(57)【要約】  式（Ｉ）で表される新規なタラロゾール代謝物を単離・同定した。式中、ＲはＨ、ＯＨ、ＯＳＯ３Ｈ、またはＯ−ｇｌｙ；Ｒ１はＨ、ＯＨ、ＯＳＯ３Ｈ、Ｏ−ｇｌｙ、または＝Ｏ；ｇｌｙはグルクロン酸塩またはその薬学的に許容可能な塩である。本化合物は様々な皮膚、髪および爪関連疾患の治療に使用される。【化１】2010506953.tif 000016
2010506953.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式Ｉで表される化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【化１】
2010506953.tif 000014
（式中、ＲはＨ、ＯＨ、ＯＳＯ３Ｈ、またはＯ−ｇｌｙ；Ｒ１はＨ、ＯＨ、ＯＳＯ３Ｈ、Ｏ−ｇｌｙ、または＝Ｏ；ｇｌｙはグルクロン酸塩またはその薬学的に許容可能な塩である（ただし、ＲがＨのときＲ１はＨではない））
【請求項２】
下記化合物からなる群から選択される化合物またはその薬学的に許容可能な塩である、請求項１に記載の化合物。
【化２】
2010506953.tif 000015
【請求項３】
請求項１に記載の化合物と薬学的に許容可能なキャリアとを含む、医薬組成物。
【請求項４】
請求項２に記載の化合物と薬学的に許容可能なキャリアとを含む、医薬組成物。
【請求項５】
角質化関連疾患の治療方法であって、
当該治療を必要とする哺乳動物に対して、請求項１に記載の化合物を効果的な量投与するステップを含む、治療方法。
【請求項６】
角質化関連疾患の治療方法であって、
当該治療を必要とする哺乳動物に対して、請求項２に記載の化合物を効果的な量投与するステップを含む、治療方法。
【請求項７】
前記角質化関連疾患は皮膚、髪または爪の疾患である、請求項５または６に記載の治療方法。
【請求項８】
前記疾患は乾癬、ニキビ、光線性角化症、湿疹、酒さ、魚鱗癬、脱毛症または光損傷皮膚である、請求項７に記載の治療方法。
【請求項９】
基底細胞癌または扁平上皮細胞癌の治療方法であって、当該治療を必要とする哺乳動物に対して、請求項１に記載の化合物を効果的な量投与するステップを含む、治療方法。
【請求項１０】
基底細胞癌または扁平上皮細胞癌の治療方法であって、当該治療を必要とする哺乳動物に対して、請求項２に記載の化合物を効果的な量投与するステップを含む、治療方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、タラロゾール（旧称「ランバゾール（ｒａｍｂａｚｏｌｅ）」）の新規な代謝物に関する。本出願はまた、皮膚、髪および爪に関連する様々な疾患への前記代謝物の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
タラロゾール（（Ｒ）−Ｎ−［４−［２−エチル−１−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）ブチル］フェニル］−２−ベンゾチアゾラミン）（旧称「ランバゾール」）は、新規な光学的に純粋なレチノイン酸代謝ブロック剤（ＲＡＭＢＡ）である。前臨床のin vitro実験および動物実験では、乾癬、ニキビ、光損傷の治療にタラロゾールの塗布が効果的でありうることが実証されている。現在、中〜重度の乾癬、さらに潜在的にはニキビの治療を目的として、経口用タラロゾールが開発されている（例えば、特許文献１〜３を参照。当該特許文献はその全体を本明細書に援用する）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】米国特許第６，８３３，３７５号明細書
【特許文献２】米国特許第６，４８６，１８７号明細書
【特許文献３】米国特許第６，１２４，３３０号明細書
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21st ed. (Lippincott, Williams & Wilkins (2005))
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
有力な治療薬としてのタラロゾールの有望性に鑑みて、特定の動物種内におけるその代謝を調べたところ、新規な代謝物が単離・同定された。その中で特定の代謝物は治療薬、特には角質化に関連する疾患の治療薬として評価されるものであった。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明の一態様は、下記式（Ｉ）で表される新規に単離されたタラロゾール代謝物である。
【化１】
2010506953.tif 000003
（式中、ＲはＨ、ＯＨ、ＯＳＯ３Ｈ、またはＯ−ｇｌｙ；Ｒ１はＨ、ＯＨ、ＯＳＯ３Ｈ、Ｏ−ｇｌｙ、または＝Ｏ；ｇｌｙはグルクロン酸塩またはその薬学的に許容可能な塩である（ただし、ＲがＨのときＲ１はＨではない））
【０００７】
本発明の別の態様は、下記化合物からなる群から選択される化合物である。
【化２】
2010506953.tif 000004
【０００８】
本発明の更に別の態様は、温血哺乳動物における角質化関連疾患（皮膚、髪および爪に関連する疾患など）の治療方法であって、当該治療を必要とする哺乳動物に対して、式Ｉで表されるタラロゾール代謝物を効果的な量投与するステップを含む、治療方法である。
【０００９】
本発明の更に別の態様は、新規なタラロゾール代謝物と賦形剤またはキャリアとを含む、医薬組成物である。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】特定の動物種間における様々なタラロゾール代謝物の比較を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
本発明の代謝物の薬学的に許容される塩としては、無機もしくは有機の酸または塩基の付加により形成される、公知の無毒性の塩が含まれる。酸付加塩の例には、酢酸塩、アジピン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、クエン酸塩、樟脳酸塩、ドデシルスルホン酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、メタスルホン酸塩、硝酸塩、シュウ酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩が含まれるが、これらに限定されない。塩基性塩としては、アンモニウム塩、ナトリウム塩及びカリウム塩などのアルカリ金属塩、カルシウム塩およびマグネシウム塩などのアルカリ土類金属塩、ジシクロヘキシルアミン塩などの有機塩基の塩、アルギニンなどのアミノ酸の塩が含まれる。また、塩基性窒素含有基は、例えばハロゲン化アルキルにより四級化されてもよい。
【００１２】
化合物の水酸基がin vivoでグリコシル化されることは当該技術分野において周知である。特定の水酸基含有タラロゾール代謝物が存在することが、かかるプロセスが研究対象であるヒトを含む哺乳動物で起こっている証拠である。一例示実施形態において、グリコシドは、グルクロン酸と代謝物に存在する１以上の水酸基との反応により生成されるグルクロニドである。
【００１３】
本発明の医薬組成物は、キャリアの他に、安定化剤および保存剤を含んでもよい。当業者に公知な典型的なキャリア、安定化剤、およびアジュバンドの例は、非特許文献１に記載されている。
【００１４】
本発明の新規な代謝物は単独で投与されうるが、好ましくは、当該代謝物と少なくとも１つの薬学的に許容可能なキャリアとを含む医薬配合物として投与されうる。必要に応じて、当業者に公知の他の治療を本発明の代謝物の投与に組み合わせてもよい。１つの組成物に２種以上の代謝物を含有させてもよい。
【００１５】
本発明の代謝物は、細胞（角化細胞、繊維芽細胞、内皮細胞、脂腺細胞など）の増殖や分化、免疫機能（造血細胞など）に影響を及ぼしうる生物プロセス調節因子（modulator）であり、乾癬、ニキビ、光線性角化症、湿疹、酒さ、魚鱗癬、脱毛症、光損傷皮膚などの皮膚、髪および爪に関連する疾患の治療に使用されうる。さらに、本発明の代謝物は、前立腺癌、基底細胞癌、扁平上皮細胞癌、メラノーマなどの癌の治療に使用されうる。本発明は、ヒトを含む哺乳動物における角質化疾患の治療方法であって、本発明の化合物、或いは本発明の化合物を含む若しくは本発明の化合物からなる医薬組成物を、前記哺乳動物に対して、他の薬剤を添加せずに、角化細胞などの表皮細胞のＩＰ−１０依存性異常増殖を阻害または抑制するのに効果的な量投与するステップを含む治療方法を含む。本方法の一実施形態では、前記異常細胞増殖は、基底細胞癌、扁平上皮細胞癌などの癌の一種であるが、これらに限定されない。他の実施形態において、前記異常細胞増殖はメラノーマの一種である。
【００１６】
「効果的な量」とは、有益なまたは所望の結果を奏するのに十分な量のことをいう。例えば、治療量は所望の治療効果を達成する量である。一例示実施形態において、一日あたりの投与量は約０．００５〜約５ｍｇ／ｋｇの範囲で変化しうる。かかる投与量は、病気や病気の症状の発現の防止に必要な量である「予防上の効果的な量」と同一でも異なってもよい。「効果的な量」は単回または複数回の投与、塗布または服用で達成されうる。
【００１７】
最も効果的な投与法および投与量を決定する方法は当業者に周知であり、治療に使用する組成物、治療目的、治療対象の細胞、治療対象によって異なる。処置を施す医師が決定した投与量及びパターンで、単回投与または複数回投与することができる。
【００１８】
一例示実施形態において、本発明の代謝物の投与対象は温血哺乳動物であり、ヒトであることが好ましい。
【００１９】
本発明の代謝物を含む医薬組成物は、任意の好適な経路で投与することでき、例えば、経口投与、直腸投与、局所投与（経皮投与、エアロゾール投与、口腔投与、舌下投与など）、非経口投与（皮下投与、筋肉投与、静脈投与など）、腹腔内投与、肺内投与で投与することができる。好ましい投与経路は、投与対象の状態や年齢、および治療対象の疾患により異なることが理解されよう。
【実施例】
【００２０】
マウス、ラット、イヌおよびヒトを対象にタラロゾールの安全性評価を行った。より詳しくは、マウス、ラットおよびヒトにおいて１４Ｃ標識タラロゾール経口投与後の体内動態を調査し、タラロゾールの吸収、代謝および排泄に関する情報を得た。
【００２１】
［実施例１］
（タラロゾール代謝物の分析）
雄および雌のＣＤ−１マウス（体重：１９〜２９ｇ、血液採取用：ｎ＝３／性別／タイムポイント、体重バランス用：ｎ＝３／性別）、Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット（体重：０．２０５〜０．２３７ｋｇ、血液採取用：ｎ＝３／性別／タイムポイント、体重バランス用：ｎ＝３／性別）、ビーグル犬（体重：７〜１２ｋｇ、ｎ＝３）に対して、２０％ヒドロキシルプロピルＢ−シクロデキストリンに溶解した１４Ｃ標識タラロゾールを５ｍｇ／ｋｇの用量で、単回経口投与した。健康な男性ボランティア（体重：７６．６〜１０７．９ｋｇ、ｎ＝５）に対して、エタノールに溶解した１４Ｃ標識タラロゾール４ｍｇを単回経口投与した。
【００２２】
投与後、特定のタイムポイントにおいて血液を回収し、血漿を調製した。マウス、ラット、およびビーグル犬の尿および糞を、２日間、７日間、および８日間それぞれ採取した。ヒトの場合は、投与後２８８時間までのサンプルを採取し、また、投与後２時間および４時間に精液サンプルを採取した。
【００２３】
様々な基質における放射能を液体シンチレーション計測（ＬＳＣ）により測定した。特定の血漿サンプル、尿サンプル、糞サンプルについて、代謝物放射能プロファイリングと特性評価(characterization）を行った。ヒトの実験では、精液サンプルについて行った。代謝物放射能プロファイリングは、分取ＨＰＬＣの後、固体シンチレーション計測（Ｐａｃｋａｒｄ  ＴｏｐＣｏｕｎｔ）により行った。放射能ピークを積分して、各サンプルにおける個々の代謝物の分布率（％）を求めた。代謝物の特性評価および同定は、適切な放射能モニタ（ＲＡＭ）と連結させたＬＣ／ＭＳ（Ｆｉｎｎｉｇａｎ  ＭＡＴ  ＬＣＱ、ポジティブまたはネガティブＥＳＩモード）により行った。
【００２４】
動物種ごとに尿サンプルおよび糞サンプルをプールして分析を行った。血漿の分析は、投与後２４時間までの数カ所のタイムポイントのサンプルについて行った。尿の分析は、単一期間（マウス：０〜２４時間、ラット：０〜４８時間、イヌ：０〜７２時間）について行い、ヒトの場合は０〜１２時間、１２〜２４時間、２４〜４８時間、０〜４８時間の期間について行った。また、糞の分析は２〜３期間（マウスおよびラット：０〜２４時間、２４〜４８時間、雄のイヌ：０〜２４時間、２４〜４８時間、４８〜７２時間、雌のイヌ：２４〜４８時間、４８〜７２時間、７２〜９６時間）について行った、ヒトの場合、糞の分析は０〜４８時間、４８〜９６時間、９６〜１４４時間、１４４〜１９２時間、１９２〜２８８時間、０〜１４４時間、１４４〜２８８時間、０〜２８８時間の期間について行った。
【００２５】
１４Ｃ標識タラロゾール放射能のＰＫパラメータは、平均血漿中濃度（マウスおよびラット）または個々の血漿中濃度（イヌおよびヒト）の時間軸に対するデータから決定した。ＰＫパラメータ値は、ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ（ＴＭ）を用いて非コンパートメント法により求めた。
【００２６】
実施例１に記載したＨＰＬＣデータは下記の通りである。
ＬＣシステム：Ｗａｔｅｒｓ  ２６９５  Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ  Ｍｏｄｕｌｅ
分析カラム：Ｃ１８カラム、４．６ｘ１５０ｍｍ  ３μｍ
流量：１．０ｍＬ／ｍｉｎ
移動相Ａ：２％ＨＣＯＯＨ水溶液（ｐＨ３．２）
移動相Ｂ：ＣＨ３ＣＮ
勾配：下記表に示す通りである。
【００２７】
【表１】
2010506953.tif 000005
【００２８】
［実施例２］
（ラット子宮の上皮分化への影響：タラロゾール代謝物Ｍ４の経口投与による、卵巣摘出ラットにおけるエストロゲン治療誘発性膣内角質化の阻害）
【００２９】
本動物モデルは、レチノイン酸（ＲＡ）が卵巣摘出ラットのエストロゲン治療により誘発された膣内重層扁平上皮の角質化を抑制するという観察に基づく（Sietsema & DeLuca, 1982; Geiger & Weiser, 1989）。タラロゾールによる角質化完全抑制（角質化スコア＝０）のＥＤ５０値は、１．０ｍｇ／ｋｇ／日であり；レチノイン酸の当該ＥＤ５０値は５．１ｍｇ／ｋｇ／日であった。３日間のＭ４の経口投与により、卵巣摘出ラットにおけるエストロゲン治療誘発性の膣角質化が濃度依存的に阻害された。Ｍ４による角質化完全抑制（角質化スコア＝０）のＥＤ５０値は、１．２ｍｇ／ｋｇ／日であった。
【００３０】
［実施例３］
（タラロゾール代謝物による、ＩＦＮγ活性化ヒト表皮角化細胞によるＩＰ−１０産生の抑制）
【００３１】
ケモカインのＣＸＣサブファミリーの一つであるＩＰ−１０は、Ｔリンパ球およびナチュラルキラー細胞を誘引する。ＩＰ−１０は、乾癬などではアップレギュレートされている。特に、乾癬病変部の表皮角化細胞ではＩＰ−１０の発現量が高い。活性化ヒト表皮角化細胞によるＩＰ−１０産生の阻害は、炎症性皮膚疾患の新規な治療ターゲットとなりうる。図１に示すように、タラロゾール、そのエナンチオマーおよび代謝物Ｍ４は、ＩＰ−１０の発現を濃度依存的にダウンレギュレートした。
【００３２】
（結果および考察）
放射能の薬物動態（Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ）
【００３３】
１４Ｃ標識タラロゾールの薬物動態（ＰＫ）パラメータを表１に示す。
【００３４】
表１：１４Ｃ標識タラロゾールの平均薬物動態パラメータ
【表２】
2010506953.tif 000006
血漿中換算量
濃度：１４Ｃ標識タラロゾールのｎｇ換算量。
【００３５】
（放射能の排出）
マウス、ラット、イヌでは、９０％を超える経口投与後の放射能回収率が達成された（表２を参照）。糞中の放射能排泄率は、雄および雌でそれぞれ７８〜８９％、７８〜９２％であった。
【００３６】
表２：排泄物からの放射能回収率（％ｄｏｓｅ）
【表３】
2010506953.tif 000007
【００３７】
タラロゾールは大規模に代謝され、代謝物の大部分は糞中に排泄されることがわかった。マウス、ラット、イヌから得られた血漿、尿、糞から、未変化体の他に、１７種、２６種、２９種の放射性成分がそれぞれ観察された。マウス血漿では、未変化１４Ｃ標識タラロゾール、Ｍ３、Ｍ４、Ｍ９、Ｍ１３が主要な放射性成分であった。血漿中の循環代謝物量はラットが一番多かった。ラットの血漿では、マウスで観察された代謝物の他に、Ｍ１２およびＭ１６が観察された。イヌでは、未変化１４Ｃ標識タラロゾールおよびＭ４のみの特性が明らかにされた。マウスの糞では、未変化１４Ｃ標識タラロゾールおよびＭ４が主要な代謝物であり、雄マウス糞中で放射能の６．１１％、１０．５６％、雌マウス糞中で放射能の７．０４％、１５．１６％をそれぞれ占めた。未変化１４Ｃ標識タラロゾール、Ｍ４、Ｍ１４、Ｍ１５は、ラット糞中の主要な代謝物であり、雄ラット糞中で放射能の５．３４％、４．９５％、５．０５％、６．４２％；雌ラット糞中で放射能の４．６０％、７．７６％、４．８２％、２．３８％をそれぞれ占めた。
【００３８】
Ｍ８およびＭ４は、イヌ糞中の主要な代謝物であり、雄イヌ糞中で放射能の１１．７３％、１９．８８％；雌イヌ糞中で放射能の８．８６％、１７．０１％をそれぞれ占めた。マウスの尿中では未変化１４Ｃ標識タラロゾールは検出されなかった。ラット尿中では、未変化１４Ｃ標識タラロゾールおよびＭ４は微量放射性成分として観察され、放射能の０．０７〜１．９０％を占めた。２種の微量放射性成分（Ｍ９およびＭ１０）が、イヌの尿中に同定され、放射能の０．４５〜１．３４％を占めた。
【００３９】
ヒトにおいては、タラロゾールは大規模に代謝された。未変化１４Ｃ標識タラロゾールの他に、合計で７種類の代謝物が同定された。Ｍ３およびＭ４は、モノヒドロキシル化タラロゾールとして同定された。Ｍ１４ａおよびＭ１４ｂは、ジヒドロキシル化タラロゾールとして同定された。Ｍ１８およびＭ１９は、ジヒドロキシル化タラロゾールのグルクロニドとして同定された。Ｍ１７についてはプロトン化分子イオンが決定されたが、データからは構造は明らかにできなかった。
【００４０】
ヒトにおける１４Ｃ標識タラロゾールは、複数部位が酸化された後、グルクロン酸化される代謝経路が主要であった。未変化タラロゾールは、ＡＵＣ０−２４ｈから、全血漿中放射能の６．０３％を占めた。３種類の主要循環代謝物（Ｍ４、Ｍ１４ａ、Ｍ１８）は、全血漿中放射能の２７．８％、１２．８％、１０．７％をそれぞれ占めた。Ｍ１９は全血漿放射能の５．６０％を占めた。未変化タラロゾール、Ｍ４、Ｍ１４ａ、Ｍ１８、Ｍ１９は、ＡＵＣ０−２４ｈ値から、全血漿中放射能の６２．９％であった。代謝物Ｍ４は、主要な糞中代謝物であり、ヒト糞中で放射能の１６％であった。未変化タラロゾールおよび他の糞中代謝物は微量であり、全放射能の５％未満であった。未変化タラロゾールは、０〜４８時間ヒト尿サンプルでは検出されず、全ての尿中代謝物は放射能の１％未満であった。精液サンプル中では未変化タラロゾールおよびＭ４は微量放射性成分であり、Ｍ１４ａが主要な精液中代謝物であった。
【００４１】
（代謝物の特性評価および同定）
ＬＣ／ＭＳ／ＭＳにより同定および／または特性評価したタラロゾール代謝物を表３に示す。１４Ｃ標識タラロゾールは、ベンズチアゾール環の酸化によりＭ４へ、アルキル側鎖の酸化にによりＭ３およびＭ１３へそれぞれ代謝された。ベンズチアゾール環およびアルキル側鎖の両方の酸化により、Ｍ１４およびＭ１５に代謝された。Ｍ１４がグルクロニル成分または硫酸塩成分と結合すると、それぞれＭ９またはＭ１６が生じた。Ｍ１４およびＭ１５が硫酸塩成分と結合すると、それぞれＭ１１およびＭ１２が生じた。イヌのみで発見された他の代謝経路では、Ｍ４またはＭ９に対して１６２原子量（おそらく単糖）の付加が生じ、Ｍ８またはＭ１０がそれぞれ得られた。
【００４２】
タラロゾール代謝経路の例を以下に示す。
【００４３】
【化３】
2010506953.tif 000008
「*」は１４Ｃ標識を示す
【００４４】
ヒトにおけるタラロゾール代謝経路を以下に示す。
【化４】
2010506953.tif 000009
Ｒ１１５８６６＝タラロゾール
「*」は１４Ｃ標識を示す
Ｐ：血漿（％ＡＵＣ０−２４ｈ）  Ｕ：尿（％ｄｏｓｅ）  Ｆ：糞（％ｄｏｓｅ）
【００４５】
上記の詳細説明は、如何なる場合も本発明の範囲を限定するものではない。さらに、開示された特徴の組み合わせは、必ずしも本発明の課題に必須ではない。本明細書中に引用した全ての文献、特許および公開公報の開示は、その全体を本明細書に援用する。
【００４６】
表３：動物種間のタラロゾール代謝物の比較
【表４】
2010506953.tif 000010
【００４７】
【表５】
2010506953.tif 000011
表３（続き）
【００４８】
【表６】
2010506953.tif 000012
表３（続き）
【００４９】
【表７】
2010506953.tif 000013
表３（続き）
【図１】
2010506953.tif 000017
【国際調査報告】
2010506953.tif 000018