(57)【要約】  本発明は、ヒストン・デアセチラーゼのインヒビター、ＪＮＪ−２６４８１５８５のモノ−ＨＣｌ塩およびモノ−ＨＣｌ塩水和物の新規結晶形を提供する。発明はまた、これらの結晶形の製法、これらの方法に使用される中間体、これらの結晶形を含んでなる製薬学的組成物、並びに、例えば癌および白血病のような増殖性状態を抑制するための医薬としての医学的処置におけるこれらの結晶形の使用、に関する。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（ＸＩＸ）
【化１】
2010526851.tif 000033
の一塩酸塩。
【請求項２】
塩が結晶形Ｉ、結晶形IIまたは水和物形にある、請求項１の一塩酸塩。
【請求項３】
結晶形が１５．１°±０．２°、１７．２°±０．２°、２３．４°±０．２°、２４．４°±０．２°および２７．７°±０．２°におけるピークを含んでなるＸ線粉末回折像を有する結晶形Ｉにある、請求項１または２の一塩酸塩。
【請求項４】
Ｘ線粉末回折像が更に、７．６°±０．２°、１２．０°±０．２°および１２．５°±０．２°におけるピークを含んでなる、請求項３の一塩酸塩。
【請求項５】
結晶形が３１１９±１ｃｍ−１、２７５６±１ｃｍ−１、１６３４±１ｃｍ−１、１４７５±１ｃｍ−１、１３７１±１ｃｍ−１、１３３３±１ｃｍ−１、１２７５±１ｃｍ−１、１２２６±１ｃｍ−１、１１２８±１ｃｍ−１および１０６６±１ｃｍ−１にピークをもつ赤外線分光分析ミクロ減衰反射スペクトルを有する、請求項１〜４のいずれかの一塩酸塩。
【請求項６】
結晶形が約２１６．８℃に吸熱ピークをもつ示差走査熱量測定曲線を有する、請求項１〜５のいずれかの一塩酸塩。
【請求項７】
結晶形が高い相対湿度において０．６％までの水を吸着する、請求項１〜６のいずれかの一塩酸塩。
【請求項８】
水和物形が１０．０°±０．２°、１３．４°±０．２°および２６．５°±０．２°におけるピークを含んでなるＸ線粉末回折像を有する水和物形にある、請求項１または２の一塩酸塩。
【請求項９】
Ｘ線粉末回折像が更に、２１．６°±０．２°および２４．９°±０．２°におけるピークを含んでなる、請求項８の一塩酸塩。
【請求項１０】
結晶形が３５５８±１ｃｍ−１、３２３８±１ｃｍ−１、１６０７±１ｃｍ−１および９９７±１ｃｍ−１におけるピークをもつ赤外線分光分析ミクロ減衰反射スペクトルを有する、請求項８または９の一塩酸塩。
【請求項１１】
結晶形Ｉが本質的に純粋である、請求項１〜７のいずれかの一塩酸塩。
【請求項１２】
結晶形IIが本質的に純粋である、請求項１または２の一塩酸塩。
【請求項１３】
水和物形が本質的に純粋である、請求項１、２、８、９または１０のいずれかの一塩酸
塩。
【請求項１４】
ａ）５０℃〜７０℃の間に加熱しながら、０．１％ｗ／ｗ未満の水を含むアルコール溶媒中に式（ＸＶIII）の化合物を溶解する工程、
ｂ）反応混合物に塩酸を添加する工程、および
ｃ）５０℃〜７０℃の間に温度を維持しながら、反応混合物を撹拌する工程、
を含んでなる、請求項２〜７のいずれか１項に記載の結晶形を調製する方法。
【請求項１５】
工程ａ）とｂ）の中間に、結晶形Ｉを混合物に播種する工程を含んでなる、請求項１４の方法。
【請求項１６】
ａ）溶媒を５０℃〜７０℃の間、好ましくは５０℃〜６０℃の間に加熱しながら、５％を超える水を含んでなるエタノール／水またはメタノール／水混合物中に式（ＸＶIII)の化合物を溶解する工程、
ｂ）反応混合物に塩酸を添加する工程、および
ｃ）５０℃〜７０℃の間、好ましくは５０℃〜６０℃の間、そしてより好ましくは５５℃の温度を維持しながら反応混合物を撹拌する工程、
を含んでなる、請求項２、８、９または１０のいずれかに記載の水和物形を調製する方法。
【請求項１７】
ａ）適当な溶媒の存在下で式（ＸＩ）の中間体と式（ＶIII）の中間体を反応させる工程、
【化２】
2010526851.tif 000034
ｂ）適当な溶媒中で式（II）の中間体と式（Ｉ）の中間体を反応させ、次に還元および塩形成により式（ＸIII）の中間体を与える工程、
【化３】
2010526851.tif 000035
ｃ）塩基の中和、塩基性加水分解および塩酸による酸性化による、式（ＸIII）の中間体の、式（ＸＶII)の中間体への転化、
【化４】
2010526851.tif 000036
並びに
ｄ）適当なカップリング試薬の存在下で、Ｏ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−ヒドロキシルアミンと式（ＸＶII)の中間体を反応させる工程、
【化５】
2010526851.tif 000037
を含んでなる、式（ＸＶIII)の化合物を調製する方法。
【請求項１８】
中間体（ＸＶII）中の水の量が１５〜２５ｖ／ｖ％の間である、請求項１７の方法。
【請求項１９】
適当な溶媒の存在下で、式（Ｘ）の中間体と式（ＩＸ）の中間体を反応させる工程を含んでなる、式（ＸＩ）の化合物の調製法。
【化６】
2010526851.tif 000038
【請求項２０】
式（ＸＩ）、（ＸIII）、（ＸＶII）または（ＸＶIII)の化合物、
【化７】
2010526851.tif 000039
そのＮ−オキシド、付加塩または立体化学的異性形。
【請求項２１】
医薬としての使用のための請求項１〜１３のいずれかの一塩酸塩。
【請求項２２】
ＨＤＡＣ関連状態の処置のための医薬の製造における、請求項１〜１３のいずれかの一塩酸塩の使用。
【請求項２３】
癌および白血病の処置のための医薬の製造における、請求項１〜１３のいずれかの一塩酸塩の使用。
【請求項２４】
請求項１〜１３のいずれかの一塩酸塩および製薬学的に許容され得る賦形剤を含んでなる、製薬学的組成物。
【請求項２５】
形Ｉを調製するための播種材料としての請求項１〜７または１１に記載の一塩酸塩の使用。
【請求項２６】
他の抗ガン剤との請求項１〜１３のいずれかの一塩酸塩の組み合わせ物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はヒストン・デアセチラーゼのインヒビター、ＪＮＪ−２６４８１５８５のモノ−ＨＣｌ塩およびモノ−ＨＣｌ塩水和物の新規結晶形に関する。発明はまた、これらの結晶形の製法、これらの方法で使用される中間体、これらの結晶形を含んでなる製薬学的組成物並びに、例えば、癌および白血病のような増殖性状態を抑制するための医薬としての医学的処置におけるこれらの結晶形の使用、に関する。
【背景技術】
【０００２】
多数の製薬学的固形物は異なる物理的形状で、例えば、非晶質形で、１種または複数の結晶形（例えば無水形または溶媒和形）で、異なる結晶形の混合物の形状で、あるいは非晶質形および１種または複数の結晶形の混合物として存在することができる。
【０００３】
非晶質形は三次元の長領域の秩序が存在しない形状である。非晶質形においては、相互に対する分子の位置が本質的にランダムであり、すなわち格子構造上に分子の秩序ある配列がない。非晶質で、不規則な物質はしばしば、改善された特性を有するが、この状態を形成し、安定化することは大きな課題である可能性がある。
【０００４】
結晶または結晶形は、相互に対する分子の位置が三次元格子構造に従って組織されている形状である。結晶形は典型的には多形相および擬似多形相を含む。多形相は固態における分子の異なる配列から生成される同一化合物の異なる結晶形である。異なる多形相は格子中の分子の異なる充填のために、異なる結晶構造を有する。これが、異なる、結晶の対称性および／または単位セルパラメーターをもたらす。多形相はそれらの物理化学的パラメーターにおいて相互に異なるが、それらの化学組成は異ならない。多形相は通常、制御が困難で、生薬学者に課題を突き付ける。溶媒和物とも呼ばれる擬似多形相は、化学量論的量または非化学量論的量いずれかの溶媒分子が化合物の格子構造中に存在するかまたはその中に取り込まれている固態の結晶形の特定の事例である。水の溶媒和物はまた水和物とも呼ばれる。
【０００５】
固態化学は製薬学的産業、そして特に適切な剤形の開発の関連者に興味深い。例えば、固態の転化は医薬の安定性（棚寿命）に重要な影響を与える可能性がある。不安定な製薬学的固態は、環境条件、加工または経時の変化に対して、結晶質構造（例えば非晶質から結晶質に）または溶媒和物／脱溶媒物に変化することができる。
【０００６】
同一薬剤の異なる結晶形または非晶質形は、溶解速度、熱力学的溶解度および生物学的利用能のような製薬学的に重要な特性の実質的な相異を有することができる。患者の胃液中の有効成分の溶解速度は、経口投与された有効成分が患者の血流に到達することができる速度に上限を与えるために、治療的結果を有する可能性がある。従って、溶解速度は固形の剤形並びにシロップおよびエリキシルのような液体医薬を調合する際の考慮対象である。
【０００７】
同様に、異なる結晶形または非結晶形は、市販品製造のための有効医薬としてのそれらの適性に影響する可能性がある、吸湿性、流動性、成形性、等のような異なる加工特性を有する可能性がある。
【０００８】
多形相が恒常的に維持されない場合は、製薬学的薬剤の臨床開発期間中に、使用または研究される正確な剤形が相互のロットで比較可能でないかも知れない。更に、存在する不純物が望ましくない毒性学的効果をもたらすかも知れないために、化合物が臨床研究また
は市販製品中に使用される時は、高い純度で選択された多形相形を含む化合物を生成する方法を見いだすことが所望される。特定の多形相形は、高い熱力学的安定性を示すかまたは大量を高純度で、より容易に製造することができ、そして従って、製薬学的調合物中への包含のためにより適切である。
【０００９】
ＪＮＪ−２６４８１５８５は以下の構造：
【００１０】
【化１】
2010526851.tif 000002
【００１１】
を有する。
【００１２】
該化合物はヒストン・デアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）のインヒビターである。
【００１３】
２００６年２月２日に公開された特許文献１は、ＪＮＪ−２６４８１５８５．Ｃ２ＨＦ３Ｏ２塩およびジ−ＨＣｌ塩の非晶質形並びにそれらを得る方法を開示している（特許文献１参照）。
【００１４】
特許文献２に最初に記載されたＪＮＪ−２６４８１５８５．Ｃ２ＨＦ３Ｏ２塩の合成はスキーム１に示されている（特許文献２参照）。
【００１５】
その中の、工程１において、式（III）の中間体は、メタノール中でナトリウムテトラヒドロボレートの存在下で、式（II）のカルボキシアルデヒドと式（Ｉ）の中間体を反応させることにより調製された。
【００１６】
工程２において、式（ＩＶ）の中間体は、エタノール中で水酸化ナトリウムと式（III）の中間体を反応させることにより調製された。
【００１７】
工程３において、式（Ｖ）の中間体は、Ｎ’−（エチルカルボンイミドイル）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−１，３−プロパンジアミン、一塩酸（ＥＤＣ）および１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）のような適当な試薬の存在下で、Ｏ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−ヒドロキシルアミンと式（ＩＶ）の中間体を反応させることにより調製された。反応はジクロロメタンおよびテタラヒドロフランの混合物中で実施された。
【００１８】
工程４において、式（ＶＩ）のヒドロキサム酸Ｃ２ＨＦ３Ｏ２塩は、トリフルオロ酢酸と式（Ｖ）の中間体を反応させることにより調製された。該反応はメタノール中で実施された。
【００１９】
【化２】
2010526851.tif 000003
【００２０】
あるいはまた、特許文献２に最初に記載されたＪＮＪ−２６４８１５８５．２ＨＣｌ塩は、水酸化ナトリウムの存在下で、ヒドロキシルアミンと式（III）の中間体を反応させることにより調製された（特許文献２参照）。該反応はメタノール中で実施され、ジ−ＨＣｌ塩への更なる転化物はエタノール中で調製された。
【００２１】
特許文献１に開示された方法は、結果的に幾つかのクロマトグラフィー工程を要する異なる処理工程における低い収量および大量の不純物の結果として、大量生産に不適当である（特許文献２参照）。クロマトグラフィーを使用する化合物の精製は、溶媒消費および、大規模クロマトグラフィーを実施するために要する特別の装置のために、高価で、環境に不適切である。
【００２２】
本発明により解決される課題は、ＪＮＪ−２６４８１５８５のモノ−ＨＣｌ塩およびモノ−ＨＣｌ塩水和物の新規結晶形の提供である。本発明の他の態様は、新規結晶質ＨＣｌ塩およびＨＣｌ塩水和物形が高い収率および高い純度で得られる方法である。本ＨＣｌ形の有利な特性は、本化合物の薬物製造を可能にするその非吸湿性および化学安定性を含む優れた物理化学的特性である。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００２３】
【特許文献１】国際公開出願第２００６／０１０７５０号パンフレット
【特許文献２】国際公開出願第９７／２１７０１号パンフレット
【図面の簡単な説明】
【００２４】
【図１】形状Ｉの赤外線（ＩＲ）スペクトルの表示である。
【図２】形状ＩのＸ線粉末回折（ＸＰＲＤ）像の表示である。
【図３】形状Ｉの示差走査熱量測定（ＤＳＣ）曲線である。
【図４】相対湿度の関数としての形状Ｉの重量変化である。
【図５】形状Ｉの吸着−脱着（ＡＤＳ／ＤＥＳ）曲線の表示である。
【図６】形状IIのＩＲスペクトルの表示である。
【図７】形状IIのＸＰＲＤ像の表示である。
【図８】形状IIのＤＳＣ曲線である。
【図９】相対湿度の関数としての形状IIの重量変化である。
【図１０】形状IIのＡＤＳ／ＤＥＳ曲線の表示である。
【図１１】水和物形のＩＲスペクトルの表示である。
【図１２】水和物形のＸＰＲＤ像の表示である。
【図１３】異なる温度におけるエタノール中の形状Ｉおよび形状IIのスラーリー転化研究のＸＰＲＤ像のオーバーレイである。
【図１４】異なる温度におけるエタノール／水（９０／１０、ｖ／ｖ％）中の形状Ｉおよび形状IIのスラーリー転化研究のＸＰＲＤ像のオーバーレイである。
【図１５】異なる温度における水中の形状Ｉおよび形状IIのスラーリー転化研究のＸＰＲＤ像のオーバーレイである。
【図１６】異なる温度におけるエタノール中の水和物のスラーリー転化研究のＸＰＲＤ像のオーバーレイである。
【発明の概要】
【００２５】
中間体の調製
Ａ．式（Ｉ）の中間体の調製
【００２６】
【化３】
2010526851.tif 000004
【００２７】
ａ）式（ＸＩ）の中間体は、極性または非極性の非プロトン炭化水素溶媒、例えばトルエン、メチレンクロリド、イソプロピルアセテート、エチルアセテート、テトラヒドロフラン等のような適切な溶媒の存在下で、式（Ｘ）の中間体と式（ＩＸ）の中間体を反応させることにより調製することができる。他の芳香族または脂肪族アルデヒドを工程に使用することができる。この反応はまた、プロトン溶媒、例えばメタノール、エタノール、イソプロパノール等中で実施することができる。反応は２５℃〜６０℃の間の温度で、好ましくは４５℃の温度で実施することができる。式（Ｘ）の中間体の可能な不安定性のために、更なる高温は推奨されない。
【００２８】
【化４】
2010526851.tif 000005
【００２９】
ｂ）式（ＶIII）の中間体は、極性または非極性の非プロトン炭化水素の溶媒、例えばトルエン、メチレンクロリド、イソプロピルアセテート、エチルアセテート、テトラヒドロ
フラン等のような適切な溶媒中で、メタ−クロロペルオキシ安息香酸（ＭＣＰＢＡ）のような適切な酸化剤の存在下で、式（ＶII）の中間体を転化することにより調製することができる。反応は−２０℃〜４０℃の間の温度、好ましくは０℃〜５℃の間の温度、より好ましくは０℃で実施することができる。更に高温では、メタ−クロロペルオキシ安息香酸が不安定で、式（ＶIII）の中間体が分解する可能性がある。中間体（ＶIII）への中間体（ＶII）の完全な転化は適量のＭＣＰＢＡの添加により得ることができる。従ってＭＣＰＢＡの量は好ましくは＞１当量である。
【００３０】
【化５】
2010526851.tif 000006
【００３１】
ｃ）式（Ｉ）の中間体は、極性または非極性の非プロトン炭化水素の溶媒またはそれらの混合物、例えばトルエン、メチレンクロリド、イソプロピルアセテート、テトラヒドロフラン、ジイソプロピルエチルアミンもしくは他の第三級アミン塩基およびエチルアセテートの混合物等のような適切な溶媒の存在下で、式（ＸＩ）の中間体と式（ＶIII）の中間体を反応させることにより調製することができる。反応は−２０℃〜４０℃の間の温度、好ましくは０℃〜５℃の間の温度、より好ましくは０℃で、２５℃まで暖めながら実施することができる。
【００３２】
【化６】
2010526851.tif 000007
【００３３】
式（ＸＩ）の中間体の形成を伴う式（Ｘ）のｐ−ニトロベンズアルデヒドによる式（ＩＸ）のアミノピペリジンの一時的保護を伴う本合成は、より多数の置換された環窒素の優先的反応を許す。この保護が実施されないと、式（ＩＸ）の中間体の双方の窒素が式（ＶIII）の中間体と反応するので、大量の二量体（Ａ）および異性体（Ｂ）が形成される。反応混合物を１晩暖めると、式（ＸＩ）の中間体の、式（Ｉ）の中間体への完全な反応、および式（ＩＸ）のあらゆる残りの中間体の二量体（Ａ）への完全な転化を確保し、その二量体は残りのＭＣＰＢＡと一緒に、次の酸処理において容易に除去することができる。
【００３４】
【化７】
2010526851.tif 000008
【００３５】
本発明の１つの実施態様は式（ＸＩ）の中間体を含んでなる。
【００３６】
Ｂ．式（ＶIII）の中間体の調製
【００３７】
【化８】
2010526851.tif 000009
【００３８】
ａ）式（ＸII）の中間体は、適切な溶媒中で式（II）の中間体と式（Ｉ）の中間体を反応させることにより調製することができる。反応は５０℃〜１５０℃の間の温度、好ましくは１１０℃の温度（トルエンの還流温度）で実施することができる。この反応を進行させるためには水の共沸除去が必要である。溶媒としては、トルエン、イソプロピルアセテート等のような、極性または非極性の非プロトンの炭化水素の溶媒を使用することができる。これらの溶媒は水と十分に共沸する。
【００３９】
【化９】
2010526851.tif 000010
【００４０】
ｂ）式（ＸII）の中間体は、極性または非極性の非プロトン炭化水素の溶媒およびそれらの混合物、例えばトルエン、イソプロピルアセテート、エタノール、メタノール、イソプロパノール等のような適切な溶媒中で、ナトリウムテトラヒドロボレートで処理される。ナトリウムテトラヒドロボレートによる還元は０℃〜５０℃の間で、好ましくは１０℃で起ることができる。還元中の低温は、過剰還元された不純物の形成を回避するために好ましい。
ｃ）次に、５％ｖ／ｖの水を含むアセトン／エタノールの混合物中でフマル酸により塩形成が実施され、式（ＸIII）の中間体の形成を伴う。
【００４１】
【化１０】
2010526851.tif 000011
【００４２】
本発明の１つの実施態様は式（ＸIII）のフマル酸塩を含んでなる。
【００４３】
Ｃ．式（ＸＶIII）の中間体の調製
ＪＮＪ−２６４８１５８５の製造のためのより良い合成法を見いだす第１の試みにおいて、式（III）の中間体を、塩基および溶媒の存在下で、しかしカップリング試薬の不在下で、Ｏ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−ヒドロキシルアミンと反応させた。この試みは成功しなかった。
【００４４】
第２の試みにおいて、同時の脱保護−塩形成を実施するために、酸不安定な保護基でアミノおよびヒドロキサム酸部分を保護することを試みた。
【００４５】
従って、式（ＸIII）の中間体は遊離塩基に転化されて、式（III）の中間体を与え、そして更にそのＲが第三級ブチル、ベンジルまたはフルベネイルである式（ＸＩＶ）の中間体に転化させ、次にエタノール中のＮａＯＨで加水分解し、そして酸性化および反応混合物から直接の結晶化により式（ＸＶ）の中間体を単離した。
【００４６】
【化１１】
2010526851.tif 000012
【００４７】
標準のアミノ酸カップリング条件（ＥＤＣ、ＨＯＢＴ、トリエチルアミン、テトラヒドロフラン）下でのＯ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−ヒドロキシルアミンとの式（ＸＶ）の中間体のカップリングは優れた収率で式（ＸＶＩ）の中間体を与えた。Ｒがフルベニルである式（ＸＶ）の中間体のためのカップリング反応は、最適なカップリングのために必要なトリエチルアミンのために、フルベニル−基の幾らかの開裂を引き起こした。
【００４８】
【化１２】
2010526851.tif 000013
【００４９】
そのＲが第三級ブチルである式（ＸＶＩ）の中間体を脱保護する試みを、種々の条件（溶媒：エタノール、エチルアセテート、トルエン、アセトン、メチルイソオブチルケトン、ジメチルホルムアミド；酸：エタンスルホン酸、メタンスルホン酸、塩酸、トリフルオロ酢酸）下で実施した。不幸なことには、外気温（２〜３時間）または５０℃（１０分）のいずれにおいても、観察された唯一の生成物はインドール部分の開裂からの生成物であった。
【００５０】
そのＲがベンジルである式（ＸＶＩ）の中間体の水素化分解を、水素雰囲気下で、そして、例えば木炭上パラジウムのような適切な触媒の存在下で試み、ヒドロキサム酸生成物上のＮ−Ｏ結合の競合的開裂（２０％まで）により不成功と判定された。他方、緩和な条件下での、本明細書で式（ＸＶＩ−ａ）の中間体と呼ばれる、そのＲがフルベニルである式（ＸＶＩ）の中間体のフルベニル基の開裂および、チオールシリカゲルを使用することによりフルベン副産物を捕捉する工程は成功であった。以下に説明されるように、式（Ｖ）の対応する遊離アミンは同様な条件（１．０５当量の塩酸、エタノール、７０℃）下で式（ＸＩＸ）の化合物を与えることができる。
【００５１】
【化１３】
2010526851.tif 000014
【００５２】
ａ）最後に、中間体（ＸIII）の遊離塩基は、水酸化ナトリウム水溶液の中和および、メチルテトラヒドロフラン中の抽出により得ることができる。次に遊離塩基含有有機層を還流における３モル当量の水酸化ナトリウム水溶液による塩基性加水分解にかける。次に水層中のナトリウム塩をメチルテトラヒドロフラン層から分離し、１０℃で５モル当量のＨＣｌで酸性化する。
【００５３】
式（ＸＶII）の中間体はばらつく水分を含むことができる。乾燥直後の水分含量は０．７％である。試料を外気中に２４時間放置すると、水分含量は２モルの水分を表す８％水分に増加し、安定した。
【００５４】
【化１４】
2010526851.tif 000015
【００５５】
ｂ）以下のカップリング反応が成功するためには特定量の水分を要するために、中間体（ＸＶII）の水分の効果は重要である。中間体（ＸＶII）中の水分量は好ましくは１５〜２５ｖ／ｖ％の間、もっとも好ましくは約１６ｖ／ｖ％である。
【００５６】
式（ＸＶIII）の中間体は、カップリング剤としてのＮ’−（エチルカルボンイミドイル）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−１，３−プロパンジアミン、一塩酸（ＥＤＣ）のような適切な試薬の存在下で、Ｏ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−ヒドロキシルアミンと式（ＸＶII）の中間体を反応させることにより調製することができる。反応は、極性または非極性の非プロトンおよびプロトン炭化水素の溶媒およびそれらの混合物、例えばメチルテトラヒドロフラン、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジクロロメタン（ＤＣＭ）、トルエン、イソプロパノール、エタノール、アセトニトリル、エチルアセテート、イソプロパノールアセテート、それらの混合物および１種以上の異なる溶媒の水との混合物、好ましくはエチルアセテートおよびエタノールの混合物、より好ましくはエチルアセテート、エタノールおよび水の混合物中で実施することができる。反応中の温度は１０℃〜４０℃の間、好ましくは室温であることができる。
【００５７】
【化１５】
2010526851.tif 000016
【００５８】
十分な水分が存在する時は、反応は急速で完全である。乾燥状態下では反応はより遅く、より大量の不純物が存在し、生成物に向かう反応速度が低下する。
ｃ）式（ＸＶIII）をもつ中間体は、ジメチルホルムアミドまたはジメチルアセトアミド、好ましくはジメチルアセトアミドのような溶媒に溶解することができる。共溶媒の添加は生成物を晶出させる。アセトン、メチルイソブチルケトンまたはメチルエチルケトン、好ましくはメチルイソブチルケトンのような共溶媒を使用することができる。精製は２５℃〜９０℃の間、好ましくは５０℃〜７０℃の間の温度で実施することができる。晶出時間は５時間を超えてはならない。より高温またはより長い晶出期間においては、最終生成物の収量は低下する。再結晶は５０℃〜７０℃の間、好ましくは７０℃の温度でメチルエチルケトンのような共溶媒の存在下でエタノールのような溶媒中で実施することができる。
【００５９】
本発明の１つの実施態様は式（ＸＶII）および（ＸＶIII）の塩酸塩を含んでなる。
【００６０】
結晶形の調製
式（ＸＶIII）の中間体は、反応混合物が所望の温度にある間に、エタノールまたはメ
タノールのような適切な溶媒中に塩酸を添加することにより、式（ＸＩＸ）のＨＣｌ塩に転化させることができる。
【００６１】
【化１６】
2010526851.tif 000017
【００６２】
本発明は以下の工程を含んでなる結晶質モノ−ＨＣｌ塩形状Ｉを調製するための方法を提供する：
ａ）５０℃〜７０℃、好ましくは５０℃〜６０℃の間に溶媒を加熱しながら、０．１％ｗ／ｗ未満の水分を含むアルコール溶媒中に式（ＸＶIII）の化合物を溶解し、
ｂ）反応混合物に塩酸を添加し、そして
ｃ）５０℃〜７０℃の間、好ましくは５０℃〜６０℃の間、より好ましくは５５℃の温度を維持しながら反応混合物を撹拌する。
【００６３】
１つの実施態様において、形状Ｉを調製するための前項に記載の方法は１０．３〜２０．６Ｌ／モルの間の濃度、好ましくは１０．３Ｌ／モル濃度のエタノールまたはメタノールを添加する工程を含んでなる。
【００６４】
他の実施態様において、形状Ｉを調製するための前項に記載の方法は、工程ａ）において、３０分〜３時間のタイムスロット、好ましくは３０分〜４５分のタイムスロットに化合物を溶解する工程、を含んでなる。
【００６５】
他の実施態様において、形状Ｉを調製するための前記の方法は、工程ｂ）において、０．０５〜０．４当量の濃度、好ましくは０．０５〜１．１当量の間の濃度、好ましくは０．０５〜０．４当量の間の濃ＨＣｌの濃度で塩酸を添加する工程、を含んでなる。
【００６６】
他の実施態様において、形状Ｉを調製するための前記の項１〜３に記載の方法は、工程ｂ）において、０．０３〜０．０７当量の濃度、好ましくは０．０３〜０．０５当量の間のＨＣｌ（１モル）の濃度の塩酸を添加する工程、を含んでなる。
【００６７】
他の実施態様において、形状Ｉを調製するための１〜３項に記載の方法は、工程ｂ）において、イソプロパノール中に０．０３〜０．０５当量のＨＣｌの濃度の塩酸を添加する工程を含んでなる。
【００６８】
他の実施態様において、形状Ｉを調製するための前記の方法は、工程ｃ）において、３０分〜３時間のタイムスロット、好ましくは３０分〜４５分のタイムスロットで化合物を溶解する工程を含んでなる。
【００６９】
他の実施態様において、形状Ｉを調製するための前記の方法は、工程ｃ）において、３０分〜１６時間の間、好ましくは１６時間、混合物を撹拌する工程を含んでなる。
【００７０】
本発明は更に、以下の工程を含んでなる、水和物形を調製する方法を提供する：
ａ）５０℃〜７０℃、好ましくは５０℃〜６０℃の間に溶媒を加熱しながら、５％を超える水分を含んでなるエタノール／水またはメタノール／水混合物中に式（ＸＶIII）の化
合物を溶解し、
ｂ）反応混合物に塩酸を添加し、そして
ｃ）５０℃〜７０℃の間、好ましくは５０℃〜６０℃の間、より好ましくは５５℃に温度を維持しながら、反応混合物を撹拌する。
【００７１】
１つの実施態様において、水和物形を調製するための前項に記載の方法は、１０．３〜２０．６Ｌ／モルの間の濃度、好ましくは１０．３Ｌ／モルの濃度のエタノールまたはメタノールを添加する工程を含んでなる。
【００７２】
１つの実施態様において、水和物形を調製するための前記の方法は、工程ａ）において、３０分〜３時間のタイムスロット、好ましくは３０分〜４５分のタイムスロットに化合物を溶解する工程を含んでなる。
【００７３】
他の実施態様において、水和物形を調製するための前記の方法は、工程ｂ）において、０．０５〜０．４当量の濃ＨＣｌの濃度、好ましくは０．０５〜１．１当量の間の濃度、好ましくは０．０５〜０．４当量の間の濃度で塩酸を添加する工程を含んでなる。
【００７４】
他の実施態様において、水和物形を調製するための項１〜３に記載の方法は、工程ｂ）において、０．０３〜０．０７当量のＨＣｌ（１モル）の濃度、好ましくは０．０３〜０．０５当量の間の濃度で塩酸を添加する工程を含んでなる。
【００７５】
他の実施態様において、水和物形を調製するための項１〜３に記載の方法は、工程ｂ）において、イソプロパノール中０．０３〜０．０５当量のＨＣｌの濃度で塩酸を添加する工程を含んでなる。
【００７６】
他の実施態様において、水和物形を調製するための前記の方法は、工程ｃ）において、３０分〜３時間のタイムスロット、好ましくは３０分〜４５分のタイムスロットで、化合物を溶解する工程を含んでなる。
【００７７】
他の実施態様において、水和物形を調製するための前記の方法は、工程ｃ）において、３０分〜１６時間の間、好ましくは１６時間、混合物を撹拌する工程を含んでなる。
【００７８】
本発明は更に、以下の工程を含んでなる、形状Ｉを調製するためのスラーリー化法を提供する：
−少なくとも５０℃、好ましくは７０℃以上の温度でエタノールまたはメタノールから選択される溶媒中に形状IIをスラーリー化する、または
−少なくとも５０℃、好ましくは７０℃以上の温度でエタノールまたはメタノールから選択される溶媒中に形状Ｉおよび形状IIの混合物をスラーリー化する。
【００７９】
他の実施態様において、形状Ｉを調製するための前記のスラーリー化法は、１０％の水、好ましくは＜２％の水、もっとも好ましくは＜０．０７％の水を含んでなることができる。
【００８０】
他の実施態様において、形状Ｉを調製するための前記のスラーリー化法は更に、少なくとも４〜７日間撹拌する工程を含んでなる。
【００８１】
本発明は更に、以下の工程を含んでなる、水和物形を調製するためのスラーリー化法を提供する：
−少なくとも１０％の水を含んでなるエタノール／水またはメタノール／水混合物中に形状IIをスラーリー化する、
−少なくとも１０％の水を含んでなるエタノール／水またはメタノール／水混合物中に形状Ｉおよび形状IIの混合物をスラーリー化する、
−少なくとも９０％の水を含んでなる水性溶媒に形状Ｉおよび形状IIの混合物をスラーリー化する。
【００８２】
他の実施態様において、水和物形を調製するためのスラーリー化法は更に、４〜７日間撹拌する工程を含んでなる。
【００８３】
他の実施態様において、形状Ｉを調製するための方法は更に、アルコール溶媒中に形状IIをスラーリー化後、または前記のような溶媒中に形状Ｉおよび形状IIの混合物をスラーリー化後に得られる沈殿物を濾取する工程を含んでなる。
【００８４】
他の実施態様において、形状Ｉを調製するためのスラーリー化法は更に、前記の濾取工程後、アルコール溶媒中に形状IIをスラーリー化後、または前記のような溶媒中に形状Ｉおよび形状IIの混合物をスラーリー化後に得られる濾取沈殿物を洗浄する工程を含んでなり、ここで該洗浄工程がスラーリー工程中に使用されたものと同一の溶媒で実施される。
【００８５】
式（ＸＶIII）の化合物の溶液から進行する本発明のいずれかの形状の調製のためには、出発材料の固態が最終生成物の固態に影響をもたず、そして生成される固態の制御が、工程パラメーターの制御により実施されることは当業者により認められなければならない。
【００８６】
本発明はまた、工程ａ）およびｂ）の間に、形状Ｉを混合物に播種する工程を含んでなる、形状Ｉを調製する前記の方法を提供する。
【００８７】
本発明はまた、工程ａ）およびｂ）の間に、形状Ｉを混合物に播種する工程を含んでなる、水和物形を調製する前記の方法を提供する。
【００８８】
発明はまた、得られる結晶形が、場合により洗浄および乾燥と組み合わせた、濾過または遠心分離により単離される方法を提供する。
【００８９】
本発明の方法に使用される出発材料は、式（ＸＶIII）の化合物のあらゆる結晶形であってよい。
【００９０】
「本発明の化合物」の用語により、式（ＸＩ）、（ＸIII）、（ＸＶII）、（ＸＶIII）または（ＸＩＸ）の化合物を意味する。
【００９１】
１つの実施態様において、本発明の結晶形の調製に使用される溶媒は、製薬学的に許容され得る溶媒である。他の実施態様においては、本発明の結晶形の調製に使用される溶媒は、それらがまた、製薬学的に許容され得る多形体の調製にそれらの使用を見いだすことができるために、製薬学的に許容され得ない溶媒である。
【００９２】
本発明の結晶形の生成法は典型的には、溶媒中の式（ＸＩＸ）の化合物の溶液または分散物から、あるいは式（ＸＩＸ）の化合物をスラーリー化する工程から、結晶質固体材料を得る工程を含む。
【００９３】
当業者は、結晶化に拘る条件は、結晶化工程を改善する、または沈殿を誘発するために、そして得られる多形体の形状に影響を与えずに修飾することができることを認めるであろう。これらの条件は、式（ＸＶIII）または（ＸＩＸ）の化合物の溶液、分散物またはスラーリーおよび１種または複数の溶媒を所望の濃度にもたらす工程、前記の溶液、分散
物またはスラーリーを所望の温度にもたらす工程、所望の濃度の塩酸を添加する工程、結晶種を添加する工程、あらゆる適切な圧力をかける工程、あらゆる望ましくない物質または不純物を除去および／または分離する工程、そのような状態が所望される場合は、形成された結晶を乾燥して固態の多形体を得る工程、を含むことができる。
【００９４】
沈殿を誘発する好ましい方法は発明の化合物の溶解度を低下させることである。化合物の溶解度は例えば、抗溶媒物質（ａｎｔｉｓｏｌｖｅｎｔ）を添加することにより低下させることができる。
【００９５】
本発明の化合物の溶液、分散物またはスラーリーおよび溶媒を所望の濃度にもたらす工程は、必ずしも発明の化合物の濃度の増加を意味しない。特定の例においては、発明の化合物の濃度の減少または不変が好ましい可能性がある。所望の濃度を得るために使用される方法は、当該技術分野で一般的なもの、例えば、大気蒸留、真空蒸留、分別蒸留、共沸蒸留、フィルム蒸発による蒸発、加熱、冷却、当該技術分野で周知の他の方法およびそれらの組み合わせ物である。所望の濃度を得るための場合により使用される方法はまた、例えば十分量の非溶媒を溶液に添加して、飽和点に到達させることにより、発明の化合物および溶媒の溶液の飽和を伴う可能性がある。溶液を飽和するための他の適切な方法は、例えば、溶液への発明の更なる化合物の導入、および／または溶液からの溶媒の一部の蒸発を含む。本明細書で言及される飽和溶液は、それらの飽和点の、またはそれらの飽和点を超える、すなわち超飽和の溶液を含む。近飽和（ｎｅａｒｌｙ  ｓａｔｕｒａｔｅｄ）溶液は、飽和に近いがそれらの飽和点には到達していない溶液を意味する。
【００９６】
本発明の結晶化法を改善する、とりわけ結晶化を促進する方法は、生成物の結晶を播種する工程、またはガラス棒で結晶化容器の内面を引っ掻く工程による方法である。他の場合には、結晶化は何の誘発も伴わずに自然に起ることができる。本発明は、式（ＸＩＸ）の化合物の特定の形状の結晶化が自然に起るか、あるいは、そのような誘発または加速が特定の形状を得るために決定的（ｃｒｉｔｉｃａｌ）でない限り、誘発または加速される、双方の実施態様を含む。
【００９７】
用語「播種」は結晶化を容易にするための結晶質物質の添加を意味する。用語「結晶種」は式（ＸＩＸ）の化合物の以前に得られた結晶形の粉末を意味する。形状Ｉを調製するために有用であることができる本発明の特定の結晶種または播種物質は以下である：
−化合物（ＸＩＸ）および式（ＸＶIII）の化合物の形状Ｉの混合物の結晶種
−形状Ｉの結晶種、または
−形状IIの結晶種。
【００９８】
前記溶液、分散物またはスラーリーを所望の温度にもたらす工程により、加熱、冷却または外気温に放置する行為が理解されるであろう。溶液、分散物またはスラーリーを暖める工程は、発明の化合物を完全に溶解するために必要かも知れない。
【００９９】
あらゆる望ましくない物質または不純物を除去および／または分離する工程は、精製、濾過、洗浄、沈殿または同様な方法により実施することができる。例えば分離は、知られた固体−液体分離法により実施することができる。当業者に知られた濾過法も本方法に使用することができる。他の方法のなかでは、濾過は溶液、分散物またはスラーリーを紙、焼結ガラスフィルターまたは他の膜材料を通過させる工程により、遠心分離により、あるいはブッフナー型フィルター、ローゼンムントフィルターまたはプレート、あるいはフレームプレスを使用して実施することができる。生成される多形体形の純度を増加するためには、好ましくは、インラインの濾過または安全濾過を、前記の方法中に有利に挿入することができる。問題の結晶から不純物を分離するためには、更に、シリカゲル、Ｃｅｌｉｔｅ（Ｒ）、Ａｒｂｏｃｅｌ（Ｒ）、ジカライトジアトマイト、等のような濾過物質も使
用することができる。
【０１００】
得られる結晶はまた、乾燥することができ、そして２種以上の結晶化工程が適用される場合は、このような乾燥法は、場合により異なる結晶化工程で使用することができる。乾燥法は、加熱、真空を適用、空気または気体を循環、乾燥剤を添加、凍結乾燥、噴霧乾燥、蒸発、等、またはそれらのあらゆる組み合わせのような当業者に知られたすべての方法を含む。
【０１０１】
式（ＸＩＸ）の化合物の多形体の結晶化法は、方法の多数の組み合わせ物およびそれらの改変物を含むことができる。従って、そして例えば、式（ＸＩＸ）の化合物の多形体の結晶化は、溶媒中で、適切な温度において式（ＸＩＸ）の化合物を溶解、分散またはスラーリー化させ、それにより該溶媒の一部が蒸発して、該溶液、分散物またはスラーリー中の式（ＸＩＸ）の化合物の濃度を増加する工程、前記混合物を冷却する工程、並びに、場合により、生成された式（ＸＩＸ）の化合物の結晶を洗浄および／または濾過および乾燥する工程により実施することができる。場合により、式（ＸＩＸ）の化合物の多形体は、溶媒中に式（ＸＩＸ）の化合物を溶解し、分散し、またはスラーリー化し、該溶液、分散物またはスラーリーを冷却し、そして次に、得られる多形体を濾過、乾燥することにより調製することができる。式（ＸＩＸ）の化合物の結晶形の調製の他の例は、溶媒中に式（ＸＩＸ）の化合物を飽和させ、そして場合により得られる結晶を濾過、洗浄および乾燥することにより得られる。
【０１０２】
結晶形成はまた、１種を超える結晶化法を伴うことができる。特定の例において、生成される結晶形の質を高めるためのような異なる理由で、１、２またはそれを超える余分な結晶化工程を有利に実施することができる。
【０１０３】
溶媒中に発明の化合物を溶解、分散またはスラーリー化することにより、懸濁物、スラーリーまたは混合物のような異なる度合いの分散物を得ることができ、あるいは好ましくは均一な単相溶液を得ることができる。用語「懸濁物」は、液体または分散媒質、通常溶媒中に分散された（懸濁された）、非晶質形、結晶形またはそれらの混合物の微細に粉砕された固体よりなるに二相系を表す。用語「スラーリー」は、その中で固体がごく僅かに可溶性（または不溶性）の液体中に、一定量の粉末が混合される時に形成される懸濁物を表す。「スラーリー化する」はスラーリーを製造することを表す。
【０１０４】
溶媒は場合により、添加剤、例えば１種または複数の分散剤、界面活性剤または他の添加剤、あるいは、結晶質懸濁物の調製に通常使用され、そして文献にしばしば記載される（ｗｅｌｌ  ｄｏｃｕｍｅｎｔｅｄ）種類のそれらの混合物を含むことができる。添加剤は滑らかさ（ｌｅｎｉｅｎｃｙ）を増加し、表面積を減少させることにより、結晶の形状を修飾する際に有利に使用することができる。
【０１０５】
固体を含む溶媒は、場合により有機化合物に所望の粒度を生成するために、特定の期間撹拌するあるいは、例えば、高剪断ミキサーまたはホモジナーザーまたはこれらの組み合わせ物を使用して激しく撹拌することができる。
【０１０６】
更に、生成物の結晶化工程の再現性、粒度分配および形状を改善するために、沈殿温度の制御および播種を使用することができる。従って、結晶化は式（ＸＩＸ）の化合物の結晶を播種せずに、または好ましくは、播種により溶液中に導入される式（ＸＩＸ）の化合物の結晶の存在下で実施することができる。播種はまた、種々の温度で数回実施することができる。種材料の量は実験規模に左右され、当業者により容易に決定することができる。播種材料の量は典型的には、反応から期待される結晶質物質の量の約０．１〜１重量％である。
【０１０７】
各結晶化工程における結晶化時間は、適用条件、使用される方法および／または使用される溶媒に左右されるであろう。
【０１０８】
所望の、均一な粒度を得るために、結晶転化後に大型粒子または粒子の凝集体を破壊する工程を更に実施することができる。従って、式（ＸＩＸ）の化合物の多形体形の結晶、粉末凝集体および粗い粉末は場合により、転化経過後に粉砕され、分粒されることができる。粉砕または微粉砕は、粉末の粒度縮小のための当該技術分野で周知の方法および装置を使用して、大型粒子または粒子の凝集物を物理的に破壊する工程を表す。生成される粒度はミリメーター〜ナノメーターにわたり、すなわちナノ結晶、ミクロ結晶を生成することができる。
【０１０９】
微粉砕または粉砕に好ましい装置は、狭い粒度分布の小粒度の粒子を生成するその能力のために、流体エネルギーミルまたは微粉砕装置である。微粉砕装置は粒子を粉砕するために急速に移動する流体流中に懸濁された粒子間の衝突の運動エネルギーを使用する。エアジェットは好ましい流体エネルギーミルである。懸濁された粒子が再循環粒子流中に圧力下で注入れる。小型粒子が空中をミルの内部に運ばれ、サイクロンのような特定の粒度分類装置に接続された排出口に吐き出される。当業者は、幾らかの結晶形は粒度縮小期間に他の形状への転化を受けるかも知れないことを認めるであろう。
【０１１０】
結晶形の特徴
本発明は、更に、それが結晶形にあることを特徴とする、固態の式（ＸＩＸ）のモノ−ＨＣｌ塩を提供する。１つの実施態様において、発明は形状Ｉ、形状IIおよび水和物形から選択される式（ＸＩＸ）の化合物の結晶形を提供する。これらの形状は実質的に不純物を含まない。適切にはこれらの形状は１０％以下の不純物を含み、より適切には、それらは５％以下の不純物を含み、更により適切にはそれらは１％以下の不純物を含む。多形体の純度はＸＰＲＤにより試験することができ、多形体の純度を計算するためにピーク下の面積が使用される。これらの形状は本質的に純粋である。用語「本質的に純粋」は、９０％を超えて純粋、適切には９５％を超えて純粋、より適切には９７％を超えて純粋、もっとも適切には９９％を超えて純粋であることを意味する。
【０１１１】
本発明は更に、その結晶形が形状Ｉ、形状IIおよび水和物形から選択される、式（ＸＩＸ）の化合物の２種以上の結晶形の混合物を提供する。
【０１１２】
１つの実施態様において、式（ＸＩＸ）の化合物の形状Ｉおよび形状IIを含んでなる混合物が提供される。
【０１１３】
他の実施態様において、式（ＸＩＸ）の化合物の形状Ｉおよび水和物形を含んでなる混合物が提供される。
【０１１４】
他の実施態様において、式（ＸＩＸ）の化合物の水和物形および形状IIを含んでなる混合物が提供される。
【０１１５】
他の実施態様において、式（ＸＩＸ）の化合物の形状Ｉ、水和物形および形状IIを含んでなる混合物が提供される。
【０１１６】
本発明は更に、その結晶形が形状Ｉ、形状IIおよび水和物形から選択される、式（ＸＩＸ）の化合物の１種または複数の結晶形および、式（ＸＩＸ）の化合物の非ＨＣｌ塩の非晶質形の混合物を提供する。
【０１１７】
形状Ｉ、形状IIおよび水和物形の特徴的ＸＰＲＤ強度ピークの位置は２度−シータに与えられる。
【０１１８】
化合物（ＸＩＸ）の形状Ｉは２−シータ位置１５．１°±０．２°、１７．２°±０．２°、２３．４°±０．２°、２４．４°±０．２°および２７．７°±０．２°における典型的な回折ピークにより特徴付けられる。形状Ｉは更に、２−シータ位置７．６°±０．２°、１２．０°±０．２°および１２．５°±０．２°におけるＸ線粉末回折ピークにより特徴付けられる。
【０１１９】
化合物（ＸＩＸ）の形状IIは２−シータ位の１０．８°±０．２°、１３．７°±０．２°、１７．８°±０．２°および２６．７°±０．２°における典型的な回折ピークにより特徴付けられる。形状IIは更に、２−シータ位の７．４°±０．２°および２２．９°±０．２°におけるＸ線粉末回折ピークにより特徴付けられる。
【０１２０】
化合物（ＸＩＸ）の水和物形は２−シータ位１０．０°±０．２°、１３．４°±０．２°および２６．５°±０．２°における典型的な回折ピークにより特徴付けられる。水和物は更に、２−シータ位置２１．６°±０．２°および２４．９°±０．２°のＸ線粉末回折ピークにより特徴付けられる。
【０１２１】
形状ＩのＸ線粉末回折像（ＸＰＲＤ）は実質的に図２に示される。形状IIのＸ線粉末回折像は実質的に図７に示される。水和物形のＸ線粉末回折像は実質的に図１２に示される。
【０１２２】
すべての形状のＸＰＲＤデータおよび像の表示はジェネレーターＰＷ３０４０を伴うＰｈｉｌｉｐｓ  Ｘ’ＰｅｒｔＰＲＯ  ＭＰＤ回折計ＰＷ３０５０／６０を使用して得た。装置はＣｕ  ＬＦＦ  Ｘ線管ＰＷ３３７３／００を備えていた。分析される化合物はゼロ背景の試料ホルダー上に広げた。装置のパラメーターは以下である：
−ジェネレーター電圧：        ４５ｋＶ
−ジェネレーターアンペア：    ４０ｍＡ
−構造：                      Ｂｒａｇｇ−Ｂｒｅｎｔａｎｏ
−ステージ：                  スピナーステージ（ｓｐｉｎｎｅｒ  ｓｔａｇｅ）。
【０１２３】
形状Ｉ、IIおよび水和物形の走査パラメーターは以下であった：領域は０．０１６７５°／ステップ、２９．８４５秒／ステップの速度で連続走査により３°〜５０°の２−シータであった。スピナー回転時間は１秒、放射線タイプはＣｕＫα、そして放射線波長は１．５４０５６Åであった。
【０１２４】
形状Ｉおよび形状IIの走査パラメーターは以下であった：領域は０．０１６７５°／ステップ、２９．８４５秒／ステップの速度で連続走査により３°〜５０°の２−シータであった。スピナー回転時間は１秒、放射線タイプはＣｕＫα、そして放射線波長は１．５４０５６Åであった。
【０１２５】
水和物形の走査パラメーターは以下であった：領域は０．０１６７５°／ステップ、５９．６９０秒／ステップの速度で連続走査により３°〜５０°の２−シータであった。スピナー回転時間は１秒、放射線タイプはＣｕＫα、そして放射線波長は１．５４０５６Åであった。
【０１２６】
形状Ｉ、IIおよび水和物形の入射ビーム経路のパラメーターは以下であった：
−プログラム・発散スリット：  １５ｍｍ
−ソラースリット：            ０．０４ラド
−ビームマスク：              １５ｍｍ
−散乱防止スリット：          １°
−ビームナイフ：              ＋。
【０１２７】
形状Ｉ、IIおよび水和物形の回折ビーム経路パラメーターは以下であった：
−長い散乱防止シールド：      ＋
−ソラースリット：            ０．０４ラド
−Ｎｉフィルター：            ＋
−検出計：                    Ｘ’Ｃｅｌｅｒａｔｏｒ。
【０１２８】
形状Ｉ、IIおよび水和物形に提供されたＸＰＲＤピーク位置の精度は計測器、試料調製物、等のような実験誤差により０．２°と規定される。
【０１２９】
形状Ｉ、IIおよび水和物形の特徴的ＩＲ吸収のピーク位置は周波数ｃｍ−１で与えられる。
【０１３０】
化合物（ＸＩＸ）の形状Ｉは３１１９±２ｃｍ−１、２７５６±２ｃｍ−１、１６３４±２ｃｍ−１、１４７５±２ｃｍ−１、１３７１±２ｃｍ−１、１３３３±２ｃｍ−１、１２７５±２ｃｍ−１、１２２６±２ｃｍ−１、１１２８±２ｃｍ−１および１０６６±２ｃｍ−１に典型的な吸収帯をもつ赤外線分光分析（ＩＲ）ミクロ減衰反射スペクトルにより特徴付けられる。
【０１３１】
化合物（ＸＩＸ）の形状IIは約３５５３±２ｃｍ−１、３２０３±２ｃｍ−１、３０１４±２ｃｍ−１および１５４１±２ｃｍ−１に典型的な吸収帯をもつ赤外線分光分析ミクロ減衰反射スペクトルにより特徴付けられる。
【０１３２】
４０℃／７５％相対湿度における４２日保存後の化合物（ＸＩＸ）の水和物形は、約３５５８±２ｃｍ−１、３２３８±２ｃｍ−１、１６０７±２ｃｍ−１および９９７±２ｃｍ−１に典型的な吸収帯をもつ赤外線分光分析ミクロ減衰反射スペクトルにより特徴付けられる。
【０１３３】
形状ＩのＩＲ像は実質的に図１に示されるようなものである。形状IIのＩＲ像は実質的に図６に示されるようなものである。水和物形のＩＲ像は実質的に図１１に示されるようなものである。
【０１３４】
ＩＲデータおよび像の表示はＮｅｘｕｓ  ＦＴＩＲ分光光度計を伴う赤外線分光分析ミクロ減衰総反射（ミクロＡＴＲ）を使用して得た。ミクロＡＴＲアクセサリーはＳｉ結晶を伴うＨａｒｒｉｃｋ  Ｓｐｌｉｔ  Ｐｅａであった。使用された検出計はＫＢｒウィンドウをもつＤＴＧＳであった。形状Ｉ、IIおよび水和物形の走査パラメーターは以下であった：
−走査数：                    ３２
−解像：                      ２ｃｍ−１
−波長領域：                  ４０００〜４００ｃｍ−１
−基底線補正：                有り
−ビームスプリッター：        ＫＢｒ上のＧｅ。
【０１３５】
形状Ｉ、IIおよび水和物形に提供されたＩＲ吸収ピークの精度は、計測器、試料調製物、等のような実験誤差により２ｃｍ−１と規定される。
【０１３６】
形状ＩおよびIIの特徴的示差走査熱量測定（ＤＳＣ）発熱ピーク位置または領域は℃で
与えられる。化合物（ＸＩＸ）の形状Ｉは溶融分解する。発熱信号は約２１６．８℃で認められる。
【０１３７】
化合物（ＸＩＸ）の形状IIは約１９７．３℃で溶融分解する。発熱信号は約２０３．６℃で認められる。ＤＳＣ曲線の超吸熱信号は溶媒の蒸発のために約７１．５℃で認められる。
【０１３８】
形状ＩのＤＳＣ曲線は実質的に図３に示されるようなものである。形状IIのＤＳＣ曲線は実質的に図８に示されるようなものである。ＤＳＣデータおよび曲線の表示は、ＲＣＳ冷却ユニットを備えたＴＡ−Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｑ１０００  ＭＴＤＳＣを使用して得た。試料の重量は約３ｍｇであり、それを標準のアルミニウムＴＡ−Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔの試料パン中に移した。試料を２５℃から３００℃の最終温度まで、１０℃／分の速度で走査した。オーブンは５０ｍｌ／分の流速の窒素ガスで恒常的にパージした。
【０１３９】
形状ＩおよびIIに提供されたＤＳＣ曲線の許容範囲は、計測器、試料調製物、等のような実験誤差により３℃と規定される。
【０１４０】
形状Ｉおよび形状IIの吸着−脱着特徴は質量の％変化として与えられる。
【０１４１】
化合物（ＸＩＸ）の形状Ｉは高い相対湿度で０．６％までの水を吸着し、それは吸湿動態を示さず、試験期間中結晶質を維持する。
【０１４２】
化合物（ＸＩＸ）の形状IIは吸湿性生成物である。それは高い相対湿度において９．６％まで水を吸着する。生成物は脱着周期中に完全に乾燥し、試験中結晶質を維持する。
【０１４３】
形状ＩのＡＤ／ＤＥＳ曲線は実質的に図５に示されるようなものである。形状IIのＡＤ／ＤＥＳ曲線は実質的に図１０に示されるようなものである。
【０１４４】
ＡＤ／ＤＥＳデータはＳＭＳ動力学的蒸気吸収モデルＤＶＳ−１を使用して得られ、重量変化は２５℃の大気湿度に関して記録された。試料の重量は形状Ｉで約１７ｍｇ、形状IIで約２４ｍｇであった。試料は乾燥窒素下で６０分間乾燥した。平衡は最低１５分間、そして最大６０分間、０．０１％／分以下であった。データ収集間隔は０．０５％または２．０分であった。
【０１４５】
相対湿度（％）測定点は以下であった：
第１組：５、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、９５、９０、８０、７０、６０、５０、４０、３０、２０、１０、５
第２組：５、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、９５、９０、８０、７０、６０、５０、４０、３０、２０、１０、５、０。
【０１４６】
結晶形の製薬学的使用
本発明は更に、医薬としての使用のための式（ＸＩＸ）の化合物の形状Ｉ、形状IIまたは水和物形、式（ＸＩＸ）の化合物の２種以上の結晶形の混合物、あるいは式（ＸＩＸ）の化合物の少なくとも形状Ｉまたは水和物形および式（ＸＩＸ）の化合物の非ＨＣｌ塩の非晶質形の混合物を提供する。１つの実施態様において、医薬としての使用のための単独または前記混合物のいずれか中の結晶形は、形状Ｉ、形状IIまたは水和物形から選択される。
【０１４７】
本発明は更に、ＨＤＡＣ関連状態の処置のための医薬の製造における、式（ＸＩＸ）の化合物の形状Ｉ、形状IIまたは水和物形、式（ＸＩＸ）の化合物の２種以上の結晶形の混
合物、あるいは式（ＸＩＸ）の化合物の少なくとも形状Ｉまたは水和物形および式（ＸＩＸ）の化合物の非ＨＣｌ塩の非晶質形の混合物の使用を提供する。１つの実施態様において、医薬の製造に使用される、単独または前記混合物のいずれか中の結晶形は形状Ｉ、形状IIおよび水和物形から選択される。
【０１４８】
本発明は同様に、それを要する哺乳動物に、式（ＸＩＸ）の化合物の少なくとも形状Ｉ、形状IIまたは水和物形、式（ＸＩＸ）の化合物の２種以上の結晶形の混合物、あるいは式（ＸＩＸ）の化合物の少なくとも形状Ｉまたは水和物形および式（ＸＩＸ）の化合物の非ＨＣｌ塩の非晶質形の混合物を投与する方法を含んでなる、ＨＤＡＣ関連状態を罹患している哺乳動物を処置する方法を提供する。１つの実施態様において、処置方法は、形状Ｉ、形状IIおよび水和物形から選択される、単独のまたは前記混合物のいずれか中の結晶形を投与する方法を含んでなる。
【０１４９】
本明細書で使用される用語「ヒストン・デアセチラーゼ」および「ＨＤＡＣ」は、ヒストンのＮ−末端でリシン残基のε−アミノ基からアセチル基を除去する酵素の１族のいずれか１つを表すことが意図される。文脈により別に示されない限り、用語「ヒストン」はあらゆる種からのＨ１、Ｈ２Ａ、Ｈ２Ｂ、Ｈ３、Ｈ４およびＨ５を含むいずれかのヒストンタンパク質を表すことを意味する。ヒトのＨＤＡＣタンパク質または遺伝子産物は、それらに限定はされないがＨＤＡＣ−１、ＨＤＡＣ−２、ＨＤＡＣ−３、ＨＤＡＣ−４、ＨＤＡＣ−５、ＨＤＡＣ−６、ＨＤＡＣ−７、ＨＤＡＣ−８、ＨＤＡＣ−９、ＨＤＡＣ−１０およびＨＤＡＣ−１１を含む。ヒストン・デアセチラーゼはまた、原生動物またはカビ・真菌源から誘動することができる。
【０１５０】
用語「処置」は、哺乳動物、特にヒトにおける病理学的状態のあらゆる処置を表し、１種または複数の以下の行為を含む：
（ｉ）病理学的状態が、その状態の素因をもつ可能性はあるが、まだその状態をもつと診断はされていない非検体において起ることを予防し、そして従って、処置は疾患状態の予防的処置を構成する、
（ii）病理学的状態を抑制する、すなわちその発症（ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ）を停止する、
（iii）病理学的状態を緩和する、すなわち病理学的状態の退行を誘発する、または
（iv）病理学的状態により仲介される症候を緩和する。
【０１５１】
用語「本発明の１種または複数の多形体」により、式（ＸＩＸ）の化合物の少なくとも形状Ｉ、形状IIまたは水和物形、式（ＸＩＸ）の化合物の２種以上の結晶形の混合物、あるいは式（ＸＩＸ）の化合物の少なくとも形状Ｉまたは水和物形および式（ＸＩＸ）の化合物の非ＨＣｌ塩の非晶質形の混合物を意味する。
【０１５２】
本発明は、有効量の本発明の多形体を投与する方法により、形質転換細胞を含む細胞の異常増殖を抑制する方法を提供する。細胞の異常増殖は正常な制御機構に依存しない細胞増殖（例えば接触抑制の喪失）を表す。これは直接には癌細胞の増殖の停止、末端分化および／または細胞死を誘発することによる、そして間接的には、腫瘍の新生血管形成を抑制する双方による、腫瘍増殖の抑制を含む。
【０１５３】
本発明はまた、有効量の本発明の多形体を、このような処置を要する被験体、例えば哺乳動物（そしてより具体的にはヒト）に投与する方法による、腫瘍の増殖を抑制する方法を提供する。とりわけ本発明は、有効量の本発明の多形体の投与による腫瘍の増殖を抑制する方法を提供する。抑制することができる腫瘍の例は、それらに限定されないが、肺癌（例えば腺癌および非小細胞肺癌を含む）、膵臓癌（例えば外分泌膵癌のような膵癌）、結腸癌（例えば結腸腺癌および結腸腺腫のような、例えば結腸直腸癌）、進行疾患を含む
前立腺癌、リンパ系の造血器官腫瘍（例えば急性リンパ性白血病、Ｂ−細胞リンパ腫、ブルキットリンパ腫）、ホジキン病および非ホジキン病、骨髄性白血病（例えば、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ））、甲状腺濾胞腺癌、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、間葉細胞源の腫瘍（例えば繊維肉腫および横紋筋肉腫）、メラノーマ、奇形癌、神経芽細胞腫、神経膠腫、皮膚の良性腫瘍（例えば、角化棘細胞腫）、乳癌（例えば進行乳癌）、腎臓癌、卵巣癌、膀胱癌および上皮癌である。
【０１５４】
本発明は更に、式（ＸＩＸ）の化合物の少なくとも形状Ｉ、形状IIまたは水和物形、式（ＸＩＸ）の化合物の２種以上の結晶形の混合物、あるいは式（ＸＩＸ）の化合物の少なくとも形状Ｉまたは水和物形および式（ＸＩＸ）の化合物の非ＨＣｌ塩の非晶質形の混合物、並びに製薬学的に許容され得る賦形剤を含んでなる製薬学的組成物を提供する。１つの実施態様において、製薬学的組成物は形状Ｉ、形状IIおよび水和物形から選択される、単独のまたは前記のいずれかの混合物中の結晶形を含んでなる。
【０１５５】
製薬学的組成物は経口、非経口（皮下、筋肉内および静脈内を含む）、直腸内、経皮的、舌下または鼻腔内投与することができる医薬として調製することができる。経口投与に適する剤形は、散剤、顆粒、凝結物（ａｇｇｒｅｇａｔｅｓ）、錠剤、打錠またはコートピル、糖衣錠、小袋、ハードカプセルまたはゼラチンカプセル、シロップおよび懸濁物を含む。非経口投与に適する剤形は、水溶液または非水溶液またはエマルションを含むが、他方直腸投与に適する剤形は、親水性または疎水性ベヒクルを伴う座薬を含む。局所投与のためには本発明は当該技術分野で知られた適切な経皮的送達系を提供し、そして鼻腔内送達のためには当該技術分野で知られた適切なエアゾール送達系が提供される。あらゆる与えられる事例における大部分の適切な投与は、処置されている状態の本質および重症度に左右されるであろうが、本発明のもっとも好ましい経路は経口である。
【０１５６】
用量は便利には単位投与剤形で提供され、製薬学分野で周知のいずれかの方法により調製することができる。あるいはまた、剤形は１日全体で適当な間隔を明けて投与される、１、２、３または４回以上の分割投与物として提供することができる。使用される単位用量は好ましくは式（ＸＩＸ）の化合物の塩基当量約１ｍｇ〜約１０００ｍｇ、より好ましくは約５〜約４００ｍｇである。
【０１５７】
本発明の製薬学的組成物は式（ＸＩＸ）の化合物の形状Ｉ、形状IIまたは水和物形を含んでなる。製薬学的組成物は式（ＸＩＸ）の化合物の形状Ｉ、形状IIまたは水和物形の単一形状のみ、あるいは式（ＸＩＸ）の化合物の非ＨＣｌ塩の非晶質形を含むまたは含まない、式（ＸＩＸ）の化合物の種々の形状の混合物を含んでなることができる。１種または複数の有効成分に加えて、製薬学的組成物は１種または複数の賦形剤または補助剤を含んでなる。賦形剤の選択および使用量は、経験および標準法の考慮および当該技術分野の参照研究に基づいて生薬学者により容易に決定されることができる。
【０１５８】
適切な賦形剤の例は、アラビアゴム、マグネシア、炭酸マグネシウム、リン酸カリウム、ラクトース、グルコースまたはデンプン、とりわけコーンスターチである。適切な油性賦形剤または溶媒はヒマワリ油または肝油のような植物または動物油である。水溶液またはアルコール溶液に適する溶媒は水、エタノール、糖溶液またはそれらの混合物である。ポリエチレングリコールおよびポリプロピレングリコールもまた、他の投与形のための更なる補助剤として有用である。
【０１５９】
皮下または静脈内投与のための、本発明の多形体は、所望される場合は、可溶化剤、乳化剤または更なる補助剤のような、それらのための通常の物質とともに、溶液、懸濁物またはエマルションに製造される。本発明の多形体をまた、凍結乾燥し、得られる凍結乾燥物を例えば注射または注入調製物の製造のために使用することができる。適切な溶媒は例
えば、水、生理学的食塩溶液またはアルコール、例えばエタノール、プロパノール、グリセロール、更にまた、グルコースまたはマニトール溶液のような糖溶液、あるいはまた、言及された種々の溶媒の混合物である。
【０１６０】
エアゾールまたはスプレーの形状の投与に適する製薬学的組成物は例えば、エタノールまたは水のような製薬学的に許容され得る溶媒あるいはこのような溶媒の混合物中の、本発明の多形体の溶液、懸濁物またはエマルションである。必要な場合は、調合物はまた、更に、界面活性剤、乳化剤および安定剤のような他の製薬学的補助剤並びに噴射剤を含むことができる。このような調製物は、従来、約０．１〜５０重量％、とりわけ約０．３〜３重量％の濃度で有効化合物を含む。
【０１６１】
特に前記の成分に加えて、本発明の製薬学的組成物は、問題の調合の種類に関して当該技術分野で通常の他の物質を含むことができ、例えば、経口投与に適する物質は香り付け物質または味隠蔽物質を含むことができることは理解しなければならない。
【０１６２】
本発明の他の態様として、他の抗ガン剤との、式（ＸＩＸ）の化合物の形状Ｉ、形状IIまたは水和物形、式（ＸＩＸ）の化合物の２種以上の結晶形の混合物、あるいは式（ＸＩＸ）の化合物の少なくとも形状Ｉまたは水和物形および式（ＸＩＸ）の化合物の非ＨＣｌ塩の非晶質形の混合物、の組み合わせ物が、特に医薬としての使用のために、更に特には癌または関連疾患の処置において、予見される。
【０１６３】
前記の状態の処置のための本発明の多形体は有利には、１種または複数の他の医薬物質と、より具体的には、他の抗ガン剤と組み合わせて使用することができる。抗ガン剤の例はそれらに限定はされないが、以下を含む：
−白金配位化合物、例えばシスプラチン、カルボプラチンまたはオキサリプラチン、
−タキサン化合物、例えばパクリタキセルまたはドセタキセル、
−カンプトテシン化合物のようなトポイソメラーゼＩインヒビター、例えばイリノテカンまたはトポテカン、
−抗ガン性エピポドフィロトキシンまたはポドフィロトキシン誘導体のようなトポイソメラーゼIIインヒビター、例えばエトポシドまたはテニポシド、
−抗腫瘍ビンカアルカロイド、例えばビンブラスチン、ビンクリスチンまたはビノレルビン、
−抗腫瘍ヌクレオシド誘導体、例えば５−フルオロウラシル、ロイコボリン、ゲムシタビンまたはカペシタビン、
−ナイトロジェン・マスタードまたはニトロソ尿素のようなアルキル化剤、例えばシクロホスホアミド、クロランブシル、カルムスチン、チオテパ、メファランまたはロムスチン、
−抗腫瘍アントラサイクリン誘導体、例えばダウノルビシン、ドキソルビシン、ドキシル、イダルビシンまたはミトキサントロン、
−ＩＧＦ−１受容体を標的とする分子、例えばピクロポドフィリン、
−テトラカルシン誘導体、例えばテトロカルシンＡ、
−グルココルチコイド、例えばプレドニソン、
−抗体、例えばトラスツズマブ（ＨＥＲ２抗体）、リツキシマブ（ＣＤ２０抗体）、ゲンツザマブ、セツキシマブ、ペルツヅマブまたはベバシヅマブ、
−エストロゲン受容体アンタゴニストまたは選択的エストロゲン受容体モジュレーター、例えばタモキシフェン、フルベストラント、トレミレン、ドロロキシフェン、ファスロデックスまたはラロキシフェン、
−エキセメスタン、アナストロゾール、レトラゾールおよびボロゾールのようなアロマターゼインヒビター、
−レチノイド、ビタミンＤまたはレチノイン酸およびレチノイン酸代謝阻害剤（ＲＡＭＢ
Ａ）のような分化剤、例えばアキュタン、
−ＤＮＡメチルトランスフェラーゼインヒビター、例えばアザシチジンまたはデシタビン、
−抗葉酸塩、例えばプレメトレキセド二ナトリウム、
−抗生物質、例えばアンチノマイシンＤ、ブレオマイシン、マイトマイシンＣ、ダクチノマイシン、カルミノマイシンまたはダウノマイシン、
−抗代謝剤、例えばクロファラビン、アミノプテリン、シトシン・アラビノシドまたはメトトレキセート、
−Ｂｃｌ−２インヒビターのような細胞死誘発剤および抗脈管形成剤、例えばＹＣ１３７、ＢＨ３１２、ＡＢＴ７３７、ゴッシポール、ＨＡ１４−１、ＴＷ３７またはデカン酸、−チューブリン結合剤、例えばコンブレスタチン、コルヒシンまたはノコダゾール、
−キナーゼインヒビター、例えばフラボペリドール、イマチニブ・メシレート、エルロチニブまたはゲフィチニブ、
−ファルネシルトランスフェラーゼインヒビター、例えばチピファルニブ、
−ヒストン・デアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）インヒビター、例えば酪酸ナトリウム、スベロイルアニリド・ヒドロキサミド酸（ＳＡＨＡ）、デプシペプチド（ＦＲ  ９０１２２８）、ＮＶＰ−ＬＡＱ８２４、Ｒ３０６４６５、ＪＮＪ−２６４８１５８５またはトリコスタチンＡ、
−ユビキチン−プロテアソム経路のインヒビター、例えばＰＳ−３４１、ＭＬＮ  ４１またはボルテゾミブ
−Ｙｏｎｄｅｌｉｓ、
−テロメラーゼ・インヒビター、例えばテロメスタチン、
−マトリックスメタロプロテイナーゼ・インヒビター、例えばバチマスタート、マリマスタート、プリノスタートまたはメタスタート、
である。
【０１６４】
それらの有用な薬理学的特性を考慮すると、発明に従う組み合わせ物の成分、すなわち他の医薬および発明の多形体は、投与の目的のための種々の製薬学的剤形に調合することができる。成分は個々の製薬学的組成物中または両成分を含む単一製薬学的組成物中に別々に調合することができる。
【０１６５】
従って、本発明の１つの実施態様はまた、１種または複数の製薬学的担体と一緒に、他の医薬および本発明の多形体を含んでなる製薬学的組成物に関する。
【０１６６】
本発明は更に、腫瘍細胞の増殖を抑制するための製薬学的組成物の製造における本発明に従う組み合わせ物の使用に関する。
【０１６７】
本発明は更に、癌を罹患している患者の処置における同時の、別のまたは連続的使用のための組み合わせ物調製物として、第１の有効成分としての本発明に従う多形体および第２の有効成分としての抗ガン剤を含む製品に関する。
【０１６８】
他の医薬および本発明の多形体は同時に（例えば、別のまたは単一の組成物中）またはいずれの順序でも連続的に投与することができる。後者の場合は、２種の化合物は、有利なまたは相乗的な効果が達成されることを確保するのに十分な期間内に、そして十分な量で、そして十分な方法で投与されるであろう。投与の好ましい方法および順序並びに組み合わせ物の各成分のそれぞれの投与量および投与計画は、投与されている特定の他の医薬および多形体、それらの投与経路、処置されている特定の腫瘍並びに処置されている特定の宿主に左右されるであろう。投与の最適な方法および順序および投与量および計画は、従来の方法を使用し、本明細書に記載の情報を考慮して、当業者により容易に決定されることができる。
【０１６９】
白金配位化合物は有利には、１コースの処置当たり、体表面積１平方メーターにつき１〜５００ｍｇ（ｍｇ／ｍ２）、例えば５０〜４００ｍｇ／ｍ２、特にシスプラチンに対しては約７５ｍｇ／ｍ２、そしてカルボプラチンに対しては約３００ｍｇ／ｍ２の用量で投与される。
【０１７０】
タキサン化合物は有利には、１コースの処置当たり、体表面積１平方メーターにつき５０〜４００ｍｇ（ｍｇ／ｍ２）、例えば７５〜２５０ｍｇ／ｍ２、特にパクリタキセルに対しては約１７５〜２５０ｍｇ／ｍ２、そしてドセタキセルに対しては約７５〜１５０ｍｇ／ｍ２の用量で投与される。
【０１７１】
カンプトテシン化合物は有利には、１コースの処置当たり、体表面積１平方メーターにつき０．１〜４００ｍｇ（ｍｇ／ｍ２）、例えば１〜３００ｍｇ／ｍ２、特にイリノテカンに対しては約１００〜３５０ｍｇ／ｍ２、そしてトポテカンに対しては約１〜２ｍｇ／ｍ２の用量で投与される。
【０１７２】
抗腫瘍ポドフィロトキシン誘導体は有利には、１コースの処置当たり、体表面積１平方メーターにつき３０〜３００ｍｇ（ｍｇ／ｍ２）、例えば５０〜２５０ｍｇ／ｍ２、特にエトポシドに対しては約３５〜１００ｍｇ／ｍ２、そしてテニポシドに対しては約５０〜２５０ｍｇ／ｍ２の用量で投与される。
【０１７３】
抗腫瘍ビンカアルカロイドは有利には、１コースの処置当たり、体表面積１平方メーターにつき２〜３０ｍｇ（ｍｇ／ｍ２）、特にビンブラスチンに対しては約３〜１２ｍｇ／ｍ２、ビンクリスチンに対しては約１〜２ｍｇ／ｍ２、そしてビノレルビンに対しては約１０〜３０ｍｇ／ｍ２の用量で投与される。
【０１７４】
抗腫瘍ヌクレオシド誘導体は有利には、１コースの処置当たり、体表面積１平方メーターにつき２００〜２５００ｍｇ（ｍｇ／ｍ２）、例えば７００〜１５００ｍｇ／ｍ２、特に５−ＦＵに対しては約２００〜５００ｍｇ／ｍ２、ゲムシタビンに対しては約８００〜１２００ｍｇ／ｍ２、そしてカペシタビンに対しては約１０００〜２５００ｍｇ／ｍ２の用量で投与される。
【０１７５】
ナイトロジェンマスタードまたはニトロソ尿素のようなアルキル化剤は有利には、１コースの処置当たり、体表面積１平方メーターにつき１００〜５００ｍｇ（ｍｇ／ｍ２）、例えば１２０〜２００ｍｇ／ｍ２、特にシクロホスホアミドに対しては約１００〜５００ｍｇ／ｍ２、クロランブシルに対しては約０．１〜０．２ｍｇ／ｍ２、カルムスチンに対しては約１５０〜２００ｍｇ／ｍ２、そしてロムスチンに対しては約１００〜１５０ｍｇ／ｍ２の用量で投与される。
【０１７６】
抗腫瘍アントラサイクリン誘導体は有利には、１コースの処置当たり、体表面積１平方メーターにつき１０〜７５ｍｇ（ｍｇ／ｍ２）、例えば１５〜６０ｍｇ／ｍ２、特にドキソルビシンに対しては約４０〜７５ｍｇ／ｍ２、ダウノルビシンに対しては約２５〜４５ｍｇ／ｍ２、そしてイダルビシンに対しては約１０〜１５ｍｇ／ｍ２の用量で投与される。
【０１７７】
抗エストロゲン剤は有利には、特定の薬剤および処置されている状態に応じて１日に約１〜１００ｍｇの用量で投与される。タモキシフェンは有利には５〜５０ｍｇ、好ましくは１０〜２０ｍｇを１日２回の用量で経口投与され、治療効果を達成し、維持するために十分な期間、治療を継続する。トレミフェンは有利には１日１回約６０ｍｇの用量で経口投与され、治療効果を達成し、維持するために十分な期間治療を継続する。アナストロゾ
ールは有利には１日１回約１ｍｇの用量で経口投与される。ドロロキシフェンは有利には１日１回約２０〜１００ｍｇの用量で経口投与される。ラロキシフェンは有利には１日１回約６０ｍｇの用量で経口投与される。エキセメスタンは有利には１日１回約２５ｍｇの用量で経口投与される。
【０１７８】
抗体は有利には、体表面積１平方メーターにつき約１〜５ｍｇ（ｍｇ／ｍ２）の用量で、または、異なる場合は当該技術分野で知られたように投与される。トラスツヅマブは有利には、１コースの処置当たり、体表面積１平方メーターにつき１〜５ｍｇ（ｍｇ／ｍ２）、特には２〜４ｍｇ／ｍ２の用量で投与される。
【０１７９】
これらの用量は１コースの処置当たり、例えば１回、２回またはそれ以上投与することができ、それを例えば７、１４、２１または２８日毎に反復することができる。
【０１８０】
本発明の多形体を、機械的、環境的、生物学的または化学的障害または劣化に対して防御的な包装材料中に保存することは便利であることができる。薬剤物質を状態調節することは、シールされた蒸気ロックバッグのような湿気を通さない包装材料を使用することにより達成することができる。錠剤、カプセルのような薬剤製品を状態調節する方法は例えば、アルミニウムブリスターを使用することにより達成することができる。
【０１８１】
実験部門
以下の実施例は本発明を具体的に示すことを意図され、それらに限定されることは意図されない。
【実施例１】
【０１８２】
中間体（Ｉ）の調製
【０１８３】
【化１７】
2010526851.tif 000018
【０１８４】
ａ）４−ピペリジンメタンアミン（２．６モル）および酢酸エチル（５．２Ｌ）を不活性反応容器（２０Ｌ）中に入れ、４５℃に暖めた。４−ニトロベンズアルデヒド（２．７モル）を添加し、反応混合物を４５℃で２時間撹拌した。反応物を０℃に冷却し、次にジイソプロピルエチルアミン（６．６モル）を添加すると、溶液１を与えた。
【０１８５】
ｂ）２−（メチルチオ）−５−ピリミジンカルボン酸エチルエステル（２．７モル）および酢酸エチル（２．６Ｌ）を不活性容器に入れ、０℃に冷却した。メタ−クロロペルオキシ安息香酸（１．２モル）の溶液（２．６Ｌの酢酸エチル中）を０℃〜５℃の間の温度で１時間にわたり添加した。反応混合物を０℃で３０分間撹拌すると溶液２を与えた。
【０１８６】
ｃ）溶液２を０℃〜５℃の間の温度で１時間にわたり溶液１に添加した。反応混合物を室温に１晩放置した。混合物を、６４０ｍｌの濃塩酸溶液（１０Ｌの水中）で、２のｐＨに酸性化した。水層を回収し、１Ｌの酢酸エチルで洗浄した。水層を回収し、１Ｌのジクロロメタンを添加した。混合物を４５０ｍｌの５０％水酸化ナトリウムで１０のｐＨに塩基性化した。混合物を室温で３０分間撹拌した。有機層を回収すると画分１を与えた。水層を更に、２Ｌのジクロロメタンで抽出し、有機層を回収すると画分２を与えた。画分１お
よび２を合せ、ジクロロメタンを蒸発させると５１１．２５ｇ（１．９３モル）の中間体（Ｉ）を与えた（収率７４％）。
【実施例２】
【０１８７】
中間体（ＸIII）の調製
【０１８８】
【化１８】
2010526851.tif 000019
【０１８９】
ａ）中間体（Ｉ）（０．９７モル）およびトルエン（４．５Ｌ）を不活性反応容器（２０Ｌ）中に添加した。１−メチル−１Ｈ−インドール−３−カルボキシアルデヒド（０．９７モル）を室温で反応混合物に添加した。反応混合物を還流温度に暖め、１晩還流し、室温に冷却した。メタノールで変性されたエタノール（１．５Ｌ）を添加すると溶液３を与えた。
【０１９０】
ｂ）ナトリウムテトラヒドロボレート（５５．２ｇ）およびトルエン（１．５Ｌ）を不活性反応容器（２０Ｌ）中に添加した。混合物を連続撹拌下で１０℃にした。溶液３を＃１０℃の温度で１時間にわたり混合物に添加した。混合物を＃１０℃の温度で１時間撹拌した。反応混合物を室温にした。アセトン（８．７９モル）を３０分間にわたり添加した。反応混合物を４時間撹拌した。水（５．１Ｌ）を１５分間にわたり反応混合物に滴下した。反応混合物を室温で１時間撹拌した。水層を放念し（ｄｉｓｒｅｇａｒｄ）、有機層を３００ｇの重炭酸ナトリウムの溶液（４．１Ｌの水中）で２回洗浄した。有機層を硫酸マグネシウム上で濾過し、蒸発させると画分３（蒸発後に３９７ｇの残渣）を与えた。
【０１９１】
ｃ）２％メチルエチルケトンで変性されたエタノール（５Ｌ）を室温で画分３に添加した。濃アセトン（５Ｌ）および０．５Ｌの水を室温で添加し、次に混合物を５０℃に暖めた。フマル酸（０．９７モル）、２％メチルエチルケトンで変性されたエタノール（１．４Ｌ）、アセトン（１．４Ｌ）および１４０ｍｌの水の混合物を調製すると、溶液４を与えた。溶液４を５０℃の温度で２時間にわたり反応混合物に添加した。反応混合物を５０℃で２時間撹拌し、室温に４時間冷却し、室温で１晩撹拌した。沈降物を回収し、次に、２％メチルエチルケトンで変性された１．４Ｌのエタノール、１．４Ｌの濃アセトンおよび１４０ｍｌの水で洗浄した。沈降物を５０℃で１晩乾燥すると，３７１ｇ（０．７モル）の中間体（ＸIII）を与えた（収率７３％）。
【実施例３】
【０１９２】
中間体（ＸＶII）の調製
【０１９３】
【化１９】
2010526851.tif 000020
【０１９４】
４首フラスコ（２Ｌ）に中間体（ＸIII）（１００ｇ、１９１．０ミリモル）を充填した。水（３Ｌ／モル−ピュア限定試薬；５７３．０ｍｌ）および２−メチルテトラヒドロフラン（２．２Ｌ／モル−ピュア限定試薬；４２０．２ｍｌ）を添加した。撹拌後に、５０％水酸化ナトリウム（２．５モル／モル−ピュア限定試薬；４７７．５ミリモル；２５．１３ｍｌ）を添加した。反応混合物を更に室温で４０〜６０分間撹拌し、その後反応物を静置した。上部有機層を回収し、水（２Ｌ／モル−ピュア限定試薬；３８２．０ｍｌ）で洗浄した。水（１．５Ｌ／モル−ピュア限定試薬；２８６．５ｍｌ）および水酸化ナトリウム（３モル／モル−ピュア限定試薬；５７３．０ミリモル；４５．８４ｇ）を有機層に添加した。反応混合物を８０℃に暖め、１６時間撹拌した。反応混合物を室温に冷却し、下部の水層を回収した。イソプロピルアルコール（９０ｍｌ；１．１７７モル）を添加し、混合物を氷浴中で１０℃に冷却した。反応混合物を濃塩酸（５モル／モル−ピュア限定試薬；９５４．９モル；１００．９ｇ）でｐＨ１に酸性化した（ｐＨ１３．８：暗緑色溶液；ｐＨ７．５：オールドピンク溶液；ｐＨ４．７：ピンク溶液、白色沈殿物）。反応混合物を１０℃で４時間撹拌した。白色沈殿物を濾取し、水で４回洗浄し、４０℃で真空乾燥すると８４ｇの中間体（ＸＶII）を与えた（収率：９７％）。
【実施例４】
【０１９５】
中間体（ＸＶIII）の調製
【０１９６】
【化２０】
2010526851.tif 000021
【０１９７】
ａ）４首フラスコ（１Ｌ）に０．０９３モルの中間体（ＸＶII）を充填し、そして２２０ｍｌの酢酸エチルを添加した。反応混合物を撹拌し、５ｍｌの水を添加すると溶液５を与えた。２５０ｍｌのフラスコに０．１２２モルのＮ’−（エチルカルボンイミドイル）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−１，３−プロパンジアミン、一塩酸（ＥＤＣ）（１３０ｍｌのエタノール中）を充填し、反応混合物を撹拌すると、溶液６を与えた。Ｏ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−ヒドロキシルアミン（０．１２３モル）を溶液５に添加し、添加漏斗を２６ｍｌの酢酸エチルで洗浄した。直後に２００ｍｌの溶液６を、溶液５を含んでなる反応混合物に１時間３０分間にわたり添加した（反応混合物は９０％の溶液６が添加された時に均一になり、次に所望の生成物が析出した）。反応混合物を室温で５時間撹拌した。沈殿物を濾取し、５５ｍｌの酢酸エチルで洗浄し、１６時間、５０℃で真空下乾燥すると、３５．７ｇ（０．０７モル）の中間体（ＸＶIII）を与えた（収率：７１％）。
【０１９８】
ｂ）４首フラスコ（１Ｌ）に０．０７３モルの中間体（ＸＶIII）を窒素雰囲気下で充填した。Ｎ，Ｎ−ジメチル−アセトアミド（３７７ｍｌ）および３７７ｍｌのメチルイソブチルケトンを添加し、混合物を７０℃に暖めた。反応混合物を７０℃で５時間撹拌し、次に１時間にわたり２５℃に冷却し、次に２５℃で更に１時間撹拌した。沈殿物を濾取し、次に、９４ｍｌのＮ，Ｎ−ジメチル−アセトアミドおよびメチルイソブチルケトンの混合物、次にスラーリー洗浄において１５０ｍｌのメチルイソブチルケトンおよび次に交換洗浄において１５０ｍｌのメチルイソブチルケトンで洗浄した。沈殿物を２日間５０℃で真空乾燥すると３３．４ｇの精製中間体（ＸＶIII）を与えた（収率：８９％）。
【実施例５】
【０１９９】
ＪＮＪ−２６４８１５８５のＨＣｌ塩結晶形Ｉの調製
【０２００】
【化２１】
2010526851.tif 000022
【０２０１】
ａ）不活性の４首フラスコ（０．５Ｌ）に０．０３モルの精製中間体（ＸＶIII）を充填した。エタノール（３００ｍｌ）を添加した（典型的な水含量は０．０７％（ｗ／ｗ）である）。反応混合物を撹拌し、５７℃〜６０℃に暖めた。３０ｍｇの中間体（ＸＶIII）ＪＮＪ−２６４８１５８５．ＨＣｌ（３０ｍｇ）形状Ｉを播種した。濃塩酸（０．０５モル％）を５７℃で反応混合物に添加し、反応混合物を１６時間撹拌した。沈殿物を５０℃で濾取し、２０ｍｌのエタノールで３回洗浄すると１０ｇのＪＮＪ−２６４８１５８５．ＨＣｌ塩結晶形Ｉを与えた。
【０２０２】
ｂ）不活性４首フラスコ（５０ｍｌ）に工程ａ）で得た２．６ｇのＪＮＪ−２６４８１５８５ＨＣｌ塩結晶形Ｉを充填した。エタノール（２０ｍｌ）を添加した。反応混合物を窒素下、暗所で撹拌し、５０℃に暖めた。反応混合物を５０℃で１２時間撹拌し、４０℃に１時間にわたり冷却し、濾過した。沈殿物を２０ｍｌのエタノールで１回、２０ｍｌのアセトンで２回洗浄した。次に生成物を５０℃で１６時間真空乾燥すると２ｇ（８０％）の精製ＪＮＪ−２６４８１５８５ＨＣｌ塩結晶形Ｉを生成した。
【実施例６】
【０２０３】
スラーリー法を使用する多形体ＩおよびIIの混合物の転化（ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ）
ａ）スラーリーの調製
約２５ｍｇの形状Ｉおよび約２５ｍｇの形状IIをバイアル中に秤量した。約０．２ｍｌのエタノールを添加し、バイアルを封印した。３本のバイアルを調製し、各バイアルを異なる温度、４℃（冷蔵庫）、４０℃および７０℃で４日間保存した。
【０２０４】
これをエタノール／水（９０／１０、ｖ／ｖ％）中および水中のスラーリーにつき反復した。スラーリーを異なる温度で４日間および７日間保存した。保存後、バイアルを開放し、濾紙上に数ｍｇのスラーリーを広げることにより試料を乾燥した。
【０２０５】
ｂ）分析法（粉末ＸＲＤ）
すべての得られた画分を、粉末ＸＲＤを使用して分析した。
【０２０６】
Ｘ線粉末回折（ＸＰＲＤ）分析を、ジェネレーターＰＷ３０４０を備えたＰｈｉｌｉｐｓＸ’ＰｅｒｔＰＲＯ  ＭＰＤ回折計ＰＷ３０５０／６０上で実施した。装置はＣｕ  ＬＦＦ  Ｘ線管ＰＷ３３７３／００を備えていた。化合物をゼロ背景の試料ホルダー上に広げた。
【０２０７】
装置のパラメーター
ジェネレーター電圧：          ４５ｋＶ
ジェネレーターアンペア：      ４０ｍＡ
構造：                        Ｂｒａｇｇ−Ｂｒｅｎｔａｎｏ
ステージ：                    スピナーステージ
【０２０８】
測定条件
走査モード：                  連続
走査範囲：                    ３〜５０°２θ
ステップサイズ：              ０．０１６７５°／ステップ
測定時間：                      ２９．８５秒／ステップ
スピナー回転時間：              １秒
放射線タイプ：                  ＣｕＫα
放射線波長：                    １．５４０５６Å
【０２０９】
入射ビーム経路                              回折ビーム経路
プログラム．分散スリット：１５ｍｍ        長い散乱防止シールド：＋
ソラースリット：          ０．０４ラド    ソラースリット        ０．０４ラド
ビームマスク：            １５ｍｍ        Ｎｉフィルター：      ＋
散乱防止スリット：        １°            検出機：              X’Celerator
ビームナイフ：            ＋
【０２１０】
ｃ）結果
エタノール中で４日および７日の保存後のスラーリー転化研究で得た結果を次の表Ａにまとめた。
【０２１１】
【表１】
2010526851.tif 000023
【０２１２】
溶媒和形のＸＲＤ像は水和物のＸＲＤ像に匹敵する。
【０２１３】
エタノール／水（９０／１０、ｖ／ｖ／％）中に４日および７日間の保存後のスラーリー転化研究で得た結果は以下の表Ｂにまとめる。
【０２１４】
【表２】
2010526851.tif 000024
【０２１５】
水中で４日間の保存後のスラーリー転化研究で得た結果を次の表Ｃにまとめる。
【０２１６】
【表３】
2010526851.tif 000025
【０２１７】
これらの水和物試料（以前の水中スラーリー）を異なる温度、４０℃、５０℃および７０℃で０．１ｍｌのエタノールとともに３日間保存した。
【０２１８】
４０℃および５０℃で３日間保存された水和物試料は水和物のままであった。
【０２１９】
７０℃で３日間保存された水和物試料は完全に液化した（油）。
【実施例７】
【０２２０】
形状Ｉの安定性
ａ）化合物の情報
構造式：
【０２２１】
【化２２】
2010526851.tif 000026
【０２２２】
化学名：Ｎ−ヒドロキシ−２−［４−［［［（１−メチル−１Ｈ−インドル−３−イル）メチル］アミノ］メチル］−１−ピペリジニル］−５−ピリミジンカルボキシアミド・塩酸
分子式：Ｃ２１Ｈ２６Ｎ６Ｏ２．ＨＣｌ
分子量：４３０．９４
【０２２３】
ｂ）吸着／脱着の研究
異なる条件の相対湿度における２５℃の水の吸着および脱着を１７ｍｇの形状Ｉにつき研究した。
【０２２４】
相対湿度の関数としての重量変化を記録した。結果は図４に示された。
【０２２５】
形状Ｉの画分は高い相対湿度において０．６％までの水を吸着し、それは吸湿性動態を示さず、試験期間中、結晶質のままであった。
【０２２６】
ｃ）溶解度
形状Ｉの水溶解度を、異なるｐＨをもつ溶媒中で測定した。過剰の溶質を２４時間、２０℃の溶媒と平衡させた。不溶解化合物を除去後、溶液中の濃度を、ＵＶ分光分析を使用して測定した。
【０２２７】
溶解度を次の表Ｄに記載した：
【０２２８】
【表４】
2010526851.tif 000027
【０２２９】
ｄ）結晶学的安定性
形状Ｉの結晶構造の安定性を＜５％、５６％および７５％相対湿度（ＲＨ）下で室温で（ＲＴ）、５０℃および４０℃／７５％ＲＨ下で、６週間の期間、開放条件で化合物を保存後に研究した。
【０２３０】
試料を熱重量分析（ＴＧＡ）、示差走査熱量計（ＤＳＣ）、Ｘ線粉末回折（ＸＰＲＤ）および赤外線分光分析（ＩＲ）で分析した。
【０２３１】
試験結果を次の表Ｅに報告する。
【０２３２】
【表５】
2010526851.tif 000028
【０２３３】
形状Ｉは溶融分解し、従って融解熱は報告されなかった。
【０２３４】
形状Ｉは結晶学的に安定である。
【０２３５】
異なる条件下での保存後に変化を認めない。
【０２３６】
ＩＲスペクトル、ＸＲＤ像およびＤＳＣ曲線は保存前後に同様であった。
【０２３７】
ｅ）化学的安定性
形状Ｉを１、４および８週の期間、異なる開放条件で保存した。これらの条件は４０℃／７５％ＲＨ、５０℃、ＲＴ／＜５％ＲＨ、ＲＴ／５６％ＲＨ、ＲＴ／７５％ＲＨおよび０．３ｄａ  ＩＣＨ光線である。
【０２３８】
化合物を保存後、ＨＰＬＣおよび視覚的観察により分析した。
【０２３９】
試験の結果を次の表Ｆに報告した。
【０２４０】
【表６】
2010526851.tif 000029
【０２４１】
不純物の合計が０．３ｄａＩＣＨ光線条件下で保存後に増加したので、形状Ｉは光線に対する感受性を示した。
【実施例８】
【０２４２】
形状IIの安定性
ａ）化合物の情報
構造式：
【０２４３】
【化２３】
2010526851.tif 000030
【０２４４】
化学名：Ｎ−ヒドロキシ−２−［４−［［［（１−メチル−１Ｈ−インドル−３−イル）メチル］アミノ］メチル］−１−ピペリジニル］−５−ピリミジンカルボキシアミド・塩酸
分子式：Ｃ２１Ｈ２６Ｎ６Ｏ２．ＨＣｌ
分子量：４３０．９４
【０２４５】
ｂ）吸着／脱着の研究
異なる条件の相対湿度における２５℃の水の吸着および脱着を約２４ｍｇの形状IIにつき研究した。
【０２４６】
相対湿度の関数としての重量変化を記録した。結果は図９に示された。
【０２４７】
最初の乾燥工程中に、形状IIに対して１．６７％の重量喪失が記録される。得られた乾燥生成物は吸湿性であった。それは高い相対湿度において９．６％までの水を吸着した。生成物は脱着周期中に完全に乾燥し、試験期間中結晶質のままであった。
【０２４８】
ｃ）結晶学的安定性
形状IIの結晶構造の安定性を＜５％、５６％および７５％相対湿度（ＲＨ）下室温で（
ＲＴ）、５０℃および４０℃／７５％ＲＨで、６週間にわたり、開放条件で化合物を保存後に研究した。
【０２４９】
試料を熱重量分析（ＴＧＡ）、示差走査熱量計（ＤＳＣ）、Ｘ線粉末回折（ＸＰＲＤ）および赤外線分光分析（ＩＲ）で分析した。
【０２５０】
試験結果を次の表Ｇに報告した。
【０２５１】
【表７】
2010526851.tif 000031
【０２５２】
形状IIは溶融分解し、従って融解熱は報告されなかった。ＤＳＣ曲線の超発熱信号は溶媒の蒸発によるものであった。
【０２５３】
形状IIは結晶学的に安定ではない。異なる湿度条件下での保存後に変化を認める。ＩＲスペクトルおよびＸＲＤ像はＲＴ／５６％ＲＨ、ＲＴ／７５％ＲＨおよび４０℃／７５％ＲＨ条件下で保存後、出発材料と異なる。
【０２５４】
ＲＴ／５６％ＲＨ、ＲＴ／７５％ＲＨおよび４０℃／７５％ＲＨ条件下で保存後の変化は水の取り込みによるものであった。
【０２５５】
ｄ）化学的安定性
形状IIを１、４および８週の期間、異なる開放条件下で保存した。これらの条件は４０℃／７５％ＲＨ、５０℃、ＲＴ／＜５％ＲＨ、ＲＴ／５６％ＲＨ、ＲＴ／７５％ＲＨおよび０．３ｄａ  ＩＣＨ光線であった。保存後、化合物をＨＰＬＣおよび視覚的観察により分析した。
【０２５６】
試験の結果を次の表Ｈに報告する。
【０２５７】
【表８】
2010526851.tif 000032
【０２５８】
Ｒ４２５７５４の化学安定性の研究は以下の観察をもたらした：
Ｒ４２５７５４は０．３ｄａＩＣＨ光線条件での保存後に不純物の合計が増加するので、光線に対する感受性を示した。
【０２５９】
更に、０．３ｄａＩＣＨ光線における保存後に白色から橙褐色へ、そして湿度条件ＲＴ／５６％ＲＨ、ＲＴ／７５％ＲＨおよび４０℃／７５％ＲＨおよび高温５０℃における保存後に白色からピンクへの変色が認められる。
【図１】
2010526851.tif 000040
【図２】
2010526851.tif 000041
【図３】
2010526851.tif 000042
【図４】
2010526851.tif 000043
【図５】
2010526851.tif 000044
【図６】
2010526851.tif 000045
【図７】
2010526851.tif 000046
【図８】
2010526851.tif 000047
【図９】
2010526851.tif 000048
【図１０】
2010526851.tif 000049
【図１１】
2010526851.tif 000050
【図１２】
2010526851.tif 000051
【図１３】
2010526851.tif 000052
【図１４】
2010526851.tif 000053
【図１５】
2010526851.tif 000054
【図１６】
2010526851.tif 000055
【国際調査報告】
2010526851.tif 000056
2010526851.tif 000057