(57)【要約】本発明は、毒素部分（例えば、クロロトキシン部分）を、治療剤（例えば、それらの効果を発揮するために細胞内取込みを要する治療剤）のためのキャリアとして、使用することに関する。例えば、いくつかの実施形態において、本発明は、毒素（例えば、クロロトキシン）部分および抗癌部分を含む結合体、ならびに細胞取り込みを増大させる、および／もしくは上記抗癌薬物の癌細胞に対する特異性を増大させるために、このような結合体を使用するための方法を提供する。いくつかの実施形態において、本発明は、毒素部分（例えば、クロロトキシン部分）および核酸薬剤を含む結合体を提供する。このような結合体の投与を含む処置方法、ならびにこのような処置方法を行うために有用な薬学的組成物およびキットもまた、提供される。
2010535811.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも１つの治療部分と会合した少なくとも１つの毒素部分を含む結合体であって、ここで該毒素部分は、クロロトキシン、その生物学的に活性なフラグメントもしくはその誘導体を含む、結合体。
【請求項２】
前記結合体は、正常細胞よりも選択的にもしくは特異的に癌細胞を標的にする、請求項１に記載の結合体。
【請求項３】
前記結合体は、細胞のインターナリゼーションを受ける、請求項１に記載の結合体。
【請求項４】
前記毒素部分および治療部分は、共有結合的に会合されている、請求項１に記載の結合体。
【請求項５】
前記毒素部分および治療部分は、直接的に共有結合的に会合されている、請求項４に記載の結合体。
【請求項６】
前記毒素部分および治療部分は、リンカーを介して共有結合的に会合されている、請求項４に記載の結合体。
【請求項７】
前記治療部分は、抗癌剤を含む、請求項１に記載の結合体。
【請求項８】
前記抗癌剤は、癌細胞に対して不十分な選択性／特異性を示す抗癌剤；癌細胞による不十分な取り込みを示す抗癌剤；癌細胞において不十分な保持を示す抗癌剤；不十分な水溶解性を示す抗癌剤；癌細胞において早期不活性化を受ける抗癌剤；癌細胞において損なわれた活性化を受ける抗癌剤；徹底的な細胞による分解を受ける抗癌剤；および薬物耐性と関連する抗癌剤からなる群のメンバーである、請求項７に記載の結合体。
【請求項９】
前記治療部分は、放射性同位体、酵素、プロドラッグ活性化酵素、放射線増感剤、干渉ＲＮＡ、スーパー抗原、抗血管新生剤、アルキル化剤、プリンアンタゴニスト、ピリミジンアンタゴニスト、植物アルカロイド、インターカレート抗生物質、アロマターゼインヒビター、代謝拮抗物質、有糸分裂インヒビター、増殖因子インヒビター、細胞周期インヒビター、酵素、トポイソメラーゼインヒビター、生物学的応答改変因子、抗ホルモンおよび抗アンドロゲンからなる群のメンバーである、請求項１に記載の結合体。
【請求項１０】
前記毒素部分は、標識と会合されている、請求項１に記載の結合体。
【請求項１１】
前記標識は、放射性標識を含む、請求項１０に記載の結合体。
【請求項１２】
有効量の、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の少なくとも１つの結合体、またはその生理学的に許容可能な塩、および少なくとも１種の薬学的に受容可能なキャリアを含む、薬学的組成物。
【請求項１３】
化学療法剤をさらに含む、請求項１２に記載の薬学的組成物。
【請求項１４】
癌細胞に対する治療部分の特異性を増大させるための方法であって、該方法は、該治療部分を、毒素部分に会合させて、結合体を形成する工程を包含し、ここで該毒素部分は、クロロトキシン、その生物学的に活性なサブユニットもしくはその誘導体を含む、方法。
【請求項１５】
癌細胞による治療部分の細胞取り込みを増大させるための方法であって、該方法は、該治療部分を、毒素部分に会合させて、結合体を形成する工程を包含し、ここで該毒素部分は、クロロトキシン、その生物学的に活性なサブユニットもしくはその誘導体を含む、方法。
【請求項１６】
癌細胞による治療部分の細胞保持を増大させるための方法であって、該方法は、該治療部分を、毒素部分に会合させて、結合体を形成する工程を包含し、ここで該毒素部分は、クロロトキシン、その生物学的に活性なサブユニットもしくはその誘導体を含む、方法。
【請求項１７】
前記毒素部分および治療部分は、共有結合的に会合される、請求項１４、１５または１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記毒素部分および治療部分は、直接的に共有結合的に会合される、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記毒素部分および治療部分は、リンカーを介して共有結合的に会合される、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記癌細胞は、前記治療剤に対して耐性である、請求項１４、１５または１６に記載の方法。
【請求項２１】
癌患者を処置するための方法であって、該方法は、有効量の、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の結合体を該患者に投与する工程を包含する、方法。
【請求項２２】
前記結合体の投与は、実質的に同一の条件下での前記治療部分の投与より高い癌細胞の特異的標的化、実質的に同一の条件下での前記治療部分の投与より高い癌細胞による取り込み、実質的に同一の条件下での前記治療部分の投与より高い癌細胞による保持、実質的に同一の条件下での前記治療部分の投与より少ないもしくは重篤度が低い、望ましくない副作用；ならびに実質的に同一の条件下での前記治療部分の投与より弱い細胞分解、のうちの１つ以上を生じる、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記癌細胞は、前記治療部分に対して耐性の癌細胞を含む、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記結合体の投与は、経口投与、非経口投与、もしくは経腸投与によって行われる、請求項２１に記載の方法。
【請求項２５】
化学療法剤を前記患者に投与する工程をさらに包含する、請求項２１に記載の方法。
【請求項２６】
前記結合体は、前記化学療法剤の投与の前に投与される、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記結合体は、前記化学療法剤の投与の後に投与される、請求項２５に記載の方法。
【請求項２８】
前記結合体は、前記化学療法剤と同時に投与される、請求項２５に記載の方法。
【請求項２９】
前記化学療法剤は、ｉＲＮＡ、アルキル化剤、プリンアンタゴニスト、ピリミジンアンタゴニスト、植物アルカロイド、インターカレート抗生物質、アロマターゼインヒビター、代謝拮抗物質、有糸分裂インヒビター、増殖因子インヒビター、細胞周期インヒビター、酵素、トポイソメラーゼインヒビター、生物学的応答改変因子、抗ホルモンおよび抗アンドロゲンからなる群より選択される、請求項２５に記載の方法。
【請求項３０】
前記化学療法剤は、ＢＣＮＵ、シスプラチン、ゲムシタビン、ヒドロキシウレア、パクリタキセル、テモゾロミド、トポテカン、フルオロウラシル、ビンクリスチン、ビンブラスチン、プロカルバジン、ダカルバジン、アルトレタミン、メトトレキサート、メルカプトプリン、チオグアニン、リン酸フルダラビン、クラドリビン、ペントスタチン、シタラビン、アザシチジン（ａｚａｃｉｔｉｓｉｎｅ）、エトポシド、テニポシド、イリノテカン、ドセタキセル、ドキソルビシン、ダウノルビシン、ダクチノマイシン、イダルビシン、プリカマイシン、マイトマイシン、ブレオマイシン、タモキシフェン、フルタミド、ロイプロリド、ゴセレリン、アミノグルテチミド、アナストロゾール、アムサクリン、アスパラギナーゼ、ミトキサントロン、ミトタン、およびアミホスチンからなる群より選択される、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
前記患者は、肺癌、骨癌、肝臓癌、膵臓癌、皮膚癌、頭頸部癌、皮膚黒色腫もしくは眼球内黒色腫、子宮癌、卵巣癌、直腸癌、肛門領域の癌、胃癌、結腸癌、乳癌、子宮癌、性器または生殖器官の癌腫、ホジキン病、食道癌、小腸の癌、内分泌系の癌、甲状腺の癌、副甲状腺の癌、副腎の癌、軟組織の肉腫、尿道の癌、慢性白血病もしくは急性白血病、リンパ球性リンパ腫、膀胱の癌、腎臓の癌、腎細胞癌、中枢神経系（ＣＮＳ）の新生物、神経外胚葉癌、脊髄腫瘍、神経膠腫、髄膜腫、および下垂体腺腫からなる群のメンバーである癌である、請求項２１に記載の方法。
【請求項３２】
前記患者における癌の存在を検出する工程をさらに包含する、請求項２１に記載の方法。
【請求項３３】
約５〜２０００ヌクレオチド長の間の核酸薬剤に共有結合的に連結された毒素部分を含む、組成物。
【請求項３４】
前記毒素部分は、クロロトキシン部分である、請求項３３に記載の組成物。
【請求項３５】
前記毒素部分は、サソリクロロトキシンと少なくとも３５％アミノ酸同一性を共有する、請求項３４に記載の組成物。
【請求項３６】
前記クロロトキシン部分は、サソリクロロトキシンのフラグメントを含む、請求項３４に記載の組成物。
【請求項３７】
前記核酸薬剤は、アンチセンス薬剤を含む、請求項３３に記載の組成物。
【請求項３８】
前記核酸薬剤は、アンチセンス薬剤をコードする、請求項３３に記載の組成物。
【請求項３９】
前記核酸薬剤は、細胞に導入されたときに、アンチセンス薬剤を送達するベクターとして作用する、請求項３３に記載の組成物。
【請求項４０】
前記核酸薬剤は、阻害性ＲＮＡを含む、請求項３３に記載の組成物。
【請求項４１】
前記核酸薬剤は、阻害性ＲＮＡをコードする、請求項３３に記載の組成物。
【請求項４２】
前記核酸薬剤は、細胞に導入されたときに、阻害性ＲＮＡを送達するベクターを含む、請求項３３に記載の組成物。
【請求項４３】
前記少なくとも１つの治療部分は、コアおよび表面を有する粒子を含む、請求項１に記載の結合体。
【請求項４４】
前記少なくとも１つの毒素部分は、前記粒子の表面に結合体化される、請求項４３に記載の結合体。
【請求項４５】
前記粒子の最小寸法は、約１μｍ未満である、請求項４３に記載の結合体。
【請求項４６】
前記粒子の最小寸法は、約１００ｎｍ未満である、請求項４３に記載の結合体。
【請求項４７】
前記コアは、磁気共鳴活性を有する物質を含む、請求項４６に記載の結合体。
【請求項４８】
前記磁気共鳴活性を有する物質は、アルミニウム、コバルト、インジウム、鉄、銅、ゲルマニウム、マンガン、ニッケル、スズ、チタン、パラジウム、白金、セレン、ケイ素、銀、および亜鉛からなる群より選択される原子を含む、請求項４７に記載の結合体。
【請求項４９】
前記少なくとも１つの治療部分は、リポソームを含む、請求項１に記載の結合体。
【請求項５０】
以下：
請求項１−１２のいずれか１項に記載の結合体；および
被包剤、
を含む、薬学的組成物であって、ここで該結合体は、該被包剤内に閉じこめられている、薬学的組成物。
【請求項５１】
前記結合体は、前記被包剤内に少なくとも部分的に埋め込まれている、請求項５０に記載の薬学的組成物。
【請求項５２】
前記被包剤は、リポソームを含む、請求項５０に記載の薬学的組成物。
【請求項５３】
前記結合体は、前記リポソーム膜内に少なくとも部分的に埋め込まれている、請求項５２に記載の薬学的組成物。
【請求項５４】
前記治療部分は、５〜２０００ヌクレオチド長の間の核酸薬剤を含む、請求項５０に記載の薬学的組成物。
【請求項５５】
前記核酸薬剤は、阻害性ＲＮＡを含む、請求項５４に記載の薬学的組成物。
【請求項５６】
前記核酸薬剤は、阻害性ＲＮＡをコードする、請求項５５に記載の薬学的組成物。
【請求項５７】
前記核酸薬剤は、細胞に導入されるときに、阻害性ＲＮＡを送達するベクターを含む、請求項５６に記載の薬学的組成物。
【請求項５８】
前記核酸薬剤は、前記被包剤によって閉じこめられる、請求項５４に記載の薬学的組成物。
【請求項５９】
前記核酸薬剤は、前記被包剤内に少なくとも部分的に埋め込まれる、請求項５４に記載の薬学的組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連する出願）
本願は、２００７年８月７日に出願された米国仮特許出願第６０／９５４，４０９号に対する優先権および米国仮特許出願第６０／９５４，４０９号の利益を主張する。米国仮特許出願第６０／９５４，４０９号の全ての内容は、参考として本明細書中に援用される。
【背景技術】
【０００２】
（発明の背景）
悪性腫瘍に対する化学療法剤の臨床的使用は、多くの場合において成功しているが、いくつかの制限もまた存在する（非特許文献１）。特に、抗癌剤は、しばしば、健康な細胞と比較して、腫瘍細胞を選択的に作用せず、このことは、高い毒性および副作用をもたらす（非特許文献２）。高い細胞分裂速度を有する組織（例えば、骨髄、腸粘膜、および毛包細胞）は、特に影響を及ぼされる。選択性の欠如および得られる有害な全身毒性は、患者に投与され得る薬物の用量、従って、特定の抗癌剤の治療可能性を制限する。
【０００３】
選択性の欠如は、主要ではあるが、唯一の障害物であり、このことは、腫瘍薬物有効性の最適化を妨げる。化学療法剤の効力はまた、細胞の薬物耐性の存在もしくは発生によって被毒制限され得る（非特許文献３；非特許文献４；非特許文献５；非特許文献６）。細胞増殖抑制剤／細胞傷害剤に対する耐性は、種々の機構によって機能し得、これらの機構としては、特定の抗癌剤が細胞に入らないようになる原形質膜キャリアの減少もしくは喪失、および／またはエネルギー依存性ポンプのレベルにおける増加（例えば、上記腫瘍細胞からの上記薬物の排出において生じるｐ−糖タンパク質）に起因する低下した細胞内蓄積、標的部位において不十分な濃度をもたらす薬物の早期不活性化、特異的酵素活性の低下もしくは喪失に起因する上記薬物の損なわれた活性化、不活性化抗体の形成、ならびにＤＮＡ修復機構の出現が挙げられる。
【０００４】
特定の化学療法剤の別の制限は、それらの水中での溶解度が低いことである。このような薬物の膜透過性および抗力は、疎水性が増加するとともに増加する。さらに、これら疎水性薬剤の非経口投与は、いくつかの問題と関連する。従って、水性媒体中の溶解しなかった薬物によって形成される凝集物の静脈内投与は、上記薬物が腫瘍に浸透する前に血液の毛細管の塞栓を引き起こし得る。さらに、疎水性薬物の低い溶解度は、排出および代謝性分解と合わせて、治療上顕著な全身濃度の維持を妨げる。
【０００５】
化学療法剤が直面する難題はまた、他の治療剤についても当てはまり得る。特に、細胞への有効な送達は、多くの異なる治療実体についても未だに問題がある。
【０００６】
薬物送達系は、薬物効力を最適化するという目的とともに開発されてきたが、これら系の多く（例えば、ミセル、リポソーム、微粒子、抗体および薬物−ポリマー結合体）は、血漿中での不安定性、酸化もしくは他の分解機構に対する感受性、それらの生成に伴う技術的課題、細網内皮細胞による急速な排出（ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ）、癌細胞に対して選択性がないこともしくは低い選択性，および制限された細胞のインターナリゼーションを含む制限を欠点としてもつ。従って、上記の課題を克服しかつ薬物送達を実質的に増強するための改善された薬物送達アプローチが、当該分野で未だに必要である。上記薬物を細胞に選択的に送達し得る薬物キャリアもしくはビヒクルの開発が、特に望ましい。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Ｂ．Ａ．Ｃｈａｂｎｅｒ  ａｎｄ  Ｔ．Ｇ．Ｒｏｂｅｒｔｓ，Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖ．Ｃａｎｃｅｒ，２００５，５：６５−７２
【非特許文献２】Ｍ．Ｖ．Ｂｌａｇｏｓｋｌｏｎｎｙ，Ｔｒｅｎｄｓ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｓｃｉ．，２００５，２６：７７−８１
【非特許文献３】Ｍ．Ｐｏｍｅｒｏｙ  ａｎｄ  Ｍ．Ｍｏｒｉａｒｔｙ，Ｃｙｔｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，１９９３，１２：３８５−３９１
【非特許文献４】Ｇ．Ｇｉａｃｃｏｎｅ  ａｎｄ  Ｈ．Ｍ．Ｐｉｎｅｄｏ，Ｔｈｅ  Ｏｎｃｏｌｏｇｉｓｔ，１９９６，１：８２−８７
【非特許文献５】Ｍ．Ｍ．Ｇｏｔｔｅｓｍａｎ，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，２００２，５３：６１５−６２７
【非特許文献６】Ｇ．Ｄ．Ｋｒｕｔｈ，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ，２００３，２２：７２６２−７２６４
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
（発明の要旨）
本発明は、治療剤（例えば、抗癌剤）の改善された送達および投与のための新たなシステムおよびストラテジーに関する。特に、本発明は、毒素部分（例えば、クロロトキシン）が（１）癌細胞に対して高い特異性を示し、（２）効率的な細胞によるインターナリゼーションを受け、そして（３）一定期間にわたって細胞内で安定なままである、という認識を包含する。従って、本発明は、治療剤（例えば、化学療法剤、核酸薬剤など）のためのキャリアとしての、毒素部分の使用に関する。本発明は、薬物の作用部位（例えば、腫瘍部位）において薬物を投与および送達するための方法および組成物を提供する。本発明は、治療剤を細胞へ送達するためのシステムを提供する。特定の実施形態において、本発明は、治療剤（例えば、抗癌剤）と関連する毒素部分（例えば、クロロトキシンもしくは関連薬剤）を含む結合体を提供する。
【０００９】
患者への本発明の結合体の投与は、標的細胞に対する（特に、腫瘍細胞に対する）特異性を増大し得、細胞による細胞インターナリゼーションを増大し得、細胞による細胞分解を低下させ得、標的部位における蓄積を増大させ得、薬物耐性を克服し得、上記薬物の生物学的活性を増大させ得、そして／または上記治療剤単独（すなわち、本発明の結合体の一部としてではない）の投与と比較して、望ましくない副作用および毒性を予防、制限もしくは排除し得る。
【００１０】
本発明のこれらおよび他の目的、利点および特徴は、以下の好ましい実施形態の詳細な説明を読めば、当業者に明らかになる。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】図１は、腫瘍細胞内のＴＭ−６０１の迅速な取り込みおよび長期の細胞内局在を示す２つの蛍光顕微鏡画像のセットを示す。（Ａ）は、非固定生細胞中のＴＭ−６０１の核周囲の局在（緑）を示す。核は、青く見える。（Ｂ）は、培地からＴＭ−６０１を除去し、さらに６日間３７℃で培養した後の細胞を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
（定義）
本明細書全体を通して、いくつかの用語が使用され、これらは、以下の段落において定義される。
【００１３】
用語「個体」および「被験体」とは、本明細書において交換可能に使用される。それらは、疾患もしくは障害（例えば、癌）に罹患している可能性があるか、もしくは罹患しやすいか可能性があるが、上記疾患もしくは障害を有していてもよいし、有していなくてもよい、ヒトもしくは他の哺乳動物（例えば、マウス、ラット、ウサギ、イヌ、ネコ、ウシ、ブタ、ヒツジ、ウマもしくは霊長類）をいう。多くの実施形態において、上記被験体は、ヒトである。用語「個体」および「被験体」は、特定の年齢を表さず、よって、成人、小児および新生児を包含する。
【００１４】
本明細書において使用される場合、用語「癌患者」とは、癌に罹患しているかもしくは癌にかかりやすい個体をいい得る。癌患者は、癌と診断されていてもよいし、診断されていなくてもよい。上記用語はまた、癌治療を以前に受けたことがある個体を包含する。
【００１５】
用語「処置」は、（１）疾患もしくは状態の始まりを遅らせること；（２）上記疾患もしくは状態の進行、悪化、その症状の悪化を遅らせるもしくは停止させること；（３）上記疾患もしくは状態の１つ以上の症状の程度および／もしくは発生率の改善をもたらすこと；（４）上記疾患もしくは状態を治癒すること、を目的とした方法もしくはプロセスを特徴づけるために本明細書において使用される。処置は、上記疾患が始まる前に、予防行為として施されてもよい。代わりにもしくはさらに、処置は、上記疾患もしくは状態が始まった後に、治療行為として施されてもよい。
【００１６】
「薬学的組成物」とは、有効量の本発明の少なくとも１つの薬剤（すなわち、毒素結合体）、および少なくとも１種の薬学的に受容可能なキャリアを含むとして、本明細書において定義される。
【００１７】
本明細書において使用される場合、用語「有効量」とは、その意図された目的（例えば、組織、システムもしくは被験体における望ましい生物学的もしくは医学的応答）を満たすに十分な化合物、薬剤もしくは組成物の任意の量をいう。例えば、本発明の特定の実施形態において、上記目的は、以下のとおりであり得る：標的組織に薬物を特異的に送達すること、細胞（例えば、癌細胞）の内部に薬物を送達すること、疾患もしくは障害（例えば、癌）を処置すること、など。
【００１８】
本明細書において使用される場合、用語「生理学的に許容可能な塩」とは、任意の酸付加塩もしくは塩基付加塩であって、それぞれ、対応する遊離塩基もしくは遊離酸の生物学的活性もしくは特性を保持し、かつ生物学的に望ましくないものでも、別の方法で望ましくないものでもないものをいう。酸付加塩は、無機酸（例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸など）；および有機酸（例えば、酢酸、プロピオン酸、ピルビン酸、マレイン酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、サリチル酸など）と形成される。塩基付加塩は、無機塩基（例えば、ナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩、アンモニウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、亜鉛塩、アルミニウム塩など）および有機塩基（例えば、一級アミン、二級アミンおよび三級アミン、置換されたアミン（天然に存在する置換されたアミン、環式アミン、および塩基性イオン交換樹脂（例えば、イソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、エタノールアミン、２−ジメチル−アミノエタノール、２−ジエチルアミノエタノール、トリメチルアミン、ジシクロヘキシル−アミン、リジン、アルギニン、ヒスチジン、カフェイン、プロカイン、ヒドラバミン（ｈｙｄｒａｂａｎｉｎｅ）、塩素、ベタイン、エチレン−ジアミン、グリコサミン、メチルグルカミン、テオブロミン、プリン、ピペラジン、Ｎ−エチルピペリジン、ポリアミン樹脂など）の塩が挙げられる）と形成され得る。
【００１９】
本明細書において使用される場合、用語「薬学的に受容可能なキャリア」とは、上記活性成分の生物学的活性の有効性を妨害せずかつ投与される濃度で宿主に対して過度に毒性でないキャリア媒体をいう。上記用語は、溶媒、分散媒、コーティング、抗菌剤および抗真菌剤、等張剤、吸収遅延剤などを含む。薬学的に活性な物質のためのこのような媒体および薬剤の使用は、当該分野で周知である（例えば、「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ」，Ｅ．Ｗ．Ｍａｒｔｉｎ，１８ｔｈ  Ｅｄ．，１９９０，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．：Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ（これは、その全体が本明細書に参考として援用される）を参照のこと）。
【００２０】
本明細書において使用される場合、用語「癌細胞」とは、調節されない細胞増殖を受ける細胞をいう。いくつかの実施形態において、癌細胞は、望ましくないかつ調節されない細胞増殖もしくは組織の異常な侵襲の異常な持続性を受ける、インビボでの哺乳動物（例えば、ヒト）における細胞である。いくつかの実施形態において、癌細胞は、永久的に不死化されている（例えば、適切な新鮮な培地および空間を与えられれば、無限にかつ調節されない様式で増殖する細胞培養物を樹立した細胞株）インビトロでの細胞である。
【００２１】
本明細書において使用される場合、用語「癌」とは、調節されない細胞増殖によって代表的には特徴づけられる、哺乳動物における生理学的状態をいうかまたは記載する。癌の例としては、癌腫、リンパ腫、芽細胞腫、肉腫、および白血病が挙げられるが、これらに限定されない。より具体的には、このような癌の例としては、肺癌、骨癌、肝臓癌、膵臓癌、皮膚癌、頭頸部癌、皮膚黒色腫もしくは眼球内黒色腫、子宮癌、卵巣癌、直腸癌、肛門領域の癌、胃癌、結腸癌、乳癌、子宮癌、性器および生殖器官の癌腫、ホジキン病、食道癌、小腸の癌、内分泌系の癌、甲状腺の癌、副甲状腺の癌、副腎の癌、軟組織の肉腫、尿道の癌、膀胱の癌、腎臓の癌、腎細胞癌、腎盂の癌、中枢神経系（ＣＮＳ）の新生物、神経外胚葉癌、脊髄腫瘍、神経膠腫、髄膜腫、および下垂体腺腫が挙げられる。
【００２２】
用語「治療剤」および「薬物」とは、本明細書において交換可能に使用される。それらは、疾患もしくは臨床的状態の処置において有効な、物質、分子、化合物、薬剤、因子もしくは組成物をいう。
【００２３】
用語「化学療法剤」および「抗癌剤」もしくは「薬物」とは、本明細書において交換可能に使用される。それらは、癌もしくは癌のような状態を処置するために使用される薬物療法をいう。抗癌剤は、従来から、以下の群のうちの１つに分類されている：放射性同位体（例えば、ヨウ素−１３１、ルテチウム−１７７、レニウム−１８８、イットリウム−９０）、毒素（例えば、ジフテリア、シュードモナス、リシン、ゲロニン）、酵素、プロドラッグを活性化する酵素、放射線増感剤、干渉ＲＮＡ、スーパー抗原、抗血管新生剤、アルキル化剤、プリンアンタゴニスト、ピリミジンアンタゴニスト、植物アルカロイド、インターカレート抗生物質、アロマターゼインヒビター、代謝拮抗物質、有糸分裂インヒビター、増殖因子インヒビター、細胞周期インヒビター、酵素、トポイソメラーゼインヒビター、生物学的応答改変因子、抗ホルモンおよび抗アンドロゲン。このような抗癌剤の例としては、ＢＣＮＵ、シスプラチン、ゲムシタビン、ヒドロキシウレア、パクリタキセル、テモゾロミド、トポテカン、フルオロウラシル、ビンクリスチン、ビンブラスチン、プロカルバジン、ダカルバジン（ｄｅｃａｒｂａｚｉｎｅ）、アルトレタミン、メトトレキサート、メルカプトプリン、チオグアニン、リン酸フルダラビン、クラドリビン、ペントスタチン、シタラビン、アザシチジン、エトポシド、テニポシド、イリノテカン、ドセタキセル、ドキソルビシン、ダウノルビシン、ダクチノマイシン、イダルビシン、プリカマイシン、マイトマイシン、ブレオマイシン、タモキシフェン、フルタミド、ロイプロリド、ゴセレリン、アミノグルテチミド（ａｍｉｎｏｇｌｕｔｈｉｍｉｄｅ）、アナストロゾール、アムサクリン、アスパラギナーゼ、ミトキサントロン、ミトタンおよびアミホスチンが挙げられるが、これらに限定されない。
【００２４】
用語「プロドラッグ」とは、インビボで投与した後に、代謝されるか、または別の方法で上記化合物の生物学的に、薬学的に、もしくは治療的に活性な形態へと変換される化合物をいう。プロドラッグは、副作用もしくは毒性をマスクするため、化合物の風味を改善するため、および／または化合物の他の特徴もしくは特性を変えるために、代謝的安定性もしくは化合物の移動特性を変化させるように設計され得る。薬力学的プロセスおよびインビボでの薬物代謝の知識によって、一旦薬学的に活性な化合物が同定されると、薬学分野の当業者は、一般に、上記化合物のプロドラッグを設計し得る（Ｎｏｇｒａｄｙ，「Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ａ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ」，１９８５，Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ：Ｎ．Ｙ．，ｐａｇｅｓ  ３８８−３９２）。適切なプロドラッグの選択および調製のための手順はまた、当該分野で公知である。本発明の状況において、プロドラッグは、好ましくは、インビボ投与の後に、その活性形態への変換が、酵素触媒を要する化合物である。
【００２５】
用語「タンパク質」、「ポリペプチド」、および「ペプチド」とは、本明細書において交換可能に使用され、その中性（非荷電）形態においてもしくは塩としての、および改変されていないかまたはグリコシル化、側鎖酸化、もしくはリン酸化によって改変されているかのいずれかの、いずれかの種々の長さのアミノ酸配列をいう。特定の実施形態において、上記アミノ酸配列は、全長のネイティブタンパク質である。他の実施形態において、上記アミノ酸配列は、上記全長タンパク質のより小さなフラグメントである。さらに他の実施形態において、上記アミノ酸配列は、アミノ酸側鎖に結合されたさらなる置換基（例えば、グリコシル単位、脂質、もしくは無機イオン（例えば、ホスフェート））、および上記鎖の化学的変換に関する改変（例えば、スルフヒドリル基の酸化）によって改変される。従って、用語「タンパク質」（もしくはその等価な用語）は、その特異的な特性を変化させない改変を仮定して、上記全長ネイティブタンパク質のアミノ酸配列を含むことが意図される。特に、上記用語「タンパク質」は、タンパク質アイソフォーム（すなわち、同じ遺伝子によってコードされるが、それらのｐＩもしくはＭＷ、または両方において異なる改変体）を包含する。このようなアイソフォームは、ｃａｎ  ｄｉｆｆｅｒ  ｉｎ  それらのアミノ酸配列（例えば、代わりのスプライシングもしくは制限されたタンパク質分解の結果として）、または選択肢において、他と異なる翻訳後修飾（例えば、グリコシル化、アシル化もしくはリン酸化）から生じ得る。
【００２６】
用語「タンパク質アナログ」とは、本明細書において使用される場合、親ポリペプチドと類似もしくは同一の機能を保持するが、上記親のものとは少なくともいくつかの点において異なるアミノ酸配列を有するポリペプチドをいう。本発明の特定の実施形態において、タンパク質アナログは、上記親ポリペプチドと少なくとも特定の特徴的配列を共有する。いくつかの実施形態において、このような特徴的配列は、少なくとも３アミノ酸長、４アミノ酸長、５アミノ酸長、６アミノ酸長、７アミノ酸長、８アミノ酸長、９アミノ酸長、１０アミノ酸長、１１アミノ酸長、１２アミノ酸長、１３アミノ酸長、１４アミノ酸長、１５アミノ酸長、１６アミノ酸長、１７アミノ酸長、１８アミノ酸長、１９アミノ酸長、２０アミノ酸長、２１アミノ酸長、２２アミノ酸長、２３アミノ酸長、２４アミノ酸長、２５アミノ酸長、もしくはそれ以上のアミノ酸長である。いくつかの実施形態において、特徴的配列は、必要とされる配列要素を含み、変動する領域によって分離される１個以上のアミノ酸長であり得る。いくつかの実施形態において、特徴的配列は、特定のアミノ酸残基が必要とされる位置を含む；いくつかの実施形態において、特徴的配列は、１個より多くの種々のアミノ酸が許容されるが、任意のアミノ酸が許容されるわけではない位置を含む。いくつかの実施形態において、タンパク質アナログは、上記親ポリペプチドと、少なくとも３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくはそれ以上の配列全体の同一性を共有する。従って、活性を保持しかつ少なくとも約３０〜４０％、しばしば、約５０％、６０％、７０％、もしくは８０％より大きい、そしてさらに通常には、遙かに高い同一性の少なくとも１個の領域を含み、そして少なくとも３〜４個のアミノ酸およびしばしば最大２０個もしくはそれ以上のアミノ酸を通常含む１個以上の高度に保存された領域において、上記親ポリペプチドと遙かに高い同一性の、しばしば、９０％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％より高い同一性の１つの領域を含む配列全体の同一性を共有する任意のポリペプチドは、用語「タンパク質アナログ」に包含される。
【００２７】
用語「タンパク質フラグメント」とは、本明細書において使用される場合、アミノ酸配列が親ポリペプチドのものの一部分に同一であるポリペプチドをいう。代表的には、タンパク質フラグメントは、上記親ポリペプチドにおいて見いだされた少なくとも５アミノ酸残基の範囲を含むアミノ酸配列を有する。タンパク質フラグメントは、全長親ポリペプチドの機能的活性を有してもよいし、有さなくてもよい。
【００２８】
用語「生物学的に活性な」とは、指定された生物学的活性を有する薬剤に言及する。いくつかの実施形態において、上記用語は、上記親ポリペプチドの生物学的活性（例えば、癌細胞に特異的に結合する、そして／または癌細胞へとインターナライズされる能力）を共有するものを示すために、タンパク質改変体、アナログ、もしくはフラグメントに適用される。
【００２９】
用語「相同な」（もしくは「相同性」）とは、本明細書において使用される場合、２つのポリペプチドの間、または２つの核酸分子の間の同一性の程度をいう。当該分野で公知であるように、両方の比較される配列における位置が同じ塩基もしくはアミノ酸モノマーサブユニットによって占有される場合、それぞれの分子は、その位置において相同であるといわれる。２つの配列間の相同性のパーセンテージは、２つの配列によって共有されるマッチングもしくは相同な位置の数を、比較した位置の数で除算し、そして１００を乗算したものに対応する。一般に、比較は、２つの配列を整列させて、最大相同性を与える場合に、行われる。相同なアミノ酸配列は、同一もしくは類似のアミノ酸残基を共有する。類似の残基は、参照配列中の対応するアミノ酸残基の保存的置換であるか、または参照配列中の対応するアミノ酸残基の「供された点変異」である。参照配列中の残基の「保存的置換」とは、その対応する参照残基に物理的にもしくは機能的に類似する（例えば、類似のサイズ、形状、電荷、化学的特性（共有結合もしくは水素結合などを形成する能力を含む）を有する）置換である。特に好ましい保存的置換は、Ｄａｙｈｏｆｆら（「Ａｔｌａｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ」，１９７８，Ｎａｔ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｒｅｓ．Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，ＤＣ，Ｓｕｐｐｌ．３，２２：３５４−３５２）によって「許容された点変異」について定義される基準を満たすものである。
【００３０】
用語「融合タンパク質」とは、２つ以上のタンパク質もしくはそのフラグメントの個々のペプチド骨格を介して共有結合によって連結されたこれらタンパク質もしくはそのフラグメントを含むポリペプチドをいう。いくつかの実施形態において、融合タンパク質は、それらタンパク質をコードするポリヌクレオチド分枝の遺伝的発現を介して生成される。
【００３１】
用語「低分子」とは、代表的には、約５，０００ダルトン（Ｄａ）未満の分子量を有する化合物（例えば、有機化合物）をいう。多くの実施形態において、低分子は、約２，５００Ｄａ未満、約１，０００Ｄａ未満、もしくは約５００Ｄａ未満の分子量を有する。いくつかの実施形態において、低分子は、ポリマーではない。いくつかの特定の実施形態において、低分子は、ペプチドではない。いくつかの実施形態において、低分子は、生物学的に活性である。低分子は、生物学的系（例えば、細胞もしくは生物）によって生成されるか、または実験室において化学的に合成され得る。
【００３２】
（特定の好ましい実施形態の詳細な説明）
上記のように、本発明は、薬物の送達および／もしくは投与を改善するための組成物および方法を提供する。特に、本発明は、治療剤と会合された毒素部分（例えば、クロロトキシン）を含む結合体；および患者の処置においてこれら結合体を使用するための方法を提供する。本発明の結合体の投与の利点としては、とりわけ、標的細胞に対する選択性（特に、癌細胞に対するものを含む）、細胞インターナリゼーションおよび保持が挙げられる。
【００３３】
（結合体）
結合体は、一般に、少なくとも２つの分子の会合（例えば、結合、相互作用、もしくはカップリング）から生じる化合物である。既に上記で言及したように、本発明の結合体は、一般に、治療剤と会合された少なくとも１つの毒素部分（例えば、クロロトキシン部分）を含む。
【００３４】
結合体内の毒素部分と治療剤との間の会合は、共有結合的であってもよいし、非共有結合的であってもよい。上記毒素部分と治療剤との間の会合の性質に拘わらず、上記会合は、好ましくは、上記結合体が、細胞へのおよび細胞内への輸送の前もしくはその間に解離しないように、十分に選択的で、特異的でかつ強い。毒素部分と治療部分との間の会合は、当業者に公知の任意の化学的、生化学的、酵素的、もしくは遺伝的カップリングを使用して達成され得る。
【００３５】
特定の実施形態において、上記毒素部分と治療剤との間の会合は、非共有結合的である。非共有結合的会合の例としては、疎水性相互作用、静電的相互作用、双極子相互作用、ファンデルワールス相互作用、および水素結合が挙げられるが、これらに限定されない。
【００３６】
特定の実施形態において、上記毒素部分と治療剤との間の会合は、共有結合的である。当業者によって認識されるように、治療剤および毒素部分は、直接的もしくは間接的のいずれかで（例えば、以下に議論されるように、リンカーを介して）互いに結合され得る。
【００３７】
特定の実施形態において、治療剤および毒素部分は、直接的に、共有結合的に、互いに連結される。このような直接的共有結合は、アミド、エステル、炭素−炭素、ジスルフィド、カルバメート、エーテル、チオエーテル、尿素、アミン、もしくはカーボネート結合を介して達成される。このような共有結合は、例えば、上記治療剤および／もしくは上記毒素部分上に存在する官能基を利用することによって、達成され得る。２つの部分を一緒に結合するために使用され得る適切な官能基としては、アミン、無水物、ヒドロキシル基、カルボキシル基、チオールなどが挙げられるが、これらに限定されない。特定の実施形態において、一方の部分の官能基は、他方の部分にカップリングするために活性化される。例えば、活性化薬剤（例えば、カルボジイミド）は、このようなカップリングをもたらすために使用され得る。広範に種々の活性化薬剤が当該分野で公知であり、提供される結合体を形成するために適している。
【００３８】
他の実施形態において、治療剤および毒素部分は、リンカー基を介して互いに間接的に共有結合的に連結される。これは、当該分野で周知の安定な二官能性薬剤（ホモ官能性薬剤およびヘテロ官能性薬剤（このような薬剤の例については、例えば、Ｐｉｅｒｃｅ  Ｃａｔａｌｏｇ  ａｎｄ  Ｈａｎｄｂｏｏｋを参照のこと）を含む）の任意の数を使用して達成され得る。二官能性薬剤の使用は、前者が、上記得られる結合体に存在する連結部分を生じるという点で活性化剤の使用とは異なるのに対して、後者は、この反応に関与する２つの部分の間の直接的なカップリングを生じる。上記二官能性薬剤の役割は、２つの他の不活性部分の間の反応を可能にし得る。代わりにもしくはさらに、上記二官能性薬剤は、反応生成物の一部になり、上記結合体に対してある程度の配座的可撓性を付与するように選択され得る（例えば、上記二官能性薬剤は、いくつかの原子を含む直線的なアルキル鎖を含む（例えば、上記直線的なアルキル鎖は、２〜１０個の間の炭素原子を含む））。代わりにもしくはさらに、上記二官能性薬剤は、上記治療剤と毒素部分との間で形成される連結が切断可能である（例えば、加水分解可能である（このようなリンカーの例については、例えば、米国特許第５，７７３，００１号；同第５，７３９，１１６号および同第５，８７７，２９６号（これらの各々は、その全体が本明細書に参考として援用される）を参照のこと））ように、選択され得る。このようなリンカーは、例えば、上記薬物のより高い活性が、上記毒素部分の加水分解後に認められる場合に、好ましくは使用される。薬物が上記毒素部分から切断される例示的機構としては、ライソゾームの酸性ｐＨにおける加水分解（ヒドラゾン、アセタール、およびｃｉｓ−アコニテート様アミド）、ライソゾーム酵素（カテプシンおよび他のライソゾーム酵素）によるペプチド切断、およびジスルフィドの還元が挙げられる。薬物が上記毒素生体結合体から切断される別の機構としては、細胞外もしくは細胞内での生理学的ｐＨにおいて加水分解が挙げられる。この機構は、上記治療剤を上記毒素部分にカップリングするために使用される架橋剤が、生分解性／生体腐蝕性実体（例えば、ポリデキストランなど）である場合に適用される。
【００３９】
例えば、ヒドラゾン含有結合体は、望ましい薬物放出特性を提供する導入されたカルボニル基と作製され得る。結合体はまた、一方の末端にジスルフィド基および他方の末端にヒドラジン誘導体を有するアルキル鎖を含むリンカーと作製され得る。
【００４０】
ヒドラゾン以外の官能基を含むリンカーはまた、ライソゾームの酸性環境において切断される可能性を有する。例えば、結合体は、細胞内で切断可能なヒドラゾン以外の基（例えば、エステル、アミド、およびアセタール／ケタール）を含むチオール反応性リンカーから作製され得る。上記抗癌剤に対して結合される酸素原子のうちの一方および毒素結合のためにリンカーに対する他方の酸素原子を有する５〜７員環のケトンから作製されるケタールがまた、使用され得る。
【００４１】
ｐＨ感受性リンカーのクラスの別の例は、ｃｉｓ−アコニテートであり、これは、アミド基に併置されたカルボン酸基を有する。上記カルボン酸は、酸性のライソゾームにおけるアミド加水分解を促進する。構造のいくつかの他のタイプを有する、加水分解速度加速の類似のタイプを達成するリンカーがまた、使用され得る。
【００４２】
薬物−毒素結合体についての別の潜在的な放出方法は、上記ライソゾーム酵素によるペプチドの酵素的加水分解である。一例において、ペプチド毒素は、アミド結合を介してパラ−アミノベンジルアルコールに結合され、次いで、カルバメートもしくはカーボネートが、上記ベンジルアルコールと上記治療剤との間に作製される。上記ペプチドの切断は、上記アミノベンジルカルバメートもしくはアミノベンジルカーボネートの崩壊、および上記治療剤の放出をもたらす。別の例において、フェノールは、上記カルバメートの代わりに上記リンカーの崩壊によって切断され得る。別のバリエーションにおいて、ジスルフィド還元は、パラ−メルカプトベンジルカルバメートもしくはパラ−メルカプトベンジルカーボネートの崩壊を開始するために使用される。
【００４３】
多くの治療剤（特に、抗癌剤）は、あるとしても、水中での溶解度がほとんどなく、このことは、上記治療剤の凝集に起因して、上記結合体上に添加する（ｌｏａｄ）薬物を制限し得る。このことを克服するための１つのアプローチは、上記リンカーに可溶化基を付加することである。ＰＥＧ（ポリエチレングリコール）およびジペプチドからなるリンカーで作製された結合体が使用され得、これらとしては、例えば、上記毒素部分に結合されたＰＥＧ  二酸  チオール−酸、もしくはマレイミド−酸、ジペプチドスペーサー、および治療剤に結合されたアミドを有するものが挙げられる。別の例は、治療剤にジスルフィド結合し、上記毒素部分にアミド結合したＰＥＧ含有リンカーで作製された結合体である。ＰＥＧ基を組み込んだアプローチは、凝集および薬物添加（ｌｏａｄｉｎｇ）における制限を克服するにあたって有益であり得る。
【００４４】
クロロトキシン結合体内の治療部分がタンパク質、ポリペプチドもしくはペプチドである実施形態において、上記クロロトキシン結合体は、融合タンパク質であり得る。既に上記で定義されるように、融合タンパク質は、２つ以上のタンパク質もしくはペプチドの個々のペプチド骨格を介して共有結合によって連結されたこれらタンパク質もしくはペプチドを含む分子である。本発明の方法において使用される融合タンパク質は、当該分野で公知の任意の適切な方法によって生成され得る。例えば、それらは、ポリペプチド合成器を使用して直接タンパク質合成方法によって生成され得る。あるいは、遺伝子配列のＰＣＲ増幅は、アンカープライマーを使用して行われ得、このアンカープライマーは、後にアニールされかつ再増幅されて、キメラ遺伝子配列を生成し得る２つの連続する遺伝子フラグメント間に相補的突出部を生じる。融合タンパク質は、標準的な組換え方法によって得られ得る（例えば、Ｍａｎｉａｔｉｓら「Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：  Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ」，第２版，１９８９，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ，Ｎ．Ｙ．を参照のこと）。これらの方法は、一般に、（１）所望の融合タンパク質をコードする核酸分子の構築；（２）上記核酸分子の組換え発現ベクターへの挿入；（３）発現ベクターでの適切な宿主細胞の形質転換；および（４）上記宿主細胞における上記融合タンパク質の発現を含む。このような方法によって生成される融合タンパク質は、当該分野で公知のように、培養培地から直接的に、もしくは上記細胞の溶解によるかのいずれかで、回収および単離され得る。形質転換された宿主細胞によって生成されるタンパク質を精製するための多くの方法は、当該分野で周知である。これらとしては、沈降、遠心分離、ゲル濾過、および（イオン交換、逆相、およびアフィニティー）カラムクロマトグラフィーが挙げられるが、これらに限定されない。他の精製方法が記載されている（例えば、Ｄｅｕｔｓｃｈｅｒら「Ｇｕｉｄｅ  ｔｏ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ」  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，１９９０，Ｖｏｌ．１８２，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓを参照のこと）。
【００４５】
当業者によって容易に認識され得るように、本発明の結合体は、任意の数の異なる方法によって互いに会合される任意の数の毒素部分および任意の数の治療剤分子を含み得る。結合体の設計は、その意図された目的およびその使用の特定の状況において望ましいその特性によって影響される。毒素部分を治療剤に会合もしくは結合して、結合体を形成するための方法の選択は、当業者の知識の範囲内であり、一般に、上記部分の間で望ましい会合の性質（すなわち、共有結合  対  非共有結合および／もしくは切断可能  対  切断可能でない）、上記毒素部分および治療剤の性質、関与する部分の上の官能化学基の存在と性質などに依存する。
【００４６】
（毒素）
本発明の結合体は、少なくとも１つの毒素部分を含む。本明細書において使用される場合、用語「毒素部分」とは、細胞（特に、腫瘍／癌細胞）に特異的に結合し、これら細胞へインターナライズされる毒素をいう。毒素部分はしばしば、特定の細胞に対して高い親和性、選択性および／もしくは特異性を示し、すなわち、毒素部分は、上記細胞へのその曝露の条件もしくは環境下で、特異的にそして／もしくは効率的に、上記細胞を認識し、上記細胞と相互作用し、上記細胞に結合し、上記細胞を標識する。結合体の一部の場合、上記毒素部分は、上記結合体にその特性のうちの少なくともいくらかを付与し、そして上記結合体は、細胞（例えば、腫瘍／癌細胞）を標的とし、上記細胞へ浸透する。好ましくは、毒素部分は、インビボ条件下でそれらの選択性／特異性およびインターナリゼーション特性を保持する安定な実体である。
【００４７】
本発明の多くの実施形態において、毒素部分は、クロロトキシン、生物学的に活性なクロロトキシンサブユニット、もしくはクロロトキシン誘導体からなる群より選択される。
【００４８】
特定の実施形態において、用語「クロロトキシン部分」とは、Ｌｅｉｕｒｕｓ  ｑｕｉｎｑｕｅｓｔｒｉｔｕｓ  サソリ毒液（ＤｅＢｉｎら，Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．，１９９３，２６４：Ｃ３６１−３６９）に天然に由来する全長の３６アミノ酸ポリペプチドであって、国際出願番号ＷＯ  ２００３／１０１４７４（その内容は、本明細書に参考として援用される）の配列番号１に示されるネイティブクロロトキシンのアミノ酸配列を含むものをいう。用語「クロロトキシン」とは、合成されるかもしくは組換え生成される配列番号１を含むポリペプチド（例えば、米国特許第６，３１９，８９１号（これは、その全体が本明細書に参考として援用される）に開示されるもの）を含む。
【００４９】
「生物学的に活性なクロロトキシンサブユニット」は、クロロトキシンの３６アミノ酸未満を含み、正常細胞と比較して、クロロトキシンが腫瘍／癌細胞に特異的に結合し、これら腫瘍／癌細胞にインターナライズされる能力を保持するペプチドである。
【００５０】
本明細書において使用される場合、用語「クロロトキシン誘導体」とは、正常細胞と比較して、クロロトキシンが腫瘍／癌細胞に特異的に結合し、これら腫瘍／癌細胞の中にインターナライズされる能力を保持する、広範に種々のクロロトキシンの誘導体、アナログ、改変体ポリペプチドフラグメントおよび模倣物、ならびに関連ペプチドのうちのいずれかをいう。クロロトキシン誘導体の例としては、クロロトキシンのペプチド改変体、クロロトキシンのペプチドフラグメント（例えば、国際出願番号ＷＯ２００３／１０１４７４に記載される配列番号１、２、３、４、５、６、もしくは７の連続１０マーペプチドを含むかもしくはこれらからなるか、または国際出願番号ＷＯ２００３／１０１４７４に記載される配列番号１の残基１０〜１８もしくは２１〜３０を含むフラグメント）、コア結合配列、およびペプチド模倣物が挙げられるが、これらに限定されない。
【００５１】
クロロトキシン誘導体の例としては、国際出願番号ＷＯ２００３／１０１４７４の配列番号１に示されるアミノ酸配列のフラグメントを有し、少なくとも約７個、８個、９個、１０個、１５個、２０個、２５個、３０個もしくは３５個連続するアミノ酸残基を有し、クロロトキシンの活性と関連するペプチドを含む。このようなフラグメントは、公知のペプチドドメイン、および述べられた親水性の領域に対応する上記アミノ酸配列の領域と同定された、上記クロロトキシンペプチドの機能的領域を含み得る。このようなフラグメントはまた、リンカーによって除去もしくは置換される、互いに任意の順番で間に挟まるアミノ酸で連結された２つのコア配列を含み得る。
【００５２】
クロロトキシン誘導体は、上記誘導体配列および上記クロロトキシン配列が最大に整列される場合、少なくとも１個のアミノ酸残基の保存的もしくは非保存的置換を含むポリペプチドを含む。上記置換は、クロロトキシンの少なくとも１つの特性もしくは機能を増強するか、クロロトキシンの少なくとも１つの特性もしくは機能を阻害するか、またはクロロトキシンの少なくとも１つの特性もしくは機能に対して中立であるものであり得る。本明細書において使用される場合、クロロトキシンの「特性もしくは機能」としては、異常な細胞増殖を停止させる能力、被験体における麻痺を引き起こす能力、正常細胞と比較した場合に腫瘍／癌細胞に特異的に結合する能力、腫瘍／癌細胞へインターナライズされる能力、および腫瘍／癌細胞を死滅させる能力が挙げられるが、これらに限定されない。上記腫瘍／癌細胞は、インビトロ、エキソビボ、インビトロで存在し得、被験体に由来する初代単離物、培養細胞、もしくは細胞株であり得る。
【００５３】
本発明の実施における使用に適したクロロトキシン誘導体の例としては、国際出願番号ＷＯ２００３／１０１４７４に記載されている。特定の例としては、この国際出願に示される配列番号８もしくは配列番号１３を含むかもしくはこれらからなるポリペプチド、ならびにその改変体、アナログ、および誘導体を含む。
【００５４】
クロロトキシンの他の例としては、例えば、相同組換え、部位指向性変異誘発もしくはＰＣＲ変異誘発によって予め決定された変異を含むポリペプチド、および上記ペプチドのファミリーの対立遺伝子もしくは他の天然に存在する改変体；ならびに誘導体であって、上記ペプチドが、置換、化学的な、酵素的なもしくは他の適切な手段によって、天然に存在するアミノ酸（例えば、酵素もしくは放射性同位体のような検出可能な部分）以外の部分で共有結合的に改変されたものが挙げられる。
【００５５】
クロロトキシンおよびそのペプチド誘導体は、当該分野で公知のように、広範な種々の方法のうちのいずれか（標準的な固相（もしくは液相）ペプチド合成法が挙げられる）を使用して、調製され得る。さらに、これらペプチドをコードする核酸は、市販のオリゴヌクレオチド合成機器を使用して合成され得、上記タンパク質は、標準的な組換え生成システムを使用して組換え生成され得る。
【００５６】
他の適切なクロロトキシン誘導体としては、クロロトキシンの三次元構造を模倣するペプチド模倣物が挙げられる。このようなペプチド模倣物は、天然に存在するペプチドを超える顕著な利点（例えば、より経済的な生成、より高い化学的安定性、増強された薬理学的特性（半減期、吸収、強度、抗力など）、変化した特異性（例えば、広いスペクトルの生物学的活性、低下した抗原性など）が挙げられる）を有し得る。
【００５７】
特定の実施形態において、模倣物は、クロロトキシンペプチド二次構造の要素を模倣する分子である。タンパク質のペプチド骨格は、分子相互作用を容易にするような方法でアミノ酸側鎖（例えば、抗体および抗原のもの）を配向するために、主に存在する。ペプチド模倣物は、天然分子に類似の分子相互作用を可能にすると予期される。ペプチドアナログは、上記テンプレートペプチドのものに類似の特性を有する非ペプチド薬物として製薬産業で一般に使用される。化合物のこれらタイプはまた、ペプチド模倣物（ｐｅｐｔｉｄｅ  ｍｉｍｅｔｉｃｓ）もしくはペプチド模倣物（ｐｅｐｔｉｄｏｍｉｍｅｔｉｃｓ）といわれ（例えば、Ｆａｕｃｈｅｒｅ，Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｒｅｓ．，１９８６，１５：２９−６９；Ｖｅｂｅｒ  ＆  Ｆｒｅｉｄｉｎｇｅｒ，Ｔｒｅｎｄｓ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，１９８５，８：３９２−３９６；Ｅｖａｎｓら，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，１９８７，３０：１２２９−１２３９を参照のこと）、そして通常、コンピューター化された分子モデリングの助けを借りて開発されている。
【００５８】
一般に、ペプチド模倣物は、模範ポリペプチド（すなわち、生化学的特性もしくは薬理学的活性を有するポリペプチド）に構造的に類似であるが、非ポリペプチド連結によって必要に応じて置換された１つ以上のペプチド結合を有する。ペプチド模倣物の使用は、薬物ライブラリーを作り出すために、コンビナトリアル化学の使用を介して高められ得る。ペプチド模倣物の設計は、例えば、腫瘍細胞へのペプチドの結合を増大もしくは減少させるアミノ酸変異を同定することによって補助され得る。使用され得るアプローチとしては、酵母ツーハイブリッド法（ｓｅｅ，  例えば、Ｃｈｉｅｎら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１９９１，８８：９５７８−９５８２）およびファージディスプレイ法の使用が挙げられる。上記ツーハイブリッド法は、酵母におけるタンパク質−タンパク質相互作用を検出する（Ｆｉｅｌｄら，Ｎａｔｕｒｅ，１９８９，３４０：２４５−２４６）。上記ファージディスプレイ法は、固定化タンパク質と、ファージ（例えば、λおよびＭ１３（Ａｍｂｅｒｇら，Ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ，１９９３，６：２−４；Ｈｏｇｒｅｆｅら，Ｇｅｎｅ，１９９３，１２８：１１９−１２６））の表面で発現されるタンパク質との間の相互作用を検出する。これら方法は、ペプチド−タンパク質相互作用のポジティブ選択およびネガティブ選択、ならびにこれら相互作用を決定する配列の同定を可能にする。
【００５９】
特定の実施形態において、用語「毒素部分」とは、上記のクロロトキシンに類似もしくは関連した活性を示す他のサソリ種のポリペプチド毒素をいう。本明細書において使用される場合、用語「クロロトキシンに類似もしくは関連した活性」とは、特に、腫瘍／癌細胞に対する選択性／特異性、ならびに腫瘍／癌細胞へインターナライズされる能力をいう。適切な関連サソリ毒素の例としては、クロロトキシンに対してアミノ酸および／もしくはヌクレオチド配列同一性を示すサソリ起源の毒素もしくは関連ペプチドが挙げられるが、これらに限定されない。関連サソリ毒素の例としては、Ｍｅｓｏｂｕｔｈｕｓ  ｍａｒｔｅｎｓｓｉ由来のＣＴ神経毒（ＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＡＡＤ４７３７３０）、Ｂｕｔｈｕｓ  ｍａｒｔｅｎｓｉｉ  ｋａｒｓｃｈ由来の神経毒ＢｍＫ  ４１−２（ＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号Ａ５９３５６）、Ｂｕｔｈｕｓ  ｍａｒｔｅｎｓｉｉ由来の神経毒Ｂｍ１２−ｂ（ＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＡＡＫ１６４４４）、Ｌｅｉｕｒｕｓ  ｑｕｉｎｑｕｅｓｔｒｉａｔｕｓ  ｈｅｂｒａｅｕ由来の推定毒素ＬＧＨ  ８／６（Ｐｒｏｂａｂｌｅ  Ｔｏｘｉｎ  ＬＧＨ  ８／６）（ＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号Ｐ５５９６６）、Ｍｅｓｕｂｕｔｕｓ  ｔａｍｕｌｕｓ  ｓｉｎｄｉｃｕｓ由来の低分子毒素（ＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号Ｐ１５２２９）が挙げられるが、これらに限定されない。
【００６０】
本発明における使用に適した関連サソリ毒素は、国際出願番号ＷＯ２００３／１０１４７４の配列番号１に示されるクロロトキシン全体の配列と少なくとも６５％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上の配列同一性のアミノ酸配列を有するポリペプチドを含む。特定の実施形態において、関連サソリ毒素は、国際出願番号ＷＯ２００３／１０１４７４に示されるクロロトキシンの配列番号８もしくは配列番号１３に相同な配列を有するこれらサソリ毒素を含む。
【００６１】
特定の実施形態において、本発明の結合体内の毒素部分は、標識される。標識は、通常、好ましくは、上記ペプチド配列上の妨げない位置への１個以上の標識の非共有結合的結合もしくは共有結合的結合（直接的もしくは間接的に、スペーサー（例えば、アミド基）を介して）を含む。このような妨げない位置は、腫瘍細胞への上記毒素部分の特異的結合および／もしくは腫瘍細胞への上記毒素部分のインターナリゼーションに関与しない位置である。好ましい実施形態において、標識は、上記毒素部分の望ましい生物学的活性もしくは薬理学的活性を実質的に妨げない。
【００６２】
標識もしくは検出可能な薬剤の役割は、上記毒素部分を含む結合体の検出を容易にすることである。好ましくは、上記検出可能な薬剤は、これが、測定され得かつその強度が毒素部分の量に関連するシグナルを生じるように、選択される。
【００６３】
広範に種々の検出可能な薬剤のうちのいずれかが、本発明の実施において使用され得る。適切な検出可能な薬剤としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：種々のリガンド、放射性核種；蛍光色素；化学発光薬剤；微粒子；酵素；比色標識など。特定の実施形態において、毒素部分は、放射性同位体で標識される。例えば、毒素部分は、放射性同位体で標識され得る（すなわち、天然において通常は見いだされる原子質量もしくは質量数とは異なる原子質量もしくは質量数を有する原子によって置換された１個以上の原子を含み得る）か、または放射性同位体は、上記毒素分子に結合され得る。毒素部分に組み込まれ得る放射性同位体の例としては、水素、炭素、フッ素、リン、ヨウ素、銅、レニウム、インジウム、イットリウム、テクネチウムおよびルテチウムの放射性同位体（すなわち、３Ｈ、１４Ｃ、１８Ｆ、１９Ｆ、３２Ｐ、３５Ｓ、１３５Ｉ、１２５Ｉ、１２３Ｉ、６４Ｃｕ、１８７Ｒｅ、１１１Ｉｎ、９０Ｙ、９９ｍＴｃ、１７７Ｌｕ）が挙げられる。いくつかの実施形態において、金属放射性同位体は、キレート化によって、上記毒素部分へ非共有結合される。キレート化の例としては、毒素部分に融合されたポリ−Ｈｉｓ領域への金属放射性同位体のキレート化が挙げられる。
【００６４】
特定の実施形態において、上記毒素部分は、上記のように、共有結合もしくはキレート化のいずれかを介して、金属（例えば、ガドリニウム（ｇａｄｏｌｉｎｏｕｍ）（Ｇｄ）で標識される。
【００６５】
このような標識された毒素部分は、陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ）画像化法のため、もしくは単一光子放射型コンピューター断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）のためのラジオトレーサーとして有用であり得る。
【００６６】
（治療剤）
本発明によって提供される結合体において、毒素部分（例えば、クロロトキシン部分）は、治療剤と会合される。特定の好ましい実施形態において、治療剤は、抗癌剤である。適切な抗癌剤としては、癌細胞に対して直接的もしくは間接的に毒性もしくは有害である、多数の種々の物質、分子、化合物、薬剤もしくは因子のうちのいずれかが挙げられる。
【００６７】
当業者によって認識されるように、本発明の実施における使用に適した抗癌剤は、合成化合物であってもよいし、天然化合物であってもよいし；単一分子であっても異なる分子の複合体であってもよい。適切な抗癌剤は、種々のクラスの化合物（低分子、ペプチド、サッカリド、ステロイド、抗体、融合タンパク質、アンチセンスポリヌクレオチド、リボザイム、低分子干渉ＲＮＡ、ペプチド模倣物などが挙げられるが、これらに限定されない）のうちのいずれかに属し得る。同様に、適切な抗癌剤は、種々のクラスの抗癌剤（アルキル化剤、代謝拮抗物質薬物、抗有糸分裂抗生物質、アルカロイド性抗腫瘍剤、ホルモンおよび抗ホルモン、インターフェロン、非ステロイド性抗炎症薬物、および種々の他の抗腫瘍薬剤が挙げられるが、これらに限定されない）のうちのいずれかの中に見いだされ得る。
【００６８】
特に適切な抗癌剤は、癌細胞に対して不十分な選択性／特異性に起因して、望ましくない副作用を引き起こす薬剤；全くないかもしくは不十分な細胞取り込みおよび／もしくは保持を受ける薬剤；細胞薬物保持と関連する薬剤；ならびに不十分な水溶解度、凝集などに起因して、癌患者への投与のために容易に処方され得ない薬剤、である。
【００６９】
本発明の結合体において使用され得る適切な抗癌剤の例は、以下でより詳細に記載される。
【００７０】
（不十分に水溶解性の抗癌剤）
特定の実施形態において、本発明の結合体内の抗癌剤は、不十分な水溶解性の化合物である。当業者によって認識されるように、広範に種々の不十分な水溶解性の抗癌剤は、本発明における使用に適している。
【００７１】
例えば、抗癌剤は、タキサンの中から選択され得、タキサンは、他の抗新生物薬剤に対して不応性である多くの固形腫瘍の処置において有効な薬剤と認識されている。現在承認されている２つのタキサンは、パクリタキセル（ＴＡＸＯＬ）およびドセタキセル（ＴＡＸＯＴＥＲＥ）である。パクリタキセル、ドセタキセル、および他のタキサンは、チューブリン（紡錘体微小管の形成において必須のタンパク質）の重合化を増強することによって作用する。このことは、非常に安定な、非機能的細管の形成を生じ、これは、細胞複製を阻害し、細胞死をもたらす。
【００７２】
パクリタキセルは、非常に水溶性に乏しく、従って、実際に、静脈内投与のために水で処方することはできない。注射もしくは静脈内注入のためのＴＡＸＯＬのいくつかの処方物は、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ  ＥＬ（ポリオキシエチレン化ひまし油）を薬物キャリアとして使用して、開発された。しかし、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ  ＥＬは、それ自体毒性であり、かつ少なくとも部分的に、このような調製物の投与と関連して、過敏反応（重篤な皮疹（ｓｋｉｎ  ｒａｓｈ）、蕁麻疹（ｈｉｖｅｓ）、潮紅、呼吸困難、頻脈など）を担うと考えられている。このような副作用を回避するために、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒを含むパクリタキセル処方物とともに、準備投薬がしばしば処方される。ドセタキセルは、パクリタキセルのアナログであり、水中で溶解性の乏しいパクリタキセルに類似である。薬学的使用についてドセタキセルを溶解するために使用される現在最も好ましい溶媒は、ポリソルベート８０（ＴＷＥＥＮ  ８０）である。患者に過敏反応を引き起こすことに加えて、ＴＷＥＥＮ  ８０は、ジエチルヘキシルフタレート（これは、非常に毒性である）を浸出させる傾向があるので、ＰＶＣ送達装置で使用することができない。
【００７３】
タキサンおよび毒素（例えば、クロロトキシン）部分を含む本発明に従う結合体は、患者において有害な反応を誘導する溶媒およびキャリアの使用を回避するために、改善された送達法として使用され得る。
【００７４】
別の例において、本発明の結合体内の抗癌剤は、抗生物質のエンジインファミリーに属し得る。ファミリーとして、上記エンジイン抗生物質は、これまでに発見された最も強力な抗腫瘍薬剤である。いくつかのメンバーは、アドリアマイシン（最も有効な、臨床的に使用されている抗腫瘍抗生物質のうちの１つ（Ｙ．Ｓ．Ｚｈｅｎら，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔ．，１９８９，４２：１２９４−１２９８））よりも１０００倍強力である。例えば、本発明の結合体内の抗癌剤は、カリチアマイシンのエンジインファミリーのメンバーであり得る。土壌微生物であるＭｉｃｒｏｍｏｎｏｓｐｏｒａ  ｅｃｈｉｎｏｓｐｏｒａ  ｓｓｐ．  ｃａｌｉｃｈｅｎｓｉｓのブロス抽出物から最初に単離され、上記カリチアマイシンは、強力なＤＮＡ損傷薬剤についてのスクリーニングにおいて検出された（Ｍ．Ｄ．Ｌｅｅら，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１９８７，１０９：３４６４−３４６６；Ｍ．Ｄ．Ｌｅｅら，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１９８７，１０９：３４６６−３４６８；Ｗ．Ｍ．Ｍａｉｅｓｅら，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔ．，１９８９，４２：５５８−５６３；Ｍ．Ｄ．Ｌｅｅら，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔ．，１９８９，４２：１０７０−１０８７）。
【００７５】
カリチアマイシンは、オリゴサッカリド鎖へのグリコシル結合を介して連結された複雑な合成の二環式エンジインアリル基のトリスルフィド（ａｌｌｙｌｉｃ  ｔｒｉｓｕｌｆｉｄｅ）コア構造によって特徴づけられる。上記オリゴサッカリド部分は、多くの置換された糖誘導体、および置換されたテトラヒドロピラン環を含む。カリチアマイシンの上記エンジイン含有コア（もしくはアグリコン）および炭水化物部分は、これら分子の生物学的活性において異なる役割を果たすと報告された。一般に、上記コア部分がＤＮＡを切断するのに対して、上記カリチアマイシンの上記オリゴサッカリド部分は、認識および送達系として働き、上記薬物を、二本鎖ＤＮＡの副溝（ここで上記薬物がそれ自体をつなぐ）へと導くと考えられる（「Ｅｎｅｄｉｙｎｅ  Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ  ａｓ  Ａｎｔｉｔｕｍｏｒ  Ａｇｅｎｔｓ」，Ｄｏｙｌｅ  ａｎｄ  Ｂｏｒｄｅｒｓ，１９９５，Ｍａｒｃｅｌ−Ｄｅｋｋｅｒ：Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ；）。二本鎖ＤＮＡ切断は、宿主細胞に関して通常は修復不能もしくは容易には修復できない、最も頻繁には、致死的である損傷のタイプである。
【００７６】
それらの化学的特性および生物学的特性が原因で、上記カリチアマイシンのいくつかのアナログが、潜在的な抗腫瘍薬剤として、前臨床モデルにおいて試験されてきた。単一薬剤療法としてのそれらの開発は、処置のための治療的用量範囲を制限する遅延毒性が原因で、続行されてこなかった。しかし、上記カリチアマイシンのいくつかのアナログの効能によって、それらは標的化化学療法に特に有用になる。
【００７７】
適切な不十分な水溶性抗癌剤の他の例としては、タモキシフェンおよびＢＣＮＵが挙げられる。タモキシフェンは、種々のエストロゲンレセプター陽性癌腫（例えば、乳癌、子宮内膜癌、前立腺癌、卵巣癌、腎細胞癌（ｒｅｎａｌ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、黒色腫、結腸直腸癌、硬性線維腫、膵臓癌、および下垂体腫瘍）を処置するために種々の程度の成功をもって、使用されてきた。不十分な水溶解度によって制限されることに加えて、タモキシフェンを使用する化学療法は、副作用（例えば、細胞の薬物耐性）を引き起こし得る。ＢＣＮＵ（１，３−ビス（２−クロロエチル）−１−ニトロソウレア）は、その抗腫瘍特性について周知であり、１９７２年以来、  脳腫瘍、結腸癌、ホジキン病、肺癌および多発性骨髄腫に対する使用について、国立癌研究所（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ）によって計画されてきた。しかし、その低溶解度によって、この抗癌剤の効率的使用に欠陥が生じている。
【００７８】
（薬物耐性と関連する抗癌剤）
本発明の特定の実施形態において、毒素結合体は、薬物耐性と関連する抗癌剤を含む。本明細書において使用される場合、用語「薬物耐性と関連する抗癌剤」とは、癌細胞が耐性になるかまたは耐性になり得る任意の化学療法剤をいう。既に上記で言及されているように、抗癌剤に対する耐性は、多くの要因に起因し得、そして異なる機構によって現れ得る。毒素（例えば、クロロトキシン部分）および薬物耐性と関連する抗癌剤を含む本発明の結合体の投与は、上記抗癌剤の細胞取り込みを増強し得、そして上記抗癌剤を腫瘍細胞（例えば、耐性腫瘍細胞）の中へ運び得る。
【００７９】
薬物耐性と関連する広範に種々の抗癌剤のいずれも、本発明における使用に適している。例えば、薬物耐性と関連した抗癌剤は、メトトレキサートであり得る。メトトレキサートは、広範に使用される癌の薬物であり、葉酸のアナログであり、かつテトラヒドロ葉酸の合成において重要な工程をブロックし、テトラヒドロ葉酸自体は、チミジレート（特異的であり、従って、ＤＮＡ合成に特に重要な構築ブロック）の合成において利用される化合物の重要な供給源である。メトトレキサート誘導性薬物耐性は、その薬物の細胞取り込みの欠損に関連づけられる。
【００８０】
適切な抗癌剤の他の例としては、プリンアナログおよびピリミジンアナログが挙げられ、これらアナログは、酵素活性の喪失を通じて、上記薬物の不適切な細胞内活性化に起因して、薬物耐性と関連する。このようなプリンアナログの例は、６−メルカプトプリン（６−ＭＰ）である。６−ＭＰに対する腫瘍細胞の耐性の一般的な原因は、６−ＭＰをその対応するヌクレオチドである６−メルカプトホスホリボシルプリン（６−ＭＰＲＰ）（上記薬物の致死的形態）へ活性化する酵素、ヒポキサンチングアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＨＧＰＲＴ）の喪失である。上記耐性は、６−ＭＰＲＰ自体が上記細胞へ導入され得る場合に、克服され得る。この化合物は市販されているが、未だ、癌処置において治療的に使用されてきてはいない。なぜならこの化合物は、生細胞へと不適切に輸送されるからである。６−ＭＰＲＰの、本発明に従う毒素部分への会合は、細胞膜を横断するその能力を劇的に増大させる。チオグアニンは、上記酵素ＨＧＰＲＴの欠如に起因して、薬物耐性と関連する抗癌剤の別の例である。
【００８１】
不適切な細胞内活性化に起因して、薬物耐性と関連するピリミジンアナログの例としては、シトシンアラビノシドおよびアデノシンアラビノシドが挙げられ、これらは、酵素デオキシシチジンキナーゼ（ＤＯＣＫ）によって、それぞれ、その致死的形態であるシトシンジホスフェートおよびアデノシンジホスフェートへと活性化される。毒素部分（例えば、クロロトキシン）は、それらの細胞取り込みを増強し、かつ細胞の薬物耐性を克服するために、このようなピリミジンアナログの活性化形態に連結され得る。
【００８２】
薬物耐性と関連する抗癌剤の他の例としては、５−フルオロウラシル、フルオロデオキシウリジン、シトシン、アラビノシド、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、アクチノマイシン、およびブレオマイシンが挙げられるが、これらに限定されない。
【００８３】
（他の抗癌剤）
他の実施形態において、抗癌剤は、いくつか挙げると、アルキル化剤（メクロレタミン、クラムブシル、シクロホスファミド、メルファラン、イホスファミド）、代謝拮抗物質（メトトレキサート）、プリンアンタゴニストおよびピリミジンアンタゴニスト（６−メルカプトプリン、５−フルオロウラシル、シタラビン、ゲムシタビン）、紡錘体毒素（ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビノレルビン、パクリタキセル）、ポドフィロトキシン（エトポシド、イリノテカン、トポテカン）、抗生物質（ドキソルビシン、ブレオマイシン、マイトマイシン）、ニトロソウレア（カルムスチン、ロムスチン）、無機イオン（シスプラチン、カルボプラチン）、酵素（アスパラギナーゼ）、およびホルモン（タモキシフェン、ロイプロリド、フルタミド、およびメゲストロール）から選択される。最新の癌治療のより包括的な議論については、ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃａｎｃｅｒ．ｇｏｖ／を、ＦＤＡ承認腫瘍薬物のリストについては、ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｆｄａ．ｇｏｖ／ｃｄｅｒ／ｃａｎｃｅｒ／ｄｒｕｇｌｉｓｔｆｒａｍｅ．ｈｔｍ、およびＴｈｅ  Ｍｅｒｃｋ  Ｍａｎｕａｌ，第１７版．１９９９（これらの内容全体が、本明細書に参考として援用される）を参照のこと。
【００８４】
（核酸薬剤）
特定の実施形態において、本発明の結合体内の治療（例えば、抗癌）剤は、核酸薬剤である。
【００８５】
多くの癌および腫瘍は、種々の程度の遺伝的欠陥（例えば、点変異、遺伝子欠失、もしくは重複）と関連することが示された。癌の処置についての多くの新たなストラテジー（例えば、「アンチセンス」、「アンチジーン」、および「ＲＮＡ干渉」）は、遺伝子の発現を調節するための開発された（Ａ．Ｋａｌｏｔａら，Ｃａｎｃｅｒ  Ｂｉｏｌ．Ｔｈｅｒ．，２００４，３：４−１２；Ｙ．Ｎａｋａｔａら，Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｅｕｋａｒｙｏｔ．Ｇｅｎｅ  Ｅｘｐｒ．，２００５，１５：１６３−１８２；Ｖ．ＷａｃｈｅｃｋおよびＵ．Ｚａｎｇｍｅｉｓｔｅｒ−Ｗｉｔｔｋｅ，Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｏｎｃｏｌ．Ｈｅｍａｔｏｌ．，２００６，５９：６５−７３；Ａ．Ｋｏｌａｔａら，Ｈａｎｄｂ．Ｅｘｐ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，２００６，１７３：１７３−１９６）。これらのアプローチは、例えば、アンチセンス核酸、リボザイム、トリプレックス物質（ｔｒｉｐｌｅｘ  ａｇｅｎｔ）、もしくは短い干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）を利用して、標的遺伝子の特異的ｍＲＮＡもしくはＤＮＡの転写もしくは翻訳を、そのｍＲＮＡを、アンチセンス核酸もしくはトリプレックス物質を有するＤＮＡでマスクするか、そのヌクレオチド配列をリボザイムで切断するか、またはＲＮＡ干渉に関与する複雑な機構を介するｍＲＮＡの破壊かのいずれかによって、ブロックする。これらストラテジーの全てにおいて、主にオリゴヌクレオチドは、活性薬剤として使用されるが、低分子および他の構造もまた、提供されてきた。遺伝子発現を調節するためのオリゴヌクレオチドベースのストラテジーは、いくつかの癌の処置について非常に大きな可能性を有するものの、オリゴヌクレオチドの薬理学的適用は、これら化合物の、癌細胞内のそれらの作用部位への非効率的送達によって、主に妨げられてきた（Ｐ．Ｈｅｒｄｅｗｉｊｎら，Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｖ．，２０００，１０：２９７−３１０；Ｙ．Ｓｈｏｊｉ  ａｎｄ  Ｈ．  Ｎａｋａｓｈｉｍａ，Ｃｕｒｒ．Ｃｈａｒｍ．Ｄｅｓ．，２００４，１０：７８５−７９６；Ａ．Ｗ  Ｔｏｎｇら，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｍｏｌ．Ｔｈｅｒ．，２００５，７：１１４−１２４）。
【００８６】
毒素部分（例えば、クロロトキシン部分）および治療（例えば、抗癌）剤として有用な核酸分子を含む結合体が、本明細書において提供される。核酸の種々の化学的タイプおよび構造的形態が、このようなストラテジーに適切であり得る。これらとしては、非限定的な例示によって、ＤＮＡ（一本鎖（ｓｓＤＮＡ）および二本鎖（ｄｓＤＮＡ）を含む）；ＲＮＡ（ｓｓＲＮＡ、ｄｓＲＮＡ、ｔＲＮＡ、ｍＲＮＡ、ｒＲＮＡ、酵素的ＲＮＡが挙げられるが、これらに限定されない）；ＲＮＡ：ＤＮＡハイブリッド、三本鎖ＤＮＡ（例えば、短いオリゴヌクレオチドと会合したｄｓＤＮＡ）などが挙げられる。
【００８７】
本発明のいくつかの実施形態において、本発明の結合体に存在する核酸薬剤は、約５〜２０００の間のヌクレオチド長である。いくつかの実施形態において、上記核酸薬剤は、少なくとも約６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９  ２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０  ４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０もしくはそれ以上のヌクレオチド長である。いくつかの実施形態において、上記核酸薬剤は、約２０００、１９００、１８００、１７００、１６００、１５００、１４００、１３００、１２００、１１００、１０００、９００、８００、７００、６００、５００、４５０、４００、３５０、３００、２５０、２００、１５０、１００、５０、４５、４０、３５、３０、２５、２０もしくはそれ以下のヌクレオチド長である。
【００８８】
いくつかの実施形態において、本発明の結合体に存在する核酸薬剤は、転写を調節するプロモーターおよび／もしくは他の配列を含む。いくつかの実施形態において、本発明の結合体に存在する核酸薬剤は、複製起点および／もしくは複製を調節する他の配列を含む。いくつかの実施形態において、本発明の結合体に存在する核酸薬剤は、プロモーターおよび／もしくは複製起点を含まない。
【００８９】
本発明の実施における使用に適した核酸抗癌剤としては、細胞分裂を刺激するタンパク質をコードする、腫瘍形成および細胞増殖もしくは細胞形質転換と関連する遺伝子（例えば、プロトオンコジーン）、血管新生／抗血管新生遺伝子、腫瘍サプレッサ遺伝子（これは、細胞分裂を抑制するタンパク質をコードする）、腫瘍増殖および／もしくは腫瘍移動と関連するタンパク質をコードする遺伝子、ならびにアポトーシスもしくは他の形態の細胞死を誘導する自殺遺伝子（特に、急速に分裂している細胞において最も活性である自殺遺伝子）を標的する薬剤が挙げられる。
【００９０】
腫瘍形成および／もしくは細胞形質転換と関連する遺伝子配列の例としては、ＭＬＬ融合遺伝子、ＢＣＲ−ＡＢＬ、ＴＥＬ−ＡＭＬ１、ＥＷＳ−ＦＬＩ１、ＴＬＳ−ＦＵＳ、ＰＡＸ３−ＦＫＨＲ、Ｂｃｌ−２、ＡＭＬ１−ＥＴＯ、ＡＭＬ１−ＭＴＧ８、Ｒａｓ、Ｆｏｓ  ＰＤＧＦ、ＲＥＴ、ＡＰＣ、ＮＦ−１、Ｒｂ、ｐ５３、ＭＤＭ２など；多剤耐性遺伝子のような過剰発現される遺伝子；サイクリン；β−カテニン；テロメラーゼ遺伝子；ｃ−ｍｙｃ、ｎ−ｍｙｃ、Ｂｃｌ−２、Ｅｒｂ−Ｂ１およびＥｒｂ−Ｂ２；ならびに変異遺伝子（例えば、Ｒａｓ、Ｍｏｓ、Ｒａｆ、およびＭｅｔ）が挙げられる。腫瘍サプレッサ遺伝子の例としては、ｐ５３、ｐ２１、ＲＢ１、ＷＴ１、ＮＦ１、ＶＨＬ、ＡＰＣ、ＤＡＰキナーゼ、ｐ１６、ＡＲＦ、ニューフィブロミン、およびＰＴＥＮが挙げられるが、これらに限定されない。抗癌治療において有用な核酸分子によって標的とされ得る遺伝子の例としては、腫瘍移動と関連するタンパク質（例えば、インテグリン、セレクチンおよびメタロプロテイナーゼ）をコードする遺伝子；新たな脈管の形成を促進するタンパク質（例えば、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）もしくはＶＥＧＦｒ）をコードする抗血管新生遺伝子；血管新生を阻害するタンパク質（例えば、エンドスタチン、アンジオスタチン、およびＶＥＧＦ−Ｒ２）をコードする抗血管新生遺伝子；およびインターロイキン、インターフェロン、線維芽細胞増殖因子（α−ＦＧＦおよびβ−ＦＧＦ）、インスリン様増殖因子（例えば、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２）、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）、トランスホーミング増殖因子（例えば、ＴＧＦ−αおよびＴＧＦ−β）、表皮増殖因子（ＥＧＦ）、ケラチノサイト増殖因子（ＫＧＦ）、幹細胞因子およびそのレセプターｃ−Ｋｉｔ（ＳＣＦ／ｃ−Ｋｉｔ）リガンド、ＣＤ４０Ｌ／ＣＤ４０、ＶＬＡ−４  ＶＣＡＭ−１、ＩＣＡＭ−１／ＬＦＡ−１、ヒアルロン（ｈｙａｌｕｒｉｎ）／ＣＤ４４などのようなタンパク質をコードする遺伝子が挙げられる。当業者によって認識されるように、前述の例は、排他的ではない。
【００９１】
本発明の結合体中の核酸は、種々の活性（例えば、抗癌剤もしくは他の治療剤、プローブ、プライマーなどを含む）のいずれかを有し得る。本発明の結合体中の核酸は、酵素的活性（例えば、リボザイム活性）、遺伝子発現阻害活性（例えば、アンチセンス薬剤もしくはｓｉＲＮＡ薬剤など）、および／もしくは他の活性を有し得る。本発明の結合体中の核酸は、それ自体が活性であってもよいし、活性な核酸薬剤を送達する（例えば、複製および／もしくは送達された核酸の転写を介して）ベクターであってもよい。本明細書の目的については、このようなベクター核酸は、それらが治療上活性な薬剤をコードするか、またはさもなければ送達する場合に、それら自体が治療的活性を有しない場合すら、「治療剤」と考えられる。
【００９２】
特定の実施形態において、本発明の結合体は、アンチセンス化合物を含むかもしくはアンチセンス化合物をコードする核酸治療剤を含む。用語「アンチセンス化合物もしくはアンチセンス薬剤」、「アンチセンスオリゴマー」、「アンチセンスオリゴヌクレオチド」および「アンチセンスオリゴヌクレオチドアナログ」は、本明細書において交換可能に使用され、そしてヌクレオチド塩基の配列、および上記ンチセンス化合物を、ワトソン−クリック塩基対合によってＲＮＡ中の標的配列にハイブリダイズさせて、上記標的配列内でＲＮＡオリゴマーヘテロ二重鎖を形成させるサブユニットからサブユニットへの骨格（ｓｕｂｕｎｉｔ−ｔｏ−ｓｕｂｕｎｉｔ  ｂａｃｋｂｏｎｅ）をいう。上記オリゴマーは、上記標的配列内での正確な配列相補性もしくはほとんど相補性を有し得る。このようなアンチセンスオリゴマーは、上記標的配列を含むｍＲＮＡの翻訳をブロックもしくは阻害し得るか、または遺伝子転写を阻害し得る。アンチセンスオリゴマーは、二本鎖もしくは一本鎖の配列に結合し得る。
【００９３】
本発明の実施における使用に適したアンチセンスオリゴヌクレオチドの例としては、例えば、以下の総説において言及されるものが挙げられる：Ｒ．Ａ  Ｓｔａｈｅｌら，Ｌｕｎｇ  Ｃａｎｃｅｒ，２００３，４１：Ｓ８１−Ｓ８８；Ｋ．Ｆ．Ｐｉｒｏｌｌｏら，Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｈｅｒ．，２００３，９９：５５−７７；Ａ．Ｃ．Ｓｔｅｐｈｅｎｓ  ａｎｄ  Ｒ．Ｐ．Ｒｉｖｅｒｓ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｍｏｌ．Ｔｈｅｒ．，２００３，５：１１８−１２２；Ｎ．Ｍ．Ｄｅａｎ  ａｎｄ  Ｃ．Ｆ．Ｂｅｎｎｅｔｔ，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ，２００３，２２：９０８７−９０９６；Ｎ．Ｓｃｈｉａｖｏｎｅら，Ｃｕｒｒ．Ｐｈａｒｍ．Ｄｅｓ．，２００４，１０：７６９−７８４；Ｌ．Ｖｉｄａｌら，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，２００５，４１：２８１２−２８１８；Ｔ．Ａｂｏｕｌ−Ｆａｄｌ，Ｃｕｒｒ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，２００５，１２：２１９３−２２１４；Ｍ．Ｅ．Ｇｌｅａｖｅ  ａｎｄ  Ｂ．Ｐ．Ｍｏｎｉａ，Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｃａｎｃｅｒ，２００５，５：４６８−４７９；Ｙ．Ｓ．Ｃｈｏ−Ｃｈｕｎｇ，Ｃｕｒｒ．Ｐｈａｒｍ．Ｄｅｓ．，２００５，１１：２８１１−２８２３；Ｅ．Ｒａｙｂｕｒｎら，Ｌｅｔｔ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ＆Ｄｉｓｃｏｖ．，２００５，２：１−１８；Ｅ．Ｒ．Ｒａｙｂｕｒｎら，Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ．Ｅｍｅｒｇ．Ｄｒｕｇｓ，２００６，１１：３３７−３５２；Ｉ．Ｔａｍｍ  ａｎｄ  Ｍ．Ｗａｇｎｅｒ，Ｍｏｌ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，２００６，３３：２２１−２３８（これらの各々は、その全体が本明細書において参考として援用される）。
【００９４】
適切なアンチセンスオリゴヌクレオチドの例としては、例えば、ｏｌｉｍｅｒｓｏｎナトリウム（ｏｌｉｍｅｒｓｏｎ  ｓｏｄｉｕｍ）（ＧｅｎａｓｅｎｓｅＴＭもしくはＧ３１２３９としても公知であり、Ｇｅｎｔａ，Ｉｎｃ．，Ｂｅｒｋｅｌｅｙ  Ｈｅｉｇｈｔｓ，ＮＪによって開発）、ｂｃｌ−２  ｍＲＮＡ（これは、アポトーシスの強力なインヒビターであり、多くの癌（濾胞性リンパ腫、乳癌、結腸癌および前立腺癌、ならびに中程度／高い進行度のリンパ腫（Ｃ．Ａ．Ｓｔｅｉｎら，Ｓｅｍｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．，２００５，３２：５６３−５７３；Ｓ．Ｒ．Ｆｒａｎｋｅｌ，Ｓｅｍｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．，２００３，３０：３００−３０４）が挙げられる）において過剰発現される）の開始コドン領域を標的とするホスホロチオエートオリゴマーが挙げられる。他の適切なアンチセンスオリゴヌクレオチドとしては、ＧＥＭ−２３１（ＨＹＢ０１６５，Ｈｙｂｒｉｄｏｎ，Ｉｎｃ．，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，ＭＡ）（これは、ｃＡＭＰ依存性プロテインキナーゼＡ（ＰＫＡ）に対して指向される混合された骨格オリゴヌクレオチドである（Ｓ．Ｇｏｅｌら，Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，２０３，９：４０６９−４０７６））；Ａｆｆｉｎｉｔａｋ（ＩＳＩＳ  ３５２１もしくはアプリノカルセン（ａｐｒｉｎｏｃａｒｓｅｎ）、ＩＳＩＳ  ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．，Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ）、ＰＫＣ−αのアンチセンスインヒビター；ＯＧＸ−０１１（Ｉｓｉｓ  １１２９８９，Ｉｓｉｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．）、クラスタリン（細胞周期、組織リモデリング、脂質輸送および細胞死の調節に関与し、乳癌、前立腺癌および結腸癌において過剰発現される糖タンパク質）に対する２’−メトキシエチル改変アンチセンスオリゴヌクレオチド；ＩＳＩＳ  ５１３２（Ｉｓｉｓ  １１２９８９，Ｉｓｉｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．）（ｃ−ｒａｆ−１  ｍＲＮＡの３’−非翻訳領域の配列に相補的なホスホロチオエートオリゴヌクレオチド）（Ｓ．Ｐ．Ｈｅｎｒｙら，Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓ．，１９９７，１２：４０９−４２０；Ｂ．Ｐ．Ｍｏｎｉａら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１９９６，９３：１５４８１−１５４８４；Ｃ．Ｍ．Ｒｕｄｉｎら，Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，２００１，７：１２１４−１２２０）；ＩＳＩＳ  ２５０３（Ｉｓｉｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．）（ヒトＨ−ｒａｓ  ｍＲＮＡ発現のホスホロチオエートオリゴヌクレオチドアンチセンスインヒビター）（Ｊ．Ｋｕｒｒｅｃｋ，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，２００３，２７０：１６２８−１６４４）；アポトーシスタンパク質のＸ染色体連鎖性インヒビター（ＸＩＡＰ）（これは、アポトーシス経路の実質的部分をブロックする）を標的とするオリゴヌクレオチド（例えば、ＧＥＭ  ６４０（ＡＥＧ  ３５１５６，Ａｅｇｅｒａ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  Ｉｎｃ．およびＨｙｂｒｉｄｏｎ，Ｉｎｃ．）、またはアポトーシスタンパク質のインヒビター（ＩＡＰ）であるサバイビン（ｓｕｒｖｉｖｉｎ）を標的とするオリゴヌクレオチド（例えば、ＩＳＩＳ  ２３７２２）（Ｉｓｉｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃ���ｌｓ，Ｉｎｃ．）、２’−Ｏ−メトキシエチルキメラオリゴヌクレオチド；ＭＧ９８（これは、ＤＮＡメチルトランスフェラーゼを標的とする）；ならびにＧＴＩ−２０４０（Ｌｏｒｕｓ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，Ｉｎｃ．Ｔｏｒｏｎｔｏ，Ｃａｎａｄａ）、ヒトリボヌクレオチドレダクターゼのＲ２小サブユニット成分のｍＲＮＡにおけるコード領域に相補的な２０マーオリゴヌクレオチドが挙げられる。
【００９５】
他の適切なアンチセンスオリゴヌクレオチドとしては、Ｈｅｒ−２／ｎｅｕ、ｃ−Ｍｙｂ、ｃ−Ｍｙｃ、およびｃ−Ｒａｆに対して開発されつつあるアンチセンスオリゴヌクレオチドが挙げられる（例えば、Ａ．Ｂｉｒｏｃｃｉｏら，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ，２００３，２２：６５７９−６５８８；Ｙ．Ｌｅｅら，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，２００３，６３：２８０２−２８１１；Ｂ．Ｌｕら，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，２００４，６４：２８４０−２８４５；Ｋ．Ｆ．Ｐｉｒｏｌｌｏら，Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｈｅｒ．，２００３，９９：５５−７７；およびＡ．Ｒａｉｔら，Ａｎｎ．Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，２００３，１００２：７８−８９を参照のこと）。
【００９６】
特定の実施形態において、本発明の結合体は、干渉ＲＮＡ分子を含むかもしくはコードする核酸抗癌剤を含む。用語「干渉ＲＮＡ」および「干渉ＲＮＡ分子」とは、本明細書において交換可能に使用され、そして配列特異的様式において、例えば、ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）を媒介することによって、遺伝子発現を阻害もしくはダウンレギュレートし得るかまたは遺伝子をサイレントにし得るＲＮＡ分子をいう。ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）は、進化的に保存された、相補的標的一本鎖ｍＲＮＡの分解および対応する翻訳された配列の「サイレンシング」を誘導する二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）によって誘発される配列特異的機構である（ＭｃＭａｎｕｓ  ａｎｄ  Ｓｈａｒｐ，２００２，Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖ．Ｇｅｎｅｔ．，２００２，３：７３７）。ＲＮＡｉは、より長いｄｓＲＮＡ鎖を、約２１−２３ヌクレオチド長の生物学的に活性な「短い干渉ＲＮＡ」（ｓｉＲＮＡ）配列へと酵素的に切断することによって機能する（Ｅｌｂａｓｈｉｒら，Ｇｅｎｅｓ  Ｄｅｖ．，２００１，１５：１８８）。ＲＮＡ干渉は、癌の治療のための有望なアプローチとして出現してきた。
【００９７】
本発明の実施における使用に適した干渉ＲＮＡは、いくつかの形態のうちのいずれかにおいて提要され得る。例えば、干渉ＲＮＡは、単離された短い干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）、マイクロ−ＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）、もしくは短いヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）のうちの１種以上として提供され得る。
【００９８】
本発明における使用に適した干渉ＲＮＡ分子の例としては、例えば、以下の総説において引用されるｉＲＮＡが挙げられる：Ｏ．Ｍｉｌｈａｖｅｔら，Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｒｅｖ．，２００３，５５：６２９−６４８；Ｆ．Ｂｉら，Ｃｕｒｒ．Ｇｅｎｅ．Ｔｈｅｒ．，２００３，３：４１１−４１７；Ｐ．Ｙ．Ｌｕら，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｍｏｌ．Ｔｈｅｒ．，２００３，５：２２５−２３４；Ｉ．Ｆｒｉｅｄｒｉｃｈら，Ｓｅｍｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｂｉｏｌ．，２００４，１４：２２３−２３０；Ｍ．Ｉｚｑｕｉｅｒｄｏ，Ｃａｎｃｅｒ  Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒ．，２００５，１２：２１７−２２７；Ｐ．Ｙ．Ｌｕら，Ａｄｖ．Ｇｅｎｅｔ．，２００５，５４：１１７−１４２；Ｇ．Ｒ．Ｄｅｖｉ，Ｃａｎｃｅｒ  Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒ．，２００６，１３：８１９−８２９；Ｍ．Ａ．Ｂｅｈｌｋｅ，Ｍｏｌ．Ｔｈｅｒ．，２００６，１３：６４４−６７０；およびＬ．Ｎ．Ｐｕｔｒａｌら，Ｄｒｕｇ  Ｎｅｗｓ  Ｐｅｒｓｐｅｃｔ．，２００６，１９：３１７−３２４（これらの各々は、その全体が本明細書において参考として援用される）。
【００９９】
適切な干渉ＲＮＡ分子の他の例としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：ｐ５３干渉ＲＮＡ（例えば、Ｔ．Ｒ．Ｂｒｕｍｍｅｌｋａｍｐら，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２００２，２９６：５５０−５５３；Ｍ．Ｔ．Ｈｅｍｍａｎら，Ｎａｔ．Ｇｅｎｅｔ．，２００３，３３：３９６−４００）；ｂｃｒ−ａｂｌ  融合物を標的とする干渉ＲＮＡ（これは、慢性骨髄性白血病および急性リンパ芽球性白血病の発症と関連する）（例えば、Ｍ．Ｓｃｈｅｒｒら，Ｂｌｏｏｄ，２００３，１０１：１５６６−１５６９；Ｍ．Ｊ．Ｌｉら，Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ，２００３，１３：４０１−４０９）、ＮＰＭ−ＡＬＫ（未分化大細胞リンパ腫のうちの７５％において見いだされ、腫瘍形成と関連する構成的に活性なキナーゼの発現をもたらすタンパク質）の発現を阻害する干渉ＲＮＡ（Ｕ．Ｒｉｔｔｅｒら，Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ，２００３，１３：３６５−３７３）；Ｒａｆ−１（Ｔ．Ｆ．Ｌｏｕら，Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ，２００３，１３：３１３−３２４）、Ｋ−Ｒａｓ（Ｔ．Ｒ．Ｂｒｕｍｍｅｌｋａｍｐら，Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌ，２００２，２：２４３−２４７）、ｅｒｂＢ−２（Ｇ．Ｙａｎｇら，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２００４，２７９：４３３９−４３４５）のようなオンコジーン（例えば、）を標的とする干渉ＲＮＡ；ｂ−カテニンタンパク質（この過剰発現は、Ｔ細胞因子標的遺伝子のトランス活性化（これは、結腸直腸癌の主要な形質転換事象であると考えられている）をもたらす）を標的とする干渉ＲＮＡ（Ｍ．ｖａｎ  ｄｅ  Ｗｅｔｅｒｉｎｇら，ＥＭＢＯ  Ｒｅｐ．，２００３，４：６０９−６１５）。
【０１００】
特定の実施形態において、本発明の結合体は、リボザイムである核酸治療剤を含む。本明細書において使用される場合、用語「リボザイム」とは、標的特異的様式において他のＲＮＡ分子を切断する触媒性ＲＮＡ分子をいう。リボザイムは、目的の遺伝子の任意の望ましくない生成物の発現をダウンレギュレートするために使用され得る。本発明の実施において使用され得るリボザイムの例としては、ヒト、マウスおよびラットの血管内皮細胞増殖因子レセプター（ＶＧＥＦＲ）−１  ｍＲＮＡの保存された領域を標的とするリボザイムであるＡｎｇｉｏｚｙｍｅＴＭ（ＲＰＩ．４６１０，Ｓｉｍａ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，Ｂｏｕｌｄｅｒ，ＣＯ）、およびＨｅｒｚｙｍｅ（Ｓｉｍａ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１０１】
（光感作物質）
特定の実施形態において、本発明の結合体内の治療（例えば、抗癌）剤は、光線力学療法（ＰＤＴ）において使用される光感作物質である。ＰＤＴにおいて、患者への光感作物質の局所投与もしくは全身投与に続いて、処置されるべき組織もしくは器官中の上記光感作物質によって吸収される光での照射が行われる。上記光感作物質による光の吸収は、細胞にとって有害な活性種（例えば、ラジカル）を生成する。最大の効力のためには、光感作物質は、投与に適した形態で存在しなければならないことのみならず、上記標的部位における細胞インターナリゼーションを容易に受け得る（好ましくは、正常組織よりもある程度の選択性をもって）形態でも存在しなければならない。
【０１０２】
いくつかの光感作物質（例えば、Ｐｈｏｔｏｆｒｉｎ（登録商標）（ＱＬＴ，Ｉｎｃ．，Ｖａｎｃｏｕｖｅｒ，ＢＣ，Ｃａｎａｄａ））は、単純な水溶液の一部として成功裏に送達されてきたが、このような水溶液は、疎水性光感作物質薬物（例えば、テトラ−ピロールベースもしくはポリ−ピロールベースの構造を有するもの）については適切ではない可能性がある。これらの薬物は、本質的に、分子の積み重なりによって凝集する傾向があり、このことによって、光増感プロセスの効力の顕著な低下が生じる（Ｓｉｇｇｅｌら，Ｊ．Ｐｈｙｓ．Ｃｈｅｍ．，１９９６，１００：２０７０−２０７５）。凝集を最小にするためのアプローチとしては、リポソーム処方物（例えば、ベンゾポルフィリン誘導体モノ酸Ａについては、ＢＰＤＭＡ，Ｖｅｒｔｅｐｏｒｆｉｎ（登録商標）（ＱＬＴ，Ｉｎｃ．，Ｖａｎｃｏｕｖｅｒ，Ｃａｎａｄａ））；および亜鉛フタロシアニン（ＣＩＢＡ−Ｇｅｉｇｙ，Ｌｔｄ．，Ｂａｓｅｌ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）、および生体適合性ブロックコポリマー（Ｐｅｔｅｒｓｏｎら，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，１９９６，５６：３９８０−３９８５）および／もしくは抗体（Ｏｍｅｌｙａｎｅｎｋｏら，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，１９９８，７５：６００−６０８）への光感作物質の結合体化が挙げられる。
【０１０３】
光感作物質と会合される毒素部分を含む結合体は、ＰＤＴにおける新たな送達系として使用され得る。光感作物質凝集を低下させることに加えて、本発明に従う光感作物質の送達は、標的組織／器官に対する増大した特異性および上記光感作物質の細胞インターナリゼーションのような他の利点を示す。
【０１０４】
本発明における使用に適した光感作物質は、ＰＤＴにおいて有用な光増感特性を有する種々の合成分子および天然に存在する分子のうちのいずれかを含む。特定の実施形態において、上記光感作物質の吸収スペクトルは、可視範囲（代表的には、３５０ｎｍ〜１２００ｎｍの間、好ましくは、４００ｎｍ〜９００ｎｍの間、例えば、６００ｎｍ〜９００ｎｍの間）に存在する。本発明に従う毒素に連結され得る適切な光感作物質としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：ポルフィリンおよびポルフィリン誘導体（例えば、クロリン（ｃｈｌｏｒｉｎ）、バクテリオクロリン（ｂａｃｔｅｒｉｏｃｈｌｏｒｉｎ）、イソバクテリオクロリン（ｉｓｏｂａｃｔｅｒｉｏｃｈｌｏｒｉｎ）、フタロシアニン、およびナフタロシアニン）；メタロポルフィリン、メタロフタロシアニン、アンゲリシン（ａｎｇｅｌｉｃｉｎ）、ｃｈａｌｃｏｇｅｎａｐｙｒｒｉｌｌｉｕｍ色素、クロロフィル、クマリン、フラビンおよび関連化合物（例えば、アロキサジンおよびリボフラビン）、フラーレン、フェオフォルバイド（ｐｈｅｏｐｈｏｒｂｉｄｅ）、ピロフェオフォルバイド（ｐｙｒｏｐｈｅｏｐｈｏｒｂｉｄｅ）、シアニン（例えば、メロシアニン５４０）、フェオフィチン、サフィリン、テキサフィリン、プルプリン、ポルフィセン、フェノチアジニウム、メチレンブルー誘導体、ナフタルイミド、ナイルブルー誘導体、キノン、ペリレンキノン（ｐｅｒｙｌｅｎｅｑｕｉｎｏｎｅ）（例えば、ヒペリシン、ヒポクレリン（ｈｙｐｏｃｒｅｌｌｉｎ）、およびセルコスポリン）、ソラレン、キノン、レチノイド、ローダミン、チオフェン、ベルジン（ｖｅｒｄｉｎ）、キサンテン色素（例えば、エオシン、エリスロシン、ローズベンガル）、ダイマー形態およびオリゴマー形態のポルフィリン、ならびにプロドラッグ（例えば、５−アミノレブリン酸（Ｒ．Ｗ．Ｒｅｄｍｏｎｄ  ａｎｄ  Ｊ．Ｎ．Ｇａｍｌｉｎ，Ｐｈｏｔｏｃｈｅｍ．Ｐｈｏｔｏｂｉｏｌ．，１９９９，７０：３９１−４７５））。
【０１０５】
本発明における使用に適した例示的な光感作物質は、米国特許第５，１７１，７４１号；同第５，１７１，７４９号；同第５，１７３，５０４号；同第５，３０８，６０８号；同第５，４０５，９５７号；同第５，５１２，６７５号；同第５，７２６，３０４号；同第５，８３１，０８８号；同第５，９２９，１０５号；および同第５，８８０，１４５号（これらの各々は、その全体が本明細書に参考として援用される）に記載されている。
【０１０６】
（放射線増感剤）
特定の実施形態において、本発明の結合体内の治療（例えば、抗癌）剤は、放射線増感剤である。本明細書において使用される場合、用語「放射線増感剤」とは、腫瘍細胞を、放射線療法に対してより感受性にする分子、化合物、もしくは薬剤をいう。放射線療法を受ける患者への放射線増感剤の投与は、一般に、放射線療法の効果の増強を生じる。理想的には、放射線増感剤は、標的細胞に対してのみその機能を発揮する。使用が容易であるために、放射線増感剤はまた、全身に投与された場合ですら、標的細胞を見いだすことができるはずである。しかし、現在入手可能な放射線増感剤は、代表的には、腫瘍に対して選択的ではなく、哺乳動物の身体における拡散によって分布する。本発明の毒素結合体は、放射線増感剤のための新たな送達系として使用され得る。
【０１０７】
放射線増感剤は、当該分野で公知である。本発明における使用に適切な放射線増感剤の例としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：パクリタキセル（Ｔａｘｏｌ（登録商標））、カルボプラチン、シスプラチン、およびオキサリプラチン（Ａｍｏｒｉｎｏら，Ｒａｄｉａｔ．Ｏｎｃｏｌ．Ｉｎｖｅｓｔｉｇ．１９９９；７：３４３−３５２；Ｃｈｏｙ，Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，１９９９，１３：２２−３８；Ｓａｆｒａｎら，Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｖｅｓｔ．，２００１，１９：１−７；Ｄｉｏｎｅｔら，Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，２００２，２２：７２１−７２５；Ｃｉｖｉｄａｌｌｉら，Ｒａｄｉａｔ．Ｏｎｃｏｌ．Ｂｉｏｌ．Ｐｈｙｓ．，２００２，５２：１０９２−１０９８）；ゲムシタビン（Ｇｅｍｚａｒ（登録商標））（Ｃｈｏｙ，Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，２０００，１４：７−１４；Ｍｏｒｎｅｘ  ａｎｄ  Ｇｉｒａｒｄ，Ａｎｎａｌｓ  ｏｆ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，２００６，１７：１７４３−１７４７）；エタニダゾール（Ｎｉｔｒｏｌｍｉｄａｚｏｌｅ（登録商標））（Ｉｎａｎａｍｉら，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｒａｄｉａｔ．Ｂｉｏｌ．，２００２，７８：２６７−２７４）；ミソニダゾール（Ｔａｍｕｌｅｖｉｃｉｕｓら，Ｂｒ．Ｊ．Ｒａｄｉｏｌｏｇｙ，１９８１，５４：３１８−３２４；Ｐａｌｃｉｃら，Ｒａｄｉａｔ．Ｒｅｓ．，１９８４，１００：３４０−３４７）、チラパザミン（Ｍａｓｕｎａｇａら，Ｂｒ．Ｊ．Ｒａｄｉｏｌ．，２００６，７９：９９１−９９８；Ｒｉｓｃｈｉｎら，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．，２００１，１９：５３５−５４２；Ｓｈｕｌｍａｎら，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｒａｄｉａｔ．Ｏｎｃｏｌ．Ｂｉｏｌ．Ｐｈｙｓ．，１９９９，４４：３４９−３５３）；および核酸塩基誘導体（例えば、ハロゲン化プリンもしくはハロゲン化ピリミジン（例えば、５−フルオロデオキシウリジン（Ｂｕｃｈｈｏｌｚら，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｒａｄｉａｔ．Ｏｎｃｏｌ．Ｂｉｏｌ．Ｐｈｙｓ．，１９９５，３２：１０５３−１０５８））。
【０１０８】
（放射性同位体）
特定の実施形態において、本発明の結合体内の治療（例えば、抗癌）剤は、放射性同位体である。適切な放射性同位体の例としては、任意のαエミッター、β−エミッターもしくはγ−エミッターが挙げられ、これらは、腫瘍部位に局在された場合、細胞破壊を生じる（Ｓ．Ｅ．Ｏｒｄｅｒ，「Ａｎａｌｙｓｉｓ，Ｒｅｓｕｌｔｓ，ａｎｄ  Ｆｕｔｕｒｅ  Ｐｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ｕｓｅ  ｏｆ  Ｒａｄｉｏｌａｂｅｌｅｄ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ」，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｆｏｒ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｔｈｅｒａｐｙ，Ｒ．Ｗ．Ｂａｌｄｗｉｎら（編），Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，１９８５）。このような放射性同位体の例としては、ヨウ素−１３１（１３１Ｉ）、ヨウ素−１２５（１２５Ｉ）、ビスマス−２１２（２１２Ｂｉ）、ビスマス−２１３（２１３Ｂｉ）、アスタチン−２１１（２１１Ａｔ）、レニウム−１８６（１８６Ｒｅ）、レニウム−１８６（１８８Ｒｅ）、リン−３２（３２Ｐ）、イットリウム−９０（９０Ｙ）、サマリウム−１５３（１５３Ｓｍ）、およびルテチウム−１７７（１１７Ｌｕ）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１０９】
（スーパー抗原）
特定の実施形態において、本発明の結合体内の治療（例えば、抗癌）剤は、スーパー抗原もしくはその生物学的に活性な部分である。スーパー抗原は、Ｔ細胞集団の大部分を活性化することにおいて有効な細菌タンパク質およびウイルスタンパク質の群を構成する。スーパー抗原は、プロセシングされることなく、腫瘍組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）に直接結合する。実際に、スーパー抗原は、ＭＨＣクラスＩＩ分子上の抗原結合溝のプロセシングされていない外側に結合し、それによって、従来のペプチド結合部位における多型の大部分を回避する。
【０１１０】
スーパー抗原ベースの腫瘍治療アプローチは、固形腫瘍の処置のために開発されてきた。このアプローチにおいて、標的化部分（例えば、抗体もしくは抗体フラグメント）は、スーパー抗原に結合体化され、このことは、標的化スーパー抗原を提供する。上記抗体もしくは抗体フラグメントが腫瘍関連抗原を認識する場合、腫瘍細胞に結合した上記標的化スーパー抗原は、スーパー抗原活性化細胞傷害性Ｔ細胞を誘発して、上記腫瘍細胞を、スーパー抗原依存細胞媒介性細胞傷害によって、直接死滅させ得る（Ｓoｇａａｒｄら，Ｉｍｍｕｎｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，１９９６，２：１５１−１６２）
スーパー抗原ベースの腫瘍治療は、いくらか成功してきた。例えば、野生型ブドウ球菌エンテロトキシンＡ（ＳＥＡ）との融合タンパク質は、結腸直腸癌および膵臓癌の治験において調査されてきた（Ｇｉａｎｔｏｎｉｏら，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．，１９９７，１５：１９９４−２００７；Ａｌｐａｕｇｈら，Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，１９９８，４：１９０３−１９１４；Ｃｈｅｎｇら，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．，２００４，２２：６０２−６０９）；エンテロトキシン遺伝子クラスタ（ｅｇｃ）のブドウ球菌スーパー抗原は、非小細胞肺癌の処置について研究されてきた（Ｔｅｒｍａｎら，Ｃｌｉｎ．Ｃｈｅｓｔ  Ｍｅｄ．，２００６，２７：３２１−３２４）。そしてブドウ球菌エンテロトキシンＢは、表在性膀胱癌の膀胱内免疫療法について評価されてきた（Ｐｅｒａｂｏら，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，２００５，１１５：５９１−５９８）。
【０１１１】
スーパー抗原、もしくはその生物学的に活性な部分は、毒素部分に会合されて、本発明に従う結合体を形成し得、そして本明細書において記載されるように、治療（例えば、抗癌治療）において使用され得る。
【０１１２】
本発明における使用に適したスーパー抗原の例としては、ブドウ球菌エンテロトキシン（ＳＥ）（例えば、ブドウ球菌エンテロトキシンＡ（ＳＥＡ）もしくはブドウ球菌エンテロトキシンＥ（ＳＥＥ））、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ発熱性外毒素（ＳＰＥ）、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ毒性ショック症候群毒素（ＴＳＳＴ−１）、レンサ球菌有糸分裂促進性外毒素（ＳＭＥ）、レンサ球菌性スーパー抗原（ＳＳＡ）、および上記エンテロトキシン遺伝子クラスタのレンサ球菌性スーパー抗原が挙げられるが、これらに限定されない。当業者に公知であるように、上記に列挙したスーパー抗原の三次元構造は、プロテインデータバンク（Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｄａｔａ  Ｂａｎｋ）から得られ得る。同様に、上記に列挙したスーパー抗原および他のスーパー抗原の上記核酸配列およびアミノ酸配列は、当業者に認識されるように、ＧｅｎＢａｎｋから得られ得る。
【０１１３】
（プロドラッグ活性化酵素）
特定の実施形態において、本発明の結合体は、指向性（ｄｉｒｅｃｔｅｄ）酵素プロドラッグ治療において使用され得る。指向性酵素プロドラッグ治療アプローチにおいて、指向性／標的化酵素およびプロドラッグは、被験体に投与され、ここで上記標的化酵素は、上記プロドラッグを活性薬物へと変換する上記被験体の身体の一部に特異的に局在する。上記プロドラッグは、一工程において（上記標的化酵素によって）もしくは１つより多い工程において、活性薬物へ変換され得る。例えば、上記プロドラッグは、上記標的化酵素によって活性薬物の前駆体に変換され得る。次いで、上記前駆体は、例えば、被験体に投与される１種以上のさらなる標的化酵素、１種以上の非標的化酵素、上記被験体にもしくは上記被験体における標的部位に天然に存在する１種以上の酵素（例えば、プロテアーゼ、ホスファターゼ、キナーゼもしくはポリメラーゼ）の触媒的活性によって、上記被験体に投与される薬剤によって、および／または酵素に触媒されない化学的プロセス（例えば、酸化、加水分解、異性化、エピマー化など）によって、上記活性薬物へと変換され得る。
【０１１４】
異なるアプローチは、上記酵素を、目的の部位へと指向／目標の部位を標的とするために使用されてきた。例えば、ＡＤＥＰＴ（抗体指向性酵素プロドラッグ治療）において、腫瘍抗原に対して設計／開発された抗体は、酵素に連結され、被験体に注射され、上記腫瘍への上記酵素の選択的結合を生じる。腫瘍と正常組織との間の酵素レベルの区別が十分である場合、プロドラッグは、上記被験体に投与される。上記プロドラッグは、上記酵素によってその活性な形態へと、上記腫瘍内でのみ変化される。選択性は、上記抗体の腫瘍特異性によって、そしてプロドラッグ投与を、腫瘍と正常組織との間の酵素レベルの大きな差異が存在するようになるまで遅らせることによって、達成される。初期の治験は有望であり、ＡＤＥＰＴが、腫瘍関連抗体もしくは腫瘍特異的抗体が公知である全ての固形癌の有効な処置になり得ることを示す。腫瘍はまた、プロドラッグ活性化酵素をコードする遺伝子を用いて、標的とされてきた。このアプローチは、ウイルス指向性酵素プロドラッグ治療（ＶＤＥＰＴ）もしくはより一般には、ＧＤＥＰＴ（遺伝子指向性酵素プロドラッグ治療）といわれており、実験系において良好な結果を示した。指向性酵素プロドラッグ治療の他のバージョンとしては、ＰＤＥＰＴ（ポリマー指向性酵素プロドラッグ治療）、ＬＥＡＰＴ（レクチン指向性酵素活性化プロドラッグ治療）、およびＣＤＥＰＴ（クロストリジウム指向性酵素プロドラッグ治療）が挙げられる。本発明に従う結合体は、毒素部分と会合されるプロドラッグ活性化酵素を含み、同様の方法において使用され得る。
【０１１５】
本発明における使用に適した酵素／プロドラッグ／活性薬物組汗の例は、例えば、Ｂａｇｓｈａｗｅら，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎｓ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，１９９９，１１：５７９−５８３；Ｗｉｌｍａｎ，「Ｐｒｏｄｒｕｇｓ  ｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ」，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  Ｔｒａｎｓａｃｔｉｏｎｓ，１４：３７５−３８２，６１５ｔｈ  Ｍｅｅｔｉｎｇ，Ｂｅｌｆａｓｔ，１９８６；Ｓｔｅｌｌａら，「Ｐｒｏｄｒｕｇｓ：  Ａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ  Ｔｏ  Ｔａｒｇｅｔｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ」，「Ｄｉｒｅｃｔｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ」，Ｂｏｒｃｈａｒｄｔら，（編），ｐｐ．２４７−２６７（Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ，１９８５）において記載されている。酵素／プロドラッグ／活性抗癌剤組み合わせの例は、例えば、Ｒｏｏｓｅｂｏｏｍら，Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｒｅｖｉｅｗｓ，２００４，５６：５３−１０２に記載される。
【０１１６】
プロドラッグ活性化酵素の例としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：ニトロレダクターゼ、シトクロームＰ４５０、プリン−ヌクレオシドホスホリラーゼ、チミジンキナーゼ、アルカリホスファターゼ、β−グルクロニダーゼ、カルボキシペプチダーゼ、ペニシリンアミダーゼ、β−ラクタマーゼ、シトシンデアミナーゼ、およびメチオニンγ−リアーゼ。
【０１１７】
プロドラッグ活性化酵素によるプロドラッグの活性化によってインビボで形成され得る抗癌剤の例としては、５−（アジリジン−１−イル）−４−ヒドロキシ−アミノ−２−ニトロ−ベンズアミド、イソホスホルアミドマスタード、ホスホルアミドマスタード、２−フルオロアデニン、６−メチルプリン、ガンシクロビル−トリホスフェートヌクレオチド、エトポシド、マイトマイシンＣ、ｐ−［Ｎ，Ｎ−ビス（２−クロロエチル）アミノ］フェノール（ＰＯＭ）、ドキソルビシン、オキサゾリジノン、９−アミノカンプトテシン、マスタード、メトトレキサート、安息香酸マスタード、ドキソルビシン、アドリアマイシン、ダウノマイシン、カルミノマイシン、ブレオマイシン、エスペラミシン、メルファラン、パリトキシン、４−デスアセチルビンブラスチン−３−カルボン酸ヒドラジド、フェニレンジアミンマスタード、４’−カルボキシフタラト（１，２−シクロヘキサン−ジアミン）白金、タキソール、５−フルオロウラシル、メチルセレノール、およびｃａｒｂｏｎｏｔｈｉｏｎｉｃジフルオリド（ｃａｒｂｏｎｏｔｈｉｏｎｉｃ  ｄｉｆｌｕｏｒｉｄｅ）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１１８】
（抗血管新生剤）
特定の実施形態において、本発明の結合体内の治療（例えば、抗癌）剤は、抗血管新生剤を含む。本発明における使用に適した抗血管新生剤としては、血管新生のプロセス、もしくは新たな血管が、既存の血管から発生することによって形成するプロセスをブロックするか、阻害するか、遅らせるかもしくは減少させる任意の分子、化合物もしくは因子が挙げられる。このような分子、化合物もしくは因子は、血管新生に関与する工程のうちのいずれか（（１）生じつつある脈管の膜の溶解、（２）内皮細胞の移動および増殖、ならびに（３）移動している細胞による新たな脈管の形成の工程を含む）をブロックするか、阻害するか、遅らせるか、または低下させることによって、血管新生をブロックし得る。
【０１１９】
抗血管新生剤の例としては、ベバシズマブ（アバスチン（登録商標））、セレコキシブ（セレブレックス（登録商標））、エンドスタチン、サリドマイド、ＥＭＤ１２１９７４（シレンジチド）、ＴＮＰ−４７０、スクアラミン、コンブレタスタチンＡ４、インターフェロン−α、抗ＶＥＧＦ抗体、ＳＵ５４１６、ＳＵ６６６８、ＰＴＫ７８７／２Ｋ  ２２５８４、Ｍａｒｉｍｉｓｔａｌ、ＡＧ３３４０、ＣＯＬ−３、Ｎｅｏｖａｓｔａｔ、およびＢＭＳ−２７５２９１が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１２０】
当業者に認識されるように、本明細書において引用される治療剤の具体例は、本発明の実施における使用に適した少数の治療剤を代表するに過ぎない。
【０１２１】
（被包剤）
いくつかの実施形態において、本発明によって提供される組成物は、１種以上の被包剤を含む。一般に、被包剤は、実体（例えば、結合体もしくは部分）を進入させるために使用され得る任意の生理学的に許容可能な薬剤であり得る。「封入される」によって、上記被包剤が、上記実体を取り囲み得るかもしくは囲い込み得るか、または「封入された」実体は、上記被包剤を含む物質内に、部分的にもしくは全体的に埋め込まれ得ることが、意味される。
【０１２２】
いくつかの実施形態において、上記被包剤は、上記治療部分の一部であり、上記毒素部分は、上記被包剤に結合体化される。いくつかのこのような実施形態において、上記毒素部分は、上記被包剤の外側表面に結合体化される。いくつかのこのような実施形態において、上記毒素部分は、上記被包剤の外側の環境に曝露される。上記毒素部分は、直接的相互作用（これは、非共有結合的であってもよいし、共有結合的であってもよい）によって上記被包剤に結合体化されてもよいし、リンカーを介して上記被包剤に結合体化されてもよい。
【０１２３】
いくつかの実施形態において、上記毒素部分および上記治療部分を含む結合体は、上記被包剤によって囲い込まれる。上記結合体は、規定されるおよび／もしくは上記被包剤によって作り出される空間もしくは環境（例えば、水性環境）内で部分的もしくは全体的に囲い込まれ得る。いくつかの実施形態において、上記結合体は、少なくとも部分的に、上記被包剤内に埋め込まれる。例えば、上記被包剤が脂質膜を含む場合、上記結合体は、少なくとも部分的に、上記膜中の脂質分子内にもしくはその分子の間に埋め込まれ得る。いくつかの実施形態において、上記結合体は、上記被包剤内に全体的に埋め込まれる。
【０１２４】
種々のタイプの被包剤が、当該分野で公知であり、このような薬剤を使用して、薬物、生体分子などを封入する方法も同様である。特定の実施形態において、上記被包剤は、コアおよび表面を有する小さな粒子を含む。このような被包剤としては、リポソーム、ミセル、微粒子、ナノ粒子などが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１２５】
リポソームは、代表的には、ほぼ球形の形状をした二層構造もしくは小胞であり、天然リン脂質もしくは合成リン脂質の膜から構成される。リポソームは、他の膜成分（例えば、コレステロールおよびタンパク質）さらに含み得る。リポソームの内部コアは、代表的には、水溶液を含む。治療剤および／もしくは結合体は、上記水溶液中に溶解され得る。先に言及したように、治療剤および結合体は、上記リポソームの膜内に埋め込まれ得る。リポソームは、核酸薬剤（例えば、を含む上記に記載されるもの）のような薬剤（ｓｉＲＮＡのような阻害性ＲＮＡ分子を含む）を送達するために特に有用であり得る。
【０１２６】
ミセルは、それらが一般に単層のリン脂質から形成され、内部水溶液を欠いていることを除いて、リポソームに類似している。内部水溶液を含めるために作製される逆ミセルはまた、本発明に従って使用され得る。
【０１２７】
いくつかの実施形態において、上記粒子は、微粒子（その少なくとも一方の寸法は、平均約１μｍより小さい）である。例えば、上記粒子の最も小さい寸法は、平均して約１００ｎｍ、約１２０ｎｍ、約１４０ｎｍ、約１６０ｎｍ、約１８０ｎｍ、約２００ｎｍ、約２２０ｎｍ、約２４０ｎｍ、約２６０ｎｍ、約２８０ｎｍ、約３００ｎｍ、約３２０ｎｍ、約３４０ｎｍ、約３６０ｎｍ、約３８０ｎｍ、約４００ｎｍ、約４２０ｎｍ、約４４０ｎｍ、約４６０ｎｍ、約４８０ｎｍ、約５００ｎｍ、約５５０ｎｍ、約６００ｎｍ、約６５０ｎｍ、約７００ｎｍ、約７５０ｎｍ、約８００ｎｍ、約８５０ｎｍ、約９００ｎｍ、もしくは約９５０ｎｍであり得る。
【０１２８】
いくつかの実施形態において、上記粒子は、その少なくとも一方の寸法が平均して約１００μｍより小さいナノ粒子である。例えば、上記粒子の最も小さい寸法は、平均して、約１ｎｍ、約２ｎｍ、約３ｎｍ、約４ｎｍ、約５ｎｍ、約６ｎｍ、約７ｎｍ、約８ｎｍ、約９ｎｍ、約１０ｎｍ、約１１ｎｍ、約１２ｎｍ、約１３ｎｍ、約１４ｎｍ、約１５ｎｍ、約１６ｎｍ、約１７ｎｍ、約１８ｎｍ、約１９ｎｍ、約２０ｎｍ、約２２ｎｍ、約２４ｎｍ、約２６ｎｍ、約２８ｎｍ、約３０ｎｍ、約３２ｎｍ、約３４ｎｍ、約３６ｎｍ、約３８ｎｍ、約４０ｎｍ、  約４２ｎｍ、約４４ｎｍ、約４６ｎｍ、約４８ｎｍ、約５０ｎｍ、約５５ｎｍ、約６０ｎｍ、約６５ｎｍ、約７０ｎｍ、  約７５ｎｍ、約８０ｎｍ、約８５ｎｍ、約９０ｎｍ、約９５ｎｍ、もしくは約１００ｎｍであり得る。
【０１２９】
いくつかの実施形態において、上記粒子のコアは、磁気共鳴活性を有する物質を含み、この物質は、診断適用および／もしくは治療適用において有利であり得る。磁気共鳴活性を有する物質としては、金属およびそれらの酸化物（例えば、アルミニウム含有金属、コバルト含有金属、インジウム含有金属、鉄含有金属、銅含有金属、ゲルマニウム含有金属、マンガン含有金属、ニッケル含有金属、スズ含有金属、チタン含有金属、パラジウム含有金属、白金含有金属、セレン含有金属、ケイ素含有金属、銀含有金属、亜鉛含有金属など）が挙げられる。
【０１３０】
いくつかの実施形態において、治療剤は、核酸を含む。核酸は、上記被包剤内に完全に囲い込まれ得る。いくつかの実施形態において、核酸薬剤は、上記被包剤内に埋め込まれ得る。例えば、上記被包剤は、リポソームであり得、上記核酸薬剤は、上記リポソーム内に囲い込まれ得る。上記核酸薬剤は、少なくとも部分的に、上記リポソームの上記脂質分子内に存在し得る。
【０１３１】
（ＩＩ−薬学的組成物および処方物）
本明細書において記載される結合体は、それ自体で投与されてもよいし、薬学的組成物の形態で投与されてもよい。従って、本発明は、有効量の少なくとも１つの本発明の結合体および少なくとも１種の薬学的に受容可能なキャリアを含む薬学的組成物を提供する。
【０１３２】
結合体、もしくはその薬学的組成物は、本発明に従ってこのような量で、そして少なくとも１つの所望の結果を達成するに必要もしくは十分であるような時間にわたって投与され得る。例えば、本発明の薬学的組成物は、このような量で、そして上記薬学的組成物が癌細胞を死滅させ、腫瘍サイズを縮小し、腫瘍増殖もしくは転移を阻害し、種々の白血病を処置し、そして／またはその疾患を有する哺乳動物（ヒトを含む）の生存時間を長期化するか、別の方法で臨床的利益を得るような時間にわたって、投与され得る。
【０１３３】
薬学的組成物は、本発明に従って、望ましい治療効果を達成するに有効な任意の量および任意の投与経路を使用して投与され得る。
【０１３４】
投与されるべき薬学的組成物の正確な量は、種、年齢、および上記被験体の全身状態、状態の重篤度などに依存して被験体間で変動する（以下を参照のこと）。
【０１３５】
最適な薬学的処方物は、投与経路および望ましい投与量に依存して変動し得る。このような処方物は、上記投与された化合物の物理的状態、安定性、インビボ放出速度、およびインビボクリアランスの速度に影響を及ぼし得る。
【０１３６】
本発明の薬学的組成物は、投与の容易さおよび投与量の均一性のために、単位投与形態で処方され得る。表現「単位投与形態」とは、本明細書において使用される場合、処置されるべき患者に対して結合体の物理的に別個の単位（１種以上のさらなる薬剤ありまたはなしで）をいう。しかし、本発明の組成物の全体の一日し右腰量は、妥当な医学的判断の範囲内で、主治医によって決定されることが理解される。
【０１３７】
１種以上の適切な生理学的に受容可能なキャリアもしくは賦形剤とともに、望ましい投与量において処方した後に、本発明の薬学的組成物は、任意の適切な経路によって、ヒトもしくは他の哺乳動物に投与され得る。種々の送達系が公知であり、このような組成物を投与するために使用され得、それらとしては、錠剤、カプセル剤、注射用溶液などが挙げられる。投与方法としては、皮膚経路、皮内経路、筋肉内経路、腹腔内経路、静脈内経路、皮下経路、鼻内経路、肺経路、表皮系路、眼の経路、および経口経路が挙げられるが、これらに限定されない。本発明の組成物は、任意の従来からの経路もしくは別の適切な経路によって（例えば、注入もしくはボーラス注射によって、上皮もしくは粘膜と粘膜内層を介する吸収によって（例えば、口内粘膜、直腸および腸粘膜など）投与されてもよいし、他の生物学的に活性な薬剤と一緒に投与されてもよい。投与は、全身であってもよいし、局所であってもよい。
【０１３８】
注射用調製物（例えば、滅菌注射用水性懸濁物もしくは油性懸濁物）は、適切な分散剤もしくは湿潤剤、および懸濁剤を使用して、公知の技術に従って処方され得る。滅菌注射用調製物はまた、非毒性の非経口的に受容可能な希釈剤もしくは溶媒中の滅菌注射用溶液、懸濁物もしくはエマルジョン（例えば、２，３−ブタンジオール中の溶液として）であり得る。使用され得る上記受容可能なビヒクルおよび溶媒の中では、水、リンゲル溶液（米国局方）および等張性塩化ナトリウム溶液が使用され得る。さらに、滅菌不揮発性油は、溶液もしくは懸濁媒体として従来から使用されている。この目的のために、任意の刺激の強くない不揮発性油が、使用され得、これとしては、合成のモノグリセリドもしくはジグリセリドが挙げられる。脂肪酸（例えば、オレイン酸）はまた、注射用処方物の調製において使用され得る。滅菌液体キャリアは、非経口投与のための組成物を形成する滅菌液体において有用である。
【０１３９】
注射用処方物は、例えば、細菌保持フィルタを通す濾過によって、もしくは使用前に滅菌水もしくは他の滅菌注射用媒体中に溶解もしくは分散され得る、滅菌剤を滅菌固体組成物の形態で組み込むことによって、滅菌され得る。滅菌溶液もしくは懸濁物である液体薬学的組成物は、例えば、静脈内注射、筋肉内注射、腹腔内注射もしくは皮下注射によって投与され得る。注射は、１回押し出しを介してもしくは徐々に注入することによる（例えば、３０分間の静脈内注入）ものであり得る。必要であれば、上記組成物は、注射部位における疼痛を和らげるために、局所麻酔剤を含み得る。
【０１４０】
薬物の効果を長期化するために、皮下注射もしくは筋肉注射から薬物の吸収を遅らせることは、しばしば望ましい。このことは、水溶解度が不十分な結晶性もしくは非定型物質をの液体懸濁物を使用することによって、達成され得る。すると、上記薬物の吸収速度は、その溶解速度に依存し、この溶解速度は、続いて、結晶サイズおよび結晶形態に依存し得る。あるいは、非経口投与された薬物形態の遅延した吸収は、油性ビヒクル中に上記薬物を溶解もしくは懸濁することによって達成される。注射用デポー形態は、生分解性ポリマー（例えば、ポリラクチド−ポリグリコリド）中に上記薬物の微小カプセル化マトリクスを形成することによって作製される。薬物  対  ポリマーの比および使用される特定のポリマーの性質に依存して、上記薬物の放出速度は、制御され得る。他の生分解性ポリマーの例としては、ポリ（オルトエステル）およびポリ（無水物）が挙げられる。デポー注射様処方物はまた、上記薬物を、身体組織と適合性であるリポソーム（脂質小胞としても公知）もしくはマイクロエマルジョン中に閉じこめることによって調製され得る。
【０１４１】
経口投与のための液体投与形態としては、薬学的に受容可能なエマルジョン、マイクロエマルジョン、液剤、懸濁物、シロップ剤、エリキシル剤、および加圧組成物が挙げられるが、これらに限定されない。上記活性成分（すなわち、結合体）に加えて、上記液体投与形態は、当該分野で一般に使用される不活性希釈剤（例えば、水もしくは他の溶媒、可溶化剤および乳化剤（例えば、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド）、油（特に、綿実油、ラッカセイ油、コーン油、胚芽油、オリーブ油、ひまし油、およびごま油）、グリセロール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレングリコールおよびソルビタンの脂肪酸エステル、ならびにこれらの混合物）を含み得る。不活性希釈剤の他に、上記経口用組成物はまた、補助剤（例えば、湿潤剤、懸濁剤、保存剤、甘味剤、矯味矯臭剤、および芳香剤、濃化剤、着色剤、粘性調節剤、安定化剤もしくは浸透圧調節剤）を含み得る。経口投与のための液体キャリアの適切な例としては、水（部分的に、上記のような添加剤を含む）；例えば、セルロース誘導体（例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム溶液）、アルコール（一価アルコールおよび多価アルコール（例えば、グリコール）を含む）およびそれらの誘導体、ならびに油（例えば、分画ココナツ油および落花生油）が挙げられる。
【０１４２】
経口投与のための固体投与形態としては、例えば、カプセル剤、錠剤、丸剤、散剤、および顆粒剤が挙げられる。このような固体投与形態において、上記活性成分は、少なくとも１種の不活性な生理学的に受容可能な賦形剤もしくはキャリア（例えば、クエン酸ナトリウムもしくはリン酸ニカルシウム）および以下のうちの１種以上と混合される：（ａ）充填剤もしくは増量剤（例えば、デンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール、およびケイ酸）；（ｂ）結合剤（例えば、カルボキシメチルセルロース、アルギネート、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、スクロースおよびアカシアガム）；（ｃ）湿潤剤（ｈｕｍｅｃｔａｎｔ）（例えば、グリセロール）；（ｄ）崩壊剤（例えば、寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモもしくはタピオカのデンプン、アルギン酸、特定のケイ酸塩、および炭酸ナトリウム）；（ｅ）溶液抑制剤（ｓｏｌｕｔｉｏｎ  ｒｅｔａｒｄｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）（例えばパラフィン）；（ｆ）吸収促進剤（例えば、四級アンモニウム化合物）；（ｇ）湿潤剤（ｗｅｔｔｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）（例えば、例えば、セチルアルコールおよびグリセロールモノステアレート）；（ｈ）吸収剤（例えば、カオリンおよびベントナイトクレイ）；ならびに（ｉ）滑沢剤（例えば、タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム、およびこれらの混合物）。固体処方物に適した他の賦形剤としては、表面改変剤（例えば、非イオン性表面改変剤およびアニオン性表面改変剤）が挙げられる。表面改変剤の代表例としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：ポロキサマー１８８、塩化ベンザルコニウム、ステアリン酸カルシウム、セトステアリルアルコール、セトマクロゴール乳化ワックス、ソルビタンエステル、コロイド性二酸化ケイ素、ホスフェート、ドデシル硫酸ナトリウム、マグネシウムアルミニウムシリケート、およびトリエタノールアミン。カプセル剤、錠剤および丸剤の場合、上記投与形態はまた、緩衝化剤を含み得る。固体投与形態あたりの固体キャリアの量は、広く変動するが、好ましくは、約２５ｍｇ〜約１ｇである。
【０１４３】
類似のタイプの固体組成物はまた、ラクトースもしくは乳糖および高分子量ポリエチレングリコールなどの様な賦形剤を使用して、軟質充填ゼラチンカプセル剤および硬質充填ゼラチンカプセル剤中の充填剤として使用され得る。錠剤、糖衣錠、カプセル剤、丸剤および顆粒剤の上記固体投与形態は、コーティングおよび殻（例えば、腸溶性コーティング、放出制御コーティングおよび他の製薬分野で周知のコーティング）で調製され得る。上記投与形態は、必要に応じて、不透明化剤を含み得、そしてまた、組成物が、活性成分のみを、もしくは優先的に、腸管の特定の部分において、必要に応じて遅延した様式で放出するようにされ得る。使用され得る埋め込み組成物の例は、ポリマー物質およびワックスを含む。
【０１４４】
特定の実施形態において、処置の必要な領域に、本発明の組成物を局所的に投与することは望ましいことであり得る。このことは、例えば、限定ではなく、手術の間の局所的注入、局所的適用、注射によって、カテーテルによって、坐剤によって、または皮膚パッチもしくはステントもしくは他のインプラントによって、達成され得る。
【０１４５】
局所投与のために、組成物は、好ましくは、キャリア（例えば、水、グリセロール、アルコール、プロピレングリコール、脂肪アルコール、トリグリセリド、脂肪酸エステル、もしくはミネラルオイル）を含み得るゲル、軟膏剤、ローション剤、もしくはクリーム剤として処方され得る。他の局所的キャリアとしては、流動パラフィン（ｌｉｑｕｉｄ  ｐｅｔｒｏｌｅｕｍ）、パルミチン酸イソプロピル、ポリエチレングリコール、エタノール（９５％）、水中ポリオキシエチレンモノラウレート（５％）、もしくは水中ラウリル硫酸ナトリウム（５％）が挙げられる。抗酸化剤、湿潤剤（ｈｕｍｅｃｔａｎｔ、粘性安定化剤、および類似の薬剤の他の物質は、必要な場合に添加され得る。経皮浸透増強剤（例えば、アゾン）はまた、含められ得る。
【０１４６】
さらに、特定の場合に、本発明の組成物が、皮膚の上にもしくは皮膚の下に配置される経皮デバイス内に配置され得ることが予期される。このようなデバイスとしては、受動的もしくは能動的いずれかの放出機構によって皮膚に化合物を放出するパッチ、インプラント、および注射物が挙げられる。経皮投与は、身体の表面および身体経路の内層（上皮組織および粘膜組織を含む）を横断する全ての投与を含む。このような投与は、本発明の組成物を、ローション剤、クリーム剤、泡沫剤、パッチ、懸濁物、液剤および坐剤（直腸および膣の）において実施され得る。
【０１４７】
経皮投与は、活性成分および皮膚に対して非毒性でありかつ皮膚を介した血流への全身吸収のために上記活性成分のうちの少なくともいくらかの送達を可能にするキャリアを含む経皮パッチの使用を介して達成され得る。上記キャリアは、任意の数の形態（例えば、クリーム剤および軟膏剤、パスタ剤、ゲル、および閉塞性デバイス）をとり得る。クリーム剤および軟膏剤は、水中油型もしくは油中水型いずれかの粘性の液体もしくは半固体のエマルジョンであり得る。活性成分を含むワセリン（ｐｅｔｒｏｌｅｕｍ）もしくは親水性ワセリン（ｈｙｄｒｏｐｈｉｌｉｃ  ｐｅｔｒｏｌｅｕｍ）中に分散させた吸収性散剤から構成される吸収性パスタ剤もまた、適切であり得る。種々の閉塞性デバイスが、活性成分を血流へ放出するために使用され得る（例えば、キャリアありまたはなしの上記活性成分を含むレザバあるいは上記活性成分を含むマトリクスを覆う半透膜）。
【０１４８】
坐剤処方物は、古典的な物質（カカオ脂を含む）から、坐剤の融解点を変化させるワックス、およびグリセリンを添加してもしくは添加せずに作製され得る。水溶性坐剤基剤（例えば、種々の分子量のポリエチレングリコール）もまた、使用され得る。
【０１４９】
種々の処方物を生成するための材料および方法は、当該分野で公知であり、本発明を実施するために適合され得る。
【０１５０】
（ＩＩＩ−投与量および投与）
本発明に従う処置は、単一用量もしくは一定期間にわたる複数用量からなり得る。
【０１５１】
投与は、ｍａｙ  ｂｅ  １日に、１週間に（もしくはある他の複数日の間隔で）、もしくは断続的スケジュールで１回もしくは複数回であり得る。例えば、本発明の薬学的組成物は、数週間の期間（例えば、４〜１０週間）にわたって１週間に１回のベースで、１日あたり１回以上投与され得る。あるいは、本発明の薬学的組成物は、数日（例えば、１〜１０日間）の期間にわたって１日１回投与され得、続いて、数日の期間（例えば、１〜３０日間）投与されず、そのサイクルが所定の回数（例えば、２〜１０サイクル）、反復される。
【０１５２】
投与は、注射（皮下注射、静脈内注射、筋肉内注射、腹腔内注射など）もしくは経口投与のような任意の従来の様式において実施され得る。
【０１５３】
投与経路に依存して、有効用量は、処置されるべき上記被験体の器官の機能、体重、もしくは体表面積に応じて計算され得る。適切な投与量の最適化は、ヒトの治験において観察された薬物動態データに鑑みて、当業者によって容易になされ得る。最終的な投与レジメンは、上記薬物の作用を改変する種々の要因（例えば、上記薬物の比活性、上記患者の損傷の重篤度および応答性、上記患者の年齢、状態、体重、性別および食事、任意の存在する感染の重篤度、投与時間、同時に行う治療の有用性（ｕｓｅ）（もしくはないか）、ならびに他の臨床的要因を考慮して、主治医によって決定される。本発明の組み合わせを使用して研究を行う場合、さらなる情報は、適切な投与レベルおよび処置時間に関して分かってくる。
【０１５４】
代表的な投与量は、１．０ｐｇ／ｋｇ体重〜１００ｍｇ／ｋｇ体重を含む。例えば、全身投与については、投与量は、１００．０ｎｇ／ｋｇ体重〜１０．０ｍｇ／ｋｇ体重であり得る。マイクロ注入を介した上記部位への直接投与については、投与量は、１ｎｇ／ｋｇ体重〜１ｍｇ／ｋｇ体重であり得る。
【０１５５】
本発明の薬学的組み合わせは、さらなる治療と組み合わせて使用され得ることが認識される（すなわち、本発明に従う処置は、１種以上の望ましい治療剤もしくは医療手順と同時、その前、もしくはその後に施され得る）。このような組み合わせレジメンにおいて使用するための治療（治療剤もしくは手順）の特定の組み合わせは、所望の治療剤の適合性および／もしくは手順、ならびに達成されるべき望まし治療効果を考慮に入れる。
【０１５６】
例えば、本発明の方法および組成物は、他の手順（外科手術、放射線療法（例えば、γ線照射、プロトンビーム放射線療法、電子ビーム放射線療法、プロトン療法、近接照射療法、および全身的放射活性同位体）、内分泌療法、加温療法および低温療法が挙げられる）と一緒に使用され得る。
【０１５７】
代わりにもしくはさらに、本発明の方法および組成物は、任意の有害な効果を減弱する他の薬剤（例えば、制吐剤）、および／もしくは他の承認された化学療法剤（いくつか挙げると、アルキル化剤（メクロレタミン、クロラムブシル、シクロホスファミド、メルファラン、イホスファミド）、代謝拮抗物質（メトトレキサート）、プリンアンタゴニストおよびピリミジンアンタゴニスト（６−メルカプトプリン、５−フルオロウラシル、シタラビン、ゲムシタビン）、紡錘体毒素（ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビノレルビン、パクリタキセル）、ポドフィロトキシン（エトポシド、イリノテカン、トポテカン）、抗生物質（ドキソルビシン、ブレオマイシン、マイトマイシン）、ニトロソウレア（カルムスチン、ロムスチン）、無機イオン（シスプラチン、カルボプラチン）、酵素（アスパラギナーゼ）、およびホルモン（タモキシフェン、ロイプロリド、フルタミド、およびメゲストロール）が挙げられるが、これらに限定されない）と一緒に使用され得る。最新の癌治療についてのより包括的な議論については、ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃａｎｃｅｒ．ｇｏｖ／、ＦＤＡ承認腫瘍薬物の列挙については、ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｆｄａ．ｇｏｖ／ｃｄｅｒ／ｃａｎｃｅｒ／ｄｒｕｇｌｉｓｔｆｒａｍｅ．ｈｔｍ、およびＴｈｅ  Ｍｅｒｃｋ  Ｍａｎｕａｌ，第１７版．１９９９（これらの内容全体が、本明細書に参考として援用される）を参照のこと。
【０１５８】
本発明の方法および組成物はまた、処置レジメンの一部として、細胞傷害薬剤の１種以上のさらなる組み合わせと一緒に使用され得る。ここで上記細胞傷害性薬剤のさらなる組み合わせは、以下から選択される：ＣＨＯＰＰ（シクロホスファミド、ドキソルビシン、ビンクリスチン、プレドニゾン、およびプロカルバジン）；ＣＨＯＰ（シクロホスファミド、ドキソルビシン、ビンクリスチン、およびプレドニゾン）；ＣＯＰ（シクロホスファミド、ビンクリスチン、およびプレドニゾン）；ＣＡＰ−ＢＯＰ（シクロホスファミド、ドキソルビシン、プロカルバジン、ブレオマイシン、ビンクリスチン、およびプレドニゾン）；ｍ−ＢＡＣＯＤ（メトトレキサート、ブレオマイシン、ドキソルビシン、シクロホスファミド、ビンクリスチン、デキサメタゾン、およびロイコボリン）；ＰｒｏＭＡＣＥ−ＭＯＰＰ（プレドニゾン、メトトレキサート、ドキソルビシン、シクロホスファミド、エトポシド、ロイコボリン、メクロレタミン、ビンクリスチン、プレドニゾン、およびプロカルバジン）；ＰｒｏＭＡＣＥ−ＣｙｔａＢＯＭ（プレドニゾン、メトトレキサート、ドキソルビシン、シクロホスファミド、エトポシド、ロイコボリン、シタラビン、ブレオマイシン、およびビンクリスチン）；ＭＡＣＯＰ−Ｂ（メトトレキサート、ドキソルビシン、シクロホスファミド、ビンクリスチン、プレドニゾン、ブレオマイシン、およびロイコボリン）；ＭＯＰＰ（メクロレタミン、ビンクリスチン、プレドニゾン、およびプロカルバジン）；ＡＢＶＤ（アドリアマイシン／ドキソルビシン、ブレオマイシン、ビンブラスチン、およびダカルバジン）；ＡＢＶ（アドリアマイシン／ドキソルビシン、ブレオマイシン、およびビンブラスチン）の代わりにＭＯＰＰ（メクロレタミン、ビンクリスチン、プレドニゾンおよびプロカルバジン）；ＡＢＶＤ（アドリアマイシン／ドキソルビシン、ブレオマイシン、ビンブラスチン、およびダカルバジン）の代わりにＭＯＰＰ（メクロレタミン、ビンクリスチン、プレドニゾン、およびプロカルバジン）；ＣｈｌＶＰＰ（クロラムブシル、ビンブラスチン、プロカルバジン、およびプレドニゾン）；ＩＭＶＰ−１６（イホスファミド、メトトレキサート、およびエトポシド）；ＭＩＭＥ（メチル−ｇａｇ、イホスファミド、メトトレキサート、およびエトポシド）；ＤＨＡＰ（デキサメタゾン、高用量シタラビン、およびシスプラチン）；ＥＳＨＡＰ（エトポシド、メチルプレドニゾロン、高用量シタラビン、およびシスプラチン）；ＣＥＰＰ（Ｂ）（シクロホスファミド、エトポシド、プロカルバジン、プレドニゾン、およびブレオマイシン）；ＣＡＭＰ（ロムスチン、ミトキサントロン、シタラビン、およびプレドニゾン）；ＣＶＰ−１（シクロホスファミド、ビンクリスチン、およびプレドニゾン）、ＥＳＨＯＰ（エトポシド、メチルプレドニゾロン、高用量シタラビン、ビンクリスチンおよびシスプラチン）；ＥＰＯＣＨ（シクロホスファミドおよび経口プレドニゾンのボーラス用量での９６時間にわたってエトポシド、ビンクリスチン、およびドキソルビシン）、ＩＣＥ（イホスファミド、シクロホスファミド、およびエトポシド）、ＣＥＰＰ（Ｂ）（シクロホスファミド、エトポシド、プロカルバジン、プレドニゾン、およびブレオマイシン）、ＣＨＯＰ−Ｂ（シクロホスファミド、ドキソルビシン、ビンクリスチン、プレドニゾン、およびブレオマイシン）、ＣＥＰＰ−Ｂ（シクロホスファミド、エトポシド、プロカルバジン、およびブレオマイシン）、ならびにＰ／ＤＯＣＥ（エピルビシンもしくはドキソルビシン、ビンクリスチン、シクロホスファミド、およびプレドニゾン）。
【０１５９】
（ＩＶ−適応症）
本発明の組成物および方法は、原発性癌および／もしくは転移性癌、ならびに他の癌性状態を処置するために使用され得る。例えば、本発明の組成物および方法は、固形腫瘍のサイズを縮小し、腫瘍増殖もしくは転移を阻害し、種々のリンパ系癌を処置し、および／あるいはこれら疾患に罹患した哺乳動物（ヒトを含む）の生存期間を長期化するために有用であるはずである。
【０１６０】
本発明に従って処置され得る癌および癌性状態の例としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：脳および中枢神経系の腫瘍（例えば、髄膜、脳、脊髄、脳神経およびＣＮＳの他の部分の腫瘍（例えば、神経膠芽種もしくは髄芽腫））；頭部および／もしくは頸部の癌、乳房の腫瘍、循環系（例えば、心臓、縦隔および強膜、ならびに他の胸郭内器官）の腫瘍、血管腫瘍、ならびに腫瘍関連血管組織）；血液およびリンパ系の腫瘍（例えば、ホジキン病、非ホジキン病リンパ腫、ハーキットリンパ腫、ＡＩＤＳ関連リンパ腫、悪性免疫増殖疾患、多発性骨髄腫、および悪性形質細胞新生物、リンパ球性白血病、骨髄性白血病、急性リンパ性白血病もしくは慢性リンパ性白血病、単球性白血病、特定の細胞型の他の白血病、非特定細胞型の白血病、リンパ系、造血および関連組織の非特定悪性新生物（例えば、びまん性大細胞リンパ腫、Ｔ細胞リンパ腫もしくは皮膚浸潤性Ｔ細胞リンパ腫）；排泄系（例えば、腎臓、腎盂、尿管、膀胱、および他の尿器官）の腫瘍；胃腸管（例えば、食道、胃、小腸、結腸、結腸直腸、直腸Ｓ状結腸境界部、直腸、肛門、および肛門管）の腫瘍；肝臓および肝臓内胆管、胆嚢、および胆道の他の部分、膵臓、ならびに他の消化器官に関する腫瘍；口腔（例えば、口唇、舌、歯肉、口床、口蓋、耳下腺、唾液腺、扁桃、中咽頭、鼻咽頭、梨状洞（ｐｕｒｉｆｏｒｍ  ｓｉｎｕｓ）、下咽頭および口腔の他の部位）の腫瘍；生殖器系（例えば、外陰、膣、子宮頸管、子宮、卵巣、および女性生殖器と関連する他の部位、胎盤、陰茎、前立腺、精巣および男性生殖器と関連する他の部位）の腫瘍；気道の腫瘍（例えば、鼻腔、中耳、副鼻腔（ａｃｃｅｓｓｏｒｙ  ｓｉｎｕｓ）、喉頭、気管、気管支および肺の腫瘍（例えば、小細胞肺癌および非小細胞肺癌））；骨格系（例えば、四肢の骨および関節軟骨、骨関節軟骨（ｂｏｎｅ  ａｒｔｉｃｕｌａｒ  ｃａｒｔｉｌａｇｅ）および他の部位）の腫瘍；皮膚の腫瘍（例えば、皮膚の悪性黒色腫、非黒色腫皮膚癌、皮膚の基底細胞癌、皮膚の扁平上皮細胞癌、中皮腫、カポージ肉腫）；ならびに他の組織に関する腫瘍（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ  末梢神経系および自律神経系、結合組織および軟組織、後腹膜および腹膜、眼および付属器、甲状腺、副腎、および他の内分泌腺と関連構造、リンパ節の二次的新生物および非特定悪性新生物、呼吸器系および消化器系の二次的悪性新生物、ならびに他の部位の二次的悪性新生物。
【０１６１】
より具体的には、本発明の特定の実施形態において、本発明の処置において使用される組成物および方法は、肉腫の処置において使用される。いくつかの実施形態において、本発明の組成物および方法は、膀胱癌、乳癌、慢性リンパ腫白血病、頭頸部癌、子宮内膜癌、非ホジキンリンパ腫、非小細胞肺癌、卵巣癌、膵臓癌、および前立腺癌の処置において使用される。
【０１６２】
本発明の組成物および方法を使用して処置され得る腫瘍は、他の化学療法剤での処置に不応性であり得る。用語「不応性」とは、腫瘍に関して本明細書において使用される場合、ｍｅａｎｓ  ｔｈａｔ  本発明の組成物以外の少なくとも１種の化学療法剤での処置の際に、上記腫瘍（および／もしくはその転移）が、このような化学療法剤の処置の後に全くもしくはごく弱い抗増殖応答を示す（すなわち、腫瘍増殖の阻害が全くないか、ごく弱い）こと、すなわち、他の（好ましくは、標準的な）化学療法剤で全く処置できないか、または不満足な結果しか伴わない腫瘍を意味する。本発明は、不応性腫瘍などの処置が言及される場合、（ｉ）１種以上の化学療法剤が患者の処置の間に既に失敗している腫瘍を包含するのみならず、（ｉｉ）他の手段（例えば、生検および化学療法剤の存在下での培養）によって不応性であることが示され得る腫瘍もまた含むことが理解されるべきである。
【０１６３】
（Ｖ−薬学的パックもしくはキット）
別の曲面において、本発明は、本発明の結合体の投与を可能にする本発明の薬学的組成物の１種以上の成分を含む１つ以上の容器（例えば、バイアル、アンプル、試験管、フラスコもしくはボトル）を含む薬学的パックもしくはキットを提供する。
【０１６４】
薬学的パックもしくはキットの種々の成分は、固体（例えば、凍結乾燥）もしくは液体形態において供給され得る。各成分は、一般に、そのそれぞれの容器中にアリコートに分けられるかまたは濃縮形態で提供されるのに適している。薬学的パックもしくはキットは、凍結乾燥成分の再構成のための媒体を含み得る。上記キットの個々の容器は、好ましくは、商業的スケールのためにぴったりと拘束して維持される。
【０１６５】
特定の実施形態において、薬学的パックもしくはキットは、１種以上のさらなる承認された治療剤（例えば、上記のように、１種以上の他の抗癌剤）を含む。必要に応じて、薬学的製品もしくは生物学的製品の製造、使用もしくは販売を規制する政府当局によって定められた形態の注意書きもしくはパッケージ挿入物は、このような容器と関連づけられ得る。この注意書きは、ヒト投与のための製造、使用もしくは販売の当局による承認を表す。上記注意書きもしくはパッケージ挿入物は、本明細書で開示される方法に従う薬学的組成物の使用のための説明書を含み得る。
【０１６６】
識別子（例えば、バーコード、高周波、ＩＤタグなど）は、上記キット中もしくはキット上に存在し得る。上記識別子は、例えば、品質制御、在庫管理、ワークステーション間の移動追跡の目的で、上記キットを個別に識別するために使用され得る。
【実施例】
【０１６７】
（実施例）
以下の実施例は、本発明を作製し実施するための好ましい態様のいくつかを記載する。しかし、これら実施例は例示目的に過ぎず、本発明の範囲を限定することを意味しないことが理解されるべきである。さらに、実施例中の記載が過去形で示されていなければ、本文は、本明細書の残りの部分と同様に、実験が実際に行われたか、またはデータが実際に得られたことを示唆することを意図しない。
【０１６８】
（実施例１：腫瘍細胞内のＴＭ−６０１の迅速な取り込みおよび長期間の細胞内位置）
本実施例は、癌細胞へのＴＭ−６０１の取り込みおよびその取り込み後の安定性を実証する。ヒト神経膠芽種細胞株Ｕ３７３を培養し、その培養培地に蛍光タグ化したＴＭ−６０１分子を添加することによって、固定せずにＴＭ−６０１取り込みについて染色した（図１において緑で示される）。２４時間後、上記培地を除去し、上記細胞を繰り返し洗浄して、残りの蛍光タグ化ＴＭ−６０１を除去した。参考のために、その核を、４’，６−ジアミジノ−２−フェニルインドール，ジヒドロクロリド（ＤＡＰＩ）（青）で染色し、図１Ａにおける写真を、共焦点顕微鏡で撮影した。次いで、上記細胞を、培地中に入れ、３７℃でさらに６日間培養し、２枚目の写真（図１Ｂ）を撮影した。その結果は、２４時間処置の間に上記細胞に入った上記蛍光タグ化ＴＭ−６０１が、最大６日間にわたって生細胞内に残っていることを示す。
（他の実施形態）
本発明の他の実施形態は、本明細書および本明細書で開示される本発明の実施の考察から、当業者に明らかである。本明細書および実施例は、単に例示と考えられ、本発明の真の範囲は、以下の特許請求の範囲によって示されることが意図される。
【図１】
2010535811.tif 000003
【国際調査報告】
2010535811.tif 000004
2010535811.tif 000005
2010535811.tif 000006