(57)【要約】本発明は、低酸素状態活性化プロドラッグ単独で、および他の抗癌剤および治療法と組み合わせて、癌および他の超増殖性病態を治療するための組成物および方法を提供し、したがってさらに、医学、薬理学、化学、および生物学の諸分野にも関する。本発明は、ＴＨ３０２と呼ばれる化合物、または薬学的に受容可能なその塩；および、薬学的に受容可能な担体、賦形剤、または希釈剤を含む、薬学的に受容可能な処方に関する。ＴＨ３０２を含む組成物、およびＴＨ３０２を投与する方法は、癌、および他の増殖性疾患の治療に有用である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＴＨ３０２、または薬学的に受容可能なその塩、および、スクロースを含む、薬学的に受容可能な処方。
【請求項２】
ＴＨ３０２、または薬学的に受容可能なその塩、および、エタノールを含む、薬学的に受容可能な処方。
【請求項３】
請求項１に記載の処方の単位用量。
【請求項４】
請求項２に記載の処方の単位用量。
【請求項５】
約２５ｍｇから約２５０ｍｇのＴＨ３０２を含む、請求項３に記載の単位用量。
【請求項６】
約２５ｍｇから約２５０ｍｇのＴＨ３０２を含む、請求項４に記載の単位用量。
【請求項７】
約５０ｍｇから約１５０ｍｇのＴＨ３０２を含む、請求項３に記載の単位用量。
【請求項８】
約１００ｍｇのＴＨ３０２を含む単位用量であって、前記単位用量は凍結乾燥される、請求項７に記載の単位用量。
【請求項９】
癌の治療法であって、そのような治療を必要とする患者に対し、約４ｍｇ／ｍ２から約１６００ｍｇ／ｍ２の範囲内の量としてＴＨ３０２を投与することを含む方法。
【請求項１０】
前記投与されるＴＨ３０２の量が、約８ｍｇ／ｍ２から約８００ｍｇ／ｍ２の範囲内にある、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記投与されるＴＨ３０２の量が、約１６ｍｇ／ｍ２から約４００ｍｇ／ｍ２の範囲内にある、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記投与されるＴＨ３０２の量が、約３２ｍｇ／ｍ２から約２００ｍｇ／ｍ２の範囲内にある、請求項１０に記載の方法。
【請求項１３】
ＴＨ３０２が静脈内に投与される、請求項９に記載の方法。
【請求項１４】
ＴＨ３０２が経口的に投与される、請求項９に記載の方法。
【請求項１５】
ＴＨ３０２が、１日当たり少なくとも１回から、１月当たり少なくとも１回の範囲内にある頻度で投与される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
ＴＨ３０２が、１週当たり少なくとも１回の頻度で投与される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
ＴＨ３０２が、少なくとも１週間の期間投与される、請求項９に記載の方法。
【請求項１８】
ＴＨ３０２が、少なくとも３週間の期間投与される、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
ＴＨ３０２が、少なくとも２４週間の期間投与される、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記治療される癌が、乳癌、結腸直腸癌、すい臓癌、および前立腺癌から成る群から選ばれる、請求項９に記載の方法。
【請求項２１】
前記癌が、骨髄癌、肺癌、肝臓癌、リンパ節癌、および卵巣癌から成る群から選ばれる転移癌である、請求項９に記載の方法。
【請求項２２】
前記ＴＨ３０２が、シスプラチン、カルボプラチン、ドセタキセル、パクリタキセル、ゲムシタビン、およびイリノテカンから成る群から選ばれる、別の抗癌剤と組み合わせて投与されるか、または、放射線治療と組み合わせて投与される、請求項９に記載の方法。
【請求項２３】
前立腺癌を有する患者を治療する方法であって、該患者に対し、約４ｍｇ／ｍ２から約１６００ｍｇ／ｍ２の範囲内の量としてＴＨ３０２を投与することを含む方法。
【請求項２４】
前記患者がさらにドセタキセルによって治療される、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
転移癌を有する患者を治療する方法であって、該患者に対し、約４ｍｇ／ｍ２から約１６００ｍｇ／ｍ２の範囲内の量としてＴＨ３０２を投与することを含む方法。
【請求項２６】
前記患者がさらにイリノテカンによって治療される、請求項２５に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連する出願への相互参照
本願は、２００６年１２月２６日に出願された米国特許出願第６０／８７１，８６５号に対する優先権を主張する。米国特許出願第６０／８７１，８６５号は、本明細書中に参考として援用される。
【０００２】
本発明は、低酸素状態活性化プロドラッグ単独で、および他の抗癌剤および治療法と組み合わせて、癌および他の超増殖性病態を治療するための組成物および方法を提供し、したがってさらに、医学、薬理学、化学、および生物学の諸分野にも関する。
【背景技術】
【０００３】
癌の治療はチャレンジングである。なぜなら、正常の細胞をまったく冒さず、または冒す程度を低く抑えて癌細胞を殺すのは困難だからである。癌治療中、正常な細胞を殺すこと、または殺さないまでも有害作用を及ぼすことは、患者に副作用を引き起こす可能性がある。癌細胞は、その酸素吸収のレベルが、ある種の正常細胞と異なり、正常細胞よりもより低酸素過敏である場合がある。現在、いくつかの薬剤が、低酸素過敏癌細胞を標的することによって癌を治療するために臨床で使われている。例えば、特許文献１、特許文献２、特許文献３、および特許文献４を参照されたい。なお、これらをそれぞれ、引用により本明細書に含める。癌を治療するための組成物および方法は依然として求められている。本発明は、下記に概略するように、フォスフォルアミデートアルキル化剤プロドラッグＴＨ３０２、および、その他、このようなフォスフォルアミデートアルキル化剤プロドラッグに関連する、組成物および方法を提供することによって、これらの要求に応える。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】国際公開第００／６４８６４号パンフレット
【特許文献２】国際公開第０４／０８７０７５号パンフレット
【特許文献３】国際公開第０７／００２９３１号パンフレット
【特許文献４】米国特許出願公開第２００７／００３２４５５号明細書
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００５】
一局面において、本発明は、ＴＨ３０２と呼ばれる化合物、または薬学的に受容可能なその塩；および、薬学的に受容可能な担体、賦形剤、または希釈剤を含む、薬学的に受容可能な処方に関する。一実施態様では、薬学的に受容可能な本処方は、ＴＨ３０２、および、賦形剤として、スクロースを含む。別の実施態様では、本発明は、ＴＨ３０２およびエタノールを含む、ＴＨ３０２の安定処方を提供する。各種実施態様において、本溶液は、ＴＨ３０２、エタノール、および、５％以下の他の任意の溶媒、好ましくは２％以下、より好ましくは１％以下、もっとも好ましくは０．５％以下、または０．１％以下の、エタノール以外の溶媒を含む。本処方は、患者への投与前に（例えば、水性賦形剤で）希釈してもよい。いくつかの実施態様において、本発明は、フォスフォルアミデートアルキル化剤の、他の、低酸素状態活性化プロドラッグ、例えば、ただし限定されないが、ＴＨ２８１と呼ばれる化合物、および、国際公開第０７／００２９３１号に記載されるものなどを含む、薬学的に受容可能な処方を提供する。ＴＨ３０２およびＴＨ２８１の構造を下記に示す：
【０００６】
【化１】
2010514787.tif 000002
別の局面では、本発明は、ＴＨ３０２の薬学的に受容可能な処方の単位用量を提供する。一実施態様では、薬学的に受容可能な処方の単位用量は、約２５ｍｇ〜約２５０ｍｇ、または約５０ｍｇ〜約１５０ｍｇのＴＨ３０２を含む。一実施態様では、単位用量は、約１００ｍｇのＴＨ３０２を含む。一実施態様では、本発明は、約１００ｍｇの凍結乾燥ＴＨ３０２を含む、単位用量処方を提供する。一実施態様では、本発明は、エタノールに溶解したＴＨ３０２（例えば、約１００ｍｇ）を含む、単位用量処方を提供する。
【０００７】
別の局面では、本発明は、癌の治療法であって、そのような治療を必要とする患者に対し、約４ｍｇ／ｍ２〜約１６００ｍｇ／ｍ２、約８ｍｇ／ｍ２〜約８００ｍｇ／ｍ２、約１６ｍｇ／ｍ２〜約４００ｍｇ／ｍ２、または約３２ｍｇ／ｍ２〜約２００ｍｇ／ｍ２の範囲内の治療的有効量のＴＨ３０２を投与することによって癌を治療する方法を提供する。一実施態様では、ＴＨ３０２は、静脈内（ｉ．ｖ．）投与によって投与される。一実施態様では、ＴＨ３０２は経口投与によって投与される。一実施態様では、治療的有効量のＴＨ３０２は、１日当たり少なくとも１回、１週当たり少なくとも１回、２週当たり少なくとも１回、または１月当たり少なくとも１回の頻度で投与される。ＴＨ３０２は、少なくとも１週間、少なくとも２週間、少なくとも３週間、または、最大少なくとも２４週間の期間投与されてもよい。ある実施態様では、さらに長い投与期間が用いられる。
【０００８】
一実施態様では、治療される癌は、乳癌、結腸直腸癌、卵巣癌、すい臓癌、および前立腺癌から選ばれる。別の実施態様では、治療される癌は、骨髄癌、肺癌、肝臓癌、リンパ節癌、および卵巣癌から成る群から選ばれる、転移癌である。
【０００９】
ある実施態様では、ＴＨ３０２は、シスプラチン、カルボプラチン、ドセタキセル、パクリタキセル、ゲムシタビン、およびイリノテカンから成る群から選ばれる、別の抗癌剤と組み合わせて投与されるか、または、放射線治療などの抗癌治療と組み合わせて投与される。
【００１０】
一実施態様では、本発明は、ＴＨ３０２以外の、低酸素状態活性化フォスフォルアミデートアルキル化剤プロドラッグで、例えば、ただしこれらに限定されないが、ＴＨ２８１、および国際公開第０７／００２９３１号に記載されるものを含む、本発明の薬学的に受容可能な処方を投与することによって癌を治療する方法を提供する。
【００１１】
上記およびその他の局面および実施態様は、本発明の添付の図面および詳細な説明に記載される。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】異なるレベルの酸素濃度下における５０ｍｇ／ｋｇ  ＴＨ３０２による処理後の生存率（ＳＦ）を示す。下記の実施例６を参照されたい。異なる符合は、個々の動物を表す。
【図２】Ｈ４６０異種移植腫瘍担持マウスの癌治療において、ＴＨ３０２の静脈内投与の効力を示す。
【図３】Ｈ４６０異種移植腫瘍担持マウスの癌治療において、放射線、例えば、Ｘ−線と組み合わせて投与されるＴＨ３０２は、Ｘ−線の抗癌作用を強化することを示す。グラフ基底部の矢印は、薬剤および放射線が投与された日にちを示す。下記の実施例９を参照されたい。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本発明の局面および実施態様の詳細な説明は、下記のセクションに組織的に配置される。セクションＩは、本明細書で使用される用語の定義を提示する。セクションＩＩは、本発明の薬学的に受容可能な処方を記載する。セクションＩＩＩは、本発明の治療法を提供する。セクションＩＶは、本発明の、例示の薬学的に受容可能な処方および治療法を提供する。この詳細な説明が、セクションに分けて組織的に配置されるのは、読者の都合のためだけであって、いずれのセクションに見られる開示であれ、それは、本明細書の別箇所の開示にも適用が可能である。
Ｉ．定義
下記の定義は、読者を助けるために提供される。別様に定義されない限り、本明細書で用いられる、全ての専門用語、表示、およびその他の、科学的または医学的名称または専門語は、化学的、医学的分野における当業者によって一般的に理解される意味を有することが意図される。ある場合、一般的に理解される意味を持つ用語とは、本明細書では、分かり易さ、および／または簡単な参照のために定義されるものであるが、本明細書にこのような定義を含めることを、当該技術分野で一般的に理解される、その用語の定義とは事実上異なるものを表すと思量してならない。
【００１４】
「約」とは、ある量の±２０％を指し、例えば、ただしこれらに限定されないが、その量の±１５％、±１０％、および±５％を含む。
【００１５】
患者（および、この語句の語法的等価物）に対して薬剤を「投与する」または「投与」とは、患者に対する医療専門家による投与、または自己投与であってもよい直接的投与、および／または、薬剤を処方する行為であってもよい間接的投与を指す。例えば、患者に、薬を自己投与するよう指令する、および／または、患者に、薬の処方を提供する医師は、その患者に対しその薬を投与している。
【００１６】
「癌」とは、白血病、リンパ腫、および、浸潤によって局所的に、転移によって全身的に拡大する可能性を持つ、無制限な増殖の可能性を持つ、他の悪性腫瘍を指す。癌の例としては、例えば、ただしこれらに限定されないが、副腎、骨、脳、乳房、気管支、結腸および／または直腸、胆嚢、頭部および頸部、腎臓、咽喉、肝臓、肺、神経組織、すい臓、前立腺、副甲状腺、皮膚、胃、および甲状腺の癌が挙げられる。他の、いくつかの癌の例としては、例えば、急性および慢性リンパ球および顆粒球腫瘍、腺癌、アデノーマ、基底細胞癌、子宮頸部異形成およびインシトゥ癌腫、ユーイング肉腫、類表皮癌、巨細胞腫、グリア芽細胞多形腫、毛細胞腫瘍、小腸神経節細胞腫、過形成角膜神経腫瘍、島細胞癌腫、カポジ肉腫、平滑筋腫、白血病、リンパ腫、悪性カルチノイド、悪性メラノーマ、悪性高カルシウム血症、マルファン体型腫瘍、髄様癌腫、転移皮膚癌、粘膜神経腫、骨髄腫、菌状息肉腫、神経芽細胞腫、骨肉腫、骨原性および他の肉腫、卵巣腫瘍、クロム親和細胞腫、真性赤血球増加症、一次脳腫瘍、小細胞肺腫瘍、潰瘍型および乳頭型両扁平上皮癌、過形成、セミノーマ、軟部組織肉腫、網膜芽細胞腫、横紋筋肉腫、腎細胞腫瘍、局所皮膚病変、細網肉腫、およびウィルムス腫瘍が挙げられる。
【００１７】
「超増殖疾患」とは、細胞の超増殖（例えば、異常な増加率または量の細胞増殖）によって特徴づけられる疾患を指す。癌以外の、超増殖疾患の例としては、例えば、ただしこれらに限定されないが、アレルギー性血管炎および肉芽腫症（Ｃｈｕｒｇ−Ｓｔｒａｕｓｓ病）、石綿症、喘息、萎縮性胃炎、良性前立腺過形成、水泡性類天疱瘡、腹部疾患、慢性気管支炎、および慢性閉塞性気道疾患、慢性副鼻腔炎、クローン病、脱髄性ニューロパシー、皮膚筋炎、アトピー性皮膚炎を含む湿疹、耳管の疾患、巨細胞性動脈炎、移植拒絶、過敏性肺炎、過敏性血管炎（ヘノッホ−シェーンライン紫斑病）、刺激性接触皮膚炎、炎症性溶血貧血症、炎症性好中球減少血症、炎症性腸疾患、川崎病、多発性硬化症、心筋炎、筋炎、鼻腔ポリープ、鼻涙管の疾患、新生物血管炎、膵炎、尋常天疱瘡、一次糸球体腎炎、乾癬、歯周病、多嚢胞性腎臓病、結節性多発動脈炎、多発性血管炎オーバーラップ症候群、一次硬化胆管炎、慢性関節リューマチ、血清病、手術癒着、狭窄症または再発狭窄症、強膜炎、強皮症、胆管狭窄、（十二指腸、小腸、および結腸の）狭窄、珪肺および他の形の塵肺、Ｉ型糖尿病、潰瘍性大腸炎、潰瘍性直腸炎、結合組織障害を伴う脈管炎、補体系の先天的欠損に関連する脈管炎、中枢神経系の脈管炎、およびヴェーゲナー肉芽腫症が挙げられる。
【００１８】
「患者」とは、癌の治療を必要とする哺乳動物を指す。一般に、患者はヒトである。患者は、非ヒト哺乳動物、例えば、非ヒト霊長類、イヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ウサギ、ブタなどであってもよい。患者はまた、薬剤および治療法のスクリーニング、特徴解明、および評価に使用される、マウスまたはラットなどの非ヒト動物であってもよい。
【００１９】
「薬学的に受容可能な担体、賦形剤、または希釈剤」とは、一般に安全で、無毒であり、生物学的にも、他の点でも、不快なことのない製薬組成物を調製するのに有用な担体、賦形剤、または希釈剤を指し、例えば、ヒトの薬学的使用の外、獣医学的使用にも受容可能な担体、賦形剤、または希釈剤などが挙げられる。「薬学的に受容可能な担体、賦形剤、または希釈剤」は、一つと、一つを超えるの、両方の、そのような担体、賦形剤、または希釈剤を含む。
【００２０】
「薬学的に受容可能な塩」とは、本発明に記載される化合物の上に認められる特定の置換基に依存して、比較的無毒な酸または塩基を伴って調製される、該活性化合物の塩を含むことを意味する。本発明の化合物が、比較的酸性度の高い官能基を含む場合、その化合物の中和形を、十分量の所望の塩基と、生のままで、または、適切な不活性溶媒に溶解して接触させることによって、塩基添加塩を獲得することが可能である。薬学的に受容可能な無機塩基から得られる塩の例としては、アルミニウム、アンモニウム、カルシウム、銅、第二鉄、第一鉄、リチウム、マグネシウム、マンガン酸塩、亜マンガン酸塩、カリウム、ナトリウム、亜鉛などの塩が挙げられる。薬学的に受容可能な有機塩基から得られる塩としては、一次、二次、および三次アミンの塩、例えば、置換アミン、環状アミン、天然アミンなど、例えば、アルギニン、ベタイン、カフェイン、コリン、Ｎ，Ｎ′−ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチルモルフォリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン、イソプロピルアミン、リシン、メチルグルカミン、モルフォリン、ピペラジン、ピペラディン、ポリアミン樹脂類、プロカイン、プリン類、テオブロミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミン、トロメタミンなどがある。本発明の化合物が、比較的塩基度の高い官能基を含む場合、その化合物の中和形を、十分量の所望の酸と、生のままで、または、適切な不活性溶媒に溶解して接触させることによって、酸添加塩を獲得することが可能である。薬学的に受容可能な酸添加塩の例としては、無機酸、例えば、塩化水素酸、臭化水素酸、硝酸、炭酸、炭酸一水素酸、リン酸、リン酸一水素酸、リン酸二水素酸、硫酸、硫酸一水素酸、ヨウ化水素酸、または亜リン酸などの外、比較的無害な有機酸、例えば、酢酸、プロピオン酸、イソブチル酸、マロン酸、安息香酸、コハク酸、スベリン酸、フマール酸、マンデル酸、フタル酸、ベンゼンスルフォン酸、ｐ−トリルスルフォン酸、クエン酸、酒石酸、メタンスルフォン酸などから得られる塩が挙げられる。さらに含まれるものとしては、アミノ酸の塩、例えば、アルギン酸塩など、有機酸の塩、例えば、グルクロン酸、またはガラクツノル酸などの塩がある（例えば、Ｂｅｒｇｅ，Ｓ．Ｍ．，ｅｔ  ａｌ．，“Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ，”Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９７７，６６，１−１９を参照されたい）。本発明の、いくつかの特異的化合物は、塩基性および酸性両方の官能基を含み、そのため、該化合物は、塩基添加塩、または酸添加塩のいずれかに変換することが可能である。この化合物の中和形は、該塩を、塩基または酸と接触させ、従来の方法にしたがって親化合物を単離することによって再生することが可能である。化合物の親形は、ある種の物理的特性において、例えば、極性溶媒における可溶性において、各種塩形とは異なるが、他の点では、化合物の塩は、本発明の目的のためには、化合物の親形と等価である。
【００２１】
「プロドラッグ」とは、投与後、代謝またはその他のやり方を通じて、少なくとも一つの特性に関して、生物学的に活性な、またはより活性な化合物（または薬剤）に変換される化合物を指す。薬剤に対してプロドラッグは、該薬剤よりも活性を低くするか、または不活性化するようなやり方で化学的に修飾されるが、その化学的修飾は、対応薬剤が、プロドラッグの投与後、代謝、または別の生物学的プロセスによって生成されるように行われる。活性薬剤に比べ、プロドラッグは、代謝安定性または輸送特徴が変更されているか、副作用が少ないか、または毒性が低いか、または、匂いが改善されていてもよい（例えば、参考文献のＮｏｇｒａｄｙ，１９８５，Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ａ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ，Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ｐａｇｅｓ  ３８８−３９２を参照されたい、なお、引用により本明細書に含める）。プロドラッグは、対応薬剤以外の反応分子を用いて合成してもよい。
【００２２】
一つの症状、または複数の症状（および、この語句の語法的等価物）の「軽減」とは、症状（単数または複数）の重度または頻度の低下、または、症状（単数または複数）の根絶を指す。
【００２３】
薬剤の「治療的有効量」とは、癌または別の超増殖性疾患に罹患する患者に投与された場合、所期の治療作用、例えば、該患者における癌または別の超増殖性疾患の、一つ以上の兆候の、緩和、寛解、軽減、または根絶をもたらす、薬剤の量を指す。治療作用は、必ずしも１用量の投与によって起こる必要はなく、一連の用量を投与した後始めて起こってもよい。したがって、治療的有効量は、１回以上の投与において投与されてもよい。
【００２４】
病態または患者を「治療する」または「治療」とは、臨床結果を含め、有益な、または所望の結果を獲得するために必要手順を取ることを指す。本発明のためには、有益または所望の臨床結果として、例えば、ただしこれらに限定されないが、癌または別の超増殖性疾患の一つ以上の症状の緩和または寛解；病気の程度の低下；病気の進行の遅延または緩徐化；病状の寛解、軽減、または安定化；または他の有益な結果が挙げられる。
ＩＩ．薬学的に受容可能な処方
一局面において、本発明は、ＴＨ３０２と呼ばれる化合物、またはその薬学的に受容可能な塩を、薬学的に受容可能な担体、賦形剤、または希釈剤と共に含む、薬学的に受容可能な処方に関する。ＴＨ３０２は、ＰＣＴ特許出願公開第ＷＯ０７／００２９３１号に記載される。なお、この文書を引用により本明細書に含める。一実施態様では、この薬学的に受容可能な処方は、ＴＨ３０２、および、賦形剤として、スクロースを含む。ＴＨ３０２のこのような処方は、下記の実施例１に記載される。別の実施態様では、薬学的に受容可能な処方は、ＴＨ３０２、またはその薬学的に受容可能な塩の、エタノール溶液である。ＴＨ３０２の、このような安定なエタノール処方は、実施例２に記載される。
【００２５】
一実施態様では、薬学的に受容可能な本処方は、ＴＨ２８１、および、賦形剤として、スクロースを含む。別の実施態様では、薬学的に受容可能な処方は、ＴＨ２８１、またはその薬学的に受容可能な塩の、エタノール溶液である。ＴＨ３０２およびＴＨ２８１の構造は下記に示される。
【００２６】
【化２】
2010514787.tif 000003
他の実施態様では、本発明は、国際公開第０７／００２９３１号に記載される、フォスフォルアミデートアルキル化剤の、低酸素状態活性化プロドラッグを含む、薬学的に受容可能な処方を提供する。
【００２７】
別の局面では、本発明は、単位用量の、ＴＨ３０２の薬学的に受容可能な処方を提供する。一実施態様では、薬学的に受容可能な本処方の単位用量は、約２５ｍｇから約２５０ｍｇのＴＨ３０２、または約５０ｍｇから約１５０ｍｇのＴＨ３０２を含む。一実施態様では、単位用量は、約１００ｍｇのＴＨ３０２を含む。一実施態様では、本発明は、約１ｍｇの凍結乾燥ＴＨ３０２を含む。適切な単位用量の、薬学的に受容可能なＴＨ３０２処方は、下記の実施例１に記載される。
ＩＩＩ．治療法
別の局面では、本発明は、癌の治療法であって、そのような治療を必要とする患者に対し、約４ｍｇ／ｍ２〜約１６００ｍｇ／ｍ２、約８ｍｇ／ｍ２〜約８００ｍｇ／ｍ２、約１６ｍｇ／ｍ２〜約４００ｍｇ／ｍ２、または約３２ｍｇ／ｍ２〜約２００ｍｇ／ｍ２の範囲内の治療的有効量のＴＨ３０２を投与することによって癌を治療する方法を提供する。別の実施態様では、ＴＨ３０２は、約４ｍｇ／ｍ２〜約４００ｍｇ／ｍ２、約８ｍｇ／ｍ２〜約２００ｍｇ／ｍ２、約１６ｍｇ／ｍ２〜約１２０ｍｇ／ｍ２、または約３２ｍｇ／ｍ２〜約８０ｍｇ／ｍ２の範囲内の治療的有効量としてヒトの患者に投与してもよい。抗腫瘍作用を持つ、治療的有効なＴＨ３０２の投与を示す動物実験が下記の実施例（例えば、実施例４−９）に記載される。ヒトの治験プロトコールは、下記の実施例１３に記載される。
【００２８】
一実施態様では、ＴＨ３０２は、ｉ．ｖ．投与によって投与される。癌治療のためのＴＨ３０２の有効ｉ．ｖ．投与は、図２にグラフ的に記述される。一実施態様では、ＴＨ３０２は、経口投与によって投与される。ＴＨ３０２経口投与の効率的バイオアベイラビリティは、実施例１１に記載される。
【００２９】
一実施態様では、治療的有効量のＴＨ３０２は、１日当たり少なくとも１回、１週当たり少なくとも１回、２週当たり少なくとも１回、１月当たり少なくとも１回まで、の頻度で投与される。ＴＨ３０２は、少なくとも１週間、少なくとも２週間、少なくとも３週間、または、最大すくなくとも２４週間の期間投与される。ある実施態様では、さらに長い投与期間が用いられる。本発明による効果的癌治療のためのＴＨ３０２投与の、種々の頻度および期間は、例えば、下記の実施例４〜１１および１３に記載される。
【００３０】
一実施態様では、治療される癌は、乳癌、結腸直腸癌、卵巣癌、すい臓癌、および前立腺癌から選ばれる。別の実施態様では、治療される癌は、骨髄癌、肺癌、肝臓癌、リンパ節癌、および卵巣癌から成る群から選ばれる、転移癌である。
【００３１】
一実施態様では、ＴＨ３０２は、シスプラチン、カルボプラチン、ドセタキセル、パクリタキセル、ゲムシタビン、またはイリノテカンから成る群から選ばれる、別の抗癌剤と組み合わせて投与される。別の抗癌剤、または別の抗癌治療法と組み合わせたＴＨ３０２の投与は、例えば、下記の実施例４〜９に記載される。
【００３２】
特定実施態様では、本発明は、前立腺癌の患者を治療する方法であって、該患者に対して治療的有効量のＴＨ３０２（例えば、約４ｍｇ／ｍ２〜約１６００ｍｇ／ｍ２の範囲内）を投与することによる方法を提供する。一実施態様では、患者はさらに、ドセタキセルによって治療される。
【００３３】
別の特定実施態様では、本発明は、転移癌の患者を治療する方法であって、該患者に対して治療的有効量のＴＨ３０２（例えば、約４ｍｇ／ｍ２〜約１６００ｍｇ／ｍ２の範囲内）を投与することによる方法を提供する。一実施態様では、患者はさらに、イリノテカンによって治療される。
【００３４】
一実施態様では、本発明は、本発明の薬学的に受容可能な処方を投与する癌の治療法であって、ＴＨ３０２以外の、低酸素状態活性化フォスフォルアミデートアルキル化剤プロドラッグ、例えば、ただしこれらに限定されないが、ＴＨ２８１、および国際公開第０７／００２９３１号に記載されるものなどを投与することを含む方法を提供する。
【００３５】
これまでに概要および詳細において記載された本発明は、下記の実施例によって具体的に説明されるが、それらによって限定はされない。実施例は、本発明のＴＨ３０２の薬学的に受容可能な処方を提示し、本発明による癌の治療におけるＴＨ３０２の効力を実証する。
【実施例】
【００３６】
ＩＶ．実施例
（実施例１）
ＴＨ３０２の凍結乾燥単位用量処方
ＴＨ３０２（１００ｍｇ）およびスクロース（１ｇ）の溶液を、凍結乾燥バイアルに加え、凍結乾燥して、ＴＨ３０２の凍結乾燥単位用量剤形を得た。ヒト投与のために、単位用量剤形を、ＤＷ５に溶解し、この溶液の適切量を患者に投与した。
【００３７】
（実施例２）
ＴＨ３０２のエタノール処方
ＴＨ３０２を純粋アルコールに溶解し、５％ＴＨ３０２の、薬学的に受容可能な液体処方を得た。本明細書で用いるＴＨ３０２の５％溶液は、１００ｍＬの溶媒（例えば、エタノール）中に５ｇのＴＨ３０２を含む。
【００３８】
ＴＨ３０２のエタノール処方の安定性は下記のように実証した。エタノールに溶解したＴＨ３０２の液体処方は、１ｍＬの該溶液中に１ｍｇのＴＨ３０２を含むものとして調製した。この処方から分液を採取し、エタノールで希釈し、ＴＨ３０２のエタノール液の４０μｇ／ｍＬ処方を得、これを、２０℃および３０℃でインキュベートし、安定性を、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）によって分析した。ＨＰＬＣは、下記の成分および条件を用いた：カラム（Ａｌｌｔｅｃｈ，Ａｌｌｔｉｍａ  Ｃ１８，５０×４．６，３μｍ）、移動相（水およびアセトニトリル）、流速０．８ｍＬ／分、注入容量（１０μＬ）、検出（３２５ｎｍおよび２５４ｎｍにおけるＵＶ検出）、およびカラム温度（室温）。移動相の組成は下記に表として掲げた。
【表Ａ】
2010514787.tif 000004
【００３９】
安定性結果は、下記に表として掲げた。
【表Ｂ】
2010514787.tif 000005
【００４０】
結果は、試験条件下において、ＴＨ３０２のエチルアルコール液は２０℃で安定であることを示す。
【００４１】
（実施例３）
ＴＨ３０２の合成および／または精製法の実証
ＴＨ３０２は、国際公開第０７／００２９３１号（引用により本明細書に含める）の実施例６，８、および２２〜２６に記載の通りに、合成し、不要の反応物質から分離することが可能である。カラムクロマトグラフィーによるＴＨ３０２の分離に有用な溶出液としては、上記の国際公開第０７／００２９３１号の実施例６に記載される、アセトン／トルエン系溶出液、および、５％ヘキサン／酢酸エチル−５％ＭｅＯＨ／酢酸エチルが挙げられる。これらの方法にしたがって、ＡＰＩ等級ＴＨ３０２が、Ｓｙｎｇｅｎｅ，Ｉｎｄｉａによって製造された。これらの合成法は、下記のように改変することが可能である。リン酸化剤として、ＰＯＣｌ３の代わりに、ＰＯＢｒ３を使用することが可能である。リン酸化剤としてＰＯＣｌ３を使用する場合、中間産物ＣｌＰ（＝Ｏ）（ＮＨＣＨ２ＣＨ２Ｂｒ）２（１当量）の加水分解は、ＮａＢｒ（１０当量）水溶液を用いて実行することが可能である。
【００４２】
（実施例４）
癌治療における、イリノテカンと組み合わせたＴＨ３０２効力の実証
ＴＨ３０２およびイリノテカン（ＣＰＴ−１１）は、下記のように処方した：ＴＨ３０２は生理的食塩水に溶解し（７．５ｍｇ／ｍＬ）、ＣＰＴ−１１は２％Ｔｗｅｅｎ８０−生理的食塩水に溶解した（５ｍｇ／ｍＬ）。この処方を、０．２μｍフィルターでろ過し、次いで、作製の１時間後に動物に送達した。ＨＴ２９ヒト結腸直腸癌細胞を、５０％マトリゲルおよび５０％ＲＰＭＩ１６４０媒体に調製し、該細胞を（３×１０６細胞）９０匹のマウスの右横腹の皮下の空間に接種した（０．２ｍＬ／１匹）。移植後１２日目に、腫瘍体積は、約１６０ｍｍ３に達した。同様の腫瘍サイズを持つ７２匹の動物を選び、ランダム化後治療した。残りのマウスは、治療無しコントロールとして用いた。
【００４３】
マウスに、ＴＨ３０２を７５ｍｇ／ｋｇで、週１回２週間、静注（Ｑ７Ｄ×２、ｉ．ｖ．）単独、および、ＣＰＴ−１１、５０ｍｇ／ｋｇ（Ｑ７Ｄ×３、腹腔内（ｉ．ｐ．））と組み合わせて、投与した。マウスの治療群のいずれも、予想外の体重減少を示さなかった。投与開始後、腫瘍体積を週に２度測定した。２９日目、ベヒクル（５％ＤＭＳＯ、５％Ｔｗｅｅｎ８０−Ｄ５Ｗ、２％Ｔｗｅｅｎ８０−生理的食塩水）を投与されたコントロールに比べ、併用治療を受けたマウスでは、腫瘍について５０％の腫瘍増殖抑制が見られた。ＣＰＴ−１１だけを投与されたマウスでは、すなわち、ＣＰＴ−１１単一治療を受けたマウスでは、マウスのコントロール群に比べ、４１％の腫瘍増殖抑制が観察された。
【００４４】
ヒト投与のために有効な用量は、マウス用量から、該マウス用量を１２．３で割ることによって推定することが可能である。したがって、本発明の一実施態様では、ＴＨ３０２を、癌治療のために、ヒトに対し、７５／１２．３ｍｇ／ｋｇ、すなわち、約６ｍｇ/ｋｇの量として投与してもよい。ｍｇ／ｋｇで表されるヒトの用量は、そのｍｇ／ｋｇ用量に４０を掛けることによってｍｇ／ｍ２に変換することが可能である。したがって、本発明の一実施態様では、ＴＨ３０２を、癌治療のために、ヒトに対し、約２４０ｍｇ／ｍ２の量として投与してもよい。同じ変換係数を用い、ヒトにおける癌治療に有効なＴＨ３０２の用量は、実施例２〜９に記載される、マウスについて得られた有効量から推定することが可能である。
【００４５】
（実施例５）
卵巣癌治療におけるＴＨ３０２の効力の実証
４０匹のヌードマウスの皮下に、ＩＧＲＯＶ１ヒト卵巣癌細胞を植えつけた（５×１０６細胞／マウス）。腫瘍体積を、７日目から始めて週に２度測定した。８日目、腫瘍体積は、約９７．７±３．９ｍｍ３に達した。マウスを、三つの治療群にランダムに割り当てた。治療群には下記を投与した：ＣＤＤＰ（４ｍｇ／ｋｇ、ｉｐ、Ｑ７Ｄ×２）、ＣＤＤＰ（６ｍｇ／ｋｇ，ｉ．ｐ．、Ｑ７Ｄ×２）、およびＴＨ３０２（７５ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｖ．、Ｑ７Ｄ×２）。マウスのコントロール群には生理的食塩水を投与した。両用量におけるＣＤＤＰによる治療は、腫瘍体積において有意な低下を示さなかったけれども、ＴＨ３０２治療の方は、有意な増殖抑制を示した（Ｐ＜０．０５）。ＴＨ３０２の第１回投与の４５日後、腫瘍増殖抑制は６６％であった。腫瘍増殖遅延（３００ｍｍ３まで）は１９日であった。マウスは、治療期間中体重増加を示し、ＴＨ３０２の投与は、投与量において安全であることを示した。本実施例は、卵巣癌の治療において、ＴＨ３０２単独の、すなわち、単一治療の効力を実証する。
【００４６】
（実施例６）
低酸素腫瘍細胞の殺作用におけるＴＨ３０２の効力の実証
Ｈ４６０ヒト非小細胞癌（ＮＳＣＬＣ）細胞を、ＰＲＩＭ媒体に溶解させた３０％または５０％マトリゲルにおいて調製した。次に、５０％マトリゲルに縣濁させた２×１０６細胞を、３５匹のマウスの右横腹皮下に植えつけ、３０％マトリゲルに縣濁させた０．５×１０６細胞を同様に３０匹のマウスに植えつけた。同じ大きさ、好ましくは〜３００ｍｍ３の腫瘍を担うマウスをＴＨ３０２投与のために選んだ。ＴＨ３０２は、生理的食塩水液として処方し、単回用量を５０ｍｇ／ｋｇで静注投与した。
【００４７】
投与前、マウスを９５％および１０％Ｏ２チェンバーに３０分置き、治療直後、該チェンバーに２時間戻した。治療の２４時間後、腫瘍を取り出した。腫瘍組織を細かく切り刻み、その細切組織を、酵素カクテルで、攪拌しながら３７℃で１５分消化することによって単一細胞を得、４０μｍの滅菌マッシュでろ過した。細胞数をコールターカウンターでカウントした。連続希釈後、エルを、６０または１００ｍｍのペトリ皿に移し、３７℃で８から１０日インキュベートしコロニーを形成させた。クリスタルバイオレット（９５％エタノールに溶解した０．２５％液）による染色後、このコロニーをカウントした。コロニー形成率（ＰＥ）は、形成されたコロニーの数を、撒いた細胞の数で割ることによって計算した。生存率（ＳＦ）は、処理細胞のＰＥを、生理的食塩水コントロール処理細胞のＰＥで割ることによって計算した。
【００４８】
結果を、下記の図１に記載する。９５％Ｏ２を呼吸するマウスの腫瘍から得られた腫瘍細胞は、もっとも高いＳＦを示した。２１％Ｏ２、１０％Ｏ２、９５％Ｏ２を呼吸するマウスの腫瘍から得られる腫瘍細胞では、その平均ＳＦは、それぞれ、５．７６％、２．５８％、および５０．３８％であった。この結果は、インビボで、低酸素状態が増加するにつれて、ＴＨ３０２の抗腫瘍効力が増すことを示す。
【００４９】
（実施例７）
同所移植前立腺腫瘍の治療におけるＴＨ３０２効力の実証
本実験は、マウスに対し同所的に植えつけられた、ＰＣ−３ヒト前立腺腫瘍の治療におけるＴＨ３０２の効力を実証する。同所的に植えつけられる腫瘍は、侵襲的で、未治療腫瘍を担う動物を殺す。緑色蛍光タンパク（ＧＦＰ）ＰＣ３前立腺同所移植モデルにおいて、実験は、国際公開第０７／００２９３１（引用により本明細書に含める）の実施例５５に記載されるものと同じやり方で実行され、ただし、ゲムシタビンの代わりに、Ｔａｘｏｔｅｒｅ（登録商標）（１２ｍｇ／ｋｇ）が週に１回２週間投与された。ＴＨ３０２の投与は、ベヒクル群の最終測定値（３１日目）と比較すると、１６日の腫瘍増殖遅延（ＴＧＤ）、および８４％の腫瘍体積の低下をもたらした。Ｔａｘｏｔｅｒｅ（登録商標）単独は、３１日のＴＧＤ、および、２１±１５ｍｍ３の腫瘍後退をもたらしたが、一方、Ｔａｘｏｔｅｒｅ（登録商標）と組み合わせたＴＨ３０２によって治療された腫瘍は、１６±８ｍｍ３に後退した。この併用治療を受けたマウスの腫瘍が５００ｍｍ３の体積に達することは決してなかった。３１日目を過ぎると、Ｔａｘｏｔｅｒｅ（登録商標）で治療した腫瘍は増殖を始め、６２日目には７６０ｍｍ３の体積に達した。併用治療を受けたマウスの腫瘍は、Ｔａｘｏｔｅｒｅ（登録商標）単独治療に比べ、より優れた予後を示し、１８０ｍｍ３の体積に達した（Ｔａｘｏｔｅｒｅ（登録商標）単独に対しＰ＜０．０１）。ＴＨ３０２およびＴａｘｏｔｅｒｅ（登録商標）の併用で治療された８匹のマウスの内４匹は、検出可能なＧＦＰ発現を示さず、治癒と見なされた。これらの結果は、化学療法と組み合わされたＴＨ３０２は、癌の治療および治癒に有効であることを示した。
【００５０】
（実施例８）
ＴＨ３０２の抗転移癌効力の実証
本実施例は、ＴＨ３０２は、Ｔａｘｏｔｅｒｅ（登録商標）（ドセタキセル、Ｓａｎｏｆｉ  Ａｖｅｎｔｉｓ）と組み合わせて投与されると、骨および軟部組織における微小転移の治療に効力を有することを示す。雄性ヌードマウスの左心室に、ルシフェラーゼ遺伝子をトランスフェクトさせたＰＣ−３ヒト前立腺細胞（３×１０６）を注入した。心臓内トランスフェクションの成功は、注入後生物発光スキャンによって確認した。１４日目、骨腫瘍負荷が確立されたマウスを、四つの治療群（Ｎ＝１０）にランダムに割り当てた：Ｔａｘｏｔｅｒｅ（登録商標）単独群（２０ｍｇ／ｋｇ、週に１回、３週間、ｉ．ｖ．）、ＴＨ３０２単独群（５０ｍｇ／ｋｇ毎日、週に５日、３週間）、両薬剤による併用治療群、およびベヒクル群である。生物発光画像取得は、麻酔下、ＩＶＩＳ５０光学画像システムを用いて行った。
【００５１】
骨および、軟部組織腫瘍負荷（主に、肺と肝臓）は、ベヒクル群では、時間と共に約１０００倍に増加した。全てのベヒクル治療マウスは、病気の進行によって体重を失い、治療開始後２９日までに死んだ。ＴＨ３０２単独によって治療されたマウスは、実験の終了までに（４３日目）、骨転移（９４％）および軟部組織腫瘍負荷（９５％）の有意な低下を示した。体重減量は僅少であり、これは、病気進行の全体的低下を示唆する。Ｔａｘｏｔｅｒｅ（登録商標）単独で治療されたマウスは、ベヒクルと比べ、骨転移および軟部組織腫瘍負荷において有意な低下を示した。Ｔａｘｏｔｅｒｅ（登録商標）治療は、平均すると、実験の多くにおいて病気の進行を阻止し、ある程度の寛解をもたらしたが、減量および毒性関連死を招いた。
【００５２】
併用治療は、投与期間の後でも、骨転移および転移性軟部組織腫瘍負荷に対し、驚くほどの、持続的低下と関連していた。全ての生物発光は、２９日目までに消え、実験の終了までゼロに留まっていた。併用群の毒性は、Ｔａｘｏｔｅｒｅ（登録商標）群で観察されたものと同様であった。したがって、ＴＨ３０２は、Ｔａｘｏｔｅｒｅ（登録商標）関連毒性の外にはまったく毒性を示さなかった。ベヒクル群から得たサンプルについてＨ＆Ｅ染色したところ、骨全体から突出する、大きな転移性スポットが示されたが、一方、併用療法によって治療された動物は、あるとしても、ごく僅かな腫瘍細胞を呈する形態しか示さなかった。
【００５３】
これらの結果は、ＴＨ３０２単独が、前立腺転移性疾患という、この猛烈な、致死的モデルでも有効であることを示す。ＴＨ３０２と、Ｔａｘｏｔｅｒｅ（登録商標）との併用は有効であり、測定の限り、骨および軟部組織において転移を根絶した。したがって、ＴＨ３０２とＴａｘｏｔｅｒｅ（登録商標）の併用は、前立腺癌に関連する転移性疾患の治療には有用である可能性がある。
【００５４】
転移腫瘍はさらに、Ｈ４６０  ＮＳＣＬＣ癌細胞を胸腔に注入することによって増殖させた。外にもいろいろと器官のある中で、肺と卵巣に転移が観察された。これらの転移腫瘍を抱えるマウスに対する、ＴＨ３０２単独による治療（Ｑ３Ｄ×５、１００ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｖ．）によって、目に見える、転移腫瘍質量の低下が示された。したがって、ＴＨ３０２は、単独で投与した場合でも、別の抗癌剤と組み合わせて投与した場合でも、転移腫瘍の治療に有効である。
【００５５】
（実施例９）
放射線照射と組み合わせたＴＨ３０２の、癌治療における効力の実証
Ｈ４６０異種移植腫瘍担持マウスを、Ｘ線照射単独（１サイクルは１．２Ｇｙ／日、５日間）、および、ＴＨ３０２（ｉｐ投与、７５ｍｇ／ｋｇ／日、５連続日、各放射線投与の３０分後）との併用によって治療した。理論には拘束されないが、放射線治療では、殺作用の効力は、正常酸素腫瘍細胞に比べ、低酸素腫瘍細胞ではより低い。腫瘍細胞の殺作用に与り、酸素の放射線被爆下、例えば、正常酸素条件下で生成される酸素ラジカルは、低酸素条件下では効率的に形成されない。したがって、この実施例は、ＴＨ３０２は、腫瘍細胞を殺すために放射線治療と組み合わせて投与された場合、固体腫瘍の治療における放射線照射の抗腫瘍効力を強化することを示す。
【００５６】
（実施例１０）
ラットおよびイヌに対するＴＨ３０２の安全投与の実証
ＴＨ３０２の単回用量を、比較的高い薬剤レベルへの速やかな上昇を実現するために、ラットおよびイヌに３０分に亘って投与した。ラットには、５０、１００、および２００ｍｇ／ｋｇのＴＨ３０２を、イヌには、８、１６、および３２ｍｇ／ｋｇのＴＨ３０２を投与した。最高用量において種特異的毒性が、ラットの脂肪組織および脾臓に見られた。ラットでも、イヌでも、単回用量の最低毒性レベルでは、一次所見は、白血球数の低下であり、これは、雄性ラットにおいてのみ中等度の体重減少を伴っていた。最低毒性レベルにおけるこれらの変化は、２週間以内に完全に可逆的であった。ラットにおける２００ｍｇ／ｋｇ、イヌにおける３２ｍｇ／ｋｇの最高用量では、致死性が観察され、各動物種において毒性に冒された器官は、骨髄、腎臓、胸腺、および小腸であった。
【００５７】
これらの結果に基づき、ＴＨ３０２の１２．５、２５、および５０ｍｇ／ｋｇの用量を、ＧＬＰ複数用量毒性試験においてラットに投与した。各ラットに対し、週１回３０分輸液を３週間投与した（Ｑ７Ｄ×３）。一次毒性は、血清学的性質のもので、可逆的であった。これらの作用は、最高用量（５０ｍｇ／ｋｇ）においてのみ顕著で、この用量で組織病理学検査を行ったところ、骨髄および舌に作用が、腎臓および子宮に軽微な作用が明らかにされた。
【００５８】
４、８、および１６ｍｇ／ｋｇのＴＨ−３０２を服用したイヌにおける反復用量ＧＬＰ試験では、白血球減少および好中球減少血症が、特に高用量レベルで明白であり、かつ、このレベルでは、骨髄において細胞密度の低下が報告されている。これらの変化は可逆的であった。
【００５９】
最小有毒用量は、ラットでは２５ｍｇ／ｋｇ、イヌでは８ｍｇ／ｋｇと決定された。ラットの用量は、該ラット用量を６．２で割ることによって、推定されるヒトの等価用量に変換することが可能である。イヌの用量は、該イヌ用量を１．８で割ることによって、推定されるヒトの等価用量に変換することが可能である。したがって、２５ｍｇ／ｋｇのラット用量は、約４ｍｇ／ｋｇの、ヒトの等価用量に相当し、８ｍｇ／ｋｇのイヌ用量は、４．５ｍｇ／ｋｇの、ヒトの等価用量に相当する。
【００６０】
本実施例において実証されるように、本発明の、いくつかの他の実施態様では、ヒトにおける癌の治療のために、ＴＨ３０２は、約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約４０ｍｇ／ｋｇ、約０．２ｍｇ／ｋｇ〜約２０ｍｇ／ｋｇ、約０．４ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇ、または約０．８ｍｇ／ｋｇ〜約５ｍｇ／ｋｇの量の用量で、癌の治療のためにヒトの患者に対し、安全かつ、治療有効的に投与することが可能である。本発明の、いくつかの他の実施態様では、ヒトにおける癌の治療のために、ＴＨ３０２は、約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇ、約０．２ｍｇ／ｋｇ〜約５ｍｇ／ｋｇ、約０．４ｍｇ／ｋｇ〜約３ｍｇ／ｋｇ、または約０．８ｍｇ／ｋｇ〜約２ｍｇ／ｋｇの量の用量で、癌の治療のためにヒトの患者に対し、安全かつ、治療有効的に投与することが可能である。
【００６１】
治療的有効量の抗癌剤は、ｍｇ／ｍ２の単位で表すことが可能である。１ｍｇ／ｋｇは、患者１人当たり約７０ｍｇに等しい。平均的ヒト患者の推定体表面積は約１．７ｍ２である。したがって、１ｍｇ／ｋｇ、または７０ｍｇ／患者・用量は、約７０／１．７ｍｇ／ｍ２、すなわち、４０ｍｇ／ｍ２用量に等しい。したがって、ｍｇ／ｋｇで表したヒトの推定用量は、４０を掛けて、ｍｇ／ｍ２で表されるヒトの用量に変換することが可能である。したがって、一実施態様では、ＴＨ３０２は、約４ｍｇ／ｍ２〜約１６００ｍｇ／ｍ２、約８ｍｇ／ｍ２〜約８００ｍｇ／ｍ２、約１６ｍｇ／ｍ２〜約４００ｍｇ／ｍ２、約３２ｍｇ／ｍ２〜約２００ｍｇ／ｍ２の治療的有効量として、ヒトの患者に投与することが可能である。別の実施態様では、ＴＨ３０２は、約４ｍｇ／ｍ２〜約４００ｍｇ／ｍ２、約８ｍｇ／ｍ２〜約２００ｍｇ／ｍ２、約１６ｍｇ／ｍ２〜約１２０ｍｇ／ｍ２、約３２ｍｇ／ｍ２〜約８０ｍｇ／ｍ２の治療的有効量として、ヒトの患者に投与することが可能である。
【００６２】
ラットにおけるＴＨ３０２の２５ｍｇ／ｋｇ用量は、約２１１０時×ナノグラム（ｎｇ）／ｍＬのＡＵＣによって測定される薬剤暴露を示した。イヌにおけるＴＨ３０２の８ｍｇ／ｋｇ用量は、約１９１０時×ｎｇ／ｍＬを示した（下記の作表データを参照）。したがって、本発明のある実施態様では、ＴＨ３０２は、その暴露が約５００〜約１４，０００時×ｎｇ／ｍＬである場合、癌の治療のためにヒトの中に安全に投与することが可能である。活性毒素Ｂｒ−ＩＰＭについて測定されたＡＵＣは、ラットでは約９７時×ｎｇ／ｍＬであり、イヌでは約２１．８時×ｎｇ／ｍＬであった。したがって、一実施態様では、本発明は、癌の治療法であって、そのような治療を必要とする患者に対し、治療的有効量のプロドラッグＢｒ−ＩＰＭを投与することにより、プロドラッグＢｒ−ＩＰＭの前記治療的有効量は、血漿中のＢｒ−ＩＰＭとして約１０〜１０００時×ｎｇ／ｍＬのＡＵＣを提示する方法を提供する。
【００６３】
表１は、実施例１０にしたがってラットに対しＴＨ３０２を反復投与した後（Ｑ７Ｄ×３）１５日目に定量したＴＨ３０２の薬理動態パラメータを示す。
【００６４】
【表１】
2010514787.tif 000006
表２は、実施例１０にしたがってラットに対しＴＨ３０２を反復投与した後（Ｑ７Ｄ×３）に定量したブロモ−ＩＰＭ（ＨＯ−Ｐ（＝Ｏ）（ＮＨＣＨ２ＣＨ２Ｂｒ）２）の薬理動態パラメータを示す。Ｂｒ−ＩＰＭは、水、および、いくつかの、他の求核分子と反応することが可能なので、Ｂｒ−ＩＰＭのＨＰＬＣ分析では、得られた血漿を凍結し、ＮａＦおよびシュウ酸カリウムで処理した。
【００６５】
【表２】
2010514787.tif 000007
表３は、実施例１０にしたがってイヌに対しＴＨ３０２を反復投与した後（Ｑ７Ｄ×３）に定量したＴＨ３０２の薬理動態パラメータを示す。
【００６６】
【表３】
2010514787.tif 000008
表４は、実施例１０にしたがってイヌに対しＴＨ３０２を反復投与した後（Ｑ７Ｄ×３）に定量したブロモ−ＩＰＭ（ＨＯ−Ｐ（＝Ｏ）（ＮＨＣＨ２ＣＨ２Ｂｒ）２）の薬理動態パラメータを示す。
【００６７】
【表４】
2010514787.tif 000009
（実施例１１）
ＴＨ３０２の薬理動態（ＰＫ）の実証
雄性ＣＤ−１（５０ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｐ．、または経口（ｐ．ｏ．））、または雌性ヌードマウス（５０ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｖ．またはｉ．ｐ．）、雄性Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット（１、５、２０、および５０ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｖ．、および、１００ｍｇ／ｋｇ、ｐ．ｏ．）、ビーグル犬（２０ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｖ．）、およびｃｙｎｏｍｏｌｏｇｕｓ  ｍｏｎｋｅｙ（２０ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｖ．）において薬理動態試験を実施した。ＴＨ３０２血漿濃度を、ＬＣ／ＭＳ法を用いて分析し、薬理動態パラメータを、非コンパートメント法を用いて計算した。種間のスケール調整は、標準法を用いて実施した。ＣＤ−１マウスでは、ＴＨ３０２血漿濃度は、末端排泄相半減期（ｔ１／２）７．９で減少し、５０ｍｇ／ｋｇｉ．ｐ．およびｐ．ｏ．では、ｔ１／２は、それぞれ、２５．７分と９１分であり、ヌードマウスでは、５０ｍｇ／ｋｇｉ．ｖ．およびｐ．ｏ．では、ｔ１／２は、それぞれ、８．２分と９．７分であった。ヌードマウスにおける全身クリアランス（Ｃｌ）および、見かけの定常分布容量（Ｖｓｓ）は、それぞれ、４．３７Ｌ／時／ｋｇおよび０．５４２Ｌ／ｋｇであった。ラットでは、ＴＨ３０２は、試験した用量範囲に亘って直線的薬理動態を示した。血漿の末端排泄相平均半減期（ｔ１／２）は、ｉ．ｖ．用量投与後では、１．３２〜４．３７時の範囲にあった。平均Ｃｌは高く（４．６９〜６．１４Ｌ／時／ｋｇ）、平均Ｖｓｓは、大きかった（１．６５〜５．０９Ｌ／ｋｇ）。ｐ．ｏ．投与後では、ＴＨ３０２は、速やかに、確実に吸収され、平均ピーク血漿濃度には、１５分の第１サンプル時点で達し、絶対経口バイオアベイラビリティは７７．３％であった。ＴＨ−３０２の血漿末端排泄相ｔ１／２は、１．５９時であった。
【００６８】
イヌでは、ｉ．ｖ．投与後、平均ＣｌおよびＶｓｓは、それぞれ、３．２８Ｌ／時／ｋｇおよび１．９８Ｌ／ｋｇであった。平均ｔ１／２は４９．２分であった。サルでは、ＴＨ３０２は、高いＣｌ（７．６６Ｌ／時／ｋｇ）および大きいＶｓｓ（２．９２Ｌ／ｋｇ）を有していた。血漿ｔ１／２は２４．９分であった。複雑なＤｅｄｒｉｃｋ分析による種間スケール調整から、７０−ｋｇヒトでは、１０９Ｌ／時および４９３ＬのＣｌおよびＶｓｓが予想される。ＴＨ３０２は、直線的薬理動態、および優れた経口バイオアベイラビリティを示した。投与した全ての動物種において、ＴＨ−３０２は、高いＣｌおよび大きなＶｓｓを示した。観察された高いクリアランスは、肝臓以外のクリアランス経路が関わっている可能性を示す。下記のパートＡ、Ｂ、およびＣは、ラット、イヌ、およびサルに投与した場合の、ＴＨ３０２の薬理動態結果を作表したものである。
Ａ．ラットにおけるＴＨ３０２ＰＫの実証
ＴＨ３０２を、５０％ＰＥＧ４００／生理的食塩水に溶解し、２５ｍｇ／ｍＬ最終濃度の溶液を得、次いで、さらに希釈して、ＴＨ３０２（ｐＨ＝６）の、２５、１０、２．５、および０．５ｍｇ／ｍＬ処方を得た。これらの処方は、投与の直前に調製した。本試験では、雄性Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙラット（体重：２００ｇから２３０ｇ）を用いた。薬理動態試験の前に、動物を、四つの治療群にランダムに割り当て、血液の連続サンプル採取のため総頚動脈にカニューレを挿入した。全てのラットに、尾静脈を通じて、単回静注ボーラス用量を１分間投与した。血漿におけるＴＨ３０２の濃度は、高速液体クロマトグラフィー／質量分析（ＨＰＬＣ／ＭＳ／ＭＳ）法によって定量した。１、５、２０、および５０ｍｇ／ｋｇの用量における静注ボーラス投与後、ＴＨ３０２は、急速分布相に続くより緩徐な排泄相を有する、直線的薬理動態を示した。結果は、下記に表として掲げる。結果から、ヒトの毎日の等価用量である８ｍｇ／ｋｇまで、ＴＨ３０２は直線的薬理動態を示し、そのＡＵＣで測定したＴＨ３０２の暴露は、約８５００であることが示された。
【００６９】
【表５】
2010514787.tif 000010
Ｂ．ビーグル犬におけるＴＨ３０２薬理動態の実証
下表に見られるように、ＴＨ３０２の薬理動態をイヌにおいて実証した。
【００７０】
【表６】
2010514787.tif 000011
Ｃ．カニクイ猿におけるＴＨ３０２の薬理動態の実証
２０ｍｇ／ｋｇ（Ｎ＝３）用量の静注投与後における、ＴＨ３０２の薬理動態パラメータの個別の値および平均値を表７に示す。
【００７１】
【表７】
2010514787.tif 000012
（実施例１２）
ＴＨ３０２の生体分布の実証
本実施例は、ラットに対する［１４Ｃ］ＴＨ３０２の、単回ボーラス静注投与後、全身オートラジオグラフィー（ＷＢＡ）によって得た、インビボのＴＨ３０２分布を示す。５匹のＳｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙラットを一用量群に割り当てた。非放射線標識ＴＨ３０２（０．０６ｇ）を秤量して、適切な処方瓶に納めた。１５３μＬの［１４Ｃ］ＴＨ３０２溶液を測定し、該処方瓶に移し、次いで、５０ＰＥＧ４００の生理的食塩水溶液６．８５ｍＬを加えた。得られた処方を、０．２２μｍメッシュサイズの市販フィルターによって冷却滅菌した。この投与処方を周囲温に維持し、暗黒中で用量投与待機させた。放射線標識ＴＨ３０２は、この処方を５０ｍｇ／ｋｇ用量において動物に静脈内投与することによって投与した。その際、約１００μＣｉの放射能を投与した。ＴＨ３０２の投与後、選ばれた時点で動物を屠殺し、死骸を瞬間凍結し、薄切切片作製のために処理した。各死骸から、一連の、矢状および旁矢状切片を得、これを、十分な放射能プリントが得られるまで、高感度フィルムに暴露した。得られた画像は、コンピュータ化デンシトメトリーを用いて半定量的に分析した。結果から、ＴＨ３０２の静脈内投与後、放射能は、消化（ＧＩ）管、その内容物、および腎臓と関連することが示された。
【００７２】
（実施例１３）
ヒト患者におけるＴＨ３０２のＩ相臨床治験
本実施例は、癌患者に対するＴＨ３０２投与の、ラベル開放、複数センターによるＩ相治験を記載する。
ＴＨ３０２の処方および投与
注入用ＴＨ３０２（１００ｍｇ）を、１００ｍＬガラスバイアルに調製した。この製剤は、凍結乾燥ケーキであり、バイアルはストッパーで栓をし、蓋を折り返し密封した。ＴＨ３０２は、２から８℃の調節条件下に保存した。各用量は、２５０ｍＬのＤ５Ｗに溶解して調製し、輸液ポンプを用いて静脈内に３０分に亘って投与した。
【００７３】
ＴＨ３０２投与量および頻度は下記の通り：
レベル１：７．５ｍｇ／ｍ２毎週×３；１週の休薬期間
レベル２：１５．０ｍｇ／ｍ２毎週×３；１週の休薬期間
レベル３：３０．０ｍｇ／ｍ２毎週×３；１週の休薬期間
加速定量設計変法を用いる（Ｓｉｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，ＪＮＣＩ，８９：１１３８−４７，引用により本明細書に含める）。投与はレベル１で始める。最初の投与レベルには２名までの患者しか登録させなかった。最初の投与制限毒性（ＤＬＴ）、または、サイクル１において、病気の進行、併発症、同時投薬、または、他の非投薬介入とは明らかに関連しない、２等級毒性が発生するまでは、用量は、連続段階レベルを通過して１００％増加させた。ＤＬＴの定義は下記の通り。
【００７４】
＊３等級または４等級の、非血清学的毒性（発熱性好中球減少血症）
＊３等級または４等級の、医学的に管理不能の、悪心、嘔吐、または下痢
＊４等級の好中球減少血症の持続＞５日
＊４等級の血小板減少血症（または、血小板輸血を要する任意の事象）
＊４等級貧血（基礎疾患では説明のつかないもの）
＊以前には見られなかった、任意の２等級非血清学的毒性（２等級悪心、嘔吐、下痢、脱毛、および疲労を除く）であって、調査者、医学モニター、およびスポンサーの判断でＤＬＴと見なされるもの。
【００７５】
＊任意の２等級以上の非血清学的毒性であって、次のサイクルの開始までに０等級または１等級に解消せず、調査者、医学モニター、およびスポンサーの判断でＤＬＴと見なされるもの。
【００７６】
＊解消しない毒性のために、最終投与から２週間以内に第２治療サイクルを開始できない状況。
【００７７】
次の用量レベルに進む前に、医学モニターおよび主席調査者は、手元の安全性関連およびＰＫデータを検閲し、討論することになっている。
試験集団
本試験には、進行性固体腫瘍を持つ、最大４８名の患者が登録される。最大６名の患者から成る部分集団が、加速定量変法にしたがって用量漸増相に参加する。一旦ＭＴＤが確立されたならば、さらに６名の患者が、そのＭＴＤ用量レベルで登録される。その参加基準は下記の通り：
１．少なくとも１８歳である。
【００７８】
２．試験の目的およびリスクを理解することができ、調査者のＩＲＢ／倫理委員会によって承認されたインフォームドコンセント書面に署名した人。
【００７９】
３．組織学的、または細胞学的に確認された、進行または転移性固体悪性腫瘍。
【００８０】
４．以前に、一つ以上の化学療法処方によって治療されたか、または利用可能な効果的治療がまったく無い進行または転移性固体腫瘍。
【００８１】
５．以前の治療の毒性から回復した人。
【００８２】
６．ＲＥＣＥＳＴ基準による測定可能な疾患（少なくとも一つの標的病変）。
【００８３】
７．ＥＣＯＧパフォーマンス状態が０または１。
【００８４】
８．少なくとも３ヶ月の余命。
【００８５】
９．受容可能な肝臓機能：
＊ビリルビン≦正常の上限の１．５倍
＊ＡＳＴ（ＳＧＯＴ）およびＡＬＴ（ＳＧＰＴ）≦正常（ＵＬＮ）の上限の２．５倍
肝臓転移が存在する場合は、≦５×ＵＬＮも許容される。
【００８６】
１０．受容可能な腎機能：
＊血清クレアチニン（ＳＣＲ）が正常限界内、ＯＲクレアチニンクリアランス計算値（ＣＲＣＬ≧６０ｍＬ／分／１．７３ｍ２、クレアチニンレベルが、施設正常値を超える患者の場合）
１１．受容可能な血清学的状態（血清学的サポート無し）
＊ＡＮＣ≧１５００細胞／μＬ
＊血小板数≧１００，０００／μＬ
＊ヘモグロビン≧９．０ｇ／ｄＬ
１２．尿分析：臨床的に重大な異常無し。
【００８７】
１３．受容可能な凝固状態：
＊ＰＴ≦１．３×ＵＬＮ
＊ＰＴＴ≦１．３×ＵＬＮ
１４．受胎の可能性のある女子は全て、血清妊娠試験において陰性でなければならず、女性および男性被験者は、そのパートナーが試験に参加している場合、最後の投与から６ヶ月間、有効な避妊手段（外科的不妊、または、精子傷害ゲルまたはＩＵＤと組み合わせたコンドームまたはペッサリー（ｄｉａｐｈｒａｇｍ）による障壁避妊）の行使に同意しなければならない。
【００８８】
排除基準は下記の通り：
１．ニューヨーク心臓協会（ＮＹＨＡ）のクラスＩＩＩまたはＩＶの心臓病、１日目の前６ヶ月以内の心筋梗塞、または不安定な不整脈。
【００８９】
２．抗痙攣治療を必要とする痙攣発作障害。
【００９０】
３．脳転移症状（以前に治療されたことがなく、≧３ヶ月の期間十分コントロールされていない）。
【００９１】
４．低酸素血症を伴う重度の慢性閉塞性肺疾患、または、調査者の判断で、低酸素血症を招くとされる任意の生理的状態。
【００９２】
５．１日目前４週間以内の、診断的手術以外の大手術で、完全に回復していないもの。
【００９３】
６．全身治療を必要とする、活発な、コントロールされていない細菌、ウィルス、または真菌感染。
【００９４】
７．試験登録前４週間（ニトロソウレアまたはマイトマシンＣの場合は６週間）以内の、放射線療法、手術、化学療法、標的療法（エルロチニブ、ラパチニブなど）、またはホルモンによる治療。
【００９５】
８．試験登録前２８日以内に、試験薬剤またはデバイスの治験に参加していた患者。
【００９６】
９．ＨＩＶ、Ｂ型肝炎ウィルス、またはＣ型肝炎ウィルスによる感染が知られる。
【００９７】
１０．同様構造の化合物、生物製剤、または処方（ソリュトールおよび／またはプロピレングリコールを含む）に対してアレルギー反応を示したことのある患者。
【００９８】
１１．妊娠または哺乳中の女子。
【００９９】
１２．試験の進行に干渉する可能性があるか、または、調査者の判断では、本試験の被験者に対し受容不可能なリスクをもたらす可能性のある、同時進行の病気または病態。
【０１００】
１３．何らかの理由で、試験プロトコールを遵守する気が無いか、またはできないこと。
スクリーニング
候補者を、前述の参加および排除基準（セクション４、試験集団）にしたがって本試験への参加資格について評価した。調査者は、臨床検査値を含む、全ての試験結果を評価し、本試験に関する、各候補者の適性を判断する。調査者は、登録前に、基礎結果を知らなければならない。受胎の可能性のある女性に対する血清妊娠試験は、登録に進むべき被験者においては陰性でなければならない。全てのスクリーング手順は、１サイクル／１日目の前２１日以内に完了していなければならない。
【０１０１】
各候補の一般的健康状態、および、本試験への登録資格を定めるために、下記の手順を実行する。
【０１０２】
一次腫瘍の経過（および、分化の程度）を含む既往歴、一次腫瘍部位、癌の診断日付け、進行／転移疾患の診断日付け、以前の抗腫瘍治療法の種類（手術、放射線治療、全身治療を含む）および日付け、および、もっとも最近の病気進行の日付けを記録する。以前に治療したことがある場合、最後の化学療法に対する最善の反応、および進行の日付けを記録する。化学療法前後の腫瘍測定値がある場合、これらの腫瘍評価のためにＲＥＣＩＳＴを用いる。ビタミン、薬草、血液製剤、およびその他の、一般大衆（ＯＴＣ）薬を含む、最近の服薬履歴（１日目の前１４日以内に同時服用した全ての薬剤）を、登録被験者について記録する。１２−リードＥＣＧを得る。血圧（ＢＰ）、心拍数（ＨＲ）、呼吸数（ＲＲ）、および体温測定値を記録する。これらの測定は、標準的指令にしたがって行う。完全身体検査（眼球評価を含む）を行い、身長および体重を記録する。
【０１０３】
試験開始後、および、もっとも最近の抗腫瘍治療の完了後、もっとも最近の進行後２８日以内に、関連部位（単数または複数）（すなわち、下腹部、骨盤、および／または胸郭、プラス、全ての既知の疾病を評価するために、他の関連評価）のスパイラルＣＴスキャンによって腫瘍評価を実行する。既知の疾病は全て、ＲＥＣＩＳＴを用いて、標的または非標的病変として記録しなければならない。試験中緩和的放射線治療を必要とすることが予想される病変は、標的病変として含めず、非標的病変としてリストしなければならない。以前６週間内に放射線治療を受けたことがない病変は、標的病変としてもよい。
【０１０４】
Ｅａｓｔｅｒｎ  Ｃｏｏｐｅｒａｔｉｖｅ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ  Ｇｒｏｕｐ（ＥＣＯＧ）の治療成果状態を評価する。血液学および化学検査のために血液サンプルを採取する。要すれば、腫瘍マーカーを得る。クレアチニンクリアランスを、Ｃｏｃｋｒｏｆｔ−Ｇａｕｌｔ式を用いて計算し、ＢＳＡに基づいて標準化する：男子：ＣｒＣＬ（ｍＬ／分／１．７３ｍ２）＝（１４０−年齢）×（ＢＷ［ｋｇ］）×（ＢＳＡ）／（１．７３×７２×（血清クレアチニン［ｍｇ／ｄＬ］））であり、上式において、年齢は、年であらわした数字であり、ＢＳＡ＝体表面積（ｍ２）であり、ＢＷ（ｋｇ）は体重である。
女子：ＣｒＣＬ（ｍＬ／分／１．７３ｍ２）＝０．８５×（１４０−年齢）×（ＢＷ［ｋｇ］）×（ＢＳＡ）／（１．７３×７２×（血清クレアチニン［ｍｇ／ｄＬ］））。
【０１０５】
血清ＨＣＧ妊娠試験を、受胎の可能性のある女性被験者に対し（外科的に不妊とされるか、または閉経後少なくとも１年を経過していない限り、全ての女性被験者に対し）実行する。尿サンプルは、顕微鏡観察を含めて尿分析される。
治療期間：
１−６サイクル：ＴＨ３０２を、毎週３週間投与し、次いで、１週間休薬し、これを最大６サイクル行う。全て必要な試験評価は、別様に指示しない限り、指定の時点の±３日以内に取得しなければならない。被験者は、スクリーニング開始の２１日以内に試験薬剤の最初の用量を服用しなければならない。
【０１０６】
下記の手順は、ＴＨ３０２の投与前に、１サイクルの１日目に全ての被験者に行う。
【０１０７】
１サイクル、１、２、および３週目：ＴＨ−３０２およびＢｒ−ＩＰＭのＰＫ分析用の、投与前血液および尿サンプルを採取する（１週目および３週目のみ）。
【０１０８】
１〜６サイクル、１、２、および３週目：ＴＨ−３０２の投与前、血清ＡＬＴ、ＡＳＴ、ビリルビン、クレアチニン、およびクレアチニンクリアランス計算値を評価しなければならない。ＴＨ３０２投与のためには、クレアチニンクリアランスは、≧６０ｍＬ／分／１．７３ｍ２でなければならない。１サイクルの第１日目投与の前に、ＡＬＴ、ＡＳＴ、ビリルビン、およびクレアチニンは、ＴＨ３０２投与前３日以内の、プロトコール適用資格基準を満たさなければならない。
【０１０９】
投与後血漿および尿ＰＫ手順（１サイクルのみ）：輸液が３０分以内に完了しなかった場合、その後のＰＫ血液採取の時点はそれにしたがって調整される。血漿および尿サンプルは、ＴＨ−３０２およびＢｒ−ＩＰＭのＰＫ分析のために収集される。同時投薬薬剤を記録する。
用量上昇
最初のＤＬＴ、または、現在用量レベルにおいて、病気の進行、併発症、同時投薬、または、他の非投薬介入とは明らかに関連しない、２等級薬剤関連毒性出現の後、部分集団のサイズを、最低３名の被験者に増大させる。次に、３名の被験者から成る後続部分集団を、漸増用量によって、ＭＴＤが定められるまで治療する。各用量上昇は、先行用量よりも２０％から４０％大きく、そのパーセント増加は、現在の用量レベル、および累積安全性データに依存する。ある用量レベルの部分集団における被験者は全て、次に高い用量レベルにその被験者を登録する前に、４週間（またはＤＬＴまで）の追跡を必要とする。個々の患者の用量上昇は許されない。
【０１１０】
最初のＤＬＴ、または、病気の進行、併発症、同時投薬、または、他の非投薬介入とは明らかに関連しない、２等級薬剤関連毒性を観察した後、少なくとも３名の患者が、各用量レベルに登録される。最初の３名の患者の内１名が、ある用量レベルで、第１サイクルにおいてＤＬＴを経験した場合、さらに最大３名の患者がその用量レベルで治療される。もしもある用量レベルで、２名以上の患者が、第１サイクルにおいてＤＬＴを経験した場合、その時ＭＴＤは超えられたのであるから、合計で最大６名の患者が、次に低い用量で治療される。この次に低い用量で、６名の患者の内、２よりも少ない数の患者がＤＬＴを経験した場合、この用量がＭＴＤと定められる。
【０１１１】
一旦ＭＴＤが定められたならば、さらに６名が、このＭＴＤ用量レベルに登録される。
用量変更
下表にまとめた用量変更は、個々の患者に許される。投与を遅らせることが必要な場合、投与は一つ飛ばされ、患者には、スケジュールの次の投与が与えられる。患者が、毒性のために、２回を超える投与削減を必要とする場合は、その患者への治療は中断しなければならない。
【０１１２】
【表８】
2010514787.tif 000013
評価のスケジュール
各被験者に対する試験の活動的部分の全持続時間は、約３０週であり、これは下記のように分割される：
３週まで、投与前（スクリーニング期間）；最大６回の４週サイクルの治療（２４週治療期間）；必要に応じて、治療期間の終了時までに進行しなかった被験者に対し、調査者および医学モニターによる検閲を経てケースバイケースで治療の続行を許可する；安全性追跡期間（試験終了訪問、試験投薬の最終投与後１−２週）；１サイクル／１日目前２１日以内に全ての被験者をスクリーニングする（スクリーニング訪問）。
【０１１３】
安全性を評価するには、生命兆候、臨床検査結果、体重、およびＡＥを用いる。効力は、試験中時々行った腫瘍評価（客観的反応率および反応の持続）、および総合生存率に基づいて評価される。
試験終了／早期試験終了
試験終了時、ＣｒＣＬが異常（女性では＜７５ｍＬ／分／１．７３ｍ２、男性では＜８５ｍＬ／分／１．７３ｍ２）で、１サイクル／１日目の数値よりも少なくとも５ｍＬ／分低い場合、３週に１回、血清クレアチニンを測定し、ＣｒＣＬを計算し、それを、どちらが先でもよいから、その値が基礎値に戻るまで、または１２週間続けなければならない。
薬理動態試験手順
ＴＨ−３０２および／またはＢｒ−ＩＰＭの血漿濃度のＰＫ定量のための血液サンプルは、試験に登録した全ての被験者について、１サイクルの１日目および１５日目のみ、投与前の１５および３０（輸液の終了）３５、４５分、輸液の開始後１、１．５、２、２．５、３．５、４．５、６．５、８．５、および１２．５時間に採取される。輸液が３０分以内に完了しなかった場合、その後のＰＫ血液採取の時点はそれにしたがって調整しなければならない。１サイクルの８日目、ＰＫ分析用血液サンプルは、投与前と、輸液の終了時に収集される。
【０１１４】
尿は、下記の時間間隔：投与前、１サイクル（１および１５日目のみ）の輸液開始後０〜４、４〜８、および８〜１２時間における投与の、最初の１２時間後に収集される。
【０１１５】
血漿および尿サンプルの収集、処理、保存、および輸送に関する詳細は、別のマニュアルに提示される。
安全性手順
完全身体検査を、スクリーニング時、および、試験終了時、または早い試験終了時に行う。限定身体検査を、１−６サイクルの１週目治療の前５日以内に行う。眼球評価は、各完全および限定身体検査において行う。眼球評価の結果が臨床的に重大であるならば、患者には、さらに精しい評価のために眼科医の診察を照会する。各完全および限定身体検査では神経学的検査を行う。各投与前に体重を測定する。身体検査の結果は、安全性監視のためにのみ使用される。各試験訪問時には、医療実施基準にしたがって、継続投与が適切かどうかを判断するために、被験者の一般的健康（例えば、外見、病気または傷害の存在、体温、および、併発病を示す生命兆候）を評価する。
【０１１６】
各被験者から収集すべき、サンプルの最大数、および大体の血液量を表９に示す。
【０１１７】
【表９−１】
2010514787.tif 000014
【０１１８】
【表９−２】
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各被験者から、試験中、合計約４１５ｍＬの血液を採取する：スクリーニング時に２５ｍＬ、１サイクル時に２９０ｍＬ、各２〜６サイクル時に３５−４０ｍＬ、および試験終了時に１５ｍＬ。血液サンプルは、臨床検査測定値、ならびにＴＨ−３０２およびＢｒ−ＩＰＭのピーク濃度を評価するのに用いる。
【０１１９】
本発明は、これまでその特異的実施態様を参照しながら説明されてきたが、当業者であれば、本発明の範囲を逸脱することなく、種々の変更の実行、および等価物の置換が可能であることを理解しなければならない。さらに、本発明の範囲から逸脱することなく、本発明によって提供される利点を実現するために、ある特定の状況、材料、物質の組成、プロセス、プロセス工程（単数または複数）に適応するように、多くの修飾を実行することが可能である。このような修飾は全て、本明細書に添付される特許請求の範囲に納まることが意図される。
【０１２０】
本明細書において引用される刊行物および特許文書は全て、それらの刊行物または文書のそれぞれが、あたかも、特異的、個別的に引用によって本明細書に含められると表示されるのと同様に、引用によって本明細書に含められる。刊行物および特許文書の引用は、そのような文書のいずれかが、関連従来技術であることの表示を意図するものでもなく、また、関連従来技術の内容または日付けに関して何らかの認容を構成するものでもない。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【国際調査報告】
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