(57)【要約】  ＨＣＶ複製阻害剤として有用な式Ｉの三級アミン置換ペプチドを提供する。2010519339.tif 000045  式Ｉの変数ＲおよびＲ１−Ｒ１２がここに説明される。本発明は、そのような化合物の調製方法も含む。本発明は、さらにＣ型肝炎感染を治療する化合物の使用法も含めて三級アミン置換ペプチドを有する医薬的組成物およびそのような化合物を使用する方法も含む。【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式に示す化合物またはその医薬的に容認可能な塩。
【化１】
2010519339.tif 000031
（上記式において、Ｒはヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、
【化２】
2010519339.tif 000032
または
【化３】
2010519339.tif 000033
であり、
Ｒ１はＣ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル、フェニル、ヘテロシクロアルキルもしくは５員または６員のヘテロアリールであり、そのそれぞれが任意に置換され；
Ｒ２はＣ１−Ｃ６アルキルまたはＣ２−Ｃ６アルケニルであり、そのそれぞれが任意に置換され；または
Ｒ１およびＲ２が結合して、Ｏ、Ｎ、Ｓから独立して選択される０、１、または２の追加のヘテロ原子を含む、５員から７員のヘテロシクロアルキル環を形成し、その環は、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、オキソ、Ｃ１−Ｃ２ハロアルキル、およびＣ１−Ｃ２ハロアルコキシから独立して選択される０または１またはそれ以上の置換基で置換され；
Ｒ３およびＲ１１は独立してＣ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルカノイル、モノＣ１−Ｃ６アルキルアミノ、ジＣ１−Ｃ６アルキルアミノ、（Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル）Ｃ０−Ｃ４アルキル、（Ｃ３−Ｃ７シクロアルケニル）Ｃ０−Ｃ４アルキル、（フェニル）Ｃ０−Ｃ２アルキル、または（ヘテロシクロアルキル）Ｃ０−Ｃ４アルキルであり、そのそれぞれがハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＯＨ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ２−Ｃ４アルカノイル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４アルキルチオ、モノＣ１−Ｃ４アルキルアミノ、ジＣ１−Ｃ４アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ２ハロアルキルおよびＣ１−Ｃ２ハロアルコキシから独立して選択される０から３の置換基で置換され；
Ｒ４およびＲ１２は独立して水素、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニルまたはＣ１−Ｃ６アルコキシであり；あるいは
Ｒ３およびＲ４は結合して３員から７員のシクロアルキル環または５員から７員のヘテロシクロアルキル環を形成し、そのそれぞれがハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、ビニル、Ｃ１−Ｃ２アルキル、Ｃ１−Ｃ２アルコキシ、リフルオロメチルおよびトリフルオロメトキシから独立して選択される０から２の置換基で置換され、あるいは
Ｒ１１およびＲ１２は、結合して３員から７員のシクロアルキル環または５員から７員のヘテロシクロアルキル環を形成し、そのそれぞれがハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、ビニル、Ｃ１−Ｃ２アルキル、Ｃ１−Ｃ２アルコキシ、トリフルオロメチルおよびトリフルオロメトキシから独立して選択される０から２の置換基で置換され；あるいは
Ｒ３は、（ｉ）Ｒ１１がメチレン基であるＲ１１に共有結合しているか、（ｉｉ）結合して３員から７員のシクロアルキル環を形成するＲ１１およびＲ１２により形成されるシクロアルキル基に共有結合するＣ７−Ｃ１１飽和または非飽和の炭化水素鎖であり；
Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ１０は独立して水素、ハロゲン、シアノ、アミノ、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ２アルキル、Ｃ１−Ｃ２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ２ハロアルキルまたはＣ１−Ｃ２ハロアルコキシであり；
Ｒ８は、ｎが０、１または２である式−（ＣＨ２）ｎＹ−Ｚの基であり、かつ
Ｒ９は水素、ハロゲン、アミノ、Ｃ１−Ｃ２アルキルまたはＣ１−Ｃ２アルコキシであり；あるいは
Ｒ８およびＲ９はともに任意に置換される５員から７員のシクロアルキル環を形成し；
Ｒ１３はＣ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニルであり、そのそれぞれがハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、アミノ、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、モノＣ１−Ｃ４アルキルアミノ、ジＣ１−Ｃ４アルキルアミノから独立して選択される０または１、もしくはそれ以上の置換基で置換され、あるいは
Ｒ１３は、（Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル）Ｃ０−Ｃ２アルキル、（アリール）Ｃ０−Ｃ２アルキル、（５員から７員のヘテロシクロアルキル）Ｃ０−Ｃ２アルキルまたは（ヘテロアリール）Ｃ０−Ｃ２アルキルであり、そのそれぞれがハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、アミノ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、モノＣ１−Ｃ４アルキルアミノ、ジＣ１−Ｃ４アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ２ハロアルキルまたはＣ１−Ｃ２ハロアルコキシから独立して選択される０または１、もしくはそれ以上の置換基で置換され；
Ｙは、存在しないか、ＣＲ１４Ｒ１５、ＮＲ１６、Ｓ、−Ｏ−、−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）（ＮＲ１６）−、−ＯＣ１４Ｒ１５−、ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）（ＮＲ１６）−、−ＮＲ１６（Ｃ＝Ｏ）ＣＲ１４Ｒ１５−、ＮＨ（Ｓ＝Ｏ）（ＮＲ１６）−、あるいは−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）−であって、Ｒ１４およびＲ１５が独立して水素、ヒドロキシル、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ２アルキル、Ｃ１−Ｃ２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ２ハロアルキルまたはＣ１−Ｃ２ハロアルコキシであり；
Ｒ１６は水素、Ｃ１−Ｃ２アルキル、Ｃ１−Ｃ２ハロアルキルまたはＣ１−Ｃ２ハロアルコキシであり；
ＺはＣ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、（単環式または二環式のアリール）Ｃ０−Ｃ２アルキル、（単環式または二環式のヘテロアリール）Ｃ０−Ｃ２アルキル、（Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル）Ｃ０−Ｃ２アルキル、（５員または６員のヘテロシクロアルキル）Ｃ０−Ｃ２アルキル、部分的に不飽和の二環式ヘテロ環、三環式アリール、または三環式ヘテロアリールであり；
該Ｚのそれぞれがハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＯＨ、モノＣ１−Ｃ４アルキルスルホンアミド、ジＣ１−Ｃ４アルキルスルホンアミド、モノＣ１−Ｃ４アルキルカルボキサミド、ジＣ１−Ｃ４アルキルカルボキサミド、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ２−Ｃ４アルカノイル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４アルキルチオ、モノＣ１−Ｃ４アルキルアミノ、ジＣ１−Ｃ４アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ４アルキルエステル、Ｃ１−Ｃ２ハロアルキルおよびＣ１−Ｃ２ハロアルコキシ、および0または1（Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル）Ｃ０−Ｃ２アルキルから独立して選択される０または１、もしくはそれ以上の置換基で置換され、（アリール）Ｃ０−Ｃ２アルキル、（フェニル）Ｃ０−Ｃ２アルコキシ、（５員または６員のヘテロアリール）Ｃ０−Ｃ２アルキル、（５員または６員のヘテロアリール）Ｃ０−Ｃ２アルコキシ、インダニル、（５員または６員のヘテロシクロアルキル）Ｃ０−Ｃ２アルキルまたは９員または１０員の二環式ヘテロアリール、そのそれぞれが下記（ａ）および０または１の置換基（ｂ）から独立して選択される０、１、または２の置換基で置換され；
（ａ）はハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、ニトロ、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、＝ＮＯＨ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ２−Ｃ４アルカノイル、Ｃ１−Ｃ４ヒドロキシアルキル、モノＣ１−Ｃ４アルキルアミノ、ジＣ１−Ｃ４アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ４アルキルエステル、モノＣ１−Ｃ４アルキルスルホンアミド、ジＣ１−Ｃ４アルキルスルホンアミド、モノＣ１−Ｃ４アルキルカルボキサミド、ジＣ１−Ｃ４アルキルカルボキサミド、Ｃ１−Ｃ２ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ２ハロアルコキシから選択され、
（ｂ）はフェニルおよび５員または６員のヘテロアリールであり、そのそれぞれがハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、−ＣＨＯ、−ＣＯＯＨ、−ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）Ｈ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ２アルコキシ、モノ（Ｃ１−Ｃ４アルキル）アミノ、ジ（Ｃ１−Ｃ４アルキル）アミノ、モノ（Ｃ１−Ｃ４アルキル）カルボキサミド、ジ（Ｃ１−Ｃ４アルキル）カルボキサミド、Ｃ１−Ｃ４アルキルエステル、（Ｃ１−Ｃ４アルキルエステル）アミノ、Ｃ１−Ｃ２ハロアルキルおよびＣ１−Ｃ２ハロアルコキシから独立して選択される０または１、あるいはそれ以上の置換基で置換される。）
【請求項２】
Ｒ１はＣ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル、フェニル、ヘテロシクロアルキルあるいは５員または６員のヘテロアリールであり、そのそれぞれが任意に置換され、
Ｒ２はＣ１−Ｃ６アルキルまたはＣ２−Ｃ６アルケニルであり、そのそれぞれが任意に置換される、請求項１に記載の化合物または塩。
【請求項３】
Ｒ１およびＲ２はともに５員から７員のヘテロシクロアルキル環を形成し、その環がハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ１−Ｃ２ハロアルキルおよびＣ１−Ｃ２ハロアルコキシから独立して選択される０または１、あるいはそれ以上の置換基で置換される、請求項１に記載の化合物または塩。
【請求項４】
Ｒ１およびＲ２はともにピロリジニル、ピぺリジニルまたはピぺリジニル環を形成し、そのそれぞれがハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ２アルキル、Ｃ１−Ｃ２アルコキシ、トリフルオロメチルおよびトリフルオロメトキシから独立して選択される０または１、あるいは２個の置換基で置換される、請求項３に記載の化合物または塩。
【請求項５】
Ｒ３はＣ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルカノイル、モノＣ１−Ｃ６アルキルアミノ、ジＣ１−Ｃ６アルキルアミノ、（Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル）Ｃ０−Ｃ４アルキル、（Ｃ３−Ｃ７シクロアルケニル）Ｃ０−Ｃ４アルキル、（フェニル）Ｃ０−Ｃ２アルキル、または（ヘテロシクロアルキル）Ｃ０−Ｃ４アルキルであり、そのそれぞれがハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＯＨ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ２−Ｃ４アルカノイル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４アルキルチオ、モノＣ１−Ｃ４アルキルアミノ、ジＣ１−Ｃ４アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ２ハロアルキルおよびＣ１−Ｃ２ハロアルコキシから独立して選択される０から３個の置換基で置換され、
Ｒ４は水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニルまたはＣ１−Ｃ６アルコキシである、請求項１から４のいずれか１項に記載の化合物または塩。
【請求項６】
Ｒ３はＣ１−Ｃ６アルキル、（Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル）Ｃ０−Ｃ４アルキルまたは（フェニル）Ｃ０−Ｃ２アルキルであり、そのそれぞれがハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ２アルキル、Ｃ１−Ｃ２アルコキシ、モノＣ１−Ｃ２アルキルアミノ、ジＣ１−Ｃ２アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ２ハロアルキルおよびＣ１−Ｃ２ハロアルコキシから独立して選択される０から３個の置換基で置換され；
Ｒ４は水素、Ｃ１−Ｃ２アルキルまたはＣ１−Ｃ２アルコキシである、請求項５に記載の化合物または塩。
【請求項７】
Ｒ３はＣ１−Ｃ６アルキル、（Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル）Ｃ０−Ｃ４アルキルまたは（フェニル）Ｃ０−Ｃ２アルキルである、請求項６に記載の化合物または塩。
【請求項８】
Ｒ３はＣ１−Ｃ６アルキルである、請求項６に記載の化合物または塩。
【請求項９】
Ｒ４は水素である、請求項６から８のいずれか１項に記載の化合物または塩。
【請求項１０】
Ｒ３およびＲ４はともにシクロプロピル環を形成し、それはビニル、Ｃ１−Ｃ２アルキルおよびＣ１−Ｃ２アルコキシから独立して選択される０から２個の置換基で置換される、請求項１から４のいずれか１項に記載の化合物または塩。
【請求項１１】
Ｒ１１はＣ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルカノイル、モノＣ１−Ｃ６アルキルアミノ、ジＣ１−Ｃ６アルキルアミノ、（Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル）Ｃ０−Ｃ４アルキル、（Ｃ３−Ｃ７シクロアルケニル）Ｃ０−Ｃ４アルキル、（フェニル）Ｃ０−Ｃ２アルキルまたは（ヘテロシクロアルキル）Ｃ０−Ｃ４アルキルであり、そのそれぞれがハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＯＨ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ２−Ｃ４アルカノイル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４アルキルチオ、モノＣ１−Ｃ４アルキルアミノ、ジＣ１−Ｃ４アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ２ハロアルキルおよびＣ１−Ｃ２ハロアルコキシから独立して選択される０から３個の置換基で置換され、
Ｒ１２は水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニルまたはＣ１−Ｃ６アルコキシである、請求項１から１０のいずれか１項に記載の化合物または塩。
【請求項１２】
Ｒ１１はＣ１−Ｃ６アルキル、（Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル）Ｃ０−Ｃ４アルキルまたは（フェニル）Ｃ０−Ｃ２アルキルであり、そのそれぞれはハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ２アルキル、Ｃ１−Ｃ２アルコキシ、モノＣ１−Ｃ２アルキルアミノ、ジＣ１−Ｃ２アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ２ハロアルキルおよびＣ１−Ｃ２ハロアルコキシから独立して選択される０から３個の置換基で置換され；
Ｒ１２は水素、Ｃ１−Ｃ２アルキルまたはＣ１−Ｃ２アルコキシである、請求項１１に記載の化合物または塩。
【請求項１３】
Ｒ１１はＣ１−Ｃ６アルキル、（Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル）Ｃ０−Ｃ４アルキルまたは（フェニル）Ｃ０−Ｃ２アルキルである、請求項１１に記載の化合物または塩。
【請求項１４】
Ｒ１１がＣ１−Ｃ６アルキルである、請求項１１に記載の化合物または塩。
【請求項１５】
Ｒ４が水素である、請求項１２から１４のいずれか１項に記載の化合物または塩。
【請求項１６】
Ｒ３およびＲ４はともにシクロプロピル環を形成し、それがビニル、Ｃ１−Ｃ２アルキルおよびＣ１−Ｃ２アルコキシから独立して選択される０から２個の置換基で置換される、請求項１から１０のいずれか１項に記載の化合物または塩。
【請求項１７】
次式を有する、請求項１から４のいずれか１項に記載の化合物または塩。
【化４】
2010519339.tif 000034
（ここで、Ｄは６から１０の炭素原子を有するアルキルまたはアルケニル基である。）
【請求項１８】
次式を有する、請求項１７に記載の化合物または塩。
【化５】
2010519339.tif 000035
【請求項１９】
次式を有する、請求項１から４のいずれか１項に記載の化合物または塩。
【化６】
2010519339.tif 000036
（ここで、Ｄは６から１０の炭素原子を有するアルキルまたはアルケニル基である。）
【請求項２０】
次式を有する、請求項１９に記載の化合物または塩。
【化７】
2010519339.tif 000037
【請求項２１】
Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、およびＲ１０がすべて水素である、請求項１から２０のいずれか１項に記載の化合物または塩。
【請求項２２】
Ｒ８は、ｎが０、１または２である、式−（ＣＨ２）ｎＹ−Ｚに示す基であり、
Ｒ９は水素、ハロゲン、アミノ、Ｃ１−Ｃ２アルキルまたはＣ１−Ｃ２アルコキシである、請求項１から２１のいずれか１項に記載の化合物または塩。
【請求項２３】
ｎが０であり、Ｙが−Ｏ−、−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）（ＮＲ１６）−、−ＮＲ１６（Ｃ＝Ｏ）−または−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）−である、請求項２２に記載の化合物または塩。
【請求項２４】
ｎが０および−Ｏ−または−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）−である、請求項２２に記載の化合物または塩。
【請求項２５】
Ｚが、次式に示す基である、請求項１から２４のいずれか１項に記載の化合物または塩。
【化８】
2010519339.tif 000038
（上記式において、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、およびＸ４は独立してＮまたはＣＨであって、Ｘ１からＸ４のうち２つ以下がＮであり；
Ｒ２１は、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＯＨ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ２−Ｃ４アルカノイル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４アルキルチオ、モノＣ１−Ｃ４アルキルアミノ、ジＣ１−Ｃ４アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ２ハロアルキルおよびＣ１−Ｃ２ハロアルコキシから独立して選択される０から３の基を示す。
Ｒ２２は水素、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＯＨ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ２−Ｃ４アルカノイル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４アルキルチオ、モノＣ１−Ｃ４アルキルアミノ、ジＣ１−Ｃ４アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ４アルキルエステル、Ｃ１−Ｃ２ハロアルキルおよびＣ１−Ｃ２ハロアルコキシであり、あるいは
Ｒ２２は（Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル）Ｃ０−Ｃ２アルキル、（フェニル）Ｃ０−Ｃ２アルキル、（フェニル）Ｃ０−Ｃ２アルコキシ、（５員または６員のヘテロアリール）Ｃ０−Ｃ２アルキル、（５員または６員のヘテロアリール）Ｃ０−Ｃ２アルコキシ、インダニル、（５員または６員のヘテロシクロアルキル）Ｃ０−Ｃ２アルキルあるいは９員または１０員の二環式ヘテロアリールであり、そのそれぞれが以下に示す（ａ）および０または１の置換基（ｂ）から独立して選択される０または１、あるいは２個の置換基で置換される。ここで（ａ）はハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、ニトロ、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、ＣＨ３（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ−、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４ヒドロキシアルキル、モノＣ１−Ｃ４アルキルアミノ、ジＣ１−Ｃ４アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ４アルキルエステル、モノＣ１−Ｃ４アルキルスルホンアミド、ジＣ１−Ｃ４アルキルスルホンアミド、モノＣ１−Ｃ４アルキルカルボキサミド、ジＣ１−Ｃ４アルキルカルボキサミド、Ｃ１−Ｃ２ハロアルキルおよびＣ１−Ｃ２ハロアルコキシから選択され、（ｂ）はフェニルあるいは５員または６員のヘテロアリールであり、そのそれぞれがハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ４アルキルおよびＣ１−Ｃ２アルコキシのうち０または１、あるいはそれ以上の置換基で置換される。）
【請求項２６】
Ｒ２２が、（フェニル）Ｃ０−Ｃ２アルキル、（フェニル）Ｃ０−Ｃ２アルコキシまたは（５員または６員のヘテロアリール）Ｃ０−Ｃ２アルキルであり、そのそれぞれが（ｃ）ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、Ｃ１−Ｃ２アルキル、Ｃ１−Ｃ２アルコキシ、モノＣ１−Ｃ２アルキルアミノ、ジＣ１−Ｃ２アルキルアミノ、トリフルオロメチルおよびトリフルオロメトキシから独立して選択される０、１または２個の置換基で置換される、請求項２５に記載の化合物または塩。
【請求項２７】
Ｒ２２が、以下のいずれかを有する、請求項２５に記載の化合物または塩。
【化９】
2010519339.tif 000039
【請求項２８】
Ｚが、Ｃ１−Ｃ６アルキルまたはＣ２−Ｃ６アルケニルであり、Ｚのそれぞれがハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＯＨ、モノＣ１−Ｃ４アルキルスルホンアミド、ジＣ１−Ｃ４アルキルスルホンアミド、モノＣ１−Ｃ４アルキルカルボキサミド、ジＣ１−Ｃ４アルキルカルボキサミド、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ２−Ｃ４アルカノイル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４アルキルチオ、モノＣ１−Ｃ４アルキルアミノ、ジＣ１−Ｃ４アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ４アルキルエステル、Ｃ１−Ｃ２ハロアルキルおよびＣ１−Ｃ２ハロアルコキシから独立して選択される０または１、あるいはそれ以上の置換基で置換される、請求項２２から２４のいずれか１項に記載の化合物または塩。
【請求項２９】
Ｚが、（フェニル）Ｃ０−Ｃ２アルキル、（ナフチル）Ｃ０−Ｃ２アルキル、（単環式または二環式のヘテロアリール）Ｃ０−Ｃ２アルキルまたはテトラヒドロキノリニルであり、
Ｚのそれぞれがハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＯＨ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ２−Ｃ４アルカノイル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４アルキルチオ、モノＣ１−Ｃ４アルキルアミノ、ジＣ１−Ｃ４アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ２ハロアルキルおよびＣ１−Ｃ２ハロアルコキシから独立して選択される０または１、あるいはそれ以上の置換基で置換され、さらに０または１のＣ３−Ｃ７シクロアルキル、アリール、５員または６員のヘテロアリール、インダニル、５員または６員のヘテロシクロアルキル、あるいは９員または１０員の二環式ヘテロアリールであり、そのそれぞれは以下に示す（ａ）および０または１個の置換基（ｂ）から独立して選択される０または１、あるいは２個の置換基で置換される。
ここで（ａ）はハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、ニトロ、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、＝ＮＯＨ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ２−Ｃ４アルカノイル、Ｃ１−Ｃ４ヒドロキシアルキル、モノＣ１−Ｃ４アルキルアミノ、ジＣ１−Ｃ４アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ４アルキルエステル、モノＣ１−Ｃ４アルキルスルホンアミド、ジＣ１−Ｃ４アルキルスルホンアミド、モノＣ１−Ｃ４アルキルカルボキサミド、ジＣ１−Ｃ４アルキルカルボキサミド、Ｃ１−Ｃ２ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ２ハロアルコキシから選択され、
（ｂ）はフェニルおよび５員または６員のヘテロアリールで、そのそれぞれがハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、−ＣＨＯ、−ＣＯＯＨ、−ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）Ｈ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ２アルコキシ、モノ（Ｃ１−Ｃ４アルキル）アミノ、ジ（Ｃ１−Ｃ４アルキル）アミノ、モノ（Ｃ１−Ｃ４アルキル）カルボキサミド、ジ（Ｃ１−Ｃ４アルキル）カルボキサミド、Ｃ１−Ｃ４アルキルエステル、（Ｃ１−Ｃ４アルキルエステル）アミノ、Ｃ１−Ｃ２ハロアルキルおよびＣ１−Ｃ２ハロアルコキシから独立して選択される０または１、あるいはそれ以上の置換基で置換される、     請求項２２から２４のいずれか１項に記載の化合物または塩。
【請求項３０】
（ｂ）はフェニル、ピリジル、チアゾリル、ピロリルまたはイミダゾリルであり、そのそれぞれがハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、−ＣＨＯ、−ＣＯＯＨ、−ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）Ｈ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ２アルコキシ、モノ（Ｃ１−Ｃ４アルキル）アミノ、ジ（Ｃ１−Ｃ４アルキル）アミノ、モノ（Ｃ１−Ｃ４アルキル）カルボキサミド、ジ（Ｃ１−Ｃ４アルキル）カルボキサミド、Ｃ１−Ｃ４アルキルエステル、（Ｃ１−Ｃ４アルキルエステル）アミノ、Ｃ１−Ｃ２ハロアルキルおよびＣ１−Ｃ２ハロアルコキシから独立して選択される０または１あるいはそれ以上の置換基で置換される、請求項２９に記載の化合物または塩。
【請求項３１】
Ｒ８およびＲ９はともに任意に置換される５員から７員のシクロアルキル環を形成する、請求項１から２１のいずれか１項に記載の化合物または塩。
【請求項３２】
Ｒ８およびＲ９がともにシクロペンチル環を形成する、請求項３１に記載の化合物または塩。
【請求項３３】
次式を有する、請求項３１に記載の化合物または塩。
【化１０】
2010519339.tif 000040
【請求項３４】
Ｒ３は、Ｃ１−Ｃ６アルキル、（Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル）Ｃ０−Ｃ４アルキルまたは（フェニル）Ｃ０−Ｃ２アルキルであり、そのそれぞれがハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ２アルキル、Ｃ１−Ｃ２アルコキシ、モノＣ１−Ｃ２アルキルアミノ、ジＣ１−Ｃ２アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ２ハロアルキルおよびＣ１−Ｃ２ハロアルコキシから独立して選択される０から３個の置換基で置換され；
Ｒ４は水素、Ｃ１−Ｃ２アルキルまたはＣ１−Ｃ２アルコキシであり；あるいは
Ｒ３およびＲ４はともにシクロプロピル環を形成し、それがビニル、Ｃ１−Ｃ２アルキルおよびＣ１−Ｃ２アルコキシから独立して選択される０から２個の置換基で置換され；
Ｒ１１はＣ１−Ｃ６アルキル、（Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル）Ｃ０−Ｃ４アルキルまたは（フェニル）Ｃ０−Ｃ２アルキルであり、そのそれぞれがハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ２アルキル、Ｃ１−Ｃ２アルコキシ、モノＣ１−Ｃ２アルキルアミノ、ジＣ１−Ｃ２アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ２ハロアルキルおよびＣ１−Ｃ２ハロアルコキシから独立して選択される０から３個の置換基で置換され；
Ｒ１２は水素、Ｃ１−Ｃ２アルキルまたはＣ１−Ｃ２アルコキシであり；あるいは
Ｒ１１およびＲ１２がともにシクロプロピル環を形成し、それがビニル、Ｃ１−Ｃ２アルキルおよびＣ１−Ｃ２アルコキシから独立して選択される０から２個の置換基で置換され；
Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ１０はそれぞれ独立して水素、メチルまたはメトキシである、請求項３３に記載の化合物または塩。
【請求項３５】
次式を有する、請求項３３または３４に記載の化合物または塩。
【化１１】
2010519339.tif 000041
【請求項３６】
次式を有する、請求項３３に記載の化合物または塩。
【化１２】
2010519339.tif 000042
（ここで、Ｄは６から１０の炭素原子を有するアルキルまたはアルケニル基であり；
Ｒ４およびＲ１２は独立して水素またはメチルであり；
Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、およびＲ１０は独立して水素またはメチルである。）
【請求項３７】
次式を有する、請求項３３に記載の化合物または塩。
【化１３】
2010519339.tif 000043
（ここで、Ｄは６から１０の炭素原子を有するアルキルまたはアルケニル基であり；
Ｒ４およびＲ１２は独立して水素またはメチルであり；
Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、およびＲ１０は独立して水素またはメチルである。）
【請求項３８】
請求項１から３７のいずれか１項に記載の化合物または塩であって、
Ｒは、次式を有する、化合物または塩。
【化１４】
2010519339.tif 000044
【請求項３９】
Ｒ１３はＣ１−Ｃ６アルキルまたはＣ２−Ｃ６アルケニルであり、そのそれぞれがハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、アミノ、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、モノＣ１−Ｃ４アルキルアミノまたはジＣ１−Ｃ４アルキルアミノから独立して選択される０または１、あるいはそれ以上の置換基で置換される、請求項３８に記載の化合物または塩。
【請求項４０】
Ｒ１３は（Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル）Ｃ０−Ｃ２アルキル、（アリール）Ｃ０−Ｃ２アルキル、（５員から７員のヘテロシクロアルキル）Ｃ０−Ｃ２アルキルまたは（ヘテロアリール）Ｃ０−Ｃ２アルキルであり、そのそれぞれがハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、アミノ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、モノＣ１−Ｃ４アルキルアミノ、ジＣ１−Ｃ４アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ２ハロアルキルまたはＣ１−Ｃ２ハロアルコキシから独立して選択される０または１、あるいはそれ以上の置換基で置換される、請求項３８に記載の化合物または塩。
【請求項４１】
Ｒ１３が、Ｃ３−Ｃ７シクロルアルキルであり、そのそれぞれがハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、アミノ、Ｃ１−Ｃ２アルキル、Ｃ１−Ｃ２アルコキシ、モノＣ１−Ｃ２アルキルアミノ、ジＣ１−Ｃ２アルキルアミノから独立して選択される０または１、あるいはそれ以上の置換基で置換される、請求項３８に記載の化合物または塩。
【請求項４２】
Ｒ１３がシクロプロピルである、請求項４１に記載の化合物または塩。
【請求項４３】
少なくとも１つの医薬的に容認可能なキャリアを含み、請求項１から４２のいずれか１項に記載の化合物または塩を有する医薬的組成物。
【請求項４３】
請求項１に記載の化合物または塩ではない少なくとも１つの追加の活性製剤を含む、請求項４３に記載の医薬的組成物。
【請求項４４】
少なくとも１つの追加の活性製剤が、リババリン、インターフェロン、ＶＸ−９５０またはバロピシタビンである、請求項３０に記載の医薬的組成物。
【請求項４５】
注射用液、エアロゾル、クリーム状、ゲル状、錠剤、丸薬、カプセル、シロップ状、点眼液、または経皮貼付として製剤された組成を有する請求項４３または４４に記載の医薬的組成物。
【請求項４６】
請求項４３から４５のいずれか１項に記載の医薬的組成物を構成し、さらにその組成を使ってＣ型肝炎の感染に苦しむ患者を治療する指示から構成される容器中のパッケージ。
【請求項４７】
請求項１に記載の化合物または塩の有効量を、そのような治療を必要とする患者に提供することを含む、Ｃ型肝炎の治療法。
【請求項４８】
有効量が、患者の血液または血清中のＨＣＶ抗体の数を低減させるのに十分な量である、請求項４７に記載の方法。
【請求項４９】
ＨＣＶレプリコン複製を体外で阻害するのに十分な濃縮された請求項１に記載の化合物または塩をＨＣＶに感染した患者に提供することを含む、生体内でＨＣＶ複製を阻害する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＨＣＶ複製の阻害剤（インヒビター）として有用な三級アミン置換ペプチドを提供する。本発明にはさらに、そのような化合物を調製するための方法も含まれる。本発明にはさらに、三級アミン置換ペプチドを含む医薬的組成物、Ｃ型肝炎感染を治療するためのそのような化合物を使用するための方法も含めて、そのような化合物を使用するための方法も含まれる。
【背景技術】
【０００２】
推定では、世界の総人口の３％が、Ｃ型肝炎ウィルスに感染している。ＨＣＶ感染者の内で、８０％が慢性肝炎となり、少なくとも３０％が肝硬変を発症し、１〜４％が肝細胞ガンを発症する。Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）は、米国においては、慢性肝疾患を引き起こす主要な原因の一つであり、急性ウィルス性肝炎の約１５パーセント、慢性肝炎の６０〜７０パーセント、ならびに肝硬変、末期肝疾患、および肝ガンの最大５０パーセントまでの原因であると報告されている。慢性ＨＣＶ感染は、米国、オーストラリア、およびヨーロッパの大半における肝臓移植の最も一般的な理由である。Ｃ型肝炎が原因の死者は、米国では年間１０，０００〜１２，０００人に達すると推定される。ＨＣＶ感染の急性期には軽度の症状を通常伴うものの、ＨＣＶを消失させることができるのは、感染者の約１５％〜２０％に過ぎないであろうという示唆もいくつかある。
【０００３】
ＨＣＶは、約９．６ｋｂのポジティブストランドゲノムを含むエンベロープ型の単鎖ＲＮＡである。ＨＣＶは、フラビウイルス科ヘパシウイルス属として分類されている。ＧＴ−１〜ＧＴ−４の少なくとも４系のＨＣＶが同定されている。
【０００４】
ＨＣＶのライフサイクルには、宿主細胞中への侵入；ＨＣＶゲノムの翻訳、ポリタンパク質のプロセシング、およびレプリカーゼ複合体の構築；ＲＮＡの複製、ならびにビリオンの構築および放出、が含まれる。ＨＣＶのＲＮＡのゲノムの翻訳により、３０００を超えるアミノ酸の長さのポリタンパク質が産生され、それが少なくとも２種の細胞プロテアーゼおよび２種のウイルスプロテアーゼによって処理される。ＨＣＶポリタンパク質は下記のとおりである：
ＮＨ２−Ｃ−Ｅ１−Ｅ２−ｐ７−ＮＳ２−ＮＳ３−ＮＳ４Ａ−ＮＳ４Ｂ−ＮＳ５Ａ−ＮＳ５Ｂ−ＣＯＯＨ。
【０００５】
細胞シグナルペプチダーゼおよびシグナルペプチドペプチダーゼは、非構造タンパク質（ＮＳ２−ＮＳ３−ＮＳ４Ａ−ＮＳ４Ｂ−ＮＳ５Ａ−ＮＳ５Ｂ）からポリタンパク質（Ｃ−Ｅ１−Ｅ２−ｐ７）のＮ末端の１／３を切断することに関与するとの報告がある。ＮＳ２−ＮＳ３プロテアーゼは、ＮＳ２−ＮＳ３部位の最初のシス切断を媒介する。次いでＮＳ３−ＮＳ４Ａプロテアーゼが、ＮＳ３−ＮＳ４Ａ結合部で第二のシス切断を媒介する。次いでＮＳ３−ＮＳ４Ａ複合体が、以下の３つの部位で切断を行って、非構造タンパク質の残りの部分を分離させる。ポリタンパク質を正確にプロセシングすることが、活性なＨＣＶレプリカーゼ複合体を形成させるためには必須であると断言されている。
【０００６】
ポリタンパク質が切断されると、少なくともＮＳ３−ＮＳ５Ｂ非構造タンパク質を含むレプリカーゼ複合体が集合する。そのレプリカーゼ複合体は、細胞質で、かつ膜結合性である。レプリカーゼ複合体における主たる酵素活性としては、ＮＳ３におけるセリンプロテアーゼ活性およびＮＴＰアーゼヘリカーゼ活性、ならびにＮＳ５ＢにおけるＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼ活性が挙げられる。ＲＮＡ複製プロセスにおいては、ゲノムＲＮＡの相補的マイナス鎖コピーが産生される。そのマイナス鎖コピーがテンプレートとして使用されて、さらなるプラス鎖ゲノムＲＮＡが合成され、それが、翻訳、複製、パッケージング、またはそれらの各種の組合せに関与して子孫ウィルスが産生される。機能性レプリカーゼ複合体の集合は、ＨＣＶ複製機構のコンポーネントとして説明されてきた。２００５年４月１１日に提出された仮出願第６０／６６９，８７２号「ＨＣＶ複製阻害の医薬的組成物およびその方法」は、レプリカーゼ複合体の集合体に関するその開示について、参照によりその全体を本明細書に含めるものとする。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】国際公開第０３／０９９２７４号パンフレット
【特許文献２】国際公開第００／５９９２９号パンフレット
【特許文献３】国際公開第０３／０９９３１６号パンフレット
【特許文献４】米国特許出願公開第２００６／２８１６８８号明細書
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
現時点でのＣ型肝炎感染の治療法としては、典型的には、ＰＥＧ化インターフェロン（ＩＦＮ）などのインターフェロンとリバビリンの併用投与が含まれる。持続的ウィルス学的著効（ＳＶＲ）によって測定すると、現行の治療法における成否は、その患者が感染されたＨＣＶの系統と、治療計画に対する患者の遵守度とに依存する。ＨＣＶの菌株ＧＴ−１に感染した患者ののうち持続性ウィルス学的著効を示したのは、５０％に過ぎなかった。ＶＸ−９５０およびＮＭ２８３（ＮＭ１０７のプロドラッグ）のような直接作用性抗ウィルス薬が、慢性のＨＣＶの治療薬として臨床開発段階にある。ある種のＨＣＶ菌株を治療するための有効な治療法が存在しないのと、ＨＣＶの突然変異率が高いために、新規な治療法が必要とされている。本発明はそのニーズを満たし、さらなる利点を与えるものであるが、それについては本明細書の中で説明する。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
Ｃ型肝炎感染を治療および防止するのに有用な化合物、医薬的組成物、およびそのような化合物を使用するための方法が、本明細書において提供される。
【００１０】
一つの態様において、本発明は、式Ｉの化合物および医薬的に許容されるその塩を含む。
【００１１】
【化１】
2010519339.tif 000002
【００１２】
式Ｉ中、変数ＲおよびＲ１〜Ｒ１２は、以下に述べる定義を有している。
【００１３】
Ｒは、ヒドロキシル、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシ、
【化２】
2010519339.tif 000003
、または
【化３】
2010519339.tif 000004
であり、Ｒ１３については以下に定義するものである。
【００１４】
Ｒ１は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、フェニル、ヘテロシクロアルキル、または５員環もしくは６員環のヘテロアリールであるが、それらのそれぞれは、場合によっては置換されている。
【００１５】
Ｒ２は、Ｃ１〜Ｃ６アルキルまたはＣ２〜Ｃ６アルケニルであるが、それらのそれぞれは、場合によっては置換されている。
【００１６】
あるいは、Ｒ１とＲ２とが結合して、独立してＯ、Ｎ、またはＳから選択される０個、１個または２個のさらなるヘテロ原子を含む５員環〜７員環のヘテロシクロアルキル環を形成するが、その環は、独立してハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシ、オキソ、Ｃ１〜Ｃ２ハロアルキル、およびＣ１〜Ｃ２ハロアルコキシから選択される０個または１個以上の置換基を用いて置換されている。
【００１７】
Ｒ３およびＲ１１は、独立してＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルカノイル、またはモノ−もしくはジ−Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、（Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル）Ｃ０〜Ｃ４アルキル、（Ｃ３〜Ｃ７シクロアルケニル）Ｃ０〜Ｃ４アルキル、（フェニル）Ｃ０〜Ｃ２アルキル、または（ヘテロシクロアルキル）Ｃ０〜Ｃ４アルキルであり、それらのそれぞれは独立して、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＯＨ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ２〜Ｃ４アルカノイル、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ４アルキルチオ、モノ−およびジ−Ｃ１〜Ｃ４アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ２ハロアルキル、およびＣ１〜Ｃ２ハロアルコキシから選択される０〜３個の置換基を用いて置換される。
【００１８】
Ｒ４およびＲ１２は、独立して、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、またはＣ１〜Ｃ６アルコキシである。
【００１９】
あるいは、Ｒ３とＲ４とが合体して、３員環〜７員環のシクロアルキル環または５員環〜７員環のヘテロシクロアルキル環を形成し、それらのそれぞれが、独立してハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、ビニル、Ｃ１〜Ｃ２アルキル、Ｃ１〜Ｃ２アルコキシ、トリフルオロメチル、およびトリフルオロメトキシから選択される０〜２個の置換基を用いて置換される。
【００２０】
あるいは、Ｒ１１とＲ１２とが結合して、３員環〜７員環のシクロアルキル環または５員環〜７員環のヘテロシクロアルキル環を形成し、それらのそれぞれが、独立してハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、ビニル、Ｃ１〜Ｃ２アルキル、Ｃ１〜Ｃ２アルコキシ、トリフルオロメチル、およびトリフルオロメトキシから選択される０〜２個の置換基を用いて置換される。
【００２１】
あるいは、Ｒ３は、（ｉ）Ｒ１１（ここで、Ｒ１１はメチレン基である）に共有結合的に結合されるか、または（ｉｉ）Ｒ１１とＲ１２とが結合して３員環〜７員環のシクロアルキル環により形成されたシクロアルキル基に共有結合的に結合されたＣ７〜Ｃ１１飽和または不飽和炭化水素鎖である。
【００２２】
Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、およびＲ１０は、独立して、水素、ハロゲン、シアノ、アミノ、ヒドロキシル、Ｃ１〜Ｃ２アルキル、Ｃ１〜Ｃ２アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ２ハロアルキル、またはＣ１〜Ｃ２ハロアルコキシである。
【００２３】
Ｒ８は、式−（ＣＨ２）ｎＹ−Ｚ（ここで、ｎは、０、１、または２である）であり、そしてＲ９は、水素、ハロゲン、アミノ、Ｃ１〜Ｃ２アルキル、またはＣ１〜Ｃ２アルコキシであるが、Ｒ８とＲ９とが結合して、場合によっては置換された５員環〜７員環のシクロアルキル環を形成する。
【００２４】
Ｒ１３は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニルであるが、それらのそれぞれは独立して、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシ、モノもしくはジ−Ｃ１〜Ｃ４アルキルアミノから選択される０個または１個以上の置換基によって置換される。
【００２５】
あるいは、Ｒ１３は、（Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル）Ｃ０〜Ｃ２アルキル、（アリール）Ｃ０〜Ｃ２アルキル、（５員環〜７員環ヘテロシクロアルキル）Ｃ０〜Ｃ２アルキル、または（ヘテロアリール）Ｃ０〜Ｃ２アルキルであるが、それらのそれぞれは独立して、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシ、モノもしくはジ−Ｃ１〜Ｃ４アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ２ハロアルキル、またはＣ１〜Ｃ２ハロアルコキシから選択される０個または１個以上の置換基を用いて置換される。
【００２６】
Ｙは存在しないかまたは、ＣＲ１４Ｒ１５、ＮＲ１６、Ｓ、−Ｏ−、−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）（ＮＲ１６）−、−ＯＣ１４Ｒ１５−、ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）（ＮＲ１６）−、−ＮＲ１６（Ｃ＝Ｏ）ＣＲ１４Ｒ１５−、ＮＨ（Ｓ＝Ｏ）（ＮＲ１６）−、もしくは−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）−である。
【００２７】
ここで、Ｒ１４およびＲ１５は独立して、水素、ヒドロキシル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ２アルキル、Ｃ１〜Ｃ２アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ２ハロアルキル、またはＣ１〜Ｃ２ハロアルコキシであり、Ｒ１６は、水素、Ｃ１〜Ｃ２アルキル、Ｃ１〜Ｃ２ハロアルキル、またはＣ１〜Ｃ２ハロアルコキシである。
【００２８】
Ｚは、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、（単環式または二環式アリール）Ｃ０〜Ｃ２アルキル、（単環式または二環式ヘテロアリール）Ｃ０〜Ｃ２アルキル、（Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル）Ｃ０〜Ｃ２アルキル、（５員または６員のヘテロシクロアルキル）Ｃ０〜Ｃ２アルキル、部分的に不飽和の二環式複素環、三環式アリール、もしくは三環式ヘテロアリールであり、それらＺのそれぞれは、独立して、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＯＨ、モノ−およびジ−Ｃ１〜Ｃ４アルキルスルホンアミド、モノ−およびジ−Ｃ１〜Ｃ４アルキルカルボキサミド、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ２〜Ｃ４アルカノイル、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ４アルキルチオ、モノ−およびジ−Ｃ１〜Ｃ４アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ４アルキルエステル、Ｃ１〜Ｃ２ハロアルキル、およびＣ１〜Ｃ２ハロアルコキシ、ならびに０個もしくは１個の（Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル）Ｃ０〜Ｃ２アルキル、（アリール）Ｃ０〜Ｃ２アルキル、（フェニル）Ｃ０〜Ｃ２アルコキシ、（５員または６員のヘテロアリール）Ｃ０〜Ｃ２アルキル、（５員または６員のヘテロアリール）Ｃ０〜Ｃ２アルコキシ、インダニル、（５員または６員のヘテロシクロアルキル）Ｃ０〜Ｃ２アルキル、または９員または１０員の二環式ヘテロアリール（それらのそれぞれは、独立して（ａ）および０個または１個の置換基（ｂ）から選択される０個、１個、または２個の置換基を用いて置換される）から選択される０個または１個以上の置換基を用いて置換される。
【００２９】
ここで、（ａ）は、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、ニトロ、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、＝ＮＯＨ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシ、Ｃ２〜Ｃ４アルカノイル、Ｃ１〜Ｃ４ヒドロキシアルキル、モノ−およびジ−Ｃ１〜Ｃ４アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ４アルキルエステル、モノ−およびジ−Ｃ１〜Ｃ４アルキルスルホンアミド、モノ−およびジ−Ｃ１〜Ｃ４アルキルカルボキサミド、Ｃ１〜Ｃ２ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ２ハロアルコキシ、から選択され、（ｂ）は、フェニルおよび５員または６員のヘテロアリールであるが、それらのそれぞれは、独立して、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、−ＣＨＯ、−ＣＯＯＨ、−ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）Ｈ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ２アルコキシ、モノ−およびジ−（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）アミノ、モノ−およびジ−（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）カルボキサミド、Ｃ１〜Ｃ４アルキルエステル、（Ｃ１〜Ｃ４アルキルエステル）アミノ、Ｃ１〜Ｃ２ハロアルキル、およびＣ１〜Ｃ２ハロアルコキシから選択される０個または１個以上の置換基を用いて置換されている。
【００３０】
本発明には、本発明の化合物またはその塩を含む医薬的組成物が含まれ、それには少なくとも１種の医薬的に許容されるキャリアが含まれる。本発明にはさらに、本発明の化合物を含み、そして少なくとも１種のさらなる活性薬剤を含む医薬的組成物もまた含まれる。本発明には、容器に収めた本発明の化合物と、Ｃ型肝炎ウィルスに感染したか、あるいはＣ型肝炎ウィルスに感染しやすい患者を処置する目的でその組成物を使用するための使用説明書とを含む、梱包された医薬的組成物も含まれる。
【００３１】
また別の態様においては、本発明は、Ｃ型肝炎感染を治療または予防する目的で、そのような治療または予防を必要とする患者に、有効量の本発明の化合物または塩を投与することを含む、方法を提供する。
【００３２】
ＨＣＶに感染した患者に、試験管内（イン・ビトロ）でＨＣＶレプリコン複製を抑制するのに十分な濃度の本発明の化合物または塩を投与することを含む、生体内（イン・ビボ）でのＨＣＶ複製を抑制する方法もまた、本発明に包含される。
【００３３】
以下に記載の説明、実施例、および特許請求項を参照すれば、本発明のこれらおよびその他の態様がより明らかに理解されるであろう。
【発明を実施するための形態】
【００３４】
専門用語
本発明について詳細な説明をする前に、本明細書に使用されるいくつかの用語について定義しておくのが役立つであろう。本発明の化合物については、標準的な命名法を用いて記載している。特に断らない限り、本明細書において使用される技術用語および科学用語は、本発明が属する当業者によって一般的に理解されているのと同じ意味合いを有している。
【００３５】
式Ｉには、すべてのその下位の化学式が含まれる。例えば、式Ｉには、式Ｉ〜ＩＸの化合物、その薬学的に許容される塩、プロドラッグ、水和物、それらの多形体などが含まれる。
【００３６】
不定冠詞の「ａ」および「ａｎ」という用語は、量的な限定を意味するものではなく、むしろ、言及された項目の少なくとも一つが存在することを意味する。「または（or）」という用語は、「および／または」を意味する。「含む（comprising）」、「有する（having）」、「含む（including）」、および「含有する（containing）」という用語は、制約のない（オープンエンドの）用語とみなすべきである（すなわち「含むが、それらに非限定される訳ではない」）。数値の範囲の引用は、特に断らない限り本明細書においては、その範囲の内に入る個々の別々な数値を個別に参照するための単なる手短な方法として役立つことを目的としており、それぞれ個別の数値が、本明細書においてあたかも独立して引用されたがごとくに、本明細書に組み入れられている。すべての範囲における終端値は、その範囲の中に含まれ、独立して組み合わせることができる。本明細書に記載された方法はすべて、本明細書内で指示されたり、文脈的に明らかに矛盾があったりした場合を除いて、適切な順序で実施することが可能である。それぞれおよびすべての実施例、または例示のための文言（例えば、「のような（such as）」）の使用は、単に本発明をよりよく説明することのみを意図しているのであって、特に断らない限り、本発明の範囲を限定するものではない。本明細書におけるいずれの文言も、本明細書で使用するとき、本発明の実施に不可欠ないかなる非特許請求要素を示しているものと受け取ってはならない。特に断らない限り、本明細書において使用される技術用語および科学用語は、本発明が属する当業者によって一般的に理解される意味と同義である。
【００３７】
「活性製剤」という用語は、化合物（式Ｉの化合物を含む）、元素、または、患者に投与したときに、単独、または他の化合物、元素もしくは混合物との組合せで、その患者に対して直接的もしくは間接的に生理的な効果を与えるような混合物、を意味している。その間接的な生理的効果は、代謝産物または他の間接的な機構を介して起きてもよい。活性製剤が化合物であるならば、その遊離化合物の塩、溶媒和化合物（水和物を含む）、その化合物の結晶形状、非結晶形状および各種の多形体も含まれる。化合物には、１種または複数の不斉元素（例えばステレオジェン中心、ステレオジェン軸など）、例えば不斉炭素原子を含んでいて、その化合物が異なった立体異性体の形態とることが可能となっていてもよい。それらの化合物は、例えば、ラセミ化合物または光学活性な形態となっていてもよい。２個以上の不斉元素を有する化合物の場合には、それらの化合物がさらに、ジアステレオマー混合物であってもよい。不斉中心を有する化合物の場合には、純粋な形態および混合物の形態にあるすべての光学異性体が包含される。さらに、炭素−炭素二重結合を有する化合物は、その化合物の全ての異性体の形態で、Ｚ−およびＥ−体の形態で起こりうる。それらの場合、単一の鏡像異性体、すなわち光学活性体は、光学活性な前駆体からの合成や、ラセミ化合物の分離などを用いた、不斉合成によって得ることができる。ラセミ化合物は、例えば、分離剤の存在下における結晶化や、キラルＨＰＬＣカラムを使用したクロマトグラフィーなどのような、従来からの方法によっても分離させることが可能である。本明細書においては、それらを得るために使用された方法には関係なく、すべての形態が考慮の対象となる。
【００３８】
活性製剤のすべての形態（例えば、溶媒和化合物、光学異性体、鏡像異性体の形態、多形体、遊離化合物および塩）が、単独または組合せの形で用いることができる。
【００３９】
ある種の状況下では、式Ｉの化合物には、１種または複数の不斉元素（例えばステレオジェン中心（キラル中心を含む）、ステレオジェン軸など）、例えば不斉炭素原子を含んでいて、その化合物が異なった立体異性体の形態をとることが可能となっていてもよい。それらの化合物は、例えば、ラセミ化合物または光学活性な形態となっていてもよい。２個以上の不斉元素を有する化合物の場合には、それらの化合物がさらに、ジアステレオマー混合物であってもよい。不斉中心を有する化合物では、すべての光学異性体およびそれらの混合物が包含されることを、理解されたい。さらに、炭素−炭素二重結合を有する化合物は、Ｚ−およびＥ−体が起こりうるが、そのような化合物の全ての異性体の形態が、本発明に含まれる。式Ｉには、式Ｉの化合物の、すべてのキラル形、立体異性体、ジアステレオマー、および鏡像異性体が含まれる。
【００４０】
「キラル」という用語は、鏡像の相手と重なり合うことが不可能な性質を有する分子を指す。
【００４１】
「立体異性体」とは、同一の化学構造を有してはいるが、原子または基の空間的配置が異なっているような化合物である。
【００４２】
「ジアステレオマー」とは、二つ以上のキラル中心を有し、分子が相互に鏡像関係にない立体異性体である。ジアステレオマーは、相互に異なる物理的性質例えば、融点、沸点、スペクトル的性質および反応性を有している。ジアステレオマーの混合物は、高分解能の分析方法例えば、電気泳動法、分割剤の存在下における結晶化法、または、例えば、キラルＨＰＬＣカラムを用いたクロマトグラフィー法などの下で、分割させることができる。
【００４３】
「鏡像異性体」という用語は、相互に鏡像を重ね合わせることが不可能な、化合物の二つの立体異性体を指す。鏡像異性体の５０対５０の混合物は、ラセミ混合物またはラセミ体と呼ばれるが、化学反応または化学プロセスにおいて立体選択性または立体特異性が存在しない場合に起こりうる。
【００４４】
本明細書で使用する立体化学的な定義および約束事は、一般的には以下の文献に従っている：Ｓ．Ｐ．パーカー編『マグローーヒル・ディクショナリー・オブ・ケミカル・タームス』（マグローーヒル・ブック・カンパニー、ニューヨーク）；およびＥ．エリールおよびＳ．ワイレン『ステレオケミストリー・オブ・オーガニック・コンパウンズ』（１９９４）（ジョン・ワイリー・アンド・ソンズ・インコーポレーテッド、ニューヨーク）。多くの有機化合物は光学活性な形態を示す、すなわちそれらは、平面偏光面を回転させる性能を有している。光学活性な化合物を記述する際には、接頭辞のＤおよびＬ，またはＲおよびＳを使用して、そのキラル中心の回りでの分子の絶対配置を表す。接頭辞のｄおよびｌ、または（＋）および（−）を採用して、化合物による平面偏光の回転の記号を明示するが、ここで（−）またはｌは、その化合物が左旋性であるということを意味している。（＋）またはｄの接頭辞を有する化合物は、右旋性である。
【００４５】
「ラセミ混合物」または「ラセミ化合物」は、光学活性をもたない等モル（すなわち５０：５０）の二つの鏡像体の混合物である。ラセミ混合物は、立体選択性または立体特異性をもたない化学反応または化学工程で発生しうる。
【００４６】
化合物が種々の互変異性体の形態で存在する場合、本発明は特定の互変異性体のいずれか一つに限定されるのではなく、むしろ全ての互変異性体の形態が含まれる。
【００４７】
本発明には、化合物中に存在しうるすべての可能な原子の同位体を有する、式Ｉの化合物が含まれる。同位体には、同一の原子番号ではあるが、質量数が異なる原子が含まれる。一般的な例を挙げれば、水素の同位体は、トリチウムおよびデューテリウムを含み、炭素の同位体は、１１Ｃ、１３Ｃおよび１４Ｃを含むが、これらに限定される訳ではない。
【００４８】
本明細書においてある種の化合物は、変数、例えば、Ｒ、Ｒ１〜Ｒ１２、ＹおよびＺを含む一般式を使用して記述される。特に断らない限り、式Ｉにおけるそれぞれの変数は、他の変数とは独立して定義される。したがって、ある基が例えば、０〜２個のＲ＊で置換されていると記載されている場合、前記の基は、２個までのＲ＊基で置換されていてよく、それぞれの場合でＲ＊は、Ｒ＊の定義から、それぞれ独立して選択される。さらに、置換基および／または変数の組合せが許されるのは、それらの組合せが安定な化合物を与える場合に限られる。
【００４９】
本明細書で用いられる場合、「置換（された）」という用語は、指摘された原子または基の上のいずれか１種または複数の水素が、指摘された基から選択されるものによって置換されることを意味しているが、ただし、その指摘された原子の通常の原子価を超えるようなことがあってはならない。置換基がオキソ（すなわち、＝Ｏ）の場合には、原子の上の２個の水素が置換されることとなる。芳香族残基がオキソ基によって置換されている場合には、その芳香環に対応する、部分的に不飽和な環に置きかえられる。例えば、オキソによって置換されたピリジル基は、ピリドンである。置換基および／または変数の組合せが許されるのは、それらの組合せが安定な化合物、または有用な合成中間体を与える場合に限られる。安定な化合物または安定な構造とは、反応混合物からの単離、およびその後の有効な治療薬への製剤に耐えうる、充分な堅牢性を有している化合物を意味している。
【００５０】
二つの文字または記号の間ではない、ダッシュ（「−」）は、置換基が付加している位置を示すのに用いられている。例えば、−（ＣＨ２）Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキルは、メチレン基（ＣＨ２）の炭素を介して付加している。
【００５１】
「アルキル」には、所定の数の炭素原子、一般的には１〜約１２個の炭素原子を有する、分岐状または直鎖状いずれもの飽和脂肪族炭化水素基が含まれる。本明細書で用いられる場合、「Ｃ１〜Ｃ６アルキル」という用語は、１〜約６個の炭素原子を有するアルキル基を指す。本明細書において、他の基との関連で「Ｃ０〜Ｃｎアルキル」という用語、例えば、（フェニル）Ｃ０〜Ｃ４アルキルが使用されている場合には、その指示された基、この場合にはフェニルが、共有単結合によって直接結合されている（Ｃ０）か、または所定の数の炭素原子、この場合には１〜約４個の炭素原子を有するアルキル鎖によって結合されているか、のいずれかである。アルキルの例としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、３−メチルブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、およびｓｅｃ−ペンチルなどが挙げられるが、これらに限定される訳ではない。
【００５２】
「アルカノイル」とは、ケト（−（Ｃ＝Ｏ）−）架橋を介して結合した、先に定義されたようなアルキル基である。アルカノイル基は、指定された数の炭素原子を有するが、ケト基の炭素も、その炭素原子の数に含まれる。例えば、Ｃ２アルカノイル基は、式ＣＨ３（Ｃ＝Ｏ）−を有するアセチル基である。
【００５３】
「アルケニル」は、１個または複数の不飽和炭素−炭素結合を含む直鎖状および分岐状の炭化水素鎖を意味しているが、それらの不飽和結合は、鎖の中の各種安定な点に生じてよい。本明細書に記載されるアルケニル基は、典型的には、２〜約１２個の炭素原子を有する。好適なアルケニル基は、低級アルケニル基であって、２〜約８個の炭素原子を有するアルケニル基、例えば、Ｃ２〜Ｃ８、Ｃ２〜Ｃ６、およびＣ２〜Ｃ４アルケニル基である。アルケニル基の例としては、エテニル、プロペニル、およびブテニル基などが挙げられる。
【００５４】
「アルコキシ」という用語は、酸素橋を介して結合した、指定された数の炭素原子を有する、先に定義されたようなアルキル基を意味している。アルコキシの例としては、メトキシ、エトキシ、３−ヘキソキシ、および３−メチルペントキシなどが挙げられるが、これらに限定される訳ではない。
【００５５】
「モノアルキルアミノおよび／またはジアルキルアミノ」という用語は、二級または三級アルキルアミノ基を示し、ここで該アルキル基は、先に定義されたようなものであり、指定された数の炭素原子を有している。アルキルアミノ基の結合点は、窒素の上である。それらのアルキル基は独立して選択される。モノアルキルアミノ基およびジアルキルアミノ基の例としては、エチルアミノ、ジメチルアミノ、およびメチル−プロピル−アミノなどが挙げられる。「モノアルキルアミノアルキルおよび／またはジアルキルアミノアルキル」基という用語は、所定の数の炭素原子を有するアルキル結合基を介して結合されているモノアルキルアミノ基および／またはジアルキルアミノ基であって、例えば、ジメチルアミノエチル基である。三級アミノ置換基は、式Ｎ−Ｒ−Ｎ−Ｒ’の命名法によって示すことができ、ここで基ＲおよびＲ’はいずれも、単一の窒素原子に結合されている。
【００５６】
「アルキルエステル」という用語は、エステル結合を介して結合された、先に定義されたようなアルキル基を示している。エステル結合は、例えば、−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）アルキル基、または式−（Ｃ＝Ｏ）Ｏアルキル基のいずれの配向であってよい。
【００５７】
「アルキルチオ」は、硫黄結合を介して結合された、先に定義されたようなアルキル基、すなわち、式アルキル−Ｓ−の基を示している。例としては、エチルチオおよびペンチルチオなどが挙げられる。
【００５８】
「アリール」とは、（１個または複数の）芳香族環の中に炭素のみを含む芳香族基を意味している。典型的なアリール基には、１〜３個の、独立しているか、縮合されているか、またはペンダントした環と、６〜１８個の環原子とを含むが、環のメンバーとしてはヘテロ原子を含まない。図示されたときに、そのようなアリール基が、炭素原子もしくは非炭素原子または基を用いてさらに置換されていてもよい。二環式アリール基には、２個の縮合芳香族環（ナフチル）、またはＮ、Ｏ、およびＳから独立して選択される１個または２個のヘテロ原子を場合によっては含む５員〜７員の非芳香族環状基、例えば、３，４−メチレンジオキシ−フェニル基に縮合された芳香族環が含まれていてよい。アリール基としては、例えば、フェニル、ナフチル（１−ナフチルおよび２−ナフチルを含む）、およびビフェニルなどが挙げられる。
【００５９】
「モノアルキルカルボキサミドおよび／またはジアルキルカルボキサミド」は、式（アルキル１）−ＮＨ−（Ｃ＝Ｏ）−および（アルキル１）（アルキル２）−Ｎ−（Ｃ＝Ｏ）−の基を示し、ここでアルキル１基およびアルキル２基は独立して、所定の数の炭素原子を有する、先に定義されたようなアルキル基から選択される。「モノアルキルカルボキサミドおよび／またはジアルキルカルボキサミド」はさらに、式−ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）（アルキル１）および−Ｎ（アルキル２）（Ｃ＝Ｏ）（アルキル１）の基の、カルボキサミド基を指し、その結合点は窒素原子であり、ここでそれらのアルキル１基およびアルキル２基は独立して、所定の数の炭素原子を有する、先に定義されたようなアルキル基から選択される。
【００６０】
「モノアルキルスルホンアミドおよびジアルキルスルホンアミド」は、式（アルキル１）−ＮＨ−（ＳＯ２）−および（アルキル１）（アルキル２）−Ｎ−（ＳＯ２）−の基を意味し、ここでアルキル１基およびアルキル２基は独立して、所定の数の炭素原子を有する、先に定義されたようなアルキル基から選択される。「モノアルキルカルボキサミドおよび／またはジアルキルカルボキサミド」はさらに、式−ＮＨ（ＳＯ２）（アルキル１）および−Ｎ（アルキル２）（ＳＯ２）（アルキル１）の基の、スルホンアミド基を指すが、ここで、その結合点は窒素原子であり、ここでそれらのアルキル１基およびアルキル２基は独立して、所定の数の炭素原子を有する、先に定義されたようなアルキル基から選択される。
【００６１】
「シクロアルキル」は、特定の数の炭素原子、通常は３〜約８個の環炭素原子、または３〜約７個の炭素原子を有する、飽和炭化水素環基を示す。シクロアルキル基の例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、またはシクロヘキシル、さらには、架橋またはかご形の飽和環基、例えば、ノルボランまたはアダマンタン、などが挙げられる。（シクロアルキル）Ｃ０〜Ｃ２アルキルとは、コア基に結合された、先に定義されたシクロアルキル基を意味し、それは、共有単結合（Ｃ０アルキル）を介するか、メチレン結合基またはエチレン結合基を介して置換されている。
【００６２】
本明細書で使用するとき、「シクロアルケニル」という用語は、少なくとも１個の炭素−炭素二重結合を有する、不飽和ではあるが芳香族ではない炭化水素環を意味している。シクロアルケニル基には、４〜約８個の炭素原子、通常は４〜約７個の炭素原子が含まれる。例としては、シクロヘキセニルおよびシクロブテニルなどが挙げられる。「（シクロアルケニル）アルキル」という用語においては、「シクロアルケニル」と「アルキル」は先に定義されたものであって、その結合点はアルキル基の上にある。
【００６３】
「単環ヘテロアリールまたは二環ヘテロアリール」という用語は、１〜４個、好ましくは１〜３個のＮ、Ｏ、およびＳから選択されるヘテロ原子を含み、残りの環原子が炭素である少なくとも１個の芳香族環を含む、安定な５員〜７員の単環式、または７員〜１０員の二環式複素環式環を示している。ヘテロアリール基の中のＳおよびＯ原子の合計数が１を超える場合には、それらのヘテロ原子は互いに隣接することはない。そのヘテロアリール基の中のＳおよびＯ原子の合計数が２以下であるのが好ましい。ヘテロアリール基の中のＳおよびＯ原子の合計数が１以下であるのが好ましい。ヘテロアリール基の中の窒素原子は、場合によっては四級化されていてもよい。図示されたときに、そのようなヘテロアリール基が、炭素原子もしくは非炭素原子または基を用いてさらに置換されていてもよい。そのような置換としては、縮合した５員〜７員の飽和環式基などが挙げられ、それには、場合によってはＮ、ＯおよびＳから独立して選択された１個または２個のヘテロ原子を含んでいてもよく、例えば、［１，３］−ジオキソロ［４，５−ｃ］ピリジル基である。ある種の実施態様においては、５員〜６員のヘテロアリール基が好ましい。ヘテロアリール基の例としては、ピリジル、インドリル、ピリミジニル、ピリジジニル、ピラジニル、イミダゾリル、オキサゾリル、フラニル、チオフェニル、チアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、イソオキサゾリル、キノリニル、ピロリル、ピラゾリル、ベンズ［ｂ］チオフェニル、イソキノリニル、キナゾリニル、キノキサリニル、チエニル、イソインドリル、および５，６，７，８−テトラヒドロイソキノリンなどが挙げられるが、これらに限定されるわけではない。
【００６４】
「ヘテロシクロアルキル」は、Ｎ、Ｏ、およびＳから選択される１〜約３個のヘテロ原子を含み、残りの環原子が炭素である、飽和環状基を意味する。ヘテロシクロアルキル基は、３〜約８個の環原子、より典型的には５〜７個の環原子を有する。ヘテロシクロアルキル基の例としては、モルホリニル、ピペラジニル、ピペリジニル、およびピロリジニル基などが挙げられる。ヘテロシクロアルキル基の中の窒素は、場合によっては四級化されていてもよい。（ヘテロシクロアルキル）Ｃ０〜Ｃ２アルキルは、コア基に結合された、先に定義されたヘテロシクロアルキル基を意味しており、共有単結合（Ｃ０アルキル）を介するか、メチレン結合基もしくはエチレン結合基を介して置換されている。
【００６５】
「ハロアルキル」は、特定の数の炭素原子を有し、１個またはそれ以上、一般には許容される最大の数のハロゲン原子までのハロゲン原子で置換された、分岐状および直鎖状の両方のアルキル基を指す。ハロアルキルの例としては、トリフルオロメチル、ジフルオロメチル、２−フルオロエチル、およびペンタ−フルオロエチル、などが挙げられるが、これらに限定される訳ではない。
【００６６】
「ハロアルコキシ」は、酸素橋（アルコールラジカルの酸素）を介して結合された、先に定義されたようなハロアルキル基を示している。
【００６７】
本明細書で用いられる場合、「ハロ」または「ハロゲン」という用語は、フルオロ、クロロ、ブロモ、またはヨードを指す。
【００６８】
「ヒドロキシアルキル」とは、少なくとも一つのヒドロキシ置換基を用いて置換された、本明細書に定義されたようなアルキル基である。
【００６９】
「場合によっては置換された（る）」という表現は、そのような基が非置換であってもよいし、あるいは、本明細書に開示されているような１種または複数の適当な基によって、利用可能な位置、典型的には１，２、３または４位の内のいずれかの１個または複数で置換されていてもよい、ということを示している。
【００７０】
「場合によっては置換された」位置に存在していてもよい適切な基は、例えば、以下のものが含まれるが、これらに限定される訳ではない：ハロゲン、シアノ、ヒドロキシル、アミノ、ニトロ、オキソ、アジド、アルカノイル（例えばアシルなどのＣ２〜Ｃ６アルカノイル基など）；カルボキサミド；アルキルカルボキサミド；アルキルエステル基；アルキル基、アルコキシ基、１個または複数のチオエーテル結合を有するものを含むアルキルチオ基、１個または複数のスルフィニル結合を有するものを含むアルキルスルフィニル基、１個または複数のスルホニル結合を有するものを含むアルキルスルホニル基、１個または複数のＮ原子を有する基を含むモノアミノアルキル基およびジアミノアルキル基（前述の任意成分のアルキル置換基はすべて、酸素または−ＮＨ−によって置換された１個または複数のメチレン基を有し、また約１〜約８個、約１〜約６個、もしくは１〜約４個の炭素原子を有していてよい）、シクロアルキル、フェニル、典型的なフェニルアルキル基であるベンジルをもつフェニルアルキル、典型的なフェニルアルコキシ基であるベンジルオキシをもつフェニルアルコキシ、１個の環と１個または複数のＮ、ＯもしくはＳ原子を有する、飽和、不飽和、もしくは芳香族のヘテロサイクリック基、例えば、ピリジル、ピラジニル、ピリミジニル、フラニル、ピロリル、チエニル、チアゾリル、トリアジニル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、イミダゾリル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、ピペリジニル、モルホリニル、ピペラジニル、およびピロリジニル。置換に利用することが可能なさらなる位置を有するそのような基はいずれも、例えば、アミノ、ヒドロキシル、アルキル、アルコキシ、ハロゲン、ハロアルキル、ハロアルコキシ、およびモノアルキルアミノおよびジアルキルアミノから独立して選択される置換基を用いてさらに置換されていてもよい。
【００７１】
「医薬的組成物」とは、式Ｉの化合物または塩などの少なくとも１種の活性製剤およびキャリア、賦形剤、または希釈剤などの少なくとも１つのその他の物質から構成される組成物である。医薬的組成物は、ヒトまたはヒト以外の薬剤についての米国食品医薬品局のＧＭＰ（適正製造）基準を満たす。
【００７２】
「医薬的に許容される塩」としては、開示された化合物の誘導体が挙げられるが、その誘導体では、親化合物が、その無機および有機で、非毒性の、酸または塩基の添加塩によって変性されている。本発明の化合物の塩は、塩基性または酸性残基を含む親化合物から、慣用される化学的手法によって合成することができる。一般的には、そのような塩は、それらの化合物の遊離の酸の形態のものを、化学量論量の適切な塩基（Ｎａ、Ｃａ、ＭｇまたはＫの水酸化物、炭酸塩、重炭酸塩など）と反応させるか、または、それらの化合物の遊離の塩基の形態のものを、化学量論量の適切な酸と反応させることによって、調製することができる。そのような反応は典型的には、水中、有機溶媒中、またはそれら両者の混合物中で実施される。一般的には、エーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノール、またはアセトニトリルのような非水溶媒が、実施可能であれば、好ましい。本発明の化合物塩にはさらに、化合物の溶媒和物および化合物の塩の溶媒和物も含まれる。
【００７３】
医薬的に許容される塩としては、アミンのような塩基性残基の鉱酸または有機酸塩、カルボン酸のような酸性残基のアルカリ塩または有機塩などが挙げられるが、これらに限定される訳ではない。医薬的に許容される塩には、例えば非毒性の無機酸または有機酸から形成された親化合物の、慣用される非毒性の塩および四級アンモニウム塩なども含まれる。例えば、慣用される非毒性の酸の塩としては、塩化水素酸、臭化水素酸、硫酸、スルファミン酸、リン酸、硝酸などの無機酸から誘導されるもの；酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、ステアリン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、パモ酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、フェニル酢酸、グルタミン酸、安息香酸、サリチル酸、メシル酸、エシル酸、ベシル酸、スルファニル酸、２−アセトキシ安息香酸、フマル酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、エタンジスルホン酸、シュウ酸、イセチオン酸、ＨＯＯＣ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＨ（ｎは０〜４である）、などの有機酸から調製される塩などが挙げられる。さらなる好適な塩のリストは、例えば、レミントンズ・ファーマシューティカル・サイエンシズ第１７版（マック・パブリッシング・カンパニー、ペンシルバニア州イーストン）、第１４１８ページ（１９８５）に見出すことができる。
【００７４】
本発明の医薬的組成物に適用される「キャリア」という用語は、活性化合物とともに投与される希釈剤、賦形剤または媒体をさす。
【００７５】
「医薬的に容認可能な賦形剤」とは、一般的に安全で、毒性がなく、生物学的またそれ以外に望ましくないわけでもない医薬的組成物を調製するのに有用な賦形剤を意味し、ヒトの医薬品用だけでなく獣医用にも容認可能な賦形剤を含む。本出願に使用される「医薬的に容認可能な賦形剤」は、そのような賦形剤を１つおよびそれ以上含む。
【００７６】
「患者」とは、医学的治療を必要とする人または人以外の動物である。医学的治療は、疾患または病気、予防治療、または診断治療などの既存の症状の治療を含む。一部の実施例において患者は人間の患者である。
【００７７】
「プロドラッグ」とは、例えばプロドラッグの代謝過程などで、哺乳類の被験者に投与されると、本発明の化合物になるあらゆる化合物を意味する。プロドラッグの例には、アセテート、ギ酸塩、安息香酸塩、および本発明の化合物の（アルコールまたはアミン基のような）官能基と同様の誘導体を含むが、それらに限定されない。
【００７８】
「提供する」とは与える、投与する、販売する、流通する、（営利目的か、否かを問わず）移動する、製造する、混合する、あるいは調剤することを意味する。
【００７９】
「少なくとも１つの追加活性製剤とともに式Ｉの化合物を提供する」とは、式Ｉの化合物および追加の活性製剤が同時に一つの剤形で提供される、または別の剤形で同時に提供される、あるいは式Ｉの化合物と少なくとも１つの追加活性製剤の両方が一人の患者の血流に存在する時間内であるような程度の時間により分かれた投与で別々の剤形で提供されることを意味する。式Ｉの化合物と追加の活性製剤は、同じ医療従事者により一人の患者に処方される必要はない。（１つまたは複数の）追加の活性製剤は、処方箋を必要としない。式Ｉの化合物または少なくとも１つの追加活性製剤は、例えば経口錠剤、経口カプセル、経口液、吸入、注入、坐剤、局所接触のような何らかの適切な経路により投与されることができる。
【００８０】
ここで使用される「治療」とは、（ａ）（慢性ＨＣＶ感染の場合肝線維症に帰結しうるような原発性疾患に関連するか、それにより引き起こされるものも含めて）疾病または疾病の症状がその疾病にかかりやすいかもしれないが、その疾病をもっていると診断されていない患者で疾病または疾病の症状を予防する、（ｂ）疾病を抑制する、すなわちその進行を阻止し、さらに（ｃ）疾病を軽減する、すなわち疾病の退行を引き起こすのに十分な式Ｉの化合物と少なくとも１つの活性製剤を提供することを含む。「治療する」および「治療」は、Ｃ型肝炎に感染している、あるいは感染しやすい患者に式Ｉの化合物と少なくとも１つの活性製剤を治療上有効量で提供することも意味する。
【００８１】
本発明の医薬品の組合せの「治療上有効量」とは、患者に投与された場合、例えばＣ型肝炎感染の症状を軽減するのに有効量のように、症状の改善といった治療効果をもたらすのに有効な量を意味する。例えばＣ型肝炎ウィルスに感染した患者の場合、ＡＳＴおよびＡＬＴなどの特定の肝臓酵素のレベル上昇を示すことがある。正常なＡＳＴレベルは、血清（血液の一部）１リットルあたり５から４０ユニットであり、正常なＡＬＴレベルは血清１リットルあたり７から５６ユニットである。治療上有効量は、したがって上昇したＡＳＴおよびＡＬＴ値を有意に下げるか、ＡＳＴおよびＡＬＴ値を通常の範囲に引き下げるのに十分な量である。治療上有効量とは、また患者の血液、血清または組織においてウィルスまたはウィルス抗体の検出可能なレベルを有意に向上させるのを防ぐ、または有意に低下させるのに十分な量でもある。治療上の効果を決定する方法の一つとして、Ｒｏｃｈ  ＴａｑＭａｎ試験のようなウィルスＲＮＡレベルを決定する換算方法によりＨＣＶ  RNAレベルを測定することがある。特定の望ましい実施例では、治療は、ＨＣＶ  ＲＮＡレベルを定量法の限度以下（Ｒｏｃｈｅ  ＴａｑＭａｎ（Ｒ）試験による測定で３０ＩＵ／ｍＬ）、あるいはさらに望ましいのは検出限度以下（Ｒｏｃｈｅ  ＴａｑＭａｎ、１０ＩＵ／ｍＬ）に低下させた。
【００８２】
ウィルスまたはウィルス抗体の検出レベルにおける有意な増加または低下とは、スチューデントのＴ検定において、ｐ＜０．０５のような統計的優位性の標準パラメトリック検定における統計的有意であるあらゆる検出可能な変化である。
【００８３】
化学的説明
本発明は、上記で論ずるように式Ｉの化合物を含む。さらに本発明は、変数ＡおよびＲ３−Ｒ７が以下に述べる値をもつ代替実施例として式Ｉの化合物および塩を含む。
【００８４】
【化４】
2010519339.tif 000005
【００８５】
変数Ｒ１およびＲ２
（ａ）Ｒ１は、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル、フェニル、ヘテロシクロアルキル、または５員または６員のヘテロアリールで、そのそれぞれが場合によっては置換される。Ｒ２は、Ｃ１−Ｃ６アルキルまたはＣ２−Ｃ６アルケニルで、そのそれぞれが場合によっては置換される。
【００８６】
（ｂ）Ｒ１およびＲ２は、結合して５員から７員のヘテロシクロアルキル環を形成し、その環は、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ１−Ｃ２ハロアルキルおよびＣ１−Ｃ２ハロアルコキシから独立して選択される０または１、あるいはそれ以上の置換基で置換される。
【００８７】
（ｃ）Ｒ１およびＲ２は、結合してピロリジニル、ピぺリジニルまたはピぺラジニル環を形成し、そのそれぞれがハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ２アルキル、Ｃ１−Ｃ２アルコキシ、トリフルオロメチルおよびトリフルオロメトキシから独立して選択される０、１または２の置換基で置換される。
【００８８】
変数Ｒ３，Ｒ４，Ｒ１１およびＲ１２
（ｄ）Ｒ３はＣ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルカノイル、またはモノＣ１−Ｃ６アルキルアミノ、ジＣ１−Ｃ６アルキルアミノ、（Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル）Ｃ０−Ｃ４アルキル、（Ｃ３−Ｃ７シクロアルケニル）Ｃ０−Ｃ４アルキル、（フェニル）Ｃ０−Ｃ２アルキルまたは（ヘテロシクロアルキル）Ｃ０−Ｃ４アルキルであり、そのそれぞれがハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＯＨ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ２−Ｃ４アルカノイル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４アルキルチオ、モノＣ１−Ｃ４アルキルアミノ、ジＣ１−Ｃ４アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ２ハロアルキル、およびＣ１−Ｃ２ハロアルコキシから独立して選択される０から３の置換基で置換され、Ｒ４は、水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニルまたはＣ１−Ｃ６アルコキシである。
【００８９】
（ｅ）Ｒ３はＣ１−Ｃ６アルキル、（Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル）Ｃ０−Ｃ４アルキル、または（フェニル）Ｃ０−Ｃ２アルキルであって、そのそれぞれがハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ２アルキル、Ｃ１−Ｃ２アルコキシ、モノＣ１−Ｃ２アルキルアミノ、ジＣ１−Ｃ２アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ２ハロアルキル、およびＣ１−Ｃ２ハロアルコキシから独立して選択される０から３の置換基で置換され、Ｒ４は、水素、Ｃ１−Ｃ２アルキル、またはＣ１−Ｃ２アルコキシである。
【００９０】
（ｆ）Ｒ３はＣ１−Ｃ６アルキル、（Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル）Ｃ０−Ｃ４アルキル、または（フェニル）Ｃ０−Ｃ２アルキルである。
【００９１】
（ｇ）Ｒ３はＣ１−Ｃ６アルキルである。
【００９２】
（ｈ）Ｒ４は水素である。
【００９３】
（ｉ）Ｒ３およびＲ４は、結合してシクロプロピル環を形成し、それはビニル、Ｃ１−Ｃ２アルキル、Ｃ１−Ｃ２アルコキシから独立して選択される０から２の置換基で置換される。
【００９４】
（ｊ）Ｒ１１は、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルカノイル、モノＣ１−Ｃ６アルキルアミノ、ジＣ１−Ｃ６アルキルアミノ、（Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル）Ｃ０−Ｃ４アルキル、（Ｃ３−Ｃ７シクロアルケニル）Ｃ０−Ｃ４アルキル、（フェニル）Ｃ０−Ｃ２アルキル、または（ヘテロシクロアルキル）Ｃ０−Ｃ４アルキルであって、そのそれぞれがハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＯＨ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ２−Ｃ４アルカノイル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４アルキルチオ、モノＣ１−Ｃ４アルキルアミノ、ジＣ１−Ｃ４アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ２ハロアルキル、およびＣ１−Ｃ２ハロアルコキシから独立して選択される０から３の置換基で置換され、Ｒ１２は水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、またはＣ１−Ｃ６アルコキシである。
【００９５】
（ｋ）Ｒ１１はＣ１−Ｃ６アルキル、（Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル）Ｃ０−Ｃ４アルキルまたは（フェニル）Ｃ０−Ｃ２アルキルであって、そのそれぞれがハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ２アルキル、Ｃ１−Ｃ２アルコキシ、モノＣ１−Ｃ２アルキルアミノ、ジＣ１−Ｃ２アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ２ハロアルキルおよびＣ１−Ｃ２ハロアルコキシから独立して選択される０から３の置換基で置換され、Ｒ１２は水素、Ｃ１−Ｃ２アルキルまたはＣ１−Ｃ２アルコキシである。
【００９６】
（ｌ）Ｒ１１はＣ１−Ｃ６アルキル、（Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル）Ｃ０−Ｃ４アルキルまたは（フェニル）Ｃ０−Ｃ２アルキルである。
【００９７】
（ｍ）Ｒ１１はＣ１−Ｃ６アルキルである。
【００９８】
（ｎ）Ｒ３およびＲ４は結合して、シクロプロピル環を形成し、ビニル、Ｃ１−Ｃ２アルキル、およびＣ１−Ｃ２アルコキシから独立して選択される０から２の置換基で置換される。
【００９９】
（ｏ）本発明はＲ３およびＲ１１が結合して大環状環を形成する実施例を含む。例えば本発明は式ＩＩの化合物および塩を含む。
【０１００】
【化５】
2010519339.tif 000006
【０１０１】
式ＩＩ中、Ｄは６から１０個の炭素原子をもつアルキル基またはアルケニル基である。
【０１０２】
（ｐ）例えば本発明は式ＩＩＩの化合物および塩を含む。
【０１０３】
【化６】
2010519339.tif 000007
【０１０４】
（ｑ）本発明は、Ｒ１１およびＲ１２が結合して３員から７員のシクロアルキル環を形成することにより形成されたシクロアルキル基にＲ３が共有結合される実施例を含む。例えば本発明は式ＩＶの化合物および塩を含む。
【０１０５】
【化７】
2010519339.tif 000008
【０１０６】
式ＩＶ中、Ｄは、６から１０個の炭素原子をもつアルキル基またはアルケニル基である。
【０１０７】
（ｒ）例えば本発明は式Ｖの化合物および塩を含む。
【０１０８】
【化８】
2010519339.tif 000009
【０１０９】
変数Ｒ５，Ｒ６，Ｒ７およびＲ１０
（ｓ）例えば本発明は、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ１０がすべて水素である上記の化学式のいずれかの化合物および塩を含む。
【０１１０】
変数Ｒ８およびＲ９
（ｔ）Ｒ８は、ｎが０、１または２であり、Ｒ９が水素、ハロゲン、アミノ、Ｃ１−Ｃ２アルキル、またはＣ１−Ｃ２アルコキシである、式−（ＣＨ２）ｎＹ−Ｚの基である。
【０１１１】
（ｕ）ｎは０、およびＹは−Ｏ−、−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）（ＮＲ１６）−、−ＮＲ１６（Ｃ＝Ｏ）−、または−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）−である。
【０１１２】
（ｖ）ｎは０および−Ｏ−または−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）−である。
【０１１３】
（ｗ）Ｚは下記の式の基である。
【０１１４】
【化９】
2010519339.tif 000010
【０１１５】
上記式中、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３およびＸ４は独立してＮまたはＣＨであり、Ｘ１−Ｘ４がＮであるのは２個以下であり；Ｒ２１は、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＯＨ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ２−Ｃ４アルカノイル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４アルキルチオ、モノＣ１−Ｃ４アルキルアミノ、ジＣ１−Ｃ４アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ２ハロアルキルおよびＣ１−Ｃ２ハロアルコキシから独立して選択される０から３基を表し、Ｒ２２は水素、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＯＨ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ２−Ｃ４アルカノイル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４アルキルチオ、モノＣ１−Ｃ４アルキルアミノ、ジＣ１−Ｃ４アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ４アルキルエステル、Ｃ１−Ｃ２ハロアルキルおよびＣ１−Ｃ２ハロアルコキシであるか、あるいは、Ｒ２２は（Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル）Ｃ０−Ｃ２アルキル、（フェニル）Ｃ０−Ｃ２アルキル、（フェニル）Ｃ０−Ｃ２アルコキシ、（５員または６員のヘテロアリール）Ｃ０−Ｃ２アルキル、（５員または６員のヘテロアリール）Ｃ０−Ｃ２アルコキシ、インダニル、（５員または６員のヘテロシクロアルキル）Ｃ０−Ｃ２アルキル、あるいは９員または１０員の二環式ヘテロアリールであり、そのそれぞれが（ａ）および０、1または２個の置換基（ｂ）で置換される。ここで（ａ）はハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、ニトロ、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、ＣＨ３（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ−、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４ヒドロキシアルキル、モノＣ１−Ｃ４アルキルアミノ、ジＣ１−Ｃ４アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ４アルキルエステル、モノＣ１−Ｃ４アルキルスルホンアミド、ジＣ１−Ｃ４アルキルスルホンアミド、モノＣ１−Ｃ４アルキルカルボキサミド、ジＣ１−Ｃ４アルキルカルボキサミド、Ｃ１−Ｃ２ハロアルキルおよびＣ１−Ｃ２ハロアルコキシから選択され、（ｂ）はフェニルあるいは５員または６員のヘテロアリールであって、そのそれぞれが０、１またはそれ以上のハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ４アルキルおよびＣ１−Ｃ２アルコキシで置換される。
【０１１６】
（ｘ）Ｚは、上記（ｗ）で定義された基であり、Ｒ２２は（フェニル）Ｃ０−Ｃ２アルキル、（フェニル）Ｃ０−Ｃ２アルコキシ、あるいは（５員または６員ヘテロアリール）Ｃ０−Ｃ２アルキルであり、そのそれぞれが（ｃ）ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、Ｃ１−Ｃ２アルキル、Ｃ１−Ｃ２アルコキシ、モノＣ１−Ｃ２アルキルアミノ、ジＣ１−Ｃ２アルキルアミノ、トリフルオロメチルおよびトリフルオロメトキシから独立して選択される０、１または２個の置換基で置換される。
【０１１７】
（ｙ）Ｚは上記（ｗ）で定義された基であり、Ｒ２２は次のとおりである。
【０１１８】
【化１０】
2010519339.tif 000011
【０１１９】
（ｚ）ＺはＣ１−Ｃ６アルキルまたはＣ２−Ｃ６アルケニルであって、そのＺのいずれかは、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＯＨ、モノＣ１−Ｃ４アルキルスルホンアミド、ジＣ１−Ｃ４アルキルスルホンアミド、モノＣ１−Ｃ４アルキルカルボキサミド、ジＣ１−Ｃ４アルキルカルボキサミド、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ２−Ｃ４アルカノイル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４アルキルチオ、モノＣ１−Ｃ４アルキルアミノ、ジＣ１−Ｃ４アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ４アルキルエステル、Ｃ１−Ｃ２ハロアルキルおよびＣ１−Ｃ２ハロアルコキシから独立して選択される０または１あるいはそれ以上の置換基で置換される。
【０１２０】
（ａａ）Ｚは（フェニル）Ｃ０−Ｃ２アルキル、（ナフチル）Ｃ０−Ｃ２アルキル、（単環式ヘテロアリールまたは二環式ヘテロアリール）Ｃ０−Ｃ２アルキルあるいはテトラヒドロキノリニルであり、そのＺのそれぞれがハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＯＨ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ２−Ｃ４アルカノイル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４アルキルチオ、モノＣ１−Ｃ４アルキルアミノ、ジＣ１−Ｃ４アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ２ハロアルキルおよびＣ１−Ｃ２ハロアルコキシから独立して選択される０または１、あるいはそれ以上の置換基で置換され、さらに０または１のＣ３−Ｃ７シクロアルキル、アリール、５員または６員のヘテロアリール、インダニル、または５員または６員のヘテロシクロアルキルまたは９員または１０員の二環式ヘテロアリール、そのそれぞれが（ａ）から独立して選択される０または１、あるいはそれ以上の置換基および０または１の置換基（ｂ）で置換される。
【０１２１】
上記（ａ）はハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、ニトロ、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、＝ＮＯＨ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ２−Ｃ４アルカノイル、Ｃ１−Ｃ４ヒドロキシアルキル、モノＣ１−Ｃ４アルキルアミノ、ジＣ１−Ｃ４アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ４アルキルエステル、モノＣ１−Ｃ４アルキルスルホンアミド、ジＣ１−Ｃ４アルキルスルホンアミド、モノとジＣ１−Ｃ４アルキルカルボキサミド、Ｃ１−Ｃ２ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ２ハロアルコキシから選択される。
【０１２２】
また、上記（ｂ）はフェニル、あるいは５員または６員のヘテロアリールであって、そのそれぞれがハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、−ＣＨＯ、−ＣＯＯＨ、−ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）Ｈ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ２アルコキシ、モノ（Ｃ１−Ｃ４アルキル）アミノ、ジ（Ｃ１−Ｃ４アルキル）アミノ、モノ（Ｃ１−Ｃ４アルキル）カルボキサミド、ジ（Ｃ１−Ｃ４アルキル）カルボキサミド、Ｃ１−Ｃ４アルキルエステル、（Ｃ１−Ｃ４アルキルエステル）アミノ、Ｃ１−Ｃ２ハロアルキルおよびＣ１−Ｃ２ハロアルコキシから独立して選択される０または１あるいはそれ以上の置換基で置換される。
【０１２３】
（ｂｂ）本発明は、（ｂ）がフェニル、ピリジル、チアゾリル、ピロリル  またはイミダゾリルである（ａａ）の化合物および塩を含み、そのそれぞれがハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、−ＣＨＯ、−ＣＯＯＨ、−ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）Ｈ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ２アルコキシ、モノ（Ｃ１−Ｃ４アルキル）アミノ、ジ（Ｃ１−Ｃ４アルキル）アミノ、モノ（Ｃ１−Ｃ４アルキル）カルボキサミド、ジ（Ｃ１−Ｃ４アルキル）カルボキサミド、Ｃ１−Ｃ４アルキルエステル、（Ｃ１−Ｃ４アルキルエステル）アミノ、Ｃ１−Ｃ２ハロアルキルおよびＣ１−Ｃ２ハロアルコキシから独立して選択される０か１あるいはそれ以上の置換基で置換される。
【０１２４】
（ｃｃ）Ｒ８およびＲ９は、ともに場合によっては置換される５員から７員のシクロアルキル環を形成する。
【０１２５】
（ｄｄ）Ｒ８およびＲ９はともにシクロペンチル環を形成する。
【０１２６】
（ｅｅ）本発明は（ｃｃ）の化合物および塩を含み、Ｒ８およびＲ９はともにシクロペンチル環を形成する。例えば本発明は、式ＶＩの化合物と塩を含む。
【０１２７】
【化１１】
2010519339.tif 000012
【０１２８】
（ｆｆ）一部の実施例で本発明は、式ＶＩの以下のような化合物および塩を含む。
【０１２９】
Ｒ３はＣ１−Ｃ６アルキル、（Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル）Ｃ０−Ｃ４アルキルまたは（フェニル）Ｃ０−Ｃ２アルキルであって、そのそれぞれが、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ２アルキル、Ｃ１−Ｃ２アルコキシ、モノＣ１−Ｃ２アルキルアミノ、ジＣ１−Ｃ２アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ２ハロアルキルおよびＣ１−Ｃ２ハロアルコキシから独立して選択される０から３の置換基で置換され；Ｒ４は水素、Ｃ１−Ｃ２アルキルまたはＣ１−Ｃ２アルコキシであり；あるいはＲ３およびＲ４は結合してシクロプロピル環を形成し、それはビニル、Ｃ１−Ｃ２アルキルおよびＣ１−Ｃ２アルコキシから独立して選択される０から２の置換基で置換される。
【０１３０】
Ｒ１１はＣ１−Ｃ６アルキル、（Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル）Ｃ０−Ｃ４アルキルまたは（フェニル）Ｃ０−Ｃ２アルキルであって、そのそれぞれがハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ２アルキル、Ｃ１−Ｃ２アルコキシ、モノＣ１−Ｃ２アルキルアミノ、ジＣ１−Ｃ２アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ２ハロアルキルおよびＣ１−Ｃ２ハロアルコキシから独立して選択される０から３の置換基で置換され；Ｒ１２は水素、Ｃ１−Ｃ２アルキルまたはＣ１−Ｃ２アルコキシであり；あるいはＲ１１およびＲ１２が結合してシクロプロピル環を形成し、それは、ビニル、Ｃ１−Ｃ２アルキルおよびＣ１−Ｃ２アルコキシから独立して選択される０から２の置換基で置換され；Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ１０はそれぞれ独立して水素、メチルまたはメトキシである。
【０１３１】
（ｇｇ）本発明は、さらに式ＶＩＩの化合物および塩も含む。
【０１３２】
【化１２】
2010519339.tif 000013
【０１３３】
（ｈｈ）本発明は、式ＶＩＩＩの化合物および塩を含む。
【０１３４】
【化１３】
2010519339.tif 000014
【０１３５】
上記式ＶＩＩＩにおいて、Ｄは６個から１０個の炭素原子を有するアルキル基またはアルケニル基であり；Ｒ４およびＲ１２は独立して水素またはメチルであり；Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ１０は、独立して水素またはメチルである。
【０１３６】
（ｉｉ）本発明は、式ＩＸの化合物および塩を含む。
【０１３７】
【化１４】
2010519339.tif 000015
【０１３８】
上記式ＩＸにおいて、Ｄは６個から１０個の炭素原子を有するアルキルまたはアルケニル基である。Ｒ４およびＲ１２は独立して水素またはメチルであり；Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ１０は独立して水素またはメチルである。
【０１３９】
変数Ｒ
（ｊｊ）Ｒは以下に示すものである。
【０１４０】
【化１５】
2010519339.tif 000016
【０１４１】
（ｋｋ）上記（ｊｊ）に示すようにＲはカルボキサミド基であり、Ｒ１３はＣ１−Ｃ６アルキルまたはＣ２−Ｃ６アルケニルであって、そのそれぞれはハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、アミノ、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、モノＣ１−Ｃ４アルキルアミノ、ジＣ１−Ｃ４アルキルアミノから独立して選択される０または１あるいはそれ以上の置換基で置換される。
【０１４２】
（ｌｌ）Ｒは（ｊｊ）に示すようにカルボキサミド基であり、Ｒ１３は（Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル）Ｃ０−Ｃ２アルキル、（アリール）Ｃ０−Ｃ２アルキル、（５員から７員のヘテロシクロアルキル）Ｃ０−Ｃ２アルキルまたは（ヘテロアリール）Ｃ０−Ｃ２アルキルであって、そのそれぞれはハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、アミノ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、モノＣ１−Ｃ４アルキルアミノ、ジＣ１−Ｃ４アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ２ハロアルキルまたはＣ１−Ｃ２ハロアルコキシから独立して選択される０または１あるいはそれ以上の置換基で置換される。
【０１４３】
（ｍｍ）Ｒは（ｊｊ）に示すようにカルボキサミド基であり、Ｒ１３はＣ３−Ｃ７シクロアルキルであり、それはハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、アミノ、Ｃ１−Ｃ２アルキル、Ｃ１−Ｃ２アルコキシ、モノＣ１−Ｃ２アルキルアミノ、ジＣ１−Ｃ２アルキルアミノから独立して選択される０または１あるいはそれ以上の置換基で置換される。
【０１４４】
（ｎｎ）Ｒは（ｊｊ）に示すようにカルボキサミド基であり、Ｒ１３はシクロプロピルである。
【０１４５】
変数ＲおよびＲ１−Ｒ１２の上記の定義のすべては、安定した化合物に帰結する限り組み合わせることができる。そのような化合物はすべて本発明のスコープに含まれる。
【０１４６】
医薬的調製
本発明の化合物は、希釈されない化学品として投与されうるが、医薬的組成物として投与されることが望ましい。したがって本発明は、医薬的に許容可能な少なくとも１つのキャリアとともに発明の化合物または医薬的に容認可能な塩から構成される医薬的製剤を提供する。
【０１４７】
本発明の化合物は、経口で、局所的に、非経口で、吸入やスプレーで、舌下で、経皮的に、口腔投与により、直腸から、点眼剤として、あるいはその他の手段により従来の医薬的に容認可能なキャリアを含む用量単位の製剤により投与されうる。医薬的組成物は、例えばエアロゾル、クリーム、ゲル状、丸薬、カプセル、錠剤、シロップ、経皮貼付または点眼剤のようないかなる医薬的に有効な剤形として製剤されうる。錠剤およびカプセルのように剤形の中には、例えば望ましい目的を達成するのに有効な量といったように有効成分を適量含む適切な量の単位用量に再分割されるものもある。
【０１４８】
キャリアは、賦形剤と希釈剤を含み、治療される患者に投与するのにふさわしいものとなるように、十分に高純度で十分に低毒性でなければならない。キャリアは、不活性であるか、あるいはそれ自体が医薬的利点を有していてもよい。化合物とあわせて使用されるキャリアの量は、化合物の単位用量ごとに投与するために実用的な量を提供するのに十分なものである。
【０１４９】
キャリアの種類は、バインダ、緩衝剤、着色剤、希釈剤、錠剤分解物質、乳化剤、香料添加剤、流動促進剤、潤滑剤、保存料、安定剤、界面活性剤、タブレット成形剤および湿潤剤を含むが、これらに限定されない。キャリアの中には、例えば植物性油脂のように一部の製剤では潤滑剤として、また別のものでは希釈剤として使用されるように１種類以上に掲載されているものもある。典型的な医薬的に許容可能なキャリアには、砂糖、でんぷん、セルロース、粉末状トラガカント、麦芽、ゼラチン、タルク、および植物油脂がある。任意の活性製剤は、医薬的組成物に含まれることがあるが、本発明の化合物の活性を実質的に妨害しない。
【０１５０】
バインダは、粉末を結合または「接着」させる物質で、顆粒を形成することによりそれらを凝集させるもので、したがって製剤で「接着剤」としての役割を果たす。バインダは、希釈剤または充填剤で既に存在する結合力を追加する。バインダの例としては、でんぷん、ゼラチン、天然の砂糖、コーン甘味料、アカシアのような天然および合成ゴム、アルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコールおよびワックスがある。組成中のバインダの量には範囲があり、例えば組成の重量の約２から約２０％、あるいは重量で約３から１０％などで、さらに望ましいのは重量で約３から６％である。
【０１５１】
希釈剤には、ラクトース、スクロース、マンニトールおよびソルビトールのような糖、小麦、コーン、米およびジャガイモに由来するでんぷん、さらに微結晶性セルロースのようなセルロースがある。組成中の希釈剤の量は、例えば組成全体の重量の約１０から約９０％、約２５から７５％、重量で約３０から６０％、あるいは約１２から約６０％である。
【０１５２】
錠剤分解物質は、医薬的組成物に追加されて、活性製剤を崩壊（分解）させ、放出させるのに役立つ材料である。適切な錠剤分解物質には、デンプン・グリコール酸ナトリウムのような「冷水に可溶な」加工でんぷんを含むでんぷん、イナゴマメ、カラヤ、グアール、トラガカントゴムや寒天のような天然および人工ゴム、メチルセルロースおよびカルボキシメチルセルロースナトリウムのようなセルロース誘導体、微結晶性セルロースおよびクロスカルメロースナトリウムのような架橋重合微結晶性セルロース、アルギン酸およびアルギン酸ナトリウムなどのようなアルギン酸塩、ベントナイトのような粘土、さらに発泡性の混合物などのデンプンを含む。組成中の錠剤分解物質の量には範囲があり、例えば組成の重量の約２から約１５％または重量の約４から約１０％である。
【０１５３】
潤滑剤は、打錠された後、摩擦や磨耗を低減することにより錠剤、顆粒がモールドや金型から離型できるようにするために医薬製剤に追加される物質である。医薬的剤形に有用な潤滑剤の例としては、ホウ酸、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウムなどである。潤滑剤は、顆粒の表面とその間に付着し、また打錠機の部品に行きわたらなければならないので、通常タブレットの打錠成形前の直前のステップで添加される。組成中の潤滑剤の量には範囲があり、例えば組成の重量の約０．１から約５％または約０．５から約２％、または重量で約０．３％から１．５％である。単位用量における本発明の化合物または塩の量は、化合物の特定の用途および効能によって約１．０ミリグラムから約１，０００ミリグラム、約１．０から約９００ミリグラム、約１．０から約５００ミリグラム、あるいは約１から約２５０ミリグラムである。実際に使用される用量は、患者の年齢、性別、体重および症状の重症度に応じて変えることができる。
【０１５４】
通常、経口投与用に製剤された医薬的組成物が望ましい。このような組成は、本発明の化合物を０．１および９９％の間で含有し、通常本発明の化合物を少なくとも約５％（重量％）含む。実施例の中には発明化合物を約２５％から５０％、あるいは５％から７５％含むものがある。
【０１５５】
液剤
発明化合物は、例えば水性または油性懸濁液、液剤、エマルジョン、シロップ、チンキ剤、シロップ、またはエリキシル剤のような経口液製剤に含有させることができる。さらにこのような化合物を含む製剤は、使用前に水またはその他の適切な媒体とともに例えば顆粒や粉末のような乾燥製品として提供されることも可能である。シロップ、エリキシル剤、エマルジョンおよび懸濁液用のキャリアの典型的な構成要素は、エタノール、グリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、液体スクロース、ソルビトールおよび水を含む。液体製剤は、懸濁化剤（例えばソルビトールシロップ、メチルセルロース、グルコース／糖、シロップ、ゼラチン、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ステアリン酸アルミニウムゲルおよび食用硬化油脂）、乳化剤（例えばレシチン、ソルビタンモノソリエート（sorbitan monsoleate）またはアカシア）、食用油（例えばアーモンドオイル、ヤシ油、シリルエステル、プロピレングリコールおよびエチルアルコール）と防腐剤（例えばｐ−ヒドロキシ安息香酸メチルまたはｐ−ヒドロキシ安息香酸プロピルおよびソルビン酸）を含む非水性の媒体従来の添加剤を含むことができる。経口製剤は、緩和剤、香料添加剤、スクロースやサッカリンのような甘味料、味を添加するもの、着色剤を含むことがある。
【０１５６】
懸濁液
水性の懸濁液は、水性の懸濁液の製造に適する賦形剤との混合に活性物質を含む。そのような賦形剤は、例えばＡＶＩＣＥＬ  ＲＣ−５９１、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガカントゴム、およびアカシアゴムのような懸濁化剤、例えばレシチンおよびポリソルベート８０などの分散剤または湿潤剤である。また水性懸濁液は、例えばエチル、ｎ−プロピルｐ−ヒドロキシ安息香酸、メチルパラベン、プロピルパラベンおよび安息香酸ナトリウムのような１つ以上の防腐剤を含むこともある。
【０１５７】
油性懸濁液は、例えばピーナッツ油、オリーブ油、ゴマ油、ココナッツ油のような植物油、あるいは流動パラフィンのような鉱物油に活性成分を懸濁させることにより生成される。油性懸濁液は、例えば蜜ろう、固形パラフィン、またはセチルアルコールのような増粘剤を含むことがある。上記の述べたような甘味料および香料添加剤は、口当たりのよい経口製剤を提供するために添加されることがある。このような組成は、アスコルビン酸のような酸化防止剤の添加により保存されることがある。
【０１５８】
乳化剤
本発明の医薬的組成は、水中油型乳剤の形であってもよい。油相は、例えばオリーブ油またはピーナッツ油のような植物油か、または例えば流動パラフィンやこれらの混合のような鉱物油であってもよい。適切な乳化剤は、例えばアカシアゴムまたはトラガカントゴムのような天然ゴム、大豆のような天然のリン脂質、レシチン、および脂肪酸から抽出されたエステルか部分的エステル、ヘキシトール、例えばソルビタンモノソリエート（sorbitan monoleate）のような無水石膏、さらに例えばポリオキシエチレンソルビタンモノソリエート（polyoxyethylene sorbitan monoleate）のようなエチレンオキシドをもつ前述の部分エステルの縮合生成物でもよい。
【０１５９】
錠剤およびカプセル
錠剤は典型的に、例えば炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、マンニトール、ラクトースおよびセルロースのような不活性希釈剤、例えばデンプン、ゼラチンおよびスクロースのようなバインダ、例えばデンプン、アルギン酸およびクロスカルメロースのような錠剤分解物質、例えばステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸およびタルクのような潤滑剤と医薬的に混合可能な従来のアジュバントから構成される。二酸化ケイ素のような流動促進剤は、粉末混合物の流量特性を向上させるために使用できる。ＦＤ＆Ｃ染料のような着色剤を外観のために添加することができる。アスパルテーム、サッカリン、メントール、ペパーミントおよびフルーツの香料などの甘味料と香料添加剤は、チュアブル錠に有用なアジュバントである。（持続放出および徐放製剤を含む）カプセルは、典型的に上記で開示した１つまたはそれ以上の固形希釈剤から構成される。キャリア成分の選択は、往々にして味、コストおよび保管時の安定性のような二次的考慮に依存する。
【０１６０】
そのような組成は、典型的にｐＨまたは時間依存性のコーティングで従来の方法によりコーティングされることも可能で、それにより対象化合物が望ましい局所適用の消化管の近くで、あるいは望ましい作用を延長するような様々なタイミングで放出されるようになる。そのような剤形は典型的に１またはそれ以上の酢酸フタル酸セルロース、フタル酸ポリ酢酸ビニル、フタル酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース、エチルセルロース、オイドラギット（Eudragit）コーティング、ワックス、シェラックを含むが、それに限定されるものではない。
【０１６１】
経口用製剤は、硬い、または柔らかいシェル（殻）のカプセルで提供されることもある。カプセルは、特別な容器または活性製剤を含む封入物で投与される剤形である。活性製剤は、固体、液体、ゲル状または粉末、あるいはその他の医薬的に許容される形態で提供される。カプセルのシェルは、メチルセルロース、ポリビニルアルコールまたは変性したゼラチンかデンプンまたはその他の素材から作られている。固いシェルは、典型的に比較的ゲル強度の高い骨とブタの皮のゼラチンのブレンドで作られる。柔らかいカプセルのシェルは、通常動物性または植物性ゼラチンから作られる。カプセル自体は、少量の染料、不透明にする物質、可塑剤および防腐剤を含むことがある。
【０１６２】
カプセル内の活性製剤は、例えば炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、またはカオリンのような不活性固形希釈剤と混合される、あるいは柔らかいゼラチンカプセルの場合活性製剤は、例えばピーナッツ油、流動パラフィンまたはオリーブ油のような水性または油性媒体と混合される。
【０１６３】
注入用および非経口製剤
医薬的組成物は、無菌注射用水溶液または油性懸濁液の形態をとることが可能である。この懸濁液は、適切な分散剤または湿潤剤および上記に述べた懸濁化剤を使用する既知の技術にしたがって調製される。また例えば１，３−ブタンジオール中の溶液のように無菌注射用製剤は、毒性のない非経口用に許容される希釈剤または溶媒中の無菌注射溶液または懸濁液もありうる。使用可能な許容される媒体および溶剤の中には水、リンガー溶液および等張の塩化ナトリウム溶液がある。さらに無菌の不揮発性油が従来溶剤または懸濁媒質として使用される。この目的のために合成のモノグリセリドまたはジグリセリドを含むいかなるブランドの不揮発性油を使用することもできる。加えてオレイン酸のような脂肪酸が注射用製剤の調製に有用である。
【０１６４】
発明の化合物は、無菌の媒体で、非経口で投与することができる。非経口投与には、皮下注射や静注、筋肉注射、髄膜注射あるいは注入テクニックが含まれる。使用される媒体および濃度に応じて薬剤は媒体に懸濁または溶解のいずれかである。有利なことに、局所麻酔、防腐剤および緩衝剤のようなアジュバントは、媒体に溶解させることができる。非経口投与用の組成でキャリアは典型的に全組成の重量で最低約９０％を構成する。
【０１６５】
治療法
本発明は、Ｃ型肝炎感染のリスクがある、またはＣ型肝炎ウィルスに感染している患者に発明の化合物の有効量を提供することにより、Ｃ型肝炎の感染を予防し、治療する方法も含む。
【０１６６】
ここで開示される医薬的組合せは、患者のＣ型肝炎の予防と治療に有用である。本発明の医薬的組合せの有効量は、（ａ）Ｃ型肝炎に感染しやすいが、まだそれに感染していると診断されていない患者のＣ型肝炎またはＣ型肝炎の症状を予防するか、またはＣ型肝炎の（慢性的なＨＣＶ感染に帰結する可能性のある肝線維症のような）一次感染症に関連あるいは起因する疾病を予防し、（ｂ）Ｃ型肝炎の進行を阻止し、さらに（ｃ）Ｃ型肝炎の退行を引き起こすのに十分な量である。Ｃ型肝炎の進行を阻止するか、退行を引き起こす医薬的組成の有効量にはＣ型肝炎の症状の悪化を阻止する、あるいはＣ型肝炎ウィルスに感染した患者の経験する症状を軽減するのに有効量を含む。その代わりに、Ｃ型肝炎の進行中止または退行がこの疾病のいくつかのマーカーのうちのいずれかにより示唆されることもある。例えば、Ｃ型肝炎ウィルス量の増加なし、または減少、あるいは患者の血液中に循環抗体の増加なし、または減少は、Ｃ型肝炎感染の進行中止または退行を示すマーカーである。他のＣ型肝炎疾病マーカーには、アミノトランスフェラーゼのレベル、とりわけ肝臓酵素ＡＳＴおよびＡＬＴのレベルがある。正常なＡＳＴレベルは、血清（血液の一部）１リットルあたり５から４０ユニットであり、正常なＡＬＴレベルは血清１リットルあたり７から５６ユニットである。典型的にＨＣＶ感染患者は、このようなレベルが高くなる。通常ＡＳＴおよびＡＬＴのレベルが正常の範囲に戻ることにより疾病の退行と判断される。
【０１６７】
発明の医薬的組合せの有効量に影響されるＣ型肝炎の症状には、肝機能の低下、疲労、インフルエンザに似た症状、発熱、悪寒、筋肉痛、関節痛、および頭痛、吐き気、特定の食べ物の嫌悪、説明できない体重減少、うつ病を含む精神的疾患、腹部の圧痛、および黄疸がある。
【０１６８】
「肝機能」とは、肝臓の正常な機能をさすが、（例えばアルブミン、凝固因子、アルカリフォスファターゼ、アラニントランスアミナーゼやアスパラギン酸トランスアミナーゼのようなアミノトランスフェラーゼ、５’−ヌクレオシダーゼ、ｙグルタモイルトランスぺプチダーゼなど）血清タンパク質合成、ビリルビンの合成、コレステロールの合成、胆汁酸の合成などのタンパク質の合成、炭水化物の代謝やアミノ酸とアンモニア代謝、ホルモン代謝および脂質代謝などの肝臓代謝機能、外来性薬剤の解毒、さらに内臓の血行動態と門脈血行動態などの血行動態機能を含むがこれらに限定されるものではない。
【０１６９】
ここに説明する組合せの有効量は、また患者に投与される濃度で活性製剤の十分な濃度も提供する。活性製剤の十分な濃度とは、患者の体内で感染の予防または治療に必要な製剤濃度である。そのような量は、例えば製剤の血中濃度の分析または理論的なバイオアベイラビリティの計算により経験的に確定することができる。ウィルス感染を生体外で阻止するのに十分な活性製剤の量は、文献に説明されているレプリコンベースの試験のようなウィルス感染性の従来の試験で決定することができる。
【０１７０】
発明は、発明の化合物と少なくとも１つの追加活性製剤から構成される医薬的組合せを予防的療法に使用することも含む。予防的治療において発明の化合物の有効量は、患者のＣ型肝炎への罹患リスクを有意に低下させるのに十分な量である。
【０１７１】
治療法は、発明の化合物と少なくとも１つの追加活性製剤の一定の用量を患者に提供することを含む。各活性製剤の用量レベルとしては、体重１キログラムにつき１日約０．１ｍｇから約１４０ｍｇが上記の適応症状の治療に有効である（１日患者ひとりあたり約０．５ｍｇから約７ｇ）。キャリアの材料と組み合わせて単回投与の剤形を作る活性製剤の量は、治療される患者および特定の投与方法に応じて変わる。単位用量の形態は、一般的に各活性製剤を約１ｍｇから約５００ｍｇの範囲で含む。特定の実施例では、発明の化合物２５ｍｇから５００ｍｇ、あるいは２５ｍｇから２００ｍｇが毎日患者に提供される。追加の活性製剤がＮＭ２８３（バロピシタビン）の場合、いずれかの薬剤として典型的には１日に１００ｍｇから１０００ｍｇ、または１日に２００から８００ｍｇ、あるいは１日に２００から４００ｍｇが患者に提供される。追加の活性製剤がＶＸ−９５０の場合、１日に１０００ｍｇから３７５０ｍｇまたは１日に１２００ｍｇから１８００ｍｇが患者に投与される。ＶＸ−９５０が追加の活性製剤である治療計画では、ＶＸ−９５０を約３５０から約４５０ｍｇまたは約７００から約８００ｍｇが１日に３回患者に投与されるか、あるいは約３５０から約４５０ｍｇまたは約７００から約８００ｍｇを１２時間ごとに投与することが発明に含まれる。
【０１７２】
服用の頻度も使用される化合物および治療される特定の疾病に応じて変わる。しかし大部分の感染症の治療において１日４回以下の用法が望ましく、１日に１回または２回の用法が特に望ましい。
【０１７３】
しかしいかなる特定の患者の具体的な用量レベルは、使用される具体的な化合物の活性、年齢、体重、全般的な健康状態、性別、食習慣、投与の時間、投与経路および排泄の程度、併用薬剤および治療を受けている個々の疾病の重症度を含む様々な要素に依存する。
【０１７４】
組合せ（併用）法
発明は、発明の化合物または塩が少なくとも１つの追加活性製剤とともに提供される治療法を含む。一部の実施例では、（単数または複数の）活性製剤は、ＨＣＶプロテアーゼ阻害剤またはＨＣＶポリメラーゼ阻害剤である。例えばプロテアーゼ阻害剤は、テラプレビア（ＶＸ−９５０）であり、ポリメラーゼ阻害剤はバロピシタビン、あるいは生体内でバロピシタビンが変換される活性製剤ＮＭ１０７である。
【０１７５】
発明の方法に従うと、発明の化合物および追加の活性製剤は、（１）共に製剤され、投与される、すなわち組み合わせた製剤で同時に送達される、（２）別々の製剤として交互にまたは並行して送達される、（３）技術で知られている他の併用治療計画によるものがある。交互療法で送達される場合、発明方法は、例えば別の溶液、乳化剤、懸濁液、錠剤、丸薬またはカプセル、または別の注射器で異なる注入で、連続して、発明の化合物および追加の活性製剤を投与または送達することから構成される。一般的に交互療法中各活性製剤の有効量が連続して投与されるが、同時治療では２つ以上の有効成分が一緒に投与される。間欠的な併用療法を使用することも可能である。
【０１７６】
一部の実施例では、式Ｉの化合物とペグインターフェロンまたはインターフェロン・ガンマのようなインターフェロンを患者に提供することが治療法に含まれる。インターフェロンは発明の化合物とともに提供される唯一の化合物であってよく、あるいはインターフェロンではない追加の活性製剤とともに提供されることもある。
【０１７７】
発明の化合物を含む治療および医薬的組合せの発明の方法は、以下の化合物および物質のいずれか、またはその組合せを追加の活性製剤とする。
【０１７８】
カスパーゼ阻害剤：ＩＤＮ６５５６（Idun Pharmaceuticals）
【０１７９】
シクロフィリン阻害剤：ＮＩＭ８１１（Novartis）およびＤＥＢＩＯ−０２５（Debiopharm）
【０１８０】
シトクロムP４５０モノオキシゲナーゼ阻害剤：リトナビル（ＷＯ９４／１４４３６）、ケトコナゾール、トロレアンドマイシン、４−メチルピラゾール、サイクロスポリン、クロメチアゾール、シメチジン、イトラコナゾール、フルコナゾール、ミコナゾール、フルボキサミン、フルオキセチン、ネファゾドン、セルトラリン、インディナビル、ネルフィナビル、アンプレナビル、フォサンプレナビル、サクイナビル、ロピナビル、デラビルディン、エリスロマイシン、ＶＸ−９４４およびＶＸ−４９７。好ましいＣＹＰ阻害剤には、リトナビル、ケトコナゾール、トロレアンドマイシン、４−メチルピラゾール、サイクロスポリン、およびクロメチアゾールが含まれる。
【０１８１】
グルココルチコイド：ヒドロコルチゾン、コルチゾン、プレドニゾン、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、トリアムシノロン、パラメタゾン、βメタゾンおよびデキサメタゾン。
【０１８２】
赤血球生成促進因子：赤血球生成促進因子−１および赤血球生成促進因子−２。コロニー刺激因子（例えば、Ｇ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、Ｍ−ＣＳＦ）、ＥｐｏおよびＳＣＦ（幹細胞刺激因子）のような赤血球生成促進因子上科に属する他の構成要素。
【０１８３】
ホメオパシー療法：オオアザミ、シリマリン、朝鮮人参、グリシルリジン、甘草、チョウセンゴミシ、ビタミンＣ、ビタミンＥ、βカロチン、およびセレン
【０１８４】
免疫調節化合物：サリドマイド、ＩＬ−２、赤血球生成促進因子、例えばメリメポディブ（Vertex Pharmaceuticals Inc.）のようなＩＭＰＤＨ阻害剤、（天然型インターフェロンのブレンドであるオムニフェロン（ヴィラジェン）とスミフェロン（スミトモ）のような）天然型インターフェロンを含むインターフェロン、天然型インターフェロンα（アルフェロン（Hemispherx Biopharma, Inc.））、リンパ芽球様細胞からのインターフェロンαｎｌ（ウェルフェロン（グラクソ・ウェルカム））、経口αインターフェロン、ペグ−インターフェロン、ペグ−インターフェロンα２ａ（ペガシス（ロシュ））、遺伝子組み換えインターフェロンα２ａ（ロフェロン（ロシュ））、吸入インターフェロンα２ｂ（ＡＥＲＸ（アラジン））、ペグ−インターフェロンα２ｂ（アルブフェロン（Human Genome Sciences / Novartis）、ペグイントロン（シェリング））、遺伝子組み換えインターフェロンα２ｂ（イントロンＡ（シェリング））、ペグインターフェロンα２ｂ（ペグ−イントロン（シェリング）、ビラフェロンペグ（シェリング））、インターフェロンβ−１ａ（ＲＥＢＩＦ（Serono, Inc.およびファイザー）、コンセンサス・インターフェロンα（インフェルゲン（Valeant Pharmaceutical））、インターフェロンγ−１ｂ（アクチミューン（Intermune, Inc.））、非ペグ化インターフェロンα、αインターフェロンとその類似体および合成サイモシンα１（ザダキシン（SciClone Pharmaceuticals Inc.））。
【０１８５】
免疫抑制剤：シロリムス（ラパミューン（Wyeth））
【０１８６】
インターロイキン：（ＩＬ−１、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−１０、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２）、ＬＩＦ、ＴＧＦ−β、ＴＮＦ−α）および他の低分子量因子（例えばＡｃＳＤＫＰ、ｐＥＥＤＣＫ、胸腺ホルモンおよびミニサイトカイン）
【０１８７】
インターフェロン・エンハンサー：ＥＭＺ７０２（トランジション・セラピューティクス）
【０１８８】
ＩＲＥＳ阻害剤：ＶＧＸ−４１０Ｃ（ＶＧＸファーマ）
【０１８９】
モノクロナールおよびポリクロナール抗体：ＸＴＬ−６８６５（ＸＴＬ）、ＨｕＭａｘ−ＨｅｐＣ（Ｇｅｎｍａｂ）、Ｃ型肝炎イムノグロビン（ヒト）（ＣＩＶＡＣＩＲ（Nabi Biopharmceuticals）
【０１９０】
ヌクレオシド類似体：ラミブジン（エピビール、３ＴＣ、グラクソスミスクライン）、ＭＫ−０６０８（メルク）、ザルシタビン（ＨＩＶＩＤ（Roche US Pharmaceuticals））、リバビリン（コペガス（ロシュ）、レベトール（シェリング）、ビロナ（ICN Pharmaceuticals）およびビラゾール（ICN Pharmaceuticals）を含む）、さらにリバビリンのアミジン・プロドラッグであるビラミジン（Valeant Pharmaceuticals）。ヌクレオシド類似体の併用も使用することができる。
【０１９１】
非ヌクレオシド阻害剤：ＰＳＩ−６１３０（ロシュ/ Pharmasset）、デラビリジン（ＲＥＳＣＲＩＰＴＯＲ（ファイザー）およびＨＣＶ−７９６（Viropharm）
【０１９２】
Ｐ７タンパク質阻害剤：アマンタジン（ＳＹＭＭＥＴＲＥＬ（Endo Pharmaceuticals, Inc.）
【０１９３】
ポリメラーゼ阻害剤：ＮＭ２８３（バロピシタビン）（Idenix）およびＮＭ１０７（Idenix）。
【０１９４】
プロテアーゼ阻害剤：ＢＩＬＮ−２０６１（Boehringer Ingelheim）、ＧＷ−４３３９０８（アンプレナビルのプロドラッグ（Glaxo/ Vertex））、インディナビル（ＣＲＩＸＩＶＡＮ（メルク）、ＩＴＭＮ−１９１（Intermune/ Array Biopharma）、ＶＸ９５０（Vertex）と前述のプロテアーゼ阻害剤の1つかそれ以上から構成される組合せ。
【０１９５】
ＲＮＡ干渉：ＳＩＲＮＡ−０３４  ＲＮＡｉ（Sirna Therapeutics）
【０１９６】
治療ワクチン：ＩＣ４１（Intercell）、ＩＭＮ−０１０１（Imnogenetics）、ＧＩ５００５（Globeimmune）、Ｃｈｒｏｎｖａｃ−Ｃ（Tripep/ Inovio）、ＥＤ−００２（Imnogenetics）、Ｈｅｐａｖａｘｘ  Ｃ（ViRex Medical）
【０１９７】
ＴＮＦ作動薬：アダリムマブ（ヒュミラ（Abbott））、エンタネルセプト（エンブレル（Amgen and Wyeth））、インフリキシマブ（レミケード（Centocor, Inc.））
【０１９８】
テュブリン阻害剤：コルヒチン
【０１９９】
スフィンゴシン−１−リン酸受容体調節：ＦＴＹ７２０（Novartis）
【０２００】
ＴＬＲアゴニスト：ＡＮＡ−９７５（Anadys Pharmaceuticals）、ＴＬＲ７アゴニスト（Anadys Pharmaceuticals）、ＣＰＧ１０１０１（Coley）およびＣＰＧ７９０９（Coley）を含むＴＬＲ９アゴニスト
【０２０１】
シクロフィリン阻害剤：ＮＩＭ８１１（Novartis）およびＤＥＢＩＯ−０２５（Debiopharm）
【０２０２】
Ｃ型肝炎治療薬を服用する患者は、典型的に別の活性製剤とともにインターフェロンの投与を受けている。したがって発明の化合物がペグインターフェロンα２ａのようなインターフェロンとともに追加活性製剤として提供される治療法と医薬的組合せは、実施例として含まれる。同様にリバビリンが追加の活性製剤である方法および医薬的組合せもここに提供される。
【実施例】
【０２０３】
すべての非水反応は、乾燥アルゴンガス（９９．９９％）雰囲気下で行われる。磁気共鳴スペクトルは、Bruker Avance 300スペクトロメーター（１Ｈは３００．１ＭＨｚで、また１３Ｃは７５．５ＭＨｚで）を使って周囲温度で記録された。１Ｈおよび１３Ｃの化学シフトは、外部テトラメチルシランに対するｐｐｍ（d）で記録され、重水素化溶媒の残留陽子の信号を基準とする。流速１．０ｍＬ／分および紫外検出２５４ｎｍで０．１％トリフルオロ酢酸を含む水の中でアセトニトリル濃度が高くなる（５％から９５％）２０−ｍｉｎ線形勾配溶離をもつＷａｔｅｒｓ  Ｘ−ｂｒｉｄｇｅ  Ｃ１８、１５０×４．６ｍｍ、３．５μｍカラムを使ってＨＰＬＣ分析が実施される。低解像度のマススペクトラムがＧｉｌｓｏｎ液体クロマトグラフィーを備えたＴｈｅｒｍｏ  Ｆｉｎｎｉｇａｎ  Ｓｕｒｖｅｙｏｒ  ＭＳＱ計器（ＡＰＣＩモードで操作）で記録される。別途明記しない限り、低解像度のマススペクトラムで観察される擬分子イオン［Ｍ＋Ｈ］＋が基準ピークである。
【０２０４】
本発明はさらに以下の例により説明されるが、これらにより限定されるものと解釈されるべきではない。
【０２０５】
略語
以下の化学的略語が実施例１から３に使用される。このような実施例で使用される追加の略語は、有機化学合成の技術を持つ者には周知のものである。
【０２０６】
ＡｃＯＥｔ      酢酸エチル
ＡＩＢＮ        ２，２’−アゾビス（２−メチルプロピオニトリル）
ＢＯＣ          ｔ−ブトキシカルボニル
（ＢＯＣ）２Ｏ    ジ−ｔ−ブチルジカーボネート
ｃ．            濃縮された
ＣＤＩ          １，１’−カルボニルジイミダゾール
ＤＣＭ            ジクロロメタン
ＤＩＰＥＡ      ジイソプロピルエチルアミン
ＥＤＣＩ        １−エチル−３−［３−ジメチルアミノプロピル］カルボジイミド
Ｅｔ３Ｎ        トリエチルアミン
ＥｔＯＨ        エタノール
Ｈｅｘ．        へキサン
ＭｅＯＨ        メタノール
ＴＦＡ          トリフルオロ酢酸
ＴＨＦ          テトラヒドロフラン
ＴＬＣ          薄層クロマトグラフィー
【０２０７】
（実施例１）  三級アミン置換チアゾール（化合物２０−２５）の合成
【０２０８】
【化１６】
2010519339.tif 000017
【０２０９】
ステップ１）  Ｎ１，Ｎ４−ジシクロプロピル−２，３−ジヒドロキシサクシンアミド（化合物２）の調製
シクロプロピルアミン（２．４当量）とジエチル酒石酸ジエチル１の混合物を密閉された試験管で一晩７０℃に熱する。生成された固形分をジエチルエーテルで洗浄し、純粋な生成物２を得る（収率＞９８％）。
【０２１０】
ステップ２）  Ｎ−シクロプロピル−２−ヒドロキシ−３−ニトロヘキサンアミド（化合物４）の調製
Ｈ５ＩＯ６（５．８ｇ、２５．２ｍｍｏｌ）が化合物２（５．７ｇ、２５ｍｍｏｌ）の懸濁液に数回の分量に分けて添加され、シリカゲル（２．０ｇ）を０℃でメタノールに加える。添加が完了したら、混合物をさらに１時間半にわたって室温まで加熱し、化合物３の形成を完了させる。１−ニトロブタン（６．２ｇ、１．２当量）を０℃で添加し、その後Ｅｔ３Ｎ（７．４ｍＬ）を加える。混合物は０℃で２時間半にわたって撹拌し続ける。固形分をろ過により除去し、ろ液を濃縮する。その結果生成されるシロップは、水と酢酸エチルで処理し、１ＮのＨＣｌで酸化される。有機層を集め、水層は酢酸エチルで３回抽出される。組み合わせた有機溶剤をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させる。溶剤を除去し、その結果得られる固形分をまずヘキサンで洗浄し、次にヘキサン−エーテルで再結晶させ、化合物４（収量＞７０％）が得られる。
【０２１１】
ステップ３）  ３−アミノ−Ｎ−シクロプロピル−２−ヒドロキシへキサンアミド（化合物５）の調製
酢酸中の化合物４およびＰｄ（パラジウム／炭素（Ｐｄ１０％）、４の重量の３０％）がＨ２（３３ｐｓｉ）で一晩水素添加される。混合物をセライトでろ過し、ろ液を濃縮する。残りの残留物をトルエンで２回蒸発させ、次にジエチルエーテルを化合物５に加える。
【０２１２】
ステップ４）  （１Ｓ，３ａＲ，６ａＳ）−エチル−２−ＢＯＣ置換−４−オキソオクタヒドロシクロペンタ［ｃ］ピロール−１−カルボン酢酸（化合物７）の調製
まずＢｕ３ＳｎＨ（アルドリッチ、３６ｍｌ、１３６ｍｍｏｌ）、次にＡＩＢＮ（２．５ｇ、１５ｍｍｏｌ）を無水トルエン（１６０ｍｌ）に溶解された四環系化合物６（ＪＯＣ５９，２７７３，１９９４で報告されるＭｏｎｎ‘ｓ法により調製されたもの３１．１ｇ、１００ｍｍｏｌ）に加える。混合物はＴＬＣ（Ｈｅｘ／ＡｃＯＥｔ、１／１）に示されるように出発物質がなくなるまで（〜６時間）Ａｒでガス抜きし、還流させる。減圧下でトルエンが蒸発し、オイル残渣はジエチルエーテル（１００ｍｌ）とＨＣｌ水溶液（１．０Ｎ、１１０ｍｌ）で処理される。一晩激しい攪拌をした後、ジエチルエーテルが分離される。水層がジエチルエーテル（１００ｍｌ×６回）で抽出され、次のステップで使用される。
【０２１３】
ＴＨＦに溶解された（ＢＯＣ）２Ｏ（３２．７ｇ、１５０ｍｍｏｌ）を上記で得られた水溶液（１００ｍｌ）に追加し、次にＮａＯＨａｑ（水１０ｍｌに４．５ｇ）を加える。次に混合物を氷槽で冷却する。混合物を１時間撹拌した後、ＮａＣｌ（ｓ、３０ｇ）を追加し、攪拌する。有機層と水層がＡｃＯＥｔ（５０ｍｌ×３回）で抽出される。組み合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させる。蒸発後、溶離液としてＨｅｘ／ＡｃＯＥｔ（４：１から３：１）とともに、油性の粗製がシリカゲルクロマトグラフィーで精製される。化合物７（２５ｇ、８４％）が無色の液体として得られる。
【０２１４】
ステップ５）  （１Ｓ，３ａＲ，６ａＳ）−エチル２−ＢＯＣ−４−ヒドロキシオクタシクロペンタ［ｃ］ピロール−１−カルボン酸塩（化合物８）の調製
ＮａＢＨ４（２．６ｇ、６７．３ｍｍｏｌ）を３回に分けて０℃で撹拌しながらＥｔＯＨ（１５０ｍｌ）中の化合物７（２０ｇ、６７．３ｍｍｏｌ）に加える。ＡｃＯＨ（１０ｍｌ）を０℃で注意深く加えて反応を抑えるまで、混合物をさらに１時間撹拌し、完了する。ＥｔＯＨを蒸発させて除去し、残留物をＡｃＯＥｔ（３００ｍｌ）で溶解し、水性ワークアップを実施する。飽和ＮａＨＣＯ３（１００ｍｌ×２）およびブライン（１００ｍｌ）で洗浄し、ＮａＳＯ４で乾燥させた後、ＡｃＯＥｔ溶液をシリカゲルのショートベッドに通す。溶媒を蒸発させ、無色のシロップとして化合物８（１９．２ｇ、９５％）が得られる。
【０２１５】
ステップ６）  （１Ｓ，３ａＲ，６ａＳ）−エチル２−ＢＯＣ−４−（フェノキシカルボノチオイルオキシ（phenoxycarbonothioyloxy））オクタヒドロシクロペンタ［ｃ］ピロール−１−カルボン酸塩（化合物９）の調製
ｏ−フェニルクロロチオノフォルメート（１０ｍｌ、７０．６ｍｍｏｌ）をＡｒ雰囲気下０℃で撹拌しながらＤＣＭ（１５０ｍｌ）中の化合物８（１９．２ｇ、６４．２ｍｍｏｌ）の溶液に追加し、次にピリジン（６．２２ｍｌ、７７．０４ｍｍｏｌ）を加える。混合物を室温で一晩撹拌する。過剰なフェニルクロロチオノカーボネートを破壊するために、水性ワークアップを実施する前にメタノール（５ｍｌ）を加える。有機層を１ＮのＨＣｌ（１００ｍｌ）、水（１００ｍｌ）、飽和ＮａＨＣＯ３（１００ｍｌ）、およびブライン（１００ｍｌ）で順に洗浄する。ＮａＳＯ４で乾燥させた後、蒸発により溶媒を除去し、金色のシロップとして化合物９（２７．５ｇ、９９％）が得られる。
【０２１６】
ステップ７）  （１Ｓ，３ａＲ，６ａＳ）−エチル２−ＢＯＣ−オクトハイドロシクロペンタ［ｃ］ピロール−１−カルボン酸塩（化合物１０）の調製
Ｂｕ３ＳｎＨ（２５ｍｌ、９４．８ｍｍｏｌ）と、その後ＡＩＢＮ（１．５５ｇ、９．４８ｍｍｏｌ）が室温でベンゼン中（６０ｍｌ）の化合物９（２７．５ｇ、６３．２ｍｍｏｌ）に追加される。混合物は、２度ガス抜きをして、Ａｒ下で４時間、還流温度で撹拌する。揮発性物質が蒸発し、残留物はシリカゲル上Ｈｅｘ／ＡｃＯＥｔ（勾配９／１から６／１）を溶離剤としてフラッシュクロマトグラフィーで精製され、化合物１０（１３ｇ、７３％）が無色の液体として得られる。
【０２１７】
ステップ８）  （１Ｓ，３ａＲ，６ａＳ）−２−ＢＯＣ−オクタヒドロシクロペンタ［ｃ］ピロール−１−カルボン酸（化合物１１）の調製
化合物１０（１３ｇ、４６ｍｍｏｌ）は、室温で３時間ＥｔＯＨ（１２０ｍｌ）中で２ＮのＮａＯＨ（４４ｍｌ）で処理される。揮発物を蒸発させて、その残留物を水（５０ｍｌ）で溶解する。ｐＨを〜２に調製するために１ＮのＨＣｌを添加し、その水溶液をＤＣＭ（１００ｍｌ×３）で逆抽出する。ＤＣＭを蒸発させると化合物１１（８．５ｇ，７２％）が無色のシロップとして得られる。
【０２１８】
ステップ９）  （１Ｓ，３ａＲ，６ａＳ）−Ｎ−（１−（シクロプロピルアミノ）−２−ヒドロキシ−１−オキソへキサン−３−イル）−２−ＢＯＣ−オクタヒドロシクロペンタ［ｃ］ピロール−１−カルボキサミド（化合物１２）の調製
化合物１１（３．０６ｇ、１２ｍｍｏｌ）は、ＤＣＭ（５０ｍｌ）中ＥＤＣＩ（２．３ｇ、１２ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（１．８４ｇ、１２ｍｍｏｌ）で１０分間処理される。まず化合物５（１．７９ｇ、９．６ｍｍｏｌ）、次にＤＩＰＥＡ（２．６ｍｌ、１５ｍｍｏｌ）が添加され、混合物を室温で一晩撹拌する。溶媒を除去するために混合物を蒸発させ、残留物をＡｃＯＥｔ（２００ｍｌ）で処理する。１ＮのＨＣｌを２０ｍｌ、飽和ＮａＨＣＯ３を５０ｍｌ×３回、およびブライン（５０ｍｌ）で順に洗浄し、ＮａＳＯ４で乾燥させた後、溶媒を蒸発させて除去すると、化合物１２（３．８５ｇ、９５％）が白色発泡体として得られる。
【０２１９】
ステップ１０）  （１Ｓ，３ａＲ，６ａＳ）−Ｎ−（１−（シクロプロピルアミノ）−２−ヒドロキシ−１−オキソへキサン−３−イル）オクタヒドロシクロペンタ［ｃ］ピロール−１−カルボキサミド（化合物１３）の調製
化合物１２（０．８４５ｇ、２ｍｍｏｌ）はＤＣＭ（１０ｍｌ）中０℃で２時間ＴＦＡ（５ｍｌ）を使って処理する。混合物を乾燥するまで蒸発させる。そのようにして得られる黄色いシロップをＤＣＭ（２０ｍｌ）に溶解させ、次のステップのための原液１３（０．１Ｍ）が生成される。
【０２２０】
ステップ１１）  （１Ｓ，３ａＲ，６ａＳ）−Ｎ−（１−（シクロプロピルアミノ）−２−ヒドロキシ−１−オキソへキサン−３−イル）−２−（２−（ピペリジン−１−イル）プロパノイル）オクタヒドロシクロペンタ［ｃ］ピロール−１−カルボキサミドおよび関連化合物（化合物１４−１９）の調製
２−ピペリジン−１−イル−プロピオン酸塩酸塩（６３ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ）は、ＤＣＭ（２ｍｌ）中１０分間ＥＤＣＩ（７７ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（６１ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ）で処理する。まず化合物１３（０．１Ｍ、４ｍｌ）の原液、次にＤＩＰＥＡ（０．１２２ｍｌ、０．７ｍｍｏｌ）を添加し、その混合物を室温で一晩撹拌する。ＡｃＯＥｔ抽出および飽和ＮａＨＣＯ３洗浄による水性ワークアップにより、溶媒の除去後化合物１４（粗製、６８ｍｇ）が得られる。対応する酸からはじめて、化合物１５−１９が同様の方法で調整された。
【０２２１】
ステップ１２）  （１Ｓ，３ａＲ，６ａＳ）−Ｎ−（１−（シクロプロピルアミノ）−１，２−ジオキソへキサン−３−イル）−２−（２−（ピペリジン−１−イル）プロパノイル）オクタヒドロシクロペンタ［ｃ］ピロール−１−カルボキサミドおよび関連化合物（化合物２０−２５）の調製
化合物１４（６８ｍｇ）は、ＤＣＭ（５ｍｌ）中室温で２時間Ｄｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎ試薬（１００ｍｇ）で処理される。混合物を濃縮し、ＨＰＬＣで精製する。ＴＦＡ塩として化合物２０（１７ｍｇ）が得られる。化合物２１−２５は同様の方法で得られる。
【０２２２】
（実施例２）  （３Ｒ，５Ｓ）−５−（１−（シクロプロピルアミノ）−１，２−ジオキソへキサン−３−イルカルバモイル）−１−（２−（ピペリジン−１−イル）プロパノイル）ピロリジン−３−イル３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−カルボン酸塩（化合物３３）の合成
化合物３３および３４の合成を次のスキーム２に示す。
【０２２３】
【化１７】
2010519339.tif 000018
【０２２４】
ステップ１）  （３Ｒ，５Ｓ）−５−（メトキシカルボニル）−１−ＢＯＣ−ピロリジン−３−イル３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−カルボン酸塩（化合物２７）の調製
ＤＣＭ（１５ｍｌ）に溶解したＢｏｃ−ｔｒａｎｓ−Ｌ−４−ヒドロキシプロリンメチルエステル２６（２．４５ｇ、１０ｍｍｏｌ）を０℃でＤＣＭ（８０ｍｌ）中ＣＤＩ（１．６２ｇ、１０ｍｍｏｌ）溶液に滴下で添加する。室温で２時間撹拌した後、ＤＣＭ（５ｍｌ）中１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン（０．５４３ｇ、４．０８ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を一晩撹拌する。溶媒を除去し、残留物に水性ワークアップを適用する。酢酸エチル（２００ｍｌ）層を１ＮのＨＣｌ（２０ｍｌ×２）、飽和重炭酸ナトリウム水溶液（３０ｍｌ×３）、ブライン（１０ｍｌ）で順に洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥する。ろ過し、溶媒を蒸発により除去すると、化合物２７（３．８９ｇ、９６％）が黄色いシロップとして得られる。
【０２２５】
ステップ２）  （２Ｓ，４Ｒ）−１−ＢＯＣ−４−（１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−２−カルボニルオキシ）ピロリジン−２−カルボン酸（化合物２８）の調製
ＭｅＯＨ（３５ｍｌ）中の化合物２７（３．８９ｇ、９．６ｍｍｏｌ）を室温で３時間２ＮのＮａＯＨ（１５ｍｌ）で処理する。溶媒を蒸発により除去し、その残留物を水（５０ｍｌ）に溶解する。濃塩酸（ｃ．ＨＣｌ）を添加し、ｐＨを〜２に調整する。沈殿物をろ過により集め、乾燥させると、白い粉末状の化合物２８（３．３４ｇ、８９％）が得られる。
【０２２６】
ステップ３）  （３Ｒ，５Ｓ）−５−（１−（シクロプロピルアミノ）−２−ヒドロキシ−１−オキソへキサン−３−イルカルバモイル）−１−ＢＯＣ−ピロリジン−３−イル３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−カルボン酸塩（化合物２９）の調製
化合物２８（２．６７ｇ、６．８５ｍｍｏｌをＤＣＭ（５０ｍｌ）中１０分間ＥＤＣＩ（１．３３ｇ、６．８５ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（１．０６ｇ、６．８５ｍｍｏｌ）で処理する。まず化合物５（１．１５ｇ、６．２ｍｍｏｌ）、次にＤＩＰＥＡ（２．２ｍｌ、１２．４ｍｍｏｌ）を添加し、その混合物を室温で一晩撹拌する。混合物を蒸発させて、溶媒を除去し、その残留物をＡｃＯＥｔ（１００ｍｌ）で処理する。ＨＣｌ２０ｍｌ、飽和ＮａＨＣＯ３３０ｍｌ×３およびブライン５０ｍｌで順に洗浄し、ＮａＳＯ４で乾燥させた後、溶媒が蒸発により除去され、化合物２９（２．６ｇ、７５％）が白色発泡体として得られる。
【０２２７】
ステップ４）  （３Ｒ，５Ｓ）−５−（１−（シクロプロピルアミノ）−２−ヒドロキシ−１−オキソへキサン−３−イルカルバモイル）ピロリジン−３−イル３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−カルボン酸塩（化合物３０）の調製
ＤＣＭ（２５ｍｌ）中の化合物２９（２．６ｇ、４．６５ｍｍｏｌ）を０℃で１時間ＴＦＡ（２５ｍｌ）により処理する。揮発物を蒸発させて乾燥させる。残留物をＡｃＯＥｔ（１００ｍｌ）で溶解させ、飽和ＮａＨＣＯ３（１０ｍｌ×３）およびブライン（２ｍｌ）で洗浄する。ＮａＳＯ４で乾燥させた後、溶媒を蒸発により除去すると、化合物３０（１．７５ｇ、８２％）が黄白色の粉末として得られる。
【０２２８】
ステップ５）  （３Ｒ，５Ｓ）−５−（１−（シクロプロピルアミノ）−２−ヒドロキシ−１−オキソへキサン−３−イルカルバモイル）−１−（２−（ピペリジン−１−イル）プロパノイル）ピロリジン−３−イル３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−カルボン酸塩および関連化合物（化合物３１と３２）の調製
２−ピペリジン−１−イル−プロピオン酸塩酸塩（５８ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（５ｍｌ）中で１０分間ＥＤＣＩ（６３ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（４６ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）で処理する。まず化合物３０（０．１３８ｇ、０．３ｍｍｏｌ）、次にＤＩＰＥＡ（０．１０４ｍｌ、０．６ｍｍｏｌ）を添加し、その混合物を一晩室温で撹拌する。ＡｃＯＥｔ抽出と飽和ＮａＨＣＯ３洗浄の水性ワークアップにより、溶媒を除去後化合物３１（粗製、１８２ｍｇ）が得られる。対応する酸からはじめると、化合物３２（粗製、１７０ｍｇ）が同様の方法で調製される。
【０２２９】
ステップ６）  （３Ｒ，５Ｓ）−５−（１−（シクロプロピルアミノ）−１，２−ジオキソへキサン−３−イルカルバモイル）−１−（２−（ピペリジン−１−イル）プロパノイル）ピロリジン−３−イル３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−カルボン酸塩（化合物３３および３４）の調製
化合物３１（１８２ｍｇ）はＤＣＭ（５ｍｌ）中室温で２時間Ｄｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎ試薬（１７０ｍｇ）を使って処理される。その混合物は、濃縮され、ＨＰＬＣで精製される。化合物３３（４７ｍｇ）が黄白色の発泡体として得られる。化合物３４（３６ｍｇ）も同様の方法により得られる。
【０２３０】
（実施例３）  マクロ環状ペプチドケトアミドの合成
マクロ環状ペプチドケトアミドの合成は、次のスキーム３に示すように行われる。
【０２３１】
【化１８】
2010519339.tif 000019
スキーム３
【０２３２】
（実施例４）  マクロ環状ペプチドケトアミドの合成の代替法
マクロ環状ペプチド酸の合成は、次のスキーム４に示すように完了することも可能である。
【０２３３】
【化１９】
2010519339.tif 000020
【０２３４】
（実施例５）  追加の三級アミン置換ペプチド
表１〜１０（化合物表）に示す化合物は、実施例１から４に説明する方法により調製される。特定の化合物を得るためにこの方法を変える必要がある場合は、表１〜１０に示す。そのような変化は、有機合成化学の技術では日常業務であり、当業者には明白である。表１〜１０において、＋＋は、１００マイクロモル未満のＨＣＶレプリコン複製阻害を、また＋は、約１００マイクロモルの阻害を示す。
【０２３５】
【表１】
2010519339.tif 000021
【０２３６】
【表２】
2010519339.tif 000022
【０２３７】
【表３】
2010519339.tif 000023
【０２３８】
【表４】
2010519339.tif 000024
【０２３９】
【表５】
2010519339.tif 000025
【０２４０】
【表６】
2010519339.tif 000026
【０２４１】
【表７】
2010519339.tif 000027
【０２４２】
【表８】
2010519339.tif 000028
【０２４３】
【表９】
2010519339.tif 000029
【０２４４】
【表１０】
2010519339.tif 000030
【０２４５】
（実施例６）  ＨＣＶ複製を阻害する化合物同定のための試験
ここに特許請求される化合物は、ＨＣＶレプリコン構造が含まれている培養細胞でＣ型肝炎レプリコンのウィルス複製を阻害する能力について試験される。ＨＣＶレプリコンシステムは、Bartenschlagerほか（Science, 285, pp. 110-113 （1999））により説明された。レプリコンシステムは、体内での抗ＨＣＶ活性を予測するもので、ヒトの体内で活性のある化合物は、一様にレプリコン試験で活性を証明する。
【０２４６】
この試験では、ＨＣＶレプリコンの複製を抑制する試験化合物の能力を確認するために、ＨＣＶレプリコンを含む細胞が試験化合物の異なる濃度で処理される。陽性対照として、ＨＣＶレプリコンを含む細胞がＨＣＶ阻害剤として周知のインターフェロンαの異なる濃度で処理される。レプリコン試験システムは、宿主細胞のレプリコン遺伝子産物の転写を検出するために、レプリコン自体の構成要素としてネオマイシン・ホスホランスフェラーゼ（ＮＰＴ）を含む。ＨＣＶレプリコンが活発に複製している細胞はＮＰＴレベルが高い。すなわちＮＰＴレベルはＨＣＶ複製に比例する。またＨＣＶレプリコンが複製していない細胞はＮＰＴレベルが低いため、ネオマイシンで治療されると生存できない。各検体のＮＰＴレベルが吸着したＥＬＩＳＡを使って測定される。
【０２４７】
ＨＣＶレプリコン構造が含まれているＣ型肝炎レプリコン培養細胞のウィルス複製阻害する化合物の能力を調べる試験のプロトコルは、次のとおりである。
【０２４８】
６Ａ．ＨＣＶレプリコンおよびレプリコンの発現
ＨＣＶゲノムは３０００のアミノ酸ポリプロテインをコードする単一のＯＲＦから構成される。ＯＲＦは、内部リボゾーム侵入部位（ＩＲＥＳ）としての役割を果たす非翻訳領域により５’側上、およびウィルス複製に必要な高度な保存配列（３’−ＮＴＲ）により３’側で側面に位置する。ウィルス感染に必要な構造タンパク質は、ＯＲＦの５’端の近くに位置する。ＮＳ２からＮＳ５Ｂと指定される非構造タンパク質は、ＯＲＦの残りから構成される。
【０２４９】
ＨＣＶレプリコンは、５’−３’、ＨＣＶ−ＩＲＥＳ、ネオマイシン・ホスホランスフェラーゼ（ｎｅｏ）遺伝子、ＨＣＶ配列ＮＳ３の翻訳をＮＳ５Ｂに導く脳心筋炎ウィルスのＩＲＥＳ、および３’−ＮＴＲを含む。ＨＣＶレプリコンの配列は、ＧｅｎＢａｎｋに登録されている（受入れ番号ＡＪ２４２６５２）。
【０２５０】
レプリコンは、エレクトロポーレーションのような標準的な方法を使いＨｕｈ−７細胞に核酸を入れる。
【０２５１】
６Ｂ．細胞の維持
設備および資材には、Ｈｕｈ−７ＨＣＶレプリコンを含む細胞、１０％ＦＢＳで補足された維持培地ＤＭＥＭ（Dulbecco's modified Eagle media）、Ｌ−グルタミン、非必須アミノ酸、ペニシリン（１００  ｕｎｉｔｓ／ｍｌ）、ストレプトマイシン（１００  ｍｉｃｒｏｇｒａｍｓ／ｍｌ）およびゲネティシン５００  ｍｉｃｒｏｇｒａｍｓ／ｍｌ（Ｇ４１８）、スクリーニング用培地（１０％ＦＢＳで補足されたＤＭＥＭ、Ｌ−グルタミン、非必須アミノ酸、ペニシリン（１００  ｕｎｉｔｓ／ｍｌ）、ストレプトマイシン（１００  ｍｉｃｒｏｇｒａｍｓ／ｍｌ））、９６ウェル組織培養プレート（平底）、９６ウェルプレート（薬剤希釈用にＵ底）、陽性対照としてインターフェロンα、（メタノール、アセトンのような）固定試薬、一次抗体（ウサギ抗ＮＰＴＩＩ）、二次抗体：Ｅｕ−Ｎ１ｌ、増強液が含まれるが、これらに限定されるものではない。
【０２５２】
ＨＣＶレプリコンを含む細胞は、その密度が適切な場合高いレベルのウィルスＲＮＡレプリコン複製をサポートする。密集度が過剰であると、ウィルスＲＮＡ複製の低下を引き起こす。したがって細胞は、Ｇ４１が５００  ｍｉｃｒｏｇｒａｍｓ／ｍｌある中で対数増殖を繰返さなければならない。一般的に細胞は、１：４−６の希釈で１週間に２回パスされなければならない。細胞の維持は以下のように実施する。
【０２５３】
ＨＣＶレプリコンを含む細胞は、細胞がうまく増殖していることを確認するために、顕微鏡下で検査する。細胞をＰＢＳで一度すすぎ、トリプシンを２ｍｌ加える。細胞とトリプシンの混合物をＣＯ２インキュベータの中で、３７℃で３−５分培養する。培養後、１０ｍｌの完全培地を追加し、トリプシン処理の反応を停止させる。細胞を静かに吹いて、１５ｍｌの試験管に入れ、１２００ｒｐｍで４分間スピンさせる。トリプシンと培地の溶液を取除く。培地（５ｍｌ）を加え、細胞を注意深く混ぜる。細胞の数を数える。
【０２５４】
次に９６ウェルのプレートに密度６０００−７５００細胞／１００ｍｉｃｒｏｌｉｔｅｒｓ／ウェル（６−７．５×１０５細胞／１０ｍｌ／プレート）で細胞を植付ける。その後プレートを３７℃で、５％ＣＯ２インキュベータで培養する。
【０２５５】
植付け後約２４時間、薬剤を添加する前に細胞を顕微鏡下で検査する。集計および希釈が正しく実行されている場合、細胞は、６０−７０％密集し、ほとんどすべての細胞がウェル内で均一に吸着し、広がる。
【０２５６】
６Ｃ．ＨＣＶ−レプリコンを含む細胞の試験化合物を使った治療
ＨＣＶレプリコンを含む細胞をＰＢＳで一度すすぎ、次にトリプシン２ｍｌを加える。細胞は５％ＣＯ２インキュベータの中で、３７℃で３−５分培養する。１０ｍｌの完全培地を追加して、反応を停止させる。細胞を静かに吹いて、１５ｍｌの試験管に入れ、１２００ｒｐｍで４分間スピンさせる。トリプシンと培地の溶液を取除き、ＢＲＬカタログ＃１２４３０−０５４、５ｍｌからの培地（５００ｍｌ  ＤＭＥＭ（高グルコース））、１０％  ＦＢＳを５０ｍｌ、ゲネティシンＧ４１８（５０ｍｇ／ｍｌ、ＢＲＬカタログ＃１０１３１−０３５）５％、ＭＥＭ非必須アミノ酸（１００×ＢＲＬ＃１１１４０−０５０）を５ｍｌおよびペンストレップ（ＢＲＬ＃１５１４０−１４８）を５ｍｌ加える。細胞と培地を注意深く混ぜる。
【０２５７】
９６ウェルプレート（６−７．５×１０５細胞／１０ｍｌ／プレート）の６０００−７５００細胞／１００μｌ／ウェルでスクリーニング用培地（５００ｍｌ  ＤＭＥＭ（ＢＲＬ＃２１０６３−０２９）、５０ｍｌのＦＢＳ（ＢＲＬ＃１００８２−１４７）および５ｍｌのＭＥＭ非必須アミノ酸（ＢＲＬ＃１１１４０−０５０）とともに細胞をプレートに入れる。プレートを３７℃、５％ＣＯ２インキュベータに一晩入れる。
【０２５８】
６Ｄ．試験
次の朝、薬剤（試験化合物またはインターフェロンα）がスクリーニングに選択される最終濃度に応じて培地またはＤＭＳＯ／培地とともに９６ウェルのＵボトムプレートで希釈される。一般的に１０マイクロモルから０．０３マイクロモルの範囲で各試験化合物の6つの濃度が適用される。試験化合物の希釈液のうち１００μｌがＨＣＶレプリコン細胞を含む９６ウェルプレートのウェルに添加される。陰性対照群として薬剤なしの培地が一部のウェルに添加される。ＤＭＳＯは細胞増殖に影響を与えることが知られている。したがって、ＤＭＳＯ中で希釈された薬剤が使用される場合、陰性対照群（培地のみ）と陽性対照群（インターフェロンα）のウェルも含めてすべてのウェルに単回投与スクリーニング時と同じ濃度のＤＭＳＯが含まれていなければならない。プレートは、３７℃の加湿された５％ＣＯ２の環境下で３日間培養される。
【０２５９】
第４日目にＮＴＰＩＩ試験が定量される。培地は、プレートから流し込み、そのプレートを２００μｌのＰＢＳで一度洗浄する。次にそのＰＢＳを静かに移し、プレートをペーパータオルの上で軽くたたいて、残りのＰＢＳを除去する。細胞は、あらかじめ冷却された（−２０℃）メタノール：アセトン（１：１）１００μｌ／ウェルとともに静かに固定し、プレートを−２０℃で３０分間置いておく。
【０２６０】
定着液をプレートから注ぎ、プレートを完全に空気乾燥させる（約１時間）。乾燥された細胞層の外観を記録し、毒性のあるウェルの細胞密度を肉眼で得点をつける。あるいはその代わりに、以下に説明するＭＴＳ試験を使って細胞の生存を判断することができる。
【０２６１】
ウェルは、２００μｌのブロッキング溶液（ＰＢＳ中１０％ＦＢＳ；３％ＮＧＳ）を使って室温で３０分間ブロックされる。ブロッキング溶液を取除き、ブロッキング溶液中１：１０００に希釈されたウサギ抗−ＮＰＴＩＩ  １００μｌが各ウェルに添加される。その後プレートは室温で４５から６０分培養される。培養後ＰＢＳ−０．０５％  Ｔｗｅｅｎ−２０溶液でウェルを６回洗浄する。ブロッキングバッファー中ユウロピウム（ＥＵ）に共役したヤギ抗ウサギを１：１５，０００で希釈した液の１００μｌを各ウェルに加え、室温で３０分から４５分培養する。プレートを再び洗浄し、増強液（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  ＃４００１−００１０）１００μｌを各ウェルに加える。各プレートは、プレートシェーカーで３分間振動させる（約３０ｒｐｍ）。各ウェルから９５μｌずつブラックプレートに移す。ＥＵ信号がＰｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ  ＶＩＣＴＯＲプレートリーダー（EU-Lance）で定量される。
【０２６２】
試験結果：実施例５の「化合物表」に説明される化合物は、実質的に本実施例に説明されるようなＨＣＶ複製試験でテストされた。
【０２６３】
（実施例７）  細胞毒性試験
非特異性ではなく、むしろＨＣＶレプリコンに対する化合物の活性によりレプリコン複製を低減させていることを確実にするために、毒性試験が化合物の細胞毒性を定量するために使用される。
【０２６４】
実施例７Ａ．細胞毒性のための細胞タンパク質アルブミン試験
細胞タンパク質アルブミンの測定値は、細胞毒性の１つのマーカーを提供する。細胞アルブミン試験から得られるタンパク質レベルは、化合物の抗ウィルス活性の正規化基準を提供するために使用されることもある。タンパク質アルブミン試験で、ＨＣＶレプリコンを含む細胞は、高濃度で細胞毒性をもつことが知られている化合物ヘリオキサンチンの異なる濃度で３日間処理される。細胞が溶解され、細胞溶解物がプレートに吸着されたヤギ抗アルブミン抗体を室温（２５℃から２８℃）で３時間結合させるために使用される。次にプレートを１Ｘ  ＰＢＳで６回洗浄する。非結合タンパク質を洗浄した後、マウス・モノクロナール抗人血清アルブミンでプレートのアルブミンに結合させる。次にフォスファターゼ標識抗マウスＩｇＧを二次抗体として使用し複合が検出される。
【０２６５】
実施例７Ｂ．細胞毒性のためのＭＴＳ試験
生存細胞の数を決定する比色法であるＣＥＬＬＴＩＴＥＲ  ９６  ＡＱＵＥＯＵＳ  ＯＮＥ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ  Ｃｅｌｌ  Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ  Ａｓｓａｙ（Promega, Madison WI）により細胞生存率も決定することができる。この方法では、細胞を定着させる前にメーカーの指示に従って各ウェルにＭＴＳ試薬１０−２０μｌを加え、プレートを３７℃で培養し、ＯＤ  ４９０ｎｍで読み取る。培養中、生体細胞は、ＭＴＳ試薬をホルマザン生成物に変換し、それは４９０ｎｍで吸収される。したがって４９０ｎｍでの吸収度は、培養中の生体細胞の数に正比例する。
【０２６６】
細胞毒性を決定する細胞アルブミン法とＭＴＳ法の直接比較により、以下が得られる。細胞は、異なる濃度の試験化合物またはヘリオキサチンで３日間処理される。上記に説明するようなアルブミンの検出のための溶解に先立って、メーカーの指示に従って各ウェルにＭＴＳ試薬を加え、３７℃で培養し、ＯＤ  ４９０ｎｍで読み取る。その後上記に説明されるように細胞アルブミンの定量が実施される。
【国際調査報告】
2010519339.tif 000046
2010519339.tif 000047
2010519339.tif 000048
2010519339.tif 000049
2010519339.tif 000050