(57)【要約】  本発明は、皮膚疾患、脱毛、およびその他の皮膚疾患を治療および予防するために有用な方法および組成物を含む。組成物は、第二の化合物または組成物と組み合せた形でＡＲＤエンハンサーを含む。一部の実施形態においては、第二の化合物は、殺菌剤、抗生物質、抗微生物ペプチド、ビタミンＡ、ビタミンＡ誘導体、レチノイド、抗炎症性化合物、および抗アンドロゲン化合物のうちの少なくとも一つである。
2010535213.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ）ＡＲＤエンハンサーと、
ｂ）殺菌剤、抗生物質、抗微生物ペプチド、ビタミンＡ、ビタミンＡ誘導体、レチノイド、および抗炎症性化合物からなる群から選択される第二の化合物と、
ｃ）薬学的に許容される担体と
を含む医薬組成物。
【請求項２】
前記ＡＲＤエンハンサーがＡＳＣ−Ｊ９またはＡＳＣ−Ｊ１５である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
前記ＡＲＤエンハンサーがＡＳＣ−Ｑ９またはＡＳＣ−Ｑ４４である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項４】
前記ＡＲＤエンハンサーが、ＡＳＣ−Ｑ４９、ＡＳＣ−Ｑ７７、およびＡＳＣ−Ｑ９８からなる群から選択される、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項５】
前記ＡＲＤエンハンサーが、ＡＳＣ−Ｑ９９、ＡＳＣ−Ｑ１０１、ＡＳＣ−Ｑ１０２、およびＡＳＣ−Ｑ１０３からなる群から選択される、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項６】
前記ＡＲＤエンハンサーがＡＳＣ−Ｑ１１０またはＡＳＣ−Ｑ１１１である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項７】
前記ＡＲＤエンハンサーが、ＡＳＣ−Ｑ１１３、ＡＳＣ−Ｑ１１６、ＡＳＣ−ＪＭ１、ＡＳＣ−ＪＭ２、およびＡＳＣ−ＪＭ４からなる群から選択される、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項８】
前記ＡＲＤエンハンサーが、ＡＳＣ−ＪＭ５、ＡＳＣ−ＪＭ６、ＡＳＣ−ＪＭ７、ＡＳＣ−ＪＭ１２、ＡＳＣ−ＪＭ１３、ＡＳＣ−ＪＭ１４からなる群から選択される、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項９】
前記ＡＲＤエンハンサーが、ＡＳＣ−ＪＭ１６、ＡＳＣ−ＪＭ１７、ＡＳＣ−ＪＭ１８、およびＡＳＣ−ＪＭ１９からなる群から選択される、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
前記殺菌剤が過酸化ベンゾイルである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
前記抗微生物ペプチドがカテジシンである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
ａ）皮膚疾患を患う患者を提供する過程と、
ｂ）治療上有効な量の請求項１に記載の医薬組成物を前記患者に投与する過程と
を含む、皮膚疾患の治療方法。
【請求項１３】
前記皮膚疾患が座瘡である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
ａ）脱毛を患う患者を提供する過程、および
ｂ）治療上有効な量の
ｉ）ＡＲＤエンハンサーと、
ｉｉ）発毛刺激活性を含む第二の組成物または化合物と
を含む医薬組成物を前記患者に投与する過程
を含む、脱毛の治療方法。
【請求項１５】
前記ＡＲＤエンハンサーがＡＳＣ−Ｊ９またはＡＳＣ−Ｊ１５である、請求項１４に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
前記ＡＲＤエンハンサーが、ＡＳＣ−Ｑ９、ＡＳＣ−Ｑ４４、ＡＳＣ−Ｑ４９、ＡＳＣ−Ｑ７７、ＡＳＣ−Ｑ９８、ＡＳＣ−Ｑ９９、ＡＳＣ−Ｑ１０１、ＡＳＣ−Ｑ１０２、ＡＳＣ−Ｑ１０３、ＡＳＣ−Ｑ１１０またはＡＳＣ−Ｑ１１１、ＡＳＣ−Ｑ１１３、ＡＳＣ−Ｑ１１６、ＡＳＣ−ＪＭ１、ＡＳＣ−ＪＭ２、ＡＳＣ−ＪＭ４、ＡＳＣ−ＪＭ５、ＡＳＣ−ＪＭ６、ＡＳＣ−ＪＭ７、ＡＳＣ−ＪＭ１２、ＡＳＣ−ＪＭ１３、ＡＳＣ−ＪＭ１４、ＡＳＣ−ＪＭ１６、ＡＳＣ−ＪＭ１７、ＡＳＣ−ＪＭ１８、およびＡＳＣ−ＪＭ１９からなる群から選択される、請求項１４に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本発明は、２００７年７月３１日に出願された米国特許出願第６０／９６２８８０号明細書に対する優先権の利益を請求するものであり、その内容は参照することによりその全体が本明細書に援用される。
【０００２】
本発明は、全体として、皮膚疾患および脱毛の治療および予防に有用な方法および組成物、そしてさらに具体的には、第二の化合物または組成物と組み合わせた形で提供されるアンドロゲン受容体分解（ＡＲＤ）エンハンサーを含み、この組合せが皮膚疾患または脱毛に対する有益な活性または効果を有している方法および組成物に関するものである。
【背景技術】
【０００３】
皮膚疾患および脱毛を患う人の間では、自尊心の低下やうつ病が見られることが多い。一部の場合では、精神的な影響は劇的であり得る。したがって、それぞれの病状を治療するための治療法が開発されつつある。本発明は、現在の治療法に取り組むと共に、成果が期待される新規な組成物を提供する。
【０００４】
座瘡（尋常性座瘡）は、性ホルモンに応答しての毛嚢脂腺単位（毛包およびそれに付随する皮脂線を含む皮膚構造）の変化により引き起こされる、皮膚の一般的な炎症性疾患である。座瘡は、顔、胸、および背中に見られることが最も多い。この症状は、思春期において最もよく発生し、一般的に個体が２０代前半に達した時点で消失するかまたは減少する傾向にある。しかしながら、座瘡は、人生で３０代から４０代に入っても、そして一部の場合ではさらに長い間、問題であり続ける可能性がある。
【０００５】
にきびまたは面皰とも呼ばれる、座瘡の基本的な病斑は、アンドロゲンに応答して皮脂線から分泌される過剰な油脂によってふさがれた、拡大した毛包である。さらに、死んだ皮膚細胞および細菌Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｃｎｅｓの集積も同様に、毛包を拡大させる一因となる。Ｐ．ａｃｎｅｓは、トリグリセリドを遊離脂肪酸に分割することのできるリパーゼを産生し、この遊離脂肪酸が濾胞細胞を刺激し得る。座瘡の重症度は、軽度から重度までの範囲にわたる可能性がある。面皰に加えて、丘疹、膿庖、結節、および炎症性嚢胞も同様に、座瘡に関連する病斑である。類表皮嚢胞とも呼ばれる、炎症を起こしていない皮脂嚢胞は、炎症性座瘡を伴って生じるかまたは単独で生じ得るが、これは通常は恒常的な特徴ではない。座瘡が消散した後、醜い瘢痕が残る可能性がある。
【０００６】
座瘡の治療には数多くの製品が利用可能であるが、最もよく知られているものとしては、剥離用製品、抗生物質、局所用殺菌剤、レチノイド、および経口ホルモン治療がある。しかしながら、それぞれに潜在的欠点がある。より最近になって、アンドロゲン受容体の分解を誘発できる化合物が、アンドロゲン受容体関連疾患のための潜在的な治療として開発中である。
【０００７】
剥離は、手作業で、または化学的に、皮膚から死んだ皮膚細胞を除去しようと試みるものであり、したがって、毛穴が詰まる確率を低下させる。剥離は、スクラブ製品を用いて手作業で行なわれてもよいし、または化学的に行われてもよい。化学的剥離用製品であるサリチル酸およびグリコール酸は、ケミカルピールとして利用可能である。剥離の結果、皮膚の薄片化または刺激が生じる可能性がある。
【０００８】
経口的または局所的な抗生物質が、細菌Ｐ．ａｃｎｅｓを攻撃するために通常用いられる。エリスロマイシン、クリンダマイシン、コトリモキサゾール、および数多くのテトラサイクリン誘導体（ドキシサイクリン、オキシテトラサイクリン、塩化テトラサイクリン、リメサイクリン、およびミノサイクリンなど）が、座瘡の治療として一般に処方される。抗生物質は、細菌コロニーを低減させる上で有効であるが、細菌の存在を低減させても皮脂腺からの油脂分泌に影響が及ぶことはなく、抗生物質に耐性を有する細菌株が発達する可能性もまた懸念される。
【０００９】
抗生物質と同様、過酸化ベンゾイルなどの局所用殺菌剤は、細菌Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｃｎｅｓを攻撃する。局所用殺菌剤は、細菌の耐性が見られないという点で抗生物質に比べさらなる利点があるが、強力な酸化剤である過酸化ベンゾイルは、皮膚の乾燥、発赤をひき起こす可能性があり、衣服を漂白し得る。したがって、使用頻度を減少させる方法または強力な酸化剤の濃度の低減が、現行の治療法に比べ顕著な利点であると思われる。
【００１０】
局所的レチノイドであるトレチノイン（商標名Ｒｅｔｉｎ−Ａ）、アダパレン（商標名Ｄｉｆｆｅｒｉｎ）、およびタザロテン（商標名Ｔａｚｏｒａｃ）などのレチノイドは、ビタミンＡに関係し、濾胞内層内の細胞周期を調節し得る。局所的レチノイドは、皮膚に重大な刺激をひき起こす可能性がある。ビタミンＡ誘導体であるイソトレノインといったような経口用レチノイド（商標名ＡｃｃｕｔａｎｅおよびＳｏｔｒｅｔ）は、皮脂腺からの油脂分泌を低減させると考えられているが、不利な副作用があるとも考えられている。
【００１１】
アンドロゲン性脱毛症は、男性における脱毛の最も一般的な形態である。この症状は、同様に男性型脱毛症としても一般的に知られている。毛髪は、両側のこめかみの上から始まって、明確なパターンで失われる。経時的に、生え際は後退して特徴的な「Ｍ字形」形状を形成する。毛髪は頭頂部でも同様に薄くなり、部分的なまたは完全な禿頭症まで進行することが多い。女性における脱毛パターンは、男性型脱毛症と異なっている。女性では、毛髪は頭全体にわたり薄くなり、生え際は後退しない。女性におけるアンドロゲン性脱毛症が完全な禿頭症を導くことは稀である。ミノキシジルが、アンドロゲン性脱毛症の唯一のＦＤＡ認可治療であるが、これは、アンドロゲンの機能を標的としておらず有効性は良く知られていない。
【００１２】
血清アンドロゲンレベルが高いことが、一部の女性における座瘡、アンドロゲン性脱毛症、および脱毛症の存在と相互に関連付けられている。アンドロゲンは、皮脂の排出に対するその効果について知られており、最終的な皮脂腺細胞の分化は、ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体リガンドにより補助される。ホルモン治療が、座瘡およびアンドロゲン性脱毛症に対する潜在的効果を有するものとして識別されている。抗アンドロゲン特性を有する化合物には、プロゲスチンと組み合わされたエストロゲン、例えば酢酸シプロテロン、酢酸クロルマジノン、デノゲストレル、ドロスピレノン、レボノゲストレル、酢酸ノルエチンドロン、ノルゲスチエートを伴う、エチニルエストラジオールが含まれる。抗アンドロゲン物質として用いられるその他の化合物としては、アンドロゲン受容体を直接遮断する（例えばフルタミド）か、またはさまざまなレベルでアンドロゲン活性を阻害するもの、例えばコルチコステロイド、スピロノラクトン、シメチジン、およびケトコナゾールが含まれる。しかしながら、アンドロゲンは数多くの生物学的プロセスに関与している。したがって、対応する受容体に対するアンドロゲンの結合を遮断または阻害すると、結果として、周囲の環境内で利用可能なアンドロゲンのレベルが増大して、それがその他のアンドロゲン関連性の生物学的プロセスに影響を及ぼし、望ましくない副作用を導く可能性がある。
【００１３】
アンドロゲン受容体の分解を誘発する新たな抗アンドロゲン化合物群が提案されている。これらの化合物は、アンドロゲン受容体およびリガンド（アンドロゲン）の結合を遮断する従来の抗アンドロゲン物質とは異なる。広く用いられている抗アンドロゲン療法とは異なり、これらの新たな化合物は、過剰なリガンド（アンドロゲン）の蓄積がアンドロゲン受容体に作用するのを妨げるものであり、したがって不利な効果が少ないものと予測されている。さまざまな化合物が提案されているが、この技術はまだ臨床的に利用可能ではなく、長期的な効果はなおも未知である。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
皮膚疾患の治療の大部分は単一の活性化合物または医薬品を利用しているものの、経口抗生物質と組み合わされた局所的レチノイドを含む治療法の組合せが、軽度から中度の炎症性座瘡において調査されている。これらの組み合わせは、経口用抗生物質の急速な用量減少およびより迅速な中止を導き、有効性を増大させ、抗生物質に対する細菌の耐性の発生を低減させると考えられている。治療法のいくつかの組み合わせが提案されているが、現行の治療法は、皮膚疾患に関連する症候を低減させようとするものであり、疾患の原因を選択的に標的化していない。したがって、皮膚疾患を導く経路を選択的に標的化し、一方で関連する症候も治療する方法および組成物を開発する必要性が残されている。
【課題を解決するための手段】
【００１５】
本発明は、皮膚疾患および脱毛症の現行の治療における欠点に対処し、関係する利点を提供するものである。現在、アンドロゲン活性を遮断しようとするアンドロゲン関連の局所的治療法は全く存在せず、アンドロゲン性脱毛症の経口治療であるフィナステリドのみが、テストステロンからＤＨＴへの転換を遮断するために用いられている。根本的なアンドロゲン受容体の存在または利用可能性を調節する方法は存在せず、かくして疾患の原因は標的化されない。本発明は、アンドロゲン受容体自体の存在を少なくとも部分的に調節する組成物および方法を提供することによりこの欠点に対処し、かくしてより効果的な治療を提供する。一部の実施形態においては、少なくとも一つの化合物が本明細書中で記載されているようなＡＲＤエンハンサーである、組み合わされた調節アプローチが提供される。
【００１６】
本発明の方法および組成物は、開示された化合物またはその誘導体のうちの一つ以上を投与することによって、さまざまな皮膚疾患および毛髪疾患を治療または予防する。本明細書中に含まれるＡＲＤエンハンサーには、図１および２に示されているものが含まれるがこれらに限定されるわけではない。ＡＲＤエンハンサーの中には、ＡＳＣ−Ｊ９、ＡＳＣ−Ｊ１５、ＡＳＣ−Ｑ９、ＡＳＣ−Ｑ４４、ＡＳＣ−Ｑ４９、ＡＳＣ−Ｑ７７、ＡＳＣ−Ｑ９８、ＡＳＣ−Ｑ９９、ＡＳＣ−Ｑ１０１、ＡＳＣ−Ｑ１０２、ＡＳＣ−Ｑ１０３、ＡＳＣ−Ｑ１１０、またはＡＳＣ−Ｑ１１１、ＡＳＣ−Ｑ１１３、ＡＳＣ−Ｑ１１６、ＡＳＣ−ＪＭ１、ＡＳＣ−ＪＭ２、ＡＳＣ−ＪＭ４、ＡＳＣ−ＪＭ５、ＡＳＣ−ＪＭ６、ＡＳＣ−ＪＭ７、ＡＳＣ−ＪＭ１２、ＡＳＣ−ＪＭ１３、ＡＳＣ−ＪＭ１４、ＡＳＣ−ＪＭ１６、ＡＳＣ−ＪＭ１７、ＡＳＣ−ＪＭ１８、およびＡＳＣ−ＪＭ１９が含まれる。
【００１７】
本発明の一態様においては、皮膚疾患の予防または治療のための組成物が提供される。この態様においては、第一の化合物はアンドロゲン受容体分解（ＡＲＤ）エンハンサーである。ＡＲＤエンハンサーは、受容体−リガンド（アンドロゲン）結合に干渉する従来の抗アンドロゲン物質とは異なるアンドロゲン受容体の分解を調節する化合物である。一実施形態において、ＡＲＤエンハンサーは、アンドロゲン受容体の分解を誘発する。別の実施形態において、ＡＲＤエンハンサーは、ＡＲＤエンハンサーの不存在下と比較してアンドロゲン受容体の分解速度を増大させる。さらに別の実施形態では、ＡＲＤエンハンサーは、突然変異アンドロゲン受容体の凝集を防止する。さらに別の実施形態では、ＡＲＤエンハンサーは、アンドロゲンおよびアンドロゲン受容体（転写因子）介在性の遺伝子活性化を防止する。第二の化合物は、殺菌剤、抗生物質、抗微生物ペプチド、ビタミンＡ、ビタミンＡ誘導体またはレチノイド、および炎症性化合物を含むさまざまな化合物のうちの少なくとも一つから選択される。かかる化合物の組み合わせは、現行の治療に比べて有害な効果を削減しながら、皮膚疾患のより効果的な治療を提供する。限定的はしないが、発明者らは、ＡＲＤエンハンサーが皮脂腺からの油脂の分泌を低減させ、皮脂腺細胞の増殖を低減させるか、または皮脂腺細胞の分化を阻害するかもしくは低減させると考えている。発明者らは、第二の化合物が細菌コロニーを標的化し得るか、またはさまざまな皮膚疾患を治療する場合に必要に応じて追加の抗炎症性補助を提供すると考えている。したがって本発明は、皮膚疾患の症候の治療および経路の調節を可能にし、それにより皮膚疾患の発生を防止または制限する。
【００１８】
本発明の別の態様においては、アンドロゲン受容体分解（ＡＲＤ）エンハンサー、殺菌剤、および薬学的に許容される担体を含む医薬組成物が開示される。この医薬品は、所望の投与経路に応じて局所的に塗布、注射などされ得る。好ましい実施形態においては、殺菌剤は過酸化ベンゾイルである。
【００１９】
本発明のさらなる態様においては、アンドロゲン受容体分解（ＡＲＤ）エンハンサー、抗生物質、および薬学的に許容される担体を含む医薬組成物が開示される。
【００２０】
本発明のさらに別の態様においては、アンドロゲン受容体分解（ＡＲＤ）エンハンサー、抗微生物ペプチド、および薬学的に許容される担体を含む医薬組成物が開示される。
【００２１】
本発明のさらに別の態様においては、アンドロゲン受容体分解（ＡＲＤ）エンハンサー、ビタミンＡ、ビタミンＡ誘導体またはレチノイド、および薬学的に許容される担体を含む医薬組成物が開示される。
【００２２】
本発明のさらに別の態様においては、アンドロゲン受容体分解（ＡＲＤ）エンハンサー、抗炎症性化合物、および薬学的に許容される担体を含む医薬組成物が開示される。
【００２３】
本発明のさらに別の態様においては、治療上有効な量の本発明の医薬組成物を、それを必要とする個体に対し投与する過程を含む、皮膚疾患を治療または予防する方法が提供される。一実施形態において、医薬組成物はＡＲＤエンハンサーおよび殺菌剤を含む。別の実施形態において、医薬組成物はＡＲＤエンハンサーおよび抗生物質を含む。さらに別の実施形態において、医薬組成物はＡＲＤエンハンサーおよび抗微生物ペプチドを含む。さらに別の実施形態において、医薬組成物は、ＡＲＤエンハンサー、およびビタミンＡ、ビタミンＡ誘導体またはレチノイドを含む。さらに別の実施形態において、医薬組成物は、ＡＲＤエンハンサーおよび抗炎症性化合物を含む。さまざまな実施形態において、皮膚疾患の限定的意味のない例としては、座瘡、脱毛症、アトピー性皮膚炎、酒さ、狼瘡、腋窩臭症、創傷などがある。
【００２４】
本発明のさらにその他の態様においては、化合物の組み合わせが、化粧品として、化粧品処方物中に提供される。本発明は、化粧品に許容される担体中に、ＡＲＤエンハンサーと、限定はしないが殺菌剤、抗生物質、抗微生物ペプチド、ビタミンＡ、ビタミンＡ誘導体またはレチノイド、および抗炎症性化合物などの化合物とを含む化粧品組成物を含む。
【００２５】
本発明のさらにその他の態様においては、ＡＲＤエンハンサーは、脱毛の治療または予防のための少なくとも一つの組成物または化合物と組み合わされる。ＡＲＤエンハンサーは、オリゴペプチド、ペプチド、抽出物、ヌクレオチドなどと組み合わされ得る。一部の実施形態において、本発明の組成物は、アンドロゲン性脱毛症を治療する。一部の実施形態においては、脱毛を予防する可能性を指摘されている化合物が、発毛を刺激すると考えられる化合物と組み合わされて提供される。
【図面の簡単な説明】
【００２６】
【図１】例示的なＡＲＤエンハンサーであるＡＳＣ−Ｊ１５およびＡＳＣ−Ｊ９の構造式を示す図である。
【図２】さまざまなＡＲＤエンハンサーの構造式の表を（媒体対照と比較したＡＲの低減の百分率に対応する）相対的な効力についての対応する値と共に示す図である。ヒト前立腺癌細胞系ＬＮＣａＰを、対応するＡＲＤエンハンサーの存在下で４８時間インキュベートした後に、ウェスタンブロット分析により抗ＡＲ活性をアッセイした。活性についての値表示は、実施例２で提供される表１中で見ることができる。
【図３Ａ】化合物ＡＳＣ−Ｑ４９、ＡＳＣ−Ｑ１０３、ＡＳＣ−ＪＭ１２、ＡＳＣ−ＪＭ１４に曝露した後の、ヒト前立腺癌細胞（ＬＮＣａＰ）におけるアンドロゲン受容体（ＡＲ）タンパク質の発現の低減を実証するウェスタンブロット分析を示す図である。
【図３Ｂ】化合物ＡＳＣ−Ｑ４９、ＡＳＣ−Ｑ７７、ＡＳＣ−ＪＭ４、およびＡＳＣ−ＪＭ５に曝露した後の、ヒト前立腺癌細胞（ＬＮＣａＰ）におけるアンドロゲン受容体（ＡＲ）タンパク質の発現の低減を実証するウェスタンブロット分析を示す図である。
【図４】ＡＳＣ−Ｊ９で処理されたＬＮＣａＰ細胞における細胞成長（増殖）およびアンドロゲン受容体の発現レベルのグラフ表示を示す図である。ＬＮＣａＰ細胞を播種し、２日間インキュベートした。ＡＳＣ−Ｊ９を、ＤＨＴを伴っておよび伴わずに、５μＭの最終濃度で培地に添加した。図４Ａを参照すると、結果は、ＤＨＴが培養中のＬＮＣａＰ細胞の成長を促進する一方で、ＡＳＣ−Ｊ９が、ＤＨＴが存在するかしないかに関わらず細胞の成長を有意に阻害するということを実証している。図４Ｂは、基底（０日目）値に対する百分率として、ＡＳＣ−Ｊ９試料について標準化されたアンドロゲン受容体シグナルを示している。細胞溶解物をＡＳＣ−Ｊ９と共に培養した細胞から収集し（図４Ａ）、ウェスタンブロット法によりＡＲの発現を検出した。データは、ＡＳＣ−Ｊ−９によって誘発されるＬＮＣａＰ細胞におけるＡＲの発現の阻害が、細胞成長の阻害と相関するということを示した。
【図５】ＤＨＴの存在下または不存在下でＡＳＣ−Ｊ９と共に４８時間培養したＬＮＣａＰ細胞溶解物のウェスタンブロット分析を示す図である。データは、ＡＳＣ−Ｊ９が、ＤＨＴが存在するかしないかに関わらずＡＲ、ＰＲタンパク質の発現を低減させるが、ＥＲ、ＰＰＡＲ、ＲＸＲ、ＨＳＰ、およびアクチンなどのその他のタンパク質の発現には影響を及ぼさないということを実証した。
【図６】アンドロゲン受容体を分解するＡＳＣ−Ｊ９の能力の特異性を実証する、Ｔ４７Ｄ（ヒト乳癌）細胞溶解物のウェスタンブロット分析を示す図である。データは、ＡＳＣ−Ｊ９がアンドロゲン受容体（ＡＲ）の発現を選択的に低減させることを実証した。ペルオキソーム増殖因子活性化受容体ガンマおよびベータ（ＰＰＡＲγ、ＰＰＡＲβ）、レチノイドＸ受容体アルファ（ＲＸＲα）、エストロゲン受容体アルファおよびベータ（ＥＲαおよびＥｒβ）、細胞外シグナル関連キナーゼ（ＥＲＫ）、熱ショックタンパク質７０（ＨＳＰ７０）、ならびにアクチンなどの、その他の受容体タンパク質の発現は影響を受けなかった。
【図７Ａ】タンパク質合成阻害物質であるシクロヘキサミドおよび化合物ＡＳＣ−Ｊ９に曝露した際のＬＮＣａＰ細胞溶解物のウェスタンブロット分析を示す図である。タンパク質合成阻害物質の存在下での経時的なアンドロゲン受容体の低減は、ＡＳＣ−Ｊ９がＡＲタンパク質の分解を増強するということを示す。
【図７Ｂ】ＡＳＣ−Ｊ９が、ＡＲタンパク質の発現を低減させることのできる唯一の抗アンドロゲン物質であり、ＣＰＡ（酢酸シプロテロン）、ＨＦ（ヒドロキシフルタミド）、またはフィナステリドなどの従来の抗アンドロゲン物質ではないことを実証するウェスタンブロットを示す図である。
【図８Ａ】プラスミドＧＦＰＡＲ（これは緑色蛍光タンパク質遺伝子および野生型アンドロゲン受容体遺伝子を含有していた）でトランスフェクトしたサル腎臓ＣＯＳ−１細胞の蛍光顕微鏡写真を示す図である。トランスフェクトした細胞を、媒体のみ（対照）または試験化合物ＡＳＣ−Ｊ９で処理した。蛍光イメージング条件下で、緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰＡＲ）について顕微鏡写真を撮影した。対照細胞は、核内に高密度量の蛍光（すなわち野生型ＡＲ）を含み、細胞質内に比較的弱い蛍光を含んでいた。ＡＳＣ−Ｊ９で処理した細胞は、核および細胞質の両方において弱い蛍光が検出され、このことは、ＡＳＣ−Ｊ９がＡＲの発現を低減させる（または低下させる）ことを示した。
【図８Ｂ】実施例５中で詳述されているように（緑色蛍光タンパク質および突然変異アンドロゲン受容体のポリＱ４９遺伝子を含んでいた）プラスミドＧＦＰＡＲＱ４９でトランスフェクトしたサル腎臓ＣＯＳ−１細胞の蛍光顕微鏡写真を示す図である。トランスフェクトした細胞を、媒体のみ（対照）または試験化合物ＡＳＣ−Ｊ９で処理した。蛍光イメージング条件で、緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰＡＲＱ４９）について顕微鏡写真を撮影した。対照細胞は、細胞質内に大量の蛍光封入体または凝集体（すなわち凝集した突然変異ｐｏｌｙＱ４９）を含んでいた。ＡＳＣ−ＪＰで処理した細胞の蛍光封入体の含有量は実質的にはさらに少なく、このことは、突然変異ｐｏｌｙＱ４９アンドロゲン受容体の発現がＡＳＣ−Ｊ９での処理により阻害されたかまたは低下したということを示唆していた。
【図９】実施例６で記載されるように処理したファッジーラットの代表的な写真を示す図である。ファジーラットを、媒体のみ（左側の動物）またはＡＳＣ−Ｊ９（２５マイクロモル濃度、右側の動物）を含有する局所用クリームで、示した時間処理した。写真は、皮脂腺のバンドおよび皮脂分泌（肌色）が、ＡＳＣ−Ｊ９で処理したファッジーラット（右側の動物）において４〜５週間以内で低減したことを示す。
【図１０Ａ−Ｅ】ファッジーラットの皮膚内の皮脂腺の代表的な写真（図１０Ａ〜Ｃ）、ならびに腺管および腺葉のサイズのグラフ表示（図１０Ｄ、１０Ｅ）を示す図である。皮膚組織の試料（分割した皮膚）を調製し、顕微鏡検査によって検査した。図１０Ａ〜Ｃは、媒体対照（８Ａ）または化合物ＡＳＣ−Ｊ９（８Ｂ）を用いて処理した際の、および去勢ラット（８Ｃ）の、（分割した皮膚試料の）皮脂腺の腺管および腺葉を示す写真である。図１０Ｄでは、良好に保存された腺小葉の縁部をトレースすることで腺葉のサイズを測定し、その後、Ｉｍａｇｅ  Ｊソフトウェアで定量化し、トレースした領域の内部に含まれた画素数として表した。得られたデータは、媒体のみでの局所的治療（対照クリーム）では、腺葉サイズの顕著な変化が発生しないことを示した。さまざまな濃度の試験化合物ＡＳＣ−Ｊ９を用いた雄ラットの局所的処理は、脂腺葉のサイズの顕著な低減をもたらしたが、去勢により引き起こされるほどではなく、それでも従来の抗アンドロゲン物質であるフルタミドよりは優れている。図１０Ｅは、皮膚に塗布したＡＳＣ−Ｊ９が、去勢効果に匹敵し、かつフルタミドよりも優れた形で、雄のファッジーラットにおける皮脂腺の腺管サイズを顕著に低減させたことを示す代表的なデータを示している。
【図１１Ａ】実施例７に記載されるように、脱毛症（脱毛または禿頭症）の動物モデルの研究から得られた結果を示す図である。６週齢の雄Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウスの毛を電気バリカンで剃り、その後、脱毛クリームで処理した。最も左の２頭の動物（「媒体＃１」および「媒体＃２」の印あり）で代表される一群のマウスの毛を剃り、エタノールのみで処理した。最も右側の２頭の動物（「テストステロン＃１」および「テストステロン＃２」）で代表される第二群のマウスの毛を剃り、午前中はテストステロン／エタノール溶液で、そして午後は対照溶液で処理した。２０日の処理期間の終了時点で動物の写真を撮影した。エタノール媒体単独（テストステロンを有さない）で処理したマウスは、２０日間の局所的処理の後、剃毛した領域において急速な再発毛を示した。テストステロンで処理したマウスは、２０日間の局所的処理の後、剃毛した領域においてほとんどまたは全く再発毛を示さなかった。
【図１１Ｂ】実施例７において記載されるように、脱毛症（脱毛または禿頭症）の動物モデルの研究から得られたさらなる結果を示す図である。６週齢の雄Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウスの毛を電気バリカンで剃り、その後脱毛クリームで処理した。一群のマウス（「テストステロン＃１」および「テストステロン＃２」と印づけされた動物により代表される）の毛を剃り、午前中はテストステロンで、午後は対照溶液で、２０日間局所的に処理した。第二群のマウス（「ＡＳＣ−Ｊ９／テストステロン＃１」および「ＡＳＣ−Ｊ９／テストステロン＃２」と印づけされた動物により代表される）の毛を剃り、午前中はテストステロンで、そして午後はＡＳＣ−Ｊ９で、２０日間局所的に処理した。午前中にテストステロンを局所的に塗布し午後は対照溶液のみを塗布したマウスは、２０日間の処理の後、剃毛した領域においてほとんどまたは全く再発毛を示さなかった。午前中にテストステロンを局所的に塗布し午後はＡＳＣ−Ｊ９を塗布したマウスは、８日目に発毛を示し、２０日の局所的なＡＳＣ−Ｊ９処理の後、剃毛した領域において完全な再発毛を示した。これらの結果は、ＡＳＣ−Ｊ９の局所的塗布が、動物モデルにおけるテストステロン誘発型の発毛抑制を克服することができるということを実証している。
【図１２】２００万個のＬＮＣａＰ細胞を接種したヌードマウスの写真を示す図である。マウスには、ＡＳＣ−Ｊ９（体重１ｋｇあたり５０ｍｇ）または媒体対照のいずれかを、一週に３回、７週間にわたり腹腔内注射した。７週間後に、腫瘍を切除し、秤量した。ＡＳＣ−Ｊ９で処理したヌードマウスは、媒体対照で処理したマウスから切除した腫瘍と比較して腫瘍サイズにおいて７５％の低減を示し、このことは、ＡＳＣ−Ｊ９化合物がインビボで腫瘍細胞の成長を阻害できるということを示した。図１２は、ヌードマウスにおけるＬＮＣａＰ成長の低減を実証する写真を示す図である。ＡＳＣ−Ｊ９マウスに、体重１ｋｇあたり１００ｍｇをＩＰ（腹腔内）注射を介して一週に３回、７週間にわたり投与した。媒体対照動物と比較して、腫瘍の重量は７５％減少し、血清ＰＳＡレベルは９０％低下した。
【図１３】Ｂａｌｂ／ｃマウスを用いた、動物モデルにおける創傷の治癒を早めるＡＳＣ−Ｊ９の能力を実証する図である。データは、動物の皮膚上の人工的創傷を治療した結果を示している。引退した種畜の雄Ｂａｌｂ／ｃマウスの頸部に皮膚パンチを用いて皮膚の人工的創傷を作った。その後、媒体クリームまたはＡＳＣ−Ｊ９（２５μＭ）を含むクリームで動物の創傷領域を一日に２回処理した。図１３中のデータは、ＡＳＣ−Ｊ９で処理した動物は媒体で処理した動物と比較して、５日目により小さい創傷開口を有すること、そして１０日目にはＡＳＣ−Ｊ９で処理したマウスにおいて創傷が完全に治癒していたこと、一方、媒体で処理した動物においては、創傷の瘢痕化が目に見えて残っていたことを示している。このデータは、ＡＲＤエンハンサーであるＡＳＣ−Ｊ９が創傷の治癒を早める能力を有することを示している。
【図１４Ａ】実施例１０で記載されるように、座瘡を患う男性のボランティアの額に試験化合物ＡＳＣ−Ｊ９（担体基剤中２．５マイクロモル濃度）を局所的塗布した結果生じる、皮膚の症状に対する代表的な可視的改善を実証する写真を示す図である。
【図１４Ｂ】実施例１０で記載されるように、ＡＳＣ−Ｊ９（６２５μＭ）を用いた、座瘡を患う別の男性（図１４Ｂに背中を示す）における、皮膚の症状に対する代表的な可視的改善を実証する写真を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００２７】
本発明は、「（置換フェニル）プロペナール部分を有する化合物、その誘導体、生物活性、およびその使用」という発明の名称の米国特許出願第１２／００８１２４号明細書を参照により援用する。本明細書において記載されているＡＲＤエンハンサーの合成方法ひいては調製方法は、引用された出願において見ることができる。援用される出願においては、さらなる定義も見ることができる。
【００２８】
Ａ.  定義
別段の定義がない限り、本明細書において使用される全ての技術的用語および科学的用語は、本発明が属する技術分野の当業者により一般に理解されるものと同じ意味を有する。全ての特許、出願、公開された出願、およびその他の刊行物は、その全体が参照により援用される。本明細書における用語について複数の定義が存在する場合、別段の記載のない限り、本節における定義が他に優先するものとする。
【００２９】
本明細書で使用する「アンドロゲン受容体」という用語または「ＡＲ」は、アンドロゲン、テストステロン、およびＤＨＴを特異的に結合する、細胞内タンパク質受容体を意味する。ＡＲは、アンドロゲン受容体の全ての哺乳動物アイソフォーム、スプライシング変異体、突然変異体、および多型を含む。
【００３０】
本明細書で用いられる「化粧品に許容される」という用語は、動物、より詳細にはヒトにおいて使用するための化粧品として連邦政府または州政府の規制当局によって認可されているかまたは認可可能であるということを意味する。本明細書において使用される「化粧品に許容される担体」という用語は、化合物と共に組み込まれるかまたは投与される、限定はしないがリポソームなどの、認可された、または認可可能な希釈剤、アジュバント、賦形剤、または担体を意味する。
【００３１】
本明細書で使用される「アンドロゲン受容体の分解を増強する」という用語は、プラセボまたは未処理の場合と比較してアンドロゲン受容体の数量を低減させること、またはアンドロゲン受容体の分解（低減）速度を増大させることを意味する。
【００３２】
本明細書で使用される「長時間放出」という用語は、化合物または組成物の遅延放出、一定期間にわたり減速された放出、連続放出、不連続放出、または持続放出をもたらす投与形態を意味する。
【００３３】
本明細書で使用される「ペプチド」という用語は、共に連結された一連のアミノ酸を意味する。「オリゴペプチド」は、長さが短いペプチドを意味する。
【００３４】
本明細書で使用される「薬学的に許容される」という用語は、動物、より詳細にはヒトにおいて使用するために連邦政府または州政府の規制当局によって認可されているかまたは認可可能であるということを意味する。「薬学的に許容される担体」という用語は、化合物と共に組み込まれるかまたは投与される、限定はしないがリポソームなどの、認可された、または認可可能な希釈剤、アジュバント、賦形剤、または担体を意味する。
【００３５】
本明細書で使用される「プロドラッグ」という用語は、インビボで投与された際に、一つ以上の過程もしくはプロセスによって代謝されるか、またはその他の形で化合物の生物学的、薬学的、もしくは治療的に活性な形態へと転換される化合物を意味する。プロドラッグを生産するためには、薬学的に活性な化合物を、活性化合物が代謝プロセスによって再生されるような形で修飾する。プロドラッグは、薬物の代謝安定性および輸送特性を改変するように、または副作用もしくは毒性をマスキングするように、または薬物の風味を改善するように、または薬物のその他の特徴もしくは特性を改変するように設計されてよい。
【００３６】
本明細書において使用される「治療上有効な量」という用語は、疾病または疾患を治療するために患者に投与した場合にその疾病または疾患に対するかかる治療を作用させるのに充分である化合物または組成物の量を意味する。「治療上有効な量」は、化合物または組成物、疾病または疾患およびその重症度、ならびに治療対象の患者の年齢および体重に応じて変動するものである。
【００３７】
Ｂ.  皮膚疾患の治療のための組成物
発明者は、本明細書において提供される化合物の組み合わせが、皮膚疾患を治療するための現行の治療法と比較した場合に増大した治療上の有用性を有するものであると考えている。したがって、本発明の一態様においては、皮膚疾患の予防または治療のための組成物が提供される。本発明の組成物は、医療業界または製薬業界の当業者に対する指針として以下で提供される多数の実施形態で提供されてよい。したがって、本発明の実施形態は、皮膚疾患、所望の投与計画または治療計画に応じて望ましいものであり得るさまざまな非限定的な製剤または有用な組み合わせを実証するものである。本発明の組成物は、少なくとも二つの化合物を含む。一つの化合物は、アンドロゲン受容体分解（ＡＲＤ）エンハンサーを含む。第二の化合物は、皮膚疾患の治療または予防に対する有用性を有することが知られているかまたはその有用性を有する可能性を指摘されているさまざまな化合物から選択可能である。さまざまな実施形態において、第二の化合物は、殺菌剤、抗生物質、抗微生物ペプチド、抗炎症性化合物、皮膚疾患に関連する一つ以上の症候を低減させることのできる化合物、またはそれらの組合せを含み得る。したがって本発明は、本明細書において提供されるかまたは示唆される一つ、二つ、三つ、またはそれ以上の化合物と組み合わせた形で提供されるＡＲＤエンハンサーを含み得る。
【００３８】
アンドロゲン受容体分解（ＡＲＤ）エンハンサー
アンドロゲン受容体分解（ＡＲＤ）エンハンサーは、アンドロゲン受容体の分解を調節するかまたは増大させる化合物である。数多くの皮膚疾患がアンドロゲン関連遺伝子の活性化経路により引き起こされるかまたは影響されると考えられている。現行の抗アンドロゲン療法は、受容体−リガンド（アンドロゲン）結合を標的とするかまたはこれに干渉するが、これは、内因性アンドロゲンレベルが低い場合にのみ有効に作用し、時として過剰なアンドロゲンの蓄積を生じさせるか、またはアンドロゲン調節性の機能を完全に遮断して、その結果、さらにその他のアンドロゲン関連機能に影響を及ぼす可能性がある。したがって、過剰なリガンドの蓄積を生じさせるこれまでの治療は、治療上の望ましくない副作用をもたらす可能性がある。これとは対照的に、本発明のＡＲＤエンハンサーは、従来の治療法と比較して内因性リガンド（アンドロゲン）の蓄積を誘発しない、有効な代替案を提供する。さらに、その機能が内因性アンドロゲンによる影響を受けないＡＲＤエンハンサーは、アンドロゲン受容体の発現を低減させ得、これにより、リガンド（アンドロゲン）の活性が下方調節され得る。本明細書に参照により援用されている「（置換フェニル）プロペナール部分を有する化合物、その誘導体、生物活性、およびその使用」という発明の名称の米国特許出願第１２／００８１２４号明細書は、ＡＲＤ増強活性を有すると考えられている化合物の一覧を開示しているが、この活性はさまざまである、好ましい実施形態において、ＡＲＤエンハンサーは、ＡＳＣ−Ｊ９、ＡＳＣ−Ｊ１５、ＡＳＣ−Ｑ９、ＡＳＣ−Ｑ４４、ＡＳＣ−Ｑ４９、ＡＳＣ−Ｑ７７、ＡＳＣ−Ｑ９８、ＡＳＣ−Ｑ９９、ＡＳＣ−Ｑ１０１、ＡＳＣ−Ｑ１０２、ＡＳＣ−Ｑ１０３、ＡＳＣ−Ｑ１１０またはＡＳＣ−Ｑ１１１、ＡＳＣ−Ｑ１１３、ＡＳＣ−Ｑ１１６、ＡＳＣ−ＪＭ１、ＡＳＣ−ＪＭ２、ＡＳＣ−ＪＭ４、ＡＳＣ−ＪＭ５、ＡＳＣ−ＪＭ６、ＡＳＣ−ＪＭ７、ＡＳＣ−ＪＭ１２、ＡＳＣ−ＪＭ１３、ＡＳＣ−ＪＭ１４、ＡＳＣ−ＪＭ１６、ＡＳＣ−ＪＭ１７、ＡＳＣ−ＪＭ１８、およびＡＳＣ−ＪＭ１９からなる群から選択される。図２は、好ましいＡＲＤエンハンサーの構造式を各々の相対的な効力を実証するデータと共に提供するものである。この効力は、対応する化合物の存在下でＬＮＣａＰ（ヒト前立腺癌細胞系）を４８時間インキュベートした後、ウェスタンブロットによって決定された。低減の百分率は、媒体対照との比較により決定された。
【００３９】
皮膚疾患に関しては、アンドロゲン受容体分解（ＡＲＤ）エンハンサーは、毛包と関連する皮脂腺による油脂（皮脂）の分泌を低減させると考えられており、これは、細菌（Ｐ．Ａｃｎｅ）の増殖を制限するかまたは減少させる。油性物質である皮脂は、アンドロゲン受容体の刺激に応答して皮脂腺によって分泌される。皮脂腺の刺激が皮脂腺細胞の増殖または皮脂の生産の増加を引き起こすか否かに関わらず、リガンド結合型アンドロゲン受容体は、皮脂生産の増加の原因であると考えられている。したがって、アンドロゲン受容体の分解の増強、すなわちリガンド（アンドロゲン）による活性化の回避により、皮脂腺からの皮脂の分泌が減少するか、皮脂腺細胞の増殖が低減するか、または皮脂腺細胞の分化が阻害されるかもしくは低減し、それにより皮脂の存在が低減し、細菌または細菌感染の存在が低減する。
【００４０】
ＡＲＤエンハンサーは、受容体−リガンドの相互作用において作用する従来の抗アンドロゲン物質とは異なる形で作用することから、ＡＲＤエンハンサーは、ＡＲ機能に関連する別のアンドロゲンまたはリガンドに実質的に干渉すること無く、皮脂腺の調節を可能にし得る。化合物（ＡＲＤエンハンサー）の一つのサブセットが、プロテオソーム依存性（またはユビキチン介在性）のタンパク質分解経路を介して作用して、細胞内アンドロゲン受容体の分解を誘発すると考えられている。ＡＳＣ−Ｊ９などの化合物は、アンドロゲン受容体の分解を誘発し、座瘡の存在に影響を及ぼすことが示されている。図２で示されている化合物も同様に、アンドロゲン受容体の発現を減少させることが示されている。
【００４１】
本発明のＡＲＤエンハンサーは、皮脂腺に影響を及ぼすものに限定されない。本発明のＡＲＤエンハンサーはさまざまな細胞型に作用するかまたは影響を及ぼし、その結果、皮膚疾患に関連する一つ以上の症候が低減する。したがって、経路は単なる例として提供されており、本発明に関して非限定的である。
【００４２】
殺菌剤
本発明の別の実施形態において、ＡＲＤエンハンサーは皮膚疾患の予防または治療のための殺菌剤と組み合わせて提供される。組み合わせて使用される場合、ＡＲＤエンハンサーは皮脂腺細胞または皮脂腺に影響を及ぼすことができ、一方、殺菌剤は、Ｐ．ａｃｎｅｓまたはその他の細菌株の集団に影響を及ぼす。限定はしないが、局所的な細菌コロニーが存在する確率が高いために、座瘡、酒さなどの皮膚疾患、および創傷治癒にとって、この実施形態は特に有用である。しかしながら、この実施形態は、細菌集団の低減が望まれるあらゆる皮膚疾患など、広い有用性を有するものである。
【００４３】
殺菌特性を有する数多くの化合物が当該技術分野において公知であり、本発明で使用されてよい。化合物は、クラスに従って、または所望の特性もしくは作用様式に従って同定可能である。例としては、ソルビン酸、安息香酸、およびパラヒドロキシ安息香酸が含まれる。本発明の特に望ましい一つの殺菌剤は、過酸化ベンゾイルである。過酸化ベンゾイルは、過酸化基により結合した二つのベニル基（ＣＨＯのＨが除去されたベンズアルデヒド）を含む。過酸化ベンゾイルは、過酸化ナトリウムと塩化ベンゾイルとの組み合わせによって形成され得る（過酸化ベンゾイルおよび塩化ナトリウムを形成する）。過酸化ベンゾイルは、ゲルまたはクリームの形態で、典型的には約０．１％〜約２０％、または約１％〜約１０％の濃度で投与されてよいが、これらの範囲外の濃度も同様に、本発明によって包含される。アンドロゲン受容体分解（ＡＲＤ）エンハンサーと組み合わせた形で使用する場合、過酸化ベンゾイルの用量を低減させてもよく、これにより、過酸化ベンゾイルに基づいた現行の治療法に付随することが多い皮膚の乾燥または刺激の頻度が低減する。
【００４４】
抗生物質
抗生物質は、殺菌性（細菌を殺す化合物）または静菌性（細菌が分裂するのを防ぐ化合物）のいずれかであるものとして分類される。抗生物質は、ウィルス、真菌、または寄生虫に対しては限定的な効果しか有さないか、または全く効果を有さない。抗生物質は宿主に対しては比較的無害であり、したがって、細菌感染を治療するために使用可能である。しかしながら、抗生物質を頻繁に使用すると、単独で使用した場合のその他の望ましくない特徴の中でも特に、細菌の耐性株が生じた。本発明において使用し得る抗生物質のクラスとしては、アミノグリコシド類（アミカシン、ゲンタマイシン、カナマイシン、ネオマイシン、ネチルマイシン、ストレプトマイシン、およびトブラマイシンを含む）、カバセフェム類（ロラカルベフを含む）、カバペネム類（エルテペネム、イミペネム／シラスタチン、およびメロペネムを含む）、第一世代セファロスポリン類（セファドロキシル、セファゾリン、およびセファレキシンを含む）、第二世代セファロスポリン類（セファクロル、セファマンドール、セフォキシチン、セフプロジル、およびセフロキシムを含む）、第三世代セファロスポリン類（セフィキシム、セフジニル、セフジトレン、セフォペラゾン、セフォタキシム、セフポドキシム、セフタジジム、セフチブテン、セフチゾキシム、およびセフトリアキソンを含む）、第四世代セファロスポリン類（セフェピムを含む）、糖ペプチド類（テイコプラニンおよびバンコマイシンを含む）、マクロライド類（アジスロマイシン、クラリスロマイシン、ジリスロマイシン、エリスロマイシン、ロキスロマイシン、およびトロレアンドマイシンを含む）、モノバクタム（アズトレオナムを含む）、ペニシリン類（アモキシシリン、アンピシリン、アズロシラン、カルベニシリン、クロキサシリン、ジクロキサシリン、フルクロキサシリン、メズロシリン、ナフシリン、ペニシリン、ピペラシリン、およびチカルシリンを含む）、ポリペプチド類（バシトラシン、コリスチン、およびポリミキシンＢを含む）、キノロン類（シプロフロキサシン、エノキサシン、ガチフロキサシン、レボフロキサシン、ロメフロキサシン、モキシフロキサシン、ノルフロキサシン、オフロキサシン、およびトロバフロキサシンを含む）、スルホンアミド類（マフェニド、プロントジル、スルファセタミド、スルファメチゾール、スルファニルイミド、スルファサリジン、スルフィソキサゾール、トリメトプリム、およびトリメトプリム−スルファメトキサゾールを含む）、テトラサイクリン類（デモクロサイクリン、ドキシサイクリン、ミンサイクリン、およびオキシテトラサイクリンを含む）、およびクロラムフェニコール、クリンダマイシン、エタンブトール、ホスホマイシン、フラゾリドン、イソニアジド、リネゾリド、メトロニダゾール、ニトロフラントイン、プラテンシマイシン、ピラジナミド、キヌプリスチン、リファンピン、ならびにスペクチノマイシンを含むその他のものが含まれる。現在、座瘡を治療するために用いられる最も一般的な抗生物質としては、エリスロマイシン、クリンダマイシン、コトリモキサゾール、テトラサイクリン、またはテトラサイクリン誘導体、例えばドキシサイクリンおよびミノサイクリンが含まれ、これらの各々を本発明において使用することができる。
【００４５】
抗微生物剤およびペプチド
本発明の別の実施形態においては、ＡＲＤエンハンサーは、抗微生物ペプチド、または抗微生物ペプチドの産生または利用可能性を誘発するかまたは媒介することのできる化合物と組み合わせて使用される。抗微生物ペプチドは、典型的には、一般に１２〜５０個のアミノ酸長を有する短いタンパク質である（ただし、類似の特性を有するより大きなタンパク質が抗微生物ペプチドとして分類されることも多く、これらのタンパク質は、本発明の範囲内に含まれる）。これらのペプチドは多くの場合、アルギニン、リジン、または酸性環境内ではヒスチジンにより提供される二つ以上の正に荷電した残基、および大きな割合（一般的には５０％超）の疎水性残基を含む。直接細菌を殺すことに加えて、これらは、宿主遺伝子の発現を改変する能力を含む、感染の排除に関与し得る数多くの免疫調節機能を有し、ケモカインとして作用しかつ／またはケモカイン産生を誘発し、リポ多糖類により誘発される炎症性サイトカインの産生を阻害し、創傷の治癒を促進し、かつ樹状細胞および適応的免疫反応の細胞の応答を調節する可能性があると指摘されている。抗微生物ペプチドは、細菌の膜に影響を及ぼすことから細胞内標的を有することに至るさまざまな機能を有すると考えられている。本発明において用いることができる抗微生物ペプチドの非限定的な例としては、高度に保存された領域（カテリンドメイン）および高度に可変的なカテリシジンペプチドドメインによって特徴づけされる、デフェンシン類およびカテリシジンファミリーのポリペプチドが含まれるが、これらに限定されるわけではない。皮膚におけるカテリシジンの抗微生物効果は、タンパク質分解によって媒介されると考えられ、これにはマスト細胞、角膜実質細胞、および好中球が関与し得る。カリクレイン介在性のタンパク質分解が提案されている（全体が本明細書に参照により援用されるＦＡＳＥＢ.Ｊ、２００６年１０月、２０（１２）：２０６８〜８０頁）。ＡＲＤエンハンサーと組み合わせて使用される場合、カテリシジンファミリーはさまざまな皮膚疾患の治療として有用であり、特にアトピー性皮膚炎および酒さの治療において有用である。効力の増大のためにはビタミンＤなどの補因子を提供することが望ましい場合がある。
【００４６】
ビタミンＡ、ビタミンＡ誘導体、およびレチノイド
本発明の別の態様においては、ＡＲＤエンハンサーはビタミンＡまたはビタミンＡ誘導体と組み合わせた形で提供される。ビタミンＡは、目、気道、尿道、および腸管の健康な表面内膜を促進し、細菌およびウィルスに対する障壁としての皮膚および粘膜の機能を助ける。さらに、ビタミンＡは、免疫系の調節を助け、こうして有害な細菌およびウィルスを破壊する白血球を作ることにより感染の予防または撃退を促進する。ビタミンＡは同様に、リンパ球が感染とより効果的に闘うのを助け得る。
【００４７】
本発明に包含されるビタミンＡ誘導体は、限定はしないが、アルキル化、エステル化などの修飾を含み、アルコール、エノール、ケト、カルボキシルなどのさまざまな官能基のうちの一つ以上の付加を含み得る。ビタミンＡ誘導体は、ビタミンＡの抗細菌特性を改変し得る。
【００４８】
レチノールは、ビタミンＡの動物形態である。レチノールは、レチノイドと呼ばれる、より大きい化合物ファミリーに属する。したがって本発明の別の態様においては、アンドロゲン受容体分解（ＡＲＤ）エンハンサーは、皮膚疾患の治療に有用な組成物としてレチノイドとの組み合わせの形で使用されてよい。本発明の組成物は、ＡＲＤエンハンサーとの組み合わせの活性が増大するために少なくとも部分的にレチノイドの用量が低減され得るという点において、以前のレチノイド療法に対する改善を提供する。かくして、用量の低減は、レチノイド関連化合物に一般的に関連する皮膚の刺激を低減させるものである。
【００４９】
抗炎症性化合物
本発明の別の態様においては、ＡＲＤエンハンサーは抗炎症性化合物と組み合わせた形で使用される。炎症性化合物は、ステロイド系の抗炎症性化合物と非ステロイド系の抗炎症性化合物に分けられ、その各々が本発明の範囲内に包含される。グルココルチコイドなどの数多くのステロイドが、コルチゾール受容体に結合することによって炎症を低減させる。これらは多くの場合、コルチコステロイド化合物と呼ばれる。
【００５０】
非ステロイド系の抗炎症性化合物には、シクロオキシゲナーゼ（ＣＯＸ）酵素の作用に拮抗するかまたはそれを阻害するものが含まれる。ＣＯＸ酵素は、プロスタグランジンを合成し、これが炎症を導く。本発明の組成物は、プロスタグランジンの合成を低減させるかまたは防止し、かくして炎症に関連する苦痛を低減させるかまたは除去する、非ステロイド系の抗炎症性化合物を含んでいてよい。
【００５１】
数多くの薬草または薬草から単離された化合物が抗炎症特性を有し、ＡＲＤと組み合わせて使用可能である。抗炎症特性を有すると考えられている薬草の例としては、ヒソップ、ショウガ、ヘレナリンを含有するアルニカ・モンタナ、セスキテルペン・ラクトン、およびサリチル酸を含有する柳の樹皮がある。同様に、一部の食物は、抗炎症特性を含有するものと考えられている。したがって抗炎症特性を有する可能性を指摘されている食物から単離された化合物も同様に、本発明の範囲内に包含されている。例えば、カプサイシンおよびオメガ−３−脂肪酸は、食物中に見られる抗炎症性化合物であり、本発明により包含される。
【００５２】
Ｃ.  脱毛の治療または予防のための組成物
発明者らは、本明細書において提供される化合物の組み合わせが、脱毛の治療のための現行の治療法と比較した場合に増大した治療上の有用性を有するものであると考えている。したがって本発明の一態様においては、脱毛の予防または治療のための組成物が提供される。これらの組成物および治療方法は、アンドロゲン性脱毛症の治療または予防において特に有用であると考えられる。しかしながら、アンドロゲンの蓄積または集積に関連するかまたはアンドロゲン受容体に関連するあらゆる脱毛症状が、少なくとも部分的に本発明によって治療または予防され得る。本発明の組成物は、医療業界または製薬業界の当業者に対する指針として以下で提供されている多数の実施形態で提供されてよい。したがって本発明の実施形態は、病状、所望の投与計画または治療計画に応じて望ましいものであり得るさまざまな非限定的な製剤または有用な組み合わせを実証するものである。本発明の組成物は、少なくとも二つの化合物を含む。一つの化合物は、アンドロゲン受容体分解（ＡＲＤ）エンハンサーを含む。第二の化合物は、脱毛、禿頭症、またはアンドロゲン性脱毛症の治療または予防に対する有用性を有することが知られているかまたはそれを有する可能性を指摘されているさまざまな化合物から選択可能である。一部の実施形態においては、第二の化合物は、発毛を増大させるかまたは促進する可能性を指摘されている。かくして、本発明は、本明細書において提供されているかまたは示唆されている一つ、二つ、またはそれ以上の化合物または組成物と組み合わせて提供されるＡＲＤエンハンサーを含み得る。本発明において使用され得るＡＲＤエンハンサーの例としては、本明細書に参照により援用されている「（置換フェニル）プロペナール部分を有する化合物、その誘導体、生物活性、およびその使用」という発明の名称の米国特許出願第１２／００８１２４号明細書において提供されているものが含まれる。好ましい実施形態においては、ＡＲＤエンハンサーは、ＡＳＣ−Ｊ９、ＡＳＣ−Ｊ１５、ＡＳＣ−Ｑ９、ＡＳＣ−Ｑ４４、ＡＳＣ−Ｑ４９、ＡＳＣ−Ｑ７７、ＡＳＣ−Ｑ９８、ＡＳＣ−Ｑ９９、ＡＳＣ−Ｑ１０１、ＡＳＣ−Ｑ１０２、ＡＳＣ−Ｑ１０３、ＡＳＣ−Ｑ１１０またはＡＳＣ−Ｑ１１１、ＡＳＣ−Ｑ１１３、ＡＳＣ−Ｑ１１６、ＡＳＣ−ＪＭ１、ＡＳＣ−ＪＭ２、ＡＳＣ−ＪＭ４、ＡＳＣ−ＪＭ５、ＡＳＣ−ＪＭ６、ＡＳＣ−ＪＭ７、ＡＳＣ−ＪＭ１２、ＡＳＣ−ＪＭ１３、ＡＳＣ−ＪＭ１４、ＡＳＣ−ＪＭ１６、ＡＳＣ−ＪＭ１７、ＡＳＣ−ＪＭ１８、およびＡＳＣ−ＪＭ１９からなる群から選択される。
【００５３】
本発明の範囲内において提供される化合物または組成物の組み合わせは、医薬品／化粧品の技術分野で知られているような、または本発明で記載されるような局所投与、経口投与などが可能である。一部の実施形態においては、少なくとも一つの化合物が経口投与され第二の化合物が局所投与される化合物の組み合わせが提供される。
【００５４】
本発明の好ましい態様においては、発毛を刺激する可能性を指摘されている化合物または組成物と組み合わされた形でＡＲＤエンハンサーが提供される。したがって、組み合わせの形で提供される場合、本発明は脱毛を予防すると同時に発毛を刺激し得る。
【００５５】
非限定的ではあるが、本発明のＡＲＤエンハンサーは、アンドロゲン受容体またはアンドロゲンと相互作用する化合物と組み合わされてよい。一部の実施形態においては、ＡＲＤエンハンサーは、アンドロゲン受容体に対するアンドロゲンの結合を遮断する化合物または組成物と組み合わされる。
【００５６】
一部の実施形態においては、ＡＲＤエンハンサーはフィナステリドと組み合せた形で提供される。別の実施形態においては、ＡＲＤエンハンサーはフルタミドまたはビカルタミドと組み合せた形で提供される。別の実施形態においては、ＡＲＤエンハンサーはミノキシジルと組み合せた形で提供される。したがって、ＡＲＤエンハンサーは、現在利用可能なまたは提案されている脱毛の治療と組み合わされてよい。
【００５７】
発毛を促進するペプチドおよびオリゴペプチド
本明細書で開示されているＡＲＤエンハンサーは、発毛または脱毛予防の潜在的な活性を実証するかまたは実証すると考えられているペプチドまたはオリゴペプチドと組み合わされてよい。ペプチドは、アンドロゲン受容体などの受容体、ＳＴＡＴなどの補因子と相互作用するドメインをコードし得る。
【００５８】
非限定的な例として、ＡＲＤエンハンサーは、限定はしないが例えば以下のようなペプチドと組み合わされてよい。本明細書に参照により援用されている「発毛を促進するためのオリゴペプチド」という発明の名称の米国特許第７２４１７３１号明細書は、有益な活性を有する可能性を指摘されているさまざまなオリゴペプチドを提供している。グルタミン含有ペプチドなどのペプチドも同様に、発毛の治療または予防において有望である。例えば、本明細書に参照により援用されている「脱毛症の治療方法」という発明の名称の米国特許第６３７６５５７号明細書は、酪酸オクチルと組み合わせて用いられたグルタミン含有ペプチドの使用を開示している。
【００５９】
上述のペプチドおよびオリゴペプチドは、限定的なものとして意図されておらず、むしろ、ＡＲＤエンハンサーとの組み合わせの形で使用された場合に脱毛の治療または予防に有用であると考えられる本発明の組成物を例示するものとして意図されている。
【００６０】
ヌクレオチドおよびオリゴヌクレオチド
本発明のＡＲＤエンハンサーは、発毛を増大させるかもしくは促進するかまたは脱毛を減少させると考えられているヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチドと組み合わせた形で使用され得る。かかるヌクレオチドは、アンドロゲン受容体、アンドロゲン受容体の補因子などを調節するものであってよい。ヌクレオチドは、意図された遺伝子の上流または下流で作用し、プロモーター活性などを増強または阻害し得る。一部の実施形態においては、かかるオリゴヌクレオチドは、アンチセンスオリゴヌクレオチドである。
【００６１】
抗微生物剤およびペプチド
脱毛を治療または予防するための組成物はまた、抗微生物剤または抗微生物ペプチドと組み合わせた形でＡＲＤエンハンサーを含んでいてよい。皮膚疾患に関して上述した化合物およびペプチドも本明細書に包含される。
【００６２】
植物抽出物
本発明の一部の実施形態においては、ＡＲＤエンハンサーは、抗アンドロゲン化合物、抗アンドロゲン活性を含む可能性を指摘されているか、または脱毛の予防もしくは治療を助ける一つ以上の植物抽出物（またはそれから得られる組成物）と組み合わされる。かかる抽出物には、植物の葉、花、果実または液果、幹、種子などから得られるものが含まれる。抽出物は、粗抽出物であっても、または純度５０％超、６０％超、７５％超、８０％超、９０％超、もしくは９５％超といったように精製されていてもよい。したがって本明細書において提供される抽出物、その活性化合物、およびそれと共に活性であると考えられているあらゆる化合物を、本発明のＡＲＤエンハンサーと組み合わせた形で使用してもよい。
【００６３】
一部の実施形態においては、抽出物は、ジョージア州およびフロリダ州を含む米国南東部に見られることの多いアメリカ産の木であるソー・パルメット植物から得られる。ソー・パルメット植物の抽出物、ならびにアセチルカルニチンおよび補酵素Ｑとのその組合せは、本明細書に参照により援用される「アンドロゲン性脱毛症の局所的治療のための組成物および方法」という発明の名称の米国特許第６３３３０５７号明細書において開示されており、ＡＲＤエンハンサーと組み合わせた形で使用し得る。ソー・パルメット植物の抽出物は、同様に、本明細書に参照により援用される「男性型脱毛の治療のための天然調製物」という発明の名称の米国特許第５９７２３４５号明細書において、アフリカピジウム抽出物およびイラクサ抽出物と組み合わせた形で提供されている。
【００６４】
本発明は同様に、以下の抽出物またはそれから単離もしくは精製された化合物と組み合わせた形のＡＲＤエンハンサーも含んでいる。本明細書に参照により援用される「頭皮疾患の治療のための経口組成物」という発明の名称の米国特許第７２０１９３１号明細書において提供される抽出物は、Ｓｅｒａｎｏａ  ｒｅｐｅｎｓおよびＶｉｔｉｓ  ｖｉｎｉｆｅｒａの使用について開示している。Ｓｅｒａｎｏａ  ｒｅｐｅｎｓからの抽出物が、前立腺癌細胞に対して「インビトロ」で試験され、放射性標識した３Ｈ−メチルトリエノレンでの置換により、アンドロゲン受容体に対する強い親和力が明らかにされた。全体が本明細書に参照により援用されている「脱毛の治療のための局所用調製物」という発明の名称の米国特許第６３５８５４１号明細書は、刺激の低い溶液中で有用であるものとして、植物ステロールを含むソー・パルメットの液果のアルコール抽出物の使用について開示している。
【００６５】
上述の抽出物は、限定的なものとしては意図されておらず、むしろＡＲＤエンハンサーと組み合わされた場合に脱毛の治療または予防にとって有用であると考えられる植物抽出物の異なる供給源を例示するものとして意図されている。
【００６６】
Ｄ.  医薬組成物および化粧品組成物
本発明の化合物は、薬学的に許容される担体と組み合わされて、化粧品を形成するための薬学的におよび化粧品に許容される担体を形成し得る。医薬品および化粧品の生産技術は、当該技術分野において周知であり、典型的には、化合物またはその塩を適切な担体の存在下で混合することが含まれる。本発明の化合物は、単一の担体もしくは一種類の担体と共に混合されてよく、または、別々の担体と独立して混合されてもよい。本発明の化合物と共に使用するための適切な担体には、意図された投与形態に応じて選択され、従来の薬学的なまたは化粧品の慣習と一貫性を有する、希釈剤、賦形剤、またはその他の担体材料が含まれる。適切な担体のさらなる非限定的な例としては、水、生理食塩水、リン酸緩衝生理食塩水、生理学的に適合性のある緩衝液、生理学的に適合性のある塩で緩衝された生理食塩水、油中水型エマルジョンおよび水中油型エマルジョン、アルコール、ジメチルスルフォキシド、デキストロース、マンニトール、ラクトース、グリセリン、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、ポリビニルピロリドン、レシチン、アルブミン、グルタミン酸ナトリウム、塩酸システインなど、およびその混合物が含まれるが、これらに限定されるわけではない。全体が本明細書に参照により援用されている従来の薬学的な慣習（「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ」、第２０版、Ｇｅｎｎａｒｏ（編）ならびにＧｅｎｎａｒｏ、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ、ＷｉｌｌｉａｍｓおよびＷｉｌｋｉｎｓ、２０００年）と一貫性を有する通り、適切な担体には同様に、適切な薬学的に許容される酸化防止剤または還元剤、防腐剤、懸濁剤、可溶化剤、安定化剤、キレート剤、錯化剤、粘度調節剤、崩壊剤、結合剤、着香剤、着色剤、着臭剤、乳白剤、湿潤剤、ｐＨ緩衝剤、およびそれらの混合物も含まれる。本発明の組成物は、シャンプーに入れて提供してもよい。
【００６７】
化合物は、治療上有効な用量で提供される。治療上有効な用量は、化合物の特定の組み合わせによって決定され得る。この用量は、化合物間、患者間で幾分か変動し、患者の症状および送達経路により左右されるものである。一般的な指針としては、約０．１〜約５０ｍｇ／ｋｇの投薬量の組み合わせ型の化合物または組成物が治療上の効力を有し得るが、さらに高いまたは低い投薬量を利用することも可能である。ＡＲＤエンハンサーを有する化合物について用量を決定する場合、当初処方された化合物用量から始め、その後、好ましくはこの用量を低下させる。
【００６８】
本発明の化合物または組成物は、プロドラッグの形態、長時間放出製剤などの形で提供され得る。あるいは、組成物は、実質的な修飾をすることなく、作用に適した活性形態で提供されてもよい。同様に、本発明の化合物または組成物は、リポソーム送達媒体と組み合わせた形で提供されてよい。リポソームは、主として両親媒性の二重層で構成されたリオトロピック液晶であり、人体内で天然に生じる材料であるレシチンおよびコレステロールを主として含むという利点を有する。レシチンおよびコレステロールはまた、人体内に大量に存在し、したがって優れた生物許容性を提供する。したがって、リポソームは、毒性の低減を促進し、かつ目的の部位への薬物の送達を促進することができる。活発な標的化には通常、リポソームの表面へのリガンドの付着またはリポソームの改変が関与する。リガンドには、抗体または抗体断片、酵素、レクチン、糖などが含まれ得る。リガンドは、共有結合的または非共有結合的に付着し得るが、共有結合による付着の方が有用である。リポソームは、多重層リポソーム（ＭＬＶ）、小型単層リポソーム（ＳＵＶ、直径１００ｎｍ未満）、および大型単層リポソーム（ＬＵＶ、直径１００ｎｍ超）という三種類に分類される。ＭＬＶは容易に調製され、最小限の実験装置しか必要としない。ＭＬＶおよびＳＵＶは両方とも、ＬＵＶと比較して被包能力が低い。ＬＵＶは、水溶性薬物の高い被包性、脂質の損失、および再現可能な高速の薬物放出を含む、数多くの利点を有する。
【００６９】
薬物送達の当業者によって知られているか、可能性を指摘されているか、または公開されている、薬物送達において使用されるその他の送達媒体も同様に考慮され、本発明の範囲内に包含されている。例えば、ナノ粒子は、約１０ナノメートル（ｎｍ）から約１０００ｎｍまでサイズが変動する高分子物質を有する固体コロイド粒子である。化合物または組成物は、高分子材料内に、溶解、封入、吸着、付着、または被包される。ナノ粒子は、マトリクスを保持するシェル様の壁を有するミクロスフェア、流体溶液を被包するポリマー格子、ならびに化合物または組成物および標的化分子の表面付着のための固体粒子（生物分解性または非生物分解性）という非限定的な組成物を有するものとして記載されている。ナノ粒子は、標準的には注射される。
【００７０】
化合物の同時投与
化合物の組み合わせは、単一の医薬品または化粧品内において提供されてよいが、その他の実施形態においては、本発明の化合物は二つの異なる組成物として提供され、一緒にまたは別々に投与される。投与経路は、二つ以上の化合物の局所的塗布といったように同じであってもよいし、または異なっていてもよい。例えば、一つの化合物を経口医薬品として提供し、第二の化合物を局所的医薬品または化粧品として提供してもよい。この実施例においては、治療には、同時に適用されるかまたは周期的間隔もしくは時間を置いて適用されてもよいしそうでなくてもよい、一方は局所的でもう一方は経口による、二つの医薬品の適用が含まれる。したがって、組成物は、所望の治療計画に応じて変動し得る。
【００７１】
Ｅ.  皮膚疾患の治療方法
本発明の組成物は、さまざまな皮膚疾患に由来する望ましくない症候を治療するか、予防するか、または低減させるために使用されてよい。皮膚は体の最大の器官であり、外部から最も良く見えることは明白である。数多くの皮膚病は、特定の領域または範囲に局在化しているが、その一部は内科疾病の徴候である。さまざまな皮膚疾患が同定されてきており、限定はしないが、全体が本明細書に参照により援用されるＴａｂｅｒ’ｓ  ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉｃ  ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ（第２０版、２００１年、ＦＡ  Ｄａｖｉｓ  Ｃｏｍｐａｎｙ）などのさまざまな医学事典の中に見出すことができる。さらなる潜在的な治療的使用について、または化合物もしくは組成物の潜在的用量を評価する場合には、皮膚および付属器官の疾病および腫瘍の診断および治療を専門とする医師である皮膚科医に助言を求めることができる。
【００７２】
皮膚の治療においては局所塗布が頻繁に用いられる。しかしながら、経口投薬治療も一般的である。本発明の組成物は、所望の通りに、または薬学的にもしくは化粧品として適合可能なものとして、局所塗布、経口適用、注射、または任意のその他の適切な投与経路に適合させることができる。
【００７３】
本発明の治療方法には、皮膚疾患を患う個体を提供する過程、およびこの患者に対して治療上有効な用量の本発明の一つ以上の組成物を投与する過程が含まれる。記載されているように、本発明の組成物には、開示される化合物のうちの少なくとも二つが含まれており、その化合物の一方はＡＲＤエンハンサーである。さらに、組成物は医薬品または化粧品の形をしていてよい。同様に、それを必要としている患者に対して、薬学的にまたは化粧品として許容される量の本発明の一つ以上の組成物を投与する過程によって、皮膚疾患を予防することもでき、ここでその組成物の一つはＡＲＤエンハンサーを含む。以下は、本発明の化合物および組成物を用いて治療または予防できる皮膚疾患の、簡潔でかつ非限定的な記載である。
【００７４】
座瘡
本発明の化合物または組成物は、座瘡を治療または予防するために使用され得、座瘡により生じる病斑の治癒を加速することができる。座瘡は一部には、皮脂腺のアンドロゲン誘発性のＡＲ活性化によって引き起こされる。本発明は、アンドロゲン受容体関連の活性化を防止するかまたは減少させることのできるＡＲＤエンハンサーを提供することによって、皮脂腺の活性化に影響を及ぼす。炎症および創傷治癒も同様に、リガンドに応答したアンドロゲン受容体と関連づけられるものと考えられており、したがって治療可能である。かくして、本発明の方法には、かかる治療または予防を必要としている個体に対して、化合物、医薬品製剤、または化粧品製剤を投与する過程が含まれていてよい。このような製剤の局所塗布、経口形態、および注射用形態は、特に興味深いものであり得るが、その他の投与経路も同様に本発明の範囲内に包含される。
【００７５】
本発明のさまざまな態様において、それを必要としている個体または対象に対して治療上有効な量の医薬組成物または化粧品組成物を投与する過程を含む、座瘡の治療方法または予防方法が提供される。好ましくは、組成物は、分泌される油脂の量を低減させ、Ｐ．ａｃｎｅｓの集団を低減させる。治療上有効な用量は、化合物間、患者間で幾分か変動し、患者の身体症状および送達経路に左右されるものである。一般的な指針としては、組成物の約０．１〜約５０ｍｇ／ｋｇの用量が治療上の効力を有し得るが、さらに高いまたは低い用量を利用することも可能である。座瘡の治療または予防において特に有用である確率の高い組成物、または化合物の組み合わせとしては、過酸化ベンゾイルなどの殺菌剤と組み合わせた形で提供されるＡＲＤエンハンサー、少なくとも一つの抗生物質と組み合わせた形で提供されるＡＲＤエンハンサー、カテジシンなどの抗微生物ペプチドと組み合わせた形で提供されるＡＲＤエンハンサー、ビタミンＡ、ビタミンＡ誘導体、もしくはレチノイドと組み合わせた形で提供されるＡＲＤエンハンサー、抗炎症性化合物と組み合わせた形で提供されるＡＲＤエンハンサー、またはそれらの組合せが含まれる。
【００７６】
一つの実施形態においては、医薬品は、ＡＲＤエンハンサー、および限定はしないが過酸化ベンゾイルなどの殺菌剤を含む。この実施形態においては、医薬組成物は好ましくはクリームまたはジェルとして提供され、皮膚の一つまたは複数の患部に局所的に塗布される。塗布は単回または複数回であってよい。その他の実施形態においては、過酸化ベンゾイルは局所的に塗布され、ＡＲＤエンハンサーは経口で投与される。別の実施形態においては、医薬品はＡＲＤエンハンサーと抗生物質とを含む。この実施形態においては、医薬品は好ましくは、経口投与のために提供される。しかしながら、局所投与、注射、またはそれらの組み合わせが望ましい場合がある。患者の症状に応じて、単回用量または複数回用量であり得る。さらに別の実施形態においては、組成物はＡＲＤエンハンサーおよび抗微生物ペプチドを含む。さらに別の実施形態においては、組成物は、ＡＲＤエンハンサー、およびビタミンＡ、ビタミンＡ誘導体、またはレチノイドを含む。さらに別の実施形態においては、組成物はＡＲＤエンハンサーおよび抗炎症性化合物を含む。
【００７７】
アトピー性皮膚炎
アトピー性皮膚炎は、アレルギー病歴を有する患者に見られる病因不明の皮膚炎の慢性形態である。この疾病は通常、生後２ヵ月以降に発症し、これを患う個体は、小児期および成人期を通して悪化と寛解を経験し得る。多くの場合、家族にアレルギー病歴がある。皮膚の病斑は、皮膚の発赤、亀裂、および肥厚からなり、これはひっかくことで皮殻質となり得る。瘢痕化または二次感染が生じ得る。
【００７８】
本発明は、それを必要としている患者に対し、治療上有効な量の本発明の医薬組成物または化粧品組成物を投与する過程を含む、アトピー性皮膚炎の治療方法または予防方法を提供する。一つの実施形態においては、医薬品はＡＲＤエンハンサー、および限定はしないが過酸化ベンゾイルなどの殺菌剤を含む。別の実施形態においては、医薬品はＡＲＤエンハンサーと抗生物質とを含む。さらに別の実施形態においては、組成物は、ＡＲＤエンハンサーおよび抗微生物ペプチドを含む。さらに別の実施形態においては、組成物は、ＡＲＤエンハンサー、およびビタミンＡ、ビタミンＡ誘導体、またはレチノイドを含む。さらに別の実施形態においては、組成物はＡＲＤエンハンサーおよび抗炎症性化合物を含む。
【００７９】
酒さ
酒さは、通常、顔面中央、例えば患者の鼻、頬、額、目のまわり、またはあごに局在化する、慢性の発疹である。症状が進行するにつれて、皮膚の小脈管の奇形が出現し得、場合によっては鼻の皮脂腺が膨潤し、変形（鼻瘤）を生成し得る。現在の治療プロトコルとしては、メトロニゾール、クリンダマイシン、またはエリスロマイシンの局所的塗布、経口のテトラサイクリンおよびレチノイドがある。この疾病は慢性的であり、現在使用されている治療法では、症状の管理を試みることはできるものの、治療はできない。
【００８０】
本発明は、それを必要としている患者に対し、治療上有効な量の本発明の医薬組成物または化粧品組成物を投与する過程を含む、酒さの治療方法または予防方法を提供する。一つの実施形態においては、医薬品は、ＡＲＤエンハンサー、および限定はしないが過酸化ベンゾイルなどの殺菌剤を含む。別の実施形態においては、医薬品はＡＲＤエンハンサーと抗生物質とを含む。さらに別の実施形態においては、組成物は、ＡＲＤエンハンサーおよび抗微生物ペプチドを含む。さらに別の実施形態においては、組成物は、ＡＲＤエンハンサー、およびビタミンＡ、ビタミンＡ誘導体、またはレチノイドを含む。さらに別の実施形態においては、組成物はＡＲＤエンハンサーおよび抗炎症性化合物を含む。
【００８１】
狼瘡
狼瘡は、自己免疫疾患によって引き起こされる慢性的炎症の症状である。自己免疫疾患は、体の組織が自身の免疫系による攻撃を受けた場合に発生する病気である。免疫系は、例えば細菌およびその他の外来性侵入物などの感染性因子と闘うように設計された体内の複雑な系である。感染と闘うために免疫系が用いる機序の一つは、抗体の産生である。狼瘡患者は、外来性の感染性因子ではなくむしろ自身の体内の組織を標的化する異常な抗体を自ら血液中に産生する。抗体およびそれに随伴する炎症細胞には、体内の至る所の組織が関与し得ることから、狼瘡は、体のさまざまな領域に影響を及ぼす潜在性を有する。時として狼瘡は、皮膚、心臓、肺、腎臓、関節、および／または神経系の疾患を引き起こす可能性がある。皮膚のみが関与する場合、症状は円板状狼瘡と呼ばれる。内臓が関与する場合、症状は全身性エリトマトーデス（ＳＬＥ）と呼ばれる。
【００８２】
本発明は、それを必要としている患者に対し、治療上有効な量の本発明の医薬組成物または化粧品組成物を投与する過程を含む、円板状狼瘡およびＳＬＥを含む狼瘡の治療方法または予防方法を提供する。一つの実施形態においては、医薬品は、ＡＲＤエンハンサー、および限定はしないが過酸化ベンゾイルなどの殺菌剤を含む。別の実施形態においては、医薬品はＡＲＤエンハンサーと抗生物質とを含む。さらに別の実施形態においては、組成物は、ＡＲＤエンハンサーおよび抗微生物ペプチドを含む。さらに別の実施形態においては、組成物は、ＡＲＤエンハンサー、およびビタミンＡ、ビタミンＡ誘導体、またはレチノイドを含む。さらに別の実施形態においては、組成物はＡＲＤエンハンサーおよび抗炎症性化合物を含む。
【００８３】
Ｆ．  発毛を刺激しかつ／または脱毛を予防する方法
本発明の治療方法には、脱毛を患う対象を提供する過程、および治療上有効な用量の本発明の一つ以上の組成物を対象に投与する過程が含まれる。本発明の一態様においては、脱毛は、アンドロゲン脱毛症に起因する。その他の態様においては、脱毛はアンドロゲン脱毛症と関連しないものと考えられる。一部の態様においては、脱毛はアンドロゲンまたはＡＲの蓄積と関連づけられる。その他の態様では、本発明の組成物は、脱毛をひき起こすか、またはかかる効果を低減させるかもしくは排除する医療と共に提供されてよい。一部の実施形態においては、脱毛を予防する可能性を指摘されている化合物を、発毛を刺激するかまたは促進する可能性を指摘されている化合物と組み合わせた形で提供する。複数回用量が必要とされる場合があり、用量は経時的に変化し、例えば増大または減少してよい。かくして、ＡＲＤエンハンサーと第二の化合物との比率も治療中に変動し得、例えば経時的に増加または減少し得る。
【００８４】
記載されているように、本発明の組成物は、開示された化合物の少なくとも二つを含み、その化合物の少なくとも一つはＡＲＤエンハンサーである。さらに、組成物は、医薬品、シャンプー、コンディショナー、クリーム、化粧品などの形をしていてよい。同様に、薬学的に許容される量の本発明の一つ以上の組成物を、それを必要とする患者に投与することによって、脱毛を予防するかまたは低減させることができ、ここで組成物の一つはＡＲＤエンハンサーを含んでいる。
【００８５】
同様に、本発明の方法は、発毛を刺激するかまたは発毛の増加をもたらすための方法または治療を含む。これらの方法には、それを必要としている対象に対して、治療上有効な量のＡＲＤエンハンサーを、発毛を刺激する可能性を指摘されている化合物などの第二の化合物と組み合わせて投与する過程が含まれる。
【００８６】
アンドロゲン性脱毛症
アンドロゲン性脱毛症は、ホルモンに対する毛包または周囲組織の感受性に起因すると考えられている。この感受性は、遺伝的要素に起因するものであり、遺伝性であることが多い。男性のアンドロゲン性脱毛症は、冠状動脈性心臓病および前立腺肥大、前立腺癌、インスリン耐性疾患（例えば糖尿病および肥満症）、ならびに高血圧（高血圧症）を含む複数のその他の症状と関連づけられている。女性においては、脱毛は多嚢胞性卵巣症候群（ＰＣＯＳ）のリスクの増加と関連づけられ得る。ＰＣＯＳは、月経不順、座瘡、過剰体毛（多毛症）、および体重増加をもたらし得るホルモンの不均衡によって特徴づけされる。女性の脱毛はアンドロゲンの集積または増量と相関関係を有することが多い。
【００８７】
本発明は、それを必要としている患者に対し、治療上有効な量の本発明の医薬組成物または化粧品組成物を投与する過程を含む、アンドロゲン性脱毛症またはアンドロゲンの蓄積と関連づけられるものなどの毛髪疾患を治療または予防する方法を提供する。組成物は、少なくとも一つの第二の化合物と組み合わされた形の、少なくとも一つのＡＲＤエンハンサーを含む。一つの実施形態においては、ＡＲＤエンハンサーはミノキシジルと組み合わされる。別の実施形態においては、ＡＲＤエンハンサーはフィナステリドまたはプロペシアと組み合わされる。別の実施形態においては、ＡＲＤエンハンサーは抗アンドロゲン化合物と組み合わされる。別の実施形態においては、ＡＲＤエンハンサーは、ペプチドまたはオリゴペプチドと組み合わされる。
【００８８】
一部の実施形態においては、本発明の方法には、脱毛を遅らさせるかまたは予防する可能性を指摘されている化合物と、発毛を刺激または促進する可能性を指摘されている第二の化合物とを含む、化合物の組み合わせを、それを必要とする対象に対して投与する過程を含む、アンドロゲン性脱毛症の治療方法が含まれる。少なくとも一つの化合物は、ＡＲＤエンハンサーである。発毛を刺激する可能性を指摘されている化合物は、発毛刺激活性を有する可能性を指摘されている。非限定的な例としては、有機化合物、ペプチド、小ペプチド、核酸配列、植物抽出物などが含まれる。かかる活性は、発毛が発生するか否かを判定する適切なあらゆる方法を用いて測定または決定できる。
【実施例１】
【００８９】
実施例１：転写因子の分解の増強の概説
以下の実施例は、アンドロゲン受容体などの核内受容体（転写因子）の分解を増強する方法の非限定的な実施形態について記載するものである。限定はしないが、核内への核内受容体の移動に干渉することもしくは核内受容体を細胞の細胞質内に保持すること、プロテアーゼ活性を誘発できる核内受容体内部のモチーフを露出させること、核内受容体を特異的に分解することのできるプロテアーゼの活性を増大させること、核内受容体の安定化を阻害すること、核内受容体の溶解度を低減させること、核内受容体を分解できる経路を活性化すること、核内受容体のユビキチン化を増大させること、適切なキナーゼによる核内受容体のリン酸化を増大／減少させること、アポトーシスを誘発すること、または核内受容体と核内受容体を安定化させることのできる補因子との間の相互作用を低減させることを含む、目的の核内受容体の分解を増強するあらゆる機序を使用することができる。この特定の実施例においては、目的の核内受容体は、ステロイドホルモン受容体であるアンドロゲン受容体である。
【００９０】
核内受容体の転写活性の下方調節、ひいては目的の核内受容体の分解を検出するため、またはかかる分解の下流の効果を検出するために、さまざまな方法およびアッセイを使用することができる。例えば、アンドロゲン受容体の下方調節を検出するために用いられるアッセイを、少なくとも部分的に、アンドロゲン受容体の分解を検出するために使用することができる。アンドロゲン受容体に適用可能なこのような方法およびアッセイの非限定的な実施例を、以下で全般的に記載する。
【００９１】
ウェスタンブロット分析を用いたＡＲ分解の検出
アンドロゲン受容体（ＡＲ）の分解を検出するのに適したウェスタンブロット法は、これまでに記載されている（Ｓｕら、１９９９年）。簡潔に言うと、細胞（例えばＬＮＣａｐ細胞）を、１０マイクログラム／ミリリットルのベンズアミジン、１０マイクログラム／ミリリットルのトリプジン阻害物質、および１ミリモル濃度のフッ化フェニルメチルスルホニル（ＰＭＳＦ）を含有する、２×ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）ローディングバッファーまたは放射性免疫沈降アッセイ（ＲＩＰＡ）溶解緩衝液（「Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ」、Ｅ．Ｈａｒｌｏｗ  ａｎｄ  Ｄ．Ｌａｎｅ、Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ、１９８８年を参照）のいずれかの中に回収する。細胞溶解物由来の総タンパク質（１試料あたり４０マイクログラム、または所望通り）をＳＤＳ−ＰＡＧＥゲル上で分離する。分離の後、タンパク質を、標準的なウェスタンブロット手順にしたがってゲルからニトロセルロース膜へと移す。適切な遮断薬（例えば、０．１％のＴｗｅｅｎ−２０を補充したリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳＴ）中の１０％の脱脂乳）で膜を遮断して、非特異的な結合を一晩還元させる。膜を、ヒトＡＲ（例えばＢＤ−ＰｈａｒＭｉｎｇｅｎ社製の抗ヒトＡＲ）に特異的な適切な一次抗体と共に、摂氏４度で一晩、または室温で２時間インキュベートする。膜をＰＢＳＴで３回、各回につき１０分間すすぎ、その後、適切な二次抗体（例えば酵素標識二次抗体、例えばホースラディッシュペルオキシダーゼ結合二次抗体）と共に室温で１時間これをインキュベートする。膜をＰＢＳＴですすぎ、適切な視覚化手順を用いて二次抗体を検出する（例えば、ホースラディッシュペルオキシダーゼは、発色基質を用いて、またはＡｍｅｒｓｈａｍ製の増強型化学発光（ＥＣＬ  Ｐｌｕｓ）キットによって提供されるような化学発光基質によって、検出可能である）。メーカーの推奨事項に従って膜を剥がし、適切な抗体（例えばベータ−アクチンに対する抗体、Ｓｉｇｍａ）と共に膜を再度インキュベートすることにより、ブロット上のアンドロゲン受容体タンパク質の量の尺度としての二次抗体シグナルを、各試料についてのロードされたタンパク質の総量に対して標準化することができる。タンパク質シグナルの定量化は、適切なソフトウェア（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ製のＩｍａｇｅＪソフトウェア）を用いて、濃度測定によって実施可能である。
【００９２】
ＡＲ活性および腫瘍細胞の成長を阻害する化合物
非限定的な実施例において、細胞におけるアンドロゲン受容体（ＡＲ）を分解するために化合物を使用した。ＡＲを分解する能力について試験した化合物の非限定的な例としては、全体が本明細書に参照により援用されている、Ｏｈｔｓｕら（２００２年）、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、第４５巻、５０３７〜５０４２頁、およびＯｈｔｓｕら（２００３年） Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、第１１巻、５０８３〜５０９０頁にその構造および調製が記載されている化合物が含まれる。例としては、化合物ＡＳＣ−Ｊ９を、培養細胞に対して試験した。ＡＳＣ−Ｊ９は、合成化合物（慣用名ジメチルクルクミン）であり、５−ヒドロキシ−１，７−ビス（３，４−ジメトキシフェニル）−１，４，６−ヘプタトリエン−３−オンという構造を有し、例えば、ジアゾメタンを用いた天然クルクミンのパーメチル化によって得ることができる。
【実施例２】
【００９３】
実施例２：核内受容体の分解の増強
ここでは、核内受容体の分解の効果を研究する上で有用な方法およびアッセイの非限定的な例について記載する。この特定の実施例においては、核内受容体であるアンドロゲン受容体（ＡＲ）の分解を増強するものとして公知の化合物を、ＡＲ活性および細胞増殖に対するその効果について試験した。癌の管理における主要な課題の一つは、腫瘍の増強を制御するかまたは遅らせることにある。アンドロゲンおよびＡＲは、前立腺癌細胞の増殖を刺激する上で有意な役割を有しており、かくして、ＡＲ分解によるＡＲ活性の調節は、前立腺癌の進行を遅らせるかまたは制御するための有用な手段として役立ち得る。
【００９４】
ＬＮＣａＰ細胞における細胞の成長およびアンドロゲン受容体の発現の検出
成長のアッセイ
ＬＮＣａＰ細胞は、前立腺癌患者において見られる内因性の突然変異ＡＲを発現する。この臨床的に関連する細胞モデルを用いて、前立腺癌細胞の成長の抑制におけるＡＳＣ−Ｊ９の効果を研究した。細胞をおよそ６．５×１０4個細胞／ウェルという密度で、６ウェルの組織培養皿に播種した。二日後に、完全培地を吸引し、１０％活性炭／デキストランで処理した（ホルモン除去した）血清含有培地を加えた。次に、試験化合物であるＡＳＣ−Ｊ９を、１ｎＭのＤＨＴを伴ってまたは伴わずに、５μＭの最終濃度で培地に添加した。媒体対照については、培地中に同量のＤＭＳＯを添加した。その後の５日間、培地を一日に一回吸引し、試験化合物および／またはＤＨＴを含有する新鮮な培地と交換した。指定された時点で細胞の一部をトリプシン処理によって回収し、血球計を用いて細胞計数を実施した。
【００９５】
５日間の実験期間中、媒体対照で処理したウェル内の細胞数は着実に増加した（図４Ａ）。１日目、ＡＳＣ−Ｊ９で処理したウェルの細胞数は、媒体対照のものに匹敵していたが、２日目から、これらのウェルの細胞数は著しく減少した。５日間のインキュベーションの終わりには、ＡＳＣ−Ｊ９で処理したウェル内には、最少数の生存細胞しか見られなかった。
【００９６】
前立腺癌細胞の成長に対するＡＳＣ−Ｊ９の効果を、アンドロゲンであるＤＨＴの存在下でさらに評価した。予想通り、ＤＨＴはＬＮＣａＰ細胞の成長を上方調節した。ウェルあたりの細胞数の上昇は、細胞を４〜５日間この男性ホルモンと共にインキュベートした後に明白になった。ＡＳＣ−Ｊ９は、ＤＨＴの存在下でもなお、ＬＮＣａＰ細胞の成長を減少させる優れた効力を示した。ＤＨＴの存在下または不在下での細胞成長の低下の程度は、実際に匹敵するものであった。上述の所見に基づくと、ＡＳＣ−Ｊ９は男性ホルモンの存在下または不在下で前立腺癌細胞の成長を事実上無効化できるという結論が導かれる。ＡＳＣ−Ｊ９は、前立腺癌の疾病管理のための薬物候補として有用であり得る。
【００９７】
ＡＲ発現のウェスタンブロット分析
ＡＲは、アンドロゲンに対する前立腺癌細胞の応答を調節するための主要な因子である。発明者らは、ＡＳＣ−Ｊ９がＡＲの定常状態のレベルに影響を及ぼすか否か、およびＡＲの低減がＬＮＣａＰ細胞の成長と相関関係を有するか否かを試験した。上述の実験に由来するＬＮＣａＰ細胞を、指定の時点で回収し、細胞溶解物を前述の通りにウェスタンブロット分析のために調製した。その後、色検出方法を用いて、膜におけるＡＲおよびアクチンタンパク質のシグナルを試験し、得られたタンパク質シグナルを濃度測定により定量化した。図４Ｂでは、（アクチンタンパク質との関係において）標準化したＡＲシグナルが報告されており、これは、基底（０日目）値の百分率として表されている。
【００９８】
結果は、ＡＳＣ−Ｊ９で処理したＬＮＣａＰ細胞中において、ＡＲの内因性レベルが着実に下降したことを示している。ＡＲの低減は、ＡＳＣ−Ｊ９との２日間の連続的なインキュベーションの後に初めて観察され、５日間のインキュベーションの終わりでは、ＡＲの最初のレベルのわずか約１０％以下しか処理細胞において残らなかった。ＡＳＣ−Ｊ９のインキュベーション後にＡＲの低減と細胞数の減少との間に相関関係があるということは特筆に値する。この情報は、ＡＳＣ−Ｊ９がＡＲ低減の機序を介して少なくとも部分的に作用して、ＬＮＣａＰ細胞の成長を下方調節し得るということを強く示唆している。
【００９９】
ＬＮＣａＰ細胞におけるＡＲ発現を低減させる能力について、さらなる化合物を試験した。結果は図２にまとめられている。ＬＮＣａＰ細胞を、各々の試験化合物の存在下で４８時間インキュベートし、その後ウェスタンブロット法により分析した。さまざまな濃度にわたって媒体対照と比較したＡＲの低減の百分率を判定することによって、各化合物について相対的効力を評価した。表示は以下の通りである。
【０１００】
【表１】
2010535213.tif 000003
【０１０１】
図３Ａおよび３Ｂは、化合物ＡＳＣ−Ｑ４９、ＡＳＣ−Ｑ１０３、ＡＳＣ−ＪＭ１２、ＡＳＣ−ＪＭ１４、ＡＳＣ−７７、ＡＳＣ−ＪＭ４、およびＡＳＣ−ＪＭ５のウェスタンブロットデータの写真を示している。対応する化合物をＬＮＣａＰ細胞に添加し、４８時間インキュベートした後に分析した。結果は、アンドロゲン受容体（ＡＲ）タンパク質の発現が、ＡＲＤエンハンサーに曝露すると低減することを実証している。
【０１０２】
インビボでの異種移植腫瘍の成長のアッセイ
関連するインビボでの研究において、ＬＮＣａＰヒト前立腺腫瘍細胞を、皮下注射によりヌードマウスに異種移植する（部位１ヵ所あたり２×１０6個）。その後、マウスを、腹腔内注射により、対照としての媒体溶液または試験化合物（体重１キロあたり１００ミリグラムの用量のＡＳＣ−Ｊ９）のいずれかで７週間、１週三回ずつ処理する。腫瘍体積を次の７週間にわたり一週間に二回ずつ測定する。ＡＳＣ−Ｊ９などの化合物で充分な期間（例えば２週間〜数ヵ月）にわたり処理した結果、腫瘍の成長速度は有意に低減すると予想される。図１２におけるデータは、一頭は媒体溶液で処理し（左）、もう一頭はＡＳＣ−Ｊ９で処理した（右）、ＬＮＣａＰ腫瘍を異種移植した２頭のヌードマウスを示す。ＡＳＣ−Ｊ９で処理した動物において、腫瘍サイズおよび血漿中のＰＳＡ含有量の有意な低減が検出された。このような結果は、ＡＳＣ−Ｊ９などのＡＲ分解化合物によって誘発されるＡＲ活性の抑制およびその結果得られる腫瘍成長の低減が、前立腺癌およびその他の癌などのＡＲ活性に関連する疾患および障害を治療または予防するための実用へとその形を変え得ることを強く示すものとしてとらえることができる。
【実施例３】
【０１０３】
実施例３：異なる細胞系におけるステロイドホルモン受容体の分解の特異性
ここでは、さまざまな細胞系における核内受容体（この場合、ステロイドホルモン受容体）の特異的分解の非限定的な例について記載する。二つの代表的な腫瘍細胞系、すなわちヒト前立腺癌細胞系であるＬＮＣａＰ、およびヒト乳腺癌細胞系であるＴ４７Ｄを使用して、アンドロゲン受容体ならびにその他の細胞内タンパク質および受容体に対するＡＳＣ−Ｊ９の効果の特異性を試験した。
【０１０４】
ヒト前立腺癌ＬＮＣａＰ細胞およびＴ４７Ｄ細胞を、１０％ＦＢＳを含有するＲｉｃｈｔｅｒの改良ＭＥＭインスリン（ＲＰＭＩ）培地中で、６０ミリメートルの組織培養皿１枚あたり７×１０5個の細胞密度で播種した。２４時間後に、１０％の活性炭処理血清を含有するＲＰＭＩまたはＤＭＥ培地に培地を変更して、細胞のアンドロゲンまたはエストロゲンを枯渇させた。さらに２４時間後、試験化合物での処理を開始した。ＡＳＣ−Ｊ９の試験用量は、１および５マイクロモル濃度であった。ＬＮＣａｐ細胞にはまた、ジヒドロテストステロン（ＤＨＴ）も加えた（３ナノモル濃度）。対照細胞には、対応する量の媒体、ジメチルスルフォキシド（ＤＭＳＯ）（０．０４％未満）を同等の曝露時間にわたり加えた。細胞をＡＳＣ−Ｊ９と共に２４時間インキュベートし、２５０マイクロリットルの１×ＳＤＳ／ＰＡＧＥローディングバッファーに溶解した。およそ４０マイクログラムの総細胞タンパク質を、プレキャストゲル（ＮｕＰＡＧＥ、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）の各レーン内にロードした。メーカーの指示事項に従って、タンパク質の分離および移動を実施した。
【０１０５】
ＬＮＣａＰ細胞溶解物について、得られた膜を抗ＡＲ抗体（ＢＤ−ＰｈａｒＭｉｎｇｅｎ）と共にインキュベートし、その後化学発光検出（ＥＣＬ  Ｐｌｕｓ、Ａｍｅｒｓｈａｍ）を行うことで、アンドロゲン受容体（ＡＲ）を視覚化した。試験化合物がその他の細胞タンパク質に対してもたらす効果を試験するため、複数の同一のゲルを調製し、得られた膜を、プロゲステロン受容体（ＰＲ）、エストロゲン受容体ベータ（ＥＲベータ）、ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体アルファ、ベータ、またはガンマ（ＰＰＡＲα、β、またはγ）、レチノイドＸ受容体アルファ（ＲＸＲα）、７０ｋＤａの熱ショックタンパク質（ｈｓｐ７０）、および細胞骨格タンパクであるアクチンに特異的な抗体と共にインキュベートした。ＰＲおよびその他の核内受容体についての抗体は、Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓから入手し、一方、ｈｓｐ７０およびアクチンについての抗体はそれぞれＳｔｒｅｓｓＧｅｎおよびＳｉｇｍａから入手した。得られたタンパク質シグナルを、濃度測定およびＮＩＨ  ＩｍａｇｅＪソフトウェアを用いて定量化した。
【０１０６】
ＬＮＣａＰ細胞溶解物のウェスタンブロットを図５に示す。ＤＨＴの存在下または不在下でＬＮＣａＰ細胞をＡＳＣ−Ｊ９と共にインキュベートすること（１または５マイクロモル濃度、２４時間）により、ＡＲの細胞内濃度は著しく減少し、程度はより低いもののプロゲステロン受容体の濃度も著しく減少したが、その他の試験対象の核内受容体またはタンパク質には実質的な影響はなかった。
【０１０７】
Ｔ４７Ｄ細胞溶解物のウェスタンブロットを図６に示す。エストロジアル（Ｅ２）の存在下または不在下でＴ４７Ｄ細胞をＡＳＣ−Ｊ９（５または１０マイクロモル濃度）と共にインキュベートすることで、ＡＲの細胞内濃度は減少したものの、その他の受容体タンパク質は、ＬＮＣａＰ細胞における観察と同様に減少しなかった。
【実施例４】
【０１０８】
実施例４：タンパク質合成阻害物質の存在下での転写因子の分解の増強
観察されたＡＲタンパク質レベルの低減がＡＲタンパク質合成の阻害よりもむしろタンパク質の分解に起因していたのか否かを判定するため、第二組の３回の反復実験を実施した。これらの実験においては、細胞による新たなタンパク質の合成を防ぐために、タンパク質合成阻害物質であるシクロヘキシミド（ＣＨＸ）を使用した。新たなＡＲタンパク質合成が無い状態では、ＡＲレベルのあらゆる改変は主にタンパク質分解に原因があると思われる。ＡＳＣ−Ｊ９（２０マイクロモル濃度）の存在下および不在下で、ならびにシクロヘキシミド（１５マイクログラム／ミリリットル）の存在下および不在下で、ＬＮＣａＰ細胞を培養した。その後、細胞を０、３、６および１２時間インキュベートした後に回収し、ウェスタンブロットによりＡＲレベルを分析した。
【０１０９】
一つの実験に由来する代表的なウェスタンブロットを図７Ａに示す。対照細胞における内因性ＡＲ濃度の低減が、シクロヘキシミドでの３時間以内の処理で検出され、これはＡＲのデノボ合成がこの受容体の定常状態のレベルに影響することを示唆した。既存のＡＲタンパク質の観察された低減は、試験化合物（ＡＳＣ−Ｊ９）が４時間以内に既存のＡＲタンパク質の分解を増強または増大させた（ひいてはＡＲ活性を低下させた）ということを表している。
【０１１０】
ＡＲの発現を低減させる上での活性に対してＡＲＤエンハンサーが及ぼす効果を従来の抗アンドロゲン物質と比較するために、ＡＳＣ−Ｊ９および従来の抗アンドロゲン物質であるＣＰＡ（酢酸シプロテロン）、ＨＦ（ヒドロキシフルタミド）、およびフィナステリドを、ＬＮＣａＰ細胞で試験した。図７Ｂ、ＡＳＣ−Ｊ９、ＣＰＡ、ＨＦ、またはフィナステリドの存在下で４８時間、ＬＮＣａＰ細胞を培養した。細胞を回収し、ＡＲタンパク質をウェスタンブロットにより定量化した。ＡＳＣ−Ｊ９処理のみがＡＲタンパク質の減少という結果をもたらし、このことは、ＡＳＣ−Ｊ９がアンドロゲン受容体の分解を誘発する一方で、従来の抗アンドロゲン物質であるＣＰＡ、ＨＦ、およびフィナステリドはそれを誘発しないということを示している。
【実施例５】
【０１１１】
実施例５：突然変異アンドロゲン受容体の分解
ここでは、突然変異核内受容体の蓄積に関連するヒトの疾病のモデルにおける、突然変異核内受容体の分解の非限定的な実施例を記載する。この具体的な実施例においては、ケネディー病のモデルが調査される。ケネディー病つまり球脊髄性筋萎縮症（ＳＭＢＡ）は、ＡＲ遺伝子のＮ末端領域における異常に長いポリグルタミン伸長からなるアンドロゲン受容体の突然変異によって引き起こされる神経変性病である。伸長したポリグルタミン（ポリＱ４９（４９回のポリグルタミン反復））を有する突然変異ＡＲでの細胞の実験的なトランスフェクションは、トランス活性化機能の低下、そして一部のケースでは、ミスフォールディングしたＡＲタンパク質の核内封入と関連することが示されている（Ｃｈａｍｂｅｒｌａｉｎら、（１９９４年）Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｒｅｓ．，第２２巻、３１８１〜３１８６頁）。異常なＡＲのこの核内蓄積は細胞毒性であり、神経細胞の死を引き起こし、ケネディー病のインビボでの病理と一貫性がある。
【０１１２】
サル腎臓ＣＯＳ−１細胞を、１０％ＦＢＳを含むダルベッコ変法イーグル（ＤＭＥ）培地が入った３５ミリメートルの懸濁培養皿の中に置かれたアルコール清浄および滅菌を行ったカバースリップの上に、０．５ミリリットルの体積あたり３×１０4個の細胞密度で播種した。細胞に、野生型ＡＲ（ＧＦＰＡＲ）またはポリＱ４９（プラスミドＧＦＰＡＲＱ４９）突然変異アンドロゲン受容体およびレポーターとしての緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）を含むプラスミドをトランスフェクトした。各々のカバースリップについて、１０２．５マイクロリットルのＤＭＥ培地中の３．０７５マイクログラムのプラスミドに１２．３マイクロリットルのＳｕｐｅｒＦｅｃｔを添加し（ＤＮＡ対ＳｕｐｅｒＦｅｃｔ試薬を１：４という比とする）、混合物を短時間ボルテックス処理し、１５分間にわたり複合体を形成させた。その後、各混合物に、８９７マイクロリットルのＣＤ／ＤＭＥを加え、穏やかに混合した。得られた１ミリリットルの体積を、カバースリップの入った皿に加えた（最終プラスミド濃度は、皿１枚あたり３．０２マイクログラムであった）。細胞を５時間トランスフェクション溶液と共に５時間インキュベートし、その後培地を、媒体（ＤＭＳＯ）のみが添加されるかまたはＡＳＣ−Ｊ９（最終濃度５マイクロモル濃度）を含む新鮮な１．５ミリリットルのＣＤ／ＤＭＥ培地に変更した。トランスフェクションが終わってから２４時間後に、培地を再び新鮮なＣＤ／ＤＭＥ培地（１．５ナノモル濃度のＤＨＴを含むかまたは含まない）へと変更し、媒体またはＡＳＣ−Ｊ９を加えた（最終濃度５マイクロモル濃度）。培地の変更から２４時間後に、培地を取り出し、細胞を、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）中の１％のホルムアルデヒドで、室温で一時間固定した。ホルムアルデヒドを除去し、固定した細胞をＰＢＳで三回洗浄し、次にカバースリップを乾燥させた。処理スキームを標示するようにカバースリップに印をつけ、細胞のまわりに色鉛筆で疎水性の円を書いた。各カバースリップを２００マイクロリットルのヨウ化プロピジウム（水１ミリリットルあたり０．７マイクログラム）を用いて室温で５分間染色し、次にＰＢＳで三回すすいだ。カバースリップを空気乾燥し、グリセロールベースの封入剤を有するスライド上に載せ、必要であれば、蛍光顕微鏡検査で観察する前に摂氏４度で保管した。ＧＦＰＡＲおよびＧＦＰＡＲポリＱ４９プラスミドでトランスフェクトしたＣＯＳ−１細胞を示す代表的な顕微鏡写真を、図８Ａおよび８Ｂに示す。顕微鏡写真中に示されている通り、トランスフェクトした細胞は、蛍光レポータータンパク質であるＧＦＰによって示されるようにプラスミドを発現した。対照細胞は、大量の蛍光封入体または凝集体を含有していた（図８Ｂ）。ＡＳＣ−Ｊ９で処理された細胞は、蛍光封入体を実質的により少ない量だけ含有し、これは、発現した突然変異体ポリＱ４９アンドロゲン受容体がＡＳＣ−Ｊ９処理によって分解されたことを示唆している。
【実施例６】
【０１１３】
実施例６：アンドロゲン受容体の分解によるラットにおける皮脂腺の低減
この実施例では、具体的にはアンドロゲン受容体の分解を誘発することによってアンドロゲン受容体活性化経路の効果を改善することおよびヒトの対象において座瘡を治療する上で有効であることが上記の実施例において示された、試験化合物ＡＳＣ−Ｊ９を、動物モデルにおける皮脂腺葉のサイズを低減させるために使用した。局所治療による皮脂腺の有効な低減は、座瘡などの皮膚の症状を治療する上で有用であり得る。この動物モデルにおいては、全体が本明細書に参照により援用されているＹｅら、（１９９７年）Ｓｋｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．、第１０号、１０２８８−１０２９７頁において記載されているファジーラットを使用した。
【０１１４】
実施例１２において後で記載する通りに局所クリームを調製した。試験クリームにはＡＳＣ−Ｊ９（２５マイクロモル濃度）が含まれ、媒体のみが添加された対照クリームも調製した。８週間の期間にわたり、毎日一回、動物の背面皮膚に綿棒を用いて試験クリームまたは対照クリームを塗布した。その後動物を屠殺し、顕微鏡検査のため皮膚試料を収集した。安楽死させた動物の背面に市販の脱毛剤を塗布した。５分後、脱毛剤と毛をティッシュペーパーで除去した。その領域を７５％のイソプロピルアルコールで完全に清浄した。４ミリメートルの皮膚用パンチを用いて皮膚組織試料を取り出し、この試料を、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ、１７ミリモル濃度）、リン酸ナトリウム（０．１モル濃度、ｐＨ７．４）溶液中において摂氏３７度で２〜３時間インキュベートした。真皮から上皮を丁寧に分離し、１０％のリン酸緩衝ホルマリン中に保管した。顕微鏡検査に先立ち、試料をスライドガラス上に載せた。顕微鏡イメージングのために、良好に保存された腺小葉の領域を選択した。腺葉の縁部をトレースし、トレースした腺葉の面積をＩｍａｇｅ  Ｊソフトウェア（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ）を用いて得た。
【０１１５】
結果を図９および図１０に示す。図９で示されているように、皮膚の褐色および皮脂腺のバンドは、ＡＳＣ−Ｊ９で処理したファージラットにおいて４〜５週間以内で低減した。図１０Ａ〜Ｃにおいて示されているように、化合物ＡＳＣ−Ｊ９（２００μＭ）での雄ラットの局所的処理の結果、皮脂腺のサイズは有意に低減したが、去勢によりひき起こされるものほどではなかった。図１０Ｄでは、データは、媒体のみでの局所的処理（対照クリーム）が腺葉のサイズの有意な変化を生み出さないことを示した。さまざまな濃度のＡＳＣ−Ｊ９を用いた局所的処理は、皮脂腺葉のサイズの有意な低減をもたらした（パネルＡ）が、去勢によりひき起こされるものほどではなく、それでも従来の抗アンドロゲンフルタミドよりは優れている。図１０Ｅ（パネルＢと記されている）は、皮膚に塗布されたＡＳＣ−Ｊ９が、去勢効果に匹敵しかつフルタミドより良い、雄ファージラットにおける皮脂腺管のサイズの有意な低減をもたらすことを示す代表的なデータを示している。
【実施例７】
【０１１６】
実施例７：アンドロゲン受容体の分解による動物モデルにおけるアンドロゲン誘発型脱毛症の治療
この実施例は、核内受容体の分解による、対象における核内受容体関連疾患の治療について記載する。この実施例では、核内受容体は、ステロイドホルモン受容体であるアンドロゲン受容体である。核内受容体関連疾患は、アンドロゲン受容体により影響されることがわかっている脱毛症（脱毛または禿頭症）である。この実施例では、具体的にはアンドロゲン受容体の分解を誘発することによってアンドロゲン受容体活性化経路の効果を改善することがこれまでの実施例において示された試験化合物ＡＳＣ−Ｊ９を使用して、動物モデルにおける脱毛を治療する。
【０１１７】
脱毛および再発毛についてのこの動物モデルにおいては、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウスを用いた（全体が本明細書に参照により援用されているＵｎｏら、（１９９０年）Ｊ．Ｃｕｔａｎｅｏｕｓ  Ａｇｉｎｇ  ＆  Ｃｏｓｍ．Ｄｅｒｍ．、第１巻、１９３頁）。６週齢の雄のマウス（１群あたり動物６〜７頭）を電気バリカンで剃毛し、その後脱毛クリームで１〜２分間処理した。剃毛後に、毛包が活発に成長する毛成長期にあることを示す暗色の皮膚の色を有していることが判明した動物は、研究から除外した。除毛から一日後に、最初の動物群には、連続２０日間、毎朝一回、剃毛した部域に、１００マイクロリットルの、エタノール中の１％テストステロン溶液を各々局所塗布した。第２群の動物には、連続２０日間、毎朝一回、剃毛した部域に１００マイクロリットルの媒体（エタノール）のみを局所塗布した。第１群のマウス（テストステロン処理されたもの）をさらに対照群と処理群に分けた。同様に、除毛の一日後から、対照群の各々のマウスには、１００マイクロリットルの対照溶液（６０％のエタノール、２０％のプロピレングリコール、および２０％の水）を塗布し、処理群の各々のマウスには、連続２０日間、毎日午後１回、剃毛した領域に、１００マイクロリットルの試験化合物、ＡＳＣ−Ｊ９（同じ６０％エタノール、２０％プロピレングリコール、および２０％水の溶液中に０．０２％）を局所塗布した。剃毛した領域における再発毛を、局所的処理の開始後、０、４、８、１１、および１４日後に観察し、写真撮影した。
【０１１８】
剃毛し、その後テストステロンを朝に局所的塗布し対照溶液のみを午後に塗布したマウスは、２０日間の処理後、剃毛部の領域にほとんどまたは全く再発毛を示さなかった（図１１Ａ）。剃毛し、その後エタノール媒体のみ（テストステロン無し）を局所的塗布したマウスは、局所的な媒体処理から２０日後に剃毛部の領域において急速な再発毛を示した（図１１Ａ）。
【０１１９】
剃毛し、その後テストステロンを朝に局所的塗布し対照溶液のみを午後に塗布したマウスは、１７日間の処理後、剃毛部の領域にほとんどまたは全く再発毛を示さなかった（図１１Ｂ）。剃毛し、その後テストステロンを朝に局所的塗布しＡＳＣ−Ｊ９を午後に塗布したマウスは、８日目から１７日目に剃毛部の領域に急速な再発毛を示した（図１１Ｂ）。これらの結果は、アンドロゲン受容体を分解するものとして知られる化合物であるＡＳＣ−Ｊ９の局所的塗布が、動物モデルにおけるテストステロン誘発型の発毛抑制を克服できるということを実証している。
【実施例８】
【０１２０】
実施例８：核内受容体分解化合物ＡＳＣ−Ｊ９を用いた癌性腫瘍のインビボでの低減
ヌードマウスの左脇腹に、２００万個のＬＮＣａＰ腫瘍細胞を皮下接種した。実験動物において、ヌードマウスに、一週間に３回、１００ｍｇ／ｋｇ／日の割合で化合物ＡＳＣ−Ｊ９の腹腔内（ｉｐ）注射するか、または媒体対照のみを投与した。７週間の処理後、腫瘍を切除し、秤量し、比較した。媒体対照対ＡＳＣ−Ｊ９の腫瘍重量比は、０．６９４ｇ：０．１７２ｇであり、したがって、ＡＳＣ−Ｊ９で処理した動物は、腫瘍サイズが７５％低減した。さらに、ＡＳＣ−Ｊ９で処理した動物に由来する血漿中のＰＳＡ（前立腺特異的抗原）レベルは９０％低減した（５７．０ｎｇ／ｍｌから７．６ｎｇ／ｍｌに低減）。結果を図１２に示す。
【実施例９】
【０１２１】
実施例９：ＡＲＤエンハンサーＡＳＣ−Ｊ９化合物は動物モデルにおいて皮膚の創傷治癒を早めることができる
動物モデルにおける創傷治癒を早めるＡＳＣ−Ｊ９の能力を、Ｂａｌｂ／ｃマウスを用いて試験した。皮膚用パンチを用いて、引退した雄の種畜Ｂａｌｂ／ｃマウスの頸部領域の背中近くに創傷を作った。マウスを毎日２回、創傷部位において局所的にＡＳＣ−Ｊ９クリーム（２５μＭ）または媒体対照クリームのいずれかで処理した。図１３を参照すると、ＡＳＣ−Ｊ９で処理された動物は、媒体処理された動物に比べて、５日目にはより小さい創傷サイズを有しており、１０日目にはＡＳＣ−Ｊ９で処理されたマウスにおいて創傷が完全に治癒し、一方、媒体で処理された動物の創傷の瘢痕化は目に見えて残っていた。
【実施例１０】
【０１２２】
実施例１０：アンドロゲン受容体の分解によるヒト対象におけるアンドロゲン関連疾患の治療
この実施例では、核内受容体（アンドロゲン受容体）の分解による、対象における核内受容体関連疾患（尋常性座瘡）の治療について記載する。一般的には単に座瘡として知られている尋常性座瘡は、両方の性別の１０代および若年成人のヒトの顔面、胸部、および背中に典型的に発症する赤色皮膚発疹であるが、これはあらゆる年令において、体のその他の領域にも発生する可能性がある（例えば、２００４年４月２３日にアクセスした、ｗｗｗ．ｅｍｅｄｉｃｉｎｅ．ｃｏｍ／ｄｅｒｍ／ｔｏｐｉｃ２．ｈｔｍで電子的に利用可能な、Ｊ．Ｃ．ＨａｒｐｅｒおよびＪ．Ｆｕｌｔｏｎ，Ｊｒ．（２００３年）、「Ａｃｎｅ  Ｖｕｌｇａｒｉｓ」を参照）。座瘡は、ほぼすべての人で、人生の或る時期において発症し、永久的な瘢痕化および精神的苦痛および低い自尊心の原因となり得ると同時に、皮膚感染などのより重篤な健康問題を導く可能性がある。皮脂腺の基底細胞および腺細胞において発現するアンドロゲン受容体は、男性と女性の間で類似した皮膚分布を有する（Ｂｌａｕｅｒら、（１９９１年）Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔｉｇ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．、第９７巻、２６４〜２６８頁）。皮膚において、アンドロゲン受容体は最終的な皮脂腺細胞の分化および皮脂の産生を刺激する。座瘡の一般的な治療は多くの場合、望ましくない副作用を有する。例えば、局所レチノイドは太陽光過敏を導く可能性があり、抗生物質は抗生物質耐性をもたらし得、過酸化ベンゾイルは接触性皮膚炎をひき起こす可能性がある。座瘡のための新規で有効な、好ましくは局所的な（非全身性の）治療が必要とされている。
【０１２３】
この実施例では、具体的にはアンドロゲン受容体の分解を誘発することによってアンドロゲン受容体活性化経路の効果を改善するものとして先の実施例において示した化合物ＡＳＣ−Ｊ１５またはＡＳＣ−Ｊ９を含有するクリームの局所的投与によりヒトの対象の座瘡を治療し、成功をおさめた。基本的な担体製剤は、（１）ａｒｉｓｔｏｆｌｅｘ  ａｖｃ、Ｏｓｍｏｃｉｄｅ、Ｔｗｅｅｎ２０、および水を含有する水性溶液、ならびに（２）ミリスチン酸イソプロピル、ココナツジエタノールアミン、エチルパラベン、イソブチルパラベン、メチルパラベン、およびプロピルパラベンを含有する油性溶液という二つの溶液を混合することによって調製した。必要に応じて、１〜２．５マイクロモル濃度の最終濃度までクリームに試験化合物（ＡＳＣ−Ｊ１５またはＡＳＣ−Ｊ９）を添加した。
【０１２４】
年齢が１５才から５２才までの男性および女性のヒトボランティアを、座瘡に冒された皮膚に試験化合物を局所的塗布することによって治療した。対象には、一日二回（朝晩一回ずつ）、座瘡に冒された領域にクリームを塗布するように依頼した。一般に、座瘡の症候は、２〜３日以内で有意に鎮まるという所見が得られ、１〜２週間以内で完全に治癒した。結果を表２に示し、一人のボランティアからの代表的な結果（写真）を図１４に示す。図１４Ａはボランティアの額を、図１４Ｂはボランティアの背中を示している。
【０１２５】
【表２】
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【０１２６】
見出しは全て、読者の便宜上のものであり、別段の規定のないかぎり、その見出しの後に続く本文の意味を限定するために用いられるものではない。本発明に対しては、その趣旨および範囲から逸脱することなく、さまざまな変更および離脱を加えることができる。したがって、本発明を明細書において具体的に記載されているものに、または図面で例示されている通りに限定することは意図されておらず、本発明は、特許請求の範囲に記載されるように限定されるものである。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０１２７】
【特許文献１】米国特許出願第６０／９６２８８０号明細書
【特許文献２】米国特許出願第１２／００８１２４号明細書
【特許文献３】米国特許第７２４１７３１号明細書
【特許文献４】米国特許第６３７６５５７号明細書
【特許文献５】米国特許第６３３３０５７号明細書
【特許文献６】米国特許第５９７２３４５号明細書
【特許文献７】米国特許第７２０１９３１号明細書
【特許文献８】米国特許第６３５８５４１号明細書
【非特許文献】
【０１２８】
【非特許文献１】ＦＡＳＥＢ.Ｊ、２００６年１０月、２０（１２）：２０６８〜８０頁
【非特許文献２】「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ」、第２０版、Ｇｅｎｎａｒｏ（編）ならびにＧｅｎｎａｒｏ、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ、ＷｉｌｌｉａｍｓおよびＷｉｌｋｉｎｓ、２０００年
【非特許文献３】Ｔａｂｅｒ’ｓ  ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉｃ  ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ（第２０版、２００１年、ＦＡ  Ｄａｖｉｓ  Ｃｏｍｐａｎｙ）
【非特許文献４】「Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ」、Ｅ．Ｈａｒｌｏｗ  ａｎｄ  Ｄ．Ｌａｎｅ、Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ、１９８８年
【非特許文献５】Ｏｈｔｓｕら（２００２年）、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、第４５巻、５０３７〜５０４２頁
【非特許文献６】Ｏｈｔｓｕら（２００３年） Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、第１１巻、５０８３〜５０９０頁
【非特許文献７】Ｃｈａｍｂｅｒｌａｉｎら、（１９９４年）Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｒｅｓ．，第２２巻、３１８１〜３１８６頁
【非特許文献８】Ｙｅら、（１９９７年）Ｓｋｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．、第１０号、１０２８８−１０２９７頁
【非特許文献９】Ｕｎｏら、（１９９０年）Ｊ．Ｃｕｔａｎｅｏｕｓ  Ａｇｉｎｇ  ＆  Ｃｏｓｍ．Ｄｅｒｍ．、第１巻、１９３頁
【非特許文献１０】２００４年４月２３日にアクセスした、ｗｗｗ．ｅｍｅｄｉｃｉｎｅ．ｃｏｍ／ｄｅｒｍ／ｔｏｐｉｃ２．ｈｔｍで電子的に利用可能な、Ｊ．Ｃ．ＨａｒｐｅｒおよびＪ．Ｆｕｌｔｏｎ，Ｊｒ．（２００３年）、「Ａｃｎｅ  Ｖｕｌｇａｒｉｓ」
【非特許文献１１】Ｂｌａｕｅｒら、（１９９１年）Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔｉｇ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．、第９７巻、２６４〜２６８頁
【図１】
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【図２−１】
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【図２−２】
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【図２−３】
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【図２−４】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図７Ｂ】
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【図８Ａ】
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【図８Ｂ】
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【図９】
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【図１０Ａ−Ｃ】
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【図１０Ｄ−Ｅ】
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【図１１Ａ】
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【図１１Ｂ】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４Ａ】
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【図１４Ｂ】
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【国際調査報告】
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