(57)【要約】    本発明は、式（ＩＩ）の新規の化合物および医薬品としてのそれらの使用に関する。本発明は、また、該化合物の製造方法、または１または複数の式（ＩＩ）の化合物を含有する薬学的組成物、および特にオレキシン受容体アンタゴニストとしてのそれらの使用を含む関連する局面に関する。これらの化合物は、特に、例えば、摂食障害、飲水障害、睡眠障害、または精神医学的および神経学的障害における認知機能障害の治療において、潜在的に有用である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（ＩＩ）の化合物であって、ここで、キラリティーは下記に示される通りであり、
【化１】
2010502587.tif 000010
式中、
Ｙは、−ＣＨ２−ＣＨ２−を示し；
Ｒ１は、フェニル基を示し、ここで、該フェニル基は、一、二、または三置換され得、ここで、該置換基は、独立して、（Ｃ１−４）アルキル、ハロゲンおよびトリフルオロメチルからなる群より選択され；
Ｒ２は、（Ｃ１−４）アルキルを示し；
Ｒ３は、（Ｃ１−４）アルキルを示し；
Ｒ４は、フェニル基を示し、ここで、該フェニル基は、非置換であるかまたは独立して一、二、または三置換され、ここで、該置換基は、独立して、（Ｃ１−４）アルキルおよびハロゲンからなる群より選択され；
Ｒ５は、（Ｃ１−４）アルキルを示す、
化合物、およびそれらの薬学的に許容される塩。
【請求項２】
Ｒ１が、フェニル基を示し、ここで、該フェニル基は、一、二、または三置換され得、ここで、該置換基は、独立して、メチル、エチル、フッ素、塩素、およびトリフルオロメチルより選択される、
請求項１記載の化合物、およびそれらの薬学的に許容される塩。
【請求項３】
Ｒ２が、メチルを示し；
Ｒ３が、エチルを示し；
Ｒ４が、フェニル基を示し；
Ｒ５が、メチルを示す、
請求項１および２記載の化合物、およびそれらの薬学的に許容される塩。
【請求項４】
（Ｒ）−２’−｛（Ｓ）−４−［２−（３，５−ジフルオロ−４−メチル−フェニル）−エチル］−１−エチル−３−メチル−４，６，７，８−テトラヒドロ−１Ｈ−１，２，５−トリアザ−アズレン−５−イル｝−Ｎ−メチル−２’−フェニル−アセトアミド；
（Ｒ）−２’−｛（Ｓ）−４−［２−（３，４−ジメチル−フェニル）−エチル］−１−エチル−３−メチル−４，６，７，８−テトラヒドロ−１Ｈ−１，２，５−トリアザ−アズレン−５−イル｝−Ｎ−メチル−２’−フェニル−アセトアミド；
（Ｒ）−２’−｛１−エチル−（Ｓ）−４−［２−（２−フルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニル）−エチル］−３−メチル−４，６，７，８−テトラヒドロ−１Ｈ−１，２，５−トリアザ−アズレン−５−イル｝−Ｎ−メチル−２’−フェニル−アセトアミド；および
（Ｒ）−２’−｛（Ｓ）−４−［２−（３，５−ジフルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニル）−エチル］−１−エチル−３−メチル−４，６，７，８−テトラヒドロ−１Ｈ−１，２，５−トリアザ−アズレン−５−イル｝−Ｎ−メチル−２’−フェニル−アセトアミド、
からなる群より選択される、請求項１〜３のいずれか一項記載の化合物、およびそれらの薬学的に許容される塩。
【請求項５】
医薬としての使用のための請求項１〜４のいずれか一項記載の化合物。
【請求項６】
気分変調性障害、例えば、大うつ病および循環気質、情動神経症、全てのタイプの躁うつ病性障害、せん妄、精神病性障害、統合失調症、緊張型統合失調症、妄想性パラノイア、適応障害および全ての群の人格障害；分裂感情障害；不安障害、例えば、全般性不安、強迫性障害、心的外傷後ストレス障害、パニック発作、全てのタイプの恐怖症性不安および回避；分離不安；全ての精神活性物質使用、乱用、要求および復活；全てのタイプの精神的または肉体的嗜癖、解離性障害、例えば、多重人格症候群および心因性健忘症；性および生殖機能障害；精神性機能障害および嗜好；麻薬に対する耐性または麻薬からの離脱症状；増加した麻酔リスク、麻酔反応性；視床下部性−副腎機能障害；乱れた生物および概日リズム；疾患、例えば、神経学的障害、例えば、神経障害性疼痛および下肢静止不能症候群に関連する睡眠障害；睡眠時無呼吸；ナルコレプシー；慢性疲労症候群；精神医学的障害に関連する不眠症；全てのタイプの特発性不眠症および睡眠時随伴症；睡眠覚醒スケジュール障害、例えば、時差ぼけ；健康な集団ならびに精神医学的および神経学的障害における全ての痴呆および認知機能障害；老化の精神機能障害；全てのタイプの健忘症；重篤な精神遅滞；ジスキネジーおよび筋疾患；筋肉痙縮、振せん、運動障害；自然および薬剤誘発ジスキネジー；神経変性障害、例えば、ハンチントン病、クロイツフェルト−ヤコブ病、アルツハイマー病およびツレット症候群；筋萎縮性側索硬化症；パーキンソン病；クッシング症候群；外傷性病変；脊髄損傷；頭部損傷；周産期低酸素症；聴力損失；耳鳴；脱髄疾患；脊髄および脳神経疾患；眼損傷；網膜症；てんかん；発作性障害；欠神発作、複雑部分および全般発作；レノックス−ガストー症候群；片頭痛および頭痛；疼痛障害；感覚消失および痛覚消失；疼痛に対する増加されたまたは誇張された感受性、例えば、痛覚過敏、カウザルギー、および異痛症；急性疼痛；熱傷疼痛；非定型顔面痛；神経障害性疼痛；背部痛；複合局所疼痛症候群ＩおよびＩＩ；関節痛；スポーツ損傷疼痛；歯痛；例えばＨＩＶによる感染に関連する疼痛；化学療法後の疼痛；脳卒中後の疼痛；手術後の疼痛；神経痛；変形性関節症；内臓痛に関連する状態、例えば、過敏性腸症候群；摂食障害；糖尿病；中毒性および代謝異常障害、例えば、脳無酸素症、糖尿病性神経障害およびアルコール症；食欲、味覚、摂食、または飲水障害；身体表現性障害、例えば、心気症；嘔吐／悪心；嘔吐；胃ジスキネジー；胃潰瘍；カルマン症候群（無嗅覚症）；耐糖能異常；腸運動ジスキネジー；視床下部疾患；下垂体疾患；高熱症候群、発熱、熱性発作、特発性発育不全；小人症；巨人症；先端巨大症；好塩基性腺腫；プロラクチノーマ；高プロラクチン血症；脳腫瘍、腺腫；良性前立腺肥大、前立腺癌；子宮内膜癌、乳癌、結腸癌；全てのタイプの精巣機能障害、受精能制御；生殖ホルモン異常；のぼせ；視床下部性性腺機能低下症、機能性または心因性無月経；膀胱失禁；喘息；アレルギー；全てのタイプの皮膚炎、ざ瘡および嚢胞、皮脂腺機能障害；心臓血管障害；心臓および肺疾患、急性およびうっ血性心不全；低血圧；高血圧；脂質異常症、高脂血症、インスリン耐性；尿閉；骨粗鬆症；狭心症；心筋梗塞；不整脈、冠動脈疾患、左室肥大；虚血性または出血性脳卒中；全てのタイプの脳血管障害、例えば、クモ膜下出血、虚血性または出血性脳卒中、および血管性痴呆；慢性腎不全および他の腎疾患；痛風；腎臓癌；尿失禁；ならびに一般的なオレキシン系機能障害に関連する他の疾患からなる群より選択される疾患の予防または治療用の医薬の製造のための、請求項１〜４のいずれか一項記載の化合物の使用。
【請求項７】
全てのタイプの、睡眠障害、ストレス性症候群、精神活性物質使用および乱用、健康な集団ならびに精神医学的および神経学的障害における認知機能障害、摂食または飲水障害からなる群より選択される疾患の予防または治療用の医薬の製造のための、請求項１〜４のいずれか一項記載の化合物の使用。摂食障害は、代謝機能障害；調節異常の食欲制御；強迫性肥満症；吐しゃ性過食症または神経性食欲不振症を含むと定義され得る。病理学的に修飾された食物摂取は、乱れた食欲（食物についての関心または嫌悪）；変化されたエネルギーバランス（摂取 対 消費）；食物品質の乱れた知覚（高い脂肪または炭水化物、高い嗜好性）；乱れた食物入手可能性（無制限の食事または不足）、または乱れた水分バランスから生じ得る。飲水障害は、精神医学的障害における多渇症および全ての他のタイプの過剰な水分摂取を含む。睡眠障害は、全てのタイプの睡眠時随伴症、不眠症、ナルコレプシーおよび過度の眠気の他の障害、睡眠関連ジストニー；下肢静止不能症候群；睡眠時無呼吸；時差ぼけ症候群；シフトワーク症候群、後退または前進睡眠相症候群、または精神医学的障害に関連する不眠症を含む。不眠症は、老化に関連する睡眠障害；慢性不眠症の間欠性処置；状況性一過性不眠症（新しい環境、騒音）、またはストレス；悲嘆；疼痛もしくは疾病に起因する短期不眠症を含むと定義される。不眠症はまた、ストレス性症候群、例えば、心的外傷後ストレス障害ならびに他のタイプおよびサブタイプの不安障害、例えば、全般性不安、強迫性障害、パニック発作ならびに全てのタイプの恐怖症性不安および回避を含み；精神活性物質使用、乱用、要求および復活は、全てのタイプの精神的または肉体的嗜癖、ならびにそれらの関連する耐性および依存成分として定義される。認知機能障害は、正常、健康、若年、成人または高齢集団において一時的にまたは慢性的に生じる、ならびにまた、精神医学的、神経学的、心臓血管および免疫障害において一時的にまたは慢性的に生じる、全てのタイプの注意、学習および記憶機能の欠損を含む。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、式（ＩＩ）の新規の化合物および医薬品としてのそれらの使用に関する。本発明はまた、該化合物の製造方法、１または複数の式（ＩＩ）の化合物を含有する薬学的組成物、および特にオレキシン受容体アンタゴニストとしてのそれらの使用を含む関連する局面に関する。
【背景技術】
【０００２】
オレキシン（オレキシンＡまたはＯＸ−ＡおよびオレキシンＢまたはＯＸ−Ｂ）は、２つの研究グループによって１９９８年に発見された新規の神経ペプチドであり、オレキシンＡは３３アミノ酸ペプチドであり、オレキシンＢは２８アミノ酸ペプチドである（例えば、非特許文献１参照）。オレキシンは、外側視床下部の個々のニューロンにおいて産生され、そしてＧタンパク質共役型受容体（ＯＸ１およびＯＸ２受容体）へ結合する。オレキシン−１受容体（ＯＸ１）はＯＸ−Ａについて選択的であり、オレキシン−２受容体（ＯＸ２）はＯＸ−ＡおよびＯＸ−Ｂに結合し得る。オレキシンはラットにおいて食物消費を刺激することがわかり、このことは、摂食行動を調節する中枢フィードバック機構におけるメディエーターとしてのこれらのペプチドについての生理学的役割を示唆している（例えば、非特許文献１参照）。他方、オレキシンが睡眠状態および覚醒状態を調節することも観察され、このことは、ナルコレプシーならびに不眠症および他の睡眠障害への潜在的に新しい治療的アプローチを開く（例えば、非特許文献２参照）。
【０００３】
オレキシン受容体は哺乳動物の脳において見られ、文献から公知であるように、病理学において多数の密接な関係を有し得る。
【０００４】
本発明は、ヒトＯＸ１およびＯＸ２受容体の非ペプチドアンタゴニストである、置換された１，４，５，６，７，８−ヘキサヒドロ−１，２，５−トリアザ−アズレン誘導体を提供する。これらの化合物は、特に、例えば、摂食障害、飲水障害、睡眠障害、または精神医学的および神経学的障害における認知機能障害の治療において、潜在的に有用である。
【０００５】
今まで、特異的にＯＸ１もしくはＯＸ２のいずれかをまたは同時に両方の受容体をアンタゴナイズする可能性を有する、いくつかの低分子量化合物が、公知である。万有製薬は、Ｎ−アシルテトラヒドロイソキノリン誘導体を特許請求している（例えば、特許文献１参照）。他のオレキシン受容体アンタゴニスト、例えば、新規のベンゾアゼピン誘導体が、開示されている（例えば、特許文献２参照）。
【０００６】
さらに、可能性のあるオレキシン受容体アンタゴニストとしての１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン誘導体のリード最適化のための溶液相化学の使用が、報告されている（例えば、非特許文献３参照）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】ＷＯ０１／８５６９３
【特許文献２】ＷＯ０２／０５１８３８
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】Sakurai T. et al., Cell, 1998, 92, 573-585
【非特許文献２】Chemelli R.M. et al., Cell, 1999, 98, 437-451
【非特許文献３】Chimia, 2003, 57, 5, 270-275
【発明の概要】
【０００９】
本発明の第１局面は、一般式ＩＩの化合物からなり、ここで、キラリティーは下記に示される通りであり、
【００１０】
【化１】
2010502587.tif 000002
【００１１】
式中、
Ｙは、−ＣＨ２−ＣＨ２−を示し；
Ｒ１は、フェニル基を示し、ここで、該フェニル基は、一、二、または三置換され得、ここで、該置換基は、独立して、（Ｃ１−４）アルキル、ハロゲンおよびトリフルオロメチルからなる群より選択され；
Ｒ２は、（Ｃ１−４）アルキルを示し；
Ｒ３は、（Ｃ１−４）アルキルを示し；
Ｒ４は、フェニル基を示し、ここで、該フェニル基は、非置換であるかまたは独立して一、二、または三置換され、ここで、該置換基は、独立して、（Ｃ１−４）アルキルおよびハロゲンからなる群より選択され；
Ｒ５は、（Ｃ１−４）アルキルを示す。
【００１２】
本発明の一部はまた、式（ＩＩ）の化合物およびそれらの薬学的に許容される塩である。
【００１３】
本明細書において、用語「ハロゲン」は、フッ素、塩素または臭素、好ましくはフッ素または塩素を意味する。本発明のさらなる好ましい態様において、用語「ハロゲン」はフッ素を意味する。
【００１４】
用語「（Ｃ１−４）アルキル」は、単独でまたは組み合わせて、１〜４個の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖アルキル基を意味する。（Ｃ１−４）アルキル基の例は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチルまたはｔｅｒｔ−ブチルである。
【００１５】
置換基Ｒ２またはＲ５について、用語「（Ｃ１−４）アルキル」は、好ましくはメチルを意味する。
【００１６】
置換基Ｒ３について、用語「（Ｃ１−４）アルキル」は、好ましくはメチル、エチルまたはブチル、より好ましくはエチルを意味する。
【００１７】
本発明において記載されるフェニル基は、独立して、一、二、または三置換され得、ここで、置換基は、独立して、（Ｃ１−４）アルキル、ハロゲンおよびトリフルオロメチルからなる群より選択される。例えば、フェニル、３，５−ジフルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニル、ジメチル−フェニル（例えば、２，３−ジメチル−フェニル、２，４−ジメチル−フェニル、３，４−ジメチル−フェニル）、３，５−ジフルオロ−４−メチル−フェニル、および２−フルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニルが挙げられる。
【００１８】
Ｒ１は、好ましくは、独立して、一、二、または三置換されている（好ましくは二、または三置換されている）フェニル基を示し、ここで、置換基は、独立して、（Ｃ１−４）アルキル、ハロゲン、およびトリフルオロメチルからなる群より選択される。好ましくは、置換基は、独立して、メチル、エチル、イソプロピル、トリフルオロメチル、フッ素、および塩素からなる群より選択される。より好ましくは、置換基は、独立して、メチル、エチル、トリフルオロメチル、フッ素、および塩素からなる群より選択される。例えば、３，５−ジフルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニル、ジメチル−フェニル（例えば、２，３−ジメチル−フェニル、２，４−ジメチル−フェニル、３，４−ジメチル−フェニル）、３，５−ジフルオロ−４−メチル−フェニル、および２−フルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニルが挙げられる。
【００１９】
Ｒ４は、非置換であるかまたは独立して一、二、または三置換されているフェニル基を示し、ここで、置換基は、独立して、（Ｃ１−４）アルキル、およびハロゲンからなる群より選択される。置換基Ｒ４について、用語「フェニル」は、好ましくは、非置換フェニルを意味する。
【００２０】
用語「薬学的に許容される塩」は、非毒性の、無機または有機酸および／または塩基付加塩を指す。"Salt selection for basic drugs", Int. J. Pharm. (1986), 33, 201-217が参照され得る。
【００２１】
本発明のさらなる好ましい態様は、
Ｙが、−ＣＨ２−ＣＨ２−を示し；
Ｒ１が、フェニル基を示し、ここで、該フェニル基は、一、二、または三置換され得、ここで、該置換基は、独立して、メチル、エチル、フッ素、塩素およびトリフルオロメチルより選択され、
Ｒ２が、（Ｃ１−４）アルキルを示し；
Ｒ３が、（Ｃ１−４）アルキルを示し；
Ｒ４が、フェニル基を示し、ここで、該フェニル基は、非置換であるかまたは独立して一、二、または三置換され、ここで、該置換基は、独立して、（Ｃ１−４）アルキルおよびハロゲンからなる群より選択され；
Ｒ５が、（Ｃ１−４）アルキルを示す、
式ＩＩの化合物である。
【００２２】
本発明のさらなる好ましい態様は、
Ｙが、−ＣＨ２−ＣＨ２−を示し；
Ｒ１が、フェニル基を示し、ここで、該フェニル基は、一、二、または三置換され得、ここで、該置換基は、独立して、メチル、エチル、フッ素、塩素およびトリフルオロメチルからなる群より選択され；
Ｒ２が、メチルを示し；
Ｒ３が、エチルを示し；
Ｒ４が、フェニル基を示し；
Ｒ５が、メチルを示す、
式ＩＩの化合物である。
【００２３】
式ＩＩの化合物は、１または複数の立体中心または不斉中心、例えば、１または複数の不斉炭素元素を含み得る。従って、式ＩＩの化合物は、立体異性体の混合物として、または好ましくは純粋な立体異性体として存在し得る。立体異性体の混合物は、当業者に公知の様式で分離され得る。
【００２４】
具体的に上記に記載される化合物は、２つのキラリティーの中心を含む。
【００２５】
好ましい態様において、一般式ＩＩの化合物は、以下のキラリティーを示す：（Ｒ）−２’および（Ｓ）−４、または（Ｒ）−２’および（Ｒ）−４。
【００２６】
より好ましい立体異性体は、下記に示されるキラリティーを示す：
【００２７】
【化２】
2010502587.tif 000003
【００２８】
特に好ましい化合物を以下に列挙する：
（Ｒ）−２’−｛（Ｓ）−４−［２−（３，５−ジフルオロ−４−メチル−フェニル）−エチル］−１−エチル−３−メチル−４，６，７，８−テトラヒドロ−１Ｈ−１，２，５−トリアザ−アズレン−５−イル｝−Ｎ−メチル−２’−フェニル−アセトアミド；
（Ｒ）−２’−｛（Ｓ）−４−［２−（３，４−ジメチル−フェニル）−エチル］−１−エチル−３−メチル−４，６，７，８−テトラヒドロ−１Ｈ−１，２，５−トリアザ−アズレン−５−イル｝−Ｎ−メチル−２’−フェニル−アセトアミド；
（Ｒ）−２’−｛１−エチル−（Ｓ）−４−［２−（２−フルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニル）−エチル］−３−メチル−４，６，７，８−テトラヒドロ−１Ｈ−１，２，５−トリアザ−アズレン−５−イル｝−Ｎ−メチル−２’−フェニル−アセトアミド；
（Ｒ）−２’−｛（Ｓ）−４−［２−（３，５−ジフルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニル）−エチル］−１−エチル−３−メチル−４，６，７，８−テトラヒドロ−１Ｈ−１，２，５−トリアザ−アズレン−５−イル｝−Ｎ−メチル−２’−フェニル−アセトアミド。
【００２９】
式ＩＩの化合物およびそれらの薬学的に許容される塩は、例えば経腸または非経口（parental）投与用の薬学的組成物の形態の、医薬として使用され得る。
【００３０】
一般式ＩＩの化合物は、本明細書中に記載される疾患の治療および／または予防に有用である。
【００３１】
１態様において、本発明は、本明細書中に記載される疾患の治療および／または予防のための方法に関し、該方法は、薬学的に活性な量の一般式ＩＩの化合物を被験体へ投与することを含む。
【００３２】
式（ＩＩ）に従う化合物は、気分変調性障害、例えば、大うつ病および循環気質、情動神経症、全てのタイプの躁うつ病性障害、せん妄、精神病性障害、統合失調症、緊張型統合失調症、妄想性パラノイア、適応障害および全ての群の人格障害；分裂感情障害；不安障害、例えば、全般性不安、強迫性障害、心的外傷後ストレス障害、パニック発作、全てのタイプの恐怖症性不安および回避；分離不安；全ての精神活性物質使用、乱用、要求および復活（reinstatement）；全てのタイプの精神的または肉体的嗜癖、解離性障害、例えば、多重人格症候群および心因性健忘症；性および生殖機能障害；精神性機能障害および嗜好；麻薬に対する耐性または麻薬からの離脱症状；増加した麻酔リスク、麻酔反応性；視床下部性−副腎機能障害；乱れた生物および概日リズム；疾患、例えば、神経学的障害、例えば、神経障害性疼痛および下肢静止不能症候群に関連する睡眠障害；睡眠時無呼吸；ナルコレプシー；慢性疲労症候群；精神医学的障害に関連する不眠症；全てのタイプの特発性不眠症および睡眠時随伴症；睡眠覚醒スケジュール障害、例えば、時差ぼけ；健康な集団ならびに精神医学的および神経学的障害における全ての痴呆および認知機能障害；老化の精神機能障害；全てのタイプの健忘症；重篤な精神遅滞；ジスキネジーおよび筋疾患；筋肉痙縮、振せん、運動障害；自然および薬剤誘発ジスキネジー；神経変性障害、例えば、ハンチントン病、クロイツフェルト−ヤコブ病、アルツハイマー病およびツレット症候群；筋萎縮性側索硬化症；パーキンソン病；クッシング症候群；外傷性病変；脊髄損傷；頭部損傷；周産期低酸素症；聴力損失；耳鳴；脱髄疾患；脊髄および脳神経疾患；眼損傷；網膜症；てんかん；発作性障害；欠神発作、複雑部分および全般発作；レノックス−ガストー症候群；片頭痛および頭痛；疼痛障害；感覚消失および痛覚消失；疼痛に対する増加されたまたは誇張された感受性、例えば、痛覚過敏、カウザルギー、および異痛症；急性疼痛；熱傷疼痛；非定型顔面痛；神経障害性疼痛；背部痛；複合局所疼痛症候群ＩおよびＩＩ；関節痛；スポーツ損傷疼痛；歯痛；例えばＨＩＶによる感染に関連する疼痛；化学療法後の疼痛；脳卒中後の疼痛；手術後の疼痛；神経痛；変形性関節症；内臓痛に関連する状態、例えば、過敏性腸症候群；摂食障害；糖尿病；中毒性および代謝異常障害、例えば、脳無酸素症、糖尿病性神経障害およびアルコール症；食欲、味覚、摂食、または飲水障害；身体表現性障害、例えば、心気症；嘔吐／悪心；嘔吐；胃ジスキネジー；胃潰瘍；カルマン症候群（無嗅覚症）；耐糖能異常；腸運動ジスキネジー；視床下部疾患；下垂体疾患；高熱症候群、発熱、熱性発作、特発性発育不全；小人症；巨人症；先端巨大症；好塩基性腺腫；プロラクチノーマ；高プロラクチン血症；脳腫瘍、腺腫；良性前立腺肥大、前立腺癌；子宮内膜癌、乳癌、結腸癌；全てのタイプの精巣機能障害、受精能制御；生殖ホルモン異常；のぼせ；視床下部性性腺機能低下症、機能性または心因性無月経；膀胱失禁；喘息；アレルギー；全てのタイプの皮膚炎、ざ瘡および嚢胞、皮脂腺機能障害；心臓血管障害；心臓および肺疾患、急性およびうっ血性心不全；低血圧；高血圧；脂質異常症、高脂血��、インスリン耐性；尿閉；骨粗鬆症；狭心症；心筋梗塞；不整脈、冠動脈疾患、左室肥大；虚血性または出血性脳卒中；全てのタイプの脳血管障害、例えば、クモ膜下出血、虚血性または出血性脳卒中、および血管性痴呆；慢性腎不全および他の腎疾患；痛風；腎臓癌；尿失禁；ならびに一般的なオレキシン系機能障害に関連する他の疾患からなる群より選択される疾患の予防または治療用の医薬の製造のために使用され得、これらの疾患の予防または治療に好適である。
【００３３】
式（ＩＩ）に従う化合物は、全てのタイプの、睡眠障害、ストレス性症候群、精神活性物質使用および乱用、健康な集団ならびに精神医学的および神経学的障害における認知機能障害、摂食または飲水障害からなる群より選択される疾患の予防または治療用の医薬の製造のために使用され得、これらの疾患の予防または治療に好適である。摂食障害は、代謝機能障害；調節異常の食欲制御；強迫性肥満症；吐しゃ性過食症または神経性食欲不振症を含むと定義され得る。病理学的に修飾された食物摂取は、乱れた食欲（食物についての関心または嫌悪）；変化されたエネルギーバランス（摂取 対 消費）；食物品質の乱れた知覚（高い脂肪または炭水化物、高い嗜好性）；乱れた食物入手可能性（無制限の食事または不足）、または乱れた水分バランスから生じ得る。飲水障害は、精神医学的障害における多渇症および全ての他のタイプの過剰な水分摂取を含む。睡眠障害は、全てのタイプの睡眠時随伴症、不眠症、ナルコレプシーおよび過度の眠気の他の障害、睡眠関連ジストニー；下肢静止不能症候群；睡眠時無呼吸；時差ぼけ症候群；シフトワーク症候群、後退または前進睡眠相症候群、または精神医学的障害に関連する不眠症を含む。不眠症は、老化に関連する睡眠障害；慢性不眠症の間欠性処置；状況性一過性不眠症（新しい環境、騒音）、またはストレス；悲嘆；疼痛もしくは疾病に起因する短期不眠症を含むと定義される。不眠症はまた、ストレス性症候群、例えば、心的外傷後ストレス障害ならびに他のタイプおよびサブタイプの不安障害、例えば、全般性不安、強迫性障害、パニック発作ならびに全てのタイプの恐怖症性不安および回避を含み；精神活性物質使用、乱用、要求および復活は、全てのタイプの精神的または肉体的嗜癖、ならびにそれらの関連する耐性および依存成分（component）として定義される。認知機能障害は、正常、健康、若年、成人または高齢集団において一時的にまたは慢性的に生じる、ならびにまた、精神医学的、神経学的、心臓血管および免疫障害において一時的にまたは慢性的に生じる、全てのタイプの注意、学習および記憶機能の欠損を含む。
【００３４】
本発明のさらなる好ましい態様において、式（ＩＩ）に従う化合物は、全てのタイプの不眠症、ナルコレプシーおよび過度の眠気の他の障害、睡眠関連ジストニー、下肢静止不能症候群、睡眠時無呼吸、時差ぼけ症候群、シフトワーク症候群、後退または前進睡眠相症候群、または精神医学的障害に関連する不眠症を含む、睡眠障害からなる群より選択される疾患の予防または治療用の医薬の製造のために使用され得、これらの疾患の予防または治療に好適である。
【００３５】
本発明の別の好ましい態様において、一般式（ＩＩ）に従う化合物は、正常、健康、若年、成人または高齢集団において一時的にまたは慢性的に生じる、ならびにまた、精神医学的、神経学的、心臓血管および免疫障害において一時的にまたは慢性的に生じる、全てのタイプの注意、学習および記憶機能の欠損を含む、認知機能障害からなる群より選択される疾患の予防または治療用の医薬の製造のために使用され得、これらの疾患の予防または治療に好適である。
【００３６】
本発明の別の好ましい態様において、一般式（ＩＩ）の化合物は、代謝機能障害；調節異常の食欲制御；強迫性肥満；吐しゃ性過食症または神経性食欲不振症を含む、摂食障害からなる群より選択される疾患の予防または治療用の医薬の製造のために使用され得、これらの疾患の予防または治療に好適である。
【００３７】
本発明の別の好ましい態様において、一般式（ＩＩ）の化合物は、全てのタイプの精神的または肉体的嗜癖、ならびにそれらの関連する耐性および依存成分を含む、精神活性物質使用および乱用からなる群より選択される疾患の予防または治療用の医薬の製造のために使用され得、これらの疾患の予防または治療に好適である。
【００３８】
薬学的組成物の製造は、好適な非毒性・不活性・治療的に適合性の固体または液体担体材料、および、必要に応じて通常の薬学的アジュバントと共に、式（ＩＩ）の記載の化合物およびそれらの薬学的に許容される塩を、必要に応じて他の治療的に価値のある物質と組み合わせて、生薬投与形態にすることによって、当業者に周知の様式（例えば、Mark Gibson, Editor, Pharmaceutical Preformulation and Formulation, IHS Health Group, Englewood, CO, USA, 2001；Remington, The Science and Practice of Pharmacy, 20th Edition, Philadelphia College of Pharmacy and Science；またはRemington, The Science and Practice of Pharmacy, 21st Edition (2005), Part 5, “Pharmaceutical Manufacturing”［Lippincott Williams & Wilkinsにより出版］を参照のこと）で行われ得る。
一般式ＩＩの化合物の一般的な製造方法：
【００３９】
【化３】
2010502587.tif 000004
【００４０】
アシル化メルドラム酸誘導体Ａを一置換ヒドラジンＢと反応させ、多工程順序（スキーム１および実験パートを参照のこと）によって、高度に位置選択的な様式で３−（２，５−二置換−２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−プロピルアミンＣが得られた。次いで、第一級アミンＣをカルボン酸誘導体Ｄでアシル化し、非環式アミドＥが得られ、これをＢｉｓｃｈｌｅｒ−Ｎａｐｉｅｒａｌｓｋｉ反応によって環状の７員環イミンＦへ変換した。引き続いてイミンを還元し、第二級アミン前駆体Ｇが得られ、これを最終的に求電子試薬ＨでＮ−アルキル化し、最終のオレキシン受容体アンタゴニストＩＩが得られた。
【００４１】
【化４】
2010502587.tif 000005
【００４２】
僅かに異なる経路において、第二級アミンＧは、エステル誘導体Ｊ（アミド誘導体Ｈの代わり）でＮ−アルキル化され得、中間体Ｋが得られ、これを、アミン誘導体Ｌとの反応によって最終化合物ＩＩへ直接変換することができ、またはこれを、先ず対応のカルボン酸Ｍへ加水分解し、続いてアミンＬと反応させ、最終化合物ＩＩが得られ得る。
【００４３】
一般的に、全ての化学変換は、文献に記載されるかまたは下記の手順に記載される周知の標準的な方法論に従って行われ得る。
一般式ＩＩの化合物の製造：
【００４４】
【化５】
2010502587.tif 000006
【００４５】
スキーム１：ピラゾール前駆体の合成
３−（２，５−二置換−２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−プロピルアミン誘導体の製造（スキーム１）は、トリエチルアミンの存在下でのジケテン１でのメルドラム酸２のアシル化で開始し、中間体３が得られた。トリエチルアミン存在下での３のメタノール性溶液と適切に置換されたヒドラジン誘導体（例えば、エチルヒドラジン４）との反応によって、位置選択的にピラゾロ誘導体５が形成された。酸性条件（メタノール中のｐ−ＴｓＯＨ）下での加水分解によって、メチルエステル６が形成され、これを対応のアルコール誘導体７へＬｉＡｌＨ４で定量的に還元した。対応のメシレートとしての第一級アルコール７の活性化、およびテトラブチルアンモニウムシアニドによって媒介される引き続いての求核置換によって、予想されるニトリル誘導体８が得られた。ニトリル８のボラン媒介還元、続いてベンジルオキシカルボニル部分での得られた第一級アミンの保護によって、フラッシュクロマトグラフィー後に、保護された化合物９が得られた。最後に、活性炭担持パラジウムを使用する加水分解によってアミノ官能基を脱保護し、予想される第一級アミン１０が得られた。
【００４６】
桂皮酸もヒドロ桂皮酸も市販されていない場合、それらの製造について、スキーム２に示される合成経路に従った。
【００４７】
【化６】
2010502587.tif 000007
【００４８】
スキーム２：ヒドロ桂皮酸誘導体の製造
「方法Ａ」に従って、ピリジン中かつピペリジンの存在下における、ベンズアルデヒド誘導体Ｎとマロン酸とのＫｎｏｅｖｅｎａｇｅｌ縮合によって、酸性後処理後、桂皮酸誘導体Ｏが得られた。標準的条件（１ａｔｍ  Ｈ２；１０％Ｐｄ−Ｃ；メタノール中；ｒｔ）下での接触水素化によって、対応のヒドロ桂皮酸Ｐが得られた。この合成順序に従って、化合物１１および１２を製造することができた。
【００４９】
「方法Ｂ」に従って、触媒系としてＰｄ（ＯＡｃ）２／ＤＡＢＣＯを使用するハロゲン化アリールＱとアクリル酸ブチルとのＨｅｃｋカップリングによって、予想される桂皮酸誘導体Ｒのブチルエステルが得られた。引き続いてのＲのパラジウム触媒水素化、続いてのブチルエステルの鹸化によって、目的のヒドロ桂皮酸誘導体Ｓが得られた。この合成経路に従うことによって、化合物１３および１４を製造することができた。
【００５０】
スキーム３は、最終化合物の製造に適用される順序を要約する（Ｙ＝−ＣＨ２ＣＨ２−の場合の例）。例えば、３−（２−エチル−５−メチル−２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−プロピルアミン１０は、ＰｙＢＯＰの存在下において、ヒドロ桂皮酸誘導体１４でアシル化され得、アミド誘導体１５が得られる。Ｂｉｓｃｈｌｅｒ−Ｎａｐｉｅｒａｌｓｋｉ反応の条件（ＰＯＣｌ３、アセトニトリル中；還流）下で１５を処理することによって、十分な収率で環状イミン１６が得られ、これを対応の第二級アミン１７へ水素化ホウ素ナトリウムで還元することができた。７０℃での２−ブタノン中におけるトシレート１８（ＷＯ２００５／１１８５４８に記載）とのＳＮ２反応によって、ジアステレオ異性体の等モル混合物１９が得られた。最終的に、ＨＰＬＣによる精製によって、純粋なジアステレオ異性体２０［（Ｓ；Ｒ）立体配置を有する］および２１［（Ｒ；Ｒ）立体配置を有する］を単離することができた。
【００５１】
【化７】
2010502587.tif 000008
【００５２】
スキーム３：最終化合物（例えば、２０および２１）の合成
以下の実施例は、本発明を例示し、しかしその範囲を限定しない。全ての温度は℃で記載される。
略語（本明細書中において使用される場合）
ＡｃＯＥｔ    酢酸エチル
ａｑ．    水性
ＢＨ３．ＴＨＦ    ボラン−テトラヒドロフラン錯体
Ｂｏｃ    ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル
ＣｌＣＯ２Ｂｎ    クロロギ酸ベンジル
ＤＡＢＣＯ    １，４−ジアザビシクロ［２．２．２］オクタン
ＤＣＭ    ジクロロメタン
ＤＩＰＥＡ    Ｎ−エチルジイソプロピルアミン
ＤＭＦ    Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ    ジメチルスルホキシド
ＥＤＣ    Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド
ＥＬＳＤ    蒸発光散乱検出
Ｅｔ    エチル
ｈ    時間
ＨＰＬＣ    高速液体クロマトグラフィー
ＨＶ    高真空
Ｋ２ＣＯ３    炭酸カリウム
ＬｉＡｌＨ４    水素化アルミニウムリチウム
ＬＣ−ＭＳ    液体クロマトグラフィー−質量分析
ＭｅＣＮ    アセトニトリル
ＭｅＯＨ    メタノール
ＭｅＳＯ２Ｃｌ    塩化メタンスルホニル
ｍｉｎ．    分
ＭＳ    質量分析
ｎ−Ｂｕ４ＮＣＮ    テトラブチルアンモニウムシアニド
ＮａＢＨ４    水素化ホウ素ナトリウム
ＮａＯＨ    水酸化ナトリウム
ＮＥｔ３    トリエチルアミン
ＰＢＳ    リン酸緩衝生理食塩水
Ｐｄ（Ｃ）    活性炭担持パラジウム
Ｐｄ（ＯＡｃ）２    酢酸パラジウム（ＩＩ）
ＰＯＣｌ３    オキシ塩化リン
ｐ−ＴｓＯＨ    パラ−トルエンスルホン酸
ＰｙＢＯＰ    ベンゾトリアゾール−１−イル−オキシ−トリス−ピロリジノ−ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート
ｒｔ    室温
ｓａｔ．    飽和
ＴＥＡ    トリエチルアミン
ＴＦＡ    トリフルオロ酢酸
ＴＨＦ    テトラヒドロフラン
ＴＬＣ    薄層クロマトグラフィー
ｔＲ    保持時間
ＵＶ    紫外線
Ｖｉｓ    可視光
【実施例】
【００５３】
一般手順および実施例：
ＨＰＬＣ条件：
分析：Ｚｏｒｂａｘ  ５９  ＳＢ  Ａｑｕａカラム、４．６×５０ｍｍ、Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ製。溶離剤：Ａ：アセトニトリル；Ｂ：Ｈ２Ｏ＋０．０４％ＴＦＡ。勾配：９％Ｂ→５％Ｂ、２分。流量：４．５ｍＬ／分。検出：ＵＶ／Ｖｉｓ＋ＭＳ。
【００５４】
分取：Ｗａｔｅｒｓ  Ｘｔｅｒｒａ  ＲＰ１８（ラージ）、７５×３０ｍｍ。溶離剤：Ａ：アセトニトリル；Ｂ：Ｈ２Ｏ＋０．０５％水酸化アンモニウム（２５％ａｑ．）。勾配：９０％Ｂ→１０％Ｂ、６．５分。流量：７５ｍＬ／分。検出：ＵＶ＋ＥＬＳＤ。
【００５５】
前駆体および中間体の調製：
５−（１−ヒドロキシ−３−オキソ−ブチリデン）−２，２−ジメチル−［１，３］ジオキサン−４，６−ジオン
メルドラム酸（５０．０ｇ；３４６．９ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（３００ｍｌ）に溶解し、そしてＮＥｔ３（４８．３ｍｌ；３４６．９ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を０℃へ冷却し、その後、ジケテン（３１．９ｍｌ；４１６．３ｍｍｏｌ）を滴下した。反応混合物をｒ．ｔ．で２時間撹拌し、０℃へ再び冷却し、そして１Ｍ塩酸（７００ｍｌ）を徐々に添加した。層を分離し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮し、生成物５−（１−ヒドロキシ−３−オキソ−ブチリデン）−２，２−ジメチル−［１，３］ジオキサン−４，６−ジオンが橙色固体として得られ、これをＨＶ下でさらに乾燥した（７９．３６ｇ；１００％）。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．５５ｍｉｎ．；［Ｍ＋Ｈ］＋：イオン化無し。
【００５６】
５−（２−エチル−５−メチル−２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−２，２−ジメチル−［１，３］ジオキサン−４，６−ジオン
５−（１−ヒドロキシ−３−オキソ−ブチリデン）−２，２−ジメチル−［１，３］ジオキサン−４，６−ジオン（１０．０ｇ；４３．８ｍｍｏｌ）を無水メタノール（１４０ｍｌ）に溶解し、０℃へ冷却し、その後、無水メタノール（６０ｍｌ）中のエチルヒドラジンオキサレート（７．２４ｇ；４８．２ｍｍｏｌ）およびＮＥｔ３（１３．４ｍｌ；９６．４ｍｍｏｌ）の溶液を１５分内で滴下した。添加が完了すると、混合物を６０℃へ徐々に加温し、そして撹拌を９０分間継続した。反応混合物を減圧下で濃縮乾固し、そしてＨＶ下でさらに乾燥し、生成物５−（２−エチル−５−メチル−２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−２，２−ジメチル−［１，３］ジオキサン−４，６−ジオンが橙色オイル（１１．０５ｇ；定量的収量）として得られ、これをさらに精製することなく次の工程において使用した。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．５２ｍｉｎ．；［Ｍ＋Ｈ］＋：イオン化無し。
【００５７】
（２−エチル−５−メチル−２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−酢酸メチルエステル
５−（２−エチル−５−メチル−２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−２，２−ジメチル−［１，３］ジオキサン−４，６−ジオン（１１．０５ｇ；４３．８ｍｍｏｌ）を無水メタノール（１２５ｍｌ）に溶解し、続いてｐ−ＴｓＯＨ×Ｈ２Ｏ（３６．６８ｇ；１９２．８５ｍｍｏｌ）を添加した。得られた反応混合物を６０℃へ７５分間加熱し、０℃へ冷却し、そしてトリエチルアミン（２６．８５ｍｌ；１９２．９ｍｍｏｌ）を２０分間にわたって滴下した。得られた混合物を減圧下で濃縮した。残渣をＤＣＭ（２００ｍｌ）に入れ、水（２×７５ｍｌ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝３０／１）による精製によって、純粋な生成物（２−エチル−５−メチル−２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−酢酸メチルエステルが黄色オイルとして得られ、これをＨＶ下でさらに乾燥した（５．５６ｇ；７０％）。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．６２ｍｉｎ．；［Ｍ＋Ｈ］＋＝１８３．１８ｇ／ｍｏｌ。
【００５８】
２−（２−エチル−５−メチル−２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−エタノール
氷冷したＴＨＦ（２５０ｍｌ）へ、水素化アルミニウムリチウム（２．２０７ｇ；５８．１７１ｍｍｏｌ）を一度に添加した。得られた灰色懸濁液を窒素下において０℃でさらに撹拌し、そして無水ＴＨＦ（８０ｍｌ）中の（２−エチル−５−メチル−２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−酢酸メチルエステル（１０．０ｇ；５４．８７８ｍｍｏｌ）の溶液を３０分で滴下した。得られた混合物を０℃で１時間撹拌した。次いで、氷冷した反応混合物を、連続して水（２．２ｍｌ）、１５％ＮａＯＨ水溶液（２．２ｍｌ）、および水（６．６ｍｌ）で処理した。ｒｔでさらに撹拌した後（３０分）、得られた沈殿物を濾過し、そしてジエチルエーテルで洗浄した。得られた濾液を硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮乾固し、そしてＨＶ下でさらに乾燥し、生成物２−（２−エチル−５−メチル−２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−エタノールが黄色オイル（８．４５ｇ；１００％）として得られた。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．３６ｍｉｎ．；［Ｍ＋Ｈ］＋＝１５５．１６ｇ／ｍｏｌ。
【００５９】
３−（２−エチル−５−メチル−２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−プロピオニトリル
無水ＴＨＦ（１０ｍｌ）中の塩化メタンスルホニル（１．８６ｍｌ；２３．９５０ｍｍｏｌ）の溶液を、無水ＴＨＦ（１００ｍｌ）中の２−（２−エチル−５−メチル−２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−エタノール（３．３５８ｇ，２１．７７５ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（４．１ｍｌ；２９．３９０ｍｍｏｌ）の氷冷した溶液へ滴下した。得られた混合物を窒素下において０℃で１５分間撹拌した。反応混合物を濾過し、そして固体を無水ＴＨＦ（６０ｍｌ）で洗浄した。次いで、テトラブチルアンモニウムシアニド（１４．６１１ｇ；５４．４４０ｍｍｏｌ）をｒｔで一度に添加した。得られた橙色溶液を７５℃へ１時間加熱した。反応混合物をｒｔへ冷却し、その後、水（３０ｍｌ）、およびジエチルエーテル（１００ｍｌ）を連続的に添加した。分離後、水層をさらに酢酸エチル（３×１００ｍｌ）で抽出した。次いで、混合した有機抽出物を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０／１）によって、純粋な生成物３−（２−エチル−５−メチル−２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−プロピオニトリルが黄色オイルとして得られ、これをＨＶ下でさらに乾燥した（３．０７ｇ；８６％）。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．５７ｍｉｎ．；［Ｍ＋Ｈ］＋＝１６４．３９ｇ／ｍｏｌ。
【００６０】
［３−（２−エチル−５−メチル−２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−プロピル］−カルバミン酸ベンジルエステル
無水ＴＨＦ（１００ｍｌ）中の３−（２−エチル−５−メチル−２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−プロピオニトリル（３．０７０ｇ；１８．８０９ｍｍｏｌ）の氷冷した溶液へ、ＴＨＦ中の１Ｎ  ＢＨ３．ＴＨＦ錯体溶液（７５ｍｌ；７５ｍｍｏｌ）を徐々に添加した。次いで、得られた溶液を７５℃へ１時間加熱した。０℃へ冷却した後、２Ｎ  ＨＣｌ水溶液（１１５ｍｌ；２３０ｍｍｏｌ）を注意深く添加した。得られた溶液を５０℃で１時間撹拌した。０℃へ冷却した後、固体Ｋ２ＣＯ３（２０．７９４ｇ；１５０．４６９ｍｍｏｌ）を少量ずつ添加し、続いてクロロギ酸ベンジル（３．０７ｍｌ；２０．６８９ｍｍｏｌ）を滴下した。得られた混合物を０℃で１時間、次いでｒｔで一晩撹拌した。次いで、ジエチルエーテル（１００ｍｌ）および水（１００ｍｌ）を添加し、そして水層をさらにジエチルエーテル（２×１００ｍｌ）で抽出した。合わせた有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル；酢酸エチル／ヘプタン＝１／１⇒酢酸エチル）による精製によって、純粋な生成物［３−（２−エチル−５−メチル−２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−プロピル］−カルバミン酸ベンジルエステルが無色オイルとして得られ、これをＨＶ下でさらに乾燥した（４．２１ｇ；７４％）。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．７８ｍｉｎ．；［Ｍ＋Ｈ］＋＝３０２．５１ｇ／ｍｏｌ。
【００６１】
３−（２−エチル−５−メチル−２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−プロピルアミン
［３−（２−エチル−５−メチル−２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−プロピル］−カルバミン酸ベンジルエステル（１．４００ｇ；４．６４５ｍｍｏｌ）および１０％活性炭担持パラジウム（２８０ｍｇ）の混合物を、窒素下に置き、その後、メタノール（２５ｍｌ）を注意深く添加した。懸濁液を真空下、次いで水素（１ａｔｍ）下に置き、そして反応混合物をｒｔで１時間撹拌した。セライトで濾過し、そしてメタノールでセライトをさらに洗浄した後、得られた濾液を減圧下で濃縮乾固した。ＨＶ下でさらに乾燥した後、黄色オイルとしての純粋な生成物３−（２−エチル−５−メチル−２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−プロピルアミン（０．７７４ｇ；１００％）が、さらに精製することなく次の工程について使用することができた。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．２１ｍｉｎ．（ブロードなピーク）；［Ｍ＋Ｈ］＋＝１６８．３９ｇ／ｍｏｌ。
【００６２】
３−（３，４−ジメチル−フェニル）−アクリル酸
ピリジン（８５ｍｌ）中の３，４−ジメチルベンズアルデヒド（１５．０００ｇ；１１１．７９３ｍｍｏｌ）およびマロン酸（２２．１０３ｇ；２１２．４１０ｍｍｏｌ）の懸濁液を窒素下で５０℃へ加熱した。次いで、ピペリジン（８．５ｍｌ；８６．０７９ｍｍｏｌ）を滴下し（５分間にわたって）、そして得られた懸濁液を７５℃へ２時間加熱した。反応混合物を０℃へ冷却し、そして水（１２００ｍｌ）中の濃塩酸（１２Ｎ；９６ｍｌ）の氷冷した溶液へ注いだ。沈殿した無色生成物を濾別し、そして水（３×１００ｍｌ）で洗浄した。残存している水を減圧下、次いでＨＶ下で蒸発させ、乾燥した生成物３−（３，４−ジメチル−フェニル）−アクリル酸が無色固体（１９．２３ｇ；９８％）として得られた。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．８８ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：イオン化無し。
【００６３】
３−（３，４−ジメチル−フェニル）−プロピオン酸
３−（３，４−ジメチル−フェニル）−アクリル酸（１９．２６９ｇ；１０９．３５５ｍｍｏｌ）および１０％活性炭担持パラジウム（１．９２０ｇ）の混合物を窒素下に置き、その後、メタノール（３００ｍｌ）を注意深く添加した。得られた懸濁液を真空下、次いで水素（１ａｔｍ）下に置き、そして反応混合物をｒｔで４時間激しく撹拌した。反応混合物をセライトのパッドにおいて濾過し、そして減圧下で濃縮し、予想される生成物３−（３，４−ジメチル−フェニル）−プロピオン酸が灰色固体として得られ、これをＨＶ下でさらに乾燥した（１９．０７０ｇ；９８％）。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．８５ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：イオン化無し。
【００６４】
３−（２−フルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニル）−アクリル酸
ピリジン（２０ｍｌ）中の２−フルオロ−４−（トリフルオロメチル）ベンズアルデヒド（５．０００ｇ；２６．０２７ｍｍｏｌ）およびマロン酸（５．１４５ｇ；４９．４５１ｍｍｏｌ）の懸濁液を窒素下で５０℃へ加熱した。次いで、ピペリジン（２ｍｌ；２０．０４０ｍｍｏｌ）を滴下し（５分間にわたって）、そして得られた懸濁液を７５℃へ３時間２０分間加熱した。反応混合物を０℃で冷却し、そして水（４００ｍｌ）中の濃塩酸（１２Ｎ；３２ｍｌ）の氷冷した溶液へ注いだ。沈殿した無色生成物を濾別し、そして水（３×１００ｍｌ）で洗浄した。残存している水を減圧下、次いでＨＶ下で蒸発させ、乾燥した生成物３−（２−フルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニル）−アクリル酸が無色固体（５．０３０ｇ；８２．５％）として得られた。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．８９ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：イオン化無し。
【００６５】
３−（２−フルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニル）−プロピオン酸
３−（２−フルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニル）−アクリル酸（５．９３７ｇ；２５．３５６ｍｍｏｌ）および１０％活性炭担持パラジウム（０．５９０ｇ）の混合物を窒素下に置き、その後、メタノール（６０ｍｌ）を注意深く添加した。得られた懸濁液を真空下、次いで水素（１ａｔｍ）下に置き、そして反応混合物をｒｔで４時間激しく撹拌した。反応混合物をセライトのパッドで濾過し、そして減圧下で濃縮し、予想される生成物３−（２−フルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニル）−プロピオン酸が灰色固体として得られ、これをＨＶ下でさらに乾燥した（４．５９０ｇ；７７％）。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．８８ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：イオン化無し。
【００６６】
５−ブロモ−１，３−ジフルオロ−２−メチル−ベンゼン
無水ジクロロメタン（１０ｍｌ）中の塩化メタンスルホニル（４．７２ｍｌ；６０．７９４ｍｍｏｌ）の溶液を、ジクロロメタン（２００ｍｌ）中の４−ブロモ−２，６−ジフルオロベンジルアルコール（１１．３００ｇ；５０．６６９ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１４．１ｍｌ；１０１．３３８ｍｍｏｌ）の氷冷した溶液へ滴下した（５分間にわたって）。得られた溶液を３０分間窒素下において０℃で撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（２００ｍｌ）で希釈し、そして水（１００ｍｌ）を添加した。有機層を、連続的に１Ｎ塩酸（１００ｍｌ）、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（１００ｍｌ）で、そして最後にブライン（１００ｍｌ）で洗浄した。次いで、有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮乾固し、橙色固体が得られ、これをさらにＨＶ下で乾燥した（１５．１７０ｇ；９９．５％）。メシレートについてのＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．９２ｍｉｎ．；［Ｍ＋Ｈ］＋：イオン化無し。
【００６７】
無水ＴＨＦ（９０ｍｌ）中の得られたメシレート誘導体（１５．１７０ｇ；５０．３８１ｍｍｏｌ）の氷冷した溶液へ、スーパーヒドリドＬｉＥｔ３ＢＨの溶液（ＴＨＦ中１Ｎ；１０６ｍｌ；１０６ｍｍｏｌ）を滴下した。得られた混合物を０℃で５分間、次いでｒｔで３０分間撹拌した。溶液を０℃へ冷却し、その後、水（１００ｍｌ）を滴下し、そしてジエチルエーテル（２００ｍｌ）を添加した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、そして減圧下で注意深く濃縮した（注意！低沸点を有する生成物、従ってロータリーエボポレーターのバスを３０℃で加熱すること！）。フラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２）による精製によって、純粋な生成物５−ブロモ−１，３−ジフルオロ−２−メチル−ベンゼンが無色オイル（６．９１０ｇ；６６％）として得られた。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝１．００ｍｉｎ．；［Ｍ＋Ｈ］＋：イオン化無し。
【００６８】
３−（３，５−ジフルオロ−４−メチル−フェニル）−アクリル酸ブチルエステル
無水ＤＭＦ（２００ｍｌ）中の５−ブロモ−１，３−ジフルオロ−２−メチル−ベンゼン（６．９１０ｇ；３３．３７９ｍｍｏｌ）の溶液へ、連続的に、アクリル酸ブチル（７．１５ｍｌ；５０．０６２ｍｍｏｌ）、ＤＡＢＣＯ（１５７ｍｇ；１．３３３ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（４．６１２ｇ；３３．３７９ｍｍｏｌ）、および酢酸パラジウム（１５０ｍｇ；０．６６９ｍｍｏｌ）を添加した。得られた褐色懸濁液を１２０℃で１時間撹拌した。反応混合物をｒｔへ冷却し、その後、ジエチルエーテル（４００ｍｌ）を添加した。次いで、この混合物を水（２×２００ｍｌ）で洗浄し、そして混合した水層をさらにジエチルエーテル（１５０ｍｌ）で抽出した。合わせた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮乾固した。フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル；ＤＣＭ／ヘプタン＝１／１⇒ＤＣＭ）による精製によって、純粋な生成物３−（３，５−ジフルオロ−４−メチル−フェニル）−アクリル酸ブチルエステルが黄色オイルとして得られ、これをＨＶ下でさらに乾燥した（４．６９ｇ；５５％）。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝１．１０ｍｉｎ．；［Ｍ＋Ｈ］＋：イオン化無し。
【００６９】
３−（３，５−ジフルオロ−４−メチル−フェニル）−プロピオン酸ブチルエステル
３−（３，５−ジフルオロ−４−メチル−フェニル）−アクリル酸ブチルエステル（７．６５１ｇ；３０．０８９ｍｍｏｌ）および１０％活性炭担持パラジウム（０．７６０ｇ）の混合物を窒素下に置き、その後、メタノール（１００ｍｌ）を注意深く添加した。得られた懸濁液を真空下、次いで水素（１ａｔｍ）下に置き、そして反応混合物をｒｔで２時間４５分間激しく撹拌した。反応混合物をセライトのパッドにおいて濾過し、そして減圧下で濃縮し、予想される生成物３−（３，５−ジフルオロ−４−メチル−フェニル）−プロピオン酸ブチルエステルが黄色オイルとして得られ、これをＨＶ下でさらに乾燥した（６．９６０ｇ；９０％）。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝１．１０ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：イオン化無し。
【００７０】
３−（３，５−ジフルオロ−４−メチル−フェニル）−プロピオン酸
メタノール（１５０ｍｌ）および水（２５ｍｌ）中の３−（３，５−ジフルオロ−４−メチル−フェニル）−プロピオン酸ブチルエステル（６．９６０ｇ；２７．１５７ｍｍｏｌ）の溶液へ、ｒｔで、１Ｎ  ＮａＯＨ水溶液（６８ｍｌ；６８ｍｍｏｌ）を添加した。得られた溶液をｒｔで１時間さらに撹拌した。次いで、メタノールを減圧下で除去した。水（２５ｍｌ）を添加し、そしてｐＨ＝２にするために混合物を１Ｎ  ＨＣｌ水溶液（６８ｍｌ）で酸性化した。ジクロロメタン（１５０ｍｌ）を添加し、そして層を振盪しそして分離した。水層をジクロロメタン（５０ｍｌ）でさらに抽出した。混合した有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮乾固した。生成物３−（３，５−ジフルオロ−４−メチル−フェニル）−プロピオン酸が淡黄色固体として得られ、これをＨＶ下でさらに乾燥した（５．０９０ｇ；９４％）。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．８６ｍｉｎ．；［Ｍ＋Ｈ］＋：イオン化無し。
【００７１】
３−（３，５−ジフルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニル）−アクリル酸ブチルエステル
無水ＤＭＦ（２３５ｍｌ）中の３，５−ジフルオロ−４−（トリフルオロメチル）ブロモベンゼン（１０．０００ｇ；３８．３１６ｍｍｏｌ）の溶液へ、連続的に、アクリル酸ブチル（８．２ｍｌ；５７．４７４ｍｍｏｌ）、ＤＡＢＣＯ（１７２ｍｇ；１．５３３ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（５．２９５ｇ；３８．３１６ｍｍｏｌ）、および酢酸パラジウム（ＩＩ）（１７２ｍｇ；０．７６６ｍｍｏｌ）を添加した。得られた褐色懸濁液を１２０℃で２時間３０分間撹拌した。反応混合物をｒｔへ冷却し、その後、ジエチルエーテル（５００ｍｌ）を添加した。次いで、この混合物を連続的に水（１×４００ｍｌ；１×２００ｍｌ）およびブライン（５０ｍｌ）で洗浄し、そして混合した水層をジエチルエーテル（３００ｍｌ）でさらに抽出した。合わせた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮乾固した。フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル；ＤＣＭ／ヘプタン＝１／１）による精製によって、純粋な生成物３−（３，５−ジフルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニル）−アクリル酸ブチルエステルが僅かにベージュ色の固体として得られ、これをＨＶ下でさらに乾燥した（１０．１２０ｇ；８６％）。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝１．１２ｍｉｎ．；［Ｍ＋Ｈ］＋：イオン化無し。
【００７２】
３−（３，５−ジフルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニル）−プロピオン酸ブチルエステル
３−（３，５−ジフルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニル）−アクリル酸ブチルエステル（８．８４９ｇ；２８．７１０ｍｍｏｌ）および１０％活性炭担持パラジウム（０．８８５ｇ）の混合物を窒素下に置き、その後、メタノール（１２０ｍｌ）を注意深く添加した。得られた懸濁液を真空下、次いで水素（１ａｔｍ）下に置き、そして反応混合物をｒｔで３時間３０分間激しく撹拌した。反応混合物をセライトのパッドで濾過し、そして減圧下で濃縮し、予想される生成物３−（３，５−ジフルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニル）−プロピオン酸ブチルエステルが黄色オイルとして得られ、これをＨＶ下でさらに乾燥した（８．６２２ｇ；９７％）。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝１．１１ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：イオン化無し。
【００７３】
３−（３，５−ジフルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニル）−プロピオン酸
メタノール（１６８ｍｌ）および水（３２ｍｌ）中の３−（３，５−ジフルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニル）−プロピオン酸ブチルエステル（７．６５８ｇ；２４．６８２ｍｍｏｌ）の溶液へ、ｒｔで、１Ｎ  ＮａＯＨ水溶液（４９．４ｍｌ；４９．４ｍｍｏｌ）を添加した。得られた溶液をｒｔで４５分間さらに撹拌した。次いで、メタノールを減圧下で除去した。水（２５ｍｌ）を添加し、そしてｐＨ＝２にするために混合物を１Ｎ  ＨＣｌ水溶液（５０ｍｌ）で酸性化した。ジクロロメタン（１５０ｍｌ）を添加し、そして層を振盪しそして分離した。水層をジクロロメタン（５０ｍｌ）でさらに抽出した。混合した有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮乾固した。生成物３−（３，５−ジフルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニル）−プロピオン酸が無色固体として得られ、これをＨＶ下でさらに乾燥した（６．２１６ｇ；９９％）。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．９０ｍｉｎ．；［Ｍ＋Ｈ］＋：イオン化無し。
【００７４】
３−（３，５−ジフルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニル）−Ｎ−［３−（２−エチル−５−メチル−２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−プロピル］−プロピオンアミド
無水ＤＭＦ（１７ｍｌ）中の３−（３，５−ジフルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニル）−プロピオン酸（１．０３１ｇ；４．０５６ｍｍｏｌ）の溶液へ、連続的に、ＰｙＢＯＰ（２．３２２ｇ；４．４６２ｍｍｏｌ）、無水ＤＭＦ（５ｍｌ）中の３−（２−エチル−５−メチル−２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−プロピルアミン（０．６７８ｇ；４．０５６ｍｍｏｌ）の溶液、そして最後にＮ−エチルジイソプロピルアミン（１．７４ｍｌ；１０．１４０ｍｍｏｌ）を添加した。得られた溶液を１時間窒素下においてｒｔでさらに撹拌した。酢酸エチル（１００ｍｌ）を添加し、そして得られた溶液をブラインおよび水の１／１混合液（３×７０ｍｌ）で洗浄した。得られた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮乾固した。粗橙色オイル（２．７３７ｇ）をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝２０／１）によって精製し、純粋な生成物３−（３，５−ジフルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニル）−Ｎ−［３−（２−エチル−５−メチル−２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−プロピル］−プロピオンアミドがベージュ色の固体として得られ、これをＨＶ下でさらに乾燥した（１．３８４ｇ；８５％）。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．８４ｍｉｎ．；［Ｍ＋Ｈ］＋＝４０４．５３ｇ／ｍｏｌ。
【００７５】
３−（３，４−ジメチル−フェニル）−Ｎ−［３−（２−エチル−５−メチル−２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−プロピル］−プロピオンアミド
無水ＤＭＦ（１５ｍｌ）中の３−（３，４−ジメチル−フェニル）−プロピオン酸（０．７９６ｇ；４．４７０ｍｍｏｌ）の溶液へ、連続的に、ＰｙＢＯＰ（２．５５８ｇ；４．９１７ｍｍｏｌ）、無水ＤＭＦ（１０ｍｌ）中の３−（２−エチル−５−メチル−２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−プロピルアミン（０．７４７ｇ；４．４７０ｍｍｏｌ）の溶液、そして最後にＮ−エチルジイソプロピルアミン（１．９１ｍｌ；１１．１７５ｍｍｏｌ）を添加した。得られた溶液を１時間窒素下においてｒｔでさらに撹拌した。酢酸エチル（１００ｍｌ）を添加し、そして得られた溶液を、ブラインおよび水の１／１混合液（３×３０ｍｌ）、そして水（３０ｍｌ）で洗浄した。得られた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮乾固した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１５／１）によって精製し、純粋な生成物３−（３，４−ジメチル−フェニル）−Ｎ−［３−（２−エチル−５−メチル−２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−プロピル］−プロピオンアミドがベージュ色の固体として得られ、これをＨＶ下でさらに乾燥した（１．２５０ｇ；８５％）。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．８２ｍｉｎ．；［Ｍ＋Ｈ］＋＝３２８．２４ｇ／ｍｏｌ。
【００７６】
Ｎ−［３−（２−エチル−５−メチル−２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−プロピル］−３−（２−フルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニル）−プロピオンアミド
無水ＤＭＦ（１５ｍｌ）中の３−（２−フルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニル）−プロピオン酸（０．７７６ｇ；３．２８６ｍｍｏｌ）の溶液へ、連続的に、ＰｙＢＯＰ（１．８８０ｇ；３．６１４ｍｍｏｌ）、無水ＤＭＦ（１０ｍｌ）中の３−（２−エチル−５−メチル−２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−プロピルアミン（０．５４９ｇ；３．２８６ｍｍｏｌ）の溶液、そして最後にＮ−エチルジイソプロピルアミン（１．４０ｍｌ；８．２１５ｍｍｏｌ）を添加した。得られた溶液を１時間窒素下においてｒｔでさらに撹拌した。酢酸エチル（１００ｍｌ）を添加し、そして得られた溶液をブラインおよび水の１／１混合液（３×３０ｍｌ）で洗浄した。得られた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮乾固した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１５／１）によって精製し、純粋な生成物Ｎ−［３−（２−エチル−５−メチル−２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−プロピル］−３−（２−フルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニル）−プロピオンアミドがベージュ色の固体として得られ、これをＨＶ下でさらに乾燥した（０．９５０ｇ；７５％）。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．８３ｍｉｎ．；［Ｍ＋Ｈ］＋＝３８６．３８ｇ／ｍｏｌ。
【００７７】
３−（３，５−ジフルオロ−４−メチル−フェニル）−Ｎ−［３−（２−エチル−５−メチル−２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−プロピル］−プロピオンアミド
無水ＤＭＦ（１５ｍｌ）中の３−（３，５−ジフルオロ−４−メチル−フェニル）−プロピオン酸（０．９２８ｇ；４．６４０ｍｍｏｌ）の溶液へ、連続的に、ＰｙＢＯＰ（２．６５６ｇ；５．１０４ｍｍｏｌ）、無水ＤＭＦ（１０ｍｌ）中の３−（２−エチル−５−メチル−２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−プロピルアミン（０．７７６ｇ；４．６４０ｍｍｏｌ）の溶液、そして最後にＮ−エチルジイソプロピルアミン（２．０ｍｌ；１１．６００ｍｍｏｌ）を添加した。得られた溶液を１時間窒素下においてｒｔでさらに撹拌した。酢酸エチル（１００ｍｌ）を添加し、そして得られた溶液を、ブラインおよび水の１／１混合液（３×３０ｍｌ）、そして水（３０ｍｌ）で洗浄した。得られた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮乾固した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１５／１）によって精製し、純粋な生成物３−（３，５−ジフルオロ−４−メチル−フェニル）−Ｎ−［３−（２−エチル−５−メチル−２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−プロピル］−プロピオンアミドが無色固体として得られ、これをＨＶ下でさらに乾燥した（１．３２０ｇ；８１％）。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．８１ｍｉｎ．；［Ｍ＋Ｈ］＋＝３５０．５３ｇ／ｍｏｌ。
【００７８】
４−［２−（３，５−ジフルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニル）−エチル］−１−エチル−３−メチル−１，４，５，６，７，８−ヘキサヒドロ−１，２，５−トリアザ−アズレン
無水アセトニトリル（２５ｍｌ）中の３−（３，５−ジフルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニル）−Ｎ−［３−（２−エチル−５−メチル−２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−プロピル］−プロピオンアミド（０．９１９ｇ；２．２７８ｍｍｏｌ）およびオキシ塩化リン（１．０５ｍｌ；１１．３９１ｍｍｏｌ）の溶液を、１時間４５分間、窒素下において加熱還流した（９０℃）。黄色溶液を室温へ冷却し、次いで減圧下で濃縮乾固した。油状残渣をメタノール（５ｍｌ）に溶解し、減圧下で再び濃縮乾固し、そしてメタノールとのこの共蒸発をさらに２回繰り返した（２×５ｍｌ  ＭｅＯＨ）。得られた粗イミン（ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．８１ｍｉｎ．；［Ｍ＋Ｈ］＋：３８６．４２ｇ／ｍｏｌ）を、さらに精製することなく対応のアミンへ還元した。無水メタノール（１８ｍｌ）中のこの粗イミン（０．８８２ｇ；２．２７８ｍｍｏｌ）の溶液を０℃へ冷却し、その後、水素化ホウ素ナトリウム（０．４３１ｇ；１１．３９０ｍｍｏｌ）を少量ずつ添加した。得られた黄色溶液を４時間窒素下において０℃でさらに撹拌した。減圧下で濃縮乾固した後、ジクロロメタン（７５ｍｌ）、そして水（４０ｍｌ）を連続的に添加した。水層をジクロロメタン（２×２０ｍｌ）でさらに抽出した。混合した有機抽出物を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮した。得られた粗生成物（黄色オイル；０．９１９ｇ）を、フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／２５％ａｑ．ＮＨ４ＯＨ＝１５／１／０．１⇒ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／ａｑ．ＮＨ４ＯＨ＝９／１／０．１）によって精製し、純粋な生成物４−［２−（３，５−ジフルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニル）−エチル］−１−エチル−３−メチル−１，４，５，６，７，８−ヘキサヒドロ−１，２，５−トリアザ−アズレンがベージュ色の固体として得られ、これをＨＶ下でさらに乾燥した（０．４７３ｇ；５４％）。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．７９ｍｉｎ．；［Ｍ＋１］＝３８８．４６ｇ／ｍｏｌ。
【００７９】
４−［２−（３，４−ジメチル−フェニル）−エチル］−１−エチル−３−メチル−１，４，５，６，７，８−ヘキサヒドロ−１，２，５−トリアザ−アズレン
無水アセトニトリル（４０ｍｌ）中の３−（３，４−ジメチル−フェニル）−Ｎ−［３−（２−エチル−５−メチル−２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−プロピル］−プロピオンアミド（１．２５０ｇ；３．８１７ｍｍｏｌ）およびオキシ塩化リン（１．７５ｍｌ；１９．０８６ｍｍｏｌ）の溶液を、１時間１５分間、窒素下において、加熱還流した（９０℃）。得られた溶液を室温へ冷却し、次いで減圧下で濃縮乾固した。油状残渣をメタノール（５ｍｌ）に溶解し、減圧下で濃縮乾固し、そしてメタノールとのこの共蒸発をさらに２回繰り返した（２×５ｍｌ  ＭｅＯＨ）。得られた粗イミン（黄色オイル；ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．７６ｍｉｎ．；［Ｍ＋Ｈ］＋：３１０．４７ｇ／ｍｏｌ）を、さらに精製することなく対応のアミンへ還元した。無水メタノール（４５ｍｌ）中のこの粗イミン（１．１８１ｇ；３．８１７ｍｍｏｌ）の溶液を０℃へ冷却し、その後、水素化ホウ素ナトリウム（０．７５２ｇ；１９．０８５ｍｍｏｌ）を少量ずつ添加した。得られた溶液を１時間１５分間窒素下において０℃でさらに撹拌した。減圧下で濃縮乾固した後、ジクロロメタン（５０ｍｌ）、そして水（５０ｍｌ）を連続的に添加した。水層をジクロロメタン（２５ｍｌ）でさらに抽出した。混合した有機抽出物を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮した。得られた粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／２５％ａｑ．ＮＨ４ＯＨ＝９／１／０．１）によって精製し、純粋な生成物４−［２−（３，４−ジメチル−フェニル）−エチル］−１−エチル−３−メチル−１，４，５，６，７，８−ヘキサヒドロ−１，２，５−トリアザ−アズレンが淡黄色オイルとして得られ、これをＨＶ下でさらに乾燥した（０．９８０ｇ；８２％）。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．７６ｍｉｎ．；［Ｍ＋１］＝３１２．５１ｇ／ｍｏｌ。
【００８０】
１−エチル−４−［２−（２−フルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニル）−エチル］−３−メチル−１，４，５，６，７，８−ヘキサヒドロ−１，２，５−トリアザ−アズレン
無水アセトニトリル（４０ｍｌ）中のＮ−［３−（２−エチル−５−メチル−２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−プロピル］−３−（２−フルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニル）−プロピオンアミド（１．０２０ｇ；２．６４７ｍｍｏｌ）およびオキシ塩化リン（１．２１ｍｌ；１３．２３３ｍｍｏｌ）の溶液を、１時間１５分間、窒素下において、加熱還流した（９０℃）。得られた溶液を室温へ冷却し、次いで減圧下で濃縮乾固した。油状残渣をメタノール（５ｍｌ）に溶解し、減圧下で再び濃縮乾固し、そしてメタノールとのこの共蒸発をさらに２回繰り返した（２×５ｍｌ  ＭｅＯＨ）。得られた粗イミン（黄色オイル；ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．７９ｍｉｎ．；［Ｍ＋Ｈ］＋：３６８．４０ｇ／ｍｏｌ）を、さらに精製することなく対応のアミンへ還元した。無水メタノール（２５ｍｌ）中のこの粗イミン（０．９７２ｇ；２．６４７ｍｍｏｌ）の溶液を０℃へ冷却し、その後、水素化ホウ素ナトリウム（０．５２１ｇ；１３．２２８ｍｍｏｌ）を少量ずつ添加した。得られた溶液を１時間１５分間窒素下において０℃でさらに撹拌した。減圧下で濃縮乾固した後、ジクロロメタン（５０ｍｌ）、そして水（５０ｍｌ）を連続的に添加した。水層をジクロロメタン（２５ｍｌ）でさらに抽出した。混合した乳白色の有機抽出物を減圧下で直接濃縮し、そして得られた粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／２５％ａｑ．ＮＨ４ＯＨ＝９／１／０．１）によって精製し、純粋な生成物１−エチル−４−［２−（２−フルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニル）−エチル］−３−メチル−１，４，５，６，７，８−ヘキサヒドロ−１，２，５−トリアザ−アズレンが黄色オイルとして得られ、これをＨＶ下でさらに乾燥した（０．４５３ｇ；４６％）。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．７７ｍｉｎ．；［Ｍ＋１］＝３７０．５０ｇ／ｍｏｌ。
【００８１】
４−［２−（３，５−ジフルオロ−４−メチル−フェニル）−エチル］−１−エチル−３−メチル−１，４，５，６，７，８−ヘキサヒドロ−１，２，５−トリアザ−アズレン
無水アセトニトリル（４０ｍｌ）中の３−（３，５−ジフルオロ−４−メチル−フェニル）−Ｎ−［３−（２−エチル−５−メチル−２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−プロピル］−プロピオンアミド（１．３２０ｇ；３．７７８ｍｍｏｌ）およびオキシ塩化リン（１．７３ｍｌ；１８．８８８ｍｍｏｌ）の溶液を、１時間１５分間、窒素下において、加熱還流した（９０℃）。得られた溶液を室温へ冷却し、次いで減圧下で濃縮乾固した。油状残渣をメタノール（５ｍｌ）に溶解し、減圧下で再び濃縮乾固し、そしてメタノールとのこの共蒸発をさらに２回繰り返した（２×５ｍｌ  ＭｅＯＨ）。得られた粗イミン（黄色オイル；ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．７６ｍｉｎ．；［Ｍ＋Ｈ］＋：３３２．４６ｇ／ｍｏｌ）を、さらに精製することなく対応のアミンへ還元した。無水メタノール（４５ｍｌ）中のこの粗イミン（１．２５０ｇ；３．７７２ｍｍｏｌ）の溶液を０℃へ冷却し、その後、水素化ホウ素ナトリウム（０．７４３ｇ；１８．８５９ｍｍｏｌ）を少量ずつ添加した。得られた溶液を１時間１５分間窒素下において０℃でさらに撹拌した。減圧下で濃縮乾固した後、ジクロロメタン（５０ｍｌ）、そして水（５０ｍｌ）を連続的に添加した。水層をジクロロメタン（２５ｍｌ）でさらに抽出した。混合した乳白色の有機抽出物を減圧下で直接濃縮し、そして得られた粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／２５％ａｑ．ＮＨ４ＯＨ＝９／１／０．１）によって精製し、純粋な生成物４−［２−（３，５−ジフルオロ−４−メチル−フェニル）−エチル］−１−エチル−３−メチル−１，４，５，６，７，８−ヘキサヒドロ−１，２，５−トリアザ−アズレンが黄色固体として得られ、これをＨＶ下でさらに乾燥した（０．９５８ｇ；７６％）。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．７５ｍｉｎ．；［Ｍ＋１］＝３３４．５０ｇ／ｍｏｌ。
【００８２】
最終化合物の製造：
【実施例１】
【００８３】
２’−｛４−［２−（３，５−ジフルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニル）−エチル］−１−エチル−３−メチル−４，６，７，８−テトラヒドロ−１Ｈ−１，２，５−トリアザ−アズレン−５−イル｝−Ｎ−メチル−２’−フェニル−アセトアミド
２−ブタノン（６ｍｌ）中の４−［２−（３，５−ジフルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニル）−エチル］−１−エチル−３−メチル−１，４，５，６，７，８−ヘキサヒドロ−１，２，５−トリアザ−アズレン（０．４７０ｇ；１．２１３ｍｍｏｌ）の溶液へ、ｒｔで連続的に、（Ｓ）−トルエン−４−スルホン酸メチルカルバモイル−フェニル−メチルエステル（０．４２６ｇ；１．３３５ｍｍｏｌ）、そしてＮ−エチルジイソプロピルアミン（０．４１ｍｌ；２．４２６ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を２３時間窒素下において７０℃へ加熱した。次いで、反応混合物をｒｔへ冷却し、溶媒を真空下で除去し、ジクロロメタン（８０ｍｌ）を添加し、そして溶液をブライン（２×８０ｍｌ）で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝２０／１）による精製によって、２つのエピマー（Ｒ）−２’−｛（Ｓ）−４−［２−（３，５−ジフルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニル）−エチル］−１−エチル−３−メチル−４，６，７，８−テトラヒドロ−１Ｈ−１，２，５−トリアザ−アズレン−５−イル｝−Ｎ−メチル−２’−フェニル−アセトアミドおよび（Ｒ）−２’−｛（Ｒ）−４−［２−（３，５−ジフルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニル）−エチル］−１−エチル−３−メチル−４，６，７，８−テトラヒドロ−１Ｈ−１，２，５−トリアザ−アズレン−５−イル｝−Ｎ−メチル−２’−フェニル−アセトアミドの混合物が得られた（黄色固体；０．４５０ｇ；６９％）。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．８７ｍｉｎ．；［Ｍ＋Ｈ］＋：５３５．５７ｇ／ｍｏｌ。
【００８４】
次いで、このエピマー混合物の分取ＨＰＬＣ精製後、光学的に純粋な異性体（Ｒ）−２’−｛（Ｓ）−４−［２−（３，５−ジフルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニル）−エチル］−１−エチル−３−メチル−４，６，７，８−テトラヒドロ−１Ｈ−１，２，５−トリアザ−アズレン−５−イル｝−Ｎ−メチル−２’−フェニル−アセトアミド（８３ｍｇ；無色固体；ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．８７ｍｉｎ．，［Ｍ＋Ｈ］＋＝５３５．５７ｇ／ｍｏｌ）および（Ｒ）−２’−｛（Ｒ）−４−［２−（３，５−ジフルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニル）−エチル］−１−エチル−３−メチル−４，６，７，８−テトラヒドロ−１Ｈ−１，２，５−トリアザ−アズレン−５−イル｝−Ｎ−メチル−２’−フェニル−アセトアミド（７５ｍｇ；無色固体；ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．８７ｍｉｎ．，［Ｍ＋Ｈ］＋＝５３５．５６ｇ／ｍｏｌ）が得られた。
【実施例２】
【００８５】
２’−｛４−［２−（３，４−ジメチル−フェニル）−エチル］−１−エチル−３−メチル−４，６，７，８−テトラヒドロ−１Ｈ−１，２，５−トリアザ−アズレン−５−イル｝−Ｎ−メチル−２’−フェニル−アセトアミド
２−ブタノン（１０ｍｌ）中の４−［２−（３，４−ジメチル−フェニル）−エチル］−１−エチル−３−メチル−１，４，５，６，７，８−ヘキサヒドロ−１，２，５−トリアザ−アズレン（０．９８０ｇ；３．１４６ｍｍｏｌ）の溶液へ、ｒｔで連続的に、（Ｓ）−トルエン−４−スルホン酸メチルカルバモイル−フェニル−メチルエステル（１．１０５ｇ；３．４６１ｍｍｏｌ）、そしてＮ−エチルジイソプロピルアミン（１．０７ｍｌ；６．２９３ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を２３時間窒素下において７０℃へ加熱した。次いで、反応混合物をｒｔへ冷却し、溶媒を真空下で除去し、ジクロロメタン（８０ｍｌ）を添加し、そして溶液をブライン（２×８０ｍｌ）で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝２０／１）による精製によって、２つのエピマー（Ｒ）−２’−｛（Ｓ）−４−［２−（３，４−ジメチル−フェニル）−エチル］−１−エチル−３−メチル−４，６，７，８−テトラヒドロ−１Ｈ−１，２，５−トリアザ−アズレン−５−イル｝−Ｎ−メチル−２’−フェニル−アセトアミドおよび（Ｒ）−２’−｛（Ｒ）−４−［２−（３，４−ジメチル−フェニル）−エチル］−１−エチル−３−メチル−４，６，７，８−テトラヒドロ−１Ｈ−１，２，５−トリアザ−アズレン−５−イル｝−Ｎ−メチル−２’−フェニル−アセトアミドの混合物が得られた（黄色固体；１．１００ｇ；７６％）。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．８４ｍｉｎ．；［Ｍ＋Ｈ］＋：４５９．６２ｇ／ｍｏｌ。
【００８６】
次いで、このエピマー混合物の分取ＨＰＬＣ精製後、光学的に純粋な異性体（Ｒ）−２’−｛（Ｓ）−４−［２−（３，４−ジメチル−フェニル）−エチル］−１−エチル−３−メチル−４，６，７，８−テトラヒドロ−１Ｈ−１，２，５−トリアザ−アズレン−５−イル｝−Ｎ−メチル−２’−フェニル−アセトアミド（７６ｍｇ；無色固体；ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．８４ｍｉｎ．，［Ｍ＋Ｈ］＋＝４５９．６２ｇ／ｍｏｌ）および（Ｒ）−２’−｛（Ｒ）−４−［２−（３，４−ジメチル−フェニル）−エチル］−１−エチル−３−メチル−４，６，７，８−テトラヒドロ−１Ｈ−１，２，５−トリアザ−アズレン−５−イル｝−Ｎ−メチル−２’−フェニル−アセトアミド（７０ｍｇ；無色固体；ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．８４ｍｉｎ．，［Ｍ＋Ｈ］＋＝４５９．６３ｇ／ｍｏｌ）が得られた。
【実施例３】
【００８７】
２’−｛１−エチル−４−［２−（２−フルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニル）−エチル］−３−メチル−４，６，７，８−テトラヒドロ−１Ｈ−１，２，５−トリアザ−アズレン−５−イル｝−Ｎ−メチル−２’−フェニル−アセトアミド
２−ブタノン（５ｍｌ）中の１−エチル−４−［２−（２−フルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニル）−エチル］−３−メチル−１，４，５，６，７，８−ヘキサヒドロ−１，２，５−トリアザ−アズレン（０．４５３ｇ；１．２２６ｍｍｏｌ）の溶液へ、ｒｔで連続的に、（Ｓ）−トルエン−４−スルホン酸メチルカルバモイル−フェニル−メチルエステル（０．４３０ｇ；１．３４９ｍｍｏｌ）、そしてＮ−エチルジイソプロピルアミン（０．４２ｍｌ；２．４５３ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を２４時間窒素下において７０℃へ加熱した。次いで、反応混合物をｒｔへ冷却し、溶媒を減圧下で除去し、ジクロロメタン（５０ｍｌ）を添加し、そして溶液をブライン（５０ｍｌ）で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝２０／１）による精製によって、２つのエピマー（Ｒ）−２’−｛１−エチル−（Ｓ）−４−［２−（２−フルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニル）−エチル］−３−メチル−４，６，７，８−テトラヒドロ−１Ｈ−１，２，５−トリアザ−アズレン−５−イル｝−Ｎ−メチル−２’−フェニル−アセトアミドおよび（Ｒ）−２’−｛１−エチル−（Ｒ）−４−［２−（２−フルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニル）−エチル］−３−メチル−４，６，７，８−テトラヒドロ−１Ｈ−１，２，５−トリアザ−アズレン−５−イル｝−Ｎ−メチル−２’−フェニル−アセトアミドの混合物が得られた（黄色固体；０．３４３ｇ；５４％）。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．８６ｍｉｎ．；［Ｍ＋Ｈ］＋：５１７．６２ｇ／ｍｏｌ。
【００８８】
次いで、このエピマー混合物の分取ＨＰＬＣ精製後、光学的に純粋な異性体（Ｒ）−２’−｛１−エチル−（Ｓ）−４−［２−（２−フルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニル）−エチル］−３−メチル−４，６，７，８−テトラヒドロ−１Ｈ−１，２，５−トリアザ−アズレン−５−イル｝−Ｎ−メチル−２’−フェニル−アセトアミド（８２ｍｇ；無色固体；ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．８６ｍｉｎ．，［Ｍ＋Ｈ］＋＝５１７．６２ｇ／ｍｏｌ）および（Ｒ）−２’−｛１−エチル−（Ｒ）−４−［２−（２−フルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニル）−エチル］−３−メチル−４，６，７，８−テトラヒドロ−１Ｈ−１，２，５−トリアザ−アズレン−５−イル｝−Ｎ−メチル−２’−フェニル−アセトアミド（９０ｍｇ；無色固体；ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．８６ｍｉｎ．，［Ｍ＋Ｈ］＋＝５１７．６３ｇ／ｍｏｌ）が得られた。
【実施例４】
【００８９】
２’−｛４−［２−（３，５−ジフルオロ−４−メチル−フェニル）−エチル］−１−エチル−３−メチル−４，６，７，８−テトラヒドロ−１Ｈ−１，２，５−トリアザ−アズレン−５−イル｝−Ｎ−メチル−２’−フェニル−アセトアミド
２−ブタノン（１０ｍｌ）の４−［２−（３，５−ジフルオロ−４−メチル−フェニル）−エチル］−１−エチル−３−メチル−１，４，５，６，７，８−ヘキサヒドロ−１，２，５−トリアザ−アズレン（０．９５８ｇ；２．８７３ｍｍｏｌ）の溶液へ、ｒｔで連続的に、（Ｓ）−トルエン−４−スルホン酸メチルカルバモイル−フェニル−メチルエステル（１．００９ｇ；３．１６１ｍｍｏｌ）、そしてＮ−エチルジイソプロピルアミン（０．９８ｍｌ；５．７４６ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を２３時間窒素下で７０℃へ加熱した。次いで、反応混合物をｒｔへ冷却し、溶媒を真空下で除去し、ジクロロメタン（８０ｍｌ）を添加し、そして溶液をブライン（２×８０ｍｌ）で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝２０／１）による精製によって、２つのエピマー（Ｒ）−２’−｛（Ｓ）−４−［２−（３，５−ジフルオロ−４−メチル−フェニル）−エチル］−１−エチル−３−メチル−４，６，７，８−テトラヒドロ−１Ｈ−１，２，５−トリアザ−アズレン−５−イル｝−Ｎ−メチル−２’−フェニル−アセトアミドおよび（Ｒ）−２’−｛（Ｒ）−４−［２−（３，５−ジフルオロ−４−メチル−フェニル）−エチル］−１−エチル−３−メチル−４，６，７，８−テトラヒドロ−１Ｈ−１，２，５−トリアザ−アズレン−５−イル｝−Ｎ−メチル−２’−フェニル−アセトアミドの混合物が得られた（黄色固体；１．０９ｇ；７９％）。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．８４ｍｉｎ．；［Ｍ＋Ｈ］＋：４８１．６２ｇ／ｍｏｌ。
【００９０】
次いで、このエピマー混合物の分取ＨＰＬＣ精製後、光学的に純粋な異性体（Ｒ）−２’−｛（Ｓ）−４−［２−（３，５−ジフルオロ−４−メチル−フェニル）−エチル］−１−エチル−３−メチル−４，６，７，８−テトラヒドロ−１Ｈ−１，２，５−トリアザ−アズレン−５−イル｝−Ｎ−メチル−２’−フェニル−アセトアミド（８３ｍｇ；無色固体；ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．８４ｍｉｎ．，［Ｍ＋Ｈ］＋＝４８１．６２ｇ／ｍｏｌ）および（Ｒ）−２’−｛（Ｒ）−４−［２−（３，５−ジフルオロ−４−メチル−フェニル）−エチル］−１−エチル−３−メチル−４，６，７，８−テトラヒドロ−１Ｈ−１，２，５−トリアザ−アズレン−５−イル｝−Ｎ−メチル−２’−フェニル−アセトアミド（７６ｍｇ；無色固体；ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．８５ｍｉｎ．，［Ｍ＋Ｈ］＋＝４８１．６４ｇ／ｍｏｌ）が得られた。
【００９１】
生物学的アッセイ
インビトロアッセイ
式（ＩＩ）の化合物のオレキシン受容体アンタゴニスト活性を、下記の実験方法に従って測定する。
実験方法：
・細胞内カルシウム測定：
ヒトオレキシン−１受容体およびヒトオレキシン−２受容体それぞれを発現するチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞を、３００μｇ／ｍｌ  Ｇ４１８、１００Ｕ／ｍｌペニシリン、１００μｇ／ｍｌストレプトマイシンおよび１０％不活性化ウシ胎仔血清（ＦＣＳ）を含有する培養培地（Ｌ−グルタミンを含むＨａｍ  Ｆ−１２）中において増殖する。細胞を、ハンクス平衡塩溶液（ＨＢＳＳ）中１％ゼラチンで予めコーティングされている９６−ウエルブラッククリアボトム滅菌プレート（Ｃｏｓｔａｒ）へ、８０’０００細胞／ウエルで播種する。全ての試薬はＧｉｂｃｏ  ＢＲＬ製である。播種したプレートを５％ＣＯ２中において３７℃で一晩インキュベートする。
【００９２】
アゴニストとしてのヒトオレキシン−Ａを、メタノール：水（１：１）中の１ｍＭストック溶液として調製し、１０ｎＭの最終濃度でのアッセイにおける使用のために、０．１％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）および２ｍＭ  ＨＥＰＥＳを含有するＨＢＳＳ中に希釈する。
【００９３】
アンタゴニストをＤＭＳＯ中１０ｍＭストック溶液として調製し、次いで、９６ウエルプレートにおいて、先ずＤＭＳＯ中に、次いで０．１％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）および２ｍＭ  ＨＥＰＥＳを含有するＨＢＳＳ中に希釈する。
【００９４】
アッセイの日に、１００μｌのローディーング媒体（１％ＦＣＳ、２ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、５ｍＭプロベネシド（Ｓｉｇｍａ）および３μＭの蛍光カルシウム指示薬ｆｌｕｏ−３  ＡＭ（１０％プルロン酸（pluronic acid）を含むＤＭＳＯ中の１ｍＭストック溶液）（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ）を含有するＨＢＳＳ）を各ウエルへ添加する。
【００９５】
９６ウエルプレートを５％ＣＯ２中において３７℃で６０分間インキュベートする。次いで、ローディーング媒体を吸引し、そして細胞を、２．５ｍＭプロベネシド、０．１％ＢＳＡ、２ｍＭ  ＨＥＰＥＳを含有する２００μｌ  ＨＢＳＳで３回洗浄する。その同一の緩衝液１００μｌを各ウエル中に残す。
【００９６】
蛍光イメージングプレートリーダー（Fluorescent Imaging Plate Reader）（ＦＬＩＰＲ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ）内において、アンタゴニストをプレートへ５０μｌの量で添加し、２０分間インキュベートし、そして最後に１００μｌのアゴニストを添加する。蛍光を１秒間隔で各ウエルについて測定し、そして各蛍光ピークの高さを、アンタゴニストの代わりに、緩衝液を含む１０ｎＭオレキシン−Ａによって誘発される蛍光ピークの高さと比較する。各アンタゴニストについて、ＩＣ５０値（アゴニスト応答の５０％を阻害するために必要とされる化合物の濃度）を測定する。化合物のアンタゴニスト活性は、ＯＸ１およびＯＸ２受容体に関してナノモル濃度範囲内である。選択した化合物を表１に示す。
【００９７】
【表１】
2010502587.tif 000009
【国際調査報告】
2010502587.tif 000011
2010502587.tif 000012