(57)【要約】（１）腫瘍細胞で発現するインテグリンのアンタゴニストと、（２）腫瘍集積性テトラピロール光増感剤、蛍光染料、及び放射線同位体標識された部分のうち少なくとも１つ、とのコンジュゲートである化合物であって、前記放射同位体が１１Ｃ、１８Ｆ、６４Ｃｕ、１２４Ｉ、９９Ｔｃ、１１１Ｉｎ又はＧｄＩＩＩである化合物、並びに、腫瘍など過剰増殖組織を診断、撮影及び治療するための前記化合物の使用方法。好ましくは、前記光増感剤は、ポルフィリン、クロリン又はバクテリオクロリンなどの腫瘍集積性テトラピロール光増感剤であり、フェオホルビド及びピロフェオホルビドが例として挙げられる。そのようなコンジュゲートは、極端な腫瘍親和性を有し、光吸収により腫瘍を抑制又は完全に破壊するために用いられ得る。前記インテグリンは通常αｖβ３、α５β１、αｖβ５、α４β１又はα２β１である。好ましくは、前記アンタゴニストはＲＧＤペプチド、又は４−［｛２−（３，４，５，６−テトラ−ヒドロピリミジン−２−イルアミノ）エチルオキシ｝−ベンゾイル］アミノ−２−（Ｓ）−アミノ−エチル−スルホニルアミノ基などの合成物質であってもよいその他のアンタゴニストである。そのような化合物は腫瘍親和性及び造影能力を提供するため、選択的且つ鮮明な腫瘍イメージングが可能となる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
（１）腫瘍細胞で発現するインテグリンに対するアンタゴニスト、及び（２）腫瘍集積性テトラピロール光増感剤、蛍光染料及び元素Ｘのうち少なくとも１つ、のコンジュゲートを有する化合物であって、前記Ｘが、Ｚｎ、Ｉｎ、Ｇａ、Ａｌ若しくはＣｕからなる群から選択される部分を有する金属、又は放射同位体標識された部分であり、前記放射同位体が11Ｃ、18Ｆ、64Ｃｕ、124Ｉ、99Ｔｃ、111Ｉｎ及びＧｄＩＩＩからなる群から選択される、化合物。
【請求項２】
腫瘍細胞で発現するインテグリンに対するアンタゴニストと結合した腫瘍集積性テトラピロール光増感剤化合物を有することを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
前記光増感剤が、フェオホルビド及びピロフェオホルビドを含む、ポルフィリン、クロリン又はバクテリオクロリンであることを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
前記インテグリンがαｖβ３、α５β１、αｖβ５、α４β１又はα２β１インテグリンであることを特徴とする、請求項２に記載の化合物。
【請求項５】
前記インテグリンがαｖβ３、α５β１、αｖβ５、α４β１又はα２β１インテグリンであることを特徴とする、請求項３に記載の化合物。
【請求項６】
前記アンタゴニストがＲＧＤペプチドであることを特徴とする、請求項２に記載の化合物。
【請求項７】
前記アンタゴニストが、４−［｛２−（３，４，５，６−テトラ−ヒドロピリミジン−２−イルアミノ）エチルオキシ｝ベンゾイル］アミノ−２−（Ｓ）−アミノエチル−スルホニルアミノ基を有することを特徴とする、請求項２に記載の化合物。
【請求項８】
前記インテグリンがαｖβ３であることを特徴とする、請求項６に記載の化合物。
【請求項９】
前記インテグリンがαｖβ３であることを特徴とする、請求項７に記載の化合物。
【請求項１０】
以下の構造式を有する、請求項１に記載の化合物、前記化合物とＸとの複合体、又は、その多核複合体：
【化１】
2010539163.tif 000018
式中、Ｒ1は−ＣＨ＝ＣＨ2、−ＣＨ2ＣＨ3、−ＣＨＯ、−ＣＯＯＨ、又は
【化２】
2010539163.tif 000019
であり、
Ｒ9は−ＯＲ10であり、ここで、Ｒ10は炭素数１〜８の低級アルキル基、−（ＣＨ2−Ｏ）nＣＨ3、−（ＣＨ2）2ＣＯ2ＣＨ3、−（ＣＨ2）2ＣＯＮＨ−フェニレン−ＣＨ2ＤＴＰＡ、−ＣＨ2ＣＨ2ＣＯＮＨ（ＣＯＮＨ−フェニレン−ＣＨ2ＤＴＰＡ）2、−ＣＨ2Ｒ11、若しくは
【化３】
2010539163.tif 000020
又は蛍光染料部分であり；
Ｒ2、Ｒ2a、Ｒ3、Ｒ3a、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ5a、Ｒ7及びＲ7aはそれぞれ独立して水素原子、低級アルキル基若しくは置換低級アルキル基であり、あるいは隣接する炭素原子上にあるＲ2、Ｒ2a、Ｒ3、Ｒ3a、Ｒ5、Ｒ5a、Ｒ7及びＲ7aのうちの２つが統合して共有結合を形成していてもよく、あるいは同一の炭素原子上にあるＲ2、Ｒ2a、Ｒ3、Ｒ3a、Ｒ5、Ｒ5a、Ｒ7及びＲ7aのうちの２つが二価のペンダント基と二重結合を形成していてもよく；Ｒ2及びＲ3が共に、酸素原子、窒素原子若しくは硫黄原子を有する５若しくは６員環のヘテロ環を形成してもよく；Ｒ6は−ＣＨ2−、−ＮＲ11−若しくは共有結合であり；Ｒ8は−（ＣＨ2）2ＣＯ2ＣＨ3、−（ＣＨ2）2ＣＯＮＨ−フェニレン−ＣＨ2ＤＴＰＡ、−ＣＨ2ＣＨ2ＣＯＮＨ（ＣＯＮＨ−フェニレン−ＣＨ2ＤＴＰＡ）2、−ＣＨ2Ｒ11、又は
【化４】
2010539163.tif 000021
であり；
Ｒ11は−ＣＨ2ＣＯＮＨ−ＲＧＤ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ、−ＣＨ2ＮＨＣＯ−ＲＧＤ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ、蛍光染料部分、若しくは−ＣＨ2ＣＯＮＨＣＨ2ＣＨ2ＳＯ2ＮＨＣＨ（ＣＯ2）ＣＨ2ＮＨＣＯ−フェニル−ＯＣＨ2ＣＨ2ＮＨ−シクロ−ＣＮＨ（ＣＨ2）3Ｎであり；
ここで、前記化合物は、−ＣＨ2ＣＯＮＨ−ＲＧＤ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ、−ＣＨ2ＮＨＣＯ−ＲＧＤ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ、−ＣＨ2ＣＯＮＨＣＨ2ＣＨ2ＳＯ2ＮＨＣＨ（ＣＯ2）ＣＨ2ＮＨＣＯ−フェニル−ＯＣＨ2ＣＨ2ＮＨ−シクロ−ＣＮＨ（ＣＨ2）3Ｎからなる群から選択される少なくとも１つのインテグリンアンタゴニストを有し、ＸがＺｎ、Ｉｎ、Ｇａ、Ａｌ、Ｃｕからなる群から選択される金属又は放射性同位体標識された部分であって、前記放射性同位体が11Ｃ、18Ｆ、64Ｃｕ、124Ｉ、99Ｔｃ、111Ｉｎ及びＧｄＩＩＩからなる群から選択されることを条件とする。
【請求項１１】
腫瘍細胞で発現するインテグリンに対するアンタゴニストと蛍光染料とのコンジュゲートを有する、請求項１に記載の化合物。
【請求項１２】
前記蛍光染料がインドシアニン染料であることを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
光線力学療法（ＰＤＴ）は、治療部位に照射した長波長の光により活性化した腫瘍局所的光増感剤（ＰＳ）をベースとした有効な局所療法である。現在の光増感剤は高い腫瘍選択性を有しており、細く柔らかい光ファイバーにより体内のほぼどこにでも光が届く。
【０００２】
近年、クロリン、バクテリオクロリン、及びそれらのアナログや誘導体を含む他のポルフィリン系誘導体を含むポルフィリンなどのテトラピロール光増感剤が、疾患の診断及び治療、特に特定の腫瘍や、黄斑変性症などの他の過剰増殖性疾患の診断及び治療に用いるための光力学化合物として優れた有用性を有することが分かった。これらの化合物は、乾癬や乳頭腫症の治療においても有用であると分かった。
【０００３】
そのような誘導体には、前記化合物の二量体や三量体が含まれる。許容される誘導体としては、前記化合物の中心にある４個の窒素を有する１６角のへテロ環がそのまま残っている場合には、前記化合物の環状バリエーションが挙げられる。従って、クロロフィリン、プルプリン、フェオホルビド（ｐｈｅｏｐｈｏｒｂｉｄｅｓ）及びこれらの誘導体は、「ポルフィリン、クロリン、バクテリオクロリン及びそれらの誘導体やアナログ」に含まれる。そのような誘導体には、これらの環状構造上の置換基を変更したもの、例えばピロフェオホルビド（ｐｙｒｏｐｈｅｏｐｈｏｒｂｉｄｅｓ）が含まれる。
【０００４】
この主題について多数の論文が書かれており、例えば以下のものが挙げられる。“Ｕｓｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｃｈｌｏｒｏｐｈｙｌｌ  Ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ  Ｐｕｒｐｕｒｉｎ−１８，  ｆｏｒ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  Ｓｅｎｓｉｔｉｚｅｒｓ  ｆｏｒ  Ｕｓｅ  ｉｎ  Ｐｈｏｔｏｄｙｎａｍｉｃ  Ｔｈｅｒａｐｙ”，Ｌｅｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１９９３，（１９）２３６９−７７；“Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  Ｎｅｗ  Ｂａｃｔｅｒｉｏｃｈｌｏｒｉｎｓ  Ａｎｄ  Ｔｈｅｉｒ  Ａｎｔｉｔｕｍｏｒ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ”，Ｐａｎｄｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔｅｒｓ，１９９２；“Ｐｈｏｔｏｓｅｎｓｉｔｉｚｉｎｇ  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ｏｆ  Ｂａｃｔｅｒｉｏｃｈｌｏｒｏｐｈｙｌｌｉｎ  ａ  ａｎｄ  Ｂａｃｔｅｒｉｏｃｈｌｏｒｉｎ  ａ，  Ｔｗｏ  Ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ  ｏｆ  Ｂａｃｔｅｒｉｏｃｈｌｏｒｏｐｈｙｌｌ  ａ”，Ｂｅｅｍｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈｏｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｐｈｏｔｏｂｉｏｌｏｇｙ，１９８７，ｖ．４６，６３９−６４３；“Ｐｈｏｔｏｒａｄｉａｔｉｏｎ  Ｔｈｅｒａｐｙ．  ＩＩ．  Ｃｕｒｅ  ｏｆ  Ａｎｉｍａｌ  Ｔｕｍｏｒｓ  Ｗｉｔｈ  Ｈｅｍａｔｏｐｏｒｐｈｙｒｉｎ  ａｎｄ  Ｌｉｇｈｔ”，Ｄｏｕｇｈｅｒｔｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｊｕｌｙ  １９７５，ｖ．５５，１１５−１１９；“Ｐｈｏｔｏｄｙｎａｍｉｃ  ｔｈｅｒａｐｙ  ｏｆ  Ｃ３Ｈ  ｍｏｕｓｅ  ｍａｍｍａｒｙ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｗｉｔｈ  ｈｅｍａｔｏｐｏｒｐｈｙｒｉｎ  ｄｉ−ｅｓｔｅｒｓ  ａｓ  ｓｅｎｓｉｔｉｚｅｒｓ”，Ｅｖｅｎｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，１９８７，５５，４８３−４８６；“Ｓｕｂｓｔｉｔｕｅｎｔ  Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｉｎ  Ｔｅｔｒａｐｙｒｒｏｌｅ  Ｓｕｂｕｎｉｔ  Ｒｅａｃｔｉｖｉｔｙ  ａｎｄ  Ｐｉｎａｃｏｌ−Ｐｉｎａｃｏｌｏｎｅ  Ｒｅａｒｒａｎｇｅｍｅｎｔｓ：  ＶＩＣ−Ｄｉｈｙｄｒｏｘｙｃｈｌｏｒｉｎｓ  ａｎｄ  ＶＩＣ−Ｄｉｈｙｄｒｏｘｙｂａｃｔｅｒｉｏｃｈｌｏｒｉｎｓ”Ｐａｎｄｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ，１９９２，ｖ．３３，７８１５−７８１８；“Ｐｈｏｔｏｄｙｎａｍｉｃ  Ｓｅｎｓｉｔｉｚｅｒｓ  ｆｒｏｍ  Ｃｈｌｏｒｏｐｈｙｌｌ：  Ｐｕｒｐｕｒｉｎ−１８  ａｎｄ  Ｃｈｌｏｒｉｎ  ｐ6“，Ｈｏｏｂｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８，ｖ．４８，５７９−５８２；“Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ／Ａｃｔｉｖｉｔｙ  Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓ  Ａｍｏｎｇ  Ｐｈｏｔｏｓｅｎｓｉｔｉｚｅｒｓ  Ｒｅｌａｔｅｄ  ｔｏ  Ｐｈｅｏｐｈｏｒｂｉｄｅｓ  ａｎｄ  Ｂａｃｔｅｒｉｏｐｈｅｏｐｈｏｒｂｉｄｅｓ”，Ｐａｎｄｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ  ａｎｄ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｌｅｔｔｅｒｓ，１９９２，ｖ．２，４９１−４９６；“Ｐｈｏｔｏｄｙｎａｍｉｃ  Ｔｈｅｒａｐｙ  Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ”，Ｐａｎｄｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｏｆ  Ｐｈｏｔｏ−Ｏｐｔｉｃａｌ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｔｉｏｎ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｓ  （ＳＰＩＥ），１９８９，ｖ．１０６５，１６４−１７４；“Ｆａｓｔ  Ａｔｏｍ  Ｂｏｍｂａｒｄｍｅｎｔ  Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒａｌ  Ａｎａｌｙｓｅｓ  ｏｆ  Ｐｈｏｔｏｆｒｉｎ  ＩＩ（登録商標）  ａｎｄ  ｉｔｓ  Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  Ａｎａｌｏｇｓ”，Ｐａｎｄｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ  Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ，１９９０，ｖ．１９，４０５−４１４。
これらの論文は、背景技術として参照することにより本明細書に援用される。
【０００５】
世界中で、この領域における多数の特許出願がこれらの光力学化合物に関してなされ、特許になっている。例えば、参照されることにより本明細書に援用される以下の米国特許に言及してもよい：米国特許番号４，６４９，１５１；米国特許番号４，８６６，１６８；米国特許番号４，８８９，１２９；米国特許番号４，９３２，９３４；米国特許番号４，９６８，７１５；米国特許番号５，００２，９６２；米国特許番号５，０１５，４６３；米国特許番号５，０２８，６２１；米国特許番号５，１４５，８６３；米国特許番号５，１９８，４６０；米国特許番号５，２２５，４３３；米国特許番号５，３１４，９０５；米国特許番号５，４５９，１５９；米国特許番号５，４９８，７１０；及び米国特許番号５，５９１，８４７。
【０００６】
これらの化合物の１つ「フォトフリン（登録商標）」は、米国、カナダ及び日本において使用承認を受けている。これらの化合物の中には、少なくとも制限的に承認を受けている化合物もあり、例えば黄斑変性症の治療に用いられるＢＰＤなどが挙げられる。また、臨床試験中であるか、臨床試験を行うことが検討されている化合物もある。
【０００７】
本明細書で用いられる「ポルフィリン、クロリン及びバクテリオクロリン」とは、上記で述べたように、並びに、背景技術として本明細書に援用される前記論文や特許により記載及び例証されているように、それらの誘導体やアナログを含むことを意図している。
【０００８】
そのような化合物は、肝臓及び脾臓を除いて、大半の正常細胞や正常臓器よりもむしろ腫瘍に特異的に蓄積するという顕著な特徴を有していることが分かっている。また、前記化合物は光により活性化されて腫瘍に対して毒性を示すようになるので、そのような腫瘍の多くを殺すことができる。
【０００９】
そのような化合物は腫瘍細胞に選択的に吸収され、近赤外（ＮＩＲ）吸収付近の選択的波長吸光度の光にさらされると腫瘍細胞を破壊する。また、そのような化合物は前記選択的吸収波長よりも長波長の放射線を放出し、その結果、光が数センチメートルの組織を透過する。従って、散光の伝搬を測定することにより、表面下の組織における光増感剤濃度を感知し定量化することが可能である。
【００１０】
しかしながら、小さな病変、巨大病変、若しくは埋没した病変に関しては、悪性腫瘍を検出すること及び／又は腫瘍に十分に光を当てるために光ファイバーを適切に配置することが難しい可能性がある。従って、腫瘍の可視化、画像誘導による光ファイバーの配置、及びその後のこの病変の光力学的破壊を可能にする、高選択性の光学的且つ放射性核種の腫瘍イメージング（造影）を用いた誘導治療アプローチは、腫瘍の診断と治療において非常に有効であると考えられる。
【００１１】
光学的イメージングは急速に進展している分野である。光造影剤（ｏｐｔｉｃａｌ  ｃｏｎｔｒａｓｔ  ａｇｅｎｔｓ）は、高感度の平面断層画像を提供することが出来る。小動物に関しては、平面画像が適切であるが、蛍光画像の光断層再構成が実現可能になりつつある。
【００１２】
ポルフィリン系光増感剤（ＰＳ）のほとんどは蛍光を発し、ｉｎ  ｖｉｖｏにおけるこれらのポルフィリンの蛍光特性は、肺、膀胱及び様々な他の部位における早期癌を検出するための検査に利用され、治療用の活性光を誘導するのに利用されている。しかしながら、ＰＳは腫瘍検出や治療誘導のための最適な蛍光色素分子（ｆｌｕｏｒｏｐｈｏｒｅｓ）ではない：（１）これらは、シアニン染料と比べると蛍光が弱い。これらは小さなストローク・シフトを有しているため、当該蛍光を励起光から分離するのが困難になる。
【００１３】
ＮＩＲ励起と発光波長を有する蛍光シアニン染料は、高い量子収率、励起係数、及び適切なストークス・シフトを有し得る。これらは高い励起係数と適切なストークス・シフトを有する。発明者らは、光増感剤と結合したそのような化合物を「二機能性剤」（すなわち、腫瘍イメージングと光線治療）として用いることが出来ることを見出した。例えば、同時係属中のＰＣＴ特許出願番号ＰＣＴ／ＵＳ０５／２４７８２を参照することが出来る。
【００１４】
ポジトロン断層法（ｐｏｓｉｔｒｏｎ  ｅｍｉｓｓｉｏｎ  ｔｏｍｏｇｒａｐｈｙ）（ＰＥＴ）は、主に生化学プロセスや循環機能を撮影、分析するのに用いられている。しかしながら、悪性腫瘍を標的とする放射標識ペプチドリガンドを使用することが多くなってきている。利用可能な同位体標識には、11Ｃ（ｔ1/2＝２０．４分）、18Ｆ（ｔ1/2＝１１０分）、64Ｃｕ（ｔ1/2＝１２．８時間）及び124Ｉ（ｔ1/2＝４．２日）が含まれる。標的指向化光増感剤については、腫瘍に当該光増感剤を多く運ぶことができるため、長い循環時間を要求してもよい。発明者らは、Ｉ−１２４標識の光増感剤がＰＥＴイメージング及びＰＤＴに用いられ得ることを示した。例えば、同時係属中の、２００６年２月１４日に出願された米国特許出願番号１１／３５３，６２６を参照することが出来る。
【００１５】
インテグリンは、細胞表面介在性シグナル伝達において重要な役割を担うヘテロ二量体膜貫通接着受容体である。１８種のαサブユニット及び８種のβサブユニットから組み立てられる、２４種以上の異なるインテグリン受容体が特定されている。αｖβ３、α５β１、αｖβ５、α４β１、α２β１は、腫瘍細胞で発現する公知のインテグリンである。本発明に従う例として、インテグリンαｖβ３は、本発明を例証するために用いられ、ＲＧＤペプチド、ＲＧＤ配列（アルギニン（Ａｒｇ）−グリシン（Ｇｌｙ）−アスパラギン酸（Ａｓｐ）のトリアミノ酸配列）を有する小さなペプチドと結合する。ＲＧＤ配列を有する１０個以上のアミノ酸などのより長い配列が用いられてもよく、そのようなペプチド全てを本明細書においてＲＧＤペプチドと呼ぶこととする。非ペプチドのアンタゴニスト又はリガンドの例としては、４−［｛２−（３，４，５，６−テトラヒドロピリミジン−２−イルアミノ）エチルオキシ｝−ベンゾイル］アミノ−２−（Ｓ）−アミノエチルスルホニルアミノ基（ＴＨＰＡＢ基）を有する化合物が用いられる。腫瘍細胞で発現するそのようなインテグリンの例として、我々はまず最初に特異的な受容体であるインテグリンαｖβ３に焦点を当てている。インテグリンαｖβ３は、腫瘍細胞（３）において高発現すること及びＲＧＤペプチドと結合することが知られている。
【００１６】
Ｔ−Ｃｏｆｆｅｅ及びＣｌｕｓｔａｌＷ多配列アラインメントプログラムを用いて行われた、様々な生物（ヒト、マウス、雄牛、鶏、蛙、ゼブラフィッシュ）由来のインテグリンαｖサブユニットの配列分析では、特に哺乳類の中において高い保存性が示されている。様々な生物（ヒト、マウス、ラット、鶏、蛙、ゼブラフィッシュ）由来のインテグリンβ３サブユニットの配列分析からも類似した結果が観察されている。関係するリガンドが結合する残基の厳格な保存性が明確に観察されている。
【００１７】
インテグリンの三次元構造に関し、いくつかの結晶構造がＰＤＢで入手できる。インテグリンβ３サブユニットに関しては、インテグリンβ３−タリンのキメラ複合体（１ＭＫ７，１ＭＫ９）の結晶構造、インテグリンβ３の細胞質ドメイン（１Ｓ４Ｘ）のＮＭＲ構造、並びに、インテグリンαＩＩｂβ３受容体の結晶構造（１ＴＸＶ，１ＴＹ３，１ＴＹ５，１ＴＹ６，１ＴＹ７，１ＴＹＥ）及びＮＭＲ構造（１Ｍ８Ｏ）が存在する。インテグリンαｖβ３系に関しては、インテグリンαｖβ３（１ＪＶ２）の細胞外ドメインの構造、並びに、それとＭｎ２＋との複合体（１Ｍ１Ｘ）及びＲＧＤリガンドとの複合体（１Ｌ５Ｇ）の構造が入手できる。また、近年、βサブユニット構造のＮ末端のＰＳＩ（プレキシン−セマフォリン−インテグリン）ドメインが、αｖβ３受容体（１Ｕ８Ｃ）の構成の中で報告された。我々は、αｖβ３及びαＩＩｂβ３の全体構造の対比較を行った。それによると、イオン結合残基の保存が明確に示されている。
【００１８】
インテグリンαｖβ３ＲＧＤペプチド複合体の結晶構造を慎重に調査した。ＲＧＤペプチドは、αｖサブユニットとβ３サブユニットの界面で結合するが、この界面においては、３個のＭｎカチオンが関与する相互作用の複雑なネットワークがＲＧＤのＡｓｐ残基の認識に重要な役割を果たしている（図１、２参照）。
【００１９】
インテグリンは、接着機能及びシグナル伝達機能の両方を有する細胞膜受容体の主要グループである。インテグリンは、周囲の細胞外マトリックスと相互作用することにより腫瘍細胞の性質に影響を与え、腫瘍成長に関与する。インテグリンの発現増加は悪性度の上昇と関連がある。αｖβ３の有意な過剰発現が、結腸癌、肺癌、膵臓癌及び乳癌で報告されており、インテグリンの発現は、腫瘍転移のない患者の腫瘍よりも腫瘍転移のある患者の腫瘍において有意に高かった。
【００２０】
下記の文献は、背景技術として本明細書に援用される。
（１）  Ｙｉｈｕｉ  Ｃｈｅｎ，Ａｍｙ  Ｇｒｙｓｈｕｋ，Ｓａｍｕｅｌ  Ａｃｈｉｌｅｆｕ，Ｔｙｍｉｓｈ  Ｏｈｕｌｃｈａｎｓｋｙ，Ｗｉｌｌｉａｍ  Ｐｏｔｔｅｒ，Ｔｕｏｘｉｕ  Ｚｈｏｎｇ，Ｊａｎｅｔ  Ｍｏｒｇａｎ，Ｂｒｉｔｔｏｎ  Ｃｈａｎｃｅ，Ｐａｒａｓ  Ｎ．Ｐｒａｓａｄ，Ｂａｒｂａｒａ  Ｗ．Ｈｅｎｄｅｒｓｏｎ，Ａｌｌａｎ  Ｏｓｅｒｏｆｆ及びＲａｖｉｎｄｒａ  Ｋ．Ｐａｎｄｅｙ，“Ａ  Ｎｏｖｅｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ  ｔｏ  ａ  Ｂｉｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｐｈｏｔｏｓｅｎｔｉｚｅｒ  ｆｏｒ  Ｔｕｍｏｒ  Ｉｍａｇｉｎｇ  ａｎｄ  Ｐｈｏｔｏｔｈｅｒａｐｙ”，  Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００５，１６，１２６４−１２７４。
（２）  Ｓｕｒｅｓｈ  Ｋ．Ｐａｎｄｅｙ，Ａｍｙ  Ｌ．Ｇｒｙｓｈｕｋ，Ｍｕｎａｗｗａｒ  Ｓａｊｊａｄ，Ｘｉａｎｇ  Ｚｈｅｎｇ，Ｙｉｈｕｉ  Ｃｈｅｎ，Ｍｏｈｅｉ  Ｍ．Ａｂｏｕｚｅｉｄ，Ｊａｎｅｔ  Ｍｏｒｇａｎ，Ｉｖａｎ  Ｃｈａｒａｍｉｓｉｎａｕ，Ｈａｎｉ  Ａ．Ｎａｂｉ，Ａｌｌａｎ  Ｏｓｅｒｏｆｆ及びＲａｖｉｎｄｒａ  Ｋ．Ｐａｎｄｅｙ，“Ｍｕｌｔｉｏｍｏｄａｌｉｔｙ  Ａｇｅｎｔｓ  ｆｏｒ  Ｔｕｍｏｒ  Ｉｍａｇｉｎｇ  （ＰＥＴ，  Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ）  ａｎｄ  Ｐｈｏｔｏｄｙｎａｍｉｃ  Ｔｈｅｒａｐｙ：  Ａ  Ｐｏｓｓｉｂｌｅ  Ｓｅｅ  ａｎｄ  Ｔｒｅａｔ  Ａｐｐｒｏａｃｈ”，Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．２００５，４８，６２８６−６２９５。
（３）  Ｘｉａｏｙｕａｎ  Ｃ．ｅｔ  ａｌ．，“Ｉｎｔｅｇｒｉｎ  ａｖｂ３−Ｔａｒｇｅｔｅｄ  Ｉｍａｇｉｎｇ  ｏｆ  Ｌｕｎｇ  Ｃａｎｃｅｒ”，Ｎｅｏｐｌａｓｉａ，２００５，７，２７１−２７９．；Ｙｉｈｕｉ  Ｃｈｅｎ，Ａｍｙ  Ｇｒｙｓｈｕｋ，Ｓａｍｕｅｌ  Ａｃｈｉｌｅｆｕ，Ｔｙｍｉｓｈ  Ｏｈｕｌｃｈａｎｓｋｙ，Ｗｉｌｌｉａｍ  Ｐｏｔｔｅｒ，Ｔｕｏｘｉｕ  Ｚｈｏｎｇ，Ｊａｎｅｔ  Ｍｏｒｇａｎ，Ｂｒｉｔｔｏｎ  Ｃｈａｎｃｅ，Ｐａｒａｓ  Ｎ．Ｐｒａｓａｄ，Ｂａｒｂａｒａ  Ｗ．Ｈｅｎｄｅｒｓｏｎ，Ａｌｌａｎ  Ｏｓｅｒｏｆｆ及びＲａｖｉｎｄｒａ  Ｋ．Ｐａｎｄｅｙ，“Ａ  Ｎｏｖｅｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ  ｔｏ  ａ  Ｂｉｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｐｈｏｔｏｓｅｎｔｉｚｅｒ  ｆｏｒ  Ｔｕｍｏｒ  Ｉｍａｇｉｎｇ  ａｎｄ  Ｐｈｏｔｏｔｈｅｒａｐｙ”，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００５，１６，１２６４−１２７４。
（４）  Ｓｕｒｅｓｈ  Ｋ．Ｐａｎｄｅｙ，Ａｍｙ  Ｌ．Ｇｒｙｓｈｕｋ，Ｍｕｎａｗｗａｒ  Ｓａｊｊａｄ，Ｘｉａｎｇ  Ｚｈｅｎｇ，Ｙｉｈｕｉ  Ｃｈｅｎ，Ｍｏｈｅｉ  Ｍ．Ａｂｏｕｚｅｉｄ，Ｊａｎｅｔ  Ｍｏｒｇａｎ，Ｉｖａｎ  Ｃｈａｒａｍｉｓｉｎａｕ，Ｈａｎｉ  Ａ．Ｎａｂｉ，Ａｌｌａｎ  Ｏｓｅｒｏｆｆ及びＲａｖｉｎｄｒａ  Ｋ．Ｐａｎｄｅｙ，“Ｍｕｌｔｉｏｍｏｄａｌｉｔｙ  Ａｇｅｎｔｓ  ｆｏｒ  Ｔｕｍｏｒ  Ｉｍａｇｉｎｇ  （ＰＥＴ，  Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ）  ａｎｄ  Ｐｈｏｔｏｄｙｎａｍｉｃ  Ｔｈｅｒａｐｙ：  Ａ  Ｐｏｓｓｉｂｌｅ  Ｓｅｅ  ａｎｄ  Ｔｒｅａｔ  Ａｐｐｒｏａｃｈ”，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００５，４８，６２８６−６２９５。
（５）  Ｘｉａｏｙｕａｎ  Ｃ．ｅｔ  ａｌ．，“Ｉｎｔｅｇｒｉｎ  ａｖｂ３−Ｔａｒｇｅｔｅｄ  Ｉｍａｇｉｎｇ  ｏｆ  Ｌｕｎｇ  Ｃａｎｃｅｒ”，Ｎｅｏｐｌａｓｉａ，２００５，７，２７１−２７９。
【図面の簡単な説明】
【００２１】
【図１】図１は、インテグリンＲＧＤペプチド複合体の結晶構造を示す。平らな矢印はβ鎖を示し、円筒はαへリックスを示す。白色は、αｖサブユニット、及び例えばフェオホルビド及びピロフェオホルビドなどのポルフィリン、クロリン又はバクテリオクロリンに用いられており、灰色はβ３サブユニットに用いられている。インテグリンＲＧＤペプチド、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｎ−メチルＶａｌは、球棒図中に示されるαｖサブユニットとβ３サブユニットの間に位置している。ＭｎイオンはＲＧＤペプチド付近に位置し、球で示されている。
【００２２】
【図２】図２はＡｓｐがどのようにβ３サブユニット由来の残基及びβ３サブユニットに埋め込まれたＭｎイオンと相互作用するかを示す図である。特に、中央のＭｎイオンはＡｓｐの側鎖（ＣＯＯ−）基と直接配位結合する。次に、このＭｎイオンはＳｅｒ１２１、Ｓｅｒ１２３及びＧｌｕ２２０により配位結合する。次に、これらの残基は、β３サブユニットの他の残基と別途に配位結合を形成している他の２個のＭｎイオンと配位結合する。ＲＧＤペプチドのＡｓｐ側鎖はＡｓｎ２１５とも直接相互作用する。３個のＭｎイオンが関与するこの相互作用ネットワークは非常に重要な安定化要因であるように思われる。
【発明の概要】
【００２３】
本発明は、以下の（１）と（２）とのコンジュゲート（複合体、抱合体）である化合物、並びに、腫瘍、及び黄斑変性症において見られるようなその他の制御不能な増殖組織などの過剰増殖組織を診断、撮影（イメージ）及び／又は治療するための前記化合物の使用方法である。
（１）腫瘍細胞で発現するインテグリンのアンタゴニスト。
（２）蛍光染料、元素Ｘと複合体（ｃｏｍｐｌｅｘ）を形成していてもよい腫瘍集積性テトラピロール光増感剤のうち、少なくとも１つ（ここで、ＸはＺｎ、Ｉｎ、Ｇａ、Ａｌ若しくはＣｕからなる群から選択される金属、又は放射性同位体標識された部分であって、前記放射性同位体が11Ｃ、18Ｆ、64Ｃｕ、124Ｉ、99Ｔｃ、111Ｉｎ及びＧｄＩＩＩからなる群から選択されるものである）。
【００２４】
好ましい実施態様において、前記化合物は、腫瘍細胞で発現するインテグリンのアンタゴニストと結合（抱合）した腫瘍集積性テトラピロール光増感剤化合物である。そのような化合物は、極端な腫瘍親和性（集積性）を有し、光吸収により腫瘍を抑制又は完全に破壊するために用いられ得る。前記テトラピロール光増感剤は通常、フェオホルビド及びピロフェオホルビドを含むポルフィリン、クロリン又はバクテリオクロリンであり、前記インテグリンは通常、αｖβ３、α５β１、αｖβ５、α４β１、又はα２β１インテグリンである。
【００２５】
好ましい実施態様において、前記アンタゴニストは、ＲＧＤペプチドや、４−［｛２−（３，４，５，６−テトラ−ヒドロピリミジン−２−イルアミノ）エチルオキシ｝−ベンゾイル］アミノ−２−（Ｓ）−アミノエチル−スルホニルアミノ基などの合成物質であってもよい他のアンタゴニストである。前記インテグリンはαｖβ３が最も一般的である。
【００２６】
前記アンタゴニストは、蛍光染料などのイメージング（造影）化合物や元素Ｘを有する構造と結合してもよく、ここで、ＸはＺｎ、Ｉｎ、Ｇａ、Ａｌ若しくはＣｕからなる群から選択される金属又は放射性同位体標識された部分であって、前記放射性同位体は11Ｃ、18Ｆ、64Ｃｕ、124Ｉ、99Ｔｃ、111Ｉｎからなる群から選択される。そのような化合物は腫瘍集積性及び造影能力を提供するため、選択的且つ鮮明な腫瘍イメージングが可能となる。
【００２７】
本発明の目的としては以下のものが挙げられる。
１．αｖβ３標的特異的な光増感剤を製造するための効果的な合成方法：
（ａ）ＲＧＤの結合（抱合）した光増感剤
（ｂ）インテグリンに対するアンタゴニストの結合した光増感剤
２．ＲＧＤペプチドを有する／有さないマルチモーダル剤（光増感剤−シアニン染料コンジュゲート）
３．標的特異的なＰＥＴ／蛍光イメージング剤（造影剤）。
【００２８】
［発明の詳細な説明］
上記で述べたように、本発明は、（１）腫瘍細胞で発現するインテグリンのアンタゴニストと、（２）蛍光染料、及び元素Ｘと複合体（ｃｏｍｐｌｅｘ）を形成していてもよい腫瘍集積性テトラピロール光増感剤の少なくとも１つ、とのコンジュゲートである化合物（ここで、ＸはＺｎ、Ｉｎ、Ｇａ、Ａｌ若しくはＣｕからなる群から選択される金属、又は放射性同位体標識された部分であって、前記放射性同位体は11Ｃ、18Ｆ、64Ｃｕ、124Ｉ、99Ｔｃ、111Ｉｎ及びＧｄＩＩＩからなる群から選択される）、並びに、腫瘍やその他の制御不能な増殖組織、例えば黄斑変性症において見られるような制御不能な増殖組織を、診断、撮影及び／又は治療するための前記化合物の使用方法である。
【００２９】
テトラピロール光増感剤が存在する場合には、通常、前記化合物は、以下の構造式、それとＸとの複合体、及びその多核複合体（ｐｏｌｙｎｕｃｌｉｄｅ  ｃｏｍｐｌｅｘｅｓ）を有する。
【００３０】
【化１】
2010539163.tif 000002
式中、Ｒ1は−ＣＨ＝ＣＨ2、−ＣＨ2ＣＨ3、−ＣＨＯ、−ＣＯＯＨ、又は、
【化２】
2010539163.tif 000003
であり、
Ｒ9は−ＯＲ10であり、Ｒ10は炭素数１〜８の低級アルキル基、−（ＣＨ2−Ｏ）nＣＨ3、−（ＣＨ2）2ＣＯ2ＣＨ3、−（ＣＨ2）2ＣＯＮＨ−フェニレン−ＣＨ2ＤＴＰＡ、
−ＣＨ2ＣＨ2ＣＯＮＨ（ＣＯＮＨ−フェニレン−ＣＨ2ＤＴＰＡ）2、−ＣＨ2Ｒ11、若しくは、
【化３】
2010539163.tif 000004
又は蛍光染料部分であり；
Ｒ2、Ｒ2a、Ｒ3、Ｒ3a、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ5a、Ｒ7及びＲ7aはそれぞれ独立して水素原子、低級アルキル基若しくは置換低級アルキル基であり、あるいは隣接する炭素原子間にあるＲ2、Ｒ2a、Ｒ3、Ｒ3a、Ｒ5、Ｒ5a、Ｒ7及びＲ7aのうちの２つが統合して共有結合を形成していてもよく、あるいは同一の炭素原子上にあるＲ2、Ｒ2a、Ｒ3、Ｒ3a、Ｒ5、Ｒ5a、Ｒ7及びＲ7aのうちの２つが二価のペンダント基と二重結合を形成していてもよく；Ｒ2及びＲ3が共に、酸素原子、窒素原子若しくは硫黄原子を有する５若しくは６員環のヘテロ環を形成してもよく；Ｒ6は−ＣＨ2−、−ＮＲ11−若しくは共有結合であり；Ｒ8は−（ＣＨ2）2ＣＯ2ＣＨ3、−（ＣＨ2）2ＣＯＮＨ−フェニレン−ＣＨ2ＤＴＰＡ、−ＣＨ2ＣＨ2ＣＯＮＨ（ＣＯＮＨ−フェニレン−ＣＨ2ＤＴＰＡ）2、−ＣＨ2Ｒ11、又は、
【化４】
2010539163.tif 000005
であり、
Ｒ11は、−ＣＨ2ＣＯＮＨ−ＲＧＤ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ、−ＣＨ2ＮＨＣＯ−ＲＧＤ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ、蛍光染料部分、若しくは−ＣＨ2ＣＯＮＨＣＨ2ＣＨ2ＳＯ2ＮＨＣＨ（ＣＯ2）ＣＨ2ＮＨＣＯ−フェニル−ＯＣＨ2ＣＨ2ＮＨ−シクロ−ＣＮＨ（ＣＨ2）3Ｎである。
ここで、前記化合物は、−ＣＨ2ＣＯＮＨ−ＲＧＤ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ、−ＣＨ2ＮＨＣＯ−ＲＧＤ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ、−ＣＨ2ＣＯＮＨＣＨ2ＣＨ2ＳＯ2ＮＨＣＨ（ＣＯ2）ＣＨ2ＮＨＣＯ−フェニル−ＯＣＨ2ＣＨ2ＮＨ−シクロ−ＣＮＨ（ＣＨ2）3Ｎからなる群から選択される少なくとも１つのインテグリンアンタゴニストを有し、ＸがＺｎ、Ｉｎ、Ｇａ、Ａｌ、Ｃｕからなる群から選択される金属又は放射性同位体標識された部分であって、前記放射性同位体が11Ｃ、18Ｆ、64Ｃｕ、124Ｉ、99Ｔｃ、111Ｉｎ及びＧｄＩＩＩからなる群から選択されることを条件とする。
【００３１】
Ｘとの複合体は、単に前記化合物を塩化物などのＸの塩とともに加熱することにより容易に製造される。前記複合体は、存在するときには、−ＤＴＰＡ部分のキレートとして若しくはアミン構造の窒素原子間のテトラピロール構造中に、又はその両方に生ずるであろう。そのような構造の例としては、以下のものが挙げられる。
【００３２】
【化５】
2010539163.tif 000006
式中、Ｍは２Ｈであるか、又は
ＭはＩｎ、Ｃｕ、Ｇａ（放射性同位元素を有していてもいなくてもよい）である。
【００３３】
【化６】
2010539163.tif 000007
式中、Ｍは２Ｈであるか、又は
ＭはＩｎ、Ｃｕ、Ｇａ（放射性同位元素を有していてもいなくてもよい）である。
ここで、Ｘ＝Ｍである。
【００３４】
蛍光染料がインテグリンアンタゴニスト（リガンドであることが多い）と抱合（結合）している例において、前記蛍光染料は、８００から約９００ｎｍの波長で前記コンジュゲート（抱合体、複合体）に選択的に蛍光を発させるいかなる非毒性染料であってもよい。例えば、インドシアニン染料が挙げられる。通常そのような染料は、共役二重結合、芳香族炭素環、共鳴へテロ環、又はそれらの組み合わせの中間共鳴構造によって共に結合された少なくとも２つの共鳴環構造、これは発色団であることが多いが、を有している。
【００３５】
そのような染料の例には、２個のインドール又は改変されたインドール環構造が、上記のように中間共鳴構造によってそれぞれ３1炭素原子及び２1炭素原子で共に結合したビスインドール染料が含まれる。そのような染料は一般にトリカルボシアニン（ｔｒｉｃａｒｂｏｃｌｙａｎｉｎｅ）染料として知られている。ほとんどの場合、そのような染料は、前記染料を水溶性にする１個以上、通常は２個以上の親水性の置換基を有する。そのような水溶性は、該構造が生物及びその細胞構造の中に入り込むのを促進し、脂肪組織に蓄積されにくく体内から素早く取り除かれるため毒性の可能性を減らす。通常、前記中間共鳴構造は、通常共役二重結合である多数の二重結合性炭素原子を有し、不飽和カルボン酸環又はヘテロ環を有していてもよい。そのような環は、前記中間構造の共鳴を著しく妨げることなくポルフィリンや他の構造との結合を可能にする。好ましい染料はインドシアニングリーンである。
【００３６】
放射性同位体がインテグリンアンタゴニストと組み合わされる場合、共有結合若しくは半イオン結合により化学的に結合してもよく、前記化合物中にキレートを形成してもよい。そのような例において、前記化合物はＤＴＰＡなどの公知のキレート構造を有することが多い。
【実施例】
【００３７】
［１７2（１７5−Ｎ−ｔ−Ｂｕ−エチレン−ジアミド−）ピロフェオホルビド−ａ（下記式２）の製造］
【００３８】
【化７】
2010539163.tif 000008
【００３９】
文献の手順に従って、スピルリナ（ｓｐｉｒｏｌｉｎａ）藻類からピロフェオホルビド−ａカルボン酸１（２００ｍｇ）を得た。それを乾燥ジクロロメタン（ＤＣＭ）（５ｍＬ）に溶解し、窒素雰囲気下でこの溶液にトリエチルアミン（０．３ｍＬ）、Ｂｏｃで保護したジエチルアミン（６６．６μＬ）及びＢＯＰ（１４６ｍｇ）を順に添加した。排気（２〜３回）した後に、この反応混合液を窒素雰囲気下、室温で一晩攪拌した。この反応混合液を濃縮して、シリカ上でクロマトグラフィーを行い（溶離剤：ジクロロメタン中の４％メタノール）、所望の化合物２を主要生成物として分離した。収率９０％。ＮＭＲ（ＡＭＸ４００）：（ＣＤＣｌ3，δｐｐｍ）：９．３５，９．１５及び８．５０（各々のｓ，１Ｈ，メソＨ）；７．８０（ｍ，１Ｈ，ＣＨ＝ＣＨ2）；６．２５，６．１（各々のｄ，１Ｈ，ＣＨ−ＣＨ2）；５．２２（ｄｄ，２Ｈ，−ＣＨ2エキソ環（ｅｘｏｃｙｃｌｉｃ  ｒｉｎｇ）））；４．４１（ｑ，１Ｈ，１８Ｈ）；４．２８（ｄ，１Ｈ，１７Ｈ）；３．７５（ｑ，２Ｈ，ＣＨ2−ＣＨ3）；３．６２，３．４，３．２５（各々のｓ，３Ｈ，環ＣＨ3），２．８−２．０（いくつかのｍ，ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＯ−ＮＨ−ＣＨ2−ＣＨ2−ＮＨ）；１．２（ｓ，９Ｈ，Ｂｏｃ）。
【００４０】
［ピロフェオホルビド−シクロ（Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｌ−Ｐｈｅ）コンジュゲートの製造］
【００４１】
【化８】
2010539163.tif 000009
【００４２】
ピロフェオホルビド（前記式２）を９０％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）で処理してＢｏｃ基を除去した。回転蒸発器（ｒｏｔａｅｖａｐｏｒａｔｏｒ）を用いてＴＦＡを除去し、上記式３の化合物を次の反応のために高真空下で乾燥した。上記式３の化合物（１５ｍｇ）を乾燥ＤＣＭに溶解し、この溶液に、窒素雰囲気下でシクロ（Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｌ−Ｐｈｅ）（２０ｍｇ）とＥＤＣＩ（１２ｍｇ）を添加した。この反応混合液を窒素雰囲気下、室温で一晩攪拌した。この反応混合液を濃縮し、用意したシリカプレート上でクロマトグラフィーを行った（溶離剤：ジクロロメタン中の１０％メタノール）。分離した化合物を更に９０％ＴＦＡ／ＤＣＭで３〜４時間処理して、所望のピロフェオホルビド（上記式４）を得た。ＴＦＡを蒸発させて、前記化合物をＣ−１８カラムを用いてＨＰＬＣで更に精製した（溶離剤：９０％メタノール水溶液〜１００％メタノール水溶液のグラジエント、流速０．５ｍＬ／ｍｉｎ）。収量１０ｍｇ。質量：ｍ／ｚ＝１１６１（Ｍ＋Ｈ）+。
【００４３】
［メソ−プルプリンイミド（下記式６）の製造］
【００４４】
【化９】
2010539163.tif 000010
【００４５】
メソ−プルプリンイミド（６０ｍｇ）及びＢｏｃで保護されたジエチルアミン（２．２４ｇ）を最少量のＤＣＭに溶解し、その反応混合液を窒素雰囲気下、室温で４８時間攪拌した。ＵＶ−ＶＩＳの結果、吸光度が６８５ｎｍから６５１ｎｍに完全にシフトした。この反応混合液に、用意したばかりのジアゾメタン（２００〜４００ｍｇ）を添加し、その反応をＴＬＣ（ＤＣＭ中の５％メタノール）でモニターした。１０分後、ＵＶ−ＶＩＳの結果、６５１ｎｍのピークが完全に消失し、６９５ｎｍの生成物ピークが現れた。その反応混合液を２％の酢酸水溶液ですぐに洗浄した後、水で３回洗浄した。該化合物をＮａ2ＮＯ4で乾燥、濃縮してシリカ上でクロマトグラフィーを行った（溶離剤：ジクロロメタン中の２〜３％メタノール）。分離した化合物を９０％ＴＦＡ／ＤＣＭで３〜４時間更に処理し、ＴＦＡを回転蒸発して所望の化合物（上記式６）を主要生成物として得た。収率９０％。ＮＭＲ（ＡＭＸ４００）：９．５４（ｓ，１Ｈ，１０Ｈ）；９．１６（ｓ，１Ｈ，５Ｈ）；８．４（ｓ，１Ｈ，２０Ｈ）；５．３４（ｍ，１Ｈ，１７Ｈ），４．６７（ｍ，２Ｈ，Ｎ−ＣＨ2），４．３４（ｑ，１Ｈ，１８Ｈ），３．７８，３．５８，３．２３，３．１５（各々，３Ｈ，１２ＣＨ3，１７2ＣＨ3，２ＣＨ3，７ＣＨ3），３．７４（ｑ，２Ｈ，８’ＣＨ2），３．６０５（ＣＨ2−ＣＨ3），２．７１（ｍ，１Ｈ，１×１７2Ｈ），２．４０２（ｍ，２Ｈ，２×１７1Ｈ），２．０（ｍ，１Ｈ，１７2Ｈ），１．７６（ｄ，３Ｈ，１８ＣＨ3），１．７−１．６４（８Ｈ，８2ＣＨ2−ＣＨ3，３ＣＨ2−ＣＨ3，Ｎ−ＣＨ2−ＣＨ2−ＮＨ2），０．１１−．１（２Ｈ，各々のｓ，−ＮＨ）。
【００４６】
［メソ−プルプリンイミド−シクロ（Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｌ−Ｐｈｅ）コンジュゲート（下記式８）の製造］
【００４７】
【化１０】
2010539163.tif 000011
【００４８】
メソ−プルプリンイミド（上記式６）（１７ｍｇ）を乾燥ＤＣＭに溶解し、この溶液に、窒素雰囲気下でシクロ（Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｌ−Ｐｈｅ）（２０ｍｇ）とＥＤＣＩ（１２ｍｇ）を添加した。この反応混合液を窒素雰囲気下、室温で一晩攪拌した。この反応混合液を濃縮し、用意したシリカプレート上でクロマトグラフィーを行った（溶離剤：ジクロロメタン中の１０％メタノール）。その分離した化合物を９０％ＴＦＡ／ＤＣＭで３〜４時間更に処理し、所望のメソ−プルプリンイミド−シクロ（Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｌ−Ｐｈｅ）コンジュゲート（上記式８）を得た。ＴＦＡを回転蒸発し、前記化合物を高真空下で乾燥した。収量１９ｍｇ。質量：ｍ／ｚ＝１２０７（Ｍ＋Ｈ）+。
【００４９】
［ピロフェオホルビド−シクロ（Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ）コンジュゲート（下記式８）の製造］
【００５０】
【化１１】
2010539163.tif 000012
【００５１】
文献の手順に従って、スピルリナ（ｓｐｉｒｏｌｉｎａ）藻類からピロフェオホルビド−ａカルボン酸（上記式７）（２００ｍｇ）を得た。上記式７の化合物（１４ｍｇ）を乾燥ＤＣＭに溶解し、この溶液に、窒素雰囲気下でシクロ（Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ）（２０ｍｇ）、ＥＤＣＩ（１２ｍｇ）及びＤＭＡＰ（１２ｍｇ）を添加した。この反応混合液を窒素雰囲気下、室温で一晩攪拌した。この反応混合液を濃縮し、用意したシリカプレート上でクロマトグラフィーを行った（溶離剤：ジクロロメタン中の１０％メタノール）。分離した化合物を９０％ＴＦＡ／ＤＣＭで３〜４時間更に処理し、固体生成物をメタノールで洗浄して、所望のピロフェオホルビド−シクロ（Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ）コンジュゲート（上記式８）を得た。ＴＦＡを回転蒸発し、前記化合物を真空下で乾燥した。収量１０ｍｇ。質量：ｍ／ｚ＝１１１９．６（Ｍ＋Ｈ）+。
【００５２】
［メソ−プルプリンイミド−グリシンエステル（下記式１０）の製造］
【００５３】
【化１２】
2010539163.tif 000013
【００５４】
５８ｍｇのプルプリン−１８を最少量のトルエンに溶解し、この溶液にグリシン−ｔ−ＢｕエステルのＨＣｌ塩、１０〜１５滴のトリエチルアミンを添加し、反応液を窒素雰囲気下で還流した。３時間後、ＵＶ−ＶＩＳの結果、出発物質の６９６ｎｍのピークが完全に消失し、７０５ｎｍの新たなピークが現れた。この反応混合物を濃縮し、シリカ上でクロマトグラフィーを行った（溶離剤：ジクロロメタンの２％メタノール）。所望のメソ−プルプリンイミド−グリシンエステル（上記式１０）を主要生成物として分離した。収率９０％。ＮＭＲ（ＡＭＸ４００）：９．６４（ｓ，１Ｈ，１０Ｈ），９．３９（ｓ，１Ｈ，１５Ｈ），８．５８（ｓ，１Ｈ，２０Ｈ），７．８４（ｄ，１Ｈ，３ＣＨ−ＣＨ2），６．１６（ｄ，１Ｈ，３ＣＨ＝ＣＨ2），５．４（ｍ，１Ｈ，１７Ｈ），４．４６（ｍ，２Ｈ，Ｎ−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＯ2Ｈ），４．３１（ｑ，１Ｈ，１８Ｈ），３．８４（ｓ，３Ｈ，７ＣＨ3）；２．６８及び２．３９（各々のｍ，１Ｈ＋２Ｈ，２×１７1Ｈ）；１．９９（ｍ，１Ｈ，１×１７2Ｈ）；１．７４（ｄ，３Ｈ，１８ＣＨ3），１．６４（ｔ，３Ｈ，８2ＣＨ3）；０．０７及び−０．１６（各々のｂｒ，１Ｈ，２ＮＨ）。
【００５５】
［メソ−プルプリンイミド−グリシン−シクロ（Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ）コンジュゲート（下記式１２）の製造］
【００５６】
【化１３】
2010539163.tif 000014
【００５７】
メソ−プルプリンイミド−グリシンエステル（前記式１０）（１７ｍｇ）を乾燥ＤＣＭに溶解し、この溶液に窒素雰囲気下で、シクロ（Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ）（２０ｍｇ）、ＥＤＣＩ（１２ｍｇ）及びＤＭＡＰ（１２ｍｇ）を添加した。この反応混合液を窒素雰囲気下、室温で一晩攪拌した。反応混合液を濃縮し、固体粉末をメタノールで洗浄した。分離した化合物を９０％ＴＦＡ／ＤＣＭで３〜４時間更に処理して、所望のメソ−プルプリンイミド−グリシン−シクロ（Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ）コンジュゲート（上記式１２）を得た。ＴＦＡを回転蒸発し、メタノールで洗浄し、真空下で乾燥した。収量：２０ｍｇ。質量：ｍ／ｚ＝１２２０（Ｍ＋Ｈ）+。
【００５８】
［モノ−Ｉ−シパート（Ｃｙｐａｔｅ）の製造］
【００５９】
【化１４】
2010539163.tif 000015
【００６０】
シパート（上記式１３）（２６０ｍｇ、０．４ｍＭ）を乾燥ＤＭＦ（１０〜１５ｍＬ）に溶解し、この溶液に窒素雰囲気下、ｍ−Ｉ−ベンジルアミン（９２ｍｇ、０．４ｍＭ）、ＥＤＣＩ（９２ｍｇ、０．４８ｍＭ）及びＨｏＢｔ（６４．７５ｍｇ、０．４８ｍＭ）を添加した。この反応混合液を窒素雰囲気下、室温で一晩攪拌した。一晩反応させた後、ＤＭＦを高真空下で除去し、この反応混合液をブライン（塩水）（３回）及び水（３回）で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥して濃縮した。メタノール／ＤＣＭを溶離剤として用いて、Ｓｉカラム上で精製を行った。収量：５７ｍｇ（１７％）。質量：ｍ／ｚ＝８３９（Ｍ＋Ｈ）+。ＮＭＲ（ＡＭＸ４００）：７．２５−８．０３（ｍ，１６Ｈ，芳香族），６．２８−６．８０（ｍ，４Ｈ，−ＣＨ），２．４７−３．０（ｍ，１０Ｈ，ＣＨ2），１．８８（ｓ，１２Ｈ，ＣＨ3）。
【００６１】
［モノ−Ｉ−シパート−シクロ（Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ）コンジュゲート（下記式１６）の製造］
【００６２】
【化１５】
2010539163.tif 000016
【００６３】
モノ−Ｉ−シパート（３０ｍｇ）を乾燥ＤＣＭに溶解し、この溶液に窒素雰囲気下で、シクロ（Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ）（２０ｍｇ）、ＥＤＣＩ（１２ｍｇ）及びＤＭＡＰ（１２ｍｇ）を添加した。この反応混合液を窒素雰囲気下、室温で一晩攪拌した。一晩攪拌した後、反応混合液を濃縮し、用意したシリカプレート上でクロマトグラフィーを行った（溶離剤：ジクロロメタン中の１３％メタノール）。分離した化合物を９０％ＴＦＡ／ＤＣＭで３〜４時間更に処理し、油性の生成物をＨＰＬＣで更に分析、精製した（Ｗａｔｅｒｓ社製、９９６光ダイオードアレイ検出器を有するＤｅｌｔａ６００）。Ａｎａ．カラム：Ｗａｔｅｒｓ社製Ｓｙｍｍ−Ｃ−８１、４．６×１５０ｍｍ、５μ：Ｓｅｍｉｐｒｅｐカラム：Ｗａｔｅｒｓ社製Ｓｙｍｍ−Ｃ−１８、７．８×１５０ｍｍ、７μ：溶離剤としてアセトニトリル／水（グラジエント：３０％〜１００％ＡＣＮ）を用いた。その結果、所望のモノ−Ｉ−シパート−シクロ（Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ）コンジュゲート（下記式１６）を得た。収量：２４ｍｇ。質量：ｍ／ｚ＝１４２４（Ｍ＋Ｈ）+。
【００６４】
［ピロ−ＩＡ（メチルエステル）（１９）］
窒素雰囲気下で、無水ＤＭＦ（５．０ｍＬ）中のメチル３−［４−｛２−（３，４，５，６−テトラヒドロピリミジン−２−イルアミノ）エチルオキシ｝−ベンゾイル］アミノ−２−（Ｓ）−アミノエチルスルホニルアミノプロピオナート（１７）（４７ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）とピロカルボン酸（１８）（６０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）の溶液に、ＰｙＢＯＰ（６５ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）と無水トリエチルアミン（０．３ｍＬ）を添加した。得られた反応混合液を室温で一晩攪拌した。その後、反応混合液を回転蒸発して乾燥し、最初にｐｒｅｐシリカＴＬＣプレートで（溶離剤：ＣＨ2Ｃｌ2中の１０％メタノール）、次にショートシリカカラム（溶離剤：ＣＨ2Ｃｌ2中の８％メタノール）で粗反応混合液を精製した後、所望の生成物（１９）を得た。収量：５０ｍｇ（５０％）。
【００６５】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3中の１０％ＣＤ3ＯＤ；４００ＭＨｚ）：δ９．３９，９．２８及び８．５６（全てのｓ，１Ｈ，メソ−Ｈ）；７．９５（ｄｄ，Ｊ＝１１．４，１８．２，１Ｈ，３−ビニル）；７．７３（ｄ，Ｊ＝８．８，２Ｈ，ＡｒＨ）；６．８４（ｄ，Ｊ＝８．８，２Ｈ，ＡｒＨ）；６．２８（ｄ，Ｊ＝１７．６，１Ｈ，３−ビニル）；６．１８（ｄ，Ｊ＝１１．６，１Ｈ，３−ｖｉｎｙｌ）；５．２６（ｄ，Ｊ＝２０，１Ｈ，１３2−ＣＨ2）；５．０６（ｄ，Ｊ＝２０，１Ｈ，１３2−ＣＨ2）；４．５１（ｍ，１Ｈ，１８−Ｈ）；４．３０−４．２０（ｍ，２Ｈ，ＣＨ及び１７−Ｈ）；４．００（ｔ，Ｊ＝５．０，２Ｈ，ＯＣＨ2）；３．８５（ｍ，１Ｈ，ＣＯＮＨＣＨ2）；３．６７（ｓ，３Ｈ，環ＣＨ3）；３．６２（ｍ，２Ｈ，８−ＣＨ2ＣＨ3）；３．６０（ｍ，１Ｈ，ＣＯＮＨＣＨ2）；３．５８（ｓ，３Ｈ，ＯＣＨ3）；３．４２（ｔ，Ｊ＝５．０，２Ｈ，ＳＯ2ＣＨ2）；３．３８（ｓ，３Ｈ，環ＣＨ3）；３．３７−３．３１（ｍ，６Ｈ，３×ＮＨＣＨ2）；３．１９（ｓ，３Ｈ，環ＣＨ3）；３．１４（ｍ，２Ｈ，３×ＮＣＨ2）；２．６６，２．４５，２．２８，２．２０（全てのｍ，４Ｈ，１７1及び１７2−Ｈ）；１．９３（ｔ，Ｊ＝５．６，２Ｈ，ＣＨ2）；１．８０（ｄ，Ｊ＝７．２，３Ｈ，１８−ＣＨ3）；１．６８（ｔ，Ｊ＝７．８，３Ｈ，８−ＣＨ2ＣＨ3）。Ｃ52Ｈ62Ｎ10Ｏ8Ｓの質量：９８６．４５（Ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ）；９８６．６（Ｆｏｕｎｄ，Ｍ+）。
【００６６】
［ピロ−インテグリンアンタゴニスト−ＩＡ（２０）］
乾燥ＴＨＦ（１０ｍＬ）中のピロ−ＩＡ（メチルエステル）（１９）（４０ｍｇ）の溶液に、アルゴン雰囲気下、ＬｉＯＨ（水（５ｍＬ）とメタノール（４ｍＬ）中に８０ｍｇ）の溶液を添加し、この反応混合液を４５分間攪拌した。その後、カチオン交換樹脂を用いて反応を慎重に中和した。樹脂を濾過して取り除き、反応混合液を回転蒸発して乾燥した。生成物を精製するために更に何かを行うことはなかった。
【００６７】
収量：３５ｍｇ（９０％）。1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3中の２５％ＣＤ3ＯＤ；４００ＭＨｚ）：δ９．３９，９．２８及び８．５６（全てのｓ，１Ｈ，メソ−Ｈ）；７．９５（ｄｄ，Ｊ＝１１．４，１８．２，１Ｈ，３−ビニル）；７．７３（ｄ，Ｊ＝８．８，２Ｈ，ＡｒＨ）；６．８４（ｄ，Ｊ＝８．８，２Ｈ，ＡｒＨ）；６．２８（ｄ，Ｊ＝１７．６，１Ｈ，３−ビニル）；６．１８（ｄ，Ｊ＝１１．６，１Ｈ，３−ビニル）；５．２６（ｄ，Ｊ＝２０，１Ｈ，１３2−ＣＨ2）；５．０６（ｄ，Ｊ＝２０，１Ｈ，１３2−ＣＨ2）；４．５１（ｍ，１Ｈ，１８−Ｈ）；４．３０−４．２０（ｍ，２Ｈ，ＣＨ及び１７−Ｈ）；４．００（ｔ，Ｊ＝５．０，２Ｈ，ＯＣＨ2）；３．８５（ｍ，１Ｈ，ＣＯＮＨＣＨ2）；３．６７（ｓ，３Ｈ，環ＣＨ3）；３．６２（ｍ，２Ｈ，８−ＣＨ2ＣＨ3）；３．６０（ｍ，１Ｈ，ＣＯＮＨＣＨ2）；３．４２（ｔ，Ｊ＝５．０，２Ｈ，ＳＯ2ＣＨ2）；３．３８（ｓ，３Ｈ，環ＣＨ3）；３．３７−３．３１（ｍ，６Ｈ，３×ＮＨＣＨ2）；３．１９（ｓ，３Ｈ，環ＣＨ3）；３．１４（ｍ，２Ｈ，３×ＮＣＨ2）；２．６６，２．４５，２．２８，２．２０（全てのｍ，４Ｈ，１７1及び１７2−Ｈ）；１．９３（ｔ，Ｊ＝５．６，２Ｈ，ＣＨ2）；１．８０（ｄ，Ｊ＝７．２，３Ｈ，１８−ＣＨ3）；１．６８（ｔ，Ｊ＝７．８，３Ｈ，８−ＣＨ2ＣＨ3）。Ｃ52Ｈ62Ｎ10Ｏ8Ｓの質量：９７２．４（Ｃａｌｕｃｕｌａｔｅｄ）；９７２．６（Ｆｏｕｎｄ，Ｍ+）。
【００６８】
［プルプリンイミド−Ｇｌｙ−ＩＡ（メチルエステル）（２２）］
窒素雰囲気下で、無水ＤＭＦ（３．０ｍＬ）中のメチル３−［４−｛２−（３，４，５，６−テトラヒドロピリミジン−２−イルアミノ）エチルオキシ｝−ベンゾイル］アミノ−２−（Ｓ）−アミノエチルスルホニルアミノプロピオナート（１７）（２０ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）とグリシンプルプリンイミド（２１）（２０ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ）の溶液に、ＰｙＢＯＰ（２０ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）と無水トリエチルアミン（０．１ｍＬ）を添加した。得られた反応混合液を室温で一晩攪拌した。その後、反応混合液を回転蒸発して乾燥し、最初にｐｒｅｐシリカＴＬＣプレートで（溶離剤：ＣＨ2Ｃｌ2中の１０％メタノール）、次にショートシリカカラムで（溶離剤：ＣＨ2Ｃｌ2中の８％メタノール）粗反応混合液を精製した後、所望の生成物（２２）を得た。収量：１５ｍｇ（４５％）。
【００６９】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3中の１０％ＣＤ3ＯＤ；４００ＭＨｚ）：δ９．０７，８．９４及び８．５８（全てのｓ，１Ｈ，メソ−Ｈ）；７．８２（ｄｄ，Ｊ＝１１．４，１８．２，１Ｈ，３−ビニル）；７．７０（ｄ，Ｊ＝８．８，２Ｈ，ＡｒＨ）；６．７５（ｄ，Ｊ＝８．８，２Ｈ，ＡｒＨ）；６．２６（ｄ，Ｊ＝１７．６，１Ｈ，３−ビニル）；６．１６（ｄ，Ｊ＝１１．６，１Ｈ，３−ビニル）；５．２５（ｄ，Ｊ＝７．２，１Ｈ，１７−Ｈ）；５．１０（ｄｄ，Ｊ＝８．６，１６．０，２Ｈ，ＮＣＨ2）；４．４２（ｄｄ，Ｊ＝４．４，７．６，１Ｈ，ＣＨ）；４．３５（ｑ，Ｊ＝６．８，１Ｈ，１８−Ｈ）；３．８９（ｍ，２Ｈ，ＯＣＨ2）；３．８５（ｍ，１Ｈ，ＣＯＮＨＣＨ2）；３．８０（ｍ，２Ｈ，ＮＨＣＨ2）；３．７２，３．５２，３．３６，３．３３及び２．８５（全てのｓ，全ての３Ｈ，３×環ＣＨ3及び２×ＯＣＨ3について）；３．６７（ｍ，１Ｈ，ＣＯＮＨＣＨ2）；３．３５（ｍ，４Ｈ，２×ＮＨＣＨ2）；３．２６（ｍ，４Ｈ，８−ＣＨ2ＣＨ3及びＳＯ2ＣＨ2）；３．１５（ｍ，２Ｈ，ＮＣＨ2）；３．６２（ｍ，２Ｈ，８−ＣＨ2ＣＨ3）；２．６８，２．３８，１．９８（全てのｍ，４Ｈ，１７1及び１７2−Ｈ）；１．８３（ｔ，Ｊ＝５．６，２Ｈ，ＣＨ2）；１．８０（ｄ，Ｊ＝７．２，３Ｈ，１８−ＣＨ3）；１．４１（ｔ，Ｊ＝７．８，３Ｈ，８−ＣＨ2ＣＨ3）。Ｃ55Ｈ65Ｎ11Ｏ11Ｓの質量：１０８７．４６（Ｃａｌｕｃｕｌａｔｅｄ）；１０８７．８（Ｆｏｕｎｄ，Ｍ+）。
【００７０】
［プルプリンイミド−Ｇｌｙ−ＩＡ（２３）］
【００７１】
【化１６】
2010539163.tif 000017
【００７２】
乾燥ＴＨＦ（７ｍＬ）中のプルプリンイミド−Ｇｌｙ−ＩＡ（メチルエステル）（２２）（１５ｍｇ）の溶液に、アルゴン雰囲気下、ＬｉＯＨ（水（４ｍＬ）とメタノール（３ｍＬ）中に３０ｍｇ）の溶液を添加し、この反応混合液を４５分間攪拌した。その後、カチオン交換樹脂を用いて反応を慎重に中和した。樹脂を濾過して取り除き、反応混合液を回転蒸発して乾燥した。生成物を精製するために更に何かを行うことはなかった。収量：１２ｍｇ（８５％）。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3中の２５％ＣＤ3ＯＤ；４００ＭＨｚ）：δ９．０７，８．９４及び８．５８（全てのｓ，１Ｈ，メソ−Ｈ）；７．８２（ｄｄ，Ｊ＝１１．４，１８．２，１Ｈ，３−ビニル）；７．７０（ｄ，Ｊ＝８．８，２Ｈ，ＡｒＨ）；６．７５（ｄ，Ｊ＝８．８，２Ｈ，ＡｒＨ）；６．２６（ｄ，Ｊ＝１７．６，１Ｈ，３−ビニル）；６．１６（ｄ，Ｊ＝１１．６，１Ｈ，３−ビニル）；５．２５（ｄ，Ｊ＝７．２，１Ｈ，１７−Ｈ）；５．１０（ｄｄ，Ｊ＝８．６，１６．０，２Ｈ，ＮＣＨ2）；４．４２（ｄｄ，Ｊ＝４．４，７．６，１Ｈ，ＣＨ）；４．３５（ｑ，Ｊ＝６．８，１Ｈ，１８−Ｈ）；３．８９（ｍ，２Ｈ，ＯＣＨ2）；３．８５（ｍ，１Ｈ，ＣＯＮＨＣＨ2）；３．８０（ｍ，２Ｈ，ＮＨＣＨ2）；３．３６，３．３３，２．８５（全てのｓ，全ての３Ｈ，３×環ＣＨ3について）；３．６７（ｍ，１Ｈ，ＣＯＮＨＣＨ2）；３．３５（ｍ，４Ｈ，２×ＮＨＣＨ2）；３．２６（ｍ，４Ｈ，８−ＣＨ2ＣＨ3及びＳＯ2ＣＨ2）；３．１５（ｍ，２Ｈ，ＮＣＨ2）；３．６２（ｍ，２Ｈ，８−ＣＨ2ＣＨ3）；２．６８，２．３８，１．９８（全てのｍ，４Ｈ，１７1及び１７2−Ｈ）；１．８３（ｔ，Ｊ＝５．６，２Ｈ，ＣＨ2）；１．８０（ｄ，Ｊ＝７．２，３Ｈ，１８−ＣＨ3）；１．４１（ｔ，Ｊ＝７．８，３Ｈ，８−ＣＨ2ＣＨ3）。Ｃ55Ｈ65Ｎ11Ｏ11Ｓの質量：１０５９．４３（Ｃａｌｕｃｕｌａｔｅｄ）；１０５９．８（Ｆｏｕｎｄ，Ｍ+）。
【図１】
2010539163.tif 000022
【図２】
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【国際調査報告】
2010539163.tif 000024