(57)【要約】本発明は、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン：2010538041.tif 000031またはその医薬上許容される塩、特にその塩酸塩および塩酸塩の結晶形、該化合物またはその塩の調製法、それを含有する組成物、ならびに例えば、ヒトなどの哺乳動物における、神経疾患または精神疾患、例えば、認識機能障害、疲労または睡眠障害の治療または予防におけるその使用に関する。該化合物またはその塩は、ヒスタミンＨ３受容体に対しアフィニティーを有し、ヒスタミンＨ３受容体のアンタゴニストおよび／または逆アゴニストである。
2010538041.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン：
【化１】
2010538041.tif 000030
で示される化合物またはその医薬上許容される塩。
【請求項２】
１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩である、請求項１記載の化合物または塩。
【請求項３】
銅Ｋα  Ｘ線照射して回折計で得られた２θ角として定義される５以上の以下のピーク：６．４±０．１、１２．７±０．１、１５．４±０．１、１５．７±０．１、１７．１±０．１、１９．１±０．１、１９．７±０．１、２１．９±０．１、２５．５±０．１、２７．０±０．１、および２８．２±０．１°２θを有する粉末Ｘ線回折スペクトルによって特徴付けられ、ただし、粉末Ｘ線回折スペクトルが以下の２つのピーク：１５．７±０．１および２５．５±０．１°２θを有する、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩の結晶形１。
【請求項４】
粉末Ｘ線回折スペクトルが、８以上の請求項３に記載のピークを有する、請求項３記載の１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩の結晶形１。
【請求項５】
図５に示されるものと実質的に同一の固形フーリエ変換赤外線スペクトルによって特徴付けられる、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩の結晶形１。
【請求項６】
共鳴に対する以下の化学シフト：１８．５±０．３、３０．４±０．３、３１．８±０．３、３７．６±０．３、４５．８±０．３、４９．４±０．３、５２．３±０．３、５９．２±０．３、６３．６±０．３、６８．４±０．３、１１０．３±０．３、１１８．８±０．３、１２８．４±０．３、１３１．２±０．３、１３３．９±０．３、１５９．１±０．３、および１６７．６±０．３ｐｐｍを有する１３Ｃ固体核磁気共鳴スペクトルによって特徴付けられる、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩の結晶形１。
【請求項７】
銅Ｋα  Ｘ線照射して回折計で得られた２θ角として定義される以下の５以上のピーク：６．４±０．１、１２．８±０．１、１５．４±０．１、１９．２±０．１、１９．７±０．１、２０．０±０．１、２１．８±０．１、２１．９±０．１、２３．５±０．１、２４．６５±０．１（または２４．７±０．１）、２５．８±０．１、および２７．０±０．１°２θを有する粉末Ｘ線回折スペクトルによって特徴付けられ、ただし、粉末Ｘ線回折スペクトルが以下の２つのピーク：２０．０±０．１°２θ、および２４．６５±０．１または２４．７±０．１°２θのいずれかを有する、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩の結晶形２。
【請求項８】
粉末Ｘ線回折スペクトルが、８以上の請求項７に記載のピークを有する、請求項７記載の１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩の結晶形２。
【請求項９】
図７に示されるものと実質上同一の固形フーリエ変換赤外線スペクトルによって特徴付けられる、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩の結晶形２。
【請求項１０】
共鳴に対する以下の化学シフト：１８．８±０．３、１９．５±０．３、３２．４±０．３、３７．５±０．３、４５．７±０．３、４９．３±０．３、５２．７±０．３、５９．１±０．３、６６．３±０．３、７１．１±０．３、１０９．４±０．３、１１９．６±０．３、１２８．４±０．３、１３１．３±０．３、１３４．３±０．３、１５８．７±０．３、および１６７．８±０．３ｐｐｍを有する１３Ｃ固体核磁気共鳴スペクトルによって特徴付けられる、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩の結晶形２。
【請求項１１】
１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンである、請求項１記載の化合物または塩。
【請求項１２】
１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンまたはその医薬上許容される塩および医薬上許容される担体または賦形剤を含む医薬組成物。
【請求項１３】
経口投与用であって、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩を含む、請求項１２記載の医薬組成物。
【請求項１４】
経口投与用であって、請求項７、８、９または１０のいずれか１項に記載の１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩の結晶形２を含む、請求項１２記載の医薬組成物。
【請求項１５】
医薬として用いる、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の化合物、塩または結晶形。
【請求項１６】
神経疾患の治療または予防に用いる、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の化合物、塩または結晶形。
【請求項１７】
神経疾患の治療または予防のための医薬の製造における、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンまたはその医薬上許容される塩の使用。
【請求項１８】
哺乳動物における認識機能障害、疲労または睡眠障害の治療または予防に用いるための医薬の製造における１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンまたはその医薬上許容される塩の使用。
【請求項１９】
医薬が、ヒトにおける認識機能障害または疲労の治療または予防に用いるためのものである、請求項１８記載の使用。
【請求項２０】
医薬が、ヒトにおける認識機能障害の治療または予防に用いるためのものであり、認識機能障害が、アルツハイマー病、認知症、軽度認識障害、または関連神経変性疾患であるかあるいは認識機能障害が、パーキンソン病であるかあるいは認識機能障害が、統合失調症である、請求項１９記載の使用。
【請求項２１】
１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンまたはその医薬上許容される塩が、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩である、請求項１７、１８、１９または２０に記載の使用。
【請求項２２】
認識機能障害、疲労または睡眠障害の治療または予防に用いるための、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンまたはその医薬上許容される塩および医薬上許容される担体を含む医薬組成物。
【請求項２３】
治療を必要とするヒトなどの哺乳動物における神経疾患の治療方法であって、有効量の１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンまたはその医薬上許容される塩を哺乳動物に投与することを含む、方法。
【請求項２４】
治療を必要とするヒトなどの哺乳動物における認識機能障害、疲労または睡眠障害の治療または予防方法であって、治療上有効な量の１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンまたはその医薬上許容される塩を哺乳動物に投与することを含む、方法。
【請求項２５】
１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンまたはその塩の調製法であって、
ａ）塩化４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）ベンゾイルを１−イソプロピルピペラジンと反応させること；または
ｂ）４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸、またはカルボン酸基が活性化されている非酸性塩化物誘導体を１−イソプロピルピペラジンと反応させること；
および１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンの塩を調製してもよいことを含む、方法。
【請求項２６】
方法の工程ｂ）を含む、請求項２５記載の方法であって、方法の工程ｂ）が、適当な溶媒中のカップリング試薬での４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸の活性化、次いで、１−イソプロピルピペラジンとの反応を含む、方法。
【請求項２７】
カップリング試薬がカルボニルジイミダゾールである、請求項２６記載の方法。
【請求項２８】
カルボニルジイミダゾールカップリング試薬での４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸の活性化および１−イソプロピルピペラジンとの次反応の両方が、アセトニトリルおよび／またはプロピオニトリルを含む反応溶媒中で実施される、請求項２７記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、薬理活性を有する新規ピペラジン誘導体、その調製法、それを含有する組成物、および神経障害または精神障害、例えば、認識機能障害、例えば、アルツハイマー病の治療におけるその使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
ヒスタミンＨ３受容体は、いくつかの交感神経以外の末梢組織での発現を最小限に抑えて、哺乳動物の中枢神経系（ＣＮＳ）で主に発現される（Ｌｅｕｒｓら，（１９９８），Ｔｒｅｎｄｓ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｓｃｉ．１９，１７７−１８３）。選択的アゴニストまたはヒスタミンによるＨ３受容体の活性化は、ヒスタミン作動性およびコリン作動性ニューロンを含む、種々の異なる神経群からの神経伝達物質放出の抑制をもたらす（Ｓｃｈｌｉｃｋｅｒら，（１９９４），Ｆｕｎｄａｍ．Ｃｌｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．８，１２８−１３７）。加えて、インビトロおよびインビボ研究は、認識に関する、大脳皮質および海馬などの脳領域における神経伝達物質放出を促進しうる（Ｏｎｏｄｅｒａら，（１９９８），Ｉｎ：Ｔｈｅ  Ｈｉｓｔａｍｉｎｅ  Ｈ３  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ｅｄ．Ｌｅｕｒｓ  ａｎｄ  Ｔｉｍｍｅｒｍａｎ，ｐｐ２５５−２６７，Ｅｌｓｅｖｉｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｂ．Ｖ．）。さらに、多数の文献報告は、５つの選択タスク、物体認識、高架式十字迷路、新規タスクの取得および受動回避を含む齧歯動物モデルにおけるＨ３アンタゴニスト（例えば、チオペラミド、クロベンプロピット、シプロキシファンおよびＧＴ−２３３１）の認識促進特性を立証している（Ｇｉｏｖａｎｎｉら，（１９９９），Ｂｅｈａｖ．Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ．１０４，１４７−１５５）。ヒスタミンＨ３受容体アンタゴニストＧＳＫ１８９２５４は、ラットへの経口投与後ラットの皮質で［３Ｈ］Ｒ−α−メチルヒスタミンのエクスビボ結合を阻害し、ある経口投与量で、以下の認識パラダイム：受動回避、水迷路、物体認識、および注意セットシフト（ａｔｔｅｎｔｉｏｎａｌ  ｓｅｔ  ｓｈｉｆｔ）におけるラットの行動を改善した（Ａ．Ｄ．Ｍｅｄｈｕｒｓｔら，Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒａｐ．，２００７，３２１（３），１０３２−１０４５）。
【０００３】
これらのデータは、新規Ｈ３アンタゴニストおよび／または逆アゴニストが、神経疾患、例えば、アルツハイマー病または関連神経変性障害における認識機能障害の治療に有用でありうることを示唆している。
【０００４】
ＷＯ  ２００５／０４０１４４  Ａ１（Ｇｌａｘｏ  Ｇｒｏｕｐ  Ｌｉｍｉｔｅｄ）は、ヒスタミンＨ３受容体に対しアフィニティーを有し、ヒスタミンＨ３受容体のアンタゴニストおよび／または逆アゴニストである、一連の１−ベンゾイル置換ジアゼパニル誘導体を開示している。ＷＯ  ２００５／０４０１４４  Ａ１の実施例１０は、１−（イソプロピル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ヘキサヒドロ−１Ｈ−１，４−ジアゼピン塩酸塩：
【化１】
2010538041.tif 000003
を開示している。
【０００５】
ＷＯ  ２００４／０３７８０１  Ａ１（Ｊａｎｓｓｅｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａ，Ｎ．Ｖ．）は、ヒスタミン受容体、特にＨ３受容体の活性の調節能を有する、一連のピペラジニルおよびジアゼパニルベンズアミド誘導体およびベンゾチアミド誘導体を開示している。
【０００６】
ＷＯ  ２００４／１０１５４６  Ａ１（Ｇｌａｘｏ  Ｇｒｏｕｐ  Ｌｉｍｉｔｅｄ）は、ヒスタミンＨ３受容体に対しアフィニティーを有し、ヒスタミンＨ３受容体のアンタゴニストおよび／または逆アゴニストである、多数の（ピペリジン−４−カルボニル）−ピペラジン誘導体および（ピペリジン−４−カルボニル）−［１，４］−ジアゼパン誘導体を開示している。
【０００７】
ＷＯ  ０３／００４４８０  Ａ２（Ｎｏｖｏ  Ｎｏｒｄｉｓｋ  Ａ／ＳおよびＢｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ＧｍｂＨ）は、ヒスタミンＨ３受容体に対し結合アフィニティーを有する一連の置換ピペラジン誘導体およびジアザパン誘導体（ｄｉａｚａｐａｎｅｓ）を開示している。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】国際公開第２００５／０４０１４４号パンフレット
【特許文献２】国際公開第２００４／０３７８０１号パンフレット
【特許文献３】国際公開第２００４／１０１５４６号パンフレット
【特許文献４】国際公開第０３／００４４８０号パンフレット
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】Ｌｅｕｒｓら，（１９９８），Ｔｒｅｎｄｓ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｓｃｉ．１９，１７７−１８３
【非特許文献２】Ｓｃｈｌｉｃｋｅｒら，（１９９４），Ｆｕｎｄａｍ．Ｃｌｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．８，１２８−１３７
【非特許文献３】Ｏｎｏｄｅｒａら，（１９９８），Ｉｎ：Ｔｈｅ  Ｈｉｓｔａｍｉｎｅ  Ｈ３  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ｅｄ．Ｌｅｕｒｓ  ａｎｄ  Ｔｉｍｍｅｒｍａｎ，ｐｐ２５５−２６７，Ｅｌｓｅｖｉｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｂ．Ｖ．
【非特許文献４】Ｇｉｏｖａｎｎｉら，（１９９９），Ｂｅｈａｖ．Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ．１０４，１４７−１５５
【非特許文献５】Ａ．Ｄ．Ｍｅｄｈｕｒｓｔら，Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒａｐ．，２００７，３２１（３），１０３２−１０４５
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明は、ヒスタミンＨ３受容体に対しアフィニティーを有し、ヒスタミンＨ３受容体のアンタゴニストおよび／または逆アゴニストである、化合物またはその塩を提供する。
【００１１】
本発明は、第１の態様において、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン：
【化２】
2010538041.tif 000004
またはその塩を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】図１は、２θ角（°）単位で表され、０．０１６７°２θのステップサイズ、３１．７５秒の時間／ステップを有する、銅Ｋα（銅Ｋ−アルファ）Ｘ線照射し、かつ、シリコンウエハープレート上に置いたサンプルを用いて回折計で得られた、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩の結晶形１の粉末Ｘ線回折（ＸＲＰＤ）スペクトルである。
【図２】図２は、２θ角（°）単位で表され、０．０１６７°２θのステップサイズ、３１．７５秒の時間／ステップを有する、銅Ｋα（銅Ｋ−アルファ）Ｘ線照射し、かつ、シリコンウエハープレート上に置いたサンプルを用いて回折計で得られた、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩の結晶形２の粉末Ｘ線回折（ＸＲＰＤ）スペクトルである。
【図３】図３は、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩の結晶形１（最上部）および結晶形２（最下部）のＸＲＰＤスペクトルの一部のオーバーレイである。
【図４】図４は、４０００〜６７５ｃｍ−１のスペクトル領域を示す、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩の結晶形１のフーリエ変換赤外線（ＦＴ−ＩＲ）スペクトルである。
【図５】図５は、２０００〜６７５ｃｍ−１のスペクトル領域を示す、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩の結晶形１のフーリエ変換赤外線（ＦＴ−ＩＲ）スペクトルである。
【図６】図６は、４０００〜６７５ｃｍ−１のスペクトル領域を示す、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩の結晶形２のフーリエ変換赤外線（ＦＴ−ＩＲ）スペクトルである。
【図７】図７は、２０００〜６７５ｃｍ−１のスペクトル領域を示す、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩の結晶形２のフーリエ変換赤外線（ＦＴ−ＩＲ）スペクトルである。
【図８】図８は、２０００〜６７５ｃｍ−１のスペクトル領域を示す、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩の結晶形１（最上部）および結晶形２（最下部）のＦＴ−ＩＲスペクトルのオーバーレイである。
【図９】図９は、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩の結晶形１（最上部）および結晶形２（最下部）の、ｐｐｍ単位における、１３Ｃ固体核磁気共鳴（固体ＮＭＲ）スペクトルのオーバーレイである。
【図１０】図１０は、試験化合物（「薬剤候補」）の受容体占有が、受容体に対する放射性リガンド特異的結合の減少によりどのようにインビボで測定されうるのかを示すスキームである。ＢＡは、利用可能な受容体部位の濃度である。組織における薬剤候補の異なる濃度の存在の結果として、試験化合物の投与後の、基準、および１０分、２．５時間、および６時間の間にＢＡがどのように変化するのかを確認する。
【図１１】図１１は、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩（「Ａ塩」、本発明の範囲内）、および１−（イソプロピル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ヘキサヒドロ−１Ｈ−１，４−ジアゼピン塩酸塩（「Ｂ塩」、コンバレータ化合物）のＨ３受容体占有を測定するためのブタ−ＰＥＴプロトコルを示すスキームである。
【図１２】図１２、グラフＡは、ブタへの５０マイクログラム／ｋｇ静脈投与後の、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩（「Ａ塩」、本発明の範囲内、黒丸）および１−（イソプロピル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ヘキサヒドロ−１Ｈ−１，４−ジアゼピン塩酸塩（「Ｂ塩」、コンバレータ化合物、黒ひし形）の時間ごとの平均（中間）血漿濃度を示すグラフである。図１２、グラフＢは、ブタへのＡ塩またはＢ塩の５０マイクログラム／ｋｇ静脈投与後の、インビボブタ−ＰＥＴ試験中の３つの時点の平均（中間）測定Ｈ３受容体占有経時変化、ならびに本発明の範囲内の「Ａ塩」（黒丸としての測定値、および実線としてモデル適合）、およびコンバレータ化合物「Ｂ塩」（黒ひし形としての測定値、および点線としてモデル適合）について、それを当てはめたｋｏｎ−ｋｏｆｆ限定モデルを示すグラフである。
【図１３−１】図１３、パートＡおよびＢは、図１２グラフＡおよびＢの一部に示される、各々「Ａ塩」（のみ）についての、平均（中間）血漿濃度経時変化および平均（中間）Ｈ３受容体占有経時変化を示すグラフである。
【図１３−２】図１３、パートＣおよびＤは、図１２グラフＡおよびＢの一部に示される、各々「Ｂ塩」（のみ）についての、平均（中間）血漿濃度経時変化および平均（中間）Ｈ３受容体占有経時変化を示すグラフである。
【図１４】図１４は、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩（「Ａ塩」、本発明の範囲内、左側グラフ、ｎ＝３）、および１−（イソプロピル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ヘキサヒドロ−１Ｈ−１，４−ジアゼピン塩酸塩（「Ｂ塩」、コンバレータ化合物、右側グラフ、ｎ＝３）について、図１２および１３に示される平均測定値を得たデータである、試験されたブタごとの、個別の血漿濃度およびＨ３受容体占有経時変化を示す一連のグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本発明は、ヒスタミンＨ３受容体に対しアフィニティーを有し、ヒスタミンＨ３受容体のアンタゴニストおよび／または逆アゴニストである、化合物またはその塩を提供する。
【００１４】
本発明は、第１の態様において、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン：
【化３】
2010538041.tif 000005
またはその塩を提供する。
【００１５】
ラットまたはブタへの経口投与を含む予備試験において、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンは、その塩酸塩として、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンまたはその医薬上許容される塩が、ヒト医薬用途、特に、ヒトにおける認識機能障害、例えば、アルツハイマー病における認識機能障害の治療において、ある適当な特性を有しうることを示唆する、脳ヒスタミンＨ３受容体占有のラットおよびブタの経時変化（時間ごとの減少）で示されている（以下のラットエクスビボ結合試験およびブタ−ＰＥＴ試験を参照のこと）。
【００１６】
本発明において、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン（「遊離塩基」）またはその塩に関する言及は、遊離塩基の溶媒和物および水和物またはその塩を包含する。
【００１７】
１の実施態様において、本発明は、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン（「遊離塩基」）を提供する。
【００１８】
医薬としてのその潜在的使用のために、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンの塩は、好ましくは、その医薬上許容される塩、特に、その医薬上許容される酸付加塩である。
【００１９】
１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンの医薬上許容される酸付加塩には、臭化水素酸塩（例えば、一臭化水素酸塩）、塩酸塩（例えば、一塩酸塩）、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、ギ酸塩、酢酸塩、プロピオン酸塩、フマル酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、乳酸塩、安息香酸塩、サリチル酸塩、グルタミン酸塩、アスパラギン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ナフタレンスルホン酸塩（例えば、２−ナフタレンスルホン酸塩）またはヘキサン酸塩が含まれる。かかる塩は、一般には、例えば、結晶化および濾過により単離されうる塩を得るために、適当な酸と、所望により適当な溶媒、例えば、有機溶媒中で混合し、通常次いで、乾燥することにより形成されうる。
【００２０】
本発明は、水和物および溶媒和物を含む本発明の化合物の塩の全ての可能な化学量論的および非化学量論的形態をその範囲内に含む。
【００２１】
１の好ましい実施態様において、化合物または塩は、塩酸塩、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩、典型的には、一塩酸塩の形態である。
【００２２】
１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩、例えば、一塩酸塩は、固形、具体的には結晶形、より具体的には結晶形１または結晶形２でありうる。
【００２３】
したがって、本発明はまた、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩、例えば、一塩酸塩の結晶形１（以下、「結晶形１」）を提供する。
【００２４】
１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩、例えば、一塩酸塩の結晶形１は、銅Ｋα（銅Ｋ−アルファ）Ｘ線照射して回折計で得られた°２θ角として定義される５以上、例えば、８以上、例えば、すべての以下のピーク：６．４±０．１、１２．７±０．１、１５．４±０．１、１５．７±０．１、１７．１±０．１、１９．１±０．１、１９．７±０．１、２１．９±０．１、２５．５±０．１、２７．０±０．１、および２８．２±０．１°２θを有する粉末Ｘ線回折（ＸＲＰＤ）スペクトルによって特徴付けられうる；
ただし、粉末Ｘ線回折スペクトルは、以下の２つのピーク：１５．７±０．１および２５．５±０．１°２θを有する。
【００２５】
別法としてまたはさらに、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩、例えば、一塩酸塩の結晶形１は、２θ角（°）単位で表され、銅Ｋα（銅Ｋ−アルファ）Ｘ線照射して回折計で得られた、図１に示されるものと実質上同一の粉末Ｘ線回折（ＸＲＰＤ）スペクトルによって特徴付けられうる。
【００２６】
１の実施態様において、本明細書に記載のＸＲＰＤスペクトルピークおよび／または図１に示されるものと実質上同一のＸＲＰＤスペクトルによって特徴付けられる、結晶形１は、０．０１６７°２θ以下のステップサイズ、および／または３１．７５秒以上の時間／ステップ、および／またはシリコンウエハープレート上に置いたサンプルを用いて回折計で得られるようにさらに特徴付けられうる。
【００２７】
別法としてまたはさらに、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩、例えば、一塩酸塩の結晶形１は、図５に示されるものと実質上同一の固形フーリエ変換赤外線（ＦＴ−ＩＲ）スペクトルによって特徴付けられる。図５は、２０００〜６７５ｃｍ−１のスペクトル域における結晶形１のＦＴ−ＩＲスペクトルを示す。ＦＴ−ＩＲスペクトルは、例えば、Ｎｉｃｏｌｅｔ  Ａｖａｔａｒ  ３６０  ＦＴ−ＩＲ回折計を用いて測定されうる、および／または、例えば、４ｃｍ−１または２ｃｍ−１分解能で測定されうる。変化は、約±２ｃｍ−１の各ピークについて認められうる。
【００２８】
別法としてまたはさらに、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩、例えば、一塩酸塩の結晶形１は、共鳴に対する以下の化学シフト：１８．５±０．３、３０．４±０．３、３１．８±０．３、３７．６±０．３、４５．８±０．３、４９．４±０．３、５２．３±０．３、５９．２±０．３、６３．６±０．３、６８．４±０．３、１１０．３±０．３、１１８．８±０．３、１２８．４±０．３、１３１．２±０．３、１３３．９±０．３、１５９．１±０．３、および１６７．６±０．３ｐｐｍを有する１３Ｃ固体核磁気共鳴（固体ＮＭＲ）スペクトルによって特徴付けられうる。該固形ＮＭＲスペクトルは、例えば、２９６Ｋの温度にて４ｍｍ  Ｂｒｕｋｅｒ  ＨＦＸ  ＭＡＳ（マジック角回転）プローブを用いて、および／または８ｋＨｚの回転速度を用いて、例えば、１３Ｃ観察の９０．５５ＭＨｚの周波数で得られうる。データは、例えば、側波帯抑圧を伴う交差分極配列を用いて得られうる。１０秒の弛緩遅延は、スキャン中に用いられうる。
【００２９】
１の実施態様において、本発明の塩酸塩は、結晶形純度に関して実質的に結晶形１の形態である（例えば、６０重量％以上または７０重量％以上または８０重量％以上またはモル濃度）。
【００３０】
本発明はまた、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩、例えば、一塩酸塩の結晶形２を提供する（以下、「結晶形２」）。
【００３１】
理論にとらわれることなく、結晶形２は、保存、処方および／または使用に関して特定の利点が得られうる、結晶形１より熱力学的に安定であると考えられる。
【００３２】
１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩、例えば、一塩酸塩の結晶形２は、銅Ｋα（銅Ｋ−アルファ）Ｘ線照射して回折計で得られた°２θ角として定義される５以上、例えば、８以上、例えば、すべての以下のピーク：６．４±０．１、１２．８±０．１、１５．４±０．１、１９．２±０．１、１９．７±０．１、２０．０±０．１、２１．８±０．１、２１．９±０．１、２３．５±０．１、２４．６５±０．１（または２４．７±０．１）、２５．８±０．１、および２７．０±０．１°２θ角を有する粉末Ｘ線回折（ＸＲＰＤ）スペクトルによって特徴付けられる；
ただし、粉末Ｘ線回折スペクトルは、以下の２つのピーク：２０．０±０．１°２θ、
および２４．６５±０．１または２４．７±０．１°２θのいずれかを有する。
【００３３】
別法としてまたはさらに、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩、例えば、一塩酸塩の結晶形２は、２θ角（°）単位で表され、銅Ｋα（銅Ｋ−アルファ）Ｘ線照射して回折計で得られた、図２に示されるものと実質上同一の粉末Ｘ線回折（ＸＲＰＤ）スペクトルによって特徴付けられる。
【００３４】
１の実施態様において、本明細書に記載のＸＲＰＤスペクトルピークによって特徴付けられるおよび／または図２に示されるものと実質上同一のＸＲＰＤスペクトルによって特徴付けられる、結晶形２は、０．０１６７°２θ以下のステップサイズ、および／または３１．７５秒以上の時間／ステップ、および／またはシリコンウエハープレート上に置いたサンプルを用いて回折計で得られるようにさらに特徴付けられうる。
【００３５】
別法としてまたはさらに、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩、例えば、一塩酸塩の結晶形２は、図７に示されるものと実質上同一の固体フーリエ変換赤外線（ＦＴ−ＩＲ）スペクトルによって特徴付けられうる。図７は、２０００〜６７５ｃｍ−１のスペクトル域における結晶形２のＦＴ−ＩＲスペクトルを示す。ＦＴ−ＩＲスペクトルは、例えば、Ｎｉｃｏｌｅｔ  Ａｖａｔａｒ  ３６０  ＦＴ−ＩＲ分光計を用いて測定されうる、および／または例えば、４ｃｍ−１または２ｃｍ−１分解能で測定されうる。変化は、±２ｃｍ−１、例えば、±１ｃｍ−１の各ピークについて認められうる。
【００３６】
別法としてまたはさらに、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩、例えば、一塩酸塩の結晶形２は、共鳴に対する以下の化学シフト：１８．８±０．３、１９．５±０．３、３２．４±０．３、３７．５±０．３、４５．７±０．３、４９．３±０．３、５２．７±０．３、５９．１±０．３、６６．３±０．３、７１．１±０．３、１０９．４±０．３、１１９．６±０．３、１２８．４±０．３、１３１．３±０．３、１３４．３±０．３、１５８．７±０．３、および１６７．８±０．３ｐｐｍを有する１３Ｃ固体核磁気共鳴（固体ＮＭＲ）スペクトルによって特徴付けられる。該固体ＮＭＲスペクトルは、例えば、２９６Ｋの温度にて４ｍｍ  Ｂｒｕｋｅｒ  ＨＦＸ  ＭＡＳ（マジック角回転）プローブを用いて、および／または、例えば、８ｋＨｚの回転速度を用いて、例えば、１３Ｃ観察の９０．５５ＭＨｚの周波数で得られうる。データは、例えば、側波帯抑圧を伴う交差分極配列を用いて得られうる。１０秒の弛緩遅延は、スキャン中に用いられうる。
【００３７】
本発明の塩酸塩は、適当には、実質的に結晶形２の形態である（例えば、７０重量％以上または８０重量％以上または９０重量％以上またはモル濃度）。
【００３８】
合成法
本発明はまた、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンまたはその塩（例えば、医薬上許容される塩）の調製法であって、
ａ）塩化４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）ベンゾイルを１−イソプロピルピペラジンと反応させること；または
ｂ）カルボン酸基が活性化されている４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸またはその非酸性塩化物誘導体を１−イソプロピルピペラジンと反応させること；
ならびに１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンの塩（例えば、医薬上許容される塩）を所望により調製することを含む方法を提供する。
【００３９】
方法（ａ）は、典型的には、適当な溶媒、例えば、非水性有機溶媒、例えば、ジクロロメタン中適当な温度、例えば、約−１０℃〜約４０℃、例えば、室温での、適当な塩基、例えば、トリエチルアミンまたは固体支持塩基（例えば、ジエチルアミノメチルポリスチレン）の存在下における、アミド形成条件の使用を含む。方法（ａ）の具体的な実施態様において、触媒量のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）は反応物を触媒するために加えられる。
【００４０】
合成法において、室温（常温）は通常、１２〜３５℃、例えば、１８〜３０℃または１８〜２５℃、例えば、約２２℃である。
【００４１】
方法（ｂ）は、典型的には、例えば、適当な溶媒、例えば、極性非プロトン性有機溶媒、例えば、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、アセトニトリルまたはプロピオニトリルにおける、カップリング試薬での４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸の活性化、次いで、１−イソプロピルピペラジンとの反応を含む。
【００４２】
１の実施態様において、カップリング試薬は、有機二置換カルボジイミド、例えば、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ）またはジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）であり、その場合、所望により１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）の存在下において反応は行われうる、および／または反応溶媒は、例えば、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドでありうる、および／または反応温度は、例えば、約０℃〜約４０℃、例えば、室温でありうる。
【００４３】
方法（ｂ）では、１の実施態様において、カップリング試薬は、カルボニルジイミダゾール、塩化ピバロイル（塩化トリメチルアセチル）または２−プロパンホスホン酸無水物である。しかしながら、４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸とカップリング試薬との活性化について、特に中規模または大規模で行われる方法については、カップリング試薬がカルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）であることが好ましい。中規模または大規模で、カップリング試薬としてのカルボニルジイミダゾールの使用は、カップリング試薬としての塩化ピバロイル（塩化トリメチルアセチル）または２−プロパンホスホン酸無水物の使用に比べて、よりよい収率および／またはよりクリーンな反応が得られると考えられる。
【００４４】
方法（ｂ）では、より具体的には、４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸とカルボニルジイミダゾールカップリング試薬との活性化、次いで、１−イソプロピルピペラジンとの反応は両方とも、アセトニトリルおよび／またはプロピオニトリル、より具体的には、アセトニトリルを含む（または、１の具体的な実施態様において、本質的にはそれらからなる）反応溶媒中で行われる。
【００４５】
カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）が、４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸の活性化、次いで、１−イソプロピルピペラジンとの反応のためのカップリング試薬として用いられる場合、その場合、反応条件は、独立しておよび／またはいずれか組み合わせて、特に以下のとおりでありうる：
【００４６】
−カルボニルジイミダゾールは、典型的には、０．５〜１．５モル当量（４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸のモル数を基準にして）、適当には０．９〜１．１モル当量、好ましくは１．０〜１．１モル当量、例えば、１．１モル当量で存在する；および／または
【００４７】
−１−イソプロピルピペラジンは、典型的には、０．５〜１．５モル当量（４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸を基準にして）、適当には１．０〜１．２５モル当量、好ましくは１．１〜１．２モル当量、例えば、１．１５または１．２モル当量で存在する；および／または
【００４８】
−反応（４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸とＣＤＩとの活性化、または１−イソプロピルピペラジンとの次反応、あるいは両方）は、典型的には、適当な有機溶媒、例えば、極性非プロトン性有機溶媒、例えば、アセトニトリル、プロピオニトリル、ジメチルスルホキシド、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、Ｎ−メチルピロリジノン（ＮＭＰ）、および／または１，４−ジオキサンを含む（例えば、本質的にはそれらからなる）溶媒中で行われ、好ましくは反応溶媒は、アセトニトリルおよび／またはプロピオニトリル、より好ましくはアセトニトリルを含む（例えば、本質的にはそれらからなる）；および／または
【００４９】
−反応溶媒中のわずかな割合の水は大抵、耐性でありうるが、反応溶媒は、典型的には、乾燥している；および／または
【００５０】
−反応溶媒がアセトニトリルまたはプロピオニトリルである場合、反応温度（４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸おカルボニルジイミダゾールとの活性化、または１−イソプロピルピペラジンとの次反応のいずかについて、あるいは両方について）は、例えば、約０℃〜溶媒の沸点または還流温度でありうる。活性化反応の温度は、例えば、約２０〜約４０℃の範囲内（例えば、約３０℃）であって、１−イソプロピルピペラジンとの次反応は、約２０℃〜反応溶媒の沸点または還流温度（例えば、約４０〜約６０℃、例えば、約５０℃）でありうる；該低い活性化反応温度は、ＣＤＩ分解の低下による収率を最大にするのに有用でありうるが、活性化反応後の任意の残存している過剰のＣＤＩは、１−イソプロピル−ピペラジン−４−イル−Ｃ（Ｏ）−イミダゾールまたはその塩であると考えられる除去しにくい不純物を形成するために後で加えられた１−イソプロピルピペラジンと反応する可能性が高いと考えられている。したがって、最近になって、約５０℃〜反応溶媒の沸点／還流温度または約６０℃〜沸点／還流温度（例えば、約６０〜約７０℃、例えば、６５〜７０℃、例えば、アセトニトリル溶媒中）にて４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸をカルボニルジイミダゾールで活性化し、所望により例えば、該不純物を潜在的に減少させるために、１−イソプロピルピペラジンとの次反応の温度として該温度範囲（約５０℃〜沸点／還流温度、例えば、約６０℃〜約７０℃）を有することも好ましいと考えられている；および／または
【００５１】
−１−イソプロピルピペラジンを活性化４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸と混合する前に、４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸およびカルボニルジイミダゾールは、典型的には、少なくとも０．５時間、適当には少なくとも２時間、例えば、０．５〜５時間、例えば、０．５〜３時間、例えば、２〜５時間または２〜３時間（例えば、攪拌しながら）一緒に反応する；および／または
【００５２】
−カルボニルジイミダゾールによる４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸の活性化の生成物、および１−イソプロピルピペラジンは、典型的には、少なくとも０．５時間（例えば、０．５〜２４時間）、適当には少なくとも１時間（例えば、１〜３時間）、例えば、少なくとも２時間（例えば、２〜３時間）（例えば、攪拌しながら）一緒に反応する。
【００５３】
１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンの塩（例えば、塩酸塩）の調製のための一般的プロセス：
本発明の化合物の塩（例えば、塩酸塩）を調製、結晶化および単離するために、１の実施態様において、４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸がカップリング試薬（例えば、カルボニルジイミダゾール）によって活性化されている反応、次いで、反応溶媒、例えば、アセトニトリルまたはプロピオニトリル中における、活性化された酸と１−イソプロピルピペラジンとの反応の終わりに、以下のプロセスが実施されうる：
【００５４】
−反応溶媒（例えば、アセトニトリルまたはプロピオニトリル）の容量が、約２〜５容量、例えば、約３容量（例えば、アセトニトリルまたはプロピオニトリル）に減圧下で減少する、および
【００５５】
−次いで、適当な塩形成酸（例えば、ＨＣｌ）の適当な溶媒（例えば、以下に記載の結晶化溶媒、例えば、イソプロパノール）中溶液（例えば、塩酸塩を調製するために：これは、イソプロパノール中ＨＣｌ、例えば、イソプロパノール中５〜６Ｎ  ＨＣｌ、例えば、その約０．９容量でありうる）は、用いられる４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸のモル量に対して０．５〜１．３モル当量、例えば、０．８５〜１．０５モル当量、例えば、１．０モル当量の量で加えられる好ましくは適当な塩形成酸、例えば、ＨＣｌとの反応混合物に加えられる、および
【００５６】
−好ましくは、適当な塩形成酸の添加前または後または同時に、結晶化溶媒を加える（ここで、結晶化溶媒は、例えば、Ｃ１−３アルコールまたはｎ−ブタノールであるアルコール（アルコールの混合物を含む）、例えば、イソプロパノール、ｎ−プロパノール、プロパノール、ｎ−ブタノール、エタノール、またはメタノール；水およびＣ１−３アルコールまたはｎ−ブタノールである混合液、例えば、イソプロパノール：水、エタノール：水、またはメタノール：水；酢酸イソプロパノール；酢酸エチル；Ｃ３−６ケトン、例えば、メチルイソブチルケトン（ＭＩＢＫ）、メチルエチルケトン、またはアセトン；アセトニトリル；またはジクロロメタンを含みうるかまたはそれらでありうる；ここで、適当には、結晶化溶媒は、Ｃ１−３アルコールまたはｎ−ブタノールであるアルコール（アルコールの混合物を含む）、または水およびＣ１−３アルコールまたはｎ−ブタノールであるアルコールの混合液；例えば、好ましくは：イソプロパノール、イソプロパノール：水、例えば、約２〜１０％、例えば、約２〜５％、例えば、約５％水／イソプロパノール、またはエタノール：水、例えば、約１〜５％水／エタノールもしくは工業用変性アルコールを含むかそれらである）（例えば、６〜２０容量、例えば、約１２容量の結晶化溶媒は例えば加えられうる）、および
【００５７】
−塩（例えば、ＨＣｌ塩）生成物を含む溶媒含有混合物は、約５０℃〜溶媒の沸点または還流温度（例えば、約５０〜７５℃、例えば、約６０〜７０℃、例えば、約６０〜６５℃）の温度であるか、またはそれらに加熱される、および
【００５８】
−１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンの塩（例えば、塩酸塩）は、（例えば、熱混合物を冷却することによって）熱混合物から結晶化または再結晶されうるかまたは生じる、および
【００５９】
−１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンの結晶塩（例えば、塩酸塩）は、溶媒（例えば、濾過によって）単離され、（例えば、約４０〜６０℃、例えば、約５０℃にて減圧下で乾燥することによって、または室温にて、例えば、気体、例えば、空気または窒素の吸引または気流下で乾燥することによって）通常乾燥される。
【００６０】
１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンの塩酸塩（一塩酸塩）について、理論にとらわれることなく、上記タイプのＨＣｌ塩形成および結晶化の予備実験から、結晶形１は大抵、塩形成プロセスの動力学的生成物である傾向にあり、結晶形２は熱力学的生成物（すなわち、熱力学的により安定な生成物）であるように考えられる。結晶形１（または結晶形１の優位性）は大抵、条件によって最初に形成されるが、条件（例えば、溶媒の種類および結晶形１の溶媒中での安定性、および／または温度および／または温度経時変化、および／または結晶形１と溶媒との接触時間）によって、次いで、結晶形１は大抵、適当な溶媒、すなわち、結晶形１を結晶形２に変換するのに適当な溶媒と接触する場合、多かれ少なかれ結晶形２に変換されうる。
【００６１】
したがって、本発明は、１の態様において、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩（例えば、一塩酸塩）の結晶形２の調製方法であって、結晶形１を結晶形２に変換するのに十分な時間および／または十分に高い温度で、結晶形１を適当な変換溶媒と接触させることによって、例えば、結晶形１を適当な変換溶媒中でスラリー化することによって、結晶形１を結晶形２に変換することを含む、方法を提供する。適当な変換溶媒は、典型的には、Ｃ１−３アルコールまたはｎ−ブタノールあるいはＣ１−３アルコールまたはｎ−ブタノールであるアルコールの混合液を含む（例えば、本質的にはそれらからなる）。変換をもたらすのに必要な時間および／または温度は、例えば、溶媒および結晶形１の溶媒中での安定性に依存しうる。変換プロセルにおいて、プロセルの結晶生成物は、適当には、結晶形純度に関して実質的に結晶形２の形態である（例えば、７０重量％以上または８０重量％以上または９０重量％以上または９５重量％以上またはモル濃度）。
【００６２】
１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩の結晶形１を調製するために、
−上記のＨＣｌ塩形成プロセルは、適当には、結晶溶媒、例えば、Ｃ１−３アルコールまたはｎ−ブタノールあるいは水およびＣ１−３アルコールまたはｎ−ブタノールであるアルコールの混合液を含む溶媒、特に、イソプロパノール、ｎ−プロパノール、ｎ−ブタノール、エタノールまたはその混合液を使用する、および
−形成後、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩（例えば、一塩酸塩）は、結晶の発生から測定された熱混合物を、例えば、約０〜２５℃に２〜４時間以下にわたって（例えば、１．５〜３時間かけて、例えば、約１．５時間かけて）冷却することによって熱混合物から結晶化または再結晶されうるかまたは生じる、および
−結晶形１を含む１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンの結晶性塩酸塩は、結晶の発生から測定された溶媒との接触時間のわずか６時間（好ましくはわずか４時間、例えば、わずか２〜３時間、例えば、約１．５時間）後に溶媒から単離される。
【００６３】
１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩の結晶形２を調製するために、例えば、結晶形１を結晶形２に変換することによって、
−（ｉ）上記のＨＣｌ塩形成プロセスは、結晶化溶媒（例えば、Ｃ１−３アルコールまたはｎ−ブタノールであるアルコール（アルコールの混合液を含む）、あるいは水およびＣ１−３アルコールまたはｎ−ブタノールであるアルコールの混合液、特に、イソプロパノール、ｎ−プロパノール、ｎ−ブタノール、エタノール、メタノール、イソプロパノール：水、エタノール：水、またはメタノール：水；好ましくは、イソプロパノール、またはイソプロパノール：水、例えば、約２〜１０％、例えば、約２〜５％、例えば、約５％水／イソプロパノール、またはエタノール：水、例えば、約１〜５％水／エタノールまたは工業用変性アルコール）を使用する；
および
−（ｉｉ）（ａ）結晶化溶媒がメタノール、イソプロパノール：水、ｎ−プロパノール：水、ｎ−ブタノール：水、エタノール：水、またはメタノール：水である場合において、形成後、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩（例えば、一塩酸塩）は、（好ましくは、徐冷却を用いて）結晶化開始から測定４時間以上（例えば、５〜６時間以上）にわたって熱混合物を、例えば、約０〜約３０℃に冷却することによって；所望により、冷却前に、結晶化開始から測定０．５時間以上（例えば、１時間以上、例えば、１〜３時間、または２時間以上、例えば、約２時間）約５０℃〜溶媒の沸点または還流温度（例えば、約５０〜７５℃、例えば、約６０〜７０℃、例えば、約６０〜６５℃）にて塩および溶媒の混合物（例えば、スラリー）を熟成することによって、（例えば、約５０〜７５℃、例えば、約６０〜７０℃、例えば、約６０〜６５℃にて）熱混合物から結晶化または再結晶されうるかまたは生じるか；
または
−（ｉｉ）（ｂ）結晶化溶媒がエタノール、イソプロパノール、ｎ−プロパノールまたはｎ−ブタノールである場合において、形成後、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩（例えば、一塩酸塩）は、熱混合物から結晶化または再結晶されうるかまたは生じ、塩および溶媒の混合物（例えば、スラリー）は、結晶化開始から測定６時間以上（例えば、１０時間以上、例えば、１５時間以上、例えば、約１８〜２４時間）約５０℃〜溶媒の沸点または還流温度（例えば、約５０−７５℃、例えば、約６０−７５℃、例えば、約６０−７０℃）で熟成され；次いで、熱混合物は、例えば、徐冷却を用いて、例えば、約０〜約３０℃に冷却される；
および
−（ｉｉｉ）１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンの結晶性塩酸塩は、実質的に結晶形２の形態であり（例えば、８０重量％以上または９０重量％または９５重量％またはモル濃度）、溶媒（例えば、濾過によって）溶媒から単離され、（例えば、約４０〜６０℃、例えば、約５０℃にて減圧下で乾燥することによって、または例えば、室温にて、例えば、気体、例えば、空気または窒素の吸引または気流下で乾燥することによって）通常乾燥される。
【００６４】
合成プロセス、継続
塩化４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）ベンゾイル（Ｖ）または４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸（ＩＶ）は、以下のスキーム（式中：Ｐは適当な保護基、例えば、Ｃ１−６直鎖アルキル（例えば、メチルエチル、ｎ−プロピルまたはｎ−ブチル）またはイソプロピルまたはイソブチル、またはベンジル；例えば、メチルまたはエチル；特にメチルを示す）にしたがって調製されうる。
【化４】
2010538041.tif 000006
【００６５】
工程（ｉ）は、典型的には、適当な溶媒、例えば、テトラヒドロフラン、トルエンおよび／またはキシレン（ここで、「キシレン」は、ｏ−キシレン、ｍ−キシレン、ｐ−キシレン、またはキシレンの混合物でありうる）中におけるホスフィン、例えば、トリフェニルホスフィンの使用、次いで、適当な温度、例えば、室温〜約８０℃、例えば、室温での、アゾジカルボン酸塩、例えば、アゾジカルボン酸ジエチルまたはアゾジカルボン酸ジイソプロピルの添加（例えば、スロー添加および／または滴下）を含む。反応時間（任意のアゾジカルボン酸塩添加時間を含む）は、例えば、０．５〜７２時間でありうる。テトラヒドロフランを反応溶媒として用いる場合、室温を使用することができ、反応時間は、例えば、３〜７２時間である。反応溶媒が、トルエンおよび／またはキシレン、特にトルエンを含むかまたは本質的にそれらからなる場合、約４０〜約８０℃、例えば、約４０〜約７０℃、例えば、約５５℃の反応温度を使用することができ、および／または約０．５〜６時間、例えば、０．５〜３時間、例えば、１〜２時間の反応時間（任意のアゾジカルボン酸塩添加時間を含む）を使用することができる。好ましい実施態様において、反応溶媒は、トルエンおよび／またはキシレン、特にトルエンを含むかまたはそれらからなり、反応工程（ｉ）は、トリフェニルホスフィンおよびアゾジカルボン酸ジイソプロピルを使用する；その場合、適当には、加熱（例えば、約４０〜７０℃）反応混合物を例えば、０．５〜２時間冷却することができ（例えば、−１０〜２５℃に、例えば、約０〜５℃に、ただし、溶媒の融点以下には冷却されない）、次いで、形成された固体副生成物を、例えば、濾過により除去する。反応溶媒としてのトルエンの使用は、溶液からトリフェニルホスフィンオキシドおよびヒドラジンジカルボン酸ジイソプロピルの副生成物付加物を結晶化するのに有用であり（特に、反応混合物を該付加物とシードする場合、例えば、冷却後）、粗生成物（ＩＩＩ）中のトリフェニルホスフィンオキシドの濃度を低下させるのに有用である。
【００６６】
反応工程（ｉ）において溶媒としてトルエンおよび／またはキシレンを用いる場合、１の実施態様において、式（ＩＩＩ）の反応生成化合物は単離されない。所望により、この実施態様において、式（ＩＩＩ）の化合物のトルエンおよび／またはキシレン溶液は、次反応（脱保護、例えば、加水分解）工程（ｉｉ）に直接用いられ、特に、Ｃ１−６直鎖アルキル（例えば、メチルエチル、ｎ−プロピルまたはｎ−ブチル）またはイソプロピルまたはイソブチルの場合、次工程（ｉｉ）はエステルのアルカリ（例えば、ＮａＯＨまたはＫＯＨ）加水分解を含む。
【００６７】
本発明のさらなる態様によれば、式（ＩＩＩ）：
【化５】
2010538041.tif 000007
［式中：Ｐは、保護基、例えば、Ｃ１−６直鎖アルキル（例えば、メチルエチル、ｎ−プロピルまたはｎ−ブチル）またはイソプロピルまたはイソブチル、またはベンジル（特に、Ｃ１−６直鎖アルキルまたはイソプロピル、例えば、メチルまたはエチル）を示す］
で示される化合物の調製方法であって、
（ｉ）式（Ｉ）：
【化６】
2010538041.tif 000008
［式中：Ｐは、式（ＩＩＩ）の化合物に記載の保護基を示す］
で示される化合物を式（ＩＩ）の４−ヒドロキシテトラヒドロピランまたはそのＯＨ基が活性化されるその誘導体と反応させることを含み、ここで、反応工程（ｉ）が、トルエンおよび／またはキシレン（特に、トルエン）を含むかまたは本質的にそれらからなる反応溶媒中で実施されるところの、方法が提供される。
【００６８】
「キシレン」は、ｏ−キシレン、ｍ−キシレン、ｐ−キシレン、またはキシレンの混合物でありうる。
【００６９】
トルエンおよび／またはキシレンを含む工程（ｉ）反応溶媒を用いる本発明の該プロセス態様において、工程（ｉ）の反応条件は、特に、一般合成法の工程（ｉ）については本明細書に記載のとおりでありうる。特に、反応工程（ｉ）は、トリフェニルホスフィンおよびアゾジカルボン酸ジイソプロピルを使用しうる。トルエンおよび／またはキシレン、特にトルエンを含む工程（ｉ）反応溶媒について、約４０〜約８０℃、例えば、約４０〜約７０℃、例えば、約５５℃の反応温度を使用することができる；および／または約０．５〜６時間、例えば、０．５〜３時間、例えば、１〜２時間の反応時間（任意のアゾジカルボン酸塩添加時間を含む）を使用することができる。具体的な実施態様において、工程（ｉ）反応溶媒がトルエンおよび／またはキシレン、好ましくはトルエンを含み、反応工程（ｉ）がトリフェニルホスフィンおよびアゾジカルボン酸ジイソプロピルを使用する場合、加熱（例えば、約４０〜７０℃）反応混合物を例えば、０．５〜２時間冷却することができ（例えば、−１０〜２５℃に、例えば、約０〜５℃に、ただし、溶媒の融点以下に冷却されない）、次いで、形成された固体副生成物（トリフェニルホスフィンオキシドおよびヒドラジンジカルボン酸ジイソプロピルの付加物）は例えば、濾過により除去される。特に、反応混合物は、例えば、反応混合物を冷却した後に、トリフェニルホスフィンオキシドおよびヒドラジンジカルボン酸ジイソプロピルの付加物とシードされうる。反応溶媒としてのトルエンの使用は、溶液からトリフェニルホスフィンオキシドおよびヒドラジンジカルボン酸ジイソプロピルの付加物を結晶化するのに有用であり（特に、反応混合物が、例えば、冷却後に該付加物とシードされる場合）、粗生成物（ＩＩＩ）中のトリフェニルホスフィンオキシドの濃度を低下させるのに有用である。
【００７０】
トルエンおよび／またはキシレンを含む工程（ｉ）反応溶媒を用いて、式（ＩＩＩ）の化合物を調製する方法である本発明の態様について、４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸である、式（ＩＶ）の化合物の調製方法であって、
−トルエンおよび／またはキシレンを含むかまたは本質的にそれらからなる反応溶媒を用いて工程（ｉ）を実施すること、次いで、
−（ｉｉ）ＰがＣ１−６直鎖アルキル（例えば、メチルエチル、ｎ−プロピルまたはｎ−ブチル）またはイソプロピルまたはイソブチル（特に、メチルまたはエチル）を示す場合、式（ＩＩＩ）の化合物のうちのエステルを、例えば、アルカリ条件下（例えば、水酸化ナトリウムまたは水酸化カリウム、例えば、水性を用いて）で加水分解することによって、あるいは例えば、Ｐがベンジルを示す場合、水素化によって、式（ＩＩＩ）の化合物を式（ＩＶ）の化合物に変換することを含む、方法も提供される。
【００７１】
本発明の該プロセル態様において、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンまたはその塩の調製方法であって、
−トルエンおよび／またはキシレンを含むかまたは本質的にそれらからなる反応溶媒を用いて工程（ｉ）を実施すること；次いで、
−（ｉｉ）式（ＩＩＩ）の化合物を４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸である、例えば、本明細書に記載の、式（ＩＶ）の化合物に変換すること；次いで、
−ａ）４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸を塩化４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）ベンゾイルに変換し、次いで、これを１−イソプロピルピペラジンと反応させること；
−あるいはｂ）４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸を１−イソプロピルピペラジンを反応させること、または４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸をカルボン酸基が活性化されているその非酸性塩化物誘導体に変換すること、次いで、これを１−イソプロピルピペラジンと反応させること、のいずれか；
−ならびに、所望により１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンの塩（例えば、医薬上許容される塩）を調製することを含む、方法も提供される。
【００７２】
工程ａ）および／またはｂ）は、例えば、本明細書に記載のとおりでありうる。
【００７３】
工程（ｉｉ）は、脱保護反応である。ＰがＣ１−６直鎖アルキル（例えば、メチルエチル、ｎ−プロピルまたはｎ−ブチル）またはイソプロピルまたはイソブチル（特に、メチルまたはエチル）を示す場合、反応は、典型的には、適当な溶媒、例えば、メタノール（例えば、Ｐ＝Ｍｅの場合）、またはエタノール（例えば、Ｐ＝Ｅｔの場合）、またはトルエンおよび／またはキシレン中例えば、適当な温度、例えば、７０〜１００℃（例えば、９５℃または８０℃）および／または還流温度にて、例えば、１〜２４時間、例えば、２〜６時間または２〜３時間；典型的には、加水分解が実質的に終わるまで、適当なアルカリ（例えば、水性）、例えば、水酸化ナトリウムまたは水酸化カリウム（例えば、水性水酸化ナトリウムまたは水酸化カリウム溶液）で処理することを含む。具体的な実施態様において、工程（ｉｉ）反応溶媒がトルエンおよび／またはキシレンであり、反応が適当な水性アルカリ、例えば、水性水酸化ナトリウムまたは水酸化カリウム溶液での処理を含む場合、反応は、効率的（例えば、激しい）攪拌または混合を含む。
【００７４】
具体的な実施態様において、工程（ｉ）で製造された、式（ＩＩＩ）の化合物を含有するトルエンおよび／またはキシレン溶液は、特に、次工程（ｉｉ）がエステルのアルカリ（例えば、ＮａＯＨまたはＫＯＨ）加水分解を含む場合、次の加水分解工程（ｉｉ）に直接、すなわち、式（ＩＩＩ）の化合物を単離することなく用いられる。工程（ｉ）および／または（ｉｉ）の反応条件は、特に本明細書に記載のとおりでありうる、例えば、反応工程（ｉ）は、トリフェニルホスフィンおよびアゾジカルボン酸ジイソプロピルを使用しうる。
【００７５】
Ｐがベンジルを示す場合、脱保護反応（ｉｉ）は、水素化を含みうる。
【００７６】
本発明の別の態様によれば、４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸である、式（ＩＶ）：
【化７】
2010538041.tif 000009
で示される化合物の調製方法であって、
（ｉ）式（Ｉ）の化合物（式中：ＰはＣ１−６直鎖アルキル（例えば、メチルエチル、ｎ−プロピルまたはｎ−ブチル）またはイソプロピルまたはイソブチル（特に、メチルまたはエチル）を示す）を式（ＩＩ）の４−ヒドロキシテトラヒドロピランまたはそのＯＨ基が活性化される誘導体と反応させて、式（ＩＩＩ）の化合物（式中：Ｐは式（Ｉ）の化合物についての定義と同義である）を調製すること、および
（ｉｉ）式（ＩＩＩ）の化合物のうちのエステルを、例えば、アルカリ条件下（例えば、水酸化ナトリウムまたは水酸化カリウム、例えば、水性）を加水分解して、式（ＩＶ）の化合物を形成することを含み、ここで、
反応工程（ｉ）および（ｉｉ）が両方、トルエンおよび／またはキシレン（特に、トルエン）を含むかまたはそれらからなる反応溶媒中で実施されるところの、方法が提供される。
【００７７】
「キシレン」は、ｏ−キシレン、ｍ−キシレン、ｐ−キシレン、またはキシレンの混合物でありうる。
【００７８】
本発明の該プロセル態様の具体的な実施態様において、工程（ｉ）で製造された式（ＩＩＩ）の化合物のトルエンおよび／またはキシレン溶液は、特に次工程（ｉｉ）がエステルのアルカリ（例えば、ＮａＯＨまたはＫＯＨ）加水分解を含む場合、次の加水分解工程（ｉｉ）に直接、すなわち、式（ＩＩＩ）の化合物を単離することなく用いられる。工程（ｉ）および／または（ｉｉ）の反応条件は、特に本明細書に記載のとおりでありうる、例えば、反応工程（ｉ）は、トリフェニルホスフィンおよびアゾジアカルボン酸ジイソプロピルを使用しうる。本発明の該プロセル態様の具体的な実施態様において、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンまたはその塩の調製方法であって、
−反応工程（ｉ）および（ｉｉ）が両方とも、例えば、上記の、トルエンおよび／またはキシレンを含むかまたはそれらからなる、反応溶媒中で実施される、工程（ｉ）および（ｉｉ）を実施すること；次いで、
−ａ）４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸を塩化４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）ベンゾイルに変換し、次いで、これを１−イソプロピルピペラジンと反応させること；
−あるいはｂ）４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸を１−イソプロピルピペラジンと反応させること、または４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸をカルボン酸基が活性化されているその非酸性塩化物誘導体変換させること、次いで、それを１−イソプロピルピペラジンと反応させること、のいずれか；
−ならびに、所望により１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンの塩（例えば、医薬上許容される塩）を調製することを含む、方法も提供される。
【００７９】
工程ａ）および／またはｂ）は、例えば、本明細書に記載のとおりでありうる。
【００８０】
工程（ｉｉｉ）は、典型的には、例えば、適当な溶媒（例えば、非水性有機溶媒）、例えば、ジクロロメタンまたは酢酸エチル（適当には、ジクロロメタン）中、または（塩化チオニルについては）溶媒なしに適当な温度、例えば、室温にて適当な塩素化剤、例えば、塩化オキサリルまたは塩化チオニルで処理することを含む。
【００８１】
式（Ｉ）の化合物は、商業的に入手可能であるか（例えば、４−ヒドロキシ安息香酸メチルはＡｌｄｒｉｃｈから入手可能である）、またはそれらは標準的方法を用いて商業的に入手可能な化合物から調製されうる。１−イソプロピルピペラジンおよび４−ヒドロキシテトラヒドロピランは、例えば、Ａｌｄｒｉｃｈから商業的に入手可能である。
【００８２】
使用
１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンまたはその医薬上許容される塩は、ヒスタミンＨ３受容体に対しアフィニティーを有し、ヒスタミンＨ３受容体のアンタゴニストおよび／または逆アゴニストであり、例えば、有用な治療的特性を有する可能性がある。
【００８３】
より具体的には、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンまたはその医薬上許容される塩は、
−神経疾患（例えば、ヒトなどの哺乳動物における）；例えば、認識機能障害（群）、認知障害、アルツハイマー病、認知症（例えば、レヴィー小体認知症または血管性認知症）、加齢に伴う記憶機能障害、てんかん、片頭痛、パーキンソン病、多発性硬化症（疲労を含む）、疲労（特に、多発性硬化症における疲労、鬱病における疲労、ガンまたはガン化学療法における疲労、あるいは慢性疲労症候群）、例えば、認識および／または精神的疲労、卒中、神経障害に由来する疼痛（例えば、神経痛、例えば、ヘルペス後神経痛、神経炎、神経障害性背痛、異痛など）、炎症性疼痛（特に、慢性炎症性疼痛、例えば、変形性関節症における疼痛または関節リウマチもしくは炎症性背痛における疼痛；または急性炎症性疼痛）、または睡眠障害（例えば、過剰傾眠、日中の過剰な眠気、ナルコレプシー、またはパーキンソン病、レストレスレッグス症候群および／または疲労、特に多発性硬化症に付随する睡眠不足）；
ここで、認識機能障害（群）は、アルツハイマー病、認知症（例えば、レヴィー小体認知症または血管性認知症）、軽度認識機能障害、または関連神経変性障害における認識機能障害（群）；あるいはパーキンソン病における認識機能障害（群）、あるいは総合失調症における認識機能障害（群）でありうる；あるいは
−精神疾患（例えば、ヒトなどの哺乳動物における）；例えば、精神異常（例えば、統合失調症または双極性障害）、注意欠陥過活動性障害（ＡＤＨＤ）、鬱病（大鬱病性障害を含む）、不安症または依存症；あるいは
−他の疾患（例えば、ヒトなどの哺乳動物における）；例えば、肥満症または消化器疾患の治療または予防（特に、治療）における潜在的な用途を有する。
【００８４】
したがって、本発明はまた、上記障害のいずれか；特に、認識機能障害（群）、例えば、疾患、例えば、アルツハイマー病、認知症（例えば、レヴィー小体認知症または血管性認知症）、軽度認識機能障害、または関連神経変性障害における認識機能障害（群）、またはパーキンソン病における認識機能障害（群）、または統合失調症における認識機能障害（群）；あるいは疲労；あるいは睡眠障害の治療または予防（特に、治療）における治療剤として用いるための、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンまたはその医薬上許容される塩を提供する。
【００８５】
本発明はまた、ヒトなどの哺乳動物（例えば、ラットなどの齧歯動物、またはブタもしくはヒト）における上記障害のいずれか、特に、認識機能障害（群）、疲労または睡眠障害の治療または予防（特に、治療）における治療剤として用いるための、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンまたはその医薬上許容される塩を提供する。
【００８６】
本発明は、ヒトなどの哺乳動物における、上記障害のいずれか、例えば、神経疾患の治療方法または予防方法（特に、治療方法）であって、治療上有効な量の１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンまたはその医薬上許容される塩を患者（それを必要とする哺乳動物）に投与することを含む、方法をさらに提供する。
【００８７】
本発明は、治療を必要とする、ヒトなどの哺乳動物（例えば、ラットなどの齧歯動物、またはブタもしくはヒト）における、
−認識機能障害（群）；例えば、疾患、例えば、アルツハイマー病、認知症（例えば、レヴィー小体認知症または血管性認知症）、軽度認識機能障害、または関連神経変性障害における認識機能障害（群）、またはパーキンソン病における認識機能障害（群）、または陶業失調症における認識機能障害（群）；
−あるいは、疲労（特に、多発性硬化症における疲労、鬱病における疲労、ガンもしくはガン化学療法における疲労、または慢性疲労症候群）；
−あるいは、睡眠障害（例えば、過剰傾眠、日中の過剰な眠気、ナルコレプシー、またはパーキンソン病、レストレスレッグス症候群および／または疲労に付随する睡眠不足）の治療方法または予防方法（特に、治療方法）であって、治療上有効な量の１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンまたはその医薬上許容される塩を哺乳動物に投与することを含む、方法をさらに提供する。
【００８８】
別の態様において、本発明は、上記障害のいずれか、特に、神経疾患および／または特に認識機能障害（群）、疲労もしくは睡眠障害の治療または予防（特に、治療）に用いるための医薬の製造における、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンまたはその医薬上許容される塩の使用を提供する。
【００８９】
特に、本発明は、ヒトなどの哺乳動物（例えば、ラットなどの齧歯動物、またはブタもしくはヒト）における、上記障害のいずれか、特に、神経疾患および／または特に、認識機能障害（群）、疲労もしくは睡眠障害の治療または予防（特に、治療）に用いるための医薬の製造における１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンまたはその医薬上許容される塩の使用を提供する。
【００９０】
より具体的には、本発明は、例えば、ヒトなどの哺乳動物（例えば、ラットなどの齧歯動物、またはブタもしくはヒト）における
−認識機能障害（群）；例えば、疾患、例えば、アルツハイマー病、認知症（例えば、レヴィー小体認知症または血管性認知症）、軽度認識機能障害、または関連神経変性障害における認識機能障害（群）、またはパーキンソン病における認識機能障害（群）、または統合失調症における認識機能障害（群）の治療または予防（特に、治療）に用いるための；
−あるいは、疲労（特に、多発性硬化症における疲労、鬱病における疲労、ガンもしくはガン化学療法における疲労、または慢性疲労症候群）の治療または予防（特に、治療）に用いるための；
−あるいは、睡眠障害（例えば、過剰傾眠、日中の過剰な眠気、ナルコレプシー、またはパーキンソン病、レストレスレッグス症候群および／または疲労に付随する睡眠不足）の治療または予防（特に、治療）に用いるための；
医薬の製造における１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンまたはその医薬上許容される塩の使用を提供する。
【００９１】
医薬組成物、用量、および投与計画
医薬として用いる場合、本発明の化合物またはその医薬上許容される塩は通常、医薬組成物中に処方される。かかる組成物は、種々の製法を用いて調製されうる。
【００９２】
したがって、本発明は、１-（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンまたはその医薬上許容される塩および医薬上許容される担体を含む、上記障害のいずれか、例えば、神経疾患および／または認識機能障害（群）、疲労または睡眠障害の治療または予防（例えば、処置）に用いるための医薬組成物をさらに提供する。
【００９３】
本発明は、１-（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンまたはその医薬上許容される塩および医薬上許容される担体を含む医薬組成物をさらに提供する。
【００９４】
混合して、例えば、常温および／または大気圧にて調製されうる、本発明の医薬組成物は通常、経口、非経口または直腸投与に適しており、それ自体は、錠剤、カプセル剤、経口液体製剤、粉末、顆粒、ロゼンジ、再構成粉末、注射または注入溶液または懸濁液、あるいは坐剤の形態でありうる。
【００９５】
経口投与可能な医薬組成物は、例えば、錠剤またはカプセル剤が一般的に好ましい。
【００９６】
経口投与用錠剤またはカプセル剤は、単位剤形であってもよく、１種または複数の賦形剤、例えば、結合剤（例えば、ポビドン、ヒドロキシプロピルメチルセルロースまたはスターチ）、充填剤（例えば、マンニトールまたは乳糖）、微結晶セルロース、潤滑剤、例えば、錠剤化用潤滑剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウムまたはステアリン酸）、崩壊剤、例えば、錠剤崩壊剤、および／または医薬上許容される湿潤剤を含有していてもよい。
【００９７】
錠剤は、例えば、錠剤コーティング方法にしたがって、コーティング、例えば、フィルムコーティングされていてもよい。カプセル剤は、例えば、粉末またはペレット形態で本発明の化合物または塩および１種または複数の賦形剤を含有する、硬または軟カプセル剤でありうる。
【００９８】
経口液体製剤は、例えば、水性または油性懸濁液、溶液、乳濁液、シロップまたはエリキシル剤の形態であってもよく、あるいは使用前に水または他の適当なビヒクルで復元するための乾燥生成物の形態であってもよい。かかる液体製剤は、添加剤（複数でも可）、例えば、懸濁化剤、乳化剤、非水性ビヒクル（食用油を含んでいてもよい）、および／または保存剤、ならびに／あるいは、必要に応じて、香味剤および／または着色剤を含有していてもよい。
【００９９】
非経口投与について、流体単位剤形は、典型的には、本発明の化合物またはその医薬上許容される塩および滅菌ビヒクルを利用して調製される。例えば、用いられるビヒクルおよび／または濃度に依存する、化合物または塩は、ビヒクルに懸濁されうるかまたは溶解されうる。溶液を調製する場合、化合物または塩は、適当なバイアルまたはアンプル中に充填し、密封する前に注射用に溶解され、フィルター滅菌されうる。アジュバント（群）、例えば、局所麻酔薬、保存剤（群）および／または緩衝剤（群）は、ビヒクルに溶解されうる。安定性を強化するために、組成物は、バイアルに充填し、水を真空下で除去した後に凍結されうる。非経口懸濁液は、典型的には、化合物または塩が、溶解される代わりにビヒクルに懸濁されることを除き、実質上同一の方法で調製され、典型的には、滅菌は濾過により達成されない。１の実施態様において、化合物または塩は、滅菌ビヒクルに懸濁する前に、例えば、エチレンオキシドへの曝露により滅菌される。１の実施態様において、界面活性剤または湿潤剤は、化合物または塩の均一分布を促進するために組成物中に含まれる。
【０１００】
医薬組成物は、０．１重量％〜９９重量％の活性物質（すなわち、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンまたはその医薬上許容される塩）の組成物、特に、１〜６０重量％または１０〜６０重量％の活性物質の組成物を含有しうる。例えば、これは、投与経路および／または組成物の使用目的（複数でも可）により変化しうる。
【０１０１】
医薬組成物中の医薬上許容される担体の総量は、例えば、医薬組成物および／またはその使用目的および／または投与経路により変化しうる。
【０１０２】
１の実施態様において、医薬組成物中の医薬上許容される担体の総量（例えば、または、すなわち、その中に存在する１種または複数の賦形剤、例えば、本明細書に記載の１種または複数の賦形剤タイプの総量）は、組成物の１重量％〜９９．９重量％、例えば、組成物の４０重量％〜９９重量％、例えば、４０重量％〜９０重量％の範囲である。さらにまたは別法として、１の実施態様において、単位剤形中の組成物（例えば、経口投与用組成物、例えば、錠剤またはカプセル剤）について、単位剤形の医薬組成物中医薬上許容される担体の総量（例えば、または、すなわち、その中に存在する１種または複数の賦形剤の総量）は、１０ｍｇ〜２０００ｍｇ、例えば、２０ｍｇ〜１５００ｍｇ、例えば、１００ｍｇ〜約１０００ｍｇでありうる。
【０１０３】
例えば、上記障害／疾患／病態の治療もしくは予防に用いられるおよび／または医薬組成物中に含まれる、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンまたはその医薬上許容される塩の投与量、例えば、経口投与量は通常、例えば、障害の重症度、患者の重量、および／または他の同様の因子によって変化しうる。しかしながら、一般的な指針として、１の実施態様において、本発明の化合物またはその医薬上許容される塩（「遊離塩基」化合物として測定）の、０．０２〜１０００ｍｇまたは０．０５〜１０００ｍｇ、例えば、０．１〜２００ｍｇ、例えば、１．０〜２００ｍｇ、および／または、例えば、０．０２〜２００ｍｇまたは０．０５〜２００ｍｇ、例えば、０．０５〜４５ｍｇまたは０．１〜４５ｍｇの適当な単位投与量（例えば、経口単位投与量）は、例えば、本発明の医薬組成物中（例えば、経口医薬組成物中、および／または、例えば、単位剤形中）に用いられうる。１の実施態様において、かかる単位投与量は、例えば、経口および／またはヒトなどの哺乳動物に１日１回投与するためのものである；あるいは、かかる単位投与量は、例えば、経口および／またはヒトなどの哺乳動物に１日１回以上、例えば、１日２回または３回投与するためのものである。かかる療法は、数週、数ヵ月または数年に延長しうる。
【０１０４】
医薬剤形の１の実施態様
１の実施態様において、本発明は、
ａ）１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンまたはその医薬上許容される塩（例えば、塩酸塩）；
ｂ）所望により、安定剤を含有しない剤形と比べた場合に、剤形における１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンまたはその塩の分解を低下させる安定剤；および
ｃ）医薬上許容される賦形剤を含む医薬剤形（例えば、経口投与用剤形）を提供する。
【０１０５】
該実施態様の１の実施態様において、医薬剤形（例えば、経口投与用剤形）は、キャリア錠剤を含み、該キャリア錠剤は、
ａ）１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンまたはその医薬上許容される塩（例えば、塩酸塩）、および
ｂ）所望により、安定剤を含有しない剤形と比べた場合に、剤形における１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンまたはその塩の分解を低下させる安定剤を含むフィルムによって少なくとも部分的に（例えば、部分的にまたは全体的に、例えば、部分的にのみ）被覆されている。
【０１０６】
該実施態様において、「キャリア錠剤」なる語は、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンまたはその医薬上許容される塩を実質上含有しない医薬上許容される錠剤をいう。
【０１０７】
１の実施態様において、キャリア錠剤は、直接圧縮技法によって形成される。
【０１０８】
１の実施態様において、キャリア錠剤は、
−希釈剤（例えば、キャリア錠剤の重量に対して５０〜１００％、例えば、８０〜９８％の量で）、例えば、微結晶セルロース、例えば、約５０ミクロン（例えば、Ａｖｉｃｅｌ  ＰＨ−１０１（商標））または１００ミクロン（例えば、Ａｖｉｃｅｌ  ＰＨ−１０２（商標））の正常な平均粒径を有する微結晶セルロース、または乳糖、またはマンニトール；および／または
−結合剤（例えば、キャリア錠剤の重量に対して０．５〜１５％、例えば、２〜１０％の量で）、例えば、スターチ（例えば、コーンスターチ、ジャガイモスターチまたはアルファ化スターチ）、ポリビニルピロリドン（ポビドン）、またはヒドロキシプロピルメチルセルロース；および／または
−潤滑剤（例えば、キャリア錠剤の重量に対して０．１〜５％、例えば、０．３〜３％の量で）、例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウムまたはステアリン酸を含む。
【０１０９】
１の実施態様において、キャリア錠剤は、微結晶セルロース（例えば、Ａｖｉｃｅｌ  ＰＨ−１０２（商標））（例えば、キャリア錠剤の重量に対して９０％で）、アルファ化スターチ（例えば、Ｓｔａｒｃｈ  １５００（商標））（例えば、キャリア錠剤の重量に対して９％で）、およびステアリン酸マグネシウム（例えば、キャリア錠剤の重量に対して１％で）を含む錠剤である。
【０１１０】
上記の所望の安定剤を含む医薬剤形は、例えば、存在する遊離塩基の量として測定した場合、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンまたはその医薬上許容される塩（例えば、塩酸塩）を０．０２ｍｇ〜２ｍｇ（例えば、０．０５ｍｇ〜１ｍｇ）含有しうる。
【０１１１】
１の実施態様において、剤形は安定剤を含まない。
【０１１２】
具体的な実施態様において、剤形は安定剤を含まない。
【０１１３】
上記の医薬剤形（群）において、安定剤は、典型的には、クエン酸またはその塩、リンゴ酸またはその塩、アスコルビン酸またはその塩、重炭酸ナトリウム、所望によりブチル化ヒドロキシアニソールおよび／またはブチル化ヒドロキシトルエンを含みうる。１の具体的な実施態様において、安定剤は、所望によりブチル化ヒドロキシアニソール、例えば、ブチル化ヒドロキシアニソール、あるいはより具体的には、クエン酸またはその塩、例えば、クエン酸を含む。剤形において、クエン酸またはその塩（クエン酸として測定）の１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンまたはその塩（遊離塩基として測定）に対するモル比は、例えば、５５０：１〜１：２、例えば、５００：１〜２：３でありうる。
【０１１４】
１の実施態様において、キャリア錠剤は、キャリア錠剤フィルム被膜としてエチルセルロース（例えば、Ｓｕｒｅｌｅａｓｅ（商標））またはメタクリル酸共重合体（例えば、Ｅｕｄｒａｇｉｔ（商標））を用いて、例えば、水に溶けない（またはメタノールもしくはエタノールに溶けない）コーティングを用いて、例えば、２〜６％増量するためにキャリア錠剤フィルム被膜でコーティングされている。キャリア錠剤を被覆し、本発明の化合物または塩を含むフィルムおよび所望の安定剤は、典型的には、キャリア錠剤フィルム被膜の外側であり、および／またはキャリア錠剤フィルム被膜上にコーティングされている。
【０１１５】
１の実施態様において、所望の安定剤を含む上記の剤形において、キャリア錠剤による１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンまたはその医薬上許容される塩の吸収が実質的に存在しない。
【０１１６】
キャリア錠剤は、特に、１つまたは複数の陥凹またはくぼみを有しうる。具体的な実施態様において、（キャリア錠剤を少なくとも部分的に、例えば、部分的にのみ被覆し、本発明の化合物または塩および所望の安定剤を含む）フィルムは、キャリア錠剤の１つまたは複数の陥凹またはくぼみに実質的に存在する。
【０１１７】
１の実施態様において、上記の剤形（例えば、本発明の化合物またはその塩および所望の安定剤を含むフィルムで少なくとも部分的に被覆されたキャリア錠剤を含む）は、外側フィルムコーティングでさらにコーティングされている。
【０１１８】
該実施態様の別の態様において、本発明は、上記の医薬剤形（本発明の化合物または塩および所望の安定剤を含むフィルムで少なくとも部分的に被覆されたキャリア錠剤を含む）の調製方法であって、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンまたはその医薬上許容される塩および安定剤（例えば、クエン酸またはその塩、例えば、約２〜３％ｗ／ｖで存在）をキャリア錠剤上に分散させることを含む、方法を提供する。任意の溶媒を用いてもよい、ただし、フィルム中に存在する安定剤および任意の他の賦形剤（キャリア錠剤を少なくとも部分的に被覆するためのものである）は溶媒に溶解する。溶媒は、典型的には、揮発性である。溶媒は、使用済み剤形に見られる任意の（残存）量で医薬上許容されるべきである。該方法にて用いられる溶媒には、水、および／または有機溶媒、例えば、メタノール、エタノール、アセトン、酢酸および／またはジクロロメタンが含まれうる。溶媒の混合液（例えば、水−エタノール）が用いられうる。１の実施態様において、溶媒はメタノールである。
【０１１９】
剤形の調製方法において、キャリア錠剤および分散溶液または懸濁液を、過剰の液体を蒸発させるために（例えば、強制空気オーブン中で）加熱してもよく、キャリア錠剤の表面の少なくとも一部にフィルムの形成をもたらしてもよい。次いで、剤形は、外側フィルムコーティングを作製するために、例えば、既知の方法にしたがって、所望によりフィルムコーティングされてもよい。
【０１２０】
剤形の調製方法に用いられるキャリア錠剤は、分散した後に得るために１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンまたはその医薬上許容される塩および安定剤の溶液または懸濁液のベイスンを提供する陥凹またはくぼみを有しうる。典型的には、錠剤の２つの面上に陥凹を有する両凹面錠剤が用いられる。
【０１２１】
１の所望の実施態様において、本発明のキャリア錠剤を含む上記の剤形は、ＷＯ  ２００５／１２３５６９に記載の装置によって製造され、より具体的には、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンまたはその医薬上許容される塩および安定剤の溶液または懸濁液の所定量をキャリア錠剤上に正確に分散させるための調剤モジュールを含有する装置によって製造される。装置はまた、キャリア錠剤を保有するための押さえを有していてもよく、調剤モジュールが溶液または懸濁液を各キャリア錠剤上に分散させるように継続して装置に沿って移動してもよい。装置はまた、各キャリア錠剤上に蓄積した溶液または懸濁液から溶媒を乾燥または蒸発する乾燥システムを有していてもよい。押さえは、乾燥システムが各キャリア錠剤上の剤形を乾燥するように継続して装置に沿って移動してもよい。乾燥システムは、熱風の使用、または赤外線もしくはマイクロ波加熱によって剤形を乾燥してもよい。装置はまた、剤形に対して外側フィルムコーティングを適用するコーティングシステムを有していてもよい。
【０１２２】
組み合わせ
１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンまたはその医薬上許容される塩は、他の治療剤と組み合わせて用いられうる。１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンまたはその医薬上許容される塩が、例えば、ヒトなどの哺乳動物における、アルツハイマー病、認知症、軽度認識機能障害、または関連神経変性障害の治療または予防（特に、治療）、特に、アルツハイマー病、認知症（例えば、レヴィー小体認知症または血管性認知症）、軽度認識機能障害、または関連神経変性障害における認識機能障害（群）の治療または予防（特に、治療）に用いることを意図とする場合、それは、アルツハイマー病、認知症、軽度認識機能障害、または関連神経変性障害の予防維持または対症療法のいずれかとして有用であるといわれる医薬と組み合わせて用いられうる。かかる他の治療剤の適当な例は、対症薬剤、例えば、コリン作動性伝達を修飾することが知られているもの、例えば、Ｍ１ムスカリン受容体アゴニストまたはアロステリック調節因子、Ｍ２ムスカリンアンタゴニスト、アセチルコリンエステラーゼ阻害薬（例えば、テトラヒドロアミノアクリジン、ドネペジル、例えば、塩酸ドネペジル、リバスティグミン、またはガランタミン、例えば、塩酸ガランタミン）、ニコチン性受容体アゴニストまたはアロステリック調節因子（例えば、α７アゴニストもしくはアロステリック調節因子またはα４β２アゴニストもしくはアロステリック調節因子）、ＰＰＡＲアゴニスト（例えば、ＰＰＡＲγアゴニスト）、５−ＨＴ４受容体部分的アゴニスト、５−ＨＴ６受容体アンタゴニスト［例えば、３−（フェニルスルホニル）−８−（１−ピペラジニル）キノリンまたはその塩、例えば、塩酸塩（実施例２）としておよび遊離塩基（実施例１６）としてＷＯ０３／０８０５８０に開示］、５ＨＴ１Ａ受容体アンタゴニスト、ＮＭＤＡ受容体アンタゴニストまたは調節因子（例えば、メマンチン、例えば、塩酸メマンチン）、あるいは予防維持薬、例えば、βまたはγ−セクレターゼ阻害薬であってもよい。
【０１２３】
１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンまたはその医薬上許容される塩がナルコレプシーの治療に用いることを意図とする場合、それは、ナルコレプシーの治療として有用であるといわれる医薬と組み合わせて用いられうる。かかる他の治療剤の適当な例には、モダフィニル、アルモダフィニルおよびモノアミン取り込み阻害薬が含まれる。
【０１２４】
１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンまたはその医薬上許容される塩が当量失調症の治療に用いることを意図とする場合、それは、ｉ）定型抗精神病薬（例えば、クロルプロマジン、チオリダジン、メソリダジン、フルフェナジン、ペルフェナジン、プロクロペラジン、トリフルオペラジン、チオチキシン、ハロペリドール、モリンドンまたはロキサピン）、非定型抗精神病薬（例えば、クロザピン、オランザピン、リスペリドン、クエチアピン、ジプラシドン、アミスルピリドまたはアリピプラゾール）、グリシントランスポーター１阻害薬および代謝調節型受容体リガンドを含む抗精神病薬；ｉｉ）錐体外路副作用治療剤、例えば、抗コリン作用薬（例えば、ベンズトロピン、ビペリデン、プロシクリジン、またはトリヘキシフェニジルおよびドーパミン作動薬（例えば、アマンタジン）；ｉｉｉ）セロトニン再取り込み阻害薬（例えば、シタロプラム、エスシタロプラム、フルオキセチン、パロキセチン、ダポキセチンまたはセルトラリン）、デュアルセロトニン／ノルアドレナリン再取り込み阻害薬（例えば、ベンラファクシン、デュロキセチンまたはミルナシプラン）、ノルアドレナリン再取り込み阻害薬（例えば、レボキセチン）、三環系抗うつ薬（例えば、アミトリプチリン、クロミプラミン、イミプラミン、マプロチリン、ノルトリプチリンまたはトリイミプラミン）、モノアミンオキシダーゼ阻害薬（例えば、イソカルボキサジド、モクロベミド、フェネルジンまたはトラニルシプロミン）、およびその他（例えば、ブプロプリオン、ミアンセリン、ミルタザピン、ネファドゾンまたはトラゾドン）を含む抗うつ薬；ｉｖ）ベンゾジアゼピン系、例えば、アルプラゾラムまたはロラゼパムを含む抗不安薬；およびｖ）向知性薬、例えば、コリンエステラーゼ阻害薬（例えば、タクリン、ドネペジル、リバスティグミンまたはガランタミン）を含む統合失調症の治療として有用であるといわれる医薬と組み合わせて用いられうる。
【０１２５】
本発明の化合物またはその医薬上許容される塩が他の治療剤と組み合わせて用いられる場合、該化合物は、任意の便利な経路で連続してまたは同時に投与されうる。
【０１２６】
したがって、本発明は、さらなる態様において、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジンまたはその医薬上許容される塩をさらなる治療剤または複数の治療剤と一緒に含む組み合わせを提供する。
【０１２７】
上記の組み合わせは、都合の良いことには、医薬処方の形態で使用するために存在しうるので、医薬上許容される担体または賦形剤と一緒に上記の組み合わせを含む医薬処方は、本発明のさらなる態様を含む。かかる組み合わせの個々の成分は、個々のまたは合した医薬処方中に連続してまたは同時に投与されうる。
【０１２８】
本発明の化合物またはその医薬上許容される塩が、同一病状に対して活性な第２治療剤と組み合わせて用いられる場合、各化合物の用量は、化合物が単独で用いられる場合とは異なる。
【０１２９】
実験項目
以下の記載例および実施例は、本発明、その塩酸塩、その調製、およびその調製に用いる中間体（「記載例」）を説明するものである。
【０１３０】
記載例１
４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸メチル（Ｄ１）
【化８】
2010538041.tif 000010
方法Ａ
室温にて、４−ヒドロキシ安息香酸メチル（１．４９ｇ、９．８ｍｍｏｌ、例えば、Ａｌｄｒｉｃｈから入手可能）、４−ヒドロキシテトラヒドロピラン（１ｇ、９．８ｍｍｏｌ、例えば、Ａｌｄｒｉｃｈから入手可能）およびトリフェニルホスフィン（３．８５ｇ、１４．７ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（６０ｍｌ）中攪拌溶液を、アゾジカルボン酸ジエチル（２．３２ｍｌ、１．５モル当量）で滴下処理した。反応物を一晩攪拌した。溶媒を蒸発除去し、粗生成物を酢酸エチル（５０ｍｌ）に再溶解し、５％炭酸ナトリウム溶液（２ｘ４０ｍｌ）、水（３ｘ４０ｍｌ）、ブライン（４０ｍｌ）で洗浄し、（硫酸マグネシウム）乾燥して、蒸発させた。粗生成物をシリカカラム上に充填し、酢酸エチルの軽油（４０℃〜６０℃）中１０％〜３０％勾配で溶出する、フラッシュクロマトグラフィーに付して、表題化合物を得た（２．１２ｇ）。
【０１３１】
方法Ｂ
アゾジカルボン酸ジイソプロピル（７．８ｍｌ、３９．６ｍｍｏｌ、２モル当量）を、４−ヒドロキシ安息香酸メチル（３．０ｇ、１９．７ｍｍｏｌ）、４−ヒドロキシテトラヒドロピラン（２．８ｍｌ、２８．２ｍｍｏｌ、約１．４モル当量）およびトリフェニルホスフィン（１０．３ｇ、３９．３ｍｍｏｌ、２モル当量）のテトラヒドロフラン（１２０ｍｌ）中攪拌溶液に加えた。反応混合物を室温にて６８時間攪拌した。次いで、溶媒を真空中で除去し、粗残渣を酢酸エチル（１００ｍｌ）に溶解した。次いで、有機溶液を、炭酸水素ナトリウム（４０ｍｌ）、水（４０ｍｌ）およびブライン（４０ｍｌ）の飽和水性溶液で洗浄した。有機相を（相分離カラム）乾燥し、濃縮した。粗残渣を、０％〜３０％酢酸エチルのヘキサン中勾配で溶出する、シリカゲルクロマトグラフィーに付して精製し、淡黄色油として表題化合物を得た（３．１４ｇ）（ＣＤＣｌ３中１Ｈ  ＮＭＲは、相当量のアザジカルボン酸ジイソプロピル残渣が混入する生成物を示唆した）。
【０１３２】
方法Ｃ
アゾジカルボン酸ジイソプロピル（２．８９ｍｌ、１４．６８ｍｍｏｌ、１．５モル当量）を、０℃にて４−ヒドロキシ安息香酸メチル（１．４９ｇ、９．８０ｍｍｏｌ、１．０モル当量）、４−ヒドロキシテトラヒドロピラン（１．００ｇ、９．７９ｍｍｏｌ、１．０モル当量）およびトリフェニルホスフィン（３．８５ｇ、１４．６８ｍｍｏｌ、１．５モル当量）のテトラヒドロフラン（６０ｍｌ）中攪拌溶液に加えた。反応混合物を室温に加温し、２１時間攪拌した。４−ヒドロキシテトラヒドロピラン（０．３ｍｌ）、トリフェニルホスフィン（１．１１ｇ）およびアゾジカルボン酸ジイソプロピル（０．９ｍｌ）を室温にて反応混合物に続けて加え、２時間攪拌し続けた。溶媒を真空中で除去し、残渣を酢酸エチル（５０ｍｌ）に溶解した。有機相を炭酸水素ナトリウム（３０ｍｌ）、水（３０ｍｌ）およびブライン（３０ｍｌ）の飽和水性溶液で洗浄した。有機相を（相分離カラム）乾燥し、濃縮した。粗残渣を、０％〜３０％酢酸エチルのヘキサン中勾配で溶出する、シリカゲルクロマトグラフィーに付して精製し、淡黄色油として表題化合物を得た（２．１９ｇ）（微量のアゾジカルボン酸ジイソプロピル残渣が混入）。
【０１３３】
方法Ｄ
室温にて、４−ヒドロキシ安息香酸メチル（３０ｇ、１９７ｍｍｏｌ、１．０モル当量）、テトラヒドロ−４−ピラノール（２４ｍｌ、２５１ｍｍｏｌ、１．３モル当量）およびトリフェニルホスフィン（７８ｇ、２９７ｍｍｏｌ、１．５モル当量）のテトラヒドロフラン（６００ｍｌ）中攪拌溶液に、１５分かけてアゾジカルボン酸ジイソプロピル（５８ｍｌ、２９８ｍｍｏｌ、１．５モル当量）を加えた。反応混合物を室温にて２４時間攪拌した。別群のアゾジカルボン酸ジイソプロピル（５ｍｌ）およびテトラヒドロ−４−ピラノール（２ｍｌ）を加え、反応混合物を室温にてさらに２時間攪拌した。次いで、反応混合物を、炭酸水素ナトリウム（５００ｍｌ）および酢酸エチル（５００ｍｌ）の飽和水性溶液を加えてクエンチした。有機相を水（２ｘ２５０ｍｌ）で洗浄し、（硫酸マグネシウム）乾燥し、次いで、真空中で濃縮して、濃黄色油として粗生成物、４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸メチルを得た（１８２ｇ）。
【０１３４】
記載例２
４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸（Ｄ２）
【化９】
2010538041.tif 000011
方法Ａ
室温にて、４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸メチル（２．１２ｇ；記載例１方法Ａに記載のとおりに調製）のメタノール（２０ｍｌ）中攪拌溶液を、１Ｍ水酸化ナトリウム溶液（１７．９ｍｌ、約２モル当量）で処理した。反応混合物を４時間還流し、次いで、室温に冷却した。メタノールを蒸発除去し、水性混合物をジクロロメタン（３ｘ１０ｍｌ）で洗浄し、次いで、濃塩酸でｐＨ２に酸性化した。水層をエーテル（１００ｍｌ）で抽出し、エーテル溶液を水（３ｘ５０ｍｌ）、ブライン（５０ｍｌ）で洗浄し、（硫酸マグネシウム）乾燥し、蒸発させて、表題化合物を得た（１．２７ｇ、ＮＭＲによると約１５％の４−ヒドロキシ安息香酸を含有する）。
【０１３５】
別法として、反応物を室温に冷却する後、メタノールを蒸発除去し、水性混合物をジクロロメタン（３ｘ１０ｍｌ）で洗浄し、次いで、濃塩酸でｐＨ２に酸性化し、次いで、生成物を直接濾去する。
【０１３６】
方法Ｂ
４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸メチル（３．１４ｇ、記載例１方法Ｂに記載のとおりに調製）のメタノール（２８ｍｌ）中攪拌溶液に、水酸化ナトリウムの１．０Ｍ水性溶液（２８ｍｌ、２８ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を９５℃にて１８時間加熱し、次いで、室温に冷却した。メタノールを真空中で除去し、残存水相をジクロロメタン（２ｘ３０ｍｌ）で洗浄した。次いで、水層を、ＨＣｌの１．０Ｍ水性溶液を用いてｐＨ２に酸性化した。得られた白色沈殿物を濾去し、（４０℃にて３時間真空オーブン）乾燥して、表題化合物を得た（１．５２ｇ）。
【０１３７】
方法Ｃ
室温にて、４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸メチル（２．１９ｇ、記載例１方法Ｃに記載のとおりに調製）のメタノール（２０ｍｌ）中溶液に、水酸化ナトリウムの１．０Ｍ水性溶液（１９ｍｌ、１９ｍｍｏｌ）を加えた。次いで、反応混合物を還流温度にて１５時間加熱した。次いで、反応混合物を室温に冷却し、メタノールを真空中で除去した。得られた水相をジクロロメタン（２ｘ１５ｍｌ）で洗浄し、次いで、ＨＣｌの１．０Ｍ水性溶液を用いてｐＨ２に酸性化した。得られた白色沈殿物を濾去し、（４０℃にて２時間真空オーブン）乾燥して、表題化合物を得た（１．３２ｇ）。
【０１３８】
方法Ｄ
粗４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸メチル（１８２ｇ、記載例１方法Ｄに記載のとおりに調製）のメタノール（８００ｍｌ）中攪拌溶液に、水酸化ナトリウム１．０Ｍ水性溶液（９００ｍｌ、９００ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を５０℃にて４時間加熱し、次いで、室温に冷却した。メタノールを真空中で除去し、残存水相を酢酸エチル（２ｘ４００ｍｌ）で洗浄した。次いで、水相を２．５Ｍ水性ＨＣｌで酸性化した。得られた白色固体を濾去して、表題化合物を得た（３６．５ｇ）。
【０１３９】
記載例３
４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸（Ｄ３）
【化１０】
2010538041.tif 000012
【０１４０】
簡単なプロセス記述
全重量、容量（「ｖｏｌ」）および当量は、４−ヒドロキシ安息香酸メチルに関する。
【０１４１】
窒素下、４−ヒドロキシ安息香酸メチル（１ｗｔ、１モル当量）、トリフェニルホスフィン（２．６ｗｔ、１．５モル当量）、４−ヒドロキシテトラヒドロピラン（０．７５ｖｏｌ、１．２モル当量）のトルエン（３．５ｖｏｌ）中溶液を５５℃に加熱し、含有物を６０±２℃にて維持しながら、アゾジカルボン酸ジイソプロピル（１．９５ｖｏｌ、１．５モル当量）を６０分かけて滴下する。添加後、反応物を３０分間攪拌し、次いで、０〜５℃に冷却する。次いで、バッチを、予め調製されたトリフェニルホスフィンオキシド−ヒドラジンジカルボン酸ジイソプロピル付加物とシードし、次いで、濾過前にさらに１時間攪拌する。湿ったケークをトルエン（２ｘ１ｖｏｌ）で洗浄し、合した母液をきれいなベッセルに移す。トルエン溶液を、０〜５℃にて２Ｍ水酸化ナトリウム溶液（５ｖｏｌ）で洗浄し、次いで、３Ｍ水酸化ナトリウム溶液（５ｖｏｌ）を加え、反応物を８０℃に加熱する。ＨＰＬＣが出発物質を示さなくなるまで、反応物を少なくとも２．５時間攪拌する。次いで、混合物を５０℃に冷却し、トルエン（５ｖｏｌ）および水（５ｖｏｌ）を加える。層を分離し、水層をトルエン（１０ｖｏｌ）で洗浄し、次いで、２．５Ｍ  ＨＣｌ溶液（７．５ｖｏｌ）でｐＨ１に酸性化した。得られたスラリーを濾過し、湿ったケークを水（２ｘ２ｖｏｌ）で洗浄する。表題化合物を、一定のプローブ温度になるように窒素流出下真空オーブン中約５０℃にて乾燥する。
【０１４２】
詳細なプロセス記述
１．  ４−ヒドロキシ安息香酸メチル（１ｗｔ、４８２．３ｇ、Ｆｌｕｋａから入手可能）をベッセル１に加えた。
２．  ４−ヒドロキシテトラヒドロピラン（０．７５ｖｏｌ、３６２ｍＬ、１．２モル当量、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈから入手可能）をベッセル１に加えた。
３．  トリフェニルホスフィン（２．６ｗｔ、１２５３ｇ、１．５モル当量）をベッセル１に加えた。
４．  ベッセル１を窒素でパージした。
５．  トルエン（３．５ｖｏｌ、１６９０ｍＬ）をベッセル１に加えた。
６．  攪拌しながら含有物を５５℃に加熱した。
７．  含有物を６０±２℃の温度で維持しながら２時間かけて蠕動ポンプでアゾジカルボン酸ジイソプロピル（ＤＩＡＤ、１．９５ｖｏｌ、９４０ｍＬ、１．５モル当量、Ａｌｄｒｉｃｈから入手可能）をベッセル１に加えた。
８．  ベッセル１の含有物を６０±２℃にて５０分間攪拌した。
９．  ＨＰＬＣ分析のために反応混合物を抽出した。
１０．  含有物を０〜５℃に冷却した。
１１．  バッチをトリフェニルホスフィンオキシド−ヒドラジンジカルボン酸ジイソプロピル付加物（０．００１ｗｔ、０．４８２ｇ）とシードした。
１２．  ベッセル１の含有物を８１分間攪拌した。
１３．  Ｗｈａｔｍａｎ  Ｎｏ．１１３ウェット強化濾紙（粗いサイドアップ）を取り付けたＰＴＦＥミニフィルター上で５分かけて副生成物を濾去した。レシーバーとして２０Ｌ  Ｂｕｃｈｎｅｒフラスコを用いた。
１４．  湿ったケークをトルエン（２ｘ約１ｖｏｌ、２ｘ４９０ｍＬ）で洗浄し、ケーク不含溶媒を吸引した。
１５．  合した濾液およびケーク洗浄物をＰＴＦＥ吸引ラインでベッセル２に移した。
１６．  ベッセル２含有物を０〜５℃に冷却した。
１７．  ２Ｍ水酸化ナトリウム溶液（５ｖｏｌ、２４００ｍＬ）をベッセル２に加えた。
１８．  層を安定化する前にベッセル２の含有物を０〜５℃にて５分間攪拌した。
１９．  水性下層を標識化Ｓｃｈｏｔｔ瓶に加えた。
２０．  ３Ｍ水酸化ナトリウム溶液（５ｖｏｌ、２４１０ｍＬ）をベッセル２に加えた。
２１．  含有物を８０℃に加熱し、２時間４５分攪拌した。
２２．  加水分解が終わるまでＨＰＬＣで反応をモニターした。
２３．  ベッセル２の含有物を５０℃に冷却し、次いで、トルエン（５ｖｏｌ、２４１０ｍＬ）をベッセル２に加えた。
２４．  水（５ｖｏｌ、２４１０ｍＬ）をベッセル２に加えた。
２５．  層を安定化する前に含有物を５０±５℃にて５分間攪拌した。
２６．  保存するために水性下層を標識化Ｓｃｈｏｔｔ瓶に加えた。
２７．  廃棄のために有機上層を標識化Ｓｃｈｏｔｔ瓶に加えた。
２８．  標識化Ｓｃｈｏｔｔ瓶からの水層をベッセル２に再度加えた。
２９．  トルエン（約１０ｖｏｌ、４９００ｍＬ）をベッセル２に加えた。
３０．  層を安定化する前に含有物を５０±５℃にて５分間攪拌した。
３１．  保存するために水性下層を標識化Ｓｃｈｏｔｔ瓶に加えた。
３２．  廃棄のために有機上層を標識化Ｓｃｈｏｔｔ瓶に加えた。
３３．  水層をベッセル２に再度加えた。
３４．  ｐＨ１になるまで蠕動ポンプで２．５Ｍ水性塩酸（７．５ｖｏｌ、３６２０ｍＬ）を加えた。
３５．  得られたスラリーを１５分間攪拌した。
３６．  Ｗｈａｔｍａｎ  １１３ウェット強化濾紙（粗いサイドアップ）を取り付けたＰＴＦＥミニフィルター上で生成物を濾去した。１０分の濾過時間。
３７．  濾過ケークを水（２ｘ２ｖｏｌ、９７０ｍＬ）で洗浄した。
３８．  真空および窒素流出下で５０℃にて一晩および７５℃にてさらに３日間、モルリン布で覆われたポリスチレン系スチール製トレイ中で固体生成物を乾燥した。
３９．  表題生成物を、灰白色固体として得た（５６８．９ｇ）。
【０１４３】
分析データ
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  １．５５−１．６４（ｍ，２Ｈ）  １．９５−２．０３（ｍ，２Ｈ）  ３．４９（ｄｄｄ，Ｊ＝１１．７４，９．４１，２．５７Ｈｚ，２Ｈ）  ３．８５（ｄｄｄ，Ｊ＝１１．８０，４．３４，４．１６Ｈｚ，２Ｈ）  ４．６９（ｄｄｄ，Ｊ＝８．５６，４．６５，４．４０Ｈｚ，１Ｈ）  ７．０３−７．０９（ｍ，２Ｈ）  ７．８４−７．９０（ｍ，２Ｈ），および１２．３１（ｂｒ−ｓ，１Ｈ）。
【０１４４】
上記の方法と別法、工程３７において、濾過ケークは、工程３８の５０〜７５℃の真空乾燥前に、水の代わりにトルエンで洗浄されうる。
【実施例】
【０１４５】
実施例１
１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩（Ｅ１）
【化１１】
2010538041.tif 000013
方法Ａ
室温にて、４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸（２００ｍｇ；記載例２方法Ａに記載のとおりに調製）のジクロロメタン（１０ｍｌ）中溶液を、塩化オキサリル（０．１６ｍｌ、約２モル当量）および１滴のジクロロメタン中１０％Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドで処理した。３０分後、溶媒を蒸発させ、生成物をジクロロメタンから再蒸発させた（ｘ２）。ジクロロメタン中酸塩化物生成物を、室温にてジエチルアミノメチルポリスチレン（８４４ｍｇ、３．２ｍｍｏｌ／ｇ、２．７ｍｍｏｌ、約３モル当量）おより１−イソプロピルピペラジン（１１５ｍｇ、０．９０ｍｍｏｌ、例えば、Ａｌｄｒｉｃｈから入手可能）のジクロロメタン（１０ｍｌ）中攪拌混合物に加えた。３０分後、混合物をシリカフラッシュカラムに直接充填し、２％〜６％メタノール（１０％０．８８アンモニア含有）のジクロロメタン中勾配で溶出した。生成物含有フラクションを蒸発させた。生成物をジクロロメタンに再溶解し、過剰のジオキサン中４Ｍ  ＨＣｌで処理した。溶媒を蒸発させ、生成物をアセトンで結晶化し、濾去し、アセトンで洗浄し、乾燥して、表題化合物を得た（２４７ｍｇ）。
１Ｈ  ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ，２５０ＭＨｚ）  δ  １０．９〜１１．０（１Ｈ，ｂｒ），７．４３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ），７．０４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ），４．６５（１Ｈ，ｍ），４．１８（２Ｈ，ｂｒ），３．９０−３．８１（２Ｈ，ｍ），３．５７−３．４１（７Ｈ，ｍ），３．１２−３．００（２Ｈ，ｍ），２．０２−１．９５（２Ｈ，ｍ），１．６６−１．５２（２Ｈ，ｍ），１．２８（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ）；ＭＳ（エレクトロスプレー）：ｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ）＋３３３；Ｃ１９Ｈ２８Ｎ２Ｏ３理論値３３２。
【０１４６】
方法Ｂ
室温にて、４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸（２．５６ｇ、１１．５ｍｍｏｌ；記載例２方法Ｂおよび／または方法Ｃに記載のとおりに調製されうる）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４０ｍｌ）中攪拌溶液に、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（３．３２ｇ、１７．３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を１５分間攪拌し、次いで、１−イソプロピルピペラジン（２．５０ｍｌ、１７．５ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を２０時間攪拌した。ジクロロメタン（１０ｍｌ）を反応混合物に加え、溶媒を真空中で除去した。淡黄色油性残渣を、０％〜１０％の（２Ｎアンモニア／メタノール）のジクロロメタン中勾配で溶出する、シリカゲルクロマトグラフィーに付して精製し、淡黄色油として遊離塩基を得た（１．８０ｇ）（ＬＣＭＳ（塩基性）：ｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ）＋３３３）。遊離塩基をジクロロメタン（２０ｍｌ）に溶解し、次いで、４．０Ｍ  ＨＣｌのジオキサン中溶液（５ｍｌ）を加えた。次いで、溶媒を真空中で除去して、灰白色固体として、対応する塩酸塩、１-（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩を得た（１．８１ｇ）；ＬＣＭＳ（塩基性）：ｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ）＋３３３。
【０１４７】
方法Ｃ
４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸（０．２０５ｇ、０．９２ｍｍｏｌ；記載例２方法Ｃに記載のとおりに調製されうる）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３．５ｍｌ）中攪拌溶液に、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（０．２６８ｇ、１．３９ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温にて１５分間攪拌し、次いで、１−イソプロピルピペラジン（０．２０ｍｌ、１．４ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を室温にて６６時間攪拌した。ジクロロメタン（５ｍｌ）を反応混合物に加え、溶媒を真空中で除去した。淡黄色粗残渣を、０％〜１０％の（２Ｍアンモニア／メタノール）のジクロロメタン中勾配で溶出する、シリカゲルクロマトグラフィーに付して精製し、淡黄色油として遊離塩基を得た（２０４ｍｇ）（ＬＣＭＳ（塩基性）：ｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ）＋３３３）。遊離塩基をジクロロメタン（５ｍｌ）に溶解し、次いで、４．０Ｍ  ＨＣｌのジオキサン中溶液（１ｍｌ）を加えた。次いで、溶媒を真空中で除去して、灰白色固体として、対応する塩酸塩、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩を得た（０．１９６ｇ）；ＬＣＭＳ（塩基性）：ｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ）＋３３３。
【０１４８】
方法Ｄ
室温にて、４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸（３６．５ｇ、１６４ｍｍｏｌ、記載例２方法Ｄに記載のとおりに調製されうる）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（３８ｇ、１９８ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（３１ｇ、２０３ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５００ｍｌ）中攪拌溶液に、１−イソプロピルピペラジン（２６ｍｌ、１８２ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温にて１．５時間攪拌し、次いで、炭酸水素ナトリウム（５００ｍｌ）および酢酸エチル（１リットル）の飽和水性溶液を加えてクエンチした。水層を酢酸エチル（４００ｍｌ）で抽出し、合した有機抽出液を水（２ｘ４００ｍｌ）で洗浄した。溶媒を真空中で除去し、残渣をジクロロメタン（１５０ｍｌ）で処理し、次いで、１．０Ｍ  ＨＣｌのジエチルエーテル中溶液（２００ｍｌ）を加えた。次いで、得られた白色固体を濾過で分離し、ジクロロメタンで洗浄して、対応する塩を得た。該物質をエタノールから再結晶して、固体として表題化合物、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩を得た（３２ｇ）。
【０１４９】
実施例２
１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩の結晶形１
【化１２】
2010538041.tif 000014
【０１５０】
簡単なプロセス記述
全重量、容量（「ｖｏｌ」）および当量は、４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸に関する。
【０１５１】
４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸（１ｗｔ、例えば、記載例３にて調製されうる）およびカルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）（０．８ｗｔ、１．１モル当量）を、２０Ｌベッセルに加える。次いで、アセトニトリル（１２容量）を加え、懸濁液／スラリーを３０℃に加温し、約２〜２．２５時間攪拌する。Ｎ−イソプロピルピペラジン（１−イソプロピルピペラジン、０．６６ｗｔ、１．１５モル当量）を少しずつ加え、得られた濁った溶液を約１５〜３０分かけて５０℃に加熱し、次いで、約２〜２．２５時間攪拌する。反応をＨＰＬＣでモニターする。反応終了後、混合物を２０℃に冷却し、任意の不溶物（例えば、４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸中に残存する任意の無機物）を濾去する。精製された溶液を、１０Ｌベッセルに少しずつ移して、約３容量に減圧下で蒸留濃縮して、アセトニトリルを除去する（例えば、ジャケット温度５０℃および圧力１００ｍｂａｒに低下させる圧力２００ｍｂａｒを用いて）。蒸留後、プロパン−２−オール（６容量）を加え、溶液を減圧下で５容量にさらに蒸留濃縮する。さらにプロパン−２−オール（８容量）を加える後、溶液を攪拌しながら７０℃に加熱し、イソプロパノール中５〜６Ｎ  ＨＣｌ（０．９容量）を少なくとも１０分かけて加える。一般には、添加中に結晶化が開始する。添加後、得られたスラリーを１．５時間かけて２０℃にランプ冷却する。生成物を濾過し、ケークをイソプロパノール（３容量）で洗浄する。溶媒を少なくとも２時間ケークが存在しないように吸引される。生成物を少なくとも２２時間かけて一定のプローブ温度になるように５０℃にて真空オーブン中で乾燥して、表題生成物を得る。
【０１５２】
詳細なプロセス記述
１．  ４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸（１ｗｔ、１０００．０ｇ）をベッセル１（２０Ｌ）に加えた。
２．  カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）（０．８ｗｔ、１．１モル当量、８００．０ｇ）（Ｆｌｕｏｒｏｃｈｅｍから得た）をベッセル１に加えた。
３．  アセトニトリル（１２ｖｏｌ、１２Ｌ）をベッセル１および開始スターラーに加えた（気体発生を観察した）。
４．  ベッセル１の含有物を慎重に３０℃に加熱し、次いで、２時間１０分攪拌した。
５．  Ｎ−イソプロピルピペラジン（１−イソプロピルピペラジン）（Ｆｌｕｏｒｏｃｈｅｍから得た）（０．６６ｗｔ、１．１５モル当量、６６６．４ｇ）をベッセル１に加えた。
６．  ベッセル１の含有物を約１５〜２０分かけて慎重に５０℃に加熱し、次いで、２時間１５分攪拌した。
７．  ＨＰＬＣのために混合物を抽出した（生成物：ブチルアミドの比率が＞５０：１である場合、ブチルアミンのクエンチおよび反応は終了とみなされた）。
８．  ベッセル１の含有物を２０℃に冷却した。
９．  溶液を５ミクロンＤｏｍｉｎｉｃフィルターでベッセル２に移して、不溶物を除去した。
１０．  ベッセル１をアセトニトリル（０．２ｖｏｌ、２００ｍＬ）でリンスし、ベッセル２にライン洗浄物として用いた。
１１．  減圧下蒸留してベッセル２の含有物を３．０容量に濃縮した。ジャケット温度５０℃および真空２００ｍｂａｒで開始し、徐々に１００ｍｂａｒに減圧した。
１２．  ベッセル１を水でリンスし、メタノールと一緒に煮沸除去して、洗浄した。
１３．  プロパン−２−オール（６容量、６Ｌ）をベッセル２に加えた。
１４．  減圧下蒸留してベッセル２の含有物を５容量に濃縮した。
１５．  プロパン−２−オール（８容量、８Ｌ）をベッセル２に加えた。
１６．  結晶化のために反応混合物をベッセル１に移した。
１７．  攪拌しながらベッセル１の含有物を７０℃に加熱する。
１８．  少なくとも１０分かけてシリコンチューブを取り付けた蠕動ポンプでプロパン−２−オール中５〜６Ｎ塩酸（０．９容量、９００ｍＬ）をベッセル１に加えた。
１９．  ベッセル１の含有物を１．５時間かけて２０℃にランプ冷却した。
２０．  Ｗｈａｔｍａｎ  Ｎｏ．１１３ウェット強化濾紙（粗いサイドアップ）を取り付けたＰＴＦＥミニフィルター９上で生成物を濾去した。
２１．  濾過ケークをプロパン−２−オール（３容量、３Ｌ）で洗浄し、生成物不含溶媒を吸引した。
２２．  真空下５０℃にて約２２時間、一定のプローブ温度になるように、モルリン布で覆われたポリスチレン系スチール製トレイ中で固体生成物を乾燥して、固体として表題化合物を得た（１５１５．１ｇ）。
【０１５３】
分析から、実施例２によって製造された１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩の結晶形１は、完全に純粋な結晶形であるとは考えられず、大体約２０％の結晶形２を含有すると考えられる。実施例２によって製造される結晶形１の分析には以下のものが含まれる：
【０１５４】
粉末Ｘ線回折（ＸＲＰＤ）
ＸＲＰＤデータは、Ｘ’Ｃｅｌｅｒａｔｏｒ検出器を装備した、ＰＡＮａｌｙｔｉｃａｌ  Ｘ’Ｐｅｒｔ  Ｐｒｏ粉末回折計上で得られた。捕獲条件は、照射：Ｃｕ  Ｋα（銅Ｋ−アルファ）、ジェネレータ電圧：４０ｋＶ、ジェネレータ電流：４５ｍＡ、始角：２．０°２θ（２シータ）、終角：４０．０°２θ、ステップサイズ：０．０１６７°２θ（２シータ）であった。時間／ステップは、３１．７５０秒であった。サンプルは、Ｓｉウエハー（０バックグラウンド）プレート上に数ミリグラムのサンプルを置くことにより調製して、粉末の薄層がもたらされた。
【０１５５】
実施例２によって製造された結晶形１生成物のいくつかの特徴的なピーク位置および計算されたｄ−間隔は、以下の表に要約されている（注釈：これらは、確認されたピークのみではない）。これらは、Ｈｉｇｈｓｃｏｒｅソフトウェアを用いて生データから計算された。
【表１】
2010538041.tif 000015
【０１５６】
実施例２によって調製される結晶形１のＸＲＰＤスペクトルは、図１に示される。ＸＲＰＤオーバーレイスペクトルは、比較のために、実施例２からの結晶形１のＸＲＰＤピーク（最上部）を実施例３からの結晶形２のもの（最下部）と比較する、図３に示される。１５．７°２θおよび２５．５°２θの結晶形１ＸＲＰＤピークは、これらのピークが結晶形２のＸＲＰＤスペクトルに存在するとは考えられないという点で結晶形１に特徴的であると考えられる。
【０１５７】
ＦＴ−ＩＲ（ＦＴ−赤外線）スペクトル
ＦＴ−ＩＲスペクトルは、Ｄｉａｍｏｎｄ／ＺｎＳｅ  ＡＴＲ  Ａｃｃｅｓｓｏｒｙを装着したＮｉｃｏｌｅｔ  Ａｖａｔａｒ  ３６０  ＦＴ−ＩＲ分光計を用いて、４ｃｍ−１分解能で６４スキャンかけて得られた。
【０１５８】
実施例２によって調製される結晶形１のＦＴ−ＩＲスペクトルは、各々、４０００〜６７５ｃｍ−１および２０００〜６７５ｃｍ−１のスペクトル域を示す、図４および５に示される。比較のために、実施例２からの結晶形１のこれらのピークを実施例３からの結晶形２のものと比較する、ＦＴ−ＩＲオーバーレイスペクトルは、２０００〜６７５ｃｍ−１のスペクトル域を示す、図８に示される。
【０１５９】
固体ＮＭＲスペクトル
固体ＮＭＲスペクトルは、２９６Ｋの温度、および８ｋＨｚの回転速度にて４ｍｍ  Ｂｒｕｋｅｒ  ＨＦＸ  ＭＡＳ（マジック角回転）プローブを用いて、１３Ｃ観察の９０．５５ＭＨｚの周波数で得られた。データは、側波帯抑圧を伴う交差分極配列を用いて得られた。複数のスキャンは、１０秒の弛緩遅延で得られた。
【０１６０】
実施例２によって調製される結晶形１について観測される共鳴の化学シフトは、以下に列挙される（ｐｐｍ単位）：
１８．５±０．３、３０．４±０．３、３１．８±０．３、３７．６±０．３、４５．８±０．３、４９．４±０．３、５２．３±０．３、５９．２±０．３、６３．６±０．３、６８．４±０．３、１１０．３±０．３、１１８．８±０．３、１２８．４±０．３、１３１．２±０．３、１３３．９±０．３、１５９．１±０．３、および１６７．６ｐｐｍ。
【０１６１】
さらなる共鳴はまた、１９．５±０．３、７１．１±０．３、１０９．５±０．３および１１９．６±０．３ｐｐｍにて観測され、不純物として結晶形２に相当すると考えられる。
【０１６２】
実施例２によって調製される結晶形１の固体ＮＭＲスペクトルは、結晶形２のスペクトルとオーバーレイ比較して、図９に示される。
【０１６３】
実施例３
１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩の結晶形２
【化１３】
2010538041.tif 000016
４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸（１ｗｔ、２０ｇ；例えば、記載例３に記載のとおりに調製されうる）をアセトニトリル（８０ｍＬ）に懸濁した。３５〜４０℃に予め加温されていた、カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）（０．８ｗｔ、１６ｇ、１．１モル当量）のアセトニトリル（８０ｍＬ）中溶液を、常温にて懸濁液に少しずつ加えた。アセトニトリル系洗浄物（２０ｍＬ、１容量）もまた加えた。反応混合物を、窒素下６０℃にて１時間加熱した。Ｎ−イソプロピルピペラジン（１−イソプロピルピペラジン、０．６６ｗｔ、１３．３３ｇ、Ｆｌｕｏｒｏｃｈｅｍ  ＡＣＩから得られた）を反応混合物に加え、２時間加熱し続けた。混合物を真空蒸留で約２．５容量（５０ｍＬ）に濃縮して、濃モービル油を得た。次いで、プロパン−２−オール（２４０ｍＬ、１２容量）を加え、混合物を減圧下（１００ｍｂａｒ）で蒸留にて濃縮して、２容量（４０ｍＬ）を除去した。混合物を、攪拌しながら７０℃に加熱した。プロパン−２−オール中５−６Ｎ塩酸（２０ｍＬ、１容量）を１０分かけて混合物に加えた。すべての酸を加えるまで結晶化は起こらなかった。反応混合物を７０℃にて一晩維持した。混合物を冷却し、スラリーを濾過した。濾過した固体を、１〜１．５時間かけてフィルター上で空気吸入しながら乾燥した。わずかにピンク色の固体として表題生成物を得た（２５ｇ）。
【０１６４】
実施例３によって製造された結晶形２生成物の分析には、以下のものが含まれる：
粉末Ｘ線回折（ＸＲＰＤ）
ＸＲＰＤデータは、Ｘ’Ｃｅｌｅｒａｔｏｒ検出器を装備した、ＰＡＮａｌｙｔｉｃａｌ  Ｘ’Ｐｅｒｔ  Ｐｒｏ粉末回折計上で得られた。捕獲条件は、照射：Ｃｕ  Ｋα（銅Ｋ−アルファ）、ジェネレータ電圧：４０ｋＶ、ジェネレータ電流：４５ｍＡ、始角：２．０°２θ（２シータ）、終角：４０．０°２θ、ステップサイズ：０．０１６７°２θ（２シータ）であった。時間／ステップは、３１．７５０秒であった。サンプルは、Ｓｉウエハー（０バックグラウンド）プレート上に数ミリグラムのサンプルを置くことにより調製して、粉末の薄層がもたらされた。
【０１６５】
実施例３によって製造された結晶形２生成物のいくつかの特徴的なピーク位置および計算されたｄ−間隔は、以下の表に要約されている（注釈：これらは、確認されたピークのみではない）。これらは、Ｈｉｇｈｓｃｏｒｅソフトウェアを用いて生データから計算された。
【表２】
2010538041.tif 000017
【０１６６】
実施例３によって調製される結晶形２のＸＲＰＤスペクトルは、図２に示される。ＸＲＰＤオーバーレイスペクトルは、比較のために、実施例３からの結晶形２のＸＲＰＤピーク（最下部）を実施例２からの結晶形１のもの（最上部）と比較する、図３に示される。２０．０°２θおよび２４．６５°（または２４．７°）２θの結晶形２ＸＲＰＤピークは、これらのピークが結晶形１のＸＲＰＤスペクトルに有意に存在するとは考えられないという点で結晶形２に特徴的であると考えられる。
【０１６７】
ＦＴ−ＩＲ（ＦＴ−赤外線）スペクトル
ＦＴ−ＩＲスペクトルは、Ｄｉａｍｏｎｄ／ＺｎＳｅ  ＡＴＲ  Ａｃｃｅｓｓｏｒｙを装着したＮｉｃｏｌｅｔ  Ａｖａｔａｒ  ３６０  ＦＴ−ＩＲ分光計を用いて、４ｃｍ−１分解能で６４スキャンかけて得られた。
【０１６８】
実施例３によって調製される結晶形２のＦＴ−ＩＲスペクトルは、各々、４０００〜６７５ｃｍ−１および２０００〜６７５ｃｍ−１のスペクトル域を示す、図６および７に示される。比較のために、実施例３からの結晶形２のこれらのピークを実施例２からの結晶形１のものと比較する、ＦＴ−ＩＲオーバーレイスペクトルは、２０００〜６７５ｃｍ−１のスペクトル域を示す、図８に示される。
【０１６９】
固体ＮＭＲスペクトル
固体ＮＭＲスペクトルは、２９６Ｋの温度、および８ｋＨｚの回転速度にて４ｍｍ  Ｂｒｕｋｅｒ  ＨＦＸ  ＭＡＳ（マジック角回転）プローブを用いて、１３Ｃ観察の９０．５５ＭＨｚの周波数で得られた。データは、側波帯抑圧を伴う交差分極配列を用いて得られた。複数のスキャンは、１０秒の弛緩遅延で得られた。
【０１７０】
実施例３によって調製される結晶形２について観測される共鳴の化学シフトは、以下に列挙される（ｐｐｍ単位）：
１８．８±０．３、１９．５±０．３、３２．４±０．３、３７．５±０．３、４５．７±０．３、４９．３±０．３、５２．７±０．３、５９．１±０．３、６６．３±０．３、７１．１±０．３、１０９．４±０．３、１１９．６±０．３、１２８．４±０．３、１３１．３±０．３、１３４．３±０．３、１５８．７±０．３、および１６７．８±０．３ｐｐｍ。
【０１７１】
実施例３によって調製される結晶形２の固体ＮＭＲスペクトルは、結晶形１のスペクトルとオーバーレイ比較して、図９に示される。
【０１７２】
実施例４
１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩
【化１４】
2010538041.tif 000018
【０１７３】
全重量、容量（「ｖｏｌ」）および当量は、４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸に関する。
【０１７４】
４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸（１０ｇ、１ｗｔ、１ｖｏｌ、１モル当量）を、約６５℃（７０℃のジャケット温度）にて窒素下、カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ、８．０ｇ、０．８ｗｔ、１．１モル当量）のアセトニトリル（１００ｍＬ、１０ｖｏｌ）中攪拌溶液に１０分かけて少しずつ加えた（気体発生に注意）。アセトニトリル（１．５容量、１５ｍＬ）を、４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸の容器のライン洗浄物として用い、漏斗を試薬の添加に用いる。得られた懸濁液／スラリーを、抽出する前に約６５℃にて少なくとも約２時間（例えば、約２〜２．５時間）攪拌する。
【０１７５】
反応の進行をＨＰＬＣでモニターする：サンプルを１ｍＬの５％ブチルアミンのアセトニトリル中溶液に１滴の反応混合物をクエンチして調製する；これは、活性化酸イミダゾリドを対応するブチルアミドに誘導化して残存４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸を決定する。スラリー不均一性は一貫した結果をもたらしうる  （典型的には、＜２％残存４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）安息香酸は現段階で満たしている）ので、これは、一般には、情報のみを記録する。
【０１７６】
次いで、１−イソプロピルピペラジン（０．６６７ｗｔ、６．６７ｇ、１．１５モル当量）を約６５℃にて少しずつ加え、次いで、アセトニトリル（０．５ｖｏｌ、５ｍＬ）でライン洗浄する。得られた濁った溶液を、抽出する前に約６５℃にて少なくとも約２時間（例えば、約２〜２．５時間）攪拌し続けた。反応の進行を、上記の方法を用いて、ＨＰＬＣでモニターする。
【０１７７】
次いで、反応物を冷却し、不溶物を濾去する。次いで、精製された溶液を、真空蒸留して、２．５〜３容量に濃縮し、イソプロパノール中５％水（５容量、５０ｍＬ）を常温にて加える。次いで、溶液を約６５℃に加熱し、イソプロパノール中５〜６Ｎ  ＨＣｌ（０．９容量）を少しずつ加える。添加後、簡単に結晶化が開始しうる。得られたスラリーを６５℃にて１．５時間熟成する。次いで、スラリーを、約２０分かけて５５℃に冷却し、１．５時間５５℃にて保持し、次いで、約２０分かけて４５℃に冷却し、１．５時間４５℃にて保持し、次いで、常温に冷却し、固体を濾去する（全１時間）；したがって、全冷却時間は約４．５〜４．７５時間である。
【０１７８】
濾過により単離された、固体１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩は、４容量のイソプロパノールで洗浄し、真空下５０℃にて、例えば、一晩乾燥する。
【０１７９】
上記のプロセスは、最近になって、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩の結晶形２を製造すると考えられている。
【０１８０】
実施例５
１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩の再結晶
【化１５】
2010538041.tif 000019
【０１８１】
簡単なプロセス記述
すべての重量、容量（「ｖｏｌ」）および当量は、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩に関する。
【０１８２】
１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩（１ｗｔ、例えば、実施例１の方法Ｄに記載のとおりに調製されうる）のエタノール（５０ｖｏｌ）中懸濁液を加熱還流し、溶液が形成するまで攪拌する。該溶液を６５±３℃に冷却し、精製する。熱エタノール（３ｖｏｌ）のライン洗浄物を加え、溶液を５８±３℃に冷却する。１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩（０．０１ｗｔ）の種を加え、得られた懸濁液を５８±３℃にて３０分間攪拌する。次いで、懸濁液を２時間以上０±３℃に冷却した後に、該温度にて１時間熟成する。次いで、固体を真空下で濾去し、冷エタノール（３ｖｏｌ）で洗浄する。生成物を、一定のプローブ温度になるように真空中４０℃にて乾燥する。
【０１８３】
詳細なプロセス記述
１．  １−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩（１ｗｔ、１４０ｇ、例えば、実施例１の方法Ｄに記載のとおりに調製されうる）をリアクター１に加える。
２．  反応体を窒素でパージする。
３．  エタノール（５０ｖｏｌ、７１００ｍＬ）を加える。
４．  加熱還流し、溶液が形成するまで攪拌する。
５．  該溶液を６５±３℃に冷却する。
６．  リアクター１の含有物を、シリコンチューブおよび５ミクロンインラインフィルターを装備した蠕動ポンプでリアクター２に移す。
７．  エタノールをリアクター１に加え（３ｖｏｌ、４２０ｍＬ）、６５±３℃に加熱する。
８．  リアクター１の含有物を、工程６のように、リアクター２に移す。
９．  溶液を５８℃±３℃に冷却する。
１０．  １−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩（０．０１ｗｔ）のシードを加え、得られた懸濁液を５８±３℃にて３０分間攪拌する。
１１．  次いで、懸濁液を２時間以上０±３℃に冷却した後、該温度にて１時間熟成する。
１２．  次いで、固体を真空下で濾去し、冷エタノール（３ｖｏｌ）で洗浄する。
１３．  生成物を、一定のプローブ温度まで真空中４０℃にて乾燥する。
１４．  一般に、生成物は白色固体として得られる。
【０１８４】
生物学的データ
ヒスタミンＨ３受容体を含有する膜調製物は、以下の製法にしたがって調製されうる：
（ｉ）ヒスタミンＨ３細胞系の発生
ヒトヒスタミンＨ３遺伝子をコードするＤＮＡ（Ｈｕｖａｒ，Ａら．（１９９９）  Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．５５（６），１１０１−１１０７）を、ホールディングベクターｐＣＤＮＡ３．１  ＴＯＰＯ（ＩｎＶｉｔｒｏｇｅｎ）中にクローン化し、そのｃＤＮＡを、酵素ＢａｍＨ１およびＮｏｔ−１でのプラスミドＤＮＡの制限消化によって該ベクターから単離し、同一酵素で消化された誘導性発現ベクターｐＧｅｎｅ（ＩｎＶｉｔｒｏｇｅｎ）にライゲートした。ＧｅｎｅＳｗｉｔｃｈ（商標）システム（トランス遺伝子発現が、誘導因子の非存在下でスイッチオフとなり、誘導因子の存在下でスイッチオンになるシステム）は、米国特許番号：第５，３６４，７９１号；第５，８７４，５３４号；および第５，９３５，９３４号に記載のとおりに行われた。ライゲートＤＮＡを、コンピテントＤＨ５α大腸菌宿主細菌性細胞に形質転換し、５０μｇ  ｍｌ−１にてＺｅｏｃｉｎ（商標）（ｐＧｅｎｅおよびｐＳｗｉｔｃｈ上に存在するｓｈ  ｂｌｅ遺伝子を発現する細胞の選択を可能にする抗体）を含有するＬｕｒｉａ  Ｂｒｏｔｈ（ＬＢ）寒天上にプレートした。再度ライゲートしたプラスミドを含有するコロニーを、制限分析によって同定した。哺乳動物細胞に形質転換するためのＤＮＡを、ｐＧｅｎｅＨ３プラスミドを含有する宿主バクテリアの２５０ｍｌ培養液から調製し、製造業者の指針（Ｑｉａｇｅｎ）のとおりにＤＮＡ調製物キット（Ｑｉａｇｅｎ  Ｍｉｄｉ−Ｐｒｅｐ）を用いて単離した。
【０１８５】
ｐＳｗｉｔｃｈ制限プラスミド（ＩｎＶｉｔｒｏｇｅｎ）で予めトランスフェクトされたＣＨＯ  Ｋ１細胞を、使用２４時間前に、１０％ｖ／ｖ透析ウシ胎仔血清、Ｌ−グルタミン、およびハイグロマイシン（１００μｇ  ｍｌ−１）を追加したＨａｍｓ  Ｆ１２（ＧＩＢＣＯＢＲＬ，Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）培地を含有する、完全培地にてＴ７５フラスコ当たり２ｘ１０ｅ６細胞で播種した。プラスミドＤＮＡを、製造業者の指針（ＩｎＶｉｔｒｏｇｅｎ）にしたがってＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ  ｐｌｕｓを用いて細胞にトランスフェクトした。トランスフェクションの４８時間後、細胞を、５００μｇ  ｍｌ−１  Ｚｅｏｃｉｎ（商標）を追加した完全培地にプレートした。
【０１８６】
選択の１０〜１４日後、１０ｎＭ  Ｍｉｆｅｐｒｉｓｔｏｎｅ（ＩｎＶｉｔｒｏｇｅｎ）を、受容体の発現を誘導するために培地に加えた。誘導の１８時間後、リン酸緩衝生理食塩水ｐＨ７．４で数回洗浄した後に、細胞をエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ；１：５０００；ＩｎＶｉｔｒｏｇｅｎ）を用いてフラスコから分離し、フェノール・レッド不含最小必須培地（ＭＥＭ）を含有するＳｏｒｔｉｎｇ培地中に再懸濁し、アール塩および３％胎児クローンｌｌ（Ｈｙｃｌｏｎｅ）を追加した。約１ｘ１０ｅ７細胞を、ウサギポリクローナル抗体、４ａで染色することにより受容体発現について試験し、ヒスタミンＨ３受容体のＮ末端ドメインに対して伸長し、６０分間氷上で培養し、次いで、ｓｏｒｔｉｎｇ培地中で２回洗浄した。受容体結合抗体を、Ａｌｅｘａ  ４８８蛍光マーカー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ）でコンジュゲートされた、ヤギ抗ウサギ抗体と氷上で６０分間細胞を培養することによって検出した。Ｓｏｒｔｉｎｇ培地でさらに２回洗浄した後、細胞を５０μｍ  Ｆｉｌｃｏｎ（商標）（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）で濾過し、次いで、Ａｕｔｏｍａｔｉｃ  Ｃｅｌｌ  Ｄｅｐｏｓｉｔｉｏｎ  Ｕｎｉｔを装備したＦＡＣＳ  Ｖａｎｔａｇｅ  ＳＥ  Ｆｌｏｗ  Ｃｙｔｏｍｅｔｅｒ上で分析した。対照細胞は、同様の方法で処理された非誘導性細胞であった。ポジティブ染色した細胞を、５００μｇ  ｍｌ−１  Ｚｅｏｃｉｎ（商標）を含有する完全培地を含有する、９６ウェルプレートに単細胞として保存し、抗体を用いる受容体発現の再分析およびリガンド結合試験の前に細胞を増殖させた。１つのクローン、３Ｈ３は、膜調製物用に選択された。
【０１８７】
（ｉｉ）培養細胞からの膜調製物
４℃で、かつ、予め冷却した試薬と一緒にプロトコルの全工程を実施する。細胞ペレットを、１０容量の均質化バッファー（１ｍＭフッ化フェニルメチルスルホニル（ＰＭＳＦ）および２ｘ１０ｅ−６Ｍペプスタイン（ｐｅｐｓｔａｉｎ）Ａ（Ｓｉｇｍａ）を追加した１０ｅ−４Ｍロイペプチン（アセチル−ロイシル−ロイシル−アルギナル；Ｓｉｇｍａ  Ｌ２８８４）および２５ｇ／ｍｌバシトラシン（Ｓｉｇｍａ  Ｂ０１２５））を含有する、５０ｍＭ  Ｎ−２−ヒドロキシエチルピペラジン−Ｎ’−２−エタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）、１ｍＭエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ＫＯＨでｐＨ７．４）中で再懸濁する。次いで、細胞を１リットルのガラス製ワーリングブレンダー中にて２ｘ１５秒のバーストにより均質化し、次いで、２０分間５００ｇで遠心分離する。次いで、上清を、３０分間４８，０００ｇで回転させる。ペレットを、５秒間ボルテックスして、均質化バッファー（４Ｘ容量の起源細胞ペレット）中で再懸濁、次いで、内径０．６ｍｍニードルを介してシリンジで加える。この時点で、調製物をポリプロピレンチューブにアリコートし、−８０℃にて保存する。
【０１８８】
（ｉｉｉ）ヒスタミンＨ１細胞系の発生
ヒトＨ１受容体は、一般に、文献［Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．１９９４，２０１（２），８９４］に記載の既知の製法を用いてクローン化された。ヒトＨ１受容体を安定に発現するチャイニーズハムスター卵巣細胞は、一般に、文献［Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１９９６，１１７（６），１０７１］に記載の既知の製法にしたがって産生された。
【０１８９】
本発明の化合物またはその医薬上許容される塩は、以下のアッセイにしたがってインビトロ生物活性について試験されうる。
【０１９０】
（Ｉ）ヒスタミンＨ３機能的アンタゴニストアッセイ
アッセイされる各化合物について、固体白色３８４ウェルプレート中にて、
（ａ）ＤＭＳＯ（または対照として０．５μｌ（０．５ｕｌ）ＤＭＳＯ）中で所定の濃度に希釈した０．５μｌ（０．５ｕｌ）の試験化合物；
（ｂ）コムギ胚芽凝集素ポリスチレンＬｅａｄＳｅｅｋｅｒ（登録商標）（ＷＧＡ  ＰＳ  ＬＳ）シンチレーション近接アッセイ（ＳＰＡ）ビーズを膜（例えば、上記の方法にしたがって調製された）および１０μＭ（１０ｕＭ）最終濃度のグアノシン５’二リン酸（ＧＤＰ）と混合し、ウェル当たり５μｇ（５ｕｇ）タンパク質および０．２５ｍｇビーズを含有する最終容量３０μｌ（３０ｕｌ）を得るためにアッセイバッファー（２０ｍＭ  Ｎ−２−ヒドロキシエチルピペラジン−Ｎ’−２−エタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）＋１００ｍＭ  ＮａＣｌ＋１０ｍＭ  ＭｇＣｌ２、ｐＨ７．４  ＮａＯＨ）中で希釈し、室温にて６０分間ローラー上で培養することによって調製された３０μｌ（３０ｕｌ）ビーズ／膜／ＧＤＰミックス；
（ｃ）１５μｌ（１５ｕｌ）の０．３８ｎＭ［３５Ｓ］−ＧＴＰγＳ（［３５Ｓ］−ＧＴＰ−ガンマ−Ｓ）（Ａｍｅｒｓｈａｍ；放射能濃度＝３７ＭＢｑ／ｍｌ；比放射能＝１１６０Ｃｉ／ｍｍｏｌ）、ヒスタミン（ＥＣ８０であるヒスタミンの最終アッセイ濃度をもたらす濃度）を加える。
【０１９１】
プレートを密封し、２〜６時間後、プレートを１５００ｒｐｍにて５分間遠心分離し、５分間／プレート６１３／５５フィルターを用いてＶｉｅｗｌｕｘカウンター上で計測する。データを、４パラメータロジスティック式を用いて解析する。定常活性は最小値として用いた、すなわち、ヒスタミンＨ３アンタゴニストヨードフェンプロピット（３０ｕＭ、０．５ｕｌ）をウェルに加えた。
【０１９２】
（ＩＩ）ヒスタミンＨ１機能的アンタゴニストアッセイ
組換えヒトＨ１受容体を安定発現する接着性チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞を、１０％透析ウシ胎仔血清および２００ｍＭグルタミンを追加したリボヌクレオシド不含アルファ最小必須培地（Ｇｉｂｃｏ  Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）中５％ＣＯ２下３７℃にて培養物中にて維持した。ヒトＨ１受容体を発現するこれらの細胞を、急冷凍結し、アッセイのために保存した。
【０１９３】
アッセイの２４または７２時間前に、細胞を、１２，０００または４，０００細胞／ウェル（各々）の密度で黒壁の透明底３８４ウェルプレートに播種し、５％ＣＯ２下３７℃にて培養した。細胞播種密度は、約２４時間の時点で１２００細胞に対するまたは約７２時間の時点で４０００細胞に対する細胞の融合性単層をもたらす。培地を吸引除去し、次いで、細胞を３７℃にて６０分間、細胞質カルシウム指示薬、アセチルメチル型のＦｌｕｏ−４（４ｍＭ）、２．５ｍＭプロベネシドおよび２５０ｕＭブリリアント・ブラック（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ）を含有するＨＢＳＳ培地（ＣａＣｌ２．２Ｈ２Ｏ  １．２６ｍＭ、グルコース  ５．５５ｍＭ、ＫＣｌ  ５．３６ｍＭ、ＭｇＳＯ４（無水）  ０．８１ｍＭ、ＮａＣｌ  １３６．８９ｍＭ、ＫＨ２ＰＯ４（無水）  ０．４１ｍＭ、ＨＥＰＥＳ  ２０ｍＭ、ＮａＨＣＯ３  ４．１６ｍＭ）で培養した。
【０１９４】
次いで、ロード細胞を、３７℃にて３０分間試験化合物と培養した。次いで、プレートを、アンタゴニストモードで試験用ＦＬＩＰＲ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ，ＵＫ）に分類したところで、細胞蛍光（λｅｘ  ４８８ｎｍ、λｅｍ  ５４０ｎｍ）をモニターしながら所定濃度のヒスタミン（約４ｘＥＣ５０）を加えた。
【０１９５】
機能的拮抗作用は、ＦＬＩＰＲ（商標）システム（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ）で測定される、蛍光の増加を誘導したヒスタミンの抑制によって示される。濃度効果曲線を用いて、機能的アフィニティーは、標準的薬理学的数理解析を用いて決定される。
【０１９６】
Ｈ３およびＨ１機能的アンタゴニストアッセイの結果
１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニルフェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩（例えば、実施例Ｅ１）を、ヒスタミンＨ３機能的拮抗アッセイで試験した。結果は、機能的ｐＫｉ（ｆｐＫｉ）値で表す。機能的ｐＫｉは、培養Ｈ３細胞から調製された膜を用いてＨ３機能的アンタゴニストアッセイで決定されるアンタゴニスト平衡解離定数の負の対数である。得られた結果は、多数の実験の平均値である。１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩（例えば、実施例Ｅ１）は、６．９〜８．２の観測ｆｐＫｉの範囲の、（２７実験の平均値として）約７．６のｆｐＫｉを有する拮抗作用を示した。
【０１９７】
１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩（例えば、実施例Ｅ１）を、ヒスタミンＨ１機能的アンタゴニストアッセイまたは同様のＨ１機能的アンタゴニストアッセイにて試験した。再度、結果は、機能的ｐＫｉ（ｆｐＫｉ）値として表され、多数の実験の平均値である。１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩（例えば、実施例Ｅ１）は、約＜５．６ｆｐＫｉの拮抗作用を示した。
【０１９８】
ラットエクスビボ結合試験−ラット脳ヒスタミンＨ３受容体占有
エクスビボ結合試験は、試験化合物の経口投与後のある時点でのラットのヒスタミンＨ３受容体占有を決定するために行われた。
【０１９９】
成熟雄ラット（Ｌｉｓｔｅｒ  ｈｏｏｄｅｄ  ２００−２５０ｇ，Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ，ＵＫ）は、ビヒクル（１％ｗ／ｖ水性メチルセルロース）（対照）または試験化合物（１０ｍｇ／ｋｇ）を強制経口投与され（ｎ＝３／群）、経口投与１時間または４時間後に死亡した。１時間および４時間の試験は、必ずしも同日に行われなかった。終末血液サンプルを回収し、脳を迅速に取り出した。大脳皮質組織は、エクスビボ結合の各脳の半分から分析された；他の半分の脳は、各化合物の脳濃度の薬物動態解析に用いられうる。すべての分析された組織サンプルを、液体窒素中で急冷凍結し、使用するまで−８０℃にて保存した。組織を、約３０容量の氷冷アッセイ反応バッファー中で急速に解凍および均質化した。アッセイ反応バッファーは、７．２〜７．８、通常約７．４の最終バッファーｐＨで、５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（Ｔｒｉｚｍａプリセット結晶  ｐＨ７．７  ＠２５℃を用いて調製、Ｓｉｇｍａ  ｃａｔ．Ｎｏ．Ｔ８０６８−２５０Ｇ）および５ｍＭ  ＥＤＴＡを含有していた。次いで、粗ホモジネート（６００〜８００μｇ／ウェル）を、放射性リガンドとして［３Ｈ］−Ｒ−α−メチルヒスタミンを用いてＨ３受容体結合を測定するために用いた。［３Ｈ］−Ｒ−α−メチルヒスタミンの全結合を測定するアッセイは、５０μｌアッセイ反応バッファー、４００μｌのホモジネート（６００−８００μｇ／ウェルに相当）および５０μｌの２ｎＭ  Ｒ（−）α−メチル［イミダゾール−２，５（ｎ）−３Ｈ］ヒスタミン二塩酸塩（［３Ｈ］−Ｒ−α−メチルヒスタミン；比放射能，２４Ｃｉｍｍｏｌ−１，Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，ｃａｔａｌｏｇｕｅ  ｎｏ．ＴＲＫ１０１７）から構成されていた。３０℃にて４５分間、［３Ｈ］−Ｒ−α−メチルヒスタミンと培養した。［３Ｈ］−Ｒ−α−メチルヒスタミンの非特異的結合を、５０μｌのアッセイ反応バッファーの代わりに５０μｌの１０μＭイメチット（Ｈ３受容体アゴニスト、例えば、Ｔｏｃｒｉｓから入手可能）を用いることを除き、同一アッセイを用いて同時に決定した。Ｗｈａｔｍａｎ  ＧＦ／Ｂフィルター（０．３％ｖ／ｖポリエチレンイミン（ＰＥＩ）中に予め浸された）に通して急速濾過によって実験を終了し、次いで、フィルターを４ｘ５ｍｌの氷冷採取バッファーで洗浄した。採取バッファーは、７．２〜７．８、通常約７．４の最終バッファーｐＨで、５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（Ｔｒｉｚｍａ  プリセット結晶  ｐＨ７．７  ＠２５℃から）および５ｍＭ  ＭｇＣｌ２を含有していた。フィルターを乾燥し、各々４ｍｌ  Ｕｌｔｉｍａ  Ｇｏｌｄ  ＭＶシンチレーション流体（Ｈｅｗｌｅｔｔ  Ｐａｃｋａｒｄ）を含有するバイアルに加え、放射能をＰａｃｋａｒｄ  Ｔｒｉ−Ｃａｒｂ  ２５００ＴＲ液体シンチレーションカウンターを用いて液体シンチレーション分光によって測定した。
【０２００】
Ｈ３受容体に対する［３Ｈ］−Ｒ−α−メチルヒスタミンの特異的結合を、全結合として得られた値から非特異的結合として得られた値を減算することによって決定した。
【０２０１】
タンパク質濃度を、基準としてウシ血清アルブミンを用いてＢｒａｄｆｏｒｄアッセイ法（Ｂｉｏ−Ｒａｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ａｓｓａｙ  Ｄｙｅ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅ，ｃａｔａｌｏｇｕｅ  ｎｏ．５００−０００６；Ｂｉｏ−Ｒａｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ  ＧｍｂＨから入手，Ｈｅｉｄｅｍａｎｎｓｔｒａｓｓｅ  １６４，８０９３９  Ｍｕｅｎｃｈｅｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ；またはＢｉｏ−Ｒａｄから入手，Ｙｏｒｋ，ＵＫ）を用いて決定した。サンプル中の特異的放射能を、タンパク質（すなわち、タンパク質のミクログラム当たり）について補正した。
【０２０２】
Ｈ３受容体に対する［３Ｈ］−Ｒ−α−メチルヒスタミンの特異的結合は、ビヒクル処理対照動物の割合として、平均値（ｎ＝３ラット）±ＳＥＭ（平均値の標準誤差）として表される。データはまた、Ｈ３受容体に対する［３Ｈ］−Ｒ−α−メチルヒスタミンの平均特異的結合％として計算された、試験化合物によるＨ３受容体占有の代替的測定値として、Ｈ３受容体に対する［３Ｈ］−Ｒ−α−メチルヒスタミン特異的結合の阻害として表される。
【０２０３】
ラットエクスビボ結合試験の結果
１０ｍｇ／ｋｇでラット（ｎ＝３）に経口投与し、経口投与の１時間後にラットを死亡させた、本発明のうちの、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩（
【化１６】
2010538041.tif 000020
）について、Ｈ３受容体に対する［３Ｈ］−Ｒ−α−メチルヒスタミンの特異的結合は、４０％±２％（対照の％）であると決定された。したがって、Ｈ３受容体に対する［３Ｈ］−Ｒ−α−メチルヒスタミン特異的結合の阻害は、１０ｍｇ／ｋｇでの経口投与の１時間後に試験化合物による脳Ｈ３受容体占有の代替的測定値として約６０％であった。
【０２０４】
１０ｍｇ／ｋｇでラット（ｎ＝３）に経口投与し、経口投与４時間後にラットを死亡させた、本発明のうち、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩について、Ｈ３受容体に対する［３Ｈ］−Ｒ−α−メチルヒスタミンの特異的結合は、８４％±６％（対照の％）であると決定された。したがって、Ｈ３受容体に対する［３Ｈ］−Ｒ−α−メチルヒスタミン特異的結合の阻害は、１０ｍｇ／ｋｇでの経口投与の４時間後に試験化合物によるラット脳Ｈ３受容体占有の代替的測定値として、約１６％であった。
【０２０５】
１０ｍｇ／ｋｇでラット（ｎ＝３）に経口投与し、経口投与の１時間後にラットを死亡させた、コンバレータ化合物、１−（イソプロピル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ヘキサヒドロ−１Ｈ−１，４−ジアゼピン塩酸塩（
【化１７】
2010538041.tif 000021
）について、Ｈ３受容体に対する［３Ｈ］−Ｒ−α−メチルヒスタミンの特異的結合は、４０％±４％（対照の％）であると決定された。したがって、Ｈ３受容体に対する［３Ｈ］−Ｒ−α−メチルヒスタミン特異的結合の阻害は、１０ｍｇ／ｋｇでの経口投与の１時間後に試験化合物によるラット脳Ｈ３受容体占有の代替的測定値として、約６０％であった。
【０２０６】
１０ｍｇ／ｋｇでラット（ｎ＝３）に経口投与し、経口投与の４時間後ラットを死亡させた、コンバレータ化合物、１−（イソプロピル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ヘキサヒドロ−１Ｈ−１，４−ジアゼピン塩酸塩について、Ｈ３受容体に対する［３Ｈ］−Ｒ−α−メチルヒスタミンの特異的結合は、８８％±６％（対照の％）であると決定された。したがって、Ｈ３受容体に対する［３Ｈ］−Ｒ−α−メチルヒスタミン特異的結合の阻害は、１０ｍｇ／ｋｇでの経口投与の４時間後に試験化合物によるラット脳Ｈ３受容体占有の代替的測定値として、約１２％であった。
【０２０７】
時間毎のＹｏｒｋｓｈｉｒｅ−Ｌａｎｄｒａｃｅブタ：ブタ脳Ｈ３受容体占有プロファイルにおける陽電子放出断層撮影法（ＰＥＴ）を用いる、ヒスタミンＨ３受容体アンタゴニスト「ブタ−ＰＥＴ」試験
これらの試験、およびそこから生じる結果は、すでに簡単に記載された、添付の図１０、１１、１２、１３および１４によって一部説明されている。
【０２０８】
陽電子放出断層撮影法（ＰＥＴ）の理論
ＰＥＴは、生体の放射性医薬品の４次元（３空間、１時間）分布の測定を可能にする核イメージング法である。生物活性分子（目的受容体、本場合においては、ヒスタミンＨ３受容体に結合する）は、陽電子放出核（例えば、１５Ｏ、１１Ｃ、１８Ｆなど）によってその原子の１つを交換することにより変化する。次いで、生物活性分子（放射性医薬品）は対象に静脈注射される。理論上、陽電子放出原子は、その核から陽電子を放出することにより放射性崩壊を起こす。一般には、複数の環境との相互作用の後、陽電子は、運動エネルギーを消失し、消滅により電子と相互作用する。消滅は、互いに１８０°に放射された２つの高エネルギー光子（２ｘ５１１ｋｅＶ）をもたらす。１８０°に放射された、陽電子電子消滅により生じた高エネルギー陽電子対は、外部検出されうる。ＰＥＴスキャナーの結晶検出器のリングは、同時に生じた２つの陽電子の存在を感知し、活性の局在を可能にする２つの陽電子を感知した２つの検出器のデータ対を記録する。これは、一般的には、ＰＥＴスキャンの過程中において何百万もの時間行われる。３Ｄ画像は、トモグラフィー再構成技法を用いて連続して生成される。ＰＥＴの性質は、本質的に定量的であるため、放射性医薬品の三次元分布は、放射性医薬品の比放射能（ＳＡ）を用いてＢｑ／ｍｌまたはｎＭの単位で表されうる。
【０２０９】
ＰＥＴでのインビボ受容体占有の測定
非放射性標識試験化合物（「薬剤候補」）の受容体占有は、競合的結合の結果として放射性リガンドの特異的結合の減少を測定することにより間接的に測定されうる（図１０）。図１０が示すように、薬剤候補の占有は、受容体に対する放射性特異的結合の減少により間接的に測定されうる。ＢＡは、得られる受容体部位の濃度である。組織における薬剤候補の異なる濃度の存在の結果として、試験化合物の投与後の、基準、および１０分、２．５時間、および６時間の間にＢＡがどのように変化するのかを確認する。
【０２１０】
少量の放射性リガンド（放射性リガンドの自己占有が最小、＜１０％となるようなμｇ範囲）が対象に投与される場合に、基準スキャンは行われる。標的および参照範囲（特異的結合部位を欠く領域）からの局所時間放射能曲線ならびに数学的モデルを用いて、各標的領域の得られる受容体の濃度ＢＡに比例する、結合能、ＢＰＮＤを予測することが可能である。基準スキャン後、非標識薬剤候補は対象に投与され、次のスキャンは目的の時点で得られ、結合能は予測される。異なる時点での薬剤候補占有は、基準に対する結合能測定値の変化率として計算される（Ｊ．Ｐａｓｓｃｈｉｅｒ，Ａ．Ｇｅｅ，Ａ．Ｗｉｌｌｅｍｓｅｎ，Ｗ．Ｖａａｌｂｕｒｇ，およびＡ．ｖａｎ  Ｗａａｒｄｅ，「Ｍｅａｓｕｒｉｎｇ  ｄｒｕｇ−ｒｅｌａｔｅｄ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｏｃｃｕｐａｎｃｙ  ｗｉｔｈ  ｐｏｓｉｔｒｏｎ  ｅｍｉｓｓｉｏｎ  ｔｏｍｏｇｒａｐｈｙ，」Ｍｅｔｈｏｄｓ，２００２，ｖｏｌ．２７，ｐｐ．２７８−２８６）。
【０２１１】
Ｙｏｒｋｓｈｉｒｅ−Ｌａｎｄｒａｃｅブタにおける前臨床ＰＥＴ試験
１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩（「Ａ塩」、本発明の範囲内）、および
１−（イソプロピル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ヘキサヒドロ−１Ｈ−１，４−ジアゼピン塩酸塩（「Ｂ塩」、コンバレータ化合物）のＨ３受容体占有（ＲＯ）経時変化は、選択的Ｈ３受容体アンタゴニスト［１１Ｃ］ＧＳＫ１８９２５４およびＰＥＴを用いてＹｏｒｋｓｈｉｒｅ−Ｌａｎｄｒａｃｅブタにて測定された。
【０２１２】
［１１Ｃ］ＧＳＫ１８９２５４は、［１１Ｃ−Ｎ−メチル］−６−（３−シクロブチル−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］アゼピン−７−イルオキシ）−ニコチンアミドおよび／またはその医薬上許容される塩であり、その構造は、
【化１８】
2010538041.tif 000022
である。
【０２１３】
フッ化テトラブチルアンモニウムの存在下において、ジメチルスルホキシド中１３０℃での６−（３−シクロブチル−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］アゼピン−７−イルオキシ）−ニコチンアミドとヨウ化［１１Ｃ］メチルとの反応、次いで、ＨＰＬＣ精製による［１１Ｃ］ＧＳＫ１８９２５４の調製のための、ＷＯ  ２００６／０７２５９６  Ａ１（Ｇｌａｘｏ  Ｇｒｏｕｐ  Ｌｉｍｉｔｅｄ）の第５頁第８行〜第６頁第１１行、その中の実施例１（化合物Ａ）を参照のこと。例えば、（ブタ）ＰＥＴイメージング試験における［１１Ｃ］ＧＳＫ１８９２５４の使用について、ＷＯ  ２００６／０７２５９６  Ａ１の第７頁第３２行〜第９頁第２行を参照のこと。
【０２１４】
１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩（「Ａ塩」）を用いるブタ−ＰＥＴ試験
Ｙｏｒｋｓｈｉｒｅ−Ｌａｎｄｒａｃｅブタ（ｎ＝３、ブタ体重約３８±１ｋｇ）は、麻酔（ケタミン−ミダゾラム誘導＋イソフルラン維持）下にて、図１１に示されるブタ−ＰＥＴプロトコルに示されるように、同日に４回のＰＥＴスキャンを受けた。放射性リガンド［１１Ｃ］ＧＳＫ１８９２５４は、各ＰＥＴスキャンの直前に合成された。粗［１１Ｃ］ＧＳＫ１８９２５４含有反応生成物は、ｐＨ４のギ酸アンモニウムの０．１Ｎ水性バッファー溶液中１７％のアセトニトリルからなる移動相を用いて流速１０ｍＬ／分で逆相Ｃ１８カラム（Ｗａｔｅｒｓ，Ｘ−ｔｅｒｒａ（登録商標）  ＲＰ１８，１９ｘ１００ｍｍ，５ｍｍ）を用いて行われたＨＰＬＣ精製の対象とした。回収された［１１Ｃ］ＧＳＫ１８９２５４含有生成物フラクションを真空中で濃縮して、アセトニトリルを除去し、０．９％水性塩化ナトリウム溶液中で再処方した。
【０２１５】
各ＰＥＴスキャンについて、事実上水性ギ酸アンモニウム緩衝液およびセイラインの混合物であった上記ビヒクルにおける、放射性リガンド［１１Ｃ］ＧＳＫ１８９２５４は、ボーラス投与として約１分かけて静脈投与（ｉ．ｖ．）された。全量２マイクログラム未満の［１１Ｃ］ＧＳＫ１８９２５４を、約３８±１ｋｇのブタ体重に対し５３ｎｇ／ｋｇ未満の平均全注入量で注入した。［１１Ｃ］ＧＳＫ１８９２５４を介して各ブタに注入された放射能量は、一般には、約２５０〜約４００ＭＢｑ（理想的には、約３００ＭＢｑ）であった。ブタ当たりに注入される［１１Ｃ］ＧＳＫ１８９２５４＋ビヒクルの容量は、最終ＨＰＬＣ精製から得られた収量に依存するが、一般には、約２〜約１１ｍｌの範囲であった。
【０２１６】
血液および組織活性濃度データは、９０分間記録された。
【０２１７】
基準スキャン後、非標識１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩（「Ａ塩」、５０μｇ／ｋｇ、５０マイクログラム／ｋｇ）（水性セイラインビヒクル中１ｍｌ）は、約１分かけてボーラス方法にて手で注入して静脈投与された。次のＰＥＴ捕獲を、Ａ塩の投与の１０、１５０、および３６０分後に開始した。動脈血サンプルを、［１１Ｃ］ＧＳＫ１８９２５４血漿活性および代謝物および１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン血漿濃度についてアッセイした。
【０２１８】
１−（イソプロピル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ヘキサヒドロ−１Ｈ−１，４−ジアゼピン塩酸塩（「Ｂ塩」）を用いるブタ−ＰＥＴ試験
実質上同一の実験法は、Ｙｏｒｋｓｈｉｒｅ−Ｌａｎｄｒａｃｅブタ（ｎ＝３、ブタ体重約３８±１ｋｇ）において１−（イソプロピル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ヘキサヒドロ−１Ｈ−１，４−ジアゼピン塩酸塩（「Ｂ塩」、５０μｇ／ｋｇ、ビヒクル中５０マイクログラム／ｋｇ）を用いて繰り返された。
【０２１９】
結合能および占有測定
ＰＥＴ画像は、定位座標アトラス（ｓｔｅｒｅｏｔａｘｉｃ  ａｔｌａｓ）に配列され、局所時間放射能曲線は、目的の標的領域（前頭葉、海馬、被殻、尾、間脳、内側視床、外側視床、小脳虫部、橋、中脳、および延髄）について得られた。簡易参照組織モデル（ｓｉｍｐｌｉｆｉｅｄ  ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ  ｔｉｓｓｕｅ  ｍｏｄｅｌ）（ＳＲＴＭ）（Ａ．Ａ．ＬａｍｍｅｒｔｓｍａおよびＳ．Ｐ．Ｈｕｍｅ，「Ｓｉｍｐｌｉｆｉｅｄ  ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ  ｔｉｓｓｕｅ  ｍｏｄｅｌ  ｆｏｒ  ＰＥＴ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｓｔｕｄｉｅｓ，」  Ｎｅｕｒｏｉｍａｇｅ，１９９６，ｖｏｌ．４，ｐｐ．１５３−１５８）は、参照領域として小脳を用いて各局所時間放射能曲線に当てはめられた：
【数１】
2010538041.tif 000023
［式中：Ｃｔ（ｔ）は、標的領域の活性濃度であり、Ｃｒ（ｔ）は、参照領域（小脳）の活性濃度であり、Ｒ１は、標的および参照領域の間の流入率（Ｋ１）であり、ｋ２は、標的領域における組織−血漿流出速度定数であり、ＢＰＮＤは、標的領域の結合能である］。さらに、結合能は、
【数２】
2010538041.tif 000024
［式中：ｆＮＤは、組織中の放射性リガンド不含フラクションであり、ＢＡは、結合部位の利用可能な濃度であり、Ｋｄは、放射性リガンド−受容体複合体の平衡解離定数である］
として定義されうる。
【０２２０】
受容体占有は、基準および薬剤スキャン後の間のＢＰＮＤの変化率として計算されうる（Ｊ．Ｐａｓｓｃｈｉｅｒ，Ａ．Ｇｅｅ，Ａ．Ｗｉｌｌｅｍｓｅｎ，Ｗ．Ｖａａｌｂｕｒｇ，およびＡ．ｖａｎ  Ｗａａｒｄｅ，「Ｍｅａｓｕｒｉｎｇ  ｄｒｕｇ−ｒｅｌａｔｅｄ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｏｃｃｕｐａｎｃｙ  ｗｉｔｈ  ｐｏｓｉｔｒｏｎ  ｅｍｉｓｓｉｏｎ  ｔｏｍｏｇｒａｐｈｙ，」  Ｍｅｔｈｏｄｓ，２００２，ｖｏｌ．２７，ｐｐ．２７８−２８６）：
【数３】
2010538041.tif 000025
【０２２１】
［１１Ｃ］ＧＳＫ１８９２５４の場合、小脳の領域にて小さな特異的シグナルが存在するので、小脳は真の参照領域ではない。これは、小脳結合能（ＢＰｒｅｆＮＤ）および方程式：
【数４】
2010538041.tif 000026
の母集団予測値を用いて補正されうる。
【０２２２】
占有プロファイルのモデリング
ＰＥＴスキャン全体にわたって測定された薬剤候補の投与１０、１５０および３６０分後の時間的占有プロファイル（Ｏｃｃ（ｔ））ならびに薬剤候補の血漿濃度（Ｃｐ（ｔ））は、間接モデル（ｋｏｎ−ｋｏｆｆ限定モデル）からＰＫ／ＲＯ（薬物動態／受容体占有）モデルパラメータ予測値（ｆｐ、ｋｏｎ、およびｋｏｆｆ）を得るために用いられた：
【数５】
2010538041.tif 000027
［式中：ｋｏｎおよびｋｏｆｆは、各々、試験化合物がＨ３受容体に結合するかまたはＨ３受容体から解離する速度を定義する速度定数であり、ｆｐは試験化合物（ここでは、Ａ塩またはＢ塩）の血漿中タンパク質不含フラクションである］
【０２２３】
該モデルは、律速段階が受容体−リガンド結合および解離（ｋｏｎ、ｋｏｆｆ）である一方で、血漿組織交換が瞬間的な平衡状態にあると考えられるのに十分に短時間であることを仮定する。
【０２２４】
ブタ−ＰＥＴ試験の結果
図１２、グラフＡは、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩（本発明のうち、「Ａ塩」、黒丸）および１−（イソプロピル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）フェニル］カルボニル｝ヘキサヒドロ−１Ｈ−１，４−ジアゼピン塩酸塩（「Ｂ塩」、コンバレータ化合物、黒ひし形）の時間ごとの平均（中間）血漿濃度を示す。
【０２２５】
図１２、グラフＢは、３つの時点の平均（中間）測定Ｈ３受容体占有経時変化；ならびに本発明の範囲内の「Ａ塩」（黒丸としての測定値、および実線としてモデル適合）、およびコンバレータ化合物「Ｂ塩」（黒ひし形としての測定値、および点線としてモデル適合）について、それを当てはめたｋｏｎ−ｋｏｆｆ限定モデルを示すグラフである。
【０２２６】
図１３、パートＡおよびＢは、Ａ塩単独についての図１２からのデータを示すグラフ、例えば、各々、「Ａ塩」についての時間ごとの平均（中間）血漿濃度および平均（中間）Ｈ３受容体占有経時変化を示すものである。図１３、パートＣおよびＤは、Ｂ塩単独の図１２からのデータを示すグラフ、例えば、各々、「Ｂ塩」についての時間ごとの平均（中間）血漿濃度および平均（中間）Ｈ３受容体占有経時変化を示すものである。
【０２２７】
図１４は、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩（本発明のうち、「Ａ塩」、左側グラフ、ｎ＝３）、および１−（イソプロピル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ヘキサヒドロ−１Ｈ−１，４−ジアゼピン塩酸塩（コンバレータ化合物、「Ｂ塩」、右側グラフ、ｎ＝３）についての、試験されたブタごとの、個別の血漿濃度およびＨ３受容体占有経時変化を示す。
【０２２８】
表１は、試験ごとの（すなわち、ブタごとの）予測パラメータｋｏｎ、ｋｏｆｆ、Ｋｄ（ｋｏｆｆ／ｋｏｎ）、および血漿クリアランスを示す。表１の最終列（「平均モデル」）は、平均血漿データおよび平均占有から生じる予測パラメータを示す（図１２、１３）；これらの「平均モデル」パラメータが、一般には、スキャンごとの個々に予測された平均パラメータ（「平均値」）（下から２列目）と一致すると考えられることに留意することができる。
【表３】
2010538041.tif 000028
【０２２９】
表２は、試験化合物、Ａ塩およびＢ塩ごとの、行われた３回の各試験における（試験された３匹の各ブタにおける）、３つの時点の測定Ｈ３受容体占有を示す。
【表４】
2010538041.tif 000029
【０２３０】
ブタ−ＰＥＴ試験の結論
ＰＥＴおよび［１１Ｃ］ＧＳＫ１８９２５４によってＹｏｒｋｓｈｉｒｅ−Ｌａｎｄｒａｃｅブタ（ｎ＝３）において得られた予備測定値は、試験条件下（すなわち、ブタへの試験化合物の５０マイクログラム／ｋｇの静脈投与後、および他のある条件下）、１−（イソプロピル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ヘキサヒドロ−１Ｈ−１，４−ジアゼピン塩酸塩（「Ｂ塩」、コンバレータ化合物）に比べて、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩（「Ａ塩」、本発明の範囲内）のブタ脳Ｈ３受容体占有の一般的に高速な減少を示すと考えられる。
本発明の範囲内の、Ａ塩についての、ブタ脳Ｈ３受容体占有の見掛け上高速な減少は、コンバレータ塩Ｂに比べて、Ａ塩で試験された試験２および３（すなわち、ブタ２および３）において見られるが、上記表２に示されるように、Ａ塩で試験された試験１（すなわち、ブタ１）では見られない。
【０２３１】
毒性試験１：雄Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙラットでの７日の経口繰り返し試験における１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩の毒性
毒性試験１の計画
該試験の課題は、雄Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙラットでの７日の経口繰り返し試験における、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩の毒性、および１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩（遊離塩基として測定）のトキシコキネティクスを決定することであった。
【０２３２】
１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩は、１０ｍＬ／ｋｇの投与容量にて、経口投与で７日間０（ビヒクル、対照）、３０、１００または３００ｍｇ／ｋｇ／日の投与量にて、１％（ｗ／ｖ）水性メチルセルロース中懸濁液として処方され、雄ラット（４匹／群）に投与された。３匹の雄ラットは、トキシコキネティクス評価について各ノンゼロ投与レベルで加えられた。血漿中検体濃度を含む、すべての投与量および濃度は、親「遊離塩基」化合物を用いて表される。
【０２３３】
以下の終点／パラメータは、毒性動物について評価された：臨床的観察、体重、食糧消費測定、選択血液学および選択臨床化学結果、肝重量、選択巨視的および微視的観察、ならびに選択肝臓遺伝子発現遺伝子。トキシコキネティクス評価（一連のプロファイリング）は、第１日目および第７日目のサテライト動物から回収されたサンプルで行われた。３０または１００ｍｇ／ｋｇ／日で投与された雄ラットについて、病理組織観察は、腎臓、腸間膜および下顎リンパ節のみで行われた。０ｍｇ／ｋｇ／日（対照）および３００ｍｇ／ｋｇ／日で投与された雄ラットについて、病理組織観察は、副腎、脳、心臓、腎臓、肝臓、肺、下顎リンパ節、腸間膜、胃、精巣および胸腺で行われた（下顎リンパ節観察は、０ｍｇ／ｋｇ／日投与ラットついてのみであったことを除く）。
【０２３４】
毒性試験１の主な結果の要約
−体重増加の低下（約０．３８ｘ対照）および食糧消費の低下（約０．８０ｘ前処理）は、３００ｍｇ／ｋｇ／日の投与量で雄ラットにて観察された。
−体重増加の増加（約１．４３ｘ平均対照）は、１００ｍｇ／ｋｇ／日で雄ラットにて見られた。
−重症度が最小の動脈周囲炎症細胞湿潤物は、３００ｍｇ／ｋｇ／日の用量で処置された４匹すべての雄ラットの腎臓の肺門領域にて認められ、片側（４匹のラットのうち２匹）または両側（４匹のラットのうち２匹）であった。該所見は、腸間膜動脈、または検査されたその他の動脈では認められず、その有意性は不明確である。
−０（ビヒクル）、３０および１００ｍｇ／ｋｇ／日で投与された雄ラットの腎臓が検査された；腎門動脈周囲炎症性細胞湿潤物はこれらの投与量では見出されなかった。
−コレステロール濃度は、３００ｍｇ／ｋｇ／日の雄ラットにてわずかに低下した（約０．６５ｘ平均対照）。
−咀嚼運動を伴う、ケージ室で顎をこする行動は、雄ラットにおける全ての０以外の用量、主に３００ｍｇ／ｋｇ／日にて確認された。
−雄ラットにおける特定の他の観察は、３００ｍｇ／ｋｇ／日または１００および３００ｍｇ／ｋｇ／日用量にて確認されたが、  一般的には、散発性、一過性かつ大部分はわずかであった。
【０２３５】
雄Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙラットにおいて、３０または１００ｍｇ／ｋｇ／日の１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩（遊離塩基として測定）の７日間の経口繰り返し投与は、十分に耐性であると考えられる。雄Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙラットにおいて、３００ｍｇ／ｋｇ／日の該塩（遊離塩基として測定）の７日間の経口繰り返し投与は、適度に耐性であると考えられる。
【０２３６】
毒性試験２：Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙラットでの７日の経口繰り返し試験における１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩の毒性
１％（ｗ／ｖ）水性メチルセルロース中懸濁液として処方された、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩は、以下のように１０ｍＬ／ｋｇの投与量でＳｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙラット群に投与された（すべての投与量および濃度は、親「遊離塩基」化合物を用いて表される）：
−経口投与で最大７日間、０（ビヒクル、対照）または６００ｍｇ／ｋｇ／日の投与量で１日１回雄ラット（４匹／群）に投与された（６００ｍｇ／ｋｇ／日で２日のみ）；
−経口投与で最大７日間、０（ビヒクル、対照）または３００もしくは６００ｍｇ／ｋｇ／日で１日１回雌ラット（４匹／群）に投与された（６００ｍｇ／ｋｇ／日で２日のみ）。
【０２３７】
トキシコキネティクス評価のために、３匹の雄ラットおよび３匹の雌ラットは６００ｍｇ／ｋｇ／日にて加えられ、３匹の雌ラットは３００ｍｇ／ｋｇ／日にて加えられた。
【０２３８】
以下の終点／パラメータは、毒性動物について評価された：臨床的観察、体重、食糧消費、選択血液学、選択臨床化学、肝重量、ならびに選択巨視的および微視的観察。トキシコキネティクス評価は、第１日目（３００および６００ｍｇ／ｋｇ／日投与）および第７日目（３００ｍｇ／ｋｇ／日投与のみ）に回収されたサンプルで行われた。
【０２３９】
６００ｍｇ／ｋｇ／日の投与量は、雄または雌Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙラットのいずれかでは耐性ではなかった。
【０２４０】
雌ラットにおける３００ｍｇ／ｋｇ／日の投与量について：
−臨床兆候には、咀嚼運動、ケージ室で顎をなでること、および特定の他の臨床兆候が含まれていた；
−特定の血液学および他の臨床化学パラメータは増加した；
−尿素およびコレステロール濃度は減少した（尿素約０．８１ｘ対照または平均対照、およびコレステロール約０．５２ｘ対照または平均対照）；および
−巨視的または微視的観察に関連しないように思われるが、肝重量は増加した（約１．２４ｘ対照または平均対照）。
【０２４１】
最小重症度の、胃底部の腺膨張は、３００ｍｇ／ｋｇ／日の投与量を投与されたほとんどの雌ラットにて観察された。該変化はまた、２種の対照（１種の雄および１種の雌）に存在しており、その重要性は現段階では不明確である。
【０２４２】
雌Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙラットでは、１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩（遊離塩基として測定）の３００ｍｇ／ｋｇ／日の７日間の経口繰り返し用量は、適度に耐性であると考えられる。
【０２４３】
毒性試験１および２からの予備的結果
１−（１−メチルエチル）−４−｛［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル］カルボニル｝ピペラジン塩酸塩は、３００ｍｇ／ｋｇ／日（遊離塩基として測定）までの用量での経口繰り返し投与の７日後、雄および雌のＳｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙラットにおいて十分に耐性であるかまたは適度に耐性であると考えられる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３−１】
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【図１３−２】
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【図１４】
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【国際調査報告】
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