(57)【要約】  前駆体は、液体の混合によるペースト状の骨置換材料の調製のために使用される。前駆体は、水の、または水溶液の作用により膨潤性の、それによりヒドロゲルを形成する、生体適合性物質；および骨置換材料として適切である物質から作製される固体粒子を含む。膨潤性物質は１８μｍ〜２０００μｍの範囲に平均次元を有する離散性粒子の形態にある。
2010512864.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
液体の混合によるペースト状の骨置換材料の調製のための前駆体であって、該前駆体は、以下
ａ）水の、または水溶液の作用により膨潤性の、それによりヒドロゲルを形成する、生体適合性物質；および
ｂ）骨置換材料として適切である物質から作製される固体粒子、を含み、ここで
ｃ）該膨潤性物質は１８μｍ〜２０００μｍの範囲に平均次元を有する離散性粒子の形態にある、前駆体。
【請求項２】
前記前駆体が、少なくとも前記膨潤性物質の湿潤オートクレーブ、およびその後の乾燥により得られた、請求項１に記載の前駆体。
【請求項３】
前記固体粒子が、セラミックまたは鉱物性の性質である、請求項１または２に記載の前駆体。
【請求項４】
前記固体粒子がカルシウムを含む、請求項１〜３のいずれかに記載の前駆体。
【請求項５】
前記固体粒子が、鉱物質を除かれるか、または精製された骨材料に基づく、請求項１または２に記載の前駆体。
【請求項６】
前記固体粒子が、ポリマーの性質であり、好ましくは、ポリ乳酸（ＰＬＡ）またはポリグリコール酸（ＰＧＡ）である、請求項１〜５のいずれかに記載の前駆体。
【請求項７】
前記固体粒子がバイオガラスに基づく、請求項１〜６のいずれかに記載の前駆体。
【請求項８】
前記膨潤性物質の前記離散性粒子が、５よりも小さい、好ましくは２よりも小さい球形度Ｓを有する、請求項１〜７のいずれかに記載の前駆体。
【請求項９】
前記固体粒子および前記膨潤性物質が混合物として存在する、請求項１〜８のいずれかに記載の前駆体。
【請求項１０】
前記膨潤性物質が粉末化形態にある、請求項１〜９のいずれかに記載の前駆体。
【請求項１１】
前記膨潤性物質の前記離散性粒子が少なくとも１８μｍ、好ましくは少なくとも５０μｍの平均直径を有する、請求項１〜１０のいずれかに記載の前駆体。
【請求項１２】
前記膨潤性物質の前記離散性粒子が２０００μｍ未満、好ましくは１０００μｍ未満の平均直径を有する、請求項１〜１１のいずれかに記載の前駆体。
【請求項１３】
オートクレーブが、前記膨潤性物質のＭＷの最少３０％の減少を導く、請求項１〜１２のいずれかに記載の前駆体。
【請求項１４】
オートクレーブが、前記膨潤性物質のＭＷの最大７０％の減少を導く、請求項１〜１３のいずれかに記載の前駆体。
【請求項１５】
オートクレーブが１１０°〜１４０℃、好ましくは１２１°〜１２８℃の範囲の温度にて行われる、請求項１〜１４のいずれかに記載の前駆体。
【請求項１６】
前記乾燥が、乾燥空気、減圧、凍結乾燥、および／または乾燥剤の作用により得られる、請求項１〜１５のいずれかに記載の前駆体。
【請求項１７】
前記前駆体の１０５℃での乾燥の際の喪失が、５％よりも小さい、好ましくは２％よりも小さい、請求項１〜１６のいずれかに記載の前駆体。
【請求項１８】
前記膨潤性物質が、ポリアミノ酸またはその誘導体、好ましくはポリリジンまたはゼラチンを含む、請求項１〜１７のいずれかに記載の前駆体。
【請求項１９】
請求項１〜１７のいずれかに記載の前駆体であって、前記膨潤性物質が以下の成分：
ａ）多糖およびそれらの誘導体、好ましくはグリコサミノグリカンもしくはアルギン酸塩；ｂ）ポリリピド（ｐｏｌｙｌｉｐｉｄ）、脂肪酸、およびそれらの誘導体；ｃ）ヌクレオチドおよびそれらの誘導体；ｄ）ポリメチレンオキシドもしくはその誘導体；ｅ）ポリエチレン、ポリエチレンオキシド、もしくはそれらの誘導体；ｆ）ポリプロピレン、ポリプロピレンオキシド、もしくはそれらの誘導体；ｇ）ポリアクリル酸塩もしくはその誘導体、またはａ）〜ｇ）において列挙されるような成分の組み合わせの１つを含む、前駆体。
【請求項２０】
前記膨潤性物質が、グリコサミノグリカンもしくはプロテオグリカンのいずれか、またはこれらの２つの物質の混合物を含む、請求項１〜１９のいずれかに記載の前駆体。
【請求項２１】
前記グリコサミノグリカンが、ヒアルロン酸、コンドロイチン硫酸、デルマタン硫酸、ヘパラン硫酸、へパリン、またはケラタン硫酸である、請求項２０に記載の前駆体。
【請求項２２】
前記膨潤性物質がヒアルロン酸またはヒアルロン酸ナトリウムである、請求項１〜２１のいずれかに記載の前駆体。
【請求項２３】
前記膨潤性物質が生物学的起源である、請求項１〜２２のいずれかに記載の前駆体。
【請求項２４】
前記膨潤性物質が完全に合成起源である、請求項１〜２３のいずれかに記載の前駆体。
【請求項２５】
前記膨潤性物質が生物工学的に作製された物質を含む、請求項１〜２４のいずれかに記載の前駆体。
【請求項２６】
前記膨潤性物質のＭＷが−滅菌後に−３００’０００ダルトンよりも大きく、および好ましくは５００’０００ダルトンよりも大きい、請求項１〜２５のいずれかに記載の前駆体。
【請求項２７】
前記膨潤性物質のＭＷが１’０００’０００ダルトンよりも大きく、および好ましくは１’５００’０００ダルトンよりも大きい、請求項１〜２６のいずれかに記載の前駆体。
【請求項２８】
膨潤性物質が、滅菌前に、２．０、好ましくは２．５ｍ３／ｋｇよりも大きい固有粘度を有する、請求項１〜２７のいずれかに記載の前駆体。
【請求項２９】
膨潤性物質が、滅菌後に、少なくとも１．３ｍ３／ｋｇ、好ましくは少なくとも１．４ｍ３／ｋｇの固有粘度を有する、請求項１〜２８のいずれかに記載の前駆体。
【請求項３０】
固有粘度の少なくとも８０％が、混合の開始後５分以内に、好ましくは２分以内に達成される、請求項２９に記載の前駆体。
【請求項３１】
骨代謝に対して活性な効果を有する任意の薬物、好ましくは骨誘導性物質、骨粗鬆症に対する薬物、または抗菌薬をさらに含む、請求項１〜３０のいずれかに記載の前駆体。
【請求項３２】
前記固体粒子が少なくとも部分的に多孔性の構造を有する、請求項１〜３１のいずれかに記載の前駆体。
【請求項３３】
前記固体粒子の孔の大きさが１０ナノメートルと５００マイクロメートルとの間にある、請求項３２に記載の前駆体。
【請求項３４】
前記固体粒子の多孔率が６０と９０パーセントとの間、好ましくは６８と８４パーセントとの間である、請求項３２または３３に記載の前駆体。
【請求項３５】
前記固体粒子の平均直径が、１００と５００マイクロメートルとの間である、請求項１〜３４に記載の前駆体。
【請求項３６】
前記固体粒子が、１．０と２．０との間のＣａ／Ｐモル関係により特徴づけられるリン酸カルシウムを含む、請求項１〜３５のいずれかに記載の前駆体。
【請求項３７】
前記固体粒子が、１．４５と１．５２との間のＣａ／Ｐモル関係により特徴づけられるリン酸カルシウムを含む、請求項１〜３６のいずれかに記載の前駆体。
【請求項３８】
請求項３６または３７のいずれかに記載の前駆体であって、ここで前記リン酸カルシウムが、以下の群：リン酸二カルシウム−二水和物（ＣａＨＰＯ４×２Ｈ２Ｏ）、リン酸二カルシウム（ＣａＨＰＯ４）、α−リン酸三カルシウム（α−Ｃａ３（ＰＯ４）２）、β−リン酸三カルシウム（β−Ｃａ３（ＰＯ４）２）、カルシウム欠乏ヒドロキシアパタイト（Ｃａ９（ＰＯ４）５（ＨＰＯ４）ＯＨ）、ヒドロキシアパタイト（Ｃａ１０（ＰＯ４）６ＯＨ）２）、炭酸アパタイト（Ｃａ１０（ＰＯ４）３（ＣＯ３）３（ＯＨ）２）、フルオロアパタイト（Ｃａ１０（ＰＯ４）６（Ｆ，ＯＨ）２）、クロロアパタイト（Ｃａ１０（ＰＯ４）６（Ｃｌ，ＯＨ）２）、ウイットロッカイト（ｗｈｉｔｌｏｃｋｉｔｅ）（（Ｃａ，Ｍｇ）３（ＰＯ４）２）、リン酸テトラカルシウム（Ｃａ４（ＰＯ４）２Ｏ）、オキシアパタイト（Ｃａ１０（ＰＯ４）６Ｏ）、β−ピロリン酸カルシウム（β−Ｃａ２（Ｐ２Ｏ７）、α−ピロリン酸カルシウム、γ−ピロリン酸カルシウム、およびリン酸オクトカルシウム（Ｃａ８Ｈ２（ＰＯ４）６×５Ｈ２Ｏ）から選択され、それによって全ての上述のリン酸カルシウムは、Ｎａ、Ｃｌ、Ｆ、Ｓ、Ｃ、Ｓｒ、Ｍｇ、Ｚｎ、Ｓｉ、Ｆｅ、Ｌｉ、Ｋ、またはＡｇのような元素でドープされ得る、前駆体。
【請求項３９】
前記固体粒子が異なるリン酸カルシウムの混合物を含む、請求項１〜３８のいずれかに記載の前駆体。
【請求項４０】
前記固体粒子が、硫酸カルシウム、好ましくは以下の群：無水物−ＣａＳＯ４、半水和物−ＣａＳＯ４・１／２Ｈ２Ｏ、二水和物−ＣａＳＯ４・２Ｈ２Ｏ、およびそれらの多形体から選択される、を含む、請求項１〜３９のいずれかに記載の前駆体。
【請求項４１】
前記固体粒子が、炭酸カルシウムの異なる多形体である方解石、アラゴナイト、またはバテライトを含む、請求項１〜４０のいずれかに記載の前駆体。
【請求項４２】
前記固体粒子が異なるリン酸カルシウム、硫酸カルシウム、炭酸カルシウム、および／またはカルシウム含有バイオガラスの混合物を含む、請求項１〜４１のいずれかに記載の前駆体。
【請求項４３】
前記固体粒子の比重が、０．５と１．０ｇ／ｃｃｍとの間である、請求項１〜４２のいずれかに記載の前駆体。
【請求項４４】
前記固体粒子が、非球面形状を有する、請求項１〜４３のいずれかに記載の前駆体。
【請求項４５】
前記固体粒子が、０．０１ｍ２／ｇよりも大きい、好ましくは０．１ｍ２／ｇよりも大きい比表面積（ＳＳＡ）を有する、請求項１〜４４のいずれかに記載の前駆体。
【請求項４６】
前記固体粒子が、５ｍ２／ｇよりも大きい、好ましくは５０ｍ２／ｇよりも大きい比表面積（ＳＳＡ）を有する、請求項１〜４５のいずれかに記載の前駆体。
【請求項４７】
前記膨潤性物質の前記離散性粒子が、少なくとも３・１０−６ｍｍ３、好ましくは少なくとも６５・１０−６ｍｍ３の平均容積を有する、請求項１〜４６のいずれかに記載の前駆体。
【請求項４８】
前記膨潤性物質の前記離散性粒子が、最大４．２ｍｍ３、好ましくは最大０．５ｍｍ３の平均容積を有する、請求項１〜４７のいずれかに記載の前駆体。
【請求項４９】
前記前駆体が１０重量パーセント未満の、好ましくは１重量パーセント未満のゼラチンを含む、請求項１〜４８のいずれかに記載の前駆体。
【請求項５０】
前記前駆体が放射線不透過剤を含む、請求項１〜４９のいずれかに記載の前駆体。
【請求項５１】
前記放射線不透過剤が、以下の群：タンタル粉末、タングステン粉末、チタニウム粉末、酸化ジルコニウム粉末、酸化ビスマス粉末、ヨードベースの液体から選択される、請求項５０に記載の前駆体。
【請求項５２】
請求項１〜５１のいずれかに記載の前駆体を調製するための方法であって、以下の工程：
ａ）前記膨潤性物質を湿潤オートクレーブして、該膨潤性物質の重合化を回避する工程；
ｂ）工程「ａ」において得られ生成物を乾燥して重合化を回避する工程；
ｃ）工程「ｂ」において得られた生成物と、前記固体粒子とを混合する工程、
包含する、方法。
【請求項５３】
液体を、請求項１〜５１のいずれかに記載の前駆体に混合することにより得られる、骨置換材料。
【請求項５４】
請求項５３に記載の骨置換材料であって、ここで前記液体が、純水、滅菌脱塩水、水溶液、滅菌生理食塩水、滅菌リンガー溶液、血清、血液、骨髄、抗菌薬溶液−好ましくは抗生物質溶液−、または骨誘導性物質−好ましくはＢＭＰ２およびＢＭＰ７のような骨形成タンパク質もしくは増殖因子−ならびに／もしくは骨粗鬆症に対する薬物−好ましくはビスホスフォネートおよび副甲状腺ホルモンを含む溶液である、骨置換材料。
【請求項５５】
膨潤性物質の乾燥重量と液体との間の比率が、０．００１および０．５００の範囲にある、請求項５３または５４に記載の骨置換材料。
【請求項５６】
前記比率が、０．０１および０．２０の範囲、好ましくは０．０３および０．０９の範囲にある、請求項５５に記載の骨置換材料。
【請求項５７】
水和されたヒドロゲルと固体粒子との間の重量関係が、０．２よりも大きい、好ましくは０．６よりも大きい、請求項５３〜５６のいずれかに記載の骨置換材料。
【請求項５８】
水和されたヒドロゲルと固体粒子との間の重量関係が、４よりも小さい、好ましくは２よりも小さい、請求項５３〜５７のいずれかに記載の骨置換材料。
【請求項５９】
請求項１〜５１のいずれかに記載の前駆体と、得られる混合物を骨置換のための練り込み可能な塊に変換するために該前駆体に混合するのに適切な液体とを備える、キット。
【請求項６０】
請求項５９に記載のキットであって、ここで前記液体が、純水、滅菌脱塩水、水溶液、滅菌生理食塩水、滅菌リンガー溶液、血清、血液、骨髄、抗菌薬溶液−好ましくは抗生物質溶液−、または骨誘導性物質−好ましくはＢＭＰ２およびＢＭＰ７のような骨形成タンパク質もしくは増殖因子−ならびに／もしくは骨粗鬆症に対する薬物−好ましくはビスホスフォネートおよび副甲状腺ホルモンを含む溶液である、キット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、請求項１の序文に記載される、液体の混合によるペースト状の骨材料の調製のための前駆体に関する。
【背景技術】
【０００２】
液体を混合することにより、固体の、乾燥前駆体から調製される、多くの骨置換材料が知られる。しかし、公知の前駆体材料の全ては、非滅菌性であるか、または滅菌化プロセスによりそれらの分子構造が分解されるかのいずれかである。特に、通常の乾燥オートクレーブ（例えば、１７０℃にて１２０分間−ＷＨＯ  １９８６）は、このような骨置換材料において使用される大部分のヒドロゲルの破壊を導く。
【０００３】
注入され得る材料がまた公知である。例えば、水硬性リン酸カルシウムセメントは、１つまたはいくつかのリン酸カルシウム粉末および水溶液からなる。混合の際、ペーストが形成される。ペーストは注入され得、そして（典型的に）５〜２０分以内に硬化する。残念なことに、得られる硬化されたペーストはなお脆く、そして層ごとに、すなわち、本発明において記載されるペーストよりも非常に遅延して再吸収され得るのみである。他の注入可能なペーストは、マイクロサイズのリン酸カルシウムおよび水溶液の非セメント系の混合物からなる。これもまた、再吸収は層ごとにのみ生じる。第３の代替は、球形粒子（約０．１ｍｍよりも大きい）と、低粘度のヒドロゲルとを組み合わせることである。これらの混合物は、注入可能であり、そして球形粒子間のギャップの存在に起因して十分に分配された再吸収を有するが、これらの混合物は、練り込み可能でなく、そして低い粘着力を示す。
【０００４】
以下の文脈において、用語「粒子」は、任意の三次元体を、その寸法にかかわらず、特に「顆粒」または「粒」として一般に知られる小さい部分を包含する。粒子の球形度Ｓ（あるいは球形関係）は、個々の粒子の最も大きい直径Ｄｍａｘと、最も小さい直径Ｄｍｉｍとの間のＤｍａｘ／Ｄｍｉｍの比率として規定される。それゆえ、十分に球形の粒子は、球形度Ｓ＝１．００を有する。
【０００５】
現在の技術水準に関する本記載は、本発明の環境を説明するためのみに使用され、本明細書中で引用される技術水準が、本発明の登録またはその優先日時に、実際に公開されていたこと、または一般に知られていたことを意味しない。
【発明の開示】
【０００６】
本発明は、この状況のための改善を提供する。本発明は、上述で列挙される欠点を克服する前駆体を作製する問題に基づく。本発明は、請求項１の特徴を有する前駆体を伴って、この課題を解決する。
【０００７】
本発明の目的は、液体の混合によるペースト状の骨置換材料の調製のための固体前駆体を提供することであり、それにより当該前駆体は、使用の前に安定なままであり、そして特にその分子完全性を高度に保持する。
【０００８】
本発明の利点は以下である：
−  乾燥前駆体は、血液、多血小板血漿、抗生物質溶液、または骨髄のような多くの異なる液体と混合され得るので、非常に多用途性である；
−  取り扱いが良好である（ペースト状の材料の迅速な獲得）；
−  前駆体から得られる練り込み可能な骨置換材料の至適な再吸収；
−  良好な光学的外観（不十分な大きさを有する固体粒子の存在に起因して色むらがない）；および
−  生成が容易（自動秤量を許容する固体粒子の十分に大きな大きさに起因する）。
【０００９】
特別な実施態様において、前駆体は、少なくとも当該膨潤性物質の湿潤オートクレーブ、およびその後の乾燥により得られている。
【００１０】
ヒドロゲルは、固体物質が液相を介して水和され、液相の粘度を変化し、そして増加する、すなわち、液相をゼリー状にするか、または凝固する場合に、存在する。あるヒドロゲルはいくぶん弾力性であり、そして他方はいくぶん可塑性である（例えば、ヒアルロン酸ナトリウム）。弾力性のヒドロゲルは、可塑性（変形可能な）ヒドロゲルとは異なり、剪断力で破壊され得る。
【００１１】
当該固体粒子は、セラミックまたは鉱物性の性質であり得、ならびにそれらはカルシウムを含み得る。固体粒子はまた、鉱物質が除かれた、または精製された骨材料に基づき得る。鉱物質が除かれた、または精製された骨材料は、ウシの骨から全ての有機物を抽出することにより天然の骨からも得られ得る。固体粒子は、ポリマーの性質、好ましくはポリ乳酸（ＰＬＡ）またはポリグリコール酸（ＰＧＡ）のいずれかであり得るか、またはバイオガラスに基づき得る。
【００１２】
ヒドロゲルマトリクスは、オリゴマー部分もしくはポリマー部分からなり得るか、または２つの組み合わせからなり得る。
【００１３】
固体粒子および当該膨潤性物質は、混合物として存在し得る。あるいは膨潤性物質は粉末化形体にある。
【００１４】
さらなる実施態様において、当該膨潤性物質の離散性粒子は、少なくとも１８μｍ、好ましくは少なくとも５０μｍの平均直径を有する。さらなる実施態様において、当該膨潤性物質の離散性粒子は２０００μｍ未満の、好ましくは１０００μｍ未満の平均直径を有する。
【００１５】
膨潤性物質は、ポリアミノ酸またはその誘導体、好ましくはポリリジンまたはゼラチンを含み得る。あるいは、膨潤性物質は以下の成分：ａ）多糖およびそれらの誘導体、好ましくはグリコサミノグリカンもしくはアルギン酸塩；ｂ）ポリリピド（ｐｏｌｙｌｉｐｉｄ）、脂肪酸、およびそれらの誘導体；ｃ）ヌクレオチドおよびそれらの誘導体；ｄ）ポリメチレンオキシドもしくはその誘導体；ｅ）ポリエチレン、ポリエチレンオキシド、もしくはそれらの誘導体；ｆ）ポリプロピレン、ポリプロピレンオキシド、もしくはそれらの誘導体；ｇ）ポリアクリル酸塩もしくはその誘導体；またはａ）〜ｇ）において列挙されるような成分の組み合わせの１つを含み得る。
【００１６】
膨潤性物質は、グリコサミノグリカンもしくはプロテオグリカン、またはそれらの２つの物質の混合物からなり得る。グリコサミノグリカンは、ヒアルロン酸、コンドロイチン硫酸、デルマタン硫酸、ヘパラン硫酸、へパリン、またはケラタン硫酸であり得る。
【００１７】
さらなる実施態様において、ヒドロゲルはヒアルロン酸である。ヒアルロン酸は、二糖ヒアルロン酸を作製するグルコン酸およびアセチルグルコサミンからなる。ヒアルロン酸は、線維状の、非分岐分子構造を有し、それゆえ、非常に粘性の液体溶液を生じる。ヒドロゲルはまた、ヒアルロン酸ナトリウム（ＮａＨｙＡ）の形態にあり得る。
【００１８】
さらなる実施態様において、膨潤性物質は、完全に合成起源である。このことは、天然起源の前駆体に比較して、タンパク質、病原菌、ウイルス、または細菌のような潜在的な病原因子の不在に起因して疾患の伝播の危険性を排除する。
【００１９】
あるいは、膨潤性物質は、生物工学的に作製（例えば、発酵）された物質からなり得る。
【００２０】
さらなる実施態様において、膨潤性物質のＭＷは−滅菌後に−３００’０００ダルトンよりも大きく、および好ましくは５００’０００ダルトンよりも大きい。さらなる実施態様において、膨潤性物質のＭＷは、１’０００’０００ダルトンよりも大きく、および好ましくは１’５００’０００ダルトンよりも大きい。ＭＷに関して、これがポリマーの粘度データ、特に「固有粘度」に基づいてしばしば算定されることを知ることは重要である。それゆえ、ポリマーのＭＷよりも、その固有粘度を特定することが有利であり得る。２．０ｍ３／ｋｇよりも大きい、好ましくは２．５ｍ３／ｋｇよりも大きい最初の固有粘度は、滅菌後に良好な生成物を得るために必要とされる最小値であるようである。滅菌後、固有粘度は、好ましくは１．３ｍ３／ｋｇを上回るべきである。
【００２１】
さらなる実施態様において、当該膨潤性物質は、滅菌後に、少なくとも１．３ｍ３／ｋｇ、好ましくは少なくとも１．４ｍ３／ｋｇの固有粘度を有する。好ましくは、当該固有粘度の少なくとも８０％は、混合の開始後５分以内に、好ましくは２分以内に達成される。
【００２２】
さらなる実施態様において、当該膨潤性物質の当該離散性粒子は、５よりも小さい、好ましくは２よりも小さい球形度Ｓを有する。
【００２３】
さらなる実施態様において、前駆体はさらに、骨代謝に対して活性な効果を有する薬物、好ましくは骨誘導性物質、骨粗鬆症に対する薬物、または抗菌薬を含む。骨誘導性物質についての例は：形態形成タンパク質および増殖因子であり；骨粗鬆症に対する薬物についての例は：ビスホスフォネートおよび副甲状腺ホルモンであり；抗菌薬についての例は硫酸ゲンタマイシンである。
【００２４】
さらなる実施態様において、固体粒子は少なくとも部分的に多孔性の構造を有する。固体粒子の孔の大きさは、好ましくは１０ナノメートルと、５００マイクロメートルとの間である。好ましくは固体粒子の少なくとも５０％は、１００と５００マイクロメートルとの間の孔の大きさを有する。このことは、至適な孔の大きさの分布および自己組織の孔への成長を保証する。さらなる実施態様において、固体粒子の多孔率は、６０と９０パーセントとの間、好ましくは６８と８４パーセントとの間である。このことは、自己組織が固体粒子の大容量の割り当てに成長し得ることを確実にする。
【００２５】
固体粒子の平均直径は好ましくは、１００と５００マイクロメートルとの間である。この利点は、前駆体と、液体とを混合することにより得られるペーストが、滑らかな軟度を得るという事実である。さらに、粒子の直径が１００マイクロメートルよりも小さくない場合、粒子を取り囲む組織内の炎症の危険性は実質的に存在しない。２つの異なる大きさの集団を備える固体粒子、例えば、１２５と２５０マイクロメートルとの間の平均直径を備える粒子と、５００と７１０マイクロメートルとの間の平均直径、または０．５と５．６ｍｍとの間の平均直径を備える粒子とを混合することはまた可能である。このことは、これが骨置換材料の緊密さを保証するという利点を有する。従って、大粒の材料の使用から生じる間質性の孔容積（孔死容積）は、最少に減少され得る。種々の大きさの固体粒子の使用を介して骨置換材料の分解期間を影響することがまた可能である。（より小さい粒子はより大きい粒子よりも早く再吸収される）。
【００２６】
当該固体粒子の比重は、０．５と１．０ｇ／ｃｃｍとの間にあり得る。球形形態に代わって、固体粒子はまた、非球形の形状を有し得る。固体粒子は、０．０１ｍ２／ｇよりも大きい、好ましくは０．１ｍ２／ｇよりも大きい比表面積（ＳＳＡ）を有し得る。固体粒子はまた、５ｍ２／ｇよりも大きい、好ましくは５０ｍ２／ｇよりも大きい比表面積（ＳＳＡ）を有する。高いＳＳＡは薬物送達目的に有利である。多孔性構造中に捕獲された薬物は、非常に遅延された速度にて、典型的に数日にわたって、またはさらに数週間にわたって拡散する。
【００２７】
特別な実施態様において、当該膨潤性物質の離散性粒子は、少なくとも３・１０−６ｍｍ３、好ましくは少なくとも６５・１０−６ｍｍ３の平均容積を有する。別の実施態様において、当該膨潤性物質の離散性粒子は、最大４．２ｍｍ３、好ましくは最大０．５ｍｍ３の平均容積を有する。
【００２８】
さらなる実施態様において、前駆体は１０重量パーセント未満の、好ましくは１重量パーセント未満のゼラチンを含む。最も好ましくは、前駆体はゼラチンを含まない。
【００２９】
さらなる実施態様において、前駆体は、放射線不透過剤を含む。放射線不透過剤の使用は脊髄形成術または後湾形成術のような、ある適用に有益である。これは骨欠損への挿入の間およびその後の、骨置換の位置のより良好な可視化を許容する。放射線不透過剤は、以下の群：タンタル粉末、タングステン粉末、チタニウム粉末、酸化ジルコニウム粉末、酸化ビスマス粉末、ヨードベースの液体から選択され得る。適切なヨードベースの液体はイオパミドールである。
【００３０】
生物学的効力を改善するために、本発明に従う前駆体の種々の成分を混合することにより生成されるペーストは、好ましくは、ヒドロゲル（固体粒子間に存在する）を介する迅速な細胞浸潤を許容する、従って、骨置換体内の骨の迅速な内部成長を可能にするために固体粒子間に大きいドメインを示すべきである（なぜなら、ヒドロゲルは数日内で再吸収または除去されるからである）。
【００３１】
用語「非球形」は、球形形状とは有意に異なる任意の粒子の形状を記載する。本発明の１つの変形は、角度のある形状を備える固体粒子を使用する。「角度のある」は、個々の端を有する粒子、特に裸眼で可視できる、すなわち、少なくとも０．１ｍｍの大きさである粒子を記載する。丸い粒子に比較して、これらは粒子表面の増加を生じるが、粒子の平均直径は同じままである。このことは、固体粒子と、ヒドロゲルとの間の接着相互作用の増加を引き起こし、使用されるヒドロゲルの量またはその濃度を増加する必要を伴わずに、骨置換材料の成型能力を保証する。特別な実施態様がまたあり、ここでは固体粒子は、最も大きい直径Ｄｍａｘと、最も小さい直径Ｄｍｉｎとの間に球形関係Ｓ＝Ｄｍａｘ／Ｄｍｉｎを有し、これは１．２よりも大きく、および好ましくは１．５よりも大きい。Ｓの値は、３よりも大きくあるべきであり、好ましくは５よりも大きくあるべきである。好ましくは少なくとも６０％、および典型的には少なくとも８０％の固体粒子は、非球形の形状であるべきである。
【００３２】
あるいは、注入可能なペーストを提供することは興味深くあり得る。その目的のために、丸い粒子を使用することが重要である。種々粒子の大きさの混合物は、より緊密なペーストを導き得、これはまたより良好に注入可能である。迅速な骨内部成長および固体粒子の再吸収を提供するために、少なくとも６０％、および典型的に少なくとも８０％の固体粒子が非球形の形状であるべきである。
【００３３】
さらなる実施態様において、固体粒子の、例えばカルシウムを含有する、多孔性のセラミック粒子の形態において、充填されたかさ密度は、好ましくは０．５と１．０ｇ／ｃｃｍとの間である。
【００３４】
高い比表面積（ＳＳＡ）を伴う粒子は、複数のナノサイズ孔の存在により、または高い表面コルゲーションにより特徴づけられる。結果として、このような粒子は、薬物送達適用について非常に興味深い；ナノ細孔中に捕獲された薬物は非常に遅延された速度にて分散し、従って優れた薬物送達系を提供する。高温度にて得られた粒子（例えば、β−リン酸三カルシウム、α−リン酸三カルシウム、リン酸テトラカルシウム、焼成骨）は、通常、非常に低いＳＳＡを、典型的に０．００１〜１ｍ２／ｇの範囲において有する。室温にてまたは室温付近で合成された粒子は、一般に、非常に高いＳＳＡを示す。例えば、骨片を精製する（有機物質の抽出）ことにより得られる粒子は、典型的に５０〜１００ｍ２／ｇの範囲においてＳＳＡを有する。水硬性の反応により得られる粒子（例えば、リン酸カルシウムセメント）は、組成に依存して、１０〜２００ｍ２／ｇの範囲においてＳＳＡを有する。
【００３５】
さらなる実施態様において、固体粒子は、１．０と２．０との間のＣａ／Ｐモル関係により特徴づけられるリン酸カルシウムを含む。好ましくは、セラミック粒子は、１．４５と１．５２との間のＣａ／Ｐモル関係により特徴づけられるリン酸カルシウムを含む。
【００３６】
リン酸カルシウムは、以下の群：リン酸二カルシウム二水和物（ＣａＨＰＯ４×２Ｈ２Ｏ）、リン酸二カルシウム（ＣａＨＰＯ４）、α−リン酸三カルシウム（α−Ｃａ３（ＰＯ４）２）、β−リン酸三カルシウム（β−Ｃａ３（ＰＯ４）２）、カルシウム欠乏ヒドロキシアパタイト（Ｃａ９（ＰＯ４）５（ＨＰＯ４）ＯＨ）、ヒドロキシアパタイト（Ｃａ１０（ＰＯ４）６ＯＨ）２）、炭酸アパタイト（Ｃａ１０（ＰＯ４）３（ＣＯ３）３（ＯＨ）２）、フルオロアパタイト（Ｃａ１０（ＰＯ４）６（Ｆ，ＯＨ）２）、クロロアパタイト（Ｃａ１０（ＰＯ４）６（Ｃｌ，ＯＨ）２）、ウイットロッカイト（ｗｈｉｔｌｏｃｋｉｔｅ）（（Ｃａ，Ｍｇ）３（ＰＯ４）２）、リン酸テトラカルシウム（Ｃａ４（ＰＯ４）２Ｏ）、オキシアパタイト（Ｃａ１０（ＰＯ４）６Ｏ）、β−カルシウムピロリン酸（β−Ｃａ２（Ｐ２Ｏ７）、α−ピロリン酸カルシウム、γ−ピロリン酸カルシウム、リン酸オクトカルシウム（Ｃａ８Ｈ２（ＰＯ４）６×５Ｈ２Ｏ）から選択され得る。種々のリン酸カルシウム材料はまた、Ｎａ、Ｃｌ、Ｆ、Ｓ、Ｃ、Ｓｒ、Ｍｇ、Ｚｎ、Ｓｉ、Ｆｅ、Ｌｉ、Ｋ、またはＡｇのような元素でドープされ得る。
【００３７】
さらなる実施態様において、固体粒子は、異なるリン酸カルシウムの混合物を含む。このような混合物の利点は、再吸収期間の制御にある。混合物成分の異なる再吸収挙動に起因して、より迅速な再吸収時間を伴って、成分の空洞中へのより迅速な骨成長が促進され得る。あるいは、固体粒子は硫酸カルシウム（無水物、半水和物、二水和物、およびそれらの多形体）、炭酸カルシウム（方解石、アラゴナイト、もしくはバテライト）、バイオガラス、または異なるリン酸カルシウム、硫酸カルシウム、炭酸カルシウム、および／もしくはカルシウムを含有するバイオガラスの混合物を含み得る。このような混合物の利点は、再吸収期間の制御にある。混合物成分の異なる再吸収挙動に起因して、より迅速な再吸収時間を伴って、成分の空洞中へのより迅速な骨成長が促進され得る。
【００３８】
好ましくは、固体前駆体中に存在する残余の水の最大量（１０５℃にて乾燥する際の喪失により表わされる）は、５％よりも小さく、好ましくは２％よりも小さい。吸収された水の存在は、ヒドロゲルの分解を誘発し、従って乾燥産物中の残余の湿潤性は可能な限り低く維持されるべきである。
【００３９】
骨置換材料の調製は、前駆体に液体を混合することにより得られる。以下の液体は、その目的のために適切である：純水、滅菌脱塩水、水溶液、滅菌生理食塩水、滅菌リンガー溶液、抗菌薬溶液−好ましくは抗生物質溶液−、または骨誘導性物質−好ましくはＢＭＰ２およびＢＭＰ７のような骨形成タンパク質もしくは増殖因子−ならびに／もしくは骨粗鬆症に対する薬物−好ましくはビスホスフォネートおよび副甲状腺ホルモンを含む溶液。外科医は、血液、血液抽出物（例えば、血清、多血小板血漿）、骨髄、骨髄抽出物、または骨形成に対して有益な効果を有する任意のヒト抽出物で、滅菌溶液を置き換える可能性を有する。
【００４０】
固体前駆体は、外科的使用のために滅菌であるべきである。使用され得る２つの滅菌化アプローチがある：（ｉ）２つの滅菌生成物を合わせ、そしてそれらを無菌環境に包む、または（ｉｉ）固体前駆体を調製し、次いでこれを滅菌する。第１のアプローチは、一見最も容易であるが、生産コストの理由のために、第２のアプローチが、現今、最も良好なアプローチである。それゆえ、骨置換材料および膨潤性物質は、同時に滅菌されなくてはならない。固体について使用され得る種々の滅菌技術（ガンマ線照射、プラズマ、酸化エチレン、オートクレーブ、熱風）の中で、オートクレーブが、（ｉ）滅菌方法の良好な均一性、（ｉｉ）毒性の不在、および（ｉｉｉ）粉末物質の分子完全性を保持する能力に起因して、最も考えられ得る技術である。
【００４１】
好ましくは、オートクレーブ（＝蒸気滅菌）は、７０％よりも大きいヒドロゲルの分子量（ＭＷ）喪失を導かないような方法において行われる。オートクレーブは、種々の持続時間、種々の温度にて行われ得る。事実、温度が高いほどより短い滅菌時間を必要とする（「Ｓｔｅｒｉｌｉｓａｔｉｏｎ，Ｄｅｓｉｎｆｅｋｔｉｏｎ，Ｋｏｎｓｅｒｖｉｅｒｕｎｇ，Ｋｅｉｍｉｄｅｎｔｉｆｉｚｉｅｒｕｎｇ，Ｂｅｔｒｉｅｂｓｈｙｇｉｅｎｅ」（１９８８年出版）の第４章、「Ｖｅｒｆａｈｒｅｎ  ｚｕｒ  Ｖｅｒｍｉｎｄｅｒｕｎｇ  ｄｅｒ  Ｋｅｉｍｚａｈｌ」を参照のこと）。所定のオートクレーブ持続時間（例えば、１８分間）を維持すると、温度が低すぎるとサンプルを滅菌し得ないのに対し、大きすぎる温度差はポリマーを劇的に破壊する。結果として、中間の温度が理想的である。例えば、ヒアルロン酸ナトリウムとβ−ＴＣＰ顆粒との混合物で、１２１℃の温度（１８分間のオートクレーブ）は低すぎた（部分的な滅菌のみであった）のに対し、１２８℃の温度（１８分間のオートクレーブ）は高すぎたことが観察され得た。それゆえ、１８分間の持続時間については１２５℃の温度が至適であるようであった。
【００４２】
好ましくは、オートクレーブは、最少３０％の、および最大７０％の当該膨潤性物質の分子量の減少を導く。オートクレーブは、１１０°〜１４０℃の、好ましくは１２１°〜１２８℃の範囲の温度にて行われ得る。前駆体の乾燥は、乾燥空気、減圧、凍結乾燥、および／または乾燥剤の作用により得られ得る。好ましくは、当該前駆体の１０５℃での乾燥の際の喪失は、５％よりも小さく、好ましくは２％よりも小さい。
【００４３】
好ましい実施態様において、膨潤性物質の乾燥重量と液体との間の比率は、０．００１および０．５００の範囲である。濃度が高いほど、より高いコストを導き、そしてより低い濃度は、所望される可塑性および硬さのタイプの材料を導かない。好ましくは、膨潤性物質の乾燥重量と液体との間の比率は、０．０３および０．０９の範囲にある。
【００４４】
さらなる実施態様において、水和されたヒドロゲルと固体粒子との間の重量関係は、０．２よりも大きく、好ましくは、０．６よりも大きい。別の実施態様において、水和されたヒドロゲルと固体粒子との間の重量関係は、４よりも小さく、好ましくは２よりも小さい。
【００４５】
前駆体は、得られる混合物を骨置換のための練り込み可能な塊に前駆体を変換するために、当該前駆体に混合するのに適切な液体をとともに含むキットの形態において利用可能にされ得る。好ましくは、骨置換材料生成物は、滅菌粉末（例えば、β−ＴＣＰ顆粒＋ＮａＨｙＡ粉末）および滅菌液体（例えば、脱イオン水または生理食塩水）からなるキットとして外科医に提示される。
【００４６】
例示的に、いわゆる粘着力試験が、種々のＮａＨｙＡ粒子の大きさを用いて生成されたペーストを用いて行われた。ペーストの「粘着力」は、水溶液との接触に置かれた場合に１片に留まるペーストの能力として規定される。この特性は、水溶液中にペーストを浸し（例えば、調製の開始の４分後）、そして経時的にペーストの重量喪失を測定することにより測定され得る（Ｂｏｈｎｅｒら、Ｅｕｒ  Ｃｅｌｌｓ  Ｍａｔｅｒ、２００６）。２つのアプローチが、結果を定量するために使用され得る：重量の既知量が喪失される（例えば、−０．３ｇ）までにどのくらいかかるのか、または所定の時間内で（例えば、測定の１０分の時点と３０分の時点との間で）どのくらいの材料が喪失されたのかを測定する。
【００４７】
本発明に従う前駆体は、ペースト状の材料を得るために液体と混合されなくてはならない。得られるペーストの粘度は、膨潤性物質の濃度およびモル重量に依るのみでなく、膨潤性物質の溶解の動力学にもまた依ることが見出された。膨潤性物質の溶解は、膨潤性物質と液体との間の界面面積に依るので、小さい粒子は大きい粒子よりも非常に迅速に溶解する。結果として、比較的小さい粒子は、大きい粒子よりも好ましい。小さい粒子はあまり良好に流動しない。それゆえ、大きい粒子は、それらを自動秤量することがより容易であるので、生成の目的のために小さい粒子よりも好ましい。同様に、丸い粒子は、線維よりも非常に良好に流動し、すなわち、丸くて大きい粒子（＞２０〜５０ミクロンの直径）は、生成目的のために最も適合される。
【００４８】
さらに、膨潤性物質の粒子は、オートクレーブおよびその後の乾燥の間に縮小する傾向がある。得られる粒子密度の変化は、ヒドロゲルの光学的外観の変化を引き起こし得る。例えば、ＮａＨｙＡ粒子の色は、白色／半透明から黄色に変化する。リン酸カルシウム粒子は一般に白色であるので、生成物中の黄色の粒子の存在は、その風合いに対してネガティブな影響を有する。この影響は、ヒドロゲル粒子の大きさに依る：約０．５ｍｍよりも小さい粒子は小さすぎて目視により検出されず、従って生成物の外観は維持され（生成物中に明らかな不均一性はない）、すなわち、ハイドロゲル粒子は、１ｍｍよりも小さい、好ましくは０．５ｍｍよりも小さい直径を有するべきである。
【００４９】
２つの異なるＮａＨｙＡ粉末の４〜５の大きさ画分を用いて得られた結果が、図１〜４において示される。結果は、１ｍｍよりも大きい粒子の大きさは十分でないことを示唆する。１２５℃にて１８分間、サンプルをオートクレーブし、そしてそれらを６０℃にて４時間乾燥した後、サンプルの粘着力はＮａＨｙＡの平均ＭＷの減少に起因して減少する（図５〜６）。興味深いことに、結果は１．７６ＭＤａ  ＮａＨｙＡの大きさ画分０．５〜１．０ｍｍは、他の３つの試験された画分よりも悪い結果を導くことを示唆する。まとめると、これらの結果は、ヒドロゲル粒子直径は１ｍｍよりも低いべきであり、おそらく０．５ｍｍよりも低いべきであることを示す。
【発明を実施するための最良の形態】
【００５０】
本発明および本発明のさらなる発展は、以下の実施例においてより詳細に説明される：
【実施例１】
【００５１】
Ａ）滅菌されたヒアルロン酸ナトリウムを得る
１４２８ｋＤａのＭＷおよび０．１２５〜０．５００ｍｍの粒子直径を有するＮａＨｙＡの水溶液を、１８分間１２５℃にてオートクレーブした。オートクレーブにより、ＮａＨｙＡのＭＷは元来の１４００ｋＤａから８００〜１０００ｋＤａに減少した（粘度測定法により測定された）。ＭＷの減少は質に対してネガティブな影響は何ら有しなかった。湿潤オートクレーブ後、乾燥を、滅菌条件下で、Ｐ２Ｏ５粉末の存在下、乾燥空気中で行った。滅菌は、オートクレーブの前に材料を包むために使用された２枚の蒸気−透過性膜により提供された。
【００５２】
Ｂ）パテ軟度の骨置換材料を得る
０．１２ｇの得られた乾燥ＮａＨｙＡ（工程Ａによる）、１．１ｇのβ−リン酸三カルシウム粉末（０．１２５〜０．５００ｍｍの範囲の直径、および０．０１〜０．３０ｍ２／ｇの比表面積を備える）、および１．１ｇのβ−リン酸三カルシウム粉末（０．５００〜０．７００ｍｍの範囲の直径、および０．０１〜０．３０ｍ２／ｇの比表面積を備える）を、２ｍｌの滅菌水とともに、スパチュラで６０秒間混合した。β−リン酸三カルシウム粉末は６０％の多孔率を有した。混合の開始の２分後、わずかに弾力性の、および練り込み可能な塊が得られた。次いで、このペーストを練り込み、長くて薄い「ミミズ」の形にし、そして脛骨プラトー骨折から生じた海綿骨空隙に挿入した。次いで空隙の入り口を骨膜で閉塞した。手術の二ヶ月半後、Ｘ線写真は、欠損部における新規な骨の存在、およびβ−ＴＣＰ顆粒の再吸収プロセスの開始を実証した。十分な体重支持が脛骨に対して再度適用され得た。
【実施例２】
【００５３】
２４ｇのリン酸二カルシウムＤＣＰの多孔性の、および角のある顆粒（約５００マイクロメートルの大きさ、Ｓ＝３．１の球形度、および７ｍ２／ｇに近似する比表面積を備える）と、５３５ｋＤａのＭＷを備える１．４ｇコンドロイチン硫酸との混合物を、１２５℃にて１８分間、オートクレーブすることにより滅菌した。湿潤オートクレーブ後、乾燥を滅菌条件下での凍結乾燥により行った。滅菌乾燥混合物を、１０歳齢の男児の骨盤骨から吸引された２５ｍＬの骨髄とともに混合した。得られた混合物を、滅菌ボウル中、１．５分間、滅菌されたスパチュラで練り込んだ。混合の開始の２分後、わずかに弾力性の、および練り込み可能な塊が得られた。次いで、このペーストを男児の上腕骨に存在する嚢胞に挿入した。次いで、空隙の入り口を骨膜で閉塞した。手術の６週間後、Ｘ線写真は、欠損部における新規な骨の存在、およびＤＣＯ顆粒の再吸収プロセスの開始を実証した。空っぽの空隙は観察されず、これは新規な上腕骨の形成を示唆し得た。
【実施例３】
【００５４】
０．３ｇの、カルシウム欠乏ヒドロキシアパタイト（３０ｍ２／ｇの比表面積を有する）の０．２〜０．３ｍｍの多孔性および球形の顆粒、および０．３ｇのカルシウム欠乏ヒドロキシアパタイト（３０ｍ２／ｇの比表面積を有する）の０．５〜０．７ｍｍの多孔性および球形の顆粒の混合物を、９００ｋＤａのＭＷを備える５０ｍｇの生物工学的に作製されたヒドロキシプロピルメチルセルロースとともに混合した。この混合物を、１２５℃にて１８分間、オートクレーブすることにより滅菌した。湿潤オートクレーブ後、乾燥を、滅菌条件下で、乾燥空気の作用下により行った。次いで、０．１ｍＬの５重量パーセント硫酸ゲンタマイシン溶液を、乾燥した混合物に添加し、そして２分間、十分に混合した。得られた練り込み可能な材料は、可塑性の骨置換材料として、およびゲンタマイシン送達系として非常に適切であった。
【実施例４】
【００５５】
０．２ｇのアルギン酸ナトリウム（ＭＷ＝５０〜５００ｋＤａ／０．７１ｍｍ未満の粒子直径）と、２．５ｇの炭酸リン灰石の球形顆粒（２００〜３００ミクロンの顆粒の大きさおよび８０ｍ２／ｇの比表面積を備える）とを混合し、そして１２５℃にて１８分間、オートクレーブすることにより滅菌した。湿潤オートクレーブ後、乾燥を、滅菌条件下で、減圧の作用下により行った。次いで、２．０ｇの滅菌リンガー溶液をこの乾燥混合物中に攪拌した。これにより、練り込み可能な材料を得、これは可塑性の骨置換材料として使用され得た。
【実施例５】
【００５６】
０．１８ｇのＮａＨｙＡ（ＭＷ＝１．１〜１．３ミリオンダルトン）、２．５ｇの炭酸リン灰石の球形顆粒（２００〜３００ミクロンの顆粒の大きさおよび８０ｍ２／ｇの比表面積を備える）、１．０ｇのタンタル粉末（直径０．５ｍｍ）、および１．５ｇの、β−リン酸三カルシウム（β−ＴＣＰ）の多孔性の、および角のある顆粒（１２５〜５００マイクロメートルの顆粒の大きさ、Ｓ＝２．５の球形度、および０．０１〜０．３０ｍ２／ｇの範囲の比表面積を有する）を十分に混合し、そして１２５℃にて１８分間、オートクレーブすることにより滅菌した。滅菌混合物の乾燥後、滅菌条件下で０．５ｍｌの多血小板血漿、次いで１．５ｍｌの量の滅菌脱イオン水を、この混合物中で攪拌した。十分な混合後、これにより優れた可塑性の練り込み可能な材料が得られ、これは可塑性の骨置換材料として使用され得た。
【実施例６】
【００５７】
０．１８ｇのＮａＨｙＡ（ＭＧ＝１．１〜１．３ミリオンダルトン）、１．０ｇの、β−リン酸三カルシウムの多孔性の、および角のある顆粒（５００〜７００マイクロメートルの顆粒の大きさ、Ｓ＝２．９の球形度、および０．０１〜０．３０ｍ２／ｇの範囲の比表面積を備える）、および１．５ｇの、β−リン酸三カルシウムの多孔性の、および角のある顆粒（１２５〜５００マイクロメートルの顆粒の大きさ、Ｓ＝２．５の球形度、および０．０１〜０．３０ｍ２／ｇの比表面積を有する）を十分に混合し、そして１２５℃にて１８分間、オートクレーブすることにより滅菌した。滅菌混合物の乾燥後（滅菌条件下）、２ｍｌの新鮮な血液を、この混合物中で攪拌した。十分な混合後、これにより優れた可塑性の練り込み可能な材料が得られ、これは可塑性の骨置換材料として使用され得た。
【実施例７】
【００５８】
Ａ）粉末の製造
６．６ｇのβ−ＴＣＰ球形顆粒（０．１２５〜０．５００ｍｍの大きさ、および０．０１〜０．３０ｍ２／ｇの比表面積を備える）、および０．２７ｇのＮａＨｙＡ（ＭＷ＝１１００ｋＤａ）の混合物を、１２５℃にて１８分間、オートクレーブした。オートクレーブが効果的であること、および混合物がオートクレーブ後も滅菌のままであることを確実にするために、混合物を、ブリスターパッケージ中に二度包み、これを上紙でくるんだ。上紙は、蒸気について透過性であったが、細菌については透過性でなかった。乾燥後、二重のブリスターパッケージを、アルミニウムピールパウチ中に包み、保存の間、ＮａＨｙＡを分解する湿気を防止した。
【００５９】
Ｂ）液体の製造
６ｍＬの滅菌リンガー溶液を、アルミニウム被覆膜でくるまれた２つのブリスターパッケージに、無菌下で充填した。次いで、溶液を２５〜４２ｋＧｒａｙでガンマ照射してこれを滅菌した。
【００６０】
Ｃ）キットの使用
生成物キットは、乾燥成分（ＮａＨｙＡおよびβ−ＴＣＰ顆粒）を含むピールパウチおよび湿潤成分からなった。キットは手術室において看護師により開封された。乾燥成分を含有するピールパウチが滅菌手術台の上方で開封され、後者の台上に二重ブリスターパッケージを落とした。その後、外科医は乾燥成分の両方のブリスターパッケージを開封し、そして粉末／顆粒混合物を含む第２の（内部）のブリスターパッケージを滅菌手術台上に置いた。看護師は、滅菌手術台の上方で溶液を含有する二重ブリスターを開封し、そして内部のブリスターを台上に落とした。外科医は後者のブリスターを開封し、液体を粉末／顆粒を含有するブリスター中に注入し、そして滅菌金属スパチュラを使用して、２つの成分を１分間混合した。その後、外科医は得られたペーストを指にとり、そしてそれを練り込んだ。
【実施例８】
【００６１】
Ａ）粉末の製造
６．６ｇの球形β−ＴＣＰ粒子［３００＋／−５０ミクロンの直径、理論的な密度（３．１ｇ／ｃｃ）の８０％よりも大きい見かけ密度、および０．０１〜０．３０ｍ２／ｇの比表面積を備える］、および０．３６ｇのＮａＨｙＡ（ＭＷ＝１４２９ｋＤａ／粒子直径０．１２５〜０．５００ｍｍ）を湿潤−透過性のブリスター中に二度包み、そして１２５℃にて１８分間オートクレーブした。次いで、サンプルを一定重量が達成されるまで凍結乾燥した。次いで、外側のパッケージを取り除き、そして内側の部分（湿潤透過性ブリスター）を、層流ベンチ中に落とし、そして滅菌の湿潤−不透過性ブリスター中に包んだ。
【００６２】
Ｂ）液体の製造
６ｍＬの滅菌蒸留水を、工程Ａにおいて得られたブリスターパッケージ中に無菌条件下で充填し、そして後者のパッケージをアルミニウム被覆膜でくるんだ。次いで、溶液を２５〜４２ｋＧｒａｙでガンマ照射してこれを滅菌した。
【００６３】
Ｃ）キットの使用
実施例７に従った。
【実施例９】
【００６４】
２ｇの、２５０〜４２０ミクロンにわたる粒子の大きさの、凍結乾燥され、脱塩された皮質同種移殖骨を、９３．６ｍｇのヒアルロン酸ナトリウム粉末（直径０．１〜０．５ｍｍ；１．８ＭＤａモル重量、２．７ｍ３／ｋｇ固有粘度）に添加し、蒸気透過性のパッケージ材料中に二度包み、そして１２５℃にて１８分間、オートクレーブした。次いで、サンプルを４時間、６０℃にて乾燥し、そして蒸気保障パッケージ中に包んだ。次いで、この固体前駆体と、患者からの４．７ｍＬの全血とを、スパチュラを使用して２分間混合して、優れた成形性特性を備える可錬性のパテを得た。
【図面の簡単な説明】
【００６５】
【図１】１．７６ＭＤａ  ＮａＨｙＡ粉末（固有粘度：２．６８ｍ３／ｋｇ）での粘着試験において得られた代表的な曲線を示す。粒子の直径は：（▲）ｄ＜０．１２５ｍｍ；（○）０．１２５＜ｄ＜０．２５０ｍｍ；（×）０．２５０＜ｄ＜０．５００ｍｍ；（△）０．５００＜ｄ＜１．０００ｍｍであった。パテ組成：０．９４ｇ  ０．１２５〜０．２５０ｍｍ  β−ＴＣＰ顆粒、０．９４ｇ  ０．５０〜０．７１ｍｍ  β−ＴＣＰ顆粒、１０２ｍｇ  ＮａＨｙＡ、１．６ｍＬ脱イオン水。
【図２】１．１ＭＤａ  ＮａＨｙＡ粉末（固有粘度：１．６４ｍ３／ｋｇ）での粘着試験において得られた代表的な曲線を示す。粒子直径は：（▲）ｄ＜０．１２５ｍｍ；（○）０．１２５＜ｄ＜０．２５０ｍｍ；（×）０．２５０＜ｄ＜０．５００ｍｍ；（△）０．５００＜ｄ＜１．０００ｍｍ；および（●）１．０＜ｄ＜２．０ｍｍであった。パテ組成：０．９４ｇ  ０．１２５〜０．２５０ｍｍ  β−ＴＣＰ顆粒、０．９４ｇ  ０．５０〜０．７１ｍｍ  β−ＴＣＰ顆粒、１０２ｍｇ  ＮａＨｙＡ、１．６ｍＬ脱イオン水。
【図３】−０．３ｇの重量喪失に達するまでの平均持続時間に対する粒子の大きさの効果を示す。；（×）１．７６ＭＤａ  粉末（固有粘度：２．６８ｍ３／ｋｇ）；（△）１．１ＭＤａ  粉末（固有粘度：１．６４ｍ３／ｋｇ）。
【図４】１０分と３０分との間の重量喪失に対する粒子の大きさの効果を示す。；（×）１．７６ＭＤａ  粉末（固有粘度：２．６８ｍ３／ｋｇ）；（△）１．１ＭＤａ  粉末（固有粘度：１．６４ｍ３／ｋｇ）。
【図５】粘着試験の間に０．３ｇ重量喪失が測定されるまでの持続時間に対するＮａＨｙＡ分子量、粒子の大きさ、および滅菌の効果を示す。（○）１．７６ＭＤａ  ＮａＨｙＡ、オートクレーブ前；（●）１．７６ＭＤａ  ＮａＨｙＡ、オートクレーブ後；（△）１．１ＭＤａ  ＮａＨｙＡ、オートクレーブ前；（▲）１．１ＭＤａ  ＮａＨｙＡ、オートクレーブ後（１回のみの測定）。赤色の点線は０．６７ＭＤａ  ＮａＨｙＡ粉末（固有粘度：１．３ｍ３／ｋｇ）を用いて得られた値を示す
【図６】試験の１０分と３０分との間で測定された粘着重量喪失に対するＮａＨｙＡ粒子の大きさおよび滅菌の効果を示す。（○）１．７６ＭＤａ  ＮａＨｙＡ、オートクレーブ前；（●）１．７６ＭＤａ  ＮａＨｙＡ、オートクレーブ後；（△）１．１ＭＤａ  ＮａＨｙＡ、オートクレーブ前；。赤色の点線は０．６７ＭＤａ  ＮａＨｙＡ粉末（固有粘度：１．３ｍ３／ｋｇ）を用いて得られた値を示す。ペーストが最初の１０分間以内に落ちてしまったという事実に起因して、オートクレーブ後の１．１ＭＤａ  ＮａＨｙＡ粉末について値は何も報告されなかった。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【国際調査報告】
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