(57)【要約】  式Ｉの化合物は、ＨＩＦプロリルヒドロキシラーゼの有用な阻害剤である。式Ｉの化合物は、以下の構造を有する2010524942.tif 000054（変数の定義は、本明細書中に提供されている。）。【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも１つの、式Ｉの化合物：
【化１】
2010524942.tif 000053
医薬として許容される該化合物の塩、該化合物の互変異性体又は互変異性体の医薬として許容される塩；若しくはこれらの溶媒和物；又は前記の何れかの混合物
（Ｊ、Ｋ、Ｌ及びＭは、ＣＲ８又はＮから独立に選択され、Ｊ、Ｋ、Ｌ及びＭの０、１又は２個はＮであり；
ｎは、１から６であり；
Ｒ１及びＲ２は、Ｈ、低級アルキル、置換された低級アルキル、低級ハロアルキル若しくは置換された低級ハロアルキルから独立に選択され、又はＲ１及びＲ２は、互いに結合して、３員環から６員環若しくは置換された３員環から６員環を形成することができ；
Ｒ３及びＲ４は、Ｈ、低級アルキル、置換された低級アルキル、低級ハロアルキル若しくは置換された低級ハロアルキルから各事例において独立に選択され、又はＲ３及びＲ４は、互いに結合して、３員環から６員環若しくは置換された３員環から６員環を形成することができ；
Ｒ５は、ＯＨ、ＳＨ、ＮＨ２、低級アルキル、置換された低級アルキル、低級アルコキシ、置換された低級アルコキシ又はスルファニルから選択され；
Ｒ６は、Ｈ、ＯＨ、低級アルコキシ、ＳＨ、ＮＨ２、ＮＨＳＯ２Ｒ９又はスルホニルから選択され；
Ｒ７は、Ｈ、低級アルキル又は置換された低級アルキルから選択され；
各Ｒ８は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、アルキル、置換されたアルキル、ハロアルキル、ペルハロアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、ＮＲｂＲｃ、Ｃ（Ｏ）ＯＲ９、ＯＲ９、ＳＲ９、ＳＯ２Ｒ９、ＣＮ、ＮＯ２、アリール、置換されたアリール、アリールアルキル、置換されたアリールアルキル、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、置換されたヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリル、置換されたヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、置換されたヘテロシクリルアルキル、アルコキシカルボニル、置換されたアルコキシカルボニル又は−Ｙ−Ｒ１０から選択され；
Ｙは、−Ｎ（Ｒ１１）−Ｚ−又は−Ｚ−Ｎ（Ｒ１１）−から選択され；
Ｚは、Ｃ（Ｏ）、ＳＯ２、アルキレン、置換されたアルキレン、アルケニレン、置換されたアルケニレン、アルキニレン又は置換されたアルキニレンから選択され；
Ｒ９は、Ｈ、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル又は置換されたアルキニルから選択され；
Ｒ１０は、Ｈ、ヘテロシクリル、置換されたヘテロシクリル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール又は置換されたヘテロアリールから選択され；
Ｒ１１は、Ｈ、低級アルキル又は置換された低級アルキルから選択され；並びに
Ｒｂ及びＲｃは、Ｈ、低級アルキル、置換された低級アルキル、低級ハロアルキル若しくは置換された低級ハロアルキルから独立に選択され、又はＲｄ及びＲｅは、互いに結合して、３員環から６員環若しくは置換された３員環から６員環を形成することができる。）。
【請求項２】
Ｊ、Ｋ、Ｌ及びＭの各々がＣＲ８である、請求項１に記載の少なくとも１つの化合物。
【請求項３】
Ｊ、Ｋ、Ｌ及びＭの１つがＮであり、並びにＪ、Ｋ、Ｌ及びＭの他の３つがＣＲ８である、請求項１に記載の少なくとも１つの化合物。
【請求項４】
ＪがＮであり、並びにＫ、Ｌ及びＭがＣＲ８である、請求項３に記載の少なくとも１つの化合物。
【請求項５】
ＫがＮであり、並びにＪ、Ｌ及びＭがＣＲ８である、請求項３に記載の少なくとも１つの化合物。
【請求項６】
ＬがＮであり、並びにＪ、Ｋ及びＭがＣＲ８である、請求項３に記載の少なくとも１つの化合物。
【請求項７】
ＭがＮであり、並びにＪ、Ｋ及びＬがＣＲ８である、請求項３に記載の少なくとも１つの化合物。
【請求項８】
Ｒ５がＯＨである、請求項１から７の何れか一項に記載の少なくとも１つの化合物。
【請求項９】
Ｒ６がＯＨである、請求項１から８の何れか一項に記載の少なくとも１つの化合物。
【請求項１０】
Ｒ８の少なくとも１つの例が置換された若しくは置換されていないアリール、置換された若しくは置換されていないヘテロアリール、置換された若しくは置換されていないシクロアルキル又は置換された若しくは置換されていないヘテロシクリル基である、請求項１から９の何れか一項に記載の少なくとも１つの化合物。
【請求項１１】
Ｒ８の少なくとも１つの例がヘテロシクリル基である、請求項１０に記載の少なくとも１つの化合物。
【請求項１２】
Ｒ８の少なくとも１つの例がヘテロアリール基である、請求項１０に記載の少なくとも１つの化合物。
【請求項１３】
Ｒ８の少なくとも１つの例がフェニル又は置換されたフェニル基である、請求項１０に記載の少なくとも１つの化合物。
【請求項１４】
Ｒ８の少なくとも１つの例がハロ又は少なくとも１つのハロで置換された部分から選択される、請求項１から１３の何れか一項に記載の少なくとも１つの化合物。
【請求項１５】
ｎが１である、請求項１から１４の何れか一項に記載の少なくとも１つの化合物。
【請求項１６】
Ｒ１及びＲ２がＨ及び低級アルキルから独立に選択される、請求項１から１５の何れか一項に記載の少なくとも１つの化合物。
【請求項１７】
Ｒ１及びＲ２が何れもＨである、請求項１６に記載の少なくとも１つの化合物。
【請求項１８】
Ｒ３及びＲ４がＨ及び低級アルキルから独立に選択される、請求項１から１７の何れか一項に記載の少なくとも１つの化合物。
【請求項１９】
Ｒ３及びＲ４がＨ及びメチルから独立に選択される、請求項１８に記載の少なくとも１つの化合物。
【請求項２０】
Ｒ３及びＲ４が何れもＨである、請求項１８に記載の少なくとも１つの化合物。
【請求項２１】
ｎが１であり；Ｒ１がＨであり；Ｒ２がＨであり；Ｒ３がＨであり；Ｒ４がＨであり；Ｒ５がＯＨであり；Ｒ６がＯＨである、請求項１から７の何れか一項に記載の少なくとも１つの化合物又は医薬として許容されるその塩、その互変異性体、互変異性体の医薬として許容される塩又はこれらの混合物。
【請求項２２】
Ｒ７がＨである、請求項１から２１の何れか一項に記載の少なくとも１つの化合物。
【請求項２３】
Ｒ７が低級アルキルである、請求項１から２１の何れか一項に記載の少なくとも１つの化合物。
【請求項２４】
Ｒ７がメチルである、請求項１から２１の何れか一項に記載の少なくとも１つの化合物。
【請求項２５】
Ｒ７がアリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリルアルキル、シクロアルキルアルキル、ヒドロキシアルキル、アルコキシアルキル又はハロアルキルから選択される置換された低級アルキルである、請求項１から２１の何れか一項に記載の少なくとも１つの化合物。
【請求項２６】
化合物が、以下の化合物の１つから選択され、又はその塩、その互変異性体又は互変異性体の塩である、請求項１に記載の少なくとも１つの化合物：
４−（４−ヒドロキシ−６−ヨード−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（８−ブロモ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−７−（トリフルオロメチル）−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（７−ブロモ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（１−ベンジル−７，８−ジフルオロ−４−ヒドロキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（６−ブロモ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（５−ブロモ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（５，８−ジフルオロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（７，８−ジフルオロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；又は
４−（３−（３−カルボキシプロパノイル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−７−イル）安息香酸。
【請求項２７】
化合物が、以下の化合物の１つから選択され、又はその塩、互変異性体又は互変異性体の塩である、請求項１に記載の少なくとも１つの化合物：
４−（６−シクロヘキシル−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−フェニル−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（６−（４−フルオロフェニル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（６−シクロペンチル−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−（テトラヒドロフラン−２−イル）−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（６−（２−フルオロフェニル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（６−（３−フルオロフェニル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−６−ヨード−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（７，８−ジフルオロ−４−ヒドロキシ−６−ヨード−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−フェニル−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（６−（４−フルオロフェニル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（６−（３−フルオロフェニル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（６−（２−フルオロフェニル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（３−（３−カルボキシプロパノイル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−６−イル）安息香酸；
４−（６−（３−カルボキシプロパノイル）−５−ヒドロキシ−８−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）安息香酸；
６−（３−カルボキシプロパノイル）−５−ヒドロキシ−８−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−カルボン酸；
３−（３−カルボキシプロパノイル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−６−カルボン酸；
４−（６−シクロプロピル−７，８−ジフルオロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（７，８−ジフルオロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−（テトラヒドロフラン−２−イル）−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（８−クロロ−７−フルオロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（７，８−ジクロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
３−（３−カルボキシプロパノイル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−７−カルボン酸；
４−（７，８−ジフルオロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−７−（トリフルオロメチル）−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−７−フェニル−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
３−（３−カルボキシプロパノイル）−７，８−ジフルオロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−６−カルボン酸；
４−（７，８−ジフルオロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−フェニル−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−フェニル−７−（トリフルオロメチル）−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−７−（チオフェン−２−イル）−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−７−（チオフェン−３−イル）−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−（チオフェン−２−イル）−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−（チオフェン−３−イル）−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（６−シクロプロピル−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−７−（トリフルオロメチル）−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（１−ベンジル−７−ブロモ−４−ヒドロキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（１−ベンジル−４−ヒドロキシ−２−オキソ−７−（トリフルオロメチル）−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（１−ベンジル−４−ヒドロキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（１−ベンジル−４−ヒドロキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−（トリフルオロメチル）−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（７−ブロモ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，５−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，５−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−７−（チオフェン−２−イル）−１，２−ジヒドロ−１，５−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−７−（チオフェン−３−イル）−１，２−ジヒドロ−１，５−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，７−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−フェニル−１，２−ジヒドロ−１，７−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
３−（３−カルボキシプロパノイル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，７−ナフチリジン−６−カルボン酸；又は
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸。
【請求項２８】
ＰＨＤ２ＩＣ５０値によって除されたＣＰＨ１ＩＣ５０値が１０より大きい、請求項１から２７の何れか一項の化合物。
【請求項２９】
医薬として許容される少なくとも１つの賦形剤及び請求項１から２８の何れか一項の少なくとも１つの化合物の治療的有効量を含む医薬組成物。
【請求項３０】
少なくとも１つの化合物が、虚血、貧血、創傷治癒、自己移植、同種移植、異種移植、全身性高血圧、サラセミア、糖尿病、癌又は炎症性疾患から選択される少なくとも１つの疾患の治療に対して有効な量で存在する、請求項２９の医薬組成物。
【請求項３１】
少なくとも１つの化合物が対象の血中のエリスロポエチンの量を増加させるのに有効な量で存在する、請求項２９の医薬組成物。
【請求項３２】
請求項１から２８の何れか一項の化合物の治療的有効量を対象に投与することを含む、対象の血中のエリスロポエチンの量を増加させるための方法。
【請求項３３】
請求項１から２８の何れか一項の少なくとも１つの化合物を対象に投与することを含む、対象中のＨＩＦレベル又は活性を増加又は安定化させる方法。
【請求項３４】
請求項１から２８の何れか一項に記載の少なくとも１つの化合物を対象に投与することを含む、ＨＩＦ活性を調節することが望まれている症状を治療する方法。
【請求項３５】
前記症状が、虚血、貧血、創傷治癒、自己移植、同種移植、異種移植、全身性高血圧、サラセミア、糖尿病、癌又は炎症性疾患の少なくとも１つから選択される、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
請求項１から２８の何れか一項に記載の少なくとも１つの化合物を対象に投与することを含む、対象中の低酸素又は虚血関連疾患を治療する方法。
【請求項３７】
請求項１から２８の何れか一項に記載の少なくとも１つの化合物と細胞を接触させることを含む、細胞中のＨＩＦの量を調節する方法。
【請求項３８】
請求項１から２８の何れか一項に記載の少なくとも１つの化合物を対象に投与することを含む、対象中のＨＩＦ水酸化を阻害する方法。
【請求項３９】
医薬の調製における、請求項１から２８の何れか一項に記載の少なくとも１つの化合物の使用。
【請求項４０】
対象中のＨＩＦレベル又は活性を増加又は安定化させるための医薬の調製における、請求項１から２８の何れか一項に記載の少なくとも１つの化合物の使用。
【請求項４１】
ＨＩＦ活性を調節することが望まれる症状を治療するための医薬の調製における、請求項１から２８の何れか一項に記載の少なくとも１つの化合物の使用。
【請求項４２】
対象中の血液中のエリスロポエチンの量を増加させるための医薬の調製における、請求項１から２８の何れか一項に記載の少なくとも化合物の使用。
【請求項４３】
対象中の低酸素又は虚血関連疾患を治療するための医薬の調製における、請求項１から２８の何れか一項に記載の少なくとも１つの化合物の使用。
【請求項４４】
細胞中のＨＩＦの量を調節するための組成物の調製における、請求項１から２８の何れか一項に記載の少なくとも１つの化合物の使用。
【請求項４５】
細胞中のＨＩＦの量の調節における、請求項１から２８の何れか一項に記載の少なくとも１つの化合物の使用。
【請求項４６】
対象中のＨＩＦ水酸化を阻害するための医薬の調製における、請求項１から２８の何れか一項に記載の少なくとも１つの化合物の使用。
【請求項４７】
対象の血液中のエリスロポエチンのレベルを増加させるための方法において使用するための、請求項１から２８の何れか一項の化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本願は、２００７年４月１８日に出願された米国仮出願６０／９２５，２８５号及び２００７年５月４日に出願された米国仮出願６０／９２７，７４８号（何れも、本明細書中に完全に記載されている如く、参照により、その全体が、あらゆる目的のために本明細書に組み込まれる。）の利益を主張する。
【０００２】
発明の分野
本発明は、ＨＩＦプロリルヒドロキシラーゼなどのプロリルヒドロキシラーゼを阻害することができる化合物、ＨＩＦレベルを調節する化合物、ＨＩＦを安定化させる化合物、これらの化合物を含む組成物及びＨＩＦレベルを調節するためのこれらの使用方法に関する。前記化合物及び組成物は、虚血、貧血、創傷治癒、自己移植、同種移植、異種移植、全身性高血圧、サラセミア、糖尿病、癌及び炎症性疾患など、ＨＩＦによって調節される疾病又は症状を治療するために使用され得る。
【背景技術】
【０００３】
細胞転写因子ＨＩＦ（低酸素誘導性因子）は、多岐にわたる生物中で、酸素の恒常性において中心的な位置を占めており、低酸素症に対する応答の中心的な制御因子である。ＨＩＦ転写活性によって制御される遺伝子は、血管新生、赤血球新生、ヘモグロビンＦ産生、エネルギー代謝、炎症、血管運動機能、アポトーシス及び細胞増殖において重大な役割を果たし得る。ＨＩＦは、癌（一般に、ＨＩＦが上方制御されている。）並びに虚血及び低酸素に対する病態生理学的応答においても役割を果たし得る。
【０００４】
ＨＩＦ転写複合体はαβヘテロ二量体を含む。ＨＩＦ−βは、酸素によって制御されるＨＩＦ−αサブユニットと二量体を形成する恒常的核タンパク質である。酸素制御は、ＨＩＦ−αサブユニットの水酸化を通じて起こり、次いで、プロテアソームによって迅速に破壊される。酸素添加された細胞では、フォンヒッペル・リンダウ腫瘍抑制タンパク質（ｐＶＨＬ）は水酸化されたＨＩＦ−αサブユニットに結合し、これにより、それらのユビキチン依存性タンパク質分解を促進する。このプロセスは、低酸素状態下で抑制され、ＨＩＦ−αを安定化し、ＨＩＦαβ複合体による転写活性化を促進する。例えば、米国特許第６，７８７，３２６号を参照されたい。
【０００５】
ＨＩＦ−αサブユニットの水酸化は、プロリン及びアスパラギン残基上で起こり得、２−オキソグルタル酸依存性酵素のファミリーによって媒介され得る。このファミリーには、ヒトＨＩＦ１αのＰｒｏ４０２及びＰｒｏ５６４を水酸化するＨＩＦプロリルヒドロキシラーゼイソザイム（ＰＨＤ）及びヒトＨＩＦ１αのＡｓｎ８０３を水酸化する因子阻害ＨＩＦ（ＦＩＨ）が含まれる。ＦＩＨ又はＰＨＤの阻害は、ＨＩＦ安定化及び転写活性化をもたらす。例えば、「Ｓｃｈｏｆｉｅｌｄ  ａｎｄ  Ｒａｔｃｌｉｆｆｅ，  Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖ．Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．，  Ｖｏｌ５，  ｐａｇｅｓ  ３４３−３５４（２００４）」を参照されたい。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】米国特許第６，７８７，３２６号
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Ｓｃｈｏｆｉｅｌｄ  ａｎｄ  Ｒａｔｃｌｉｆｆｅ，  Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖ．Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．，  Ｖｏｌ５，  ｐａｇｅｓ  ３４３−３５４（２００４）
【発明の概要】
【０００８】
一態様において、本発明は、式Ｉの少なくとも１つの化合物、医薬として許容されるその塩、その互変異性体若しくは互変異性体の医薬として許容される塩；又はこれらの溶媒和物；そのキレート、その非共有的複合体、そのプロドラッグ又は前記の何れかの混合物を提供する。
【０００９】
【化１】
2010524942.tif 000002
式中、Ｊ、Ｋ、Ｌ及びＭは、ＣＲ８又はＮから独立に選択され、Ｊ、Ｋ、Ｌ及びＭの０、１又は２個はＮであり；
ｎは、１から６であり；
Ｒ１及びＲ２は、Ｈ、低級アルキル、置換された低級アルキル、低級ハロアルキル若しくは置換された低級ハロアルキルから独立に選択され、又はＲ１及びＲ２は、互いに結合して、３員環から６員環若しくは置換された３員環から６員環を形成することができ；
Ｒ３及びＲ４は、Ｈ、低級アルキル、置換された低級アルキル、低級ハロアルキル若しくは置換された低級ハロアルキルから各事例において独立に選択され、又はＲ３及びＲ４は、互いに結合して、３員環から６員環若しくは置換された３員環から６員環を形成することができ；
Ｒ５は、ＯＨ、ＳＨ、ＮＨ２、低級アルキル、置換された低級アルキル、低級アルコキシ、置換された低級アルコキシ又はスルファニルから選択され；
Ｒ６は、Ｈ、ＯＨ、低級アルコキシ、ＳＨ、ＮＨ２、ＮＨＳＯ２Ｒ９又はスルホニルから選択され；
Ｒ７は、Ｈ、低級アルキル又は置換された低級アルキルから選択され；
各Ｒ８は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、アルキル、置換されたアルキル、ハロアルキル、ペルハロアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、ＮＲｂＲｃ、Ｃ（Ｏ）ＯＲ９、ＯＲ９、ＳＲ９、ＳＯ２Ｒ９、ＣＮ、ＮＯ２、アリール、置換されたアリール、アリールアルキル、置換されたアリールアルキル、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、置換されたヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリル、置換されたヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、置換されたヘテロシクリルアルキル、アルコキシカルボニル、置換されたアルコキシカルボニル又は−Ｙ−Ｒ１０から選択され；
Ｙは、−Ｎ（Ｒ１１）−Ｚ−又は−Ｚ−Ｎ（Ｒ１１）−から選択され；
Ｚは、Ｃ（Ｏ）、ＳＯ２、アルキレン、置換されたアルキレン、アルケニレン、置換されたアルケニレン、アルキニレン又は置換されたアルキニレンから選択され；
Ｒ９は、Ｈ、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル又は置換されたアルキニルから選択され；
Ｒ１０は、Ｈ、ヘテロシクリル、置換されたヘテロシクリル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール又は置換されたヘテロアリールから選択され；
Ｒ１１は、Ｈ、低級アルキル又は置換された低級アルキルから選択され；並びに
Ｒｂ及びＲｃは、Ｈ、低級アルキル、置換された低級アルキル、低級ハロアルキル若しくは置換された低級ハロアルキルから独立に選択され、又はＲｄ及びＲｅは、互いに結合して、３員環から６員環若しくは置換された３員環から６員環を形成することができる。
【００１０】
式Ｉの化合物の幾つかの実施形態において、Ｊ、Ｋ、Ｌ及びＭの各々はＣＲ８である。他の実施形態において、Ｊ、Ｋ、Ｌ及びＭの１つはＮであり、並びにＪ、Ｋ、Ｌ及びＭの他の３つはＣＲ８である。幾つかのこのような実施形態において、ＪはＮであり、並びにＫ、Ｌ及びＭはＣＲ８である。他のこのような実施形態において、ＫはＮであり、並びにＪ、Ｌ及びＭはＣＲ８である。さらに別のこのような実施形態において、ＬはＮであり、並びにＪ、Ｋ及びＭはＣＲ８である。さらに別のこのような実施形態において、ＭはＮであり、並びにＪ、Ｋ及びＬはＣＲ８である。
【００１１】
式Ｉの化合物の幾つかの実施形態において、Ｒ５はＯＨである。
【００１２】
式Ｉの化合物の幾つかの実施形態において、Ｒ６はＯＨ、ＳＨ、ＮＨ２、ＮＨＳＯ２Ｒ９又はスルホニルから選択される。幾つかのこのような実施形態において、Ｒ６はＯＨである。
【００１３】
式Ｉの化合物の幾つかの実施形態において、Ｒ８の少なくとも１つの例は、置換された若しくは置換されていないアリール、置換された若しくは置換されていないヘテロアリール、置換された若しくは置換されていないシクロアルキル又は置換された若しくは置換されていないヘテロシクリル基である。幾つかのこのような実施形態において、Ｒ８の少なくとも１つの例はヘテロシクリル基である。他のこのような実施形態において、Ｒ８の少なくとも１つの例はヘテロアリール基である。他のこのような実施形態において、Ｒ８の少なくとも１つの例はフェニル又は置換されたフェニル基である。
【００１４】
式Ｉの化合物の幾つかの実施形態において、Ｒ８の少なくとも１つの例は、ハロ又は少なくとも１つのハロで置換された部分から独立に選択される。例えば、幾つかの実施形態において、Ｒ８の少なくとも１つの例は、ハロアルキルである。幾つかの実施形態において、Ｒ８の少なくとも１つの例はペルハロアルキルである。幾つかのこのような実施形態において、ペルハロアルキルは、ＣＦ３などのペルフルオロアルキル基である。
【００１５】
式Ｉの化合物の幾つかの実施形態において、ｎは１である。
【００１６】
式Ｉの化合物の幾つかの実施形態において、Ｒ１及びＲ２は、Ｈ及び低級アルキルから独立に選択される。幾つかのこのような実施形態において、Ｒ１及びＲ２の何れもがＨである。幾つかのこのような実施形態において、ｎは１である。さらに別のこのような実施形態において、Ｒ３及びＲ４はＨ及び低級アルキルから選択され、幾つかのこのような実施形態において、Ｒ３及びＲ４の何れもがＨである。従って、幾つかの実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４の全てがＨであり、並びにｎが１である。
【００１７】
式Ｉの化合物の幾つかの実施形態において、Ｒ３及びＲ４は、Ｈ及び低級アルキルから独立に選択される。幾つかのこのような実施形態において、Ｒ３及びＲ４は、Ｈ及びメチルから独立に選択される。幾つかのこのような実施形態において、Ｒ３及びＲ４の何れもがＨである。
【００１８】
式Ｉの化合物の幾つかの実施形態において、ｎは１であり；Ｒ１はＨであり；Ｒ２はＨであり；Ｒ３はＨであり；Ｒ４はＨであり；Ｒ５はＯＨであり；Ｒ６はＯＨであり又はこれらの塩若しくはプロドラッグである。
【００１９】
式Ｉの化合物の幾つかの実施形態において、Ｒ７はＨである。他の実施形態において、Ｒ７は低級アルキル基である。幾つかのこのような実施形態において、Ｒ７はメチルである。さらに別の実施形態において、Ｒ７はアリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリルアルキル、シクロアルキルアルキル、ヒドロキシアルキル、アルコキシアルキル又はハロアルキルから選択される置換された低級アルキルである。
【００２０】
幾つかの実施形態において、式Ｉの化合物は式ＩＡを有しており、変数Ｒ５、Ｒ７及び各Ｒ８は上に記載されている態様及び実施形態の何れかに提供されている定義を有する。
【００２１】
【化２】
2010524942.tif 000003
【００２２】
幾つかの実施形態において、式Ｉの化合物は式ＩＢを有しており、変数Ｒ５、Ｒ７及び各Ｒ８は上に記載されている態様及び実施形態の何れかに提供されている定義を有する。
【００２３】
【化３】
2010524942.tif 000004
【００２４】
幾つかの実施形態において、式Ｉの化合物は式ＩＣを有しており、変数Ｒ５、Ｒ７及び各Ｒ８は上に記載されている態様及び実施形態の何れかに提供されている定義を有する。
【００２５】
【化４】
2010524942.tif 000005
【００２６】
幾つかの実施形態において、式Ｉの化合物は式ＩＤを有しており、変数Ｒ５、Ｒ７及び各Ｒ８は上に記載されている態様及び実施形態の何れかに提供されている定義を有する。
【００２７】
【化５】
2010524942.tif 000006
【００２８】
幾つかの実施形態において、式Ｉの化合物は式ＩＥを有しており、変数Ｒ５、Ｒ７及び各Ｒ８は上に記載されている態様及び実施形態の何れかに提供されている定義を有する。
【００２９】
【化６】
2010524942.tif 000007
【００３０】
他の実施形態において、化合物は、以下に列記されている化合物の何れか１つ若しくは全部から選択され、又はその塩、その互変異性体、又は互変異性体の塩である。
【００３１】
４−（４−ヒドロキシ−６−ヨード−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（８−ブロモ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−７−（トリフルオロメチル）−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（７−ブロモ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（１ベンジル−７，８−ジフルオロ−４−ヒドロキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（６−ブロモ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（５−ブロモ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（５，８−ジフルオロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（７，８−ジフルオロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；又は
４−（３−（３−カルボキシプロパノイル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−７−イル）安息香酸。
【００３２】
さらに他の実施形態において、化合物は、以下に列記されている化合物の何れか１つ若しくは全部から選択され、又はその塩、その互変異性体、又は互変異性体の塩である。
【００３３】
４−（６−シクロヘキシル−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−フェニル−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（６−（４−フルオロフェニル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（６−シクロペンチル−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−（テトラヒドロフラン−２−イル）−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（６−（２−フルオロフェニル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（６−（３−フルオロフェニル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−６−ヨード−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（７，８−ジフルオロ−４−ヒドロキシ−６−ヨード−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−フェニル−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（６−（４−フルオロフェニル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（６−（３−フルオロフェニル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（６−（２−フルオロフェニル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（３−（３−カルボキシプロパノイル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−６−イル）安息香酸；
４−（６−（３−カルボキシプロパノイル）−５−ヒドロキシ−８−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）安息香酸；
６−（３−カルボキシプロパノイル）−５−ヒドロキシ−８−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−カルボン酸；
３−（３−カルボキシプロパノイル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−６−カルボン酸；
４−（６−シクロプロピル−７，８−ジフルオロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（７，８−ジフルオロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−（テトラヒドロフラン−２−イル）−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（８−クロロ−７−フルオロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（７，８−ジクロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
３−（３−カルボキシプロパノイル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−７−カルボン酸；
４−（７，８−ジフルオロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−７−（トリフルオロメチル）−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−７−フェニル−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
３−（３−カルボキシプロパノイル）−７，８−ジフルオロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−６−カルボン酸；
４−（７，８−ジフルオロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−フェニル−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−フェニル−７−（トリフルオロメチル）−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−７−（チオフェン−２−イル）−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−７−（チオフェン−３−イル）−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−（チオフェン−２−イル）−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−（チオフェン−３−イル）−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（６−シクロプロピル−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−７−（トリフルオロメチル）−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（１−ベンジル−７−ブロモ−４−ヒドロキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（１−ベンジル−４−ヒドロキシ−２−オキソ−７−（トリフルオロメチル）−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（１−ベンジル−４−ヒドロキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（１−ベンジル−４−ヒドロキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−（トリフルオロメチル）−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（７−ブロモ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，５−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，５−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−７−（チオフェン−２−イル）−１，２−ジヒドロ−１，５−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−７−（チオフェン−３−イル）−１，２−ジヒドロ−１，５−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，７−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−フェニル−１，２−ジヒドロ−１，７−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
３−（３−カルボキシプロパノイル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，７−ナフチリジン−６−カルボン酸；又は
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸。
【００３４】
幾つかの実施形態において、少なくとも１つの化合物は塩である。このような塩は無水物であり得、又は水和物として水と会合し得る。
【００３５】
幾つかの実施形態において、化合物はプロドラッグである。幾つかのこのような実施形態において、化合物は、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル又はヘキシルエステルなどの（Ｃ１−Ｃ６）アルキルエステルである。
【００３６】
幾つかの実施形態において、前記化合物は、ＰＨＤ２ＩＣ５０値によって除されたＣＰＨ１ＩＣ５０値が５より大きい、８より大きい、１０より大きい、１５より大きい、２０より大きい又はさらに大きい化合物である。幾つかのこのような実施形態において、ＰＨＤ２ＩＣ５０値によって除されたＣＰＨ１ＩＣ５０値は１０より大きい。
【００３７】
医薬として許容される少なくとも１つの担体及び本明細書中に記載されている実施形態の何れかの少なくとも１つの化合物の治療的有効量を含む医薬組成物も本明細書において提供される。このような実施形態において、少なくとも１つの化合物が、虚血、貧血、創傷治癒、自己移植、同種移植、異種移植、全身性高血圧、サラセミア、糖尿病、癌又は炎症性疾患から選択される少なくとも１つの疾患の治療に対して有効な量で存在する。
【００３８】
幾つかの実施形態において、本発明は、対象の血液中のエリスロポエチンの量を増加させるのに有効な量で前記実施形態の何れかの化合物を含む医薬組成物を提供する。
【００３９】
赤血球新生刺激剤又は化学療法剤などの少なくとも１つのさらなる化合物と組み合わせて、医薬として許容される少なくとも１つの担体及び本明細書中に記載されている実施形態の何れかの少なくとも１つの化合物の治療的有効量を含む医薬組成物がさらに提供される。
【００４０】
本明細書中に記載されている実施形態の何れかの少なくとも１つの化合物を対象に投与することによって、対象中のＨＩＦレベル又は活性を増加又は安定化させる方法がさらに提供される。
【００４１】
本明細書中に記載されている実施形態の何れかの少なくとも１つの化合物を対象に投与することを含む、ＨＩＦ活性を調節することが望まれている症状を治療する方法がさらに提供される。幾つかのこのような実施形態において、前記症状は、虚血、貧血、創傷治癒、自己移植、同種移植、異種移植、全身性高血圧、サラセミア、糖尿病、癌又は炎症性疾患の少なくとも１つから選択される。
【００４２】
本明細書中に記載されている実施形態の何れかの少なくとも１つの化合物を対象に投与することを含む、対象中の低酸素又は虚血関連疾患を治療する方法も提供される。
【００４３】
本明細書中に記載されている実施形態の何れかの少なくとも１つの化合物を対象に投与することを含む、対象中の貧血を治療する方法も提供される。
【００４４】
対象の血液又は血漿中のエリスロポエチンの量を増加させるための方法も提供される。このような方法は、実施形態の何れか１つの化合物の治療的有効量を対象に投与することを含む。従って、幾つかの実施形態において、実施形態の何れか１つの化合物が対象の血液中のエリスロポエチンのレベルを増加させるための方法において使用される。
【００４５】
本明細書中に記載されている実施形態の何れかの少なくとも１つの化合物と細胞を接触させることを含む、細胞中のＨＩＦの量を調節する方法がさらに提供される。
【００４６】
本明細書中に記載されている実施形態の何れかの少なくとも１つの化合物を対象に投与することを含む、対象中のヘモグロフィンＦの量を増加させる方法がさらに提供される。
【００４７】
本明細書中に記載されている実施形態の何れかの少なくとも１つの化合物を対象に投与することを含む、対象中の血管新生を治療する方法も提供される。
【００４８】
本明細書中に記載されている実施形態の何れかの少なくとも１つの化合物の治療的有効量を患者に投与することを含む、このような治療を必要としている患者中の少なくとも１つの疾病を治療する方法がさらに提供される。幾つかのこのような実施形態において、前記少なくとも１つの疾病は、虚血、貧血、創傷治癒、自己移植、同種移植、異種移植、全身性高血圧、サラセミア、糖尿病、癌又は炎症性疾患から選択される。
【００４９】
本明細書中に記載されている実施形態の何れかの少なくとも１つの化合物を対象に投与することを含む、対象中のＨＩＦ水酸化を阻害する方法も提供される。
【００５０】
幾つかの実施形態において、化合物のＨＩＦＰＨＤ阻害活性ＩＣ５０値は４０μＭ又はそれ以下である。他の実施形態において、化合物のＨＩＦＰＨＤ阻害活性ＩＣ５０値は１０μＭ又はそれ以下である。
【００５１】
幾つかの実施形態において、前記実施形態の何れかの少なくとも１つの化合物は、医薬の調製において使用される。
【００５２】
幾つかのこのような実施形態において、前記実施形態の何れかの少なくとも１つの化合物は、対象中のＨＩＦレベル又は活性を増加又は安定化させるための医薬の調製において使用される。
【００５３】
幾つかのこのような実施形態において、前記実施形態の何れかの少なくとも１つの化合物は、ＨＩＦ活性を調節することが望まれる症状を治療するための医薬の調製において使用される。幾つかのこのような実施形態において、前記症状は、虚血、貧血、創傷治癒、自己移植、同種移植、異種移植、全身性高血圧、サラセミア、糖尿病、癌又は炎症性疾患の少なくとも１つから選択される。
【００５４】
幾つかのこのような実施形態において、前記実施形態の何れかの少なくとも１つの化合物は、対象中の低酸素又は虚血関連疾患を治療するための医薬の調製において使用される。
【００５５】
幾つかのこのような実施形態において、前記実施形態の何れかの少なくとも１つの化合物は、細胞中のＨＩＦの量を調節するための医薬の調製において使用される。幾つかの実施形態において、前記実施形態の何れかの少なくとも１つの化合物は、細胞中のＨＩＦの量を調節するために使用される。
【００５６】
幾つかの実施形態において、前記実施形態の何れかの少なくとも１つの化合物は、対象中の血管新生を調節するための医薬の調製において使用される。
【００５７】
幾つかの実施形態において、前記実施形態の何れかの少なくとも１つの化合物は、対象中のＨＩＦ水酸化を阻害するための医薬の調製において使用される。
【００５８】
幾つかの実施形態において、前記実施形態の何れかの少なくとも１つの化合物は、貧血を治療するための医薬の調製において使用される。
【００５９】
本発明の他の目的、特徴及び利点は、以下の記述及び特許請求の範囲から、当業者に明らかとなる。
【図面の簡単な説明】
【００６０】
【図１】図１は、ストレプトアビジン−ＡＰＣ−ヒドロキシプロリルＨＩＦ１αペプチドとのＥｕ−ＶＣＢの相互作用によって生じた、バックグラウンドに対する蛍光シグナルの比を表すグラフである。
【図２Ａ】図２Ａ及び２Ｂは、ストレプトアビジン−ＡＰＣ−ＨＩＦ１αペプチド（水酸化されていない）とのＥｕ−ＶＣＢの相互作用によって生じた、バックグラウンドに対するストレプトアビジン−ＡＰＣ−ヒドロキシプロリルＨＩＦ１αペプチドとのＥｕ−ＶＣＢの相互作用によって生じたＴＲ−ＦＲＥＴシグナルの比を表すグラフである。図２Ａは０から１２５ｎＭのペプチド範囲を表す。
【図２Ｂ】図２Ａ及び２Ｂは、ストレプトアビジン−ＡＰＣ−ＨＩＦ１αペプチド（水酸化されていない）とのＥｕ−ＶＣＢの相互作用によって生じた、バックグラウンドに対するストレプトアビジン−ＡＰＣ−ヒドロキシプロリルＨＩＦ１αペプチドとのＥｕ−ＶＣＢの相互作用によって生じたＴＲ−ＦＲＥＴシグナルの比を表すグラフである。図２Ｂは０から１０ｎＭのペプチド範囲を表す。
【図３Ａ】図３Ａ及び３Ｂは、ＨＩＦ１αペプチドのＨＩＦＰＨＤ２水酸化を測定するためのＶＣＢ結合及びＴＲ−ＦＲＥＴ検出を表すグラフである。図３Ａは、ＨＩＦＰＤＨ２酵素の増加する量とともに、ＨＩＦ１αペプチドの水酸化に対する経時変化を表している。
【図３Ｂ】図３Ａ及び３Ｂは、ＨＩＦ１αペプチドのＨＩＦＰＨＤ２水酸化を測定するためのＶＣＢ結合及びＴＲ−ＦＲＥＴ検出を表すグラフである。図３Ｂは、酵素濃度の増加とともに初速度を表している。
【図４】図４は、ビヒクル（底部の線）並びに実施例４、実施例７及び実施例８の各々の５０ｍｇ／ｋｇＰＯの投与後の時間の関数としての血漿中のエリスロポエチン（Ｅｐｏ）のレベルを表すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００６１】
別段の記載がなければ、本明細書及び特許請求の範囲中で使用されている成分の量、反応の条件などを表す全ての数字は、全ての事例において「約」という用語によって修飾されているものと理解しなければならない。従って、別段の記載がなければ、以下の明細書及び添付の特許請求の範囲に記載されている数的パラメータは、それぞれの試験測定において見出される標準偏差に応じて変動し得る近似である。
【００６２】
本明細書において使用される、全ての変数が化学式中に２回以上出現する場合には、各出現におけるその定義は、全ての他の出現におけるその定義とは独立している。化学構造と化学名が抵触する場合には、化学構造が化合物の種類を決定する。本開示の化合物は１つ又はそれ以上のキラル中心及び／又は二重結合を含有し得、従って、二重結合異性体（すなわち、幾何異性体）、鏡像異性体又はジアステレオマーなどの立体異性体として存在し得る。従って、相対的立体配置とともに、全体又は部分が図示されている本明細書の範囲に属するあらゆる化学的構造は、立体異性体的に純粋な形態（例えば、幾何異性的に純粋、鏡像異性的に純粋又はジアステレオマーとして純粋）並びに鏡像異性体及び立体異性体の混合物などの表記化合物の全ての可能な鏡像異性体及び立体異性体を包含する。鏡像異性体及び立体異性体の混合物は、当業者に周知の分離技術又はキラル合成技術を用いて、成分の鏡像異性体又は立体異性体へ分割することができる。
【００６３】
式Ｉの化合物には、式Ｉの化合物の光学異性体、ラセミ体及びこれらの他の混合物が含まれるが、これらに限定されない。これらの状況において、単一の鏡像異性体又はジアステレオマー、すなわち、光学的に活性な形態は、不斉合成によって又はラセミ体の分割によって取得することができる。ラセミ体の分割は、例えば、分割剤の存在下での結晶化、又は例えば、キラル高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）カラムを使用するクロマトグラフィーなどの慣用法によって達成することができる。さらに、式Ｉの化合物には、二重結合を有する化合物のＺ及びＥ形態（又はシス及びトランス形態）が含まれる。
【００６４】
本発明の化合物は、複数の互変異性形態で存在し得る。これらの形態は、「互変異性体Ａ」、「互変異性体Ｂ」及び「互変異性体Ｃ」として以下で記載される。
【００６５】
【化７】
2010524942.tif 000008
【００６６】
本発明の化合物は、構造的に図示され、「互変異性体Ａ」形態の化合物として命名されている。しかしながら、化合物は、「互変異性体Ｂ」又は「互変異性体Ｃ」形態でも存在し得、「互変異性体Ｂ」形態又は「互変異性体Ｃ」形態又は別の互変異性体形態の化合物が本発明の一部であると明示的に考えられることが具体的に想定される。
【００６７】
本開示の化合物には、式Ｉの化合物及び医薬として許容されるその形態が含まれるが、これらに限定されない。本明細書中に記載されている化合物の医薬として許容される形態には、医薬として許容される塩、溶媒和物、結晶形態（多型及び包接化合物を含む。）、キレート、非共有的複合体、プロドラッグ及びこれらの混合物が含まれる。ある種の実施形態において、本明細書中に記載されている化合物は医薬として許容される塩の形態である。本明細書において使用される「化合物」という用語は、化合物そのもののみならず、医薬として許容されるその塩、その溶媒和物、そのキレート、その非共有的複合体、そのプロドラッグ及び前述のあらゆるものの混合物も包含する。
【００６８】
上述されているように、プロドラッグも、化学的実体、例えば、式Ｉの化合物のエステル又はアミド誘導体の範囲に属する。「プロドラッグ」という用語は、患者に投与されたときに、例えば、プロドラッグの代謝的加工の際に、式Ｉの化合物になるあらゆる化合物を含む。プロドラッグの例には、アセタート、ホルマート、ベンゾアート、カルボメトキシ、カルボエトキシ及び式Ｉの化合物中の官能基の同様の誘導体（アルコール、カルボン酸、エーテル、エステル又はアミン基など）が含まれるが、これらに限定されない。幾つかの実施形態において、式Ｉの化合物のプロドラッグは、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル及びヘキシルエステルなどのエステルである。
【００６９】
「溶媒和物」という用語は、溶媒と化合物の相互作用によって形成される化合物を表す。適切な溶媒和物は、水和物（一水和物及び半水和物を含む。）などの医薬として許容される水和物である。
【００７０】
「アルキル」は、親アルカンの単一の炭素原子から１つの水素原子を除去することによって得られた飽和の、分岐、直鎖又は環状の一価炭化水素基を表す。典型的なアルキル基には、メチル、エチル、プロピル（プロパン−１−イル、プロパン−２−イル及びシクロプロパン−１−イルなど）、ブチル（ブタン−１−イル、ブタン−２−イル、２−メチル−プロパン−１−イル、２−メチル−プロパン−２−イル、シクロブタン−１−イル、ｔｅｒｔ−ブチルなど）などが含まれるが、これらに限定されない。ある種の実施形態において、アルキル基は１から２０個の炭素原子を含む。本明細書において使用される「低級アルキル」という用語は、１から６個の炭素原子を含むアルキル基を表す。
【００７１】
「アルケニル」は、親アルケンの単一の炭素原子から１つの水素原子を除去することによって得られ、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を有する不飽和の、分岐、直鎖又は環状炭化水素基を表す。アルケニル基は、二重結合について、Ｚ型又はＥ型（シス又はトランス）の何れかであり得る。典型的なアルケニル基には、エテニル；プロパ−１−エン−１−イル、プロパ−１−エン−２−イル、プロパ−２−エン−１−イル（アリル）、プロパ−２−エン−２−イル、シクロプロパ−１−エン−１−イル；シクロプロパ−２−エン−１−イルなどのプロペニル；ブタ−１−エン−１−イル、ブタ−１−エン−２−イル、２−メチル−プロパ−１−エン−１−イル、ブタ−２−エン−１−イル、ブタ−２−エン−１−イル、ブタ−２−エン−２−イル、ブタ−１，３−ジエン−１−イル、ブタ−１，３−ジエン−２−イル、シクロブタ−１−エン−１−イル、シクロブタ−１−エン−３−イル、シクロブタ−１，３−ジエン−１−イルなどのブテニルなどが含まれるが、これらに限定されない。ある種の実施形態において、アルケニル基は２から２０個の炭素原子を有し、別の実施形態において、２から６個の炭素原子を有する（すなわち、「低級アルケニル」）。
【００７２】
「アルキニル」は、親アルキンの単一の炭素原子から１つの水素原子を除去することによって得られ、少なくとも１つの炭素−炭素三重結合を有する不飽和の、分岐又は直鎖炭化水素を表す。典型的なアルキニル基には、エチニル；プロピニル；ブチニル、２−ペンチニル、３−ペンチニル、２−ヘキシニル、３−ヘキシニルなどが含まれるが、これらに限定されない。ある種の実施形態において、アルキニル基は２から２０個の炭素原子を有し、別の実施形態において、２から６個の炭素原子を有する（すなわち、「低級アルキニル」）。
【００７３】
「アルコキシ」は、基−ＯＲ（Ｒは、本明細書に定義されているアルキル基を表す。）を表す。代表的な例には、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、シクロヘキシルオキシなどが含まれるが、これらに限定されない。典型的なアルコキシ基は、Ｒ基中に１から１０個の炭素原子、１から６個の炭素原子又は１から４個の炭素原子を含む。低級アルコキシ基は、（Ｃ１−６）アルキル基を含み、幾つかの実施形態においては、（Ｃ１−４）アルキル基を含み得る。
【００７４】
「アルコキシカルボニル」は、基−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ（Ｒは、「アルコキシ」に関して上に定義されているとおりである。）を表す。
【００７５】
「アルキレン」は、２つの水素原子の除去によって、親アルカンから誘導された二価の飽和炭化水素基を表す。アルキレン基の例には、−ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ（ＣＨ３）−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）（Ｈ）−などが含まれるが、これらに限定されない。
【００７６】
「アルケニレン」は、親アルケンから２つの水素原子を除去することによって誘導された、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を有する二価の不飽和炭化水素基を表す。アルケニル基は、二重結合について、Ｚ型又はＥ型（シス又はトランス）の何れかであり得る。アルケニレン基の例には、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ＝Ｃ（Ｈ）ＣＨ２−、−ＣＨ２Ｃ（Ｈ）＝Ｃ（Ｈ）ＣＨ２−などが含まれるが、これらに限定されない。
【００７７】
「アルキニレン」は、親アルキンから２つの水素原子を除去することによって誘導された、少なくとも１つの炭素−炭素三重結合を有する二価の不飽和炭化水素基を表す。アルキニレン基の例には、−Ｃ≡Ｃ−、−ＣＨ２Ｃ≡Ｃ−、−ＣＨ２Ｃ≡ＣＣＨ２−が含まれるが、これらに限定されない。
【００７８】
「アリール」とは、親芳香環系の単一の炭素原子から１つの水素原子を除去することによって誘導された一価の芳香族炭化水素基を表す。アリールは、５員及び６員の炭素環式芳香環、例えば、ベンゼン：少なくとも１つの環が炭素環及び芳香族である二環式環系、例えば、ナフタレン、インダン及びテトラリン；並びに少なくとも１つの環が炭素環及び芳香族である三環式環系、例えば、フルオレンを包含する。例えば、アリールは、Ｎ、Ｏ及びＳから選択される１つ又はそれ以上のヘテロ原子を含有する５員から７員のヘテロ環式環に縮合された５員及び６員の炭素環式芳香環を含む。ある種の実施形態において、アリール基は６から１０個の炭素原子を含むことができる。しかしながら、アリールは、以下で別途定義されているヘテロアリールを決して包含せず、又は重複しない。従って、１つ又はそれ以上の炭素環式芳香環が複素環式芳香環と縮合されている場合には、本明細書中での定義によれば、生じた環系はヘテロアリールであり、アリールではない。
【００７９】
「アリールアルキル」又は「アラルキル」は、炭素原子（典型的には（但し、常にではない。）、末端の炭素原子）に結合されている水素原子の１つがアリール基で置換されている脂環式アルキル基を表す。典型的なアリールアルキル基には、ベンジル、２−フェニルエタン−１−イル、ナフチルメチル、２−ナフチルエタン−１−イル、ナフトベンジル、２−ナフトフェニルエタン−１−イルなどが含まれるが、これらに限定されない。ある種の実施形態において、アリールアルキル基は、（Ｃ６−３０）アリールアルキルであり得、例えば、アリールアルキル基のアルキル基は（Ｃ１−１０）であり得、アリール部分が（Ｃ５−２０）であり得る。
【００８０】
「アリールアルケニル」は、アルケニル基の水素原子の１つへの結合がアリール基への結合で置換されているアルケニル基を表す。
【００８１】
「アリールアルキニル」は、アルキニル基の水素原子の１つへの結合がアリール基への結合で置換されているアルキニル基を表す。
【００８２】
「カルボニル」は、基−Ｃ（Ｏ）基を表す。
【００８３】
「カルボキシ」は、基−Ｃ（Ｏ）ＯＨを表す。
【００８４】
「シアノ」は、基−ＣＮを表す。
【００８５】
「シクロアルキル」は、飽和又は不飽和の環状アルキル基を表す。飽和の特定のレベルが予定されている場合には、「シクロアルカニル」又は「シクロアルケニル」という命名法が使用される。典型的なシクロアルキル基には、シクロプロパン、シクロブタン、シクロペンタン、シクロヘキサンなどから得られる基が含まれるが、これらに限定されない。ある種の実施形態において、シクロアルキル基は、Ｃ３−１０シクロアルキル、例えば、Ｃ３−６シクロアルキルなどであり得る。
【００８６】
「複素環式」、「ヘテロシクロ」又は「ヘテロシクリル」は、１つ又はそれ以上の炭素原子（及び付随する全ての水素原子）が同一又は別異のヘテロ原子及びその付随する水素原子で、適宜、独立に置換されている飽和又は不飽和の、非芳香族の環状炭化水素基を表す。炭素原子を置換するための典型的なヘテロ原子には、Ｎ、Ｏ及びＳが含まれるが、これらに限定されない。典型的なヘテロシクリル基には、エポキシド、イミダゾリジン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、ピラゾリジン、ピロリジン、キヌクリジン、テトラヒドロフラン、テトラヒドロピランなどから誘導される基が含まれるが、これらに限定されない。置換されたヘテロシクリルには、ピペリジニルＮ−オキシド、モルホリニル−Ｎ−オキシド、１−オキソ−チオモルホリニル及び１，１−ジオキソ−１−チオモルホリニルなど、１つ又はそれ以上のオキソ（＝Ｏ）又はオキシド（−Ｏ−）置換基で置換された環系も含まれる。
【００８７】
「ヘテロシクリルアルキル」は、アルキルの水素原子の１つがヘテロシクリル基への結合で置換されているアルキル基を表す。ヘテロシクリルアルキル基の例には、モルホリニルメチル、モルホリニルエチル、テトラヒドロフラニルメチル、ピペリジニルメチルなどが含まれるが、これらに限定されない。
【００８８】
「疾病」とは、あらゆる疾病、疾患、症状、症候又は兆候を表す。
【００８９】
「ハロ」又は「ハロゲン」とは、フルオロ、クロロ、ブロモ又はヨード基を表す。
【００９０】
「ハロアルキル」とは、少なくとも１つの水素がハロゲンで置換されているアルキル基を表す。従って、「ハロアルキル」という用語には、モノハロアルキル（１つのハロゲン原子で置換されたアルキル）及びポリハロアルキル（２つ又はそれ以上のハロゲン原子で置換されたアルキル）が含まれる。「ペルハロアルキル」という用語は、別段の記載がなければ、水素原子の各々がハロゲン原子で置換されているアルキル基を意味する。例えば、「ペルハロアルキル」という用語には、トリフルオロメチル、ペンタクロロエチル、１，１，１−トリフルオロ−２−ブロモ−２−クロロエチルなどが含まれるが、これらに限定されない。
【００９１】
「ヘテロアリール」は、親ヘテロ芳香環系の単一原子から１つの水素原子を除去することによって得られた一価のヘテロ芳香基を表す。ヘテロアリールは、Ｎ、Ｏ及びＳから選択される、１つ又はそれ以上の、例えば、１から４個の、又はある種の実施形態においては１から３個のヘテロ原子を含有し、残りの環原子が炭素である５員から７員の芳香族単環式環；並びにＮ、Ｏ及びＳから選択される、１つ又はそれ以上の、例えば、１から４個の、又はある種の実施形態においては１から３個のヘテロ原子を含有し、残りの環原子が炭素であり、及び少なくとも１つのヘテロ原子が芳香環中に存在する多環式環系を包含する。例えば、ヘテロアリールには、５員から７員のシクロアルキル環又は炭素環式芳香環に縮合された５員から７員のヘテロ芳香環及び５員から７員のヘテロ環式環に縮合された５員から７員のヘテロ芳香環が含まれる。環の唯一つが１つ又はそれ以上のヘテロ原子を含有する縮合された二環式のヘテロアリール環系に関しては、付着点はヘテロ芳香環又は炭素環式環であり得る。ヘテロアリール基中のＳ及びＯ原子の総数が１を超える場合には、ヘテロ原子は互いに隣接していない。ある実施形態において、ヘテロアリール基中のＳ及びＯ原子の総数は２以下である。ある実施形態において、芳香族複素環中のＳ及びＯ原子の総数は１以下である。ヘテロアリールは、上に定義されているアリールを包含せず、又は上に定義されているアリールと重複しない。典型的なヘテロアリール基には、アクリジン、アルシンドール、カルバゾール、β−カルボリン、クロマン、クロメン、シンノリン、フラン、イミダゾール、インダゾール、インドール、インドリン、インドリジン、イソベンゾフラン、イソクロメン、イソインドール、イソインドリン、イソキノリン、イソチアゾール、イソオキサゾール、ナフチリジン、オキサジアゾール、オキサゾール、ペリミジン、フェナントリジン、フェナントロリン、フェナジン、フタラジン、プテリジン、プリン、ピラン、ピラジン、ピラゾール、ピリダジン、ピリジン、ピリミジン、ピロール、ピロリジン、キナゾリン、キノリン、キノリジン、キノキサリン、テトラゾール、チアジアゾール、チアゾール、チオフェン、トリアゾール、キサンテンなどから誘導される基が含まれるが、これらに限定されない。ある種の実施形態において、ヘテロアリール基は、５員から２０員の間のヘテロアリール、例えば、５員から１０員のヘテロアリールなどであり得る。ある種の実施形態において、ヘテロアリール基は、チオフェン、ピロール、ベンゾチオフェン、ベンゾフラン、インドール、ピリジン、キノリン、イミダゾール、オキサゾール及びピラジンに由来し得るヘテロアリール基であり得る。
【００９２】
「ヘテロアリールアルキル」又は「ヘテロアラルキル」は、炭素原子、典型的な末端の炭素原子又はｓｐ３炭素原子に結合された水素原子の１つがヘテロアリール基で置換されている脂環式のアルキル基を表す。特異的なアルキル部分が意図される場合には、ヘテロアリールアルカニル、ヘテロアリールアルケニル及び／又はヘテロアリールアルキニルという命名法が使用される。ある種の実施形態において、ヘテロアリールアルキル基は、６員から３０員のヘテロアリールアルキルであり得、例えば、ヘテロアリールアルキルのアルキル部分は、１から１０員を含むことができ、ヘテロアリーアルキルのヘテロアリール部分は５から２０員を含むことができる。
【００９３】
「スルホニル」は、基−Ｓ（Ｏ）２Ｒ（Ｒは、本明細書中に定義されているアルキル、置換されたアルキル、置換されたシクロアルキル、置換されたヘテロシクリル、置換されたアリール又は置換されたヘテロアリール基である。）を表す。代表例には、メチルスルホニル、エチルスルホニル、プロピルスルホニル、ブチルスルホニルなどが含まれるが、これらに限定されない。
【００９４】
「スルファニル」は、基−ＳＲ（Ｒは、本明細書中に定義されているように場合によって置換され得る、本明細書中に定義されているアルキル、置換されたアルキル、置換されたシクロアルキル、置換されたヘテロシクリル、置換されたアリール又は置換されたヘテロアリール基である。）を表す。代表例には、メチルチオ、エチルチオ、プロピルチオ、ブチルチオなどが含まれるが、これらに限定されない。
【００９５】
「医薬として許容される」とは、動物中、より具体的にはヒト中での使用に関して一般的に認知されていることを表す。
【００９６】
「医薬として許容される塩」は、医薬として許容され、及び親化合物の所望される薬理学的活性を有する化合物の塩を表す。このような塩には、（１）塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などの無機酸とともに形成される酸付加塩若しくは酢酸、プロピオン酸、ヘキサン酸、シクロペンタンプロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、乳酸、マロン酸、コハク酸、リンゴ酸、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、３−（４−ヒドロキシベンゾイル）安息香酸、桂皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸などの有機酸とともに形成される酸付加塩、又は（２）親化合物中に存在する酸性プロトンが金属イオン（例えば、アルカリ金属イオン、アルカリ土類イオン又はアルミニウムイオン）によって置換されている場合に、若しくはエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、Ｎ−メチルグルカミン、ジシクロヘキシルアミンなどの有機塩基と配位している場合に形成される塩が含まれる。
【００９７】
「医薬として許容される賦形剤」、「医薬として許容される担体」又は「医薬として許容される佐剤」は、それぞれ、本開示の少なくとも１つの化合物が一緒に投与される賦形剤、担体又は佐剤を表す。「医薬として許容されるビヒクル」とは、本開示の少なくとも１つの化合物が一緒に投与される希釈剤、佐剤、賦形剤又は担体の何れをも表す。
【００９８】
「立体異性体」は、構成成分原子の配置が空間的に異なる異性体を表す。互いに鏡像であり、光学的に活性である立体異性体は「鏡像異性体」と称され、互いに鏡像でなく、光学的に活性でない立体異性体は「ジアステレオマー」と称される。
【００９９】
「対象」は、哺乳動物とヒトを含む。「ヒト」及び「対象」という用語は、本明細書中において互換的に使用される。
【０１００】
「置換された」とは、１つ又はそれ以上の水素原子が同じ又は異なる置換基でそれぞれ独立に置換された基を表す。典型的な置換基には、−Ｘ、−Ｒ１１、−ＯＨ、＝Ｏ、−ＯＲ１１、−ＳＲ１１、−ＳＨ、＝Ｓ、−ＮＲ１１Ｒ１２、＝ＮＲ１１、−ＣＸ３、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１、−ＯＳ（Ｏ２）ＯＨ、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒ１１、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１１）（ＯＲ１２）、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、−Ｃ（Ｓ）Ｒ１１、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１１、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｓ）ＯＲ１１、−ＮＲ１３Ｃ（Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２、−ＮＲ１３Ｃ（Ｓ）ＮＲ１１Ｒ１２、−ＮＲ１３Ｃ（ＮＲ１１）ＮＲ１１Ｒ１２、−Ｃ（ＮＲ１１）ＮＲ１１Ｒ１２、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１１Ｒ１２、−ＮＲ１３Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１、−ＮＲ１３Ｃ（Ｏ）Ｒ１１及び−Ｓ（Ｏ）Ｒ１１（各Ｘは、独立にハロであり；各Ｒ１１及びＲ１２は、独立に、水素、アルキル、置換されたアルキル、１つ又はそれ以上の−Ｏ−又は−Ｓ−基によって分断されているアルキル、アリール、置換されたアリール、アリールアルキル、置換されたアリールアルキル、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、置換されたヘテロシクリル、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、置換されたヘテロアリールアルキル、−ＮＲ１３Ｒ１４、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１３又は−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１３又はＲ１１及びＲ１２が結合している原子と一緒に、Ｒ１１及びＲ１２が場合によって、１つ又はそれ以上のヘテロシクリル、置換されたヘテロシクリル、ヘテロアリール又は置換されたヘテロアリール環を形成し；並びにＲ１３及びＲ１４が、独立に、水素、アルキル、置換されたアルキル、アリール、置換されたアリール、アリールアルキル、置換されたアリールアルキル、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、置換されたヘテロシクリル、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル若しくは置換されたヘテロアリールアルキルであり、又はＲ１３及びＲ１４が結合している窒素原子と一緒に、Ｒ１３及びＲ１４が場合によって、１つ又はそれ以上のヘテロシクリル、置換されたヘテロシクリル、ヘテロアリール又は置換されたヘテロアリール環を形成する。）が含まれるが、これらに限定されない。ある種の実施形態において、三級アミン又は芳香族窒素は、１つ又はそれ以上の酸素原子で置換されて、対応する酸化窒素を形成し得る。
【０１０１】
「治療的有効量」とは、疾病を治療するために、又は疾病若しくは疾患の臨床的症候の少なくとも１つを治療するために対象に投与される場合に、疾病、疾患又は症候のためのこのような治療に影響を及ぼすのに十分である化合物の量を表す。「治療的有効量」は、化合物、疾病、疾患及び／又は疾病若しくは疾患の症候、疾病、疾患及び／又は疾病若しくは疾患の症候の重症度、治療されるべき対象の年齢及び／又は治療すべき対象の重量に応じて変動し得る。ある所定の事例における適切な量は当業者に自明であり、又は定型的な実験操作によって決定することができる。
【０１０２】
何れかの疾病若しくは疾患を「治療する」又は何れかの疾病若しくは疾患の「治療」は、疾病、疾患又は疾病若しくは疾患の臨床症候の少なくとも１つを停止させ若しくは軽減すること、疾病、疾患又は疾病若しくは疾患の臨床症候の少なくとも１つを獲得するリスクを低減すること、疾病、疾患又は疾病若しくは疾患の臨床症候の少なくとも１つの発症を低減すること、又は疾病若しくは疾患又は疾病若しくは疾患の臨床症候の少なくとも１つを発症するリスクを低減することを表す。「治療する」又は「治療」は、物理的に（例えば、識別可能な症候の安定化）、生理的に（例えば、物理的パラメータの安定化）若しくはその両方で疾病若しくは疾患を阻害することを表し、又は対象にとって識別不能であり得る少なくとも１つの物理的パラメータを阻害することも表す。さらに、「治療する」又は「治療」とは、当該対象が未だ経験しておらず、又は疾病若しくは疾患の症候を示していない場合でさえ、疾病若しくは疾患に曝露され得る又は疾病若しくは疾患に対して素因を有し得る対象中において、疾病若しくは疾患又はこれらの少なくとも症候の開始を遅延させることを表す。
【０１０３】
ここで、本開示の実施形態を詳しく参照する。本開示のある種の実施形態が記載されるが、本開示の実施形態を記載されている実施形態に限定することを意図するものではないことが理解される。逆に、本開示の実施形態に対する参照は、添付の特許請求の範囲によって定義されている本開示の実施形態の精神及び範囲内に含められ得る代替物、改変及び均等物を包含することが意図される。
【０１０４】
一態様において、本発明は、式Ｉの少なくとも１つの化合物：
【０１０５】
【化８】
2010524942.tif 000009
医薬として許容されるその塩、その互変異性体又は互変異性体の医薬として許容される塩；若しくはこれらの溶媒和物；そのキレート、その非共有的複合体、そのプロドラッグ又は前記の何れかの混合物を提供する。
式中、Ｊ、Ｋ、Ｌ及びＭは、ＣＲ８又はＮから独立に選択され、Ｊ、Ｋ、Ｌ及びＭの０、１又は２個はＮであり；
ｎは、１から６であり；
Ｒ１及びＲ２は、Ｈ、低級アルキル、置換された低級アルキル、低級ハロアルキル若しくは置換された低級ハロアルキルから独立に選択され、又はＲ１及びＲ２は、互いに結合して、３員環から６員環若しくは置換された３員環から６員環を形成することができ；
Ｒ３及びＲ４は、Ｈ、低級アルキル、置換された低級アルキル、低級ハロアルキル若しくは置換された低級ハロアルキルから各事例において独立に選択され、又はＲ３及びＲ４は、互いに結合して、３員環から６員環若しくは置換された３員環から６員環を形成することができ；
Ｒ５は、ＯＨ、ＳＨ、ＮＨ２、低級アルキル、置換された低級アルキル、低級アルコキシ、置換された低級アルコキシ又はスルファニルから選択され；
Ｒ６は、Ｈ、ＯＨ、低級アルコキシ、ＳＨ、ＮＨ２、ＮＨＳＯ２Ｒ９又はスルホニルから選択され；
Ｒ７は、Ｈ、低級アルキル又は置換された低級アルキルから選択され；
各Ｒ８は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、アルキル、置換されたアルキル、ハロアルキル、ペルハロアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、ＮＲｂＲｃ、Ｃ（Ｏ）ＯＲ９、ＯＲ９、ＳＲ９、ＳＯ２Ｒ９、ＣＮ、ＮＯ２、アリール、置換されたアリール、アリールアルキル、置換されたアリールアルキル、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、置換されたヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリル、置換されたヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、置換されたヘテロシクリルアルキル、アルコキシカルボニル、置換されたアルコキシカルボニル又は−Ｙ−Ｒ１０から独立に選択され；
Ｙは、−Ｎ（Ｒ１１）−Ｚ−又は−Ｚ−Ｎ（Ｒ１１）−から選択され；
Ｚは、Ｃ（Ｏ）、ＳＯ２、アルキレン、置換されたアルキレン、アルケニレン、置換されたアルケニレン、アルキニレン又は置換されたアルキニレンから選択され；
Ｒ９は、Ｈ、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル又は置換されたアルキニルから選択され；
Ｒ１０は、Ｈ、ヘテロシクリル、置換されたヘテロシクリル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール又は置換されたヘテロアリールから選択され；
Ｒ１１は、Ｈ、低級アルキル又は置換された低級アルキルから選択され；並びに
Ｒｂ及びＲｃは、Ｈ、低級アルキル、置換された低級アルキル、低級ハロアルキル若しくは置換された低級ハロアルキルから独立に選択され、又はＲｄ及びＲｅは、互いに結合して、３員環から６員環若しくは置換された３員環から６員環を形成することができる。
【０１０６】
式Ｉの化合物の幾つかの実施形態において、Ｊ、Ｋ、Ｌ及びＭの各々はＣＲ８である。他の実施形態において、Ｊ、Ｋ、Ｌ及びＭの１つはＮであり、並びにＪ、Ｋ、Ｌ及びＭの他の３つはＣＲ８である。幾つかのこのような実施形態において、ＪはＮであり、並びにＫ、Ｌ及びＭはＣＲ８である。他のこのような実施形態において、ＫはＮであり、並びにＪ、Ｌ及びＭはＣＲ８である。さらに別のこのような実施形態において、ＬはＮであり、並びにＪ、Ｋ及びＭはＣＲ８である。さらに別のこのような実施形態において、ＭはＮであり、並びにＪ、Ｋ及びＬはＣＲ８である。
【０１０７】
式Ｉの化合物の幾つかの実施形態において、Ｒ５はＯＨである。
【０１０８】
式Ｉの化合物の幾つかの実施形態において、Ｒ６はＯＨ、ＳＨ、ＮＨ２、ＮＨＳＯ２Ｒ９又はスルホニルから選択される。幾つかのこのような実施形態において、Ｒ６はＯＨである。
【０１０９】
式Ｉの化合物の幾つかの実施形態において、Ｒ８の少なくとも１つの例は、置換された若しくは置換されていないアリール、置換された若しくは置換されていないヘテロアリール、置換された若しくは置換されていないシクロアルキル又は置換された若しくは置換されていないヘテロシクリル基である。幾つかのこのような実施形態において、Ｒ８の少なくとも１つの例はヘテロシクリル基である。他のこのような実施形態において、Ｒ８の少なくとも１つの例はヘテロアリール基である。他のこのような実施形態において、Ｒ８の少なくとも１つの例はフェニル又は置換されたフェニル基である。
【０１１０】
式Ｉの化合物の幾つかの実施形態において、Ｒ８の少なくとも１つの例は、ハロ又は少なくとも１つのハロで置換された部分から独立に選択される。例えば、幾つかの実施形態において、Ｒ８の少なくとも１つの例は、ハロアルキルである。幾つかの実施形態において、Ｒ８の少なくとも１つの例はペルハロアルキルである。幾つかのこのような実施形態において、ペルハロアルキルは、ＣＦ３などのペルフルオロアルキル基である。
【０１１１】
式Ｉの化合物の幾つかの実施形態において、Ｒ８の少なくとも１つの例は、実施例の化合物の何れかにおいてＲ８に対応する基の何れかである。
【０１１２】
式Ｉの化合物の幾つかの実施形態において、ｎは１である。
【０１１３】
式Ｉの化合物の幾つかの実施形態において、Ｒ１及びＲ２は、Ｈ及び低級アルキルから独立に選択される。幾つかのこのような実施形態において、Ｒ１及びＲ２の何れもがＨである。
【０１１４】
式Ｉの化合物の幾つかの実施形態において、Ｒ３及びＲ４は、Ｈ及び低級アルキルから独立に選択される。幾つかのこのような実施形態において、Ｒ３及びＲ４は、Ｈ及びメチルから独立に選択される。幾つかのこのような実施形態において、Ｒ３及びＲ４の何れもがＨである。
【０１１５】
式Ｉの化合物の幾つかの実施形態において、ｎは１であり；Ｒ１はＨであり；Ｒ２はＨであり；Ｒ３はＨであり；Ｒ４はＨであり；Ｒ５はＯＨであり；Ｒ６はＯＨであり又はこれらの塩若しくはプロドラッグである。
【０１１６】
式Ｉの化合物の幾つかの実施形態において、Ｒ７はＨである。他の実施形態において、Ｒ７は低級アルキル基である。幾つかのこのような実施形態において、Ｒ７はメチルである。さらに別の実施形態において、Ｒ７はアリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリルアルキル、シクロアルキルアルキル、ヒドロキシアルキル及びアルコキシアルキル又はハロアルキルから選択される置換された低級アルキルである。
【０１１７】
一実施形態において、式Ｉの化合物は本明細書中に記載されている実施例の化合物の何れか１つである。
【０１１８】
幾つかの実施形態において、式Ｉの化合物は式ＩＡを有しており、変数Ｒ５、Ｒ７及び各Ｒ８は上に記載されている態様及び実施形態の何れかに提供されている定義を有する。
【０１１９】
【化９】
2010524942.tif 000010
【０１２０】
幾つかの実施形態において、式Ｉの化合物は式ＩＢを有しており、変数Ｒ５、Ｒ７及び各Ｒ８は上に記載されている態様及び実施形態の何れかに提供されている定義を有する。
【０１２１】
【化１０】
2010524942.tif 000011
【０１２２】
幾つかの実施形態において、式Ｉの化合物は式ＩＣを有しており、変数Ｒ５、Ｒ７及び各Ｒ８は上に記載されている態様及び実施形態の何れかに提供されている定義を有する。
【０１２３】
【化１１】
2010524942.tif 000012
【０１２４】
幾つかの実施形態において、式Ｉの化合物は式ＩＤを有しており、変数Ｒ５、Ｒ７及び各Ｒ８は上に記載されている態様及び実施形態の何れかに提供されている定義を有する。
【０１２５】
【化１２】
2010524942.tif 000013
【０１２６】
幾つかの実施形態において、式Ｉの化合物は式ＩＥを有しており、変数Ｒ５、Ｒ７及び各Ｒ８は上に記載されている態様及び実施形態の何れかに提供されている定義を有する。
【０１２７】
【化１３】
2010524942.tif 000014
【０１２８】
本開示の化合物は、１つ又はそれ以上のキラル中心を含有し得る。このような化合物は、純粋な立体異性体として、すなわち、各鏡像異性体若しくはジアステレオマーとして、又は立体異性体が濃縮された混合物として調製又は単離され得る。全てのこのような立体異性体及びその濃縮された混合物が本開示の範囲に含まれる。純粋な立体異性体及び濃縮されたその混合物は、例えば、本分野において周知の光学的に活性な原材料又は立体選択的試薬を用いて調製することができる。あるいは、このような化合物のラセミ混合物は、例えば、キラルカラムクロマトグラフィー、キラル分割剤などを用いて分離することができる。
【０１２９】
幾つかの実施形態において、少なくとも１つの化合物は塩である。このような塩は無水物であり得、又は水和物として水の１つ若しくはそれ以上の分子と会合し得る。
【０１３０】
幾つかの実施形態において、化合物はプロドラッグである。幾つかのこのような実施形態において、化合物は、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル又はヘキシルエステルなどの（Ｃ１−Ｃ６）アルキルエステルである。
【０１３１】
他の実施形態において、化合物は、以下に列記されている化合物の何れか１つ若しくは全部から選択され、又はその塩、その互変異性体、又は互変異性体の塩である。
【０１３２】
４−（４−ヒドロキシ−６−ヨード−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（８−ブロモ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−７−（トリフルオロメチル）−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（７−ブロモ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（１−ベンジル−７，８−ジフルオロ−４−ヒドロキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（６−ブロモ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（５−ブロモ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（５，８−ジフルオロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（７，８−ジフルオロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；又は
４−（３−（３−カルボキシプロパノイル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−７−イル）安息香酸。
【０１３３】
他の実施形態において、化合物は、以下に列記されている化合物の何れか１つ若しくは全部から選択され、又はその塩、その互変異性体、又は互変異性体の塩である。
【０１３４】
４−（６−シクロヘキシル−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−フェニル−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（６−（４−フルオロフェニル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（６−シクロペンチル−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−（テトラヒドロフラン−２−イル）−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（６−（２−フルオロフェニル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（６−（３−フルオロフェニル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−６−ヨード−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（７，８−ジフルオロ−４−ヒドロキシ−６−ヨード−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−フェニル−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（６−（４−フルオロフェニル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（６−（３−フルオロフェニル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（６−（２−フルオロフェニル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（３−（３−カルボキシプロパノイル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−６−イル）安息香酸；
４−（６−（３−カルボキシプロパノイル）−５−ヒドロキシ−８−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）安息香酸；
６−（３−カルボキシプロパノイル）−５−ヒドロキシ−８−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−カルボン酸；
３−（３−カルボキシプロパノイル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−６−カルボン酸；
４−（６−シクロプロピルー７，８−ジフルオロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（７，８−ジフルオロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−（テトラヒドロフラン−２−イル）−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（８−クロロー７−フルオロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（７，８−ジクロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
３−（３−カルボキシプロパノイル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−７−カルボン酸；
４−（７，８−ジフルオロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−７−（トリフルオロメチル）−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−７−フェニル−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
３−（３−カルボキシプロパノイル）−７，８−ジフルオロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−６−カルボン酸；
４−（７，８−ジフルオロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−フェニル−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−フェニル−７−（トリフルオロメチル）−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−７−（チオフェン−２−イル）−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−７−（チオフェン−３−イル）−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−（チオフェン−２−イル）−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−（チオフェン−３−イル）−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（６−シクロプロピル−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−７−（トリフルオロメチル）−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（１ベンジル−７−ブロモ−４−ヒドロキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（１−ベンジル−４−ヒドロキシ−２−オキソ−７−（トリフルオロメチル）−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（１−ベンジル−４−ヒドロキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（１−ベンジル−４−ヒドロキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−（トリフルオロメチル）−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（７−ブロモ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，５−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，５−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−７−（チオフェン−２−イル）−１，２−ジヒドロ−１，５−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−７−（チオフェン−３−イル）−１，２−ジヒドロ−１，５−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，７−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−フェニル−１，２−ジヒドロ−１，７−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸；
３−（３−カルボキシプロパノイル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，７−ナフチリジン−６−カルボン酸；又は
４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸。
【０１３５】
幾つかの実施形態において、前記化合物は、ＰＨＤ２ＩＣ５０値によって除されたＣＰＨ１ＩＣ５０値が５より大きい、８より大きい、１０より大きい、１５より大きい、２０より大きい又はさらに大きい化合物である。幾つかのこのような実施形態において、ＰＨＤ２ＩＣ５０値によって除されたＣＰＨ１ＩＣ５０値は１０より大きい。
【０１３６】
医薬として許容される少なくとも１つの担体、賦形剤又は希釈剤及び本明細書中に記載されている実施形態の何れかの少なくとも１つの化合物の治療的有効量を含む医薬組成物も本明細書において提供される。このような実施形態において、少なくとも１つの化合物が、虚血、貧血、創傷治癒、自己移植、同種移植、異種移植、全身性高血圧、サラセミア、糖尿病、癌又は炎症性疾患から選択される少なくとも１つの疾患の治療に対して有効な量で存在する。
【０１３７】
赤血球新生刺激剤又は化学療法剤などの少なくとも１つのさらなる化合物と組み合わせて、医薬として許容される少なくとも１つの担体及び本明細書中に記載されている実施形態の何れかの少なくとも１つの化合物の治療的有効量を含む医薬組成物がさらに提供される。
【０１３８】
本明細書中に記載されている実施形態の何れかの少なくとも１つの化合物を対象に投与することによって対象中のＨＩＦレベル又は活性を増加又は安定化させる方法がさらに提供される。
【０１３９】
本明細書中に記載されている実施形態の何れかの少なくとも１つの化合物を対象に投与することを含む、ＨＩＦ活性を調節することが望まれている症状を治療する方法がさらに提供される。幾つかのこのような実施形態において、前記症状は、虚血、貧血、創傷治癒、自己移植、同種移植、異種移植、全身性高血圧、サラセミア、糖尿病、癌又は炎症性疾患の少なくとも１つから選択される。
【０１４０】
本明細書中に記載されている実施形態の何れかの少なくとも１つの化合物を対象に投与することを含む、対象中の低酸素又は虚血関連疾患を治療する方法も提供される。
【０１４１】
本明細書中に記載されている実施形態の何れかの少なくとも１つの化合物を対象に投与することを含む、対象中の貧血を治療する方法も提供される。
【０１４２】
本明細書中に記載されている実施形態の何れかの少なくとも１つの化合物と細胞を接触させることを含む、細胞中のＨＩＦの量を調節する方法がさらに提供される。
【０１４３】
本発明の化合物は、対象中の赤血球新生を刺激するための医薬を調製するために、又は対象中の赤血球新生を刺激するための方法においても使用され得る。このような方法及び医薬は、本発明の実施形態の何れかの化合物を使用する。このような方法において、実施形態の何れかの化合物は、治療的有効量で、ヒト対象などの対象へ典型的に投与される。従って、幾つかの実施形態において、本明細書に記載されている実施形態の何れかの化合物が対象の血液中のエリスロポエチンのレベルを増加させるための方法において使用される。このような方法において、実施形態の何れの化合物も、対象の血液中のエリスロポエチンの量を増加させるのに有効な量で対象に投与される。
【０１４４】
本明細書中に記載されている実施形態の何れかの少なくとも１つの化合物を対象に投与することを含む、対象中のヘモグロビンＦの量を増加させる方法がさらに提供される。
【０１４５】
本明細書中に記載されている実施形態の何れかの少なくとも１つの化合物を対象に投与することを含む、対象中の血管新生を調節する方法も提供される。
【０１４６】
本明細書中に記載されている実施形態の何れかの少なくとも１つの化合物の治療的有効量を患者に投与することを含む、このような治療を必要としている患者中の少なくとも１つの疾病を治療する方法がさらに提供される。幾つかのこのような実施形態において、前記少なくとも１つの疾病は、虚血、貧血、創傷治癒、自己移植、同種移植、異種移植、全身性高血圧、サラセミア、糖尿病、癌又は炎症性疾患から選択される。
【０１４７】
本明細書中に記載されている実施形態の何れかの少なくとも１つの化合物を対象に投与することを含む、対象中のＨＩＦ水酸化を阻害する方法も提供される。
【０１４８】
幾つかの実施形態において、化合物のＨＩＦＰＨＤ阻害活性ＩＣ５０値は４０μＭ又はそれ以下である。他の実施形態において、化合物のＨＩＦＰＨＤ阻害活性ＩＣ５０値は１０μＭ又はそれ以下である。さらに別の実施形態において、化合物のＨＩＦＰＨＤ阻害活性ＩＣ５０値は１００ｎＭ又はそれ以下であるのに対して、他の実施形態において、化合物のＨＩＦＰＨＤ阻害活性ＩＣ５０値は１０ｎＭ又はそれ以下である。
【０１４９】
幾つかの実施形態において、前記実施形態の何れかの少なくとも１つの化合物は、医薬の調製において使用される。
【０１５０】
幾つかのこのような実施形態において、前記実施形態の何れかの少なくとも１つの化合物は、対象中のＨＩＦレベル又は活性を増加又は安定化させるための医薬の調製において使用される。
【０１５１】
幾つかのこのような実施形態において、前記実施形態の何れかの少なくとも１つの化合物は、ＨＩＦ活性を調節することが望まれる症状を治療するための医薬の調製において使用される。幾つかのこのような実施形態において、前記症状は、虚血、貧血、創傷治癒、自己移植、同種移植、異種移植、全身性高血圧、サラセミア、糖尿病、癌又は炎症性疾患の少なくとも１つから選択される。
【０１５２】
幾つかの実施形態において、対象中の低酸素又は虚血関連疾患を治療するための医薬の調製において、前記実施形態の何れかの少なくとも１つの化合物が使用される。
【０１５３】
幾つかの実施形態において、細胞中のＨＩＦの量を調節するための医薬の調製において、前記実施形態の何れかの少なくとも１つの化合物が使用される。幾つかの実施形態において、細胞中のＨＩＦの量を調節するために、前記実施形態の何れかの少なくとも１つの化合物が使用される。
【０１５４】
幾つかの実施形態において、対象中の血管新生を調節するための医薬の調製において、前記実施形態の何れかの少なくとも１つの化合物が使用される。
【０１５５】
幾つかの実施形態において、対象中のＨＩＦ水酸化を阻害するための医薬の調製において、前記実施形態の何れかの少なくとも１つの化合物が使用される。
【０１５６】
幾つかの実施形態において、貧血を治療するための医薬の調製において、前記実施形態の何れかの少なくとも１つの化合物が使用される。
【０１５７】
本明細書中で使用される場合、「組成物」という用語は、指定成分（指示される場合には、指定量で）を含む生成物ならびに指定量の指定成分の組み合わせから直接的又は間接的に得られるあらゆる生成物を包含するものとする。「医薬的に許容可能な」とは、担体、賦形剤又は希釈剤が、製剤のその他の成分に適合し、その受容者に対して無害であることを意味する。
【０１５８】
組成物製剤は、（本明細書では活性成分と呼ばれる。）本発明の化合物の１つ又は以上の薬物動態特性（例えば、経口バイオアベイラビリティー、膜透過性）を改善し得る。
【０１５９】
本発明の化合物の投与のための医薬組成物は、好都合には単位投与剤形で与えることができ、当分野で周知の方法の何れかにより調製することができる。全ての方法は、１種類又はそれ以上の副成分を構成する担体と活性成分を一緒にさせる段階を含む。一般に、医薬組成物は、液体担体又は微粉固形担体又はその両方と活性成分を均一かつ緊密に会合させ、次いで、必要に応じて、生成物を所望の製剤に成形することによって調製される。医薬組成物において、疾患の過程又は状態に所望の効果をもたらすのに十分な量の目的活性化合物が含まれる。
【０１６０】
活性成分を含有する医薬組成物は、経口用途に適切な形態、例えば、錠剤、トローチ剤、舐剤、水性もしくは油性懸濁液剤、分散性散剤もしくは顆粒剤、乳剤、硬もしくは軟カプセル剤又はシロップ剤もしくはエリキシル剤であり得る。経口用組成物は、医薬組成物の製造分野で公知である何れかの方法によって調製され得る。このような組成物は、医薬的に優れた、口当たりの良い製剤を提供するために、甘味料、香味料、着色剤及び保存料から選択される１つ又はそれ以上の薬剤を含有し得る。錠剤は、錠剤の製造に適切である他の無毒性の医薬的に許容可能な賦形剤と混合された活性成分を含有する。これらの賦形剤は、例えば、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、ラクトース、リン酸カルシウム又はリン酸ナトリウムなどの不活性希釈剤；顆粒化剤及び崩壊剤、例えば、コーンスターチ又はアルギン酸；結合剤、例えばデンプン、ゼラチン又はアラビアゴム、及び潤滑剤、例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸又はタルクであり得る。錠剤は、被覆されず、又は、消化管内での崩壊及び吸収を遅らせ、それによって長時間の持続作用を得るために、公知の技術によって被覆され得る。例えば、モノステアリン酸グリセリン又はジステアリン酸グリセリンなどの時間遅延物質が使用され得る。制御放出のための浸透圧治療錠剤を形成させるために、米国特許第４，２５６，１０８号、同４，１６０，４５２号及び同４，２６５，８７４号に記載されている技術によって錠剤を被覆することもできる。
【０１６１】
経口用製剤は、活性成分が不活性固形希釈剤、例えば炭酸カルシウム、リン酸カルシウム又はカオリンと混合される硬ゼラチンカプセルとして与えることもでき、又は活性成分が水若しくは油媒体、例えば、ピーナツ油、流動パラフィン若しくはオリーブ油と混合される軟ゼラチンカプセルとして与えることもできる。
【０１６２】
水性懸濁液剤は、水性懸濁液剤の製造に適切な賦形剤と混合された活性物質を含有する。このような賦形剤は、懸濁剤、例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガカントゴム及びアラビアゴムであり、分散剤又は湿潤剤は、天然ホスファチド、例えばレシチン、又はアルキレンオキシドの脂肪酸との縮合生成物、例えば、ポリオキシエチレンステアラート、又はエチレンオキシドの長鎖脂肪族アルコールとの縮合生成物、例えば、ヘプタデカエチレンオキシセタノール、又は脂肪酸及びヘキシトールから誘導される部分エステルとエチレンオキシドの縮合生成物、例えばポリオキシエチレンソルビトールモノオレアートなど、又は脂肪酸及び無水ヘキシトールから誘導される部分エステルとエチレンオキシドの縮合生成物、例えば、ポリエチレンソルビタンモノオレアートであり得る。水性懸濁液は、１つ又はそれ以上の保存料、例えば、エチル又はｎ−プロピル、ｐ−ヒドロキシベンゾアート、１つ又はそれ以上の着色剤、１つ又はそれ以上の香味料及び１つ又はそれ以上の甘味料（スクロース又はサッカリンなど）も含有し得る。
【０１６３】
油性懸濁液は、植物油中、例えば、落花生油、オリーブ油、ゴマ油もしくはココナツ油中で、又は流動パラフィンなどの鉱物油中で、活性成分を懸濁することによって処方し得る。油性懸濁液は、増粘剤、例えば、蜜ろう、固形パラフィン又はセチルアルコールを含有し得る。口当たりの良い経口調製物を提供するために、上述のものなどの甘味料及び香味料を添加し得る。これらの組成物は、アスコルビン酸などの抗酸化剤の添加によって保存し得る。
【０１６４】
水を添加することによって水性懸濁液の調製に適切な分散性散剤及び顆粒剤は、分散剤又は湿潤剤、懸濁剤及び１つ又はそれ以上の保存料と混合して活性成分を提供する。適切な分散剤又は湿潤剤及び懸濁剤は、既に上記で述べられたものによって例示される。さらなる賦形剤、例えば、甘味料、香味料及び着色剤も存在し得る。
【０１６５】
本発明の医薬組成物は、水中油型乳剤の形とすることもできる。油相は、植物油、例えばオリーブ油もしくは落花生油、又は鉱物油、例えば流動パラフィン、又はこれらの混合物であり得る。適切な乳化剤は、天然ゴム、例えば、アラビアゴム又はトラガカントゴム、天然ホスファチド、例えば、ダイズ、レシチン及び脂肪酸と無水ヘキシトールとから誘導されるエステル又は部分エステル、例えば、ソルビタンモノオレアート、及び前記部分エステルとエチレンオキシドの縮合生成物、例えば、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレアートであり得る。乳剤は、甘味料及び香味料も含有し得る。
【０１６６】
シロップ剤及びエリキシル剤は、甘味料、例えば、グリセロール、プロピレングリコール、ソルビトール又はスクロースとともに処方し得る。このような製剤は、粘滑薬、保存料及び香味料及び着色剤も含有し得る。
【０１６７】
医薬組成物は、滅菌注射用水性又は油性懸濁液の形態であり得る。この懸濁液は、上述の適切な分散剤又は湿潤剤及び懸濁剤を用いて公知技術によって処方することができる。滅菌注射調製物は、無毒の非経口的に許容可能な希釈剤又は溶媒中での滅菌注射用溶液又は懸濁液、例えば１，３−ブタンジオール中の溶液とすることもできる。使用され得る許容可能なビヒクル及び溶媒の中でも、水、リンゲル液及び等張性塩化ナトリウム溶液が挙げられる。さらに、溶媒又は懸濁媒体として、滅菌固定油が慣用的に使用される。この目的のために、合成モノ又はジグリセリドを含めて、あらゆる無刺激性固定油を使用し得る。さらに、オレイン酸などの脂肪酸も注射剤の調製に使用することができる。
【０１６８】
医薬組成物は、薬物の直腸投与のための坐剤の形態でも投与され得る。常温では固体であるが直腸温度では液体であり、したがって直腸内で溶融して薬物を放出する適切な非刺激性賦形剤と薬物を混合することによって、これらの組成物を調製することができる。このような材料には、例えば、ココアバター及びポリエチレングリコールが含まれる。
【０１６９】
局所使用のために、本発明の化合物を含有する、クリーム、軟膏、ゼリー、溶液又は懸濁液などを使用する。本明細書中で使用される場合、局所適用は、洗口剤及び含嗽剤の使用も含むものとする。
【０１７０】
本発明の化合物は、スキーム１及びスキーム２において以下に示されている、並びに実施例中でより完全に記載されている一般的な合成経路を用いて調製することができる。
【０１７１】
【化１４】
2010524942.tif 000015
【０１７２】
本発明の化合物を調製するために使用される合成中間体は、スキーム３に示されている、及び実施例中でより完全に記載されている方法によって合成することができる。
【０１７３】
【化１５】
2010524942.tif 000016
【０１７４】
以下の実施例を参照することによって本発明をさらに記載するが、以下の実施例は、特許請求の範囲に記載されている発明を例示することを意図するものであって、いかなる意味においても、特許請求の範囲に記載されている発明を限定することを意図するものではない。
【実施例】
【０１７５】
別段の記載がなければ、全ての化合物は、商業的に入手し、又は本明細書中に記載されている方法及び実験手順を用いて調製された。様々な試薬及び溶媒を表すために、以下の略号を使用する。
【０１７６】
AcOH  酢酸
DCM ジクロロメタン
DMF N,N-ジメチルホルムアミド
DMSO  ジメチルスルホキシド
EtOAc 酢酸エチル
EtOH エタノール
MeI ヨウ化メチル
MeOH  メタノール
TEA  トリエチルアミン
TFA  トリフルオロ酢酸
THF  テトラヒドロフラン
TR-FRET  時間分解蛍光共鳴エネルギー転移
【０１７７】
方法１．エチル７，８−ジフルオロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボキシラートの調製
【０１７８】
【化１６】
2010524942.tif 000017
【０１７９】
（ａ）メチル３，４−ジフルオロ−２−（メチルアミノ）ベンゾアート。メチル２，３，４−トリフルオロベンゾアート（Ｏａｋｗｏｏｄ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，Ｗｅｓｔ  Ｃｏｌｕｍｂｉａ，ＳＣから入手可能）（５．００ｇ、２６ｍｍｏｌ）及び炭酸カリウム（４．０ｇ、２９ｍｍｏｌ）の混合物を、ＴＨＦ中の２Ｍメチルアミン（１７ｍＬ、３４ｍｍｏｌ）で処理、２４°Ｃで１８時間撹拌した。ＥｔＯＡｃで混合物を希釈し、水で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、蒸発させた。フラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって粗製生成物を精製して表題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：計算値；２０１．２：実測値；２０２．１。１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δｐｐｍ７．５４−７．６７（１Ｈ，ｍ），６．２６−６．４３（１Ｈ，ｍ），３．９４（１Ｈ，ｓ），３．８４（３Ｈ，ｓ），３．１５（３Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．８，５．５Ｈｚ）。
【０１８０】
（ｂ）メチル２−（３−エトキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）−３，４−ジフルオロベンゾアート。エチル３−クロロ−３−オキソプロパノアート（０．９０ｍＬ、７．１１ｍｍｏｌ）を滴加して、０℃で、ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の、メチル３，４−ジフルオロ−２−（メチルアミノ）ベンゾアート（１．１０ｇ、５．４７ｍｍｏｌ）及び炭酸カリウム（０．９８ｇ、７．１ｍｍｏｌ）の懸濁液を処理した。混合物を２４℃まで加温し、３時間撹拌し、水で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、蒸発させた。フラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）による精製によって、表題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：計算値；３１５．３：実測値；３１６．１．１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δｐｐｍ７．８１−７．９１（１Ｈ，ｍ），７．２８−７．３７（１Ｈ，ｍ），４．１２（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝ＩＡＨｚ），３．９２（３Ｈ，ｓ），３．２３（３Ｈ，ｓ），３．１０（２Ｈ，ｓ），１．２３（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）。
【０１８１】
（ｃ）エチル７，８−ジフルオロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボキシラート。ＥｔＯＨ（３ｍＬ）中のメチル２−（３−エトキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）−３，４−ジフルオロベンゾアート（１．２６ｇ、４．００ｍｍｏｌ）の溶液を、ＥｔＯＨ中のＮａＯＥｔ（８ｍＬ、８ｍｍｏｌ）の溶液で、０から１０℃で処理した。添加後、白色の沈殿が形成し、ろ過によってこれを集め、Ｅｔ２Ｏで濯ぎ、真空中で乾燥させて、表題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：計算値；２８３．２：実測値；２８４．０。１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ７．７７−７．８５（１Ｈ，ｍ），６．９４−７．０４（１Ｈ，ｍ），４．０５（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），３．５５（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），１．１９（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ）。
【０１８２】
方法２．メチル４−ヒドロキシ−６−ヨード−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−カルボキシラートの調製
【０１８３】
【化１７】
2010524942.tif 000018
【０１８４】
（ａ）メチル２−ヒドロキシニコチナート。ＭｅＯＨ（１０００ｍＬ）中の２−ヒドロキシニコチン酸（Ａｌｄｒｉｃｈから入手可能）（１００ｇ、０．７２ｍｏｌ）の溶液に、氷水槽を用いて０℃で冷却しながら、塩化チオニル（１５７ｍＬ）を滴加した。添加後、室温で一晩、混合物を撹拌した。反応混合物を減圧下で蒸発させ、残留物を水（５００ｍＬ）で希釈した。ＮａＨＣＯ３の飽和水溶液で、ｐＨ＝８から９になるように、水溶液のｐＨを調整した。ＣＨＣｌ３（５×３００ｍＬ）で混合物を抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、ろ過した。減圧下でろ液を蒸発させ、真空中で残留物を乾燥させて、白色固体として表題化合物を得た。
【０１８５】
（ｂ）メチル２−ヒドロキシ−５−ヨードニコチナート。無水ＤＣＭ（２．５Ｌ）中の、メチル２−ヒドロキシニコチナート（１００ｇ、０．６５ｍｏｌ）及びＮ−ヨードスクシンイミド（１９２ｇ、０．８５ｍｏｌ）の溶液を暗所で４８時間還流加熱し、減圧下で混合物を５００ｍＬまで濃縮した。沈殿した固体をろ過によって集め、冷ＤＣＭの少量で洗浄し、真空中で乾燥させて、淡黄色の固体として表題化合物を得た。
【０１８６】
（ｃ）メチル２−クロロ−５−ヨードニコチナート。無水ＤＣＭ（９００ｍＬ）中の、無水ＤＭＦ（２１．４５ｍＬ）及び蒸留されたＰＯＣｌ３（２６．１３ｍＬ）の溶液に、メチル２−ヒドロキシ−５−ヨードニコチナート（３９ｇ、０．１４ｍｏｌ）を一度に添加した。Ｎ２雰囲気下において２８時間、室温で混合物を撹拌した。減圧下で溶媒を除去し、Ｈ２Ｏで残留物を希釈した。ＮａＨＣＯ３の飽和水溶液で、ｐＨ＝８から９になるように水溶液のｐＨを調整した。混合物をＤＣＭ（５×）で抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、ろ過した。減圧下でろ液を蒸発させ、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（１：１０ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって、油状残留物を精製して、白色固体として表題化合物を得た。
【０１８７】
（ｄ）メチル５−ヨード−２−（メチルアミノ）ニコチナート及びエチル５−ヨード−２−（メチルアミノ）ニコチナート。ＥｔＯＨ（１００ｍＬ）中の、メチル２−クロロ−５−ヨードニコチナート（１０ｇ、３３．６ｍｍｏｌ）及びＥｔＯＨ（１４．３ｍＬ、４６０ｍｍｏｌ）中のＭｅＮＨ２の３０％溶液の混合物を、６５℃で４時間加熱した。反応混合物を室温まで到達させ、減圧下で蒸発させた。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（１：１０ＥｔＯＡｃ／石油エーテル）によって残留物を精製して、混合物として表題化合物を得た。
【０１８８】
（ｅ）６−ヨード−１−メチル−１Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］［１，３］オキサジン−２，４−ジオン。無水１，２−ジクロロエタン（１０００ｍＬ）中の、メチル５−ヨード−２−（メチルアミノ）ニコチナート及びエチル５−ヨード−２−（メチルアミノ）ニコチナート（１０．５ｇ）及び１，４−ジオキサン（１０ｍＬ）の混合物に、１時間にわたって、８０℃で撹拌及び加熱しながら、トリクロロメチルクロロホルマート（１５．４３ｍＬ、１２８．４５ｍｍｏｌ）を滴加した。添加後、反応混合物を８０°Ｃで４時間撹拌し、室温に到達させた。溶媒を蒸発させ、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（１００ｍＬ）の１：１混合物で残留物を洗浄し、真空中で乾燥させて、表題化合物を得た。
【０１８９】
（ｆ）メチル４−ヒドロキシ−６−ヨード−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−カルボキシラート。無水Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（５０ｍＬ）中のマロン酸ジメチル（２５．５ｇ、１９６ｍｍｏｌ）の溶液に、撹拌し、氷槽で冷却しながら、１時間にわたって、ＮａＨ（鉱物油中の６０％懸濁液、０．９７ｇ、２３ｍｍｏｌ）を少しずつ添加した。水素の発生が停止した時点で、６−ヨード−１−メチル−１Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］［１，３］オキサジン−２，４−ジオン（５．０ｇ、１９．５ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物の温度を１６０℃までゆっくり上昇させ、同じ温度に３．５時間保った（二酸化炭素が発生した。）。混合物を室温に到達させ、氷水中に注ぎ、ｐＨ＝２から３になるように酸性化した。沈殿した結晶をろ過によって集め、ＭｅＯＨで洗浄し、真空中で乾燥させて、表題化合物を得た。
【０１９０】
方法３Ａ．４−（７，８−ジフルオロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸の調製
【０１９１】
【化１８】
2010524942.tif 000019
【０１９２】
（ａ）７，８−ジフルオロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン。ＴＨＦ（５ｍＬ）中のエチル７，８−ジフルオロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボキシラート（方法１）（０．５００ｇ、１．７７ｍｍｏｌ）の溶液に、濃ＨＣｌ水溶液（３６．５−３７．５％、５ｍＬ）を添加した。混合物を８０°Ｃで１８時間加熱した。減圧下で溶媒を除去し、水及びジエチルエーテルで残留物を濯いだ。得られた固体を真空中、５０℃で乾燥させて、７，８−ジフルオロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オンを８５％の収率で得た。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯｄ６）δｐｐｍ１１．７０（１Ｈ，ｓ），７．７４−７．７１（１Ｈ，ｍ），７．３０−７．２５（１Ｈ，ｍ），５．８８（１Ｈ，ｓ），３．７０（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ）。ＭＳｍ／ｚ：２１０（Ｍ−）。
【０１９３】
（ｂ）４−（７，８−ジフルオロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル−４−オキソ酪酸。２４℃で、塩化スクシニル（０．０２９ｍＬ、０．２６ｍｍｏｌ）を、１，２−ジクロロエタン（３ｍＬ）中の７，８−ジフルオロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（０．０４５ｇ、０．２１ｍｍｏｌ）の黄色懸濁液に、注射器によって添加した。混合物を８０℃まで加熱した。混合物を８０℃まで加熱した。１０分後、さらなる塩化スクシニル（０．０２９ｍＬ、０．２６ｍｍｏｌ）で懸濁液を処理し、撹拌した。１０分後、ＡｌＣｌ３（０．０３４ｇ、０．２６ｍｍｏｌ）で混合物を処理し、８０℃に２日間保った。ＮａＯＨ水溶液（５Ｎ、２ｍＬ）で混合物を処理し、層を分離した。１ＭＨＣｌ水溶液を用いて、ｐＨ＝１になるように水相を酸性化した。生じた沈殿をろ過によって単離し、水で濯ぎ、真空中において５０℃で乾燥させて、表題化合物を３３％の収率で得た。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ１２．１７（１Ｈ，ｂｒ．ｓ．），８．０４−８．０１（１Ｈ，ｍ），７．４４−７．４１（１Ｈ，ｍ），３．７４（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ），３．４４（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ），２．５９（２ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ）。ＭＳｍ／ｚ：３１０（Ｍ−）。
【０１９４】
方法３Ｂ．４−（７，８−ジフルオロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸の調製
【０１９５】
【化１９】
2010524942.tif 000020
【０１９６】
（ａ）３−（３−（１，３−ジオキサン−２−イル）プロパノイル）−７，８−ジフルオロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン。ＴＨＦ４０ｍＬ中のエチル７，８−ジフルオロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボキシラート（方法１）（０．８５ｇ、３ｍｍｏｌ）の混合物を室温で撹拌し、水素化ナトリウム（０．４ｍＬ、１５ｍｍｏｌ）で処理し、３０分間撹拌した。２−［２−（１，３−ジオキサニル）］エチルマグネシウムブロミド（７ｍＬ、３ｍｍｏｌ）を滴加して、混合物を処理した。混合物を室温で２時間撹拌した。水（１０ｍＬ）で混合物を冷却し、ｐＨ＝５になるように２ＮＨＣｌで中和した。ＥｔＯＡｃ（３×５０ｍＬ）で混合物を抽出した。合わせた有機層を飽和ＮＨ４Ｃｌ（２０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濃縮した。２０から３０％のＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶出するカラムクロマトグラフィーによって、得られた生成物を精製して、白色固体として、生成物０．８３ｇを得た。ＭＳｍ／ｅ：３５４（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１９７】
（ｂ）４−（７，８−ジフルオロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソブタナール。ＡｃＯＨ／水（４：１）２５ｍＬ中の３−（３−（１，３−ジオキサン−２−イル）プロパノイル）−７，８−ジフルオロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（０．８３ｇ、２．３ｍｍｏｌ）の混合物を８２°Ｃまで加温し、１時間撹拌した。次いで、９７℃で混合物を加熱し、３０分間撹拌した。水２０ｍＬで反応混合物を希釈し、室温まで冷却し、水２００ｍＬで希釈した。沈殿をろ過し、Ｈ２Ｏ２０ｍＬで洗浄し、次いで、真空下で乾燥させて、淡黄色固体として、生成物０．６１ｇを得た。ＭＳｍ／ｅ：２９６（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１９８】
（ｃ）４−（７，８−ジフルオロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸。ＤＭＦ６ｍＬ中で４−（７，８−ジフルオロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソブタナール（０．６１ｇ、２．１ｍｍｏｌ）の混合物を室温で撹拌し、オキソン（ｒ）（１．２ｍＬ、２．１ｍｍｏｌ）で処理した。混合物を室温で２時間撹拌した。Ｈ２Ｏ５０ｍＬで混合物を冷却し、ｐＨ＝５になるように調整した。沈殿が形成され、フィルターによって固体を集め、Ｈ２Ｏ２０ｍＬで洗浄した。高真空下で、得られた生成物を乾燥し、白色固体として、生成物０．６２ｇを得た。ＭＳｍ／ｅ：３１２（Ｍ＋Ｈ）＋。Ｃ１４Ｈ１１Ｆ２ＮＯ５に対する計算値：３１１１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ１２．１７（１Ｈ，ｂｒ．ｓ．），８．０４−８．０１（１Ｈ，ｍ），７．４４−７．４１（１Ｈ，ｍ），３．７４（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ），３．４４（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ），２．５９（２ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ）．ＭＳｍ／ｚ：３１０（Ｍ−）。
【０１９９】
方法４．４−（４−ヒドロキシ−６−ヨード−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸の調製。
【０２００】
【化２０】
2010524942.tif 000021
【０２０１】
（ａ）４−ヒドロキシ−６−ヨード−１−メチル−１，８−ナフチリジン−２（１Ｈ）−オン。ＴＦＡ（１０ｍＬ）中のメチル４−ヒドロキシ−６−ヨード−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−カルボキシラート（方法２）（１．００ｇ、２．７８ｍｍｏｌ）の溶液に、濃ＨＣｌ水溶液（１０ｍＬ）を添加した。混合物を８０℃で１８時間加熱した。溶媒を除去し、水及びジエチルエーテルで残留物を濯ぎ、５０℃の真空オーブン中で生成物を乾燥させて、９６％の収率で表題化合物を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯｄ６）δｐｐｍ１１．８４（１Ｈ，ｓ），８．８２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ），８．４３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ），５．８９（１Ｈ，ｓ），３．３９（３Ｈ，ｓ）。ＭＳｍ／ｚ：３０３（Ｍ＋）。
【０２０２】
（ｂ）６−ヨード−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−４−イルメチルスクシナート。１，２−ジクロロエタン（３ｍＬ）中の、４−ヒドロキシ−６−ヨード−１−メチル−１，８−ナフチリジン−２（１Ｈ）−オン（０．２０ｇ、０．６６ｍｍｏｌ）、ＴＥＡ（０．０９２ｍＬ、０．６６ｍｍｏｌ）の懸濁液に、メチル４−クロロ−４−オキソブチラート（０．０８ｍＬ、０．６６２ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を１５分間撹拌し、蒸発させた。ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを用いるフラッシュクロマトグラフィーによって残りの固体を精製して、６０％の収率で表題化合物を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δｐｐｍ８．７８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ），８．３４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ），６．６８（１Ｈ，ｓ），３．７８（３Ｈ，ｓ），３．７７（３Ｈ，ｓ），３．０２−２．９８（２Ｈ，ｍ），２．８４−２．７９（２Ｈ，ｍ）。ＭＳｍ／ｚ：４１７（Ｍ＋）。
【０２０３】
（ｃ）メチル４−（４−ヒドロキシ−６−ヨード−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソブタノアート。１４０℃で５分間、６−ヨード−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−４−イルメチルスクシナート（０．０９６ｇ、０．２３ｍｍｏｌ）及び酢酸ナトリウム（０．０１９ｇ、０．２３ｍｍｏｌ）の混合物を加熱した。室温まで反応を冷却し、ＤＣＭで固体を濯いだ。ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを用いるフラッシュクロマトグラフィーによってろ液を精製して、２７％の収率で表題化合物を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δｐｐｍ８．８５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ），８．７１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ），３．７２（３Ｈ，ｓ），３．７１（３Ｈ，ｓ），３．６５（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ），２．７３（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ）。ＭＳｍ／ｚ：４１７（Ｍ＋）。
【０２０４】
（ｄ）４−（４−ヒドロキシ−６−ヨード−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸。ＮａＯＨ水溶液（５Ｍ、２ｍＬ）の水溶液を、ＴＨＦ（１ｍＬ）中のメチル４−（４−ヒドロキシ−６−ヨード−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソブタノアート（０．０２６ｇ、０．０６２ｍｍｏｌ）の懸濁液に添加した。混合物を室温で１時間撹拌し、ＨＣｌ水溶液を用いてｐＨ＝１になるように酸性化し、蒸発させた。ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃで生じた固体を濯ぎ、ＣＨＣｌ３中のＭｅＯＨ／２％ＡｃＯＨを用いるフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、３５％の収率で表題化合物を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ８．９８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ），８．６６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ），３．５９（３Ｈ，ｓ），３．４３（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ），２．５８（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ）。ＭＳｍ／ｚ：４０３（Ｍ＋）。
【０２０５】
方法５．４−（３−（３−カルボキシプロパノイル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−７−イル）安息香酸の調製
【０２０６】
【化２１】
2010524942.tif 000022
【０２０７】
（ａ）メチル７−（４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）フェニル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボキシラート。容器中のメチル７−ブロモ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボキシラート（方法７）（３．８２ｇ、１２．２ｍｍｏｌ）、４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）フェニルボロン酸（２．７２ｇ、１２．２ｍｍｏｌ）、フッ化セシウム（５．５８ｇ、３６．７ｍｍｏｌ）及びテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム［０］（０．４２４ｇ、０．３６７ｍｍｏｌ）の混合物に、ＭｅＯＨ（６１ｍＬ）を添加した。容器を密封し、８０°Ｃで２時間加熱した。次いで、反応混合物を冷却し、ＥｔＯＡｃ２００ｍＬで希釈し、分離漏斗に添加し、炭酸水素ナトリウム（飽和、水溶液）で分配し、炭酸水素ナトリウム７５ｍＬ（飽和、水溶液）で２回洗浄し、分離し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、回転式蒸発を介して濃縮して、生成物を得た。フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル）を介して、得られた生成物を精製して、灰白色の固体として表題化合物を得た。
【０２０８】
（ｂ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−（３−（１，３−ジオキサン−２−イル）プロパノイル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−７−イル）ベンゾアート。メチル７−（４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）フェニル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボキシラート（４５２ｍｇ、１１０４μｍｏｌ）をＴＨＦ（１１ｍＬ）中に溶解した。次いで、水素化ナトリウム（油中６０％、４４２ｍｇ、１１０４０μｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を室温で１時間撹拌した。次いで、ＴＨＦ（２２０８μＬ、１１０４μｍｏｌ）中の２−［２−（１，３−ジオキサニル）］エチルマグネシウムブロミドを滴加し、次いで、反応混合物を１時間撹拌した。ＥｔＯＡｃ１５０ｍＬで反応混合物を希釈し、分離漏斗に添加し、３ＮＨＣｌ（水溶液）で分配し、塩水（飽和、水溶液）７５ｍＬで２回洗浄し、分離し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、回転式蒸発を介して濃縮して、当初生成物を得た。フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル）を介して当初生成物を精製して、ベージュの固体として表題化合物を得た。
【０２０９】
（ｃ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−３−（４−オキソブタノイル）−１，２−ジヒドロキノリン−７−イル）ベンゾアート。ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−（３−（１，３−ジオキサン−２−イル）プロパノイル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−７−イル）ベンゾアート（１５０ｍｇ、３０４μｍｏｌ）に、ＡｃＯＨ（８０％、１５ｍＬ）を添加し、得られた混合物を９０℃で１時間加熱した。反応混合物を水で冷却し、室温まで冷却した。溶液から固体が沈殿し、ろ過し、フリットにくっつけた。ＥｔＯＡｃ（５×）でフリットを洗浄して、ベージュ色の固体として表題化合物を得た。
【０２１０】
（ｄ）４−（７−（４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）フェニル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸。ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−３−（４−オキソブタノイル）−１，２−ジヒドロキノリン−７−イル）ベンゾアート（１３０ｍｇ、２９９μｍｏｌ）をＤＭＦ（１４９３μＬ）中に溶解した。室温でオキソン（１８４ｍｇ、２９９μｍｏｌ）を混合物に添加し、得られた混合物を１時間撹拌した。溶液から生成物を沈殿させるために、水を添加した。混合物をろ過し、水及びエーテルで洗浄し、真空オーブン中で乾燥させて、灰白色の固体として、表題化合物を得た。
【０２１１】
（ｅ）４−（３−（３−カルボキシプロパノイル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−７−イル）安息香酸。室温で１５分間、４−（７−（４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）フェニル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソ酪酸（２７０ｍｇ、５９８μｍｏｌ）をＴＦＡ（１ｍＬ）中に溶解し、次いで、水を添加して、白色固体として生成物を沈殿させた。得られた混合物をろ過し、固体生成物を水及びエーテルの少量で洗浄し、次いで、真空オーブン中で乾燥させて、ベージュ色の固体として、表題化合物を得た。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ１３．００（ｂｓ，１Ｈ）１２．２２（ｂｓ，１Ｈ）８．２２（ｄ，Ｊ＝８．５３Ｈｚ，１Ｈ）８．０４−８．１３（ｍ，２Ｈ）７．９６−８．０４（ｍ，２Ｈ）７．８０（ｓ，１Ｈ）７．７１（ｄ，Ｊ＝８．５３Ｈｚ，１Ｈ）３．７１（ｓ，３Ｈ）３．４５−３．５２（ｍ，２Ｈ）２．６０（ｔ，Ｊ＝６．０２Ｈｚ，２Ｈ）。
【０２１２】
方法６．エチル４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−７−（トリフルオロメチル）−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−カルボキシラートの調製。
【０２１３】
【化２２】
2010524942.tif 000023
【０２１４】
（ａ）メチル２−クロロ−６−（トリフルオロメチル）ニコチナート。アセトン（１２５ｍＬ）中の、２−クロロ−６−（トリフルオロメチル）ニコチン酸（Ｆｌｕｏｒｏｃｈｅｍ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，Ｗｅｓｔ  Ｃｏｌｕｍｂｉａ，ＳＣから入手可能）（６．６６ｇ）及びＫ２ＣＯ３（１５．７ｇ、１１４ｍｍｏｌ）の混合物に、窒素雰囲気下において、室温で撹拌しながら、ヨードメタン（２．６０ｍＬ、４１．７ｍｍｏｌ）を滴加した。反応混合物を３５℃で１８時間撹拌した後、Ｃｅｌｉｔｅ（Ｒ）のプラグを通してろ過した。減圧下でろ液を蒸発させて、表題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ，陽性イオン）ｍ／ｚ：２４０（Ｍ＋１）。
【０２１５】
（ｂ）メチル２−（メチルアミノ）−６−（トリフルオロメチル）ニコチナート。ＴＨＦ（２５ｍＬ）中の、メチル２−クロロ−６−（トリフルオロメチル）ニコチナート（３．８２ｇ）及びＫ２ＣＯ３（５．６ｇ、４０ｍｍｏｌ）の混合物を、窒素下で１５分間撹拌した。ＴＨＦ（１０ｍＬ、２０ｍｍｏｌ）中のメチルアミンの２Ｍ溶液を混合物に添加し、撹拌を６３時間継続した。Ｃｅｌｉｔｅ（Ｒ）上で反応混合物をろ過し、減圧下でろ液を蒸発させた。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ）によって残留物を精製して、表題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ，陽性イオン）ｍ／ｚ：２３５（Ｍ＋１）。
【０２１６】
（ｃ）メチル２−（３−エトキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）−６−（トリフルオロメチル）ニコチナート。１，２−ジクロロエタン（５０ｍＬ）中の、メチル２−（メチルアミノ）−６−（トリフルオロメチル）ニコチナート（０．３００ｇ）及びエチルマロニルクロリド（０．１９ｍＬ、１．６ｍｍｏｌ）の混合物を８０℃まで６３時間加熱した。反応混合物を室温に到達させ、次いで、減圧下で蒸発させた。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（勾配：０−３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって残留物を精製して、表題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ，陽性イオン）ｍ／ｚ：３４９（Ｍ＋１）。
【０２１７】
（ｄ）エチル４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−７−（トリフルオロメチル）−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−カルボキシラート。室温で撹拌しながら、ＥｔＯＨ（２５ｍＬ）中のメチル２−（３−エトキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）−６−（トリフルオロメチル）ニコチナートの溶液に、ＥｔＯＨ（３．２ｍＬ、９．２ｍｍｏｌ）中の２０％ＮａＯＥｔの溶液を滴加した。反応混合物を１５分間撹拌し、沈殿した白色固体をろ過した。ろ過ケーキを分離し、真空中で乾燥させて、表題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ，陽性イオン）ｍ／ｚ：３１７（Ｍ＋１）。
【０２１８】
方法７．エチル４−ヒドロキシ−６−ヨード−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボキシラートの調製。
【０２１９】
【化２３】
2010524942.tif 000024
【０２２０】
（ａ）ヨード−２−（メチルアミノ）安息香酸。１Ｌの三つ口フラスコ中に、２−（メチルアミノ）安息香酸（Ａｌｄｒｉｃｈから入手可能）（４０ｇ、２６５ｍｍｏｌ）、水（３００ｍＬ）及びＨＣｌ（２６．７ｍＬ、８７１ｍｍｏｌ）を添加した。ＨＣｌ（４５ｍＬ、１４６９ｍｍｏｌ）及び水（１６７ｍＬ、９２７２ｍｍｏｌ）の冷却された溶液（０℃）に、一塩化ヨウ素（４３ｇ、２６５ｍｍｏｌ）を添加することによって、一塩化ヨウ素の溶液を調製した。一塩化ヨウ素溶液を２−（メチルアミノ）安息香酸の撹拌された溶液へ素早く添加した。混合物を２時間撹拌し、次いで、中型のフリット漏斗上でろ過した。固体を水で洗浄し、及び真空下で乾燥させて、薄緑色の粉末として、生成物の定量的収量を得た。
【０２２１】
（ｂ）６−ヨード−１−メチル−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，３］オキサジン−２，４−ジオン。０℃まで冷却された、５−ヨード−２−（メチルアミノ）安息香酸（１０ｇ、３６ｍｍｏｌ）、炭酸ナトリウム（４ｇ、３６ｍｍｏｌ）及び水（１３０ｍＬ、７２１８ｍｍｏｌ）の撹拌された溶液に、滴下漏斗を介して、トルエン中の２Ｍホスゲン（１８ｍＬ、３６ｍｍｏｌ）溶液をゆっくり添加した。２時間後、沈殿した生成物をろ過によって単離した。固体を水１００ｍＬ、ＥｔＯＨとエーテルの１：１混合物１５０ｍＬ、エーテル１００ｍＬで洗浄し、真空下で乾燥させて表題化合物を得た。
【０２２２】
（ｃ）エチル４−ヒドロキシ−６−ヨード−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボキシラート。室温で撹拌しながら、ジエチルエステルマロン酸（１７ｍＬ、１１０ｍｍｏｌ）とＤＭＦ（７５ｍＬ）の混合物に、６０％水素化ナトリウム（１．２ｍＬ、２８ｍｍｏｌ）を少しずつ添加した。６−ヨード−１−メチル−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，３］オキサジン−２，４−ジオン（７．１２ｇ、２３ｍｍｏｌ）とＤＭＦ（７５ｍＬ）の混合物をこの溶液に添加した後、１２０℃で２．５時間撹拌した。形成された沈殿をろ過によって集め、水の中に溶解し、３０％ＨＣｌを混合物に添加した。沈殿した結晶をろ過によって集め、乾燥させて表題化合物を得た。
【０２２３】
方法８．メチル７−ブロモ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボキシラートの調製。
【０２２４】
【化２４】
2010524942.tif 000025
【０２２５】
（ａ）７−ブロモ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，３］オキサジン−２，４−ジオン。Ｎ２下の２５０ｍＬの丸底フラス中で、１，４−ジオキサンの１００ｍＬ中に２−アミノ−４−ブロモ安息香酸（Ａｌｄｒｉｃｈから入手可能）（ｌ１１．６９ｇ）を溶解した。溶液を０℃まで冷却し、滴下漏斗を介して、ホスゲン（３６ｍＬ、６８ｍｍｏｌ）をこの溶液に添加した。反応混合物を２４時間撹拌して、２３°Ｃ（室温）まで加温した。生じた白色の固体をろ別し、１，４−ジオキサンとＥｔ２Ｏで洗浄した。
【０２２６】
（ｂ）７−ブロモ−１−メチル−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，３］オキサジン−２，４−ジオン。窒素下で、２５０ｍＬの三つ口丸底フラスコに、水素化ナトリウム（０．４７ｇ、１２ｍｍｏｌ）を添加し、次いで、ヘキサンで洗浄した。容器を傾けてヘキサンを除去して、ＤＭＦ（２０．０ｍＬ、１１ｍｍｏｌ）を添加した。氷水槽を用いて、生じた混合物を０℃まで冷却し、次いで、７−ブロモ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，３］オキサジン−２，４−ジオン（２．７ｇ、１１ｍｍｏｌ）を１バッチで添加した。室温で１時間撹拌した後、ヨードメタン（０．７０ｍＬ、１１ｍｍｏｌ）を黄色の溶液に滴加し、反応混合物を１６時間撹拌した。水（５０ｍＬ）を添加し、ろ過を介して、形成された生じた沈殿を集め、さらなる水（１００ｍＬ）、続いてエーテル（１００ｍＬ）で固体を洗浄した。５０℃で一晩、真空オーブン中で乾燥させて、灰白色の固体として表題化合物（２．１ｇ、収率７４％）を得た。
【０２２７】
（ｃ）メチル７−ブロモ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボキシラート。７−ブロモ−１−メチルー１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，３］オキサジン−２，４−ジオンおよびジメチルエステルマロン酸を用いて、６（ｃ）の方法に従って表題化合物を調製した。
【０２２８】
方法９．メチル７−ブロモ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，５−ナフチリジン−３−カルボキシラートの調製
【０２２９】
【化２５】
2010524942.tif 000026
【０２３０】
（ａ）３−アミノ−５−ブロモピコリンアミド。４５ｐｓｉのＨ２雰囲気下において、室温で５時間、ＥｔＯＨ（１５００ｍＬ）中の、５−ブロモ−３−ニトロピコリノニトリル（Ａｌｄｒｉｃｈから入手可能）（４０ｇ、０．１７ｍｏｌ）及びＲａｎｅｙＮｉ（２２ｇ）の混合物を撹拌した。反応混合物をろ過し、減圧下でろ液を蒸発させ、真空中で乾燥させて、表題化合物を得た。
【０２３１】
（ｂ）３−アミノ−５−ブロモピコリン酸。３−アミノ−５−ブロモピコリンアミド（２８．２ｇ、０．１３  ｍｏｌ）及び濃ＨＣｌ（３６１ｍＬ）の混合物を１２時間還流加熱した。反応混合物を室温に到達させ、沈殿した固体をろ過した。ろ過ケーキを水の中に溶解し、ｐＨ＝４になるように、飽和ＮａＯＡｃで水溶液のｐＨを調整し、ＥｔＯＡｃ（３×）で抽出した。合わせた有機層を無水ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、ろ過した。減圧下でろ液を蒸発させ、残留物を真空中で乾燥させて、表題化合物を固体として得た。
【０２３２】
（ｃ）メチル７−ブロモ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，５−ナフチリジン−３−カルボキシラート。３−アミノ−５−ブロモピコリン酸から出発し、方法８と類似の方法を用いて表題化合物を調製した。
【０２３３】
方法１０．メチル６−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−ｌ，２−ジヒドロ−ｌ，７−ナフチリジン−３−カルボキシラートの調製。
【０２３４】
【化２６】
2010524942.tif 000027
【０２３５】
（ａ）６−クロロピリジン−３−アミン。ＭｅＯＨ（５００ｍＬ）中の、２−クロロ−５−ニトロピリジン（Ａｌｄｒｉｃｈから入手可能）（１００ｇ、０．６３ｍｏｌ）及びＲａｎｅｙ  Ｎｉ（６０ｇ）の混合物を、４５ｐｓｉのＨ２下において、室温で５時間撹拌した。反応混合物をろ過し、減圧下でろ液を蒸発させて、未精製の表題化合物を得、さらなる精製を行わずに、次の工程で使用した。
【０２３６】
（ｂ）ｔｅｒｔ−ブチル６−クロロピリジン−３−イルカルバマート。上の工程から得られた未精製の６−クロロピリジン−３−アミンのジオキサン（８００ｍＬ）中溶液に、室温で、（ＢｏＣ）２Ｏを添加し、得られた溶液を一晩還流加熱した。反応混合物を室温に到達させ、減圧下で蒸発させた。カラムクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物を得た。
【０２３７】
（ｃ）５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−２−クロロイソニコチン酸。無水ジエチルエーテル（２００ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル６−クロロピリジン−３−イルカルバマート（１０ｇ、０．０４５ｍｏｌ）及びＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルエチレンジアミン（２０ｍＬ）の溶液に、−７８℃で撹拌しながら、ｎ−ＢｕＬｉ（ヘキサン中の２．５Ｍ溶液、８４ｍＬ）を滴加した。添加後、反応混合物を−１５℃まで加温し、この温度で２時間、反応を撹拌した。混合物を−７８℃まで冷却し、−７８℃で１時間、反応溶液中にＣＯ２を通気した。次いで、反応混合物を室温で一晩撹拌し、０℃まで冷却し、水で反応を停止させた。１ＮＨＣｌを用いて、ｐＨ＝３になるように水相のｐＨを調整した。有機層を分離し、ＥｔＯＡｃで水層を２回抽出した。無水ＭｇＳＯ４上で、合わせた有機層を乾燥させ、ろ過した。減圧下でろ液を蒸発させ、真空中で残留物を乾燥させて、表題化合物を得た。
【０２３８】
（ｄ）メチル５−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−２−クロロイソニコチナート。無水ＤＭＦ（１０ｍＬ）中の５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−２−クロロイソニコチン酸（１ｇ、３．７ｍｍｏｌ）の溶液に、氷槽を用いて撹拌及び冷却しながら、ＮａＨ（鉱物油中の６０％懸濁液、０．３７ｇ、９．２４ｍｍｏｌ）を少しずつ添加した。添加後、ＭｅＩ（０．５２４ｍＬ、９．２４ｍｍｏｌ）を滴加して反応混合物を処理し、次いで、室温で１時間撹拌した。反応混合物を水の中に注ぎ、室温で３時間撹拌した。沈殿をろ過し、真空中で乾燥させて、表題化合物を固体として得た。
【０２３９】
（ｅ）メチル２−クロロ−５−（メチルアミノ）イソニコチナート。メチル無水ＤＣＭ（１０ｍＬ）中の５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−２−クロロイソニコチナート（０．５ｇ、１．７ｍｍｏｌ）の溶液に、氷槽を用いて撹拌及び冷却しながら、ＴＦＡ（４．４ｍＬ）を添加した。室温で２時間、混合物を撹拌し、次いで、減圧下で蒸発させた。残留物を水中に溶解させ、飽和ＮａＨＣＯ３での処理によって、ｐＨ＝８になるように溶液を調整した。混合物をＥｔＯＡｃで２回抽出した。合わせた有機層を無水ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、ろ過した。減圧下でろ液を蒸発させ、残留物を真空中で乾燥させて表題化合物を得た。
【０２４０】
（ｆ）２−クロロ−５−（メチルアミノ）イソニコチン酸。５５℃で２時間、ＥｔＯＨ（５０ｍＬ）中の、メチル２−クロロ−５−（メチルアミノ）イソニコチナート（１０ｇ、０．０５ｍｏｌ）及び２ＮＮａＯＨ（５０ｍＬ）の混合物を加熱した。反応混合物を室温まで冷却し、ＥｔＯＨのほとんどを減圧下で蒸発させた。１ＮＨＣｌで、ｐＨ＝３になるように、水性残留物のｐＨを調整し、固体沈殿物をろ過し、真空中で乾燥させて、表題化合物を得た。
【０２４１】
（ｇ）６−クロロ−１−メチル−１Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］［１，３］オキサジン−２，４−ジオン。方法６（ｂ）と同様にして、２−クロロ−５−（メチルアミノ）イソニコチン酸及びホスゲンから、表題化合物を得た。
【０２４２】
（ｈ）メチル６−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，７−ナフチリジン−３−カルボキシラート。方法６（ｃ）と同様にして、６−クロロ−１−メチル−１Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］［１，３］オキサジン−２，４−ジオン及びマロン酸メチルから表題化合物を調製した。
【０２４３】
【表１】
2010524942.tif 000028
2010524942.tif 000029
【０２４４】
方法１１．４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−フェニル−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸の調製。
【０２４５】
【化２７】
2010524942.tif 000030
【０２４６】
（ａ）メチル４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−フェニル−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソブタノアート。「Ｍｉｙａｕｒａ，  Ｎ．；  Ｓｕｚｕｋｉ，Ａ．  Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．，  ９５，  ２４５７−８３（１９９５）」に記載されている手順に従って、フェニルボロン酸とメチル４−（４−ヒドロキシ−６−ヨード−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソブタノアート（方法４）のパラジウム媒介性Ｓｕｚｕｋｉクロスカップリング反応によって、表題化合物を調製する。あるいは、「Ｓｔｉｌｌｅ，Ｊ．Ｋ．Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ，  ２５，  ５０８−２４（１９８６）」に記載されている手順に従って、トリブチル（フェニル）スタンナンとメチル４−（４−ヒドロキシ−６−ヨード−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソブタノアートのパラジウム媒介性Ｓｔｉｌｌｅクロスカップリング反応によって表題化合物を調製する。
【０２４７】
（ｂ）４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−フェニル−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸。ＴＨＦ中の水酸化ナトリウムを用いて、メチル４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−フェニル−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−４−オキソブタノアートの鹸化によって、表題化合物を調製する。
【０２４８】
方法１２．４−（６−シクロヘキシル−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸の調製。
【０２４９】
【化２８】
2010524942.tif 000031
【０２５０】
（ａ）メチル４−（６−シクロヘキセニル−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソブタノアート。「Ｈｅｃｋ，  Ｒ．Ｆ．；Ｎｏｌｌｅｙ，  Ｊ．  Ｐ．  Ｊ．Ｏｒｇ.Ｃｈｅｍ．，３７，２３２０−２２（１９７１）」に記載されている手順に従って、シクロヘキセン及びメチル４−（４−ヒドロキシ−６−ヨード−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソブタノアート（方法４）のパラジウム媒介性Ｈｅｃｋクロスカップリング反応によって、表題化合物を調製する。
【０２５１】
（ｂ）メチル４−（６−シクロヘキシル−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソブタノアート。酢酸エチル又はエタノールなどの適切な溶媒中、水素気体の存在下でのパラジウムブラックでの水素添加によって表題化合物を調製する。
【０２５２】
（ｃ）４−（６−シクロヘキシル−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸。方法８（ｂ）と同様の鹸化条件によって表題化合物を調製する。
【０２５３】
方法１３．６−（３−カルボキシプロパノイル）−５−ヒドロキシ−８−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−カルボン酸の調製。
【０２５４】
【化２９】
2010524942.tif 000032
【０２５５】
（ａ）メチル５−ヒドロキシ−６−（４−メトキシ−４−オキソブタノイル）−８−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−カルボキシラート。「Ｔｓｕｊｉ，  Ｊ．  Ｐａｌｌａｄｉｕｍ  Ｒｅａｇｅｎｔｓ  ａｎｄ  ｃａｔａｌｙｓｔｓ：Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒ：（Ｗｉｌｅｙ，  Ｃｈｉｃｈｅｓｔｅｒ，ＵＫ），３４０−４５（１９９５）。に記載されている手順に従い、ＭｅＯＨ中の一酸化炭素での、メチル４−（４−ヒドロキシ−６−ヨード−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソブタノアート（方法４）の金属媒介性カルボニル化によって表題化合物を調製する。
【０２５６】
（ｂ）６−（３−カルボキシプロパノイル）−５−ヒドロキシ−８−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−カルボン酸。メチル５−ヒドロキシ−６−（４−メトキシ−４−オキソブタノイル）−８−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−カルボキシラートを用いて、方法８（ｂ）と同様の鹸化条件によって表題化合物を調製する。
【０２５７】
方法１４．４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−（トリフルオロメチル）−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸の調製。
【０２５８】
【化３０】
2010524942.tif 000033
【０２５９】
（ａ）メチル４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−（トリフルオロメチル）−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソブタノアート。「Ｓｈｒｅｅｖｅ，  Ｊ．  Ｍ．  Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，  ５６，  ７６１３−７６３２（２０００）」に記載されている手順に従い、トリフルオロメチルトリメチルシランとヨウ化銅の反応によって原位置で形成された推定上のＣｕＣＦ３との、メチル４−（４−ヒドロキシ−６−ヨード−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソブタノアート（方法４）の銅媒介性クロスカップリングによって表題化合物を調製する。
【０２６０】
（ｂ）４−（４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−６−（トリフルオロメチル）−１，２−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）−４−オキソ酪酸。方法８（ｂ）と同様の鹸化条件によって表題化合物を調製する。
【０２６１】
表２  以下の表は、上記方法によって調製された化合物を列記する。
【０２６２】
【表２】
2010524942.tif 000034
2010524942.tif 000035
2010524942.tif 000036
2010524942.tif 000037
2010524942.tif 000038
2010524942.tif 000039
【０２６３】
方法１５．４−（５−ヒドロキシ−８−メチル−７−オキソ−３−フェニル−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｃ］ピリダジン−６−イル）−４−オキソ酪酸の調製。
【０２６４】
【化３１】
2010524942.tif 000040
【０２６５】
（ａ）エチル３，６−ジクロロピリダジン−４−カルボキシラート。ＴＨＦ（５．０ｍＬ）及びＥｔＯＨ（５．０ｍＬ、２６ｍｍｏｌ）中の３，６−ジクロロピリダジン−４−カルボン酸（５．０ｇ、２６ｍｍｏｌ、Ａｌｄｒｉｃｈ，  Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ，  ＷＩから市販されている。）の溶液に、ＤＭＡＰ（０．３２ｇ、２．６ｍｍｏｌ）及びｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩（５．０ｇ、２８ｍｍｏｌ）を添加した。室温で１２時間、反応を撹拌した。減圧下で溶媒を除去して油を得た。ＥｔＯＡｃと水の間に、この油を分配させ、有機抽出物を合わせ、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、ろ過し、濃縮して黄色の油を得た。シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって、粗製生成物を精製して、無色の油を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：計算値：２２１．０；実測値：２２１．０。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δｐｐｍ７．８５（ｓ，１Ｈ），４．４８（ｑ，Ｊ＝７．２４Ｈｚ，２Ｈ），１．４４（ｔ，Ｊ＝７．２４Ｈｚ，３Ｈ）。
【０２６６】
（ｂ）エチル６−クロロ−３−（メチルアミノ）ピリダジン−４−カルボキシラート。密封された管に、ＴＨＦ（６ｍＬ、１２ｍｍｏｌ）中の、エチル３，６−ジクロロピリダジン−４−カルボキシラート（２．０ｇ、９ｍｍｏｌ）、無水Ｋ２ＣＯ３（１．０ｇ、１０ｍｍｏｌ）及び２．０ＭＭｅＮＨ２を添加した。管を密封し、生じた黄色の混合物を室温で１６時間撹拌し、次いで、ろ過によって固体を集め、ＥｔＯＡｃで洗浄して、白色の固体を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：計算値：２１５．６；実測値：２１６．１。
【０２６７】
（ｃ）エチル６−クロロ−３−（３−エトキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）ピリダジン−４−カルボキシラート。ＴＨＦ（５０．０ｍＬ）中の、エチル６−クロロ−３−（メチルアミノ）ピリダジン−４−カルボキシラート（１．６ｇ、７．４ｍｍｏｌ）と無水Ｋ２ＣＯ３（１．３ｇ、９．６ｍｍｏｌ）の混合物に、プロパン酸、３−クロロ−３−オキソ−、エチルエステル（１．１ｍＬ、８．９ｍｍｏｌ、Ａｌｄｒｉｃｈ，  Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ，  ＷＩから市販されている。）を滴加した。室温で１６時間、反応を撹拌した後、ろ過によって固体を除去し、ろ液を濃縮して、暗色の油を得た。シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（４０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって粗製生成物を精製して、黄色の油を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：計算値：３２９．７；実測値：３３０．０。
【０２６８】
（ｄ）ナトリウム３−クロロ−６−（エトキシカルボニル）−８−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｃ］ピリダジン−５−オラート。ＥｔＯＨ（５．０ｍＬ）の氷冷された溶液に、ナトリウム金属の小片（０．１７ｇ、７．３ｍｍｏｌ）を添加する。氷槽を取り除き、ナトリウムが見えなくなるまで、混合物を室温で撹拌した。ＥｔＯＨ（３ｍＬ）中のエチル  ６−クロロ−３−（３−エトキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）ピリダジン−４−カルボキシラート（１．２ｇ、３．６ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮａＯＥｔ溶液を滴加して移した。添加が完了した後、混合物をさらに２分間撹拌し、次いで、ろ過によって固体を集め、エーテルで洗浄した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：計算値：２８３．７；実測値：２８４．０。１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ７．８４（ｓ，１Ｈ），４．０６（ｑ，Ｊ＝７．１６Ｈｚ，２Ｈ），３．５４（ｓ，３Ｈ），１．１９（ｔ，Ｊ＝７．１６Ｈｚ，３Ｈ）。
【０２６９】
（ｅ）エチル５−ヒドロキシ−８−メチル−７−オキソ−３−フェニル−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｃ］ピリダジン−６−カルボキシラート。密封された管中で、ナトリウム３−クロロ−６−（エトキシカルボニル）−８−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｃ］ピリダジン−５−オラート（０．５０ｇ、１．８ｍｍｏｌ）、フェニルボロン酸（３．５ｍｍｏｌ、Ａｌｄｒｉｃｈ，Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ，ＷＩから市販されている。）、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（０．２０ｇ、０．１８ｍｍｏｌ）、２．０ＭＮａ２ＣＯ３水溶液（２．６ｍＬ、５．３ｍｍｏｌ）及び１，２−ジメトキシエタン（１０．０ｍＬ、１．８ｍｍｏｌ）を合わせた。管にアルゴンを吹き付け、密封し、次いで、油槽中において、１００℃で１６時間加熱した。未精製反応混合物をシリカ上に吸着させ、フラッシュクロマトグラフィー（５％から２０％へのＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ３）を介して精製した。
【０２７０】
（ｆ）５−ヒドロキシ−８−メチル−３−フェニルピリド［２，３−ｃ］ピリダジン−７（８Ｈ）−オン。方法３Ａの手順に従って、塩酸中でエチル５−ヒドロキシ−８−メチル−７−オキソ−３−フェニル−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｃ］ピリダジン−６−カルボキシラートを加熱することによって、表題化合物を調製する。
【０２７１】
（ｇ）エチル８−メチル−７−オキソ−３−フェニル−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｃ］ピリダジン−５−イルスクシナート。方法４（工程ｂ）の記載に従い、エチル４−クロロ−４−オキソブタノアートで、５−ヒドロキシ−８−メチル−３−フェニルピリド［２，３−ｃ］ピリダジン−７（８Ｈ）−オンをアシル化することによって、表題化合物を調製する。
【０２７２】
（ｈ）エチル４−（５−ヒドロキシ−８−メチル−７−オキソ−３−フェニル−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｃ］ピリダジン−６−イル）−４−オキソブタノアート。文献の手順に従い、酢酸ナトリウムを用いて、エチル８−メチル−７−オキソ−３−フェニル−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｃ］ピリダジン−５−イルスクシナートの転位によって表題化合物を調製する。あるいは、方法４（工程ｃ）の記載に従い、塩化アルミニウムを用いた、エチル８−メチル−７−オキソ−３−フェニル−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｃ］ピリダジン−５−イルスクシナートの転位によって表題化合物を調製する。
【０２７３】
（ｉ）４−（５−ヒドロキシ−８−メチル−７−オキソ−３−フェニル−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｃ］ピリダジン−６−イル）−４−オキソ酪酸。方法４（工程ｄ）の記載に従い、水酸化リチウムを用いたエチル４−（５−ヒドロキシ−８−メチル−７−オキソ−３−フェニル−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｃ］ピリダジン−６−イル）−４−オキソブタノアートの鹸化によって、表題化合物を調製する。
【０２７４】
方法１６．エチル５−ヒドロキシ−８−メチル−７−オキソ−２−（トリフルオロメチル）−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシラートの調製。
【０２７５】
【化３２】
2010524942.tif 000041
【０２７６】
（ａ）エチル４−（メチルアミノ）−２−（トリフルオロメチル）ピリミジン−５−カルボキシラート。エチル４−クロロ−２−（トリフルオロメチル）ピリミジン−５−カルボキシラート（１ｇ、４ｍｍｏｌ、Ｍａｙｂｒｉｄｇｅから市販されている。）、Ｋ２ＣＯ３（２ｇ、１２ｍｍｏｌ）及びメチルアミン（ＴＨＦ（２０ｍＬ）中の２．０Ｍ溶液）の混合物を、室温で一晩撹拌した。Ｃｅｌｉｔｅを通して反応混合物をろ過し、減圧下で濃縮して、薄桃色の固体として、粗製生成物を得た。ＭＳｍ／ｚ：計算値：２４９．１９；実測値；２５０。
【０２７７】
（ｂ）エチル４−（３−エトキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）−２−（トリフルオロメチル）ピリミジン−５−カルボキシラート。ＤＣＭ（１０ｍＬ）中のエチル４−（メチルアミノ）−２−（トリフルオロメチル）ピリミジン−５−カルボキシラート（２００ｍｇ、０．８０ｍｍｏｌ）の溶液に、エチルマロニルクロリド（０．２１ｍＬ、１．６ｍｍｏｌ）及びＡＣＮ（１０ｍＬ）中のシアン化銀（０．０２７ｍＬ、０．８ｍｍｏｌ）の懸濁液を添加した。室温で１０日間、反応を撹拌した。ＡｇＣＮのさらなる当量及びエチルマロニルクロリド１ｍＬを添加し、反応を還流加熱し、３日間撹拌した。固体をろ別し、ろ液を濃縮して、オレンジ色の油を得た。ＬＣＭＳで測定したところによると、収率は約４８％であった。さらなる精製なしに、生成物を次の段階で使用した。
【０２７８】
（ｃ）エチル５−ヒドロキシ−８−メチル−７−オキソ−２−（トリフルオロメチル）−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシラート。ＥｔＯＨ（１０ｍＬ）中のエチル４−（３−エトキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）−２−（トリフルオロメチル）ピリミジン−５−カルボキシラート（１４０ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）を希釈し、次いで、室温で１５分間、２０重量％ＮａＯＥｔ（５ｍＬ、０．３９ｍｍｏｌ）で処理した。黄色の沈殿をろ過し、いくらかの固体を回収したが、ろ液は雲状であった。ろ液にＡｃＯＨを添加し、次いで、減圧下で濃縮して、油状の固体を得た。エーテルを添加し、水及び塩水で混合物を洗浄し、次いで、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、減圧下で濃縮して黄色の油を得た。さらなる精製なしに、生成物を次の段階で使用した。
【０２７９】
【表３】
2010524942.tif 000042
【０２８０】
以下は、ＨＩＦＰＨＤ活性及び本発明の化合物によるＨＩＦＰＨＤ活性の阻害を定量するために使用され得る方法の例である。
【０２８１】
ＶＢＣの発現、精製及びユーロピウム標識並びにヒドロキシプロリルＨＩＦ１αペプチドを検出するためのＥｕ−ＶＣＢをベースとするＴＲ−ＦＲＥＴアッセイの設計
ＶＢＣ複合体は、フォン・ヒッペル−リンダウタンパク質（ｐＶＨＬ）、エロンギンＢ及びエロンギンＣヘテロ三量体複合体として定義される。ＶＣＢは、ＨＩＦ１αのヒドロキシプロリン残基へ特異的に結合し、ＨＩＦ１αのポリユビキチン化及びこれに続くタンパク質分解によるその破壊を開始させる。プロリルヒドロキシラーゼ活性の不存在下では、ＶＣＢは修飾されていないＨＩＦ１αを結合しない。ＶＣＢ複合体はイー・コリ（Ｅ．ｃｏｌｉ）中で発現され、可溶性画分から精製された。３つのタンパク質成分のアミノ酸配列は以下のとおりである。
【０２８２】
【化３３】
2010524942.tif 000043
2010524942.tif 000044
【０２８３】
【化３４】
2010524942.tif 000045
【０２８４】
ＶＨＬのＮ末端は、精製用の６ヒスチジンアフィニティータグを含有する。
【０２８５】
ＶＣＢをベースとするアッセイは、酵素的生成物形成（ヒドロキシル化されたプロリン残基を含有するＨＩＦ１αタンパク質又はその断片）の高感度な直接的測定を可能とし、高情報量スクリーニングに適する。
【０２８６】
イー・コリ中での発現のために、ＶＨＬ５４−２１３をＮｄｅＩ−ＸｈｏＩ部位間のｐＡＭＧ２１（Ｐｌｕｘプロモーター）中にクローニングした。このすぐ下流に、ＳａｃＩＩまでＸｈｏＩ部位中にエロンギンＣ遺伝子がクローニングされる。ＶＨＬの停止コドンとエロンギンＣの開始コドンとの間には、１３塩基対のスペーサーが存在する。発現プラスミドｐＡＭＧ２１は発現ベクターｐＣＦＭ１６５６（ＡＴＣＣ＃６９５７６）に由来する６１１８塩基対のプラスミドであり、発現ベクターｐＣＦＭ１６５６は米国特許第４，７１０，４７３号に記載されている発現ベクター系に由来し得る。この設計は、プロモーター領域の置換によるタンパク質発現の熱的誘導よりむしろ化学的誘導を可能とし、合成バクテリオファージλｐｌプロモーターをＬｕｘＲ遺伝子とＬｕｘＰＲプロモーターを含有するＤＮＡセグメントで置換し、プラスミドをコードするＬｕｘＲタンパク質による発現の制御を与え、これにより、あらゆるイー・コリ株が宿主としての役割を果たすことが可能となる。
【０２８７】
Ｌａｃプロモーターの調節下で、ｐＴＡ２（ｐＡＣＹＣ１８４．１をベースとするベクター）中にエロンギンＢをクローニングした。ｐＡＭＧ２１−ＶＨＬ−エロンギンＣ構築物で、形質転換受容性イー・コリ細胞を形質転換した。両プラスミド構築物を含有する最終のイー・コリ株を作製するために、ｐＴＡ−エロンギンＢ構築物での形質転換の前に、これらのイー・コリ細胞を再度形質転換受容性にした。３０℃で、ＩＰＴＧ及びＮ−（３−オキソ−ヘキサノイル）−ホモセリンラクトン（ＨＳＬ）を添加することによって、タンパク質発現の誘導を開始した。
【０２８８】
ｐＨ８．０の水性緩衝液中で、微小流動装置によって細菌細胞を溶解し、遠心によって可溶性画分を分離した。ｐＶＨＬ構築物上に位置する６ヒスチジンアフィニティータグを使用するために、可溶性のイー・コリ画分をニッケル−ＮＴＡキレートクロマトグラフィーに供した。ニッケルカラム由来のプールされた画分をＳｕｐｅｒｄｅｘ２００サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）カラムに適用した。タンパク質はＳＥＣ上で単量体として溶出され、３つのタンパク質成分が溶液中で複合体を形成したことを示唆している。ＳＥＣカラム由来の画分をプールし、最終精製のために、ＱＳｅｐｈａｒｏｓｅ陰イオン交換カラムに適用した。ＳＤＳ−ＰＡＧＥによって精製された複合体を可視化し、Ｎ末端のアミノ酸配列決定によって、３つのタンパク質成分の正体を確認した。
【０２８９】
５０ｍＭ炭酸ナトリウム緩衝液ｐＨ９．２中へ精製されたＶＣＢを交換し、ユーロピウムキレートで一晩標識した。ＶＣＢ複合体のリジン残基を標識するために、ＬＡＮＣＥＴＭユーロピウムキレート（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ，Ｉｎｃ；Ｅｕ−Ｗ１０２４ＩＴＣキレート；カタログ番号はＡＤＯＯ１３である。）を使用した。キレートは、リジン残基上においてタンパク質を特異的に標識するイソチオシアナート反応性基（ＶＣＢタンパク質複合体中には、１５のリジン残基が存在する。）を含有する。脱塩カラムによって、得られたユーロピウム化されたＶＣＢを精製し、標準的な手段によって定量した。標識収率は、１つのＶＣＢ複合体当り６．６のユーロピウム基であることが決定された。
【０２９０】
ＳｙｎＰｅｐ，Ｉｎｃ．によって２つのペプチド（ヒドロキシプロリンによって修飾されたペプチド及び修飾されていない対照ペプチド）を作製した。ＶＣＢは、ヒドロキシプロリンによって修飾されたペプチド（プロリルヒドロキシラーゼによる酵素的水酸化の模倣物）へ特異的に結合することが予想された。ＶＣＢは、修飾されていないペプチドへ結合しないと予想された。ストレプトアビジンによって標識された蛍光アクセプターアロフィコシアニンによる結合を可能とするために、Ｎ末端のビオチン基で両ペプチドを作製した（ストレプトアビジンＡＰＣ；Ｐｒｏｚｙｍｅ，Ｉｎｃ．）。
【０２９１】
特別に合成されたＨＩＦ１αペプチド（アミノ酸５５６−５７５、酸化を抑制するためにアラニン残基で置換されたメチオニン残基を有する。）の配列は、以下のとおりであった。
【０２９２】
（修飾されていない）ビオチン−ＤＬＤＬＥＡＬＡＰＹＩＰＡＤＤＤＦＱＬＲ−ＣＯＮＨ２（発現番号４）
（修飾された）ビオチン−ＤＬＤＬＥＡＬＡ［ｈｙＰ］ＹＩＰＡＤＤＤＦＱＬＲ−ＣＯＮＨ２（配列番号５）。
【０２９３】
ペプチドはＳｙｎＰｅｐから凍結乾燥された固体として購入し、実験的な使用のためにＤＭＳＯ中に懸濁した。２８０ｎｍでのペプチドの吸光度に従って、ペプチドを定量した。
【０２９４】
実験は、９６ウェルのＣｏｓｔａｒポリスチレンプレート中で実施した。ビオチン化されたペプチド及びユーロピウム化されたＶＣＢを、以下の緩衝液中に懸濁した。１００ｍＭＨＥＰＥＳ７．５、０．１ＭＮａＣｌ、０．１％ＢＳＡ及び０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０。Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ（Ｐａｃｋａｒｄ）上でプレートを読み取る前に、１時間振盪することによって、試薬を平衡状態に到達させた。データ出力は、３２０ｎｍの励起から生じた６６５ｎｍと６２０ｎｍの発光シグナルの比である。
【０２９５】
図１に示されているように、ストレプトアビジンＡＰＣに結合された、ヒドロキシプロリン修飾されたＨＩＦ１αペプチドとの、ユーロピウム化されたＶＣＢの特異的相互作用は、バックグラウンドシグナルを上回る検出可能な蛍光シグナルを生成した。これらの結果は、ｈｙｐ−ＨＩＦ１αペプチドとのＥｕ−ＶＣＢの特異的相互作用によって生成された蛍光シグナルを示す。各バーは、９６ウェルのアッセイプレートの単一ウェルから得られたデータを表す。対照プレート（非修飾ペプチド）から得られたデータから、シグナル対バックグラウンド比を計算した。横列にわたってＥｕ−ＶＣＢ濃度を滴定し（ｎＭ）、ストレプトアビジンＡＰＣ濃度は縦列方向に滴定した。ペプチド濃度は、１００ｎＭに固定した。
【０２９６】
ＨＩＦＰＨＤ２による酵素的に転化されたヒドロキシプロリルＨＩＦ−１αの検出及びＨＩＦＰＨＤ２活性の阻害
均一時間分解ＦＲＥＴ（ＴＲ−ＦＲＥＴ）技術を用いて、ＶＣＢへのＰ５６４−ＨＩＦ１αペプチドの結合を検証した。ＨＩＦ１αタンパク質のアミノ酸配列５５８から５７４に対応するＮ末端標識されたビオチン分子を有する１７アミノ酸（１７ａａ）ペプチドを自社合成した（ＤＬＥＭＬＡＰＹＩＰＭＤＤＤＦＱＬ（配列番号６））。ＶＣＢによって認識されるタンパク質のＰＨＤ酵素によって転化された生成物形態を模倣するために、５６４位に水酸化されたプロリンを含有する第二の１７アミノ酸ペプチドを化学的に作製した。５０ｍＭＴｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ８）、１００ｍＭＮａＣｌ、０．０５％熱不活化ＦＢＳ、０．０５％Ｔｗｅｅｎ−２０及び０．５％ＮａＮ３を含有する緩衝液中において、１００μＬの最終容量でアッセイを行った。バックグラウンドを上回る最適なシグナル及び検出の線形域は、ストレプトアビジンＡＰＣの５０ｎＭを加えて、０と５０ｎＭの間の変動濃度のＶＣＢ−Ｅｕの滴定で、０と１μＭの間の変動濃度の水酸化された又は水酸化されていないペプチドを滴定することによって決定した。Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ（Ｐａｃｋａｒｄ）上で読み取る前に、１時間振盪することによって、結合試薬を平衡状態に到達させた。データ出力は、３２０ｎｍの励起から生じた６６５ｎｍと６２０ｎｍの発光シグナルの比である。
【０２９７】
ＴＲ−ＦＲＥＴフォーマットで、Ｐ５６４−ＨＩＦ１αペプチド及びＶＣＢ結合によってＨＩＦＰＨＤ２活性を検出した。１００μＬの最終容量で、５０ｍＭＴｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．５）、１００ｍＭＮａＣｌ、０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０、２ｍＭ２−オキソグルタラート（２−ＯＧ）、２ｍＭアスコルビン酸及び１００μＭＦｅＣｌ２を含有する緩衝液中の３μＭＨＩＦ１αペプチドを用いて、０と４００ｎＭの間の様々な濃度でＨＩＦＰＨＤ２をアッセイした。酵素反応を終結させるために、５００ｍＭＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）、１ＭＮａＣｌ、１％ＢＳＡ及び０．５％Ｔｗｅｅｎ−２０を含有する１０×ＴＲ−ＦＲＥＴ緩衝液２５０μＬ中に反応２．５μＬを定期的に移すことによって、経時変化を測定した。１０×ＴＲ−ＦＲＥＴ緩衝液中に、１００μＬの最終容量になるように、３５ｎＭストレプトアビジン−ＡＰＣ及び１０ｎＭＶＣＢ−Ｅｕへ、終結された反応から得られた１５ｎＭＨＩＦ−１αペプチドを添加した。Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙプラットフォーム上での検出前に、ＴＲ−ＦＲＥＴ試薬を振盪装置上に１時間配置した。
【０２９８】
図２Ａ及び２Ｂに示されているように、ペプチドの水酸化されていない形態と比べて、水酸化されたＰ５６４−ＨＩＦ１αペプチドのＶＣＢ−Ｅｕへの結合から生じるＴＲ−ＦＲＥＴシグナルの用量依存性の増加が存在し、１２５ｎＭＨＩＦ１αペプチドで、１４倍のシグナル対ノイズ比率をもたらした。ＡＰＣ結合されたペプチドへのＶＣＢ結合は、ＥｕとＡＰＣの間でＦＲＥＴ転移を可能とする。３．２１５ｎＭＶＣＢを用いると、シグナルは２ｎＭペプチドまで線形であるが、５０ｎＭＶＣＢを用いると、６２．５ｎＭペプチドまで増加し、より大きな線形域をもたらす。
【０２９９】
Ｅｕ標識されたＶＣＢを使用するＴＲ−ＦＲＥＴ検出は、ＨＩＦＰＨＤ２触媒活性を測定するための実用的な系である。ＨＩＦ１αペプチドのＨＩＦＰＨＤ２水酸化は、ペプチドへのＶＣＢの親和性の増加をもたらし、従って、増加したＦＲＥＴシグナルをもたらす。図３Ａ及び３Ｂに示されているように、活性は、経時的に、かなり線形の増加するＴＲ−ＦＲＥＴシグナルによって確認された。最大４００ｎＭまでＨＩＦＰＨＤ２酵素濃度を増加させるにつれて、初速度の用量依存性増加が存在した。初速度は、１００ｎＭ酵素まで線形であった。
【０３００】
ＴＲ−ＦＲＥＴ技術を用いて、ＨＩＦＰＨＤ２活性の阻害を定量した。ＨＩＦＰＨＤ２は、Ｐ５６４−ＨＩＦ１αペプチド基質（ビオチン−ＤＬＥＭＬＡＰＹＩＰＭＤＤＤＦＱＬ（配列番号７））のプロリン残基上でのヒドロキシル修飾を触媒し、ユーロピウム化されたフォン・ヒッペル−リンダウタンパク質（ｐＶＨＬ）、エロンギンＢ及びエロンギンＣヘテロ三量体（ＶＣＢ−Ｅｕ）複合体の認識及び結合をもたらす。
【０３０１】
３０ｍＭＭＥＳ、ｐＨ６、１０ｍＭＮａＣｌ、０．２５％Ｂｒｉｊ−３５、０．０１％ＢＳＡ及び１％ＤＭＳＯを含有するＰＨＤ２反応緩衝液中に、１７８．５７μＭになるように新たに溶解されたＦｅＣｌ２の添加（１００μＭの最終濃度）によって、ＰＨＤ２阻害アッセイを実行した。１００％ＤＭＳＯ（最終５％ＤＭＳＯ）中に系列希釈された鉄溶液２８μＬ及び阻害剤化合物２μＬを、黒いポリプロピレン９６ウェルマイクロタイタープレートに添加した。これに、列１２の８ウェル（ＬＯ対照）を除き、プレートの全てのウェルに１０ｎＭＰＨＤ２（最終２ｎＭ）の１０μＬを添加し、室温で１時間、振盪装置上で温置させた。行６は、ＰＨＤ２酵素及び５％ＤＭＳＯビヒクルを含有するが、阻害剤化合物を含まないＨＩ対照であった。ＰＨＤ２酵素反応を開始させるために、ＰＨＤ２反応緩衝液中の５００ｎＭＰ５６４−ＨＩＦ１αペプチド（最終１００ｎＭ）、１０ｍＭアスコルビン酸（最終２ｍＭ）及び１．２５μＭ２−オキソグルタラート（α−ケトグルタラート；最終０．２５μＭ）を含有する溶液１０μＬをプレートの全てのウェルに添加し、室温で１時間、振盪装置上で温置した。
【０３０２】
１５０ｍＭスクシナート（生成物阻害剤；最終５０ｍＭ）、７５ｎＭストレプトアビジン−ＡＰＣ（最終２５ｎＭ）及び７．５ｎＭＶＣＢ−Ｅｕ（最終２．５ｎＭ）を含有するＴＲ−ＦＲＥＴ緩衝液２５μＬ（５０ｍＭＴＲＩＳ−ＨＣｌ、ｐＨ９、１００ｍＭＮａＣｌ、０．０５％ＢＳＡ及び０．５％Ｔｗｅｅｎ−２０）の添加によって、反応を終結させた。Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙプラットフォーム（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）上での読み取り前に、結合平衡状態に到達させるために、ＴＲ−ＦＲＥＴ検出試薬を振盪装置上に１時間配置した。ユーロピウムは３１５ｎｍで励起され、大きなストークスシフトを伴って、６１５ｎｍでリン光を発光する。続いて、ＡＰＣは、６１５ｎｍで励起されると、６５５ｎｍで発光する。ＴＲ−ＦＲＥＴシグナルは、内部ユーロピウム標準６１５ｎｍ発光シグナルによって除されたＡＰＣ６５５ｎｍシグナルの比率として測定される。
【０３０３】
ＰＯＣ（対照のパーセント）は、阻害剤化合物を含有する酵素反応中での水酸化されたペプチド基質から得られたシグナルを、ＤＭＳＯビヒクルのみを加えたＰＨＤ２酵素（ＨＩ対照）及び酵素なし（ＬＯ対照）から得られたものと比較することによって測定した。ＰＯＣは、式：％対照（ＰＯＣ）＝（ｃｐｄ−平均ＬＯ）／（平均ＨＩ−平均ＬＯ）×１００を用いて計算した。レーベンバーグ・マルカート非線形回帰アルゴリズムを用いて、データ（ＰＯＣ及びμＭでの阻害剤濃度からなる。）を４−パラメータ式（ｙ＝Ａ＋（（Ｂ−Ａ）／（１＋（ｘ／Ｃ）＾Ｄ）））（Ａは最小のｙ（ＰＯＣ）値であり、Ｂは最大のｙ（ＰＯＣ）であり、Ｃは変曲点のｘ（化合物濃度）であり、Ｄは勾配係数である。）に適合させた。
【０３０４】
ある種の実施形態において、本発明の化合物は、４０μＭ又はそれ以下のＨＩＦＰＨＤ阻害活性ＩＣ５０値を示す。さらなる実施形態において、本発明の化合物は１０μＭ又はそれ以下のＨＩＦＰＨＤ阻害活性ＩＣ５０値を示し、さらなる実施形態において、本発明の化合物は５μＭ又はそれ以下のＨＩＦＰＨＤ阻害活性ＩＣ５０値を示す。
【０３０５】
以下の表は、本明細書中に記載されている様々な実施例の化合物に対して、本明細書に記載されている手順を用いて得られたＰＨＤ２ＩＣ５０値を含む。
【０３０６】
【表４】
2010524942.tif 000046
2010524942.tif 000047
【０３０７】
コハク酸への２−オキソグルタラートの転化の放射分析ＨＰＬＣ測定によって測定されたコラーゲンプロリルヒドロキシラーゼＩ及びＩＩ活性
以下に記載されているアッセイ法を用いてコラーゲンプロリルヒドロキシラーゼＩ（ＣＰＨ１）及びコラーゲンプロリルヒドロキシラーゼＩＩ（ＣＰＨ２）に関して、実施例の化合物に対するＩＣ５０値が得られた。驚くべきことに、分子の側鎖中のアミドＮをＣ原子で置換することによって、ＣＰＨ１及びＣＰＨ２に関して、ＰＨＤ２に対する実施例化合物の選択性が大幅に増大した。
【０３０８】
ジチオスレイトール（ＤＴＴ）、アスコルバート及びカタラーゼに対する依存性を確定するために、並びに２−オキソグルタラート（２−ＯＧ；ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  ＬＡＳ，  Ｓｈｅｌｔｏｎ，  ＣＴ又はＭｏｒａｖｅｋ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ，  Ｂｒｅａ，  ＣＡ）、ＦｅＳＯ４及び（Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ）１０ペプチド（ＰＰＧ１０；Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，  Ｌｏｕｉｓｖｉｌｌｅ，  ＫＹ）に対する反応線形性及びＫｍ値を確定するために、個別の研究においてアッセイ条件を確立した。少なくとも４０％の転化までは、線形性が明白であったが、典型的には、反応は、コハク酸（ＳＡ）への２−ＯＧの３０％の転化を超えなかった。生成物阻害は明瞭でなかった。効力測定のために、１００％ＤＭＳＯ中に化合物を溶解し、系列希釈した。アッセイ緩衝液は、Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ７．５、０．２ｍＭＤＴＴ及び０．５ｍｇ／ｍＬカタラーゼからなった。ＰＰＧ１０ペプチドを０．２５％酢酸中に溶解し、５分間沸騰させることによって変性させ、次いで、５分間氷上に配置した。次いで、１Ｍアスコルバートとともに、変性されたＰＰＧ１０を予め混合し、水の中に調製し、５×ペプチド及びアスコルバートの作業溶液を得るために、アッセイ緩衝液で混合物を希釈した。ＦｅＳＯ４を新たに水の中に溶解し、２．８×濃度になるように、アッセイ緩衝液中に希釈した。５×濃度になるように、酵素原液をアッセイ緩衝液中に希釈した。ＦｅＳＯ４溶液を加えた実施例化合物を混合した後、５×酵素溶液を添加した。室温で穏やかに１０分間混合した後、５×ペプチド溶液を添加した。室温でさらに１０分間穏やかに混合した後、反応を開始するために２−ＯＧの５×原液を添加した。アッセイ中での最終濃度は、５０ｍＭＴｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ７．５、０．２ｍＭＤＴＴ、０．５ｍｇ／ｍＬカタラーゼ、１０μＭＦｅＳＯ４、１００μＭＰＰＧ１０、５０μＭ５−［ｌ４Ｃ］−２−オキソグルタラート（２３−３７ｃｐｍ／ｐｍｏｌ）、１ｍＭアスコルバート及び４％ＤＭＳＯであった。室温で１時間、反応を穏やかに混合し、０．０２ＮＨ２ＳＯ４の等容量の添加によって停止させた。別段の記載がなければ、全ての試薬はＳｉｇｍａから購入し、入手可能な最高等級のものであった。
【０３０９】
移動相として０．０１ＮＨ２ＳＯ４を用い、０．３ｍＬ／分の速度で、ＰｏｌｙｐｏｒｅＨカラム（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ，  Ｗａｌｔｈａｍ，  ＭＡ）中に、停止された各反応の一部を自動注射した。用いたＨＰＬＣ法は、「Ｃｕｎｌｉｆｆ、他（Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｊ．，  ２４０，  ６１７−６１９（１９８６））及びＫａｕｌｅ  ａｎｄ  Ｇｕｎｚｌｅｒ（Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，  １８４，  ２９１−２９７（１９９０））によって記載されたように、イオン交換樹脂上にて、低ｐＨで、生成物からクロマトグラフィーによって基質を分離するために、２−ＯＧ及びＳＡカルボキシラートのｐＫａの差を活用する。生成物を基質から分割するために、二重の四極ポンプ、カラム切り替えバルブ及び二重カラムを備えたＡｇｉｌｅｎｔ１１００ＨＰＬＣＳｙｓｔｅｍを使用した。Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ  Ｄｅｔｅｃｔｏｒは、２１０ｎｍでの基質及び生成物ピークのＵＶ吸収を示し、Ｉｎ−Ｆｌｏｗ２：１シンチレーションカクテルを用いるＢｅｔａ−ＲＡＭＭｏｄｅｌ２放射線検出装置（ＩＮ／ＵＳ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  Ｉｎｃ．）が２つの放射性ピークの定量を可能にした。放射性測定のデータを収集及び分析するために、ＬａｕｒａＬｉｔｅソフトウェア（ＩＮ／ＵＳ，Ｔａｍｐａ，ＦＬ）を使用した。ＡＵＣ測定を２−ＯＧのパーセント代謝回転へ変換した。研究間で標準化するために、それぞれ、低対照及び高対照として、酵素又は阻害剤を欠如する反応を用いて対照のパーセント（ＰＯＣ）値に２−ＯＧの転化を標準化した。ＰＯＣデータは、ＡｃｔｉｖｉｔｙＢａｓｅ（ＩＤＢＳ，  Ａｌａｍｅｄａ  ＣＡ）を用いて４パラメータロジスティックモデル（Ａ＋（（Ｂ−Ａ）／（１＋（（ｘ／Ｃ）＾Ｄ））））（Ａは最小のＰＯＣ値であり、Ｂは最大のＰＯＣ値であり、Ｄは勾配係数であり、Ｃは変曲点での化合物濃度（ＩＣ５０、μＭ）である。）に適合させた。
【０３１０】
ＣＰＨ１及びＣＰＨ２酵素のクローニング及び発現
トリコプルシア・ニー昆虫細胞中でコラーゲンプロリル４−ヒドロキシラーゼ（ＣＰＨ）を発現させるために、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎから入手したＢａｃｕｌｏｖｉｒｕｓ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ｖｅｃｔｏｒ  Ｓｙｓｔｅｍ（ＢＥＶＳ）を使用した。活性を有するコラーゲンプロリル４−ヒドロキシラーゼは、α２β２四量体として存在するオリゴマータンパク質である。四量体中に取り込まれたαサブユニットは、コラーゲンプロリル４−ヒドロキシラーゼα１（ＧｅｎＢａｎｋ参照配列ＮＭ ０００９１７）又はコラーゲンプロリル４−ヒドロキシラーゼα２（ＧｅｎＢａｎｋ参照配列ＮＭ ００４１９９）の何れかであり得る。βサブユニット、コラーゲンプロリル４−ヒドロキシラーゼβ（ＧｅｎＢａｎｋ参照配列ＮＭ ０００９１８）は、四量体の両形態に共通である。３つのサブユニットα１、α２及びβをコードする遺伝子を、固有のヒト分泌シグナル配列を含むそれらの前駆体形態で、別々のｐＦａｓｔＢａｃ１シャトルベクター（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）中に個別にクローニングした。発現されたタンパク質を同定する目的で、αサブユニット遺伝子は、遺伝子の５’末端にカスパーゼ−３切断可能な６ヒスチジン金属アフィニティー配列を含んだ。発現されたタンパク質中では、金属アフィニティータグ（ＭＡＨＨＨＨＨＨＤＥＶＤ）（配列番号８）は、分泌シグナル配列の上流にあるαサブユニットＮ末端に位置していた。同定及び精製のために、切断及び小胞体中への分泌後に金属アフィニティータグが残存するように、分泌シグナルペプチドの下流に位置する６ヒスチジン金属アフィニティータグをコードするようにβサブユニット遺伝子を設計した。それぞれのサブユニットポリペプチドを発現することができるバキュロウイルスを作製するために、それぞれ、これらの組換えｐＦａｓｔＢａｃ１シャトルベクターを使用した。２７℃でＣＰＨ−α１及びＣＰＨ−β又はＣＰＨ−α２及びＣＰＨ−βバキュロウイルスの何れかを同時発現させることによって、酵素の活性な四量体形態を作製した。遠心によって、感染から４８時間後に細胞を採集した。
【０３１１】
タンパク質配列
スラッシュ記号（／）の前の配列は、小胞体中への分泌に際してインビボで除去された。以下のパラグラフにおいて、ＳＳは分泌シグナル配列を表す。
【０３１２】
【化３５】
2010524942.tif 000048
【０３１３】
【化３６】
2010524942.tif 000049
2010524942.tif 000050
【０３１４】
【化３７】
2010524942.tif 000051
【０３１５】
ＣＰＨ酵素の精製及び性質決定
２５ｍＭＴｒｉｓ（ｐＨ７．８）、０．１５ＭＮａＣｌ、１０％グリセロール、０．１％Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００及び完全な“遊離”プロテアーゼ阻害剤カクテル（Ｒｏｃｈｅ）中にＴ．ニー細胞を再懸濁し、微小流動装置によって溶解した。遠心によって可溶化液を清澄化し、２ｍＬ／分でＮｉ−ＮＴＡカラムに適用する前に、０．４５μｍ酢酸セルロース膜を通してろ過した。２５ｍＭイミダゾールでカラムを洗浄し、２０ｍＭＴｒｉｓ７．８、０．１５ＭＮａＣｌ、１０％グリセロール、０．１％ＣＨＡＰＳ及び２５０ｍＭイミダゾールを含有する緩衝液を用いてタンパク質を溶出した。ピーク画分をプールし、２０ｍＭＴｒｉｓ（ｐＨ７．８）、０．１５ＭＮａＣｌ、１０％グリセロール及び０．１％ＣＨＡＰＳで平衡化されたＳｕｐｅｒｄｅｘ２００ＸＫ２６／６０カラム（ＧＥＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）に適用された。Ｅｄｍａｎ配列決定によって、タンパク質の正体を確認し、光散乱によってα２β２ヘテロ二量体の形成を検出した。２８０ｎｍでの計算されたモル吸光係数に従ってタンパク質濃度を求め、通例、酵素を液体窒素中に瞬間凍結し、−８０℃で保存した。
【０３１６】
以下の表は、本明細書中に記載されている様々な比較及び実施例の化合物に対して、本明細書に記載されている手順を用いて得られたＰＨＤ２、ＣＰＨ１及びＣＰＨ２ＩＣ５０値を含む。以下の表に示されているように、側鎖中のＮ原子をＣ原子に置換することによって、本発明の化合物中のＣＰＨ１及びＣＰＨ２の両方に関して、ＰＨＤ２に対する化合物の選択性の著しい驚くべき増加が生じる。従って、幾つかの実施形態において、本発明は、ＣＰＨ１に関してＰＨＤ２に対する化合物の選択性が５より大きい、８より大きい、１０より大きい、１５より大きい、２０より大きい、又はさらに大きい、前記実施形態の何れかの化合物を提供する。これらの目的のための選択性は、化合物のＰＨＤ２ＩＣ５０値によって化合物のＣＰＨ１ＩＣ５０値を除することによって測定することができる（ＩＣ５０値は、本明細書中に記載されている方法を用いて決定される。）。
【０３１７】
【表５】
2010524942.tif 000052
【０３１８】
本発明の化合物によるエリスロポエチンの刺激
１８ゲージの２’’使い捨て給餌針（Ｐｏｐｐｅｒ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，  Ｎｅｗ  Ｈｙｄｅ  Ｐａｒｋ，  ＮＹ）を用いて、経口強制補給を介して、試験化合物又はビヒクル（２％ヒドロキシプロピルメチルセルロース、１％Ｔｗｅｅｎ８０、０．０７５ＮＮａＯＨ、ＨＣｌを用いてｐＨ９）を、体重約２２０から２４０ｇの雌のＳｐｒａｇｅｕ−Ｄａｗｌｅｙラット（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，  Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ，  ＭＡ）に単回経口投与した。投与から０．５と４８時間後の間の様々な時点で、２３ゲージの３／４’’翼状針を用いて、血液約１５０μＬを尾静脈から集めた。ＥＤＴＡを含有する収集チューブ（Ｇｒｅｉｎｅｒ  Ｂｉｏ−Ｏｎｅ，  Ｋｒｅｍｓｍｕｎｓｔｅｒ，  Ａｕｓｔｒｉａ）の中に血液を移し、血漿を集めるために、４℃、１０，０００ｒｐｍで、８分間遠心した。投与から４８時間後に、ＣＯ２吸入を介して動物を屠殺し、２０ゲージの１’’針での心臓穿刺を介して血液３から４ｍＬを集め、ＥＤＴＡを含有する収集チューブの中及び血清分離装置チューブ（Ｇｒｅｉｎｅｒ  Ｂｉｏ−Ｏｎｅ，  Ｋｒｅｍｓｍｕｎｓｔｅｒ，  Ａｕｓｔｒｉａ）中に分取した。血漿及び血清収集に関して上述されているように、血液を遠心した。ＭＳＤラットＥＰＯアッセイ（Ｍｅｓｏ  Ｓｃａｌｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ，  Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ、ＭＤ）を用いて各時点から得られた血清をエリスロポエチンに関して分析して、結果が図４に示されている。実施例化合物４、７及び８の各々は、ビヒクルの投与に対応するデータと比較すると明らかであるように、投与後のエリスロポエチンの劇的な増加をもたらした。
【０３１９】
本明細書中で引用される全ての刊行物及び特許出願は、各個々の刊行物又は特許出願が、参照により本明細書によって組み込まれることが、具体的かつ個々に示されるごとく、及び各参考文献全体が完全に記載されているごとく、参照により、あらゆる目的のために、その全体が本明細書に組み込まれる。前述の発明は、明瞭に理解できるように図示及び実施例によってある程度詳細に説明してきたが、添付される特許請求の範囲の精神又は範囲から逸脱することなく、本発明に対してある変更及び改変がなされ得ることは、本発明の教示に照らして当業者には容易に明らかとなろう。
【図１】
2010524942.tif 000055
【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図３Ａ】
2010524942.tif 000058
【図３Ｂ】
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【図４】
2010524942.tif 000060
【配列表】
2010524942000001.app
【国際調査報告】
2010524942.tif 000061
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