(57)【要約】  本発明は、タンパク質キナーゼ阻害剤として有用である化合物および医薬組成物、ならびに異常または脱制御のキナーゼ活性と関連する状態を処置、改善または予防するためのこのような化合物を使用するための方法を提供する。いくつかの態様において、本発明は、ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢ、ＴｒｋＣ、Ａｂｌ、Ｂｃｒ−Ａｂｌ、ｃＳｒｃ、ＴＰＲ−Ｍｅｔ、Ｔｉｅ２、ＭＥＴ、ＦＧＦＲ３、オーロラ、Ａｘｌ、Ｂｍｘ、ＢＴＫ、ｃ−ｋｉｔ、ＣＨＫ２、Ｆｌｔ３、ＭＳＴ２、ｐ７０Ｓ６Ｋ、ＰＤＧＦＲ、ＰＫＢ、ＰＫＣ、Ｒａｆ、ＲＯＣＫ−ＩＩ、Ｒｓｋ１およびＳＧＫキナーゼまたはそれらの組合せの異常活性化を含む疾患または障害を処置、改善または予防するためのこのような化合物を使用するための方法を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（１）：
【化１】
2010505859.tif 000016
〔式中：
Ｗ１、Ｗ２、Ｗ３、Ｗ４、Ｗ５、Ｗ６、Ｗ７、Ｗ８、Ｗ９およびＷ１０は、独立して、ＣまたはＮである；ただし、Ｌ、Ｙ、Ｒ１およびＲ２が結合しているとき、Ｗ１、Ｗ２、Ｗ３、Ｗ４、Ｗ５、Ｗ６、Ｗ７、Ｗ８、Ｗ９およびＷ１０のそれぞれはＣであり；
Ｑは、Ｎ、ＮＮＲ、ＮＯまたはＣＲ０であり；
Ｌは、結合、−Ｏ−、−ＮＲＣ（Ｏ）−、−ＮＲＣ（Ｏ）ＮＲ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ−、−ＮＲ−またはＳであり；
Ｒ０、Ｒ１およびＲ２は、独立して、ハロ；所望により、ハロゲン化されているか、または、所望により、Ｎ、ＯまたはＳで置換されていてもよい、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニルまたはＣ３−６アルキニル；または、所望により置換されているアリール、ヘテロアリール、炭素環式環またはヘテロ環式環であるか；または、Ｒ０はＨであり；
それぞれのＲは、ＨまたはＣ１−６アルキルであり；
ＸおよびＺは、独立して、所望により置換されているアリール、ヘテロアリール、ヘテロ環式環または炭素環式環であり；
Ｙは、所望により置換されているヘテロアリールであり；
あるいは、環Ａが、Ｙと一体となって、縮合ヘテロアリールを形成するか；または、ＹおよびＺが、一体となって、縮合ヘテロアリールを形成してもよく；
ｍは、０−４であり；そして、
ｎは、０−３である〕
を有する化合物またはその薬学的に許容される塩または互変異性体；
ただし、該化合物は、３−（１Ｈ−ピロール−２−イルメチレン）−６−｛３−［３−（３−トリフルオロメチル−フェニル）−［１，２，４］オキサジザソール−５−イル］−フェニルアミノ｝−１，３−ジヒドロ−インドル−２−オンではない。
【請求項２】
Ｘ、ＹおよびＺが、独立して、Ｎ、ＯまたはＳを有する、所望により置換されている５−７員ヘテロアリールであるか；またはＺが所望により置換されている５−７員アリールである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
ＸおよびＹが、独立して、所望により置換されているピロリル、イミダゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、ピリジル、ピリミジニル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、ピラゾリル、フラニルまたはオキサジアゾリルであるか；または、環Ａが、Ｙと一体となって、ベンゾイミダゾリルを形成する、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｚが、所望により置換されているフェニル、ピリジルまたはフラニルであるか；または、ＹおよびＺが、一体となって、ベンゾイミダゾリルを形成する、請求項１−３のいずれかに記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ１およびＲ２が、独立して、ハロ、または、所望により、ハロゲン化されたＣ１−６アルキルまたはＣ１−６アルコキシである、請求項１−４のいずれかに記載の化合物。
【請求項６】
Ｌが結合またはＮＨである、請求項１−５のいずれかに記載の化合物。
【請求項７】
ＱがＣＲ０であり、そして、Ｒ０がＨまたはＣ１−６アルキルである、請求項１−６のいずれかに記載の化合物。
【請求項８】
Ｗ１、Ｗ２、Ｗ３、Ｗ４、Ｗ５、Ｗ６、Ｗ７、Ｗ８、Ｗ９およびＷ１０のそれぞれがＣである、請求項１−７のいずれかに記載の化合物。
【請求項９】
Ｗ５、Ｗ６、Ｗ７、Ｗ８、Ｗ９およびＷ１０の２個がＮであり、その他がＣである、請求項１−７のいずれかに記載の化合物。
【請求項１０】
該化合物が、式（２）：
【化２】
2010505859.tif 000017
〔式中、Ｒ１およびＲ２は、独立して、ハロ、または、所望により、ハロゲン化されているＣ１−６アルキルまたはＣ１−６アルコキシであり；
Ｗ５およびＷ９は、独立して、ＣまたはＮである；ただし、Ｒ１が結合しているとき、Ｗ５およびＷ９のそれぞれはＣであり；
ＸおよびＹは、独立して、所望により置換されているヘテロアリールであり；
Ｚは、所望により置換されているアリールまたはヘテロアリールであり；
あるいは、環Ａが、Ｙと一体となって、縮合ヘテロアリールを形成するか；または、ＹおよびＺが、一体となって、縮合ヘテロアリールを形成してもよく；そして、
ｍおよびｎは、独立して、０−２である〕
で示される化合物である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｘが、所望により置換されているピロリルまたはイミダゾリルである、請求項１０に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｙがイミダゾリル、トリアゾリル、ピラゾールまたはオキサジアゾリルであるか；または、環Ａが、Ｙと一体となって、ベンゾイミダゾリルを形成する、請求項１０または１１に記載の化合物。
【請求項１３】
Ｚが、所望により置換されているフェニル、ピリジルまたはフラニルであるか；または、ＹおよびＺが、一体となって、ベンゾイミダゾリルを形成する、請求項１０−１２のいずれかに記載の化合物。
【請求項１４】
該化合物が、
【化３】
2010505859.tif 000018
【化４】
2010505859.tif 000019
【化５】
2010505859.tif 000020
【化６】
2010505859.tif 000021
からなる群から選択される請求項１−１３のいずれかに記載の化合物。
【請求項１５】
治療有効量の請求項１−１４のいずれかに記載の化合物および薬学的に許容される担体を含む医薬組成物。
【請求項１６】
ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢ、ＴｒｋＣ、Ａｂｌ、Ｂｃｒ−Ａｂｌ、ｃＳｒｃ、ＴＰＲ−Ｍｅｔ、Ｔｉｅ２、ＭＥＴ、ＦＧＦＲ３、オーロラ、Ａｘｌ、Ｂｍｘ、ＢＴＫ、ｃ−ｋｉｔ、ＣＨＫ２、Ｆｌｔ３、ＭＳＴ２、ｐ７０Ｓ６Ｋ、ＰＤＧＦＲ、ＰＫＢ、ＰＫＣα、Ｒａｆ、ＲＯＣＫ−ＩＩ、Ｒｓｋ１およびＳＧＫキナーゼからなる群から選択されるキナーゼまたはそれらの組合せが介在する状態の処置のための薬物の製造における、請求項１−１４のいずれかに記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩または医薬組成物の使用。
【請求項１７】
該キナーゼがＴｒｋキナーゼである、請求項１６に記載の使用。
【請求項１８】
該状態が、細胞増殖性障害、慢性疼痛、骨痛、血管形成異常、関節炎、糖尿病、糖尿病性網膜症、黄斑変性症または乾癬である、請求項１６に記載の使用。
【請求項１９】
該細胞増殖性障害が、神経芽腫または乳房、前立腺もしくは膵臓の腫瘍もしくは癌である、請求項１８に記載の使用。
【請求項２０】
該細胞増殖性障害が、前立腺または膵臓の腫瘍または癌である、請求項１９に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本願は、２００６年１０月６日出願の米国仮特許出願６０／８５０，３６１（この出願を引用によりその全体を本明細書に包含させる）の優先権の利益を主張する。
【０００２】
技術分野
本発明は、タンパク質キナーゼ阻害剤およびこのような化合物を使用する方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
背景技術
タンパク質キナーゼは、広範囲の細胞過程の制御ならびに細胞機能の制御の維持の中心的役割を有する、タンパク質の大きなファミリーを代表する。これらのキナーゼの部分的、非限定的の一覧は、受容体チロシンキナーゼ、例えば、血小板由来増殖因子受容体キナーゼ（ＰＤＧＦＲ）、神経増殖因子受容体、ＴｒｋＢ、Ｍｅｔおよび繊維芽細胞増殖因子受容体、ＦＧＦＲ−３；非受容体チロシンキナーゼ、例えば、Ａｂｌおよび融合キナーゼＢｃｒ−Ａｂｌ、Ｌｃｋ、Ｃｓｋ、Ｆｅｓ、ＢｍｘおよびＳｒｃ；ならびにセリン／スレオニンキナーゼ、例えばＢ−Ｒａｆ、Ｃ−Ｒａｆ、Ｓｇｋ、ＭＡＰキナーゼ（例えば、ＭＫＫ４、ＭＫＫ６など）およびＳＡＰＫ２α、ＳＡＰＫ２βおよびＳＡＰＫ３を含む。異常なキナーゼ活性は、良性および悪性増殖性障害、ならびに免疫系および神経系の不適切な活性化に由来する疾患を含む、多くの疾患状態で観察されている。
【発明の概要】
【０００４】
発明の開示
本発明は、タンパク質キナーゼ阻害剤として有用であり得る化合物およびその医薬組成物を提供する。
【０００５】
１つの局面において、本発明は、式（１）：
【化１】
2010505859.tif 000002
〔式中：
Ｗ１、Ｗ２、Ｗ３、Ｗ４、Ｗ５、Ｗ６、Ｗ７、Ｗ８、Ｗ９およびＷ１０は、独立して、ＣまたはＮである；ただし、Ｌ、Ｙ、Ｒ１およびＲ２が結合しているとき、Ｗ１、Ｗ２、Ｗ３、Ｗ４、Ｗ５、Ｗ６、Ｗ７、Ｗ８、Ｗ９およびＷ１０のそれぞれはＣであり；
Ｑは、Ｎ、ＮＮＲ、ＮＯまたはＣＲ０であり；
Ｌは、結合、−Ｏ−、−ＮＲＣ（Ｏ）−、−ＮＲＣ（Ｏ）ＮＲ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ−、−ＮＲ−またはＳであり；
Ｒ０、Ｒ１およびＲ２は、独立して、ハロ；所望により、ハロゲン化されているか、または、所望により、Ｎ、ＯまたはＳで置換されていてもよい、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニルまたはＣ３−６アルキニル；または、所望により置換されているアリール、ヘテロアリール、炭素環式環またはヘテロ環式環であるか；または、Ｒ０はＨであり；
それぞれのＲは、ＨまたはＣ１−６アルキルであり；
ＸおよびＺは、独立して、所望により置換されているアリール、ヘテロアリール、ヘテロ環式環または炭素環式環であり；
Ｙは、所望により置換されているヘテロアリールであり；
あるいは、環Ａが、Ｙと一体となって、縮合ヘテロアリールを形成するか；または、ＹおよびＺが、一体となって、縮合ヘテロアリールを形成してもよく；
ｍは、０−４であり；そして、
ｎは、０−３である〕
を有する化合物またはその薬学的に許容される塩または互変異性体を提供する；
ただし、該化合物は、３−（１Ｈ−ピロール−２−イルメチレン）−６−｛３−［３−（３−トリフルオロメチル−フェニル）−［１，２，４］オキサジザソール−５−イル］−フェニルアミノ｝−１，３−ジヒドロ−インドル−２−オンではない。
【０００６】
上記式（１）において、Ｗ１、Ｗ２、Ｗ３、Ｗ４、Ｗ５、Ｗ６、Ｗ７、Ｗ８、Ｗ９およびＷ１０のそれぞれがＣであり得る。いくつかの例において、Ｗ１、Ｗ２、Ｗ３およびＷ４がそれぞれＣであり、そして、Ｗ５、Ｗ６、Ｗ７、Ｗ８、Ｗ９およびＷ１０の少なくとも１個がＮである。他の例において、Ｗ５、Ｗ６、Ｗ７、Ｗ８、Ｗ９およびＷ１０の２個がＮである。特定の例において、Ｒ１およびＲ２が、独立して、ハロ、または、所望により、ハロゲン化されているＣ１−６アルキルまたはＣ１−６アルコキシである。いくつかの例において、ｍが１であり、そしてｎが０である。
【０００７】
１つの局面において、本発明は、式（２）：
【化２】
2010505859.tif 000003
〔式中、Ｒ１およびＲ２は、独立して、ハロ、または、所望により、ハロゲン化されているＣ１−６アルキルまたはＣ１−６アルコキシであり；
Ｗ５およびＷ９は、独立して、ＣまたはＮである；ただし、Ｒ１が結合しているとき、Ｗ５およびＷ９のそれぞれはＣであり；
ＸおよびＹは、独立して、所望により置換されているヘテロアリールであり；
Ｚは、所望により置換されているアリールまたはヘテロアリールであり；
あるいは、環Ａが、Ｙと一体となって、縮合ヘテロアリールを形成するか；または、ＹおよびＺが、一体となって、縮合ヘテロアリールを形成してもよく；そして、
ｍおよびｎは、独立して、０−２である〕
を有する化合物を提供する。
【０００８】
上記式（１）および（２）において、ＸおよびＹが、独立して、Ｎ、ＯまたはＳを有する、所望により置換されている５−６員ヘテロアリールであり得る。例えば、ＸおよびＹが、独立して、所望により置換されているピロリル、イミダゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、ピリジル、ピリミジニル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、ピラゾリル、フラニルまたはオキサジアゾリルであり得る。特定の例において、Ｘが、所望により置換されているピロリルまたはイミダゾリルである。他の例において、Ｙが、イミダゾリル、トリアゾリル、ピラゾールまたはオキサジアゾリルである。さらに他の例において、環Ａが、Ｙと一体となって、ベンゾイミダゾリルを形成する。
【０００９】
上記式（１）および（２）において、Ｚが所望により置換されている５−７員アリールまたはヘテロアリールであり得る。例えば、Ｚが所望により置換されているフェニル、ピリジルまたはフラニルであり得る。他の例において、ＹおよびＺが、一体となって、ベンゾイミダゾリルを形成する。
【００１０】
上記式（１）および（２）において、Ｌが結合またはＮＨであり得る。いくつかの例において、ＱがＣＲ０であり、そしてＲ０がＨまたはＣ１−６アルキルである。
【００１１】
上記式（１）および（２）において、Ｘ、ＹおよびＺのそれぞれが、所望により、ハロで置換されているか、所望により、ハロゲン化されたＣ１−６アルキルまたはＣ１−６アルコキシであり得、ここで、炭素がＮ、ＯまたはＳから選択されるヘテロ原子；−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３Ｒ４、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ（ＣＲ２）ｋＮＲ３Ｒ４、（ＣＲ２）ｋＣＯ２Ｒ３、（ＣＲ２）ｋＣＮ、−ＮＲＳ（Ｏ）０−２Ｒ３、−Ｓ（Ｏ）０−２ＮＲ３Ｒ４、−ＮＲＳ（Ｏ）０−２ＮＲ３Ｒ４、Ｃ（Ｏ）ＮＲ（ＣＲ２）ｋＯＲ３またはＲ５で置換されていてもよく；
Ｒ３およびＲ４が、独立して、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−７シクロアルキルまたは５−１０員ヘテロ環式環、アリールもしくはヘテロアリール環であるか；または、Ｒ３およびＲ４が、ＮＲ３Ｒ４のＮと一体となって、所望により置換されている環を形成し；
Ｒ５が、Ｃ３−７シクロアルキル、５−１０員ヘテロ環式環、アリールまたはヘテロアリール環であり；
ｋが０−４であり；
ＲのそれぞれがＨまたはＣ１−６アルキルである。
【００１２】
いくつかの例において、Ｘが、所望により、所望によりハロゲン化されたＣ１−６アルキルまたはＣ１−６アルコキシ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３Ｒ４、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ（ＣＲ２）ｋＮＲ３Ｒ４、（ＣＲ２）ｋＣＯ２Ｒ３または（ＣＲ２）ｋＣＮで置換されていてもよく、ここで、Ｒ、Ｒ３およびＲ４が、独立して、ＨまたはＣ１−６アルキルであるか；または、Ｒ３およびＲ４が、ＮＲ３Ｒ４のＮと一体となって、所望により置換されている環、例えば、ピペリジニルを形成し得る。他の例において、Ｚは、所望により、Ｃ１−６アルキル、ハロゲン化Ｃ１−６アルキル（例えば、ＣＦ３）またはハロで置換されていてもよい。
【００１３】
他の局面において、本発明は、治療有効量の式（１）または（２）を有する化合物および薬学的に許容される担体を含む医薬組成物を提供する。
【００１４】
本発明は、また、治療有効量の式（１）または（２）を有する化合物またはそれらの薬学的に許容される塩または医薬組成物を処置を必要とする系または対象に投与し該キナーゼを阻害することを含む、キナーゼを阻害するための方法を提供する。１つの態様において、本発明は、ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢ、ＴｒｋＣ、Ａｂｌ、Ｂｃｒ−Ａｂｌ、ｃＳｒｃ、ＴＰＲ−Ｍｅｔ、Ｔｉｅ２、ＭＥＴ、ＦＧＦＲ３、オーロラ、Ａｘｌ、Ｂｍｘ、ＢＴＫ、ｃ−ｋｉｔ、ＣＨＫ２、Ｆｌｔ３、ＭＳＴ２、ｐ７０Ｓ６Ｋ、ＰＤＧＦＲ、ＰＫＢ、ＰＫＣα、Ｒａｆ、ＲＯＣＫ−ＩＩ、Ｒｓｋ１またはＳＧＫキナーゼ、またはそれらの組合せを阻害するための方法を提供する。さらに特に、本発明は、Ｔｒｋキナーゼ、例えば、ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢ、ＴｒｋＣ、またはそれらの組合せを阻害するための方法を提供する。
【００１５】
本発明は、また、異常なまたは脱制御されたキナーゼ活性と関連する状態を処置、改善または予防するために式（１）または（２）を有する化合物を使用するための方法を提供する。１つの態様において、本発明は、有効量の式（１）または（２）を有する化合物またはそれらの薬学的に許容される塩または医薬組成物を処置を必要とする系または対象に投与し該キナーゼ介在状態を阻害することを含む、ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢ、ＴｒｋＣ、Ａｂｌ、Ｂｃｒ−Ａｂｌ、ｃＳｒｃ、ＴＰＲ−Ｍｅｔ、Ｔｉｅ２、ＭＥＴ、ＦＧＦＲ３、オーロラ、Ａｘｌ、Ｂｍｘ、ＢＴＫ、ｃ−ｋｉｔ、ＣＨＫ２、Ｆｌｔ３、ＭＳＴ２、ｐ７０Ｓ６Ｋ、ＰＤＧＦＲ、ＰＫＢ、ＰＫＣα、Ｒａｆ、ＲＯＣＫ−ＩＩ、Ｒｓｋ１またはＳＧＫキナーゼ、またはそれらの組合せが介在する状態を処置するための方法を提供する。さらに特に、本発明は、Ｔｒｋキナーゼ、例えば、ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢ、ＴｒｋＣ、またはそれらの組合せが介在する状態を処置するための方法を提供する。
【００１６】
本発明の化合物を使用して処置し得る状態の例は、細胞増殖性障害、例えば、神経芽腫、または乳房、前立腺もしくは膵臓の腫瘍もしくは癌を含み、これに限定されない。特定の態様において、本発明の化合物は、前立腺癌または膵臓癌を処置するために使用し得る。本発明の化合物は、また、慢性疼痛、骨痛、血管形成異常、関節炎、糖尿病、糖尿病性網膜症、黄斑変性症または乾癬を処置するために使用し得る。
【００１７】
他の局面において、本発明は、キナーゼ、例えば、ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢ、ＴｒｋＣ、Ａｂｌ、Ｂｃｒ−Ａｂｌ、ｃＳｒｃ、ＴＰＲ−Ｍｅｔ、Ｔｉｅ２、ＭＥＴ、ＦＧＦＲ３、オーロラ、Ａｘｌ、Ｂｍｘ、ＢＴＫ、ｃ−ｋｉｔ、ＣＨＫ２、Ｆｌｔ３、ＭＳＴ２、ｐ７０Ｓ６Ｋ、ＰＤＧＦＲ、ＰＫＢ、ＰＫＣα、Ｒａｆ、ＲＯＣＫ−ＩＩ、Ｒｓｋ１またはＳＧＫキナーゼ、またはそれらの組合せを阻害するための、式（１）または（２）を有する化合物またはそれらの薬学的に許容される塩または医薬組成物の使用を提供する。１つの態様において、本発明は、Ｔｒｋキナーゼ、例えば、ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢ、ＴｒｋＣ、またはそれらの組合せを阻害するための式（１）または（２）を有する化合物またはそれらの薬学的に許容される塩または医薬組成物の使用を提供する。
【００１８】
さらに、本発明は、キナーゼ、例えば、ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢ、ＴｒｋＣ、Ａｂｌ、Ｂｃｒ−Ａｂｌ、ｃＳｒｃ、ＴＰＲ−Ｍｅｔ、Ｔｉｅ２、ＭＥＴ、ＦＧＦＲ３、オーロラ、Ａｘｌ、Ｂｍｘ、ＢＴＫ、ｃ−ｋｉｔ、ＣＨＫ２、Ｆｌｔ３、ＭＳＴ２、ｐ７０Ｓ６Ｋ、ＰＤＧＦＲ、ＰＫＢ、ＰＫＣα、Ｒａｆ、ＲＯＣＫ−ＩＩ、Ｒｓｋ１またはＳＧＫキナーゼ、またはそれらの組合せが介在する状態の処置のための薬物の製造における、式（１）または（２）を有する化合物またはそれらの薬学的に許容される塩または医薬組成物の使用を提供する。１つの態様において、本発明は、Ｔｒｋキナーゼ、例えば、ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢ、ＴｒｋＣ、またはそれらの組合せが介在する状態の処置のための薬物の製造における、式（１）または（２）を有する化合物またはそれらの薬学的に許容される塩または医薬組成物の使用を提供する。
【００１９】
本発明の化合物を使用するための上記方法において、式（１）または（２）を有する化合物を細胞または組織を含む系に投与し得る。他の態様において、式（１）または（２）を有する化合物をヒトまたは動物対象に投与し得る。
【００２０】
発明を実施するための形態
１つの局面において、本発明は、式（１）：
【化３】
2010505859.tif 000004
〔式中：
Ｗ１、Ｗ２、Ｗ３、Ｗ４、Ｗ５、Ｗ６、Ｗ７、Ｗ８、Ｗ９およびＷ１０は、独立して、ＣまたはＮである；ただし、Ｌ、Ｙ、Ｒ１およびＲ２が結合しているとき、Ｗ１、Ｗ２、Ｗ３、Ｗ４、Ｗ５、Ｗ６、Ｗ７、Ｗ８、Ｗ９およびＷ１０のそれぞれはＣであり；
Ｑは、Ｎ、ＮＮＲ、ＮＯまたはＣＲ０であり；
Ｌは、結合、−Ｏ−、−ＮＲＣ（Ｏ）−、−ＮＲＣ（Ｏ）ＮＲ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ−、−ＮＲ−またはＳであり；
Ｒ０、Ｒ１およびＲ２は、独立して、ハロ；所望により、ハロゲン化されているか、または、所望により、Ｎ、ＯまたはＳで置換されていてもよい、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニルまたはＣ３−６アルキニル；または、所望により置換されているアリール、ヘテロアリール、炭素環式環またはヘテロ環式環であるか；または、Ｒ０はＨであり；
それぞれのＲは、ＨまたはＣ１−６アルキルであり；
ＸおよびＺは、独立して、所望により置換されているアリール、ヘテロアリール、ヘテロ環式環または炭素環式環であり；
Ｙは、所望により置換されているヘテロアリールであり；
あるいは、環Ａが、Ｙと一体となって、縮合ヘテロアリールを形成するか；または、ＹおよびＺが、一体となって、縮合ヘテロアリールを形成してもよく；
ｍは、０−４であり；そして、
ｎは、０−３である〕
を有する化合物またはその薬学的に許容される塩または互変異性体を提供する；
ただし、該化合物は、３−（１Ｈ−ピロール−２−イルメチレン）−６−｛３−［３−（３−トリフルオロメチル−フェニル）−［１，２，４］オキサジザソール−５−イル］−フェニルアミノ｝−１，３−ジヒドロ−インドル−２−オンではない。
【００２１】
１つの局面において、本発明は、式（２）：
【化４】
2010505859.tif 000005
〔式中、Ｒ１およびＲ２は、独立して、ハロ、または、所望により、ハロゲン化されているＣ１−６アルキルまたはＣ１−６アルコキシであり；
Ｗ５およびＷ９は、独立して、ＣまたはＮである；ただし、Ｒ１が結合しているとき、Ｗ５およびＷ９のそれぞれはＣであり；
ＸおよびＹは、独立して、所望により置換されているヘテロアリールであり；
Ｚは、所望により置換されているアリールまたはヘテロアリールであり；
あるいは、環Ａが、Ｙと一体となって、縮合ヘテロアリールを形成するか；または、ＹおよびＺが、一体となって、縮合ヘテロアリールを形成してもよく；そして、
ｍおよびｎは、独立して、０−２である〕
を有する化合物を提供する。
【００２２】
上記式（１）および（２）において、Ｒ０、Ｒ１およびＲ２に対する他の部分は、当業者に知識内のものを使用でき、これはＯＲ、シアノ、アミノ、アミド、グアニジノ、ウレアイル（ureayl）、ニトロおよび他の無機置換基などを含み、これに限定しない。
【００２３】
式（１）および（２）を有する化合物は、タンパク質キナーゼ阻害剤として有用であり得る。例えば、式（１）または（２）を有する化合物およびそれらの薬学的に許容される塩、溶媒和物、Ｎ−オキシド、プロドラッグおよび異性体は、キナーゼ介在状態または疾患、例えば、ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢ、ＴｒｋＣ、Ａｂｌ、Ｂｃｒ−Ａｂｌ、ｃＳｒｃ、ＴＰＲ−Ｍｅｔ、Ｔｉｅ２、ＭＥＴ、ＦＧＦＲ３、オーロラ、Ａｘｌ、Ｂｍｘ、ＢＴＫ、ｃ−ｋｉｔ、ＣＨＫ２、Ｆｌｔ３、ＭＳＴ２、ｐ７０Ｓ６Ｋ、ＰＤＧＦＲ、ＰＫＢ、ＰＫＣα、Ｒａｆ、ＲＯＣＫ−ＩＩ、Ｒｓｋ１またはＳＧＫキナーゼ、またはそれらの組合せが介在する疾患の処置のために使用し得る。
【００２４】
本発明の化合物は、また、タンパク質キナーゼが介在する状態、例えば、Ｔｒｋ介在状態を改善するために、第２の治療剤と組み合わせて使用し得る。例えば、本発明の化合物は、神経芽腫、または乳房、前立腺もしくは膵臓の腫瘍もしくは癌を含み、これに限定されない細胞増殖性障害を処置するために、化学療法剤と組み合わせて使用し得る。
【００２５】
本発明の組成物および方法で使用され得る化学療法剤の例は、アントラサイクリン、アルキル化剤（例えば、マイトマイシンＣ）、スルホン酸アルキル、アジリジン、エチレンイミン、メチルメラミン、ナイトロジェンマスタード、ニトロソウレア、抗生物質、代謝拮抗剤、葉酸類似体（例えば、ジヒドロ葉酸還元酵素阻害剤、例えば、メトトレキサート）、プリン類似体、ピリミジン類似体、酵素、ポドフィロトキシン、プラチン含有剤、インターフェロンおよびインターロイキンを含み、これに限定されない。本発明の組成物および方法で使用され得る既知の化学療法剤の特定の例は、ブスルファン、インプロスルファン、ピポスルファン、ベンゾデパ、カルボクオン、メツレデパ、ウレデパ、アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホルアミド、トリエチレンチオホスホルアミド、トリメチロロメラミン、クロラムブシル、クロルナファジン、シクロホスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロルエタミン、塩酸メクロルエタミンオキシド、メルファラン、ノベンビキン、フェネステリン、プレドニムスチン、トロホスファミド、ウラシルマスタード、カルムスチン、クロロゾトシン、ホテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、ラニムスチン、ダカルバジン、マンノムスチン、ミトブロニトール、ミトラクトール、ピポブロマン、アクラシノマイシン、アクチノマイシンＦ（１）、アントラマイシン、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カルビシン、カルジノフィリン、クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ダウノマイシン、６−ジアゾ−５−オキソ−１−ノルロイシン、ドキソルビシン、エピルビシン、マイトマイシンＣ、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、プリカマイシン、ポルフィロマイシン、プロマイシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメックス、ジノスタチン、ゾルビシン、デノプテリン、メトトレキサート、プテロプテリン、トリメトレキセート、フルダラビン、６−メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアナイン、アンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロキシウリジン、フルオロウラシル、テガフール、Ｌ−アスパラギナーゼ、パルモザイム、アセグラトン、アルドホスファミドグリコシド、アミノレブリン酸、アンサクリン、ベストラブシル、ビサントレン、カルボプラチン、シスプラチン、デホファミド、デメコルシン、ジアジクオン、エルホルニチン、酢酸エリプチニウム、エトグルシド、エトポシド、フルタミド、硝酸ガリウム、ヒドロキシウレア、インターフェロン−α、インターフェロン−β、インターフェロン−γ、インターロイキン−２、レンチナン、ロニダミン、ミトグアゾン、ミトキサントロン、モピダモール、ニトラクリン、ペントスタチン、フェナメット、ピラルビシン、ポドフィリン酸、２−エチルヒドラジド、プロカルバジン、ラゾキサン、シゾフィラン、スピロゲルマニウム、パクリタキセル、タモキシフェン、テニポシド、テヌアゾン酸、トリアジクオン、２，２’，２”−トリクロロトリエチルアミン、ウレタン、ビンブラスチン、ビンクリスチンおよびビンデシンを含み、これに限定されない。
【００２６】
定義
本明細書で使用される所望により置換されているアルキル、アルケニルまたはアルキニルは、所望によりハロゲン化されているか（例えば、ＣＦ３）、または、ヘテロ原子、例えば、ＮＲ、ＯまたはＳで置換されている、または、置き換えられている１個以上の炭素を有しても良い（例えば、−ＯＣＨ２ＣＨ２Ｏ−、アルキルチオール、チオアルコキシ、アルキルアミン等）。
【００２７】
“アリール”は炭素原子を含む単環式または縮合二環式芳香環を意味する。例えば、アリールはフェニルまたはナフチルであり得る。“アリーレン”はアリール基から生じる二価のラジカルを意味する。
【００２８】
“ヘテロアリール”は１個以上の環員がヘテロ原子であるときの上記アリールを定義する。ヘテロアリールの例は、ピリジル、インドリル、インダゾリル、キノキサリニル、キノリニル、ベンゾフラニル、ベンゾピラニル、ベンゾチオピラニル、ベンゾ［１，３］ジオキソール、イミダゾリル、ベンゾ−イミダゾリル、ピリミジニル、フラニル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、ピラゾリル、チエニルなどを含み、これに限定されない。
【００２９】
本明細書で使用される“炭素環式環”は、所望により、例えば、＝Ｏで置換されていてもよい、炭素原子を含む飽和または部分的に不飽和、単環式、縮合二環式または架橋多環式環を意味する。炭素環式環の例は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロプロピレン、シクロヘキサノンなどを含み、これに限定されない。
【００３０】
本明細書で使用される“ヘテロ環式環”は、１個以上の環炭素がヘテロ原子であるときの上記炭素環式環を定義する。例えば、ヘテロ環式環は、Ｎ、Ｏ、Ｓ、Ｎ＝、Ｓ、Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）２またはＮＲを含んでよく、ここで、Ｒは水素、Ｃ１−４アルキルまたは保護基であり得る。ヘテロ環式環の例は、モルホリノ、ピロリジニル、ピロリジニル−２−オン、ピペラジニル、ピペリジニル、ピペリジニロン、１，４−ジオキサ−８−アザ−スピロ［４．５］デカ−８−イルなどを含み、これに限定されない。
【００３１】
他に記載のない限り、置換基が“所望により置換”されていると考えるとき、それは、置換基が、個々に、かつ独立して、例えば、所望により、ハロゲン化されたアルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アルキルアミン、アルキルチオ、アルキニル、アミド、モノおよびジ置換アミノ基を含むアミノ、アリール、アリールオキシ、アリールチオ、カルボニル、炭素環式、シアノ、シクロアルキル、ハロゲン、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、ヘテロアリール、ヘテロ環式、ヒドロキシ、イソシアネート、イソチオシアネート、メルカプト、ニトロ、Ｏ−カルバミル、Ｎ−カルバミル、Ｏ−チオカルバミル、Ｎ−チオカルバミル、Ｃ−アミド、Ｎ−アミド、Ｓ−スルホンアミド、Ｎ−スルホンアミド、Ｃ−カルボキシ、Ｏ−カルボキシ、パーハロアルキル、パーフルオロアルキル、シリル、スルホニル、チオカルボニル、チオシアネート、トリハロメタンスルホニルおよびそれらの保護された化合物から選択される１個以上の基で置換されていてもよい基であることを意味する。上記置換基の保護された化合物を形成し得る保護基は、当業者に既知であり、そして、文献、例えば、Greene and Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd Ed., John Wiley & Sons, New York, NY, 1999、およびKocienski, Protective Groups, Thieme Verlag, New York, NY, 1994で見つけることができる（これらを出典明示によりそれらの内容を本明細書に包含させる）。
【００３２】
本明細書で使用される“共投与”または“組合せ投与”などの用語は、一患者に選択された複数治療剤を投与することを含むことを意味し、そして必ずしも複数薬剤が同じ投与経路によりまたは同時に投与されない処置レジメンを含むことを意図する。
【００３３】
本明細書で使用される“薬学的組合せ”なる用語は、活性成分の混合または組合せから得られる生産物を意味し、そして活性成分の固定された組合せおよび固定されていない組合せの両方を含む。“固定された組合せ”なる用語は、複数の活性成分、例えば式（１）の化合物、および共薬剤両方が、単一の物または投与形で同時に患者に投与されることを意味する。“固定されていない組合せ”なる用語は、複数の活性成分、例えば式（１）の化合物、および共薬剤両方が、同時に、共にまたは特定の時間制限なしに連続してのいずれかで、別々の物として投与することを意味し、このような投与は、治療有効量の活性成分を患者の体内に提供する。後者は、カクテル療法、例えば３つ以上の活性成分の投与にも適用する。
【００３４】
“ＢＣＲ−Ａｂｌの変異型”は、野生型配列からの１個以上のアミノ酸変化を意味する。今日までに２２を超える変異が報告されており、Ｇ２５０Ｅ、Ｅ２５５Ｖ、Ｔ３１５Ｉ、Ｆ３１７ＬおよびＭ３５１Ｔであるものが最も一般的である。
【００３５】
“ＮＴＫＲ１”は、ＴｒｋＡタンパク質に相当する遺伝子名であり；“ＮＴＫＲ２”は、ＴｒｋＢタンパク質に相当する遺伝子名であり；そして、“ＮＴＫＲ３”は、ＴｒｋＣタンパク質に相当する遺伝子名である。
【００３６】
“治療有効量”なる用語は、研究者、獣医、医師または他の臨床医により求められる、細胞、組織、臓器、系、動物またはヒトの生物学的または医学的応答を誘導する対象化合物の量を意味する。
【００３７】
対象化合物の“投与”および／または“投与する”なる用語は、処置を必要とする個体に本発明の化合物のプロドラッグを含む本発明の化合物を提供することを意味すると理解すべきである。
【００３８】
薬理学および有用性
本発明の化合物は、キナーゼの活性を調節し、それ自体、キナーゼがその疾患の病状および／または総体症状に関与する疾患または障害の処置に有用であり得る。本明細書に記載の化合物および組成物により阻害され得て、本明細書に記載の方法が有用であり得るキナーゼの例は、ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢ、ＴｒｋＣ、Ａｂｌ、Ｂｃｒ−Ａｂｌ、ｃＳｒｃ、ＴＰＲ−Ｍｅｔ、Ｔｉｅ２、ＭＥＴ、ＦＧＦＲ３、オーロラ、Ａｘｌ、Ｂｍｘ、ＢＴＫ、ｃ−ｋｉｔ、ＣＨＫ２、Ｆｌｔ３、ＭＳＴ２、ｐ７０Ｓ６Ｋ、ＰＤＧＦＲ、ＰＫＢ、ＰＫＣα、Ｒａｆ、ＲＯＣＫ−ＩＩ、Ｒｓｋ１およびＳＧＫキナーゼを含み、これに限定されない。
【００３９】
ニューロトロフィン受容体（ＴｒｋＡまたは“ＮＴＫＲ１”；ＴｒｋＢまたは“ＮＴＫＲ２”；ＴｒｋＣまたは“ＮＴＫＲ３”）のＴｒｋファミリーは、腫瘍細胞増殖および生存ならびに分化、遊走および転移を制御することができる。Ｔｒｋ受容体のシグナル伝達経路下流は、Ｓｈｃ、活性化Ｒａｓ、ＥＲＫ−１およびＥＲＫ−２遺伝子を介するＭＡＰＫ活性化のカスケードならびにＰＬＣ−γ形質導入経路を含む（Sugimoto et al., Jpn J Cancer Res. 2001, 92: 152-60）。
【００４０】
Ｔｒｋチロシンキナーゼが、例えば、乳房および前立腺癌を含む種々の癌の発症に関わっている証拠がある（Guate et al., Expression of p75LNGFR and Trk Neurotrophin Receptors in Normal and Neoplastic Human Prostate, BJU Int. 1999, 84:495 502; Tagliabue et al., J. Biol Chem. 2000, 275:5388 5394）。さらに、Ｔｒｋキナーゼシグナル伝達の媒介は有益な生物学的効果を提供する証拠がある（LeSauteur et al., Adv. Behav. Biol. 1998, 49:615 625; Zhu et al., (1999) J. Clin. Oncology, 1999, 17:2419 28; Friess et al., Annals of Surgery 1999, 230:615-24）。
【００４１】
ＮＴＲＫ３（ＴｒｋＣ）およびそれと密接に関連したファミリーメンバーであるＮＴＲＫ１（ＴｒｋＡ）およびＮＴＲＫ２（ＴｒｋＢ）は、おそらく、受容体、そのリガンド（神経増殖因子、脳由来神経栄養因子、ニューロトロン）のいずれか、または、両方（Rubin et al., Cancer Treat. Res. 2003, 115:1-18; Nakagawara, Cancer Lett. 2001, 169:107-14）の上方調節により、癌の発症および進行に関連している。高発現のＮＴＲＫ２および／またはそのリガンドＢＤＮＦが、膵臓および前立腺癌腫、ウィルムス腫瘍および神経芽腫において見出された。加えて、高発現のＮＴＲＫ３が、黒色腫、とりわけ脳転移の場合の顕著な特徴である。多数の場合、高発現のＴｒｋが、侵襲性腫瘍動態、予後不良および転移と関連する。
【００４２】
ＮＴＫＲ２（ＴｒｋＢ）タンパク質は、小腸および大腸、膵臓のα細胞、リンパ節および脾臓の単球およびマクロファージならびに表皮顆粒層における神経内分泌型細胞で発現される。ＴｒｋＢタンパク質の発現はウィルムス腫瘍および神経芽腫の好ましくない進行と関連している。さらに、ＴｒｋＢは前立腺癌細胞で発現されるが、正常細胞では発現しない。
【００４３】
ＮＴＲＫ２は、細胞の、そのマトリックスへの接着の喪失により誘導されるアポトーシスとして定義されるアノイキスの強力な阻害剤である。ホスファチジルイノシトール−３−キナーゼ／タンパク質キナーゼＢシグナル伝達軸を活性化することにより、ＮＴＲＫ２が３次元培養で非形質転換上皮細胞の生存を促進し、そして免疫抑制マウスの細胞の腫瘍形成および転移を誘導することを示した。
【００４４】
ＮＴＲＫ２およびＮＴＲＫ３の両方と関連する遺伝的異常、すなわち点変異および染色体再配置は、種々の癌タイプで発見されている。チロシンキナーゼの点変異を同定するための網羅的（kinome-wide）アプローチにおいて、ＮＴＲＫ２およびＮＴＲＫ３の変異の両方が結腸直腸癌を有する患者由来の細胞系および一次サンプルで発見され（Bardelli et al., Science 2003, 300:949）、転移を調節するＴｒｋファミリーメンバーと関連し、そして結腸直腸癌の機能的関連性を示唆する。
【００４５】
加えて、ＮＴＲＫ１およびＮＴＲＫ３の両方と関連している染色体転座は、腫瘍のいくつかの異なるタイプで発見された。ＮＴＲＫ１および一連の異なる融合パートナー（ＴＰＭ３、ＴＰＲ、ＴＦＧ）と関連している遺伝子再配置は、甲状腺乳頭癌（ＰＴＣ）の一部の顕著な特徴である（Tallini, Endocr. Pathol. 2002, 13:271-88）。さらに、分泌性乳癌、乳児線維肉腫および先天性中胚葉性腎腫が、常時キナーゼ活性を有することが示されたＥＴＶ６−ＮＴＲＫ３融合遺伝子を生じ、繊維芽細胞、造血細胞および乳房上皮細胞を含むいくつかの異なる細胞系における形質転換を可能にする、染色体再配置ｔ（１２；１５）と関連することが示された（Euhus et al., Cancer Cell 2002, 2:347-8; Tognon et al., Cancer Cell 2002, 2:367-76; Knezevich et al., Cancer Res. 1998, 58:5046-8; Knezevich et al., Nat. Genet. 1998, 18:184-7）。
【００４６】
アベルソンチロシンキナーゼ（すなわちＡｂｌ、ｃ−Ａｂｌ）は、細胞サイクルの制御、遺伝毒性ストレスに対する細胞応答、およびインテグリンシグナル伝達を介した細胞環境についての情報伝達に関与する。Ａｂｌタンパク質は、種々の細胞外および細胞内供給源からのシグナルを統合し、細胞サイクルおよびアポトーシスに関する決定に影響を与える、細胞性モジュールとして複雑な役割を果たしているように見える。アベルソンチロシンキナーゼは、脱制御されたチロシンキナーゼ活性を伴うキメラ融合体（オンコプロテイン）ＢＣＲ−Ａｂｌまたはｖ−Ａｂｌのようなサブタイプ誘導体を含む。ＢＣＲ−Ａｂｌは、９５％の慢性骨髄性（myelogenous）白血病（ＣＭＬ）および１０％の急性リンパ性白血病の病因において重要である。ＳＴＩ５７１（Gleevec）は発癌性ＢＣＲ−Ａｂｌチロシンキナーゼの阻害剤であり、慢性骨髄性(myeloid)白血病（ＣＭＬ）の処置に使用されている。しかしながら、ＣＭＬの急性転化期にある患者の幾分かは、ＢＣＲ−Ａｂｌキナーゼの変異により、ＳＴＩ−５７１に耐性である。２２を超える変異が今日までに報告されており、例えば、Ｇ２５０Ｅ、Ｅ２５５Ｖ、Ｔ３１５Ｉ、Ｆ３１７ＬおよびＭ３５１Ｔである。
【００４７】
本発明の化合物は、ａｂｌキナーゼ、例えば、ｖ−ａｂｌキナーゼを阻害し得る。本発明の化合物はまた野生型ＢＣＲ−ＡｂｌキナーゼおよびＢＣＲ−Ａｂｌキナーゼの変異を阻害し得、故に、白血病（とりわけアポトーシス作用の機構が見られるとき、とりわけ慢性骨髄性（myeloid）白血病および急性リンパ芽球性白血病）のようなＢｃｒ−ａｂｌ−陽性癌および腫瘍疾患の処置に適当であり得る。本発明の化合物は、また、白血病性幹細胞のサブグループにおける効果を示し、ならびにこれらの細胞を、該細胞を摘出した後（例えば、骨髄摘出）インビトロで精製し、それらが癌細胞から浄化された後細胞を再移植する(例えば、精製骨髄細胞の再移植)可能性がある。
【００４８】
ＰＤＧＦ（血小板由来増殖因子）は一般的に存在する増殖因子であり、発癌および血管の平滑筋細胞の疾患、例えばアテローム性動脈硬化症および血栓症、正常増殖および病的細胞増殖において重要な役割を果たす。本発明の化合物は、ＰＤＧＦ受容体（ＰＤＧＦＲ）活性を阻害し得、したがって、神経膠腫、肉腫、前立腺腫瘍、および結腸、乳房および卵巣の腫瘍のような腫瘍疾患の処置に適当であり得る。
【００４９】
本発明の化合物は、例えば小細胞肺癌における腫瘍阻害物質としてだけでなく、またアテローム性動脈硬化症、血栓症、乾癬、強皮症および線維症のような非悪性増殖性障害にも、使用し得る。本発明の化合物は、また、例えば、５−フルオロウラシルのような化学療法剤の血液毒性作用と戦うための幹細胞の保護、および喘息において使用し得る。本発明の化合物は、とりわけＰＤＧＦ受容体キナーゼの阻害に応答する疾患の処置に有用であり得る。
【００５０】
本発明の化合物は、移植、例えば、同種異系移植に起因する障害、とりわけ閉塞性細気管支炎（ＯＢ）、すなわち同種異系肺移植の慢性拒絶のような、組織拒絶反応の処置に有効であることを示し得る。ＯＢのない患者と比較して、ＯＢを有する者は、しばしば気管支肺胞洗浄液中のＰＤＧＦ濃度の上昇を示す。
【００５１】
本発明の化合物はまた再狭窄およびアテローム性動脈硬化症のような、血管平滑筋細胞移動および増殖（ＰＤＧＦおよびＰＤＧＦ−Ｒがしばしば役割を果たす場所である）が関連する疾患に対して有用であり得る。血管平滑筋細胞インビトロおよびインビボにおけるこれらの効果および増殖または移動に対するそれらの結果は、本発明の化合物の投与により、またインビボでの血管内膜の機械的損傷後の肥厚に対する影響の試験により証明し得る。
【００５２】
Ｔｅｃファミリーキナーゼ、Ｂｍｘ、非受容体タンパク質−チロシンキナーゼは乳房上皮癌細胞の増殖を制御する。
【００５３】
血清およびグルココルチコイド調節キナーゼ（ＳＧＫ）の活性は摂動イオンチャネル活性、特にナトリウムおよび／またはカリウムチャネルの活性に相関性があり、本発明の化合物は高血圧を処理するために有用であり得る。
【００５４】
ある異常増殖状態はｒａｆ発現と関連していると考えられ、したがってｒａｆ発現の阻害に反応することが考えられる。異常な高レベルのｒａｆタンパク質の発現はまた形質転換および異常細胞増殖と関連する。これらの異常増殖状態はまたｒａｆ発現の阻害に反応することが考えられる。６０％のすべての肺癌腫細胞系が、通常、高レベルのｃ−ｒａｆのｍＲＮＡおよびタンパク質を発現することが報告されているため、例えば、ｃ−ｒａｆタンパク質の発現は異常細胞増殖における役割を果たしていることが考えられる。異常増殖状態のさらなる例は過増殖性疾患、例えば、癌、腫瘍、過形成、肺線維症、血管形成、乾癬、アテローム性動脈硬化症および血管の平滑筋細胞増殖、例えば、狭窄または血管形成術後の再狭窄である。ｒａｆを一部に含む細胞性シグナル伝達経路はまたＴ細胞増殖（Ｔ細胞活性化および増殖）、例えば、組織移植拒絶反応、内毒素性ショック、および糸球体腎炎により特徴づけられる炎症疾患と関連していた。
【００５５】
ヒトリボソームＳ６タンパク質キナーゼのファミリーは少なくとも８個のメンバー（ＲＳＫＩ、ＲＳＫ２、ＲＳＫ３、ＲＳＫ４、ＭＳＫ１、ＭＳＫ２、ｐ７０Ｓ６Ｋおよびｐ７０Ｓ６Ｋｂ）からなる。リボソームタンパク質Ｓ６タンパク質キナーゼは重要な多面的な機能を果たし、それらの中でタンパク質生合成中のｍＲＮＡ翻訳の調節の重要な役割である（Eur. J. Biochem 2000, 267(21): 6321-30; Exp Cell Res. 1999, 253 (1):100-9; Mol Cell Endocrinol. 1999, 151(1-2):65-77）。ｐ７０Ｓ６によるＳ６リボソームタンパク質のリン酸化はまた細胞運動（Immunol. Cell Biol. 2000, 78(4):447-51）および細胞増殖（Prog. Nucleic Acid Res. Mol. Biol. 2000, 65:101-27）の調節と関連しており、故に腫瘍転移、免疫反応および組織修復ならびに他の疾患状態において重要であり得る。
【００５６】
ＦＬｋ−２（胎児の肝臓キナーゼ２）としても既知である、Ｆｌｔ３（ｆｍｓ−様チロシンキナーゼ）はタイプＩＩＩ受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）ファミリーのメンバーである。Ｆｌｔ３遺伝子の異常発現は急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、骨髄異形成を伴うＡＭＬ（ＡＭＬ／ＴＭＤＳ）、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、および骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）を含む白血病および小児白血病で報告されている。Ｆｌｔ３受容体の活性化変異は急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）を有する患者の約３５％において見られ、予後不良と関連する。もっとも普通の変異は膜近傍ドメイン内の構造重複を含み、さらに５−１０％の患者がアスパラギン８３５で点変異を有する。これらの変異両方はＦｌｔ３のチロシンキナーゼ活性の構成的活性化と関連し、リガンドの非存在下で増殖および生存シグナルをもたらす。受容体の変異型を発現する患者は治癒の機会が少ないことが示されている。したがって、ヒト白血病および骨髄異形成症候群の過活性（変異）Ｆｌｔ３キナーゼ活性に対する役割に関して蓄積している証拠がある。
【００５７】
本発明の化合物は、幹細胞因子（ＳＣＦ、ｃ−Ｋｉｔリガンドまたは造血幹細胞因子としても既知）を含む細胞過程、例えば、ＳＣＦ受容体（Ｋｉｔ）自己リン酸化およびＭＡＰＫキナーゼ（マイトージェン活性タンパク質キナーゼ）のＳＣＦ刺激性活性化を阻害し得る。ＭＯ７ｅ細胞は、増殖に関するＳＣＦに依存するヒト前巨核球白血病細胞系である。本発明の化合物は、また、ＳＣＦ受容体の自己リン酸化を阻害し得る。
【００５８】
オーロラ２は、ヒトの癌、例えば、大腸、乳房および他の固形腫瘍と関連しているセリン／スレオニンタンパク質キナーゼである。このキナーゼは細胞周期を調節するタンパク質リン酸化事象と関連していると考えられる。具体的には、オーロラ２は、有糸分裂中の染色体の正確な分離を調節する役割を果たし得る。細胞周期の誤制御が細胞増殖および他の異常を引き起こし得る。ヒト大腸癌組織において、オーロラ２タンパク質が過剰発現していることが発見されている。
【００５９】
セリン／スレオニンキナーゼのオーロラファミリー［オーロラＡ（“１”）、Ｂ（“２”）およびＣ（“３”）］は細胞増殖の重要において役割を果たす。これらのタンパク質は、染色体分離、紡錘体機能および細胞分裂の原因であり、そして腫瘍形成と関連している。高レベルの全てのオーロラファミリーメンバーが種々の腫瘍細胞系で観察された。オーロラキナーゼは、乳房腫瘍で染色体の不安定性と関連すると報告された多数のヒト腫瘍で過剰発現している。例えば、オーロラＡキナーゼの異常活性は結腸直腸、胃、ヒト膀胱および卵巣癌と関連している。高レベルのオーロラＡが、また、腎臓、子宮頸、神経芽腫、黒色腫、リンパ腫、膵臓および前立腺腫瘍細胞系で報告されている。
【００６０】
オーロラＢは、また、多数のヒト腫瘍細胞系、例えば、白血病細胞および結腸直腸癌で高度に発現している。通常、胚細胞でのみ見られるオーロラＣが、また、高い割合の原発性結腸直腸癌ならびに子宮頸腺癌および乳房癌腫細胞を含む種々の腫瘍細胞系で過剰発現している。オーロラキナーゼの既知の機能に基づいて、これらの活性の阻害は、有糸分裂を崩壊させ、細胞周期阻止となるはずである。したがって、インビボでオーロラ阻害剤は腫瘍増殖を減速させ、退行を誘導する。
【００６１】
Ｃｈｋ１およびＣｈｋ２の不活性化は損傷ＤＮＡにより誘導されるＧ２／Ｍ阻止を無くし、チェックポイント欠損細胞をＤＮＡ損傷事象による死に感受性にする。癌細胞はＧ２／Ｍチェックポイントの排除により正常細胞よりもより感受性であるため、Ｃｈｋ１、Ｃｈｋ２または両方を阻害し、Ｇ２／Ｍチェックポイントを排除し、そしてＤＮＡ損傷事象による癌細胞の死を改善する、化合物において非常に関心がある。
【００６２】
種々の疾患状態および状態は、骨粗鬆症、骨減少、パジェット病、血管再狭窄、糖尿病性網膜症、黄斑変性症、血管形成、アテローム性動脈硬化症、炎症および腫瘍増殖を含む疾患を処置または予防するために、Mammalian Sterile 20-like キナーゼ、Ｍｓｔ１およびＭｓｔ２またはそれらの組合せの活性を調節することにより介在できると考えられている。
【００６３】
ＰＫＡまたは環状ＡＭＰ依存タンパク質キナーゼ、ＰＫＢまたはＡｋｔおよびＰＫＣとして既知のキナーゼの全ては、腫瘍形成の原因であるシグナル形質導入経路において重要な役割を果たす。これらのキナーゼの活性を阻害できる化合物は、異常細胞増殖、例えば、癌により特徴付けられる疾患の処置において有用であり得る。
【００６４】
Ｒｈｏキナーゼ（Ｒｏｃｋ−ＩＩ）は、血管収縮、血小板凝集、気管支平滑筋収縮、血管平滑筋増殖、内皮増殖、ストレス繊維形成、心臓肥大、Ｎａ／Ｈ交換輸送系活性化、内転筋（adducing）の活性化、高眼圧症、勃起機能障害、早産、網膜症、炎症、免疫疾患、ＡＩＤＳ、受精卵の受精および移植、骨粗鬆症、脳機能障害、細菌による消化管の感染症などに関係する。
【００６５】
Ａｘｌは、多くの疾患状態、例えば、白血病および胃癌を含む種々の他の癌と関連する受容体チロシンキナーゼである。
【００６６】
ブルートンチロシンキナーゼ（Ｂｔｋ）はＢリンパ球分化に重要である。Ｂｔｋファミリーの非受容体チロシンキナーゼはＢｔｋ／Ａｔｋ、Ｉｔｋ／Ｅｍｔ／Ｔｓｋ、Ｂｍｘ／ＥｔｋおよびＴｅｃを含む。Ｂｔｋファミリーキナーゼは、種々の細胞過程において主要であるが種々の調節的役割を果たす。それらは、細胞増殖、分化およびアポトーシスとなる細胞外刺激への応答におけるシグナル形質導入に関係する。このファミリーのキナーゼの異常活性は免疫不全疾患および種々の癌と関連している。
【００６７】
繊維芽細胞増殖因子受容体３は骨増殖の負の調節効果および軟骨細胞増殖の阻害に働くことを示した。繊維芽細胞増殖因子受容体３の種々の変異体、および１つの変異、ＴＤII  ＦＧＦＲ３によりもたらされる形成異常は、転写因子Ｓｔａｔｌを活性化する構成的チロシンキナーゼ活性を有し、細胞周期阻害剤の発現、増殖停止および異常な骨の発達をもたらす（Su et al., Nature, 1997, 386: 288-292）。ＦＧＦＲ３はまたしばしば多発性骨髄腫型癌において発現される。
【００６８】
腫瘍増殖および血管形成の阻害、また、Ｔｉｅ２（Ｔｅｋ）の細胞外ドメインの感染中の肺転移の減少が乳房腫瘍および黒色腫異種移植モデルにおいて示された（Lin et al., J. Clin. Invest. 1997, 100:2072-2078; Lin et al., Proc Natl. Acad. Sci. 1998, 95:8829-8834）。Ｔｉｅ２阻害剤は新血管形成が不適当に起こる状況（すなわち、糖尿病網膜症、慢性炎症、乾癬、カポジ肉腫、黄斑変性症による慢性新血管形成、リウマチ性関節炎、小児血管腫および癌）において使用され得る。
【００６９】
ｃ−Ｓｒｃキナーゼは多数の受容体の発癌シグナルを伝達する。例えば、腫瘍におけるＥＧＦＲまたはＨＥＲ２／ｎｅｕの過剰発現は、悪性細胞の特徴であるが正常細胞には存在しないｃ−ｓｒｃの構成的活性化をもたらす。他方、ｃ−ｓｒｃの不完全発現マウスは大理石骨病表現型を発現し、破骨細胞機能におけるｃ−ｓｒｃの重要な関与および関連疾患への関与の可能性を示す。
【００７０】
前記によって、本発明は、さらに、処置を必要とする対象における、上記のいずれかの疾患または障害を処置する方法であり、該対象に治療的有効量の式（１）の化合物またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む、方法を提供する。上記の全ての使用に関して、必要な投与量は投与形態、処置すべき特定の状態および所望の効果に依存して変化する（下記“投与および医薬組成物”参照）。
【００７１】
投与および医薬組成物：
一般に、本発明の化合物は単独でまたは１種以上の治療剤との組合せのいずれかで当分野で既知の通常のおよび許容される形式のいずれかを介して、治療有効量を投与される。治療有効量は、疾患の重症度、対象の年齢および相対的な健康状態、使用される化合物の有効性および他の要素に依存して広く変化し得る。一般に、満足な結果は体重あたり約０．０３から２．５ｍｇ／ｋｇの１日投与量で全身に得られることが示される。大型哺乳動物、例えばヒトにおいて指示される１日投与量は、例えば１日に４回までの分割用量でまたは遅延形で都合良く投与される約０．５ｍｇから約１００ｍｇの範囲である。経口投与のための適当な単位用量形は約１から５０ｍｇの活性成分を含む。
【００７２】
本発明の化合物は任意の慣用の経路、特に経腸的に、例えば経口的に、例えば錠剤形もしくはカプセル形で、または非経腸的に、例えば注射溶液形もしくは懸濁液形で、局所的に、例えばローション形、ゲル形、軟膏形もしくはクリーム形で、または経鼻形もしくは坐薬形で医薬組成物として投与してもよい。
【００７３】
少なくとも１種の薬学的に許容される担体もしくは希釈剤と一緒に遊離形または薬学的に許容される塩形の本発明の化合物を含む医薬組成物を、混合、造粒または被覆方法による慣用の方法で製造できる。例えば、経口組成物は、活性成分とａ）希釈剤、例えば、ラクトース、デキストロース、スクロース、マンニトール、ソルビトール、セルロースおよび／またはグリシン；ｂ）滑剤、例えば、シリカ、タルク、ステアリン酸、そのマグネシウムもしくはカルシウム塩および／またはポリエチレングリコール；錠剤のために共にｃ）結合剤、例えば、ケイ酸マグネシウムアルミニウム、デンプンペースト、ゼラチン、トラガカント、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウムおよび／またはポリビニルピロリドン；そして所望によりｄ）崩壊剤、例えば、デンプン、寒天、アルギン酸もしくはそのナトリウム塩または起沸性混合物；および／またはｅ）吸収剤、着色剤、香味剤および甘味剤を一緒に含む錠剤またはゼラチンカプセルであり得る。注射組成物は、等張水溶液または懸濁液であり得、そして座薬は脂肪エマルジョンまたは懸濁液から製造し得る。
【００７４】
該組成物は滅菌し得そして／またはアジュバント、例えば保存剤、安定化剤、湿潤剤もしくは乳化剤、溶解促進剤、浸透圧を調節するための塩および／またはバッファーを含む。加えて、それらはまた、治療に有効な他の物質を含み得る。適当な経皮投与用製剤は有効量の本発明の化合物を担体と含む。担体は宿主の皮膚を介する輸送を助けるために、薬理学的に許容される吸収性溶媒を含み得る。例えば、経皮デバイスは裏当て部分、化合物と所望により担体を含む貯蔵部、所望により長時間にわたって制御されたおよびあらかじめ決められた速度で宿主の皮膚に化合物を送達するための速度制御バリア、および皮膚にデバイスを固定するための手段を含む、バンデージ形である。マトリックス経皮製剤もまた使用され得る。例えば、皮膚および眼への、適当な局所投与用製剤は、当分野で既知の水溶液、軟膏、クリームまたはゲルであり得る。このような製剤は、可溶化剤、安定化剤、等張増加剤、バッファーおよび保存剤を含み得る。
【００７５】
本発明の化合物は、治療有効量の１種以上の治療剤との組合せ（薬学的組合せ）で投与され得る。例えばシクロスポリン、ラパマイシン、もしくはアスコマイシン、またはそれらの免疫抑制剤類似体、例えばシクロスポリンＡ（ＣｓＡ）、シクロスポリンＧ、ＦＫ−５０６、ラパマイシン、もしくは同等な化合物、コルチコステロイド、シクロホスファミド、アザチオプリン、メトトレキサート、ブレキナール、レフルノミド、ミゾルビン、ミコフェノール酸、ミコフェノール酸モフェチル、１５−デオキシスパガリン、免疫抑制性抗体、とりわけ白血球受容体に対するモノクローナル抗体、例えばＭＨＣ、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ７、ＣＤ２５、ＣＤ２８、Ｂ７、ＣＤ４５、ＣＤ５８もしくはそれらのリガンド、または他の免疫調節化合物、例えばＣＴＬＡ４１ｇと一緒に使用されるとき、例えば、相乗効果が、他の免疫調節剤もしくは抗炎症剤と生じ得る。本発明の化合物が他の治療と一緒に投与されるとき、共投与される化合物の用量は、使用される共薬剤の型、使用される特定の薬剤、処置される状態などに依存して変化する。
【００７６】
本発明はまた、ａ）遊離形または薬学的に許容される塩形の本明細書に記載のとおりの本発明の化合物である第１の薬剤、およびｂ）少なくとも１つの共薬剤を含む薬学的組合せ、例えばキットを提供する。該キットはその投与のための指示書を含み得る。
【００７７】
本発明の化合物の製造方法
本発明はまた、本発明の化合物の製造方法を含む。記載されている反応において、最終産物において望ましい反応性官能基（例えば、ヒドロキシ、アミノ、イミノ、チオまたはカルボキシ基）を、これらの望ましくない反応の参加を避けるために当分野で既知の保護基を使用して保護することが必要であり得る。慣用の保護基は、標準的技法にしたがって使用し得る。例えば、T.W. Greene and P. G. M. Wuts in “Protective Groups in Organic Chemistry”, John Wiley and Sons, 1991参照。
【００７８】
１つの局面において、＝Ｑ−Ｘが２−ビニル−１Ｈ−ピロリル誘導体である式（１）の化合物は、下記反応スキーム１を行うことにより製造できる：
【化５】
2010505859.tif 000006
スキーム１
〔式中、Ｗ１、Ｗ２、Ｗ３、Ｗ４、Ｗ５、Ｗ６、Ｗ７、Ｗ８、Ｗ９、Ｗ１０、Ｙ、Ｚ、Ｌ、Ｒ、Ｒ１、Ｒ２、ｍおよびｎは上記定義のとおりであり；
そして、Ｒ５は、Ｈ、アルキルまたは当業者に既知の全ての適当な基である〕
【００７９】
スキーム１に示されるとおり、式（１）の化合物は、式（３）の化合物をカルボニル化合物（４）と適当な塩基（例えば、ピペリジンなど）および適当な溶媒（例えば、エタノールなど）の存在下で反応させることにより製造できる。該反応は約５０から約１２０℃の温度範囲で実施し、完了まで数時間かかり得る。上記スキーム１において、ピロリルは、さらに、所望の置換基、例えば、上記のもので置換されていてもよい。
【００８０】
式（１）の化合物の合成の詳細な例は下記実施例で見いだすことができる。
【００８１】
本発明の化合物のさらなる製造方法
本発明の化合物を、遊離塩基形の化合物を薬学的に許容される無機酸または有機酸と反応させることにより薬学的に許容される酸付加塩として製造し得る。あるいは、本発明の化合物の薬学的に許容される塩基付加塩を、遊離塩基形の化合物を薬学的に許容される無機塩基または有機塩基と反応させることにより製造し得る。あるいは、塩形の本発明の化合物を出発物質または中間体の塩を使用して製造し得る。
【００８２】
遊離酸形または遊離塩基形の本発明の化合物を、対応する塩基付加塩形または酸付加塩形、各々から製造し得る。例えば酸付加塩形の本発明の化合物は、適当な塩基（例えば、水酸化アンモニウム溶液、水酸化ナトリウムなど）と処理することにより対応する遊離塩基に変換し得る。塩基付加塩形の本発明の化合物は、適当な酸（例えば、塩酸など）と処理することにより対応する遊離酸に変換し得る。
【００８３】
非酸化形の本発明の化合物を、適当な不活性有機溶媒（例えば、アセトニトリル、エタノール、ジオキサン溶液など）中で、０から８０℃で還元剤（例えば、硫黄、二酸化硫黄、トリフェニルホスフィン、水素化ホウ素リチウム、水素化ホウ素ナトリウム、三塩化リン、三臭化物など）と処理することにより本発明の化合物のＮ−オキシドから製造し得る。
【００８４】
本発明の化合物のプロドラッグ誘導体を当業者に既知の方法で製造し得る（例えばさらなる詳細のためにSaulnier et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. 1994, 4:1985-90参照のこと）。例えば、適当なプロドラッグを本発明の非誘導化化合物を適当なカルバミル化剤（例えば、１，１−アシルオキシアルキルカルバノクロリデート、パラ−ニトロフェニルカーボネートなど）と反応させることにより製造し得る。
【００８５】
本発明の化合物の保護された誘導体を当業者に既知の方法で製造し得る。保護基の創造およびその除去に適用できる技術の詳細な説明はT. W. Greene, “Protecting Groups in Organic Chemistry”, 3rd edition, John Wiley and Sons, Inc., 1999において見ることができる。
【００８６】
本発明の化合物を、本発明の工程中に溶媒和物（例えば、水和物）として都合良く製造または形成し得る。本発明の化合物の水和物を、有機溶媒、例えばジオキシン、テトラヒドロフランまたはメタノールを使用し、水性／有機溶媒混合物から再結晶することにより都合良く製造し得る。
【００８７】
本発明の化合物を、化合物のラセミ混合物を光学的に活性な分割剤と反応させ、一組のジアステレオマー化合物を形成し、該ジアステレオマーを分離し、そして光学的に純粋なエナンチオマーを回収することにより、それらの個々の立体異性体として製造し得る。エナンチオマーの分離は本発明の化合物の共有結合ジアステレオマー誘導体を使用して行い得るが、分離できる複合体が好ましい（例えば、結晶のジアステレオマー塩）。ジアステレオマーは異なる物理的性質（例えば、融点、沸点、溶解度、反応性など）を有し、そしてこれらの相違を利用して容易に分離し得る。ジアステレオマーをクロマトグラフィー、または溶解度の差異に基づく分割／分離技術により分割し得る。次いで光学的に純粋なエナンチオマーを、ラセミ化をもたらさないであろう実用的手段により分割剤と一緒に回収する。ラセミ混合物から化合物の立体異性体の分離に適用できる技術のより詳細な説明はJean Jacques, Andre Collet, Samuel H. Wilen, “Enantiomers, Racemates and Resolutions”, John Wiley And Sons, Inc., 1981において見ることができる。
【００８８】
手短に言えば、式（１）の化合物を下記の工程を含む方法により製造し得る：
（ａ）反応スキームＩの工程；ならびに
（ｂ）所望により本発明の化合物の薬学的に許容される塩への変換；
（ｃ）所望により塩形の本発明の化合物の非塩形への変換；
（ｄ）所望により非酸化形の本発明の化合物の薬学的に許容されるＮ−オキシドへの変換；
（ｅ）所望によりＮ−オキシド形の本発明の化合物の非酸化形への変換；
（ｆ）所望により異性体の混合物からの本発明の化合物の個々の異性体への分離；
（ｇ）所望により本発明の非誘導化合物の薬学的に許容されるプロドラッグ誘導体への変換；および
（ｈ）所望により本発明の化合物のプロドラッグ誘導体のその非誘導化形態への変換。
【００８９】
下記実施例は説明するために提供するが、本発明を限定しない。出発物質の製造において特に記載のない限り、化合物は既知であるか、または当分野で既知の方法に準じてもしくは下記の実施例に記載のとおりに製造し得る。当業者は、下記実施例が本発明の化合物の製造法の代表例のみであり、そして他の既知の方法を同様に使用し得ることを理解できよう。
【実施例】
【００９０】
実施例１
３−（１Ｈ−ピロール−２−イルメチレン）−６−｛３−［５−（３−トリフルオロメトキシ−フェニル）−４Ｈ−［１，２，４］トリアゾール−３−イル］−フェニルアミノ｝−１，３−ジヒドロ−インドル−２−オン
【化６】
2010505859.tif 000007
３−（３−ニトロ−フェニル）−５−（３−トリフルオロメトキシ−フェニル）−４Ｈ−［１，２，４］−トリアゾール（１）の合成
３−トリフルオロメトキシ安息香酸ヒドラジド（６０ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）および３−ニトロ−ベンズイミド酸メチルエステル（０．３５ｍｍｏｌ）を１，２−ジクロロエタン（０．５ｍＬ）と混合し、１１５℃で２日間加熱する。溶媒を蒸発させ、残渣をカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物を得る；ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋＋１］３５１．２。
【００９１】
（２−ニトロ−４−｛３−［５−（３−トリフルオロメトキシフェニル）−４−（２−トリメチルシラニル−エトキシメチル）−４Ｈ−［１，２，４］トリアゾール−３−イル］−フェニルアミノ｝−フェニル）−酢酸エチルエステル（２）の合成
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の化合物１（４０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）の溶液に２−（トリメチルシリル）エトキシメチルクロライド（ＳＥＭ−Ｃｌ、２６μＬ）および炭酸セシウム（７４ｍｇ）を連続して加える。懸濁液を室温で３時間撹拌する。反応を水でクエンチする。混合物をＥｔＯＡｃで抽出する。合わせた有機溶液を濃縮し、カラムクロマトグラフィーにより精製し、３−（３−ニトロ−フェニル）−５−（３−トリフルオロメトキシフェニル）−４−（２−トリメチルシラニルエトキシメチル）−４Ｈ−［１，２，４］トリアゾールを送達する。ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋＋１］４８１．２。
【００９２】
メタノール（４ｍＬ）中の３−（３−ニトロ−フェニル）−５−（３−トリフルオロメトキシ−フェニル）−４−（２−トリメチルシラニル−エトキシメチル）−４Ｈ−［１，２，４］トリアゾール（４５ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ）の溶液にＰａ／Ｃ（１０ｗｔ％、１０ｍｇ）を加える。混合物を水素バルーン下で一晩撹拌する。セライトを介して濾過し、濃縮する。ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋＋１］４５１．２。
【００９３】
３−［５−（３−トリフルオロメトキシ−フェニル）−４−（２−トリメチルシラニル−エトキシメチル）−４Ｈ−［１，２，４］トリアゾール−３−イル］−フェニルアミン（３８ｍｇ、０．０８４ｍｍｏｌ）を１，４−ジオキサン（１ｍＬ）中の（４−ブロモ−２−ニトロ−フェニル）−酢酸エチルエステル（２４ｍｇ）、キサントホス（３ｍｇ）、酢酸パラジウム（ＩＩ）（０．８ｍｇ）および炭酸セシウム（３８ｍｇ）と混合する。混合物を１１５℃で２日間加熱し、次にセライトを介して濾過する。濾液を濃縮し、カラムクロマトグラフィーにより精製し、（２−ニトロ−４−｛３−［５−（３−トリフルオロメトキシ−フェニル）−４−（２−トリメチルシラニル−エトキシメチル）−４Ｈ−［１，２，４］トリアゾール−３−イル］−フェニルアミノ｝−フェニル）−酢酸エチルエステルを得る。ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋＋１］６５８．２。
【００９４】
６−｛３−［５−（３−トリフルオロメトキシ−フェニル）−４−（２−トリメチルシラニル−エトキシメチル）−４Ｈ−［１，２，４］トリアゾール−３−イル］−フェニルアミノ｝−１，３−ジヒドロ−インドル−２−オン（３）の合成
酢酸（４ｍＬ）中の（２−ニトロ−４−｛３−［５−（３−トリフルオロメトキシ−フェニル）−４−（２−トリメチルシラニル−エトキシメチル）−４Ｈ−［１，２，４］トリアゾール−３−イル］−フェニルアミノ｝−フェニル）−酢酸エチルエステル（４２ｍｇ）の溶液にパラジウム炭素（１０ｗｔ％、８ｍｇ）を加える。混合物を室温で水素バルーン下で一晩撹拌し、セライトを介して濾過する。濾液を濃縮し、粗物質をさらなる精製なしで使用する。ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋＋１］５８２．２。
【００９５】
６−｛３−［５−（３−トリフルオロメトキシ−フェニル）−４Ｈ−［１，２，４］トリアゾール−３−イル］−フェニルアミノ｝−１，３−ジヒドロ−インドル−２−オン（４）の合成
無水メタノール（１ｍＬ）中の６−｛３−［５−（３−トリフルオロメトキシ−フェニル）−４−（２−トリメチルシラニル−エトキシメチル）−４Ｈ−［１，２，４］トリアゾール−３−イル］−フェニルアミノ｝−１，３−ジヒドロ−インドル−２−オン（４１ｍｇ）の溶液にｐ−トルエンスルホン酸一水和物（１５ｍｇ）を加える。混合物を１００℃で３０分マイクロ波照射する。混合物を濃縮し、カラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物を得る。ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋＋１］４５２．２。
【００９６】
３−（１Ｈ−ピロール−２−イルメチレン）−６−｛３−［５−（３−トリフルオロメトキシ−フェニル）−４Ｈ−［１，２，４］トリアゾール−３−イル］−フェニルアミノ｝−１，３−ジヒドロ−インドル−２−オン（５）の合成
ＥｔＯＨ（２ｍＬ）中の６−｛３−［５−（３−トリフルオロメトキシ−フェニル）−４Ｈ−［１，２，４］トリアゾール−３−イル］−フェニルアミノ｝−１，３−ジヒドロ−インドル−２−オン（１４ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ）の懸濁液にピロール−２−カルボキシアルデヒド（３．５ｍｇ）およびピペリジン（１２μＬ）を加える。混合物を還流温度で２時間加熱し、次に溶媒を蒸発させる。残渣を分取ＬＣ／ＭＳにより精製し、表題化合物を得る。1H NMR (DMSO-d6) δ 14.66 (s, 1 H), 13.17 (s, 1 H), 10.78 (s, 1 H), 8.64-8.50 (m, 1 H), 8.10 (d, 1 H), 8.03-7.92 (m, 1 H), 7.84 (s, 1 H), 7.72-7.40 (m, 6 H), 7.30-7.20 (m, 2 H), 6.80-6.68 (m, 3 H), 6.30 (m, 1 H)；ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋＋１］５２９．２。
【００９７】
上記実施例に記載されている製造を繰り返すことにより、適当な出発反応物を使用して、表１で特定される下記化合物が得られる。
表１
【表１】
2010505859.tif 000008
【００９８】
【表２】
2010505859.tif 000009
【００９９】
【表３】
2010505859.tif 000010
【０１００】
【表４】
2010505859.tif 000011
【０１０１】
【表５】
2010505859.tif 000012
【０１０２】
【表６】
2010505859.tif 000013
【０１０３】
【表７】
2010505859.tif 000014
【０１０４】
【表８】
2010505859.tif 000015
【０１０５】
アッセイ
本発明の化合物を、親３２Ｄ細胞と比較してＢｃｒ−Ａｂｌ（３２Ｄ−ｐ２１０）を発現する３２Ｄ細胞の細胞増殖を選択的に阻害する能力についてアッセイできる。これらのＢＣＲ−Ａｂｌ形質転換細胞の増殖を選択的に阻害する化合物は野生型または変異型のＢｃｒ−ａｂｌのいずれかを発現するＢａ／Ｆ３細胞における抗増殖性活性に対して試験する。
【０１０６】
本発明の化合物を、また、親Ｂａ／Ｆ３細胞と比較してＥＴＶ６−ＮＴＲＫ３（Ｂａ／Ｆ３  ＥＮ）を発現するＢａ／Ｆ３細胞の細胞増殖を選択的に阻害する能力を測定するためにアッセイできる。これらのＥＴＶ６−ＮＴＲＫ３形質転換細胞の増殖を選択的に阻害する化合物はＴｅｌ融合のＴｒｋファミリーメンバー、具体的にはＮＴＲＫ１およびＮＴＲＫ２のいずれかを発現するＢａ／Ｆ３細胞における抗増殖性活性に対して試験する。
【０１０７】
細胞性ＢＣＲ−Ａｂｌ依存性増殖の阻害（ハイスループット法）
マウス細胞系３２Ｄ造血前駆細胞系は、ＢＣＲ−Ａｂｌ  ｃＤＮＡで形質転換され得る。これらの細胞を、ペニシリン５０μｇ／ｍＬ、ストレプトマイシン５０μｇ／ｍＬおよびＬ−グルタミン２００ｍＭを添加したＲＰＭＩ／１０％胎児ウシ血清（ＲＰＭＩ／ＦＣＳ）に維持する。形質転換されていない３２Ｄ細胞を、ＩＬ３の源として１５％のＷＥＨＩ馴化培地を添加して同様に維持する。
【０１０８】
５０μｌの３２Ｄまたは３２Ｄ−ｐ２１０細胞懸濁液を５０００細胞／ウェルの密度でＧｒｅｉｎｅｒ３８４ウェルマイクロプレート（黒色）に播種する。５０ｎＬの試験化合物（ＤＭＳＯ貯蔵溶液中で１ｍＭ）をそれぞれのウェルに加える（ＳＴＩ５７１を陽性対照として包含する）。細胞を７２時間、３７℃、５％ＣＯ２でインキュベートする。１０μｌの６０％Ａｌａｍａｒ  Ｂｌｕｅ溶液（Tek diagnostics）をそれぞれのウェルに加え、細胞をさらに２４時間インキュベートする。蛍光強度（５３０ｎｍで励起、５８０ｎｍで放射）でＡｃｑｕｅｓｔＴＭシステム（Molecular Devices）を使用して定量する。
【０１０９】
細胞性ＢＣＲ−Ａｂｌ依存性増殖の阻害
３２Ｄ−ｐ２１０細胞を９６ウェルＴＣプレートに１５，０００細胞／ウェルの密度で播種する。５０μＬの試験化合物の２倍連続希釈（Ｃｍａｘは４０μＭ）をそれぞれのウェルに添加する（ＳＴＩ５７１を陽性対照として包含する）。細胞を４８時間、３７℃、５％ＣＯ２でインキュベート後、１５μＬのＭＴＴ（Promega）をそれぞれのウェルに添加し、細胞をさらに５時間インキュベートする。５７０ｎｍの光学密度を分光測光により定量し、ＩＣ５０値、５０％阻害に必要な化合物の濃度を用量応答曲線から決定する。
【０１１０】
細胞サイクル分布に対する効果
３２Ｄおよび３２Ｄ−ｐ２１０細胞を６ウェルＴＣプレートに、５ｍｌの培地中２．５×１０６細胞／ウェルで播種し、１または１０μＭの試験化合物を添加する（ＳＴＩ５７１を対照として包含する）。細胞を次いで２４時間または４８時間、３７℃、５％ＣＯ２でインキュベートする。２ｍｌの細胞懸濁液をＰＢＳで洗浄し、７０％ＥｔＯＨに１時間固定し、ＰＢＳ／ＥＤＴＡ／ＲＮａｓｅ  Ａで３０分処置する。ヨウ化プロピジウム（Ｃｆ＝１０μｇ／ｍｌ）を添加し、蛍光強度をＦＡＣＳｃａｌｉｂｕｒＴＭシステム（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）でのフローサイトメトリーにより定量する。いくつかの態様において、本発明の試験化合物は、３２Ｄ−ｐ２１０細胞に対してアポトーシス作用を証明できるが、３２Ｄ親細胞ではアポトーシスを誘発しない。
【０１１１】
細胞性ＢＣＲ−Ａｂｌ自己リン酸化に対する効果
ＢＣＲ−Ａｂｌ自己リン酸化を、ｃ−ａｂｌ特異的捕捉抗体および抗ホスホチロシン抗体を使用した、捕捉Ｅｌｉｓａで定量する。３２Ｄ−ｐ２１０細胞を９６ウェルＴＣプレートに、５０μＬの培地中２×１０５細胞／ウェルで播種する。５０μＬの試験化合物の２倍連続希釈（Ｃｍａｘは１０μＭ）をそれぞれのウェルに添加する（ＳＴＩ５７１を陽性対照として包含する）。細胞を、９０分、３７℃、５％ＣＯ２でインキュベートする。次いで、細胞を１時間、氷上でプロテアーゼおよびホスファターゼ阻害剤を含む１５０μＬの融解緩衝液（５０ｍＭのＴｒｉｓ  ＨＣｌ、ｐＨ７．４、１５０ｍＭのＮａＣｌ、５ｍＭのＥＤＴＡ、１ｍＭのＥＧＴＡおよび１％ＮＰ−４０）で処理する。５０μＬの細胞融解物を、予め抗ａｂｌ特異的抗体でコーティングし、ブロックした９６ウェルｏｐｔｉｐｌａｔｅに添加する。プレートを、４時間、４℃でインキュベートする。ＴＢＳ−Ｔｗｅｅｎ  ２０緩衝液で洗浄後、５０μＬのアルカリホスファターゼ結合抗ホスホチロシン抗体を添加し、プレートをさらに一晩４℃でインキュベートする。ＴＢＳ−Ｔｗｅｅｎ  ２０緩衝液で洗浄後、９０μＬの発光基質を添加し、発光をＡｃｑｕｅｓｔＴＭシステム（Molecular Devices）を使用して定量する。いくつかの態様において、ＢＣＲ−Ａｂｌ発現細胞の増殖を阻害する本発明の試験化合物は、細胞性ＢＣＲ−Ａｂｌ自己リン酸化を用量依存的方法で阻害する。
【０１１２】
Ｂｃｒ−ａｂｌの変異型を発現する細胞の増殖に対する効果
本発明の化合物を、ＢＣＲ−Ａｂｌの野生型または、ＳＴＩ５７１に対する耐性を付与するか感受性を低下させる変異型（Ｇ２５０Ｅ、Ｅ２５５Ｖ、Ｔ３１５Ｉ、Ｆ３１７Ｌ、Ｍ３５１Ｔ）のいずれかを発現するＢａ／Ｆ３細胞に対するそれらの抗増殖効果を試験できる。変異体ＢＣＲ−Ａｂｌ発現細胞および非形質転換細胞に対するこれらの化合物の抗増殖性効果を、上記のとおり（ＩＬ３欠如培地中で）１０、３．３、１．１および０．３７μＭで試験できる。非形質転換細胞に対して毒性がない化合物のＩＣ５０値を、上記のとおりに得た用量応答曲線から決定する。
【０１１３】
ＦＬＴ３およびＰＤＧＦＲβ
ＦＬＴ３およびＰＤＧＦＲβの細胞活性における本発明の化合物の効果を下記方法を使用して実施できる。ＦＬＴ３およびＰＤＧＦＲβに対して、Ｂａ／Ｆ３−ＦＬＴ３−ＩＴＤおよびＢａ／Ｆ３−Ｔｅｌ−ＰＤＧＦＲβ各々を使用する。
【０１１４】
本発明の化合物を、ＦＬＴ３またはＰＤＧＦＲβ細胞キナーゼ活性に依存する、形質転換Ｂａ／Ｆ３−ＦＬＴ３−ＩＴＤまたはＢａ／Ｆ３−Ｔｅｌ−ＰＤＧＦＲβ細胞増殖を阻害する能力に対して試験できる。Ｂａ／Ｆ３−ＦＬＴ３−ＩＴＤまたはＢａ／Ｆ３−Ｔｅｌ−ＰＤＧＦＲβを、培養培地として１０％胎児ウシ血清を添加したＲＰＭＩ１６４０で、懸濁液中で８００，０００細胞／ｍＬまで培養する。細胞を、５０μＬの培養培地中で５０００細胞／ウェルで３８４ウェルフォーマットプレートに分配する。本発明の化合物を、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解し、希釈する。１２点１：３連続希釈物をＤＭＳＯに入れ、一般的に１０ｍＭから０．０５μＭの範囲の濃度勾配を作る。細胞を５０ｎＬの希釈された化合物に加え、細胞培養インキュベーターで４８時間インキュベートする。細胞が増殖することにより作られる還元環境をモニタリングするために使用し得るＡｌａｍａｒＢｌｕｅ（登録商標）（TREK Diagnostic Systems）を、１０％の最終濃度で細胞に加える。細胞培養インキュベーターで３７℃でさらに４時間インキュベート後、還元ＡｌａｍａｒＢｌｕｅ（登録商標）からの蛍光シグナル（励起５３０ｎｍ；発光５８０ｎｍ）をＡｎａｌｙｓｔ  ＧＴ（Molecular Devices Corp.）で定量する。ＩＣ５０値を１２濃度でそれぞれの化合物の阻害％の線形回帰分析により計算する。
【０１１５】
細胞性ＥＴＶ６−ＮＴＲＫ３依存性増殖の阻害（ハイスループット法）
マウス細胞系Ｂａ／Ｆ３造血前駆細胞系はＥＴＶ６−ＮＴＲＫ３  ｃＤＮＡ（Ｂａ／Ｆ３  ＥＮ）で形質転換され得る。これらの細胞を、ペニシリン５０μｇ／ｍＬ、ストレプトマイシン５０μｇ／ｍＬおよびＬ−グルタミン２００ｍＭを添加したＲＰＭＩ／１０％胎児ウシ血清（ＲＰＭＩ／ＦＣＳ）に維持する。形質転換されていないＢａ／Ｆ３細胞を、ＩＬ３の源として１０％のＷＥＨＩ馴化培地を添加して同様に維持する。
【０１１６】
５０μｌのＢａ／Ｆ３またはＢａ／Ｆ３  ＥＮ細胞懸濁液を２０００細胞／ウェルの密度でＧｒｅｉｎｅｒ３８４ウェルマイクロプレート（black）に播種する。５０ｎＬの試験化合物（ＤＭＳＯ貯蔵溶液中で１ｍＭ）をそれぞれのウェルに加える。細胞を７２時間、３７℃、５％ＣＯ２でインキュベートする。１０μｌの６０％Ａｌａｍａｒ  Ｂｌｕｅ溶液（Tek diagnostics）をそれぞれのウェルに加え、細胞をさらに２４時間インキュベートする。蛍光強度（５３０ｎｍで励起、５８０ｎｍで放射）でＡｃｑｕｅｓｔＴＭシステム（Molecular Devices）を使用して定量する。
【０１１７】
細胞性ＥＴＶ６−ＮＴＲＫ３依存性増殖の阻害
９０μＬの培地中に含まれる１０，０００細胞／ウェルのＢａ／Ｆ３  ＥＮ細胞を９６ウェルＴＣプレートに播種する。１０μＬの試験化合物の３倍連続希釈（Ｃｍａｘは１０μＭ）をそれぞれのウェルに添加する（ＳＴＩ５７１を陽性対照として包含する）。細胞を７２時間、３７℃、５％ＣＯ２でインキュベート後、１５μＬのＭＴＴ（Promega）をそれぞれのウェルに添加し、細胞をさらに５時間インキュベートする。５７０ｎｍの光学密度を分光測光により定量し、ＩＣ５０値を用量応答曲線から決定する。
【０１１８】
細胞の増殖に対する効果
本発明の化合物を、ＥＴＶ６−ＮＴＲＫ３またはＥＴＶ６−ＮＴＲＫ１、ＥＴＶ６−ＮＴＲＫ２、Ｂｃｒ−Ａｂｌ、ＦＬＴ３、ＦＧＦＲ３、ＮＰＭ−Ａｌｋ、ＦＩＧ−ＲｏｓおよびＲｏｒ１のいずれかを発現するＢａ／Ｆ３細胞に対するそれらの抗増殖効果を試験できる。異なる細胞系および非形質転換細胞に対するこれらの化合物の抗増殖性効果を、上記のとおり（ＩＬ３欠如培地中で）３８４ウェルプレートで３倍連続希釈で試験する。異なる細胞系の化合物のＩＣ５０値を、上記のとおりに得た用量応答曲線から決定する。
【０１１９】
Ｕｐｓｔａｔｅ  ＫｉｎａｓｅＰｒｏｆｉｌｅｒＴＭ−放射酵素的フィルター結合アッセイ
本発明の化合物を、一連のキナーゼの個々のメンバー（キナーゼの一部として、ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢ、ＴｒｋＣ、Ａｂｌ、Ｂｃｒ−Ａｂｌ、ｃＳｒｃ、ＴＰＲ−Ｍｅｔ、Ｔｉｅ２、ＭＥＴ、ＦＧＦＲ３、オーロラ、Ａｘｌ、Ｂｍｘ、ＢＴＫ、ｃ−ｋｉｔ、ＣＨＫ２、Ｆｌｔ３、ＭＳＴ２、ｐ７０Ｓ６Ｋ、ＰＤＧＦＲ、ＰＫＢ、ＰＫＣα、Ｒａｆ、ＲＯＣＫ−ＩＩ、Ｒｓｋ１およびＳＧＫキナーゼを含み、これに限定しない）を阻害する能力についてアッセイできる。化合物を、１０μＭの最終濃度でデュプリケートで、この一般的プロトコールに従い試験する。キナーゼ緩衝液組成物および基質は一連の“Ｕｐｓｔａｔｅ  Ｋｉｎａｓｅ  ＰｒｏｆｉｌｅｒＴＭ”を含んでいる異なるキナーゼに対して変化することを留意する。キナーゼ緩衝液（２．５μＬ、１０×−必要であればＭｎＣｌ２含有）、キナーゼ緩衝液中の活性キナーゼ（０．００１−０．０１単位；２．５μＬ）、特異的またはポリ（Ｇｌｕ４−Ｔｙｒ）ペプチド（５−５００μＭまたは．０１ｍｇ／ｍｌ）およびキナーゼ緩衝液（５０μＭ；５μＬ）を、氷上でエッペンドルフで混合する。Ｍｇ／ＡＴＰミックス（１０μＬ；６７．５（または３３．７５）ｍＭのＭｇＣｌ２、４５０（または２２５）μＭのＡＴＰおよび１μＣｉ／μｌ［γ−３２Ｐ］−ＡＴＰ（３０００Ｃｉ／ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を約３０℃で約１０分インキュベートする。反応混合物を２ｃｍ×２ｃｍのＰ８１（ホスホセルロース、正に荷電したペプチド基質のため）またはＷｈａｔｍａｎ  Ｎｏ．１（ポリ（Ｇｌｕ４−Ｔｙｒ）ペプチド基質のため）試験紙升目にスポット（２０μＬ）する。アッセイ升目を４回、それぞれ５分、０．７５％リン酸で、そして１回アセトンで５分洗浄する。アッセイ升目をシンチレーションバイアルに移し、５ｍｌシンチレーションカクテルを添加し、ペプチド基質への３２Ｐ取り込み（ｃｐｍ）をＢｅｃｋｍａｎシンチレーションカウンターで計数する。それぞれの反応について阻害パーセントを計算する。
【０１２０】
遊離形の式（１）または（２）の化合物または薬学的に許容される塩形は、例えば、本出願に記載のインビトロ試験法により示される通り、重要な薬理学的特性を示すことができる。これらの実験におけるＩＣ５０値は、阻害剤なしの対照を使用して得られる細胞数よりも５０％少ない細胞数となる対象の試験化合物の濃度である。一般的に、本発明の化合物は、１ｎＭから１０μＭのＩＣ５０値を有する。いくつかの例において、本発明の化合物は、０．０１μＭから５μＭのＩＣ５０値を示す。他の例において、本発明の化合物は、０．０１μＭから１μＭ、または、さらに特に１ｎＭから１μＭのＩＣ５０値を有する。さらに他の態様において、本発明の化合物は、１ｎＭ未満または１０μＭより大きいＩＣ５０値を有する。１０μＭの濃度で式（１）または（２）の化合物は、１種以上の下記キナーゼ：ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢ、ＴｒｋＣ、Ａｂｌ、Ｂｃｒ−Ａｂｌ、ｃＳｒｃ、ＴＰＲ−Ｍｅｔ、Ｔｉｅ２、ＭＥＴ、ＦＧＦＲ３、オーロラ、Ａｘｌ、Ｂｍｘ、ＢＴＫ、ｃ−ｋｉｔ、ＣＨＫ２、Ｆｌｔ３、ＭＳＴ２、ｐ７０Ｓ６Ｋ、ＰＤＧＦＲ、ＰＫＢ、ＰＫＣα、Ｒａｆ、ＲＯＣＫ−ＩＩ、Ｒｓｋ１およびＳＧＫキナーゼに対して５０％以上の阻害％、または他の態様において、好ましくは約７０％以上の阻害％を示すことができる。
【０１２１】
ここに記載の例および態様は、説明の目的のためのみであり、それに照らした様々な修飾または変化が当業者には示唆され、それらは本発明の精神および範囲の範囲内および添付の特許請求の範囲内に包含されることは理解されるべきである。本明細書で引用する全ての刊行物、特許および特許出願は全ての目的のために引用して本明細書に包含する。
【国際調査報告】
2010505859.tif 000022
2010505859.tif 000023