(57)【要約】  ヒトプロテインキナーゼＣＫ２の優れた阻害を示す、タイプ５，６，７，８−テトラヒドロ−インデノ［１，２−ｂ］インドール−９，１０−ジオン及び５Ｈ−インデノ［１，２−ｂ］インドール−６，９，１０−トリオンの新規置換インデノ［１，２−ｂ］インドール誘導体の合成及び殊に腫瘍形成性疾病の治療のための医薬品及び／又は薬剤中の作用物質としてのその使用。【特許請求の範囲】
【請求項１】
構造Ｉ、構造ＩＡ又は構造ＩＩ：
【化１】
2010505782.tif 000021
［式中、Ｒは
水素原子又は
直鎖又は分枝鎖のＣ１〜Ｃ８−アルキル基又は
Ｃ３〜Ｃ８−シクロアルキル基又は
直鎖又は分枝鎖のＣ２〜Ｃ８−アルケニル基又は
Ｃ３〜Ｃ８−シクロアルケニル基又は
アリール基又はヘテロアリール基又は
アリール−Ｃ１〜Ｃ８−アルキル基又は
ヘテロアリール−Ｃ１〜Ｃ８−アルキル基を表し、
この際、Ｒは場合により、１個以上の同じ又は異なる次の基：
ヒドロキシ基又はシアノ基又はニトロ基又はハロゲン原子又はカルボキシ基又はスルホン酸基又は
式ＣＯＯＲ１２の基（アルコキシカルボニル基）又はＳＯ２ＯＲ１３の基（アルコキシスルホン酸基）（ここで、Ｒ１２、Ｒ１３は同じ又は異なるものであり、それぞれ直鎖又は分枝鎖のＣ１〜Ｃ８−アルキル基又はＣ３〜Ｃ８−シクロアルキル基又は直鎖又は分枝鎖のＣ２〜Ｃ８−アルケニル基を表し、これらは、場合により、同じ又は異なる、ヒドロキシ基又はシアノ基又はニトロ基又はハロゲン原子又はカルボキシ基又は式ＮＲ１４Ｒ１５、ＣＯＮＲ１４Ｒ１５、ＣＳＮＲ１４Ｒ１５、ＳＯ２ＮＲ１４Ｒ１５の基１個以上で置換されており、ここで、Ｒ１４、Ｒ１５は同じ又は異なるものであり、それぞれ水素原子又は直鎖又は分枝鎖のＣ１〜Ｃ８−アルキル基又はＣ３〜Ｃ８−シクロアルキル基を表すか又はそれらに付いている窒素原子と一緒になって窒素含有ヘテロ環を形成している）又は
式ＣＯＮＲ１６Ｒ１７の基（カルボキサミド基）、ＣＳＮＲ１６Ｒ１７の基（チオカルボキサミド基）、ＳＯ２ＮＲ１６Ｒ１７の基（スルホンアミド基）（ここで、Ｒ１６、Ｒ１７は同じ又は異なるものであり、それぞれ水素原子又は直鎖又は分枝鎖のＣ１〜Ｃ８−アルキル基又はＣ３〜Ｃ８−シクロアルキル基又は直鎖又は分枝鎖のＣ２〜Ｃ８−アルケニル基を表すか又はそれらに付いている窒素原子と一緒になって窒素含有ヘテロ環を形成しており、かつこれらは場合により１個以上の同じ又は異なる、ヒドロキシ基、シアノ基、ニトロ基、ハロゲン原子、カルボキシ基で置換されている）又は
アミノ基ＮＲ１８Ｒ１９（ここで、Ｒ１８、Ｒ１９は同じ又は異なるもので、それぞれ水素原子又は直鎖又は分枝鎖のＣ１〜Ｃ８−アルキル基又はＣ３〜Ｃ８−シクロアルキル基又は直鎖又は分枝鎖のＣ２〜Ｃ８−アルケニル基を表すか又はそれらに付いている窒素原子と一緒になって窒素含有ヘテロ環を形成している）又は
アシルオキシ基ＯＣＯＲ２０（ここで、Ｒ２０は直鎖又は分枝鎖のＣ１〜Ｃ８−アルキル基又はＣ３〜Ｃ８−シクロアルキル基又は直鎖又は分枝鎖のＣ２〜Ｃ８−アルケニル基を表し、これらは、場合により、１個以上の同じ又は異なる、ヒドロキシ基、シアノ基、ニトロ基、ハロゲン原子、カルボキシ基又は式ＣＯＯＲ２１、ＮＲ２１Ｒ２２、ＣＯＮＲ２１Ｒ２２、ＣＳＮＲ２１Ｒ２２、ＳＯ２ＮＲ２１Ｒ２２の基で置換されており、ここで、Ｒ２１、Ｒ２２は同じ又は異なるものであり、それぞれ水素原子又は直鎖又は分枝鎖のＣ１〜Ｃ８−アルキル基又はＣ３〜Ｃ８−シクロアルキル基を表すか又はそれらに付いている窒素原子と一緒になって窒素含有ヘテロ環を形成している）又は
式ＯＲ２３ＮＲ２４Ｒ２５の基（アミノアルコキシ）（ここで、Ｒ２３は直鎖又は分枝鎖のＣ１〜Ｃ８−アルキル基であり、Ｒ２４、Ｒ２５は同じ又は異なるものであり、それぞれ水素原子又は直鎖又は分枝鎖のＣ１〜Ｃ８−アルキル基又はＣ３〜Ｃ８−シクロアルキル基を表すか又はそれらに付いている窒素原子と一緒になって窒素含有ヘテロ環を形成している）
で置換されている、
この際、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０は同じ又は異なるものであり、それぞれ無関係に次のものを表す：
水素原子又は
直鎖又は分枝鎖のＣ１〜Ｃ８−アルキル基又は
Ｃ３〜Ｃ８−シクロアルキル基又は
直鎖又は分枝鎖のＣ２〜Ｃ８−アルケニル基又は
Ｃ３〜Ｃ８−シクロアケニル基又は
アリール基又は
直鎖又は分枝鎖のアリール−Ｃ１〜Ｃ８−アルキル基又は
ヘテロアリール基又は
ヒドロキシ基又は
直鎖又は分枝鎖のＣ１〜Ｃ８−アルコキシ基又は
Ｃ３〜Ｃ８−シクロアルコキシ基又は
直鎖又は分枝鎖のＣ２〜Ｃ８−アルケニルオキシ基又は
Ｃ３〜Ｃ８−シクロアルケニルオキシ基又は
Ｃ１〜Ｃ２−アルキレンジオキシ基（Ｒ１〜Ｒ１０の一つが隣りの基Ｒ１〜Ｒ１０の一つと一緒になってこれを形成している）又は
アシルオキシ基ＯＣＯＲ２６（ここで、Ｒ２６は直鎖又は分枝鎖のＣ１〜Ｃ８−アルキル基又は直鎖又は分枝鎖のＣ２〜Ｃ８−アルケニル基又はＣ３〜Ｃ８−シクロアルキル基を表す）又は
直鎖又は分枝鎖のアリール−Ｃ１〜Ｃ８−アルコキシ基又は
アルコキシカルボニルアルキル基Ｒ２７ＣＯＯＲ２８（ここで、Ｒ２７、Ｒ２８は、同じ又は異なるものであり、それぞれ直鎖又は分枝鎖のＣ１〜Ｃ８−アルキル基又はＣ３〜Ｃ８−シクロアルキル基又は直鎖又は分枝鎖のＣ２〜Ｃ８−アルケニル基である）又は
カルボキシ基ＣＯＯＨ又は
式ＣＯＮＲ２９Ｒ３０の基（カルボキサミド基）、ＣＳＮＲ２９Ｒ３０の基（チオカルボキサミド基）、ＳＯ２ＮＲ２９Ｒ３０の基（スルホンアミド基）（ここで、Ｒ２９、Ｒ３０は同じ又は異なるものであり、それぞれ水素原子又は直鎖又は分枝鎖のＣ１〜Ｃ８−アルキル基又はＣ３〜Ｃ８−シクロアルキル基を表すか又はそれらに付いている窒素原子と一緒になって窒素含有ヘテロ環を形成している）又は
アルコキシカルボニル基ＣＯＯＲ３１（ここで、Ｒ３１は、直鎖又は分枝鎖のＣ１〜Ｃ８−アルキル基又はＣ３〜Ｃ８−シクロアルキル基又は直鎖又は分枝鎖のＣ２〜Ｃ８−アルケニル基である）又は
アミノ基ＮＲ３２Ｒ３３（ここで、Ｒ３２、Ｒ３３は同じ又は異なるものであり、それぞれ水素原子又は直鎖又は分枝鎖のＣ１〜Ｃ８−アルキル基又はＣ３〜Ｃ８−シクロアルキル基又は直鎖又は分枝鎖のＣ２〜Ｃ８−アルケニル基を表すか又はそれらに付いている窒素原子と一緒になって窒素含有ヘテロ環を形成している）又は
式ＯＲ３４ＮＲ３５Ｒ３６のアミノアルコキシ基（ここで、Ｒ３４は直鎖又は分枝鎖のＣ１〜Ｃ８−アルキル基又はＣ３〜Ｃ８−シクロアルキル基又は直鎖又は分枝鎖のＣ２〜Ｃ８−アルケニル基を表し、Ｒ３５、Ｒ３６は同じ又は異なるものであり、それぞれ水素原子又は直鎖又は分枝鎖のＣ１〜Ｃ８−アルキル基又はＣ３〜Ｃ８−シクロアルキル基を表すか又はそれらに付いている窒素原子と一緒になって窒素含有ヘテロ環を形成している）を表し、
この際、基Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０の各々は、場合により、相互に無関係に、１個以上の同じ又は異なる次の置換基：
ヒドロキシ基又はシアノ基又はニトロ基又はハロゲン原子又はカルボキシ基又はスルホン酸基又はアリール基又はヘテロアリール基又は式ＣＯＯＲ３７の基、ＮＲ３７Ｒ３８の基、ＣＯＮＲ３７Ｒ３８の基（カルボキサミド基）、ＣＳＮＲ３７Ｒ３８の基（チオカルボキサミド基）、ＳＯ２ＮＲ３７Ｒ３８の基（スルホンアミド基）（ここで、Ｒ３７Ｒ３８は同じ又は異なるものであり、それぞれ水素原子又は直鎖又は分枝鎖のＣ１〜Ｃ８−アルキル基又はＣ３〜Ｃ８−シクロアルキル基を表すか又はそれらに付いている窒素原子と一緒になって窒素含有ヘテロ環を形成しており、かつ、これらは場合により１個以上の同じ又は異なる、ヒドロキシ基、シアノ基、ニトロ基、ハロゲン原子、カルボキシ基又は式ＣＯＯＲ３９、ＮＲ３９Ｒ４０、ＣＯＮＲ３９Ｒ４０、ＣＳＮＲ３９Ｒ４０、ＳＯ２ＮＲ３９Ｒ４０の基で置換されており、ここで、Ｒ３９、Ｒ４０は同じ又は異なるものであり、それぞれ水素原子又は直鎖又は分枝鎖のＣ１〜Ｃ８−アルキル基又はＣ３〜Ｃ８−シクロアルキル基を表すか又はそれらに付いている窒素原子と一緒になって窒素含有ヘテロ環を形成している）で置換されている、
この際、Ｘ、Ｙ、Ｚは同じ又は異なるものであり、それぞれ相互に無関係に、
酸素原子、
イミノ官能基ＮＲ４１（ここで、Ｒ４１は、水素原子又は線状又は分枝したＣ１〜Ｃ８−アルキル基又はＣ３〜Ｃ８−シクロアルキル基又は線状又は分枝したＣ２〜Ｃ８−アルケニル基、Ｃ３〜Ｃ８−シクロアルケニル基又はアリール基又はヘテロアリール基を表す）又は
アルキルオキシイミノ官能基ＮＯＲ４２（ここで、Ｒ４２は、水素原子又は線状又は分枝したＣ１〜Ｃ８−アルキル基又はＣ３〜Ｃ８−シクロアルキル基又は線状又は分枝したＣ２〜Ｃ８−アルケニル基又はＣ３〜Ｃ８−シクロアルケニル基を表す）又は
アリールオキシイミノ官能基ＮＯＲ４３（ここで、Ｒ４３はアリール基又はヘテロアリール基を表す）を表し、
この際、ＮＲ４１、ＮＯＲ４２及びＮＯＲ４３は、場合により相互に無関係に、１個以上の同じは異なる次の基：アリール基、ヘテロアリール基、ヒドロキシ基、シアノ基、ニトロ基、ハロゲン原子又は式ＣＯＯＲ４４の基、ＮＲ４４Ｒ４５の基（アミノ基）、ＣＯＮＲ４４Ｒ４５の基（カルボキサミド基）、ＣＳＮＲ４４Ｒ４５の基（チオカルボキサミド基）、ＳＯ２ＮＲ４４Ｒ４５の基（スルホンアミド基）（ここで、Ｒ４４、Ｒ４５は同じ又は異なるものであり、それぞれ、水素原子又は直鎖又は分枝鎖のＣ１〜Ｃ８−アルキル基又はＣ３〜Ｃ８−シクロアルキル基を表すか又は場合によりそれらに付いている窒素原子と一緒になって窒素含有ヘテロ環を形成している）で置換されており、
この際、構造ＩＡ中のＸ−Ｒ１１は、
ヒドロキシ基又は
アルコキシ基（ここで、Ｒ１１は直鎖又は分枝鎖のＣ１〜Ｃ８−アルキル基又はＣ３〜Ｃ８−シクロアルキル基又は直鎖又は分枝鎖のＣ２〜Ｃ８−アルキレン基であり、これらは場合により、アリール基、ヘテロアリール基、ヒドロキシ基、シアノ基、ニトロ基、ハロゲン原子、カルボキシ基又は式ＣＯＯＲ４６、ＮＲ４６Ｒ４７、ＣＯＮＲ４６Ｒ４７、ＣＳＮＲ４６Ｒ４７、ＳＯ２ＮＲ４６Ｒ４７の基の１個以上で置換されており、ここで、Ｒ４６、Ｒ４７は同じ又は異なるものであり、それぞれ水素原子又は直鎖又は分枝鎖のＣ１〜Ｃ８−アルキル基又はＣ３〜Ｃ８−シクロアルキル基を表すか又はそれらに付いている窒素原子と一緒になって窒素含有ヘテロ環を形成している）又は
アシルオキシ基ＯＣＯＲ４８（ここで、Ｒ４８は直鎖又は分枝鎖のＣ１〜Ｃ８−アルキル基又は直鎖又は分枝鎖のＣ２〜Ｃ８−アルケニル基又はＣ３〜Ｃ８−シクロアルキル基又はアリール基又はヘテロアリール基を表し、これらは場合により、アリール基、ヘテロアリール基、ヒドロキシ基、シアノ基、ニトロ基、ハロゲン原子、カルボキシ基又は式ＣＯＯＲ４９、ＮＲ４９Ｒ５０、ＣＯＮＲ４９Ｒ５０、ＣＳＮＲ４９Ｒ５０、ＳＯ２ＮＲ４９Ｒ５０の基の１個以上で置換されており、ここで、Ｒ４９、Ｒ５０は同じ又は異なるものであってよく、それぞれ水素原子又は直鎖又は分枝鎖のＣ１〜Ｃ８−アルキル基又はＣ３〜Ｃ８−シクロアルキル基を表すか又はそれらに付いている窒素原子と一緒になって窒素含有ヘテロ環を形成している）を表し、
この際、Ｃ２〜Ｃ８−アルケニル基とは、それぞれ相互に無関係に、少なくとも１個〜最大個数の共役二重結合を含有している、直鎖又は分枝鎖の炭化水素連鎖であると理解すべきであり、
この際、Ｃ３〜Ｃ８−シクロアルケニル基とは、それぞれ相互に無関係に、少なくとも１個〜最大個数の共役二重結合を含有している、環状の炭化水素であると理解すべきであり、
この際、アリール基とは、それぞれ相互に無関係に、フェニル又はナフチル基であると理解すべきであり、これらは、１個以上の同じ又は異なる置換基、例えば線状又は分枝したＣ１〜Ｃ８−アルキル基又はＣ３〜Ｃ８−シクロアルキル基、フェニル−Ｃ１〜Ｃ８−アルキル基、ナフチル−Ｃ１〜Ｃ８−アルキル基、Ｃ１〜Ｃ２−アルキレンジオキシ基、ヒドロキシ基、ニトロ基、シアノ基、ハロゲン原子、線状又は分枝したＣ１〜Ｃ８−アルコキシ基、フェノキシ基、線状又は分枝したＣ１〜Ｃ８−アルコキシカルボニル基、カルボキシ基、式ＯＣＲ５１ＮＲ５２Ｒ５３の基（アミノ−Ｃ１〜Ｃ８−アルコキシ基）、ＮＲ５２Ｒ５３の基（アミノ基）、ＣＯＮＲ５２Ｒ５３（カルボキサミド基）、ＣＳＮＲ５２Ｒ５３の基（チオカルボキサミド基）、ＳＯ２ＮＲ５２Ｒ５３の基（スルホンアミド基）（ここで、Ｒ５１は直鎖又は分枝鎖のＣ１〜Ｃ８−アルキル基を表し、Ｒ５２、Ｒ５３は同じ又は異なるもので、それぞれ水素原子又は直鎖又は分枝鎖のＣ１〜Ｃ８−アルキル基又はＣ３〜Ｃ８−シクロアルキル基を表すか又は、それらに付いている窒素原子と一緒になって窒素含有ヘテロ環を形成している）で置換されていてよい、
この際、ヘテロアリール基とは、それぞれ相互に無関係に、ヘテロ原子（Ｏ、Ｎ、Ｓ）１〜３個を含有している環員数５〜１２を有する芳香族の単環−又は二環系であると理解すべきであり、これは、１個以上の同じ又は異なる置換基、例えば線状又は分枝したＣ１〜Ｃ８−アルキル基、Ｃ３〜Ｃ８−シクロアルキル基、線状又は分枝したＣ１〜Ｃ８−アルキレン基、アリール基、ヒドロキシ基、ニトロ基、シアノ基、ハロゲン原子、線状又は分枝したＣ１〜Ｃ８−アルコキシ基、Ｃ３〜Ｃ８−シクロアルコキシ基、フェノキシ基、式ＯＣＲ５４ＮＲ５５Ｒ５６の基（アミノ−Ｃ１〜Ｃ８−アルコキシ基）、ＮＲ５５Ｒ５６の基（アミノ基）、ＣＯＮＲ５５Ｒ５６の基（カルボキサミド基）、ＣＳＮＲ５５Ｒ５６の基（チオカルボキサミド基）、ＳＯ２ＮＲ５５Ｒ５６の基（スルホンアミド基）（ここで、Ｒ５４は直鎖又は分枝鎖のＣ１〜Ｃ８−アルキル基を表し、Ｒ５５、Ｒ５６は同じ又は異なるものであってよく、それぞれ水素原子又は直鎖又は分枝鎖のＣ１〜Ｃ８−アルキル基又はＣ３〜Ｃ８−シクロアルキル基を表すか又はそれらに付いている窒素原子と一緒になって窒素含有ヘテロ環を形成している）で置換されていてよく、かつ、
この際、窒素含有ヘテロ環とは、それぞれ相互に無関係に、窒素と共にヘテロ原子（特にＯ、Ｎ、Ｓ）１〜３個を含有している５〜７環員数を有する飽和の単環、殊にピロリジニル−、ピペリジル−、モルホリニル−及びピペラジニル基であると理解すべきである］の化合物又は
薬剤学的に慣用の酸との塩（ここで、薬剤学的に慣用の酸とは、殊に塩化水素酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、乳酸、焦性ブドウ酸、マロン酸、コハク酸、グルタール酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、蓚酸であると理解すべきである）又は
その異性体混合物又は純粋な異性体（ここで、異性体とは、光学異性体及び二重結合位置での幾何異性体、殊にジアステレオマー、エナンチオマー及びＥ／Ｚ−異性体であると理解すべきである）。
【請求項２】
式中のＲは、水素原子又は直鎖又は分枝鎖のＣ１〜Ｃ８−アルキル基又はＣ３〜Ｃ８−シクロアルキル基又は直鎖又は分枝鎖のＣ２〜Ｃ８−アルケニル基又はＣ３〜Ｃ８−シクロアケニル基又はアリール基又はヘテロアリール基又はアミノ基ＮＲ３２Ｒ３３又は直鎖又は分枝鎖のＣ１〜Ｃ８−アルコキシ基又はＣ３〜Ｃ８−シクロアルコキシ基を表し、これらは、請求項１中におけると同様に定義され、かつ場合によっては、請求項１中で定義されているように置換されている、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
式中のＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０は、同じ又は異なるものであり、それぞれ相互に無関係に、水素原子又は直鎖又は分枝鎖のＣ１〜Ｃ８−アルキル基又はＣ３〜Ｃ８−シクロアルキル基又は直鎖又は分枝鎖のＣ２〜Ｃ８−アルケニル基又はＣ３〜Ｃ８−シクロアケニル基又はアリール基又はヘテロアリール基又はヒドロキシ基又はアシルオキシ基ＯＣＯＲ２６、カルボキシ基ＣＯＯＨ又はアミノ基ＮＲ３２Ｒ３３又は直鎖又は分枝鎖のＣ１〜Ｃ８−アルコキシ基又はＣ１〜Ｃ８−アルキレンジオキシ基を表し、これらは請求項１におけると同様に定義され、かつ場合によっては、請求項１で定義されていると同様に置換されている、請求項１又は２に記載の化合物。
【請求項４】
式中のＸは酸素原子である、請求項１から３までのいずれか１項に記載の化合物。
【請求項５】
式中のＹは酸素原子である、請求項１から３までのいずれか１項に記載の化合物。
【請求項６】
式中のＺは酸素原子である、請求項１から３までのいずれか１項に記載の化合物。
【請求項７】
式中のＸ及びＹは酸素である、請求項１から３までのいずれか１項に記載の化合物。
【請求項８】
式中のＲ５〜Ｒ１０は水素である、請求項１から３までのいずれか１項に記載の化合物。
【請求項９】
式中のＸ、Ｙ及びＺは酸素である、請求項１から３までのいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１０】
式中のＲ７及びＲ９は水素である、請求項１から３までのいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１１】
式中のＲ１〜Ｒ１０は同じ又は異なるものであり、水素、直鎖又は分枝鎖のＣ１〜Ｃ８−アルキル基又は直鎖又は分枝鎖のＣ１〜Ｃ８−アルコキシ基である、請求項１から３までのいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１２】
式中のＲは、水素原子又は請求項１に定義されていると同様な直鎖又は分枝鎖のＣ１〜Ｃ８−アルキル基又はアリール基又は請求項１に定義されていると同様な直鎖又は分枝鎖のアリール−Ｃ１〜Ｃ８−アルキル基である、請求項１から３までのいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１３】
ＩＵＰＡＣ−名称  ５−イソプロピル−５，６，７，８−テトラヒドロ−インデノ［１，２−ｂ］インドール−９，１０−ジオンを有する、構造Ｉを有する請求項１から３までのいずれか１項に記載の化合物又はこの化合物と薬剤学的に慣用の酸との塩。
【請求項１４】
ＩＵＰＡＣ−名称  ５−フェネチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−インデノ［１，２−ｂ］インドール−９，１０−ジオンを有する、構造Ｉを有する請求項１から３までのいずれか１項に記載の化合物又はこの化合物と薬剤学的に慣用の酸との塩。
【請求項１５】
ＩＵＰＡＣ−名称  ５−（１−フェニル−エチル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−インデノ［１，２−ｂ］インドール−９，１０−ジオンを有する、構造Ｉを有する請求項１から３までのいずれか１項に記載の化合物、その異性体又はこの化合物と薬剤学的に慣用の酸との塩。
【請求項１６】
ＩＵＰＡＣ−名称  ５−フェニル−５，６，７，８−テトラヒドロ−インデノ［１，２−ｂ］インドール−９，１０−ジオンを有する、構造Ｉを有する請求項１から３までのいずれか１項に記載の化合物又はこの化合物と薬剤学的に慣用の酸との塩。
【請求項１７】
ＩＵＰＡＣ−名称  ５−イソプロピル−５Ｈ−インデノ［１，２−ｂ］インドール−６，９，１０−トリオンを有する、構造ＩＩを有する請求項１から３までのいずれか１項に記載の化合物又はこの化合物と薬剤学的に慣用の酸との塩。
【請求項１８】
ＩＵＰＡＣ−名称  ５−ベンジル−５，６，９，１０−テトラヒドロインデノ［１，２−ｂ］インドール−６，９，１０−トリオンを有する、構造ＩＩを有する請求項１から３までのいずれか１項に記載の化合物又はこの化合物と薬剤学的に慣用の酸との塩。
【請求項１９】
ＩＵＰＡＣ−名称  ５−フェネチル−５Ｈ−インデノ［１，２−ｂ］インドール−６，９，１０−トリオンを有する、構造ＩＩを有する請求項１から３までのいずれか１項に記載の化合物又はこの化合物と薬剤学的に慣用の酸との塩。
【請求項２０】
式中のＸＲ１１はＯＲ又はＮＲＲであり、ここで、Ｒは、請求項１に定義されているような置換又は非置換のＣ１〜Ｃ８−アルキル基、請求項１で定義されているようなアリール基又は請求項１で定義されているようなヘテロアリール基であり、かつこの際、ＮＲＲの場合の双方の基Ｒは同じ又は異なるものである、構造ＩＡを有する請求項１から３までのいずれか１項に記載の化合物。
【請求項２１】
プロテインキナーゼを阻害するための、請求項１から２０までのいずれか１項に記載の化合物の使用。
【請求項２２】
この際、プロテインキナーゼはセリン／スレオニンキナーゼである、請求項２１に記載の使用。
【請求項２３】
この際、プロテインキナーゼはヒトプロテインキナーゼである、請求項２１又は２２に記載の使用。
【請求項２４】
この際、プロテインキナーゼはＣＫ２−キナーゼである、請求項２１から２３までのいずれか１項に記載の使用。
【請求項２５】
この際、阻害は特異的である、請求項２１から２４までのいずれか１項に記載の使用。
【請求項２６】
この際、請求項１から２０までのいずれか１項に記載の化合物を、もう１種のプロテインキナーゼ阻害物質と組み合わせて使用する、請求項２１から２３までのいずれか１項に記載の使用。
【請求項２７】
癌及び／又は腫瘍の治療のための医薬品を製造するために使用する、請求項１から２０までのいずれか１項に記載の化合物の使用。
【請求項２８】
この際、癌及び／又は腫瘍は、腫瘍性疾病、殊に：
ａ）白血病、殊に急性リンパ芽球−及び慢性リンパ球−、急性骨髄芽球−及び慢性骨髄性白血病、
ｂ）癌、殊に乳腺、前立腺、肺、子宮頸、食道、胃、小腸、脳、大腸の癌、
ｃ）肉腫、殊に骨腫、骨肉腫、脂肪腫、脂肪肉腫、血管腫、血管肉腫、黒色腫及び
ｄ）混合種類の腫瘍形成、殊に癌肉腫、リンパ組織の腫瘍形成、卵胞細網腫瘍形成、細胞肉腫及びホジキン病
から選択される腫瘍形成である、請求項２５に記載の使用。
【請求項２９】
炎症性疾病の治療のための医薬品を製造するための、請求項１から２０までのいずれか１項に記載の使用。
【請求項３０】
この際、炎症性疾病は、糸球体腎炎又は紅班性エリテマトーデスである、請求項２９に記載の使用。
【請求項３１】
癌及び／又は腫瘍疾病、殊に
ａ）白血病、殊に急性リンパ芽球−及び慢性リンパ球−、急性骨髄芽球−及び慢性骨髄性白血病、
ｂ）癌、殊に乳腺、前立腺、肺、子宮頸、食道、胃、小腸、脳、大腸の癌、
ｃ）肉腫、殊に骨腫、骨肉腫、脂肪腫、脂肪肉腫、血管腫及び血管肉腫、黒色腫及び
ｄ）混合種類の腫瘍形成、殊に癌肉腫、リンパ組織の腫瘍形成、卵胞細網腫瘍形成、細胞肉腫及びホジキン病
から選択される腫瘍形成の診断剤を製造するための、請求項１から２０までのいずれか１項に記載の化合物の使用。
【請求項３２】
炎症性疾病、殊に糸球体腎炎及び／又は紅班性エリテマトーデスの診断剤を製造するための、請求項１から２０までのいずれか１項に記載の化合物の使用。
【請求項３３】
この際、診断剤は、細胞プロセス、発病又は個体発生及びその他の発生生物学的プロセスにおける、プロテインキナーゼの役割を検査するために好適である、請求項３０又は３１に記載の使用。
【請求項３４】
この際、プロテインキナーゼは、セリン／スレオニンキナーゼ及び殊にＣＫ２である、請求項３３に記載の使用。
【請求項３５】
癌及び／又は腫瘍に罹っている動物生体を治療するために、請求項１から２０までのいずれか１項に記載の化合物を単独で又は癌及び／又は腫瘍の治療のための他の作用物質と組み合わせて用いる、動物生体を治療する方法。
【請求項３６】
この際、癌及び／又は腫瘍は、腫瘍性疾病、殊に
ａ）白血病、殊に急性リンパ芽球−及び慢性リンパ球−、急性骨髄芽球−及び慢性骨髄性白血病、
ｂ）癌、殊に乳腺、前立腺、肺、子宮頸、食道、胃、小腸、脳、大腸の癌、
ｃ）肉腫、殊に骨腫、骨肉腫、脂肪腫、脂肪肉腫、血管腫、血管肉腫、黒色腫及び
ｄ）混合種類の腫瘍形成、殊に癌肉腫、リンパ組織の腫瘍形成、卵胞細網腫瘍形成、細胞肉腫及びホジキン病
から選択される腫瘍形成である、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
請求項１から２０までのいずれか１項に記載の化合物を単独で又は炎症性病気の治療のための他の作用物質と組み合わせて用いる、炎症性病気に罹っている動物生体を治療する方法。
【請求項３８】
炎症性病気は糸球体腎炎又は紅班性エリテマトーデスである、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
作用物質として、請求項１から２０までのいずれか１項に記載の構造Ｉ、構造ＩＡ又は構造ＩＩの化合物少なくとも１種を有効用量で含有しており、かつ場合により薬剤学的に慣用の添加剤及び／又は助剤少なくとも１種と一緒に調合されたことを特徴とする、薬剤調製物。
【請求項４０】
少なくとももう１種の作用物質を含有している、請求項３０に記載の調製物。
【請求項４１】
診断用調製物である、請求項３９又は４０に記載の調製物。
【請求項４２】
治療用調製物である、請求項３９又は４０に記載の調製物。
【請求項４３】
この際、少なくとも他の１種の作用物質は、癌及び／又は炎症性病気の治療のための作用物質である、請求項４２に記載の調製物。
【請求項４４】
請求項１から２０までのいずれか１項に記載の構造Ｉの化合物を合成する場合に、
（１）環式１，３−ジケトンから、アンモニア及び／又は１級アミンとの反応により、環式エナミノン２を製造し、かつインダントリオン１
【化２】
2010505782.tif 000022
を提供する工程
（２）エナミノン２とインダントリオンヒドレート１との反応により、付加化合物３
【化３】
2010505782.tif 000023
を得る工程及び
（３）化合物３の脱酸素により、構造Ｉ
【化４】
2010505782.tif 000024
［式中、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ８及びＲ１０はＨであり、Ｒ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ７、Ｒ９は、請求項１〜２０に記載と同じものを表し、Ｘ、Ｙ及びＺは酸素である］を有する化合物４を得る工程
を包含している、請求項１から２０までのいずれか１項に記載の構造Ｉの化合物を合成する方法。
【請求項４５】
この際、工程（３）を、
（ａ）Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ"−テトラアルキル亜硫酸ジアミド（アルキル＝メチル又はエチル）又は
（ｂ）塩化チオニル及び有機の塩基性物質、例えば炭酸ナトリウム又は有機塩基、例えばトリアルキルアミンＲ３Ｎ（ここで、Ｒは直鎖又は分枝鎖のＣ１〜Ｃ８−アルキル基、殊にメチル又はエチル又はＣ３〜Ｃ８−シクロアルキル基である）又は窒素含有芳香族アミン、例えばイミダゾール又はピリジン又は
（ｃ）チオニルジイミダゾール
を用いて実施する、請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
請求項１から２０までのいずれか１項に記載の構造ＩＩの化合物を合成する場合に、請求項４４又は４５に記載の方法の工程及び更なる
（４）化合物４の脱水素により、化合物５
【化５】
2010505782.tif 000025
を生じさせる工程及び
（５）化合物５の酸化により、構造ＩＩを有する化合物６
【化６】
2010505782.tif 000026
［式中、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ８及びＲ１０はＨであり、Ｒ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ７、Ｒ９は請求項１から２０に記載のものと同じものを表す］を生じさせる工程
を包含している、請求項１から２０までのいずれか１項に記載の構造ＩＩの化合物を合成する方法。
【請求項４７】
この際、工程（４）における脱水素を、ＤＤＱを用いて実施する、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
この際、工程（５）における酸化を、酸素を用いて実施する、請求項４６又は４７に記載の方法。
【請求項４９】
請求項４４から４８に記載の工程（１）から（５）までを包含している、請求項１から２０までのいずれか１項に記載の構造Ｉ、ＩＡ又はＩＩの化合物を製造する場合に、この際、酸素基Ｘ、Ｙ及び／又はＺを、請求項１に定義されているような＝ＮＲ４１、＝ＮＯＲ４２及び／又は＝ＮＯＲ４３に変換させる、請求項１から２０までのいずれか１項に記載の構造Ｉ、ＩＡ又はＩＩの化合物を製造する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、構造Ｉ、ＩＡ及びＩＩの化合物、その合成法及びこの化合物１種以上を含有している薬剤組成物に関する。更にこの発明は、これら化合物を腫瘍及び／又は癌及び炎症性疾病の治療用の医薬品の製造のために使用することに関する。
【０００２】
人類における心臓−循環疾病に次ぐ２番目に多い死因は、悪性腫瘍病である。この場合に、男性が女性よりもいくらか多くこれに遭遇している。新羅病率は、世界人口に対して３５０（男性）及び２５０（女性）／人口１０００００／年の大きさであるが、死亡率は世界的に約１７０（男性）及び１００（女性）／人口１０００００である。ここから明らかな該当者の巨大な数値は、腫瘍性疾病の有効な治療剤の開発の必要性を明らかにしている。腫瘍性疾病は、高い細胞増殖の特徴を示し、医薬品中に含有されている作用物質によるこの細胞増殖の抑制が、腫瘍治療のための世界的に認められる出発点である。医薬品中に含有されているこのような作用物質は、腫瘍形成と結びついて高まる細胞増殖を抑制するか又は腫瘍の退化に作用し、患者の生存可能性を延長させることを特徴としている。この分野の研究は、第１に、ヒトにおける治療で使用可能である医薬品及び作用物質の開発を目標としている。この場合には屡々、小型哺乳動物、例えばマウスで、抗−腫瘍作用について化合物が検査されており、この際、これから、特別な腫瘍性疾病に対する有効性が、これら又は近縁動物におけるだけでなく、ヒトにおいても予言できることが検査される。
【０００３】
プロテインキナーゼＣＫ２は、ＣＫ１、グリコゲンシンターゼ−キナーゼ及びサイクリン−依存性キナーゼと共に、第二メッセンジャー非依存性キナーゼ（１）群に属している。これは、Ｓｅｒ／Ｔｈｒ−基を、主に酸性の環境内でリン酸化可能にした。ＣＫ２は、酵母からヒト中に見出される高保存キナーゼである。これは、ＡＴＰ／ＧＴＰ−ホスホトランスフェラーゼとしてのその任務を、通常、２個の触媒性α−又はα’−サブユニット及び２個の調節性α−サブユニットからなっているヘテロ四量体として担当している（２）。このヘテロ四量体形と並んで、個々のサブユニットは、細胞中に遊離の形で存在するか又は他の細胞分子に結合しても存在する。最近、この形でもＣＫ２は標準の調節機能を担当することができる情報が増えている（３）。ホロ酵素としても分離サブユニットとしても、これは、核酸への結合によって、おそらく転写に影響し、他の増殖関連分子（ｐ５３、ｐ２１WAF1、ＰＰ２Ａ、ｍｏｓ、ｒａｆ、トポイソメラーゼＩＩ）への結合によって、それらの活性にも及びそれによる細胞の成長にも影響する（４）。この機能はリン酸基を転移する可能性とは無関係である一方で、ＣＫ２の最も顕著な課題はどんな場合でもその酵素活性である。従来、細胞現象の種々の任務範囲に由来している１６０を越える基質が公知である。それには、複製、転写及び翻訳のために必要である分子、シグナル伝達鎖中に結合されている分子、原癌遺伝子（ｍｄｍ２）及び成長抑制物質（ｐ５３）がある。これらの一連の基質に関して、それらの活性が、ＣＫ２によるホスホリル化によって変えられることが証明できた。これらの基質及びそれらがその活性に対してそれらが持っている影響から、ＣＫ２は細胞の成長への影響をも有していることが推論できる。例えばＣＫ２に対する抗体又はアンチセンス−オリゴヌクレオチドを細胞中に注入すると、この細胞サイクルの特定の時期まで成長を抑制する（５−７）。明らかに、ＣＫ２の活性は、移行Ｇ０／Ｇ１、Ｇ１／Ｓのため及びＳ−期の進行のためにどうしても必要であることは明らかである。更に新しい研究は、Ｇ２及びＭ−期を経る進行のためのその必要性を証明している。触媒サブユニットの過剰発現によって細胞の増殖が増強され、他方、調節サブユニットの過剰発現によって重大な成長不足をもたらし、これが細胞を萎縮させる。生物体の胚発生の間に、ＣＫ２の組織−及び時間特異性発現及び活性が観察され、これから、細胞の分化の際の意義が推論される。新規の認識は、ＣＫ２が増殖の調節のみならず、プログラムされた細胞死（アポト−シス）の惹起にも関与していることを示唆している（８）。
【０００４】
細胞増殖及び細胞の生存のためのプロテインキナーゼＣＫ２の重要性と並んで、最近、この酵素が細胞の腫瘍形成性形質転換及び癌の発生及び進行に関与している指摘が蓄積されている（９、１０）。多くの種々の腫瘍において、異常に高まった酵素ＣＫ２の濃度を検出することができる。特に、ヒトの前立腺癌（１１）、乳癌（１２）、肺癌（１３）及び他の癌疾病（１４）がこれに属する。悪性形質転換の場合のプロテインキナーゼＣＫ２の直接的関与は、種々の動物モデルで証明することもできた（１５、１６）。これらの検査及び他の結果は、このプロテインキナーゼＣＫ２が抗−腫瘍作用物質に関して大いに予期される手がかりを示唆している（１７）。
【０００５】
悪性形質転換及び腫瘍生成及び−進行へのＣＫ２の関与に関する明白な情報にも関わらず、現在は、この酵素の低い活性の阻害剤のみが提供可能である（１８、１９）。これには、エモジン（２０）、４，５，６，７−テトラブロモ−１−Ｈ−ベンゾトリアゾール（ＴＢＢ）（２１）、２−ジメチルアミノ−４，５，６，７−テトラブロム−１Ｈ−ベンズイミダゾール（ＤＭＡＴ）（２２）、（５−オキソ−５，６−ジヒドロ−インドロ［１，２−ａ］キノキサリン−７−イル）酢酸（ＩＱＡ）（２３）及びエラグ酸（２４）が属している。温和な作用効果（エモジンのＩＣ５０−値：２．０μＭ、ＴＢＢ：０．９μＭ）と並んで、これらは、その作用効果が、ヒトの酵素でなく、主にラッテの酵素で調査されており、それらがその物理−化学的特性に基づき、殊に経口適用のための医薬品中の作用物質としては使用されないことが明らかである。
【０００６】
ＣＫ２が慢性の炎症性疾病、殊に糸球体腎炎（２６）及び紅班性エリテマトーデス（２７）を目標としていることは明らかであった。
【０００７】
インデノ［１，２−ｂ］インドールは、次のものとして多大に要求されている：酸化防止剤及びラジカルスカベンジャー（Ｓainsbury et al.,ＥＰ−４０４５３６−Ａ１）、エストロゲンアンタゴニスト（Miller et al.,  ＵＳ特許６１０７２９２）、カリウムチャンネルオープナー（Antane et al.、ＵＳ特許出願２００１／００４７０２６Ａ１）、トポイソメラーゼＩＩの阻害物質（Wierzbicki et al．ＵＳ特許６６２７６５０）、酸化防止剤としての４ｂ，５，９ｂ，１０−テトラヒドロ−インデノ［１，２−ｂ］インドール（Sainsbury et al．ＷＯ９０／１５７９９及びＥＰ−４０９４１０−Ｂ１）。
【０００８】
従って、本発明の課題は、その構造に基づき腫瘍性疾患の治療のための医薬品中で作用物質として使用され、その活性がヒトプロテインキナーゼＣＫ２の強力な阻害によって証明できる有効な阻害剤を合成することであった。更に本発明の課題は、慢性の炎症性疾病の治療のために使用することのできる、ＣＫ２の阻害剤を提供することであった。
【０００９】
本発明による化合物は、それらが新規であり、即ち文献に記載されておらず、請求されていなかったこと及びそれらがヒトプロテインキナーゼＣＫ２及び他のキナーゼに対して強力な阻害作用を示すことで優れている。
【００１０】
本発明は、一般構造Ｉ、ＩＡ及びＩＩを有する、新規インデノ［１，２−ｂ］インドール誘導体の合成を記載している。これらは、殊にセリン／スレオニン−キナーゼタイプのプロテインキナーゼに対する、かつこの特別な実施形では、ヒトプロテインキナーゼＣＫ２に対する阻害作用を有している。
【００１１】
【化１】
2010505782.tif 000002
【００１２】
本発明による課題は、公知で入手容易な出発物質から非常に良好又は良好な収率で得られる、構造Ｉ、ＩＡ又はＩＩを有する化合物の新規で非常に有効な合成原理である：
第１工程：
環式１，３−ジケトンからのアンモニア又は１級アミンとの反応による環式エナミノンの及び文献公知の方法によるインダントリオンの製造：
Ｒ及びＲ１〜Ｒ１０は、ここに記載のものを表す
【化２】
2010505782.tif 000003
【００１３】
第２工程：
エナミノン２とインダントリオンヒドレート１との反応により、付加化合物３にする
【化３】
2010505782.tif 000004
【００１４】
第３工程：
本発明者により開発された試薬タイプ：
Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラアルキル亜硫酸ジアミド（ＴＭＴＡ：アルキル＝ＣＨ３、Ｃ２Ｈ５）を用いる、化合物３の脱酸素。
【００１５】
この脱酸素は、（２９）に従って有利に実施される。
【００１６】
【化４】
2010505782.tif 000005
【００１７】
第４工程：
ＤＤＱを用いる化合物４（構造Ｉ；Ｒ６＝Ｒ８＝Ｒ１０＝Ｈ）の脱水素により、５を生じさせる。
【００１８】
【化５】
2010505782.tif 000006
【００１９】
第５工程：
酸素を用いる化合物５（Ｒ５＝Ｈ）の接触酸化により、６（構造ＩＩ）をもたらす。
【００２０】
【化６】
2010505782.tif 000007
【００２１】
特別好ましい１実施形で本発明は、本発明に記載の新規化合物を、殊に腫瘍性疾病を治療するための医薬品及び／又は薬剤中の作用物質として使用することに関する。
【００２２】
更なる特別好ましい１実施形は、これら化合物をヒトプロテインキナーゼＣＫ２の特異的阻害のために使用することに関する。
【００２３】
もう一つの実施形は、本発明による化合物によるプロテインキナーゼ一般の阻害、特にセリン／スレオニンキナーゼの阻害に関する。
【００２４】
もう一つの実施形は、酵素一般の阻害、殊に病気の発生、病因、進行及び／又は状態維持に役割を演じる、ヒトの酵素の阻害に関する。
【００２５】
もう一つの特別な実施形で本発明は、記載の新規化合物を、広い疾病、殊に慢性の炎症性疾病、例えば糸球体腎炎及び／又は紅班性エリテマトーデス、変質性疾病又は細胞増殖の調節の不均衡の原因に寄与している他の疾病を治療するための医薬品及び／又は薬剤中の作用物質として使用することに関する。
【００２６】
記載の新規化合物の本発明による使用は、もう一つの特別な実施形で、プロテインキナーゼ一般及び殊にセリン／スレオニンキナーゼの阻害である。
【００２７】
記載の新規化合物の本発明によるもう一つの用途は、細胞プロセス、疾病の発病又は個体発生及びその他の発生生物学的現象におけるプロテインキナーゼＣＫ２の役割及び関連を検査するため、並びに特に記載の関連におけるプロテインキナーゼ一般及び特別にセリン／スレオニンキナーゼの役割を検査するための診断剤中でのそれらの使用に関する。
【００２８】
本発明は、殊に腫瘍性疾病状態に羅っている患者の治療のための医薬品及び／又は薬剤中で使用するための作用物質（これは他の既知の殊に抗腫瘍有効な化合物又は他の作用物質と組み合わせて使用することもできる）を提供する。これによって、相乗作用を、場合によっては予想を越える相乗作用を得ることすらもできる。
【００２９】
ここで使用されているような概念「患者」とは、温血動物、例えば腫瘍性疾病に羅っている哺乳動物を意味する。当然、牛、馬、ラッテ、マウス、猫、犬、羊、山羊及びヒトが、この概念の意味する範囲の動物である。
【００３０】
ここで使用されているような概念「腫瘍性疾病状態」とは、高められた細胞増殖、細胞成長又は腫瘍形成の特徴を有する病的状態又は苦訴を意味する。本発明による化合物を含有している医薬品及び／又は薬剤を用いる治療がそれに対して特別使用可能である腫瘍性疾病状態には、白血病、例えば急性リンパ芽球−、慢性リンパ球−、急性骨髄芽球−及び慢性骨髄性白血病（非限定的であるが）；癌、例えば乳腺、前立腺、肺、子宮頸、食道、胃、小腸、脳、大腸の癌（非限定的であるが）；肉腫、例えば骨腫、骨肉腫、脂肪腫、脂肪肉腫、血管腫及び血管肉腫（非限定的であるが）；エナメル上皮及び黒皮症を包含する黒色腫；及び混合種類の腫瘍形成、例えば癌肉腫、リンパ組織の腫瘍形成、卵胞細網腫瘍形成、細胞肉腫及びホジキン病（非限定的であるが）が包含される。勿論、当業者により、全てではないが、本発明による化合物は、単独でも他の抗腫瘍作用化合物との組み合わせても、各々を用いる腫瘍性疾病状態の治療のために好適であり、かつ組み合わせることができるかが認識され、この際に一様に有効になり得ることが認識されうる。最も好適な化合物及び最も好適な組み合わせの選択は、当業者の能力の範囲内にあり、多くの要因に、例えば特別な腫瘍性疾病の治療のための個々の化合物の作用効果の調査の場合も包含する慣用の動物モデルで得られた結果の評価に依存する。
【００３１】
本発明の化合物の有効な抗腫瘍量は、約１ｍｇ／ｋｇ／日〜約１００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲で変動し、約０．１〜約２ｍｇ／ｋｇ／日が有利である。
【００３２】
ここで使用される概念「有効な抗腫瘍量」とは、１回−又は複数回投与量を患者に適用の後に腫瘍の成長を押さえるか又はこの様な処置をしない場合に予想される患者の生存可能性を越えてそれを延長するために優れて有効である量を意味する。ここで使用されている腫瘍の「成長を押さえる」とは、成長の緩慢化、中断、抑制又は停止を意味し、必ずしも完全な腫瘍の除去を意味するものではない。
【００３３】
１回−又は複数回投与量を、本発明の化合物の１種を単独で又は他の殊に抗腫瘍有効な化合物と組み合わせて適用することができる。
【００３４】
前記の疾病状態に罹っている患者の治療の実施の場合に、本発明の化合物の１種を、有効量で化合物を生物学的に利用可能にする任意の形で及び方法で、経口及び非経腸的に適用することができる。例えばこれら化合物を、経口、皮下、筋肉内、静脈内、経皮、鼻腔内、経直腸及び類似法で適用することができる。一般に経口適用が好ましい。処方物の製造時に当業者は、適用の通用形及び方式を、処置すべき疾病状態、疾病の時期、他の殊に抗腫瘍作用を有する作用物質と組合わせて又は単独での化合物の適用の形、共同の適用の選択方式等を包含する特別な状況に依存して、容易に選択することができる。
【００３５】
本発明の好ましい１実施形では、本発明の化合物の適用が、次の組成の処方で経口的に行われる：化合物１０ｇ、ヒドロキシプロピルセルロース２ｇ、穀物澱粉１１ｇ、乳糖１００ｇ、ステアリン酸マグネシウム３ｇ及びタルク３ｇ（この際、成分は、記載の量及び量比で、作用物質含分１０ｍｇを有する錠剤１０００個を製造するために充分である）。
【００３６】
本発明の化合物を、自体有効である限り、安定性、結晶化の快適性、高い溶解性等の目的で、それらの薬剤学的に認容性の酸付加塩の形で処方し、かつ適用することができる。
【００３７】
本発明のもう一つの特別な実施形は、本発明の化合物をいわゆる「プロドラック」中で使用することに関する。
【００３８】
本発明のもう一つの特別な実施形は、本発明の化合物を、溶解性、生体利用可能性、物理化学的特性等を改良するための更なる合成工程での出発物質として使用することに関する。
【００３９】
次の詳細な実施形も本発明の課題である：
実施形１：構造Ｉ及び構造ＩＩの化合物
【化７】
2010505782.tif 000008
式中Ｒは、次のものであることができる：
水素原子、
直鎖又は分枝鎖のアルキル基（Ｃ１〜Ｃ８）、
シクロアルキル基（Ｃ１〜Ｃ８）又は
直鎖又は分枝鎖のアルケニル基（Ｃ１〜Ｃ８）又は
シクロアルケニル基（Ｃ１〜Ｃ８）又は
アリール基又は
ヘテロアリール基、
（これらは、場合により：ヒドロキシ−、シアノ−、ニトロ−、ハロゲン−、カルボキシ−、スルホン酸−、カルボキサミド−及びチオカルボキサミド基、スルホンアミド基（ＣＯＮＲ１１Ｒ１２、ＣＳＮＲ１１Ｒ１２、ＳＯ２ＮＲ１１Ｒ１２（Ｒ１１、Ｒ１２は、同じ又は異なるもので、水素原子、直鎖又は分枝鎖のアルキル基（Ｃ１〜Ｃ８）又はシクロアルキル基（Ｃ２〜Ｃ８）であることができる）、アミノ基ＮＲ１３Ｒ１４（Ｒ１３、Ｒ１４は同じ又は異なるもので、直鎖又は分枝鎖のアルキル基（Ｃ１〜Ｃ８）又はシクロアルキル基（Ｃ２〜Ｃ８）であってよいか又はこれが付いている窒素原子と一緒になって窒素ヘテロ環を形成していてもよい）で置換されており、アルコキシカルボニル基ＣＯＯＲ１５（Ｒ１５は、直鎖又は分枝鎖のアルキル基（Ｃ１〜Ｃ８）又はシクロアルキル基（Ｃ１〜Ｃ８）であり、場合によりヒドロキシ−、ハロゲン−、シアノ−、ニトロ−、カルボキシ−、カルバモイル−及びチオカルバモイル基、スルファモイル基ＣＯＮＲ１６Ｒ１７、ＣＳＮＲ１６Ｒ１７、ＳＯ２ＮＲ１６Ｒ１７（Ｒ１６、Ｒ１７は同じ又は異なるものであってよく、水素原子、直鎖又は分枝鎖のアルキル基（Ｃ１〜Ｃ８）又はシクロアルキル基（Ｃ２〜Ｃ８）であってよい）で置換されている）、アミノ基ＮＲ１８Ｒ１９（Ｒ１８、Ｒ１９は同じ又は異なるもので、水素、線状又は分枝したアルキル基（Ｃ１〜Ｃ８）又はシクロアルキル基（Ｃ２〜Ｃ８）であるか又はそれが付いている窒素と一緒になって窒素ヘテロ環を形成していてよい）、アミノアルキルオキシアルキルＮＲ２０Ｒ２１（Ｒ２０、Ｒ２１は同じ又は異なるもので、水素原子、直鎖又は分枝鎖のアルキル基（Ｃ１〜Ｃ８）であってよいか又はそれらが付いている窒素原子と一緒になって窒素ヘテロ環を形成していてもよい）により置換されている）、
窒素官能基ＮＲ２２Ｒ２３
（ここで、Ｒ２２、Ｒ２３は、水素又は同じ又は異なるもので、直鎖又は分枝鎖のアルキル基（Ｃ１〜Ｃ８）又はシクロアルキル基（Ｃ２〜Ｃ８）、アリール基、ヘテロアリール基、アルコキシ基ＯＲ２４（Ｒ２４は直鎖又は分枝鎖のアルキル基であってよく、場合により、ヒドロキシ−、ハロゲン−、シアノ−、ニトロ−、カルボキシ−、カルボキサミド−及びチオカルボキサミド基、スルホンアミド基ＣＯＮＲ２５Ｒ２６、ＣＳＮＲ２５Ｒ２６、ＳＯ２ＮＲ２５Ｒ２６（Ｒ２５、Ｒ２６は同じ又は異なるもので、水素、直鎖又は分枝鎖のアルキル基（Ｃ１〜Ｃ８）、アリール基、ヘテロアリール基であってよいか又はこれらが付いている窒素原子と一緒になって窒素ヘテロ環を形成していてよい）で置換されている）、アルコキシカルボニル基（Ｃ１〜Ｃ８）ＣＯＯＲ２７（Ｒ２７は直鎖又は分枝鎖のアルキル基（Ｃ１〜Ｃ８）、シクロアルキル基、アリール基、ヘテロアリール基であり、場合によりヒドロキシ−、ハロゲン−、シアノ−、ニトロ−、カルボキシ−、カルボキサミド−及びチオカルボキサミド基、スルホンアミド基ＣＯＮＲ２８Ｒ２９、ＣＳＮＲ２８Ｒ２９、ＳＯ２ＮＲ２８Ｒ２９（Ｒ２８、Ｒ２９は同じ又は異なるものでよく、水素、直鎖又は分枝鎖のアルキル基（Ｃ１〜Ｃ８）であってよいか又はこれらに付いている窒素原子と一緒になって窒素ヘテロ環を形成していてよい）で置換されている）、アミノアルキルオキシアルキルＮＲ３０Ｒ３１（Ｒ３０、Ｒ３１は同じ又は異なるもので、直鎖又は分枝鎖のアルキル基（Ｃ１〜Ｃ８）であってよいか又はこれらが付いている窒素原子と一緒になって窒素ヘテロ環を形成していてよいか又はアリール−又はヘテロアリール基である）であることができる）、
酸素官能基ＯＲ３２
（Ｒ３２は、水素又は直鎖又は分枝鎖のアルキル基（Ｃ１〜Ｃ８）又はシクロアルキル基（Ｃ２〜Ｃ８）であってよく、場合によりヒドロキシ−、ハロゲン−、シアノ−、ニトロ−、カルボキシ−、カルバモイル−及びチオカルバモイル基、スルファモイル基ＣＯＮＲ１６Ｒ１７、ＣＳＮＲ１６Ｒ１７、ＳＯ２ＮＲ１６Ｒ１７で置換されており、アルコキシ基（Ｒ２９は、線状又は分枝したアルキル基（Ｃ１〜Ｃ８）又はシクロアルキル基（Ｃ２〜Ｃ８）、アルコキシカルボニル基、線状又は分枝した（Ｃ１〜Ｃ８）又はシクロアルキル（Ｃ１〜Ｃ８）であってよい）、アミノアルキルオキシアルキルＮＲ３０Ｒ３１（Ｒ３０、Ｒ３１は同じ又は異なるもので、線状又は分枝したアルキル基（Ｃ１〜Ｃ８）であってよいか又はそれらに付いている窒素原子と一緒になって窒素ヘテロ環を形成していてよい）又はアリール−又はヘテロアリール基であることができる）。
【００４０】
Ｒ１〜Ｒ１０は、同じ又は異なるものであることができる。
【００４１】
各々は、水素原子、
直鎖又は分枝鎖のアルキル基（Ｃ１〜Ｃ８）又は
シクロアルキル基（Ｃ１〜Ｃ８）又は
直鎖又は分枝鎖のアルケニル基（Ｃ１〜Ｃ８）又は
シクロアルケニル基（Ｃ１〜Ｃ８）又は
アリール基又は
ヘテロアリール基であってよく、
これらは、場合により次の基：ヒドロキシ−、シアノ−、ニトロ−、ハロゲン−、カルボキシ−、スルホン酸−、カルボキサミド−及びチオカルボキサミド基、スルホンアミド基ＣＯＮＲ３２Ｒ３３、ＣＳＮＲ３２Ｒ３３、ＳＯ２ＮＲ３２Ｒ３３（ここで、Ｒ３２、Ｒ３３は同じ又は異なるもので、水素原子、直鎖又は分枝鎖のアルキル基（Ｃ１〜Ｃ８）又はシクロアルキル基（Ｃ２〜Ｃ８）であることができる）、アミノ基ＮＲ３４Ｒ３５（Ｒ３４、Ｒ３５は同じ又は異なるものであってよく、直鎖又は分枝鎖のアルキル基（Ｃ１〜Ｃ８）又はシクロアルキル基（Ｃ２〜Ｃ８）であるか又はそれらに付いている窒素原子と一緒になって窒素ヘテロ環を形成している）で置換されており、アルコキシカルボニル基ＣＯＯＲ３６（Ｒ３６：直鎖又は分枝鎖のアルキル基（Ｃ１〜Ｃ８）又はシクロアルキル基（Ｃ１〜Ｃ８）であり、場合によりヒドロキシ−、シアノ−、ニトロ−、カルボキシ−、カルバモイル−及びチオカルバモイル基、スルファモイル基ＣＯＮＲ３７Ｒ３８、ＣＳＮＲ３７Ｒ３８、ＳＯ２ＮＲ３７Ｒ３８（Ｒ３７、Ｒ３８は同じ又は異なるもので、水素原子、直鎖又は分枝鎖のアルキル基（Ｃ１〜Ｃ８）又はシクロアルキル基（Ｃ２〜Ｃ８）であることができる）で置換されている）、アミノ基ＮＲ３９Ｒ４０（Ｒ３９、Ｒ４０は同じ又は異なるもので、水素、直鎖又は分枝鎖のアルキル基（Ｃ１〜Ｃ８）又はシクロアルキル基（Ｃ２〜Ｃ８）であるか又はそれらが付いている窒素原子と一緒になって窒素ヘテロ環を形成していてもよい）、アミノアルキルオキシアルキルＮ４１Ｒ４２（Ｒ４１、Ｒ４２は同じ又はことなるもので、水素原子、直鎖又は分枝鎖のアルキル基（Ｃ１〜Ｃ８）であってよいか又はそれらに付いている窒素原子と一緒になって窒素ヘテロ環を形成していてもよい）であり、場合によりアリール−、カルボキシ−又はアルコキシカルボニル基、直鎖又は分枝鎖の（Ｃ１〜Ｃ８）で置換されている）、
ヒドロキシ基、
アシルオキシカルボニル基ＯＣＯＲ４３（Ｒ４３は、直鎖又は分枝鎖のアルキル基（Ｃ１〜Ｃ８）又はシクロアルキル基又はアリール基又はヘテロアリール基であることができる）、
カルボキシ基、
アミノ官能基ＮＲ４４Ｒ４５（ここで、Ｒ４４、Ｒ４５は、同じ又は異なるもので、直鎖又は分枝鎖のアルキル基（Ｃ１〜Ｃ８）又はシクロアルキル基（Ｃ１〜Ｃ８）、アリール基又はヘテロアリール基であってよく、場合によりアミノ基ＮＲ４６Ｒ４７で置換されていてよく、ここで、Ｒ４６、Ｒ４７は、同じ又は異なるもので、直鎖又は分枝鎖のアルキル基（Ｃ１〜Ｃ８）又はシクロアルキル基（Ｃ１〜Ｃ８）、アリール基又はヘテロアリール基であってよい）、
直鎖又は分枝鎖のアルキル基（Ｃ１〜Ｃ８）又はシクロアルキル（Ｃ１〜Ｃ８）、アリール基又はヘテロアリール基を有するアルコキシ基、
直鎖又は分枝鎖のアルキル基（Ｃ１〜Ｃ８）又はシクロアルキル（Ｃ１〜Ｃ８）、アリール基又はヘテロアリール基を有するアルケニルオキシ基、
場合によりアリール基又はアミノ官能基ＮＲ３６Ｒ３７（ここで、Ｒ３６、Ｒ３７は同じ又は異なるものであってよく、それらの各々は線状又は分枝した（Ｃ１〜Ｃ８）アルキル基又はシクロアルキル基（Ｃ１〜Ｃ８）を有していてよいか又は窒素原子と一緒になって窒素含有ヘテロ環を形成していてもよい）で置換されていている）、
又は置換基Ｒ１〜Ｒ１０の一つは、隣りのＲ１〜Ｒ１０と一緒になって、アルキレンジオキシ基を形成している、
Ｘは次のものであることができる：
酸素、
窒素官能基ＮＲ４０（式中、Ｒ４０は水素原子、線状又は分枝したアルキル基（Ｃ１〜Ｃ８）又はシクロアルキル基（Ｃ１〜Ｃ８）又はアリール−又はアリールアルキル（Ｃ１〜Ｃ８）基であってよく、ここで、アルキル鎖は線状又は分枝していてよい。場合によりアルキル基は、１個以上の多重結合を有し、及び／又は複数の基（これらは同じ又は異なるもので、アリール、ヘテロアリール−、シクロアルキル（Ｃ３〜Ｃ８）シアノ−、ニトロ−又はアミノ官能基ＮＲ４１Ｒ４２（Ｒ４１、Ｒ４２は同じ又は異なるアルキル基（Ｃ１〜Ｃ８）、線状又は分枝したシクロアルキル（Ｃ１〜Ｃ８）であってよいか又はそれらに付いている窒素原子と一緒になってヘテロ環を形成していてよい）により一緒に又は単独で置換されていてよい。アルキル基又はシクロアルキル基は（Ｃ１〜Ｃ８）であってよいか又はそれらに付いている窒素原子と一緒になって窒素含有ヘテロ環を形成していてよく、場合によりヒドロキシ−、ハロゲン−、シアノ−、ニトロ−、カルボキシ−、スルホニル−、カルボキサミド−及びチオカルボキサミド基、スルホンアミド基ＣＯＮＲ３７Ｒ３８、ＣＳＮＲ３７Ｒ３８、ＳＯ２ＮＲ３７Ｒ３８で置換されていてよい）。
Ｙは、次のものであることができる：
酸素、
窒素官能基ＮＲ４８（式中、Ｒ４８は、水素原子、線状又は分枝したアルキル基（Ｃ１〜Ｃ８又はアリール−又はアリールアルキル（Ｃ１〜Ｃ８）基を表し、ここで、アルキル鎖は線状又は分枝していてよい。場合によりアルキル基は１個以上の多重結合を有し及び／又は複数の基で置換されていてよく、これらは同じ又は異なるもので、アリール基、ヘテロアリール−、シクロアルキル（Ｃ３〜Ｃ８）、シアノ−又はアミノ官能基ＮＲ４９Ｒ５０（Ｒ４９、Ｒ５０は同じ又は異なるアルキル（Ｃ１〜Ｃ８）又はシクロアルキル基Ｃ２〜Ｃ８、線状又は分枝しているか又はそれらに付いている窒素原子と一緒になってヘテロ環を形成していてよい）であることができる）。
Ｚは次のものであることができる：
酸素、
窒素官能基ＮＲ４９（式中、Ｒ４９は、水素原子、直鎖又は分枝鎖のアルキル基（Ｃ１〜Ｃ８）又はアリール−又はアリールアルキル（Ｃ１〜Ｃ８）基を表し、ここで、アルキル鎖は直鎖又は分枝鎖であることができる。場合によりアルキル基は１個以上の多重結合を有し及び／又は複数の次の基で置換されていてよく、これらは同じ又は異なるものであってよく、アリール−、ヘテロアリール−、シクロアルキル−（Ｃ３〜Ｃ８）、シアノ−、ニトロ−；又はアミノ官能基ＮＲ４９Ｒ５０（Ｒ４９、Ｒ５０は同じ又は異なるアルキル−（Ｃ１〜Ｃ８）又はシクロアルキル基（Ｃ２〜Ｃ８）、線状又は分枝していてよいか又はこれらに付いている窒素原子と一緒になってヘテロ環を形成していてよい）である）。
【００４２】
異性体とは、光学異性体及び二重結合の位置での幾何異性体であると理解すべきである。実施形には、異性体混合物も純粋な異性体（ジアステレオマー、エナンチオマー、Ｅ／Ｚ−イソマー）も包含される。
【００４３】
アリール基とは、フェニル、ナフチル基であると理解すべきであり、これらは、１個以上の同じ又は異なる次の置換基：ハロゲン、アルコキシ−、フェノキシ−、ニトロ−、シアノ−、アミノ基ＮＲ４３Ｒ４４（Ｒ４３、Ｒ４４は同じ又は異なるもので、線状又は分枝したアルキル基（Ｃ１〜Ｃ８）又はシクロアルキル（Ｃ１〜Ｃ８）であってよいか又はこれらに付いている窒素原子と一緒になってヘテロ環を形成していてよい）で置換されているか又はアリールアルキル−及び／又はアルキル基、線状又は分枝した（Ｃ１〜Ｃ８）又はシクロアルキル（Ｃ１〜Ｃ８）又はアルキレンジオキシ（Ｃ１〜Ｃ２）で、又はアミノアル（Ｃ１〜Ｃ８）コキシ基ＮＲ４５Ｒ４６（Ｒ４５、Ｒ４５は同じ又は異なるアルキル基（Ｃ１〜Ｃ８）、線状又は分枝した又はシクロアルキル（Ｃ１〜Ｃ８）であってよいか又はこれらに付いている窒素原子と一緒になってヘテロ環を形成していてよい）で、一緒に又は単独で置換されていてよい。
【００４４】
ヘテロアリール基とは、ヘテロ原子（Ｏ、Ｎ、Ｓ）１〜３個を有する５〜１２環員数を有する、芳香族の単環−又は二環系であると理解すべきであり、これらは１個以上の同じ又は異なる次の置換基：ハロゲン、アルコキシ−、フェノキシ−、ニトロ−、シアノ−、アミノ基ＮＲ４３Ｒ４４（Ｒ４３、Ｒ４４は同じ又は異なる線状又は分枝したアルキル基（Ｃ１〜Ｃ８）又はシクロアルキル（Ｃ１〜Ｃ８）であってよいか又はこれらに付いている窒素原子と一緒になってヘテロ環を形成していてよい）で置換されているか又は線状又は分枝した（Ｃ１〜Ｃ８）アリールアルキル−及び／又はアルキル基、シクロアルキル（Ｃ１〜Ｃ８）又はアルキレンジオキシ（Ｃ１〜Ｃ８）で置換されている、アミノアル（Ｃ１〜Ｃ８）コキシ基ＮＲ４５Ｒ４６（Ｒ４５、Ｒ４６は同じ又は異なるもので、線状又は分枝したアルキル基（Ｃ１〜Ｃ８）又はシクロアルキル（Ｃ１〜Ｃ８）であってよいか又はこれらに付いている窒素原子と一緒になってヘテロ環を形成していてよい）で一緒に又は単独で置換されていてよい。
【００４５】
窒素含有ヘテロ環とは、５〜７環員数を有する飽和の単環であると理解すべきであり、ヘテロ原子（Ｏ、Ｎ、Ｓ）１〜３個を含有している。
【００４６】
実施形２：この発明の特別有利な１実施形で、実施形１による化合物は、Ｘが酸素原子であることを特徴としている。
【００４７】
実施形３：この発明のもう一つの特別有利な１実施形で、実施形１による化合物は、Ｙが酸素原子であることを特徴としている。
【００４８】
実施形４：この発明のもう一つの特別有利な１実施形で、実施形１による化合物は、Ｚが酸素原子であることを特徴としている。
【００４９】
実施形５：この発明のもう一つの特別有利な１実施形で、実施形１による化合物は、Ｘ＝Ｙ＝酸素原子であることを特徴としている。
【００５０】
実施形６：本発明のもう一つの特別有利な１実施形で、実施形による化合物は、Ｒ５〜Ｒ１０が水素であることを特徴としている。
【００５１】
実施形７：この発明のもう一つの特別有利な１実施形で、実施形１による化合物はＸ＝Ｙ＝Ｚが酸素であることを特徴としている。
【００５２】
実施形８：この発明のもう一つの特別有利な１実施形で、実施形１による化合物は、
Ｒ７＝Ｒ９＝水素であることを特徴としている。
【００５３】
実施形９：この発明のもう一つの特別有利な１実施形で、実施形１による化合物は、Ｒ１〜Ｒ１０が同じ又は異なるものであってよく、水素、アルキル−又はアルコキシ基であることを特徴としている。
【００５４】
実施形１０：この発明のもう一つの特別有利な１実施形で、実施形１による化合物は、Ｒが水素原子、線状又は分枝しているアルキル基（Ｃ１〜Ｃ８）、アリール基又は線状又は分枝しているアリールアルキル基（Ｃ１〜Ｃ８）であることを特徴としている。
【００５５】
実施形１１：この発明のもう一つの特別有利な１実施形で、実施形１による化合物（構造Ｉ）は、名称（ＩＵＰＡＣ）：５−イソプロピル−５，６，７，８−テトラヒドロ−インデノ［１，２−ｂ］インドール−９，１０−ジオンを有するか又はこの化合物と薬剤学的に慣用の酸との塩である。
【００５６】
実施形１２：この発明のもう一つの特別有利な１実施形で、実施形１による化合物（構造Ｉ）は、名称（ＩＵＰＡＣ）：５−フェネチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−インデノ［１，２−ｂ］インドール−９，１０−ジオンを有するか又はこの化合物と薬剤学的に慣用の酸との塩である。
【００５７】
実施形１３：この発明のもう一つの特別有利な１実施形で、実施形１による化合物（構造Ｉ）は、名称（ＩＵＰＡＣ）：５−（１−フェニル−エチル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−インデノ［１，２−ｂ］インドール−９，１０−ジオンを有するか又はその異性体又はこの化合物と薬剤学的に慣用の酸との塩である。
【００５８】
実施形１４：この発明のもう一つの特別有利な１実施形で、実施形１による化合物（構造Ｉ）は、名称（ＩＵＰＡＣ）：５−フェニル−５，６，７，８−テトラヒドロ−インデノ［１，２−ｂ］インドール−９，１０−ジオンを有するか又はこの化合物と薬剤学的に慣用の酸との塩である。
【００５９】
実施形１５：この発明のもう一つの特別有利な１実施形で、実施形１による化合物（構造ＩＩ）は、名称（ＩＵＰＡＣ）：５−イソプロピル−５Ｈ−インデノ［１，２−ｂ］インドール−６，９，１０−トリオンを有するか又はこの化合物と薬剤学的に慣用の酸との塩である。
【００６０】
実施形１６：この発明のもう一つの特別有利な１実施形で、実施形１による化合物（構造ＩＩ）は、名称（ＩＵＰＡＣ）：５−ベンジル−５，６，９，１０−テトラヒドロインデノ［１，２−ｂ］インドール−６，９，１０−トリオンを有するか又はこの化合物と薬剤学的に慣用の酸との塩である。
【００６１】
実施形１７：この発明のもう一つの特別有利な１実施形で、実施形１による化合物（構造ＩＩ）は、名称（ＩＵＰＡＣ）：５−フェネチル−５Ｈ−インデノ［１，２−ｂ］インドール−６，９，１０−トリオンを有するか又はこの化合物と薬剤学的に慣用の酸との塩である。
【００６２】
実施形１８：実施形１による化合物において、これは、構造Ｉのエノール形（ＸＲ１１＝ＯＲ又はＮＲＲを有する；以後これを構造ＩＡと称する）であり、Ｒは実施形１中に記載の、場合により置換されているアルキル−、アリール−、ヘテロアリール基に一致していることを特徴としている。
【００６３】
実施形１９：実施形１〜１８に記載の化合物を、殊に腫瘍性疾病の治療のための医薬品及び／又は薬剤中で使用すること。
【００６４】
実施形２０：もう一つの特別有利な実施形で、実施形１〜１８による化合物を、ヒトプロテインキナーゼＣＫ２の特異的阻害のために使用すること。
【００６５】
実施形２１：実施形１〜１８による化合物を、プロテインキナーゼ一般の阻害のため、特にセリン／スレオニンキナーゼの阻害のために使用すること。
【００６６】
実施形２２：実施形１〜１８による化合物を、酵素一般の、特に疾病の発生、病因、進行及び／又は病態持続に役割を演じるヒトの酵素の阻害のために使用すること。
【００６７】
実施形２３：実施形１〜１８による化合物を、疾病の細胞プロセス、病因又は個体発生及びその他の発生生物学的現象及び関連現象におけるプロテインキナーゼＣＫ２の役割を検査するため、並びに前記の関連におけるプロテインキナーゼ一般の及び／又は特にセリン／スレオニンキナーゼの役割を検査するための診断剤中で使用すること。
【００６８】
実施形２４：実施形１〜１８による化合物を、特に腫瘍性疾病状態に罹っている患者の治療のための医薬品及び薬剤中で、他の周知の殊に抗腫瘍有効な化合物又は他の作用物質と組み合わせて使用すること。
【００６９】
実施形２５：腫瘍性疾病に罹っている生動物組織を治療するために、実施形１〜１８による化合物を単独で又は組み合わせて用いる、生動物組織を治療する方法。
【００７０】
実施形２６：作用物質として、実施形１〜１８による構造Ｉ、ＩＡ又は構造ＩＩの化合物を、単独で又は他の作用物質と組み合わせて有効用量で含有し、かつ薬剤学的に慣用の添加剤及び助剤と一緒に調合されていることを特徴とする、薬剤学的調製物。
【００７１】
次の代表的な実施例及び表は、本発明を示している。実施例は説明のためであって、決して、本発明をそれらの範囲に限定するものではない。
記号説明
第１表は、本発明の化合物と比較化合物とをまとめて示している。
【００７２】
第２表：ヒトプロテインキナーゼＣＫ２（ホロ酵素）に対する、選ばれたインデノ［１，２−ｂ］インドールのＩＣ５０−値。
【００７３】
第３表：種々のインデノ［１，２−ｂ］インドールと一緒の温置による腫瘍細胞系の増殖。
【００７４】
第４表：種々の腫瘍細胞系に対する、選ばれたインデノ［１，２−ｂ］インドールの細胞増殖のＩＣ５０−値。
【００７５】
第５表：種々のヒトプロテインキナーゼの選択されたインデノ［１，２−ｂ］インドールのＩＣ５０−値［μＭ］。
【００７６】
例１：５−イソプロピル−５，６，７，８−テトラヒドロ−インデノ［１，２−ｂ］インドール−９，１０−ジオン  ４ｂ
化合物の構造は、この例及び例２〜２６中で、スペクトルデータ（ＮＭＲ、ＩＲ、ＭＳ）及び微量分析によって、特殊な場合には、Ｘ−線構造によっても証明された。
【００７７】
第１工程：３−イソプロピルアミノ−シクロヘキセ−２−エノン
当モル量のイソプロピルアミン及びシクロヘキサン−１，３−ジオンをベンゼン中に溶かし、ｐ−トルエンスルホン酸の添加下に、水分離器を付して加熱沸騰させた。水分離の終了後に、バッチを水で充分洗浄し、溶剤を除き、残分を再結晶させた。
【００７８】
第２工程：４ｂ，９ｂ−ジヒドロキシ−５−イソプロピル−４ｂ，５，６，７，８，９ｂ−ヘキサヒドロ−インデノ［１，２ｂ］インドール−９，１０−ジオン
当モル量の３−イソプロピルアミノ−シクロヘキセ−２−エノン及びインダントリオンヒドレート（ニンヒドリン）を、クロロホルム中に溶かし、室温で１２時間撹拌した。次いで溶剤を除き、油状残分をアセトンから結晶化させた。
【００７９】
第３工程：５−イソプロピル−５，６，７，８−テトラヒドロ−インデノ［１，２−ｂ］インドール−９，１０−ジオン  ４ｂ
第２工程から得られた化合物（０．０１モル）を、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドＤＭＦ２０ｍｌ中に溶かした。酢酸５ｍｌの添加の後に、ＤＭＦ５ｍｌ中に溶かされたＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルスルホキシイミド０．０４モルを迅速に添加した。バッチを３時間撹拌し、次いで水５００ｍｌ中に入れ、分離する沈殿を濾別させる。これを乾燥させ、再結晶させる。
【００８０】
融点：２０１℃（酢酸エチル）。
【００８１】
微量分析：Ｃ１８Ｈ１９ＮＯ４（３１３．３４）
ｂｅｒ．＊：  Ｃ  ６８．９９  Ｈ  ６．１１  Ｎ  ４．４７；
ｇｅｆ，＊：  Ｃ  ６８．９５  Ｈ  ６．１７  Ｎ  ４．５２  。
【００８２】
＊ｂｅｒ．＝計算値、  ｇｅｆ．＝実測値。
【００８３】
第４工程：９−ヒドロキシ−５−イソプロピル−５Ｈ−インデノ［１，２−ｂ］インドール−１０−オン
第３工程から得られた化合物（１．０ｇ、３．６１ミリモル）をジオキサン１５０ｍｌ中に溶かし、これに、ジオキサン中に溶かされたＤＤＱ（０．９１ｇ、４ミリモル）を添加した。バッチを７０℃に４時間加温した。濾過後に、このバッチを濃縮させ、いわゆる  ＳｉＯ２／酢酸エチルで精製した。
【００８４】
融点：１８２℃（メタノール）
微量分析：  Ｃ１８Ｈ１５ＮＯ２（２７７．３２）
ｂｅｒ．：  Ｃ  ７７．９６  Ｈ  ５．４５  Ｎ  ５．０５；
ｇｅｆ．：  Ｃ  ７８．１８  Ｈ  ５．６６  Ｎ  ５．００  。
【００８５】
第５工程：５−イソプロピル−５Ｈ−インデノ［１，２−ｂ］インドール−６，９，１０−トリオン  ６ｂ
第４工程から得られた化合物（０．８ｇ、２．５ミリモル）を、ＤＭＦ１００ｍｌ中に溶かし、Ｃｏ−サレン８０ｍｇを添加し、７０℃で酸素を導入した。４時間後に出発物質は消失した。バッチを濃縮させ、クロロホルム中に溶かし、いわゆる精製を行った（ＳｉＯ２／酢酸エチル）。
【００８６】
融点：
微量分析：  Ｃ２０Ｈ２２Ｎ４Ｏ２（３５０．４１）
ｂｅｒ．：  Ｃ  ７４．２２  Ｈ  ４．５０  Ｎ  ４．８１；
ｇｅｆ．：  Ｃ  ７４．０３  Ｈ  ４．３９  Ｎ  ４．７４  。
【００８７】
例２：５−ベンジル−５，６，７，８−テトラヒドロ−インデノ［１．２−ｂ］インドール−９，１０−ジオン
この化合物は、前記の方法と同様にして得られる。
【００８８】
融点：  １８５℃（酢酸エチル）
微量分析：  Ｃ２２Ｈ１７ＮＯ２（３２７．３８）
ｂｅｒ．：  Ｃ  ８０．７１  Ｈ  ５．２３  Ｎ  ４．２８；
ｇｅｆ．：  Ｃ  ８０．８１  Ｈ  ５．２０  Ｎ  ４．２４  。
【００８９】
例３：５−ベンジル−５，６，９，１０−テトラヒドロインデノ［１，２−ｂ］インドール−６，９，１０−トリオン  ６ｃ
この化合物は、前記の方法と同様にして得られる。
【００９０】
融点：  ２２４℃（２−プロパノール）
ＨＲＭＳ：  ｂｅｒ．：３３９．０８９５４；  ｇｅｆ．：  ３３９．０８９５５  。
【００９１】
例４：５，６，７，８−テトラヒドロインデノ［１，２−ｂ］インドール−９，１０−ジオン
この化合物は、前記の方法と同様にして得られる。
【００９２】
融点：  ３３２−３℃（水／ジオキサン）
微量分析：  Ｃ１５Ｈ１１ＮＯ２（２３７．２５）
ｂｅｒ．：  Ｃ  ７５．９４  Ｈ  ４．６７  Ｎ  ５．９０；
ｇｅｆ．：  Ｃ  ７５．３４  Ｈ  ４．７１  Ｎ  ５．９３  。
【００９３】
例５：５−フェネチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−インデノ［１，２−ｂ］インドール−９，１０−ジオン  ４ｄ
この化合物は、前記の方法と同様にして得られる。
【００９４】
融点：  １８９−９０℃（酢酸エチル）
微量分析：  Ｃ２３Ｈ１９ＮＯ２（３４１．４０）
ｂｅｒ．：  Ｃ  ８０．９２  Ｈ  ５．６１  Ｎ  ４．１０；
ｇｅｆ．：  Ｃ  ８０．９２  Ｈ  ５．３９  Ｎ  ４．０４  。
【００９５】
例６：５−フェネチル−５Ｈ−インデノ［１，２−ｂ］インドール−６，９，１０−トリオン  ６ｄ
この化合物は、前記の方法と同様にして得られる。
【００９６】
融点：  ＞３１０℃  分解（酢酸エチル）
微量分析：  Ｃ２３Ｈ１５ＮＯ３（３５３．１１）
ｂｅｒ．：  Ｃ  ７８．１７  Ｈ  ４．２８  Ｎ  ３．９６；
ｇｅｆ．：  Ｃ  ７７．５４  Ｈ  ４．３４  Ｎ  ３．８９  。
【００９７】
例７：ＤＬ−５−（１−フェニル−エチル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−インデノ［１，２−ｂ］インドール−９，１０−ジオン  ４ｆ
この化合物は、前記の方法と同様にして得られる。
【００９８】
融点：  ２０１℃  （酢酸エチル）
微量分析：  Ｃ２３Ｈ１９ＮＯ２（３４１．４０）
ｂｅｒ．：  Ｃ  ８０．９２  Ｈ  ５．６１  Ｎ  ４．１０；
ｇｅｆ．：  Ｃ  ８０．７９  Ｈ  ５．７４  Ｎ  ４．００  。
【００９９】
例８：５−［２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−エチル］−５，６，７，８−テトラヒドロ−インデノ［１，２−ｂ］インドール−９，１０−ジオン
この化合物は、前記の方法と同様にして得られる。
【０１００】
融点：  １８９〜９０℃  （ＤＭＦ／Ｈ２Ｏ）
微量分析：  Ｃ２５Ｈ２３ＮＯ４（４０１．４５）
ｂｅｒ．：  Ｃ  ７４．７９  Ｈ  ５．７７  Ｎ  ３．４９；
ｇｅｆ．：  Ｃ  ７４．６３  Ｈ  ５．８４  Ｎ  ３．３７  。
【０１０１】
例９：５−フェニル−５，６，７，８−テトラヒドロ−インデノ［１，２−ｂ］インドール−９，１０−ジオン  ４ｇ
この化合物は、前記の方法と同様にして得られる。
【０１０２】
融点：  ２８８℃  （アセトニトリル）
微量分析：  Ｃ２１Ｈ１５ＮＯ２（３１３．３５）
ｂｅｒ．：  Ｃ  ８０．４９  Ｈ  ４．８２  Ｎ  ４．４７；
ｇｅｆ．：  Ｃ  ８０．４９  Ｈ  ４．７８  Ｎ  ４．４３  。
【０１０３】
例１０：（９，１０−ジオキソ−６，８，９，１０−テトラヒドロ−７Ｈ−インデノ［１，２−ｂ］インドール−５−イル）−酢酸メチルエステル
この化合物は、前記の方法と同様にして得られる。
【０１０４】
融点：  ２５６−７℃  （酢酸エチル）
微量分析：  Ｃ１８Ｈ１５ＮＯ４（３０９．３２）
ｂｅｒ．：  Ｃ  ６９．８９  Ｈ  ４．８９  Ｎ  ４．５３；
ｇｅｆ．：  Ｃ  ６９．６１  Ｈ  ４．９２  Ｎ  ４．５０  。
【０１０５】
例１１：  ５−（２−ジメチルアミノ−エチル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−インデノ［１，２−ｂ］インドール−９，１０−ジオン
この化合物は、前記の方法と同様にして得られる。
【０１０６】
融点：  １７８℃  （メタノール）
微量分析：  Ｃ１９Ｈ２０Ｎ２Ｏ２（３０８．３７）
ｂｅｒ．：  Ｃ  ７４．００  Ｈ  ６．５４  Ｎ  ９．０８；
ｇｅｆ．：  Ｃ  ７３．８２  Ｈ  ６．６８  Ｎ  ９．１１  。
【０１０７】
例１２：  ５−（３−ヒドロキシ−プロピル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−インデノ［１，２−ｂ］インドール−９，１０−ジオン
この化合物は、前記の方法と同様にして得られる。
【０１０８】
融点：  ２４１℃  （アセトニトリル）
微量分析：  Ｃ１８Ｈ１７ＮＯ３（２９５．３３）
ｂｅｒ．：  Ｃ  ７３．２０  Ｈ  ５．８０  Ｎ  ４．７４；
ｇｅｆ．：  Ｃ  ７３．０４  Ｈ  ５．７８  Ｎ  ４．８４  。
【０１０９】
例１３：  （９，１０−ジオキソ−６，８，９，１０−テトラヒドロ−７Ｈ−インデノ［１，２−ｂ］インドール−５−イル）−酢酸
例１０で得られた化合物のメタノール性水酸化カリウムを用いる鹸化による。
【０１１０】
融点：  ２７９−８０℃  （２４０℃より上で分解）（ＤＭＳＯ／Ｈ２Ｏ）
微量分析：  Ｃ１７Ｈ１３ＮＯ４（２９５．２９）
ｂｅｒ．：  Ｃ  ６９．１５  Ｈ  ４．４４  Ｎ  ４．７４；
ｇｅｆ．：  Ｃ  ６９．１１  Ｈ  ４．５５  Ｎ  ４．７４  。
【０１１１】
例１４：  ５−（２−ヒドロキシ−エチル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−インデノ［１，２−ｂ］インドール−９，１０−ジオン
この化合物は、前記の方法と同様にして得られる。
【０１１２】
融点：  ２６２−３℃  （ＤＭＳＯ／Ｈ２Ｏ）
微量分析：  Ｃ１７Ｈ１５ＮＯ３（２８１．３１）
ｂｅｒ．：  Ｃ  ７２．５８  Ｈ  ５．３７  Ｎ  ４．９８；
ｇｅｆ．：  Ｃ  ７２．５３  Ｈ  ５．３３  Ｎ  ４．９６  。
【０１１３】
例１５：  ２−（９，１０−ジオキソ−６，８，９，１０−テトラヒドロ−７Ｈ−インデノ［１，２−ｂ］インドール−５−イル）−エチル−メタンスルホン酸エステル
例１４で得られた化合物とメタンスルホニルクロリドとの反応による。
【０１１４】
融点：  ２３０−１℃  （アセトニトリル）
微量分析：  Ｃ１８Ｈ１７ＮＯ５Ｓ（３５９．４０）
ｂｅｒ．：  Ｃ  ６０．１５  Ｈ  ４．７７  Ｎ  ３．９０；
ｇｅｆ．：  Ｃ  ６０．２５  Ｈ  ４．８４  Ｎ  ４．０３  。
【０１１５】
例１６：  ５−エトキシ−プロピル−５，６，７，８−テトラヒドロ−インデノ［１，２−ｂ］インドール−９，１０−ジオン
この化合物は、前記の方法と同様にして得られる。
【０１１６】
融点：  １２９℃  （酢酸エチル）
微量分析：  Ｃ２０Ｈ２１ＮＯ３（３２３．３９）
ｂｅｒ．：  Ｃ  ７４．２８  Ｈ  ６．５５  Ｎ  ４．３３；
ｇｅｆ．：  Ｃ  ７４．１７  Ｈ  ６．６４  Ｎ  ４．２０  。
【０１１７】
例１７：  ５−［２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−エチル］−５，６，７，８−テトラヒドロ−インデノ［１，２−ｂ］インドール−９，１０−ジオン
この化合物は、前記の方法と同様にして得られる。
【０１１８】
融点：  １８９−９０℃  （ＤＭＦ／Ｈ２Ｏ）
微量分析：  Ｃ２５Ｈ２３ＮＯ４（４０１．４５）
ｂｅｒ．：  Ｃ  ７４．７９  Ｈ  ５．７７  Ｎ  ３．４９；
ｇｅｆ．：  Ｃ  ７４．６３  Ｈ  ５．８４  Ｎ  ３．３７  。
【０１１９】
例１８：  ５−（４−メトキシ−ベンジル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−インデノ［１，２−ｂ］インドール−９，１０−ジオン
この化合物は、前記の方法と同様にして得られる。
【０１２０】
融点：  １９８−９℃  （酢酸エチル）
微量分析：  Ｃ２３Ｈ１９ＮＯ３（３５７．４０）
ｂｅｒ．：  Ｃ  ７７．２９  Ｈ  ５．３６  Ｎ  ３．９２；
ｇｅｆ．：  Ｃ  ７７．１２  Ｈ  ４．９７  Ｎ  ３．８１  。
【０１２１】
例１９：  ５−イソプロピル−７−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−インデノ［１，２−ｂ］インドール−９，１０−ジオン
この化合物は、前記の方法と同様にして得られる。
【０１２２】
融点：  ２６４−５℃  （酢酸エチル）
微量分析：  Ｃ１９Ｈ１９ＮＯ２（２９３．３６）
ｂｅｒ．：  Ｃ  ７７．７９  Ｈ  ６．５３  Ｎ  ４．７７；
ｇｅｆ．：  Ｃ  ７７．５５  Ｈ  ６．７３  Ｎ  ５．０６  。
【０１２３】
例２０：  メチル−７−メチル−９，１０−ジオキソ−５−フェニル−５，６，７，８，９，１０−ヘキサヒドロ−インデノ［１，２−ｂ］インドール−８−カルボキシレート
この化合物は、前記の方法と同様にして得られる。
【０１２４】
融点：  ２４９−５０℃  （酢酸エチル）
微量分析：  Ｃ２４Ｈ１９ＮＯ４（３８５．４２）
ｂｅｒ．：  Ｃ  ７４．７９  Ｈ  ４．９７  Ｎ  ３．６３；
ｇｅｆ．：  Ｃ  ７４．５８  Ｈ  ５．２１  Ｎ  ３．５１  。
【０１２５】
例２１：  メチル−７−メチル−９，１０−ジオキソ−５，６，７，８，９，１０−ヘキサヒドロインデノ［１，２−ｂ］インドール−８−カルボキシレート
この化合物は、前記の方法と同様にして得られる。
【０１２６】
融点：  ２８７℃  （ＤＭＳＯ／Ｈ２Ｏ）
微量分析：  Ｃ１８Ｈ１５ＮＯ４（３０９．３２）
ｂｅｒ．：  Ｃ  ６９．８９  Ｈ  ４．８９  Ｎ  ４．５３；
ｇｅｆ．：  Ｃ  ６９．６７  Ｈ  ４．８０  Ｎ  ４．３５  。
【０１２７】
例２２：  ５−ベンジル−７−フェニル−５，６，７，８−テトラヒドロインデノ［１，２−ｂ］インドール−９，１０−ジオン
この化合物は、前記の方法と同様にして得られる。
【０１２８】
融点：  ２５２℃  （トルエン）
微量分析：  Ｃ２８Ｈ２１ＮＯ２（４０３．４９）
ｂｅｒ．：  Ｃ  ８３．３５  Ｈ  ５．２５  Ｎ  ３．４７；
ｇｅｆ．：  Ｃ  ８３．５４  Ｈ  ５．２７  Ｎ  ３．３３  。
【０１２９】
例２３：  ５−ベンジル−７−フェニル−６，９−ジヒドロ−５Ｈ−インデノ［１，２−ｂ］インドール−６，９，１０−トリオン
この化合物は、前記の方法と同様にして得られる。
【０１３０】
融点：  ２４７−８℃  （アセトニトリル）
ＨＲＭＳ：Ｃ２８Ｈ１７ＮＯ３：
ｂｅｒ．：  ４１５．１２０８５、ｇｅｆ．：  ４１５．１２１１１  。
【０１３１】
例２４：  ７−メチル−５−フェネチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−インデノ［１，２−ｂ］インドール−９，１０−ジオン  
この化合物は、前記の方法と同様にして得られる。
【０１３２】
融点：  ２２８−９℃  （アセトニトリル）
微量分析：  Ｃ２４Ｈ２１ＮＯ２（３５５．４３）
ｂｅｒ．：  Ｃ  ８１．１０  Ｈ  ５．９６  Ｎ  ３．９４；
ｇｅｆ．：  Ｃ  ８０．８５  Ｈ  ６．０７  Ｎ  ３．９８  。
【０１３３】
例２５：  ２−（９−ヒドロキシ−１０−オキソ−１０Ｈ−インデノ［１，２−ｂ］インドール−５−イル）メタンスルホン酸エチルエステル
この化合物は、前記の方法と同様にして得られる。
【０１３４】
融点：  １８８℃  （アセトニトリル）
微量分析：  Ｃ１８Ｈ１５ＮＯ５Ｓ（３５７．３８）
ｂｅｒ．：  Ｃ  ６０．４９  Ｈ  ４．２３  Ｎ  ３．９２；
ｇｅｆ．：  Ｃ  ６０．４１  Ｈ  ４．１０  Ｎ  ４．２４  。
【０１３５】
例２６：  ９−ヒドロキシ−５−イソプロピル−５Ｈ−インデノ［１，２−ｂ］インドール−１０−オン
この化合物は、前記の方法と同様にして得られる。
【０１３６】
融点：  １８２℃  （メタノール）
微量分析：  Ｃ１８Ｈ１５ＮＯ２（２７７．３２）
ｂｅｒ．：  Ｃ  ７７．９６  Ｈ  ５．４５  Ｎ  ５．０５；
ｇｅｆ．：  Ｃ  ７８．１８  Ｈ  ５．６６  Ｎ  ５．００  。
【０１３７】
出発物質の合成のための文献（ここに参照として開示されているものとする）
環式エナミノンの合成：
Greenhill,J.V.et.al.:  J.Heterocycl.Chem.1992,29,1375-1383
Edafiogho,I.O.et al.:  J,Med.Chem.1992,35,2798-2805
Kesten,S.J.et al.:  J.Med.Chem.1992,35,3429-3447
Scott,K.R.et al/:  J.Med.Chem.1993,36,1947-1955
u.v.a.
置換インダントリオンの合成：
Joullie,M.M. et al.:  Tetrahedron 1991,47,8791-8830
Hark,R.R. et al.:  Can.J.Chem. 2001,79,1632-1654
Hansen,D.B. et al.:  Chem,Soc.Rev.2005,34,408-417
脱酸素反応：
Synthese des Reagens nach Dorlars,A.in Houben-Weyl:Methoden der organishen Chemie Band 11/2,4.Aufl. Seite 737  。  
例２７：  選ばれた化合物のＩＣ５０−値
第２表：選ばれた合成置換インデノ［１，２−ｂ］インドール誘導体による、組み換えヒトプロテインキナーゼＣＫ２（ホロ酵素）の阻害
【表１】
2010505782.tif 000009
１）例１〜２６に記載の記号。
２）Ｒは、構造Ｉ又は構造ＩＩ中のＲに一致し、この際、Ｒ７及びＲ９＝Ｈである。
３）合成置換インデノ［１，２−ｂ］インドール誘導体の阻害作用の試験のために、ヒトプロテインキナーゼＣＫ２をＥ．コリ中で組み換え発現させ、均質になるまで精製した。プロテインキナーゼＣＫ２及びその触媒作用サブユニットの発現及び精製を、Guerra et.al(２５）による、以下に記載のプロトコルに従い行った。ＣＫ２のα−及びβ−サブユニットを、別々にｐＴ７−７−系から出発してＢｌ２１（ＤＥ３）中に発現させるか又はバイシストロン性ベクターｐＥＴ１１ｄ−ＣＫ２α，βから出発して一緒に発現させた。この双方の場合の精製法は同じであった。ＢＬ２１（ＤＥ３）は、新たに相応する構造を有して形質転換された。生じたコロニーを、前培養液中に転種し、３７℃で、一晩成長させ飽和させた。次の日にこの前培養液から出発して、主培養を行い（６リットル培地／構成）、これを０．６のＯＤ600nmに達するまで成長させた。次いで、ＩＰＴＧ（１ｍＭ）の添加によって、このタンパク質の発現を誘導させた。ＣＫ２α又はこのホロ酵素の誘導は、３０℃で５〜６時間かかり、他方、ＣＫ２βの誘導は３７℃で３時間以上かかった。６０００ｇで１０分間の遠心により細菌を収穫した。ペレットは−８０℃で保管できる。全ての精製工程は、酵素の退化を避けるために冷所で実施された。細菌を先ず水中に入れ（１００ｍｌ／細菌１０ｇ）、超音波によって破砕させた（超音波ゾンデで３×３０秒、冷所で）。細菌残分を遠心分離させ、上澄みを、水性抽出物として保存する。次いで、細菌ペレットを、Ｐ１５００−緩衝液（１００ｍｌ／１０ｇ）中に入れ、４℃で撹拌下に更に一晩抽出した（Ｐ１５００−抽出物）。双方の抽出物からの双方のサブユニットを合一させ、Ｐ３００（２０ｍＭトリス／ＨＣｌ、ｐＨ  ８．０、０．３Ｍ  ＨＣｌ、７ｍＭ２−メルカプトエタノール、０．２ｍＭ  ＰＭＳＦ）に対して透析させた。この透析物を、予めＰ３００で平衡化されたＰ１１−カチオン交換体カラム（Ｗｈａｔｍａｎのホスホセルロース、膨潤性ゲル１５０ｍｌ）の上に載せた。引き続きＢｉｏ−Ｒａｄ（Econo-System）のクロマトグラフィユニットを用いてクロマトグラフィを実施した。カラムを、２８０ｎｍで測定される吸光が当初値に戻るまで、Ｐ３００で洗浄した。カラムに付着しているタンパク質を、ＮａＣｌ  ３００〜１５００ｍＭの間の直線的塩勾配設定により溶離させ、分別（８０フラクシヨン、各７．５ｍｌ）を開始させた（流速１．５ｍｌ／ｍｉｎ、全量６００ｍｌ）。ＣＫ２含有フラクシヨンを、ＣＫ２−特異性抗体を用いるウエスターンブロット分析及び合成ペプチドＲＲＲＤＤＤＳＤＤＤを用いる活性検定によって同定した。ＣＫ２は、７００ｍＭＮａＣｌを用いる勾配のほぼ中央で溶離した。これらフラクシヨンを合一させ、Ｐ３００に対して透析させ、再度、Ｐ１１−マトリックス（膨潤したゲル約１５ｍｌ）上に積載することにより濃縮させた。このカラムに結合するタンパク質を、緩衝系のＰ１５０００への直ちの置換によって２０〜３０ｍｌの量で溶離させた。Ｓｕｐｅｒｏｓｅ  ６−マトリックス（Ｐharmacia、２．６×９０ｃｍ）での後続のゲル濾過のために、これらフラクシヨンを、ポリエチレングリコールを用いて５ｍｌの量になるまで濃縮させ、引続き、Ｐ１０００（��０ｍＭトリス／ＨＣｌ、ｐＨ８、０．１ＭＮａＣｌ、７ｍＭ  ２−メルカプトエタノール、０．２ｍＭ  ＰＭＳＦ）に対して透析させた。このゲル濾過を、Ｐ１０００を用い、１ｍｌ／ｍｉｎの流速で行い、２８０ｎｍでの吸光の測定により記録した。溶離液を分別収集し、前記のように分析し、場合によっては濃縮させ、かつＰ１００（２０ｍＭトリス／ＨＣｌ、ｐＨ８．０、１００ｍＭ  ＮａＣｌ、７ｍＭ  ２−メルカプトエタノール、０．２ｍＭ  ＰＭＳＦ）に対して透析させた。この精製された酵素を、−８０℃で少量宛貯蔵した。
【０１３８】
試験のために、それぞれ約５ｎｇ（＝５Ｕ、ここで、１Ｕは、所定の基質上にリン酸塩１μモルを転移させる酵素の量に一致する）を組み換え発現させ、かつ精製されたヒトＣＫ２を、室温で１０分間、化合物の１０μＭの最終濃度又は対称としてのＤＭＳＯ同量を用いて、キナーゼ緩衝液（５０ｍＭトリス／ＨＣｌ、ｐＨ７．５、１００ｍＭＮａＣｌ、１０ｍＭＭｇＣｌ２、１ｍＭＤＴＴ）中で、全量２０μｌ中で予備温置した。化合物を、通常、ＤＭＳＯ中の５ｍＭの出発溶液中で貯蔵した。反応を、検定緩衝液（２５ｍＭトリス／ＨＣｌ、ｐＨ８．５、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、５ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１ｍＭ  ＤＴＴ、１００μＭ  ＡＴＰ、０．１９ｍＭ基質（合成ペプチドＲＲＲＤＤＤＳＤＤＤ）及び０．６μＣｉ［γ−３２］ＡＴＰ）３０μｌの添加によって開始させた。３７℃で１５分間温置の後に、全バッチを、タイプＰ８１のイオン交換クロマトグラフィ濾紙上にスポットした。過剰のリン酸塩（８５ｍＭ  Ｈ３ＰＯ４）及びその後のエタノールを用いる３回洗浄の後に濾紙を乾燥させ、放射能の付着量を、Firma Packardのシンチレーシヨンカウンターで測定した。ＤＭＳＯ対照のフィルター付着放射能を、ＣＫ２の１００％酵素活性と決め、この酵素の活性を１０μＭの濃度での記載化合物の添加及びそれとの予備温置の際に、これに対して関係付けた。各々の値を、独立の実験で少なくとも３回測定した。
【０１３９】
４）ＩＣ５０−値測定のために、酵素試験を、３）に記載と同様に、適当な間隔で３０μＭ〜０．０１μＭの濃度範囲の化合物の変動性最終濃度を用いて実施した。こうして得られた校正曲線（これは、化合物濃度の１０の対数と阻害百分率との間の直線的関係を示している）から、その都度のＩＣ５０−値を計算することができた。各々の値を、独立の実験で少なくとも３回測定した。
【０１４０】
例２８：種々のインデノ［１，２−ｂ］インドールと一緒の温置による腫瘍細胞系の増殖
細胞増殖のＩＣ５０−値を、Bracht et al.（２８）の方法により測定した。結果は、第３表中にまとめられている。
【０１４１】
例２９：種々の腫瘍細胞系に関する、選ばれたインデノ［１，２−ｂ］インドールの細胞増殖のＩＣ５０−値
細胞増殖のＩＣ５０−値を、Bracht et al.（２８）の方法により測定した。結果は、第４表中にまとめられている。
【０１４２】
例３０：種々のヒトプロテインキナーゼの選ばれたインデノ［１，２−ｂ］インドールのＩＣ５０−値［μＭ］
ａ）組み換えプロテインキナーゼ
以下の２４種のプロテインキナーゼを、阻害像の測定のために使用した：
【化８】
2010505782.tif 000010
【０１４３】
全てのプロテインキナーゼを、Ｓｆ９−昆虫細胞中で、ヒト組み換えＧＳＴ−融合タンパク質又はＨｉｓ−タグ付きタンパク質として、バキュロウイルス−発現系によって発現させた。キナーゼを、アフィニティークロマトグラフィにより、ＧＳＨ−アガロース（シグマ）又はＮｉ−ＮＴＨ−アガロース（キアゲン）によって精製させた。キナーゼの純度を、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ／銀染色により試験し、キナーゼのアイデンティティを、特異抗体を用いるウエスタンブロット−分析により又は質量分光分析により実証した。
【０１４４】
ｂ）プロテインキナーゼ試験
Ｘ−線測定プロテインキナーゼ試験（33PanQuinase(R)Activity Assay）を、２４種のプロテインキナーゼのキナーゼ活性の測定のために使用した。このキナーゼ試験を、Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ／ＮＥＮ（Boston,MA,USA）の９６−ウエル−フラッシュプレートＴＭ中で、５０μｌの反応量で実施した。反応混合物を、４工程で、次の順序でピペット導入した：
・  試験緩衝液  ２０μｌ
・  ＡＴＰ−溶液（Ｈ２Ｏ中）  ５μｌ
・  試験化合物（１０％ＤＭＳＯ中）  ５μｌ
・  基質１０μｌ／酵素溶液１０μｌ（予め混合）。
【０１４５】
全ての酵素に関して、テストは、ＨＥＰＥＳ−ＮａＯＨ  ６０ｍＭ、ｐＨ  ７．５、ＭｇＣｌ２  ３ｍＭ、ＭｎＣｌ２  ３ｍＭ、オルトバナジン酸Ｎａ  ３μＭ、ＤＴＴ  １．２ｍＭ、ＰＥＧ20000  ５０μｇ／ｍｌ、［γ−33P］−ＡＴＰ  １μＭ（１ウエル当たり約５×１０５ｃｐｍ）を含有した。
【０１４６】
２４種のキナーゼに対して、１ウエル当たり次の量の酵素及び基質を使用した：
【表２】
2010505782.tif 000011
【０１４７】
反応混合物を、３０℃で８０分間温置した。反応を、２％（v/v）Ｈ３ＰＯ４  ５０μｌで停止させた。プレートを吸引し、０．９％（v/v）ＮａＣｌ２００μｌで２回洗浄した。33Ｐｉの取り込みをマイクロ滴定−シンチレーシヨンカウンター（Microbeta Trilux,Wallac）を用いて測定した。
【０１４８】
全ての試験を、ＢｅｃｋｍａｎＣｏｕｌｔｅｒ／Ｓａｇｉａｎ−Ｒｏｂｏｔｔｅｒｓｙｓｔｅｍを用いて実施した。
【０１４９】
結果は、第５表中にまとめられている。
【０１５０】
表
第１表：合成されたインデノ［１，２−ｂ］インドール
【表３】
2010505782.tif 000012
【０１５１】
【表４】
2010505782.tif 000013
【０１５２】
第２表：ヒトプロテインキナーゼＣＫ２に対する、選ばれたインデノ［１，２−ｂ］インドールのＩＣ５０−値
【表５】
2010505782.tif 000014
【０１５３】
１）記号は第１表中のものに一致する
２）Ｒは、構造Ｉ又は構造ＩＩ中のＲに一致し、この際、Ｒ７及びＲ９＝Ｈである。
【０１５４】
第３表：種々のインデノ［１，２−ｂ］インドールと一緒の温置の後の腫瘍細胞系の増殖
【表６】
2010505782.tif 000015
【０１５５】
１．次のものを除き、全ての物質を２０μＭで試験した。
【０１５６】
２．＊＝５μＭ、
３．＊＊＝１０μＭ。
【０１５７】
青色標識された物質を、更に検査した。
【０１５８】
【表７】
2010505782.tif 000016
【０１５９】
【表８】
2010505782.tif 000017
【０１６０】
文献
2010505782.tif 000018
【０１６１】
2010505782.tif 000019
【０１６２】
2010505782.tif 000020
【国際調査報告】
2010505782.tif 000027
2010505782.tif 000028
2010505782.tif 000029
2010505782.tif 000030
2010505782.tif 000031
2010505782.tif 000032
2010505782.tif 000033
2010505782.tif 000034