(57)【要約】  本発明は、化粧成分としての４−アミジノベンジルアミン誘導体の使用及び化粧用組成物並びに皮膚及び頭皮の化粧処置のための非治療的方法に関する。該誘導体及び組成物は、表皮バリアの損傷を予防および回復させるためのウロキナーゼ阻害剤として使用することができる。バリア異常及び破壊は、多くの場合に乾燥肌状態、痒み、フケ及び敏感肌の知覚の出発点である。これらの４−アミジノベンジルアミン誘導体は、クリーム、ローション、ゲル、シャンプーなどの形状で皮膚及び頭皮ケアの局所適用に使用することができる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
化粧品成分としての、以下の一般式（Ｉ）
【化２】
2010536892.tif 000008
［式中、
Ｒ１は、Ｈ、Ｃ１−Ｃ８−アルキル、場合により置換されたアリール−Ｃ１−Ｃ４−アルキル、アミノ−Ｃ１−Ｃ５−アルキル又はヒドロキシ−Ｃ１−Ｃ５−アルキルを表し；
Ｒ２は、Ｈ又はＣ１−Ｃ８−アルキルを表し；
Ｒ３は、ヒドロキシ−Ｃ１−Ｃ５−アルキル又はＣ１−Ｃ８−アルキルを表し；
Ｒ４は、Ｈ、−ＳＯ２−Ｒ、−ＣＯ−Ｒ，又は−ＣＯＯ−Ｒを表し；
Ｒ５は、Ｈ、ＯＨ、−ＣＯ−Ｒ又は−ＣＯＯ−Ｒを表し；
Ｒは、Ｃ１−Ｃ１６−アルキル、場合により置換されたアリール、場合により置換されたヘテロアリール、場合により置換されたアリール−Ｃ１−Ｃ４−アルキル又は場合により置換されたヘテロアリール−Ｃ１−Ｃ４−アルキルを表し、そして
Ｘは、ＣＨ又はＮを表す］
で示される少なくとも一つの化合物の使用。
【請求項２】
フェニル環が、４位でアミジノ官能基により置換されていることを特徴とする、請求項１記載の少なくとも一つの化合物の使用。
【請求項３】
Ｒ１が、Ｈ、Ｃ１−Ｃ８−アルキル、場合により置換されたアリール−Ｃ１−Ｃ４−アルキル又はアミノ−Ｃ１−Ｃ５−アルキルを表し；
Ｒ２が、Ｈを表し；
Ｒ３が、ヒドロキシ−Ｃ１−Ｃ５−アルキルを表し；
Ｒ４が、−ＳＯ２−Ｒを表し；
Ｒ５が、Ｈを表し；
Ｒが、場合により置換されたアリール−Ｃ１−Ｃ４−アルキルを表し、そして
Ｘが、ＣＨを表すことを特徴とする、請求項１及び２の一項記載の少なくとも一つの化合物の使用。
【請求項４】
請求項１記載の化合物
ａ）ベンジルスルホニル−Ｄ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−アミジノ−ベンジルアミド）
ｂ）ベンジルスルホニル−Ｄ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−（４−アミジノ−ベンジルアミド）
ｃ）ベンジルスルホニル−Ｄ−Ｓｅｒ−ホモＰｈｅ−（４−アミジノ−ベンジルアミド）
ｄ）ベンジルスルホニル−Ｄ−Ｓｅｒ−Ｌｙｓ−（４−アミジノ−ベンジルアミド）
の少なくとも一つの使用。
【請求項５】
化合物が、皮膚科学的に適合可能な塩の形状で存在することを特徴とする、請求項１〜４の一項記載の少なくとも一つの化合物の使用。
【請求項６】
化合物が、純粋なエナンチオマーとして存在することを特徴とする、請求項１〜５の一項記載の少なくとも一つの化合物の使用。
【請求項７】
化粧用組成物の調製のための、請求項１〜６の一項記載の少なくとも一つの化合物の使用。
【請求項８】
組成物が、式（Ｉ）で示される化合物を０．００１〜１００００ppm(m/m)、好ましくは０．１〜１０００ppm(m/m)の範囲の濃度で含有することを特徴とする、請求項７記載の使用。
【請求項９】
ａ）一般式（Ｉ）で示される少なくとも一つの化合物、並びに
ｂ）アミノ酸、タンパク質、タンパク質加水分解物、成長因子、酵素、プロテアーゼ、酵素阻害剤、プロテアーゼ阻害剤、補酵素、ジ−、トリ−、テトラ−、ペンタ−及びヘキサペプチドなどのペプチド、単糖、二糖、三糖、オリゴ糖、及び多糖などの糖質、グリコサミノグリカン、グリコサミノグリカンサブユニット、プリン、ピリミジン、ヌクレオチド、ヌクレオシド、カルボン酸、飽和及び不飽和脂肪酸、脂質、スフィンゴシン、スフィンゴ脂質、スフィンゴ糖脂質、硫脂質、リン脂質、ステロール、フィトステロール、サポニン、フラボノイド、フェノール、ポリフェノール、テルペン、アルカロイド、ベンゾフラン、微量元素及びそれらの塩、ポリアルコール、抗菌成分、抗菌ペプチド、ＵＶ吸収剤、ビタミン、プロビタミン、レチノイド、カロテノイド、キレート剤、保湿剤、表皮バリア機能調節剤、皮膚改善（skin-revitalizing）及び再生成分、皮膚引き締め（skin tightening）及び抗シワ剤、緩和剤及び抗炎症剤、抗痒み成分、抗フケ成分、α−又はβ−ヒドロキシカルボン酸などの落屑成分、抗酸化剤、ラジカルスカベンジャー、ＵＶ消光剤、皮脂調節及び抗ニキビ剤、ストレッチマーク調節剤、皮膚免疫系調節剤、皮膚ライトニング剤、皮膚タンニング剤、抗スリミング剤、皮膚微小循環調節剤、紅潮及び非一過性紅斑などの酒さの一次特徴を調節する薬剤、膿疹及び毛細血管拡張を調節する薬剤、抗カビ剤、並びにそれらの混合物より選択される、少なくとも一つの追加的なスキンケア成分
を含有することを特徴とする化粧用組成物、特に局所適用可能な化粧用組成物。
【請求項１０】
追加的なスキンケア成分が、メラトニン、尿素、クレアチニン、ジメチルエタノールアミン、セリン、グリシン、アスパラギン、システイン、グルタミン、リシン、アルギニン、アスパラギン酸、グルタミン酸、Ｎ−アセチルシステイン、シトルリン、コラーゲン、ゼラチン、アルブミン、カゼイン、エラスチン、ケラチン、セリシン、フィブロイン、フィラグリン（fillagrin）、形質転換成長因子、インスリン様成長因子、上皮成長因子、酸性及び塩基性線維芽細胞成長因子、神経成長因子、角化細胞成長因子、肝細胞成長因子、血小板由来成長因子、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子、血管内皮成長因子、パパイン、ブロメライン、スブチリシン、スーパーオキシドジスムターゼ、ラクトペルオキシダーゼ、ホスホリパーゼ、トランスグルタミナーゼ、トラネキサム酸、ダイズトリプシン阻害剤、Bowman Birkインヒビター、ＬＥＫＴＩ、アプロチニン、エラフィン、ＳＬＰＩ、α１−アンチトリプシン、α１−アンチキモトリプシン、コレステロール硫酸、ロイペプチン、キモスタチン、組織メタロプロテアーゼ阻害因子、Elhibin（登録商標）、Colhibin（登録商標）、Pefabloc（登録商標）シリーズの化合物、カラシエキス、ユビキノン、ニコチンアミド、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸、コエンザイムＡ、コエンザイムＢ１２、フラビンアデニンジヌクレオチド、フラビンモノヌクレオチド、カルノシン、Ｈ−βＡｌａ−Ｐｒｏ−Ｄａｂ−ＮＨベンジル、Ｃｕ（ＩＩ）−Ｈ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｌｙｓ−ＯＨ、Ｈ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＯＨ、エライジル−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＯＨ、パルミトイル−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−ＯＨ、Ｈ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−ＯＨ、パルミトイル−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｄａｂ−ＯＨ、Ｈ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−ＯＨ、パルミトイル−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｄａｂ−Ｔｈｒ−ＯＨ、Ｈ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ａｌａ−ＮＨ２、パルミトイル−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−ＯＨ、アセチル−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｍｅｔ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−ＡｒｇＮＨ２、グルコース、フルクトース、マンノース、ジヒドロキシアセトン、エリトルロース、ショ糖、トレハロース、マルトース、ガラクトマンナン、グルコマンナン、β−グルカン、カラゲナン、グリコーゲン、キトサン、レンチナン、リケニン、イヌリン、フコース、アルギネート、キシログルカン、デキストラン、アミロース、フルクタン、キサンタン、プルラン、ヒアルロナン、コンドロイチン硫酸、ヘパリン、デルマタン硫酸、グルクロン酸、Ｎ−アセチルグルコサミン、アラントイン、尿酸、アデノシン、アデノシン一リン酸、アデノシン５’−三リン酸、キネチン、乳酸、クエン酸、グリコール酸、アゼライン酸、サリチル酸、リポ酸、ピロリドンカルボン酸、ウロカニン酸、コーヒー酸、リノール酸、オレイン酸、パルミチン酸、共役リノール酸、スクアラン、スクアレン、モノグリセリド、ジグリセリド、トリグリセリド、ワセリン、ラノリン、フィトスフィンゴシン、セラミド、グリコセラミド、セレブロシド、ガングリオブロシド、スルファチド、ホスファチジルコリン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルエタノールアミン、コレステロール、シトステロール、スチグマステロール、カンペステロール（kampesterol）、ルペオール、グリチルリジン、ルチン、ケルセチン、ゲニステイン、ダイゼイン、フィセチン、ミリセチン、ルテオリン、ヘスペレチン、シリビン、シリマリン、アピゲニン、エピガロカテキン、没食子酸エピガロカテキン、レスベラトロール、ノルジヒドログアヤレト酸、エラグ酸レゾルシノール、グリチルレチン酸、ファルネソール、α−ビサボロール、β−ビサボロール、カフェイン、テオフィリン、テオブロミン、ウスニン酸、Ｚｎ−、Ｓｅ−、Ｍｎ−塩、グリセロール、プロピレングリコール、ブチレングリコール、ソルビトール、エリトリトール、ヘキサンジオール、フィタントリオール、ジンクピリチオン、デフェンシン、カテリシジン、ダームシジン、ヒスタチン、ベンゾアート、アントラニラート、サリチラート、シンナマート、ベンゾフェノン、Parsol（商標）340、ベンズイミダゾール、ベンゾトリアゾール、Tinosorb（商標）M、トリアジン、Tinosorb（商標）S、Parsol（商標）SLXとしてのポリシリコーン、酸化チタン、酸化亜鉛、メラニン、ビタミンＡ、一連のビタミンＢ類、ビタミンＣ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、レチノール、レチナール、トレチノイン、イソトレチノイン、アリトレチノイン、エトレチナート、アシトレチン、タザロテン、ベキサロテン、α−カロテン、β−カロテン、リコペン、ルテイン、ゼアキサンチン、アスタキサンチン、ＥＤＴＡ、デスフェリオキサミン、フリルジオキシム、Pentavitin（登録商標）、Phytaluronate（登録商標）、Revitalin（登録商標）-BT、酵母エキス、コンフリーエキス、イチョウエキス、ツボクサ、Pefa（登録商標）-Tight、カモミールエキス、アロエベラ、キンセンカエキス、甘草エキス、ハマメリス（hamamelis）エキス、Stimu-Tex（登録商標）、月見草油、緑茶エキス、Regu（登録商標）-Seb、アフリカプルーンエキス、タイム（thymus officinalis）エキス、ゴツコラエキス、アルニカエキス、Immucell（登録商標）、甘草エキス、Melfade（登録商標）、ガラナエキス、Regu（登録商標）-Fade、メトロニダゾール、ケトコナゾール、シクロピロクス、チャノキ油、及びそれらの誘導体、並びにそれらの混合物より選択されることを特徴とする、請求項９記載の化粧用組成物。
【請求項１１】
一つ又は複数の皮膚科学的担体を含有することを特徴とする、請求項９及び１０の一項記載の化粧用組成物。
【請求項１２】
溶液、分散液、エマルション、マイクロエマルション、ナノエマルションとしての、又は好ましくはマクロ−、マイクロ−若しくはナノカプセルとして担体に、リポソーム若しくはカイロミクロンに被包された、又はマクロ−、マイクロ−若しくはナノ粒子に、若しくはマイクロスポンジに封入された、又は粉末有機ポリマー、タルク、ベントナイト及び関連無機担体上に造粒又若しくは吸収された、式（I)で示される化合物を含有することを特徴とする、請求項９〜１１の一項記載の化粧用組成物。
【請求項１３】
溶液、エマルション（油／水及び水／油）、ミルク、ローション、分散液、軟膏、ゲル形成性及び粘性の界面活性剤及び乳化ポリマー、ポマード、シャンプー、石けん、ゲル、凍結乾燥物、粉末、スティック、ペンシル、スプレー、ボディーオイル、フェースマスク又はパッチの形状でありうることを特徴とする、請求項９〜１１の一項記載の化粧用組成物。
【請求項１４】
式（Ｉ）で示される一つ又は複数の化合物を含有する、請求項９〜１３の一項記載の組成物が、皮膚及び／又は頭皮に適用されることを特徴とする、皮膚におけるプロテアーゼ、特にウロキナーゼの阻害のための方法。
【請求項１５】
組成物が、ベンジルスルホニル−Ｄ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−アミジノ−ベンジルアミド）、ベンジルスルホニル−Ｄ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−（４−アミジノ−ベンジルアミド）、ベンジルスルホニル−Ｄ−Ｓｅｒ−ホモＰｈｅ−（４−アミジノ−ベンジルアミド）又はベンジルスルホニル−Ｄ−Ｓｅｒ−Ｌｙｓ−（４−アミジノ−ベンジルアミド）又はそれらの塩を含有することを特徴とする、請求項１４記載の方法。
【請求項１６】
式（Ｉ）で示される一つ又は複数の化合物を含有する、請求項９〜１３の一項記載の組成物が、皮膚及び／又は頭皮に適用されることを特徴とする、皮膚水分補給、経皮水分喪失を維持、回復及び／又は改善するための、乾燥性皮膚状態、痒み、フケ及び／又は敏感肌の知覚などの皮膚及び／又は頭皮バリア異常を改善するための非治療的化粧法。
【請求項１７】
組成物が、ベンジルスルホニル−Ｄ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−アミジノ−ベンジルアミド）、ベンジルスルホニル−Ｄ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−（４−アミジノ−ベンジルアミド）、ベンジルスルホニル−Ｄ−Ｓｅｒ−ホモＰｈｅ−（４−アミジノ−ベンジルアミド）若しくはベンジルスルホニル−Ｄ−Ｓｅｒ−Ｌｙｓ−（４−アミジノ−ベンジルアミド）又はそれらの塩を含有することを特徴とする、請求項１６記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の背景
ウロキナーゼ（ｕＰＡ）は、ウロキナーゼ型プラスミノーゲン活性化因子とも呼ばれ、多ドメイン性セリンプロテアーゼ（ＥＣ３．４．２１．３１）である。ｕＰＡは、三つのドメイン、すなわち成長因子様ドメイン（ａａ４−４３）、クリングルドメイン（ａａ４７−１３５）及び触媒性「Ｂ」鎖（アミノ酸１４４−４１１）からなるアミノ酸残基４１１個のタンパク質である。クリングルドメインは、ヘパリンと結合すると思われる。成長因子様ドメインは、上皮成長因子（ＥＧＦ）の構造と幾分類似性を有することから、ＥＧＦ様ドメインと呼ばれる。ｕＰＡは、チモーゲン（プロｕＰＡ又は一本鎖ｕＰＡ）として合成され、プラスミンによるＬｙｓ１５８とＩｌｅ１５９の間のタンパク質分解性切断により活性化する。結果として生じる２本の鎖は、ジスルフィド結合により一緒に保たれる１。
【０００２】
ｕＰＡは、平滑筋細胞、線維芽細胞、内皮細胞、マクロファージ及び腫瘍細胞などの多様な種類の細胞により産生される。ｕＰＡは、細胞浸潤及び組織リモデリングに主な役割を果たすことに関連づけられた２。
【０００３】
細胞外マトリックスにおいてｕＰＡは、特異的細胞表面レセプターであるｕＰＡレセプター（ｕＰＡＲ）とそれの相互作用により細胞膜に繋がれている。結合相互作用は、おそらくＥＧＦ様ドメインにより仲介されると思われる。活性ｕＰＡへのプロｕＰＡの切断は、プロｕＰＡ及びプラスミノーゲンがレセプターに結合している場合に加速する。故に、セリンプロテアーゼであるプラスミンは、プロｕＰＡを活性化し、それが今度はプラスミノーゲンを切断することによって、より多くのプラスミンを活性化する。血漿中には大過剰のプロテアーゼ阻害剤が見られることから、この正のフィードバックサイクルは、おそらく細胞表面でのレセプターに基づくタンパク質分解に限定されると思われる１。
【０００４】
ｕＰＡの最も重要な内因性阻害剤は、セルピン類、すなわちプラスミノーゲン活性化因子阻害因子−１（ＰＡＩ−１）及びプラスミノーゲン活性化因子阻害因子−２（ＰＡＩ−２）であり、これらは、プロテアーゼ活性を非可逆的に阻害する。
【０００５】
ｕＰＡに関する主な基質は、細胞表面に結合したｕＰＡによりプラスミンに変換されるプラスミノーゲンである。ｕＰＡは、プラスミノーゲンの中の単一のペプチド結合に高度に特異的である。活性化したプラスミンは、細胞外マトリックス（フィブリン、フィブロネクチン、ラミニン、及びプロテオグリカン）の構成要素を分解し、マトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）もまた活性化することで、コラーゲンの分解を促進する１、３、４。それらの活性は、細胞浸潤及び組織リモデリングを含む重要な過程を導き、それらの過程には、創傷治癒、骨リモデリング、血管形成、腫瘍浸潤性及び転移の拡大が含まれる２。
【０００６】
多種類の細胞が、プラスミン介在性タンパク質分解又は細胞外マトリックス（ＥＣＭ）及び基底膜（ＢＭ）などの細胞外支持構造の改変の主開始因子としてｕＰＡを使用する。細胞は、ＥＣＭ及びＢＭにより提供される物理的フレームワーク内の組織および器官の中に存在し、移動し、互いに相互作用する。ＥＣＭ内の又はＢＭを通過する細胞の移動は、局所タンパク質分解又はこれらの構造の改変を必要とし、細胞をそれらの細胞には従来利用できなかった隣接領域に浸潤させる５。
【０００７】
したがって、ｕＰＡ阻害剤は、血管形成、関節炎、炎症、浸潤、転移、骨粗鬆症に対して活性を有し、腫瘍の成長を阻害する３。
【０００８】
ｕＰＡが広範囲の浸潤性生物学的過程を仲介することから、強力で選択的なｕＰＡ阻害剤の有用性に注目が集まっている２。
【０００９】
第ＶＩＩ因子、第Ｘ因子及び組織型プラスミノーゲン活性化因子（ｔＰＡ）などのトリプシン様特異性を有するセリンプロテアーゼが多数存在するために、強力で選択的なｕＰＡ阻害剤の開発は難問である。構造に基づく大規模な薬物開発は、ｕＰＡの強力で選択的な阻害剤を提供した。これらは、一般に芳香族又は複素環骨格に構築されたアミジン又はグアニジン官能基を有するアルギニノ模倣体である６。
【００１０】
異なる身体部位、異なる季節及び角質層の異なる空間的レベルでのＳＣの構造、組成及び機能における変化は、過去数十年にわたり化粧品業界にとって高まり続ける関心の的であった。例えば、角質層の脂質又はＮＭＦ（天然保湿因子）のレベルの差は、異なる身体部位に生じることが知られており、冬季数ヶ月のレベル低下及びそれらのレベル減少は、角質層外層に向けて起こる。
【００１１】
プロテアーゼ活性及び質量レベルの差もまた報告された。表皮は、皮膚における複数の活性、すなわち表皮の増殖、分化、脂質バリアの恒常性及び組織リモデリングに関与する幾つかのセリンプロテアーゼを発現することが示された。最も重要なことに、他の酵素と共にセリンプロテアーゼによる角質層コルネオデスモソームのタンパク質分解は、落屑前の重大な事象である７。セリンプロテアーゼの過剰活性は、脂質プロセシング酵素の分解によるバリア撹乱を導くおそれがあり、それから高ｐＨレベルでコルネオデスモソーム分解がコントロールされずに継続することに加えて、角質層の完全性及び合着もまた悪化させる８。
【００１２】
角質層におけるセリンプロテアーゼは、基礎となる、時に観察できない皮膚炎のための主なマーカーでありうる。これに関して、プロテアーゼ阻害剤がバリア回復を支援することから、プラスミノーゲン／プラスミン系の活性上昇は、バリア回復を損なうと考えられる９。ｕＰＡは、バリア損傷後に活性化することが報告された１０。ｕＰＡ活性増加が、乾燥肌を有する被験者の頬からのテープストリッピングで観察され、これは、経皮水分喪失レベル増加と相関した１１。プロテアーゼ阻害剤は、特に乾燥肌を軽減することが報告された９、１０、１１。
【００１３】
Kitamuraら１２は、さらに、正常な被験者の基底層だけに局在したプラスミノーゲンが、乾燥肌では全ての表皮細胞層に発現していたことを実証した。しかし、Kawaiら１１は、ｕＰＡが角質層に存在し、この酵素が角質層におけるプラスミノーゲン系活性化のトリガーであったことを報告した。これは、個体の背中の皮膚に実験的に誘導された乾燥肌で上昇した。彼らは、さらに、ｕＰＡ活性増加が視覚的乾燥肌を有する被験者及びＴＥＷＬレベルが上昇した被験者の頬からの角質層試料に存在したことを実証した。被験者が正常な外見の皮膚及び約１６g m-2h-1未満のＴＥＷＬを有する場合、活性は見出されなかった。これらの結果は、バリア形成の異常又はバリア回復不全がＴＥＷＬ及びプラスミン活性の上昇の結果として起こること、並びにバリア修復のための手段がプロテアーゼ阻害剤を使用することであろうということを示している。この事実に関わらず、被験者は、臨床的に正常に見える皮膚を有し、顔でのレベル上昇は、環境の影響によって誘導される、顔での準臨床的微小炎症状態が原因であるおそれがある。
【００１４】
バリア破壊の繰り返しは、表皮過形成を誘導し、乾燥肌を導くと考えられる１０。
【００１５】
驚くべきことに、国際公開公報第０１／９６２８６号４に記載されたｕＰＡ阻害剤が、乾燥性皮膚状態、痒み、フケ及び敏感肌の知覚などの皮膚及び頭皮バリア異常の局所処置に使用できることが見い出された。
【００１６】
発明の説明
本発明は、化粧成分としての、そして化粧用及び皮膚科学的組成物の製造のための、並びに皮膚の非治療的化粧処置法における４−アミジノベンジルアミン誘導体の使用に関する。該４−アミジノベンジルアミン誘導体は、一般式（Ｉ）で示される誘導体である
【００１７】
【化１】
2010536892.tif 000002
［式中、
Ｒ１は、Ｈ、Ｃ１−Ｃ８−アルキル、場合により置換されたアリール−Ｃ１−Ｃ４−アルキル、アミノ−Ｃ１−Ｃ５−アルキル又はヒドロキシ−Ｃ１−Ｃ５−アルキルを表し；
Ｒ２は、Ｈ又はＣ１−Ｃ８−アルキルを表し；
Ｒ３は、ヒドロキシ−Ｃ１−Ｃ５−アルキル又はＣ１−Ｃ８−アルキルを表し；
Ｒ４は、Ｈ、−ＳＯ２−Ｒ、−ＣＯ−Ｒ、又は−ＣＯＯ−Ｒを表し；
Ｒ５は、Ｈ、ＯＨ、−ＣＯ−Ｒ又は−ＣＯＯ−Ｒを表し；
Ｒは、Ｃ１−Ｃ１６−アルキル、場合により置換されたアリール、場合により置換されたヘテロアリール、場合により置換されたアリール−Ｃ１−Ｃ４−アルキル又は場合により置換されたヘテロアリール−Ｃ１−Ｃ４−アルキルを表し、そして
Ｘは、ＣＨ又はＮを表す］。
【００１８】
好ましいのは、アミジノ官能基がフェニル環の４位にあり、かつ／又は
Ｒ１が、Ｈ、Ｃ１−Ｃ８−アルキル、場合により置換されたアリール−Ｃ１−Ｃ４−アルキル又はアミノ−Ｃ１−Ｃ５−アルキルを表し；
Ｒ２が、Ｈを表し；
Ｒ３が、ヒドロキシ−Ｃ１−Ｃ５−アルキルを表し；
Ｒ４が、−ＳＯ２−Ｒを表し；
Ｒ５が、Ｈを表し；
Ｒが、場合により置換されたアリール−Ｃ１−Ｃ４−アルキルを表し、そして
Ｘが、ＣＨを表す、
一般式（Ｉ）で示される化合物である。
【００１９】
さらに好ましいアミジノベンジルアミン誘導体は、ベンジルスルホニル−Ｄ−Ｓｅｒ−ホモＰｈｅ−（４−アミジノ−ベンジルアミド）、ベンジルスルホニル−Ｄ−Ｓｅｒ−Ｌｙｓ−（４−アミジノ−ベンジルアミド）、ベンジルスルホニル−Ｄ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−４−アミジノ−ベンジルアミド及びベンジルスルホニル−Ｄ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−４−アミジノ−ベンジルアミドである。これらの化合物は全て、強力で高度に特異的なウロキナーゼ阻害活性を示し、国際公開公報第０１／９６２８６号に記載されている４。これらの化合物は、純粋なエナンチオマーとして好都合に使用される。
【００２０】
「ヘテロアリール」という用語は、それ自体単独で、又はヘテロアリール含有基に関する構造要素として、一つ又は二つの環から構成される５〜１１員芳香族系を表し、ここで、１〜３員は、酸素、硫黄及び窒素より選択されるヘテロ原子である。１〜２個のベンゼン環が縮合して複素環になってもよい。その例は、ピリジル、ピリミジニル、ピリダジニル、ピラジニル、１，３，５−トリアジニル、キノリニル、イソキノリニル、キノキサリニル、キナゾリニル、フタラジニル、ピロリル、ピラゾリニル、イミダゾリニル、１，２，４−トリアゾリニル、テトラゾリニル、フリル、チエニル、オキサゾリニル、チアゾリニル、イソチアゾリニル、ベンゾキサゾリル、ベンゾチエニル、インドリル、ベンズイミダゾリル、インダゾリル、ベンゾトリアゾリル及びベンゾチアゾリルである。結合は、ヘテロ部分又はベンゾ部分のいずれかで、そしてπ電子過剰ヘテロ芳香族化合物の窒素又は任意の炭素において生じうる。
【００２１】
場合により置換されたアリール基及びヘテロアリール基の置換基は、例えば、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−ハロアルキル、ヒドロキシ、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６−ハロアルコキシ、Ｃ１−Ｃ６−アルケニル、Ｃ２−Ｃ６−アルケニルオキシ、Ｃ２−Ｃ６−アルキニル、Ｃ３−Ｃ６−アルキニルオキシ、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシカルボニル、ＣＮ、ＯＣＮ、ニトロ、アミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルアミノ、ジ−Ｃ１−Ｃ６−アルキルアミノ、アミノカルボニル、Ｃ１−Ｃ６−アルキルアミノカルボニル、ジ−Ｃ１−Ｃ６−アルキルアミノカルボニル、Ｃ１−Ｃ６−アルキルチオ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルスルホキシル、Ｃ１−Ｃ６−アルキルスルホニル及びＣ３−Ｃ６−シクロアルキルである。
【００２２】
これらの化合物は、乾燥性皮膚状態、痒み、フケ及び／又は敏感肌の知覚のような皮膚及び／又は頭皮バリア異常の処置のためのクリーム、ローション、ゲル、シャンプーなどの形状で化粧品適用に使用することができる。
【００２３】
本発明の局所的に有効なベンジルアミン誘導体は、所望の任意の適用形状で利用可能に、又は調製することができる。故に、これらの製剤は、例えば水性又は無水調製物、油中水（ｗ／ｏ）若しくは水中油（ｏ／ｗ）型のエマルション若しくはマイクロエマルション、例えば水中油中水（ｗ／ｏ／ｗ）型の多重エマルション、ゲル、シャンプー、固形剤、又はエアロゾルでありうる。本発明の製剤は、例えば粉末、湿式パッチ、ローション、クリーム若しくは軟膏、シャンプー及び洗浄製剤として、又は任意の他の化粧品として承認されている形状で利用することができる。ベンジルアミン誘導体の有効濃度は、化粧品の総重量に対して約０．００１〜１００００ppm、好ましくは０．１〜１０００ppmである。
【００２４】
製剤又は調製物にもすることができる本発明の化粧的に有効なベンジルアミン誘導体は、通常適用され局所適用可能な任意のさらなるスキンケア成分と一緒に使用することができる。追加的なスキンケア成分の例は、植物、藻類、微細藻類、酵母、キノコ、動物及び微生物、並びに以下のような合成及び半合成物質から得られる。
・メラトニン、尿素、クレアチニン、ジメチルエタノールアミン及びそれらの誘導体、
・アミノ酸及びそれらの誘導体（例えば、セリン、グリシン、アスパラギン、システイン、グルタミン、リシン、アルギニン、アスパラギン酸、グルタミン酸、Ｎ−アセチルシステイン、シトルリン）、
・タンパク質、それらの加水分解物及びそれらの誘導体（例えば、コラーゲン、ゼラチン、アルブミン、カゼイン、エラスチン、ケラチン、セリシン、フィブロイン、フィラグリン（fillagrin））、
・成長因子及びそれらの誘導体（例えば、形質転換成長因子、インスリン様成長因子、上皮成長因子、酸性及び塩基性線維芽細胞成長因子、神経成長因子、ケラチノサイト成長因子、肝細胞成長因子、血小板由来成長因子、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子、血管内皮成長因子）、
・酵素及びプロテアーゼ並びにそれらの誘導体（パパイン、ブロメライン、スブチリシン、スーパーオキシドジスムターゼ、ラクトペルオキシダーゼ、ホスホリパーゼ、トランスグルタミナーゼ）、
・酵素阻害剤、プロテアーゼ阻害剤、及びそれらの誘導体（例えば、トラネキサム酸、ダイズトリプシン阻害剤、Bowman Birkインヒビター、ＬＥＫＴＩ、アプロチニン、エラフィン、ＳＬＰＩ、α１−アンチトリプシン、α１−アンチキモトリプシン、コレステロール硫酸、ロイペプチン、キモスタチン、組織メタロプロテアーゼ阻害因子、Elhibin（登録商標）、Colhibin（登録商標）、Pefabloc（登録商標）シリーズの化合物、カラシエキス）、
・補酵素及びそれらの誘導体（例えば、ユビキノン、ニコチンアミド、ニコチンアミド  アデニンジヌクレオチド、ニコチンアミド  アデニンジヌクレオチドリン酸、コエンザイムＡ、コエンザイムＢ１２、フラビンアデニンジヌクレオチド、フラビンモノヌクレオチド）、
・ジ−、トリ−、テトラ−、ペンタ−及びヘキサペプチドなどのペプチド並びにそれらの誘導体（例えば、カルノシン、Ｈ−βＡｌａ−Ｐｒｏ−Ｄａｂ−ＮＨベンジル、Ｃｕ（ＩＩ）−Ｈ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｌｙｓ−ＯＨ、Ｈ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＯＨ、エライジル−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＯＨ、パルミトイル−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−ＯＨ、Ｈ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−ＯＨ、パルミトイル−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｄａｂ−ＯＨ、Ｈ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−ＯＨ、パルミトイル−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｄａｂ−Ｔｈｒ−ＯＨ、Ｈ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ａｌａ−ＮＨ２、パルミトイル−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−ＯＨ、アセチル−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｍｅｔ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−ＡｒｇＮＨ２）、
・単糖、二糖、三糖及びオリゴ糖などの糖質並びにそれらの誘導体（例えば、グルコース、フルクトース、マンノース、ジヒドロキシアセトン、エリトルロース、ショ糖、トレハロース、マルトース）、
・多糖及びそれらの誘導体（例えば、ガラクトマンナン、グルコマンナン、β−グルカン、カラゲナン、グリコーゲン、キトサン、レンチナン、リケニン、イヌリン、フコース、アルギネート、キシログルカン、デキストラン、アミロース、フルクタン、キサンタン、プルラン）、
・グリコサミノグリカン、それらのサブユニット並びにそれらの誘導体（例えば、ヒアルロナン、コンドロイチン硫酸、ヘパリン、デルマタン硫酸、グルクロン酸、Ｎ−アセチルグルコサミン）、
・プリン、ピリミジン、ヌクレオチド、ヌクレオシド及びそれらの誘導体（例えば、アラントイン、尿酸、アデノシン、アデノシン一リン酸、アデノシン５’−三リン酸、キネチン）、
・カルボン酸及びそれらの誘導体（例えば、乳酸、クエン酸、グリコール酸、アゼライン酸、サリチル酸、リポ酸、ピロリドンカルボン酸、ウロカニン酸、コーヒー酸）、
・脂肪酸及びそれらの誘導体（例えば、リノール酸、オレイン酸、パルミチン酸、共役リノール酸）、
・脂質及びそれらの誘導体（例えば、スクアラン、スクアレン、モノグリセリド、ジグリセリド、トリグリセリド、ワセリン、ラノリン）、
・スフィンゴシン、スフィンゴ脂質、スフィンゴ糖脂質、硫脂質及びそれらの誘導体（例えば、フィトスフィンゴシン、セラミド、グリコセラミド、セレブロシド、ガングリオブロシド、スルファチド）、
・リン脂質及びそれらの誘導体（ホスファチジルコリン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルエタノールアミン）、
・ステロール、フィトステロール、サポニン及びそれらの誘導体（例えば、コレステロール、シトステロール、スチグマステロール、カンペステロール（kampesterol）、ルペオール、グリチルリジン）、
・フラボノイド及びそれらの誘導体（例えば、ルチン、ケルセチン、ゲニステイン、ダイゼイン、フィセチン、ミリセチン、ルテオリン、ヘスペレチン、シリビン、シリマリン、アピゲニン）、
・フェノール、ポリフェノール及びそれらの誘導体（例えば、エピガロカテキン、没食子酸エピガロカテキン、レスベラトロール、ノルジヒドログアヤレト酸、エラグ酸レゾルシノール）、
・テルペン及びそれらの誘導体（例えば、グリチルレチン酸、ファルネソール、α−ビサボロール、β−ビサボロール）、
・アルカロイド及びそれらの誘導体（例えば、カフェイン、テオフィリン、テオブロミン）、
・ベンゾフラン及びそれらの誘導体（例えば、ウスニン酸）、
・微量元素（例えば、Ｚｎ、Ｓｅ、Ｍｎ）及びそれらの塩、
・ポリアルコール及びそれらの誘導体（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、ブチレングリコール、ソルビトール、エリトリトール、ヘキサンジオール、フィタントリオール）、
・抗菌成分、抗菌ペプチド及びそれらの誘導体（例えば、ジンクピリチオン、デフェンシン、カテリシジン、ダームシジン、ヒスタチン）、
・ＵＶ吸収剤及びそれらの誘導体（例えば、ベンゾアート、アントラニラート、サリチラート、シンナマート、ベンゾフェノン（Parsol（商標）340など）、ベンズイミダゾール、ベンゾトリアゾール（Tinosorb（商標）Mなど）、トリアジン（Tinosorb（商標）Sなど）、ポリシリコーン（Parsol（商標）SLXなど）、酸化チタン、酸化亜鉛、メラニン、アヴォベンゾン）、
・ビタミン、プロビタミン及びそれらの誘導体（例えば、ビタミンＡ、一連のビタミンＢ類、ビタミンＣ、ビタミンＤ、ビタミンＥ）、
・レチノイド及びそれらの誘導体（例えば、レチノール、レチナール、トレチノイン、イソトレチノイン、アリトレチノイン、エトレチナート、アシトレチン、タザロテン、ベキサロテン）、
・カロテノイド及びそれらの誘導体（例えば、α−カロテン、β−カロテン、リコペン、ルテイン、ゼアキサンチン、アスタキサンチン）、
・キレート剤及びそれらの誘導体（例えば、ＥＤＴＡ、デスフェリオキサミン、フリルジオキシム）、
・保湿剤（例えば、グリセロール、ブチレングリコール、ソルビトール、尿素、Ｎ−アセチルグルコサミン、ヒアルロン酸、グリコサミノグリカン、アミノ酸、タンパク質加水分解物、コラーゲン、単糖、二糖、オリゴ糖及び多糖、Pentavitin（登録商標）、Phytaluronate（登録商標））、
・表皮バリア機能調節剤（例えば、セラミド、コレステロール、脂肪酸、スクアラン、フィトスフィンゴシン、ラノリン、レシチン、ワセリン）、
・皮膚改善（skin-revitalizing）成分及び再生成分（例えば、Revitalin（登録商標）-BT、酵母エキス、コンフリーエキス、イチョウエキス）、
・皮膚引き締め（skin tightening）及び抗シワ剤（例えば、ツボクサ、Vialox（登録商標）、Syn（登録商標）-Ake、Pefa（登録商標）-Tight、Matrixyl（登録商標）、Biopeptide CL、Kollaren PP、エライジル−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＯＨ、Ｈ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−ＯＨ、アルジルリン、コラキシル、Dermican LS 9745)、
・緩和剤及び抗炎症剤（例えば、カモミールエキス、パンテノール、ナイアシンアミド、酸化亜鉛、アロエベラ、キンセンカエキス、甘草エキス、ハマメリス（hamamelis）エキス、Sensicalmine、アリスチン（Alistine）、Ｈ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−ＯＨ）、
・抗痒み成分（例えば、Stimu-Tex（登録商標）、月見草油）、
・抗フケ成分（例えば、アラントイン、硫化セレン、ビホナゾール、ジンクピリチオン）、
・落屑成分（例えば、α−ヒドロキシ酸、β−ヒドロキシ酸）、
・抗酸化剤（例えば、スーパーオキシドジスムターゼ、ユビキノン、リポ酸、ビタミンＥ、緑茶エキス）、
・皮脂調節及び／又は抗ニキビ剤（例えば、Regu（登録商標）-Seb、リノール酸、アフリカプルーンエキス、タイム（thymus officinalis）エキス、レゾルシノール、サリチル酸）、
・ストレッチマーク調節剤（例えば、ゴツコラエキス、ダルトシド、レジストリル（Registril））、
・皮膚免疫系調節剤（例えば、アルニカエキス、Immucell（登録商標））、
・皮膚ライトニング剤（例えば、α−アルブチン、β−アルブチン、コウジ酸、リン酸アスコルビルマグネシウム、甘草エキス、Melfade（登録商標）、メラノスタチン、アセチル−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−ＮＨ２）、
・皮膚タンニング剤（エリトルロース、ジヒドロキシアクテオン（dihydroxyacteone）、Melitane PP）、
・抗スリミング剤（例えば、カフェイン、テオフィリン、ガラナエキス、Regu（登録商標）-Fade）、
・皮膚微小循環調節剤（例えば、アルギニン、シリビン、シリマリン）、
・紅潮及び非一過性紅斑などの酒さの一次特徴を調節する薬剤（例えば、メトロニダゾール、アゼライン酸）、
・膿疹及び毛細血管拡張を調節する薬剤（例えば、シリマリン）、
・抗真菌成分（例えば、ケトコナゾール、シクロピロクス、チャノキ油）、及びそれらの混合物。
【００２５】
許容され得る担体を、一般に本発明の化粧用活性組成物又は製剤の製造に使用してもよい。該担体の例は、アルコール、ポリオール、脂肪酸、脂質、油、ロウ、粘稠化剤、界面活性剤、乳化剤、充填剤、保存料、香料(aromas）及び芳香剤（fragrances）並びに着色剤、泡安定化剤及び／又はシリコーンである。
【００２６】
本発明に使用されるべき担体は、特に、グリセリン、ポリグリセリン化合物、エチレングリコール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、寒天ガム、トラガカントガム、アラビアゴム、植物または動物性ゼラチン、メチルセルロース、エチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルアルコール、ポリビニルアルコール酢酸エステル、セチルアルコールなどのＣ６−２２脂肪アルコール、Ｃ６−２２脂肪アルコールエステル、特に、ステアリン酸、パルミチン酸、ラウリン酸及び対応するメチル、エチル及びプロピルエステル、ラノリン、流動パラフィン又はワセリン若しくは蜜ロウなどの天然若しくは合成ロウ、オリーブ油、ヤシ油、ダイズ油、ヒマシ油などの植物油及び対応する硬化油、ポリアルキレンオキシドで修飾されたヒドロキシル含有化合物、並びに化粧品製剤に組み入れられることが公知のさらなる原料である。
【００２７】
油中水（ｗ／ｏ）、水中油（ｏ／ｗ）又は水中油中水（ｗ／ｏ／ｗ）エマルション又はマイクロエマルションの調製のために、本質的に公知であり、このために適用される化合物が好ましくは使用される。脂質相の調製のために、鉱物性又は天然の油又はロウが、好ましくは使用される。脂肪酸とエタノール、プロパノール、イソプロパノール、プロピレングリコール若しくはグリセリンとのエステル、又は脂肪アルコールと有機Ｃ３−２０酸とのエステルなどの、脂肪酸とアルコールとの合成製造されたエステルもまた使用してもよい。例えば、ミリスチン酸プロピル、パルミチン酸イソプロピル、ステアリン酸イソプロピル、オレイン酸イソプロピル、ステアリン酸ブチル、ラウリン酸ヘキシル、ステアリン酸２−ヘキシルデシルなどの、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸のエステル、若しくはホホバ油などの天然油、又はそれらの混合物が好ましい。好ましいシリコーンは、特に、好ましくは環状又は直鎖形状のポリシロキサンジメチルである。
【００２８】
さらに、本発明の製剤は、好ましくは緩衝系として、ｐＨ調整のための酸又は塩基、例えば、水酸化ナトリウム、リン酸、クエン酸又は乳酸トリエタノールアミンを含みうる。
【００２９】
以下の実施例は、本発明の範囲をいかなる方法にも限定することなく、本発明をさらに具体的に説明することを意図する。
【００３０】
実施例
実施例１
エマルションの調製
相Ａの成分を７０℃に、相Ｂの成分を７５℃に加熱する。撹拌しながら相Ｂを相Ａに注ぐ。その混合物を５０℃に冷却し、均質化し、３０℃に冷却する。次いで、相Ｃ及び相Ｄの成分を添加する。室温に達するまでこのエマルションを撹拌する。
【００３１】
【表１】
2010536892.tif 000003
【００３２】
実施例２
化粧ゲルの調製
撹拌しながら相Ａの成分を溶解させる。相ＢでｐＨを６．０に調整し、次いで相Ｃを添加する。
【００３３】
【表２】
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【００３４】
実施例３
角質層におけるＴＥＷＬとプラスミン及びｕＰＡ活性の相関
健康な白人被験者１０人（皮膚タイプＩＩ−ＩＩＩ）が試験に参加した。全ての志願者は、インフォームドコンセントの書式にサインした。頬に連続的なテープストリッピング（９回）（D-Squame（登録商標）, CuDerm Corporation, Dallas, USA）を行う前に、Aquaflux AF103（Biox Systems, London, UK）を使用してＴＥＷＬを測定した。被験者に、角質層を採取する前の少なくとも１２時間は、局所薬又は化粧料を全く適用しないよう要請した。最初に、テープストリッピング手順の１５分前に、周囲温度の蒸留水を染みこませた綿パッドで皮膚を慎重に清浄し、乾燥させた。被験者を標準的な条件の環境室に順応させた。外科用マーカーで皮膚部位に印を付け、測定プローブ及びテープが同じ領域に一貫して確実に適用されるようにした。
【００３５】
加圧装置（CuDerm Corporation, Dallas, USA）で２２５g/cm2の圧を５秒間かけて、直径２．２cm及び面積３．８cm2の標準D-Squame（登録商標）ディスクを皮膚に押しつけた。各ストリッピングの間隔は、２０±５秒であった。
【００３６】
赤外デンシトメーターSquameScan（商標）850A（Heiland electronic, Wetzlar、Germany）を用いた８５０nmでの吸光度測定により、テープストリッピングのタンパク質含量を定量した。SquameScan（商標）850Aは、標準D-Squame（登録商標）ディスクの適用のために特に設計されたものである。タンパク質定量のために、以下の式を使用した：
Ｃ（タンパク質）［μg cm-2］＝１．３６６×吸光度［％］−１．５５７
【００３７】
吸光度の測定直後に、各テープストリッピングを１．５mlエッペンドルフチューブに移し、０．１Ｍトリス／ＨＣｌ及び０．５％  Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００（ｐＨ８．０）から構成される７５０μlの緩衝液中で２５℃及び１０００rpmで１５分抽出した。テープストリッピングの抽出液をプールした。その溶液２５０μlに蛍光ウロキナーゼ基質Ｂｚ−β−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−ＡＭＣ（Pentapharm, Switzerland）及びプラスミン基質ＭｅＯＳｕｃ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＡＭＣ（Bachem, Switzerland）の５mMＤＭＳＯ溶液１．２５μlを添加した（最終基質濃度＝２５μM）。それらの溶液を３７℃及び１０００rpmで混合した。２時間後に、反応混合物１００μlに１００μlの１％酢酸を添加することにより反応を停止させた。放出されたＡＭＣをＣ１８  ＨＰＬＣ勾配溶出により定量した（８０％水／２０％アセトニトリル／０．０７％ＴＦＡから５０％水／５０％アセトニトリル／０．０７％ＴＦＡ）。使用したカラムは、Symmetry C18、３．５μm、４．６mm×７５mm（Waters, Milford, USA）であった。流速は１ml/min、インジェクション体積は５μl、ＡＭＣの保持時間は３．５分であった。発光波長は４４２nm、励起については３５４nmであった。
【００３８】
表１及び図１にデータをまとめる。ヒト角質層最上層におけるｕＰＡ及びプラスミン活性の存在は、これらのプロテアーゼを局所適用された阻害剤により阻害することができると結論させる。
【００３９】
【表３】
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【００４０】
【表４】
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図１：角質層におけるＴＥＷＬとプラスミン及びウロキナーゼ活性の相関。相関係数は、それぞれプラスミンに関してＲ２＝０．９５であり、ｕＰＡに関してＲ２＝０．４９であった。
【００４１】
【表５】
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【国際調査報告】
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