(57)【要約】【課題】【解決手段】本文は一連のイソキサゾール誘導体およびイソキサゾール誘導体の免疫性疾病を治療する方法の説明を行った。【選択図】図１【特許請求の範囲】
【請求項１】
化合物は（I）の構造を持つ：
【化９】
2010505772.tif 000021
あるいはその1種の生理耐塩；
その中-Rは-のローアルキル基、-O-ローアルキル基、-シクロヘキサン、-CH2-シクロヘキサン、-O-のシクロヘキサン、-CH2-O-のシクロヘキサン、-ベンゼン、-CH2-ベンゼン、-O-のベンゼンであるH、− あるいは-CH2-O-ベンゼン。
【請求項２】
薬物調合剤は請求項1の中の化合物あるいは構造（II）の化合物を含む：
【化１０】
2010505772.tif 000022
あるいはその1種の生理耐塩；
【請求項３】
請求項2の薬物の調合剤に、塩はナトリウムの塩、アンモニウム塩とカリ岩塩化合物を含む
【請求項４】
請求項2の薬物の調合剤に、下記の内容物から一定の薬の分量を取り出して調合する：錠剤、衣服の錠剤、溶液、混合剤、乳剤、散薬、粒剤、（マイクロ）カプセル剤、座薬、シロップ、洗剤、ゲル剤、霜剤など及び化合物。
【請求項５】
腫瘍の壊死因子に対して（TNF-a）病症患者1種の治療の方法には患者に対して請求項2の中できっと有効な治療の薬の分量る薬物の調合剤を使うのである。
【請求項６】
請求項5の治療方法に適用することができると声明する：リューマチ性関節炎、乾癬の関節炎は、しかしルーマニアの恩氏の病気、乾癬、狼瘡、動脈のかゆみの様子は硬化して、硬皮病、多く性の硬化、アルツハイマー病、敗血症、I型の糖尿病、歯の肉の炎と悪疾を出して、およびこれらの病気の中の症候群などに適用する。
【請求項７】
卵白チロジンキナーゼ3 （JAK3）介入誘導式の治療方法は患者に対して請求項2に言及した薬物の調合剤を使うのである。
【請求項８】
請求項7の方法は結腸癌、乾癬、器官移植を治療して、これらの症候群に適用する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、イソキサゾールの誘導体及び疾病の治療方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
研究の結果によると、レフルノミド(Leflunimide)、N−（4−トリフルオロメチルフェニル）−4−ホルムアミド−5−メルチイソキサゾールはある免疫性疾病の治療にとても効果がある。例えば、慢性関節リウマチ(RA）、多発性硬化症と乾癬性紅皮症である。レフルノミドハイソキサゾールの一種で、商品名Arava（登録商標）である。
【０００３】
【化１】
2010505772.tif 000002
バイオベンチャー、4-(5−メルチー3-フェニル−4−イソキサゾール)sulfamidylはずっと慢性関節リウマチ、変形性関節炎と月経痛の治療に用いる。バイオベンチャーモイソキサゾール誘導体の一種で、商品名はBextra（登録商標）。
【０００４】
【化２】
2010505772.tif 000003
ほかのイソキサゾール誘導体も慢性関節リウマチと免疫性疾病の治療に効果があると証明された、なかなか将来性がある。例えば、私たちのパテントイソキサゾール誘導体(アメリカパテント番号6，727，272)、動物実験によると、それは関節炎の治療にとても役に立つ。代表的な例は、N−(2−ジメトモルフ)-3-ホルムアミド−5-イソキサゾール(或いはUTL-5b)、N-(4-ジメトモルフ)-3-ホルムアミド−5-イソキサゾール(或いはUTL-5d)。
【０００５】
【化３】
2010505772.tif 000004
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】アメリカ合衆国特許番号6，727，272
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明の適用範囲は、特許請求の範囲で明確に規定されており、本概要の説明と関係がない。導入によって、本発明の特色を持っている化合物の構造は(I)：
【０００８】
【化４】
2010505772.tif 000005
或いはこの一種の生理耐塩性、この中の-Rは-H、−ローアルキル基、-0−ロ−アルキル基、−ヘキサメチレンジイソシアネート、-CH2−ヘキサメチレンジイソシアネート、−0−ヘキサメチレンジイソシアネート、-CH2-0−ヘキサメチレンジイソシアネート、−ベンゼン、-CH2-ベンゼン、-0-ベンゼンや−CH2-0-ベンゼン。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】カラゲニン誘導の後肢水腫と5-メルチイソキサゾール−3-カルボン酸（UTR-1）前処理を行うことを示す概要図。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
以下に説明する驚く発見は多種のイソキサゾール誘導体が免疫性疾病を治療の薬剤が用い、この疾病は慢性関節リウマチのような疾病である。
たくさんのイソキサゾール誘導体は慢性関節リウマチと多発性硬化症など免疫症疾病の治療に著しく効果があると証明されたから、将来、ほかのイソキサゾール誘導体も免疫性疾病の薬剤として発見されると推定できる。
【００１１】
私たちが行ってイソキサゾール誘導体の合成と研究の一部分、5-メチルイソキサゾール−3-カルバン酸(UTR-1)が生きている体内と体外の治療効果を検定しようと決める。
【００１２】
【化５】
2010505772.tif 000006
カラゲニン誘導の水腫動物に関しての結果はUTR-1が炎症の耐性が非常に効果があると示す。
(実施例1参照)
体外に行って研究の結果によって、UTR-1が角化細胞分泌の腫瘍の壊死因子α（TNF-a）を減少する。(実施例2参照)。遺伝子チップの分析により、UTR-1は免疫関連の遺伝子を抑えたことを表明している。抑えられた遺伝子は卵白チロジンキナーゼ（JAK3）、糸分裂活性化卵白キナーゼ2（MAP3K2）などを含む（実施例2参照）。
【００１３】
卵白チロジンキナーゼの3（JAK3）は1種のチロジンのキナーゼに属して、白血球の介素に IL-2、IL-4、IL-9 および IL-13はアクティブにする。卵白のチロジンのキナーゼの3 （JAK3）T細胞に用いて活性化して、そしてアレルギー、深刻な総合免疫の欠陥（SCID）がと特に性の皮膚炎に応じて関係があります。糸/スレオニンの卵白のキナーゼはMAP3K2（糸がもとの活性化する卵白のキナーゼの2に分裂すること）とT細胞を導いてJNK信号の通り道を体にアクティブにされることに介在する；それはNF- Bをアクティブするので、そして免疫と炎症の反応を調節することができます。
それ以外に、多くの結腸癌と関係がある遺伝子もUTR-1に効果的に（実施例２参照）を抑えられる。
当発明の第1種の体現は通式（I）を持った化合物である:
【００１４】
【化６】
2010505772.tif 000007
その中：-Rは-H、 -ローアルキル基、-O-ローアルキル基、-シクロヘキサン、-CH2-シクロヘキサン、-O-のシクロヘキサン、-CH2-O-のシクロヘキサン、-ベンゼン、-CH2-ベンゼン、-O-のベンゼンであるH、− あるいは -CH2-O-ベンゼン。ここの「ローアルキル基」は2−5の炭素のまっすぐな鎖、連鎖あるいは環状の炭化水素を含むである。
当発明は第2種類の1種の薬物合剤で、1種の分子式（I）を持った化合物（あるいはその1種の生理が塩に耐えられる）と/あるいは1種の分子式（II）を持った化合物（あるいはその1種の生理塩）から構成：
【００１５】
【化７】
2010505772.tif 000008
その中：-Rは-H（注釈：構造式IIの中にRがあらない、訂正してもらう）、−ローアルキル基、-O-ローアルキル基、-シクロヘキサン、-CH2-シクロヘキサン、-O-のシクロヘキサン、-CH2-O-のシクロヘキサン、-ベンゼン、である-CH2-ベンゼン、-O-のベンゼン
あるいは -CH2-O-ベンゼン。ここ、“ローアルキル基”は上述した通りである。いくつかの具体体現中に、塩はナトリウムの塩、アンモニウム塩あるいはカリ岩塩を含む。
次に本発明の特色の化合物のいくつかの典型的な実例：
【００１６】
【化８】
2010505772.tif 000009
2010505772.tif 000010
2010505772.tif 000011
薬物合剤の適用形式は下記の形式を含むが、下記の形式に限らない：錠剤、衣服の錠剤、溶液、混合剤、乳剤、散薬、粒剤、（マイクロ）カプセル剤、座薬、シロップ、洗剤、ゲル剤、霜剤など及び化合物。
【００１７】
当発明によって、腫瘍の壊死する因子をわずらうことに対して（TNF-a）病症の患者の1種の治療方法に介在するのは、患者に対してきっと有効な治療の薬の分量の薬物調合剤を使うのである。腫瘍の壊死する因子（TNF-a）病症はリューマチ性関節炎、乾癬の関節炎、克羅恩の氏の病気、乾癬、狼瘡、動脈のかゆみの様子を含んで硬化して、硬皮病、多く性の硬化、アルツハイマー病、敗血症、I型の糖尿病、歯肉炎と凶悪な病気などを出する。
【００１８】
当発明によって、卵白のチロジンのキナーゼの3をわずらうことに対して （JAK3）導く病症の患者の1種の治療の方法に介在するのは患者に対して有効な治療の薬の分量の薬物の調合剤を使うのである。卵白のチロジンのキナーゼの3 （JAK3）病症は結腸癌、臓器移植排斥、乾癬とリューマチ性関節炎を含む。  
下記の典型フローの実施例と例証だけとして、しかし付加の権利の要求あるいは対等のテキストの中声明した範囲に限定しない。
【実施例１】
【００１９】
カラゲニン誘導の大きい白ネズミの後肢水腫に通じて、UTR-1の抗炎の作用を測定する
【００２０】
10匹のSD大きい白ネズミ（180−215ｇ、 勝敗が限りません）は2組に分けられる：（1）グループ（2）を照らし合わせてグループを実験して、一組ごとに5匹。まずUTR-1を2メチル基の亜スルフォン（DMSO）（0.5ｍｌ DMSOの中で20ｍｇ）で溶解して、更に1％のカルボキシメチル・セルロース（ナトリウム）（CMC）で調合の5ｍｌ見本の調合剤を希釈する。
【００２１】
カラゲニンで励起（前処理）前の1時間、実験グループの大きいネズミごとに腹腔に1 ｍｌ調合剤サンプルを注射する。これは20ｍｇ/ｋｇ（1 ｍｌ x 4 ｍｇ/ｍｌ x
1000g/200g=20ｍｇ/ｋｇ、 ネズミごとに平均に体重の200ｇによって計算する）に相当する。同様な方法によってグループの動物を照らし合わせますに注射して薬物の賦形剤をくわえません。
【００２２】
炎症を誘導するため、50 μlの 1％カラゲニン溶液の生理食塩水にゴムをして動物の右後肢の足底まで注射する。１つの器官の満たす度に計測器（イタリアの瓦雷沢Ugo Basile 7140 器官満度計測器）下肢の水腫の発展状況を測量する。カラゲニン励起した後に、毎時間下肢の体積（ｍｌ）に対して一回測量する。
水腫度(度合)（E％）の計算次の通り:
【００２３】
【数１】
2010505772.tif 000012
V0 =カラゲニンを注射する前に、右後足裏の体積（ｍｌ）
Vt =カラゲニンを注射した後、「t」時間点での右後足裏の体積
結果は下記の通りである、図１参照
【００２４】
【表１】
2010505772.tif 000013
【００２５】
【表２】
2010505772.tif 000014
【００２６】
【表３】
2010505772.tif 000015
【００２７】
【表４】
2010505772.tif 000016
【実施例２】
【００２８】
角化細胞の体外腫瘍の壊死する因子を釈放する（TNF-α）の調節と遺伝子のチップ分析
テスト材料
1. 賦形原料: 50:50 v/v アルコール:ポリグリコール600 
2. UTR-1原料: 50:50 v/vアルコール:ポリグリコールの600賦形剤の中で3.5
ｍｇ/ｍｌ UTR-1 
【００２９】
前処理
人表皮角化細胞を6孔板の中に接種して、37±2°C、5±1% CO2 条件の下でメーカーの推薦するプラスしない血清のEpilife育成基で育成する。細胞はいったん合流したら、育成基を除いて、それから1%含むで v/v上述の2種類の原料の溶液（賦形剤の原料とUTR-1原料）のEpilife育成基は細胞に対して1晩中の処理を行います。UTR-1の最終の濃度は35 mg/ｍｌである。全ての処理はすべて6孔の板の中の２つの孔を用意しなければなりません。供給して材料に試験することができました後に、37±2°C、5±1% CO2条件の下で細胞に対して24時間育成する。
【００３０】
処理と遺伝子のチップの分析
末期育成、引き出するを通じて装置を吸い込んで育成基を取り除いて、燐酸塩で液体を緩衝して、そして30ｍＪ/cm2のUVBで放射して細胞を照射する。照射した後に、新鮮な育成基で燐酸塩に取って代わって液体を緩衝して、37±2°C，5±1% CO2条件の下で、細胞に対して1晩中を行って育成する。育成した後に、集中の細胞の育成基、商業ELISA試薬の箱でTNF-aの釈放を測量する。PBS（燐酸塩が液体を緩衝する）で細胞を一回きれいに洗って、それからトリプシン/EDTA（乙2アミンの4酢酸）の溶液に参加して細胞を釈放しにきて、それからトリプシンの中和の液体に参加する。上述の処理の基礎の上で、細胞の集中を15ｍｌのが心が一致しません管理に、4±2 °C条件の下で1000が/1分のスピードを回転して心が一致しないで分離して細胞の団を形成することを行います。上清の液体を除いた後に、500ｍｌ 硫黄の青酸のグアニジンは液体に溶解して細胞に溶解しにきて、それから繰り返しはじいて、細胞の団まで溶解した後に、溶液を放してピペットに入れます。RNAqueousで試薬の箱（Ambion）を取り出して総括的なRNAを取り出する。純化したRNA後に、mRNAがそして転化して義RNA（aRNA）に反対することを取り出する。それから蛍光のゾンデのタグaRNAを使います。このような情況の下で、Cy3（緑色の蛍光が物を標記する）で標記して見本のsRNAを処理していないで、Cy5（赤色の蛍光物で標記する）のタグの処理したことがある見本aRNAを使います 。いったんaRNAを標記してしかも見本の中で含んでいない染料を除いたら、標記しなければならないaRNAは交雑の溶液と小さい数組の分析を混合して行います。それから60-65
°C，小さい数組の1晩中の交雑を使用する。交雑の後で、小さい数組の釈放のaRNAゾンデに洗っていって、スキャナーでスキャンを行います。遺伝子が変化の標準を表現して多種であることがあるかもしれないことを評定する。普通の情況の下で、遺伝子の±30%は変化を発生した情況は：（1）遺伝子標記物の蛍光強さは背景の強さより大きくなるべきで、（2）とCy5/Cy3（処理/未処理）の蛍光の強さの比率は1.3以上や0.66以下にする。
【００３１】
結果
TNF-α測定の結果は下記の通りである。数値はn=2である（一つの処理が2つホールを使う）
【００３２】
【表５】
2010505772.tif 000017
遺伝子のチップの分析の結果は、その他の遺伝子の中で、卵白のチロジンのキナーゼ（JAK3）と糸はもとの活性化する卵白のキナーゼの2（MAP3K2）に分裂してUTR-1に抑えられて、次の通りである
【００３３】
【表６】
2010505772.tif 000018
下記の結腸癌と関係がある遺伝子も抑えられる：
【００３４】
【表７】
2010505772.tif 000019
すべての遺伝子の説明について、次通りである：
【００３５】
【表８】
2010505772.tif 000020
要するに、当発明は免疫性疾病を治療することができるイソキサゾールに誘導体を提供した。私達は体内の体外の研究の結果が抗炎数を抑えてと免疫を植えます関係がある遺伝子で5-メチル基のイソキサゾール-3-水酸基は治療効果は素晴らしいである。
【００３６】
上記は一心さ性を含むけれども、しかしこれは理解して当発明の範囲に対する制限になる決してべきではあらないなくて、当発明のいくつかの典型的な実例に対してただいくつか説明だけを出した。当発明の範囲は、付加の権利要求に応じて及び対等の法律規範の条項は正確で、実施の説明を述べるだけではあらない。
【図１】
2010505772.tif 000023
【国際調査報告】
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