(57)【要約】  肺炎症および気管支収縮を抑制するために、エアロゾル化によって送達するための製剤中のＡＩＳＴＭおよびβ−アゴニストの相互プロドラッグが記述されている。この相互プロドラッグは、噴霧によってまたは乾燥粉末吸入器によって生成される、主として約１から５μの間の質量中央平均径を有するエアロゾルによって気道炎症および気管支収縮を治療するために、約５．０から７．０の間のｐＨを有する１／４標準生理食塩水中に溶解された小容量の溶液（１０−５００μＬ）中に好ましくは配合される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ａの化合物
【化８６】
2010513276.tif 000097
および薬剤として（ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ）許容されるその塩［式中、
Ｘは、四級化可能部分を表し；
Ｒ１Ｒ２Ｒ３Ｘは一緒になって、抗炎症シグナル伝達モジュレーター（ＡＩＳＴＭ）またはＡＩＳＴＭ活性を有する親分子を四級化可能部分Ｘに連結している該モジュレーターのプロドラッグを表し；
Ｌは、結合またはメチレンオキシ−（ＣＨ２Ｏ）基であり；
Ｒは、
【化８７】
2010513276.tif 000098
であり、ここでＲ４は、１−１２個の炭素原子のアルキル基、アリールアルキルまたは炭素鎖中の１−３つのＣＨ２基が、Ｏ、Ｓから選択される原子（複数可）およびＮＲ５（Ｒ５は、水素またはアルキルである。）で置換されている置換アリールアルキルである。］。
【請求項２】
Ｌが結合である、請求項１の化合物。
【請求項３】
抗炎症シグナル伝達モジュレーターがホスホジエステラーゼ阻害薬である、請求項１の化合物。
【請求項４】
抗炎症シグナル伝達モジュレーターがキナーゼ阻害薬である、請求項１の化合物。
【請求項５】
抗炎症シグナル伝達モジュレーターが転写因子阻害薬である、請求項１の化合物。
【請求項６】
Ｒ４が、（ＣＨ２）６Ｏ（ＣＨ２）４Ｐｈまたはｔｅｒｔ−ブチルである、請求項１から５のいずれか一項の化合物。
【請求項７】
Ｒ１Ｒ２Ｒ３Ｒ４Ｘが、
５−（２，４−ジフルオロ−フェノキシ）−１−イソブチル−１Ｈ−イミダゾール−６−カルボン酸−（２−ジメチルアミノエチル）−アミド；
３−シクロプロピルメトキシ−Ｎ−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−４−ジフルオロメトキシベンズアミド；
４−［２−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシフェニル）−２−フェニルエチル］ピリジン；
Ｎ−（３，５−ジクロロ−４−ピリジニル）−４−（ジフロウロメトキシ）−８−［（メチルスルホニル）アミノ］−１−ジベンゾフランカルボキサミド；
Ｎ−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−２−［１−（４−フルオロベンジル）−５−ヒドロキシ−１Ｈ−インドール−３−イル］−２−オキソアセトアミド；
８−メトキシ−２−トリフルオロメチルキノリン−５−カルボン酸−（３，５−ジクロロ−１−オキシピリジン−４−イル）−アミド；
４−［５−（４−フルオロフェニル）−２−（４−メタンスルフィニルフェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−ピリジン；
４−［４−（４−フルオロフェニル）−１−（３−フェニルプロピル）−５−ピリジン−４−ウル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル］−ブタ−３−イン−１−オール；
４−シアノ−４−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシフェニル）−シクロヘキサンカルボン酸ジエチルアミノエチルエステル；
（３−クロロ−４−フルオロフェニル）−［７−メトキシ−６−（３−モルポリン−４−イル−プロポキシ）−キナゾリン−４−イル］−アミン；
４−（４−メチルピペラジン−１−イルメチル）−Ｎ−［４−メチル−３−（４−ピリジン−３−イル−ピルミジン−２−イルアミノ）−フェニル］−ベンズアミド；
５−｛４−［２−（５−エチルピリジン−２−イル）エトキシ］−ベンジル｝−チアゾリジン−２，４−ジオン；
５−｛４−［２−（５−メチルピリジン−２−イルアミノ）−エトキシ］−ベンジル｝−チアゾリジン−２，４−ジオン；および
Ｏ−シクロスポリンＡ−Ｎ，Ｎジエチルグリシルエステル
からなる群から選択される、請求項１の化合物。
【請求項８】
（２−｛［５−（２，４−ジフルオロフェノキシ）−１−イソブチル−１Ｈ−インダゾール−６−カルボニル］−アミノ｝−エチル）−（５−｛１−ヒドロキシ−２−［６−（４−フェニルブトキシ）−ヘキシルアミノ］−エチル｝−２−ホスホノオキシベンジル）−ジメチルアンモニウム；
［５−（２−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−１−ヒドロキシエチル）−２−ホスホノオキシベンジル］−（２−｛［５−（２，４−ジフルオロフェノキシ）−１−イソブチル−１Ｈ−インダゾール−６−カルボニル］−アミノ｝−エチル）−ジメチルアンモニウム；
４−［２−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシフェニル）−２−フェニルエチル］−１−（４−｛１−ヒドロキシ−２−［６−（４−フェニルブトキシ）−ヘキシルアミノ］−エチル｝−２−ホスホノオキシベンジル）−ピリジニウム；
［４−（２−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−１−ヒドロキシエチル）−２−ホスホノオキシベンジル］−４−［２−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシフェニル）−２−フェニルエチル］−ピリジニウム；
３，５−ジクロロ−４−［（４−ジフルオロメトキシ−８−メタンスルホニルアミノジベンゾフラン−１−カルボニル）−アミノ］−１−（４−｛１−ヒドロキシ−２−［６−（４−フェニルブトキシ）−ヘキシルアミノ］エチル｝−２−ホスホノオキシベンジル）−ピリジニウム；および
１−［４−（２−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−１−ヒドロキシエチル）−２−ホスホノオキシベンジル］−３，５−ジクロロ−４−［（４−ジフルオロメトキシ−８−メタンスルホニルアミノジベンゾフラン−１−カルボニル）−アミノ］−ピリジニウム
からなる群から選択される、請求項１の化合物。
【請求項９】
（２−｛［５−（２，４−ジフルオロ−フェノキシ）−１−イソブチル−１Ｈ−インダゾール−６−カルボニル］−アミノ｝−エチル）−（５−｛１−ヒドロキシ−２−［６−（４−フェニル−ブトキシ）−ヘキシルアミノ］−エチル｝−２−ホスホノオキシ−ベンジル）−ジメチル−アンモニウムである、請求項１の式Ａの化合物。
【請求項１０】
［５−（２−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−１−ヒドロキシ−エチル）−２−ホスホノオキシ−ベンジル］−（２−｛［５−（２，４−ジフルオロ−フェノキシ）−１−イソブチル−１Ｈ−インダゾール−６−カルボニル］−アミノ｝−エチル）−ジメチル−アンモニウムである、請求項１の式Ａの化合物。
【請求項１１】
４−［２−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシ−フェニル）−２−フェニル−エチル］−１−（４−｛１−ヒドロキシ−２−［６−（４−フェニル−ブトキシ）−ヘキシルアミノ］−エチル｝−２−ホスホノオキシ−ベンジル）−ピリジニウムである、請求項１の式Ａの化合物。
【請求項１２】
［４−（２−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−１−ヒドロキシ−エチル）−２−ホスホノオキシ−ベンジル］−４−［２−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシ−フェニル）−２−フェニル−エチル］−ピリジニウムである、請求項１の式Ａの化合物。
【請求項１３】
３，５−ジクロロ−４−［（４−ジフルオロメトキシ−８−メタンスルホニルアミノ−ジベンゾフラン−１−カルボニル）−アミノ］−１−（４−｛１−ヒドロキシ−２−［６−（４−フェニル−ブトキシ）−ヘキシルアミノ］−エチル｝−２−ホスホノオキシ−ベンジル）−ピリジニウムである、請求項１の式Ａの化合物。
【請求項１４】
１−［４−（２−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−１−ヒドロキシ−エチル）−２−ホスホノオキシ−ベンジル］−３，５−ジクロロ−４−［（４−ジフルオロメトキシ−８−メタンスルホニルアミノ−ジベンゾフラン−１−カルボニル）−アミノ］−ピリジニウムである、請求項１の式Ａの化合物。
【請求項１５】
請求項１から１４のいずれか一項の化合物の合成方法。
【請求項１６】
肺炎症および気管支収縮の予防および治療のためのエアロゾル製剤であって、少なくとも１種の請求項１から１４のいずれか一項のモノホスフェート相互プロドラッグの約１０μｇから約１０００μｇを含み、エアロゾル化によって投与されて、１から５μの間のエアロゾル粒子を主として生成するように適合された、前記製剤。
【請求項１７】
請求項１から１４のいずれか一項の化合物のエアロゾル製剤であって、相互プロドラッグが乾燥粉末として調製され、ならびに前記製剤が乾燥粉末吸入器を用いて投与される、製剤。
【請求項１８】
肺炎症または気管支収縮の予防および治療のためのエアロゾル製剤であって、少なくとも１種の請求項１から１４のいずれか一項の相互プロドラッグの約１０μｇから約１０００μｇを含み、エアロゾル化によって投与されて、１から５μの間のエアロゾル粒子を主として生成するように適合された、前記製剤。
【請求項１９】
肺炎症および気管支収縮の予防および治療のためのエアロゾル製剤であって、生理学的に適合性でありかつ耐溶性であるマトリックス中のエアロゾル送達のための乾燥粉末として調製された、少なくとも１種の請求項１から１４のいずれか一項の相互プロドラッグの約１０μｇから約１０００μｇを含み、１から５μの間のエアロゾル粒子を主として生成することが可能な乾燥粉末吸入器を用いて投与されるように適合された、前記製剤。
【請求項２０】
肺炎症または気管支収縮の予防および治療のための方法であって、該治療を必要とする患者に、少なくとも１種の請求項１から１４のいずれか一項のモノホスフェート相互プロドラッグの約１０μｇから約１０００μｇを含むエアロゾル製剤の有効量を投与することを含む、方法。
【請求項２１】
相互プロドラッグが肺に送達された場合、ホスフェート基が内在性酵素によって切断されてＡＩＳＴＭおよびβ−アゴニストが同時に個別に放出される、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
患者における肺気管支収縮を治療するための薬物の製造のための、請求項１から１４のいずれか一項の化合物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２００６年１２月１３日に出願された、米国特許仮出願第６０／８７４，５４３号明細書の優先権を主張するものである。
【０００２】
本発明は、エアロゾル化によって肺に送達するための、抗炎症シグナル伝達モジュレーター（ＡＩＳＴＭ）およびβ−アゴニストの新規な相互プロドラッグの調製に関する。特に本発明は、肺に送達された場合、肺組織および気道中に存在する内在性酵素がこの相互プロドラッグを分解して、投与部位においてＡＩＳＴＭおよびβ−アゴニスト（例えば、サルメテロール、アルブテロール）を放出するような相互ＡＩＳＴＭ−β−アゴニストプロドラッグとしてのモノホスフェートの合成、製剤化および送達に関する。この記載されている相互プロドラッグは、液体または乾燥粉末のいずれかとして配合され、この製剤は、主として１から５μの間の質量中央平均径を有するエアロゾルの状態で、気道の肺気管支内腔へのプロドラッグの送達を可能にし、送達に適している。モノホスフェートプロドラッグの配合および送達された有効量は、気道疾患、特に、軽度から重度の喘息に関連する肺炎症および気管支収縮、ならびに慢性気管支炎または慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）の治療のためのＡＩＳＴＭおよびβ−アゴニストの両方の治療量を送達するのに十分である。
【背景技術】
【０００３】
喘息は、炎症促進性細胞（主として好酸球および活性化Ｔリンパ球）の気管支粘膜および粘膜下中への浸潤から生じる気道の慢性炎症性疾患である。これらの炎症促進性細胞によるサイトカインを含む強力なケミカルメディエーターの分泌は、粘膜の透過性、粘液の産生を変化させ、平滑筋の収縮を引き起こす。これらの因子のすべてが、各種の刺激に対する気道の反応の増加を引き起こす（Ｋａｌｉｎｅｒ、１９８８）。
【０００４】
シグナル伝達経路を標的にすることは、同じ経路には、通常いくつかの細胞タイプが関与して、いくつかの協調された炎症プロセスを調節しており、したがって、モジュレーターは、広範囲の有益な効果の可能性を有するので、炎症性疾患を治療する魅力的なアプローチである。複数の炎症シグナルが、限定された数のシグナル伝達経路（その多くはキナーゼのカスケードが関与する。）を活性化する、様々な細胞表面受容体を活性化する。次に、これらのキナーゼが、複数の炎症性の遺伝子を制御する転写因子を活性化し得る。ホスホジエステラーゼ阻害薬（例えば、具体的にＰＤＥ−４、ＰＤＥ−５、またはＰＤＥ−７）、転写因子阻害薬（例えば、ＩＫＫ阻害を介したＮＦｋＢのブロッキング）、またはキナーゼ阻害薬（例えば、Ｐ３８  ＭＡＰ、ＪＮＫ、ＰＩ３Ｋ、ＥＧＦＲまたはＳｙｋのブロッキング）のような「抗炎症シグナル伝達モジュレーター」（本文では、ＡＩＳＴＭと称される）を適用することは、これらの小分子は限定された数の共通の細胞内の経路（抗炎症治療行為について重大な意味を持つポイントであるシグナル伝達経路）を標的にするので、炎症を断つための論理的アプローチである（Ｐ．Ｊ．Ｂａｒｎｅｓによる概説、２００６参照）。
【０００５】
残念ながら、この利点は欠点でもある。なぜなら、このシグナル伝達経路の広範な分布は、モジュレーターが、細胞および作用の特異性の欠如に起因する、用量を制限する有害な副作用（例えば、ＰＤＥ−４阻害薬について認められる、悪心、下痢、頭痛、免疫欠乏および動脈症）の高いリスクを有することを意味するからである。全身性副作用に対する可能性のある解決法は、このようなＡＩＳＴＭ薬物を炎症部位に直接、即ち、肺炎症に関連する疾患治療の症例では、吸入送達を介して肺に送達することになる。しかし、多くの既存のＡＩＳＴＭは、経口送達を対象として開発され、したがってこれらは優れた吸収性を有し、これが肺から血行中への吸収を介して望ましくない全身性曝露をまねきかねない。しかし、プロドラッグの方策は、より有効な解決法のはずであり、肺への高水準の保持、全身性吸収の減少および徐放性を提供して、これは、炎症部位（即ち、肺）に直接送達された化学的実体として設計し得る。
【０００６】
アルブテロールまたはサルメテロールなどの気管支拡張薬は、活発な収縮をブロッキングすることによって、気道平滑筋を弛緩させる。これらの気管支拡張薬の多くは、これらの作用の様式としてβ２−アドレナリン受容体を活性化する。この結果は、喘息およびＣＯＰＤ両方の作用部位である、小さな末梢気道直径の２−３ｍｍの拡張である。
【０００７】
ＡＩＳＴＭの有害な副作用プロファイル（例えば、悪心、下痢、血管炎、免疫抑制（ｓｕｐｐｒｅｓｉｏｎ））およびβ−アゴニストのもの（例えば、頻脈症、心室のリズム障害、低カリウム血症）と関連するすべての問題および欠点を考慮すると、このようなプロドラッグが肺に到達するまでＡＩＳＴＭおよびβ−アゴニスト両方の薬理学的特性をマスクすることによって、ＡＩＳＴＭの全身性副作用およびβ−アゴニストの心血管副作用を緩和する、水溶性の相互ＡＩＳＴＭ−β−アゴニストプロドラッグを提供することは極めて有利である。このような相互ＡＩＳＴＭ−β−アゴニストプロドラッグは、気管支内腔に効果的に送達され、次いで肺の酵素の作用によって活性薬物に変換されることにより、炎症および気管支収縮部位に両薬物の治療量を送達する。
【０００８】
この相互ＡＩＳＴＭ−β−アゴニストプロドラッグは、気道を拡張することによって、第２の成分（ＡＩＳＴＭ）が効果的に浸透し、炎症部位に到達することを可能にする治療薬を提供する。投与部位においてβ−アゴニストおよびＡＩＳＴＭの持続放出をもたらす両薬物の相互プロドラッグを持つことが極めて望ましい。さらに、肺から吸収され難く、および十分に水溶性であって、その配合および送達系における融通性を可能にする、このような相互プロドラッグを持つことが極めて望ましい。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
したがって、本発明の第１の目的は、ＡＩＳＴＭおよびβ−アゴニストの相互プロドラッグとして、新規なモノホスフェートを提供することである。
【００１０】
本発明の他の目的は、噴霧または乾燥粉末送達のための液体または固体剤形として安定な、相互プロドラッグの組成物を提供することである。このような組成物は、定量吸入器、ジェット式噴霧、超音波、加圧、もしくは振動性多孔プレート噴霧器によってまたは乾燥粉末によって、主として１から５μのサイズ範囲のエアロゾル粒子に効果的にエアロゾル化することができる活性物質の十分であるが、過剰でない濃度を含み、ここで、塩分およびｐＨは、患者によって十分に許容される相互プロドラッグエアロゾルの生成を可能にするように調整されており、この製剤は十分な有効期間を有する。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
（発明の要旨）
本発明は、ＡＩＳＴＭおよびβ−アゴニストの相互プロドラッグとしてのモノホスフェートおよびこれらの使用、ならびに肺炎症および気管支収縮を治療する方法としての吸入による送達のための製剤を対象とする。このプロドラッグは、極性（生理的なｐＨ中で荷電されている）ホスフェートおよび四級窒素原子（正に荷電されている）を取り込んでおり、これらは、この分子に高い極性を与え、その親水性を高め、肺のＤＮＡおよびタンパク質へのその親和力を付与し、それによって、迅速な全身性吸収および嚥下による吸収を最小限に抑える。さらに、この相互プロドラッグは、アルカリホスファターゼの非存在下では活性化され得ないので、他の組織、特に肺に比較して、唾液中のこの酵素の最小限の活性（口中の部分的な相互プロドラッグの堆積の場合）のためおよび血漿中の低いホスファターゼ活性のために全身性副作用は除かれる（ＴｅｓｔａおよびＭａｙｅｒ、２００３）。
【００１２】
より特定的には、本発明は、式Ａの化合物
【００１３】
【化１】
2010513276.tif 000002
および薬剤として（ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ）許容されるその塩、［式中、
Ｘは、四級化可能部分、即ち、窒素もしくは硫黄原子または窒素含有複素環を表し；
Ｒ１Ｒ２Ｒ３Ｘは一緒になって、抗炎症シグナル伝達モジュレーター（ＡＩＳＴＭ−即ち、ホスホジエステラーゼ阻害薬、キナーゼ阻害薬、転写因子阻害薬）またはＡＩＳＴＭ活性を有する親分子を四級化可能部分Ｘに連結しているモジュレーターのプロドラッグ（例えば、エステル）を表し；
Ｌは、結合またはメチレンオキシ−（ＣＨ２Ｏ）基であり；
Ｒは、
【００１４】
【化２】
2010513276.tif 000003
（式中、Ｒ４は、１−１２個の炭素原子のアルキル基、アリールアルキルまたは炭素鎖中の１−３つのＣＨ２基が、Ｏ、Ｓから選択される原子（複数可）およびＮＲ５（Ｒ５は、水素またはアルキルである。）で置換されていてもよい置換アリールアルキルである。）である。］を対象とする。
【００１５】
好ましい実施形態では、ＡＩＳＴＭ活性を有する親分子を四級化可能部分Ｘに連結するプロドラッグは、アセチルエステルである。別の好ましい実施形態では、ＡＩＳＴＭ活性を有する親分子を四級化可能部分Ｘに連結するプロドラッグは、アセチルオキシメチルエステルである。
【００１６】
本発明の現在好ましい実施形態は、式Ａの化合物［式中、
Ｒは、
【００１７】
【化３】
2010513276.tif 000004
（Ｒ４は（ＣＨ２）６Ｏ（ＣＨ２）４Ｐｈまたはｔｅｒｔ−ブチルである。）であり、
Ｌは、結合であり、
Ｒ１Ｒ２Ｒ３Ｘは一緒になって、
５−（２，４−ジフルオロ−フェノキシ）−１−イソブチル−１Ｈ−インダゾール−６−カルボン酸（２−ジメチルアミノ−エチル）−アミド（Ｐ３８Ｍａｐキナーゼ阻害剤ＡＲＲＹ−７９７）；
３−シクロプロピルメトキシ−Ｎ−（３，５−ジクロロ−ピリジン−４−イル）−４−ジフルオロメトキシ（ｄｉｆｌｕｏｒｏｒｍｅｔｈｏｘｙ）−ベンズアミド（ＰＤＥ−４阻害剤ロフルミラスト）；
４−［２−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシフェニル）−２−フェニル−エチル］−ピリジン（ＰＤＥ−４阻害剤ＣＤＰ−８４０）；
Ｎ−（３，５−ジクロロ−４−ピリジニル）−４−（ジフルオロメトキシ）−８−［（メチルスルホニル）アミノ］−１−ジベンゾフランカルボキサミド（ＰＤＥ−４阻害剤オグレミラスト）；
Ｎ−（３，５−ジクロロ−ピリジン−４−イル）−２−［１−（４−フルオロベンジル）−５−ヒドロキシ−１Ｈ−インドール−３−イル］−２−オキソ−アセトアミド（ＰＤＥ−４阻害剤ＡＷＤ１２−２８１）；
８−メトキシ−２−トリフルオロメチル−キノリン−５−カルボン酸（３，５−ジクロロ−１−オキシ−ピリジン−４−イル）−アミド（ＰＤＥ−４阻害剤Ｓｃｈ３５１５９１）；
４−［５−（４−フルオロフェニル）−２−（４−メタンスルフィニル−フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−ピリジン（Ｐ３８阻害剤ＳＢ−２０３８５０）；
４−［４−（４−フルオロ−フェニル）−１−（３−フェニル−プロピル）−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル］−ブト−３−イン−１−オール（Ｐ３８阻害剤ＲＷＪ−６７６５７）；
４−シアノ−４−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシ−フェニル）−シクロヘキサンカルボン酸２−ジエチルアミノ−エチルエステル（シロミラストの２−ジエチル−エチルエステルプロドラッグ、ＰＤＥ−４阻害剤）；
（３−クロロ−４−フルオロフェニル）−［７−メトキシ−６−（３−モルホリン−４−イル−プロポキシ）−キナゾリン−４−イル］−アミン（ゲフィチニブ、ＥＧＦＲ阻害剤）；および
４−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）−Ｎ−［４−メチル−３−（４−ピリジン−３−イル−ピリミジン−２−イルアミノ）−フェニル］−ベンズアミド（イマチニブ、ＥＧＦＲ阻害剤）
などの抗炎症シグナル伝達モジュレーター（ＡＩＳＴＭ）を表す。］
を含む。
【００１８】
本発明の現在好ましい化合物の例には、
（２−｛［５−（２，４−ジフルオロ−フェノキシ）−１−イソブチル−１Ｈ−インダゾール−６−カルボニル］−アミノ｝−エチル）−（５−｛１−ヒドロキシ−２−［６−（４−フェニル−ブトキシ）−ヘキシルアミノ］−エチル｝−２−ホスホノオキシ−ベンジル）−ジメチル−アンモニウム（実施例２９）；
［５−（２−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−１−ヒドロキシ−エチル）−２−ホスホノオキシ−ベンジル］−（２−｛［５−（２，４−ジフルオロ−フェノキシ）−１−イソブチル−１Ｈ−インダゾール−６−カルボニル］−アミノ｝−エチル）−ジメチル−アンモニウム（実施例３０）；
４−［２−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシ−フェニル）−２−フェニル−エチル］−１−（４−｛１−ヒドロキシ−２−［６−（４−フェニル−ブトキシ）−ヘキシルアミノ］−エチル｝−２−ホスホノオキシ−ベンジル）−ピリジニウム（実施例３７）；
［４−（２−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−１−ヒドロキシ−エチル）−２−ホスホノオキシ−ベンジル］−４−［２−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシ−フェニル）−２−フェニル−エチル］−ピリジニウム（実施例３８）；
３，５−ジクロロ−４−［（４−ジフルオロメトキシ−８−メタンスルホニルアミノ−ジベンゾフラン−１−カルボニル）−アミノ］−１−（４−｛１−ヒドロキシ−２−［６−（４−フェニル−ブトキシ）−ヘキシルアミノ］−エチル｝−２−ホスホノオキシ−ベンジル）−ピリジニウム（実施例５７）；および
１−［４−（２−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−１−ヒドロキシ−エチル）−２−ホスホノオキシ−ベンジル］−３，５−ジクロロ−４−［（４−ジフルオロメトキシ−８−メタンスルホニルアミノ−ジベンゾフラン−１−カルボニル）−アミノ］−ピリジニウム（実施例５８）
が含まれる。
【００１９】
本発明はさらに、上に挙げた好ましい相互プロドラッグの合成方法に関する。
【００２０】
本発明はまた、重度から軽度の喘息、慢性気管支炎、ＣＯＰＤまたは肺炎症および気管支収縮に関連するその他の疾患から選択される障害の治療のための薬剤として許容される組成物に関し、この組成物は、少なくとも１種の式Ａの化合物または薬剤として許容されるその塩の治療有効量（好ましくは約１０μｇから約１０００μｇ）および薬剤として許容される担体を含む。この組成物は、好ましくはエアロゾルとして、最も好ましくは乾燥粉末吸入器によって投与される。本発明はまた、少なくとも１種の式Ａの化合物または薬剤として許容されるその塩の治療有効量で、このような疾患を治療する方法に関する。
【００２１】
本発明はまた、重度から軽度の喘息、慢性気管支炎、およびＣＯＰＤまたは肺炎症および気管支収縮に関連するその他の疾患から選択される障害の治療のための、式Ａの化合物の液体または乾燥粉末製剤に関し、この製剤は、少なくとも１種の式Ａの化合物または薬剤として許容されるその塩の治療有効量、好ましくは約１０μｇから約１０００μｇを含む。この組成物は、好ましくはエアロゾルとして、最も好ましくは乾燥粉末吸入器によって投与される。
【００２２】
本発明はさらに、肺炎症および気管支収縮の予防および治療のための方法に関し、少なくとも１種の式Ａの化合物の約１０μｇから約１０００μｇを含むエアロゾル製剤の有効量を、このような治療を必要とする患者に投与することを含む。好ましくは、式Ａの化合物が肺に送達された場合、このホスフェート基は、内在性酵素アルカリホスファターゼによって切断され、ＡＩＳＴＭおよびβ−アゴニストが同時に個別に放出される。
【発明を実施するための形態】
【００２３】
本明細書では、「アリール」は、水素、アミノ、ヒドロキシ、ハロ、Ｏ−アルキルおよびＮＨ−アルキルから選択される１−３つの基で置換されていてもよいＣ６−Ｃ１８炭素環として定義される。アリールは、１つの環、または縮合されて二環式芳香環系を形成するもしくはビフェニルのように直鎖状の２つ環であり得る。アリール基の１個または複数の炭素原子は、環中においてＮ、Ｓ、またはＯで場合により置換されて、複素環系を生じることができる。
【００２４】
本明細書では、「アルキル」という用語は、１個から２０個の炭素原子を含む分枝鎖または直鎖を指し、炭素原子の少なくとも１個は、Ｏ、Ｓ、またはＮＲ５（ここで、Ｒ５は本明細書に定義された通りである。）から選択される原子で場合により置換されていることができる。代表的なアルキル基には、メチル、ブチル、ヘキシル等が含まれる。
【００２５】
本明細書では、「低級アルキル」には、１−１０個の炭素原子を有する置換または非置換両方の直鎖または分枝鎖アルキル基が含まれる。代表的な低級アルキル基には、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル等が含まれる。代表的な、ハロ置換、アミノ置換およびヒドロキシ置換低級アルキル基には、クロロメチル、クロロエチル、ヒドロキシエチル、アミノエチル等が含まれる。
【００２６】
本明細書では、「シクロアルキル」には、３−１０個の炭素原子からなる非芳香環が含まれる。
【００２７】
本明細書では、「ハロゲン」という用語は、クロロ、ブロモ、フルオロおよびヨード基を指す。
【００２８】
本明細書では、「置換された複素環」または「複素環基」または「複素環」という用語は、窒素、酸素、および硫黄から選択されるヘテロ原子を含む任意の３員もしくは４員環、または窒素、酸素、もしくは硫黄からなる群から選択される１から３個のヘテロ原子を含む５員もしくは６員環を指し；ここで、５員環は０−２個の二重結合（ｂｏｕｎｄｓ）を有し、６員環は０−３個の二重結合（ｂｏｕｎｄｓ）を有し；この窒素および硫黄原子は、場合により酸化されていてもよく；この窒素および硫黄ヘテロ原子は、場合により四級化されていて（ｑｕａｒｔｅｒｎｉｚｅｄ）もよく；任意の上記複素環は、ベンゼン環または上で定義された５員または６員の別の複素環に独立に縮合されたいずれの二環式基も含む。窒素がヘテロ原子である複素環が好ましい。完全に飽和した複素環も好ましい。好ましい複素環には、ジアザピニル、ピリル、ピロリニル、ピロリジニル、ピラゾリル、ピラゾリニル、ピラゾリジニル、イミダゾイル、イミダゾリニル、イミダゾリジニル、ピリジル、ピペリジニル、ピラジニル、ピペラジニル、アゼチジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、オキサゾリル、オキサゾリジニル、イソオキサゾリル、イソアゾリジニル、モルホリニル、チアゾリル、チアゾリジニル、イソチアゾリル、イソチアゾリジニル、インドリル、キノリニル、イソキノリニル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾオキサゾリル、フリル、チエニル、トリアゾリルおよびベンゾチエニル基が含まれる。
【００２９】
複素環は、置換されていないか、またはヒドロキシ、ハロ、オキソ（Ｃ＝Ｏ）、アルキルイミノ（ＲＮ＝、ここで、Ｒは、低級アルキルもしくはアルコキシ基である。）、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アシルアミノアルキル、アルコキシ、チオアルコキシ、低級アルキル、シクロアルキルまたはハロアルキルから独立に選択される置換基で一置換または二置換されていることができる。最も好ましい複素環には、イミダゾリル、ピリジル、ピペラジニル、アゼチジニル、チアゾリル、トリアゾリル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾチアゾリルおよびベンゾオキサゾリルが含まれる。
【００３０】
本明細書では、「薬剤として許容される塩」という用語は、式Ａの化合物の酸またはアルカリ土類金属塩との非毒性の塩を指す。これらの塩は、塩基または酸官能基を、適した有機または無機の酸または塩基とそれぞれ反応させることによって、式Ａの化合物の最終の単離および精製中にインサイチュで、または別個に調製することができる。代表的な酸塩には、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸水素塩、酢酸塩、シュウ酸塩、吉草酸塩、オレイン酸塩、パルミチン酸塩、ステアリン酸塩、ラウリン酸塩、ホウ酸塩、安息香酸塩、乳酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、酒石酸塩等が含まれる。代表的なアルカリ金属または（ｏｆ）アルカリ土類金属塩には、ナトリウム、カリウム、カルシウム、およびマグネシウムが含まれる。
【００３１】
本明細書では、「アルコキシ」という用語は、−Ｏ−Ｒ（ここで、Ｒは、上記で定義された通りの低級アルキルである。）を指す。低級アルコキシ基の代表例には、メトキシ、エトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ等が含まれる。
【００３２】
本明細書では、「治療する」という用語は、別段の指示がなければ、このような用語が適用される障害または状態、またはこのような障害または状態の１つまたは複数の症状を回復させ、緩和し、進行を抑制し、または予防することを意味する。本明細書では、「治療」という用語は、治療する行為を指し、「治療する」は直前に定義された通りである。
【００３３】
「標準生理食塩水」という用語は、０．９％（重量／体積）ＮａＣｌを含む水溶液を意味する。
【００３４】
「希釈生理食塩水」という用語は、より低い濃度に希釈された、０．９％（重量／体積）ＮａＣｌを含む標準生理食塩水を意味する。
【００３５】
「１／４標準生理食塩水」または「１／４ＮＳ」という用語は、０．２２５％（重量／体積）ＮａＣｌを含む、その１／４の濃度に希釈された標準生理食塩水を意味する。
【００３６】
本明細書では、「プロドラッグ」という用語は、化合物の特定の結合（複数可）が、酵素の作用によってまたは生物学的プロセスによって分解または切断されて、薬物および実質上生物学的に不活性な化合物の断片を生成または放出する化合物を指す。したがって、プロドラッグは、治療活性化合物の共有結合で修飾された類似体または潜在的な形態である。
【００３７】
本発明の化合物のプロドラッグの典型的な例は、化合物の官能性部分上に生物学的に不安定な保護基を有する。プロドラッグには、酸化、還元、アミノ化、脱アミノ化、エステル化、脱エステル化、アルキル化、脱アルキル化、アシル化、脱アシル化、リン酸化、脱リン酸化、光分解、加水分解されることができ、またはその他の官能基の変更またはこのプロドラッグ上の化学的結合の形成もしくは分解を含む変換を受けることができる化合物が含まれる。
【００３８】
「プロドラッグ部分」とは、代謝中、全身的に細胞内部で、加水分解、酵素的切断、またはいくつかのその他のプロセスによって、活性な阻害性化合物から分離する不安定な官能基を意味する（Ｔｅｘｔｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ（１９９１）、Ｐ．Ｋｒｏｇｓｇａａｒｄ−ＬａｒｓｅｎおよびＨ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄ編集、Ｈａｒｗｏｏｄ  Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ、１１３−１９１頁中のＢｕｎｄｇａａｒｄ、Ｈａｎｓ、「Ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ」）。本発明のプロドラッグ化合物につき酵素的活性化メカニズムが可能である酵素には、限定するものではないが、アミダーゼ、エステラーゼ、微生物酵素、ホスホリパーゼ、コリンエステラーゼ、およびホスファーゼが含まれる。プロドラッグ部分は、溶解度、吸収および親油性を増強して、薬物送達、バイオアベイラビリティおよび効力を最適化する役割を果たすことができる。
【００３９】
例示的なプロドラッグ部分には、加水分解に敏感なまたは不安定な、アシルエステル−ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ９、アシルオキシメチルエステル−ＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ９およびアシルオキシメチルカーボネート−ＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）ＯＲ９（ここで、Ｒ９は、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６置換アルキル、Ｃ６−Ｃ２０アリールまたはＣ６−Ｃ２０置換アリールである。）が含まれる。ある場合は、Ｒ９基は、加水分解で不安定でもある四級（ｑｕａｎｔｅｒｎａｒｙ）アミンなどの加水分解に敏感な基を含む。アシルオキシアルキルエステルは、最初はカルボン酸に対するプロドラッグの方策に使用され、次いで、Ｆａｒｑｕｈａｒら（１９８３）、Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．７２：３２４；また、米国特許第４，８１６，５７０号明細書、同第４，９６８，７８８号、同第５，６６３，１５９号および同第５，７９２，７５６号によって、ホスフェートおよびホスホネートに適用された。アシルオキシアルキルエステルの密接な変形、アルコキシカルボニルオキシアルキルエステル（カーボネート）も、本発明の化合物におけるプロドラッグ部分としての役割を果たし得る。例示的なアシルオキシメチルエステルは、ピバロイルオキシメトキシ、（ＰＯＭ）−ＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）Ｃ（ＣＨ３）３である。例示的なアシルオキシメチルカーボネートのプロドラッグ部分は、ピバロイルオキシメチルカーボネート（ＰＯＣ）−ＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）ＯＣ（ＣＨ３）３である。
【００４０】
本明細書では、「相互プロドラッグ」という用語は、その化合物の特定の結合（複数可）が、酵素の作用によってまたは生物学的プロセスによって分解または切断されることにより、２つ以上の薬物またはプロドラッグを生成または放出する２部分または３部分プロドラッグを指す。
【００４１】
別段の指示がなければ、「約」という用語が明確に使用されるか否かにかかわらず、本明細書に示されたすべての量は、実際の示された値を指すことを意味し、およびこのような示された値に関する実験的および／または測定条件による近似値を含む、当技術分野における通常の技術に基づき合理的に推論される、このような示された値に対する近似値を指すことも意味するものと理解される。
【００４２】
本発明の化合物は、非対称的に置換された炭素原子を含んでもよい。このような非対称的に置換された炭素原子は、特定の非対称的に置換された炭素原子における立体異性体の混合物または単一の立体異性体を含む本発明の化合物をもたらし得る。結果として、本発明の化合物のラセミ混合物、ジアステレオマー混合物、および単一ジアステレオマーは、本発明に含まれる。本明細書では、「Ｓ」および「Ｒ」配置という用語は、ＩＵＰＡＣ  １９７４  ＲＥＣＯＭＭＥＮＤＡＴＩＯＮＳ  ＦＯＲ  ＳＥＣＴＩＯＮ  Ｅ、ＦＵＮＤＡＭＥＮＴＡＬ  ＳＴＥＲＥＯＣＨＥＭＩＳＴＲＹ、Ｐｕｒｅ  Ａｐｐｌ．Ｃｈｅｍ、４５：１３−３０（１９７６）で定義された通りである。αおよびβという用語は、環式化合物の環の位置について使用される。基準面のα側とは、好ましい置換基がより低い番号の位置に存在する側である。基準面の反対側に位置するこれらの置換基は、βの記述が割り当てられる。この用法は、「α」が「その面の下」を意味し、絶対配置を表す環状の立体母核に関するものとは異なることに留意するべきである。本明細書では、αおよびβ配置という用語は、ＣＨＥＭＩＣＡＬ  ＡＢＳＴＲＡＣＴＳ  ＩＮＤＥＸ  ＧＵＩＤＥ−ＡＰＰＥＮＤＩＸ  ＩＶ（１９８７）パラグラフ２０３によって定義された通りである。
【００４３】
本発明はまた、以下に詳細に記載されているように、本発明の化合物を調製する方法およびこのような方法において有用な合成の中間体に関する。
【００４４】
Ｉ．本発明の化合物の調製
本発明の化合物は、スキームＩ−ＶＩに例示されている方法によって調製することができる。
【００４５】
式Ａの化合物への収束的経路は、
ａ）アルキル化に対して活性化された、リン酸化β−アゴニスト誘導体の合成（スキームＩ−Ｖ）；および
ｂ）この活性化β−アゴニスト誘導体による、「四級化可能部分」を有する、ＡＩＳＴＭ分子またはこれらの生理学的に切断可能なエステルの四級化（アルキル化）に続く、最終脱保護（スキームＶＩ）を含む。
【００４６】
【化４】
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【００４７】
ホスフェートで官能化され、保護されたβ−アゴニスト誘導体の合成が、スキームＩ−Ｖに示されている。
【００４８】
市販されている（または、ＲｏｎｇおよびＲｕｏｈｏ、１９９９に従って調製された）ラセミのキシナホ酸サルメテロールをｔ−ブトキシキシカルボニル基（Ｂｏｃ）で保護した後、活性化されたＭｎＯ２で、一級ベンジル性アルコールのアルデヒドへの選択的酸化によって、化合物１（実施例３）を得る。このようにしてこの一級アルコールをアルデヒドとして遮蔽し、したがってフェノール部分の酸性度が増加して、その後のリン酸化の選択性を促進する。その結果、ホスホブロミデート（実施例１に記載されたように調製された）のわずかに過剰量との反応が楽に進行し、ホスフェート２を良好な収率および純度（実施例４）で得る。低温（−７８℃から０℃）で実施される水素化ホウ素ナトリウムによるアルデヒド部分の還元によりジオールが生成され、これを１，２，２，６，６−ペンタメチルピペリジン（ＰＭＰ）の存在下、メタンスルホニルクロライド（ＭｓＣｌ）を用いて０℃で選択的にスルホニル化して、一級メシレート３（実施例６）を得る。このようにして、活性化された中間体（スキームＩ）は、スキームＶＩに示されているように、ＡＩＳＴＭ分子とβ−アゴニストを相互プロドラッグに結合するアルキル化に使用される。
【００４９】
あるいは、サルメテロールのホスホノ−オキシメチル誘導体は、スキームＩＩに記載された通りに調製することができる。塩基として水素化ナトリウムおよび助剤としてテトラブチルアンモニウムヨージドを用いて、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルクロロメチルホスフェート（Ｋｒｉｓｅら、１９９９）で化合物１のフェノール性部分を５０℃でアルキル化して、誘導体４を得る。アルデヒドのボロハイドライドによる還元の後、一級ヒドロキシル基の選択的メシル化によって（前のパラグラフに記載されたのと同様に）、活性化メシレート５を得る。
【００５０】
アルブテロール誘導体の調製において、アミノアルコール部分の周辺の立体容積（Ｒ４＝ｔ−ブチル）には、スキームＩＩＩに例示された間接的合成アプローチが必要である。
【００５１】
５−ブロモサリチルアルデヒドはリン酸化され、以前のパラグラフに記載されたように、このアルデヒド部分は還元され、このようにして形成されたアルコール部分は、イミダゾールの存在下、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルクロライドによる処理によって保護されて、化合物６（実施例１０−１１）を得る。臭素原子の存在は、以下のステップでＣ−Ｃ結合の形成を可能にする。Ｓｕｚｋｉ法を用いてビニル置換基を導入するために、トリシクロヘキシルホスフィンおよび酢酸パラジウム（ＩＩ）の触媒量の存在下でトリビニルボロキシン−ピリジン錯体を使用した（実施例１２）。このようにして形成された化合物７は、オキソンとアセトンの混合物中でインサイチュで生成された２，２−ジメチルジオキシラン（ＤＭＤＯ）によってエポキシ化を受ける。エポキシドの開環は、位置選択性を確実にするルイス酸として過塩素酸リチウムの存在下、ｔｅｒｔ−ブチルアミンによる求核攻撃によって達成されて、β−アミノアルコール８が得られる。ｔ−ブチル部分によって加えられた立体容積は、ジ−ｔ−ブチルジカーボネートによるその後のアシル化に影響を持ち、アシル化は、二級アミン上ではなく二級ヒドロキシル上で選択的に進行して、化合物９を得る。続いて、シリルＴＢＳ保護の除去が低温メシル化によって行われ、メシル化は再び、一級ベンジル性ヒドロキシル上で選択的に進行して、メシレート１０を生成する（ヒンダード、二級ｔ−ブチルアミン部分は影響を受けずに）。
【００５２】
あるいは、アルブテロールのホスホノ−オキシメチル誘導体は、スキームＩＶに記載され通りに調製することができる。塩基として水素化ナトリウムおよび助剤としてテトラブチルアンモニウムヨージドを用いて、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルクロロメチルホスフェート（Ｋｒｉｓｅら、１９９９）により、５−ブロモサリチルアルデヒド（５−Ｂｒｏｍｏｓａｌｉｃａｌｄｅｈｙｄｅ）のフェノール性部分を５０℃でアルキル化して、リン酸化されたアルデヒド１１を得る。その後の還元および形成されたアルコールのシリル化は、１２をもたらすことができ、次いで、スキームＩＩＩに記載されたのと同様に、メシレート１３に変換することができる。
【００５３】
必要に応じて、文献（例えば、Ｈｅｔｔら、１９９４）に記載されているように調製された単一の所望のエナンチオマーを用いて、スキームＩおよびＩＩに従ってサルメテロール誘導体の光学的に純粋なバージョンを得ることができる。
【００５４】
代替の側鎖を有する光学的に純粋な、リン酸化β−アゴニストの合成のための代替の方法の一例が、スキームＶに例示されている。ビニル化合物７をＡＤ−ｍｉｘ−βを用いて非対称的にジヒドロキシ化して、ジオール１４を生成する。選択的トシル化は一級ヒドロキシル上で行われ、トシル化は、ジブチルスズオキサイドの触媒量の存在によって確実になり、このようにして中間体１５を形成する。塩基としてナトリウムヘキサメチルジシラジドによる短時間の低温処理によって、このキラルエポキシド１６が得られる。最適なアミン（Ｒ４部分を有する。）によるエポキシドの開環は、アミノアルコール１７をもたらすことができ、これはその後、保護基操作および最終メシル化を介して活性化キラル中間体１８に変換される。上記の全体の合成順序が、基質としてブロモ化合物１２に適用された場合、この最終結果は、メシレート類似体１９であることができる。
【００５５】
スキームＶＩは、ＡＩＳＴＭとβ−アゴニストの相互プロドラッグの収束的組立てを例示している。選択されたＡＩＳＴＭ（文献の手順により調製された。）は、アセトニトリルのような極性の非プロトン性溶媒中で、約化学量論量のヨウ化ナトリウムの存在下、保護された、リン酸化β−アゴニスト誘導体（３、５、１０、１３、１８または１９）のベンジル性メシレートでアルキル化される。最終ステップにおいて、この中間体四級アンモニウム塩は、ジオキサン中で、弱い酸分解によって、もしくは約４Ｎ  ＨＣｌによる短時間（最大１時間まで）処理によって脱保護され、または約０℃のジクロロメタン中、ＴＦＡによる低温処理で脱保護されて、本発明の対象の相互プロドラッグを得る。
【００５６】
ＩＩ．相互ＡＩＳＴＭ−β−アゴニストプロドラッグとしてのモノホスフェートの酵素的活性化
式Ａの化合物に記載されたモノホスフェート（ＡＩＳＴＭおよびβ−アゴニストの相互プロドラッグ）は、多段の生体活性化プロセスにおいて、両薬物を放出するように設計される。まず、肺中に存在するアルカリホスファターゼ（局所的送達の場合）は、相互プロドラッグを効率的に脱リン酸化して、２つの相互プロドラッグの場合（ＡＩＳＴＭがエステルプロドラッグとしてさらにマスクされた場合）、その後の酵素的加水分解と組み合わせることができる、化学的分解／加水分解のカスケードを引き起こす。ホスフェートの切断は律速段階ではなく、次のプロセスに対して比較的速く起こることが想定できる。必要なステップ数およびこれらのそれぞれの反応速度は、生体活性化を受ける相互プロドラッグの構造により決まる。例えば、モノホスフェート部分にメチレンオキシ−リンカーが存在する場合、この結果、次のホルムアルデヒドの除去は生理的なｐＨで起こる。したがって、フェノレート中間体が生じ、これはベンジル性の部位で起こる自発的加水分解を極めてしやすくし、β−アゴニストのサリゲニン部分を「復活させる」。このステップは、おそらく律速的であり、「脱離基」Ｒ１Ｒ２Ｒ３Ｘの立体的および電子的性質によって影響を受ける可能性がある。この脱離部分Ｒ１Ｒ２Ｒ３Ｘは、ＡＩＳＴＭそれ自体である、またはそのエステル前駆体であり、非特異的な肺エステラーゼによる酵素的切断の最終ステップにおいて、その作用の所望の部位にＡＩＳＴＭを送達する。
【００５７】
上記の生体活性化がスキームＶＩＩに示され、このような変換の例が、実施例９３および９４（それぞれ、インビトロおよびインビボ）に記載されている。
【００５８】
【化５】
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【００５９】
ＩＩＩ．エアロゾル送達装置
液体噴霧用または代替として乾燥粉末として適切に配合された、式Ａのモノホスフェートの使用は、肺に相互プロドラッグの十分量を提供して、両生物活性成分の局所的放出を介して治療効果を達成する。本発明のモノホスフェート相互プロドラッグは、ジェット式、電子的、または超音波噴霧器を用いたエアロゾル化に適している。これらはまた、乾燥粉末吸入器または定量吸入器によって送達するのに適している。これらの固体形態は長期安定性を有し、薬物を室温で貯蔵することを可能にする。
【００６０】
このエアロゾル製剤は、水溶液または水性−エタノール溶液中に溶解した、式Ａの化合物または薬剤として許容されるその塩の約１−１０ｍｇ／ｍＬの濃厚な溶液を含んでもよい。好ましくは、このエアロゾル製剤は、約４．０から約７．５の間のｐＨを有する。好ましい薬剤として許容される塩は、より低い肺刺激をもたらし得るので、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩またはリン酸塩を含む無機酸塩である。本発明の相互プロドラッグの治療量は、約１から約５μの間の平均質量中央径を有する液体エアロゾルまたは乾燥粉末の噴霧によって、肺気管支内腔に送達される。液体製剤は、適当な希釈剤から相互プロドラッグ塩を分離することが必要であり得て、投与の前に再構成を必要とする。なぜなら、モノホスフェート相互プロドラッグの水溶液の長期安定性は、商業的に許容される有効期間を提供しないことがあり得るからである。
【００６１】
本発明の不可分の部分は、本発明の製剤から、主に約１−５μのサイズ範囲のエアロゾル粒子にエアロゾルを生成することが可能な装置である。本出願において主にとは、生成されたすべてのエアロゾル粒子の、少なくとも約７０％、しかし好ましくは約９０％超が約１−５μのサイズ範囲内であることを意味する。典型的な装置には、ジェット式噴霧器、超音波噴霧器、振動性多孔プレート噴霧器、および電動乾燥粉末吸入器が含まれる。
【００６２】
ジェット式噴霧器は空気圧力を利用して、液体溶液をエアロゾル液滴に分割する。超音波噴霧器は、液体を小さなエアロゾル液滴にせん断する圧電性結晶によって作動する。加圧噴霧システムは、加圧下で溶液を細孔を通して押し進めて、エアロゾル液滴を生成する。振動性多孔プレート装置は、急速な振動を利用して、液体のストリームを適当な液滴サイズにせん断する。しかし、この装置は、製剤の物理的および化学的性質に影響を受けるので、モノホスフェート相互プロドラッグのいくつかの製剤のみが有効に噴霧化される。典型的には、噴霧化することができるこの製剤は、モノホスフェート相互プロドラッグの少量を含有しなければならず、これはエアロゾルの小容量（約５０−２５０μＬ）で送達される。
【００６３】
ＩＶ．効用
本発明の化合物は、肺炎症および気管支収縮を治療するのに（ヒトにおいて）有用である。
【００６４】
単回投与形態を作製するために担体材料と組み合わせ得る活性成分の量は、治療される宿主および個々の投与様式に応じて変動する。
【００６５】
式Ａの化合物のこの小容量で高濃度の製剤は、軽度から重度の喘息、慢性気管支炎または慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）に罹患した患者の気道中に、エアロゾルとして有効濃度で送達することができる。固体投与製剤は、安定で、容易に製造され、極めて費用効果が高い。さらに、この製剤は、商業的流通のために十分な有効期間を提供する。本発明の相互プロドラッグは、悪心、下痢、頭痛または免疫抑制のようなＡＩＳＴＭの全身性副作用をマスクする。この相互プロドラッグは、β−アゴニスト活性もマスクして、心血管の副作用の可能性を最小限に抑える。両薬物は、肺中に存在する酵素、特にアルカリホスファターゼによって放出されることにより、炎症および気管支収縮の部位において、β−アゴニストおよびＡＩＳＴＭの治療量を同時に放出する。
【００６６】
前述のことは、以下の実施例からより良く理解することができ、以下の実施例は、例示の目的で示されており、本発明の概念の範囲を限定することを意図するものではない。
【実施例１】
【００６７】
ホスホブロミド酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【００６８】
【化６】
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【００６９】
表題のリン酸化剤は、ＧａｊｄａおよびＺｗｉｅｒｚａｋ（１９７６）によって記述されたものに比較して、改変された条件により調製された。反応温度を１５℃に低下し、反応時間を２．５時間に短縮することによって、本発明者らが入手した表題の化合物は、文献の条件（２５℃４時間）を適用した場合より良好な純度を有していた。表題のホスホブロミデートは、不安定であり、リン酸化反応のために直ちに使用した（実施例４および１０参照）。
【００７０】
実施例２−６は、サルメテロールのラセミのリン酸化された誘導体の合成を例示する（スキームＩ参照）。
【実施例２】
【００７１】
［２−ヒドロキシ−２−（４−ヒドロキシ−３−ヒドロキシメチル−フェニル）−エチル］−［６−（４−フェニル−ブトキシ）−ヘキシル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【００７２】
【化７】
2010513276.tif 000013
【００７３】
市販されているキシナホ酸サルメテロール（６．０４ｇ、１０ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（１．３９ｇ、ｌ０ｍｍｏｌ）を、１，４−ジオキサン／水混合物（１：１、８０ｍＬ）中に攪拌しながら懸濁した。次いで、室温で攪拌を継続しながら、１，４−ジオキサン（１０ｍＬ）中に溶解したジ−ｔ−ブチル−ジカーボネート（２．４０ｇ、ｌｌｍｍｏｌ）を滴下で添加した。３０分後のＴＬＣ分析は、出発材料の痕跡量のみを示した。２時間後、１，４−ジオキサンを蒸発させ、形成された懸濁液を水で希釈し、クロロホルム（計１２５ｍＬ）で２回抽出した。次いで、有機層を飽和炭酸水素ナトリウム、ブラインで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。デカンテーションおよび蒸発後に得られた粗製物質を、酢酸エチル／ヘキサン混合物（１：１）で溶離してシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。冷却すると凝固するガラス状残留物として表題化合物（４．６１ｇ、８９％）が得られた。
【００７４】
ＬＣＭＳ：１００％、ＭＮａ＋  ５３８．３（Ｃ３０Ｈ４５ＮＯ６の厳密な質量計算値５１５．３）。元素分析；計算値：Ｃ，６９．８７；Ｈ，８．８０；Ｎ，２．７２。実測値：Ｃ，６９．６９；Ｈ，８．６４；Ｎ，２．６８。
【実施例３】
【００７５】
［２−（３−ホルミル−４−ヒドロキシ−フェニル）−２−ヒドロキシ−エチル］−［６−（４−フェニル−ブトキシ）−ヘキシル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【００７６】
【化８】
2010513276.tif 000014
【００７７】
実施例２に記載されたＮ−Ｂｏｃ−サルメテロール（３．２４ｇ、６．２８ｍｍｏｌ）をクロロホルム（５０ｍＬ）中に溶解し、激しく攪拌しながら、活性酸化マンガン（１Ｖ）（６．４４ｇ、８５重量／重量％、６３ｍｍｏｌ）を少しずつ添加した。室温で２４時間後、このスラリーをＣｅｌｉｔｅのパッドを通してろ過し、続いてクロロホルム洗浄液と合わせたろ液を濃縮した。このようにして得られた粗製残留物を、酢酸エチル／ヘキサン混合物（１：５）を用いてシリカゲルクロマトグラフィーによって精製し、表題のアルデヒド１（２．４５ｇ、７７％）を得た。ＬＣＭＳ：９６％、ＭＮａ＋  ５３６．３（Ｃ３０Ｈ４３ＮＯ６の厳密な質量計算値５１３．３）。
【実施例４】
【００７８】
｛２−［４−（ジ−ｔｅｒｔ−ブトキシ−ホスホリルオキシ）−３−ホルミル−フェニル］−２−ヒドロキシ−エチル｝−［６−（４−フェニル−ブトキシ）−ヘキシル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【００７９】
【化９】
2010513276.tif 000015
【００８０】
アルデヒド１（３．４４ｇ、６．６９ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（１０ｍＬ）中に溶解し、続いて、窒素下で激しく攪拌しながら、ＤＭＡＰ（８２ｍｇ、０．６７ｍｍｏｌ）およびＤＢＵ（１．１１ｍＬ、７．４ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を０℃に冷却した後、無水ＴＨＦ（５ｍＬ）で希釈した実施例１に記載されたホスホブロミデート（２．１９ｇ、８ｍｍｏｌ）を１５分にわたり滴下で添加した（．）。０℃における窒素下の攪拌をさらに３０分間継続した後、ＴＬＣ分析は、リン酸化がほとんど完了したことを示した。さらに６０分後、反応混合物を濃縮し、この残留物を酢酸エチル中に再溶解し、１０％クエン酸で３回、０．５Ｎ  ＮａＯＨで２回、ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。次いで、有機相を塩基性アルミナのパッドを通してろ過し、酢酸エチル洗浄液と合わせたろ液を真空中で濃縮した。この粗生成物を、ヘキサン中の３０％酢酸エチル／１％トリエチルアミンを用いてシリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、ガラス状残留物として表題化合物２（３．４２ｇ、７２％）を得た。
【００８１】
３１Ｐ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：−１５．１０７ｐｐｍ。ＬＣＭＳ：１００％、ＭＮａ＋  ７２８．０（Ｃ３８Ｈ６０ＮＯ９Ｐの厳密な質量計算値７０５．４）。元素分析；計算値：Ｃ，６４．６６；Ｈ，８．５７；Ｎ，１．９８。実測値：Ｃ，６４．０９；Ｈ，８．５４；Ｎ，２．０２。
【実施例５】
【００８２】
｛２−［４−（ジ−ｔｅｒｔ−ブトキシ−ホスホリルオキシ）−３−ヒドロキシメチル−フェニル］−２−ヒドロキシ−エチル｝−［６−（４−フェニル−ブトキシ）−ヘキシル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【００８３】
【化１０】
2010513276.tif 000016
【００８４】
リン酸化アルデヒド２（２．６８、３．８ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（１０ｍＬ）中に溶解し、この混合物を−７８℃に冷却した。次いで、窒素下で激しく攪拌しながら、固体水素化ホウ素ナトリウム（０．４３２ｇ、１１．４ｍｍｏｌ）を５分間にわたり少しずつ添加し、続いてメタノール（ｌｍＬ）を添加した。反応混合物を４時間にわたり攪拌し、浴の温度を０℃に上昇させた（この間、ＴＬＣ分析は、出発材料の消費を示した。）。反応混合物をジクロロメタン（５０ｍＬ）で希釈し、続いて、激しく攪拌しながら１０％クエン酸（２０ｍＬ）を添加することによって慎重にクエンチした。有機相を分離し、水層をＤＣＭのさらなる量で抽出し、合わせた抽出物を飽和ビカーボネート、ブラインで２回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、デカンテーションし、蒸発させた。この粗生成物をヘキサン中の４０％酢酸エチル／１％トリエチルアミンを用いてクロマトグラフィーによって精製して、無色のガラス状残留物として表題のジオール（２．０１ｇ、７５％）を得た。
【００８５】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）選択シグナル：７．１７−７．４１（ｍ，８Ｈ）、４．９２（ｍ，１Ｈ）、４．６２（ｂｓ，２Ｈ）、３．３９（ｑ，２Ｈ）、２．６４（ｔ  ２Ｈ）、１．６２（ｍ，４Ｈ）、１．５４（ｓ，９Ｈ）、１．５２（ｓ，９Ｈ）、１．４９（ｓ，９Ｈ）、１．１１５−１．４９（ｍ，８Ｈ）。３１Ｐ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：−１３．０６０ｐｐｍ。ＬＣＭＳ：９９％、ＭＮａ＋  ７３０．０（Ｃ３８Ｈ６２ＮＯ９Ｐの厳密な質量計算値７０７．４）。元素分析；計算値：Ｃ，６４．４８；Ｈ，８．８３；Ｎ，１．９８。実測値：Ｃ，６４．７０；Ｈ，８．８４；Ｎ，１．９０。
【実施例６】
【００８６】
メタンスルホン酸５−（２−｛ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−［６−（４−フェニル−ブトキシ）−ヘキシル］−アミノ｝−１−ヒドロキシ−エチル）−２−（ジ−ｔｅｒｔ−ブトキシ−ホスホリルオキシ）−ベンジルエステル（３）
【００８７】
【化１１】
2010513276.tif 000017
【００８８】
０℃の無水ジクロロメタン中に溶解した実施例５に記載されたジオールを、１，２，２，６，６−ペンタメチル−ピペリジン（ＰＭＰ）２当量の存在下、メタンスルホニルクロライド１．１当量で処理することによって、化合物３を合成した。ＴＬＣの監視は、１５−３０分後、出発材料の消失を示した。１時間後、反応混合物を真空濃縮し、酢酸エチル中に再溶解し、１０％クエン酸溶液、飽和ビカーボネート溶液、ブラインで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、デカンテーションし、蒸発させた。このようにして得られたメシレート３は、ＭＲＡ分子の四級化（アルキル化）のために直接使用された（スキームＶＩ参照）。
【００８９】
実施例７−９は、サルメテロールのホスホノオキシ−メチレン誘導体の合成を例示する。
【実施例７】
【００９０】
｛２−［４−（ジ−ｔｅｒｔ−ブトキシ−ホスホリルオキシメトキシ）−３−ホルミル−フェニル］−２−ヒドロキシ−エチル｝−［６−（４−フェニル−ブトキシ）−ヘキシル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【００９１】
【化１２】
2010513276.tif 000018
【００９２】
サルメテロール誘導体１を（ｔ−ＢｕＯ）２Ｐ＝Ｏ（ＯＣＨ２Ｃｌ）（１．２当量、少しずつ添加、Ｋｒｉｓｅら（１９９９）による発表と類似の手順によりＴＬＣで判断する。）でアルキル化した。塩基として水素化ナトリウム（１当量）および触媒としてＴＢＡＩ（０．２当量）を使用し、この反応を、無水ＴＨＦ中で緩やかに加熱して（５０℃）実施した。出発材料が消費されるための全体の反応時間は１８時間であり、その後、この混合物を室温まで冷却し、１０％（重量／体積）クエン酸水溶液でクエンチし、続いて回転蒸発（ｅｖａｐｏｒａｔｏｒｔｉｏｎ）を介してＴＨＦを除去した。得られた混合物をジエチルエーテルで抽出し（２回）、有機抽出物を合わせ、０．５Ｍ  ＮａＯＨ（３回）、１０％（重量／体積）クエン酸水溶液、脱イオン水およびブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して、９８％の粗製の茶色の油状残留物を得た。この物質を勾配（ヘキサン／酢酸エチル−両溶媒を１％トリエチルアミンで緩衝した。）を用いてシリカゲルクロマトグラフィーで精製して、７０％の透明な粘性油を得た。
【００９３】
ＬＣ−ＭＳ  ＭＮａ＋＝７５８（実測値）；２７２ｎｍのＵＶ検出器付きＨＰＬＣ：９５  面積％；３１Ｐ  ＮＭＲ、ＤＭＳＯ−ｄ６：−１０．８９２ｐｐｍ。
【実施例８】
【００９４】
｛２−（４−（ジ−ｔｅｒｔ−ブトキシ−ホスホリルオキシメトキシ）−３−ヒドロキシメチル−フェニル］−２−ヒドロキシ−エチル｝−［６−（４−フェニル−ブトキシ）−ヘキシル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【００９５】
【化１３】
2010513276.tif 000019
【００９６】
実施例５に記載されたのと同様に、アルデヒド４を還元して、わずかに黄色がかった粘性の油の表題化合物を収率９２％で得た。ＬＣ−ＭＳ：ＭＮａ＋＝７６０（実測値）；２７２ｎｍのＨＰＬＣ：９６％。３１Ｐ  ＮＭＲ、ＤＭＳＯ−ｄ６：−１１．１０４ｐｐｍ。
【実施例９】
【００９７】
メタンスルホン酸５−（２−｛ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−［６−（４−フェニル−ブトキシ）−ヘキシル］−アミノ｝−１−ヒドロキシ−エチル）−２−（ジ−ｔｅｒｔ−ブトキシ−ホスホリルオキシメトキシ）−ベンジルエステル
【００９８】
【化１４】
2010513276.tif 000020
【００９９】
実施例８に記載されたジオールを実施例６に記載された手順により、選択的にメシル化して、メシレート５を高収率で得て、四級化反応のために直接使用した。
【０１００】
実施例１０−１７は、アルブテロールのラセミのリン酸化誘導体の合成を例示する（スキームＩＩＩ参照）。
【実施例１０】
【０１０１】
リン酸４−ブロモ−２−ホルミル−フェニルエステルジ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【０１０２】
【化１５】
2010513276.tif 000021
【０１０３】
５−ブロモサリチルアルデヒド（８．０４ｇ、４０ｍｍｏｌ）を、無水ＴＨＦ（５０ｍＬ）に溶解したＤＢＵ（６．５８ｍＬ、４４ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（０．４８９ｇ、４ｍｍｏｌ）を用いて、実施例４に記載されたのと同様にリン酸化し、０℃まで冷却した。このリン酸化剤を実施例１に記載された通りに調製し（２３．２ｇ、８５ｍｍｏｌ）、無水ＴＨＦ（２０ｍＬ）で希釈した。この粗生成物をクロマトグラフィー（ヘキサン中の９％酢酸エチル＋１％トリエチルアミン）によって精製して、黄色がかった固体として分析的に純粋な表題のアルデヒド６を得た（１１．５１ｇ、７３％）。
【０１０４】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：１０．３５（ｓ，１Ｈ）、７．９９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．４Ｈｚ）、７．６７（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２．４Ｈｚ）、７．４１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．８Ｈｚ）、１．５１（ｓ，１８Ｈ）。３１Ｐ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：−１５．２３９ｐｐｍ。ＬＣＭＳ：９９％、ＭＮａ＋  ４１５（Ｃ１５Ｈ２２ＢｒＯ５Ｐの厳密な質量計算値３９２．０４）。
【実施例１１】
【０１０５】
リン酸４−ブロモ−２−（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシメチル）−フェニルエステルジ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【０１０６】
【化１６】
2010513276.tif 000022
【０１０７】
実施例５に記載されたのと同様に、実施例１０に記載されたアルデヒドをアルコールに還元した。ヘキサンで反復して蒸発した後固化した粗製物質は、この合成を継続するのに十分に純粋であった。この中間体アルコールは、イミダゾールの過剰分（５当量）の存在下、ＤＭＦ中でのわずかに過剰なｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルクロライドで処理することによって化合物６に変換された。室温において一晩反応後、この混合物をジエチルエーテルで希釈し、１０％クエン酸、ブラインで十分に洗浄し、次いで、有機相を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、デカンテーションし、蒸発させた。この粗製物質をヘキサン中の１０％酢酸エチル＋１％トリエチルアミンを用いてクロマトグラフィーによって精製した。
【実施例１２】
【０１０８】
リン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル２−（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシメチル）−４−ビニル−フェニルエステル
【０１０９】
【化１７】
2010513276.tif 000023
【０１１０】
還流凝縮器を備えた二口丸底フラスコに、化合物６のトルエン（８ｍＬ／ｍｍｏｌ）とエタノール（１ｍＬ／ｍｍｏｌ）混合物中溶液を充填し、続いて炭酸カリウム（８ｍＬ／ｍｍｏｌ）の脱気された２０％溶液を添加した。この二相混合物を、アルゴンのストリームをフラスコに通しながら、１時間激しく攪拌した。この混合物に、トリビニルボロキシン−ピリジン錯体（１．５当量）、続いてトリシクロヘキシルホスフィン（０．１当量）を添加した。反応混合物を再び３０分間アルゴンでパージし、次いで、酢酸パラジウム（０．１当量）を添加し、続いて、激しく攪拌し、アルゴンの正圧下、還流下で４時間加熱した。この時間後、ＴＬＣ分析（クロロホルム／メタノール８：１）は、出発材料の完全な消費を示した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し（元の容量の３倍）、有機相を水（３回）、１０％クエン酸溶液（２回）およびブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させた。ろ過および溶媒の蒸発後、この残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（トリエチルアミン５％を有する酢酸エチル／ヘキサン（ｈｅｘａｎｅｓ）１：２０）によって精製して、粘性の油として８０％の所望のオレフィン７を得た。
【０１１１】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：７．５２（ｓ，１Ｈ）、７．２７（ｄ，１Ｈ）、７．１９（ｄ，１Ｈ）、６．６７（ｄｄ，１Ｈ）、５．６６（ｄ，１Ｈ）、５．１７（ｄ，１Ｈ）、４．７１（ｓ，２Ｈ）、１．４８（ｓ，１８Ｈ）、０．９５（ｓ，９Ｈ）；０．１０（ｓ，６Ｈ）。３１Ｐ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：−１４．１８ｐｐｍ。ＬＣＭＳ：９５％、ＭＮａ＋  ４７９（Ｃ２３Ｈ４１Ｏ５ＰＳｉの厳密な質量計算値４５６．３）。
【実施例１３】
【０１１２】
リン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル２−（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシメチル）−４−オキシラニル−フェニルエステル
【０１１３】
【化１８】
2010513276.tif 000024
【０１１４】
０℃のＣＨ２Ｃｌ２／飽和ＮａＨＣＯ３混合物（２０ｍＬ、３：５）およびアセトン（１０ｍＬ）中の化合物７（１．２ｇ、２．６３ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、Ｏｘｏｎｅ（登録商標）（８ｇ、１３．１ｍｍｏｌ）を徐々に添加した。この混合物のｐＨを必要に応じて、飽和ＮａＨＣＯ３で＞７．５に調整した。０℃で３０分間、次いで室温で９０分間攪拌した後、得られた懸濁液をＣＨ２Ｃｌ２（３×１５ｍＬ）で抽出し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮して、明るい黄色の油として粗製エポキシド（１．３ｇ）を得た。クロマトグラフィー（３：１ヘキサン（ｈｅｘａｎｅｓ）／酢酸エチル、０．５％Ｅｔ３Ｎ）は、透明な油として表題のエポキシド（０．８０４ｇ、６５％）をもたらした。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−Ｄ６）δ  ７．３６（ｓ，１Ｈ）、７．２３（ｍ，２Ｈ）、４．７４（ｓ，２Ｈ）、３．９２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．６，４．１）、３．１１（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．１，５．３）、２．７７（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．６，５．３）、１．４３（ｓ，１８Ｈ）、０．９０（ｓ，９Ｈ）、０．０８（ｓ，６Ｈ）。
【実施例１４】
【０１１５】
リン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル４−（２−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−１−ヒドロキシ−エチル）−２−（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシメチル）−フェニルエステル
【０１１６】
【化１９】
2010513276.tif 000025
【０１１７】
ｔｅｒｔ−ブチルアミン（９ｍＬ、８４ｍｍｏｌ）中の実施例１３に記載されたエポキシド（４ｇ、８．５ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、固体ＬｉＣｌＯ４（１８０ｍｇ、１．７ｍｍｏｌ）を室温で攪拌しながら添加した。得られた混合物を４８時間攪拌し、次いで、酢酸エチル（２０ｍＬ）で希釈した。有機層を水、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮して、黄色の油として粗製アミノアルコール（５．３ｇ）を得た。クロマトグラフィー（９：１、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ、０．５％Ｅｔ３Ｎ）は、明るい黄色の油として表題化合物８（４．２ｇ、９１％）をもたらした。
【０１１８】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−Ｄ６）δ  ７．４５（ｓ，１Ｈ）、７．２３（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．１，８．４）、７．１８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．０）、４．７５（ｓ，２Ｈ）、４．４９（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝６．２）、３．１７（ｓ，１Ｈ）、２．５８（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝６．３）、１．４２（ｍ，１８Ｈ）、１．０１（ｄ，９Ｈ，Ｊ＝１４．４）、０．９２（ｓ，９Ｈ）、０．０６（ｓ，６Ｈ）；ＥＳ／ＭＳ、Ｃ２７Ｈ５３ＮＯ６ＰＳｉの計算値：５４６．３４、実測値  ｍ／ｚ＝５４６．４（Ｍ＋Ｈ）。
【実施例１５】
【０１１９】
炭酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル２−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−１−［３−（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシメチル）−４−（ジ−ｔｅｒｔ−ブトキシ−ホスホリルオキシ）−フェニル］−エチルエステル
【０１２０】
【化２０】
2010513276.tif 000026
【０１２１】
０℃の無水ＣＨ３ＣＮ（３０ｍＬ）中の８（１．７４ｇ、３．１９ｍｍｏｌ）、ＰＭＰ（１．７ｍＬ、９．６ｍｍｏｌ）、およびＤＭＡＰ（３９ｍｇ、０．３１９ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、固体（Ｂｏｃ）２Ｏ（１．０４ｇ、４．７９ｍｍｏｌ）を添加した。９０分後、得られた混合物を飽和ＮａＨＣＯ３（４０ｍＬ）でクエンチし、酢酸エチル（３×３０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮して、白色固体として粗製カーボネート（２．９３ｇ）を得た。クロマトグラフィー（１：３、ヘキサン（ｈｅｘａｎｅｓ）／酢酸エチル、０．５％Ｅｔ３Ｎ）は、透明な油として表題化合物９（０．９４６ｇ、４６％）をもたらした。
【０１２２】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−Ｄ６）δ  ７．４３（ｓ，１Ｈ）、７．２３（ｍ，２Ｈ）、５．３８（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．０，７．７）、４．７５（ｓ，２Ｈ）、２．７９（ｍ，２Ｈ）、１．４３（ｓ，１８Ｈ）、１．３６（ｓ，９Ｈ）、０．９６（ｓ，９Ｈ）、０．９２（ｓ，９Ｈ）、０．０７（ｍ，６Ｈ）；ＥＳ／ＭＳ、Ｃ３２Ｈ６１ＮＯ８ＰＳｉの計算値：６４６．３９、実測値  ｍ／ｚ＝６４６．５（Ｍ＋Ｈ）。
【実施例１６】
【０１２３】
炭酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル２−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−１−［４−（ジ−ｔｅｒｔ−ブトキシ−ホスホリルオキシ）−３−ヒドロキシメチル−フェニル］−エチルエステル
【０１２４】
【化２１】
2010513276.tif 000027
【０１２５】
室温の無水ＴＨＦ（１４ｍＬ）中の化合物９（０．９ｇ、１．４ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、ＴＢＡＦのＴＨＦ（１．４ｍＬ、１．４ｍｍｏｌ）中１．０Ｍ溶液を添加した。得られた懸濁液を１時間攪拌し、次いで、飽和ＮａＨＣＯ３（２０ｍＬ）でクエンチし、水層を酢酸エチル（３×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮して、明るい黄色の油として粗製アルコール（１．０１ｇ）を得た。クロマトグラフィー（１：３、ヘキサン（ｈｅｘａｎｅｓ）／酢酸エチル、０．５％Ｅｔ３Ｎ）は、透明な油として純粋な表題化合物（０．６１ｇ、８２％）をもたらした。
【０１２６】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−Ｄ６）δ  ７．４５（ｓ，１Ｈ）、７．２１（ｍ，２Ｈ）、５．４０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．８，８．０）、５．２２（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝５．６）、４．５６（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝５．５）、２．７９（ｄｄｄ，２Ｈ，Ｊ＝６．５，１２．３，１７．１）、１．４３（ｍ，１８Ｈ）、１．３７（ｓ，９Ｈ）、０．９８（ｓ，９Ｈ）；ＥＳ／ＭＳ、Ｃ２６Ｈ４７ＮＯ８Ｐの計算値：５３２．３０、実測値  ｍ／ｚ＝５３２．４（Ｍ＋Ｈ）。
【実施例１７】
【０１２７】
メタンスルホン酸５−［２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−ｔｅｒｔ−ブチル−アミノ）−１−ヒドロキシ−エチル］−２−（ジ−ｔｅｒｔ−ブトキシ−ホスホリルオキシ）−ベンジルエステル
【０１２８】
【化２２】
2010513276.tif 000028
【０１２９】
０℃のＣＨ２Ｃｌ２（１２ｍＬ）中の実施例１６に記載された化合物（０．６ｇ、１．１３ｍｍｏｌ）およびＰＭＰ（８１７μＬ、４．５２ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、メタンスルホニルクロライド（１０５μＬ、１．３６ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（０．５ｍＬ）中溶液を滴下で添加した。反応混合物を３０分間攪拌し、次いで飽和ＮａＨＣＯ３（２０ｍＬ）でクエンチした。有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮して、明るい黄色の油として粗製メシレート（０．９８ｇ）を得た。クロマトグラフィー（１：３、ヘキサン（ｈｅｘａｎｅｓ）／酢酸エチル、０．５％Ｅｔ３Ｎ）は、透明な油として表題のメシレート１０（０．５６ｇ、７６％）をもたらした。ＥＳ／ＭＳ、Ｃ２７Ｈ４９ＮＯ１０ＰＳの計算値：６１０．２８、実測値  ｍ／ｚ＝６１０．４（Ｍ＋Ｈ）。
【０１３０】
実施例１８−２５は、ラセミのアルブテロール（サルブタモール）のホスホノオキシ−メチレン誘導体の合成を例示する。
【実施例１８】
【０１３１】
リン酸４−ブロモ−２−ホルミル−フェノキシメチルエステルジ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【０１３２】
【化２３】
2010513276.tif 000029
【０１３３】
表題化合物１１は、出発材料として５−ブロモサリチルアルデヒド（５−Ｂｒｏｍｏｓａｌｉｃａｌｄｅｈｙｄｅ）を用いて、実施例７に記載されたのと同様に合成することができる。
【実施例１９】
【０１３４】
リン酸４−ブロモ−２−（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシメチル）−フェノキシメチルエステルジ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【０１３５】
【化２４】
2010513276.tif 000030
【０１３６】
表題化合物１２は、出発材料としてアルデヒド１１を用いて、実施例１１に記載されたのと同様に合成することができる。
【実施例２０】
【０１３７】
リン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル２−（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシメチル）−４−ビニル−フェノキシメチルエステル
【０１３８】
【化２５】
2010513276.tif 000031
【０１３９】
表題化合物は、出発材料としてブロモ化合物１２を用いて、実施例１２に記載されたＳｕｚｕｋｉビニル化によって合成することができる。
【実施例２１】
【０１４０】
リン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル２−（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシメチル）−４−オキシラニル−フェノキシメチルエステル
【０１４１】
【化２６】
2010513276.tif 000032
【０１４２】
表題化合物は、出発材料として実施例２０に記載された化合物を用いて、実施例１３に記載されたエポキシ化を介して合成することができる。
【実施例２２】
【０１４３】
リン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル４−（２−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−１−ヒドロキシ−エチル）−２−（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシメチル）−フェノキシメチルエステル
【０１４４】
【化２７】
2010513276.tif 000033
【０１４５】
基質として実施例２１からの化合物を用いて上記に示した化合物を合成するために、ｔ−ブチルアミン（実施例１４に記載された通りの）によるアミノリシスを使用することができる。
【実施例２３】
【０１４６】
炭酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル２−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−１−［３−（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシメチル）−４−（ジ−ｔｅｒｔ−ブトキシ−ホスホリルオキシメトキシ）−フェニル］−エチルエステル
【０１４７】
【化２８】
2010513276.tif 000034
【０１４８】
実施例２２に記載されたアミノアルコールのＯ−アシル化（保護）は、実施例１５に記載された手順により実施することができる。
【実施例２４】
【０１４９】
炭酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル２−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−１−［４−（ジ−ｔｅｒｔ−ブトキシ−ホスホリルオキシメトキシ）−３−ヒドロキシメチル−フェニル］−エチルエステル
【０１５０】
【化２９】
2010513276.tif 000035
【０１５１】
先の実施例に記載された化合物からのＴＢＳの除去は、実施例１６に記載されたのと同様に達成することができる。
【実施例２５】
【０１５２】
メタンスルホン酸５−（１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルオキシ−２−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−エチル）−２（ジ−ｔｅｒｔ−ブトキシ−ホスホリルオキシメトキシ）−ベンジルエステル
【０１５３】
【化３０】
2010513276.tif 000036
【０１５４】
表題化合物１３は、基質として実施例２４からのアミノアルコールを用いて、実施例１７に記載された手順により合成することができる。
【０１５５】
実施例２６−２８は、光学的に純粋なβ−アゴニスト誘導体を調製するために使用することができる不斉中間体の合成を例示する（スキームＶ参照）。
【実施例２６】
【０１５６】
リン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル２−（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシメチル）−４−（１，２Ｓ−ジヒドロキシ−エチル）−フェニルエステル
【０１５７】
【化３１】
2010513276.tif 000037
【０１５８】
０℃のｔ−ＢｕＯＨ（１ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１ｍＬ）中の７（１００ｍｇ、０．２１９ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、固体ＡＤ−ｍｉｘβ試薬（３００ｍｇ）を添加した。１９時間攪拌後、固体Ｎａ２ＳＯ３（３００ｍｇ）を添加してクエンチし、得られた反応混合物を室温まで加温させておき、さらに１時間攪拌した。水で希釈後、反応混合物をＣＨ２Ｃｌ２（３×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮して、淡黄色の油として粗製ジオール（１２３ｍｇ）を得た。クロマトグラフィー（１：３、ヘキサン（ｈｅｘａｎｅｓ）／酢酸エチル、０．５％Ｅｔ３Ｎ）は、透明な油として表題化合物１４（９３ｍｇ、８７％）をもたらした。
【０１５９】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−Ｄ６）δ  ７．４６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．４Ｈｚ）、７．１８（ｍ，２Ｈ）、５．２０（ｂｒｄ，２Ｈ，Ｊ＝４８．０Ｈｚ）、４．５３（ｍ，３Ｈ）、３．４１（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝６．７Ｈｚ）、１．４３（ｓ，１８Ｈ）、０．８３（ｓ，６Ｈ）、−０．０６（ｓ，６Ｈ）；ＥＳ／ＭＳ  Ｃ２３Ｈ４３ＮａＯ７ＰＳｉの計算値：５１３．２４、実測値  ｍ／ｚ＝５１３．３（Ｍ＋Ｎａ）。
【実施例２７】
【０１６０】
トルエン−４−スルホン酸２−［３−（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシメチル）−４−（ジ−ｔｅｒｔ−ブトキシ−ホスホリルオキシ）−フェニル］−２Ｓ−ヒドロキシ−エチルエステル
【０１６１】
【化３２】
2010513276.tif 000038
【０１６２】
ＣＨ２Ｃｌ２（１３ｍＬ）中の化合物１４（６６０ｍｇ、１．３５ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、ジブチルスズオキサイド（０．７ｍｇ、０．００２７ｍｍｏｌ）、Ｅｔ３Ｎ（１８８μＬ、１．３５ｍｍｏｌ）、およびＴｓＣｌ（２５７ｍｇ、１．３５ｍｍｏｌ）を前述の順序で室温で添加した。反応混合物を９０分間攪拌し、次いで、Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ）でクエンチした。水層をＣＨ２Ｃｌ２（３×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮して、不透明な半固体として粗製モノトシレート（１．１９ｇ）を得た。クロマトグラフィー（１：１、ヘキサン（ｈｅｘａｎｅｓ）／酢酸エチル、０．５％Ｅｔ３Ｎ）は、透明な油として純粋な１５（７００ｍｇ、８１％）をもたらした。
【０１６３】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−Ｄ６）δ  ７．６７（ｍ，２Ｈ）、７．４３（ｍ，２Ｈ）、７．３６（ｓ，１Ｈ）、７．１８（ｍ，２Ｈ）、５．８０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．６Ｈｚ）、４．７６（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．３，１０．３Ｈｚ）、４．７１（ｓ，２Ｈ）、３．９５（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝６．１Ｈｚ）、２．４０（ｓ，３Ｈ）、１．４３（ｓ，１８Ｈ）、０．８９（ｍ，９Ｈ）、０．０５（ｄ，６Ｈ，Ｊ＝０．６Ｈｚ）；ＥＳ／ＭＳ  Ｃ３０Ｈ４９ＮａＯ９ＰＳＳｉの計算値：６６７．２５、実測値  ｍ／ｚ＝６６７．２（Ｍ＋Ｎａ）。
【実施例２８】
【０１６４】
リン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル２−（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシメチル）−（Ｓ）−４−オキシラニル−フェニルエステル
【０１６５】
【化３３】
2010513276.tif 000039
【０１６６】
０℃のＴＨＦ（７ｍＬ）中の１５（４２０ｍｇ、０．６５１ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、ＮａＨＭＤＳのＴＨＦ（１．３ｍＬ、１．３０ｍｍｏｌ）中１．０Ｍ溶液を滴下で添加した。得られた混合物をさらに１０分間攪拌し、飽和ＮａＨＣＯ３（１５ｍＬ）でクエンチし、酢酸エチル（３×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮して、淡黄色の半固体として粗製エポキシド（２９３ｍｇ）を得た。クロマトグラフィー（３：１、ヘキサン（ｈｅｘａｎｅｓ）／酢酸エチル、０．５％Ｅｔ３Ｎ）は、透明な油として表題化合物１６（２５０ｍｇ、８１％）をもたらした。
【０１６７】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−Ｄ６）δ  ７．３６（ｓ，１Ｈ）、７．２３（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１．２Ｈｚ）、４．７４（ｓ，２Ｈ）、３．９３（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．６，４．１Ｈｚ）、３．１１（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．１，５．３Ｈｚ）、２．７８（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．６，５．３Ｈｚ）、１．４１（ｄ，１８Ｈ，Ｊ＝１５．４Ｈｚ）、０．９０（ｍ，９Ｈ）、０．０６（ｍ，６Ｈ）。
【０１６８】
実施例２９−９２は、スキームＶＩにより調製されたＡＩＳＴＭおよびβ−アゴニストの相互プロドラッグを例示する。
【実施例２９】
【０１６９】
（２−｛［５−（２，４−ジフルオロ−フェノキシ）−１−イソブチル−１Ｈ−インダゾール−６−カルボニル］−アミノ｝−エチル）−（５−｛１−ヒドロキシ−２−［６−（４−フェニル−ブトキシ）−ヘキシルアミノ］−エチル｝−２−ホスホノオキシ−ベンジル）−ジメチル−アンモニウム
【０１７０】
【化３４】
2010513276.tif 000040
【０１７１】
５−（２，４−ジフルオロ−フェノキシ）−１−イソブチル−１Ｈ−インダゾール−６−カルボン酸（２−ジメチルアミノ−エチル）−アミド（ＡＲＲＹ−７９７；Ｍｕｎｓｏｎら、２００４）は、以下の手順通りに２ステップを介して表題の相互プロドラッグに変換された。
【０１７２】
四級化ステップ。室温の無水ＣＨ３ＣＮ（４ｍＬ）中の５−（２，４−ジフルオロ−フェノキシ）−１−イソブチル−１Ｈ−インダゾール−６−カルボン酸（２−ジメチルアミノ−エチル）−アミド（８１ｍｇ、０．１９５ｍｍｏｌ）およびメシレート３（２３０ｍｇ、０．２９２ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、固体ＮａＩ（８ｍｇ、０．０５８ｍｍｏｌ）を添加した。４日間攪拌後、得られた懸濁液を濃縮して、粗製四級塩を得た。クロマトグラフィー（９：１、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ）は、完全に保護された四級アンモニウム塩、およびモノ−ｔ−ブチル−ホスフェートの部分をもたらし、両者を脱保護ステップのために組み合わせた。
【０１７３】
ＥＳ／ＭＳ、Ｃ２２Ｈ２７Ｆ２Ｎ４Ｏ２の計算値：１１０６．６２、実測値  ｍ／ｚ＝１１０６．７（Ｍ＋）。
【０１７４】
脱保護および最終精製ステップ。室温の無水ＣＨ２Ｃｌ２（３ｍＬ）中の保護された四級アンモニウム塩（１００ｍｇ）の攪拌溶液に、ＨＣｌのジオキサン（１．５ｍＬ）中４Ｎ溶液を添加した。１時間攪拌後、エーテル（３０ｍＬ）を添加し、この混合物をさらに１時間攪拌し、次いでろ過した。フィルターケークをエーテル（２×２０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させて、白色固体として表題の相互プロドラッグ（５２ｍｇ）を十分な高純度で得た。必要に応じて、この化合物は、逆相クロマトグラフィーによってさらに精製し得る。
【０１７５】
３１Ｐ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  −５．４ｐｐｍ；ＥＳ／ＭＳ、Ｃ４７Ｈ６３Ｆ２Ｎ５Ｏ８Ｐ＋の計算値：８９４．４４、実測値  ｍ／ｚ＝８９４．５（Ｍ＋Ｈ）。
【実施例３０】
【０１７６】
［５−（２−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−１−ヒドロキシ−エチル）−２−ホスホノオキシ−ベンジル］−（２−｛［５−（２，４−ジフルオロ−フェノキシ）−１−イソブチル−１Ｈ−インダゾール−６−カルボニル］−アミノ｝−エチル）−ジメチル−アンモニウム
【０１７７】
【化３５】
2010513276.tif 000041
【０１７８】
表題化合物は、出発材料として５−（２，４−ジフルオロ−フェノキシ）−１−イソブチル−１Ｈ−インダゾール−６−カルボン酸（２−ジメチルアミノ−エチル）−アミドおよびメシレート１０を用いて、実施例２９に記載された２ステップの手順によって調製することができる。
【実施例３１】
【０１７９】
（２−｛［５−（２，４−ジフルオロ−フェノキシ）−１−イソブチル−１Ｈ−インダゾール−６−カルボニル］−アミノ｝−エチル）−（５−｛１−ヒドロキシ−２−［６−（４−フェニル−ブトキシ）−ヘキシルアミノ］−エチル｝−２−ホスホノオキシメトキシ−ベンジル）−ジメチル−アンモニウム
【０１８０】
【化３６】
2010513276.tif 000042
【０１８１】
表題化合物は、出発材料として５−（２，４−ジフルオロ−フェノキシ）−１−イソブチル−１Ｈ−インダゾール−６−カルボン酸（２−ジメチルアミノ−エチル）−アミドおよびメシレート５を用いて、実施例２９に記載された２ステップの手順によって調製することができる。ただし、０℃で３０分間実施した最終脱保護に対して、ＴＦＡ／ＤＣＭ（１：１）混合物を使用する。
【実施例３２】
【０１８２】
［５−（２−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−１−ヒドロキシ−エチル）−２−ホスホノオキシメトキシ−ベンジル］−（２−｛［５−（２，４−ジフルオロ−フェノキシ）−１−イソブチル−１Ｈ−インダゾール−６−カルボニル］−アミノ｝−エチル）−ジメチル−アンモニウム
【０１８３】
【化３７】
2010513276.tif 000043
【０１８４】
表題化合物は、出発材料として５−（２，４−ジフルオロ−フェノキシ）−１−イソブチル−１Ｈ−インダゾール−６−カルボン酸（２−ジメチルアミノ−エチル）−アミドおよびメシレート１３を用いて、実施例２９に記載された２ステップの手順によって調製することができる。ただし、０℃で３０分間実施した最終脱保護に対して、ＴＦＡ／ＤＣＭ（１：１）混合物を使用する。
【実施例３３】
【０１８５】
３，５−ジクロロ−４−（３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシ−ベンゾイルアミノ）−１−（４−｛１−ヒドロキシ−２−［６−（４−フェニル−ブトキシ）−ヘキシルアミノ］−エチル｝−２−ホスホノオキシ−ベンジル）−ピリジニウム
【０１８６】
【化３８】
2010513276.tif 000044
【０１８７】
表題化合物は、出発材料として３−シクロプロピルメトキシ−Ｎ−（３，５−ジクロロ−ピリジン−４−イル）−４−ジフルオロメトキシ−ベンズアミド（ロフルミラスト）およびメシレート３を用いて、実施例２９に記載された２ステップの手順によって調製することができる。
【実施例３４】
【０１８８】
１−［４−（２−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−１−ヒドロキシ−エチル）−２−ホスホノオキシ−ベンジル］−３，５−ジクロロ−４−（３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシ−ベンゾイルアミノ）−ピリジニウム
【０１８９】
【化３９】
2010513276.tif 000045
【０１９０】
出発材料として３−シクロプロピルメトキシ−Ｎ−（３，５−ジクロロ−ピリジン−４−イル）−４−ジフルオロメトキシ−ベンズアミド（ロフルミラスト）およびメシレート１０を用いて、実施例２９に記載された２ステップの手順によって表題化合物を調製することができる。
【実施例３５】
【０１９１】
３，５−ジクロロ−４−（３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシ−ベンゾイルアミノ）−１−（４−｛１−ヒドロキシ−２−［６−（４−フェニル−ブトキシ）−ヘキシルアミノ］−エチル｝−２−ホスホノオキシメトキシ−ベンジル）−ピリジニウム
【０１９２】
【化４０】
2010513276.tif 000046
【０１９３】
表題化合物は、出発材料として３−シクロプロピルメトキシ−Ｎ−（３，５−ジクロロ−ピリジン−４−イル）−４−ジフルオロメトキシ−ベンズアミド（ロフルミラスト）およびメシレート５を用いて、実施例２９に記載された２ステップの手順によって調製することができる。ただし、０℃で３０分間実施した最終脱保護に対して、ＴＦＡ／ＤＣＭ（１：１）混合物を使用する。
【実施例３６】
【０１９４】
１−［４−（２−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−１−ヒドロキシ−エチル）−２−ホスホノオキシメトキシ−ベンジル］−３，５−ジクロロ−４−（３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシ−ベンゾイルアミノ）−ピリジニウム
【０１９５】
【化４１】
2010513276.tif 000047
【０１９６】
表題化合物は、出発材料として３−シクロプロピルメトキシ−Ｎ−（３，５−ジクロロ−ピリジン−４−イル）−４−ジフルオロメトキシ−ベンズアミド（ロフルミラスト）およびメシレート１３を用いて、実施例２９に記載された２ステップの手順によって調製することができる。ただし、０℃で３０分間実施した最終脱保護に対して、ＴＦＡ／ＤＣＭ（１：１）混合物を使用する。
【実施例３７】
【０１９７】
４−［２−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシ−フェニル）−２−フェニル−エチル］−１−（４−｛１−ヒドロキシ−２−［６−（４−フェニル−ブトキシ）−ヘキシルアミノ］−エチル｝−２−ホスホノオキシ−ベンジル）−ピリジニウム
【０１９８】
【化４２】
2010513276.tif 000048
【０１９９】
四級化ステップ。４−［２−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシ−フェニル）−（Ｒ）−２−フェニル−エチル］−ピリジン（ＣＤＰ−８４０；Ａｌｅｘａｎｄｅｒら、２００２）（５７ｍｇ、０．１５４ｍｍｏｌ）およびメシレート３（１８１ｍｇ、０．２３０ｍｍｏｌ）の無水アセトニトリル（２ｍＬ）中溶液に、ヨウ化ナトリウム（２３ｍｇ、０．１５４ｍｍｏｌ）を添加し、室温で２０時間攪拌を継続した。この時点で、ＬＣＭＳ分析は、出発ピリジン−化合物の消費を示した。反応混合物をろ過し、ろ液を濃縮し、残留物をジクロロメタン（１０ｍＬ）中に再溶解し、脱イオン水、ブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮して、黄色の油として粗生成物（２１１ｍｇ）を得た。シリカ−ゲルクロマトグラフィー（０−５０％勾配ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ）は、完全に保護されたピリジニウム塩（１９１ｍｇ、０．１７９ｍｍｏｌ）をもたらした。
【０２００】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−Ｄ６）δ  ｐｐｍ  ９．０３（ｍ，１Ｈ）、８．７９（ｍ，１Ｈ）、８．００（ｍ，２Ｈ）、７．２３（ｄｄ，Ｊ＝２０．０６，１２．５５Ｈｚ，７Ｈ）、６．８０（ｓ，２Ｈ）、５．６８（ｍ，２Ｈ）、５．３７（ｍ，１Ｈ）、４．７１（ｍ，２Ｈ）、４．５０（ｍ，１Ｈ）、３．６５（ｓ，３Ｈ）、３．０９（ｍ，２Ｈ）、２．６８（ｍ，３Ｈ）、１．８２（ｍ，１Ｈ）、１．２６（ｄｄｄｄ，Ｊ＝６１．３０，６０．８２，３６．６８，３０．４４Ｈｚ，１９Ｈ）；３１Ｐ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ６７．９２（ｓ，１Ｐ）；ＥＳ／ＭＳ、Ｃ６３Ｈ８８Ｎ２Ｏ１０Ｐの計算値：１０６３．６２  ｍ／ｚ（Ｍ）＋；（実測値）、１３６３．７  ｍ／ｚ。
【０２０１】
脱保護ステップ。四級化ステップからの精製された物質（１８９ｍｇ、０．１７８ｍｍｏｌ）を無水ジクロロメタン（３ｍＬ）に溶解し、続いて、室温で攪拌しながらＨＣｌ溶液（２ｍＬ、１，４−ジオキサン中４Ｎ）を滴下で添加した。１時間後、反応を濃縮し、ジエチルエーテルですりつぶし、続いて１時間攪拌し、ろ過した。この粗製物質（１４３ｍｇ）を逆相クロマトグラフィー（１％ＡｃＯＨを有する勾配Ｈ２Ｏ／ＡＣＮ、Ｔｅｌｅｄｙｎｅ  Ｉｓｃｏ  ４．３グラムＣ−１８カラム）によって精製して、表題の相互プロドラッグ（６４ｍｇ、０．０７５ｍｍｏｌ）を得た。
【０２０２】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ９．１４−９．０１（ｍ，１Ｈ）、８．０１−７．８２（ｍ，１Ｈ）、７．４５−７．０５（ｍ，６Ｈ）、６．９７−６．８５（ｍ，１Ｈ）、６．８０（ｓ，１Ｈ）、５．７５−５．５９（ｍ，１Ｈ）、４．８３−４．６６（ｍ，１Ｈ）、４．６６−４．４１（ｍ，２Ｈ）、３．６５（ｓ，３Ｈ）、１．９０（ｓ，１Ｈ）、１．８５−１．７３（ｍ，１Ｈ）、１．７３−１．３５（ｍ，６Ｈ）、１．２７（ｓ，２Ｈ）；３１Ｐ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−Ｄ６）δ  ｐｐｍ  −３．６３（ｓ，１Ｐ）；ＥＳ／ＭＳ、Ｃ５０Ｈ６４Ｎ２Ｏ８Ｐの計算値：８５１．４４  ｍ／ｚ（Ｍ）＋；（実測値）、８５１．５  ｍ／ｚ。元素分析；計算値：Ｃ，６３．２７；Ｈ，７．５７；Ｎ，２．７３。実測値：Ｃ，６２．５８，Ｈ，７．４２，Ｎ，３．１８。
【実施例３８】
【０２０３】
１−［４−（２−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−１−ヒドロキシ−エチル）−２−ホスホノオキシ−ベンジル］−４−［２−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシ−フェニル）−２−フェニル−エチル］−ピリジニウム
【０２０４】
【化４３】
2010513276.tif 000049
【０２０５】
表題化合物は、出発材料として４−［２−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシ−フェニル）−（Ｒ）−２−フェニル−エチル］−ピリジンおよびメシレート１０を用いて、実施例３７に記載された２ステップの手順よって調製することができる。
【実施例３９】
【０２０６】
４−［２−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシ−フェニル）−２−フェニル−エチル］−１−（４−｛１−ヒドロキシ−２−［６−（４−フェニル−ブトキシ）−ヘキシルアミノ］−エチル｝−２−ホスホノオキシメトキシ−ベンジル）−ピリジニウム
【０２０７】
【化４４】
2010513276.tif 000050
【０２０８】
表題化合物は、出発材料として４−［２−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシ−フェニル）−（Ｒ）−２−フェニル−エチル］−ピリジンおよびメシレート５を用いて、実施例３７に記載された２ステップの手順よって調製することができる。ただし、０℃で３０分間実施した最終脱保護に対して、ＴＦＡ／ＤＣＭ（１：１）混合物を使用する。
【実施例４０】
【０２０９】
１−［４−（２−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−１−ヒドロキシ−エチル）−２−ホスホノオキシメトキシ−ベンジル］−４−［２−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシ−フェニル）−２−フェニル−エチル］−ピリジニウム
【０２１０】
【化４５】
2010513276.tif 000051
【０２１１】
表題化合物は、出発材料として４−［２−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシ−フェニル）−（Ｒ）−２−フェニル−エチル］−ピリジンおよびメシレート１３を用いて、実施例３７に記載された２ステップの手順よって調製することができる。ただし、０℃で３０分間実施した最終脱保護に対して、ＴＦＡ／ＤＣＭ（１：１）混合物を使用する。
【実施例４１】
【０２１２】
３，５−ジクロロ−４−｛２−［１−（４−フルオロ−ベンジル）−５−ヒドロキシ−１Ｈ−インドール−３−イル］−２−オキソ−アセチルアミノ｝−１−（４−｛１−ヒドロキシ−２−［６−（４−フェニル−ブトキシ）−ヘキシルアミノ］−エチル｝−２−ホスホノオキシ−ベンジル）−ピリジニウム
【０２１３】
【化４６】
2010513276.tif 000052
【０２１４】
表題化合物は、出発材料としてＮ−（３，５−ジクロロ−ピリジン−４−イル）−２−［１−（４−フルオロ−ベンジル）−５−ヒドロキシ−１Ｈ−インドール−３−イル］−２−オキソ−アセトアミド（ＡＷＤ  １２−２８１）およびメシレート３を用いて、実施例３７に記載された２ステップの手順よって調製することができる。
【実施例４２】
【０２１５】
１−［４−（２−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−１−ヒドロキシ−エチル）−２−ホスホノオキシ−ベンジル］−３，５−ジクロロ−４−｛２−［１−（４−フルオロ−ベンジル）−５−ヒドロキシ−１Ｈ−インドール−３−イル］−２−オキソ−アセチルアミノ｝−ピリジニウム
【０２１６】
【化４７】
2010513276.tif 000053
【０２１７】
表題化合物は、出発材料としてＮ−（３，５−ジクロロ−ピリジン−４−イル）−２−［１−（４−フルオロ−ベンジル）−５−ヒドロキシ−１Ｈ−インドール−３−イル］−２−オキソ−アセトアミド（ＡＷＤ  １２−２８１）およびメシレート１０を用いて、実施例３７に記載された２ステップの手順よって調製することができる。
【実施例４３】
【０２１８】
３，５−ジクロロ−４−｛２−［１−（４−フルオロ−ベンジル）−５−ヒドロキシ−１Ｈ−インドール−３−イル］−２−オキソ−アセチルアミノ｝−１−（４−｛１−ヒドロキシ−２−［６−（４−フェニル−ブトキシ）−ヘキシルアミノ］−エチル｝−２−ホスホノオキシメトキシ−ベンジル）−ピリジニウム
【０２１９】
【化４８】
2010513276.tif 000054
【０２２０】
表題化合物は、出発材料としてＮ−（３，５−ジクロロ−ピリジン−４−イル）−２−［１−（４−フルオロ−ベンジル）−５−ヒドロキシ−１Ｈ−インドール−３−イル］−２−オキソ−アセトアミド（ＡＷＤ  １２−２８１）およびメシレート５を用いて、実施例３７に記載された２ステップの手順よって調製することができる。ただし、０℃で３０分間実施した最終脱保護に対して、ＴＦＡ／ＤＣＭ（１：１）混合物を使用する。
【実施例４４】
【０２２１】
１−［４−（２−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−１−ヒドロキシ−エチル）−２−ホスホノオキシメトキシ−ベンジル］−３，５−ジクロロ−４−｛２−［１−（４−フルオロ−ベンジル）−５−ヒドロキシ−１Ｈ−インドール−３−イル］−２−オキソ−アセチルアミノ｝−ピリジニウム
【０２２２】
【化４９】
2010513276.tif 000055
【０２２３】
表題化合物は、出発材料としてＮ−（３，５−ジクロロ−ピリジン−４−イル）−２−［１−（４−フルオロ−ベンジル）−５−ヒドロキシ−１Ｈ−インドール−３−イル］−２−オキソ−アセトアミド（ＡＷＤ  １２−２８１）およびメシレート１３を用いて、実施例３７に記載された２ステップの手順よって調製することができる。ただし、０℃で３０分間実施した最終脱保護に対して、ＴＦＡ／ＤＣＭ（１：１）混合物を使用する。
【実施例４５】
【０２２４】
５−（３，５−ジクロロ−１−オキシ−ピリジン−４−イルカルバモイル）−１−（４−｛１−ヒドロキシ−２−［６−（４−フェニル−ブトキシ）−ヘキシルアミノ］−エチル｝−２−ホスホノオキシ−ベンジル）−８−メトキシ−２−トリフルオロメチル−キノリニウム
【０２２５】
【化５０】
2010513276.tif 000056
【０２２６】
表題化合物は、出発材料として８−メトキシ−２−トリフルオロメチル−キノリン−５−カルボン酸（３，５−ジクロロ−１−オキシ−ピリジン−４−イル）−アミド（Ｓｃｈ  ３５１５９１）およびメシレート３を用いて、実施例３７に記載された２ステップの手順よって調製することができる。
【実施例４６】
【０２２７】
１−［４−（２−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−１−ヒドロキシ−エチル）−２−ホスホノオキシ−ベンジル］−５−（３，５−ジクロロ−１−オキシ−ピリジン−４−イルカルバモイル）−８−メトキシ−２−トリフルオロメチル−キノリニウム
【０２２８】
【化５１】
2010513276.tif 000057
【０２２９】
表題化合物は、出発材料として８−メトキシ−２−トリフルオロメチル−キノリン−５−カルボン酸（３，５−ジクロロ−１−オキシ−ピリジン−４−イル）−アミド（Ｓｃｈ  ３５１５９１）およびメシレート１０を用いて、実施例３７に記載された２ステップの手順よって調製することができる。
【実施例４７】
【０２３０】
５−（３，５−ジクロロ−１−オキシ−ピリジン−４−イルカルバモイル）−１−（４−｛１−ヒドロキシ−２−［６−（４−フェニル−ブトキシ）−ヘキシルアミノ］−エチル｝−２−ホスホノオキシメトキシ−ベンジル）−８−メトキシ−２−トリフルオロメチル−キノリニウム
【０２３１】
【化５２】
2010513276.tif 000058
【０２３２】
表題化合物は、出発材料として８−メトキシ−２−トリフルオロメチル−キノリン−５−カルボン酸（３，５−ジクロロ−１−オキシ−ピリジン−４−イル）−アミド（Ｓｃｈ  ３５１５９１）およびメシレート５を用いて、実施例３７に記載された２ステップの手順よって調製することができる。ただし、０℃で３０分間実施した最終脱保護に対して、ＴＦＡ／ＤＣＭ（１：１）混合物を使用する。
【実施例４８】
【０２３３】
１−［４−（２−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−１−ヒドロキシ−エチル）−２−ホスホノオキシメトキシ−ベンジル］−５−（３，５−ジクロロ−１−オキシ−ピリジン−４−イルカルバモイル）−８−メトキシ−２−トリフルオロメチル−キノリニウム
【０２３４】
【化５３】
2010513276.tif 000059
【０２３５】
表題化合物は、出発材料として８−メトキシ−２−トリフルオロメチル−キノリン−５−カルボン酸（３，５−ジクロロ−１−オキシ−ピリジン−４−イル）−アミド（Ｓｃｈ  ３５１５９１）およびメシレート５を用いて、実施例３７に記載された２ステップの手順よって調製することができる。ただし、０℃で３０分間実施した最終脱保護に対して、ＴＦＡ／ＤＣＭ（１：１）混合物を使用する。
【実施例４９】
【０２３６】
４−［５−（４−フルオロ−フェニル）−２−（４−メタンスルフィニル−フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−１−（４−｛１−ヒドロキシ−２−［６−（４−フェニル−ブトキシ）−ヘキシルアミノ）−エチル｝−２−ホスホノオキシ−ベンジル）−ピリジニウム
【０２３７】
【化５４】
2010513276.tif 000060
【０２３８】
４−［５−（４−フルオロ−フェニル）−２−（４−メタンスルフィニル−フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−ピリジン（ＳＢ−２０３５８０）は、ジ−ｔ−ブチル−ジカーボネートで保護されて、Ｎ−イミダゾールが保護された５−（４−フルオロ−フェニル）−２−（４−メタンスルフィニル−フェニル）−４−ピリジン−４−イル−イミダゾール−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルを得ことができる。この誘導体は、メシレート３と一緒になって、実施例３７に記載された２ステップの手順によって表題の相互プロドラッグの合成に使用することができる。
【実施例５０】
【０２３９】
１−［４−（２−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−１−ヒドロキシ−エチル）−２−ホスホノオキシ−ベンジル］−４−［５−（４−フルオロ−フェニル）−２−（４−メタンスルフィニル−フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−ピリジニウム
【０２４０】
【化５５】
2010513276.tif 000061
【０２４１】
表題化合物は、５−（４−フルオロ−フェニル）−２−（４−メタンスルフィニル−フェニル）−４−ピリジン−４−イル−イミダゾール−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルおよびメシレート１０から、実施例３７に記載された２ステップの手順を適用して合成することができる。
【実施例５１】
【０２４２】
４−［５−（４−フルオロ−フェニル）−２−（４−メタンスルフィニル−フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−１−（４−｛１−ヒドロキシ−２−［６−（４−フェニル−ブトキシ）−ヘキシルアミノ］−エチル｝−２−ホスホノオキシメトキシ−ベンジル）−ピリジニウム
【０２４３】
【化５６】
2010513276.tif 000062
【０２４４】
表題化合物は、５−（４−フルオロ−フェニル）−２−（４−メタンスルフィニル−フェニル）−４−ピリジン−４−イル−イミダゾール−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルおよびメシレート５から、実施例３７に記載された２ステップの手順を適用して合成することができる。ただし、０℃で３０分間実施した最終脱保護に対して、ＴＦＡ／ＤＣＭ（１：１）混合物を使用する。
【実施例５２】
【０２４５】
１−［４−（２−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−１−ヒドロキシ−エチル）−２−ホスホノオキシメトキシ−ベンジル］−４−［５−（４−フルオロ−フェニル）−２−（４−メタンスルフィニル−フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−ピリジニウム
【０２４６】
【化５７】
2010513276.tif 000063
【０２４７】
表題化合物は、５−（４−フルオロ−フェニル）−２−（４−メタンスルフィニル−フェニル）−４−ピリジン−４−イル−イミダゾール−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルおよびメシレート１３から、実施例３７に記載された２ステップの手順を適用して合成することができる。ただし、０℃で３０分間実施した最終脱保護に対して、ＴＦＡ／ＤＣＭ（１：１）混合物を使用する。
【実施例５３】
【０２４８】
４−［５−（４−フルオロ−フェニル）−２−（４−ヒドロキシ−ブタ−１−イニル）−３−（３−フェニル−プロピル）−３Ｈ−イミダゾール−４−イル］−１−（４−｛１−ヒドロキシ−２−［６−（４−フェニル−ブトキシ）−ヘキシルアミノ］−エチル｝−２−ホスホノオキシ−ベンジル）ピリジニウム
【０２４９】
【化５８】
2010513276.tif 000064
【０２５０】
表題化合物は、４−［４−（４−フルオロ−フェニル）−１−（３−フェニル−プロピル）−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル］−ブタ−３−イン−１−オール（ＲＷＪ−６７６５７）およびメシレート３から、実施例３７に記載された２ステップの手順を適用して合成することができる。
【実施例５４】
【０２５１】
１−［４−（２−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−１−ヒドロキシ−エチル）−２−ホスホノオキシ−ベンジル］−４−［５−（４−フルオロ−フェニル）−２−（４−ヒドロキシ−ブタ−１−イニル）−３−（３−フェニル−プロピル）−３Ｈ−イミダゾール−４−イル］−ピリジニウム
【０２５２】
【化５９】
2010513276.tif 000065
【０２５３】
表題化合物は、４−［４−（４−フルオロ−フェニル）−１−（３−フェニル−プロピル）−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル］−ブタ−３−イン−１−オール（ＲＷＪ−６７６５７）およびメシレート１０から、実施例３７に記載された２ステップの手順を適用して合成することができる。
【実施例５５】
【０２５４】
４−［５−（４−フルオロ−フェニル）−２−（４−ヒドロキシ−ブタ−１−イニル）−３−（３−フェニル−プロピル）−３Ｈ−イミダゾール−４−イル］−１−（４−｛１−ヒドロキシ−２−［６−（４−フェニル−ブトキシ）−ヘキシルアミノ］−エチル｝−２−ホスホノオキシメトキシ−ベンジル）−ピリジニウム
【０２５５】
【化６０】
2010513276.tif 000066
【０２５６】
表題化合物は、４−［４−（４−フルオロ−フェニル）−１−（３−フェニル−プロピル）−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル］−ブタ−３−イン−１−オール（ＲＷＪ−６７６５７）およびメシレート５から、実施例３７に記載された２ステップの手順を適用して合成することができる。ただし、０℃で３０分間実施した最終脱保護に対して、ＴＦＡ／ＤＣＭ（１：１）混合物を使用する。
【実施例５６】
【０２５７】
１−［４−（２−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−１−ヒドロキシ−エチル）−２−ホスホノオキシメトキシ−ベンジル］−４−［５−（４−フルオロ−フェニル）−２−（４−ヒドロキシ−ブタ−１−イニル）−３−（３−フェニル−プロピル）−３Ｈ−イミダゾール−４−イル］−ピリジニウム
【０２５８】
【化６１】
2010513276.tif 000067
【０２５９】
表題化合物は、４−［４−（４−フルオロ−フェニル）−１−（３−フェニル−プロピル）−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル］−ブタ−３−イン−１−オール（ＲＷＪ−６７６５７）およびメシレート１３から、実施例３７に記載された２ステップの手順を適用して合成することができる。ただし、０℃で３０分間実施した最終脱保護に対して、ＴＦＡ／ＤＣＭ（１：１）混合物を使用する。
【実施例５７】
【０２６０】
３，５−ジクロロ−４−［（４−ジフルオロメトキシ−８−メタンスルホニルアミノ−ジベンゾフラン−１−カルボニル）−アミノ］−１−（４−｛１−ヒドロキシ−２−［６−（４−フェニル−ブトキシ）−ヘキシルアミノ］−エチル｝−２−ホスホノオキシ−ベンジル）−ピリジニウム
【０２６１】
【化６２】
2010513276.tif 000068
【０２６２】
表題化合物は、４−ジフルオロメトキシ−８−メタンスルホニルアミノ−ジベンゾフラン−１−カルボン酸（３，５−ジクロロ−ピリジン−４−イル）−アミド（オグレミラスト）およびメシレート３から、実施例３７に記載された２ステップの手順を適用して合成することができる。
【実施例５８】
【０２６３】
１−［４−（２−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−１−ヒドロキシ−エチル）−２−ホスホノオキシ−ベンジル］−３，５−ジクロロ−４−［（４−ジフルオロメトキシ−８−メタンスルホニルアミノ−ジベンゾフラン−１−カルボニル）−アミノ］−ピリジニウム
【０２６４】
【化６３】
2010513276.tif 000069
【０２６５】
表題化合物は、４−ジフルオロメトキシ−８−メタンスルホニルアミノ−ジベンゾフラン−１−カルボン酸（３，５−ジクロロ−ピリジン−４−イル）−アミド（オグレミラスト）およびメシレート１０から、実施例３７に記載された２ステップの手順を適用して合成することができる。
【実施例５９】
【０２６６】
３，５−ジクロロ−４−［（４−ジフルオロメトキシ−８−メタンスルホニルアミノ−ジベンゾフラン−１−カルボニル）−アミノ］−１−（４−｛１−ヒドロキシ−２−［６−（４−フェニル−ブトキシ）−ヘキシルアミノ］−エチル｝−２−ホスホノオキシメトキシ−ベンジル）−ピリジニウム
【０２６７】
【化６４】
2010513276.tif 000070
【０２６８】
表題化合物は、４−ジフルオロメトキシ−８−メタンスルホニルアミノ−ジベンゾフラン−１−カルボン酸（３，５−ジクロロ−ピリジン−４−イル）−アミド（オグレミラスト）およびメシレート５から、実施例３７に記載された２ステップの手順を適用して合成することができる。ただし、０℃で３０分間実施した最終脱保護に対して、ＴＦＡ／ＤＣＭ（１：１）混合物を使用する。
【実施例６０】
【０２６９】
１−［４−（２−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−１−ヒドロキシ−エチル）−２−ホスホノオキシメトキシ−ベンジル］−３，５−ジクロロ−４−［（４−ジフルオロメトキシ−８−メタンスルホニルアミノ−ジベンゾフラン−１−カルボニル）−アミノ］−ピリジニウム
【０２７０】
【化６５】
2010513276.tif 000071
【０２７１】
表題化合物は、４−ジフルオロメトキシ−８−メタンスルホニルアミノ−ジベンゾフラン−１−カルボン酸（３，５−ジクロロ−ピリジン−４−イル）−アミド（オグレミラスト）およびメシレート１３から、実施例３７に記載された２ステップの手順を適用して合成することができる。ただし、０℃で３０分間実施した最終脱保護に対して、ＴＦＡ／ＤＣＭ（１：１）混合物を使用する。
【実施例６１】
【０２７２】
｛２−［４−シアノ−４−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシ−フェニル）−シクロヘキサンカルボニルオキシ］−エチル｝−ジエチル−（４−｛１−ヒドロキシ−２−［６−（４−フェニル−ブトキシ）−ヘキシルアミノ］−エチル｝−２−ホスホノオキシ−ベンジル）−アンモニウム
【０２７３】
【化６６】
2010513276.tif 000072
【０２７４】
４−シアノ−４−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシ−フェニル）−シクロヘキサンカルボン酸（シロミラスト）をＮ，Ｎ−ジエチル−エタノールでエステル化して、４−シアノ−４−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシ−フェニル）−シクロヘキサンカルボン酸２−ジエチルアミノ−エチルエステルを得ることができる。
【０２７５】
このエステル誘導体は、メシレート３と一緒になって、実施例３７に記載された２ステップの手順を適用して表題の相互プロドラッグを合成するために使用することができる。
【実施例６２】
【０２７６】
［４−（２−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−１−ヒドロキシ−エチル）−２−ホスホノオキシ−ベンジル］−｛２−［４−シアノ−４−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシ−フェニル）−シクロヘキサンカルボニルオキシ］−エチル｝−ジエチル−アンモニウム
【０２７７】
【化６７】
2010513276.tif 000073
【０２７８】
表題化合物は、４−シアノ−４−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシ−フェニル）−シクロヘキサンカルボン酸２−ジエチルアミノ−エチルエステルおよびメシレート１０から、実施例３７に記載された２ステップの手順を適用して調製することができる。
【実施例６３】
【０２７９】
｛２−［４−シアノ−４−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシ−フェニル）−シクロヘキサンカルボニルオキシ）−エチル｝−ジエチル−（４−｛１−ヒドロキシ−２−［６−（４−フェニル−ブトキシ）−ヘキシルアミノ］−エチル｝−２−ホスホノオキシメトキシ−ベンジル）−アンモニウム
【０２８０】
【化６８】
2010513276.tif 000074
【０２８１】
表題化合物は、４−シアノ−４−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシ−フェニル）−シクロヘキサンカルボン酸２−ジエチルアミノ−エチルエステルおよびメシレート５から、実施例３７に記載された２ステップの手順を適用して調製することができる。ただし、０℃で３０分間実施した最終脱保護に対して、ＴＦＡ／ＤＣＭ（１：１）混合物を使用する。
【実施例６４】
【０２８２】
［４−（２−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−１−ヒドロキシ−エチル）−２−ホスホノオキシメトキシ−ベンジル］−｛２−［４−シアノ−４−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシ−フェニル）−シクロヘキサンカルボニルオキシ］−エチル｝−ジエチル−アンモニウム
【０２８３】
【化６９】
2010513276.tif 000075
【０２８４】
表題化合物は、４−シアノ−４−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシ−フェニル）−シクロヘキサンカルボン酸２−ジエチルアミノ−エチルエステルおよびメシレート１３から、実施例３７に記載された２ステップの手順を適用して調製することができる。ただし、０℃で３０分間実施した最終脱保護に対して、ＴＦＡ／ＤＣＭ（１：１）混合物を使用する。
【実施例６５】
【０２８５】
４−｛３−［４−（３−クロロ−４−フルオロ−フェニルアミノ）−７−メトキシ−キナゾリン−６−イルオキシ］−プロピル｝−４−（４−｛１−ヒドロキシ−２−［６−（４−フェニル−ブトキシ）−ヘキシルアミノ］−エチル｝−２−ホスホノオキシ−ベンジル）−モルホリン−４−イウム
【０２８６】
【化７０】
2010513276.tif 000076
【０２８７】
表題化合物は、（３−クロロ−４−フルオロ−フェニル）−［７−メトキシ−６−（３−モルホリン−４−イル−プロポキシ）−キナゾリン−４−イル］−アミン（ゲフィチニブ）およびメシレート３から、実施例３７に記載された２ステップの手順を適用して調製することができる。
【実施例６６】
【０２８８】
４−［４−（２−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−１−ヒドロキシ−エチル）−２−ホスホノオキシ−ベンジル］−４−｛３−［４−（３−クロロ−４−フルオロ−フェニルアミノ）−７−メトキシ−キナゾリン−６−イルオキシ］−プロピル｝−モルホリン−４−イウム
【０２８９】
【化７１】
2010513276.tif 000077
【０２９０】
表題化合物は、（３−クロロ−４−フルオロ−フェニル）−［７−メトキシ−６−（３−モルホリン−４−イル−プロポキシ）−キナゾリン−４−イル］−アミン（ゲフィチニブ）およびメシレート１０から、実施例３７に記載された２ステップの手順を適用して調製することができる。
【実施例６７】
【０２９１】
４−｛３−［４−（３−クロロ−４−フルオロ−フェニルアミノ）−７−メトキシ−キナゾリン−６−イルオキシ］−プロピル｝−４−（４−｛１−ヒドロキシ−２−［６−（４−フェニル−ブトキシ）−ヘキシルアミノ］−エチル｝−２−ホスホノオキシメトキシ−ベンジル）−モルホリン−４−イウム
【０２９２】
【化７２】
2010513276.tif 000078
【０２９３】
表題化合物は、（３−クロロ−４−フルオロ−フェニル）−［７−メトキシ−６−（３−モルホリン−４−イル−プロポキシ）−キナゾリン−４−イル］−アミン（ゲフィチニブ）およびメシレート５から、実施例３７に記載された２ステップの手順を適用して調製することができる。ただし、０℃で３０分間実施した最終脱保護に対して、ＴＦＡ／ＤＣＭ（１：１）混合物を使用する。
【実施例６８】
【０２９４】
４−［４−（２−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−１−ヒドロキシ−エチル）−２−ホスホノオキシメトキシ−ベンジル］−４−｛３−［４−（３−クロロ−４−フルオロ−フェニルアミノ）−７−メトキシ−キナゾリン−６−イルオキシ］−プロピル｝−モルホリン−４−イウム
【０２９５】
【化７３】
2010513276.tif 000079
【０２９６】
表題化合物は、（３−クロロ−４−フルオロ−フェニル）−［７−メトキシ−６−（３−モルホリン−４−イル−プロポキシ）−キナゾリン−４−イル］−アミン（ゲフィチニブ）およびメシレート１３から、実施例３７に記載された２ステップの手順を適用して調製することができる。ただし、０℃で３０分間実施した最終脱保護に対して、ＴＦＡ／ＤＣＭ（１：１）混合物を使用する。
【実施例６９】
【０２９７】
１−（４−｛１−ヒドロキシ−２−［６−（４−フェニル−ブトキシ）−ヘキシルアミノ］−エチル｝−２−ホスホノオキシ−ベンジル）−１−メチル−４−｛４−（４−メチル−３−（４−ピリジン−３−イル−ピリミジン−２−イルアミノ）−フェニルカルバモイル］−ベンジル｝−ピペラジン−１−イウム
【０２９８】
【化７４】
2010513276.tif 000080
【０２９９】
表題化合物は、４−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）−Ｎ−［４−メチル−３−（４−ピリジン−３−イル−ピリミジン−２−イルアミノ）−フェニル］−ベンズアミド（イマチニブ）およびメシレート３から、実施例３７に記載された２ステップの手順を適用して調製することができる。
【実施例７０】
【０３００】
１−［４−（２−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−１−ヒドロキシ−エチル｝−２−ホスホノオキシ−ベンジル］−１−メチル−４−｛４−［４−メチル−３−（４−ピリジン−３−イルピリミジン−２−イルアミノ）−フェニルカルバモイル］−ベンジル｝−ピペラジン−１−イウム
【０３０１】
【化７５】
2010513276.tif 000081
【０３０２】
表題化合物は、４−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）−Ｎ−［４−メチル−３−（４−ピリジン−３−イル−ピリミジン−２−イルアミノ）−フェニル］−ベンズアミド（イマチニブ）およびメシレート１０から、実施例３７に記載された２ステップの手順を適用して調製することができる。
【実施例７１】
【０３０３】
１−（４−｛１−ヒドロキシ−２［６−（４−フェニル−ブトキシ）−ヘキシルアミノ］−エチル｝−２−ホスホノオキシメトキシ−ベンジル）−１−メチル−４−｛４−［４−メチル−３−（４−ピリジン−３−イル−ピリミジン−２−イルアミノ）−フェニルカルバモイル］−ベンジル｝−ピペラジン−１−イウム
【０３０４】
【化７６】
2010513276.tif 000082
【０３０５】
表題化合物は、４−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）−Ｎ−［４−メチル−３−（４−ピリジン−３−イル−ピリミジン−２−イルアミノ）−フェニル］−ベンズアミド（イマチニブ）およびメシレート５から、実施例３７に記載された２ステップの手順を適用して調製することができる。ただし、０℃で３０分間実施した最終脱保護に対して、ＴＦＡ／ＤＣＭ（１：１）混合物を使用する。
【実施例７２】
【０３０６】
１−［４−（２−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−１−ヒドロキシ−エチル）−２−ホスホノオキシメトキシ−ベンジル］−１−メチル−４−｛４−［４−メチル−３−（４−ピリジン−３−イル−ピリミジン−２−イルアミノ）−フェニルカルバモイル］−ベンジル｝−ピペラジン−１−イウム
【０３０７】
【化７７】
2010513276.tif 000083
【０３０８】
表題化合物は、４−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）−Ｎ−［４−メチル−３−（４−ピリジン−３−イル−ピリミジン−２−イルアミノ）−フェニル］−ベンズアミド（イマチニブ）およびメシレート１３から、実施例３７に記載された２ステップの手順を適用して調製することができる。ただし、０℃で３０分間実施した最終脱保護に対して、ＴＦＡ／ＤＣＭ（１：１）混合物を使用する。
【実施例７３】
【０３０９】
４−（｛４−［４−（４−フルオロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−２−イルアミノ］−ベンゼンスルホニル｝−メチル−アミノ）−１−（４−｛１−ヒドロキシ−２−［６−（４−フェニル−ブトキシ）−ヘキシルアミノ］−エチル｝−２−ホスホノオキシ−ベンジル）−１−メチル−ピペリジニウム
【０３１０】
【化７８】
2010513276.tif 000084
【０３１１】
表題化合物は、４−［４−（４−フルオロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−２−イルアミノ］−Ｎ−メチル−Ｎ−（１−メチル−ピペリジン−４−イル）−ベンゼンスルホンアミド（Ｗａｇｎｏｎら、２００７によって記載されている。）およびメシレート３から、実施例３７に記載された２ステップの手順を適用して調製することができる。
【実施例７４】
【０３１２】
１−［４−（２−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−１−ヒドロキシ−エチル）−２−ホスホノオキシ−ベンジル］−４−（｛４−［４−（４−フルオロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−２−イルアミノ］−ベンゼンスルホニル｝−メチル−アミノ）−１−メチル−ピペリジニウム
【０３１３】
【化７９】
2010513276.tif 000085
【０３１４】
表題化合物は、４−［４−（４−フルオロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−２−イルアミノ］−Ｎメチル−Ｎ−（１−メチル−ピペリジン−４−イル）−ベンゼンスルホンアミドおよびメシレート１０から、実施例３７に記載された２ステップの手順を適用して調製することができる。
【実施例７５】
【０３１５】
４−（｛４−［４−（４−フルオロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−２−イルアミノ］−ベンゼンスルホニル｝−メチル−アミノ）−１−（４−｛１−ヒドロキシ−２−［６−（４−フェニル−ブトキシ）−ヘキシルアミノ］−エチル｝−２−ホスホノオキシメトキシ−ベンジル）−１−メチル−ピペリジニウム
【０３１６】
【化８０】
2010513276.tif 000086
【０３１７】
表題化合物は、４−［４−（４−フルオロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−２−イルアミノ］−Ｎ−メチル−Ｎ−（１−メチル−ピペリジン−４−イル）−ベンゼンスルホンアミドおよびメシレート５から、実施例３７に記載された２ステップの手順を適用して調製することができる。ただし、０℃で３０分間実施した最終脱保護に対して、ＴＦＡ／ＤＣＭ（１：１）混合物を使用する。
【実施例７６】
【０３１８】
１−［４−（２−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−１−ヒドロキシ−エチル）−２−ホスホノオキシメトキシ−ベンジル］−４−（｛４−［４−（４−フルオロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−２−イルアミノ］−ベンゼンスルホニル｝−メチル−アミノ）−１−メチル−ピペリジニウム
【０３１９】
【化８１】
2010513276.tif 000087
【０３２０】
表題化合物は、４−［４−（４−フルオロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−２−イルアミノ］−Ｎ−メチル−Ｎ−（１−メチル−ピペリジン−４−イル）−ベンゼンスルホンアミドおよびメシレート１３から、実施例３７に記載された２ステップの手順を適用して調製することができる。ただし、０℃で３０分間実施した最終脱保護に対して、ＴＦＡ／ＤＣＭ（１：１）混合物を使用する。
【実施例７７】
【０３２１】
６−クロロ−２−（４−｛１−ヒドロキシ−２−［６−（４−フェニル−ブトキシ）−ヘキシルアミノ］−エチル｝−２−ホスホノオキシ−ベンジル）−７−メトキシ−８−［（２−メチル−ピリジン−３−カルボニル）−アミノ］−９Ｈ−ｂ−カルボリン−２−イウム
【０３２２】
【化８２】
2010513276.tif 000088
【０３２３】
表題化合物は、Ｎ−（６−クロロ−７−メトキシ−９Ｈ−ｂ−カルボリン−８−イル）−２−メチル−ニコチンアミド（Ｃａｓｔｒｏらによって記述された、２００３）およびメシレート３から、実施例３７に記載された２ステップの手順を適用して調製することができる。
【実施例７８】
【０３２４】
２−［４−（２−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−１−ヒドロキシ−エチル）−２−ホスホノオキシ−ベンジル）−６−クロロ−７−メトキシ−８−［（２−メチル−ピリジン−３−カルボニル）−アミノ］−９Ｈ−ｂ−カルボリン−２−イウム
【０３２５】
【化８３】
2010513276.tif 000089
【０３２６】
表題化合物は、Ｎ−（６−クロロ−７−メトキシ−９Ｈ−ｂ−カルボリン−８−イル）−２−メチル−ニコチンアミドおよびメシレート１０から、実施例３７に記載された２ステップの手順を適用して調製することができる。
【実施例７９】
【０３２７】
６−クロロ−２−（４−｛１−ヒドロキシ−２−［６−（４−フェニル−ブトキシ）−ヘキシルアミノ］−エチル｝−２−ホスホノオキシメトキシ−ベンジル）−７−メトキシ−８−［（２−メチル−ピリジン−３−カルボニル）−アミノ］−９Ｈ−ｂ−カルボリン−２−イウム
【０３２８】
【化８４】
2010513276.tif 000090
【０３２９】
表題化合物は、Ｎ−（６−クロロ−７−メトキシ−９Ｈ−ｂ−カルボリン−８−イル）−２−メチルニコチンアミドおよびメシレート５から、実施例３７に記載された２ステップの手順を適用して調製することができる。ただし、０℃で３０分間実施した最終脱保護に対して、ＴＦＡ／ＤＣＭ（１：１）混合物を使用する。
【実施例８０】
【０３３０】
２−［４−（２−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−１−ヒドロキシ−エチル）−２−ホスホノオキシメトキシ−ベンジル］−６−クロロ−７−メトキシ−８−［（２−メチル−ピリジン−３−カルボニル）−アミノ］−９Ｈ−ｂ−カルボリン−２−イウム
【０３３１】
【化８５】
2010513276.tif 000091
【０３３２】
表題化合物は、Ｎ−（６−クロロ−７−メトキシ−９Ｈ−ｂ−カルボリン−８−イル）−２−メチル−ニコチンアミドおよびメシレート１３から、実施例３７に記載された２ステップの手順を適用して調製することができる。ただし、０℃で３０分間実施した最終脱保護に対して、ＴＦＡ／ＤＣＭ（１：１）混合物を使用する。
【実施例８１】
【０３３３】
インビトロでアルカリホスファターゼに曝露後における、相互ＡＩＳＴＭ−β−アゴニストプロドラッグ（実施例２９および３７に記載された）のサルメテロールおよびそれぞれのＡＩＳＴＭ薬物への変換
原液の調製：
５０ｍＭｐＨ７．４トリス緩衝剤原液
約２００ｍ１水中にトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン１．５００ｇ（１２．５ｍｍｏｌ）を溶解し、６Ｍ  ＨＣｌ約１６００μｌを添加し、水で２５０ｍｌまで希釈した。最終ｐＨ＝７．４５（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｏｒｉｏｎ  ＲＯＳＳ  ｐＨ電極を用いて測定した。）。２°−８℃で貯蔵した。
【０３３４】
５０ｍＭ  ＭｇＣｌ２原液
水２００ｍｌ中にＭｇＣｌ２６Ｈ２Ｏ  ２．０３３ｇ（１０ｍｍｏｌ）を溶解して、５０ｍＭのＭｇＣｌ２溶液を形成した。２°−８℃で貯蔵した。
【０３３５】
５０ｍＭ  ＺｎＣｌ２原液
水２００ｍｌ中にＺｎＣｌ２  １．３６４ｇ（１０ｍｍｏｌ）を溶解した。６Ｍ  ＨＣｌ約０．１ｍＬを溶液に添加して、不溶性Ｚｎ炭酸塩または水酸化物を溶解した。２°−８℃で貯蔵した。
【０３３６】
反応緩衝剤（ｐＨ７．４、５ｍＭトリス／１ｍＭ  Ｍｇ２＋／１ｍＭ  Ｚｎ２＋）
５０ｍＭトリス原液５ｍｌ、５０ｍＭ  ＭｇＣｌ２原液１ｍｌ、およびＺｎＣｌ２  １ｍｌを水で１０ｍｌまで希釈し、次いで貯蔵した。
【０３３７】
アルカリホスファターゼ原液
Ｓｉｇｍａ  Ｐ−３８９５アルカリホスファターゼ（ロット番号０２３Ｋ３７９０２）約１ｍｇ（予備重量）を反応緩衝剤中分散にさせて、最終濃度０．２２４ｍｇ／ｍＬにした。
【０３３８】
プロドラッグ原液
本発明の相互プロドラッグ約２ｍｇを１：１アセトニトリル／水  １０ｍｌ中に溶解した。
【０３３９】
反応生成物原液
各ＭＲＡおよびβ−アゴニストの約２ｍｇを２０ｍｌの１：１アセトニトリル／水中に溶解した。
【０３４０】
反応手順
原液をミクロ遠心チューブ中で、以下の表に示したように混合した。
【０３４１】
【表１】
2010513276.tif 000092
【０３４２】
加熱区画を３７℃に設定した。次いで、アルカリホスファターゼ溶液０．５ｍＬを４個の予備加熱したＥｐｐｅｎｄｏｒｆチューブ中に添加した。プロドラッグおよび薬物標準の０．５アリコートを予備加熱したＥｐｐｅｎｄｏｒｆチューブ中に添加した。ボルテックスした後直ちに、すべての反応溶液の２５μＬのアリコートをそれぞれの９６穴プレートに配置した。それぞれを等分した後、すべての試料に、内部標準（５００ｎｇ／ｍＬグリブリド７５μｌ）を添加した。この手順を１５分間隔で約４−５時間反復した。
【０３４３】
次いで、ＬＣＭＳ技術を用いて、９６穴プレートを分析した。
【０３４４】
ＨＰＬＣ−ＭＳパラメータ（典型的な）
ＬＣ勾配
作動時間：              ３．０分
カラム流量：            ０．５００ｍｌ／分
勾配
時間（分）              ％Ｂ
０−０．３０            １５
１．５０                ９５
２．３０                ９５
２．４０                １５
３．００                １５
移動相Ａ：              水中の１％ギ酸
移動相Ｂ：              アセトニトリル中の１％ギ酸
自動試料採取器
注入容量：              ５．０μｌ
自動試料採取トレイ温度：５±３℃
カラム
Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｓｙｎｅｒｇｉ  Ｐｏｌａｒ  ＲＰ  Ｃ１８、４μｍ  ２．０×５０ｍｍ
温度：                  周囲の
ＭＳ検出器収集方式
ＥＳＩ正イオンモード下、Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍ  ＡＰＩ４０００を適用した。
【０３４５】
半減期計算法（ｔ１／２）
半減期の計算において、本発明者らは、本発明の相互プロドラッグの消失は、一次反応速度式に従うものと想定した。したがって、
Ｃ＝Ｃ０ｅ−ｋｔ
ｌｎＣ＝ｌｎＣ０−ｋｔ
まず、ＩＳ対プロドラッグのピーク面積比を時間に対してプロットした。後の時点のピーク面積比を最初の時点のピーク面積比で正規化した（できるだけ速やかに）。次いで、正規化された比の自然対数を時間に対してプロットして、直線カーブを作成した。この直線カーブの勾配ｋを以下の計算に使用した。
【０３４６】
グラフでプロットされた減少の速度定数Ｋ
ｔ１／２において、Ｃ０＝２Ｃ
ｔ１／２＝ｌｎ２／ｋ
薬物濃度の測定
薬物濃度は、ピーク面積比を（ｔ０）に対して正規化することによって計算する。したがって、任意の時点における計算した薬物濃度＝最初の薬物濃度を乗じた、正規化されたピーク面積比［ｔ（０）の平均／ｔの平均］である。薬物濃度の計算のためのデータ（正規化されたピーク面積比）は、実施例２９で調製された化合物、サルメテロール、およびＡＲＲＹ−７９７化合物（Ｍｕｎｓｏｎら、２００４）に対して、表１ａ（ＡＬＰ活性化）および１ｂ（ＡＬＰ中および緩衝剤のみの中の半減期）、ならびに実施例３７で調製された化合物、サルメテロール、およびＰＤＥ４阻害薬、ＣＤＰ−８４０（Ａｌｅｘａｎｄｅｒら、２００２）に対して、表２ａ（ＡＬＰ活性化）および２ｂ（ＡＬＰ中および緩衝剤のみの中の半減期）に列挙する。
【０３４７】
【表２】
2010513276.tif 000093
【０３４８】
【表３】
2010513276.tif 000094
【０３４９】
【表４】
2010513276.tif 000095
【０３５０】
【表５】
2010513276.tif 000096
【手続補正書】
【提出日】平成21年8月14日(2009.8.14)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ａの化合物
【化８６】
2010513276.tif 000099
および薬剤として（ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ）許容されるその塩［式中、
Ｘは、四級化可能部分を表し；
Ｒ１Ｒ２Ｒ３Ｘは一緒になって、抗炎症シグナル伝達モジュレーター（ＡＩＳＴＭ）またはＡＩＳＴＭ活性を有する親分子を四級化可能部分Ｘに連結している該モジュレーターのプロドラッグを表し；
Ｌは、結合またはメチレンオキシ−（ＣＨ２Ｏ）基であり；
Ｒは、
【化８７】
2010513276.tif 000100
であり、ここでＲ４は、１−１２個の炭素原子のアルキル基、アリールアルキルまたは炭素鎖中の１−３つのＣＨ２基が、Ｏ、Ｓから選択される原子（複数可）およびＮＲ５（Ｒ５は、水素またはアルキルである。）で置換されている置換アリールアルキルである。］。
【請求項２】
抗炎症シグナル伝達モジュレーターがホスホジエステラーゼ阻害薬である、請求項１の化合物。
【請求項３】
Ｒ１Ｒ２Ｒ３Ｒ４Ｘが、
５−（２，４−ジフルオロ−フェノキシ）−１−イソブチル−１Ｈ−イミダゾール−６−カルボン酸−（２−ジメチルアミノエチル）−アミド；
３−シクロプロピルメトキシ−Ｎ−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−４−ジフルオロメトキシベンズアミド；
４−［２−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシフェニル）−２−フェニルエチル］ピリジン；
Ｎ−（３，５−ジクロロ−４−ピリジニル）−４−（ジフロウロメトキシ）−８−［（メチルスルホニル）アミノ］−１−ジベンゾフランカルボキサミド；
Ｎ−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−２−［１−（４−フルオロベンジル）−５−ヒドロキシ−１Ｈ−インドール−３−イル］−２−オキソアセトアミド；
８−メトキシ−２−トリフルオロメチルキノリン−５−カルボン酸−（３，５−ジクロロ−１−オキシピリジン−４−イル）−アミド；
４−［５−（４−フルオロフェニル）−２−（４−メタンスルフィニルフェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−ピリジン；
４−［４−（４−フルオロフェニル）−１−（３−フェニルプロピル）−５−ピリジン−４−ウル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル］−ブタ−３−イン−１−オール；
４−シアノ−４−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシフェニル）−シクロヘキサンカルボン酸ジエチルアミノエチルエステル；
（３−クロロ−４−フルオロフェニル）−［７−メトキシ−６−（３−モルポリン−４−イル−プロポキシ）−キナゾリン−４−イル］−アミン；
４−（４−メチルピペラジン−１−イルメチル）−Ｎ−［４−メチル−３−（４−ピリジン−３−イル−ピルミジン−２−イルアミノ）−フェニル］−ベンズアミド；
５−｛４−［２−（５−エチルピリジン−２−イル）エトキシ］−ベンジル｝−チアゾリジン−２，４−ジオン；
５−｛４−［２−（５−メチルピリジン−２−イルアミノ）−エトキシ］−ベンジル｝−チアゾリジン−２，４−ジオン；および
Ｏ−シクロスポリンＡ−Ｎ，Ｎジエチルグリシルエステル
からなる群から選択される、請求項１の化合物。
【請求項４】
（２−｛［５−（２，４−ジフルオロフェノキシ）−１−イソブチル−１Ｈ−インダゾール−６−カルボニル］−アミノ｝−エチル）−（５−｛１−ヒドロキシ−２−［６−（４−フェニルブトキシ）−ヘキシルアミノ］−エチル｝−２−ホスホノオキシベンジル）−ジメチルアンモニウム；
［５−（２−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−１−ヒドロキシエチル）−２−ホスホノオキシベンジル］−（２−｛［５−（２，４−ジフルオロフェノキシ）−１−イソブチル−１Ｈ−インダゾール−６−カルボニル］−アミノ｝−エチル）−ジメチルアンモニウム；
４−［２−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシフェニル）−２−フェニルエチル］−１−（４−｛１−ヒドロキシ−２−［６−（４−フェニルブトキシ）−ヘキシルアミノ］−エチル｝−２−ホスホノオキシベンジル）−ピリジニウム；
［４−（２−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−１−ヒドロキシエチル）−２−ホスホノオキシベンジル］−４−［２−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシフェニル）−２−フェニルエチル］−ピリジニウム；
３，５−ジクロロ−４−［（４−ジフルオロメトキシ−８−メタンスルホニルアミノジベンゾフラン−１−カルボニル）−アミノ］−１−（４−｛１−ヒドロキシ−２−［６−（４−フェニルブトキシ）−ヘキシルアミノ］エチル｝−２−ホスホノオキシベンジル）−ピリジニウム；および
１−［４−（２−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−１−ヒドロキシエチル）−２−ホスホノオキシベンジル］−３，５−ジクロロ−４−［（４−ジフルオロメトキシ−８−メタンスルホニルアミノジベンゾフラン−１−カルボニル）−アミノ］−ピリジニウム
からなる群から選択される、請求項１の化合物。
【請求項５】
肺炎症および気管支収縮の予防および治療のためのエアロゾル製剤であって、少なくとも１種の請求項１から４のいずれか一項のモノホスフェート相互プロドラッグの約１０μｇから約１０００μｇを含み、エアロゾル化によって投与されて、１から５μの間のエアロゾル粒子を主として生成するように適合された、前記製剤。
【国際調査報告】
2010513276.tif 000101
2010513276.tif 000102
2010513276.tif 000103
2010513276.tif 000104
2010513276.tif 000105
2010513276.tif 000106
2010513276.tif 000107
2010513276.tif 000108
2010513276.tif 000109
2010513276.tif 000110
2010513276.tif 000111
2010513276.tif 000112
2010513276.tif 000113