(57)【要約】ペルオキシソーム−増殖因子−活性化因子−レセプター−γ（ＰＰＡＲ−γ）アゴニストもしくはチアゾリジンジオン（ＴＺＤ）で処置されているか、またはペルオキシソーム−増殖因子−活性化因子−レセプター−γアゴニストもしくはチアゾリジンジオンで処置可能な状態を有する患者を評価するための方法が、提供される。方法は、ペルオキシソーム−増殖因子−活性化因子−レセプター−γアゴニストもしくはチアゾリジンジオンで処置されている患者の体液におけるガレクチン−３濃度もしくはガレクチン−３濃度の変化を測定する工程を包含する。匹敵する患者におけるガレクチン−３レベルもしくはガレクチン−３レベルの変化の比較は、欝血性心リスクを示す情報を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
患者を評価するための方法であって、該方法は、
チアゾリジンジオンで処置されている患者の体液におけるガレクチン−３濃度を測定する工程；および
該ガレクチン−３濃度と、欝血性心状態が既知もしくは決定可能である該チアゾリジンジオンで処置した他の患者において観察されたガレクチン−３濃度とを比較し、それによって、該測定されるガレクチン−３濃度が、該患者における増大した欝血性心リスクを示すか否かを評価する工程、
を包含する、方法。
【請求項２】
患者を評価するための方法であって、該方法は、
チアゾリジンジオンで処置されている患者の体液におけるガレクチン−３濃度の経時的変化を測定する工程；および
該測定された変化と、欝血性心状態が既知もしくは決定可能である該チアゾリジンジオンで処置した他の患者において観察されたガレクチン−３濃度の変化を比較し、それによって、該ガレクチン−３濃度における測定される変化が、該患者において増大した欝血性心リスクを示すか否かを評価する工程、
を包含する、方法。
【請求項３】
患者を評価するための方法であって、該方法は、
チアゾリジンジオンで処置されている患者の体液において増大しつつあるガレクチン−３濃度の存在もしくは非存在を検出する工程、
を包含し、ここで経時的に増大しつつあるガレクチン−３濃度の存在は、該患者における増大した欝血性心リスクを示す、
方法。
【請求項４】
前記チアゾリジンジオンでの処置の過程の間のガレクチン−３濃度と、該処置の過程の間の初期のガレクチン−３濃度とを比較する工程を包含する、請求項２または３に記載の方法。
【請求項５】
前記チアゾリジンジオンでの処置の過程の間に数度、ガレクチン−３濃度を比較して、それによって、該濃度の履歴の作成を可能にする工程を包含する、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
処置方法であって、
患者を、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法によって評価する工程、および
該患者における増大した欝血性心リスクを示す、ガレクチン−３濃度もしくはガレクチン−３濃度の変化を有する患者への前記チアゾリジンジオンの投与の投与を中断するか、制限するかもしくは禁止する工程、
を含む、方法。
【請求項７】
前記患者への前記チアゾリジンジオンの投与を中断する工程を包含する、請求項６に記載の処置方法。
【請求項８】
前記患者への前記チアゾリジンジオンの投与の頻度を減らす工程を包含する、請求項６に記載の処置方法。
【請求項９】
前記患者へ投与されるべき前記チアゾリジンジオンの用量を減らす工程を包含する、請求項６に記載の処置方法。
【請求項１０】
チアゾリジンジオンでの処置のための候補を評価するための方法であって、該方法は、
チアゾリジンジオンで処置可能な状態を有する患者の体液において、ガレクチン−３濃度を測定する工程；
該測定されたガレクチン−３濃度と、参照ガレクチン−３濃度とを比較する工程であって、ここで該参照ガレクチン−３濃度は、該状態を有する他の患者におけるガレクチン−３の濃度から得られ、該状態を有する患者における欝血性心リスクを示す、工程；ならびに
該測定されたガレクチン−３濃度が、該参照ガレクチン−３濃度を超える場合、該チアゾリジンジオンの投与を中止もしくは断念する工程、
を包含する、方法。
【請求項１１】
前記方法は、前記測定されたガレクチン−３濃度が前記参照ガレクチン−３濃度を超える場合に、前記チアゾリジンジオンの投与を断念する工程を包含する、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記チアゾリジンジオンは、ロシグリタゾンである、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
前記体液は、血液、血清もしくは血漿を含む、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
前記患者は、糖尿病患者である、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
患者を評価するための方法であって、該方法は、
ペルオキシソーム−増殖因子−活性化因子−レセプター−γアゴニストで処置されている患者の体液におけるガレクチン−３濃度を測定する工程；および
該ガレクチン−３濃度と、欝血性心状態が既知もしくは決定可能である、該ペルオキシソーム−増殖因子−活性化因子−レセプター−γアゴニストで処置された他の患者において観察されたガレクチン−３濃度とを比較して、それによって、該測定されたガレクチン−３濃度が、該患者における増大した欝血性心リスクを示すか否かを評価する工程、
を包含する、方法。
【請求項１６】
患者を評価するための方法であって、該方法は、
ペルオキシソーム−増殖因子−活性化因子−レセプター−γアゴニストで処置されている患者の体液におけるガレクチン−３濃度の経時的変化を測定する工程；および
該測定された変化と、欝血性心状態が既知もしくは決定可能である、ペルオキシソーム−増殖因子−活性化因子−レセプター−γアゴニストで処置された他の患者において観察されたガレクチン−３濃度の変化とを比較して、それによって、該ガレクチン−３濃度の測定された変化が該患者における増大した欝血性心リスクを示すか否かを評価する工程、
を包含する、方法。
【請求項１７】
患者を評価するための方法であって、該方法は、
ペルオキシソーム−増殖因子−活性化因子−レセプター−γアゴニストで処置されている患者の体液における増大しつつあるガレクチン−３濃度の存在もしくは非存在を検出する工程、
を包含し、ここで経時的に増大しつつあるガレクチン−３濃度の存在が該患者における増大した欝血性心リスクを示す、方法。
【請求項１８】
前記ペルオキシソーム−増殖因子−活性化因子−レセプター−γアゴニストでの処置の過程の間のガレクチン−３濃度と、該処置の過程の間の初期のガレクチン−３濃度とを比較する工程を包含する、請求項１６または１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記ペルオキシソーム−増殖因子−活性化因子−レセプター−γアゴニストでの処置の過程の間に数回、ガレクチン−３濃度を比較して、それによって、該濃度の履歴の作成を可能にする工程を包含する、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
処置方法であって、該方法は、
患者を、請求項１５〜１９のいずれか１項に記載の方法によって評価する工程、および
該患者における増大した欝血性心リスクを示すガレクチン−３濃度もしくはガレクチン−３濃度の変化を有する患者への前記ペルオキシソーム−増殖因子−活性化因子−レセプター−γアゴニストの投与を中断、制限もしくは中止する工程、
を包含する、方法。
【請求項２１】
前記患者への前記ペルオキシソーム−増殖因子−活性化因子−レセプター−γアゴニストの投与を中断する工程を包含する、請求項２０に記載の処置方法。
【請求項２２】
前記患者への前記ペルオキシソーム−増殖因子−活性化因子−レセプター−γアゴニストの投与頻度を減らす工程を包含する、請求項２０に記載の処置方法。
【請求項２３】
前記患者に投与されるべきペルオキシソーム−増殖因子−活性化因子−レセプター−γアゴニストの用量を減らす工程を包含する、請求項２０に記載の処置方法。
【請求項２４】
ペルオキシソーム−増殖因子−活性化因子−レセプター−γアゴニストでの処置の候補を評価するための方法であって、該方法は、
ペルオキシソーム−増殖因子−活性化因子−レセプター−γアゴニストで処置可能な状態を有する患者の体液においてガレクチン−３濃度を測定する工程；
該測定されたガレクチン−３濃度と、参照ガレクチン−３濃度とを比較する工程であって、ここで該参照ガレクチン−３濃度は、該状態を有する他の患者におけるガレクチン−３の濃度から得られ、そして該状態を有する患者における欝血性心リスクを示す、工程；および
該測定されたガレクチン−３濃度が該参照ガレクチン−３濃度を超える場合、該ペルオキシソーム−増殖因子−活性化因子−レセプター−γアゴニストの投与を中止もしくは断念する工程、
を包含する、方法。
【請求項２５】
前記方法は、前記測定されたガレクチン−３濃度が前記参照ガレクチン−３濃度を超える場合に、前記ペルオキシソーム−増殖因子−活性化因子−レセプター−γアゴニストの投与を断念する工程を包含する、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記ペルオキシソーム−増殖因子−活性化因子−レセプター−γアゴニストは、チアゾリジンジオンである、請求項１５〜２５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２７】
前記チアゾリジンジオンはロシグリタゾンである、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記体液は、血液、血清もしくは血漿を含む、請求項１５〜２７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２９】
前記患者は、糖尿病患者である、請求項１５〜２８のいずれか１項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、患者における欝血性心リスクを評価するための方法に関する。より具体的には、本発明は、ペルオキシソーム−増殖因子−活性化因子−レセプター−γ（ＰＰＡＲ−γ）アゴニストもしくはチアゾリジンジオン（ＴＺＤ）で処置されているかまたはペルオキシソーム−増殖因子−活性化因子−レセプター−γ（ＰＰＡＲ−γ）アゴニストもしくはチアゾリジンジオン（ＴＺＤ）での処置に適した患者における欝血性心リスクを評価するための方法を提供する。
【背景技術】
【０００２】
（背景）
真性糖尿病は、罹患率および死亡率の主要な原因である。慢性的に上昇した血糖は、衰弱性の合併症：ネフロパシー（しばしば、透析もしくは腎移植を要する）；末梢神経障害；失明をもたらす網膜症；切断をもたらす脚および足の潰瘍化；脂肪肝疾患（ときおり、肝硬変に進行する）；ならびに冠状動脈疾患および心筋梗塞に対する脆弱性をもたらす。
【０００３】
２型真性糖尿病（Ｔ２ＤＭ）は、糖尿病のすべての症例のうちの約９０％の原因となりかつ多くの先進国において４５歳を超える人々のうちの１０〜２０％が罹患する、糖尿病のもっとも一般的な形態である。それは、筋肉および脂肪によるグルコース取り込みの低下ならびに肝臓の糖生成の増大を生じるインスリン作用の欠損によって特徴づけられ、そしてグルコース刺激性インスリン分泌の正常なパターンにおける異常性によって特徴づけられる。
【０００４】
多くのチアゾリジンジオン（ＴＺＤ）は、経口用抗糖尿病薬剤として認可されてきた。ＴＺＤは、核転写因子であるペルオキシソーム−増殖因子−活性化因子−レセプター−γ（ＰＰＡＲ−γ）の選択的リガンドである。上記ＰＰＡＲ−γは、インスリン感受性を高めることによって血糖制御（ｇｌｙｃｅｍｉｃ  ｃｏｎｔｒｏｌ）を改善する。全世界で数百万の人々が、彼らの２型糖尿病を処置するために、ＴＺＤを含む薬物療法を使用している。しかし、欝血性心不全の顕著な危険性が、ＴＺＤを含む薬物療法の使用と関連していた。心不全の継続する出荷後報告によって、米国食品医薬品局（ＦＤＡ）が刺激され、ＴＺＤを含む薬物の表示にこの安全性の懸念が浮き彫りになってきた（ＦＤＡ  Ａｌｅｒｔ  ８／２００７（ピオグリタゾンＨＣｌ）およびＦＤＡ  Ａｌｅｒｔ  ８／１４／２００７（ロシグリタゾン）；Ｕ．Ｓ．ＦＤＡウェブサイト）。
【０００５】
抗糖尿病薬剤としてのＰＰＡＲ−γアゴニストおよびＴＺＤの重要性が原因で、これら薬物療法に依存している患者における心不全を効率的に診断するための方法を開発する必要性が未だに残っている。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
（発明の要旨）
本発明は、ペルオキシソーム−増殖因子−活性化因子−レセプター−γ（ＰＰＡＲ−γ）アゴニストもしくはチアゾリジンジオン（ＴＺＤ）で処置されている患者における欝血性心不全のリスクを評価するための方法を提供し、上記方法は、心不全と関連する１種以上のマーカーの濃度を検出もしくはモニターすることによる。結果として、本発明は、患者がより安全にＰＰＡＲ−γアゴニストおよびチアゾリジンジオン化合物を治療剤として使用することを可能にする。
【０００７】
従って、本発明の一局面は、チアゾリジンジオン（例えば、ロシグリタゾン）で処置されている患者（例えば、糖尿病患者）を、欝血性心の増大した危険性について評価するための方法に関する。一実施形態において、上記方法は、上記チアゾリジンジオンで処置されている患者の体液（例えば、血液、血清、もしくは血漿）におけるガレクチン−３濃度を測定する工程、および  上記ガレクチン−３濃度と、欝血性心状態が既知もしくは決定可能である上記チアゾリジンジオンで処置した他の患者において観察されたガレクチン−３濃度とを比較する工程を包含する。上記比較の結果は、上記測定されたガレクチン−３濃度が、上記患者における増大した欝血性心リスクを示すか否かを評価するために使用される。
【０００８】
別の局面において、本発明は、患者（例えば、糖尿病患者）を評価するための方法を提供し、上記方法は、上記チアゾリジンジオン（例えば、ロシグリタゾン）で処置されている患者の体液（例えば、血液、血清、もしくは血漿）におけるガレクチン−３濃度の経時的変化を測定する工程、および上記測定された変化と、欝血性心状態が既知もしくは決定可能である該チアゾリジンジオンで処置した他の患者で観察されたガレクチン−３濃度の変化とを比較する工程を包含する。上記比較の結果は、ガレクチン−３濃度の上記測定された変化が上記患者における増大した欝血性心リスクを示すか否かを評価するために使用される。上記方法は、上記チアゾリジンジオンでの処置の過程の間のガレクチン−３濃度と、上記処置の過程の間の初期のガレクチン−３濃度とを比較する工程を包含し得る。上記方法はまた、上記処置過程の間に数回測定されたガレクチン−３レベルを比較して、ガレクチン−３濃度の処置履歴を作成する工程を包含し得る。
【０００９】
さらなる局面は、チアゾリジンジオン（例えば、ロシグリタゾン）で処置されている患者の体液（例えば、血液、血清、もしくは血漿）において増大しつつあるガレクチン−３濃度の存在もしくは非存在を検出することによって、上記患者を評価するための方法を提供する。経時的に増大しつつあるガレクチン−３濃度の存在は、上記患者における増大した欝血性心リスクを示す。上記方法は、上記チアゾリジンジオンでの処置の過程の間のガレクチン−３濃度と、上記処置の過程の間の初期のガレクチン−３濃度とを比較する工程を包含し得る。上記方法はまた、上記処置の過程の間に数度、ガレクチン−３レベルを比較して、ガレクチン−３濃度の処置履歴を作成する工程を包含し得る。
【００１０】
上記リスク評価の結果は、上記患者の処置を包含するさらなる決定を知らせるために使用され得る。例えば、患者が、上記患者のガレクチン−３濃度もしくは上記患者のガレクチン−３濃度の変化に基づいて、増大した欝血性心リスクを有するようである場合、上記チアゾリジンジオンの投与は、中断され得るか、制限され得るか、または中止され得る（例えば、上記投与の要領もしくは頻度を減らすことによって）。上記患者は、異なる薬物療法（例えば、異なるチアゾリジンジオンもしくは非チアゾリジンジオン（例えば、グリブリドもしくはメトホルミン）に切り替えられ得る。あるいは、上記患者が、実質的に増大した欝血性心リスクを有するようではない場合、上記チアゾリジンジオンの投与は、継続し得るか、長期化され得るか、または（許容可能な用量もしくは頻度に達していなければ、例えば、用量もしくは頻度において）増大させられ得る。
【００１１】
同様に、本発明は、チアゾリジンジオン（例えば、ロシグリタゾン）での処置のための候補（例えば、糖尿病患者）を評価するための方法を提供する。上記方法は、チアゾリジンジオンで処置可能な状態を有する患者の体液におけるガレクチン−３濃度を測定する工程、および上記測定されたガレクチン−３濃度と、参照ガレクチン−３濃度とを比較する工程を包含する。上記参照ガレクチン−３濃度は、上記状態を有する他の患者におけるガレクチン−３の観察された濃度から得られ得、そして上記状態を有する患者における欝血性心リスクを示す。チアゾリジンジオン処置は、上記測定されたガレクチン−３濃度が、上記参照ガレクチン−３濃度を超える場合、中止され得るか拒否され得る。
【００１２】
別の局面において、本発明は、ＰＰＡＲ−γアゴニストで処置されている患者（例えば、糖尿病患者）を、欝血性心の増大したリスクについて評価するための方法に関する。一実施形態において、上記方法は、ＰＰＡＲ−γアゴニストで処置されている上記患者の体液（例えば、血液、血清、もしくは血漿）におけるガレクチン−３濃度を評価する工程、および上記ガレクチン−３濃度と、欝血性心状態が既知であるかもしくは決定可能である、上記ＰＰＡＲ−γアゴニストで処置された他の患者において観察されたガレクチン−３濃度とを比較する工程を包含する。上記比較の結果は、上記測定されたガレクチン−３濃度が上記患者における増大した欝血性心リスクを示すか否かを評価するために使用される。
【００１３】
別の局面において、本発明は、患者（例えば、糖尿病患者）を評価するための方法を提供し、上記方法は、ＰＰＡＲ−γアゴニストで処置されている上記患者の体液（例えば、血液、血清、もしくは血漿）におけるガレクチン−３濃度の経時的変化を測定する工程、および上記測定された変化と、欝血性心状態が既知であるかもしくは決定可能である、上記ＰＰＡＲ−γアゴニストで処置された他の患者において観察されたガレクチン−３濃度の変化とを比較する工程を包含する。上記比較の結果は、ガレクチン−３濃度における測定された変化が上記患者における増大した欝血性心リスクを示すか否かを評価するために使用される。上記方法は、ＰＰＡＲ−γアゴニストでの処置の過程の間のガレクチン−３濃度と、上記処置の過程の間の初期のガレクチン−３濃度とを比較する工程を包含し得る。上記方法はまた、上記処置過程の間に数度測定されたガレクチン−３レベルを比較して、ガレクチン−３濃度の処置履歴を作成する工程を包含し得る。
【００１４】
さらなる局面は、上記患者を評価するための方法を提供し、上記方法は、ＰＰＡＲ−γアゴニストで処置されている患者の体液（例えば、血液、血清、もしくは血漿）における増大しつつあるガレクチン−３濃度の存在もしくは非存在を検出することによる。経時的に増大しつつあるガレクチン−３濃度の存在は、上記患者における増大した欝血性心リスクを示す。上記方法は、上記ＰＰＡＲ−γアゴニストでの処置の過程の間のガレクチン−３濃度と、上記処置の過程の間の初期のガレクチン−３濃度とを比較する工程を包含し得る。上記方法はまた、上記処置の過程の間に数度、ガレクチン−３レベルを比較して、ガレクチン−３濃度の処置履歴を作成する工程を包含し得る。
【００１５】
上記リスク評価の結果は、上記患者の処置を包含するさらなる決定を知らせるために使用され得る。例えば、患者が、上記患者のガレクチン−３濃度もしくは上記患者のガレクチン−３濃度の変化に基づいて、増大した欝血性心リスクを有するようである場合、上記ＰＰＡＲ−γアゴニストの投与は、中断され得るか、制限され得るか、または中止され得る（例えば、投与の用量もしくは頻度を減らすことによって）。上記患者は、異なる薬物療法（例えば、異なるＰＰＡＲ−γアゴニスト）に切り替えられ得る。あるいは、上記患者が、実質的に増大した欝血性心リスクを有するようでない場合、上記ＰＰＡＲ−γアゴニストの投与は、継続し得るか、長期化され得るか、または（許容可能な用量もしくは頻度に未だ達していなければ、例えば、用量もしくは頻度において）増大させられ得る。
【００１６】
同様に、本発明は、候補（例えば、糖尿病患者）を、ＰＰＡＲ−γアゴニストでの処置について評価するための方法を提供する。上記方法は、ＰＰＡＲ−γアゴニストで処置可能な状態を有する患者の体液におけるガレクチン−３濃度を測定する工程、および上記測定されたガレクチン−３濃度と、参照ガレクチン−３濃度とを比較する工程を包含する。上記参照ガレクチン−３濃度は、上記状態を有する他の患者におけるガレクチン−３の観察された濃度から得られ得、そして上記状態を有する患者における欝血性心リスクを示す。ＰＰＡＲ−γアゴニスト処置は、上記測定されたガレクチン−３濃度が上記参照ガレクチン−３濃度を超える場合に、中止され得るか、または拒否され得る。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
（発明の詳細な説明）
出願人は、ペルオキシソーム−増殖因子−活性化因子−レセプター−γ（ＰＰＡＲ−γ）アゴニストもしくはチアゾリジンジオン（ＴＺＤ）で処置された患者における欝血性心リスクを評価するための方法を発明した。ＴＺＤベースの薬物は、ＩＩ型糖尿病および他の疾患（例えば、脂肪肉腫および多嚢胞性卵巣疾患）を処置するために使用される。近年、臨床研究は、ＴＺＤ投与が特定の患者において心不全を引き起こし得るかもしくは悪化させ得ることを示唆した。心臓の症状を発生させるかもしくは悪化させる個々の患者のリスクを評価することによって、その患者の処置選択肢に関する適切な決定が、行われ得る。
【００１８】
出願人は、ＰＰＡＲ−γアゴニストもしくはＴＺＤで処置されている患者、またはＰＰＡＲ−γアゴニストもしくはＴＺＤでの処置に適した患者における欝血性心リスクの指標として、循環するガレクチン−３タンパク質レベルの使用を可能にする方法を開発した。体液におけるガレクチン−３の上昇した濃度は、健康な個体において観察されたガレクチン−３レベルと比較した場合、ＣＨＦの発症と相関していた（ｖａｎ  Ｋｉｍｍｅｎａｄｅら，Ｊ．Ａｍ．Ｃｏｌｌ．Ｃａｒｄｉｏｌ．，４８：１２１７−２４（２００６））。しかし、出願人の研究は、ＰＰＡＲ−γアゴニストもしくはＴＺＤで処置されている糖尿病患者における上記ガレクチン−３レベルと、健康な個体において観察されたガレクチン−３レベルとの比較は、有益である見込みがないことを明らかにした。第１に、出願人は、糖尿病自体がガレクチン−３発現における顕著な増加をもたらすことを発見した。ガレクチン−３レベルが、上記糖尿病の結果として糖尿病患者において頻繁に上昇している場合、健康な個体と比較して、糖尿病患者における上昇したガレクチン−３レベルの検出は、驚くべきことではなく、上記患者の損増の状態にとって必ずしも有益ではない。第２に、出願人はまた、ＰＰＡＲ−γアゴニストもしくはＴＺＤの投与がガレクチン−３発現を低下させ得ることを発見した。組み合わせると、ガレクチン−３発現における上記糖尿病依存性増加、およびガレクチン−３発現における上記ＰＰＡＲ−γアゴニストもしくはＴＺＤに依存性の低下は、健康な個体との比較に基づいて、意味のある結論を引き出す試みを複雑にする。
【００１９】
レクチン−３発現に対するこれら競合する効果を発見したことから、出願人は、ガレクチン−３レベルを、欝血性心リスクの指標として使用するための新たな方法を発見した。ガレクチン−３レベルと、健康な患者におけるガレクチン−３レベルとの比較は、情報価値がない可能性があるのに対して、ガレクチン−３レベルと、匹敵する患者（例えば、同じ疾患もしくは状態を有する、おそらく、同じＰＰＡＲ−γアゴニストもしくはＴＺＤで処置された患者）におけるガレクチン−３レベルとの比較は、患者の心臓状態もしくはリスクについての重要な情報を明らかにし得る。
【００２０】
従って、いくつかの実施形態において、ＰＰＡＲ−γアゴニストもしくはＴＺＤを摂取している患者は、上記患者におけるガレクチン−３（および／もしくは他の心不全マーカー）のレベルを測定し、そして上記測定されたガレクチン−３濃度と、上記欝血性心状態が既知である、上記ＰＰＡＲ−γアゴニストもしくはＴＺＤで処置されている他の患者において検出されたガレクチン−３濃度とを比較することによって、欝血性心のリスクについて評価される。上記他の患者は、年齢、性別もしくは処置されている疾患について適合され得る。上記処置されている患者におけるガレクチン−３濃度はまた、ｃａｎ  経時的に測定され得、そして欝血性心状態が既知である他の、同様に処置された患者において観察されたガレクチン−３濃度の一時的変化と比較され得る。それによって、心不全から生じるガレクチン−３レベルの変化は、特定の疾患（例えば、糖尿病）の存在から、または上記ＰＰＡＲ−γアゴニストもしくはＴＺＤでの処置から生じるガレクチン−３レベルの変化から、区別され得る。従って、上記処置されている患者が、欝血性心を有することが既知である他の患者に類似のガレクチン−３レベルもしくはガレクチン−３レベルの変化を有する場合、上記処置されている患者は、欝血性心不全についてのリスクがあり得る。
【００２１】
あるいは、ガレクチン−３濃度は、ＰＰＡＲ−γアゴニストもしくはＴＺＤを摂取している患者において測定され得、上記ガレクチン−３濃度は、上記患者において測定された以前のガレクチン−３濃度と比較され得る。上記患者における１つ以上の以前のガレクチン−３濃度と比較したガレクチン−３濃度の増加は、上記患者が欝血性心についてのリスクがあるという兆候である。マーカーレベルは、例えば、１年に１回、半年に１回、１ヶ月に２回、１ヶ月に１回、１週間に３回、１週間に２回、１週間に２回、毎日、もしくは種々の間隔で、患者から得られたサンプル中で経時的にモニターされ得る。
【００２２】
ＰＰＡＲ−γアゴニストもしくはＴＺＤでの処置は、上記患者が、鬱血性心であることが決定されたか、または欝血性心についての増大したリスクがある場合に、改変され得るかまたは終結させられ得る。例えば、上記ＰＰＡＲ−γアゴニストもしくはＴＺＤの投与量が低下させられ得るか、または上記投与頻度は、上記欝血性心不全のリスクが許容可能なレベルにまで低下させられるまで、低下させられ得る。
【００２３】
マルチマーカー分析は、診断およびモニタリングの正確性を改善するために使用され得る。例えば、ガレクチン−３（Ｇａｌ−３）および脳ナトリウム利尿性ペプチド（ＢＮＰ）の血液濃度は、心不全を診断し、そして心不全の長期の結果を推測するために使用され得る（ｖａｎ  Ｋｉｍｍｅｎａｄｅら，Ｊ．Ａｍ．Ｃｏｌｌ．Ｃａｒｄｉｏｌ．，４８：１２１７−２４（２００６）；Ｓｈａｒｍａら，Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，１１０：３１２１−２８（２００４）；Ｌｏｋら，Ｅｕｒ．Ｈｅａｒｔ  Ｊ．，２８：１４１，Ａｂｓｔｒａｃｔ  １０３５（２００７））。ＢＮＰおよびその切断等価なアミノ末端プロＢＮＰ（ＮＴ−プロＢＮＰ）は、心室の高充填圧（ｈｉｇｈ  ｆｉｌｌｉｎｇ  ｐｒｅｓｓｕｒｅ）および心筋線維の伸展の結果として、心不全の間に心筋中および血中で上昇する。心不全を診断するために使用され得る他の二次的なマーカーは、非ポリペプチド心臓マーカー（例えば、スフィンゴ脂質、スフィンゴシン、スフィンゴシン−１−ホスフェート、ジヒドロスフィンゴシンおよびスフィンゴシルホスホリルコリン（米国特許第６，５３４，３２２号を参照のこと）を含み得る。記マーカーのレベルを測定する場合、年齢および性別の較正は、診断の正確性を改善するために組み込まれ得る。
【００２４】
マーカー検出：
本発明は、ＰＰＡＲ−γアゴニストもしくはＴＺＤを含む薬物療法を受けている患者における心不全を検出およびモニターするための方法を提供し、上記方法は、１種以上のマーカー（例えば、Ｇａｌ−３、ＢＮＰ、ＮＴ−プロＢＮＰ）のレベルを測定することによる。目的のタンパク質の、定量ありまたはなしの検出のための多くの方法は、周知であり、本発明の実施において使用され得る。このようなアッセイの例は、以下に記載され、例えば、イムノアッセイ、クロマトグラフィー法、および質量分析法が挙げられ得る。このようなアッセイは、任意の生物学的サンプルに対して行われ得る。これらサンプルとしては、とりわけ、血液、血漿、および血清が挙げられる。従って、多彩なアッセイが、Ｇａｌ−３もしくはＢＮＰを検出するために使用され得、そしてサンプルは、１種以上の供給源から分析され得る。
【００２５】
マーカーは、１つ以上の分離法の助けを借りて、サンプル中で検出もしくは定量され得る。例えば、適切な分離法としては、質量分析法（例えば、エレクトロスプレーイオン化質量分析法（ＥＳＩ−ＭＳ）、ＥＳＩ−ＭＳ／ＭＳ、ＥＳＩ−ＭＳ／（ＭＳ）ｎ（ｎは、ゼロより大きい整数である）、マトリクス支援型レーザー脱離イオン化飛行時間質量分析法（ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ−ＭＳ）、表面増強レーザー脱離／イオン化飛行時間質量分析法（ＳＥＬＤＩ−ＴＯＦ−ＭＳ）、シリコン上の脱離／イオン化（ｄｅｓｏｒｐｔｉｏｎ／ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ  ｏｎ  ｓｉｌｉｃｏｎ）（ＤＩＯＳ）、二次的イオン質量分析法（ＳＩＭＳ）、四重極飛行時間（Ｑ−ＴＯＦ）、大気圧化学イオン化質量分析法（ＡＰＣＩ−ＭＳ）、ＡＰＣＩ−ＭＳ／ＭＳ、ＡＰＣＩ−（ＭＳ）ｎ、もしくは大気圧光イオン化質量分析法（ＡＰＰＩ−ＭＳ）、ＡＰＰＩ−ＭＳ／ＭＳ、およびＡＰＰＩ−（ＭＳ）ｎが挙げられ得る。他の質量分析法としては、とりわけ、四重極、フーリエ変換質量分析法（ＦＴＭＳ）およびイオントラップが挙げられ得る。同様に使用され得る分光計の技術としては、共鳴分光学および光波分光学が挙げられる。
【００２６】
他の適切な分離法としては、化学的抽出分配、カラムクロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、疎水性（逆相）液体クロマトグラフィー、等電点電気泳動、一次元ポリアクリルアミド電気泳動（ＰＡＧＥ）、二次元ポリアクリルアミドゲル電気泳動（２Ｄ−ＰＡＧＥ）、もしくは他のクロマトグラフィー技術（例えば、薄層、ガスもしくは液体クロマトグラフィー、または任意のこれらの組み合わせ）が挙げられる。一実施形態において、アッセイされるべき上記生物学的サンプルは、上記分離法の適用前に分画され得る。
【００２７】
マーカーは、上記マーカー自体の物理的分離を要しない方法によって、検出もしくは定量され得る。例えば、核磁気共鳴（ＮＭＲ）分光法は、分子の複雑な混合物からのマーカーのプロフィールを分離するために使用され得る。主要を分類するためのＮＭＲの類似の使用は、例えば、Ｈａｇｂｅｒｇ，ＮＭＲ  Ｂｉｏｍｅｄ．１１：１４８−５６（１９９８）において開示されている。
【００２８】
サンプル中のマーカーはまた、例えば、上記マーカーと、上記マーカーを特異的に結合し得る結合部分とを組み合わせることによって、検出もしくは定量され得る。上記結合部分は、例えば、リガンド−レセプター対（すなわち、特異的結合相互作用を有し得る分子の対）のメンバーを含み得る。上記結合部分はまた、例えば、特異的結合対（例えば、抗体−抗原、酵素−基質、核酸−核酸、タンパク質−核酸、タンパク質−タンパク質、もしくは当該分野で公知の他の特異的結合対）のメンバーを含み得る。結合タンパク質が設計され得、それは、ある標的に対して増強された親和性を有する。必要に応じて、上記結合部分は、検出可能な標識（例えば、酵素的、蛍光的、放射活性的、リン光性、もしくは着色粒子標識）と連結され得る。上記標識された複合体は、例えば、視覚的に、または分光光度計もしくは他の検出器の助けを借りて、検出され得るか、あるいは定量され得る。
【００２９】
本発明において測定されるマーカーは、イムノアッセイを使用して検出され得る。例えば、Ｇａｌ−３を検出するための酵素結合イムノソルベントアッセイキット（ＥＬＩＳＡ）が市販されている（Ｂｅｎｄｅｒ  Ｍｅｄｓｙｓｔｅｍｓ，Ｖｉｅｎｎａ，Ａｕｓｔｒｉａ）。さらに、ＢＮＰに結合する抗体は、商業的に入手され得る。ＢＮＰに結合する市販の抗体の例は、ウサギ抗ヒトＢＮＰポリクローナル抗体（Ｂｉｏｄｅｓｉｇｎ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ）、ウサギ抗ＢＮＰアミノ酸１〜２０ポリクローナル抗体（Ｂｉｏｄｅｓｉｇｎ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ）、抗ヒトＢＮＰモノクローナル抗体（Ｉｍｍｕｎｄｉａｇｎｏｓｔｉｋ）、およびウサギ抗ヒトＢＮＰアミノ酸１〜１０ポリクローナル抗体（Ｉｍｍｕｎｄｉａｇｎｏｓｔｉｋ）である。
【００３０】
イムノアッセイは、試験されるべき被験体に由来するサンプルと、適切な抗体とを、マーカーが存在する場合に免疫特異的結合が起こり得るような条件下で接触させる工程、および上記抗体による任意の免疫特異的結合の量を検出もしくは測定する工程によって、行われ得る。任意の適切なイムノアッセイが使用され得、それらとしては、競合アッセイ系および非競合アッセイ系（ウェスタンブロット、ラジオイムノアッセイ、ＥＬＩＳＡ（酵素結合イムノソルベントアッセイ）、「サンドイッチ」イムノアッセイ、免疫沈降アッセイ、免疫拡散アッセイ、凝集アッセイ、補体固定アッセイ、イムノラジオメトリックアッセイ、蛍光イムノアッセイおよびプロテインＡイムノアッセイの様な技術を使用する）が挙げられるが、これらに限定されない。
【００３１】
サンドイッチイムノアッセイにおいて、マーカーを結合し得る２種の抗体が、一般に使用され、例えば、一方は、固体支持体上に固定化され、そしてもう一方は、溶液中に遊離しておりかつ検出可能な化学的化合物で標識されている。第２の抗体のために使用され得る化学的標識の例としては、放射性同位体、蛍光化合物、および反応物もしくは酵素基質に曝された場合に呈色したもしくは電気化学的に活性な生成物を生じる酵素もしくは他の分子が挙げられる。上記マーカーを含むサンプルが、この系におかれた場合、上記マーカーは、上記固定化された抗体および上記標識された抗体の両方に結合して、「サンドイッチ」免疫複合体を上記支持体の表面に形成する。上記複合体化マーカーは、非結合サンプル成分および過剰な標識された抗体を洗い流し、上記支持体の表面上のマーカーに複合体化された標識抗体の量を測定することによって、検出される。あるいは、上記溶液中で遊離している抗体は、化学的部分（例えば、ハプテン）で標識され得、上記遊離抗体（または例えば、それに結合されたハプテン）に結合する検出可能な部分で標識された第３の抗体によって検出され得る。
【００３２】
上記サンドイッチイムノアッセイおよび組織免疫組織化学的手順の両方は、非常に特異的でありかつ非常に感度が高いが、ただし、十分な検出限界を有する標識が使用される。免疫学的アッセイの設計、理論およびプロトコールの詳細な総説は、当該分野の多くの教科書（Ｂｕｔｔ，Ｗ．Ｒ．，Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，編．Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ  （１９８４）およびＨａｒｌｏｗら  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ａｐｐｒｏａｃｈ，編．Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ（１９８８）が挙げられる）において見いだされ得る。
【００３３】
一般に、イムノアッセイ設計の考慮事項は、非特異的相互作用の生成物から容易に区別され得る複合体を形成するために、上記標的に対して十分に高い結合特異性を有する抗体の調製（例えば、モノクローナル抗体もしくはポリクローナル抗体）を含む。本明細書において使用される場合、用語「抗体」とは、結合タンパク質（例えば、抗体、もしくは適切な結合親和性および上記標的に対する特異性を有する免疫グロブリン可変領域様結合ドメインを含む他のタンパク質）を意味することが理解される。上記抗体結合特異性が高くなるほど、検出され得る上記標的濃度は低くなる。本明細書において使用される場合、用語「特異的結合」もしくは「特異的に結合する」とは、上記結合部分（例えば、結合タンパク質）が、約１０５Ｍ−１より大きい、より好ましくは、約１０７Ｍ−１より大きい上記標的に対する結合親和性を有することを意味することが理解される。
【００３４】
個体における心不全を検出するためのアッセイにおいて有用な単離された標的マーカーに対する抗体は、当該分野で周知かつ記載されている標準的な免疫学的手順を使用して、生成され得る。例えば、Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（前出）を参照のこと。簡潔には、単離されたマーカーは、異種宿主（例えば、マウス、ヤギもしくは他の適切な哺乳動物）において抗体を惹起するために使用される。上記マーカーは、上記宿主における抗体生成を増強し得る適切なアジュバントと合わされ、例えば、腹腔内投与によって上記宿主に注射される。上記宿主の免疫応答を刺激するのに適した任意のアジュバントは、使用され得る。一般に使用されるアジュバントは、フロイント完全アジュバント（死滅もしくは乾燥させた微生物細胞を含み、例えば、Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ  Ｃｏｒｐ．，Ｓａｎ  ＤｉｅｇｏもしくはＧｉｂｃｏ，Ｇｒａｎｄ  Ｉｓｌａｎｄ，ＮＹから市販されるエマルジョン）である。複数回の抗原注射が望ましい場合、その後の注射は、不完全アジュバント（例えば、無細胞エマルジョン）と組み合わせた抗原を含み得る。ポリクローナル抗体は、上記目的のタンパク質に対する抗体を含む血清を抽出することによって、上記抗体生成宿主から単離され得る。モノクローナル抗体は、望ましい抗体を生成する宿主細胞を単離し、免疫学分野において公知の標準的手順を使用して、これら細胞と骨髄腫細胞とを融合し、上記標的と特異的に反応しかつ上記望ましい結合親和性を有するハイブリッド細胞（ハイブリドーマ）についてスクリーニングすることによって、生成され得る。
【００３５】
抗体結合ドメインはまた、生合成的に生成され得、そして上記結合ドメインのアミノ酸は、上記標的上の好ましいエピトープに対する結合親和性を増強するために操作され得る。特異的抗体の方法論は、十分に理解されており、文献中に記載されている。それらの調製のより詳細な説明は、例えば、Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（前出）において見いだされ得る。
【００３６】
さらに、遺伝的に操作された生合成抗体結合部位（当該分野では、ＢＡＢＳもしくはｓＦｖ’ｓとして公知）は、サンプルがマーカーを含むか否かを決定するために使用され得る。（ｉ）非共有結合的に会合されているか、もしくはジスルフィド結合で結合されている合成ＶＨおよびＶＬダイマー、（ｉｉ）共有結合的に連結されたＶＨ−ＶＬ一本鎖結合部位、（ｉｉｉ）個々のＶＨもしくはＶＬドメイン、または（ｉｖ）一本鎖抗体結合部位を含むＢＡＢＳを作製し、使用するための方法は、例えば、米国特許第５，０９１，５１３号；同第５，１３２，４０５号；同第４，７０４，６９２号；および同第４，９４６，７７８号に開示されている。さらに、上記マーカーに対する必須特異性を有するＢＡＢＳは、コンビナトリアル遺伝子ライブラリーからのファージ抗体クローニングによって得られ得る（例えば、Ｃｌａｃｋｓｏｎら  Ｎａｔｕｒｅ  ３５２：６２４−６２８（１９９１）を参照のこと）。簡潔には、ファージ（各々は、それらのコート表面に、単離されたマーカー、もしくはそのフラグメントであらかじめ免疫されたマウスから得られた可変領域遺伝子配列によってコードされる免疫グロブリン可変領域を有するＢＡＢＳを発現する）は、上記固定化されたマーカーに対する結合活性についてスクリーニングされる。上記固定化されたマーカーに結合するファージは、回収され、上記ＢＡＢＳをコードする遺伝子が配列決定される。次いで、上記目的のＢＡＢＳをコードする得られた核酸配列は、従来の発現系において発現されて、上記ＢＡＢＳタンパク質を生成し得る。
【実施例】
【００３７】
（実施例１：糖尿病の動物モデルおよびＰＰＡＲ−γアゴニストおよびＴＺＤの投与）
全体の実験設計を、２型真性糖尿病（Ｔ２ＤＭ）の処置において使用される３種の薬物（ロシグリタゾンマレエート（Ｒｏｓｉ）、グリブリド（Ｇｌｙ）およびメトホルミン（Ｍｅｔ））についての生体マーカーのフィンガープリントを特徴づけるために開発した。この目的を達成するために、薬物応答を、Ｔ２ＤＭの２種の実験的マウスモデルにおいて評価した。
【００３８】
一方のマウスモデルは、食餌誘導性肥満モデル（ＨＦＤ）であり、ここでＣ５７ＢＬ／６マウスを、高脂肪食下においた。このマウス系統は、遺伝的に、食餌誘導性肥満、高血糖症、および高インスリン血症になりやすい（Ｓｕｒｗｉｔら  Ｄｉａｂｅｔｅｓ．３７：１１６３−７（１９８８））。８〜１２週間にわたって高脂肪の、高い単純炭水化物食餌（５８％  ｋｃａｌ  脂肪）下に置かれた場合、これら動物は、肥満、軽度の高血糖症、および高インスリン血症を発症させる。これらマウスはまた、脂質異常症に特徴的な表現型を発生させ、上記表現型としては、上昇したコレステロール、トリグリセリド、および遊離脂肪酸が挙げられる。
【００３９】
他方のマウスモデルは、Ｔ２ＤＭのｄｂ／ｄｂマウスモデル（ＤＢ）であった。上記ｄｂ／ｄｂマウスは、中程度から重篤な高血糖症および高インスリン血症によって特徴づけられるＴ２ＤＭの広く使用されている遺伝的モデルである（Ｈｕｍｍｅｌら  Ｓｃｉｅｎｃｅ．１５３：１１２７−８（１９６６））。これらマウスは、レプチンレセプター（ｌｅｐｒ）において自発的な変異、および欠損性レプチン誘導性シグナル伝達を有し、これは、慢性の過食を生じる。上昇した血漿インスリンは１０〜１４日の間で現れ、肥満は、３〜４週齢で顕著であり、高血糖症は、４〜８週齢で現れる。血清トリグリセリド（ＴＧ）および遊離脂肪酸（ＦＦＡ）はまた、上昇する。Ｃ５７ＢＬバックグラウンドにあるｄｂ／ｄｂマウスを使用した。
【００４０】
野生型Ｃ５７ＢＬ／６マウスを、ＨＦＤマウスに対する非糖尿病コントロールとして使用した。ｄｂ／＋マウスを、ＤＢマウスに対する非糖尿病コントロールとして使用した。上記コントロールマウスは、上記疾患モデルマウスとして研究薬物の同じ要領を受けた。雄性マウスを、すべての研究に使用した。
【００４１】
サンプルサイズの考慮事項：
パイロット研究において、トランスクリプトミクス（ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｏｍｉｃｓ）プラットフォームについてのサンプルサイズ計算を、ｄｂ／ｄｂマウスにおいて行った。パワー（ｐｏｗｅｒ）を評価して、生物学的に関連のある遺伝子の中で差示的発現を検出するために、Ｔ２ＤＭについての７８個の代謝的に関連した遺伝子のリストを、上記文献から編集した。ｄｂ／＋およびｄｂ／ｄｂ動物の肝臓組織の分析は、Ｉ型、０．０５の誤差、２倍の変化、および０．８のパワー（ｐｏｗｅｒ）を使用すると、１群あたり１０匹の動物が、上記７８個の選択された転写物のうちの６１．５％を、差示的に発現されるとして同定するに十分であることが実証された。この分析から、１処置群あたり１０匹の動物が、目的の生体マーカーを適切に同定することが決定された。
【００４２】
動物プロトコール：
（研究ＤＢ０６およびＤＢ０７）
雄性のｄｂ／ｄｂおよびｄｂ／＋マウスを、Ｔｈｅ  Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  （Ｂａｒ  Ｈａｒｂｏｒ，Ｍａｉｎｅ）から購入したところ、４週齢に達していた。上記マウスを、１２：１２時間の明暗サイクルおよび２３±２℃において５つの群で収容した。１週間の隔離期間の後に、マウスを、３週間にわたって研究条件に順応させた。マウスを、標準的な齧歯類飼料（Ｐｕｒｉｎａ  ５００１；ＴｅｓｔＤｉｅｔ，Ｒｉｃｈｍｏｎｄ，ＩＮ）で維持した。すべてのマウスに、実験の間中、自由に水を摂取できるようにした。７週齢において、血液サンプルを採取し、マウスを、平均血漿グルコースレベルに基づいて、処置群の１つに割り当てた。マウスに、ビヒクル（０．５％  メチルセルロース）もしくはビヒクル中のＲｏｓｉ（１０ｍｇ／ｋｇ）もしくはビヒクル中のＧｌｙ（１０ｍｇ／ｋｇ）もしくはビヒクル中のＭｅｔ（７５ｍｇ／ｋｇ）を、８週齢から開始して１４日間にわたって経口投与した。すべての実験を経口胃管栄養（１０ｍｌ／ｋｇ）を介して行い、投与を、ほぼ午前８時および午後３時に、１日に２回行った。
【００４３】
処置期間の間に、体重を、投与前の朝に毎日測定した。飼料の摂取を、上記研究の開始前に、週の始めに、１週間に１回測定した。飼料の摂取を、各週の始めに、あらかじめ秤量した量の飼料を与え、そしてその週の終わりに残っている飼料を差し引くことによって、評価した。
【００４４】
１４日目に、マウスを、頚椎脱臼によって安楽死させた。組織（肝臓、鼠径部皮下脂肪および腓腹筋）を採取し、組織学分析およびトランスクリプトーム分析のために調製した。肝臓、皮下脂肪、心臓、および腎臓の重量を記録した。組織学的分析のために、各組織の小さな切片を１０％  ホルマリン中に集め、２４時間後に７０％  エタノール中に移した。簡潔には、トランスクリプトーム分析のために、各組織を、２．０〜５．０ｍｌのＲＮＡＬａｔｅｒ（登録商標）（Ａｍｂｉｏｎ，Ｉｎｃ．，Ａｕｓｔｉｎ，ＴＸ）中で切り刻み、ドライアイス上で凍結させ、−８０℃での長期間貯蔵に移した。
【００４５】
（研究ＨＦＤ０６およびＨＦＤ０７）
雄性のＣ５７ＢＬ／６マウスを、Ｔｈｅ  Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ（Ｂａｒ  Ｈａｒｂｏｒ，Ｍａｉｎｅ）から購入したところ、４週齢に達していた。上記マウスを、１２：１２時間の明暗サイクルで、２３±２℃において５つの群で収容した。１週間の隔離期間の後に、マウスを、５８％  ＨＦＤ（Ｄ１２３３１；Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｄｉｅｔｓ  Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｂｒｕｎｓｗｉｃｋ，ＮＪ）もしくは１１％  標準脂肪食（Ｄ１２３２９）のいずれかの下に置いた。マウスを、上記実験の期間にわたって、彼らそれぞれの食餌で維持した。すべてのマウスに、実験の間中、自由に水を摂取できるようにした。
【００４６】
食餌の７週間後、血液サンプルを回収し、マウスを、平均血漿グルコースレベルに基づいて、４つの処置群のうちの１つに割り当てた。マウスに、ビヒクル（０．５％  メチルセルロース）もしくはビヒクル中のＲｏｓｉ（１０ｍｇ／ｋｇ）もしくはビヒクル中のＧｌｙ（１０ｍｇ／ｋｇ）もしくはビヒクル中のＭｅｔ（７５ｍｇ／ｋｇ）を、８週齢からはじめて１４日間にわたって経口投与した。すべての処置を、経口胃管栄養（１０ｍｌ／ｋｇ）を介して行い、投与を、ほぼ午前８時および午後３時で１日に２回行った。すべての処置を、経口胃管栄養（１０ｍｌ／ｋｇ）を介して行い、投与を、ほぼ午前８時および午後３時で１日に２回行った。
【００４７】
処置期間の間に、体重を投与の前の朝に１日に１回測定した。飼料の摂取を、上記研究を開始する前に、週の始めに、１週間に１回測定した。飼料の摂取を、各週の始めに、あらかじめ秤量した量の飼料を与え、その週の最後に残っている飼料を差し引くことによって評価した。
【００４８】
１４日目に、マウスを、頚椎脱臼によって安楽死させた。組織（肝臓、鼠径部皮下脂肪および腓腹筋）を採取し、組織学分析およびトランスクリプトーム分析のために調製した。肝臓、皮下脂肪、心臓、および腎臓の重量を記録した。組織学的分析のために、各組織の小さな切片を１０％  ホルマリン中に集め、２４時間後に７０％  エタノール中に移した。簡潔には、トランスクリプトーム分析のために、各組織を、２．０〜５．０ｍｌのＲＮＡＬａｔｅｒ（登録商標）（Ａｍｂｉｏｎ，Ｉｎｃ．，Ａｕｓｔｉｎ，ＴＸ）中で切り刻み、ドライアイス上で凍結させ、−８０℃での長期間貯蔵に移した。
【００４９】
健康および安全性評価：
研究に関する上記マウスの前進的な健康を、研究員が１日に１回モニターした。健康評価は、視覚的観察および１日に１回の体重測定を含んでいた。研究の間の任意の時に、マウスが苦痛の症状もしくは病気の挙動（例えば、重篤な嗜眠、うずくまった姿勢、紋切り型の運動、異常な呼吸、もしくは極端な体重減少）を示した場合、二酸化炭素（ＣＯ２）吸入を介して彼らを適切に安楽死させた。
【００５０】
（実施例２：マウスＴ２ＤＭモデルにおけるＧａｌ−３およびＢＮＰの転写プロファイリング）
遺伝子の転写分析（ＴＡ）および発現配列タグ（Ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ｔａｇ）（ＥＳＴ）は、生物学的プロセスについての価値ある情報を提供する。Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘ  ＧｅｎｅＣｈｉｐ（登録商標）技術（Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘ，Ｓａｎｔａ  Ｃｌａｒａ，ＣＡ）は、遺伝子発現において全体的な変化を分析するために使用され得る。簡潔には、この技術は、実験情感からのメッセンジャーリボ核酸（ｍＲＮＡ）を使用して、相補的なデオキシリボ核酸（ｃＤＮＡ）を、および最終的には、ＧｅｎｅＣｈｉｐ（登録商標）アレイへのハイブリダイゼーションのために相補的リボ核酸（ｃＲＮＡ）を得る。ＧｅｎｅＣｈｉｐｓ（登録商標）は、個体表面に結合される数千もの配列に対する核酸プローブを含む。Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘ  ＧｅｎｅＣｈｉｐ（登録商標）技術を、実施例１における前臨床研究において、３種の組織（肝臓、皮下脂肪、腓腹筋）における転写的変化を圧制するために使用した。サンプルを、上記ＧｅｎｅＣｈｉｐ（登録商標）マウスゲノム４３０Ａアレイにハイブリダイズさせた。＞２２，０００個のプローブセットに対する相対的ｍＲＮＡ強度レベルを、Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘ  Ｍｉｃｒｏａｒｒａｙ  Ｓｕｉｔｅ（登録商標）バージョン５．０（ＭＡＳ  ５．０，Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘ  Ｍｉｃｒｏａｒｒａｙ  Ｓｕｉｔｅ，Ｓａｎｔａ  Ｃｌａｒａ，ＣＡ）を使用して得た。
【００５１】
転写分析のために集めた組織は、実施例１における前臨床動物研究の１４日目の肝臓、皮下脂肪および腓腹筋を含んだ。
【００５２】
サンプル調製：
解剖時に、肝臓のある葉（１００〜２００ｍｇ）、皮下脂肪の一部（１００〜３５０ｍｇ）および１つの腓腹筋（１００〜２００ｍｇ）を採取し、細かく切り刻み（１〜３ｍｍ）、５〜１０容積のＲＮＡｌａｔｅｒ（登録商標）（Ａｍｂｉｏｎ，Ｉｎｃ．，Ａｕｓｔｉｎ，ＴＸ）の中に置いた。ＲＮＡｌａｔｅｒ（登録商標）（硫酸アンモニウム溶液）を使用して、実験手順の間にＲＮＡの分解を防止した。サンプルをドライアイス上で貯蔵し、さらに処理するまで、−８０℃の冷凍庫へと移した。
【００５３】
ＲＮＡ抽出：
ＲＮＡｌａｔｅｒ（登録商標）ストックからの組織を秤量し、Ｔｒｉｚｏｌ試薬（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ）に移し、ＭｉｘＡＭｉｌシステム（Ｒｅｔｓｃｈ，Ｈａａｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を使用してホモジナイズした。ＲＮａｓｅを含まない水、クロロホルム、およびＴｒｉｚｏｌ−組織ホモジネートを、Ｐｈａｓｅ  Ｌｏｃｋ  ＧｅｌＴＭ（ＰＬＧ）チューブ（ＶＷＲ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｗｅｓｔ  Ｃｈｅｓｔｅｒ，ＰＡ）中で遠心分離した。透明な水性上清を、上記ＰＬＧの上の層から回収し、ＲＮｅａｓｙ（登録商標）Ｍｉｎｉカラム（Ｑｉａｇｅｎ  Ｉｎｃ．，Ｖａｌｅｎｃｉａ，ＣＡ）に移し、製造業者の指示に従って始めた。ＲＮＡサンプルを、推奨されるように処理したＤＮＡｓｅ  Ｉであった。ＲＮＡ完全性を、光学密度（ＯＤ）比（Ｓｐｅｔｒａｍａｘ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ  Ｃｏｒｐ．，Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ，ＣＡ）およびＡｇｉｌｅｎｔ  ＢｉｏＡｎａｌｙｚｅｒＴＭ  ＲＮＡチップおよびソフトウェア（Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ｉｎｃ．，Ｐａｌｏ  Ａｌｔｏ，ＣＡ）によって測定される場合に、リボソームの質によって、評価した。
【００５４】
サンプル標識：
５μｇのｍＲＮＡを、各サンプルについて使用した。ｃＤＮＡ合成（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ）およびビオチン化ヌクレオチド（Ｅｎｚｏ  Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｉｎｃ．，Ｆａｒｍｉｎｇｄａｌｅ，ＮＹ）を組み込むインビトロ転写を、Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘによって推奨される標準的な操作手順に従って行った。標識の質を、Ａｇｉｌｅｎｔ  ＢｉｏＡｎａｌｙｚｅｒ  ＲＮＡチップおよびソフトウェアによってモニターされる場合、ｃＲＮＡ収量および完全性によって評価した。
【００５５】
データ取得：
１０μｇの代表的サンプルｃＲＮＡを含むハイブリダイゼーションカクテルを、ＧｅｎｅＣｈｉｐ（登録商標）  Ｍｏｕｓｅ  Ｇｅｎｏｍｅ  ４３０Ａ  Ａｒｒａｙの上にのせ、一晩ハイブリダイズさせた。Ｇｅｎｅｃｈｉｐｓ（登録商標）を洗浄し、Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘ（登録商標）流体ステーションおよびスキャナを使用してスキャンした。強度データを、アルゴリズムＭＡＳ  ５．０を使用するＧｅｎｅｃｈｉｐ（登録商標）  Ｃｏｍｐｕｔｅｒ  Ｏｐｅｒａｔｉｎｇ  Ｓｙｓｔｅｍ（ＧＣＯＳ）によって取り込んだ。
【００５６】
データ処理および品質制御：
各チップの初期の視覚的検査を完了し、均質な色、予測外のスポットもしくはかき傷および適切なグリッドアラインメントについてチェックした。すべてのマイクロアレイデータの技術的品質制御（ＱＣ）を、ＭＡＳ  ５．０分析ソフトウェアを使用して行った。さらに、Ｓ−Ｐｌｕｓ（登録商標）（Ｉｎｓｉｇｈｔｆｕｌ  Ｃｏｒｐ．，Ｓｅａｔｔｌｅ，ＷＡ）およびＳｉｍｃａ−ＰＴＭソフトウェア（Ｕｍｅｔｒｉｃｓ，ＵｍｅａCＳｗｅｄｅｎ）を使用して、相関計算を行い、上記データの包括的外観を提供した。
【００５７】
すべてのトランスクリプトームデータについて、上記処理したデータを、データ分析をする前に対数変換（底１０）した。
【００５８】
表１および表２において報告される結果は、ガレクチン−３（Ｇａｌ−３）および脳ナトリウム利尿性ペプチド（ＢＮＰ）についてのｍＲＮＡにおける変化に対する特異的焦点に由来する。
【００５９】
データ分析法：
この研究において行った全体的データ分析ストラテジーは、以下を含んでいた：ａ）一変量データ分析（ＵＶＤＡ）を行うこと（これは、標準的な統計学的アプローチ（例えば、個々の分析物に別個に適用される分散分析（ＡＮＯＶＡ）を含む）；ｂ）ＭＶＤＡを行うこと（これは、個々の分析物に共同で適用される単一の統計学的分析を使用する）；ｃ）主なエンドポイント（例えば、グルコース、インスリン、およびＨｂＡ１ｃ）に相関する生体マーカーを同定するために、相関分析を行うこと；ｄ）異なる経路分析ツールを試験して、試して、個々の結果をより総合的な生物学的経路の理解へと組み合わせること；ならびにｅ）統計学的分析を組み込んだサンプル／組織内で種々行って、プラットフォームおよびサンプルにまたがる共通フィンガープリントを同定すること。一般に、これらアプローチのすべてを、上記プラットフォームデータベースの各々の中で利用した；しかし、プラットフォームデータにおけるわずかな差異（例えば、他よりも、いくつかのプラットフォームデータのより良好な注釈）が原因で、すべての分析を、各プラットフォームに対して行わなかった。
【００６０】
以下の節において、現在の研究に関するデータ分析の一般的考慮事項、続いて、利用した統計学的および分析アプローチの各々の詳細を記載する。
【００６１】
分析集団：
上記「分析集団」は、以下に列挙した理由に起因して排除しなかったすべてのマウスからなり、１つ以上のプラットフォームからのデータを有した。上記「分析集団」は、上記データの分析において使用した唯一の集団であった。マウスを、マウスの死亡、体重の急激な減少、もしくは瀕死の外見に起因して、研究から外した。
【００６２】
処置比較：
各薬物に対するマウスと、ビヒクルに対するマウスとの間の比較、または上記ｄｂ／ｄｂマウスと上記ｄｂ／＋マウスとの間の比較、またはＨＦＤマウスと、非ＨＦＤマウスとの間の比較を、それぞれ、薬物作用および疾患に関連した有意差を同定するために行った。
【００６３】
疾患性生体マーカー：
疾患生体マーカーは、疾患表現型（例えば、ｄｂ／ｄｂ特異的）に関連し、ビヒクルで処置した上記ｄｂ／ｄｂマウスと、ビヒクルで処置した上記ｄｂ／＋マウス、またはビヒクルで処置した上記ＨＦＤマウスと、ビヒクルで処置した上記非ＨＦＤマウスとの比較によって、開発した。
【００６４】
薬物効果生体マーカー：
ｄｂ／ｄｂ特異的薬物生体マーカーを、薬物処置によって顕著に変化したものとして定義し、薬物で処置した上記ｄｂ／ｄｂマウスと、ビヒクルで処置した上記ｄｂ／ｄｂマウスとの比較によって開発した。
【００６５】
ＨＦＤ特異的薬物生体マーカーを、薬物処置によって顕著に変化したものとして定義し、薬物で処置した上記ＨＦＤマウスと、ビヒクルで処置した上記非ＨＦＤマウスとの比較によって開発した。
【００６６】
疾患および薬物生体マーカー：
疾患および薬物生体マーカーを、薬物および疾患の両方によって顕著に影響を受けたものとして定義し、「疾患および薬物生体マーカー」とよんだ。
【００６７】
薬物×疾患生体マーカー（Ｄｒｕｇ−ｂｙ−ｄｉｓｅａｓｅ  ｂｉｏｍａｒｋｅｒ）を、顕著な薬物×疾患相互作用を示したそれらの生体マーカーとして定義し、「薬物×疾患生体マーカー」とよんだ。
【００６８】
アウトライアー検出（Ｏｕｔｌｉｅｒ  Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ）：
この研究において、統計学的アウトライアー検出法を、高完全性データを確実にしようとして、トランスクリプトームプラットフォームデータについて利用した。統計学的アプローチは必須であった。なぜなら、数千ものデータ点を、上記トランスクリプトームプラットフォームにおいて生成し、そしてすべてのデータ点を誤差について視覚的に検査することは不可能であるからである。従って、保存的アプローチを利用して、統計学的有意性を検出する能力にネガティブに影響を及ぼし得る極端なアウトライアーを除去した。この研究において、一変数のアウトライアー検出法を利用して、極端なアウトライアーを同定した。
【００６９】
一変数アウトライアー検出：
ボックスプロットを使用して、上記分析から排除されるべき研究群における極端なアウトライアーを定義した。コホートを、アウトライアー検出のために別個に分析した。２５番目の百分位数より小さいかまたは７５番目の百分位数より大きい四分位数間領域を２回置く任意のデータ点を、極端なアウトライアーとみなした。
【００７０】
欠けているデータ：
欠けているデータ値を、「そのとおりに（ａｓ  ｉｓ）」処理し、帰属（ｉｍｐｕｔａｔｉｏｎ）は行わなかった。
【００７１】
欠けているデータの理由は、以下を含んでいた：
・アウトライアーを除去
・不十分なサンプル検査
・回収されなかったサンプル
・ピークのミスアラインメントもしくはスペクトルにおける化学ノイズ
・検出限界値未満
・アッセイの失敗もしくは技術的ＱＣをし損なったデータ
・上記いくつかの疾患×薬物群のうちの少なくとも１つにおいて５０％以上の欠けている値を有するピークが、上記分析から排除された。
【００７２】
生体マーカーフィルタリング基準：
数千もの統計学的試験を行ったので、複数の仮定試験（すなわち、偽陽性結果の機会の増大）は、重要な論点であった。例えば、伝統的な５％レベルで較正されない独立した仮定試験を行うことが単純であるとすると、１０，０００×０．０５＝５００の偽陽性は、１０，０００個の生体マーカーを試験し、いずれも真に差示的に発現されないか否かを予期する。従って、ＵＶＤＡおよびＭＶＤＡの完了の際に、種々の統計学的カットオフおよび生体マーカーフィルタリング基準を使用して、生体マーカーの数を減らし、偽陽性の数の制御を助けた。統計学的カットオフのタイプを以下に記載し、上記種々の分析において使用した特定のカットオフを、それらそれぞれの節において示す。
【００７３】
Ｐ値カットオフ：
すべての標準的な統計学的試験について、ｐ値を各生体マーカーおよび各処置比較について生成した。上記の実施例において記載されるように、数百もしくは数千もの統計学的試験を行う場合、複数比較についてのいかなる調節をもなしで、０．０５のαレベルは、多数の偽陽性をもたらし得る。しかし、上記の実施例の延長として、０．０５から０．００１へｐ値カットオフを減らすと、１０，０００個の生体マーカーを試験し、いずれも真に差示的に発現されなければ、５００から１０へ予期される偽陽性が減る。さらに、０．１のＦＤＲ値が見いだされたので、いくつかの場合において、０．０５のｐ値カットオフに類似であるために、低ｐ値カットオフを使用して、生物学的解釈のために生体マーカーリストをさらに減らした。すべての場合において、ｐ値カットオフを、ｐ値とＦＤＲ値との間の関係、および偽陽性についての制御において、よりよく理解しようとして、ＦＤＲ値と組み合わせて使用した。
【００７４】
偽の発見率：
ＦＤＲアプローチ（Ｂｅｎｊａｍｉｎｉ  ａｎｄ  Ｈｏｃｈｂｅｒｇ，Ｊ．Ｒ．Ｓｔａｔｉｓｔ  Ｓｏｃ．Ｂ．５７：２８９−３００（１９９５））を評価して、選択された生体マーカーのリストにおける偽陽性の平均数を制御した。推論ごとの過誤率の制御（すべての生体マーカーにおける偽陽性を制御することによって非常に保存的である）の代わりに、ＦＤＲは、選択された生体マーカーの数においてのみ擬陽性のパーセントを制御する。統合された生体マーカー分析のために、２５％のＦＤＲカットオフを適用した（ＦＤＲ≦０．２５）。
【００７５】
メジアン倍率変化：
上記ＭＦＣ（これは、他と比較して、１群における変化のメジアン量を表す）を使用して、生体マーカーリストおよび偽陽性の制御の減少を助けた。ＭＦＣカットオフは、ある種の生物学的フィルタリング基準を表し、生物学的関連性を示すために必要とされる最小の倍数変化を表す。大部分のプラットフォームリストについて、生物学的関連性のカットオフを、１．２倍変化（ＭＦＣ≧１．２）に設定した。
【００７６】
強度カットオフ：
強度カットオフを、上記トランスクリプトミクスデータのために利用した。なぜなら、ＭＡＳ  ５．０ソフトウェアを使用する強度レベルは、低い発現範囲において正確性が低いことが既知であるからである。この制限について調節し、偽陽性の数の制御を助けるために、強度基準を適用した。上記メジアンスケール係数値を、ＧｅｎｅＣｈｉｐ（登録商標）  ＭＯＥ  ４３０Ａから生成し、計算した。次いで、この数に調整されていない（ｕｎｓｃａｌｅｄ）ＭＯＥ  ４３０Ａ  ＧｅｎｅＣｈｉｐ（登録商標）もしくは３２の係数を乗算した。肝臓、腓腹筋および皮下脂肪についての上記強度カットオフを、独立して生成し、一変数生体マーカーリストを生成した後に適用した。強度フィルタリングを、両方の比較群のメジアンが各組織から得られた強度カットオフ値より低い群を排除することによって適用した。一方の群が検出限界より大きく、他方が低い場合において、上記生体マーカーを含めて、生成した。
【００７７】
一変数分析：
標準的なＵＶＤＡを、すべての最終的データセットに対して行った。上記ＵＶＤＡアプローチを、いくつかの主要な効果（例えば、薬物、疾患）および相互作用（例えば、薬物×疾患）を試験した。ＵＶＤＡについては、生体マーカーを、個々に試験した。
【００７８】
分散分析：
主要なＵＶＤＡは、ＡＮＯＶＡに基づいていた。上記ＡＮＯＶＡモデルは、主要な効果（薬物および疾患）、２つの因子の相互作用（薬物×疾患）、および他の実験的妨害因子（例えば、トランスクリプトミクスデータについてのハイブリダイゼーション日数）を含んだ。最後の時点のみで測定された生体マーカーについて：ＡＮＯＶＡを、１４日目データのみを使用して行った。
【００７９】
結果：
ＰＰＡＲ−γアゴニストもしくはＴＺＤで処置された糖尿病におけるマーカーとしてのＧａｌ−３およびＢＮＰの有用性を、評価した。Ｇａｌ−３発現レベルを、糖尿病モデル（ｄｂ／ｄｂおよびＨＦＤ）マウスおよび正常マウスにおいて測定した。脂肪組織におけるＧａｌ−３  ｍＲＮＡのレベルは、上記疾患モデル動物において、正常動物に由来する脂肪組織におけるＧａｌ−３  ｍＲＮＡのレベルの４倍より高いレベルへと上昇した（表１を参照のこと）。同様に、筋肉組織におけるＧａｌ−３  ｍＲＮＡのレベルはまた、上記疾患モデル動物において、正常動物に由来する筋肉組織におけるＧａｌ−３  ｍＲＮＡのレベルの２倍より高いレベルへと上昇した（表１を参照のこと）。上記疾患モデル動物に由来する肝臓組織におけるＧａｌ−３  ｍＲＮＡのレベルは、正常動物に由来する肝臓組織におけるＧａｌ−３のレベルから有意差がなかったか、または大きくない程度にのみ有意差があった（表１を参照のこと）。従って、全体的に、Ｇａｌ−３発現は、糖尿病動物において有意に増大したようである。
【００８０】
Ｇａｌ−３発現レベルはまた、ロシグリタゾン、グリブリド、もしくはメトホルミンで処理した罹患したマウスおよび健康なマウスにおいて評価した。ロシグリタゾンでのＴ２ＤＭ動物の処置は、脂肪組織および筋肉組織の両方においてＧａｌ−３  ｍＲＮＡレベルの有意な低下を引き起こす（表１を参照のこと）。さらに、ロシグリタゾンは、上記疾患モデル動物における肝臓組織のＧａｌ−３  ｍＲＮＡレベルを穏やかに上昇させた。従って、Ｇａｌ−３  ｍＲＮＡレベルが罹患した動物に由来する脂肪組織および筋肉組織において増大する一方で、ロシグリタゾンでの処置は、これら同じ組織においてＧａｌ−３  ｍＲＮＡレベルを低下させる。
【００８１】
Ｔ２ＤＭのマウスモデルのグリブリド処置もメトホルミン処置も、これら動物における脂肪組織、筋肉組織もしくは肝臓組織のＧａｌ−３  ｍＲＮＡレベルに対して何ら有意な影響を有しなかった（表１を参照のこと）。
【００８２】
さらに、ＢＮＰ発現レベルを、未処置動物およびＰＰＡＲ−γアゴニストもしくはＴＺＤで処置されている動物の両方において評価した。上記罹患した動物に由来する脂肪組織、肝臓組織および筋肉組織のＢＮＰ  ｍＲＮＡのレベルは、正常動物に由来する同じ組織のＧａｌ−３  ｍＲＮＡのレベルとは有意には異ならなかった（表２を参照のこと）、同様に、上記疾患モデル動物の、ロシグリタゾンでの処置は、１つの動物モデルにおける脂肪組織の中程度の上昇を除いて、それら動物における脂肪組織、肝臓組織もしくは筋肉組織のＢＮＰ  ｍＲＮＡレベルに対して有意な効果を有さない（表２を参照のこと）。ＢＮＰレベルは、罹患した動物において、またはＰＰＡＲ−γアゴニストもしくはＴＺＤでの処置に応じて影響を受けなかいので、糖尿病における心不全の存在もしくは進行を評価するためのＢＮＰレベルの比較は、非糖尿病におけるＢＮＰレベル、もしくは心不全を発症させることが既知の糖尿病におけるＢＮＰレベルに対して行われうる。
【００８３】
【表１−１】
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【００８４】
【表１−２】
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【００８５】
【表２−１】
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【００８６】
【表２−２】
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（実施例３：マーカーとしてＧａｌ−３を使用する欝血性心リスクの評価）
ロシグリタゾンでの処置を受けているヒト糖尿病患者は、血中Ｇａｌ−３タンパク質レベルを検出することにより欝血性心リスクについてモニターされる。Ｇａｌ−３の処置前レベルを、初期血液サンプル中のＧａｌ−３レベルを検出することによって、上記患者について確立する。さらなる血液サンプルを、処置の開始後に種々の時間で上記患者から得る。血液サンプル中のＧａｌ−３タンパク質レベルを、当該分野で周知の任意の方法（例えば、ＥＬＩＳＡ）を使用して、検出される。上記観察されたＧａｌ−３タンパク質レベル、もしくは処置の過程にわたって観察されたＧａｌ−３タンパク質レベルにおける傾向を、濃度もしくは過去にロシグリタゾンで処置した糖尿病患者で観察されたデータから得られる傾向と比較して、上記患者におけるＧａｌ−３レベルを、上記患者における特定の欝血性心リスクを示すか否かを決定する。例えば、Ｇａｌ−３レベルが、ロシグリタゾン処置の過程の間に贈出している場合、上記患者は、ロシグリタゾンで処置した他の患者と比較して上昇した欝血性心リスクを有するとして同定する。ロシグリタゾン処置を中断し、上記患者の糖尿病を処置もしくは管理するための代替の治療選択肢を、評価する。
【国際調査報告】
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