(57)【要約】  本発明は、化粧品用に容認できる媒体を含む組成物における、人体における新しい脂肪の生成を抑制するスリミング活性剤としてのおよび／または活性剤としての少なくとも１種のキノアエキスの使用に関する。本発明は、上記エキスを用いる非治療的な処置方法、および人体にスリミング効果をもたらすための脂肪分解活性を有する薬剤を調製するための、および人体における新しい脂肪の生成を抑制するための薬剤を調製するための上記エキスの使用に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
化粧品用に容認できる媒体を含む組成物における、人体における新しい脂肪の生成を抑制するスリミング活性剤としてのおよび／または活性剤としての少なくとも１種のキノアエキスの使用。
【請求項２】
人体を痩せさせることを目的とした非治療的処置のための方法であって、化粧品用に容認できる媒体と、有効量の少なくとも１種のキノアエキスを含む組成物を塗布することを特徴とする方法。
【請求項３】
人体が痩せることを引き起こすことを意図して、脂肪分解作用を有する薬剤を調製するための、少なくとも１種のキノアエキスの使用。
【請求項４】
人体における新しい脂肪の生成を抑制することを意図した薬剤を調製するための、少なくとも１種のキノアエキスの使用。
【発明の詳細な説明】
【発明の概要】
【０００１】
本発明の目的は、人体を痩せさせるための、および／または人体における脂肪の生成を防止するための化粧品活性剤の新規の使用である。
【０００２】
人体におけるある種の脂肪は、トリグリセリドの形態で、皮膚の脂肪組織の細胞、いわゆる含脂肪細胞中に貯蔵される。スリミングは、含脂肪細胞に貯蔵された脂肪の減少を示す。このプロセスは、これらの細胞の内部で起こり、かつトリグリセリドを脂肪酸およびグリセロールに加水分解する予備段階を必要とする。この現象は脂肪分解と呼ばれる。現在市販されている多くのスリミング化粧品配合物は、脂肪分解活性を有する少なくとも１種の化合物を含んでいる。最もよく用いられるものはカフェインであるが、テオフィリンもこのような性質を有することが知られている。
【０００３】
これに対して、体重増加中に、含脂肪細胞はいわゆる含脂肪細胞萎縮（adipocyte atrophy）プロセスとの関連で脂肪で膨らみ得るが、含脂肪細胞増殖プロセスによりトリグリセリドを貯蔵することができる成熟した含脂肪細胞への前脂肪細胞の分化による新しい含脂肪細胞の漸増の現象も起こり得る。従って、体重増加を防止することを可能にする活性剤は、新しい含脂肪細胞の漸増を防止するその能力に基づいて選択することができる。腫瘍壊死因子またはＴＮＦαは、含脂肪細胞のこの成熟阻害剤として科学文献において広く記載されているが、化粧品配合物におけるその使用は許されない。従って、当該技術の現状における化粧品におけるその使用について知られ、また、前脂肪細胞の分化の基準となる抑制剤を構成する活性分子は存在しない。
【０００４】
脂肪分解活性を有し、および／または新しい脂肪の生成を防止するために、前脂肪細胞の分化を阻害することができ、皮膚との良好な適合性を有する新規の活性剤を調査する間、本発明者等は、その保湿性および鬱血除去性のために化粧品産業により通常市販されているキノアエキスが、カフェインよりもより効果的な脂肪分解効能、および前脂肪細胞の分化についての阻害影響を有したことを明らかにした。
【０００５】
従って、第１の態様によれば、本発明の目的は、スリミング活性剤としての、および／または人体における新しい脂肪の生成を阻害することを可能にする活性剤としての、化粧用に容認できる媒体を含有する組成物におけるキアノエキスの使用である。
【０００６】
本特許出願において、キノアという語は、キノア植物（ケノポディウムキノア）、または遺伝子操作されている変異体を示す。本特許出願の目的である本発明において用いられるキノアエキスは、一般的に、水性エキスとしての流エキス、グリコールエキス（ここで溶媒は、例えば、グリコール、プロピレングリコールまたはブチレングリコール）、水性グリコールエキス、アルコールエキス（ここでアルコールは、例えば、エタノール）、水性−アルコールエキスの形態で市販されている。このようなエキスは、一般的に、０．０１質量％〜１０質量％の乾燥エキスを含有している。
【０００７】
本発明の目的は、人体を痩せさせることを目的とした、および／または新しい脂肪の生成を阻害することを目的とした、人体の非治療的処置のための方法であって、化粧品的に容認できる媒体と、有効量のキノアエキスとを含む組成物を塗布することを特徴とする。
【０００８】
本発明に関連して有効量という表現は、０．０００１質量％〜２．０質量％、好ましくは０．０００１質量％〜０．９質量％の、最終組成物についての乾燥エキスの質量パーセントを示す。
【０００９】
本発明の目的は、また、人体のスリミングを引き起こすことを目的として、脂肪分解活性を有する薬剤を調製するための、上記したキノアエキスの使用である。
【００１０】
本発明の目的は、また、人体および／または動物体における新しい脂肪の生成を防止することを目的とした、前脂肪細胞の分化について阻害活性を有する薬剤を調製するための、上記したキノアエキスの使用である。
【００１１】
上記した組成物において、キノアエキスは、一般的に、乾燥エキスとして組成物の０．０００１質量％〜２質量％、より特には乾燥エキスとして組成物の質量の０．０００５質量％〜０．９質量％、最も特には乾燥エキスとして組成物の質量の０．００１質量％〜０．６質量％である十分な量で用いられる。
【００１２】
以下の実験的な研究が示す通り、上記した化粧的処置または治療上の処置において用いられるキノアエキスは、予想外に、当該技術水準の組成物よりも高い脂肪分解活性、および人体における脂肪の生成を防止する能力により特徴付けられる。従って、これらは、人体を痩せさせるための処置に一般に適している。
【００１３】
上記処置において用いられる組成物は、一般的に、低濃度の水性または水性−アルコール性溶液の形態、単純エマルジョンまたはマルチプルエマルジョン、例えば油中水型エマルジョン（Ｗ／Ｏ）、水中油型エマルジョン（Ｏ／Ｗ）、または水中油中水滴型エマルジョン（Ｗ／Ｏ／Ｗ）の形態（ここで油は植物または鉱物種のものである）、または粉末化された形態で提供される。これらは、テキスタイル上、またはふきとり繊維、紙ナプキン若しくは衣類上に含浸させることができる。
【００１４】
上記処置において用いられる組成物は、化粧品および薬学において用いられる通常の形態において、対象に投与される。これは、より特には、局所的な、経口の、または非経口の投与を含む。
【００１５】
一般的に、キノアエキスは、化粧品配合物において用いられる多くのタイプの佐剤または活性成分、例えば脂肪質の物質、有機溶媒、増粘剤、ゲル化剤、皮膚軟化剤、酸化防止剤、乳白剤、安定剤、気泡剤、香料、乳化剤（イオン性または非イオン性）、充填剤、金属イオン封止剤、キレート剤、防腐剤、化学スクリーニング剤若しくは無機スクリーニング剤、エッセンシャルオイル、着色剤、顔料、親水性活性剤若しくは脂肪親和性活性剤、保湿剤、例えばグリセリン、防腐剤、着色剤、香料、化粧品活性剤、無機若しくは有機日焼け止め剤、無機充填剤、例えば酸化鉄、酸化チタンおよびタルク、合成充填剤、例えばナイロンおよびポリ（メチルメタクリラート）であって、架橋されているもの若しくは他のもの、シリコンエラストマー、絹雲母、または植物エキス、または脂質小胞、または化粧品において習慣的に用いられている他の成分と組み合わされる。
【００１６】
キノアエキスと組み合わされ得る油の例としては、鉱物油、例えばパラフィン油、流動パラフィン、イソパラフィンまたは白色鉱油、動物由来の油、例えばスクアレンまたはスクアラン、植物油、例えばスイートアーモンド油、やし油、ヒマシ油、ホホバ油、オリーブ油、菜種油、ラッカセイ油、ひまわり油、小麦の胚種油、トウモロコシ胚種油、大豆油、綿実油、ムラサキウマゴヤシ油、ケシ油、パンプキンシード油、月見草油、キビ油、オオムギ油、ライ油、ひまわり油、ククイ油、トケイソウ油、ヘーゼルナッツ油、ヤシ油、シアバター、杏仁油、カロフィラム油、シシンブリウム油、アボカド油、カレンデュラ油；エトキシ化植物油；合成油、例えば脂肪酸エステル、例えばミリスチン酸ブチル、ミリスチン酸プロピル、ミリスチン酸セチル、パルミチン酸イソプロピル、ステアリン酸ブチル、ステアリン酸ヘキサデシル、ステアリン酸イソプロピル、ステアリン酸オクチル、ステアリン酸イソセチル、オレイン酸ドデシル、ラウリン酸ヘキシル、ジカプリル酸プロピレングリコール、ラノリン酸から誘導されるエステル、例えばラノリン酸イソプロピル、ラノリン酸イソセチル、脂肪酸のモノグリセリド、ジグリセリド、およびトリグリセリド、例えばトリヘプタン酸グリセリル、安息香酸アルキル、ポリ−アルファ−オレフィン、ポリオレフィン、例えばポリイソブテン、合成イソアルカン、例えばイソヘキサデカン、イソドデカン、過フッ化油およびシリコーン油を述べることができる。後者の中でも、より特にはジメチルポリシロキサン、メチルフェニルポリシロキサン、アミンにより変性されたシリコーン、アルコールにより変性されたシリコーン、アルコールおよび脂肪酸により変性されたシリコーン、ポリエーテル基により変性されたシリコーン、エポキシ変性シリコーン、フッ素化基により変性されたシリコーン、環状シリコーン、およびアルキル基により変性されたシリコーンを述べることができる。
【００１７】
この活性剤と組合わせることができる他の脂肪質の物質として、脂肪アルコールまたは脂肪酸を述べることができる。
【００１８】
本発明において用いられる増粘ポリマーおよび／または乳化ポリマーの中には、例えばアクリル酸またはアクリル酸誘導体のホモポリマーまたはコポリマー、アクリルアミドのホモポリマーまたはコポリマー、アクリルアミド誘導体のホモポリマーまたはコポリマー、アクリルアミドメチルプロパンスルホン酸のホモポリマーまたはコポリマー、ビニルモノマー、トリメチルアミノエチルアクリラートクロリド、植物の若しくは生合成由来の親水コロイド、例えばキサンタンガム、カラヤゴム、カラギーナン、アルギナート；シリケート；セルロースおよびその誘導体；デンプンおよびその親水性誘導体、ポリウレタンがある。本発明の対象であるキノアエキスを含有する、Ｗ／Ｏ、Ｏ／Ｗ、Ｗ／Ｏ／Ｗ若しくはＯ／Ｗ／Ｏエマルジョンの、または水性ゲルンの調製において用いられ得る、ゲル状の水相の生成に用いられ得る高分子電解質タイプのポリマーの中には、例えば、アクリル酸と２−メチル−［（１−オキソ−２−プロペニル）アミノ］−１−プロパンスルホン酸（ＡＭＰＳ）のコポリマー、アクリルアミドと２−メチル−［（１−オキソ−２−プロペニル）アミノ］−１−プロパンスルホン酸のコポリマー、２−メチル−［（１−オキソ−２−プロペニル）アミノ］−１−プロパンスルホン酸と（２−ヒドロキシエチル）アクリラートのコポリマー、２−メチル−［（１−オキソ−２−プロペニル）アミノ］−１−プロパンスルホン酸のホモポリマー、アクリル酸のホモポリマー、アクリロイルエチルトリメチルアンモニウムクロリドとアクリルアミドのコポリマー、ＡＭＰＳとビニルピロリドンのコポリマー、アクリル酸とアクリル酸アルキル（その炭素鎖は、１０個〜３０個の炭素原子を含む）のコポリマー、ＡＭＰＳとアクリル酸アルキル（その炭素鎖は１０個〜３０個の炭素原子を含む）のコポリマーがある。このようなポリマーは、SIMULGEL（登録商標）EG、SEPIGEL（登録商標）305、SIMULGEL（登録商標）NS、SIMULGEL（登録商標）800、SIMULGEL（登録商標）A、SIMULGEL（登録商標）EPG、SIMULGEL（登録商標）INS、SIMULGEL（登録商標）FL、SEPIGEL（登録商標）501、SEPIGEL（登録商標）502、SEPIPLUS（登録商標）250、SEPIPLUS（登録商標）265、SEPIPLUS（登録商標）400、SEPINOV（登録商標）EMT 10、CARBOPOL（登録商標）, ULTREZ（登録商標）10、ACULYN（登録商標）、PEMULEN（登録商標）TR1、PEMULEN（登録商標）TR2、LUVIGEL（登録商標）EM、SALCARE（登録商標）SC91、SALCARE（登録商標）SC92、SALCARE（登録商標）SC95、SALCARE（登録商標）SC96、FLOCARE（登録商標）ET100、FLOCARE（登録商標）ET58、HISPAGEL（登録商標）, NOVEMER（登録商標）EC1、ARISTOFLEX（登録商標）AVC、ARISTOFLEX（登録商標）HBM、RAPITHIX（登録商標）A60、RAPITHIX（登録商標）A100、COSMEDIA SP および STABILEZE（登録商標）06 の名前でそれぞれ市販されている。
【００１９】
本発明において用いられ得るワックスの中では、例えば、蜜ろう；カルナウバろう、カンデリラろう；オーリクリーろう；木ろう；コルク繊維ワックスまたはサトウキビろう；パラフィンワックス；モンタンロウ；マイクロクリスタリンワックス；ラノリンロウ；オゾケライト；ポリエチレンワックス；硬化油；シリコーンワックス；植物ろう；脂肪アルコールまたは脂肪酸（室温で固体）；グリセリド（室温で固体）を述べることができる。
【００２０】
本発明において用いることができる乳化剤の中でも、
任意にアルコキシ化された、アルキルポリグリコシドの脂肪酸エステル、最も特には、メチルポリグルコシドのエトキシ化エステル、例えば、GLUCAMATE（登録商標）LT および GLUTAMATE（登録商標）DOE120 の名前で販売されているＰＥＧ１２０メチルグルコーストリオレアートおよびＰＥＧ１２０メチルグルコースジオレアート；
アルコキシ化脂肪酸エステル、例えば CROTHIX（登録商標）DS53 の名前で市販されているＰＥＧ１５０ペンタエリトリチルテトラステアラート、ANTIL（登録商標）141 の名前で市販されているＰＥＧ５５プロピレングリコールオレアート；
脂肪鎖ポリアルキレングリコールのカルバマート、例えば ELFACOS（登録商標）T211 の名前で市販されているＰＰＧ１４ラウレスイソホリル（isophoryl）ジカルバマート、ELFACOS（登録商標）GT2125 の名前で市販されているＰＰＧ１４パルメス（palmeth）６０ヘキシルジカルバマート；
脂肪酸、エトキシ化脂肪酸、ソルビトールの脂肪酸エステル、エトキシ化脂肪酸エステル、ポリソルバート、ポリグリセロールエステル、エトキシ化脂肪アルコール、ショ糖エステル、アルキルポリグリコシド、硫酸化脂肪アルコールおよびリン酸化脂肪アルコール、またはアルキルポリグリコシドおよび脂肪アルコールの混合物であって、フランス特許出願６６８  ０８０，２  ７３４  ４９６，２  ７５６  １９５，２  ７６２  ３１７，２  ７８４  ６８０，２  ７８４  ９０４，２  ７９１  ５６５，２  ７９０  ９７７，２  ８０７  ４３５，２  ８０４  ４３２，２  ８３０  ７７４，２  ８３０  ４４５に記載されているもの、アルキルポリグリコシドから選択される乳化性界面活性剤の組み合わせ、アルキルポリグリコシドと脂肪アルコールの組み合わせ、ポリグリセロールまたはポリグリコールまたはポリオールのエステル、例えばフランス特許出願２  ８５２  ２５７，２  ８５８  ５５４，２  ８２０  ３１６および２  ８５２  ２５８において用いられているポリグリコールまたはポリグリセロールのポリヒドロキシステアラート
を述べることができる。
【００２１】
キノアエキスと組合わせることができる活性成分の例として、美白作用または脱色作用を有する化合物、例えばアルブチン、コウジ酸、ヒドロキノン、エラグ酸、ビタミンＣ、リン酸アルコルビルマグネシウム、SEPICALM（登録商標）MSH、ポリフェノールのエキス、ブドウエキス、マツエキス、ワインエキス、オリーブエキス、マール（marc）エキス、Ｎ−アシル化タンパク質、Ｎ−アシル化ペプチド、Ｎ−アシル化アミノ酸、例えばＮ−ラウロイルプロリン、Ｎ−リノリルリシン、Ｎ−リノリルロイシン、Ｎ−オクタノイルグリシン、Ｎ−ウンデシレノイルフェニルアラニン、Ｎ−パルミトイルプロリン、タンパク質のＮ−アシル化部分加水分解物、アミノ酸、ペプチド、タンパク質の全加水分解物、タンパク質の部分加水分解物、ポリオール（例えばグリセリンまたはブチレングリコール）、ウレア、ピロリドンカルボン酸またはこの酸の誘導体、グリシルレチン酸、アルファ−ビサボロール、糖または糖誘導体、多糖類またはその誘導体、ヒドロキシ酸、例えば乳酸、ビタミン、レチノールのようなビタミン誘導体、ビタミンＥおよびその誘導体、ミネラル、酵素、コエンザイムＱ１０のようなコエンザイム、ホルモンまたはホルモン様物質、大豆エキス、例えば Raffermine（登録商標）、コムギ胚芽エキス、例えば Tensine（登録商標）または Gliadine（登録商標）、植物エキス、例えばタンニンが豊富なエキス、イソフラボンが豊富なエキス、またはテルペンが豊富なエキス、淡水の抽出物または海草エキス、エキスを含むワックス、バクテリア抽出物、ミネラル、一般に脂質、セラミドまたはリン脂質のような脂質、カフェインまたはその誘導体のようなスリミング作用を有する活性剤、抗菌活性または脂っぽい皮膚に対して消毒作用を含有する活性剤、例えば LIPACIDE（登録商標）PVB、LIPACIDE（登録商標）UG、活力を与える性質または活性化させる性質を有する活性剤、例えば SEPITONIC（登録商標）M3 または Physiogenyl（登録商標）、パンテノールおよびその誘導体、例えば SEPICAP（登録商標）MP、老化防止活性剤、例えば SEPILIFT（登録商標）DPHP、LIPACIDE（登録商標）PVB、SEPIVINOL（登録商標）、SEPIVITAL（登録商標）、保湿活性剤、例えば SEPICALM（登録商標）S、SEPICALM（登録商標）VG および LIPACIDE（登録商標）DPHP、PROTEOL（登録商標）SAV 50、「抗光老化」老化防止活性剤、真皮表皮接合物の完全性を保護する活性剤、細胞外マトリックスの成分の合成を促進する活性剤、スリミング、調色または排出活性を有する活性剤、例えばカフェイン、テオフィリン、環状アデノシルモノホスファート（cyclic adenosyl monophosphate）（ｃＡＭＰ）、緑茶、セージ、イチョウ、セイヨウキヅタ、セイヨウトチノキ、タケ、ルスカス、ナギイカダ、センテラアジアティカ、ヒース、シモツケ、ヒバマタ、ローズマリー、ヤナギ、皮膚に「熱」感を生じる活性剤、例えば皮膚微小循環の活性剤（例えばニコチネート）または皮膚に「爽快」感を作り出す製品（例えば、メントールおよびその誘導体）を述べることができる。
【００２２】
本発明による組成物中に取り込まれ得る日焼け止め剤として、改正化粧品指令７６／７６８／ＥＥＣ，付属書類ＶＩＩにおいて示される全てのものを述べることができる。
【００２３】
以下の実験的な研究は本発明を示すが、これには限定されない。
【００２４】
Ａ−遊離脂肪酸をアッセイすることによる、通常のヒト含脂肪細胞の培養におけるキノアエキスの脂肪分解活性のインビトロ評価
１−目的および方法の方針
この実験の目的は、単離したヒト含脂肪細胞のインビトロモデルにおける、用いた化合物の脂肪分解活性を示すことである。トリグリセリドの非エステル化脂肪酸およびグリコールへの加水分解を脂肪分解と呼ぶ。トリグリセリドは含脂肪細胞中に貯蔵され、脂肪蓄積を構成する。スリミング製品が用いられる際に所望される目的であるこの蓄積を減少させるために、トリグリセリドは脂肪酸の形態に加水分解されるべきであり、この酸は細胞から除去することができる。トリグリセリドの加水分解は、ホルモン依存性のリパーゼを利用し、これは、活性化するためにリン酸化反応させることを必要とする。リン酸化反応段階は、キナーゼとｃＡＭＰを用いる。含脂肪細胞のｃＡＭＰ含有量における増加は。リパーゼの活性化、つまり脂肪分解の活性化を促進するために必要である。記載したこの方法は、懸濁液中においてヒト含脂肪細胞の存在下で製品をインキュベートすることを構成し、続いて細胞内のｃＡＭＰレベルを測定する。
【００２５】
２−実験手順
（ｉ）細胞モデル
この試験を、単離し、細胞懸濁液として調製したヒト含脂肪細胞を用いて行った。含脂肪細胞を、女性において行った美容整形手術作業（腹部美容整形手術作業）中に回収した腹部の脂肪組織から単離した。この細胞は新鮮組織から単離した。脂肪組織を単離し、コラゲナーゼに作用して解離させた（SIGMA（登録商標），１ｍｇ／ｍｌ，３７℃で３０分，穏やかに攪拌）。コラゲナーゼは脂肪組織に存在する結合組織を消化する。消化後、細胞をろ過し、フェノールレッドを含まず、グルタミンを含まず（SIGMA）＋２．２ｍｇ／ｍｌの重炭酸ナトリウム（GIBCO）＋５０ＩＵのペニシリン（BIOWHITTAKER（登録商標））＋５０μｇ／ｍｌのストレプトマイシン＋１％（ｖ／ｖ）のＬ−グルタミン（BIOWHITTAKER（登録商標））＋０．５％の脂質のない血清アルブミン（SIGMA（登録商標））のＭＥＭ（最小必須媒体）媒体を含む適切な培地において洗浄する。含脂肪細胞懸濁液を、この調製後即座に用いた。
【００２６】
（ｉｉ）含脂肪細胞を伴う製品のインキュベーション
この試験製品を含脂肪細胞媒体中で希釈化した。これらを懸濁液中で３７℃２時間細胞を用いてインキュベートする（２５０μｌの製品＋２５０μｌの含脂肪細胞懸濁液）。フランスでPROVITAL社により市販されているグリコールのキノアエキスは、０．５質量％〜１質量％の乾燥エキスを含み、これを、０．０００１質量％〜０．０００５質量％の乾燥エキス（ＤＥ）において試験する。
【００２７】
３−試験の評価
（ｉ）遊離脂肪酸の濃度
インキュベーション後、細胞溶解を、細胞懸濁液の表面における脂肪層の存在により視覚的にチェックする。表面に浮かぶ媒体を集める。遊離脂肪酸を市販のキット（NEFA（登録商標）Cキット, WAKO）を用いて、脂肪酸検定系列を参照しながらアッセイする。製品の脂肪分解活性は、含脂肪細胞の存在下、製品の不存在下でインキュベートした対照グループと比較して評価した。含脂肪細胞の反応性は、基準製品、カフェイン（１，３，７−トリメチルキサンチン）およびテオフィリン（１，３−ジメチル−２，６−ジヒドロキシプリン）の脂肪分解活性の測定について系統的にチェックする。５回のアッセイを、各試験製品のそれぞれについて行う。
【００２８】
（ｉｉ）試験の結果
それぞれの製品について行なった５回のアッセイの相加平均として示した結果を以下の表に示す。
【表１】
2010503644.tif 000002
【００２９】
これらの結果は、キノアエキスが、スリミング組成物の活性成分として対照としたカフェインのものと同程度の脂肪分解活性を有することを示す。
【００３０】
Ｂ−前脂肪細胞の含脂肪細胞への分化の測定、阻害作用の検索
１−方法の方針
記載する方法は、ネズミ前脂肪細胞（３Ｔ３−Ｌ１株）の存在下での製品のインキュベーションから成り、これは適切な培地の影響下で、トリグリセリドを貯蔵することができる成熟した含脂肪細胞への分化である。分化を、グルコース−６−ホスファートデヒドロゲナーゼ（Ｇ６ＰＤＨ）の酵素アッセイにより評価する。含脂肪細胞内にあるこの酵素は、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドホスファート（ＮＡＰＤ）の存在下でのグルコース−６−ホスファートをグルコナート−６−ホスファートへの転換を可能にし、脂肪酸の新合成に用いられる、水素化されたニコチンアミドアデニンジヌクレオチドホスファート（ＮＡＰＤＨ）の生成をもたらす。これは成熟した含脂肪細胞に存在する。ＮＡＰＤＨの生成を、３４０ナノメートルにおける吸光光度分析によりモニタリングする。
【００３１】
２−実験手法
（ｉ）細胞モデル
この試験を、密集が得られるまで単層で培養したネズミ前脂肪細胞（３Ｔ３−Ｌ１細胞株）を用いて行う。このため、細胞（６０×１０3細胞／ｃｍ2）を接取し、４．５ｇ／ｌのグルコース（SIGMA）＋１０％胎児血清（SIGMA）＋５０ＩＵのペニシリン（BIOWHITTAKER（登録商標））＋５０μｇ／ｍｌのストレプトマイシン（BIOWHITTAKER（登録商標））＋１％（ｖ／ｖ）のＬ−グルタミン（BIOWHITTAKER（登録商標））（培地Ａ）を含有するＤＭＥＭ培地において５日間培養する。細胞が密集してから２日目、これらを０．１μＭのデキサメタゾン＋０．１７ｍＭのインスリン＋０．５ｍＭのイソブチルメチルキサンチン（培地Ｂ）を補った培地Ａから成る分化培地においてインキュベートする。細胞をこの培地中で２日間インキュベートした後、さらに２日間０．１７Ｍのインスリン（培地Ｃ）を補った培地Ａ中でインキュベートする。最終的には細胞を、培地Ａ中で、懸濁液中で３７℃で２時間（２５０μｌの製品＋２５０μｌの含脂肪細胞の懸濁液）さらに５日間培養する。PROVITAL社によりフランスで市販されているグリコールキノアエキスを、０．０００１質量％〜０．０００５質量％の乾燥エキス（ＤＥ）で試験する。
【００３２】
（ｉｉ）前脂肪細胞と製品のインキュベーション
０．０２％ＤＥのグリコールキノアエキスを、培地Ｂでの分化の開始時にインキュベートする。その後、アッセイの時間までインキュベートする。
【００３３】
（ｉｉｉ）Ｇ６ＰＤＨ活性のアッセイ
インキュベーションの終わりに、細胞をトリス−ＥＤＴＡ−ＨＣｌバッファ（５０ｍｍｏｌ．ｌ-1／５ｍｍｏｌ．ｌ-1，ｐＨ＝７．５）で洗浄した後、超音波作用により溶解させる。このようにして得られた細胞溶解物を冷所で貯蔵する。細胞溶解物のＧ６ＰＤＨ活性を、その基質、Ｄ−グルコース６Ｐ（１ｍｍｏｌ）およびその補助因子ＮＡＤＰ（８ｍｍｏｌ）を加えることにより測定する。ＮＡＰＤＨの出現速度を、３４０ｎｍで２分間、分光光度法により測定する。アッセイをＧ６ＰＤＨ検定系列に対して行う。前脂肪細胞の分化における製品の効果を、前脂肪細胞の存在下、製品の存在なしに（分化対照）インキュベートした対照グループと比較して、また分化しない対照グループであって、培地Ａ中で単に培養した前脂肪細胞の存在下でインキュベートしたものと比較して評価する。
【表２】
2010503644.tif 000003
【００３４】
１ｎｇ／ｍｌ（すなわち、１０-7％ＤＥ）で試験したＴＮＦαは、前脂肪細胞の分化を４３％まで抑制する。試験したグリコールキノアエキスは、Ｇ６ＰＤＨの活性を２６％まで抑制し、これは、人体における脂肪の生成を防止するスリミング活性成分としての使用に適している。
【００３５】
Ｃ−化粧用配合物の例
以下の例において、割合を重量パーセントとして示す。
【００３６】
例１：スリミングボディミルク
MONTANOV（登録商標）L             ３．００％
植物スクアレン                   ８．００％
スイートアーモンドオイル           ２．００％
水                             ｑｓ１００％
SEPIGEL（登録商標）501             １．５０％
グリコールキノアエキス             ３．００％
SEPICIDE（登録商標）CI             ０．２０％
SEPICIDE（登録商標）HB             ０．３０％
香料                           ０．３０％
例２：抗たるみクリーム（卵型の顔に使用）
MONTANOV（登録商標）202           ３．５０％
MONTANOV（登録商標）14             １．００％
SEPILIFT（登録商標）DPHP           １．００％
LANOL（登録商標）1688             １５．００％
小麦の胚芽油                     ５．００％
水                             ｑｓｐ１００％
SIMULGEL（登録商標）EG             １．３０％
グリコールキノアエキス             ２．００％
SEPICIDE（登録商標）CI             ０．２０％
SEPICIDE（登録商標）HB             ０．３０％
香料                           ０．１０％
例３：抗肥満（anti-plumpness）スプレイ
MONTANE（登録商標）60             ３．３０％
MONTANOX（登録商標）60             １．７０％
カプリル／カプリントリグリセリド   ６．００％
イソヘキサデカン                 ５．００％
ケイ酸アルミニウムマグネシウム     １．５０％
水                             ｑｓｐ１００％
SIMULGEL（登録商標）EG             １．００％
グリコールキノアエキス             ２．００％
センテラアジアティカ/チドメグサ    １．００％
エキス
SEPICIDE（登録商標）CI             ０．２０％
SEPICIDE（登録商標）HB             ０．３０％
香料                           ０．４０％
水                             ｑｓｐ１００％
例４：爽快スリミングジェル
SEPIGEL（登録商標）305             ３．５０％
ヒドロキシエチルセルロース         １．００％
カフェイン                       ５．００％
メントール                       ０．３０％
エタノール                       ５０．００％
グリコールキノアエキス             ３．００％
SEPICIDE（登録商標）LD             １．００％
香料                           ０．２０％
水                             ｑｓｐ１００％
例５：スリミングボディフルイド
SIMULGEL（登録商標）NS             ２．５０％
キサンタンガム                   ０．２０％
LANOL（登録商標）99               ５．００％
グリコールキノアエキス             ２．００％
イチョウエキス                   ２．００％
コーラエキス                     １．００％
朝鮮人参エキス                   ０．５０％
SEPICIDE（登録商標）HB             １．５０％
香料                           ０．１０％
水                             ｑｓｐ１００％
例６：ボディワイプに浸透させることを意図するトーニングリバイタライジングローション
グリコールキノアエキス             １．５０％
グリセリン                       ５．００％
エタノール                       ５．００％
ルスカスエキス                   ３．００％
SEPITONIC（登録商標）M3           １．００％
SEPICIDE（登録商標）CI             ０．２０％
SEPICIDE（登録商標）HB             ０．３０％
水                             ｑｓｐ１００％
例７：スリミングシャワージェル
MONTALINE（登録商標）C40           ８．００％
PROTEOL（登録商標）OAT             ５．００％
ラウリル硫酸ナトリウム             ９．００％
グリコールキノアエキス             ３．００％
緑茶エキス                       １．００％
KATHON（登録商標）CG       ０．８０％
緑色着色剤                       qs
緑茶香料                         １．００％
乳酸                           ｑｓ  ｐＨ＝６．５
水                             ｑｓｐ１００％
例８：二相性反湿潤（disinfiltrating）マッサージ
アラビカコーヒーオイル             １．００％
LANOL（登録商標）189       ２０．００％
LANOL（登録商標）99               １０．００％
ルリヂサオイル                   ２．００％
香料                           ０．１０％
グリコールキノアエキス             ３．００％
グリセリン                       ３．００％
エタノール                       １０．００％
青色着色剤                       qs
水                             ｑｓｐ  １００％
例において用いた市販製品の定義は以下の通りである。
【００３７】
SEPILIFT（登録商標）DPHP：（INCI 名:ジパルミトイヒドロキシプロリン）， SEPPIC 社により販売；
SEPICIDE（登録商標）CI：イミダゾリンウレア（防腐剤），SEPPIC 社により販売；
SEPICIDE（登録商標）HB： フェノキシエタノール，メチルパラベン，エチルパラベン，プロピルパラベン，およびブチルパラベンの混合物（防腐剤），SEPPIC 社により販売；
SEPICIDE（登録商標）LD：フェノキシエタノール，SEPPIC 社により販売；
KATHON（登録商標）CG：（INCI 名：メチルイソチアゾリノン／メチルクロロイソチアゾリノン）；
MONTANE（登録商標）60：ステアリン酸ソルビタン；
MONTANOX（登録商標）60：ポリソルベート６０；
SIMULGEL（登録商標）EG：WO 99/36445 に記載されているような自己可逆性逆ラテックス（self-reversible invert latex）のコポリマー（INCI 名：アクリル酸ナトリウム／アクリロイルジメチルタウリンナトリウムコポリマーおよびイソヘキサデカンおよびポリソルベート８０），SEPPIC 社により販売；
SIMULGEL（登録商標）NS：国際公開 WO 99/36445 に記載されているような自己可逆性逆ラテックスのコポリマー（INCI 名：ヒドロキシエチルアクリラート／アクリロイルジメチルタウリンナトリウムコポリマーおよびスクアランおよびポリソルベート６０），SEPPIC 社により販売；
SEPIGEL（登録商標）305：自己可逆性逆ラテックス（INCI 名：ポリアクリルアミド／Ｃ１３−１４イソパラフィン／ラウレス−７）；
SEPIGEL（登録商標）501：自己可逆性逆ラテックス（INCI 名：Ｃ１３−１４イソパラフィン／鉱油／ポリアクリル酸ナトリウム／ポリアクリルアミド／ポリソルベート８５），SEPPIC 社により販売；
LANOL（登録商標）99：イソノナン酸イソノニル，SEPPIC 社により販売；
LANOL（登録商標）189：イソノナン酸イソステアリル；
LANOL（登録商標）1688：エチルヘキサン酸セテアリル，SEPPIC 社により販売；
SEPITONIC（登録商標）M3：アスパラギン酸マグネシウム，グルコン酸銅およびグルコン酸亜鉛の混合物，SEPPIC 社により販売；
MONTALINE（登録商標）C40：コカミドプロピルベタインアミドＭＥＡクロリド；
PROTEOL（登録商標）OAT：Ｎ−ラウロイル含有オートアミノ酸；
MONTANOV（登録商標）14：ミリスチルアルコール／ミリスチルグリコシド；
MONTANOV（登録商標）L：Ｃ１４−Ｃ２２アルコールおよびＣ１２−Ｃ２０アルキルポリグリコシドに基づく乳化剤、例えばヨーロッパ特許出願 EP 0 995 487 に記載されているもの；
MONTANOV（登録商標）202：アラキジルアルコール、ベヘニルアルコールおよびアラキジルポリグルコシドに基づく乳化剤。
【国際調査報告】
2010503644.tif 000004
2010503644.tif 000005
2010503644.tif 000006
2010503644.tif 000007