(57)【要約】  ニトロキシド媒介制御ラジカル重合によって形成された、櫛型、ブロック型、分岐型の官能基化されたポリマーを介した、ＰＥＧ修飾された生理活性分子の封入および結合を開示する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
機能剤と、
前記機能剤と結合しているかまたはこれを封入している、用途に適合されたポリマーと
を含み、前記用途に適合されたポリマーが、ニトロキシド媒介制御ラジカル重合によって形成される、組成物。
【請求項２】
前記用途に適合されたポリマーが、官能性ポリエチレングリコールを含むポリマーであり、前記機能剤が、前記用途に適合されたポリマーに１種またはそれ以上の結合基を介して結合している、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記機能剤が、生理活性物質であり、前記用途に適合されたポリマーが、官能性ポリエチレングリコールを含むポリマーである、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
前記用途に適合されたポリマーが、結合基を含む少なくとも１種の末端基を有する、官能性ポリエチレングリコールを含むポリマーであって、前記結合基が、重合開始剤として使用されるアルコキシアミンから誘導されたものである、請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
前記用途に適合されたポリマーが、ポリエチレングリコールを含まない官能性ポリマーである、請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
前記用途に適合されたポリマーが、親水性単位、疎水性単位、またはこれらの混合物から選択されるモノマー単位を含む、ポリエチレングリコールを含まない官能性ポリマーである、請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
前記用途に適合されたポリマーが、ポリエチレングリコールを含まない官能性ポリマーであり、前記機能剤が、農薬、医薬品、または化粧料から選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項８】
前記用途に適合されたポリマーが、両親媒性ブロックコポリマーである、請求項１に記載の組成物。
【請求項９】
前記両親媒性ブロックコポリマーが、グラジエントコポリマーである少なくとも１種のブロックセグメントを含む、請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
前記機能剤が、農薬、医薬品、風味剤もしくは香料、または化粧料から選択される、請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】
前記用途に適合されたポリマーが、結晶化させることができる少なくとも１種のブロックセグメントを含む両親媒性ブロックコポリマーであり、かつ前記機能剤が、封入されているが前記用途に適合されたポリマーとは共有結合していない、請求項１に記載の組成物。
【請求項１２】
結晶化させることができる前記少なくとも１種のブロックセグメントが結晶化しており、かつグラジエントコポリマーである、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１３】
前記両親媒性ブロックコポリマーが、少なくとも１種の親水性ブロックセグメントおよび少なくとも１種の疎水性ブロックセグメントを含む、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１４】
前記用途に適合されたポリマーが、グラジエントコポリマーである少なくとも１種のブロックセグメントを含む両親媒性ブロックコポリマーであり、前記機能剤が、封入されているが前記用途に適合されたポリマーとは共有結合していない、請求項１に記載の組成物。
【請求項１５】
前記用途に適合されたポリマーが、少なくとも１種の親水性ブロックセグメントおよび少なくとも１種の疎水性ブロックセグメントを含む両親媒性ブロックコポリマーである、請求項１に記載の組成物。
【請求項１６】
前記用途に適合されたポリマーの少なくとも１種のセグメントがグラジエントコポリマーであり、
前記機能剤が、疎水性であるかまたは水に不溶であり、かつ
前記機能剤が、封入されているが前記用途に適合されたポリマーとは共役結合していない、請求項１５に記載の組成物。
【請求項１７】
前記用途に適合されたポリマーが、ＡＢＣトリブロックコポリマーである、請求項１５に記載の組成物。
【請求項１８】
１種またはそれ以上のブロックセグメントがグラジエント型である、請求項１７に記載の組成物。
【請求項１９】
ポリマーセグメントＢおよびＣの一方または両方が疎水性である、請求項１７に記載の組成物。
【請求項２０】
ポリマーセグメントＢおよびＣの少なくとも一方が、結晶化させることができる、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２１】
前記疎水性ブロックセグメントが、結晶化させることができる、請求項１４に記載の組成物。
【請求項２２】
前記疎水性ブロックセグメントが、結晶化させることができ、かつグラジエントコポリマーである、請求項１４に記載の組成物。
【請求項２３】
機能剤と、前記官能基に結合した、用途に適合されたポリマーとを含む組成物の製造方法であって、前記用途に適合されたポリマーが、
開始アルコキシアミンを結合基を介して前記機能剤に結合させることによって反応性薬剤を形成する工程と、
前記反応性薬剤を少なくとも１種のエチレン性不飽和モノマーと反応させることによってポリマーセグメントを生成させる工程と、
場合により、その後、前記ポリマーセグメントをさらなる少なくとも１種のエチレン性不飽和モノマーと反応させることによってブロックコポリマーを生成させる工程と
を含むニトロキシド媒介制御ラジカル重合を介して形成される、方法。
【請求項２４】
前記機能剤が、処理の最中にその場で前記用途に適合されたポリマーに結合する、請求項２３に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、官能基化および／または用途に適合された（ｔａｉｌｏｒｅｄ）ポリマー、特に、ニトロキシド媒介制御ラジカル重合により形成された官能基化および／または用途に適合されたホモポリマー、コポリマー、分岐ポリマー、およびブロックコポリマーを介して、材料または機能剤の封入および結合を行うことに関する。
【背景技術】
【０００２】
ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）から誘導された基で物質を修飾することは、ＰＥＧ修飾として周知である。現在、ＰＥＧ修飾は、薬物として使用するためのタンパク質、ペプチド、抗体断片、オリゴヌクレオチド等の生理活性分子の修飾に幅広く使用されている。
【０００３】
タンパクおよびペプチド医薬品等の生理活性分子が治療薬として大いに有望視されているが、その多くは、タンパク質分解酵素によって分解され、短時間で腎臓から排除される可能性があり、中和抗体が産生され、貯蔵寿命が短く、溶解性が低く、かつ／または循環半減期が短い。このような物質をＰＥＧ修飾することにより、上記および他の欠点を克服することができる。ＰＥＧ修飾がクリアランスを減少させる能力は、一般に、タンパク質に結合したＰＥＧ基の数の関数になるのではなく、改変されたタンパク質全体の分子量が関係する。ＰＥＧ修飾を行うことにより、タンパク質およびペプチドの分子量を増加させ、これらをタンパク質分解酵素から保護することによって、薬物動態が改善される。ＰＥＧ修飾の他の利点の中でも、水溶性の増大、生物学的利用能の向上、血液循環の向上、タンパク質凝集の低減、免疫原性の低下、毒性の低下、および投与頻度の減少が挙げられる。
【０００４】
分岐ポリマーは、単独でも全体の分子量が高い非線状ポリマー分子を提供することができる。中心のコアに結合した複数のポリマーアームを有し、生理活性分子と結合する唯一の反応基を有する分岐または星型ポリマーが、例えば、米国特許第５，６４３，５７５号明細書および米国特許第５，９３２，４６２号明細書に記載されており、この両方の開示内容を参考として本明細書に組み込む。このような分岐ポリマーは、高分子量ポリマーを、極端に長いポリマー鎖を用いることなく分子の唯一の結合部位に結合させるのに有用であるが、分岐ＰＥＧ分子を形成する方法が難しく、また、コア分子に結合させる前にＰＥＧポリマーの大掛かりな精製を行うことに加えて、結合の後に、部分的にＰＥＧ修飾されたポリマー中間体を精製／除去することが必要となる。
【０００５】
国際公開第２００６／００３３５２号パンフレット（この開示内容を本明細書に参照として組み込む）には、原子移動重合（ＡＴＲＰ）および可逆的付加開裂連鎖移動（ＲＡＦＴ）を用いることにより、アルコキシポリエーテルを含むモノマーから櫛型ポリマーを調製することが記載されている。この開示には、先行技術の多くの欠点および制御重合法を用いることの利点が記載されているが、ＡＴＲＰ重合にも幾つか欠点があり、これらに限定されるものではないが、重合速度が遅く、金属を含む副生成物が残留し、スケールアップが難しく、ポリマーの組成および分子量範囲が限られることが挙げられる。金属を含む副生成物は生物系に有害となる可能性があるので除去することが必要であり、これは困難かつ面倒な手順を要する。例えば、米国特許第６，６１０，８０２号明細書にはこのような副生成物が記載されており、ＡＴＲＰ法の欠点が開示されている。さらに、必要とされる大量の金属含有制御剤は、変色だけでなく、ある種の反応器においては腐食の問題も起こし得る。この技術を用いると、酸素および特定の官能基（酸等）に対する感度の高さによって制御が難しくなるとともに不純物が生じるというさらなる制限に直面する。
【０００６】
ＲＡＦＴには、ラジカル制御剤として、ジチオカルバミン酸エステル、キサントゲン酸エステル、およびトリチオ炭酸エステル（トリチオ炭酸ジベンジル（ＤＢＴＴＣ）等）が使用される。しかしながら、ＲＡＦＴ法を効果的に機能させるためには、使用されるモノマーの種類および重合速度に基づきＲＡＦＴ剤を慎重に選択しなければならない。ＲＡＦＴ技術はまた、外部の重合開始源（ｐｏｌｙｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｓｏｕｒｃｅｓ）を必要とするため、すべてのポリマー鎖が所望の末端官能基化を施されることにはならないので、正確に定められた官能基化を達成することには限界がある。硫黄系の制御剤による悪臭および変色もこの技術の欠点である。さらに、ＡＴＲＰおよびＲＡＦＴ技術はいずれも副生成物による汚染および生成物の精製に関する問題に悩まされている。
【０００７】
したがって、設計に柔軟性を与えながらもこのような欠点を持たない、用途に適合された、ＰＥＧ基を含むポリマーを調製するための制御方法が求められている。
【０００８】
機能剤（本明細書においては、分子、生理活性分子、成分、または組成物（風味剤、香料、医薬品、病虫害防除剤（ｐｅｓｔｉｃｉｄｅ）等）、農薬（除草剤、殺菌剤、病虫害防除剤等）、染料、および他の多くのものとして定義する）の送達は、ほぼすべての応用科学における重要な一面である。容易に輸送および加工を行うことができる濃縮形態の機能剤は、安定化を行わないと、送達の信頼性が低くなり、この薬剤が予め定められた場所および時間に有益な特性を発揮することがごくまれにしか起こらなくなるであろう。非常に反応しやすい添加剤を分解から保護するとともに、その性能が所要の用途に応じて最適化されるであろう制御放出を行うために、有効な封入を行うことが幅広い用途において求められている。
【０００９】
ＰＥＧ修飾とは別に、多くの異なる封入技術が利用可能である。このような利用可能な技術の１つが、両親媒性ブロックコポリマー（親水性および疎水性ブロックセグメントを有するポリマー）を使用することである。両親媒性ブロックコポリマーは、水溶液中でミセルを形成し、疎水性または水に不溶な薬剤を封入または可溶化するのに適したものになることが知られている。封入技術、特に両親媒性ブロックコポリマーを使用するものは、例えば、米国特許第５，９３９，４５３号明細書、米国特許第６，６３８，９９４号明細書、米国特許公開第２００７／０１６０５６１号明細書、米国特許公開第２００４／００１００６０号明細書、および米国特許公開第２００５／０１８０９２２号明細書に記載されており、これらの開示内容を本明細書に参考として組み込む。これらの参考文献には、上述のＡＴＲＰまたはＲＡＦＴ法により調製される両親媒性ポリマーが記載されているが、これらの技術に付随する欠点（先に上述したもの）による制限がある。リビングアニオン重合法により製造されるＰＥＯ系の両親媒性ブロックコポリマーに分類されるものも記載されている。
【００１０】
リビングアニオン重合の難点は、極性および無極性コモノマー間の共重合性に劣ることや、容易に脱プロトン化し得るモノマーを使用できないなどの幾つかの欠点にある。したがって、官能性モノマーをそのまま組み込むことができず、また、モノマー混合物の共重合は問題を生じ、かつ／または実施できない可能性がある。このため、溶解性、反応性、Ｔｇ等の特性を用途に適合させる能力が低下する。さらに、この方法には費用がかかる可能性があり、塊状または乳化技術を使用することができないため商業規模で実施するのは困難であるかまたは実施が不可能であり、極めて純度の高い試薬が必要であり（微量のプロトン性物質でさえ重合を阻害する）、そして不活性雰囲気が不可欠である。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１１】
【特許文献１】米国特許第５，６４３，５７５号明細書
【特許文献２】米国特許第５，９３２，４６２号明細書
【特許文献３】国際公開第２００６／００３３５２号パンフレット
【特許文献４】米国特許第６，６１０，８０２号明細書
【特許文献５】米国特許第５，９３９，４５３号明細書
【特許文献６】米国特許第６，６３８，９９４号明細書
【特許文献７】米国特許公開第２００７／０１６０５６１号明細書
【特許文献８】米国特許公開第２００４／００１００６０号明細書
【特許文献９】米国特許公開第２００５／０１８０９２２号明細書
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
これらの参考文献は、共重合、グラジエントコポリマー、官能基化を用いて特定の特性を用途に適合させるのには適していない技術を使用しているか、または薬剤の溶解性および薬剤の放出の両方を制御するためにブロック組成を用途に適合させることや傾斜組成を形成させることの重要性を教示していないかのいずれかである。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本発明は、ニトロキシド媒介制御ラジカル重合（ＮＭ−ＣＲＰ）により形成された、官能基化および／または用途に適合されたポリマーに関する。一態様においては、本発明は、機能剤をＰＥＧ修飾することができるポリマーの調製方法である。他の態様においては、本発明は、用途に適合された、機能剤と結合するかまたはこれを封入することができる官能基化された非ＰＥＧ系ポリマーを得る方法を提供する。他の態様においては、本発明は、両親媒性ブロックコポリマーを用途に適合させることにより、機能剤の封入性の向上およびこの薬剤の放出特性の制御を可能にする方法を提供する。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
特段の断りがない限り、本明細書および特許請求の範囲において特定された材料群には、この種の材料の混合物も含まれる。特段の断りがない限り、百分率はすべて重量百分率であり、温度はすべて摂氏度（ｄｅｇｒｅｅｓ  Ｃｅｎｔｉｇｒａｄｅ、ｄｅｇｒｅｅｓ  Ｃｅｌｓｉｕｓ）である。
【００１５】
制御ラジカル重合
本発明のポリマーは、機能剤の結合または封入に使用することができる。本発明は、このようなポリマーを調製する方法ならびに機能剤の封入性の向上およびこの薬剤の放出特性の制御を可能にするためにこのポリマーを用途に適合させる方法について記載する。結合とは、機能剤がポリマーと共有結合することを意味する。封入とは、機能剤が捕捉されているが共有結合はしていないことを意味する。
【００１６】
これらは、好ましくは、ニトロキシド媒介ＣＲＰ（ＮＭ−ＣＲＰ）を用いて調製される。ＮＭ−ＣＲＰを用いることにより、様々な機能剤への結合および／またはその封入およびその制御放出を促すことができる、特定の制御された官能性および／または用途に適合された溶解性を有するポリマーを合成することが可能になる。
【００１７】
このようなポリマーの調製に様々なＣＲＰ手法が使用できることは明らかであるが、先に述べた多くの制限を有するＡＴＲＰやＲＡＦＴ等の他の周知のＣＲＰ技術と比較して多くの利点を有するＮＭ−ＣＲＰが好ましい。ＮＭ−ＣＲＰでは、アクリル系化合物、アクリルアミド、特に酸官能性を有するアクリル系化合物の使用を含め、多種多様なモノマーを使用することが可能である。ニトロキシド媒介ＣＲＰの他の明らかな利点は、ニトロキシドが通常は無害であるため反応混合物中に残留してもよいことにあり、その一方で、他のＣＲＰ法は、最終ポリマーから制御化合物を除去することがしばしば必要となる。試薬の精密な精製は必要ない。さらに、官能基化されたアルコキシアミンを使用することにより、形成されたポリマーの１００％またはほぼ１００％が確実に鎖末端またはポリマー鎖の中央のいずれかに官能基を含むようにすることができる。
【００１８】
ＮＭ−ＣＲＰには、ニトロキシド媒介剤を使用することによってラジカル重合を制御し、それによって、正確に定められた構造を有する配列したコポリマー（ブロックコポリマー等）を調製できるようにすることが含まれる。ＮＭ−ＣＲＰは、例えば、米国特許第６，２５５，４４８号明細書、米国特許第６，５６９，９６７号明細書、および米国特許第６，６４６，０７９号明細書に開示されており、この開示内容を、本明細書に参考として組み込む。重合は、塊状で、溶媒中で、および水性媒体中で行うことができ、既存の設備を用いて他のラジカル重合と類似の反応時間および温度で用いてもよい。
【００１９】
この方法においては、安定なフリーラジカルであるニトロキシドによってラジカル重合過程が制御される。この方法においては、重合が制御されており、しかもポリマーがリビングポリマーであるため、異なるモノマーを連続的に重合媒体に導入することによって各ブロックの組成および鎖長が厳密に制御されたブロックポリマーを調製することが可能になる。さらに、重合のリビング性により、均質な（すなわち、所与の反応混合物中の鎖の組成がすべて類似の構成を有する）コポリマーまたはグラジエント型のポリマーを調製することが可能になる。ＮＭ−ＣＲＰでは、このような制御が行われるため、用途に正確に適合した組成、分子量、官能基化、構成を有するブロックコポリマーを得ることができる。
【００２０】
この制御の機構を以下のように図で表すことができ、
【化１】
2010513556.tif 000002
ここで、Ｍは、重合性モノマーを表し、Ｐは、生長ポリマー鎖を表す。この制御の鍵には、定数Ｋdeact、ｋact、およびｋpが関連している（Ｔ．ＦｕｋｕｄａおよびＡ．Ｇｏｔｏ、Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ、１９９９、３２、ｐｐ．６１８〜６２３）。ｋdeact／ｋactの比が高すぎると重合が阻害されるが、一方で、ｋp／ｋdeactの比が高すぎるかまたはｋdeac／ｋactの比が低すぎると重合が制御できない。β置換されたアルコキシアミンは、幾つかの種類のモノマーの重合を開始および効率的に制御することを可能にし（Ｐ．Ｔｏｒｄｏら、Ｐｏｌｙｍ．Ｐｒｅｐ．、１９９７、３８、ｐｐ．７２９〜７３０およびＣ．Ｊ．Ｈａｗｋｅｒら、Ｐｏｌｙｍ．ｍａｔｅｒ．Ｓｃｉ．Ｅｎｇ．、１９９９、８０、ｐｐ．９０〜９１）、一方、ＴＥＭＰＯ系のアルコキシアミン（Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ、１９９６、２９、ｐｐ．５２４５〜５２５４に述べられている（２’，２’，６’，６’−テトラメチル−１’−ピペリジルオキシ−）メチルベンゼン等）は、スチレンおよびスチレン系誘導体の重合のみを制御することがわかっている。ＴＥＭＰＯおよびＴＥＭＰＯ系のアルコキシアミンは、アクリル系化合物の制御重合には適していない。
【００２１】
ラジカル重合の調整剤として有用なβ位にリンを含むニトロキシドラジカルが米国特許公開第２００４／００７７８７３号明細書に開示されており、この開示内容を本明細書に参考として組み込む。
【００２２】
ニトロキシドの一般構造は、
【化２】
2010513556.tif 000003
（式中、ＲLは、１５を超えるモル重量を表す）である。
【００２３】
ＣＲＰに有用なβ位にリンを含むニトロキシドラジカルとしては、構造
【化３】
2010513556.tif 000004
を有するＮ−ｔ−ブチル−Ｎ−［１−ジエチルホスホノ−（２，２，−ジメチルプロピル）］ニトロキシドまたは（ＤＥＰＮ）としても周知のＳＧ１が例示される。
【００２４】
特に有用なニトロキシド化合物は、１個の分子内に制御剤および開始剤を組み合わせたアルコキシアミンである。米国特許公開第２００５／００６５１１９号（この開示内容を本明細書に参考として組み込む）には、β位がリン酸エステル化されたニトロキシドから誘導されたアルコキシアミンが開示されている。このアルコキシアミンの一般構造は、
【化４】
2010513556.tif 000005
である。
【００２５】
ここで、アルコキシアミンは、式（Ｉ）のβ置換されたニトロキシド（式中、Ａは、１価または多価の構造を表し、ＲLは、１５を超えるモル重量を表す１価の基であり、ｎ≧１である）から得られる。式（Ｉ）の多価のアルコキシアミンの形成は、多官能性モノマー（これらに限定されるものではないが、アクリレートモノマーやアルコキシアミン等）を反応させることにより、温度制御下に達成することができる。次いで、式（Ｉ）の多官能性アルコキシアミン（式中、ｎ≧２である）を利用して、想定されている１種または複数種のモノマーから星型および分岐ポリマーおよびコポリマー材料を合成してもよい。
【００２６】
有用な化合物の一例としては、ＳＧ１ラジカルをイソ酪酸ラジカルと結合させることによって形成された、以下に構造を示すアルコキシアミン（ｉＢＡ−ＳＧ１開始剤）が挙げられる。
【化５】
2010513556.tif 000006
【００２７】
この開始剤／制御剤は、アクリレートおよびアクリル酸等の官能性アクリル系化合物等の幅広いモノマーに好適である。この化合物は、ラジカル重合の制御剤ＢｌｏｃＢｕｉｌｄｅｒ（登録商標）としてＡｒｋｅｍａ  Ｉｎｃ．から市販されている。
【００２８】
アルコキシアミンＢｌｏｃＢｕｉｌｄｅｒ（登録商標）制御剤を使用することには固有の利点がある。それは、開始部位がポリマー鎖に直接組み込まれるカルボン酸官能基を有しており、機能剤に直接結合させるかまたはさらなる化学修飾部位の役割を果たすかのいずれかの化学的な結合手（ｃｈｅｍｉｃａｌ  ｈａｎｄｌｅ）としてさらに利用することができるためである。
【００２９】
ＢｌｏｃＢｕｉｌｄｅｒ（登録商標）制御剤をそのまま使用する場合、酸官能性は鎖の一方の末端に存在することになるであろう。酸官能性の化学的結合手は、さらに多種多様な官能性に変換される部位を提供するので重要である。例えば、酸は任意の数の有用な官能基に容易に転換され、これらを制限するものではないが、国際公開第２００６／００３３５２号パンフレットにその多くが開示されている。米国特許第７，２１４，８１０号明細書には、ＢｌｏｃＢｕｉｌｄｅｒ（登録商標）制御剤の酸官能性の転換およびＢｌｏｃＢｕｉｌｄｅｒ（登録商標）制御剤の酸部分により末端が官能基化されたポリマーの多くの例が開示されている。他の多くの転換技術が当業者に明らかであろう。
【００３０】
ＢｌｏｃＢｕｉｌｄｅｒ（登録商標）制御剤を使用することにより、鎖末端の末端官能基化の度合いを高くすることができる。官能性部分は重合開始源の役割を果たすので、理論的には鎖の１００％が末端官能基化されるはずである。この高度な官能基化により、特に、望ましくない場合が多いテレケリックな性質の鎖（アニオン的方法で形成される）およびＲＡＦＴ法で生成する非官能性鎖が生成しなくなる。アニオン的に形成されたポリマーは、典型的には、５％を超えるテレケリックポリマーを含む。これらはしばしば望ましくない架橋反応を起こし得る。
【００３１】
もちろん、単官能性開始剤であるＭＯＮＡＭＳおよび二官能性開始剤であるＤＩＡＭＳ等の、ＳＧ１を含む非官能性アルコキシアミンも使用することができる。これらの開始剤の構造を以下に示す。
ＳＧ１−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ3      ＭＯＮＡＮＳ
（ＳＧ１−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ（Ｏ）Ｏ（ＣＨ2）3）2      ＤＩＡＭＳ
【００３２】
ｉＢＡ−ＳＧ１開始剤は、加熱により２つのフリーラジカルに分裂し、その一方は重合を開始させ、その一方すなわちＳＧ１ニトロキシドラジカルは可逆的に重合を停止させる。ＳＧ１ニトロキシドラジカルは、約２５℃を超えるとメタクリレートから解離し、それぞれ約８０および７０℃を超えるとアクリレートおよびスチレン系化合物から解離する。したがって、ｉＢＡ−ＳＧ１をアクリレートモノマーと一緒に１：１の比率で２５℃超７５℃未満の温度で反応させることにより、官能基化された付加物を形成させることができる。
【００３３】
アルコキシアミンを使用することにより、外部重合開始源（有機過酸化物やジアゾ化合物等）が不要になるが、場合によっては、従来のフリーラジカルにより生成されるポリマーおよび制御されたポリマーの混合物を得るために過酸化物を導入してもよく、あるいは残留モノマーを「追い払う（ｃｈａｓｅ）」ために反応の終わりに過酸化物を使用してもよい。ＡＢ型ブロックコポリマーの合成には、典型的には、単官能性アルコキシアミンが使用される。二官能性アルコキシアミンは、典型的には、ＡＢＡトリブロックコポリマーを生成させるために使用される。しかしながら、まず最初にモノマーＡ、次いでモノマーＢを反応させ、次いで元のモノマーＡに切り替えることによって、単官能性アルコキシアミンからトリブロックコポリマーを製造することもできる。この手法を用いることによって、セグメント化されたＡＢＡＢＡ型ポリマーだけでなく、当業者に明らかなように、異なる数種のモノマーセグメントを含むＡＢＣやＡＢＣＤ等のマルチブロックポリマーも形成することができる。この方法により製造されたポリマーはニトロキシド末端基を有することとなる。これらはポリマー鎖の末端にそのまま残してもよいし、さらなる処理ステップで除去してもよい。
【００３４】
他の方法として、多峰性ポリマーの調製を示すが、この場合は、想定されているモノマーの少なくとも１種が、式（Ｉ）（式中、ｎは、ゼロ以外の整数であり、アルコキシアミンは異なるｎの値を表す）の配列を含む数種のアルコキシアミンの存在下にラジカル重合に付される。
【００３５】
機能剤と結合するかまたはこれを封入する、本発明のＮＭ−ＣＲＰにより製造されるポリマーは、３種のポリマー：１）機能剤のＰＥＧ修飾に用いられる、用途に適合されたＰＥＧ系官能基化ポリマー、２）機能剤と結合するかまたはこれを封入することができる、用途に適合された非ＰＥＧ系官能基化ポリマー、および３）封入性の向上および機能剤の放出特性の制御の両方を可能にする、官能基化および非官能基化ならびにＰＥＧ系および非ＰＥＧ系のものを含む、用途に適合された両親媒性ブロックコポリマーに大別して説明することができる。各分類の一般的な説明を以下に記載するが、当業者に明らかなように、これらに限定することを意味するものではない。
【００３６】
分類１は、機能剤のＰＥＧ修飾に用いるための、ＮＭ−ＣＲＰにより製造されるＰＥＧ系官能基化ポリマーからなる。機能剤の好ましい分類の１つとして、生理活性分子（薬物として使用される、タンパク質、ペプチド、抗体断片、オリゴヌクレオチド等）が挙げられる。
【００３７】
ＰＥＧ系ポリマーとしては、当業者に周知のように、ポリエチレングリコール単位をポリマー骨格または骨格の側鎖のいずれかに含む任意のポリマーが挙げられる。本発明の好ましいＰＥＧ系ポリマーは、ポリ（アルキレングリコール）等のアルコキシポリエーテルであるモノマーから誘導されたものである。このようなモノマーの例としては、ポリエチレングリコールアクリレートおよびポリエチレングリコールメタクリレートが挙げられ、これをモノマー（１）と称し、構造を以下に示す：
ＣＨ2＝Ｃ（Ｒ2）Ｃ（Ｏ）（ＯＣＨＲ3ＣＨＲ4）n−Ｑ      （１）
（式中、Ｒ2は、水素またはメチルであり、ｎは、１〜４００の整数であり、Ｒ3およびＲ4は、好ましくは、水素であるが、ｎはまた、エチレンオキシドおよびプロピレンオキシドの繰り返し単位の混合物を含む側鎖も表してもよい）。すなわち、繰り返し単位の一部は、水素としてのＲ3およびＲ4を有し、残りのＲ3およびＲ4は、水素およびメチル基を表す。Ｑは、ヒドロキシル基、メトキシ基、アルキル基、または他の基であってもよい。Ｑはまた、生理活性分子（Ｍ）に結合させるための結合基であるＬであるかまたは結合基に結合した生理活性分子Ｌ’Ｍ（式中、Ｌ’は結合基である）であってもよい。
【００３８】
好ましいモノマーの一例は、Ｒ3およびＲ4の両方が好ましくは水素であり、ｎが好ましくは３〜１１０の、モノマー（２）と称する以下に構造を示すものである：
ＣＨ2＝ＣＨ（Ｒ2）ＣＯ（ＯＣＨＲ3ＣＨＲ4）n−ＯＨ      （２）
（式中、−ＯＨは結合基である）。あるいは、結合基を、この構造のモノマーを誘導体化することによって調製してもよい。
【００３９】
本発明に定義する、官能基化されているとは、ポリマーが、機能剤（ＦＡ）と結合してＬ’ＦＡまたはＬ’Ｍ基を生成させることができる結合基Ｌを含むことを意味する。官能基化は、（１）に記載したモノマーに由来するものでも、アルコキシアミンの開始部位に由来するものであってもよいし、モノマー（２）等の官能基化されたコモノマーまたはアクリル酸やヒドロキシエチルアクリレート等を介して導入してもよい。ポリマーは、１種またはそれ以上の官能基を含んでいてもよい。好ましい一実施形態においては、ポリマーは、Ｌ基を１個だけ含む。モノマーまたはアルコキシアミンの開始部位から誘導された官能基は、そのままで結合基Ｌとして利用してもよいし、先に述べたように、従来の化学を用いて結合基に容易に変性してもよい。
【００４０】
分類１のポリマーは、ポリエチレングリコール単位を含むモノマー繰り返し単位のみを含んでいてもよい（純粋なＰＥＧ系ポリマーと称される）し、非ポリエチレングリコール単位のモノマーを含んでいてもよい（ＰＥＧ系コポリマーと称される）。これらのモノマーは、当業者に明らかなように、ラジカル重合させることができる任意のオレフィン性モノマーから選択することができる。
【００４１】
有用なモノマーとしては、例えば、これらに限定されるものではないが、アクリル酸、メタクリル酸、（メタ）アクリル酸のアルキルエステルおよび混合エステル、アクリルアミド、メタクリルアミド、Ｎ−およびＮ，Ｎ−置換（メタ）アクリルアミド等のアクリル系化合物；マレイン酸、フマル酸、クロトン酸、イタコン酸、およびこれらの対応する無水物；ハロゲン化カルボニル；アミド、アミド酸、アミド酸エステル、ならびにこれらの完全および部分エステル；ならびにこれらの混合物が挙げられる。有用な非アクリル系コモノマーとしては、エチレン性不飽和モノマーが挙げられ、これらに限定されるものではないが、無水物、アクリロニトリル、ビニルエステル、アルファ−オレフィン、ジエン、不飽和ジカルボン酸の置換または無置換のモノおよびジアルキルエステル、ビニル芳香族化合物、置換ビニル芳香族化合物、環式モノマー、アルコキシル化された側鎖を含むモノマー、スルホン化されたモノマー、およびビニルアミドモノマーが挙げられる。
【００４２】
生理活性剤または治療剤を送達する用途に用いる場合は、ラジカル重合可能なコモノマーは、ＮＭ−ＣＲＰによる共重合が可能なように、かつ結果として得られるＰＥＧ修飾された生理活性分子の形成または性質（水溶性、生体受容性（ｂｉｏ−ａｃｃｅｐｔａｂｉｌｉｔｙ）、および／または生理活性等）に悪影響を及ぼさないように選択する。有望なコモノマーの例としては、アクリル酸およびメタクリル酸ならびにこれらの塩（カリウム、ナトリウム、リチウム、アンモニウム、および置換アンモニウム塩等）、プロピレングリコールモノアクリレート、プロピレングリコールモノメタクリレート、ビニルピロリドン、１，４−ブタンジオールモノアクリレート、１，４−ブタンジオールモノメタクリレート等のモノマーが挙げられる。
【００４３】
アルコキシアミンＢｌｏｃＢｕｉｌｄｅｒ（登録商標）制御剤の使用には固有の利点がある。それは、その開始部位が、ポリマー鎖末端にそのまま組み込まれて結合基Ｌの役割を果たすことができるカルボン酸官能基を有するためである。これにより、他の任意の官能性モノマーの非存在下に、鎖末端に正確に１個の結合基が位置するポリマー鎖が提供される。これは、本開示の好ましい実施形態である。先に述べたように、酸官能性Ｌ基は多種多様な官能性Ｌ部分に容易に変換することができる。
【００４４】
以下の説明は、ＮＭ−ＣＲＰにより合成することができる分類１型の材料の代表的なものを意味するが、これらに限定されるものとみなされるべきではない。
【００４５】
モノマー（１）またはモノマー（１）の混合物は、ＢｌｏｃＢｕｉｌｄｅｒ（登録商標）制御剤を用いて重合させることにより、鎖末端にカルボン酸基を含む櫛型の純粋なＰＥＧ系ポリマーを形成することができる。このポリマーは、Ｑ基を介してさらに官能基化してもよいし、あるいはＱ基が非官能性（例えば、メトキシ基）であってもよい。好ましい実施形態においては、Ｑ基は結合基ではなく、鎖末端のカルボン酸基が結合基Ｌの役割を果たすかまたは他の形態の結合基に変性される。
【００４６】
他の種類の制御された好ましい構造は、モノマー（１）を１単位だけ含むものであろう。これは、ＢｌｏｃＢｕｉｌｄｅｒ（登録商標）制御剤等のアルコキシアミンをモノマー（１）と１対１の比率で（または温度制御下にＢｌｏｃＢｕｉｌｄｅｒ（登録商標）制御剤をやや過剰で用いて）反応させることにより達成することができる。こうすることにより、低分子量の末端官能基化ＰＥＧ系オリゴマーが得られる。
【００４７】
当業者に明らかであるが、重合を実施する前にアルコキシアミンを機能剤と直接結合させることも可能である。ポリマーを後段で送達物質と反応させることに替えて、送達物質上で直接ＮＭ重合を実施することによって、結合効率が上昇する。これは、官能性結合部位を含むＢｌｏｃＢｕｉｌｄｅｒ（登録商標）制御剤等のアルコキシアミンに特に魅力的な経路である。この官能基は、それだけで結合基Ｌ’として作用させることもできるし、あるいは従来の化学を用いて結合基Ｌ’に容易に変性することもできる。したがって、この結合基は、目的の分子結合に必要な所望の化学的性質に合うように適合させることができる。この種の処理経路は、制御された構造を生成させるための他の好ましい方法である。ＡＴＲＰの場合は、これに続いて金属を含む不純物を除去するための処理ステップを行うと、結合した送達物質を損傷する可能性があるので、この経路には限界がある。
【００４８】
モノマー（１）は、付加重合可能な１種または複数種のさらなるモノマーと共重合させることにより、グラジエント型のＰＥＧ系コポリマーを形成させることもできる。官能基を含むコモノマーを使用した場合、これらはそれだけで結合基として利用することもできるし、容易に変性することもできる。ＮＭ−ＣＲＰ技術を用いた共重合により、最終的には、結合／封入に利用されるポリマーの最終用途における使用性を用途に適合させることが可能になる。例えば、疎水性モノマーをＰＥＧ系モノマーと共重合させることができ、ＰＥＧ修飾された薬物の場合は、こうすることにより、最終的に封入粒子の流体力学的体積が変化したり、コポリマーに共役結合した薬物の安定性、溶解性、毒性、および／または薬物の保持時間が変化するであろう。
【００４９】
２種の異なるＬ基を含み、それぞれの種類のＬ基が異なる機能剤に対する結合親和性を有するＰＥＧ系コポリマーを製造することができ、それによって、２種以上の異なる活性分子を含むポリマーが得られる。例えば、モノマー（１）が結合した機能剤を含む場合、異なる機能剤を含む他の官能基化モノマーおよび場合により非官能基化コモノマーと共重合させることができ、この非官能基化コモノマーは、非ＰＥＧ系上のＰＥＧ系であってもよい。制御ラジカル重合においてモノマー（１）の量および１種または複数種のコモノマーの量を適切に制御することによって、分子量、最終ＰＥＧ修飾ポリマーの溶解性、および最終ＰＥＧ修飾生理活性ポリマー中の生理活性分子の量を制御することが可能になる。さらに、非官能性モノマーと共重合させることにより、分岐鎖または機能剤を含むモノマーの間隔および含有量を制御することができる。この種の処理を行うことにより、ＰＥＧ系コポリマー中の機能剤の量、種類、および位置を制御することが可能になる。
【００５０】
したがって、本発明の重要な利点は、特定の組成および対応する（コ）ポリマーの構成を、送達を意図した機能剤に従い容易に用途に適合させることができることにある。
【００５１】
結合基
生理活性分子をポリエチレングリコールおよびポリオキシエチレン化ポリオールに結合させるための結合基は当業者に周知である。ＰＥＧの周知の誘導体の活性基のいずれかを使用してもよい。例えば、スクシンイミジルエステルをタンパク質アミノ基に結合させることができる。しかしながら、カルボン酸ポリマー部分を様々な表面および分子に結合させるために活性化させるのに利用可能な多種多様な官能性部分が存在する。生物学的およびバイオ技術的用途に用いられる活性部分の例としては、トリフルオロエチルスルホネート、イソシアネート、イソチオシアネート（ｉｓｏｓｔｈｉｏｃｙａｎａｔｅ）、活性エステル、活性炭酸エステル、様々なアルデヒド、様々なスルホン（クロロエチルスルホン、ビニルスルホン等）、マレイミド、ヨードアセトアミド、およびイミノエステルが挙げられる。活性エステルとしては、Ｎ−ヒドロキシルスクシンイミジルエステルが挙げられる。活性炭酸エステルとしては、炭酸Ｎ−ヒドロキシルスクシンイミジル、炭酸ｐ−ニトロフェニル、および炭酸トリクロロフェニルが挙げられる。
【００５２】
結合基は、Ｔｈｏｍｐｓｏｎによる米国特許第６，５５２，１７０号明細書に開示されており、この開示内容を本明細書に参考として組み込む。分子および表面上のアミノ部分に替えてチオール部分に選択的に結合させるのに使用することができる有用な活性基は、Ｈａｒｒｉｓによる米国特許第５，４４６，０９０号明細書に記載されているビニルスルホン部分であり、この開示内容を本明細書に参考として組み込む。
【００５３】
炭酸ジスクシンイミジル（炭酸ビススクシンイミジルまたはＤＳＣ）結合基を用いて生理活性分子をポリエチレングリコールおよびポリオキシエチル化ポリオールに結合させることが米国特許第５，２８１，６９８号明細書に開示されており、この開示内容を本明細書に参考として組み込む。ＤＳＣと遊離ヒドロキシル基を有するＰＥＧとの反応は、塩化メチレンやクロロホルム等の不活性溶媒中で、ピリジンや４−ジメチルアミノピリジン等の塩基性触媒を用いて実施される。析出物が形成された場合は濾去する。ジエチルエーテルを加えることにより反応混合物から析出した活性ＰＥＧエステルをジエチルエーテルで洗浄し、必要に応じて再度溶解させて再度析出させる。
【化６】
2010513556.tif 000007
【００５４】
本発明においては、結合基を含むモノマーをこの手順で調製してもよい。
モノマー（１）＋ＤＳＣ  →  ＣＨ2＝ＣＨ（Ｒ1）−（ＯＣＨＲ3ＣＨＲ4）nＯＣ（Ｏ）ＯＮ［（ＣＯ）2（ＣＨ2）2］
【００５５】
分類２は、機能剤の結合または封入に用いるための、ＮＭ−ＣＲＰにより製造された、用途に適合された非ＰＥＧ系官能化ポリマーからなる。この分類のポリマーは、モノマー（１）やモノマー（２）等のＰＥＧ系モノマーを使用しないことを除いては、分類１のポリマーと同じ技術および処理を用いて調製することができる。調製された官能性ポリマーの溶解性は、モノマー組成に基づき用途に適合させることができる。機能剤の封入または結合に用いるための分類２の非ＰＥＧ系官能性ポリマーの２つの例として、水溶性または親水性官能性ポリマーおよび有機可溶性または疎水性官能性ポリマーが挙げられる。もちろん、この２種のモノマーの混合物を共重合させることによって両方の媒質に親和性を有するポリマーを得ることができる。
【００５６】
親水性ポリマーとは、ポリマーまたはコポリマーが水と親和性を有することを意味する。本明細書において用いられる「親水性」または「親水性ポリマー」は、ポリマーブロックセグメントが、水溶性、水分散性、または概して水を吸収および／もしくは透過させることができることを意味する。親水性ポリマーは、親水性ホモポリマー、１種もしくはそれ以上の親水性モノマーを含むランダムコポリマー、または１種もしくはそれ以上の親水性モノマーを１種もしくはそれ以上の疎水性モノマーと一緒に含むランダムコポリマーであってもよい。親水性ポリマーの形成に有用なエチレン性不飽和モノマーとしては、これらに限定されるものではないが、アクリル酸、メタクリル酸、ならびにメタクリルおよびアクリル酸の塩、エステル、無水物、およびアミド；ジカルボン酸無水物；カルボキシエチルアクリレート；スチレンの親水性誘導体；ならびにアクリルアミドが挙げられる。具体的な有用なモノマーとしては、これらに限定されるものではないが、無水マレイン酸、マレイン酸、置換無水マレイン酸、無水マレイン酸のモノエステル、無水イタコン酸、イタコン酸、置換無水イタコン酸、イタコン酸のモノエステル、フマル酸、無水フマル酸、フマル酸、置換無水フマル酸、フマル酸のモノエステル、クロトン酸およびその誘導体、アクリル酸、メタクリル酸、ジメチルアクリルアミド、ジエチルアクリルアミド、ｎ−イソプロピルアクリルアミド、ジメチルアミノエチルアクリレート、ジエチルアミノエチルアクリレート、スチレンスルホン酸、アクリルアミド２−メチル２−プロパンスルホン酸塩、ビニルピロリドン、２−カルボキシエチルアクリレート、メチルアクリレート、エチルアクリレート、２−メトキシエチルアクリレート、ヒドロキシエチルアクリレート、ならびにヒドロキシエチルメタクリレートが挙げられる。この酸モノマーの塩およびアミンの４級化形態も本発明に想定されている。
【００５７】
疎水性ポリマーとは、ポリマーまたはコポリマーが水溶性でないことを意味する。本明細書において用いられる「疎水性」および「疎水性ポリマー」とは、ポリマーブロックセグメントが水に不溶であるかまたは水に分散しないことを意味する。疎水性ポリマーは、疎水性ホモポリマー、１種もしくはそれ以上の疎水性モノマーを含むランダムコポリマー、または１種もしくはそれ以上の疎水性モノマーを１種もしくはそれ以上の親水性モノマーと一緒に含むランダムコポリマーであってもよい。疎水性ポリマーの形成に有用なエチレン性不飽和モノマーの例としては、これらに限定されるものではないが、スチレン、スチレンの疎水性誘導体、共役ジエン、Ｃ3〜30直鎖または分岐アルキルおよびアリール（メタ）アクリレート、オレフィン、含フッ素モノマー、ならびに含ケイ素モノマーが挙げられる。疎水性モノマーの具体例としては、スチレン、アルファ−メチルスチレン、ラウリルメタクリレート（または他の長鎖アルキルアクリレートまたはメタクリレート、例えば、Ｃ6〜Ｃ30アルキルエステル２−エチルヘキシルアクリレートおよび２−エチルヘキシルメタクリレート、オクチルアクリレートおよびオクチルメタクリレート、デシルアクリレートおよびデシルメタクリレート等、一般構造ＣＦ3（ＣＦ2）nＣＨ2ＯＣＯＣ（Ｒ）＝ＣＨ2（式中、Ｒは、水素またはメチルであり、ｎは、典型的には、２〜２０である）を有する１，１−ジヒドロパーフルオロアルキルアクリレートおよびメタクリレート、ヘキサフルオロブチルアクリレート、トリイソプロピルシリルアクリレート、イソボルニルアクリレート、イソボルニルメタクリレート、ブタジエン、イソプレン、メチルメタクリレート、ｔ−ブチルアクリレート、およびｔ−ブチルメタクリレートが挙げられる。
【００５８】
上述の親水性および疎水性モノマーの一覧には、様々な官能基化および非官能基化モノマーが含まれる。官能基化モノマーは、本発明の機能剤と結合してＬ’ＦＡ結合を生成させるのに使用することができるＬ基を提供し、すべて非官能基化モノマーが使用された場合は、分類１のポリマーの項で前述したように、アルコキシアミンにより提供されるＬ基を利用することができる。
【００５９】
分類３は、ＮＭ−ＣＲＰにより作製された、封入性の向上および機能剤の放出特性の制御の両方を可能にする、官能基化および非官能基化ならびにＰＥＧ系および非ＰＥＧ系のものを含む、用途に適合された両親媒性ブロックコポリマーからなる。
【００６０】
本明細書において用いられる「ブロックコポリマー」とは、当業者に明らかなように、ジブロック体、トリブロック体、またはマルチブロック体、グラフトブロックコポリマー、分岐ブロックコポリマー（線状星型ポリマーとしても周知である）を意味する。本明細書において用いられる「ブロックコポリマー」には、グラジエントポリマーまたはグラジエントブロックコポリマーも含まれる。グラジエントポリマーは、制御重合法により作製される、組成がポリマー鎖に沿って変化（ランダムからブロック様構造の範囲内で可能）する、線状または分岐コポリマーである。
【００６１】
コポリマーセグメントがニトロキシド媒介重合等の制御ラジカル重合（ＣＲＰ）技術を用いて合成された場合、これはしばしばグラジエントまたは「所定のプロファイルを有する（ｐｒｏｆｉｌｅｄ）」コポリマーと称される。この種のコポリマーは、従来のフリーラジカル法によって得られるポリマーとは異なり、モノマー組成、制御剤、および重合条件に依存するであろう。例えば、モノマー混合物を従来のラジカル重合によって重合する場合は、モノマー混合物の組成は生長鎖の寿命（約１秒間）が続く間は一定のままであるため、統計学的コポリマーが生成する。さらに、反応全体を通じてフリーラジカルが絶えず生成するため、モノマー濃度が変動することになるので、鎖の組成は不均一になるであろう。制御ラジカル重合が行われる間は、鎖は重合期間中は終始活性なままであり、したがって、組成は均一であり、これは、反応時間に対する対応するモノマー混合物に依存する。したがって、一方のモノマーが他方よりも速く反応する２種のモノマー系においては、モノマー単位の分布すなわち「プロファイル」は、ポリマーセグメントの一端において一方のモノマー単位の濃度がより高くなるようになるであろう。
【００６２】
ブロックコポリマーの各ブロックは、それ自体はホモポリマー、コポリマー（ここで、コポリマーには、ターポリマーおよび他の２種以上の異なるモノマーの組合せが含まれる）、またはグラジエントポリマーであってもよい。グラジエントブロックコポリマーは、例えば、第１ブロックに由来する未反応のモノマーの反応を第２ブロック形成中も継続させることによって形成することができる。したがって、Ａ−ＢブロックグラジエントコポリマーにおいてはＡブロックが最初に形成される。Ｂブロックのモノマーを添加した後は、未反応のＡブロックモノマーを混合物中に維持して反応させ、ＡブロックからＢブロックへの勾配を有するＡ−Ｂブロックコポリマーを得る。グラジエントブロックコポリマーは本発明の好ましいブロックコポリマーである。それは、勾配を有する組成および／または正確に配置された官能基化により得られる特定の性質によって、薬剤の溶解性および薬剤の放出の両方の制御が可能になるためである。好ましいグラジエントブロックポリマーは、Ａ−ＢジブロックおよびＡ−Ｂ−ＣまたはＡ−Ｂ−Ａトリブロックコポリマーである。
【００６３】
両親媒性ブロックコポリマーとは、少なくとも１つのセグメントが機能剤と混和性を有し、少なくとも１つのセグメントが混和性を有しないことを意味する。例えば、疎水性の機能剤を親水性Ａブロックおよび疎水性Ｂブロックを含むＡＢブロックコポリマーと混合する場合である。
【００６４】
親水性および疎水性セグメントを含む両親媒性ブロックコポリマーは、水溶液中でミセルを形成し、疎水性または水に不溶な薬剤の封入または可溶化に適したものになることが知られている。しかしながら、先に開示した物質は、それを調製した方法に由来する欠点を有するという難点がある。ＮＭ−ＣＲＰにより、これらの制限を克服することができる。さらに本発明のポリマーは、勾配および官能基化によって用途に適合された組成物のさらなる利点を示している。
【００６５】
両親媒性親水性／疎水性ブロックコポリマーは、本発明の好ましいブロックコポリマーである。親水性ブロックセグメントは、ＰＥＧ系または非ＰＥＧ系であってもよいし、官能基化されていても官能基化されていなくてもよい。
【００６６】
ＮＭ−ＣＲＰテクノロジー（ｔｅｃｈｎｏｌｉｇｙ）により（ｂｙ  ｖｉｒｔｕｒｅ  ｏｆ）、性質を一定とすることも勾配を持たせることもできるブロックコポリマー構造を共重合によって製造できるようになったことで、最終的には、ポリマーの最終用途における使用性を用途に適合させることに加えて、結合または封入に利用するための官能性部位の量および配置を制御することが可能になる。この官能性部位は、共有結合または他の非共有結合的な力（当業者に明らかな、水素結合等）を介して機能剤と結合させるために用いることができる。官能基が存在しない場合は、封入は、溶解性の調整により捕捉を行うことによって単純に達成することができる。例えば、疎水性機能剤を親水性Ａブロックおよび疎水性Ｂブロックを含むＡＢブロックコポリマーと混合する場合、薬剤は、材料の疎水性のＢ相中に封入されることになるであろう。
【００６７】
ブロック系の勾配を用いることによって制御された溶解性を有するポリマーを調製することが可能になり、それによって、ブロックコポリマーを送達を要する特定の機能剤向けに設計することが可能になる。また、ブロックセグメントの組成を用途に適合させることにより機能剤の放出を制御することも可能になる。例えば、Ａが親水性（ｈｙｄｒｏｐｈｉｌｌｉｃ）でありＢおよびＣが親水性でないＡＢＣトリブロックコポリマーの場合、ポリマーを水に入れると、Ａブロックの外層、Ｂブロックの中間層、およびＣブロックのコアを有するミセルが形成されるであろう。機能剤がＣブロックと最も親和性が高い場合は、主としてそこに留まるかまたは封入されるであろう。その放出を制御するためにＢセグメントを用途に適合させることができる。機能剤はＣセグメントの外に拡散するので、Ｂを通過しなければならない。薬剤をゆっくりまたは速やかに通過させるようにＢを用途に適合させることができる。１つの方法は、Ｂ層の機能（ｆｕｎｃｔｏｎａｌ）剤に対する溶解性を単純に改変することである。
【００６８】
したがって、ここに開示した発明の重要な利点は、対応するブロックコポリマーの特定の組成および構成を、送達を意図した機能剤に基づき相応に用途に適合させることが容易なことにある。
【００６９】
放出制御の他の例は、結晶性ブロックセグメントを使用するものである。例えば、水性分散液およびミセル形成を可能にする親水性のＡセグメントならびに機能剤と混和性を有する疎水性のＢセグメントを有するＡＢブロックコポリマーを用いる場合、ラウリルメタクリレートやステアリルメタクリレート等のモノマーを用いることによってＢセグメントが結晶性になるよう用途に適合させてもよい。したがって、ポリマーを加熱して結晶性Ｂセグメントが溶融すると、機能剤は自由に拡散したり放出されることが可能になる。したがって、結晶化度が機能剤放出を制御するための手段となる。Ｂセグメントは、結晶性モノマーの混合物であってもよいし、溶融温度を効果的に用途に適合させるために一部非結晶性モノマーを含んでいてもよい。
【００７０】
ブロックコポリマーは、分類１または２のポリマーで説明したように、Ｌ’ＭまたはＬ’ＦＡ結合を含む１つのセグメントと官能基を有しない第２ブロックとを有していてもよい。非官能性セグメントは、所望の送達媒体への溶解性が得られるように用途に適合させてもよい。
【００７１】
両親媒性ブロックコポリマーの他の例は、ＢｌｏｃＢｕｉｌｄｅｒ（登録商標）制御剤等のアルコキシアミンとモノマー（１）とを１対１の比率で温度制御下に反応させることによって達成される、（１）型のモノマーを１単位だけ含むものであろう。この材料は、反対側の末端にニトロキシド基を有するため、さらに第２モノマーと重合させることによってブロックコポリマーを生成させることができる。第２ブロックセグメントは、先に述べたように機能剤との結合またはその封入を可能にするブロックから構成されるであろう。
【００７２】
分類１および２型のポリマーに関し説明したように、ブロックコポリマーの合成を実施する前にアルコキシアミンを機能剤または生理活性物質に結合させることも可能である。
【００７３】
親水性ブロックセグメントに有用なモノマーの例としては、アクリル酸、メタクリル酸、メトキシエチルアクリレート、無水マレイン酸、２−ヒドロキシエチルアクリレート、２−ヒドロキシエチルメタクリレート、ポリエチレングリコールアクリレート、ポリエチレングリコールメタクリレート、Ｎ，Ｎ，ジメチルアクリルアミド、スチレンスルホネート、またはこれらの混合物が挙げられるであろう。疎水性ブロックセグメントに有用なモノマーの例としては、水素化もしくはフッ素化されたＣ１〜Ｃ２４アルコールを含むアクリルおよびメタクリル酸のエステル、スチレン、ジエン、またはこれらの混合物が挙げられるであろう。疎水性モノマーを親水性ブロック中に使用してもよく、親水性モノマーが疎水性ブロック中に含まれていてもよい。
【実施例】
【００７４】
これらの例は、ＮＭ−ＣＲＰから容易に調製される、本発明に従う有用なポリマーの種類の代表的なものである。これらの実施例は、当業者に明らかなように、包括的なものを意味するものではない。制御された構成を有する両親媒性ブロックコポリマーを一般的な手順に従い合成した。モノマー対開始剤濃度（［Ｍ］／［Ｉ］）を操作することにより目的の分子量を得た。したがって、［Ｍ］／［Ｉ］比を設定し、次いで、目的分子量に到達させるのに必要な所望の転化率まで重合を実施することにより目的の分子量を達成することができた。モノマー転化率は、ガスクロマトグラフィー（ＧＣ）分析により適宜観測した。未反応のモノマーをフラッシュデボリティゼーション（ｆｌａｓｈ  ｄｅｖｏｌｉｔｉｚａｔｉｏｎ）させるかまたは抽出した。ポリマー実施例をそのまままたは溶液で実施した。使用した典型的な溶媒としては、ジオキサン、ｎ−メチルピロリジノン、ジメチルアセトアミド、ジメチルホルムアミド、ｔｅｒｔ−ブチルアルコール、ｎ−ブチルアルコール、トルエン、エチルベンゼン、アセトン、酢酸メチル、酢酸エチル、酢酸プロピル、酢酸ブチル、エタノール、シクロヘキサノン、シクロペンタノン、およびメチルエチルケトンが挙げられる。常圧または６０ｐｓｉまでの窒素圧力で重合を実施した。重合は、剪断能力を有するかまたは有しない標準的な重合容器内で実施したが、十分な混合能力があるものが好ましかった。
【００７５】
一般的な手順としては、以下に一般的に説明するように、そして当業者に明らかなように、所望の最終ブロック組成に応じた様々な従来のモノマー付加およびポリマー単離手順により特定のジブロックコポリマー組成物を調製する。
【００７６】
例えば、第１ブロック合成が完了した後に、析出技術によるかまたは残留モノマーを蒸発させることによって純粋な第１ブロックを単離し、次いで、第１とは異なる第２モノマー組成物を添加することによって純粋なブロックコポリマーが調製される。次いで、この第２モノマー組成物を重合させる。
【００７７】
２種以上のモノマーの混合物を重合させることにより、所定のプロファイルを有するブロックコポリマーを合成した。この混合物は、例えば、残留した第１モノマーを蒸発させる前に第２モノマーを初期重合媒体に加えることにより得ることができ、あるいは複数種のモノマー混合物を第１ブロックとして重合させてもよいし、複数種のモノマー混合物を単離された純粋な第１ブロックに加えてもよい。
【００７８】
純粋な勾配は、１種またはそれ以上のモノマーが他よりもより速く反応するモノマーの混合物から形成した。結果として得られたグラジエントポリマーは、ポリマー鎖の一端に反応性モノマー非常に凝集したものとなるであろう。
【００７９】
第２ブロックが形成する間、第１ブロック由来の未反応のモノマーの反応を継続させることにより、グラジエントブロックコポリマーを形成した。したがって、Ａ−Ｂブロックグラジエントコポリマーにおいては、Ａブロックがまず最初に形成される。Ｂブロックのモノマーが添加されたら、未反応のＡブロックモノマーを混合物中に留めて反応させることにより、Ｂブロック中にＡブロックの勾配を有するＡ−Ｂブロックコポリマーが得られる。
【００８０】
以下の実施例１、２、および３（各分類のポリマーの詳細な一実施例）および表１の結果を参照することにより、上述した本発明のコポリマーの合成をさらに例示する。当業者に明らかなように、本発明の他のコポリマーも類似の方法により調製することができる。
【００８１】
【表１】
2010513556.tif 000008
【００８２】
ポリマーはいずれもＢｌｏｃＢｕｉｌｄｅｒ（登録商標）制御剤を用いて調製した。ブロックＡは第１ブロックの合成に用いられるモノマーを示す。ホモポリマーまたはグラジエントコポリマーの場合は、第１ブロックが唯一のブロックである。ブロックＢは、第２ブロック合成に用いられる主なモノマーを示すものであり、以下の実施例の合成に記載するように、末端ブロックは、第１ブロック合成から持ち越されるある程度の量のモノマーも含んでいてもいなくてもよい。相当量（＞１０ｗｔ％）の持ち越しモノマーがＢブロック中に存在する場合は、おおよその重量百分率を示す。ＡおよびＢブロックのおおよその数平均分子量（Ｍｎ）を示す。Ｍｎの値は、出発時の［Ｍ］／［Ｉ］比率およびモノマー転化率の測定データから算出した。モノマーの転化率データが利用できない場合は、ＧＰＣ  Ｍｎを用いた（標準ＰＳ基準）。ポリマーの分類（本文に記載）を最後の欄に示す。ＮＭは未測定であることを示す。モノマーの略称は、ＭＡ＝メチルアクリレート、ＭＭＡ＝メチルメタクリレート、ＥＡ＝エチルアクリレート、Ｓ＝スチレン、ＬＭＡ＝ラウリルメタクリレート、ＢＡ＝ブチルアクリレート、ＭＥＡ＝２−メトキシエチルアクリレート、ＡＡ＝アクリル酸、ＤＭＡ＝Ｎ，Ｎジメチルアクリルアミド、ＺＴＡＮ＝ＤｕＰｏｎｔより供給されたフッ素化アクリレート、ＰＥＧａ＝ポリエチレングリコールアクリレート、ＰＥＧｍ＝ポリエチレングリコールメタクリレートである。
【００８３】
表１中のポリマーはいずれも以下の実施例１〜３の方法を用いて調製した。
【００８４】
実施例１：アルコキシアミンＢｌｏｃＢｕｉｌｄｅｒ（登録商標）制御剤（ｉＢＡ−ＤＥＰＮ）を用いてポリ（メチルアクリレート）−コ−ポリ（ポリエチレングリコールメタクリレート）−コ−ポリ（アクリル酸）のリビング第１ブロックターポリマーを調製した。ポリエチレングリコールメタクリレートはＡｌｄｒｉｃｈより供給されたものであり、平均Ｍｎは４７５ｇ／ｍｏｌである。ＢｌｏｃＢｕｉｌｄｅｒ（登録商標）制御剤２．８４ｇ（７．４ｍｍｏｌ）をメチルアクリレート４０．７ｇ（０．４７３ｍｏｌ）およびＰＥＧメタクリレート２８．８ｇ（６０．５ｍｍｏｌ）およびアクリル酸４．５ｇ（６２．５ｍｍｏｌ）に加えた。この混合物に窒素を１０分間バブリングした後、２５０ｍＬのガラス反応器に加えた。反応器を密閉して撹拌を開始した後、１００℃で１時間加熱し、次いで１１５℃に昇温してさらに２時間加熱した。この時点でメチルアクリレートおよびアクリル酸の約６０％がポリマーに転化し、ＰＥＧメタクリレートの約８０％がポリマーに転化した。これは、Ｍｎが約６．４ｋｇ／ｍｏｌであることに相当する。ＧＰＣによるＰＤＩは１．２であった。
【００８５】
実施例２：両親媒性ジブロックを形成するために、実施例１からのポリマー７．７３ｇをメチルメタクリレート７０．９ｇ（０．７０９ｍｏｌ）と混合した。この混合物に窒素を１０分間バブリングした後、２５０ｍＬのガラス反応器に加えた。反応器を密閉して撹拌を開始し、１０７℃で８０分間加熱した。この時点でメチルメタクリレートの約５４％がポリマーに転化した。これは、Ｍｎが約９５．８ｋｇ／ｍｏｌであることに相当する。ＧＰＣによるＰＤＩは２．０であった。
【００８６】
実施例３：鎖末端に結合基Ｌを有する親水性コポリマーを形成するために、ＢｌｏｃＢｕｉｌｄｅｒ（登録商標）制御剤０．７７ｇ（２．０２ｍｍｏｌ）をジメチルアクリルアミド１０．０５ｇ（０．１０１ｍｏｌ）およびエチルアクリレート３０ｇ（０．３０ｍｏｌ）に加えた。この溶液をマグネチックスターラーバーと一緒に小型のガラス瓶に挿入し、脱気した。次いでガラス瓶を１１５℃に加熱し、エチルアクリレートの約７０％が転化するまで１８０分間反応させた。ジメチルアクリルアミドの転化率は７５％に到達した。これは、Ｍｎが約１４．２ｋｇ／ｍｏｌであることに相当する。ＧＰＣによるＰＤＩは１．３であった。
【００８７】
本発明を説明してきたが、ここで請求項記載の発明およびその均等物を特許請求する。
【産業上の利用可能性】
【００８８】
幅広い用途において、反応しやすい添加剤を分解から保護するとともにその放出を制御する（こうすることにより、必要な用途に応じてその性能が最適化されることとなる）ために、効果的な封入が必要とされている。本発明のポリマーを用いることにより、分子、生理活性分子、成分、または組成物（風味剤、香料、医薬品、病虫害防除剤等）、農薬（除草剤、殺菌剤、病虫害防除剤等）、染料、および他の多くのものとして定義される機能剤の送達を実施することができる。用途に適合されたブロックコポリマーにより、機能剤の安定化、濃縮、容易に輸送および加工される形態が可能となり、したがって、信頼性のある送達が行われるようになり、薬剤が所望の位置および時間に有益な性質を示すであろう。その用途としては、これらに限定されるものではないが、薬物の送達、農薬の送達、化粧料の送達、香料の送達等が挙げられる。
【００８９】
本発明のポリマーに結合させることによって有用に修飾することができる生理活性物質としては、これらに限定されるものではないが、医薬品、ビタミン類、栄養素、核酸、アミノ酸、ポリペプチド、タンパク質、酵素、酵素補因子、ステロイド類、炭水化物、ヘパリン等の有機種、金属含有薬剤、受容体作動薬、受容体拮抗薬、受容体または受容体の一部、細胞表面分子、抗原、ハプテン、生体系内の部位に化合物を誘導することができるターゲッティング基（ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｇｒｏｕｐ）、およびキレート剤（催眠剤や鎮静剤等）、精神賦活剤、精神安定剤、吸入剤、抗痙攣剤、筋弛緩剤、抗パーキンソン剤（ドーパミン拮抗薬（ａｎｔａｇｎｏｎｉｓｔｓ））、鎮痛剤、抗炎症剤、抗不安薬（ａｎｔｉａｎｘｉｅｔｙ  ｄｒｕｇ）（抗不安薬（ａｎｘｉｏｌｙｔｉｃ））、食欲抑制剤、偏頭痛薬、筋収縮剤、抗感染剤（抗生物質、抗ウイルス剤、抗真菌剤、ワクチン）抗関節炎剤、抗マラリア剤、制吐剤、抗てんかん薬（ａｎｅｐｉｌｅｐｔｉｃｓ）、気管支拡張剤、サイトカイン、成長因子、抗癌剤、抗血栓剤、降圧剤、心血管薬、抗不整脈剤、抗酸化剤（ａｎｔｉｏｘｉｃａｎｔｓ）、抗喘息薬、ホルモン剤（避妊薬、交感神経様作用薬、利尿剤、脂質調節剤、抗アンドロゲン剤を含む）、抗寄生虫剤、抗凝血剤、新生物（ｎｅｏｐｌａｓｔｉｃｓ）、抗新生物剤、血糖降下剤、栄養剤、および栄養補給剤、成長サプリメント（ｇｒｏｗｔｈ  ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ）、抗腸炎症剤、ワクチン、抗体、診断用薬、および造影剤が挙げられる。生理活性物質としては、本発明のポリマーに結合させることにより有用に修飾することができる非常に多くのタンパク質および酵素も挙げられる。グリコシル化されたポリペプチドおよび合成的に修飾されたタンパク質も使用してもよい。タンパク質および酵素は、動物性原料、人体、微生物、および植物から誘導されたものであってもよく、遺伝子工学または合成によって製造してもよい。代表的なものとしては、例えば、各種インターフェロン等のサイトカイン（例えば、インターフェロン−α、インターフェロン−β、インターフェロン−γ、インターロイキン−２、およびインターロイキン−３）、インスリン等のホルモン、成長ホルモン放出因子（ＧＲＦ）、カルシトニン、カルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）、心房性ナトリウム利尿ペプチド（ＡＮＰ）、バソプレッシン、コルチコトロピン（ｃｏｒｔｉｃｏｒｔｒｏｐｉｎ）放出因子（ＣＲＦ）、血管作動性腸管ペプチド（ＶＩＰ）、セクレチン、α−メラノサイト刺激ホルモン（α−ＭＳＨ）、副腎皮質刺激ホルモン（ＡＣＴＨ）、コレシストキニン（ＣＣＫ）、グルカゴン、副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）、ソマトスタチン、エンドセリン、サブスタンスＰ、ダイノルフィン、オキシトシンおよび成長ホルモン放出ペプチド、腫瘍壊死因子結合タンパク質、成長因子（成長ホルモン（ＧＨ）、インスリン様成長因子（ＩＧＦ−Ｉ、ＩＧＦ−ＩＩ）、β−神経成長因子（β−ＮＧＦ）、塩基性線維芽細胞成長因子（ｂＦＧＦ）、トランスフォーミング成長因子、エリトロポエチン、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、血小板由来成長因子（Ｐ���ＧＦ）、上皮成長因子（ＥＧＦ）等）、酵素（組織プラスミノーゲン活性化因子（ｔ−ＰＡ）、エラスターゼ、スーパーオキシドジスムターゼ（ＳＯＤ）、ビリルビンオキシダーゼ、カタラーゼ、ウリカーゼ、アスパラギナーゼ等）、他のタンパク質（ユビキチン、インスリン分泌活性化タンパク質（ＩＡＰ）、血清胸腺因子（ＳＴＦ）、ペプチド−Ｔ、トリプシン阻害剤等）、ならびにこれらの誘導体が挙げられる。生理活性物質には、本発明のポリマーと結合した場合に、水性または有機溶媒のいずれかに対する溶解性が向上することが期待できる小分子も含まれる。本発明の誘導体に結合した脂質およびリポソームも、血液中を循環する寿命が長くなることを期待することができる。本発明のポリマーは、薬物の様々な形態に結合させることによりプロドラッグを生成させることができる。多置換誘導体が結合した小分子薬は、溶解性、クリアランス時間、ターゲッティング、および他の特性が改変されることを期待することができる。
【国際調査報告】
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