(57)【要約】本発明は、グリセロールに基づく脂肪酸エステルとポリリジン及び／又はポリリジンの塩とを含む組成物の施与を含む、グラム陰性菌の存在、増殖及び／又は活動の防止及び／又は減少の為の方法に関し、ここで該グリセロールに基づく脂肪酸エステルは抗菌剤として用いられる。本発明はさらに、該組成物を、抗菌剤として、工業製品及びパーソナルケア製品から動物及びヒトの消費の為の食品製品及び飲料製品に及ぶ種々の製品及び用途において使用する方法に関する。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
製品中又は表面上のグラム陰性菌の活動、増殖又は存在の減少又は防止の為の方法であって、該製品又は表面と、
ａ．グリセロールと脂肪酸のエステル
と
ｂ．ポリリジン又はポリリジンの塩又はこれらの混合物
との組み合わせを含む組成物とを接触させることを含み、ここで該グリセロールと脂肪酸のエステルは抗菌剤として用いられる、前記方法。
【請求項２】
該グリセロールの脂肪酸エステルが、グリセロールのモノ−若しくはジ−エステル又はこれらの混合物である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
該脂肪酸が、ヘキサン酸、オクタン酸、デカン酸、ドデカン酸、テトラデカン酸、及びこれらの混合物から選ばれる、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
ポリリジンがε−ポリリジンである、請求項１、２又は３に記載の方法。
【請求項５】
該組成物がさらに、１以上の有機酸又はこの塩若しくはエステル又はこれらの混合物を含む、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
該組成物がさらに、１以上の金属キレート剤を含む、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
該組成物がさらに、１以上のラクチレートを含む、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
該組成物が液体又は固体の形にあり、且つ、該組成物が０．０００１〜４５重量％のグリセロールと肪酸の該エステル、０．０００１〜４０重量％のポリリジン又はこの塩又はこれらの混合物、０〜４５重量％のラクチレート、０〜４５重量％の有機酸又はこの塩若しくはエステル又はこれらの混合物、０〜９８重量％のキャリア、及び０〜２０重量％の乳化剤を含む、請求項１〜７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
該組成物が、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ、Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ又はＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓのファミリーからのバクテリアと接触される、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
該製品が、該製品の製造、取扱い、貯蔵又は調製の１以上の段階の間に該組成物と接触される、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
該製品が、ヒトの消費の為の食品製品又は飲料製品、動物の消費の為の飼料製品又は食品製品、洗浄製品、洗剤、化粧料製品又はパーソナルケア製品である、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
グリセロールと脂肪酸のエステルを、グラム陰性菌に対する、ポリリジン又はポリリジンの塩又はこれらの混合物を含む組成物中における抗菌剤として、製品又は表面の中又は上のグラム陰性菌の活動、増殖又は存在の減少又は防止の為に、使用する方法。
【請求項１３】
Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ、Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ又はＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓのファミリーのグラム陰性菌に対する、請求項１２に記載のグリセロール脂肪酸エステルの使用方法。
【請求項１４】
該製品が、動物又はヒトの消費の為の食品製品若しくは飲料製品、又は洗浄製品若しくは洗剤、又は化粧料製品若しくはパーソナルケア製品である、請求項１２又は１３に記載のグリセロール脂肪酸エステルの使用方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、グリセロールの脂肪酸エステルに基づく組成物を使用することによる、製品中の又は製品上のグラム陰性菌の活動の減少及び／又は防止の為の方法に関する。本発明はさらに、この方法を用いることからもたらされる製品に向けられる。
【背景技術】
【０００２】
グリセロールの脂肪酸モノエステルは、酵母、真菌及び食品損傷細菌に対するそれらの抗菌活性について知られている。それらは、グラム陽性の或る食品病原性バクテリア、例えばＬｉｓｔｅｒｉａ及びＣｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍなど、に対する抗菌活性も有する。しかしながらそれらは、それら自身ではグラム陰性菌に対して有効で無いか又はほとんど有効で無い。
【０００３】
米国特許出願第２００５／００８４４７１号明細書は、グリセロールモノエステルをグラム陰性菌、たとえばＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉなど、に対して活性にする為のエンハンサーの使用を記載する。該特許出願は、全ての可能性のあるエンハンサーの広範なリストを提供する。該エンハンサーは、α−ヒドロキシ酸、β−ヒドロキシ酸、他のカルボン酸、カルボン酸以外のキレート剤、フェノール化合物（例えば或る抗酸化剤及びパラベン）又はＣ１−Ｃ１０−モノヒドロキシアルコールでありうる。さらに、適当なエンハンサーは、第一鉄イオン及び／又は第二鉄イオンに結合することにとって非常に特異的な化合物、例えばシデロフォア（例えばエンテロバクチン、ピオケリン（pyochelin））及び鉄結合性タンパク質（例えばラクトフェリン、トランスフェリン）など、である。キレーター、例えばバクテリオシン、抗菌性酵素、糖、糖アルコール及びそれらの組み合わせなど、も包含される。上記言及されたキレート剤は、溶液中における金属イオンとの複数の配位部位の能力がある有機化合物であると記載されている。典型的には、これらのキレート剤はポリアニオン性化合物であり、そして、多価金属イオンと最もよく配位する。例は、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）及びその塩、種々のホスフェートに基づく化合物及び／又はホスホン酸に基づく化合物、アジピン酸、コハク酸、ジエチレントリアミン五酢酸、１−ヒドロキシエチレン及び或るカルボン酸、例えばα−及びβ−ヒドロキシ酸、リンゴ酸及び酒石酸などである。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明は、グラム陰性菌に対するグリセロールの脂肪酸エステルの抗菌活性を増大する為の全く異なる手段を提供する。本発明は、グラム陰性菌に対する非常に有効な手段を結果し、これは工業的な製品及び適用から消費及び／又はパーソナルケアの為の製品に及ぶ広くさまざまな製品及び適用において適用されうる。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
ここに、本発明は、製品中又は表面上のグラム陰性菌の活動、増殖及び／又は存在の減少及び／又は防止の為の方法であって、該製品又は表面と、ａ）グリセロールの脂肪酸エステル並びにｂ）ポリリジン及び／またはポリリジンの塩の組み合わせを含む組成物とを接触させることを含む上記方法に向けられ、ここで該グリセロールの脂肪酸エステルは、抗菌剤又は抗微生物剤として適用され、乳化剤として適用されない。
【図面の簡単な説明】
【０００６】
【図１】Ｃ８−グリセリド及びポリリジンの混合物の存在下におけるＳａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍの実験的に観察された相対的増殖速度（ＯＣ８Ｇ．ｐＬｙｓ）対Ｃ８−グリセリド及びポリリジンの混合物の存在下における予測された相対的増殖速度（ＯＣ８Ｇ・ＯｐＬｙｓ）のプロットを表すグラフである。
【図２】Ｃ８−グリセリド及びポリリジンの混合物の存在下におけるＳａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｅｎｔｉｒｉｔｉｄｉｓの実験的に観察された相対的増殖速度（ＯＣ８Ｇ．ｐＬｙｓ）対Ｃ８−グリセリド及びポリリジンの混合物の存在下における予測された相対的増殖速度（ＯＣ８Ｇ・ＯｐＬｙｓ）のプロットを表すグラフである。
【図３】Ｃ１０−グリセリド及びポリリジンの混合物の存在下におけるＳａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍの実験的に観察された相対的増殖速度（ＯＣ１０Ｇ．ｐＬｙｓ）対Ｃ１０−グリセリド及びポリリジンの混合物の存在下における予測された相対的増殖速度（ＯＣ１０Ｇ・ＯｐＬｙｓ）のプロットを表すグラフである。
【図４】Ｃ１０−グリセリド及びポリリジンの混合物の存在下におけるＳａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｅｎｔｉｒｉｔｉｄｉｓの実験的に観察された相対的増殖速度（ＯＣ１０Ｇ．ｐＬｙｓ）対Ｃ１０−グリセリド及びポリリジンの混合物の存在下における予測された相対的増殖速度（ＯＣ１０Ｇ・ＯｐＬｙｓ）のプロットを表すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【０００７】
グリセロールの脂肪酸エステルは通常、乳化剤として適用されるが、驚くべきことに、ポリリジン及び／又はこの塩を含む組成物中でそれらを用いることにより、それらは、なおそのうえ、特にグラム陰性菌に対する抗菌剤として適用されうることが今発見された。
【０００８】
ポリリジン及び／又は塩とグリセロールの脂肪酸エステルとの組み合わせは、両方の成分の活性を単に増大する（該増大効果は該ポリリジン及び該グリセロール脂肪酸エステルの個々の活性の合計である）ことができるだけでなく、それは、両方の成分が、該組成物の個々の成分の活性の合計よりも有意に高い抗菌活性を結果する相乗作用において働くので、該抗菌活性についての相乗効果を予想外に実証する。
【０００９】
上記の先行文献において言及されたエンハンサー多くが、この相乗作用を示さず、そして、本発明に従うグリセロールの脂肪酸エステルとポリリジン及び／又はこの塩との組み合わせにおけるものと比べて、グリセロール脂肪酸モノエステルとの組み合わせにおいて、相乗的に有効でない。
【００１０】
さらに、該エンハンサーの多くは、それ自体、グラム陰性菌に対して非常に有効でなく、そしてすなわち、何らかの増大する抗菌効果を示すために高い量で適用される必要がある。この抗菌効果を達成する為に必要とされる該量において、該エンハンサーは、それらが適用される食品製品の品質に、味、色、臭い及び／又はテクスチャーの点で悪影響を及ぼす。
【００１１】
有機酸は例えば、グラム陰性菌に対してそれ自体であまり有効なものでなく、そして、増大効果を有する為に、該有機酸の相当な量が必要とされる。しかしながら、該酸は何らかの抗菌効果を有する為に必要とされる量において該食品製品のｐＨを低めるので、それらは多くの製品の味、テクスチャー及び他の特性に悪影響を及ぼす。酸は例えば、それらが例えばタンパク質の変性をもたらすので、タンパク質に富む製品（例えば食肉製品）のテクスチャーに悪影響を及ぼすと知られている。
【００１２】
他の例は、先行文献において言及されたタンパク質、シデロフォア及びバクテリオシンであり、それらは食品製品におけるｐＨ変化に非常に感受性であるので又はそれらは食品製品の味及びテクスチャーに対する望ましくない効果を有するので、それらの使用において限定される。
【００１３】
これは、先行文献において言及されたようなＣ１−Ｃ１０−モノヒドロキシアルコールの多くについても当てはまり、これらは、それらを食品製品及び飲料製品における多くの適用にとって適さないものとする強力且つ望ましくない臭気特性をそれらが有するという不利点を有する。
【００１４】
本発明に従う方法において用いられるグリセロールの脂肪酸エステルも、グラム陰性菌に対してそれら自身では非常に有効でないが、ポリリジン及び／又はこの塩との組み合わせにおいて、相乗的に増加した抗菌活性が、多くの食品製品及び飲料製品において許容できる該グリセロール脂肪酸エステルの濃度で得られる。
【００１５】
ポリリジンは、グラム陰性菌に対して抗菌活性を発揮すると知られている。Ｓｈｉｍａら（Ｎｏｖ．１９８４）により記載されるとおり、α−ポリリジン及びε−ポリリジンの両方が、抗菌活性を有するが、後者が有意により大きな程度で抗菌活性を有する。該文献において記載されるとおり、ε−ポリリジンは、１ｍｌ当たり約１〜８μｇの濃度で、グラム陽性菌及びグラム陰性菌に対して有効に用いられうる。
【００１６】
Ｈｉｒａｋｉら（２０００）は、ε−ポリリジンが、抗菌剤、例えばグリシン、酢酸（酢の形にある）、エタノール又はチアミンラウリルスルホネートなど、と一緒に用いられる場合に、その抗菌能力が大きく増大されることを記載する。しかしながら、グラム陰性菌に対する抗菌活性を達成する為に、グリセロールの脂肪酸エステルがε−ポリリジンと組み合わされるところの方法は、おそらくこのタイプのグラム陰性菌に対するグリセロール脂肪酸エステルの非常に既知の乏しい活性の故に、言及されていない。
【００１７】
特開２０００−２７０８２１号公報、特開平０７−１３５９４３号公報、特開平０４−８２７３号公報、特開平２００１−５８７４６５号公報、特公２００１−０９４７９４号公報、特公１９９９−３２１０１３号公報、特開平１１−１１３７７９号公報、特公１９９４−２９８７８０号公報、特開平２００１−３８４６７４号公報は、モノ−及びジ−グリセロールエステル及び他の抗菌性成分、例えばプロタミン、エタノール、グリシン、リゾチームなど、との組み合わせにおいてε−ポリリジンを含む組成物を記載する。上記言及された組成物は、胞子形成菌および乳酸生成菌に対して、腐敗性菌、例えばＬｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ（グラム陽性）など、に対して、並びに、酵母及び真菌、例えばＣａｎｄｉｄａなど、に対して有効であると記載されている。
【００１８】
上記言及された特許文献を含む先行文献は、ポリリジン及び／又はこの塩と一緒にされたグリセロールの脂肪酸エステルが、グラム陰性菌に対して、及び特には、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ、Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ及びＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓに対して、非常に有効に適用されうることを記載しない。
【００１９】
さらに、先行文献は、抗菌剤、例えばポリリジン及びその他など、を含みうる混合物において、例えば特公平２００２−２７４７４２号公報におけるように、グリセロールの脂肪酸エステルの乳化剤として又は界面活性剤としての使用方法に向けられる。グリセロールの脂肪酸エステルが、ポリリジン及び／又はこの塩を含む組成物中において、グラム陰性菌に対する抗菌剤として用いられたことを記載する先行文献は発見されていない。
【００２０】
本発明はすなわち、グラム陰性菌の存在、増殖及び／又は活動の減少又は防止の為の方法であって、該菌と、ａ）脂肪酸とグリセロールの脂肪酸エステル及びｂ）ポリリジン及び／又はこの塩の組み合わせを含む組成物とを接触させることを含む前記方法を含み、ここで該脂肪酸とグリセロールの脂肪酸エステルは抗菌剤として用いられる。
【００２１】
ポリリジンは、ε−ポリリジンとして、α−ポリリジンとして又はこれらの混合物として存在しうる。ε−ポリリジンは、それが、他の形のポリリジンと比較してグラム陰性菌に対してより高い抗菌活性を有するので、すなわち、この抗菌剤のより少ない量が適用におけるグラム陰性菌に対しての抗菌活性における満足できる相乗作用を達成するのに必要とされるので、好ましい。さらに、ε−ポリリジンは好ましくは、遊離カルボキシル基とｅ−アミノ基との間に、ペプチド結合により連結された３０〜５０のＬ−リジンモノマーを含む。本発明の脂肪酸エステルは、ポリリジンの１以上の塩とも一緒にされうる。
【００２２】
本発明のグリセロール脂肪酸エステル（グリセリド又はグリセロール又はグリセロールに基づく脂肪酸エステルとも言われる）は、グリセロールのモノエステル、ジエステル若しくはトリエステル又はこれらの混合物を含みうる。これらのエステルが製造される方法はしばしば、一般に知られるとおり、種々のモノ−、ジ−又はトリ−エステルの混合物を可能にもたらす。該エステルは、これらの混合物から、当技術分野の当業者により既知の種々の技術により分離されうる。すなわち、モノ−エステルに言及する場合、これらのグリセロールのモノ−エステルは、純粋な成分ならびに、主にモノエステルを含むが該混合物のさらなる成分としてジ−及びトリ−エステルも含む混合物を含む。
【００２３】
非常に良い結果が、菌又は該菌を含む製品及び表面が、ポリリジンとグリセロールのモノ−及びジ−エステルとの組み合わせを含む組成物と接触されたときに得られた。高い抗菌活性をもたらす高い相乗作用が、グリセロールと脂肪酸との脂肪酸エステルと組み合わせられたポリリジン及び／又はこの塩を含む組成物により観察され、ここで該脂肪酸は、飽和脂肪酸、例えばヘキサン（Ｃ６）酸、オクタン（Ｃ８）酸、デカン（Ｃ１０）酸、ドデカン（Ｃ１２）酸、テトラデカン（Ｃ１４）酸、ヘキサデカン（Ｃ１６）酸、オクタデカン（Ｃ１８）酸、及びこれらの混合物などであるがこれらに限定されない、を含む。この出願において、例えばＣ８−グリセリド又はＣ１０−グリセリドが言及される場合、グリセロールとそれぞれオクタン酸及びデカン酸との脂肪酸エステルが意味される。
【００２４】
本発明に従う方法は、もし該菌又は該菌を含む該製品若しくは表面が、グリセロール脂肪酸エステル、ポリリジン及び／又はその塩、並びにさらに１以上の（１又は１より多い）ラクチレートを含む組成物と接触されるならば、さらにより有効であると分かった。ラクチレートは、乳酸（及び／又は乳酸の塩）の脂肪酸エステルであり、当技術分野の当業者によく知られている。これらの成分は、それらの乳化効果について知られており、そして、従って、乳化剤として用いられる。モノラクチレート及びジラクチレートの両方が適当であり、これらの混合物も同様に適当である。該ラクチレート成分はしばしば、混合物として、例えば主としてモノラクチレートと、さらにそれらが調製される方法に起因してジラクチレートをさらに含む混合物として得られる。より高く重合されたラクチレートが該混合物中に存在することも、非常によくありうる。該ラクチレートは、例えばクロマトグラフィー分離により又は当技術分野の当業者に既知の任意の他の方法により、それらの純粋な形（例えばモノ−形だけ）で得られうる。
【００２５】
本発明に従う方法において用いられる抗菌性組成物はさらに、１以上の有機酸及び／又はそれらの塩若しくはエステルを含みうる。なぜなら、これらの成分はさらに抗菌活性を増大するからである。好ましくは、乳酸、酢酸、クエン酸、リンゴ酸、フマル酸、酒石酸、グルコン酸、プロピオン酸及びカプロン酸から選ばれる１以上の有機酸及び／又はそれらの塩若しくはエステルが用いられる。なぜなら、これらの酸は、例えば該製品の味、臭い及び色に関する該製品品質に対して悪影響を有さないからである。
【００２６】
任意的に、本発明に従う方法において用いられる抗菌性組成物はさらに、１以上の金属キレート剤を含む。該キレート剤は例えば、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）及びその塩、ジエチレントリアミン五酢酸及びその塩、種々のホスフェートに基づく化合物、例えばヘキサメタホスフェートナトリウム、酸性ピロホスフェートナトリウム（socium  acid  pyrophosphate）、及びピロリン酸、オルガノホスフェートキレーティング化合物、例えばフィチン酸、１，１−ジホスホン酸、シデロフォア及び鉄結合性タンパク質、例えばエンテロバクテリン及びラクトフェリン、及びカルボン酸及びヒドロキシカルボン酸及び／又はそれらの塩、例えばコハク酸、アスコルビン酸、グリコール酸、安息香酸、オクタン酸及びアジピン酸など、から選ばれうる。
【００２７】
本発明に従う方法は、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ（例えばＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ（例えばＳａｌｍｏｎｅｌｌａ種）、Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ（例えばＣａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ種）及びＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ（例えばＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ種）のファミリーのグラム陰性菌に対して非常に有効であると分かった。なぜなら、該組成物中のポリリジン成分及びグリセリド成分はこれらの特定の標的生物に対して相乗的に作用し、それによりこれらのグラム陰性菌の存在、増殖及び／又は活性を防ぎ及び／又は減少するのに十分な抗菌活性が達成されるからである。
【００２８】
さらに、本発明に従う方法は、例えば低い及び高いｐＨ値の製品、非常に濃厚にされた製品及び非常に希釈された製品、工業分野において（例えば産業用途又は家事用途の為の洗剤において）、医薬分野において（例えば装置の洗浄／殺菌の為、又は医薬組成物の調製又はそれらのパッケージングにおいて）、パーソナルケアにおいて（例えば化粧料、シャンプー、クリーム及びローションの製造において）、飼料産業において（例えば装置の洗浄の為に、動物の飼料製品及び飲料製品の製造、貯蔵、取扱い及び調製において）及び食品産業及び飲料産業において使用可能な製品に及ぶ、非常にさまざまな製品及び用途において適用可能である。
【００２９】
それ故に、本発明は、洗剤、化粧料製品及びパーソナルケア製品の製造、取扱い、貯蔵及び調製において、グラム陰性菌及び特には前に言及された菌の存在、増殖又は活動の減少及び／又は防止の為に、グラム陰性菌に対する、ポリリジン及び／又はこの塩を含む組成物中における抗菌剤としてグリセロール脂肪酸エステルを使用する方法に関する。
【００３０】
ここに、洗剤製品、化粧料製品及びパーソナルケア製品におけるグラム陰性菌の存在、増殖又は活動の減少又は防止の為の本発明に従う方法は、該製品を、本発明の種々の実施態様に従う、グリセロール脂肪酸エステルとポリリジン及び／又はこの塩とを含む組成物に、該製品の製造、取扱い、貯蔵又は調製の１以上の工程の間に接触させることを含み、ここで該グリセロール脂肪酸エステルは抗菌剤として用いられる。
【００３１】
グリセロール脂肪酸エステルとポリリジン及び／又はこの塩とを含む組成物は、表面を洗浄することにとって非常に便利であるとさらに分かる。それ故に、本発明に従う方法は、表面上のグラム陰性菌、特には前に言及された菌、の存在、増殖又は活動の減少又は防止に向けられ、該表面を、グリセロール脂肪酸エステルとポリリジン及び／又はこの塩とを含む抗菌性組成物に接触させることを含み、ここで該グリセロール脂肪酸エステルは抗菌剤として用いられる。
【００３２】
本発明はさらに、飼料産業の為の食品製品及び飲料製品並びにヒトの消費の為の食品製品及び飲料製品の製造、取扱い、貯蔵及び調製において、グリセロール脂肪酸エステルを、グラム陰性菌に対する、ポリリジン及び／又はこの塩を含む組成物中における抗菌剤として使用する方法に向けられる。
【００３３】
ここに、動物又はヒトの消費の為の食品製品及び飲料製品におけるグラム陰性菌の存在、増殖又は活動の減少又は防止の為の本発明に従う方法は、該製品を、該食品処理プロセスの１以上の段階、例えば該製品の製造、取扱い、貯蔵又は調製など、の間に、グリセロール脂肪酸エステルとポリリジン及び／又はこの塩とを含む組成物と接触させることを含み、ここで該グリセロール脂肪酸エステルは抗菌剤として適用されている。
【００３４】
食品製品及び飲料製品の例は、飲料、例えば炭酸飲料及び非炭酸飲料並びに果実若しくは野菜に基づくジュースなど、タンパク質に富む製品、例えば種々の食肉製品及び魚製品など、ドレッシング、ソース及びトッピング、すぐに食べられる（ready-to-eat）製品及びすぐに飲むことができる（ready-to-drink）製品、冷凍された製品及び高温処理された製品などである。これらの製品は、本発明に従う方法により非常によく製造され又は処理されうる。得られた製品は、例えば味、テクスチャー及び色の点で感覚受容的性質において悪影響を及ぼされず、一方で該製品は、グラム陰性菌の存在及び活動による食品損傷及び／又は食品中毒に対して守られている。
【００３５】
グリセロール脂肪酸エステルは通常は、食品製品又は飲料製品中に、該製品の最大で５重量％の量、好ましくは０．０００１重量％〜５重量％、好ましくは０．０００１重量％〜２重量％、好ましくは０．０００１重量％〜１重量％の量で存在するであろう。
【００３６】
ポリリジンは通常は、食品製品又は飲料製品中に、該製品の最大で１重量％の量、好ましくは０．０００１重量％〜１重量％、好ましくは０．０００１重量％〜０．１重量％、好ましくは０．０００１重量％〜０．０１重量％、好ましくは０．０００１重量％〜０．００１重量％の量で存在するであろう。
【００３７】
ＥＤＴＡ，オルガノホスフェート及びポリホスフェートは通常は、食品製品又は飲料製品中に、該製品の最大で１重量％の量で、好ましくは０．０００１重量％〜１重量％の量で存在するであろう。
【００３８】
ラクチレートは通常は、食品製品又は飲料製品中に、該製品の最大で１重量％の量で、好ましくは０．０００１重量％〜１重量％、又は０．０００１重量％〜０．１重量％さえ、そして最も好ましくは０．０００１重量％〜０．０１重量％の量で存在するであろう。
【００３９】
有機酸、例えば乳酸、フマル酸、コハク酸、酒石酸、アスコルビン酸、グリコール酸、安息香酸、酢酸、プロピオン酸、オクタン酸、リンゴ酸及びアジピン酸など、は食品製品又は飲料製品中に、該製品の最大で１０重量％の量で、好ましくは０．０００１重量％〜１０重量％、好ましくは０．０００１重量％〜５重量％の量で存在しうる。
【００４０】
本発明に従う方法において、上記言及された食品製品及び飲料製品は、グリセロール脂肪酸エステルとポリリジン及び／又はこの塩とを含む本発明に従う組成物と接触される。本発明に従う方法の好ましい実施態様において、該食品製品及び飲料製品は、上記言及された組成物を注入される。次に、該組成物は、内部部分に存在し又は該製品の内側に存在する。
【００４１】
本発明の他の好ましい実施態様において、該方法は、グリセロール脂肪酸エステルとポリリジン及び／又はこの塩とを含む該組成物により該製品を表面処理することを含む。これは、最後の製品段階においてだけでなく、例えば食肉製品の製造における枝肉の殺菌の間若しくは当該殺菌において又は果実及び野菜について適用される洗浄工程においても行われうる。該抗菌性組成物は、種々の手段により、例えばスプレー、リンス若しくは洗浄溶液のような又は種々の食品製品が浸される溶液のような種々の手段により、処理されるべき製品との接触に付されてよく又は当該製品中に導入されてよい。
【００４２】
適用の種類により及び本発明の組成物が最終製品中の活性成分として用いられるか又は例えば洗浄溶液又は洗浄スプレーの成分として用いられるかにより、該組成物の成分は、当技術分野の当業者に明白であろう濃度及び内部比で変わるであろう。
【００４３】
グリセロール脂肪酸とポリリジン及び／又はこの塩とを含む該組成物は、固体又は液体の形で適用されうる。もし該組成物が液体の形にあるならば、それは一般に水性組成物の形にあり、これは溶液又は分散物でありうる。そのような水性組成物は一般に、該溶液の合計重量に基づき、０．０００１重量％から最大で４０重量％、より好ましくは０．１重量％〜３５重量％、及び最も好ましくは１〜２５重量％のポリリジン、及び、０．０００１重量％から最大で４５重量％、より好ましくは１〜４０重量％、及び最も好ましくは５〜３５重量％のグリセロール脂肪酸エステルを、本発明に従い含む。該組成物はさらに、０〜４５重量％、及びより好ましくは５〜３５重量％の量でラクチレートを、そしてさらに、０〜４５重量％、及びより好ましくは０〜３０重量％の範囲で有機酸を含みうる。
【００４４】
該グリセロール脂肪酸エステル及び該ポリリジン又は該その塩は、キャリアにより該液体組成物中に導入されうる。当技術分野の当業者は、いかなる種類のキャリアが用いられうるかを知っている。種々のよく知られたキャリアのうち、ポリエチレングリコール及び／又はラクテートが、キャリアとして非常によく機能することが分かった。該キャリアは、約５０〜９８重量％の濃度で存在しうる。さらに、当技術分野の当業者に既知の種々の乳化剤が添加されうる。好ましくは、乳化剤、例えばポリソルベート（例えばポリソルベート６０又は８０）及びレシチンが、１００％の脂肪酸誘導体、例えばグリセロール脂肪酸エステル及び／又はラクチレートなど、に基づき、例えば０．１〜２５％、より好ましくは１〜１０％及び最も好ましくは２〜４％の濃度で、もしも後者の成分がグリセロール脂肪酸エステル及びポリリジン又はその塩に加えて該組成物中において用いられるならば、適用される。
【００４５】
もしグリセロール脂肪酸エステルとポリリジン又はその塩とを含む該組成物が固体の形にあるならば、それは一般に、関連のある成分の粒子を含む粉の形にあるであろう。固体の形にある該組成物は一般に、該粉の合計重量に基づき、０．０００１重量％から最大で４０重量％、より好ましくは０．１重量％〜３５重量％、及び最も好ましくは１〜２５重量％のポリリジンと、０．０００１重量％から最大で４５重量％、より好ましくは１〜４０重量％、及び最も好ましくは５〜３５重量％のグリセロール脂肪酸エステルを、本発明に従い含む。
【００４６】
キャリアが使用されうる。非常に適したキャリアは、シリカ及び／又はマルトデキストリンであり、これは最大で５０〜９８重量％の濃度で存在する。
【００４７】
該組成物はさらに、０〜４５重量％及びより好ましくは０〜３５重量％の量でラクチレートを含んでよく、そしてさらに、０〜４５重量％及びより好ましくは０〜３０重量％の範囲で有機酸を含んでよい。
【００４８】
以下の非限定的な実施例が本発明をさらに説明する。
【実施例１】
【００４９】
以下の培養物が研究において用いられた：Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ（ＡＴＣＣ  ８７３９）、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ血清型Ｏ１５７：Ｈ７（ＡＴＣＣ  ７００７２８）、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ（ＡＴＣＣ  １３３１１）及びＳａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｅｎｔｉｒｉｔｉｄｉｓ（ＡＴＣＣ  １３０７６）。全ての培養物は、１０ｍｌのブレインハートインフュージョン培地を含むスクリューキャップチューブ中に一日毎に移された。培養物は、攪拌無しで３０℃でインキュベートされた。ブレインハートインフュージョン培地は、モノ／ジグリセリド及びポリリジンの増加する量を有して調製された。カプリリック（Ｃ８）モノ／ジグリセリドについての濃度範囲は、１０の０．０２％ステップで０〜０．１８％のとおりであり、カプリック（Ｃ１０）モノ／ジグリセリドについての濃度範囲は、１０の０．０１％ステップで０〜０．０９％のとおりであり、ラウリック（Ｃ１２）モノ／ジグリセリドについての濃度範囲は、１０の０．００１％ステップで０〜０．００９％のとおりであった。モノ／ジグリセリドはポリリジンと一緒にされた。該ポリリジンの濃度範囲は、１０の０．００７５％ステップで０〜０．０６７５％のとおりであり、１００の異なる培地を結果した。該培地のｐＨは、６．１〜６．２へと、１ＮのＨＣｌ又は１ＮのＮａＯＨにより調整された。培地は、１０ｍｌの量で調製され、そしてろ過により滅菌された。３００μｌの夫々の培地が、滅菌されたＢｉｏｓｃｒｅｅｎ（商標）ハニカム１００ウェルプレートのパネルに移された。ウェルプレートは、滅菌された５μｌリピーティングディスペンサーを用いて、ブレインハートインフュージョン培地中で一晩増殖された培養物の５μｌを植菌された。増殖速度は、垂直測光（vertical  photometry）により濁度の発達を動的に測定するＢｉｏｓｃｒｅｅｎ（商標）Ｃにより決定された。該プレートは、１６〜２４時間、３７℃でインキュベートされ、該培養物の光学密度は、ワイドバンドフィルターを用いて４２０−５８０ｎｍで３０分毎に測定された。Ｂｉｏｓｃｒｅｅｎ（商標）は、該培養物の光学密度を設定時間間隔で測定する。これらのデータから、Ｂｉｏｓｃｒｅｅｎ（商標）は、最大の比増殖速度を計算する。さらなるデータ処理の目的は、２つのアミノ酸が互いに独立して働くかどうか又はそれらがそれらの抑制作用において互いに刺激するか（相乗作用）若しくは抑制効果を互いに打ち消すか（拮抗作用）どうかを確認することである。或る化合物が生物に対して効果を有さない場合、この生物の比増殖速度（μ）は、例えばモノーの方程式により、増殖限定性基質濃度（ｓ）の関数（ｆ）として表されうる、これはμ＝μｍａｘ・ｓ／（Ｋｓ＋ｓ）と読め、ここでμｍａｘは、最大比増殖速度を表し、ｓは培地中の増殖限定性基質の不変濃度（standing  concentration）を表し、そしてＫｓはμ＝０．５μｍａｘであるところの基質濃度を表す。しかしながら、インヒビターＰの存在が細胞増殖に影響する場合、μについての関数ｆは修正されなければならない、すなわちμ＝ｆ（ｓ，ｐ）、ここでｐはインヒビターＰの濃度を表す。バクテリアの増殖抑制速度論のたくさんの研究が、多くのインヒビターが非競合的インヒビターとして振舞うことを示している。これは、最大比増殖速度（μｍａｘ）の値だけが影響され、そして、親和性（Ｋｓ）は影響されないことを暗示する。それ故に、インヒビターの存在下における比増殖速度は、
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、ここでμiはインヒビターＰの存在下における最大比増殖速度である、として記載されうる。μiとμｍａｘとの間の関係及びインヒビターＰの濃度は、ロジスティック用量応答方程式を用いて記載され、これは
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と読める（Jungbauer, A. (2001). The logistic dose response function: a robust fitting function for transition phenomena in life sciences. J. Clinical Ligand Assay 24: 270 - 274）。この方程式において、ｐはインヒビターＰの濃度を表し、そして、ｐ０．５は、μi＝０．５μｍａｘであるところのＰの濃度を表す；μｍａｘは、インヒビターＰの不在下における比増殖速度である最大比増殖速度であり、ｂは次元の無い量であり、これはμiとｐとの間の関係を決定する。モノー方程式及びロジスティック用量応答方程式とを併せると、
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と記載されることができる。ｓが通常、Ｋｓよりも何倍も大きいバッチカルチャーにおいて、この方程式は
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に変形される。同じ条件下で増殖された異なる生物を比較する場合、又は異なる条件下で増殖された同じ生物を比較する場合、比較の基準として絶対的増殖速度よりもむしろ、相対的増殖速度を用いることがより意味がある。相対的増殖速度（Ｏ）は、最大増殖速度（μｍａｘ）に対する増殖速度（μ）の比であり、すなわちＯ＝μ／μｍａｘである。μ及びμｍａｘが（時間）−１の次元を有する一方で、それらの比Ｏは次元無し、すなわち純粋な数であると見られることができる。同様に、我々は、相対的インヒビター濃度εをｐ／ｐ０．５として定義することができる。該変形されたモノー及びロジスティック用量応答方程式は今、
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として記載されうる。２つのインヒビターＸ及びＹについて、例えばＯについての以下の２つの式が定義されうる：
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。Ｏｘ及びＯｙは、標的生物の増殖速度に対するＸ又はＹのいずれかの抑制効果を試験することにより実験的に評価されうる。Ｏｘ及びＯｙについての該評価された関数を知ることにより、理論的な独立の効果がＯｘ・Ｏｙとして定義される。該相対的増殖速度に対するＸ及びＹの組み合わせの実験的に観察された効果はＯｘｙとして定義される。Ｘ及びＹが或る生物に対して互いに独立に作用するという仮説は、数学的に
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に言い換えられる。この仮説の棄却は、Ｘ及びＹの組み合わせられた効果が、独立の効果でなく、相乗的又は拮抗的であることをほのめかす。インヒビターＸ及びＹが該標的生物に対して相乗的に作用する場合、
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（しかし＞０）である。インヒビターＸ及びＹの組み合わされた効果が拮抗的である場合、
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である。
【００５０】
相乗作用、独立の効果、及び拮抗作用は、Ｏｘｙ対Ｏｘ・Ｏｙのプロットにおいて可視化されうる。これは図１〜４において例示され、ここでＳａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ（ＡＴＣＣ  １３３１１）及びＳａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｅｎｔｉｒｉｔｉｄｉｓ（ＡＴＣＣ  １３０７６）についてのＯＣｘＧ ｐＬｙｓ（モノグリセリド及びポリリジンの混合物の存在下において実験的に観察された相対的増殖速度）対ＯＣｘＧ・ＯｐＬｙｓ（ラクチレート及びポリリジンの混合物の存在下において予測された相対的増殖速度）の種々のプロットが与えられ、ラクチレートとポリリジンとの間の抑制における相乗作用を示す。このグラフ中の実線は、該実験的に観察された相対的増殖速度（ＯＣｘＬ ｐＬｙｓ）が該予測された相対的増殖速度（ＯＣｘＬ・ＯｐＬｙｓ）に等しく且つ該ラクチレート及びポリリジンが独立的なインヒビターとして作用するところの線を表す。
【００５１】
図１〜４は、Ｏｘｙ／Ｏｘ・Ｏｙ＜１及び＞０である（実線の下のドットにより表される）ので、試験された種々の組み合わせにおけるポリリジン及びグリセリドが、標的生物に対して相乗的に作用することを実証する。
【００５２】
相乗作用のさらなる例、例えば０．０２２５％（ｗ／ｗ）のポリリジンと０．１２％（ｗ／ｗ）のＣ８−グリセリドとの間、又は０．０２２５％（ｗ／ｗ）のポリリジンと０．０９％（ｗ／ｗ）Ｃ１０−グリセリドとの間の相乗作用など、が表１に与えられる。該表において観察されるとおり、０．０２２５％（ｗ／ｗ）のポリリジン及び０．１２％（ｗ／ｗ）のＣ８−グリセリド、又は０．０２２５％（ｗ／ｗ）のポリリジン及び０．０９％（ｗ／ｗ）Ｃ１０−グリセリドを含む培地中における、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ（ＡＴＣＣ  ８７３９）、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ血清型Ｏ１５７：Ｈ７（ＡＴＣＣ  ７００７２８）、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ（ＡＴＣＣ  １３３１１）又はＳａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｅｎｔｉｒｉｔｉｄｉｓ（ＡＴＣＣ  １３０７６）の相対的増殖速度は、ポリリジン又はグリセリドエステルの１つを含む培地中におけるこれらの生物の相対的増殖速度に基づき予測されうるものよりも、全ての場合において低い。
【００５３】
【表１】
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【実施例２】
【００５４】
汚染されたチキンフィレと乳における抗菌効果
【００５５】
材料及び方法
【００５６】
培養物及び培養条件
Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  Ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ  ＡＴＣＣ  １３３１１及びＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ  Ｏ１５７：Ｈ７  ＡＴＣＣ  ７００７２８が、ブレインハートインフュージョン培地を含む滅菌スクリューキャップチューブ中で、１８〜２４時間、３０℃で増殖された。
【００５７】
チキンフィレの調製
チキンフィレ（１５０〜２００ｇ）が切り取られ、真空パックされ、そして４〜７℃で保蔵された。フィレは次にガンマ線照射により滅菌された（平均放射線量：１２キログレイ）。
【００５８】
Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  Ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍによるチキンフィレの接種
ブレインハートインフュージョン培地中のＳａｌｍｏｎｅｌｌａ  Ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍの一晩培養物の１ｍｌが、滅菌された０．８％（ｗ／ｖ）ＮａＣｌ及び０．１％（ｗ／ｖ）ペプトンにより１０００倍に希釈された。この希釈された培養物の０．５ｍｌが、該フィレの一面に移された。該接種材料が、該フィレの全部の表面に穏やかにこすりつけることにより分布された。これが、該フィレの他方の面についても繰り返された。接種は６℃で実施された。接種されたフィレは、６℃で６０〜１２０分間休まされて、細胞の付着を許した。
【００５９】
チキンフィレの汚染除去
チキンフィレは、適切な処方を有する１ｌの溶液中に手短に浸され且つ完全に沈められ、そして次に、適切な処方の５ｍｌを含む、４００ｍｌのＢａｇｆｉｌｔｅｒ（商標）ラテラルフィルターバッグ（Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ、Ｓｔ  Ｎｏｍ、フランス）に移された。バッグは真空シールされ、そして、さらなる分析まで、最大で７日間、１２℃でインキュベートされた。時間ゼロの試料が、浸漬後３０分以内にプレートされた。
【００６０】
チキンフィレの微生物分析
チキンフィレ上に生存しているＳａｌｍｏｎｅｌｌａ  Ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍが以下のとおりに計数された：封されたバッグが開けられ、そしてこれに、合計重量の２倍の滅菌された希釈流体（８．５％（ｗ／ｖ）ＮａＣｌ及び０．１％（ｗ／ｖ）細菌学的ペプトン（bacteriological  peptone））が添加された。同じフィレが、１分間、Ｂａｇｍｉｘｅｒ（商標）４００パドルラボブレンダー（Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ、Ｓｔ  Ｎｏｍ、フランス）中で、ホモジナイズされた。５０μｌのホモジネート又はその希釈物が、Ｅｄｄｙｊｅｔタイプ１．２３スパイラルプレーター（ＩＵＬ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、バルセロナ、スペイン）を用いて、セフスロジン、ノボビオシンの補充（ＳＲ０１９４）（Ｏｘｏｉｄ、Ｂａｓｉｎｇｓｔｏｋｅ、英国）を有する同じＳａｌｍｏｎｅｌｌａ発色アガープレート（ＣＭ１００７）上にプレートされた。プレートは、３０℃で２４〜４８時間インキュベートされ、そして次に計数された。Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａの数は、１ｍｌのホモジネート当たりのｌｏｇ１０コロニー形成ユニットとして表された。
【００６１】
抗微生物性処方物により処理された乳の接種
滅菌された低脂肪乳が地域のスーパーマーケットから購入され、そして１００ｍｌの量が、一連の滅菌スクリューキャップボトルに移された。ε−ポリリジン、グリセリル  モノ／ジ  オクタノエートのナトリウム塩（Ｃ８  モノ／ジ  グリセリド）及びグリセリル  モノ／ジ  デカノエートのナトリウム塩（Ｃ１０  モノ／ジ  グリセリド）が、表２に示されるとおりの濃度に添加された。種々の乳調製物が、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ  Ｏ１５７：Ｈ７の一晩培養物により接種された。出発時の細胞密度はｌｏｇ１０  ２．５〜３．０であった。
【００６２】
乳培養物の微生物分析
生存しているＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ  Ｏ１５７：Ｈ７が以下のとおりに計数された：乳培養物又はその希釈物の同じ５０μｌ試料が、Ｅｄｄｙｊｅｔタイプ１．２３スパイラルプレーター（ＩＵＬ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、バルセロナ、スペイン）を用いて、同じＶｉｏｌｅｔ  Ｒｅｄ  Ｂｉｌｅ  Ｇｌｕｃｏｓｅ（ＶＲＢＧ）アガープレート（ＣＭ０４８５  Ｏｘｏｉｄ、Ｂａｓｉｎｇｓｔｏｋｅ、英国）上にプレートされた。プレートは、２４〜４８時間、３０℃でインキュベートされ、そして次に計数された。Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉの数は、１ｍｌのホモジネート当たりのｌｏｇ１０コロニー形成ユニットとして表された。
【００６３】
抗微生物性処方物の調製
研究された処方物の組成が表２に示される。ε−ポリリジン及びモノ／ジ  グリセリドが脱塩水中に溶解され、そして２０分間、１２０℃で滅菌された。
【００６４】
【表２】
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【００６５】
化学物質
ε−ポリリジンは、Ｃｈｉｓｓｏ  Ａｍｅｒｉｃａ  Ｉｎｃ（ニューヨーク、米国）から購入された。グリセリル  モノ／ジ  オクタノエートのナトリウム塩（Ｃ８  モノ／ジ  グリセリド）及びグリセリル  モノ／ジ  デカノエートのナトリウム塩（Ｃ１０  モノ／ジ  グリセリド）は、Ｃａｒａｖａｎ  Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ（Ｌｅｎｅｘａ、カンザス、ＵＳＡ）から購入された。
【００６６】
チキンフィレの汚染除去の結果
チキンフィレ上に存在するＳａｌｍｏｎｅｌｌａ  Ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ  ＡＴＣＣ  １３３１１の、ε−ポリリジンとモノ／ジ  グリセリドとの組み合わせへの曝露は、約９０％だけ、生存細胞数のほぼ即時の減少を結果した（表３）。１２℃での１日後、数における減少は、４ｌｏｇ１０より大きい。該試験された組み合わせによる増殖抑制は永続的でない；４日後に数は増加したが、接種後７日後で該処方物と該ブランクとの間の差異は２ｌｏｇ１０以上であり、そして、微生物の活動はなお存在する。
【００６７】
表３
１２℃でのチキンフィレ上のＳａｌｍｏｎｅｌｌａ  Ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍに対する、ε−ポリリジン（ε−ＰＬ）とモノ／ジ  グリセリドとの組み合わせの効果；ｌｏｇ１０コロニー形成ユニット（ＣＦＵ）／ｍｌで表される
【表３】
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【００６８】
個々には、該グリセロールエステルは、ε−ポリリジンの不在下において、殺傷する効果又は増殖を抑制する効果を何も示さなかった（表４）。ε−ポリリジンそれ自体は細胞数を減少するが、その効果は、脂肪酸誘導体の１つと組み合わされた場合よりも小さかった。これは特に、インキュベーションの１日後に明らかであった。該組み合わせについての数の減少は４ｌｏｇ１０から５ｌｏｇ１０に及び（表３）、単独添加としてのε−ポリリジンについての減少は２ｌｏｇ１０だけであった（表４）。これは、ε−ポリリジンと該脂肪酸誘導体との間の抑制における相乗作用の形があることを示唆する。これは、これらの組み合わせの効果が培養物中において研究されたｉｎ  ｖｉｔｒｏ研究により確認される（実験１）。
【００６９】
表４
１２℃でのチキンフィレ上のＳａｌｍｏｎｅｌｌａ  Ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍに対する、ε−ポリリジン及びＣ８及びＣ１０モノ／ジ  グリセリドの個々の効果；ｌｏｇ１０コロニー形成ユニット（ＣＦＵ）／ｍｌで表される
【表４】
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【００７０】
乳中のＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ  Ｏ１５７：Ｈ７の抑制の結果
ε−ポリリジンとモノ／ジ  グリセリドとの組み合わせによる強力な増殖抑制も、無脂肪乳において増殖するＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ  Ｏ１５７：Ｈ７について観察された（表５）。
【００７１】
表５
１２℃での乳中におけるＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ  Ｏ１５７：Ｈ７に対する、ε−ポリリジン（ε−ＰＬ）とモノ／ジ  グリセリドとの組み合わせの効果；ｌｏｇ１０コロニー形成ユニット（ＣＦＵ）／ｍｌで表される（ＮＤ：データ無し）
【表５】
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【００７２】
チキンフィレと対照的に、最初の死滅は観察されなかった。ε−ポリリジンとＣ８  モノ／ジ  グリセリド（グリセリル  モノ／ジ  オクタノエート）との組み合わせは特に有効であった。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【国際調査報告】
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