(57)【要約】本発明は容器内でのクロマトグラフィ媒体の均質な混合物を形成するための方法および装置に関する。本発明はまた、クロマトグラフィカラムの充填のため準備において、容器から第２容器へ均質な媒体を搬送するための方法および装置に関する。また本発明は、カラムに均質な媒体を充填するのに直接使用することができる。【選択図】図５
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
容器内でクロマトグラフィ媒体の均質な混合物を形成するための方法であって、
前記媒体は上清を含む第１液体中に存在しており、その方法は、
(a)管状部材を通して前記上清を吸引することによって前記容器から上清を取り除き、
(b)前記上清を廃棄物として廃棄し、
(c)スラリーを形成するために前記管状部材で容器中の前記媒体に第２液体を加え、
(d)前記管状部材を通して前記容器からスラリーを吸引し、
(e)前記クロマトグラフィ媒体の均質な混合物を形成するために前記管状部材を通して前記容器へ前記スラリーを戻して追加する、
ステップを含むクロマトグラフィ媒体の均質な混合物を形成するための方法。
【請求項２】
前記ステップ(d)および(e)は同時に実行される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記第２液体及び／又は前記スラリーは、前記管状部材を通して前記容器に噴射される、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
前記管状部材は第１チューブと第２チューブとを備え、
前記第１チューブを通して前記上清又はスラリーを前記容器から吸引し、
前記第２チューブから容器へ前記液体又はスラリーを追加又は噴射する、請求項１から３の何れか一項に記載の方法。
【請求項５】
前記第１チューブは前記第２チューブと同軸である、請求項４記載の方法。
【請求項６】
前記第１チューブは外側チューブであり、前記第２チューブは内側チューブである、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記上清又はスラリーは前記外側チューブを通して前記容器から吸引され、前記第２液体又はスラリーは前記内側チューブを通して容器へ加えられあるいは噴射される、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記容器は移送容器又は貯蔵容器である、請求項１から７の何れか一項に記載の方法。
【請求項９】
前記容器は５リットル以上の体積を有する、請求項１から８の何れか一項に記載の方法。
【請求項１０】
前記容器は５０リットル以上の体積を有する、請求項１から９の何れか一項に記載の方法。
【請求項１１】
前記容器は１００リットル以上の体積を有する、請求項１から１０の何れか一項に記載の方法。
【請求項１２】
前記第１液体は前記媒体中の微生物の成長又は活動を低減する、請求項１から１１の何れか一項に記載の方法。
【請求項１３】
前記第１液体はアルコール、アルコール溶液、アルコール混合物及び保存剤からなる群から選択される、請求項１から１２の何れか一項に記載の方法。
【請求項１４】
前記第１液体はエタノール又はエタノール溶液水である、請求項１から１３の何れか一項に記載の方法。
【請求項１５】
前記第２液体は緩衝液である、請求項１から１４の何れか一項に記載の方法。
【請求項１６】
前記第２液体は水である、請求項１から１５の何れか一項に記載の方法。
【請求項１７】
前記容器は移送容器であり、キャリアからその移送容器を取り外すことを必要としない、請求項１から１６の何れか一項に記載の方法。
【請求項１８】
前記管状部材はポンプに接続されている、請求項１から１７の何れか一項に記載の方法。
【請求項１９】
前記管状部材は携帯ロッドである、請求項１から１８の何れか一項に記載の方法。
【請求項２０】
吸引により第２容器へ前記均質な媒体を移送することを更に含む、請求項１から１９の何れか一項に記載の方法。
【請求項２１】
前記第２容器はクロマトグラフィカラムのための媒体を充填するための供給タンク又はクロマトグラフィカラムである、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記第１容器はクロマトグラフィカラムである、請求項２０に記載の方法。
【請求項２３】
少なくとも１０％重量／体積の濃度を有するクロマトグラフィ媒体の均質な混合物を生成する、請求項１から２２の何れか一項に記載の方法。
【請求項２４】
操作者によって遠隔的に制御される、請求項１から２３の何れか一項に記載の方法。
【請求項２５】
上記請求項１から２３の何れか一項に記載の方法を実行するように形成されたコンピュータソフトウェア。
【請求項２６】
請求項２５に記載のコンピュータソフトウェアを記憶するデータ記憶手段。
【請求項２７】
クロマトグラフィ媒体の均質な混合物を容器内で形成するための装置であって、
第１チューブ２０と第２チューブ３０とを有する管状部材１０を備え、
(a)前記第１チューブ２０は、液体又はスラリーが入るための第１オリフィス２２と、液体／上清あるいはスラリーが出るための第２オリフィス２４とを有する、細長い本体２１を有し、
(b)前記第２チューブ３０は、液体又はスラリーが入るための第１ポート３２と、液体又はスラリーが出るための第２ポート３４とを有する、細長い本体３１を有する、装置。
【請求項２８】
前記第１チューブ２０は前記第２チューブ３０と同軸である、請求項２７に記載の装置。
【請求項２９】
前記第１チューブは、中に前記第２チューブを挿入するための第３オリフィスを追加的に備える、請求項２７又は２８に記載の装置。
【請求項３０】
前記第２チューブは管状部材の内側チューブであり、前記第１チューブは管状部材の外側チューブである、請求項２７から２９の何れか一項に記載の装置。
【請求項３１】
前記液体又はスラリーが出るための前記第２ポートに取り付けられたノズルを追加的に備える、請求項２７から３０の何れか一項に記載の装置。
【請求項３２】
前記ノズルは、前記第１チューブの前記第１オリフィスの中に液体又はスラリーが吸引されるのを防ぐために、前記第２チューブの前記細長い本体に対して９０°よりも大きいかあるいは９０°に等しい角度で配置されている、請求項３１に記載の装置。
【請求項３３】
前記ノズルは、半径方向の噴射を生成するために分流器を追加的に備えている、請求項３２に記載の装置。
【請求項３４】
前記第１チューブと第２チューブとは、前記管状部材を形成するために取り外し可能な固定具によってお互いに取り付けられている、請求項２７から３３の何れか一項に記載の装置。
【請求項３５】
前記取り外し可能な固定具は固定リングである、請求項３４に記載の装置。
【請求項３６】
前記第１チューブ及び／又は第２チューブはステンレス鋼からなる、請求項２７から３５の何れか一項に記載の装置。
【請求項３７】
前記管状部材は携帯ロッドである、請求項２７から３６の何れか一項に記載の装置。
【請求項３８】
前記第１オリフィス２２及び第２ポート３４にわたって配置可能で取り外し自在なフィルタユニット４１５をさらに備えている、請求項２７から３７の何れか一項に記載の装置。
【請求項３９】
請求項１から２４の何れか一項に記載の方法によって、前記媒体を収容している容器中のクロマトグラフィ媒体の均質な混合物を形成するためのシステムであって、ポンプに取り付けられた請求項２７から３８の何れか一項に記載の装置、を備えているシステム。
【請求項４０】
前記システムは操作者によって遠隔的に制御される、請求項３９に記載のシステム。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、容器内でクロマトグラフィ媒体の均質な混合物を形成し、その混合物を他の容器や直接クロマトグラフィカラムに供給するための方法および装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
クロマトグラフィは、化学的および生物化学的物質の分離、化合物の調合(compound preparation)、精製(purification)および分析の分野における多くの応用の発見のための、良好に確立されて研究や産業の分野で広く用いられている価値ある技術である。クロマトグラフィには多くの異なる形態が存在しているが、液体クロマトグラフィは製薬や生物化学産業の分野で、タンパク質、ペプチドおよび核酸の調合及び精製のために特に重要である。
【０００３】
液体クロマトグラフィで使用されるカラムは、一般的に多孔質クロマトグラフィ媒体を包含する管状本体を備え、それを通してキャリア液が流れ、キャリア液と多孔質媒体の固体相との間の物質捕集(material collection)によって分離が起こる。分離工程に先立って、粒子のスラリーがカラムへ導入されなければならないときから開始して層(bed)が準備されなければならない。充填層(packed bed)はスラリーとして知られる分離した粒子の懸濁を確立することによって形成され、このスラリーは通常は一端からカラムの中へ送り込まれ、注入されあるいは吸引される。端部片即ち網(net)は、多孔質物質を維持しながら液体がカラムから流れるのを許容し、カラム中のスラリーからの粒子を固める。
【０００４】
カラムの寸法は、求められる分離の希望に依存して変化する。而して、例えば研究室では比較的少量、一般的には１００マイクロリットルから１リットルオーダーのクロマトグラフィ媒体を保持するカラムしか求められない。これに対して、精製や調整が必要な多量の試料を扱う産業界の研究室では、一般的に５リットルを超え、しばしば５０リットルから１０００リットルの範囲のより大きな容量のカラムが要求される。
【０００５】
タンパク質、ペプチドそして核酸のような化学物質を分離、精製そして分析するために用いられるクロマトグラフィ媒体としては、多くの異なる形態のものがある。例えば、いくつかの媒体は寸法に基づいて分離に効果的であり、他のものは関心のある分析物を分離するために電荷や親和性を利用する。
【０００６】
充填産業のカラム(packing industrial column)に使用されるクロマトグラフィ媒体は、しばしば産業界の研究室の大きな容器に貯蔵され供給される。これらの容器はプラスチック、金属のような適切な不活性材料から作られ、一般的には５リットルを超えるクロマトグラフィ媒体を保持し、重くて扱いが困難であり、５０から１００リットルの媒体を保持する大きな容器はなおさら困難である。その嵩と重さに起因し、容器は一般的に機械的な取り扱いを容易にするためにパレットに載せて供給業者から研究室に運搬される。微生物による汚染を防ぐかあるいは最小限にとどめるために、充填カラムに使用されるようになるまでしばしばアルコールや静菌性溶液に貯蔵される。媒体は、アルコールや静菌性溶液の上清によって覆われるように、貯蔵部内で沈殿する傾向にある。
【０００７】
容器が一旦産業界の研究室に到着すると、媒体がクロマトグラフィカラムを充填するために要求されるまで貯蔵し続けられる。そのようなカラムを充填するための媒体を使用するために、上清（浮遊物）は通常吸い上げ(siphoning)や上澄み液を移すこと(decanting)によって取り除かれるが、これはアルコール性の上清が環境的そして安全性の両方の観点から研究室内の設備に悪影響を及ぼすからである。適切な緩衝液や水が、取り除かれた貯蔵溶液の容積を補うために容器へ加えられ、そしてそれは媒体を再懸濁させるために用いられる。そして均質に混合された再懸濁した媒体は、容器を手作業で揺さぶるかパドルでそれらを撹拌するか、それらをパレットのようなキャリアから物理的に取り除くか、あるいは手作業でそれを床に転がすかのどちらかである。そして得られた媒体は、クロマトグラフィカラムに充填される前に、適切な濃度の適当な緩衝液と続いて混合するためにこれらの容器から他の容器へ上澄み液を移すか吸い上げられなければならない。
【０００８】
しかし、上記の方法には多くの問題が生じており、大部分は容器の大きさと重さに起因するものである。上清をデキャンティングによって手作業で容器から移すことは、高価な媒体を失ってしまうことにつながる。手作業で容器を揺さぶったり転がすことによる容器中の媒体の均質混合のための準備は、時間の浪費であり相当に屈強で巧妙な作業者を必要とする骨の折れる作業である。この方法は、媒体を混合するべく容器を回転させるために重い容器をパレットから降ろす作業者に対する安全性リスクを見せかけることができるが、これも時間を浪費する方法である。混合された媒体は、永続的に沈殿するのを防ぐために継続して撹拌されなければならない。更に、カラムを充填するための最終的なスラリーを形成するために第２容器に媒体を移送する場合にも問題が発生する。なぜなら、媒体は容器の壁への貼り付きやこぼれに起因して、ドラムから吸い上げたり上澄み液を移動する場合に失われるからである。クロマトグラフィカラムを充填するのに使用される所定の濃度（一般的には５０重量／体積％より大きい）への媒体の希釈という更なる問題が発生する。
【０００９】
本発明は、上記課題に対処するものであり、これらの技術的困難を解消し解決するための方法、装置及びシステムを提示する。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本発明の目的は、最も一般的な容器に入ったあらゆる型のクロマトグラフィ媒体の均質な混合物を形成するための改善された、そしてより効率的な方法を提供することであり、またスラリータンクや充填されるクロマトグラフィカラムのような第２容器へ移すための方法を提供することである。本発明の更なる目的は、本発明の改善された方法を実施するための装置及びシステムを提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明の第１の特徴部分によれば、容器内のクロマトグラフィ媒体の均質な混合物を形成するための方法を提供するものであり、その媒体は上清を有する第１液体中に存在し、その方法は、
(a)管状部材を通して上清を吸引することによって容器から上清を取り除き、
(b)その上清を廃棄物として廃棄し、
(c)スラリーを形成するために管状部材によって容器中の媒体に第２液体を加え、
(d)管状部材を通して容器からスラリーを吸引し、さらに
(e)クロマトグラフィ媒体の均質な混合物を形成するために、管状部材を通して容器にスラリーを戻して加える、各工程を含んでいる。
【００１２】
本発明の第２の特徴部分によれば、上記した方法を実施するために構成されたコンピュータソフトウェアが提供される。
【００１３】
本発明の第３の特徴部分によれば、上記したコンピュータソフトウェアを記憶するデータキャリア(data carrier)が提供される。
【００１４】
本発明の第４の特徴部分によれば、媒体を収容している容器中のクロマトグラフィ媒体の均質な混合物を形成するための装置が提供され、その装置は、第１チューブと第２チューブとを含む管状部材を備え、
(a)第１チューブは、液体又はスラリーが入るための第１オリフィスと液体／上清あるいはスラリーが出るための第２オリフィスを有する細長い本体と、
(b)第２チューブは液体又はスラリが入るための第１ポートと液体あるいはスラリーが出る第２ポートとを有する細長い本体と、を備えている。
【００１５】
本発明の第５の特徴部分によれば、上記した方法による、媒体を収容している容器中のクロマトグラフィ媒体の均質な混合物を形成するためのシステムが提供され、このシステムはポンプに取り付けられた上記のような装置を備えている。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１Ａ】本発明に係る携帯ロッドの形態の管状部材の三次元概略図である。
【図１Ｂ】図１Ａの管状部材の正面図である。
【図１Ｃ】図１Ｂの管状部材の断面図である。
【図２Ａ】本発明による第１チューブの斜視図である。
【図２Ｂ】本発明による第２チューブの斜視図である。
【図３】図１の管状部材の何れかの端部の詳細断面図である。
【図４】携帯ポンプスキッドに取付けられた本発明による管状部材の斜視図である。
【図５】本発明によるシステムを例示するための図である。
【図６】本発明の方法によるクロマトグラフィ媒体の均質な混合物を形成するために、管状部材を利用する使用者を示している。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
図１Ａ、図１Ｂ、図１Ｃで使用されている数字は、管状部材１０の同じ特徴部分を示している。図１Ａは、管状部材１０の三次元図であり、本発明に係る携帯ロッドの形態の管状部材である。管状部材１０は、第１チューブ２０すなわち外側チューブと、第２チューブ３０すなわち内側チューブとを備え、外側チューブ２０と内側チューブ３０の両方は、細長い本体（図１Ｃの２１、３１）を有している。外側チューブ２０は内側チューブ３０と同軸となっている。内側チューブ３０は、内側チューブ３０の本体内へ液体又はスラリーが入るのを許容する第１ポート３２と、液体あるいはスラリーが内側チューブ３０を出る第２ポート３４とを有している。第１ポート３２はアダプタ３３に取り付けられたホース（図示略）によってポンプ（図示略）に接続されており、そのポンプは液体、緩衝液あるいはスラリーを収容するリザーバと流体接続されている。第２ポート３４には、内側チューブ３０からの緩衝液、水あるいは媒体スラリーのような液体を噴射するためのノズル（図１Ｂ、図１Ｃの３６）と端部片（図１Ｂ、図１Ｃの３８）が備えられている。端部片３８とノズル３６との間の角度は、内側チューブ３０の第２ポート３４から出る液体の噴射の方向を制御し、その角度は外側チューブ３０の第１オリフィス２２の中へ液体が吸引されるのを防ぐように構成されている。ノズルは、外側チューブ２０の細長本体に対して少なくとも９０°の角度に向けられた液体やスラリーの放射方向噴射を生成することが望ましい。
【００１８】
内側チューブ３０を覆っている管状部材１０の第１チューブ２０すなわち外側チューブは、それを通して液体又はスラリーが外側チューブ２０の本体中へ導入され吸引される第１オリフィス２２と、それを通して上清やスラリーのような液体が外側チューブ２０を出る第２オリフィス２４を備えている。液体又はスラリーは外側チューブ２０の本体へポンプ（図示略）によって生み出される真空によって第１オリフィス２２において導入され、そのポンプは適切なホース（図示略）を通してアダプタ２５を介して第２オリフィスに接続されている。液体又はスラリーはその後、第２オリフィスで出るために、第１チューブ２０の細長い本体２１のルーメンあるいは内孔を通して吸引される。
【００１９】
外側チューブ２０と内側チューブ３０の両方は、人体中で免疫反応を引き起こさないように、アメリカ合衆国Pharmacopia(USP)＜８８＞クラスVIに従って、ポリプロピレン、テフロン（登録商標）あるいはステンレス鋼のような主に生物化学的に不活性な材料から製造される。ノズル３６と端部片３８はポリプロピレンやテフロン（登録商標）のような適切なプラスチックから作られる。
【００２０】
図１Ｂは図１Ａの管状部材１０の正面図を示している。第２チューブすなわち内側チューブ３０は大部分が第１チューブすなわち外側チューブ２０によって包まれている。ホース又は（加圧パイプのような）適当なパイプ(図示略）は、アダプタ２５、３３によって第２オリフィス２４と第１ポート３２とをポンプ（図示略）に接続する。第２チューブすなわち内側チューブ３０の細長い本体３１の一端は、上記図１Ａに対して説明したようにノズル３６と端部片３４を備えている。ポンプは外側チューブ２０の第１オリフィス２２を通して第１チューブすなわち外側チューブ２０の本体内へ液体を吸引し又は導入し、特にノズル３６と外側チューブ２０の端部との間の隙間を通して吸引し又は導入できる（図３も参照）。
【００２１】
図１Ｃは、管状部材１０の側方断面図であり、第１チューブ２０と第２チューブ３０が管状部材１０の中心軸線に関して同心として構成されていることを示している。オリフィス／ポート（２４、３２）のアダプタ２５、３３は、ホースやパイプを取り付けるのに適しており、ホースやパイプは外側チューブ２０の第１オリフィス２２を通して液体を吸引するためにポンプに接続され、あるいは第２ポート３４のノズル３６から液体を噴射するためにポンプに接続されている。
【００２２】
図１Ａ、Ｂ、Ｃに示される実施形態において、管状部材１０は１つのユニットとして組み立てられるが、その管状部材は１つの複合ユニットとして製造され、また図２Ａ、Ｂに示すように洗浄を容易にするために第１チューブ２０と第２チューブ３０の構成部品へ分割できるように設計されていてもよい。図２Ａは、チューブ１２０の内部へ液体又はスラリーが入るのを許容するチューブ１２０の一端の第１オリフィス１２２と、チューブの第２端部の近傍のチューブ１２０の内部から液体又はスラリーが出るための第２オリフィスとを伴う細長い本体１２１を有する第１チューブ１２０の斜視図を示している。チューブ１２０は、第２オリフィス１２４の周囲のアダプタ１２５に取り付けられた適切な圧力ホース又はパイプによってポンプに接続されている。第３オリフィス１２６は、第１チューブ１２０の内部に第２チューブ１３０が入るのを許容するように寸法決めされている。第２チューブ１３０の内孔は図２Ｂに示すように、第１チューブ１２０の内孔よりも細く、両端に第１ポート１３２と第２ポート１３４を有する細長い本体１３１を備えており、そこから液体又はスラリーがそれぞれ管に入ったり管から出る。圧力ホース又はパイプ（図示略）は、ノズル１３６を介して第２ポート１３４からチューブを出ることで液体又はスラリーの噴射を生成するために第１ポート１３２の周囲のアダプタ１３３に取り付けられる。
【００２３】
管状部材は、第１チューブ１２０の第３オリフィス１２６を通して第２チューブ１３０のノズル１３６を挿入し、チューブ１３０の細長い本体を第１チューブ１２０を通して、それぞれのチューブ１２０，１３０の密封リング１２７，１３７が流体気密を作り出すまで送ることによって組み立てられる。そしてチューブ１２０，１３０は同軸の関係となっている。第１チューブ１２０と第２チューブ１３０は、固定リング（図示略）のような解除可能な固定具によって固定位置とされる。
【００２４】
図３は、第１すなわち外側チューブ２２０と第２すなわち内側チューブ２３０を備える管状部材のそれぞれの端部の詳細を示す断面図である。図から明らかなように、端部片２３８はノズル２３６に隣接した第２すなわち内側チューブ２３０の第２ポート２３４内に位置している。第１チューブ２２０の第１オリフィス２２２を通って内孔すなわちルーメン２２９に入る液体又はスラリーは、ノズル２３６と第１チューブ２２０の端部の間の隙間を通らなければならない。液体又はスラリーは第１チューブ２２０のルーメン２２９すなわち内孔の中に真空によって引き込まれ、その真空は第１チューブ２２０を第２オリフィス２２４でポンプ（図示略）に接続することによって作り出される。その接続はポンプと周りの第２オリフィス２２４との間にアダプタ２２５を使ってホース又はパイプを取付けることによって成し遂げられる。スラリー又は液体は第１チューブ２２０のルーメンすなわち内孔２２９を通して吸引され、第２オリフィス２２４から出て、吸引された流体は廃棄物（例えば、上清の場合）として廃棄され、混合を促進するために第２チューブ２３０へ再循環して戻るか、混合が完了したときにクロマトグラフィカラムあるいはカラム充填のために待機しているスラリータンクに向けられる。液体またはスラリーの分配は適切な弁およびポンプによって制御される。
【００２５】
クロマトグラフィ媒体を収容している容器に加えられる緩衝液のような液体は、第２チューブ２３０の長さ方向に沿って第１ポートおよびルーメン２３９を通って適当なリザーバ（図示略）から送り出され、容器内へ第２ポート２３４およびノズル２３６を通して噴射される。代替的には、第１すなわち外側チューブ２２０を通して容器からすでに吸引されているスラリーは、上記したように第２すなわち内側チューブ２３０を通して再循環され、ポンプからの加圧下で容器に噴射して戻される。ホースまたはパイプの長さ方向に沿った第１チューブ２２０へのそしてこれを通るこの継続した吸引行程、そして容器中へ戻すスラリーの加圧された噴射は、クロマトグラフィ媒体の均質な混合物を形成する。媒体は、貯蔵された形態の媒体の凝集を破壊するのに十分な力で容器へ噴射される。一般的に、圧力は２から５バールで十分である。この行程が数サイクル実施された後に、媒体は十分に混合され、それは他の容器へ供給され、あるいはクロマトグラフィカラムへの充填に用いられる。２から５バールの圧力を用いると、カラムを充填するために用意されるクロマトグラフィ媒体の均質な混合物を生成するための全体の混合と１サイクルの時間は、一般的には２から１０分のオーダーである。これは、従来の揺さぶり、転がしおよび吸い上げ技法を用いるよりもより早く、安全で便利である。
【００２６】
図４は、可搬型ポンプスキッド３４０に取付けられた本発明に係る管状部材３１０の斜視図である。ポンプスキッド３４０は車輪３４２を有する可動トロリー３４１に載置され、それぞれの車輪はブレーキ３４２と移動を容易にするためのハンドルを備えている。図示された実施形態において、空気圧ポンプ３４４はポンプおよび媒体容器へのそしてこれらからの液体の流れを統制する５つの弁３４５ａから３４５ｅを有する。本発明の方法は様々な数の弁、一般的には少なくとも３つの弁で実行されることは理解されるであろう。各弁は操作者によって独立に制御される。レギュレータ３４６は圧力計３４７で監視されている作動圧力を統制している。管状部材をポンプへ（アダプタ３２５と３３３で）接続する圧力ホースまたはパイプは、図には示されていない。ポンプは電気的あるいはなんらかの適切なエネルギ源によって動力が供給される。
【００２７】
図５は適切なポンプに取り付けられた、本発明に係る管状部材を用いる本発明の方法を実施するためのシステムを示す図である。容器４５０に供給され、および／又は貯蔵されたクロマトグラフィ媒体は、クロマトグラフィカラムに充填されるために用意されなければならない。容器４５０を開放する第１ステップは、媒体の微生物汚染を低減する防腐剤上清(preservative supernatant)を媒体から取り除く。そのような防腐剤の一例はエタノールやエタノール溶液であり、それは使用される前に発火のおそれを低減するために取り除かれる。この上清はポンプ４４４によって加圧ホース（４５１ａ〜ｅ）および弁（４４５ａ、４４５ｂ）を通して管状部材４１０で吸引により廃棄容器４５２へ取り除かれる。図５において、管状部材４１０の一端に配置された取り外し可能なフィルタユニット４１５が示されており、これは第１オリフィスと第２ポートを通して貯蔵液体のデカンテーション(decantation)の間に管状部材へ媒体の粒子が導入されるのを避けるためのものである。フィルタユニット４１５は、吸引の後に取り外される。そして、容器４５０内で凝集する媒体を分散させるため、および／またはその中でスラリーを形成するために媒体を希釈するために、加圧でホース４５１ｃ、ｂおよび弁（４４５ａ、ｂおよびｃ）を通してリザーバ４５４からの適切な緩衝液又は水が加えられる。緩衝液又は水は、少なくとも１０％重量／体積(weight to volume)の媒体の最終濃度を提供するために加えられる。媒体の濃度は、カラムの直接的な充填を可能にするために、少なくとも５０％重量／体積の緩衝液／水が望ましい。このスラリーはその後管状部材４１０を通して吸引され、加圧下で容器４５０へ噴射して戻すためにホース（４５１ａとｂ）と弁（４４５ａ、ｂ、ｃ）を介してシステムを回って循環する。加圧下でのこの再循環、噴射そして媒体の混合の行程の繰り返しは、媒体粒子のクランプ(clamp)又は凝集を分散させ、クロマトグラフィ媒体の均質な混合物を作り出す。その行程は完了までに一般的に２から１０分を要し、この場合均質な混合物は管状部材４１０によって容器４５０から吸引され、クロマトグラフィカラムの充填の準備のために、第２容器すなわちスラリータンク４５３に供給される。随意的であるが、媒体は充填を効果的にするためにクロマトグラフィカラムへ直接供給してもよい。もし必要であれば、スラリータンク４５３への媒体の完全な移送を確実にするために、容器４５０の壁を濯ぐためのリーザバ４５４からの追加の緩衝液又は水が用いられる。
【００２８】
この方法は操作者の制御の下で手動であるいは自動で実施できることは理解されるであろう。点線４５７は、操作者によって遠隔操作され、又はコンピュータソフトウェア制御の基で自動的に操作される媒体取り扱いステーションを示す。
【図１Ａ】
2010517050.tif 000003
【図１Ｂ】
2010517050.tif 000004
【図１Ｃ】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
2010517050.tif 000007
【図３】
2010517050.tif 000008
【図４】
2010517050.tif 000009
【図５】
2010517050.tif 000010
【図６】
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【手続補正書】
【提出日】平成21年8月4日(2009.8.4)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
容器内でクロマトグラフィ媒体の均質な混合物を形成するための方法であって、
前記媒体は上清を含む第１液体中に存在しており、その方法は、
(a)管状部材を通して前記上清を吸引することによって前記容器から上清を取り除き、
(b)前記上清を廃棄物として廃棄し、
(c)スラリーを形成するために前記管状部材で容器中の前記媒体に第２液体を加え、
(d)前記管状部材を通して前記容器からスラリーを吸引し、
(e)前記クロマトグラフィ媒体の均質な混合物を形成するために前記管状部材を通して前記容器へ前記スラリーを戻して追加する、
ステップを含むクロマトグラフィ媒体の均質な混合物を形成するための方法。
【請求項２】
前記ステップ(d)および(e)は同時に実行される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記第２液体及び／又は前記スラリーは、前記管状部材を通して前記容器に噴射される、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
前記管状部材は第１チューブと第２チューブとを備え、
前記第１チューブを通して前記上清又はスラリーを前記容器から吸引し、
前記第２チューブから容器へ前記液体又はスラリーを追加又は噴射する、請求項１から３の何れか一項に記載の方法。
【請求項５】
前記第１チューブは前記第２チューブと同軸である、請求項４記載の方法。
【請求項６】
前記第１チューブは外側チューブであり、前記第２チューブは内側チューブである、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記上清又はスラリーは前記外側チューブを通して前記容器から吸引され、前記第２液体又はスラリーは前記内側チューブを通して容器へ加えられあるいは噴射される、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
吸引により第２容器へ前記均質な媒体を移送することを更に含む、請求項１から７の何れか一項に記載の方法。
【請求項９】
前記第２容器はクロマトグラフィカラムのための媒体を充填するための供給タンク又はクロマトグラフィカラムである、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
クロマトグラフィ媒体の均質な混合物を容器内で形成するための装置であって、
第１チューブ２０と第２チューブ３０とを有する管状部材１０を備え、
(a)前記第１チューブ２０は、液体又はスラリーが入るための第１オリフィス２２と、液体／上清あるいはスラリーが出るためのノズル３６を備えた第２オリフィス２４とを有する、細長い本体２１を有し、
(b)前記第２チューブ３０は、液体又はスラリーが入るための第１ポート３２と、液体又はスラリーが出るための第２ポート３４とを有する、細長い本体３１を有し、
前記第２チューブ３０は管状部材１０の内側チューブであり、前記第１チューブ２０は管状部材１０の外側チューブである、装置。
【請求項１１】
前記第１チューブ２０は前記第２チューブ３０と同軸である、請求項１０に記載の装置。
【請求項１２】
前記第１チューブは、中に前記第２チューブを挿入するための第３オリフィスを追加的に備える、請求項１０又は１１に記載の装置。
【請求項１３】
請求項１から９の何れか一項に記載の方法によって、前記媒体を収容している容器中のクロマトグラフィ媒体の均質な混合物を形成するためのシステムであって、ポンプに取り付けられた請求項１０から１２の何れか一項に記載の装置、を備えているシステム。
【国際調査報告】
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