(57)【要約】  本発明は、薬理活性を有する式（Ｉ）で示される化合物またはその塩、それらの製造方法、それらを含有する医薬組成物、およびＳ１Ｐ１受容体によって媒介される種々の障害の治療におけるそれらの使用を提供する。2010524886.tif 000166
2010524886.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
2010524886.tif 000161
［式中、
Ｒ5およびＲ6の一方は水素またはＲ2であり、他方は（ａ）：
【化２】
2010524886.tif 000162
であり；
Ｒ3およびＲ4の一方は（ｂ）：
【化３】
2010524886.tif 000163
であり；
Ａは、フェニルまたは５員もしくは６員ヘテロアリール環であり；
Ｒ1は、水素であるか、または、ハロゲン、Ｃ(1-4)アルキル、Ｃ(1-4)アルコキシ、Ｃ(5-7)シクロアルキル、Ｃ(5-7)シクロアルコキシ、トリフルオロメトキシ、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメチル、シアノ、フェニル、５員または６員ヘテロアリール環、ピペリジニルおよびピロリジニルから独立して選択される３個までの置換基であり；
Ｒ2は、水素であるか、または、ハロゲン、Ｃ(1-4)アルキル、Ｃ(1-4)アルコキシ、トリフルオロメトキシ、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメチルおよびシアノから独立して選択される３個までの置換基であり；
Ｒ7は、水素またはハロゲンであり；
Ｚは、ＮまたはＯによって１回中断されていてもよく、そして、ハロゲン、メチルおよびヒドロキシルから独立して選択される４個までの置換基によって炭素上で置換されていてもよい（ただし、２個のヒドロキシル基によって置換されている炭素原子はない）、Ｃ(1-4)アルキルである］
で示される化合物またはその塩。
【請求項２】
式（ＩＡ）：
【化４】
2010524886.tif 000164
［式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7およびＺは請求項１に従って定義される］
で示される化合物またはその塩。
【請求項３】
式（ＩＢ）：
2010524886.tif 000165
［式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7およびＺは請求項１に従って定義される］
で示される化合物またはその塩。
【請求項４】
Ａが置換されていてもよいチオフェン、ピリジルまたはフェニルであり；そして、
Ｒ1が水素、クロロ、ブロモ、イソプロポキシ、プロポキシ、メトキシ、１−メチルプロポキシ、シアノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、シクロヘキシル、ピペリジン、ピロリジニル、エチル、２−メチルプロピル、フェニルおよびシクロペントキシから独立して選択される２個の置換基であり；そして、
Ｒ2が水素であり；そして、
Ｒ7が水素であり；そして、
Ｚが、ｇｅｍ−ジメチルによって置換されていてもよい、エチレンまたはプロピレンである、
請求項１または２記載の化合物。
【請求項５】
以下から選択される化合物またはその塩：
３−[５−(５−｛３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]プロパン酸、
３−(５−｛５−[３−クロロ−４−(エチルオキシ)フェニル]−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル｝−１Ｈ−インダゾール−１−イル)プロパン酸、
３−[５−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]プロパン酸、
３−[５−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]プロパン酸、
４−[５−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]ブタン酸、
３−(５−｛５−[４−[(１−メチルエチル)オキシ]−３−(トリフルオロメチル)フェニル]−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル｝−１Ｈ−インダゾール−１−イル)プロパン酸、
４−[４−(５−｛３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]ブタン酸、
４−[４−(５−｛３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]ブタン酸、
３−[４−(５−｛３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]プロパン酸、
３−(５−｛５−[３−クロロ−４−(プロピルオキシ)フェニル]−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル｝−１Ｈ−インダゾール−１−イル)プロパン酸、
３−[５−(５−｛３−クロロ−４−[(トリフルオロメチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]プロパン酸、
３−(５−｛５−[４−シクロヘキシル−３−(トリフルオロメチル)フェニル]−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル｝−１Ｈ−インダゾール−１−イル)プロパン酸、
３−(５−｛５−[４−(メチルオキシ)−３−(トリフルオロメチル)フェニル]−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル｝−１Ｈ−インダゾール−１−イル)プロパン酸
[５−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]酢酸、
３−(５−｛５−[３−クロロ−４−(メチルオキシ)フェニル]−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル｝−１Ｈ−インダゾール−１−イル)プロパン酸、
３−(５−｛５−[３−エチル−４−(１−ピペリジニル)フェニル]−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル｝−１Ｈ−インダゾール−１−イル)プロパン酸、
３−｛５−[５−(４−シクロヘキシル−３−エチルフェニル)−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル]−１Ｈ−インダゾール−１−イル｝プロパン酸、
３−(５−｛５−[３−シアノ−４−(２−メチルプロピル)フェニル]−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル｝−１Ｈ−インダゾール−１−イル)プロパン酸、
３−[５−(５−｛３−ブロモ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]プロパン酸、
３−(５−｛５−[３−クロロ−４−(２−メチルプロピル)フェニル]−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル｝−１Ｈ−インダゾール−１−イル)プロパン酸、
４−(５−｛５−[４−[(１−メチルエチル)オキシ]−３−(トリフルオロメチル)フェニル]−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル｝−１Ｈ−インダゾール−１−イル)ブタン酸、
３−｛５−[５−(２−シアノ−４−ビフェニリル)−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル]−１Ｈ−インダゾール−１−イル｝プロパン酸、
３−(５−｛５−[３−クロロ−４−(１−ピロリジニル)フェニル]−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル｝−１Ｈ−インダゾール−１−イル)プロパン酸、
４−[５−(５−｛５−クロロ−６−[(１−メチルエチル)オキシ]−３−ピリジニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]ブタン酸・塩酸塩、
４−[５−(５−｛５−クロロ−６−[(１−メチルエチル)オキシ]−３−ピリジニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−２Ｈ−インダゾール−２−イル]ブタン酸・塩酸塩、
４−(５−｛５−[２−(トリフルオロメチル)−４−ビフェニリル]−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル｝−１Ｈ−インダゾール−１−イル)ブタン酸、
４−(５−｛５−[２−(トリフルオロメチル)−４−ビフェニリル]−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル｝−２Ｈ−インダゾール−２−イル)ブタン酸、
３−[４−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]プロパン酸、
３−[４−(５−｛３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−２Ｈ−インダゾール−２−イル]プロパン酸、
３−[４−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−２Ｈ−インダゾール−２−イル]プロパン酸、
４−[４−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]ブタン酸、
４−(４−｛５−[３−エチル−４−(１−ピペリジニル)フェニル]−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル｝−１Ｈ−インダゾール−１−イル)ブタン酸、
４−(４−｛５−[２−(トリフルオロメチル)−４−ビフェニリル]−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル｝−１Ｈ−インダゾール−１−イル)ブタン酸、
４−[４−(５−｛３−クロロ−４−[(トリフルオロメチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]ブタン酸、
３−(４−｛５−[４−[(１−メチルエチル)オキシ]−３−(トリフルオロメチル)フェニル]−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル｝−１Ｈ−インダゾール−１−イル)プロパン酸、
４−[４−(５−｛５−クロロ−６−[(１−メチルエチル)オキシ]−３−ピリジニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]ブタン酸、
４−(４−｛５−[４−フェニル−５−(トリフルオロメチル)−２−チエニル]−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル｝−１Ｈ−インダゾール−１−イル)ブタン酸、
４−[４−(５−｛３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−２Ｈ−インダゾール−２−イル]ブタン酸、
３−｛５−[５−(３−シアノ−４−｛[(１Ｓ)−１−メチルプロピル]オキシ｝フェニル)−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル]−１Ｈ−インダゾール−１−イル｝プロパン酸ナトリウム、
３−｛５−[５−(３−シアノ−４−｛[(１Ｒ)−１−メチルプロピル]オキシ｝フェニル)−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル]−１Ｈ−インダゾール−１−イル｝プロパン酸ナトリウム、
３−(５−｛５−[３−シアノ−４−(シクロペンチルオキシ)フェニル]−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル｝−１Ｈ−インダゾール−１−イル)プロパン酸、
４−[５−(５−｛３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]ブタン酸、
４−(５−｛５−[４−フェニル−５−(トリフルオロメチル)−２−チエニル]−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル｝−１Ｈ−インダゾール−１−イル)ブタン酸、
４−[５−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−２Ｈ−インダゾール−２−イル]ブタン酸、
３−[５−(５−｛３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]−２,２−ジメチルプロパン酸、
３−[５−(５−｛３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−２Ｈ−インダゾール−２−イル]−２,２−ジメチルプロパン酸、
３−[４−(５−｛３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]−２,２−ジメチルプロパン酸、
３−[４−(５−｛５−クロロ−６−[(１−メチルエチル)オキシ]−３−ピリジニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]−２,２−ジメチルプロパン酸、
３−[５−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]−２,２−ジメチルプロパン酸、
４−[５−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]−２,２−ジメチルブタン酸、
３−[４−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]−２,２−ジメチルプロパン酸、
３−[５−(５−｛５−クロロ−６−[(１−メチルエチル)オキシ]−３−ピリジニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]−２,２−ジメチルプロパン酸、
４−[４−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]−２,２−ジメチルブタン酸、
４−[４−(５−｛５−クロロ−６−[(１−メチルエチル)オキシ]−３−ピリジニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]−２,２−ジメチルブタン酸。
【請求項６】
Ｓ１Ｐ１受容体によって媒介される病気または障害の治療のための請求項１〜５いずれか１項記載の化合物の使用。
【請求項７】
病気または障害が、多発性硬化症、自己免疫疾患、慢性炎症性疾患、喘息、炎症性ニューロパチー、関節炎、移植、クローン病、潰瘍性大腸炎、全身エリテマトーデス、乾癬、虚血再灌流障害、固形腫瘍、および腫瘍転移、血管新生に関連する疾患、血管病、疼痛疾患、急性ウイルス性疾患、炎症性腸疾患、インスリン依存性および非依存性糖尿病である、請求項６記載の使用。
【請求項８】
病気または障害が多発性硬化症である、請求項６または７記載の使用。
【請求項９】
Ｓ１Ｐ１受容体によって媒介される病気または障害の治療用の薬剤の製造のための、請求項１〜５いずれか１項記載の化合物の使用。
【請求項１０】
病気または障害が、多発性硬化症、自己免疫疾患、慢性炎症性疾患、喘息、炎症性ニューロパチー、関節炎、移植、クローン病、潰瘍性大腸炎、全身エリテマトーデス、乾癬、虚血再灌流障害、固形腫瘍、および腫瘍転移、血管新生に関連する疾患、血管病、疼痛疾患、急性ウイルス性疾患、炎症性腸疾患、インスリン依存性および非依存性糖尿病である、請求項９記載の使用。
【請求項１１】
病気または障害が多発性硬化症である、請求項９または１０記載の使用。
【請求項１２】
請求項１〜５いずれか１項記載の化合物を含む医薬組成物。
【請求項１３】
請求項１２記載の医薬組成物の調製方法。
【請求項１４】
ヒトを含む哺乳動物における、Ｓ１Ｐ１受容体によって媒介され得る病気または障害の治療方法であって、該患者に式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩の治療上安全かつ有効な量を投与することを含む、方法。
【請求項１５】
病気または疾患が、多発性硬化症、自己免疫疾患、慢性炎症性疾患、喘息、炎症性ニューロパチー、関節炎、移植、クローン病、潰瘍性大腸炎、全身エリテマトーデス、乾癬、虚血再灌流障害、固形腫瘍、および腫瘍転移、血管新生に関連する疾患、血管病、疼痛疾患、急性ウイルス性疾患、炎症性腸疾患、インスリン依存性および非依存性糖尿病である、請求項１４記載の治療方法。
【請求項１６】
病気または障害が多発性硬化症である、請求項１４または１５記載の治療方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、薬理活性を有する新規オキサジアゾール誘導体、それらの製造方法、それらを含有する医薬組成物、および種々の障害の治療におけるそれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
スフィンゴシン１−リン酸（Ｓ１Ｐ）は、スフィンゴシンキナーゼによるスフィンゴシンのリン酸化によって形成される生理活性脂質メディエーターであり、血中にて高レベルで見出される。それは、血小板およびマスト細胞のような造血系オリジンのものを包含する多くの細胞型によって生産および分泌される（非特許文献１；非特許文献２）。細胞増殖、分化、運動性、血管新生、ならび炎症細胞および血小板の活性化の調節を包含する、広範囲の生物学的作用を有する（非特許文献３）。受容体のＧタンパク質共役内皮分化遺伝子ファミリーの一部を形成するＳ１Ｐ反応性受容体の５種類のサブタイプ、Ｓ１Ｐ１（Ｅｄｇ−１）、Ｓ１Ｐ２（Ｅｄｇ−５）、Ｓ１Ｐ３（Ｅｄｇ−３）、Ｓ１Ｐ４（Ｅｄｇ−６）およびＳ１Ｐ５（Ｅｄｇ−８）が記載されている（非特許文献４、非特許文献２）。これらの５つの受容体は識別的ｍＲＮＡ発現を示し、Ｓ１Ｐ１〜３は広範に発現され、Ｓ１Ｐ４はリンパ系組織および造血系組織上で発現され、Ｓ１Ｐ５は主に脳において発現され、それほどではないが脾臓において発現される。それらは、異なるサブセットのＧタンパク質によってシグナル伝達して、様々な生物学的反応を促進する（非特許文献５、非特許文献２）。
【０００３】
提案されたＳ１Ｐ１受容体の役割としては、リンパ球輸送、サイトカイン誘導／抑制および内皮細胞に対する効果が挙げられる（非特許文献６）。Ｓ１Ｐ１受容体のアゴニストは、誘導された疾患の重篤度を軽減するために、ＭＳの実験的自己免疫性脳脊髄炎（ＥＡＥ）モデルを包含する多数の自己免疫性および移植動物モデルにて用いられている（非特許文献７；非特許文献８；非特許文献９；非特許文献１０）。この活性は、リンパ系を介するリンパ球循環に対するＳ１Ｐ１アゴニストの効果によって媒介されることが報告される。Ｓ１Ｐ１アゴニストによる処置は、結果として、リンパ節のような二次リンパ器官内でのリンパ球の捕捉を生じ、動物モデルにおいて可逆性末梢リンパ球減少症を誘発する（非特許文献１１、非特許文献１２；非特許文献１３）。アゴニストについての公表されたデータは、インターナリゼーションによりＳ１Ｐ１受容体の細胞表面からの消失を誘導することを示唆しており（非特許文献１４；非特許文献１５；非特許文献１６）、それは、リンパ節から血流中へのＴ細胞の移動の軽減に寄与する、免疫細胞上のＳ１Ｐ１受容体のこの減少である。
【０００４】
Ｓ１Ｐ１遺伝子欠失は胚性致死を引き起こす。リンパ球移動および輸送におけるＳ１Ｐ１受容体の役割を調べる実験は標識Ｓ１Ｐ１欠損Ｔ細胞の照射された野生型マウスへの養子移入を含んでいた。これらの細胞は二次リンパ器官からの放出の低下を示した（非特許文献１５）。
【０００５】
Ｓ１Ｐ１はまた、内皮細胞間結合調節における役割が記載されている（非特許文献１７、非特許文献１８）。この内皮作用に関して、Ｓ１Ｐ１アゴニストは、免疫障害を調節することにおける役割に寄与している可能性がある単離リンパ節に対する効果を有することが報告されている。Ｓ１Ｐ１アゴニストは、リンパ節をドレインし、リンパ球放出を防止するリンパ洞の内皮間質「ゲート」の閉鎖を引き起こした（非特許文献１９）。
【０００６】
免疫抑制性化合物ＦＴＹ７２０（特許文献１）は、動物およびヒトにおける循環リンパ球を減少させること、免疫障害動物モデルにおいて疾患調節活性を有すること、および再発寛解型多発性硬化症における寛解率を低下させることが示されている（非特許文献２０、非特許文献２１、非特許文献２２、非特許文献２３、非特許文献９、非特許文献２４、非特許文献２５、非特許文献２６、非特許文献２７）。この化合物は、スフィンゴシンキナーゼによりインビボでリン酸化されてＳ１Ｐ１、Ｓ１Ｐ３、Ｓ１Ｐ４およびＳ１Ｐ５受容体でアゴニスト活性を有する分子をもたらすプロドラッグである。臨床研究は、ＦＴＹ７２０による処置が処置を開始して２４時間のうちに徐脈を引き起こすことを立証している（非特許文献２７）。該徐脈は、多数の細胞ベース実験および動物実験に基づいて、Ｓ１Ｐ３受容体でのアゴニズムによるものと考えられる。これらは、ＦＴＹ７２０投与後の徐脈を示していない、野生型マウスとは異なるＳ１Ｐ３ノックアウト動物の使用およびＳ１Ｐ１選択的化合物の使用を包含する。（非特許文献２８、非特許文献１３、非特許文献２９）。
【０００７】
以下の特許出願には、Ｓ１Ｐ１アゴニストとしてのオキサジアゾール誘導体が記載されている：特許文献２、特許文献３、特許文献４、特許文献５、特許文献６および特許文献７。
【０００８】
以下の特許出願には、抗ピコルナウイルス剤としてのインドール−オキサジアゾール誘導体が記載されている：特許文献８。以下の特許出願には、それぞれ、ロイコトリエン受容体アンタゴニスト、殺虫剤および農薬用殺菌剤としてのインドール−カルボン酸誘導体が記載されている：特許文献９、特許文献１０および特許文献１１。
【０００９】
特許文献１２には、Ｓ１Ｐ１受容体のアゴニストとしての種々の化合物が記載されている。
【００１０】
特許文献１３には、Ｓ１Ｐ１受容体のアゴニストとしてのインドール−オキサジアゾール化合物が記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１１】
【特許文献１】特開平１１−０８００２６号公報
【特許文献２】国際公開ＷＯ０３／１０５７７１
【特許文献３】国際公開ＷＯ０５／０５８８４８
【特許文献４】国際公開ＷＯ０６／０４７１９５
【特許文献５】国際公開ＷＯ０６／１００６３３
【特許文献６】国際公開ＷＯ０６／１１５１８８
【特許文献７】国際公開ＷＯ０６／１３１３３６
【特許文献８】国際公開ＷＯ９６／００９８２２
【特許文献９】国際公開ＷＯ０６／０９０８１７
【特許文献１０】ＥＰ ０ ４３９ ７８５
【特許文献１１】ＤＥ ３９ ３９ ２３８
【特許文献１２】国際公開ＷＯ０６／００１４６３
【特許文献１３】国際特許出願ＰＣＴ／ＥＰ２００７／０６４１８５
【非特許文献】
【００１２】
【非特許文献１】Okamoto et al 1998 J Biol Chem 273(42):27104
【非特許文献２】Sanchez and Hla 2004, J Cell Biochem 92:913
【非特許文献３】Pyne and Pyne 2000, Biochem J. 349: 385
【非特許文献４】Chun et al 2002 Pharmacological Reviews 54:265
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【非特許文献２１】Mandala et al 2002 Science 296:346
【非特許文献２２】Fujino et al 2003 J Pharmacology and Experimental Therapeutics 305:45658
【非特許文献２３】Brinkman et al 2004 American J Transplantation 4:1019
【非特許文献２４】Morris et al 2005 EurJ Immunol 35:3570
【非特許文献２５】Chiba 2005 Pharmacology and Therapeutics 108:308
【非特許文献２６】Kahan et al 2003, Transplantation 76:1079
【非特許文献２７】Kappos et al 2006 New Eng J Medicine 335:1124
【非特許文献２８】Hale et al 2004 Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 14:3501
【非特許文献２９】Koyrakh et al 2005 American J Transplantation 5:529
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１３】
この度、Ｓ１Ｐ１受容体のアゴニストを提供する構造上新しいクラスの化合物が見出された。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
本発明は、したがって、式（Ｉ）：
【化１】
2010524886.tif 000003
［式中、
Ｒ5およびＲ6の一方は水素またはＲ2であり、他方は（ａ）：
【化２】
2010524886.tif 000004
であり；
Ｒ3およびＲ4の一方は（ｂ）：
【化３】
2010524886.tif 000005
であり；
Ａは、フェニルまたは５員もしくは６員ヘテロアリール環であり；
Ｒ1は、水素であるか、または、ハロゲン、Ｃ(1-4)アルキル、Ｃ(1-4)アルコキシ、Ｃ(5-7)シクロアルキル、Ｃ(5-7)シクロアルコキシ、トリフルオロメトキシ、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメチル、シアノ、フェニル、５員または６員ヘテロアリール環、ピペリジニルおよびピロリジニルから独立して選択される３個までの置換基であり；
Ｒ2は、水素であるか、または、ハロゲン、Ｃ(1-4)アルキル、Ｃ(1-4)アルコキシ、トリフルオロメトキシ、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメチルおよびシアノから独立して選択される３個までの置換基であり；
Ｒ7は、水素またはハロゲンであり；
Ｚは、ＮまたはＯによって１回中断されていてもよく、そして、ハロゲン、メチルおよびヒドロキシルから独立して選択される４個までの置換基によって炭素上で置換されていてもよい（ただし、２個のヒドロキシル基によって置換されている炭素原子はない）、Ｃ(1-4)アルキルである］
で示される化合物またはその塩を提供する。
【００１５】
本発明は、したがって、式（ＩＡ）：
【化４】
2010524886.tif 000006
［式中、Ａ、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7およびＺは式（Ｉ）についての定義と同じである］
で示される化合物またはその塩を提供する。
【００１６】
本発明は、したがって、式（ＩＢ）：
【化５】
2010524886.tif 000007
［式中、Ａ、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7およびＺは式（Ｉ）についての定義と同じである］
で示される化合物またはその塩を提供する。
【００１７】
本発明は、したがって、式（ＩＩ）：
【化６】
2010524886.tif 000008
［式中、
Ｒ5およびＲ6の一方は水素またはＲ2であり、他方は（ａ）：
【化７】
2010524886.tif 000009
であり；
Ｒ3およびＲ4の一方は水素であり、他方は（ｂ）：
【化８】
2010524886.tif 000010
であり；
Ａは、フェニルまたは５員もしくは６員ヘテロアリール環であり；
Ｒ1は水素であるか、または、ハロゲン、Ｃ(1-4)アルキル、Ｃ(1-4)アルコキシ、トリフルオロメトキシ、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメチル、シアノ、および置換されていてもよいフェニルまたは置換されていてもよい５員もしくは６員ヘテロアリール環から独立して選択される３個までの置換基であり；
Ｒ2は、水素であるか、またはハロゲン、Ｃ(1-4)アルキル、Ｃ(1-4)アルコキシ、トリフルオロメトキシ、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメチルおよびシアノから独立して選択される３個までの置換基であり；
Ｒ7は水素またはハロゲンであり；
Ｚは、ＮまたはＯによって中断されていてもよく、そして、ハロゲンまたはメチルによって置換されていてもよい、Ｃ(1-4)アルキルである］
で示される化合物またはその医薬上許容される誘導体を提供する。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
Ｒ1がフェニルまたは５員もしくは６員ヘテロアリール環である場合、ハロゲン、Ｃ(1-4)アルキル、Ｃ(1-4)アルコキシ、トリフルオロメトキシ、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメチルおよびシアノから選択される３個までの置換基によって置換されていてもよい。
【００１９】
当然のことながら、式（ＩＩ）で示される化合物について、Ｒ4が（ｂ）である場合、Ｒ3は存在せず、芳香環における結合は上記式（ＩＢ）において示されているようにアレンジされる。
【００２０】
「アルキル」なる用語は、１つの基としてまたはアルコキシもしくはヒドロキシアルキルのような基の一部として、全ての異性体形の直鎖または分枝鎖アルキル基をいう。「Ｃ(1-4)アルキル」なる用語は、少なくとも１個で最大４個の炭素を含有する上記定義のアルキル基をいう。かかるアルキル基の例としては、メチル、エチル、プロピル、ｉｓｏ−プロピル、ｎ−ブチル、ｉｓｏ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、１−メチルプロピルまたは２−メチルプロピルが挙げられる。かかるアルコキシ基の例としては、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ｉｓｏ−プロポキシ、ブトキシ、ｉｓｏ−ブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、または１−メチルプロポキシが挙げられる。
【００２１】
好適なＣ(5-7)シクロアルキル基としては、シクロペンチル、シクロヘキシルおよびシクロヘプチルが挙げられる。
【００２２】
好適なＣ(5-7)シクロアルキルオキシ基としては、シクロペントキシ、シクロヘキシルオキシおよびシクロヘプトキシが挙げられる。
【００２３】
本明細書で用いる場合、「ハロゲン」なる用語は、フッ素（Ｆ）、塩素（Ｃｌ）、臭素（Ｂｒ）またはヨウ素（Ｉ）をいい、「ハロ」なる用語は、該ハロゲン：フルオロ（−Ｆ）、クロロ（−Ｃｌ）、ブロモ（−Ｂｒ）およびヨード（−Ｉ）をいう。
【００２４】
「ヘテロアリール」なる用語は、１個またはそれ以上のヘテロ原子を含む不飽和環を表す。ヘテロアリールなる用語が５員の基を表す場合、それは、Ｏ、ＮまたはＳから選択されるヘテロ原子を含有しており、さらに１〜３個の窒素原子を含有していてもよい。ヘテロアリールが６員の基を表す場合、それは、１〜３個の窒素原子を含有する。かかる５員または６員ヘテロアリール環の例としては、ピロリル、トリアゾリル、チアジアゾリル、テトラゾリル、イミダゾリル、ピラゾリル、イソチアゾリル、チアゾリル、イソオキサゾリル、オキサゾリル、オキサジアゾリル、フラザニル、フラニル、チエニル、ピリジル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニルおよびトリアジニルが挙げられる。
【００２５】
本発明の一の実施態様は、
Ａがチオフェン、ピリジルまたはフェニルであり；そして、
Ｒ1がクロロ、ブロモ、イソプロポキシ、プロポキシ、メトキシ、１−メチルプロポキシ、シアノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、シクロヘキシル、ピペリジン、ピロリジニル、エチル、２−メチルプロピル、フェニルおよびシクロペントキシから独立して選択される２個の置換基であり；そして、
Ｒ2が水素であり；そして、
Ｒ7が水素であり；そして、
Ｚがエチレンまたはプロピレンである（各々、ｇｅｍ−ジメチルによって置換されていてもよい）、
式（Ｉ）で示される化合物である。
【００２６】
本発明の一の実施態様は、
Ｒ6が（ａ）であり、そして、Ｒ5が水素であり；そして
Ａがチオフェン、ピリジルまたはフェニルであり；そして、
Ｒ1が、クロロ、ブロモ、イソプロポキシ、プロポキシ、メトキシ、１−メチルプロポキシ、シアノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、シクロヘキシル、ピペリジン、ピロリジニル、エチル、２−メチルプロピル、フェニルおよびシクロペントキシから独立して選択される２個の置換基であり；そして、
Ｒ2が水素であり；そして、
Ｒ7が水素であり；そして、
Ｚがエチレンまたはプロピレンである（各々、ｇｅｍ−ジメチルによって置換されていてもよい）、
式（Ｉ）で示される化合物である。
【００２７】
本発明の一の実施態様は、
Ｒ6が（ａ）であり、そして、Ｒ5が水素であり；そして、
Ａがフェニルであり；そして、
Ｒ1が、クロロ、イソプロポキシ、シアノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、ピペリジン、エチルおよびフェニルから独立して選択される２個の置換基であり；そして、
Ｒ2が水素であり；そして、
Ｒ7が水素であり；そして、
Ｚがエチレンまたはプロピレンである、
式（ＩＡ）で示される化合物である。
【００２８】
本発明の一の実施態様は、
Ｒ6が（ａ）であり、そして、Ｒ5が水素であり；そして、
Ａがフェニルであり；そして、
Ｒ1がクロロおよびイソプロポキシであり；そして、
Ｒ2が水素であり；そして、
Ｒ7が水素であり；そして、
Ｚがエチレンまたはプロピレンである、
式（ＩＡ）で示される化合物である。
【００２９】
本発明の一の実施態様は、
Ｒ6が（ａ）であり、そして、Ｒ5が水素であり；そして、
Ａがフェニルであり；そして、
Ｒ1がクロロ、イソプロポキシおよびシアノから独立して選択される２個の置換基であり；そして、
Ｒ2が水素であり；そして、
Ｒ7が水素であり；そして、
Ｚがエチレンまたはプロピレンである、
式（ＩＢ）で示される化合物である。
【００３０】
本発明の一の実施態様は、
Ｒ5が（ａ）であり、そして、Ｒ6が水素であり；そして、
Ａがチオフェン、ピリジルまたはフェニルであり；そして、
Ｒ1がクロロ、ブロモ、イソプロポキシ、プロポキシ、メトキシ、１−メチルプロポキシ、シアノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、シクロヘキシル、ピペリジン、ピロリジニル、エチル、２−メチルプロピル、フェニルおよびシクロペントキシから独立して選択される２個の置換基であり；そして、
Ｒ2が水素であり；そして、
Ｒ7が水素であり；そして、
Ｚがエチレンまたはプロピレンである（各々、ｇｅｍ−ジメチルによって置換されていてもよい）、
式（Ｉ）で示される化合物である。
【００３１】
本発明の一の実施態様は、
Ｒ5が（ａ）であり、そして、Ｒ6が水素であり；そして、
Ａがフェニルであり；そして、
Ｒ1がクロロおよびイソプロポキシであり；そして、
Ｒ2が水素であり；そして、
Ｒ7が水素であり；そして、
Ｚがエチレンである、
式（ＩＡ）で示される化合物である。
【００３２】
本発明の一の実施態様は、
Ｒ5が（ａ）であり、Ｒ6が水素であり；そして／または
Ａがフェニルであり；そして、
Ｒ1がクロロ、イソプロポキシ、フェニルおよびトリフルオロメチルから独立して選択される２個の置換基であり；そして、
Ｒ2が水素であり；そして、
Ｒ7が水素であり；そして、
Ｚがプロピレンである、
式（ＩＢ）で示される化合物である。
【００３３】
本発明の一の実施態様は、
Ｒ3が（ｂ）であり；そして／または
Ｒ5が（ａ）であり、そして、Ｒ6が水素であり；そして／または
Ａがチオフェンまたはフェニルで置換されていてもよく；そして／または
Ｒ1が水素、ハロゲン、Ｃ1-4アルコキシまたはトリフルオロメチルであり；そして／または
Ｒ2が水素であり；そして／または
Ｚがエチレンである、
式（ＩＩ）で示される化合物である。
【００３４】
本発明の一の実施態様は、
Ｒ3が（ｂ）であり；そして／または
Ｒ5が（ａ）であり、そして、Ｒ6が水素であり；そして／または
Ａがフェニルによって置換されているチオフェンであり；そして／または
Ｒ1が水素、ハロゲン、Ｃ1-4アルコキシまたはトリフルオロメチルであり；そして／または
Ｒ2が水素であり；そして／または
Ｚがエチレンである、
式（ＩＩ）で示される化合物である。
【００３５】
本発明は、エナンチオマー、ジアステレオ異性体およびその混合物（例えば、ラセミ化合物）を包含する式（Ｉ）で示される化合物の立体異性体形態のような全ての光学異性体にまで及ぶ。異なる立体異性体形態は、慣用的な方法によって１つをもう１つと分離または分割することができるか、または、慣用の立体選択的合成法または不斉合成法によって所定の異性体を得ることができる。
【００３６】
本発明の好適な化合物は、以下の化合物またはその塩である：
３−[５−(５−{３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]プロパン酸、
３−(５−｛５−[３−クロロ−４−(エチルオキシ)フェニル]−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル｝−１Ｈ−インダゾール−１−イル)プロパン酸、
３−[５−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]プロパン酸、
３−[５−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]プロパン酸、
【００３７】
４−[５−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]ブタン酸、
３−(５−｛５−[４−[(１−メチルエチル)オキシ]−３−(トリフルオロメチル)フェニル]−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル｝−１Ｈ−インダゾール−１−イル)プロパン酸、
４−[４−(５−｛３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]ブタン酸、
４−[４−(５−｛３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]ブタン酸、
３−[４−(５−｛３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]プロパン酸、
３−(５−｛５−[３−クロロ−４−(プロピルオキシ)フェニル]−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル｝−１Ｈ−インダゾール−１−イル)プロパン酸、
３−[５−(５−｛３−クロロ−４−[(トリフルオロメチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]プロパン酸、
３−(５−｛５−[４−シクロヘキシル−３−(トリフルオロメチル)フェニル]−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル｝−１Ｈ−インダゾール−１−イル)プロパン酸、
３−(５−｛５−[４−(メチルオキシ)−３−(トリフルオロメチル)フェニル]−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル｝−１Ｈ−インダゾール−１−イル)プロパン酸
[５−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]酢酸、
３−(５−｛５−[３−クロロ−４−(メチルオキシ)フェニル]−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル｝−１Ｈ−インダゾール−１−イル)プロパン酸、
３−(５−｛５−[３−エチル−４−(１−ピペリジニル)フェニル]−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル｝−１Ｈ−インダゾール−１−イル)プロパン酸、
【００３８】
３−｛５−[５−(４−シクロヘキシル−３−エチルフェニル)−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル]−１Ｈ−インダゾール−１−イル｝プロパン酸、
３−(５−｛５−[３−シアノ−４−(２−メチルプロピル)フェニル]−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル｝−１Ｈ−インダゾール−１−イル)プロパン酸、
３−[５−(５−｛３−ブロモ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]プロパン酸、
３−(５−｛５−[３−クロロ−４−(２−メチルプロピル)フェニル]−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル｝−１Ｈ−インダゾール−１−イル)プロパン酸、
４−(５−｛５−[４−[(１−メチルエチル)オキシ]−３−(トリフルオロメチル)フェニル]−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル｝−１Ｈ−インダゾール−１−イル)ブタン酸、
３−｛５−[５−(２−シアノ−４−ビフェニリル)−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル]−１Ｈ−インダゾール−１−イル｝プロパン酸、
３−(５−｛５−[３−クロロ−４−(１−ピロリジニル)フェニル]−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル｝−１Ｈ−インダゾール−１−イル)プロパン酸、
４−[５−(５−｛５−クロロ−６−[(１−メチルエチル)オキシ]−３−ピリジニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]ブタン酸・塩酸塩、
４−[５−(５−｛５−クロロ−６−[(１−メチルエチル)オキシ]−３−ピリジニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−２Ｈ−インダゾール−２−イル]ブタン酸・塩酸塩、
４−(５−｛５−[２−(トリフルオロメチル)−４−ビフェニリル]−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル｝−１Ｈ−インダゾール−１−イル)ブタン酸、
４−(５−｛５−[２−(トリフルオロメチル)−４−ビフェニリル]−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル｝−２Ｈ−インダゾール−２−イル)ブタン酸、
３−[４−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]プロパン酸、
【００３９】
３−[４−(５−｛３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−２Ｈ−インダゾール−２−イル]プロパン酸、
３−[４−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−２Ｈ−インダゾール−２−イル]プロパン酸、
４−[４−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]ブタン酸、
４−(４−｛５−[３−エチル−４−(１−ピペリジニル)フェニル]−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル｝−１Ｈ−インダゾール−１−イル)ブタン酸、
４−(４−｛５−[２−(トリフルオロメチル)−４−ビフェニリル]−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル｝−１Ｈ−インダゾール−１−イル)ブタン酸、
４−[４−(５−｛３−クロロ−４−[(トリフルオロメチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]ブタン酸、
３−(４−｛５−[４−[(１−メチルエチル)オキシ]−３−(トリフルオロメチル)フェニル]−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル｝−１Ｈ−インダゾール−１−イル)プロパン酸、
４−[４−(５−｛５−クロロ−６−[(１−メチルエチル)オキシ]−３−ピリジニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]ブタン酸、
４−(４−｛５−[４−フェニル−５−(トリフルオロメチル)−２−チエニル]−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル｝−１Ｈ−インダゾール−１−イル)ブタン酸、
４−[４−(５−｛３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−２Ｈ−インダゾール−２−イル]ブタン酸、
３−｛５−[５−(３−シアノ−４−｛[(１Ｓ)−１−メチルプロピル]オキシ｝フェニル)−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル]−１Ｈ−インダゾール−１−イル｝プロパン酸ナトリウム、
３−｛５−[５−(３−シアノ−４−｛[(１Ｒ)−１−メチルプロピル]オキシ｝フェニル)−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル]−１Ｈ−インダゾール−１−イル｝プロパン酸ナトリウム、
【００４０】
３−(５−｛５−[３−シアノ−４−(シクロペンチルオキシ)フェニル]−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル｝−１Ｈ−インダゾール−１−イル)プロパン酸、
４−[５−(５−｛３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]ブタン酸、
４−(５−｛５−[４−フェニル−５−(トリフルオロメチル)−２−チエニル]−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル｝−１Ｈ−インダゾール−１−イル)ブタン酸、
４−[５−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−２Ｈ−インダゾール−２−イル]ブタン酸、
３−[５−(５−｛３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]−２,２−ジメチルプロパン酸、
３−[５−(５−｛３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−２Ｈ−インダゾール−２−イル]−２,２−ジメチルプロパン酸、
３−[４−(５−｛３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]−２,２−ジメチルプロパン酸、
３−[４−(５−｛５−クロロ−６−[(１−メチルエチル)オキシ]−３−ピリジニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]−２,２−ジメチルプロパン酸、
３−[５−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]−２,２−ジメチルプロパン酸、
４−[５−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]−２,２−ジメチルブタン酸、
３−[４−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]−２,２−ジメチルプロパン酸、
３−[５−(５−｛５−クロロ−６−[(１−メチルエチル)オキシ]−３−ピリジニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]−２,２−ジメチルプロパン酸、
【００４１】
４−[４−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]−２,２−ジメチルブタン酸、
４−[４−(５−｛５−クロロ−６−[(１−メチルエチル)オキシ]−３−ピリジニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]−２,２−ジメチルブタン酸。
【００４２】
式（Ｉ）で示される化合物の医薬上許容される誘導体としては、受容者への投与により式（Ｉ）で示される化合物またはその活性代謝物もしくは残留物を（直接または間接的に）もたらす能力を有する式（Ｉ）で示される化合物の医薬上許容される塩、エステル、またはかかるエステルの塩が挙げられる。
【００４３】
式（Ｉ）で示される化合物は塩を形成することができる。当然のことながら、医薬で用いるためには、式（Ｉ）で示される化合物の塩は、医薬上許容されるべきである。適当な医薬上許容される塩は当業者に明らかであろうし、これらの塩としては、無機酸、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸またはリン酸；および有機酸、例えば、コハク酸、マレイン酸、酢酸、フマル酸、クエン酸、酒石酸、安息香酸、ｐ−トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸またはナフタレンスルホン酸を用いて形成される酸付加塩のような、J. Pharm. Sci., 1977, 66, 1-19に記載のものが挙げられる。式（Ｉ）で示される化合物には、１当量またはそれ以上の酸と酸付加塩を形成することができるものがある。本発明は、その範囲内に、全ての起こり得る化学量論形態または非化学量論形態を包含する。塩はまた、無機塩基および有機塩基を包含する医薬上許容される塩基から調製することもできる。無機塩基に由来する塩としては、アルミニウム、アンモニウム、カルシウム、銅、第二鉄、第一鉄、リチウム、マグネシウム、第一マンガン塩、第二マンガン、カリウム、ナトリウム、亜鉛および同類のものが挙げられる。医薬上許容される有機塩基に由来する塩としては、第一、第二および第三アミン；天然置換アミンを含む置換アミン；ならびに環状アミンの塩が挙げられる。詳細な医薬上許容される有機塩基としては、アルギニン、ベタイン、カフェイン、コリン、Ｎ,Ｎ'−ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチル−モルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン（hydrabamine）、イソプロピルアミン、リジン、メチルグルカミン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、プロカイン、プリン、テオブロミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミン、トリス(ヒドロキシメチル)アミノメタン（ＴＲＩＳ、トロメタモール）および同類のものが挙げられる。塩はまた、塩基性イオン交換樹脂、例えば、ポリアミン樹脂から形成され得る。本発明の化合物が塩基性である場合、塩は、無機酸および有機酸を包含する医薬上許容される酸から調製され得る。かかる酸としては、酢酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、クエン酸、エタンスルホン酸、エタンジスルホン酸、フマル酸、グルコン酸、グルタミン酸、臭化水素酸、塩化水素酸、イセチオン酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、ムチン酸、パモン酸、パントテン酸、リン酸、プロピオン酸、コハク酸、硫酸、酒石酸、ｐ−トルエンスルホン酸および同類のものが挙げられる。
【００４４】
式（Ｉ）で示される化合物は、結晶形または非結晶形で調製され得、結晶形の場合、水和化または溶媒和化されてもよい。本発明は、その範囲内に、化学量論的水和物または溶媒和物ならびに可変量の水および／または溶媒を含有する化合物を包含する。
【００４５】
さらなる態様では、本発明は、式（Ｉ）で示される化合物の製造方法を提供する。当業者には当然のことながら、スキーム１〜８はまた、適当な中間体を使用することにより、（記載するようなＲ5が（ａ）である場合ではなく）Ｒ6が（ａ）である式（Ｉ）で示される化合物の製造にも適用できる。式（ＩＶ）で示される化合物は、文献公知であり、Ｒ6が（ａ）である場合またはＲ5が（ａ）である場合のいずれかの場合の異性体が市販されている。
【００４６】
式（ＩＡ）で示される化合物を製造するために用いることができる一の経路をスキーム１に示す。
【００４７】
【化９】
2010524886.tif 000011
【００４８】
式（ＩＩＩ）で示される化合物をヒドラジン・水和物による処理によって式（ＩＶ）で示される化合物に変換することができるが、別法として、式（ＩＶ）で示される化合物は市販品であっても、文献に記載されているように製造されてもよい。
【００４９】
式（ＩＶ）で示される化合物を溶媒（例えば、メタノールまたはエタノール）中における高温（例えば、５０℃）でのヒドロキシルアミン・塩酸塩および適当な塩基（例えば、重炭酸ナトリウム）による処理によって式（Ｖ）で示される化合物に変換することができる。
【００５０】
式（Ｖ）で示される化合物を好適な溶媒（例えば、ＤＭＦ）中におけるＥＤＡＣおよびＨＯＢｔの存在下での式（ＶＩ）で示されるカルボン酸による処理によって式（ＶＩＩ）で示される化合物に変換することができる。かかる反応は、典型的には、高温（例えば、５０〜８０℃）で行われる。典型的には、該酸（ＶＩ）、ＥＤＡＣおよびＨＯＢｔは、式（Ｖ）で示される化合物の添加前に室温で一定時間撹拌する。式（ＶＩ）で示される酸は、市販品であっても、または以下に記載するような多くの経路によって製造されてもよい。
【００５１】
式（ＶＩＩ）で示される化合物を溶媒（例えば、ＤＭＦまたはＤＭＰＵ）中における塩基（例えば、炭酸セシウム）の存在下でのアルキル化剤（ＶＩＩＩ）による処理によって式（ＩＸ）で示される化合物に変換することができる。かかる反応は、高温（例えば、８０℃）で行われても、１４０℃のような温度でマイクロ波反応容器中にて行われてもよい。アルキル化剤（ＶＩＩＩ）は、典型的には、市販品であっても、標準的な方法を用いて製造されてもよい。
【００５２】
式（ＩＸ）で示される化合物をアルコール系溶媒（例えば、エタノールまたはメタノール）中における塩基（例えば、水酸化ナトリウム水溶液）による処理によって式（ＩＡ）で示される化合物に変換することができる。溶解を促進するために共溶媒（例えば、ＴＨＦ）を添加してもよい。加水分解反応は、室温で行われても、高温（例えば、５０〜８０℃）で行われてもよい。別法として、この変換は、１００℃のような温度でマイクロ波反応容器中にてエタノール中において固体水酸化ナトリウムを用いて行うことができる。別法として、かかる反応は、１６０℃のような温度で水の添加を伴ってエタノール中においてジメチルアミンを用いてマイクロ波反応容器中にて行うことができる。
【００５３】
（ＩＸ）を生じさせるための（ＶＩＩ）と（ＶＩＩＩ）との反応によって、式（Ｘ）で示される異性体化合物も生じることがある（スキーム２）。上記したような、ＤＭＦのような溶媒中における塩基（例えば、炭酸セシウム）を用いる式（ＶＩＩ）で示される化合物の式（ＶＩＩＩ）で示されるアルキル化剤による処理は、典型的にはクロマトグラフィーによって分離することができる式（ＩＸ）で示される化合物および式（Ｘ）で示される化合物の混合物を生じる。
【００５４】
【化１０】
2010524886.tif 000012
【００５５】
式（Ｘ）で示される化合物をスキーム３に記載の加水分解工程によって式（ＩＢ）で示される化合物に変換することができる。
【００５６】
【化１１】
2010524886.tif 000013
【００５７】
別法として、式（ＩＡ）で示される化合物および式（ＩＢ）で示される化合物は、スキーム４、５および６に概略記載された経路によって製造することができる。式（ＸＩ）で示される化合物および式（ＸＩＩ）で示される化合物は、溶媒（例えば、ＤＭＦ）中における塩基（例えば、炭酸セシウム）の存在下での式（ＶＩＩＩ）で示されるアルキル化剤との反応によって式（ＩＶ）で示される化合物から生じさせることができる。典型的には、かかる反応は高温（例えば、８０℃）で行われる。場合によっては化合物（ＸＩ）および（ＸＩＩ）をクロマトグラフィーによって分取するが、他の場合には、２つの化合物の混合物を次反応に用いて、典型的にはクロマトグラフィーによって分離することができる化合物（ＩＸ）および（Ｘ）の混合物を生じさせる。
【００５８】
【化１２】
2010524886.tif 000014
【００５９】
式（ＸＩ）で示される化合物をスキーム５に概略記載されるように式（ＩＸ）で示される化合物に変換することができる。
【００６０】
【化１３】
2010524886.tif 000015
【００６１】
式（ＸＩ）で示される化合物を高温（例えば、５０℃）での溶媒（例えば、エタノール）中におけるヒドロキシルアミン・塩酸塩および塩基（例えば、重炭酸ナトリウム）による処理によって式（ＸＩＩＩ）で示される化合物に変換することができる。
【００６２】
式（ＸＩＩＩ）で示される化合物を好適な溶媒（例えば、ＤＭＦ）中におけるＥＤＡＣおよびＨＯＢｔの存在下での式（ＶＩ）で示されるカルボン酸による処理によって式（ＩＸ）で示される化合物に変換することができる。かかる反応は、典型的には、高温（例えば、５０〜１２０℃）で行われる。しばしば、該酸（ＶＩ）、ＥＤＡＣおよびＨＯＢｔを式（ＸＩＩ）で示される化合物の添加前に室温にて一定時間撹拌するか、別法として、該試薬の全てを合わせて一緒に加熱することができる。式（ＩＸ）で示される化合物は、上記したように式（ＩＡ）で示される化合物に変換することができる。
【００６３】
式（ＸＩＩ）で示される化合物をスキーム６に概略記載されるように式（Ｘ）で示される化合物に変換することができる。
【００６４】
【化１４】
2010524886.tif 000016
【００６５】
式（ＸＩＩ）で示される化合物を高温（例えば、５０℃）で溶媒（例えば、エタノール）中におけるヒドロキシルアミン・塩酸塩および塩基（例えば、重炭酸ナトリウム）による処理によって式（ＸＩＶ）で示される化合物に変換することができる。
【００６６】
式（ＸＩＶ）で示される化合物を好適な溶媒（例えば、ＤＭＦ）中におけるＥＤＡＣおよびＨＯＢｔの存在下での式（ＶＩ）で示されるカルボン酸による処理によって式（Ｘ）で示される化合物に変換することができる。かかる反応は、典型的には、高温（例えば、８０〜１２０℃）で行われる。該酸（ＶＩ）、ＥＤＡＣおよびＨＯＢｔは、式（ＩＸ）で示される化合物の添加前に室温で一定の時間撹拌することができるが、別法として、該試薬の全てを合わせて一緒に加熱することができる。式（Ｘ）で示される化合物は、上記したように式（ＩＢ）で示される化合物に変換することができる。
【００６７】
スキーム７に概略記載した経路によってＺが−ＣＨ2−ＣＨ2−である式（ＸＩ）で示される化合物（式（ＸＶＩＩＩ）で示される化合物として示される）を製造することもできる。
【００６８】
【化１５】
2010524886.tif 000017
【００６９】
式（ＸＶ）で示される化合物を、５℃〜１５℃の温度での溶媒（例えば、クロロホルム）中での無水酢酸による処理に次いで室温〜８０℃の温度での塩基（例えば、酢酸カリウムおよび亜硝酸イソアミル）による処理によって式（ＸＶＩ）で示される化合物に変換することができる。
【００７０】
式（ＸＶＩ）で示される化合物を、還流温度での溶媒（例えば、アセトニトリル）中における塩基（例えば、ＤＢＵ）の存在下での２−プロペン酸エチルによる処理によって、異性体（ＸＩＸ）：
【化１６】
2010524886.tif 000018
の形成を回避して式（ＸＶＩ）で示される化合物に変換することができる。
【００７１】
式（ＸＶＩＩ）で示される化合物を還流温度での溶媒（例えば、１,４−ジオキサン）中における触媒（例えば、Ｐｄ2(ｄｂａ)3）およびリガンド（例えば、ＤＰＰＦ）の存在下での二シアン化亜鉛による処理によって式（ＸＶＩＩＩ）で示される化合物に変換することができる。
【００７２】
別法として、式（ＸＶＩ）で示される化合物を８０℃のような温度での溶媒（例えば、ＮＭＰ）中における触媒（例えば、Ｐｄ(ＰＰｈ3)4）の存在下でのジシアノ亜鉛［Ｚｎ(ＣＮ)2］による処理によって式（ＩＶ）で示される化合物に変換することができる。次いで、式（ＸＶ）で示される化合物を式（ＸＶＩＩ）で示される化合物に変換するために用いられる方法と同様の方法で式（ＩＶ）で示される化合物を式（ＸＶＩＩＩ）で示される化合物に変換することができる。
【００７３】
スキーム８に概略記載される経路に従って式（ＸＩＩＩ）で示される化合物を式（ＩＸ）で示される化合物に変換することができる：
【００７４】
【化１７】
2010524886.tif 000019
【００７５】
式（ＶＩ）で示される化合物を室温での溶媒（例えば、ジクロロメタン）中におけるＤＭＦの存在下での塩化オキサリルによる処理によって式（ＸＩＸ）で示される化合物に変換することができる。
【００７６】
式（ＸＩＩＩ）で示される化合物を０℃での溶媒（例えば、ジクロロメタン）中における塩基（例えば、トリエチルアミン）の存在下での式（ＸＸ）で示される化合物による処理によって式（ＸＸＩ）で示される化合物に変換することができる。
【００７７】
式（ＸＸＩ）で示される化合物を溶媒（例えば、アセトニトリル）の存在下での１００℃での加熱の後に式（ＩＸ）で示される化合物に変換することができる。
【００７８】
「別法として、式（ＸＩＩＩ）で示される化合物を室温〜１１０℃の温度での溶媒（例えば、アセトニトリル）中における式（ＸＸ）で示される化合物およびトリエチルアミンによる処理によって式（ＩＸ）で示される化合物に変換することができる。」：
【００７９】
式（Ｉ）で示される化合物およびそれらの医薬上許容される塩は、したがって、Ｓ１Ｐ１受容体によって媒介される疾患または障害の治療に有用である。特に、式（Ｉ）で示される化合物およびそれらの医薬上許容される塩は、多発性硬化症、自己免疫疾患、慢性炎症性疾患、喘息、炎症性ニューロパチー、関節炎、移植、クローン病、潰瘍性大腸炎、全身エリテマトーデス、乾癬、虚血再灌流障害、固形腫瘍および腫瘍転移、血管新生に関連する疾患、血管病、疼痛疾患、急性ウイルス性疾患、炎症性腸疾患、インスリン依存性糖尿病およびインスリン非依存性糖尿病（本明細書では、以下、「本発明の障害」と記す）の治療に有用である。
【００８０】
当然のことながら、本明細書で用いる場合、「治療」とは、予防および罹患している症状の軽減を含む。
【００８１】
かくして、本発明はまた、特にＳ１Ｐ１受容体によって媒介される疾患または障害の治療において、治療剤として使用するための式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩を提供する。特に、本発明は、多発性硬化症、自己免疫疾患、慢性炎症性疾患、喘息、炎症性ニューロパチー、関節炎、移植、クローン病、潰瘍性大腸炎、全身エリテマトーデス、乾癬、虚血再灌流障害、固形腫瘍および腫瘍転移、血管新生に関連する疾患、血管病、疼痛疾患、急性ウイルス性疾患、炎症性腸疾患、インスリン依存性糖尿病およびインスリン非依存性糖尿病の治療において治療剤として使用するための式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩を提供する。本発明はまた、ヒトを含む哺乳動物における、Ｓ１Ｐ１受容体によって媒介され得る疾患または障害の治療方法であって、該患者に式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩の治療上安全かつ有効な量を投与することを含む方法を提供する。
【００８２】
別の態様では、本発明は、Ｓ１Ｐ１受容体によって媒介される疾患または障害の治療のための薬剤の製造における式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩の使用を提供する。
【００８３】
式（Ｉ）で示される化合物を治療に使用するためには、それらは、通常、標準的な製薬プラクティスに従って医薬組成物に製剤化されるであろう。本発明はまた、式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩および医薬上許容される担体または賦形剤を含む医薬組成物を提供する。
【００８４】
さらなる態様では、本発明は、式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩および医薬上許容される担体または賦形剤を混合することを含む、医薬組成物の調製方法を提供する。
【００８５】
好適には周囲温度および大気圧で、混合によって調製され得る、本発明の医薬組成物は、通常、経口投与、非経口投与または直腸投与に適しており、それ自体は、錠剤、カプセル剤、経口液体製剤、散剤、顆粒剤、ロゼンジ剤、還元用散剤、注射可能もしくは注入可能な液剤もしくは懸濁剤、または坐剤の剤形であり得る。一般的には経口投与用組成物が好ましい。
【００８６】
Ｓ１Ｐ１受容体に関する本発明の化合物の効力および効果は、本明細書に記載のようにヒトクローン化受容体に対して行われるＧＴＰγＳアッセイによって、または、本明細書記載の酵母結合アッセイによって、決定することができる。式（Ｉ）で示される化合物は、本明細書に記載の機能アッセイを用いてＳ１Ｐ１受容体でアゴニスト活性を示した。
【００８７】
経口投与用の錠剤およびカプセル剤は単位投与剤形であり得、慣用的な賦形剤、例えば、結合剤（例えば、アルファ化トウモロコシデンプン、ポリビニルピロリドンまたはヒドロキシプロピルメチルセルロース）；充填剤（例えば、ラクトース、微結晶性セルロースまたはリン酸水素カルシウム）；錠剤化用滑沢剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム、タルクまたはシリカ）；崩壊剤（例えば、ジャガイモデンプンまたはデンプングリコール酸ナトリウム）；および許容される湿潤剤（例えば、ラウリル硫酸ナトリウム）を含有することができる。該錠剤は、通常の製薬プラクティスにおいて周知の方法に従って被覆され得る。
【００８８】
経口液体製剤は、例えば、水性または油性懸濁剤、液剤、乳剤、シロップ剤またはエリキシル剤の剤形であり得るか、または、使用前の水または適当なビヒクルでの還元のための乾燥製剤の剤形であり得る。かかる液体製剤は、慣用の添加剤、例えば、懸濁化剤（例えば、ソルビトールシロップ、セルロース誘導体または硬化食用脂）、乳化剤（例えば、レシチンまたはアカシア）、非水性ビヒクル（食用油、例えば、扁桃油、油性エステル、エチルアルコールまたは精製ヤシ油を包含することができる）、保存剤（例えば、ｐ−ヒドロキシ安息香酸メチルもしくはｐ−ヒドロキシ安息香酸プロピルまたはソルビン酸）、および、所望により慣用の矯味矯臭剤または着色料、必要に応じて緩衝塩および甘味料を含有することができる。経口投与製剤は、活性化合物を制御放出させるように適当に製剤化され得る。
【００８９】
非経口投与について、流動性単位投与剤形は、本発明の化合物またはその医薬上許容される塩および滅菌ビヒクルを用いて調製される。注射用製剤は、本発明の化合物またはその医薬上許容される誘導体および滅菌ビヒクルを用い、所望により保存剤を添加して、単位投与剤形で、例えば、アンプルにて、または繰り返し投与剤にて、提供され得る。該組成物は、油性または水性ビヒクルにて懸濁剤、液剤または乳剤のような剤形をとり得、懸濁化剤、安定剤および／または分散剤のような処方剤を含有することができる。別法として、活性成分は、使用前の適当なビヒクル、例えば、滅菌パイロジェン不含水での還元のための散剤の剤形であり得る。該化合物は、ビヒクルおよび使用濃度に依存して、ビヒクルに懸濁され得るかまたは溶解され得る。液剤の調製において、該化合物は、注射用に溶解され、濾過滅菌された後、適当なバイアルまたはアンプルに充填され、密閉され得る。有利には、局所麻酔薬、保存剤および緩衝剤のようなアジュバントをビヒクルに溶解させる。安定性を増強するために、該組成物をバイアルに充填した後に冷凍し、水分を真空除去することができる。非経口懸濁剤は、該化合物をビヒクルに溶解させるのではなく懸濁させることおよび滅菌を濾過によって行うことができないこと以外は実質的に同様の方法で調製される。該化合物は、滅菌ビヒクルに懸濁させる前に酸化エチレンへの暴露により滅菌することができる。有利には、化合物の均一な分布を促進するために組成物に界面活性剤または湿潤剤を含ませる。
【００９０】
ローション剤は、水性または油性基剤を用いて製剤化され得、一般に、１種類またはそれ以上の乳化剤、安定剤、分散剤、懸濁化剤、増粘剤または着色剤を含有するであろう。滴剤は、水性または非水性基剤を用いて製剤化され得、１種類またはそれ以上の分散剤、安定剤、可溶化剤または懸濁化剤も含むことができる。それらは、保存剤を含むこともできる。
【００９１】
本発明の化合物はまた、例えばカカオ脂または他のグリセリドのような慣用の坐剤基剤を含有する、坐剤または停留浣腸剤のような直腸用組成物において製剤化され得る。
【００９２】
本発明の化合物はまた、デポー製剤として製剤化され得る。かかる長期作用型製剤は、埋め込み（例えば、皮下または筋肉内）または筋肉注射によって投与され得る。かくして、例えば、本発明の化合物は、適当な高分子または疎水性物質（例えば、許容される油中のエマルションとして）またはイオン交換樹脂を用いて、またはやや溶けにくい（sparingly soluble）誘導体として、例えば、やや溶けにくい塩として製剤化され得る。
【００９３】
鼻腔内投与について、本発明の化合物は、好適な定量型または単一投与型装置による投与のための液剤として、または、別法として、適当なデリバリー装置を使用する投与のための適当な担体との粉末混合物として製剤化され得る。かくして、式（Ｉ）で示される化合物は、経口投与、頬側投与、非経口投与、局所投与（眼内投与および鼻腔内投与を含む）、デポー投与または直腸投与のために製剤化され得るか、または吸入またはガス注入（口または鼻のいずれかから）による投与に適した剤形で製剤化され得る。
【００９４】
式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩は、軟膏剤、クリーム剤、ゲル剤、ローション剤、ペッサリー剤、エアゾール剤または滴剤（例えば、点眼剤、点耳剤または点鼻剤）の剤形で局所投与のために製剤化され得る。軟膏剤およびクリーム剤は、例えば、適当な増粘剤および／またはゲル化剤の添加を伴って水性または油性基剤を用いて製剤化され得る。目への投与のための軟膏剤は、滅菌成分を用いて無菌法で製造され得る。
【００９５】
該組成物は、投与方法に依存して、活性物質を０.１重量％〜９９重量％、好ましくは、１０〜６０重量％含有することができる。上記障害の治療に用いられる化合物の投与量は、通常どおり、疾患の重篤度、患者の体重、および他の同様のファクターによって異なる。しかしながら、一般的な指針としては、適当な単位投与量は、０.０５〜１０００ｍｇ、１.０〜５００ｍｇまたは１.０〜２００ｍｇであり得、かかる単位投与量は、１日２回以上、例えば、１日２回または３回、投与され得る。
【００９６】
式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩は、配合剤にて使用され得る。例えば、本発明の化合物は、シクロスポリンＡまたは他の治療活性化合物と併用することができる。
【００９７】
本発明は、また、１個またはそれ以上の原子が、自然界にて通常見られる原子量または質量数とは異なる原子量または質量数を有する原子と置き換えられたこと以外は、式Ｉおよびそれに続く式において記載されるものと同一の同位体標識化合物を含む。本発明の化合物に取り込まれ得る同位体の例としては、水素、炭素、窒素、酸素、リン、フッ素、ヨウ素および塩素の同位体が挙げられ、例えば、3Ｈ、11Ｃ、14Ｃ、18Ｆ、123Ｉおよび125Ｉが挙げられる。
【００９８】
上記同位体および／または他の原子の他の同位体を含有する式（Ｉ）で示される化合物および該化合物の医薬上許容される塩は本発明の範囲内である。本発明の同位体標識化合物、例えば、3Ｈ、14Ｃのような放射性同位体が取り込まれているものは、薬物および／または基質組織分布アッセイに有用である。トリチウム同位体（すなわち、3Ｈ）および炭素−１４同位体（すなわち、14Ｃ）は、それらの製造の容易さおよび検出能のために特に好ましい。11Ｃおよび8Ｆ同位体は、ＰＥＴ（陽電子放射型断層撮影）に特に有用であり、125Ｉ同位体は、ＳＰＥＣＴ（単一光子放射型コンピューター断層撮影）に特に有用であり、全て、脳画像診断に有用である。さらに、ジュウテリウム（すなわち、2Ｈ）のようなより重い同位体での置換は、大きい代謝安定性により生じるある種の治療的利点、例えば、インビボ半減期の増加または必要用量の減少をもたらすことができ、故に、状況によっては好ましいことがある。本発明の式（Ｉ）およびそれに続く式で示される同位体標識化合物は、一般に、同位体標識されていない試薬の代わりに容易に入手可能な同位体標識試薬を用いることにより下記スキームおよび／または下記実施例に記載されている方法を行うことによって製造され得る。
【００９９】
本明細書にて引用した特許および特許出願を包含するがこれらに限定されない全ての刊行物は、個々の刊行物が十分に開示されているかの如く具体的かつ個別的に出典明示により本明細書の一部とすることが明示されているかのように出典明示により本明細書の一部とする。
【０１００】
以下の説明および実施例は本発明の化合物の製造を示す。
【実施例】
【０１０１】
分析方法のためのハードウェアおよびソフトウェアについての下記情報は単なる例示のために記載される。
【０１０２】
分析用ＬＣＭＳシステムについての条件、ハードウェアおよびソフトウェア
ハードウェア
Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  Ｇｒａｄｉｅｎｔ  Ｐｕｍｐ
Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  Ａｕｔｏｓａｍｐｌｅｒ  
Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  ＤＡＤ  Ｄｅｃｔｅｃｔｏｒ  
Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  Ｄｅｇａｓｓｅｒ  
Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  Ｏｖｅｎ
Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｒ
Ｗａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  Ｂｉｎａｒｙ  Ｓｏｌｖｅｎｔ  Ｍａｎａｇｅｒ  
Ｗａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  Ｓａｍｐｌｅ  Ｍａｎａｇｅｒ  
Ｗａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＰＤＡ
Ｗａｔｅｒｓ  ＺＱ  Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒ
Ｓｅｄｅｒｅ  Ｓｅｄｅｘ  ５５、Ｓｅｄｅｒｅ  Ｓｅｄｅｘ  ８５、Ｓｅｄｅｒｅ  Ｓｅｄｅｘ  ７５またはＰｏｌｙｍｅｒ  Ｌａｂｓ  ＰＬ−ＥＬＳ−２１００
ソフトウェア
Ｗａｔｅｒｓ  ＭａｓｓＬｙｎｘ  ｖｅｒｓｉｏｎ  ４.０  ＳＰ２またはｖｅｒｓｉｏｎ  ４.１
【０１０３】
５分法について
カラム
使用したカラムは、Ｗａｔｅｒｓ  Ａｔｌａｎｔｉｓであり、その寸法は４.６ｍｍ×５０ｍｍである。固定相粒径は３μｍである。
溶媒
Ａ：  水性溶媒＝水＋０.０５％ギ酸
Ｂ：  有機溶媒＝アセトニトリル＋０.０５％ギ酸
方法
使用した一般的な方法は５分間の実行時間を有する。
【表１】
2010524886.tif 000020
流速
上記方法は、３ｍｌ／分の流速を有する。
【０１０４】
２分法について
ソフトウェア
Ｗａｔｅｒｓ  ＭａｓｓＬｙｎｘ  ｖｅｒｓｉｏｎ  ４.１
カラム
使用したカラムは、Ｗａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＢＥＨ  ＵＰＬＣ  Ｃ１８であり、その寸法は２.１ｍｍ×５０ｍｍである。固定相粒径は１.７μｍである。
溶媒
Ａ：  水性溶媒＝水＋０.０５％ギ酸
Ｂ：  有機溶媒＝アセトニトリル＋０.０５％ギ酸
弱洗浄＝メタノール：水（１：１）
強洗浄＝水
方法
使用した一般的な方法は２分間の実行時間を有する。
【表２】
2010524886.tif 000021
上記方法は１ｍｌ／分の流速を有する。
一般的な方法についての注入容量は０.５ｕｌである。
カラム温度は４０度である。
ＵＶ検出範囲は２２０〜３３０ｎｍである。
【０１０５】
オープンアクセス質量分析型自動分取システム（ＭＤＡＰ）
ハードウェア
オープンアクセス質量分析型自動分取装置は以下のものからなる：
１  Ｗａｔｅｒｓ  ６００  Ｇｒａｄｉｅｎｔ  ｐｕｍｐ  
１  Ｗａｔｅｒｓ  ２７６７  ｉｎｊｅｃｔ  ／  ｃｏｌｌｅｃｔｏｒ  
１  Ｗａｔｅｒｓ  Ｒｅａｇｅｎｔ  ｍａｎａｇｅｒ  
１  ＭｉｃｒｏＭａｓｓ  ＺＱ  Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒ  
１  Ｇｉｌｓｏｎ  Ａｓｐｅｃ  −  ｗａｓｔｅ  ｃｏｌｌｅｃｔｏｒ  
１  Ｇｉｌｓｏｎ  １１５  ｐｏｓｔ−ｆｒａｃｔｉｏｎ  ＵＶ  ｄｅｔｅｃｔｏｒ  
１  Ｃｏｍｐｕｔｅｒ  Ｓｙｓｔｅｍ。
ソフトウェア
ＭｉｃｒｏＭａｓｓ  ＭａｓｓＬｙｎｘ  ｖ４.０
カラム
使用したカラムは、典型的には、Ｓｕｐｅｌｃｏ  ＬＣＡＢＺ＋＋カラムであり、その寸法は内径２０ｍｍ×長さ１００ｍｍである。固定相粒径は５μｍである。
溶媒
Ａ：  水性溶媒＝水＋０.１％ギ酸
Ｂ：  有機溶媒＝ＭｅＣＮ：水（９５：５）＋０.０５％ギ酸
調製用溶媒＝ＭｅＯＨ：水（８０：２０）＋５０ｍＭｏｌ酢酸アンモニウム
ニードル洗浄溶媒＝ＭｅＯＨ：水：ＤＭＳＯ（８０：１０：１０）
方法
目的化合物の分析的保持時間に依存して５つの方法のうちの１つを使用することができる。
全て、１５分の実行時間を有しており、該実行時間は、１０分間の勾配、次いで、５分間のカラムフラッシュおよび再平衡化工程を含む。
ＭＤＰ  １.５−２.２  ＝  ０〜３０％  Ｂ
ＭＤＰ  ２.０−２.８  ＝  ５〜３０％  Ｂ
ＭＤＰ  ２.５−３.０  ＝  １５〜５５％  Ｂ
ＭＤＰ  ２.８−４.０  ＝  ３０〜８０％  Ｂ
ＭＤＰ  ３.８−５.５  ＝  ５０〜９０％  Ｂ
流速
上記の方法は全て２０ｍｌ／分の流速を有する。
【０１０６】
代替システム：
ハードウェア
Ｗａｔｅｒｓ  ２５２５  Ｂｉｎａｒｙ  Ｇｒａｄｉｅｎｔ  Ｍｏｄｕｌｅ  
Ｗａｔｅｒｓ  ５１５  Ｍａｋｅｕｐ  Ｐｕｍｐ  
Ｗａｔｅｒｓ  Ｐｕｍｐ  Ｃｏｎｔｒｏｌ  Ｍｏｄｕｌｅ  
Ｗａｔｅｒｓ  ２７６７  Ｉｎｊｅｃｔ  Ｃｏｌｌｅｃｔ  
Ｗａｔｅｒｓ  Ｃｏｌｕｍｎ  Ｆｌｕｉｄｉｃｓ  Ｍａｎａｇｅｒ  
Ｗａｔｅｒｓ  ２９９６  Ｐｈｏｔｏｄｉｏｄｅ  Ａｒｒａｙ  Ｄｅｔｅｃｔｏｒ  
Ｗａｔｅｒｓ  ＺＱ  Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒ  
Ｇｉｌｓｏｎ  ２０２  ｆｒａｃｔｉｏｎ  ｃｏｌｌｅｃｔｏｒ  
Ｇｉｌｓｏｎ  Ａｓｐｅｃ  ｗａｓｔｅ  ｃｏｌｌｅｃｔｏｒ  
ソフトウェア
Ｗａｔｅｒｓ  ＭａｓｓＬｙｎｘ  ｖｅｒｓｉｏｎ  ４  ＳＰ２
カラム
使用したカラムは、Ｗａｔｅｒｓ  Ａｔｌａｎｔｉｓであり、その寸法は１９ｍｍ×１００ｍｍ（小規模）および３０ｍｍ×１００ｍｍ（大規模）である。固定相粒径は５ｍ ｍである。
溶媒
Ａ：  水性溶媒＝水＋０.１％ギ酸
Ｂ：  有機溶媒＝アセトニトリル＋０.１％ギ酸
調製用溶媒＝メタノール：水（８０：２０）
ニードル洗浄溶媒＝メタノール
方法
目的化合物の分析的保持時間に依存して使用される５つの方法がある。それらは、１３.５分の実行時間を有しており、該実行時間は、１０分間の勾配、次いで、３.５分間のカラムフラッシュおよび再平衡化工程を含む。
大規模／小規模  １.０−１.５＝５−３０％  Ｂ
大規模／小規模  １.５−２.２＝１５−５５％  Ｂ
大規模／小規模  ２.２−２.９＝３０−８５％  Ｂ
大規模／小規模  ２.９−３.６＝５０−９９％  Ｂ
大規模／小規模  ３.６−５.０＝８０−９９％  Ｂ（６分間、次いで、７.５分間のフラッシュおよび再平衡化）
流速
上記方法は全て、２０ｍｌ／分（小規模）または４０ｍｌ／分（大規模）の流速を有する。
シャロー勾配
大規模  １.５〜２.３分＝１３−２９％  Ｂ
大規模  １.９〜２.３分＝２５−４１％  Ｂ
大規模  ２.３〜２.６分＝３７−５３％  Ｂ
大規模  ２.６〜３.１分＝４９−６５％  Ｂ
大規模  ３.１〜３.６分＝６１−７７％  Ｂ
【０１０７】
ＮＭＲに使用する条件
ハードウェア
Ｂｒｕｋｅｒ  ４００ＭＨｚ    Ｕｌｔｒａｓｈｉｅｌｄ
Ｂｒｕｋｅｒ  Ｂ−ＡＣＳ６０  Ａｕｔｏｓａｍｐｌｅｒ
Ｂｒｕｋｅｒ  Ａｄｖａｎｃｅ  ４００  Ｃｏｎｓｏｌｅ
Ｂｒｕｋｅｒ  ＤＰＸ２５０
Ｂｒｕｋｅｒ  ＡＶＡＮＣＥ  ５００
Ｂｒｕｋｅｒ  ＤＲＸ６００
ソフトウェア
ユーザー・インターフェース  −  ＮＭＲ  Ｋｉｏｓｋ
管理ソフトウェア  −  ＸＷｉｎ  ＮＭＲ  ｖｅｒｓｉｏｎ  ３.０
クロマトグラフィー
特に明記しない限り、クロマトグラフィーは全てシリカカラムを使用して行った。
【０１０８】
略語：
ｇ  −  グラム
ｍｇ  −  ミリグラム
ｍｌ  −  ミリリットル
ｕｌ  −  マイクロリットル
ＣＨＣｌ3  −  クロロホルム
ＭｅＣＮ  −  アセトニトリル
ＭｅＯＨ  −  メタノール
ＥｔＯＨ  −  エタノール
ＥｔＯＡｃ  −  酢酸エチル
ＤＢＡ  −  ジベンジリデンアセトン
ＤＣＭ  −  ジクロロメタン
ＤＭＦ  −  Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＤＭＰＵ  −  １,３−ジメチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２(１Ｈ)−ピリミジノン
ＤＭＳＯ  −  ジメチルスルホキシド
ＤＰＰＦ  −  １,１'−ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン
ＥＤＣ  −  Ｎ−(３−ジメチルアミノプロピル)−Ｎ'−エチルカルボジイミド・塩酸塩
ＥＤＡＣ  −  Ｎ−(３−ジメチルアミノプロピル)−Ｎ'−エチルカルボジイミド・塩酸塩
ＥＤＣｌ・ＨＣｌ  −  Ｎ−(３−ジメチルアミノプロピル)−Ｎ'−エチルカルボジイミド・塩酸塩
ＨＡＴＵ  −  ２−(１Ｈ−７−アザベンゾトリアゾール−１−イル)−１,１,３,３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェートメタンアミニウム
ＩＰＡ  −  イソプロパノール
ＮＭＰ  −  Ｎ−メチル−２−ピロリジノン
ＰｙＢＯＰ  −  ベンゾトリアゾール−１−イル−オキシトリピロリジノホスホニウム・ヘキサフルオロホスフェート
ＴＨＦ  −  テトラヒドロフラン
ｄｂａ  −  ジベンジリデンアセトン
ＲＴ  −  室温
℃  −  摂氏度
Ｍ  −  モル濃度
Ｈ  −  プロトン
ｓ  −  一重線
ｄ  −  二重線
ｔ  −  三重線
ｑ  −  四重線
ＬＣＭＳ  −  液体クロマトグラフィー質量分析
ＬＣ／ＭＳ  −  液体クロマトグラフィー質量分析
ＮＭＲ  −  核磁気共鳴
ＭＳ  −  質量分析
ＥＳ  −  エレクトロスプレー
ＭＨ+  −  質量イオン ＋ Ｈ+
ＭＤＡＰ  −  質量分析型自動分取液体クロマトグラフィー
ＳＣＸ  −  強い陽イオン交換
【０１０９】
一般化学
実施例の製造のための中間体は必ずしも記載された特定のバッチから製造されたものでなくてもよい。
【０１１０】
Ｄ１の説明
１Ｈ−インダゾール−５−カルボニトリル（Ｄ１）
【化１８】
2010524886.tif 000022
２−フルオロ−５−シアノベンズアルデヒド（１.１ｇ）をヒドラジン・水和物（１９ｍｌ）に溶解し、室温で１８時間撹拌する。次いで、該溶液を蒸留し、残留物をシリカによるフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製し、ＤＣＭで溶離する。これにより標記化合物（３００ｍｇ）が得られる。
【０１１１】
Ｄ１（別法）の説明
１Ｈ−インダゾール−５−カルボニトリル（Ｄ１）
【化１９】
2010524886.tif 000023
５−シアノ−３−フルオロベンズアルデヒド（４ｇ、２６.８ｍｍｏｌ）をヒドラジン・水和物に溶解し、室温で１８時間撹拌した。該溶液を氷上に注ぎ、得られた固体を濾過により分取し、次いで、６０℃で真空乾燥させて、標記化合物をピンク色の固体として得た（１.２７ｇ）。水性層からさらなる物質を単離した。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ8Ｈ5Ｎ3の理論値１４３；測定値１４４（ＭＨ+）。
１Ｈ−インダゾール−５−カルボニトリルはまた従前の記載に従って製造することもできる（Halley and Sava 1997, Synth. Commun. 27(7):1199-1207）。
【０１１２】
Ｄ２の説明
Ｎ−ヒドロキシ−１Ｈ−インダゾール−５−カルボキシイミドアミド（Ｄ２）
【化２０】
2010524886.tif 000024
５−シアノインダゾール（Ｄ１）（５００ｍｇ）、ヒドロキシルアミン・ＨＣｌ（４８５ｍｇ）およびＮａＨＣＯ3（１.４７ｇ）をＭｅＯＨ（１８ｍｌ）に溶解／懸濁し、５０℃に加熱し、１９時間および一夜撹拌した。次いで、反応混合物を濾過し、ＭｅＯＨで洗浄し、蒸発させて、標記化合物を白色の固体として得た（５８４ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ8Ｈ8Ｎ4Ｏの理論値１７６；測定値１７７（ＭＨ+）。
【０１１３】
Ｄ３の説明
３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]安息香酸（Ｄ３）
【化２１】
2010524886.tif 000025
４−ヒドロキシ−３−クロロ安息香酸メチル（１３.４ｇ）をＤＭＦ（１５０ｍｌ）に溶解し、Ｋ2ＣＯ3（１９.９ｇ）で処理し、次いで、臭化イソプロピル（１３.５ｍｌ）で処理し、得られた混合物を７０℃に加熱し、一夜撹拌した。次いで、反応混合物を室温に冷却し、蒸発乾固させ、ＥｔＯＨに再溶解し、濾過し、もう一度蒸発させて、中間エステルを白色の固体として得た（２２.２４ｇ）。この化合物はエチルエステルとメチルエステルの３：１混合物であり、そのまま次反応に用いた。
粗中間体（２２.２４ｇ）をＭｅＯＨ（７５ｍｌ）に溶解し、２Ｍ ＮａＯＨ水溶液（７５ｍｌ）で処理し、６０℃に加熱し、２時間撹拌した。次いで、反応混合物を室温に冷却し、ＭｅＯＨを蒸発させ、残存する水溶液を５Ｍ ＨＣｌ水溶液（３０ｍｌ）で酸性化した。沈殿物を濾過し、乾燥させて、標記化合物を白色の固体として得た（１５.１ｇ）。δＨ（ＣＤＣｌ3，４００ＭＨｚ）：  １.４２（６Ｈ，ｄ）、４.７０（１Ｈ、septet）、６.９７（１Ｈ，ｄ）、７.９７（１Ｈ，ｄ）、８.１２（１Ｈ，ｓ）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ10Ｈ11ＣｌＯ3の理論値２１４；測定値２１３（Ｍ−Ｈ+）。
３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]安息香酸はＷＯ２００６／０４７１９５に記載されているように製造することができる。
【０１１４】
Ｄ４の説明
５−(５−｛３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール（Ｄ４）
【化２２】
2010524886.tif 000026
３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]安息香酸（Ｄ３）（７１２ｍｇ）、ＥＤＣＩ・ＨＣｌ（６９９ｍｇ）およびＨＯＢＴ（４９３ｍｇ）をＤＭＦ（１６.５ｍｌ）に溶解し、室温で１０分間撹拌した。Ｎ−ヒドロキシ−１Ｈ−インダゾール−５−カルボキシイミドアミド（Ｄ２）（５８４ｍｇ）を添加し、該混合物を８０℃に１２時間加熱した。次いで、反応混合物を室温に冷却し、週末の間放置し、蒸発乾固させ、Ｈ2Ｏに再溶解した。この溶液をＥｔＯＡｃで３回抽出し、合わせた抽出物をブラインで洗浄し、蒸発させ、ＤＣＭと一緒に２回トリチュレートし、４分間超音波処理した後、濾過し、乾燥させ、一度繰り返して、標記化合物をピンク色の固体として得た（４０７ｍｇ）。δＨ（ｄ6−ＤＭＳＯ，４００ＭＨｚ）：  １.３７（６Ｈ，ｄ）、４.８９（１Ｈ，septet）、７.４６（１Ｈ，ｄ）、７.７３（１Ｈ，ｄ）、８.０４（１Ｈ，ｄ）、８.１３（１Ｈ，ｄ）、８.２０（１Ｈ，ｓ）、８.２８（１Ｈ，ｓ）、８.５８（１Ｈ，ｓ）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ18Ｈ15ＣｌＮ4Ｏ2の理論値３５４；測定値３５５（Ｍ＋Ｈ）。
【０１１５】
Ｄ５の説明
３−[５−(５−｛３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]プロパン酸エチル（Ｄ５）
【化２３】
2010524886.tif 000027
５−(５−｛３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール（Ｄ４）（２００ｍｇ）をＤＭＰＵ（２.８ｍｌ）に溶解し、Ｃｓ2ＣＯ3（３６７ｍｇ）で処理し、次いで、３−ブロモプロピオン酸エチル（１４５ｕｌ）で処理した。得られた混合物をマイクロ波反応容器中にて１４０℃に１.５時間加熱した。次いで、反応混合物を室温に冷却し、蒸発乾固させ、Ｈ2Ｏに溶解した。この溶液をＥｔＯＡｃで３回抽出し、合わせた抽出物をブラインで洗浄し、蒸発させて、標記化合物を茶色の油状物として得た（２４０ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ23Ｈ2335ＣｌＮ4Ｏ4の理論値４５４；測定値４５５（ＭＨ+）。
【０１１６】
Ｄ５（別法）の説明
３−[５−(５−｛３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]プロパン酸エチル（Ｄ５）
【化２４】
2010524886.tif 000028
３−｛５−[(ヒドロキシアミノ)(イミノ)メチル]−１Ｈ−インダゾール−１−イル｝プロパン酸エチル（Ｄ５２）（２.０４ｇ、７.３８ｍｍｏｌ）、３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]安息香酸（Ｄ３）（１.７４３ｇ、８.１２ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（２.１２３ｇ、１１.０８ｍｍｏｌ）およびＨＯＢＴ（１.３５７ｇ、８.８６ｍｍｏｌ）のＮ,Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）（２５ｍｌ）中溶液を一夜撹拌し、次いで、１２０℃で４時間加熱した。該混合物をＥｔＯＡｃに溶解し、次いで、水およびＮａＨＣＯ3で洗浄し、フラッシュクロマトグラフィーにより精製し、ＥｔＯＡｃ／ｉｓｏ−ヘキサン（１０−９０％、次いで、１０−３０％）で溶離した。溶媒を蒸発させて、白色固体を得た（１.９５ｇ）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ23Ｈ2335ＣｌＮ4Ｏ4の理論値４５４；測定値（ＭＨ+）４５５。
【０１１７】
Ｄ６の説明
３−クロロ−４−(エチルオキシ)安息香酸メチル（Ｄ６）
【化２５】
2010524886.tif 000029
４−ヒドロキシ−３−クロロ安息香酸メチル（１０ｇ、５３.６ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（１４.８ｇ、１０７.２ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１１０ｍｌ）に懸濁し、次いで、ヨウ化エチル（８.５６ｍｌ、１０７.２ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を７０℃に一夜加熱した。反応混合物を濾過し、残留物をエーテルで洗浄した。有機溶液を真空中にて蒸発させ、次いで、ＥｔＯＡｃに溶解し、ＮａＯＨ水溶液および水で洗浄し、乾燥させ、真空中にて蒸発乾固させて、標記化合物を黄色油状物として得た（１１.２４ｇ）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ10Ｈ1135ＣｌＯ3の理論値２１４；測定値（ＭＨ+）２１５。
【０１１８】
Ｄ７の説明
３−クロロ−４−(エチルオキシ)安息香酸（Ｄ７）
【化２６】
2010524886.tif 000030
３−クロロ−４−(エチルオキシ)安息香酸メチル（Ｄ６）（１１.２４ｇ、５２.４ｍｍｏｌ）のメタノール（４０ｍｌ）中撹拌懸濁液に２Ｍ ＮａＯＨ水溶液（４０ｍｌ）を添加し、得られた混合物を６０℃で２時間加熱した。反応混合物をＥｔＯＡｃと希塩酸との間で分配させた。有機層を分取し、乾燥させ、真空中にて蒸発させて粗生成物を得た。この物質をエーテルと一緒にトリチュレートして、標記化合物を白色の固体として得た（８.２１ｇ）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ9Ｈ935ＣｌＯ3の理論値２００；測定値（ＭＨ+）２０１。
【０１１９】
Ｄ８の説明
３−エチル−４−(１−ピペリジニル)ベンゾニトリル（Ｄ８）
【化２７】
2010524886.tif 000031
４−アミノ−３−エチルベンゾニトリル（３.０ｇ、２０.５ｍｍｏｌ）、１,５−ジブロモペンタン（１１.１ｍＬ、８２.１ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（５.６７ｇ、４１.０ｍｍｏｌ）および水（３９.６ｍＬ）を全て１０個のマイクロ波バイアルに等分し、各々を１６０℃で１時間加熱した。反応混合物を全て合わせ、酢酸エチル（４０ｍＬ）で２回抽出し、合わせた有機フラクションを乾燥させ（相分離器）、真空中にて濃縮した。ジクロロメタンを添加し、該混合物を濾過し、次いで、濾液をシリカクロマトグラフィーにより精製し、ヘキサン中２〜５％酢酸エチルで溶離して、標記化合物を無色の油状物として得た（８２３ｍｇ、３.８５ｍｍｏｌ）。分析は化合物が少量のジブロモペンタン不純物を含有することを示した。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ14Ｈ18Ｎ2の理論値２１４；測定値２１５（ＭＨ+）。
【０１２０】
Ｄ９の説明
３−エチル−４−(１−ピペリジニル)安息香酸（Ｄ９）
【化２８】
2010524886.tif 000032
エタノール（３５ｍＬ）および水（８ｍＬ）中の３−エチル−４−(１−ピペリジニル)ベンゾニトリル（Ｄ８）（８１７ｍｇ、３.８２ｍｍｏｌ）および水酸化カリウム（２.１４ｇ、３８.２ｍｍｏｌ）を９０℃（ブロック温度）に９時間加熱した。さらなる水酸化カリウム（２.１４ｇ、３８.２ｍｍｏｌ）および水（８ｍＬ）を添加し、反応物をさらに１８時間加熱した。反応物を冷却し、ＨＣｌ水溶液で中和した。白色固体を濾過により分取し、ＳＣＸカートリッジによる濾液の精製を試みたが、失敗した。該固体およびＳＣＸの生成物の両者を合わせ、メタノールを添加し、次いで、該混合物を酢酸で酸性化した。該混合物を濾過して濾液を得、次いで、ＳＣＸカートリッジで捕捉し、メタノールで洗浄し、メタノール中２Ｍアンモニアで溶離した。試験規模で、これにより標記化合物を白色の固体として得（９６ｍｇ、０.４１ｍｍｏｌ）、残りの物質について無色の油状物を得た（５６３ｍｇ、２.４１ｍｍｏｌ）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ14Ｈ19ＮＯ2の理論値２３３；測定値２３４（ＭＨ+）。
【０１２１】
Ｄ１０の説明
３−エチル−４−ヨードベンゾニトリル（Ｄ１０）
【化２９】
2010524886.tif 000033
０℃にて水（１４ｍＬ）中において撹拌した４−アミノ−３−エチルベンゾニトリル（２.５０ｇ、１７.１ｍｍｏｌ）に濃塩酸（７.８０ｍＬ、２５７ｍｍｏｌ）を滴下し、次いで、亜硝酸ナトリウム（１.２４ｇ、１８.０ｍｍｏｌ）の水（３.４３ｍＬ）中溶液を滴下した。得られた混合物を１５分間撹拌し、次いで、０℃にてヨウ化カリウム（２.９８ｇ、１８.０ｍｍｏｌ）の水（６.０ｍＬ）中溶液に１５分間にわたって添加した。該混合物を室温で２時間撹拌した。該混合物を酢酸エチル（１００ｍＬ）で３回抽出し、合わせた有機フラクションをブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（相分離器）、真空中にて濃縮して、標記化合物を茶色の固体として得た（４.２１ｇ、１６.４ｍｍｏｌ）。δＨ（メタノール−ｄ4，４００ＭＨｚ）：  ８.０２（１Ｈ，ｄ）、７.６１（１Ｈ，ｄ）、７.２４（１Ｈ，ｄｄ）、２.８０（２Ｈ，ｑ）、１.２１（３Ｈ，ｔ）。
【０１２２】
Ｄ１１の説明
４−(１−シクロヘキセン−１−イル)−３−エチルベンゾニトリル（Ｄ１１）
【化３０】
2010524886.tif 000034
３−エチル−４−ヨードベンゾニトリル（Ｄ１０）（１.２３ｇ、４.８０ｍｍｏｌ）、１−シクロヘキセン−１−イルボロン酸（９０７ｍｇ、７.２０ｍｍｏｌ）、ナトリウムメトキシド（７７８ｍｇ、１４.４ｍｍｏｌ）およびビス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(ＩＩ)クロリド（３３７ｍｇ、０.４８ｍｍｏｌ）の無水メタノール（１２ｍＬ）中混合物をマイクロ波にて８０℃で１０分間加熱した。反応混合物を酢酸エチル（４０ｍＬ）と水（４０ｍＬ）との間で分配した後、有機層をさらに水（４０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（相分離器）、真空中にて濃縮した。粗物質をシリカクロマトグラフィーにより精製し、ヘキサン中０〜５％ＥｔＯＡｃで３０分間にわたって溶離して、標記化合物を黄色油状物として得た（８２４ｍｇ、３.９１ｍｍｏｌ）。δＨ（メタノール−ｄ4，４００ＭＨｚ）７.５６（１Ｈ，ｄ）、７.４６（１Ｈ，ｄｄ）、７.１９（１Ｈ，ｄ）、５.６１−５.５６（１Ｈ，ｍ）、２.６８（２Ｈ，quart）、２.２３−２.１６（４Ｈ，ｍ）、１.８５−１.６８（４Ｈ，ｍ）、１.２０（３Ｈ，ｔ）。
【０１２３】
Ｄ１２の説明
４−(１−シクロヘキセン−１−イル)−３−エチル安息香酸（Ｄ１２）
【化３１】
2010524886.tif 000035
エタノール（３６ｍＬ）および水（８ｍＬ）中の４−(１−シクロヘキセン−１−イル)−３−エチルベンゾニトリル（Ｄ１１）（８２４ｍｇ、３.９１ｍｍｏｌ）および水酸化カリウム（２.１９ｇ、３９.１ｍｍｏｌ）を９０℃（ブロック温度）で２０時間加熱した。反応混合物を真空中にて濃縮し、残留物を酢酸エチル（１２０ｍＬ）と塩酸水溶液（２Ｍ、５０ｍＬ）との間で分配させた後、有機相をさらなる塩酸（２Ｍ、５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（相分離器）、真空中にて濃縮して、標記化合物を黄色油状物として得た（８０８ｍｇ、３.５１ｍｍｏｌ）。ＬＣＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ15Ｈ18Ｏ2の理論値２３０；測定値２２９（Ｍ−Ｈ+）。
【０１２４】
Ｄ１３の説明
４−シクロヘキシル−３−エチル安息香酸（Ｄ１３）
【化３２】
2010524886.tif 000036
４−(１−シクロヘキセン−１−イル)−３−エチル安息香酸（Ｄ１２）（８０３ｍｇ、３.４９ｍｍｏｌ）をメタノール（７０ｍＬ）に溶解し、パラジウム−炭素カートリッジを使用してＨ−Ｃｕｂｅで水素添加した。生成溶液を真空中にて濃縮して、標記化合物を白色の固体として得た（７９２ｍｇ、３.４１ｍｍｏｌ）。δＨ（メタノール−ｄ4，４００ＭＨｚ）：  ７.８２−７.６８（２Ｈ，ｍ）、７.３３（１Ｈ，ｄ）、２.８３（１Ｈ，ｍ）、２.７３（２Ｈ，ｑ）、１.８７（２Ｈ，ｍ）、１.８５−１.７０（３Ｈ，ｍ）、１.５８−１.３０（５Ｈ，ｍ）、１.２２（３Ｈ，ｔ）。
【０１２５】
Ｄ１４の説明
３−ブロモ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]安息香酸１−メチルエチル（Ｄ１４）
【化３３】
2010524886.tif 000037
３−ブロモ−４−ヒドロキシ安息香酸（２.００ｇ、９.２２ｍｍｏｌ）、２−ヨードプロパン（１.８５ｍＬ、１８.４ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（２.５５ｇ、１８.４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１７５ｍＬ）中混合物を５時間加熱還流した。反応物を冷却し、濾過した。濾液を真空中にて濃縮し、残留物を酢酸エチル（１５０ｍＬ）と水（１５０ｍＬ）との間で分配させ、２Ｍ ＮａＯＨで塩基性化した。有機相を乾燥させ（相分離器）、真空中にて濃縮して、標記化合物を黄色油状物として得た（２.３６ｇ、７.８４ｍｍｏｌ）。δＨ（メタノール−ｄ4，４００ＭＨｚ）：  ８.０５（１Ｈ，ｄ）、７.９０（１Ｈ，ｄｄ）、７.２５（１Ｈ，ｄ）、５.１０（１Ｈ，septet）、４.８１（１Ｈ，septet）、１.３２（６Ｈ，ｄ）、１.３１（６Ｈ，ｄ）。
【０１２６】
Ｄ１５の説明
３−ブロモ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]安息香酸（Ｄ１５）
【化３４】
2010524886.tif 000038
３−ブロモ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]安息香酸１−メチルエチル（Ｄ１４）（２.３６ｇ、７.８４ｍｍｏｌ）のエタノール（１００ｍＬ）および水酸化ナトリウム水溶液（２Ｍ、３９ｍＬ）中溶液を５時間加熱還流した。反応混合物を真空中にて濃縮し、酢酸エチル（１２５ｍＬ）と水（１２５ｍＬ）との間で分配させ、後者を２Ｍ ＨＣｌ（４０ｍＬ）で酸性化した。水性層をさらなる酢酸エチル（７０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機抽出物を乾燥させ（相分離器）、真空中にて濃縮して、標記化合物をオフホワイト色の固体として得た（１.８３ｇ、７.０６ｍｍｏｌ）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ10Ｈ11ＢｒＯ3の理論値２５８、２６０；測定値２５７、２５９（Ｍ−Ｈ+）。
【０１２７】
Ｄ１６の説明
４−ブロモ−３−クロロ安息香酸エチル（Ｄ１６）
【化３５】
2010524886.tif 000039
４−ブロモ−３−クロロ安息香酸（５.００ｇ、２１.２ｍｍｏｌ）のエタノール（５０ｍＬ）中懸濁液に硫酸（５ｍＬ）を添加し、得られた混合物を６０時間加熱還流した。反応物を酢酸エチル（５０ｍＬ）と水（５０ｍＬ）との間で分配させた。水性層をさらなる酢酸エチルで抽出し、合わせた有機フラクションを乾燥させ（相分離器）、真空中にて濃縮して、標記化合物を茶色の油状物／固体として得た（５.０９ｇ、１９.３ｍｍｏｌ）。δＨ（ｄ6−ＤＭＳＯ，４００ＭＨｚ）：  ８.０６（１Ｈ，ｄ）、７.９６（１Ｈ，ｄ）、７.８０（１Ｈ，ｄｄ）、４.３３（２Ｈ，ｑ）、１.３３（３Ｈ，ｔ）。
【０１２８】
Ｄ１７の説明
３−クロロ−４−(２−メチルプロピル)安息香酸エチル（Ｄ１７）
【化３６】
2010524886.tif 000040
アルゴン下にて臭化イソブチル亜鉛のＴＨＦ中溶液（０.５Ｍ、３０ｍＬ、１５.０ｍｍｏｌ）を４−ブロモ−３−クロロ安息香酸エチル（Ｄ１６）（２.００ｇ、７.６０ｍｍｏｌ）に添加し、次いで、１,１'−ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン−パラジウム(ＩＩ)ジクロリドジクロロメタン錯体（９３０ｍｇ、１.１４ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を４.５時間加熱還流した。該混合物を真空中にて濃縮し、残留物を酢酸エチル（１２５ｍＬ）と水（１２５ｍＬ）との間で分配させた。固体が形成され、これを濾過し、廃棄した。有機層を水（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（相分離器）、真空中にて濃縮した。粗生成物をシリカクロマトグラフィーにより精製し、ヘキサン中０〜５％ＥｔＯＡｃで３０分間にわたって溶離して、標記化合物を無色の油状物として得た（１.７６ｇ、７.３３ｍｍｏｌ）。δＨ（ｄ6−ＤＭＳＯ，４００ＭＨｚ）：  ７.９１（１Ｈ，ｄ）、７.８０（１Ｈ，ｄｄ）、７.４６（１Ｈ，ｄ）、４.３０（２Ｈ，ｑ）、２.６６（２Ｈ，ｄ）、１.８８−２.０１（１Ｈ，ｍ）、１.３２（３Ｈ，ｔ）、０.８９（６Ｈ，ｄ）。
【０１２９】
Ｄ１８の説明
３−クロロ−４−(２−メチルプロピル)安息香酸（Ｄ１８）
【化３７】
2010524886.tif 000041
３−クロロ−４−(２−メチルプロピル)安息香酸エチル（Ｄ１７）（１.７６ｇ、７.３３ｍｍｏｌ）および水酸化ナトリウム水溶液（２Ｍ、３.７０ｍＬ、７.４ｍｍｏｌ）のエタノール（３０ｍＬ）中溶液を４０℃で３時間加熱した。反応混合物を真空中にて濃縮し、残留物を酢酸エチル（１００ｍＬ）と水（１００ｍＬ）との間で分配させ、後者を２Ｍ ＨＣｌ（４ｍＬ）で酸性化した。水性層を酢酸エチル（１００ｍＬ）で抽出し、合わせた有機抽出物を乾燥させ（相分離器）、真空中にて濃縮して、標記化合物を白色の固体として得た（１.３５ｇ、６.３６ｍｍｏｌ）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ11Ｈ1335ＣｌＯ2の理論値２１２；測定値２１１（Ｍ−Ｈ+）。
【０１３０】
Ｄ１９の説明
３−シアノ−４−｛[(トリフルオロメチル)スルホニル]オキシ｝安息香酸メチル（Ｄ１９）
【化３８】
2010524886.tif 000042
アルゴンフラッシュ下における０℃での３−シアノ−４−ヒドロキシ安息香酸メチル（３ｇ、１６.９３ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（３.５４ｍｌ、２５.４ｍｍｏｌ）の乾燥ジクロロメタン（６０ｍｌ）中溶液に無水トリフルオロメタンスルホン酸（３.１５ｍｌ、１８.６３ｍｍｏｌ）をゆっくりと滴下した。反応物を室温に加温し、１時間撹拌した。反応混合物を１０％炭酸カリウム水溶液（５０ｍＬ）で２回洗浄し、次いで、ＨＣｌ水溶液（２Ｍ、５０ｍＬ）で２回洗浄した後、有機相を乾燥させ（相分離器）、溶媒を真空除去して、標記化合物を暗褐色の油状物として得た（５.１６５ｇ、１６.７０ｍｍｏｌ）。δＨ（ＣＤＣｌ3，４００ＭＨｚ）：  ８.４４（１Ｈ，ｄ）、８.３８（１Ｈ，ｄｄ）、７.６０（１Ｈ，ｄ）、３.９９（３Ｈ，ｓ）。
【０１３１】
Ｄ２０の説明
２−シアノ−４−ビフェニルカルボン酸メチル（Ｄ２０）
【化３９】
2010524886.tif 000043
以下の反応を半分の量ずつ２つのバッチに分けた：３−シアノ−４−｛[(トリフルオロメチル)スルホニル]オキシ｝安息香酸メチル（Ｄ１９）（１.５ｇ、４.８５ｍｍｏｌ）、フェニルボロン酸（１.１８３ｇ、９.７０ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（２.０１１ｇ、１４.５５ｍｍｏｌ）およびパラジウムテトラキストリフェニルホスフィン(０)（０.５６１ｇ、０.４８５ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２４ｍｌ）に溶解し、該混合物をマイクロ波にて１５０℃で３０分間加熱した。２つの反応物を合わせ、酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈し、該混合物を珪藻土で濾過して、パラジウム残留物を除去した。濾液を真空中にて濃縮してＤＭＦの量を減少させ、次いで、残留物を重炭酸ナトリウム飽和水溶液（５０ｍＬ）と酢酸エチル（５０ｍＬ）との間で分配させた。有機相をさらなる重炭酸ナトリウム（５０ｍＬ）で洗浄し、次いで、水（５０ｍＬ）で洗浄した後、乾燥させ（ＭgＳＯ4）、濾過し、溶媒を真空除去した。茶色の固体をシリカクロマトグラフィーにより精製し、ｉｓｏ−ヘキサン中０〜２５％ＥｔＯＡｃで３５分間にわたって溶離して、標記化合物を白色の固体として得た（９３５ｍｇ、３.９４ｍｍｏｌ）。δＨ（ｄ6−ＤＭＳＯ，４００ＭＨｚ）：  ８.４２（１Ｈ，ｄ）、８.２９（１Ｈ，ｄｄ）、７.８１（１Ｈ，ｄ）、７.６５（２Ｈ，ｍ）、７.６０−７.５０（３Ｈ，ｍ）、３.９２（３Ｈ，ｓ）。
【０１３２】
Ｄ２１の説明
２−シアノ−４−ビフェニルカルボン酸（Ｄ２１）
【化４０】
2010524886.tif 000044
２−シアノ−４−ビフェニルカルボン酸メチル（Ｄ２０）（９３５ｍｇ、３.９４ｍｍｏｌ）にエタノール（１８ｍｌ）を添加したが溶解が生じなかったので、ジクロロメタン（１０ｍｌ）を添加した。次いで、２Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（２ｍｌ、４.００ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を２時間撹拌した。該混合物にジクロロメタン（２０ｍＬ）および２Ｍ ＨＣｌ水溶液（１０ｍＬ）を添加した。層を分離し、水性層をさらなるジクロロメタン（２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を乾燥させ（相分離器）、溶媒を真空除去して白色固体を得、メタノール（３０ｍＬ）に溶解し、水酸化ナトリウム水溶液（２Ｍ、３ｍＬ）を添加した。反応物を室温で１時間撹拌した後、水（２０ｍＬ）を添加した。該反応物をさらに１時間撹拌した。ジクロロメタン（６０ｍＬ）を添加し、該混合物を振盪し、層を分取した。水性相をさらなるジクロロメタン（５０ｍＬ）で抽出した後、合わせた有機相を乾燥させ（相分離器）、溶媒を真空除去して、標記化合物を白色の固体として得た（８４９ｍｇ、３.８０ｍｍｏｌ）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ14Ｈ9ＮＯ2の理論値２２３；測定値２２２（Ｍ−Ｈ+）。
【０１３３】
Ｄ２２の説明
４−クロロ−３−(トリフルオロメチル)安息香酸エチル（Ｄ２２）
【化４１】
2010524886.tif 000045
４−クロロ−３−(トリフルオロメチル)安息香酸（１ｇ、４.４５ｍｍｏｌ）をエタノール（３ｍｌ）に溶解し、濃硫酸（０.１５ｍｌ）を添加した。該混合物をマイクロ波にて１００℃で５分間加熱し、次いで、１２０℃で１５分間加熱した。溶媒を真空除去し、残留物を重炭酸ナトリウム飽和水溶液（５０ｍｌ）と酢酸エチル（５０ｍｌ）との間で分配させた。水性層をさらなるＥｔＯＡｃ（５０ｍｌ）で抽出し、有機相を合わせ、相分離器で乾燥させ、真空中にて濃縮して、標記化合物を無色の油状物として得た（１.０２６ｇ）。δＨ（メタノール−ｄ4，４００ＭＨｚ）１.４０（３Ｈ，ｔ）、４.４１（２Ｈ，ｑ）、７.７６（１Ｈ，ｄ）、８.２１（１Ｈ，ｄｄ）、８.３３（１Ｈ，ｄ）。
【０１３４】
Ｄ２２（別法）の説明
４−クロロ−３−(トリフルオロメチル)安息香酸エチル（Ｄ２２）
【化４２】
2010524886.tif 000046
４−クロロ−３−トリフルオロメチル安息香酸（１０ｇ、４４.５ｍｍｏｌ）のエタノール（１０ｍｌ）中溶液を２つのマイクロ波バイアルに等分した。各バイアルに濃硫酸（０.７５ｍｌ）を添加した（合計１.５ｍｌ）。反応物をマイクロ波にて１２０℃で合計３０分間加熱した。反応混合物を合わせ、真空中にて濃縮した。残留物をＥｔＯＡｃ（１００ｍｌ）と重炭酸ナトリウム水溶液（１００ｍｌ）との間で分配させ、有機相を分取し、重炭酸ナトリウム水溶液（１００ｍｌ）で洗浄し、水（１００ｍｌ）で２回洗浄し、次いで、乾燥させ（相分離器）、溶媒を真空除去して、標記化合物を無色の油状物として得た（４.１２６ｇ）。δＨ（４００ＭＨｚ，メタノール−ｄ4）は上記実施例と一致した。
【０１３５】
Ｄ２３の説明
２−(トリフルオロメチル)−４−ビフェニルカルボン酸（Ｄ２３）
【化４３】
2010524886.tif 000047
試薬を４分の１ずつ使用して反応を４つに分けた：４−ブロモ−３−(トリフルオロメチル)ベンゾニトリル（４ｇ、１６.００ｍｍｏｌ）、フェニルボロン酸（３.９０ｇ、３２.０ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（６.６３ｇ、４８.０ｍｍｏｌ）のＮ,Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）（６４ｍｌ）中混合物にパラジウムテトラキストリフェニルホスフィン(０)（１.８４９ｇ、１.６００ｍｍｏｌ）を添加した。各反応物をマイクロ波にて１５０℃で３０分間加熱した。合わせた反応混合物をセライトで濾過し、酢酸エチルで洗浄し、溶媒を真空除去した。残留物を酢酸エチル（１００ｍＬ）と水（１００ｍＬ）との間で分配させ、有機相を重炭酸ナトリウム溶液（１００ｍＬ）で洗浄した。有機相を乾燥させ（ＭgＳＯ4）、濾過し、溶媒を真空除去した。茶色の油状物をジクロロメタンと一緒にトリチュレートし、濾過して、薄黄色の固体である２−(トリフルオロメチル)−４−ビフェニルカルボキサミド（２.４７ｇ）を得、さらなる精製を行わずに使用した。エタノール（８０ｍｌ）中の２−(トリフルオロメチル)−４−ビフェニルカルボキサミド（２ｇ、７.５４ｍｍｏｌ）に水酸化カリウム（４.２３ｇ、７５ｍｍｏｌ）および水を添加し、該混合物を９０℃に１８時間加熱した。反応混合物を真空中にて濃縮し、残留物をジクロロメタン（１００ｍＬ）と２Ｍ ＨＣｌ（１００ｍＬ）との間で分配させた。有機相を単離し、乾燥させ（相分離器）、溶媒を真空除去して、粗生成物を得た。Ｂｉｏｔａｇｅ  Ｈｏｒｉｚｏｎ、逆相カートリッジを使用して精製し、水中５〜１００％ＭｅＣＮで溶離して、標記化合物をオフホワイト色の固体として得た（９６０ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ14Ｈ9Ｆ3Ｏ2の理論値２６６；測定値２６５（Ｍ−Ｈ+）。
【０１３６】
Ｄ２３（別法）の説明
２−(トリフルオロメチル)−４−ビフェニルカルボン酸（Ｄ２３）
【化４４】
2010524886.tif 000048
バッチＡ：４−クロロ−３−(トリフルオロメチル)安息香酸エチル（Ｄ２２）（１.０ｇ、３.９６ｍｍｏｌ）、フェニルボロン酸（７２４ｍｇ、５.９４ｍｍｏｌ）、酢酸パラジウム（４４ｍｇ）、(ジシクロヘキシルホスフィノ)ビフェニル（１４０.２ｍｇ）およびフッ化カリウム（６８９ｍｇ、１１.９ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（８ｍｌ）中混合物をマイクロ波にて１２０℃で合計４０分間加熱した。
バッチＢ：４−クロロ−３−(トリフルオロメチル)安息香酸エチル（Ｄ２２）（５００ｍｇ、１.９８ｍｍｏｌ）、フェニルボロン酸（２９０ｍｇ、２.３８ｍｍｏｌ）、酢酸パラジウム（２.２ｍｇ）、(ジシクロヘキシルホスフィノ)ビフェニル（７ｍｇ）およびフッ化カリウム（３４４ｍｇ、５.８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４ｍｌ）中混合物をマイクロ波にて１２０℃で２０分間加熱した。
バッチＡおよびＢからの反応混合物を合わせ、濾過し、濾液を真空中にて濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して（ＳｉＯ2、ヘキサン中０〜５％ＥｔＯＡｃ）、出発物質と結合生成物との混合物を得た。この物質をエタノール（１０ｍｌ）および２Ｍ ＮａＯＨ（ａｑ）（５ｍｌ）に溶解し、次いで、３時間加熱還流した。溶媒を真空除去し、残留物をＤＣＭと２Ｍ ＨＣｌ水溶液との間で分配させた。水性層をさらなるＤＣＭで抽出した。有機相を合わせ、真空中にて濃縮した。粗物質をＨｏｒｉｚｏｎによる逆相クロマトグラフィーによって精製し、水中５〜１００％ＭｅＣＮで溶離して、標記化合物を白色の固体として得た（３６７ｍｇ）（ＤＮ１０８１２１−１７０Ａ２、ＧＳＫ１８６９７８０Ａ）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ14Ｈ9Ｆ3Ｏ2の理論値２６６；測定値２６５（Ｍ−Ｈ+）。
【０１３７】
Ｄ２４の説明
３−シアノ−４−(２−メチルプロピル)安息香酸メチル（Ｄ２４）
【化４５】
2010524886.tif 000049
３−シアノ−４−｛[(トリフルオロメチル)スルホニル]オキシ｝安息香酸メチル（Ｄ１９）（１.５ｇ、４.８５ｍｍｏｌ）にアルゴン下でのテトラヒドロフラン（５０ｍｌ）中のブロモ(２−メチルプロピル)亜鉛（４８.５ｍｌ、２４.２５ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、該溶液に１,１'−ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセンジクロロパラジウム(ＩＩ)ジクロロメタン錯体（０.３５５ｇ、０.４８５ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を６時間加熱還流した。該混合物を水（２ｍＬ）でクエンチし、次いで、セライトで濾過し、酢酸エチルで洗浄した。溶媒を真空除去した。残留物を酢酸エチル（５０ｍＬ）と水（５０ｍＬ）との間で分配させ、有機相を乾燥させ（相分離器）、溶媒を真空除去した。残留物をシリカクロマトグラフィーにより精製し、ｉｓｏ−ヘキサン中０〜１５％ＥｔＯＡｃで４０分間にわたって溶離した。２つのバッチを回収し、そのうちの１つは無色の油状物として標記化合物であった（２３３ｍｇ、１.０７２ｍｍｏｌ）。δＨ（ＣＤＣｌ3，４００ＭＨｚ）：  ８.２８（１Ｈ，ｄ）、８.１５（１Ｈ，ｄｄ）、７.３８（１Ｈ，ｄ）、３.９４、３Ｈ，ｓ）、２.７８（２Ｈ，ｄ）、２.０２（１Ｈ，ｍ）、０.９６（６Ｈ，ｄ）。
【０１３８】
Ｄ２５の説明
３−シアノ−４−(２−メチルプロピル)安息香酸（Ｄ２５）
【化４６】
2010524886.tif 000050
３−シアノ−４−(２−メチルプロピル)安息香酸メチル（Ｄ２４）（２３３ｍｇ、１.０７２ｍｍｏｌ）をエタノール（４ｍｌ）に溶解し、２Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（１ｍｌ、２ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を１時間撹拌した。２Ｍ ＨＣｌ水溶液（１０ｍＬ）を添加し、該混合物をジクロロメタン（２０ｍＬおよび１０ｍＬ）で抽出した。有機相を単離し、相分離器によって乾燥させ、合わせた後、溶媒を真空除去して、標記化合物を白色の固体として得た（２０３ｍｇ、０.９９９ｍｍｏｌ）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ12Ｈ13ＮＯ2の理論値２０３；測定値２０２（Ｍ−Ｈ+）。
【０１３９】
Ｄ２６の説明
５−ホルミル−２−｛[(１Ｓ)−１−メチルプロピル]オキシ｝ベンゾニトリル（Ｄ２６）
【化４７】
2010524886.tif 000051
(２Ｓ)−２−ブタノール（０.９９ｇ、０.０１３ｍｏｌ）をＤＭＦ（５０ｍｌ）に溶解し、該溶液を０℃に冷却した。これに水素化ナトリウム（鉱油中６０％分散物、１.５４ｇ、０.０３６ｍｏｌ）を滴下し、添加完了後、該混合物を０℃で１０分間撹拌した。次いで、２−フルオロ−５−ホルミルベンゾニトリル（２.０ｇ、０.０１３ｍｏｌ）を添加し、次いで、反応混合物を室温に加温し（氷浴内でゆっくりと）、反応混合物を室温で一夜撹拌した。次いで、反応混合物を０℃に冷却し、ブラインでクエンチし、ＥｔＯＡｃ（約２５ｍｌ）で希釈した。該混合物を分配させ、有機フラクションを水（約３０ｍｌ）で抽出し、合わせた有機物を相分離カートリッジに通すことによって乾燥させ、次いで、減圧下にて蒸発乾固させて、粗生成物を得た。粗残留物を４０＋Ｍ  Ｂｉｏｔａｇｅカートリッジで精製し、ＥｔＯＡｃのヘキサン中２０〜５０％混合物で溶離した。これにより標記化合物を白色の固体として得た（２２０ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ12Ｈ13ＮＯ2の理論値２０３；測定値２０４（ＭＨ+）。
【０１４０】
Ｄ２７の説明
３−シアノ−４−｛[(１Ｓ)−１−メチルプロピル]オキシ｝安息香酸（Ｄ２７）
【化４８】
2010524886.tif 000052
５−ホルミル−２−｛[(１Ｓ)−１−メチルプロピル]オキシ｝ベンゾニトリル（Ｄ２６）（２２０ｍｇ、１.０８ｍｍｏｌ）の酢酸（２０ｍｌ）中溶液に過ホウ酸ナトリウム・四水和物（３３４ｍｇ、２.１７ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を５０℃で週末にわたって加熱した。反応混合物を真空中にて濃縮した。水（約５０ｍｌ）を添加し、ＥｔＯＡｃ（約３０ｍｌ）を添加し、層を分配させ、水性層をＥｔＯＡｃ（約３０ｍｌ）でさらに２回抽出し、合わせた有機層を減圧下にて蒸発乾固させて、標記化合物をオフホワイト色の固体として得た（２４５ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ12Ｈ13ＮＯ2の理論値２１９；測定値２２０（ＭＨ+）。
【０１４１】
Ｄ２８の説明
５−ホルミル−２−｛[(１Ｒ)−１−メチルプロピル]オキシ｝ベンゾニトリル（Ｄ２８）
【化４９】
2010524886.tif 000053
(２Ｒ)−２−ブタノール（０.９９ｇ、０.０１３ｍｏｌ）をＤＭＦ（５０ｍｌ）に溶解し、該溶液を０℃に冷却した。これに水素化ナトリウム（鉱油中６０％分散物）（１.５４ｇ、０.０３６ｍｏｌ）を滴下し、滴下完了後に該混合物を０℃で１０分間撹拌した。次いで、２−フルオロ−５−ホルミルベンゾニトリル（２.０ｇ、０.０１３ｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温に加温し（氷浴内でゆっくりと）、反応混合物を室温で一夜撹拌した。次いで、反応混合物を０℃に冷却し、ブラインでクエンチし、ＥｔＯＡｃ（約２５ｍｌ）で希釈した。該混合物を分配させ、有機フラクションを水（約３０ｍｌ）で抽出し、合わせた有機フラクションを層分離用カートリッジに通して乾燥させ、減圧下にて蒸発乾固させて、粗生成物を得た。粗残留物を４０＋Ｍ  Ｂｉｏｔａｇｅカートリッジで精製し、ＥｔＯＡｃのヘキサン中２０〜５０％混合物で溶離した。これにより標記化合物を黄色油状物として得た（３１０ｍｇ）。δＨ（ｄ6−ＤＭＳＯ，４００ＭＨｚ）：  ９.８８（１Ｈ，ｓ）、８.３０（１Ｈ，ｓ）、８.１５（１Ｈ，ｄ）、７.４９（１Ｈ，ｄ）、４.７３−４.８１（１Ｈ，ｍ）、１.６３−１.７９（２Ｈ，ｍ）、１.３３（３Ｈ，ｄ）、０.９５（３Ｈ，ｔ）。
【０１４２】
Ｄ２９の説明
３−シアノ−４−｛[(１Ｒ)−１−メチルプロピル]オキシ｝安息香酸（Ｄ２９）
【化５０】
2010524886.tif 000054
５−ホルミル−２−｛[(１Ｒ)−１−メチルプロピル]オキシ｝ベンゾニトリル（Ｄ３７）（３１０ｍｇ、１.５３ｍｍｏｌ）の酢酸（３０ｍｌ）中溶液に過ホウ酸ナトリウム・四水和物（４７１ｍｇ、３.０５ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を５０℃で週末にわたって加熱した。反応混合物を真空中にて濃縮し、水（約５０ｍｌ）を添加し、ＥｔＯＡｃ（約３０ｍｌ）を添加し、層を分配させ、水性層をＥｔＯＡｃ（約３０ｍｌ）でさらに２回抽出し、合わせた有機層を減圧下にて蒸発乾固させて、標記化合物をオフホワイト色の固体として得た（３１５ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ12Ｈ13ＮＯ2の理論値２１９；測定値２２０（ＭＨ+）。
【０１４３】
Ｄ３０の説明
５−クロロ−６−[(１−メチルエチル)オキシ]−３−ピリジンカルボン酸１−メチルエチル（Ｄ３０）
【化５１】
2010524886.tif 000055
５−クロロ−６−ヒドロキシ−３−ピリジンカルボン酸（３.００ｇ、１７.２８ｍｍｏｌ）をトルエン（７５ｍｌ）に懸濁し、炭酸銀（１２.４ｇ、２４.８ｍｍｏｌ）および２−ヨードプロパン（６.９ｍｌ、６９.１２ｍｍｏｌ）で処理し、暗所にて室温で１８時間撹拌した。該混合物を濾過し、濾液を蒸発させて、不純物を含む標記化合物を得た（１.３２ｇ）。δＨ（ｄ6−ＤＭＳＯ）１.３１（６Ｈ，ｄ）、１.３５（６Ｈ，ｄ）、５.１３（１Ｈ，sept）、５.４０（１Ｈ，sept）、８.２２（１Ｈ，ｄ）、８.６５（１Ｈ，ｄ）。
【０１４４】
Ｄ３０（別法）の説明
５−クロロ−６−[(１−メチルエチル)オキシ]−３−ピリジンカルボン酸１−メチルエチル（Ｄ３０）
【化５２】
2010524886.tif 000056
５−クロロ−６−ヒドロキシ−３−ピリジンカルボン酸（１ｇ、５.７６ｍｍｏｌ）をトルエン（２００ｍｌ）に懸濁し、炭酸銀（３.９７ｇ、１４.４０ｍｍｏｌ）および２−ヨードプロパン（３.４６ｍｌ、３４.６ｍｍｏｌ）で処理し、暗所にて室温で３日間撹拌した。さらなる２−ヨードプロパン（３ｍｌ）を添加し、２４時間撹拌した。ＥｔＯＡｃ（２００ｍｌ）を添加し、水（２００ｍｌ）および飽和ＮａＨＣＯ3（５０ｍｌ）で洗浄し、次いで、水（２００ｍｌ）で洗浄した。ＭｇＳＯ4で乾燥させ、溶媒を蒸発させて、標記化合物１.０ｇを透明な無色の油状物として得、さらなる特徴付けを行わずに使用した。
【０１４５】
Ｄ３０（別法）の説明
５−クロロ−６−[(１−メチルエチル)オキシ]−３−ピリジンカルボン酸１−メチルエチル（Ｄ３０）
【化５３】
2010524886.tif 000057
２−ヨードプロパン（１２.４２ｍｌ、１２４ｍｍｏｌ）を５−クロロ−６−ヒドロキシ−３−ピリジンカルボン酸（Flukaからの市販品、５.４ｇ、３１.１ｍｍｏｌ）およびＡｇ2ＣＯ3（２１.４５ｇ、７８ｍｍｏｌ）のＣＨＣｌ3（２００ｍｌ）中懸濁液に添加し、反応物を室温で３日間撹拌した。沈殿物を濾過し、溶媒を真空除去して、標記化合物を黄色油状物として得（４ｇ、４７％）、さらなる精製を行わずに次工程で使用した。ＭＳ（ＥＳ）Ｃ12Ｈ16ＣｌＮＯ3の理論値２５７、測定値２５８ [Ｍ＋Ｈ]+。
【０１４６】
Ｄ３１の説明
５−クロロ−６−[(１−メチルエチル)オキシ]−３−ピリジンカルボン酸（Ｄ３１）
【化５４】
2010524886.tif 000058
イソプロパノール（７０ｍｌ）および水（３５.０ｍｌ）中の５−クロロ−６−[(１−メチルエチル)オキシ]−３−ピリジンカルボン酸１−メチルエチル（Ｄ３０）（１.６ｇ、６.２１ｍｍｏｌ）２Ｎ水酸化ナトリウム（６.２１ｍｌ、１２.４２ｍｍｏｌ）で処理し、３時間撹拌して、単一生成物を得た。ＩＰＡを蒸発させ、氷酢酸で酸性化し、生成物をＥｔＯＡｃ（１００ｍｌ）中に抽出した。ＭｇＳＯ4で乾燥させ、溶媒を蒸発させて、標記化合物１.３０ｇを白色の固体として得た。ＭＳ（ＥＳ）Ｃ9Ｈ1035ＣｌＮＯ3の理論値２１５；測定値２１４（Ｍ−Ｈ+）。
【０１４７】
Ｄ３１（別法）の説明
５−クロロ−６−[(１−メチルエチル)オキシ]−３−ピリジンカルボン酸（Ｄ３１）
【化５５】
2010524886.tif 000059
水酸化ナトリウム（２９.１ｍｌ、５８.２ｍｍｏｌ）を５−クロロ−６−[(１−メチルエチル)オキシ]−３−ピリジンカルボン酸１−メチルエチル（Ｄ３０）（３ｇ、１１.６４ｍｍｏｌ）のメタノール（２５ｍｌ）中溶液に添加し、室温で一夜撹拌した。溶媒を蒸発させた後、２Ｍ ＨＣｌで中和し、エーテルで抽出した。次いで、硫酸マグネシウムで乾燥させ、蒸発させて、不純物を含む白色固体を得た。ＤＣＭと一緒にトリチュレートして、標記化合物を純粋な白色固体として得た。ＭＳ（ＥＳ）Ｃ9Ｈ10ＣｌＮＯ3の理論値２１５、測定値２１６ [Ｍ＋Ｈ]+。
【０１４８】
Ｄ３２の説明
４−(１−シクロヘキセン−１−イル)−３−(トリフルオロメチル)ベンズアミド（Ｄ３２）
【化５６】
2010524886.tif 000060
４−ブロモ−３−(トリフルオロメチル)ベンゾニトリル（市販品）（１.２ｇ、４.８０ｍｍｏｌ）、１−シクロヘキセン−１−イルボロン酸（０.９０７ｇ、７.２０ｍｍｏｌ）、ナトリウムメトキシド（０.７７８ｇ、１４.４０ｍｍｏｌ）およびビス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(ＩＩ)クロリド（０.３３７ｇ、０.４８０ｍｍｏｌ）を乾燥メタノール（１２ｍＬ）に添加し、該混合物をマイクロ波にて８０℃で１０分間加熱した。反応混合物を酢酸エチル（４０ｍＬ）と水（４０ｍＬ）との間で分配させ、次いで、有機相をさらなる水（４０ｍＬ）で洗浄した。有機相を乾燥させ（ＭｇＳＯ4）、濾過し、溶媒を真空除去した。粗生成物をフラッシュシリカクロマトグラフィーにより精製し、ヘキサン中０〜７５％酢酸エチルで溶離して、標記化合物を白色の固体として得た（１.０２ｇ）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ14Ｈ14Ｆ3ＮＯの理論値２６９；測定値２７０（ＭＨ+）。
【０１４９】
Ｄ３３の説明
４−シクロヘキシル−３−(トリフルオロメチル)ベンズアミド（Ｄ３３）
【化５７】
2010524886.tif 000061
４−(１−シクロヘキセン−１−イル)−３−(トリフルオロメチル)ベンズアミド（Ｄ３２）（８５０ｍｇ、３.１６ｍｍｏｌ）をメタノール（６３ｍｌ）に溶解し、４０℃にて流速２ｍＬ／分でパラジウム−炭素を用いてＨ−Ｃｕｂｅを使用して水素添加した。溶媒を真空除去して、標記化合物を白色の固体として得た（８２２ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ14Ｈ16Ｆ3ＮＯの理論値２７１；測定値２７２（ＭＨ+）。
【０１５０】
Ｄ３４の説明
４−シクロヘキシル−３−(トリフルオロメチル)安息香酸（Ｄ３４）
【化５８】
2010524886.tif 000062
４−シクロヘキシル−３−(トリフルオロメチル)ベンズアミド（Ｄ３３）（８２２ｍｇ、３.０３ｍｍｏｌ）のエタノール（４０ｍｌ）中溶液に水酸化カリウム（１.７００ｇ、３０.３ｍｍｏｌ）および水（５ｍｌ）を添加し、反応物を９０℃のブロック温度に３時間加熱し、室温で１６時間撹拌した。さらなる水酸化カリウム（１.７００ｇ、３０.３ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を還流下にて２７時間加熱した。さらに水５ｍＬを添加し、該反応物を６６時間（週末）加熱した。反応混合物を真空中にて濃縮し、残留物を酢酸エチル（２５ｍＬ）と塩酸水溶液（２Ｍ、２５ｍＬ）との間で分配させた。水性層をさらに酢酸エチル（２５ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ4）、濾過し、溶媒を真空除去して、標記化合物を白色の固体として得た（７３７ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ14Ｈ15Ｆ3Ｏ2の理論値２７２；測定値２７１（Ｍ−Ｈ+）。
【０１５１】
Ｄ３５の説明
４−[(１−メチルエチル)オキシ]−３−(トリフルオロメチル)安息香酸１−メチルエチル（Ｄ３５）
【化５９】
2010524886.tif 000063
４−ヒドロキシ−３−(トリフルオロメチル)安息香酸（市販品）（４５０ｍｇ、２.１８ｍｍｏｌ）、２−ヨードプロパン（４３５μＬ、４.３６ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（６０３ｍｇ、４.３６ｍｍｏｌ）のＮ,Ｎ'−ジメチルホルムアミド（４０ｍＬ）中混合物を７０℃で４時間加熱した後、さらなる２−ヨードプロパン（２１８μＬ、２.１８ｍｍｏｌ）を添加し、加熱を１８時間続けた。無機固体を濾過し、酢酸エチルですすいだ。濾液を真空中にて濃縮し、酢酸エチル（１５０ｍＬ）と若干の水酸化ナトリウム水溶液を含有する水（１５０ｍＬ）との間で分配させた。有機層を乾燥させ（相分離器）、真空中にて濃縮して、粗標記化合物を黄色油状物として得た（７０４ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ14Ｈ17Ｆ3Ｏ3の理論値２９０；測定値２９１（ＭＨ+）。
【０１５２】
Ｄ３６の説明
４−[(１−メチルエチル)オキシ]−３−(トリフルオロメチル)安息香酸（Ｄ３６）
【化６０】
2010524886.tif 000064
４−[(１−メチルエチル)オキシ]−３−(トリフルオロメチル)安息香酸１−メチルエチル（Ｄ３５）（７０４ｍｇ、２.４３ｍｍｏｌ）のエタノール（１１０ｍＬ）中混合物に水酸化ナトリウム水溶液（２Ｍ、１２.２ｍＬ、２４.３ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を１時間加熱還流した。該混合物を真空中にて濃縮し、残留物を酢酸エチル（１００ｍＬ）と水（１００ｍＬ）との間で分配させ、塩酸水溶液（２Ｍ、１３ｍＬ）で酸性化した。水性層を酢酸エチル（１００ｍＬ）でさらに抽出し、合わせた有機層を乾燥させ、真空中にて濃縮して、標記化合物を黄色固体として得た（５６３ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ11Ｈ11Ｆ3Ｏ3の理論値２４８；測定値２４７（Ｍ−Ｈ+）。
【０１５３】
Ｄ３７の説明
３−クロロ−４−(プロピルオキシ)安息香酸メチル（Ｄ３７）
【化６１】
2010524886.tif 000065
４−ヒドロキシ−３−クロロ安息香酸メチル（１０ｇ、５３.６ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１１０ｍｌ）に溶解し、次いで、炭酸カリウム（１４.８ｇ、１０７.２ｍｍｏｌ）を添加し、次いで、ヨウ化ｎ−プロピル（１０.４ｍｌ、１０７.２ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を７０℃に一夜加熱し、濾過し、次いで、濾液をＥｔＯＡｃと水との間で分配させた。有機層を分取し、乾燥させ、蒸発させて、標記化合物を黄色油状物として得た（１２.３７ｇ）。ＭＳ（ＥＳ）Ｃ11Ｈ1335ＣｌＯ3の理論値２２８；測定値２２９（ＭＨ+）。
【０１５４】
Ｄ３８の説明
３−クロロ−４−(プロピルオキシ)安息香酸（Ｄ３８）
【化６２】
2010524886.tif 000066
３−クロロ−４−(プロピルオキシ)安息香酸メチル（Ｄ３７）（ＲＤ１０８８２５−５８−Ｂ１）（１２.２２ｇ、０.０５３ｍｏｌ）のエタノール（４０ｍｌ）および２Ｍ ＮａＯＨ水溶液（４０ｍｌ）中溶液を６０℃で３時間加熱した。反応物を冷却し、次いで、室温で週末にわたって放置した。反応混合物をＨＣｌ希水溶液およびＥｔＯＡｃの混合物中に注いた。有機層を分取し、乾燥させ、蒸発させて固体を得、エーテルと一緒にトリチュレートして、標記化合物を白色の固体として得た（７.７ｇ）。ＭＳ（ＥＳ）Ｃ10Ｈ1135ＣｌＯ3の理論値２１４；測定値２１３（Ｍ−Ｈ+）。
【０１５５】
Ｄ３９の説明
３−クロロ−４−(１−ピロリジニル)安息香酸エチル（Ｄ３９）
【化６３】
2010524886.tif 000067
４−ブロモ−３−クロロ安息香酸エチル（Ｄ１６）（２.５３ｇ、９.６２ｍｍｏｌ）、ピロリジン（１.０３ｍＬ、１２.５ｍｍｏｌ）、ナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（１.２９ｇ、１３.５ｍｍｏｌ）、ＢＩＮＡＰ（１９６ｍｇ、０.２９ｍｍｏｌ）およびトリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(０)（５８ｍｇ、０.１０ｍｍｏｌ）のトルエン（１２０ｍＬ）中混合物をアルゴン下で３時間加熱還流した。反応物を冷却し、濾過した。固体をトルエンで洗浄し、次いで、濾液を濃縮した。残留物を酢酸エチル（１５０ｍＬ）と重炭酸ナトリウム水溶液（５０ｍＬ）を添加した水（１００ｍＬ）との間で分配させた。有機相を乾燥させ（相分離器）、濃縮して、橙色の油状物を得た。該油状物を逆相クロマトグラフィーによって精製し、水中５〜１００％アセトニトリルで溶離して、標記化合物を橙色の油状物として得た（６００ｍｇ）。これは不純物を若干含有していた。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ13Ｈ1635ＣｌＮＯ2の理論値２５３；測定値２５４（ＭＨ+）。
同様の方法でさらなる標記化合物（８５ｍｇ）を調製した。
【０１５６】
Ｄ４０の説明
３−クロロ−４−(１−ピロリジニル)安息香酸（Ｄ４０）
【化６４】
2010524886.tif 000068
３−クロロ−４−(１−ピロリジニル)安息香酸エチル（Ｄ３９）（６８５ｍｇ、２.７１ｍｍｏｌ）および水酸化ナトリウム水溶液（２Ｍ、１.３６ｍＬ、２.７２ｍｍｏｌ）のエタノール（１５ｍＬ）中混合物を４０℃で１７時間加熱した。さらなる水酸化ナトリウム（１.３６ｍＬ、２.７２ｍｍｏｌ）を添加し、反応物をさらに８時間加熱した。該混合物を濃縮し、残留物を水（１００ｍＬ）に溶解した。水性相を酢酸エチル（１００ｍＬ）で２回洗浄し、次いで、ｐＨ６に酸性化した。白色固体が形成され、したがって、これを濾過し、水で洗浄し、真空オーブン中にて乾燥させて、標記化合物をオフホワイト色の固体として得た（３６２ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ11Ｈ1235ＣｌＮＯ2の理論値２２５；測定値２２６（ＭＨ+）。
【０１５７】
Ｄ４１の説明
２−(シクロペンチルオキシ)−５−ホルミルベンゾニトリル（Ｄ４１）
【化６５】
2010524886.tif 000069
シクロペンタノール（１.１５g、０.０１３ｍｏｌ）のＤＭＦ（５０ｍｌ）中溶液を０℃に冷却した。該溶液に水素化ナトリウム（１.５４ｇ、０.０１６ｍｏｌ）を滴下し、滴下完了後に該混合物を０℃で１０分間撹拌した。次いで、３−シアノ−４−フルオロベンズアルデヒド（市販品）（２.０g、０.０１３ｍｏｌ）を添加し、該混合物を室温に加温し、一夜撹拌した。反応混合物を０℃に冷却し、ブラインを添加し、該混合物を酢酸エチル（約２５ｍｌ）で希釈し、分配させ、有機層を水（約３０ｍｌ）で洗浄し、相分離用カートリッジに通して乾燥させた。該溶液を真空中にて濃縮し、残留物を、溶離液として２０〜６０％酢酸エチル／ヘキサンを用いてＢｉｏｔａｇｅ  ＳＰ４、４０Ｍによって精製した。生成物含有フラクションを真空中にて濃縮して、標記化合物を黄色液体として得た（１.０２g、４.２ｍｍｏｌ）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ13Ｈ13ＮＯ2の理論値２１５；測定値２１６（ＭＨ+）。
【０１５８】
Ｄ４２の説明
３−シアノ−４−(シクロペンチルオキシ)安息香酸（Ｄ４２）
【化６６】
2010524886.tif 000070
５０℃での（Ｄ４１）（０.１３g、０.６０４ｍｍｏｌ）の酢酸（２０ｍｌ）中溶液に過ホウ酸ナトリウム・四水和物（０.１８６ｇ、１.２０８ｍｍｏｌ）を滴下した。反応混合物を５０℃で一夜撹拌した。撹拌を５０℃で４８時間続け、反応混合物に過ホウ酸ナトリウム・四水和物（０.０９３ｇ、０.６０４ｍｍｏｌ）を添加し、撹拌をさらに２日間続け、次いで、反応混合物を室温で２日間放置した。
溶媒を真空除去し、該混合物を酢酸エチル（約２０ｍｌ）と水（約２０ｍｌ）との間で分配させ、水性層を酢酸エチル（約１５ｍｌ）で２回抽出し、合わせた有機層を真空中にて濃縮して、標記化合物を黄色固体として得た（１０６ｍｇ、０.４３５ｍｍｏｌ）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ13Ｈ13ＮＯ3の理論値２３１；測定値２３０（Ｍ−Ｈ+）。
【０１５９】
Ｄ４３の説明
５−[３−(１Ｈ−インダゾール−５−イル)−１,２,４−オキサジアゾール−５−イル]−２−[(１−メチルエチル)オキシ]ベンゾニトリル（Ｄ４３）
【化６７】
2010524886.tif 000071
３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]安息香酸（ＷＯ２００５／５８８４８に記載されているように製造することができる）（１.５２ｇ）、ＥＤＡＣ（２.１４ｇ）およびＨＯＢｔ（１.５１ｇ）をＤＭＦ（３０ｍｌ）に溶解し、次いで、５分間撹拌した。Ｎ−ヒドロキシ−１Ｈ−インダゾール−５−カルボキシイミドアミド（Ｄ２）（１.３ｇ）を添加し、反応物を８０℃に６時間加熱し、一夜冷却した。溶媒を真空除去し、粗物質をＥｔＯＡｃと重炭酸ナトリウム水溶液との間で分配させた。有機層を分取し、乾燥させ、真空下にて蒸発乾固させた。得られた固体をエーテルおよび酢酸エチルと一緒にトリチュレートし、メタノールおよびエーテルで洗浄して、標記化合物をピンク色の固体として得た（８１６ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ19Ｈ15Ｎ5Ｏ2の理論値３４５；測定値（ＭＨ+）３４６
【０１６０】
Ｄ４３（別法）の説明
５−[３−(１Ｈ−インダゾール−５−イル)−１,２,４−オキサジアゾール−５−イル]−２−[(１−メチルエチル)オキシ]ベンゾニトリル（Ｄ４３）
【化６８】
2010524886.tif 000072
３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]ベンゾイルクロリド（Ｄ１０６）（５４５ｍｇ、２.４３７ｍｍｏｌ）およびＮ−ヒドロキシ−１Ｈ−インダゾール−５−カルボキシイミドアミド（Ｄ２）（６８５ｍｇ、２.４３７ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（３０ｍｌ）に溶解した後、トリエチルアミン（０.３７４ｍｌ、２.６８ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を室温で３時間撹拌し、次いで、８０℃で４８時間撹拌し、次いで、室温で冷却した。形成した沈殿物を濾過し、ＥｔＯＡｃに溶解し、水で洗浄し、蒸発させ、クロマトグラフィー処理して［シクロヘキサン中０〜１５％ＥｔＯＡｃ］、標記化合物をピンク色の固体として得た（１７０ｍｇ、１７％）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ19Ｈ15Ｎ5Ｏ2の理論値３４５；測定値（ＭＨ+）３４６
【０１６１】
Ｄ４４およびＤ４５の説明
４−[５−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−２Ｈ−インダゾール−２−イル]ブタン酸エチル（Ｄ４４）および４−[５−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−２Ｈ−インダゾール−２−イル]ブタン酸エチル（Ｄ４５）
【化６９】
2010524886.tif 000073
５−[３−(１Ｈ−インダゾール−５−イル)−１,２,４−オキサジアゾール−５−イル]−２−[(１−メチルエチル)オキシ]ベンゾニトリル（Ｄ４３）（２００ｍｇ、０.５８ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（５ｍｌ）に溶解し、Ｃｓ2ＣＯ3（５６７ｍｇ、１.７４ｍｍｏｌ）および４−ブロモブタン酸エチル（０.１６６ｍｌ、１.１６ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を８０℃に１２時間加熱し、次いで、冷却した。反応混合物を水とＥｔＯＡｃとの間で分配させた。有機層を分取し、乾燥させ、真空中にて蒸発させて、粗生成物を得、フラッシュクロマトグラフィーにより精製して（ＥｔＯＡｃ／石油エーテル（１：６〜１：１））、４−[５−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]ブタン酸エチル（Ｄ４４）を白色の固体として得（１５１ｍｇ）［δＨ（ｄ6−ＤＭＳＯ）１.１４（３Ｈ，ｔ）、１.３９（６Ｈ，ｄ）、２.０４−２.１８（２Ｈ，ｍ）、２.３１（２Ｈ，ｔ）、４.０１（２Ｈ，ｑ）、４.５１（２Ｈ，ｔ）、４.９９（１Ｈ，sept）、７.５７（１Ｈ，ｄ）、７.８７（１Ｈ，ｄ）、８.０８（１Ｈ，ｄｄ）、８.２９（１Ｈ，ｄ）、８.４３（１Ｈ，ｄｄ）、８.５２（１Ｈ，ｄ）、８.５７−８.５８（１Ｈ，ｍ）；ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ25Ｈ25Ｎ5Ｏ4の理論値４５９；測定値（ＭＨ+）４６０］、ＲＤ１０８８２５−１８７Ａ２  ４−[５−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−２Ｈ−インダゾール−２−イル]ブタン酸エチル（Ｄ４５）を白色の固体として得た（６６ｍｇ）［δＨ（ｄ6−ＤＭＳＯ）１.１６（３Ｈ，ｔ）、１.３７（６Ｈ，ｄ）、２.１４−２.２６（２Ｈ，ｍ）、２.３２（２Ｈ，ｔ）、４.０３（２Ｈ，ｑ）、４.５１（２Ｈ，ｔ）、４.９９（１Ｈ，sept）、７.５７（１Ｈ，ｄ）、７.７８−７.８０（１Ｈ，ｍ）、７.８９（１Ｈ，ｄｄ）、８.４２（１Ｈ，ｄｄ）、８.５２（１Ｈ，ｄ）、８.５７−８.５８（１Ｈ，ｍ）、８.６２（１Ｈ，ｓ）。ＭＳ（ＥＳ）Ｃ25Ｈ25Ｎ5Ｏ4の理論値４５９；測定値（ＭＨ+）４６０］。
【０１６２】
Ｄ４６の説明
[５−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]酢酸エチル（Ｄ４６）
【化７０】
2010524886.tif 000074
５−[３−(１Ｈ−インダゾール−５−イル)−１,２,４−オキサジアゾール−５−イル]−２−[(１−メチルエチル)オキシ]ベンゾニトリル（Ｄ４３）およびブロモ酢酸エチルから（Ｄ４４）と同様の方法で製造した。粗物質をジエチルエーテルと一緒にトリチュレートすることによって精製して、標記化合物を黄色固体として得た。ＭＳ（ＥＳ）Ｃ23Ｈ21Ｎ5Ｏ4の理論値４３１；測定値（ＭＨ+）４３２。
【０１６３】
Ｄ４７の説明
３−(５−シアノ−１Ｈ−インダゾール−１−イル)プロパン酸エチル（Ｄ４７）
【化７１】
2010524886.tif 000075
１Ｈ−インダゾール−５−カルボニトリル（Ｄ１）（２.８ｇ、１９.７２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（６０ｍｌ）中溶液に炭酸セシウム（１２.８６ｇ、３９.４ｍｍｏｌ）を添加し、次いで、３−ブロモプロパン酸エチル（３.８ｍｌ、２９.６ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を８０℃で３時間撹拌し、次いで、冷却した。溶媒を真空除去し、粗物質をＥｔＯＡｃ（×２）と水との間で分配させ、有機層を合わせ、乾燥させ、蒸発させた。粗物質をトルエンと共沸させ、次いで、フラッシュクロマトグラフィーにより精製して（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（１：３））、ピンク色の固体３.７５ｇを得、その後、ヘキサンと一緒にトリチュレートして、標記化合物をピンク色の固体として得た（３.２ｇ）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ13Ｈ13Ｎ3Ｏ2の理論値２４３、測定値（ＭＨ+）２４４。
【０１６４】
Ｄ４７（別法）の説明
３−(５−シアノ−１Ｈ−インダゾール−１−イル)プロパン酸エチル（Ｄ４７）
【化７２】
2010524886.tif 000076
１Ｈ−インダゾール−５−カルボニトリル（Ｄ１）（３.８８ｇ、２７.３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（８５ｍｌ）中溶液にＣｓ2ＣＯ3（１７.８ｇ、５４.６ｍｍｏｌ）を添加し、次いで、３−ブロモプロパン酸エチル（３.５ｍｌ、２７ｍｍｏｌ）および３−クロロプロパン酸エチル（３.３ｇ、２４.２ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を８０℃で４時間撹拌し、次いで、冷却した。溶媒を真空除去し、粗物質をＥｔＯＡｃと水との間で分配させ、有機層を分取し、ブラインで洗浄し、乾燥させ、蒸発させた。粗物質をトルエンと共沸させ、次いで、フラッシュクロマトグラフィーにより精製して（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（１：９〜１：１））、黄色のガム状物３.８４ｇを得た。ＭＳデータは上記実施例と同様であった。
【０１６５】
Ｄ４７（別法）の説明
３−(５−シアノ−１Ｈ−インダゾール−１−イル)プロパン酸エチル（Ｄ４７）
【化７３】
2010524886.tif 000077
１Ｈ−インダゾール−５−カルボニトリル（Ｄ１）（３.５ｇ、２４.４５ｍｍｏｌ）をＮ,Ｎ−ジメチルホルムアミド（６０ｍｌ）に溶解した。炭酸セシウム（１５.９３ｇ、４８.９ｍｍｏｌ）および３−ブロモプロパン酸エチル（４.６８ｍｌ、３６.７ｍｍｏｌ）を添加した。該混合物を８０℃で４時間加熱した。ＥｔＯＡｃで希釈し、水（３×４０ｍｌ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥させ、蒸発させた。該混合物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、ＥｔＯＡｃ／ｉｓｏ−ヘキサン（１０−３０％、次いで、１０−２０％）で溶離して、第１異性体（黄色油状物）３.６８２ｇおよび第２異性体（ピンク色の固体）１.５０９ｇを得た。１Ｈ  ｎｍｒによる第１異性体の分析は１−異性体が２−異性体で汚染されていた（約２０％）ことを示している。δＨ（ｄ6−ＤＭＳＯ，４００ＭＨｚ）１.０５（３Ｈ，ｔ）、２.９５（２Ｈ，ｔ）、３.９７（２Ｈ，ｑ）、４.６９（２Ｈ，ｔ）、７.７４（１Ｈ，ｄｄ）、７.９２（１Ｈ，ｄｔ）、８.２８（１Ｈ，ｄ）、８.３８（１Ｈ，ｄｄ）。ＭＳ（ＥＳ+）：  Ｃ13Ｈ13Ｎ3Ｏ2の理論値２４３；測定値（ＭＨ+）２４４。
【０１６６】
Ｄ４８の説明
４−(４−シアノ−２Ｈ−インダゾール−２−イル)ブタン酸エチルおよび４−(４−シアノ−１Ｈ−インダゾール−１−イル)ブタン酸エチルの混合物（Ｄ４８）
【化７４】
2010524886.tif 000078
４−ブロモブタン酸エチル（０.３９０ｇ、１.９９８ｍｍｏｌ）、１Ｈ−インダゾール−４−カルボニトリル（０.１４３ｇ、０.９９９ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（０.９７６ｇ、３.００ｍｍｏｌ）のＮ,Ｎ−ジメチルホルムアミド（４ｍｌ）中混合物を撹拌し、８０℃で９０分間加熱した。冷却し、酢酸エチル／水（各々３０ｍｌ）で希釈し、有機物を水１５ｍｌで３回洗浄し、乾燥させ（硫酸マグネシウム）、蒸発させ、フラッシュクロマトグラフィーにより精製し、酢酸エチル／ヘキサン（１：２）で溶離して２つの異性体の部分分離を行い、特徴付けの後に再度合わせて、標記の異性体混合物を得た（２４９ｍｇ）。１−異性体についてのδＨ（ＣＤＣｌ3，４００ＭＨｚ）：  １.２４（３Ｈ，ｔ）、２.２９（４Ｈ，ｍ）、４.１２,（２Ｈ，ｑ）、４.５３（２Ｈ，ｔ）、７.４５（１Ｈ，ｄｄ）、７.５４（１Ｈ，ｄｄ）、７.７１（１Ｈ，ｄｄ）、８.１９（１Ｈ，ｄ）。２−異性体についてδＨ（ＣＤＣｌ3，４００ＭＨｚ）１.２５（３Ｈ，ｔ）、２.３５（４Ｈ，ｍ）、４.１４,（２Ｈ，ｑ）、４.５８（２Ｈ，ｔ）、７.３３（１Ｈ，ｄｄ）、７.５４（１Ｈ，ｄｄ）、７.９６（１Ｈ，ｄｄ）、８.１５（１Ｈ，ｄ）。
【０１６７】
Ｄ４８（別法）の説明
４−(４−シアノ−２Ｈ−インダゾール−２−イル)ブタン酸エチルおよび４−(４−シアノ−１Ｈ−インダゾール−１−イル)ブタン酸エチルの混合物（Ｄ４８）
【化７５】
2010524886.tif 000079
４−ブロモブタン酸エチル（５.３６ｍｌ、３７.４ｍｍｏｌ）、１Ｈ−インダゾール−４−カルボニトリル（２.６８ｇ、１８.７２ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（１８.３０ｇ、５６.２ｍｍｏｌ）のＮ,Ｎ−ジメチルホルムアミド（５０ｍｌ）中混合物を８０℃で９０分間加熱した。冷却し、ＥｔＯＡｃ／水で希釈し、有機物を水３０ｍｌで３回洗浄し、乾燥させ（硫酸マグネシウム）、蒸発させた。フラッシュクロマトグラフィーにより精製し、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（１：３）で溶離して、標記異性体混合物を黄色油状物として得た（４.７ｇ）。ＭＳ（ＥＳ+）：  Ｃ14Ｈ15Ｎ3Ｏ2の理論値２５７；測定値（ＭＨ+）２５８。
【０１６８】
Ｄ４９の説明
３−(４−シアノ−２Ｈ−インダゾール−２−イル)プロパン酸エチルおよび３−(４−シアノ−１Ｈ−インダゾール−１−イル)プロパン酸エチルの混合物（Ｄ４９）
【化７６】
2010524886.tif 000080
３−ブロモプロパン酸エチル（１.８０８ｇ、９.９９ｍｍｏｌ）、１Ｈ−インダゾール−４−カルボニトリル（０.７１５ｇ、４.９９ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（４.８８ｇ、１４.９８ｍｍｏｌ）のＮ,Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）（１０ｍｌ）中混合物を撹拌し、８０℃で２時間加熱した。冷却し、酢酸エチル（４０ｍｌ）および水（４０ｍｌ）で希釈し、有機物を水１５ｍｌで３回洗浄し、乾燥させ（硫酸マグネシウム）、蒸発させ、フラッシュクロマトグラフィーにより精製し、酢酸エチル／ヘキサン（３：７）で溶離して、無色の油状物１.１９ｇを得た。これはゆっくりと白色固体に結晶化した。ＮＭＲおよびＬＣ／ＭＳによって、これは約３：１の異性体混合物であることが示された。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ13Ｈ13Ｎ3Ｏ2の理論値２４３、測定値（ＭＨ+）２４４。
【０１６９】
Ｄ５０およびＤ５１の説明
４−(５−シアノ−１Ｈ−インダゾール−１−イル)ブタン酸エチル（Ｄ５０）および４−(５−シアノ−２Ｈ−インダゾール−２−イル)ブタン酸エチル（Ｄ５１）
【化７７】
2010524886.tif 000081
１Ｈ−インダゾール−５−カルボニトリル（Ｄ１）（１.９３ｇ、１３.５９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（４５ｍｌ）中溶液に炭酸セシウム（９.１ｇ、２７.９ｍｍｏｌ）を添加し、次いで、４−ブロモブタン酸エチル（２.９２ｍｌ、２０.４ｍｍｏｌ）を添加した。該反応物を８０℃で６時間加熱した。ＤＭＦをほとんど真空除去し、得られた物質を酢酸エチルと水との間で分配させ、有機物をブラインで洗浄し、乾燥させ、蒸発させて、ガム状物４ｇを得た。該粗物質を、ヘキサン中ＥｔＯＡｃ（１：４）を使用してフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。上部ランニングスポットを単離して、ＲＤ１０７９７３−３９Ｂ１を得、４−(５−シアノ−１Ｈ−インダゾール−１−イル)ブタン酸エチル（Ｄ５０）であると同定した。δＨ（ｄ6−ＤＭＳＯ）１.１３（３Ｈ，ｔ）、２.０４−２.１３（２Ｈ，ｍ）、２.２９（２Ｈ，ｔ）、３.９９（２Ｈ，ｑ）、４.５１（２Ｈ，ｔ）、７.７４（１Ｈ，ｄｄ）、７.８８（１Ｈ，ｄ）、８.２８（１Ｈ，ｄ）、８.４１−８.４４（１Ｈ，ｍ）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ14Ｈ15Ｎ3Ｏ2の理論値２５７、測定値（ＭＨ+）２５８。
下部ランニングスポットを単離して、標記化合物を得た。δＨ（ｄ6−ＤＭＳＯ）１.１５（３Ｈ，ｔ）、２.１５−２.２２（２Ｈ，ｍ）、２.３１（２Ｈ，ｔ）、４.０１（２Ｈ，ｑ）、４.４９−４.５５（２Ｈ，ｍ）、７.４８（１Ｈ，ｄｄ）、７.７８（１Ｈ，ｄｄ）、８.４３−８.４４（１Ｈ，ｍ）、８.６７（１Ｈ，ｄ）。Ｃ14Ｈ15Ｎ3Ｏ2の理論値２５７、測定値（ＭＨ+）２５８。
【０１７０】
Ｄ５２の説明
３−｛５−[(ヒドロキシアミノ)(イミノ)メチル]−１Ｈ−インダゾール−１−イル｝プロパン酸エチル（Ｄ５２）
【化７８】
2010524886.tif 000082
３−(５−シアノ−１Ｈ−インダゾール−１−イル)プロパン酸エチル（Ｄ４７）（１ｇ、４.１１ｍｍｏｌ）をエタノール（３０ｍｌ）に溶解し、重炭酸ナトリウム（１.７３ｇ、２０.５５ｍｍｏｌ）およびヒドロキシルアミン・塩酸塩（５７１ｍｇ、８.２２ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を５０℃で一夜加熱し、次いで、冷却した。反応混合物を濾過し、残留物をエタノールで洗浄した。濾液を真空下にて蒸発乾固させ、得られた粗標記化合物（１.０６ｇ）を次反応に使用した。
【０１７１】
Ｄ５２（別法）の説明
３−｛５−[(ヒドロキシアミノ)(イミノ)メチル]−１Ｈ−インダゾール−１−イル｝プロパン酸エチル（Ｄ５２）
【化７９】
2010524886.tif 000083
３−(５−シアノ−１Ｈ−インダゾール−１−イル)プロパン酸エチル（Ｄ４７）（１ｇ、４.１１ｍｍｏｌ）をエタノール（３０ｍｌ）に溶解し、重炭酸ナトリウム（１.７３ｇ、２０.８８ｍｍｏｌ）およびヒドロキシルアミン・塩酸塩（５７１ｍｇ、８.２２ｍｍｏｌ）を添加した。該反応物を室温で一夜放置し、次いで、５０℃に４時間加熱し、次いで、一夜冷却した。反応混合物を濾過し、残留物をエタノールで洗浄した。エタノール性濾液を真空下にて蒸発乾固させ、次いで、エーテルと一緒にトリチュレートして、標記化合物を純度約９０％の白色の固体として得た（７６４ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ13Ｈ16Ｎ4Ｏ3の理論値２７６；測定値（ＭＨ+）２７７。
【０１７２】
Ｄ５２（別法）の説明
３−｛５−[(ヒドロキシアミノ)(イミノ)メチル]−１Ｈ−インダゾール−１−イル｝プロパン酸エチル（Ｄ５２）
【化８０】
2010524886.tif 000084
３−(５−シアノ−１Ｈ−インダゾール−１−イル)プロパン酸エチル（Ｄ４７）（３.８４ｇ、１５.８ｍｍｏｌ）をエタノール（１００ｍｌ）に溶解し、重炭酸ナトリウム（６.６ｇ、７９ｍｍｏｌ）、次いで、ヒドロキシルアミン・塩酸塩（３.３ｇ、４７.４ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を５０℃に合計１１時間加熱し、次いで、一夜冷却した。反応物を濾過し、残留物をエタノールで洗浄した。濾液を真空下にて蒸発乾固させ、得られた固体をエーテルと一緒にトリチュレートして、標記化合物を白色の固体として得た（３.７９ｇ）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ13Ｈ16Ｎ4Ｏ3の理論値２７６；測定値（ＭＨ+）２７７。
【０１７３】
Ｄ５２（別法）の説明
３−｛５−[(ヒドロキシアミノ)(イミノ)メチル]−１Ｈ−インダゾール−１−イル｝プロパン酸エチル（Ｄ５２）
【化８１】
2010524886.tif 000085
３−(５−シアノ−１Ｈ−インダゾール−１−イル)プロパン酸エチルＤ４７（３.６ｇ、１４.８０ｍｍｏｌ）をエタノール（４０ｍｌ）に溶解し、ヒドロキシルアミン・塩酸塩（２.０５７ｇ、２９.６ｍｍｏｌ）および重炭酸ナトリウム（６.２２ｇ、７４.０ｍｍｏｌ）を添加した。該混合物を６０℃で一夜加熱した。冷却し、濾過し、濾液を蒸発させ、ＥｔＯＡｃに溶解し、水（３×２０ｍｌ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥させ、再度蒸発させて、生成物（１.７５ｇ）を得た。ロータリー式エバポレーターからさらなる白色結晶０.２９０ｇを回収した。ＭＳ（ＥＳ+）：  Ｃ13Ｈ16Ｎ4Ｏ3の理論値２７６；測定値（ＭＨ+）２７７。
【０１７４】
Ｄ５３の説明
４−｛５−[(ヒドロキシアミノ)(イミノ)メチル]−１Ｈ−インダゾール−１−イル｝ブタン酸エチル（Ｄ５３）
【化８２】
2010524886.tif 000086
これは、Ｄ５０  ＲＤ１０７９７３−０３９Ｂ１から上記の方法と同様の方法によって製造した。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ14Ｈ18Ｎ4Ｏ3の理論値２９０；測定値（ＭＨ+）２９１。
【０１７５】
Ｄ５４の説明
４−｛５−[(ヒドロキシアミノ)(イミノ)メチル]−２Ｈ−インダゾール−２−イル｝ブタン酸エチル（Ｄ５４）
【化８３】
2010524886.tif 000087
これは、４−(５−シアノ−２Ｈ−インダゾール−２−イル)ブタン酸エチル（Ｄ５１）から上記の方法と同様の方法によって製造した。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ14Ｈ18Ｎ4Ｏ3の理論値２９０；測定値（ＭＨ+）２９１。
【０１７６】
Ｄ５５の説明
３−｛４−[(ヒドロキシアミノ)(イミノ)メチル]−２Ｈ−インダゾール−２−イル｝プロパン酸エチルおよび３−｛４−[(ヒドロキシアミノ)(イミノ)メチル]−１Ｈ−インダゾール−１−イル｝プロパン酸エチルの混合物（Ｄ５５）
【化８４】
2010524886.tif 000088
エタノール（１５ｍｌ）中の３−(４−シアノ−２Ｈ−インダゾール−２−イル)プロパン酸エチルおよび３−(４−シアノ−１Ｈ−インダゾール−１−イル)プロパン酸エチルの混合物（Ｄ４９）（１.２ｇ、４.９３８ｍｍｏｌ）（試料は１−異性体および２−異性体の約３：１混合物であった）、ヒドロキシルアミン・塩酸塩（０.６８６ｇ、９.８７ｍｍｏｌ）および重炭酸ナトリウム（２.０７２ｇ、２４.６６ｍｍｏｌ）を５０℃で３時間加熱した。固体を濾過し、濾液を蒸発乾固させて、無色の油状物を得た（１.４ｇ）。ＬＣＭＳおよびＮＭＲによって、異性体の約３：１混合物であることを確認した。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ13Ｈ16Ｎ4Ｏ3の理論値２７６；測定値（ＭＨ+）２７７。
【０１７７】
Ｄ５６の説明
４−｛４−[(ヒドロキシアミノ)(イミノ)メチル]−２Ｈ−インダゾール−２−イル｝ブタン酸エチルおよび４−｛４−[(ヒドロキシアミノ)(イミノ)メチル]−１Ｈ−インダゾール−１−イル｝ブタン酸エチルの混合物（Ｄ５６）
【化８５】
2010524886.tif 000089
エタノール（５ｍｌ）中の４−(４−シアノ−２Ｈ−インダゾール−２−イル)ブタン酸エチルおよび４−(４−シアノ−１Ｈ−インダゾール−１−イル)ブタン酸エチルの混合物（Ｄ４８）（０.２４９ｇ、０.９６８ｍｍｏｌ）（試料は１−異性体および２−異性体の約３：２混合物であった）、ヒドロキシルアミン・塩酸塩（０.１３５ｇ、１.９３６ｍｍｏｌ）および重炭酸ナトリウム（０.４０７ｇ、４.８４ｍｍｏｌ）を撹拌し、８０℃で９０分間加熱し、次いで、酢酸エチル（３０ｍｌ）／水（５０ｍｌ）で希釈し、有機物を乾燥させ（硫酸マグネシウム）、蒸発させて、標記混合物を無色のガム状物として得た（２７０ｍｇ）。ＬＣ／ＭＳによって、２種類の小さな不純物を含む異性体の３：２混合物であることが示された。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ14Ｈ18Ｎ4Ｏ3の理論値２９０；測定値（ＭＨ+）２９１
【０１７８】
Ｄ５６（別法）の説明
４−｛４−[(ヒドロキシアミノ)(イミノ)メチル]−２Ｈ−インダゾール−２−イル｝ブタン酸エチルおよび４−｛４−[(ヒドロキシアミノ)(イミノ)メチル]−１Ｈ−インダゾール−１−イル｝ブタン酸エチルの混合物（Ｄ５６）
【化８６】
2010524886.tif 000090
４−(４−シアノ−２Ｈ−インダゾール−２−イル)ブタン酸エチルおよび４−(４−シアノ−１Ｈ−インダゾール−１−イル)ブタン酸エチルの混合物（Ｄ４８）（４.７ｇ、９.１３ｍｍｏｌ）（試料は１−異性体および２−異性体の約２：１混合物であった）、ヒドロキシルアミン・塩酸塩（２.５４ｇ、３６.５ｍｍｏｌ）および重炭酸ナトリウム（７.６７g ９１ｍｍｏｌ）のエタノール（５０ｍｌ）中懸濁液を５０℃で３時間加熱し、冷却し、蒸発させ、ＥｔＯＡｃ／水間で分配させた。有機層を乾燥させ（硫酸マグネシウム）、蒸発させ、エーテルと一緒にトリチュレートして、標記混合物を白色の固体として得た（４ｇ）。ＮＭＲおよびＬＣＭＳによって、異性体の２：１混合物であることが示された。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ14Ｈ18Ｎ4Ｏ3の理論値２９０；測定値（ＭＨ+）２９１。
【０１７９】
Ｄ５７の説明
３−(５−｛５−[３−クロロ−４−(エチルオキシ)フェニル]−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル｝−１Ｈ−インダゾール−１−イル)プロパン酸エチル（Ｄ５７）
【化８７】
2010524886.tif 000091
８０℃でＤＭＦ（５ｍｌ）中にて３−｛５−[(ヒドロキシアミノ)(イミノ)メチル]−１Ｈ−インダゾール−１−イル｝プロパン酸エチル（Ｄ５２）（２６５ｍｇ、０.９６ｍｍｏｌ）および３−クロロ−４−(エチルオキシ)安息香酸（Ｄ７）（１９２ｍｇ、０.９６ｍｍｏｌ）を一緒に撹拌し、ＥＤＡＣ（２０３ｍｇ）およびＨＯＢｔ（１４２ｍｇ）を添加した。反応が完了したと判断された後（ＬＣＭＳによる分析）、冷却し、反応混合物をＥｔＯＡｃと重炭酸ナトリウム水溶液との間で分配させた。有機層を分取し、水で洗浄し、乾燥させ、蒸発させ、エタノールと一緒にトリチュレートして、粗生成物を得た。フラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（１：３〜１：１））により精製して、標記化合物を白色の固体として得た（８７ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ22Ｈ2135ＣｌＮ4Ｏ4の理論値４４０、測定値（ＭＨ+）４４１。
【０１８０】
Ｄ５８の説明
３−[５−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]プロパン酸エチル（Ｄ５８）
【化８８】
2010524886.tif 000092
８０℃でＤＭＦ（５ｍｌ）中にて３−｛５−[(ヒドロキシアミノ)(イミノ)メチル]−１Ｈ−インダゾール−１−イル｝プロパン酸エチル（Ｄ５２）（２６５ｍｇ、０.９６ｍｍｏｌ）、３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]安息香酸（ＷＯ２００５／５８８４８に記載のように製造することができる）（１９７ｍｇ、０.９６ｍｍｏｌ）、ＥＤＡＣ（２０３ｍｇ）およびＨＯＢｔ（１４２ｍｇ）を２時間撹拌した。室温で週末にわたって撹拌し、次いで、８０℃でさらに４時間加熱した。反応混合物を冷却し、次いで、ＥｔＯＡｃと重炭酸ナトリウムとの間で分配させた。有機層を分取し、ブラインで洗浄し、乾燥させ、真空下にて蒸発乾固させた。粗物質をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、標記化合物を白色の固体として得た（２１４ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ24Ｈ23Ｎ5Ｏ4の理論値４４５；測定値（ＭＨ+）４４６。
【０１８１】
Ｄ５８（別法）の説明
３−[５−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]プロパン酸エチル（Ｄ５８）
【化８９】
2010524886.tif 000093
３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]安息香酸（ＷＯ２００５／５８８４８に記載のように製造することができる）（３７１ｍｇ、１.８１ｍｍｏｌ）、ＥＤＡＣ（５４７ｍｇ、２.８５ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（４３７ｍｇ、２.８５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍｌ）中混合物を室温で１０分間放置した。３−｛５−[(ヒドロキシアミノ)(イミノ)メチル]−１Ｈ−インダゾール−１−イル｝プロパン酸エチル（Ｄ５２）（５００ｍｇ、１.８１ｍｍｏｌ）を添加し、一夜室温で放置した。ＥＤＡＣ（２００ｍｇ、１.０４ｍｍｏｌ）を添加し、２４時間放置した。該混合物を８０℃で２日間加熱し、毎晩室温で放置した。該混合物を８０℃でさらに４時間加熱した。ＥｔＯＡｃ（５０ｍｌ）を添加し、水（６０ｍｌ）、飽和ＮａＨＣＯ3（６０ｍｌ）および水（６０ｍｌ）で洗浄した。ＥｔＯＡｃ層を乾燥させ（ＭｇＳＯ4）、溶媒を蒸発させた。エタノールと一緒にトリチュレートして、標記化合物をベージュ色の固体として得た（５２３ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ24Ｈ23Ｎ5Ｏ4の理論値４４５；測定値（ＭＨ+）４４６。
【０１８２】
Ｄ５９の説明
３−(５−｛５−[４−[(１−メチルエチル)オキシ]−３−(トリフルオロメチル)フェニル]−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル｝−１Ｈ−インダゾール−１−イル)プロパン酸エチル（Ｄ５９）
【化９０】
2010524886.tif 000094
４−[(１−メチルエチル)オキシ]−３−(トリフルオロメチル)安息香酸（Ｄ３６）（１００ｍｇ、０.４ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（５ｍｌ）に溶解し、次いで、ＥＤＡＣ（１１５ｍｇ、０.６ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（８１ｍｇ、０.６ｍｍｏｌ）を添加した。該混合物を３０分間撹拌し、次いで、３−｛５−[(ヒドロキシアミノ)(イミノ)メチル]−１Ｈ−インダゾール−１−イル｝プロパン酸エチル（Ｄ５２）（１１１ｍｇ、０.４０ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を８０℃で一夜加熱した。さらなるＥＤＡＣ（５０ｍｇ）を添加し、反応物をさらに４時間加熱した。さらなるＥＤＡＣ（２０ｍｇ）を添加し、反応物を一夜加熱した。反応混合物を酢酸エチルおよび重炭酸ナトリウムの混合物に添加し、有機物を分取し、水性物をさらなる酢酸エチルで抽出した。合わせた有機物を水で洗浄し、次いで、ブラインで洗浄し、乾燥させ、蒸発させて、粗生成物を得た。この物質をフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ2）により精製して、標記化合物を得た（８２ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ24Ｈ23Ｆ3Ｎ4Ｏ4の理論値４８８；測定値（ＭＨ+）４８９。
【０１８３】
Ｄ６０の説明
４−[４−(５−｛３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]ブタン酸エチル（Ｄ６０）
【化９１】
2010524886.tif 000095
Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド（５ｍｌ）中の４−｛４−[(ヒドロキシアミノ)(イミノ)メチル]−２Ｈ−インダゾール−２−イル｝ブタン酸エチルおよび４−｛４−[(ヒドロキシアミノ)(イミノ)メチル]−１Ｈ−インダゾール−１−イル｝ブタン酸エチルの混合物（Ｄ５６）（０.２７ｇ、０.９３０ｍｍｏｌ）（１−異性体および２−異性体の３：２混合物）、３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]安息香酸（Ｄ３）（０.２００ｇ、０.９３０ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（０.１９６ｇ、１.０２３ｍｍｏｌ）およびＨＯＢＴ（０.１５７ｇ、１.０２３ｍｍｏｌ）を８０℃で１６時間撹拌し、次いで、１２０℃で２時間撹拌した。反応物を冷却し、酢酸エチル（４０ｍｌ）および水（４０ｍｌ）で希釈し、有機物を水１５ｍｌで３回洗浄し、乾燥させ（硫酸マグネシウム）、蒸発させた。粗物質をフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、酢酸エチル／ヘキサン（３：７）で溶離して、２つの生成物を得、エーテル／ヘキサン（１：１）と一緒にトリチュレートして、上部スポット６６ｍｇおよび下部スポット３６ｍｇを得た。上部スポットは所望の１−置換インダゾールであった。δＨ（ＣＤＣｌ3，４００ＭＨｚ）：  １.２４（３Ｈ，ｔ）、１.４６（６Ｈ，ｄ）、２.３１（４Ｈ，ｍ）、４.１２（２Ｈ，ｑ）、４.５５（２Ｈ，ｔ）、４.７３（１Ｈ，ｍ）、７.０８（１Ｈ，ｄ）、７.５２（１Ｈ，ｄｄ）、７.６２（１Ｈ，ｄ）、８.０７（１Ｈ，ｄｄ）、８.１１（１Ｈ，ｄｄ）、８.２９（１Ｈ，ｄ）、８.７０（１Ｈ，ｄ）。
【０１８４】
Ｄ６０（別法）の説明
４−[４−(５−｛３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]ブタン酸エチル（Ｄ６０）
Ｎ２６６５−８４−Ａ１
【化９２】
2010524886.tif 000096
４−｛４−[(ヒドロキシアミノ)(イミノ)メチル]−２Ｈ−インダゾール−２−イル｝ブタン酸エチルおよび４−｛４−[(ヒドロキシアミノ)(イミノ)メチル]−１Ｈ−インダゾール−１−イル｝ブタン酸エチルの混合物（Ｄ５６）（４ｇ、１３.７８ｍｍｏｌ）、３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]安息香酸（Ｄ３）（２.９６ｇ、１３.７８ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（２.９１ｇ、１５.１６ｍｍｏｌ）およびＨＯＢＴ（２.３２１ｇ、１５.１６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（４０ｍｌ）中溶液を室温で３時間撹拌して、中間体を形成し、次いで、１２０℃で２時間加熱して環化した。該溶液を冷却し、ＥｔＯＡｃで希釈し、水で３回洗浄し、乾燥させ（硫酸マグネシウム）、蒸発させた。フラッシュクロマトグラフィーによって精製し、ＥｔＯＡｃ／ｉｓｏ−ヘキサン（１：３）で溶離した。合わせたフラクションを蒸発させて、標記化合物を白色の固体として得た（１.５ｇ）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ24Ｈ2535ＣｌＮ4Ｏ4の理論値４６８；測定値（ＭＨ+）４６９。δＨ（ＣＤＣｌ3，４００ＭＨｚ）：  １.２４（３Ｈ，ｔ）、１.４６（６Ｈ，ｄ）、２.３１（４Ｈ，ｍ）、４.１２（２Ｈ，ｑ）、４.５５（２Ｈ，ｔ）、４.７３（１Ｈ，ｍ）、７.０８（１Ｈ，ｄ）、７.５２（１Ｈ，ｄｄ）、７.６２（１Ｈ，ｄ）、８.０６（１Ｈ，ｄｄ）、８.１０（１Ｈ，ｄｄ）、８.２９（１Ｈ，ｄ）、８.７０（１Ｈ，ｄ）。
【０１８５】
Ｄ６１の説明
３−[４−(５−｛３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]プロパン酸エチル（Ｄ６１）
【化９３】
2010524886.tif 000097
Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド（１０ｍｌ）中の３−｛４−[(ヒドロキシアミノ)(イミノ)メチル]−２Ｈ−インダゾール−２−イル｝プロパン酸エチルおよび３−｛４−[(ヒドロキシアミノ)(イミノ)メチル]−１Ｈ−インダゾール−１−イル｝プロパン酸エチルの混合物（Ｄ５５）（７００ｍｇ、１.２７ｍｍｏｌ）（１−異性体および２−異性体の３：１混合物）、３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]安息香酸（Ｄ３）（０.５４４ｇ、２.５３ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（０.５３４ｇ、２.７９ｍｍｏｌ）およびＨＯＢＴ（０.４２７ｇ、２.７９ｍｍｏｌ）を１２０℃で２時間加熱し、冷却し、酢酸エチル（６０ｍｌ）で希釈し、水（３×２０ｍｌ）で洗浄した。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ4）、蒸発させ、フラッシュクロマトグラフィーにより精製し、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（１：４）で溶離して、標記化合物を白色の固体として得た（３８０ｍｇ）。δＨ（ＣＤＣｌ3，４００ＭＨｚ）：  １.１７（３Ｈ，ｔ）、１.４６（６Ｈ，ｄ）、３.０２（２Ｈ，ｔ）、４.１０（２Ｈ，ｑ）、４.７０−４.７７（３Ｈ，ｍ）、７.０８（１Ｈ，ｄ）、７.５３（１Ｈ，ｄｄ）、７.６９（１Ｈ，ｄ）、８.０５−８.１２（２Ｈ，ｍ）、８.２９（１Ｈ，ｄ）、８.７１（１Ｈ，ｄ）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ23Ｈ2335ＣｌＮ4Ｏ4の理論値４５４；測定値（ＭＨ+）４５５。
【０１８６】
上記の例と同様の化学反応によって以下の化合物を製造した。いくつかの場合、アミドキシムの添加前に、カルボン酸、ＥＤＡＣおよびＨＯＢｔを一緒に撹拌した。いくつかの場合、加熱の前に反応混合物を室温で撹拌した。特に明記しない限り、反応は、ＤＭＦ中にて８０〜１２０℃の温度で行った。いくつかの場合、さらなるＥＤＡＣおよび／またはＨＯＢｔを添加した。Ｄ９１の場合、さらなるカルボン酸を添加した。生成物は、フラッシュクロマトグラフィー、トリチュレーション、ＭＤＡＰ、逆相クロマトグラフィー、エタノールを使用する反応混合物からの生成物の沈殿、またはこれらの方法の組合せによって精製した。
【０１８７】
【表３−１】
2010524886.tif 000098
【０１８８】
【表３−２】
2010524886.tif 000099
【０１８９】
【表３−３】
2010524886.tif 000100
【０１９０】
【表３−４】
2010524886.tif 000101
【０１９１】
【表３−５】
2010524886.tif 000102
【０１９２】
【表３−６】
2010524886.tif 000103
【０１９３】
【表３−７】
2010524886.tif 000104
【０１９４】
【表３−８】
2010524886.tif 000105
【０１９５】
【表３−９】
2010524886.tif 000106
【０１９６】
Ｄ９６の説明
３−(４−シアノ−１Ｈ−インダゾール−１−イル)プロパン酸エチル（Ｄ９６）
【化９４】
2010524886.tif 000107
１Ｈ−インダゾール−４−カルボニトリル（０.７１６ｇ、５ｍｍｏｌ）、３−ブロモプロパン酸エチル（１.２７６ｍｌ、１０.００ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（４.９０ｇ、１５.００ｍｍｏｌ）をＮ,Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）（２０ｍｌ）に添加し、該混合物を９０℃に８０分間加熱した。該混合物を冷却した後、酢酸エチルおよび水の混合物中で抽出した。有機フラクションを水３０ｍｌで３回洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ4）、濾過し、蒸発させた。粗生成混合物をＢｉｏｔａｇｅカラムに添加し、酢酸エチル／石油エーテル（１：３）で溶離して、標記化合物０.９５ｇを得た。δＨ（ＣＤＣｌ3，４００ＭＨｚ）１.１７（３Ｈ，ｔ）、３.０１（２Ｈ，ｔ）、４.０８（２Ｈ，ｑ）、４.７１（２Ｈ，ｔ）、７.４６（１Ｈ，ｄｄ）、７.５４（１Ｈ，ｄｄ）、７.８１（１Ｈ，ｄ）、８.２１（１Ｈ，ｄ）。
【０１９７】
Ｄ９７の説明
３−｛４−[(ヒドロキシアミノ)(イミノ)メチル]−１Ｈ−インダゾール−１−イル｝プロパン酸エチル（Ｄ９７）
【化９５】
2010524886.tif 000108
３−(４−シアノ−１Ｈ−インダゾール−１−イル)プロパン酸エチル（Ｄ９６）（０.９５ｇ、３.９１ｍｍｏｌ）、ヒドロキシルアミン・塩酸塩（１.０８６ｇ、１５.６２ｍｍｏｌ）および重炭酸ナトリウム（３.２８ｇ、３９.１ｍｍｏｌ）をエタノール（２０ｍｌ）中にて５０℃で３時間加熱した。該混合物を濾過し、蒸発させて、標記化合物を白色粉末として得た（７６０ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ13Ｈ16Ｎ4Ｏ3の理論値２７６；測定値（ＭＨ+）２７７。
【０１９８】
Ｄ９８の説明
３−ブロモ−２,２−ジメチルプロパン酸エチル（Ｄ９８）
【化９６】
2010524886.tif 000109
３−ブロモ−２,２−ジメチルプロパン酸（Flukaからの市販品）（１ｇ、５.５２ｍｍｏｌ）を塩化チオニル（５ｍｌ、６８.５ｍｍｏｌ）に溶解し、得られた混合物を２時間還流し、次いで、室温に冷却し、真空中にて濃縮した。残留物をエタノール（１０ｍｌ）に溶解して、室温で３０分間撹拌した。溶媒をほとんど真空除去し、残留物をＥｔＯＡｃに溶解し、１Ｍ ＮａＯＨ水溶液、ブラインで２回洗浄し、乾燥させ、濃縮して、標記化合物を薄黄色の油状物として得（０.９３９ｇ、８１％）、さらなる精製を行わずに次工程で使用した。
【０１９９】
Ｄ９９の説明
４−ブロモ−２,２−ジメチルブタン酸エチル（Ｄ９９）
【化９７】
2010524886.tif 000110
３,３−ジメチルジヒドロ−２(３Ｈ)−フラノン（１ｇ、８.７６ｍｍｏｌ）に臭化水素を室温で約５時間通気し、得られた混合物を室温で一夜放置した。次いで、該混合物に窒素を通気した。粗酸をＤＣＭ（１０ｍｌ）に溶解し、塩化オキサリル（２.３ｍｌ、２６.３ｍｍｏｌ）およびＤＭＦ（１滴）で処理し、得られた混合物を室温で週末にわたって撹拌し、次いで、真空中にて濃縮した。残留物をエタノール（１０ｍｌ）で処理し、得られた混合物を室温で１時間撹拌し、次いで、水中に注いだ。水性相をジエチルエーテルで２回抽出し、該エーテル性溶液をブラインで洗浄し、乾燥させ、真空中にて濃縮して、標記化合物を非常に薄い黄色の油状物として得（９４９ｍｇ、４９％）、さらなる精製を行わずに次工程で使用した。
【０２００】
Ｄ１００およびＤ１０１の説明
３−[５−(５−｛３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]−２,２−ジメチルプロパン酸エチル（Ｄ１００）、Ｎ６１２８−６−Ａ４および３−[５−(５−｛３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−２Ｈ−インダゾール−２−イル]−２,２−ジメチルプロパン酸エチル（Ｄ１０１）
【化９８】
2010524886.tif 000111
ＤＭＦ（２ｍｌ）中の５−(５−｛３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール（Ｄ４）（１２２ｍｇ、０.３４４ｍｍｏｌ）を３−ブロモ−２,２−ジメチルプロパン酸エチル（Ｄ９８）（７９ｍｇ、０.３７８ｍｍｏｌ）およびＣｓ2ＣＯ3（１３４ｍｇ、０.４１３ｍｍｏｌ）で処理し、得られた混合物を８０℃で一夜撹拌した。さらなる３−ブロモ−２,２−ジメチルプロパン酸エチル（Ｄ９８）（２９ｍｇ、０.４ｍｍｏｌ）およびＣｓ2ＣＯ3（５６ｍｇ、０.５ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を８０℃で６時間撹拌し、次いで、室温に冷却し、真空中にて濃縮した。残留物をＥｔＯＡｃに溶解し、有機相を水で洗浄し、次いで、ブラインで洗浄し、乾燥させ、真空中にて濃縮した。残留物をシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィー［酢酸エチル／シクロヘキサン勾配液］により精製して、３−[５−(５−｛３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]−２,２−ジメチルプロパン酸エチル（Ｄ１００）（９２ｍｇ、５５％）および３−[５−(５−｛３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−２Ｈ−インダゾール−２−イル]−２,２−ジメチルプロパン酸エチル（Ｄ１０１）（４９ｍｇ、３０％）を得た。ＭＳ（ＥＳ）Ｃ25Ｈ27ＣｌＮ4Ｏ4の理論値４８２、測定値４８３ [Ｍ＋Ｈ]+。
【０２０１】
Ｄ１０２の説明
３−(４−シアノ−１Ｈ−インダゾール−１−イル)−２,２−ジメチルプロパン酸エチル（Ｄ１０２）
【化９９】
2010524886.tif 000112
乾燥ＤＭＦ（３ｍｌ）中の１Ｈ−インダゾール−４−カルボニトリル（Insight Chemical Solutions Ltd.からの市販品）（５００ｍｇ、３.４９ｍｍｏｌ）、３−ブロモ−２,２−ジメチルプロパン酸エチル（Ｄ９８）（８０３ｍｇ、３.８４ｍｍｏｌ）およびＣｓ2ＣＯ3（１.３６ｇ、４.１９ｍｍｏｌ）を８０℃に一夜加熱し、次いで、さらに７時間加熱した。次いで、反応混合物をＥｔＯＡｃとＨ2Ｏとの間で分配させた。２つの層を分取し、有機相をさらなるＨ2Ｏ、ブラインで洗浄し、乾燥させ、黄色油状物に濃縮した。残留物をシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィー［酢酸エチル／シクロヘキサン勾配液］により精製して、標記化合物を結晶性物質として得た（３５６ｍｇ、３７％）。ＭＳ（ＥＳ）Ｃ15Ｈ17Ｎ3Ｏ2の理論値２７１、測定値２７２ [Ｍ＋Ｈ]+。
【０２０２】
Ｄ１０２（別法）の説明
３−(４−シアノ−１Ｈ−インダゾール−１−イル)−２,２−ジメチルプロパン酸エチル（Ｄ１０２）
【化１００】
2010524886.tif 000113
窒素下で乾燥Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）（１ｍｌ）中の１Ｈ−インダゾール−４−カルボニトリル（Insight Chemical Solutions Ltd.からの市販品、２９８ｍｇ、１.９５７ｍｍｏｌ）をＮａＨ（９４ｍｇ、２.３４８ｍｍｏｌ）で処理した。次いで、該暗褐色の混合物に３−ブロモ−２,２−ジメチルプロパン酸エチル（Ｄ９８）（４５０ｍｇ、２.１５３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２ｍｌ）中溶液を添加した。反応混合物を８０℃に一夜加熱し、次いで、真空中にて濃縮した。残留物をＥｔＯＡｃに溶解し、有機相を水で洗浄し、次いで、ブラインで洗浄し、乾燥させ、濃縮して、茶色のガム状物を得た。残留物をシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィー［酢酸エチル／シクロヘキサン勾配液］により精製して、標記化合物を黄色油状物として得た（２１７ｍｇ、８６％）。ＭＳ（ＥＳ）Ｃ15Ｈ15Ｎ3Ｏ2の理論値２７１、測定値２７２ [Ｍ＋Ｈ]+。
【０２０３】
Ｄ１０３の説明
３−｛４−[(ヒドロキシアミノ)(イミノ)メチル]−１Ｈ−インダゾール−１−イル｝−２,２−ジメチルプロパン酸エチル（Ｄ１０３）
【化１０１】
2010524886.tif 000114
ＭｅＯＨ（２０ｍｌ）中の３−(４−シアノ−１Ｈ−インダゾール−１−イル)−２,２−ジメチルプロパン酸エチル（Ｄ１０２）（３４８ｍｇ、１.２８ｍｍｏｌ）、ヒドロキシルアミン・塩酸塩（１.０８７ｇ、１０.２６ｍｍｏｌ）、ＮａＨＣＯ3（１.０７８ｇ、１２.８３ｍｍｏｌ）を６５℃で２４時間加熱し、次いで、室温で週末にわたって加熱した。該混合物を濾過し、濃縮し、水で処理し、１０分間強く撹拌し、濾過し、乾燥させて、無色の固体を得、真空下にて４５℃で一夜乾燥させて、標記化合物を得た（３７３ｍｇ、９０％）。ＭＳ（ＥＳ）Ｃ15Ｈ20Ｎ4Ｏ3の理論値３０４、測定値３０５ [Ｍ＋Ｈ]+。
【０２０４】
Ｄ１０４の説明
３−[４−(５−｛３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]−２,２−ジメチルプロパン酸エチル（Ｄ１０４）
【化１０２】
2010524886.tif 000115
室温での３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]安息香酸（Ｄ３）（２４５ｍｇ、１.１４３ｍｍｏｌ）、３−｛４−[(ヒドロキシアミノ)(イミノ)メチル]−１Ｈ−インダゾール−１−イル｝−２,２−ジメチルプロパン酸エチル（Ｄ１０３）（３４８ｍｇ、１.１４３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍｌ）中混合物をＮ−エチル−Ｎ−(１−メチルエチル)−２−プロパンアミン（０.２４０ｍｌ、１.３７２ｍｍｏｌ）で処理し、次いで、ＨＡＴＵ（５２２ｍｇ、１.３７２ｍｍｏｌ）で処理した。得られた混合物を室温で１時間撹拌し、８０℃で一夜撹拌し、次いで、さらに４時間撹拌し、次いで、室温に冷却し、真空中にて濃縮した。残留物をＥｔＯＡｃに溶解し、有機相をＨ2Ｏ、次いで、ブラインで、２回洗浄し、乾燥させ、真空中にて濃縮した。残留物をシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィー［酢酸エチル／シクロヘキサン勾配液］により精製して、標記化合物をクリーム色の固体として得た（２３３ｍｇ、３９％）。ＭＳ（ＥＳ）Ｃ25Ｈ27ＣｌＮ4Ｏ4の理論値４８２、測定値４８３ [Ｍ＋Ｈ]+。
【０２０５】
Ｄ１０５の説明
３−[４−(５−｛５−クロロ−６−[(１−メチルエチル)オキシ]−３−ピリジニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]−２,２−ジメチルプロパン酸エチル（Ｄ１０５）
【化１０３】
2010524886.tif 000116
Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）（５ｍｌ）に５−クロロ−６−[(１−メチルエチル)オキシ]−３−ピリジンカルボン酸（Ｄ３１）（７０.９ｍｇ、０.３２９ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（０.０９２ｍｌ、０.６５７ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ（６０.４ｍｇ、０.３９４ｍｍｏｌ）を溶解し、次いで、ＥＤＣ（７６ｍｇ、０.３９４ｍｍｏｌ）を溶解し、次いで、３−｛４−[(ヒドロキシアミノ)(イミノ)メチル]−１Ｈ−インダゾール−１−イル｝−２,２−ジメチルプロパン酸エチル（Ｄ１０３）（１００ｍｇ、０.３２９ｍｍｏｌ）を溶解した。得られた混合物を５０℃で一夜撹拌し、次いで、室温に冷却し、ＥｔＯＡｃで希釈した。有機相をＨ2Ｏで洗浄し、乾燥させ、真空中にて濃縮した。残留物をシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィー［１５〜４０％ＥｔＯＡｃ／シクロヘキサン］により精製して、標記化合物を淡黄色固体として得た（３０ｍｇ、１７％）。ＭＳ（ＥＳ）Ｃ24Ｈ26ＣｌＮ5Ｏ4の理論値４８３、測定値４８４ [Ｍ＋Ｈ]+。
【０２０６】
Ｄ１０６の説明
３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]ベンゾイルクロリド（Ｄ１０６）
【化１０４】
2010524886.tif 000117
３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]安息香酸（ＷＯ２００５／５８８４８に記載のように製造することができる、５００ｍｇ、２.４３７ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍｌ）中撹拌溶液に塩化オキサリル（０.２２４ｍｌ、２.５６ｍｍｏｌ）を添加し、次いで、ＤＭＦ（２０μｌ）を添加し、次いで、得られた混合物を室温で２時間撹拌した。溶媒を蒸発させて、標記化合物を黄緑色の固体として得（５４５ｍｇ、１００％）、さらなる精製を行わずに次工程で使用した。
【０２０７】
Ｄ１０７の説明
３−[５−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]−２,２−ジメチルプロパン酸エチル（Ｄ１０７）
【化１０５】
2010524886.tif 000118
５−[３−(１Ｈ−インダゾール−５−イル)−１,２,４−オキサジアゾール−５−イル]−２−[(１−メチルエチル)オキシ]ベンゾニトリル（Ｄ４３）（８５ｍｇ、０.２４６ｍｍｏｌ）のＮ,Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）（５ｍｌ）中溶液に３−ブロモ−２,２−ジメチルプロパン酸エチル（Ｄ９８）（１０３ｍｇ、０.４９２ｍｍｏｌ）およびＣｓ2ＣＯ3（１２０ｍｇ、０.３６９ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を８０℃で４８時間撹拌し、次いで、室温に冷却し、ＥｔＯＡｃで希釈した。有機相を水で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥させ、真空中にて濃縮した。残留物をシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィー［３０〜５０％ＥｔＯＡｃ／シクロヘキセン］により精製して、標記化合物を黄色固体として得た（２０ｍｇ、１６％）。ＭＳ（ＥＳ）Ｃ２６Ｈ27Ｎ5Ｏ4の理論値４７３、測定値４７４ [Ｍ＋Ｈ]+。
【０２０８】
Ｄ１０８の説明
４−[５−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]−２,２−ジメチルブタン酸エチル（Ｄ１０８）
【化１０６】
2010524886.tif 000119
３−[５−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]−２,２−ジメチルプロパン酸エチル（Ｄ１０７）の合成方法と類似の手順を用い、アルキル化剤として３−ブロモ−２,２−ジメチルプロパン酸エチル（Ｄ９８）の代わりに４−ブロモ−２,２−ジメチルブタン酸エチル（Ｄ９９）を使用して、５−[３−(１Ｈ−インダゾール−５−イル)−１,２,４−オキサジアゾール−５−イル]−２−[(１−メチルエチル)オキシ]ベンゾニトリル（Ｄ４３）から標記化合物を収率３１％で得た（５０ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ）Ｃ25Ｈ25Ｎ5Ｏ4の理論値４５９、測定値４６０ [Ｍ＋Ｈ]+。
【０２０９】
Ｄ１０９の説明
３−[４−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]−２,２−ジメチルプロパン酸エチル（Ｄ１０９）
【化１０７】
2010524886.tif 000120
室温でアセトニトリル（３.００ｍｌ）中の３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]ベンゾイルクロリド（Ｄ１０６）（０.３９８ｍｍｏｌ）を３−｛４−[(ヒドロキシアミノ)(イミノ)メチル]−１Ｈ−インダゾール−１−イル｝−２,２−ジメチルプロパン酸エチル（Ｄ１０３）（１０１ｍｇ、０.３３２ｍｍｏｌ）で処理し、次いで、トリエチルアミン（０.０６９ｍｌ、０.４９８ｍｍｏｌ）で処理した。得られた黄色溶液を室温で１時間撹拌し、一夜還流し、さらに２４時間還流し、再度、一夜還流し、次いで、室温に冷却し、真空中にて濃縮した。残留物をシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィー［酢酸エチル／シクロヘキサン勾配液］により精製して、標記化合物を無色の固体として得た（１０７ｍｇ、６８％）。ＭＳ（ＥＳ）Ｃ26Ｈ27Ｎ5Ｏ4の理論値４７３、測定値４７４ [Ｍ＋Ｈ]+。
【０２１０】
Ｄ１１０の説明
５−(５−｛５−クロロ−６−[(１−メチルエチル)オキシ]−３−ピリジニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール（Ｄ１１０）、Ｎ６０４３−４２
【化１０８】
2010524886.tif 000121
５−クロロ−６−[(１−メチルエチル)オキシ]−３−ピリジンカルボン酸（Ｄ３１）（３５０ｍｇ、１.６２３ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（３２８ｍｇ、４５２μｌ、３.２５ｍｍｏｌ）、ヒドロキシベンゾトリアゾール・水和物（２９８ｍｇ、１.９５ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（３７３ｍｇ,１.９５ｍｍｏｌ）およびＮ−ヒドロキシ−１Ｈ−インダゾール−５−カルボキシイミドアミド（Ｄ２）（４３０ｍｇ、２.４３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍｌ）中混合物を５０℃で４日間撹拌した。反応混合物を室温に冷却し、ＥｔＯＡｃ（２５ｍｌ）で希釈した。有機層をＮａＨＣＯ3飽和水溶液、水、次いで、ブラインで洗浄した。有機相を乾燥させ、真空中にて濃縮して、標記化合物を淡い赤色の固体として得（３３４ｍｇ、５８％）、さらなる精製を行わずに次工程で使用した。ＭＳ（ＥＳ）Ｃ17Ｈ14ＣｌＮ5Ｏ2の理論値３５５、測定値３５６ [Ｍ＋Ｈ]+。
【０２１１】
Ｄ１１１の説明
３−[５−(５−｛５−クロロ−６−[(１−メチルエチル)オキシ]−３−ピリジニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]−２,２−ジメチルプロパン酸エチル（Ｄ１１１）
【化１０９】
2010524886.tif 000122
５−(５−｛５−クロロ−６−[(１−メチルエチル)オキシ]−３−ピリジニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール（Ｄ１１０）（３３５ｍｇ、０.９４ｍｍｏｌ）、３−ブロモ−２,２−ジメチルプロパン酸エチル（Ｄ９８）（１９７ｍｇ、０.９４ｍｍｏｌ）およびＫ2ＣＯ3（１３０ｍｇ、０.９４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍｌ）中混合物を８０℃で４８時間撹拌した。次いで、反応混合物を室温に冷却し、ＥｔＯＡｃと水との間（３０ｍｌ、１：１）で分配させ。有機相を分取し、ＭｇＳＯ4で乾燥させ、真空中にて濃縮した。残留物をシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィー［２０％酢酸エチル／シクロヘキサン］により精製して、標記化合物を無色の固体として得た（１００ｍｇ、２２％）。ＭＳ（ＥＳ）Ｃ24Ｈ26ＣｌＮ5Ｏ4の理論値４８３、測定値４８４ [Ｍ＋Ｈ]+。
【０２１２】
Ｄ１１２の説明
４−(４−ブロモ−１Ｈ−インダゾール−１−イル)−２,２−ジメチルブタン酸エチル（Ｄ１１２）
【化１１０】
2010524886.tif 000123
室温での４−ブロモ−１Ｈ−インダゾール（Insight Chemical Solutions Ltd.からの市販品、８２６ｍｇ、４.１９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍｌ）中溶液にＣｓ2ＣＯ3（１.３７ｇ、４.１９ｍｍｏｌ）および４−ブロモ−２,２−ジメチルブタン酸エチル（Ｄ９９）（１.４０ｇ、６.２９ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を８０℃で２４時間撹拌し、次いで、室温に冷却し、ＡｃＯＥｔで希釈した。有機相を水で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥させ、真空中にて濃縮した。残留物をシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィー［１５〜２５％ＥｔＯＡｃ／シクロヘキサン］により精製して、標記化合物を橙色の油状物として得た（６００ｍｇ、４０％）。ＭＳ（ＥＳ）Ｃ15Ｈ1981ＢｒＮ2Ｏ2の理論値３４０、測定値３４１ [Ｍ＋Ｈ]+。
【０２１３】
Ｄ１１３の説明
４−(４−シアノ−１Ｈ−インダゾール−１−イル)−２,２−ジメチルブタン酸エチル（Ｄ１１３）、Ｎ６３７５−４０
【化１１１】
2010524886.tif 000124
室温での４−(４−ブロモ−１Ｈ−インダゾール−１−イル)−２,２−ジメチルブタン酸エチル（Ｄ１１２）（６００ｍｇ、１.７７ｍｍｏｌ）およびＺｎ(ＣＮ)2（２０７ｍｇ、１.７７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍｌ）中溶液にＰｄ(ＰＰｈ3)4（２０４ｍｇ、０.１８ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を１００℃で週末にわたって撹拌し、さらに５時間加熱し、次いで、室温に冷却し、ＡｃＯＥｔで希釈した。有機相をセライトで濾過し、水、次いで、ブラインで洗浄し、乾燥させ、真空中にて濃縮した。残留物をシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィー［１０〜２０％ＥｔＯＡｃ／シクロヘキサン］により精製して、標記化合物を無色の油状物として得た（２００ｍｇ、３６％）。ＭＳ（ＥＳ）Ｃ16Ｈ19Ｎ3Ｏ2の理論値２８５、測定値２８６ [Ｍ＋Ｈ]+。
【０２１４】
Ｄ１１４の説明
４−｛４−[(ヒドロキシアミノ)(イミノ)メチル]−１Ｈ−インダゾール−１−イル｝−２,２−ジメチルブタン酸エチル（Ｄ１１４）
【化１１２】
2010524886.tif 000125
３−｛４−[(ヒドロキシアミノ)(イミノ)メチル]−１Ｈ−インダゾール−１−イル｝−２,２−ジメチルプロパン酸エチル（Ｄ１０３）の合成について記載した手順と同様に４−(４−シアノ−１Ｈ−インダゾール−１−イル)−２,２−ジメチルブタン酸エチル（Ｄ１１３）から４−｛４−[(ヒドロキシアミノ)(イミノ)メチル]−１Ｈ−インダゾール−１−イル｝−２,２−ジメチルブタン酸エチル（Ｄ１１４）を得た（２００ｍｇ、収率８５％）。ＭＳ（ＥＳ）Ｃ16Ｈ22Ｎ4Ｏ3の理論値３１８、測定値３１９ [Ｍ＋Ｈ]+。
【０２１５】
Ｄ１１５の説明
４−[４−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]−２,２−ジメチルブタン酸エチル（Ｄ１１５）
【化１１３】
2010524886.tif 000126
５−[３−(１Ｈ−インダゾール−５−イル)−１,２,４−オキサジアゾール−５−イル]−２−[(１−メチルエチル)オキシ]ベンゾニトリル（Ｄ４３）の合成について別法として記載した手順と同様に３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]ベンゾイルクロリド（Ｄ１０６）および４−｛４−[(ヒドロキシアミノ)(イミノ)メチル]−１Ｈ−インダゾール−１−イル｝−２,２−ジメチルブタン酸エチル（Ｄ１１４）から４−[４−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]−２,２−ジメチルブタン酸エチル（Ｄ１１５）を得た（１２０ｍｇ、収率７４％）。ＭＳ（ＥＳ）Ｃ27Ｈ29Ｎ5Ｏ4の理論値４８７、測定値４８８ [Ｍ＋Ｈ]+。
【０２１６】
Ｄ１１６の説明
４−[４−(５−｛５−クロロ−６−[(１−メチルエチル)オキシ]−３−ピリジニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]−２,２−ジメチルブタン酸エチル（Ｄ１１６）
【化１１４】
2010524886.tif 000127
室温でＤＭＦ（４ｍｌ）に５−クロロ−６−[(１−メチルエチル)オキシ]−３−ピリジンカルボン酸（Ｄ３１）（６７.７ｍｇ、０.３１４ｍｍｏｌ）、次いで、トリエチルアミン（８８μｌ、０.６２８ｍｍｏｌ）、次いで、ＨＯＢＴ（５７.７ｍｇ、０.３７７ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（７２.３ｍｇ、０.３７７）および４−｛４−[(ヒドロキシアミノ)(イミノ)メチル]−１Ｈ−インダゾール−１−イル｝−２,２−ジメチルブタン酸エチル（Ｄ１１４）（１００ｍｇ、０.３１４ｍｍｏｌ）を溶解し、次いで、５０℃で５日間撹拌した。該混合物を室温に冷却し、ＥｔＯＡｃで希釈した。有機相を水で洗浄し、乾燥させ、真空中にて濃縮した。残留物をシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィー［１５〜４０％ＥｔＯＡｃ／シクロヘキサン］により精製して、標記化合物を淡黄色固体として得た（１１０ｍｇ、６７％）。ＭＳ（ＥＳ）Ｃ25Ｈ28ＣｌＮ5Ｏ4の理論値４９７、測定値４９８ [Ｍ＋Ｈ]+。
【０２１７】
実施例１
３−[５−(５−｛３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]プロパン酸（Ｅ１）
【化１１５】
2010524886.tif 000128
ＭｅＯＨ（５ｍｌ）に３−[５−(５−｛３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]プロパン酸エチル（Ｄ５）（２４０ｍｇ）を溶解し、２Ｍ ＮａＯＨ水溶液（５ｍｌ）で処理し、室温で一夜撹拌し、ＭｅＯＨを真空除去した。次いで、反応混合物を１Ｍ ＮａＯＨ水溶液で希釈し、ＥｔＯＡｃで２回洗浄し、ｐＨ＝３に酸性化した。この溶液をＥｔＯＡｃで３回抽出し、合わせた抽出物をブラインで洗浄し、蒸発させて、粗生成物を得た。これを、ＭＤＡＰシステムを用いて精製して、標記化合物を白色の固体として得た（１３ｍｇ）。δＨ（ＣＤＣｌ3，４００ＭＨｚ）：  １.４４（６Ｈ，ｄ）、３.０３（２Ｈ，ｔ）、４.６８−４.７５（３Ｈ，ｍ）、７.０５（１Ｈ，ｄ）、７.６０（１Ｈ，ｄ）、８.０６（１Ｈ，ｄ）、８.１１（１Ｈ，ｓ）、８.１５（１Ｈ，ｄ）、８.２４（１Ｈ，ｓ）、８.５６（１Ｈ，ｓ）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ21Ｈ1935ＣｌＮ4Ｏ4の理論値４２６；測定値４２７（ＭＨ+）。
【０２１８】
実施例１（別法）
３−[５−(５−｛３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]プロパン酸（Ｅ１）
【化１１６】
2010524886.tif 000129
エタノールに３−[５−(５−｛３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]プロパン酸エチル（Ｄ５）（１.９５ｇ、４.２９ｍｍｏｌ）を溶解した。２Ｍ ＮａＯＨ（２.１４３ｍｌ、４.２９ｍｍｏｌ）を添加し、該溶液を室温で３時間放置した。エタノールを蒸発させ、該混合物をＥｔＯＡｃおよび水に溶解し、酢酸で酸性化した。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ4）、蒸発させて、白色固体を得た（１.３４ｇ）。δＨ（ｄ6−ＤＭＳＯ，４００ＭＨｚ）：  １.３７（６Ｈ，ｄ）、２.８９（２Ｈ，ｔ）、４.６５（２Ｈ，ｔ）、４.８９（１Ｈ，ｍ）、７.４５（１Ｈ，ｄ）、７.８９（１Ｈ，ｄ）、８.０６（１Ｈ，ｄ）、８.１２（１Ｈ，ｄ）、８.２０（１Ｈ，ｓ）、８.２７（１Ｈ，ｓ）、８.５５（１Ｈ，ｓ）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ21Ｈ1935ＣｌＮ4Ｏ4の理論値４２６；測定値４２７（ＭＨ+）。
【０２１９】
実施例２
３−(５−｛５−[３−クロロ−４−(エチルオキシ)フェニル]−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル｝−１Ｈ−インダゾール−１−イル)プロパン酸ナトリウム（Ｅ２）
【化１１７】
2010524886.tif 000130
３−(５−｛５−[３−クロロ−４−(エチルオキシ)フェニル]−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル｝−１Ｈ−インダゾール−１−イル)プロパン酸エチル（Ｄ５７）（７７ｍｇ、０.１７ｍｍｏｌ）を２Ｍ ＮａＯＨ水溶液（２ｍｌ）およびエタノール（２ｍｌ）に懸濁した。該混合物を５０℃で加熱して溶解させ、次いで、冷却した。エタノールを真空除去し、得られた固体を濾過し、エタノール、水およびジエチルエーテルで洗浄し、次いで、高真空下にて乾燥させて、標記化合物をピンク色の固体として得た（６３.６ｍｇ）。δＨ（メタノール−ｄ4，４００ＭＨｚ）１.４９（３Ｈ，ｔ）、２.７７（２Ｈ，ｔ）、４.２５（２Ｈ，ｑ）、４.７１（２Ｈ，ｔ）、７.２７（１Ｈ，ｄ）、７.８２（１Ｈ，ｄ）、８.０９−８.２５（４Ｈ，ｍ）、８.５５（１Ｈ，ｓ）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ２０Ｈ1735ＣｌＮ4Ｏ4の理論値４１２；測定値（ＭＨ+）４１３。
【０２２０】
実施例３
３−[５−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]プロパン酸ナトリウム（Ｅ３）
【化１１８】
2010524886.tif 000131
エタノール（２ｍｌ）に３−[５−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]プロパン酸エチル（Ｄ５８）（９９ｍｇ、０.２２ｍｍｏｌ）を溶解し、２Ｍ ＮａＯＨ水溶液（０.５５ｍｌ）を添加した。反応物を８０℃で３０分間加熱し、試薬を溶解した。反応混合物を室温に冷却し、次いで、一夜放置した。得られた沈殿物を濾過し、水、次いで、エーテルで洗浄し、真空下での加熱により乾燥させて、標記化合物を得た（２９.１ｍｇ）。δＨ（メタノール−ｄ4，４００ＭＨｚ）１.４６（６Ｈ，ｄ）、２.７８,（２Ｈ，ｔ）、４.７１（２Ｈ，ｔ）、４.８８−５.００（estimate １Ｈ [partially overlapping water peak]、m）。７.４３（１Ｈ，ｄ）、７.８３（１Ｈ，ｄ）、８.１０−８.１７（２Ｈ，ｍ）、８.３７−８.４９（２Ｈ，ｍ）、８.５６（１Ｈ，ｓ）、ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ22Ｈ19Ｎ5Ｏ4の理論値４１７；測定値（ＭＨ+）４１８。
【０２２１】
実施例４
３−[５−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]プロパン酸（Ｅ４）
【化１１９】
2010524886.tif 000132
エタノール（２０ｍｌ）およびＴＨＦ（１０ｍｌ）の混合物に３−[５−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]プロパン酸エチル（Ｄ５８）（５２３ｍｇ、１.１７ｍｍｏｌ）を、５０℃で加温することにより溶解した。室温に冷却し、２Ｎ ＮａＯＨ（１ｍｌ、２ｍｍｏｌ）を添加し、室温で３０分間放置した。溶媒を蒸発させ、水（５０ｍｌ）を添加し、ＥｔＯＡｃ（５０ｍｌ）で洗浄した。水性層を酸性化し、生成物をＥｔＯＡｃ（５０ｍｌ）中に抽出した。ＥｔＯＡｃ層を乾燥させ（ＭｇＳＯ4）、溶媒を蒸発させた。ジエチルエーテルと一緒にトリチュレートして、標記化合物をベージュ色の固体として得た（１３９ｍｇ）。δＨ（ｄ6−ＤＭＳＯ，４００ＭＨｚ）：  １.３９（６Ｈ，ｄ）、２.９０（２Ｈ，ｔ）、４.６６（２Ｈ，ｔ）、４.９４−５.０３（１Ｈ，ｍ）、７.５７（１Ｈ，ｄ）、７.９０（１Ｈ，ｄ）、８.０７（１Ｈ，ｄｄ）、８.２８（１Ｈ，ｄ）、８.４２（１Ｈ，ｄｄ）、８.５４（２Ｈ，ｄｄ）、１２.３５（１Ｈ、broad s）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ22Ｈ19Ｎ5Ｏ4の理論値４１７；測定値（ＭＨ+）４１８。
【０２２２】
実施例５
４−[５−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]ブタン酸（Ｅ５）
【化１２０】
2010524886.tif 000133
４−[５−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−２Ｈ−インダゾール−２−イル]ブタン酸エチル（Ｄ４４）（７３ｍｇ、０.１６ｍｍｏｌ）、エタノール中３３％ジメチルアミン（４ｍｌ）をマイクロ波にて１６０℃で１時間加熱した。水２滴を添加し、マイクロ波にて１６０℃で３時間加熱した。反応物を一夜冷却し、次いで、真空下にて蒸発乾固させた。ＭＤＡＰ精製を試みて、粗物質を得た。
４−[５−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−２Ｈ−インダゾール−２−イル]ブタン酸エチル（Ｄ４４）（６５ｍｇ、０.１４ｍｍｏｌ）のエタノール（１０ｍｌ）中溶液に２Ｍ ＮａＯＨ水溶液（１ｍｌ）を添加した。８０℃で１時間加熱し、次いで、室温で一夜放置した。溶媒を蒸発させ、粗物質をＭＤＡＰにより精製した。得られた物質をエーテルおよび水と一緒にトリチュレートして、粗物質を得た。
粗バッチを合わせ、ＭＤＡＰにより精製し、生成物を含有するフラクションを凍結乾燥させて、標記化合物を得た（１１.１ｍｇ）。δＨ（ｄ6−ＤＭＳＯ，４００ＭＨｚ）１.３９（６Ｈ，ｄ）、２.０１−２.１１（２Ｈ，ｍ）、２.２３（２Ｈ，ｔ）、４.５０（２Ｈ，ｔ）、４.９８（１Ｈ，sept）、７.５６（１Ｈ，ｄ）、７.８６（１Ｈ，ｄ）、８.０７（１Ｈ，ｄｄ）、８.２８（１Ｈ，ｄ）、８.４２（１Ｈ，ｄｄ）、８.５２（１Ｈ，ｄ）、８.５７（１Ｈ，ｄｄ）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ23Ｈ21Ｎ5Ｏ4の理論値４３１；測定値（ＭＨ+）４３２。
【０２２３】
実施例６
３−(５−｛５−[４−[(１−メチルエチル)オキシ]−３−(トリフルオロメチル)フェニル]−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル｝−１Ｈ−インダゾール−１−イル)プロパン酸（Ｅ６）
【化１２１】
2010524886.tif 000134
エタノール（４ｍｌ）に３−(５−｛５−[４−[(１−メチルエチル)オキシ]−３−(トリフルオロメチル)フェニル]−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル｝−１Ｈ−インダゾール−１−イル)プロパン酸エチル（Ｄ５９）（８２ｍｇ、０.１７ｍｍｏｌ）を溶解し、次いで、２Ｍ ＮａＯＨ水溶液（０.５ｍｌ）を添加した。反応物を室温で一夜撹拌し、次いで、エタノールを真空中にて蒸発させた。酢酸エチルを添加したが、該化合物が水性層および有機層の両方にあると思われるので、該混合物を蒸発させた。ＭＤＡＰ（２つのバッチにおいて）により精製し、次いで、凍結乾燥させて、標記化合物を得た（２８.７ｍｇ）。δＨ（４００ＭＨｚ、ｄ6−ＤＭＳＯ）１.３６（６Ｈ，ｄ）、２.８８（２Ｈ，ｔ）、４.６５（２Ｈ，ｔ）、４.９８（１Ｈ，sept.）、７.５９（１Ｈ，ｄ）、７.８９（１Ｈ，ｄ）、８.０７（１Ｈ，ｄｄ）、８.２７（１Ｈ，ｄ）、８.３２（１Ｈ，ｄ）、８.４１（１Ｈ，ｄｄ）、８.５７（１Ｈ，ｄｄ）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ22Ｈ19Ｆ3Ｎ4Ｏ4の理論値４６０；測定値（ＭＨ+）４６１。
【０２２４】
実施例７
４−[４−(５−｛３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]ブタン酸 （Ｅ７）
【化１２２】
2010524886.tif 000135
４−[４−(５−｛３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]ブタン酸エチル（Ｄ６０）（Ｎ２６６６−１３−Ａ１）（０.０６２ｇ、０.１３２ｍｍｏｌ）のエタノール（５ｍｌ）中溶液に２Ｍ水酸化ナトリウム（１ｍｌ、２ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を８０℃に加熱して溶解させ、次いで、２時間冷却した。蒸発させ、酢酸エチル／水（各々２５ｍｌ）に溶解し、酢酸で酸性化した。有機物を乾燥させ（硫酸マグネシウム）、蒸発させ、トルエン１５ｍｌと一緒に共沸させ、エーテルと一緒にトリチュレートした。濾過して、標記化合物を白色の固体として得た（４２ｍｇ）。δＨ（ｄ6−ＤＭＳＯ，４００ＭＨｚ）：  １.３７（６Ｈ，ｄ）、２.０９（２Ｈ，ｍ）、２.２４（２Ｈ，ｔ）、４.５４（２Ｈ，ｔ）、４.９０（１Ｈ，ｍ）、７.４７（１Ｈ，ｄ）、７.６２（１Ｈ，ｄｄ）、７.９７（１Ｈ，ｄ）、８.０１（１Ｈ，ｄ）、８.１７（１Ｈ，ｄｄ）、８.２６（１Ｈ，ｄ）、８.５６（１Ｈ，ｓ）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ22Ｈ2135ＣｌＮ4Ｏ4の理論値４４０；測定値（ＭＨ+）４４１。
【０２２５】
実施例７（別法）
４−[４−(５−｛３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]ブタン酸（Ｅ７）
【化１２３】
2010524886.tif 000136
４−[４−(５−｛３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]ブタン酸エチル（Ｄ６０）（１.５ｇ、３.２０ｍｍｏｌ）の熱エタノール（１５ｍｌ）中溶液を水酸化ナトリウム（７.５ｍｌ、１５.００ｍｍｏｌ）で処理し、１時間放置した。溶媒を蒸発させ、残留物を酢酸エチル／水間で分配させた。酢酸を添加してｐＨを５に調整し、層を分取した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、蒸発させた。粗物質をエーテルと一緒にトリチュレートして、標記化合物を白色の固体として得た（１.１ｇ）。δＨ（ｄ6−ＤＭＳＯ，４００ＭＨｚ）：  １.３７（６Ｈ，ｄ）、２.０８（２Ｈ，ｍ）、２.２３（２Ｈ，ｔ）、４.５４（２Ｈ，ｔ）、４.９０（１Ｈ，ｍ）、７.４７（１Ｈ，ｄ）、７.６２（１Ｈ，ｄｄ）、７.９７（１Ｈ，ｄ）、８.０１（１Ｈ，ｄ）、８.１７（１Ｈ，ｄｄ）、８.２６（１Ｈ，ｄ）、８.５６（１Ｈ，ｓ）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ22Ｈ2135ＣｌＮ4Ｏ4の理論値４４０；測定値（ＭＨ+）４４１。
【０２２６】
実施例８
３−[４−(５−｛３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]プロパン酸（Ｅ８）
【化１２４】
2010524886.tif 000137
熱エタノール（４ｍｌ）に３−[４−(５−｛３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]プロパン酸エチル（Ｄ６１）（３８０ｍｇ、０.８３５ｍｍｏｌ）を溶解し、２Ｍ水酸化ナトリウム（２ｍｌ、４.００ｍｍｏｌ）を添加し、該溶液を３０分間撹拌した。沈殿物が生じた。エタノールを蒸発させ、残留物をＥｔＯＡｃ／水間で分配させた。水性層をＡｃＯＨで中和し、層を分取した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、蒸発させた。粗物質をエーテルと一緒にトリチュレートして、白色固体を得た（２４０ｍｇ）。δＨ（ｄ6−ＤＭＳＯ）１.３６（６Ｈ，ｄ）、２.９０（２Ｈ，ｔ）、４.６８（２Ｈ，ｔ）、４.８９（１Ｈ，ｍ）、７.４６（１Ｈ，ｄ）、７.５９（１Ｈ，ｔ）、７.９９（２Ｈ，ｄ）、８.１６（１Ｈ，ｄｄ）、８.２５（１Ｈ，ｄ）、８.５５（１Ｈ，ｓ）、１１.９０（１Ｈ、br。s）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ21Ｈ1935ＣｌＮ4Ｏ4の理論値４２６；測定値（ＭＨ+）４２７。
【０２２７】
同様の加水分解反応によって以下の実施例を調製した。特別に明記しない限り、反応は室温〜８０℃で行われた。反応溶媒はエタノールおよび２Ｍ ＮａＯＨ水溶液の混合物であった。場合によっては、溶解を助けるためにＤＣＭのようなさらなる溶媒を添加した。場合によっては、後処理工程においてＥｔＯＡｃの代わりにＤＣＭのような別の溶媒を使用した。場合によっては、反応混合物を酸性化して（酢酸または塩酸のいずれかを使用）カルボン酸を生じさせたが、他の場合は、生成物はナトリウム塩として単離した。場合によっては、反応溶媒の一部の蒸発により生成物が沈殿し、この物質を濾過により単離することができた。別法として、しばしばカルボン酸を単離し、次いで、水酸化ナトリウムによる処理によってナトリウム塩に変換した。Ｅ２３、Ｅ２４の場合、後処理後に反応物を酸性化するために塩酸を使用することによって塩酸塩が生じた。該化合物はＭＤＡＰまたはトリチュレーションのいずれかによって精製された。凍結乾燥は、しばしば、固体物質を生じさせるために用いられた。
【０２２８】
【表４−１】
2010524886.tif 000138
【０２２９】
【表４−２】
2010524886.tif 000139
【０２３０】
【表４−３】
2010524886.tif 000140
【０２３１】
【表４−４】
2010524886.tif 000141
【０２３２】
【表４−５】
2010524886.tif 000142
【０２３３】
【表４−６】
2010524886.tif 000143
【０２３４】
【表４−７】
2010524886.tif 000144
【０２３５】
【表４−８】
2010524886.tif 000145
【０２３６】
【表４−９】
2010524886.tif 000146
【０２３７】
【表４−１０】
2010524886.tif 000147
【０２３８】
【表４−１１】
2010524886.tif 000148
【０２３９】
【表４−１２】
2010524886.tif 000149
【０２４０】
実施例４２
４−[５−(５−｛３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]ブタン酸（Ｅ４２）
【化１２５】
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エタノール（５ｍｌ）に４−[５−(５−｛３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]ブタン酸エチル（Ｄ６３）（１２７ｍｇ、０.２７ｍｍｏｌ）を溶解し、次いで、水酸化ナトリウム（１１ｍｇ）を添加した。反応混合物をマイクロ波反応容器中にて１００℃で１時間加熱し、次いで、冷却した。得られた固体を濾過により分取し、次いで、アセトンで洗浄した。ＭＤＡＰにより精製し、次いで、得られた物質を凍結乾燥させて、標記化合物を得た（３８.１ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ22Ｈ2135ＣｌＮ4Ｏ4の理論値４４０；測定値（ＭＨ+）４４１。
【０２４１】
上記方法と同様の方法を用いて以下の実施例を調製した。
【０２４２】
【表５】
2010524886.tif 000151
【０２４３】
実施例４４
４−[５−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−２Ｈ−インダゾール−２−イル]ブタン酸（Ｅ４４）
【化１２６】
2010524886.tif 000152
ジメチルアミンのエタノール中溶液（４ｍｌ）に４−[５−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−２Ｈ−インダゾール−２−イル]ブタン酸エチル（Ｄ４５）（６０ｍｇ、０.１３ｍｍｏｌ）を添加し、次いで、水数滴を添加した。該混合物をマイクロ波反応容器中にて１６０℃に４時間加熱し、次いで、冷却した。溶媒を真空除去し、粗物質をＭＤＡＰにより精製して、標記化合物を白色の固体として得た（２８.３ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ23Ｈ21Ｎ5Ｏ4の理論値４３１；測定値（ＭＨ+）４３２。
【０２４４】
実施例４５
３−[５−(５−｛３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]−２,２−ジメチルプロパン酸（Ｅ４５）
【化１２７】
2010524886.tif 000153
室温での３−[５−(５−｛３−クロロ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]−２,２−ジメチルプロパン酸エチル（Ｄ１００）（８５ｍｇ、１７６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２ｍｌ）中溶液にＮａＯＨ（Ｈ2Ｏ中２Ｎ、４４０μｌ、８８０ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を５０℃で一夜撹拌した。ＮａＯＨ（Ｈ2Ｏ中２Ｎ、４４０μｌ、８８０ｍｍｏｌ）およびＴＨＦ（２ｍｌ）を添加し、得られた混合物を８０℃で二夜撹拌し、次いで、室温に冷却した。ＴＨＦをほとんど真空除去し、得られた水性相をｐＨ３に酸性化した。形成された沈殿物を濾過し、Ｈ2Ｏで洗浄し、次いで、真空下にて６０℃で乾燥させて、標記化合物を白色の固体として得た（７３ｍｇ、９１％）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ23Ｈ23ＣｌＮ4Ｏ4の理論値４５４；測定値（ＭＨ+）４５５。
【０２４５】
有機溶媒としてＴＨＦではなくてＥｔＯＨを用い、実施例４５（Ｅ４５）について記載した方法と同様の方法を用いて以下の実施例を調製した：
【０２４６】
【表６】
2010524886.tif 000154
【０２４７】
実施例４８
３−[４−(５−｛５−クロロ−６−[(１−メチルエチル)オキシ]−３−ピリジニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]−２,２−ジメチルプロパン酸（Ｅ４８）
【化１２８】
2010524886.tif 000155
エタノール（１０ｍｌ）に３−[４−(５−｛５−クロロ−６−[(１−メチルエチル)オキシ]−３−ピリジニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]−２,２−ジメチルプロパン酸エチル（Ｄ１０５）（５０ｍｇ、０.１０３ｍｍｏｌ）を溶解した。水酸化ナトリウム（Ｈ2Ｏ中２Ｎ、０.２５８ｍｌ、０.５１７ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を６０℃で一夜撹拌し、次いで、室温に冷却した。溶媒を蒸発させ、次いで、残留物を水で希釈した。水性相を２Ｎ ＨＣｌ水溶液で中和し、次いで、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機相をＨ2Ｏで洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥させ、真空中にて濃縮して、標記化合物をオフホワイト色の固体として得た（２２ｍｇ、４２％）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ22Ｈ22ＣｌＮ5Ｏ4の理論値４５５；測定値（ＭＨ+）４５６。
【０２４８】
実施例４９
３−[５−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]−２,２−ジメチルプロパン酸（Ｅ４９）
【化１２９】
2010524886.tif 000156
エタノール（１０ｍｌ）に３−[５−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]−２,２−ジメチルプロパン酸エチル（Ｄ１０７）（５０ｍｇ、０.１０６ｍｍｏｌ）を溶解した。水酸化ナトリウム（Ｈ2Ｏ中２Ｎ、０.２６４ｍｌ、０.５２８ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を室温で２時間撹拌した。溶媒をほとんど真空除去し、残留物を水で希釈した。水性相を２Ｎ ＨＣｌ水溶液で中和し、次いで、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機相をＨ2Ｏで洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥させ、真空中にて濃縮して、標記化合物を淡黄色固体として得た（１５ｍｇ、３０％）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ23Ｈ24Ｎ5Ｏ4の理論値４４５；測定値（ＭＨ+）４４６。
【０２４９】
実施例５０
４−[５−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]−２,２−ジメチルブタン酸（Ｅ５０）
【化１３０】
2010524886.tif 000157
実施例４９（Ｅ４９）の製造方法と同様の方法を用いて４−[５−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]−２,２−ジメチルブタン酸エチル（Ｄ１０８）から標記化合物（Ｅ５０）を得た（１６ｍｇ、３２％）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ25Ｈ25Ｎ5Ｏ4の理論値４５９；測定値（ＭＨ+）４６０。
【０２５０】
実施例５１
３−[４−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]−２,２−ジメチルプロパン酸（Ｅ５１）
【化１３１】
2010524886.tif 000158
３−[４−(５−｛３−シアノ−４−[(１−メチルエチル)オキシ]フェニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]−２,２−ジメチルプロパン酸エチル（Ｄ１０９）（１００ｍｇ、０.２１ｍｍｏｌ）のエタノール（２ｍｌ）中溶液を２Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（１ｍｌ、大過剰）で処理し、８０℃で２時間加熱した。反応混合物を冷却し、エタノールをほとんど真空除去した。残留物を水（３ｍｌ）で希釈し、濃ＨＣｌ水溶液で酸性化し、ＥｔＯＡｃ（３×１０ｍｌ）で抽出した。合わせた抽出物を乾燥させ、真空中にて濃縮した。残留物をＭＤＡＰによって精製して、所望の生成物を無色の固体として得た（５ｍｇ、５％）。ＭＳ（ＥＳ）Ｃ24Ｈ23Ｎ5Ｏ4の理論値４４５；測定値（ＭＨ+）４４６。
【０２５１】
実施例５２
３−[５−(５−｛５−クロロ−６−[(１−メチルエチル)オキシ]−３−ピリジニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]−２,２−ジメチルプロパン酸（Ｅ５２）
【化１３２】
2010524886.tif 000159
３−[５−(５−｛５−クロロ−６−[(１−メチルエチル)オキシ]−３−ピリジニル｝−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル)−１Ｈ−インダゾール−１−イル]−２,２−ジメチルプロパン酸エチル（Ｄ１１１）（１００ｍｇ、０.２１ｍｍｏｌ）のエタノール（２ｍｌ）中溶液を２Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（１ｍｌ）で処理し、撹拌しながら８０℃で４時間加熱した。反応混合物を室温に冷却し、水（５ｍｌ）で希釈した。該水溶液を氷酢酸で酸性化し、ＥｔＯＡｃ（２×１０ｍｌ）で抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ4で乾燥させ、真空中にて濃縮した。残留物をＭＤＡＰにより精製して、所望の生成物を無色の固体として得た（３ｍｇ、３％）。ＭＳ（ＥＳ）：  Ｃ22Ｈ22ＣｌＮ5Ｏ4の理論値４５５；測定値（ＭＨ+）４５６。
【０２５２】
実施例４８（Ｅ４８）について記載した方法と同様の方法を用いて以下の実施例を調製した。
【０２５３】
【表７】
2010524886.tif 000160
【０２５４】
Ｓ１Ｐ１  ＧＴＰγＳ結合アッセイ
Ｓ１Ｐ１受容体を安定に発現しているラット好塩基球性白血病細胞（ＲＢＬ）を培養密度８０％に増殖させた後、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）１０ｍｌ中に回収し、１２００ｒｐｍで５分間遠心分離した。上清を除去した後、ペレットを再懸濁し、２０倍の容量のアッセイバッファー（２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ ｐＨ７.４、１００ｍＭ ＮａＣｌ、１０ｍＭ ＭｇＣｌ2・６Ｈ2Ｏ、１０μＭ ＧＤＰ  Ｓａｐｏｎｉｎ １０μｇ／ｍｌ）中にてホモジナイズした。膜懸濁液をさらに２０,０００ｒｐｍで２０分間遠心分離し、再ホモジナイズし、再度、回転させた。２回目の遠心分離後、ペレットを適当な量に再懸濁させ（細胞の各フラスコについて１ｍｌ）、タンパク質濃度についてアッセイした。
Ｓ１Ｐの濃縮貯蔵液を超音波処理した後、出発濃度１０-5Ｍから段階希釈液を調製した。希釈膜（１０μｇ／ウェル）を９６ディープウェルプレート中にて種々の濃度のＳ１Ｐおよび０.３ｎＭ 35Ｓ−ＧＴＰγＳ（ＮＥＮ；比活性１２５０Ｃｉ／ｍｍｏｌ）と一緒にインキュベートした。結合は３０℃で４５分間行われ、Ｐａｃｋａｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ  Ｈａｒｖｅｓｔｅｒを使用してＧＦ／Ｂフィルタープレート上にて膜を回収することによって終わった。該プレートを４５分間乾燥させた後、各ウェルにＭｉｃｒｏｓｃｉｎｔ ０（５０μｌ）を添加し、Ｔｏｐｃｏｕｎｔ  ＮＸＴ（Perkin Elmer）にて結合を測定した。Ｇｒａｐｈｐａｄ  Ｐｒｉｓｍ  ４を使用してデータを解析し、基底を超えた刺激のパーセンテージとして表した。ＥＣ５０値は、最大刺激の５０％が得られるのに必要とされるアゴニストの濃度であると定義された。
このＧＴＰγＳ結合アッセイにおいて、本発明の実施例１はｐＥＣ５０＞６を有した。
【０２５５】
Ｓ１Ｐ１   ＧＴＰγＳアッセイ（別法）
膜調製のために、全ての工程を４℃で行った。ヒトＳ１Ｐ１受容体を安定に発現しているラット肝細胞腫細胞またはヒトＳ１Ｐ３受容体を安定に発現しているラット好塩基球性白血病細胞（ＲＢＬ）を培養密度８０％に増殖させた後、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）１０ｍｌ中に回収し、１２００ｒｐｍで５分間遠心分離した。上清を除去した後、ペレットを再懸濁し、バッファー（５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１ｍＭロイペプチン、２５μｇ／ｍｌ バシトラシン、１ｍＭ ＥＤＴＡ、１ｍＭ ＰＭＳＦ、２μＭ ペプスタチンＡ）２００ｍｌ中での１５秒のバースト２回の間にガラス製Ｗａｒｉｎｇブレンダー内で細胞をホモジナイズした。１回目のバーストの後５分間、そして、最後のバーストの後１０〜４０分間、ブレンダーを氷中に浸漬して泡を散逸させた。次いで、該物質を５００ｇで２０分間回転させ、上清を４８,０００ｇで３６分間回転させた。該ペレットを、上記と同じであるがＰＭＳＦおよびペプスタチンＡを含有しないバッファーに再懸濁した。次いで、該物質を０.６ｍｍのニードルに通し、所望の容量（通常、最初の細胞ペレットの容量の４倍）に調製し、アリコート化し、−８０℃で冷凍貯蔵した。
アッセイバッファー（２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１０ｍＭ ＭｇＣｌ2、１００ｍＭ ＮａＣｌ、そして、５Ｍ ＫＯＨを使用して７.４にｐＨ調整、ＧＤＰ １０μＭ ＦＡＣ（最終アッセイ濃度）およびサポニン９０μｇ／ｍｌ ＦＡＣもまた添加した）中にて、ヒトＳ１Ｐ１ラット肝細胞腫膜（１.５μｇ／ウェル）をコムギ胚芽凝集素（ＷＧＡ）被覆シンチレーションプロキシミティアッセイ（ＳＰＡ）ビーズ（０.１２５ｍｇ／ウェル）に付着させた。
氷上で３０分間プレカップリングさせた後、ビーズおよび膜懸濁液を、化合物０.１μｌが入っている白色ＧｒｅｉｎｅｒポリプロピレンＬＶ３８４−ウェルプレート中に分注した（５μｌ／ウェル）。次いで、アッセイバッファーで調製された５μｌ／ウェルの[35Ｓ]−ＧＴＰγＳ（最終放射リガンド濃度０.５ｎＭ）をアゴニストプレートに添加した。次いで、最終アッセイカクテル（１０.１μｌ）を１０００ｒｐｍで５分間遠心分離し、次いで、すぐにＶｉｅｗｌｕｘ ｒｅａｄｅｒで読み取った。
全ての試験化合物を１０ｍＭの濃度でＤＭＳＯに溶解し、４分の１希釈工程を使用して１００％ＤＭＳＯ中にて調製して、１１のポイント用量反応曲線を得た。確実にＤＭＳＯ濃度が全てのアッセイのプレート間で一定となるように、希釈液をアッセイプレートに移した。
全てのデータを、各プレートについての１６個の高いコントロールウェルおよび１６個の低いコントロールウェルの平均に正規化した。次いで、四パラメーター曲線適合を適用した。
このアッセイにおいて、本発明の実施例１〜５２はｐＥＣ５０＞５を有した。
【０２５６】
Ｓ１Ｐ３  ＧＴＰγＳ結合アッセイ
アッセイバッファー（２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、３ｍＭ ＭｇＣｌ2、１００ｍＭ ＮａＣｌ、そして、５Ｍ ＫＯＨを使用してｐＨを７.４に調整）、ＧＤＰ １０μＭ ＦＡＣおよびサポニン９０μｇ／ｍｌ ＦＡＣもまた添加）中にて、ラット好塩基球性白血病細胞からのＳ１Ｐ３膜（ＲＢＬ−２Ｈ３）（１.５μｇ／ウェル）をＷＧＡ被覆ＳＰＡビーズ（０.１２５ｍｇ／ウェル）に付着させた。
氷上で３０分間プレカップリングさせた後、ビーズおよび膜懸濁液を化合物０.１μｌが入っている白色ＧｒｅｉｎｅｒポリプロピレンＬＶ３８４−ウェルプレート中に分注した（５μｌ／ウェル）。次いで、アッセイバッファーで調製した５μｌ／ウェルの[35Ｓ]−ＧＴＰγＳ（最終放射リガンド濃度０.５ｎＭ）をアゴニストプレートに添加した。最終アッセイカクテル（１０.１μｌ）を１０００ｒｐｍで５分間遠心分離し、次いで、すぐにＶｉｅｗｌｕｘリーダーで読み取った。
全ての試験化合物を１０ｍＭの濃度でＤＭＳＯに溶解し、４分の１希釈工程を使用して１００％ＤＭＳＯ中にて調製して、１１のポイントの用量反応曲線を得た。確実にＤＭＳＯ濃度が全てのアッセイのプレート間で一定となるように、希釈液をアッセイプレートに移した。
全てのデータを、各プレート上にて１６個の高いコントロールウェルおよび１６個の低いコントロールウェルの平均に正規化した。次いで、四パラメーター曲線適合を適用した。
このアッセイにおいて、実施例１〜４６および５２はｐＥＣ５０＜６.５を有し、試験した実施例の多くはｐＥＣ５０＜５を有した。
【０２５７】
酵母結合アッセイ
酵母株ＭＭＹ２３のｕｒａ３染色体座位に発現カセットを組み込むことによって、ヒトＳ１Ｐ１受容体を発現している酵母（サッカロミセス・セレビシエ（Saccharomyces cerevisiae））細胞を得た。このカセットは、Ｓ１Ｐ１の５’末端側に酵母ＧＰＤプロモーターが隣接しており、そして、Ｓ１Ｐ１の３’末端側に酵母転写終結配列が隣接しているヒトＳ１Ｐ１受容体をコードしているＤＮＡ配列からなる。ＭＭＹ２３は、Ｇｐａ１のＣ末端の５個のアミノ酸がヒトＧαｉ１／２（Brown et al. (2000), Yeast 16:11-22に記載されている）のＣ末端の５個のアミノ酸と置き換えられている酵母／哺乳動物キメラＧタンパク質αサブユニットを発現する。細胞を、ウラシル、トリプトファン、アデニンおよびロイシンを欠いている液体Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  Ｃｏｍｐｌｅｔｅ（ＳＣ）酵母培地（Guthrie and Fink (1991), Methods in Enzymology, Vol. 194）中にて３０℃で後期対数期（約６ ＯＤ600／ｍｌ）まで増殖させた。
アゴニストをＤＭＳＯ中にて１０ｍＭ溶液として調製した。ＤＭＳＯでの４倍希釈液（ＢｉｏｍｅｋＦＸ、Beckman）を使用してＥＣ50値（５０％最大応答を生じるのに必要とされる濃度）を概算した。ＤＭＳＯ中アゴニスト溶液（１％最終アッセイ容量）を、Greinerからの黒色マイクロタイタープレート（３８４ウェル）に移した。ヒスチジン、ウラシル、トリプトファン、アデニンおよびロイシンを欠いており、かつ、０.１ｍＭ ３−アミノトリアゾール、０.１Ｍリン酸ナトリウム（ｐＨ７.０）および１０μＭフルオレセイン・ジ−β−Ｄ−グルコピラノシド（ＦＤＧｌｕ）を加えたＳＣ培地中にて、０.２ ＯＤ600／ｍｌの密度で細胞を懸濁した。この混合物（ウェルあたり５０ｕｌ）をアッセイプレート（Ｍｕｌｔｉｄｒｏｐ  ３８４、Labsystems）中のアゴニストに添加した。３０℃で２４時間インキュベートした後、アゴニスト刺激細胞増殖の間に生じた内因性酵母酵素であるエキソグルカナーゼによってＦＤＧｌｕからフルオレセインへの分解により生じた蛍光を、蛍光マイクロタイタープレートリーダー（Ｔｅｃａｎ  ＳｐｅｃｔｒｏｆｌｕｏｒまたはＬＪＬ  Ａｎａｌｙｓｔ励起波長：４８５ｎｍ；発光波長：５３５ｎｍ）を使用して測定した。蛍光を化合物濃度に対してプロットし、四パラメーター適合を使用して反復的に曲線適合させて、濃度効果値を得た。以下の方程式から効力（Ｅmax）を算出した：
Ｅmax＝Ｍａｘ[化合物X]−Ｍｉｎ[化合物X]／Ｍａｘ[S1P]−Ｍｉｎ[S1P]×１００％
ここで、Ｍａｘ[化合物X]およびＭｉｎ[化合物X]は、それぞれ、化合物Ｘについての濃度効果曲線からの適合した最大値および最小値であり、Ｍａｘ[S1P]およびＭｉｎ[S1P]は、それぞれ、フィンゴシン−１−ホスフェート（Sigmaから入手可能）についての濃度効果曲線からの適合した最大値および最小値である。以下の方程式から等効果モル比（ＥＭＲ）値を算出した：
ＥＭＲ＝ＥＣ50[化合物X]／ＥＣ50[S1P]
ここで、ＥＣ50[化合物X]は、化合物のＸのＥＣ50であり、ＥＣ50[S1P]は、Ｓ１ＰのＥＣ50である。
このアッセイにおいて試験した本発明の例示化合物はｐＥＣ５０＞５を有した。
【国際調査報告】
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