(57)【要約】  本発明は、Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジン２エタンスルホン酸塩、その製造方法、それを含む骨粗しょう症、骨折またはアレルギー性炎症疾患の予防および治療用薬学組成物、並びにそれを含む骨粗しょう症、骨折またはアレルギー性炎症疾患の予防および治療用経口製剤に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記化学式１で表されるＮ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジン２エタンスルホン酸塩。
【化１】
2010521524.tif 000008
【請求項２】
不活性溶媒中でＮ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジンとエタンスルホン酸とを反応させる段階を含む、請求項１のＮ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジン２−エタンスルホン酸塩の製造方法。
【請求項３】
前記不活性溶媒は、酢酸エチル、メタノール、エタノール、イソプロパノール、アセトン、アセトニトリル、ヘキサンおよびイソプロピルエーテルよりなる群から選ばれる少なくとも１種であることを特徴とする、請求項２に記載の製造方法。
【請求項４】
請求項１のＮ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジン２エタンスルホン酸塩および薬学的に許容される担体を含む、骨粗しょう症予防および治療用薬学組成物。
【請求項５】
請求項１のＮ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジン２エタンスルホン酸塩よび薬学的に許容される担体を含む、骨折治療用薬学組成物。
【請求項６】
請求項１のＮ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジン２エタンスルホン酸塩よび薬学的に許容される担体を含む、アレルギー性炎症疾患の予防および治療用薬学組成物。
【請求項７】
請求項１のＮ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジン２エタンスルホン酸塩と共に、（ａ）炭酸アルカリ金属塩、炭酸水素アルカリ金属塩および炭酸アルカリ土金属塩よりなる群から選ばれる少なくとも１種の炭酸塩；（ｂ）カルボキシメチル澱粉ナトリウム、カルメロースナトリウム、カルメロースカルシウムおよびクロスカルメロースナトリウムよりなる群から選ばれる少なくとも１種の崩壊剤；または（ａ）および（ｂ）の組み合わせを含む、骨粗しょう症、骨折またはアレルギー性炎症疾患の予防および治療用経口製剤。
【請求項８】
前記炭酸塩は炭酸水素ナトリウムまたは炭酸カルシウムであり、前記崩壊剤は、カルボキシメチル澱粉ナトリウムまたはクロスカルメロースナトリウムであることを特徴とする、請求項７に記載の経口製剤。
【請求項９】
前記経口製剤は無機賦形剤をさらに含むことを特徴とする、請求項７または８に記載の経口製剤。
【請求項１０】
前記無機賦形剤はリン酸水素カルシウム、リン酸カルシウム、重質酸化マグネシウム、沈降炭酸カルシウム、炭酸マグネシウムまたはこれらの混合物であることを特徴とする、請求項９に記載の経口製剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジン２エタンスルホン酸塩、その製造方法、それを含む粗しょう症、骨折またはアレルギー性炎症疾患の予防および治療用薬学組成物、並びにそれを含む骨粗しょう症、骨折またはアレルギー性炎症疾患の予防および治療用経口製剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジンは、骨粗しょう症の治療および予防（特許文献１）、骨折の治療（特許文献２）、アレルギー性疾患の予防および治療（特許文献３）に優れた効果を示す物質である。
【０００３】
薬学組成物に使用される活性成分が水または広いｐＨ範囲の水溶液に対して高い溶解度を示さなければならないということは、当業者には周知の事実である。ところが、Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジンは、溶解度が低いため、生体利用率を高めるためにはより優れた溶解度を有する塩の開発が要求されている。
【０００４】
したがって、本発明者らは、溶解度に優れるとともに、安定なＮ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジン２メタンスルホン酸塩を開発したところがある（特許文献４）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】韓国登録特許第１０−４５４７６７号
【特許文献２】韓国登録特許第１０−６３９０４１号
【特許文献３】韓国登録特許第１０−６８２１９９号
【特許文献４】韓国公開特許第１０−２００６−５７５１１号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
そこで、本発明者らは、当業者によって既に発明されたＮ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジン２メタンスルホン酸塩よりさらに優れた安定性、溶解度、生体利用率などの物理化学的性質を有する塩を開発するために研究を行ったところ、Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジン２エタンスルホン酸塩を合成し、前記２エタンスルホン酸塩が２メタンスルホン酸塩に比べて初期溶出率が高いうえ、溶解度、安定性および生体利用率に優れることを確認し、本発明を完成するに至った。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明の目的は、Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジン２エタンスルホン酸塩、その製造方法、それを含む骨粗しょう症、骨折またはアレルギー性炎症疾患の予防および治療用薬学組成物、並びにそれを含む骨粗しょう症、骨折またはアレルギー性炎症疾患の予防および治療用経口製剤を提供することにある。
【発明を実施するための形態】
【０００８】
一様態において、本発明は、下記化学式１で表されるＮ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジン２エタンスルホン酸塩に関する。
【０００９】
【化１】
2010521524.tif 000002
【００１０】
Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジンは、文献（Lee, Sung-Eun, Synthesis and Biological Activity of Natural Products and Designed New Hybrid Compounds for the Treatment of LTB4 Related Disease, Busan National University, a thesis for a Ph. D degree, August 1999）に記載されている。
【００１１】
本発明で引用する「２エタンスルホン酸塩」とは、遊離塩基化合物１個当り２個のエタンスルホン酸が結合されて塩を形成した化合物を意味し、本発明の目的上、Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジンの２エタンスルホン酸塩をいう。
【００１２】
本発明者らは、溶解度の低いＮ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジン化合物に対してエタンスルホン酸が２個結合された形態の２エタンスルホン酸塩が、メタンスルホン酸が２個結合された形態の２メタンスルホン酸塩に比べて、初期溶出率が高く、溶解度および安定性に優れるうえ、生体内実験においても高い生体利用率を示すことを確認した。
【００１３】
具体的に、本発明に係るＮ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジンの２エタンスルホン酸塩は、２メタンスルホン酸塩に比べて、蒸留水で約１．２５倍高い溶解度を示し、５分後に２．８倍、１０分後には１．４倍、１５分後には１．２倍高い溶出率を示す。また、２週間６０℃の過酷条件の安定性試験においても含量変化が殆どなく、温度による化学的安定性にも優れる。ひいては、生体投与の際に、生体内における２エタンスルホン酸塩は、２メタンスルホン酸塩に比べて、最高血中濃度において１．３倍高く、最高血中濃度到達時間においても１．４倍速く、血中濃度時間下面積においても約１．２倍高い生体利用率を示す。
【００１４】
本発明のＮ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジンの２エタンスルホン酸塩は、結晶型または非結晶型であり、結晶型のＮ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジンの２エタンスルホン酸塩がさらに好ましい。
【００１５】
別の様態において、本発明は、前記化学式１のＮ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジン２エタンスルホン酸塩の製造方法に関する。
【００１６】
具体的に、本発明は、不活性溶媒中でＮ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジンとエタンスルホン酸とを反応させる段階を含むＮ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジンの２エタンスルホン酸塩の製造方法を提供し、これは下記反応式１で表される。
【００１７】
【化２】
2010521524.tif 000003
【００１８】
本発明に係る製造方法に使用されるエタンスルホン酸は、医薬品に使用できるように米国ＦＤＡで許容された酸であり、安定な無色液体であって吸湿性および腐食性がなく、有害でないため、製造上安全性があり、取り扱いが容易であって大量生産にも容易に使用することができる。
【００１９】
本発明の製造方法に使用される不活性溶媒としては、酢酸エチル、メタノール、エタノール、イソプロパノール、アセトン、アセトニトリル、ヘキサンおよびイソプロピルエーテルなどが含まれるが、好ましくはエタノールである。
【００２０】
前記不活性溶媒中でＮ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジン１当量に対してエタンスルホン酸２〜４当量、好ましくは２．１〜２．５当量を滴加して反応させることができ、−２０〜４０℃、好ましくは０〜２０℃の反応温度で１０分〜５時間、好ましくは３０分〜２時間反応させることができる。
【００２１】
前述したような製造方法によって、 Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジンの２エタンスルホン酸塩を８６％以上の高収率で製造することができる。
【００２２】
別の様態において、本発明は、前記化学式１のＮ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジン２エタンスルホン酸塩を含む、骨粗しょう症、骨折またはアレルギー性炎症疾患の予防および治療用薬学組成物に関する。
【００２３】
本発明において、用語「骨粗しょう症」は、残っている骨には構造上何の異常も無いながら骨を形成する無機質と基質の量が過度に減少して骨にスポンジのように多数の小孔が多く開いており、脆くて容易に壊れる状態をいい、骨減少症ともいう。Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジン化合物が骨粗しょう症の予防および治療に優れた効果を示すということは、韓国登録特許第１０−４５４７６７号および国際特許ＷＯ０３００７９４７号に詳細に開示されている。
【００２４】
本発明において、用語「骨折」とは、骨の連続性が完全または不完全に消失した状態であって、解剖学的に部位（骨端、骨幹端、骨幹部、関節内、または近位部、中間部および遠位部）、骨折の度合い（完全、不完全など）、骨折の方向（横状、斜状、螺旋状、縦状など）、開放創同伴有無（開放性、閉鎖性）、骨切片の数（単純または線状、粉砕、分節など）、骨折の安定性（安定性、不安定性）、骨折片の転位有無などを基準として分類される様々な骨の物理的損傷をいう。Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジン化合物は、ラット実験において、前記ベンズアミジン化合物無処置対照群に比べて仮骨の体積を有意的に減少させ、仮骨の骨密度および骨強度を有意的に増加させ、仮骨組織内の結合組織および軟骨組織の含量を有意的に減少させるうえ、骨組織の含量を有意的に増加させた（韓国登録特許第１０−６３９０４１号）。
【００２５】
本発明において、用語「アレルギー性炎症疾患」とは、多様なアレルギー誘発原因によって引き起こされる非特異性の炎症性疾患をいい、例えばアレルギー性鼻炎、喘息、アレルギー性結膜炎、アレルギー性皮膚炎、アトピー性皮膚炎、接触性皮膚炎、じんま疹(urticaria)、過敏症(anaphylaxis)、昆虫アレルギー、食品アレルギーおよび薬品アレルギーなどを例示することができる。
【００２６】
Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジン化合物のアレルギー性炎症疾患の予防および治療効果は、卵白タンパク質により誘発させたマウス喘息モデル実験で確認された。前記ベンズアミジン化合物は、卵白タンパク質の感作(immunization)の際に投与し始めて１８日間投与した。実験動物を感作１５日後にさらに卵白タンパク質に露出させた後、３日後に犠牲にして肺の重量、抹消血液および肺気管支洗浄液内細胞成分の変化、並びに肺の組織学的変化を観察した結果、無菌蒸留水のみを投与した対照群に比べて、前記ベンズアミジン化合物を経口投与したときに肺の重量増加を抑制し、喘息誘発による血液中の総白血球数および酸好性白血球の比率は、対照群では正常群に比べて有意的に増加したが、前記ベンズアミジン化合物投与群では対照群に比べて有意的に減少し、投与用量依存的減少を示した。喘息誘発による気管支肺洗浄液中の酸好性白血球の比率を測定したときにも、対照群では正常群に比べて有意的に増加したが、前記ベンズアミジン化合物投与群では対照群に比べて有意的に減少し、投与用量依存的減少を示した。前記ベンズアミジン投与群は、対照群に比べて、喘息誘発による肺組織内肺胞面積を有意的に増加させた（韓国登録特許第１０−６８２１９９９号）。
【００２７】
本発明の組成物は、前述した成分以外に、さらに薬学的に許容される担体を少なくとも１種含むことができる。薬学的に許容される担体は、通常の賦形剤、崩壊剤、湿潤剤、充填剤、増量剤、結合剤、潤滑剤、滑沢剤、抗酸化剤、緩衝剤、界面活性剤および分散剤などを例示することができ、これらを２種以上混合して含むことができる。
【００２８】
本発明の組成物は、経口または非経口で投与でき、経口投与する場合には、例えば錠剤、カプセル剤、丸薬および散剤などの固形剤形；例えば懸濁剤、シロップ剤および液剤などの液状剤形に剤形化することができる。非経口投与（例えば、静脈内、皮下、腹腔内および鼻腔内など）する場合には、注射剤、軟膏剤およびパッチ剤などに剤形化することができる。このような剤形化は、当分野における公知の適切な方法または文献（Remington's Pharmaceutical Science (recent version), Mack Publishing Company, Easton PA.）に開示されている方法を用いて、各疾患に応じてまたは成分に応じて適切に剤形化することができる。
【００２９】
好ましい経口投与剤形において、炭酸アルカリ金属塩、炭酸水素アルカリ金属塩および炭酸アルカリ土金属塩よりなる群から選ばれる少なくとも１種の炭酸塩および／またはカルボキシメチル澱粉ナトリウム、カルメロースカルシウムおよびクロスカルメロースナトリウムよりなる群から選ばれる少なくとも１種の崩壊剤を用いて剤形化することができる。このような剤形は、２エタンスルホン酸塩が水分と接触するとき、初期溶出段階でゲル形成を抑制して溶出速度を増加させ、生体利用率を著しく上昇させる。前述した炭酸塩および／または崩壊剤を添加して剤形化することにより、２エタンスルホン酸塩の溶出の際に水と接触する拡散層のｐＨ環境を局所的に中性化または弱アルカリ化させ、或いは組成物を速く分散させて溶出初期水和によるゲル化を効果的に抑制することができる。
【００３０】
前記経口投与剤形で使用される炭酸塩は、例えば炭酸ナトリウムおよび炭酸カリウムなどの炭酸アルカリ金属塩；例えば炭酸水素ナトリウムおよび炭酸水素カリウムなどの炭酸水素アルカリ金属塩；例えば炭酸カルシウムおよび炭酸マグネシウムなどの炭酸アルカリ土金属塩よりなる群から選択され、これらの中でも炭酸水素ナトリウムまたは炭酸カルシウムが好ましい。前記炭酸塩は、２エタンスルホン酸塩１重量部に対して約０．４〜６重量部、好ましくは０．５〜２重量部が含まれる。もし０．４重量部未満であれば、溶出速度増加効果を得ることができず、もし６重量部以上であれば、胃腸管内ガス発生により腹部膨満の欠点があるおそれがある。
【００３１】
前記経口投与剤形で使用される特定の崩壊剤は、カルボキシメチル澱粉ナトリウム、カルメロースナトリウム、カルメロースカルシウムおよびクロスカルメロースナトリウムよりなる群から選ばれる少なくとも１種を含み、それらの中でもカルボキシメチル澱粉ナトリウムまたはクロスカルメロースナトリウムが好ましい。前記崩壊剤は、溶出初期に速く水分を吸収して大きく膨潤することにより、前記化学式１の２エタンスルホン酸塩の薬物粒子を分散させ、製剤の表面から進むゲル化を効果的に阻害して溶出速度を増加させる。特定の崩壊剤の含量は前記化学式１の２エタンスルホン酸塩１重量部に対して０．５〜５重量部である。もし０．５重量部未満であれば、薬物が均一に分散せず担体による溶出初期ゲル形成阻害効果が少なくて溶出速度の改善効果が減少し、もし５重量部以上であれば、それ以上溶出速度の改善が現れず、製剤の大きさが大きくなって服用時の難しさにより患者の薬剤服用順応度(patient compliance)が低下するという問題点がある。
【００３２】
前記経口投与剤形は、崩壊剤と炭酸塩を２エタンスルホン酸塩と混合して剤形化することができるが、この場合、それぞれを単独で用いる場合に比べて改善された溶出特性を示す。前記崩壊剤と炭酸塩を混合使用する場合、本発明の経口用製剤は２エタンスルホン酸塩１重量部に対して０．５〜５重量部の崩壊剤および０．１〜６重量部の炭酸塩を含むことが好ましい。前記崩壊剤および炭酸塩がそれぞれ０．５および０．１重量部未満の場合には適切なゲル形成阻害効果が現れず、前記崩壊剤および炭酸塩がそれぞれ５および６重量部超過の場合には患者の薬剤服用順応度が良くない。
【００３３】
また、前記経口投与剤形は賦形剤をさらに含有することができる。賦形剤としては、ゲル形成を効果的に阻害して薬物を速く分散させることにより溶出速度を増加させるという観点からみて、好ましくはリン酸水素カルシウム、リン酸カルシウム、重質酸化マグネシウム、沈降炭酸カルシウムおよび炭酸マグネシウムなどの無機賦形剤が使用でき、さらに好ましくはリン酸水素カルシウム、リン酸カルシウムまたは重質酸化マグネシウムが使用できる。一方、前記追加される賦形剤としてアビセル、マンニトール、トウモロコシ澱粉および乳糖などの有機賦形剤を使用する場合には、薬物の溶出速度増加効果を期待することができない。
【００３４】
また、前記経口投与剤形は薬学的に許容される通常の添加剤を含むことができるが、その例としては結合剤、滑沢剤、界面活性剤、着色剤および矯味矯臭剤などを挙げることができる。結合剤および滑沢剤としては薬学的に許容される通常の結合剤および滑沢剤が使用できる。例えば、結合剤としてはマルトース、アラビアゴムおよびヒドロキシプロピルセルロースなどが使用でき、滑沢剤としてはカルナウバ蝋、軽質無水ケイ酸、合成ケイ酸アルミニウム、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウムおよびタルクなどが使用できる。
【００３５】
前記経口投与剤形は、前記構成成分以外に、薬学的に許容される通常の賦形剤または補助剤を添加し、通常の薬学的方法で製剤化して錠剤、カプセル剤、顆粒剤および細粒剤などの経口投与用固形剤形に製造できる。すなわち、本発明によって顆粒体を製造し、顆粒体に滑沢剤およびその他の薬学的に許容される添加剤などを添加して粉末状または顆粒状に直接硬質カプセル内に充填し、或いは打錠に必要な薬学的添加剤を添加して公知の方法によって圧縮成形して錠剤に剤形化することができる。
【００３６】
本発明の組成物の投与量は、患者の体重、年齢、性別、健康状態、食餌、投与時間、投与方法、排泄率または疾患の重症度などによって異なる。前記化学式１のＮ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジン２エタンスルホン酸塩の１日投与量は、約１〜１０００ｍｇ／ｋｇ、好ましくは１０〜５００ｍｇ／ｋｇである。このような投与量は１日１回または数回に分けて投与することができる。
【００３７】
本発明の組成物は、骨粗しょう症、骨折またはアレルギー性炎症疾患の予防および治療のために、単独で、或いは手術、ホルモン治療、薬物治療および生物学的反応調節剤を用いる方法と併用して使用することができる。
【００３８】
以下、本発明の理解を助けるために好適な実施例を提示する。ところが、これらの実施例は本発明をより容易に理解するために提供されるものに過ぎず、本発明の内容を限定するものではない。
【実施例】
【００３９】
〔実施例１〕：Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジン２エタンスルホン酸塩の製造
３０ｍＬのエタノールにＮ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジン３ｇ（６．６１４ｍｍｏｌ）を溶解させ、ここにエタンスルホン酸１．１４ｍＬ（２．２当量）を滴加した後、常温で１時間攪拌し、しかる後に、３０ｍＬのアセトンと６０ｍＬのヘキサンを加えた後、１時間攪拌した。生成された固体を濾過し、アセトンで洗浄した後、真空乾燥させた。その結果、Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジン２エタンスルホン酸塩を白色の固体として４．１７ｇ（収率：８６％）得た。
【００４０】
得られたＮ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジン２エタンスルホン酸塩のエタンスルホン酸含量の分析結果および融点は、次のとおりである。
【００４１】
−エタンスルホン酸含量（理論値：３２．７％、測定値：３３．０％）、
−融点：１４１℃
【００４２】
〔比較例１〕：Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジンの製造
Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジンは、文献（Lee, Sung-Eun, Synthesis and Biological Activity of Natural Products and Designed New Hybrid Compounds for the treatment of LTB4 Related Disease, the doctoral thesis, the Graduate School, Busan National University, 1999 August）に開示された公知の方法によって製造した。
【００４３】
〔比較例２〕：Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジン２メタンスルホン酸塩の製造
韓国公開特許公報第１０−２００６−５７５１１号に開示された方法によって、Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジン２メタンスルホン酸塩を製造した。
【００４４】
〔実験例１〕：溶解度試験
実施例１で製造したＮ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジン２エタンスルホン酸塩、比較例１で製造したＮ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジン、および比較例２で製造したＮ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジン２メタンスルホン酸塩の 溶解度（μｇ／ｍＬ）を室温で多様な溶媒条件の下に測定した。
【００４５】
その結果は表１に示す。
【００４６】
【表１】
2010521524.tif 000004
【００４７】
表１に示すように、Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジンの２エタンスルホン酸塩は、２メタンスルホン酸塩より１．２５倍高い溶解度を示した。
【００４８】
〔実験例２〕：溶出率試験
実施例１で製造したＮ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジン２エタンスルホン酸塩、比較例１で製造したＮ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジン、および比較例２で製造したＮ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジン２メタンスルホン酸塩の溶出率（％）をｐＨ１．２の緩衝溶液で分当たりパドル回転数５０ｒｐｍのパドル装置を用いて測定した。
【００４９】
その結果は表２に示す。
【００５０】
【表２】
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【００５１】
表２に示すように、Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジンの２エタンスルホン酸塩は、２メタンスルホン酸塩に比べて、５分後には２．８倍、１０分後には１．４倍、１５分後には１．２倍高い溶出率を示した。
【００５２】
〔実験例３〕：安定性試験
実施例１で製造したＮ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジン２エタンスルホン酸塩を透明なガラス製の薬瓶に入れて蓋を開放した状態の試料を、加速試験条件（６０℃±２／７５％ＲＨ±５）の下で２週間保管した後、検出波長ＵＶ２５６ｎｍ、注入量１０μＬ、移動相速度１．５ｍＬ／ｍｉｎ、オクタデシルシリル化シリカゲル（Ｓｈｉｓｅｉｄｏ ＣＡＰＣＥＬＬ ＰＡＫ Ｃ１８、ＵＧ１２０、粒径５μｍ）カラムを使用する条件でＨＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ Ｍｏｄｕｋｅ１）面積百分率として定量した。
【００５３】
その結果は表３に示す。
【００５４】
【表３】
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【００５５】
表３に示すように、蒸留水において、Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジン２エタンスルホン酸塩は、６０℃での加速試験で含量変化が殆どなかったうえ、温度による化学的安定性にも優れた。
【００５６】
〔実験例４〕：薬動力学（生体利用率）試験
実施例１で製造したＮ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジン２エタンスルホン酸塩、および比較例２で製造したＮ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジン２メタンスルホン酸塩をＳＤラットにそれぞれ５０ｍｇ／ｋｇで投与し、所定の時間（０、０．５、１、１．５、２、３、５および８時間）にジエチルエーテルで軽く麻酔した後、眼窩静脈叢から血液を採取し、濃度分析時まで−２０℃の温度で冷凍保管した。血漿の試料処理は、血漿体積に相当する内部標準物質溶液（ベータメタゾンをアセトニトリルに溶かして３０μｇ／ｍＬの濃度で製造）を加え、１分間振とう器で混合した後、１２，０００ｒｐｍで１０分間遠心分離させ、血漿中の活性成分をＨＰＬＣ（モデル名：Ｗａｔｅｒｓ Ｍｏｄｕｌｅ１）で分析した。ここで得られたデータから、ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ（Ｖｅｒｓｉｏｎ１．０、Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｃｏｎｓｕｌｔｉｎｇ Ｉｎｃ．，ＵＳＡ）のナノコンパートメント分析(nanocompartment analysis)を用いて薬動学的パラメータ［血中最高濃度（Ｃｍａｘ）］、血中濃度時間曲線下面積（ＡＵＣ）］を算出した。
【００５７】
その結果は表４に示す。
【００５８】
【表４】
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【００５９】
表４に示すように、蒸留水において、Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジン２エタンスルホン酸塩は、２メタンスルホン酸塩に比べて、最高血中濃度において１．３倍高く、最高血中濃度到達時間においても１．４倍速く、血中濃度時間曲線下面積においても約１．２倍高い生体利用率を示した。
【産業上の利用可能性】
【００６０】
本発明のＮ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イソプロピル−２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）フェノキシ］ペントキシ｝ベンズアミジン２エタンスルホン酸塩は、２メタンスルホン酸塩に比べて、初期溶出率が高いうえ、溶解度、安定性および生体利用率に優れる。特に生体利用率において、薬物の血中最高濃度および血中濃度時間下面積が高く、最高血中濃度到達時間が短くて薬物が迅速に有効血中濃度に到達する速い薬効発現を期待することができ、全体生体内利用率の向上によって低濃度でも骨粗しょう症、骨折またはアレルギー性炎症反応などに有効であってこれら疾患の予防および治療に使用することができる。
【国際調査報告】
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