(57)【要約】  本発明は、分岐鎖部分を含有するポリマーリンカーを提供する。また、ポリマーリンカーの調製方法、およびポリマーリンカーを使用して複合体を調製する方法も開示する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
2010503706.tif 000040
で表される化合物
［式中：
Ｒ1は、実質的に非抗原性の水溶性ポリマーであり；
Ａは、キャッピング基または：
【化２】
2010503706.tif 000041
であり；
Ｌ1-3およびＬ'1-3は、独立して選択される二官能性リンカーであり；
Ｙ1およびＹ'1は、独立してＯ、Ｓ、またはＮＲ20であり；
Ｙ2-3およびＹ'2-3は、独立してＯ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２またはＮＲ７であり；
Ｒ2-7、Ｒ'2-6、およびＲ20は、独立して、水素、Ｃ1-6アルキル、Ｃ2-6アルケニル、Ｃ2-6アルキニル、Ｃ3-19分岐鎖アルキル、Ｃ3-8シクロアルキル、Ｃ1-6置換アルキル、Ｃ2-6置換アルケニル、Ｃ2-6置換アルキニル、Ｃ3-8置換シクロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、Ｃ1-6ヘテロアルキル、置換Ｃ1-6ヘテロアルキル、Ｃ1-6アルコキシ、アリールオキシ、Ｃ1-6ヘテロアルコキシ、ヘテロアリールオキシ、Ｃ2-6アルカノイル、アリールカルボニル、Ｃ2-6アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、Ｃ2-6アルカノイルオキシ、アリールカルボニルオキシ、Ｃ2-6置換アルカノイル、置換アリールカルボニル、Ｃ2-6置換アルカノイルオキシ、置換アリールオキシカルボニル、および置換アリールカルボニルオキシからなる群から選択され；
Ｒ9-10およびＲ'9-10は、独立して、水素、ＯＨ、脱離基、官能基、標的基、診断薬および生物活性部分からなる群から選択され；
（ａ）および（ａ'）は、独立して０もしくは正の整数であり；
（ｂ）および（ｂ'）は、独立して正の整数であり；
（ｃ）、（ｃ'）、（ｄ）、（ｄ'）、（ｅ）および（ｅ'）は、独立して０もしくは１である］。
【請求項２】
前記脱離基が、ハロゲン、活性エステル、イミダゾール、環状イミドチオン、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジル、ｐ−ニトロフェノキシ、Ｎ−ヒドロキシフタルイミジル、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾリル、トシレート、メシレート、トレシレート、ノシレート、Ｃ1−Ｃ6アルキルオキシ、Ｃ1−Ｃ6アルカノイルオキシ、アリールカルボニルオキシ、ｏ−ニトロフェノキシ、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾリル、ペンタフルオロフェノキシ、１，３，５−トリクロロフェノキシ、および１，３，５−トリフルオロフェノキシからなる群より選択されることを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
前記官能基が、マレイミジル、ビニル、スルホン、アミノ、カルボキシ、メルカプト、ヒドラジド、およびカルバゼートの残基からなる群より選択されることを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ9-10およびＲ'9-10が、独立して、ＯＨ、メトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、ｐ−ニトロフェノキシおよびＮ−ヒドロキシスクシンイミジルからなる群より選択されることを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
前記生物活性部分が、−ＮＨ2含有部分、−ＯＨ含有部分および−ＳＨ含有部分からなる群より選択されることを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
前記生物活性部分が、薬学的に活性な化合物、酵素、タンパク質、オリゴヌクレオチド、抗体、モノクローナル抗体、一本鎖抗体およびペプチドからなる群より選択されることを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
Ｌ1-3およびＬ'1-3が、独立して、
【化３−１】
2010503706.tif 000042
【化３−２】
2010503706.tif 000043
からなる群より選択されることを特徴とする、請求項１に記載の化合物
［式中：
Ｒ21-29は、水素、Ｃ1-6アルキル類、Ｃ3-12分岐鎖アルキル類、Ｃ3-8シクロアルキル類、Ｃ1-6置換アルキル類、Ｃ3-8置換シクロアルキル類、アリール類、置換アリール類、アラルキル類、Ｃ1-6ヘテロアルキル類、置換Ｃ1-6ヘテロアルキル類、Ｃ1-6アルコキシ、フェノキシおよびＣ1-6ヘテロアルコキシからなる群から独立して選択され；
（ｔ）および（ｔ'）は、独立して０もしくは正の整数であり；
（ｖ）および（ｖ'）は、独立して０もしくは１である］。
【請求項８】
Ｌ1-3およびＬ'1-3が、独立して、
【化４】
2010503706.tif 000044
−Ｖａｌ−Ｃｉｔ−、
−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−、
−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｌｅｕ−、
−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−、
【化５】
2010503706.tif 000045
からなる群より選択されることを特徴とする、請求項１に記載の化合物
［式中、
Ｙ11-19は、独立してＯ、ＳまたはＮＲ４８であり；
Ｒ31-48、Ｒ50-51およびＡ51は、独立して、水素、Ｃ1-6アルキル類、Ｃ3-12分岐鎖アルキル類、Ｃ3-8シクロアルキル類、Ｃ1-6置換アルキル類、Ｃ3-8置換シクロアルキル類、アリール類、置換アリール類、アラルキル類、Ｃ1-6ヘテロアルキル類、置換Ｃ1-6ヘテロアルキル類、Ｃ1-6アルコキシ、フェノキシおよびＣ1-6ヘテロアルコキシからなる群から選択され；
Ａｒは、アリールまたはヘテロアリール部分であり；
Ｌ11-15は、独立して選択される二官能性スペーサーであり；
ＪおよびＪ'は、独立して標的細胞に能動的に輸送される部分、疎水性部分、二官能性連結部分およびそれらの組合せからなる群より選択され；
（ｃ１１）、（ｈ１１）、（ｋ１１）、（ｚ１１）、（ｍ１１）および（ｎ１１）は、独立して選択される正の整数であり；
（ａ１１）、（ｅ１１）、（ｇ１１）、（ｊ１１）、（ｏ１１）および（ｑ１１）は、独立して０もしくは正の整数であり；
（ｂ１１）、（ｘ１１）、（ｘ'１１）、（ｆ１１）、（ｉ１１）および（ｐ１１）は、独立して０もしくは１である］。
【請求項９】
Ｌ1-3およびＬ'1-3が、独立して、
【化６−１】
2010503706.tif 000046
【化６−２】
2010503706.tif 000047
からなる群より選択されることを特徴とする、請求項１に記載の化合物
［式中、（ｒ）および（ｒ'）は、独立して０もしくは１である］。
【請求項１０】
Ｌ1-3およびＬ'1-3が、独立して、アミノ酸、アミノ酸誘導体、およびペプチドからなる群より選択されることを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項１１】
式（ＩＩ）：
【化７】
2010503706.tif 000048
で表されることを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項１２】
Ａが、Ｈ、ＮＨ2、ＯＨ、ＣＯ2Ｈ、Ｃ1-6アルコキシおよびＣ1-6アルキルからなる群より選択されることを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項１３】
Ｒ1が、直鎖、末端分岐鎖またはマルチアームポリアルキレンオキシドを含むことを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項１４】
前記ポリアルキレンオキシドが、ポリエチレングリコールおよびポリプロピレングリコールからなる群より選択されることを特徴とする、請求項１３に記載の化合物。
【請求項１５】
前記ポリアルキレンオキシドが、
−Ｙ71−（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）n−ＣＨ2ＣＨ2−Ｙ71−、
−Ｙ71−（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）n−ＣＨ2Ｃ（＝Ｙ72）−Ｙ71−、
−Ｙ71−Ｃ（＝Ｙ72）−（ＣＨ2）a71−Ｙ73−（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ)ｎ−ＣＨ2ＣＨ2−Ｙ73−（ＣＨ2）a71−Ｃ（＝Ｙ72）−Ｙ71−、および
−Ｙ71−（ＣＲ71Ｒ72）a72−Ｙ73−（ＣＨ2）b71−Ｏ−（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）n−（ＣＨ2）b71−Ｙ73−（ＣＲ71Ｒ72）a72−Ｙ71−、
からなる群より選択されることを特徴とする、請求項１３に記載の化合物
［式中：
Ｙ71およびＹ73は、独立してＯ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ2、ＮＲ73または結合であり；
Ｙ７２は、Ｏ、Ｓ、またはＮＲ７４であり；
Ｒ71、Ｒ72、Ｒ73、およびＲ74は、Ｒ2に使用し得る同じ部分から独立して選択され；
（ａ７１）、（ａ７２）、および（ｂ７１）は、独立して０もしくは正の整数であり；
（ｎ）は、約１０〜約２３００の整数である］。
【請求項１６】
前記ポリアルキレンオキシドが、式：
−Ｏ−（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）n−
で表されるポリエチレングリコールであることを特徴とする、請求項１３に記載の化合物
［式中、（ｎ）は、約１０〜約２，３００の整数である］。
【請求項１７】
Ｒ1が、約２，０００〜約１００，０００の平均分子量を有することを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項１８】
Ｒ1が、約５，０００〜約６０，０００の平均分子量を有することを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項１９】
Ｒ1が、約５，０００〜約２５，０００または約２０，０００〜約４５，０００の平均分子量を有することを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項２０】
Ｒ2-8およびＲ'2-8が、独立して、水素、メチル、エチルおよびイソプロピルからなる群より選択されることを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項２１】
【化８−１】
2010503706.tif 000049
【化８−２】
2010503706.tif 000050
【化８−３】
2010503706.tif 000051
【化８−４】
2010503706.tif 000052
【化８−５】
2010503706.tif 000053
【化８−６】
2010503706.tif 000054
【化８−７】
2010503706.tif 000055
【化８−８】
2010503706.tif 000056
【化８−９】
2010503706.tif 000057
【化８−１０】
2010503706.tif 000058
からなる群より選択されることを特徴とする、請求項１に記載の化合物
［式中：
ｍＰＥＧは、式：ＣＨ3Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）n−で表され；
ＰＥＧは、式：−Ｏ−（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）n−で表され；
（ｎ）は、約１０〜約２，３００の整数であり；
Ｒ9-10およびＲ'9-10は、独立して、標的基、診断薬および生物活性部分からなる群より選択される］。
【請求項２２】
【化９−１】
2010503706.tif 000059
【化９−２】
2010503706.tif 000060
からなる群より選択されることを特徴とする、請求項１に記載の化合物
［式中：
ＳＣＨ  ＡＦは、
【化１０】
2010503706.tif 000061
であり；
ｍＰＥＧは、式：ＣＨ3−Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）n−で表され；
ＰＥＧは、式、−Ｏ−（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）n−で表され；
（ｎ）は、約１０〜約２，３００の整数である］。
【請求項２３】
分岐鎖部分を有するポリマー複合体の調製方法であって、
（ｉ）式（ＩＩＩ）の化合物と：
【化１１】
2010503706.tif 000062
式（ＶＩ）の化合物とを：
【化１２】
2010503706.tif 000063
式（Ｖ）の化合物：
【化１３】
2010503706.tif 000064
を形成するのに十分な条件下で反応させる工程と、
（ｉｉ）式（Ｖ）の化合物を、式（Ｖ'）の化合物：
【化１４】
2010503706.tif 000065
を形成するのに十分な条件下で、脱保護する工程と、
［式中：
Ｒ1は、実質的に非抗原性の水溶性ポリマーであり；
Ａ1は、キャッピング基またはＭ１であり；
Ａ2は、キャッピング基または：
【化１５】
2010503706.tif 000066
であり；
Ａ3は、キャッピング基または：
【化１６】
2010503706.tif 000067
であり；
Ｍ1は−ＯＨ、ＳＨ、または−ＮＨＲ30であり；
Ｍ2は、ＯＨまたは脱離基であり；
Ｍ3-4およびＭ'3-4は、独立して選択される保護基であり；
Ｌ3およびＬ'3は、独立して選択される二官能性リンカーであり；
Ｙ1およびＹ'1は、独立してＯ、Ｓ、またはＮＲ20であり；
Ｙ2-3およびＹ'2-3は、独立してＯ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ2またはＮＲ7であり；
Ｒ2-7、Ｒ'2-6、Ｒ20およびＲ30は、独立して、水素、Ｃ1-6アルキル、Ｃ2-6アルケニル、Ｃ2-6アルキニル、Ｃ3-19分岐鎖アルキル、Ｃ3-8シクロアルキル、Ｃ1-6置換アルキル、Ｃ2-6置換アルケニル、Ｃ2-6置換アルキニル、Ｃ3-8置換シクロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、Ｃ1-6ヘテロアルキル、置換Ｃ1-6ヘテロアルキル、Ｃ1-6アルコキシ、アリールオキシ、Ｃ1-6ヘテロアルコキシ、ヘテロアリールオキシ、Ｃ2-6アルカノイル、アリールカルボニル、Ｃ2-6アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、Ｃ2-6アルカノイルオキシ、アリールカルボニルオキシ、Ｃ2-6置換アルカノイル、置換アリールカルボニル、Ｃ2-6置換アルカノイルオキシ、置換アリールオキシカルボニル、および置換アリールカルボニルオキシからなる群より選択され；
（ａ）および（ａ'）は、独立して０もしくは正の整数であり；
（ｂ）および（ｂ'）は、独立して正の整数であり；
（ｅ）および（ｅ'）は、独立して０もしくは１である］
を有してなる、方法。
【請求項２４】
前記脱保護された式（Ｖ'）の化合物と、式（ＶＩ）の化合物：
【化１７】
2010503706.tif 000068
とを、式（ＶＩＩ）の化合物：
【化１８】
2010503706.tif 000069
を形成するのに十分な条件下で反応させる工程をさらに含んでなる、請求項２３に記載の方法
［式中
各Ｒ''９は、独立して、標的基、診断薬または生物活性部分であり；
Ａ4は、キャッピング基または
【化１９】
2010503706.tif 000070
であり；
Ｍ5は、−ＯＨまたは脱離基であり；
各Ｌ''１は、独立して、二官能性リンカーであり；
各（ｃ）は、独立して０もしくは１であり；
他のすべての変数は、請求項２３において定義したとおりである］。
【請求項２５】
式（Ｉ）の化合物を有効量で、それらを必要とする患者に投与することを含んでなる、哺乳動物を治療する方法。
【発明の詳細な説明】
【関連出願の説明】
【０００１】
本出願は、２００６年９月１５日に出願された米国仮特許出願第６０／８４４，９４５号明細書、２００６年１１月２７日に出願された同第６０／８６1-3４９号明細書および２００７年４月１３日に出願された同第６０／９１１，７３４号明細書の優先権の利益を主張し、それらの各内容は、参照することにより本明細書に援用される。
【技術分野】
【０００２】
本発明は、薬物送達システムに関する。特に、本発明は、特定の生物活性部分の充填および送達を向上させる、複数の末端アミン基を提供する分岐鎖部分を含有するポリマー系の薬物送達システムに関する。
【背景技術】
【０００３】
長年にわたり、治療薬を身体に送達し、また、それらの薬剤のバイオアベイラビリティを改善するための多数の方法が提唱されている。それらの試みの１つは、可溶性の輸送システムの一部に、これらの薬剤を含むことである。このような輸送システムには、恒久的な（permanent）複合体系のシステムまたはプロドラッグが含まれうる。特に、ポリマー輸送システムは、薬剤の溶解度および安定性を改善することができる。例えば、タンパク質およびポリペプチドのような治療成分(therapeutic moiety)を有する水溶性ポリアルキレンオキシドの複合体が知られている。特許文献１（その内容は、参照することにより本明細書に援用される）を参照のこと。特許文献１は、ＰＥＧで改変された生理学的に活性なポリペプチドがインビボで長期間循環し、また、低減した免疫原性および抗原性を有することを開示している。
【０００４】
さらなる改善も実現されている。例えば、ベンジル基脱離システム、トリアルキルロックシステムなどを含有するポリマー系の薬物送達プラットホームシステムが、タンパク質、ペプチドおよび小分子を遊離可能に送達する手段として、エンゾン・ファーマシューティカルズ社によって、開示された。非特許文献１；非特許文献２；非特許文献３も参照されたい。上記文献の各内容は、参照することにより本明細書に援用される。
【０００５】
小分子およびオリゴヌクレオチドなどの治療薬をポリアルキレンオキシドに結合させるためには、まず、ポリマーのヒドロキシル末端基を、反応性官能基に変換しなければならない。この工程は、多くの場合、「活性化」と称され、また、生成物は「活性化されたポリアルキレンオキシド」と呼ばれる。他のポリマーも同様に活性化される。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】米国特許第４，１７９，３３７号明細書
【非特許文献１】グリーンウォルド（Ｇｒｅｅｎｗａｌｄ）らＪ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．第４２巻、１８号、３６５７−３６６７
【非特許文献２】グリーンウォルド（Ｇｒｅｅｎｗａｌｄ）らＪ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．第４７巻、３号、７２６−７３４
【非特許文献３】グリーンウォルド（Ｇｒｅｅｎｗａｌｄ）らＪ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．第４３巻、３号、４７５−４８７
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
こうした試みおよび進展にもかかわらず、治療薬がより高度に充填されたポリマーのような、ＰＥＧおよびポリマーの複合体には、技術のさらなる改善が求められている。本発明は、このような必要性などに取り組むものである。
【０００８】
上記の問題を克服し、薬物送達の技術を向上させることを目的として、新規の分岐鎖ポリマーおよびそれによって作製される複合体が提供される。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明の１つの態様では、式（Ｉ）：
【化１】
2010503706.tif 000002
【００１０】
の化合物が提供され、
［式中：
Ｒ1は、実質的に非抗原性の水溶性ポリマーであり；
Ａは、キャッピング基または：
【化２】
2010503706.tif 000003
【００１１】
であり；
Ｌ1-3およびＬ'1-3は、独立して選択される二官能性リンカーであり；
Ｙ1およびＹ'1は、独立してＯ、Ｓ、またはＮＲ20であり；
Ｒ2-7、Ｒ'2-6、およびＲ20は、独立して、水素、Ｃ1-6アルキル、Ｃ2-6アルケニル、Ｃ2-6アルキニル、Ｃ3-19分岐鎖アルキル、Ｃ3-8シクロアルキル、Ｃ1-6置換アルキル、Ｃ2-6置換アルケニル、Ｃ2-6置換アルキニル、Ｃ3-8置換シクロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、Ｃ1-6ヘテロアルキル、置換Ｃ1-6ヘテロアルキル、Ｃ1-6アルコキシ、アリールオキシ、Ｃ1-6ヘテロアルコキシ、ヘテロアリールオキシ、Ｃ2-6アルカノイル、アリールカルボニル、Ｃ2-6アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、Ｃ2-6アルカノイルオキシ、アリールカルボニルオキシ、Ｃ2-6置換アルカノイル、置換アリールカルボニル、Ｃ2-6置換アルカノイルオキシ、置換アリールオキシカルボニル、、および置換アリールカルボニルオキシの中から選択され；
Ｒ9-10およびＲ'9-10は、独立して、水素、ＯＨ、脱離基、官能基、標的基、診断薬および生物活性部分の中から選択され；
（ａ）および（ａ'）は、独立して０もしくは正の整数であり；
（ｂ）および（ｂ'）は、独立して正の整数であり；
（ｃ）、（ｃ'）、（ｄ）、（ｄ'）、（ｅ）および（ｅ'）は、独立して０もしくは１である］。
【００１２】
本発明のある好適な態様では、ポリマー薬物送達システムは、リジンを含む。
【００１３】
いくつかの好適な態様では、本発明の分岐鎖部分に結合する官能基の少なくとも１つは、標的部分に連結される。
【００１４】
いくつかの好適な態様では、本発明の分岐鎖部分に結合する官能基の少なくとも１つは、生物活性部分に連結される。
【００１５】
いくつかの特に好適な態様では、Ｒ1は、約５，０００〜約６０，０００の分子量を有する直鎖または分岐鎖ポリ（エチレングリコール）残基を含み、Ｙ1およびＹ'1はＯであり、Ｙ2-3およびＹ'2-3はＮＨであり、（ａ）および（ａ'）は０もしくは１であり、（ｂ）および（ｂ'）は、約２〜約４であり、（ｃ）、（ｃ'）、（ｄ）、および（ｄ'）は０であり、（ｅ）および（ｅ'）は１である。１つの特定の態様では、Ｒ2-7、Ｒ'2-6およびＲ20は、水素、メチルおよびエチルの中から選択され、それぞれ、水素であることがさらに好ましい。
【００１６】
本発明の別の態様では、本明細書に記載の化合物を調製する方法、および本明細書に記載の化合物を使用する治療方法が提供される。
【００１７】
本明細書に記載のポリマー輸送システムを含有する分岐鎖部分の１つの利点は、技術者が薬剤の充填を増加できることである。本明細書に記載のポリマーシステムのさらなる利点は、第２の薬剤を結合可能なことである。分岐鎖部分を複数置換することにより、当業者は、治療の相乗効果を有するための第２の薬物、または選択的に標的化された送達のための標的基を結合させることができる。本明細書に記載のポリマー送達システムは、薬剤を治療部位に標的化することを可能にする。
【００１８】
本明細書に記載の分岐鎖部分をベースにしたポリマー輸送システムの別の利点は、ポリマー送達システムの安定性が改善されることである。いずれの理論にもとらわれるものではないが、ポリマーと、官能基、生物活性部分および標的基のような部分との間の共有結合を取り囲む疎水性の微小環境は、共有結合を改変可能な塩基性の水性媒体または酵素に共有結合が曝露されることを阻害し、それによって、共有結合を安定化する。ポリマーシステムの安定性はまた、標的基または生物活性部分への結合前の長期間の貯蔵を可能にする。
【００１９】
本発明の目的では、用語「生物活性部分」および「生物活性部分の残基」は、生物活性化合物が、輸送担体部分が結合される置換反応を経た後にも保持される、生物活性化合物の部分を意味するものと理解されるべきである。
【００２０】
他に定義しない限り、本発明の目的では：
用語「アルキル」は、直鎖、分岐鎖、置換、例えばハロ−、アルコキシ−、およびニトロ−Ｃ1-12アルキル類、Ｃ3-8シクロアルキル類または置換シクロアルキル類などを含むものと解されるべきであり；
用語「置換された」は、官能基または化合物に付加するか、またはそれらに含有される１つ以上の原子を１つ以上の異なる原子で置換することを含むものと理解されるべきであり；
用語「置換アルキル類」は、カルボキシアルキル類、アミノアルキル類、ジアルキルアミノ類、ヒドロキシアルキル類およびメルカプトアルキル類を含み；
用語「置換シクロアルキル類」は、４−クロロシクロヘキシルのような部分を含み；アリール類は、ナフチルのような部分を含み；置換アリール類は、３−ブロモフェニルのような部分を含み；アラルキル類は、トリルのような部分を含み；ヘテロアルキル類は、エチルチオフェンのような部分を含み；
用語「置換へテロアルキル類」は、３−メトキシ−チオフェンのような部分を含み；アルコキシは、メトキシのような部分を含み；フェノキシは、３−ニトロフェノキシのような部分を含み；
用語「ハロ」は、フルオロ、クロロ、ヨードおよびブロモを含むものと解されるべきであり；
本発明の目的では、用語「十分量」および「有効量」は、効果が当業者によって理解されるような、治療効果を達成する量を意味するべきである。
【図面の簡単な説明】
【００２１】
【図１】実施例１〜２に記載の合成の方法を図式的に示す。
【図２】実施例３〜８に記載の合成の方法を図式的に示す。
【図３】実施例９〜１４に記載の合成の方法を図式的に示す。
【図４】実施例１５〜１７に記載の合成の方法を図式的に示す。
【図５】実施例１８〜２１に記載の合成の方法を図式的に示す。
【発明を実施するための形態】
【００２２】
Ａ．概観
本発明の１つの態様では、式（Ｉ）の化合物：
【化３】
2010503706.tif 000004
【００２３】
が提供される
［式中：
Ｒ1は、実質的に非抗原性の水溶性ポリマーであり；
Ａは、キャッピング基または
【化４】
2010503706.tif 000005
【００２４】
であり；
Ｌ1-3およびＬ'1-3は、独立して選択される二官能性リンカーであり；
Ｙ1およびＹ'1は、独立してＯ、Ｓ、またはＮＲ20であり；
Ｙ2-3およびＹ'2-3は、独立してＯ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ2またはＮＲ7であり；
Ｒ2-7、Ｒ'2-6、およびＲ20は、独立して、水素、Ｃ1-6アルキル、Ｃ2-6アルケニル、Ｃ2-6アルキニル、Ｃ3-19分岐鎖アルキル、Ｃ3-8シクロアルキル、Ｃ1-6置換アルキル、Ｃ2-6置換アルケニル、Ｃ2-6置換アルキニル、Ｃ3-8置換シクロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、Ｃ1-6ヘテロアルキル、置換Ｃ1-6ヘテロアルキル、Ｃ1-6アルコキシ、アリールオキシ、Ｃ1-6ヘテロアルコキシ、ヘテロアリールオキシ、Ｃ2-6アルカノイル、アリールカルボニル、Ｃ2-6アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、Ｃ2-6アルカノイルオキシ、アリールカルボニルオキシ、Ｃ2-6置換アルカノイル、置換アリールカルボニル、Ｃ2-6置換アルカノイルオキシ、置換アリールオキシカルボニル、および置換アリールカルボニルオキシの中から選択され；
Ｒ9-10およびＲ'9-10は、独立して、水素、ＯＨ、脱離基、官能基、標的基、診断薬および生物活性部分の中から選択され；
（ａ）および（ａ'）は、０もしくは正の整数、好ましくは、０もしくは１〜３の整数、およびより好ましくは、０であり；
（ｂ）および（ｂ'）は、独立して、正の整数、好ましくは、約１〜約１０、より好ましくは、約２〜約６、および最も好ましくは、４であり；
（ｃ）、（ｃ'）、（ｄ）、（ｄ'）、（ｅ）および（ｅ'）は、独立して０もしくは１である］。
【００２５】
本発明のその態様内では、置換が考えられる置換基（ここでは、Ｒ2-7、Ｒ'2-6、およびＲ20に対応する部分が置換可能であることを示す）として、例えば、アシル、アミノ、アミド、アミジン、アラアルキル、アリール、アジド、アルキルメルカプト、アリールメルカプト、カルボニル、カルボキシレート、シアノ、エステル、エーテル、ホルミル、ハロゲン、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、ヒドロキシ、イミノ、ニトロ、チオカルボニル、チオエステル、チオアセテート、チオホルメート、アルコキシ、ホスホリル、ホスホネート、ホスフィネート、シリル、スルフヒドリル、スルフェート、スルホネート、スルファモイル、スルホンアミド、およびスルホニルを挙げることができる。
【００２６】
本発明の別の態様では、生物学的部分として、−ＮＨ2含有部分、−ＯＨ含有部分および−ＳＨ含有部分が挙げられる。
【００２７】
なお別の態様として、Ａは、Ｈ、ＮＨ2、ＯＨ、ＣＯ2Ｈ、Ｃ1-6アルコキシおよびＣ1-6アルキル類の中から選択することができる。他のいくつかの好適な実施形態では、Ａは、メチル、エチル、メトキシ、エトキシ、Ｈ、およびＯＨであり得る。Ａは、より好ましくは、メチルまたはメトキシである。
【００２８】
１つの好適な実施形態では、本明細書に記載の化合物は、式（ＩＩ）：
【化５】
2010503706.tif 000006
【００２９】
で表される。
【００３０】
より好適な実施形態では、本明細書に記載の化合物は、例えば、
【化６】
2010503706.tif 000007
【００３１】
であり得る。
【００３２】
より好適な実施形態では、本明細書に記載の化合物は、例えば、
【化７】
2010503706.tif 000008
【００３３】
［式中、Ａは、キャッピング基または
【化８】
2010503706.tif 000009
【００３４】
であり；
他のすべての変数は、先に定義したとおりである］
であり得る。
【００３５】
いくつかの好適な実施形態では、Ｒ2-7、Ｒ'2-6、およびＲ20は、独立して、水素またはＣＨ3である。いくつかの特に好適な実施形態では、Ｒ2-8、Ｒ'2-8、およびＲ20は、すべて水素またはＣＨ3である。他の特定の実施形態では、Ｒ3-6およびＲ'3-6として、水素およびＣＨ3が挙げられる。なお他の特定の実施形態では、Ｙ1として、ＯおよびＮＲ20が挙げられ、Ｒ2-8、Ｒ'2-8、およびＲ4として、水素、Ｃ1-6アルキル類、シクロアルキル類、アリール類、およびアラルキル基類が挙げられる。
【００３６】
Ｂ．実質的に非抗原性の水溶性ポリマー
本明細書に記載の化合物において用いられるポリマーは、好ましくは、水溶性ポリマーであり、ポリアルキレンオキシド（ＰＡＯ）のように実質的に非抗原性である。
【００３７】
本発明の１つの態様では、本明細書に記載の化合物は、直鎖、末端分岐鎖またはマルチアームポリアルキレンオキシドを含む。本発明のいくつかの好適な実施形態では、ポリアルキレンオキシドは、ポリエチレングリコールおよびポリプロピレングリコールを含む。
【００３８】
ポリアルキレンオキシドは、約２，０００〜約１００，０００、好ましくは、約５，０００〜約６０，０００の平均分子量を有する。ポリアルキレンオキシドの平均分子量は、より好ましくは、約５，０００〜約２５，０００、あるいは、約２０，０００〜約４５，０００であり得る。いくつかの特に好適な実施形態では、本明細書に記載の化合物として、約１２，０００〜約２０，０００または約３０，０００〜約４５，０００の平均分子量を有するポリアルキレンオキシドが挙げられる。１つの特定の実施形態では、ポリマー部分は、約１２，０００または４０，０００の分子量を有する。
【００３９】
ポリアルキレンオキシドは、ポリエチレングリコールおよびポリプロピレングリコールを含む。より好ましくは、ポリアルキレンオキシドは、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）を含む。ＰＥＧは、一般的に、構造：
−Ｏ−（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）n−
［式中、（ｎ）は、ポリマーの重合度を表し、ポリマーの分子量に依存する］によって表される。あるいは、本発明のポリエチレングリコール（ＰＥＧ）残基部分は、構造：
−Ｙ71−（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）n−ＣＨ2ＣＨ2−Ｙ71−、
−Ｙ71−（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）n−ＣＨ2Ｃ（＝Ｙ72）−Ｙ71−、
−Ｙ71−Ｃ（＝Ｙ72）−（ＣＨ2）a71−Ｙ73−（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ)ｎ−ＣＨ2ＣＨ2−Ｙ73−（ＣＨ2）a71−Ｃ（＝Ｙ72）−Ｙ71−、および
−Ｙ71−（ＣＲ71Ｒ72）a72−Ｙ73−（ＣＨ2）b71−Ｏ−（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）n−（ＣＨ2）b71−Ｙ73−（ＣＲ71Ｒ72）a72−Ｙ71−、
の中から選択することができ：
［式中：
Ｙ71およびＹ73は、独立してＯ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ2、ＮＲ73または結合であり；
Ｙ72は、Ｏ、Ｓ、またはＮＲ74であり；
Ｒ71-74は、独立して、Ｒ2に用いられるのと同一の部分であり；
（ａ７１）、（ａ７２）、および（ｂ７１）は、独立して０もしくは正の整数、好ましくは、０〜６、およびより好ましくは、１であり；
（ｎ）は、約１０〜約２３００の整数である］。
【００４０】
分岐鎖またはＵ−ＰＥＧ誘導体については、米国特許第５，６４３，５７５号明細書、同第５，９１９，４５５号明細書、同第６，１１３，９０６号明細書および同第６，５６６，５０６号明細書に説明されており、それらのそれぞれの開示内容は、参照することにより本明細書に援用される。これらの化合物の非限定的なリストは、以下の構造：
【化９−１】
2010503706.tif 000010
【化９−２】
2010503706.tif 000011
【００４１】
［式中：
Ｙ61−６2は、独立してＯ、ＳまたはＮＲ61であり；
Ｙ63は、Ｏ、ＮＲ62、Ｓ、ＳＯまたはＳＯ2であり
（ｗ６２）、（ｗ６３）および（ｗ６４）は、独立して０もしくは正の整数であり；
（ｗ６１）は、０もしくは１であり；
ｍＰＥＧは、メトキシＰＥＧであって、
ここで、ＰＥＧは先に定義したとおりであり、ポリマー部分の総分子量は、約２，０００〜約１００，０００であり；
Ｒ61およびＲ62は、独立して、水素、Ｃ1-6アルキル、Ｃ2-6アルケニル、Ｃ2-6アルキニル、Ｃ3-19分岐鎖アルキル、Ｃ3-8シクロアルキル、Ｃ1-6置換アルキル、Ｃ2-6置換アルケニル、Ｃ2-6置換アルキニル、Ｃ3-8置換シクロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、Ｃ1-6ヘテロアルキル、置換Ｃ1-6ヘテロアルキル、Ｃ1-6アルコキシ、アリールオキシ、Ｃ1-6ヘテロアルコキシ、ヘテロアリールオキシ、Ｃ2-6アルカノイル、アリールカルボニル、Ｃ2-6アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、Ｃ2-6アルカノイルオキシ、アリールカルボニルオキシ、Ｃ2-6置換アルカノイル、置換アリールカルボニル、Ｃ2-6置換アルカノイルオキシ、置換アリールオキシカルボニル、および置換アリールカルボニルオキシの中から選択される。
【００４２】
さらに別の態様では、ポリマーは、参照することによりその開示内容が本明細書に援用される、日油株式会社(NOF Corp.)の薬物送達システムカタログ第８版（２００６年４月）に記載される、マルチアームＰＥＧ−ＯＨ、または「スター型ＰＥＧ」製品を含む。ポリマーは、米国特許第５，１２２，６１４号明細書または同第５，８０８，０９６号明細書に記載の活性化技術を使用して、適切に活性化された形態に変換することができる。具体的には、そのようなＰＥＧは、式の化合物：
【化１０】
2010503706.tif 000012
【００４３】
［式中：
（ｕ'）は、約４〜約４５５の整数であり；残基の３個までの末端部分がメチルまたは他の低級アルキルでキャップ化される］であり得る。
【００４４】
いくつかの好適な実施形態では、４つすべてのＰＥＧアームを、芳香族基への結合を可能にするための適切な活性化基に変換することができる。変換前のそのような化合物としては：
【化１１−１】
2010503706.tif 000013
【化１１−２】
2010503706.tif 000014
【００４５】
が挙げられる。
【００４６】
本明細書に含まれるポリマー物質は、好ましくは、室温で水溶性である。そのようなポリマーの非限定的なリストには、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）またはポリプロピレングリコール類、ポリオキシエチレン化ポリオール類のようなポリアルキレンオキシドホモポリマー、それらのコポリマーおよびそれらのブロックコポリマーが含まれるが、但し、ブロックコポリマーの水溶性が維持されることを条件とする。
【００４７】
さらなる実施形態およびＰＡＯ系のポリマーの代替物としては、デキストラン、ポリビニルアルコール類、炭水化物系ポリマー、ヒドロキシプロピルメタクリルアミド（ＨＰＭＡ）、ポリアルキレンオキシド類、および／または、それらのコポリマーなど、１つ以上の効果的な非抗原性の材料を使用することができる。また、本発明と同一の譲受人に譲渡された米国特許第６，１５３，６５５号明細書（その内容は、参照することにより本明細書に援用される）を参照のこと。当業者であれば、同じタイプの活性化が、ＰＥＧなどのＰＡＯについても本明細書に記載のように用いられることを理解するであろう。当業者であれば、上記のリストが単なる例示であること、および本明細書に記載の性質を有するすべてのポリマー材料が考慮されることをさらに理解するであろう。本発明の目的では、「実質的にまたは効果的に非抗原性の」は、非毒性であり、かつ哺乳動物における免疫原性応答の誘発が認められないことが当該分野において理解されているすべての材料を意味する。
【００４８】
いくつかの態様では、末端アミン基を有するポリマーを用いて、本明細書に記載の化合物を作製することができる。末端アミン類を含有するポリマーを高い純度で調製する方法については、米国特許出願第１１／５０８，５０７号明細書および同第１１／５３７，１７２号明細書（それらのそれぞれの内容は、本明細書において援用される）に記載されている。例えば、アジド類を有するポリマーは、トリフェニルホスフィンのようなホスフィン系の還元剤またはＮａＢＨ4のようなアルカリ金属ボロハイドライド還元剤と反応する。あるいは、脱離基を含むポリマーは、メチル−ｔｅｒｔ−ブチルイミドジカーボネートのカリウム塩（ＫＮＭｅＢｏｃ）またはジ−ｔｅｒｔ−ブチルイミドジカーボネートのカリウム塩（ＫＮＢｏｃ2）のような保護されたアミン塩と反応し、続いて、保護されたアミン基を脱保護する。これらのプロセスによって形成される末端アミン類を含有するポリマーの純度は、約９５％より大きく、および好ましくは、９９％より大きい。
【００４９】
別の態様では、末端カルボン酸基を有するポリマーは、本明細書に記載のポリマー送達システムにおいて用いることができる。末端カルボン酸類を有するポリマーを高純度で調製する方法については、米国特許出願第１１／３２８，６６２号明細書（その内容は、参照することにより本明細書に援用される）に記載されている。該方法は、第１に、ポリアルキレンオキシドの第三級アルキルエステルを調製すること、続いて、そのカルボン酸誘導体への変換を含む。プロセスのＰＡＯカルボン酸類の調製の第１の工程は、ポリアルキレンオキシドカルボン酸のｔ−ブチルエステルのような中間体を形成することを含む。この中間体は、カリウムｔ−ブトキシドのような塩基の存在下で、ＰＡＯをハロ酢酸ｔ−ブチルと反応させることによって形成される。一旦、ｔ−ブチルエステル中間体が形成されると、ポリアルキレンオキシドのカルボン酸誘導体は、９２％を超える、好ましくは、９７％を超える、より好ましくは、９９％を超える、および最も好ましくは、９９．５％純度を超える純度で容易に提供することができる。
【００５０】
Ｃ．二官能性リンカー
二官能性リンカーとして、アミノ酸またはアミノ酸誘導体が挙げられる。アミノ酸は、天然に存在するおよび天然に存在しないアミノ酸のものであり得る。天然に存在するアミノ酸の誘導体および類似体、ならびに当該分野において公知のさまざまな天然に存在しないアミノ酸（ＤもしくはＬ）、疎水性または非疎水性のものもまた、本発明の範囲内にあると考えられる。天然に存在しないアミノ酸の適切な非限定的なリストには、２−アミノアジピン酸、３−アミノアジピン酸、β−アラニン、β−アミノ−プロピオン酸、２−アミノ酪酸、４−アミノ酪酸、ピペリジン酸、６−アミノカプロン酸、２−アミノヘプタン酸、２−アミノイソ酪酸、３−アミノイソ酪酸、２−アミノピメリン酸、２，４−アミノ酪酸、デスモシン、２，２−ジアミノピメリン酸、２，３−ジアミノプロピオン酸、Ｎ−エチルグリシン、Ｎ−エチルアスパラギン、３−ヒドロキシプロリン、４−ヒドロキシプロリン、イソデスモシン、アロイソロイシン、Ｎ−メチルグリシン、サルコシン、Ｎ−メチル−イソロイシン、６−Ｎ−メチル−リジン、Ｎ−メチルバリン、ノルバリン、ノルロイシン、およびオルニチンが挙げられる。いくつかの好適なアミノ酸残基は、グリシン、アラニン、メチオニンまたはサルコシンから選択され、より好ましくはグリシンである。
【００５１】
あるいは、Ｌ1-3およびＬ'1-3は、
【化１２−１】
2010503706.tif 000015
【化１２−２】
2010503706.tif 000016
【００５２】
の中から独立して選択することができる
［式中：
Ｒ21-29は、水素、Ｃ1-6アルキル類、Ｃ3-12分岐鎖アルキル類、Ｃ3-8シクロアルキル類、Ｃ1-6置換アルキル類、Ｃ3-8置換シクロアルキル類、アリール類、置換アリール類、アラルキル類、Ｃ1-6ヘテロアルキル類、置換Ｃ1-6ヘテロアルキル類、Ｃ1-6アルコキシ、フェノキシおよびＣ1-6ヘテロアルコキシの中から選択され；
（ｔ）および（ｔ'）は、独立して０もしくは正の整数、好ましくは、０もしくは約１〜約１２の整数、より好ましくは、約１〜約８の整数、および最も好ましくは、１もしくは２であり；
（ｖ）および（ｖ'）は、独立して０もしくは１である］。
【００５３】
いくつかの好適な実施形態では、Ｌ1-3およびＬ'1-3は：
【化１３】
2010503706.tif 000017
【００５４】
−Ｖａｌ−Ｃｉｔ−、
−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−、
−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｌｅｕ−、
−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−、
【化１４】
2010503706.tif 000018
【００５５】
の中から独立して選択することができる
［式中、
Ｙ11-19は、独立してＯ、ＳまたはＮＲ４８であり；
Ｒ31-48、Ｒ50-51およびＡ51は、水素、Ｃ1-6アルキル類、Ｃ3-12分岐鎖アルキル類、Ｃ3-8シクロアルキル類、Ｃ1-6置換アルキル類、Ｃ3-8置換シクロアルキル類、アリール類、置換アリール類、アラルキル類、Ｃ1-6ヘテロアルキル類、置換Ｃ1-6ヘテロアルキル類、Ｃ1-6アルコキシ、フェノキシおよびＣ1-6ヘテロアルコキシの中から選択され；
Ａｒは、アリールまたはヘテロアリール部分であり；
Ｌ11-15は、独立して選択される二官能性スペーサーであり；
ＪおよびＪ'は、独立して標的細胞に能動的に輸送される部分、疎水性部分、二官能性連結部分およびそれらの組合せの中から選択され；
（ｃ１１）、（ｈ１１）、（ｋ１１）、（ｚ１１）、（ｍ１１）および（ｎ１１）は、独立して選択される正の整数、好ましくは、１であり；
（ａ１１）、（ｅ１１）、（ｇ１１）、（ｊ１１）、（ｏ１１）および（ｑ１１）は、独立して０もしくは正の整数、好ましくは、１であり；
（ｂ１１）、（ｘ１１）、（ｘ'１１）、（ｆ１１）、（ｉ１１）および（ｐ１１）は、独立して０もしくは１である］。
【００５６】
いくつかのより好適な実施形態では、Ｌ1-3およびＬ'1-3は：
【化１５−１】
2010503706.tif 000019
【化１５−２】
2010503706.tif 000020
【００５７】
の中から独立して選択される
［式中、（ｒ）および（ｒ'）は、独立して０もしくは１である］。
【００５８】
さらなる実施形態および代替物として、Ｌ1-3およびＬ'1-3は、上記で示したものに対応するが、しかし、マレイミジルの代わりに、ビニル、スルホン、アミノ、カルボキシ、メルカプト、ヒドラジド、カルバゼートなどの残基を有する構造を含む。
【００５９】
Ｄ．Ｒ9-10およびＲ'9-10基
１．脱離基および官能基
いくつかの態様では、適切な脱離基として、当業者に明らかであるようなハロゲン（Ｂｒ、Ｃｌ）、活性化されたカーボネート、カルボニルイミダゾール、環状イミドチオン、イソシアネート、Ｎ−ヒドロキシスクイシンイミジル、ｐ−ニトロフェノキシ、Ｎ−ヒドロキシフタルイミド、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾリル、イミダゾール、トシレート、メシレート、トレシレート(tresylate)、ノシレート(nosylate)、Ｃ1−Ｃ6アルキルオキシ、Ｃ1−Ｃ6アルカノイルオキシ、アリールカルボニルオキシ、ｏ−ニトロフェノキシ、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾリル、イミダゾール、ペンタフルオロフェノキシ、１，３，５−トリクロロフェノキシ、および１，３，５−トリフルオロフェノキシまたは他の適切な脱離基が挙げられるが、これらに限定されない。
【００６０】
本発明の目的では、脱離基は、所望の標的、即ち、生物活性部分、診断薬、標的部分、二官能性スペーサー、中間体などに見出される求核部分と反応することが可能な基として理解されるべきである。それ故、標的は、タンパク質、ペプチド、酵素、ドキソルビシンのような天然または化学的に合成された治療用分子、およびモノ−保護ジアミン類のようなスペーサー上に見出されるＯＨ、ＮＨ2またはＳＨ基のような置換基を含有する。
【００６１】
いくつかの好適な実施形態では、ポリマー輸送システムを生物活性部分に連結するための官能基として、生物学的に活性な基にさらに結合可能なマレイミジル、ビニル、スルホン、アミノ、カルボキシ、メルカプト、ヒドラジド、カルバゼートなどの残基が挙げられる。
【００６２】
本発明のさらにいくつかの好適な実施形態では、Ｒ9-10およびＲ'9-10は、Ｈ、ＯＨ、メトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジルおよびマレイミジルの中から選択することができる。
【００６３】
２．生物活性部分
本発明のいくつかの態様では、生物活性部分として、アミン−、ヒドロキシル−、またはチオール−含有化合物が挙げられる。そのような適切な化合物の非限定的なリストには、有機化合物、酵素、タンパク質、ポリペプチド、抗体、モノクローナル抗体、一本鎖抗体またはオリゴヌクレオチドなどが含まれる。有機化合物として、カンプトテシンならびにＳＮ３８およびイリノテカンのような類似体、ならびに関連するトポイソメラーゼＩ阻害剤、タキサン系薬剤およびパクリタキセル誘導体、ＡＺＴを含むヌクレオシド類、ダウノルビシン、ドキソルビシンを含むアントラサイクリン化合物；ｐ−アミノアニリンマスタード、メルファラン、Ａｒａ−Ｃ（シトシンアラビノシド）および関連する抗代謝化合物、例えば、ゲムシタビンなどのような部分が挙げられるが、これらに限定されない。あるいは、生物活性部分として、循環器系薬剤、抗新生物薬、抗感染薬、ナイスタチンおよびアムホテリシンＢのような抗真菌薬、抗不安剤、胃腸薬、中枢神経系作用剤、鎮痛薬、妊娠促進剤、避妊剤、抗炎症剤、ステロイド剤、抗尿酸薬(anti-uricemic)、血管拡張剤、および血管収縮剤などを挙げることができる。特に言及しないが適切なアミン−、ヒドロキシル−またはチオール−含有基を有する他の生物学的に活性な材料もまた意図され、本発明の範囲内にあることが理解されるべきである。
【００６４】
本発明の別の態様では、生物活性化合物は、例えば、ヒトを含む哺乳動物など、治療が所望される病状にある、動物の治療における医学または診断用途に適している。
【００６５】
本発明に含まれるのに適切な生物活性部分の種類について唯一の限定条件は、担体部分に反応し、連結することができる利用可能な少なくとも１つのアミン−、ヒドロキシル−、またはチオール−含有部分が存在すること、および本明細書に記載のポリマー送達システムに連結された形態で実質的な生物活性の消失が認められないことである。あるいは、本発明のポリマー輸送複合体化合物への組み込みに適切な親化合物は、連結した化合物からの加水分解による遊離後に活性であってもよく、または加水分解による遊離後は活性ではないが、さらなる化学的プロセス／反応を経た後に活性になってもよい。例えば、ポリマー輸送システムによって血中に送達される抗癌薬は、癌または腫瘍細胞に進入するまで不活性を保持してもよく、この時、それは癌または腫瘍細胞化学、例えば、細胞特異性の酵素反応によって活性化される。
【００６６】
本発明のさらなる態様は、随意的に、本明細書に記載のポリマー送達システムに連結した診断用タグによって調製される複合体化合物を提供し、ここで、タグは、診断または画像化目的で選択される。それ故、適切なタグは、任意の適切な部分、例えば、アミノ酸残基を、任意の当該分野において標準的な放出性同位元素、放射線負透過性標識、磁気共鳴標識、または磁気共鳴画像に適切な他の非放射性同位元素標識、蛍光タイプ標識、可視光を示すおよび／または紫外線、赤外線もしくは電気化学的刺激下で蛍光を発することが可能な標識に連結することによって調製され、外科手術中などにおいて腫瘍組織を画像化することを可能にする。随意的に、診断タグは、連結された治療用部分に、組み入れられ、および／または連結され、動物またはヒト患者内の治療用の生物学的に活性な材料の分布のモニタリングを可能にする。
【００６７】
本発明のなおさらなる態様では、本タグ化複合体は、例えば、放射性同位元素標識を含む任意の適切な標識を伴う当該分野において公知の方法によって、容易に調製される。簡単な例として、これらは131ヨウ素、125ヨウ素、99mテクネチウムおよび／または111インジウムを含んで、インビボで腫瘍細胞への選択的取り込みのための放射性免疫シンチグラフィ用剤を生成する。例えば、単なる例示に過ぎないが、参照することにより本明細書に援用される米国特許第５，３２８，６７９号明細書；同第５，８８８，４７４号明細書；同第５，９９７，８４４号明細書；および同第５，９９７，８４５号明細書に示されるものを含む、ペプチドをＴｃ−９９ｍに連結するための既知の方法が、当該分野において多数存在する。
【００６８】
３．標的基
いくつかの態様では、本明細書に記載の化合物は、標的基を含む。標的基として、受容体リガンド、抗体または抗体フラグメント、一本鎖抗体、標的ペプチド、標的炭水化物分子またはレクチンが挙げられる。標的基は、本明細書に記載の化合物の標的組織および細胞集団への結合または取り込みを増強する。例えば、標的基の非限定的リストには、血管内皮細胞増殖因子、ＦＧＦ２、ソマトスタチンおよびソマトスタチン類似体、トランスフェリン、メラノトロピン、ＡｐｏＥおよびＡｐｏＥペプチド、フォン・ウィルブランド因子およびフォン・ウィルブランド因子ペプチド、アデノウイルスファイバータンパク質およびアデノウイルスファイバータンパク質ペプチド、ＰＤ１およびＰＤ１ペプチド、ＥＧＦおよびＥＧＦペプチド、ＲＧＤペプチド、葉酸塩などが含まれる。本発明の別の態様では、標的基として、モノクローナル抗体、一本鎖抗体、ビオチン、細胞接着性ペプチド、細胞膜透過性ペプチド（ＣＰＰ）、蛍光化合物、放射性標識化合物、およびアプタマーが挙げられる。本発明のさらなる態様では、標的剤として、セレクチン、ＴＡＴ、ペネトラチン、ポリＡｒｇ、および葉酸を挙げることができる。
【００６９】
Ｅ．ポリマー送達システムの合成
一般的に、本明細書に記載の化合物を調製する方法には、ポリマーと分岐鎖部分とを反応させて、分岐鎖単位を有するポリマーを形成させる工程が含まれる。本発明の１つの態様では、本明細書に記載の化合物を調製する方法は、
式（ＩＩＩ）：
【化１６】
2010503706.tif 000021
【００７０】
のポリマー化合物と、保護化された形態の分岐鎖部分を含有する式（ＩＶ）の化合物：
【化１７】
2010503706.tif 000022
【００７１】
とを、式（Ｖ）の化合物：
【化１８】
2010503706.tif 000023
【００７２】
を形成するのに十分な条件下で反応させる工程を含む
［式中、
Ｒ1は、実質的に非抗原性の水溶性ポリマーであり；
Ａ1は、キャッピング基またはＭ1であり；
Ａ2は、キャッピング基または：
【化１９】
2010503706.tif 000024
【００７３】
であり；
Ｍ1は−ＯＨ、ＳＨ、または−ＮＨＲ30であり；
Ｍ2は、ＯＨ、またはハロゲン類、活性化されたカーボネート類、活性エステル、イソチオネート、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジル、トシレート、メシレート、トレシレート、ノシレート、ｏ−ニトロフェノキシおよびイミダゾールの中から選択される脱離基であり；
Ｍ3-4およびＭ'3-4は、独立して、ｔ−Ｂｏｃ（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル）、Ｃｂｚ（カルボニルオキシ）およびＴＲＯＣ（トリクロロ−エトキシカルボニル）の中から選択される保護基であり；
Ｌ3およびＬ'3は、独立して選択される二官能性リンカーであり；
Ｙ1およびＹ'1は、独立してＯ、Ｓ、またはＮＲ20であり；
Ｙ2-3およびＹ'2-3は、独立してＯ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２またはＮＲ7であり；
Ｒ2-7、Ｒ'2-6、Ｒ20およびＲ30は、独立して、水素、Ｃ1-6アルキル、Ｃ2-6アルケニル、Ｃ2-6アルキニル、Ｃ3-19分岐鎖アルキル、Ｃ3-8シクロアルキル、Ｃ1-6置換アルキル、Ｃ2-6置換アルケニル、Ｃ2-6置換アルキニル、Ｃ3-8置換シクロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、Ｃ1-6ヘテロアルキル、置換Ｃ1-6ヘテロアルキル、Ｃ1-6アルコキシ、アリールオキシ、Ｃ1-6ヘテロアルコキシ、ヘテロアリールオキシ、Ｃ2-6アルカノイル、アリールカルボニル、Ｃ2-6アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、Ｃ2-6アルカノイルオキシ、アリールカルボニルオキシ、Ｃ2-6置換アルカノイル、置換アリールカルボニル、Ｃ2-6置換アルカノイルオキシ、置換アリールオキシカルボニル、および置換アリールカルボニルオキシの中から選択され；
（ａ）および（ａ'）は、０もしくは正の整数、好ましくは、０もしくは１〜３の整数、およびより好ましくは、０であり；
（ｂ）および（ｂ'）は、独立して、正の整数、好ましくは、１〜１０、より好ましくは、２〜６、および最も好ましくは、４であり；
（ｅ）および（ｅ'）は、独立して０もしくは１である］。
【００７４】
得られた式（Ｖ）の化合物を、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）もしくは他のハロ酢酸、ＨＣｌ、硫酸などの強酸による処置、または接触水素化を使用することによって脱保護し、式（Ｖ'）の化合物：
【化２０】
2010503706.tif 000025
【００７５】
を形成させることができる
［式中：
Ａ3は、キャッピング基または：
【化２１】
2010503706.tif 000026
【００７６】
である］。
【００７７】
あるいは、本方法は、得られた脱保護された末端アミノ基と、式（ＶＩ）の化合物：
【化２２】
2010503706.tif 000027
【００７８】
とを、式（ＶＩＩ）の化合物：
【化２３】
2010503706.tif 000028
【００７９】
を形成させるのに十分な条件下で、さらに、反応させる工程を含みうることもまた、意図されている
［式中
Ａ4は、キャッピング基または：
【化２４】
2010503706.tif 000029
【００８０】
であり；
各Ｒ''9は、独立して、標的基、診断薬または生物活性部分であり；
Ｍ5は、−ＯＨまたは脱離基であり；
各Ｌ''1は、独立して、二官能性リンカーであり；
各（ｃ）は、独立して０もしくは１である］。
【００８１】
分岐鎖部分のポリマー部分への結合、または分岐鎖部分を含有するポリマーシステムと式（ＶＩ）の化合物との結合は、好ましくは、カップリング剤の存在下で行われる。適切なカップリング剤の非限定的なリストには、例えばシグマ−アルドリッチ社（Sigma-Aldrich Co.)のような商業的供給源から入手可能であるか、または既知の技術を使用して合成される１，３−ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＰＣ）、任意の適切なジアルキルカルボジイミド類、２−ハロ−１−アルキル−ピリジニウムハロゲン化物（向山試薬）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド（ＥＤＣ）、プロパンホスホン酸環状無水物（ＰＰＡＣＡ）、およびフェニルジクロロホスホネート類などが含まれる。
【００８２】
好ましくは、反応は、塩化メチレン、クロロホルム、ＤＭＦまたはそれらの混合物のような不溶性溶媒で行われる。好ましくは、反応は、生成する酸を中和するために、ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）、ジイソプロピルエチルアミン、ピリジン、トリエチルアミンなどのような塩基の存在下で、行うことができる。反応は、約０℃〜約２２℃（室温）までの温度で行うことができる。
【００８３】
本明細書に記載の方法によって調製されるいくつかの特定の実施形態は、以下を含む：
【化２５−１】
2010503706.tif 000030
【化２５−２】
2010503706.tif 000031
【化２５−３】
2010503706.tif 000032
【化２５−４】
2010503706.tif 000033
【化２５−５】
2010503706.tif 000034
【化２５−６】
2010503706.tif 000035
【化２５−７】
2010503706.tif 000036
【化２５−８】
2010503706.tif 000037
【化２５−９】
2010503706.tif 000038
【化２５−１０】
2010503706.tif 000039
【００８４】
［式中：
ｍＰＥＧは、式ＣＨ3Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）n−で表され；
ＰＥＧは、式：−Ｏ−（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）n−で表され、
（ｎ）は、約１０〜約２，３００の整数であり；
Ｒ9-10およびＲ'9-10は、標的基、診断薬および生物活性部分の中から独立して選択される］。
【００８５】
Ｆ．治療方法
本発明の別の態様は、哺乳動物におけるさまざまな病態の治療の方法を提供する。方法は、そのような治療を必要とする哺乳動物に、本明細書に記載の化合物を有効量で投与することを含む。ポリマー複合体化合物は、とりわけ、例えば、酵素置換療法、新生物疾患など、親化合物で治療されるものに類似する疾患の治療、腫瘍量の減少、新生物の転移の防止、および哺乳動物における腫瘍の再発／新生物増殖の防止に有用である。
【００８６】
投与されるポリマー複合体の量は、それに含まれる親分子の量に依存する。一般的に、治療方法において使用されるポリマー複合体の量は、哺乳動物において所望される治療結果を有効に達成する量である。当然ながら、さまざまなポリマー複合体化合物の用量は、親化合物、ポリマーの分子量、インビボでの加水分解の速度などに依存して、いくらか変動する。当業者であれば、臨床的経験および治療適応に基づいて、選択されるポリマー輸送複合体の至適投薬量を決定するであろう。正確な用量は、過度の実験を行なわなくとも、当業者には明らかであろう。
【００８７】
本発明の化合物は、哺乳動物への投与のために、１つ以上の適切な医薬組成物に封入することができる。医薬組成物は、溶液、懸濁液、錠剤、カプセルなどの形で当該分野において周知の方法に従って調製してもよい。また、これらの組成物の投与は、当業者の必要に応じて、経口および／または非経口経路であって構わないことが意図されている。組成物の溶液および／または懸濁液を、例えば、当該分野において既知の任意の方法、例えば、静脈内、筋肉内、腹腔内、皮下注入など、組成物の注入または浸潤のための担体ビヒクルとして、利用してもよい。また、これらの投与は、身体の空間または間隙への輸注によるもの、ならびに吸入および／または鼻腔内経路によるものであってもよい。しかし、本発明の好適な態様では、ポリマー複合体は、それらを必要とする哺乳動物に非経口的に投与される。
【実施例】
【００８８】
以下の実施例は、本発明のさらなる理解を提供するために役立つが、決して、本発明の範囲を限定することを意味しない。実施例において説明する太字の番号は、図に示す番号に対応する。実施例を通して、ＤＣＭ（ジクロロメタン）、ＤＩＥＡ（ジイソプロピルエチルアミン）、ＤＭＡＰ（４−ジメチルアミノピリジン）、ＤＭＦ（Ｎ，Ｎ'−ジメチルホルムアミド）、ＤＳＣ（ジスクシンイミジルカーボネート）、ＥＤＣ（１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド）、ＩＰＡ（イソプロパノール）、ＮＨＳ（Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド）、ＰＥＧ（ポリエチレングリコール）、ＳＣＡ−ＳＨ（一本鎖抗体）、ＳＮ３８（７−エチル−１０−ヒドロキシカンプトテシン）、ＴＢＤＰＳ（ｔｅｒｔ−ブチル−ジプロピルシリル）、ＴＥＡ（トリエチルアミン）のような略称を使用する。
【００８９】
一般的手順：
すべての反応は、乾燥窒素またはアルゴンの雰囲気下で稼動する。市販の試薬を、さらなる精製を伴わずに使用する。すべてのＰＥＧ化合物を、使用前に、減圧下またはトルエンからの共沸蒸留によって乾燥する。他で特定しない限り、バリアン・マーキュリー（Ｖａｒｉａｎ  Ｍｅｒｃｕｒｙ）（登録商標）３００ＮＭＲ分光計および溶媒として重クロロホルムを使用して、３００ＭＨｚで1Ｈ  ＮＭＲスペクトルおよび７５．４６ＭＨｚで13Ｃ  ＮＭＲスペクトルを得た。化学シフト（δ）は、テトラメチルシラン（ＴＭＳ）からの下方領域について、ｐｐｍで記載される。
【００９０】
ＨＰＬＣ方法：
反応混合物ならびに中間体および最終生成物の純度を、ベックマン・コールター・システム・ゴールド（Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ  Ｓｙｓｔｅｍ  Ｇｏｌｄ）（登録商標）ＨＰＬＣ機器によってモニターする。それは、０．０５％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）中アセトニトリルの１０〜９０％の勾配を１ｍＬ／分の流速で使用する、１６８ダイオード・アレイ（Ｄｉｏｄｅ  Ａｒｒａｙ）ＵＶディテクター（Ｄｅｔｅｃｔｏｒ）を伴う、ＺＯＲＢＡＸ（登録商標）３００ＳＢ  Ｃ８逆相カラム（１５０×４．６ｍｍ）またはフェノメックス・ジュピター（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｊｕｐｉｔｅｒ）（登録商標）３００Ａ  Ｃ１８逆相カラム（１５０×４．６ｍｍ）を用いる。
【００９１】
実施例１．ＰＥＧ−［Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）2］2、化合物（３）
ＰＥＧ−ジアミン（化合物１、分子量２０ｋ、２５ｇ、１．２５ｍｍｏｌ）を共沸させ、トルエンを減圧下で取り出して、乾燥した。２００ｍＬのＤＣＭに溶解し、Ｂｏｃ−Ｌｙｓ−Ｂｏｃ（化合物２、２．６３８ｇ、５ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（６１０ｍｇ、５ｍｍｏｌ）を添加し、ＥＤＣ（９５８ｍｇ、５ｍｍｏｌ）の添加前に、反応混合物を０℃まで、１５分間、冷却した。反応混合物を、一晩、撹拌しながら、室温まで加温した。溶媒を減圧下で取り出して乾燥し、残渣を、２−プロパノールから再結晶化して、１４ｇの生成物を得た：13Ｃ  ＮＭＲ  δ  １７１．３０，７８．３，５３．４４，３９．０８，３８．２７，３１．５９，２８．７２，２７．６３，２７．５２，２１．７１。
【００９２】
実施例２．ＰＥＧ−［Ｌｙｓ（ＮＨ2）2］、化合物（４）
化合物３（１４ｇ）を、２４０ｍＬのＴＦＡ／ＤＣＭ（１：１）混合物に溶解し、４時間、室温で撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、エチルエーテルを添加することによって、残渣を沈殿させ、溶媒をデカントした。固体を６０ｍＬの０．１Ｍ  ＮａＨＣＯ3に溶解し、水層が澄明になるまでＤＣＭで抽出した。有機層を無水ＭｇＳＯ4上で乾燥し、溶媒を減圧下で取り出して、粗生成物を得、これを２−プロパノールから再結晶化して、１３ｇの生成物を得た：13Ｃ  ＮＭＲ  δ  １７４．４，５３．７９，３９．１３，３７．９，３３．５５，２６．９０，２１．７１。
【００９３】
実施例３．ＳＣＨ  ＡＦ−ＤＧＡ−ＯＨ、化合物（７ａ）
化合物ＳＣＨ−ＯＨ（化合物ＳＣＨ  ＡＦ、５．０ｇ、７．１３５ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（３．４９ｇ、２８．５ｍｍｏｌ）、およびジリコール酸無水物（化合物６、１．６６ｇ、１４．３ｍｍｏｌ）を、２００ｍＬ無水ＤＣＭに溶解し、２時間、撹拌した。次いで、溶液を１００ｍＬの０．１Ｎ  ＨＣｌで４回洗浄し、無水ＭｇＳＯ4上で乾燥した。溶液をろ過し、溶媒を減圧下で取り出した。残渣を減圧下で一晩乾燥して、生成物（５．６１ｇ、６．８７ｍｍｏｌ、９６％）を得た。13Ｃ  ＮＭＲ  δ  １０．２３，１７．１１，２２．０７，３７．３３，３８．６５，４８．７３，５０．６９，５３．３４，５５．８８，６０．１８，６８．０３，６８．１８，６８．７５，７０．５３，７１．９６，８３．７６（ＪCF＝４Ｈｚ），１０４．４６（ＪCF＝２６Ｈｚ），１１１．１８（ＪCF＝２０Ｈｚ），１１５．０３，１１６．５１，１１８．６６，１２３．５３，１２５．１１（ＪCF＝１２Ｈｚ），１２５．３９，１２８．４４（ＪCF＝７Ｈｚ），１３４．６４，１４４．３２，１４４．８１，１５０．２１，１５０．３２，１５３．０３，１５３．３２，１５８．７８（ＪCF＝２４４Ｈｚ，ＪCF＝１２Ｈｚ），１６２．５９（ＪCF＝２４８Ｈｚ，ＪCF＝１２Ｈｚ），１６９．０７，１７１．４２。
【００９４】
実施例４．ＳＮ３８−ＴＢＤＰＳ−ＤＧＡ−ＯＨ、化合物（７ｂ）
１０−ＯＴＢＤＰＳ−ＳＮ３８（化合物ＳＮ３８−ＴＢＤＰＳ）を、実施例３に記載の同じ条件で化合物６と反応させて、化合物７ｂを提供する。
【００９５】
実施例５．ＳＣＨ−グルタル酸−ＯＨ、化合物（９ａ）
化合物ＳＣＨ  ＡＦ（５．６７ｇ、８．１０ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（２０．３ｇ１６６ｍｍｏｌ）、およびグルタル酸無水物（化合物８、１８．９ｇ１６６ｍｍｏｌ）を、６００ｍＬの無水物ＤＣＭに溶解し、一晩、撹拌した。次いで、溶液を２００ｍＬの０．１Ｎ  ＨＣｌで３回洗浄し、エバポレートしてゴム状とした。次いで、それを６００ｍＬのアセトニトリル／０．１Ｍ炭酸ナトリウム＝１／１溶液に溶解し、アセトニトリルをエバポレートする前に、４時間、撹拌した。生成物を抽出して、有機溶媒ＤＣＭに戻した。有機層を無水ＭｇＳＯ4上で乾燥した。溶液をろ過し、溶媒を減圧下で取り出した。残渣を減圧下で一晩乾燥して、生成物（６．０９ｇ、７．４７ｍｍｏｌ、９２％）を得た。13Ｃ  ＮＭＲ  δ  １０．３６，１７．２７，２０．０６，２２．３０，３３．４６，３７．４３，３８．７９，４９．０６，５０．５８，５３．３７，５５．９２，６０．２３，６８．８６，７０．６９，７１．０３，８３．９３（ＪCF＝４．７Ｈｚ），１０４．５７（ＪCF＝２６Ｈｚ），１１１．２７（ＪCF＝２４Ｈｚ），１１５．１０，１１６．５９，１１８．５０，１２３．５０，１２５．１３，１２５．４８（ＪCF＝１２Ｈｚ），１２８．５３（ＪCF＝１０Ｈｚ，ＪCF＝５．４Ｈｚ）１３４．５１，１４４．５３，１４５．６０，１５０．５５，１５０．６９，１５３．０３，１５８．９３（ＪCF＝２４７Ｈｚ，ＪCF＝１２Ｈｚ），１６２．７３（ＪCF＝２４７Ｈｚ，ＪCF＝１２Ｈｚ），１７２．０７。
【００９６】
実施例６．ＳＮ３８−ＴＢＤＰＳ−グルタル酸−ＯＨ、化合物（９ｂ）
化合物ＳＮ３８−ＴＢＤＰＳを、実施例５に記載の同じ条件で化合物８と反応させて、化合物８ｂを提供する。
【００９７】
実施例７．ＳＣＨ−コハク酸−ＯＨ、化合物（１１ａ）
化合物ＳＣＨ  ＡＦを、実施例５に記載の同じ条件でコハク酸無水物（化合物１０）と反応させて、化合物１１ａを提供した。
【００９８】
実施例８．ＳＮ３８−ＴＢＤＰＳ−コハク酸−ＯＨ、化合物（１１ｂ）
化合物ＳＮ３８−ＴＢＤＰＳを、実施例５に記載の同じ条件で化合物１０と反応させて、化合物１１ｂを提供する。
【００９９】
実施例９．ＰＥＧ−［Ｌｙｓ（ＤＧＡ−ＳＣＨ  ＡＦ）2］2、化合物（１２ａ）
化合物４（０．５ｇ）を１０ｍＬの無水ＤＣＭに溶解し、化合物７ａ（１５８ｍｇ）およびＤＭＡＰ（７１ｍｇ）を添加した。反応混合物を氷浴中で０℃まで冷却し、続いて、ＥＤＣ（７４ｍｇ）を添加した。反応混合物を室温で一晩、撹拌した。溶媒を、減圧下で部分的に取り出し、残渣を、ＩＰＡ、ＴＨＦ、およびＤＣＭ−エーテル（４：１１、ｖ／ｖ）から記載の順に３回、再結晶化した。生成物を単離し、減圧オーブン中、４５℃で一晩、乾燥して、所望される生成物（０．３６ｇ、６４％収量）を得た。ＵＳアッセイによって測定されるＳＣＨ  ＡＦの量は、１１％ｗｔ／ｗｔであった：13Ｃ  ＮＭＲ  δ  ９．７１，１６．５７，２１．４１，３６．６５，６８．０９，４８．２６，４９．７５，５５．０７，５９．５２，６６．９４，６７．０１，６７．１１，６７．１４，６７．２１，６７．２９，６７．３７，６７．４２，６７．４８，６７．７６，６８．１１，６８．８３，６９．７５，７０．７１，７１．４０，７１．５４，７８．１７，７８．３０，８３．２３，１０３．８４，１１０．３８，１１０．６７，１１４．３６，１１５．６８，１１７．５８，１２２．７２，１２４．７３，１２４．８４，１２４．９１，１２７．８６，１２７．９４，１３４．３３，１４３．９６，１４４．９７，１４９．７７，１４９．８２，１５０．１７，１５２．１８，１５２．３０，１５２．４３，１５９．９７，１６０．１５，１６８．０５，１６８．２１，１７０．６６。
【０１００】
実施例１０．ＰＥＧ−［Ｌｙｓ（ＤＧＡ−ＳＮ３８−ＴＢＤＰＳ）2］2、化合物（１２ｂ）
化合物７ｂを、実施例９に記載の同じ条件で化合物４と反応させて、化合物１２ｂを提供する。
【０１０１】
実施例１１．ＰＥＧ−［Ｌｙｓ（グルタル酸−ＳＣＨ  ＡＦ）2］2、化合物（１３ａ）
化合物８ａを、実施例９に記載の同じ条件で化合物４と反応させて、化合物１３ａを提供する。
【０１０２】
実施例１２．ＰＥＧ−［Ｌｙｓ（グルタル酸−ＳＮ３８−ＴＢＤＰＳ）2］2、化合物（１３ｂ）
化合物８ｂを、実施例９に記載の同じ条件で化合物４と反応させて、化合物１３ｂを提供する。
【０１０３】
実施例１３．ＰＥＧ−［Ｌｙｓ（コハク酸−ＳＣＨ  ＡＦ）2］2、化合物（１４ａ）
化合物９ａを、実施例９に記載の条件と同じ条件で化合物４と反応させて、化合物１４ａを提供する。
【０１０４】
実施例１４．ＰＥＧ−［Ｌｙｓ（コハク酸−ＳＮ３８−ＴＢＤＰＳ）2］2、化合物（１４ｂ）
化合物９ｂを、実施例９に記載の同じ条件で化合物４と反応させて、化合物１４ｂを提供する。
【０１０５】
実施例１５．ＰＥＧ−［Ｌｙｓ（ＤＧＡ−ＳＮ３８）2］2、化合物（１５ｂ）
ＴＨＦおよび０．０５Ｍ  ＨＣｌ溶液（ｖ／ｖ）の１：１混合物中ＴＢＡＦ（４当量）の溶液を、化合物１２ｂの水溶液に添加した。反応混合物を、室温で４時間、撹拌し、次いで、ＤＣＭで２回抽出する。合わせた有機層を合わせ、ＭｇＳＯ4上で乾燥し、ろ過し、減圧下でエバポレートする。残渣を７体積当量のＤＭＦに溶解し、３７体積当量のＩＰＡで沈殿させる。固体をろ過し、ＩＰＡで洗浄する。ＤＭＦ／ＩＰＡによる沈殿を反復する。最終的に、残渣をＤＣＭに溶解し、エーテルの添加により沈殿させた。固体をろ過し、４０℃、減圧オーブン中で一晩、乾燥して、生成物を提供する。
【０１０６】
実施例１６．ＰＥＧ−［Ｌｙｓ（グルタル酸−ＳＮ３８）2］2、化合物（１６ｂ）
化合物１３ｂを、実施例１５に記載の同じ条件に供して、化合物１６ｂを提供する。
【０１０７】
実施例１７．ＰＥＧ−［Ｌｙｓ（コハク酸−ＳＮ３８）2］2、化合物（１７ｂ）
化合物１４ｂを、実施例１５に記載の同じ条件に供して、化合物１７ｂを提供する。
【０１０８】
実施例１８．ＰＥＧ２−Ｃ３−アミン、化合物（２０）
ＰＥＧ２−ＮＨＳ（化合物１８、分子量４０ｋ、０．００２５ｍｍｏｌ）を無水ＤＣＭ（１０ｍＬ）に溶解し、１，３−プロピルジアミン（０．０１ｍｍｏｌ）を溶液に添加する。反応混合物を室温で一晩、撹拌した。溶媒を、減圧下で部分的に取り出し、エチルエーテルを添加して、粗生成物を沈殿させ、これを、ＤＣＭ−エーテルから再結晶化して、所望される生成物を得る。
【０１０９】
実施例１９．ＰＥＧ２−［Ｌｙｓ（ＮＨＢｏｃ）２］、化合物（２１）
ＰＥＧ２−アミン（化合物２０、１．２５ｍｍｏｌ）を共沸させ、トルエンを減圧下で取り出して、乾燥する。共沸させたＰＥＧ２−アミンを、２００ｍＬのＤＣＭに溶解し、Ｂｏｃ−Ｌｙｓ−Ｂｏｃ（化合物２、２．６３８ｇ、５ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（６１０ｍｇ、５ｍｍｏｌ）を添加し、ＥＤＣ（９５８ｍｇ、５ｍｍｏｌ）の添加前に、反応混合物を０℃まで、１５分間、冷却する。反応混合物を、一晩、撹拌しながら、室温まで加温する。溶媒を減圧下で取り出して乾燥し、残渣を、ＩＰＡから再結晶化して、生成物を得る。
【０１１０】
実施例２０．ＰＥＧ２−［Ｌｙｓ（ＮＨ2）2］、化合物（２２）
化合物２１をＤＣＭ（１０ｍＬ）に溶解し、ＴＦＡ（５ｍＬ）を緩徐に溶液に添加する。溶液を２時間、室温で撹拌する。反応溶液を減圧下で濃縮し、エチルエーテルを添加して、生成物を沈殿させる。生成物をろ過によって単離し、一晩、４５℃、減圧下で乾燥する。
【０１１１】
実施例２１．ＰＥＧ２−［Ｌｙｓ（ＤＧＡ−ＳＣＨ  ＡＦ）2］、化合物（２３）
化合物４（０．５ｇ）を１０ｍＬの無水ＤＣＭに溶解し、化合物７ａ（１５８ｍｇ）およびＤＭＡＰ（７１ｍｇ）を添加する。反応混合物を氷浴中で０℃まで冷却し、続いて、ＥＤＣ（７４ｍｇ）を添加する。反応混合物を室温で一晩、撹拌する。溶媒を、減圧下で部分的に取り出し、残渣を、ＩＰＡ、ＴＨＦ、およびＤＣＭ−エーテル（４：１１、ｖ／ｖ）から記載の順に３回、再結晶化する。生成物を単離し、減圧オーブン中、４５℃で一晩、乾燥して、生成物を得る。
【０１１２】
実施例２２．ＰＥＧプロドラックの加水分解の速度の決定
（ａ）０．１Ｍ酢酸トリエチルアンモニウム緩衝液および（ｂ）アセトニトリルより作製した勾配移動相を使用するＣ８逆相カラム（ゾルバックス（Ｚｏｒｂａｘ）（登録商標）ＳＢ−Ｃ８）を用いることによって、加水分解速度を得た。１ｍＬ／分の流速を使用し、ＵＶ検出器を使用して、クロマトグラムをモニターした。緩衝液中での加水分解では、ＰＥＧ誘導体を０．１Ｍ  ｐＨ７．４  ＰＢＳに５ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解した一方、血漿中での加水分解では、誘導体を蒸留水に２０ｍｇ／１００μＬの濃度で添加し、９００μＬのラット血漿をこの溶液に添加した。混合物を、２分間、ボルテックス撹拌し、２ｍＬガラスバイアルに、１バイアルあたり１００μＬのアリコートで分割した。溶液を、３７℃でさまざまな期間、インキュベートした。メタノール−アセトニトリル（１：１、ｖ／ｖ、４００μＬ）の混合物を、適切な間隔でバイアルに添加し、混合物を１分間、ボルテックス撹拌し、続いて、０．４５ｍｍフィルター膜を介してろ過した（随意的に、続いて、０．２ｍｍフィルター膜を介して第２のろ過を行った）。２０μＬのろ過物のアリコートを、ＨＰＬＣに注入した。ピーク面積に基づいて、生来の化合物およびＰＥＧ誘導体の量を推定し、異なる媒体における各化合物の半減期を、ＰＥＧ誘導体の消失からの線形回帰分析を使用して、算出した。化合物１２ａを加水分解に供し、ｐＨ７．４  ＰＢＳ緩衝液では、ｔ1/2 ＝２４時間超、ならびにラット血漿では、ｔ1/2α＝５時間およびｔ1/2β＝１５時間が得られた。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【国際調査報告】
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