(57)【要約】  本発明は、プロテオグリカンに対して親和性を有する新規化合物及びかかる化合物を含む医薬品組成物を提供する。かかる化合物は、正に帯電した部分に結合したアミノ酸系のコア単位を含んでいる。かかる化合物はさらにインビボイメージングで検出可能な１以上のイメージング部分を含んでいるので、ヘパラン硫酸プロテオグリカンのようなプロテオグリカンのイメージングのための診断用造影剤として有用である。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
プロテオグリカンに対して親和性を有する次の式Ｉの化合物及びその薬学的に許容される塩。
Ｒ−Ｓｐ−Ｃ−（Ｌ−Ｐ）ｎ        （Ｉ）
式中、
Ｃは、Ｌ単位に結合しているとともに、Ｓが存在する場合にはＳ単位に結合し、Ｓが存在しない場合にはＲ部分に結合したコア単位であって、アミノ酸残基を含むコア単位を表し、
Ｌは同一又は異なるもので、二官能性リンカー単位を表し、
Ｐは同一又は異なるもので、正に帯電したペプチド単位を表し、
Ｓはスペーサー単位を表し、
Ｒはイメージング部分を表し、
ｐは０又は１の整数を表し、
ｎは１〜１６の整数を表す。
【請求項２】
コア単位Ｃが、アミノ酸であるリシン、オルニチン及びジアミノプロピオン酸並びにアミンを含み、
リンカーＬが同一のものであって、ＰＥＧ結合単位からなり、
単位Ｐが同一のものであって、２〜８の正電荷及び２０以下のアミノ酸を含み、
Ｓが存在するか又は存在せず、存在する場合にはアルキル鎖又はＰＥＧ単位からなり、
Ｒが以下のイメージング成分（ｉ）〜（ｖｉｉ）の１つを含み、
（ｉ）放射性金属イオン、
（ｉｉ）常磁性金属イオン、
（ｉｉｉ）γ放出型放射性ハロゲン、
（ｉｖ）陽電子放出型放射性非金属、
（ｖ）過分極ＮＭＲ活性核、
（ｖｉ）インビボ光学イメージングに適したレポーター、
（ｖｉｉ）血管内検出に適したβ放射体、
ｐが０又は１の整数を表し、
ｎが１〜４の整数を表す、請求項１記載の化合物。
【請求項３】
Ｃが２〜１６のアミノ酸残基を含む、請求項１又は請求項２記載の化合物。
【請求項４】
Ｃが２〜４のリシン残基を含み、遊離末端カルボキシル残基はアミド残基の形成によって官能化されている、請求項１乃至請求項３のいずれか１項記載の化合物。
【請求項５】
Ｌが末端基の位置においてカルボキシル化及び／又はアミド化により官能化されたＰＥＧリンカーからなる、請求項１又は請求項２記載の化合物。
【請求項６】
Ｌが次の式（ＩＩ）のＰＥＧリンカーからなり、式（ＩＩ）中のｑは１〜１０の整数に等しく、リンカーはアミノ酸のカルボキシ基及びアミノ基に結合している、請求項５記載の化合物。
【化１】
2010513476.tif 000022
【請求項７】
Ｌが次の式のＰＥＧリンカーからなる、請求項５記載の化合物。
【化２】
2010513476.tif 000023
【請求項８】
Ｐが２〜１６のアミノ酸を含み、２以上のアミノ酸が生理的ｐＨで正電荷を有する、請求項１又は請求項２記載の化合物。
【請求項９】
Ｒが（ｉ）放射性金属イオン、（ｉｉ）常磁性金属イオン及び（ｉｉｉ）γ放出型放射性ハロゲンから選択され、金属イオンはキレート化剤によって結合される、請求項１又は請求項２記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒが次の式（ＩＩＩ）のキレーターでキレート化された放射性金属イオンから選択される、請求項９記載の化合物。
【化３】
2010513476.tif 000024
式中、Ｅ１〜Ｅ６は各々独立にＲ′基であり、各Ｒ′はＨ或いはＣ１−１０アルキル、Ｃ３−１０アルキルアリール、Ｃ２−１０アルコキシアルキル、Ｃ１−１０ヒドロキシアルキル、Ｃ１−１０フルオロアルキル、Ｃ２−１０カルボキシアルキル又はＣ１−１０アミノアルキルであり、或いは２以上のＲ′基がそれらに結合した原子と共に炭素環式又は複素環式の飽和又は不飽和環を形成し、Ｒ′基の１以上は枝分れ単位にコンジュゲートされており、Ｑは式−（Ｊ）ｆ−（式中、ｆは３、４又は５であり、各Ｊは−（Ｊ）ｆ−が−Ｏ−又は−ＮＲ′−である最大１つのＪ基を含むことを条件にして独立に−Ｏ−、−ＮＲ′−又は−Ｃ（Ｒ′）２−である。）の橋かけ基である。
【請求項１１】
Ｐが０の整数を表し、ｎが２又は４の整数を表す、請求項２記載の化合物。
【請求項１２】
放射性金属成分（好ましくは９９ｍＴｃ）とキレート化した、次の構造を有する式（Ｉ）の化合物。
【化４】
2010513476.tif 000025
【請求項１３】
光学イメージングに適した次の構造を有する式（Ｉ）の化合物。
【化５】
2010513476.tif 000026
【請求項１４】
次の式（Ｉａ）の中間体であって、
Ｃ−（Ｌ−Ｐ）ｎ                （Ｉａ）
次の構造を有する中間体。
【化６】
2010513476.tif 000027
2010513476.tif 000028
2010513476.tif 000029
2010513476.tif 000030
【請求項１５】
ヘパラン硫酸プロテオグリカンに対して親和性を有する、請求項１乃至請求項１２のいずれか１項記載の化合物。
【請求項１６】
請求項１乃至請求項１３のいずれか１項記載の化合物及び１種以上の薬学的に許容されるキャリヤー又は賦形剤を含んでなる医薬品組成物。
【請求項１７】
ヒト又は動物の身体の画像を生成する方法であって、請求項１乃至請求項１３のいずれか１項記載の化合物をヒト又はヒト以外の動物の身体に投与する段階、及び前記化合物が分布した前記身体の少なくとも一部の画像を生成する段階を含んでなる方法。
【請求項１８】
請求項１乃至請求項１３のいずれか１項記載の化合物を含む医薬品組成物を予め投与したヒト又は動物の身体の画像を生成する方法であって、前記造影剤組成物が分布した前記身体の少なくとも一部の画像を生成する段階を含んでなる方法。
【請求項１９】
請求項１乃至請求項１２のいずれか１項記載の化合物の製造方法であって、
ｆ）Ｌ及びＳｐ又はＲの結合を可能にする反応基で置換されたコア単位Ｃを第１の構成単位として使用する段階、
ｇ）Ｌ又はその前駆体を前記第１の構成単位と反応させて、コアＣ及びＬからなる第２の構成単位を形成する段階、
ｈ）Ｐ又はその前駆体を前記第２の構成単位と反応させて、コアＣ、Ｌ及びＰからなる第３の構成単位を形成する段階、
ｉ）任意にはＳｐ又はその前駆体を前記第３の構成単位と反応させて、Ｓｐ、コアＣ、Ｌ及びＰからなる第４の構成単位を形成する段階、並びに
ｊ）Ｒ又はその前駆体を前記第３又は第４の構成単位と反応させる段階
を含んでなる方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、プロテオグリカンに対して親和性を有する１群の化合物及びかかる化合物を含む医薬品組成物に関する。さらに詳しくは、これらの化合物はかかるプロテオグリカンを標的化する造影剤として使用できる。
【０００２】
本発明はさらに、上述したような医薬品組成物の、診断イメージングにおける造影剤としての使用に関する。
【背景技術】
【０００３】
プロテオグリカンは体内に分布する巨大分子である。プロテオグリカンは細胞内、細胞表面上及び細胞外マトリックス中に見出すことができる。プロテオグリカンは、高度にグリコシル化された特殊な種類の糖タンパク質を表す。これらは、１以上の共有結合したグリコサミノグリカン鎖を有するコアタンパク質からなっている。これらのグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）鎖は、硫酸基及びウロン酸基の存在のために生理的条件下で負に帯電した長い線状炭水化物ポリマーである。
【０００４】
ヘパラン硫酸プロテオグリカン（ＨＳＰＧ）は１群のプロテオグリカンである。これらは、コアタンパク質に結合したＤ−グルクロン酸（ＧｌｃＵＡ）及びＮ−アセチルグルコサミン（ＧｌｃＮＡｃ）の繰返し二糖（ＧＡＧ）を含んでいる。個々のＧＡＧのサイズは１００ｋＤａに達成することがある。ＧＡＧは、多くの糖残基上に硫酸基又はカルボキシル基或いはその両方が存在するため高度に負に帯電しており、結果としてＨＳＰＧ全体が負に帯電している。
【０００５】
グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）又はムコ多糖は、繰返し二糖単位からなる長い枝なしの多糖である。この単位はＮ−アセチルヘキソサミン及びヘキソース又はヘキスロン酸からなり、そのいずれか一方又は両方が硫酸化されていることがある。グリコサミノグリカン族のメンバーは、それが含有するヘキソサミン、ヘキソース又はヘキスロン酸単位の種類（例えば、グルクロン酸、イズロン酸、ガラクトース、ガラクトサミン、グルコサミン）が異なっている。これらはまた、グリコシド結合の幾何学的形状も異なっている。このような部類の炭水化物は、脊椎動物及び様々な下等動物の生命にとって必須又は重要である。
【０００６】
ＧＡＧは、結合組織の重要な成分を形成している。
【０００７】
プロテオグリカンのアップレギュレーションは、アルツハイマー病、大動脈瘤、アテローム性動脈硬化症、肝線維症、微小血管内皮腫及び癌（例えば、乳癌、子宮頸癌、結腸癌、結腸直腸癌、膵臓癌、前立腺癌及びウィルムス腫瘍）のような各種の疾患及び状態に関連している。
【０００８】
以下の出版物によって例示されるように、いくつかの研究グループがインビボでのプロテオグリカン同定のための製品及び方法を発見することに活動してきた。
【０００９】
国際公開第００／２３１０９号（カリフォルニア大学評議員会）には、レポーター分子に結合されかつグリピカン（ｇｌｙｐｉｃａｎ）−１及びシンデカン（ｓｙｎｄｅｃａｎ）−１に結合する結合分子（特に抗体）を含んでなるヒトの癌用の診断剤が提唱されている。
【００１０】
米国特許出願公開第２００２／０１２２８０６号（Ｃｈｉｎｎａｉｙａｎら）には、蛍光性又は化学発光性ポリペプチド及びコンドロイチン硫酸プロテオグリカン結合ポリペプチドを含んでなるキメラ分子（例えば、組換えポリペプチド）及び医薬品粗生成物並びに診断イメージングでのその使用が提唱されている。
【００１１】
国際公開第８８／０３４１３号（Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｄｅａｃｏｎｅｓｓ  Ｈｏｓｐｉｔａｌ）は、放射性核種又は磁気共鳴イメージング成分で標識された、血管系の異常に関連する標的探索用の生物学的活性分子を記載している。生物学的活性分子は例えばコンドロイチン硫酸プロテオグリカンに対して親和性を有しており、抗体は好ましくはモノクローナル抗体である。
【００１２】
国際公開第９１／１６９１９号（Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｄｅａｃｏｎｅｓｓ  Ｈｏｓｐｉｔａｌ）は、プロテオグリカンであり得る血管壁成分に対して親和性を有する血管関連タンパク質から導かれ、かつ検出可能な標識で標識できるペプチドに関する。
【００１３】
米国特許第６９９１７７８号（Ｎｉｔｒｏｓｃｉ）には、関節中に存在する軟骨のプロテオグリカンの可視化のために水溶性の正に帯電したニトロキシル官能化デンドリマーを用いて関節のイメージングを増強させるＭＲイメージング方法が提唱されている。
【００１４】
プロテオグリカン、特にＨＳＰＧは、上述したような各種疾患の診断のための魅力的なマーカーである。ＨＳＰＧの効率的な標的化及びイメージングのためには、標的構造に対して高い親和性を有する化学的に頑強で安定なベクターが要求される。これらの条件は本発明の化合物によって満たされる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１５】
【特許文献１】国際公開第０２／００２６５号パンフレット
【特許文献２】欧州特許出願公開第０５１２８４４号明細書
【特許文献３】国際公開第２００６／０９０９２４号パンフレット
【非特許文献】
【００１６】
【非特許文献１】ZHANG ET AL: "Multiple-Peptide Conjugates for Binding ss-Amyloid Plaques of Alzheimer's Disease", BIOCONJUGSTE CHEMISTRY, vol.14, 2003, pages 86-92
【非特許文献２】MAGZOUB M ET AL:"CELL-PENETRATING PEPTIDES:SMALL FROM INCEPTION TO APPLICATION", QUARTERLY REVIEWS OF BIOPHYSICS, vol.37, no.2, 2004, pages 147-195
【非特許文献３】SANDGREN STAFFAN ET AL:"Nuclear targeting of macromolecular polyanions by an HIV-Tat derived peptide.Role for cell-surface proteoglycans", THE JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY, vol.277, no.41, 2002, pages 38877-38883
【非特許文献４】MARTY C ET AL:"ENHANCED HEPARAN SULFATE PROTEOGLYCAN-MEDIATED UPTAKE OF CELL-PENETRATING PEPTIDE-MODIFIED LIPOSOMES", CMLS CELLULAR AND MOLECULAR LIFE SCIENCES, vol.61, no.14, 2004, pages 1785-1794
【非特許文献５】FOGED CAMILLA ET AL:"Cell-penetrating peptides for drug delivery across membrane barriers", EXPERT OPINION ON DRUG DELIVERY, vol.5, no.1, 2008, pages 105-117
【非特許文献６】COCKMAN ET AL:"Quantitative imaging of proteoglycan in cartilage using a gadolinium probe and microCT", OSTEOARTHRITIS AND CARTILAGE, vol.14, no.3, 2006, pages 210-214
【発明の概要】
【００１７】
本発明は、プロテオグリカンに対して親和性を有する新規化合物及びかかる化合物を含む医薬品組成物を提供する。かかる化合物は、正に帯電した部分に結合したコア単位を含んでいる。かかる化合物はさらにインビボイメージングで検出可能な１以上のイメージング部分を含んでいるので、プロテオグリカンのイメージングのための診断用造影剤として有用であり、したがって変性疾患、心臓血管疾患及び癌のような医学的状態の診断において有用である。
【００１８】
本発明の化合物を含んでなる医薬品組成物、その使用及びイメージング方法も、本発明の一部をなしている。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
第１の実施形態では、本発明は、プロテオグリカンに対して親和性を有する次の式Ｉの化合物及びその薬学的に許容される塩を提供する。
Ｒ−Ｓｐ−Ｃ−（Ｌ−Ｐ）ｎ        （Ｉ）
式中、
Ｃは、Ｌ単位に結合しているとともに、Ｓが存在する場合にはＳ単位に結合し、Ｓが存在しない場合にはＲ部分に結合したコア単位であって、アミノ酸残基を含むコア単位を表し、
Ｌは同一又は異なるもので、二官能性リンカー単位を表し、
Ｐは同一又は異なるもので、正に帯電したペプチド単位を表し、
Ｓはスペーサー単位を表し、
Ｒはイメージング部分を表し、
ｐは０又は１の整数を表し、
ｎは１〜１６の整数を表す。
【００２０】
本発明の様々な態様は、添付の特許請求の範囲中にさらに詳しく記載されている。
【００２１】
Ｃは、Ｌ単位に結合しているとともに、Ｓが存在する場合にはＳ単位に結合し、Ｓが存在しない場合にはＲ部分に結合したコア単位であって、天然及び非天然アミノ酸のアミノ酸残基並びに任意にはアミンを含むコア単位を表す。アミノ酸はＤ−又はＬ−アミノ酸であり、好ましくはＤ−アミノ酸である。アミノ酸であるリシン、オルニチン及びジアミノプロピオン酸並びに次の式のアミンのようなアミンが好ましい。
【００２２】
【化１】
2010513476.tif 000002
アミン基は、アミノ酸連鎖上にグラフトするのが好ましい。好ましくは、Ｃは２〜１６のアミノ酸残基を含み、最も好ましくは２〜８のアミノ酸残基を含む。
【００２３】
さらに一段と好ましくは、単位Ｃはリシン残基を含み、任意には単位Ｌ及び単位Ｓ又は部分Ｒに対する部位特異的コンジュゲーションを容易にする官能基を含む他のアミノ酸のような追加の単位も含む。かかる官能基の例には、ＮＨ２、ＯＨ、ＳＨ、ＯＮＨ２、ＮＨＮＨ２がある。
【００２４】
特に好ましい実施形態では、単位Ｃは２〜４のアミノ酸残基を含む。アミノ酸残基は、最も好ましくはリシン残基であり、その遊離Ｃ末端カルボキシル残基はアミド残基の形成によって官能化することができる。
【００２５】
好ましいＣ単位の例には、
ｌｙｓ−ｌｙｓ−ＮＨ２
ｌｙｓ−ｌｙｓ（ｌｙｓ）−ｌｙｓ−ＮＨ２
がある。
【００２６】
コア単位Ｃはまた、式（Ｉ）の化合物の生体分布を調整する単位を含むことができる。かかる単位はバイオモディファイアー単位といわれる。即ち、例えばエーテルの導入は、血漿タンパク質の結合を最小にするために役立つ。バイオモディファイアー単位はまた、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）構成単位又は１〜１０のアミノ酸残基のペプチド鎖或いはこれらの組合せからなることができ、インビボで式（Ｉ）の化合物の薬物動態及び血中クリアランス速度を調整するために機能する。かかるバイオモディファイアー単位の存在は、バックグラウンド組織（例えば、筋肉又は肝臓）及び／又は血液からのイメージング剤のクリアランスを加速又は減速し、それによりバックグラウンド妨害を少なくして一層良好な診断画像を与える。血中滞留時間を増加させるために使用した場合、これは化合物が罹患部位で標的成分と相互作用する確率を最大にするために有益である。バイオモディファイアー単位はまた、特定の排出経路（例えば、肝臓経由ではなく腎臓経由の排出）を有利にするためにも使用できる。
【００２７】
上述の通り、Ｌは同一又は異なるもので、Ｐ単位をＣ単位に結合する二官能性リンカー単位を表し、好ましくはＬは中性であるか又は負に帯電している。ＰＥＧリンカー単位が好ましい。Ｃ及びＰ単位への結合を容易にするため、ＰＥＧ単位は末端基の位置で官能化することができる。かかる官能化の例には、カルボキシル化及びアミド化がある。
【００２８】
ＬがＰＥＧ単位からなる場合、それは単分散ＰＥＧ様構造体である次の式（ＩＩ）の１７−アミノ−５−オキソ−６−アザ−３，９，１２，１５−テトラオキサヘプタデカン酸のオリゴマー化から導かれる単位からなることが好ましい。
【００２９】
【化２】
2010513476.tif 000003
式中、ｑは１〜１０の整数に等しく、これはアミノ酸のカルボキシ基又はアミノ基に結合している。
【００３０】
次の式の単位Ｌ（「ＰＥＧ１２」という）も好ましい。
【００３１】
【化３】
2010513476.tif 000004
単位Ｐの各々は上述したように同一又は異なるもので、２０以下のアミノ酸、好ましくは２〜１６のアミノ酸を含んでいる。アミノ酸はＤ−又はＬ−アミノ酸である。
【００３２】
単位Ｐの各々は全体として正に帯電している。かくして、Ｐは生理的ｐＨで正に帯電した１以上のアミノ酸、好ましくは２以上のアミノ酸（常用又は非常用アミノ酸）からなる。Ｐ単位が生理的ｐＨで全体として正の電荷を維持する限り、Ｐは生理的ｐＨで中性のアミノ酸及び任意には１又は２の負に帯電したアミノ酸を含み得る。特に好ましいアミノ酸はアミノ酸模倣体も包含する。好ましい実施形態では、Ｐはアルギニン、アルギニン模倣体、リシン、グリシン、プロリン、オルニチン及びヒスチジンからなる群から選択される１以上のアミノ酸を含むが、その他各種のアミノ酸を使用できること並びにレセプター部位の親和性及びインビボでの結合部位のｐＨに応じてアミノ酸配列を変化できることは当業者にとって自明であろう。
【００３３】
別の好ましい実施形態では、各々の単位Ｐは２以上の正電荷、さらに好ましくは３以上の正電荷、最も好ましくは４以上の正電荷を有する。全体として、式（Ｉ）の化合物は８以上の正電荷、好ましくは８〜３２の正電荷を有するべきである。
【００３４】
最も好ましくは、Ｐはグアニジン基又はグアニジン誘導基を含む１以上のアミノ酸を含んでいる。グアニジンは式（Ｎ２Ｈ）２Ｃ＝ＮＨを有し、中性ｐＨではグアニジニウムイオンの形態で正に帯電している。かかるグアニジン基又はグアニジン誘導基を含むアミノ酸の例は、アルギニン、及びｎｏｒＡｒｇ、Ｐｈｅ（４−グアニジン）、ホモアルギニン及びｔｒａｎｓＰｒｏ（４−アルギニン）のようなアルギニン模倣体である。他の正に帯電した非常用アミノ酸も使用できる。ペプチド単位ＰのＮ末端は、任意に封鎖することができる。
【００３５】
単位Ｓは、単位Ｃをイメージング部分Ｒから遠ざけるスペーサーである。これは、イメージング部分が比較的バルキーである場合、例えばそれが金属錯体又は放射性ヨウ素原子を含む結果として式（Ｉ）の化合物の結合がイメージング部分によって損なわれる場合に特に重要である。これは、例えばアルキル鎖を含むことにより、イメージング部分が活性部位から離れて位置する自由を与えるような柔軟性を組み合わせることで達成できる。単位Ｓは、単位Ｌと同一又は類似のものであってよい。即ち、それはＰＥＧ単位であってよい。
【００３６】
イメージング部分Ｒは、哺乳動物体の外部から検出できるか、或いはインビボで使用するために設計された検出器（例えば、内視鏡のような血管内放射線検出器又は光学検出器）又は手術中の使用のために設計された放射線検出器の使用によって検出できる「イメージング成分」を含んでいる。
【００３７】
好ましいイメージング成分は、式（Ｉ）の化合物のインビボ投与後、外部から非侵襲的に検出できるものである。好ましくは、ＲはＭＲ、ＳＰＥＣＴ、ＰＥＴ、光学イメージングモダリティ又はＸ線イメージングモダリティでイメージング可能なイメージング成分を含んでいる。最も好ましいのは放射性イメージング成分、とりわけ放射性金属イオン、γ放出型放射性ハロゲン及び陽電子放出型放射性非金属であり、特にＳＰＥＣＴ又はＰＥＴを用いるイメージングに適したものである。また、光学イメージング用の染料からなるイメージング成分も特に好ましい。
【００３８】
イメージング部分は、式（Ｉ）のＳ又はＣ単位に直接結合したイメージング成分（例えば、ハロゲン原子又は染料のような非金属の化学成分）自体からなり得る。イメージング成分が金属化合物（例えば、金属イオン）である場合、イメージング成分はＳ又はＣに結合したイメージング部分（例えば、錯化剤）の一部である。このような状況では、イメージング部分Ｒはイメージング成分を含んでいる。
【００３９】
イメージング成分は、好ましくは以下のものから選択される。
（ｉ）放射性金属イオン、
（ｉｉ）常磁性金属イオン、
（ｉｉｉ）γ放出型放射性ハロゲン、
（ｉｖ）陽電子放出型放射性非金属、
（ｖ）過分極ＮＭＲ活性核、
（ｖｉ）インビボ光学イメージングに適したレポーター、
（ｖｉｉ）血管内検出に適したβ放射体。
【００４０】
イメージング成分が放射性金属イオン（即ち、放射性金属）である場合、放射性金属という用語は、放射性の遷移元素及びランタニド及びアクチニド並びに金属主族元素を包含する。半金属であるヒ素、セレン及びテルルは除外される。好適な放射性金属は、６４Ｃｕ、４８Ｖ、５２Ｆｅ、５５Ｃｏ、９４ｍＴｃ又は６８Ｇａのような陽電子放射体、或いは９９ｍＴｃ、１１１Ｉｎ、１１３ｍＩｎ又は６７Ｇａのようなγ放射体であり得る。好ましい放射性金属は９９ｍＴｃ、６４Ｃｕ、６８Ｇａ及び１１１Ｉｎである。最も好ましい放射性金属はγ放射体、特に９９ｍＴｃである。
【００４１】
イメージング成分が常磁性金属イオンである場合、好適なかかる金属イオンには、Ｇｄ（ＩＩＩ）、Ｍｎ（ＩＩ）、Ｃｕ（ＩＩ）、Ｃｒ（ＩＩＩ）、Ｆｅ（ＩＩＩ）、Ｃｏ（ＩＩ）、Ｅｒ（ＩＩ）、Ｎｉ（ＩＩ）、Ｅｕ（ＩＩＩ）及びＤｙ（ＩＩＩ）がある。好ましい常磁性金属イオンはＧｄ（ＩＩＩ）、Ｍｎ（ＩＩ）及びＦｅ（ＩＩＩ）であり、Ｇｄ（ＩＩＩ）が特に好ましい。
【００４２】
イメージング成分がγ放出型放射性ハロゲンである場合、放射性ハロゲンは好適には１２３Ｉ、１３１Ｉ及び７７Ｂｒから選択される。好ましいγ放出型放射性ハロゲンは１２３Ｉである。
【００４３】
イメージング成分が陽電子放出型放射性非金属である場合、好適なかかる陽電子放射体には、１１Ｃ、１３Ｎ、１５Ｏ、１７Ｆ、１８Ｆ、７５Ｂｒ、７６Ｂｒ及び１２４Ｉがある。好ましい陽電子放出型放射性非金属は１１Ｃ、１３Ｎ、１８Ｆ及び１２４Ｉであり、特に好ましくは１１Ｃ及び１８Ｆであり、最も好ましくは１８Ｆである。
【００４４】
イメージング成分が過分極ＮＭＲ活性核である場合、かかるＮＭＲ活性核は非ゼロ核スピンを有し、１３Ｃ、１５Ｎ、１９Ｆ、２９Ｓｉ及び３１Ｐを包含する。これらのうち、１３Ｃが好ましい。「過分極」という用語は、ＮＭＲ活性核の分極度がその平衡分極を超えて増強されていることを意味する。（１２Ｃに対する）１３Ｃの天然存在度は約１％であり、好適な１３Ｃ−標識化合物は過分極前に好適には５％以上、好ましくは５０％以上、最も好ましくは９０％以上の存在度に富化される。
【００４５】
イメージング成分がインビボ光学イメージングに適したレポーターである場合、レポーターは光学イメージング手続きで直接又は間接に検出できる任意の成分である。レポーターは、光散乱剤（例えば、着色又は無着色粒子）、吸光剤又は発光剤であり得る。さらに好ましくは、レポーターは発色団又は蛍光化合物のような染料である。染料は、紫外域ないし近赤外域の波長をもった電磁スペクトル中の光と相互作用する任意の染料であり得る。最も好ましくは、レポーターは蛍光特性を有する。
【００４６】
好ましい有機発色性及び発蛍光性レポーターには、広範な非局在化電子系を有する群、例えばシアニン類、メロシアニン類、インドシアニン類、フタロシアニン類、ナフタロシアニン類、トリフェニルメチン類、ポルフィリン類、ピリリウム染料、チアピリリウム染料、スクアリリウム染料、クロコニウム染料、アズレニウム染料、インドアニリン類、ベンゾフェノキサジニウム染料、ベンゾチアフェノチアジニウム染料、アントラキノン類、ナフトキノン類、インダスレン類、フタロイルアクリドン類、トリスフェノキノン類、アゾ染料、分子内及び分子間電荷移動染料及び染料錯体、トロポン類、テトラジン類、ビス（ジチオレン）錯体、ビス（ベンゼン−ジチオレート）錯体、インドアニリン染料、ビス（Ｓ，Ｏ−ジチオレン）錯体がある。緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）及び異なる吸収／発光特性を有するＧＦＰの変種のような蛍光タンパク質も有用である。特定の状況においてはある種の希土類金属（例えば、ユウロピウム、サマリウム、テルビウム又はジスプロシウム）の錯体が使用され、蛍光ナノ結晶（量子ドット）についても同様である。
【００４７】
使用できる発色団の具体例には、フルオレセイン、スルホローダミン１０１（Ｔｅｘａｓ  Ｒｅｄ）、ローダミンＢ、ローダミン６Ｇ、ローダミン１９、インドシアニングリーン、Ｃｙ２、Ｃｙ３、Ｃｙ３．５、Ｃｙ５、Ｃｙ５．５、Ｃｙ＊＊、Ｃｙ７、Ｍａｒｉｎａ  Ｂｌｕｅ、Ｐａｃｉｆｉｃ  Ｂｌｕｅ、Ｏｒｅｇｏｎ  Ｇｒｅｅｎ  ８８、Ｏｒｅｇｏｎ  Ｇｒｅｅｎ  ５１４、テトラメチルローダミン、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ３５０、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ４３０、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ５３２、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ５４６、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ５５５、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ５６８、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ５９４、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ６３３、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ６４７、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ６６０、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ６８０、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ７００、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ７５０及びこれらの誘導体がある。
【００４８】
特に好ましいのは、４００ｎｍないし３μｍ、特に６００〜１３００ｎｍの可視域又は近赤外域に吸収極大を有する染料である。光学イメージングモダリティ及び測定技法には、特に限定されないが、ルミネセンスイメージング、内視鏡検査、蛍光内視鏡検査、光学コヒーレンス断層撮影、透過率イメージング、時間分解透過率イメージング、共焦点イメージング、非線形顕微鏡検査、光音響イメージング、音響光学イメージング、スペクトル分析、反射スペクトル分析、干渉分析、コヒーレンス干渉分析、拡散光学断層撮影及び蛍光媒介拡散光学断層撮影（連続波、時間ドメイン及び周波数ドメインシステム）、並びに光の散乱、吸光、偏光、ルミネセンス、蛍光寿命、量子収率及び消光の測定がある。
【００４９】
イメージング成分が例えば血管内検出に適したβ放射体である場合、かかるβ放射体には、放射性金属である６７Ｃｕ、８９Ｓｒ、９０Ｙ、１５３Ｓｍ、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ及び１９２Ｉｒ、並びに非金属である３２Ｐ、３３Ｐ、３８Ｓ、３８Ｃｌ、３９Ｃｌ、８２Ｂｒ及び８３Ｂｒがある。
【００５０】
イメージング成分が金属イオンからなる場合、金属イオンは金属錯体として存在する。「金属錯体」という用語は、金属イオンと１以上のリガンドとの配位錯体を意味する。金属錯体は動力学的に安定であり、したがってキレート交換に耐えること（即ち、金属配位座に関して他の潜在的に競合するリガンドとのリガンド交換を受けにくいこと）が極めて好ましい。
【００５１】
キレート交換に耐える金属錯体を形成するために本発明で使用するのに適したリガンドには、２〜６（好ましくは２〜４）の金属ドナー原子が（金属ドナー原子を結合する炭素原子又は非配位ヘテロ原子の非配位主鎖を有することで）五員又は六員のキレート環を生じるように配列されたキレート剤、或いは金属イオンと強く結合するドナー原子を含む単座リガンド（例えば、イソニトリル、ホスフィン、チオール又はジアゼニド）がある。キレート剤の一部として金属とよく結合するドナー原子種の例は、アミン、チオール、アミド、オキシム及びホスフィンである。ホスフィンは非常に強い金属錯体を形成するので、単座又は二座のホスフィンでも好適な金属錯体を形成する。イソニトリル及びジアゼニドの直線形状はキレート剤中に組み込みにくいものであり、したがって通例は単座リガンドとして使用される。好適なイソニトリルの例には、ｔｅｒｔ−ブチルイソニトリルのような単純アルキルイソニトリル、及びｍｉｂｉ（即ち、１−イソシアノ−２−メトキシ−２−メチルプロパン）のようなエーテル置換イソニトリルがある。好適なホスフィンの例には、テトロフォスミン（Ｔｅｔｒｏｆｏｓｍｉｎ）、及びトリス（３−メトキシプロピル）ホスフィンのような単座ホスフィンがある。好適なジアゼニドの例には、ＨＹＮＩＣ系列のリガンド（即ち、ヒドラジン置換ピリジン又はニコチンアミド）がある。
【００５２】
好ましいリガンドは、キレート剤並びに動力学的に安定な金属錯体を形成する単座リガンド（例えば、ホスフィン、イソニトリル及びジアゼニド）である。最も好ましいリガンドは、上記に定義したようなキレート剤である。
【００５３】
キレート交換に耐える金属錯体を形成するテクネチウム用の好適なキレート剤の例には、特に限定されないが、以下のものがある。
【００５４】
（ｉ）次の式（ＩＩＩ）のジアミンジオキシム。
【００５５】
【化４】
2010513476.tif 000005
式中、Ｅ１〜Ｅ６は各々独立にＲ'基であり、各Ｒ'はＨ或いはＣ１−１０アルキル、Ｃ３−１０アルキルアリール、Ｃ２−１０アルコキシアルキル、Ｃ１−１０ヒドロキシアルキル、Ｃ１−１０フルオロアルキル、Ｃ２−１０カルボキシアルキル又はＣ１−１０アミノアルキルであり、或いは２以上のＲ'基がそれらに結合した原子と共に炭素環式又は複素環式の飽和又は不飽和環を形成し、Ｒ'基の１以上は枝分れ単位にコンジュゲートされており、Ｑは式−（Ｊ）ｆ−（式中、ｆは３、４又は５であり、各Ｊは−（Ｊ）ｆ−が−Ｏ−又は−ＮＲ'−である最大１つのＪ基を含むことを条件にして独立に−Ｏ−、−ＮＲ'−又は−Ｃ（Ｒ'）２−である。）の橋かけ基である。
【００５６】
好ましいＱ基は以下の通りである。
Ｑ＝−（ＣＨ２）（ＣＨＲ'）（ＣＨ２）−（即ち、プロピレンアミンオキシム又はＰｎＡＯ誘導体）、
Ｑ＝−（ＣＨ２）２（ＣＨＲ'）（ＣＨ２）２−（即ち、ペンチレンアミンオキシム又はＰｅｎｔＡＯ誘導体）、
Ｑ＝−（ＣＨ２）２ＮＲ（ＣＨ２）２−。
【００５７】
Ｅ１〜Ｅ６は、好ましくはＣ１−３アルキル、アルキルアリール、アルコキシアルキル、ヒドロキシアルキル、フルオロアルキル、カルボキシアルキル及びアミノアルキルから選択される。最も好ましくは、各Ｅ１〜Ｅ６基はＣＨ３−である。
【００５８】
枝分れ単位は、好ましくはＥ１又はＥ６のＲ'基或いはＱ基のＲ'基にコンジュゲートされている。最も好ましくは、枝分れ単位はＱ基のＲ'基にコンジュゲートされている。枝分れ単位がＱ基のＲ'基にコンジュゲートされている場合、Ｒ'基は好ましくはブリッジヘッドの位置にある。その場合、Ｑは、好ましくは−（ＣＨ２）（ＣＨＲ）（ＣＨ２）−、−（ＣＨ２）２（ＣＨＲ'）（ＣＨ２）２−又は−（ＣＨ２）２ＮＲ'（ＣＨ２）２−であり、最も好ましくは−（ＣＨ２）（ＣＨＲ）（ＣＨ２）２−である。
【００５９】
特に好ましい二官能性ジアミンジオキシムキレーターは次の式を有する。
【００６０】
（ｉ）
【００６１】
【化５】
2010513476.tif 000006
式中、単位Ｃ又はＳの一方はブリッジヘッドの−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２基を介してコンジュゲートされる。
【００６２】
さらに他の好ましいキレーターには、以下のものがある。
【００６３】
（ｉｉ）ＭＡＧ３（メルカプトアセチルトリグリシン）のようなチオールトリアミドドナーセット又はＰｉｃａのようなジアミドピリジンチオールドナーセットを有するＮ３Ｓリガンド及び関連するリガンド。
【００６４】
（ｉｉｉ）ＢＡＴ又はＥＣＤ（即ち、エチルシステイネート二量体）のようなジアミンジチオールドナーセット或いはＭＡＭＡのようなアミドアミンジチオールドナーセットを有するＮ２Ｓ２リガンド。
【００６５】
（ｉｖ）シクラム、モノオキソシクラム又はジオキソシクラムのようなテトラアミン、アミドトリアミン又はジアミドジアミンドナーセットを有する開鎖又は大環状リガンドであるＮ４リガンド。
【００６６】
（ｖ）ジアミンジフェノールドナーセットを有するＮ２Ｏ２リガンド。
【００６７】
上述のリガンドはテクネチウム（例えば、９４ｍＴｃ又は９９ｍＴｃ）を錯体化するために特に適しており、Ｊｕｒｉｓｓｏｎら［Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．，９９，２２０５−２２１８（１９９９）］によって一層詳しく記載されている。かかるリガンドは、銅（６４Ｃｕ又は６７Ｃｕ）、バナジウム（例えば、４８Ｖ）、鉄（例えば、５２Ｆｅ）或いはコバルト（例えば、５５Ｃｏ）のような他の金属に対しても有用である。他の好適なリガンドはＳａｎｄｏｚの国際公開第９１／０１１４４号に記載されており、その中にはインジウム、イットリウム及びガドリニウムに対して特に好適なリガンド（特に大環状アミノカルボキシレート及びアミノホスフィン酸リガンド）が含まれる。ガドリニウムの非イオン性（即ち、中性）金属錯体を形成するリガンドも知られており、米国特許第４，８８５，３６３号に記載されている。放射性金属イオンがテクネチウムである場合、リガンドは好ましくは四座のキレート剤である。テクネチウム用の好ましいキレート剤は、ジアミンジオキシム或いは上述のようなＮ２Ｓ２又はＮ３Ｓドナーセットを有するものである。
【００６８】
単位Ｐは、結合が血中において容易に代謝を受けないようにして金属錯体に結合していることが好ましい。それは、標識化合物が所望のインビボ標的部位に到達する前に、かかる代謝が金属錯体の離脱をもたらすからである。したがって、単位Ｐは容易に代謝されない結合Ｓを介して金属錯体に共有結合すればよい。
【００６９】
イメージング成分が放射性ハロゲン（例えば、ヨウ素）である場合、枝分れ単位は好適には、（放射性ヨウ素交換を可能にするための）アリールヨージド又はブロミドのような非放射性ハロゲン原子、有機金属前駆体化合物（例えば、トリアルキルスズ又はトリアルキルシリル）、或いはトリアゼンのような有機前駆体又は求核置換のための良好な脱離基（例えば、ヨードニウム塩）を含むように選択される。（ＨＩ及びＯＦＦを含む）放射性ハロゲンを導入する方法は、Ｂｏｌｔｏｎ［Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｏｍｐ．Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．，４５，４８５−５２８（２００２）］によって記載されている。放射性ハロゲン（特にヨウ素）を結合できる好適なアリール基の例を以下に示す。
【００７０】
【化６】
2010513476.tif 000007
これらの基はいずれも、芳香環上への容易な放射性ヨウ素置換を可能にする置換基を含んでいる。放射性ヨウ素を含む代わりの置換基は、放射性ハロゲン交換による直接ヨウ素化で合成できる。イメージング剤がヨウ素の放射性同位体である場合、飽和脂肪族系に結合したヨウ素原子はインビボでの代謝を受けやすく、したがって放射性ヨウ素の損失を招きやすいことが知られているので、放射性ヨウ素原子は好ましくはベンゼン環のような芳香環への直接共有結合によって結合される。
【００７１】
イメージング部分がフッ素の放射性同位体（例えば、１８Ｆ）を含む場合、放射性ハロゲン化は、１８Ｆ−フッ化物と良好な脱離基を有する適当な前駆体（例えば、アルキルブロミド、アルキルメシレート又はアルキルトシレート）との反応を用いる直接標識によって実施できる。１８Ｆはまた、１８Ｆ（ＣＨ２）３ＯＭｓ（式中、Ｍｓはメシレートである）のようなアルキル化剤でアミン前駆体をアルキル化してＮ−（ＣＨ２）３１８Ｆを得るか、或いはＦ（ＣＨ２）３ＯＭｓ又は１８Ｆ（ＣＨ２）３Ｂｒでヒドロキシル基をＯ−アルキル化することによっても導入できる。１８Ｆはまた、１８Ｆ（ＣＨ２）３ＯＨ反応体でＮ−ハロアセチル基をアルキル化して−ＮＨ（ＣＯ）ＣＨ２Ｏ（ＣＨ２）３１８Ｆ誘導体を得ることによっても導入できる。アリール系に関しては、アリールジアゾニウム塩、アリールニトロ化合物又はアリール第四級アンモニウム塩からの１８Ｆ−フッ化物求核置換が、アリール−１８Ｆ誘導体への好適な経路である。
【００７２】
本発明の好ましい実施形態では、式（Ｉ）の化合物及びその薬学的に許容される塩において、
コア単位Ｃが、アミノ酸であるリシン、オルニチン及びジアミノプロピオン酸並びにアミンを含み、
リンカーＬが同一のものであって、ＰＥＧ結合単位からなり、
単位Ｐが同一のものであって、２〜８の正電荷及び２０以下のアミノ酸を含み、
Ｓが存在するか又は存在せず、存在する場合にはアルキル鎖又はＰＥＧ単位からなり、
Ｒが以下のイメージング成分（ｉ）〜（ｖｉｉ）の１つを含み、
（ｉ）放射性金属イオン、
（ｉｉ）常磁性金属イオン、
（ｉｉｉ）γ放出型放射性ハロゲン、
（ｉｖ）陽電子放出型放射性非金属、
（ｖ）過分極ＮＭＲ活性核、
（ｖｉ）インビボ光学イメージングに適したレポーター、
（ｖｉｉ）血管内検出に適したβ放射体、
ｐが０又は１の整数を表し、
ｎが１〜４の整数を表す
ものが提供される。
【００７３】
一般式（Ｉ）の化合物は、当業者にとって公知であるいくつかの合成経路により、商業的に入手可能な出発原料から合成できる。単位Ｃ及びＰは公知の化学合成方法を用いて合成できる。自動ペプチド合成機を用いるメリフィールドの固相法（Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，８５：２１４９（１９６４））が特に有用である。合成戦略のための標準手順は、Ｅ．Ａｔｈｅｒｔｏｎ  ＆  Ｒ．Ｃ．Ｓｈｅｐｐａｒｄ，“Ｓｏｌｉｄ  ｐｈａｓｅ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｓｙｓｎｔｈｅｓｉｓ：ａ  ｐｒａｃｔｉｃａｌ  ａｐｐｒｏａｃｈ”，１９８９，ＩＲＬ  ｐｒｅｓｓ，Ｏｘｆｏｒｄに記載されている。
【００７４】
固相技法によるペプチドの合成は、任意にはリンカー単位を介して固相支持体に結合される保護アミノ酸を順次に付加することに基づいている。常用される一方法では、α−アミノ基を酸不安定基又は塩基不安定基で適宜に保護する。第１のアミノ酸残基の付加及びカップリング後、α−アミノ保護基を除去する。追加の保護アミノ酸誘導体又はペプチドフラグメントを順次に付加することで鎖を伸長する。
【００７５】
次の式（Ｉａ）の化合物は、全自動合成方法を用いてアセンブルできる。
Ｓｐ−Ｃ−（Ｌ−Ｐ）ｎ
式（Ｉａ）
式中、Ｓ、ｐ、Ｃ、Ｌ、Ｐ及びｎは上記の意味を有し、該化合物は非ペプチドリンカー単位、Ｓ（存在する場合）及びＰを含んでいる。追加の段階では、通常の合成方法によってイメージング部分ＲをＳ又はＣ単位にカップリングする。上述の通り、非金属イメージング成分はＣ単位に直接カップリングすることができ、或いはそれを担体（例えば、ヨウ素元素に関してはアリール基）に結合できる。イメージング成分が金属イオンである場合、適当な錯化剤をＳ又はＣ単位にカップリングし、塩又は酸化物の形態の金属イオンを現行の技術で知られる手順（例えば、国際公開第０３／００６０７０号）に従って錯化剤を担持する化合物に付加する。
【００７６】
本発明に係る化合物の製造は、構成単位及び段階合成に準拠し得る。コアＣを第１の構成単位として使用するが、前記コアはＬ及びＳｐ又はＲの結合を可能にする反応基で置換されている。Ｌ又はその前駆体を置換された第１の構成単位と反応させることで、コアＣ及びＬからなる第２の構成単位を形成する。この反応のため、Ｌは、第１の構成単位の反応基と反応して前記第１の構成単位へのＬの結合をもたらすることができる反応基を含んでいる。次の段階では、Ｐ又はその前駆体を第２の構成単位に結合することで、コアＣ、Ｌ及びＰからなる第３の構成単位を形成する。存在する場合、Ｓｐ又はその前駆体を第３の構成単位に結合することで、Ｓｐ、コアＣ、Ｌ及びＰからなる第４の構成単位を形成する。Ｓｐが存在するか否かに応じ、Ｒ又はその前駆体を第３又は第４の構成単位に結合する。
【００７７】
かくして、本発明に係る化合物の製造方法は以下の段階を含んでなる。
ａ）Ｌ及びＳｐ又はＲの結合を可能にする反応基で置換されたコア単位Ｃを第１の構成単位として使用する段階、
ｂ）Ｌ又はその前駆体を前記第１の構成単位と反応させて、コアＣ及びＬからなる第２の構成単位を形成する段階、
ｃ）Ｐ又はその前駆体を前記第２の構成単位と反応させて、コアＣ、Ｌ及びＰからなる第３の構成単位を形成する段階、
ｄ）任意にはＳｐ又はその前駆体を前記第３の構成単位と反応させて、Ｓｐ、コアＣ、Ｌ及びＰからなる第４の構成単位を形成する段階、並びに
ｅ）Ｒ又はその前駆体を前記第３又は第４の構成単位と反応させる段階。
【００７８】
本発明の式（Ｉ）の化合物は、プロテオグリカンに対して親和性を有している。プロテオグリカングループの例は、シンデカン−１及びＧＰＣ１（膵臓癌でアップレギュレートされるもの）、シンデカン−２（結腸癌でアップレギュレートされるもの）並びにシンデカン−４（肝細胞癌でアップレギュレートされるもの）がある。本発明の好ましい化合物はＨＳＰＧに対して親和性を有しており、ＨＳＰＧのグルコサミノグリカン（ＧＡＧ）の負電荷と相互作用することでこれらを標的化する。式（Ｉ）の化合物の構造化ペプチド配列Ｐは、ＧＡＧの繰返し棒状構造と整合して交差結合標的化効果を生じる。ペプチド構造Ｐは、１本のＧＡＧ鎖の複数の領域と結合するか、或いは複数のＧＡＧ鎖と交差結合することができる。これにより、ただ１つの正電荷をもったペプチド鎖を有する化合物より高い結合親和性が得られる。
【００７９】
イメージング部分は、化合物をインビボで哺乳動物体に投与した後に検出することができる。投与のためには、式（Ｉ）の化合物は、インビボ注射に適した無菌組成物として、或いは経口投与のため又は直腸及び子宮のような生体ダクトへの投与に適した組成物として処方される。
【００８０】
第２の態様では、本発明は、上述したような化合物を哺乳動物への投与に適した形態で生体適合性キャリヤーと共に含んでなる医薬品組成物を提供する。「生体適合性キャリヤー」は、毒性又は過度の不快感なしに哺乳動物体に投与できる生理学的に許容される形態の組成物を与えるようにして化合物を懸濁又は溶解し得る流体（特に液体）である。生体適合性キャリヤーは、好適には、無菌の無発熱原性注射用水、（有利には注射用の最終生成物が等張性又は非低張性になるように平衡させ得る）食塩水のような水溶液、或いは１種以上の張度調整物質（例えば、生体適合性対イオンを有する血漿陽イオンの塩）、糖（例えば、グルコース又はスクロース）、糖アルコール（例えば、ソルビトール又はマンニトール）、グリコール（例えば、グリセロール）又は他の非イオン性ポリオール物質（例えば、ポリエチレングリコール、プロピレングリコールなど）の水溶液のような注射可能なキャリヤー液体である。
【００８１】
本発明はさらに、診断イメージング方法での医薬品組成物の使用を提供する。かかる方法は、ヒト又はヒト以外の動物の身体に医薬品組成物を投与する段階を含んでいる。身体を診断装置で検査し、検査からデータをコンパイルする。データを用いて画像を生み出し、かつ診断に到達することを容易にするために必要であれば、データをさらに処理できる。データは、上述したようなプロテオグリカンのアップレギュレーションに関連する疾患及び状態の可視化及び同定のために使用できる。組成物は、無菌組成物の注射又は輸液によって投与でき、或いは経口投与のため又は直腸及び子宮のような生体ダクトへの投与に適した組成物として投与できる。
【００８２】
さらに別の態様では、本発明はまた、ヒト又はヒト以外の動物の身体の診断イメージング方法であって、上述の医薬品組成物を予め投与したヒト又はヒト以外の動物の身体のイメージングを行うことを含んでなる方法を提供する。この実施形態では、医薬品組成物はイメージング方法又はイメージング処理において使用される。この場合、「予め投与した」という用語は、医療資格者が組成物を患者に投与することを要求する任意の段階が既に実施されていることを意味する。
【００８３】
さらに別の態様では、本発明は、ヒト又は動物の身体の画像を生成する方法であって、開示されたような化合物又はかかる化合物を含む医薬品組成物をヒト又はヒト以外の動物の身体に投与する段階、及び前記化合物が分布した前記身体の少なくとも一部の画像を生成する段階を含んでなる方法を提供する。
【実施例】
【００８４】
以下の略語を使用する。
Ａｃ：  アセチル
Ａｒｇ：  アルギニン
Ｂｏｃ：  ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル
Ｄｄｅ：  １−（４，４−ジメチル−２，６−ジオキソシクロヘキシ−１−リデン）エチル
ＤＭＦ：  ジメチルホルムアミド
Ｆｍｏｃ：  ９−フルオレニルメトキシカルボニル
Ｇｌｕ：  グルタミン酸
Ｇｌｙ：  グリシン
ＨＡＴＵ：  Ｎ−[（ジメチルホルムアミノ）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾロ−[４，５ｂ]ピリジン−１−イルメチレン］−Ｎ−メチルメタナミニウムヘキサフルオロホスフェートＮ−オキシド
ＨＢＴＵ：  ２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート
ＨＯＡｔ：  １−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール
ＨＰＬＣ：  高速液体クロマトグラフィー
Ｌｙｓ：  リシン
ＮＭＭ：  Ｎ−メチルモルホリン
Ｏｔ−Ｂｕ：  ｔｅｒｔ−ブトキシド
Ｐｂｆ：  ２，２，４，６，７−ペンタメチルジヒドロベンゾフラン５−スルホニル
ＰＥＧ：  ポリエチレングリコール
ＰＥＧ４：  １７−アミノ−５−オキソ−６−アザ−３，９，１２，１５−テトラオキサヘプタデカン酸
ＰＥＧ１２：  ３９−アミノ−４，７，１０，１３，１６，１９，２２，２５，２８，３１，３４，３７−ドデカオキサプロピオン酸
ＰｙＡＯＰ：  （７−アザベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）トリス（ピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート
Ｐｒｏ：  プロリン
ＴＦＡ：  トリフルオロ酢酸
ＴＩＳ：  トリイソプロピルシラン
Ｒｉｎｋ  Ａｍｉｄｅ（商標）：ポリスチレン系樹脂
実施例１〜８は、ｐがゼロに等しい場合の式（Ｉａ）の化合物に相当する式Ｃ−（Ｌ−Ｐ）ｎの中間体の製造を例示している。実施例９〜１３は、式（Ｉ）の化合物を例示している。
【００８５】
実施例１
Ａｃ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ａｒｇ−ＰＥＧ１２−Ｄ−Ｌｙｓ（ＰＥＧ１２−Ｄ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ａｃ）−Ｄ−Ｌｙｓ−ＮＨ２の合成
【００８６】
【化７】
2010513476.tif 000008
Ｒｉｎｋ  Ａｍｉｄｅ  ＭＢＨＡ樹脂（Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ社、０．５８ｍｍｏｌｅ／ｇ、スケール＝０．１０ｍｍｏｌｅ＝０．１７２ｇ）から出発して、Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｄｄｅ）−ＯＨ及びＦｍｏｃ  ＰＥＧ１２のアセンブリを手作業で行った。ペプチドの合成中におけるＦｍｏｃ基の除去はジメチルホルムアミド（Ｒａｔｈｂｕｒｎ社）中２０％ピペリジン（Ｆｌｕｋａ社）を用いて行い、Ｄｄｅ保護基はＤＭＦ中２％ヒドラジン（Ａｌｄｒｉｃｈ社）を用いて除去した。Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ（Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ社、１４１ｍｇ、０．３ｍｍｏｌｅ）をＨＡＴＵ（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ社、１１４ｍｇ、０．３ｍｍｏｌｅ）及びＤＭＦ中の４−メチルモルホリン（Ｆｌｕｋａ社、６６μＬ、０．６ｍｍｏｌｅ）で予備活性化した後、樹脂にカップリングした。次のアミノ酸のカップリングは、Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｄｄｅ）−ＯＨ（Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ社、２６６．３ｍｇ、０．５ｍｍｏｌｅ）、ＨＡＴＵ（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ社、１９０ｍｇ、０．５ｍｍｏｌｅ）及びＤＭＦ中の４−メチルモルホリン（Ｆｌｕｋａ社、１１０μＬ、１．０ｍｍｏｌｅ）並びに３９−（Ｆｍｏｃ−アミノ）−４，７，１０，１３，１６，１９，２２，２５，２８，３１，３４，３７−ドデカオキサプロピオン酸（Ｐｏｌｙｐｕｒｅ社、３３６ｍｇ、０．４ｍｍｏｌｅ）、ＨＡＴＵ（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ社、１５２ｍｇ、０．４ｍｍｏｌｅ）及びＤＭＦ中の４−メチルモルホリン（Ｆｌｕｋａ社、８８μＬ、０．８ｍｍｏｌｅ）を用いて同様に実施した。
【００８７】
残りのアミノ酸配列（Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ））のアセンブリは、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ社からの１ｍｍｏｌｅアミノ酸カートリッジを使用しながら全自動合成機（ＡＢＩ  ４３３Ａ）を用いて行った。カップリングに先立ち、ＨＢＴＵ（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ社）を用いてアミノ酸を予備活性化した。ＤＭＦ中で無水酢酸（Ｍｅｒｃｋ社、１０ｅｑ）及び４−メチルモルホリン（Ｆｌｕｋａ社、２０ｅｑ）を用いて樹脂をアセチル化した。樹脂からの側鎖保護基及びペプチドの同時除去は、２．５％の水及び２．５％のトリイソプロピルシラン（Ａｌｄｒｉｃｈ社）を含むトリフルオロ酢酸（Ｆｌｕｋａ社）中で６時間実施した。樹脂を濾過によって取り除き、濾液を真空中で蒸発させた。残留物にジエチルエーテル（Ｅｔｅｒｎｅｌｌ社）を添加した。得られた沈殿をエーテルで洗浄し、空気乾燥した。逆相分取クロマトグラフィー（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム，００Ｇ−４２５２−Ｐ０；溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝ＣＨ３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ；勾配：６０分で１０〜２５％Ｂ；流量：１０ｍｌ／分；検出：２１４ｎｍ及び２５４ｎｍ）を用いて粗生成物を精製した。分析ＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム，００Ｇ−４２５２−Ｅ０；溶媒：Ａ＝水＋０．１％ＴＦＡ／Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ＋０．１％ＴＦＡ；勾配：２０分で１０〜２５％Ｂ；流量：１．０ｍｌ／分；保持時間：１１．８分；検出：２１４ｎｍ及び２５４ｎｍ）を用いて特性決定を行った。質量分析法を用いて追加の特性決定を実施することで、１０５０．７［Ｍ−３Ｈ＋］のｍ／ｚ値を得た。
【００８８】
実施例２
Ａｃ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｇｌｕ−ＰＥＧ１２−Ｄ−Ｌｙｓ（ＰＥＧ１２−Ｄ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ａｃ）−Ｄ−Ｌｙｓ−ＮＨ２の合成
【００８９】
【化８】
2010513476.tif 000009
ＮｏｖａＰＥＧ  Ｒｉｎｋ  Ａｍｉｄｅ樹脂（Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ社、０．６２ｍｍｏｌｅ／ｇ、スケール＝０．０５ｍｍｏｌｅ＝０．０８１ｇ）を使用しながら、全自動合成機（Ｌｉｂｅｒｔｙ  ＣＥＭマイクロ波ペプチド合成機）を用いてアミノ酸配列Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｏｔ−Ｂｕ）−ＰＥＧ１２−Ｄ−Ｌｙｓ（−ＰＥＧ１２−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｏｔ−Ｂｕ）−Ｇｌｙ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）のアセンブリを行った。カップリングに先立ち、ＨＢＴＵ（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ社）を用いてアミノ酸（Ｉｒｉｓ  Ｂｉｏｔｅｃｈ社及びＮｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ社）を予備活性化した。ジメチルホルムアミド（Ｒａｔｈｂｕｒｎ社）中で無水酢酸（Ｍｅｒｃｋ社、１０ｅｑ）及び４−メチルモルホリン（Ｆｌｕｋａ社、２０ｅｑ）を用いて樹脂をアセチル化した。樹脂からの側鎖保護基及びペプチドの同時除去は、２．５％の水及び２．５％のトリイソプロピルシラン（Ａｌｄｒｉｃｈ社）を含むトリフルオロ酢酸（Ｆｌｕｋａ社）中で一晩実施した。樹脂を濾過によって取り除き、濾液を真空中で蒸発させた。残留物にジエチルエーテル（Ｅｔｅｒｎｅｌｌ社）を添加した。得られた沈殿をエーテルで洗浄し、空気乾燥した。逆相分取クロマトグラフィー（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム，００Ｇ−４２５２−Ｐ０；溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝ＣＨ３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ；勾配：４０分で００〜３０％Ｂ；流量：１０ｍｌ／分；検出：２１４ｎｍ及び２５４ｎｍ）を用いて粗生成物の半分を精製することで１３．１ｍｇの純化合物を得た。分析ＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム，００Ｇ−４２５２−Ｅ０；溶媒：Ａ＝水＋０．１％ＴＦＡ／Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ＋０．１％ＴＦＡ；勾配：２０分で１０〜４５％Ｂ；流量：１．０ｍｌ／分；保持時間：８．８分；検出：２１４ｎｍ及び２５４ｎｍ）を用いて特性決定を行った。質量分析法を用いて追加の特性決定を実施することで、１７６１．８［Ｍ−２Ｈ＋］のｍ／ｚ値を得た。
【００９０】
実施例３
Ａｃ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ｐｒｏ−ＰＥＧ４−Ｄ−Ｌｙｓ（ＰＥＧ４−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｒｇ−Ａｃ）−Ｄ−Ｌｙｓ−ＮＨ２の合成
【００９１】
【化９】
2010513476.tif 000010
ＮｏｖａＰＥＧ  Ｒｉｎｋ  Ａｍｉｄｅ樹脂（Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ社、０．６２ｍｍｏｌｅ／ｇ、スケール＝０．０５ｍｍｏｌｅ＝０．０８１ｇ）を使用しながら、全自動合成機（Ｌｉｂｅｒｔｙ  ＣＥＭマイクロ波ペプチド合成機）を用いてアミノ酸配列（Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ｐｒｏ−ＰＥＧ４−Ｄ−Ｌｙｓ（ＰＥＧ４−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ））−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）のアセンブリを行った。カップリングに先立ち、ＨＢＴＵ（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ社）を用いてアミノ酸（Ｉｒｉｓ  Ｂｉｏｔｅｃｈ社及びＮｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ社）を予備活性化した。ジメチルホルムアミド（Ｒａｔｈｂｕｒｎ社）中で無水酢酸（Ｍｅｒｃｋ社、１０ｅｑ）及び４−メチルモルホリン（Ｆｌｕｋａ社、２０ｅｑ）を用いて樹脂をアセチル化した。樹脂からの側鎖保護基及びペプチドの同時除去は、２．５％の水及び２．５％のトリイソプロピルシラン（Ａｌｄｒｉｃｈ社）を含むトリフルオロ酢酸（Ｆｌｕｋａ社）中で一晩実施した。樹脂を濾過によって取り除き、濾液を真空中で蒸発させた。残留物にジエチルエーテル（Ｅｔｅｒｎｅｌｌ社）を添加した。得られた沈殿をエーテルで洗浄し、空気乾燥した。逆相分取クロマトグラフィー（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム，００Ｇ−４２５２−Ｐ０；溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝ＣＨ３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ；勾配：４０分で１０〜３０％Ｂ；流量：１０ｍｌ／分；検出：２１４ｎｍ及び２５４ｎｍ）を用いて粗生成物の半分を精製することで２１．８ｍｇの純化合物を得た。分析ＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム，００Ｇ−４２５２−Ｅ０；溶媒：Ａ＝水＋０．１％ＴＦＡ／Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ＋０．１％ＴＦＡ；勾配：２０分で１０〜２５％Ｂ；流量：１．０ｍｌ／分；保持時間：９．６分；検出：２１４ｎｍ及び２５４ｎｍ）を用いて特性決定を行った。質量分析法を用いて追加の特性決定を実施することで、１８２４．４［Ｍ−２Ｈ＋＋３ＴＦＡ］のｍ／ｚ値を得た。
【００９２】
実施例４
Ａｃ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ａｒｇ−ＰＥＧ１２−Ｄ−Ｌｙｓ（ＰＥＧ１２−Ｄ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ａｃ）−ｋ（Ａｃ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ａｒｇ−ＰＥＧ１２−Ｄ−Ｌｙｓ（ＰＥＧ１２−Ｄ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ａｃ））−Ｄ−Ｌｙｓ−ＮＨ２の合成
【００９３】
【化１０】
2010513476.tif 000011
ＮｏｖａＰＥＧ  Ｒｉｎｋ  Ａｍｉｄｅ樹脂（Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ社、０．６２ｍｍｏｌｅ／ｇ、スケール＝０．０２５ｍｍｏｌｅ＝０．０４０ｇ）を使用しながら、全自動合成機（Ｌｉｂｅｒｔｙ  ＣＥＭマイクロ波ペプチド合成機）を用いてアミノ酸配列（Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＰＥＧ１２−Ｄ−Ｌｙｓ（ＰＥＧ１２−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ））−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＰＥＧ１２−Ｄ−Ｌｙｓ（ＰＥＧ１２−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）））−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）のアセンブリを行った。カップリングに先立ち、ＨＢＴＵ（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ社）を用いてアミノ酸（Ｉｒｉｓ  Ｂｉｏｔｅｃｈ社及びＮｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ社）を予備活性化した。ジメチルホルムアミド（Ｒａｔｈｂｕｒｎ社）中で無水酢酸（Ｍｅｒｃｋ社、１０ｅｑ）及び４−メチルモルホリン（Ｆｌｕｋａ社、２０ｅｑ）を用いて樹脂をアセチル化した。樹脂からの側鎖保護基及びペプチドの同時除去は、２．５％の水及び２．５％のトリイソプロピルシラン（Ａｌｄｒｉｃｈ社）を含むトリフルオロ酢酸（Ｆｌｕｋａ社）中で一晩実施した。樹脂を濾過によって取り除き、濾液を真空中で蒸発させた。残留物にジエチルエーテル（Ｅｔｅｒｎｅｌｌ社）を添加した。得られた沈殿をエーテルで洗浄し、空気乾燥した。逆相分取クロマトグラフィー（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム，００Ｇ−４２５２−Ｐ０；溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝ＣＨ３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ；勾配：４０分で００〜３０％Ｂ；流量：１０ｍｌ／分；検出：２１４ｎｍ及び２５４ｎｍ）を用いて粗生成物の１／４を精製することで２．８ｍｇの純化合物を得た。分析ＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム，００Ｇ−４２５２−Ｅ０；溶媒：Ａ＝水＋０．１％ＴＦＡ／Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ＋０．１％ＴＦＡ；勾配：２０分で１０〜４０％Ｂ；流量：１．０ｍｌ／分；保持時間：９．０分；検出：２１４ｎｍ及び２５４ｎｍ）を用いて特性決定を行った。
【００９４】
実施例５
Ａｃ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ｐｒｏ−ＰＥＧ４（ＰＥＧ４−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｒｇ−Ａｃ）−ｋ（Ａｃ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ｐｒｏ−ＰＥＧ４−Ｄ−Ｌｙｓ（ＰＥＧ４−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｒｇ−Ａｃ））−Ｄ−Ｌｙｓ−ＮＨ２の合成
【００９５】
【化１１】
2010513476.tif 000012
ＮｏｖａＰＥＧ  Ｒｉｎｋ  Ａｍｉｄｅ樹脂（Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ社、０．６２ｍｍｏｌｅ／ｇ、スケール＝０．０２５ｍｍｏｌｅ＝０．０４０ｇ）を使用しながら、全自動合成機（Ｌｉｂｅｒｔｙ  ＣＥＭマイクロ波ペプチド合成機）を用いてアミノ酸配列（Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ｐｒｏ−ＰＥＧ４（ＰＥＧ４−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ））−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ｐｒｏ−ＰＥＧ４−Ｄ−Ｌｙｓ（ＰＥＧ４−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）））−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ））のアセンブリを行った。カップリングに先立ち、ＨＢＴＵ（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ社）を用いてアミノ酸（Ｉｒｉｓ  Ｂｉｏｔｅｃｈ社及びＮｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ社）を予備活性化した。ジメチルホルムアミド（Ｒａｔｈｂｕｒｎ社）中で無水酢酸（Ｍｅｒｃｋ社、１０ｅｑ）及び４−メチルモルホリン（Ｆｌｕｋａ社、２０ｅｑ）を用いて樹脂をアセチル化した。樹脂からの側鎖保護基及びペプチドの同時除去は、２．５％の水及び２．５％のトリイソプロピルシラン（Ａｌｄｒｉｃｈ社）を含むトリフルオロ酢酸（Ｆｌｕｋａ社）中で一晩実施した。樹脂を濾過によって取り除き、濾液を真空中で蒸発させた。残留物にジエチルエーテル（Ｅｔｅｒｎｅｌｌ社）を添加した。得られた沈殿をエーテルで洗浄し、空気乾燥した。逆相分取クロマトグラフィー（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム，００Ｇ−４２５２−Ｐ０；溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝ＣＨ３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ；勾配：４０分で００〜３０％Ｂ；流量：１０ｍｌ／分；検出：２１４ｎｍ及び２５４ｎｍ）を用いて粗生成物の半分を精製することで６．８ｍｇの純化合物を得た。分析ＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム，００Ｇ−４２５２−Ｅ０；溶媒：Ａ＝水＋０．１％ＴＦＡ／Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ＋０．１％ＴＦＡ；勾配：２０分で１０〜２５％Ｂ；流量：１．０ｍｌ／分；保持時間：１０．５分；検出：２１４ｎｍ及び２５４ｎｍ）を用いて特性決定を行った。
【００９６】
実施例６
Ａｃ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ｌｙｓ−Ｄ−Ｌｙｓ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ｏｒｎ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｇｌｕ−Ｄ−Ｇｌｕ−ＰＥＧ１２−Ｄ−Ｌｙｓ（ＰＥＧ１２−Ｄ−Ｇｌｕ−Ｄ−Ｇｌｕ−Ｄ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ｏｒｎ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ｌｙｓ−Ｄ−Ｌｙｓ−Ｄ−Ａｒｇ−Ａｃ）−Ｄ−Ｃｙｓ−ＮＨ２の合成
【００９７】
【化１２】
2010513476.tif 000013
０．０５ｍｍｏｌのＮｏｖａＰＥＧ  Ｒｉｎｋ  Ａｍｉｄｅ樹脂（Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ社）から出発するＦｍｏｃ化学を用いて、ＣＥＭ  Ｌｉｂｅｒｔｙマイクロ波ペプチド合成機上でアミノ酸配列Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ｏｒｎ（Ｂｏｃ）−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｄ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＰＥＧ１２−Ｄ−Ｌｙｓ（ＰＥＧ１２−Ｄ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｄ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｙ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ｏｒｎ（Ｂｏｃ）−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ））−Ｄ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）をアセンブルした。各カップリング段階では、インサイチュ活性化のためにＨＡＴＵ（ＧｅｎＳｃｒｉｐｔ  Ｃｏｒｐ．）、ＨＯＡｔ（ＧｅｎＳｃｒｉｐｔ  Ｃｏｒｐ．）及びＤＩＥＡ（Ｆｌｕｋａ社）を使用しながら、０．４ｍｍｏｌのアミノ酸（Ｉｒｉｓ  Ｂｉｏｔｅｃｈ社、Ｆｌｕｋａ社及びＮｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ社）を適用した。ジメチルホルムアミド（Ｒａｔｈｂｕｒｎ社）中で無水酢酸（Ｍｅｒｃｋ社、１０ｅｑ）及びＤＩＥＡ（Ｆｌｕｋａ社、１１ｅｑ）を用いて樹脂をアセチル化した。樹脂からの側鎖保護基及びペプチドの同時除去は、２．５％の水及び２．５％のトリイソプロピルシラン（Ａｌｄｒｉｃｈ社）を含むトリフルオロ酢酸（Ｆｌｕｋａ社）中で一晩実施した。樹脂を濾過によって取り除き、濾液を真空中で蒸発させた。残留物にジエチルエーテル（Ｅｔｅｒｎｅｌｌ社）を添加した。得られた沈殿をエーテルで洗浄し、空気乾燥した。逆相分取クロマトグラフィー（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム，００Ｇ−４２５２−Ｐ０；溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝ＣＨ３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ；勾配：４０分で１０〜５０％Ｂ；流量：１０ｍｌ／分；検出：２１４ｎｍ及び２５４ｎｍ）を用いて粗生成物の半分を精製することで純化合物を得た。分析ＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  ３μ  Ｃ１８（２）２０×２ｍｍ；溶媒：Ａ＝水＋０．１％ＴＦＡ／Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ＋０．１％ＴＦＡ；勾配：５分で１０〜５０％Ｂ；流量：０．６ｍｌ／分；保持時間：１．７７分；検出：２１４ｎｍ）を用いて特性決定を行った。質量分析法を用いて追加の特性決定を実施することで、１５９３．３［Ｍ３Ｈ３＋］のｍ／ｚ値を得た。
【００９８】
実施例７
Ａｃ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ｌｙｓ−Ｄ−Ｌｙｓ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ｏｒｎ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−ＰＥＧ１２−Ｄ−Ｌｙｓ（ＰＥＧ１２−Ｄ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ｏｒｎ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ｌｙｓ−Ｄ−Ｌｙｓ−Ｄ−Ａｒｇ−Ａｃ）−Ｄ−Ｃｙｓ−ＮＨ２の合成
【００９９】
【化１３】
2010513476.tif 000014
０．０５ｍｍｏｌのＮｏｖａＰＥＧ  Ｒｉｎｋ  Ａｍｉｄｅ樹脂（Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ社）から出発するＦｍｏｃ化学を用いて、ＣＥＭ  Ｌｉｂｅｒｔｙマイクロ波ペプチド合成機上でアミノ酸配列Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ｏｒｎ（Ｂｏｃ）−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＰＥＧ１２−Ｄ−Ｌｙｓ（ＰＥＧ１２−Ｄ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ｏｒｎ（Ｂｏｃ）−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ））−Ｄ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）をアセンブルした。各カップリング段階では、インサイチュ活性化のためにＨＡＴＵ（ＧｅｎＳｃｒｉｐｔ  Ｃｏｒｐ．）、ＨＯＡｔ（ＧｅｎＳｃｒｉｐｔ  Ｃｏｒｐ．）及びＤＩＥＡ（Ｆｌｕｋａ社）を使用しながら、０．４ｍｍｏｌのアミノ酸（Ｉｒｉｓ  Ｂｉｏｔｅｃｈ社、Ｆｌｕｋａ社及びＮｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ社）を適用した。ジメチルホルムアミド（Ｒａｔｈｂｕｒｎ社）中で無水酢酸（Ｍｅｒｃｋ社、１０ｅｑ）及びＤＩＥＡ（Ｆｌｕｋａ社、１１ｅｑ）を用いて樹脂をアセチル化した。樹脂からの側鎖保護基及びペプチドの同時除去は、２．５％の水及び２．５％のトリイソプロピルシラン（Ａｌｄｒｉｃｈ社）を含むトリフルオロ酢酸（Ｆｌｕｋａ社）中で一晩実施した。樹脂を濾過によって取り除き、濾液を真空中で蒸発させた。残留物にジエチルエーテル（Ｅｔｅｒｎｅｌｌ社）を添加した。得られた沈殿をエーテルで洗浄し、空気乾燥した。逆相分取クロマトグラフィー（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム，００Ｇ−４２５２−Ｐ０；溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝ＣＨ３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ；勾配：４０分で１０〜３５％Ｂ；流量：１０ｍｌ／分；検出：２１４ｎｍ及び２５４ｎｍ）を用いて粗生成物の半分を精製することで純化合物を得た。分析ＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  ３μ  Ｃ１８（２）２０×２ｍｍ；溶媒：Ａ＝水＋０．１％ＴＦＡ／Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ＋０．１％ＴＦＡ；勾配：５分で１０〜３０％Ｂ；流量：０．６ｍｌ／分；保持時間：２．８０分；検出：２１４ｎｍ）を用いて特性決定を行った。質量分析法を用いて追加の特性決定を実施することで、１２６５．３［（Ｍ４Ｈ＋８ＴＦＡ）４＋］のｍ／ｚ値を得た。
【０１００】
実施例８
Ａｃ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−ＰＥＧ１２−Ｄ−Ｌｙｓ（ＰＥＧ１２−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ａｃ）−Ｄ−Ｌｙｓ−ＮＨ２の合成
【０１０１】
【化１４】
2010513476.tif 000015
０．０５ｍｍｏｌのＮｏｖａＰＥＧ  Ｒｉｎｋ  Ａｍｉｄｅ樹脂（Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ社）から出発するＦｍｏｃ化学を用いて、ＣＥＭ  Ｌｉｂｅｒｔｙマイクロ波ペプチド合成機上でアミノ酸配列Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＰＥＧ１２−Ｄ−Ｌｙｓ（ＰＥＧ１２−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ））−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）をアセンブルした。各カップリング段階では、インサイチュ活性化のためにＨＡＴＵ（ＧｅｎＳｃｒｉｐｔ  Ｃｏｒｐ．）、ＨＯＡｔ（ＧｅｎＳｃｒｉｐｔ  Ｃｏｒｐ．）及びＤＩＥＡ（Ｆｌｕｋａ社）を使用しながら、０．４ｍｍｏｌのアミノ酸（Ｉｒｉｓ  Ｂｉｏｔｅｃｈ社、Ｆｌｕｋａ社及びＮｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ社）を適用した。ジメチルホルムアミド（Ｒａｔｈｂｕｒｎ社）中で無水酢酸（Ｍｅｒｃｋ社、１０ｅｑ）及びＤＩＥＡ（Ｆｌｕｋａ社、１１ｅｑ）を用いて樹脂をアセチル化した。樹脂からの側鎖保護基及びペプチドの同時除去は、２．５％の水及び２．５％のトリイソプロピルシラン（Ａｌｄｒｉｃｈ社）を含むトリフルオロ酢酸（Ｆｌｕｋａ社）中で一晩実施した。樹脂を濾過によって取り除き、濾液を真空中で蒸発させた。残留物にジエチルエーテル（Ｅｔｅｒｎｅｌｌ社）を添加した。得られた沈殿をエーテルで洗浄し、空気乾燥した。逆相分取クロマトグラフィー（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム，００Ｇ−４２５２−Ｐ０；溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝ＣＨ３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ；勾配：４０分で１０〜３５％Ｂ；流量：１０ｍｌ／分；検出：２１４ｎｍ及び２５４ｎｍ）を用いて粗生成物の半分を精製することで純化合物を得た。分析ＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  ３μ  Ｃ１８（２）２０×２ｍｍ；溶媒：Ａ＝水＋０．１％ＴＦＡ／Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ＋０．１％ＴＦＡ；勾配：５分で１０〜３０％Ｂ；流量：０．６ｍｌ／分；保持時間：２．１９分；検出：２１４ｎｍ）を用いて特性決定を行った。質量分析法を用いて追加の特性決定を実施することで、８０８．５［（Ｍ６Ｈ＋３ＴＦＡ）６＋］のｍ／ｚ値を得た。
【０１０２】
実施例９
Ａｃ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ａｒｇ−ＰＥＧ１２−Ｄ−Ｌｙｓ（−ＰＥＧ１２−Ｄ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ａｃ）−Ｄ−Ｌｙｓ（ＣＯＣＨ２ＮＨ−Ｈｉｓ−ＯＨ）−ＮＨ２及びその９９ｍＴｃ錯体の合成
【０１０３】
【化１５】
2010513476.tif 000016
ジメチルホルムアミド（Ｒａｔｈｂｕｒｎ社、０．６ｍＬ）中の（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−カルボキシメチル−アミノ）−３−（１−トリチル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）プロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１．０ｍｇ、１．６μｍｏｌｅ）、ＰｙＡＯＰ（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ社、０．８６ｍｇ、１．６μｍｏｌｅ）及びジイソプロピルエチルアミン（Ｆｌｕｋａ社、０．５５μＬ、３．２μｍｏｌｅ）に、実施例１からのペプチド（３．４ｍｇ、１．１μｍｏｌｅ）を添加した。溶液を一晩放置した後、（ジメチルホルムアミドを含む）粗生成物を逆相分取クロマトグラフィー（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム，００Ｇ−４２５２−Ｐ０；溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝ＣＨ３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ；勾配：４０分で１０〜４０％Ｂ；流量：１０ｍｌ／分；検出：２１４ｎｍ及び２５４ｎｍ）によって精製した。質量分析法を用いて特性決定を実施したところ、１４３８．０［Ｍ−３Ｈ＋＋５ＴＦＡ］のｍ／ｚ値が得られた。キレート上の保護基は、トリフルオロ酢酸（Ｆｌｕｋａ社）（９５％）、水（２．５％）及びトリイソプロピルシラン（Ａｌｄｒｉｃｈ社）（２．５％）を用いて除去した。１時間後に減圧下でＴＦＡを蒸発させ、逆相分取クロマトグラフィー（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム，００Ｇ−４２５２−Ｐ０；溶媒：Ａ＝水／０．１％ＨＣＯＯＨ及びＢ＝ＣＨ３ＣＮ／０．１％ＨＣＯＯＨ；勾配：３０分で００〜２０％Ｂ；流量：５ｍｌ／分；検出：２１４ｎｍ及び２５４ｎｍ）を用いて粗生成物を精製することで１．５ｍｇの純化合物を得た。分析ＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム，００Ｇ−４２５２−Ｅ０；溶媒：Ａ＝水＋０．１％ＴＦＡ／Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ＋０．１％ＴＦＡ；勾配：２０分で１０〜４０％Ｂ；流量：１．０ｍｌ／分；保持時間：８．７分；検出：２１４ｎｍ及び２５４ｎｍ）を用いて特性決定を行った。質量分析法を用いて追加の特性決定を実施することで、１６７２．３［Ｍ−２Ｈ＋］のｍ／ｚ値を得た。
【０１０４】
こうして得られた式Ａｃ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ａｒｇ−ＰＥＧ１２−Ｄ−Ｌｙｓ（−ＰＥＧ１２−Ｄ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ａｃ）−Ｄ−Ｌｙｓ（ＣＯＣＨ２ＮＨ−Ｈｉｓ−ＯＨ）−ＮＨ２の生成物を、カルボン酸基及びイミダゾールを介して９９ｍＴｃと配位させる。
【０１０５】
実施例１０
Ａｃ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ａｒｇ−ＰＥＧ１２−Ｄ−Ｌｙｓ（−ＰＥＧ１２−Ｄ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ａｃ）−Ｄ−Ｌｙｓ（ＣＯＣＨ２ＣＨ（ＣＨ２ＮＨＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２）２）−ＮＨ２及びその９９ｍＴｃ錯体の合成
【０１０６】
【化１６】
2010513476.tif 000017
ジメチルホルムアミド（Ｒａｔｈｂｕｒｎ社、０．６ｍＬ）中のＮ−スクシンイミジル−４−（２−アミノ−エチルアミノ）−３−［（２−アミノ−エチルアミノ）−メチル］ブチレート（１．２ｍｇ、１．６μｍｏｌｅ）、ＨＯＡｔ（ＧｅｎＳｃｒｉｐｔ  Ｃｏｒｐ．，０．２０ｍｇ、１．６μｍｏｌｅ）及びジイソプロピルエチルアミン（Ｆｌｕｋａ社、０．５５μＬ、３．２μｍｏｌｅ）に、実施例１からのペプチド（３．４ｍｇ、１．１μｍｏｌｅ）を添加した。溶液を一晩放置した後、（ジメチルホルムアミドを含む）粗生成物を逆相分取クロマトグラフィー（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム，００Ｇ−４２５２−Ｐ０；溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝ＣＨ３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ；勾配：４０分で１０〜５０％Ｂ；流量：１０ｍｌ／分；検出：２１４ｎｍ及び２５４ｎｍ）によって精製した。質量分析法を用いて特性決定を実施したところ、１４４０．２［Ｍ−３Ｈ＋＋５ＴＦＡ］のｍ／ｚ値が得られた。キレート上の保護基は、トリフルオロ酢酸（Ｆｌｕｋａ社）（９７．５％）及び水（２．５％）を用いて除去した。１時間後に減圧下でＴＦＡを蒸発させ、逆相分取クロマトグラフィー（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム，００Ｇ−４２５２−Ｐ０；溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝ＣＨ３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ；勾配：４０分で１０〜４０％Ｂ；流量：１０ｍｌ／分；検出：２１４ｎｍ及び２５４ｎｍ）を用いて粗生成物を精製することで１．９ｍｇの純化合物を得た。分析ＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム，００Ｇ−４２５２−Ｅ０；溶媒：Ａ＝水＋０．１％ＴＦＡ／Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ＋０．１％ＴＦＡ；勾配：２０分で１０〜４０％Ｂ；流量：１．０ｍｌ／分；保持時間：８．５分；検出：２１４ｎｍ及び２５４ｎｍ）を用いて特性決定を行った。質量分析法を用いて追加の特性決定を実施することで、１６７４．８［Ｍ−２Ｈ＋］のｍ／ｚ値を得た。
【０１０７】
例えば国際公開第０３／００６０７０号からの公知方法を用いて、放射性イメージング成分（好ましくは９９ｍＴｃ）を付加することができる。
【０１０８】
実施例１１
Ａｃ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ａｒｇ−ＰＥＧ１２−Ｄ−Ｌｙｓ（−ＰＥＧ１２−Ｄ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ａｃ）−Ｄ−Ｌｙｓ（（３−（４−ヒドロキシフェニル）プロピオニル）−ＮＨ２及びそのヨウ素化誘導体の合成
【０１０９】
【化１７】
2010513476.tif 000018
ジメチルホルムアミド（Ｒａｔｈｂｕｒｎ社、０．６ｍＬ）中の３−（４−ヒドロキシフェニル）プロピオン酸Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（Ｓｉｇｍａ社、０．４０ｍｇ、１．６μｍｏｌｅ）及びジイソプロピルエチルアミン（Ｆｌｕｋａ社、０．５５μＬ、３．２μｍｏｌｅ）に、実施例１からのペプチド（３．４ｍｇ、１．１μｍｏｌｅ）を添加した。溶液を一晩放置した後、逆相分取クロマトグラフィー（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム，００Ｇ−４２５２−Ｐ０；溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝ＣＨ３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ；勾配：４０分で１０〜５０％Ｂ；流量：１０ｍｌ／分；検出：２１４ｎｍ及び２５４ｎｍ）を用いて（ジメチルホルムアミドを含む）粗生成物を精製することで２．０ｍｇの純化合物を得た。分析ＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム，００Ｇ−４２５２−Ｅ０；溶媒：Ａ＝水＋０．１％ＴＦＡ／Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ＋０．１％ＴＦＡ；勾配：２０分で１０〜４０％Ｂ；流量：１．０ｍｌ／分；保持時間：９．７分；検出：２１４ｎｍ及び２５４ｎｍ）を用いて特性決定を行った。質量分析法を用いて追加の特性決定を実施することで、１２８９．４［Ｍ−３Ｈ＋＋５ＴＦＡ］のｍ／ｚ値を得た。
【０１１０】
ヨウ素化誘導体：
【０１１１】
【化１８】
2010513476.tif 000019
ヨウ素誘導体を製造するためには、Ｂｏｌｔｏｎ［Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｏｍｐ．Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．，４５，４８５−５２８（２００２）］によって記載された方法を用いてフェノール基のオルト位にヨウ素原子を導入すればよい。
【０１１２】
実施例１２
Ａｃ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ａｒｇ−ＰＥＧ１２−Ｄ−Ｌｙｓ（−ＰＥＧ１２−Ｄ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ａｃ）−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｃｙ５．５）−ＮＨ２の合成
【０１１３】
【化１９】
2010513476.tif 000020
Ｎ−メチルピロリドン（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ社、０．２５ｍＬ）に溶解したＣｙ５．５  ＮＨＳエステル（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ社、１．５ｍｇ、１．３μｍｏｌｅ）及びｓｙｍ−コリジン（Ｆｌｕｋａ社、１．２μＬ、９．１μｍｏｌｅ）の溶液に、ジメチルホルムアミド（Ｒａｔｈｂｕｒｎ社、０．２５ｍＬ）に溶解した実施例１からのペプチド（２．８ｍｇ、０．８９μｍｏｌｅ）を添加し、透明な青色の反応混合物を遮光して一晩撹拌した。次いで、反応混合物を水／０．１％ＴＦＡ（６ｍＬ）で希釈し、逆相分取クロマトグラフィー（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム，００Ｇ−４２５２−Ｐ０；溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝ＣＨ３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ；勾配：４０分で００〜４０％Ｂ；流量：１０ｍｌ／分；検出：２１４ｎｍ及び２５４ｎｍ）を用いて生成物を精製することで１．１ｍｇの純化合物を得た。分析ＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム，００Ｇ−４２５２−Ｅ０；溶媒：Ａ＝水＋０．１％ＴＦＡ／Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ＋０．１％ＴＦＡ；勾配：２０分で１０〜２５％Ｂ；流量：１．０ｍｌ／分；保持時間：１６．５分；検出：２１４ｎｍ及び２５４ｎｍ）を用いて特性決定を行った。質量分析法を用いて追加の特性決定を実施することで、１３５０．４［Ｍ−３Ｈ＋］のｍ／ｚ値を得た。
【０１１４】
実施例１３
Ａｃ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ａｒｇ−ＰＥＧ１２−Ｄ−Ｌｙｓ（−ＰＥＧ１２−Ｄ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｒｇ−Ａｃ）−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｃｙ５＊＊）−ＮＨ２の合成
【０１１５】
【化２０】
2010513476.tif 000021
Ｎ−メチルピロリドン（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ社、０．２５ｍＬ）に溶解したＣｙ５＊＊  ＮＨＳエステル（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ社、１．８ｍｇ、１．３μｍｏｌｅ）及びｓｙｍ−コリジン（Ｆｌｕｋａ社、１．２μＬ、９．１μｍｏｌｅ）の溶液に、ジメチルホルムアミド（Ｒａｔｈｂｕｒｎ社、０．２５ｍＬ）に溶解した実施例１からのペプチド（２．８ｍｇ、０．８９μｍｏｌｅ）を添加し、透明な青色の反応混合物を遮光して一晩撹拌した。次いで、反応混合物を水／０．１％ＴＦＡ（６ｍＬ）で希釈し、逆相分取クロマトグラフィー（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム，００Ｇ−４２５２−Ｐ０；溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝ＣＨ３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ；勾配：４０分で１０〜４０％Ｂ；流量：１０ｍｌ／分；検出：２１４ｎｍ及び２５４ｎｍ）を用いて生成物を精製することで１．２ｍｇの純化合物を得た。分析ＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム，００Ｇ−４２５２−Ｅ０；溶媒：Ａ＝水＋０．１％ＴＦＡ／Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ＋０．１％ＴＦＡ；勾配：２０分で１０〜２５％Ｂ；流量：１．０ｍｌ／分；保持時間：１４．５分；検出：２１４ｎｍ及び２５４ｎｍ）を用いて特性決定を行った。質量分析法を用いて追加の特性決定を実施することで、１３４０．６［Ｍ−３Ｈ＋］のｍ／ｚ値を得た。
【国際調査報告】
2010513476.tif 000031
2010513476.tif 000032
2010513476.tif 000033
2010513476.tif 000034