(57)【要約】  再構成可能なサンプル調製装置は、中空本体を有する回転プランジャ装置と、回転プランジャの第１の端部上に設けられてサンプルを収容するカップリング装置とを含む。また、装置は、少なくとも１つのシールされた試薬モジュールも含む。回転プランジャがカップリング装置上で回転されると、試薬モジュールの膜が穿孔されて、サンプルと試薬モジュールからの物質とが混合される。
2010533298.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
中空本体を有する回転プランジャ装置と、
前記回転プランジャの第１の端部に設けられるカップリング装置と、
前記回転プランジャの第２の端部にある少なくとも１つのチャンバと少なくとも１つのシールとを備える少なくとも１つのシールされた試薬モジュールと、を備え、
前記回転プランジャが前記カップリング装置上で回転されると、前記試薬モジュールのシールが穿孔されて、前記試薬モジュールの少なくとも１つのチャンバ内の物質とサンプルとが混合される、
サンプル調製装置。
【請求項２】
前記試薬モジュールのチャンバが試薬流体を収容する、請求項１に記載のサンプル調製装置。
【請求項３】
前記試薬モジュールのチャンバが試薬流体を収容する、請求項１に記載のサンプル調製装置。
【請求項４】
前記回転プランジャが試薬モジュールを線形態様で穿孔する、請求項１に記載のサンプル調製装置。
【請求項５】
前記回転プランジャ装置に設けられる膜穿孔装置を更に備える、請求項１に記載のサンプル調製装置。
【請求項６】
前記回転プランジャ装置の中空本体内に受けられる磁気ワンドを更に備える、請求項１に記載のサンプル調製装置。
【請求項７】
前記磁気ワンドは、磁気ビーズ混合体を引き付け或いは解放するために挿入され或いは後退させられる、請求項６に記載のサンプル調製装置。
【請求項８】
前記膜穿孔装置がプラスチックから形成される、請求項５に記載のサンプル調製装置。
【請求項９】
流体を洗浄して磁気ビーズから分離するために吸着材料が使用される、請求項３に記載のサンプル調製装置。
【請求項１０】
サンプル調製装置を動作させるための方法であって、
中空本体を有する回転プランジャ装置を設ける工程、
カップリング装置を前記回転プランジャの一端上に位置合わせする工程、
サンプルを前記カップリング装置上に収容する工程、
少なくとも１つのシールされた試薬モジュールを前記カップリング装置上に設ける工程、及び
前記試薬モジュールの膜が穿孔されるように前記回転プランジャを前記カップリング装置上で回転させ、それにより、サンプルと試薬モジュールからの物質とを混合させる工程、
を含む方法。
【請求項１１】
サンプル調製装置のためのコネクタシステムであって、
第１の端部と第２の端部と内側キャビティとを有するコネクタ装置を備え、
前記内側キャビティが、その第１の端部で試薬モジュールを収容し、その第２の端部でサンプルを収容し、
回転プランジャに組み合わせられる第１の端部が、試薬モジュールをサンプルと混合されるように穿孔するための穿孔機構を有する、コネクタシステム。
【請求項１２】
サンプル調製装置のための回転プランジャであって、
第１の端部と、第２の端部と、前記第１の端部と前記第２の端部との間で延びる中空キャビティとを有する円筒体と、
前記中空キャビティ内に受けられ、前記第１の端部から前記第２の端部へと進退する磁気ワンドと、
前記第２の端部に設けられる膜穿孔装置と、を備え、
前記磁気ワンドが前記第１の端部から前記第２の端部へと前進されるときに、膜穿孔装置が取り付けられた試薬モジュールの膜を穿孔し、サンプルと試薬モジュールからの物質とが混合される、回転プランジャ。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はサンプル調製装置に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
生体サンプルは、しばしば、分析前に調製されなければならない。例えば、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）技術を使用して生体サンプルを分析することが可能となる前に、サンプルを収集して処理することにより核酸を抽出しなければならない。しばしば、３つのステップが一般に行なわれなければならない。第１に、サンプルが得られる環境でフミン酸などの阻害物質及び金属が除去される。第２に、サンプルが濾過されて濃縮される。第３に、ＰＣＲ検定のための試薬がサンプルに加えられる。サンプル調製は、しばしば、更なるステップ、例えばサンプル細胞溶解やサンプルの洗浄を含む場合がある。これらのステップは、非常に時間がかかる可能性があり、また、熟練した実験技師の技能を必要とする場合がある。
【０００３】
生体サンプル調製は、しばしば、多くの複雑なステップを伴うため、当業者は、しばしば、サンプルを調製して分析技術を行なうために必要な器具または技能を欠く。したがって、当該分野でサンプルを調製して分析できるようにするのではなく、サンプルを調製および分析のための実験施設へ輸送しなければならない。これは、病理学的物質の拡散、付加的なコスト、サンプル損失、及び、汚染を引き起こす可能性がある遅延をもたらし得る。これらの不都合は、生物兵器剤（biowarfare agents）を含む病原微生物を取り扱う場合に特に問題である。したがって、訓練の限られた職員によって当該分野で容易に使用できるサンプル調製装置の必要性が存在する。
【０００４】
幾つかの消耗可能なサンプル調製装置が公知である。しかしながら、これらのサンプル調製装置は多くの不都合に見舞われる。例えば、携帯できるサンプル調製装置は一般に容易に再構成することができない。これらの装置には、全ての用途には適さない場合がある試薬が予め装填され、その結果、用途に応じて異なるサンプル調製装置の必要性が生じる。
【０００５】
また、消耗可能なサンプル調製装置は、しばしば、分析装置への導入前にサンプル操作の複数のステップを必要とする。例えば、サンプルを一方の試薬チャンバから他方の試薬チャンバへと手で移動させなければならない場合がある。そのようなステップは、時間がかかる可能性があり、また、サンプルの汚染または損失をもたらす可能性がある。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
したがって、容易に再構成でき且つサンプルの簡単な調製を可能にする生体サンプル調製装置の必要性が存在する。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
これに伴って、使用および再構成を容易にするサンプル調製装置が開示される。１つの実施形態は、中空本体を有する回転プランジャ装置と、回転プランジャの一端上に設けられてサンプルを収容するカップリング装置とを含むサンプル調製装置を提供する。また、装置は、少なくとも１つのシールされた試薬モジュールも含む。回転プランジャがカップリング装置上で回転されると、試薬モジュールの膜が穿孔されて、サンプルと試薬モジュールからの物質とが混合される。
【０００８】
他の実施形態によれば、サンプル調製装置を形成するための方法は、中空本体を有する回転プランジャ装置を設け、カップリング装置を回転プランジャの一端上に位置合わせすることを含む。また、方法は、サンプルをカップリング装置上に収容し、少なくとも１つのシールされた試薬モジュールをカップリング装置上に設け、試薬モジュールの膜が穿孔されるように回転プランジャをカップリング装置上で回転させ、それにより、サンプルと試薬モジュールからの物質とを混合させることも含む。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】一実施形態に係る再構成可能なサンプル調製装置の断面図を示している。
【図２】一実施形態に係る再構成可能なサンプル調製装置内で行なわれるステップを示すフローチャートである。
【図３ａ】試薬モジュール４の幾つかの典型的な構成を示している。
【図３ｂ】試薬モジュール４の幾つかの典型的な構成を示している。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
サンプル調製装置とその使用および構成のための方法とが開示される。以下の説明では、数多くの詳細が示される。しかしながら、当業者であれば分かるように、これらの特定の詳細な記述が無くても実施形態を実施できる。その他の場合には、周知の構造および装置が詳しくはないがブロック図形式で示される。
【００１１】
図１はサンプル調製装置の断面図を示している。参照符号１０で全体的に示されるサンプル調製装置は、回転プランジャ装置１と、膜穿孔装置１ａと、ワンド２と、カップリング装置３と、試薬モジュール４とを含む。
【００１２】
一実施形態によれば、回転プランジャ１は、近位端２０と、遠位端３０と、中空本体２５とを有する。回転プランジャ１の遠位端３０には膜穿孔装置１ａを設けることができる。膜穿孔装置１ａは、プラスチックまたは金属材料などの任意の適切な材料から形成することができる。膜穿孔装置１ａを形成し得る材料は、好ましくは、試薬に適合すべきであり、サンプルに支障を来たすべきではない。ワンド２は、回転プランジャ１の近位端２０から遠位端３０へと延びる中空本体２５内に収容することができる。ワンド２が磁気ワンドであってもよい。中空本体２５は、既に市販されている磁気ワンドを収容するように形成することができる。
【００１３】
カップリング装置３は近位端３５と遠位端３６とを有する。カップリング装置３の近位端は、以下で更に詳しく説明するように、回転プランジャ１と機械的に連通(mechanical communication)するように適合されることができる。カップリング装置３は、回転プランジャのネジに対応するネジ、摩擦接続、又は、何らかの他のタイプの機械的な連通を含む任意の手段を使用して、回転プランジャ１と機械的に連通できる。カップリング装置３の遠位端は、以下で更に詳しく説明するように、１つ以上の試薬モジュール４を保持するように適合されることができる。カップリング装置３は、試薬モジュール４の外面のネジに対応するネジ、試薬モジュール４との摩擦接続、又は、任意の他の適切な手段を含む任意の適切な手段を使用して、１つ以上の試薬モジュール４を保持できる。
【００１４】
多数の異なる方法でサンプルをサンプル調製装置に導入することができる。カップリング装置３は、最初のサンプルを近位端３５で受けることができる。任意の手段、例えばピペットまたはスワブによってサンプルをカップリング装置３内へ配置することができる。カップリング装置３がサンプルを受けるように適合されてもよい。例えば、カップリング装置３は、サンプルを受けるために緩衝溶液または吸着材料、例えば綿を含んでもよい。また、サンプルを最初に膜穿孔装置１ａの遠位端側または近位端側の中空本体２５内に配置することもできる。サンプルを収容するため、中空チューブ２５が吸着材料を含んでもよい。更なる他の代替案として、サンプルを最初に試薬モジュール４によって受けることができる。例えば、試薬モジュール４は、図３ａに示されるように、シール８ａ、８ｂ、８ｃによってそれぞれ分離される３つのチャンバを有してもよい。第１のシール８ａを穿孔することによってサンプルを第１のチャンバ９内へ導入することができる。第２のチャンバ１０および第３のチャンバ１１は、サンプルの更なる調製のために緩衝剤および吸着材料をそれぞれ収容することができる。これらのチャンバには、装置の動作中に、膜穿孔装置１ａまたはワンド２が順次にシール８ｂおよびシール８ｃを貫通することによりアクセスできる。
【００１５】
試薬モジュール４は任意の構成を成すことができる。例えば、試薬モジュール４は、チャンバを分離するシールが穿孔されない限り各チャンバの内容物が互いに接触しないようにシールされた１つ以上のチャンバを含むことができる。チャンバは、磁気ビーズ、緩衝剤、試薬、又は、吸収材料を収容することができる。シールは、任意の適切な材料、例えば箔またはプラスチックから形成できる。試薬モジュール４を特定の用途のために構成することができる。例えば、試薬モジュール４は、特定のタイプの分析のための全ての試薬を収容することができる。別の方法では、望まれるサンプル調製の特定のタイプに応じて試薬モジュール４の異なる組み合わせを使用できるように、それぞれの試薬毎に異なる試薬モジュール４を形成することができる。また、ユーザが所望の試薬を加え或いは試薬を変更できるように試薬モジュール４を構成することもできる。例えば、試薬モジュール４は、内容物、例えば磁気ビーズ、緩衝剤、及び、試薬を注入または除去するために注入ポートを遠位端に含むことができる。
【００１６】
図３は幾つかの試薬モジュール４の構成を示している。図３ａは、第１のチャンバ９、第２のチャンバ１０、及び、吸着材料１２を収容する第３のチャンバ１１を有する試薬モジュール４を示している。これらの３つのチャンバはシール８ａ、８ｂ、８ｃによって分離される。１つの実施形態では、第１のチャンバ９が緩衝溶液を収容し、第２のチャンバ１０が試薬を収容し、第３のチャンバ１１が緩衝剤および試薬を吸収するための吸着材料を収容する。図３ｂは、第１のチャンバ１３、第２のチャンバ１４、第３のチャンバ１５、第４のチャンバ１７、及び、第５のチャンバ１８を有する試薬モジュール４を示している。第３のチャンバ１５および第５のチャンバ１９は吸着材料１６、１９をそれぞれ有する。第１のチャンバ１３は緩衝剤を磁気ビーズ２０と共に収容することができ、第２のチャンバ１４は溶菌液を収容することができ、第３のチャンバ１５は緩衝溶液および溶菌液を吸収することができ、第４のチャンバ１７は、磁気ビーズと結合する材料を洗浄するために洗浄緩衝剤を有することができ、また、第５のチャンバは、洗浄緩衝剤を第４のチャンバ１７から吸収するために吸着材料１９を収容することができる。特定の用途に基づいて他の構成を容易に形成できる。
【００１７】
試薬モジュール４は、試薬モジュールカプラ２０を使用して他の試薬モジュールに対して取り付けることができる。試薬モジュールカプラ２０により、多くの試薬モジュールを直列に接続することができる。試薬モジュールカプラ２０は、摩擦取り付けを使用して２つの試薬モジュールを組み合わせることができ、あるいは、試薬モジュールの外面上に見出されるネジに対応するネジを含むことができる。試薬モジュールカプラ２０を使用して２つ以上の試薬モジュール４を使用する必要はない。単に１つの試薬モジュール４をカプラ３から取り外して異なる試薬モジュール４を取り付けることによって異なる試薬モジュール４を使用することもできる。第１の試薬モジュール４を使用して調製されるサンプルを、磁気ビーズおよびワンド２を使用して第２の試薬モジュール４へ移すことができる。
【００１８】
試薬モジュール４はサンプルモジュール６を含むことができる。このサンプルモジュール６は、分析のために最終調製サンプルを保持するべく使用できる。例えば、サンプルモジュール６がキュベットであってもよい。サンプルモジュール６は、試薬モジュール６の一体部分となることができ、あるいは、試薬モジュール４に組み合わせることができる。
【００１９】
動作の１つの実施形態において、回転プランジャ装置１は、該回転プランジャ１をカップリング装置３の方へと捩じることによって、カップリング装置３と機械的に連通した状態で配置させることができる。膜穿孔装置１ａは、シール９を穿孔してサンプル７を試薬モジュール４の内容物に晒す。試薬モジュール４が２つ以上のチャンバを含む場合には、試薬モジュール４を回転プランジャ装置４に捩じ込むことによってサンプルを各チャンバに対して順次に晒すことができる。また、磁気プランジャ２を使用して、チャンバを分離するシールを穿孔することによって、サンプル７を各チャンバに対して順次に晒すこともできる。このようにして、それぞれが１つ以上のチャンバを含む１つ以上の試薬モジュール４の内容物に対してサンプル７を順次に晒すことができる。
【００２０】
１つの実施形態によれば、磁気ビーズを引き付け或いは解放するために、磁気ワンド２を中空本体２５内に挿入し或いは後退させることができる。サンプルを装填前に磁気ビーズと予め混合させることができ、あるいは、磁気ビーズを試薬モジュール４のチャンバ内に収容することができる。磁気ビーズ混合は、サンプル中の粒子の単離および分離のために利用することができる。例えば、検体を磁気ビーズに結合することができ、また、磁気ワンド２を使用して磁気ビーズを各チャンバを通じて押し進めることによって、検体を各チャンバの内容物に対して順次に晒すことができる。１つの実施形態では、磁気ビーズが核酸を結合するようになっていてもよい。
【００２１】
動作においては、回転プランジャ１をカップリング装置３だけに組み合わせられるため、他のサンプルがカップリング装置３によって受けられるように回転プランジャをカップリング装置３から容易に取り外すことができる。したがって、多くのサンプルを迅速な方法で調製することができる。回転プランジャ１の動き、具体的には組み込まれた磁気ワンド２の動きは、ユーザによって制御されてもよく、あるいは、それが自動プロセスとなるように他の装置に取り付けられてもよい。同様に、磁気ワンドがユーザ調整形態で或いは自動形態でサンプルモジュール６内に挿入され或いは後退させてもよい。磁気ワンドの繰り返しの挿入または後退は、磁気ビーズと試薬モジュール４の内容物との最大接触を可能にし得る。
【００２２】
サンプル調製装置を消耗可能にすることができる。すなわち、サンプル調製装置を１回の使用の後に処分することができる。別の方法では、サンプル調製装置の一部だけを消耗可能にしてもよい。例えば、回転プランジャ装置１を繰り返し使用するように形成できるとともに、カップリング装置３および試薬モジュール４をそれぞれの使用後に廃棄することができる。再使用可能な構成要素は、繰り返しの汚染除去処理後に劣化しない或いは損傷しない材料から形成することができる。
【００２３】
１つの実施形態によれば、再構成可能なサンプル調製装置をＤＮＡ精製のために使用できる。ＤＮＡ精製は、ＤＮＡが細胞から抽出されて他の核物質および細胞物質から分離されるプロセスである。ＤＮＡは、しばしば、様々な異なるタイプのサンプルから抽出される。したがって、異なる数の試薬流体または吸着剤を伴う再構成可能な装置を有することができるのが理想的である。これは、ＤＮＡを異なるタイプのサンプルから抽出するために異なる反応および異なるステップが必要だからである。ＤＮＡを抽出できるサンプルの例としては、数例を挙げると、バクテリア、ウイルス、植物、及び、動物が挙げられるが、これらに限定されない。サンプル源に応じて、異なる試薬およびサンプル調製ステップが使用されなければならない。したがって、試薬モジュール４を構成できる容易な方法が、試薬モジュールをＤＮＡ精製で使用するのに良く適するようにする。
【００２４】
１つの実施形態によれば、サンプル調製が終了されると、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）を使用してサンプルが分析される。更なる実施形態では、携帯できる環境においてＰＣＲのために再構成可能なサンプル調製装置を利用することができる。使用の容易性および効率を維持するためには、同じ回転プランジャ装置１を使用しつつ、得られたサンプルに基づいて異なるサンプルモジュール６を使用できることが、携帯可能な状況にとって理想的である。この場合、サンプルホルダ６は、蛍光光度計またはＰＣＲ反応を行なうための何らかの他の装置に挿入されて該装置で利用されてもよい。
【００２５】
サンプル調製装置はサンプルを調製するための分野で使用できるが、サンプル調製装置を実験環境において利用することもできる。磁気ビーズ分離技術は、新鮮な冷凍した保存サンプルと共に利用されて有効であることが知られている。この方法によってこの装置を利用するＤＮＡ精製は、多量の機械的応力を与えることがなく、また、サンプルを化学的な処理または物理的な処理に晒すこともないため、有益である。また、該方法は容易に制御されて繰り返すことができる。更に、再構成可能なサンプル調製装置は、拡張可能であり、最終結果を得るために面倒な或いは時間のかかるプロセスを伴わない。
【００２６】
図２は、一実施形態に係る再構成可能なサンプル調製装置内で行なわれるステップを示すフローチャートである。プロセスは、開始状態Ｓ１００から始まり、プロセスステップＳ１０１へ移行する。このプロセスステップＳ１０１では、中空本体を有する回転プランジャ装置が設けられる。プロセスステップＳ１０２では、カップリング装置が回転プランジャの一端上に位置合わせされる。プロセスステップＳ１０３では、サンプルをカップリング装置上に収容することができる。サンプルが収容された後、プロセスステップＳ１０４では、少なくとも１つのシールされた試薬モジュールをカップリング装置上に設けることができる。シールされた試薬モジュールが設けられた後、プロセスステップ１０５では、試薬モジュールの膜が穿孔されるように回転プランジャをカップリング装置上で回転させることができ、それにより、サンプルと試薬モジュールからの物質とが混合される。サンプルが調製された後、プロセスは決定ステップＳ１０６へ移行する。この決定ステップでは、他のサンプルが調製されるべきかどうかが決定される。他のサンプルが調製されるべきである場合には、プロセスがプロセスステップＳ１０１へ戻り、そうでない場合には、プロセスが状態Ｓ１０７で終わる。
【００２７】
典型的な実施形態のこの説明に基づき、他の実施形態は当業者に容易に理解できる。したがって、これらの典型的な実施形態が範囲を限定するものと見なされるべきではなく、範囲は以下の特許請求の範囲にしたがって規定される。
【図１】
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【図２】
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【図３ａ】
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【図３ｂ】
2010533298.tif 000006
【国際調査報告】
2010533298.tif 000007
2010533298.tif 000008
2010533298.tif 000009