(57)【要約】  本開示は、一般に、従来技術の配合物と比して修正された薬物動態学的プロファイルを有する有効処方成分である甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）を含有する新規な配合物に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
有効量のＴＳＨと有効量の薬学的に許容可能なポリマーとを含む有効量の医薬組成物を患者に投与するステップを含む、必要とする患者における甲状腺疾患を治療する方法。
【請求項２】
医薬組成物が、投与後４８時間の間にわたって患者において２．５ｎｇ／ｍｌ以下の血清Ｔ３レベルをもたらす、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
甲状腺疾患が、甲状腺種および甲状腺癌からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
医薬組成物が筋肉内注射を介して送達される、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
患者の血清中のＴＳＨの有効Ｔｍａｘが、対応するＴＳＨの水溶液が投与された場合の患者の血清中のＴＳＨの有効Ｔｍａｘと比して少なくとも約２０％長い、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
患者の血清中のＴＳＨの有効Ｃｍａｘが、対応するＴＳＨの水溶液が投与された場合の患者の血清中のＴＳＨの有効Ｃｍａｘと比して少なくとも約２０％低い、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
組成物が、投与後４８時間の間にわたって患者において２．５ｎｇ／ｍｌ以下の血清Ｔ３レベルをもたらす、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
甲状腺疾患を患う患者において２．０ｍＩＵ／Ｌ超にＴＳＨの血漿中濃度を維持する方法であって、有効量のＴＳＨと有効量の薬学的に許容可能なポリマーとを含む有効量の医薬組成物を患者に投与するステップを含み、ＴＳＨの血清中濃度または血漿中濃度が、投与後約６時間を超えて約２．０ｍＩＵ／Ｌ超に維持される方法。
【請求項９】
ＴＳＨの血漿中濃度が、投与の後、約１０時間より長い間高く維持される、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
ＴＳＨの血漿中濃度が、投与の後、約１５時間より長い間高く維持される、請求項８に記載の方法。
【請求項１１】
ＴＳＨの血漿中濃度が、投与の後、約１日より長い間高く維持される、請求項８に記載の方法。
【請求項１２】
ＴＳＨの血漿中濃度が、投与の後、約２日間より長い間高く維持される、請求項８に記載の方法。
【請求項１３】
ＴＳＨの血漿中濃度が、投与の後、約４日間より長い間高く維持される、請求項８に記載の方法。
【請求項１４】
甲状腺疾患が、甲状腺種および甲状腺癌からなる群から選択される、請求項８に記載の方法。
【請求項１５】
有効量のＴＳＨと有効量の薬学的に許容可能なポリマーとを混合し、これにより放出調節製剤を提供するステップを含むＴＳＨの放出調節製剤を提供する方法。
【請求項１６】
ＴＳＨが哺乳動物から単離されたＴＳＨである、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
ＴＳＨが組換え型哺乳類ＴＳＨである、請求項１５に記載の方法。
【請求項１８】
哺乳動物がヒトである、請求項１６または１７に記載の方法。
【請求項１９】
薬学的に許容可能なポリマーが代謝的に排除可能であるポリマーである、請求項１５に記載の方法。
【請求項２０】
薬学的に許容可能なポリマーが身体中に注射可能である、請求項１５に記載の方法。
【請求項２１】
薬学的に許容可能なポリマーが約４０〜約１２５ｃｐｓの粘度を有する、請求項１５に記載の方法。
【請求項２２】
薬学的に許容可能なポリマーがカルボキシメチルセルロースナトリウムである、請求項１５に記載の方法。
【請求項２３】
カルボキシメチルセルロースナトリウムが約７０，０００〜約９５０，０００の間の平均分子量を有する、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
薬学的に許容可能なポリマーが約３％カルボキシメチルセルロースナトリウムである、請求項２２に記載の方法。
【請求項２５】
ＴＳＨの濃度が、約４０μｇ／ｍｌ〜約８０μｇ／ｍｌの間である、請求項１５に記載の方法。
【請求項２６】
ＴＳＨと薬学的に許容可能なポリマーとを含む、患者の血流中へのＴＳＨの調節された放出を許容する医薬組成物であって、患者に投与されたときに、対応するＴＳＨの水溶液が投与された場合の患者の血清中のＴＳＨの有効Ｔｍａｘより少なくとも約２０％長い患者の血清中のＴＳＨの有効Ｔｍａｘをもたらす医薬組成物。
【請求項２７】
ＴＳＨと薬学的に許容可能なポリマーとを含む、患者の血流中へのＴＳＨの調節された放出を許容する医薬組成物であって、患者に投与されたときに、対応するＴＳＨの水溶液が投与された場合の患者の血清中のＴＳＨの有効Ｃｍａｘより少なくとも約２０％低い患者の血清中のＴＳＨの有効Ｃｍａｘをもたらす医薬組成物。
【請求項２８】
ＴＳＨが哺乳動物から単離されたＴＳＨである、請求項２６または２７に記載の医薬組成物。
【請求項２９】
哺乳動物がヒトである、請求項２８に記載の医薬組成物。
【請求項３０】
ＴＳＨが組換え型哺乳類ＴＳＨである、請求項２６または２７に記載の医薬組成物。
【請求項３１】
哺乳動物がヒトである、請求項３０に記載の医薬組成物。
【請求項３２】
薬学的に許容可能なポリマーが、多糖類、セルロース誘導体、メチルセルロース、ヒドロキシメチルセルソール、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、エチルヒドロキシエチルセルロース、ヒプロメロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、ポリ（エチレングリコール）、ポリ（エチレングリコール）ポリマー、ポリ（エチレンオキシド）、ポリ（プロピレンオキシド）、ポリオキシアルキレンブロックコポリマー、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、ポリプロリン、アガロース、キトサン、カラゲナン、高分子キトサン、ヒアルロン酸、コンドロイチン、コンドロイチン−４−硫酸、ヘパラン硫酸、ヘパリン、グリコサミノグリカン、寒天、ペクチン、膠、アルギン酸、デキストラン、α−アミロース、アミロペクチン、キトサンおよび前述のいずれかのものの塩またはエステルからなる群から選択される、請求項２６または２７に記載の医薬組成物。
【請求項３３】
薬学的に許容可能なポリマーがカルボキシメチルセルロースナトリウムである、請求項２６または２７に記載の医薬組成物。
【請求項３４】
組成物が、約０．０５％〜約５％カルボキシメチルセルロースナトリウムを含む、請求項３に記載の医薬組成物。
【請求項３５】
カルボキシメチルセルロースナトリウムが、約７０，０００〜約９５０，０００の分子量を有する、請求項３に記載の医薬組成物。
【請求項３６】
組成物が、少なくとも約４０ｃｐｓの粘度を有する、請求項２６または２７に記載の医薬組成物。
【請求項３７】
組成物が約４０〜約１２５ｃｐｓの粘度を有する、請求項２６または２７に記載の医薬組成物。
【請求項３８】
有効量のＴＳＨと有効量の薬学的に許容可能なポリマーとを含む医薬組成物であって、少なくとも約４０ｃｐｓの粘度を有する組成物。
【請求項３９】
組成物が、少なくとも約５０ｃｐｓの粘度を有する、請求項３８に記載の医薬組成物。
【請求項４０】
組成物が、少なくとも約７０ｃｐｓの粘度を有する、請求項３８に記載の医薬組成物。
【請求項４１】
組成物が、少なくとも約９０ｃｐｓの粘度を有する、請求項３８に記載の医薬組成物。
【請求項４２】
有効量のＴＳＨと有効量の薬学的に許容可能なポリマーとを含む医薬組成物であって、必要とする患者への投与後４８時間の間にわたって２．５ｎｇ／ｍｌ以下の血清Ｔ３レベルをもたらす組成物。
【請求項４３】
有効量のＴＳＨと有効量の薬学的に許容可能なポリマーとを含む医薬組成物であって、必要とする患者への投与の後に少なくとも６時間の有効Ｔｍａｘをもたらす組成物。
【請求項４４】
有効量のＴＳＨと有効量の薬学的に許容可能なポリマーとを含む医薬組成物であって、必要とする患者への投与後に、約２．０ｍＩＵ／Ｌ超の血清中の有効Ｃｍａｘをもたらす組成物。
【請求項４５】
必要とする患者が、甲状腺種および甲状腺癌からなる群から選択される甲状腺疾患を患う患者である、請求項４２〜４４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項４６】
ＴＳＨが哺乳動物から単離されたＴＳＨである、請求項４２〜４４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項４７】
哺乳動物がヒトである、請求項４６に記載の医薬組成物。
【請求項４８】
ＴＳＨが組換え型哺乳類ＴＳＨである、請求項４２〜４４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項４９】
哺乳動物がヒトである、請求項４８に記載の医薬組成物。
【請求項５０】
薬学的に許容可能なポリマーが、約７０，０００〜約９５０，０００の間の平均分子量を有するカルボキシメチルセルロースナトリウムである、請求項４２〜４４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項５１】
甲状腺疾患を治療する薬剤の製造のための、請求項２６、２７、３８および４２〜４４のいずれか一項に記載の組成物の使用。
【請求項５２】
甲状腺疾患が、甲状腺種および甲状腺癌からなる群から選択される、請求項５１に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２００６年９月１９日出願の米国仮特許出願第６０／８４６，０７７号明細書の利益を主張する。上記出願の全教示は参照により本明細書において援用される。
【０００２】
（発明の分野）
本開示は、一般に、従来技術の配合物と比して修正された薬物動態学的プロファイルを有する、有効処方成分である甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）を含有する新規配合物に関する。
【背景技術】
【０００３】
（発明の背景）
甲状腺腫は甲状腺の肥大である。甲状腺種の症状としては、甲状腺肥大、首の膨満、呼吸障害、咳嗽、喘鳴、嚥下障害、頸静脈拡張、および眩暈が挙げられる。時間と共に、甲状腺種は、正常な甲状腺組織が自己免疫性または他の甲状腺疾病により破壊されるために甲状腺機能低下症を生じる可能性がある。あるいは、甲状腺種は、中毒性結節性甲状腺種に進行する可能性がある。この場合、中毒性結節性甲状腺種は、追加的な甲状腺ホルモンを生成する可能性があり、患者は、甲状腺機能亢進症に進展する可能性がある。また、甲状腺肥大または甲状腺種からの硬化結節の発達は甲状腺悪性腫瘍に進展する可能性があり、または甲状腺癌が、既存の甲状腺種無しで発達する可能性がある。患者へのＴＳＨの投与は、甲状腺種および甲状腺癌を含む種々の甲状腺疾病に対する診断上のまたは治療的アプローチに関与することができる。これらの疾病について、投与されたＴＳＨの薬物動態学的プロファイルは、診断上のまたは治療的処置の最適な成功のために重要であり得る。
【０００４】
現在、甲状腺種の治療は、放射性ヨウ素の投与または甲状腺の一部あるいはすべての手術的除去を含む。放射性ヨウ素治療からの副作用は、甲状腺ホルモンによる日々の治療が必要である終生甲状腺機能低下症である。甲状腺の手術的除去もまた終生甲状腺機能低下症をもたらす可能性がある。しかも、甲状腺付近の構造に対する外傷を含めて、手術には関連するリスクが存在する。
【０００５】
甲状腺腫は、甲状腺が、身体が必要とする量を満たす十分な甲状腺ホルモンを産生することができない場合に生じる可能性がある。他の甲状腺種患者は、角に活動性の甲状腺を有する可能性がある。
【０００６】
甲状腺機能低下症は身体が十分な甲状腺ホルモンに欠く状態であり、遅い新陳代謝が、通常は、この状態の特徴である。臨床的症状としては、疲労、脱力感、体重増加、乾燥髪、乾燥肌、脱毛、寒冷不耐性、筋肉痙攣、便秘、うつ状態、過敏症、記憶喪失、および異常な月経周期が挙げられる。確定診断は高いレベルのＴＳＨを示す血液検査によりなされることができ、ここで、通常レベルのＴＳＨは一般に約０．４〜約４．５ｍＩＵ／Ｌの間である。合衆国人口を反映する約１７，０００人の患者のサンプル研究では、約４．６％が甲状腺機能低下症と報告された。
【０００７】
甲状腺機能亢進は、身体の組織への過剰な量の甲状腺ホルモンの作用により生じる状態である。臨床的症状としては、動悸、高熱不耐性、神経衰弱、不眠症、息切れ、便通の増加、軽微な月経期または月経期の欠如、および疲労が挙げられる。甲状腺機能亢進は、ＴＳＨのレベルを計測する血液検査で診断することが可能である。低血中ＴＳＨが甲状腺が自然にホルモンを過剰産生していることを強く示唆し、ここで、ＴＳＨの正常なレベルは、一般に、約０．４〜約４．５ｍＩＵ／Ｌの間である。サンプル研究によると、母集団の０．５〜６．３％の範囲の甲状腺機能亢進症の全体罹患率が報告されている。
【０００８】
甲状腺癌は、甲状腺由来の細胞の非制御的な増殖が存在する疾病の一群である。甲状腺癌は、通例、乳頭状、濾胞性および好酸性細胞癌を含む分化型甲状腺癌、ならびに、髄様および未分化癌を含む他の甲状腺癌として区分されている。時間と共に、いくつかの分化型甲状腺癌は高度に分化されなくなり、脱分化型または低分化型癌として区分され得る。種々のタイプの甲状腺癌を有する患者へのＴＳＨの投与は、甲状腺癌の診断または治療において役立つ可能性がある。ＴＳＨの正確な薬物動態学が、診断上のおよび／または治療的処置の最適化に重要であり得る。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本開示は、一般に、従来技術の配合物と比して修正された薬物動態学的プロファイルを有する、有効処方成分であるＴＳＨを含有する新規配合物に関する。
【００１０】
一実施形態は、有効量のＴＳＨと有効量の薬学的に許容可能なポリマーとを混合し、これにより放出調節製剤を提供するステップを含む、ＴＳＨの放出調節製剤を提供する方法を提供する。
【００１１】
一実施形態は、必要とする患者における甲状腺疾患を治療する方法を提供し、有効量のＴＳＨと有効量の薬学的に許容可能なポリマーとを含む有効量の医薬組成物を患者に送達するステップが含まれる。
【００１２】
一実施形態は、甲状腺疾患を患う患者においてＴＳＨの血漿中濃度を２．０ｍＩＵ／Ｌに維持する方法であって、有効量のＴＳＨと有効量の薬学的に許容可能なポリマーとを含む有効量の医薬組成物を患者に投与するステップを含む方法を提供し、ここで、ＴＳＨの血清中濃度または血漿中濃度が、投与後約６時間より長く約２．０ｍＩＵ／Ｌ超に維持される。
【００１３】
一実施形態は、ＴＳＨと薬学的に許容可能なポリマーとを含む、患者の血流中へのＴＳＨの調節された放出を許容する医薬組成物を提供し、ここで、患者に投与されたときに、医薬品投与量形態は、対応するＴＳＨの水溶液が投与された場合の患者の血清中のＴＳＨの有効Ｔｍａｘより少なくとも約２０％長い患者の血清中のＴＳＨの有効Ｔｍａｘをもたらす。
【００１４】
一実施形態は、ＴＳＨと薬学的に許容可能なポリマーとを含む、患者の血流中へのＴＳＨの調節された放出を許容する医薬組成物を提供し、ここで、患者に投与されたときに、医薬品投与量形態は、対応するＴＳＨの水溶液が投与された場合の患者の血清中のＴＳＨの有効Ｃｍａｘより少なくとも約２０％低い患者の血清中のＴＳＨの有効Ｃｍａｘをもたらす。
【００１５】
一実施形態は、有効量のＴＳＨと有効量の薬学的に許容可能なポリマーとを含む医薬組成物を提供し、ここで、組成物は、少なくとも約４０ｃｐｓの粘度を室温で有する。
【００１６】
一実施形態は、有効量のＴＳＨと有効量の薬学的に許容可能なポリマーとを含む医薬組成物を提供し、ここで、必要とする患者への投与後に、組成物は、少なくとも６時間の有効Ｔｍａｘをもたらす。
【００１７】
一実施形態は、有効量のＴＳＨと有効量の薬学的に許容可能なポリマーとを含む医薬組成物を提供し、ここで、必要とする患者への投与後に、組成物は、４８時間の間にわたって２．５ｎｇ／ｍｌ以下の血清Ｔ３レベルをもたらす。
【００１８】
一実施形態は、有効量のＴＳＨと有効量の薬学的に許容可能なポリマーとを含む医薬組成物を提供し、ここで、必要とする患者への投与後に、組成物は、患者の血清中に、約２．０ｍＩＵ／Ｌ超の有効Ｃｍａｘをもたらす。
【００１９】
一実施形態は、甲状腺疾患（例えば、甲状腺種、甲状腺癌）を治療するための薬剤の製造のための、開示の実施形態の医薬組成物の使用を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
【図１】ラットにおける、ｒｈＴＳＨの様々な配合物の筋肉内投与（ＩＭ）後の特定の時点でのＴＳＨの平均血清中濃度（ｎｇ／ｍＬ）を示すグラフである。各ラットに対して、注射用滅菌水（「ＳＷＦＩ」として標識した）；０．２５％メチルセルロース（「０．２５％ＭＣ」として標識した）；０．１％メチルセルロース（「０．１％ＭＣ」として標識した）；３％カルボキシメチルセルロースナトリウム（「３％ＮａＣＭＣ」として標識した）；２％カルボキシメチルセルロースナトリウム（「２％ＮａＣＭＣ」として標識した）；または１％カルボキシメチルセルロースナトリウム（「１％ＮａＣＭＣ」として標識した）のいずれか中に、１ｍｇ／ｋｇのｒｈＴＳＨを単一用量で投与した。値は平均±ＳＤを示す。
【図２】ラットにおける、ｒｈＴＳＨの様々な配合物の筋肉内投与（ＩＭ）後の特定の時点でのＴＳＨの平均血清中濃度（ｎｇ／ｍＬ）を示すグラフである。各ラットに対して、注射用滅菌水（「ＳＷＦＩ」として標識した）；０．２５％メチルセルロース（「０．２５％ＭＣ」として標識した）；または３％カルボキシメチルセルロースナトリウム（「３％ＮａＣＭＣ」として標識した）のいずれか中に、１ｍｇ／ｋｇのｒｈＴＳＨを単一用量で投与した。
【図３】ラットにおける、ｒｈＴＳＨの様々な配合物の筋肉内投与（ＩＭ）後の特定の時点でのＴＳＨの平均血清中濃度（ｎｇ／ｍＬ）を示すグラフである。各ラットに対して、注射用滅菌水（「ＳＷＦＩ」として標識した）；ヘラクレス（Ｈｅｒｃｕｌｅｓ）製の２％中粘度カルボキシメチルセルロースナトリウム（「２％ＭＶ  ＮａＣＭＣ、１４９ｃｐｓ」として標識した）；ヘラクレス（Ｈｅｒｃｕｌｅｓ）製の１．５％％中粘度カルボキシメチルセルロースナトリウム（「１．５％ＭＶ  ＮａＣＭＣ、７９ｃｐｓ」として標識した）；ルガー（Ｒｕｇｅｒ）製の３％低粘度カルボキシメチルセルロースナトリウム（「３％ＬＶ  ＮａＣＭＣ、７６ｃｐｓ」として標識した）；ヘラクレス（Ｈｅｒｃｕｌｅｓ）製の３％低粘度カルボキシメチルセルロースナトリウム（「３％ＬＶ  ＮａＣＭＣ、４６ｃｐｓ」として標識した）；または２％低粘度カルボキシメチルセルロースナトリウム（「２％ＬＶ  ＮａＣＭＣ、１８ｃｐｓ」として標識した）のいずれか中に、１ｍｇ／ｋｇのｒｈＴＳＨを単一用量で投与した。
【図４】ラットにおける、ｒｈＴＳＨの様々な配合物の筋肉内投与（ＩＭ）後の特定の時点でのＴＳＨの平均血清中濃度（ｎｇ／ｍＬ）を示すグラフである。各ラットに対して、注射用滅菌水（「ＳＷＦＩ」として標識した）；２．５％カルボキシメチルセルロースナトリウム（「２．５％ＮａＣＭＣ、４１ｃｐｓ」として標識した）；３％カルボキシメチルセルロースナトリウム（「３．０％ＮａＣＭＣ、９７ｃｐｓ」として標識した）；または３．５％カルボキシメチルセルロースナトリウム（「３．５％ＮａＣＭＣ、１５９ｃｐｓ」として標識した）のいずれか中に、０．１ｍｇ／ｋｇのｒｈＴＳＨを単一用量で投与した。値は平均±ＳＤを示している。
【図５】イヌにおける、ｒｈＴＳＨの様々な配合物および／または投与量の筋肉内投与（ＩＭ）後の特定の時点でのＴＳＨの平均血清中濃度（ｎｇ／ｍＬ）を示すグラフである。各イヌに対して、１ｍｇ／ｋｇのｒｈＴＳＨを単一用量で投与した。イヌに、注射用滅菌水中の０．１５ｍｌ／ｋｇのｒｈＴＳＨ（「ＳＷＦＩ（０．１５ｍＬ／ｋｇ）」として標識した）；３％カルボキシメチルセルロースナトリウム中の０．１５ｍｌ／ｋｇのｒｈＴＳＨ（「３％ＮａＣＭＣ（０．１５ｍＬ／ｋｇ）」として標識した）；または３％カルボキシメチルセルロースナトリウム中の０．０７ｍｌ／ｋｇのｒｈＴＳＨ（「３％ＮａＣＭＣ（０．０７ｍＬ／ｋｇ）」として標識した）のいずれかを投与した。
【図６】イヌにおける、ｒｈＴＳＨの様々な配合物の筋肉内投与（ＩＭ）後の特定の時点でのＴＳＨの平均血清中濃度（ｎｇ／ｍＬ）を示すグラフである。イヌに、注射用滅菌水（「ＳＷＦＩ中の０．０５ｍｇ／ｋｇ  ｒｈＴＳＨ」として標識した）または９３ｃｐｓでの３％カルボキシメチルセルロースナトリウム（「３％ＮａＣＭＣ中の０．０５ｍｇ／ｋｇ  ｒｈＴＳＨ、９３ｃｐｓ」として標識した）のいずれか中の０．０５ｍｇ／ｋｇのｒｈＴＳＨを投与した。
【図７】イヌにおける、ｒｈＴＳＨの様々な配合物の筋肉内投与（ＩＭ）後の特定の時点でのＴＳＨの平均血清中濃度（ｎｇ／ｍＬ）を示すグラフである。イヌに、注射用滅菌水中の０．１ｍｇ／ｋｇのｒｈＴＳＨ（「ＳＷＦＩ中の０．１ｍｇ／ｋｇ  ｒｈＴＳＨ」として標識した）；９３ｃｐｓでの３％カルボキシメチルセルロースナトリウム中の０．１ｍｇ／ｋｇのｒｈＴＳＨ（「３％ＮａＣＭＣ中の０．１ｍｇ／ｋｇ  ｒｈＴＳＨ、９３ｃｐｓ」として標識した）；または５４ｃｐｓでの３％カルボキシメチルセルロースナトリウム中の０．１ｍｇ／ｋｇのｒｈＴＳＨ（「３％ＮａＣＭＣ中の０．１ｍｇ／ｋｇ  ｒｈＴＳＨ、５４ｃｐｓ」として標識した）を投与した。
【図８】イヌにおける、ｒｈＴＳＨの様々な配合物の筋肉内投与（ＩＭ）後の特定の時点でのＴＳＨの平均血清中濃度（ｎｇ／ｍＬ）を示すグラフである。イヌに、注射用滅菌水（「ＳＷＦＩ中の０．２ｍｇ／ｋｇ  ｒｈＴＳＨ」として標識した）または９３ｃｐｓでの３％カルボキシメチルセルロースナトリウム（「３％ＮａＣＭＣ中の０．２ｍｇ／ｋｇ  ｒｈＴＳＨ、９３ｃｐｓ」として標識した）のいずれか中の０．２ｍｇ／ｋｇのｒｈＴＳＨを投与した。
【図９】ヒトにおける、０．１ｍｇのｒｈＴＳＨ（チロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標））または３％カルボキシメチルセルロース中の０．１ｍｇのｒｈＴＳＨ（「ＭＲ−ｒｈＴＳＨ」として標識した）の筋肉内投与（ＩＭ）後の、特定の時点（投与前〜９６時間）でのＴＳＨの平均未補正血清中濃度（ｎｇ／ｍＬ）を示すグラフである。
【図１０】ヒトにおける、０．１ｍｇのｒｈＴＳＨ（チロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標））または３％カルボキシメチルセルロース中の０．１ｍｇのｒｈＴＳＨ（「ＭＲ−ｒｈＴＳＨ」として標識した）の筋肉内投与（ＩＭ）後の、特定の時点（投与前〜９６時間）でのＴＳＨの平均補正済血清中濃度（ｎｇ／ｍＬ）を示すグラフである。
【図１１】０．１ｍｇのｒｈＴＳＨ（チロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標））または３％カルボキシメチルセルロース中の０．１ｍｇのｒｈＴＳＨ（「ＭＲ−ｒｈＴＳＨ」として標識した）の筋肉内投与（ＩＭ）後の、ヒト患者におけるＴ３（トリヨードチロニン）の濃度を示すグラフである。＊は、ブートストラップ法を用いてマルチテストに調整したＴテストを用いた治療グループ間の統計的有意差（ｐ＜０．０５）を示す。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
（発明の詳細な説明）
本開示を通して、種々の文献、特許および公開特許公報は引用を特定することにより参照される。これらの文献、特許および公開特許公報における開示は、本発明が関連する技術分野における状態をより完全に記載するために、参照により本開示中に援用される。
【００２２】
本明細書において用いられるところ、一定の用語は、以下に定義される意味を有する。
【００２３】
定義
本明細書において用いられるところ、「を含む」という用語は、組成物および方法は、言及された構成要素を包含し、他のものも除外されないことを意味することが意図される。組成物および方法の定義に用いられる場合、「から本質的に構成される」とは、組み合わせに対していずれかの本質的な重要性を有する他の構成要素を除外することを意味すべきである。それ故、本明細書において定義される構成要素から本質的に構成される組成物は、単離および精製法に由来する微量な汚染物、ならびにリン酸−緩衝生理食塩水、防腐剤等などの薬学的に許容可能な担体を除外しないであろう。「からなる」とは、他の処方成分の構成要素のトレース量以上および本発明の組成物を投与するための実質的な方法ステップが除外されることが意味されるべきである。これらの翻訳用語の各々により定義される実施形態は、本発明の範囲内に包含される。
【００２４】
範囲を含む、例えば、ｐＨ、温度、時間、濃度、および分子量といったすべての数値指定は、０．１の増分により（＋）または（−）に変化される近似値である。常に明確に規定されてはいないが、すべての数値指定は「約」という用語により先行されていると理解されるべきである。また、常に明確に規定されてはいないが、本明細書に記載の試薬は単に例示的であり、およびこのようなものの等価物が技術分野において公知であると理解されるべきである。
【００２５】
「単離された」という用語は、ポリヌクレオチド、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、抗体、またはこれらのフラグメントが通常は性質的に関連している、細胞その他といった構成成分から分離されることを意味する。当業者には明らかであるとおり、非天然のポリヌクレオチド、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、抗体、またはこれらのフラグメントは、その天然の対応物と識別するために「単離」を必要としない。加えて、「濃縮された」、「分離された」または「希釈された」ポリヌクレオチド、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、抗体、またはこれらのフラグメントは、体積当たりの濃度または分子数が、その天然の対応物のものより大きい（「濃縮された」）または未満（「分離された」）という点において、その天然の対応物から識別可能である。その一次配列でまたは例えばそのグリコシル化パターンにより天然の対応物とは異なるポリヌクレオチド、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、抗体、またはこれらのフラグメントは、その一次配列により、またはあるいは、グリコシル化パターンなどの他の特徴によりその天然の対応物とは識別可能であるために、その単離形態中に存在している必要はない。それ故、非天然ポリヌクレオチドは、単離されたポリヌクレオチドからの個別の実施形態として提供される。細菌細胞中で産生されるタンパク質は、自然に産生される真核細胞から単離された天然タンパク質からの個別の実施形態として提供される。
【００２６】
「組換え型」という用語は、合成された、またはそうでなければインビトロで処理された（例えば「組換えポリヌクレオチド」）ポリヌクレオチド、および、組換えポリヌクレオチドを用いて細胞または他の生物学的系において遺伝子産物を産生させる方法、および、組換えポリヌクレオチドによりコードされたポリペプチド（「組換えタンパク質」）を指す。
【００２７】
「医薬組成物」とは、有効薬剤と、組成物を、インビトロ、インビボまたはエキソビボでの診断または治療的用途に好適とさせる不活性または活性な担体との組み合わせが包含されることが意図される。
【００２８】
本明細書において用いられるところ、「薬学的に許容可能な担体」という用語は、リン酸緩衝生理食塩水などの標準的な医薬品担体、水、および油／水または水／油エマルジョンなどのエマルジョン、ならびに種々のタイプの湿潤剤のいずれかを含む。組成物はまた、安定化剤および防腐剤を含むことが可能である。担体、安定化剤および補助剤の例については、マーチン（Ｍａｒｔｉｎ）、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．、第１５版（Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌ．Ｃｏ．、イーストン（Ｅａｓｔｏｎ）（１９７５年））を参照のこと。
【００２９】
「賦形剤」とは、有効処方成分の投与をさらに容易にするために医薬組成物に添加される非有効物質を指す。
【００３０】
本明細書において用いられるところ、「粘性ビヒクル」という用語は、流動性に対して比較的高い抵抗を有する場合に物質を希釈するために用いられる非有効物質を意図する。ニュートン液体（例えば水）は、力が作用された直後に流れることが知られている。粘度は、せん断速度にかかわらず一定のままである。粘度は、流体が攪拌または流される時のせん断（運動）に対する抵抗をもたらす、流体の内部摩擦の尺度を指す。内部摩擦力が大きいほど（すなわち粘度が高い）、流体の易流動性は低くなる。
【００３１】
粘度は、最も一般的には、回転円筒粘度計または毛細管装置で計測される。回転円筒粘度計は流体に関連するせん断力を計測し、それ故、絶対粘度を測定する。絶対粘度は、通常はセンチポアズであるメートル単位で測定される。次いで、動粘性率を得ることができるよう、流体の密度が計測されなければならい。動粘性率は、メートル法でのセンチストークで表記される。絶対粘度がセンチポアズで表記され、および密度がグラム／ｃｃで表記される場合、この比はセンチストークとなるであろう。液体の粘度は、大きく温度に依存する。温度の上昇は、粘度の低下をもたらすこととなる。本明細書における粘度の計測は、室温（例えば、２０〜２５℃）で考慮される。
【００３２】
本明細書において用いられるところ、「薬学的に許容可能なポリマー」という用語は、ＴＳＨの、インビトロ、インビボまたはエキソビボでの薬学的に許容可能な投与用の粘性ビヒクルを提供するポリマーを指す。
【００３３】
本明細書において用いられるところ、「放出調節製剤」という用語は、対応するＴＳＨの水溶液と比して遅延性のＴｍａｘおよび／または低減されたＣｍａｘをもたらす粘性ビヒクル中のＴＳＨの溶液および／またはＴＳＨの調製物を指す。
【００３４】
本明細書において用いられるところ、「放出調節ｒｈＴＳＨ」という用語は、対応するｒｈＴＳＨの水溶液と比して遅延性のＴｍａｘおよび／または低減されたＣｍａｘをもたらす粘性ビヒクル中の組換え型ヒトＴＳＨ（ｒｈＴＳＨ）の溶液および／またはｒｈＴＳＨの調製物を指す。
【００３５】
本明細書において用いられるところ、「対応するＴＳＨの水溶液」という用語は、ＴＳＨを溶解させることができる水または緩衝剤中のＴＳＨの溶液を指す。対応するＴＳＨの水溶液は、粘性ビヒクルを実質的に含まない。
【００３６】
本明細書において用いられるところ、「代謝的に排除可能な」という用語は、身体の正常なプロセスまたは新陳代謝を介した身体からの化合物の排除を指す。
【００３７】
「有効量」は、有益なまたは所望の結果をもたらすために十分な量である。有効量は、１回以上の投与、施用、または投与量で投与されることが可能である。
【００３８】
「対象」、「個体」または「患者」は本明細書において同義に用いられており、脊椎動物、好ましくは哺乳動物、より好ましくはヒトを指す。哺乳動物としては、これらに限定されないが、マウス、ラット、サル、ヒト、家畜、競技用動物、および愛玩動物が挙げられる。
【００３９】
薬物の薬物動態学的プロファイルは、血中（または血清あるいは血漿中）濃度時間曲線により測定することが可能であり、アンセル（Ａｎｓｅｌ）ら、「医薬品投与量形態および薬物送達系（Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ  Ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）」、第７版（リッペンコック（Ｌｉｐｐｅｎｃｏｃｋ）、ウィリアムズ（Ｗｉｌｌｉａｍｓ）、およびウィルケンス（Ｗｉｌｋｅｎｓ）、ペンシルバニア州フィラデルフィア（Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ＰＡ）（１９９９年））を参照のこと。血中（または血清あるいは血漿中）濃度時間曲線は、投与割合の割合を示す縦軸と時間を示す横軸とで経時的な薬物の濃度を追う。アンセル（Ａｎｓｅｌ）ら（１９９９年、前述の第１１３ページ）は、「薬物が最初に投与されるとき（時間ゼロ）、薬物の血中濃度もまたゼロであるあるべきである。薬物は、胃および／または腸管を通過するに伴って、投与量形態から開放され、最終的には溶解すると共に吸収される。サンプリングおよび分析が継続するに伴って、血液サンプルが、最大（ピーク）濃度（Ｃｍａｘ）に達するまでの薬物の濃度の上昇を明らかにする。次いで、追加的な投与量が与えられなければ、薬物の血中レベルは連続的に低下し、最終的にはゼロにまで低下する。」と報告している。アンセル（Ａｎｓｅｌ）は、薬物の胃および／または腸管への放出を開示するが、薬物の放出は、投与経路に応じて、他の場所でも生じる可能性があることが理解される。
【００４０】
血中レベル曲線の比較評価に対するパラメータの考慮において、コドス（Ｃｈｏｄｏｓ）およびサント（Ｓａｎｔｏ）（生物学的利用能の基礎（Ｂａｓｉｃｓ  ｏｆ  Ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ）、ミシガン州カラマズー（Ｋａｌａｍａｚｏｏ，ＭＩ）、ザ・アップジョンカンパニー（Ｔｈｅ  Ｕｐｊｏｈｎ  Ｃｏｍｐａｎｙ）（１９７３年））は、以下を列挙する。
１．ピーク高さ濃度（Ｃｍａｘ）；
２．ピーク高さ濃度（Ｔｍａｘ）の時間；および
３．血中（または血清あるいは血漿中）濃度−時間曲線下の面積（ＡＵＣ）。
【００４１】
これに関して、アンセル（Ａｎｓｅｌ）ら（１９９９年、前述の第１１５ページ）もまた「薬物吸収速度の変化は、ＣｍａｘおよびＴｍａｘの両方の値の変化によることとなる。各生成物は、その独自の特徴的な吸収速度を有する。吸収速度が低下するとき、Ｃｍａｘが低下し、Ｔｍａｘがその後に生じる。」と報告している。
【００４２】
本明細書において用いられるところ、「有効Ｔｍａｘ」とは、関連している組成物の特徴である「ピーク高さ濃度の時間」を指す。本明細書において用いられるところ、「有効Ｃｍａｘ」とは、関連している組成物の特徴である「ピーク高さ濃度」を指す。多くの場合、有効ＴｍａｘおよびＣｍａｘは、薬物の濃度が治療的範囲内にある血中（または血清あるいは血漿中）濃度時間曲線をもたらす。
【００４３】
ＴＳＨの投与は、甲状腺種および甲状腺癌などの甲状腺疾患に対する診断上のおよび／または治療的アプローチである。患者に対するＴＳＨの投与は、甲状腺種組織、正常な甲状腺組織、および／または甲状腺癌組織の新陳代謝を変化させることが可能である。組織新陳代謝の変化は、特にこれらに限定されないが、放射性ヨウ素（１２３−Ｉ、１２４−Ｉ、１３１−Ｉ）、放射線標識化グルコース（ＰＥＴスキャンに用いられるものなど）などの放射性同位元素、ならびに、非放射性ストラテジー（ＴＳＨによる組織新陳代謝の刺激、次いでサイログロブリンなどの血液中の腫瘍マーカの計測など）の利用を度々可能とさせる、これらの甲状腺疾病についての診断上のおよび／または治療的処置の実施を許容することができる。
【００４４】
血流中のＴＳＨの出現の薬物動態学は、診断上のおよび／または治療的処置の有効性に作用する可能性がある。それ故、ＴＳＨの薬物動態学を調整するための配合物の使用は、甲状腺種、甲状腺癌または他の甲状腺疾病を有する患者に対する診断上のおよび／または治療的アプローチを最適化するための重要なストラテジーである。この原理の甲状腺種への適用においては、ＴＳＨ血清レベルの急激なスパイクは患者において甲状腺機能亢進症をもたらす可能性があるため、例えば、１日または２日にわたる血中へのＴＳＨのより漸進的な放出が所望される。一定の状況（例えば甲状腺種）については、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２５、３０、３５、４０、４５時間または場合により５０時間もの長時間などの数時間にわたる血中へのＴＳＨの漸次的な放出が有用であり得る。あるいは、甲状腺癌などの一定の状況については、１、２、３、４、５、１０、１５、２０、２５日間または場合により３０日間もの長期などの数日間にわたる血中へのＴＳＨの漸次的な放出が、腫瘍マーカまたは核薬物または他のスキャンの使用により検出されおよび／または位置が特定されることが可能であるよう、身体中に残留する甲状腺癌組織の新陳代謝の刺激に有用であり得、この腫瘍の刺激はまた、放射線または他の手段を用いて癌をより治療可能とさせ得る。それ故、ＴＳＨ放出の薬物動態学を最適化するＴＳＨ含有配合物に対する要求が存在する。
【００４５】
ＴＳＨの投与は、大部分（約９９．５％）が担体タンパク質に結合している血中を循環する甲状腺ホルモンであるＴ３（トリヨードチロニン）の放出に作用する。未結合のＴ３が、生物学的作用および新陳代謝の制御に関与していると考えられている。正常な甲状腺機能において、担体タンパク質の濃度が変化可能であると共に総Ｔ３レベルが変化可能であるが、遊離Ｔ３のレベルは一定に維持される。Ｔ３レベルの定常性は異常に機能している甲状腺に対する場合ではない可能性がある。従って、遊離Ｔ３のレベルは、臨床的状態に相関する可能性がある。遊離Ｔ３レベルにおけるスパイクは、甲状腺機能亢進症状および／または心臓病症をもたらす可能性がある。例えば、遊離Ｔ３レベルにおけるスパイクは、患者（例えば、高齢の患者、病気の患者）に対する懸念である可能性がある心拍数の増加をもたらす可能性がある。それ故、ＴＳＨの投与においては、血清ＴＳＨレベルの急激なスパイクは遊離Ｔ３レベルにおける急激なスパイクをもたらす可能性があり、これは、次いで、患者に甲状腺機能亢進症および／または心臓病症をもたらす可能性がある。従って、特定の実施形態においては、遊離Ｔ３レベルがより一定のレベルで維持されるようＴＳＨを投与することが望ましい。
【００４６】
一実施形態において、出願人らの開示は、有効量のＴＳＨと有効量の粘性ビヒクルとを混合することによる、ＴＳＨの投与のための放出調節製剤を提供する方法を提供する。ＴＳＨが配合される媒体の粘度を高めることで、注射周囲の組織へのＴＳＨの吸収速度を著しく低下させることが可能であり、これは、次いで、血清中におけるＴＳＨレベルのより漸次的な増加をもたらすことが可能である。血清ＴＳＨレベルのより漸次的な放出は、遊離Ｔ４（チロキシン）、Ｔ４、Ｔ３および／または遊離Ｔ３の速効的な放出を抑えることが可能であると共に、より少ない甲状腺機能亢進症の急性徴候および症状を生じさせる。
【００４７】
薬学的に許容可能なポリマーは、有害な副作用を伴うことなく粘度を高めることが可能である。従って、薬学的に許容可能なポリマーを用い、ＴＳＨの水溶液と比した時に、ＴＳＨの薬物動態学的プロファイルの変性は好結果であるように見られた。好適な薬学的に許容可能なポリマーの例としては、これらに限定されないが、セルロース誘導体、メチルセルロース、ヒドロキシメチルセルソール、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、エチルヒドロキシエチルセルロース、ヒプロメロース、およびカルボキシメチルセルロースカルシウムなどの多糖類、ポリ（エチレングリコール）、ポリ（エチレングリコール）ポリマー、ポリ（エチレンオキシド）、ポリ（プロピレンオキシド）、ポリオキシアルキレンブロックコポリマー、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、ポリプロリン、アガロース、キトサン、カラゲナン、高分子キトサン、ヒアルロン酸、コンドロイチン、コンドロイチン−４−硫酸、ヘパラン硫酸、ヘパリン、グリコサミノグリカン、寒天、ペクチン、膠、アルギン酸、デキストラン、α−アミロース、アミロペクチン、キトサン、またはこれらの塩あるいはエステルが挙げられる。一実施形態においては、薬学的に許容可能なポリマーは、メチルセルロースおよびカルボキシメチルセルロースからなる群から選択される。他の実施形態において、薬学的に許容可能なポリマーはカルボキシメチルセルロースである。
【００４８】
本開示は、薬学的に許容可能なポリマーを含み、ＴＳＨの水溶液と比した時にＴＳＨの薬物動態学的プロファイルを変更することができる組成物を提供する。一実施形態においては、患者の血流中へのＴＳＨの調節された放出を許容するＴＳＨと薬学的に許容可能なポリマーとを含む医薬品投与量形態が提供され、ここで、患者に投与されたときに、医薬品投与量形態は、対応するＴＳＨの水溶液が投与された場合の患者の血清中のＴＳＨの有効Ｔｍａｘより少なくとも約２０％長い患者の血清中のＴＳＨの有効Ｔｍａｘをもたらす。他の実施形態において、患者の血流中へのＴＳＨの調節された放出を許容するＴＳＨと薬学的に許容可能なポリマーとを含む医薬品投与量形態が提供され、ここで、患者に投与されたときに、医薬品投与量形態は、対応するＴＳＨの水溶液が投与された場合に、患者におけるＴＳＨの有効Ｃｍａｘより少なくとも約２０％低い患者の血清中のＴＳＨの有効Ｃｍａｘをもたらす。
【００４９】
一実施形態において、出願人らの開示は、有効量のＴＳＨと有効量の薬学的に許容可能なポリマーとを混合することによる、ＴＳＨの投与のための放出調節製剤を提供する方法を提供する。他の実施形態において、出願人らの開示は、有効量のＴＳＨと有効量のメチルセルロースまたはカルボキシメチルセルロースとを混合することによる、ＴＳＨの投与のための放出調節製剤を提供する方法を提供する。他の薬学的に許容可能なポリマーは、種々の濃度のポリマーと、本明細書に記載のＴＳＨとを混合することにより同定され得る。同一のまたは同様のＣｍａｘおよび／またはＴｍａｘを有するポリマーが、次いで、同定され、本明細書に記載の方法において利用されることが可能である。例えば、図２は、１）ＴＳＨおよび水；２）ＴＳＨおよびメチルセルロース；および３）ＴＳＨおよびカルボキシメチルセルロースを含む組成物の放出動態学を比較する。
【００５０】
クロロキンの放出速度に対するポリマー、メチルセルロースの粘度の影響が、プラコンパン（Ｐｒａｋｏｎｇｐａｎ）ら（１９８９年）「筋肉内投与用のクロロキンの向上した配合物：ウサギにおける吸収動態学（Ａｎ  ｉｍｐｒｏｖｅｄ  ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃｈｌｏｒｏｑｕｉｎｅ  ｆｏｒ  ｉｎｔｒａｍｕｓｃｕｌａｒ  ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ：  ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ  ｋｉｎｅｔｉｃｓ  ｉｎ  ｒａｂｂｉｔｓ）」、Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．、４１：７２６〜７２８ページに報告された。著者らにより報告されているとおり、クロロキンは、合計分布容積より数桁小さい分布の中央見かけ容積、および筋肉内または皮下注射後の急速な吸収を含む特異な薬物動態学的プロファイルを有する。Ｉｄ．従って、クロロキンの過渡的に高い血中濃度が、脆弱性の対象に対して致命的である可能性のある血圧の低下を生じさせる可能性がある。Ｉｄ．ここで、著者らは、放出速度対数と、担体として用いられたポリマーメチルセルロース（２％）の粘度対数との間の直線関係を報告している。
【００５１】
出願人らは、ＴＳＨと薬学的に許容可能なポリマーとの組み合わせが、甲状腺疾患の治療に好適である修正された薬物動態学的プロファイルを有する組成物を提供することを予想外にも発見した。本明細書において既述し、例示したとおり、配合物は、予想外にも、低いＣｍａｘおよび高いＴｍａｘを薬物の生物学的利用能を変化させることなく提供する。
【００５２】
組成物を得るために、約１０μｇ〜約５０００μｇのＴＳＨが、約０．２％〜約５．０％ｗ／ｖ溶液の薬学的に許容可能なポリマーと混合される。一実施形態においては、約３００μｇ／ｍｌ〜約１５００μｇ／ｍｌのＴＳＨが薬学的に許容可能なポリマーと混合される。他の実施形態においては、薬学的に許容可能なポリマーの量は、ポリマーの約０．２５％および約５．０％；約１％および約４．５％；約２％および約４．０％；約２．５％および約３．５％；または約０．２％；約０．２５％；約０．３％；約０．３５％；約０．４％；約０．４５％；約０．５％、約１％、約２％、約３％、または約４％である。
【００５３】
配合物用のＴＳＨは、ウシ、ブタの、霊長類、またはヒトなどの天然哺乳類源から精製されることができ、または、代替的に、米国特許第５，８４０，５６６号明細書および米国特許第６，３６５，１２７号明細書に記載のものなどの技術分野において公知である方法を用いて非天然源から単離されることができる。ヒト組換え−産生ＴＳＨが以下に提供されている例において利用されてきているが、本開示の本発明は、これらの例において提供されているソースに限定されるべきではない。しかも、当業者には明らかであるとおり、タンパク質に対する軽微な修正は、組成物が本明細書に規定のパラメータの範囲内の薬物動態学的プロファイルを提供する限りにおいて、本発明の思想および範囲から逸脱せずに成すことが可能である。
【００５４】
チロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標）（ゲンザイム社（Ｇｅｎｚｙｍｅ  Ｃｏｒｐ．）、ＮＤＡ２−８９８）は、甲状腺癌の診断および／または治療のために現在市販されている組換え型ヒトＴＳＨ（ｒｈＴＳＨ）である。これは、筋肉内投与に先立って水で還元されるための凍結乾燥された粉末として販売されている。２〜８℃で保管されている場合、もしチロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標）薬物生成物が３６月間安定であれば、これは、現在の配合物用のＴＳＨのソースとして好適である。
【００５５】
媒体の粘度を高めるために粘性ビヒクルが用いられる。薬学的に許容可能なポリマーが粘性ビヒクルとして作用することができる。粘性ビヒクルおよびその濃度は、少なくとも約５ｃｐｓ、少なくとも約１０ｃｐｓ；少なくとも約１５ｃｐｓ；少なくとも約２０ｃｐｓ；少なくとも約２５ｃｐｓ；少なくとも約３０ｃｐｓ；少なくとも約３５ｃｐｓ；少なくとも約４０ｃｐｓ；少なくとも約４５ｃｐｓ；少なくとも約５０ｃｐｓ；少なくとも約５５ｃｐｓ；少なくとも約６０ｃｐｓ；少なくとも約６５ｃｐｓ；少なくとも約７０ｃｐｓ；少なくとも約７５ｃｐｓ；少なくとも約８０ｃｐｓ；少なくとも約８５ｃｐｓ；少なくとも約９０ｃｐｓ；少なくとも約９５ｃｐｓ；少なくとも約１００ｃｐｓ；少なくとも約１０５ｃｐｓ；少なくとも約１１０ｃｐｓ；少なくとも約１１５ｃｐｓ；少なくとも約１２０ｃｐｓ；少なくとも約１２５ｃｐｓ；少なくとも約１３０ｃｐｓ；少なくとも約１３５ｃｐｓ；少なくとも約１４０ｃｐｓ；少なくとも約１４５ｃｐｓ；少なくとも約１５０ｃｐｓ；少なくとも約１５５ｃｐｓ；少なくとも約１６０ｃｐｓ；少なくとも約１６５ｃｐｓ；少なくとも約１７０ｃｐｓ；少なくとも約１７５ｃｐｓ；少なくとも約１８０ｃｐｓ；少なくとも約１８５ｃｐｓ；少なくとも約１９０ｃｐｓ；少なくとも約１９５ｃｐｓ；少なくとも約２００ｃｐｓ；またはあるいは約４０〜９０ｃｐｓの最終粘度を有する配合物を達成するよう選択される。一定の実施形態において、粘性ビヒクルおよびその濃度は、約１５〜１５０ｃｐｓ、約４０〜１６０ｃｐｓ、約４５〜１２５ｃｐｓ、または約４０〜９０ｃｐｓの最終粘度を達成するよう選択される。特定の実施形態において、粘性ビヒクルおよびその濃度は、約４５〜１２５ｃｐｓの最終粘度を達成するよう選択される。
【００５６】
本開示はまた、数々の実施形態において、放出調節薬物動態学的プロファイルを示す組成物または配合物を提供する。
【００５７】
一実施形態は、患者の血清中へのＴＳＨの調節された放出を許容する、ＴＳＨと薬学的に許容可能なポリマーとを含む医薬品投与量形態を提供する。一実施形態においては、薬学的に許容可能なポリマーは、本明細書に定義されているとおり、粘性ビヒクルまたは薬学的に許容可能な希釈剤である。
【００５８】
一実施形態においては、組成物は、薬学的に許容可能なポリマー中にＴＳＨを含有する。一実施形態においては、薬学的に許容可能なポリマーはカルボキシメチルセルロースナトリウムである。一実施形態においては、組成物は、約１０μｇ／ｍｌ〜約５０００μｇ／ｍｌのＴＳＨを薬学的に許容可能なポリマー中に含有する。他の実施形態においては、組成物は、約１０μｇ／ｍｌ〜約１５００μｇ／ｍｌ、約１０μｇ／ｍｌ〜約１０００μｇ／ｍｌ、約１０μｇ／ｍｌ〜約８００μｇ／ｍｌ、約１０μｇ／ｍｌ〜約５００μｇ／ｍｌ、約１０μｇ／ｍｌ〜約３００μｇ／ｍｌ、約１０μｇ／ｍｌ〜約２００μｇ／ｍｌ、約１０μｇ／ｍｌ〜約１００μｇ／ｍｌ、または約１０μｇ／ｍｌ〜約９０μｇ／ｍｌのＴＳＨを薬学的に許容可能なポリマー中に含有する。一実施形態においては、組成物は、約４０μｇ／ｍｌ〜約８０μｇ／ｍｌのＴＳＨを薬学的に許容可能な担体中に含有する。他の実施形態においては、組成物は、約３０μｇ／ｍｌ、約４０μｇ／ｍｌ、約５０μｇ／ｍｌ、約６０μｇ／ｍｌ、約７０μｇ／ｍｌ、約８０μｇ／ｍｌ、または約９０μｇ／ｍｌのＴＳＨを薬学的に許容可能な担体中に含有する。特定の実施形態において、組成物は約６０μｇ／ｍｌのＴＳＨを薬学的に許容可能な担体中に含有する。
【００５９】
組成物は、任意により、防腐剤等などの他の薬剤を含有し得る。さらなる実施形態において、組成物は、担当医または患者により組み合わせについて個別にパッケージ化される。パッケージは、任意により、シリンジおよび針などの組成物を投与する手段を含有し得る。それ故、本開示はまた、ＴＳＨのソース、好適な薬学的に許容可能なポリマーのソース、説明書および還元された後の組成物を投与するための手段を含有する製造物品を提供する。さらに、組成物は、予め混合され、投与のための手段と共に、その投与のための説明書有りまたは無しで販売される。
【００６０】
一実施形態は、有効量のＴＳＨと有効量の薬学的に許容可能なポリマーとを混合することによる、ＴＳＨの投与のための放出調節製剤を提供する方法を提供する。
【００６１】
一実施形態において、ＴＳＨは哺乳動物（例えばヒト）から単離されたＴＳＨである。他の実施形態において、ＴＳＨは組換え型哺乳類ＴＳＨである（例えば、組換え型ヒトＴＳＨ）。
【００６２】
一実施形態において、薬学的に許容可能なポリマーは代謝的に排除可能なポリマーである。他の実施形態において、薬学的に許容可能なポリマーは身体中に注射可能である。
【００６３】
一実施形態においては、投与量形態は少なくとも約２０ｃｐｓの粘度を有する。他の実施形態において、投与量形態は少なくとも約４０ｃｐｓの粘度を有する。一定の実施形態において、組成物は、少なくとも約５０ｃｐｓ、少なくとも約７０ｃｐｓまたは少なくとも約９０ｃｐｓの粘度を有する。一定の実施形態において、投与量形態は、約１５〜１５０ｃｐｓ、約４０〜１６０ｃｐｓ、約４５〜１２５ｃｐｓ、または約４０〜９０ｃｐｓの粘度を有する。特定の実施形態において、投与量形態は約４５〜１２５ｃｐｓの粘度を有する。
【００６４】
一実施形態において、薬学的に許容可能なポリマーは、約９０，０００〜約７００，０００の平均分子量を有するカルボキシメチルセルロースナトリウムを含む。他の実施形態において、薬学的に許容可能なポリマーは、約０．０５〜約５％カルボキシメチルセルロースナトリウムを含む。
【００６５】
本明細書に既述のとおり、本発明の配合物および組成物は、薬学的に許容可能なポリマー（例えば、本明細書に記載のもの）を含む。特定の一例において、薬学的に許容可能なポリマーは：約９０，０００；約２５０，０００；および約７００，０００からなる群から選択される平均分子量を有するカルボキシメチルセルロースナトリウムである。他の好適なポリマー（例えば、本明細書に記載のもの）は、約７０，０００、約９０，０００、約１００，０００、約１５０，０００、約２００，０００、約２５０，０００、約３００，０００、約３５０，０００、約４００，０００、約４５０，０００、約５００，０００、約５５０，０００、約６００，０００、約６５０，０００、約７００，０００、約７５０，０００、約８００，０００、約８５０，０００、約９００，０００、または約９５０，０００の範囲内の分子量を有する。さらに、約７０，０００〜約９５０，０００の範囲内に分子量を有するポリマーを用いることができ、または、さらに約９０，０００〜約９００，０００である。
【００６６】
組成物は、任意により、防腐剤等などの他の薬剤を含有し得る。さらなる実施形態において、組成物は、担当医または患者により組み合わせについて個別にパッケージ化される。パッケージは、任意により、シリンジおよび針などの組成物を投与する手段を含有し得る。それ故、本開示はまた、ＴＳＨのソース、好適な薬学的に許容可能なポリマーのソース、説明書および還元された後の組成物を投与するための手段を含有する製造物品を提供する。さらに、組成物は、予め混合され、投与のための手段と共に、その投与のための説明書有りまたは無しで販売される。
【００６７】
一実施形態は、有効量のＴＳＨと有効量の薬学的に許容可能なポリマーとを混合することによる、ＴＳＨの投与のための放出調節製剤を提供する方法を提供する。
【００６８】
一実施形態においては、ＴＳＨは哺乳動物（例えばヒト）から単離されたＴＳＨである。他の実施形態において、ＴＳＨは組換え型哺乳類ＴＳＨである（例えば、組換え型ヒトＴＳＨ）。
【００６９】
一実施形態において、薬学的に許容可能なポリマーは代謝的に排除可能であるポリマーである。他の実施形態において、薬学的に許容可能なポリマーは身体中に注射可能である。
【００７０】
他の実施形態は、患者の血流中へのＴＳＨの調節された放出を許容するＴＳＨと薬学的に許容可能なポリマーとを含む医薬品投与量形態を提供し、ここで、患者に投与されたときに、医薬品投与量形態は、対応するＴＳＨの水溶液が投与された場合の患者の血清中のＴＳＨの有効Ｔｍａｘより少なくとも約２０％長い患者の血清中のＴＳＨの有効Ｔｍａｘをもたらす。
【００７１】
一実施形態においては、医薬組成物は有効量のＴＳＨと有効量の薬学的に許容可能なポリマーとを含み、ここで、この組成物は、必要とする患者への投与の後に少なくとも６時間の有効Ｔｍａｘをもたらす。
【００７２】
一実施形態は、患者の血流中へのＴＳＨの調節された放出を許容するＴＳＨと薬学的に許容可能なポリマーとを含む医薬品投与量形態を提供し、ここで、患者に投与されたときに、医薬品投与量形態は、対応するＴＳＨの水溶液が投与された場合の患者の血清中のＴＳＨの有効Ｃｍａｘより少なくとも約２０％低い患者の血清中のＴＳＨの有効Ｃｍａｘをもたらす。
【００７３】
他の実施形態は、有効量のＴＳＨと有効量の薬学的に許容可能なポリマーとを含む医薬組成物を提供し、ここで、組成物は、約２．０ｍＩＵ／Ｌを超える有効な血清Ｃｍａｘを必要とする患者にもたらす。
【００７４】
一実施形態は、有効量のＴＳＨと有効量の薬学的に許容可能なポリマーとを含む医薬組成物を提供し、ここで、組成物は、投与後４８時間の間にわたって必要とする患者において２．５ｎｇ／ｍｌ以下の血清Ｔ３レベルをもたらす。
【００７５】
他の実施形態において、必要とする患者は、甲状腺種および甲状腺癌から選択される甲状腺疾患を患う患者である。
【００７６】
当業者には明らかであるとおり、１種以上の好適な薬学的に許容可能な希釈剤を、本明細書に記載の配合物の調製における使用のために組み合わせることが可能である。組成物は、任意により、防腐剤等などの他の薬剤を含有し得る。さらなる実施形態において、組成物は、担当医または患者により組み合わせについて個別にパッケージ化される。パッケージは、任意により、シリンジおよび針などの組成物を投与する手段を含有し得る。それ故、本開示はまた、ＴＳＨのソース、好適な希釈剤のソース、説明書および還元された後の組成物を投与するための手段を含有する製造物品を提供する。さらに、組成物は、予め混合され、投与のための手段と共に、その投与のための説明書有りまたは無しで販売される。
【００７７】
本発明の組成物は、必要とする患者（例えば、甲状腺癌患者、甲状腺種を患っている患者、他の甲状腺疾患を患っている患者）に投与されたとき、示された用途のために調整されたＴＳＨの血清中濃度をもたらすであろう。一実施形態においては、組成物は、４８時間の間にわたって必要とする患者において２．５ｎｇ／ｍｌ以下の血清Ｔ３レベルをもたらす。他の実施形態において、組成物は、必要とする患者への投与の後に少なくとも６時間の有効Ｔｍａｘをもたらす。他の実施形態において、組成物は、約２．０ｍＩＵ／Ｌを超える有効Ｃｍａｘを必要とする患者にもたらす。
【００７８】
一実施形態において、治療されるべき甲状腺疾患は甲状腺種であり、ＴＳＨの血清Ｃｍａｘは、投与から１時間後から約２．０ｍＩＵ／Ｌを超えるべきである。他の実施形態において、ＴＳＨの血清Ｃｍａｘは、投与から１時間後から約５ｍＩＵ／Ｌを超える。さらに他の実施形態において、治療されるべき甲状腺疾患は甲状腺種であり、配合物は、甲状腺ホルモンの急性放出を生じさせることなく放射性ヨウ素の甲状腺吸収を最適化させるために、ＴＳＨ血清Ｃｍａｘが投与の後約数時間（例えば約８〜１２時間）後に生じるよう調整される。一定の徴候（例えば甲状腺種）について、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２５、３０、３５、４０、４５時間およびおそらくは最長で５０時間などの数時間にわたる血中へのＴＳＨの漸次的な放出が有用であり得る。
【００７９】
他の徴候（例えば甲状腺癌）について、血清ＴＳＨの異なる最適な薬物動態学は、１、２、３、４、５、１０、１５、２０、２５日間およびおそらくは最長で３０日間にわたる数日間にわたる血中へのＴＳＨの緩徐な放出の達成などの、試みられる診断上のおよび／または治療的用途について維持され得る。配合物は、筋肉内注射などのいずれかの好適な方法により送達されることが可能である。
【００８０】
特定の実施形態において、本発明は、甲状腺疾患を治療するための本発明の組成物の使用である。他の実施形態においては、本発明は、甲状腺疾患を治療するための薬剤を製造するための本発明の組成物の使用である。多くの場合において、甲状腺疾患は、ＴＳＨのレベル変化に起因する。ＴＳＨのレベルは、ＴＳＨの量を計測する血液検査で監視し、および分析することが可能であり、ここで、正常なＴＳＨの血清レベルは、一般に、成人で約０．４〜約４．５ｍＩＵ／Ｌであり、新生児で約３〜約２０ｍＩＵ／Ｌである。従って、ＴＳＨのレベル変化は、ＴＳＨの正常なレベルから外れたレベルである。ＴＳＨのレベル変化に起因する状態としては、甲状腺種および甲状腺機能低下症が挙げられる。甲状腺機能低下症の確定診断は、高いレベルのＴＳＨを示す血液検査で成されることが可能であり、ここで、ＴＳＨの正常なレベルは、一般に、成人で約０．４〜約４．５ｍＩＵ／Ｌであり、新生児で約３〜約２０ｍＩＵ／Ｌである。甲状腺種の確定診断は、ＴＳＨのレベル変化を示す血液検査で確認されることが可能である。特定の実施形態において、甲状腺疾患は、甲状腺種および甲状腺癌からなる群から選択される。
【００８１】
他の実施形態において、本発明は、有効量の開示の医薬組成物を患者に投与するステップを含む、甲状腺疾患を患う患者において２．０ｍＩＵ／Ｌ超にＴＳＨの血漿中濃度を維持する方法であり、ここで、ＴＳＨの血漿中濃度は、投与の後、約１時間維持される。一定の徴候（例えば、甲状腺種）について、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２５、３０、３５、４０、４５時間およびおそらくは最長で５０時間などの数時間にわたる血中へのＴＳＨの漸次的な放出が有用であり得る。あるいは、甲状腺癌などの一定の状況について、１、２、３、４、５、１０、１５、２０、２５日間およびおそらくは最長で３０日間などの数日間にわたる血中へのＴＳＨの漸次的な放出が有用であり得る。
【００８２】
一実施形態は、有効量のＴＳＨおよび有効量の薬学的に許容可能なポリマーを含む有効量の医薬組成物患者に送達させるステップを含む、必要とする患者における甲状腺疾患を治療する方法を提供する。
【００８３】
一実施形態においては、医薬組成物は筋肉内注射を介して送達される。
【００８４】
他の実施形態において、医薬組成物は、対応するＴＳＨの水溶液が投与された場合の患者の血清中のＴＳＨの有効Ｔｍａｘと比して少なくとも約２０％長い患者の血清中のＴＳＨの有効Ｔｍａｘを送達する。
【００８５】
他の実施形態において、医薬組成物は、対応するＴＳＨの水溶液が投与された場合の患者の血清中のＴＳＨの有効Ｃｍａｘより少なくとも約２０％低い患者の血清中のＴＳＨの有効Ｃｍａｘを送達する。
【００８６】
他の実施形態において、医薬組成物は、投与後４８時間の間にわたって必要とする患者において２．５ｎｇ／ｍｌ以下の血清Ｔ３レベルをもたらす。
【００８７】
他の実施形態は、有効量のＴＳＨおよび有効量の薬学的に許容可能なポリマーを含む有効量の医薬組成物を患者に投与するステップを含む、甲状腺疾患を患う患者において２．０ｍＩＵ／Ｌ超にＴＳＨの血漿中濃度を維持する方法を提供し、ここで、ＴＳＨの血清中濃度または血漿中濃度が、投与後約６時間より長く約２．０ｍＩＵ／Ｌ超に維持される。
【００８８】
他の実施形態において、ＴＳＨの血漿中濃度は、投与の後、約１０時間より長く、約１５時間より長く、約１日より長く、約２日間より長くまたは約４日間より長い間、高く維持される。
【００８９】
他の実施形態は、有効量の本開示の実施形態の医薬組成物を患者に投与するステップを含む、患者における甲状腺疾患を治療するための方法を提供し、ここで、組成物は、投与後４８時間の間にわたって必要とする患者において２．５ｎｇ／ｍｌ以下の血清Ｔ３レベルをもたらす。
【実施例】
【００９０】
本発明は、例示のために本明細書に記載された実施形態に限定されず、上記開示の範囲内にある限りにおいて、これらのすべてのこのような形態を包含することが理解される。
【００９１】
以下の実施例において、ならびに本明細書全体を通して、以下の略語は以下の意味を有する。定義されていない場合には、その用語は、一般に受け入れられている意味を有する。
【００９２】
【表１】
2010503689.tif 000002
【００９３】
実施例１：カルボキシメチルセルロースナトリウムまたはメチルセルロースを含有する溶液の調製
カルボキシメチルセルロースナトリウムおよびメチルセルロースをスペクトルファーマシューティカルズ（Ｓｐｅｃｔｒｕｍ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）（カリフォルニア州アーバイン（Ｉｒｖｉｎｅ，ＣＡ））から入手した。３％カルボキシメチルセルロースナトリウムおよび１％カルボキシメチルセルロースナトリウムの溶液を調製した。０．５％メチルセルロースの溶液を調製した。
【００９４】
３％マンニトール、０．２％塩化ナトリウム、２０ｍｍリン酸緩衝剤のＴＳＨの溶液、ｐＨ７．０（１ｍＬの０．９ｍｇ／ｍｌ溶液）を、３％カルボキシメチルセルロースナトリウム（１ｍｌ）の溶液および０．５％メチルセルロース（１ｍｌ）の溶液に添加した。溶液をボルテックスし、白色および黒色の背景を有する蛍光照明に対して観察した。混合した溶液の各々は発泡性であった。約５分間静置させた後、溶液の各々は清透であると共に、溶液中に視認可能な粒子はなかった。溶液を振盪したところ、発泡が出現したが、それでも視認可能な粒子はなかった。
【００９５】
ＴＳＨの凍結乾燥したケーキを、３％カルボキシメチルセルロースナトリウム（１０ｍｌ）の溶液および０．５％メチルセルロース（１０ｍｌ）の溶液で還元した。還元した溶液の各々は乳色または乳白色ではなかった。カルボキシメチルセルロースナトリウム溶液がＴＳＨの凍結乾燥ケーキをメチルセルロース溶液より速く還元したが、最終的には両方の溶液がＴＳＨの凍結乾燥ケーキを還元した。両方の溶液について発泡が観察された。両方の溶液において、粒子はなかった。
【００９６】
ラットに投与したｒｈＴＳＨの薬物動態学：およびメチルセルロース濃度の効果
この実施例においては、ｒｈＴＳＨの６種の様々な配合物の薬物動態学（ＰＫ）を比較した。研究デザインは、６つのグループに分けた１８匹の頚動脈カニューレ処置したラットを含んでいた。すべてのラットに、単一用量の１ｍｇ／ｋｇ組換え型ヒトＴＳＨ（ｒｈＴＳＨ）を筋肉内注射（ＩＭ）を介して投与した。６種の投与用ビヒクルは、メチルセルロース（ＭＣ）が異なる割合の注射用滅菌水、または約０．９ｍｇ／ｍＬでのカルボキシメチルセルロースナトリウム（ＮａＣＭＣ）であった。特に：
グループ１には、注射用滅菌水（ＳＷＦＩ）中のｒｈＴＳＨを投与し；
グループ２には、０．２５％ＭＣ中のｒｈＴＳＨを投与し；
グループ３には、０．１％ＭＣ中のｒｈＴＳＨを投与し；
グループ４には、３％ＮａＣＭＣ中のｒｈＴＳＨを投与し；
グループ５には、２％ＮａＣＭＣ中のｒｈＴＳＨを投与し；および
グループ６には、１％ＮａＣＭＣ中のｒｈＴＳＨを投与した。
【００９７】
血清サンプルを、ＰＫ分析（ｎ＝３）のために、０、３０、６０、１２０、２４０、４８０、および１４４０分間で採取した。血清サンプルをｒｈＴＳＨ  ＥＬＩＳＡを用いて評価した。
【００９８】
材料および方法
この実施例において用いたラットは、約２５０ｇの体重の、メスのスプラーグドーリーラット（マサチューセッツ州ウィルミントン（Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ，ＭＡ）のチャールズリバーラボラトリーズ（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ））であった。示したとおり、すべてのラットに、単一用量の１ｍｇ／ｋｇ組換え型ヒトＴＳＨ（ｒｈＴＳＨ）を筋肉内注射（ＩＭ）を介して投与した。６種のテスト物品を、注射用滅菌水または異なる割合のメチルセルロース（ＭＣ）またはカルボキシメチルセルロースナトリウム（ＮａＣＭＣ）と共に約０．９ｍｇ／ｍＬで配合した。具体的には、ラットに、注射用滅菌水（ＳＷＦＩ）中のｒｈＴＳＨ、０．２５％ＭＣ中のｒｈＴＳＨ、０．１％ＭＣ中のｒｈＴＳＨ、３％ＮａＣＭＣ中のｒｈＴＳＨ、２％ＮａＣＭＣ中のｒｈＴＳＨ、または１％ＮａＣＭＣ中のｒｈＴＳＨを投与した。
【００９９】
ｒｈＴＳＨ  ＥＬＩＳＡ
マウス抗ｈＣＧ抗体およびビオチン化マウス抗ｒｈＴＳＨ抗体を用いる比色サンドイッチ酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）を利用して、ラット血清中のｒｈＴＳＨの量を定量化した。プレートをマウス抗ｈＣＧ抗体（カリフォルニア州サンティー（Ｓａｎｔｅｅ，ＣＡ）のスキャンティボディーズラボラトリーズ社（Ｓｃａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ  Ｉｎｃ．））でコートし、一晩２〜８℃でインキュベートした。基準曲線を、５．５５６ｎｇ／ｍｌから開始し、１：１．５から０．４８８ｎｇ／ｍｌに連続的に希釈したｒｈＴＳＨを用いて用意した。一連の希釈物を、各テストサンプルについて希釈用緩衝剤中に調製した。基準、対照、およびサンプルを重複させてプレートに追加し、振盪しながら３７℃で１時間インキュベートした。プレートを、ＥＬＩＳＡプレート洗浄溶液（１×リン酸緩衝生理食塩水および０．５％トゥイーン（Ｔｗｅｅｎ）２０（商標）（ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート）；パーキンエルマーライフサイエンスプロダクツ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ））で洗浄した。ビオチン化マウス抗ｒｈＴＳＨをサンプル希釈用緩衝剤中に適切に希釈し、各ウェルに追加し、および振盪しながら３７℃で１時間インキュベートした。プレートをＥＬＩＳＡプレート洗浄溶液で６回洗浄した。ストレプトアビジン標識化された西洋わさび由来ペルオキダーゼ（イリノイ州ロックフォード（Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，ＩＬ）のピアースバイオテクノロジー社（Ｐｉｅｒｃｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．））をサンプル希釈用緩衝剤（１×リン酸緩衝生理食塩水、０．５％トゥイーン（Ｔｗｅｅｎ）２０（商標）（ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート）、０．１％ＢＳＡ；パーキンエルマーライフサイエンスプロダクツ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ））中に適切に希釈し、各ウェルに追加し、および暗中に、室温で１５分間インキュベートした。プレートをＥＬＩＳＡプレート洗浄溶液で洗浄した。オルト−フェニレンジアミン（ＯＰＤ）（ミズーリ州セントルイス（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）のシグマ（Ｓｉｇｍａ））を添加し、振盪しながら３７℃で３０分間インキュベートした。４．５Ｍ硫酸停止溶液（ニューハンプシャー州ハンプトン（Ｈａｍｐｔｏｎ，ＮＨ）のフィッシャーサイエンティフィック（Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ））を用いて反応を停止させた。各サンプル中のｒｈＴＳＨの量を、４９０ｎｍの吸光度読み取り値で計測した。
【０１００】
データ分析
サンプルについての吸光度読み取り値は、４９０ｎｍでの吸光度計測値が、最高ｒｈＴＳＨ基準（５．５５６ｎｇ／ｍｌ）により達成したものより大きいか、または最低ｒｈＴＳＨ基準（０．４８８ｎｇ／ｍｌ）について得た読み取り値未満である場合には、除外した。このような読み取り値はデータ分析に含まなかった。
【０１０１】
各サンプル希釈におけるｒｈＴＳＨの量（ｎｇ／ｍｌで計測）を、基準曲線から補間した。各サンプルにおけるｒｈＴＳＨの量を、適切な希釈係数に補間結果を乗じることにより算出した。ｒｈＴＳＨの量は、血清のｒｈＴＳＨ／ｍｌのｎｇとして表記されている。表１は、研究に関するパラメータのまとめを提供する。動物における異常は、研究の生存中または検屍では観察されなかった。
【０１０２】
【表２】
2010503689.tif 000003
【０１０３】
薬物動態学的パラメータ
薬物動態学的分析を、個別の動物に対して実施した。血清中濃度−時間データの薬物動態学的分析を、ウィンノンリン（ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ）（登録商標）コンピュータソフトウェア（カリフォルニア州マウンテンビュー（Ｍｏｕｎｔａｉｎ  Ｖｉｅｗ，ＣＡ）の、ファーサイトコーポレーション（Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ））を用いて実施した。最終消失半減期（ｔ１／２）は直線（対数−線形スケール）上のいずれかの点での薬物濃度が半分に減るために必要とされる時間を表し、０．６９３／ｎにより求められ、ここで、ｎは消失速度定数（２．３０３と終末勾配との積）である。Ｃｍａｘは、ｎｇ／ｍＬでの最大血清中濃度である。Ｔｍａｘは、分間での最高濃度が観察された時間（Ｃｍａｘでの時間）である。Ｃｍａｘ、Ｔｍａｘ、最終消失半減期（ｔ１／２）、曲線下面積（ＡＵＣ）およびクリアランス（Ｃｌ）パラメータが表２にまとめられている。図１は、ｒｈＴＳＨの異なるＭＣまたはＮａＣＭＣ配合物のラットへの筋肉内投与（ＩＭ）後の特定の時点でのＴＳＨの平均血清中濃度（ｎｇ／ｍＬ）を示す。
【０１０４】
【表３】
2010503689.tif 000004
【０１０５】
薬物動態学的パラメータのまとめ
各ｒｈＴＳＨ調製物のボーラスＩＭ投与の後、濃度対時間の片対数プロットは、投与経路に一致する吸収、および消失プロファイルを示した。３％ＮａＣＭＣ中に還元したｒｈＴＳＨの投与は、ＳＷＦＩ中のｒｈＴＳＨと比してＣｍａｘの統計的に有意なシフトをもたらした（例えば表２および図１を参照のこと）。ＭＣ中に還元されたｒｈＴＳＨでの効果の徴候もまたあった。
【０１０６】
実施例３：ラットにおけるカルボキシメチルセルロースナトリウムおよびメチルセルロースの比較
この実施例においては、ｒｈＴＳＨの３種の様々な配合物の薬物動態学（ＰＫ）を比較した。研究デザインは、３つのグループに分けた、１４匹の頚動脈カニューレ処置したラットを含んでいた。すべてのラットに、単一用量の１ｍｇ／ｋｇ  ｒｈＴＳＨを筋肉内注射（ＩＭ）を介して投与した。３種の投与用ビヒクルは、注射用滅菌水（ＳＷＦＩ）、０．２５％メチルセルロース（ＭＣ）および約０．９ｍｇ／ｍＬでの３％カルボキシメチルセルロースナトリウム（ＮａＣＭＣ）であった。特に：
グループ１には、注射用滅菌水（ＳＷＦＩ）中のｒｈＴＳＨを投与し；
グループ２には、０．２５％ＭＣ中のｒｈＴＳＨを投与し；および
グループ３には、３％ＮａＣＭＣ中のｒｈＴＳＨを投与した。
【０１０７】
血清サンプルを、ＰＫ分析（ｎ＝３）のために、０、３０、６０、９０、１２０、１５０、１８０、２４０、４８０、１４４０、および１９２０分間で採取した。血清サンプルをｒｈＴＳＨ  ＥＬＩＳＡを用いて評価した。
【０１０８】
材料および方法
実施例２に記載のとおり実験を実施した。
【０１０９】
表３は、研究に関するパラメータのまとめを提供する。動物における異常は、研究の生存中または検屍では観察されなかった。
【０１１０】
【表４】
2010503689.tif 000005
【０１１１】
薬物動態学的パラメータ
薬物動態学的分析を、個別の動物に対して実施した。血清中濃度−時間データの薬物動態学的分析を、ウィンノンリン（ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ）（登録商標）コンピュータソフトウェア（カリフォルニア州マウンテンビュー（Ｍｏｕｎｔａｉｎ  Ｖｉｅｗ，ＣＡ）の、ファーサイト（Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ））を用いて実施した。直線（対数−線形スケール）上のいずれかの点での薬物濃度が半分に減るために必要とされる時間を表す最終消失半減期（ｔ１／２）は０．６９３／ｎによって求められ、ここで、ｎは消失速度定数（２．３０３と終末勾配との積）である。Ｃｍａｘは、ｎｇ／ｍＬでの最大血清中濃度である。Ｔｍａｘは、分間での最高濃度が観察された時間（Ｃｍａｘでの時間）である。Ｃｍａｘ、Ｔｍａｘ、最終消失半減期（ｔ１／２）、曲線下面積（ＡＵＣ）、およびクリアランス（Ｃｌ）パラメータが表４にまとめられている。図２は、ｒｈＴＳＨの０．２５％ＭＣまたは３％ＮａＣＭＣ配合物のラットへの筋肉内投与（ＩＭ）後の特定の時点でのＴＳＨの平均血清中濃度（ｎｇ／ｍＬ）を示す。
【０１１２】
【表５】
2010503689.tif 000006
【０１１３】
薬物動態学的パラメータのまとめ
各ｒｈＴＳＨ調製物のボーラスＩＭ投与の後、濃度対時間の片対数プロットは、投与経路に一致する吸収、および消失プロファイルを示した。この研究の条件下では、３％ＮａＣＭＣ中に還元したｒｈＴＳＨのＩＭ投与は、ＳＷＦＩ中のｒｈＴＳＨと比してＣｍａｘの統計的に有意なシフトをもたらした。ＳＷＦＩ中のｒｈＴＳＨと比して、０．２５％ＭＣ中の放出調節ｒｈＴＳＨとの間に統計的有意差はなかった。
【０１１４】
実施例４：ラットに投与したｒｈＴＳＨの薬物動態学：
カルボキシメチルセルロースナトリウムの粘度およびタイプの効果
この実施例においては、ｒｈＴＳＨの６種の様々な配合物の薬物動態学（ＰＫ）を比較した。研究デザインは、６つのグループに分けた３０匹の頚動脈カニューレ処置したラットを含んでいた。すべてのラットに、単一用量の１ｍｇ／ｋｇ組換え型ヒトＴＳＨ（ｒｈＴＳＨ）を筋肉内注射（ＩＭ）を介して投与した。６種の投与用ビヒクルは、注射用滅菌水、および約０．９ｍｇ／ｍＬで異なる粘度のカルボキシメチルセルロースナトリウム（ＮａＣＭＣ）である。特に：
グループ１には、注射用滅菌水（ＳＷＦＩ）中のｒｈＴＳＨを投与し；
グループ２には、ヘラクレス（Ｈｅｒｃｕｌｅｓ）製の２％媒体粘度のＮａＣＭＣ中のｒｈＴＳＨを投与し；
グループ３には、ヘラクレス（Ｈｅｒｃｕｌｅｓ）製の１．５％媒体粘度のＮａＣＭＣ中のｒｈＴＳＨを投与し；
グループ４には、ルガー（Ｒｕｇｅｒ）製の３％低粘度のＮａＣＭＣ中のｒｈＴＳＨを投与し；
グループ５には、ヘラクレス（Ｈｅｒｃｕｌｅｓ）製の３％低粘度のＮａＣＭＣ中のｒｈＴＳＨを投与し；および
グループ６には、ヘラクレス（Ｈｅｒｃｕｌｅｓ）製の２％低粘度のＮａＣＭＣ中のｒｈＴＳＨを投与した。
【０１１５】
血清サンプルを、ＰＫ分析（ｎ＝３）のために、０、３０、６０、９０、１２０、１５０、１８０、２４０、４８０および１４４０分間で採取した。血清サンプルをｒｈＴＳＨ  ＥＬＩＳＡを用いて評価した。
【０１１６】
材料および方法
実施例２に記載のとおり実験を実施した。
【０１１７】
表５は、研究に関するパラメータのまとめを提供する。動物における異常は、研究の生存中または検屍では観察されなかった。
【０１１８】
【表６】
2010503689.tif 000007
【０１１９】
薬物動態学的パラメータ
薬物動態学的分析を、個別の動物に対して実施した。血清中濃度−時間データの薬物動態学的分析を、ウィンノンリン（ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ）（登録商標）コンピュータソフトウェア（ファーサイトコーポレーション（Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、カリフォルニア州マウンテンビュー（Ｍｏｕｎｔａｉｎ  Ｖｉｅｗ，ＣＡ））を用いて実施した。直線（対数−線形スケール）上のいずれかの点での薬物濃度が半分に減るために必要とされる時間を表す最終消失半減期（ｔ１／２）は０．６９３／ｎによって求められ、ここで、ｎは消失速度定数（２．３０３と終末勾配との積）である。Ｃｍａｘは、ｎｇ／ｍＬでの最大血清中濃度である。Ｔｍａｘは、分間での最高濃度が観察された時間（Ｃｍａｘでの時間）である。Ｃｍａｘ、Ｔｍａｘ、最終消失半減期（ｔ１／２）、曲線下面積（ＡＵＣ）、およびクリアランス（Ｃｌ）パラメータが表６にまとめられている。図３は、ｒｈＴＳＨの種々のＮａＣＭＣ配合物のラットへの筋肉内投与（ＩＭ）後の特定の時点でのＴＳＨの平均血清中濃度（ｎｇ／ｍＬ）を示す。
【０１２０】
【表７】
2010503689.tif 000008
【０１２１】
薬物動態学的パラメータのまとめ
各ｒｈＴＳＨ調製物のボーラスＩＭ投与の後、濃度対時間の片対数プロットは、投与経路に一致する吸収、および消失プロファイルを示した。放出調節ｒｈＴＳＨサンプルの各々についてのウィンノンリン（ＷｉｎＮｏｎＬｉｎ）（登録商標）パラメータを、ｒｈＴＳＨウィンノンリン（ＷｉｎＮｏｎＬｉｎ）（登録商標）パラメータに対して比較するスチューデントＴ検定を実施した。Ｃｍａｘ終末半減期（ｔ１／２）、および曲線下面積（曝露）はテストしたＮａＣＭＣビヒクルのすべてについて統計的に著しく異なっており、投与するｒｈＴＳＨ溶液の粘度の変更は、薬物動態学的パラメータを著しく変化させることを示していた。
【０１２２】
この研究の条件下では、薬物動態学的分析は、ＮａＣＭＣ中に投与されたｒｈＴＳＨとＳＷＦＩ中に投与されたｒｈＴＳＨとの間には、テストしたすべての粘度で、統計的に有意な変化を実証した。
【０１２３】
実施例５：ラットに投与されたｒｈＴＳＨの薬物動態学：
カルボキシメチルセルロースの粘度／濃度の効果
この実施例においては、ｒｈＴＳＨの４種の様々な配合物の薬物動態学（ＰＫ）を比較した。研究デザインは、４つのグループに分けた４０匹の頚動脈カニューレ処置したメスのスプラーグドーリーラットを含んでいた。各グループに、指定したｒｈＴＳＨ配合物の単回の筋肉内（ＩＭ）注射を受けさせた。特に：
グループ１は、０．１ｍｇ／ｋｇで注射用滅菌水（ＳＷＦＩ）中にｒｈＴＳＨを受け；
グループ２は、０．１ｍｇ／ｋｇで、２．５％カルボキシメチルセルロース（ＮａＣＭＣ）中に、４１センチポアズ（ｃｐｓ）でｒｈＴＳＨを受け；
グループ３は、０．１ｍｇ／ｋｇで、３．０％ＮａＣＭＣ中に、９７ｃｐｓでｒｈＴＳＨを受け；および
グループ４は、０．１ｍｇ／ｋｇで、３．５％ＮａＣＭＣ中に、１５９ｃｐｓでｒｈＴＳＨを受けた。
【０１２４】
投薬の後、すべての動物を、頚動脈カニューレを介して連続的に出血させた。すべての血液サンプルを血清用に処理し、血清を、対応するラベルを付した微量遠心チューブに移した。すべてのサンプルは、分析時まで−８０℃で保存した。
【０１２５】
材料および方法
実施例２に記載のとおり実験を実施した。
【０１２６】
表７は、研究に関するパラメータのまとめを提供する。動物における異常は、研究の生存中または検屍では観察されなかった。
【０１２７】
【表８】
2010503689.tif 000009
【０１２８】
薬物動態学的パラメータ
薬物動態学的分析を、ウィンノンリン（ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ）（登録商標）ソフトウェアバージョン５．０（カリフォルニア州マウンテンビュー（Ｍｏｕｎｔａｉｎ  Ｖｉｅｗ，ＣＡ）のファーサイト社（Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ  Ｃｏｒｐ．））で、ノンコンパートメント法を用いて各動物について実施した。各濃度対時間曲線の終末対数−線形相の勾配（β）を、線形回帰分析により測定した。この勾配を用いて、見かけの消失半減期を算出した。時間ゼロから最後に検出可能な濃度までの血清中濃度曲線下面積（ＡＵＣ）を線形台形法により測定し、無限大まで補外した。見かけのクリアランスを総ＡＵＣにより除したｒｈＴＳＨの投与した投与量として算出し、および分布の見かけの体積を、βにより除したクリアランスとして算出した。各テスト物品に対するｒｈＴＳＨの平均血清中濃度対時間曲線が図４に示されている。薬物動態学的パラメータを各テスト物品について平均化し、表８に示されている。
【０１２９】
【表９】
2010503689.tif 000010
【０１３０】
薬物動態学的パラメータのまとめ
一元配置分散分析に続いて、放出調節ＴＳＨサンプルの各々についてのウィンノンリン（ＷｉｎＮｏｎＬｉｎ）（登録商標）パラメータを対照ｒｈＴＳＨに対して比較する、ダネット（Ｄｕｎｎｅｔｔ）のポストホックテストを実施した。ＰＫ分析は、対照ｒｈＴＳＨと比して、放出調節ｒｈＴＳＨの３種の濃度のすべてに関連する平均Ｃｍａｘとの間に統計的有意差を見出した。加えて、データは、平均ｔ１／２は、放出調節テスト物品において異なっていたことを示している。４種のテスト物品に対する平均ＡＵＣ間に統計的有意差はなく、これは、放出調節ｒｈＴＳＨグループにおける平均曝露は、対照ｒｈＴＳＨの投与後の平均曝露とは識別可能ではなかったことを示唆する。
【０１３１】
これらのデータは、他のラットでの研究から得られた観察された結果を証明する、すなわち、Ｃｍａｘが低減し、およびＡＵＣ（曝露）の変化を伴わずにＴｍａｘが後の時点にシフトする。具体的には、２．５％（４１ｃｐｓ）、３％（９７ｃｐｓ）および３．５％（１５９ｃｐｓ）ＮａＣＭＣ中に投与されるｒｈＴＳＨのＩＭ投与は、ＳＷＦＩ中に投与されたｒｈＴＳＨと比して、Ｃｍａｘ、Ｔｍａｘ、ｔ１／２、およびＡＵＣの有意なシフトをもたらした。
【０１３２】
実施例６：イヌに投与したｒｈＴＳＨの薬物動態学：注射体積／ｒｈＴＳＨ濃度の効果
この研究においては、ビーグル犬に、３％ＮａＣＭＣ中およびＳＷＦＩ中に投与されたｒｈＴＳＨの薬物動態学（ＰＫ）を比較した。研究デザインは、３つのグループに分けた１５匹のイヌを含んでいた。すべてのイヌに、０．１ｍｇ／ｋｇ  ｒｈＴＳＨを単一用量で投与した。特に：
グループ１には、ＳＷＦＩ中の０．１５ｍｌ／ｋｇのｒｈＴＳＨを投与し；
グループ２には、３％ＮａＣＭＣ中の０．１５ｍｌ／ｋｇのｒｈＴＳＨを投与し；および
グループ３には、３％ＮａＣＭＣ中の０．０７ｍｌ／ｋｇのｒｈＴＳＨを投与した。
【０１３３】
血清サンプルを、ＰＫ分析（ｎ＝３）のために、０、１５、３０、６０、９０、１２０、１５０、１８０、２４０、３００、３６０、４８０、１４４０、および２１６０分間で採取した。血清サンプルをｒｈＴＳＨ  ＥＬＩＳＡを用いて評価した。
【０１３４】
方法および材料
ｒｈＴＳＨ  ＥＬＩＳＡ
マウス抗ｈＣＧ抗体およびビオチン化マウス抗ｒｈＴＳＨ抗体を用いる比色サンドイッチ酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）を利用して、イヌ血清中のｒｈＴＳＨの量を定量化した。プレートをマウス抗ｈＣＧ抗体でコートし、２〜８℃で一晩インキュベートした。基準曲線を、５．５５６ｎｇ／ｍｌから開始し、１：１．５から０．４８８ｎｇ／ｍｌに連続的に希釈したｒｈＴＳＨを用いて用意した。一連の希釈物を、各テストサンプルについて希釈用緩衝剤中に調製した。基準、対照、およびサンプルを重複させてプレートに追加し、振盪しながら３７℃で１時間インキュベートした。プレートをＥＬＩＳＡプレート洗浄溶液で洗浄した。ビオチン化マウス抗ｒｈＴＳＨをサンプル希釈用緩衝剤中に適切に希釈し、各ウェルに追加し、および振盪しながら３７℃で１時間インキュベートした。プレートをＥＬＩＳＡプレート洗浄溶液で６回洗浄した。ストレプトアビジン標識化された西洋わさび由来ペルオキダーゼをサンプル希釈用緩衝剤中に適切に希釈し、各ウェルに追加し、および暗中に、室温で１５分間インキュベートした。プレートをＥＬＩＳＡプレート洗浄溶液で洗浄した。オルト−フェニレンジアミン（ＯＰＤ）を添加し、振盪しながら３７℃で３０分間インキュベートした。４．５Ｍ硫酸停止溶液を用いて反応を停止させた。各サンプル中のｒｈＴＳＨの量を、４９０ｎｍの吸光度読み取り値で計測した。
【０１３５】
データ分析
サンプルについての吸光度読み取り値は、もし、４９０ｎｍでの吸光度計測値が、最高ｒｈＴＳＨ基準（５．５５６ｎｇ／ｍｌ）により達成したものより大きいか、または最低ｒｈＴＳＨ基準（０．４８８ｎｇ／ｍｌ）について得た読み取り値未満である場合には、除外した。このような読み取り値はデータ分析に含まなかった。
【０１３６】
各サンプル希釈におけるｒｈＴＳＨの量（ｎｇ／ｍｌで計測）を、基準曲線から補間し、適切な希釈率で乗じ、および血清のｒｈＴＳＨ／ｍｌのｎｇとして表記した。各サンプルにおけるｒｈＴＳＨの量を、適切な希釈係数に補間結果を乗じることにより算出した。ｒｈＴＳＨの量は、血清のｒｈＴＳＨ／ｍＬのｎｇとして表記されている。
【０１３７】
ウィンノンリン（ＷｉｎＮｏｎＬｉｎ）（登録商標）分析
薬物動態学的パラメータ推定値を得るために、血清中ｒｈＴＳＨ濃度−時間データを、非線形最小二乗曲線適合プログラム、ウィンノンリン（ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ）（登録商標）（ファーサイトコーポレーション（Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、カリフォルニア州マウンテンビュー（Ｍｏｕｎｔａｉｎ  Ｖｉｅｗ，ＣＡ））を用いて分析した。直線（対数−線形スケール）上のいずれかの点での薬物濃度が半分に減るために必要とされる時間を表す最終消失半減期（ｔ１／２）は０．６９３／ｎによって求められ、ここで、ｎは消失速度定数（２．３０３と終末勾配との積）である。Ｃｍａｘは、ｎｇ／ｍｌでの最大血清中濃度である。Ｔｍａｘは、分間での最高濃度が観察された時間（Ｃｍａｘでの時間）である。最終消失半減期（ｔ１／２）、曲線下面積（ＡＵＣ）、クリアランス、Ｃｍａｘ、およびＴｍａｘパラメータがまとめられている。
【０１３８】
各テスト物品についてのＴＳＨの平均血清中濃度対時間曲線が、図５に示されている。薬物動態学的パラメータを各テスト物品について平均化し、表９に示されている。
【０１３９】
結論
放出調節ｒｈＴＳＨサンプルの各々についてのウィンノンリン（ＷｉｎＮｏｎＬｉｎ）（登録商標）パラメータを、ｒｈＴＳＨウィンノンリン（ＷｉｎＮｏｎＬｉｎ）（登録商標）パラメータに対して比較するスチューデントＴ検定を実施した。分析は、ＣｍａｘおよびＴｍａｘにおいて、注射用滅菌水中に投与されたｒｈＴＳＨと比して３％ＮａＣＭＣ中に投与されたｒｈＴＳＨの両方の濃度について統計的有意差を実証した。グループ間にＡＵＣにおける有意差はなく、３つのグループについて曝露に差異はなかったことを示唆している。グループ３の動物においてはより高いＣｍａｘがあったことに注目したが、これは、この投与量グループにおけるｒｈＴＳＨのより高い濃度と一致していた。この研究からの結果は、注射用滅菌水中に投与されたｒｈＴＳＨと比して、３％ＮａＣＭＣ中に投与されたｒｈＴＳＨについてＣｍａｘの低下およびＴｍａｘのシフトを実証した。
【０１４０】
【表１０】
2010503689.tif 000011
【０１４１】
実施例７：イヌに投与したｒｈＴＳＨの薬物動態学：
ＮａＣＭＣビヒクルの投与量および粘度の効果
この研究においては、単回の筋肉内（ＩＭ）注射後のビーグル犬における、３％ＮａＣＭＣ中に投与されたｒｈＴＳＨの薬物動態学（ＰＫ）を、ＳＷＦＩ中に投与されたｒｈＴＳＨのＰＫと比較した。９３ｃｐｓおよび５４ｃｐｓの、２種の異なる粘度の粘性ビヒクルをテストした。研究デザインは、７つのグループに分けた３５匹のイヌを含んでいた（ｎ＝５／グループ）。イヌに、テスト物品を、０、０．０５、０．１、または０．２ｍｇ／ｋｇのいずれかで投与した。特に：
グループ１には、ＳＷＦＩ中の０．０５ｍｇ／ｋｇ  ｒｈＴＳＨを投与し；
グループ２には、９３ｃｐｓでの３％ＮａＣＭＣ中の０．０５ｍｇ／ｋｇ  ｒｈＴＳＨを投与し；
グループ３には、ＳＷＦＩ中の０．１ｍｇ／ｋｇ  ｒｈＴＳＨを投与し；
グループ４には、９３ｃｐｓでの３％ＮａＣＭＣ中の０．１ｍｇ／ｋｇ  ｒｈＴＳＨを投与し；
グループ５には、０．１ｍｇ／ｋｇ  ３％ＮａＣＭＣ中に５４ｃｐｓでｒｈＴＳＨを投与し；
グループ６には、ＳＷＦＩ中の０．２ｍｇ／ｋｇ  ｒｈＴＳＨを投与し；および
グループ７には、９３ｃｐｓでの３％ＮａＣＭＣ中の０．２ｍｇ／ｋｇ  ｒｈＴＳＨを投与した。
【０１４２】
血清サンプルを、ＰＫ分析（ｎ＝３）のために、０、１５、３０、６０、９０、１２０、１５０、１８０、２４０、３００、３６０、４８０、および１４４０分間で採取した。血清サンプルをｒｈＴＳＨ  ＥＬＩＳＡを用いて評価した。
【０１４３】
材料および方法
実施例６に記載のとおり実験を実施した。
【０１４４】
テスト物品についてのＴＳＨの平均血清中濃度対時間曲線が図６、７および８に示されている。薬物動態学的パラメータを各テスト物品について平均化し、表１０に示されている。
【０１４５】
結論
ＮａＣＭＣサンプル中に投与されたｒｈＴＳＨの各々についてのウィンノンリン（ＷｉｎＮｏｎＬｉｎ）（登録商標）パラメータを、ＳＷＦＩ中に投与されたｒｈＴＳＨのウィンノンリン（ＷｉｎＮｏｎＬｉｎ）（登録商標）パラメータに対して比較するスチューデントＴ検定を実施した。分析は、Ｃｍａｘ、Ｔｍａｘおよびｔ１／２において、同一の投与量で注射用滅菌水中に投与されたｒｈＴＳＨと比して、０．０５ｍｇ／ｋｇでの３％ＮａＣＭＣ中に投与されたｒｈＴＳＨについては統計的有意差があることを実証した。加えて、分析は、Ｃｍａｘ、Ｔｍａｘおよびｔ１／２において、同一の投与量で注射用滅菌水中に投与されたｒｈＴＳＨと比して、０．１ｍｇ／ｋｇ（５４および９３ｃｐｓで）での３％ＮａＣＭＣ中に投与されたｒｈＴＳＨについて統計的有意差があることを実証した。９３ｃｐｓでの３％ＮａＣＭＣ中に投与されたｒｈＴＳＨと比して、５４ｃｐｓでの３％ＮａＣＭＣ中に投与されたｒｈＴＳＨの薬物動態学的パラメータに差異はなかった。最後に、分析は、同一の投与労で注射用滅菌水中に投与されたｒｈＴＳＨと比して、０．２ｍｇ／ｋｇで３％ＮａＣＭＣ中に投与されたｒｈＴＳＨのＣｍａｘ、Ｔｍａｘおよびｔ１／２において統計的有意差があったことを実証した。しかしながら、このより高い投与量では、この投与量での統計的に有意なクリアランスの増加を伴う、統計的に有意なＡＵＣの低下がみられた。
【０１４６】
【表１１】
2010503689.tif 000012
【０１４７】
実施例８：ヒトに投与したｒｈＴＳＨの薬物動態学
この研究は、健常なヒト被験者における０．１ｍｇのチロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標）の単回の筋肉内（ＩＭ）投与対０．１ｍｇの、３％カルボキシメチルセルロースナトリウム（ＮａＣＭＣ）中の放出調節ｒｈＴＳＨ（ＭＲｒｈＴＳＨ）配合物の単回のＩＭ投与の薬物動態学を評価しおよび比較した。研究は、健常なヒト被験者における０．１ｍｇのチロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標）の単回のＩＭ投与対単一用量の３％ＮａＣＭＣ中の０．１ｍｇのＭＲｒｈＴＳＨ配合物後の、安全性プロファイル、薬力学的（ＰＤ）効果、および放射性ヨウ素（１２３Ｉ）の甲状腺吸収をさらに評価しおよび比較した。
【０１４８】
方法論および主題
この研究は、単回投与、無作為化、単純盲検、併用グループ、比較生物学的利用能デザインを有していた。合計で、４６人の健常な成人の被験者を無作為に指定して、単一用量のチロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標）、０．１ｍｇ  ＩＭ、または単一用量のＭＲ３％ＮａＣＭＣ中のｒｈＴＳＨ、０．１ｍｇ  ＩＭを受けさせた。合計で４６人の被験者を計画し；４６人の被験者を登録し；および４５人の被験者に研究薬物を受けさせ、および安全性、薬物動態学、および薬力学について分析した。
【０１４９】
被験者のサブグループ（ｎ＝１０）に、甲状腺による放射性ヨウ素吸収（ＲＡＩＵ）が計測されることが可能であるよう、より微量の投与量の放射性ヨウ素（約４００μＣｉ１２３Ｉ）を受けさせた。研究薬物を受ける前に中止したＲＡＩＵグループにおける１人の被験者についての結果を記載したが、総括の統計値には含めなかった。
【０１５０】
スクリーニング評価を以下のとおり実施した：すべての被験者について、研究薬物投与前の１４日間以内；およびＲＡＩＵサブグループについては、研究薬物投与前の１週間以内に実施したベースラインＲＡＩＵ計測の１４日間以内。
【０１５１】
被験者は投薬の前日の夜にクリニックにチェックインさせ、投薬後は９６時間クリニックに拘束した。被験者は、投薬前に一晩、少なくとも１０時間の間絶食させた。一連の血清サンプルを、研究薬物の投与後３３６時間にわたって、甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）濃度レベルの測定のために採取した。
【０１５２】
包含に関する診断および主判断基準
肥満度指数（ＢＭＩ）＜３０ｋｇ／ｍ２を有すると共に、スクリーニング時で正常な物理的検査、バイタルサイン、実験用評価、心電図（ＥＣＧ）、およびホルター結果の健常な成人男性または女性被験者。１２３Ｉ吸収に影響することが知られている非甲状腺状態（例えば、うっ血性心不全クラスＩＩＩまたはＩＶ、腎不全）の被験者、または甲状腺または腎性機能に影響し得る薬物（例えば、副腎皮質ステロイド、利尿薬、リチウム、アミオダロン、または他の既述のヨウ素−含有投薬）を服用中の被験者は除外した。
【０１５３】
配合物
被験者に、同一の有効原体を含有するが異なる希釈剤中に還元したチロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標）または３％ＮａＣＭＣ中のＭＲｒｈＴＳＨ配合物を投与した。両方の配合物は、凍結乾燥の前に、０．２％塩化ナトリウムを含有する、２０ｍｍリン酸ナトリウム緩衝剤中に、ｐＨ７．０で配合した。凍結乾燥した薬物／バイアルの定量的組成は、１．１ｍｇ甲状腺刺激ホルモンα、３６ｍｇマンニトール、１．４ｍｇリン酸ナトリウム（一塩基性、一水和物）、３．７ｍｇリン酸ナトリウム（二塩基性、七水和物）、および２．４ｍｇ塩化ナトリウムであった。
【０１５４】
チロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標）を、５．５ｍＬ注射用滅菌水（ＳＷＦＩ）、欧州薬局方（ＥＰ）／米国薬局方（ＵＳＰ）で還元した。ＭＲｒｈＴＳＨは、５．５ｍＬ無菌、ＳＷＦＩ中の３％ＮａＣＭＣの非発熱性溶液、Ｅ／ＰＵＳＰで還元した。ＭＲｒｈＴＳＨ用の希釈剤である３％ＮａＣＭＣはバイアル中に無菌液体として提供され、２〜８℃（３６〜４６°Ｆ）で補間された。すべての研究薬物および希釈剤は調製前に室温（約３０分間）に戻した。研究薬物バイアルの内容物を通気させ、無菌的技術を用いて還元した。研究薬物を反転させることにより混合し、穏やかに、凍結乾燥した生成物が溶解するまで穏やかに回旋させた。還元後、両方の研究薬物中の甲状腺刺激ホルモンαの濃度は０．２ｍｇ／ｍＬであった。研究薬物の各バイアルは単回使用用であった。
【０１５５】
安全性
有害事象（ＡＥ）、臨床実験用テスト、バイタルサイン計測値、物理的検査、ＥＣＧ、ホルターモニター、甲状腺超音波、およびＴＳＨレベルの監視を通して安全性を評価した。治療は、この研究においては被験者によって良好に許容された。ＡＥはほとんど報告されず、２つの治療グループにおける発現率は同一であった（それぞれ３人の被験者、１３％）。研究薬物に関連すると考えられる現象は、腹痛、下痢、眩暈、頭痛、および高血圧症（すべてはそれぞれ１人の被験者により報告された）を含んでいた。すべてのＡＥは軽度または中程度であり、研究の中断には至らなかった。
【０１５６】
本研究における多重血液−サンプリング法の影響と一致して、多くの血液学的パラメータ（ヘモグロビン、ヘマトクリット、ＲＢＣ、ＷＢＣ、好中球、およびリンパ球）に関する平均値は、研究の最後に低い傾向を有していた。しかしながら、明らかな治療関連傾向は実験結果の分析では観察されなかった。
【０１５７】
４日目には、ＥＣＧ異常を有する３人の被験者がいたが、臨床的に有意にではなかった。他の点では、１２誘導ＥＣＧ、ホルターモニターおよび甲状腺超音波評価の結果は、いかなる新たな安全性問題も明らかにせず、および治療関連傾向も識別されなかった。
【０１５８】
統計学的方法
全ての分析は、統計学的分析システム（Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｓｙｓｔｅｍ）（ＳＡＳ）、バージョン８．２以降を用いて実施した。主な効果は、０．０５レベルでテストした。
【０１５９】
薬物動態学的分析
以下の薬物動態学（ＰＫ）パラメータをＴＳＨについて算出した：最大実測薬物濃度（Ｃｍａｘ）、Ｃｍａｘに達するまでの時間（Ｔｍａｘ）、最終計測可能濃度（Ｃｌａｓｔ）、最小処理速度定数（λｚ）、消失半減期（ｔ１／２）、時間ゼロからＣｌａｓｔの時間までの濃度−時間曲線下面積（ＡＵＣ０〜ｔ）、および時間ゼロから無限大までのＡＵＣ（ＡＵＣ０〜∞）。ベースラインの内在性ＴＳＨに対する補正を伴って、および伴わずに、標準的な、ノンコンパートメント法を用いて、ＴＳＨについてＰＫパラメータを算出した。計算は、ウィンノンリン（ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ）（登録商標）（バージョン４．１）コンピュータソフトウェア（ファーサイトコーポレーション（Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、カリフォルニア州マウンテンビュー（Ｍｏｕｎｔａｉｎ  Ｖｉｅｗ，ＣＡ））を用いて実施した。
【０１６０】
所与の被験者についてのベースラインＴＳＨ値は、時間１２時間および時間ゼロ時間（投与前）ＴＳＨ値の平均であった。ベースライン減算後に＜０であった個別の濃度時点を、ＰＫ可変要素の推定および記述統計の算出のために０に設定した。ＰＫパラメータ、個別の被験者ＴＳＨ濃度、および実際のサンプリング時間は、ベースライン補正をしたおよびしない治療グループにより、記述統計を用いて列挙し、まとめた。
【０１６１】
ＰＫパラメータにおける差異を、すべての被験者およびＲＡＩＵサブグループについて、治療グループ間でのＣｍａｘ、Ｔｍａｘ、ｔ１／２、ＡＵＣ０〜ｔ、およびＡＵＣ０〜∞の平均および中央値を調べることにより評価した。以下の対数−変換（自然対数）、ＡＵＣ０〜∞、ＡＵＣ０〜ｔ、およびＣｍａｘ結果を、ｐ値および相乗平均比を中心とした９０％信頼区間（ＣＩ）を用いて治療グループ間で比較した。ＳＡＳ（登録商標）におけるＰＲＯＣ  ＭＩＸＥＤ（バージョン８．２）を、以下のとおり、モデルにおける固定効果として治療と共に用いた。
ＰＫ可変推定値＝治療
【０１６２】
ＴＳＨ、Ｔ３、遊離Ｔ３、Ｔ４、および遊離Ｔ４のレベルの薬力学的分析および判定
甲状腺機能テスト（ＴＦＴ）は、遊離チロキシン（Ｔ４）、総Ｔ４、遊離トリヨードチロニン（Ｔ３）、および総Ｔ３レベルの計測を含んでいた。ＣｍａｘおよびＴｍａｘをこれらのパラメータについて測定した。４００μＣｉ１２３Ｉの微量投与を受けた後の甲状腺によるＲＡＩＵを被験者のサブセットにおいて測定した。
【０１６３】
ＴＳＨ濃度およびＴ３、遊離Ｔ３、Ｔ４、および遊離Ｔ４のレベルを、ベイヤーＡＤＶＩＡセントールアナライザー（Ｂａｙｅｒ  ＡＤＶＩＡ  Ｃｅｎｔａｕｒ  Ａｎａｌｙｚｅｒ）で実施される検証された直接化学発光アッセイ法を用いて血清サンプルから測定した。このアッセイはインビトロ診断試験のためのＦＤＡ−承認アッセイである。機器は、機器がアッセイを実施することができる前に必要である、アッセイ精密運動、較正、検証および直線性運転のボリュームを有する。
【０１６４】
ＴＦＴ（遊離Ｔ３、総Ｔ３、遊離Ｔ４、および総Ｔ４）の結果を記述統計を用いて治療グループにより列挙し、まとめた。ＣｍａｘおよびＴｍａｘを試験することにより、効力（わずかな増加）および安全性（大きな増加の欠如）の両方について結果を評価した。これらの結果を、治療グループ間におけるＣｍａｘおよびＴｍａｘ平均および中央値における差異を、ｔ検定およびウィルコクソン順位和検定を用いて調べることにより分析した。
【０１６５】
放射性ヨウ素吸収
ＲＡＩＵサブグループについて、甲状腺による、ベースライン評価からのＲＡＩＵの増加の測定および比較を研究薬物の投与に続いて行った。ＲＡＩＵに対する治療の絶対値および相対的効果をまとめた。ベースライン吸収、治療後吸収、ベースラインから治療後までの吸収の変化、およびベースラインから治療後までの吸収の変化割合の平均、標準偏差、中央値、範囲を、各時点で算出した。同様に、各時点での治療後吸収：ベースライン吸収の比を両方の治療グループについてまとめた。
【０１６６】
結果
薬物動態学的分析
ＰＫを、チロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標）グループにおける２３人の被験者およびＭＲｒｈＴＳＨグループにおける２２人の被験者について評価した。本研究において観察されたところ、外因性のＴＳＨの投与は、血漿中濃度プロファイルにおける後期にベースラインを超える漸次的な血漿中ＴＳＨのリバウンドまたは「オーバーシュート」を伴って、血漿中ＴＳＨの急速な増加およびその結果生じるＴＳＨレベルの低下をもたらした。内在性のＴＳＨによるこれらの増加したＴＳＨ濃度は、外因性の投与された薬物についてのＰＫ推定値を混乱させる可能性がある。従って、本研究におけるデータは、ベースライン補正有りおよび無しで供される。投薬の後、ゼロ未満となる補正された値（およびすべてのその後の評価）は、ＰＫ可変要素の推定については除外した。この研究において、被験者の大部分が投薬後９６時間でこの点に到達していた。
【０１６７】
未補正血漿中濃度データからの推定ＡＵＣ０〜∞は、後の時点で増加しているＴＳＨ濃度により推定することができなかった。同様に、ＡＵＣ０〜ｔは、内在性および外因性のＴＳＨに対する曝露を計測し、および特に、プロファイルにおける後期の内在性のリバウンドによるＴＳＨ曝露を反映する。外因的に投与されたＴＳＨからのＴＳＨ曝露をより良好な定量化するために、部分ＡＵＣを、時間ゼロから、投薬後２４、４８、７２、および９６時間で算出した。
【０１６８】
ベースラインでは、血漿中濃度は、チロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標）およびＭＲｒｈＴＳＨ治療グループのそれぞれについて、１．６９および１．６３μＩＵ／ｍＬ  ＴＳＨの平均濃度で、治療間で同等であった。平均ＴＳＨ濃度は、研究薬物の注射の後増加し、その後の４日間にわたって徐々に低下して、投薬後約９６時間ではベースラインレベル未満の平均濃度となった。配合物における変化と同様に、ＭＲｒｈＴＳＨ治療グループについての最大ＴＳＨ濃度は著しく低く、最大ＴＳＨ濃度には約３時間後に達し、ＴＳＨレベルは、チロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標）対照配合物を投薬した後に見られるものより遅い速度で低下した。
【０１６９】
未補正データ
ベースラインでは、血漿中濃度は、チロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標）およびＭＲｒｈＴＳＨ治療グループのそれぞれについて、１．６９および１．６３μＩＵ／ｍＬ  ＴＳＨの平均濃度で、治療間で同等であった。平均ＴＳＨ濃度は、研究治療の注射の後増加し、その後の４日間にわたって徐々に低下して、投薬後約９６時間ではベースラインレベル未満の平均濃度となった。最大ＴＳＨ濃度はＭＲｒｈＴＳＨ治療グループについては低く、チロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標）グループのものより約３時間後に達成された。放出調節製剤においては、チロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標）対照配合物と比して、Ｔｍａｘの後、血漿中ＴＳＨの減少は被験者にとってより漸次的であるように見えた。このより漸次的な減少は、放出調節製剤注射部位からの継続および遷延性のＴＳＨの吸収によるものであった。
【０１７０】
ＴＳＨ  ＰＫパラメータを、未補正ＴＳＨ濃度およびベースライン−補正濃度を用いて推定した。未補正血漿データについてｔ１／２およびＡＵＣ０〜∞を推定することはできないため、未補正ＰＫ値はＡＵＣ０〜ｔ、Ｃｍａｘ、およびＴｍａｘを含んでいた。９６時間時点経過後のＴＳＨ濃度の増加の影響を評価するために、追加の部分的なＡＵＣ可変要素を、ＡＵＣ０〜２４、ＡＵＣ０〜４８、ＡＵＣ０〜７２、およびＡＵＣ０〜９６を含む未補正データから推定した。
【０１７１】
未補正ＰＫパラメータの結果は、すべての時間間隔で、ＭＲｒｈＴＳＨ治療の生物学的利用能はチロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標）の場合より低いが、これらの値は、経時的に経時的に収束に向かう傾向を見せることを示した（表１１）。
【０１７２】
【表１２】
2010503689.tif 000013
【０１７３】
投薬後の最初の９６時間にわたる平均未補正血漿中ＴＳＨ濃度が、図９における治療による直尺でプロットされている。
【０１７４】
ベースライン−補正データ
血漿中濃度は、投薬後３３６時間計測した。未補正データについて見られたとおり、平均ＴＳＨ濃度は、研究治療の注射後約６〜９時間でピークに達し、投薬後約９６時間でベースライン未満のレベルまで漸次的に減少した。９６時間時点の後、平均ベースライン−補正濃度はベースラインレベル超に増加した。
【０１７５】
ベースライン−補正ＴＳＨ濃度を用いて推定した算術平均ＴＳＨ  ＰＫパラメータが表１２に示されている。
【０１７６】
【表１３】
2010503689.tif 000014
【０１７７】
ＭＲｒｈＴＳＨ治療に対する１５．６８μＩＵ／ｍＬ  ＴＳＨのＣｍａｘと比して、平均Ｃｍａｘはチロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標）治療については約５７％高く、２４．５８μＩＵ／ｍＬ  ＴＳＨの平均値であった。ピーク濃度は、それぞれ、チロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標）およびＭＲｒｈＴＳＨグループに対する６時間および９時間の中位時間で達成された。より低いピーク濃度にかかわらず、ＭＲｒｈＴＳＨグループに対するより長いｔ１／２（１３．１７時間対９．８８時間）は、チロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標）グループのものに匹敵するＡＵＣ値をもたらした。ＭＲｒｈＴＳＨおよびチロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標）グループに対する平均ＡＵＣ０〜ｔ値は、それぞれ、４６４．４２μＩＵ＊×ｈｒ／ｍＬおよび４７４．５０μＩＵ＊×ｈｒ／ｍＬで匹敵するものであった。
【０１７８】
相対的生物学的利用能の分析
相対的生物学的利用能の分析を、ＡＵＣおよびＣｍａｘの対数−変換ＰＫパラメータで実施した。ベースライン−補正結果は、それぞれ、ＡＵＣ０〜∞およびＡＵＣ０〜ｔについての０．８９８７（０．７３３４、１．１０１２；ｐ＝０．３８１０）および０．８７３９（０．６８５８、１．１１３７；ｐ＝０．３５５３）の比率（９０％ＣＩ）で、合計曝露（すなわちＡＵＣ）は放出調節製剤について約１０〜１３％低かったことを示した。放出調節製剤の投与後の平均Ｃｍａｘは、統計的に有意（ｐ＝０．０００２）である０．５２３７の比率および０．３９９９、０．６８５９の９０％ＣＩで、チロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標）の投与後に見出されたものよりも約５０％低かった。
【０１７９】
【表１４】
2010503689.tif 000015
【０１８０】
未補正データに対するＰＫ結果は、０．５６９２のＣｍａｘ比率およびｐ＝０．０００２で、補正データのものと匹敵していた。部分ＡＵＣに対する結果は、ＡＵＣ０〜２４に対する０．６２７１の比率（ｐ＝０．０００４）およびＡＵＣ０〜９６に対する０．９１３６の比率（ｐ＝０．３２４１）で、投薬後間隔にわたって収束していた。ＡＵＣ０〜ｔに対する結果は、０．９８８７の比率（９０％ＣＩ）（０．８３８２、１．１６６３；ｐ＝０．９０８７）で生物学的同等性に対する判断基準を満たしていたが、このＡＵＣパラメータの推定値は、ＰＫプロファイル後期における視床下部−下垂体−甲状頚動脈応答に対する二次的なＴＳＨの内在性の放出によって混乱され、および投与量形態から放出された薬物を正確に表していない。
【０１８１】
放出調節製剤で見出された投薬後のＣｍａｘの減少と一致して、２種の配合物間のＴｍａｘにおける差異もまた、それぞれ、ウィルコクソン順位和検定およびｔ検定により、統計的に有意（ｐ＝０．０００３および０．０００９）であった。ＭＲｒｈＴＳＨおよびチロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標）治療グループに対する平均Ｔｍａｘ（ＳＤ）値は、それぞれ、１０．７３（５．７０）時間および５．９２（２．０６）時間であった。
【０１８２】
配合物における差異と一致して、ＭＲｒｈＴＳＨの血漿中プロファイルは、チロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標）対照配合物で観察されるものと比して、より低いピークＴＳＨ濃度ならびにより遅い吸収速度およびクリアランス速度により特徴付けられていた。ＭＲｒｈＴＳＨの投与後の平均ベースライン−補正平均Ｃｍａｘは、チロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標）より約４０％低いが（２４．５８μＩＵ／ｍＬ  ＴＳＨに対して１５．６８μＩＵ／ｍＬ  ＴＳＨ）、これらの２種の配合物の生物学的利用能は、ＡＵＣ０〜∞およびＡＵＣ０〜ｔに対して０．８９８７（０．７３３４、１．１０１２）および０．８７３９（０．６８５８、１．１１３７）の比率（９０％ＣＩ）でおよそ匹敵していた。
【０１８３】
ベースラインでは、血漿中ＴＳＨ濃度は、それぞれ、チロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標）およびＭＲｒｈＴＳＨ治療グループに対する１．６９および１．６３μＩＵ／ｍＬの平均濃度で治療間で匹敵していた。投薬の後、ＭＲｒｈＴＳＨ治療グループについて最大ＴＳＨ濃度は低く、チロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標）対照グループのものから約３時間遅れて達成された。ＭＲｒｈＴＳＨグループにおける平均ＴＳＨ濃度は、注射の後増加すると共にその後の４日間にわたって漸次的に減少し、平均濃度は投薬後約９６時間ではベースラインレベル未満に落ちた。血漿中ＴＳＨにおける減少は、放出調節製剤注射部位からのＴＳＨの継続および遷延性の吸収により、放出調節製剤の投与後はより漸次的であるように見えた。
【０１８４】
平均Ｃｍａｘ（ベースライン補正済）は、チロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標）治療に対する２４．５８μＩＵ／ｍＬ  ＴＳＨのＣｍａｘと比して、１５．６８μＩＵ／ｍＬ  ＴＳＨの平均値で、ＭＲｒｈＴＳＨ治療については約４０％低かった。ピーク濃度は、それぞれ、チロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標）およびＭＲｒｈＴＳＨグループについて６時間および９時間の中位時間で達成された。より低いピーク濃度にかかわらず、ＭＲｒｈＴＳＨグループに対するより長いｔ１／２（１３．１７時間対９．８８時間）は、チロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標）グループのものに匹敵するＡＵＣ値をもたらした。ＭＲｒｈＴＳＨおよびチロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標）グループに対する平均ＡＵＣ０〜ｔ値は、それぞれ、４６４．４２μＩＵ＊ｈｒ／ｍＬおよび４７４．５０μＩＵ＊ｈｒ／ｍＬであった。
【０１８５】
ベースライン−補正データを用いた相対的生物学的利用能の分析は、０．１ｍｇ  ＭＲｒｈＴＳＨでの注射が、０．５２３７のＣｍａｘ比率および０．３９９９〜０．６８５９の９０％ＣＩ（ｐ＝０．０００２）での吸収速度の低下をもたらしたことを実証した。２つの治療間でのＴｍａｘにおける差異はまた、統計的に有意（ｐ＝０．０００３）であると見出された。総合生物学的利用能は、ベースライン−補正ＡＵＣ０〜∞およびＡＵＣ０〜ｔに対して０．８９８７（０．７３３４、１．１０１２；ｐ＝０．３８１０）および０．８７３９（０．６８５８、１．１１３７；ｐ＝０．３５５３）の比率（９０％ＣＩ）で、放出調節製剤については低かった。
【０１８６】
未補正データについての結果は、０．５６９２のＣｍａｘ比率および１．０以外の９０％ＣＩを示した。部分ＡＵＣについての結果は、ＡＵＣ０〜２４については０．６２７１の比率でおよびＡＵＣ０〜９６については０．９１３６の比率で、投薬後間隔にわたって値の収束を示した。ＡＵＣ０〜２４およびＡＵＣ０〜４８についての治療間の差異は統計的に有意であったが（それぞれｐ＝０．０００４および０．０２０２）、０〜７２および０〜９６時間の残りの間隔についての結果は有意には異なっていなかった（それぞれｐ＝０．１５０３および０．３２４１）。
【０１８７】
薬力学
遊離Ｔ３、総Ｔ３、遊離Ｔ４、および総Ｔ４の濃度に対する、チロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標）およびＭＲｒｈＴＳＨの単回の０．１ｍｇ投与量の効果は、注射の後２４時間もの早期に計測した場合治療間で同等であり、平均ピーク濃度は２４〜４８時間に観察され、続いて、投薬後約１６８時間までにベースラインレベルへ定常的に減少した。普通、ピーク濃度は、ベースラインレベルを超えて１．５倍〜２倍の増加を示した。注射の後の早い時点での総Ｔ３レベルを評価するために凍結血清を回収することが決定され、これらの早い時間では、以下に記載のとおり、総Ｔ３の血清レベルは、チロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標）後よりＭＲｒｈＴＳＨ後に漸次的に増加した。
【０１８８】
ベースラインでのパーセントＲＡＩＵに対する結果は、１２３Ｉ投与後６、２４および４８時間に、それぞれ、チロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標）およびＭＲｒｈＴＳＨグループについて、１０．８２および１０．８６、２３．７０および２５．７２、および２４．３２および２７．３０の平均吸収値で、治療間で同等であった。チロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標）またはＭＲｒｈＴＳＨでの治療の後、ＲＡＩＵは、１２３Ｉ投与量の投与後、それぞれ、６時間で２２５％および２７７％、２４時間で１２５％および１２３％、ならびに４８時間で１２６％および１２２％の増加で、２つの治療において匹敵する速度で増加した。
【０１８９】
チロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標）治療およびＭＲｒｈＴＳＨ治療ヒト被験者におけるＴ３（トリヨードチロニン）レベルの分析
チロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標）およびＭＲｒｈＴＳＨの両方が、健常な被験者によって良好に許容されたが、ホルターモニターは、研究薬物が投与された後３日目、約４８時間に、両方の治療グループの平均心拍数のわずかな増加を明らかにした（それぞれ、スクリーニングおよび３日目に、すべてのチロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標）患者について７２．７〜７８．２ｂｐｍ、ならびにすべてのＭＲｒｈＴＳＨ患者について７２．９〜７９．０ｂｐｍ）。心拍数の増加は、特に高齢およびより病気の患者中において、安全上の懸念である可能性がある。本研究における健常な被験者はこの心拍数における変化について不具合を訴えず、彼らが心臓関連症状を経験することもなかったことに留意すべきである。平均心拍数データの追加の分析は、この平均心拍数の上昇は、チロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標）被験者（７６．０ｂｐｍの平均）において２日目（研究薬物から２４時間後）に明らかであったが、ＭＲｒｈＴＳＨ被験者（７２．８ｂｐｍの平均）ではそうでなかったことを示した。最初の２４時間におけるこの急性の効果は、その後のＭＲｒｈＴＳＨ投与よりも急速な、チロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標）投与後の甲状腺からのトリヨードチロニン（Ｔ３）の放出に起因し得る。経口トリヨードチロニン後または乾燥甲状腺（Ｔ４およびＴ３の両方を含有する）が投与された後の吸収フェーズの最中の血清Ｔ３の急速な上昇は、報告によれば、甲状腺ホルモン補充療法の最中に動悸、過敏症、神経衰弱、眩暈、および振戦を生じさせる（スミスＲ．Ｎ．（Ｓｍｉｔｈ，Ｒ．Ｎ．）ら、Ｂｒ．Ｍｅｄ．Ｊ．４：１４５〜４８ページ（１９７０年）；ビエルシンガＷ．Ｍ．（Ｗｉｅｒｓｉｎｇａ，Ｗ．Ｍ．）、Ｈｏｒｍ．Ｒｅｓ．５６（Ｓ１）：７４〜８１ページ（２００１年）、ジークムントＷ．（Ｓｉｅｇｍｕｎｄ，Ｗ．）ら、Ｃｌｉｎ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．６０：７５０〜５７ページ（２００４年））。
【０１９０】
Ｔ３と心拍数との間の可能性のある関係をよりよく理解するために、ヒト被験者における合計血清Ｔ３レベルを、投与前１２時間〜投与後２４時間の間の複数の時点で、保管した血清サンプルを用いて計測した。研究薬物を受けた４５人の被験者の全員について、−１２時間、０分、２、３、４、５、６、８、１２、および２４時間の時点からの保管した血清を回収し、評価した。合計Ｔ３を、同一の実験的な、機器、総Ｔ３アッセイならびに上記において実施した総Ｔ３試験について用いた方法論を用いて各血清サンプルにおいて計測した。−１２時間、０分、および２４時間サンプルの再試験は品質検査を許容し、既に計測されたＴ３レベルが実際に、サンプルの再試験の最中に再度計測された。
【０１９１】
要するに、チロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標）被験者（ｎ＝２３）およびＭＲｒｈＴＳＨ被験者（ｎ＝２２）におけるベースライン平均血清Ｔ３レベルは同一であった。平均血清Ｔ３レベルは、ＭＲｒｈＴＳＨグループより、２時間までにはチロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標）グループにおいて高く、２４時間にわたって高いままに維持される傾向にあった。平均Ｔ３レベルは、３、４、および６時間では、２つの治療グループ間で著しく異なっていた（ｐ＜０．０５）（図１１）。それ故、チロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標）ではなくＭＲｒｈＴＳＨを受けた患者は、投与後最初の２４時間の間での血清Ｔ３レベルにおけるより遅い増加を有することとなり、これは、心拍数の急性の増加のより低い可能性をもたらし得および何人かの患者に対しては重要な要件であり得る。
【０１９２】
考察
要するに、本研究は、ヒト被験者に投与される場合には、ＭＲｒｈＴＳＨの重要なＰＫパラメータはチロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標）とは異なることを実証した。配合物をより高い粘度に調整することにより、ＭＲｒｈＴＳＨは最高濃度（Ｔｍａｘ）までの遅延時間を有した。０．１ｍｇチロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標）のＩＭ注射の後、血清ＴＳＨのＴｍａｘは約６時間で生じたが、一方で、０．１ｍｇ  ＭＲｒｈＴＳＨのＩＭ注射の後、Ｔｍａｘは約９時間で生じた。血清ＴＳＨ（約１４ｍＵ／Ｌ）の最高血漿中濃度（Ｃｍａｘ）は、チロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標）（Ｃｍａｘ約２１ｍＵ／Ｌ）の投与と比して、ＭＲｒｈＴＳＨの投与に約３３％減であったが、血清ＴＳＨの曲線下面積（ＡＵＣ）（注射時〜９６時間）は、ＭＲｒｈＴＳＨについてのものよりわずかに少ないのみであった。甲状腺による２４時間放射性ヨウ素吸収の刺激により、および血清甲状腺機能テストにおける過渡的な増加により実証されるとおり、ＭＲｒｈＴＳＨおよびチロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標）の両方は薬力学的に有効であった。両方の薬は、一般に良好に許容されると共に、０．１ｍｇ  ＩＭの投与量では安全であった。
【０１９３】
それ故、本研究は以下を実証した。
ｉ）ＭＲｒｈＴＳＨ配合物に対する平均ピーク濃度は、チロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標）対照配合物のものよりも約４０％低かった；
ｉｉ）合計曝露により計測したところ、放出調節製剤の相対的生物学的利用能は、チロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標）対照配合物のものより約１０〜１３％低かった；
ｉｉｉ）放出調節製剤とチロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標）対照配合物との間のＴｍａｘにおける差異は統計的に有意であった；
ｉｖ）チロゲン（Ｔｈｙｒｏｇｅｎ）（登録商標）またはＭＲｒｈＴＳＨでの治療の後、治療間ではＲＡＩＵが同等の速度で増加した；および
ｖ）０．１ｍｇ  ＭＲｒｈＴＳＨの単回の注射の投与は、如何なる新たな安全上の懸念をも提起しなかった。
【０１９４】
上記の実施形態と併せて本発明を説明してきたが、前述の記載および実施例は例示を目的とし、本発明の範囲を制限することを意図しないことが理解されるべきである。本発明の範囲内の他の態様、利点および改良は、本発明に関する当業者に明らかであろう。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【国際調査報告】
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