(57)【要約】【課題】５’−置換アデノシン、その製造、及び、Ｓ−アデノシルメチオニン脱炭酸酵素の阻害剤としての使用の提供。【解決手段】Ｓ−アデノシルメチオニンメチルエステルと変異体ｈＡｄｏＭｅｔＤＣ  Ｆ２２３Ａとの複合体の結晶構造に関し、該結晶構造においては、Ｆ７、アデニン及びＦ２２３の芳香族環のスタッキングが解消されていると考えられる。エステルが付加されたこの変異体の構造では、Ｆ７とのπ−π相互作用、Ｇｌｕ６７のバックボーンとの水素結合、及び、静電相互作用が寄与して、リガンドのｓｙｎ配座が変わらず維持される。アデニンの８位が様々な基で置換されている数種類のＡｄｏＭｅｔ基質類似体を合成し、それらのｈＡｄｏＭｅｔＤＣ阻害能を分析した。この結果を理解する上で、酵素阻害剤複合体の仮想モデリングを行い、５’−デオキシ−５’−［Ｎ−メチル−Ｎ−［２−（アミノオキシ）エチル］アミノ−８−メチル］アデノシン（ＭＡＯＥＭＡ）及び５’−デオキシ−５’−［Ｎ−メチル−Ｎ−［４−（アミノオキシ）ブチル］アミノ−８−エチル］アデノシン（ＭＡＯＢＥＡ）が活性部位に結合したヒトＡｄｏＭｅｔＤＣの結晶構造を実験的に求めた。【選択図】図４
2010535202.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式で表される化合物、その薬学的に許容される塩、その溶媒和物、及び、そのプロドラッグ。
【化１】
2010535202.tif 000017
［式中、
Ｒ１及びＲ２はそれぞれ独立して、Ｈ及びアルキルからなる群より選択され；
Ｒ３は、Ｈ、アルキル、ＮＲ１Ｒ２、ＯＲ１Ｒ２、アリ−ル、ヘテロアリ−ル、ハロゲン、及び、ＣＦ３からなる群より選択され；
Ｒ４は、ＮＲ７Ｒ８及びＳＲ１Ｒ２からなる群より選択され；
Ｒ７及びＲ８はそれぞれ独立して、Ｈ、アルキル、（ＣＨ２）ｎＮＲ１Ｒ２、（ＣＨ２）ｎＣＯＮＲ１Ｒ２、及び、（ＣＨ２）ｎＣ＝ＯＮＲ１Ｒ２（前記において、ｎは１〜８の整数）からなる群より選択され；
Ｒ５及びＲ６はそれぞれ独立して、Ｈ及びアシルからなる群より選択される。］
【請求項２】
Ｒ１及びＲ２はそれぞれＨである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ５及びＲ６はそれぞれＨである、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ３はアルキルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ３はメチルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
５’−クロロ−５’−デオキシ−８−メチルアデノシン；５’−クロロ−５’−デオキシ−８−エチルアデノシン；５’−クロロ−５’−デオキシ−８−（メチルアミノ）アデノシン；５’−クロロ−５’−デオキシ−８−フェニルアデノシン；５’−デオキシ−５’−メチルアミノ−８−メチルアデノシン；５’−デオキシ−５’−メチルアミノ−８−エチルアデノシン；５’−デオキシ−５’，８−ビス（メチルアミノ）アデノシン；５’−デオキシ−５’−メチルアミノ−８−フェニルアデノシン；５’−デオキシ−５’−［［２−［［（１−エトキシエチリデン）アミノ］オキシ］エチル］メチルアミノ］−８−メチルアデノシン；５’−デオキシ−５’−［［２−［［（１−エトキシエチリデン）アミノ］オキシ］エチル］メチルアミノ］−８−（メチルアミノ）アデノシン；５’−デオキシ−５’−［［２−［［（１−エトキシエチリデン）アミノ］オキシ］エチル］メチルアミノ］−８−フェニルアデノシン；５’−［（２−アミノオキシエチル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−メチルアデノシン硫酸塩；５’−［（２−アミノオキシエチル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−（メチルアミノ）アデノシン硫酸塩；５’−［（２−アミノオキシエチル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−フェニルアデノシン硫酸塩；５’−デオキシ−５’−［［４−［［（１−エトキシエチリデン）アミノ］オキシ］ブチル］メチルアミノ］−８−（メチルアミノ）アデノシン；５’−デオキシ−５’−［［４−［［（１−エトキシエチリデン）アミノ］オキシ］ブチル］メチルアミノ］−８−フェニルアデノシン；５’−デオキシ−５’−［［４−［［（１−エトキシエチリデン）アミノ］オキシ］ブチル］メチルアミノ］−８−オキソアデノシン；５’−デオキシ−２’，３’−イソプロピリデン−５’−［［４−［［（１−エトキシエチリデン）アミノ］オキシ］ブチル］メチルアミノ］−８−メチルアデノシン；５’−デオキシ−２’，３’−イソプロピリデン−５’−［［４−［［（１−エトキシエチリデン）アミノ］オキシ］ブチル］メチルアミノ］−８−エチルアデノシン；５’−デオキシ−２’，３’−イソプロピリデン−５’−［［４−［［（１−エトキシエチリデン）アミノ］オキシ］ブチル］メチルアミノ］−アデノシン；５’−［（４−アミノオキシブチル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−（メチルアミノ）アデノシン硫酸塩；５’−［（４−アミノオキシブチル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−フェニルアデノシン硫酸塩；５’−［（４−アミノオキシブチル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−オキソアデノシン硫酸塩；５’−［（４−アミノオキシブチル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−メチルアデノシン硫酸塩；５’−［（４−アミノオキシブチル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−エチルアデノシン硫酸塩；５’−［（４−アミノオキシブチル）メチルアミノ］−５’−デオキシアデノシン硫酸塩；５’−デオキシ−２’，３’−Ｏ−イソプロピリデン−５’−［（２−ヒドロキシエチル）メチルアミノ］アデノシン；５’−デオキシ−２’，３’−Ｏ−イソプロピリデン−５’−［（２−フタルイミドオキシエチル）メチルアミノ］−アデノシン；５’−［（２−アミノオキシエチル）メチルアミノ］−５’−デオキシアデノシン硫酸塩；５’−［（２−カルボエトキシエチル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−メチルアデノシン；５’−［（２−カルボエトキシエチル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−エチルアデノシン；５’−［（カルボエトキシメチル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−メチルアデノシン；５’−［（２−カルボキサミドエチル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−メチルアデノシン硫酸塩；５’−［（２−カルボキサミドエチル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−エチルアデノシン硫酸塩；５’−［（カルボキサミドメチル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−メチルアデノシン硫酸塩；５’−［（２−カルボエトキシエチル）メチルアミノ］−５’−デオキシアデノシン；５’−デオキシ−５’−［（カルボエトキシエチル）メチルアミノ］−２’，３’−Ｏ−イソプロピリデンアデノシン；５’−［（カルボキサミドエチル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−２’，３’−Ｏ−イソプロピリデンアデノシン；５’−［（２−カルボキサミドエチル）メチルアミノ］−５’−デオキシアデノシン硫酸塩；５’−デオキシ−５’−［（２−ヒドラジノカルボニルエチル）メチルアミノ］−８−メチルアデノシン硫酸塩；５’−デオキシ−５’−［（２−ヒドラジノカルボニルエチル）メチルアミノ］−アデノシン硫酸塩；５’−デオキシ−５’−［（ヒドラジノカルボニルメチル）メチルアミノ］−８−メチルアデノシン；５’−［（３−アミノプロピル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−（メチルアミノ）アデノシン硫酸塩；５’−デオキシ−８−（メチルアミノ）−５’−（３−メチルアミノプロピルアミノ）アデノシン硫酸塩；５’−［（３−アミノプロピル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−フェニルアデノシン硫酸塩；５’−デオキシ−５’−（３−メチルアミノプロピルアミノ）−８−フェニルアデノシン硫酸塩；５’−［（３−アミノプロピル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−２’，３’−Ｏ−イソプロピリデンアデノシン；５’−［（３−アミノプロピル）メチルアミノ］−５’−デオキシアデノシン硫酸塩；５’−［（２−アミノエチル）メチルアミノ］−５’−デオキシアデノシン；５’−デオキシ−５’−（２−メチルアミノエチルアミノ）アデノシン；５’−［（２−アミノエチル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−メチルアデノシン；５’−デオキシ−８−メチル−５’−（２−メチルアミノエチルアミノ）アデノシン；５’−デオキシ−２’，３’−Ｏ−イソプロピリデン−５’−［（３−フタルイミドプロピル）メチルアミノ］−８−メチルアデノシン；５’−デオキシ−２’，３’−Ｏ−イソプロピリデン−５’−［（３−フタルイミドプロピル）メチルアミノ］−８−エチルアデノシン；５’−デオキシ−２’，３’−Ｏ−イソプロピリデン−５’−［（３−アミノプロピル）メチルアミノ］−８−メチルアデノシン；５’−デオキシ−２’，３’−Ｏ−イソプロピリデン−５’−［（３−アミノプロピル）メチルアミノ］−８−エチルアデノシン；５’−［（３−アミノプロピル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−メチルアデノシン硫酸塩；５’−［（３−アミノプロピル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−エチルアデノシン硫酸塩；５’−デオキシ  ５’−［（２−グアニジノエチル）メチルアミノ］アデノシン；５’−［（２−シアノエチル）メチルアミノ］−５’−デオキシアデノシン；５’−デオキシ−５’−［（２−ヒドロキシアミジノエチル）メチルアミノ］アデノシン；５’−デオキシ−５’−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）−８−メチルアデノシン；５’−デオキシ−５’−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）アデノシン；５’−デオキシ−５’−メチルチオ−８−メチルアデノシン；５’−デオキシ−５’−ジメチルスルホニオ−８−メチルアデノシン臭化物；５’−デオキシ−５’−ジメチルスルホニオ−８−メチルアデノシン塩化物；５’−デオキシ−５’−ジメチルスルホニオアデノシン臭化物；５’−デオキシ−５’−ジメチルスルホニオアデノシン塩化物；５’−［［４−［［（１−エトキシエチリデン）アミノ］オキシ］ブチル］メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−ヒドロキシアデノシン；５’−［［４−［［（１−エトキシエチリデン）アミノ］オキシ］ブチル］メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−ヒドロキシアデノシン；５’−［［４−［［（１−エトキシエチリデン）アミノ］オキシ］ブチル］メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−（メチルアミノ）アデノシン；５’−［（カルボエトキシエチル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−メチルアデノシン；５’−［（カルボエトキシエチル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−エチルアデノシン；５’−［（カルボキサミドエチル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−メチルアデノシン硫酸塩；５’−［（カルボキサミドエチル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−エチルアデノシン硫酸塩；５’−［（カルボエトキシメチル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−メチルアデノシン；及び、５’−［（カルボキサミドメチル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−メチルアデノシン硫酸塩；その薬学的に許容される塩、その溶媒和物、及び、そのプロドラッグからなる群より選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
有効量の、請求項１、２、３、４、５又は６のいずれか一項に記載の化合物、又はその薬学的に許容される塩、又はその溶媒和物、又はそのプロドラッグと、薬学的に許容される基剤とを含む医薬組成物。
【請求項８】
Ｓ−アデノシルメチオニン脱炭酸酵素の阻害を必要とするホストにおいて該酵素を阻害する方法であって、
請求項１、２、３、４、５又は６のいずれか一項に記載の化合物、その薬学的に許容される塩、その溶媒和物、又はそのプロドラッグを有効量で前記ホストに投与することを含む方法。
【請求項９】
寄生虫感染症、又は、ニューモシスチス・カリニ（Ｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓ  ｃａｉｎｉｉ）により引き起こされた感染症に罹患したホストを治療する方法であって、
請求項１、２、３、４、５又は６のいずれか一項に記載の化合物、その薬学的に許容される塩、その溶媒和物、又はそのプロドラッグを有効量で前記ホストに投与することを含む方法。
【請求項１０】
前記感染症は原虫感染症である、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記感染症はトリパノソーマ症又はマラリアである、請求項１０に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
連邦政府による資金提供を受けた研究開発の記載
本発明は、ＰＯ１  ＣＡ−９４０００により国立癌研究所、及び、国立衛生研究所の生物医学研究基金プログラム（Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ  ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｒｅｓｏｕｒｃｅ  Ｐｒｏｇｒａｍ）（ＲＲ−０１６４６）から提供された資金を使用してなされたものである。このように、米国政府は本発明に一定の権利を有する。
【０００２】
関連出願の相互参照
本願は、２００７年８月２日に出願された米国仮特許出願番号６０／９５３，６２１を優先権主張の基礎とする。当該出願の全開示を、本願明細書に引用して援用する。
【０００３】
技術分野
本開示は、ある種のアデニン誘導体、特にある種の５’−置換アデノシン化合物に関する。本開示はまた、当該アデニン誘導体の、Ｓ−アデノシルメチオニン脱炭酸酵素の阻害剤としての使用に関する。本開示はまた、癌や寄生虫感染症などの様々な疾患を治療するための当該アデニン誘導体の使用に関し、特に哺乳動物における使用に関する。本開示はまた本開示化合物の製造プロセスにも関する。
【背景技術】
【０００４】
Ｓ−アデノシルメチオニン脱炭酸酵素は、ポリアミン生合成経路において重要な酵素であり、脱炭酸プロセスにおいてピルボイル（ｐｙｒｕｖｏｙｌ）基に依存する。当該酵素の阻害剤は、癌化学療法薬としての可能性を有し、さらに、様々な寄生虫感染症を治療し得る。活性部位に様々な阻害剤が結合した当該酵素の結晶構造は既に決定されており、リガンドのアデニン塩基が酵素との相互作用の際に通常と異なるｓｙｎ配座を取ることが分かっている。例えば、アデニン環の８−置換によって、ヌクレオチドが溶液中でｓｙｎ配座を取ることが知られている（非特許文献１〜４）。このｓｙｎ配座において、アデニン塩基はＡｄｏＭｅｔＤＣのＦ２２３及びＦ７残基間にスタッキングしている。Ｓ−アデノシルメチオニン脱炭酸酵素（ＡｄｏＭｅｔＤＣ）は、ピルボイル基依存性脱炭酸酵素であって、ポリアミン生合成経路において重要な酵素であり、あらゆる種で確認されている（非特許文献５〜８）。プトレシン、スペルミジン及びスペルミンといったポリアミンは細胞成長に必須であり、細胞増殖及び分化において重要な役割を果たす（非特許文献９〜１１）。ポリアミンは、非小細胞肺癌、前立腺癌、黒色腫及び膵臓癌を含む各種癌において増加することが確認されている（非特許文献１２、１３）。細胞中のポリアミン濃度はポリアミン合成経路及び異化経路に依存しており、また、細胞膜を介したポリアミンの取り込み及び排出にも依存している。ポリアミン経路の鍵となるこの酵素の調節を変えることは、各種癌の治療の治療戦略となる。ＡｄｏＭｅｔＤＣは、Ｓ−アデノシルメチオニン（ＡｄｏＭｅｔ）の、脱炭酸されたＳ−アデノシルメチオニン（ｄｃＡｄｏＭｅｔ）への変換を触媒する。その後、ｄｃＡｄｏＭｅｔのアミノプロピル基がプトレシン又はスペルミジンに付与されて、それぞれスペルミジン、スペルミンが形成される。ＡｄｏＭｅｔＤＣは上記経路の鍵となる分岐点に存在しており、その作用によって、ポリアミン生合成系にＡｄｏＭｅｔが導入され、メチル付与に利用できるプールから該物質が取り出される。
【０００５】
ポリアミン濃度の調節が試みられた結果、オルニチン脱炭酸酵素（ＯＤＣ）（非特許文献１４）、ＡｄｏＭｅｔＤＣ、及び、異化酵素であるスペルミジン／スペルミンＮ１−アセチル転移酵素（ＳＳＡＴ）（非特許文献１５）といった生合成酵素を標的とする阻害剤が開発された。ＯＤＣの最もよく知られた阻害剤は、不可逆的に酵素を不活性化するα−ジフルオロメチルオルニチン（ＤＦＭＯ）である。ＤＦＭＯによってポリアミン合成が減少しても、細胞がポリアミンの細胞内への取り込みを高めて補填するため、癌治療においてＤＦＭＯにより好結果が得られるケースは限定的である（非特許文献１６）。ＤＦＭＯについては現在、発癌に対する化学予防剤としての研究が進められている（非特許文献１７〜１９）。ＡｄｏＭｅｔＤＣを阻害する薬剤として、まず、スペルミジンと類似した構造を有する拮抗阻害剤であるメチルグリオキサールビス（グアニルヒドラゾン）（ＭＧＢＧ）が開発された（非特許文献２０）。ＭＧＢＧはヒトに使用した場合の毒性が非常に強いため、その毒性を減少させようと多くのＭＧＢＧ類似体が開発された。そのようなＡｄｏＭｅｔ阻害剤の一つとして開発されたのが、４−アミジノインダン−１−オン−２’−アミジノヒドラゾン（ＣＧＰ４８６６４Ａ）であり、該物質は癌化学療法剤として臨床試験段階に進められている（非特許文献２１）。別の例として、天然基質の構造類似体であるＭＨＺＰＡ、ＭＡＯＥＡ及びＭＨＺＥＡのような阻害剤が開発された。これらの化合物は、活性部位のピルボイル基に対してシッフ塩基を形成することでＡｄｏＭｅｔＤＣを不活性化する（非特許文献２２）。ＡｄｏＭｅｔＤＣの公知のヌクレオシド阻害剤の他の例としては、５’−（１８）−５’−デオキシアデノシンが挙げられる。当該阻害剤は、酵素により活性化される不可逆的阻害剤として設計されたが（非特許文献２３）、その後の実験から当該阻害剤がピルベート補欠分子団のアミノ基転移を介して作用することが分かった（非特許文献２２）。
【０００６】
脱炭酸及び自己プロセッシングのメカニズムを理解するために、ＡｄｏＭｅｔＤＣ並びにそのＳ６８Ａ及びＨ２４３Ａ変異体の結晶構造が解明された（非特許文献２４〜２６）。ＭＡＯＥＡ、ＭＨＺＰＡ及びＭｅＡｄｏＭｅｔのような阻害剤が結合したＡｄｏＭｅｔＤＣの結晶構造は既に解明されている（非特許文献２７）。これらの結晶構造から、阻害剤のアデニン塩基が活性部位で通常と異なるｓｙｎ配座を取ることが示されている。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Ｓｅｃｒｉｓｔ，Ｊ．Ａ．，ＩＩＩ．Ｎｅｗ  Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ  Ａｎａｌｏｇｕｅｓ  ａｓ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｏｆ  Ｓ−Ａｄｅｎｏｓｙｌｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ  Ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ．Ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｓ  Ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ，１９８７，６，７３−８３
【非特許文献２】Ｍｉｔｓｕｎｏｂｕ，Ｏ．Ｔｈｅ  Ｕｓｅ  ｏｆ  Ｄｉｅｔｈｙｌ  Ａｚｏｄｉｃａｒｂｏｎｙｌａｔｅ  ａｎｄ  Ｔｒｉｐｈｅｎｙｌｐｈｏｓｐｈｉｎｅ  ｉｎ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ａｎｄ  Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｎａｔｕｒａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，１９８１，１−２８
【非特許文献３】Ｉｋｅｈａｒａ，Ｍ．；Ｕｅｓｕｇｉ，Ｓ．；Ｋａｎｅｋｏ，Ｍ．Ｂｒｏｍｉｎａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ａｄｅｎｉｎｅ  Ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ  ａｎｄ  Ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ．Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍ．，１９６７，１７−１８
【非特許文献４】Ｖａｎ  Ａｅｒｓｃｈｏｔ，Ａ．Ａ．；Ｍａｍｏｓ，Ｐ．；Ｗｅｙｎｓ，Ｎ．Ｊ．；Ｉｋｅｄａ，Ｓ．；Ｄｅ  Ｃｌｅｒｃｑ，Ｅ．；Ｈｅｒｄｅｗｉｊｎ，Ｐ．Ａ．Ａｎｔｉｖｉｒａｌ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  Ｃ−Ａｌｋｙｌａｔｅｄ  Ｐｕｒｉｎｅ  Ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｓ  Ｏｂｔａｉｎｅｄ  ｂｙ  Ｃｒｏｓｓ−Ｃｏｕｐｌｉｎｇ  ｗｉｔｈ  Ｔｅｔｒａａｌｋｙｌｔｉｎ  Ｒｅａｇｅｎｔｓ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，１９９３，３６，２９３８−２９４２
【非特許文献５】Ｈａｃｋｅｒｔ，Ｍ．Ｌ．；Ｐｅｇｇ，Ａ．Ｅ．Ｐｙｒｕｖｏｙｌ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ｅｎｚｙｍｅｓ．Ｉｎ  Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃａｔａｌｙｓｉｓ；Ｓｉｎｎｏｔｔ，Ｍ．Ｌ．，Ｅｄ．；Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ：Ｌｏｎｄｏｎ，１９９７；ｐｐ  ２０１−２１６
【非特許文献６】Ｐｅｇｇ，Ａ．Ｅ．；Ｘｉｏｎｇ，Ｈ．；Ｆｅｉｔｈ，Ｄ．；Ｓｈａｎｔｚ，Ｌ．Ｍ．Ｓ−Ａｄｅｎｏｓｙｌｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ  Ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ：Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，Ｆｕｎｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｂｙ  Ｐｏｌｙａｍｉｎｅｓ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｔｒａｎｓ．，１９９８，２６，５８０−５８６
【非特許文献７】Ｔａｂｏｒ，Ｃ．Ｗ．；Ｔａｂｏｒ，Ｈ．Ｐｏｌｙａｍｉｎｅｓ．Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１９８４，５３，７４９−７９０
【非特許文献８】Ｔａｂｏｒ，Ｃ．Ｗ．；Ｔａｂｏｒ，Ｈ．Ｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ  Ａｄｅｎｏｓｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ（Ｓ−Ａｄｅｎｏｓｙｌｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ  Ｓｙｎｔｈｅｔａｓｅ）  ａｎｄ  Ｓ−Ａｄｅｎｏｓｙｌｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ  Ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ．Ａｄｖａｎ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．Ｒｅｌａｔｅｄ  Ａｒｅａｓ  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，１９８４，５６，２５１−２８２
【非特許文献９】ｖａｎ  Ｐｏｅｌｊｅ，Ｐ．Ｄ．；Ｓｎｅｌｌ，Ｅ．Ｅ．Ｐｙｒｕｖｏｙｌ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  Ｅｎｚｙｍｅｓ．Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１９９０，５９，２９−５９
【非特許文献１０】Ｗａｌｌａｃｅ，Ｈ．Ｍ．；Ｆｒａｓｅｒ，Ａ．Ｖ．；Ｈｕｇｈｅｓ，Ａ．Ａ  Ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅ  ｏｆ  Ｐｏｌｙａｍｉｎｅ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．，２００３，３７６，１−１４
【非特許文献１１】Ｃａｓｅｒｏ，Ｒ．Ａ．，Ｊｒ．；Ｃｅｌａｎｏ，Ｐ．；Ｅｒｖｉｎ，Ｓ．Ｊ．；Ａｐｐｌｅｇｒｅｎ，Ｎ．Ｂ．；Ｗｉｅｓｔ，Ｌ．；Ｐｅｇｇ，Ａ．Ｅ．Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ｃＤＮＡ  Ｃｌｏｎｅ  ｔｈａｔ  Ｃｏｄｅｓ  ｆｏｒ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｐｅｒｍｉｄｉｎｅ／Ｓｐｅｒｍｉｎｅ  Ｎ１−ａｃｅｔｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，１９９１，２６６，８１０−４
【非特許文献１２】Ｐｅｇｇ，Ａ．Ｅ．Ｐｏｌｙａｍｉｎｅ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ａｎｄ  ｉｔｓ  Ｉｍｐｏｒｔａｎｃｅ  ｉｎ  Ｎｅｏｐｌａｓｔｉｃ  Ｇｒｏｗｔｈ  ａｎｄ  ａｓ  ａ  Ｔａｒｇｅｔ  ｆｏｒ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，１９８８，４８，７５９−７７４
【非特許文献１３】Ｇｅｒｎｅｒ，Ｅ．Ｗ．；Ｍｅｙｓｋｅｎｓ，Ｆ．Ｌ．，Ｊｒ．Ｐｏｌｙａｍｉｎｅｓ  ａｎｄ  Ｃａｎｃｅｒ：Ｏｌｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ，Ｎｅｗ  Ｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｉｎｇ．Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｃａｎｃｅｒ，２００４，４，７８１−７９２
【非特許文献１４】Ｍｅｔｃａｌｆ，Ｂ．Ｗ．；Ｂｅｙ，Ｐ．；Ｄａｎｚｉｎ，Ｃ．；Ｊｕｎｇ，Ｍ．Ｊ．；Ｃａｓａｒａ，Ｐ．；Ｖｅｖｅｒｔ，Ｊ．Ｐ．Ｃａｔａｌｙｔｉｃ  Ｉｒｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｍａｍｍａｌｉａｎ  Ｏｒｎｉｔｈｉｎｅ  Ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ（ＥＣ４１１１７）  ｂｙ  Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ  ａｎｄ  Ｐｒｏｄｕｃｔ  Ａｎａｌｏｇｓ．Ｊ．Ａｍｅｒ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１９７８，１００，２５５１−２５５３
【非特許文献１５】Ｂｅｗｌｅｙ，Ｍ．Ｃ．；Ｇｒａｚｉａｎｏ，Ｖ．；Ｊｉａｎｇ，Ｊ．；Ｍａｔｚ，Ｅ．；Ｓｔｕｄｉｅｒ，Ｆ．Ｗ．；Ｐｅｇｇ，Ａ．Ｅ．；Ｃｏｌｅｍａｎ，Ｃ．Ｓ．；Ｆｌａｎａｇａｎ，Ｊ．Ｍ．Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ  ｏｆ  Ｗｉｌｄ−ｔｙｐｅ  ａｎｄ  Ｍｕｔａｎｔ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｐｅｒｍｉｄｉｎｅ／Ｓｐｅｒｍｉｎｅ  Ｎ１−Ａｃｅｔｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ，ａ  Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ｄｒｕｇ  Ｔａｒｇｅｔ．Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ，２００６，１０３，２０６３−８
【非特許文献１６】Ａｌｈｏｎｅｎ−Ｈｏｎｇｉｓｔｏ，Ｌ．；Ｓｅｐｐａｎｅｎ，Ｐ．；ａｎｄ  Ｊａｎｎｅ，Ｊ．Ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｐｕｔｒｅｓｃｉｎｅ  ａｎｄ  Ｓｐｅｒｍｉｄｉｎｅ  Ｄｅｐｒｉｖａｔｉｏｎ  Ｉｎｄｕｃｅｓ  Ｉｎｃｒｅａｓｅｄ  Ｕｐｔａｋｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎａｔｕｒａｌ  Ｐｏｌｙａｍｉｎｅｓ  ａｎｄ  Ｍｅｔｈｙｌｇｌｙｏｘａｌ  ｂｉｓ（ｇｕａｎｙｌｈｙｄｒａｚｏｎｅ）．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．，１９８０，１９２，９４１−５
【非特許文献１７】Ｍｅｙｓｋｅｎｓ，Ｆ．Ｌ．，Ｊｒ．；Ｇｅｒｎｅｒ，Ｅ．Ｗ．Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｄｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌｏｒｎｉｔｈｉｎｅ（ＤＦＭＯ）  ａｓ  ａ  Ｃｈｅｍｏｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ  Ａｇｅｎｔ．Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，１９９９，５，９４５−５１
【非特許文献１８】Ｆａｂｉａｎ，Ｃ．Ｊ．；Ｋｉｍｌｅｒ，Ｂ．Ｆ．；Ｂｒａｄｙ，Ｄ．Ａ．；Ｍａｙｏ，Ｍ．Ｓ．；Ｃｈａｎｇ，Ｃ．Ｈ．；Ｆｅｒｒａｒｏ，Ｊ．Ａ．；Ｚａｌｌｅｓ，Ｃ．Ｍ．；Ｓｔａｎｔｏｎ，Ａ．Ｌ．；Ｍａｓｏｏｄ，Ｓ．；Ｇｒｉｚｚｌｅ，Ｗ．Ｅ．；Ｂｏｙｄ，Ｎ．Ｆ．；Ａｒｎｅｓｏｎ，Ｄ．Ｗ．；Ｊｏｈｎｓｏｎ，Ｋ．Ａ．Ａ  Ｐｈａｓｅ  ＩＩ  Ｂｒｅａｓｔ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｈｅｍｏｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ  Ｔｒｉａｌ  ｏｆ  Ｏｒａｌ  Ａｌｐｈａ−ｄｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌｏｒｎｉｔｈｉｎｅ：Ｂｒｅａｓｔ  Ｔｉｓｓｕｅ，Ｉｍａｇｉｎｇ，  ａｎｄ  Ｓｅｒｕｍ  ａｎｄ  Ｕｒｉｎｅ  Ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ．Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，２００２，８，３１０５−１７
【非特許文献１９】Ｂａｓｕｒｏｙ，Ｕ．Ｋ．；Ｇｅｒｎｅｒ，Ｅ．Ｗ．Ｅｍｅｒｇｉｎｇ  Ｃｏｎｃｅｐｔｓ  ｉｎ  Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｔｈｅ  Ｐｏｌｙａｍｉｎｅ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｃ  Ｐａｔｈｗａｙ  ｉｎ  Ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｈｅｍｏｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．（Ｔｏｋｙｏ），２００６，１３９，２７−３３
【非特許文献２０】Ｗｉｌｌｉａｍｓ−Ａｓｈｍａｎ，Ｈ．Ｇ．；Ｓｃｈｅｎｏｎｅ，Ａ．Ｍｅｔｈｙｌｇｌｙｏｘａｌ  ｂｉｓ（ｇｕａｎｙｌｈｙｄｒａｚｏｎｅ）  ａｓ  ａ  Ｐｏｔｅｎｔ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｏｆ  Ｍａｍｍａｌｉａｎ  ａｎｄ  Ｙｅａｓｔ  Ｓ−ａｄｅｎｏｓｙｌｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ  Ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅｓ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．，１９７２，４６，２８８−２９５
【非特許文献２１】Ｍｉｌｌｗａｒｄ，Ｍ．Ｊ．；Ｊｏｓｈｕａ，Ａ．；Ｋｅｆｆｏｒｄ，Ｒ．；Ａａｍｄａｌ，Ｓ．；Ｔｈｏｍｓｏｎ，Ｄ．；Ｈｅｒｓｅｙ，Ｐ．；Ｔｏｎｅｒ，Ｇ．；Ｌｙｎｃｈ，Ｋ．Ｍｕｌｔｉ−ｃｅｎｔｒｅ  Ｐｈａｓｅ  ＩＩ  Ｔｒｉａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｐｏｌｙａｍｉｎｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ＳＡＭ４８６Ａ（ＣＧＰ４８６６４）  ｉｎ  Ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  Ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ  Ｍｅｌａｎｏｍａ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｎｅｗ  Ｄｒｕｇｓ，２００５，２３，２５３−６
【非特許文献２２】Ｓｈａｎｔｚ，Ｌ．Ｍ．；Ｓｔａｎｌｅｙ，Ｂ．Ａ．；Ｓｅｃｒｉｓｔ，Ｊ．Ａ．，ＩＩＩ；  ａｎｄ  Ｐｅｇｇ，Ａ．Ｅ．Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｈｕｍａｎ  Ｓ−ａｄｅｎｏｓｙｌｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ  Ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ  Ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ  ｉｎ  Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  ｏｆ  ｔｈｉｓ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  ｔｏ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ  ｔｈｅ  Ｍｅｃｈａｎｉｓｍ  ｏｆ  Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｂｙ  ｔｈｅ  Ｉｒｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ，５’−Ｄｅｏｘｙ−５’−［（３−ｈｙｄｒａｚｉｎｏｐｒｏｐｙｌ）ｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ］ａｄｅｎｏｓｉｎｅ  ａｎｄ  ５’｛［（Ｚ）−４−Ａｍｉｎｏ−２−ｂｕｔｅｎｙｌ］ｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ−５’−ｄｅｏｘｙａｄｅｎｏｓｉｎｅ．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９９２，３１，６８４８−６８５５
【非特許文献２３】Ｄａｎｚｉｎ，Ｃ．；Ｍａｒｃｈａｌ，Ｐ．；Ｃａｓａｒａ，Ｐ．Ｉｒｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｒａｔ  Ｓ−Ａｄｅｎｏｓｙｌｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ  Ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ  ｂｙ  ５’−｛［（Ｚ）−４−Ａｍｉｎｏ−２−ｂｕｔｅｎｙｌ］ｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ｝−５’−ｄｅｏｘｙａｄｅｎｏｓｉｎｅ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，１９９０，４０，１４９９−１５０３
【非特許文献２４】Ｅｋｓｔｒｏｍ，Ｊ．Ｅ．；Ｍａｔｔｈｅｗｓ，Ｉ．Ｉ．；Ｓｔａｎｌｅｙ，Ｂ．Ａ．；Ｐｅｇｇ，Ａ．Ｅ．；Ｅａｌｉｃｋ，Ｓ．Ｅ．Ｔｈｅ  Ｃｒｙｓｔａｌ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ｏｆ  Ｈｕｍａｎ  Ｓ−Ａｄｅｎｏｓｙｌｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ  Ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ  ａｔ  ２．２５  Å  Ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ  Ｒｅｖｅａｌｓ  ａ  Ｎｏｖｅｌ  Ｆｏｌｄ．Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，１９９９，７，５８３−５９５
【非特許文献２５】Ｔｏｌｂｅｒｔ，Ｗ．Ｄ．；Ｚｈａｎｇ，Ｙ．；Ｃｏｔｔｅｔ，Ｓ．Ｅ．；Ｂｅｎｎｅｔｔ，Ｅ．Ｍ．；Ｅｋｓｔｒｏｍ，Ｊ．Ｌ．；Ｐｅｇｇ，Ａ．Ｅ．；Ｅａｌｉｃｋ，Ｓ．Ｅ．Ｍｅｃｈａｎｉｓｍ  ｏｆ  Ｈｕｍａｎ  Ｓ−Ａｄｅｎｏｓｙｌｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ  Ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ  Ｐｒｏｅｎｚｙｍｅ  Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ  ａｓ  Ｒｅｖｅａｌｅｄ  ｂｙ  ｔｈｅ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｓ６８Ａ  Ｍｕｔａｎｔ．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００３，４２，２３８６−９５
【非特許文献２６】Ｅｋｓｔｒｏｍ，Ｊ．Ｌ．；Ｔｏｌｂｅｒｔ，Ｗ．Ｄ．；Ｘｉｏｎｇ，Ｈ．；Ｐｅｇｇ，Ａ．Ｅ．；Ｅａｌｉｃｋ，Ｓ．Ｅ．Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ｏｆ  ａ  ｈｕｍａｎ  Ｓ−Ａｄｅｎｏｓｙｌｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ  Ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ  Ｓｅｌｆ−ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ  Ｅｓｔｅｒ  Ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅ  ａｎｄ  Ｍｅｃｈａｎｉｓｍ  ｏｆ  Ｐｕｔｒｅｓｃｉｎｅ  Ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ  ａｓ  Ｒｅｖｅａｌｅｄ  ｂｙ  ｔｈｅ  Ｈ２４３Ａ  Ｍｕｔａｎｔ．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００１，４０，９４９５−９５０４
【非特許文献２７】Ｔｏｌｂｅｒｔ，Ｄ．Ｗ．；Ｅｋｓｔｒｏｍ，Ｊ．Ｌ．；Ｍａｔｈｅｗｓ，Ｉ．Ｉ．；Ｓｅｃｒｉｓｔ，Ｊ．Ａ．，ＩＩＩ；Ｋａｐｏｏｒ，Ｐ．；Ｐｅｇｇ，Ａ．Ｅ．；Ｅａｌｉｃｋ，Ｓ．Ｅ．Ｔｈｅ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｆｏｒ  Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ  Ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ  ａｎｄ  Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｈｕｍａｎ  Ｓ−Ａｄｅｎｏｓｙｌｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ  Ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００１，４０，９４８４−９４９４
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本開示によって、ある種のアデニン類似体が、溶液中でｓｙｎ配座を取りやすいリガンドとなることが見出された。８−置換アデニン及び非置換アデニン（即ち、８置換基がＨ）を有するＡｄｏＭｅｔの数種類の構造類似体の合成、並びに、それらのＡｄｏＭｅｔＤＣ阻害能の分析を本明細書中で開示する。ＭｅＡｄｏＭｅｔと複合体を形成したＡｄｏＭｅｔＤＣ  Ｆ２２３Ａ変異体、並びに、各阻害剤：５’−デオキシ−５’−［Ｎ−メチル−Ｎ−［２−（アミノオキシ）エチル］アミノ−８−メチル］アデノシン（ＭＡＯＥＭＡ）及び５’−デオキシ−５’−［Ｎ−メチル−Ｎ−［４−（アミノオキシ）ブチル］アミノ−８−エチル］アデノシン（ＭＡＯＢＥＡ）と複合体を形成した野生型タンパク質のそれぞれの結晶構造もまた開示する。便宜上、本明細書中、以下の略号を使用する。ＡｄｏＭｅｔＤＣ（Ｓ−アデノシルメチオニン脱炭酸酵素）；ＡｄｏＭｅｔ（Ｓ−アデノシルメチオニン）；ＭＡＯＥＭＡ（５’−デオキシ−５’−［Ｎ−メチル−Ｎ−［２−（アミノオキシ）エチル］アミノ−８−メチル］アデノシン）；ＭＡＯＢＥＡ（５’−デオキシ−５’−［Ｎ−メチル−Ｎ−［４−（アミノオキシ）ブチル］アミノ−８−エチル］アデノシン）；ＭｅＡｄｏＭｅｔ（Ｓ−アデノシルメチオニンのメチルエステル）；Ｔｒｉｓ（トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン）；ＰＥＧ（ポリ（エチレングリコール））；ＣＣＤ（電荷結合素子）；ＭＧＢＧ（メチルグリオキサールビス（グアニルヒドラゾン））；ＣＧＰ４８６６４Ａ（４−アミジノインダン−１−オン−２’−アミジノヒドラゾン）；ＭＡＯＥＡ（５’−デオキシ−５’−［Ｎ−メチル−Ｎ−［（２−アミノオキシ）エチル］アミノ］アデノシン）；ＭＨＺＰＡ（５’−デオキシ−５’−［Ｎ−メチル−Ｎ−（３−ヒドラジノプロピル）アミノ］アデノシン）；Ｈｅｐｅｓ（Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−Ｎ’−２−エタンスルホン酸）；ＩＰＴＧ（イソプロピル−１−チオ−β−Ｄ−ガラクトピラノシド）；ＤＴＴ（ジチオスレイトール）；ＥＤＴＡ（エチレンジアミン四酢酸）。
【０００９】
特に、本開示は、下記式で表される化合物、その薬学的に許容される塩、その溶媒和物、及び、そのプロドラッグに関する。
【００１０】
【化１】
2010535202.tif 000003
［式中、
Ｒ１及びＲ２はそれぞれ独立して、Ｈ及びアルキルからなる群より選択され；
Ｒ３は、Ｈ、アルキル、ＮＲ１Ｒ２、ＯＲ１Ｒ２、アリ−ル、ヘテロアリ−ル、ハロゲン、及び、ＣＦ３からなる群より選択され；
Ｒ４は、ＮＲ７Ｒ８及びＳＲ１Ｒ２からなる群より選択され；
Ｒ７及びＲ８はそれぞれ独立して、Ｈ、アルキル、（ＣＨ２）ｎＮＲ１Ｒ２、（ＣＨ２）ｎＣＯＮＲ１Ｒ２、及び、（ＣＨ２）ｎＣ＝ＯＮＲ１Ｒ２（上記において、ｎは１〜８の整数）からなる群より選択され；
Ｒ５及びＲ６はそれぞれ独立して、Ｈ及びアシルからなる群より選択される。］
【００１１】
本開示は、有効量の、上記に開示される化合物、又はその薬学的に許容される塩、又はその溶媒和物、又はそのプロドラッグと、薬学的に許容される基剤とを含む医薬組成物にも関する。
【００１２】
本発明の別の態様は、Ｓ−アデノシルメチオニン脱炭酸酵素の阻害を必要とするホストにおいて該酵素を阻害する方法であって、上記に開示される化合物、その薬学的に許容される塩、その溶媒和物、又はそのプロドラッグを有効量で上記ホストに投与することを含む方法に関する。
【００１３】
本発明のさらに別の態様は、寄生虫感染症、又は、ニューモシスチス・カリニ（Ｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓ  ｃａｉｎｉｉ）により引き起こされた感染症に罹患したホストを治療する方法に関する。
【００１４】
本開示のさらに他の目的及び利点は、以下の詳細な説明により、当業者にとって容易に明らかとなるであろう。詳細な説明においては、単に考えられる最良の形態を例示することで好ましい実施形態を図示し、説明している。十分に理解されるであろうが、本開示は他の異なる実施形態も採りうるものであり、幾つかの細部については、本開示から逸脱することなく、各種の自明な点で改変が可能である。従って、本明細書は本質的に例示的なものであり、これに限定されることはない。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１Ａ】活性部位にＭｅＡｄｏＭｅｔが結合したｈＡｄｏＭｅｔＤＣの実際の結晶構造を示す。
【図１Ｂ】ＡｄｏＭｅｔＤＣの活性部位におけるＭｅＡｄｏＭｅｔのモデリングにより得られた構造（濃く図示）を実際の結晶構造（薄色で図示）に重ね合わせて示す。
【図２】Ａ及びＢは、それぞれＭｅＡｄｏＭｅｔと複合体を形成したｈＡｄｏＭｅｔＤＣ  Ｆ２２３Ａ及びｈＡｄｏＭｅｔＤＣ  Ｆ７Ａのモデルを示す。
【図３】ＡｄｏＭｅｔＤＣ  Ｆ２２３Ａ変異体の活性部位におけるＭｅＡｄｏＭｅｔの結晶構造を示す。
【図４】Ａ〜Ｗは、ｈＡｄｏＭｅｔＤＣの阻害剤候補の構造を示す。
【図５】Ａ及びＢは、ｈＡｄｏＭｅｔＤＣと、該酵素に対する２つの阻害剤との相互作用を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
本開示は、下記式で表される化合物、その薬学的に許容される塩、その溶媒和物、及び、そのプロドラッグに関する。
【００１７】
【化２】
2010535202.tif 000004
［式中、
Ｒ１及びＲ２はそれぞれ独立して、Ｈ及びアルキルからなる群より選択され；
Ｒ３は、Ｈ、アルキル、ＮＲ１Ｒ２、ＯＲ１Ｒ２、アリ−ル、ヘテロアリ−ル、ハロゲン、及び、ＣＦ３からなる群より選択され；
Ｒ４は、ＮＲ７Ｒ８及びＳＲ１Ｒ２からなる群より選択され；
Ｒ７及びＲ８はそれぞれ独立して、Ｈ、アルキル、（ＣＨ２）ｎＮＲ１Ｒ２、（ＣＨ２）ｎＣＯＮＲ１Ｒ２、及び、（ＣＨ２）ｎＣ＝ＯＮＲ１Ｒ２（上記において、ｎは１〜８の整数）からなる群より選択され；
Ｒ５及びＲ６はそれぞれ独立して、Ｈ及びアシルからなる群より選択される。］
【００１８】
本開示の説明に使用する様々な用語の定義を以下に列挙する。これらの定義は、本明細書中で、特に規定されることがない限り、それぞれ独立して又はより大きな群の一部として使用される用語に適用される。また、本明細書及び特許請求の範囲に記載される化学式において、任意の記号が特定の化学式又は置換基において二度以上登場する際には、それぞれが意味するものは他方に対して独立していることを意図している。
【００１９】
「有効（な）量」とは、本明細書中に記載される化合物の、薬剤の効能が高まるような治療上有効であり得る量をいう。上記化合物の正確な用量は、用いられる化合物又は誘導体の種類、治療対象の年齢や健康状態、症状の性質や重症度によって異なる。しかしながら、本開示を知得した当業者であれば、過度な実験を強いられることなく、有効量を決定できよう。
【００２０】
「薬学的に許容される」とは、適切な医学的判断の範囲内で、ヒト及び動物の組織との接触に適しており、過度の毒性、刺激、アレルギー反応、又は、他の厄介な問題がなく、妥当な利益／リスク比に相応した化合物、材料、組成物（若しくは構成物）、及び／又は、投与形態をいう。
【００２１】
「薬学的に許容される塩」とは、本開示化合物の誘導体であって、親化合物を修飾して酸塩又は塩基塩としたものをいう。薬学的に許容される塩の例としては、以下に限定されないが、アミンなどの塩基性残基の鉱酸塩又は有機酸塩；カルボン酸などの酸性残基のアルカリ塩又は有機塩などが挙げられる。薬学的に許容される塩は、無毒な無機酸や有機酸などから形成された、親化合物の公知の無毒な塩又は第四級アンモニウム塩も包含する。当該塩の形成に使用される無機酸としては、典型的には、塩化水素酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硝酸、硫酸、リン酸、及び、次リン酸などが挙げられる。また、脂肪族モノ及びジカルボン酸、フェニル置換アルカン酸（ａｌｋｏｎｉｃ  ａｃｉｄｓ）、ヒドロキシアルカン酸、及び、ヒドロキシアルカン二酸、芳香族酸、脂肪族スルホン酸、及び、芳香族スルホン酸などの有機酸由来の塩を使用してもよい。よって、上記薬学的に許容される塩としては、酢酸塩、フェニル酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、アクリル酸塩、アスコルビン酸塩、安息香酸塩、クロロ安息香酸塩、ジニトロ安息香酸塩、ヒドロキシ安息香酸塩、メトキシ安息香酸塩、メチル安息香酸塩、ｏ−アセトキシ安息香酸塩、ナフタレン−２−安息香酸塩、臭化物、イソ酪酸塩、フェニル酪酸塩、β−ヒドロキシ酪酸塩、ブチン−１，４−ジオエート、ヘキシン−１，４−ジオエート、カプリン酸塩（ｃａｂｒａｔｅ）、カプリル酸塩、塩化物、桂皮酸塩、クエン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グリコール酸塩、ヘプタン酸塩、馬尿酸塩、乳酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、ヒドロキシマレイン酸塩、マロン酸塩、マンデル酸塩、メシル酸塩、ニコチン酸塩、イソニコチン酸塩、硝酸塩、シュウ酸塩、フタル酸塩、テレフタル酸塩、リン酸塩、一水素リン酸塩（モノハイドロジェンホスフェート）、二水素リン酸塩（ジハイドロジェンホスフェート）、メタリン酸塩、ピロリン酸塩、プロピオール酸塩、プロピオン酸塩、フェニルプロピオン酸塩、サリチル酸塩、セバシン酸塩、コハク酸塩、スベリン酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、ピロ硫酸塩、亜硫酸塩、重亜硫酸塩、スルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−ブロモベンゼンスルホン酸塩、クロロベンゼンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、メタンスルホン酸塩、ナフタレン−１−スルホン酸塩、ナフタレン−２−スルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、キシレンスルホン酸塩、及び、酒石酸塩などが挙げられる。
【００２２】
塩の形成に一般的に使用される塩基としては、水酸化アンモニウム、並びに、アルカリ金属及びアルカリ土類金属水酸化物、炭酸塩、さらには、脂肪族１級、２級、及び３級アミン、脂肪族ジアミンが挙げられる。付加塩の調製に特に有用な塩基として、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化アンモニウム、炭酸カリウム、メチルアミン、ジエチルアミン、及び、エチレンジアミンが例示される。
【００２３】
「プロドラッグ」とは、医学的効果を有する活性型に体内で変換される化合物である。全身的に投与するには活性薬剤の毒性が強過ぎる場合、消化管による活性薬剤の吸収が乏しい場合、又は、活性薬剤が標的に到達する前に体内で分解されてしまう場合に、プロドラッグが有効であり得る。プロドラッグの調製方法は、文献：Ｈａｎｓ  Ｂｕｎｄｇａａｒｄ，Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ  Ｂ．Ｖ．１９８５）に開示されており、当該文献の全内容を本明細書に引用して援用する。
【００２４】
各種の窒素官能基（アミノ、ヒドロキシアミノ、ヒドラジノ、グアニジノ、アミジノ、アミド等）を有する化合物のプロドラッグ形態としては、以下に示すような種類の誘導体が挙げられる。
カルボキサミド：−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ
カルバメート：−ＮＨＣ（Ｏ）ＯＲ
（アシルオキシ）アルキルカルバメート：ＮＨＣ（Ｏ）ＯＲＯＣ（Ｏ）Ｒ
エナミン：−ＮＨＣＲ（＝ＣＨＣＲＯ２Ｒ）又は−ＮＨＣＲ（＝ＣＨＣＲＯＮＲ２）
シッフ塩基：−Ｎ＝ＣＲ２
マンニッヒ塩基（カルボキシイミド化合物由来）：ＲＣＯＮＨＣＨ２ＮＲ２
上記式中、Ｒ基はそれぞれ独立して、上記で定義されるような、水素、置換又は非置換のアルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、ヘテロサイクリル、アルキルアリール、アラルキル、アラルケニル、アラルキニル、シクロアルキル、又は、シクロアルケニル基であってもよい。
【００２５】
このようなプロドラッグ誘導体の調製については、各種文献で考察されている（例えば、ＡｌｅｘａｎｄｅｒらによるＪ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９８８，３１，３１８；Ａｌｉｇａｓ−ＭａｒｔｉｎらによるＰＣＴ  ＷＯ  ｐｐ／４１５３１のｐ．３０）。本発明の化合物の窒素原子のうちの１つ（又は１つ以上）が、これらの誘導体の調製において変換される窒素官能基である。
【００２６】
本開示のカルボキシル含有化合物のプロドラッグ形態はエステル（−ＣＯ２Ｒ）を含む。上記式中、Ｒ基は、体内で酵素又は加水分解プロセスを経て、薬学的に許容される濃度で放出される任意のアルコールに相当する。
【００２７】
本開示のカルボン酸形態に由来する別のプロドラッグは、ＢｏｄｏｒらによるＪ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９８０，２３，４６９に記載されている構造からなる以下のような第四級塩型であってもよい。
【００２８】
【化３】
2010535202.tif 000005
【００２９】
言うまでもなく、本開示の化合物は、特に断りのない限り、分子中の考え得る各種原子におけるあらゆる光学異性体及び立体異性体に関するものであると解されたい。
【００３０】
「溶媒和物」とは、溶媒と溶質との相互作用により形成された化合物をいい、例えば水和物が挙げられる。溶媒和物は、通常、化学量論的割合又は不定比の割合のいずれかで結晶構造中に溶媒分子を含む結晶性の固体付加物である。
【００３１】
「ハロゲン」又は「ハロ（ｈａｌｏ）」という用語は、フッ素、塩素、臭素、及びヨウ素を指す。
【００３２】
「アリール（基）」という用語は、環部分に６〜１２個の炭素原子を有する、単環又は二環の芳香族炭化水素基（例えばフェニル、ナフチル、ビフェニル及びジフェニル基など）を指し、該基は置換されていてもよい。芳香族基又はアリール基は、より典型的には、フェニル及びアルキルで置換された芳香族基（アラルキル）であり、例えばフェニルＣ１−３アルキル及びベンジルが挙げられる。
【００３３】
「アラルキル（基）」又は「アルキルアリール（基）」又は「アラリル（基）（ａｌａｒｙｌ）」という用語は、アルキル基を介して直接結合しているアリール基を指し、例えばベンジルやフェネチルが挙げられる。
【００３４】
「置換アリール（基）」又は「置換アルキルアリール（基）」という用語は、例えばアルキル、置換アルキル、ハロゲン及びアルコキシなどの１〜４つの置換基などで置換されたアリール基又はアルキルアリール基を指す。「置換ベンジル」は、置換アリールにおいて上掲された基のいずれかなどで置換されたベンジル基を指す。
【００３５】
「アルキル（基）」という用語は、直鎖又は分枝鎖の置換されていないＣ１−Ｃ２０、より典型的にはＣ１−Ｃ８の炭化水素基、さらにより典型的には置換されていないＣ１−Ｃ４アルキル基を指す。好適なアルキル基の例としては、メチル、エチル、及びプロピルが挙げられる。分枝アルキル基の例としては、イソプロピル及びｔ−ブチルが挙げられる。
【００３６】
「ヘテロアリール」という用語は、置換されていても置換されていなくてもよい環状芳香族基であって、例えば、環内に少なくとも１つのヘテロ原子と少なくとも１つの炭素原子とを含む、４〜７員環の単環系、７〜１１員環の二環系、又は、１０〜１５員環の三環系などである基を指す。ヘテロ原子を含むヘテロサイクリル基の各環は、窒素原子、酸素原子及び硫黄原子から選択されるヘテロ原子を１、２又は３つ有していてもよく、さらにその窒素及び硫黄ヘテロ原子は所望により酸化されていてもよく、また、窒素ヘテロ原子は所望により四級化（ｑｕａｔｅｒｎｉｚｅｄ）されていてもよい。ヘテロサイクリル基は任意のヘテロ原子又は炭素原子で結合していてもよい。ヘテロアリールの例としては、以下に限定されないが、ピロール、イミダゾール、ピラゾール、ピリジン、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、インドリジン、イソインドール、インドール、インダゾール、プリン、キノキサリン、キナゾリン、シンノリン、チオフェン、フラン及びイソピロールが挙げられる。ヘテロ芳香族部分は、所望により、上記のアリールの場合のように置換されていてもよく、アルコキシ、ハロゲン及びアルキルから選択される１つ以上の置換基での置換も包含される。
【００３７】
脂肪族アシル基は、典型的には１〜６つの炭素原子を含み、例えばホルミル、アセチル及びプロピオニルが挙げられる。
【００３８】
本発明に係る化合物は、以下のスキームによって製造することができる。
【００３９】
スキーム１には、使用された前駆体ヌクレオシド系列３及び４がそれらの合成系とともに表されている。
【００４０】
【化４】
2010535202.tif 000006
【００４１】
Ｃ−５’にアミノオキシアルキルアミノ側鎖を有する標的化合物を、スキーム２に示すように、２つの異なる経路で製造した。保護基として２’，３’−Ｏ−イソプロピリデン基を利用した元の反応シーケンスにおいては、ヒドロキシアルキルアミノ前駆体１０を、それに必須のアミンでトシル基を置換することにより生成した。Ｎ−ヒドロキシフタルイミド、トリフェニルホスフィン及びＤＥＡＤを使用して３８、アミノオキシ前駆体１１を生成した後、酸性条件下で所望の標的１２に変換した。その後、アミノオキシ前駆体である、Ｎ−（２−ブロモエトキシ）エタンイミド酸エチル４８及びＮ−（Ｎ−４−ブロモブトキシ）エタンイミド酸エチル４９を最初に生成すること（スキーム２）がより有効であることが分かった。これらアミノオキシ前駆体は、５’−メチルアミノ−５’−デオキシヌクレオシドとのハロゲン化物置換によってＣ−５’に付加され、これにより生成物系列６及び８が生成された。当初は、ヌクレオシドに対してイソプロピリデン保護基を用いてこの置換を行ったが、その後、保護基を用いなくても反応が同様又はより良好に行われるとの結論が得られた。上記方法により標的７ａ〜ｃ及び９ａ〜ｆを製造した。
【００４２】
【化５】
2010535202.tif 000007
【００４３】
スキーム３に示されるように、全てのアミド及びヒドラジドを同様の手順で製造した。５’−メチルアミノ−５’−デオキシヌクレオシドを適当なω−クロロエステルで処理した後、アンモニア又はヒドラジンのいずれかで処理した。イソプロピリデン基が含まれる場合には、その後、酸性脱保護工程で当該イソプロピリデン基を取り除いた。このようにして、２つの異なるリンカー長を有し、かつ、様々な８−置換基を有する標的１３ｄ〜ｆ、ｊ〜ｍを製造した。
【００４４】
【化６】
2010535202.tif 000008
【００４５】
Ｃ−５’にアミノアルキルアミノ側鎖を有する標的を、主に、非対称アミンによるＣ−５’離脱基の置換を利用して製造した（スキーム４）。例えば、３ａを３−メチルアミノエチルアミンで処理して、１４ｆ及び１５ｄの混合物を生成し、当該混合物を分離して、所望の標的である純粋な１４ｆを得た。この手順においてイソプロピリデン基を有する出発物質を使用する場合、酸で処理して所望の最終生成物を生成した。初期の研究過程においては、３−ブロモプロピルフタルイミドで５’−メチルアミノ−５’−デオキシヌクレオシドを処理した後、２つの脱保護工程を施して化合物１７ｃ、ｄを製造した。
【００４６】
【化７】
2010535202.tif 000009
【００４７】
アミノアルキルアミノ側鎖を基にして、１４ｅを１−カルボキサミジノピラゾール５０と反応させ、グアニジン標的１８ａを生成した。関連した反応シーケンスにおいては、３ｊを３−（メチルアミノ）プロピオニトリルで処理し、ニトリル１８ｂ５１を生成し、当該ニトリル１８ｂを塩基性条件下、ヒドロキシアミン塩酸塩で処理して、標的アミドキシム１８ｃを製造した。
【００４８】
５’−ジメチルアミノ及び５’−ジメチルスルホニオ化合物である１９ａ、ｂ及び２１ａ〜ｄを慣例の方法で製造した（スキーム５）。ジメチルアミンで３ａ又は３ｇ４３の５’−塩素を置換してジメチルアミノ基を導入した。５’−メチルチオ化合物２０ａ、ｂを臭化メチルで処理し、２１ａ及び２１ｃを生成した。イオン交換を用いて、塩化物塩２１ｂ及び２１ｄを製造した。ナトリウムチオメトキシドで３ａの５’−塩素を置換して、８−メチル−５’−メチルチオヌクレオシド２０ａを製造した。
【００４９】
【化８】
2010535202.tif 000010
【００５０】
本開示をさらに説明するために以下の実施例を示すが、これらに限定されない。
【実施例１】
【００５１】
５’−クロロ−５’−デオキシ−８−メチルアデノシン（３ａ）
無水ピリジン（５０１ｍｇ、０．５１ｍＬ、６．３３ｍｍｏｌ）及びＣＨ３ＣＮ（２．５ｍＬ）中に２ａ４０（８９２ｍｇ、３．１７ｍｍｏｌ）を添加した懸濁液を氷浴で冷却下、攪拌しながら、該懸濁液に対して、ＳＯＣｌ２（１．８８ｇ、１．１５ｍＬ、１５．８０ｍｍｏｌ）をゆっくりと添加した。０〜５℃で３〜４時間攪拌し続けた後、一晩かけて室温にまで加温した。得られた懸濁液を減圧濃縮した。この反応混合物にメタノール（２０ｍＬ）、水（２ｍＬ）及びＮＨ４ＯＨ（４ｍＬ）を添加した後、室温で０．５時間攪拌した。反応混合物を濃縮乾固した。化合物をＭｅＯＨに溶解し、シリカゲル（３ｇ）を添加した後、溶媒を除去した。そのシリカゲル上の混合物を、シリカゲルを充填したカラムに投入し、クロロホルム：メタノール（７：１）で溶出を行った。所望の画分を合わせて、濃縮し、減圧下で乾燥した。収率６６１ｍｇ（７０％）。ＭＳ  ｍ／ｚ  ３００（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．０９（ｂｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．１５（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．８１（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝５．７Ｈｚ），５．４９（ｄ，１Ｈ，２’−ＯＨ，Ｊ２’−２’ＯＨ＝６．１Ｈｚ），５．４５（ｄ，１Ｈ，３’−ＯＨ，Ｊ３’−３’ＯＨ＝５．３Ｈｚ），５．１３（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ１’，２’＝５．７Ｈｚ，Ｊ２’，３’＝４．８Ｈｚ，Ｊ２’−２’ＯＨ＝６．１Ｈｚ），４．３１（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ２’，３’＝４．８Ｈｚ，Ｊ３’，４’＝４．０Ｈｚ，Ｊ３’−３’ＯＨ＝５．３Ｈｚ），４．０３−４．１０（ｂｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），３．９３−３．９９（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），３．８２−３．８８（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．５５（ｓ，３Ｈ，８−ＣＨ３）．
【実施例２】
【００５２】
５’−クロロ−５’−デオキシ−８−エチルアデノシン（３ｂ）
２ｂ４０（１．２８ｇ、４．３３ｍｍｏｌ）、ピリジン（６８５ｍｇ、０．７０ｍＬ、８．６５ｍｍｏｌ）、ＣＨ３ＣＮ（１０ｍＬ）、及び、ＳＯＣｌ２（２．５７ｇ、１．５８ｍＬ、２１．６０ｍｍｏｌ）を使用し、上記の３ａで示した手順と同様の手順を実施した。収率４９８ｍｇ（３７％）。ＭＳ  ｍ／ｚ  ３１４（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．０９（ｂｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．１４（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．８０（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝５．７Ｈｚ），５．４８（ｄ，１Ｈ，２’−ＯＨ，Ｊ２’−２’ＯＨ＝６．１Ｈｚ），５．４５（ｄ，１Ｈ，３’−ＯＨ，Ｊ３’−３’ＯＨ＝５．４Ｈｚ），５．２０（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ１’，２’＝５．７Ｈｚ，Ｊ２’，３’＝４．６Ｈｚ，Ｊ２’−２’ＯＨ＝６．１Ｈｚ），４．３０−４．３７（ｂｍ，１Ｈ，Ｈ−３’），４．０３−４．１０（ｂｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），３．９４−４．０（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），３．８３−３．８９（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．８９（ｑ，２Ｈ，８−ＣＨ２ＣＨ３），１．３１（ｔ，３Ｈ，８−ＣＨ２ＣＨ３）．
【実施例３】
【００５３】
５’−クロロ−５’−デオキシ−８−（メチルアミノ）アデノシン（３ｃ）
２ｃ４１（２．９ｇ、９．７８ｍｍｏｌ）、ピリジン（１．５４ｇ、１．５７ｍＬ、１９．４６ｍｍｏｌ）、ＣＨ３ＣＮ（５ｍＬ）、及び、ＳＯＣｌ２（５．８２ｇ、３．５６ｍＬ、４８．９１ｍｍｏｌ）を使用し、３ａの製造の記載と同様の手順で化合物３ｃを製造した。収率１．９５ｇ（６３％）。ＭＳ  ｍ／ｚ  ３１５（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．９１（ｂｓ，１Ｈ，Ｈ−２），），６．７８（ｑ，１Ｈ，８ＣＨ３−ＮＨ），６．５０（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．７０（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝５．０Ｈｚ），５．４１（ｄ，１Ｈ，２’−ＯＨ，Ｊ２’−２’ＯＨ＝５．６Ｈｚ），５．３２（ｄ，１Ｈ，３’−ＯＨ，Ｊ３’−３’ＯＨ＝５．３Ｈｚ），５．１８（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ１’，２’＝５．０Ｈｚ，Ｊ２’，３’＝５．４Ｈｚ，Ｊ２’−２’ＯＨ＝５．６Ｈｚ），４．３３（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ２’，３’＝５．４Ｈｚ，Ｊ３’，４’＝４．４Ｈｚ，Ｊ３’−３’ＯＨ＝５．３Ｈｚ），），３．９１−４．０２（ｂｍ，２Ｈ，Ｈ−４’，５’−ＣＨ２），３．７６−３．８２（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．８８（ｄ，３Ｈ，８ＮＨ−ＣＨ３，Ｊ＝４．５Ｈｚ）．
【実施例４】
【００５４】
５’−クロロ−５’−デオキシ−８−フェニルアデノシン（３ｄ）
３ａで記載された手順を用いて、２ｄ４２（４．５ｇ、１３．１０ｍｍｏｌ）、ピリジン（２．０７ｍｇ、２．１２ｍＬ、２６．２ｍｍｏｌ）、ＣＨ３ＣＮ（６ｍＬ）、及び、ＳＯＣｌ２（７．７９ｇ、４．７８ｍＬ、６５．４７ｍｍｏｌ）から、３ｄを製造した。収率２．２１ｇ（４７％）。ＭＳ  ｍ／ｚ  ３６２（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．２０（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．７１−７．７６（ｍ，２Ｈ，８−フェニルｏ−Ｈ’ｓ），７．５９−７．６４（ｍ，３Ｈ，８−フェニルｍ−及びｐ−Ｈ’ｓ），７．４０（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．７５（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝６．０Ｈｚ），５．５２（ｄ，１Ｈ，２’−ＯＨ，Ｊ２’−２’ＯＨ＝５．６Ｈｚ），５．３９−５．４４（ｍ，２Ｈ，Ｈ−２’，３’−ＯＨ），４．３３（ｂｓ，１Ｈ，Ｈ−３’），３．９８−４．０６（ｂｍ，２Ｈ，Ｈ−４’，５’−ＣＨ２），３．８８−３．９４（ｍ，２Ｈ，５’−ＣＨ２）．
【実施例５】
【００５５】
５’−デオキシ−５’−メチルアミノ−８−メチルアデノシン（４ａ）
スチール製容器内で３３％メチルアミン／エタノール溶液（３０ｍＬ）中に３ａ（６６０ｍｇ、２．２０ｍｍｏｌ）を添加した混合物を、９０℃で２日間加熱した。反応混合物を濃縮乾固し、カラムクロマトグラフィー（４：１：０．３＝クロロホルム：メタノール：ＮＨ４ＯＨで溶出）により精製した。所望の画分を合わせて、濃縮し、減圧下で乾燥した。収率２９４ｍｇ（４５％）。ＭＳ  ｍ／ｚ  ２９５（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．０８（ｂｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．１４（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．７２（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝６．５Ｈｚ），５．３０（ｄ，１Ｈ，２’−ＯＨ，Ｊ２’−２’ＯＨ＝６．３Ｈｚ），５．１７（ｂｄ，１Ｈ，３’−ＯＨ，Ｊ３’−３’ＯＨ＝３．５Ｈｚ），５．０１（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ１’，２’＝６．５Ｈｚ，Ｊ２’，３’＝５．５Ｈｚ，Ｊ２’−２’ＯＨ＝６．３Ｈｚ），４．１６（ｂｓ，１Ｈ，Ｈ−３’），３．９６−４．０（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），２．６４−２．７７（ｂｍ，２Ｈ，５’−ＣＨ２），２．５３（ｓ，３Ｈ，８−ＣＨ３），２．２９（ｓ，３Ｈ，５’ＮＨ−ＣＨ３）．
【実施例６】
【００５６】
５’−デオキシ−５’−メチルアミノ−８−エチルアデノシン（４ｂ）
３ｂ（１．００ｇ、３．１８ｍｍｏｌ）及び３３％メチルアミン／エタノール溶液（３０ｍＬ）を使用し、上記の４ａで示した手順と同様の手順を実施した。カラムクロマトグラフィー（５：１：０．３＝クロロホルム：メタノール：ＮＨ４ＯＨで溶出）により、ガラス質の黄色固体を得た。４９８ｍｇ（５０％）。ＭＳ  ｍ／ｚ  ３０９（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．０８（ｂｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．１３（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．７０（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝６．６Ｈｚ），５．３０（ｄ，１Ｈ，２’−ＯＨ，Ｊ２’−２’ＯＨ＝６．４Ｈｚ），５．１６（ｄ，１Ｈ，３’−ＯＨ，Ｊ３’−３’ＯＨ＝４．５Ｈｚ），５．０８（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ１’，２’＝６．６Ｈｚ，Ｊ２’，３’＝５．４Ｈｚ，Ｊ２’−２’ＯＨ＝６．４Ｈｚ），４．１４−４．１８（ｍ，１Ｈ，Ｈ−３’），３．９６−４．０（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），２．８８（ｑ，２Ｈ，８−ＣＨ２ＣＨ３），２．６４−２．７８（ｍ，２Ｈ，５’−ＣＨ２），２．２９（ｓ，３Ｈ，５’ＮＨ−ＣＨ３），１．３０（ｔ，３Ｈ，８ＣＨ２ＣＨ３）．
【実施例７】
【００５７】
５’−デオキシ−５’，８−ビス（メチルアミノ）アデノシン（４ｃ）
３ｃ（１．００ｇ、３．１７ｍｍｏｌ）及び３３％メチルアミン／エタノール溶液（３０ｍＬ）を使用し、４ａの製造の記載と同様の手順で化合物４ｃを製造した。カラムクロマトグラフィー（７：１：０．４＝クロロホルム：メタノール：ＮＨ４ＯＨで溶出）により、ガラス質の黄色固体を得た。５０５ｍｇ（５１％）。ＭＳ  ｍ／ｚ  ３１０（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．８９（ｂｓ及びｑ，２Ｈ，Ｈ−２及び８ＣＨ３−ＮＨ），６．４４（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．８４（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝７．０Ｈｚ），５．２２（ｄ，１Ｈ，２’−ＯＨ，Ｊ２’−２’ＯＨ＝６．４Ｈｚ），５．１２（ｄ，１Ｈ，３’−ＯＨ，Ｊ３’−３’ＯＨ＝４．０Ｈｚ），４．６６（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ１’，２’＝７．０Ｈｚ，Ｊ２’，３’＝５．４Ｈｚ，Ｊ２’−２’ＯＨ＝６．４Ｈｚ），４．１４（ｂｍ，１Ｈ，Ｈ−３’），３．９４−４．０（ｂｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），２．９０（ｄ，３Ｈ，８ＮＨ−ＣＨ３，Ｊ＝４．４Ｈｚ），２．７７−２．８３（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．５７−２．６２（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．３５（ｓ，３Ｈ，５’ＮＨ−ＣＨ３）．
【実施例８】
【００５８】
５’−デオキシ−５’−メチルアミノ−８−フェニルアデノシン（４ｄ）
３ｄ（２．００ｇ、５．５２ｍｍｏｌ）及び３３％メチルアミン／エタノール溶液（４０ｍＬ）を使用し、４ａの製造の記載と同様の手順で化合物４ｄを製造した。カラムクロマトグラフィー（４：１：０．２＝クロロホルム：メタノール：ＮＨ４ＯＨで溶出）により、ガラス質の黄色固体を得た。９６３ｍｇ（４９％）。ＭＳ  ｍ／ｚ  ３５７（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．１９（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．７２−７．７６（ｍ，２Ｈ，８−フェニルｏ−Ｈ’ｓ），７．５８−７．６１（ｍ，３Ｈ，８−フェニルｍ−及びｐ−Ｈ’ｓ），７．４０（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．７０（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝６．４Ｈｚ），５．３８（ｄ，１Ｈ，２’−ＯＨ，Ｊ２’−２’ＯＨ＝６．２Ｈｚ），５．２９（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ１’，２’＝６．４Ｈｚ，Ｊ２’，３’＝５．１Ｈｚ，Ｊ２’−２’ＯＨ＝６．２Ｈｚ），５．１４（ｂｓ，１Ｈ，３’−ＯＨ），４．１９（ｂｓ，１Ｈ，Ｈ−３’），３．９５−４．０（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），２．８２（ｄ，２Ｈ，５’−ＣＨ２，Ｊ＝５．２Ｈｚ），２．３４（ｓ，３Ｈ，５’ＮＨ−ＣＨ３）．
【実施例９】
【００５９】
５’−デオキシ−５’−［［２−［［（１−エトキシエチリデン）アミノ］オキシ］エチル］メチルアミノ］−８−メチルアデノシン（６ａ）
ＤＭＦ（５ｍＬ）中に化合物４ａ（４１６ｍｇ、１．４１ｍｍｏｌ）、Ｎ−（２−ブロモエトキシ）エタンイミド酸エチル（ｅｔｈｙｌ  Ｎ−（２−ｂｒｏｍｏｅｔｈｏｘｙ）ｅｔｈａｎａｍｉｄａｔｅ）４８（３５０ｍｇ、１．６６ｍｍｏｌ）、及び、ＤＩＥＡ（１１ｍｇ、０．０１４ｍＬ、０．０８５ｍｍｏｌ）を添加した混合物を、窒素雰囲気下、５０℃で一晩加熱した。反応混合物を濃縮乾固し、得られたシロップ状液体をカラムクロマトグラフィー（７：１：０．１＝クロロホルム：メタノール：ＮＨ４ＯＨで溶出）により精製した。所望の画分を合わせて、濃縮し、減圧下で乾燥し、ガラス質の黄色粘稠固体を得た。収率５０ｍｇ（８％）。ＭＳ  ｍ／ｚ  ４２４（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．０７（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．１１（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．７３（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝５．５Ｈｚ），４．３１（ｄ，１Ｈ，２’−ＯＨ，Ｊ２’−２’ＯＨ＝６．３Ｈｚ），５．１５（ｄ，１Ｈ，３’−ＯＨ，Ｊ３’−３’ＯＨ＝５．５Ｈｚ），５．０４（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ１’，２’＝５．５Ｈｚ，Ｊ２’，３’＝５．１Ｈｚ，Ｊ２’−２’ＯＨ＝６．３Ｈｚ），４．１３（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ２’，３’＝５．１Ｈｚ，Ｊ３’，４’＝４．７Ｈｚ，Ｊ３’−３’ＯＨ＝５．５Ｈｚ），３．９２（ｑ，２Ｈ，ＣＨ２ＣＨ３），３．８８（ｔ，２Ｈ，ＮＯ−ＣＨ２），２．７２−２．７８（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．５６−２．６２（ｍ，４Ｈ，５’−ＣＨ２，Ｈ−４’，Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ２），２．５３（ｓ，３Ｈ，８−ＣＨ３），２．２１（ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），１．８３（ｓ，３Ｈ，Ｃ−ＣＨ３），１．１９（ｔ，３Ｈ，ＯＣＨ２ＣＨ３）．
【実施例１０】
【００６０】
５’−デオキシ−５’−［［２−［［（１−エトキシエチリデン）アミノ］オキシ］エチル］メチルアミノ］−８−（メチルアミノ）アデノシン（６ｂ）
４ｃ（５００ｍｇ、１．６１ｍｍｏｌ）、Ｎ−（２−ブロモエトキシ）エタンイミド酸エチル（ｅｔｈｙｌ  Ｎ−（２−ｂｒｏｍｏｅｔｈｏｘｙ）ｅｔｈａｎａｍｉｄａｔｅ）４８（４０７ｍｇ、１．９３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（１０４ｍｇ、０．１４ｍＬ、０．８０ｍｍｏｌ）、及び、ＤＭＦ（５ｍＬ）を使用し、６ａで示した手順と同様の手順で化合物６ｂを製造した。カラムクロマトグラフィー（７：１：０．３＝クロロホルム：メタノール：ＮＨ４ＯＨで溶出）により、ガラス質の黄色粘稠固体を得た。収率２０９ｍｇ（３０％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ４３９（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．８９（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），６．８５（ｑ，１Ｈ，８ＣＨ３−ＮＨ），６．４７（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．６９（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝５．０Ｈｚ），５．２７（ｄ，１Ｈ，２’−ＯＨ，Ｊ２’−２’ＯＨ＝５．５Ｈｚ），５．０６（ｄ，１Ｈ，３’−ＯＨ，Ｊ３’−３’ＯＨ＝５．０Ｈｚ），４．８８（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ１’，２’＝５．０Ｈｚ，Ｊ２’，３’＝５．８Ｈｚ，Ｊ２’−２’ＯＨ＝５．５Ｈｚ），４．１７（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ２’，３’＝５．８Ｈｚ，Ｊ３’，４’＝４．７Ｈｚ，Ｊ３’−３’ＯＨ＝５．０Ｈｚ），３．８６−３．９５（ｍ，３Ｈ，Ｈ−４’，ＮＯ−ＣＨ２），３．９２（ｑ，２Ｈ，ＣＨ２ＣＨ３），２．８８（ｄ，３Ｈ，８ＮＨ−ＣＨ３，Ｊ＝４．６Ｈｚ），２．７１−２．７７（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．５６−２．６７（ｍ，３Ｈ，５’−ＣＨ２，Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ２），２．２４（ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），１．８３（ｓ，３Ｈ，Ｃ−ＣＨ３），１．１９（ｔ，３Ｈ，ＯＣＨ２ＣＨ３）．
【実施例１１】
【００６１】
５’−デオキシ−５’−［［２−［［（１−エトキシエチリデン）アミノ］オキシ］エチル］メチルアミノ］−８−フェニルアデノシン（６ｃ）
６ａで記載された手順を用いて、４ｄ（４００ｍｇ、１．１２ｍｍｏｌ）、Ｎ−（２−ブロモエトキシ）エタンイミド酸エチル（ｅｔｈｙｌ  Ｎ−（２−ｂｒｏｍｏｅｔｈｏｘｙ）ｅｔｈａｎａｍｉｄａｔｅ）４８（２８３ｍｇ、１．３４ｍｍｏｌ）、及び、ＤＩＥＡ（７２ｍｇ、０．１０ｍＬ、０．５５ｍｍｏｌ）から、６ｃを製造した。カラムクロマトグラフィー（７：１＝クロロホルム：メタノールで溶出）により、ガラス質の黄色粘稠固体を得た。収率１０５ｍｇ（２０％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ４８６（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．１７（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．７２−７．７８（ｍ，２Ｈ，８−フェニルｏ−Ｈ’ｓ），７．５８−７．６３（ｍ，３Ｈ，８−フェニルｍ−及びｐ−Ｈ’ｓ），７．３６（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．６７（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝５．２Ｈｚ），５．２９−５．３４（ｍ，２Ｈ，２’−ＯＨ，Ｈ−２’），５．１３（ｄ，１Ｈ，３’−ＯＨ，Ｊ３’−３’ＯＨ＝５．３Ｈｚ），４．１４−４．１８（ｍ，１Ｈ，Ｈ−３’），３．８８−３．９７（ｍ，３Ｈ，Ｈ−４’，ＮＯ−ＣＨ２），３．９２（ｑ，２Ｈ，ＣＨ２ＣＨ３），２．７８−２．８４（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．６０−２．７０（ｍ，３Ｈ，５’−ＣＨ２，Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ２），２．２４（ｂｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），１．８３（ｓ，３Ｈ，Ｃ−ＣＨ３），１．１９（ｔ，３Ｈ，ＯＣＨ２ＣＨ３）．
【実施例１２】
【００６２】
５’−［（２−アミノオキシエチル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−メチルアデノシン硫酸塩（２．２：１塩）（７ａ）
化合物６ａ（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を２Ｎ  Ｈ２ＳＯ４（２ｍＬ）に溶解し、室温で２日間攪拌した。反応混合物をＮａＨＣＯ３で中和し、凍結乾燥した。化合物をＥｔＯＨ（２×１０ｍＬ）で抽出し、濃縮乾固した。残留物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル２３０〜４００メッシュ、７：１：０．３＝クロロホルム：メタノール：ＮＨ４ＯＨで溶出）で精製した。所望の画分を合わせて、濃縮し、減圧下で乾燥した。生成物をＥｔＯＨ（３ｍＬ）に溶解し、２Ｎ  Ｈ２ＳＯ４を滴下した。その後沈殿した硫酸塩を濾過し、ＥｔＯＨで洗滌した。本質的に吸湿性である該生成物を水（２ｍＬ）に溶解し、凍結乾燥して、白色固体を得た。収率２０ｍｇ（２９％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ３５４（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．２５（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．８０（ｂｓ，２Ｈ，Ｏ−ＮＨ２），５．８７（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝５．７Ｈｚ），４．８８（ｔ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ２’，３’＝５．２Ｈｚ），４．３５−４．４０（ｂｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），４．２３（ｔ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ２’，３’＝３．２Ｈｚ），４．１０（ｔ，２Ｈ，ＮＨ２Ｏ−ＣＨ２），３．５０−３．５７（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），３．６５−３．７２（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），３．４５（ｂｍ，２Ｈ，Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ２），２．８５（ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），２．５８（ｓ，３Ｈ，８−ＣＨ３）；ＵＶ  λｍａｘ，ｎｍ，ｐＨ１，２７４（ε  １５，２００），ｐＨ７，２７６（ε  １５，５００），ｐＨ１３，２７７（ε  １５，９００）．Ａｎａｌ．（Ｃ１４Ｈ２３Ｎ７Ｏ４．２．２Ｈ２ＳＯ４．０．１Ｃ２Ｈ５ＯＨ．０．５Ｈ２Ｏ）Ｃ，Ｈ，Ｎ．
【実施例１３】
【００６３】
５’−［（２−アミノオキシエチル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−（メチルアミノ）アデノシン硫酸塩（２．１：１塩）（７ｂ）
７ａで記載された手順を用いて、６ｂ（２００ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）から、７ｂを製造した。収率１２５ｍｇ（４６％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ３６９（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．１６（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．５０−７．６５（ｂｍ，２Ｈ，Ｏ−ＮＨ２），５．８３（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝５．３Ｈｚ），６．５６（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），４．９６（ｔ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ２’，３’＝４．８Ｈｚ），４．２８−４．３５（ｂｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），４．２５（ｔ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ２，３＝４．１Ｈｚ），３．９６（ｔ，２Ｈ，ＮＨ２Ｏ−ＣＨ２），３．５９−３．６６（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），３．４９−３．５７（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），３．３６−３．４０（ｂｍ，２Ｈ，Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ２），２．９４（ｓ，３Ｈ，８ＮＨ−ＣＨ３），２．８１（ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３）；ＵＶ  λｍａｘ，ｎｍ，ｐＨ１，２７４（ε  １４，３００），ｐＨ７，２７６．７（ε  １７，１００），ｐＨ１３，２７６．１（ε  １７，５００）．Ａｎａｌ．（Ｃ１４Ｈ２４Ｎ８Ｏ４．２．１Ｈ２ＳＯ４．０．３Ｃ２Ｈ５ＯＨ．０．２Ｈ２Ｏ）Ｃ，Ｈ，Ｎ，Ｓ．
【実施例１４】
【００６４】
５’−［（２−アミノオキシエチル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−フェニルアデノシン硫酸塩（２：１塩）（７ｃ）
６ｃ（９９ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）を使用し、７ａの製造の記載と同様の手順で化合物７ｃを製造した。収率５７ｍｇ（４２％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ４１６（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ８．３７（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．７３−７．７６（ｍ，２Ｈ，８−フェニルｏ−Ｈ’ｓ），７．６０−７．７０（ｍ，３Ｈ，８−フェニルｍ−及びｐ−Ｈ’ｓ），６．０２（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝５．７Ｈｚ），５．２５（ｔ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ２’，３’＝４．９Ｈｚ），４．４６−４．５４（ｂｍ，２Ｈ，Ｈ−３’，４’），４．０３（ｔ，２Ｈ，ＮＨ２Ｏ−ＣＨ２），３．８７−４．０（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），３．６１−３．６７（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），３．５０−３．５５（ｍ，２Ｈ，Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ２），３．０（ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），；ＵＶ  λｍａｘ，ｎｍ，ｐＨ１，２７５（ε  ２１，６００），ｐＨ７，２７５（ε  １７，１００），ｐＨ１３，２７４．４（ε  １６，８００）．Ａｎａｌ．（Ｃ１９Ｈ２５Ｎ７Ｏ４．２．０Ｈ２ＳＯ４．３Ｈ２Ｏ）Ｃ，Ｈ，Ｎ，Ｓ．
【実施例１５】
【００６５】
５’−デオキシ−５’−［［４−［［（１−エトキシエチリデン）アミノ］オキシ］ブチル］メチルアミノ］−８−（メチルアミノ）アデノシン（８ａ）
４ｃ（１．００ｇ、３．２３ｍｍｏｌ）、Ｎ−（４−ブロモブトキシ）エタンイミド酸エチル４９（９２４ｍｇ、３．８７ｍｍｏｌ）、及び、ＤＩＥＡ（２０９ｍｇ、０．２８ｍＬ、１．６ｍｍｏｌ）を使用し、６ａで示した手順と同様の手順で化合物８ａを製造した。収率６３５ｍｇ（４２％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ４６７（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．８９（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），６．８７（ｑ，１Ｈ，８ＣＨ３−ＮＨ），６．４６（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．６９（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝４．８Ｈｚ），５．２５（ｄ，１Ｈ，２’−ＯＨ，Ｊ２’−２’ＯＨ＝５．６Ｈｚ），５．０６（ｄ，１Ｈ，３’−ＯＨ，Ｊ３’−３’ＯＨ＝５．４Ｈｚ），４．９１（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ１’，２’＝４．８Ｈｚ，Ｊ２’，３’＝５．４Ｈｚ，Ｊ２’−２’ＯＨ＝５．６Ｈｚ），４．１６（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ２’，３’＝５．４Ｈｚ，Ｊ３’，４’＝４．９Ｈｚ，Ｊ３’−３’ＯＨ＝５．４Ｈｚ），３．８５−３．９４（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），３．９２（ｑ，２Ｈ，ＯＣＨ２ＣＨ３），３．８０（ｔ，２Ｈ，ＮＯ−ＣＨ２），２．８８（ｄ，３Ｈ，８ＮＨ−ＣＨ３，Ｊ＝４．６Ｈｚ），２．６５−２．７４（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．４６−２．５８（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．３４（ｔ，２Ｈ，Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ２），２．１７（ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），１．８３（ｓ，３Ｈ，Ｃ−ＣＨ３），１．３７−１．６１（ｂｍ，４Ｈ，ＮＯＣＨ２−ＣＨ２ＣＨ２），１．１９（ｔ，３Ｈ，ＯＣＨ２ＣＨ３）．
【実施例１６】
【００６６】
５’−デオキシ−５’−［［４−［［（１−エトキシエチリデン）アミノ］オキシ］ブチル］メチルアミノ］−８−フェニルアデノシン（８ｂ）
６ａにおける記載と同様の手順を用いて、４ｄ（４５０ｍｇ、１．２６ｍｍｏｌ）、Ｎ−（４−ブロモブトキシ）エタンイミド酸エチル４９（３６０ｍｇ、１．５１ｍｍｏｌ）、及び、ＤＩＥＡ（８１ｍｇ、０．１０ｍＬ、０．６２ｍｍｏｌ）から、８ｂを製造した。カラムクロマトグラフィー（７：１＝クロロホルム：メタノールで溶出）により、ガラス質の黄色粘稠固体を得た。収率３１２ｍｇ（４８％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ５１４（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．１７（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．７１−７．７８（ｍ，２Ｈ，８−フェニルｏ−Ｈ’ｓ），７．５８−７．６４（ｍ，３Ｈ，８−フェニルｍ−及びｐ−Ｈ’ｓ），７．３６（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．６７（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝５．７Ｈｚ），５．３２（ｂｓ，１Ｈ，２’−ＯＨ），５．３１（ｔ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ１’，２’＝５．７Ｈｚ，Ｊ２，３＝５．４Ｈｚ），５．１１（ｄ，１Ｈ，３’−ＯＨ，Ｊ３’−３’ＯＨ＝４．８Ｈｚ），４．１６（ｂｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ２’，３’＝５．４Ｈｚ，Ｊ３’，４’＝４．０Ｈｚ），３．９２−３．９７（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），３．９１（ｑ，２Ｈ，ＯＣＨ２ＣＨ３），３．７９（ｔ，２Ｈ，ＮＯ−ＣＨ２），２．７２−２．８０（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．５４−２．５９（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．３４（ｂｔ，２Ｈ，Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ２），２．１７（ｂｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），１．８３（ｓ，３Ｈ，Ｃ−ＣＨ３），１．３９−１．６０（ｂｍ，４Ｈ，ＮＯＣＨ２−ＣＨ２ＣＨ２），１．１８（ｔ，３Ｈ，ＯＣＨ２ＣＨ３）．
【実施例１７】
【００６７】
５’−デオキシ−５’−［［４−［［（１−エトキシエチリデン）アミノ］オキシ］ブチル］メチルアミノ］−８−オキソアデノシン（８ｃ）
６ａで記載された手順を用いて、４ｉ４５（５００ｍｇ、１．６８ｍｍｏｌ）、Ｎ−（４−ブロモブトキシ）エタンイミド酸エチル４９（４８１ｍｇ、２．０１ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（１０９ｍｇ、０．１４ｍＬ、０．８４ｍｍｏｌ）、及び、ＤＭＦ（５ｍＬ）から、８ｃを製造した。カラムクロマトグラフィー（４：１：０．２＝クロロホルム：メタノール：ＮＨ４ＯＨで溶出）により、ガラス質の黄色粘稠固体を得た。収率２００ｍｇ（２６％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ４５４（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１０．３４（ｂｓ，１Ｈ，８−ＯＨ），８．０２（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），６．４９（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．６２（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝５．０Ｈｚ），４．９９（ｂｓ，１Ｈ，３’−ＯＨ），５．１９（ｂｓ，１Ｈ，２’−ＯＨ），４．９０（ｔ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ２’，３’＝５．４Ｈｚ），４．１６−４．２４（ｂｍ，１Ｈ，Ｈ−３’），３．８３−３．８９（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），３．９２（ｑ，２Ｈ，ＯＣＨ２ＣＨ３），３．７７（ｔ，２Ｈ，ＮＯ−ＣＨ２），２．６２−３．６８（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．４０−２．４６（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．３０（ｔ，２Ｈ，Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ２），２．１３（ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），１．８４（ｓ，３Ｈ，Ｃ−ＣＨ３），１．３５−１．６０（ｂｍ，４Ｈ，ＮＯＣＨ２−ＣＨ２ＣＨ２），１．２１（ｔ，３Ｈ，ＯＣＨ２ＣＨ３）．
【実施例１８】
【００６８】
５’−デオキシ−２’，３’−イソプロピリデン−５’−［［４−［［（１−エトキシエチリデン）アミノ］オキシ］ブチル］メチルアミノ］−８−メチルアデノシン（８ｄ）
４ｅ（１．００ｇ、３．１１ｍｍｏｌ）、ＭｓＣｌ（３９２ｍｇ、０．２６ｍＬ、３．４２ｍｍｏｌ）、メチルアミン（２５ｍＬ）、Ｎ−（４−ブロモブトキシ）エタンイミド酸エチル（８５３ｍｇ、３．５８ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（２００ｍｇ、０．２７ｍＬ、１．５４ｍｍｏｌ）、及び、ＤＭＦ（８ｍＬ）を使用し、６ａで示した手順と同様の手順で化合物８ｄを製造した。カラムクロマトグラフィー（９５：５＝クロロホルム：メタノール）により、ガラス質の固体を得た。収率１７６ｍｇ（１２％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ４９２（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ８．２７（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），５．９９（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１，２＝１．８Ｈｚ），５．７５（ｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ１，２＝１．８Ｈｚ，Ｊ２，３＝６．４Ｈｚ），５．３９（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．０８（ｄｄ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ２，３＝６．４Ｈｚ，Ｊ３，４＝３．５Ｈｚ），４．２７−４．３４（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），４．０（ｑ，２Ｈ，ＯＣＨ２ＣＨ３），３．８４（ｔ，２Ｈ，ＮＯ−ＣＨ２），２．６４（ｓ，３Ｈ，８−ＣＨ３），２．５５−２．６１（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．４５−２．５５（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．２９−２．３４（ｍ，２Ｈ，Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ２），２．２１（ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），１．９１（ｓ，３Ｈ，Ｃ−ＣＨ３），１．６１及び１．４０（２ｓ，６Ｈ，Ｃ（ＣＨ３）２），１．５１−１．６０（ｍ，２Ｈ，ＮＯＣＨ２−ＣＨ２），１．３７−１．４５（ｍ，２Ｈ，Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２−ＣＨ２），１．２７（ｔ，３Ｈ，ＯＣＨ２ＣＨ３）．
【実施例１９】
【００６９】
５’−デオキシ−２’，３’−イソプロピリデン−５’−［［４−［［（１−エトキシエチリデン）アミノ］オキシ］ブチル］メチルアミノ］−８−エチルアデノシン（８ｅ）
６ａで記載された手順を用いて、４ｆ（１．００ｇ、２．９８ｍｍｏｌ）、ＭｓＣｌ（３７５ｍｇ、０．２５ｍＬ、３．２７ｍｍｏｌ）、メチルアミン（２５ｍＬ）、Ｎ−（４−ブロモブトキシ）エタンイミド酸エチル（８５２ｍｇ、３．５７ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（１９２ｍｇ、０．２５ｍＬ、１．４８ｍｍｏｌ）、及び、ＤＭＦ（１０ｍＬ）から、８ｅを製造した。カラムクロマトグラフィー（９５：５＝クロロホルム：メタノール）により、ガラス質の固体を得た。収率１５９ｍｇ（１１％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ５０６（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ８．２７（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），５．９９（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１，２＝２．０Ｈｚ），５．７３（ｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ１，２＝２．０Ｈｚ，Ｊ２，３＝６．４Ｈｚ），５．４０（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．０９（ｄｄ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ２，３＝６．４Ｈｚ，Ｊ３，４＝３．６Ｈｚ），４．２６−４．３３（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），４．０（ｑ，２Ｈ，ＯＣＨ２ＣＨ３），３．８４（ｔ，２Ｈ，ＮＯ−ＣＨ２），２．９１−２．９９（ｍ，２Ｈ，８−ＥｔのＣＨ２），２．５９−２．６５（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．４６−２．５３（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．３０−２．３５（ｍ，２Ｈ，Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ２），２．２１（ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），１．９１（ｓ，３Ｈ，Ｃ−ＣＨ３），１．６１及び１．４０（２ｓ，６Ｈ，Ｃ（ＣＨ３）２），１．５１−１．５９（ｍ，２Ｈ，ＮＯＣＨ２−ＣＨ２），１．４９−１．３８（ｍ，２Ｈ，Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２−ＣＨ２），１．４３（ｓ，３Ｈ，８−ＥｔのＣＨ３），１．２７（ｔ，３Ｈ，ＯＣＨ２ＣＨ３）．
【実施例２０】
【００７０】
５’−デオキシ−２’，３’−イソプロピリデン−５’−［［４−［［（１−エトキシエチリデン）アミノ］オキシ］ブチル］メチルアミノ］−アデノシン（８ｆ）
４ｇ４３（１．００ｇ、３．２５ｍｍｏｌ）、ＭｓＣｌ（４４７ｍｇ、０．３０ｍＬ、３．９０ｍｍｏｌ）、メチルアミン（２５ｍＬ）、Ｎ−（４−ブロモブトキシ）エタンイミド酸エチル（５１１ｍｇ、２．１５ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（１２５ｍｇ、０．１７ｍＬ、０．９６ｍｍｏｌ）、及び、ＤＭＦ（５ｍＬ）を使用し、６ａで示した手順と同様の手順で化合物８ｆを製造した。カラムクロマトグラフィー（９５：５＝クロロホルム：メタノール）により、浅黄色シロップ状液体を得た。収率８３９ｍｇ（８６％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ４７８（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ８．３６（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．９６（ｓ，１Ｈ，Ｈ−８），６．０７（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝２．２Ｈｚ），５．６０（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．４９（ｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ１’，２’＝２．２Ｈｚ，Ｊ２’，３’＝６．４Ｈｚ），４．９５（ｄｄ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ２’，３’＝６．４Ｈｚ，Ｊ３’，４’＝３．４Ｈｚ），４．３６−４．４０（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），４．０（ｑ，２Ｈ，ＯＣＨ２ＣＨ３），３．８６（ｔ，２Ｈ，ＮＯ−ＣＨ２），２．６１（ｄｄ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．５５（ｄｄ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．３８（ｂｔ，２Ｈ，Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ２），２．２６（ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），１．９１（ｓ，３Ｈ，Ｃ−ＣＨ３），１．６１及び１．４０（２ｓ，６Ｈ，Ｃ（ＣＨ３）２），１．５５−１．６１（ｍ，２Ｈ，ＮＯＣＨ２−ＣＨ２），１．４４−１．５２（ｍ，２Ｈ，Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２−ＣＨ２），１．２７（ｔ，３Ｈ，ＯＣＨ２ＣＨ３）．
【実施例２１】
【００７１】
５’−［（４−アミノオキシブチル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−（メチルアミノ）アデノシン硫酸塩（０．４：１塩）（９ａ）
８ａ（６００ｍｇ、１．２８ｍｍｏｌ）及び２Ｎ  Ｈ２ＳＯ４（１０ｍＬ）を使用し、７ａの製造と同様の手順を用いて９ａを製造した。収率５１４ｍｇ（８７％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ５１０（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．９１（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），６．８８（ｂｑ，１Ｈ，８ＣＨ３−ＮＨ），６．５０（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．７２（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝５．１Ｈｚ），５．０８−５．３９（ｂｍ，２Ｈ，２’，３’−ＯＨ），４．０−５．０２（ｍ，１Ｈ，Ｈ−２’），４．１９（ｔ，１Ｈ，Ｈ−３’），３．９４−４．０６（ｂｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），３．４５（ｂｔ，２Ｈ，ＮＨ２Ｏ−ＣＨ２），３．３６−３．５４（ｍ，２Ｈ，５’−ＣＨ２），２．８９（ｄ，３Ｈ，８ＮＨ−ＣＨ３），２．７８−２．９５（ｂｍ，２Ｈ，ＮＣＨ３−ＣＨ２），２．０４（ｂｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），１．３８−１．５２（ｂｍ，４Ｈ，ＮＨ２ＯＣＨ２−ＣＨ２ＣＨ２）；ＵＶ  λｍａｘ，ｎｍ，ｐＨ１，２７４．８（ε  １４，３００），ｐＨ７，２７６（ε  １６，７００），ｐＨ１３，２７７（ε  １７，４００）．Ａｎａｌ．（Ｃ１６Ｈ２８Ｎ８Ｏ４．０．４Ｈ２ＳＯ４．０．２Ｃ２Ｈ５ＯＨ．０．９Ｈ２Ｏ）Ｃ，Ｈ，Ｎ，Ｓ．
【実施例２２】
【００７２】
５’−［（４−アミノオキシブチル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−フェニルアデノシン硫酸塩（１．７５：１塩）（９ｂ）
８ｂ（３０５ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）及び２Ｎ  Ｈ２ＳＯ４（４ｍＬ）を使用し、７ａの製造の記載と同様の手順で化合物９ｂを製造した。収率２５２ｍｇ（６４％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ４４４（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．１８（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．２０−７．７８（ｍ，２Ｈ，８−フェニルｏ−Ｈ’ｓ），７．５９−７．６１（ｍ，３Ｈ，８−フェニルｍ−及びｐ−Ｈ’ｓ），７．３７（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．８５（ｓ，２Ｈ，Ｏ−ＮＨ２），５．６８（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝５．７Ｈｚ），５．３１（ｔ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ２’，３’＝５．５Ｈｚ），５．１３（ｂｄ，１Ｈ，３’−ＯＨ），４．１８（ｔ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ３’，４’＝３．９Ｈｚ），３．９４−３．９９（ｂｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），３．４９（ｔ，２Ｈ，ＮＨ２Ｏ−ＣＨ２），２．７３−２．７９（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．５４−２．６２（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．２７−２．３６（ｂｍ，２Ｈ，Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ２），２．１６（ｂｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），１．３３−１．５３（ｂｍ，４Ｈ，ＮＨ２ＯＣＨ２−ＣＨ２ＣＨ２）；１ＨＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ８．３６（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．７２−７．７８（ｍ，２Ｈ，８−フェニルｏ−Ｈ’ｓ），７．６３−７．７１（ｍ，３Ｈ，８−フェニルｍ−及びｐ−Ｈ’ｓ），６．０２（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝５．８Ｈｚ），５．２８−５．４１（ｂｍ，１Ｈ，Ｈ−２’），４．４３−４．５３（ｂｍ，２Ｈ，Ｈ−３’，４’），３．９２−４．０３（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），３．９０（ｔ，２Ｈ，ＮＨ２Ｏ−ＣＨ２），３．４９−３．５９（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），３．２２−３．３２（ｂｍ，２Ｈ，Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ２），２．９２（ｂｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），１．６１−１．８３（ｂｍ，４Ｈ，ＮＨ２ＯＣＨ２−ＣＨ２ＣＨ２）；ＵＶ  λｍａｘ，ｎｍ，ｐＨ１，２７５（ε  ２１，４００），ｐＨ７，２７４．５（ε  １６，９００），ｐＨ１３，２７４．８（ε  １６，７００）．Ａｎａｌ．（Ｃ２１Ｈ２９Ｎ７Ｏ４．１．７５Ｈ２ＳＯ４．０．０５Ｃ２Ｈ５ＯＨ．２．４Ｈ２Ｏ）Ｃ，Ｈ，Ｎ，Ｓ．
【実施例２３】
【００７３】
５’−［（４−アミノオキシブチル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−オキソアデノシン硫酸塩（１．９：１塩）（９ｃ）
８ｃ（１９０ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）及び２Ｎ  Ｈ２ＳＯ４（３ｍＬ）を使用し、上記７ａで示した手順と同様の手順を実施した。カラムクロマトグラフィー（４：１：０．５＝クロロホルム：メタノール：ＮＨ４ＯＨで溶出）により化合物を精製した。収率２０８ｍｇ（８２％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ３８４（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１０．４５（ｂｓ，１Ｈ，８−ＯＨ），８．０５（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），６．５８（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．７７（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝５．０Ｈｚ），５．３７−５．７１（ｂｍ，２Ｈ，Ｏ−ＮＨ２），４．８３（ｔ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ２’，３’＝４．２Ｈｚ），４．１８−４．２９（ｍ，２Ｈ，Ｈ−３’，Ｈ−４’），３．８８（ｔ，２Ｈ，ＮＨ２Ｏ−ＣＨ２），３．３４−３．５４（ｍ，２Ｈ，５’−ＣＨ２），３．０６（ｂｔ，２Ｈ，Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ２），２．７３（ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），１．４６−１．７４（ｂｍ，４Ｈ，ＮＨ２ＯＣＨ２−ＣＨ２ＣＨ２）；ＵＶ  λｍａｘ，ｎｍ，ｐＨ１，２６３．３（ε  １２，２００），ｐＨ７，２６８．９（ε  １３，６００），ｐＨ１３，２７９．９（ε  １５，６００）．Ａｎａｌ．（Ｃ１５Ｈ２５Ｎ７Ｏ５．１．９Ｈ２ＳＯ４．０．１Ｃ２Ｈ５ＯＨ．２Ｈ２Ｏ）Ｃ，Ｈ，Ｎ，Ｓ．
【実施例２４】
【００７４】
５’−［（４−アミノオキシブチル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−メチルアデノシン硫酸塩（１．９：１塩）（９ｄ）
化合物８ｄ（１４９ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）を１Ｎ  Ｈ２ＳＯ４（２．５ｍＬ）に溶解し、室温で１２日間攪拌した。反応混合物をＮａＨＣＯ３で中和し、凍結乾燥した。化合物をＥｔＯＨ（２×１０ｍＬ）で抽出し、濃縮乾固した。残留物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル２３０〜４００メッシュ、４：１：０．２＝クロロホルム：メタノール：ＮＨ４ＯＨで溶出）で精製した。所望の画分を集めて、濃縮し、減圧下で乾燥した。生成物をＥｔＯＨ（８ｍＬ）に溶解し、２Ｎ  Ｈ２ＳＯ４を滴下した。沈殿した硫酸塩を濾過し、ＥｔＯＨで洗滌した。該生成物を水（２ｍＬ）に溶解し、凍結乾燥して、白色固体を得た。収率５９ｍｇ（３３％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ３８２（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ８．３９（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），６．０８（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝５．５Ｈｚ），５．０−５．１９（ｂｍ，１Ｈ，Ｈ−２’），４．５１−４．５８（ｂｍ，２Ｈ，Ｈ−３’，４’），４．０８（ｔ，２Ｈ，ＮＨ２Ｏ−ＣＨ２），３．７３−４．０（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），３．４４−３．６９（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），３．１６−３．３６（ｂｍ，２Ｈ，Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ２），２．９２（ｂｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），２．７０（ｓ，３Ｈ，８−ＣＨ３），１．６８−１．８８（ｂｍ，４Ｈ，ＮＨ２ＯＣＨ２−ＣＨ２ＣＨ２）；ＵＶ  λｍａｘ，ｎｍ，ｐＨ１，２５８．２（ε  １５，４００），ｐＨ７，２５９．７（ε  １５，５００），ｐＨ１３，２６０．９（ε  １５，９００）．Ａｎａｌ．（Ｃ１６Ｈ２７Ｎ７Ｏ４．１．９Ｈ２ＳＯ４．０．４Ｃ２Ｈ５ＯＨ）Ｃ，Ｈ，Ｎ．
【実施例２５】
【００７５】
５’−［（４−アミノオキシブチル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−エチルアデノシン硫酸塩（１．９：１塩）（９ｅ）
８ｅ（１５５ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）を使用し、上記９ｄで示した手順と同様の手順を実施した。収率５５ｍｇ（３０％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ３９６（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ８．３９（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），６．０９（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝５．６Ｈｚ），５．０７−５．２３（ｂｍ，１Ｈ，Ｈ−２’），４．５０−４．６０（ｂｍ，２Ｈ，Ｈ−３’，４’），４．０６（ｔ，２Ｈ，ＮＨ２Ｏ−ＣＨ２），３．８２−３．９６（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），３．４５−３．６９（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），３．２７（ｂｓ，２Ｈ，Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ２），３．０−３．１０（ｍ，２Ｈ，８ＣＨ２ＣＨ３），２．９１（ｂｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），１．６８−１．８６（ｂｍ，４Ｈ，ＮＨ２ＯＣＨ２−ＣＨ２ＣＨ２），１．３９（ｔ，３Ｈ，８ＣＨ２ＣＨ３）；ＵＶ  λｍａｘ，ｎｍ，ｐＨ１，２５９．１（ε  １６，４００），ｐＨ７，２６０（ε  １５，７００），ｐＨ１３，２６０．２（ε  １５，９００）．Ａｎａｌ．（Ｃ１７Ｈ２９Ｎ７Ｏ４．１．９Ｈ２ＳＯ４．０．２Ｃ２Ｈ５ＯＨ）Ｃ，Ｈ，Ｎ．
【実施例２６】
【００７６】
５’−［（４−アミノオキシブチル）メチルアミノ］−５’−デオキシアデノシン硫酸塩（２：１塩）（９ｆ）
８ｆ（７５０ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）を使用し、上記９ｄで示した手順と同様の手順を実施した。収率４５７ｍｇ（４８％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ３６８（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．４３（ｓ，１Ｈ，Ｈ−８），８．２３（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．５８（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），６．０３（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝５．４Ｈｚ），４．７５（ｔ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ１’，２’＝５．４Ｈｚ，Ｊ２’，３’＝４．８Ｈｚ），４．３２−４．４０（ｂｍ，２Ｈ，Ｈ−４’），４．２３（ｔ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ３’，４’＝３．８Ｈｚ），３．９３（ｔ，２Ｈ，ＮＨ２Ｏ−ＣＨ２），３．６８（ｄｄ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），３．４９（ｂｄｄ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），３．１３（ｂｔ，２Ｈ，Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ２），２．８０（ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），１．５０−１．７８（ｂｍ，４Ｈ，ＮＨ２ＯＣＨ２−ＣＨ２ＣＨ２）．Ａｎａｌ．（Ｃ１５Ｈ２５Ｎ７Ｏ４．２．０Ｈ２ＳＯ４．０．３Ｃ２Ｈ５ＯＨ．１．５Ｈ２Ｏ）Ｃ，Ｈ，Ｎ，Ｓ．
【実施例２７】
【００７７】
５’−デオキシ−２’，３’−Ｏ−イソプロピリデン−５’−［（２−ヒドロキシエチル）メチルアミノ］アデノシン（１０）
化合物３ｉ４５（８．２０ｇ、１７．７９ｍｍｏｌ）を２−（メチルアミノ）エタノール（５４ｍＬ、６７３ｍｍｏｌ）に溶解し、室温で４１時間攪拌した。溶媒を留去し、黄色残留物を得た。該残留物をクロロホルム（１００ｍＬ）に溶解し、ＮａＨＣＯ３（３×５０ｍＬ）で洗滌した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮乾固して、黄色泡状物を得た。カラムクロマトグラフィー（シリカゲル２３０〜４００メッシュ、９：１：０．１＝クロロホルム：メタノール：ＮＨ４ＯＨで溶出）により残留物を精製した。所望の画分を合わせて、濃縮し、減圧下で乾燥した。収率２．５５ｇ（３９％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ３６５（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．３４（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），８．１８（ｓ，１Ｈ，Ｈ−８），７．３３（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），６．１３（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝２．５Ｈｚ），５．４８（ｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ２’，３’＝６．３Ｈｚ），４．９６（ｄｄ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ３’，４’＝３．０Ｈｚ），４．３３（ｔ，１Ｈ，ＯＨ），４．２４（ｄｔ，１Ｈ，Ｈ−４’），３．４４（ｔ，２Ｈ，ＯＨ−ＣＨ２），２．６４（ｄｄ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．３５−２．４９（ｍ，３Ｈ，５’−ＣＨ２，Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ２），２．１８（ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），１．５４及び１．３３（２ｓ，６Ｈ，Ｃ（ＣＨ３）２）．
【実施例２８】
【００７８】
５’−デオキシ−２’，３’−Ｏ−イソプロピリデン−５’−［（２−フタルイミドオキシエチル）メチルアミノ］アデノシン（１１）
無水ＴＨＦ（５０ｍＬ）中に化合物１０（９８９ｍｇ、２．７１４ｍｍｏｌ）、Ｎ−ヒドロキシフタルイミド（１．１０７ｇ、６．７８６ｍｍｏｌ）、及び、Ｐ（Ｐｈ）３（１．７８０ｇ、６．７８７ｍｍｏｌ）を溶解した溶液に、ＤＥＡＤ（１．０７ｍＬ、６．８ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１０ｍＬ）中に添加したものを、窒素雰囲気下、室温で３分間かけて添加した。５分後、２％の炭酸ナトリウム（７５ｍＬ）を反応混合物に添加し、次にジクロロメタン（１００ｍＬ）を添加した。有機層を２％Ｎａ２ＣＯ３（７５ｍＬ）で洗滌した後、飽和ＮａＣｌ（２×７５ｍＬ）で洗滌した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮乾固して、泡状物を得た。残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製した。この際、１：３＝ジクロロメタン：アセトンでカラムからの溶出を行った。所望の画分を合わせて、濃縮し、減圧下で乾燥した。収率８４２ｍｇ（６１％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ５１０（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ８．３６（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），８．０７（ｓ，１Ｈ，Ｈ−８），７．７９−７．８３（ｍ，２Ｈ，フタルイミド芳香族Ｈ’ｓ），７．６３−７．７２（ｍ，２Ｈ，フタルイミド芳香族Ｈ’ｓ），６．１２（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝２．２Ｈｚ），５．８７（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．４９（ｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ１’，２’＝２．２Ｈｚ，Ｊ２’，３’＝６．４Ｈｚ），５．０５（ｄｄ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ２’，３’＝６．４Ｈｚ，Ｊ３’，４’＝３．３Ｈｚ），４．４０−４．４５（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），４．２９（ｔ，２Ｈ，ＮＯ−ＣＨ２），２．８９（ｔ，２Ｈ，ＮＯＣＨ２−ＣＨ２），２．８３−２．８９（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．７２−２．７９（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．４０（ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），１．６２及び１．４０（２ｓ，６Ｈ，Ｃ（ＣＨ３）２）．
【実施例２９】
【００７９】
５’−［（２−アミノオキシエチル）メチルアミノ］−５’−デオキシアデノシン硫酸塩（１：１塩）（１２）
１１（３７３ｍｇ、０．７３ｍｍｏｌ）を１Ｎ  Ｈ２ＳＯ４（５ｍＬ）に溶解した溶液を６０℃で３時間加熱した。反応混合物をＮａＨＣＯ３で中和し、凍結乾燥した。化合物をＥｔＯＨ（２×２０ｍＬ）で抽出し、濃縮乾固した。残留物をカラムクロマトグラフィーで精製した。この際、７７：２０：３＝クロロホルム：メタノール：ＮＨ４ＯＨで溶出を行った。所望の画分を集めて、濃縮し、減圧下で乾燥した。生成物をＥｔＯＨ（１０ｍＬ）に溶解し、冷却しながら１Ｎ  Ｈ２ＳＯ４を滴下して、塩を沈殿させた。当該塩を濾過し、ＥｔＯＨで洗滌し、減圧下で乾燥した。収率１００ｍｇ。ＭＳ：ｍ／ｚ  ３４０（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．４２（ｓ，１Ｈ，Ｈ−８），８．２５（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．６８（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．９９（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝５．３Ｈｚ），５．６７（ｔ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ２’，３’＝４．６Ｈｚ），４．３３−４．３９（ｂｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），４．２２（ｔ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ３’，４’＝４．７Ｈｚ），４．０６（ｂｔ，２Ｈ，ＮＨ２Ｏ−ＣＨ２），３．６３−３．７１（ｄｄ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），３．５２−３．３．５９（ｂｄｄ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），３．４３（ｂｍ，２Ｈ，Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ２），２．８４（ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３）；ＵＶ  λｍａｘ，ｎｍ，ｐＨ１，２５８．２（ε  １４，３００），ｐＨ７，２５９（ε  １４，６００），ｐＨ１３，２５９（ε  １５，５００）．Ａｎａｌ．（Ｃ１３Ｈ２１Ｎ７Ｏ４．１．０  Ｈ２ＳＯ４．０．５Ｃ２Ｈ５ＯＨ．１．０Ｈ２Ｏ）Ｃ，Ｈ，Ｎ．
【実施例３０】
【００８０】
５’−［（２−カルボエトキシエチル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−メチルアデノシン（１３ａ）
４ａ（５００ｍｇ、１．６９ｍｍｏｌ）、３−クロロプロピオン酸エチル（２７０ｍｇ、１．９７ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（１０９ｍｇ、０．１４ｍＬ、０．８４ｍｍｏｌ）、及び、ＤＭＦ（５ｍＬ）の混合物を、６０℃で２日間加熱した。出発物質がまだ残っていたが、溶液が黒ずんできたため、加熱を止めた。反応混合物を濃縮乾固した。生成物をカラムクロマトグラフィー（７：１：０．１＝クロロホルム：メタノール：ＮＨ４ＯＨ）により精製し、粘稠固体を得た。収率２１０ｍｇ（３１％）。ＭＳ  ｍ／ｚ  ３９５（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．０８（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．１１（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．７４（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’２’＝５．６Ｈｚ），５．３３（ｂｄ，１Ｈ，ＯＨ−２’），５．１６（ｂｄ，１Ｈ，ＯＨ−３’），５．１２（ｂｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ１’，２’＝５．６Ｈｚ，Ｊ２’，３’＝５．５Ｈｚ），４．２１（ｂｄｄ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ２’，３’＝５．５Ｈｚ，Ｊ３’，４’＝４．３Ｈｚ），４．０１（ｑ，２Ｈ，ＯＣＨ２ＣＨ３），３．９１−４．００（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），２．７０−２．７７（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．５４−２．６６（ｍ，３Ｈ，５’−ＣＨ２，ＣＯ−ＣＨ２），２．５３（ｓ，３Ｈ，８−ＣＨ３），２．３８（ｔ，２Ｈ，Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ２），２．１６（ｂｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），１．１５（ｔ，３Ｈ，ＯＣＨ２ＣＨ３）．
【実施例３１】
【００８１】
５’−［（２−カルボエトキシエチル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−エチルアデノシン（１３ｂ）
４ｂ（２６０ｍｇ、０．８４ｍｍｏｌ）、３−クロロプロピオン酸エチル（１３８ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（５３ｍｇ、０．０７ｍＬ、０．４１ｍｍｏｌ）、及び、ＤＭＦ（４ｍＬ）を使用し、１３ａの製造の記載と同様の手順で化合物１３ｂを製造した。カラムクロマトグラフィー（７：１：０．１＝クロロホルム：メタノール：ＮＨ４ＯＨで溶出）により、ガラス質の粘稠固体を得た。収率１５３ｍｇ（４４％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ４０９（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．０８（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．１０（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．７１（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’２’＝５．５Ｈｚ），５．３２（ｂｄ，１Ｈ，ＯＨ−２’，Ｊ２’−２’ＯＨ＝５．０Ｈｚ），５．１６（ｂｄ，１Ｈ，ＯＨ−３’，Ｊ３’−３’ＯＨ＝５．１Ｈｚ），５．１２（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ１’，２’＝５．５Ｈｚ，Ｊ２’，３’＝５．７Ｈｚ，Ｊ２’−２’ＯＨ＝５．０Ｈｚ），４．１４（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ２’，３’＝５．７Ｈｚ，Ｊ３’，４’＝４．１Ｈｚ，Ｊ３’−３’ＯＨ＝５．１Ｈｚ），４．０１（ｑ，２Ｈ，ＯＣＨ２ＣＨ３），３．９１−３．９８（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），２．８７（ｑ，２Ｈ，８−ＥｔのＣＨ２），２．７１−２．７９（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．５１−２．６５（ｍ，３Ｈ，５’−ＣＨ２，ＣＯ−ＣＨ２），２．３８（ｔ，２Ｈ，Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ２），２．１６（ｂｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），１．３０（ｔ，３Ｈ，８−ＥｔのＣＨ３），１．１５（ｔ，３Ｈ，ＯＣＨ２ＣＨ３）．
【実施例３２】
【００８２】
５’−［（カルボエトキシメチル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−メチルアデノシン（１３ｃ）
４ａ（４１５ｍｇ、１．４１ｍｍｏｌ）、クロロ酢酸エチル（２０７ｍｇ、０．１８ｍＬ、１．６８ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（９１ｍｇ、０．１２ｍＬ、０．７０ｍｍｏｌ）、及び、ＤＭＦ（５ｍＬ）を使用し、１３ａの製造の記載と同様の手順で化合物１３ｃを製造した。収率２０４ｍｇ（３８％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ３８１（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．０６（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．１１（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．７３（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’２’＝５．４Ｈｚ），５．３３（ｂｄ，１Ｈ，ＯＨ−２’，Ｊ２’−２’ＯＨ＝４．７Ｈｚ），５．１９（ｂｄ，１Ｈ，ＯＨ−３’，Ｊ３’−３’ＯＨ＝４．９Ｈｚ），５．０３（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ１’，２’＝５．４Ｈｚ，Ｊ２’，３’＝５．７Ｈｚ，Ｊ２’−２’ＯＨ＝４．７Ｈｚ），４．１７（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ２’，３’＝５．７Ｈｚ，Ｊ３’，４’＝４．４Ｈｚ，Ｊ３’−３’ＯＨ＝４．９Ｈｚ），４．０２（ｑ，２Ｈ，ＯＣＨ２ＣＨ３），３．９２−３．９９（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），３．２７（ｂｓ，２Ｈ，Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ２），２．８３−２．９０（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．７０−２．７９（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．５３（ｓ，３Ｈ，８−ＣＨ３），２．３１（ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），１．１３（ｔ，３Ｈ，ＯＣＨ２ＣＨ３）；ＵＶ  λｍａｘ，ｎｍ，ｐＨ１，２５８．９（ε  １６，１００），ｐＨ７，２６０（ε  １５，９００），ｐＨ１３，２６０．１（ε  １６，２００）．Ａｎａｌ．（Ｃ１６Ｈ２４Ｎ６Ｏ５．０．５ＣＨＣｌ３．０．３ＣＨ３ＯＨ）Ｃ，Ｈ，Ｎ．
【実施例３３】
【００８３】
５’−［（２−カルボキサミドエチル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−メチルアデノシン硫酸塩（１．５：１塩）（１３ｄ）
化合物１３ａ（８９ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）をメタノール性アンモニア（５ｍＬ）に溶解し、当該溶液を室温で５日間攪拌した。反応混合物を濃縮乾固し、カラムクロマトグラフィー（４：１：０．２＝クロロホルム：メタノール：ＮＨ４ＯＨ）で精製した。所望の画分を集めて、濃縮し、減圧下で乾燥した。生成物をＥｔＯＨ（８ｍＬ）に溶解し、２Ｎ  Ｈ２ＳＯ４を滴下した。沈殿した塩を濾過し、ＥｔＯＨで洗滌した。本質的に吸湿性の該生成物を水（２ｍＬ）に溶解し、凍結乾燥して、白色固体を得た。収率６５ｍｇ（５５％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ３６６（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ８．４３（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），６．０９（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝５．９Ｈｚ），５．０−５．３０（ｂｍ，１Ｈ，Ｈ−２’），４．６１−４．７０（ｂｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），４．５１−４．５４（ｂｍ，１Ｈ，Ｈ−３’），３．３０−３．８９（ｂｍ，５Ｈ，Ｎ−ＣＨ３及びＮ（ＣＨ３）−ＣＨ２），２．９６（ｂｓ，２Ｈ，５’−ＣＨ２），２．７７（ｂｓ，２Ｈ，ＮＨ２ＣＯ−ＣＨ２），２．７０（ｓ，３Ｈ，８−ＣＨ３）；ＵＶ  λｍａｘ，ｎｍ，ｐＨ１，２５８．４（ε  １４，９００），ｐＨ７，２６０．１（ε  １４，９００），ｐＨ１３，２６０．１（ε  １５，３００）．Ａｎａｌ．（Ｃ１５Ｈ２３Ｎ７Ｏ４．１．５Ｈ２ＳＯ４．０．８Ｈ２Ｏ）Ｃ，Ｈ，Ｎ，Ｓ．
【実施例３４】
【００８４】
５’−［（２−カルボキサミドエチル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−エチルアデノシン硫酸塩（１．１：１塩）（１３ｅ）
１３ｂ（１４９ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）及びメタノール性アンモニア（５ｍＬ）を使用し、上記１３ｄで示した手順と同様の手順を実施した。収率９４ｍｇ（５１％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ３８０（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．０８（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．３１（ｂｓ，１Ｈ，ＣＯ−ＮＨ２），７．１０（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），６．７１（ｂｓ，１Ｈ，ＣＯ−ＮＨ２），５．７２（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’２’＝５．４Ｈｚ），５．３１（ｄ，１Ｈ，ＯＨ−２’，Ｊ２’−２’ＯＨ＝６．２Ｈｚ），５．１６（ｄ，１Ｈ，ＯＨ−３’，Ｊ３’−３’ＯＨ＝５．５Ｈｚ），５．０９（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ１’，２’＝５．４Ｈｚ，Ｊ２’，３’＝５．７Ｈｚ，Ｊ２’−２’ＯＨ＝６．２Ｈｚ），４．１７（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ２’，３’＝５．７Ｈｚ，Ｊ３’，４’＝４．３Ｈｚ，Ｊ３’−３’ＯＨ＝５．５Ｈｚ），３．９２−３．９９（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），２．８７（ｑ，２Ｈ，８−ＣＨ２ＣＨ３），２．６９−２．７５（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．５２−２．６０（ｍ，３Ｈ，ＣＯ−ＣＨ２，５’−ＣＨ２），２．１８（ｂｓ，２Ｈ，Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ２），２．１６（ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），１．３０（ｔ，３Ｈ，８−ＥｔのＣＨ３）；１ＨＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ８．３８（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），６．０９（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝６．２Ｈｚ），５．３３（ｂｓ，１Ｈ，Ｈ−２’），４．５６−４．６２（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），４．５１−４．５４（ｍ，１Ｈ，Ｈ−３’），３．８７−３．９６（ｂｍ，２Ｈ，ＮＨ２ＣＯ−ＣＨ２），３．５６（ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），２．９８−３．８０（ｂｍ，２Ｈ，８−ＣＨ２ＣＨ３），２．９６（ｂｓ，２Ｈ，５’−ＣＨ２），２．７２−２．８２（ｍ，２Ｈ，Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ２），１．３９（ｓ，３Ｈ，８−ＥｔのＣＨ３）；ＵＶ  λｍａｘ，ｎｍ，ｐＨ１，２５９．４（ε  １５，２００），ｐＨ７，２６０．８（ε  １５，１００），ｐＨ１３，２６０．６（ε  １５，５００）．Ａｎａｌ．（Ｃ１６Ｈ２５Ｎ７Ｏ４．１．１Ｈ２ＳＯ４．１．０５Ｈ２Ｏ）Ｃ，Ｈ，Ｎ，Ｓ．
【実施例３５】
【００８５】
５’−［（カルボキサミドメチル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−メチルアデノシン硫酸塩（１．４５：１塩）（１３ｆ）
１３ｃ（２００ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）及びメタノール性アンモニア（５ｍＬ）を使用し、１３ｄの製造と同様の手順で化合物１３ｆを製造した。収率１０５ｍｇ（３９％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ３５２（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．０８（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．１１（ｂｓ，２Ｈ，ＣＯ−ＮＨ２），７．０７（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．７４（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’２’＝５．２Ｈｚ），５．３４（ｄ，１Ｈ，ＯＨ−２’，Ｊ２’−２’ＯＨ＝５．９Ｈｚ），５．２１（ｄ，１Ｈ，ＯＨ−３’，Ｊ３’−３’ＯＨ＝５．７Ｈｚ），４．９７（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ１’，２’＝５．２Ｈｚ，Ｊ２’，３’＝５．５Ｈｚ，Ｊ２’−２’ＯＨ＝５．９Ｈｚ），４．２１（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ２’，３’＝５．５Ｈｚ，Ｊ３’，４’＝５．２Ｈｚ，Ｊ３’−３’ＯＨ＝５．７Ｈｚ），３．９４−４．０１（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），２．９４（ｄ，１Ｈ，Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ２，Ｊ＝１５．７Ｈｚ），２．８８（ｄ，１Ｈ，Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ２，Ｊ＝１５．７Ｈｚ），２．７５−２．８０（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．６３−２．７０（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．５３（ｓ，３Ｈ，８−ＣＨ３），２．２３（ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），１ＨＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ８．４０（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），６．０８（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝４．８Ｈｚ），５．０１（ｔ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ２’，３’＝５．２Ｈｚ），４．６０（ｔ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ３’，４’＝４．９Ｈｚ），４．５０−４．５９（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），４．０３−４．１７（ｍ，２Ｈ，ＮＨ２ＣＯ−ＣＨ２），３．８２−３．９２（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），３．６８−３．７６（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），３．０３（ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），２．７０（ｓ，３Ｈ，８−ＣＨ３）；ＵＶ  λｍａｘ，ｎｍ，ｐＨ１，２５９（ε  １５，９００），ｐＨ７，２５９．７（ε  １６，１００），ｐＨ１３，２６０．２（ε  １６，１００）．Ａｎａｌ．（Ｃ１４Ｈ２１Ｎ７Ｏ４．１．４５Ｈ２ＳＯ４．０．２Ｃ２Ｈ５ＯＨ．１．３Ｈ２Ｏ）Ｃ，Ｈ，Ｎ，Ｓ．
【実施例３６】
【００８６】
５’−［（２−カルボエトキシエチル）メチルアミノ］−５’−デオキシアデノシン（１３ｇ）
４ｈ４７（４００ｍｇ、１．４２ｍｍｏｌ）、３−クロロプロピオン酸エチル（２１４ｍｇ、１．５６ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（９２ｍｇ、０．１２ｍＬ、０．７１ｍｍｏｌ）、及び、ＤＭＦ（５ｍＬ）を使用し、上記１３ａおいて記載された基本手順を用いて１３ｇを製造した。反応混合物を６０℃で２日間加熱した。生成物をカラムクロマトグラフィー（７：１＝クロロホルム：メタノール）で精製し、固体を得た。収率１０２ｍｇ（１９％）。ＭＳ  ｍ／ｚ  ３８１（Ｍ＋Ｈ）＋．
【実施例３７】
【００８７】
５’−デオキシ−５’−［（カルボエトキシエチル）メチルアミノ］−２’，３’−Ｏ−イソプロピリデンアデノシン（１３ｈ）
無水ＣＨ３ＣＮ（５ｍＬ）中に化合物４ｇ（３８０ｍｇ、１．１８ｍｍｏｌ）を添加したものに、３−クロロプロピオン酸エチル（１９５ｍｇ、０．１８ｍＬ、１．４２ｍｍｏｌ）及びジイソプロピルエチルアミン（１５３ｍｇ、０．２ｍＬ、１．１８ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を窒素雰囲気下、７５〜８０℃で７２時間攪拌した。反応混合物を蒸発乾固して、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル２３０〜４００メッシュ、９：１＝塩化メチレン：メタノールで溶出）により残留物を精製した。所望の画分を合わせて、濃縮し、減圧下で乾燥した。収率２６０ｍｇ（５２％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ４２１（Ｍ＋Ｈ）＋．
【実施例３８】
【００８８】
５’−［（カルボキサミドエチル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−２’，３’−Ｏ−イソプロピリデンアデノシン（１３ｉ）
飽和メタノール性アンモニア（１５ｍＬ）中に１３ｈ（８０ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）を添加した混合物を室温で１２日間攪拌した。得た溶液を濃縮乾固して、カラムクロマトグラフィー（９：１：０．１＝塩化メチレン：メタノール：ＮＨ４ＯＨで溶出）により残留物を精製した。所望の画分を合わせて、濃縮し、減圧下で乾燥した。収率４０ｍｇ（５５％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ３９２（Ｍ＋Ｈ）＋．
【実施例３９】
【００８９】
５’−［（２−カルボキサミドエチル）メチルアミノ］−５’−デオキシアデノシン硫酸塩（１．９：１塩）（１３ｊ）
化合物１３ｉ（２０ｍｇ）を１Ｎ  Ｈ２ＳＯ４（２ｍＬ）に溶解し、当該溶液を室温で３６時間攪拌した。反応混合物を０．５ｍＬまで濃縮し、当該溶液に無水エタノール（３ｍＬ）を添加し、わずかに混濁させ、混合物を０℃に冷却した。固体を濾過し、エタノールで洗滌し、高減圧下で乾燥した。収率１５ｍｇ（５１％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ３５２（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．６４（ｓ，１Ｈ，Ｈ−８），８．４３（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．５９（ｂｓ，１Ｈ，ＮＨ２），７．１７（ｂｓ，１Ｈ，ＮＨ２），６．０２（ｂｄｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝３．４Ｈｚ），４．６５（ｔ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ２’，３’＝６．４Ｈｚ），４．１７−４．２１（ｂｍ，１Ｈ，Ｈ−３’），３．３４−３．４２（ｂｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），３．５２−３．６７（ｂｍ，４Ｈ，５’−ＣＨ２，Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ２），２．８０（ｂｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），２．５４−２．６０（ｂｍ，２Ｈ，ＣＯ−ＣＨ２）；ＵＶ  λｍａｘ，ｎｍ，ｐＨ１，２５６．３（ε  １５，２００），ｐＨ７，２５８．５（ε  １５，４００），ｐＨ１３，２５９．６（ε  １６，１００）．Ａｎａｌ．（Ｃ１４Ｈ２１Ｎ７Ｏ４．１．９Ｈ２ＳＯ４．１．６Ｈ２Ｏ）Ｃ，Ｈ，Ｎ，Ｓ．
【実施例４０】
【００９０】
５’−デオキシ−５’−［（２−ヒドラジノカルボニルエチル）メチルアミノ］−８−メチルアデノシン硫酸塩（２：１塩）（１３ｋ）
化合物１３ａ（１１５ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）を無水エタノール（１０ｍＬ）に溶解し、当該溶液にヒドラジン一水和物（７３ｍｇ、０．０７ｍＬ、１．４６ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を加熱して一晩中、還流した。ヒドラジン一水和物（０．０７ｍＬ）をさらに添加し、一晩中、加熱し続けた。得た溶液を蒸発乾固した。カラムクロマトグラフィー（４：１：０．５＝クロロホルム：メタノール：ＮＨ４ＯＨ）により粗生成物を精製した。所望の画分を集めて、濃縮し、減圧下で乾燥し、粘稠固体を得た。生成物をＥｔＯＨ（８ｍＬ）に溶解し、２Ｎ  Ｈ２ＳＯ４を滴下した。沈殿した塩を濾過し、ＥｔＯＨで洗滌した。本質的に吸湿性の該塩を水（２ｍＬ）に溶解し、凍結乾燥して、白色固体を得た。収率７１ｍｇ（６５％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ３８１（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ８．４４（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），６．０９（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝５．６Ｈｚ），５．１０（ｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ２’，３’＝４．５Ｈｚ），４．５３−４．６２（ｂｍ，２Ｈ，Ｈ−３’，Ｈ−４’），３．８６−３．９４（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），３．５２−３．６６（ｍ，３Ｈ，５’−ＣＨ２，Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ２），２．９５（ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），２．８６（ｔ，２Ｈ，ＮＨＣＯ−ＣＨ２），２．７０（ｓ，３Ｈ，８−ＣＨ３）；ＵＶ  λｍａｘ，ｎｍ，ｐＨ１，２５８．４（ε  １５，０００），ｐＨ７，２５９．３（ε  １５，２００），ｐＨ１３，２６０．４（ε  １５，７００）．Ａｎａｌ．（Ｃ１５Ｈ２４Ｎ８Ｏ４．２．０Ｈ２ＳＯ４．２．７Ｈ２Ｏ）Ｃ，Ｈ，Ｎ，Ｓ．
【実施例４１】
【００９１】
５’−デオキシ−５’−［（２−ヒドラジノカルボニルエチル）メチルアミノ］−アデノシン硫酸塩（２：１塩）（１３ｌ）
１３ｇ（９５ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）及びヒドラジン一水和物（６３ｍｇ、０．０６ｍＬ、１．２５ｍｍｏｌ）を使用し、上記１３ｋで示した手順と同様の手順を実施した。収率３９ｍｇ（４３％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ３６７（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ８．４７（ｓ，１Ｈ，Ｈ−８），８．４５（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），６．１７（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝４．７Ｈｚ），４．９０（ｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ２’，３’＝５．２Ｈｚ），４．５６−４．６０（ｂｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），４．４８（ｄｄ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ３’，４’＝５．０Ｈｚ），３．８２（ｄｄ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），３．６６（ｄｄ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），３．５９（ｂｔ，２Ｈ，Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ２），２．９７（ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），２．８６（ｔ，２Ｈ，ＮＨＣＯ−ＣＨ２）；ＵＶ  λｍａｘ，ｎｍ，ｐＨ１，２５６．８（ε  １６，６００），ｐＨ７，２５８．５（ε  １６，８００），ｐＨ１３，２５９．５（ε  １７，６００）．Ａｎａｌ．（Ｃ１４Ｈ２２Ｎ８Ｏ４．２．０Ｈ２ＳＯ４．２．０Ｈ２Ｏ）Ｃ，Ｈ，Ｎ．
【実施例４２】
【００９２】
５’−デオキシ−５’−［（ヒドラジノカルボニルメチル）メチルアミノ］−８−メチルアデノシン（１３ｍ）
１３ｃ（１６７ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）及びヒドラジン一水和物（１０９ｍｇ、０．１１ｍＬ、２．１８ｍｍｏｌ）を使用し、１３ｋの製造と同様の手順で１３ｍを製造した。カラムに通すと、白色固体を得た。収率１５４ｍｇ（９６％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ３６７（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．７５（ｂｓ，１Ｈ，ＮＨ），８．０９（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．１０（ｂｓ，２Ｈ，ＮＨ−ＮＨ２），５．７４（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝５．２Ｈｚ），５．３１（ｄ，１Ｈ，ＯＨ−２’，Ｊ２’−２’ＯＨ＝６．０Ｈｚ），５．１８（ｄ，１Ｈ，ＯＨ−３’，Ｊ３’−３’ＯＨ＝５．６Ｈｚ），５．０（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ１’，２’＝５．２Ｈｚ，Ｊ２’，３’＝５．７Ｈｚ，Ｊ２’−２’ＯＨ＝６．０Ｈｚ），４．１９（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ２’，３’＝５．７Ｈｚ，Ｊ３’，４’＝４．９Ｈｚ，Ｊ３’−３’ＯＨ＝５．６Ｈｚ），３．９４−３．９９（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），３．０１（ｄ，１Ｈ，ＣＯ−ＣＨａＨｂ，Ｊ＝１５．２Ｈｚ），２．９５（ｄ，１Ｈ，ＣＯ−ＣＨａＨｂ，Ｊ＝１５．２Ｈｚ），２．７８（ｄｄ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．６６（ｄｄ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．５３（ｓ，３Ｈ，８−ＣＨ３），２．２２（ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３）；ＵＶ  λｍａｘ，ｎｍ，ｐＨ１，２５８．９（ε  １５，３００），ｐＨ７，２５９．３（ε  １５，６００），ｐＨ１３，２６０．１（ε  １６，１００）．Ａｎａｌ．（Ｃ１４Ｈ２２Ｎ８Ｏ４．０．２ＣＨ３ＯＨ．０．４Ｈ２Ｏ）Ｃ，Ｈ，Ｎ．
【実施例４３】
【００９３】
５’−［（３−アミノプロピル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−（メチルアミノ）アデノシン硫酸塩（２．４：１塩）（１４ａ）及び５’−デオキシ−８−（メチルアミノ）−５’−（３−メチルアミノプロピルアミノ）アデノシン硫酸塩（２．４：１塩）（１５ａ）
３ｃ（１７５ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）をＮ−メチル−１，３−プロパンジアミン（２ｍＬ）に溶解した溶液を室温で４日間攪拌した。混合物をジエチルエーテル（２０ｍＬ）中に注ぎ込んだ。エーテル層をデカントして油状液体を残し、該油状液体をカラムクロマトグラフィーにより精製した。カラムの溶出は４：１：０．５＝クロロホルム：メタノール：ＮＨ４ＯＨで行った。所望の画分を集めて、濃縮し、減圧下で乾燥し、２つの異性体を得た。この分離した異性体をそれぞれ、６ｍＬのＥｔＯＨ、５ｍＬのＥｔＯＨに溶解し、２Ｎ  Ｈ２ＳＯ４を滴下した。沈殿した硫酸塩を濾過し、ＥｔＯＨで洗滌した。本質的に吸湿性の該塩を水（２ｍＬ）に溶解し、凍結乾燥して、白色固体を得た。１４ａの収率５０ｍｇ（１５％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ３６７（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．９１（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），６．９０（ｂｓ，１Ｈ，８ＣＨ３−ＮＨ），６．４９（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．７０（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝４．８Ｈｚ），４．９２（ｔ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ２’，３’＝５．５Ｈｚ），４．１７（ｔ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ３’，４’＝５．２Ｈｚ），３．８９−３．９６（ｂｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），２．８９（ｓ，３Ｈ，８ＮＨ−ＣＨ３），２．５３−２．７０（ｍ，４Ｈ，ＮＨ２−ＣＨ２，５’−ＣＨ２），２．３８（ｔ，２Ｈ，Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ２），２．１７（ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），１．４８−１．６０（ｍ，２Ｈ，ＮＨ２ＣＨ２−ＣＨ２），１ＨＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ８．２８（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），５．８７（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝５．１Ｈｚ），５．１８（ｔ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ２’，３’＝５．１Ｈｚ），４．５４（ｔ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ３’，４’＝５．１Ｈｚ），４．４６−４．５１（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），３．０１−３．８２（ｂｍ，６Ｈ，５’−ＣＨ２，ＮＨ２−ＣＨ２，Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ２），３．０５（ｓ，３Ｈ，８ＮＨ−ＣＨ３），２．９４（ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），２．０５−２．１８（ｂｍ，２Ｈ，ＮＨ２ＣＨ２−ＣＨ２）；ＵＶ  λｍａｘ，ｎｍ，ｐＨ１，２７５．５（ε  １４，５００），ｐＨ７，２７５（ε  １７，２００），ｐＨ１３，２７７（ε  １７，５００）．Ａｎａｌ．（Ｃ１５Ｈ２６Ｎ８Ｏ３．２．４Ｈ２ＳＯ４．０．２Ｃ２Ｈ５ＯＨ）Ｃ，Ｈ，Ｎ；１５ａの収率２９ｍｇ（７％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ３６７（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．９６（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．０（ｂｓ，１Ｈ，８ＣＨ３−ＮＨ），６．５７（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．８０（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝５．５Ｈｚ），４．９７（ｔ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ２’，３’＝５．５Ｈｚ），５．４（ｂｓ，２Ｈ，２’，３’−ＯＨ’ｓ），４．３３（ｔ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ３’，４’＝３．７Ｈｚ），４．１７−４．２４（ｂｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），３．２０−３．５０（ｍ，２Ｈ，５’−ＣＨ２），３．０５−３．８５（ｍ，４Ｈ，ＮＨ−ＣＨ２），２．８８（ｓ，３Ｈ，８ＮＨ−ＣＨ３），２．４９（ｓ，３Ｈ，ＮＨ−ＣＨ３），１．８５−２．０（ｂｍ，２Ｈ，ＮＨＣＨ２−ＣＨ２），１ＨＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ８．２７（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），５．８６（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝５．２Ｈｚ），５．１６（ｔ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ２’，３’＝５．５Ｈｚ），４．５５（ｔ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ３’，４’＝４．５Ｈｚ），４．３６−４．４４（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），３．４７−３．６９（ｍ，２Ｈ，５’−ＣＨ２），３．２２（ｔ，２Ｈ，ＮＨ−ＣＨ２），３．１０（ｔ，２Ｈ，ＣＨ３ＮＨ−ＣＨ２），３．０５（ｓ，３Ｈ，８ＮＨ−ＣＨ３），２．７１（ｓ，３Ｈ，ＮＨ−ＣＨ３），２．０４−２．１８（ｂｍ，２Ｈ，ＮＨＣＨ２−ＣＨ２）；ＵＶ  λｍａｘ，ｎｍ，ｐＨ１，２７４．１（ε  １４，３００），ｐＨ７，２７６（ε  １７，１００），ｐＨ１３，２７７．１（ε  １８，７００）．Ａｎａｌ．（Ｃ１５Ｈ２６Ｎ８Ｏ３．２．４Ｈ２ＳＯ４．０．２Ｃ２Ｈ５ＯＨ）Ｃ，Ｈ，Ｎ．
【実施例４４】
【００９４】
５’−［（３−アミノプロピル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−フェニルアデノシン硫酸塩（２．２：１塩）（１４ｂ）及び５’−デオキシ−５’−（３−メチルアミノプロピルアミノ）−８−フェニルアデノシン硫酸塩（１．７：１塩）（１５ｂ）
上記１４ａの記載と同様の手順を用いて、３ｄ（２００ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）及びＮ−メチル−１，３−プロパンジアミン（３ｍＬ）から、１４ｂ及び１５ｂを製造した。ただしこの場合においては、室温で１日間攪拌した後、反応混合物を６５℃で２日間加熱した。カラムの溶出は４：１：０．２＝クロロホルム：メタノール：ＮＨ４ＯＨで行った。ワークアップを同様に行い、２つの異性体を得た。１４ｂの収率１２４ｍｇ（３４％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ４１４（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．３８（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．６１−７．８４（ｍ，７Ｈ，８−フェニル，６−ＮＨ２），５．８８（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝６．３Ｈｚ），５．１７−５．３０（ｂｍ，１Ｈ，Ｈ−２’），４．３４−４．３８（ｂｍ，１Ｈ，Ｈ−３’），４．２５−４．３１（ｂｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），３．１０−３．８５（ｂｍ，４Ｈ，Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ２，５’−ＣＨ２），２．８０−２．９４（ｍ，２Ｈ，ＮＨ２−ＣＨ２），２．７８（ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），１．８１−２．０（ｂｍ，２Ｈ，ＮＨ２ＣＨ２−ＣＨ２）；ＵＶ  λｍａｘ，ｎｍ，ｐＨ１，２７４．２（ε  ２０，５００），ｐＨ７，２７５．８（ε  １６，３００），ｐＨ１３，２７４．５（ε  １６，４００）．Ａｎａｌ．（Ｃ２０Ｈ２７Ｎ７Ｏ３．２．２Ｈ２ＳＯ４．０．１Ｃ２Ｈ５ＯＨ．２．５Ｈ２Ｏ）Ｃ，Ｈ，Ｎ，Ｓ；１５ｂの収率１５１ｍｇ（４２％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ４１４（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．２３（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．０−７．７４（ｍ，２Ｈ，８−フェニルｏ−Ｈ’ｓ），７．６０−７．６５（ｍ，３Ｈ，８−フェニルｍ−及びｐ−Ｈ’ｓ），７．４６（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．８０（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１，２＝６．２Ｈｚ），５．２５（ｔ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ２，３＝４．９Ｈｚ），５．５−６．０（ｍ，２Ｈ，ＮＨ’ｓ），４．２９−４．３５（ｂｍ，１Ｈ，Ｈ−３’），４．１２−４．２０（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），３．４０−３．４７（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），３．１９−３．２５（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．９４（ｍ，４Ｈ，ＮＨ−ＣＨ２，ＣＨ３ＮＨ−ＣＨ２），２．５４（ｓ，３Ｈ，ＮＨ−ＣＨ３），１．８０−１．９５（ｂｍ，２Ｈ，ＮＨＣＨ２−ＣＨ２）；ＵＶ  λｍａｘ，ｎｍ，ｐＨ１，２７５．５（ε  ２０，６００），ｐＨ７，２７４．９（ε  １６，２００），ｐＨ１３，２７４．９（ε  １６，３００）．Ａｎａｌ．（Ｃ２０Ｈ２７Ｎ７Ｏ３．１．７Ｈ２ＳＯ４．０．０５Ｃ２Ｈ５ＯＨ．３．３Ｈ２Ｏ）Ｃ，Ｈ，Ｎ，Ｓ．
【実施例４５】
【００９５】
５’−［（３−アミノプロピル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−２’，３’−Ｏ−イソプロピリデンアデノシン（１４ｃ）
３ｈ４４（１．０ｇ、２．６０ｍｍｏｌ）及びＮ−メチル−１，３−プロパンジアミン（１．３５ｍＬ、１３．０ｍｍｏｌ）の混合物をアルゴン雰囲気下で一晩攪拌した。反応混合物を濃縮乾固し、粗生成物を、溶離液にクロロホルム：メタノール：ＮＨ４ＯＨ（６：１：０．１）を使用したカラムクロマトグラフィーにより精製した。所望の画分を合わせて、濃縮し、減圧下で乾燥し、半固体を得た。この物質を水（３ｍＬ）に溶解し、凍結乾燥した。収率３６１ｍｇ（３７％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ３７８（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．３３（ｓ，１Ｈ，Ｈ−８），８．１７（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．３３（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），６．１３（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝２．３Ｈｚ），５．４９（ｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ２’，３’＝４．０Ｈｚ），４．９４（ｄｄ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ３’，４’＝２．９Ｈｚ），４．２１−４．２７（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），２．５２−２．５８（ｍ，２Ｈ，ＮＨ２−ＣＨ２），２．２６−２．３８（ｍ，４Ｈ，５’−ＣＨ２，Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ２），２．１２（ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），１．５３及び１．３３（２ｓ，６Ｈ，Ｃ（ＣＨ３）２），１．３７−１．４７（ｍ，２Ｈ，ＮＨ２ＣＨ２−ＣＨ２）．
【実施例４６】
【００９６】
５’−［（３−アミノプロピル）メチルアミノ］−５’−デオキシアデノシン硫酸塩（２：１塩）（１４ｄ）
１３ｊで記載した手順を用いて１４ｃ（２００ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）から１４ｄを製造した。収率１２１ｍｇ（４１％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ３３８（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．４７（ｂｓ，１Ｈ，Ｈ−８），８．２９（ｂｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．０−１０．０（ブロードなピーク，ＮＨ２ｓ＋Ｈ２ＳＯ４），５．９７（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝４．７Ｈｚ），５．７０（ｂｓ，１Ｈ，２’−ＯＨ），５．５６（ｂｓ，１Ｈ，３’−ＯＨ），４．７２（ｂｔ，１Ｈ，Ｈ−２’），４．３０（ｂｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），４．２１（ｂｔ，１Ｈ，Ｈ−３’），３．３０−３．７０（ｂｍ，２Ｈ，５’−ＣＨ２），３．０８（ｂｓ，２Ｈ，Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ２），２．８３（ｂｍ，２Ｈ，ＮＨ２−ＣＨ２），２．７０（ｂｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），１．８４−１．９２（ｍ，２Ｈ，ＮＨ２ＣＨ２−ＣＨ２）；ＵＶ  λｍａｘ，ｎｍ，ｐＨ１，２５７（ε  １４，７００），ｐＨ７，２５９．２（ε  １５，０００），ｐＨ１３，２６０（ε  １５，３００）．Ａｎａｌ．（Ｃ１４Ｈ２３Ｎ７Ｏ３．２．０Ｈ２ＳＯ４．０．２５Ｃ２Ｈ５ＯＨ．０．７Ｈ２Ｏ）Ｃ，Ｈ，Ｎ．
【実施例４７】
【００９７】
５’−［（２−アミノエチル）メチルアミノ］−５’−デオキシアデノシン（１４ｅ）及び５’−デオキシ−５’−（２−メチルアミノエチルアミノ）アデノシン（１５ｃ）
３ｇ４３（１．０ｇ、３．５ｍｍｏｌ）及びＮ−メチルエチレンジアミン（８ｍＬ）の混合物を室温で１２日間攪拌した。反応混合物をジエチルエーテル（５０ｍＬ）中に注ぎ込んだ。エーテル層をデカントし、得たシロップ状液体をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル２３０〜４００メッシュ、４：１：０．５＝クロロホルム：メタノール：ＮＨ４ＯＨで溶出）により精製した。所望の画分を合わせて、濃縮し、減圧下で乾燥し、２つの異性体を得た。収率（１４ｅ）５７６ｍｇ（５１％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ３２４（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．３５（ｓ，１Ｈ，Ｈ−８），８．１５（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．２７（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．８５（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝５．３Ｈｚ），４．６４（ｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ２’，３’＝５．３Ｈｚ），４．１１（ｄｄ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ３’，４’＝４．３Ｈｚ），３．９５−４．０（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），２．９０−３．６０（ｂｓ，４Ｈ，２’，３’−ＯＨｓ＋ＮＨｓ），２．７０（ｄｄ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．５０−２．６０（ｂｍ，３Ｈ，５’−ＣＨ２，Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ２），２．３６（ｔ，２Ｈ，ＮＨ２−ＣＨ２），２．１９（ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３）；ＵＶ  λｍａｘ，ｎｍ，ｐＨ１，２５６．９（ε  １４，１００），ｐＨ７，２５９．５（ε  １４，７００），ｐＨ１３，２５９．２（ε  １５，３００）．Ａｎａｌ．（Ｃ１３Ｈ２１Ｎ７Ｏ３．０．２５ＣＨＣｌ３  ０．５Ｈ２Ｏ）Ｃ，Ｈ，Ｎ；収率（１５ｃ）３２３ｍｇ（２９％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ３２４（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．３５（ｓ，１Ｈ，Ｈ−８），８．１４（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．２８（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．８４（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝５．９Ｈｚ），４．６９（ｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ２’，３’＝５．３Ｈｚ），４．１２（ｄｄ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ３’，４’＝３．５Ｈｚ），３．９４−３．９９（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），２．９０−３．６０（ｂｓ，４Ｈ，２’，３’−ＯＨｓ＋ＮＨｓ），２．８０（ｄｄ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．７３（ｄｄ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．５０−２．６２（ｂｍ，４Ｈ，ＮＨＣＨ３−ＣＨ２，ＮＨ−ＣＨ２），２．２５（ｓ，３Ｈ，ＮＨ−ＣＨ３）；ＵＶ  λｍａｘ，ｎｍ，ｐＨ１，２５６．４（ε  １３，９００），ｐＨ７，２５９（ε  １３，９００），ｐＨ１３，２５９．８（ε  １４，０００）．Ａｎａｌ．（Ｃ１３Ｈ２１Ｎ７Ｏ３．０．０５ＣＨ３ＯＨ．０．１Ｈ２Ｏ）Ｃ，Ｈ，Ｎ．
【実施例４８】
【００９８】
５’−［（２−アミノエチル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−メチルアデノシン（１４ｆ）及び５’−デオキシ−８−メチル−５’−（２−メチルアミノエチルアミノ）アデノシン（１５ｄ）
上記１４ｅ／１５ｃで記載した手順を用いて、３ａ（３００ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）及びＮ−メチルエチレンジアミン（３ｍＬ）から１４ｆ／１５ｄを製造した。収率（１４ｆ）６９ｍｇ（１８．３％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ３３８（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．０８（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．１１（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．７４（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝５．４Ｈｚ），５．３１（ｂｓ，１Ｈ，２’−ＯＨ），５．０４（ｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ２’，３’＝５．６Ｈｚ），４．１７（ｄｄ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ３’，４’＝４．５Ｈｚ），４．０８（ｂｓ，１Ｈ，３’−ＯＨ），３．９３−３．９８（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），２．７０（ｄｄ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．５３−２．５７（ｂｍ，３Ｈ，５’−ＣＨ２，Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ２），２．５３（ｓ，３Ｈ，８−ＣＨ３），２．３０−２．３５（ｍ，２Ｈ，ＮＨ２−ＣＨ２），２．１６（ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３）；ＵＶ  λｍａｘ，ｎｍ，ｐＨ１，２５８．５（ε  １５，６００），ｐＨ７，２５９．１（ε  １６，０００），ｐＨ１３，２６０（ε  １６，２００）．Ａｎａｌ．（Ｃ１４Ｈ２３Ｎ７Ｏ３．０．５ＣＨ３ＯＨ．０．３Ｈ２Ｏ）Ｃ，Ｈ，Ｎ；収率（１５ｄ）５８ｍｇ（１５．４％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ３３８（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．０７（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．１２（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．７２（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝６．４Ｈｚ），５．２７（ｂｓ，１Ｈ，２’−ＯＨ），５．０２（ｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ２’，３’＝５．４Ｈｚ），４．１７（ｄｄ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ３’，４’＝３．１Ｈｚ），３．９４−３．９９（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），２．８０（ｄｄ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．７４（ｄｄ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．５４−２．６３（ｂｍ，４Ｈ，ＮＨＣＨ３−ＣＨ２，ＮＨ−ＣＨ２），２．５４（ｓ，３Ｈ，８−ＣＨ３），２．２４（ｓ，３Ｈ，ＮＨ−ＣＨ３）；ＵＶ  λｍａｘ，ｎｍ，ｐＨ１，２５８．４（ε  １５，４００），ｐＨ７，２５９．５（ε  １５，４００），ｐＨ１３，２６０（ε  １５，９００）．Ａｎａｌ．（Ｃ１４Ｈ２３Ｎ７Ｏ３．０．４ＣＨ３ＯＨ．０．７Ｈ２Ｏ）Ｃ，Ｈ，Ｎ．
【実施例４９】
【００９９】
５’−デオキシ−２’，３’−Ｏ−イソプロピリデン−５’−［（３−フタルイミドプロピル）メチルアミノ］−８−メチルアデノシン（１６ａ）
化合物２ｅ（５００ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）を無水ピリジン（２ｍＬ）に溶解した溶液を冷却して、この溶液に塩化メタンスルホニル（１９６ｍｇ、０．１３ｍＬ、１．７ｍｍｏｌ）を添加した。該溶液を０℃で２時間攪拌した。反応混合物を濃縮乾固し、粗生成物３ｅを得た。当該粗混合物にメチルアミン（ＥｔＯＨ中の３３％溶液、１２ｍＬ）を添加し、この溶液を室温で３日間攪拌した。反応混合物を蒸発乾固した。得た粗生成物４ｅを無水ＤＭＦ（３ｍＬ）に溶解し、ＤＩＥＡ（０．０７ｍＬ）及びＮ−（３−ブロモプロピル）フタルイミド（５０２ｍｇ、１．８７ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を６０℃で一晩加熱した。該溶液を蒸発乾固して、残留物をＣＨＣｌ３（１０ｍＬ）に溶解し、水洗し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮乾固した。得たシロップ状液体をカラムクロマトグラフィーにより精製した。カラムの溶出は、９７：３＝クロロホルム：メタノールで行った。所望の画分を合わせて、濃縮し、減圧下で乾燥した。収率１０８ｍｇ（１３％）。ＭＳ  ｍ／ｚ  ５２２（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ８．２６（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．８２−７．８６（ｍ，２Ｈ，フタルイミド芳香族Ｈ’ｓ），７．６９−７．７３（ｍ，２Ｈ，フタルイミド芳香族Ｈ’ｓ），５．９８（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝１．８Ｈｚ），５．７６（ｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ１’，２’＝１．８Ｈｚ，Ｊ２’，３’＝６．５Ｈｚ），５．３８（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．１０（ｄｄ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ２’，３’＝６．５Ｈｚ，Ｊ３’，４’＝３．５Ｈｚ），４．２６−４．３２（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），３．６０−３．７６（ｍ，２Ｈ，Ｎ−ＣＨ２），２．６４（ｓ，３Ｈ，８−ＣＨ３），２．５８−２．６３（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２４１−２．４８（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．３８（ｔ，２Ｈ，Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ２），２．２１（ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），１．６８−１．８０（ｍ，２Ｈ，ＮＣＨ２−ＣＨ２），１．６１及び１．４０（２ｓ，６Ｈ，Ｃ（ＣＨ３）２）．
【実施例５０】
【０１００】
５’−デオキシ−２’，３’−Ｏ−イソプロピリデン−５’−［（３−フタルイミドプロピル）メチルアミノ］−８−エチルアデノシン（１６ｂ）
１６ａの記載と同様の手順を用いて、２ｆ（６００ｍｇ、１．７８ｍｍｏｌ）、ＭｓＣｌ（２２５ｍｇ、０．１５ｍＬ、１．９６ｍｍｏｌ）、メチルアミン（１２ｍＬ）、及び、Ｎ−（３−ブロモプロピル）フタルイミド（５５３ｍｇ、２．０６ｍｍｏｌ）から、１６ｂを製造した。収率８１ｍｇ（８．５％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ５３６（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ８．２６（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．８１−７．８６（ｍ，２Ｈ，フタルイミド芳香族Ｈ’ｓ），７．６７−７．７２（ｍ，２Ｈ，フタルイミド芳香族Ｈ’ｓ），５．９８（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝２．０Ｈｚ），５．７５（ｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ１’，２’＝２．０Ｈｚ，Ｊ２’，３’＝６．５Ｈｚ），５．３７（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．１２（ｄｄ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ２’，３’＝６．５Ｈｚ，Ｊ３’，４’＝３．５Ｈｚ），４．２５−４．３３（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），３．６１−３．７５（ｍ，２Ｈ，Ｎ−ＣＨ２），２．９４（ｑ，２Ｈ，８−ＥｔのＣＨ２），２．６２−２．６８（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２４３−２．４９（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．３８（ｂｔ，２Ｈ，Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ２），２．２２（ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），１．７０−１．８０（ｍ，２Ｈ，ＮＣＨ２−ＣＨ２），１．６０及び１．４０（２ｓ，６Ｈ，Ｃ（ＣＨ３）２），１．４２（ｔ，３Ｈ，８−ＥｔのＣＨ３）．
【実施例５１】
【０１０１】
５’−デオキシ−２’，３’−Ｏ−イソプロピリデン−５’−［（３−アミノプロピル）メチルアミノ］−８−メチルアデノシン（１７ａ）
１６ａ（１００ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）をエタノール（３ｍＬ）に溶解した溶液を沸騰させて、この溶液にヒドラジン一水和物（５０ｍｇ、０．０４８ｍＬ、０．９９ｍｍｏｌ）を添加し、その溶液を加熱して１時間還流した。反応混合物を室温まで冷却し、固体を濾過し、エタノールで洗滌した。濾液を蒸発乾固した。この粗生成物を、溶離液にクロロホルム：メタノール：ＮＨ４ＯＨ（７：１：０．２）を使用したカラムクロマトグラフィーにより精製した。収率６９ｍｇ（９２％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ３９２（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．１２（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．１８（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），６．０６（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝１．９Ｈｚ），５．７９（ｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ１’，２’＝１．９Ｈｚ，Ｊ２’，３’＝６．３Ｈｚ），５．０（ｄｄ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ２’，３’＝６．３Ｈｚ，Ｊ３’，４’＝３．１Ｈｚ），４．１５−４．２１（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），２．５６（ｓ，３Ｈ，８−ＣＨ３），２．４０−２．５０（ｍ，２Ｈ，Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ２），２．１３−２．３１（ｂｍ，４Ｈ，ＮＨ２−ＣＨ２，５’−ＣＨ２），２．０７（ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），１．５３及び１．３３（２ｓ，６Ｈ，Ｃ（ＣＨ３）２），１．２２−１．３２（ｍ，２Ｈ，ＮＨ２ＣＨ２−ＣＨ２）．
【実施例５２】
【０１０２】
５’−デオキシ−２’，３’−Ｏ−イソプロピリデン−５’−［（３−アミノプロピル）メチルアミノ］−８−エチルアデノシン（１７ｂ）
１６ｂ（７６ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）及びヒドラジン一水和物（３８ｍｇ、０．３６ｍＬ、０．７６ｍｍｏｌ）を使用し、１７ａで示した手順と同様の手順で化合物１７ｂを製造した。収率４７ｍｇ（８２％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ４０６（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．１２（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．１６（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），６．０３（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝２．０Ｈｚ），５．７６（ｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ１’，２’＝２．０Ｈｚ，Ｊ２’，３’＝６．４Ｈｚ），５．０１（ｄｄ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ２’，３’＝６．４Ｈｚ，Ｊ３’，４’＝３．０Ｈｚ），４．１５−４．２２（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），２．８７−２．９４（ｂｍ，２Ｈ，５’−ＣＨ２），２．３８−２．５３（ｍ，２Ｈ，８−ＥｔのＣＨ２），２．１３−２．３４（ｍ，４Ｈ，Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ２，ＮＨ２−ＣＨ２），２．０８（ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），１．５３及び１．３３（２ｓ，６Ｈ，Ｃ（ＣＨ３）２），１．２２−１．３９（ｍ，２Ｈ，ＮＨ２ＣＨ２−ＣＨ２），１．３１（ｔ，３Ｈ，８−ＥｔのＣＨ３）．
【実施例５３】
【０１０３】
５’−［（３−アミノプロピル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−メチルアデノシン硫酸塩（２：１塩）（１７ｃ）
化合物１７ａ（６６ｍｇ、０．１６８ｍｍｏｌ）を１Ｎ  Ｈ２ＳＯ４（２ｍＬ）に溶解し、一晩中攪拌した。この溶液にエタノール（１０ｍＬ）を添加し、微細な固体を分離した。溶媒をデカントし、化合物を水（１ｍＬ）に溶解し、エタノール（１５ｍＬ）を添加した。得られた固体を水（２ｍＬ）に溶解し、凍結乾燥して、白色固体を得た。収率６６ｍｇ（６７％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ３５２（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．１６（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．７４（ｂｓ，２Ｈ，ＣＨ２−ＮＨ２），７．２４（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．８４（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝６．０Ｈｚ），５．６２（ｂｓ，２Ｈ，２’，３’−ＯＨ’ｓ），４．９８（ｔ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ２，３＝４．４Ｈｚ），４．２９−４．３６（ｂｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），４．２３（ｔ，１Ｈ，Ｈ−３’），３．４０−３．６８（ｂｍ，２Ｈ，５’−ＣＨ２），２．９９−３．１９（ｂｍ，２Ｈ，Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ２），２．８３（ｔ，２Ｈ，ＮＨ２−ＣＨ２），２．７０（ｂｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），２．５５（ｓ，３Ｈ，８−ＣＨ３），１．８０−１．９３（ｍ，２Ｈ，ＮＨ２ＣＨ２−ＣＨ２）；ＵＶ  λｍａｘ，ｎｍ，ｐＨ１，２５８．７（ε  １４，９００），ｐＨ７，２５９．５（ε  １５，１００），ｐＨ１３，２６０．７（ε  １５，３００）．Ａｎａｌ．（Ｃ１５Ｈ２５Ｎ７Ｏ３．２．０Ｈ２ＳＯ４．２．５Ｈ２Ｏ）Ｃ，Ｈ，Ｎ，Ｓ．
【実施例５４】
【０１０４】
５’−［（３−アミノプロピル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−エチルアデノシン硫酸塩（２．５：１塩）（１７ｄ）
１７ｃで記載された手順を用いて１７ｂ（４４ｍｇ、０．１０８ｍｍｏｌ）から１７ｄを製造した。この場合、ＥｔＯＨ添加後に微細な固体が析出し、この固体を遠心分離により回収した。次に、該固体を水（２ｍＬ）に溶解し、凍結乾燥した。収率３０ｍｇ（６９％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ３６６（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ；８．１５（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．６８（ｂｓ，２Ｈ，ＣＨ２−ＮＨ２），７．２１（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．８２（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝６．０Ｈｚ），５．６１（ｂｓ，２Ｈ，２’，３’−ＯＨ’ｓ），５．０４（ｔ，１Ｈ，Ｈ−２’），４．１９−４．２７（ｂｍ，２Ｈ，Ｈ−３’，４’），３．２２−３．４３（ｂｍ，４Ｈ，５’−ＣＨ２，Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ２），２．９０（ｑ，２Ｈ，８ＣＨ２ＣＨ３），２．８１（ｔ，２Ｈ，ＮＨ２−ＣＨ２），２．５０（ｂｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），１．７３−１．８８（ｂｍ，２Ｈ，ＮＨ２ＣＨ２−ＣＨ２），１．３２（ｔ，３Ｈ，８ＣＨ２ＣＨ３）；ＵＶ  λｍａｘ，ｎｍ，ｐＨ１，２５９．３（ε  １５，１００），ｐＨ７，２６０．５（ε  １５，１００），ｐＨ１３，２６０．３（ε  １５，１００）．Ａｎａｌ．（Ｃ１６Ｈ２７Ｎ７Ｏ３．２．５Ｈ２ＳＯ４．２．５Ｈ２Ｏ）Ｃ，Ｈ，Ｎ．
【実施例５５】
【０１０５】
５’−デオキシ−５’−［（２−グアニジノエチル）メチルアミノ］アデノシン（１８ａ）
無水ＤＭＦ（５ｍＬ）中に１４ｅ（２１８ｍｇ、０．６７ｍｍｏｌ）及び１Ｈ−ピラゾール−１−カルボキサミジン塩酸塩５０（１９６ｍｇ、１．３４ｍｍｏｌ）が溶解した溶液を攪拌しながら、該溶液に対して、窒素雰囲気下、５℃でＤＩＥＡ（４７９ｍｇ、０．６５ｍＬ、３．７ｍｍｏｌ）を添加した。室温で一晩中攪拌し続けた。反応混合物を濃縮乾固し、生成物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル２３０〜４００メッシュ、４：１：０．３＝クロロホルム：メタノール：ＮＨ４ＯＨで溶出）により精製した。所望の画分を合わせて、濃縮し、減圧下で乾燥して、白色固体を得た。収率２１９ｍｇ（８９％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ３６６（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．３４（ｓ，１Ｈ，Ｈ−８），８．１５（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．４８，７．３７，７．２８（ｂｓ，ＮＨｓ），５．８７（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝５．２Ｈｚ），５．５０（ｄ，１Ｈ，２’−ＯＨ，Ｊ２’−２’ＯＨ＝５．７Ｈｚ），５．２８（ｄ，１Ｈ，３’−ＯＨ，Ｊ３’−３’ＯＨ＝４．５Ｈｚ），４．６５（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ１’，２’＝５．２Ｈｚ，Ｊ２’，３’＝５．１Ｈｚ，Ｊ２’−２’ＯＨ＝５．７Ｈｚ），４．１２（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ２’，３’＝５．１Ｈｚ，Ｊ３’，４’＝４．６Ｈｚ，Ｊ３’−３’ＯＨ＝４．５Ｈｚ），４．０−４．１０（ｂｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），３．３０−３．５０（ｂｍ，２Ｈ，５’−ＣＨ２），３．１２−３．２８（ｂｍ，２Ｈ，ＮＨ−ＣＨ２），２．５５−２．６５（ｂｍ，２Ｈ，Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ２），２．２５（ｂｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３）；ＵＶ  λｍａｘ，ｎｍ，ｐＨ１，２５６．３（ε  １０，９００），ｐＨ７，２５９（ε  １１，３００），ｐＨ１３，２５９（ε  １１，０００）．Ａｎａｌ．（Ｃ１４Ｈ２３Ｎ９Ｏ３．０．０５ＣＨＣｌ３．３．５Ｈ２Ｏ）Ｃ，Ｈ，Ｎ．
【実施例５６】
【０１０６】
５’−［（２−シアノエチル）メチルアミノ］−５’−デオキシアデノシン（１８ｂ）
３ｊ４６（１．０ｇ、２．３７ｍｍｏｌ）を３−（メチルアミノ）プロピオニトリル（１０ｍＬ）に溶解した溶液を室温で５日間攪拌した。反応混合物をジエチルエーテル（５０ｍＬ）に注ぎ込んだ。エーテル層をデカントし、得られたシロップ状液体をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、７：１：０．１＝クロロホルム：メタノール：ＮＨ４ＯＨで溶出）により精製した。所望の画分を合わせて、濃縮し、減圧下で乾燥した。収率６８５ｍｇ（８７％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ３２４（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．３４（ｓ，１Ｈ，Ｈ−８），８．１５（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．２９（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．８７（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝５．４Ｈｚ），５．４６（ｂｄ，１Ｈ，２’−ＯＨ），５．２２（ｂｄ，１Ｈ，３’−ＯＨ），４．６５（ｍ，１Ｈ，Ｈ−２’），４．１３（ｍ，１Ｈ，Ｈ−３’），３．９７−４．０３（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），２．７８（ｄｄ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．５８−２．６８（ｂｍ，５Ｈ，５’−ＣＨ２，ＮＣ−ＣＨ２ＣＨ２），２．２４（ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３）．
【実施例５７】
【０１０７】
５’−デオキシ−５’−［（２−ヒドロキシアミジノエチル）メチルアミノ］アデノシン（１８ｃ）
窒素雰囲気下で無水ＭｅＯＨ（２０ｍＬ）及び無水ＤＭＦ（４ｍＬ）中に１８ｂ（４７０ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）を溶解した溶液に、ヒドロキシルアミン塩酸塩（２５８ｍｇ、３．７ｍｍｏｌ）及び水酸化カリウム（２０６ｍｇ、３．７ｍｍｏｌ）を添加し、得た懸濁液を室温で２日間攪拌した。反応混合物を濃縮乾固し、その粗生成物をＥｔＯＡｃ（２×４０ｍＬ）で抽出し、塩水（２０ｍＬ）で洗滌した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、ＥｔＯＡｃで洗滌し、濃縮乾固した。生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製した。カラムの溶出は、４：１：０．５＝クロロホルム：メタノール：ＮＨ４ＯＨで行った。所望の画分を合わせて、濃縮し、減圧下で乾燥し、固体を得た。収率１６５ｍｇ（３２％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ３６７（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．７０（ｂｓ，１Ｈ，ＮＯＨ），８．３３（ｓ，１Ｈ，Ｈ−８），８．１５（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．２７（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．８６（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝５．３Ｈｚ），５．４３（ｄ，１Ｈ，２’−ＯＨ，Ｊ２’−２’ＯＨ＝６．０Ｈｚ），５．３５（ｂｓ，２Ｈ，Ｃ−ＮＨ２），５．２０（ｄ，１Ｈ，３’−ＯＨ，Ｊ３’−３’ＯＨ＝５．２Ｈｚ），４．６３（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ１’，２’＝５．３Ｈｚ，Ｊ２’，３’＝４．９Ｈｚ，Ｊ２’−２’ＯＨ＝６．０Ｈｚ），４．１０（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ２’，３’＝４．９Ｈｚ，Ｊ３’，４’＝３．５Ｈｚ，Ｊ３’−３’ＯＨ＝５．２Ｈｚ），３．９６−４．０（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），２．６４−２．７５（ｂｍ，２Ｈ，５’−ＣＨ２），２．５６（ｔ，２Ｈ，Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ２），２．２０（ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），２．０９（ｔ，２Ｈ，Ｃ−ＣＨ２）．Ａｎａｌ．（Ｃ１４Ｈ２２Ｎ８Ｏ４．１．２Ｃ２Ｈ５ＯＨ．０．２ＣＨ３ＯＨ）Ｃ，Ｈ，Ｎ．
【実施例５８】
【０１０８】
５’−デオキシ−５’−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）−８−メチルアデノシン（１９ａ）
３ａ（１５０ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）、及び、メタノール中ジメチルアミンの２Ｍ溶液（１０ｍＬ）の混合物をスチール製容器に投入し、９０℃で２日間加熱した。反応混合物を濃縮乾固し、カラムクロマトグラフィー（４：１：０．１５＝クロロホルム：メタノール：ＮＨ４ＯＨで溶出）により精製した。所望の画分を合わせて、濃縮し、減圧下で乾燥した。収率３８ｍｇ（２５％）。ＭＳ  ｍ／ｚ  ３０９（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．０８（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．１１（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．７４（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝５．５Ｈｚ），５．３１（ｄ，１Ｈ，ＯＨ−２’，Ｊ２’−２’ＯＨ＝５．９Ｈｚ），５．１８（ｄ，１Ｈ，ＯＨ−３’，Ｊ３’−３’ＯＨ＝５．４Ｈｚ），５．０３（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ１’，２’＝５．５Ｈｚ，Ｊ２’，３’＝４．６Ｈｚ，Ｊ２’−２’ＯＨ＝５．９Ｈｚ），４．１５（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ２’，３’＝４．６Ｈｚ，Ｊ３’，４’＝５．５Ｈｚ，Ｊ３’−３’ＯＨ＝５．４Ｈｚ），３．９１−３．９６（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），２．５５−２．６１（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．５３（ｓ，３Ｈ，８−ＣＨ３），２．４２−２．４８（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．１４（ｂｓ，６Ｈ，Ｎ−（ＣＨ３）２）；ＵＶ  λｍａｘ，ｎｍ，ｐＨ１，２５８．５（ε  １５，３００），ｐＨ７，２５９．３（ε  １５，３００），ｐＨ１３，２６０．１（ε  １５，５００）．Ａｎａｌ．（Ｃ１３Ｈ２０Ｎ６Ｏ３．０．３５ＣＨＣｌ３．０．５Ｃ２Ｈ５ＯＨ）Ｃ，Ｈ，Ｎ．
【実施例５９】
【０１０９】
５’−デオキシ−５’−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）アデノシン（１９ｂ）
３ｇ４３（５００ｍｇ、１．７５ｍｍｏｌ）、及び、メタノール中ジメチルアミンの２Ｍ溶液（２０ｍＬ）を使用し、１９ａの製造の記載と同様の手順で化合物１９ｂを製造した。収率２３８ｍｇ（４６％）。ＭＳ  ｍ／ｚ  ２９５（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．３３（ｓ，１Ｈ，Ｈ−８），８．１５（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．２９（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．８６（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝５．４Ｈｚ），５．４５（ｄ，１Ｈ，ＯＨ−２’，Ｊ２’−２’ＯＨ＝５．９Ｈｚ），５．２２（ｂｄ，１Ｈ，ＯＨ−３’，Ｊ３’−３’ＯＨ＝３．９Ｈｚ），４．６５（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ１’，２’＝５．４Ｈｚ，Ｊ２’，３’＝５．５Ｈｚ，Ｊ２’−２’ＯＨ＝５．９Ｈｚ），４．１０（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ２’，３’＝５．５Ｈｚ，Ｊ３’，４’＝４．５Ｈｚ，Ｊ３’−３’ＯＨ＝３．９Ｈｚ），３．９４−４．０（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），２．６２（ｄｄ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．４８（ｄｄ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．１８（ｂｓ，６Ｈ，Ｎ−（ＣＨ３）２）；ＵＶ  λｍａｘ，ｎｍ，ｐＨ１，２５６．３（ε  １５，１００），ｐＨ７，２５９．２（ε  １５，５００），ｐＨ１３，２５９．７（ε  １５，６００）．Ａｎａｌ．（Ｃ１２Ｈ１８Ｎ６Ｏ３．０．３５ＣＨ３ＯＨ）Ｃ，Ｈ，Ｎ．
【実施例６０】
【０１１０】
５’−デオキシ−５’−メチルチオ−８−メチルアデノシン（２０ａ）
無水ＤＭＦ（２ｍＬ）中に３ａ（２００ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ）及びナトリウムチオメトキシド（４７ｍｇ、０．６７ｍｍｏｌ）を溶解した溶液を室温で２日間攪拌した後、濃縮乾固した。溶離液にクロロホルム：メタノール（７：１）を使用したカラムクロマトグラフィーにより、粗生成物を精製した。所望の画分を集めて、濃縮し、減圧下で乾燥した。収率１０２ｍｇ（４９％）。ＭＳ  ｍ／ｚ  ３１２（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．０９（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．１２（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．７７（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝５．７Ｈｚ），５．３８（ｂｄ，１Ｈ，ＯＨ−２’，Ｊ２’−２’ＯＨ＝４．４Ｈｚ），５．３１（ｄ，１Ｈ，ＯＨ−３’，Ｊ３’−３’ＯＨ＝４．２Ｈｚ），５．１５（ｂｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ１’，２’＝５．７Ｈｚ，Ｊ２’，３’＝５．７Ｈｚ，Ｊ２’−２’ＯＨ＝４．４Ｈｚ），４．２０（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ２’，３’＝５．７Ｈｚ，Ｊ３’，４’＝３．６Ｈｚ，Ｊ３’−３’ＯＨ＝４．２Ｈｚ），３．９７−４．０５（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），２．７４−２．９２（ｍ，２Ｈ，５’−ＣＨ２），２．５４（ｓ，３Ｈ，８−ＣＨ３），２．０３（ｓ，３Ｈ，Ｓ−ＣＨ３）．
【実施例６１】
【０１１１】
５’−デオキシ−５’−ジメチルスルホニオ−８−メチルアデノシン臭化物（２１ａ）
化合物２０ａ（７８ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）を蟻酸と酢酸との２：１混合液（４ｍＬ）に添加したものを、ジエチルエーテル中ブロモメタンの２Ｍ溶液（５ｍＬ）で処理し、暗室内で室温下、６日間攪拌した。減圧下で溶媒を除去し、残留物を水（１０ｍＬ）に溶解した溶液をエーテル（３×１０ｍＬ）で抽出した。水層を濃縮乾固した。得た生成物をＭｅＯＨ（１０ｍＬ）に溶解し、濾過し、ジエチルエーテルで処理して、塩を沈殿させた。該塩を濾過し、エーテルで洗滌し、減圧下で乾燥して、白色固体を得た。収率７９ｍｇ（７８％）。ＭＳ  ｍ／ｚ  ３２６（Ｍ）＋；１ＨＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ８．２４（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），６．０３（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝５．４Ｈｚ），５．２９（ｔ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ２’，３’＝５．７Ｈｚ），４．８０（ｔ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ３’，４’＝４．８Ｈｚ），４．５２−４．６０（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），４．１１−４．２０（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），３．８１−３．９０（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．９２及び２．８９（２ｓ，６Ｈ，Ｓ−（ＣＨ３）２），２．６７（ｓ，３Ｈ，８−ＣＨ３）．
【実施例６２】
【０１１２】
５’−デオキシ−５’−ジメチルスルホニオ−８−メチルアデノシン塩化物（２１ｂ）
イオン交換樹脂（ＩＲＡ−４００、Ｃｌ−型）を繰り返し水洗し、カラムに充填した。該カラムを一晩置いた後、さらに繰り返し水洗した。臭化物塩２１ａ（５０ｍｇ）を水（１ｍＬ）に溶解し、カラムに投入した。水によるカラムの溶出を暗室内で非常にゆっくりと行った。所望の画分を合わせ、凍結乾燥して、３０ｍｇ（６８％）を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  ３２６（Ｍ）＋；１ＨＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ８．２４（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），６．０３（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝５．４Ｈｚ），５．２９（ｔ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ２’，３’＝５．６Ｈｚ），４．８０（ｔ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ３’，４’＝４．９Ｈｚ），４．５２−４．６０（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），３．８２−４．１１（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），３．７５−３．８３（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．９５及び２．９２（２ｓ，６Ｈ，Ｓ−（ＣＨ３）２），２．６９（ｓ，３Ｈ，８−ＣＨ３）；ＵＶ  λｍａｘ，ｎｍ，ｐＨ１，２５８．８（ε  １５，０００），ｐＨ７，２５９．１（ε  １４，７００），ｐＨ１３，２６３．５（ε  １３，０００）．Ａｎａｌ．（Ｃ１３Ｈ２０ＣｌＮ５Ｏ３Ｓ．２Ｈ２Ｏ）Ｃ，Ｈ，Ｎ．
【実施例６３】
【０１１３】
５’−デオキシ−５’−ジメチルスルホニオアデノシン臭化物（２１ｃ）
２１ａで記載された手順を用いて２０ｂ（５８ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）から２１ｃを製造した。収率４９ｍｇ（６５％）。ＭＳ  ｍ／ｚ  ３１２（Ｍ）＋．
【０１１４】
５’−デオキシ−５’−ジメチルスルホニオアデノシン塩化物（２１ｄ）
イオン交換樹脂（ＩＲＡ−４００、Ｃｌ−型）を水洗し、カラムに充填した。該カラムを一晩置いた後、さらに繰り返し水洗した。塩２１ｃ（４８ｍｇ）を水（１ｍＬ）に溶解し、カラムに投入した。水によるカラムの溶出を暗室内で非常にゆっくりと行った。所望の画分を合わせ、凍結乾燥して、３０ｍｇ（４４％）を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  ３１２（Ｍ）＋；１ＨＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ８．２９（ｓ，１Ｈ，Ｈ−８），８．２７（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），６．１２（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝４．４Ｈｚ），４．９９（ｔ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ２’，３’＝５．１Ｈｚ），４．５５−４．６２（ｍ，２Ｈ，Ｈ−３’，Ｈ−４’），３．８４−４．０（ｍ，２Ｈ，５’−ＣＨ２），２．９５及び２．９３（２ｓ，６Ｈ，Ｓ−（ＣＨ３）２）；ＵＶ  λｍａｘ，ｎｍ，ｐＨ１，２５６．４（ε  １４，３００），ｐＨ７，２５９．６（ε  １４，４００），ｐＨ１３，２６６（ε  １２，３００）．Ａｎａｌ．（Ｃ１２Ｈ１８ＣｌＮ５Ｏ３Ｓ．１．５Ｈ２Ｏ．０．１Ｃ２Ｈ５ＯＨ）Ｃ，Ｈ，Ｎ，Ｓ．
【実施例６４】
【０１１５】
５’−［［４−［［（１−エトキシエチリデン）アミノ］オキシ］ブチル］メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−ヒドロキシアデノシン（２３ａ）
６ａで記載された手順を用いて、４ｅ（５００ｍｇ、１．６８ｍｍｏｌ）、１３（４８１ｍｇ、２．０１ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（１０９ｍｇ、０．１４ｍＬ、０．８４ｍｍｏｌ）、及び、ＤＭＦ（５ｍＬ）から、２３ａを製造した。カラムクロマトグラフィー（４：１：０．２＝クロロホルム：メタノール：ＮＨ４ＯＨで溶出）により、ガラス質の黄色粘稠固体を得た。収率２００ｍｇ（２６％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ４５４（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１０．３４（ｂｓ，１Ｈ，８−ＯＨ），８．０２（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），６．４９（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．６２（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝５．０Ｈｚ），４．９９（ｂｓ，１Ｈ，３’−ＯＨ），５．１９（ｂｓ，１Ｈ，２’−ＯＨ），４．９０（ｔ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ２’，３’＝５．４Ｈｚ），４．１６−４．２４（ｂｍ，１Ｈ，Ｈ−３’），３．８３−３．８９（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），３．９２（ｑ，２Ｈ，ＣＨ３−ＣＨ２），３．７７（ｔ，２Ｈ，ＮＨ２Ｏ−ＣＨ２），２．６２−３．６８（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．４０−２．４６（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．３０（ｔ，２Ｈ，ＮＣＨ３−ＣＨ２），２．１３（ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），１．８４（ｓ，３Ｈ，Ｃ−ＣＨ３），１．３５−１．６０（ｂｍ，４Ｈ，ＮＯＣＨ２−ＣＨ２ＣＨ２），１．２１（ｔ，３Ｈ，ＯＣＨ２−ＣＨ３）．
【実施例６５】
【０１１６】
５’−［［４−［［（１−エトキシエチリデン）アミノ］オキシ］ブチル］メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−ヒドロキシアデノシン（２３ｂ）
４ｃ（１．００ｇ、３．２３ｍｍｏｌ）、１３（９２４ｍｇ、３．８７ｍｍｏｌ）、及び、ＤＩＥＡ（２０９ｍｇ、０．２８ｍＬ、１．６ｍｍｏｌ）を使用し、６ａで示した手順と同様の手順で化合物２３ｂを製造した。収率６３５ｍｇ（４２％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ４６７（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．８９（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），６．８７（ｑ，１Ｈ，８ＣＨ３−ＮＨ），６．４６（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．６９（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝４．８Ｈｚ），５．２５（ｄ，１Ｈ，２’−ＯＨ，Ｊ２’−２’ＯＨ＝５．６Ｈｚ），５．０６（ｄ，１Ｈ，３’−ＯＨ，Ｊ３’−３’ＯＨ＝５．４Ｈｚ），４．９１（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ１’，２’＝４．８Ｈｚ，Ｊ２’，３’＝５．４Ｈｚ，Ｊ２’−２’ＯＨ＝５．６Ｈｚ），４．１６（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ２’，３’＝５．４Ｈｚ，Ｊ３’，４’＝４．９Ｈｚ，Ｊ３’−３’ＯＨ＝５．４Ｈｚ），３．８５−３．９４（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），３．９２（ｑ，２Ｈ，ＣＨ３−ＣＨ２），３．８０（ｔ，２Ｈ，ＮＯ−ＣＨ２），２．８８（ｄ，３Ｈ，８ＮＨ−ＣＨ３，Ｊ＝４．６Ｈｚ），２．６５−２．７４（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．４６−２．５８（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．３４（ｔ，２Ｈ，ＮＣＨ３−ＣＨ２），２．１７（ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），１．８３（ｓ，３Ｈ，Ｃ−ＣＨ３），１．３７−１．６１（ｂｍ，４Ｈ，ＮＯＣＨ２−ＣＨ２ＣＨ２），１．１９（ｔ，３Ｈ，ＯＣＨ２−ＣＨ３）．
【実施例６６】
【０１１７】
５’−［［４−［［（１−エトキシエチリデン）アミノ］オキシ］ブチル］メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−（メチルアミノ）アデノシン（２３ｃ）
６ａの記載と同様の手順を用いて、４ｄ（４５０ｍｇ、１．２６ｍｍｏｌ）、１３（３６０ｍｇ、１．５１ｍｍｏｌ）、及び、ＤＩＥＡ（８１ｍｇ、０．１０ｍｌ、０．６２ｍｍｏｌ）から、２３ｃを製造した。カラムクロマトグラフィー（７：１＝クロロホルム：メタノールで溶出）により、ガラス質の黄色粘稠固体を得た。収率３１２ｍｇ（４８％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ５１４（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．１７（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．７１−７．７８（ｍ，２Ｈ，８Ｃ６Ｈ５−オルトＨ），７．５８−７．６４（ｍ，３Ｈ，８Ｃ６Ｈ５−メタ及びパラＨ），７．３６（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．６７（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝５．７Ｈｚ），５．３２（ｂｓ，１Ｈ，２’−ＯＨ），５．３１（ｔ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ１’，２’＝５．７Ｈｚ，Ｊ２，３＝５．４Ｈｚ），５．１１（ｄ，１Ｈ，３’−ＯＨ，Ｊ３’−３’ＯＨ＝４．８Ｈｚ），４．１６（ｂｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ２’，３’＝５．４Ｈｚ，Ｊ３’，４’＝４．０Ｈｚ），３．９２−３．９７（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），３．９１（ｑ，２Ｈ，ＣＨ３−ＣＨ２），３．７９（ｔ，２Ｈ，ＮＯ−ＣＨ２），２．７２−２．８０（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．５４−２．５９（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．３４（ｂｔ，２Ｈ，ＮＣＨ３−ＣＨ２），２．１７（ｂｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），１．８３（ｓ，３Ｈ，Ｃ−ＣＨ３），１．３９−１．６０（ｂｍ，４Ｈ，ＮＯＣＨ２−ＣＨ２ＣＨ２），１．１８（ｔ，３Ｈ，ＯＣＨ２−ＣＨ３）．
【実施例６７】
【０１１８】
５’−［（カルボエトキシエチル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−メチルアデノシン（３３ａ）
４ａ（５００ｍｇ、１．６９ｍｍｏｌ）、３−クロロプロピオン酸エチル（２７０ｍｇ、１．９７ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（１０９ｍｇ、０．１４ｍＬ、０．８４ｍｍｏｌ）、及び、ＤＭＦ（５ｍＬ）を使用し、上記６ａで記載された基本手順で３３ａを製造した。反応混合物を６０℃で２日間加熱した。出発物質がまだ残っていたが、溶液が黒ずんできたため、加熱を止めた。生成物をカラムクロマトグラフィー（６：１：０．１＝クロロホルム：メタノール：ＮＨ４ＯＨ）により精製し、粘稠固体を得た。収率２１０ｍｇ（３１％）。ＭＳ  ｍ／ｚ  ３９５（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．０８（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．１１（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．７４（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’２’＝５．６Ｈｚ），５．３３（ｂｄ，１Ｈ，ＯＨ−２’），５．１６（ｂｄ，１Ｈ，ＯＨ−３’），５．１２（ｂｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ１’，２’＝５．６Ｈｚ，Ｊ２’，３’＝５．５Ｈｚ），４．２１（ｂｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ２’，３’＝５．５Ｈｚ，Ｊ３’，４’＝４．３Ｈｚ），４．０１（ｑ，２Ｈ，ＣＨ３−ＣＨ２），３．９１−４．００（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），２．７０−２．７７（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．５４−２．６６（ｍ，３Ｈ，５’−ＣＨ２，ＣＯ−ＣＨ２），２．５３（ｓ，３Ｈ，８−ＣＨ３），２．３８（ｔ，２Ｈ，ＮＣＨ３−ＣＨ２），２．１６（ｂｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），１．１５（ｔ，３Ｈ，ＯＣＨ２−ＣＨ３）．
【実施例６８】
【０１１９】
５’−［（カルボエトキシエチル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−エチルアデノシン（３３ｂ）
４ｂ（２６０ｍｇ、０．８４ｍｍｏｌ）、３−クロロプロピオン酸エチル（１３８ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（５３ｍｇ、０．０７ｍＬ、０．４１ｍｍｏｌ）、及び、ＤＭＦ（４ｍＬ）を使用し、６ａ及び３３ａの製造の記載と同様の手順で化合物３３ｂを製造した。カラムクロマトグラフィー（７：１：０．１＝クロロホルム：メタノール：ＮＨ４ＯＨで溶出）により、ガラス質の粘稠固体を得た。収率１５３ｍｇ（４４％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ４０９（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．０８（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．１０（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．７１（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’２’＝５．５Ｈｚ），５．３２（ｂｄ，１Ｈ，ＯＨ−２’，Ｊ２’−２’ＯＨ＝５．０Ｈｚ），５．１６（ｂｄ，１Ｈ，ＯＨ−３’，Ｊ３’−３’ＯＨ＝５．１Ｈｚ），５．１２（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ１’，２’＝５．５Ｈｚ，Ｊ２’，３’＝５．７Ｈｚ，Ｊ２’−２’ＯＨ＝５．０Ｈｚ），４．１４（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ２’，３’＝５．７Ｈｚ，Ｊ３’，４’＝４．１Ｈｚ，Ｊ３’−３’ＯＨ＝５．１Ｈｚ），４．０１（ｑ，２Ｈ，ＣＨ３−ＣＨ２），３．９１−３．９８（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），２．８７（ｑ，２Ｈ，８−ＥｔのＣＨ２），２．７１−２．７９（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．５１−２．６５（ｍ，３Ｈ，５’−ＣＨ２，ＣＯ−ＣＨ２），２．３８（ｔ，２Ｈ，ＮＣＨ３−ＣＨ２），２．１６（ｂｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），１．３０（ｔ，３Ｈ，８−ＥｔのＣＨ３），１．１５（ｔ，３Ｈ，ＯＣＨ２−ＣＨ３）．
【実施例６９】
【０１２０】
５’−［（カルボキサミドエチル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−メチルアデノシン硫酸塩（１．５：１塩）（３４ａ）
化合物３３ａ（８９ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）をメタノール性アンモニア（５ｍＬ）に溶解し、当該溶液を室温で５日間攪拌した。反応混合物を濃縮乾固し、カラムクロマトグラフィー（４：１：０．２＝クロロホルム：メタノール：ＮＨ４ＯＨ）で精製した。所望の画分を集めて、濃縮し、減圧下で乾燥した。生成物をＥｔＯＨ（８ｍＬ）に溶解し、２Ｎ  Ｈ２ＳＯ４を滴下した。化合物が沈殿し、該化合物を濾過し、ＥｔＯＨで洗滌した。本質的に吸湿性の該生成物を水（２ｍＬ）に溶解し、凍結乾燥して、白色固体を得た。収率６５ｍｇ（５５％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ３６６（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ８．４３（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），６．０９（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝５．９Ｈｚ），５．０−５．３０（ｂｍ，１Ｈ，Ｈ−２’），４．６１−４．７０（ｂｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），４．５１−４．５４（ｂｍ，１Ｈ，Ｈ−３’），３．３０−３．８９（ｂｍ，５Ｈ，Ｎ−ＣＨ３ＣＨ２），２．９６（ｂｓ，２Ｈ，５’−ＣＨ２），２．７７（ｂｓ，２Ｈ，ＮＨ２ＣＯ−ＣＨ２），２．７０（ｓ，３Ｈ，８−ＣＨ３）；ＵＶ  λｍａｘ，ｎｍ，ｐＨ１，２５８．４（ε  １４，９００），ｐＨ７，２６０．１（ε  １４，９００），ｐＨ１３，２６０．１（ε  １５，３００）．
【実施例７０】
【０１２１】
５’−［（カルボキサミドエチル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−エチルアデノシン硫酸塩（１．１：１塩）（３４ｂ）
３３ｂ（１４９ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）及びメタノール性アンモニア（５ｍＬ）を使用し、上記の３４ａの記載と同様の手順を実施した。収率９４ｍｇ（５１％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ３８０（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．０８（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．３１（ｂｓ，１Ｈ，ＣＯ−ＮＨ２），７．１０（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），６．７１（ｂｓ，１Ｈ，ＣＯ−ＮＨ２），５．７２（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’２’＝５．４Ｈｚ），５．３１（ｄ，１Ｈ，ＯＨ−２’，Ｊ２’−２’ＯＨ＝６．２Ｈｚ），５．１６（ｄ，１Ｈ，ＯＨ−３’，Ｊ３’−３’ＯＨ＝５．５Ｈｚ），５．０９（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ１’，２’＝５．４Ｈｚ，Ｊ２’，３’＝５．７Ｈｚ，Ｊ２’−２’ＯＨ＝６．２Ｈｚ），４．１７（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ２’，３’＝５．７Ｈｚ，Ｊ３’，４’＝４．３Ｈｚ，Ｊ３’−３’ＯＨ＝５．５Ｈｚ），３．９２−３．９９（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），２．８７（ｑ，２Ｈ，ＣＨ３−ＣＨ２），２．６９−２．７５（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．５２−２．６０（ｍ，３Ｈ，ＣＯ−ＣＨ２，５’−ＣＨ２），２．１８（ｂｓ，２Ｈ，ＮＣＨ３−ＣＨ２），２．１６（ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），１．３０（ｔ，３Ｈ，８−ＥｔのＣＨ３）；１ＨＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ８．３８（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），６．０９（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝６．２Ｈｚ），５．３３（ｂｓ，１Ｈ，Ｈ−２’），４．５６−４．６２（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），４．５１−４．５４（ｍ，１Ｈ，Ｈ−３’），３．８７−３．９６（ｂｍ，２Ｈ，ＮＨ２ＣＯ−ＣＨ２），３．５６（ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），２．９８−３．８０（ｂｍ，２Ｈ，ＣＨ３−ＣＨ２），２．９６（ｂｓ，２Ｈ，５’−ＣＨ２），２．７２−２．８２（ｍ，２Ｈ，ＮＣＨ３−ＣＨ２），１．３９（ｓ，３Ｈ，８−ＥｔのＣＨ３）；ＵＶ  λｍａｘ，ｎｍ，ｐＨ１，２５９．４（ε  １５，２００），ｐＨ７，２６０．８（ε  １５，１００），ｐＨ１３，２６０．６（ε  １５，５００）．
【実施例７１】
【０１２２】
５’−［（カルボエトキシメチル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−メチルアデノシン（３５）
４ａ（４１５ｍｇ、１．４１ｍｍｏｌ）、クロロ酢酸エチル（２０７ｍｇ、０．１８ｍＬ、１．６８ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（９１ｍｇ、０．１２ｍＬ、０．７０ｍｍｏｌ）、及び、ＤＭＦ（５ｍＬ）を使用し、６ａの製造の記載と同様の手順で化合物３５を製造した。収率２０４ｍｇ（３８％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ３８１（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．０６（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．１１（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．７３（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’２’＝５．４Ｈｚ），５．３３（ｂｄ，１Ｈ，ＯＨ−２’，Ｊ２’−２’ＯＨ＝４．７Ｈｚ），５．１９（ｂｄ，１Ｈ，ＯＨ−３’，Ｊ３’−３’ＯＨ＝４．９Ｈｚ），５．０３（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ１’，２’＝５．４Ｈｚ，Ｊ２’，３’＝５．７Ｈｚ，Ｊ２’−２’ＯＨ＝４．７Ｈｚ），４．１７（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ２’，３’＝５．７Ｈｚ，Ｊ３’，４’＝４．４Ｈｚ，Ｊ３’−３’ＯＨ＝４．９Ｈｚ），４．０２（ｑ，２Ｈ，ＣＨ３−ＣＨ２），３．９２−３．９９（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），３．２７（ｂｓ，２Ｈ，ＮＣＨ３−ＣＨ２），２．８３−２．９０（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．７０−２．７９（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．５３（ｓ，３Ｈ，８−ＣＨ３），２．３１（ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），１．１３（ｔ，３Ｈ，ＯＣＨ２−ＣＨ３）；ＵＶ  λｍａｘ，ｎｍ，ｐＨ１，２５８．９（ε  １６，１００），ｐＨ７，２６０（ε  １５，９００），ｐＨ１３，２６０．１（ε  １６，２００）．
【実施例７２】
【０１２３】
５’−［（カルボキサミドメチル）メチルアミノ］−５’−デオキシ−８−メチルアデノシン硫酸塩（１．４５：１塩）（３６）
３５（２００ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）及びメタノール性アンモニア（５ｍＬ）を使用し、３４ａの製造と同様の手順を用いて３６を製造した。収率１０５ｍｇ（３９％）。ＭＳ：ｍ／ｚ  ３５２（Ｍ＋Ｈ）＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．０８（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），７．１１（ｂｓ，２Ｈ，ＣＯ−ＮＨ２），７．０７（ｂｓ，２Ｈ，６−ＮＨ２），５．７４（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’２’＝５．２Ｈｚ），５．３４（ｄ，１Ｈ，ＯＨ−２’，Ｊ２’−２’ＯＨ＝５．９Ｈｚ），５．２１（ｄ，１Ｈ，ＯＨ−３’，Ｊ３’−３’ＯＨ＝５．７Ｈｚ），４．９７（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ１’，２’＝５．２Ｈｚ，Ｊ２’，３’＝５．５Ｈｚ，Ｊ２’−２’ＯＨ＝５．９Ｈｚ），４．２１（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ２’，３’＝５．５Ｈｚ，Ｊ３’，４’＝５．２Ｈｚ，Ｊ３’−３’ＯＨ＝５．７Ｈｚ），３．９４−４．０１（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），２．９４（ｄ，１Ｈ，ＮＣＨ３−ＣＨ２，Ｊ＝１５．７Ｈｚ），２．８８（ｄ，１Ｈ，ＮＣＨ３−ＣＨ２，Ｊ＝１５．７Ｈｚ），２．７５−２．８０（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．６３−２．７０（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），２．５３（ｓ，３Ｈ，８−ＣＨ３），２．２３（ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），１ＨＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ８．４０（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２），６．０８（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１’，Ｊ１’，２’＝４．８Ｈｚ），５．０１（ｔ，１Ｈ，Ｈ−２’，Ｊ２’，３’＝５．２Ｈｚ），４．６０（ｔ，１Ｈ，Ｈ−３’，Ｊ３’，４’＝４．９Ｈｚ），４．５０−４．５９（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），４．０３−４．１７（ｍ，２Ｈ，ＮＨ２ＣＯ−ＣＨ２），３．８２−３．９２（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），３．６８−３．７６（ｍ，１Ｈ，５’−ＣＨ２），３．０３（ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ３），２．７０（ｓ，３Ｈ，８−ＣＨ３）；ＵＶ  λｍａｘ，ｎｍ，ｐＨ１，２５９（ε  １５，９００），ｐＨ７，２５９．７（ε  １６，１００），ｐＨ１３，２６０．２（ε  １６，１００）．
【０１２４】
突然変異生成及びプラスミド構築
結晶構造解析に使用する、組み換え野生型及びＦ２２３Ａ変異体ｈＡｄｏＭｅｔＤＣをＥ．ｃｏｌｉにおいて産生させるためのｐＱＥ３０ベクタープラスミドを先行技術文献（２３）に記載されているように生成した。この構築物によってＮ−末端メチオニンが、固定化金属アフィニティークロマトグラフィーにより精製するために必要なＭＲＧＳ（Ｈ）６ＧＳ−に置換される。同様にｐＱＥ３０ベクターに基づく異なるプラスミドを使用して、ｈＡｄｏＭｅｔＤＣ酵素アッセイ用タンパク質を生成した。当該プラスミドでは、（Ｈ）６タグが、−ＱＱＱＱＱＳ末端から置き換わってカルボキシル末端に位置していた。（Ｈ）６タグの位置によって精製酵素の活性は変化しなかった。
【０１２５】
タンパク質発現及び精製
Ｅｋｓｔｒｏｍら（２０）により記載されたプロトコルに基づいて、野生型ｈＡｄｏＭｅｔＤＣを精製した。該酵素をコードするプラスミドはｐＱＥ３０ベクターに含まれるので、このプラスミドをＥ．ｃｏｌｉ  ＪＭ１０９株細胞に形質導入した。細胞をＬＢ培地中、３７℃で一晩培養して増殖させた後、より大きな細胞培養培地に投入した。これらの培地は共にアンピシリン（１００ｍｇ／ｍＬ）を含んでいた。細胞のＯ．Ｄ６００が０．６に達するまで細胞を増殖させた後、イソプロピル−１−チオ−β−Ｄガラクトピラノシド（ＩＰＴＧ）（１００ｍｇ／Ｌ）で発現を誘導した。細胞を１５℃で一晩増殖させた後、遠心分離により採取し、Ｎａ２ＨＰＯ４（２０ｍＭ、ｐＨ７．０）、ＮａＣｌ（５００ｍＭ）、プトレシン（２．５ｍＭ）、Ｂｒｉｊ−３５（０．０２％）、及び、イミダゾール（１０ｍＭ）を含有する洗滌用バッファーで洗滌し、−８０℃で保存した。冷凍細胞ペレットを解凍し、洗滌用バッファーに懸濁させ、加圧型細胞破壊装置（Ｆｒｅｎｃｈ  ｐｒｅｓｓ）を１５００ｐｓｉで使用して溶解した。細胞残渣及びライセートを１２０００ｇの遠心分離により分離した。Ｔａｌｏｎ金属アフィニティ樹脂を洗滌用バッファーで平衡化した後、ライセートと樹脂とを混合して１．５時間穏やかに遠心操作を行った。樹脂をカラムに充填し、カラム容積の１５〜２０倍に相当する量の洗滌用バッファーで洗滌した。次に、イミダゾール（２５ｍＭ）を含有する洗滌用バッファーで同じようにカラムを洗滌した。その後、イミダゾール（１００〜２００ｍＭ）を含有するバッファーでタンパク質を溶出した。溶出したタンパク質を１０ｍｌほどまで濃縮し、Ｈｅｐｅｓ（１０ｍＭ、ｐＨ７．５）、プトレシン（２．５ｍＭ）、ＤＴＴ（５ｍＭ）、ＥＤＴＡ（０．１ｍＭ）、Ｂｒｉｊ−３５（０．０２％）、及び、ＮａＣｌ（３００ｍＭ）で事前に平衡化させたＳｅｐｈａｄｅｘ  Ｇ−７５カラムに通液した。該バッファーをカラムに通液し、タンパク質を含む画分を２８０ｎｍのＵＶにより同定した。タンパク質を約１０ｍｇ／ｍＬまで濃縮し、−８０℃で保存した。Ｆ２２３Ａ変異体の精製は野生型酵素と同様に行った。
【０１２６】
結晶化
タンパク質を氷上で解凍し、Ｂｉｏ−ｒａｄバッファー交換クロマトグラフィーカラム（Ｂｉｏ−ｒａｄ  ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（カリフォルニア州  ９４５４７、ハーキュリーズ））を使用してバッファーをＨｅｐｅｓ（１０ｍＭ、ｐＨ７．５）、ＮａＣｌ（２００ｍＭ）、及び、ＤＴＴ（１ｍＭ）に交換した。野生型タンパク質は、４〜６モル過剰量のＭＡＯＢＥＡ及びＭＡＯＥＭＡと２４時間インキュベートし、その後結晶化させた。Ｆ２２３Ａ変異体は約６ｍｇ／ｍＬまで希釈し、４〜６モル過剰量のＭｅＡｄｏＭｅｔと２４時間インキュベートし、その後結晶化させた。野生型複合体及び変異型複合体の両方の結晶を、ハンギングドロップ法によってＰＥＧ８０００（１３〜１６％）、Ｔｒｉｓ（１００ｍＭ、ｐＨ８．０〜９．０）及びＤＴＴ（１０ｍＭ）中、２２℃で成長させた。一晩で結晶が現れ、１〜２週間安定であった。
【０１２７】
データ収集及び加工
ＭＡＯＥＭＡ複合体のデータは、Ｒｉｇａｋｕ  ＲＵ−３００回転対陰極型発生器からのＣｕＫα線を用いたＲｉｇａｋｕ  Ｒ−ａｘｉｓ  ＩＶ＋検出器のホームソース（ｈｏｍｅ  ｓｏｕｒｃｅ）から収集した。ＭＡＯＢＥＡ複合体のデータは、Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｐｈｏｔｏｎ  Ｓｏｕｒｃｅ（ＡＰＳ）においてＮＥ−ＣＡＴビームラインの８ＢＭステーションで、ＡＤＳＣ  ｑｕａｎｔｕｍ  ３１５検出器を使用して収集した。ＭｅＡｄｏＭｅｔが結合したＡｄｏＭｅｔＤＣ  Ｆ２２３Ａ変異体のデータは、ＣＨＥＳＳのＦ２ステーションで、ＡＤＳＣ  Ｑｕａｎｔｕｍ  ４検出器を使用して収集した。液体窒素又は液体窒素蒸気の雰囲気下で全ての結晶を急速冷凍した。結晶の回折品質は、結晶の凍結保護性に強く依存していた。結晶を、２％、５％、８％、１５％及び１８％のグリセロールを含有するウェル溶液を含む溶液へと順次移した。この際、各工程は１〜２分の平衡化時間を挟んで行った。
【０１２８】
ＨＫＬ２０００（２４）プログラムスイートを使用して、全ての複合体のデータに対してインデックス付け、積分及びスケーリングを行った。収集したデータの統計を表１にまとめる。
【０１２９】
構造決定及び精密化
探索モデルとしてＭｅＡｄｏＭｅｔが結合した野生型ＡｄｏＭｅｔＤＣの構造（ＰＤＢ  １Ｉ７Ｂ）を使用した分子置換及びＣＮＳプログラムスイート（２５）によって、全ての複合体の構造を決定した。ＭＡＯＥＭＡ及びＭＡＯＢＥＡ複合体のモデル構築はＯプログラム（２６）を使用して行った。ＭｅＡｄｏＭｅｔと複合体を形成したＡｄｏＭｅｔＤＣ  Ｆ２２３Ａ変異体のモデル構築はｃｏｏｔプログラム（２７）を使用して行った。ｆｏ−ｆｃ差及びコンポジットオミットマップによりリガンド分子の配座を決定した。ｈｉｃ−ｕｐサーバー（２８）を使用して、リガンドのパラメータ及びトポロジーファイルを生成した。また、上記差マップから、３つの構造全てにおいて、結合したプトレシン分子の電子密度も示された。複合体の精密化統計を表２に示す。
【０１３０】
ＡｄｏＭｅｔＤＣの活性部位におけるＭｅＡｄｏＭｅｔの分子モデリング
ＡｄｏＭｅｔＤＣの活性部位におけるリガンドの配座優先性を、Ｍａｃｒｏｍｏｄｅｌ  ｖｅｒｓｉｏｎ  ７．２プログラム（２９）により決定した。ベースシェル原子団（ｂａｓｅ  ｓｈｅｌｌ  ｏｆ  ａｔｏｍｓ）には、活性部位（ｐｄｂ  １Ｉ７Ｂ由来）の２０．０Å範囲内にある任意の残基が含まれており、このベースシェル原子団を配座探索及びエネルギー最小化の出発モデルとして使用した。リガンドを活性部位に付加した後、水分子を除去し、適当な水素処理を行った。リガンドのアミノ末端とピルボイル基とを共有結合で結合した。
【０１３１】
得た構造に対して混合型Ｍｏｎｔｅ  Ｃａｒｌｏ  ＭＣＭＭ／ローモード配座探索工程（３０）（３１）を５０，０００回施して、活性部位の周りの５Åシェル内の残基を移動させた。一方、Ｈ５、Ｅ６７、Ｃ２２６及びＥ２４７残基は固定した。ＡＭＢＥＲ＊力場（３２、３３）、誘電率定数：４の距離依存性誘電率、及び、ＴＮＣＧ最小化法（３４）を用いて、得られた構造に対して勾配：０．０５ｋＪ／ｍｏｌまでエネルギー最小化を行った。この探索の大域的最小値（ｇｌｏｂａｌ  ｍｉｎｉｍｕｍ）（収束後）を採用し、勾配を０．０１ｋＪ／ｍｏｌに微調整した。この際、リガンドだけを移動可能とした。完全を期して塩基をｓｙｎ及びａｎｔｉ両配座から始めて、ジョブを実行した。スルホニウムイオンのＡＭＢＥＲ＊パラメータは、Ｍａｒｋｈａｍらの研究（３５）から出典した。
【０１３２】
ＡｄｏＭｅｔＤＣの活性部位におけるＭＡＯＢＥＡのモデリング
Ｍａｃｒｏｍｏｄｅｌ  ｖｅｒｓｉｏｎ  ７．２プログラムを使用し、配座探索及び分子力学を用いてＭＡＯＢＥＡの末端の３原子のモデリングを行った。リガンドの残部とタンパク質の位置は電子密度により高精度に決定されるため、配座探索中、タンパク質と、末端の３原子を除いたリガンドとを全て固定した。配座探索中、Ｃ５−Ｃ４結合及びＣ４−Ｏ１結合を軸としてねじれ回転させた。Ｍｏｎｔｅ  Ｃａｒｌｏ探索により生成された構造を、ＡＭＢＥＲ＊力場、誘電率定数：４の距離依存性誘電率、及び、ＴＮＣＧ最小化法を用いて、勾配：０．０１ｋＪ／ｍｏｌまで最小化した。上位５つの最小構造を一見した限り、該最小構造は類似しており、探索の大域的最小値を考慮して、ＭＡＯＢＥＡの無秩序な（ｄｉｓｏｒｄｅｒｅｄ）末端原子の座標を得た。
【０１３３】
ＡｄｏＭｅｔＤＣ活性のアッセイ及び阻害剤のＩＣ５０値の決定
Ｓ−アデノシル−Ｌ−［カルボキシ−１４Ｃ］メチオニン（Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｐｈａｒｍａｃｉａ  Ｂｉｏｔｅｃｈ、約６０ｍＣｉ／ｍｍｏｌ）からの１４ＣＯ２の放出を測定することによりＡｄｏＭｅｔＤＣをアッセイした（３６）。これらの条件下でＣ末端ｈｉｓタグ付加ＡｄｏＭｅｔＤＣ（３０ｎｇ）をアッセイすることで、約７０００ｃｐｍ（バックグラウンド：３０）の結果が得られ、活性は約１．５ｐｍｏｌ／分／ｎｇ（タンパク質）であった。化合物のＡｄｏＭｅｔＤＣ阻害能を求めるために、阻害剤の非存在下、かつ、少なくとも５種類の濃度の各阻害剤候補の存在下で酵素活性を測定した。ＡｄｏＭｅｔＤＣ阻害％に対する阻害剤濃度のプロットに適合する曲線からＩＣ５０値を決定した。
【０１３４】
結果
ＡｄｏＭｅｔＤＣの活性部位におけるＭｅＡｄｏＭｅｔのモデリング
ＭｅＡｄｏＭｅｔと、又は、各阻害剤ＭＨＺＰＡ及びＭＡＯＥＡと複合体を形成したＡｄｏＭｅｔＤＣの結晶構造により、該リガンドが通常とは異なるｓｙｎ配座のアデニン塩基で結合していることが分かっている２３。ＭｅＡｄｏＭｅｔと結合したＡｄｏＭｅｔＤＣの活性部位残基を図１Ａに示す。しかしながら、分子モデリング研究と組み合わせたＮＭＲデータからは、溶液中、ＡｄｏＭｅｔがエネルギー最小値としてａｎｔｉ配座を取ることが示唆されている３５。ＡｄｏＭｅｔが結合している結晶構造の調査により、基質がグリコシドのねじれ角の範囲の位置を取ることが示されており、ほとんどの構造ではａｎｔｉ配座が選択されるものの、ｓｙｎ配座が観察される場合もあることが明らかになっている３５。このようなＡｄｏＭｅｔＤＣに結合したリガンドの配座優先と、関連するエネルギー特性とを説明するために、ＡｄｏＭｅｔＤＣの活性部位におけるＭｅＡｄｏＭｅｔのモデリングを行った。ＭｅＡｄｏＭｅｔはＡｄｏＭｅｔＤＣの活性部位に、ピルボイル基との共有結合により結合しているため、位置及び配向サンプリングを伴うドッキングは行わなかった。代わりに、ＡｄｏＭｅｔＤＣ活性部位において取られているＡｄｏＭｅｔの低エネルギー配座を特定する配座探索を、ＭａｃｒｏＭｏｄｅｌプログラムにおいて混合型Ｍｏｎｔｅ  Ｃａｒｌｏ／ローモード配座探索法２９〜３１を使用して行った。ａｎｔｉ又はｓｙｎ配座のいずれかのＡｄｏＭｅｔから配座探索を開始したところ、それぞれにおいて、探索で得た最も低いエネルギー構造５つがアデニンヌクレオシドに対してｓｙｎ配座を示している。モデリングされた構造を結晶構造と重ね合わせると（図１Ｂ）、配座探索の結果は結晶学的に観察されたものとよく一致していることが分かる。ＡｄｏＭｅｔＤＣに結合するＡｄｏＭｅｔ、５’−デオキシ−５’−（ジメチルスルホニオ）アデノシン（ＭＭＴＡ）、ＭＨＺＰＡ及びＭＡＯＥＡに対しても配座探索を行ったところ、それぞれ、塩基のｓｙｎ配座が得られた（データは示さず）。リボースはＥ２４７と鍵となる水素結合を形成し、アデニン塩基はＦ７及びＦ２２３間にスタッキングする。アデニン塩基はさらに、Ｅ６７のバックボーンアミド及びＣ末端カルボキシル基それぞれと水素結合を形成する。塩基をｓｙｎ配座に強いる主な相互作用は、塩基のＦ２２３及びＦ７それぞれとのπ−πスタッキング、並びに、塩基とＥ６７のバックボーンとの２つの水素結合である。
【０１３５】
ＡｄｏＭｅｔＤＣの活性部位における仮想的変異
結合したヌクレオシドの配座に対する様々な残基の効果を調査するために、仮想的に変異を生じさせた。活性部位にＭｅＡｄｏＭｅｔが結合したＡｄｏＭｅｔＤＣの単一アミノ酸変異体（Ｆ２２３Ａ変異体及びＦ７Ａ変異体）を使用し、ＭａｃｒｏＭｏｄｅｌにより配座探索を行うと、低エネルギー集合体（ｅｎｓｅｍｂｌｅ）においてｓｙｎ及びａｎｔｉ配座が混合しているという結果が得られた。それぞれの変異体において、大域的最小値はアデニン塩基のａｎｔｉ配座であったが、ｓｙｎ配座はそれに迫るものであり、そのエネルギー差は約０．５ｋｃａｌ／ｍｏｌであった。Ｆ２２３Ａ変異体におけるａｎｔｉ配座の結合リガンドの大域的最小エネルギー配座は、ｓｙｎ配座を取る２番目にエネルギーの低い配座異性体と比べて大きく異なっている。Ｆ２２３Ａ結合部位において、大域的最小エネルギー構造のリボースの位置が変化し、Ｅ２４７とのみではなく、Ｅ２４７及びＥ２２６と水素結合を形成している（図２Ａ）。この変化により、リガンド自体が湾曲し、スルホニウムがアデニン塩基上にスタッキングし、アデニン塩基はＳ６６と３つの水素結合を形成する。Ｆ７Ａ結合部位においても、リガンドはＦ２２３Ａ変異体の場合と同様の配座を取る。Ｆ２２３残基はリガンドの配座変化に合わせてねじれ変化を受け、さらにアデニン塩基にスッタキングする（図２Ｂ）。仮想的に変異を生じさせた酵素活性部位では、リガンドが低エネルギー構造のａｎｔｉ配座を取ることから、野生型酵素活性部位においてリガンドのｓｙｎ配座を維持する上でフェニル基が重要であることが示唆される。また、ＭｅＡｄｏＭｅｔと複合体を形成したＦ２２３Ａ変異体の結晶構造も得られた。
【０１３６】
ＡｄｏＭｅｔＤＣ及びＦ２２３Ａ変異体の三次構造
ヒトＡｄｏＭｅｔＤＣ（ｈＡｄｏＭｅｔＤＣ）の二量体は４層αββαサンドイッチである。酵素前駆体は３３４個のアミノ酸残基からなり、該酵素は自己プロセシングにより、α及びβサブユニットを形成する２０。この自己プロセシングによりピルボイル補因子が結合した活性酵素が得られる。ピルボイル基はＮ末端βシートの末端に位置しており、活性部位は両方のβシートの残基を含む。ｈＡｄｏＭｅｔＤＣの自己プロセシング及び脱炭酸反応をいずれも活性化するプトレシンの結合部位は、野生型酵素においてはリガンド結合部位から十分に離れて位置している。酵素精製のための実験条件では、確実にプトレシン結合部位の占有率が高くなるように十分な濃度のプトレシンを使用した。結晶構造において、１〜４、２１〜２７、１６５〜１７３、２８８〜２９９、３２９〜３３４の各残基間のループは無秩序な状態である。ＡｄｏＭｅｔＤＣ  Ｆ２２３Ａ変異体の構造は野生型タンパク質と同様である。
【０１３７】
ＭｅＡｄｏＭｅｔと複合体を形成したＡｄｏＭｅｔＤＣ  Ｆ２２３Ａ変異体の結晶構造
ＭｅＡｄｏＭｅｔと複合体を形成したｈＡｄｏＭｅｔＤＣ  Ｆ２２３Ａの結晶構造を分子置換により解明した。ｆｏ−ｆｃ電子密度差により、ＭｅＡｄｏＭｅｔが酵素と共有結合を形成し、アデニン塩基が明らかにｓｙｎ配座を取っていることが分かる（図３）。コンポジットオミットマップ密度では、予想通り、Ｆ２２３に対しては電子密度が見られなかった。リボースはＥ２４７と２つの水素結合を形成することで、リガンドと結合し、塩基は、Ｆ７とのスタッキング相互作用及びＥ６７との水素結合によってｓｙｎ配座に保持されている。単量体当たり、プトレシン１分子が変異タンパク質のプトレシン結合部位に存在する。Ｆ２２３Ａ構造と野生型構造のＭｅＡｄｏＭｅｔを重ね合わすことで、リガンドの位置又は配座はさほど異なっていないことが分かる。野生型タンパク質において無秩序であったループは変異体においても無秩序である。
【０１３８】
ｈＡｄｏＭｅｔＤＣの阻害剤候補の合成及び生化学分析
アデニンの８位に対してメチル基からフェニル基にわたる各置換基を用いて、数種類のＡｄｏＭｅｔ構造類似体を合成した。その後、これらの化合物それぞれのｈＡｄｏＭｅｔＤＣ阻害能をアッセイし、阻害のＩＣ５０値を測定した（表３）。
【０１３９】
化学合成の部で述べたように、試験した阻害剤は４つの群に分類される。第一群（７ａ〜ｃ、９ａ〜ｆ、１２）は、Ｃ−５’にアミノオキシアルキル側鎖を有し、該側鎖はＡｄｏＭｅｔＤＣのピルベート（ｐｙｒｕｖａｔｅ）とシッフ塩基を形成できる１８、４１、４２。この群の化合物は、４−アミノオキシブチル基を付加した場合に効力が強い不活性化剤であり、この場合、２−アミノオキシエチルを付加した場合よりもわずかに効力が強かった。第二群の化合物（１３ｄ、ｅ、ｆ、ｊ、ｋ、ｌ、ｍ）はＣ−５’にアミド又はヒドラジド側鎖を有し、第三群の阻害剤（１４ａ、ｂ、ｄ、ｅ、ｆ；１５ａ、ｂ、ｃ、ｄ；１７ｃ、ｄ）はＣ−５’にアミノアルキルアミノ側鎖を有する。また、合成法から第三群に関するものは１８ａ及び１８ｃであり、それぞれＣ−５’側鎖の末端にグアニジン及びアミドキシムを有する。第二及び三群の化合物（特にアミノアルキルアミノ、グアニジン又はアミドキシム側鎖を有する化合物）は効力が弱いが、インビボ条件下で安定である可能性が高い。最後の群の化合物は、５’−ジメチルアミノ（１９ａ、ｂ）又は５’−ジメチルスルホニオ（２１ｂ、ｄ）化合物からなっていた。化合物２１ｄは、μＭ範囲のＫｉを有するＡｄｏＭｅｔＤＣ阻害剤であることが既に報告されている４３。表３に示す通り、硫黄を窒素により置換することでＡｄｏＭｅｔＤＣの不活性化がわずかに高まる。
【０１４０】
上記群それぞれにおいて、８−メチル置換基をアデニン環に付加した場合、阻害活性は一貫して高まった。ＩＣ５０値の低下は、化合物９ｄでの３．４倍から、化合物１９ａ及び１３ｄでの１５〜１７倍までにわたり変動するものであった。アデニン８−メチル置換基を化合物１２（ＭＡＯＥＡ）に付加して化合物７ａを形成した場合、効力は８倍増加した。この結果は、アデニンの８−メチル置換によって対応するヌクレオシドがｓｙｎ配座を取りやすくなり、この配座が活性部位における結合形態であるという考え方と一致するものである。アデニン８−ヒドロキシ置換基では、置換されていない場合よりも効力がわずかに強まったが、８−メチル置換基（９ｃ〜９ｅ及び９ｅと比較）ほどの効果は得られなかった。より大きな基の８−置換では効果は高まらなかった。化合物１２、９ｆ及び１４ｄに８−フェニルを付加すると阻害活性が失われた。８−エチル基（９ｄ及び９ｅ、１３ｄ及び１３ｅ、並びに１７ｃ及び１７ｄと比較）又は８−メチルアミノ基（７ａ及び７ｂ並びに１７ｃ及び１４ａと比較）などのより小さな基の付加では、許容されるものの、８−メチルよりも悪い結果であった。
【０１４１】
７ａの結晶構造
分子置換により、７ａが結合した野生型ｈＡｄｏＭｅｔＤＣの結晶構造を解明した。上述のように、７ａは、アデニン塩基の８位がメチル置換されていることを除き、既に調査された阻害剤ＭＡＯＥＡと同様の構造を有する。電子密度から、７ａのアミノ末端が酵素のピルボイル基とシッフ塩基を形成することが分かる。７ａのアデニン塩基は、予想通り、結晶構造においてｓｙｎ配座を取る。７ａの複合体の電子密度を図４Ａ（５Ａ）に示す。プトレシン結合部位にプトレシンが１分子、結合している。
【０１４２】
９ｅの結晶構造
分子置換により、９ｅが結合した野生型ｈＡｄｏＭｅｔＤＣの結晶構造を解明した。９ｅは、アデニン塩基の８位がエチル置換されており、さらに、三級窒素（リボース付近）及び末端窒素間の炭素原子が２つ多いことを除き、ＭＡＯＥＡと同様の構造である。このリガンドが調査上興味深いのは、リボース及びアミノ末端間のリンカーが長いという点による。電子密度マップから、ピルボイル基とリガンドのアミノ末端とによるシッフ塩基形成を表す密度が見られないことが分かる。リガンドの末端の３原子の電子密度は見られないが、リガンドの残部の電子密度は良好である（図４Ｂ）。分子モデリングを用いて、末端の３原子をエネルギー的に有利な配座にモデリングすることで、該３原子の位置を得た。ピルボイル基周囲の電子密度はそれに十分に適合しており、シッフ塩基の形成を示すいかなる形跡も見られない。リボースは、重要な役割を果たす水素結合をＥ２４７と形成し、リガンドと結合する。塩基はｓｙｎ配座に保持され、π−πスタッキングにより安定化している。塩基のエチル置換基の電子密度ははっきりしており、末端エチル基が無秩序な状態ではないことが分かる。
【０１４３】
考察
ＡｄｏＭｅｔＤＣの活性部位は、ピルボイル基に特徴付けられる。既に報告された２３阻害剤ＭＨＺＰＡ、ＭＡＯＥＡ、ＭｅＡｄｏＭｅｔ、ＭＧＢＧ、及び、ＣＧＰ４８６６４Ａとの酵素の複合体から得た結晶構造によって、活性部位での様々なリガンドの相互作用を明らかにした。酵素と共有結合したＭｅＡｄｏＭｅｔの結晶構造は、活性部位における基質ＡｄｏＭｅｔに最も近似したものである。結晶構造から、ＭｅＡｄｏＭｅｔと酵素との鍵となる相互作用が示される。この相互作用としては、１）リボースの酸素とＥ２４７との水素結合；２）アデニン環とＦ２２３及びＦ７とのスタッキング相互作用；３）アデニン環の６−アミノ置換基とＥ６７の末端カルボキシル基との水素結合；４）アデニン環のＮ１とＥ６７のアミドＮ−Ｈとの水素結合が挙げられる（図１Ａ）。同様の相互作用が、ｈＡｄｏＭｅｔＤＣと複合体を形成したＭＨＺＰＡ及びＭＡＯＥＡの構造にも存在する。上記３つの構造においてアデニン塩基のグリコシドの角度は１２８°〜１３９°の範囲であり、アデノシン由来ヌクレオシドのｓｙｎ配座の優先性が強いことが分かる。ｓｙｎ配座は、タンパク質バックボーンとの水素結合に加えて、アデニン塩基とＦ２２３及びＦ７とのπ−πスタッキングにより安定化される。酵素が結合したＭＧＢＧ及びＣＧＰ４８６６４Ａの結晶構造から、それらが２つのフェニル環の間でスタッキングを形成し、さらにＥ２４７及び他のタンパク質残基と水素結合を形成していることが示される。
【０１４４】
上記の混合型Ｍｏｎｔｅ  Ｃａｒｌｏ／ローモード配座探索を用いて、ｈＡｄｏＭｅｔＤＣの活性部位のＭｅＡｄｏＭｅｔの分子モデリングを行った。配座探索中はグリコシドのねじれ角を自由に回転させることができ、これにより、エネルギー最小化前の活性部位の立体障害に合った多様な回転異性体（ｒｏｔｏｍｅｒｓ）が得られるようになっていた。低エネルギー構造では、アデニン由来ヌクレオシドがｈＡｄｏＭｅｔＤＣの活性部位においてｓｙｎ配座を取りやすくなっている。溶液中及び真空下のＡｄｏＭｅｔの配座優先性は、Ｍａｒｋｈａｍらによって調査されている３５。その１ＨＮＭＲに基づいた調査及びＮＭＲの制約に基づいた計算により、ＡｄｏＭｅｔが溶液中でａｎｔｉ配座を、真空下でｓｙｎ配座を取りやすいことが分かっている。溶液中では、ａｎｔｉ配座と対応するｓｙｎ配座とのエネルギー差（立体、静電及び溶媒和によるものも含む）は約−３４ｋｊ／ｍｏｌである。本願の結晶構造及びモデリング結果は、酵素がエネルギー的に不利なｓｙｎ配座のリガンドと結合しやすくなっており、芳香環を含むタンパク質残基とのπ−π相互作用が寄与してこの配座が維持されることを示している。平行な配置のπ―π相互作用は、典型的には２〜３ｋｃａｌ／ｍｏｌの安定化に相当する４４。酵素結合時にグリコシドのねじれ障壁を克服するようにリガンドを補助する多くの安定化因子が存在する。ヌクレオシドのｓｙｎ配座の安定化に寄与し得る他の因子には、スルホニウムイオンとアデニン塩基との相互作用が含まれる。付近にＦ２２３及びＦ７が位置するＡｄｏＭｅｔ（ｐｄｂ  ｉｄ  １Ｉ７Ｂの結晶構造に基づく）に対してＨａｒｔｒｅｅ  Ｆｏｃｋ  ６〜３１Ｇ＊＊レベルのａｂ  ｉｎｉｔｉｏ計算を行い、一点エネルギー及びそれに対応する原子の電荷を求めた。これらの計算から、アデニン塩基のＮ３が−０．７９の電荷を有しており、＋０．３９の電荷を帯びるスルホニウムイオンから３．４Å離れて存在していることが示された（データは示さず）。従って、これら２つの原子間には、ｓｙｎ配座を安定化する有利な静電相互作用が存在する。
【０１４５】
ＡｄｏＭｅｔＤＣ中のＦ２２３及びＦ７の役割は、結晶構造や速度実験によって既に調査されている２３。ＭＧＢＧやＣＧＰ４８６６４Ａなどの阻害剤が結合したＡｄｏＭｅｔＤＣの結晶構造から、フェニル環によって、ＭＧＢＧ全長及びＣＧＰ４８６６４Ａの二環を包含するスッタキング構造が生じることが分かっている。ｈＡｄｏＭｅｔＤＣ  Ｆ２２３Ａ及びＦ７Ａ変異体と基質ＡｄｏＭｅｔとの反応の速度データから、Ｆ７Ａ変異体の特異性定数（ｋｃａｔ／ｋｍ）が４５分の１に減少し、Ｆ２２３Ａ変異体の場合には１４００分の１に減少していることが分かっている。ＭＧＢＧやＣＧＰ４８６６４Ａのような阻害剤による阻害に関する速度データから、野生型酵素と比べて両変異体のＩＣ５０値が有意に増加していることが分かっている。活性の減少はＦ７Ａ変異体よりもＦ２２３Ａ変異体の方が大きかった。これらの結果は、アデニン塩基がＦ７環よりもＦ２２３環の方に近い位置にあることからも支持される。ｈＡｄｏＭｅｔＤＣ  Ｆ２２３Ａ変異体の活性部位のＭｅＡｄｏＭｅｔの構造及び配座特性を調べた。
【０１４６】
ｓｙｎ配座の安定化に対するＦ２２３及びＦ７の役割を理解するために仮想的に変異を生じさせ配座探索を行った。低エネルギー構造の集合体（ｅｎｓｅｍｂｌｅ）にはｓｙｎ配座しか観察されなかった野生型酵素構造における計算の結果とは対照的に、いずれの変異でも大域的最小値はａｎｔｉ配座の塩基を有し、次に高いエネルギー構造はｓｙｎ配座の塩基を有する。これらの配座のエネルギーの差は約０．５ｋＪ／ｍｏｌであり、分子力学に基づく計算の誤差限界内である。両構造のｓｙｎ配座とａｎｔｉ配座とのエネルギー差は小さく、ＭｅＡｄｏＭｅｔが活性部位に結合したｈＡｄｏＭｅｔＤＣ  Ｆ２２３ＡのＸ線構造から分かる通り、酵素は、実際、ｓｙｎ配座のリガンドに結合しやすい。従って、モデリング調査では、Ｆ２２３Ａ変異体においてヌクレオシドのｓｙｎ配座が維持されると正確には予見できなかったものの、これらの調査から、ヌクレオシドの酵素に対する結合親和性が減少すると推論することができた。
【０１４７】
ＭｅＡｄｏＭｅｔが結合したｈＡｄｏＭｅｔＤＣ  Ｆ２２３Ａの結晶構造のデータから、ｓｙｎ配座を取るアデニン塩基の明らかな電子密度が示される。アデニン塩基はＦ７残基と有利なπ―π相互作用を変わらず維持し、リボースはＥ２４７と２つの鍵となる水素結合を形成している。これらの結果から、π−π相互作用と静電相互作用が揃えば塩基がｓｙｎ配座に保持されること、さらに、Ｆ７残基が、活性部位のＭｅＡｄｏＭｅｔ及び他のリガンドの配座の維持に貢献していることが分かる。
【０１４８】
ＭＨＺＰＡ、ＭＡＯＥＡ、ＭｅＡｄｏＭｅｔ、ＭＧＢＧ、及び、ＣＧＰ４８６６４Ａが結合したＡｄｏＭｅｔＤＣの構造から、Ｅ２４７が、リガンドを活性部位に適合するように適切な配座に保持する、リガンドとの鍵となる水素結合の形成に貢献していることが分かっている２３。大部分のヌクレオシドでは、リボースの酸素が、通常、酵素のアスパラギン酸基、グルタミン酸基又はカルボニル基と鍵となる水素結合を形成し、これにより触媒活性に適切な配座に保持される。ＡｄｏＭｅｔＤＣにおいて、ＡｄｏＭｅｔ類似体のリボースは、２つの水素結合を介しＥ２４７によって定位置に保持される。この２つの水素結合は、末端窒素とピルボイル基とのシッフ塩基の形成を容易にし、さらに、アデニン塩基を、各フェニル環の間のスタッキング位置に配置する。ｈＡｄｏＭｅｔＤＣ  Ｆ２２３Ａの結晶構造から、ＭｅＡｄｏＭｅｔのリボースが依然としてＥ２４７と２つの水素結合を形成し、この２つの水素結合により、アデニン塩基がＦ７と有利なπ−π相互作用を行うことができる配座に該リボースが固定され、ｓｙｎ配座を取ることが示される。
【０１４９】
本開示から、アデニンのＣ８にメチル基を付加することで、非置換親化合物と比べて８〜１８倍良好な酵素阻害剤である化合物が得られたことは明らかであり、従って該基の付加が本開示の好ましい態様であることが明らかである。しかしながら、上述のように、非置換親化合物も本開示の範囲内の態様であると考えられる。３つよりも多くの炭素原子を持つものなど大きな置換基を有するある種の化合物は、非置換親化合物よりも多くの利益をもたらすものではなく、従って本開示の好ましい態様ではない。事実、８−フェニル置換基により化合物のｈＡｄｏＭｅｔＤＣ阻害能は大幅に低下した。活性部位のモデリング調査から、ｓｙｎ配座のアデニンに大きな基を付与するには十分な空間が必要となることが分かっていた。また、アデニンＣ８置換基に占有される領域をさらに詳細に調べることによって、この領域が溶媒界面付近であることが分かっている。従って、大きな置換基にとって十分な空間が立体的には存在するが、選択されるのは溶媒界面との近接に適さない疎水基であった。生化学的結果を踏まえて、疎水基の、タンパク質の疎水性キャビティ内への不完全な埋没による不利益は置換基の大きさとともに増し、該不利益は、阻害剤にｓｙｎ配座を優先させることで得られる利益よりも恐らく大きいと思われる。
【０１５０】
化合物７ａは既に調査されたＭＡＯＥＡと同様の構造を有し、アデニン塩基の８位にメチル置換基を有する。７ａとｈＡｄｏＭｅｔＤＣとの複合体の結晶構造から、ピルボイル基とのシッフ塩基形成を表す明らかな電子密度が示され、ＡｄｏＭｅｔＤＣの阻害剤としてＭＡＯＥＡと同様の作用を示すことが分かる。リボースはＥ２４７と水素結合を形成し、アデニン塩基はｓｙｎ配座でスタッキングし、アデニン塩基の６−アミノ置換基はＥ６７のバックボーンカルボキシル基と水素結合を形成し、Ｅ６７のアミド水素はアデニン環のＮ３と水素結合している。大きな負電荷を有するＮ３窒素と、生理学的に適切なプロトン化状態において形式正電荷を有する３級窒素との距離は２．９４Åであり、対応する位置に硫黄原子を有するＭｅＡｄｏＭｅｔにおいて確認される距離よりも小さい。また、アデニン環のメチル置換基は塩基にｓｙｎ配座を取らせ、静電効果を高めるため、アデニンのＣ８に置換基を持たないＭＨＺＰＡやＭＡＯＥＡと比較してＮ３窒素と３級窒素との距離が減少することが分かる。
【０１５１】
ＡｄｏＭｅｔＤＣに結合した多くのＡｄｏＭｅｔ類似体の構造から、該類似体が酵素のピルボイル基とシッフ塩基を形成することで酵素を阻害することが分かっている。それらの阻害剤の３級アンモニウム／硫黄と末端窒素の間のリンカー長は３〜４原子であったが、これによりシッフ塩基の形成が幾何学的かつ立体的に可能となっている。９ｅのリンカー長は５原子である。９ｅの複合体の電子密度マップはピルボイル基の後の電子密度が途切れており、これはシッフ塩基の形成がないことを示唆する。当該リガンドでは、無秩序であり電子密度が確認されない３つの末端原子を除き、良好な電子密度が確認される。分子力学を用いて、末端の３原子の位置をエネルギー的に有利な配座に固定した。リンカー領域の５原子は、シッフ塩基の形成に立体的に不利な状態をもたらすように思われる。リガンドは、Ｅ２４７との水素結合とＦ７及びＦ２２３とのπスタッキング相互作用とによって活性部位にしっかりと保持されるため、より長いリンカー領域に合わせてシッフ塩基を形成するために必要と思われる状態に移動することがほとんどできない。
【０１５２】
ＡｄｏＭｅｔＤＣは、まず溶液中に多く存在するａｎｔｉ配座と相互作用した後にアデニン塩基をｓｙｎ配座に回転させることによって、又は、既にｓｙｎ配座の状態の基質／リガンド（その溶液平衡濃度は低い）の配座をわずかに変更させることによって、基質／リガンドに結合することができる。上記結果から、８−置換によってｓｙｎ配座の阻害剤分子の数が増加し、それにより、ＡｄｏＭｅｔＤＣ阻害が高まることが示唆される。しかしながら、ＡｄｏＭｅｔＤＣのリガンド結合の正確なメカニズムは依然として分かっていない。
【０１５３】
実験の部
突然変異生成及びプラスミド構築
結晶構造解析に使用する、組み換え野生型及びＦ２２３Ａ変異体ｈＡｄｏＭｅｔＤＣをＥ．ｃｏｌｉにおいて産生させるためのｐＱＥ３０ベクタープラスミドを先行技術文献に記載されているように生成した２３。この構築物によってＮ−末端メチオニンが、固定化金属アフィニティークロマトグラフィーにより精製するために必要なＭＲＧＳ（Ｈ）６ＧＳ−に置換される。同様にｐＱＥ３０ベクターに基づく異なるプラスミドを使用して、ｈＡｄｏＭｅｔＤＣ酵素アッセイ用タンパク質を生成した。当該プラスミドでは、（Ｈ）６タグが、−ＱＱＱＱＱＳ末端から置き換わってカルボキシル末端に位置していた。（Ｈ）６タグの位置によって精製酵素の活性は変化しなかった。
【０１５４】
タンパク質発現及び精製
Ｅｋｓｔｒｏｍら２０により記載されたプロトコルに基づいて、野生型ｈＡｄｏＭｅｔＤＣを精製した。該酵素をコードするプラスミドはｐＱＥ３０ベクターに含まれるが、このプラスミドをＥ．ｃｏｌｉ  ＪＭ１０９株細胞に形質導入した。細胞をＬＢ培地中、３７℃で一晩培養して増殖させた後、より大きな細胞培養培地に投入した。これらの培地は共にアンピシリン（１００ｍｇ／ｍＬ）を含んでいた。細胞のＯ．Ｄ６００が０．６に達するまで細胞を増殖させた後、イソプロピル  １−チオ−β−Ｄガラクトピラノシド（ＩＰＴＧ）（１００ｍｇ／Ｌ）で発現を誘導した。細胞を１５℃で一晩増殖させた後、遠心分離により採取し、Ｎａ２ＨＰＯ４（２０ｍＭ、ｐＨ７．０）、ＮａＣｌ（５００ｍＭ）、プトレシン（２．５ｍＭ）、Ｂｒｉｊ−３５（０．０２％）、及び、イミダゾール（１０ｍＭ）を含有する洗滌用バッファーで洗滌し、−８０℃で保存した。冷凍細胞ペレットを解凍し、洗滌用バッファーに懸濁させ、加圧型細胞破壊装置（Ｆｒｅｎｃｈ  ｐｒｅｓｓ）を１５００ｐｓｉで使用して溶解した。細胞残渣及びライセートを１２０００ｇの遠心分離により分離した。Ｔａｌｏｎ金属アフィニティ樹脂を洗滌用バッファーで平衡化した後、ライセートと樹脂とを混合して１．５時間穏やかに遠心操作を行った。樹脂をカラムに充填し、カラム容積の１５〜２０倍に相当する量の洗滌用バッファーで洗滌した。次に、イミダゾール（２５ｍＭ）を含有する洗滌用バッファーで同じようにカラムを洗滌した。その後、イミダゾール（１００〜２００ｍＭ）を含有するバッファーでタンパク質を溶出した。溶出したタンパク質を１０ｍｌほどまで濃縮し、Ｈｅｐｅｓ（１０ｍＭ、ｐＨ７．５）、プトレシン（２．５ｍＭ）、ＤＴＴ（５ｍＭ）、ＥＤＴＡ（０．１ｍＭ）、Ｂｒｉｊ−３５（０．０２％）、及び、ＮａＣｌ（３００ｍＭ）で事前に平衡化させたＳｅｐｈａｄｅｘ  Ｇ−７５カラムに通液した。該バッファーをカラムに通液し、タンパク質を含む画分を２８０ｎｍのＵＶにより同定した。タンパク質を約１０ｍｇ／ｍＬまで濃縮し、−８０℃で保存した。Ｆ２２３Ａ変異体の精製は野生型酵素と同様に行った。
【０１５５】
結晶化
タンパク質を氷上で解凍し、Ｂｉｏ−ｒａｄバッファー交換クロマトグラフィーカラム（Ｂｉｏ−ｒａｄ  ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（カリフォルニア州  ９４５４７、ハーキュリーズ））を使用してバッファーをＨｅｐｅｓ（１０ｍＭ、ｐＨ７．５）、ＮａＣｌ（２００ｍＭ）、及び、ＤＴＴ（１ｍＭ）に交換した。野生型タンパク質は、４〜６モル過剰量の９ｅ及び７ａと２４時間インキュベートし、その後結晶化させた。Ｆ２２３Ａ変異体は約６ｍｇ／ｍＬまで希釈し、４〜６モル過剰量のＭｅＡｄｏＭｅｔと２４時間インキュベートし、その後結晶化させた。野生型複合体及び変異型複合体の両方の結晶を、ハンギングドロップ法によってＰＥＧ８０００（１３〜１６％）、Ｔｒｉｓ（１００ｍＭ、ｐＨ８．０〜９．０）及びＤＴＴ（１０ｍＭ）中、２２℃で成長させた。一晩で結晶が現れ、１〜２週間安定であった。
【０１５６】
データ収集及び加工
７ａ複合体のデータは、Ｒｉｇａｋｕ  ＲＵ−３００回転対陰極型発生器からのＣｕＫα線を用いたＢｒｕｋｅｒ  ＣＣＤ検出器のホームソース（ｈｏｍｅ  ｓｏｕｒｃｅ）から収集した。９ｅ複合体のデータは、Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｐｈｏｔｏｎ  Ｓｏｕｒｃｅ（ＡＰＳ）においてＮＥ−ＣＡＴビームラインの８ＢＭステーションで、ＡＤＳＣ  ｑｕａｎｔｕｍ  ３１５検出器を使用して収集した。ＭｅＡｄｏＭｅｔが結合したＡｄｏＭｅｔＤＣ  Ｆ２２３Ａのデータは、ＣＨＥＳＳのＦ２ステーションで、ＡＤＳＣ  Ｑｕａｎｔｕｍ  ４検出器を使用して収集した。液体窒素又は液体窒素蒸気の雰囲気下で全ての結晶を急速冷凍した。結晶の回折品質は、結晶の凍結保護性に強く依存していた。結晶を、２％、５％、８％、１５％及び１８％のグリセロールを含有するウェル溶液を含む溶液へと順次移した。この際、各工程は１〜２分の平衡化時間を挟んで行った。
【０１５７】
ＨＫＬ２０００（２４）プログラムスイートを使用して、全ての複合体のデータに対してインデックス付け、積分及びスケーリングを行った。収集したデータの統計を表１にまとめる。
【０１５８】
構造決定及び精密化
探索モデルとしてＭｅＡｄｏＭｅｔが結合した野生型ＡｄｏＭｅｔＤＣの構造（ＰＤＢ  １Ｉ７Ｂ）を使用した分子置換及びＣＮＳプログラムスイート２５によって、全ての複合体の構造を決定した。７ａ及び９ｅ複合体のモデル構築はＯプログラム２６を使用して行った。ＭｅＡｄｏＭｅｔと複合体を形成したＡｄｏＭｅｔＤＣ  Ｆ２２３Ａのモデル構築はｃｏｏｔプログラム２７を使用して行った。ｆｏ−ｆｃ差及びコンポジットオミットマップによりリガンド分子の配座を決定した。ｈｉｃ−ｕｐサーバー２８を使用して、リガンドのパラメータ及びトポロジーファイルを生成した。また、上記差マップから、３つの構造全てにおいて、結合したプトレシン分子の電子密度も示された。複合体の精密化統計を表２に示す。
【０１５９】
ＡｄｏＭｅｔＤＣの活性部位におけるＭｅＡｄｏＭｅｔの分子モデリング
ＡｄｏＭｅｔＤＣの活性部位におけるリガンドの配座優先性を、Ｓｃｈｒｏｅｄｉｎｇｅｒ，Ｌ．Ｌ．Ｃ．から入手可能なＭａｃｒｏｍｏｄｅｌ  ｖｅｒｓｉｏｎ  ７．２２９により決定した。タンパク質を、ＡｄｏＭｅｔＤＣ（ｐｄｂ  １Ｉ７Ｂ由来）の活性部位に配置したＭｅＡｄｏＭｅｔの２０．０Å範囲内に原子を有する任意の残基を含むシェル原子団（ｓｈｅｌｌ  ｏｆ  ａｔｏｍｓ）へと切断し、このシェル原子団を配座探索／エネルギー最小化の出発モデルとして使用した。この「ドッキングシェル（ｄｏｃｋｉｎｇ  ｓｈｅｌｌ）」から水分子を除去した後、Ｓｃｈｒｏｅｄｉｎｇｅｒのタンパク質調製ユーティリティを利用して適当な水素処理を行った。該ユーティリティは、活性部位アミノ酸の適当なイオン状態及びヒスチジン互変異性体を生成するのに役立ち、一連の拘束エネルギー最小化（ｃｏｎｓｔｒａｉｎｅｄ  ｅｎｅｒｇｙ  ｍｉｎｉｍｉｚａｔｉｏｎｓ）によってタンパク質のポテンシャルエネルギー勾配を最小化する。配座探索のため、適当なリガンドを活性部位に付加し、必要に応じて、リガンドのアミノ末端とピルボイル基とを共有結合で結合した。
【０１６０】
得た構造に対して混合型Ｍｏｎｔｅ  Ｃａｒｌｏ  ＭＣＭＭ／ローモード配座探索工程３０、３１を５０，０００回施した。各Ｍｏｎｔｅ  Ｃａｒｌｏ／ローモード工程中、活性部位の周りの５Åシェル内の残基が自由に移動できるようにした。この工程の後には、探索のエネルギー最小化工程を行った。他の全てのタンパク質の原子はそれらの出発位置に拘束した。Ｈ５、Ｅ６７、Ｃ２２６及びＥ２４７残基もそれらの出発位置に拘束した。エネルギー最小化工程は、エネルギー勾配が０．０５ｋＪ／ｍｏｌ未満の場合、１つにまとまってしまうと考えられた。係数４でさらに減衰させた距離依存性誘電率「定数」とともにＡＭＢＥＲ＊力場３２、３３を用いて計算を行い、エネルギー最小化をＴＮＣＧ最小化法３４に準拠して行った。大域的最小値、及び、大域的最小値（収束後）の１５ｋＪ／ｍｏｌ範囲内の構造の低エネルギー集合体を、０．０１ｋＪ／ｍｏｌ未満の勾配が得られるまでエネルギー最小化によってさらに改良した。第一の工程に続くこのエネルギー最小化の手順中はリガンドのみ移動可能とした。このプロセス中の全てのタンパク質原子をそれらの出発位置に拘束した。完全を期してヌクレオシドをｓｙｎ及びａｎｔｉ両配座から始めて、ジョブを実行した。スルホニウムイオンのＡＭＢＥＲ＊パラメータは、Ｍａｒｋｈａｍらの研究３５から出典した。
【０１６１】
ＡｄｏＭｅｔＤＣの活性部位における９ｅのモデリング
上記のＭａｃｒｏｍｏｄｅｌ  ｖｅｒｓｉｏｎ  ７．２での配座探索を用いて９ｅの末端の３原子のモデリングを行った。リガンドの残部とタンパク質の位置は、Ｘ線回折により決定される電子密度へのフィッティングにより高精度に決定されるため、配座探索中、タンパク質と、末端の３つの非水素原子及びそれらが結合する水素を除いた各リガンド原子とを全て固定した。配座探索中、Ｃ５−Ｃ４結合及びＣ４−Ｏ１結合を軸としてねじれ回転させた。上位５つの最小構造を一見した限り、該最小構造は類似したものであり、探索の大域的最小値を利用して、９ｅの無秩序な末端原子の座標を得た。
【０１６２】
ＡｄｏＭｅｔＤＣ活性のアッセイ及び阻害剤のＩＣ５０値の決定
Ｓ−アデノシル−Ｌ−［カルボキシ−１４Ｃ］メチオニン（Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｐｈａｒｍａｃｉａ  Ｂｉｏｔｅｃｈ、約６０ｍＣｉ／ｍｍｏｌ）からの１４ＣＯ２の放出を測定することによりＡｄｏＭｅｔＤＣをアッセイした（３６）。これらの条件下でＣ末端ｈｉｓタグ付加ＡｄｏＭｅｔＤＣ（３０ｎｇ）をアッセイすることで、約７０００ｃｐｍ（バックグラウンド：３０）の結果が得られ、活性は約１．５ｐｍｏｌ／分／ｎｇ（タンパク質）であった。化合物のＡｄｏＭｅｔＤＣ阻害能を求めるために、阻害剤の非存在下、かつ、少なくとも５種類の濃度の各阻害剤候補の存在下で酵素活性を測定した。ＡｄｏＭｅｔＤＣ阻害％に対する阻害剤濃度のプロットに適合する曲線からＩＣ５０値を決定した。
【０１６３】
標的合成
ＴＬＣをＡｎａｌｔｅｃｈシリカゲルプレコート（２５０μｍ）ＧＦプレートで行った。融点をＭｅｌ−Ｔｅｍｐ装置で測定し、補正は行わなかった。Ｍｅｒｃｋシリカゲル（２３０〜４００メッシュ）を用いてフラッシュクロマトグラフィーにより精製を行った。ロータリー・エバポレータで濃縮し、高沸点溶媒（ＤＭＦ、ピリジン）を減圧下（＜１ｍｍ、３５℃浴）で除去し、生成物を減圧下（＜１ｍｍ）、２２〜２５℃、Ｐ２Ｏ５で乾燥した。Ｖａｒｉａｎ−ＭＡＴ  ３１１Ａ質量分析計を用い高速原子衝撃（ＦＡＢ）モードで、又は、Ｂｒｕｋｅｒ  ＢＩＯＴＯＦ  ＩＩを用いエレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ）により質量スペクトルデータを得た。Ｎｉｃｏｌｅｔ  ＮＴ−３００  ＮＢ分光計を３００．６３５ＭＨｚで作動させて１ＨＮＭＲスペクトルを記録した。ＣＤＣｌ３及びＭｅ２ＳＯ−ｄ６の化学シフトをテトラメチルシラン（ＴＭＳ）から低磁場側のｐｐｍで表し、Ｄ２Ｏにおいては、化学シフトを３−（トリメチルシリル）プロピオン酸ナトリウム−２，２，３．３−ｄ４（ＴＭＳＰ）から低磁場側のｐｐｍで表す。多重線で示された化学シフト（δ）は近似的な中心により測定したものであり、ピーク面積の相対積分値は、特定された構造から予想されたものと一致していた。ＭｅＯＨ又はＥｔＯＨに各化合物を溶解し、０．１Ｎ  ＨＣｌ、ｐＨ７バッファー又は０．１Ｎ  ＮａＯＨで１０倍希釈することにより、Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ  Ｌａｍｂｄａ  １９分光計でＵＶ吸収スペクトルを測定した。括弧内の数字は吸光係数（ε×１０−３）である。Ａｔｌａｎｔｉｃ  Ｍｉｃｒｏｌａｂ，Ｉｎｃ（ジョージア州、アトランタ）、又は、サザン  リサーチ  インスティテュートの分光分析部で微量分析を行った。元素記号で示す分析結果は理論値の±０．４％の範囲内であった。ここでは溶媒を化学式で示しており、その存在は１ＨＮＭＲで確認した。
【０１６４】
溶液中、ＡｄｏＭｅｔはｓｙｎ〜ａｎｔｉさらにその中間のものといった各種配座を維持している。ＡｄｏＭｅｔＤＣは、多く存在するａｎｔｉ配座を選び出した後にそのアデニン塩基をｓｙｎ配座に回転させることによって、又は、溶液から配座を変更する必要が無いｓｙｎ配座のリガンドを直接選び出すことによって、基質／リガンドに結合することができる。上記結果から、ｓｙｎ配座で存在するリガンドによってＡｄｏＭｅｔＤＣ阻害が高まることが分かる。ＡｄｏＭｅｔＤＣのリガンド結合の正確なメカニズムは依然として分かっていない。
【０１６５】
表１：ＡｄｏＭｅｔＤＣ複合体の収集データ統計
【０１６６】
【表１】
2010535202.tif 000011
括弧内の値は最高分解能シェルでのものである。
【０１６７】
表２：ＡｄｏＭｅｔＤＣ複合体の精密化の統計データ
【０１６８】
【表２】
2010535202.tif 000012
【０１６９】
表３：阻害剤候補のｈＡｄｏＭｅｔＤＣ阻害能
各阻害剤候補のｈＡｄｏＭｅｔＤＣ阻害能を、「材料及び方法」に記載したようにアッセイした。各化合物について少なくとも５種類の濃度を用いて、ｈＡｄｏＭｅｔＤＣ阻害％に対する阻害剤濃度のプロットに適合する曲線からＩＣ５０値を算出した。
【０１７０】
【表３−１】
2010535202.tif 000013
【０１７１】
【表３−２】
2010535202.tif 000014
【０１７２】
表の説明
下記表に本開示に係る各種化合物の化学式を示す。
【０１７３】
【表４−１】
2010535202.tif 000015
【０１７４】
【表４−２】
2010535202.tif 000016
【０１７５】
本願で開示された化合物は、Ｓ−アデノシルメチオニン脱炭酸酵素を阻害することが見出されたため、腫瘍及び癌を哺乳動物、特にヒトにおいて治療する上で有用である可能性がある。加えて、本願の化合物は、トリパノソーマ症、マラリアを含む原虫感染症などの寄生虫感染症、又は、肺炎症などのニューモシスチス・カリニ（Ｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓ  ｃａｉｎｉｉ）により引き起こされた肺炎症感染症の治療に有用である。
【０１７６】
図の考察
【０１７７】
図１：ｈＡｄｏＭｅｔＤＣの結晶構造、及び、モデリングにより得られた構造との比較
Ａ）活性部位にＭｅＡｄｏＭｅｔが結合したｈＡｄｏＭｅｔＤＣの実際の結晶構造を示す。活性部位のピルボイル基を赤紫色で示す。リガンド炭素原子を緑色で示す。ＭｅＡｄｏＭｅｔはピルボイル基とシッフ塩基を形成している。リボースはＥ２４７と２つの水素結合を形成している（赤色で示す）。アデニン塩基は、通常と異なるｓｙｎ配座でＦ２２３及びＦ７間にスタッキングしている。アデニン塩基とＧｌｕ６７のバックボーンとの水素結合によりｓｙｎ配座が安定化されている。
Ｂ）ＡｄｏＭｅｔＤＣの活性部位におけるＭｅＡｄｏＭｅｔのモデリングににより得られた構造（濃色で図示）を実際の結晶構造（薄く図示）に重ね合わせている。モデリング結果は実験的に求めた結晶構造とよく一致している。
【０１７８】
図２：ＭｅＡｄｏＭｅｔと複合体を形成したｈＡｄｏＭｅｔＤＣ  Ｆ２２３Ａ及びｈＡｄｏＭｅｔＤＣ  Ｆ７Ａのモデル
ｈＡｄｏＭｅｔＤＣのＦ２２３Ａ変異体（Ａ）及びＦ７Ａ変異体（Ｂ）の活性部位におけるＭｅＡｄｏＭｅｔのモデリングの大域的最小値（詳細は材料及び方法を参照）。ピルボイル基を２番目に濃い色で示し、リガンド炭素原子を２番目に薄い色で示す。これらの複合体においてアデニン塩基はａｎｔｉ配座を取る。リボースはＥ２４７と１つの水素結合を形成し、さらにＣ２２６のバックボーンカルボニルと別の水素結合を形成している。アデニン塩基はＳ６６と３つの水素結合を形成している。Ｆ７Ａモデル（Ｂ）では、Ｆ２２３残基の配座が変化し、ａｎｔｉ配座のＭｅＡｄｏＭｅｔのアデニン塩基とスタッキングを形成している。
【０１７９】
図３：ＡｄｏＭｅｔＤＣ  Ｆ２２３Ａ変異体の活性部位におけるＭｅＡｄｏＭｅｔの結晶構造
ＭｅＡｄｏＭｅｔとＡｄｏＭｅｔＤＣ  Ｆ２２３Ａとの複合体の、実験的に求めた（材料及び方法を参照）構造を示す。リガンドの炭素原子及び連結鎖を２番目に薄い色で示す。２．５σの等高線を記した１  ｆｏ−ｆｃ電子密度により、ｓｙｎ配座のアデニン塩基、及び、末端窒素とピルボイル基とのシッフ塩基の形成が示される。マップ計算において、ピルボイル基とＳ６９残基はオミットされている。リボースは２つの鍵となる水素結合をＥ２４７と形成している。アデニン環はＦ７とスタッキングしており、Ｅ６７のバックボーンと２つの水素結合を形成している。
【０１８０】
図４：ｈＡｄｏＭｅｔＤＣの阻害剤候補の構造
全ての化合物を「材料及び方法」に記載されるように合成した。
【０１８１】
図５：ｈＡｄｏＭｅｔＤＣと該酵素に対する２つの阻害剤との相互作用
Ａ）ｈＡｄｏＭｅｔＤＣとＭＡＯＥＭＡとの複合体の、実験的に求めた構造を示す（詳細は材料及び方法を参照）。リガンドの炭素原子及び連結鎖を２番目に薄い色で示す。
【０１８２】
１．０σの等高線を記したコンポジットオミットマップ密度により、ｓｙｎ配座のアデニン塩基スタッキング、及び、シッフ塩基形成が示される。明確にするためにＥ６７はオミットされている。
Ｂ）活性部位にＭＡＯＢＥＡが結合したｈＡｄｏＭｅｔＤＣの、実験的に求めた構造を示す。リガンドの炭素原子を２番目に薄い色で示す。３．０σの等高線を記した１  ｆｏ−ｆｃ電子密度により、アデニン塩基がｓｙｎ配座でスタッキングしていることが示される。電子密度からはシッフ塩基の形成を示す形跡は見られず、リガンドの末端の３原子の電子密度も見られない。マップ計算において、ピルボイル基はオミットされている。末端の３原子の位置はモデリングにより決定される。
【０１８３】
剤形
本開示の化合物は、医薬品と共に使用することが可能な任意の従来手段によって投与することができ、単一の治療剤としてもよく、又は、治療剤を組み合わせてもよい。本開示の化合物は単独で投与してもよいが、一般的には医薬基剤と共に投与する。当該医薬基剤は、選択された投与経路と医薬分野の標準的な慣行とに基づいて選択される。当該化合物は、他の治療剤と共に投与することもできる。他の治療剤としては、例えば、インターフェロン（ＩＦＮ）、インターフェロンα−２ａ、インターフェロンα−２ｂ、コンセンサスインターフェロン（ＣＩＦＮ）、リバビリン、アマンタジン、リマンタジン、インターロイキン−１２、ウルソデオキシコール酸（ＵＤＣＡ）、及び、グリシリジンが挙げられる。
【０１８４】
本明細書で説明する薬学的に許容される基剤、例えば、ビヒクル、アジュバント、賦形剤又は希釈剤などは、当業者に周知である。一般的に、薬学的に許容される基剤は活性化合物に対して化学的に不活性であり、使用条件下において有害な副作用又は毒性を持つことはない。薬学的に許容される基剤としては、ポリマー及びポリマーマトリックスが挙げられる。
【０１８５】
本開示の化合物は、医薬品と共に使用することが可能な任意の従来手段によって投与することができ、単一の治療剤としてもよく、又は、治療剤を組み合わせてもよい。
【０１８６】
投与量は当然ながら、薬剤の種類及びその投与の形態や経路といった薬力学的特徴；服用者の年齢、健康状態及び体重；症状の性質及び程度；併用療法の種類；治療頻度；並びに、所望の効果などの既知の要因に応じて異なるであろう。有効成分の１日当たりの投与量は、体重１キログラム（ｋｇ）当たり約０．００１〜１０００ミリグラム（ｍｇ）であると予想され、好ましくは０．１〜約３０ｍｇ／ｋｇである。
【０１８７】
投与形態（投与に適した組成物）には、１単位当たり約１ｍｇ〜約５００ｍｇの有効成分が含まれている。これらの医薬組成物には、通常、当該組成物の全重量に基づいて約０．５〜９５重量％の量の有効成分が含まれるであろう。
【０１８８】
有効成分は、カプセル、錠剤及び散剤などの固形剤として経口投与してもよく、或いは、エリキシル剤、シロップ剤及び懸濁剤などの液剤として経口投与してもよい。また、無菌液の投与形態で非経口投与してもよい。有効成分は、鼻腔内に投与してもよく（点鼻薬）、或いは、薬剤パウダーミストの吸入によって投与してもよい。パッチ型や軟膏による経皮投与などの他の投与形態も可能な場合がある。
【０１８９】
経口投与に適した剤形は、（ａ）水、塩水、又は、オレンジジュース等の希釈液に有効量の化合物を溶解させたような液状溶液、（ｂ）所望量の有効成分を含有している、固形物又は顆粒としてのカプセル、サシェ剤、錠剤、薬用ドロップ（ｌｏｚｅｎｇｅｓ）及びトローチ剤、（ｃ）散剤、（ｄ）適当な液体との懸濁剤、並びに、（ｅ）好適な乳剤であってもよい。液剤の場合、水、並びに、例えばエタノール、ベンジルアルコール、プロピレングリコール、グリセリン及びポリエチレンアルコール等のアルコール類などといった希釈剤が含まれてもよく、薬学的に許容される界面活性剤、懸濁化剤又は乳化剤が添加されていても、いなくてもよい。カプセル形態の場合、界面活性剤、滑沢剤、並びに、例えばラクトース、スクロース、リン酸カルシウム及びコーンスターチ等の不活性充填剤などを含有している通常のハードシェルゼラチン型又はソフトシェルゼラチン型であってもよい。錠剤の場合、以下のものを１つ以上含んでいてもよい：ラクトース、スクロース、マンニトール、コーンスターチ、ジャガイモ澱粉、アルギン酸、微結晶セルロース、アラビアゴム、ゼラチン、グアーガム、コロイド二酸化ケイ素、クロスカルメロースナトリウム、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸亜鉛、ステアリン酸、及び、その他の賦形剤、着色剤、希釈剤、緩衝剤、崩壊剤、湿潤剤、保存料、フレーバー付与剤、及び、薬理学的に適合した基剤。薬用ドロップ形態の場合、一般的にはスクロース、アラビアゴム又はトラガカントゴム等であるフレーバー中に有効成分を含んでいてもよい。香錠（ｐａｓｔｉｌｌｅｓ）の場合も同様に、ゼラチン及びグリセリン、又は、スクロース及びアラビアゴム（ａｃａｄｉａ）等といった不活性なベース中に有効成分を含んでいてもよく、乳剤及びゲル剤の場合も、有効成分に加えて当該技術分野で公知であるような基剤を含有していてもよい。
【０１９０】
本開示の化合物は、単独で、又は、他の好適な成分と組み合わせて、吸入投与用のエアロゾル剤形に調剤されてもよい。このエアロゾル剤形は、ジクロロジフルオロメタン、プロパン及び窒素などの許容される高圧噴射剤としてもよい。また、このエアロゾル剤形は、ネブライザー又はアトマイザー等といった非加圧製剤用の医薬品に調剤されてもよい。
【０１９１】
非経口投与に適した剤形としては、酸化防止剤、緩衝剤、静菌剤、及び、製剤を対象受容者の血液と等張にする溶質を含んでいてもよい、水性及び非水性の等張無菌注射液；並びに、懸濁化剤、溶解剤、増粘剤、安定剤、及び保存料を含んでいてもよい、水性及び非水性無菌懸濁液が挙げられる。化合物は、医薬基剤中の生理学的に許容される希釈剤に含ませて投与してもよい。この生理学的に許容される希釈剤は、例えば無菌の液体又は液体混合物であり、水；塩水；デキストロース水溶液及び関連する糖液；エタノール、イソプロパノール又はヘキサデシルアルコール等のアルコール；プロピレングリコール、又は、例えばポリ（エチレングリコール）４００等のポリエチレングリコールなどといったグリコール類；２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−メタノール等のグリセロールケタル類；エーテル；オイル；脂肪酸；脂肪酸エステル又はグリセリド；或いは、アセチル化脂肪酸グリセリドが挙げられる。これらには、薬学的に許容される界面活性剤（石鹸又は洗浄剤など）、懸濁化剤（ペクチン、カルボマー、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース又はカルボキシメチルセルロース等）、又は乳化剤、及び、他の医薬アジュバントが添加されていても、いなくてもよい。
【０１９２】
非経口剤形で使用されるオイルとしては、石油、動物油、植物油、又は合成油が挙げられる。オイルの具体例としては、ピーナッツ油、大豆油、ゴマ油、綿実油、コーン油、オリーブ油、ペトロラタム、及び鉱物油が挙げられる。非経口剤形に使用される好適な脂肪酸としては、オレイン酸、ステアリン酸、及びイソステアリン酸が挙げられる。オレイン酸エチル及びミリスチン酸イソプロピルが好適な脂肪酸エステルの例として挙げられる。非経口剤形に使用される好適な石鹸としては、脂肪酸アルカリ金属塩、脂肪酸アンモニウム塩、及び脂肪酸トリエタノールアミン塩が挙げられる。好適な洗浄剤としては、（ａ）例えばハロゲン化ジメチルジアルキルアンモニウム及びハロゲン化アルキルピリジニウム等のカチオン性洗浄剤、（ｂ）例えばアルキル、アリール及びオレフィンスルホネート、アルキル、オレフィン、エーテル及びモノグリセリドスルフェート、並びに、スルホサクシネート等のアニオン性洗浄剤、（ｃ）例えば脂肪族アミンオキシド、脂肪酸アルカノールアミド、及びポリオキシエチレン・ポリプロピレン共重合体などの非イオン性洗浄剤、（ｄ）例えばアルキルβ−アミノプロピオネート、及び２−アルキルイミダゾリン第４級アンモニウム塩などの両性洗浄剤、さらに（ｅ）これらの混合物が挙げられる。
【０１９３】
非経口剤形は、典型的には約０．５〜約２５重量％の有効成分を溶液中に含有している。このような剤形には、適当な保存料及び緩衝剤を使用してもよい。注射部位での刺激を最小限に抑えるか又は除くために、このような組成物には、親水親油バランス（ＨＬＢ）が約１２〜約１７である非イオン性界面活性剤を１つ以上含有させてもよい。このような剤形における界面活性剤の量は、約５〜約１５重量％である。好適な界面活性剤としては、モノオレイン酸ソルビタンなどのポリエチレンソルビタン脂肪酸エステル、並びに、プロピレンオキシドとプロピレングリコールとの縮合により形成される疎水性基部（ベース）とのエチレンオキシドの高分子量付加物が挙げられる。
【０１９４】
薬学的に許容される賦形剤もまた、当業者には周知である。賦形剤は、化合物の種類や組成物の投与に使用される具体的な方法を幾分考慮して選択されるであろう。従って、本開示の医薬組成物には、様々な種類の好適な剤形が考えられる。以下の方法及び賦形剤は単なる例示に過ぎず、これらに限定されない。薬学的に許容される賦形剤としては、有効成分の作用を阻害せず、不都合な副作用を引き起こさないものが好ましい。好適な基剤及び賦形剤としては、水、アルコール及びプロピレングリコール等の溶媒、固体の吸収剤及び希釈剤、界面活性剤、懸濁化剤、錠剤結合剤（ｔａｂｌｅｔｉｎｇ  ｂｉｎｄｅｒｓ）、滑沢剤、フレーバー、並びに、着色剤が挙げられる。
【０１９５】
剤形は、単回投与用又は反復投与用の密封容器（アンプル及びバイアル等）に封入してもよい。また、使用直前に水などの無菌液体賦形剤を添加するだけで注射可能となるフリーズドライ（凍結乾燥）状態で保存してもよい。無菌粉末、顆粒及び錠剤から、用時調製注射液及び懸濁液を調製してもよい。注射用組成物には有効な医薬基剤が必要であることは、当業者に周知である。Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ  ａｎｄ  Ｐｈａｒｍａｃｙ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ，Ｊ．Ｂ．Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｃｏ．，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ＰＡ，Ｂａｎｋｅｒ  ａｎｄ  Ｃｈａｌｍｅｒｓ，Ｅｄｓ．，２３８−２５０（１９８２）、及び、ＡＳＨＰ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｎ  Ｉｎｊｅｃｔａｂｌｅ  Ｄｒｕｇｓ，Ｔｏｉｓｓｅｌ，４ｔｈ  ｅｄ．，６２２−６３０（１９８６）を参照されたい。
【０１９６】
局所投与に適した剤形としては、一般的にはスクロース及びアラビアゴム又はトラガカントゴムであるフレーバー中に有効成分を含んでいる薬用ドロップ；ゼラチン及びグリセリン、又は、スクロース及びアラビアゴム等といった不活性なベース中に有効成分を含んでいる香錠；並びに、好適な液体基剤中に有効成分を含んでいる口内洗浄剤；さらに、有効成分に加えて当該技術分野で公知であるような基剤を含有しているクリーム、乳剤及びゲル剤が挙げられる。
【０１９７】
さらに、直腸投与に適した剤形を、乳化性のベース又は水溶性のベースなどといった種々のベースと混合することで坐薬として調製してもよい。膣投与に適した剤形を、有効成分に加えて、関連分野で適切であることが知られている基剤を含有させた膣坐薬、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、発泡体、又は、スプレー式剤形として調製してもよい。
【０１９８】
好適な医薬基剤については、当該分野の標準的な参考文献であるＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙに記載されている。
【０１９９】
本開示において、動物、とりわけヒトへの投与量は、適度な期間にわたって体内で治療反応を引き起こすのに十分な量であるのが望ましい。投与量が、動物の体調や体重、さらには、治療される症状の重症度や段階などの種々の要因によって決定されることは当業者の理解するところであろう。
【０２００】
好適な投与量は、最終的に、患者体内で活性物質が所望の反応を起こすことが知られている濃度になると推定される量である。扱いにくい副作用を起こすことなく、治療される症状を最大限抑制することとなる投与量が好ましい。
【０２０１】
投与量は、投与の経路、タイミング及び頻度、さらに、化合物の投与に伴って生じる何らかの不都合な副作用の有無、性質及び程度や、所望の生理学的効果によっても決定される。
【０２０２】
本開示に係る化合物を投与するのに有用な薬学的投与形態は、以下のように説明される。
【０２０３】
ハードシェルカプセル
標準的な２ピース（ｔｗｏ−ｐｉｅｃｅ）ハードゼラチンカプセル毎に、粉末状の有効成分１００ｍｇ、ラクトース１５０ｍｇ、セルロース５０ｍｇ、及び、ステアリン酸マグネシウム６ｍｇを充填して、多数のカプセル単位を調製する。
【０２０４】
ソフトゼラチンカプセル
大豆油、綿実油又はオリーブ油等の消化可能なオイル中に有効成分を含ませて混合物を調製し、それを容積移送式ポンプで、溶かしたゼラチンに注入し、有効成分１００ｍｇを含有するソフトゼラチンカプセルを形成する。カプセルを洗浄し、乾燥する。ポリエチレングリコールとグリセリンとソルビトールとの混合物に有効成分を溶解し、水混和性の混合薬を調製してもよい。
【０２０５】
錠剤
有効成分１００ｍｇ、コロイド二酸化ケイ素０．２ｍｇ、ステアリン酸マグネシウム５ｍｇ、微結晶セルロース２７５ｍｇ、デンプン１１ｍｇ、及び、ラクトース９８．８ｍｇを含む投与単位となるように、従来の手順で多数の錠剤を調製する。嗜好性を増加させるため、外観及び安定性を向上させるため、又は、吸収を遅らせるために適当な水性及び非水性コーティングを施してもよい。
【０２０６】
速放性（ｉｍｍｅｄｉａｔｅ  ｒｅｌｅａｓｅ）錠剤／カプセル
従来のプロセスや新規のプロセスで調製される、経口投与用の固体投与形態である。これらの投与単位は、すぐに溶解して薬物を送達するので、水無しで経口的に摂取される。有効成分を、糖、ゼラチン、ペクチン及び甘味料などの成分を含有する液体に混合する。これらの液体を、フリーズドライ技術や固体状態で抽出する技術によって固体の錠剤又はカプレットへと固体化する。薬剤化合物を、粘弾性及び熱弾性の糖やポリマー或いは起泡性成分と共に打錠して、水無しで即時放出されるような多孔質マトリックスを調製してもよい。
【０２０７】
また、本開示の化合物は、点鼻薬、又は、定量吸入器や鼻腔用若しくは口腔用吸入器の形態で投与してもよい。薬剤は、細かい霧状の点鼻液、或いはエアロゾル状の粉末によって送達される。
【０２０８】
本願に関して、本方法は、Ｓ−アデノシルメチオニン脱炭酸酵素の阻害、又は、寄生虫感染症の阻害、又は、ニューモシスチス・カリニ（Ｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓ  ｃａｉｎｉｉ）により引き起こされた感染症の阻害、又は、腫瘍形成及び腫瘍増殖の阻害に有効な化合物を治療上有効な量で動物、とりわけ哺乳動物、特にヒトに投与することを含む。
【０２０９】
ここまで、本開示について例示し、説明した。また、本開示では好ましい実施形態しか図示及び記載していないが、上述の通り、上記教示、及び／又は、関連技術の技術若しくは知識に相応する範囲において、様々な他の組み合わせ例、変形例及び環境のもとで本開示を用いることができ、本明細書に示した概念の範囲内であれば変更又は改変も可能であると解されるべきである。さらに、上記実施形態は、現段階で本出願人が分かっている最良の形態を説明することを意図したものであり、このような実施形態として、或いは、別の実施形態として、また、具体的に適用若しくは使用するにあたって必要とされる各種の改変をさらに施して、当業者が本開示を利用できるよう意図したものである。従って、本明細書に開示された形態に限定する意図はない。また、添付した特許請求の範囲は、代替の実施形態を含むと解されるものである。
【０２１０】
本開示のさらに他の目的及び利点は、以下の詳細な説明により、当業者にとって容易に明らかとなるであろう。詳細な説明においては、単に考えられる最良の形態を例示することで好ましい実施形態のみを図示し、説明している。十分に理解されるであろうが、本開示は他の異なる実施形態も採りうるものであり、幾つかの細部については、本開示から逸脱することなく、各種の自明な点で改変が可能である。従って、本明細書は本質的に例示的なものであり、これに限定されることはない。
【０２１１】
本明細書に引用した全ての刊行物及び特許出願文献は、各刊行物又は特許出願文献をそれぞれ具体的に且つ個別に提示し、引用して援用するように、本明細書に引用され、任意のあらゆる目的に援用される。
【０２１２】
参照
（１）  Ｈａｃｋｅｒｔ，Ｍ．Ｌ．；Ｐｅｇｇ，Ａ．Ｅ．Ｐｙｒｕｖｏｙｌ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ｅｎｚｙｍｅｓ．Ｉｎ  Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃａｔａｌｙｓｉｓ；Ｓｉｎｎｏｔｔ，Ｍ．Ｌ．，Ｅｄ．；Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ：Ｌｏｎｄｏｎ，１９９７；ｐｐ  ２０１−２１６．
（２）  Ｐｅｇｇ，Ａ．Ｅ．；Ｘｉｏｎｇ，Ｈ．；Ｆｅｉｔｈ，Ｄ．；Ｓｈａｎｔｚ，Ｌ．Ｍ．Ｓ−Ａｄｅｎｏｓｙｌｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ  Ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ：Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，Ｆｕｎｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｂｙ  Ｐｏｌｙａｍｉｎｅｓ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｔｒａｎｓ．，１９９８，２６，５８０−５８６．
（３）  Ｔａｂｏｒ，Ｃ．Ｗ．；Ｔａｂｏｒ，Ｈ．Ｐｏｌｙａｍｉｎｅｓ．Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１９８４，５３，７４９−７９０．
（４）  Ｔａｂｏｒ，Ｃ．Ｗ．；Ｔａｂｏｒ，Ｈ．Ｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ  Ａｄｅｎｏｓｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ（Ｓ−Ａｄｅｎｏｓｙｌｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ  Ｓｙｎｔｈｅｔａｓｅ）  ａｎｄ  Ｓ−Ａｄｅｎｏｓｙｌｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ  Ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ．Ａｄｖａｎ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．Ｒｅｌａｔｅｄ  Ａｒｅａｓ  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，１９８４，５６，２５１−２８２．
（５）ｖａｎ  Ｐｏｅｌｊｅ，Ｐ．Ｄ．；Ｓｎｅｌｌ，Ｅ．Ｅ．Ｐｙｒｕｖｏｙｌ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  Ｅｎｚｙｍｅｓ．Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１９９０，５９，２９−５９．
【０２１３】
（６）  Ｗａｌｌａｃｅ，Ｈ．Ｍ．；Ｆｒａｓｅｒ，Ａ．Ｖ．；Ｈｕｇｈｅｓ，Ａ．Ａ  Ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅ  ｏｆ  Ｐｏｌｙａｍｉｎｅ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．，２００３，３７６，１−１４．
（７）  Ｃａｓｅｒｏ，Ｒ．Ａ．，Ｊｒ．；Ｃｅｌａｎｏ，Ｐ．；Ｅｒｖｉｎ，Ｓ．Ｊ．；Ａｐｐｌｅｇｒｅｎ，Ｎ．Ｂ．；Ｗｉｅｓｔ，Ｌ．；Ｐｅｇｇ，Ａ．Ｅ．Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ｃＤＮＡ  Ｃｌｏｎｅ  ｔｈａｔ  Ｃｏｄｅｓ  ｆｏｒ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｐｅｒｍｉｄｉｎｅ／Ｓｐｅｒｍｉｎｅ  Ｎ１−ａｃｅｔｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，１９９１，２６６，８１０−４．
（８）  Ｐｅｇｇ，Ａ．Ｅ．Ｐｏｌｙａｍｉｎｅ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ａｎｄ  ｉｔｓ  Ｉｍｐｏｒｔａｎｃｅ  ｉｎ  Ｎｅｏｐｌａｓｔｉｃ  Ｇｒｏｗｔｈ  ａｎｄ  ａｓ  ａ  Ｔａｒｇｅｔ  ｆｏｒ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，１９８８，４８，７５９−７７４．
（９）  Ｇｅｒｎｅｒ，Ｅ．Ｗ．；Ｍｅｙｓｋｅｎｓ，Ｆ．Ｌ．，Ｊｒ．Ｐｏｌｙａｍｉｎｅｓ  ａｎｄ  Ｃａｎｃｅｒ：Ｏｌｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ，Ｎｅｗ  Ｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｉｎｇ．Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｃａｎｃｅｒ，２００４，４，７８１−７９２．
（１０）  Ｍｅｔｃａｌｆ，Ｂ．Ｗ．；Ｂｅｙ，Ｐ．；Ｄａｎｚｉｎ，Ｃ．；Ｊｕｎｇ，Ｍ．Ｊ．；Ｃａｓａｒａ，Ｐ．；Ｖｅｖｅｒｔ，Ｊ．Ｐ．Ｃａｔａｌｙｔｉｃ  Ｉｒｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｍａｍｍａｌｉａｎ  Ｏｒｎｉｔｈｉｎｅ  Ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ（ＥＣ４１１１７）  ｂｙ  Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ  ａｎｄ  Ｐｒｏｄｕｃｔ  Ａｎａｌｏｇｓ．Ｊ．Ａｍｅｒ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１９７８，１００，２５５１−２５５３．
【０２１４】
（１１）  Ｂｅｗｌｅｙ，Ｍ．Ｃ．；Ｇｒａｚｉａｎｏ，Ｖ．；Ｊｉａｎｇ，Ｊ．；Ｍａｔｚ，Ｅ．；Ｓｔｕｄｉｅｒ，Ｆ．Ｗ．；Ｐｅｇｇ，Ａ．Ｅ．；Ｃｏｌｅｍａｎ，Ｃ．Ｓ．；Ｆｌａｎａｇａｎ，Ｊ．Ｍ．Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ  ｏｆ  Ｗｉｌｄ−ｔｙｐｅ  ａｎｄ  Ｍｕｔａｎｔ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｐｅｒｍｉｄｉｎｅ／Ｓｐｅｒｍｉｎｅ  Ｎ１−Ａｃｅｔｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ，ａ  Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ｄｒｕｇ  Ｔａｒｇｅｔ．Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ，２００６，１０３，２０６３−８．
（１２）  Ａｌｈｏｎｅｎ−Ｈｏｎｇｉｓｔｏ，Ｌ．；Ｓｅｐｐａｎｅｎ，Ｐ．；ａｎｄ  Ｊａｎｎｅ，Ｊ．Ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｐｕｔｒｅｓｃｉｎｅ  ａｎｄ  Ｓｐｅｒｍｉｄｉｎｅ  Ｄｅｐｒｉｖａｔｉｏｎ  Ｉｎｄｕｃｅｓ  Ｉｎｃｒｅａｓｅｄ  Ｕｐｔａｋｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎａｔｕｒａｌ  Ｐｏｌｙａｍｉｎｅｓ  ａｎｄ  Ｍｅｔｈｙｌｇｌｙｏｘａｌ  ｂｉｓ（ｇｕａｎｙｌｈｙｄｒａｚｏｎｅ）．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．，１９８０，１９２，９４１−５．
（１３）  Ｍｅｙｓｋｅｎｓ，Ｆ．Ｌ．，Ｊｒ．；Ｇｅｒｎｅｒ，Ｅ．Ｗ．Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｄｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌｏｒｎｉｔｈｉｎｅ（ＤＦＭＯ）  ａｓ  ａ  Ｃｈｅｍｏｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ  Ａｇｅｎｔ．Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，１９９９，５，９４５−５１．
（１４）  Ｆａｂｉａｎ，Ｃ．Ｊ．；Ｋｉｍｌｅｒ，Ｂ．Ｆ．；Ｂｒａｄｙ，Ｄ．Ａ．；Ｍａｙｏ，Ｍ．Ｓ．；Ｃｈａｎｇ，Ｃ．Ｈ．；Ｆｅｒｒａｒｏ，Ｊ．Ａ．；Ｚａｌｌｅｓ，Ｃ．Ｍ．；Ｓｔａｎｔｏｎ，Ａ．Ｌ．；Ｍａｓｏｏｄ，Ｓ．；Ｇｒｉｚｚｌｅ，Ｗ．Ｅ．；Ｂｏｙｄ，Ｎ．Ｆ．；Ａｒｎｅｓｏｎ，Ｄ．Ｗ．；Ｊｏｈｎｓｏｎ，Ｋ．Ａ．Ａ  Ｐｈａｓｅ  ＩＩ  Ｂｒｅａｓｔ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｈｅｍｏｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ  Ｔｒｉａｌ  ｏｆ  Ｏｒａｌ  Ａｌｐｈａ−ｄｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌｏｒｎｉｔｈｉｎｅ：Ｂｒｅａｓｔ  Ｔｉｓｓｕｅ，Ｉｍａｇｉｎｇ，  ａｎｄ  Ｓｅｒｕｍ  ａｎｄ  Ｕｒｉｎｅ  Ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ．Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，２００２，８，３１０５−１７．
（１５）  Ｂａｓｕｒｏｙ，Ｕ．Ｋ．；Ｇｅｒｎｅｒ，Ｅ．Ｗ．Ｅｍｅｒｇｉｎｇ  Ｃｏｎｃｅｐｔｓ  ｉｎ  Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｔｈｅ  Ｐｏｌｙａｍｉｎｅ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｃ  Ｐａｔｈｗａｙ  ｉｎ  Ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｈｅｍｏｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．（Ｔｏｋｙｏ），２００６，１３９，２７−３３．
【０２１５】
（１６）  Ｗｉｌｌｉａｍｓ−Ａｓｈｍａｎ，Ｈ．Ｇ．；Ｓｃｈｅｎｏｎｅ，Ａ．Ｍｅｔｈｙｌｇｌｙｏｘａｌ  ｂｉｓ（ｇｕａｎｙｌｈｙｄｒａｚｏｎｅ）  ａｓ  ａ  Ｐｏｔｅｎｔ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｏｆ  Ｍａｍｍａｌｉａｎ  ａｎｄ  Ｙｅａｓｔ  Ｓ−ａｄｅｎｏｓｙｌｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ  Ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅｓ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．，１９７２，４６，２８８−２９５．
（１７）  Ｍｉｌｌｗａｒｄ，Ｍ．Ｊ．；Ｊｏｓｈｕａ，Ａ．；Ｋｅｆｆｏｒｄ，Ｒ．；Ａａｍｄａｌ，Ｓ．；Ｔｈｏｍｓｏｎ，Ｄ．；Ｈｅｒｓｅｙ，Ｐ．；Ｔｏｎｅｒ，Ｇ．；Ｌｙｎｃｈ，Ｋ．Ｍｕｌｔｉ−ｃｅｎｔｒｅ  Ｐｈａｓｅ  ＩＩ  Ｔｒｉａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｐｏｌｙａｍｉｎｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ＳＡＭ４８６Ａ（ＣＧＰ４８６６４）  ｉｎ  Ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  Ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ  Ｍｅｌａｎｏｍａ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｎｅｗ  Ｄｒｕｇｓ，２００５，２３，２５３−６．
（１８）  Ｓｈａｎｔｚ，Ｌ．Ｍ．；Ｓｔａｎｌｅｙ，Ｂ．Ａ．；Ｓｅｃｒｉｓｔ，Ｊ．Ａ．，ＩＩＩ；  ａｎｄ  Ｐｅｇｇ，Ａ．Ｅ．Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｈｕｍａｎ  Ｓ−ａｄｅｎｏｓｙｌｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ  Ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ  Ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ  ｉｎ  Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  ｏｆ  ｔｈｉｓ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  ｔｏ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ  ｔｈｅ  Ｍｅｃｈａｎｉｓｍ  ｏｆ  Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｂｙ  ｔｈｅ  Ｉｒｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ，５’−Ｄｅｏｘｙ−５’−［（３−ｈｙｄｒａｚｉｎｏｐｒｏｐｙｌ）ｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ］ａｄｅｎｏｓｉｎｅ  ａｎｄ  ５’｛［（Ｚ）−４−Ａｍｉｎｏ−２−ｂｕｔｅｎｙｌ］ｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ−５’−ｄｅｏｘｙａｄｅｎｏｓｉｎｅ．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９９２，３１，６８４８−６８５５．
（１９）  Ｄａｎｚｉｎ，Ｃ．；Ｍａｒｃｈａｌ，Ｐ．；Ｃａｓａｒａ，Ｐ．Ｉｒｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｒａｔ  Ｓ−Ａｄｅｎｏｓｙｌｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ  Ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ  ｂｙ  ５’−｛［（Ｚ）−４−Ａｍｉｎｏ−２−ｂｕｔｅｎｙｌ］ｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ｝−５’−ｄｅｏｘｙａｄｅｎｏｓｉｎｅ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，１９９０，４０，１４９９−１５０３．
（２０）  Ｅｋｓｔｒｏｍ，Ｊ．Ｅ．；Ｍａｔｔｈｅｗｓ，Ｉ．Ｉ．；Ｓｔａｎｌｅｙ，Ｂ．Ａ．；Ｐｅｇｇ，Ａ．Ｅ．；Ｅａｌｉｃｋ，Ｓ．Ｅ．Ｔｈｅ  Ｃｒｙｓｔａｌ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ｏｆ  Ｈｕｍａｎ  Ｓ−Ａｄｅｎｏｓｙｌｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ  Ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ  ａｔ  ２．２５  Å  Ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ  Ｒｅｖｅａｌｓ  ａ  Ｎｏｖｅｌ  Ｆｏｌｄ．Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，１９９９，７，５８３−５９５．
【０２１６】
（２１）  Ｔｏｌｂｅｒｔ，Ｗ．Ｄ．；Ｚｈａｎｇ，Ｙ．；Ｃｏｔｔｅｔ，Ｓ．Ｅ．；Ｂｅｎｎｅｔｔ，Ｅ．Ｍ．；Ｅｋｓｔｒｏｍ，Ｊ．Ｌ．；Ｐｅｇｇ，Ａ．Ｅ．；Ｅａｌｉｃｋ，Ｓ．Ｅ．Ｍｅｃｈａｎｉｓｍ  ｏｆ  Ｈｕｍａｎ  Ｓ−Ａｄｅｎｏｓｙｌｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ  Ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ  Ｐｒｏｅｎｚｙｍｅ  Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ  ａｓ  Ｒｅｖｅａｌｅｄ  ｂｙ  ｔｈｅ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｓ６８Ａ  Ｍｕｔａｎｔ．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００３，４２，２３８６−９５．
（２２）  Ｅｋｓｔｒｏｍ，Ｊ．Ｌ．；Ｔｏｌｂｅｒｔ，Ｗ．Ｄ．；Ｘｉｏｎｇ，Ｈ．；Ｐｅｇｇ，Ａ．Ｅ．；Ｅａｌｉｃｋ，Ｓ．Ｅ．Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ｏｆ  ａ  ｈｕｍａｎ  Ｓ−Ａｄｅｎｏｓｙｌｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ  Ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ  Ｓｅｌｆ−ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ  Ｅｓｔｅｒ  Ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅ  ａｎｄ  Ｍｅｃｈａｎｉｓｍ  ｏｆ  Ｐｕｔｒｅｓｃｉｎｅ  Ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ  ａｓ  Ｒｅｖｅａｌｅｄ  ｂｙ  ｔｈｅ  Ｈ２４３Ａ  Ｍｕｔａｎｔ．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００１，４０，９４９５−９５０４．
（２３）  Ｔｏｌｂｅｒｔ，Ｄ．Ｗ．；Ｅｋｓｔｒｏｍ，Ｊ．Ｌ．；Ｍａｔｈｅｗｓ，Ｉ．Ｉ．；Ｓｅｃｒｉｓｔ，Ｊ．Ａ．，ＩＩＩ；Ｋａｐｏｏｒ，Ｐ．；Ｐｅｇｇ，Ａ．Ｅ．；Ｅａｌｉｃｋ，Ｓ．Ｅ．Ｔｈｅ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｆｏｒ  Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ  Ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ  ａｎｄ  Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｈｕｍａｎ  Ｓ−Ａｄｅｎｏｓｙｌｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ  Ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００１，４０，９４８４−９４９４．
（２４）  Ｏｔｗｉｎｏｗｓｋｉ，Ｚ．；Ｍｉｎｏｒ，Ｗ．Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ  ｏｆ  Ｘ−Ｒａｙ  Ｄｉｆｆｒａｃｔｉｏｎ  Ｄａｔａ  Ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ  ｉｎ  Ｏｓｃｉｌｌａｔｉｏｎ  Ｍｏｄｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．，１９９７，２７６，３０７−３２６．
（２５）  Ｂｒｕｎｇｅｒ，Ａ．Ｔ．；Ａｄａｍｓ，Ｐ．Ｄ．；Ｃｌｏｒｅ，Ｇ．Ｍ．；ＤｅＬａｎｏ，Ｗ．Ｌ．；Ｇｒｏｓ，Ｐ．；Ｇｒｏｓｓｅ−Ｋｕｎｓｔｌｅｖｅ，Ｒ．Ｗ．；Ｊｉａｎｇ，Ｊ．Ｓ．；Ｋｕｓｚｅｗｓｋｉ，Ｊ．；Ｎｉｌｇｅｓ，Ｍ．；Ｐａｎｎｕ，Ｎ．Ｓ．；Ｒｅａｄ，Ｒ．Ｊ．；Ｒｉｃｅ，Ｌ．Ｍ．；Ｓｉｍｏｎｓｏｎ，Ｔ．；Ｗａｒｒｅｎ，Ｇ．Ｌ．Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒａｐｈｙ＆ＮＭＲ  Ｓｙｓｔｅｍ：Ａ  Ｎｅｗ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｓｕｉｔｅ  ｆｏｒ  Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ．Ａｃｔａ  Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒ．，１９９８，Ｄ  ５４，９０５−２１．
【０２１７】
（２６）  Ｊｏｎｅｓ，Ｔ．Ａ．；Ｚｏｕ，Ｊ．−Ｙ．；Ｃｏｗａｎ，Ｓ．Ｗ．；Ｋｊｅｌｄｇａａｒｄ，Ｍ．Ｉｍｐｒｏｖｅｄ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｂｕｉｌｄｉｎｇ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｍｏｄｅｌｓ  ｉｎ  Ｅｌｅｃｔｒｏｎ  Ｄｅｎｓｉｔｙ  Ｍａｐｓ  ａｎｄ  ｔｈｅ  Ｌｏｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｅｒｒｏｒｓ  ｉｎ  Ｔｈｅｓｅ  Ｍｏｄｅｌｓ．Ａｃｔａ  Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒ．，１９９１，Ａ  ４７，１１０−１１９．
（２７）  Ｅｍｓｌｅｙ，Ｐ．；Ｃｏｗｔａｎ，Ｋ．Ｃｏｏｔ：Ｍｏｄｅｌ−Ｂｕｉｌｄｉｎｇ  Ｔｏｏｌｓ  ｆｏｒ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｇｒａｐｈｉｃｓ．Ａｃｔａ  Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒ  Ｄ  Ｂｉｏｌ  Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒ．，２００４，６０，２１２６−３２．
（２８）  Ｋｌｅｙｗｅｇｔ，Ｇ．Ｊ．；Ｊｏｎｅｓ，Ｔ．Ａ．Ｄａｔａｂａｓｅｓ  ｉｎ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒａｐｈｙ．Ａｃｔａ  Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒ  Ｄ  Ｂｉｏｌ  Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒ．，１９９８，５４，１１１９−３１．
（２９）  Ｍｏｈａｍａｄｉ，Ｆ．；Ｒｉｃｈａｒｄｓ，Ｎ．Ｇ．Ｊ．；Ｇｕｉｄａ，Ｗ．Ｃ．；Ｌｉｓｋａｍｐ，Ｒ．；Ｌｉｐｔｏｎ，Ｍ．；Ｃａｕｆｉｅｌｄ，Ｃ．；Ｃｈａｎｇ，Ｇ．；Ｈｅｎｄｒｉｃｋｓｏｎ，Ｔ．；Ｓｔｉｌｌ，Ｗ．Ｃ．Ｍａｃｒｏｍｏｄｅｌ−ａｎ  Ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｓｙｓｔｅｍ  ｆｏｒ  Ｍｏｄｅｌｉｎｇ  Ｏｒｇａｎｉｃ  ａｎｄ  Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ  Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  Ｕｓｉｎｇ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｍｅｃｈａｎｉｃｓ．Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９９０，１１，４４０−４６７．ＭａｃｒｏＭｏｄｅｌ  ｉｓ  ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｅｄ  ｂｙ  Ｓｃｈｒｏｅｄｉｎｇｅｒ，Ｌ．Ｌ．Ｃ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＮＹ．
（３０）  Ｃｈａｎｇ，Ｇ．；Ｇｕｉｄａ，Ｗ．Ｃ．；Ｓｔｉｌｌ，Ｗ．Ｃ．Ａｎ  Ｉｎｔｅｒｎａｌ  Ｃｏｏｒｄｉｎａｔｅ  Ｍｏｎｔｅ−Ｃａｒｌｏ  Ｍｅｔｈｏｄ  ｆｏｒ  Ｓｅａｒｃｈｉｎｇ  Ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎａｌ  Ｓｐａｃｅ．Ｊ．Ａｍｅｒ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１９８９，１１１，４３７９−４３８６．
【０２１８】
（３１）  Ｋｏｌｏｓｓａｖａｒｙ，Ｉ．；Ｇｕｉｄａ，Ｗ．Ｃ．Ｌｏｗ−Ｍｏｄｅ  Ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎａｌ  Ｓｅａｒｃｈ  Ｅｌｕｃｉｄａｔｅｄ：Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｔｏ  Ｃ３９Ｈ８０  ａｎｄ  Ｆｌｅｘｉｂｌｅ  Ｄｏｃｋｉｎｇ  ｏｆ  ９−Ｄｅａｚａｇｕａｎｉｎｅ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｉｎｔｏ  ＰＮＰ．Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９９９，２０，１６７１−１６８４．
（３２）  Ｗｅｉｎｅｒ，Ｓ．Ｊ．；Ｋｏｌｌｍａｎ，Ｐ．Ａ．；Ｃａｓｅ，Ｄ．Ａ．；Ｓｉｎｇｈ，Ｕ．Ｃ．；Ｇｈｉｏ，Ｃ．；Ａｌａｇｏｎａ，Ｇ．；Ｐｒｏｆｅｔａ，Ｓ．；Ｗｅｉｎｅｒ，Ｐ．Ａ  Ｎｅｗ  Ｆｏｒｃｅ−Ｆｉｅｌｄ  ｆｏｒ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｍｅｃｈａｎｉｃａｌ  Ｓｉｍｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｎｕｃｌｅｉｃ−Ａｃｉｄｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ．Ｊ．Ａｍｅｒ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１９８４，１０６，７６５−７８４．
（３３）  Ｗｅｉｎｅｒ，Ｓ．Ｊ．；Ｋｏｌｌｍａｎ，Ｐ．Ａ．；Ｎｇｕｙｅｎ，Ｄ．Ｔ．；Ｃａｓｅ，Ｄ．Ａ．Ａｎ  Ａｌｌ  Ａｔｏｍ  Ｆｏｒｃｅ−Ｆｉｅｌｄ  ｆｏｒ  Ｓｉｍｕｌａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ａｎｄ  Ｎｕｃｌｅｉｃ−Ａｃｉｄｓ．Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９８６，７，２３０−２５２．
（３４）  Ｐｏｎｄｅｒ，Ｊ．Ｗ．；Ｒｉｃｈａｒｄｓ，Ｆ．Ｍ．Ａｎ  Ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ  Ｎｅｗｔｏｎ−Ｌｉｋｅ  Ｍｅｔｈｏｄ  ｆｏｒ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｍｅｃｈａｎｉｃｓ  Ｅｎｅｒｇｙ  Ｍｉｎｉｍｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｌａｒｇｅ  Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ．Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９８７，８，１０１６−１０２４．
（３５）  Ｍａｒｋｈａｍ，Ｇ．Ｄ．；Ｎｏｒｒｂｙ，Ｐ．Ｏ．；Ｂｏｃｋ，Ｃ．Ｗ．Ｓ−Ａｄｅｎｏｓｙｌｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ  Ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ  ｉｎ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｉｎ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｃｏｍｐｌｅｘｅｓ：Ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｓｕｌｆｏｎｉｕｍ  Ｇｒｏｕｐ．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００２，４１，７６３６−４６．
【０２１９】
（３６）  Ｓｈａｎｔｚ，Ｌ．Ｍ．；Ｐｅｇｇ，Ａ．Ｅ．（１９９８）  Ａｓｓａｙ  ｏｆ  Ｓ−Ａｄｅｎｏｓｙｌｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ  Ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ，ｉｎ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ  ７９：Ｐｏｌｙａｍｉｎｅ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ；Ｍｏｒｇａｎ，Ｄ．Ｍ．Ｌ．，Ｅｄ．；Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ  Ｉｎｃ．：Ｎｅｗ  Ｊｅｒｓｅｙ，１９９８；ｐｐ  ４５−５０．
（３７）  Ｓｅｃｒｉｓｔ，Ｊ．Ａ．，ＩＩＩ．Ｎｅｗ  Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ  Ａｎａｌｏｇｕｅｓ  ａｓ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｏｆ  Ｓ−Ａｄｅｎｏｓｙｌｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ  Ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ．Ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｓ  Ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ，１９８７，６，７３−８３．
（３８）  Ｍｉｔｓｕｎｏｂｕ，Ｏ．Ｔｈｅ  Ｕｓｅ  ｏｆ  Ｄｉｅｔｈｙｌ  Ａｚｏｄｉｃａｒｂｏｎｙｌａｔｅ  ａｎｄ  Ｔｒｉｐｈｅｎｙｌｐｈｏｓｐｈｉｎｅ  ｉｎ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ａｎｄ  Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｎａｔｕｒａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，１９８１，１−２８．
（３９）  Ｉｋｅｈａｒａ，Ｍ．；Ｕｅｓｕｇｉ，Ｓ．；Ｋａｎｅｋｏ，Ｍ．Ｂｒｏｍｉｎａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ａｄｅｎｉｎｅ  Ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ  ａｎｄ  Ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ．Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍ．，１９６７，１７−１８．
（４０）  Ｖａｎ  Ａｅｒｓｃｈｏｔ，Ａ．Ａ．；Ｍａｍｏｓ，Ｐ．；Ｗｅｙｎｓ，Ｎ．Ｊ．；Ｉｋｅｄａ，Ｓ．；Ｄｅ  Ｃｌｅｒｃｑ，Ｅ．；Ｈｅｒｄｅｗｉｊｎ，Ｐ．Ａ．Ａｎｔｉｖｉｒａｌ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  Ｃ−Ａｌｋｙｌａｔｅｄ  Ｐｕｒｉｎｅ  Ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｓ  Ｏｂｔａｉｎｅｄ  ｂｙ  Ｃｒｏｓｓ−Ｃｏｕｐｌｉｎｇ  ｗｉｔｈ  Ｔｅｔｒａａｌｋｙｌｔｉｎ  Ｒｅａｇｅｎｔｓ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，１９９３，３６，２９３８−２９４２．
【０２２０】
（４１）  （ａ）Ｌｏｎｇ，Ｒ．Ａ．；Ｒｏｂｉｎｓ，Ｒ．Ｋ．；Ｔｏｗｎｓｅｎｄ，Ｌ．Ｂ．Ｐｕｒｉｎｅ  Ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｓ．ＸＶ．Ｔｈｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  ８−Ａｍｉｎｏ−  ａｎｄ  ８−Ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ  Ａｍｉｎｏｐｕｒｉｎｅ  Ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｓ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，１９６７，３２，２７５１−２７５６；（ｂ）Ｒｅｅｓｅ，Ｃ．Ｂ．；Ｃｈａｔｔｏｐａｄｈｙａｙａ，Ｊ．Ｂ．Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ  Ｂｅｔｗｅｅｎ  ８−Ｂｒｏｍｏａｄｅｎｏｓｉｎｅ  ａｎｄ  Ａｍｉｎｅｓ．Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  ８−Ｈｙｄｒａｚｉｎｏａｄｅｎｏｓｉｎｅ．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，１９７７，７２５−７２６．
（４２）  Ｋｏｈｙａｍａ，Ｎ．；Ｋａｔａｓｈｉｍａ，Ｔ．；Ｙａｍａｍｏｔｏ，Ｙ．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  Ｎｏｖｅｌ  ２−Ａｒｙｌ  ＡＩＣＡＲ  Ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，２００４，２７９９−２８０４．
（４３）  （ａ）Ｂｏｒｃｈａｒｄｔ，Ｒ．Ｔ．；Ｈｕｂｅｒ，Ｊ．Ａ．；Ｗｕ，Ｙ．Ｓ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，１９７６，４１，５６５−５６７．（ｂ）ｖａｎ  Ｔｉｌｂｕｒｇ，Ｅ．Ｗ．；ｖｏｎ  Ｆｒｉｊｔａｇ  Ｄｒａｂｂｅ  Ｋｕｎｚｅｌ，Ｊ．Ｋ．；ｄｅ  Ｇｒｏｏｔｅ，Ｍ．；Ｖｏｌｌｉｎｇａ，Ｒ．Ｃ．；Ｌｏｒｅｎｚｅｎ，Å．；ＩＪｚｅｒｍａｎ，Ａ．Ｐ．Ｎ６，５’−Ｄｉｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ  Ａｄｅｎｏｓｉｎｅ  ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ  ａｓ  Ｐａｒｔｉａｌ  Ａｇｏｎｉｓｔｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｈｕｍａｎ  Ａｄｅｎｏｓｉｎｅ  Å３  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，１９９９，４２，１３９３−１４００．
（４４）  Ｇａｎｉ，Ｄ．；Ｊｏｈｎｓｏｎ，Ａ．Ｗ．Ｔｈｅ  Ｂａｓｅ−Ｓｕｇａｒ  Ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｃｅｒｔａｉｎ  Ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ  ｏｆ  Ａｄｅｎｏｓｉｎｅ．Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｐｅｒｋｉｎ  Ｔｒａｎｓ．１，１９８２，１１９７−１２０４．
（４５）  Ｋｕｈｎ，Ｒ．；Ｊａｈｎ，Ｗ．Ｖｏｍ  Ａｄｅｎｏｓｉｎ  ａｂｇｅｌｅｉｔｅｔｅ  Ｔｈｉｏａｔｈｅｒ  ｕｎｄ  Ｓ−Ｏｘｉｄｅ，Ｃｈｅｍ．Ｂｅｒ．，１９６５，９８，１６９９−１７０４．
【０２２１】
（４６）  Ｓｃｈｍｉｄｔ，Ｒ．Ｒ．；Ｓｃｈｌｏｚ，Ｕ．；Ｓｃｈｗｉｌｌｅ，Ｄ．Ｓｙｎｔｈｅｓｅ  ５’−ｍｏｄｉｆｉｚｉｅｒｔｅｒ  Ａｄｅｎｏｓｉｎｄｅｒｉｖａｔｅ．Ｃｈｅｍ．Ｂｅｒ．，１９６８，１０１，５９０−５９４．
（４７）  Ｍｉｎｎｉｃｋ，Ａ．Ａ．；Ｋｅｎｙｏｎ，Ｇ．Ｌ．Ｇｅｎｅｒａｌ  Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  Ａｐｐｒｏａｃｈ  ｔｏ  Ｓｔａｂｌｅ  Ｎｉｔｒｏｇｅｎ  Ａｎａｌｏｇｓ  ｏｆ  Ｓ−Ａｄｅｎｏｓｙｌｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，１９８８，５３，４９５２−４９６１．
（４８）  Ｋｈｏｍｕｔｏｖ，Ａ．Ｒ．；Ｖｅｐｓａｌａｉｎｅｎ，Ｊ．Ｊ．；Ｓｈｖｅｔｓｏｖ，Ａ．Ｓ．；Ｈｙｖｏｎｅｎ，Ｔ．；Ｋｅｉｎａｎｅｎ，Ｔ．Ａ．；Ｐｕｓｔｏｂａｅｖ，Ｖ．Ｎ．；Ｅｌｏｒａｎｔａ，Ｔ．Ｏ．；Ｋｈｏｍｕｔｏｖ，Ｒ．Ｍ．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  Ｈｙｄｒｏｘｙｌａｍｉｎｅ  Ａｎａｌｏｇｕｅｓ  ｏｆ  Ｐｏｌｙａｍｉｎｅｓ．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，１９９６，５２，１３７５１−１３７６６．
（４９）  Ｗｅｂｂ，Ｒ．Ｒ．；Ｋａｎｅｋｏ，Ｔ．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  １−（ａｍｉｎｏｏｘｙ）−４−［（３−ｎｉｔｒｏ−２−ｐｙｒｉｄｙｌ）ｄｉｔｈｉｏ］ｂｕｔａｎｅ  ａｎｄ  １−（Ａｍｉｎｏｏｘｙ）−４−［３−ｎｉｔｒｏ−２−ｐｙｒｉｄｙｌ）ｄｉｔｈｉｏ］ｂｕｔ−２−ｅｎｅ，Ｎｏｖｅｌ  Ｈｅｔｅｒｏｂｉｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｃｒｏｓｓ−Ｌｉｎｋｉｎｇ  Ｒｅａｇｅｎｔｓ．Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．，１９９０，１，９６−９９．
（５０）  Ｋｕｃｚｎｉｅｒｚ，Ｒ；Ｇｒａｍｓ，Ｆ．；Ｌｅｉｎｅｒｔ，Ｈ．；Ｍａｒｚｅｎｅｌｌ，Ｋ．；Ｅｎｇｈ，Ｒ．Ａ．；ｖｏｎ  ｄｅｒ  Ｓａａｌ，Ｗ．Ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏ−ｉｓｏｑｕｉｎｏｌｉｎｅ−Ｂａｓｅｄ  Ｆａｃｔｏｒ  Ｘａ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，１９９８，４１，４９８３−４９９４．
【０２２２】
（５１）  Ｐａｎｋａｓｋｉｅ，Ｍ．；Ａｂｄｅｌ−Ｍｏｎｅｍ，Ｍ．Ｍ．Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｏｆ  Ｐｏｌｙａｍｉｎｅ  Ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ．８．Ｉｒｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｍａｍｍａｌｉａｎ  Ｓ−Ａｄｅｎｏｓｙｌ−Ｌ−ｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ  Ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ  ｂｙ  Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ  Ａｎａｌｏｇｕｅｓ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，１９８０，２３，１２１−１２７．
（５２）  Ｔａｖａｌｅ，Ｓ．Ｓ．；Ｓｏｂｅｌｌ，Ｈ．Ｍ．Ｃｒｙｓｔａｌ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ｏｆ  ８−Ｂｒｏｍｏｇｕａｎｏｓｉｎｅ  ａｎｄ  ８−Ｂｒｏｍｏａｄｅｎｏｓｉｎｅ，Ｔｗｏ  Ｐｕｒｉｎｅ  Ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｓｙｎ  Ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ．Ｊ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ．，１９７０，４８，１０９−２３．
（５３）  Ｉｋｅｈａｒａ，Ｍ．；Ｕｅｓｕｇｉ，Ｓ．；Ｙｏｓｈｉｄａ，Ｋ．Ｓｔｕｄｉｅｓ  ｏｎ  ｔｈｅ  Ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｐｕｒｉｎｅ  Ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｓ  ａｎｄ  Ｔｈｅｉｒ  ５’−Ｐｈｏｓｐｈａｔｅｓ．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９７２，１１，８３０−６．
（５４）  Ｔａｋｅｎａｋａ，Ｈ．；Ｉｋｅｈａｒａ，Ｍ．；Ｔｏｎｏｍｕｒａ，Ｙ．Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ  Ｂｅｔｗｅｅｎ  Ａｃｔｏｍｙｏｓｉｎ  ａｎｄ  ８−Ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ  ＡＴＰ  Ａｎａｌｏｇｓ．Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ，１９７８，７５，４２２９−３３．
（５５）  Ｓｔｏｌａｒｓｋｉ，Ｒ．；Ｈａｇｂｅｒｇ，Ｃ．Ｅ．；Ｓｈｕｇａｒ，Ｄ．Ｓｔｕｄｉｅｓ  ｏｎ  ｔｈｅ  Ｄｙｎａｍｉｃ  Ｓｙｎ−Ａｎｔｉ  Ｅｑｕｉｌｉｂｒｉｕｍ  ｉｎ  Ｐｕｒｉｎｅ  Ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｓ  ａｎｄ  Ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ  ｗｉｔｈ  ｔｈｅ  Ａｉｄ  ｏｆ  １Ｈ  ａｎｄ  １３Ｃ  ＮＭＲ  Ｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙ．Ｅｕｒ  Ｊ  Ｂｉｏｃｈｅｍ，１９８４，１３８，１８７−９２．
【０２２３】
（５６）  Ｓｅｃｒｉｓｔ，Ｊ．Ａ．，ＩＩＩ．Ｎｅｗ  Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ  Ａｎａｌｏｇｕｅｓ  ａｓ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｏｆ  Ｓ−Ａｄｅｎｏｓｙｌｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ  Ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ．Ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｓ  Ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ，１９８７，６，７３−８４．
（５７）  Ｐｅｇｇ，Ａ．Ｅ．；Ｊｏｎｅｓ，Ｄ．Ｂ．；Ｓｅｃｒｉｓｔ，Ｊ．Ａ．，ＩＩＩ．Ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｏｆ  Ｓ−Ａｄｅｎｏｓｙｌｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ  Ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ  ｏｎ  Ｐｏｌｙａｍｉｎｅ  Ｃｏｎｔｅｎｔ  ａｎｄ  Ｇｒｏｗｔｈ  ｏｆ  Ｌ１２１０  Ｃｅｌｌｓ．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９８８，２７，１４０８−１４１５．
（５８）  Ｋｏｌｂ，Ｍ．；Ｄａｎｚｉｎ，Ｃ．；Ｂａｒｔｈ，Ｊ．；Ｃａｌｖｅｒｉｅ，Ｎ．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ａｎｄ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｌｙ  Ｓｔａｂｌｅ  Ｐｒｏｄｕｃｔ  Ａｎａｌｏｇｕｅｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｒｅａｃｔｉｏｎ  Ｃａｔａｌｙｚｅｄ  Ｂｙ  Ｓ−Ａｄｅｎｏｓｙｌｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ  Ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，１９８２，２５，５５０−５５６．
（５９）  Ｓｉｎｎｏｋｒｏｔ，Ｍ．Ｏ．；Ｖａｌｅｅｖ，Ｅ．Ｆ．；Ｓｈｅｒｒｉｌｌ，Ｃ．Ｄ．Ｅｓｔｉｍａｔｅｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ａｂ  ｉｎｉｔｉｏ  ｌｉｍｉｔ  ｆｏｒ  ｐｉ−ｐｉ  ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ：Ｔｈｅ  ｂｅｎｚｅｎｅ  ｄｉｍｅｒ．Ｊ．Ａｍｅｒ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，２００２，１２４，１０８８７−１０８９３．
【図１Ａ】
2010535202.tif 000018
【図１Ｂ】
2010535202.tif 000019
【図２】
2010535202.tif 000020
【図３】
2010535202.tif 000021
【図４】
2010535202.tif 000022
【図５】
2010535202.tif 000023
【国際調査報告】
2010535202.tif 000024