(57)【要約】  本発明は、患者における、記憶、学習、認知、シナプス伝達、神経伝達物質の合成および放出を向上させ、脳リン脂質レベルを増加させる方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を患者に投与することを含む方法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
アルツハイマー病または他の加齢性記憶障害を有する患者において、記憶、学習または認知を向上させる方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を含む組成物を該患者に投与し、それによってアルツハイマー病または他の加齢性記憶障害を有する患者において、記憶、学習または認知を向上させることを含む方法。
【請求項２】
前記ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩が、前記患者におけるウリジンまたはウリジンホスフェートのレベルを増加させることができる、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記組成物が、多価不飽和脂肪酸をさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
アルツハイマー病または他の加齢性記憶障害を有する患者において、シナプス伝達を向上させる方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を含む組成物を該患者に投与し、それによってアルツハイマー病または他の加齢性記憶障害を有する患者において、シナプス伝達を向上させることを含む方法。
【請求項５】
前記ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩が、前記患者におけるウリジンまたはウリジンホスフェートのレベルを増加させることができる、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記組成物が、多価不飽和脂肪酸をさらに含む、請求項４に記載の方法。
【請求項７】
アルツハイマー病または他の加齢性記憶障害を有する患者の脳細胞または神経細胞が、神経伝達物質を合成する能力を、増加または強化する方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を含む組成物を該患者に投与し、それによって患者の脳細胞または神経細胞が神経伝達物質を合成する能力を増加または強化することを含む方法。
【請求項８】
前記神経伝達物質がアセチルコリンである、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩が、前記患者におけるウリジンまたはウリジンホスフェートのレベルを増加させることができる、請求項７に記載の方法。
【請求項１０】
前記組成物が、多価不飽和脂肪酸をさらに含む、請求項７に記載の方法。
【請求項１１】
アルツハイマー病または他の加齢性記憶障害を有する患者の脳細胞または神経細胞が、有効量の神経伝達物質をシナプスに繰り返し放出する能力を、増加または強化する方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を含む組成物を該患者に投与し、それによって患者の脳細胞または神経細胞が、有効量の神経伝達物質をシナプスに繰り返し放出する能力を増加または強化することを含む方法。
【請求項１２】
前記神経伝達物質がアセチルコリンである、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩が、前記患者におけるウリジンまたはウリジンホスフェートのレベルを増加させることができる、請求項１１に記載の方法。
【請求項１４】
前記放出がニューロンの刺激後に生じる、請求項１１に記載の方法。
【請求項１５】
前記組成物が、多価不飽和脂肪酸をさらに含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１６】
アルツハイマー病または他の加齢性記憶障害を有する患者の脳細胞または神経細胞によるホスファチジルコリンの生成を刺激または強化する方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を含む組成物を該患者に投与し、それによって患者の脳細胞または神経細胞によるホスファチジルコリンの生成を刺激または強化することを含む方法。
【請求項１７】
前記脳細胞または神経細胞が新しく分化される、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記ホスファチジルコリンのレベルが、脳細胞または神経細胞の樹状突起膜において増加される、請求項１６に記載の方法。
【請求項１９】
前記ホスファチジルコリンのレベルが、脳細胞または神経細胞の軸索膜において増加される、請求項１６に記載の方法。
【請求項２０】
前記ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩が、前記患者におけるウリジンまたはウリジンホスフェートのレベルを増加させることができる、請求１６に記載の方法。
【請求項２１】
前記組成物が、多価不飽和脂肪酸をさらに含む、請求項１６に記載の方法。
【請求項２２】
アルツハイマー病または他の加齢性記憶障害を有する患者の脳において、ホスファチジルコリン（ＰＣ）、ホスファチジルエタノールアミン（ＰＥ）、ホスファチジルセリン（ＰＳ）およびホスファチジルイノシトール（ＰＩ）から選択されるリン脂質のレベルを増加させる方法であって、ＣＤＰコリンまたは薬学的に許容可能なその塩を含む組成物を該患者に投与し、それによって患者の脳において、ＰＣ、ＰＥ、ＰＳおよびＰＩから選択されるリン脂質のレベルを増加させることを含む方法。
【請求項２３】
前記ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩が、前記患者におけるウリジンまたはウリジンホスフェートのレベルを増加させることができる、請求２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記組成物が、多価不飽和脂肪酸をさらに含む、請求項２２に記載の方法。
【請求項２５】
アルツハイマー病または他の加齢性記憶障害を有する患者において、脳膜の生成を増加または強化する方法であって、ＣＤＰコリンまたは薬学的に許容可能なその塩を含む組成物を該患者に投与し、それによって患者の脳膜の生成を増加または強化することを含む方法。
【請求項２６】
前記ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩が、前記患者におけるウリジンまたはウリジンホスフェートのレベルを増加させることができる、請求２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記組成物が、多価不飽和脂肪酸をさらに含む、請求項２５に記載の方法。
【請求項２８】
アルツハイマー病または他の加齢性記憶障害を有する患者の神経細胞の神経突起伸長を刺激または強化する方法であって、ＣＤＰコリンまたは薬学的に許容可能なその塩を含む組成物を該患者に投与し、それによって患者の神経細胞の神経突起伸長を刺激または強化することを含む方法。
【請求項２９】
前記ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩が、前記患者におけるウリジンまたはウリジンホスフェートのレベルを増加させることができる、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記組成物が、多価不飽和脂肪酸をさらに含む、請求項２８に記載の方法。
【請求項３１】
アルツハイマー病または他の加齢性記憶障害を有する患者の神経細胞の軸策分岐を刺激または強化する方法であって、ＣＤＰコリンまたは薬学的に許容可能なその塩を含む組成物を該患者に投与し、それによって患者の神経細胞の軸策分岐を刺激または強化することを含む方法。
【請求項３２】
前記ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩が、前記患者におけるウリジンまたはウリジンホスフェートのレベルを増加させることができる、請求３１に記載の方法。
【請求項３３】
前記組成物が、多価不飽和脂肪酸をさらに含む、請求項３１に記載の方法。
【請求項３４】
アルツハイマー病または他の加齢性記憶障害を有する患者の損傷された神経細胞の修復を促進する方法であって、ＣＤＰコリンまたは薬学的に許容可能なその塩を含む組成物を該患者に投与し、それによって患者の損傷された神経細胞の修復を促進することを含む方法。
【請求項３５】
前記ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩が、前記患者におけるウリジンまたはウリジンホスフェートのレベルを増加させることができる、請求３４に記載の方法。
【請求項３６】
前記組成物が、多価不飽和脂肪酸をさらに含む、請求項３４に記載の方法。
【請求項３７】
膜の生成が、前記神経細胞において刺激または強化される、請求項３４に記載の方法。
【請求項３８】
損傷された神経細胞が損傷された軸索を有し、該損傷された軸索が治癒される、請求項３４に記載の方法。
【請求項３９】
膜の生成が、前記神経細胞に隣接するミエリン生成乏突起神経膠細胞において刺激または強化される、請求項３４に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、患者における、記憶、学習、認知、シナプス伝達、神経伝達物質の合成および放出を向上させ、脳リン脂質レベルを増加させる方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を患者に投与することを含む方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
ウリジンは、ピリミジンヌクレオシドであり、リボ核酸および組織グリコゲン、例えばＵＤＰグルコースおよびＵＴＰグルコースの合成に不可欠である。以前のウリジン単独の医学的使用は、ピリミジン合成の欠乏に関連した遺伝的障害、例えばオロト酸尿、の治療を包含する。コリンは、多くの食品の食餌性成分であり、正常な膜構成および機能に不可欠ないくつかの主要リン脂質の一部である。コリンは、ある場合に、栄養を非経口的に投与されている患者に追加のカロリーおよび必須脂肪酸を送達する液体エマルジョンと共に含有される。
【発明の概要】
【０００３】
本発明は、患者における、記憶、学習、認知、シナプス伝達、神経伝達物質の合成および放出を向上させ、脳リン脂質レベルを増加させる方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を患者に投与することを含む方法に関する。
【０００４】
１つの実施形態において、本発明は、患者における記憶を向上させる方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を含む組成物を患者に投与し、それによって患者における記憶を向上させることを含む方法を提供する。
【０００５】
１つの実施形態において、本発明は、患者における学習を向上させる方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を含む組成物を患者に投与し、それによって患者における学習を向上させることを含む方法を提供する。
【０００６】
１つの実施形態において、本発明は、患者における認知を向上させる方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を含む組成物を患者に投与し、それによって患者における認知を向上させることを含む方法を提供する。
【０００７】
他の実施形態において、本発明は、患者におけるシナプス伝達を向上させる方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を含む組成物を患者に投与し、それによって患者におけるシナプス伝達を向上させることを含む方法を提供する。
【０００８】
他の実施形態において、本発明は、患者の脳細胞または神経細胞が神経伝達物質を合成する能力を増加または強化する方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を含む組成物を患者に投与し、それによって患者の脳細胞または神経細胞が神経伝達物質を合成する能力を増加または強化することを含む方法を提供する。
【０００９】
他の実施形態において、本発明は、有効量の神経伝達物質をシナプスに繰り返し放出する患者の脳細胞または神経細胞の能力を増加または強化する方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を含む組成物を患者に投与し、それによって有効量の神経伝達物質をシナプスに繰り返し放出する患者の脳細胞または神経細胞の能力を増加または強化することを含む方法を提供する。
【００１０】
他の実施形態において、本発明は、患者の脳細胞または神経細胞によるホスファチジルコリンの生成を刺激または強化する方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を含む組成物を患者に投与し、それによって患者の脳細胞または神経細胞によるホスファチジルコリンの生成を刺激または強化することを含む方法を提供する。
【００１１】
他の実施形態において、本発明は、患者の脳において、ホスファチジルコリン（ＰＣ）、ホスファチジルエタノールアミン（ＰＥ）、ホスファチジルセリン（ＰＳ）およびホスファチジルイノシトール（ＰＩ）から選択されるリン脂質のレベルを増加させる方法であって、ＣＤＰコリンまたは薬学的に許容可能なその塩を含む組成物を患者に投与し、それによって患者の脳において、ＰＣ、ＰＥ、ＰＳおよびＰＩから選択されるリン脂質のレベルを増加させることを含む方法を提供する。
【００１２】
他の実施形態において、本発明は、患者の神経細胞の神経突起伸長を刺激または強化する方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を患者に投与し、それによって患者の神経細胞の神経突起伸長を刺激または強化することを含む方法を提供する。
【００１３】
他の実施形態において、本発明は、患者の神経細胞の軸策分岐を刺激または強化する方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を患者に投与し、それによって患者の神経細胞の軸策分岐を刺激または促進することを含む方法を提供する。
【００１４】
他の実施形態において、本発明は、患者の損傷された神経細胞の修復を促進する方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を含む組成物を患者に投与し、それによって患者の損傷された神経細胞の修復を促進することを含む方法を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】標準ＨＰＬＣ法によって試験した場合の、シチジンピークおよびチロシンピーク（６．５９）の一致を示す。
【図２】低メタノールを含有する溶離緩衝液を使用する改変ＨＰＬＣ法によって試験した場合の、互いに異なるシチジン（３．２５）およびチロシン（２．９２）ピークを示す。
【図３】経口ＵＭＰ投与は、ヒトにおいて、血中ウリジンレベルを増加させる。２５０ミリグラム／ｋｇ体重（ｍｇ／ｋｇ）のウリジンの経口投与後の、血漿におけるシチジンに対するウリジンの比率（１００％値として設定）を示す。
【図４】経口ウリジン投与は、ジャービルにおいて、血中ウリジンレベルを増加させる。シチジンまたはウリジンの疑似投与または投与後６０分の、血漿ウリジンレベルを示す。＊＊：ｐ＜０．０１対疑似投与対照；＃＃：ｐ＜０．０１対シチジン。
【図５】経口ウリジン投与は、脳ウリジンレベルを増加させる。シチジンまたはウリジンの疑似投与または投与後６０分の、脳ウリジンレベルを示す。＊＊：ｐ＜０．０１対疑似投与対照；＃＃：ｐ＜０．０１対シチジン。
【図６】経口ＵＭＰ投与は、脳ウリジンレベルを増加させる。水またはＵＭＰの投与または投与後の、種々の時点における脳ウリジンレベルを示す。
【図７】ウリジンは、脳においてシチジンに変換される。２５０ミリグラム／ｋｇ体重（ｍｇ／ｋｇ）のウリジンの経口投与後の、血漿（Ａ）および脳（Ｂ）における、ウリジン（１００％）対シチジンの比率を示す。
【図８】経口ＵＭＰ投与は、脳ＣＤＰ−コリンレベルを増加させる。水またはＵＭＰの投与または投与後の、種々の時点における脳ＣＤＰ−コリンレベルを示す。
【図９】ウリジンは、神経細胞系において、ＣＤＰ−コリンの細胞内レベルを増加させる。細胞を指示濃度のウリジンと共に６時間培養した。６皿の平均値±Ｓ．Ｅ．Ｍ．を示し、それはピコモル（ｐｍｏｌ）ＣＤＰ−コリン／ｍｇタンパク質で表わされている。実験を３回繰り返した。＊：ｐ＜０．０５。
【図１０】ＵＭＰ食餌補充は、線条体透析物において、カリウム誘発ドーパミン（ＤＡ）放出を有意に増加させる。（Ａ）：Ｋ＋誘発線条体ＤＡ放出における食餌ＵＭＰ補充の作用。データは、各時点における６〜９測定値から算出した（平均値±測定の標準誤差［Ｓ．Ｅ．Ｍ．］）。１００％値は、カリウム刺激を１００％に設定する前の、４測定の平均値を表す。（Ｂ）：データをＵＭＰ処理グループ別に収集した。「＊」は対応する対照と比較したｐ＜０．０５を示す。
【図１１】ＵＭＰ処理に伴って増加したアセチルコリン基礎濃度。平均値±ＳＥＭが示されている。「＊」は、＞０．０５のｐ値を示す。
【図１２】対側線条体における神経フィラメントタンパク質レベルへの、ＵＭＰ食餌補充の作用。（Ａ）：ＮＦ−７０、（Ｂ）：ＮＦ−Ｍ、＊：ｐ＜０．０５、＊＊：ｐ＜０．０１（対応する対照と比較）。
【図１３】ウリジン処理は神経突起伸長を促進する。（Ａ）：ウリジン（５０μＭ）の存在または不存在下に、ＮＧＦ（５０ｎｇ／ｍＬ）で４日間処理したＰＣ１２細胞。（Ｂ）：２日または４日間の処理後の細胞当たりの神経突起の数。（Ｃ）：ＮＧＦおよび種々の濃度のウリジン（５０μＭ、１００μＭおよび２００μＭ）で２日または４日間処理した後の、細胞当たりの神経突起の数。（Ｄ）：各細胞についての分岐点の数の定量化。（Ｅ）：ウエスタンブロッティングを使用して求めた構造タンパク質ＮＦ−７０およびＮＦ−Ｍのレベル。Ｎ＝ＮＧＦ、Ｕ＝ウリジン。数値は平均値＋ＳＥＭを表す。＊＊：ｐ＜０．０１、＊＊＊：ｐ＜０．００１対ＮＧＦ処理。
【図１４】ウリジン処理は、ＮＧＦで処理した細胞において、ＵＴＰおよびＣＴＰの細胞内レベルを増加させる。ウリジン処理（５０μＭ）は、細胞内ＵＴＰレベル（Ａ）および細胞内ＣＴＰレベル（Ｂ）を有意に増加させた。Ｎ＝ＮＧＦ、Ｕ＝ウリジン、Ｃ＝シチジン。数値は平均値＋ＳＥＭを表す。＊：ｐ＜０．０５対ＮＧＦ処理。
【図１５】ＵＴＰ処理は、神経突起伸長を増加させる。ＮＧＦおよびＵＴＰでのＰＣ１２細胞の４日間の処理は、ＮＧＦ単独での処理と比較して、細胞当たりに生じる神経突起の数を有意に増加させた。数値は平均値＋ＳＥＭを表す。＊＊ｐ＜０．０１。
【図１６】ＮＧＦ分化細胞は、ピリミジン感受性Ｐ２Ｙ受容体を発現する。（Ａ）：ＮＧＦと共に細胞を種々の時間で培養した後の、Ｐ２Ｙ２、Ｐ２Ｙ４およびＰ２Ｙ６受容体発現のレベル。（Ｂ）：４日間のＮＧＦ処理後に、細胞を固定し、ＮＦ−７０（赤）およびＰ２Ｙ受容体（緑）タンパク質を免疫蛍光法で可視化した。左パネル：Ｐ２Ｙ２、中間パネル：Ｐ２Ｙ４、右パネル：Ｐ２Ｙ６。数値は平均値＋ＳＥＭを表す。＊＊＊ｐ＜０．００１。
【図１７】Ｐ２Ｙ受容体アンタゴニストは、神経突起伸長におけるウリジンの作用を阻害した。ＮＧＦを使用し、かつ、ウリジン（１００μＭ）およびＰ２Ｙ受容体アンタゴニストＰＰＡＤＳ、スラミンまたはＰＢ−２を使用するかまたは使用せずに、細胞を４日間処理した。数値は平均値＋ＳＥＭを表す。＊＊＊ｐ＜０．００１対ＮＧＦ処理；＃ｐ＜０．０５、＃＃＃ｐ＜０．００１対ＮＧＦおよびウリジン処理。
【図１８】ホスファチジルイノシトール（ＰＩ）代謝回転は、ＵＴＰおよびウリジンによって刺激される。細胞を［３Ｈ］イノシトールで一晩にわたって代謝的に標識し、リチウムの存在下で、指示濃度のＵＴＰ、ウリジン、またはＵＴＰおよびＰＰＡＤＳで刺激し、ＰＩ分解から誘導された放射標識イノシトールホスフェートをシンチレーション計数によって測定した。数値は平均値＋ＳＥＭを表す。＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１対、対照；＃ｐ＜０．０５対１００μＭ  ＵＴＰ処理。
【図１９】経口ＵＭＰは、ラットにおいて学習および空間記憶を向上させる。制限環境における１８カ月齢のラットが、対照食餌またはＵＭＰ食餌を６週間摂取し、次に、モリス水迷路を使用して、４日間にわたって４試験／日で試験した。足場（プラットホーム）の位置を発見するまでの平均時間を秒で示す。
【図２０】経口ＵＭＰは、ジャービルにおいて学習および空間記憶を向上させる。対照食餌または指示量のＵＭＰを含有する食餌を与えたジャービルの学習および空間記憶を、ラジアルアーム迷路で試験した。結果を、３分間の最終期限までに残っている時間の量で示す。
【図２１】経口ＵＭＰは、作業記憶および参照記憶を向上させる。対照または０．１％ＵＭＰ食餌を４週間与えたジャービルの記憶を、図２０に示した試験の改変法を使用して試験し、作業記憶誤り（Ａ）および参照記憶誤り（Ｂ）の両方を測定した。菱形は対照ジャービルのデータ点を示し、三角形は０．１％ＵＭＰ食餌を与えたジャービルのデータ点を示す。
【図２２】ウリジンおよびコリンは、線条体薄片（上部パネル）、海馬薄片（中間パネル）および皮質薄片（上部パネル）において、神経伝達物質放出を増加させる。データは、ナノモル／ミリグラムタンパク質／２時間として表わされ、平均値±ＳＥＭで示されている。「＊」＝ｐ＜０．００１対コリン不存在下に得た数値。各パネルにおける第一系列は、コリン不存在下に行われ、第二系列はコリン存在下に行われた。各系列におけるバーは、左から右に、付加化合物無添加、シチジン添加、およびウリジン添加を表す（適切であれば、それぞれコリンに加えて添加された）。
【図２３】海馬依存性隠れプラットホーム水迷路課題に関する記憶における、環境およびＵＭＰ補充食餌の作用。非処理ＩＣラット（ＩＣ−ＣＯＮＴ）は、ＥＣラット（ＥＣ−ＣＯＮＴおよびＥＣ−ＵＭＰ）または高ＵＭＰ食餌で処理されたＩＣラット（ＩＣ−ＵＭＰ）と比較して、より遅い速度で隠れプラットホーム水迷路課題を習得し（左パネル）、かつ、プローブテストの間に、プラットホームを初めに有していた四分円（ｑｕａｄｒａｎｔ）において、より少ない時間を使った（右パネル）。誤差バーはＳＥＭを表す。
【図２４】線条体依存性可視プラットホーム水迷路課題に関する記憶における、環境およびＵＭＰ補充食餌の作用。全てのラットは、同等の速度で可視プラットホーム水迷路課題を習得した。
【図２５】ヒト血漿ウリジンレベルにおける、経口ＣＤＰ−コリンおよびＵＭＰの作用。
【図２６】ＤＨＡおよびＵＭＰは相乗作用して、全動物試験において脳リン脂質レベルを増加させる。「＊」：一元配置ＡＮＯＶＡにより、対照群より有意に高い。（Ａ）：ｐｍｏｌリン脂質／ミリグラム（ｍｇ）タンパク質。ＵＭＰ＋ＤＨＡは、対照より有意に高かった（ｐ＜０．０５）（一元配置ＡＮＯＶＡ［Ｆ（３，２８）＝４．１２；ｐ＝０．０１５］）。二元配置ＡＮＯＶＡは、対照群と比較して、ＤＨＡの統計的に有意な作用も示した［Ｆ（１，２８）＝８．７８；ｐ＝０．００６］。（Ｂ）：ｐｍｏｌリン脂質／μｇＤＮＡ。ＵＭＰ＋ＤＨＡは、対照より有意に高かった（ｐ＝０．０２０）（一元配置ＡＮＯＶＡ［Ｆ（３，２８）＝３．２１５；ｐ＝０．０３８］）。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
本発明は、患者における、記憶、学習、認知、シナプス伝達、神経伝達物質の合成および放出を向上させ、脳リン脂質レベルを増加させる方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を患者に投与することを含む方法に関する。
【００１７】
１つの実施形態において、本発明は、患者における記憶を向上させる方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を含む組成物を該患者に投与し、それによって患者における記憶を向上させることを含む方法を提供する。他の実施形態において、患者はアルツハイマー病を有する。他の実施形態において、患者は他の加齢性記憶障害を有する。他の実施形態において、患者は知られていない記憶障害を有する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００１８】
他の実施形態において、本発明は、患者の認知記憶の低下を改善または抑制する方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を患者に投与し、それによって患者の認知記憶の低下を改善または抑制することを含む方法を提供する。他の実施形態において、本発明は、患者の知力の低下を改善または抑制する方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を患者に投与し、それによって患者の知力の低下を改善または抑制することを含む方法を提供する。他の実施形態において、患者はアルツハイマー病を有する。他の実施形態において、患者は加齢に無関係な記憶障害を有する。他の実施形態において、患者は加齢に無関係な記億障害を有する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００１９】
他の実施形態において、本発明は、患者の認知記憶を向上または強化させる方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を患者に投与し、それによって患者の認知記憶を向上または強化させることを含む方法を提供する。他の実施形態において、本発明は、患者の知力を向上または強化させる方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を患者に投与し、それによって患者の知力を向上または強化させることを含む方法を提供する。他の実施形態において、患者はアルツハイマー病を有する。他の実施形態において、患者は他の加齢性記憶障害を有する。他の実施形態において、患者は知られていない記憶障害を有する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００２０】
本明細書に示すように（実施例１４）、血漿ウリジンレベルを増加させることは、空間および／または認知記憶および知力における、外部刺激が少ない環境条件によって生じる障害を予防し、健康な対象における空間および／または認知記憶および知力を向上させる。さらに、実施例１３のデータは、コリンが神経伝達物質放出を増加させることを示している。従って、血漿ウリジンレベルを増加させる組成物、特にＣＤＰ−コリンの投与は、空間および／または認知記憶および知力における、外部刺激が少ない環境条件によって生じる障害を予防し、健康な対象における空間および／または認知記憶および知力を向上させる。
【００２１】
他の実施形態において、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩は、患者におけるウリジンのレベルを増加させる。他の実施形態において、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩は、患者におけるウリジンホスフェートのレベルを増加させる。他の実施形態において、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩は、患者におけるウリジンのレベルを増加させることができる。他の実施形態において、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩は、患者におけるウリジンホスフェートのレベルを増加させることができる。他の実施形態において、そのレベルは血漿レベルである。他の実施形態において、そのレベルは脳レベルである。他の実施形態において、ウリジンホスフェートはＵＭＰである。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００２２】
他の実施形態において、本発明は、患者の海馬依存性記憶の低下を改善または抑制する方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を患者に投与し、それによって患者の海馬依存性記憶の低下を改善または抑制することを含む方法を提供する。他の実施形態において、患者はアルツハイマー病を有する。他の実施形態において、患者は他の加齢性記憶障害を有する。他の実施形態において、患者は加齢に無関係な記億障害を有する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００２３】
他の実施形態において、本発明は、患者の海馬依存性記憶を向上または強化させる方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を患者に投与し、それによって患者の海馬依存性記憶を向上または強化させることを含む方法を提供する。他の実施形態において、患者はアルツハイマー病を有する。他の実施形態において、患者は他の加齢性記憶障害を有する。他の実施形態において、患者は知られていない記憶障害を有する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００２４】
本明細書に示すように（実施例１４）、血漿ウリジンレベルを増加させることは、外部刺激が少ない環境条件によって生じる海馬依存性記憶障害を予防し、健康な対象における海馬依存性記憶を向上させる。さらに、実施例１３のデータは、コリンが神経伝達物質放出を増加させることを示している。従って、血漿ウリジンレベルを増加させる組成物、特にＣＤＰ−コリンの投与は、外部刺激が少ない環境条件によって生じる海馬依存性記憶障害を予防し、健康な対象における海馬依存性記憶を向上させる。
【００２５】
本発明の方法によって治療、改善または抑制される認知記憶、海馬依存性記憶、または知力の低下は、他の実施形態において、加齢によるものである。「加齢による」とは、他の実施形態において、５５才以上の対象において観察される低下を意味する。他の実施形態において、対象は５７才以上である。他の実施形態において、対象は５９才以上である。他の実施形態において、対象は６０才以上である。他の実施形態において、対象は６２才以上である。他の実施形態において、対象は６４才以上である。他の実施形態において、対象は６５才以上である。他の実施形態において、対象は６７才以上である。他の実施形態において、対象は６９才以上である。他の実施形態において、対象は７０才以上である。他の実施形態において、対象は７２才以上である。他の実施形態において、対象は７４才以上である。他の実施形態において、対象は７５才以上である。他の実施形態において、対象は７６才以上である。他の実施形態において、対象は７８才以上である。他の実施形態において、対象は８０才以上である。他の実施形態において、対象は８２才以上である。他の実施形態において、対象は８４才以上である。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００２６】
他の実施形態において、治療される低下は、加齢性疾患または加齢性認知低下によるものである。他の実施形態において、加齢性疾患はアルツハイマー病である。他の実施形態において、加齢性疾患は中等度認知障害である。他の実施形態において、加齢性疾患はピック病である。他の実施形態において、加齢性疾患はレビー小体病である。他の実施形態において、加齢性疾患は認知症である。他の実施形態において、加齢性疾患は、当分野において既知の他の任意の加齢性疾患または加齢性認知低下である。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００２７】
他の実施形態において、治療される低下は、不活動性によるものである。他の実施形態において、不活動性は身体的不活動性である。他の実施形態において、不活動性は精神的不活動性である。他の実施形態において、不活動性は社会的不活動性である。他の実施形態において、不活動性は他の任意のタイプの不活動性である。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００２８】
認知記憶、海馬依存性記憶および知力の低下の原因を決定する方法は、当分野において周知であり、例えば、Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎ  ＲＧ  ｅｔ  ａｌ（Ｇｅｒｉａｔｒｉｃ  ｆａｉｌｕｒｅ  ｔｏ  ｔｈｒｉｖｅ．Ａｍ  Ｆａｍ  Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ．２００４  Ｊｕｌ  １５；７０（２）：３４３−５０）およびｖａｎ  ｄｅ  Ｐｏｒｔ  ｅｔ  ａｌ（Ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ  ｔｏ  ｄｅｔｅｒｉｏｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｍｏｂｉｌｉｔｙ  ｌｏｎｇ−ｔｅｒｍ  ａｆｔｅｒ  ｓｔｒｏｋｅ：ａ  ｐｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ  ｃｏｈｏｒｔ  ｓｔｕｄｙ．Ｓｔｒｏｋｅ．２００６  Ｊａｎ；３７（１）：１６７−７１）に記載されている。各方法は、本発明の別の実施形態である。
【００２９】
他の実施形態において、認知または海馬依存性記憶を「向上させること」またはその「向上」は、患者の記憶能力を増加させることを意味する。他の実施形態において、その用語は、患者における記憶の基線レベルを増加させるかまたは向上させることを意味する。他の実施形態において、その用語は、増加したまたは向上した記憶レベルを意味する。
【００３０】
他の実施形態において、認知記憶、海馬依存性記憶、および知力を「向上させること」は、その１０％向上を達成することを意味する。他の実施形態において、その用語は、その２０％向上を達成することを意味する。他の実施形態において、その用語は、その３０％向上を達成することを意味する。他の実施形態において、その用語は、その４０％向上を達成することを意味する。他の実施形態において、その用語は、その５０％向上を達成することを意味する。他の実施形態において、その用語は、その６０％向上を達成することを意味する。他の実施形態において、その用語は、その７０％向上を達成することを意味する。他の実施形態において、その用語は、その８０％向上を達成することを意味する。他の実施形態において、その用語は、その９０％向上を達成することを意味する。他の実施形態において、その用語は、その１００％向上を達成することを意味する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００３１】
他の実施形態において、認知記憶または知力の向上は、治療開始前の認知記憶または知力と比較して評価される。他の実施形態において、認知記憶または知力の向上は、非治療患者と比較して評価される。他の実施形態において、認知記憶または知力の向上は、標準化基準、例えばテスト等によって評価される。認知活性の向上の各タイプは、本発明の別の実施形態である。
【００３２】
他の実施形態において、本発明は、患者における海馬機能不全を改善する方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を患者に投与し、それによって患者における海馬機能不全を改善することを含む方法を提供する。他の実施形態において、患者はアルツハイマー病を有する。他の実施形態において、患者は他の加齢性記憶障害を有する。他の実施形態において、患者は加齢に無関係な記憶または認知障害を有する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００３３】
他の実施形態において、本発明は、患者の記憶能力の低下を抑制する方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を患者に投与し、それによって患者の記憶能力の低下を抑制することを含む方法を提供する。他の実施形態において、患者はアルツハイマー病を有する。他の実施形態において、患者は他の加齢性記憶障害を有する。他の実施形態において、患者は加齢に無関係な記憶障害を有する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００３４】
他の実施形態において、本発明は、患者における学習を向上させる方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を含む組成物を患者に投与し、それによって患者における学習を向上させることを含む方法を提供する。他の実施形態において、学習は認知学習である。他の実施形態において、学習は感情学習である。他の実施形態において、学習は精神運動学習である。他の実施形態において、学習は当分野において既知の、他の任意のタイプの学習である。他の実施形態において、患者はアルツハイマー病を有する。他の実施形態において、患者は加齢に無関係な記憶または認知障害を有する。他の実施形態において、患者は知られていない記憶障害を有する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００３５】
本明細書に示すように、図１７〜１９のデータは、血漿ウリジンレベルを増加させることがいくつかのタイプの記憶および学習を向上させることを示している。異なる種、ならびに異なるタイプの記憶および学習評価における作用の一貫性は、本発明の発見を立証している。さらに、実施例１３におけるデータは、コリンが神経伝達物質放出を増加させることを示している。従って、血漿ウリジンレベルを増加させる組成物、特にＣＤＰ−コリンの投与は、記憶および神経学的機能を向上させる。
【００３６】
他の実施形態において、本発明は、患者における認知を向上させる方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を含む組成物を患者に投与し、それによって患者における認知を向上させることを含む方法を提供する。他の実施形態において、患者はアルツハイマー病を有する。他の実施形態において、患者は他の加齢性記憶障害を有する。他の実施形態において、患者は知られていない記憶障害を有する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００３７】
他の実施形態において、本発明は、認知機能に障害を有する患者において、認知機能を回復する方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を患者に投与し、それによって認知機能に障害を有する患者において認知機能を回復することを含む方法を提供する。他の実施形態において、患者はアルツハイマー病を有する。他の実施形態において、患者は他の加齢性記憶障害を有する。他の実施形態において、患者は加齢に無関係な記憶または認知障害を有する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００３８】
他の実施形態において、本発明は、患者における加齢性認知障害または加齢性記憶障害（ＡＡＭＩ）の発生を治療または発生率を減少する方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を患者に投与し、それによって患者における加齢性認知障害またはＡＡＭＩの発生を治療または発生率を減少することを含む方法を提供する。
【００３９】
他の実施形態において、記憶または学習の低下、または海馬機能不全は、神経学的障害から生じる。他の実施形態において、神経学的障害は記憶障害である。他の実施形態において、記憶障害は記憶低下を含む。他の実施形態において、記憶低下は、脳老化に関係している。他の実施形態において、記憶障害はピック病である。他の実施形態において、記憶障害は、レビー小体病である。他の実施形態において、記憶障害は認知症である。他の実施形態において、認知症はハンチントン病に関係している。他の実施形態において、認知症はＡＩＤＳ認知症に関係している。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００４０】
他の実施形態において、神経学的障害は、ドーパミン作用経路に関係している。他の実施形態において、神経学的障害は、ドーパミン作用経路に関係していない。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００４１】
他の実施形態において、神経学的障害は認知機能不全である。他の実施形態において、認知機能不全は失読症である。他の実施形態において、認知機能不全は、注意欠如を含む。他の実施形態において、認知機能不全は、警戒欠如を含む。他の実施形態において、認知機能不全は、集中欠如を含む。他の実施形態において、認知機能不全は、焦点（ｆｏｃｕｓ）の欠如を含む。他の実施形態において、認知機能不全は、脳卒中または多発脳梗塞性認知症に関連している。他の実施形態において、認知機能不全は、微小認知障害を含む。他の実施形態において、認知機能不全は、加齢性記憶障害を含む。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００４２】
他の実施形態において、神経学的障害は、感情障害である。他の実施形態において、感情障害は、躁病を含む。他の実施形態において、感情障害は、鬱病を含む。他の実施形態において、感情障害は、ストレスを含む。他の実施形態において、感情障害は、パニックを含む。他の実施形態において、感情障害は、不安を含む。他の実施形態において、感情障害は、気分変調を含む。他の実施形態において、感情障害は、精神病を含む。他の実施形態において、感情障害は、季節性感情障害を含む。他の実施形態において、感情障害は、双極性障害を含む。
【００４３】
他の実施形態において、神経学的障害は、鬱病である。他の実施形態において、鬱病は、内因性鬱病である。他の実施形態において、鬱病は、大鬱病性障害である。他の実施形態において、鬱病は、不安を伴う鬱病である。他の実施形態において、鬱病は、双極性鬱病である。各タイプの鬱病は、本発明の別の実施形態である。
【００４４】
他の実施形態において、神経学的障害は、運動失調である。他の実施形態において、神経学的障害は、フリートライヒ運動失調である。他の実施形態において、本発明の神経学的障害は、癲癇、発作、痙攣等を除く。
【００４５】
他の実施形態において、神経学的障害は、運動障害である。他の実施形態において、運動障害は、遅発性ジスキネジーを含む。他の実施形態において、運動障害は、ジストニーを含む。他の実施形態において、運動障害は、トゥレット症候群を含む。他の実施形態において、運動障害は、当分野において既知の、他の任意の運動障害である。
【００４６】
他の実施形態において、神経学的障害は、脳血管疾患である。他の実施形態において、脳血管疾患は、低酸素症から生じる。他の実施形態において、脳血管疾患は、脳血管疾患を生じうる他の任意の原因から生じる。他の実施形態において、脳血管疾患は、脳血栓症である。他の実施形態において、脳血管疾患は虚血である。
【００４７】
他の実施形態において、神経学的障害は、行動症候群である。他の実施形態において、神経学的障害は、神経学的症候群である。他の実施形態において、行動症候群または神経学的症候群は、脳外傷後に生じる。他の実施形態において、行動症候群または神経学的症候群は、脊髄損傷後に生じる。他の実施形態において、行動症候群または神経学的症候群は、無酸素症後に生じる。
【００４８】
他の実施形態において、神経学的障害は、末梢神経系障害である。他の実施形態において、末梢神経系障害は、神経筋障害である。他の実施形態において、末梢神経系障害は、当分野において既知の他の任意の末梢神経系障害である。他の実施形態において、神経筋障害は、重症筋無力症である。他の実施形態において、神経筋障害は、ポリオ後症候群である。他の実施形態において、神経筋障害は、筋ジストロフィである。
【００４９】
各神経学的障害は、本発明の別の実施形態である。
【００５０】
他の実施形態において、本発明は、患者の脳におけるシナプス伝達を向上させる方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を含む組成物を患者に投与し、それによって患者の脳におけるシナプス伝達を向上させることを含む方法を提供する。他の実施形態において、患者はアルツハイマー病を有する。他の実施形態において、患者は他の加齢性記憶障害を有する。他の実施形態において、患者は、知られていない記憶障害を有する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００５１】
他の実施形態において、本発明は、患者の中枢神経系（ＣＮＳ）におけるシナプス伝達を向上させる方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を含む組成物を患者に投与し、それによって患者のＣＮＳにおけるシナプス伝達を向上させることを含む方法を提供する。他の実施形態において、患者はアルツハイマー病を有する。他の実施形態において、患者は他の加齢性記憶障害を有する。他の実施形態において、患者は知られていない記憶障害を有する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００５２】
他の実施形態において、本発明は、有効量の神経伝達物質をシナプスに繰り返し放出する患者の脳細胞の能力を増加または強化する方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を含む組成物を患者に投与し、それによって有効量の神経伝達物質をシナプスに繰り返し放出する患者の脳細胞の能力を増加または強化することを含む方法を提供する。他の実施形態において、患者はアルツハイマー病を有する。他の実施形態において、患者は他の加齢性記憶障害を有する。他の実施形態において、患者は知られていない記憶障害を有する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００５３】
他の実施形態において、本発明は、有効量の神経伝達物質をシナプスに繰り返し放出する患者の神経細胞の能力を増加または強化する方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を含む組成物を患者に投与し、それによって有効量の神経伝達物質をシナプスに繰り返し放出する患者の神経細胞の能力を増加または強化することを含む方法を提供する。他の実施形態において、患者はアルツハイマー病を有する。他の実施形態において、患者は他の加齢性記憶障害を有する。他の実施形態において、患者は知られていない記憶障害を有する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００５４】
他の実施形態において、本発明は、有効量のドーパミンをシナプスに繰り返し放出する患者の脳細胞の能力を増加または強化する方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を含む組成物を患者に投与し、それによって有効量のドーパミンをシナプスに繰り返し放出する患者の脳細胞の能力を増加または強化することを含む方法を提供する。他の実施形態において、患者はアルツハイマー病を有する。他の実施形態において、患者は他の加齢性記憶障害を有する。他の実施形態において、患者は知られていない記憶障害を有する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００５５】
他の実施形態において、本発明は、有効量のドーパミンをシナプスに繰り返し放出する患者の神経細胞の能力を増加または強化する方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を含む組成物を患者に投与し、それによって有効量のドーパミンをシナプスに繰り返し放出する患者の神経細胞の能力を増加または強化することを含む方法を提供する。他の実施形態において、患者はアルツハイマー病を有する。他の実施形態において、患者は他の加齢性記憶障害を有する。他の実施形態において、患者は知られていない記憶障害を有する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００５６】
他の実施形態において、本発明は、有効量のアセチルコリンをシナプスに繰り返し放出する患者の脳細胞の能力を増加または強化する方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を含む組成物を患者に投与し、それによって有効量のアセチルコリンをシナプスに繰り返し放出する患者の脳細胞の能力を増加または強化することを含む方法を提供する。他の実施形態において、患者はアルツハイマー病を有する。他の実施形態において、患者は他の加齢性記憶障害を有する。他の実施形態において、患者は知られていない記憶障害を有する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００５７】
他の実施形態において、本発明は、有効量のアセチルコリンをシナプスに繰り返し放出する患者の神経細胞の能力を増加または強化する方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を含む組成物を患者に投与し、それによって有効量のアセチルコリンをシナプスに繰り返し放出する患者の神経細胞の能力を増加または強化することを含む方法を提供する。他の実施形態において、患者はアルツハイマー病を有する。他の実施形態において、患者は他の加齢性記憶障害を有する。他の実施形態において、患者は知られていない記憶障害を有する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００５８】
有効量の神経伝達物質を決定する方法は、当分野において周知であり、例えば、以下に記載されている。Ｈｕｅｙ  ＥＤら（Ａ  ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ  ｒｅｖｉｅｗ  ｏｆ  ｎｅｕｒｏｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｒ  ｄｅｆｉｃｉｔｓ  ａｎｄ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ  ｉｎ  ｆｒｏｎｔｏｔｅｍｐｏｒａｌ  ｄｅｍｅｎｔｉａ．Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  ２００６  Ｊａｎ  １０；６６（１）：１７−２２）；Ｓｈｉｎｏｅ  Ｔ  ｅｔ  ａｌ（Ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｓｙｎａｐｔｉｃ  ｐｌａｓｔｉｃｉｔｙ  ｂｙ  ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｍ１  ｍｕｓｃａｒｉｎｉｃ  ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｍｏｕｓｅ  ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ．Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  ２００５  Ｎｏｖ  ３０；２５（４８）：１１１９４−２００）およびＬａｎａｒｉ  Ａ  ｅｔ  ａｌ（Ｎｅｕｒｏｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｒ  ｄｅｆｉｃｉｔｓ  ｉｎ  ｂｅｈａｖｉｏｒａｌ  ａｎｄ  ｐｓｙｃｈｏｌｏｇｉｃａｌ  ｓｙｍｐｔｏｍｓ  ｏｆ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ．Ｍｅｃｈ  Ａｇｅｉｎｇ  Ｄｅｖ  ２００６  Ｆｅｂ；１２７（２）：１５８−６５）。他の実施形態において、神経伝達物質の量は直接的に測定される。他の実施形態において、神経伝達物質の量は、神経伝達物質の公知の作用によって測定される。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００５９】
他の実施形態において、本発明は、神経伝達物質を合成する患者の脳細胞の能力を増加または強化する方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を含む組成物を患者に投与し、それによって神経伝達物質を合成する患者の脳細胞の能力を増加または強化することを含む方法を提供する。他の実施形態において、患者はアルツハイマー病を有する。他の実施形態において、患者は他の加齢性記憶障害を有する。他の実施形態において、患者は知られていない記憶障害を有する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００６０】
他の実施形態において、本発明は、神経伝達物質を合成する患者の神経細胞の能力を増加または強化する方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を含む組成物を患者に投与し、それによって神経伝達物質を合成する患者の神経細胞の能力を増加または強化することを含む方法を提供する。他の実施形態において、患者はアルツハイマー病を有する。他の実施形態において、患者は他の加齢性記憶障害を有する。他の実施形態において、患者は知られていない記憶障害を有する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００６１】
他の実施形態において、本発明は、アセチルコリンを合成する患者の脳細胞の能力を増加または強化する方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を含む組成物を患者に投与し、それによってアセチルコリンを合成する患者の脳細胞の能力を増加または強化することを含む方法を提供する。他の実施形態において、患者はアルツハイマー病を有する。他の実施形態において、患者は他の加齢性記憶障害を有する。他の実施形態において、患者は知られていない記憶障害を有する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００６２】
他の実施形態において、本発明は、アセチルコリンを合成する患者の神経細胞の能力を増加または強化する方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を含む組成物を患者に投与し、それによってアセチルコリンを合成する患者の神経細胞の能力を増加または強化することを含む方法を提供する。他の実施形態において、患者はアルツハイマー病を有する。他の実施形態において、患者は他の加齢性記憶障害を有する。他の実施形態において、患者は知られていない記憶障害を有する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００６３】
他の実施形態において、本発明は、ドーパミンを合成する患者の脳細胞の能力を増加または強化する方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を含む組成物を患者に投与し、それによってドーパミンを合成する患者の脳細胞の能力を増加または強化することを含む方法を提供する。他の実施形態において、患者はアルツハイマー病を有する。他の実施形態において、患者は他の加齢性記憶障害を有する。他の実施形態において、患者は知られていない記憶障害を有する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００６４】
他の実施形態において、本発明は、ドーパミンを合成する患者の神経細胞の能力を増加または強化する方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を含む組成物を患者に投与し、それによってドーパミンを合成する患者の神経細胞の能力を増加または強化することを含む方法を提供する。他の実施形態において、患者はアルツハイマー病を有する。他の実施形態において、患者は他の加齢性記憶障害を有する。他の実施形態において、患者は知られていない記憶障害を有する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００６５】
他の実施形態において、本発明は、患者のシナプスにおけるアセチルコリンのレベルを増加する方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を患者に投与し、それによって患者のシナプスにおけるアセチルコリンのレベルを増加することを含む方法を提供する。他の実施形態において、患者はアルツハイマー病を有する。他の実施形態において、患者は他の加齢性記憶障害を有する。他の実施形態において、患者は知られていない記憶障害を有する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００６６】
他の実施形態において、本発明は、患者のシナプスにおけるドーパミンのレベルを増加する方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を患者に投与し、それによって患者のシナプスにおけるドーパミンのレベルを増加することを含む方法を提供する。他の実施形態において、患者はアルツハイマー病を有する。他の実施形態において、患者は他の加齢性記憶障害を有する。他の実施形態において、患者は知られていない記憶障害を有する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００６７】
他の実施形態において、本発明は、患者の神経細胞の神経突起伸長を刺激または促進する方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を患者に投与し、それによって患者の神経細胞の神経突起伸長を刺激または促進することを含む方法を提供する。他の実施形態において、患者はアルツハイマー病を有する。他の実施形態において、患者は他の加齢性記憶障害を有する。他の実施形態において、患者は知られていない記憶障害を有する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００６８】
他の実施形態において、本発明は、患者の神経細胞の軸策分岐を刺激または促進する方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を患者に投与し、それによって患者の神経細胞の軸策分岐を刺激または促進することを含む方法を提供する。他の実施形態において、患者はアルツハイマー病を有する。他の実施形態において、患者は他の加齢性記憶障害を有する。他の実施形態において、患者は知られていない記憶障害を有する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００６９】
他の実施形態において、本発明は、患者の神経細胞の樹状突起棘の形成を刺激または促進する方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を患者に投与し、それによって患者の神経細胞の樹状突起棘の形成を刺激または促進することを含む方法を提供する。他の実施形態において、患者はアルツハイマー病を有する。他の実施形態において、患者は他の加齢性記憶障害を有する。他の実施形態において、患者は知られていない記憶障害を有する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００７０】
他の実施形態において、神経細胞における軸策分岐、神経突起伸長、または樹状突起棘の形成を刺激または促進することは、新しいシナプスの形成を促進する。他の実施形態において、より大きいシナプスの形成が促進される。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００７１】
他の実施形態において、本発明は、患者の脳における神経フィラメント−７０（ＮＦ−７０）または神経フィラメント−Ｍ（ＮＦ−Ｍ）タンパク質のレベルを増加する方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を患者に投与し、それによって患者の脳におけるＮＦ−７０またはＮＦ−Ｍタンパク質のレベルを増加することを含む方法を提供する。他の実施形態において、患者はアルツハイマー病を有する。他の実施形態において、患者は他の加齢性記憶障害を有する。他の実施形態において、患者は知られていない記憶障害を有する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００７２】
他の実施形態において、本発明は、脳修復を促進または増強する方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を患者に投与し、それによって脳修復を促進または増強することを含む方法を提供する。他の実施形態において、患者はアルツハイマー病を有する。他の実施形態において、患者は他の加齢性記憶障害を有する。他の実施形態において、患者は加齢に無関係な記憶または認知障害を有する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００７３】
他の実施形態において、脳修復は、脳卒中後に促進または増強される。他の実施形態において、脳修復は、脳損傷後に促進または増強される。他の実施形態において、脳修復は、脳修復を必要とする当分野において既知の他の任意の事象、疾患または障害後に、促進または増強される。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００７４】
他の実施形態において、本発明は、患者の脳細胞または神経細胞によるホスファチジルコリンの生成を刺激または促進する方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を含む組成物を患者に投与し、それによって患者の脳細胞または神経細胞によるホスファチジルコリンの生成を刺激または促進することを含む方法を提供する。他の実施形態において、患者はアルツハイマー病を有する。他の実施形態において、患者は他の加齢性記憶障害を有する。他の実施形態において、患者は知られていない記憶障害を有する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００７５】
他の実施形態において、本発明は、患者の脳においてリン脂質のレベルを増加する方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を含む組成物を患者に投与し、それによって患者の脳においてリン脂質のレベルを増加することを含む方法を提供する。他の実施形態において、患者はアルツハイマー病を有する。他の実施形態において、患者は他の加齢性記憶障害を有する。他の実施形態において、患者は知られていない記憶障害を有する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００７６】
他の実施形態において、本発明は、患者の脳においてＰＣのレベルを増加する方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を含む組成物を患者に投与し、それによって患者の脳においてＰＣのレベルを増加することを含む方法を提供する。他の実施形態において、患者はアルツハイマー病を有する。他の実施形態において、患者は他の加齢性記憶障害を有する。他の実施形態において、患者は知られていない記憶障害を有する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００７７】
他の実施形態において、本発明は、患者の脳においてＰＥのレベルを増加する方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を含む組成物を患者に投与し、それによって患者の脳においてＰＥのレベルを増加することを含む方法を提供する。他の実施形態において、患者はアルツハイマー病を有する。他の実施形態において、患者は他の加齢性記憶障害を有する。他の実施形態において、患者は知られていない記憶障害を有する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００７８】
他の実施形態において、本発明は、患者の脳においてＰＳのレベルを増加する方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を含む組成物を患者に投与し、それによって患者の脳においてＰＳのレベルを増加することを含む方法を提供する。他の実施形態において、患者はアルツハイマー病を有する。他の実施形態において、患者は他の加齢性記憶障害を有する。他の実施形態において、患者は知られていない記憶障害を有する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００７９】
他の実施形態において、本発明は、患者の脳においてＰＩのレベルを増加する方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を含む組成物を患者に投与し、それによって患者の脳においてＰＩのレベルを増加することを含む方法を提供する。他の実施形態において、患者はアルツハイマー病を有する。他の実施形態において、患者は他の加齢性記憶障害を有する。他の実施形態において、患者は知られていない記憶障害を有する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００８０】
本発明の方法および組成物の他の実施形態において、目的とするリン脂質のレベルが、脳細胞または神経細胞の樹状突起膜において増加される。他の実施形態において、目的とするリン脂質のレベルが、脳細胞または神経細胞の軸索膜において増加される。他の実施形態において、目的とするリン脂質のレベルが、脳細胞または神経細胞において増加される。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００８１】
他の実施形態において、本発明は、患者の脳細胞または神経細胞による膜の生成を刺激または促進する方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を含む組成物を患者に投与し、それによって患者の脳細胞または神経細胞による膜の生成を刺激または促進することを含む方法を提供する。他の実施形態において、患者はアルツハイマー病を有する。他の実施形態において、患者は他の加齢性記憶障害を有する。他の実施形態において、患者は知られていない記憶障害を有する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００８２】
他の実施形態において、本発明の方法および組成物は、ＰＣおよび／または他のホスファチド（例えば、ホスファチジルイノシトール、スフィンゴミエリン）のレベルを増加し、次に、それが第一メッセンジャーまたは第二メッセンジャーのレベルを増加し、それによって記憶および／または認知におけるそれらの作用を媒介する。他の実施形態において、メッセンジャーは、エイコサノイドである。他の実施形態において、メッセンジャーはジアシルグリセロールである。他の実施形態において、メッセンジャーはイノシトールトリホスフェートである。他の実施形態において、メッセンジャーは、血小板活性化因子（ＰＡＦ）である。他の実施形態において、メッセンジャーは、ＰＣおよび／または他のホスファチドから誘導される他の任意のメッセージである。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００８３】
脳細胞膜または神経細胞膜の生成を評価する方法は、当分野において周知である。他の実施形態において、膜生成は、神経突起伸長または軸策分岐のレベルを測定することによって評価される（実施例８）。他の実施形態において、膜生成は、膜マーカータンパク質のレベルを測定することによって評価される（実施例７）。他の実施形態において、膜生成は、膜前駆物質の合成を測定することによって評価される。他の実施形態において、膜生成は、ＣＤＰ−コリン処理の前および後の、膜の量を測定することによって評価される。他の実施形態において、膜生成は、膜代謝回転の生物学的指標を測定することによって評価される。細胞膜代謝回転の指標は当分野において周知であり、例えば、Ｄａｓ  ＫＰ  ｅｔ  ａｌ，Ｎｅｕｒｏｔｏｘｉｃｏｌ  Ｔｅｒａｔｏｌ  ２６（３）：３９７−４０６，２００４に記載されている。膜生成を評価する各方法は、本発明の別の実施形態である。
【００８４】
他の実施形態において、本発明は、患者の脳のコリン作用性機能を向上または回復させる方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を患者に投与し、それによって患者の脳のコリン作用性機能を向上または回復させることを含む方法を提供する。他の実施形態において、患者はアルツハイマー病を有する。他の実施形態において、患者は他の加齢性記憶障害を有する。他の実施形態において、患者は加齢に無関係の記憶または認知障害を有する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００８５】
他の実施形態において、本発明の方法または組成物は、脳発達に関係した小児神経学的疾患を治療するために使用される。他の実施形態において、本発明の方法または組成物は、早産の場合の脳発達を刺激するために使用される。他の実施形態において、本発明の方法または組成物は、アスペルガー症候群を治療するために使用される。他の実施形態において、標的はレット症候群である。他の実施形態において、標的はトゥレット症候群である。他の実施形態において、標的はアンジェルマン症候群である。他の実施形態において、標的は家族性自律神経障害である。他の実施形態において、標的は失読症である。他の実施形態において、標的は末梢神経病である。他の実施形態において、標的は運動失調である。他の実施形態において、標的は変形性筋失調症である。
【００８６】
他の実施形態において、標的はＡＤＨＤである。他の実施形態において、ＡＤＨＤはドーパミンの欠乏から生じる。
【００８７】
他の実施形態において、本発明の方法および組成物は、脳損傷を治療するために使用される。他の実施形態において、損傷は放射線誘発性である。他の実施形態において、損傷は周産期脳低酸素による。他の実施形態において、損傷は周産期脳虚血による。他の実施形態において、周産期脳低酸素および／または虚血は、分娩時外傷に続発性である。他の実施形態において、本発明の方法および組成物は、前記の状態の１つから生じる脳性麻痺を治療するために使用される。
【００８８】
他の実施形態において、本発明の方法および組成物は、ダウン症候群または２１トリソミーを治療するために使用される。
【００８９】
他の実施形態において、本発明の方法および組成物は、低母体栄養に続発する障害性脳成長または発達を治療するために使用される。他の実施形態において、障害性脳成長または発達は、低乳児栄養に続発する。他の実施形態において、障害性脳成長または発達は、代謝病に続発する。
【００９０】
他の実施形態において、本発明の方法および組成物は、自閉症を治療するために使用される。他の実施形態において、本発明の方法および組成物は、自閉症関連症候群を治療するために使用される。他の実施形態において、症候群は自閉症である。他の実施形態において、症候群は、当分野において既知の、他の任意の自閉症関連症候群である。
【００９１】
他の実施形態において、本発明の方法および組成物は、当分野において既知の、他の任意の小児神経学的疾患を治療するために使用される。各疾患は、本発明の別の実施形態である。
【００９２】
本発明の方法の他の実施形態において、本発明の組成物の投与は、患者の血流におけるウリジンレベルを増加し、それによって本明細書に列挙する作用の１つを媒介する（例えば、記憶または認知機能の向上、神経機能、膜合成、神経伝達物質放出などの刺激）。他の実施形態において、作用は、血漿におけるウリジンのレベルを増加せずに媒介される。本明細書に示す他の実施形態において、増加した血漿ウリジンレベルは、脳シチジンレベルの増加を生じる。従って、本発明は、ＣＤＰ−コリンの作用の新規メカニズム（即ち、血漿ウリジンレベルを増加させることによる）を示す。他の実施形態において、本発明の方法および組成物の、血漿ウリジンレベルにおける作用は、他の場合に可能であるより少ない治療用量を可能にする。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００９３】
本発明の方法の他の実施形態において、本発明の組成物の投与は、患者の脳におけるシチジンレベルを増加させ、それによって、本明細書に列挙する作用の１つを媒介する（例えば、記憶または認知機能の向上、神経機能、膜合成、神経伝達物質放出の刺激など）。他の実施形態において、作用は、脳におけるシチジントリホスフェート（ＣＴＰ）のレベルを増加することによって媒介される。他の実施形態において、作用は、脳におけるＣＤＰ−コリンのレベルを増加することによって媒介される。他の実施形態において、作用は、脳における、シチジン、ＣＴＰ、ＣＤＰ−コリンの誘導体のレベルを増加することによって媒介される。他の実施形態において、作用は、脳におけるシチジン、ＣＴＰ、ＣＤＰ−コリンの代謝産物のレベルを増加することによって媒介される。他の実施形態において、作用は、シチジン、ＣＴＰ、ＣＤＰ−コリン、またはそれらの誘導体または代謝産物のレベルを増加せずに媒介される。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００９４】
本明細書に記載するように、図７〜９は、経口投与されたウリジンが、迅速かつ有効に作用して、脳におけるシチジンのレベルを増加させることを示している。これらの結果は、血漿ウリジンレベルを増加させることが、次に、シチジン、ＣＴＰおよびＣＤＰ−コリンのレベルを増加させることを示している。さらに、実施例１３のデータは、コリンが神経伝達物質放出を増加させることを示している。従って、血漿ウリジンレベルを増加させる組成物、特にＣＤＰ−コリンの投与は、脳シチジンレベルを増加させる。
【００９５】
他の実施形態において、シチジン、ＣＴＰまたはＣＤＰ−コリン、またはそれらの誘導体または代謝産物の増加は、細胞がリン脂質のレベルを増加させることを可能にし、それによって、本明細書に列挙する作用の１つを媒介する（例えば、記憶または認知機能の向上、神経機能、膜合成、神経伝達物質放出の刺激など）。他の実施形態において、リン脂質はＰＣである。他の実施形態において、リン脂質はＰＥである。他の実施形態において、リン脂質はＰＳである。他の実施形態において、リン脂質はＰＩである。他の実施形態において、リン脂質は、ＰＣ、ＰＥまたはＰＳの誘導体または代謝産物である。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００９６】
本発明の方法の他の実施形態において、本発明の組成物の投与は、患者における神経学的機能を向上させ、それによって、本明細書に列挙する作用の１つを媒介する（例えば、記憶または認知機能の向上、神経機能、膜合成、神経伝達物質放出の刺激など）。
【００９７】
他の実施形態において、本発明の方法によって向上される神経学的機能は、シナプス伝達である。他の実施形態において、シナプス伝達は、運動ニューロンに隣接する。他の実施形態において、シナプス伝達は、介在ニューロンに隣接する。他の実施形態において、シナプス伝達は、感覚ニューロンに隣接する。各タイプのシナプス伝達は、本発明の別の実施形態である。
【００９８】
本発明の方法の他の実施形態において、本発明の組成物の投与は、神経細胞の神経突起の成長を刺激または促進し、それによって、本明細書に列挙する作用の１つを媒介する（例えば、記憶または認知機能の向上、神経機能、膜合成、神経伝達物質放出の刺激など）。本発明の方法の他の実施形態において、本発明の組成物の投与は、軸策分岐を刺激または促進し、それによって、本明細書に列挙する作用の１つを媒介する。他の実施形態において、本明細書に列挙する作用の１つは、神経細胞の神経突起の数を増加せずに生じる。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【００９９】
「神経突起」は、他の実施形態において、ニューロンから成長する突起を意味する。他の実施形態において、突起は樹状突起である。他の実施形態において、突起は軸索である。各タイプの神経突起は、本発明の別の実施形態である。
【０１００】
本発明の方法の他の実施形態において、本発明の組成物の投与は、神経細胞の神経突起の平均数を増加させ、それによって、本明細書に列挙する作用の１つを媒介する（例えば、記憶または認知機能の向上、神経機能、膜合成、神経伝達物質放出の刺激など）。他の実施形態において、本明細書に列挙する作用の１つは、神経細胞の神経突起の数を増加せずに生じる。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【０１０１】
本明細書に示すように、実施例８の結果は、血漿ウリジンレベルを増加させることが膜前駆物質レベルを増加させて、ニューロンに、より多くの分岐を有するより多くの神経突起を生じさせることを示している。他の実施形態において、表面積および大きさを増加することによって、細胞は、隣接細胞とのより多くの接合部を形成することができる。さらに、実施例１３におけるデータは、コリンが神経伝達物質放出を増加させることを示している。さらに、他の実施形態において、形質膜の組成物量の増加は、神経伝達物質合成および放出を変化させる。他の実施形態において、記憶形成も影響を受ける。従って、血漿ウリジンレベルを増加させる組成物、特にＣＤＰ−コリンの投与は、神経突起伸長および軸策分岐を増加させる。
【０１０２】
本発明の方法の他の実施形態において、本発明の組成物の投与は、神経細胞膜の量を増加させ、それによって、本明細書に列挙する作用の１つを媒介する（例えば、記憶または認知機能の向上、神経機能、神経伝達物質放出の刺激など）。他の実施形態において、本明細書に列挙する作用の１つは、神経細胞膜の合成を刺激することによって達成される。他の実施形態において、神経細胞膜の量または合成を刺激または促進することは、本明細書に列挙する作用の１つを媒介することに部分的に寄与している。他の実施形態において、本発明の組成物は、神経細胞膜の量または合成を刺激または促進せずに、本明細書に列挙する作用の１つを媒介する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【０１０３】
他の実施形態において、本発明の方法によって増加する膜は、神経突起膜である。他の実施形態において、膜は樹状突起膜である。他の実施形態において、膜は軸索膜である。他の実施形態において、膜は、当分野において既知の、他の任意のタイプの膜である。各タイプの膜は、本発明の別の実施形態である。
【０１０４】
他の実施形態において、細胞膜またはシナプスの成分の合成が、本発明の方法によって促進される。本明細書に示すように、本発明の発見は、血漿ウリジンレベルを増加させることが、ＰＣ前駆物質の合成を促進することを示している。他の実施形態において、その合成が本発明の方法によって強化される成分は、ＰＣである。他の実施形態において、成分はグリセロリン脂質である。他の実施形態において、成分はホスファチジン酸である。他の実施形態において、成分はホスファチジルエタノールアミンである。他の実施形態において、成分はレシチンである。他の実施形態において、成分はホスファチジルイノシトールである。他の実施形態において、成分はホスファチジルセリンである。他の実施形態において、成分は２−リソレシチンである。他の実施形態において、成分はプラスマロゲンである。他の実施形態において、成分はコリンプラスマロゲンである。他の実施形態において、成分はホスファチジルグリセロールである。他の実施形態において、成分はコリンジホスファチジルグリセロールである。他の実施形態において、成分はコリンスフィンゴ脂質である。他の実施形態において、成分はコリンスフィンゴミエリンである。他の実施形態において、成分は、当分野において既知の他の任意のリン脂質である。各タイプのリン脂質は、本発明の別の実施形態である。
【０１０５】
他の実施形態において、リン脂質前駆物質の合成が促進される。他の実施形態において、リン脂質前駆物質はＣＴＰである。他の実施形態において、リン脂質前駆物質はイノシトールである。他の実施形態において、リン脂質前駆物質はグリセロールである。他の実施形態において、リン脂質前駆物質はアセテートである。他の実施形態において、リン脂質前駆物質は、当分野において既知の他の任意のリン脂質前駆物質である。各リン脂質前駆物質は、本発明の別の実施形態である。
【０１０６】
本発明の方法の他の実施形態において、本発明の組成物または方法は、神経伝達物質の機能を向上または強化し、それによって、本明細書に列挙する作用の１つを媒介する（例えば、記憶または認知機能の向上、神経機能、神経伝達物質放出の刺激など）。他の実施形態において、神経伝達物質の機能を向上または強化することは、シナプスにおける神経伝達物質のレベルを増加することによってなされる。他の実施形態において、神経伝達物質の機能を向上または強化することは、シナプスへの神経伝達物質の放出を増加させることによってなされる。本明細書に記載するように、本発明の発見は、血漿ウリジンレベルを増加させることが、神経伝達物質を合成し、それらを繰り返し放出するニューロンの能力を強化することを示している（実施例６）。さらに、実施例１３におけるデータは、コリンが神経伝達物質放出を増加させることを示している。従って、血漿ウリジンレベルを増加させる組成物、特にＣＤＰ−コリンの投与は、神経伝達物質の機能を向上させる。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【０１０７】
他の実施形態において、促進される放出は、ニューロンの刺激後に生じる。他の実施形態において、放出は、ニューロンの脱分極後に生じる。他の実施形態において、放出は基礎神経伝達物質放出である。他の実施形態において、ニューロンの刺激は、カリウムイオンへのニューロンの暴露を含む。他の実施形態において、ニューロンの刺激は、当分野において既知の、他の任意の神経刺激方法を含む。神経刺激および神経伝達物質の放出を評価する方法は、当分野において周知であり、例えば、Ｂｅｗｉｃｋ  ＧＳ，Ｊ  Ｎｅｕｒｏｃｙｔｏｌ  ３２：４７３−８７，２００３に記載されている。各可能性は、本発明の別の実施形態である。他の実施形態において、神経伝達物質の機能を向上または強化することは、シナプスにおける神経伝達物質のレベルまたは放出を変化させずになされる。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【０１０８】
本明細書に示すように、図１０に示されている結果は、血漿ウリジンレベルを増加させることが、神経伝達物質の機能を有意に向上させ、従って、神経学的機能を向上させることを示している。図１１〜１４に示されているデータは、神経突起形態における増加した血漿ウリジンレベルの有利な作用を示し、この場合も神経学的機能を向上させる。さらに、実施例１３におけるデータは、コリンが神経伝達物質放出を増加させることを示している。従って、血漿ウリジンレベルを増加させる組成物、特にＣＤＰ−コリンの投与は、神経学的機能を向上させる。
【０１０９】
他の実施形態において、そのレベルまたは活性、または放出が本発明の方法によって影響を受ける神経伝達物質は、アセチルコリンである。他の実施形態において、神経伝達物質はドーパミンである。他の実施形態において、神経伝達物質はセロトニンである。他の実施形態において、神経伝達物質は５−ヒドロキシトリプタミン（５−ＨＴ）である。他の実施形態において、神経伝達物質はＧＡＢＡである。他の実施形態において、神経伝達物質は、当分野において既知の、他の任意の神経伝達物質である。各タイプの神経伝達物質は、本発明の別の実施形態である。
【０１１０】
他の実施形態において、細胞膜の量または合成を刺激することは、リン脂質の合成を刺激または促進することによって達成される（実施例５）。他の実施形態において、神経細胞膜の量または合成を刺激または促進することは、リン脂質前駆物質の合成を刺激または促進することによって達成される（実施例５）。他の実施形態において、リン脂質またはその前駆物質の合成を刺激または促進することは、神経細胞膜の量または合成を刺激することに部分的に寄与している。他の実施形態において、本発明の組成物は、リン脂質またはその前駆物質の合成を刺激または促進せずに、膜の量または合成を刺激する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【０１１１】
他の実施形態において、本発明は、患者の損傷された神経細胞の修復を促進する方法であって、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩を含む組成物を患者に投与し、それによって患者の損傷神経細胞の修復を促進することを含む方法を提供する。他の実施形態において、患者はアルツハイマー病を有する。他の実施形態において、患者は他の加齢性記憶障害を有する。他の実施形態において、患者は加齢に無関係の記憶または認知障害を有する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【０１１２】
他の実施形態において、膜生成が、本発明の方法によって損傷された神経細胞において刺激または促進される。他の実施形態において、膜生成が、本発明によって神経細胞に隣接するミエリン生成乏突起膠細胞において刺激または促進される。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【０１１３】
他の実施形態において、損傷された神経細胞は損傷軸索を有する。他の実施形態において、損傷軸索が、本発明の方法によって治癒される。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【０１１４】
他の実施形態において、本発明の方法が、損傷されたニューロンを治癒させるために使用される。他の実施形態において、ニューロンは、小児疾患または障害によって損傷されている。他の実施形態において、ニューロンは、出産時の事故によって損傷されている。他の実施形態において、ニューロンは、出産前または出産中の酸素不足によって損傷されている。他の実施形態において、ニューロンは、ダウン症候群によって損傷されている。他の実施形態において、ニューロンは、脳性麻痺によって損傷されている。他の実施形態において、前記の状態の１つが、本発明の方法によって治療される低シナプス数を生じる。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【０１１５】
他の実施形態において、本発明の方法または組成物は、早産の場合の脳発達を刺激するために使用される。他の実施形態において、本発明の方法または組成物は、アスペルガー症候群を治療するために使用される。他の実施形態において、標的はレット症候群である。他の実施形態において、標的はトゥレット症候群である。他の実施形態において、標的はアンジェルマン症候群である。他の実施形態において、標的は家族性自律神経障害である。他の実施形態において、標的は失読症である。他の実施形態において、標的は末梢神経病である。他の実施形態において、標的は運動失調である。他の実施形態において、標的は変形性筋失調症である。
【０１１６】
他の実施形態において、標的はＡＤＨＤである。他の実施形態において、ＡＤＨＤは、ドーパミンの欠乏から生じると考えられる。
【０１１７】
他の実施形態において、本発明の方法および組成物は、脳損傷を治療するために使用される。他の実施形態において、損傷は放射線誘発性である。他の実施形態において、損傷は周産期脳低酸素による。他の実施形態において、損傷は周産期脳虚血による。他の実施形態において、周産期脳低酸素および／または虚血は、分娩時外傷に続発性である。他の実施形態において、本発明の方法および組成物は、前記の状態の１つから生じる脳性麻痺を治療するために使用される。
【０１１８】
他の実施形態において、本発明の方法および組成物は、ダウン症候群または２１トリソミーを治療するために使用される。
【０１１９】
他の実施形態において、本発明の方法および組成物は、低母体栄養に続発する障害性脳成長または発達を治療するために使用される。他の実施形態において、障害性脳成長または発達は、低乳児栄養にに続発する。他の実施形態において、障害性脳成長または発達は、代謝病にに続発する。
【０１２０】
他の実施形態において、本発明の方法および組成物は、自閉症を治療するために使用される。他の実施形態において、本発明の方法および組成物は、自閉症関連症候群を治療するために使用される。他の実施形態において、症候群は自閉症である。他の実施形態において、症候群は、当分野において既知の、他の任意の自閉症関連症候群である。
【０１２１】
他の実施形態において、本発明の方法および組成物は、当分野において既知の、他の任意の小児神経学的疾患を治療するために使用される。各疾患は、本発明の別の実施形態である。
【０１２２】
他の実施形態において、本発明の方法は、神経細胞、ニューロンまたは脳細胞のＰ２Ｙ受容体を刺激することによって、前記の作用の１つを生じる。他の実施形態において、前記の作用の１つは、部分的に、神経細胞またはニューロンのＰ２Ｙ受容体を刺激した結果として生じる。他の実施形態において、前記の作用の１つは、部分的または全面的に、他の細胞型のＰ２Ｙ受容体を刺激することによって生じる。他の実施形態において、前記の作用の１つは、Ｐ２Ｙ受容体を刺激せずに生じる。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【０１２３】
他の実施形態において、Ｐ２Ｙ受容体の刺激は、本発明の組成物によって与えられるＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩によって媒介される。他の実施形態において、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩は、細胞においてＰ２Ｙ受容体を刺激する第二の化合物に変換される。他の実施形態において、第二の化合物はウリジン−５’−トリホスフェート（ＵＴＰ）である。他の実施形態において、第二の化合物は、当分野において既知のＣＤＰ−コリンの他の代謝産物である。各化合物は、本発明の別の実施形態である。
【０１２４】
他の実施形態において、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩は、細胞内的に第二の化合物に変換される。他の実施形態において、変換は細胞外的である。他の実施形態において、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩は、細胞において第二の化合物に変換され、次に、第二の化合物が細胞から分泌される。他の実施形態において、第二の化合物は、細胞から分泌された後に、別の細胞と接触し、そこでＰ２Ｙ受容体を刺激する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【０１２５】
他の実施形態において、Ｐ２Ｙ受容体は、血小板活性化および他の生物学的機能に関与していることが公知の受容体のファミリーである。それらは、Ｍａｈａｕｔ−Ｓｍｉｔｈ  ＭＰ  ｅｔ  ａｌ，Ｐｌａｔｅｌｅｔｓ．２００４  １５：１３１−４４，２００４に概説されている。
【０１２６】
他の実施形態において、本発明のＰ２Ｙ受容体は、Ｐ２Ｙ２受容体である。他の実施形態において、Ｐ２Ｙ受容体は、Ｐ２Ｙ４受容体である。他の実施形態において、Ｐ２Ｙ受容体は、Ｐ２Ｙ６受容体である。他の実施形態において、Ｐ２Ｙ受容体は、当分野において既知の、他の任意のＰ２Ｙ受容体である。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【０１２７】
他の実施形態において、Ｐ２Ｙ受容体は、第二メッセンジャーを刺激する。他の実施形態において、第二メッセンジャーはＧαタンパク質である。他の実施形態において、第二メッセンジャーは、Ｇα（ｑ）タンパク質である。他の実施形態において、第二メッセンジャーはｃＡＭＰである。他の実施形態において、第二メッセンジャーは、当分野において既知の、他の任意の第二メッセンジャーである。第二メッセンジャーおよびそれらの関連シグナル伝達経路は、当分野において周知であり、例えば、以下に記載されている。Ｆｅｒｇｕｓｏｎ  Ｓ，Ｐｈａｒｍ  Ｒｅｖ  ５３：１−２４，２００１；Ｈｕａｎｇ  Ｅ  ｅｔ  ａｌ，Ａｎｎ  Ｒｅｖ  Ｂｉｏｃｈｅｍ  ７２：６０９−６４２，２００３；およびＢｌｉｔｔｅｒｓｗｉｊｋ  Ｗ  ｅｔ  ａｌ，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．３６９：１９９−２１１，２００３。各第二メッセンジャーは、本発明の別の実施形態である。
【０１２８】
他の実施形態において、第二メッセンジャーは、ホスホリパーゼＣ酵素を刺激する。他の実施形態において、第二メッセンジャーは、細胞内カルシウムレベルを調節する。他の実施形態において、第二メッセンジャーは、タンパク質キナーゼＣ活性を増加させる。他の実施形態において、前記の経路の１つまたはそれ以上が、膜生成を刺激する。他の実施形態において、第二メッセンジャーは、膜生成を刺激する他の細胞経路を調節または刺激する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【０１２９】
他の実施形態において、本発明のの方法の標的であるか、または本発明の方法において接触される細胞は、神経細胞である。他の実施形態において、細胞は脳細胞である。他の実施形態において、細胞は、当分野において既知の、他の任意のタイプの細胞である。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【０１３０】
他の実施形態において、本発明の方法の標的神経細胞、神経突起、または脳細胞は、新たに分化した。他の実施形態において、細胞は、新しく分化していない。他の実施形態において、「新たに分化した」は、本発明の組成物の投与を開始する２４時間前に分化したニューロンを意味する。他の実施形態において、「新たに分化した」は、本発明の組成物の投与を開始する４８時間前に分化したニューロンを意味する。他の実施形態において、「新たに分化した」は、本発明の組成物の投与を開始する７２時間前に分化したニューロンを意味する。他の実施形態において、「新たに分化した」は、本発明の組成物の投与を開始する１週間前に分化したニューロンを意味する。他の実施形態において、「新たに分化した」は、本発明の組成物の投与の開始後に分化を終了するニューロンを意味する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【０１３１】
ニューロン分化を評価する方法は、当分野において周知であり、例えば、Ｃｏｎｔｅｓｔａｂｉｌｅ  Ａ  ｅｔ  ａｌ（Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ  Ｉｎｔ．４５：９０３−１４，２００４）に記載されている。そのような各方法は、本発明の別の実施形態である。
【０１３２】
他の実施形態において、ＣＤＰ−コリン前駆物質が、本発明の方法において投与される。他の実施形態において、ＣＤＰ−コリン前駆物質は、当分野において既知の、薬学的に許容可能な任意のＣＤＰ−コリン前駆物質である。
【０１３３】
他の実施形態において、ＣＤＰ−コリン誘導体が、本発明の方法において投与される。
【０１３４】
他の実施形態において、ＣＤＰ−コリン代謝産物が、本発明の方法において投与される。
【０１３５】
本発明の方法および組成物の他の実施形態において、ＣＤＰ−コリンは、ＣＤＰ−コリンに基づく化合物の形態で投与される。他の実施形態において、ＣＤＰ−コリンは、ＣＤＰ−コリン前駆物質の形態で投与される。他の実施形態において、ＣＤＰ−コリンに基づく化合物は、ＣＤＰ−コリン塩である。他の実施形態において、ＣＤＰ−コリンに基づく化合物またはＣＤＰ−コリン前駆物質は、当分野において既知の、任意のＣＤＰ−コリンに基づく化合物またはＣＤＰ−コリン前駆物質である。各ＣＤＰ−コリンに基づく化合物またはＣＤＰ−コリン前駆物質は、本発明の別の実施形態である。
【０１３６】
本発明の方法および組成物の他の実施形態において、ＣＤＰ−コリンは、ＣＤＰ−コリン源の形態で投与される。他の実施形態において、ＣＤＰ−コリン源は、ＣＤＰ−コリンに富む食物である。他の実施形態において、ＣＤＰ−コリン源は、ＣＤＰ−コリンに富む食餌製品である。
【０１３７】
他の実施形態において、本発明の方法および組成物は、ＣＤＰ−コリン塩を含む。他の実施形態において、ＣＤＰ−コリン塩は、当分野において既知の、任意のＣＤＰ−コリン塩である。他の実施形態において、ＣＤＰ−コリン塩は、ＣＤＰ−コリン前駆物質、ＣＤＰ−コリン誘導体またはＣＤＰ−コリン源の、任意の公知の塩である。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【０１３８】
他の実施形態において、前記のＣＤＰ−コリン関連化合物の２つまたはそれ以上の混合物が投与される。各タイプのＣＤＰ−コリン前駆物質、誘導体、代謝産物または源、およびそれらの各組合せは、本発明の別の実施形態である。
【０１３９】
本発明の方法の他の実施形態において、ＣＤＰ−コリンまたは関連化合物は、少なくとも９〜３０マイクロモラー（ｍｃＭ）の血清ウリジンレベルが患者の脳において達成されるように投与される。他の実施形態において、９〜５０ｍｃＭの血清ウリジンレベルが達成される。他の実施形態において、９〜２０ｍｃＭの血清ウリジンレベルが達成される。他の実施形態において、９〜１５ｍｃＭの血清ウリジンレベルが達成される。他の実施形態において、１２〜３０ｍｃＭの血清ウリジンレベルが達成される。他の実施形態において、１２〜５０ｍｃＭの血清ウリジンレベルが達成される。他の実施形態において、１２〜２０ｍｃＭの血清ウリジンレベルが達成される。他の実施形態において、１２〜１５ｍｃＭの血清ウリジンレベルが達成される。他の実施形態において、１４〜３０ｍｃＭの血清ウリジンレベルが達成される。他の実施形態において、１４〜５０ｍｃＭの血清ウリジンレベルが達成される。他の実施形態において、１４〜２０ｍｃＭの血清ウリジンレベルが達成される。他の実施形態において、１４〜１５ｍｃＭの血清ウリジンレベルが達成される。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【０１４０】
本発明の方法の他の実施形態において、ＣＤＰ−コリンまたは関連化合物は、少なくとも２０〜３０ナノモルのコリンレベルが患者の脳において達成されるように投与される。他の実施形態において、１０〜５０ナノモルのコリンレベルが達成される。他の実施形態において、５〜７５ナノモルのコリンレベルが達成される。他の実施形態において、２５〜４０ナノモルのコリンレベルが達成される。他の実施形態において、３０〜３５ナノモルのコリンレベルが達成される。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【０１４１】
他の実施形態において、ＣＤＰ−コリン、その誘導体、源または前駆物質は、２０〜５００ｍｇ／日の用量で投与される。他の実施形態において、日用量は、約３０〜５００ｍｇである。他の実施形態において、日用量は、約４０〜５００ｍｇである。他の実施形態において、日用量は、約７０〜５００ｍｇである。他の実施形態において、日用量は、約４０〜５００ｍｇである。他の実施形態において、日用量は、約１００〜５００ｍｇである。他の実施形態において、日用量は、約１５０〜５００ｍｇである。他の実施形態において、日用量は、約２００〜５００ｍｇである。他の実施形態において、日用量は、約３００〜５００ｍｇである。他の実施形態において、日用量は、約２０〜２００ｍｇである。他の実施形態において、日用量は、約３０〜２００ｍｇである。他の実施形態において、日用量は、約４０〜２００ｍｇである。他の実施形態において、日用量は、約７０〜２００ｍｇである。他の実施形態において、日用量は、約１００〜２００ｍｇである。他の実施形態において、日用量は、約２０〜３５０ｍｇである。他の実施形態において、日用量は、約３０〜３５０ｍｇである。他の実施形態において、日用量は、約４０〜３５０ｍｇである。他の実施形態において、日用量は、約７０〜３５０ｍｇである。他の実施形態において、日用量は、約１００〜３５０ｍｇである。他の実施形態において、日用量は、約２０〜７００ｍｇである。他の実施形態において、日用量は、約３０〜７００ｍｇである。他の実施形態において、日用量は、約４０〜７００ｍｇである。他の実施形態において、日用量は、約７０〜７００ｍｇである。他の実施形態において、日用量は、約１００〜７００ｍｇである。他の実施形態において、日用量は、約７０〜７００ｍｇである。他の実施形態において、日用量は、約１００〜７００ｍｇである。他の実施形態において、日用量は、約１５０〜７００ｍｇである。他の実施形態において、日用量は、約２００〜７００ｍｇである。他の実施形態において、日用量は、約３００〜７００ｍｇである。他の実施形態において、日用量は、約４００〜７００ｍｇである。
【０１４２】
他の実施形態において、日用量は、約３００ｍｇ〜１ｇである。他の実施形態において、日用量は、約３００ｍｇ〜１．５ｇである。他の実施形態において、日用量は、約３００ｍｇ〜２ｇである。他の実施形態において、日用量は、約３００ｍｇ〜３ｇである。他の実施形態において、日用量は、約３００ｍｇ〜４ｇである。他の実施形態において、日用量は、約２００ｍｇ〜１ｇである。他の実施形態において、日用量は、約２００ｍｇ〜１．５ｇである。他の実施形態において、日用量は、約２００ｍｇ〜２ｇである。他の実施形態において、日用量は、約２００ｍｇ〜３ｇである。他の実施形態において、日用量は、約２００ｍｇ〜４ｇである。
【０１４３】
他の実施形態において、用量は、約２０ｍｇ〜５０ｇ／日である。他の実施形態において、用量は、約５０ｍｇ〜３０ｇ／日である。他の実施形態において、用量は、約７５ｍｇ〜２０ｇ／日である。他の実施形態において、用量は、約１００ｍｇ〜２０ｇ／日である。他の実施形態において、用量は、約１００ｍｇ〜１０ｇ／日である。他の実施形態において、用量は、約２００ｍｇ〜８ｇ／日である。他の実施形態において、用量は、約４００ｍｇ〜６ｇ／日である。他の実施形態において、用量は、約６００ｍｇ〜４ｇ／日である。他の実施形態において、用量は、約８００ｍｇ〜３ｇ／日である。他の実施形態において、用量は、約１〜２．５ｇ／日である。他の実施形態において、用量は、約１．５〜２ｇ／日である。他の実施形態において、用量は、約５ｍｇ〜５ｇ／日である。他の実施形態において、用量は、約５ｍｇ〜５０ｇ／日である。各用量範囲は、本発明の別の実施形態である。
【０１４４】
本発明の方法および組成物の他の実施形態において、１日当たり約２０ｍｇのＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩が投与される。他の実施形態において、用量は約１０ｍｇ／日である。他の実施形態において、用量は約３０ｍｇ／日である。他の実施形態において、用量は約４０ｍｇ／日である。他の実施形態において、用量は約６０ｍｇ／日である。他の実施形態において、用量はｍｇ／日である。他の実施形態において、用量は約１００ｍｇ／日である。他の実施形態において、用量は約１５０ｍｇ／日である。他の実施形態において、用量は約２００ｍｇ／日である。他の実施形態において、用量は約３００ｍｇ／日である。他の実施形態において、用量は約４００ｍｇ／日である。他の実施形態において、用量は約６００ｍｇ／日である。他の実施形態において、用量は約８００ｍｇ／日である。他の実施形態において、用量は約１ｇ／日である。他の実施形態において、用量は約１．５ｇ／日である。他の実施形態において、用量は約２ｇ／日である。他の実施形態において、用量は約３ｇ／日である。他の実施形態において、用量は約５ｇ／日である。他の実施形態において、用量は５ｇ以上／日である。
【０１４５】
他の実施形態において、前記の量のいずれかが、１日に２回投与される。他の実施形態において、前記の量のいずれかが、１日に３回投与される。他の実施形態において、前記の量のいずれかが、１週間に１回投与される。他の実施形態において、前記の量のいずれかが、１週間に２回投与される。他の実施形態において、前記の量のいずれかが、１週間に３回投与される。他の実施形態において、前記の量のいずれかが、当分野において既知の、他の任意の投薬計画に従って投与される。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【０１４６】
本発明の方法および組成物の他の実施形態において、一用量当たり約２０ｍｇのＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩が投与される。他の実施形態において、投与量は、約１０ｍｇ／用量である。他の実施形態において、投与量は、約３０ｍｇ／用量である。他の実施形態において、投与量は、約４０ｍｇ／用量である。他の実施形態において、投与量は、約６０ｍｇ／用量である。他の実施形態において、投与量は、約ｍｇ／用量である。他の実施形態において、投与量は、約１００ｍｇ／用量である。他の実施形態において、投与量は、約１５０ｍｇ／用量である。他の実施形態において、投与量は、約２００ｍｇ／用量である。他の実施形態において、投与量は、約３００ｍｇ／用量である。他の実施形態において、投与量は、約４００ｍｇ／用量である。他の実施形態において、投与量は、約６００ｍｇ／用量である。他の実施形態において、投与量は、約８００ｍｇ／用量である。他の実施形態において、投与量は、約１ｇ／用量である。他の実施形態において、投与量は、約１．５ｇ／用量である。他の実施形態において、投与量は、約２ｇ／用量である。他の実施形態において、投与量は、約３ｇ／用量である。他の実施形態において、投与量は、約５ｇ／用量である。他の実施形態において、投与量は、約５ｇ／用量より多い。
【０１４７】
他の実施形態において、投与量は、約１０〜２０ｍｇ／用量である。他の実施形態において、投与量は、約２０〜３０ｍｇ／用量である。他の実施形態において、投与量は、約２０〜４０ｍｇ／用量である。他の実施形態において、投与量は、約３０〜６０ｍｇ／用量である。他の実施形態において、投与量は、約４０〜８０ｍｇ／用量である。他の実施形態において、投与量は、約５０〜１００ｍｇ／用量である。他の実施形態において、投与量は、約５０〜１５０ｍｇ／用量である。他の実施形態において、投与量は、約１００〜２００ｍｇ／用量である。他の実施形態において、投与量は、約２００〜３００ｍｇ／用量である。他の実施形態において、投与量は、約３００〜４００ｍｇ／用量である。他の実施形態において、投与量は、約４００〜６００ｍｇ／用量である。他の実施形態において、投与量は、約５００〜８００ｍｇ／用量である。他の実施形態において、投与量は、約４００〜１ｇ／用量である。他の実施形態において、投与量は、約８００〜１ｇ／用量である。他の実施形態において、投与量は、約１〜１．５ｇ／用量である。他の実施形態において、投与量は、約１．５〜２ｇ／用量である。他の実施形態において、投与量は、約１〜２ｇ／用量である。他の実施形態において、投与量は、約１〜３ｇ／用量である。他の実施形態において、投与量は、約１．５〜３ｇ／用量である。他の実施形態において、投与量は、約２〜３ｇ／用量である。他の実施形態において、投与量は、約１〜４ｇ／用量である。他の実施形態において、投与量は、約２〜４ｇ／用量である。他の実施形態において、投与量は、約１〜５ｇ／用量である。他の実施形態において、投与量は、約２〜５ｇ／用量である。他の実施形態において、投与量は、約３〜５ｇ／用量である。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【０１４８】
他の実施形態において、本発明において投与される組成物は、多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）をさらに含む。
【０１４９】
他の実施形態において、「多価不飽和脂肪酸」または「ＰＵＦＡ」は、ω−３脂肪酸を意味する。他の実施形態において、その用語は、ω−６脂肪酸を意味する。他の実施形態において、その用語は、２個またはそれ以上の二重結合を有する脂肪酸を意味する。他の実施形態において、その用語は、２個の二重結合を有する脂肪酸を意味する。他の実施形態において、その用語は、３個の二重結合を有する脂肪酸を意味する。他の実施形態において、その用語は、３個より多い二重結合を有する脂肪酸を意味する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【０１５０】
他の実施形態において、本発明の方法および組成物のω−３脂肪酸は、ＤＨＡである。ＤＨＡは、ω−３、多価不飽和、２２炭素脂肪酸であり、４，７，１０，１３，１６，１９−ドコサヘキサエン酸とも称される。
【０１５１】
他の実施形態において、ω−３脂肪酸は、α−リノレン酸（９，１２，１５−オクタデカトリエン酸）である。他の実施形態において、ω−３脂肪酸は、ステアリドン酸（６，９，１２，１５−オクタデカテトラエン酸）である。他の実施形態において、ω−３脂肪酸は、エイコサトリエン酸（ＥＴＡ；１１，１４，１７−エイコサトリエン酸）である。他の実施形態において、ω−３脂肪酸は、エイコサテトラエン酸（８，１１，１４，１７−エイコサテトラエン酸）である。他の実施形態において、ω−３脂肪酸は、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ；５，８，１１，１４，１７−エイコサペンタエン酸）である。他の実施形態において、ω−３脂肪酸は、エイコサヘキサエン酸（「ＥＰＡ」とも称される、５，７，９，１１，１４，１７−エイコサヘキサエン酸）である。他の実施形態において、ω−３脂肪酸は、ドコサペンタエン酸（ＤＰＡ；７，１０，１３，１６，１９−ドコサペンタエン酸）である。他の実施形態において、ω−３脂肪酸は、テトラコサヘキサエン酸（６，９，１２，１５，１８，２１−テトラコサヘキサエン酸）である。他の実施形態において、ω−３脂肪酸は、当分野において既知の、他の任意のω−３脂肪酸である。各ω−３脂肪酸は、本発明の別の実施形態である。
【０１５２】
他の実施形態において、ω−３脂肪酸は、抗炎症性ＰＵＦＡである。他の実施形態において、抗炎症性ＰＵＦＡは、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ；５，８，１１，１４，１７−エイコサペンタエン酸）である。他の実施形態において、抗炎症性ＰＵＦＡは、ＤＨＡである。他の実施形態において、抗炎症性ＰＵＦＡは、当分野において既知の、他の任意の抗炎症性ＰＵＦＡである。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【０１５３】
他の実施形態において、ω−３脂肪酸は、ＤＨＡの代謝前駆物質である。他の実施形態において、代謝前駆物質はＥＰＡである。他の実施形態において、代謝前駆物質は、ドコサペンタエン酸（ＤＰＡ；７，１０，１３，１６，１９−ドコサペンタエン酸）である。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【０１５４】
他の実施形態において、「代謝前駆物質」は、血流または組織における脂肪酸の濃度を増加させる化合物を意味する。他の実施形態において、「代謝前駆物質」は、患者の組織または酵素によって脂肪酸に代謝される化合物を意味する。他の実施形態において、「代謝前駆物質」は、標的細胞によって脂肪酸に代謝される化合物を意味する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【０１５５】
本発明の方法および組成物の他の実施形態において、ω−３脂肪酸の代謝前駆物質は、α−リノレン酸であり、これは、ＥＰＡ（エイコサペンタエン酸）およびＤＨＡ（ドコサヘキサエン酸）の前駆物質として機能する。他の実施形態において、代謝前駆物質は、当分野において既知の他の任意のω−３脂肪酸前駆物質である。各ω−３脂肪酸前駆物質は、本発明の別の実施形態である。
【０１５６】
他の実施形態において、本発明の方法および組成物のＰＵＦＡは、ω−６脂肪酸である。他の実施形態において、ω−６脂肪酸は、アラキドン酸である。アラキドン酸は、ω−６、２０−炭素脂肪酸であり、５，８，１１，１４−エイコサテトラエン酸とも称される。他の実施形態において、ω−６脂肪酸は、アラキドン酸の代謝前駆物質である。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【０１５７】
他の実施形態において、ω−６脂肪酸は、リノール酸（９，１２−オクタデカジエン酸）である。他の実施形態において、ω−６脂肪酸は、コンジュゲートリノール酸（ＣＬＡ）である。他の実施形態において、ω−６脂肪酸は、γ−リノレン酸（６，９，１２−オクタデカトリエン酸）である。他の実施形態において、ω−６脂肪酸は、エイコサジエン酸（１１，１４−エイコサジエン酸）である。他の実施形態において、ω−６脂肪酸は、ホモ−γ−リノレン酸（８，１１，１４−エイコサトリエン酸）である。他の実施形態において、ω−６脂肪酸は、ドコサジエン酸（１３，１６−ドコサジエン酸）である。他の実施形態において、ω−６脂肪酸は、ドコサテトラエン酸（７，１０，１３，１６−ドコサテトラエン酸）である。他の実施形態において、ω−６脂肪酸は、４，７，１０，１３，１６−ドコサペンタエン酸である。他の実施形態において、ω−６脂肪酸は、ジホモ−γ−リノレン酸（ＤＧＬＡ）である。他の実施形態において、ω−６脂肪酸は、当分野において既知の、他の任意のω−６脂肪酸である。各ω−６脂肪酸は、本発明の別の実施形態である。
【０１５８】
本発明の方法および組成物の他の実施形態において、ω−６脂肪酸の代謝前駆物質は、リノール酸である。他の実施形態において、代謝前駆物質は、トランス−バクセン酸（ＴＶＡ）、リノール酸の源である。他の実施形態において、代謝前駆物質は、当分野において既知の、他の任意のω−６脂肪酸前駆物質である。各ω−６脂肪酸前駆物質は、本発明の別の実施形態である。
【０１５９】
本明細書に示すように、ω−３脂肪酸およびω−６脂肪酸は、それぞれ、ウリジン（例えば、ＣＤＰ−コリン）と相乗的に作用して、リン脂質合成およびリン脂質レベルを増加させる（図２６）。他の実施形態において、ウリジンホスフェートはＣＤＰ−コリンである。
【０１６０】
他の実施形態において、本発明の方法において行われる投与は、慢性的投与である。他の実施形態において、「慢性的投与」は、無期限の定期的投与を意味する。他の実施形態において、その用語は、少なくとも１ヵ月間の定期的投与を意味する。他の実施形態において、その用語は、少なくとも６週間の定期的投与を意味する。他の実施形態において、その用語は、少なくとも２ヵ月間の定期的投与を意味する。他の実施形態において、その用語は、少なくとも３ヵ月間の定期的投与を意味する。他の実施形態において、その用語は、少なくとも４ヵ月間の定期的投与を意味する。他の実施形態において、その用語は、少なくとも５ヵ月間の定期的投与を意味する。他の実施形態において、その用語は、少なくとも６ヵ月間の定期的投与を意味する。他の実施形態において、その用語は、少なくとも９ヵ月間の定期的投与を意味する。他の実施形態において、その用語は、少なくとも１年間の定期的投与を意味する。他の実施形態において、その用語は、少なくとも１．５年間の定期的投与を意味する。他の実施形態において、その用語は、少なくとも２年間の定期的投与を意味する。他の実施形態において、その用語は、２年間より長い定期的投与を意味する。他の実施形態において、その用語は、再診までの定期的投与を意味する。他の実施形態において、その用語は、治療されている疾患または障害の再評価までの定期的投与を意味する。他の実施形態において、その用語は、栄養管による本発明の組成物の投与を意味する。他の実施形態において、投与は、永久的である。他の実施形態において、栄養管は、昏睡患者または被験者に使用される。他の実施形態において、組成物は、患者または被験者の認知機能を回復するために使用される。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【０１６１】
他の実施形態において、「定期間隔」は、毎日の投与を意味する。他の実施形態において、その用語は、毎週の投与を意味する。他の実施形態において、その用語は、毎日の投与を意味する。他の実施形態において、その用語は、週に１〜２回の投与を意味する。他の実施形態において、その用語は、週に１〜３回の投与を意味する。他の実施形態において、その用語は、週に２〜３回の投与を意味する。他の実施形態において、その用語は、週に１〜４回の投与を意味する。他の実施形態において、その用語は、週に１〜４回の投与を意味する。他の実施形態において、その用語は、週に１〜５回の投与を意味する。他の実施形態において、その用語は、週に２〜５回の投与を意味する。他の実施形態において、その用語は、週に３〜５回の投与を意味する。他の実施形態において、その用語は、１日に１〜２回の投与を意味する。他の実施形態において、その用語は、１日に１〜３回の投与を意味する。他の実施形態において、その用語は、１日に１〜４回の投与を意味する。他の実施形態において、その用語は、１日に２〜３回の投与を意味する。他の実施形態において、その用語は、１日に２〜４回の投与を意味する。他の実施形態において、その用語は、１日に３〜４回の投与を意味する。他の実施形態において、その用語は、１日に２〜５回の投与を意味する。他の実施形態において、その用語は、１日に３〜５回の投与を意味する。他の実施形態において、その用語は、１日に４〜５回の投与を意味する。
【０１６２】
前記の各タイプの投与は、本発明の別の実施形態である。
【０１６３】
他の実施形態において、本発明の組成物は、治療されている患者の母集団の少なくとも１０％において、所望の作用を生じる用量で投与される。他の実施形態において、用量は、治療されている患者の少なくとも２０％において、作用を生じる用量である。他の実施形態において、作用は、治療されている患者の少なくとも３０％において生じる。他の実施形態において、作用は、患者の少なくとも４０％において生じる。他の実施形態において、作用は、患者の少なくとも５０％において生じる。他の実施形態において、作用は、患者の少なくとも６０％において生じる。他の実施形態において、作用は、患者の少なくとも７０％において生じる。他の実施形態において、作用は、患者の少なくとも８０％において生じる。他の実施形態において、作用は、患者の少なくとも９０％において生じる。他の実施形態において、作用は、９０％を超える患者において生じる。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【０１６４】
他の実施形態において、本発明の方法の対象は、哺乳類である。他の実施形態において、対象はヒトである。他の実施形態において、対象はげっ歯類である。他の実施形態において、対象は実験動物である。他の実施形態において、対象は女性である。他の実施形態において、対象は男性である。他の実施形態において、対象は妊娠女性である。他の実施形態において、対象は授乳中の女性である。他の実施形態において、対象は乳児である。他の実施形態において、対象は子供である。他の実施形態において、対象は幼児である。他の実施形態において、対象は成人である。他の実施形態において、対象は高齢成人である。他の実施形態において、「加齢」は、先に列挙した実施形態のいずれかを意味する。他の実施形態において、対象は成人である。他の実施形態において、対象は、当分野において既知の他の任意のタイプの対象である。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【０１６５】
他の実施形態において、「乳児」は、１才未満の対象を意味する。他の実施形態において、その用語は、月齢１８ヶ月未満の対象を意味する。他の実施形態において、その用語は、月齢６ヵ月未満の対象を意味する。他の実施形態において、その用語は、月齢７ヵ月未満の対象を意味する。他の実施形態において、その用語は、月齢８ヵ月未満の対象を意味する。他の実施形態において、その用語は、月齢９ヵ月未満の対象を意味する。他の実施形態において、その用語は、月齢１０ヵ月未満の対象を意味する。他の実施形態において、その用語は、月齢１１ヵ月未満の対象を意味する。他の実施形態において、その用語は、月齢１３ヵ月未満の対象を意味する。他の実施形態において、その用語は、月齢１４ヵ月未満の対象を意味する。他の実施形態において、その用語は、月齢１６ヵ月未満の対象を意味する。他の実施形態において、その用語は、月齢２０ヵ月未満の対象を意味する。他の実施形態において、その用語は、２才未満の対象を意味する。他の実施形態において、その用語は、離乳していない対象を意味する。他の実施形態において、その用語は、離乳しているが、前記の齢範囲の１つ以内である対象を意味する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【０１６６】
他の実施形態において、「子供」は、１８才未満の対象を意味する。他の実施形態において、その用語は、１７才未満の対象を意味する。他の実施形態において、その用語は、１６才未満の対象を意味する。他の実施形態において、その用語は、１５才未満の対象を意味する。他の実施形態において、その用語は、１４才未満の対象を意味する。他の実施形態において、その用語は、１３才未満の対象を意味する。他の実施形態において、その用語は、１２才未満の対象を意味する。他の実施形態において、その用語は、１１才未満の対象を意味する。他の実施形態において、その用語は、１０才未満の対象を意味する。他の実施形態において、その用語は、９未満の対象を意味する。他の実施形態において、その用語は、８才未満の対象を意味する。他の実施形態において、その用語は、７才未満の対象を意味する。
【０１６７】
他の実施形態において、「幼児」は、７才未満の対象を意味する。他の実施形態において、その用語は、６才未満の対象を意味する。他の実施形態において、その用語は、５才未満の対象を意味する。他の実施形態において、その用語は、４才未満の対象を意味する。他の実施形態において、その用語は、３  １／２才未満の対象を意味する。他の実施形態において、その用語は、３才未満の対象を意味する。他の実施形態において、その用語は、２  １／２才未満の対象を意味する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【０１６８】
他の実施形態において、「成人」は、子供の上限として先に列挙した年齢の１つを超えた対象を意味する。他の実施形態において、その用語は、幼児の上限として先に列挙した年齢の１つを超えた対象を意味する。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【０１６９】
他の実施形態において、対象は乳児または新生児であり、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩が、乳児または新生児に授乳中の母に投与される。他の実施形態において、対象は胎児であり、ＣＤＰ−コリンまたは薬学的に許容可能なその塩が、乳児または新生児の妊娠中の母に投与される。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【０１７０】
他の実施形態において、付加的な治療化合物が、本発明の方法の一部として、患者に投与される。他の実施形態において、ＣＤＰ−コリン、またはその前駆物質、誘導体または源が、それによって使用される組成物における単独活性成分である。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【０１７１】
他の実施形態において、付加的な治療化合物は、ウリジンホスホリラーゼ阻害剤として作用する薬剤、例えば、ベンジルバルビツレートまたはその誘導体である。他の実施形態において、付加的な治療化合物は、ウリジンのアベイラビリティーを増加させる薬剤である。他の実施形態において、付加的な治療化合物は、ウリジン分泌阻害化合物、例えば、ジラゼプまたはヘキソベンジンである。他の実施形態において、付加的な治療化合物は、ウリジン腎臓輸送競合物質（ｒｅｎａｌ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔ  ｃｏｍｐｅｔｉｔｏｒｓ）、例えば、Ｌ−ウリジン、Ｌ−２’，３’−ジデオキシウリジン、およびＤ−２’，３’−ジデオキシウリジンである。他の実施形態において、付加的な治療化合物は、リン脂質の産生においてＣＤＰ−コリンと相乗作用する薬剤である。他の実施形態において、付加的な治療化合物は、腎臓クリアランスにおいてウリジンと競合する化合物、例えば、Ｌ−ウリジン、Ｌ−２’，３’−ジデオキシウリジンおよびＤ−２’，３’−ジデオキシウリジンまたはそれらの混合物（米国特許第５，７２３，４４９号および第５，５６７，６８９号に開示されている）である。他の実施形態において、付加的な治療化合物は、患者に有利な他の任意の化合物である。
【０１７２】
他の実施形態において、付加的な治療化合物は、スフィンゴミエリン、アシルグリセロホスホコリン、レシチン、リソレシチン、グリセロホスファチジルコリンまたはそれらの混合物である。各付加的な治療化合物は、本発明の別の実施形態である。
【０１７３】
他の実施形態において、本発明の方法は、ＣＤＰ−コリン、またはその前駆物質、誘導体または源の、類似体、誘導体、異性体、代謝産物、薬学的に許容可能な塩、医薬品、水和物、Ｎ−オキシドまたはそれらの任意の組合せを含む医薬組成物を投与することを含む。
【０１７４】
他の実施形態において、本発明の医薬組成物は、当業者に既知の任意の方法によって、例えば、非経口的、癌近傍的、経粘膜的、経皮的、筋肉内的、静脈内的、皮内的、皮下的、腹腔内的、脳室内的、頭蓋内的、膣内的または腫瘍内的に、患者に投与される。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【０１７５】
本発明の方法および組成物の他の実施形態において、ＣＤＰ−コリン、またはその前駆物質、誘導体または源を含む組成物は、脂質部分をさらに含む。他の実施形態において、脂質部分は、１０％（ｗｔによる）より多いω−３脂肪酸を含む。他の実施形態において、脂質部分は、１０％より多い、１８炭素原子より大きい長さを有するω−３脂肪酸を含む。他の実施形態において、ω−３脂肪酸、または１８炭素原子より長いω−３脂肪酸のパーセンテージは、１６％を超える。他の実施形態において、そのパーセンテージは、２０％を超える。他の実施形態において、そのパーセンテージは、２５％を超える。他の実施形態において、そのパーセンテージは、３０％を超える。他の実施形態において、そのパーセンテージは、３５％を超える。他の実施形態において、そのパーセンテージは、４０％を超える。他の実施形態において、そのパーセンテージは、４５％を超える。他の実施形態において、そのパーセンテージは、１０〜４０％である。他の実施形態において、そのパーセンテージは、１０〜５０％である。他の実施形態において、そのパーセンテージは、１６〜４０％である。他の実施形態において、そのパーセンテージは、１６〜５０％である。他の実施形態において、そのパーセンテージは、２０〜４０％である。他の実施形態において、そのパーセンテージは、２０〜５０％である。他の実施形態において、そのパーセンテージは、３０〜４０％である。他の実施形態において、そのパーセンテージは、３０〜５０％である。各可能性は、本発明の別の実施形態である。
【０１７６】
他の実施形態において、ＣＤＰ−コリン、またはその前駆物質、誘導体または源を含む組成物は、ドコサヘキサエン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサペンタエン酸またはそれらの組合せ含む。他の実施形態において、これらの脂肪酸の合計は、存在するω−３長鎖脂肪酸の５０ｗｔ％より大である。他の実施形態において、これらの脂肪酸の合計は、ω−３長鎖脂肪酸の６０ｗｔ％より大である。他の実施形態において、これらの脂肪酸の合計は、ω−３長鎖脂肪酸の７０ｗｔ％より大である。他の実施形態において、これらの脂肪酸の合計は、ω−３長鎖脂肪酸の７５ｗｔ％より大である。他の実施形態において、これらの脂肪酸の合計は、ω−３長鎖脂肪酸の８０ｗｔ％より大である。他の実施形態において、これらの脂肪酸の合計は、ω−３長鎖脂肪酸の８５ｗｔ％より大である。
【０１７７】
他の実施形態において、［これらの脂肪酸（ＤＨＡ、ＤＰＡおよびＥＰＡ）の合計］／［リノール酸］の比率は、０．５より大である。他の実施形態において、その比率は０．６より大である。他の実施形態において、その比率は０．７より大である。他の実施形態において、その比率は０．８より大である。他の実施形態において、その比率は１より大である。他の実施形態において、その比率は１．５より大である。他の実施形態において、その比率は２より大である。他の実施形態において、その比率は３より大である。他の実施形態において、その比率は５より大である。他の実施形態において、その比率は７より大である。他の実施形態において、その比率は１０より大である。他の実施形態において、その比率は１２より大である。他の実施形態において、その比率は１５より大である。他の実施形態において、その比率は１〜２５である。他の実施形態において、その比率は２〜２２である。他の実施形態において、その比率は３〜２２である。他の実施形態において、その比率は５〜２０である。他の実施形態において、その比率は７〜１５である。他の実施形態において、その比率は１０〜１２である。
【０１７８】
他の実施形態において、ＣＤＰ−コリン、またはその前駆物質、誘導体または源を含む組成物の脂質部分は、組成物のエネルギー分の２０〜６０％を占める。他の実施形態において、脂質部分はエネルギー分の２５〜５５％を占める。他の実施形態において、エネルギー分の３０〜５０％を占める。他の実施形態において、エネルギー分の３２〜４５％を占める。
【０１７９】
他の実施形態において、ＣＤＰ−コリン、またはその前駆物質、誘導体または源を含む組成物の脂質部分における、ＤＨＡ／ＥＰＡの重量比は、１〜２０である。他の実施形態において、その範囲は２〜１８である。他の実施形態において、その範囲は３〜１６である。他の実施形態において、その範囲は５〜１４である。他の実施形態において、その範囲は７〜１２である。
【０１８０】
他の実施形態において、本発明の方法および組成物の、ある組成物は、以下を含む栄養補助食品（他の実施形態において、飲料）である。
ＣＤＰ−コリン      ０．５ｇ
魚油                ３．７ｇ
炭水化物            ９．０ｇ
乳タンパク質        ３ｇ
【０１８１】
ＣＤＰ−コリン、またはその前駆物質、誘導体または源を含む組成物の、前記のタイプの各脂質部分は、本発明の別の実施形態である。
【０１８２】
本発明の方法および組成物の他の実施形態において、医薬組成物は、経口投与され、従って、経口投与に好適な形態に配合される。他の実施形態において、その形態は栄養配合物である。他の実施形態において、その形態は、固体調製物である。他の実施形態において、その形態は半固体調製物である。他の実施形態において、その形態は、液体調製物である。他の実施形態において、固体経口配合物は、錠剤、カプセル剤、丸剤、顆粒剤、ペレット剤などである。他の実施形態において、半固体調製物はゲル剤であり、他の実施形態において、スポーツゲル剤である。他の実施形態において、液体経口配合物は、液剤、懸濁剤、分散剤、乳剤、油剤などである。
【０１８３】
他の実施形態において、活性成分がカプセルに配合される。他の実施形態において、本発明の組成物は、活性化合物に加えて、不活性担体または希釈剤、硬カプセル（ｈａｒｄ  ｇｅｌａｔｉｎｇ  ｃａｐｓｕｌｅ）を含む。
【０１８４】
他の実施形態において、医薬組成物は、液体調製物の静脈内、動脈内または筋肉内注射によって投与される。好適な液体配合物は、液剤、懸濁剤、分散剤、乳剤、油剤などを包含する。他の実施形態において、医薬組成物は、静脈内投与され、従って、静脈内投与に好適な形態に配合される。他の実施形態において、医薬組成物は、動脈内投与され、従って、動脈内投与に好適な形態に配合される。他の実施形態において、医薬組成物は、筋肉内投与され、従って、筋肉内投与に好適な形態に配合される。
【０１８５】
他の実施形態において、医薬組成物は、体表に局所投与され、従って、局所投与に好適な形態に配合される。好適な局所配合物は、ゲル剤、軟膏剤、クリーム剤、ローション剤、滴剤などを包含する。局所投与のために、本発明の組成物は、医薬担体を使用するか使用せずに、生理的に許容される希釈剤中の溶液、懸濁液または乳濁液として適用される。
【０１８６】
他の実施形態において、医薬組成物は、坐剤、例えば、直腸坐剤または尿道坐剤として投与される。他の実施形態において、医薬組成物は、ペレット剤の皮下埋め込みによって投与される。他の実施形態において、ペレット剤は、長時間にわたる活性剤の制御放出をもたらす。
【０１８７】
他の実施形態において、活性化合物は、小胞、例えばリポソームにおいて、送達される。
【０１８８】
他の実施形態において、本発明の方法に使用される担体または希釈剤は、ゴム、デンプン（例えば、コーンスターチ、事前ゲル化デンプン）、糖（例えば、ラクトース、マンニトール、スクロース、デキストロース）、セルロース系材料（例えば、微結晶性セルロース）、アクリレート（例えば、ポリメチルアクリレート）、炭酸カルシウム、酸化マグネシウムまたはそれらの混合物を包含するがそれらに限定されない。
【０１８９】
他の実施形態において、液体配合物用の薬学的に許容可能な担体は、水性または非水性溶液、懸濁液、乳濁液または油である。非水性溶媒の例は、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールおよび注射用有機エステル、例えばオレイン酸エチルである。水性担体は、水、アルコール性／水性溶液、乳濁液または懸濁液を包含し、食塩水および緩衝媒質を包含する。油の例は、動物、植物または合成由来の油、例えば、落花生油、ダイズ油、オリーブ油、ヒマワリ油、魚肝油、他の魚油、またはミルクまたは卵からの脂質である。
【０１９０】
他の実施形態において、非経口賦形剤（皮下、静脈内、動脈内または筋肉内注射用）は、塩化ナトリウム溶液、リンゲルデキストロース、デキストロースおよび塩化ナトリウム、乳酸加リンゲルおよび固定油を包含する。静脈内賦形剤は、液体および栄養補液、電解質補液、例えば、リンゲルデキストロースに基づく補液などを包含する。その例は、界面活性剤または他の薬学的に許容可能な補助剤を添加したまたは添加していない、滅菌液体、例えば、水および油である。一般に、水、食塩水、水性デキストロースおよび関連する糖溶液、およびグリコール、例えばプロピレングリコールまたはポリエチレングリコールは、特に注射用溶液に好ましい液体担体である。油の例は、動物、植物または合成由来の油、例えば、落花生油、ダイズ油、オリーブ油、ヒマワリ油、魚肝油、他の魚油、またはミルクまたは卵からの脂質である。
【０１９１】
他の実施形態において、組成物は、以下の物質をさらに含む。結合剤（例えば、アカシア、コーンスターチ、ゼラチン、カルボマー、エチルセルロース、グアルゴム、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポビドン）；崩壊剤（例えば、コーンスターチ、バレイショデンプン、アルギン酸、二酸化珪素、クロスカルメロースナトリウム、クロスポビドン、グアルゴム、デンプングリコール酸ナトリウム）；種々のｐＨおよびイオン強度の緩衝剤（例えば、トリス−ＨＣｌ、酢酸塩、リン酸塩）；添加剤、例えば、表面への吸収を防止するアルブミンまたはゼラチン；洗浄剤（例えば、Ｔｗｅｅｎ  ２０、Ｔｗｅｅｎ  ８０、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ６８、胆汁酸塩）；プロテアーゼ阻害剤；界面活性剤（例えば、ラウリル硫酸ナトリウム）；浸透促進剤；可溶化剤（例えば、グリセロール、ポリエチレングリセロール）；抗酸化剤（例えば、アスコルビン酸、メタ重亜硫酸ナトリウム、ブチルヒドロキシアニソール）；安定剤（例えば、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース）；粘度上昇剤（例えば、カルボマー、コロイド状二酸化珪素、エチルセルロース、グアルゴム）；甘味料（例えば、アスパルテーム、クエン酸）；防腐剤（例えば、チメロサール、ベンジルアルコール、パラベン）；潤滑剤（例えば、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム）；流れ助剤（例えば、コロイド状二酸化珪素）；可塑剤（例えば、ジエチルフタレート、トリエチルシトレート）；乳化剤（例えば、カルボマー、ヒドロキシプロピルセルロース、ラウリル硫酸ナトリウム）；高分子被覆剤（例えば、ポロキサマーまたはポロキサミン）；被膜および皮膜形成剤（例えば、エチルセルロース、アクリレート、ポリメタクリレート）；および／またはアジュバント。前記の各賦形剤は、本発明の別の実施形態である。
【０１９２】
他の実施形態において、医薬組成物は、制御放出系において送達される。例えば、薬剤を、静脈内輸液、埋め込み型浸透圧ポンプ、経皮パッチ、リポソーム、または他の投与方法を使用して投与しうる。１つの実施形態において、ポンプを使用しうる（前記Ｌａｎｇｅｒ；Ｓｅｆｔｏｎ，ＣＲＣ  Ｃｒｉｔ．Ｒｅｆ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｅｎｇ．１４：２０１（１９８７）；Ｂｕｃｈｗａｌｄ  ｅｔ  ａｌ，Ｓｕｒｇｅｒｙ  ８８：５０７（１９８０）；Ｓａｕｄｅｋ  ｅｔ  ａｌ，Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３２１：５７４（１９８９）参照）。他の実施形態において、例えばミクロスフェアまたはインプラントにおいて、高分子材料が使用される。さらに他の実施形態において、制御放出系が、治療標的、即ち脳に、近接に配置され、従って、全身投与量の何分の一かを必要とするにすぎない（例えば、前記のＧｏｏｄｓｏｎ，Ｍｅｄｉｃａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ，ｖｏｌ．２，ｐｐ．１１５−１３８（１９８４）；およびＬａｎｇｅｒ  Ｒ，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４９：１５２７−１５３３（１９９０）参照）。
【０１９３】
他の実施形態において、組成物は、高分子化合物、例えば、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ヒドロゲルなどの粒状調製物の中へのまたは上への、またはリポソーム、ミクロエマルジョン、ミセル、単層または多層小胞、赤血球ゴーストまたはスフェロプラスト上への、活性物質の組み込みも包含する。そのような組成物は、物理的状態、溶解性、安定性、生体内放出速度、および生体内クリアランス速度に影響を与える。
【０１９４】
ポリマー（例えば、ポロキサマーまたはポロキサミン）で被覆された粒状組成物、および組織特異性受容体、リガンドまたは抗原を指向する抗体に結合しているか、または組織特異性受容体のリガンドに結合している化合物も、本発明に包含される。
【０１９５】
水溶性ポリマー、例えば、ポリエチレングリコール、ポリエチレングリコールとポリプロピレングリコールとのコポリマー、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドンまたはポリプロリンの共有結合によって修飾された化合物も本発明に包含される。修飾された化合物は、対応する非修飾化合物と比較して、静脈注射後に血中において実質的により長い半減期を示すことが知られている（Ａｂｕｃｈｏｗｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ，１９８１；Ｎｅｗｍａｒｋ  ｅｔ  ａｌ，１９８２；ａｎｄ  Ｋａｔｒｅ  ｅｔ  ａｌ，１９８７）。そのような修飾は、さらに、水溶液における化合物の溶解性を増加し、凝集を無くし、化合物の物理的および化学的安定性を強化し、化合物の免疫原性および反応性をかなり減少しうる。それによって、他の実施形態において、そのようなポリマー化合物アブダクトを、非修飾化合物より少ない頻度または少ない用量で投与することによって、所望される生体内生物学的活性が得られる。
【０１９６】
他の実施形態において、活性成分が、中和された薬学的に許容可能な塩形態として、組成物に配合される。薬学的に許容可能な塩は、酸付加塩（ポリペプチドまたは抗体分子の遊離アミノ基を使用して形成される）を包含し、それらは、無機酸、例えば、塩酸またはリン酸、または有機酸、例えば、酢酸、シュウ酸、酒石酸、マンデル酸などを使用して形成される。遊離カルボシル基から形成される塩を、無機塩基、例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化アンモニウム水酸化、水酸化カルシウムまたは水酸化第二鉄、および有機塩基、例えば、イソプロピルアミン、トリメチルアミン、２−エチルアミノエタノール、ヒスチジン、プロカインなどから誘導することもできる。
【０１９７】
前記の各添加剤、賦形剤、配合物および投与法は、本発明の別の実施形態である。
［実験詳細セクション］
【実施例１】
【０１９８】
［チロシンからの干渉のないＨＰＬＣによるシチジンの測定］
［材料および方法］
［試料調製］
ヘパリン化血漿の１ミリリットル（ｍＬ）試料を、内標準として使用するために、１μｇのフルオロ−ウリジンでスパイクし、次に、メタノール（５ｍＬ）の添加によってタンパク質を除いた。試料を遠心分離し、凍結乾燥し、５ｍＬの０．２５Ｎ酢酸アンモニウム（ｐＨ８．８）において再構成し、次に、ボロネートアフィニティカラムですぐに精製した。
【０１９９】
［ボロネートアフィニティカラム］
全ての段階を、４℃で行った。ボロネートアフィニティカラム（Ａｆｆｉｇｅｌ−６０１、Ｂｏｄ−Ｒａｄ）を、２回の５ｍＬ酢酸アンモニウム洗浄で準備し、試料を適用し、カラムを酢酸アンモニウムで再び洗浄し、次に、ヌクレオシドを０．１Ｎ  ギ酸（７ｍＬ）で溶離した。溶出液を凍結乾燥し、次に、ＨＰＬＣ分析のために１００μＬの水において再構成した。ボロネートアフィニティカラムが、多くの生物学的分子（ヌクレオチド塩基アデノシン、シチジン、グアノシン、チミジンおよびウリジンを包含する）を結合する。
【０２００】
［ＨＰＬＣ］
ＨＰＬＣ分析は、Ｒａｉｎｉｎ  Ｄｙｎａｍａｘ  Ｍｉｃｒｏｓｏｒｂ  Ｃ１８カラム（３μＭ装填；４．６×１００ｍｍ）を取り付けたＢｅｃｋｍａｎ  Ｓｙｓｔｅｍ  Ｇｏｌｄ  ａｐｐａｒａｔｕｓ（Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）を用いて、室温で行った。標準ＨＰＬＣ法は、Ｌｏｐｅｚ−Ｃｏｖｉｅｌｌａら（Ｊ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ  ６５：８８９−８９４，１９９５）に記載されている。改変ＨＰＬＣのために、０．００４Ｎリン酸カリウム緩衝液（ｐＨ５．８）および０．１％メタノールをギ酸の代わりに含有し、１ｍＬ／分で流動し、３５℃に加熱した定組成溶離緩衝液を使用した。
【０２０１】
［結果］
ヌクレオシドを測定する標準ＨＰＬＣ法は、ウリジンおよびシチジンの分離ピークを生じるが、シチジンピークおよびチロシンピークの一致は、ヒト血漿試料に関して示されているように（図１）、シチジンレベルの正確な測定を妨げる。チロシンは多くの生物学的流体、例えば、血漿または脳脊髄液（ＣＳＦ）に存在する。この実施例において、シチジンおよびチロシンピークを区別し、シチジンレベルの正確な測定を可能にする改変ＨＰＬＣ法を使用した（図２）。
【実施例２】
【０２０２】
［ＵＭＰの経口投与は、ヒトにおいて、血漿ウリジンレベルを増加させる］
［材料および実験方法］
［試験計画］
８人の健康な被験者（男性５人、女性３人、２７〜６７才）に一晩絶食するよう指示し、少なくとも３日の洗い流し期間をあけた３日間の、それぞれの日の７〜８ＡＭにおいて、漸増用量（５００、１０００および２０００ｍｇ）の二ナトリウムＵＭＰ（Ｎｕｍｉｃｏ，Ｗａｇｅｎｉｎｇｅｎ，ＮＬ）を順次に投与した。全被験者に昼食を与えた。血液試料をヘパリン化した管に８時間にわたって採取した。血漿をメタノールで処理して、タンパク質を沈殿させ、クロロホルムで抽出し、水性層のアリコートを凍結乾燥し、水に溶解し、ＵＶ検出を伴うＨＰＬＣによって分析した。
【０２０３】
［統計的分析］
統計的分析をＳＰＳＳ  １２．０で行った。データを、平均値±ＳＥＭとして示した。独立スチューデント試験、一元配置分散分析（ＡＮＯＶＡ）、反復測定を行うＡＮＯＶＡ、二元配置ＡＮＯＶＡを使用して、文脈において詳しく記載されているように統計的作用を評価した。適切であれば、Ｔｕｋｅｙ’ｓ  ＨＳＤ  ｐｏｓｔ  ｈｏｃ分析を行った。有意レベルをｐ＜０．０５に設定した。
【０２０４】
［結果］
被験者に、５００、１０００または２０００ｍｇのＵＭＰを経口投与し、血中ウリジンレベルを、基線および投与から１、２、４および８時間後に測定した。血漿ウリジンレベルを、実施例１に記載のように分析した。血漿ウリジンレベルは、経口ＵＰＭに反応して、用量依存的に増加し、次に、８時間以内に基線レベルに戻った（図３）。同様の結果がジャービルにおいても観測された（図４）。
【実施例３】
【０２０５】
［ウリジンまたはＵＭＰの経口投与は、ジャービルにおいて、脳ウリジンレベルを増加させる］
［材料および実験方法］
［実験計画］
８〜９匹の雄ジャービル（６０〜８０ｇ）のグループを、一晩絶食させ、（ａ）ウリジン（Ｓｉｇｍａ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ；２５０ｍｇ／ｋｇ体重）または二ナトリウＵＭＰ（１ｍｍｏｌ／ｋｇ体重、胃管栄養法による２５０ｍｇ／ｋｇウリジンに対応する用量）を投与し、１時間後に、テラゾール麻酔下の断頭によって犠牲にした。首から採取した血液を、ＥＤＴＡを含有する試験管に収集し、実施例２に記載したように処理した。
【０２０６】
［ジャービル脳組織調製］
断頭後に、頭蓋から脳をすばやく除去し、ドライアイスで凍結し、８０％メタノール中に均質化し、遠心分離し、凍結乾燥し、実施例２において血液に関して記載したように分析した。
【０２０７】
［結果］
ウリジンの経口投与が、血漿ウリジンレベルを増加しうるかを確認するために、ジャービルに２５０ｍｇ／ｋｇシチジンまたはウリジンを胃管栄養法によって与えた。６０分後、脳を均質化し、ウリジンレベルを分析した。対照動物と比較して、シチジンの経口投与は、脳ウリジンレベルの２倍増加を生じ、ウリジンの経口投与は脳ウリジンレベルの３倍より多い増加を生じた（図５）。グループ間の全ての差異は統計的に有意であった。
【０２０８】
時間経過に伴う血漿ウリジンレベルの増加を評価する別の実験において、ジャービルに、水または１ミリモル（ｍｍｏｌ）ＵＭＰ／キログラム（ｋｇ）体重を投与し、その後の６０分間の種々の時点で犠牲にし、脳ウリジンレベルを評価した。脳ウリジンレベルはウリジン投与から１０分以内に増加し、３０分以内にピークに達し、血漿ウリジンレベルで観測された結果と類似していた（図６）。従って、経口投与ウリジンは、脳に有効に輸送される。
【実施例４】
【０２０９】
［ウリジンは脳においてシチジンに容易に変換される］
別の実験において、ジャービルに２５０ｍｇ／ｋｇ体重のウリジンを経口投与し、６０分後にシチジンおよびウリジンの血漿および脳レベルを評価した。対照動物と比較した倍増加を計算し、図７Ａ（血漿）および７Ｂ（脳）に示す。各場合に、シチジンの倍増加を、１００％に任意設定したウリジンの倍増加に標準化した。これらの結果は、以下のことを示している。（ａ）血流中のウリジンが脳に輸送され、（ｂ）ウリジンが、血漿における場合と比較して、脳において異なって代謝的処理され、特に、それは血漿における場合と比較して、より有効にシチジンに変換される。
【０２１０】
従って、増加する血漿ウリジンレベル（例えば、ＣＤＰ−コリンの投与による）は、脳シチジンレベルを増加させる。
【実施例５】
【０２１１】
［ウリジンは、脳および神経細胞系において、ＣＤＰ−コリンのレベルを増加させる］
［材料および実験方法］
［実験計画］
データを３つの実験から収集し、グループサイズは動物５〜１６匹であった。雄ジャービル（６０〜８０ｇ）にＵＭＰ（１ｍｍｏｌ／ｋｇ体重）を胃管栄養法によって与え、指示された時期に犠牲にした。実施例３に記載したように、脳の均質化、タンパク質沈殿および凍結乾燥を行った後に、試料をＨＰＬＣ−ＵＶによって分析した。
【０２１２】
［ＣＤＰ−コリンレベルの評価］
脳組織または細胞を、メタノール／クロロホルム（１：２  ｖｏｌ／ｖｏｌ）に溶解し、遠心分離し、水性相を真空乾燥し、１００〜２００μＬの水に再懸濁し、イオン交換カラム（Ａｌｌｔｅｃｈ  Ｈｙｐｅｒｓｉｌ  ＡＰＳ−２、５μＭ、２５０×４．６ｍｍ）上でのＨＰＬＣによって分離した。ＣＤＰ−コリンを、線形勾配のＮａＨ２ＰＯ４緩衝液Ａ（１．７５ｍＭ  ＮａＨ２ＰＯ４、ｐＨ２．９）およびＢ（５００ｍＭ、ｐＨ４．５）で溶離し、これは、接近して共溶出する物質、例えばＵＭＰからの、ＣＤＰ−コリンの４０分間にわたる分解を可能にした。ＣＤＰ−コリンの滞留時間は９．５分であった。個々のヌクレオチドピークを、３８０ｎｍにおけるＵＶ吸収によって検出し、真正標準の位置との比較によって、ならびに選択試料に対するヌクレオチド標準の付加によって、同定した。
【０２１３】
［ＰＣ１２細胞］
ＰＣ１２細胞を、１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）を補充した最小必須培地（ＭＥＭ；Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ）において、３７℃で維持した。実験培養は、被験化合物を添加したまたは添加していない５０ｎｇ／ｍＬマウス２．５Ｓ（２．５サブユニット）ＮＧＦおよび１％  ＦＢＳを含有する倍地において、２日間または４日間であった。ＮＧＦおよびＦＢＳはＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎから得た。
【０２１４】
［結果］
脳でのリン脂質前駆物質レベルにおける経口投与ウリジンの作用を評価するために、実施例３の第二実験からのジャービルの脳を、ＣＤＰ−コリン（ケネディ経路によるリン脂質生合成における主要中間体）のレベルについて分析した。ＵＭＰ投与後３０分間にわたってＣＤＰ−コリンのレベルが、線形に有意に増加した（回帰分析、ｒ＝０．９８、ｐ＜０．０２）（図８）。
【０２１５】
神経細胞、ＰＣ１２細胞における、ウリジンのＣＤＰ−コリンへの変換を直接的に示すために、神経細胞に分化しうる細胞系をウリジンで処理し、ＣＤＰ−コリンの細胞内レベルを測定した。ウリジン処理は、５０分後にＣＤＰ−コリンレベルの統計的有意な増加を生じた（図９）。これらの結果は、脳への輸送後に、ウリジンが、おそらくは中間体ＣＴＰを経て、リン脂質前駆物質に変換され、従って、脳細胞におけるリン脂質前駆物質の合成を増加させることによって認知機能および知力を増強することを示す。
【実施例６】
【０２１６】
［ＵＭＰの経口投与は、高齢ラットの脳において、神経伝達物質放出を増加させる］
［材料および実験方法］
［動物および食餌ＵＭＰ補充］
雄の中年Ｆｉｓｃｈｅｒ  ３４４ラット（微量透析を行う時点で２２〜２４ヶ月）を、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｎ  Ａｇｉｎｇ（Ｈａｒｌａｎ  Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ，Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ，ＩＮ）から得た。ラットを一匹ずつ標準飼育条件下に収容し、餌および水を自由に与えながら１２時間の明暗サイクルに暴露した。各ラットは約５００ｍｇ／ｋｇ／日のＵＭＰ−２Ｎａを摂取した（ウリジンの腹腔内ＬＤ５０は４．３ｇ／Ｋｇである）。
【０２１７】
対照実験食餌（Ｔｅｋｌａｄ  Ｇｌｏｂａｌ  １６％タンパク質げっ歯類食餌、ＴＤ．００２１７，Ｈａｒｌａｎ  Ｔｅｋｌａｄ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）、またはＵＭＰ・２Ｎａ＋（２．５％、ＴＤ．０３３９８、ＵＭＰ・２Ｎａ＋；Ｎｕｍｉｃｏ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，ｔｈｅ  Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）で栄養強化したこの食餌を６週間にわたって与える前に、ラットを７日間より長い期間にわたって動物施設に順化させた。
【０２１８】
到着から少なくとも７日後までは、ラットに研究食餌を与えなかった。給餌の開始時（ｔ＝０）、ならびに１、２、４、６週間後に、それらの体重を測定した。時間０において、ラットを無作為に２つのグループに分けた。グループ間に有意な体重差はなく（Ｆ１，１１＝３．０３、ｐ＞０．０５）、平均体重は４５５±５（Ｎ＝１３ラット）であった。週を対象内ファクターとする反復測定は、給餌時間（０、１、２、４、６週間）が体重を有意に変化させた（Ｆ４，４４＝２．６５、ｐ＜０．０５）が、ＵＭＰ−食餌（対照に対する）もＵＭＰ×時間相互作用も体重に影響を与えなかった（それぞれ、Ｆ１，１１＝０．０１、Ｆ４，４４＝１．２５；全てｐ＞０．０５）ことを示した。
【０２１９】
この実施例に記載した実験は２回行われ、各回において、対象ラット７匹、およびＵＭＰ食餌投与ラット９匹であった。結果は２つの実験において一致していた。
【０２２０】
［化学物質および溶液］
ドーパミン（ＤＡ）、ジヒドロキシフェニル酢酸（ＤＯＰＡＣ）、ホモバニリン酸（ＨＶＡ）、セロトニン（５−ＨＴ）、５−ヒドロキシインドール酢酸（５−ＨＩＡＡ）、および３，４−ジヒドロキシ安息香酸（ＤＨＢＡ：内標準）を、Ｓｉｇｍａ（Ｓｔ，Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）から購入し、ＨＣｌＯ４（０．１Ｍ）に溶解させて、１ｍＭの原液を作り、アリコートを−８０℃で保存した。塩酸ケタミン（１００ｍｇ／ｍＬ）をＦｏｒｔ  Ｄｏｄｇｅ  Ａｎｉｍａ  Ｈｅａｌｔｈ（Ｆｏｒｔ  Ｄｏｒｇｅ，ＩＡ）から購入した。キシラジン（２０ｍｇ／ｍＬ）をＰｈｏｅｎｉｘ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｉｎｃ．（Ｓｔ．Ｊｏｓｅｐｈ，ＭＯ）から得た。
【０２２１】
リンゲル溶液は、ＮａＣｌ  １４７ｍＭ、ＫＣｌ  ２．７ｍＭ、ＣａＣｌ２  １．２ｍＭおよびＭｇＣｌ２  ０．８５ｍＭから構成されるものであった。高カリウム溶液のために、ＫＣｌを８０ｍＭに増加し、ＮａＣｌを６９．７ｍＭに減少して、容量オスモル濃度を維持した。全ての溶液を、二倍希釈脱イオン水から作り、Ｓｔｅｒｉｆｌｉｐ（登録商標）（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ，Ｂｅｄｆｏｒｄ，ＭＡ）によって濾過した。
【０２２２】
［生体内微量透析］
ケタミンおよびキシラジンの混合物（それぞれ８０ｍｇ／ｋｇ体重および１０ｍｇ／ｋｇ体重、腹腔内）でラットに麻酔し、Ｋｏｐｆ定位枠に入れた。全ての外科用器具をホットビーズ乾燥滅菌器または７０％エタノールによって滅菌した。２ｍｍ穿頭器によって、頭蓋に小さい穴を開けた。ＣＭＡ／１１  １４／０４  Ｃｕｐｒプローブ（Ｏ．Ｄ．０．２４ｍｍ、４ｍｍ膜、６，０００Ｄａ、ＣＭＡ微量透析、Ｓｗｅｄｅｎ）を、右線条体に埋め込み（ＡＰ＝＋０．５、ＭＬ＝−３．０  ブレグマから、ＤＶ＝−７．３ｍｍ  硬膜から；Ｐａｘｉｎｏｓ  Ｇ  ｅｔ  ａｌ，Ｔｈｅ  Ｒａｔ  Ｂｒａｉｎ  ｉｎ  Ｓｔｅｒｅｏｔａｘｉｃ  Ｃｏｏｒｄｉｎａｔｅｓ，第２版、Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏに記載）、切歯バー（ｉｎｃｉｓｏｒ  ｂａｒ）は、−５．０ｍｍに設定した。歯科用セメントを使用してプローブを適切な位置に永久的に固定し、３つのアンカースクリューを頭蓋に固定した。手術後、ラットに生理食塩水（５ｍＬ／ｋｇ）を腹腔内注射し、目覚めるまで３７℃の体温を維持する電気パッドに保持した。
【０２２３】
液体スイベルを不要にする回転台上の円形ボウルにおいて、自由運動ラットを灌流し（Ｗａｎｇ  Ｌ  ｅｔ  ａｌ，Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ  Ｉｎｔ  ４２：４６５−７０，２００３参照）、手術後一日目に環境に順化させた。実験を手術から約４８時間後に行い、１０：００ａｍ〜４：００ｐｍの間で実施した。フッ素化エチレンプロピレン（ＦＥＰ）樹脂管および気密シリンジ（Ｅｘｍｉｒｅ  ｔｙｐｅ  １，ＣＭＡ）を用いて、１．５μＬ／分の定速度において、微量注入ポンプ（ＣＭＡ／１００）によって、リンゲル溶液を連続的に灌流させた。透析物を１５分間隔で収集した。５μＬの抗酸化物質混合物（０．２Ｍ  ＨＣｌＯ４および０．１ｍＭ  ＥＤＴＡから成る）を、収集の前に試料採取バイアルに添加して、ドーパミンおよびその代謝産物を保護した。最初の６０分以内の試料を分析から捨てた。次に、３連続セッションの試料を収集した。最後のセッション（１．５時間、６試料）を除いて、その他は１時間にわたって収集した（４試料）。順序は以下の通りであった。セッション１（ａＣＳＦ）、セッション２（高Ｋ＋）、セッション３（ａＣＳＦ）。全ての試料は、砕氷上に収集し、即座に凍結し、ＨＰＬＣ分析まで−８０℃で維持した。
【０２２４】
［タンパク質およびモノアミンに関する脳切開］
微量透析実験の後、ラットにケタミンおよびキシラジン（８０および１０ｍｇ／ｋｇ、腹腔内）で麻酔した。黒インクをプローブから入れて、プローブのまわりの組織を染色した。ラットをギロチンで断頭した。脳をすぐに冷却切開板上で切開した。左線条体を、後のタンパク質アッセイのために、液体窒素中に配置したエッペンドルフ管においてスナップ凍結した。さらに右線条体を切開し、プローブの位置を目視観測によって決定した。プローブが線条体内で見出されなかった場合は、データを含めなかった。
【０２２５】
付加的ラット群（月齢２０ヵ月；対照およびＵＭＰの両方についてｎ＝６）に６ヵ月間餌を与えた。これらのラットにおいて微量透析を行わなかった。線条体（左および右の両方）を前記のように収集して、ドーパミンおよびその代謝産物の組織レベルを測定した。
【０２２６】
［組織ドーパミン試料の抽出］
線条体の重さを量り、氷上のエッペンドルフ管において、０．１Ｍ  ＨＣｌＯ４および１μＭ  ＥＤＴＡを含有する１ｍＬのＨ２Ｏで１分間均質化した。１０秒間にわたってボルテックスした後、アリコートをビシンコニニック酸（Ｓｉｇｍａ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）タンパク質アッセイに使用した。次に、ホモジネートをＵｌｔｒａｆｒｅｅ−ＭＣ遠心分離フィルターユニット（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ，１４，０００ｒｐｍ／１５分／４℃）で濾過した。水性相をＨＰＬＣに付す前に、１：１０希釈を行った。均質化の前に、ＤＨＢＡを内標準として試料に添加した。ドーパミンおよびその代謝産物の濃度をＨＰＬＣによって測定し、３反復測定の数値を平均し、試料当たりのタンパク質量に標準化した。
【０２２７】
［ドーパミンおよび代謝産物の分析］
透析物および組織試料におけるＤＡおよび代謝産物を、ＥＳＡ  Ｃｏｕｌｏｃｈｅｍ  ５１００Ａ検出器（Ｅ１＝−１７５ｍＶ；Ｅ２＝＋３２５ｍＶ；Ｅｇｕａｒｄ＝３５０ｍＶ）およびＥＳＡ  Ｍｉｃｒｏｄｉａｌｙｓｉｓ  Ｃｅｌｌ（モデル５０１４Ｂ，ＥＳＡ，Ｎｏｒｔｈ  Ｃｈｅｌｍｓｆｏｒｄ，ＭＡ）を使用して測定した。移動相（ＭＤ−ＴＭ，ＥＳＡ）は、７５ｍＭ  ＮａＨ２ＰＯ４、１．７ｍＭ  １−オクタンスルホン酸、１００μ／Ｌ  トリエチルアミン、２５μＭ  ＥＤＴＡ、１０％アセトニトリル、ｐＨ３．０から成っていた。流速は、０．４ｍＬ／分であった。カラム（ＥＳＡ  ＭＤ  １５０、３×１５０ｍｍ、３μｍ、１２０Å）を、４０℃カラムオーブンに維持した。試料を、Ａｌｌｔｅｃｈ  ５８０自動試料採取器（Ａｌｌｔｅｃｈ，Ｄｅｅｒｆｉｅｌｄ，ＩＬ）によってＨＰＬＣに注入し、分析の間に冷却トレーで４℃に維持した。データをＡｌｌｔｅｃｈ  ＡｌｌＣｈｒｏｍ（商標）データシステムによって捕捉し、ＡｌｌＣｈｒｏｍ  ｐｌｕｓ（商標）ソフトウエアで分析した。試料分離および検出の間に検出ゲインを変化させうる時間線プログラムを使用して、１回の注入によって透析物における低ＤＡおよび高代謝産物濃度データを得ることを可能にした。
【０２２８】
［データ分析］
データを、各時点で６〜９測定の試料採取時間に従って示した（平均値±測定値の標準誤差［Ｓ．Ｅ．Ｍ．］）。ＤＡおよび主要代謝産物の基礎値を、Ｋ＋刺激前の最初の４連続試料の平均値に基づいて求め（透析物における平均値は１０．２±０．４ｎＭであった；ｎ＝２２）、これを１００％値とした。二元配置ＡＮＯＶＡ（処理ｘ時間）およびＴｕｒｋｅｙ’ｓ  ＨＳＤ  ｐｏｓｔ  ｈｏｃ試験を使用して、統計を取った。一元配置ＡＮＯＶＡを使用して、各時点における３グループ間の違いを比較した。＞０．０５のｐ値を使用して、統計的有意性を評価した。ドーパミンの基礎レベルは、二回の反復実験間で均一であり、従って、対応するグループに収集した（Ｆ１，２０＝３．９９、ｐ＞００５）。透析物における基礎ＤＡレベルは、Ｋ＋刺激前の４連続試料において、１時間の平衡後に安定であった（Ｆ３，５７＝０．１５、ｐ＞０．０５；試料採取時間（０、１５、３０、４５分）を対象内ファクターとして使用する反復測定を行う一元配置ＡＮＯＶＡ）。
【０２２９】
基礎ＤＡレベルと同様に、透析物におけるＤＯＰＡＣおよびＨＶＡの基礎レベルは６１２±１４および３６９±７ｎＭ（ｎ＝２２ラット）であり、安定であった（それぞれＦ３，５７＝１．０６、Ｆ３，５７＝０．８４；各場合にｐ＞０．０５）。基礎ＤＯＰＡＣおよびＨＶＡレベルにおけるＵＭＰ処理の作用はなかった（対照対ＵＭＰ−１週間対ＵＭＰ−６週間；それぞれＦ２，１９＝０．２７、Ｆ２，１９＝０．０３；各場合にｐ＞０．０５）。
【０２３０】
［結果］
脳での神経伝達物質放出における経口投与ウリジン代謝産物の作用を評価するために、制限環境に維持した高齢ラットが、１週間または６週間にわたって、対照食餌または２．５％ＵＭＰを補充した食餌を摂取した。ＵＭＰ補充は、処理グループ間において、透析物における基礎ＤＡレベルに影響を与えなかった（対照対ＵＭＰ−１週間対ＵＭＰ−６週間；Ｆ２，１９＝０．２８）。透析物におけるＤＡ濃度は１０．２±０．４ｎＭ（ｎ＝２２ラット）であった。
【０２３１】
Ｋ＋誘発線条体ＤＡ放出（高Ｋ＋溶液での灌流後）における、食餌ＵＭＰ補充の作用を、図１０Ａに示す。統計的に有意な差異（Ｆ２，２６６＝３．３６）が、対照、ＵＭＰ−１週間およびＵＭＰ−６週間処理グループにおける透析物のＤＡレベルに見られた。ｐｏｓｔ  ｈｏｃ多重比較は、対照およびＵＭＰ６週間のグループにおける有意な差異を示した。データをさらに３セクションに分け（前、Ｋ＋誘発、および後）、これも、対照およびＵＭＰ−６週間のグループにおいて、２８３±９％〜３４１±２１％のＫ＋誘発ＤＡ放出の有意な促進を示した（図１０Ｂ）。ＵＭＰ−１週間のグループも、対照グループと比較して増加したＤＡ放出（３１６±１５％）を示したが、この増加は有意でなかった。
【０２３２】
さらに、食餌ＵＭＰが、線条体におけるニューロンからの神経伝達物質アセチルコリンの基礎放出を増加させることも示された（図１１）。
【０２３３】
これらの結果は、以下のことを示している。（ａ）例えばＣＤＰ−コリンの投与によって、血漿ウリジンレベルを増加させることが、脳における神経伝達物質放出を向上させ、（ｂ）脳機能の増強が、多種現象であって、ジャービルに限定されず、（ｃ）脳機能の増強が、加齢障害性認知機能不全の生物学的関連動物モデルにおいて生じる。
【０２３４】
従って、例えばＣＤＰ−コリンの投与によって、血漿ウリジンレベルを増加させることが、神経伝達物質放出および脳機能を向上させる。
【実施例７】
【０２３５】
［ＵＴＰ投与は、高齢ラットの脳において、ＮＦ−７０およびＮＦ−Ｍのレベルを増加させる］
［材料および実験方法］
［データ分析］
データは、各グループについて、６〜１６測定したＵＭＰ処理に従って示した（平均値±Ｓ．Ｅ．Ｍ）。一元配置ＡＮＯＶＡおよびＴｕｒｋｅｙ’ｓ  ＨＳＤ  ｐｏｓｔ  ｈｏｃ試験を使用して、処理間の差異を比較した。Ｎｅｗｍａｎ−Ｋｅｕｌｓ多重範囲試験を、図１３のデータに使用した。
【０２３６】
［ウエスタンブロッティング］
２００μＬ溶解緩衝液（６０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、４％ＳＤＳ、２０％グリセロール、１ｍＭ  ジチオトレイトール、１ｍＭ  ＡＥＢＳＦ、８μＭアプロチニン、５００μＭベスタチン、１５μＭ  Ｅ６４、２００μＭロイペプチン、１０μＭペプスタチンＡ）を含有するエッペンドルフ管に、線条体組織を入れた。試料を音波処理し、沸騰させ（１０分間）、遠心分離した（１４，０００ｇ、室温で１分間）。上澄み液を無菌管に移し、ビシンコニニック酸アッセイ（Ｓｉｇｍａ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）を使用して、全タンパク質含有量を測定した。
【０２３７】
等量のタンパク質（４０μｇタンパク質／レーン）を、ドデシル硫酸ナトリウム−ポリアクリルアミドゲル電気泳動（４〜１５％  ＳＤＳ  ＰＡＧＥ；Ｂｉｏ−Ｒａｄ，Ｈｅｒｃｕｌｅｓ，ＣＡ）のために装填した。ゲル電気泳動の前に、ブルモフェノールブルー溶液（０．０７％）を各試料に添加した。タンパク質を分離し、ポリビニリデンジフルオリド（ＰＶＤＦ）膜（Ｉｍｍｏｂｉｌｏｎ−Ｐ，Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）上に移し、５％ウシ血清アルブミン（Ｔｒｉｓ−緩衝生理食塩水／０．１５％  Ｔｗｅｅｎ  ２０）で１時間ブロックした。Ｔｒｉｓ−緩衝生理食塩水（ＴＢＳＴ）中における３回の１０分間洗浄後、ブロットを、ＴＢＳＴ中で、ＮＦ−７０、ＮＦ−Ｍ（それぞれ１：２０００、１：５０００、Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ，Ｌａ  Ｊｏｌｌａ，ＣＡ）を包含する関心対象のタンパク質に対する種々の抗体と共に、４℃で一晩、軌道シェーカー上で培養した。ＥＣＬシステム（Ａｍｅｒｓｈａｍ，Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，ＮＪ）およびＫｏｄａｋ  Ｘ−ＡＲフィルムをそれぞれ製造会社によって示されるように使用して、タンパク質−抗体複合体を検出し、可視化した。トランスペアレンシーアダプターを有するＳｕｐｅｒｖｉｓｔａ  Ｓ−１２スキャナー（ＵＭＡＸ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｆｒｅｅｍｏｎｔ，ＣＡ）を使用して、フィルムをデジタル化した。パブリックドメインＮＩＨイメージプログラム（ＮＩＨ  Ｖ．１．６１）を使用して、分析を行った。
【０２３８】
［結果］
ウリジンレベルを増加させることが、脳における新しい膜の生成、神経フィラメント−７０（ＮＦ−７０）および神経フィラメント−Ｍ（ＮＦ−Ｍ）のレベルを増強しうるかを評価するために、神経突起伸長の生物マーカーを、実施例６に記載した実験からのラットの脳において評価した。６週間のＵＭＰ食餌補充は、ＮＦ−７０（図１２Ａ）およびＮＦ−Ｍ（図１２Ｂ）のレベルを、それぞれ、対照値の１８２±２５％（Ｆ２，３１＝６．０１、ｐ＜０．０５）および２２１±３４％（Ｆ２，２１＝８．８６、ｐ＜０．０１）に有意に増加させた。１週間のＵＭＰ食餌の摂取は、これら２つのタンパク質のレベルを、対照群と比較して統計的有意に増加させなかった。線条体におけるＮＦ−７０およびＮＦ−Ｍのレベルは、それぞれ、対照値の２０４±３６％および２２１±３４％に増加した。
【実施例８】
【０２３９】
［ウリジンまたはＵＴＰ投与は、神経突起伸長、軸策分岐、ならびに神経突起細胞におけるＮＦ−７０およびＮＦ−Ｍレベルを増加させる］
［材料および実験方法］
［データ分析］
データは平均値±Ｓ．Ｅ．Ｍ．として示される。分散分析（ＡＮＯＶＡ）を使用して、グループ間の差異を求めた（有意レベル、ｐ＜０．０５）。差異が検出された場合、平均値をＮｅｗｍａｎ−Ｋｅｕｌｓ多重範囲試験によって分離した。
【０２４０】
［神経突起伸長試験］
１％ウシ胎児血清を含有するＭＥＭにおいて、ＰＣ１２細胞を、コラーゲン被覆６０ｍｍ培養皿で低密度平板培養した。実験グループは以下の通りであった。ウリジン、ウリジントリホスフェート、シチジン、リアクティブブルー２、スラミンおよびＰＰＡＤＳ（Ｓｉｇｍａ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）。全ての処理を、平板培養から２４時間後に行った。処理期間の終りに、ＯｐｅｎＬａｂソフトウエアを使用して、位相差Ｚｅｉｓｓ  Ａｘｉｏｐｌａｎ  ２顕微鏡で画像を得た。各皿について６デジタル画像を捕捉し、処理グループごとに合計１８〜２４画像であった。各実験における各処理グループについて、約３００細胞を定量化した。実験を三重に行った。神経突起伸長および神経突起長さを包含する神経突起の定量化を、実験グループを知らされていない１人以上の研究者によって行った。神経突起長さは、パブリックドメインＮＩＨソフトウエア「Ｉｍａｇｅ  Ｊ」を使用して測定した。細胞体の直径より長い突起を、神経突起として計数した。突起を有する細胞だけを分析した。
【０２４１】
［細胞内ＵＴＰおよびＣＴＰの検出］
細胞内ＵＴＰおよびＣＴＰのレベルを、実施例５に記載のようにＨＰＣＬによって分析し、但し、５ｍＭ  ＮａＨ２ＰＯ４、ｐＨ２．６５を緩衝剤Ａとして使用した。
【０２４２】
［結果］
次に、ＮＧＦ−誘発神経突起伸長における、ウリジン処理（１０〜２００μＭ）の作用を試験した。ＮＧＦの不存在下において、ＰＣ１２細胞は神経突起を発生させなかった（１％未満）。ＮＧＦの不存在におけるウリジン処理（５０μＭ、２または４日間）は、神経突起を発生させなかった。ＮＧＦの存在において、ウリジン（５０〜２００μＭ）は、４日間の処理後に細胞当たりの神経突起の数を有意に（ｐ＜０．０１または０．００１）増加させた（図１３Ａ〜Ｃ）が、２日間の処理または低ウリジン濃度（１０、２５μＭ）は、作用を有さなかった。ＮＧＦ暴露細胞のシチジンでの処理も、神経突起伸長に作用を有さなかった。
【０２４３】
ウリジンは、細胞当たりの細胞突起の数を増加させたので、ＮＧＦの存在下の神経突起伸長および長さにおけるウリジンの作用も評価した。ウリジン（５０μＭ）およびＮＧＦでの処理の４日後に、細胞当たりの神経突起伸長点の数が、ＮＧＦだけで処理した細胞と比較して、有意に（ｐ＜０．０１）増加した（図１３Ｄ）。ウリジンは、ＮＧＦ分化細胞において、平均神経突起長さに有意に作用しなかった。
【０２４４】
神経フィラメントタンパク質は、神経突起内に極めて豊富であり、従って、神経突起数の増加は、神経フィラメントタンパク質の発現増加に関連しているはずである。従って、ＮＧＦ単独、またはＮＧＦおよびウリジン（５０μＭ）でのＰＣ１２細胞の４日間の処理後の、ＮＦ−７０（７０ｋＤ）およびＮＦ−Ｍ（１４５ｋＤ）レベルを測定した（図１３Ｅ）。ウリジン処理後に、ＮＦ−７０およびＮＦ−Ｍ発現の両方が、ＮＧＦのみで処理された細胞と比較して、有意に（それぞれ、ｐ＜０．０１、ｐ＜０．００１）増加した。ＮＧＦの不存在下において、ウリジン処理はいずれの神経フィラメントタンパク質のレベルにも作用しなかった。このように、ウリジンはＰＣ１２細胞における神経突起伸長を増強する。
【０２４５】
ＮＧＦの不存在下において、外因性ウリジンの添加は、ＰＣ１２細胞において、細胞内ＵＴＰおよびＣＤＰ−コリンレベルを増加させる（実施例５）。ＮＧＦの存在下にウリジンがＵＴＰまたはＣＴＰレベルに作用するかどうかを確認するために、ＰＣ１２細胞においてＮＧＦを用いて２日間にわたってＵＴＰおよびＣＴＰのレベルを測定し、ＮＧＦの存在下に、無ヌクレオチド（対照）、ウリジン、シチジンまたはＵＴＰで処理した。ウリジン（５０μＭ）は、ＮＧＦ処理だけを受けた細胞と比較して、ＵＴＰおよびＣＴＰレベルの両方（それぞれ、図１４Ａ、Ｂ参照）を有意に（ｐ＜０．０５）増加させた。ＵＴＰ（１００μＭ）またはシチジン（５０μＭ）は、いずれのヌクレオチドの細胞内レベルにも有意に作用しなかった。
【０２４６】
ＵＴＰが神経突起伸長におけるウリジンの作用を媒介するかどうかを確認するために、ＰＣ１２細胞をＮＧＦおよび種々の用量のＵＴＰで処理した。処理の４日後、ＵＴＰ  （１０および５０μＭ）は、ＮＧＦだけで処理した細胞と比較して、有意に（ｐ＜０．０１）神経突起伸長を増強した（図１５）。このように、ウリジンまたはＵＴＰのいずれかが神経突起伸長を増強する。
【０２４７】
要するに、ウリジンまたはＵＴＰ食餌補充は、ラット脳において、２つの主要神経フィラメントタンパク質のレベルを増加させ、ＰＣ１２細胞において神経突起伸長を誘発することが直接的に示された。このように、例えばＣＤＰ−コリンの投与によって、血漿ウリジンレベルを増加させることは、神経突起伸長を誘発する。
【実施例９】
【０２４８】
ＮＧＦ−分化ＰＣ１２細胞は、ピリミジン感受性Ｐ２Ｙ２、Ｐ２Ｙ４およびＰ２Ｙ６受容体を発現する
［材料および実験方法］
［Ｐ２Ｙ受容体の検出］
ウエスタンブロットは、ウサギ抗−Ｐ２Ｙ２、抗−Ｐ２Ｙ４（両方ともＣａｌｂｉｏｃｈｅｍより）、またはウサギ抗−Ｐ２Ｙ６（Ｎｏｖｕｓ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ，Ｌｉｔｔｌｅｔｏｎ，ＣＯ）を使用した。
【０２４９】
［免疫細胞学］
ＰＣ１２細胞を、コラーゲンで被覆した１２ｍｍガラスカバースリップ（Ａ．Ｄａｉｇｇｅｒ  ＆  Ｃｏ．，Ｖｅｒｎｏｎ  Ｈｉｌｌｓ，ＩＬ）上でそれらを増殖させたこと以外は、前記のように処理した。免疫蛍光法を使用して、タンパク質を可視化した。簡単に言えば、細胞を、４％パラホルムアルデヒドで固定し、０．２５％  Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００で透過化処理し、１０％健常ヤギ血清でブロックし、適切な抗体（マウス抗−ＮＦ−７０、およびウサギ抗−Ｐ２Ｙ２、ウサギ抗−Ｐ２Ｙ４またはウサギ抗−Ｐ２Ｙ６）中で一晩にわたって培養した。Ｐ２Ｙ２およびＰ２Ｙ４可視化のために、対照培養物を、一次抗体および対照抗原と共に培養して、免疫染色が特異性であることを確実にした。Ｐ２Ｙ６受容体については、対照抗原が入手できなかった。次に、細胞を、蛍光色素接合二次抗体中で１時間培養し（ヤギ抗−ウサギＡＬＥＸＡ  ４８８およびヤギ抗−マウスＡＬＥＸＡ  ５６８；Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ，Ｅｕｇｅｎｅ，ＯＲ）、ＤＡＰＩ（Ｖｅｃｔｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｂｕｒｌｉｎｇａｍｅ，ＣＡ）を用いるか用いずに、封入剤を用いてガラススライドに載せた。一次抗体を与えた対照抗原を使用して、免疫染色が特異性であることを確実にした。Ｚｅｉｓｓ  Ｐｌａｎ−Ｎｅｏｆｌｕｏｒ  ４０ｘ油浸対物レンズを用いて、ＯｐｅｎＬａｂソフトウエアを使用するＺｅｉｓｓ（Ｏｂｅｒｋｏｃｈｅｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）Ａｘｉｏｐｌａｎ顕微鏡でデジタル画像を得た。
【０２５０】
［結果］
ＵＴＰは、Ｐ２Ｙ受容体、即ちＰ２Ｙ２、Ｐ２Ｙ４およびＰ２Ｙ６受容体の、ピリミジン活性化種のアゴニストである。細胞外ＵＴＰが神経突起伸長に作用するメカニズムに、これらの受容体が関与しているかどうかを確認するために、受容体がＰＣ１２細胞において発現されるかどうか、およびＮＧＦへの暴露がそれらの発現を変更させるかどうかを先ず確認し、ＰＣ１２細胞を０〜７日間にわたってＮＧＦで処理し、受容体のレベルを測定した。３日間のＮＧＦ処理後、Ｐ２Ｙ２受容体の発現が最大レベルに達し、それは３日未満のＮＧＦ処理で観測されたレベルより有意に（ｐ＜０．００１）高かった（図１６Ａ）。Ｐ２Ｙ２、ならびにＰ２Ｙ４およびＰ２Ｙ６受容体の発現および局在を可視化するために、細胞を、ＮＧＦの存在または不存在下に４日間にわたって増殖させ、次に、神経突起マーカーＮＦ−７０、およびＰ２Ｙ２、Ｐ２Ｙ４またはＰ２Ｙ６（ぞれぞれ、図１６Ｂ、左〜右）について、それらを免疫染色した。３つの全ての受容体が、ＮＧＦ−分化ＰＣ１２細胞において高度に発現された。さらに、Ｐ２Ｙ２は、ニューロンマーカーＭＡＰ−２と共局存していた。ＮＧＦの不存在下において、受容体タンパク質発現は、免疫染色によって検出されなかった。さらに、ウリジンの存在は、ＮＧＦだけに暴露された細胞に存在する量と比較して、受容体の発現に作用しなかった。従って、Ｐ２Ｙ２、Ｐ２Ｙ４およびＰ２Ｙ６受容体は、神経細胞に存在するが、それらの前駆物質に存在しない。
【実施例１０】
【０２５１】
［Ｐ２Ｙ受容体のアンタゴニストは、ＮＧＦ誘発神経突起伸長におけるウリジンの作用を阻害する］
Ｐ２Ｙ受容体によるシグナル伝達が、ウリジンによる神経突起伸長の誘発を媒介するかどうかを確認するために、ＰＣ１２細胞を、ＮＧＦ、ウリジン（１００μＭ）およびＰ２Ｙ受容体アンタゴニストスラミン（３０μＭ）、ピリドキサル−ホスフェート−６−アゾフェニル−２’，４’二スルホン酸（ＰＰＡＤＳ；３０μＭ）およびリアクティブブルー２（ＲＢ−２；１０μＭ）と共に、４日間にわたって培養した。各アンタゴニストは、ＮＧＦ刺激神経突起伸長のウリジン強化を、有意に（ｐ＜０．０５または０．００１）ブロックした（図１７）。Ｐ２Ｙ受容体アンタゴニストはどれも、ＰＣ１２細胞へのウリジンの取込みを阻害しなかった。これらの結果は、使用した条件下に、Ｐ２Ｙ受容体を経たシグナル伝達が、神経突起伸長のウリジン誘発を媒介することを示している。従って、例えばＣＤＰ−コリンの投与によって、血漿ウリジンレベルを増加させることは、Ｐ２Ｙ受容体の刺激による神経突起伸長を誘発する。
【実施例１１】
【０２５２】
［ホスファチジルイノシトール（ＩＰ）シグナル伝達は、ＵＴＰおよびウリジンによって刺激される］
［材料および実験方法］
［代謝標識およびＰＩ代謝回転分析］
ＰＩ代謝回転の分析を、Ｎｉｔｓｃｈ  ＲＭ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ  Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ  ６９：７０４−１２，１９９７に記載されているように行った。簡単に言えば、細胞を無血清ＭＥＭ中の１．２５  ｍｉｃｒｏＣｕｒｉｅ（μＣｉ）／皿のミオ−［２−３Ｈ］イノシトール（１７．０Ｃｕｒｉｅ／ｍｍｏｌ；Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）で３６時間にわたって代謝的に標識し、ハンクス平衡塩類溶液（ＨＢＳＳ）で２回洗浄し、ＨＢＳＳ中の１０ｍＭの塩化リチウムで１５分間処理した。薬剤を１０ｍＭリチウムの存在下に３７℃で６０分間にわたって添加した。細胞を氷冷メタノールで溶解し、脂質をクロロホルム／メタノール／水（容量により２：２：１）での抽出によって除去した。ＡＧ  １−Ｘ８カラム（Ｂｉｏ−Ｒａｄ）ならびに溶離剤としての１Ｍギ酸アンモニウムおよび０．１Ｍギ酸を使用するイオン交換クロマトグラフィーによって、標識された水溶性イノシトールホスフェートを、遊離［３Ｈ］イノシトールから分離した。放射能を、液体シンチレーションスペクトロメトリによって定量化した。
【０２５３】
［結果］
Ｐ２Ｙ２、Ｐ２Ｙ４およびＰ２Ｙ６受容体は、ホスホリパーゼＣ／ジアシルグリセロール／イノシトールトリホスフェート（ＰＬＣ／ＤＡＧ／ＩＰ３）シグナル伝達経路を活性化する。神経突起伸長を促進するウリジンまたはＵＴＰの濃度が、これらの受容体を活性化するかどうかを確認するために、ＮＧＦ分化ＰＣ１２細胞を、［３Ｈ］−イノシトール（５０μＭ）またはＵＴＰ（１０、１００μＭ）で１時間標識し、ＩＰシグナル伝達を、放射標識ＩＰの代謝回転を測定することによって評価した（図１８）。ＩＰの形成は、１００μＭ  ＵＴＰ（ｐ＜０．０５）の添加によって、および５０μＭウリジン（ｐ＜０．０１）によって、有意に増加した。Ｐ２Ｙ受容体アンタゴニストＰＰＡＤＳ（１００μＭ）は、ＵＴＰによるＩＰシグナル伝達の刺激を、有意に（ｐ＜０．０５）ブロックした。これらの結果は、ＵＴＰが、ＩＰシグナル伝達経路のＰ２Ｙ受容体媒介刺激によって、神経突起伸長を促進することを示している。
【０２５４】
実施例９〜１１の結果は、増加する血清ウリジンレベルが神経突起伸長を刺激するメカニズム（即ち、Ｐ２Ｙ受容体の活性化による）を示す。Ｐ２Ｙ受容体の作用の少なくとも一部が、ＩＰシグナル伝達によって媒介される。全般的に、実施例６〜１１からわかったことは、血清ウリジンレベルを増加させることが、下記の多重メカニズムにより神経伝達を促進することによって認知機能および知力を向上させることのさらなる根拠となる。（１）神経伝達物質放出を促進する。（２）ＣＴＰを介して、膜ホスファチドの前駆物質として作用する。（３）ＵＴＰを介して、Ｐ２Ｙ受容体結合細胞内シグナル伝達経路を活性化する。他の実施形態において、メカニズム（２）および（３）が共に作用して、神経突起形成を増加させる。
【実施例１２】
【０２５５】
［ＵＭＰ補充食餌は、多種属において、学習および記憶を強化する］
［材料および実験方法］
［モリス水迷路］
高齢ラット（１８ヵ月、５００ｇ）に、対照食餌、または２．５％  ＵＭＰ含有食餌を、６週間与えた。次に、それらに、プールの４つの各四分円のどこかに順に配置した直径６フィートの水プール中の隠れたプラットホームを示し、泳ぐことによってプラットホームに移る各試行に９０秒を与え、泳ぎ時間「平均逃避潜伏時間」を記録した。４試行１セットを、４日連続で毎日繰り返した。プラットホームを毎日同じ場所に置いた。モリス水迷路として公知のこの試験は、空間記憶の指標である。
【０２５６】
［固形飼料学習分析］
対照またはＵＭＰ含有固形飼料（０、０．１、０．５または２．５％）を３週間にわたって自由に与えた雄の若い成長ジャービルを、ラジアルアーム迷路（各末端に小さい固形飼料を入れた４つの枝を有する中央室から成る）で試験した。試験の前に、動物を一晩絶食させ、次に、各動物を中央室に入れ、全ての固形飼料を見出すために１８０秒までを与えた。固形飼料を見出すのに要する時間が短いほど、向上した学習および空間記憶を示す。
【０２５７】
［作業記憶および参照記憶分析］
対照または０．１％  ＵＭＰ食餌を４週間与え、前記の全固形飼料を見出すことができるように訓練した１０匹のジャービルのグループを改変試験に付し、該改変試験において、迷路の２つのアームだけ（但し、常に同じ２つのアーム）が固形飼料報酬を有していた。この試験において、作業記憶誤りは、ジャービルがその日に固形飼料を既に取ったアームに再訪したという誤りである。参照記憶誤りは、ジャービルが固形飼料を有していなかった（改変試験中）アームに入ったという誤りである。
【０２５８】
［結果］
前記の実施例は、血清ウリジンレベルを増加させることが、いくつかの方法で機能する神経細胞の能力を向上させることを示した。この実施例は、ウリジンが認知機能および知力を増強させることを直接的に示す。高齢ラット（１８ヵ月、５００ｇ）に、対照食餌または２．５％  ＵＭＰ・２Ｎａ＋を含有する食餌を６週間与え、それらの記憶をモリス水迷路（空間記憶の指標）で試験した。ＵＭＰ・２Ｎａ＋強化食餌を与えたラットは、プラットホームの位置に到達するのに要する時間の、統計的に有意な減少を示し（図１９）、血清ウリジンレベルを増加させることによって空間記憶が強化されることを示している。
【０２５９】
学習および空間記憶における、血清ウリジンレベルの増加の作用も、ジャービルにおいて試験した。対照またはＵＭＰ含有飼料（０、０．１、０．５または２．５％）を３週間にわたって自由に与えた雄の若い成体ジャービルを、ラジアルアーム迷路（各末端に小さい固形飼料を入れた４つの枝を有する中央室から成る）で試験した。試験の前に、動物を一晩絶食させ、次に、各動物を中央室に入れ、全ての固形飼料を見出すために１８０秒間までを与えた。固形飼料を見出すのに要する時間を減少させるには、空間学習を必要とする。ＵＭＰ補充食餌は、ジャービルが固形飼料を見出すのに要する時間を用量依存的に減少させた（図２０）。
【０２６０】
さらに、作業記憶および参照記憶における、血清ウリジンレベルの増加の作用も試験した。対照または０．１％  ＵＭＰ食餌を４週間与え、前記の全固形飼料を見出すことができるように訓練したジャービルを、作業記憶および参照記憶を測定する改変試験に付した。ＵＭＰ補充食餌を与えたジャービルは、作業記憶誤り（図２１Ａ）および参照記憶誤り（Ｂ）の両方の減少した数を示した。
【０２６１】
これらの結果は、以下のことを直接的に示している。（ａ）血清ウリジンレベルの増加は、学習および種々のタイプ（空間、作業および参照）の記憶を向上させ、（ｂ）その作用は、特定の種属に限定されず、（ｃ）その作用は、加齢障害性認知機能および知力の生物学的関連モデルにおいて明示される。従って、血漿ウリジンレベルを増加させる組成物、例えばＣＤＰ−コリンは、学習および記憶を向上させる。
【０２６２】
要約すれば、本明細書に示した結果は、血清ウリジンレベルを増加させることが、神経学的シグナル伝達、神経細胞解剖学的構造、認知記憶および知力に、正の作用をすることを示している。このような結果は、ウリジンがその作用を発揮するいくつかのメカニズムも示している。
【実施例１３】
【０２６３】
［コリンは神経伝達物質放出を増加させる］
［材料および実験方法］
［脳薄片調製］
雄スプレイグ・ドーリーラット（９〜１１ヵ月齢）に、ケタミン（８５ｍｇ／ｋｇ体重、筋肉内）で麻酔し、低温室において４℃で断頭した。すぐに脳を除去し、１ｍＭ  ケタミンおよび１５μｇ／ｍＬ  エセリンを含有する冷却（４℃）酸素化クレブス緩衝液（１１９．５ｍＭ  ＮａＣｌ、３．３ｍＭ  ＫＣｌ、１．３ｍＭ  ＣａＣｌ２、１．２ｍＭ  ＭｇＳＯ４、２５ｍＭ  ＮａＨＣＯ３、１．２ｍＭ  ＫＨ２ＰＯ４、１１ｍＭグルコースおよび０．０３ｍＭ  ＥＤＴＡ、ｐＨ７．４）に入れた。残留する髄膜および脈絡叢を除去した後、すぐに、線条体、海馬および皮質の３０μｍ薄片を、マッキルウェイン（ＭｃＩｌｌｗａｉｎ）組織細断機で調製し、３回洗浄し、特注の灌流室（Ｗａｒｎｅｒ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ，Ｈａｍｄｅｎ，ＣＴ）に入れた。
【０２６４】
［灌流および電気刺激］
前記の酸素化クレブス／ケタミン／エセリン緩衝液を用いて０．８ｍＬ／分の流量で室を灌流することによって、薄片を３７℃で６０分間平衡させた。灌流室は、電気刺激装置（モデルＳ８８；Ｇｒａｓｓ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）に連結された２つの反対シルバーマッシュ（ｓｉｌｖｅｒ  ｍａｓｈ）電極を有していた。注文製の転極装置（ｐｏｌａｒｉｔｙ  ｒｅｖｅｒｓａｌ  ｄｅｖｉｃｅ）を用いて、室分極を防ぎ、かつ各パルスの開始後５０マイクロ秒で電流および電圧の両方を監視して、均一室抵抗を確実にした。平衡時間後に、２０μＭ  コリン、２５μＭシチジンおよび／または２５μＭウリジンの存在または不存在下において、薄片を、クレブス／ケタミン／エセリン緩衝液の高Ｋ＋（５２ｍＭ）バージョンでの灌流によって脱分極した。灌流液を、全２時間にわたって収集し、アセチルコリンに関して分析した。数値を、薄片のタンパク質含有量に関して標準化した。
【０２６５】
［結果］
アセチルコリン放出におけるコリンの作用を調べるために、線条体、海馬および皮質の薄片（ｎ＝８）を、コリンの存在または不存在下において培養し、次に、脱分極し、アセチルコリン放出を測定した。いくつかのグループにおいて、シチジンまたはウリジンも添加した。コリンはアセチルコリンの放出を増加させた（図２２）。
【０２６６】
これらの結果は、ニューロンを繰り返し刺激してアセチルコリンを放出する場合に、コリンが、膜リン脂質（例えばＰＣ）におけるコリンの蓄積を補充することによって、放出される神経伝達物質の量を増加させることを示している。前記の実施例は、ウリジンがＣＤＰ−コリンの合成を増強し、次に、それを使用して新しいＰＣを合成することを示している。従って、新しいリン脂質を合成し、それによって神経伝達物質を繰り返し放出するニューロンの能力が、ＣＤＰ−コリンによって特に増加される。
【０２６７】
このように、ＣＤＰ−コリンの投与は、以下の２つの別のメカニズムによって、神経学的シグナル伝達、神経細胞解剖学的構造、認知記憶および知力に正の作用をする。（ａ）血清ウリジンレベルを増加させることによる、および（ｂ）コリン源として作用することによる。
【実施例１４】
【０２６８】
［ＵＭＰ投与は、ＥＣおよびＩＣラットにおいて、海馬依存性記憶処理を向上させる］
［材料および実験方法］
［動物］
動物を、標準環境条件（室温、２０〜２５℃；相対湿度、５５〜６０％；明暗時間割、１２／１２）に維持した。７匹の妊娠スプレイグ・ドーリーラット（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）を、出産前１週間に得た。生後２３日目に、雄の子を取り、小グループに分け、１週間順化させた。この際に、３２匹のラットを体重によって組合せ、ＩＣまたはＥＣ条件のいずれかに割り当てた。ＩＣラットの１つのサブグループ（ｎ＝８）およびＥＣラットの１つのサブグループ（ｎ＝８）に、対照実験食餌（Ｔｅｋｌａｄ  Ｇｌｏｂａｌ  １６％タンパク質げっ歯類食餌（Ｔｅｋｌａｄ  ｄｉｅｔ  ００２１７）、Ｈａｒｌａｎ  Ｔｅｋｌａｄ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）を与え、残りのサブグループ（それぞれｎ＝８）には、２００ｍｇ／ｋｇ／日のＵＭＰ−２Ｎａ＋または約１３２ｍｇ／ｋｇ／日のウリジンに対応するウリジン−５’−モノホスフェート二ナトリウム（０．１％  ＵＭＰ−２Ｎａ＋；Ｔｅｋｌａｄ  ｄｉｅｔ  ０３２７３）を補充したこの食餌を与えた。
【０２６９】
ラットを、金網蓋付きのプラスチックケージ（５２×３２×２０ｃｍ高さ）中の同じラックに入れた。敷料および水を定期的に交換し、動物の体重を週１回量り、その際に全身の健康評価を行った。動物が、固形飼料および水を自由に摂取しうるようにした。ＥＣラットは２〜３匹のグループで収容した。ＥＣケージに入れたプラスチック玩具（ブロック、ボール、ＰＶＣ管など）を週１回グループ間で交換し、新しい玩具を月１回導入した。ＥＣラットを、１日おきに４５分間にわたって「遊戯室」（１２×６ｆｔ；戸棚、机、椅子、箱および玩具を有する）に入れた。ＩＣラットは玩具なしで１匹ずつ収容し、週３回手で触って、取り扱う実験者に動物を馴らし、かつ次の行動訓練手順における恐れおよび不安を軽減した。外部刺激がない条件（栄養富化ラットに対する）による一般的体重増加を避けるために、実験者だけが存在する何もない４×６ｆｔ室で、ＩＣラットを１週間に３回、１５分間運動させた。
【０２７０】
週１回、動物の体重を量り、ＵＭＰ処理および非処理ラットが等量の餌を食べていることを確認した。ＵＭＰ補充群と対照群との間で平均体重の有意な違いは見出されず、これは、ＵＭＰで補充されているかそうでないかに関係なくラットが等量の餌を食べていることを示す。さらに、ＩＣラットは、生じうる体重増加（ＥＣラットに対する）を避けるために運動させたので、ＥＣ群とＩＣ群との間に体重の違いはなかった。
【０２７１】
［水迷路装置］
直径６ｆｔ（１８５ｃｍ）および高さ１．５ｆｔ（０．５５ｃｍ）の亜鉛めっき円形タンクを、２０ｃｍの深さまで水（２５℃±２℃）で満たし、いくつかの特別迷路目印（ｅｘｔｒａ−ｍａｚｅ  ｃｕｅｓ）を有する薄暗い照明の部屋に置いた。４つの出発位置（北、南、東、西）をタンクの外周部に一定の間隔で配置し、プールを４つの等しい四分円に分割した。水迷路の可視プラットホーム版のために、白いゴムボール（直径８ｃｍ）を、浸水プラットホームの上部に取り付け、水面より上に突き出させた。プラットホームは、水から逃避するためにボールに乗るための踏み段として使用できた。ビデオカメラを水迷路より上方に取り付け、このカメラは、ビデオ追跡ソフトウエアを有するコンピューターに連結されて、逃避潜伏時間（プラットホームに到達するまでの時間）、泳いだ距離（プラットホームを見つけるために泳いだ経路の長さ）、および水泳速度を自動的に記録した（ＨＶＳ  Ｉｍａｇｅ  Ｌｔｄ；Ｂｕｃｋｉｎｇｈａｍ，ＵＫ）。
【０２７２】
［行動手順］
行動訓練を、１０：００ＡＭ〜２．００ＰＭの間にブラインド的に実施した。ラットは、隠れたプラットホーム（水面下１．５ｃｍ）を探すための１日４試行（即ち水泳）から成る４日間の訓練を受け、該プラットホームは、各動物について試行を通して同じ位置（即ち、４つの四分円の１つ）に維持された。各試行において、動物を、４つの指定出発点（Ｎ、Ｓ、ＥおよびＷ）の１つにおいて、壁に面しているタンクに入れ、隠れたプラットホームに逃避させた。各出発点が１日に１回使用されるように、各試行において異なる出発点を使用した。動物が９０秒以内に逃避できなかった場合、実験者によってプラットホームに逃避するように手で誘導した。プラットホームに乗った後、ラットをプラットホームに２０秒間留まらせた。各試行後に、動物を迷路から出し、３０秒間の試行間間隔（ＩＴＩ）にわたって待機ケージ（ｈｏｌｄｉｎｇ  ｃａｇｅ）に入れた。逃避プラットホームに乗るまでの潜伏時間を、課題習得の測度として使用した。
【０２７３】
５日目に、ラットをプローブテストに付した。このために、プラットホームを除去し、以前にプラットホームを有していたプールの四分円において、探索するのに使った水泳経路および時間を６０秒間測定した。これは、空間記憶の保持の測度を与え、空間戦略が隠れプラットホーム訓練の間に使用されたかどうかを示す。
【０２７４】
［統計的分析（この実施例および次の実施例）］
結果を平均値±Ｓ．Ｅ．Ｍとして示す。データを、ＡＮＯＶＡ、次にフィッシャーＰＬＳＤによって、ｐｏｓｔ−ｈｏｃ比較に関して分析した。Ｐ＜０．０５の数値を有する差異は、有意とみなされた。
【０２７５】
［結果］
海馬依存性および／または認知記憶処理における、経口ＵＭＰ投与の作用を調べるために、ラットを豊富（ＥＣ）または貧困（ＩＣ）条件に３ヶ月間暴露し、各条件に暴露したラットに対照食餌またはＵＭＰ強化食餌を与え、次に、隠れプラットホーム水迷路課題を与えた。試行のブロックの有意な主作用によって立証されるように（ＡＮＯＶＡ分析；Ｐ＜０．００１）、全ラットの成績が、隠れプラットホーム水迷路課題における４日間の訓練期間中に向上した（図２３Ａ）。さらに、グループの主作用（Ｐ＜０．０１）、および有意グループ×食餌相互作用（Ｐ＜０．０５）も観測された。ＩＣ−ＵＭＰラットおよびいずれかの食餌で処理されたＥＣラットが、ＩＣ−ＣＯＮＴラット（対照食餌を与えられたＩＣラット）より有意に速く、課題を習得した（ｐｏｓｔ−ｈｏｃ分析；Ｐ＜０．０５）。さらに、ＵＭＰで処理したＥＣラットは、ＥＣ−ＣＯＮＴラットより速く課題を習得した（Ｐ＜０．０９）。このように、ＵＭＰでの慢性的食餌処理は、貧困環境条件によって生じる空間および／または認知記憶および知力における障害を防止し、健康被験動物において空間および／または認知記憶および知力を向上させる。
【０２７６】
さらに、プローブテストをラットに課した。全体的に、ラットは、プラットホームを初めに有していた四分円においてより多くの時間を費やし、これは、全動物が、隠れプラットホーム課題を習得するために空間能力をある程度使用したことを示す（図２３Ｂ）。ＩＣ−ＵＭＰおよび処理または非処理ＥＣラットは、６０秒のプローブテストの間に、正確な四分円において、ＩＣ−ＣＯＮＴラットより有意に長い時間を費やし（ＡＮＯＶＡ；ｐ＜０．０１）、これは、ＵＭＰでの慢性的食餌処理が、貧困環境条件によって生じる、空間および／または認知記憶および知力における障害を防止し、健康被験動物において空間および／または認知記憶および知力を向上させるという付加的根拠を与える。このように、血清ウリジンレベルを増加させる組成物、例えばＣＤＰ−コリンは、認知記憶および知力を向上させ、認知記憶および知力の加齢性低下を防止する。
【実施例１５】
【０２７７】
［ＵＭＰ投与は、ＥＣおよびＩＣラットにおいて、線条体依存性記憶処理を向上させない］
［材料および実験方法］
［可視水迷路課題］
４日間／１日４試行の空間訓練課題の終了から１週間後、前記の実施例からのラットに、１日４試行（即ち、水泳）から構成される４訓練期間を与えた。各試行において、動物を、４つの指定出発点（Ｎ、Ｓ、ＥおよびＷ）の１つにおいて、壁に面しているタンクに入れ、可視的に合図されたプラットホームに逃避しうるようにした。各出発点が各日に使用されるように、各試行において、異なる出発点を使用した。さらに、４つの各四分円が各日に１回プラットホームを有するように、可視逃避プラットホームを、各試行において、異なる四分円に入れた。動物が９０秒以内に逃避できなかった場合、実験者によってプラットホームに逃避するように手で誘導した。プラットホームに乗った後、ラットをプラットホームに２０秒間留まらせた。各試行後に、動物を迷路から出し、３０秒ＩＴＩにわたって待機ケージに入れた。
【０２７８】
［結果］
線条体依存性記憶処理における、経口ＵＭＰ投与の作用を調べるために、ラットを、先の実施例のように処理し、可視プラットホーム水迷路課題を与えた。図２４に示すように、試行のブロックの有意な主作用によって立証されるように（ＡＮＯＶＡ分析；Ｐ＜０．００１）、ラットの成績が４日間の訓練期間中に向上した。他の有意な主作用は観測されず、これは、環境およびＵＭＰ補充食餌が線条体に基づく（刺激−反応）記憶における作用をほとんどまたは全く有さないことを示す。
【実施例１６】
【０２７９】
［経口投与ＣＤＰ−コリンは、血中ウリジンレベルを増加させる］
対象に、３．３ｍｍｏｌ（ミリモル）ウリジンまたは３．２ｍｍｏｌシチジンをそれぞれ含有する経口ＵＭＰ（２０００ｍｇ）またはＣＤＰ−コリン（４０００ｍｇ）を投与した。ＵＭＰおよびＣＤＰ−コリン後に、血漿ウリジンピークが、それぞれ２４および１４ｍｃＭでピークに達し；曲線下面積の増加は、それぞれ３４５％および２０１％であった（図２５）。
【実施例１７】
【０２８０】
［ＰＵＦＡの投与は脳リン脂質レベルを増加させ、血漿ウリジンレベルの増加は付加的相乗増加を生じる］
［材料および実験方法］
［食餌］
対照標準食餌（表４）は、Ｔｅｋｌａｄ  Ｇｌｏｂａｌ  １６％タンパク質げっ歯類食餌（Ｈａｒｌａｎ  Ｔｅｋｌａｄ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）から成り、それは０．１％塩化コリン（ＣＣ）を含有し、５０ｍｇ／ｋｇ／日の日用量に相当した。ＵＭＰは、０．５％ＵＭＰ・２Ｎａ＋ｗ／ｗとして与え、対照食餌に添加され、これもＨａｒｌａｎ  Ｔｅｋｌａｄによって製造され、２４０ｍｇ／ｋｇ／日ＵＭＰに相当した。ＤＨＡは、２００マイクロリットル（ｍｃＬ）／日５％アラビアゴム溶液中の３００ｍｇ／ｋｇ／日として投与され、ＤＨＡを投与されないグループは賦形剤（５％アラビアゴム）だけを投与された。ＤＨＡは、Ｎｕ−Ｃｈｅｋ  Ｐｒｅｐ（Ｅｌｙｓｉａｎ，ＭＮ）によって供給され、ＵＭＰはＮｕｍｉｃｏ（Ｗａｇｅｎｉｇｅｎ，ＮＬ）によって供給された。どのグループも、実験期間中に体重の有意な変化を示さなかった。
【０２８１】
【表１】
2010502611.tif 000002
【０２８２】
［脳摘出］
ジャービルにケタミンおよびキシラジン（８０および１０ｍｇ／ｋｇ体重、腹腔内）で麻酔し、頭を液体窒素に２分間浸し、次に断頭することによって、犠牲にした。すぐに、かつ素早く（３０秒）、骨鉗子を用いて脳を除去し、−８０℃で保存した。
【０２８３】
［脳リン脂質測定］
凍結した脳半球の重さを量り、組織崩壊剤（Ｐｏｌｙｔｒｏｎ  ＰＴ  １０−３５，Ｋｉｎｅｍａｔｉｃａ  ＡＧ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）を用いて１００容量の氷冷脱イオン水中で均質化し、次に、実施例１に記載したように分析した。
【０２８４】
［ＤＮＡおよびタンパク質分析］
全脳ホモジネート試料中のタンパク質を、ビシンコニニック酸試薬（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ，Ｎｏｒｗａｌｋ，ＣＴ，ＵＳＡ）を用いて測定した。ＤＮＡは、Ｈｏｅｃｈｓｔ  Ｈ  ３３２５８（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｈｏｅｃｈｓｔ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）として公知の蛍光染料であるビスベンズイミダゾール（ｂｉｓｂｅｎｚｉｍｉｄｉｚｏｌｅ）の存在下に、蛍光計で試料の４６０ｎｍ発光を測定することによって測定し、該染料は、ＤＮＡに結合した際に３５６ｎｍにおける励起極大および４５８の発光極大を有する。
【０２８５】
［結果］
体重８０〜１００ｇの雄ジャービルを、８匹のジャービルの４つのグループに分け、表１に示されている栄養補助食品を投与した。
【０２８６】
【表２】
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【０２８７】
４週間後、動物を犠牲にし、小脳および脳幹を除いた脳の１半球を、総リン脂質、ならびにＰＣ、ホスファチジルエタノールアミン（ＰＥ）、スフィンゴミエリン（ＳＭ）、ホスファチジルイノシトール（ＰＩ）およびホスファチジルセリン（ＰＳ）の含有量について分析した。ω−３脂肪酸（ＤＨＡ）は、総リン脂質のレベルを、対照グループより有意に高いレベルに増加させた（図２６および表２および３）。ＤＨＡとＵＭＰの組合せは、相乗的な付加的増加（２６％）を生じた（即ち、ＤＨＡ（１２％）およびＵＭＰ（５％）グループで観測された増加の合計より大）。同様の結果が、個々のリン脂質でも観測された（表２および３）。リン脂質値をタンパク質（図２６Ａおよび表２）またはＤＮＡ（図２６Ｂおよび表３）の量に標準化したいずれの場合にも、統計的有意性が観測された。
【０２８８】
表２。ＤＨＡ、ＵＭＰ、または両方による処理の脳リン脂質レベルへの作用は、タンパク質レベルへ標準化した。データは平均±平均の標準誤差（ＳＥＭ）として表した。統計的分析には二元ＡＮＯＶＡおよびＴｕｋｅｙ試験を使用した。「＊」は、対照群に対してｐ＜０．０５；「＊＊」はｐ＜０．０１；「＊＊＊」はｐ＜０．００１を示す。
【０２８９】
【表３】
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【０２９０】
表３。ＤＨＡ、ＵＭＰ、または両方による処理の脳リン脂質レベルへの作用は、タンパク質レベルへ標準化した。統計的分析／データの表示は表２のとおりである。
【０２９１】
【表４】
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【０２９２】
これらの結果は、ω−３脂肪酸およびω−６脂肪酸の両方が、脳リン脂質合成および脳リン脂質レベル、総レベルおよび個々のリン脂質のレベルの両方を増加させることを示す。これらの結果は、血中ウリジンレベルを増加させるＰＵＦＡとＵＭＰとの組合せが、付加的相乗増加を生じることも示している。
【０２９３】
脳における細胞膜の大部分を構成する４つの構造リン脂質（４つのホスファチド、すなわちＰＣ、ＰＥ、ＰＳおよびスフィンゴミエリン）の比例的増加は、約２０％増加するこれら４つの化合物のそれぞれのレベルとほぼ等しかった。即ち、膜における４つの構造リン脂質の比率が維持された。従って、膜質量は、標準の膜構造および機能を損なわずに増加した。これらの結果は、本発明の組成物が、脳機能を向上させ強化することを示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【国際調査報告】
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