(57)【要約】本発明は、伝導障害、電撃痙攣および／または発作、特にてんかん、より詳細には小児てんかんによって特徴づけられる障害を治療するための、ピリダジン化合物の治療的および／または予防的使用、ならびにこれらの化合物の１つ以上を有効成分として含む医薬組成物に関する。本発明の一態様では、ピリダジン化合物は、式ＩａまたはＩｂ：2010520223.tif 000115（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６およびＲ７は、明細書中に定義されたとおりである）を有する。
2010520223.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
伝導障害、電撃痙攣および／または発作によって特徴付けられる障害を治療するための医薬組成物であって、該障害を治療するための治療有効量のピリダジン化合物、および医薬的に許容される担体、賦形剤、またはビヒクルを含む医薬組成物。
【請求項２】
ピリダジン化合物が、アリールまたは置換アリール、ヘテロアリールまたは置換ヘテロアリールを有するペンダント状のピリダジニル基を含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
前記ヘテロアリールが、ピリミジニルまたはピリジニルで置換されたピペラジニルである、請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
前記ピリダジン化合物が、式ＩａまたはＩｂ：
【化１０】
2010520223.tif 000110
（式中、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は、独立して、水素、ヒドロキシル、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルキレン、アルケニレン、アルコキシ、アルケニルオキシ、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、シクロアルコキシ、アリール、アリールオキシ、アリールアルコキシ、アロイル、ヘテロアリール、複素環、アシル、アシルオキシ、スルホニル、スルフィニル、スルフェニル、スルホキシド、サルフェート、スルホネート、アミノ、イミノ、アジド、チオール、チオアルキル、チオアルコキシ、チオアリール、ニトロ、ウレイド、シアノ、ハロ、シリル、シリルオキシ、シリルアルキル、シリルチオ、＝Ｏ、＝Ｓ、ホスホネート、カルボキシル、カルボニル、カルバモイル、またはカルボキサミドであり；Ｒ７は、置換もしくは非置換の、水素、ヒドロキシル、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルキレン、アルケニレン、アルコキシ、アルケニルオキシ、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、シクロアルコキシ、アリール、アリールオキシ、アリールアルコキシ、アロイル、ヘテロアリール、複素環、アシル、アシルオキシ、スルホニル、スルフィニル、スルフェニル、スルホキシド、サルフェート、スルホネート、アミノ、イミノ、アジド、チオール、チオアルキル、チオアルコキシ、チオアリール、ニトロ、ウレイド、シアノ、ハロ、シリル、シリルオキシ、シリルアルキル、シリルチオ、＝Ｏ、＝Ｓ、ホスホネート、カルボキシル、カルボニル、カルバモイル、またはカルボキサミドであり、またはＲ７は不在であってよく、１位のＮと６位のＣとの間には二重結合が存在し；Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６は、独立して、水素、アルキル、アルコキシ、ハロ、またはニトロであり；またはＲ１およびＲ２、Ｒ１およびＲ７、またはＲ２およびＲ３は、ヘテロアリールまたは複素環を形成してよい）；またはその異性体もしくは医薬的に許容される塩を有する、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項５】
前記ピリダジン化合物が、式ＩＩ：
【化１１】
2010520223.tif 000111
（式中、Ｒ１０およびＲ１１は、独立して、水素、ヒドロキシル、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルキレン、アルケニレン、アルコキシ、アルケニルオキシ、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、シクロアルコキシ、アリール、アリールオキシ、アリールアルコキシ、アロイル、ヘテロアリール、複素環、アシル、アシルオキシ、スルホニル、スルフィニル、スルフェニル、スルホキシド、サルフェート、スルホネート、アミノ、イミノ、アジド、チオール、チオアルキル、チオアルコキシ、チオアリール、ニトロ、ウレイド、ホスホネート、シアノ、ハロ、シリル、シリルオキシ、シリルアルキル、シリルチオ、＝Ｏ、＝Ｓ、カルボキシル、カルボニル、カルバモイル、またはカルボキサミドである）；またはその異性体もしくは医薬的に許容される塩を有する、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項６】
前記ピリダジン化合物が、式ＩＩＩ：
【化１２】
2010520223.tif 000112
（式中、Ｒ１５およびＲ１６は、独立して、置換もしくは非置換の、水素、ヒドロキシル、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルキレン、アルケニレン、アルコキシ、アルケニルオキシ、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、シクロアルコキシ、アリール、アリールオキシ、アリールアルコキシ、アロイル、ヘテロアリール、複素環、アシル、アシルオキシ、スルホニル、スルフィニル、スルフェニル、スルホキシド、サルフェート、スルホネート、アミノ、イミノ、アジド、チオール、チオアルキル、チオアルコキシ、チオアリール、ニトロ、ウレイド、シアノ、ハロ、シリル、シリルオキシ、シリルアルキル、シリルチオ、＝Ｏ、＝Ｓ、ホスホネート、カルボキシル、カルボニル、カルバモイル、またはカルボキサミドである）；またはその異性体もしくは医薬的に許容される塩を有する、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項７】
前記ピリダジン化合物が、式ＩＶ：
【化１３】
2010520223.tif 000113
（式中、Ｒ７０は、置換もしくは非置換の、水素、ヒドロキシル、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルキレン、アルケニレン、アルコキシ、アルケニルオキシ、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、シクロアルコキシ、アリール、アリールオキシ、アリールアルコキシ、アロイル、ヘテロアリール、複素環、アシル、アシルオキシ、スルホニル、スルフィニル、スルフェニル、スルホキシド、サルフェート、スルホネート、アミノ、イミノ、アジド、チオール、チオアルキル、チオアルコキシ、チオアリール、ニトロ、ウレイド、シアノ、ハロ、シリル、シリルオキシ、シリルアルキル、シリルチオ、＝Ｏ、＝Ｓ、カルボキシル、ホスホネート、カルボニル、カルバモイル、またはカルボキサミド、特に複素環、ヘテロアリール、アミノ、および置換アミノであり；およびＲ７１は、アリールまたは置換アリールである）；またはその異性体もしくは医薬的に許容される塩を有する、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項８】
前記ピリダジン化合物が、式Ｖ：
【化１４】
2010520223.tif 000114
（式中、Ｒ５０、Ｒ５１、およびＲ５２は、独立して、水素、ヒドロキシル、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルキレン、アルケニレン、アルコキシ、アルケニルオキシ、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、シクロアルコキシ、アリール、アリールオキシ、アリールアルコキシ、アロイル、ヘテロアリール、複素環、アシル、アシルオキシ、スルホニル、スルフィニル、スルフェニル、スルホキシド、サルフェート、スルホネート  アミノ、イミノ、アジド、チオール、チオアルキル、チオアルコキシ、チオアリール、ニトロ、ウレイド、シアノ、ハロ、シリル、シリルオキシ、シリルアルキル、シリルチオ、＝Ｏ、＝Ｓ、ホスホネート、カルボキシル、カルボニル、カルバモイル、またはカルボキサミドである）；またはその異性体もしくは医薬的に許容される塩を有する、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項９】
前記ピリダジン化合物が、表１に記述された化合物を含まない、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
前記ピリダジン化合物が、２−（４−（４−メチル−６−フェニルピリダジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）ピリミジン二塩酸塩である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
対象における伝導障害、電撃痙攣および／または発作によって特徴付けられる障害を治療および／または予防するための方法であって、請求項１〜１０のいずれかに記載の組成物の治療有効量を投与することを含む方法。
【請求項１２】
障害がてんかんである、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
対象が小児患者である、請求項１１または１２に記載の方法。
【請求項１４】
伝導障害、電撃痙攣および／または発作によって特徴付けられる障害を治療および／または予防するための、請求項１〜１３のいずれかに記載の組成物の使用。
【請求項１５】
伝導障害、電撃痙攣および／または発作によって特徴付けられる障害を治療および／または予防するための、請求項１〜１４のいずれかに記載のピリダジン化合物または組成物、容器、およびその使用法の指示書を含むキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、「国立衛生研究所」により授与された助成金番号第ＡＧ０２８５６１号および同第ＮＳ０４４９９８号のもと政府の支援でなされた。米国政府は、本発明における一定の権利を有する。
【０００２】
本発明は、発作関連障害患者、特にてんかん患者の治療のための組成物および方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
てんかんは、世界中で何百万人もの人々に影響を及ぼす一般的な、しかし、破壊的な障害である。てんかんは、神経活動に対して一過性ではあるが、再発性の過度なまたは異常な障害により特徴付けられる慢性の神経学的病態である。これらの障害は、運動、痙攣、知覚的または精神的徴候として、特に発作および意識喪失の形態で現れることがある。
【０００４】
てんかん症候群は、特徴的な徴候、発作の種類、原因、発症年齢およびＥＥＧパターンに基づいて４０を超える異なったタイプに分類されてきた。これらは、欠神発作、精神運動性てんかん、側頭葉てんかん、前頭葉てんかん、後頭葉てんかん、頭頂葉てんかん、レノックス−ガストー症候群、ラスムッセン脳炎、小児期欠神てんかん、ラムゼイハント症候群タイプＩＩ、良性てんかん症候群、乳児良性脳症、新生児良性痙攣、早期ミオクロニー脳症、進行性てんかんおよび乳児てんかんを含むが、これらに限定されない。
【０００５】
発作患者らは、彼らが参加することのできる活動の種類にしばしば制限される。発作は、人々が運転すること、働くこと、あるいは、それ以外に社会が提供しなければならないものの多くに参加することを妨げることがある。一部の患者は、彼らが事実上、無能力にされるほど、しばしば、重い発作にかかっている。さらにまた、これらはしばしば進行性であり、変性障害や病態を伴うことがある。時間とともに、発作はしばしばより頻繁となり、より重くなり、特にひどい場合には、身体的な障害だけでなく他の脳機能の悪化につながる可能性がある。
【０００６】
痙攣を治療抑制する多くの治療法が、てんかんおよび発作を含む他の障害の防除のために開発されてきたが、発作は例えば、てんかん患者のおよそ３分の１では抑制されないままであり、治療の失敗が一般的である（非特許文献１）。さらにより重要なことは、時間が経つにつれて、患者はしばしば薬物に耐性となることである。そのうえ、多くの抗発作薬剤は、望ましくない副作用、神経毒性、および薬物相互作用を引き起こす。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Ｌｏｓｃｈｅｒ，Ｗ．ａｎｄ  Ｓｃｍｉｄｔ，Ｄ．２００２，Ｅｐｉｌｅｐｓｙ  Ｒｅｓ．５０：３−１６
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
したがって、例えば、最小の副作用で、てんかんなどの発作およびその関連する徴候を含む病態を治療または予防する医薬組成物に対しての継続的な必要性が存在する。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明は、てんかんを含む発作関連障害の治療のための、ピリダジン化合物の治療的および／または予防的使用、およびこれらの化合物の１つ以上を有効成分として含む医薬組成物に関する。
【００１０】
本発明は、対象における発作関連障害の治療のための治療有効量のピリダジン化合物を含む組成物を提供する。特に、本発明は、対象におけるてんかんの治療のための治療有効量のピリダジン化合物を含む組成物を提供する。本発明の組成物は、概してピリダジン化合物を医薬的に許容される担体、賦形剤またはビヒクル中に含む。
【００１１】
一態様では、本発明の医薬組成物は、治療有効量のピリダジン化合物を含み、有益な効果、特に処置後に持続される有益な効果を提供する。
【００１２】
他の態様では、医薬組成物は、好ましい薬理学的プロファイルを有するピリダジン化合物を含み、安全性および寛容性が強化される必要性がある小児患者および／または長期間の治療を受ける患者などに特に適合させる。
【００１３】
本発明は、本発明の組成物を製造するための方法をさらに提供する。一態様では、本発明は、本明細書で開示される障害に使用するのに適したピリダジン化合物を含む医薬組成物を製造する方法を提供する。１つの方法は、１つ以上のピリダジン化合物と、場合により医薬的に許容される担体、賦形剤またはビヒクルとを配合することを含むことができる。医薬的に許容される担体、賦形剤、またはビヒクルは、物理的にピリダジン化合物（複数可）を安定させるために効果的であるものを選択してよい。組成物は、製造された後、適切な容器に入れられ、適応症状の治療のためにラベルを付されてよい。本発明の組成物の投与のために、そのようなラベルには、投与量、投与頻度および投与方法が含まれ得る。
【００１４】
いくつかの態様では、本発明は、本明細書で開示される障害に使用するのに適したピリダジン化合物を含む、市販の丸剤、錠剤、カプレット剤、軟質ゼラチンカプセル剤および硬質ゼラチンカプセル剤、ロゼンジ剤、サシェ剤、ベジキャップ剤、液滴剤、エリキシル剤、懸濁剤、乳剤、液剤、シロップ剤、エアゾール剤（固体として、または液体媒体中で）坐薬、無菌注射溶液、ならびに／または無菌の包装された散剤を製造するための方法を提供する。
【００１５】
本発明は、また、障害の重症度、障害の徴候を予防および／または改善するか、および／または本明細書で開示される障害の再発周期を減らすための、本発明の１つ以上のピリダジン化合物または方法の使用を意図する。
【００１６】
したがって、本発明は、本発明のピリダジン化合物または組成物を用いた、対象における本明細書で開示される障害の予防および治療を意図する。特に、本発明は、本発明の１つ以上のピリダジン化合物または組成物の治療有効量を対象に投与することを含む、対象において本明細書で開示される障害を治療する方法を提供する。本発明の方法は、本明細書で開示される障害に対する素因に感受性である対象、または素因を有する対象において、予防的にまたは治療的に使用することができる。
【００１７】
一態様では、本発明は、対象における本明細書で開示される障害の予防および／または治療介入のための方法であって、本発明の少なくとも１つのピリダジン化合物または組成物を対象に投与することを含む方法を提供する。
【００１８】
本発明は、本明細書で開示される障害の治療をする方法であって、本発明の少なくとも１つのピリダジン化合物または組成物をそのような治療を必要とする対象に投与することを含み、それにより有益な効果、特に治療後の持続される有益な効果をもたらす方法を提供する。一態様では、化合物または組成物は、経口または全身投与される。
【００１９】
一態様では、本発明は、本明細書で開示される障害に罹患している対象において、そのような障害の進行を改善する、または障害の重篤度が低い状態を得るための方法であって、本発明の１つ以上のピリダジン化合物または組成物の治療有効量を投与することを含む方法を提供する。
【００２０】
本発明は、本明細書で開示される障害の進行を遅らせる方法であって、本発明の１つ以上のピリダジン化合物または組成物の治療有効量を投与することを含む方法に関する。
【００２１】
本発明は、また、本明細書で開示される障害に罹患している対象の生存率を高める方法であって、本発明の１つ以上のピリダジン化合物または組成物の治療有効量を投与することを含む方法にも関する。
【００２２】
一実施形態では、本発明は、本明細書で開示される障害に罹患している対象の寿命を長くする方法であって、本発明の１つ以上のピリダジン化合物または組成物の治療有効量を投与することを含む方法に関する。
【００２３】
本発明の特定の実施形態では、組成物および方法は、対象の病態の原因にかかわりなく、発作関連障害（例えば発作、伝導障害、および電撃痙攣）およびこれらの兆候の予防、緩和、および／または治療に有用である。
【００２４】
本発明は、グリア活性化を抑制することを含む、小児患者のてんかんの予防、緩和および／または治療のための方法を提供する。特定の一態様では、本発明は、乳幼仔期発作後に炎症促進性サイトカイン（例えば、ＩＬ−βおよびＳ１００Ｂ）を減少させることを含む、小児患者のてんかんの予防、緩和および／または治療のための方法を提供する。
【００２５】
本発明の治療方法は、数日、数週間、数カ月、数年にも渡って持続させることができ、それによって障害またはその合併症の重症度に大きな有益な効果をもたらす。
【００２６】
本発明は、また、医薬としての、または本明細書で開示される障害を予防および／または治療するための医薬の製造のための、１つ以上のピリダジン化合物の使用も意図する。
【００２７】
本発明は、さらに、医薬としての、または本明細書で開示される障害を予防および／または治療するための医薬の製造においての、本発明の医薬組成物の使用を提供する。本発明の態様では、医薬は、有益な効果、好ましくは、治療後に持続される有益な効果を提供する。医薬は、対象が服用するのに適した形態、例えば、丸剤、錠剤、カプレット剤、軟質ゼラチンカプセル剤および硬質ゼラチンカプセル剤、ロゼンジ剤、サシェ剤、ベジキャップ剤、液滴剤、エリキシル剤、懸濁剤、乳剤、液剤、シロップ剤、エアゾール剤（固体として、または液体媒体中で）坐薬、無菌注射溶液、ならびに／または無菌の包装された散剤の形態とすることができる。
【００２８】
本発明の組成物または方法は、健康な対象または本明細書で開示される障害に罹患した対象に投与することができる。したがって、一実施形態では、本発明のピリダジン化合物または組成物は、対象での発症の前か後に投与すべきである。
【００２９】
本発明は、また、本発明のピリダジン化合物または医薬組成物をキットの形態で含むキットを提供する。一態様では、本発明は、本発明の１つ以上のピリダジン化合物または医薬組成物、容器および本明細書で開示される障害を治療および／または予防する際に使用するための指示書を含むキットを提供する。
【００３０】
本発明のこれらおよび他の態様、特徴、ならびに利点は、以下の詳細な記載から当業者には明らかであるはずである。
【図面の簡単な説明】
【００３１】
【図１】（Ａ）発作発症までの潜時；（Ｂ）生存率；および（Ｃ、Ｄ）未成熟ラットおよび成体ラットにおけるカイニン酸（ＫＡ）誘発発作後の神経細胞障害の定量化。（Ａ）出生後日数（Ｐ）１５（ＫＡ−ＰＢＳ）での発作発症の潜時（分±ＳＥＭ）は、成体（Ｐ４５）発作（ＰＢＳ−ＫＡ）と比較して減少する。乳幼仔期発作は、成体発作（ＰＢＳ−ＫＡ）群と比較して、「ツーヒット」（Ｔｗｏ−ｈｉｔ）（Ｐ１５およびＰ４５）発作群（ＫＡ−ＫＡ）における発作の減少した潜時により示される成体期における発作に対する感受性を増大する。（Ｂ）Ｐ１５でＫＡまたはビヒクル（ＰＢＳ）投与後の４０日間にわたる回復のＫａｐｌａｎ−Ｍｅｉｅｒ生存曲線は、有意差がある（対数順位検定、ｐ＜０．０５）。生存率は、ＫＡのセカンドヒット（ｓｅｃｏｎｄ  ｈｉｔ）後、ＫＡ−ＫＡ群では有意に減少する。（Ｃ）「ツーヒット（ＫＡ−ＫＡ）」動物の海馬ＣＡ１領域における、ＤＡＰＩで対比染色された、死亡したまたは死滅する神経細胞（緑色）のＦｌｕｏｒｏ−Ｊａｄｅ  Ｂ（ＦＪＢ）蛍光を示す代表的な顕微鏡写真。（Ｄ）対照（ＰＢＳ−ＰＢＳ）群およびＫＡ−ＰＢＳ群の海馬での４０日の回復期間後のＦＪＢ−蛍光の定量化は、傷害の何らの証拠を示さない。「ツーヒット」（ＫＡ−ＫＡ）動物は、最初にＫＡ（ＰＢＳ−ＫＡ）に曝露された成熟動物と比較して、より大きな傷害を示す。（Ｅ）海馬の横断面の細胞数に対する関心領域。ＣＡ１、ＣＡ２、ＣＡ３、歯状回（ＤＧ）、および多形歯状回（ＰｏＤＧ）のデジタル画像は、低電力（１０Ｘ）で得られた。各々の画像は、陽性染色に対して分析され、結果が加味されて全体の海馬染色を表示した。＊＊＊ｐ＜０．００１；＊＊ｐ＜０．０１対分散分析（ＡＮＯＶＡ）によるＰＢＳＰＢＳ。スケールバー、（Ｃ）１００μｍ；（Ｅ）２００μｍ。
【図２】ＫＡ誘発発作は、２４時間の回復後の海馬の炎症促進性サイトカインタンパク質レベルを上昇させる。（Ａ）ＩＬ−１βの有意な増加が、新生仔（Ｐ１５  ＫＡ）および成体（Ｐ４５  ＫＡ）で存在した。群間の違いは、ＩＬ−６またはＴＮＦ−α（Ｂ、Ｃ）に対して見られなかった。（Ｄ）Ｓ１００Ｂレベルは、新生仔および成体の両方での発作の後で、対照と比較して有意に上昇した。Ｐ値は、ＡＮＯＶＡで測定された。
【図３】（Ａ）新生仔でのＫＡ誘発発作は、海馬関連タスクでの損傷をもたらす。乳幼仔期発作（ＫＡ−ＰＢＳ）後のＹ−迷路でのラットの自発的交替行動の連続測定値は、４０日間回復の対照（ＰＢＳ−ＰＢＳ）と比較して減少を示す。（Ｂ〜Ｆ）Ｐ１５でのＫＡ誘発発作は、Ｐ５５でのＧＦＡＰの海馬発現の持続性の増加を引き起こす。代表的な顕微鏡写真は、対照（Ｂ、ＰＢＳ−ＰＢＳ）、乳幼仔期発作（Ｃ、ＫＡ−ＰＢＳ）、成体期発作（Ｄ、ＰＢＳ−ＫＡ）、および「ツーヒット」（Ｅ、ＫＡ−ＫＡ）動物の海馬ＣＡ１領域におけるＧＦＡＰ免疫染色を例示する。ＫＡ−ＰＢＳ、ＰＢＳ−ＫＡおよびＫＡ−ＫＡ群のＣＡ１領域におけるＧＦＡＰ陽性の星状細胞の形態は、対照（ＰＢＳ−ＰＢＳ）に比べて、活性化されたグリアに似ている。（Ｆ）４群の海馬の合わせた領域でのＧＦＡＰ免疫反応性細胞の定量化。３つのＫＡ処置群のすべては、対照と比較してＧＦＡＰ発現の有意な増加を示した。（Ｇ〜Ｋ）Ｐ１５でのＫＡ誘発発作は、４０日間の回復に渡り、Ｓ１００Ｂの海馬発現の長期的増加をもたらす。（Ｇ〜Ｊ）ＰＢＳ−ＰＢＳ（Ｇ）、ＫＡ−ＰＢＳ（Ｈ）、ＰＢＳ−ＫＡ（Ｉ）、およびＫＡ−ＫＡ（Ｊ）動物の海馬ＣＡ１領域におけるＳ１００Ｂ免疫染色を例示する代表的な顕微鏡写真。（Ｋ）４群の海馬の合わせた領域でのＳ１００Ｂ免疫反応性細胞の定量化。３つのＫＡ処置群のすべては、対照と比較してＳ１００Ｂ発現の有意な増加を示した。対比染色剤は、ヘマトキシリンである。挿入図（Ｂ〜Ｅ；Ｇ〜Ｊ）は、ＣＡ１のより高倍率の顕微鏡写真を表わす。＊＊＊ｐ＜０．００１対ＰＢＳ−ＰＢＳ；＊＊ｐ＜０．０１対ＰＢＳ−ＰＢＳ（ＡＮＯＶＡによる）。スケールバー、（Ｂ）２００μｍ；挿入図（Ｂ）１００μｍ。
【図４】成熟動物のＫＡ誘発ミクログリア活性化は、乳幼仔期発作によって促進される。（Ａ〜Ｄ）ＰＢＳ−ＰＢＳ（Ａ）、ＫＡ−ＰＢＳ（Ｂ）、ＰＢＳ−ＫＡ（Ｃ）およびＫＡ−ＫＡ（Ｄ）動物の海馬ＣＡ１領域におけるＩｂａｌ免疫染色を例示する代表的な顕微鏡写真。挿入図（Ａ〜Ｄ）は、ＣＡ１のより高倍率の顕微鏡写真である。（Ｅ）４群の海馬の合わせた領域でのＩｂａｌ免疫反応性細胞の定量化は、乳幼仔期発作（ＫＡ−ＰＢＳ）の後、ミクログリア活性化の長期間の増加を示さない。「ツーヒット」（ＫＡ−ＫＡ）群は、成体発作群（ＰＢＳ−ＫＡ）と比較して、有意に大きなミクログリア活性化を示した。両群の値は、対照（ＰＢＳ−ＰＢＳ）と比較して増加した。＊＊＊ｐ＜０．００１対ＰＢＳＰＢＳ；＊＊ｐ＜０．０１対ＰＢＳ−ＰＢＳ（ＡＮＯＶＡによる）。スケールバー（Ａ）２００μｍ；挿入図（Ａ〜Ｄ）１００μｍ。
【図５】ＫＡ曝露後の海馬のＨ因子（ＦＨ）およびクラステリンのレベル。（Ａ）ウェスタンブロット顕微鏡写真およびＦＨブロット密度の相対的定量化は、新生仔および成体のＫＡ誘発発作の２４時間後では、ＦＨタンパク質レベルの有意な変化を示さない。（Ｂ）Ｐ５５での「ツーヒット」（ＫＡ−ＫＡ）動物の海馬ＣＡ１領域におけるＦＨ免疫染色の代表的な顕微鏡写真。（挿入図Ｂ）ＦＨ免疫反応性星状細胞を示す顕微鏡写真。（Ｃ）長期回復群の海馬の合わせた領域でのＰ５５におけるＦＨ免疫反応性細胞の定量化は、群間の有意差を示さない。（Ｄ）ウェスタンブロット顕微鏡写真およびクラステリンのブロット密度の相対的定量化は、Ｐ１５およびＰ４５での発作後２４時間で、海馬クラステリンタンパク質レベルの有意な増加を示す。（Ｅ〜Ｇ）長期の回復群、対照群（挿入図Ｅ、ＰＢＳ−ＰＢＳ）、乳幼仔期発作群（Ｅ、ＫＡ−ＰＢＳ）、成体発作群（Ｆ、ＰＢＳ−ＫＡ；挿入図、ＣＡ１におけるクラステリン免疫反応性細胞のより高倍率の図）、および「ツーヒット」（Ｇ、ＫＡ−ＫＡ）動物の海馬ＣＡ１領域におけるクラステリン免疫染色を示す代表的な顕微鏡写真。（Ｈ）長期回復群の海馬の合わせた領域でのＰ５５におけるクラステリン免疫反応性細胞の定量化は、成体発作（ＰＢＳ−ＫＡ）動物と比較して、「ツーヒット」（ＫＡ−ＫＡ）群では、有意な増加を示す。（Ｉ、Ｊ）ＮｅｕＮ陽性細胞は、クラステリンと共染色しないことを示す代表的な顕微鏡写真。（Ｉ）ＮｅｕＮ（灰色）およびクラステリン（赤色）は、共標識しない。（Ｊ）免疫蛍光検出は、ＮｅｕＮ（緑色）およびクラステリン（赤色）の類似したパターンを示す。（Ｋ）ＧＦＡＰ（緑色）とクラステリン（赤色）との免疫蛍光二重標識は、クラステリン陽性細胞が星状細胞でないことを示す。クラステリン陽性細胞は、Ｉｂａ１免疫反応性（Ｌ）であり、このことは、これらの細胞がミクログリアであることを示唆する。（Ｈ）＊＊＊ｐ＜０．００１対ＰＢＳ−ＰＢＳ（ＡＮＯＶＡによる）。（Ｂ）スケールバー（Ｂ、Ｆ、Ｇ）２００μｍ；（Ｅ、Ｊ）１００μｍ；（Ｉ、Ｌ）５０μｍ。
【図６】Ｐ４５動物でのＫＡ誘発発作は、グリア特異的グルタミン酸輸送体、ＧＬＡＳＴおよびＧＬＴ−１の増加をもたらす。（Ａ〜Ｃ）ＰＢＳ−ＰＢＳ（挿入図Ａ）、ＫＡ−ＰＢＳ（Ａ）、ＰＢＳＫＡ（Ｂ）およびＫＡ−ＫＡ（Ｃ）動物の海馬ＣＡ１領域におけるＧＬＡＳＴ免疫染色を示す代表的な顕微鏡写真。挿入図（Ｃ）は、ＣＡ１でのＧＬＡＳＴ免疫反応性細胞のより高倍率の図を示す。（Ｄ）長期回復群での海馬の合わせた領域におけるＰ５５でのＧＬＡＳＴ免疫反応性細胞の定量化は、対照（ＰＢＳ−ＰＢＳ）と比較して、ＰＢＳ−ＫＡおよびＫＡ−ＫＡにおいて増加した発現を示す。ＰＢＳ−ＫＡおよびＫＡ−ＫＡは、互いに有意差がない。ＧＬＴ−１の結果は、ＧＬＡＳＴ（データは示されていない）と類似している。＊＊ｐ＜０．０１対ＰＢＳ−ＰＢＳ；＊ｐ＜０．０５対ＰＢＳ−ＰＢＳ（ＡＮＯＶＡによる）。スケールバー２００μｍ；（挿入図Ｃ）１００μｍ。
【図７】（Ａ）ミノザク（Ｍｚｃ）投与およびＹ−迷路試験の時間割。Ｐ１５でのＰＢＳまたはカイニン酸（ＫＡ）のいずれかを腹腔内（ｉｐ）投与した後、３時間および９時間の回復後に、動物はＭｚｃ（５ｍｇ／ｋｇ、ｉｐ）または生理食塩水希釈剤（Ｓａｌ）で処置された。各群（ＰＢＳ−Ｓａｌ、ＫＡ−ＳａｌおよびＫＡ−Ｍｚｃ）からの動物の１団は、海馬炎症促進性サイトカインの変化の評価のために、１２時間目に殺処分された。残りの動物は、３０日（Ｐ４５）間、回復させた。これらの群において、海馬依存性挙動に関するＹ−迷路試験は、離乳時期（Ｐ２１、６日間の回復）で開始し、殺処分するまで続けた。（Ｂ）乳幼仔期発作の後のＹ−迷路の自発的交替行動の連続測定は、３０日間の回復にわたるＭｚｃによる保護を示す。＊＊＊ｐ＜０．００１対ＫＡ−Ｓａｌ（ＡＮＯＶＡによる）。
【図８】Ｐ１５でのＫＡ誘発発作（Ａ〜Ｄ）後の炎症促進性サイトカインの急激な増加および３０日の回復後（Ｅ〜Ｌ）のグリア活性化に関するミノザク（Ｍｚｃ）の効果。（Ａ）乳幼仔期発作後のＭｚｃの投与は、未処置動物（ＫＡ−Ｓａｌ）で見られるＩＬ−１βの急性増加を抑制した。類似した結果は、ＩＬ−６（Ｂ）、ＴＮＦ−α（Ｃ）、およびＳ１００Ｂ（Ｄ）について見られた。脳ホモジネートについての組織は、ＫＡ注射後１２時間に集められた。（Ｅ〜Ｌ）ミノザク（Ｍｚｃ）は、Ｐ１５でＫＡ曝露から３０日の回復後に、ＫＡ誘発乳幼仔期発作への長期グリア活性化応答を抑制する。（Ｅ〜Ｇ）対照（Ｅ、ＰＢＳ−Ｓａｌ）、乳幼仔期発作（Ｆ、ＫＡ−Ｓａｌ）およびＭｚｃ処置（Ｇ、ＫＡ−Ｍｚｃ）動物のＣＡ１領域でのＧＦＡＰ免疫染色の代表的な顕微鏡写真。（Ｈ）海馬でのＧＦＡＰ陽性細胞の定量化は、Ｍｚｃ処置動物（ＫＡ−Ｍｚｃ）が、未処置動物（ＫＡ−Ｓａｌ）と比較して、有意に少ないグリア活性化を有することを示す。（Ｉ〜Ｌ）ＰＢＳ−Ｓａｌ（Ｉ）、ＫＡ−Ｓａｌ（Ｊ）およびＫＡ−Ｍｚｃ（Ｋ）動物のＣＡ１領域でのＳ１００Ｂ免疫染色の代表的な顕微鏡写真。（Ｌ）Ｓ１００Ｂ免疫陽性細胞の定量化は、ＭｚｃがＫＡ−Ｓａｌで見られる増加したＳ１００Ｂの発現を抑制したことを示す。データ（Ｄ）は、対照（％）±ＳＥＭとして表わされた。データ（Ｈ、Ｌ）は、免疫陽性細胞（％）±ＳＥＭである。＊ｐ＜０．０５対ＫＡ−Ｓａｌ、＊＊ｐ＜０．０１対ＫＡ−Ｓａｌ；＊＊＊ｐ＜０．００１対ＫＡ−Ｓａｌ（ＡＮＯＶＡによる）。スケールバー（Ｅ）２００μｍ；（挿入図Ｆ、Ｇ、Ｊ、Ｋ）１００μｍ。
【図９】促進された発作感受性における星状細胞活性化およびミクログリア活性化の役割に関して提案された図式。出生後（Ｐ）の日数１５日（Ａ）、および「ツーヒット」（Ｐ１５および４５）（Ｂ）を含むＰ４５（Ｂ）でのカイニン酸投与の概要。Ｐ１５で、炎症促進性サイトカインの一過性の増加の後に、ミクログリア活性化および持続（４０日）した星状細胞活性化が続く。サイトカインおよびミクログリア活性化の類似したパターンが、星状細胞グルタミン酸輸送体が増加する際にもＰ４５で起こる。重要なことに、Ｐ１５とＰ４５とでカイニン酸に曝露された「ツ−ヒット」群は、促進されたミクログリア活性化（Ｂ、緑色の点線）を示す。
【図１０】２−（４−（４−メチル−６−フェニルピリダジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）ピリミジン二塩酸塩（ＭＷ０１−９−０３４ＷＨ、また、本明細書では「ミノザク」とも称する））の合成の製造スキームを表す。試薬および条件：（ａ）Ｎ２Ｈ４、ＥｔＯＨ、還流、（ｂ）ＣｕＣｌ２、ＣＨ３ＣＮ、還流、（ｃ）ＰＯＣｌ３、ＣＨ３ＣＮ、還流、（ｄ）１−（２−ピリミジル）ピペラジン、水、還流、（ｅ）ＨＣｌ、イソプロパノール。
【発明を実施するための形態】
【００３２】
本発明の実施形態の詳細な説明
便宜上、本明細書、実施例および添付の特許請求の範囲において使用される特定の用語をここに集約する。
【００３３】
端点により本明細書において参照される数値範囲は、その範囲内に包含されるすべての数および端数を含む（例えば、１〜５は、１、１．５、２、２．７５、３、３．９０、４および５を含む）。また、すべての数およびその端数は、「約」という用語により変更されると理解されるべきである。「約」という用語は、言及されている数のプラスまたはマイナス０．１〜５０％、５〜５０％、または１０〜４０％、好ましくは１０〜２０％、さらに好ましくは１０％または１５％を意味する。さらに、「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、内容が、別途明瞭に指示しない限り、複数の対象を含むものと理解されるべきである。したがって、例えば、「化合物」を含む組成物という場合は、２つ以上の化合物の混合物を含む。
【００３４】
本明細書において使用される「投与すること」および「投与」という用語は、本明細書において意図される化合物または組成物の治療有効量が、予防および／または治療目的のために対象に送達される過程を意味する。組成物は、対象の臨床的状態、投与の部位および方法、用量、患者の年齢、性別、体重、および医者の知る他の要因を考慮に入れて、良好な医療行為に従って投与される。
【００３５】
「治療すること」という用語は、そのような用語が適用される障害またはそのような障害の１つ以上の症状の進行を、後退、軽減、または阻害することを意味する。対象の状態によって、この用語は、また、障害を予防することを意味し、障害の発症を予防し、または障害に伴う症状を予防することを含む。治療は、急性的または慢性的な方法のいずれで行われてもよい。この用語は、また、障害に伴う苦痛の前に、障害またはそのような障害に伴う症状の重症度を減少させることを意味する。そのような苦痛の前の障害の重症度の予防または減少とは、投与の時点で、障害に苦しめられていない対象に対する本発明の化合物または組成物の投与を意味する。「予防すること」とは、また、障害またはそのような障害に伴う１つ以上の症状の再発の予防を意味する。「治療」および「治療的に」とは、「治療すること」として先に定義されているような治療行為を意味する。予防および治療介入は、そのような障害に対抗することであり、症状または合併症の発症を予防または遅延させるための活性化合物の投与、または症状もしくは合併症を軽減すること、あるいはそのような障害を除くことを含む。
【００３６】
障害がてんかん発生、特にてんかんである本発明の態様では、治療は、（ｉ）てんかん発生の部分的または完全な後退、（ｉｉ）てんかん発生の予防、またはてんかん発生率の減少もしくは遅延、（ｉｉｉ）てんかん発生の際に起こる生化学プロセスの割合の抑制または遅延；および／または（ｉｖ）てんかん発生のプロセスの予防、遅延、停止および／または後退させることを含むことができる。
【００３７】
「対象」、「個体」、または「患者」という用語は、本明細書では互換的に使用され、動物、好ましくは温血動物、例えば、哺乳類などを意味する。哺乳類としては、哺乳類の任意のメンバーが挙げられるがこれらに限定されない。本開示における対象または患者としての哺乳類は、霊長類、肉食動物、長鼻目、奇蹄類、偶蹄類、齧歯類、およびウサギ目のファミリーからのものであることができる。特定の実施形態では、哺乳類は、ヒトである。他の実施形態では、動物は治療され得る；動物は、鳥類および哺乳類をともに含む脊椎動物である。本発明の一態様では、この用語は、また、ウマ、ウシ、ヒツジ、家禽類、魚、ブタ、イヌ、およびネコを含む食用またはペットとして飼育される家畜、および動物園の動物、ヤギ、サル（例えば、ゴリラまたはチンパンジー）、ならびにラットおよびマウスなどの齧歯動物を含む。
【００３８】
本発明の態様では、この用語は、本発明方法により治療される生体を意味する。本発明の特定の態様の文脈において、「対象」という用語は、本発明で開示される障害に対して治療（例えば、ピリダジン化合物（複数を含む）または組成物）を受けるまたは受けたことのある個体を一般的に意味する。
【００３９】
治療のための一般的対象としては、本明細書に開示される障害に苦しむまたは有している疑いのある、または掛かりやすい、障害に掛かっている、あるいは掛かったことがある人が挙げられる。対象は、てんかんなどの本明細書に開示される障害に対して遺伝子的疾病素質を有してもよく、有しなくてもよい。本発明の特定の態様では、対象は、小児患者である。特定の態様では、対象は、健康な対象であってよい。
【００４０】
本明細書において使用される「健康な対象」という用語は、本明細書に開示される障害、虚弱または病気と診断されていない対象、特に、哺乳類を意味する。
【００４１】
本明細書において使用される「共投与」、「併用療法」、および「併用投与」という用語は、１つ以上のピリダジン化合物およびさらなる治療剤または療法を対象に投与することを意味する。複数の態様では、２つ以上の薬剤／療法の投与は、同時に起こる。他の態様では、第１の薬剤／療法が、第２の薬剤／療法の前に投与される。この態様では、各成分は、別々に投与され得るが、十分に接近した時間で所望の効果、特に有益な相加的または相乗的効果を提供する。共投与のための製剤、投与経路および適切な用量は、当業者によって容易に決定することができる。いくつかの実施形態では、薬剤／療法が共投与される場合は、それぞれの薬剤／療法は、それらの単独投与に適切な量よりも少ない投与量で投与される。したがって、共投与は、薬剤／療法の共投与が、既知の潜在的に有害な（例えば、有毒な）薬剤の必要投与量を減少させる実施形態において特に望ましい。
【００４２】
「有益な効果」とは、有利な薬理学的および／または治療的効果、ならびに改善された生物学的活性を含む、本発明のピリダジン化合物または組成物の効果を意味する。本発明の態様では、有益な効果としては、非制限的に、増強された安定性、より長い半減期、および／または促進された摂取が挙げられる。他の態様では、有益な効果は、次の１つ以上を含む：（ａ）乳幼仔期発作後の神経細胞の機能不全または損傷の減少または改善；（ｂ）炎症促進性サイトカインの減少または抑制；（ｃ）星状細胞活性化の減少；（ｄ）ＧＦＡＰ免疫反応性細胞の減少；（ｅ）ミクログリア活性化の減少および（ｆ）グリア活性化および海馬依存性挙動障害の減少。有益な効果は、本発明のピリダジン化合物または組成物の効果対本発明の範囲内ではない化合物または組成物なしでの効果の統計的分析による統計的に有意な効果であることができる。統計的に有意な」または「有意差がある」効果または水準は、標準より高いまたは低い水準を表してもよい。本発明の態様では、その差は、本発明のピリダジン化合物または組成物なしで得られる効果と比較して、１．５、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５または５０倍高くまたは低くてもよい。
【００４３】
複数の態様では、有益な効果は、有益な効果が治療終了の後に長期間にわたって持続する「持続される有益な効果」である。治療は、数日間、数週間、数カ月または数年も持続することができ、その結果、障害およびその合併症の重症度に対して主な有益な効果を有する。本発明の複数の態様では、有益な効果は治療後の少なくとも約１〜３日間、２〜４週間、２〜５週間、３〜５週間、２〜６週間、２〜８週間、２〜１０週間、２〜１２週間、２〜１４週間、２〜１６週間、２〜２０週間、２〜２４週間、２週間〜１２カ月、２週間〜１８カ月、２週間〜２４カ月、または数年の長期にわたって持続することが可能である。有益な効果が持続している期間は、治療の持続時間およびタイミングに互いに相関している場合がある。対象は継続的に、または約もしくは少なくとも約１〜３日間、１週間、２〜４週間、２〜６週間、２〜８週間、２〜１０週間、２〜１２週間、２〜１４週間、２〜１６週間、２週間〜６カ月、２週間〜１２カ月、２週間〜１８カ月、もしくは数年の間、定期的または継続的に治療されてよい。
【００４４】
「医薬的に許容される担体、賦形剤、またはビヒクル」という用語は、活性成分の有効性または活性を妨げず、投与されるホストにとって有毒ではない媒体を意味する。担体、賦形剤、またはビヒクルとしては、希釈剤、結合剤、接着剤、滑沢剤、崩壊剤、増量剤、湿潤剤または乳化剤、ｐＨ緩衝剤、および特定の組成物を調製するために必要とされ得る吸収剤などの種々の材料が挙げられる。担体などの例としては、生理食塩水、緩衝生理食塩水、デキストロース、水、グリセロール、エタノール、およびこれらの組合せが挙げられるが、これらに限定されない。活性物質に対するそのような媒体および薬剤の使用は、当技術分野においてよく知られている。
【００４５】
「治療有効量」とは、１つ以上の所望の効果、特に、１つ以上の有益な効果、さらに詳しくは治療的効果を引き出す、本発明の活性なピリダジン化合物または組成物の量または用量を意味する。物質の治療有効量は、障害状態、年齢、性別、および対象の体重、ならびに対象での所望の応答を導き出すための物質の能力などの要因により変動し得る。投薬方式は、最適な治療的応答（例えば、持続される有益な効果）を与えるために調整されてもよい。例えば、いくつかの分割した用量は、毎日投与されてもよく、またはその用量は、治療状態の緊急性に比例して減少されてもよい。一般的に、ＣＮＳ障害を治療する際には、化合物または組成物の有効量は、対象の血液−脳関門を通過して、対象の脳内の関連受容体と相互作用するのに十分な量である。
【００４６】
「ピリダジン化合物」は、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、もしくはＶの化合物、または、表１、２、３、４もしくは５、特に表２、３、４、もしくは５で記述された化合物を指す。本発明の複数の態様では、ピリダジン化合物は、アリールもしくは置換アリール、ヘテロアリールもしくは置換ヘテロアリールを有するペンダント状のピリダジニル基を指す。いくつかの態様では、この用語は、米国特許出願第２００３０１７６４３７号および第２００６００７３４７２号で開示された構造を含む。
【００４７】
複数の態様では、有益な効果、特に統計的に有意な有益な効果を示すピリダジン化合物は、本発明で使用するために選択される。
【００４８】
本発明の態様では、以下の式ＩａまたはＩｂの化合物が使用される。
【００４９】
【化１】
2010520223.tif 000003
（式中、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は、独立して、置換または非置換の、水素、ヒドロキシル、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルキレン、アルケニレン、アルコキシ、アルケニルオキシ、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、シクロアルコキシ、アリール、アリールオキシ、アリールアルコキシ、アロイル、ヘテロアリール、複素環、アシル、アシルオキシ、スルホニル、スルフィニル、スルフェニル、スルホキシド、サルフェート、スルホネート、アミノ、イミノ、アジド、チオール、チオアルキル、チオアルコキシ、チオアリール、ニトロ、ウレイド、シアノ、ハロ、シリル、シリルオキシ、シリルアルキル、シリルチオ、＝Ｏ、＝Ｓ、ホスホネート、カルボキシル、カルボニル、カルバモイル、またはカルボキサミドであり；Ｒ７は、置換もしくは非置換の、水素、ヒドロキシル、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルキレン、アルケニレン、アルコキシ、アルケニルオキシ、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、シクロアルコキシ、アリール、アリールオキシ、アリールアルコキシ、アロイル、ヘテロアリール、複素環、アシル、アシルオキシ、スルホニル、スルフィニル、スルフェニル、スルホキシド、サルフェート、スルホネート、アミノ、イミノ、アジド、チオール、チオアルキル、チオアルコキシ、チオアリール、ニトロ、ウレイド、シアノ、ハロ、シリル、シリルオキシ、シリルアルキル、シリルチオ、＝Ｏ、＝Ｓ、ホスホネート、カルボキシル、カルボニル、カルバモイル、またはカルボキサミドであり、またはＲ７は不在であってもよく、１位のＮと６位のＣとの間には二重結合が存在し；Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６は、独立して、水素、アルキル、アルコキシ、ハロ、またはニトロであり；Ｒ１およびＲ２、Ｒ１およびＲ７、またはＲ２およびＲ３は、ヘテロアリールまたは複素環を形成してもよい）；またはその異性体もしくは医薬的に許容される塩。
【００５０】
一態様では、式ＩａまたはＩａの化合物は、以下の場合に使用される：（ａ）Ｒ１が、場合により置換された、ハロ、ヒドロキシル、アルキル、アルケニル、アルコキシ、シアノ、アミノ、シクロアルキル、スルホニル、スルフィニル、スルフェニル、チオアリール、チオアルキル、カルボニル、シリル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピロリジニル、モルホリニル、−ＳＲ２０（ここで、Ｒ２０は、場合により置換された、アルキル、カルボニル、カルボキシル、カルバモイル、アリール、複素環、またはヘテロアリールである）である；（ｂ）Ｒ２が、場合により置換された、ハロ、ヒドロキシル、アルキル、アルケニル、アルコキシ、カルボニル、カルボキシル、フェニル、ベンジル、アミノ、アリール、シアノ、−ＣＯＨ、ピペラジニル、アルコール、ピペリジニル、モルホリニル、またはナフチルである；（ｃ）Ｒ３が場合により置換された、水素、ハロ、ヒドロキシル、アルキル、アルケニル、アルコキシ、フェニル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピロリジニル、モルホリニル、チオール、スルフェニル、スルホニル、スルフィニル、またはニトロである；（ｄ）Ｒ４が水素、ハロ、またはニトロである；（ｅ）Ｒ５が場合により置換された、水素、ハロ、アルコキシ、またはアミドである；（ｆ）Ｒ７が置換もしくは非置換の、水素  ハロ、ヒドロキシ、アルキル、アルケニル、アルコキシ、カルボキシ、モルホリノ、イミダゾリル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピロリジニル、モルホリニルであり、またはＲ７が不在であり、１位のＮと６位のＣとの間には二重結合が存在する；および／または（ｇ）Ｒ１およびＲ２、Ｒ１およびＲ７、またはＲ２およびＲ３が、置換もしくは非置換のヘテロアリールまたは複素環を形成してもよい。
【００５１】
本発明の別の態様では、Ｒ１がＣｌもしくはＢｒ、−ＮＨ２、アルキル、−ＣＮ、＝Ｓ、シリル、スルホニル、チオアルキル、チオアリール、ピペラジニル、ピペリジニル、モルホリニル、ピロリル、またはピロリジニルであり、これらは、ハロ、＝Ｏ、アルコキシ、アルケニル、アルキル、置換アルキル、−ＣＮ、−ＳＲ２１（ここで、Ｒ２１は、場合により置換された、メチル、エチル、フェニル、複素環、またはヘテロアリールである）、またはフェニルもしくは置換フェニルで置換された−ＣＯで場合により置換されていてよい、式ＩａまたはＩｂの化合物が使用される。
【００５２】
本発明の別の態様では、Ｒ２がカルボニル、ピペラジニル、モルホリニル、スルホニル、スルフィニル、スルフェニル、もしくはフェニル、−ＣＮ、−ＣＯＨ、−ＣＨ２ＯＨ、−ＯＣＨ２ＣＨ３、またはアルキル（アルキル、アルコキシ、アミノ、ハロ、フェニル、置換フェニル、ベンジル、ヒドロキシル、アミノ、ピペリジニル、またはモルホリニルで場合により置換されていてよい）である式ＩａまたはＩｂの化合物が使用される。
【００５３】
本発明の別の態様では、Ｒ３がピペラジニル；置換ピペルジニル（ｐｉｐｅｒｚｉｎｙｌ）；場合によりアミノで置換されていてよいアルキル；フェニル；置換フェニル；アルキルもしくはアルキルアミン（例えば、ＮＨＣＯＯＣ（ＣＨ３）３）、カルボキシル、もしくは置換カルボキシルで場合により置換されていてよいアミノ；ヒドロキシル；またはニトロである式ＩａまたはＩｂの化合物が使用される。
【００５４】
本発明の別の態様では、Ｒ４がニトロまたは水素である式ＩａまたはＩｂの化合物が使用される。
【００５５】
本発明の別の態様では、Ｒ５が水素、ハロ、−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣＯＯＣ（ＣＨ３）３、または−ＯＣＨ３である式ＩａまたはＩｂの化合物が使用される。
【００５６】
本発明の別の態様では、Ｒ７がアルキル、モルホリニル、ベンジル、イミダゾリル、−ＣＨ２ＣＯＯＣＨ２ＣＨ３、ＣＨ２Ｃ＝ＣＯＯＣＨ２ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ２ＯＨ、ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−、ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＰＯ（ＯＨ）２、またはＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＰＯ（ＯＨ）２である式ＩａまたはＩｂの化合物が使用される。
【００５７】
本発明の別の態様では、Ｒ７が不在であり、１位のＮと６位のＣとの間には二重結合が存在する式ＩａまたはＩｂの化合物が使用される。
【００５８】
さらなる態様では、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ７が、独立して、置換脂肪族、低級アルキル置換アミノ、低級アルキル置換ハロゲン、環状脂肪族、または置換環状脂肪族である式Ｉａの化合物が使用される。
【００５９】
本発明のなおさらなる態様では、Ｒ１が（例えば、ピリミジニル部分で）置換されていてよいピペラジニル；ハロ；置換されていてよいアミノ；シアノ；−ＳＲ２２（ここで、Ｒ２２はアルキルまたはアリール（例えば、フェニル）であり、これらは（例えば、ハロで）置換されていてよい）；置換アルキル（例えば、ＣＨ（Ｂｒ）２などのハロゲンによって置換されたアルキル）；モルホリニル；置換されていてよいピロリル；ヒドロキシル；−ＯＲ２８（ここで、Ｒ２８はアルキルである）；−Ｃ＝ＣＨＲ３０（ここで、Ｒ３０は、アルキルである）；またはピロリジニルである式ＩａまたはＩｂの化合物が使用される。
【００６０】
本発明のなおさらなる態様では、Ｒ２が水素；モルホリニル；（例えば、ピリミジニル部分で）置換されていてよいピペラジニル；フェニル；アルキル；アルコキシ（例えば、ＣＨ（ＯＣＨ３）２）；置換アルキル；置換アリール（例えば、フェニル）；シアノ；またはヒドロキシルである式ＩａまたはＩｂの化合物が使用される。
【００６１】
本発明の別の態様では、Ｒ１がピリジニルであり、Ｒ２がＮ−置換ピペルジニルである式Ｉｂの化合物が使用される。
【００６２】
別の態様では、Ｒ１がアルキルまたはシクロアルキルで置換されたアミノであり、Ｒ２がピリジニルである式Ｉｂの化合物が使用される。
【００６３】
本発明のなおさらなる態様では、Ｒ３が水素；ヒドロキシル；（例えば、ハロで）置換されていてよいアルキル；置換されていてよいアミノ；−ＣＯＲ３１（ここでＲ３１は、水素、ヒドロキシル、アルコキシ（例えば、−ＯＣＨ３）；または、（例えば、アルキルで）置換されてもよいアリール（例えば、フェニル基）である式ＩａまたはＩｂの化合物が使用される。
【００６４】
本発明のなおさらなる態様では、Ｒ４が水素またはハロであり；Ｒ５が水素またはハロであり；Ｒ６が水素またはハロである式ＩａまたはＩｂの化合物が使用される。
【００６５】
本発明のなおさらなる態様では、Ｒ７が水素；（例えば、フェニル基で）置換されていてよいアルキル；−ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＲ３２（ここで、Ｒ３２は、アルキルである）、−ＣＨ２Ｃ＝ＣＯＯＲ３３（ここで、Ｒ３３は、アルキルである）、ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓ（Ｏ）２ＯＨ、モルホリニル、ベンジル、イミダゾリル、または［ＣＨ２］ｎＰＯ（ＯＨ）２（ここで、ｎは１〜６、特に３または４である）の式Ｉａの化合物が使用される。
【００６６】
本発明のなおさらなる態様では、Ｒ１およびＲ２が、カルボキシルによって場合により置換されていてよいピペリジニル環を形成する式ＩａまたはＩｂの化合物が使用される。
【００６７】
本発明のなおさらなる態様では、Ｒ１およびＲ７が、アルキル、アリール、ハロ、またはヒドロキシルによって場合により置換されていてよいピリミジニル環を形成する式Ｉａの化合物が使用される。
【００６８】
特定の態様では、Ｒ１が−ＮＲ３４Ｒ３５（ここで、Ｒ３４は水素またはアルキルであり、Ｒ３５は水素、アルキル、カルボニル、アリール、アミノ、シクロアルカン、複素環、または置換されていてよいヘテロアリールである）である式ＩａまたはＩｂの化合物が使用される。複数の実施形態では、Ｒ３５が水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル（例えば、メチルまたはエチル）（場合により置換されたヒドロキシル、アルキル、アミノ、カルボニル、カルボキシル、モルホリニル、イソキノリニルで置換されていてよい）、またはアミノ（１つ以上の場合により置換されていてよいアルキル、ベンジル、カルボキシル、アルコール基、ヘテロアリールまたは複素環で置換されていてよい）、プロパノール基、ハロで場合により置換されていてよいフェニル、アルコキシで置換されていてよいベンジル、シクロヘキシル、場合により置換されたフェニルで置換されていてよいピペリジニル、ピロリジニル、アルキルで置換されていてよいピロリジニルアルキル、−ＣＯＯＲ８（ここで、Ｒ８は、置換されてよいアルキルである）、または［ＣＨ２］ｍ−ピペリジニル（ここで、ｍは１〜４、特に１〜３であり、ピペリジニルは、場合により置換されたアルキル、フェニル、またはベンジルで場合により置換されている）から成る群を含み、それらから選択されてよい。
【００６９】
複数の実施形態では、Ｒ３５が、−Ｒ４４Ｒ４５であり、ここで、Ｒ４４は、−ＮＨ［ＣＨ２］ｗＮＨ（ｗは、１〜４であり、特に２または３である）であり、Ｒ４５は、置換されていてよい、特にアルキルで置換されたピリミジニルで置換されたピペラジニルである。
【００７０】
複数の実施形態では、Ｒ３５が、−Ｒ４６Ｒ４７であり、ここで、Ｒ４６は、−［ＣＨ２］ｗＮ（ＣＨ３）（ｗは、１〜４であり、特に２または３である）であり、Ｒ４７は、置換されていてよい、特にアルキルで置換されたピリミジニルで置換されたピペラジニルである。
【００７１】
本発明の一態様では、Ｒ１がハロ、特に塩素または臭素であり、Ｒ２が置換されていてよい、特にアルコキシ（例えば、メトキシ、ジメトキシ）で置換されてよいアルキル、置換アリール（アルキル、アルコキシ、（例えば、ベンジル、メトキシフェニル）、ハロ（例えば、臭素または塩素）、またはカルボニルで置換されていてよい）、１〜４個の窒素原子を含む置換または非置換の飽和３〜６員単環式複素環基（例えば、ピペリジニルおよびピペラジニル）または１〜２個の酸素原子および１〜３個の窒素原子を含む飽和した３〜６員の単環式複素環基（例えば、モルホリニル；シドノニル）、特に置換されたモルホリニル、ピペラジニル、またはヘテロアリールで置換されたピペラジニルであり、該ヘテロアリールは、１〜４個の窒素原子を含む不飽和５〜６員単環式複素環基、具体的にはピロリル、ピロリニル、イミダゾリル、ピラゾリル、２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジル、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、またはピリダジニル、特にピリミジニルであり、そして、場合によりＲ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、およびＲ７が水素である式ＩａまたはＩｂの化合物が使用される。
【００７２】
本発明の別の態様では、Ｒ１が、ハロ、特に、塩素または臭素であり、Ｒ３が、１〜４個の窒素原子を含む置換もしくは非置換の飽和３〜６員単環式複素環基（例えば、ピペリジニル、およびピペラジニル）または１〜２個の酸素原子および１〜３個の窒素原子を含む飽和３〜６員単環式複素環基（例えば、モルホリニル；シドノニル）、特に、置換モルホリニル、ピペラジニル、もしくはアルキルで置換されたピペラジニル、またはヘテロアリール（１〜４個の窒素原子を含む不飽和５〜６員ヘテロモノシクリル基）であり、特に、ピロリル、ピロリニル、イミダゾリル、ピラゾリル、２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジル、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、またはピリダジニル、とりわけピリミジニルであり、またはＲ２が置換アミノ、特に、アルキルもしくは置換アルキル（特に、アルコキシカルボニルで置換されたアルキル）で置換されたアミノであり、場合により、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、およびＲ７が水素である式Ｉａの化合物が使用される。
【００７３】
さらなる態様では、Ｒ１がハロ、特に、臭素または塩素であり、Ｒ２およびＲ３が、不飽和環、特にフェニルを形成し、Ｒ５が、ヘテロアリール、特に、１〜４個の窒素原子を含む置換または非置換の不飽和５〜６員ヘテロモノシクリル基、特に、ピロリル、ピロリニル、イミダゾリル、ピラゾリル、とりわけ、イミダゾリルであり、場合により、Ｒ４、Ｒ６、およびＲ７が水素である。
【００７４】
さらなる態様では、Ｒ１がハロ、特に、臭素または塩素であり、Ｒ４がニトロであり、場合により、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ５、Ｒ６、およびＲ７が水素である。
【００７５】
さらなる態様では、本発明は、Ｒ１が、アルキルで置換されたチオール（チオアルキル）；置換アルキル、特に、１〜４個の窒素原子を含む置換もしくは非置換の飽和３〜６員単環式複素環基（例えば、ピロリジニル、イミダゾリジニル、ピペリジニル、およびピペラジニル）または、１〜２個の酸素原子および１〜３個の窒素原子を含む飽和３〜６員単環式複素環基（例えば、モルホリニル；シドノニル）、特に、置換モルホリニルまたはピペリジニルで置換されたアルキル；アリール；置換アリール；置換もしくは非置換のアリールで置換されていてよいカルボキシルであり；場合により、Ｒ２が、アルキル、特に低級アルキルであり；場合により、Ｒ３が、アルキル、特に、低級アルキルまたはニトロであり；場合により、Ｒ５が、アルコキシであり；場合により、Ｒ７が、アルキルであり；場合により、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６が水素である式Ｉａの化合物を使用する。
【００７６】
本発明のさらなる態様では、Ｒ１が、＝Ｓであり、場合により、Ｒ２が、アルキル、特に、低級アルキルであり、Ｒ５が、アルコキシであり、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６、およびＲ７が水素である式Ｉａの化合物が使用される。
【００７７】
本発明のさらなる態様では、Ｒ１が、置換または非置換のアリール、特に、置換フェニルで置換されていてよいスルホニルであり、場合により、Ｒ２が、アルキルであり、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、およびＲ７が水素である式Ｉａの化合物が使用される。
【００７８】
本発明のさらなる態様では、Ｒ１が、置換もしくは非置換のアルキルまたはアルキニルであり、特に、アリール、置換アリール、ハロ、シアノで置換されたアルキルであるか、またはアルキルで置換されたアルキニルであり；場合により、Ｒ２がアルキルであり、Ｒ７がアルキルであり、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６が水素である式Ｉａの化合物が使用される。
【００７９】
本発明のさらなる態様では、Ｒ１がシアノであり、Ｒ２が、アリールまたはアルキルであり、場合により、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、およびＲ７が水素である式Ｉａの化合物が使用される。
【００８０】
本発明のさらなる態様では、Ｒ１およびＲ２の１つまたは両方が、１〜２個の酸素原子および１〜３個の窒素原子を含む飽和３〜６員単環式複素環基（例えば、モルホリニル；シドノニル）、特に、置換モルホリニルであり、場合により、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、およびＲ７が水素である式Ｉａの化合物が使用される。
【００８１】
本発明のさらなる態様では、Ｒ１が、置換または非置換のカルボキシルで置換されていてよい、１〜４個の窒素原子を含む飽和３〜６員単環式複素環基（例えば、ピロリジニル）であり、Ｒ２が、アルキルまたはハロであり、場合により、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、およびＲ７が水素である式Ｉａの化合物が使用される。
【００８２】
本発明のさらなる態様では、Ｒ１がヒドロキシルであり；Ｒ２が、アルキルまたは置換アルキルであり、またはＲ３が、ヘテロアリール（例えば、ピリミジニル）で場合により置換されていてよい、１〜４個の窒素原子を含む飽和３〜６員単環式複素環基（例えば、ピペリジニル、およびピペラジニル）であり、Ｒ２またはＲ３の他方が水素であり、場合により、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、およびＲ７が水素である式Ｉａの化合物が使用される。
【００８３】
本発明のさらなる態様では、Ｒ１が１〜４個の窒素原子を含む飽和３〜６員単環式複素環基（例えば、ピペリジニル、およびピペラジニル）であり、前記単環式複素環基は、カルボキシル、またはアルキルもしくはアルコキシで、あるいはプリニルもしくは置換プリニルで置換されたカルボキシルで置換されていてよく；Ｒ２が、アルキルまたは置換アルキル、特に、アルキルアリールであり、場合により、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、およびＲ７が水素である式Ｉａの化合物が使用される。
【００８４】
本発明のさらなる態様では、Ｒ１が、＝Ｏであり、Ｒ２が、アルキル、アルキルアリール、シアノ、アルコキシ、または置換アルコキシであり、場合により、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、およびＲ７が水素である式Ｉａの化合物が使用される。
【００８５】
本発明のさらなる態様では、Ｒ１が、アルコキシであり、Ｒ２が、アルキル、置換アルキル、またはアルコキシであり、場合により、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、およびＲ７が水素である式Ｉａの化合物が使用される。
【００８６】
本発明のさらなる態様では、Ｒ１およびＲ２が、例えば、アルキル、ハロ、カルボキシル、またはアルコキシカルボニルで置換されていてよい複素環、特に１〜４個の窒素原子を含む飽和３〜６員単環式複素環基、とりわけ、１個または２個の窒素原子を含む６員環（例えば、ピペリジニルおよびピペラジニル）を形成し、場合により、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、およびＲ７が水素である式Ｉａの化合物が使用される。
【００８７】
本発明のさらなる態様では、Ｒ１およびＲ７が、ヘテロアリール、特に、１〜４個の窒素原子を含む不飽和５〜６員ヘテロモノシクリル基、とりわけ、ピロリル、ピロリニル、イミダゾリル、ピラゾリル、２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジル、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、またはピリダジニルを形成し、Ｒ２が、水素またはアルキルであり、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、およびＲ７が水素である式Ｉａの化合物が使用される。
【００８８】
本発明のさらなる態様では、Ｒ１が、置換されていてよいシリル、特にアルキルで置換されていてよいシリルであり、Ｒ２がアルキルであり、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、およびＲ７が水素である式Ｉａの化合物が使用される。
【００８９】
いくつかの態様では、次の化合物の１つ以上は、本発明で使用される式ＩａまたはＩｂのピリダジン化合物の範囲内には入らない：
ａ）Ｒ１が、＝Ｏである場合に、Ｒ３が、−ＣＯＯＣＨ３、ＣＨ＝ＣＨＣＯＯＣＨ３、−ＣＨ＝ＣＨＣ（＝Ｏ）−フェニル、−ＣＨ＝ＣＨ（Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ３）２、−Ｓ−フェニル、−ＣＨ＝ＣＨ（ＣＯＣＨ３）（ＣＯＯＣＨ３）、ＣＨ＝ＣＨ（ＣＯＯＣＨ２ＣＨ３）２、−フェニル−ＣＯＯＣＨ３、−ＣＨ＝ＣＨＣＯ−フェニル、−ＣＨ２ＣＨ（Ｃｌ）（ＣＨ２ＯＨ）、−メチルフェニルであり、Ｒ７が、水素または−ＣＨ２ＯＣＨ３であり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６が水素である化合物；
ｂ）Ｒ１が、＝Ｏである場合に、Ｒ２がシアノであり、Ｒ３が−Ｃ（＝Ｏ）ＯＣＨ３であり、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６が水素である化合物；
ｃ）Ｒ１が、＝Ｏである場合に、Ｒ２が、−メチルチオフェンまたはベンジルであり、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６およびＲ７が水素である化合物；
ｄ）Ｒ１が、＝Ｏである場合に、Ｒ２がメチルであり、Ｒ５が、水素、ヒドロキシル、塩素、または臭素であり、Ｒ７が水素またはエチルモルホリニルであり、Ｒ３、Ｒ４およびＲ６が水素である化合物；
ｅ）Ｒ２が、メチルである場合に、Ｒ５が、塩素、臭素、または水素であり、Ｒ７が、水素または−ＣＨ２ＣＨ２−モルホリニルであり、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４およびＲ６が水素である化合物；
ｆ）Ｒ１が、ピペラジニル、ピリジニルで置換されたピペラジニル、フェニルまたはメチルである場合に、Ｒ２が、水素またはメチルであり、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６が水素である化合物；
ｇ）Ｒ１が、塩素または臭素である場合に、Ｒ２が、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、フェニル、アミノ、ベンジル、モルホリニル、塩素、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨ２、Ｃ１〜Ｃ３アルキルフェニル、−ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２、−ベンジルクロロであり、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５よびＲ６が水素である化合物；
ｈ）Ｒ１が、塩素または臭素である場合に、Ｒ３が、ヒドロキシル、塩素、臭素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、フェニル、または−Ｎ（ＣＨ３）２であり、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６が水素である化合物；
ｉ）Ｒ１が塩素である場合に、Ｒ２がメチルであり、Ｒ５がヒドロキシルであり、Ｒ３、Ｒ４よびＲ６が水素である化合物；
ｊ）Ｒ１が塩素である場合に、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６が水素である化合物；
ｋ）Ｒ１がヒドロキシルである場合に、Ｒ２がＣ１〜Ｃ４アルキルであり、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６が水素である化合物；
ｌ）Ｒ１が、−Ｃ１〜Ｃ４アルコキシ、または−Ｎ（ＣＨ３）２で置換されたＣ１〜Ｃ４アルコキシ、モルホリニル、またはベンジルで置換されたピペリジニルである場合に、Ｒ２が、水素またはメチルであり、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６が水素であり、Ｒ７が存在しないか、水素、またはメチルである化合物；
ｍ）Ｒ１が、−ＳＨ、−ＳＣＨ３、または−ＳＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ３である場合に、Ｒ２が水素またはメチルであり、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６が水素である化合物；
ｎ）Ｒ１が、＝Ｓである場合に、Ｒ２が水素またはメチルであり、Ｒ７がメチルまたはベンジルであり、Ｒ３、Ｒ４およびＲ６が水素である化合物；
ｏ）Ｒ１が、＝Ｓである場合に、Ｒ２がメチルであり、Ｒ５が塩素であり、またはＲ７がメチルであり、Ｒ３、Ｒ４およびＲ６が水素である化合物；
ｐ）Ｒ１がヒドロキシルである場合に、Ｒ２が、水素、メチル、またはブチルであり、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６が水素である化合物；
ｑ）Ｒ１がメトキシである場合に、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６が水素である化合物；
ｒ）Ｒ１が、Ｃ１〜Ｃ２アルコキシまたはモルホリニルで置換されたＣ１〜Ｃ４アルコキシ、−Ｎ（ＣＨ３）２、またはベンジルで置換されたピペリジニルである場合に、Ｒ２がメチルであり、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６が水素である化合物；
ｓ）Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６が水素である化合物；
ｔ）Ｒ１が、シアノまたは−Ｃ（ＯＣＨ２ＣＨ３）２で置換されたシアノ、−ＣＨ（ＯＨ）（ＣＨ３）、−Ｓｉ（ＣＨ２ＣＨ３）２、シクロヘキソール、−ＣＨ２Ｏ−トリメチルジフェニルシリル、またはヒドロキシルで置換されたシクロヘキシルであり、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６が水素である化合物；
ｕ）Ｒ１が、−ＣＨ（ＯＨ）（ＣＨ３）２で置換されたシアノ、−Ｓｉ（ＣＨ２ＣＨ３）２、モルホリニル、トリメチルジフェニルシリル、または−ＣＨ（ＯＣＨ２ＣＨ３）２であり、Ｒ２がメチルであり、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６が水素である化合物；
ｖ）Ｒ７がオキシであり、Ｒ２が、水素またはメチルであり、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６が水素である化合物；
ｗ）Ｒ１がメチルであり、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６が水素である化合物；
ｘ）Ｒ２がメチルであり、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６が水素である化合物；
ｙ）Ｒ１がメトキシカルボニルであり、Ｒ３が水素であり、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６が水素である化合物；
ｚ）Ｒ１が、−ＮＨ２であり、Ｒ２が、メチル、クロロフェニル、メトキシフェニル、エチルフェニル、エチルメトキシフェニル、プロピルフェニル、または−ＣＨ（ＣＨ３）２であり、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６が水素であり、Ｒ７が存在しないか、または−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨである化合物；
ａａ）Ｒ１が、−ＯＲ２９（ここで、Ｒ２９は、エチルモルホリニルまたは−ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２である）であり、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５よびＲ６が水素である化合物；
ｂｂ）Ｒ１が−ＮＨ２であり、Ｒ３が−ＮＨ２であり、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６が水素である化合物；
ｃｃ）Ｒ１が−ＮＨ２であり、Ｒ５よびＲ６がメトキシであり、Ｒ３およびＲ４が水素である化合物；
ｄｄ）Ｒ１が−ＮＨ２であり、Ｒ３がメチルであり、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６が水素である化合物；
ｅｅ）Ｒ１が−ＮＨ２であり、Ｒ５が塩素であり、Ｒ３、Ｒ４およびＲ６が水素である化合物；
ｆｆ）Ｒ１が−ＮＨ−クロロフェニルであり、Ｒ２およびＲ３がフェニル基を形成し、Ｒ４、Ｒ５よびＲ６が水素である化合物；
ｇｇ）Ｒ１が−ＮＨ２であり、Ｒ４およびＲ５がメトキシであり、Ｒ２、Ｒ３およびＲ６が水素である化合物；
ｈｈ）Ｒ１が−ＮＨ２であり、Ｒ２がエチルメトキシフェニルであり、Ｒ７が、カルボキシエチルまたはカルボキシプロピルであり、Ｒ３、Ｒ４およびＲ６が水素である化合物；
ｉｉ）Ｒ１が−ＮＨＲ４８（ここで、Ｒ４８は、エチルモルホリニル、＝Ｏで置換されたエチルモルホリニル、−ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、または−ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３である）であり、Ｒ２が、水素、メチル、エチル、−ＣＨＯ、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＯＯＨ、塩素、−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２、−ＮＯ２、−Ｃ≡Ｎ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＣＨ２ＣＨ３、または−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２であり、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６が水素である化合物；
ｊｊ）Ｒ１が−ＮＨＲ４９（ここで、Ｒ４９は、エタノール、メチルピペリジニルベンジル、エチルピペリジニル、エチルピペリジニルベンジル、またはブチルピペリジニルベンジルである）であり、Ｒ２が、水素、メチル、または−Ｃ（ＣＨ３）２であり、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６が水素である化合物；
ｋｋ）Ｒ１が−ＮＨＲ５５（ここで、Ｒ５５は、水素である）であり、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６が水素である化合物；
ｌｌ）Ｒ１が−ＮＨＲ５６（ここで、Ｒ５６は、−ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＣＨ３）２またはエチルモルホリニルである）であり、Ｒ３がエチルであり、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６が水素である化合物；
ｍｍ）Ｒ１が−ＮＨＮＨ２であり、Ｒ３が、水素、アルキル、またはフェニルであり、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６が水素である化合物；
ｎｎ）Ｒ１が−ＮＨＲ５７（ここで、Ｒ５７は、ＮＨ２、−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）（ＣＨ３）、エチルモルホリニル、＝Ｏで置換されたエチルモルホリニル、エチルフェニル、−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）２、エチルピペリジニル、またはエチルピペリジニルベンジルである）であり、Ｒ２がメチルであり、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６が水素である化合物；
ｏｏ）Ｒ１がモルホリニルであり、Ｒ２が、−Ｃ（Ｆ）３、−Ｃ（＝Ｏ）、−ＣＨ２ＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、−ＣＯＯＨ、塩素、−ＮＯ２、またはシアノであり、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６が水素である化合物；
ｐｐ）Ｒ１が−ＮＨＲ５８（ここで、Ｒ５８は、ヘプチル、フェニル、ベンジル、またはエチルフェニルである）であり、Ｒ２が、水素、メチル、またはクロロフェニルであり、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６が水素である化合物；
ｑｑ）Ｒ１が−ＮＲ９（ここで、Ｒ９はフェニルである）であり、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６が水素である化合物；
ｒｒ）Ｒ１がモルホリニルであり、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６が水素である化合物；
ｓｓ）Ｒ１がメチルピペラジニルであり、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６が水素である化合物；
ｔｔ）Ｒ１が、−ＮＨＣＨ２ＣＨ２ＯＨまたはＮＨＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３であり、Ｒ２がフェニルであり、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６が水素である化合物；
ｕｕ）Ｒ１が−ＮＨＲ５９（ここで、Ｒ５９は、エチルアミノ、ブチルアミノ、エチルアミノメチルである）であり、Ｒ２が、水素、メチル、または−Ｃ（＝Ｏ）ＨＮ２であり、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６が水素である化合物；
ｖｖ）Ｒ１が−ＮＨＲ６０（ここで、Ｒ６０は、エチルピペリジニル、メチルピペリジニルベンジル、ピペリジニルベンジル、エチルピペリジニルベンジル、メチルピロリジニルメチル、エチルピペラジニルベンジル、−ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）−ピペラジニルベンジル、−Ｃ（＝Ｏ）−メチルナフチル、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）（Ｃ７Ｈ７）、−ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）−ピペリジニルベンジル、−Ｃ（＝Ｏ）−メチルピペリジニルベンジル、または−ＣＨ（ＣＨ３）２である）であり、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６が水素である化合物；
ｗｗ）Ｒ１が、−ＣＨＣＨ２ＣＨ２−イソキノリニル、−ＮＨＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）２、フェニルに縮合したピペリジニルで置換されたプロピル、−ＮＨＣＨ２ＣＨ２、またはフェニル部分の２つの隣接炭素原子に縮合したピペリジニルで置換された−ＮＨＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２である化合物；
ｘｘ）Ｒ１が、２つのピロリジニル基で置換された−ＮＨであり；Ｒ３がメチルであり、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６が水素である化合物；
ｙｙ）Ｒ１が−ＣＯＯＣＨ３であり、Ｒ３がメチルであり、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６が水素である化合物；
ｚｚ）Ｒ１が水素であり、Ｒ２がメチルであり、Ｒ７が酸素である化合物；
ａａａ）Ｒ７が、メチルまたは酸素であり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６が水素である化合物；
ｂｂｂ）Ｒ１が、−ＮＨＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＣＨ３）２であり、Ｒ３がエチルであり、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６が水素である化合物；および
ｃｃｃ）Ｒ１が、−ＮＨＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）（ＣＨ３）または−ＮＨＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣＨ２ＣＨ２ＯＨであり、Ｒ２がメチルであり、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６が水素である化合物。
【００９０】
本発明の複数の態様では、Ｒ１がピペラジニルまたは置換ピペラジニル、特に以下の式Ａ：
【００９１】
【化２】
2010520223.tif 000004
のピリミジニルで置換されたピペラジニルである式ＩａまたはＩｂの化合物が使用される。
【００９２】
したがって、本発明での使用のためのピリダジン化合物は、式ＩＩ：
【００９３】
【化３】
2010520223.tif 000005
（式中、Ｒ１０およびＲ１１は、独立して、置換または非置換の水素、ヒドロキシル、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルキレン、アルケニレン、アルコキシ、アルケニルオキシ、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、シクロアルコキシ、アリール、アリールオキシ、アリールアルコキシ、アロイル、ヘテロアリール、複素環、アシル、アシルオキシ、スルホニル、スルフィニル、スルフェニル、スルホキシド、サルフェート、スルホネート、アミノ、イミノ、アジド、チオール、チオアルキル、チオアルコキシ、チオアリール、ニトロ、ウレイド、ホスホネート、シアノ、ハロ、シリル、シリルオキシ、シリルアルキル、シリルチオ、＝Ｏ、＝Ｓ、カルボキシル、カルボニル、カルバモイル、またはカルボキサミドである）の化合物；またはその異性体もしくは医薬的に許容される塩を含む。
【００９４】
本発明の一態様では、Ｒ１０が水素；ヒドロキシル；アルキル；アリール（例えば、場合により置換されたフェニル（例えば、ハロゲン化物））；置換（例えば、ピリミジニルで置換）されていてよいピペラジニル；−ＮＲ３６Ｒ３７（ここで、Ｒ３６は水素またはアルキルであり、Ｒ３７は置換されていてよいフェニルまたは置換されていてよいアルキル（例えば、アミノ、特に−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２；ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣＯＯＣ（ＣＨ３）３）；置換されていてよいモルホリニル；または−ＳＲ２３（ここで、Ｒ２３は、置換されていてよいフェニルである）であり；Ｒ１１が、水素、または置換されていてよいアリール（例えば、フェニル）である式ＩＩの化合物が使用される。
【００９５】
本発明の特定の態様では、Ｒ１０が水素、ハロ、場合により置換されたヒドロキシル、アルキル、ピリジニル、フェニル、ベンジル、ピペラジニル、アミノ、モルホリニル、または−ＳＲ２４（ここで、Ｒ２４は、アルキルまたはアリールである）である式ＩＩの化合物が使用される。一実施形態では、Ｒ１０が−ＮＨ［ＣＨ２］ｍＮＲ６１Ｒ６２（ここで、ｍは１〜６、特に２〜４であり、Ｒ６１は水素であり、Ｒ６２はカルボキシル、特に−ＣＯＯＣ（ＣＨ３）３である）である。
【００９６】
本発明の一態様では、Ｒ１１が水素、ハロ、場合により置換されたアルキル、ピリジニル、ピペリジニル、モルホリニル、ピペラジニル、またはフェニルである式ＩＩの化合物が使用される。
【００９７】
本発明の別の態様では、Ｒ１０およびＲ１１の両方が水素ではない式ＩＩの化合物が使用される。
【００９８】
本発明の特定の実施形態では、Ｒ１０およびＲ１１の１つ以上がアルキル、特にＣ１〜Ｃ６アルキルであり、Ｒ１０およびＲ１１の他方が水素である。
【００９９】
本発明の特定の実施形態では、Ｒ１０およびＲ１１の１つ以上がアリール、特にフェニルまたはベンジルであり、Ｒ１０およびＲ１１の他方が水素である。
【０１００】
本発明の特定の実施形態では、式ＩＩの化合物は、表３の化合物であり、より具体的には、ＭＷ０１−２−０６５ＬＫＭ、ＭＷ０１−２−０６９ＳＲＭ、ＭＷ０１−２−１５１ＳＲＭ、ＭＷ０１−５−１８８ＷＨ、ＭＷ０１−６−１２７ＷＨ、ＭＷ０１−６−１８９ＷＨ、またはＭＷ０１−７−１０７ＷＨと称される化合物、ならびにその医薬的に許容される塩、および誘導体である。
【０１０１】
複数の態様では、本発明は、式ＩＩＩ：
【０１０２】
【化４】
2010520223.tif 000006
（式中、Ｒ１５およびＲ１６は、独立して、置換もしくは非置換の、水素、ヒドロキシル、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルキレン、アルケニレン、アルコキシ、アルケニルオキシ、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、シクロアルコキシ、アリール、アリールオキシ、アリールアルコキシ、アロイル、ヘテロアリール、複素環、アシル、アシルオキシ、スルホニル、スルフィニル、スルフェニル、スルホキシド、サルフェート、スルホネート、アミノ、イミノ、アジド、チオール、チオアルキル、チオアルコキシ、チオアリール、ニトロ、ウレイド、シアノ、ハロ、シリル、シリルオキシ、シリルアルキル、シリルチオ、＝Ｏ、＝Ｓ、ホスホネート、カルボキシル、カルボニル、カルバモイル、またはカルボキサミドである）の化合物；またはその異性体もしくは医薬的に許容される塩を使用する。
【０１０３】
他の態様では、本発明は、式ＩＶ：
【０１０４】
【化５】
2010520223.tif 000007
（式中、Ｒ７０およびＲ７１は、独立して、置換もしくは非置換の、水素、ヒドロキシル、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルキレン、アルケニレン、アルコキシ、アルケニルオキシ、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、シクロアルコキシ、アリール、アリールオキシ、アリールアルコキシ、アロイル、ヘテロアリール、複素環、アシル、アシルオキシ、スルホニル、スルフィニル、スルフェニル、スルホキシド、サルフェート、スルホネート、アミノ、イミノ、アジド、チオール、チオアルキル、チオアルコキシ、チオアリール、ニトロ、ウレイド、シアノ、ハロ、シリル、シリルオキシ、シリルアルキル、シリルチオ、＝Ｏ、＝Ｓ、ホスホネート、カルボキシル、カルボニル、またはカルバモイルである）の化合物；またはその異性体もしくは医薬的に許容される塩を使用する。
【０１０５】
他の態様では、Ｒ７０が、置換もしくは非置換の、水素、ヒドロキシル、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルキレン、アルケニレン、アルコキシ、アルケニルオキシ、シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、アリールオキシ、アリールアルコキシ、アロイル、ヘテロアリール、複素環、アシル、アシルオキシ、スルホニル、スルフィニル、スルフェニル、アミノ、イミノ、アジド、チオール、チオアルキル、チオアルコキシ、チオアリール、ニトロ、ウレイド、シアノ、ハロ、シリル、シリルオキシ、シリルアルキル、シリルチオ、＝Ｏ、＝Ｓ、カルボキシル、カルボニル、カルバモイル、またはカルボキサミド、特に複素環、ヘテロアリール、アミノ、および置換アミノであり、Ｒ７１が、アリールまたは置換アリールである式ＩＶの化合物；またはその異性体もしくは医薬的に許容される塩が使用される。
【０１０６】
別の態様では、Ｒ７０が複素環、特に１〜４個の窒素原子を含む飽和３〜６員単環式複素環基、より具体的には、ピロリジニル、イミダゾリジニル、ピペリジニル、およびピペラジニル、特にピペラジニルまたはピペリジニル（アルキル、特にメチル、ジメチル、シクロアルキル、特にシクロヘキシル、アリール、特にフェニルで置換されていてよい）、１〜５個の窒素原子を含む置換または非置換の不飽和縮合複素環基、特にインドリル、イソインドリル、インドリジニル、インダゾリル、キナゾリニル、プテリジニル、キノリジジニル、フタラジニル、ナフチリジニル、キノキサリニル、シンノリニル、フェナントリジニル、アクリジニル、フェナントロリニル、フェナジニル、カルバゾリル、プリニル、ベンゾイミダゾリル、キノリル、イソキノリル、キノリニル、イソキノリニル、またはインダゾリル、特にオキシで置換されたベンゾイミダゾリルである式ＩＶの化合物が使用される。
【０１０７】
他の態様では、Ｒ７０がアミノまたは置換アミノであり、場合により、Ｒ７１がアリール、特にフェニルである式ＩＶの化合物が使用される。一態様では、Ｒ７０が−Ｎ−Ｒ６３（ここで、Ｒ６３は、水素またはアルキル、特にＣ１〜Ｃ６アルキル、より具体的にはメチルまたはジメチルである）、または−Ｎ−Ｒ４０Ｒ４１（ここで、Ｒ４０は、水素またはアルキル、特にＣ１〜Ｃ６アルキル、より具体的にはメチルであり、Ｒ４１が、アミノもしくは置換アミノで置換されたアルキル、複素環、置換複素環、またはシクロアルキルである）である。一実施形態では、Ｒ７０は、−ＮＲ４２Ｒ４３であり、ここで、Ｒ４２が、水素またはアルキル、特にＣ１〜Ｃ６アルキル、より具体的にはメチルであり、Ｒ４３が、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、特にシクロアルキル（特にシクロプロピル）で置換されたメチルまたはジメチル、複素環、特にピペリジニル、ピロリジニル、またはモルホリニルであり、これらは置換されていてよく、特にアリール、とりわけベンジルで置換されていてよい。
【０１０８】
式ＩＶの化合物は、表５において、化合物１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、１３７、１３８、または１３９として明示された構造またはその医薬的に許容される塩、異性体、もしくは誘導体を含む。
【０１０９】
さらなる態様では、本発明は、式Ｖ：
【０１１０】
【化６】
2010520223.tif 000008
（式中、Ｒ５０、Ｒ５１、およびＲ５２は、独立して、置換または非置換の水素、ヒドロキシル、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルキレン、アルケニレン、アルコキシ、アルケニルオキシ、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、シクロアルコキシ、アリール、アリールオキシ、アリールアルコキシ、アロイル、ヘテロアリール、複素環、アシル、アシルオキシ、スルホニル、スルフィニル、スルフェニル、スルホキシド、サルフェート、スルホネート、アミノ、イミノ、アジド、チオール、チオアルキル、チオアルコキシ、チオアリール、ニトロ、ウレイド、シアノ、ハロ、シリル、シリルオキシ、シリルアルキル、シリルチオ、＝Ｏ、＝Ｓ、カルボキシル、カルボニル、カルバモイル、またはカルボキサミドである）の化合物；またはその異性体もしくは医薬的に許容される塩を使用する。
【０１１１】
本発明の態様では、Ｒ５０が置換または非置換の水素、アルキル、アリール、または複素環であり；Ｒ５１が、置換または非置換の水素またはアルキルであり、Ｒ５２が、置換または非置換の水素、アルキル、シクロアルキル、ヘテロアリールまたはハロである式Ｖの化合物が使用される。一態様では、Ｒ５０が、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル（アルキル、特にメチルまたはトリメチルで置換されていてもよい）、フェニル、または１〜４個の窒素原子を含む３〜６員単環式複素環基、より具体的にはピペリジニルまたはモルホリニルであり、Ｒ５１が、水素またはアルキル、特にメチルであり、Ｒ５２が、水素、アルキル、特にメチル、ジメチル、エチル、もしくはプロピル、シクロヘキシル、塩素、または１〜４個の窒素原子を含む不飽和５〜６員単環式複素環基、特にピロリル、ピロリニル、イミダゾリル、ピラゾリル、２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジル、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、またはピリダジニル、特にピリジニルである式Ｖの化合物が使用される。一実施形態では、Ｒ５０がアリールであり、Ｒ５１が水素であり、Ｒ５２がＣ１〜Ｃ６アルキルである。
【０１１２】
式Ｖの化合物は、化合物ＭＷ０１−７−０５７ＷＨ、または表５中の構造３２、３４、３６、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４６、４７、４８、４９、６３、６９、７０、７１、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、もしくは８２、またはその医薬的に許容される塩、異性体もしくは誘導体を含むことができる。
【０１１３】
本発明の複数の態様では、ピリダジン化合物は、単離された、純粋な、特に実質的に純粋な式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、もしくはＶの化合物、またはその異性体もしくは医薬的に許容される塩である。本明細書で使用される場合、「純粋な」という用語は、一般に、９０％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％純度よりも良好であることを意味し、「実質的に純粋な」とは、本明細書に記載される組成物または用量を考慮して作られたまたはそのために利用できる化合物が、常套の精製方法により容易にもしくは合理的に除去できない不純物のみを有するように合成された化合物を意味する。
【０１１４】
本発明で使用されるピリダジン化合物は、誘導体、特に式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、またはＶの化合物の誘導体を含む。本明細書において使用される「誘導体」という用語は、化学的修飾が、化合物の官能基において、または芳香環上において起こる、化学的に修飾された化合物を意味する。式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、またはＶの化合物の誘導体（例えば、本発明のピリダジン誘導体）の非限定的な例としては、化合物での任意の利用可能な窒素におけるＮ−アセチル、Ｎ−メチル、Ｎ−ヒドロキシ基を挙げることができる。式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、またはＶの化合物を修飾するために使用することのできる誘導体基は、米国特許出願第２００３０１７６４３７号（参照により、その全体がすべての目的のために本明細書に組み込まれる）に見出すことができる。
【０１１５】
いくつかの実施形態では、表１、２、３、４、または５に記載の有機化合物、および／またはその複素環式誘導体は、特に表２、３、４、または５で使用される。
【０１１６】
特定の態様では、本発明は、本明細書で定義される式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、またはＶの化合物を使用するが、表１中で記述される化合物は除外される。
【０１１７】
他の特定の態様では、本発明は式ＩＩの化合物を使用するが、表１中で記述される化合物は除外される。
【０１１８】
さらなる特定の態様では、本発明は式ＩＩＩの化合物を使用するが、表１中で記述される化合物は除外される。
【０１１９】
さらなる特定の態様では、本発明は式ＩＶの化合物を使用するが、表１中で記述される化合物は除外される。
【０１２０】
なおさらなる特定の態様では、本発明は式Ｖの化合物を使用するが、表１中で記述される化合物は除外される。
【０１２１】
本発明の態様によると、ピリダジン化合物および／またはその関連する複素環式誘導体（例えば、本明細書の表、特に表２、３、４および／または５、またはその複素環式誘導体を参照）は、本明細書で開示される障害の治療または予防に使用される。いくつかの実施形態では、使用される化合物は、表２、３、４、および／または５に記述されたもの、またはその誘導体である。いくつかの実施形態では、本発明は、ＭＷ０１−３−１８３ＷＨ、ＭＷ０１−５−１８８ＷＨ、ＭＷ０１−２−０６５ＬＫＭ、ＭＷ０１−２−１８４ＷＨ、ＭＷ０１−２−１８９ＷＨおよびＭＷ０１−２−１５１ＳＲＭとして本明細書に示された１つ以上の化合物、またはその異性体もしくは医薬的に許容される塩を使用する。
【０１２２】
いくつかの実施形態では、本発明は、ＭＷ０１−３−１８３ＷＨ、ＭＷ０１−５−１８８ＷＨ、ＭＷ０１−２−０６５ＬＫＭ、ＭＷ０１−２−１８４ＷＨ、ＭＷ０１−２−１８９ＷＨおよびＭＷ０１−２−１５１ＳＲＭとして本明細書に示された１つ以上の化合物、またはその異性体もしくは医薬的に許容される塩を使用する。
【０１２３】
いくつかの実施形態では、本発明は、ＭＷ０１−３−１８３ＷＨ、ＭＷ０１−５−１８８ＷＨ、ＭＷ０１−２−０６５ＬＫＭ、ＭＷ０１−２−１８４ＷＨ、ＭＷ０１−２−１５１ＳＲＭ、ＭＷ０１−２−１８９ＷＨ、およびＭＷ０１−１−０１−Ｌ−Ｄ０７として示された１つ以上の化合物、および／またはこれらの化合物の関連誘導体、特に、複素環式誘導体を使用する。本発明の別の特定の実施形態では、ＭＷ０１−２−１５１ＳＲＭ、その異性体、医薬的に許容される塩、または誘導体が本発明で使用される。本発明の特定の実施形態では、ＭＷ０１−５−１８８ＷＨ、その異性体、医薬的に許容される塩、または誘導体が本発明で使用される。
【０１２４】
また、ピリダジン化合物は、「医薬的に許容される塩（複数を含む）」を含む。医薬的に許容される塩は、過度の毒性、刺激、アレルギー反応などがなく、対象または患者の組織に接触して使用するのに適しており、合理的な便益／リスク比と釣り合ったものであることを意味する。医薬的に許容される塩は、例えば、Ｓ．Ｍ．ＢｅｒｇｅらのＪ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、１９７７、６６：１に記載されている。塩の例としては、ＭＷ０１−１−０１−Ｌ−Ｄ１０、ＭＷ０１−１−０１−Ｅ０２、ＭＷ０１−１−０１−ＬＥ０８、ＭＷ０１−１−０３−Ｌ−Ａ０５、ＭＷ０１−１−１６−Ｌ−Ｄ０９、およびＭＷ０１−１−１７−Ｌ−Ｇ０４として本明細書に示される化合物が挙げられる。
【０１２５】
本発明の複数の態様では、式ＩＩの化合物の酸付加塩、特にハロゲン化物塩、より具体的には塩化物、さらに特定的には塩酸塩が使用される。特定の実施形態では、図１０で示されるピリダジン化合物４−メチル−６−フェニル−３−（４−ピリミジン−２−イルピペラジン−１−イル）ピリダジン（５）の医薬的に許容されるハロゲン化物塩が使用される。
【０１２６】
一実施形態では、本発明で使用される医薬的に許容される塩は、図１０で示される４−メチル−６−フェニル−３−（４−ピリミジン−２−イルピペラジン−１−イル）ピリダジン（５）の塩化物塩である。特定の実施形態では、医薬的に許容される塩は、図１０で示される４−メチル−６−フェニル−３−（４−ピリミジン−２−イルピペラジン−１−イル）ピリダジン（５）の塩酸塩、より詳細には、下記（すなわち、ＭＷ０１−９−０３４ＷＨ）（１６）（すなわち、２−（４−（４−メチル−６−フェニルピリダジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）ピリミジン二塩酸塩）（６）に示される二塩酸塩水和物塩である。
【０１２７】
【化７】
2010520223.tif 000009
本発明の態様では、高い溶解度を特徴とする式Ｖの化合物の二塩酸塩水和物塩、特に図１０で示される２−（４−（４−メチル−６−フェニルピリダジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）ピリミジン二塩酸塩（６）が本発明で利用される。二塩酸塩水和物塩は、以下の１つ以上の特徴をさらに有することができる：黄色粉末、約９０％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％よりも大きい純度、４２３．３３９５の分子量、ＤＭＳＯに可溶性、４８８Ｋより高い融点、２．５５、１．４６、０．８４、および−４．３１（計算値）の酸解離定数（ｐＫａ）、オクタノール／水分配係数から測定された２．２９のｌｏｇＰ、２．５（実験値）／４．０８（計算値）のｌｏｇＳを有する、および／または約１００〜４００ｍｇ／ｍｌ、約１００〜３５０ｍｇ／ｍｌ、約１５０〜３５０ｍｇ／ｍｌ、約２００〜３５０ｍｇ／ｍｌ、または約３００〜３５０ｍｇ／ｍｌの水に対する溶解度、特に水中で３２２ｍｇ／ｍｌ（２ＨＣｌ・Ｈ２Ｏ塩）より大きい溶解度を有する。
【０１２８】
複数の態様では、高い吸収率を有する無定形または結晶形の式Ｖの化合物が使用される。特定の態様では、特定の態様では、吸収率は少なくとも２、３、４または５倍増加する。
【０１２９】
ピリダジン化合物、特に式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、またはＶの化合物は、１つ以上の不斉中心を含むことができ、エナンチオマー、ジアステレオマー、および（Ｒ）−または（Ｓ）−などの絶対立体化学に関して定義され得る他の立体異性体を生じてもよい。したがって、ピリダジン化合物は、すべての可能なジアステレオマーおよびエナンチオマー、ならびにラセミ体および光学的に純粋な形態を含む。光学的に活性な（Ｒ）−および（Ｓ）−異性体は、キラル合成素子またはキラル試薬を使用して調製されてもよく、または常套の手法を使用して分割されてもよい。ピリダジン化合物が、幾何学的非対称の中心を含み、別途特定されない場合は、その化合物は、ＥおよびＡの幾何異性体の両方を含むものとされる。すべての互変異性体もまた、本発明で使用されるピリダジン化合物の範囲内に含まれる。
【０１３０】
式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶまたはＶの化合物は、多形として存在し得る結晶形態を含む。また、水または一般的な有機溶媒とで形成される化合物の溶媒和物もまた、多形の用語内に包含されるものとする。その結果、ピリダジン化合物、特に式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、またはＶの化合物は、医薬的に許容される溶媒（例えば、水、エタノールなど）との非溶媒和物形態、および溶媒和物形態で存在することができる。溶媒和物形態は、本発明の目的に関して、非溶媒和物形態と均等であるとみなすことができる。さらに、化合物およびそれらの塩の水和物形態は、本発明の範囲内に包含される。さらに、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶまたはＶの化合物のプロドラックは、その用語の中に包含される。
【０１３１】
「溶媒和物」という用語は、化合物と１つ以上の溶媒分子との物理的会合または溶質（例えば、本発明の化合物）と溶媒（例えば、水、エタノール、または酢酸）とで形成される可変化学量論の複合体を意味する。この物理的会合は、水素結合を含む、異なる程度のイオン結合および共有結合を含むことが可能である。ある例では、溶媒和物は、例えば、１つ以上の溶媒分子が結晶性固体の結晶格子に取り込まれる場合、単離することができるであろう。一般に、選択された溶媒は、溶質の生物学的活性を妨げない。溶媒和物は、液相と分離可能な溶媒和物との両方を包含する。代表的な溶媒和物としては、水和物、エタノール和物、メタノール和物などが挙げられる。
【０１３２】
本発明の化合物の脱水物、共結晶、無水物または無定形の形態も含まれる。「水和物」という用語は、その一水和物、二水和物、および種々のポリ水和物を含めた、溶媒分子（複数可）が水である溶媒和物を意味する。溶媒和物は、当該分野で公知の方法を用いて形成することができる。
【０１３３】
式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶまたはＶの結晶性化合物は、有離塩基、塩、または共結晶の形態で存在できる。有離塩基化合物は、溶媒和物を形成するために適切な溶媒の存在下で結晶化させることができる。式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶまたはＶの化合物の酸塩化合物（例えば、ＨＣｌ、ＨＢｒ、安息香酸）もまた、溶媒和物の調製に使用することができる。例えば、溶媒和物は、酢酸または酢酸エチルを使用して形成することができる。溶媒和物分子は、水素結合、ファンデルワールス力、もしくは分散力、または任意の２つもしくは３つ全ての力の組み合わせにより結晶構造を形成することができる。
【０１３４】
溶媒和物を作るのに使用される溶媒の量は、通常の試験により測定できる。例えば、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶまたはＶの化合物の一水和物は、本発明の化合物の各当量に対して溶媒（Ｈ２Ｏ）の約１当量であろう。しかしながら、多かれ少なかれ、溶媒は、所望の溶媒和物の選択に依存して使用することができる。
【０１３５】
式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶまたはＶの化合物は、無定形であってもよく、または恐らく異なる溶媒和または水和状態で存在する異なる結晶多形を有してもよい。薬物の剤形を変えることによって、それの物理的特性を変えることが可能である。例えば、より熱力学的に安定した多形は、より少ない熱力学的に安定な多形ほど可溶性ではないという互いに異なる溶解度を結晶多形は一般に有する。また、医薬用多形は、貯蔵寿命、生物学的利用能、形態学、蒸気圧、密度、色、および圧縮性などの特性において異なることもできる。
【０１３６】
式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、またはＶの化合物は、インビボで活性化合物に変換されるプロドラックの形態であってもよい。式Ｉの化合物において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、およびＲ７の１つ以上は、対象に投与された後で開裂して活性（例えば、治療的に活性な）化合物またはその後に活性化合物を産生する中間体化合物を与える開裂可能な基を含むことができる。開裂可能な基は、酵素的または非酵素的のいずれかで除去されるエステルであることができる。
【０１３７】
「プロドラック」という用語は、その薬理的効果（複数可）を示す前に少なくとも何らかの生体内変化を受ける親化合物または活性薬物の共有結合した誘導体または担体を意味する。一般に、そのようなプロドラックは、代謝的に開裂可能な基を有し、例えば、血液中での加水分解によりインビボで急速に変換されて親化合物をもたらし、概して親化合物のエステル類やアミド類似体を含む。プロドラックは、改善された化学的安定性、改善された患者の承諾および同意、改善された生物学的利用能、作用の延長された持続時間、改善された臓器選択性、改善された製剤（例えば、水溶性の増加）、および／または、副作用の減少（例えば、毒性）の目的でもって製剤化される。一般に、プロドラック自体は、弱い生物学的活性を有するか、全くその活性を有さず、通常の条件下では安定である。プロドラックは、以下に記載される方法などの当該分野で公知の方法を使用して容易に製造することができる：Ａ  Ｔｅｘｔｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，Ｋｒｏｇｓｇａａｒｄ−Ｌａｒｓｅｎ  ａｎｄ  Ｈ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄ（ｅｄｓ．），Ｇｏｒｄｏｎ  ＆  Ｂｒｅａｃｈ，１９９１，特に第５章：「Ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ」；Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ，Ｈ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄ（ｅｄ．），Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，１９８５；Ｐｒｏｄｒｕｇｓ：Ｔｏｐｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｏｃｕｌａｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，Ｋ．Ｂ．Ｓｌｏａｎ（ｅｄ．），Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，１９９８；Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，Ｋ．Ｗｉｄｄｅｒら、（ｅｄｓ．），Ｖｏｌ．４２，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，１９８５，特にｐｐ．３０９  ３９６；Ｂｕｒｇｅｒ’ｓ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ，５ｔｈ  Ｅｄ．，Ｍ．Ｗｏｌｆｆ（ｅｄ．），Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，１９９５，特にＶｏｌ．１およびｐｐ．１７２  １７８およびｐｐ．９４９  ９８２；Ｐｒｏ−Ｄｒｕｇｓ  ａｓ  Ｎｏｖｅｌ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｔ．Ｈｉｇｕｃｈｉ  ａｎｄ  Ｖ．Ｓｔｅｌｌａ（ｅｄｓ．），Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１９７５；およびＢｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  Ｃａｒｒｉｅｒｓ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ，Ｅ．Ｂ．Ｒｏｃｈｅ（ｅｄ．），Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，１９８７。
【０１３８】
プロドラックの例としては、限定されないが、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶまたはＶの化合物のヒドロキシ官能基のエステル類（例えば、酢酸エステル、ギ酸エステル、および安息香酸エステル誘導体）、カルバメート類（例えば、Ｎ、Ｎ−ジメチルアミノカルボニル）、およびその他が挙げられる。
【０１３９】
式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶまたはＶの化合物の１つの化合物は、医薬的に許容される共結晶または共結晶塩を含むことができる。医薬的に許容される共結晶は、過度の毒性、刺激、アレルギー反応を伴わずに対象または患者の組織に接触して使用するのに適し、また、所望の薬物速度論的特性を有している共結晶である。
【０１４０】
本明細書で使用される「共結晶」という用語は、室温で２つ以上の特有な固体から成る結晶質を意味し、それぞれ、構造、融点、および融解熱などの特有の物理的特性を含む。共結晶は、活性な医薬成分（ＡＰＩ）、ならびにパイスタッキングおよびファンデルワールス相互作用などの水素結合または他の非共有相互作用による共結晶形成剤により形成することができる。本発明の一態様は、共結晶を提供し、共結晶形成剤は、第２のＡＰＩである。別の態様では、共結晶形成剤は、ＡＰＩではない。別の態様では、共結晶は、２つ以上の共結晶形成剤を含む。例えば、２つ、３つ、４つ、５つ、またはそれより多い共結晶形成剤は、ＡＰＩと共に共結晶に組み込むことができる。医薬的に許容される共結晶は、例えば、「Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  ｃｏ−ｃｒｙｓｔａｌｓ」，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｖｏｌｕｍｅ  ９５（３）Ｐａｇｅｓ  ４９９−５１６，２００６に記載されている。共結晶を製造する方法は、米国特許出願第２００７００２６０７８号で議論されている。
【０１４１】
一般に、医薬的に許容される化合物である共結晶形成剤は、例えば、ベンゾキノン、テレフタルアルデヒド、サッカリン、ニコチンアミド、酢酸、蟻酸、酪酸、トリメシン酸、５−ニトロイソフタル酸、アダマンタン−１，３，５，７−テトラカルボン酸、ホルムアミド、コハク酸、フマル酸、酒石酸、リンゴ酸、マロン酸、ベンズアミド、マンデル酸、グリコール酸、フマル酸、マレイン酸、尿素、ニコチン酸、ピペラジン、ｐ−フタルアルデヒド、２，６−ピリジンカルボン酸、５−ニトロイソフタル酸、クエン酸、ならびにアルカン−、およびアレンスルホン酸（例えば、メタンスルホン酸およびベンゼンスルホン酸）であってよい。
【０１４２】
一般に、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶまたはＶの化合物の物理的形態の全てが、本発明の範囲内にあるものとする。
【０１４３】
ピリダジン化合物、特に式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、またはＶの化合物は、化合物中の１つ以上の基、例えば、式Ｉ中のＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６またはＲ７と相互作用する担体を場合により含んでよい。担体は、ポリマー、炭水化物、もしくはペプチド、もしくは誘導体またはそれらの組み合わせであってよく、場合により、例えば、１個以上のアルキル、ハロ、ヒドロキシル、ハロ、またはアミノで置換されていてよい。担体は、直接または間接的にピリダジン化合物に共有結合されていてよい。担体は、限定されないが、１つ以上のアルキル基、アミノ基、ニトロ基、ハロゲン基、チオール基、チオアルキル基、サルフェート基、スルホニル基、スルフィニル基、スルホキシド基およびヒドロキシル基を含む、本明細書で記載される置換基で置換されていてよい。本発明の態様では、担体は、アラニン、グリシン、プラリン（ｐｒａｌｉｎｅ）、メチオニン、セリン、トレオニン、アスパラギン、アラニル−アラニル、プロリル−メチオニル、またはグリシル−グリシルを含むアミノ酸である。また、担体は、ピリダジン化合物、特に式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、またはＶの化合物を特定の組織または器官の標的とする分子を含むこともできる。したがって、担体は、ピリダジン化合物、特に式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶまたはＶの化合物を、標的とする治療部位、例えば、脳への輸送を容易にする、または促進させることができる。
【０１４４】
「ポリマー」とは、同じ繰り返しサブユニットまたは異なる繰り返しサブユニットであってもよい２つ以上のモノマーの繰り返しサブユニットを含む分子を意味する。モノマーは、一般に、炭素を含む単純な構造の低分子量分子を含む。ポリマーは、場合により置換されていてよい。本発明において使用することのできるポリマーとしては、ビニル、アクリル、スチレン、炭水化物由来のポリマー、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリオキシエチレン、ポリメチレングリコール、ポリ−トリメチレングリコール、ポリビニルピロリドン、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンブロックポリマー、ならびにこれらのコポリマー、塩および誘導体が挙げられるが、これらに限定されない。本発明の態様では、ポリマーは、ポリ（２−アクリルアミド−２−メチル−１−プロパンスルホン酸）；ポリ（２−アクリルアミド−２−メチル−１−プロパンスルホン酸−コアクリロニトリル）、ポリ（２−アクリルアミド−２−メチル−１−プロパンスルホン酸−コ−スチレン）、ポリ（ビニルスルホン酸）；ポリ（ナトリウム４−スチレンスルホン酸）；およびこれらから誘導されるサルフェートおよびスルホネート；ポリ（アクリル酸）、ポリ（メチルアクリレート）、ポリ（メチルメタクリレート）、およびポリ（ビニルアルコール）である。
【０１４５】
本明細書において使用される「炭水化物」とは、ポリヒドロキシアルデヒド、またはポリヒドロキシケトンおよびそれらの誘導体を意味する。この用語は、エリトロース、アラビノース、アロース、アルトロース、グルコース、マンノース、トレオース、キシロース、グロース、イドース、ガラクトース、タロース、アルドヘキソース、フルクトース、ケトヘキソース、リボース、およびアルドペントースなどの単糖類を含む。この用語は、また、二糖類、オリゴ糖類、または多糖類を含めた、単糖類単位からなる炭水化物を含む。二糖類の例は、スクロース、ラクトース、およびマルトースである。オリゴ糖類は、一般に、３〜９個の単糖類単位を含み、そして、多糖類は、１０個を超える単糖類単位を含む。炭水化物基は、ピリダジン化合物に対する結合の位置以外に、１つ、２つ、３つまたは４つの位置で置換されていてよい。例えば、炭水化物は、場合により置換されていてよい、１つ以上のアルキル基、アミノ基、ニトロ基、ハロ基、チオール基、カルボキシル基、またはヒドロキシル基で置換されていてよい。例示される置換炭水化物は、グルコサミン、またはガラクトサミンである。本発明の態様では、炭水化物は、糖類、特に、ヘキソースまたはペントースであり、アルドースまたはケトースであってもよい。糖類は、ＤまたはＬ系列のものであってもよく、アミノ糖、デオキシ糖、およびこれらのウロン酸誘導体を含むことができる。炭水化物がヘキソースである本発明の実施形態においては、ヘキソースは、グルコース、ガラクトース、もしくはマンノース、または置換されたヘキソース糖残基、例えばアミノ糖残基（例えば、ヘキソサミン、ガラクトサミン、グルコサミン、特に、Ｄ−グルコサミン（２−アミノ−２−デオキシ−Ｄ−グルコース）もしくはＤ−ガラクトサミン（２−アミノ−２−デオキシ−Ｄ−ガラクトース）などである。例示的なペントース糖としては、アラビノース、フコースおよびリボースが挙げられる。
【０１４６】
糖残基は、１，１結合、１，２結合、１，３結合、１，４結合、１，５結合、または１，６結合でピリダジン化合物に結合されてよい。結合は、ピリダジン化合物の酸素原子を介していてよい。酸素原子は、−ＣＨ２−または−Ｓ−基で１回以上、置換することができる。
【０１４７】
「炭水化物」という用語は、また、レクチン類（例えば、コンカナバリンＡ、コムギ胚芽凝集素、ピーナッツ凝集素、セロムコイド、およびオロソムコイド）などの糖タンパク質ならびに糖脂質（例えば、セレブロシドおよびガングリオシド）を含む。
【０１４８】
「ペプチド」担体は、ペプチド結合により共有結合した１個、２個、３個、４個、もしくは５個またはそれより多くのアミノ酸を含む。ペプチドは、１つ以上の天然アミノ酸、ならびにこの類似体、誘導体および同族体を含むことができる。ペプチドを修飾して、その安定性、生物学的利用能、溶解度などを増大させることができる。本明細書において使用される「ペプチド類似体」および「ペプチド誘導体」としては、ペプチドの化学構造を模倣した、ペプチドの機能性を維持する分子が挙げられる。担体は、アラニン、グリシン、プロリン、メチオニン、セリン、トレオニン、ヒスチジン、アスパラギン、アラニル−アラニル、プロリル−メチオニル、またはグリシル−グリシルなどのアミノ酸であることができる。担体は、アルブミン、アンチトリプシン、マクログロブリン、ハプトグロビン、セルロプラスム、トランスフェリン（ｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎｇ）、α−もしくはβ−リポタンパク質、β−もしくはγ−グロブリンまたはフィブリノゲンなどのポリペプチドであることができる。ペプチドは、ある種のアミノ酸（例えば、セリン）の側鎖上の官能基または他の適切な官能基を介してピリダジン化合物に結合することができる。担体は、側鎖上の官能基を介して３つ以上のアミノ酸に結合した基を有する４つ以上のアミノ酸を含んでよい。一態様では、担体はアミノ酸、特にアミノ酸のスルホネート誘導体、例えば、システイン酸である。
【０１４９】
ペプチド類似体、誘導体および模倣体を表す方法は、当技術分野において知られている。例えば、Ｆａｒｍｅｒ，Ｐ．Ｓ．ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ（Ｅ．Ｊ．Ａｒｉｅｎｓ，ｅｄ．）Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、１９８０，ｖｏｌ．１０，ｐｐ．１１９−１４３；Ｂａｌｌ．Ｊ．Ｂａｎｄ  Ａｌｅｗｏｏｄ，Ｐ．Ｆ．（１９９０）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ  ３：５５；Ｍｏｒｇａｎ，Ｂ．Ａ．ａｎｄ  Ｇａｉｎｏｒ，Ｊ．Ａ．（１９８９）Ａｎｎ．Ｒｅｐ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２４：２４３；およびＦｒｅｉｄｉｎｇｅｒ，Ｒ．Ｍ．（１９８９）Ｔｒｅｎｄｓ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｓｃｉ．１０：２７０を参照されたい。また、Ｓａｗｙｅｒ，Ｔ．Ｋ．（１９９５）「Ｐｅｐｔｉｄｏｍｉｍｅｔｉｃ  Ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ  ｔｏ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ」，ｉｎ  Ｔａｙｌｏｒ，Ｍ．Ｄ．ａｎｄ  Ａｍｉｄｏｎ，Ｇ．Ｌ．（ｅｄｓ．）Ｐｅｐｔｉｄｅ−Ｂａｓｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ：Ｃｏｎｔｒｏｌｌｉｎｇ  Ｔｒａｎｓｐｏｒｔ  ａｎｄ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ、Ｃｈａｐｔｅｒ  １７；Ｓｍｉｔｈ，Ａ．Ｂ．３ｒｄら（１９９５）Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１１７：１１１１３−１１１２３；Ｓｍｉｔｈ，Ａ．Ｂ．３ｒｄら（１９９４）Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１１６：９９４７−９９６２、およびＨｉｒｓｃｈｍａｎ，Ｒ．ら（１９９３）Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１１５：１２５５０−１２５６８を参照されたい。
【０１５０】
「アルキル」という用語は、単独、または「チオアルキル」および「アリールアルキル」などの他の用語内において、直鎖（即ち、線状）または分枝鎖であってよい１価の飽和炭化水素基を意味する。本発明における使用のためのアルキル基は、一般に、約１〜２０個の炭素原子、特に、約１〜１０個、１〜８個または１〜７個、さらに詳しくは、約１〜６個または３〜６個の炭素原子を含む。アルキル基の例示としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｎ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、イソプロピル、イソブチル、イソペンチル、アミル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｔｅｒｔ−ペンチル、ｎ−ヘプチル、ｎ−オクチル、ｎ−ノニル、ｎ−デシル、ウンデシル、ｎ−ドデシル、ｎ−テトラデシル、ペンタデシル、ｎ−ヘキサデシル、ヘプタデシル、ｎ−オクタデシル、ノナデシル、エイコシル、ドシル、ｎ−テトラコシルなど、およびこれらの分枝状の変形体などが挙げられる。本発明のある態様では、アルキル基は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｎ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、イソプロピル、イソブチル、イソペンチル、アミル、トリブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｔｅｒｔ−ペンチル、およびｎ−ヘキシルからなる群を含む、またはこれらの群から選択されるＣ１〜Ｃ６低級アルキルである。アルキル基は、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、またはＶの化合物の調製を著しく妨げず、化合物の有効性を著しく減少させない位置で、本明細書において定義される置換基で場合により置換されていてよい。本発明のある態様では、アルキル基は、置換基で、特にハロ、低級アルコキシ、低級脂肪族、置換低級脂肪族、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、チオ、アミノ、ケト、アルデヒド、エステル、アミド、置換アミノ、カルボキシル、スルホニル、スルフィニル、スルフェニル、サルフェート、スルホキシド、置換カルボキシル、ハロゲン化低級アルキル（例えば、ＣＦ３）、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、低級アルコキシカルボニル、低級アルキルカルボニルオキシ、低級アルキルカルボニルアミノ、環状脂肪族、置換環状脂肪族、またはアリール（例えば、フェニルメチル（即ち、ベンジル））を含む１〜５個の置換基で置換される。アルキル基上の置換基は、それ自体置換されていてよい。
【０１５１】
本発明のある態様に関して本明細書において使用される「置換脂肪族」という用語は、脂肪族水素原子の少なくとも１つが、ハロゲン、アミノ、ヒドロキシ、ニトロ、チオ、ケトン、アルデヒド、エステル、アミド、低級脂肪族、置換低級脂肪族、または環（アリール、置換アリール、環状脂肪族、または置換環状脂肪族など）で置換されている、１０個未満の炭素を有するアルキルまたはアルカンを意味する。そのような基の例としては、１−クロロエチルなどが挙げられるが、これに限定されない。
【０１５２】
本発明のある態様に関して本明細書において使用される「アミノ置換低級アルキル」という用語は、脂肪族水素原子の１つがアミノ基で置換されている、８個までおよび８個の炭素原子を含む任意のアルキル単位を意味する。そのような例としては、エチルアミノなどが挙げられるが、これに限定されない。
【０１５３】
本発明のある態様に関して本明細書において使用される「ハロゲン置換低級アルキル」という用語は、脂肪族水素原子の１つが、ハロゲンで置換されている、８個までおよび８個の炭素原子を含む任意のアルキル鎖を意味する。そのような例としては、クロロエチルなどが挙げられるが、これに限定されない。
【０１５４】
本明細書において使用される「アセチルアミノ」という用語は、アセチル化されている任意の第１級または第２級アミノを意味する。そのような例としては、アセトアミドなどが挙げられるが、これに限定されない。
【０１５５】
本明細書において使用される「アルケニル」という用語は、少なくとも１個の二重結合を含む、不飽和非環式分枝鎖または直鎖の炭化水素基を意味する。アルケニル基は、約２〜２４個、２〜１５個、または２〜１０個の炭素原子、特に、約３〜８個の炭素原子、さらに詳しくは、約３〜６個または２〜６個の炭素原子を含んでよい。適切なアルケニル基としては、エテニル、プロペニル（例えば、プロパ−１−エン−１−イル、プロパ−１−エン−２−イル、プロパ−２−エン−１−イル（アリル）、およびプロパ−２−エン−２−イル）、ブテン−１−イル、ブタ−１−エン−２−イル、２−メチル−プロパ−１−エン−１−イル、ブタ−２−エン−１−イル、ブタ−２−エン−２−イル、ブタ−１，３−ジエン−１−イル、ブタ−１，３−ジエン−２−イル、ヘキセン−１−イル、３−ヒドロキシヘキセン−１−イル、ヘプテン−１−イル、およびオクテン−１−イルなどが挙げられるが、これらに限定されない。アルケニル基は、アルキル同様に、場合により置換されていてよい。
【０１５６】
本発明の態様では、「置換アルケニル」は、例えば、１〜３個の置換基、好ましくは１〜２個の置換基によって置換されたアルケニル基を含み、置換基としては、アルキル、アルコキシ、ハロアルコキシ、アルキルアルコキシ、ハロアルコキシアルキル、アルカノイル、アルカノイルオキシ、シクロアルキル、シクロアルコキシ、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、アルキルアミノ、アルカノイルアミノ、アミノアシル、アミノアシルオキシ、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、カルボキシル、カルボキシアルキル、カルバミル、ケト、チオケト、チオール、アルキルチオ、スルホニル、スルホンアミド、チオアルコキシ、アリール、ニトロなどが挙げられる。
【０１５７】
本明細書において使用される「アルキニル」という用語は、１つ以上の三重結合を含む、不飽和分枝鎖または直鎖炭化水素基を意味する。アルキニル基は、約１〜２０個、１〜１５個、または２〜１０個の炭素原子、特に、約３〜８個の炭素原子、さらに詳しくは、約３〜６個の炭素原子を含んでもよい。適切なアルキニル基としては、エチニル、プロパ−１−イン−１−イルおよびプロパ−２−イン−１−イルなど、ブチニル（例えば、ブタ−１−イン−１−イル、ブタ−１−イン−３−イル、およびブタ−３−イン−１−イルなど）、ペンチニル（例えば、ペンチン−１−イル、ペンチン−２−イル、４−メトキシペンチン−２−イル、および３−メチルブチン−１−イルなど）、ヘキシニル（例えば、ヘキシン−１−イル、ヘキシン−２−イル、ヘキシン−３−イルおよび３，３−ジメチルブチン−１−イル基など）などが挙げられるが、これらに限定されない。アルキニルは、アルキルと同様に、場合により置換されていてよい。「シクロアルキニル」という用語は、環状アルキニル基を意味する。
【０１５８】
本発明の態様では、「置換アルキニル」としては、例えば、アルキル、アルコキシ、アルカノイル、アルカノイルオキシ、シクロアルキル、シクロアルコキシ、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、アルキルアミノ、アルカノイルアミノ、アミノアシル、アミノアシルオキシ、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、カルボキシル、カルボキシアルキル、カルバミル、ケト、チオケト、チオール、アルキルチオ、スルホニル、スルホンアミド、チオアルコキシ、アリール、ニトロなどの置換基によって置換されたアルキニル基が挙げられる。
【０１５９】
本明細書において使用される「アルキレン」という用語は、約１〜１０個、１〜８個、１〜６個、または２〜６個の炭素原子を有し、２つ以上の共有結合のための結合点を有する、線状または分枝の基を意味する。そのような基の例は、メチレン、エチレン、プロピレン、ブチレン、ペンチレン、ヘキシレン、エチリデン、メチルエチレン、およびイソプロピリデンである。アルケニレン基が他の基上の置換基として存在する場合は、２つの置換基で形成される基ではなく単独の置換基と一般的にみなされる。
【０１６０】
本明細書において使用される「アルケニレン」という用語は、約２〜１０個、２〜８個、または２〜６個の炭素原子、少なくとも１つの二重結合を有し、２つ以上の共有結合のための結合点を有する、線状または分枝の基を意味する。アルケニレン基の例としては、１，１−ビニリデン（−ＣＨ２＝Ｃ−）、１，２−ビニリデン（−ＣＨ＝ＣＨ−）、および１，４−ブタジエニル（−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−）が挙げられる。
【０１６１】
本明細書において使用される「ハロ」という用語は、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素原子などのハロゲンを意味する。
【０１６２】
本明細書において使用される「ヒドロキシル」または「ヒドロキシ」という用語は、−ＯＨ基を意味する。
【０１６３】
本明細書において使用される「シアノ」という用語は、４つの共有結合のうち３つが窒素原子により共有される炭素基、特に、−Ｃ≡Ｎを意味する。シアノ基は、本明細書に記載の置換基で置換されていてよい。
【０１６４】
本明細書において使用される「アルコキシ」という用語は、置換されていてよい、メトキシ基などの、１〜約１０個の炭素原子のアルキル部分を有する線状または分枝のオキシ含有基を意味する。本発明の態様では、アルコキシ基は、約１〜１０個、１〜８個、１〜６個または１〜３個の炭素原子を含んでよい。本発明の実施形態において、アルコキシ基は、約１〜６個の炭素原子を含み、例としてＣ１〜Ｃ６アルキル−Ｏ−基が挙げられ、ここで、Ｃ１〜Ｃ６アルキルは、本明細書で示された意味を有する。アルコキシ基の例としては、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、イソプロポキシおよびｔ−ブトキシアルキルが挙げられるが、これらに限定されない。「アルコキシ」基は、「アルキルアルコキシ」基を与えるためのアルキル原子；「ハロアルコキシ」基（例えば、フルオロメトキシ、クロロメトキシ、トリフルオロメトキシ、ジフルオロメトキシ、トリフルオロエトキシ、フルオロエトキシ、テトラフルオロエトキシ、ペンタフルオロエトキシ、およびフルオロプロポキシ）および「ハロアルコキシアルキル」基（例えば、フルオロメトキシメチル、クロロメトキシエチル、トリフルオロメトキシメチル、ジフルオロメトキシエチル、およびトリフルオロエトキシメチル）を与えるための、フッ素、塩素または臭素などのハロ原子を含む、本明細書において開示される１つ以上の置換基で場合により置換されていてよい。
【０１６５】
本明細書において使用される「アルケニルオキシ」という用語は、エテニルオキシまたはプロペニルオキシ基などの、約２〜１０個の炭素原子のアルケニル部分を有する線状または分枝のオキシ含有基を意味する。アルケニルオキシ基は、約２〜６個の炭素原子を有する「低級アルケニルオキシ」基であってよい。アルケニルオキシ基の例としては、エテニルオキシ、プロペニルオキシ、ブテニルオキシ、およびイソプロペニルオキシアルキルが挙げられるが、これらに限定されない。「アルケニルオキシ」基は、「ハロアルケニルオキシ」基（例えば、トリフルオロエテニルオキシ、フルオロエテニルオキシ、ジフルオロエテニルオキシ、およびフルオロプロペニルオキシ）を与えるために、フッ素、塩素または臭素などのハロ原子を含む、本明細書に開示されている１つ以上の置換基で置換されていてよい。
【０１６６】
「炭素環式」は、環を形成する原子（水素以外）が炭素だけの、飽和または不飽和の、置換または非置換の５〜１４員、５〜１２員または５〜１０員の有機核から誘導される基を含む。炭素環式基の例は、シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、特に、フェニル、ナフチル、ノルボルナニル、ビシクロヘプタジエニル、トルリル、キシレニル、インデニル、スチルベニル、テルフェニリル、ジフェニルエチレニル、フェニルシクロヘキシル、アセナフチレニル、アントラセニル、ビフェニル、ビベンジリル、および関連するビベンジリル同族体、オクタヒドロナフチル、テトラヒドロナフチル、オクタヒドロキノリニル、ジメトキシテトラヒドロナフチルなどである。
【０１６７】
本明細書において使用される「シクロアルキル」という用語は、約３〜１５個、３〜１０個、３〜８個、または３〜６個の炭素原子を有し、１つ、２つ、３つ、または４つの環を含み、そのような環が、ペンダント状に結合されていてもよく、または縮合していてもよい基を指す。本発明のある態様では、「シクロアルキル」は、１〜２個の環および環（不飽和のＣ３〜Ｃ７炭素環とさらに縮合していてよい）あたり３〜７個の炭素原子を含む、場合により置換された飽和炭化水素環系を意味する。シクロアルキル基の例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル、シクロノニル、シクロデシル、シクロドデシルなどの単環構造、またはアダマンチルなどの多環構造が挙げられる。本発明のある態様では、シクロアルキル基は、約３〜１０個、３〜８個、３〜６個または３〜４個の炭素原子を有する「低級シクロアルキル」であり、特にシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、およびシクロヘプチルである。「シクロアルキル」という用語は、また、シクロアルキル基がアリール基またはヘテロシクリル基と縮合した基も包含する。シクロアルキル基は、本明細書において開示される基で、場合により置換されていてよい。
【０１６８】
本発明の態様では、「置換シクロアルキル」は、非制限的に、アルキル、アルケニル、アルコキシ、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、アミノアシル、アミノアシルオキシ、オキシアシルアミノ、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、カルボキシル、カルボキシアルキル、ケト、チオケト、チオール、チオアルコキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヒドロキシアミノ、アルコキシアミノ、およびニトロなどを含む１〜５個（特に１〜３個）の置換基を有するシクロアルキル基を含む。
【０１６９】
本発明のある態様に関して本明細書で使用される「環状脂肪族」という用語は、８個未満の炭素を有するシクロアルカンまたは３個以下の縮合環状脂肪族環からなる縮合環系を意味する。そのような例としては、限定されないが、デカリンなどが挙げられる。
【０１７０】
本発明のある態様に関して本明細書で使用される「置換環状脂肪族」という用語は、８個未満の炭素を有するシクロアルカンまたは３個以下の縮合環からなる縮合環系であって、脂肪族水素原子の少なくとも１つが、ハロゲン、ニトロ、チオ、アミノ、ヒドロキシ、ケトン、アルデヒド、エステル、アミド、低級脂肪族、置換低級脂肪族、または環（アリール、置換アリール、環状脂肪族、または置換環状脂肪族）で置換された基を意味する。そのような例としては、１−クロロデカリルなどが挙げられるが、これに限定されない。
【０１７１】
本明細書で使用される「シクロアルケニル」という用語は、約４〜１６個、２〜１５個、２〜１０個、２〜８個、４〜１０個、３〜８個、３〜７個、３〜６個、または４〜６個の炭素原子、１つ以上の炭素−炭素二重結合、および１つ、２つ、３つ、または４つの環を含み、そのような環が、ペンダント状に結合していてよく、または縮合していてよい基を意味する。本発明のある態様では、シクロアルケニル基は、３〜７個の炭素原子を有する「低級シクロアルケニル」基である。シクロアルケニル基の例としては、シクロブテニル、シクロペンテニル、シクロヘキセニルおよびシクロヘプテニルが挙げられるが、これらに限定されない。シクロアルケニル基は、本明細書において開示される基、特に、同じか、または異なっていてもよい、１個、２個、または３個の置換基で場合により置換されていてよい。
【０１７２】
本明細書で使用される「シクロアルコキシ」という用語は、オキシ基に結合したシクロアルキル基（特に、３〜１５個、３〜８個または３〜６個の炭素原子を有するシクロアルキル基）を意味する。シクロアルコキシ基の例としては、シクロヘキソキシおよびシクロペントキシが挙げられる。シクロアルコキシ基は、本明細書で開示される基で場合により置換されていてよい。
【０１７３】
本明細書で使用される、「アリール」という用語は、単独でまたは組み合わせて、１つ、２つまたは３つの環を含む炭素環式芳香族系を意味し、そのような環が、ペンダント状に一緒に結合されていてもよく、または縮合していてもよい。本発明の態様では、アリール基は、４〜２４個の炭素原子、特に４〜１０個，４〜８個、または４〜６個の炭素原子を含む。「アリール」基の例としては、フェニル、ベンジル、ナフチル、インデニル、ベンゾシクロオクテニル、ベンゾシクロヘプテニル、ペンタレニル、アズレニル、テトラヒドロナフチル、インダニル、ビフェニル、アセフチレニル、フルオレニル、フェナレニル、フェナントレニル、およびアントラセニルなどの芳香族基が挙げられるが、これらに限定されない。アリール基は、本明細書に開示の基、特に、ヒドロキシル、アルキル（「アリールアルキル」）、カルボニル、カルボキシル、チオール（「チオアルキル」）、アミノ、および／またはハロで場合により置換されていてよく、特に、置換アリールとしては、アリールアミンおよびアリールアルキルアミンが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１７４】
本発明のある態様に関して本明細書で使用される「置換アリール」という用語は、芳香族環、または少なくとも１つが芳香族である３以下の縮合環から成る縮合芳香族環系を含み、環炭素上の水素原子の少なくとも１つが、ハロゲン、アミノ、ヒドロキシ、ニトロ、チオ、アルキル、ケトン、アルデヒド、エステル、アミド、低級脂肪族、置換低級脂肪族、または環（アリール、置換アリール、環状脂肪族、または置換環状脂肪族）で置換された基を意味する。そのような例としては、ヒドロキシフェニル、クロロフェニルなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１７５】
本発明の態様では、アリール基は、１〜４個の置換基で場合により置換されていてよく、そのような置換基としては、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、アラルキル、ハロ、トリフルオロメトキシ、トリフルオロメチル、ヒドロキシ、アルコキシ、アルカノイル、アルカノイルオキシ、アリールオキシ、アラルキルオキシ、アミノ、アルキルアミノ、アリールアミノ、アラルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アルカノイルアミノ、チオール、アルキルチオ、ウレイド、ニトロ、シアノ、カルボキシ、カルボキシアルキル、カルバミル、アルコキシカルボニル、アルキルチオノ、アリールチオノ、アリールスルホニルアミン、スルホン酸、アルキルスルホニル、スルホンアミド、アリールオキシなどが挙げられる。置換基は、ヒドロキシ、ハロ、アルキル、アルコキシ、アルケニル、アルキニル、アリールまたはアラルキルによってさらに置換されてよい。本発明の態様では、アリール基は、ヒドロキシル、アルキル、カルボニル、カルボキシル、チオール、アミノ、および／またはハロで置換されている。「アラルキル」という用語は、アルキル基を介して直接に結合しているアリール基または置換アリール基、例えばベンジルを意味する。置換アリール基の他の特定の例は、クロロベンジル、およびアミノベンジルを含む。
【０１７６】
本明細書で使用される「アリールオキシ」という用語は、酸素原子に結合した、上で定義されるようなアリール基を意味する。アリールオキシ基の例としては、ナフチルオキシ、キノリルオキシ、イソキノリジニルオキシなどが挙げられる。
【０１７７】
本明細書で使用される「アリールアルコキシ」という用語は、アルコキシ基に結合したアリール基を意味する。アリールアルコキシの代表的な例としては、２−フェニルエトキシ、３−ナフト−２−イルプロポキシ、および５−フェニルペンチルオキシが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１７８】
本明細書で使用される「アロイル」という用語は、ベンゾイルおよびトルオイルを含むがこれらに限定されない、本明細書で定義されるカルボニル基に結合した、先に定義されるアリール基を意味する。アロイル基は、本明細書において開示される基で、場合により置換されていてよい。
【０１７９】
本明細書で使用される「ヘテロアリール」という用語は、炭素、窒素、硫黄および酸素から選択される少なくとも１つのヘテロ原子を有する、完全に不飽和のヘテロ原子含有環状芳香族基を意味する。ヘテロアリール基は、１つ、２つまたは３つの環を含んでもよく、環は、ペンダント状に結合されていてもよく、または縮合していてもよい。本発明の態様では、その用語は、炭素、窒素、硫黄および酸素から選択される３〜１５、３〜１０、３〜８、５〜１５、５〜１０、または５〜８環員を有する完全に不飽和のヘテロ原子含有環状芳香族基を意味し、そこでは少なくとも１つの環原子は、ヘテロ原子である。「ヘテロアリール」基の例としては、１〜４個の窒素原子を含む不飽和の５〜６員ヘテロモノシクリル基、特に、ピロリル、ピロリニル、イミダゾリル、ピラゾリル、２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジル、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、トリアゾリル、テトラゾリルなど；１〜５個の窒素原子を含む不飽和の縮合複素環基、特に、インドリル、イソインドリル、インドリジニル、インダゾリル、キナゾリニル、プテリジニル、キノリジジニル、フタラジニル、ナフチリジニル、キノキサリニル、シンノリニル、フェナントリジニル、アクリジニル、フェナントロリニル、フェナジニル、カルバゾリル、プリニル、ベンゾイミダゾリル、キノリル、イソキノリル、キノリニル、イソキノリニル、インダゾリル、ベンゾトリアゾリル、テトラゾロピリダジニルなど；酸素原子を含む不飽和の３〜６員単環式複素環基、特に、２−フリル、３−フリル、ピラニルなど；硫黄原子を含む不飽和の５〜６員単環式複素環基、特に、チエニル、２−チエニル、３−チエニルなど；１〜２個の酸素原子および１〜３個の窒素原子を含む不飽和の５〜６員単環式複素環基、特に、フラザニル、ベンゾフラザニル、オキサゾリル、イソキサゾリル、およびオキサジアゾリル；１〜２個の酸素原子および１〜３個の窒素原子を含む不飽和の縮合複素環基、特に、ベンゾオキサゾリル、ベンゾオキサジアゾリルなど；１〜２個の硫黄原子および１〜３個の窒素原子を含む不飽和の５〜６員単環式複素環基、例えば、チアゾリル、イソチアゾリル、チアジアゾリルなど；１〜２個の硫黄原子および１〜３個の窒素原子を含む不飽和の縮合複素環基、例えばベンゾチアゾリル、ベンゾチアジアゾリルなどが挙げられるが、これらに限定されない。この用語は、また、複素環基がアリール基と縮合した基、特に、ベンゾフラニル、ベンゾチオフェニル、フタラジニル、クロメニル、キサンテニルなどの二環式基を含む。ヘテロアリール基は、本明細書において開示される基、例えば、アルキル、アミノ、ハロゲンなどで場合により置換されていてよく、特に、ヘテロアリールアミンである。
【０１８０】
本発明の態様では、その用語は、特に１〜４個の窒素原子を含む不飽和の５〜６員ヘテロモノシクリル基、特にピロリル、ピロリニル、イミダゾリル、ピラゾリル、２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジル、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、トリアゾリル、テトラゾリルなどを意味する。
【０１８１】
ヘテロアリール基は、本明細書で開示される基で、例えば、アルキル、アミノ、ハロゲンなどで場合により置換されていてよく、特に置換されたヘテロアリール基は、ヘテロリールアミンである。
【０１８２】
「複素環」という用語は、炭素、窒素、硫黄および酸素から選択される少なくとも１つのヘテロ原子を有する、飽和および部分飽和のヘテロ原子含有環状基を意味する。複素環基は、１つ、２つまたは３つの環を含んでよく、そのような環は、ペンダント状に結合されていてもよく、または縮合していてもよい。一態様では、その用語は、炭素、窒素、硫黄および酸素から選択される３〜１５、３〜１０、５〜１５、５〜１０、または３〜８環員を有する飽和および部分飽和のヘテロ原子含有環状基を意味し、少なくとも１つの環原子は、ヘテロ原子である。飽和複素環基の例としては、１〜４個の窒素原子を含む、飽和３〜６員単環式複素環基（例えば、ピロリジニル、イミダゾリジニル、ピペリジニル、およびピペラジニル）；１〜２個の酸素原子および１〜３個の窒素原子を含む、飽和３〜６員単環式複素環基（例えば、モルホリニル；シドノニル）；および１〜２個の硫黄原子および１〜３個の窒素原子を含む、飽和３〜６員単環式複素環基（例えば、チアゾリジニル）などが挙げられるが、これらに限定されない。部分的に飽和したヘテロシクリル基の例としては、ジヒドロチオフェン、ジヒドロピラニル、ジヒドロフラニル、およびジヒドロチアゾリルが挙げられるが、これらに限定されない。複素環基の例としては、アジリジニル、アゼチジニル、２−ピロリニル、３−ピロリニル、ピロリジニル、アゼピニル、１，３−ジオキソラニル、２Ｈ−ピラニル、４Ｈ−ピラニル、ピペリジニル、１，４−ジオキサニル、モルホリニル、ピラゾリニル、１，４−ジチアニル、チオモルホリニル、１，２，３，６−テトラヒドロピリジニル、オキシラニル、オキセタニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロピリジニル、テトラヒドロチオピラニル、チオキサニル、インドリニル、２Ｈ−ピラニル、４Ｈ−ピラニル、ジオキサニル、１，３−ジオキソラニル、ピラゾリニル、ジヒドロピラニル、ジヒドロチエニル、ジヒドロフラニル、ピラゾリジニル、イミダゾリニル、イミダゾリジニル、３Ｈ−インドリル、キヌクリジニル、キノリジニルなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１８３】
本発明のある態様に関して本明細書で使用される「複素環」という用語は、８個未満の炭素を有する、シクロアルカンおよび／またはアリール環系、または３以下の縮合環からなる、環炭素原子の少なくとも１つが、酸素、窒素または硫黄で置換されている縮合環系を意味する。そのような例としては、モルホリノなどが挙げられるが、これに限定されない。
【０１８４】
本発明のある態様に関して本明細書で使用される「置換複素環」という用語は、８個未満の炭素を有する、シクロアルカンおよび／またはアリール環系、または３以下の縮合環からなる縮合環系を意味し、環炭素原子の少なくとも１つが、酸素、窒素または硫黄で置換されており、脂肪族水素原子の少なくとも１つは、ハロゲン、ヒドロキシ、チオ、ニトロ、アミノ、ケトン、アルデヒド、エステル、アミド、低級脂肪族、置換低級脂肪族、または環（アリール、置換アリール、環状脂肪族、または置換環状脂肪族）で置換されている。そのような例としては、２−クロロピラニルが挙げられるが、これに限定されない。
【０１８５】
前述のヘテロアリールおよび複素環基は、Ｃ−結合されていてもよく、またはＮ−結合されていてもよい（可能である場合）。
【０１８６】
本明細書で使用される「スルホニル」という用語は、単独で、またはアルキルスルホニルもしくはアリールスルホニルなどの他の用語と組み合わせて、２価の基である−ＳＯ２−を意味する。本発明の態様では、スルホニル基は、置換または非置換のヒドロキシル、アルキル基、エーテル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、シクロアルキル基、シクロアルケニル基、シクロアルキニル基、複素環基、炭水化物、ペプチド、またはペプチド誘導体に結合していてもよい。
【０１８７】
単独で、またはアルキルスルフィニル（即ち、−Ｓ（Ｏ）−アルキル）もしくはアリールスルフィニルなどの他の用語とリンクして使用される「スルフィニル」という用語は、２価の基である−Ｓ（Ｏ）−を意味する。
【０１８８】
「スルホネート」という用語は、当該分野で認められており、式：
【０１８９】
【化８】
2010520223.tif 000010
（式中、Ｒ１８は、電子対、水素、アルキル、シクロアルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、複素環、炭水化物、ペプチド、またはペプチド誘導体である）で表わされる基を含む。
【０１９０】
「サルフェート」という用語は、単独でまたは他の用語とリンクして使用されて当該分野で認められており、式：
【０１９１】
【化９】
2010520223.tif 000011
（式中、Ｒ１９は、電子対、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、アリール、複素環、炭水化物、ペプチド、またはペプチド誘導体である）で表わすことができる基を含む。
【０１９２】
「スルホキシド」という用語は、−Ｓ＝Ｏの基を意味する。
【０１９３】
単独または組み合わせて本明細書で使用される「アミノ」という用語は、窒素原子（Ｎ）が、水素、ヒドロキシル、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、シリル、複素環、または一般的化学式が、−ＮＲ３８１Ｒ３９のヘテロアリール（ここで、Ｒ３８およびＲ３９は、置換されていてもされていなくてもよい、水素、ヒドロキシル、アルキル、シクロアルキル、アルコキシ、アルケニル、アルキニル、アリール、カルボニル、カルボキシル、アミノ、シリル、ヘテロアリール、または複素環の任意の組合せであることができる）の任意の組合せで存在する３個の置換基と結合する基を意味する。場合により、窒素原子上の１つの置換基は、ヒドロキシルアミンとして知られているアミンを与えるためにヒドロキシル基（−ＯＨ）であってよい。アミノ基の具体例は、置換されていてもされていなくてもよい、アミノ（−ＮＨ２）、アルキルアミノ、アシルアミノ、シクロアミノ、非環式アルキルアミノ、アリールアミノ、アリールアルキルアミノ、および低級アルキルシリルアミノ、特に、メチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ、２−プロピルアミノ、ブチルアミノ、イソブチルアミノ、シクロプロピルアミノ、ベンジルアミノ、アリルアミノ、ヒドロキシルアミノ、シクロヘキシルアミノ、ピペリジニル、ヒドラジニル、ベンジルアミノ、ジフェニルメチルアミノ、トリチルアミノ、トリメチルシリルアミノ、およびジメチル−ｔｅｒｔ−ブチルシリルアミノである。
【０１９４】
本明細書で使用される「チオール」という用語は、−ＳＨを意味する。チオールは、本明細書において開示される置換基、特にアルキル（チオアルキル）、アリール（チオアリール）、アルコキシ（チオアルコキシ）またはカルボキシルで置換されていてよい。
【０１９５】
単独で、またはアルキルスルフェニルなどの他の用語とリンクして使用される「スルフェニル」という用語は、−ＳＲ２５基（ここで、Ｒ２５は、水素ではない）を意味する。本発明の態様では、Ｒ２５は、置換または非置換の、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、シリル、シリルアルキル、複素環、ヘテロアリール、カルボニル、カルバモイル、アルコキシ、またはカルボキシルである。
【０１９６】
単独で、または組み合わせて本明細書で使用される「チオアルキル」という用語は、硫黄原子（Ｓ）が、置換されていてよいアルキルに結合している化学的官能基を意味する。チオアルキル基の例は、チオメチル、チオエチル、およびチオプロピルである。チオアルキルは、置換または非置換の、カルボキシル、アリール、複素環、カルボニル、または複素環で置換されていてもよい。
【０１９７】
単独で、または組み合わせて本明細書で使用される「チオアリール」という用語は、硫黄原子（Ｓ）が、一般化学式の−ＳＲ２６基（ここで、Ｒ２６は、置換されていてよいアリールである）でアリール基に結合している化学的官能基を意味する。チオアリール基および置換チオアリール基の具体例は、チオフェニル、クロロチオフェニル、パラ−クロロチオフェニル、チオベンジル、４−メトキシ−チオフェニル、４−ニトロ−チオフェニル、およびパラ−ニトロチオベンジルである。
【０１９８】
単独で、または組み合わせて本明細書で使用される「チオアルコキシ」という用語は、硫黄原子（Ｓ）が、一般化学式の−ＳＲ２７基（ここで、Ｒ２７は、置換されていてよいアルコキシ基である）でアルコキシ基に結合している化学的官能基を意味する。「チオアルコキシ基」は、１〜６個の炭素原子、即ち、−Ｓ−（Ｏ）−Ｃ１〜Ｃ６アルキル基（ここで、Ｃ１〜Ｃ６アルキルは、先に定義されたもの同じ意味を有する）を有していてよい。１〜６個の炭素原子を有する直鎖または分枝のチオアルコキシ基またはラジカル（Ｃ１〜Ｃ６チオアルコキシとしても知られる）の具体例としては、チオメトキシおよびチオエトキシが挙げられる。
【０１９９】
チオールは、置換もしくは非置換のヘテロアリールまたは複素環、特に、１〜４個の窒素原子を含む、置換または非置換の飽和の３〜６員単環式複素環基（例えば、ピロリジニル、イミダゾリジニル、ピペリジニル、およびピペラジニル）または１〜２個の酸素原子および１〜３個の窒素原子を含む飽和の３〜６員単環式複素環基（例えば、モルホリニル、シドノリル）、特に、置換モルホリニルまたはピペリジニルで置換されていてよい。
【０２００】
本明細書で使用される「カルボニル」という用語は、４つの共有結合のうち２つを酸素原子と共有する炭素基を意味する。
【０２０１】
単独で、または組み合わせて本明細書で使用される「カルボキシル」という用語は、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１４または−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ１４（ここで、Ｒ１４は、場合により置換されていてよい、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アミノ、チオール、アリール、ヘテロアリール、チオアルキル、チオアリール、チオアルコキシ、ヘテロアリール、または複素環である）を意味する。本発明の特定の態様では、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１４は、エステルまたはアミノ酸誘導体を提供する。エステル化形態は、また、本明細書では特に「カルボン酸エステル」として言及される。本発明の態様では、「カルボキシル」は、置換されていてもよく、特に、場合により１つ以上のアミノで置換されたアルキル、アミノ、ハロ、アルキルアミノ、アリール、カルボキシルまたは複素環で置換されていてよい。カルボキシル基の例は、メトキシカルボニル、ブトキシカルボニル、ｔｅｒｔ−アルコキシカルボニル（例えば、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）、１つまたは２つのアリール基（限定されないが、例えば、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシル、ハロ、および／またはニトロで場合により置換されたフェニル）を有するアリールメトキシカルボニルであり、例えば、ベンジルオキシカルボニル、メトキシベンジルオキシカルボニル、ジフェニルメトキシカルボニル、２−ブロモエトキシカルボニル、２−ヨードエトキシカルボニルｔｅｒｔ−ブチルカルボニル、４−ニトロベンジルオキシカルボニル、ジフェニルメトキシ−カルボニル、ベンズヒドロキシカルボニル、ジ−（４−メトキシフェニル−メトキシカルボニル、２−ブロモエトキシカルボニル、２−ヨードエトキシカルボニル、２−トリメチルシリルエトキシカルボニル、または２−トリフェニルシリルエトキシカルボニルなどが挙げられる。エステル化形態におけるさらなるカルボキシル基は、有機シリルオキシカルボニルを含むシリルオキシカルボニル基である。そのような化合物のケイ素置換基は、低級アルキル（例えば、メチル）、アルコキシ（例えば、メトキシ）、および／またはハロ（例えば、塩素）で置換されていてよい。ケイ素置換基の例としては、トリメチルシリルおよびジメチルｔｅｒｔ−ブチルシリルが挙げられる。本発明の態様では、カルボキシル基は、アルコキシカルボニル、特に、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、イソプロポキシカルボニル、ｔ−ブトキシカルボニル、ｔ−ペンチルオキシカルボニル、またはヘプチルオキシカルボニル、特に、メトキシカルボニルまたはエトキシカルボニルであってもよい。
【０２０２】
単独で、または組み合わせて本明細書で使用される「カルバモイル」という用語は、カルボニル基における２つの非共有結合の１つに結合した、アミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、モノシクロアルキルアミノ、アルキルシクロアルキルアミノ、およびジシクロアルキルアミノ基を意味する。
【０２０３】
本明細書で使用される「カルボキサミド」という用語は、−ＣＯＮＨ−の基を意味する。
【０２０４】
本明細書で使用される「ニトロ」という用語は、−ＮＯ２−を意味する。
【０２０５】
単独で、または組み合わせて本明細書で使用される「アシル」という用語は、例えば、場合により置換された、ヒドリド、アルキル（例えば、ハロアルキル）、アルケニル、アルキニル、アルコキシ（アセチルオキシ、ブチリルオキシ、イソ−バレリルオキシ、フェニルアセチルオキシ、ベンゾイルオキシ、ｐ−メトキシベンゾイルオキシを含む「アシルオキシ」、および置換アシルオキシ、例えば、アルコキシアルキルおよびハロアルコキシなど）、アリール、ハロ、ヘテロシクリル、ヘテロアリール、スルフィニル（例えば、アルキルスルフィニルアルキル）、スルホニル（例えば、アルキルスルホニルアルキル）、シクロアルキル、シクロアルケニル、チオアルキル、チオアリール、アミノ（例えば、アルキルアミノまたはジアルキルアミノ）、およびアラルコキシから選択される基に結合したカルボニルまたはチオカルボニル基を意味する。「アシル」基の具体例は、ホルミル、アセチル、２−クロロアセチル、２−ブロモアセチル、ベンゾイル、トリフルオロアセチル、フタロイル、マロニル、ニコチニルなどである。
【０２０６】
本発明の態様では、「アシル」は、−Ｃ（Ｏ）Ｒ６４の基（ここで、Ｒ６４は、水素、アルキル、シクロアルキル、シクロヘテロアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアルキル、ヘテロアリール、およびヘテロアリールアルキルである）を意味する。例としては、限定されないが、ホルミル、アセチル、シクロヘキシルカルボニル、シクロヘキシルメチルカルボニル、ベンゾイル、ベンジルカルボニルなどが挙げられる。
【０２０７】
本明細書で使用される「ホスホネート」という用語は、Ｃ−ＰＯ（ＯＨ）２またはＣ−ＰＯ（ＯＲ６５）２を意味し、ここでＲ６５は、置換されていてもよい、アルキルまたはアリールである。
【０２０８】
本明細書で使用される「ウレイド」という用語は、「−ＮＨＣＯＮＨ−」基を意味する。ウレイド基としては、アルキルで置換されたウレイド、特に、ウレイド基の末端窒素に低級アルキルが結合したウレイドを含むアルキルウレイドが挙げられる。アルキルウレイドの例としては、Ｎ’−メチルウレイド、Ｎ’−エチルウレイド、Ｎ’−ｎ−プロピルウレイド、Ｎ’−ｉ−プロピルウレイドなどが挙げられるが、これらに限定されない。また、ウレイド基としては、−ＮＨＣＯＮ基（ここで、末端窒素は、アルキル、アリール、複素環、およびヘテロアリールを含む、場合により２つの置換された基に結合している）を含むＮ’，Ｎ’−ジアルキルウレイド基が挙げられる。
【０２０９】
「アルキル」、「アルコキシ」、「アルケニル」、「アルキニル」、「ヒドロキシル」などを含む基に対して本明細書で使用される用語は、非置換基および置換基の両方を意味する。本明細書で使用される「置換（された）」という用語は、指定された原子の正常原子価を超えることなく、その置換が安定な化合物をもたらす場合に、指定された原子（例えば、水素）の任意の１つ以上の部分が、本明細書に開示される基から選択されたもので置き換えられていることを意味する。置換基および／または基の組合せは、そのような組合せが、安定な化合物をもたらす場合にのみ可能である。「安定な化合物」とは、反応混合物からの有用な程度の純度への単離、および有効な治療剤への製剤に耐えられる十分に頑強な化合物を意味する。
【０２１０】
ピリダジン化合物における基は、アルキル、アルコキシ、アルケニル、アルキニル、アルカノイル、アルキレン、アルケニレン、ヒドロキシアルキル、ハロアルキル、ハロアルキレン、ハロアルケニル、アルコキシ、アルケニルオキシ、アルケニルオキシアルキル、アルコキシアルキル、アリール、アルキルアリール、ハロアルコキシ、ハロアルケニルオキシ、複素環、ヘテロアリール、アルキルスルホニル、スルフィニル、スルホニル、スルフェニル、アルキルスルフィニル、アラルキル、ヘテロアラルキル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルコキシ、シクロアルケニルオキシ、アミノ、オキシ、ハロ、アジド、チオ、＝Ｏ、＝Ｓ、シアノ、ヒドロキシル、ホスホネート、ホスフィネート、チオアルキル、アルキルアミノ、アリールアミノ、アリールスルホニル、アルキルカルボニル、アリールカルボニル、ヘテロアリールカルボニル、ヘテロアリールスルフィニル、ヘテロアリールスルホニル、ヘテロアリールアミノ、ヘテロアリールオキシ、ヘテロアリールオキシルアルキル、アリールアセトアミドイル、アリールオキシ、アロイル、アラルカノイル、アラルコキシ、アリールオキシアルキル、ハロアリールオキシアルキル、ヘテロアロイル、ヘテロアラルカノイル、ヘテロアラルコキシ、ヘテロアラルコキシアルキル、チオアリール、アリールチオアルキル、アルコキシアルキル、およびアシル基を含むが、これらに限定されない、当業者に明らかな１つ以上の置換基で置換されていてよい。これらの置換基は、それ自体置換されていてよい。
【０２１１】
化学的置換基は、それが基の原子に結合している場合は、基からの「ペンダント」である。この文脈において、置換基は、基の炭素原子、鎖伸長剤で基の炭素原子に結合した炭素原子、または基のヘテロ原子からぶら下がることができる。「縮合」という用語は、第２の環が第１の環と共通または共有の２つの隣接した原子を有して存在（すなわち、結合または形成）していることを意味する。
【０２１２】
ピリダジン化合物、特に式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、またはＶの化合物は、その知識および実施例を含む本願の開示を考慮して、当業者に一般に知られている反応および方法を使用して調製することができる。反応は、使用される試薬および材料にとって適切な、そして実施される反応にとって適切な溶剤において行われる。化合物に存在する官能性が提案される反応工程と一致すべきことは、有機合成の当業者には理解されるであろう。これは、時に、本発明の所望の化合物を得るために、合成工程の順序の変更、または他と比べて１つの特定の方法スキームの選択を必要とするであろう。また、合成経路の開発における別の主な考慮すべき事項は、化合物に存在する反応性官能基の保護のために使用される保護基の選択であることが認識されるであろう。熟練者に対して多くの選択肢を記述している権威ある報告は、ＧｒｅｅｎおよびＷｕｔｓ（Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  Ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，１９９１）である。
【０２１３】
ピリダジン化合物を調製するのに使用される出発物質および試薬は、製造業者から入手可能であり、またはＦｉｅｓｅｒ  ａｎｄ  Ｆｉｅｓｅｒ’ｓ  Ｒｅａｇｅｎｔｓ  ｆｏｒ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，ｖｏｌｓ．１−１７，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、Ｎ．Ｙ．，１９９１；Ｒｏｄｄ’ｓ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｃａｒｂｏｎ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ、ｖｏｌｓ．１−５  ａｎｄ  ｓｕｐｐｓ．，Ｅｌｓｅｖｉｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，１９８９；Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，ｖｏｌｓ．１−４０，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．，１９９１；Ｍａｒｃｈ  Ｊ．：Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、４ｔｈ  ｅｄ．，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．；およびＬａｒｏｃｋ：Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ，ＶＣＨ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９８９などの参考文献に記載されている手順に従って、当業者によく知られた方法により調製される。
【０２１４】
出発物質、中間体、およびピリダジン化合物は、常套の方法、例えば、沈殿、濾過、蒸留、結晶化、クロマトグラフィなどを使用して単離および精製されてよい。ピリダジン化合物は、物理定数および分光分析方法、特に、ＨＰＬＣを含めて、通常の方法を使用して特性決定されてもよい。
【０２１５】
本質的に塩基性であるピリダジン化合物は、種々の無機酸および有機酸と広範囲の異なる塩を形成することができる。実際には、初めに、ピリダジン化合物を、反応混合物から医薬として許容されない塩として単離し、次いで、その塩をアルカリ試薬での処理により遊離塩基化合物に転換し、その後に、遊離塩基を、医薬として許容される酸付加塩に転換することが望ましい。ピリダジン化合物の塩基化合物の酸付加塩は、塩基化合物を、水性溶剤媒体において、またはメタノールもしくはエタノールなどの適切な有機溶剤において、選択された無機酸または有機酸の実質的に当量で処理することにより容易に調製される。溶剤を注意して蒸発させることにより、所望の固体塩が得られる。
【０２１６】
本質的に酸性であるピリダジン化合物は、種々の薬理学的に許容されるカチオンと塩基性塩を形成することができる。これらの塩は、相当する酸性化合物を、所望の薬理学的に許容されるカチオンを含む水溶液で処理し、次いで、得られた溶液を、好ましくは、減圧下で蒸発乾固することによる常套の方法により調製されてもよい。あるいはまた、これらは、酸性化合物の低級アルカノール溶液と所望のアルカリ金属アルコキシドとを一緒に混合し、次いで、前述と同じ方法で、得られた溶液を蒸発乾固することにより調製されてよい。どちらの場合においても、試薬の化学量論量が、反応の完結度および最大生成物収率を確実にするために一般的に使用される。
【０２１７】
特定の態様では、本発明は、式ＩＩ（式中、Ｒ１１は水素であり、Ｒ１０は１〜４個の窒素原子を含む不飽和５〜６員ヘテロモノシクリル基、特に、ピロリル、ピロリニル、イミダゾリル、ピラゾリル、２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジル、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、トリアゾリル、またはテトラゾリル、さらに詳しくは、ピリジニルである）の製造法であって、式ＩＩ（式中、Ｒ１０はハロ、特に塩素であり、Ｒ１１は水素である）の構造を有する化合物と、１〜４個の窒素原子を含む不飽和５〜６員ヘテロモノシクリル基で置換されたボロン酸（特に、ピロリル、ピロリニル、イミダゾリル、ピラゾリル、２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジル、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、トリアゾリル、またはテトラゾリル、さらに詳しくは、ピリジニルで置換されたボロン酸）とを、適切な条件下で反応させて、式ＩＩ（式中、Ｒ１１は水素であり、Ｒ１０は１〜４個の窒素原子を含む不飽和５〜６員ヘテロモノシクリル基、特に、ピロリル、ピロリニル、イミダゾリル、ピラゾリル、２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジル、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、トリアゾリル、またはテトラゾリル、さらに詳しくは、ピリジニルである）の化合物を製造することができる。一実施形態においては、Ｒ１０は、ハロで置換されたフェニルである。
【０２１８】
別の態様では、式ＩＩ（式中、Ｒ１１は水素であり、Ｒ１０は置換アリールである）の化合物は、式ＩＩ（式中、Ｒ１０はハロ、特に塩素であり、Ｒ１１は水素である）の構造の化合物を置換アリールボロン酸と適切な条件下で反応させることにより製造される。
【０２１９】
別の態様では、式ＩＩ（式中、Ｒ１０は水素であり、Ｒ１１はアルキルである）の化合物は、式ＩＩ（式中、Ｒ１１はハロ、特に塩素であり、Ｒ１０は水素である）の構造の化合物をアルキルボロン酸と適切な条件下で反応させることにより製造される。一実施形態においては、Ｒ１１は低級アルキル、特に、メチルまたはエチルであり、式ＩＩ（式中、Ｒ１１は塩素である）の化合物は、適切な条件下で、低級アルキルボロン酸、特に、メチルまたはエチルボロン酸と反応させる。
【０２２０】
別の態様では、式ＩＩ（式中、Ｒ１０は水素であり、Ｒ１１はアルキルである）の化合物の製造であって、Ｃ３位をハロ（例えば、塩素）で、Ｃ４位をアルキルで、および６位をフェニルで置換されたピリダジンと、２−（ピペリジン−４−イルオキシ）ピリミジンとを、適切な条件下で反応させて、式ＩＩ（式中、Ｒ１０は水素であり、Ｒ１１はアルキルである）の化合物を製造する。一実施形態においては、Ｒ１１は、メチルまたはエチルである。
【０２２１】
別の態様では、式ＩＩ（式中、Ｒ１０は水素であり、Ｒ１１はアリールである）の化合物は、式ＩＩ（式中、Ｒ１０は水素であり、Ｒ１１はハロ（例えば、塩素）である）の構造の化合物を、Ｃ３位をハロ（例えば、塩素）で、Ｃ４位をアリールで、および６位をフェニルで置換されたピリダジンと、２−（ピペリジン−４−イルオキシ）ピリミジンとを、適切な条件下で反応させることにより製造される。一実施形態においては、Ｒ１１はフェニルである。
【０２２２】
別の態様では、式ＩＩ（式中、Ｒ１０は水素であり、Ｒ１１は１〜４個の窒素原子を含む不飽和５〜６員ヘテロモノシクリル基（特に、ピロリル、ピロリニル、イミダゾリル、ピラゾリル、２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジル、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、トリアゾリル、またはテトラゾリル、さらに詳しくは、ピリジニル）である）の化合物は、式ＩＩ（式中、Ｒ１１はハロ、特に塩素であり、Ｒ１０は水素である）の化合物を、１〜４個の窒素原子を含む不飽和５〜６員ヘテロモノシクリル基で置換されたボロン酸（特に、ピロリル、ピロリニル、イミダゾリル、ピラゾリル、２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジル、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、トリアゾリル、またはテトラゾリル、さらに詳しくは、ピリジニルで置換されたボロン酸）と適切な条件下で反応させることにより製造される。
【０２２３】
一実施形態では、式ＩＩ（式中、Ｒ１０は水素であり、Ｒ１１はピリジニルである）の化合物は、式ＩＩ（式中、Ｒ１１はハロ、特に塩素であり、Ｒ１０は水素である）の化合物を、ピリジニルボロン酸と適切な条件下で反応させることにより製造される。
【０２２４】
別の態様では、式ＩＩ（式中、Ｒ１０は水素であり、Ｒ１１は１〜４個の窒素原子を含む不飽和５〜６員ヘテロモノシクリル基（特に、ピロリル、ピロリニル、イミダゾリル、ピラゾリル、２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジル、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、トリアゾリル、またはテトラゾリル、さらに詳しくは、ピリジニル）である）の化合物は、Ｃ３位をハロで、Ｃ４位を１〜４個の窒素原子を含む不飽和５〜６員ヘテロモノシクリル基（特に、ピロリル、ピロリニル、イミダゾリル、ピラゾリル、２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジル、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、トリアゾリル、またはテトラゾリル、さらに詳しくは、ピリジニル）で、および６位をフェニルで置換されたピリダジンと、２−（ピペリジン−４−イルオキシ）ピリミジンとを、適切な条件下で反応させることにより製造される。
【０２２５】
一実施形態では、式ＩＩ（式中、Ｒ１０は水素であり、Ｒ１１はピリジニルである）の化合物の製造であって、Ｃ３位をハロで、Ｃ４位をピリジニルで、および６位をフェニルで置換されたピリダジンと、２−（ピペリジン−４−イルオキシ）ピリミジンとを適切な条件下で反応させて式ＩＩ（式中、Ｒ１０は水素であり、Ｒ１１はピリジニルである）の化合物が製造される。
【０２２６】
別の態様では、式ＩＩ（式中、Ｒ１０は水素であり、Ｒ１１はピペリジニルまたは置換ピペリジニルである）の化合物は、式ＩＩ（式中、Ｒ１１はハロ、特に塩素であり、Ｒ１０は水素である）の化合物を、ピペラジニルまたは置換ピペラジニルと適切な条件下で反応させることにより製造される。
【０２２７】
別の態様では、式Ｉ（式中、Ｒ１はピペラジニル、またはアルキル、アリール、もしくはシクロアルキルで置換されたピペラジニルであり、Ｒ２はアリールであり、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は水素であり、Ｒ７は存在しない）の化合物は、Ｃ３位をハロで、Ｃ４位をアリールで置換されたピリダジンを、ピペラジニルまたはアルキル、アリール、もしくはシクロアルキルで置換されたピペラジニルと適切な条件下で反応させることにより製造される。
【０２２８】
別の態様では、式Ｉ（式中、Ｒ１はピペラジニル、またはアルキル、アリール、もしくはシクロアルキルで置換されたピペラジニルであり、Ｒ２は、１〜４個の窒素原子を含む不飽和５〜６員ヘテロモノシクリル基（特に、ピロリル、ピロリニル、イミダゾリル、ピラゾリル、２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジル、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、トリアゾリル、またはテトラゾリル、さらに詳しくは、ピリジニル）であり、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は水素であり、Ｒ７は存在しない）の化合物は、Ｃ３位をハロで、Ｃ４位を、１〜４個の窒素原子を含む不飽和５〜６員ヘテロモノシクリル基（特に、ピロリル、ピロリニル、イミダゾリル、ピラゾリル、２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジル、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、トリアゾリル、またはテトラゾリル、さらに詳しくは、ピリジニル）で置換されたピリダジンを、ピペラジニルまたはアルキル、アリール、もしくはシクロアルキルで置換されたピペラジニルと適切な条件下で反応させることにより製造される。
【０２２９】
別の態様では、式Ｉ（式中、Ｒ１は置換アミノ（特に置換モルホリニルで置換されたアミノ、とりわけ、モルホリノエチルで置換されたアミノ）であり、Ｒ２はアリールまたは１〜４個の窒素原子を含む不飽和５〜６員ヘテロモノシクリル基（特に、ピロリル、ピロリニル、イミダゾリル、ピラゾリル、２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジル、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、トリアゾリル、またはテトラゾリル、とりわけ、ピリジニル）であり、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は水素であり、Ｒ７は存在しない）の化合物は、Ｃ３位をハロで、Ｃ４位をアリールまたは１〜４個の窒素原子を含む不飽和５〜６員ヘテロモノシクリル基（特に、ピロリル、ピロリニル、イミダゾリル、ピラゾリル、２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジル、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、トリアゾリル、またはテトラゾリル、さらに詳しくは、ピリジニル）で置換されたピリダジンを、置換アミノ（特に、置換モルホリニルで置換されたアミノ、とりわけ、モルホリノエチルで置換されたアミノ）と適切な条件下で反応させることにより製造される。
【０２３０】
別の態様では、式Ｖ（式中、Ｒ５０はアリールであり、Ｒ５１は水素であり、Ｒ５２はアルキルである）の化合物は、Ｃ３位をハロで、Ｃ４位をアリールで、および６位をアルキルで置換されたピリダジンを、１−（２−ピリミジル）ピペラジンと適切な条件下で反応させることにより製造される。
【０２３１】
別の態様では、式Ｉ（式中、Ｒ１は置換アミノであり、Ｒ２は１〜４個の窒素原子を含む不飽和５〜６員ヘテロモノシクリル基（特に、ピロリル、ピロリニル、イミダゾリル、ピラゾリル、２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジル、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、トリアゾリル、またはテトラゾリル、とりわけ、ピリジニル）であり、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は水素であり、Ｒ７は存在しない）の化合物は、Ｃ３位をハロで、Ｃ４位を１〜４個の窒素原子を含む不飽和５〜６員ヘテロモノシクリル基（特に、ピロリル、ピロリニル、イミダゾリル、ピラゾリル、２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジル、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、トリアゾリル、またはテトラゾリル、とりわけ、ピリジニル）で、およびＣ６位をフェニルで置換されたピリダジンと、置換アミノとを適切な条件下で反応させることにより製造される。
【０２３２】
式ＩＩの化合物の製造において、利用されてもよい前駆体（例えば、図１０、化合物（１５）を参照されたい）は、市販品を入手することができ、さらなる精製なしで、例示されている化合物ＭＷ０１−３−１８３ＷＨの合成に直接使用することができる。化合物は、８１〜９６％の収率で合成することができる。すべての精製化合物は、合成を確認するために、ＨＰＬＣ、質量分析およびＮＭＲで特性決定することができる。図１０では、ＭＷ０１−３−１８３ＷＨ合成用の合成スキームが示される。
【０２３３】
したがって、一態様においては、置換６−フェニルピリダジンと、２−（ピペラジン−１−イル）ピリミジンとを反応させて、式ＩＩ（式中、Ｒ１０およびＲ１１は水素である）の化合物を製造する、式ＩＩの化合物が製造される。式ＩＩ（式中、Ｒ１０およびＲ１１は水素である）の化合物は、適切な条件下で、適切な試薬と反応して、基Ｒ１０およびＲ１１（独立して、水素、ヒドロキシル、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルキレン、アルケニレン、アルコキシ、アルケニルオキシ、シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、アリールオキシ、アリールアルコキシ、アロイル、ヘテロアリール、複素環、アシル、アシルオキシ、スルホニル、スルフィニル、スルフェニル、アミノ、イミノ、アジド、チオール、チオアルキル、チオアルコキシ、チオアリール、ニトロ、ウレイド、シアノ、ハロ、シリル、シリルオキシ、シリルアルキル、シリルチオ、＝Ｏ、＝Ｓ、カルボキシル、カルボニル、カルバモイル、またはカルボキサミドである）を導入することができる。
【０２３４】
「障害」という用語は、通常の神経の電気的活性および／または機能に対する異常に関わる障害を意味し、これに限定されないが、中枢神経系（ＣＮＳ）の伝導障害、特に発作関連の障害を含む。障害は、原因不明、遺伝的原因の急性もしくは慢性の性質のどちらかもしくは両方であってよく、またはそれが、例えば手術または放射線による脳の処置；アルコール、ベンゾジアゼピン、バルビツール酸類もしくは他の薬物または化学薬品の禁断症状；てんかん誘発剤への曝露；負傷または外傷、脳卒中、脳血管発作、熱、ＣＮＳ炎症または感染（例えば、髄膜炎）、代謝性障害または電気ショック療法に対する２次的なものであってもよい。この用語は、また、これらの障害から生じる感情的、認知的、および運動的症状を含む。
【０２３５】
「発作関連障害」という用語は、伝導障害、電撃痙攣および／または発作、特に再発性および／または過度の発作により特徴付けられる障害を意味する。「発作」は、意識変容および／または他の神経的および行動的症状に伴う脳の正常な電気的活性の突然の異常である。発作は、部分的であっても、全般的であってもよい。本発明のいくつかの態様では、発作関連障害は、てんかん、発作発生、てんかん原性、非てんかん性痙攣、子癇および痙攣剤投与による痙攣または対象に対する外傷を含む。
【０２３６】
発作発生は、数秒または数分間にわたり起こる急性の、明確な電気的／化学的事象を指す。てんかん原性は、正常な脳を、何カ月も、何年間にもわたって、自然発生的に、時たま起きる、時限的な、再発性の発作を受けやすい状態に変換させることに関わるゆっくりとした生化学的または組織学的なプロセスを指す。てんかん原性は、最初の発作の前に起こり、しばしば脳卒中、疾患、外傷（例えば、頭部外傷または手術に起因する）から生じる第１初期相を含む。てんかん原性の第２相では、発作をすでに受けやすい脳が、より頻繁により重い発作をより受けやすくなる。
【０２３７】
「てんかん」という用語は、特定の発作において、意識障害および意識喪失および異常な運動、知覚または挙動を伴う、または伴わない場合がある、一過性ではあるが再発性の、過度の、または異常な、脳の電気的機能への障害により特徴付けられる脳の慢性的な障害を指す。この用語は、てんかん発作を含む特異的症状によって特徴付けられるてんかん性の症候群を含む。そのような症候群は、欠神発作、精神運動てんかん、側頭葉てんかん、前頭葉てんかん、後頭葉てんかん、頭頂葉てんかん、レノックス−ガストー症候群、ラスムッセン脳炎、小児期欠神てんかん、ラムゼイハント症候群タイプＩＩ、良性てんかん症候群、乳児良性脳症、新生児良性痙攣、早期ミオクロニー脳症、進行性てんかんおよび乳児てんかん、内側側頭葉てんかん、幼児の良性若年性ミオクローヌスてんかん、若年性ミオクローヌスてんかん、児童期における全般性強直間代発作を伴うてんかん、乳児痙攣（Ｗｅｓｔ症候群）、徐波睡眠時（ＥＳＥＳ）の持続性棘徐波を示すてんかん、Ｌａｕｄａｕ  Ｋｌｅｆｆｎｅｒ症候群およびラスムッセン症候群）を包含するが、これらに限定されない。対象は、これらの症候群のどんな組合せに罹患していてよい。本発明の態様では、対象は、部分的な発作に罹患している。本発明の他の態様では、対象は全身性発作を患っている。
【０２３８】
本発明の態様では、障害はてんかん原性である。本発明の他の態様では、障害はてんかんである。本発明の他の態様では、障害は、乳幼仔期発作または小児てんかんである。
【０２３９】
組成物およびキット
１つの以上のピリダジン化合物、特に式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、またはＶの化合物は、対象に投与するための医薬組成物に製剤化することができる。したがって、本発明は、限定されないが、丸剤、錠剤、カプレット剤、軟質ゼラチンカプセル剤および硬質ゼラチンカプセル剤、ロゼンジ剤、サシェ剤、ベジキャップ剤、液滴剤、エリキシル剤、懸濁剤、乳剤、液剤、シロップ剤、エアゾール剤（固体として、または液体媒体中で）坐薬、無菌注射溶液、および／または無菌の包装された散剤を含む製剤を提供し、これらは、ピリダジン化合物、特に純粋なまたは実質的に純粋なピリダジン化合物を含む。
【０２４０】
本発明の医薬組成物またはその一部分は、投与の意図した形態に基づいて選択された、通常の薬務に合致する適切な医薬的に許容される担体、賦形剤およびビヒクルを含む。本発明の特定の組成物は、純粋なまたは実質的に純粋なピリダジン化合物を含むことができる。適切な医薬担体、賦形剤およびビヒクルは、標準的教科書の、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ（２１ｓｔ  Ｅｄｉｔｉｏｎ．２００５，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ｉｎ  Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ（Ｅｄｉｔｏｒ）、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ）、および米国薬局方：１９９９年発行の国民医薬品集（Ｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｆｏｒｍｕｌａｒｙ）（ＵＳＰ  ２４  ＮＦ１９）に記載されている。
【０２４１】
本発明の組成物は、少なくとも１つの緩衝剤または緩衝溶液を含んでよい。適切な緩衝剤としては、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、リン酸、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、グルコロン酸、マレイン酸、フロン酸、クエン酸、グルタミン酸、安息香酸、アントラニル酸、サリチル酸、フェニル酢酸、マンデル酸、エンボン酸、パモ酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、パントテン酸、ベンゼンスルホン酸、ステリアン酸、スルファニル酸、アルゲン（ａｌｇｅｎｉｃ）酸、ガラクツロン酸およびこれらの混合物が挙げられるが、これらに限定されない。包含されてよい添加剤は、α化トウモロコシデンプン、ポリビニルピロリドン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、乳糖、微結晶性セルロース、リン酸水素カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、シリカ、ジャガイモデンプン、デンプングリコール酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ソルビトールシロップ、セルロース誘導体、水素化食用油脂、レシチン、アカシア、アーモンド油、油性エステル、エチルアルコール、分留植物油、メチル、プロピル−ｐ−ヒドロキシベンゾエート、ソルビン酸およびこれらの混合物である。緩衝剤は、１つ以上のジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素、ポリ（Ｎ−ビニルピロリドン）、ポリ（メチルメタクリレート）、ポリラクチド（ｐｏｌｙａｃｔｉｄｅ）、ポリグリコリドおよびそれらの混合物を含んでもよい。いくつかの態様では、緩衝剤は、懸濁液、溶液、または乳液を含む少なくとも１つの媒体として製剤化されてもよいが、これらに限定されない。他の態様では、緩衝剤は、さらに、医薬的に許容される担体、賦形剤、懸濁剤、安定剤または分散剤を含む製剤用物質を含んでもよいが、これらに限定されない。
【０２４２】
本発明の態様では、医薬組成物は、障害を治療するための１つ以上のピリダジン化合物の経口投与のために提供される。例えば、カプセル剤または錠剤の形態における経口投与のためには、活性成分は、ラクトース、デンプン、スクロース、メチルセルロース、ステアリン酸マグネシウム、グルコース、硫酸カルシウム、第２リン酸カルシウム、マンニトール、ソルビタールなどの、経口の非毒性の医薬的に許容される不活性担体と組み合わせることができる。液体形態における経口投与のためには、薬物成分は、エタノール、グリセリン、水などの任意の経口の非毒性の医薬的に許容される不活性担体と組み合わされてもよい。適切な結合剤（例えば、ゼラチン、デンプン、コーン甘味料、グルコースを含む天然糖；天然および合成ゴム、およびワックス類）、潤滑剤（例えば、オレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、および塩化ナトリウム）、崩壊剤（例えば、デンプン、メチルセルロース、寒天、ベントナイト、およびキサンタンガム）、芳香剤、および着色剤は、また、組成物に配合してもよい。本明細書に開示の組成物は、湿潤剤もしくは乳化剤、またはｐＨ緩衝剤をさらに含むことができる。
【０２４３】
本発明の態様では、本発明の組成物は、液体溶液、懸濁液、乳液、錠剤、丸剤、カプセル剤、徐放性製剤、または散剤である。組成物は、トリグリセリドなどの従来の結合剤および担体と一緒に、坐薬として調剤することができる。経口製剤は、医薬品グレードのマンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、サッカリンナトリウム、セルロース、炭酸マグネシウムなどを含むことができる。例えば、リポソームへのカプセル化、微粒子、マイクロカプセルなどの種々の送達システムが知られており、本発明の化合物を投与するのに使用することができる。
【０２４４】
非経口投与のための製剤は、水溶液、シロップ、綿実油、ココナッツ油またはピーナツ油などの食用油との水性または油性懸濁液および乳液を含んでもよい。水性懸濁液のために使用することのできる分散剤または懸濁剤としては、合成または天然ゴム、例えば、トラガカント、アルギネート、アカシア、デキストラン、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、ゼラチン、メチルセルロース、およびポリビニルピロリドンが挙げられる。
【０２４５】
非経口投与のための組成物は、無菌の水性または非水性溶剤、例えば、水、等張生理食塩水、等張グルコース溶液、緩衝溶液、または治療的に活性な薬剤の非経口投与のために都合よく使用される他の溶剤を含んでもよい。非経口投与を意図した組成物は、また、安定剤、緩衝剤、もしくは防腐剤、例えば、メチルヒドロキシベンゾエートなどの酸化防止剤などの通常の添加剤または類似の添加剤を含んでもよい。
【０２４６】
本発明の組成物は、本明細書に記載の医薬的に許容される塩として製剤化することができる。
【０２４７】
本発明の式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、もしくはＶの化合物または組成物は、例えば、バクテリア保持フィルタによる濾過、化合物または組成物への滅菌剤の添加、化合物または組成物の放射線照射、または化合物または組成物の加熱によって滅菌されてよい。あるいはまた、本発明の化合物または組成物は、滅菌固体製剤、例えば、使用直前に、滅菌溶剤に容易に溶解する凍結乾燥粉末として提供されてよい。
【０２４８】
医薬組成物が調製された後、これらは、適切な容器に入れられ、適応症状の治療のためにラベルが付されてよい。本発明の組成物の投与のために、そのようなラベルには、投与量、投与頻度、および投与方法が含まれ得る。
【０２４９】
本発明によれば、キットが提供される。一態様では、キットは、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、もしくはＶの化合物またはキット形態の本発明の組成物を含む。キットは、本発明の式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、もしくはＶの化合物または製剤を含む容器を収納し、また、対象への化合物または製剤の投与の指示書を収納するパッケージであることができる。本発明は、さらに、本発明の式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、もしくはＶの化合物または製剤を、その使用の指示書と共に含む市販パッケージに関する。特に、ラベルは、投与量、投与頻度、および投与方法を含んでよい。
【０２５０】
本発明は、また、治療効果を含む有益な効果を提供するために、１つまたは複数の本発明の組成物の成分で充填された１つまたは複数の容器を含む医薬パックまたはキットを提供する。そのような容器（複数可）と一緒に、様々な文書資料、例えば、使用説明書、またはヒト投与のための製造、使用、もしくは販売の機関による証明を示す、ラベル、製造、医薬品または生物学製品の使用または販売を規制する政府機関により命じられた方式の注意書などが伴う。
【０２５１】
本発明は、また、本明細書で開示される障害の治療のために有用な物質を含む製品およびキットに関する。製品は、ラベルを付した容器を含んでよい。適切な容器の例としては、瓶、バイアル、および試験管であり、それらは、ガラスおよびプラスチックを含む様々な材料から形成することが可能である。容器は、本発明で開示される障害の治療に有用な本発明の式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、もしくはＶの化合物または製剤を保持する。容器上のラベルは、本発明の式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、もしくはＶの化合物または製剤が、本明細書で開示される障害の治療のために使用されることを示し、そしてまた、使用方法を示すこともできる。本発明の態様では、容器中の医薬または製剤は、本明細書に開示される医薬または製剤を含むことができる。
【０２５２】
本発明の態様では、本発明のキットは、本明細書に記述された容器を含む。特定の態様では、本発明のキットは、本明細書に記述された容器、および緩衝剤を含む第２の容器を含む。キットは商売上または使用者の見地から望ましい他の物質をさらに含んでもよく、例えば、緩衝剤、希釈剤、フィルタ、針、注射器、および本明細書に開示された任意の方法を実施するための指示書を伴う添付文書（例えば、本明細書で開示される障害の治療方法）が挙げられるが、これらに限定されない。本発明のキットにおける医薬または製剤は、本明細書で開示された製剤または組成物の任意のものを含んでもよい。
【０２５３】
本発明の態様では、キットは、本明細書に開示されたいかなる方法に対しても有用であり、てんかんで苦しんでいる対象を治療することを含むが、これに限定されない。本発明のキットは、本明細書に開示された方法のいずれをも実施するための指示書を含むことが可能である。
【０２５４】
投与
本発明のピリダジン化合物および組成物は、治療効果、特に有益な効果、とりわけ、持続される有益な効果をもたらすために、活性剤が対象または患者の体での活性剤の作用部位と接触をもたらす任意の手段で投与することができる。本発明のピリダジン化合物および組成物は、徐放性のために、局所に、または全身に送達させるために調剤することができる。治療効果、特に有益な効果、さらに詳しくは、持続される有益な効果を与えるために、本発明の組成物および治療の効果を最適化する投与の形態および経路を選択することは、熟練の医者または獣医の能力の範囲内である。
【０２５５】
ピリダジン化合物および組成物は、錠剤、カプセル剤（その各々は、徐放性または時限型放出製剤を含む）、丸剤、散剤、顆粒剤、エリキシル剤、チンキ剤、懸濁液剤、シロップ剤、および乳剤などの経口投薬形態で投与されてよい。これらは、また、すべて、薬剤分野の当業者にはよく知られている投薬形態を利用して、静脈内（ボーラスまたは注入）、腹腔内、皮下、または筋肉内形態で投与されてよい。本発明のピリダジン化合物および組成物は、適切な鼻腔内ビヒクルの局所使用による鼻腔内経路により、または経皮経路、例えば、通常の経皮的皮膚パッチにより投与されてよい。経皮的送達システムを使用する投与のための投薬量プロトコルは、投薬方式の全体にわたって、間歇的よりも連続的であってよい。徐放性製剤は、また、治療剤のために使用することもできる。
【０２５６】
本発明の態様では、本発明のピリダジン化合物および組成物は、末梢投与、特に静脈内投与、腹腔内投与、皮下投与、筋肉内投与、経口投与、局所投与、経粘膜投与、または経肺投与により投与される。
【０２５７】
効果、特に有益な効果、さらに詳しくは、持続される有益な効果を与えるために、特定の障害または状態の治療のための本発明のピリダジン化合物および組成物の治療有効投薬量は、障害の性質に依存し、標準的臨床方法で決定することができる。製剤において使用される正確な投与量は、また、投与の経路、および障害の重症度に依存し、開業医の判断およびそれぞれの患者の環境により決定されるべきである。
【０２５８】
投与のための適切な投薬量範囲は、治療効果、特に有益な効果、さらに詳しくは持続される有益な効果を与えるために細かく選択される。投薬量範囲は、所望の生物学的応答を引き起こすのに一般に有効である。ピリダジン化合物のための投薬量範囲は、一般に、１日に１回、２回、またはそれ以上の回数で、好ましくは１日に１回、対象の体重１ｋｇ当たり約０．０１ｍｇ〜約３ｇ／ｋｇ、０．０１ｍｇ〜約２ｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ〜約２ｇ／ｋｇ、約１ｍｇ〜約１ｇ／ｋｇ、約１ｍｇ〜約５００ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ〜約２００ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇ、または約３０ｍｇ〜約７０ｍｇ／ｋｇである。
【０２５９】
本発明の態様では、投薬量範囲は、１日あたり２回またはそれ以下で、約０．０１〜３０００ｍｇ／ｋｇ、０．０１〜２０００ｍｇ／ｋｇ、０．５〜２０００ｍｇ／ｋｇ、約０．５〜１０００ｍｇ／ｋｇ、０．１〜１０００ｍｇ／ｋｇ、０．１〜５００ｍｇ／ｋｇ、０．１〜４００ｍｇ／ｋｇ、０．１〜３００ｍｇ／ｋｇ、０．１〜２００ｍｇ／ｋｇ、０．１〜１００ｍｇ／ｋｇ、０．１〜５０ｍｇ／ｋｇ、０．１〜２０ｍｇ／ｋｇ、０．１〜１０ｍｇ／ｋｇ、０．１〜６ｍｇ／ｋｇ、０．１〜５ｍｇ／ｋｇ、０．１〜３ｍｇ／ｋｇ、０．１〜２ｍｇ／ｋｇ、０．１〜１ｍｇ／ｋｇ、１〜１０００ｍｇ／ｋｇ、１〜５００ｍｇ／ｋｇ、１〜４００ｍｇ／ｋｇ、１〜３００ｍｇ／ｋｇ、１〜２００ｍｇ／ｋｇ、１〜１００ｍｇ／ｋｇ、１〜５０ｍｇ／ｋｇ、１〜２０ｍｇ／ｋｇ、１〜１０ｍｇ／ｋｇ、１〜６ｍｇ／ｋｇ、１〜５ｍｇ／ｋｇ、または１〜３ｍｇ／ｋｇ、または１〜２．５ｍｇ／ｋｇ、または約１０ｍｇ／ｋｇもしくはそれ未満、５ｍｇ／ｋｇ、２．５ｍｇ／ｋｇ，１ｍｇ／ｋｇ、または０．５ｍｇ／ｋｇである。
【０２６０】
本発明の実施形態では、投薬量範囲は、約０．１〜１０００ｍｇ／ｋｇ、０．１〜５００ｍｇ／ｋｇ、０．１〜４００ｍｇ／ｋｇ、０．１〜３００ｍｇ／ｋｇ、０．１〜２００ｍｇ／ｋｇ、０．１〜１００ｍｇ／ｋｇ、０．１〜７５ｍｇ／ｋｇ、０．１〜５０ｍｇ／ｋｇ、０．１〜２５ｍｇ／ｋｇ、０．１〜２０ｍｇ／ｋｇ、０．１〜１５ｍｇ／ｋｇ、０．１〜１０ｍｇ／ｋｇ、０．１〜９ｍｇ／ｋｇ、０．１〜８ｍｇ／ｋｇ、０．１〜７ｍｇ／ｋｇ、０．１〜６ｍｇ／ｋｇ、０．１〜５ｍｇ／ｋｇ、０．１〜４ｍｇ／ｋｇ、０．１〜３ｍｇ／ｋｇ、０．１〜２ｍｇ／ｋｇ、または０．１〜１ｍｇ／ｋｇである。
【０２６１】
本発明の組成物または治療は、有益な効果、特に本明細書で記載された１つ以上の有益な効果を与えるために、ピリダジン化合物の単位投薬量を含んでもよい。「単位投薬量」または「投薬量単位」とは、患者に投与することができ、活性剤をそのまま、または１つまたは複数の固体もしくは液体の医薬的賦形剤、担体、またはビヒクルとの混合物として含む、物理的におよび化学的に安定な単位投与量を残したまま、簡単に取り扱え、充填することが可能な単位、即ち、単一投与量を意味する。
【０２６２】
ピリダジン化合物は、１日に１回、１日に２回、約５０〜約１００００ｍｇ、５０〜約２０００ｍｇ、７０〜約７０００ｍｇ、７０〜約６０００ｍｇ、７０〜約５５００ｍｇ、７０〜約５０００ｍｇ、７０〜約４５００ｍｇ、７０〜約４０００ｍｇ、７０〜約３５００ｍｇ、７０〜約３０００ｍｇ、１５０〜約２５００ｍｇ、１５０〜約２０００ｍｇ、２００〜約２５００ｍｇ、２００〜約２０００ｍｇ、２００〜約１５００ｍｇ、７００〜約１２００ｍｇ、７０ｍｇ〜１０００ｍｇ、７０ｍｇ〜５００ｍｇ、特に２００〜２０００ｍｇ、７０〜１２００ｍｇ、または１０００ｍｇを有する単一投薬量単位または複合投薬量単位（すなわち、錠剤またはカプセル剤）で提供することができる。
【０２６３】
本発明の投薬方式は、薬剤の薬力学的特徴ならびに投与の方法および経路；患者の種、年齢、性別、健康、病状、および体重、症状の性質および範囲、併用治療の種類、治療頻度、投与経路、患者の腎臓および肝臓機能、および所望の効果などの既知の要因によって変動する。
【０２６４】
したがって、対象は、実質的に任意の所望のスケジュールで、本発明のピリダジン化合物または組成物によって治療することが可能である。本発明のピリダジン化合物または組成物は、１日当たり１回または複数回、特に、１日１回または２回、週に１回、月に１回、月に２回または連続的に投与されてもよい。しかしながら、対象は、隔日に、または週に１回など頻度を少なくして、または頻度を多くして治療してよい。本発明のピリダジン化合物または組成物は、おおよそ、または少なくとも約２４時間、２日、３日、１週間、２週間〜４週間、２週間〜６週間、２週間〜８週間、２週間〜１０週間、２週間〜１２週間、２週間〜１４週間、２週間〜１６週間、２週間〜６カ月間、２週間〜１２カ月間、２週間〜１８カ月間、または２週間〜２４カ月間、周期的にまたは連続的に対象に投与されてよい。
【０２６５】
本明細書に記載のピリダジン化合物、組成物および治療方法は、単独で、または他の治療剤もしくは他の治療形態との組合せの治療剤または方法としてその適応が指示される。これらは、本明細書に記載の状態を治療するために使用される１つ以上の治療法または薬剤と一緒に組み合わされてもよくまたは調剤されてもよい。本発明の組成物は、他の治療剤または治療法と一緒に、同時に、別々に、または順番に投与されてよい。したがって、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、および／またはＶの化合物は、本明細書に記載される障害を治療するための１つ以上のさらなる薬剤、ならびに本明細書に記載される障害に起因する、または障害に伴う合併症の治療のために使用される薬剤、または副作用を治療または予防する一般の医薬と共投与されてよい。
【０２６６】
複数の態様において、さらなる治療薬は、フェノバルビタール、バルプロエート、レベチラセタム、チアガビン、Ｎ−メチル−Ｄ−アスパルテート、アルファ−アミノ−３−ヒドロキシ−５−メチルイソオキサゾール−４−プロピオン酸（ＡＭＰＡ）アンタゴニスト、および神経栄養因子、およびそれらの受容体を含む。
【０２６７】
本発明は、特定の実施例によりさらに詳細に記述される。以下の実施例は、例示目的のために提供され、いかなる方法によっても本発明を限定するものではない。
【実施例】
【０２６８】
概要
乳幼仔期発作は、後の神経傷害に対する脆弱性を高める。乳幼児発作が慢性のグリア活性化を引き起こすことによって、その後の神経傷害に対する感受性を増加させるという仮説が試験された。グリア活性化が神経損傷を調節し得るメカニズムを決定するために、カイニン酸（ＫＡ）誘発発作における「ツーヒット」モデルでの、炎症促進性サイトカインの急性変化ならびに星状細胞およびミクログリアの活性化および星状細胞グルタミン酸輸送体における長期間の変化の両方について試験した。方法：生後日数（Ｐ）１５日の雄のラットに、ＫＡまたはリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）を投与した。Ｐ４５に、動物はＫＡまたはＰＢＳの２回目の処置を受けた。Ｐ５５に、対照（ＰＢＳ−ＰＢＳ）、乳幼仔期発作（ＫＡ−ＰＢＳ）、成体発作（ＰＢＳ−ＫＡ）、および「ツーヒット」（ＫＡ−ＫＡ）群を、星状細胞およびミクログリア活性化、グルタミン酸輸送体における変化、およびグリアタンパク質、クラステリンの発現に関して試験した。結果：Ｐ１５発作は、ＩＬ−１０およびＳ１００Ｂの海馬レベルの急性の増加をもたらし、行動障害ならびにＧＦＡＰおよびＳ１００Ｂの長期の増加が後に続いた。「ツーヒット」群の動物は、成体発作群と比較して、より大きなミクログリア活性化、神経損傷、および発作に対する感受性を示した。グルタミン酸輸送体は発作の後で増加したが、これらの２つの群間では違いはなかった。乳幼仔期発作後のミノザク（炎症促進性サイトカインのアップレギュレーションの小分子抑制剤）による処置は、活性化グリアの長期の増加と関連する行動障害との両方を防止した。結論：これらのデータは、乳幼仔期発作後のグリア活性化が、一部はプライミングミクログリアおよび増強されたグリア活性化により、成体期の発作に対する感受性を増加させることを示唆する。グリア活性化は、小児てんかんの新しい治療標的となり得る。
【０２６９】
以下の材料および方法はこの実施例で記載される研究で使用した。
【０２７０】
材料および方法：
使用動物
全部で１９５匹の雄のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，ＭＡ）を、これらの実験で使用した。動物は、表６および７に要約されるような実験群に分けられた。各々の群内で、複数の結果判定が必要とされる場合は、生存動物をエンドポイントごとにランダムに選択した。すべての手順は、Ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃａｒｅ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ  ｏｆ  Ｃｈｉｌｄｒｅｎ’ｓ  Ｍｅｍｏｒｉａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｅｎｔｅｒ，Ｃｈｉｃａｇｏ，ＩＬにより承認された。
【０２７１】
カイニン酸媒介誘発発作
生後（Ｐ）１５日または４５日のいずれかにおいて、ラットにＫＡ（Ｏｃｅａｎ  Ｐｒｏｄｕｃｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｎｏｖａ  Ｓｃｏｔｉａ）、または等価量のビヒクル、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ、ｐＨ７．４）（２）のいずれかを投与した。Ｐ１５（５ｍｇ／ｋｇ）およびＰ４５（１５ｍｇ／ｋｇ）でのＫＡ投薬量は、ＫＡ誘発発作（２２）に対する年齢依存性の閾値の違いに基づいた。すべての注射は、腹腔内（ｉｐ）であった。
【０２７２】
カイニン酸誘発発作の「ツーヒット」モデル
Ｐ１５で起こる乳幼仔期発作の長期の効果を測定するために、動物を、３０日間回復させた。Ｐ４５で、ラットにＫＡ誘発神経障害（２）の「ツーヒット」モデルに対して先に記述されたようにＫＡを投与した。対照動物にＰＢＳを投与し、全ての動物を、Ｐ５５で殺処分する前に、さらに１０日間回復させた。対照（ＰＢＳ−ＰＢＳ）、新生仔発作（ＫＡ−ＰＢＳ）、成体発作（ＰＢＳ−ＫＡ）、および「ツーヒット」動物を含む４つの実験群を試験した。ラットは、ＰＢＳで心臓灌流し、０．１ＭのＰＢＳ（ｐＨ７．４）中、４％のパラホルムアルデヒド（ＰＦＡ）で固定した。脳を切除し、一晩中４％のＰＦＡ中で後固定した。脳を免疫組織化学のためにパラフィン包埋して切断した。各結果判定のために、海馬（Ｂｒｅｇｍａ−７．３４ｍｍ、Ｐａｘｉｎｏｓプレート９９とＢｒｅｇｍａ−５．６０ｍｍ、Ｐａｘｉｎｏｓプレート１０６との間の切片）を表す二軸断面を選択した（２３）。
【０２７３】
発作の発症および発作の重症度グレードの判定
ＫＡまたはＰＢＳの投与後、すべての動物を３時間連続的にモニタリングした。最初の発作の発症（前肢間代痙攣の発症と定義される）への潜時および発作の重症度は、前に述べたように定量化した（２）。グレードＩＶ発作の動物のみをこの研究に含めた。
【０２７４】
神経細胞障害の評価
神経細胞障害は、Ｆｌｕｏｒｏ−Ｊａｄｅ  Ｂ（ＦＪＢ）（Ｃｈｅｍｉｃｏｎ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ、Ｔｅｍｅｃｕｌａ、ＣＡ）（２４、２５）を使用して、５μｍのパラフィン包埋切片で測定した。核染料４，６−ジアミジノ−２−フェニルインドール（ＤＡＰＩ，Ｓｉｇｍａ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，Ｍｉｓｓｏｕｒｉ）を使用して、細胞核を対比染色し、同定した。海馬のＣＡ１、ＣＡ２、ＣＡ３、歯状回（ＤＧ）および多形歯状回（ＰｏＤＧ）は、１０倍率で撮影し、画像はＦＪＢ陽性細胞の定量化のためにグレースケール（白黒の階調）に変換した。指定された海馬領域での陽性細胞の割合は、軽く染色された、またはＦＪＢ陽性細胞（Ｍｅｔａｍｏｒｐｈ、Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ  Ｉｍａｇｉｎｇ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ、ＣＡ）に対する閾値化により測定した。海馬領域に特有の染色だけでなく、海馬中の全ＦＪＢ陽性細胞は、各々のサンプル対して得た。
【０２７５】
脳ホモジネートの調製およびタンパク質濃度の決定
海馬ホモジネートは、プロテアーゼ阻害剤カクテル（ＩｍｌのＰＢＳ中、１μｇのロイペプチン（Ｓｉｇｍａ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ）、０．００１Ｍの４−ジチオ−Ｌ−スレイトール（ＤＴＴ、Ｓｉｇｍａ）、０．００２Ｍのオルトバナジン酸ナトリウム（Ｓｉｇｍａ）および０．００１Ｍのフェニルメタンスルホニルフルオライド（ＰＭＳＦ、ＦＬＵＫＡ、スイス））中での超音波処理によって調製した。全体のタンパク質濃度は、市販の試薬（ＢＣＡ、Ｐｉｅｒｃｅ、Ｒｏｃｋｆｏｒｄ、ＩＬ）を使って測定した。
【０２７６】
炎症促進性サイトカインの測定
ＩＬ−１β、ＩＬ−６、およびＴＮＦ−αのレベルは、市販のプレートと試薬（ＥＬＩＳＡ；ＭｅｓｏＳｃａｌｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ、ＭＳＤ、Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ、Ｍａｒｙｌａｎｄ）とを用いた酵素免疫測定法により、海馬ホモジネート中で測定した。Ｓ１００Ｂレベルは、（２６）に記述されるように測定した。サンプルを２回分析し、タンパク質の既知の濃度と比較した。プレートを、ＳＥＣＴＯＲ  Ｉｍａｇｅｒ  ２４００（ＭＳＤ）を使用して分析した。
【０２７７】
海馬関連タスク試験
自発的交替行動のＹ−迷路試験は、海馬依存性の空間学習（２６、２７）を評価するために用いた。試験は、動物が迷路の左または右のアームのいずれかを決定することが最初にできたＰ２７に開始した。試験は、盲検観察者により、Ｐ５５まで隔日で行った。各動物は、Ｙ−迷路の縦のアームで出発した。動物が迷路において２回目の走行で異なるアームを選択した場合、それは交替行動としてスコアリングした。試験の期間にわたる交替行動率を各々の動物に対して計算した。
【０２７８】
カイニン酸誘発発作後のＨ因子およびクラステリン濃度のウェスタンブロット解析
ＫＡ誘発発作後の海馬におけるＨ因子およびクラステリンレベルの変化は、市販の抗体（１：２０００のヤギポリクローナル抗ＦＨ抗体、Ｑｕｉｄｅｌ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ；１：１０００のヤギポリクローナル抗クラステリン抗体、Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ  Ｂｉｏｔｅｃｈ、Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ、ＣＡ）を用いるウェスタンブロットによって定量化した。タンパク質は、ポリアクリルアミド電気泳動ゲルを用いる従来の方法によって分離した。二次抗体（ＦＨに対する１：１０００の抗ヤギＩｇＧ−ＨＲＰ；クラステリンに対する１：２０００の抗ヤギＩｇＧ−ＨＲＰ）とインキュベーションした後、タンパク質のバンドを電気化学発光検出法（ＥＣＬ  Ｗｅｓｔｅｒｎ  Ｂｌｏｔｔｉｎｇ  Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  Ｒｅａｇｅｎｔｓ、Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ、ＮＪ）により視覚化した。適切なサイズのバンドは、デジタル化画像とＯｐｅｎＬａｂソフトウェア（Ｉｍｐｒｏｖｉｓｉｏｎ  ｌｉｎｅ、Ｌｅｘｉｎｇｔｏｎ、ＭＡ）とを使用して、相対的なデンシトメトリによって定量化した。ＦＨおよびクラステリンに対する値を、それぞれＧＡＰＤＨおよびβ−チューブリンに正規化し、データを、２つのバンド（１：４０００のＧＡＰＤＨ、Ａｍｂｉｏｎ、Ａｕｓｔｉｎ、Ｔｘ；１：１０００のβ−チューブリン）の比率として表わした。Ｍｉｃｈａｅｌ  Ｋｌｙｍｋｏｗｓｋｙによって開発されたＥ７抗−β−チューブリン抗体は、ＮＩＣＨＤ後援で開発されたＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ  Ｓｔｕｄｉｅｓ  Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ  Ｂａｎｋから得、Ｔｈｅ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｉｏｗａ、Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｉｏｗａ  Ｃｉｔｙ、ＩＡ  ５２２４２によって維持された。
【０２７９】
免疫組織化学
グリア活性化の海馬マーカーおよび星状細胞グルタミン酸輸送体の免疫組織化学的検出は、Ｖｅｃｔａｓｔａｉｎ  Ｅｌｉｔｅ  ＡＢＣ免疫検出キットおよびジアミノベンジジン基質（ＤＡＢ）（（Ｖｅｃｔｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｂｕｒｌｉｎｇａｍｅ  ＣＡ）を用いて５μｍパラフィン包埋切片で行った。以下の１次抗体を使用した：ＧＦＡＰ（１：１５００、マウスモノクローナル、Ｓｉｇｍａ）；Ｓ１００Ｂ（１：１５００、ウサギポリクローナル、ＤＡＫＯ  Ｃｙｔｏｍａｔｉｏｎ、Ｃａｒｐｉｎｔｅｒｉａ、ＣＡ）；Ｉｂａｌ（１：４００、ヤギポリクローナル、Ａｂｃａｍ、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ、ＭＡ）；ＦＨ（１：４００、ヤギポリクローナル、Ｑｕｉｄｅｌ）；β−クラステリン（１：１００、ヤギポリクローナル、Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ）；ＧＬＡＳＴ（１：５０００、モルモットポリクローナル、Ｃｈｅｍｉｃｏｎ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ、Ｔｅｍｅｃｕｌａ、ＣＡ）およびＧＬＴ−１（１：５０００、モルモットポリクローナル、Ｃｈｅｍｉｃｏｎ）。対照切片を、１次抗体の代わりに正常血清またはＰＢＳでインキュベーションした。抗体の特異性を決定するために、選ばれたスライドを、１次抗体の代わりに前吸着されたＩｇＧでインキュベーションした（Ｓ１００Ｂに対するウサギＩｇＧ；ＧＦＡＰに対するマウスＩｇＧ）。クラステリン、ＧＬＡＳＴおよびＧＬＴ−１に関しては、対照ペプチドを１次抗体の代わりに使用して、特異的な免疫反応性を測定した。切片を、１：４００の希釈倍率で、適切なビオチン化二次抗体（Ｖｅｃｔｏｒ）と共に３８℃で１時間インキュベーションした。
【０２８０】
クラステリン陽性細胞の免疫蛍光二重標識化
クラステリン免疫反応性細胞の二重標識化を、星状細胞マーカーであるＧＦＡＰ（１：１０００）または神経細胞マーカーであるＮｅｕＮ（１：５０、Ｃｈｅｍｉｃｏｎ）のいずれかを用いて行った。標準の馬血清（ＮＨＳ）中で２０分間の再水和およびインキュベーションの後、切片を室温で１時間、いずれかの１次抗体と共にインキュベーションした。ビオチン化二次抗体（抗マウスＩｇＧ、１：４００）との３０分のインキュベーションの後、組織を４５分間、蛍光アビジンＤ（Ｖｅｃｔｏｒ）とインキュベーションし、アビジンおよびビオチン溶液ならびに１０％ＮＨＳでブロックした。次いで、組織を、第２の一次抗体（クラステリン、１：５０希釈）と共に１時間インキュベーションした。切片をビオチン化抗ヤギＩｇＧ二次抗体（１：４００）と２０分間インキュベーションし、続いてＴｅｘａｓ  Ｒｅｄ  Ａｖｉｄｉｎ（Ｖｅｃｔｏｒ）と４５分間インキュベーションした。ＰＢＳで洗浄後、カバーグラスを、ＤＡＰＩを含むＶｅｃｔａｓｈｉｅｌｄ封入剤（Ｖｅｃｔｏｒ）で封入した。
【０２８１】
クラステリン免疫反応性細胞のペルオキシダーゼ二重標識化
クラステリン免疫反応性細胞の二重標識化を、ミクログリアマーカーであるＩｂａｌ、または神経細胞マーカーであるＮｅｕＮを用いても行った。標準的な免疫組織化学的方法を続けたが、ＤＡＢの代わりにＶＩＰ（Ｖｅｃｔｏｒ）を視覚化のための基質として使用した。ＶＩＰによる展開の後、組織をブロッキングし、次いで、Ｉｂａｌ抗体（１：４００希釈）で一晩中、４℃でインキュベーションした。ビオチン化された抗ヤギＩｇＧで１時間インキュベーションした後、組織をＡＢＣ溶液（Ｖｅｃｔｏｒ）で処理し、封入する前にＳＧ基質（Ｖｅｃｔｏｒ）で展開した。同様の方法をＮｅｕＮ（１：５０）によるクラステリンの二重標識化に使用した。
【０２８２】
免疫反応性細胞の画像取得および定量化
切片を２人の盲検観察者によって明視野顕微鏡（Ｎｉｋｏｎ  Ｅｃｌｉｐｓｅ  Ｅ８００）で調べた。ＧＦＡＰ、Ｓ１００Ｂ、Ｉｂａｌ、ＦＨ、クラステリン、ＧＬＡＳＴおよびＧＬＴ−１切片に対しては、ＣＡＩ、ＣＡ２、ＣＡ３、ＤＧおよびＰｏＤＧをｌ０倍率で撮影し、画像を免疫反応性細胞の定量化のためにグレースケールに変換した。特定の海馬領域における陽性細胞の割合は、免疫反応性細胞を示す暗い目的物に対する閾値処理により測定した（Ｍｅｔａｍｏｒｐｈ、Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ  Ｉｍａｇｉｎｇ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ、ＣＡ）。海馬領域に特有の免疫反応性だけでなく全海馬免疫反応性を各々のサンプルに対して得た。免疫反応性細胞の形態の変化は評価しなかった。
【０２８３】
カイニン酸投与後の炎症促進性サイトカイン増加の減衰
初期のサイトカイン増加の抑制が、長期のグリア活性化を防止し、乳幼仔期の発作後の神経行動学的な結果を改善するかどうかを決定するために、Ｐ１５ラットに、ミノザク（Ｍｚｃ）を投与した。Ｍｚｃ（２−（４−（４−メチル−６−フェニルピリダジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）ピリミジン二塩酸塩一水和物）は、生物学的に利用可能であり、また、脳の炎症促進性サイトカインのアップレギュレーション（１９）のＣＮＳ浸透性の小分子抑制剤である。Ｍｚｃを不活性なピリダジンフラグメント（２６）の化学的多様化により合成された鉛化合物から精製した。Ｍｚｃ（５ｍｇ／ｋｇ）または希釈剤（生理食塩水）を、Ｐ１５におけるＫＡ注射後の３時間目と９時間目に腹腔内注射により投与した（図７）。対照動物に等量の生理食塩水（Ｓａｌ）を注射した。１２時間目に、動物を殺処分し、組織を上記のＥＬＩＳＡによって炎症促進性サイトカインの分析のために処理した。動物の別の群は、Ｙ−迷路試験およびグリア活性化の免疫組織化学的分析のために３０日間回復させた。実験群および結果判定の詳細を表７に要約する。
【０２８４】
統計分析
値を各群に対して平均±ＳＥＭとして表わす。正規性検定を各々のデータセットについて行った。スチューデントｔ検定は、２群を比較するのに使用し、一元配置分散分析（ＡＮＯＶＡ）を実施して３群またはそれより多い群を比較した。Ｔｕｋｅｙの多重比較検定をパラメトリック測定に使用し、Ｄｕｎｎの事後検定をノンパラメトリックデータに適用した。Ｆｉｓｈｅｒの正確確率検定を使用して発作の重症度の相違を決定した。Ｋａｐｌａｎ−Ｍｅｉｅｒの生存分析およびログランク検定を実施して、群間での死亡率の相違を分析した。有意差は、全検定に対してｐ＜０．０５として定義した。Ｐｒｉｓｍ４．０（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｉｎｃ．，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）を統計分析に使用した。
【０２８５】
結果
Ｐ１５およびＰ４５のカイニン酸誘発発作の比較
発作潜時（分±ＳＥＭ；ｎとして表わされるデータ）は、Ｐ４５（Ｐ４５  ＫＡおよびＰＢＳ−ＫＡ；３４．３±３．３；ｎ＝３２）と比較して、Ｐ１５（Ｐ１５  ＫＡおよびＫＡ−ＰＢＳ；１６．７±１．２；ｎ＝３０）でＫＡに曝露されたラットでは有意に減少した（図１Ａ）。年齢群の間に発作の重症度に違いはなかった。Ｐ１５では、大多数の動物（Ｐ１５  ＫＡおよびＫＡ−ＰＢＳ；２７／３１、８７％）がグレードＩＶの発作を経験したが、Ｐ４５処置群（Ｐ４５  ＫＡおよびＰＢＳ−ＫＡ；２８／３２，８８％）におけるグレードＩＶの発作の頻度と有意差がなかった。ＫＡ（ＫＡ−Ｐ１３Ｓ、１６／１９、８４％）に曝露された未成熟ラットの生存率は、Ｐ４５群（ＰＢＳ−ＫＡ、１３／２０、６５％）と有意差がなかった（図１Ｂ）。
【０２８６】
乳幼仔期発作の成体期発作に対する感受性の増大
発作感受性（図１）について、Ｐ１５およびＰ４５（ＫＡ−ＫＡ）の両方でＫＡに曝露された「ツーヒット」群において、Ｐ４５（ＰＢＳ−ＫＡ）で最初にＫＡに曝露されたラットと比較した。発作潜時は、Ｐ４５（Ｐ４５  ＫＡおよびＰＢＳ−ＫＡ；３４．３±３．３；ｎ＝３２）で最初にＫＡを投与されたラットと比較して、「ツーヒット」群（ＫＡ−ＫＡ、１８．８±３．８；ｎ＝１２）では有意に減少した（図１Ａ）。生存率（図１Ｂ）は、ＰＢＳ−ＫＡ動物（１３／２０、６５％）と比較して、「ツーヒット」群（６／１２、５０％）で有意に低下した。発作の重症度において、群間内に有意差はなかった。グレードＩＶの発作が、Ｐ４５（Ｐ４５  ＫＡおよびＰＢＳ−ＫＡ）でＫＡに曝露された動物の８８％（２８／３２）で、そして「ツーヒット」ＫＡ−ＫＡ動物では１００％（１２／１２）発生した。Ｐ５５（ＰＢＳ−ＰＢＳ、３１６．７±６．１；ＫＡ−ＰＢＳ、３２７．７±８．４；ＰＢＳ−ＫＡ、２９２．６±９．０；ＫＡ−ＫＡ、３２６．０±２１．２）で殺処分された時点の群間では、体重（ｇ±ＳＥＭ）に有意差はなかった。
【０２８７】
「セカンドヒット」後の発作から生じる神経細胞障害の増大
成体発作（ＰＢＳ−ＫＡ）における海馬神経細胞障害（図１ＣおよびＤ）の程度を、蛍光色素ＦＪＢ（％ＦＪＢ陽性細胞±ＳＥＭとして表わされるデータ）を使用して、「ツーヒット」（ＫＡ−ＫＡ）群と比較した。ＦＪＢに対する関心領域および他の免疫組織化学的な結果判定の概要を図１Ｅに示す。神経細胞障害は、対照群（ＰＢＳ−ＰＢＳ；ｎ＝９）または未成熟発作群（ＫＡ−ＰＢＳ；ｎ＝５）のどちらにおいても検出されなかった。成体（ＰＢＳ−ＫＡ、６．４±０．８；ｎ＝７）として最初にＫＡを投与した同腹仔と比較して、「ツーヒット」群は、有意により大きな神経細胞障害（２９．２±３．６；ｎ＝５）を有した。両群のＦＪＢ陽性細胞の大多数は、海馬のＣＡ３層に存在した。ＣＡＩ、ＣＡ２およびＤＧはまた、対照に比べて標識細胞の有意な増加も示した。ＦＪＧ陽性細胞はまた、これらの群の嗅内皮質および前頭皮質、外側中隔核、梨状葉皮質、嗅周囲皮質においても観察された。これらの領域における値は、群間で差はなかった。
【０２８８】
海馬ＩＬ−１βおよびＳ１００Ｂレベルの急性増加を生じる発作
発作が炎症促進性サイトカインレベルおよびグリア活性化（ｐｇ／ｍｌ±ＳＥＭ；ｎで表わされるデータ）の増加をもたらすかどうかを決定するために、ＫＡ投与後２４時間において、海馬脳ホモジネートでの炎症促進性サイトカイン（ＩＬ−１β、ＩＬ−６、ＴＮＦ−α、およびＳ１００）のレベルの変化を測定した（図２）。未成熟脳（Ｐ１５）および成体脳（Ｐ４５）でのこの応答がを比較した。新生仔において、ＫＡ曝露は、ＰＢＳ処置対照（２０．５±３．０；ｎ＝６）と比べて、ＩＬ−１βの有意な増加（３７．０±４．０；ｎ＝７）をもたらした（図２Ａ）。同様の増加が同年齢対照（２１．１±４．８；ｎ＝４）と比較してＫＡで処置したＰ４５動物（４５．８±９．３；ｎ＝９）で観察された。ＩＬ−１βの未成熟および成体のレベル間には、何らの有意差はなかった。また、ＩＬ−６は、ＩＬ−βと同様の変化の傾向を示したが、統計的有意性には達しなかった（図２Ｂ）。４群においては、ＴＮＦ−αのレベルに変化がなかった（図２Ｃ）。対照的に、Ｓ１００Ｂレベル（図２Ｄ）は、ＰＢＳ処置された対照（１１２３±１３０．７、ｎ＝４）と比較して、ＫＡ処置された新生仔（２６６４．０±２２５．８、ｎ＝７）では有意に増加した。同様の増加が、ＰＢＳ処置Ｐ４５対照（３６７８．０の±５２９．３、ｎ＝４）と比較して、ＫＡ処置のＰ４５動物（５５０８±３０４．３、ｎ＝１０）では観察された。Ｓ１００Ｂレベルは、ＫＡ処置群およびＰＢＳ処置群の両方において、新生仔と比較して、成体では有意に高かった。
【０２８９】
神経行動障害を生じる乳幼仔期発作
新生仔におけるＫＡ誘発性発作後のＩＬ−１βおよびＳ１００Ｂの急性増加が異常な神経行動の結果を伴うかどうかを決定するために、動物がＹ−迷路で海馬関連挙動（％交替±ＳＥＭとして表わされるデータ；ｎ）を行う能力に関して試験した（図３Ａ）。神経細胞障害の欠如にもかかわらず、乳幼仔期発作群の動物は、４０日の回復期の後、対照（ＰＢＳ−１ＰＢＳ、７３．４±５．３、ｎ＝８）と比較して、有意な障害（ＫＡ−ＰＢＳ、２５．４±３．４、ｎ＝１２）を示した。
【０２９０】
長期グリア活性化を生じる新生仔脳発作
神経細胞障害の欠如にもかかわらず、未成熟脳の発作がグリア活性化をもたらしたかどうかを決定するために、免疫組織化学的方法を使用して、海馬における星状細胞特異的マーカーＧＦＡＰおよびＳ１００Ｂ（図３Ｂ〜Ｋ）ならびにミクログリアマーカーＩｂａ１（図４）の変化を定量化した。４つの長期（Ｐ５５）回復群、すなわち、対照群（ＰＢＳ−ＰＢＳ）、未成熟発作群（ＫＡ−ＰＢＳ）、成体発作群（ＰＢＳ−ＫＡ）および「ツーヒット」群（ＫＡ−ＫＡ）における免疫染色（％免疫陽性細胞±ＳＥＭ；ｎとして表わされるデータ）を比較した。
【０２９１】
Ｐ１５でのＫＡの単回投与は、海馬においてＧＦＡＰ免疫反応性の有意な増加をもたらし（図３Ｂ〜Ｆ）、それは対照（ＰＢＳ−ＰＢＳ、２５．８±３．４、ｎ＝１３）と比較して４０日の回復（ＫＡ−ＰＢＳ、５９．９±４．８、ｎ＝１０）の後まで持続した。「ツーヒット」群の動物は、対照と比較して、ＧＦＡＰ（ＫＡ−ＫＡ、７２．０±１５．５、ｎ＝５）の有意な増加を示したが、成体発作群（ＰＢＳ−ＫＡ、５０．３±６．５、ｎ＝１０）とは有意差がなかった。ＫＡ−ＰＢＳ、ＰＢＳ−ＫＡおよびＫＡ−ＫＡ群のＧＦＡＰ陽性星状細胞は、対照と比較して、より濃い加工および増強された染色を有した。これらの細胞は、神経細胞を囲む傾向もあった。調べられた全ての海馬領域（ＣＡ１、ＣＡ２、ＣＡ３、ＤＧおよびＰｏＤＧ）に関して、全３つのＫＡ処置群は、ＰＢＳ−ＰＢＳ群と比較して、ＧＦＡＰ陽性細胞を有意に増加させた。個々の領域は、調べられた他の領域と比較して、ＧＦＡＰ陽性細胞のより高い割合を示さなかった。
【０２９２】
同様の応答が、グリア由来のタンパク質、Ｓ１００Ｂについて観察された（図３Ｇ〜Ｋ）。海馬でのＳ１００Ｂ免疫反応性星状細胞は、対照（ＰＢＳ−ＰＢＳ、１０．８±１．７、ｎ＝１１３）と比較して、Ｐ１５にＫＡへ単回曝露（ＫＡ−ＰＢＳ、３５．０±７．３、ｎ＝１０）した４０日後に有意に増加した。一方、「ツーヒット」群の動物は、対照と比較して、Ｓ１００Ｂの有意な増加（ＫＡ−ＫＡ、３９．６±１．９、ｎ＝６）を示したが、成体発作群（ＰＢＳ−ＫＡ、３１．０±２．６、ｎ＝８）とは有意差はなかった。ＫＡに曝露された動物では、これらの細胞の形態は、活性化された星状細胞の形態であるのが一般的であった（図３Ｈ〜Ｊ）。
【０２９３】
ミクログリア活性化の一過性および「セカンドヒット」による増加
注目すべきことに、「ツーヒット」群の動物は、成体発作群（ＰＢＳＫＡ、１７．４±４．３、ｎ＝５）と比較して、Ｉｂａ１免疫反応性ミクログリア（ＫＡ−ＫＡ、３４．０±５．０、ｎ＝６）の有意な増加を示した（図４）。これらの両方の群（図４Ｃ、Ｄ）におけるＩｂａｌ発現はまた、対照（ＰＢＳ−ＰＢＳ、４．０±０．６、ｎ＝６）と比較して、有意に増加した（図４Ａ）。ＧＦＡＰおよびＳ１００Ｂの持続的な増加と対照的に、活性化されたミクログリアは、乳幼仔期発作後、長期の回復群（ＫＡ−ＰＢＳ、８．７±０．８、ｎ＝８）では増加しなかった（図４Ｂ）。
【０２９４】
「ツーヒット」モデルでのミクログリア活性化に関与する増加したクラステリンレベル
ＦＨおよびクラステリンは、脳損傷後のミクログリア活性化と星状細胞依存性の細胞死とを調節する（１６〜１８、２８）。新生仔（図５Ａ、Ｄ）の発作後２４時間における海馬での両方のタンパク質の変化は、ウェスタンブロット法（相対的な密度±ＳＥＭ；ｎとして表わされるデータ）を使用して測定した。Ｐ１５またはＰ４５での対照群とＫＡ処置群との間にはＦＨレベルに差はなかった（図５Ａ）。次に、免疫組織化学的方法を使用して、乳幼仔期発作が成体期の海馬でのＦＨに持続的な変化（図５Ｂ、Ｃ）をもたらすかどうかを決定した。長期回復群でのＦＨに関しての値に有意差はなかった。ＦＨ免疫反応性細胞は、星状細胞の形態を有し、前頭皮質、線条体および脳室周囲領域にも存在した。
【０２９５】
ＫＡ誘発発作から２４時間の回復の後、海馬のクラステリンレベルは、同年齢対照群（３．０±０．３０、ｎ＝６）および（２．７±０．３１、ｎ＝６）と比較して、Ｐ１５（４．５±０．３６、ｎ＝８）およびＰ４５（４．３±０．３３、ｎ＝５）の両方で有意に高かった（図５Ｄ）。乳幼仔期発作は、海馬でのクラステリンの持続的な変化（免疫陽性細胞±ＳＥＭの％として表わされるデータ）を生じなかった（図７Ｅ）。成体期にＫＡに曝露された動物（図５Ｆ）は、対照と比較してクラステリン（ＰＢＳ−ＫＡ、１８．９±３．７、ｎ＝７）の有意な増加を示した。
【０２９６】
クラステリンレベルは、成体期発作（ＰＢＳ−ＫＡ、１８．９±３．７、ｎ＝７）および乳幼仔期発作（ＫＡ−ＰＢＳ、２．１±０．８、ｎ＝７）の両方ならびに対照（ＰＢＳ−ＰＢＳ、１．６±１．１、ｎ＝８）と比較して、「ツーヒット」群（ＫＡ−ＫＡ、３２．９±３．１、ｎ＝６）では有意に増加した（図５Ｇ、Ｈ）。クラステリンの細胞起源を確認するために、二重標識化研究を、全部で４つの実験群（１群あたり、ｎ＝４）（図５Ｉ〜Ｌ）で行った。クラステリンの免疫染色の定量的評価は、嗅内皮質、大脳皮質、中脳および海馬層ＣＡｌ、ＣＡ２、ＣＡ３歯状回およびＰｏＤＧでクラステリン陽性細胞を示した。クラステリン陽性細胞は、ＮｅｕＮ（図５Ｉ、Ｊ）またはＧＦＡＰ（図５Ｋ）と共標識されないが、Ｉｂａｌ（図５Ｌ）と共標識されてミクログリアとして同定された。
【０２９７】
発作後のグリアグルタミン酸輸送体ＧＬＡＳＴおよびＧＬＴ−１の増加
乳幼仔期発作後の神経機能障害をもたらし得る１つの潜在的メカニズムを決定するために、免疫組織化学的方法を使用して、海馬での星状細胞グルタミン酸輸送体ＧＬＡＳＴおよびＧＬＴ−１の変化を測定した（図６）（１３）。これらのタンパク質の発現を、Ｐ１５にＫＡまたはＰＢＳへの曝露後、４つの長期実験群で比較した（データは、免疫陽性細胞の％±ＳＥＭ；ｎとして表わされたデータ）。ＧＬＡＳＴおよびＧＬＴ−１免疫反応性細胞は、脳で、同様の細胞周囲染色パターンと分布とを示した（図６Ａ〜Ｃ）。標識化細胞の大多数は、海馬、嗅内皮質および前頭皮質に分布した。ＧＬＡＳＴもＧＬＴ−１の発現も、乳幼仔期発作後の海馬では長期間の回復に渡り有意に増加しなかった（図６Ｄ）。対照的に、成体期にＫＡに曝露された動物は、対照（ＰＢＳ−ＰＢＳ；３．４±０．６、ｎ＝７）と比較して、ＧＬＡＳＴ（ＰＢＳ−ＫＡ、１６．３±３．８、ｎ＝７）の有意な増加を示した。ＧＬＡＳＴレベルはまた、対照と比較して、「ツーヒット」群（ＫＡ−ＫＡ、２２．４±５．０、ｎ＝６）でも有意に増加した。同様の結果が、ＧＬＴ−１に関して観察された。乳幼仔期発作群（ＫＡ−ＰＢＳ、５．９±１．９、ｎ＝６）でのＧＬＴ−１についての値は、対照（ＰＢＳ−ＰＢＳ、７．２±１．１、ｎ＝６）と比較して有意差はなかったが、成体期にＫＡに曝露された動物は、対照に比べてＧＬＴ−１（ＰＢＳ−ＫＡ、１９．４±３．５、ｎ＝１０）の有意な増加を示した。ＧＬＴ−１レベルは、対照と比較して、「ツーヒット」群（ＫＡ−ＫＡ、２５．０±４．２、ｎ＝５）で有意に増加した。
【０２９８】
ＫＡ誘発発作後のミノザク遅延投与による海馬依存性行動障害の予防
注目すべきことに、Ｐ１５でのＫＡ誘発発作後の小分子化合物Ｍｚｃによる処置（図７Ａ）は、ＫＡ曝露群（図７Ｂ）で見られる行動機能の弱体化を防止した。３０日の回復期間後、生理食塩水（ＫＡ−Ｓａｌ、５３．３±３．１、ｎ＝２１）で処置されたＫＡ曝露動物の交替率は、対照（ＰＢＳ−Ｓａｌ、８３．０±３．４、ｎ＝１０）と比較して有意に低下した。ＫＡ誘発発作後にＭｚｃで処置された動物は、ＫＡ−生理食塩水処置の動物（Ｐ＜０．００１）と比較して、本試験において有意に改善された行動を示した。
【０２９９】
炎症促進性サイトカインにおけるカイニン酸誘発急性増加のミノザク遅延投与による抑制
次に、乳幼仔期発作後の神経行動障害のＭｚｃによる阻害が、急性サイトカインの抑制、および長期のグリア活性化応答の結果であるかどうかを決定することが求められた。Ｐ１５でのＫＡ誘発発作後のＭｚｃによる処置もまた、海馬脳ホモジネートでの炎症促進性サイトカインの急性増加（図８Ａ〜Ｄ）を防止した（％対照±ＳＥＭ、ｎとして表わされるデータ）。ＫＡ曝露後１２時間の回復時のＭｚｃ処置群では、ＩＬ−１β（１０３．７±４．６、ｎ＝１２）、ＩＬ−６（１０３．２±３．８、ｎ＝１２）、ＴＮＦ−α（９８．５±３．９、ｎ＝１２）およびＳ１００Ｂ（８９．１±９．７、ｎ＝８）のレベルは、対照と有意差がなく、ＫＡに曝露され、食塩水単独で処置された動物と比較して有意に抑制された。
【０３００】
Ｍｉｎｏｚａｃの遅延投与によるグリア活性化におけるＫＡ誘発持続性増加の防止
Ｐ１５でのＫＡ曝露後のＭｚｃによる処置はまた、星状細胞活性化の長期の増加も防止した（図８Ｅ〜Ｌ）。３０日間の回復の後、グリア活性化を、免疫組織化学的方法によって定量した。ＧＦＡＰ免疫反応性細胞（図８Ｅ〜Ｈ）のレベルは、ＫＡ曝露動物（ＫＡ−Ｓａｌ、４７．８±７．６、ｎ＝８）で有意に増加し、この増加は、Ｍｚｃ（ＫＡ−Ｍｚｃ、２０．９±１．８、ｎ＝９）（図８Ｈ）の処置により妨げられた。同様の結果が、両群（ＫＡ−Ｓａｌ、１５．６±２．０、ｎ＝１２；ＫＡ−Ｍｚｃ、８．１±０．９、ｎ＝１３）、（図８Ｉ〜Ｌ）に対するＳ１００８について見られた。
【０３０１】
考察
この研究は、２つの問題、つまり、神経細胞障害の不在に反した乳幼仔期発作後の動物での神経行動障害と第２に、未成熟脳での発作が後年の発作に対する脆弱性を増大させ得るメカニズムとに二分して記述した（４、６、２９、３０）。この研究の主要な所見は以下の通りである：（ａ）乳幼仔期発作後に、ＫＡの「セカンドヒット」に曝露された「ツーヒット」動物での発作に対する感受性の増大；（ｂ）乳幼仔期発作後のグリア活性化の長期間の増加および海馬依存性の行動障害；（ｃ）Ｐ１５およびＰ４５での、ＫＡに曝露された「ツーヒット」動物での増強されたミクログリア活性化；ならびに（ｄ）炎症促進性サイトカインのアップレギュレーションの小分子阻害剤の遅延投与による両方の結果の防止。
【０３０２】
乳幼仔期発作群での神経細胞障害の欠如および「ツーヒット」群での増加した障害は、先の研究（２）と一致している。この研究および他の研究（３１）で見られる乳幼仔期発作後の神経行動機能の障害は、他の辺縁領域も障害を受ける場合があるが、海馬神経細胞機能の脆弱性を示唆する（３２）。Ｍｚｃ処置によるこの障害の防止は、そのプロセスの開始における炎症促進性サイトカインを関与させる。乳幼仔期発作群および成体期発作群でのサイトカイン応答に差がないことは、そのような報告（２２）はされており、これらのデータは１つの時点だけを反映するので、この初期のサイトカイン応答における年齢依存性の違いを無視するものではない。Ｍｚｃ処置動物でのグリア活性化の長期増加の防止は、グリア活性化が神経機能障害（８）に寄与することができることを証明している。
【０３０３】
発作の発生に関する閾値は、成体脳よりも未成熟脳で低い（６）が、未成熟な海馬は、ＳＥによって誘発された構造障害に耐性がある（２９）。この矛盾は、乳幼仔期発作が、成体の発作に対する脆弱性および神経障害を増やすメカニズムが分子レベルまたは細胞内レベルで起こることを意味する。先の研究は、ＡＭＰＡ受容体（３３）、グルタミン酸受容体サブユニット（３４）、および神経細胞のグルタミン酸輸送体、ＥＡＡＣ１（１５）における変化が関係あることを示した。「ツーヒット」群での増強されたミクログリア活性化を示すデータは、グリア（星状細胞およびミクログリア）の活性化を、乳幼仔期発作後の発作および神経障害に対する感受性を増大させることにつながるメカニズムと関係させた。この仮説は、Ｍｚｃ処置動物での改善された行動機能と長期のグリア活性化の防止とにより支持される。活性化された星状細胞およびミクログリアが神経障害を起こす正確なメカニズムは、不明瞭なままである（３５、３６）。
【０３０４】
てんかんの治療標的としてのこの応答の可能性は、詳細に調べられていないが、神経炎症は、てんかん（３７）を含む中枢神経系障害（３６）に対する確立された応答である。アルツハイマー病のヒトのインビトロおよびインビボでの病理学的な研究からの先例は、疾患の病態生理学（８）において、および治療標的（１９、２６、３８）としての両方で、グリア介在神経炎症反応を関係させた。ＩＬ−１の過剰発現につながるミクログリア活性化は、神経変性（８、３９）となる自己増殖型サイトカインサイクルの開始における重要なステップとして提案されてきた。ＩＬ−１βの早期の増加を示すデータは、Ｐ１５（２２）およびＰ２１（４０）におけるＫＡに応じた炎症促進性サイトカインｍＲＮＡの変化についての先の研究と一致している。このサイクルの開始の炎症促進性サイトカインの重要な役割は、急性サイトカイン応答が抑制されたＭｚｃ処置の乳幼仔期発作群で提供される治療効果により支持される。ＩＬ−１βおよび炎症促進性サイトカインはまた、そのようなサイクルから独立した痙攣誘発のシグナル伝達分子として、てんかんで機能する可能性もある（４１）。
【０３０５】
Ｐ１５でＫＡに曝露されたラットの海馬での長期グリア活性化についての証拠が見られ、これは、４０日の回復後のＧＦＡＰおよびＳ１００Ｂ（４２、４３）の発現の増加として現れる。星状細胞由来サイトカインＳ１００Ｂは、急激におよびこの研究の長期の回復の過程の両方で増加した。ＧＦＡＰの長期の増加と共に、この知見は、星状細胞が乳幼仔期発作後、活性化されたまま残存することを意味する。Ｓ１００Ｂがそれにより神経障害に対する脆弱性を増加させるメカニズムは、未解明のままであるが、Ｓ１００Ｂを過剰発現するマウスの研究は、グリア活性化の増加および神経障害に対する感受性の増加の両方を証明している（１０、４４）。成熟した対照動物で見られる増加したＳ１００Ｂレベルは、加齢に伴うＳ１００Ｂの上昇と一致している（４５）。
【０３０６】
中枢神経系で大多数のグルタミン酸の取り込みを担う星状細胞グルタミン酸輸送体（１３、１４）の発現においては、長期間変化がなかった。「ツーヒット」群での両方の輸送体の増加は、成体（ＰＢＳ−ＫＡ）発作群で見られるそれに匹敵し、防御反応（４６）である場合がある。これらのデータは、星状細胞グルタミン酸輸送体が、乳幼仔期発作後の発作感受性の増加に寄与しないこと、またはこれらの輸送体の機能的性質が変更されることのいずれかを意味する。
【０３０７】
クラステリン発現は、発作後の星状細胞でアップレギュレートされる（１８）。ＫＡに曝露された動物でのクラステリンの増加は、ミクログリア起源である。この結果は、ミクログリア活性化が、「ツーヒット」群では強化されて、活性化されたミクログリアが細胞障害に至るメカニズムである可能性があるという知見を支持する（１７）。補体阻害タンパク質であるＨ因子（２８）は、アミロイド−βで誘発された脳障害（１６）における活性化ミクログリアに対する走化因子として作用する。ＫＡに応じてのＨ因子レベルの変化がないことは、このシグナル伝達経路が、発作後のミクログリアのリクルートに関与していないことを示唆する。
【０３０８】
これらの研究において使われる小分子のＭｚｃ（１９）は、生物学的利用可能性、水溶性、ＣＮＳ浸透性、非毒性の化合物であり、これは、アルツハイマー病マウスモデルにおいて、海馬の炎症促進性サイトカインのアップレギュレーションを阻害し、シナプス機能障害を抑制し、そして海馬依存性行動障害を弱める。本明細書で示される結果およびＦＤＡガイドライン（１９）に従った大規模なＭｚｃ産生能は、小児てんかんの新規な治療剤としてこの化合物の可能性を調べる必要性を示している。本研究の有効性は、標的とする神経炎症が中枢神経系疾患の進行を変える場合があるという仮説（１９、２０、３８）を更に支持することにつながる。
【０３０９】
これらのデータは、乳幼仔期発作の慢性神経学的後遺症および新生仔期の発作後のさらなる神経障害に対する感受性の増大の両方における神経炎症に関係する。乳幼仔期発作後の炎症促進性サイトカイン、特にＩＬ−１βおよびＳ１００Ｂでの初期の上昇がミクログリアのさらなる活性化をもたらすモデル（図９）が提案される。この活性化は、一過性でもあるが、星状細胞の活性化の持続的な増加が後に続く。活性化された星状細胞は、神経行動障害をもたらし、部分的には障害の後に増強されたミクログリア活性化により、第２の神経学的障害に対する感受性を増加させる可能性がある。乳幼仔期発作は、２番目の神経傷害に対する過剰な反応に関してミクログリアに呼び水を差す（２０）。これらの仮説は、初期の炎症促進性サイトカイン応答の抑制効果、海馬ヘのグリア活性化反応の領域特異性、Ｓ１００Ｂを過剰発現するトランスジェニックマウス（１０、４４）での神経障害に対する増加した感受性を示す以前のデータ、およびアルツハイマー病での神経変性のために提案された同様のモデル（７、８、１９、２０）によって支持される。
【０３１０】
このような実施形態は、本発明の一態様の単なる例示であるが、任意の機能的に均等な実施形態は、本発明の範囲内にあることを意図するものであるので、本発明は、本明細書に記載の特定の実施形態による範囲に限定されるものではない。事実、本明細書において示され、記載されているものに加えて、本発明の様々な変更は、前述の記述および添付の図面から当業者には明らかとなるであろう。そのような変更は、添付の特許請求の範囲内にあるものとする。
【０３１１】
本明細書において参照されたすべての刊行物、特許および特許出願は、それぞれ個々の刊行物、特許および特許出願が、その全体の開示が参照により組み込まれることを具体的に、個々に示している場合と同程度に、それらの全体の開示が参照により組み込まれる。本明細書において言及されているすべての刊行物、特許および特許出願は、本発明との関連において使用されてもよい、そこに報告されている方法等を記述し、開示する目的のために参照により本明細書に組み込まれる。本発明が、先行発明によるそのような開示に先行する権利が与えられないことを認めるものとして本明細書では解釈されるべきではない。
【０３１２】
【表１−１】
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【０３１３】
【表１−２】
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【０３１４】
【表１−３】
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【０３１５】
【表１−４】
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【０３１６】
【表１−５】
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【０３１７】
【表１−６】
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【０３１８】
【表１−７】
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【０３１９】
【表１−８】
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【０３２０】
【表１−９】
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【０３２１】
【表１−１０】
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【０３２２】
【表１−１１】
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【０３２３】
【表１−１２】
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【０３２４】
【表１−１３】
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【０３２５】
【表１−１４】
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【０３２６】
【表１−１５】
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【０３２７】
【表１−１６】
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【０３２８】
【表１−１７】
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【０３２９】
【表１−１８】
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【０３３０】
【表１−１９】
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【０３３１】
【表１−２０】
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【０３３２】
【表１−２１】
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【０３３３】
【表１−２２】
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【０３３４】
【表１−２３】
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【０３３５】
【表１−２４】
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【０３３６】
【表１−２５】
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【０３３７】
【表１−２６】
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【０３３８】
【表１−２７】
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【０３３９】
【表１−２８】
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【０３４０】
【表１−２９】
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【０３４１】
【表１−３０】
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【０３４２】
【表１−３１】
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【０３４３】
【表２−１】
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【０３４４】
【表２−２】
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【０３４５】
【表２−３】
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【０３４６】
【表２−４】
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【０３４７】
【表２−５】
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【０３４８】
【表２−６】
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【０３４９】
【表２−７】
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【０３５０】
【表２−８】
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【０３５１】
【表２−９】
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【０３５２】
【表２−１０】
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【０３５３】
【表２−１１】
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【０３５４】
【表２−１２】
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【０３５５】
【表２−１３】
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【０３５６】
【表２−１４】
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【０３５７】
【表２−１５】
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【０３５８】
【表２−１６】
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【０３５９】
【表２−１７】
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【０３６０】
【表２−１８】
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【０３６１】
【表２−１９】
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【０３６２】
【表２−２０】
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【０３６３】
【表２−２１】
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【０３６４】
【表２−２２】
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【０３６５】
【表２−２３】
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【０３６６】
【表２−２４】
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【０３６７】
【表２−２５】
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【０３６８】
【表２−２６】
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【０３６９】
【表２−２７】
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【０３７０】
【表２−２８】
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【０３７１】
【表２−２９】
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【０３７２】
【表２−３０】
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【０３７３】
【表２−３１】
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【０３７４】
【表２−３２】
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【０３７５】
【表２−３３】
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【０３７６】
【表２−３４】
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【０３７７】
【表２−３５】
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【０３７８】
【表２−３６】
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【０３７９】
【表３−１】
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【０３８０】
【表３−２】
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【０３８１】
【表３−３】
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【０３８２】
【表３−４】
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【０３８３】
【表３−５】
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【０３８４】
【表３−６】
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【０３８５】
【表３−７】
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【０３８６】
【表４−１】
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【０３８７】
【表４−２】
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【０３８８】
【表４−３】
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【０３８９】
【表４−４】
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【０３９０】
【表４−５】
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【０３９１】
【表４−６】
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【０３９２】
【表４−７】
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【０３９３】
【表４−８】
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【０３９４】
【表４−９】
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【０３９５】
【表４−１０】
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【０３９６】
【表５−１】
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【０３９７】
【表５−２】
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【０３９８】
【表５−３】
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【０３９９】
【表５−４】
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【０４００】
【表５−５】
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【０４０１】
【表５−６】
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【０４０２】
【表５−７】
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【０４０３】
【表５−８】
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【０４０４】
【表６】
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Ｐ、出生後日数；ＫＡ、カイニン酸；Ｃｙｔ、サイトカイン（ＩＬ−１β；ｌＬ６；ＴＮＦ−α、Ｓ−１００Ｂ）；ＦＪＢ、Ｆｌｕｏｒｏ−ＪａｄｅＢ；ＦＨ、Ｈ因子；Ｃｌ、クラステリン；ＧＬＡＳＴおよびＧＬＴ−１、グルタミン酸輸送体；潜時、発作発症までの時間；重症度、ＫＡ後の発作重症度
【０４０５】
【表７】
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Ｐ、出生後日数；ＫＡ、カイニン酸；Ｍｚｃ、ミノザク；Ｃｙｔ、サイトカイン（ＩＬ−１β；ＩＬ６；ＴＮＦα、Ｓ−１００Ｂ）
参考文献
以下は、実施例１に含まれる出版物により用いられた参考文献である。
【０４０６】
【数１】
2010520223.tif 000106
【０４０７】
【数２】
2010520223.tif 000107
【０４０８】
【数３】
2010520223.tif 000108
【０４０９】
【数４】
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【図１０】
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【国際調査報告】
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