(57)【要約】本発明は、以下の具体的な構造を有するPTP1B阻害剤を提供するものである。該阻害剤はプロティンチロシンホスファターゼ1B（PTP1B）の活性を効果的に阻害することができ、インスリン抵抗性改善薬として、PTP1Bによるインスリン抵抗性と関連する疾病、特にII型糖尿病と肥満症の予防、遅延又は治療に用いることが可能である。また本発明は該阻害剤の調製方法を提供する。2010520240.tif 000076【選択図】なし
2010520240.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式Iに示された構造を有する化合物であって、
【化１】
2010520240.tif 000057
その中、XはS、O、NH又はCH=CHであり；
R1はOCOR9、OCOCOR9、NHCOR9、NHCOCOR9、NHCONHR9、
【化２】
2010520240.tif 000058
又はCH2R9であり；
その中、R9とR9’はそれぞれ独立にC2-C6アルケニル基；C1-C2カルバルコキシ基；C3-C6シクロアルキル基、又はO、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基；フェニル基、ナフチル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルコキシル基に置換されたフェニル基；ベンジル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルコキシル基に置換されたベンジル基；ハロゲン原子、カルボキシ基、フェニル基又は置換フェニル基、ベンジル基又は置換ベンジル基、O、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基、C3-C6シクロアルキル基、O、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基、又はヒドロキシ基に置換されたC1-C13アルキル基；O、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基、又はベンゾのO、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基；カルボキシ基、ぎ酸メチル基、又はぎ酸エチル基を含有するC1-C4アルキル基；又はCH2OR13であり、
R13はフェニル基、又はハロゲン原子、C1-C6アルコキシル基、ヒドロキシ基に置換されたフェニル基；ベンジル基、又はハロゲン原子、C1-C6アルコキシル基、ヒドロキシ基に置換されたベンジル基；チアゾール基、フリル基、チオフェン基、ピラニル基、ピリジン基、ベンゾチアゾール基、ベンゾチオフェン基、ナフチル基；C3-C6シクロアルキル基、又はO、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基であり；
R2はH；ハロゲン原子；C2-C6アルケニル基；C1-C2カルバルコキシ基；C3-C6シクロアルキル基、ハロゲン原子又はカルボキシ基に置換されたC3-C6シクロアルキル基、又はO、N、S原子に置換された5員又は6員シクロアルキル基；フェニル基、ナフチル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルコキシル基に置換されたフェニル基；ベンジル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルコキシル基に置換されたベンジル基；ハロゲン原子、カルボキシ基、フェニル基又は置換フェニル基、ベンジル基又は置換ベンジル基、O、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基、C3-C6シクロアルキル基、O、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基、又はヒドロキシ基に置換されたC1-C13アルキル基；O、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基、又はベンゾのO、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基；カルボキシ基、ぎ酸メチル基、又はぎ酸エチル基を含有するC1-C4アルキル基；アリール基又は置換アリール基に置換されたメルカプト基、オキシ基、アミノ基、C1-C6アルキル基又はC2-C6アルケニル基であり；
R3はH；ハロゲン原子；C2-C6アルケニル基；C1-C2カルバルコキシ基；C3-C6シクロアルキル基、ハロゲン原子又はカルボキシ基に置換されたC3-C6シクロアルキル基、又はO、N、S原子に置換された5員又は6員シクロアルキル基；フェニル基、ナフチル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルコキシル基に置換されたフェニル基；ベンジル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルコキシル基に置換されたベンジル基；ハロゲン原子、カルボキシ基又はヒドロキシ基に置換されたC1-C13アルキル基；O、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基、又はベンゾのO、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基；カルボキシ基、ぎ酸メチル基、又はぎ酸エチル基を含有するC1-C4アルキル基であり；
R4、R5、R6とR7はそれぞれ独立にH；ハロゲン原子；C2-C6アルケニル基；C3-C6シクロアルキル基；フェニル基又はハロゲン化フェニル基；ベンジル基；ハロゲン原子、C1-C6アルコキシル基又はヒドロキシ基に置換されたC1-C13アルキル基；カルボキシ基、ぎ酸メチル基、又はぎ酸エチル基を含有するC1-C4アルキル基であり；
その中、R4とR5はそれぞれ二重結合の同じ側又は反対側に位置し、R6とR7はそれぞれ二重結合の同じ側又は反対側に位置し；
R8はカルボキシ基、ぎ酸メチル基、又はぎ酸エチル基を含有するC1-C4アルキル基である。
【請求項２】
R3はH又はフェニル基であり；
R4、R5、R6とR7はそれぞれ独立にH、C1-C4アルキル基であり、その中H又はメチル基が好ましく；
R8はカルボキシ基、ぎ酸メチル基、又はぎ酸エチル基を含有するC1-C4アルキル基であり、その中ぎ酸エチル基又はカルボキシ基が好ましい、請求項1に記載の化合物。
【請求項３】
下記一般式IIに示された構造を有する化合物であって、
【化３】
2010520240.tif 000059
その中、X、R1、R3〜R8の定義は、請求項1の記載通りであり；
YはS、O、NH；C1-C6アルキル基；C2-C6アルケニル基であり；
R10はH；ハロゲン原子；ヒドロキシ基；C2-C6アルケニル基；ハロゲン原子、C1-C6アルコキシル基、フェニル基、ベンジルオキシ基、ヒドロキシ基に置換されたC1-C13アルキル基；フェニル基、ナフチル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルキル基又はアルコキシル基に置換されたフェニル基；ベンジル基、又はハロゲン原子、C1-C6アルキル基又はアルコキシル基に置換されたベンジル基；カルボキシ基、ぎ酸メチル基、又はぎ酸エチル基を含有するC1-C4アルキル基；OCH2R12又はOR12であり；
R12はH；C2-C6アルケニル基；ハロゲン原子、C1-C6アルコキシル基、フェニル基、ヒドロキシ基に置換されたC1-C13アルキル基；カルボキシ基、ぎ酸メチル基、又はぎ酸エチル基を含有するC1-C4アルキル基；チアゾール基、フリル基、チオフェン基、ピラニル基、ピリジン基、ベンゾチアゾール基、ベンゾチオフェン基、ナフチル基；ベンジル基；フェニル基、又はハロゲン原子、C1-C6アルコキシル基、ヒドロキシ基に置換されたフェニル基；C3-C6シクロアルキル基、又はO、N、S原子に置換された5員又は6員シクロアルキル基であり；
R11はH；ヒドロキシ基；ハロゲン原子；C1-C6アルキル基；C1-C6アルコキシル基である、請求項1に記載の化合物。
【請求項４】
下記一般式IIIに示された構造を有する化合物であって、
【化４】
2010520240.tif 000060
その中、X、R1、R3〜R8、Y、R10〜R11の定義は請求項3の記載通りである、請求項3に記載の化合物。
【請求項５】
Yは-CH2-であり；
R10はH；ヒドロキシ基；フェニル基；-OCH3；-OCH2CH=CH2；-OCH2COOEt；-OCH2COOH；-OBn；2-ぎ酸エチルエトキシ基；2-ヒドロキシエトキシ基；ブトキシ基；4-シアノベンジルオキシ基；4-フルオロベンジルオキシ基；4-メトキシベンジルオキシ基；3-フルオロベンジルオキシ基；2-フルオロベンジルオキシ基；2-ナフチルメトキシ基；4-ニトロ-2-フルオロフェノキシ基；ベンゼンエトキシ基；1-ピリジンメトキシ基；4-ピリジンメトキシ基；2-フリルメトキシ基；2-ピラニルメトキシ基であり；
R11はHであることを特徴とする請求項3又は4に記載の化合物。
【請求項６】
下記一般式IVに示された構造を有する化合物であって、
【化５】
2010520240.tif 000061
その中、X、R3〜R8、Y、R10〜R11の定義は請求項4の記載通りであり；
R9はC2-C6アルケニル基；C1-C2カルバルコキシ基；C3-C6シクロアルキル基、又はO、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基；フェニル基、ナフチル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルコキシル基に置換されたフェニル基；ベンジル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルコキシル基に置換されたベンジル基；ハロゲン原子、カルボキシ基、フェニル基又は置換フェニル基、ベンジル基又は置換ベンジル基、O、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基、C3-C6シクロアルキル基、O、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基、又はヒドロキシ基に置換されたC1-C13アルキル基；O、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基、又はベンゾのO、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基；カルボキシ基、ぎ酸メチル基、又はぎ酸エチル基を含有するC1-C4アルキル基；又はCH2OR13であり；
その中、R13はフェニル基、又はハロゲン原子、C1-C6アルコキシル基、ヒドロキシ基に置換されたフェニル基；ベンジル基、又はハロゲン原子、C1-C6アルコキシル基、ヒドロキシ基に置換されたベンジル基；チアゾール基、フリル基、チオフェン基、ピラニル基、ピリジン基、ベンゾチアゾール基、ベンゾチオフェン基、ナフチル基；C3-C6シクロアルキル基、又はO、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基であり；
WはCO、CO-CO、CO-NH又はCO-NR9’であり；
その中、R9’はC2-C6アルケニル基；C1-C2カルバルコキシ基；C3-C6シクロアルキル基、又はO、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基；フェニル基、ナフチル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルコキシル基に置換されたフェニル基；ベンジル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルコキシル基に置換されたベンジル基；ハロゲン原子、カルボキシ基、フェニル基又は置換フェニル基、ベンジル基又は置換ベンジル基、O、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基、C3-C6シクロアルキル基、O、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基、又はヒドロキシ基に置換されたC1-C13アルキル基；O、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基、又はベンゾのO、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基；カルボキシ基、ぎ酸メチル基、又はぎ酸エチル基を含有するC1-C4アルキル基；又はCH2OR13であり；
その中、R13はフェニル基、又はハロゲン原子、C1-C6アルコキシル基、ヒドロキシ基に置換されたフェニル基；ベンジル基、又はハロゲン原子、C1-C6アルコキシル基、ヒドロキシ基に置換されたベンジル基；チアゾール基、フリル基、チオフェン基、ピラニル基、ピリジン基、ベンゾチアゾール基、ベンゾチオフェン基、ナフチル基；C3-C6シクロアルキル基、又はO、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基である、請求項4に記載の化合物。
【請求項７】
下記一般式V又はVIに示された構造を有する化合物であって、
【化６】
2010520240.tif 000062
その中、X、Y、W、R3〜R8、R9、R10〜R11の定義は請求項6の記載通りである、請求項6に記載の化合物。
【請求項８】
下記一般式VIIに示された構造を有する化合物であって、
【化７】
2010520240.tif 000063
その中、X、Y、R3〜R8、R9、R10〜R11の定義は請求項7の記載通りであり；
R9’はC2-C6アルケニル基；C1-C2カルバルコキシ基；C3-C6シクロアルキル基、又はO、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基；フェニル基、ナフチル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルコキシル基に置換されたフェニル基；ベンジル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルコキシル基に置換されたベンジル基；ハロゲン原子、カルボキシ基、フェニル基又は置換フェニル基、ベンジル基又は置換ベンジル基、O、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基、C3-C6シクロアルキル基、O、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基、又はヒドロキシ基に置換されたC1-C13アルキル基；O、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基、又はベンゾのO、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基；カルボキシ基、ぎ酸メチル基、又はぎ酸エチル基を含有するC1-C4アルキル基；又はCH2OR13であり；
その中、R13はフェニル基、又はハロゲン原子、C1-C6アルコキシル基、ヒドロキシ基に置換されたフェニル基；ベンジル基、又はハロゲン原子、C1-C6アルコキシル基、ヒドロキシ基に置換されたベンジル基；チアゾール基、フリル基、チオフェン基、ピラニル基、ピリジン基、ベンゾチアゾール基、ベンゾチオフェン基、ナフチル基；C3-C6シクロアルキル基、又はO、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基である、請求項6に記載の化合物。
【請求項９】
R3はH又はフェニル基であり；
R4、R5、R6とR7はそれぞれ独立にH、C1-C4アルキル基であり、その中H又はメチル基が好ましく；
R8はカルボキシ基、ぎ酸メチル基、又はぎ酸エチル基を含有するC1-C4アルキル基であり、その中ぎ酸エチル基又はカルボキシ基が好ましく；
R9はC2-C6アルケニル基；C1-C2カルバルコキシ基；C3-C6シクロアルキル基、又はO、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基；フェニル基、ナフチル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルコキシル基に置換されたフェニル基；ベンジル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルコキシル基に置換されたベンジル基；ハロゲン原子、カルボキシ基、フェニル基又は置換フェニル基、ベンジル基又は置換ベンジル基、O、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基、C3-C6シクロアルキル基、O、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基、又はヒドロキシ基に置換されたC1-C13アルキル基；O、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基、又はベンゾのO、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基；カルボキシ基、ぎ酸メチル基、又はぎ酸エチル基を含有するC1-C4アルキル基であり；
Yは-CH2-であり；
WはCOであり；
R10はH；ヒドロキシ基；フェニル基；-OCH3；-OCH2CH=CH2；-OCH2COOEt；-OCH2COOH；-OBn；2-ぎ酸エチルエトキシ基；2-ヒドロキシエトキシ基；ブトキシ基；4-シアノベンジルオキシ基；4-フルオロベンジルオキシ基；4-メトキシベンジルオキシ基；3-フルオロベンジルオキシ基；2-フルオロベンジルオキシ基；2-ナフチルメトキシ基；4-ニトロ-2-フルオロフェノキシ基；ベンゼンエトキシ基；1-ピリジンメトキシ基；4-ピリジンメトキシ基；2-フリルメトキシ基；2-ピラニルメトキシ基であり；
R11はHであることを特徴とする請求項6乃至8のいずれかに記載の化合物。
【請求項１０】
下記一般式VIIIに示された構造を有する化合物であって、
【化８】
2010520240.tif 000064
その中、X、Y、R3〜R8、R9、R10〜R11の定義は請求項7の記載通りで、n＝0, 1, 2, 3である、請求項6に記載の化合物。
【請求項１１】
n＝0であり；
R9はC2-C6アルケニル基；C1-C2カルバルコキシ基；C3-C6シクロアルキル基、又はO、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基；フェニル基、ナフチル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルコキシル基に置換されたフェニル基；ベンジル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルコキシル基に置換されたベンジル基；ハロゲン原子、カルボキシ基、フェニル基又は置換フェニル基、ベンジル基又は置換ベンジル基、O、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基、C3-C6シクロアルキル基、O、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基、又はヒドロキシ基に置換されたC1-C13アルキル基；O、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基、又はベンゾのO、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基；カルボキシ基、ぎ酸メチル基、又はぎ酸エチル基を含有するC1-C4アルキル基であることを特徴とする請求項10に記載の化合物。
【請求項１２】
前記化合物は、
【化９ａ】
2010520240.tif 000065
【化９ｂ】
2010520240.tif 000066
【化９ｃ】
2010520240.tif 000067
【化９ｄ】
2010520240.tif 000068
【化９ｅ】
2010520240.tif 000069
【化９ｆ】
2010520240.tif 000070
である、請求項1に記載の化合物。
【請求項１３】
前記化合物は、
【化１０】
2010520240.tif 000071
であることを特徴とする請求項12に記載の化合物。
【請求項１４】
以下のステップを含む方法であって、
ステップ1：下記化学反応式により、
【化１１】
2010520240.tif 000072
Hantzsch法により、芳香環類化合物4を得て；
ステップ2：下記化学反応式により、
【化１２】
2010520240.tif 000073
芳香環類化合物4を対応するアルデヒド5に還元させ；得られたアルデヒド5をグリニャール試薬と反応させて、対応する第二級アルコール6を得る；得られた第二級アルコール6が対応するケトン7に酸化される；得られたケトン7をWittig-Horner試薬と反応させて、シス型又はトランス型立体配置のα, β-不飽和カルボン酸エチル類化合物8を得る；
ステップ3：下記化学反応式により、
【化１３】
2010520240.tif 000074
ステップ2と同じ方法を用いて、共役二重結合に置換されたシス型又はトランス型立体配置の芳香環類化合物12を得る；
ステップ4：下記化学反応式により、
【化１４】
2010520240.tif 000075
化合物12におけるR13基の保護基を除去し、対応するR9COOH、R9COCl、R9COCOOH、R9NH2又はR9COC(PPh3)CNとカップリングさせ、化合物Iを得る；
その中、R9COOH、R9COCl又はR9COCOOHとカップリングする場合、反応の溶媒はジクロロメタンである；R9NH2とカップリングする場合、反応の溶媒はテトラヒドロフランであり、カルボニルジイミダゾールの作用により反応させる；R9COC(PPh3)CNとカップリングする場合、反応の溶媒はジクロロメタンであり、オゾン化の条件で反応させる；
以上の四つのステップにおいて、X、R1、R3〜R8の定義は請求項1の記載通りであり、Y、R10〜R11の定義は請求項3の記載通りであり；
R13はフェニル基、又はハロゲン原子、C1-C6アルコキシル基、ヒドロキシ基に置換されたフェニル基；ベンジル基、又はハロゲン原子、C1-C6アルコキシル基、ヒドロキシ基に置換されたベンジル基；チアゾール基、フリル基、チオフェン基、ピラニル基、ピリジン基、ベンゾチアゾール基、ベンゾチオフェン基、ナフチル基；C3-C6シクロアルキル基、又はO、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基である請求項1に記載の化合物の調製方法。
【請求項１５】
インスリン抵抗性改善薬として、PTP1Bによる疾病、特にII型糖尿病と肥満症の予防、遅延又は治療ための薬物の調製における、請求項1に記載の化合物の用途。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、PTP1B阻害剤に関し、より詳しくは、プロティンチロシンホスファターゼ1B（PTP1B）阻害剤としての新規な小分子有機化合物に関し、また該阻害剤の調製方法と、インスリン抵抗性改善薬としての、PTP1Bによる疾病、特にII型糖尿病と肥満症の予防、遅延又は治療ための薬物における用途に関する。
【背景技術】
【０００２】
糖尿病（Diabetes Mellitus）は、遺伝因子と環境因子の相互作用による臨床症候群であり、インスリン分泌の絶対または相対的不足及びターゲット組織細胞のインスリンに対する感受性の低下の原因で、糖、タンパク質、脂肪、水と電解質など一連の代謝障害を引き起す。臨床においては高血糖を主な共同症状とし、長く罹る場合、失明、心脳血管疾病、腎不全など多種類の合併症を引き起こし、病状が重くなる場合及びストレスの場合に、例えばケトアシドーシス等の急性代謝障害を引き起こす可能性がある。糖尿病及びその合併症は、すでに人類の健康を脅す世界的な公衆衛生問題になっている。
【０００３】
糖尿病は、I型糖尿病（インスリン依存型糖尿病、IDDM）とII型糖尿病（インスリン非依存型糖尿病、NIDDM）と2種類に分けられる。I型糖尿病の患者は、6番染色体短腕上のHLA-D遺伝子が遺伝子感受性を決めているので、環境因子に対する反応が異常であり、自己免疫反応によりランゲルハンス島ｂ細胞の破壊を引き起こし、その結果インスリン絶対的不足になる。患者はインスリンの治療に依存して生命を維持しなければならない。90％以上のII型糖尿病の病因は、インスリン分泌の相対的不足とインスリン抵抗性であり、また、強い遺伝性を持つ同時に、顕著な異質性を示し、その発症メカニズムは多様且つ複雑であり、患者によって大きな相違が存在する。
【０００４】
II型糖尿病に伴うインスリン感受性組織においてのインスリンに対する感受性の低下、即ちインスリン抵抗性の原因は、インスリンシグナルが伝達の過程で低下又は乱れることによって、筋肉、肝臓及び脂肪組織中の糖脂質代謝平衡失調を引き起すことである。インスリンシグナル経路のシグナル伝達において、体液へ分泌されたインスリンは、先にインスリン感受性細胞上のインスリン受容体（IR）サブユニットと結合し、IRがダイマー（dimer）を形成した後、サブユニットが自己リン酸化により活性点のチロシンをリン酸化させ、IRサブユニットのプロティンチロシンキナーゼ（protein tyrosine kinase, PTK）を活性化させた後、例えばインスリン受容体基質1-4（insulin receptor substrate, IRS）のようなSH2構造ドメインを含有するアダプタータンパク質がIRのSH2結合部位に集まられ、次にPI3Kが活性化された後、糖代謝経路の下流においてのPKB、GLUT4が更に活性化され、生体内の糖脂質代謝が開始される。このシグナル伝達の過程において、１つの重要な制御メカニズムはIR、IRS及びその他の下流分子のプロティンチロシンリン酸化を可逆調節し（White M.F., Kahn C.R.; J. Bio. Chem., 1996, 269, 1-4）、活性化されたリン酸化IRは内在化し、小胞体へ移動してPTP1Bのような特定のチロシンホスファターゼ（PTPase）に脱リン酸化されることにより失活し、インスリンシグナルが終止される。これによって、特定のPTPasesとインスリン経路中のPTK間の酵素活性のアンバランスは、II型糖尿病のインスリン抵抗性を引き起こす原因であると考えられる。したがって、該経路中のPTPasesと選択的に作用する阻害剤を探しその活性を阻害することにより、インスリンシグナルを強化と延長することは、II型糖尿病治療の新しいルートとして重視されている。
【０００５】
PTPasesとして、たくさん膜貫通受容体型と細胞内非受容体型酵素が挙げられる。細胞内型プロティンチロシンホスファターゼ1B（PTP1B）は、最初純化されかつ生物学特性を確定されたPTPasesであり、その全長が約50 kDaであり、C末端にカットされた35個アミノ酸の疎水性断片があり、該断片がPTP1Bを小胞体に定位させている（Frangioni J.V., Beahm P.H., Shifrin V., et al.; Cell, 1992, 68, 544-560）。小胞体に定位されたPTP1Bは、受容体型キナーゼIR、EGFR （epidermal growth factor receptor）とPDGFR（platelet-derived growth factor receptor）と相互作用することにより脱リン酸化させている（Boute N., Boubekeur S., Lacasa D., et al.; EMBO Rep., 2003, 4(3), 313-319; Haj F.G., Verveer P.J., Squire A., et al.; Science, 2002, 295(5560), 1708-1711）。
【０００６】
実験データからPTP1Bは、IRのキナーゼ活性とIRSのリン酸化レベルの負の調節過程において重要な役割を果たすことが示された（Johnson T.O., Ermolieff J., Jirouesk M.R.; Nat. Rev. Drug disc., 2002, 1(9), 696-709）。PTP1Bはインスリン感受性組織に広く発現し、また、インスリン抵抗性の肥満群と齧歯類動物の骨格筋と脂肪細胞におけるタンパク質発現とホスファターゼ活性は対照群より高く、PTP1Bはインスリン抵抗性の病理的過程の中で重要な作用を発揮した可能性があることを示している（Ahmad F., Azevedo J.L., Cortright R., et al.; J. Clin. Invest., 1997, 100(2), 449-458; Ahmad F., Considine R.V., Bauer T.L., et al.; Metabolism, 1997, 46(10), 1140-1145）。アデノウイルス介在で遺伝子トランスフェクション法を使用し、L6筋肉細胞とFao細胞の中でPTP1Bを高く発現し、インスリンに誘導されたIRとIRS-1のリン酸化レベルを明らかに抑制できるので、その下流経路の伝達及び最終のグリコーゲン合成を抑制することができる（Egawa K. et al.; J. Biol. Chem., 276(13), 10207-10211）。Ahmadらは、PTP1Bの特異性中和型抗体でラットの肝臓細胞KRC-7を処理し、細胞内PTP1B活性に対する抗体の阻害により、インスリンシグナル経路の感受性を高めることができ、IRとIRS-1のリン酸化レベル及びその下流経路のPI3Kの活性も明らかに向上できることを発見した（Ahmad F., et al.; J. Biol. Chem., 1995, 170(35), 20503-20508）。
【０００７】
より重要な実験証拠はPTP1B遺伝子ノックアウトマウスからである。Elcheblyらは、相同組換え法で得られたPTP1B遺伝子ノックアウトマウスが正常の生理状態を維持し、インスリンに対する感受性も著しく強化され、これが肝臓と骨格筋中のIR及びIRS1リン酸化レベルの向上と関連していることが報告された（Elchebly M., et al.; Science, 283, 1544-1548）。驚くことは、PTP1B遺伝子ノックアウトマウスが食物に誘導された体重増加とインスリン抵抗性に対しても一定の抵抗能力を持つことである。これは脂肪細胞の体積が減少されたが、脂肪細胞の数が変わらず、生体内のエネルギー代謝速度が向上しているからである（Klaman L. D., et al. Mol. Cell. Bio., 20(15), 5479-5489）。これはPTP1Bがインスリン感受性、エネルギー消耗と脂肪貯蔵の面で重要な作用を有することを実証している。
【０００８】
ヒトゲノム研究の進展に伴って、多くの遺伝学の証拠からPTP1Bはインスリン抵抗性、肥満及びII型糖尿病などの疾病と関連することが示されている。ヒトのプロティンチロシンホスファターゼ1B（hPTP1B）遺伝子は、人の染色体の20q13.1-13.2に位置し、10つのエクソンを含有し、前の9つのエクソンのみを含有する形式及びすべての10つのエクソンを含有する形式といった二つの剪断形式が存在し、二つの形式の発現がすべてインスリンシグナル自身の制御を受ける（Forsell P.A., Boie Y., Montalibet T., et al.; Gene, 2003, 260(1-2), 145-153）。研究から網膜の脂肪組織中のPTP1Bは過剰発現であり、且つその活性が高すぎる場合、該組織のインスリン感受性が低下することにより、全身のインスリン抵抗性を引き起こすことが発見された（Wu X.D., et al.; J. Clin. Endocrinol Metab, 2001, 86, 5973-5980）。いくつか人群においては、PTP1BのmRNA安定性を高める1つの挿入突然変異により、PTP1Bの発現量を高め、該人群においては、インスリン抵抗性及びトリアシルグリセロールと高密度リポタンパク質（high-density lipoprotein, HDL）の向上を伴うことが見られた（Echwald S.M., et al.; Diabetes, 2002, 51, 1-6）。また、珍しいPro387/Leuの1つの突然変異により、PTP1B制御の序列にあるSerがリン酸化されず、全体レベルのPTP1Bの酵素活性が高くなり、該人群のII型糖尿病の罹患率は正常の人より3.7倍高いことが見られた（Echwald S.M., et al.; Diabetes, 2002, 51, 1-6）。OJI-OREE人群においては、8番目のエクソンにある981T/981Cの一塩基多型（single nucleotide polymorphism, SNP）を発見し、該人群のII型糖尿病の罹患率と耐糖能異常（impaired glucose tolerance, IGT）は正常の人群より42％低く、そのメカニズムは全体レベルのPTP1Bの酵素活性が低いからである（Di Paoia R., et al.; Am. J. Hum. Genet., 2002,70, 806-812）。
【０００９】
上述したように、PTP1Bは糖尿病と肥満症を治療する新しい潜在ターゲットであり、インスリン感受性組織においてのPTP1B活性を阻害することにより、糖尿病と肥満症の治療を著しく改善することができる。したがって、PTP1B特異性の阻害剤を探すことは、高い実用価値を持っている。
【００１０】
PTP1Bの選択的阻害剤の研究は一定の進展があるが、例えばPTP1B脱リン酸化基質の序列に基づいて設計した阻害剤EEDE(F2PMP)M（Ki = 7.2 nM）、Glu-F2PMP-F2PMP（IC50 = 40 nM）などいくつかペプチド類あるいはペプトイド類の化合物に限られ、これらのペプチド類阻害剤は、強い阻害活性と高い選択性を有するが、これらがペプチド類リン酸化合物であるゆえに、薬物の候補化合物になり難い。最近、一連の非ペプチド類非リン酸化合物類のPTP1B阻害剤は一定の選択性を有し、最も重要なのは、その中のいくつか化合物がob/obマウス血漿中のグルコースとインスリンの低下に対して著しい作用を有することが報道されている。これは第1例の薬理学の直接証拠であり、PTP1B阻害剤が抗糖尿病活性を有することを実証している（Malamas, M. S., et al. J. Med. Chem., 2000, 43, 1293-1310）。これらは高い効率、高い選択性のPTP1B阻害剤として、新しい小分子の非ペプチド類有機化合物を探す可能性を与えている。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明の目的は、PTP1B阻害剤として小分子の有機化合物を提供することにある。
本発明のもう一つの目的は、該化合物の調製方法を提供することにある。
本発明のもう一つの目的は、インスリン抵抗性改善薬としての該化合物の、PTP1Bによる疾病、特にII型糖尿病と肥満症の予防、遅延又は治療のための薬物における用途を提供することにある。
【００１２】
前記目的を実現するために、本発明は下記構造式Iに示された構造を持つ化合物を提供する。
【００１３】
【化１】
2010520240.tif 000003
【００１４】
その中、XはS、O、NH又はCH=CHであり；
R1はOCOR9、OCOCOR9、NHCOR9、NHCOCOR9、NHCONHR9、
【００１５】
【化２】
2010520240.tif 000004
【００１６】
又はCH2R9であり、
R9とR9’はそれぞれ独立にC2-C6アルケニル基；C1-C2カルバルコキシ基；C3-C6シクロアルキル基、又はO、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基；フェニル基、ナフチル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルコキシル基に置換されたフェニル基；ベンジル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルコキシル基に置換されたベンジル基；ハロゲン原子、カルボキシ基、フェニル基又は置換フェニル基、ベンジル基又は置換ベンジル基、O、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基；C3-C6シクロアルキル基、O、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基、又はヒドロキシ基に置換されたC1-C13アルキル基；O、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基、又はベンゾのO、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基；カルボキシ基、ぎ酸メチル基、又はぎ酸エチル基を含有するC1-C4アルキル基；又はCH2OR13であり、
R13はフェニル基、又はハロゲン原子、C1-C6アルコキシル基、ヒドロキシ基に置換されたフェニル基；ベンジル基、又はハロゲン原子、C1-C6アルコキシル基、ヒドロキシ基に置換されたベンジル基；チアゾール基、フリル基、チオフェン基、ピラニル基、ピリジン基、ベンゾチアゾール基、ベンゾチオフェン基、ナフチル基；C3-C6シクロアルキル基、又はO、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基であり、
R2はH；ハロゲン原子；C2-C6アルケニル基；C1-C2カルバルコキシ基；C3-C6シクロアルキル基、ハロゲン原子又はカルボキシ基に置換されたC3-C6シクロアルキル基、又はO、N、S原子に置換された5員又は6員シクロアルキル基；フェニル基、ナフチル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルコキシル基に置換されたフェニル基；ベンジル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルコキシル基に置換されたベンジル基；ハロゲン原子、カルボキシ基、フェニル基又は置換フェニル基、ベンジル基又は置換ベンジル基、O、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基、C3-C6シクロアルキル基、O、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基、又はヒドロキシ基に置換されたC1-C13アルキル基；O、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基、又はベンゾのO、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基；カルボキシ基、ぎ酸メチル基、又はぎ酸エチル基を含有するC1-C4アルキル基；アリール基又は置換アリール基に置換されたメルカプト基、オキシ基、アミノ基、C1-C6アルキル基又はC2-C6アルケニル基であり、
R3はH；ハロゲン原子；C2-C6アルケニル基；C1-C2カルバルコキシ基；C3-C6シクロアルキル基、ハロゲン原子又はカルボキシ基に置換されたC3-C6シクロアルキル基、又はO、N、S原子に置換された5員又は6員シクロアルキル基；フェニル基、ナフチル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルコキシル基に置換されたフェニル基；ベンジル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルコキシル基に置換されたベンジル基；ハロゲン原子、カルボキシ基又はヒドロキシ基に置換されたC1-C13アルキル基；O、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基、又はベンゾのO、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基；カルボキシ基、ぎ酸メチル基、又はぎ酸エチル基を含有するC1-C4アルキル基であり、その中H又はフェニル基が好ましい；
R4、R5、R6とR7はそれぞれ独立にH；ハロゲン原子；C2-C6アルケニル基；C3-C6シクロアルキル基；フェニル基又はハロゲン化フェニル基；ベンジル基；ハロゲン原子、C1-C6アルコキシル基又はヒドロキシ基に置換されたC1-C13アルキル基；カルボキシ基、ぎ酸メチル基、又はぎ酸エチル基を含有するC1-C4アルキル基であり、その中H又はメチル基が好ましい；
その中、R4とR5はそれぞれ二重結合の同じ側又は反対側に位置し；R6とR7はそれぞれ二重結合の同じ側又は反対側に位置し、
R8はカルボキシ基、ぎ酸メチル基、又はぎ酸エチル基を含有するC1-C4アルキル基であり、その中ぎ酸エチル基又はカルボキシ基が好ましい。
特に、R3はH又はフェニル基であることが好ましい。R4、R5、R6とR7はそれぞれ独立にH、C1-C4アルキル基であることが好ましく、H又はメチル基がより好ましい。R8はカルボキシ基、ぎ酸メチル基、又はぎ酸エチル基を含有するC1-C4アルキル基であることが好ましく、ぎ酸エチル基又はカルボキシ基がより好ましい。
【００１７】
本発明に関する化合物は、下記構造式IIに示された構造を持っている。
【００１８】
【化３】
2010520240.tif 000005
【００１９】
その中、X、R1、R3〜R8の定義は、化合物Iの定義通りであり、
YはS、O、NH；C1-C6アルキル基；C2-C6アルケニル基であり、
R10はH；ハロゲン原子；ヒドロキシ基；C2-C6アルケニル基；ハロゲン原子、C1-C6アルコキシル基、フェニル基、ベンジルオキシ基、ヒドロキシ基に置換されたC1-C13アルキル基；フェニル基、ナフチル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルキル基又はアルコキシル基に置換されたフェニル基；ベンジル基、又はハロゲン原子、C1-C6アルキル基又はアルコキシル基に置換されたベンジル基；カルボキシ基、ぎ酸メチル基、又はぎ酸エチル基を含有するC1-C4アルキル基；OCH2R12又はOR12であり、
その中、R12はH；C2-C6アルケニル基；ハロゲン原子、C1-C6アルコキシル基、フェニル基、ヒドロキシ基に置換されたC1-C13アルキル基；カルボキシ基、ぎ酸メチル基、又はぎ酸エチル基を含有するC1-C4アルキル基；チアゾール基、フリル基、チオフェン基、ピラニル基、ピリジン基、ベンゾチアゾール基、ベンゾチオフェン基、ナフチル基；ベンジル基；フェニル基、又はハロゲン原子、C1-C6アルコキシル基、ヒドロキシ基に置換されたフェニル基；C3-C6シクロアルキル基、又はO、N、S原子に置換された5員又は6員シクロアルキル基であり、
具体的に、R10はH；-OH；フェニル基；-OCH3; -OCH2CH=CH2; -OCH2COOEt ; -OCH2COOH ; -OBn；2-ぎ酸エチルエトキシ基；2-ヒドロキシエトキシ基；ブトキシ基；4-シアノベンジルオキシ基；4-フルオロベンジルオキシ基；4-メトキシベンジルオキシ基；3-フルオロベンジルオキシ基；2-フルオロベンジルオキシ基；2-ナフチルメトキシ基；4-ニトロ-2-フルオロフェノキシ基；ベンゼンエトキシ基；1-ピリジンメトキシ基；4-ピリジンメトキシ基；2-フリルメトキシ基；2-ピラニルメトキシ基であり、
R11はH；ヒドロキシ基；ハロゲン原子；C1-C6アルキル基；C1-C6アルコキシル基であり、その中Hが好ましい。
【００２０】
本発明に関する化合物は、下記構造式IIIに示された構造を持っている。
【００２１】
【化４】
2010520240.tif 000006
【００２２】
その中、X、R1、R3〜R8、Y、R10〜R11の定義は化合物IIの通りである。
特に、前記構造式IIとIIIにおいて、
Yは-CH2-であることが好ましく、
R10はH；ヒドロキシ基；フェニル基；-OCH3；-OCH2CH=CH2；-OCH2COOEt；-OCH2COOH；-OBn；2-ぎ酸エチルエトキシ基；2-ヒドロキシエトキシ基；ブトキシ基；4-シアノベンジルオキシ基；4-フルオロベンジルオキシ基；4-メトキシベンジルオキシ基；3-フルオロベンジルオキシ基；2-フルオロベンジルオキシ基；2-ナフチルメトキシ基；4-ニトロ-2-フルオロフェノキシ基；ベンゼンエトキシ基；1-ピリジンメトキシ基；4-ピリジンメトキシ基；2-フリルメトキシ基；2-ピラニルメトキシ基であり、
R11はHであることが好ましい。
【００２３】
本発明に関する化合物は、下記構造式IVに示された構造を持っている。
【００２４】
【化５】
2010520240.tif 000007
【００２５】
その中、X、R3〜R8、Y、R10〜R11の定義は化合物IIIの通りであり、
R9はC2-C6アルケニル基；C1-C2カルバルコキシ基；C3-C6シクロアルキル基、又はO、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基；フェニル基、ナフチル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルコキシル基に置換されたフェニル基；ベンジル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルコキシル基に置換されたベンジル基；ハロゲン原子、カルボキシ基、フェニル基又は置換フェニル基、ベンジル基又は置換ベンジル基、O、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基、C3-C6シクロアルキル基、O、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基、又はヒドロキシ基に置換されたC1-C13アルキル基；O、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基、又はベンゾのO、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基；カルボキシ基、ぎ酸メチル基、又はぎ酸エチル基を含有するC1-C4アルキル基；又はCH2OR13であり、
R13はフェニル基、又はハロゲン原子、C1-C6アルコキシル基、ヒドロキシ基に置換されたフェニル基；ベンジル基、又はハロゲン原子、C1-C6アルコキシル基、ヒドロキシ基に置換されたベンジル基；チアゾール基、フリル基、チオフェン基、ピラニル基、ピリジン基、ベンゾチアゾール基、ベンゾチオフェン基、ナフチル基；C3-C6シクロアルキル基、又はO、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基であり、
WはCO、CO-CO、CO-NH又はCO-NR9’であり、
その中、R9’はC2-C6アルケニル基；C1-C2カルバルコキシ基；C3-C6シクロアルキル基、又はO、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基；フェニル基、ナフチル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルコキシル基に置換されたフェニル基；ベンジル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルコキシル基に置換されたベンジル基；ハロゲン原子、カルボキシ基、フェニル基又は置換フェニル基、ベンジル基又は置換ベンジル基、O、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基、C3-C6シクロアルキル基、O、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基、又はヒドロキシ基に置換されたC1-C13アルキル基；O、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基、又はベンゾのO、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基；カルボキシ基、ぎ酸メチル基、又はぎ酸エチル基を含有するC1-C4アルキル基；又はCH2OR13であり、
その中、R13はフェニル基、又はハロゲン原子、C1-C6アルコキシル基、ヒドロキシ基に置換されたフェニル基；ベンジル基、又はハロゲン原子、C1-C6アルコキシル基、ヒドロキシ基に置換されたベンジル基；チアゾール基、フリル基、チオフェン基、ピラニル基、ピリジン基、ベンゾチアゾール基、ベンゾチオフェン基、ナフチル基；C3-C6シクロアルキル基、又はO、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基である。
【００２６】
本発明に関する化合物は、下記構造式V又はVIに示された構造を持っている。
【００２７】
【化６】
2010520240.tif 000008
【００２８】
その中、X、W、Y、R3〜R8、R9、R10〜R11の定義は化合物IVの通りである。
本発明に関する化合物は、下記構造式VIIに示された構造を持っている。
【００２９】
【化７】
2010520240.tif 000009
【００３０】
その中、X、Y、R3〜R8、R9、R10〜R11の定義は化合物V又はVIの通りであり、
R9’はC2-C6アルケニル基；C1-C2カルバルコキシ基；C3-C6シクロアルキル基、又はO、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基；フェニル基、ナフチル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルコキシル基に置換されたフェニル基；ベンジル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルコキシル基に置換されたベンジル基；ハロゲン原子、カルボキシ基、フェニル基又は置換フェニル基、ベンジル基又は置換ベンジル基、O、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基、C3-C6シクロアルキル基、O、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基、又はヒドロキシ基に置換されたC1-C13アルキル基；O、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基、又はベンゾのO、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基；カルボキシ基、ぎ酸メチル基、又はぎ酸エチル基を含有するC1-C4アルキル基；又はCH2OR13であり、
その中、R13はフェニル基、又はハロゲン原子、C1-C6アルコキシル基、ヒドロキシ基に置換されたフェニル基；ベンジル基、又はハロゲン原子、C1-C6アルコキシル基、ヒドロキシ基に置換されたベンジル基；チアゾール基、フリル基、チオフェン基、ピラニル基、ピリジン基、ベンゾチアゾール基、ベンゾチオフェン基、ナフチル基；C3-C6シクロアルキル基、又はO、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基である。
【００３１】
特に、構造式IV〜VIIにおいて、
R3はH又はフェニル基であることが好ましい。
R4、R5、R6とR7はそれぞれ独立にH、C1-C4アルキル基であることが好ましく、H又はメチル基がより好ましい。
【００３２】
R8はカルボキシ基、ぎ酸メチル基、又はぎ酸エチル基を含有するC1-C4アルキル基であることが好ましく、ぎ酸エチル基又はカルボキシ基がより好ましい。
R9はC2-C6アルケニル基；C1-C2カルバルコキシ基；C3-C6シクロアルキル基、又はO、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基；フェニル基、ナフチル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルコキシル基に置換されたフェニル基；ベンジル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルコキシル基に置換されたベンジル基；ハロゲン原子、カルボキシ基、フェニル基又は置換フェニル基、ベンジル基又は置換ベンジル基、O、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基、C3-C6シクロアルキル基、O、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基、又はヒドロキシ基に置換されたC1-C13アルキル基；O、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基、又はベンゾのO、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基；カルボキシ基、ぎ酸メチル基、又はぎ酸エチル基を含有するC1-C4アルキル基である。
【００３３】
Yは-CH2-であることが好ましい。
WはCOであることが好ましい。
R10はH；ヒドロキシ基；フェニル基；-OCH3；-OCH2CH=CH2；-OCH2COOEt；-OCH2COOH；-OBn；2-ぎ酸エチルエトキシ基；2-ヒドロキシエトキシ基；ブトキシ基；4-シアノベンジルオキシ基；4-フルオロベンジルオキシ基；4-メトキシベンジルオキシ基；3-フルオロベンジルオキシ基；2-フルオロベンジルオキシ基；2-ナフチルメトキシ基；4-ニトロ-2-フルオロフェノキシ基；ベンゼンエトキシ基；1-ピリジンメトキシ基；4-ピリジンメトキシ基；2-フリルメトキシ基；2-ピラニルメトキシ基である。
【００３４】
R11はHであることが好ましい。
本発明に関する化合物は、下記構造式VIIIに示された構造を持っている。
【００３５】
【化８】
2010520240.tif 000010
【００３６】
その中、X、Y、R3〜R8、R9、R10〜R11の定義は化合物V又はVIの通りであり、且つR9はC2-C6アルケニル基；C1-C2カルバルコキシ基；C3-C6シクロアルキル基、又はO、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基；フェニル基、ナフチル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルコキシル基に置換されたフェニル基；ベンジル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルコキシル基に置換されたベンジル基；ハロゲン原子、カルボキシ基、フェニル基又は置換フェニル基、ベンジル基又は置換ベンジル基、O、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基、C3-C6シクロアルキル基、O、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基、又はヒドロキシ基に置換されたC1-C13アルキル基；O、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基、又はベンゾのO、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基；カルボキシ基、ぎ酸メチル基、又はぎ酸エチル基を含有するC1-C4アルキル基であるが好ましい。
【００３７】
n＝0、1、2、3であり、その中0であることが好ましい。
本発明に関する化合物は、
【００３８】
【化９ａ】
2010520240.tif 000011
【００３９】
【化９ｂ】
2010520240.tif 000012
【００４０】
【化９ｃ】
2010520240.tif 000013
【００４１】
【化９ｄ】
2010520240.tif 000014
【００４２】
【化９ｅ】
2010520240.tif 000015
【００４３】
であることが好ましく、
【００４４】
【化１０】
2010520240.tif 000016
【００４５】
であることがより好ましい。
本発明は、更に前記化合物の調製方法を提供している。該方法は以下のステップを含む。
【００４６】
ステップ1：下記化学反応式により、
【００４７】
【化１１】
2010520240.tif 000017
【００４８】
ジクロロメタンを溶媒として、カルボン酸類化合物1と第一級アミンの塩酸塩2を室温でカップリング反応させ、化合物3を生成する；次にテトラヒドロフランを溶媒として、還流の条件下で、Lawssen試薬により化合物3を閉環させて、XがSであるチアゾール芳香環類化合物4を生成する；又はオキシ塩化リンによりXがOであるオキサゾール芳香環類化合物4を生成する；又は酢酸と酢酸ナトリウムによりXがNHであるイミダゾール芳香環類化合物4を生成する。
【００４９】
ステップ2：下記化学反応式により、
【００５０】
【化１２】
2010520240.tif 000018
【００５１】
ジクロロメタンを溶媒として、-78℃の条件で、水素化ジイソブチルアルミニウムを使用して、ぎ酸エチルに置換された芳香環類化合物4を対応するアルデヒド5に還元させる；次にテトラヒドロフランを溶媒として、室温又は加熱の条件で、ホルムアルデヒドに置換された芳香環類化合物5をグリニャール試薬と反応させ、対応する第二級アルコール6を得る；更にトルエンとジメチルスルホキシドを溶媒として、50℃の条件で、第二級アルコール6をIBXによって酸化させ対応するケトン7を生成する；最後にテトラヒドロフランを溶媒として、0℃から室温までの条件下で、ケトン類化合物7をWittig-Horner試薬と反応させ、シス型又はトランス型立体配置のα, β-不飽和カルボン酸エチル類化合物8を得る。
【００５２】
ステップ3：下記化学反応式により、
【００５３】
【化１３】
2010520240.tif 000019
【００５４】
テトラヒドロフランを溶媒として、0℃から室温までの条件下で、α, β-不飽和カルボン酸エチル類化合物8を水素化リチウムアルミニウムに還元されて対応するアルコールを生成し、更にトルエンとジメチルスルホキシドを溶媒として、50℃の条件で、IBXによって酸化させて対応するアルデヒド9を生成する；次にテトラヒドロフランを溶媒として、室温又は加熱の条件で、α, β-不飽和アルデヒド9をグリニャール試薬と反応させ、対応する第二級アルコール10を得る；更にトルエンとジメチルスルホキシドを溶媒として、50℃の条件で、第二級アルコール10をIBXによって酸化させて対応するケトン11を生成する；最後にテトラヒドロフランを溶媒として、0℃から室温までの条件下で、ケトン類化合物11をWittig-Horner試薬と反応させ、共役二重結合に置換されたシス型又はトランス型立体配置の芳香環類化合物12を得る。
【００５５】
ステップ4：下記化学反応式により、
【００５６】
【化１４】
2010520240.tif 000020
【００５７】
化合物12においてのR13基の保護基を除去し、ジクロロメタンを溶媒として、対応するR9COOH、R9COCl又はR9COCOOHとカップリングさせる；又はテトラヒドロフランを溶媒として、カルボニルジイミダゾールによりR9NH2とカップリングさせる；又はジクロロメタンを溶媒として、オゾン化の条件でR9COC(PPh3)CNと反応させ、化合物Iを得る。
以上の四つのステップにおいて、X、R1、R3〜R9、R13の定義は化合物Iの場合と同様であり、Y、R10〜R12の定義は化合物IIの場合と同様である。
【００５８】
R13はNHBoc又はOTBSであることが好ましい。
前記反応の反応時間は、具体的な反応物により決められる。通常TLCを用いて反応の進行具合を測定し、反応が終わった後、一般に使用される後処理方法は、吸引ろ過、反応液を濃縮して溶媒を除去すること、再結晶、抽出、カラムクロマトグラフィー分離などが挙げられる。最終産物は核磁気共鳴スペクトルで測定される。
【００５９】
本発明で提案している新型トリアゾール縮合複素環のPTP1B阻害剤は、生体外実験においてPTP1Bの活性を有効的に阻害でき、PTP1Bによる疾病、特にII型糖尿病と肥満症の予防、遅延又は治療ための薬物の調製に用いられる。
【図面の簡単な説明】
【００６０】
【図１】図1は、WY586sがCHO/IR細胞内インスリン受容体のリン酸化レベルに対する影響を示す図であり、化合物WY586sの最終濃度が0.21、0.43、0.85、1.70μMの四つの濃度であり、溶媒DMSOを陰性対照（0で表示）として、バナジン酸ナトリウムを陽性化合物（Vで表示）とする場合、インスリン受容体のリン酸化レベルに対する影響（p-IR）を示し、IRβはインスリン受容体のβサブユニットであり、インスリン受容体のバックグラウンド発現レベルを代表している。
【発明を実施するための最良の形態】
【００６１】
以下の実施例を参照しながら本発明を更に詳しく説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
以下の調製例において、NMRは、Varianに製造されたMercury-Vx 300M型機で測定され、NMRスケーリング：δH/C 7.26/77.23 ppm（CDCl3）、試薬は主に上海化学試薬会社から提供され、製品の精製に関しては、主にカラムクロマトグラフィー法を使用し、シリカゲルは200-300メッシュであり、カラムクロマトグラフィー法に用いられるシリカゲルの型番は粗空（ZLX-II）であり、青島海洋化学工場の支工場により生産されたものである。
【００６２】
実施例1
【００６３】
【化１５】
2010520240.tif 000021
【００６４】
ステップ1：
55mmolチロシンを100mL水と100mL の1,4-ジオキサンの中に懸濁させ、110mmolトリエチルアミンを添加し、1時間反応させ、更に83mmolの(Boc)2Oを入れ、20時間反応させて回転蒸発させた。氷水で希釈し、酢酸エチルで抽出洗浄し、水性相でpHを2に調整し、酢酸エチルで抽出した。濃縮産物を100mLDMEの中に溶解させ、0.22molイミダゾールを入れ、10分間撹拌した後、0.1molの TBSClを入れて一晩反応させた。氷水でクエンチし、エーテルで抽出して濃縮させ、化合物14を得た（収率80%）。
【００６５】
32mmolの化合物14を200mL再蒸留DMEに溶解させ、-13℃下で32mmolのN-メチルモルホリンと32mmolクロロぎ酸イソブチルを入れ、室温で1時間反応させてから、4時間アンモニアガスを流し、氷水でクエンチし、クロロホルムで抽出した。濃縮産物を200mL再蒸留DMEに溶解させ、16mmolのLawesson試薬を入れて5時間反応させ、氷水でクエンチし、pHを8に調整し、ジクロロメタンで抽出して回転蒸発させ、カラムにより化合物15を得た（収率80%）。
【００６６】
1mmol化合物15と8mmol炭酸水素カリウムを10mL再蒸留DMEに溶解させ、15分間反応させてから、3mmolのα-ブロモプロピオン酸エチルを入れ、3時間反応させ、0℃下でトリフルオロ酢酸無水物（4mmol）と2,6-ジメチルピリジン（8mmol）の5mL DME溶液を滴下し、5時間反応させた。回転によりDMEを除去し、水で洗浄し、酢酸エチルで抽出して回転蒸発させ、カラムにより化合物16を得た（収率90%）。
【００６７】
ステップ2：
化合物16（7.5mmol）を50mLジクロロメタンに溶解させ、-78℃下でDIBAL-H（19mmol）のノルマルヘキサン溶液（19mL）を滴下し、10時間反応させ、アセトンでクエンチし、室温までに昇温した。20％酒石酸カリウムナトリウムを入れて10時間撹拌し、酢酸エチルで抽出して濃縮し、カラムにより化合物17を得た（収率70%）。
【００６８】
6mmolホスホネート(EtO)2P(O)CH(CH3)CO2Etを10mL無水THFに溶解させ、7mmolのNaHを入れ、30分間反応させ、氷浴下で3mmol化合物17のTHF溶液を入れ、室温で4時間反応させ、氷水でクエンチし、酢酸エチルで抽出して濃縮し、カラムにより化合物18を得た（収率82%）。
【００６９】
ステップ3：
0.5mmol水素化リチウムアルミニウムを20mL無水THFに溶解させ、0.5mmol化合物18のTHF溶液10mLを入れ、1時間反応させ、氷水でクエンチし、酢酸エチルで抽出し、濃縮産物を次の反応に導入した。1mmol塩化オキサリルを2mLジクロロメタンに溶解させ、-78℃までに冷却した後、ジメチルスルホキシド（2mmol）のジクロロメタン溶液を入れ、30分間撹拌し、化合物20（0.5mmol）のジクロロメタン溶液を滴下し、8時間反応させ、3mmolトリエチルアミンを入れ、室温で10時間撹拌し、氷水を入れ、ジクロロメタンで抽出して濃縮させ、カラムにより化合物19を得た（収率70%）。
【００７０】
27mmolの18-クラウンエーテル-6と5.5mmolホスホネート(CF3CH2O)2P(O)CH(CH3)CO2Etを10mL無水THFに溶解させ、-78℃までに冷却し、カリウムヘキサメチルシラジド溶液5.5mmolを入れ、1時間反応させ、化合物19（1.3mmol）のTHF溶液5mLを入れ、2時間反応させ、飽和塩化アンモニウム溶液でクエンチし、室温までに昇温し、氷水で希釈し、酢酸エチルで抽出して濃縮させ、カラムにより化合物20を得た（収率90%）。
【００７１】
ステップ4：
0.05mmol化合物20を再蒸留THFに溶解させ、0.075mmolフッ化テトラ-n-ブチルアンモニウムを滴下し、2時間反応させた。回転により溶媒を除去し、0.5mmol無水炭酸カリウムと2mL DMFを入れ、0.25mmolベンジルブロミドを滴下し、一晩反応させた。氷水でクエンチし、酢酸エチルで抽出して濃縮させ、カラムにより化合物21を得た（収率80%）。
【００７２】
0.05mmol化合物21を2mLジクロロメタンの中に溶解させ、0.75mLトリフルオロ酢酸を滴下し、2時間反応させ、回転により溶媒とトリフルオロ酢酸を除去し、中間体を使う。イリドCH3(CH2)3COC(PPh3)CN（0.1mmol）を10mL無水ジクロロメタンの中に溶解させ、-78℃までに冷却し、体系が青色になるまでオゾンを流し、前の化合物21から得られた中間体のジクロロメタン溶液を入れ、1時間反応させ、回転により溶媒を除去し、酸化銀（0.5mmol）のTHF/H2O溶液（0.4mL/0.1mL）を入れ、一晩反応させ、氷水でクエンチし、ジクロロメタンで抽出して濃縮させ、石油エーテル：酢酸エチル＝4：1のカラムにより、化合物22を得た（収率20-50%）。
【００７３】
【化１６】
2010520240.tif 000022
【００７４】
1H NMR (CDCl3, 300 MHz)データ：δ 0.91 (t, 3H), 1.27 (t, 3H), 1.32 (m, 2H), 1.57 (m, 2H), 2.03 (s, 3H), 2.15 (s, 3H), 2.88 (t, 2H), 3.25 (d, 2H), 4.21 (q, 2H), 5.21 (s, 2H), 5.42 (q, 1H), 6.27 (s, 1H), 6.47 (s, 1H), 6.84 (d, 2H), 6.99 (s, 1H), 7.01 (d, 2H), 7.33-7.42 (5H), 7.65 (d, 1H).
実施例2〜13
実施例1と類似する方法で表1-1中の実施例2〜13の最終産物を得た。
【００７５】
【表１−１ａ】
2010520240.tif 000023
【００７６】
【表１−１ｂ】
2010520240.tif 000024
【００７７】
【表１−１ｃ】
2010520240.tif 000025
【００７８】
実施例14
【００７９】
【化１７】
2010520240.tif 000026
【００８０】
化合物21の調製方法は実施例1と同じである。
0.05mmol化合物21を1mLジクロロメタンに溶解させ、0.3mLトリフルオロ酢酸を滴下し、2時間反応させ、回転により溶媒とトリフルオロ酢酸を除去した。0.06mmol F3CCOOH、0.12mmol EDCI、0.01mmol DMAPと2mLDMFを入れ、一晩反応させ、氷水でクエンチし、酢酸エチルで抽出して濃縮させ、石油エーテル：酢酸エチル＝4：1のカラムにより、化合物23を得た（収率50-90%）。
【００８１】
【化１８】
2010520240.tif 000027
【００８２】
1H NMR (CDCl3, 300 MHz)データ：δ 1.26 (t, 3H), 2.04 (s, 3H), 2.17 (s, 3H), 3.26 (dq, 2H) , 4.21 (q, 2H), 5.02 (s, 2H), 5.47 (q, 1H), 6.27 (s, 1H), 6.48 (s, 1H), 6.88 (d, 2H), 6.98 (d, 2H), 7.04 (s, 1H), 7.32-7.44 (5H), 7.48 (d, 1H).
実施例15〜35
実施例14と類似する方法で表1-2中の実施例15〜34の最終産物を得た。
【００８３】
【表１−２ａ】
2010520240.tif 000028
【００８４】
【表１−２ｂ】
2010520240.tif 000029
【００８５】
【表１−２ｃ】
2010520240.tif 000030
【００８６】
【表１−２ｄ】
2010520240.tif 000031
【００８７】
実施例36
【００８８】
【化１９】
2010520240.tif 000032
【００８９】
化合物20の調製方法は実施例1と同じである。
0.05mmol化合物20を1mLジクロロメタンの中に溶解させ、0.3mLトリフルオロ酢酸を滴下し、2時間反応させ、回転により溶媒とトリフルオロ酢酸を除去した。0.056mmolシクロヘキサンカルボン酸、0.12mmol EDCI、0.01mmol DMAPと2mLDMFを入れ、一晩反応させ、氷水でクエンチし、酢酸エチルで抽出して濃縮し、カラムにより化合物24を得た（収率80%）。
【００９０】
0.04mmol化合物24を1mLのTHFに溶解させ、0.06mmolフッ化テトラ-n-ブチルアンモニウムを滴下し、2時間反応させた。回転により溶媒を除去し、0.5mmol無水炭酸カリウムと2mL DMFを入れ、CH3Iを滴下し、一晩反応させた。氷水でクエンチし、酢酸エチルで抽出して濃縮し、石油エーテル：酢酸エチル＝4：1のカラムにより、化合物25を得た（収率60-95%）。
【００９１】
【化２０】
2010520240.tif 000033
【００９２】
1H NMR (CDCl3, 300 MHz)データ：δ 1.27 (t, 3H), 1.30-1.44 (4H), 1.66-1.81 (6H), 2.02 (s, 3H), 2.07 (m, 1H), 2.14 (s, 3H), 3.22 (m, 2H) , 3.76 (s, 3H), 4.21 (q, 2H), 5.52 (q, 1H), 6.23 (d, 1H), 6.27 (s, 1H), 6.47 (s, 1H), 6.76 (d, 2H), 6.96 (d, 2H), 6.98 (s, 1H).
実施例37〜55
実施例35と類似する方法で表1-3中の実施例36〜54の最終産物を得た。
【００９３】
【表１−３ａ】
2010520240.tif 000034
【００９４】
【表１−３ｂ】
2010520240.tif 000035
【００９５】
【表１−３ｃ】
2010520240.tif 000036
【００９６】
【表１−３ｄ】
2010520240.tif 000037
【００９７】
実施例56
【００９８】
【化２１】
2010520240.tif 000038
【００９９】
化合物20の調製方法は実施例1と同じである。
0.05mmol化合物20を1mLジクロロメタンに溶解させ、0.3mLトリフルオロ酢酸を滴下し、2時間反応させ、回転により溶媒とトリフルオロ酢酸を除去した。0.125mmolトリフルオロメタンスルホン酸無水物、0.15mmol DMAPと2mLのCH2Cl2を入れ、一晩反応させ、濃縮して化合物26を得た（収率100%）。
【０１００】
0.04mmol化合物26、0.004mmolテトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム、0.06mmol無水炭酸カリウムとホウ酸を2mL再蒸留トルエンに溶解させ、50℃で一晩反応させた。氷水でクエンチし、酢酸エチルで抽出して濃縮し、石油エーテル：酢酸エチル＝4：1のカラムにより、化合物27を得た（収率60-90%）。
【０１０１】
【化２２】
2010520240.tif 000039
【０１０２】
1H NMR (CDCl3, 300 MHz)データ：δ 1.27 (t, 3H), 1.30-1.44 (4H), 1.66-1.80 (6H), 2.03 (s, 3H), 2.07 (m, 1H), 2.13 (s, 3H), 3.20 (dd, 2H) , 4.21 (q, 2H), 5.56 (q, 1H), 6.27 (br, 2H), 6.46 (br, 1H), 7.02 (s, 1H), 7.15 (br, 4H).
実施例57
実施例56と類似する方法で表1-4中の実施例56の最終産物を得た。
【０１０３】
【表１−４】
2010520240.tif 000040
【０１０４】
実施例58
【０１０５】
【化２３】
2010520240.tif 000041
【０１０６】
化合物25の調製方法は実施例36と同じである。
0.2mmol化合物25を5mLジクロロメタンの中に溶解させ、氷晶浴を行い、1.2mmol三塩化ホウ素トリフルオロ酢酸を滴下し、3時間反応させた。氷水でクエンチし、酢酸エチルで抽出して濃縮し、石油エーテル：酢酸エチル＝4：1のカラムにより、化合物28を得た（収率50-80%）。
【０１０７】
【表１−５】
2010520240.tif 000042
【０１０８】
実施例59
【０１０９】
【化２４】
2010520240.tif 000043
【０１１０】
化合物17の調製方法は実施例1と同じである。
化合物18’、化合物19’と化合物20’の調製方法は、実施例1における化合物18、化合物19と化合物20の調製を参照した。
【０１１１】
0.05mmol化合物20’を1mLジクロロメタンの中に溶解させ、0.3mLトリフルオロ酢酸を滴下し、2時間反応させ、回転により溶媒とトリフルオロ酢酸を除去した。0.056mmolシクロヘキサンカルボン酸、0.12mmol EDCI、0.01mmol DMAPと2mL DMFを入れ、一晩反応させ、氷水でクエンチし、酢酸エチルで抽出して濃縮し、カラムを通った。前記得られた化合物を1mL THFに溶解させ、0.075mmolフッ化テトラ-n-ブチルアンモニウムを滴下し、2時間反応させた。回転により溶媒を除去し、0.5mmol無水炭酸カリウムと2mL DMFを入れ、0.25mmolベンジルブロミドを滴下し、一晩反応させた。氷水でクエンチし、酢酸エチルで抽出して濃縮し、石油エーテル：酢酸エチル＝4：1のカラムにより、化合物29を得た（収率50-80%）。
【０１１２】
【表１−６】
2010520240.tif 000044
【０１１３】
実施例60
【０１１４】
【化２５】
2010520240.tif 000045
【０１１５】
化合物21の調製方法は実施例1と同じである。
0.05mmol化合物21を1mLジクロロメタンの中に溶解させ、0.3mLトリフルオロ酢酸を滴下し、2時間反応させ、回転により溶媒とトリフルオロ酢酸を除去した。0.06mmolのR9NHR9’を1mL THFに溶解させ、0.06mmolカルボニルジイミダゾールを入れ、2時間撹拌し、前記産物のTHF溶液（0.5mL）を入れ、一晩還流反応させた。回転により溶媒を除去し、石油エーテル：酢酸エチル＝4：1のカラムにより、化合物30を得た（収率50-90%）。
【０１１６】
【表１−７】
2010520240.tif 000046
【０１１７】
実施例61
【０１１８】
【化２６】
2010520240.tif 000047
【０１１９】
50mmol化合物13を水酸化ナトリウム溶液（100mmol/50mL）に溶解させ、1.5時間撹拌し、硫酸銅（25mmol/25mL）溶液を滴下し、30分間撹拌し、メタノールを入れ、氷浴で51mmolベンジルブロミドを滴下し、室温で3時間反応させてから、吸引ろ過し、2N HClで洗浄して真空乾燥した。得られた産物を、100mL水と100mL の1,4-ジオキサンに懸濁し、110mmolトリエチルアミンを入れ、1時間反応させ、また75mmol (Boc)2Oを入れ、20時間反応させてから、回転蒸発した。氷水で希釈し、酢酸エチルで抽出し、水性相でpHを2に調製し、酢酸エチルで抽出して濃縮させ、化合物31を得た（収率80%）。
【０１２０】
12mmol化合物31と10mmol CH3COC(COOEt)NH2HCl、12mmol EDCI、2mmol DMAP及び20mmolピリジンを50mLジクロロメタンの中に溶解させ、一晩反応させた。氷水で希釈し、酢酸エチルで抽出して濃縮させ、カラムにより、化合物32を得た（収率70%）。
【０１２１】
1mmol化合物32と1.5mmol Lawssen試薬を10mL THFの中に溶解させ、一晩還流反応させた。回転により溶媒を除去し、カラムにより、化合物33を得た（収率60-95%）。
化合物33から化合物34を得る方法は、実施例1における化合物16から化合物20を得る方法を参照した。
【０１２２】
化合物34から化合物35を得る方法は、実施例14における化合物21から化合物23を得る方法を参照した。
【０１２３】
【表１−８】
2010520240.tif 000048
【０１２４】
実施例62
【０１２５】
【化２７】
2010520240.tif 000049
【０１２６】
0.02mmol化合物36と0.08mmol水酸化リチウムを、水とジオキサン（0.5mL/0.5mL）の混合溶媒の中に溶解させ、一晩還流反応させた。pH値を2に調製し、酢酸エチルで抽出して濃縮し、化合物37を得た（収率100%）。
【０１２７】
【表１−９】
2010520240.tif 000050
【０１２８】
実験実施例1：PTP1B阻害活性の測定
１）測定原理：分子生物学手段を利用し、大腸菌システムにおいてhPTP1Bの触媒構造ドメインを発現し、精製された後のhPTP1B組換え蛋白質が基質pNPPのリン脂質結合を加水分解でき、得られた産物は410nmで強い光吸収性を有するので、410nmで光吸収の変化を直接測定することにより、酵素の活性変化及び化合物の酵素活性に対する阻害状況を観察することができる。標準の活性測定体系は、50 mM Mops、PH 7.0、1 mM EDTA、2 mM DTT、2 mM PNPP、2% DMSO、40 nM hPTP1Bである。
【０１２９】
【化２８】
2010520240.tif 000051
【０１３０】
２）観察指標
波長が410 nmである光吸収を動態測定し、時間は3分であり、その動力学的曲線一次反応の傾きを酵素の活性指標とした。
【０１３１】
３）サンプルテスト
１、1 mgサンプルを200μL DMSOの中に溶解させた。20μLを取って96穴ポリプロピレンプレートのA2-H11サンプル穴に入れ、次に80μL DMSOを入れ、マザーボードとした。２、Biomek 2000サンプル自動分注装置を用い、2μLサンプルを取って96穴ポリスチレンプレートの対応するサンプル穴に入れ、スクリーニング用ドーターボードとした。３、A1-D1、E12-H12の中に2μL DMSOを入れて百パーセントの酵素活性対照とした。４、A12-D12、E1-H1の中に2μLの異なる濃度の陽性対照物（10μL/mLで2倍希釈した4つの濃度)を入れた。５、A1-H12にそれぞれ88μL Assay mixを入れた。６、A1-H12の中にそれぞれ10μL hPTP1Bを入れた。７、SpectraMAX 340において410 nmでの光吸収を測定し、時間は3分であった。８、データをテキストファイルに出力した後、Excel方式で開き、A1-D1、E12-H12 のVmaxの平均値を100％酵素活性とした。化合物のPTP1Bに対する阻害率は以下の式により得られた。
【０１３２】
% 阻害率=(1 - 各スクリーニング穴のVmax値/ 空白対照Vmax平均値)＊100%
４）テスト結果
スクリーニング結果は、化合物の濃度が20μg/mLである場合、酵素活性に対するパーセント阻害率であり、阻害活性が50％より高い場合、通常のスクリーニングによりIC50を求め、陽性対照である4-[4-(4-オキサリル基-フェノキシメチル基)-ベンジルオキシ基]-フェニルグリオキシル酸（4-[4-(4-oxalyl-phenoxymethyl)-benzyloxy]-phenyl-oxo-acetic acid）のIC50は、5.4 μM［Christopher T. Seto, et al. J. Med. Chem., 2002, 45, 3946-3952］であった。各テスト化合物のhPTP1B阻害のIC50値は表2の通りである。
【０１３３】
【化２９】
2010520240.tif 000052
【０１３４】
【表２ａ】
2010520240.tif 000053
【０１３５】
【表２ｂ】
2010520240.tif 000054
【０１３６】
【表２ｃ】
2010520240.tif 000055
【０１３７】
【表２ｄ】
2010520240.tif 000056
【０１３８】
実験実施例2：化合物WY586sのCHO/IR細胞内のIRリン酸化レベルに対する影響の実験
一、実験原理：インスリン感受性細胞内のインスリン受容体IRのリン酸化レベルは、PTKとPTPaseの厳密な制御を受け、この過程においてPTP1Bは、負の制御因子の作用を発揮している。CHO/IR細胞内におけるIRリン酸化レベルの変化を測定することにより、PTP1B阻害剤が細胞に進入しているか否か及び細胞内でのその作用効果を判断することができる。
【０１３９】
二、実験方法
１、細胞接種：3-4×105細胞/穴の密度で成長状態良好な細胞を6穴プレートに接種し、各穴に10% FBSを含むF12培地2 mLを入れた。２、飢餓：24時間培養した後、2mL無血清F12培地で12時間一晩培養した。３、投与：元の培地を除去し、化合物を含む無血清F12培地0.9mLを入れ、2〜4時間培養した。それぞれ1mMのNa3VO4と0.1%のDMSOを陽性と陰性対照とした。４、インスリン刺激：穴あたり100nMインスリン100μLを入れることにより、終濃度を10nMにさせ、10分間作用した。５、サンプルの収集：培地を除去し、穴あたり150μL×1のローディングバッファーを入れ、細胞を溶解し、サンプルを収集した。
【０１４０】
三、実験結果
本実験は、WY586sがCHO/IR細胞内インスリン受容体のリン酸化レベルに対する影響を測定するためのものであり、測定された化合物WY586sに対して、その終濃度を0.21μM、0.43μM、0.85μM、1.70μMの四つの濃度に設定し、溶媒DMSOを陰性対照として（0で表示）、バナジン酸ナトリウムを陽性化合物とした（Vで表示）。図1に示すように、p-IRはリン酸化のインスリン受容体で、インスリン受容体の活性レベルを代表している；IRβはインスリン受容体のβサブユニットで、インスリン受容体のバックグラウンド発現レベルを代表している；βアクチベータータンパク質を内部参考ものとして、総負荷量を代表している。化合物WY586sに対する研究から、阻害剤濃度の向上に従い、IRのリン酸化レベルが明らかに向上する傾向を有することが示された。これにより、WY586sは、細胞内でIRの脱リン酸化過程において阻害効果を発揮し、細胞のインスリンに対する感受性を高めることができ、該種類化合物はインスリン増加の作用を有し、ある程度でインスリン抵抗性を軽減できることが示唆されている。
【図１】
2010520240.tif 000077
【手続補正書】
【提出日】平成20年7月18日(2008.7.18)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式Iに示された構造を有する化合物であって、
【化１】
2010520240.tif 000078
その中、XはS、O、NH又はCH=CHであり；
R1はOCOR9、OCOCOR9、NHCOR9、NHCOCOR9、NHCONHR9、
【化２】
2010520240.tif 000079
又はCH2R9であり；
その中、R9とR9’はそれぞれ独立にC2-C6アルケニル基；C1-C2カルバルコキシ基；C3-C6シクロアルキル基、又はO、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基；フェニル基、ナフチル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルコキシル基に置換されたフェニル基；ベンジル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルコキシル基に置換されたベンジル基；ハロゲン原子、カルボキシ基、フェニル基又は置換フェニル基、ベンジル基又は置換ベンジル基、O、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基、C3-C6シクロアルキル基、O、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基、又はヒドロキシ基に置換されたC1-C13アルキル基；O、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基、又はベンゾのO、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基；カルボキシ基、ぎ酸メチル基、又はぎ酸エチル基を含有するC1-C4アルキル基；又はCH2OR13であり、
R13はフェニル基、又はハロゲン原子、C1-C6アルコキシル基、ヒドロキシ基に置換されたフェニル基；ベンジル基、又はハロゲン原子、C1-C6アルコキシル基、ヒドロキシ基に置換されたベンジル基；チアゾール基、フリル基、チオフェン基、ピラニル基、ピリジン基、ベンゾチアゾール基、ベンゾチオフェン基、ナフチル基；C3-C6シクロアルキル基、又はO、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基であり；
R2はH；ハロゲン原子；C2-C6アルケニル基；C1-C2カルバルコキシ基；C3-C6シクロアルキル基、ハロゲン原子又はカルボキシ基に置換されたC3-C6シクロアルキル基、又はO、N、S原子に置換された5員又は6員シクロアルキル基；フェニル基、ナフチル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルコキシル基に置換されたフェニル基；ベンジル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルコキシル基に置換されたベンジル基；ハロゲン原子、カルボキシ基、フェニル基又は置換フェニル基、ベンジル基又は置換ベンジル基、O、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基、C3-C6シクロアルキル基、O、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基、又はヒドロキシ基に置換されたC1-C13アルキル基；O、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基、又はベンゾのO、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基；カルボキシ基、ぎ酸メチル基、又はぎ酸エチル基を含有するC1-C4アルキル基；アリール基又は置換アリール基に置換されたメルカプト基、オキシ基、アミノ基、C1-C6アルキル基又はC2-C6アルケニル基であり；
R3はH；ハロゲン原子；C2-C6アルケニル基；C1-C2カルバルコキシ基；C3-C6シクロアルキル基、ハロゲン原子又はカルボキシ基に置換されたC3-C6シクロアルキル基、又はO、N、S原子に置換された5員又は6員シクロアルキル基；フェニル基、ナフチル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルコキシル基に置換されたフェニル基；ベンジル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルコキシル基に置換されたベンジル基；ハロゲン原子、カルボキシ基又はヒドロキシ基に置換されたC1-C13アルキル基；O、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基、又はベンゾのO、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基；カルボキシ基、ぎ酸メチル基、又はぎ酸エチル基を含有するC1-C4アルキル基であり；
R4、R5、R6とR7はそれぞれ独立にH；ハロゲン原子；C2-C6アルケニル基；C3-C6シクロアルキル基；フェニル基又はハロゲン化フェニル基；ベンジル基；ハロゲン原子、C1-C6アルコキシル基又はヒドロキシ基に置換されたC1-C13アルキル基；カルボキシ基、ぎ酸メチル基、又はぎ酸エチル基を含有するC1-C4アルキル基であり；
その中、R4とR5はそれぞれ二重結合の同じ側又は反対側に位置し、R6とR7はそれぞれ二重結合の同じ側又は反対側に位置し；
R8はカルボキシ基、ぎ酸メチル基、又はぎ酸エチル基である。
【請求項２】
R3はH又はフェニル基であり；
R4、R5、R6とR7はそれぞれ独立にH、C1-C4アルキル基であり、その中H又はメチル基が好ましく；
R8はカルボキシ基、ぎ酸メチル基、又はぎ酸エチル基であり、その中ぎ酸エチル基又はカルボキシ基が好ましい、請求項1に記載の化合物。
【請求項３】
下記一般式IIに示された構造を有する化合物であって、
【化３】
2010520240.tif 000080
その中、X、R1、R3〜R8の定義は、請求項1の記載通りであり；
YはS、O、NH；C1-C6アルキル基；C2-C6アルケニル基であり；
R10はH；ハロゲン原子；ヒドロキシ基；C2-C6アルケニル基；ハロゲン原子、C1-C6アルコキシル基、フェニル基、ベンジルオキシ基、ヒドロキシ基に置換されたC1-C13アルキル基；フェニル基、ナフチル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルキル基又はアルコキシル基に置換されたフェニル基；ベンジル基、又はハロゲン原子、C1-C6アルキル基又はアルコキシル基に置換されたベンジル基；カルボキシ基、ぎ酸メチル基、又はぎ酸エチル基を含有するC1-C4アルキル基；OCH2R12又はOR12であり；
R12はH；C2-C6アルケニル基；ハロゲン原子、C1-C6アルコキシル基、フェニル基、ヒドロキシ基に置換されたC1-C13アルキル基；カルボキシ基、ぎ酸メチル基、又はぎ酸エチル基を含有するC1-C4アルキル基；チアゾール基、フリル基、チオフェン基、ピラニル基、ピリジン基、ベンゾチアゾール基、ベンゾチオフェン基、ナフチル基；ベンジル基；フェニル基、又はハロゲン原子、C1-C6アルコキシル基、ヒドロキシ基に置換されたフェニル基；C3-C6シクロアルキル基、又はO、N、S原子に置換された5員又は6員シクロアルキル基であり；
R11はH；ヒドロキシ基；ハロゲン原子；C1-C6アルキル基；C1-C6アルコキシル基である、請求項1に記載の化合物。
【請求項４】
下記一般式IIIに示された構造を有する化合物であって、
【化４】
2010520240.tif 000081
その中、X、R1、R3〜R8、Y、R10〜R11の定義は請求項3の記載通りである、請求項3に記載の化合物。
【請求項５】
Yは-CH2-であり；
R10はH；ヒドロキシ基；フェニル基；-OCH3；-OCH2CH=CH2；-OCH2COOEt；-OCH2COOH；-OBn；2-ぎ酸エチルエトキシ基；2-ヒドロキシエトキシ基；ブトキシ基；4-シアノベンジルオキシ基；4-フルオロベンジルオキシ基；4-メトキシベンジルオキシ基；3-フルオロベンジルオキシ基；2-フルオロベンジルオキシ基；2-ナフチルメトキシ基；4-ニトロ-2-フルオロフェノキシ基；ベンゼンエトキシ基；1-ピリジンメトキシ基；4-ピリジンメトキシ基；2-フリルメトキシ基；2-ピラニルメトキシ基であり；
R11はHであることを特徴とする請求項3又は4に記載の化合物。
【請求項６】
下記一般式IVに示された構造を有する化合物であって、
【化５】
2010520240.tif 000082
その中、X、R3〜R8、Y、R10〜R11の定義は請求項4の記載通りであり；
R9はC2-C6アルケニル基；C1-C2カルバルコキシ基；C3-C6シクロアルキル基、又はO、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基；フェニル基、ナフチル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルコキシル基に置換されたフェニル基；ベンジル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルコキシル基に置換されたベンジル基；ハロゲン原子、カルボキシ基、フェニル基又は置換フェニル基、ベンジル基又は置換ベンジル基、O、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基、C3-C6シクロアルキル基、O、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基、又はヒドロキシ基に置換されたC1-C13アルキル基；O、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基、又はベンゾのO、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基；カルボキシ基、ぎ酸メチル基、又はぎ酸エチル基を含有するC1-C4アルキル基；又はCH2OR13であり；
その中、R13はフェニル基、又はハロゲン原子、C1-C6アルコキシル基、ヒドロキシ基に置換されたフェニル基；ベンジル基、又はハロゲン原子、C1-C6アルコキシル基、ヒドロキシ基に置換されたベンジル基；チアゾール基、フリル基、チオフェン基、ピラニル基、ピリジン基、ベンゾチアゾール基、ベンゾチオフェン基、ナフチル基；C3-C6シクロアルキル基、又はO、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基であり；
WはCO、CO-CO、CO-NH又はCO-NR9’であり；
その中、R9’はC2-C6アルケニル基；C1-C2カルバルコキシ基；C3-C6シクロアルキル基、又はO、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基；フェニル基、ナフチル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルコキシル基に置換されたフェニル基；ベンジル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルコキシル基に置換されたベンジル基；ハロゲン原子、カルボキシ基、フェニル基又は置換フェニル基、ベンジル基又は置換ベンジル基、O、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基、C3-C6シクロアルキル基、O、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基、又はヒドロキシ基に置換されたC1-C13アルキル基；O、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基、又はベンゾのO、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基；カルボキシ基、ぎ酸メチル基、又はぎ酸エチル基を含有するC1-C4アルキル基；又はCH2OR13であり；
その中、R13はフェニル基、又はハロゲン原子、C1-C6アルコキシル基、ヒドロキシ基に置換されたフェニル基；ベンジル基、又はハロゲン原子、C1-C6アルコキシル基、ヒドロキシ基に置換されたベンジル基；チアゾール基、フリル基、チオフェン基、ピラニル基、ピリジン基、ベンゾチアゾール基、ベンゾチオフェン基、ナフチル基；C3-C6シクロアルキル基、又はO、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基である、請求項4に記載の化合物。
【請求項７】
下記一般式V又はVIに示された構造を有する化合物であって、
【化６】
2010520240.tif 000083
その中、X、Y、W、R3〜R8、R9、R10〜R11の定義は請求項6の記載通りである、請求項6に記載の化合物。
【請求項８】
下記一般式VIIに示された構造を有する化合物であって、
【化７】
2010520240.tif 000084
その中、X、Y、R3〜R8、R9、R10〜R11の定義は請求項7の記載通りであり；
R9’はC2-C6アルケニル基；C1-C2カルバルコキシ基；C3-C6シクロアルキル基、又はO、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基；フェニル基、ナフチル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルコキシル基に置換されたフェニル基；ベンジル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルコキシル基に置換されたベンジル基；ハロゲン原子、カルボキシ基、フェニル基又は置換フェニル基、ベンジル基又は置換ベンジル基、O、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基、C3-C6シクロアルキル基、O、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基、又はヒドロキシ基に置換されたC1-C13アルキル基；O、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基、又はベンゾのO、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基；カルボキシ基、ぎ酸メチル基、又はぎ酸エチル基を含有するC1-C4アルキル基；又はCH2OR13であり；
その中、R13はフェニル基、又はハロゲン原子、C1-C6アルコキシル基、ヒドロキシ基に置換されたフェニル基；ベンジル基、又はハロゲン原子、C1-C6アルコキシル基、ヒドロキシ基に置換されたベンジル基；チアゾール基、フリル基、チオフェン基、ピラニル基、ピリジン基、ベンゾチアゾール基、ベンゾチオフェン基、ナフチル基；C3-C6シクロアルキル基、又はO、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基である、請求項6に記載の化合物。
【請求項９】
R3はH又はフェニル基であり；
R4、R5、R6とR7はそれぞれ独立にH、C1-C4アルキル基であり、その中H又はメチル基が好ましく；
R8はカルボキシ基、ぎ酸メチル基、又はぎ酸エチル基であり、その中ぎ酸エチル基又はカルボキシ基が好ましく；
R9はC2-C6アルケニル基；C1-C2カルバルコキシ基；C3-C6シクロアルキル基、又はO、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基；フェニル基、ナフチル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルコキシル基に置換されたフェニル基；ベンジル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルコキシル基に置換されたベンジル基；ハロゲン原子、カルボキシ基、フェニル基又は置換フェニル基、ベンジル基又は置換ベンジル基、O、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基、C3-C6シクロアルキル基、O、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基、又はヒドロキシ基に置換されたC1-C13アルキル基；O、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基、又はベンゾのO、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基；カルボキシ基、ぎ酸メチル基、又はぎ酸エチル基を含有するC1-C4アルキル基であり；
Yは-CH2-であり；
WはCOであり；
R10はH；ヒドロキシ基；フェニル基；-OCH3；-OCH2CH=CH2；-OCH2COOEt；-OCH2COOH；-OBn；2-ぎ酸エチルエトキシ基；2-ヒドロキシエトキシ基；ブトキシ基；4-シアノベンジルオキシ基；4-フルオロベンジルオキシ基；4-メトキシベンジルオキシ基；3-フルオロベンジルオキシ基；2-フルオロベンジルオキシ基；2-ナフチルメトキシ基；4-ニトロ-2-フルオロフェノキシ基；ベンゼンエトキシ基；1-ピリジンメトキシ基；4-ピリジンメトキシ基；2-フリルメトキシ基；2-ピラニルメトキシ基であり；
R11はHであることを特徴とする請求項6乃至7のいずれかに記載の化合物。
【請求項１０】
下記一般式VIIIに示された構造を有する化合物であって、
【化８】
2010520240.tif 000085
その中、X、Y、R3〜R8、R9、R10〜R11の定義は請求項7の記載通りで、n＝0, 1, 2, 3である、請求項6に記載の化合物。
【請求項１１】
n＝0であり；
R9はC2-C6アルケニル基；C1-C2カルバルコキシ基；C3-C6シクロアルキル基、又はO、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基；フェニル基、ナフチル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルコキシル基に置換されたフェニル基；ベンジル基、又はハロゲン原子、カルボキシ基、C1-C6アルコキシル基に置換されたベンジル基；ハロゲン原子、カルボキシ基、フェニル基又は置換フェニル基、ベンジル基又は置換ベンジル基、O、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基、C3-C6シクロアルキル基、O、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基、又はヒドロキシ基に置換されたC1-C13アルキル基；O、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基、又はベンゾのO、N、S原子に置換された5員又は6員芳香環基；カルボキシ基、ぎ酸メチル基、又はぎ酸エチル基を含有するC1-C4アルキル基であることを特徴とする請求項10に記載の化合物。
【請求項１２】
前記化合物は、
【化９ａ】
2010520240.tif 000086
【化９ｂ】
2010520240.tif 000087
【化９ｃ】
2010520240.tif 000088
【化９ｄ】
2010520240.tif 000089
【化９ｅ】
2010520240.tif 000090
【化９ｆ】
2010520240.tif 000091
である、請求項1に記載の化合物。
【請求項１３】
前記化合物は、
【化１０】
2010520240.tif 000092
であることを特徴とする請求項12に記載の化合物。
【請求項１４】
以下のステップを含む方法であって、
ステップ1：下記化学反応式により、
【化１１】
2010520240.tif 000093
Hantzsch法により、芳香環類化合物4を得て；
ステップ2：下記化学反応式により、
【化１２】
2010520240.tif 000094
芳香環類化合物4を対応するアルデヒド5に還元させ；得られたアルデヒド5をグリニャール試薬と反応させて、対応する第二級アルコール6を得る；得られた第二級アルコール6が対応するケトン7に酸化される；得られたケトン7をWittig-Horner試薬と反応させて、シス型又はトランス型立体配置のα, β-不飽和カルボン酸エチル類化合物8を得る；
ステップ3：下記化学反応式により、
【化１３】
2010520240.tif 000095
ステップ2と同じ方法を用いて、共役二重結合に置換されたシス型又はトランス型立体配置の芳香環類化合物12を得る；
ステップ4：下記化学反応式により、
【化１４】
2010520240.tif 000096
化合物12におけるR13基の保護基を除去し、対応するR9COOH、R9COCl、R9COCOOH、R9NH2又はR9COC(PPh3)CNとカップリングさせ、化合物Iを得る；
その中、R9COOH、R9COCl又はR9COCOOHとカップリングする場合、反応の溶媒はジクロロメタンである；R9NH2とカップリングする場合、反応の溶媒はテトラヒドロフランであり、カルボニルジイミダゾールの作用により反応させる；R9COC(PPh3)CNとカップリングする場合、反応の溶媒はジクロロメタンであり、オゾン化の条件で反応させる；
以上の四つのステップにおいて、X、R1、R3〜R8の定義は請求項1の記載通りであり、Y、R10〜R11の定義は請求項3の記載通りであり；
R13はフェニル基、又はハロゲン原子、C1-C6アルコキシル基、ヒドロキシ基に置換されたフェニル基；ベンジル基、又はハロゲン原子、C1-C6アルコキシル基、ヒドロキシ基に置換されたベンジル基；チアゾール基、フリル基、チオフェン基、ピラニル基、ピリジン基、ベンゾチアゾール基、ベンゾチオフェン基、ナフチル基；C3-C6シクロアルキル基、又はO、N、S原子に置換されたC3-C6シクロアルキル基である請求項1に記載の化合物の調製方法。
【請求項１５】
インスリン抵抗性改善薬として、PTP1Bによる疾病、特にII型糖尿病と肥満症の予防、遅延又は治療ための薬物の調製における、請求項1に記載の化合物の用途。
【国際調査報告】
2010520240.tif 000097
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