(57)【要約】  本発明は、シクリトールのポリリン酸化誘導体およびピロリン酸誘導体を対象とする。より詳細には、本発明は、イノシトールのポリリン酸化誘導体およびピロリン酸誘導体に関する。本発明はまた、イノシトールのポリリン酸化誘導体およびピロリン酸誘導体およびその他の同様のより親油性の高い誘導体の組成物、ならびにアロステリックエフェクター、細胞シグナル伝達分子類似体、および治療剤としてのそれらの使用にも関する。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
イノシトールがシス−イノシトール、エピ−イノシトール、アロ−イノシトール、ムコ−イノシトール、ネオ−イノシトール、シロ−イノシトール、（＋）カイロ−イノシトール、または（−）カイロ−イノシトールである、イノシトール六リン酸誘導体。
【請求項２】
前記イノシトール誘導体がカチオンと錯体を形成して塩となり、前記カチオンが、アルカリ金属カチオン、アルカリ性金属カチオン、アンモニウムカチオン、または有機カチオンである、請求項１に記載のイノシトール六リン酸誘導体。
【請求項３】
請求項２に記載のイノシトール六リン酸誘導体を含む医薬組成物。
【請求項４】
イノシトールが１つまたは複数の遊離ヒドロキシル基またはヒドロキシル誘導体基を含む、ポリリン酸化イノシトール誘導体。
【請求項５】
前記ヒドロキシル誘導体がアルコキシ（−ＯＲ）またはアシルオキシ（−ＯＣＯＲ）誘導体である、請求項４に記載のイノシトール誘導体。
【請求項６】
Ｒが、アルキル、アリール、アシル、アラルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロシクリル、ポリシクリル、炭素環、アミノ、アシルアミノ、アミド、アルキルチオ、カルボニル、スルホナート、アルコキシル、スルホニル、またはスルホキシドのうち１つまたは複数から選択される、請求項５に記載のイノシトール誘導体。
【請求項７】
前記イノシトール誘導体がカチオンと錯体を形成して塩となり、前記カチオンが、アルカリ金属カチオン、アルカリ性金属カチオン、アンモニウムカチオン、または有機カチオンである、請求項５に記載のイノシトール誘導体。
【請求項８】
請求項７に記載のイノシトール誘導体を含む医薬組成物。
【請求項９】
イノシトールがシス−イノシトール、エピ−イノシトール、アロ−イノシトール、ムコ−イノシトール、ネオ−イノシトール、シロ−イノシトール、（＋）カイロ−イノシトール、または（−）カイロ−イノシトールであり、イノシトール誘導体がモノピロリン酸、ビスピロリン酸、またはトリスピロリン酸誘導体である、ピロリン酸イノシトール誘導体。
【請求項１０】
前記イノシトール誘導体がカチオンと錯体を形成して塩となり、前記カチオンが、アルカリ金属カチオン、アルカリ性金属カチオン、アンモニウムカチオン、または有機カチオンである、請求項９に記載のピロリン酸イノシトール誘導体。
【請求項１１】
請求項１０に記載のピロリン酸誘導体を含む医薬組成物。
【請求項１２】
ミオ−イノシトールがビスピロリン酸を含む、ピロリン酸ミオ−イノシトール誘導体。
【請求項１３】
前記ミオ−イノシトール誘導体がカチオンと錯体を形成して塩となり、前記カチオンが、アルカリ金属カチオン、アルカリ性金属カチオン、アンモニウムカチオン、または有機カチオンである、請求項１２に記載のピロリン酸ミオ−イノシトール誘導体。
【請求項１４】
請求項１３に記載のピロリン酸ミオ−イノシトール誘導体を含む医薬組成物。
【請求項１５】
チオホスホルイミドイノシトール誘導体。
【請求項１６】
前記イノシトール誘導体がカチオンと錯体を形成して塩となり、前記カチオンが、アルカリ金属カチオン、アルカリ性金属カチオン、アンモニウムカチオン、または有機カチオンである、請求項１５に記載のトリスホスホルイミドイノシトール誘導体。
【請求項１７】
請求項１６に記載のトリスホスホルイミドイノシトール誘導体を含む医薬組成物。
【請求項１８】
トリスチオピロリン酸イノシトール誘導体。
【請求項１９】
前記イノシトール誘導体がカチオンと錯体を形成して塩となり、前記カチオンが、アルカリ金属カチオン、アルカリ性金属カチオン、アンモニウムカチオン、または有機カチオンである、請求項１８に記載のトリスチオピロリン酸イノシトール誘導体。
【請求項２０】
請求項１９に記載のトリスチオピロリン酸誘導体を含む医薬組成物。
【請求項２１】
ヒトまたは動物における赤血球に対するヘモグロビンの親和性を減少させる方法であって、前記ヒトまたは動物に、有効量のイノシトールのポリリン酸誘導体またはピロリン酸誘導体を投与するステップを含む方法。
【請求項２２】
前記ポリリン酸誘導体が、シス−イノシトール、エピ−イノシトール、アロ−イノシトール、ムコ−イノシトール、ネオ−イノシトール、シロ−イノシトール、（＋）カイロ−イノシトール、または（−）カイロ−イノシトールの六リン酸誘導体である、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記ポリリン酸誘導体が、１つまたは複数の遊離ヒドロキシル基またはヒドロキシル誘導体基を含む、請求項２１に記載の方法。
【請求項２４】
前記ピロリン酸誘導体が、シス−イノシトール、エピ−イノシトール、アロ−イノシトール、ムコ−イノシトール、ネオ−イノシトール、シロ−イノシトール、（＋）カイロ−イノシトール、または（−）カイロ−イノシトールのトリスピロリン酸エステルである、請求項２１に記載の方法。
【請求項２５】
前記ピロリン酸誘導体がミオ−イノシトール二リン酸である、請求項２１に記載の方法。
【請求項２６】
前記ピロリン酸誘導体がトリスホスホルイミドである、請求項２１に記載の方法。
【請求項２７】
前記ピロリン酸誘導体がトリスチオピロリン酸誘導体である、請求項２１に記載の方法。
【請求項２８】
虚血介在性疾患を治療する方法であって、虚血性疾患に罹患している患者に、治療有効量の請求項１に記載のイノシトール六リン酸誘導体を投与するステップを含む方法。
【請求項２９】
前記虚血介在性疾患が、アルツハイマー病、認知症、脳卒中、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、骨粗鬆症、または成人呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）である、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
血管新生介在性疾患を治療する方法であって、虚血性疾患に罹患している患者に、治療有効量の請求項１に記載のイノシトール六リン酸誘導体を投与するステップを含む方法。
【請求項３１】
前記血管新生介在性疾患が、内皮細胞の過剰もしくは異常刺激（例えば、アテローム性動脈硬化症）、血液由来腫瘍、固形腫瘍および腫瘍転移、良性腫瘍、例えば、血管腫、聴神経腫、神経線維腫、トラコーマおよび化膿性肉芽腫、血管機能不全、異常な創傷治癒、炎症性および免疫障害、ベーチェット病、痛風もしくは痛風性関節炎、糖尿病性網膜症、ならびに未熟児網膜症（水晶体後線維増殖症）、黄斑変性症、角膜移植拒絶反応、血管新生緑内障等の他の眼球血管新生疾患、ならびにＯｓｌｅｒ  Ｗｅｂｅｒ症候群（Ｏｓｌｅｒ−Ｗｅｂｅｒ−Ｒｅｎｄｕ病）、乳癌、前立腺癌、腎細胞癌、脳腫瘍、卵巣癌、結腸癌、膀胱癌、膵癌、胃癌、食道癌、皮膚黒色腫、肝癌、肺癌、精巣癌、腎癌、膀胱癌、子宮頸癌、リンパ腫、副甲状腺癌、陰茎癌、直腸癌、小腸癌、甲状腺癌、子宮癌、ホジキンリンパ腫、口唇および口腔癌、皮膚癌、白血病、または多発性骨髄腫である、請求項３０に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願の相互参照）
本出願は、２００６年１２月２９日に出願された米国仮特許出願第６０／８７７，９７６号の利益を主張するものであり、その内容は、参照により本明細書に組み込まれる。
【０００２】
（発明の分野）
本発明は、シクリトールのポリリン酸化誘導体およびピロリン酸誘導体を対象とする。より詳細には、本発明は、イノシトールのポリリン酸化誘導体およびピロリン酸誘導体に関する。本発明はまた、イノシトールのポリリン酸化誘導体およびピロリン酸誘導体、およびその他の同様のより親油性の高い誘導体の組成物、ならびにアロステリックエフェクター、細胞シグナル伝達分子類似体、および治療剤としてのそれらの使用にも関する。
【背景技術】
【０００３】
概してシクリトール、特にイノシトールは、生体システム中に広範な分布を呈し、これは、生物学的機能におけるその重要性を示唆している。分類として、シクリトールは、すべてのポリヒドロキシル化された同素環分子を包含する。イノシトールは、具体的にはポリヒドロキシル化されたシクロヘキサン誘導体を指す。イノシトールは、多数の既知の配座異性体（すなわち、シス−イノシトール、エピ−イノシトール、アロ−イノシトール、ミオ−イノシトール、ムコ−イノシトール、ネオ−イノシトール、シロ−イノシトール、およびカイロ−イノシトール）を有し、ミオ−イノシトールは、最も自然界に豊富であり、良く特徴付けられた配座異性体である。イノシトールの一部のポリリン酸化誘導体およびピロリン酸誘導体は、生物活性を有することが知られている。この活性は、重要な細胞シグナル伝達経路における主要な二次メッセンジャーとしての機能から、ヘモグロビンのアロステリックエフェクターとして機能する能力にまで及ぶ。
【０００４】
例えば、イノシトール１，４，５−三リン酸は、多様な細胞型における高度に組織化されたＣａ２＋シグナルの産生に関与する可溶性二次メッセンジャーである。これらのＣａ２＋シグナルは、細胞増殖、受精、平滑筋収縮、および分泌を含む多くの細胞応答の制御において機能することが知られている（１）。加えて、イノシトール１，３，４，５四リン酸は、イノシトール１，４，５三リン酸受容体との相互作用によってＣａ２＋を内部貯蔵から動員する（２）ことが示されており、研究は、原形質膜を横切るＣａ２＋流入の調節にイノシトール１，３，４，５四リン酸を関係付けるものであった（３〜８、２９）。イノシトール１，４二リン酸は、筋肉型６−ホスホフルクト−１−キナーゼのアロステリック活性化を発揮することが報告されている（９）。イノシトール１，３，４，５四リン酸ではなく、イノシトール４，５二リン酸およびイノシトール１，４，５三リン酸が、ラット心臓筋鞘（１０）およびヒト赤血球膜（１１）のＣａ２＋−ＡＴＰアーゼを選択的に阻害することが示されている。イノシトール１，３，４，６四リン酸によって活性化されたＣａ２＋動員は、微量注入したアフリカツメガエル卵母細胞（１２）および透過化されたヒト神経芽腫細胞（１３）において観察された。
【０００５】
さらに、そのトリスピロリン酸誘導体を含むイノシトール六リン酸は、ヘモグロビンのアロステリックエフェクターとして機能することが示されている（Ｎｉｃｏｌａｕら、米国特許第７，０８４，１１５号）。ヘモグロビンは、アロステリック機構を介して酸素を送達する四量体タンパク質である。血液中において、ヘモグロビンは、２つのアロステリック構造間で平衡状態にある。「Ｔ」（緊張を表す）状態において、ヘモグロビンは脱酸素化される。「Ｒ」（弛緩を表す）状態において、ヘモグロビンは酸素化される。酸素平衡曲線をスキャンして、ヘモグロビンの親和性、および協同性の程度（アロステリック作用）を観察することができる。スキャンにおいて、Ｙ軸はヘモグロビン酸素化率をプロットし、Ｘ軸は酸素分圧を水銀柱ミリメートル（ｍｍＨｇ）でプロットしている。水平線が５０％酸素飽和点からスキャンした曲線まで引かれ、垂直線が水平線と曲線との交点から分圧を示すＸ軸まで引かれている場合、Ｐ５０として一般に知られている値が決定される（すなわち、これは、スキャンしたヘモグロビン試料が酸素で５０％飽和している場合のｍｍＨｇ表記での圧力である）。生理的条件（すなわち、３７℃、ｐＨ＝７．４、および二酸化炭素分圧４０ｍｍＨｇ）下、正常な成人のヘモグロビン（ＨｂＡ）のＰ５０値は２６．５ｍｍＨｇ前後である。試験されているヘモグロビンについて正常なＰ５０値よりも低い値が得られた場合、スキャンした曲線は「左にシフトしている」と考えられ、高酸素親和性ヘモグロビンの存在が示されている。逆に、試験されているヘモグロビンについて正常なＰ５０値よりも高い値が得られた場合、スキャンした曲線は「右にシフトしている」と考えられ、低酸素親和性ヘモグロビンの存在を示している。
【０００６】
哺乳動物赤血球の酸素放出能は、イノシトール六リン酸およびイノシトールトリスピロリン酸のようなアロステリックエフェクターを導入することによって増強でき、それにより、酸素に対するヘモグロビンの親和性を低下させ、血液の酸素節約を改善する。この現象は、低酸素関連疾患または肺もしくは循環系の機能不良に関連する他の病態に罹患している個体を治療するための種々の医療用途を示唆している。
【０００７】
例えば、血管新生の調節におけるＶＥＧＦの役割は、熱心な研究対象であった（１４〜１９）。一方、ＶＥＧＦは、生理的血管新生における重大な律速段階を表し、腫瘍増殖に関連する血管新生等の病的血管新生においても重要である（２０）。ＶＥＧＦは、血管漏出を誘発するその能力に基づいて、血管透過性因子としても知られている（２１）。数種の固形腫瘍は、多量のＶＥＧＦを産生し、これが内皮細胞の増殖および移動を刺激し、それによって新血管形成を誘発する（２１）。ＶＥＧＦ発現は、様々な種類のヒト癌の予後に著しく影響を及ぼすことが示されている。腫瘍中の酸素圧は、ＶＥＧＦ遺伝子の発現を調節する上で主要な役割を有する。ＶＥＧＦ  ｍＲＮＡ発現は、多様な病態生理学的状況下で、低酸素圧への暴露によって誘発される（２１）。増殖する腫瘍は低酸素を特徴とし、これは、ＶＥＧＦの発現をもまた誘発し、転移性疾患の発生の予測因子になり得る。したがって、腫瘍中の酸素圧を上昇させる能力は、血管新生および腫瘍の増殖の阻害に役立ち得る。同様の用途はまた、血管腫、関節リウマチ、潰瘍性大腸炎およびクローン病等、他の血管新生関連疾患について想定することもできる。
【０００８】
加えて、内側側頭葉の酸素代謝は、軽度から中等度のアルツハイマー病に罹患している患者において顕著に影響を受けることが知られている。内側側頭葉ならびに頭頂葉および外側側頭葉皮質における平均酸素代謝は、アルツハイマー病に罹患している患者において、アルツハイマー病に罹患していない対照群よりも著しく低いこともまた知られている（２２）。よって、アルツハイマー病に罹患している患者を治療する１つの潜在的手段は、アロステリックエフェクターを使用して、血液脳関門を横切る酸素を増加させることである。
【０００９】
アロステリックエフェクターはまた、種々の形態の認知症に関連する多様な疾患の治療にも役立ち得る。脳は、血管網を利用して、酸素を担持する血液を血管網に運ぶため、脳に供給する酸素が欠乏すると、脳細胞は死滅する可能性が高く、これが血管性認知症の症状を引き起こし得る。これらの症状は、脳卒中に続いて突然、または一連の小さい脳卒中を経て経時的に発生し得る。よって、種々の形態の認知症に関連する血管疾患に罹患している患者を治療するための１つの潜在的手段は、例えば血液脳関門を横切って、病変部に利用可能な酸素を増加させることである。
【００１０】
さらに、アロステリックエフェクターによる個体の治療は、脳卒中および引き続いてそのうち起こり得る骨粗鬆症の病態の治療の両方に有益な効果を有し得る。脳卒中および骨がもろくなる疾患である骨粗鬆症は、通常、２つの異なる健康問題と考えられているが、この２つの間には関連性があることが分かっている。脳卒中から助かった患者は、骨折のリスクを高める疾患である骨粗鬆症に極めて罹患しやすい。多くの場合、骨折は、脳卒中によって麻痺した体の側面で発生する。脳卒中は、脳への血液および酸素の供給が止まっているかまたは大幅に減少している際に発生することが知られている。脳の一部がその栄養豊富な血液および酸素の供給を失うと、脳のその部分によって制御されている身体機能（視覚、発話、歩行等）が損なわれる。米国では、年間５００，０００人を超える人々が脳卒中に罹患し、１５０，０００人がその結果として死亡している。脳への酸素流量を増加させる１つの手段は、ヘモグロビンのアロステリックエフェクターの使用によるものである。
【００１１】
したがって、シクリトールのポリリン酸化誘導体およびピロリン酸誘導体が容易に合成できることは、上述の潜在的な治療上の使用に適した新たなアロステリックエフェクターを発見するための貴重なツールとなる。加えて、細胞型の多様性、ならびにＣａ２＋シグナル伝達およびそれらのシグナルを伝える上でのシクリトールの役割を利用する細胞機能を前提とすると、ポリリン酸誘導体およびピロリン酸誘導体が容易に合成できることにより、これらの複雑なシグナル伝達経路の機能をより良く解明する上での非常に貴重なツールがもたらされる。それはまた、プロドラッグとして機能する能力を含む、これらの誘導体が有し得る任意の治療活性を測定するのにも有用となる。ミオ−イノシトールの生物活性は、極めて良く特徴付けられている。しかしながら、その生物学的機能が知られていないか、またはあまり理解されていないイノシトールの配座異性体が多数ある。したがって、イノシトールのこれらの配座異性体のポリリン酸化誘導体およびピロリン酸誘導体が容易に合成できることによってまた、多数の有用かつこれまで未知の生物活性が潜在的に明らかとなる。
【発明の概要】
【００１２】
本発明は、シクリトール、特にイノシトールのポリリン酸化誘導体およびピロリン酸誘導体を含む化合物および組成物、ならびにそれらの合成方法を対象とする。加えて、本発明は、低酸素によって引き起こされる疾患、または肺もしくは循環系の機能不良に関連する他の病態を治療する際における、ヘモグロビンのアロステリックエフェクター、細胞シグナル伝達分子類似体、および治療剤としてのこれらの組成物の使用を対象とする。
【００１３】
一実施形態において、本発明は、イノシトールの六リン酸誘導体である化合物である。より具体的には、シス−イノシトール、エピ−イノシトール、アロ−イノシトール、ムコ−イノシトール、ネオ−イノシトール、シロ−イノシトール、（＋）カイロ−イノシトール、または（−）カイロ−イノシトールの六リン酸誘導体のトリエチルアンモニウム塩である。別の実施形態において、化合物は、アルコキシ基およびアシルオキシ基等の１種または複数の遊離ヒドロキシル基またはヒドロキシル誘導体基を含有するポリリン酸化イノシトール誘導体である。
【００１４】
別の実施形態において、本発明は、イノシトールのピロリン酸誘導体である化合物である。イノシトール誘導体は、モノピロリン酸、ビスピロリン酸、またはトリスピロリン酸誘導体であってよい。別の実施形態において、化合物は、イノシトールのトリスホスホルイミド誘導体またはトリスチオピロリン酸誘導体である。
【００１５】
別の実施形態において、本発明は、イノシトールのポリリン酸化誘導体およびピロリン酸誘導体の対応する塩を含む。アルカリ(alkali)金属カチオン、アルカリ性(alkaline)金属カチオン、アンモニウムカチオン、または有機カチオンと塩錯体を形成することができる。
【００１６】
別の実施形態において、本発明は、イノシトールのポリリン酸化誘導体および／またはピロリン酸誘導体を含む医薬組成物を含む。
【００１７】
さらに別の実施形態において、本発明は、血液に対するヘモグロビンの親和性を減少させる方法における、ポリリン酸化イノシトールおよびピロリン酸イノシトールの使用を対象とする。
【００１８】
別の実施形態において、本発明の化合物および組成物は、低酸素によって引き起こされる疾患、または肺もしくは循環系の機能不良に関連する他の病態を治療するための治療剤として使用される。
【００１９】
本発明の別の実施形態において、本発明の化合物および組成物は、天然型イノシトール細胞シグナル伝達化合物の類似体またはそのプロドラッグとして使用することができる。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
【図１】イノシトールの様々な配座異性体を表す図である。
【図２】既知の提案されているイノシトール代謝経路を表す図である。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
（発明の詳細な説明）
本発明は、シクリトール、特にイノシトールのポリリン酸化誘導体およびピロリン酸誘導体を対象とする。本発明の化合物を合成するための方法を以下に記載する。本発明はまた、ヘモグロビンのアロステリックエフェクターとしての、シクリトールのポリリン酸化誘導体およびピロリン酸誘導体の使用も包含する。加えて、本発明は、低酸素関連疾患または肺もしくは循環系の機能不良に関連する他の病態の治療のための治療剤としてのそれらの使用を包含する。本発明はまた、細胞シグナル伝達経路の研究における、または、そのような経路、特にイノシトールリン脂質の切断によってシグナルを伝達する細胞シグナル伝達経路を調節するための新たな治療剤の設計における、有用な中間体としてのポリリン酸化誘導体およびピロリン酸誘導体の使用も包含する。
【００２２】
（定義）
便宜のために、明細書、実施例および添付の特許請求の範囲において用いられるいくつかの用語をここにまとめる。本明細書および特許請求の範囲全体を通じて使用する場合、下記の用語は下記の意味を有する。
【００２３】
「ヘモグロビン」という用語は、すべての天然型および非天然型のヘモグロビンを含む。
【００２４】
「ヘモグロビン製剤」という用語は、生理的に適合する担体中のヘモグロビンまたは生理的に適合する担体によって再構成される凍結乾燥されたヘモグロビンを含むが、全血、赤血球または濃厚赤血球を含まない。
【００２５】
「全血」という用語は、そのすべての天然構成物質、成分もしくは要素、またはかなりの量の天然構成物質、成分もしくは要素を含有する血液を指す。例えば、一部の成分は、血液を対象に投与する前に、精製プロセスによって除去され得ると想定される。
【００２６】
「精製された」、「精製プロセス」および「精製する」は、いずれも、対象に投与された際に赤血球または全血が非毒性であるように、赤血球または全血から本発明の１種または複数の化合物を除去する状態またはプロセスを指す。
【００２７】
「非天然型ヘモグロビン」は、細胞内に自然に存在するヘモグロビンのアミノ酸配列と異なるアミノ酸配列を有する合成ヘモグロビン、および化学修飾ヘモグロビンを含む。そのような非天然型突然変異ヘモグロビンは、その調製方法によっては制限されないが、典型的には、例えば、組換えＤＮＡ技術、形質転換ＤＮＡ技術、タンパク質合成、および他の突然変異誘発方法を含む、当該技術分野においてよく知られているいくつかの技術のうち１つまたは複数を使用して作製される。
【００２８】
「化学修飾ヘモグロビン」は、別の化学的部分と結合している天然型および非天然型ヘモグロビン分子である。例えば、ヘモグロビン分子は、ピリドキサール−５’−リン酸もしくは他の酸素親和性修飾部分と結合してヘモグロビン分子の酸素結合特性を変化させ、架橋剤と結合して架橋ヘモグロビンもしくは重合ヘモグロビンを形成し、または抱合剤と結合して抱合ヘモグロビンを形成することができる。
【００２９】
「酸素親和性」は、酸素がヘモグロビン分子と結合する強度を意味する。高酸素親和性は、ヘモグロビンが、その結合した酸素分子を容易には放出しないことを意味する。Ｐ５０は、酸素親和性の指標である。
【００３０】
「協同性」は、ヘモグロビンのＳ字形酸素結合曲線を指し、すなわち、第１の酸素と四量体ヘモグロビン分子内の１つのサブユニットとの結合は、酸素分子と他の非結合サブユニットとの結合を増強する。これは、好都合なことに、Ｈｉｌｌ係数（ｎ［ｍａｘ］）によって計測される。Ｈｂ  Ａでは、ｎ［ｍａｘ］＝３．０である。
【００３１】
「治療」という用語は、予防、療法および治癒も包含することが意図されている。
【００３２】
「虚血」は、臓器または骨格組織への酸素供給の一時的もしくは長期的な不足または減少を意味する。虚血は、臓器が移植される際に、または、敗血症性ショックおよび鎌状赤血球貧血等の状態によって誘発され得る。
【００３３】
「骨格組織」は、（それだけに限らないが）上皮、結合組織（血液、骨および軟骨を含む）、筋肉組織、および神経組織を含む細胞ならびに細胞間質からなる、骨格生物の有機体の物質を意味する。
【００３４】
「虚血性傷害」は、虚血によって引き起こされる臓器または骨格組織への損傷を意味する。
【００３５】
「対象」は、ヒトおよび動物を含む任意の生命体を意味する。
【００３６】
「非経口投与」および「非経口投与される」という語句は、本明細書において使用する場合、通常は注射による、経腸および局所投与以外の投与形態を意味し、静脈内、筋肉内、動脈内、鞘内、嚢内、眼窩内、心臓内、皮内、腹腔内、経気管、皮下、表皮下、関節内、嚢下、くも膜下、髄腔内、および胸骨内注射ならびに注入を含むが、これらに限定されない。
【００３７】
本明細書において使用する場合、「手術」という用語は、手動または操作的方法による疾患、負傷および変形の治療を指す。一般的な手術手順は、（それだけに限らないが）腹部手術、耳手術、ベンチ手術、心臓手術、動形成切断術、保存的手術、美容手術、腫瘍縮小術、歯科手術、顎顔面手術、一般外科手術、大手術、小手術、モース術、心臓切開術、臓器移植術、整形外科手術、形成外科手術、精神外科手術、根治手術、再建手術、音波手術、定位固定手術、構造的手術、胸部手術、および獣医外科手術を含む。本発明の方法は、（それだけに限らないが）上記の手術、およびあらゆる種類の任意の一般外科手術、大手術、小手術、または低侵襲手術を含む、身体のいずれかの部分を扱う任意の種類の手術を受けるべき患者に適している。
【００３８】
「低侵襲手術」には、皮膚の穿刺もしくは切開、または体内への機器もしくは異物の挿入を含む。低侵襲手術の非限定的な例は、動脈または静脈カテーテル法、経尿道的切除術、内視鏡検査（例えば、腹腔鏡検査(laparoscopy)、気管支鏡検査、尿検査、咽頭鏡検査、膀胱鏡検査、子宮鏡検査、胃鏡検査、大腸内視鏡検査、膣鏡検査、腹腔鏡検査(celioscopy)、Ｓ状結腸鏡検査、およびオルソスコピー(orthoscopy)）、および血管形成術（例えば、バルーン血管形成術、レーザー血管形成術、および経皮経管的血管形成術）を含む。
【００３９】
「ＥＤ５０」という用語は、その最大応答または効果の５０％を生じる薬物の用量を意味する。あるいは、５０％の試験対象または製剤において所定の応答を生じる用量である。
【００４０】
「ＬＤ５０」という用語は、５０％の試験対象に致死的な薬物の用量を意味する。
【００４１】
「治療指数」という用語は、ＬＤ５０／ＥＤ５０として定義される薬物の治療指数を指す。
【００４２】
「全身投与」、「全身投与される」、「末梢投与」および「末梢投与される」という語句は、本明細書において使用する場合、化合物、薬物、または他の物質が直接ではなく中枢神経系内へ投与され、その結果それが患者の身体へ入り、したがって代謝および他の同様のプロセスにさらされること、例えば皮下投与を意味する。
【００４３】
「構造活性相関（ＳＡＲ）」という用語は、薬物の分子構造を変更することにより、受容体、酵素等とのそれらの相互作用を変更する手法を指す。
【００４４】
「ピロリン酸」という用語は、以下の一般式を指し、
【化１】
2010514772.tif 000003
【００４５】
式中、Ｒは、それぞれ独立に、Ｈ、カチオンおよび炭化水素基からなる群から選択される。
【００４６】
「内部ピロリン酸部分」、「内部ピロリン酸環」および「環状ピロリン酸」という用語は、以下の構造的特徴を指し、
【化２】
2010514772.tif 000004
【００４７】
式中、Ｒは、それぞれ独立に、Ｈ、カチオン、アルキル、アルケニル、アルキニル、アラルキル、アリール、およびアシル基からなる群から選択される。
【００４８】
「ＩＨＰ−モノピロリン酸」（「ＩＭＰＰ」と略される）という用語は、２個のオルトピロリン酸が１個の内部ピロリン酸環に縮合されたイノシトール六リン酸を指す。
【００４９】
「ＩＨＰ−トリスピロリン酸」または「イノシトールトリスピロリン酸」（いずれも「ＩＴＰＰ」と略される）という用語は、３個の内部ピロリン酸環を持つイノシトール六リン酸を指す。
【００５０】
「２，３−ジホスホ−Ｄ−グリセリン酸」（ＤＰＧ）という用語は、以下の化合物を指す。
【化３】
2010514772.tif 000005
【００５１】
「２，３−シクロピロホスホグリセラート」（ＣＰＰＧ）という用語は、以下の化合物を指す。
【化４】
2010514772.tif 000006
【００５２】
「アンモニウムカチオン」という用語は、以下の構造を指し、
【化５】
2010514772.tif 000007
【００５３】
式中、Ｒは、それぞれ独立に、Ｈまたは置換もしくは非置換の脂肪族基を表す。「脂肪族アンモニウムカチオン」は、少なくとも１つのＲが脂肪族基である場合の上記構造を指す。「第四級アンモニウムカチオン」は、４つのすべてのＲが独立に脂肪族基を表す場合の上記構造を指す。Ｒは、２つ以上について同じであってもよく、また４つすべてについて異なっていてもよい。
【００５４】
「ヘテロ原子」という用語は、本明細書において使用する場合、炭素または水素以外の任意の元素の原子を意味する。好ましいヘテロ原子は、ホウ素、窒素、酸素、リン、硫黄、およびセレンである。
【００５５】
「電子求引基」という用語は、当該技術分野において認識されており、置換基が隣接原子から価電子を誘引する傾向を表しており、すなわち、この置換基は、隣接原子に対して電気的に陰性である。電子求引能のレベルの定量化は、Ｈａｍｍｅｔｔシグマ（σ）定数によって求められる。このよく知られている定数は、多くの参考文献、例えば、Ｊ．Ｍａｒｃｈ、Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、ＭｃＧｒａｗ  Ｈｉｌｌ  Ｂｏｏｋ  Ｃｏｍｐａｎｙ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、（１９７７年版）２５１〜２５９ページに記載されている。Ｈａｍｍｅｔｔ定数値は、概して、電子供与基では負の値であり（ＮＨ２ではσ［Ｐ］＝−０．６６）、電子求引基では正の値であり（ニトロ基ではσ［Ｐ］０．７８）、σ［Ｐ］はパラ置換を示している。例示的な電子求引基は、ニトロ、アシル、ホルミル、スルホニル、トリフルオロメチル、シアノ、クロリド等を含む。例示的な電子供与基は、アミノ、メトキシ等を含む。
【００５６】
「アルキル」という用語は、直鎖アルキル基、分岐鎖アルキル基、シクロアルキル（脂環式）基、アルキル置換シクロアルキル基、およびシクロアルキル置換アルキル基を含む飽和脂肪族基の化学基を指す。好ましい実施形態において、直鎖または分岐鎖アルキルは、その主鎖中に、３０個以下の炭素原子（例えば、直鎖ではＣ１〜Ｃ３０、分岐鎖ではＣ３〜Ｃ３０）、より好ましくは２０個以下の炭素原子を有する。同様に、好ましいシクロアルキルは、その環構造中に３〜１０個の炭素原子を有し、より好ましくは、環構造中に５、６または７個の炭素を有する。
【００５７】
「アラルキル」という用語は、本明細書において使用する場合、アリール基（例えば、芳香族基またはヘテロ芳香族基）で置換されているアルキル基を指す。
【００５８】
「アルケニル」および「アルキニル」という用語は、長さおよび考えられる置換においては上記のアルキルと類似しているが、少なくとも１つの二重結合または三重結合をそれぞれ含有する、不飽和脂肪族基を指す。
【００５９】
炭素の数について特に規定されていない限り、「低級アルキル」は、本明細書において使用する場合、上記で定義された通りであるが、その主鎖構造中に約１〜約１０個の炭素、より好ましくは１〜６個の炭素原子を有するアルキル基を意味する。同様に、「低級アルケニル」および「低級アルキニル」は、同様の鎖長を有する。好ましいアルキル基は、低級アルキルである。好ましい実施形態において、本明細書においてアルキルと指定されている置換基は、低級アルキルである。
【００６０】
「アリール」という用語は、本明細書において使用する場合、０〜４個のヘテロ原子を含み得る５、６および７員の単環式芳香族基、例えば、ベンゼン、ピロール、フラン、チオフェン、イミダゾール、オキサゾール、チアゾール、トリアゾール、ピラゾール、ピリジン、ピラジン、ピリダジン、およびピリミジン等を含む。環構造中にヘテロ原子を有するそれらのアリール基を、「アリールヘテロ環」または「ヘテロ芳香族」と称する場合もある。芳香族環は、１つまたは複数の環位置で、上記のような置換基、例えば、ハロゲン、アジド、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヒドロキシル、アルコキシル、アミノ、ニトロ、スルフヒドリル、イミノ、アミド、ホスホナート、ホスフィナート、カルボニル、カルボキシル、シリル、エーテル、アルキルチオ、スルホニル、スルホンアミド、ケトン、アルデヒド、エステル、ヘテロシクリル、芳香族またはヘテロ芳香族部分、−ＣＦ３、−ＣＮ等によって置換されていてよい。「アリール」という用語はまた、２つ以上の炭素が２つの隣接環に共通である（環が「縮合環」である）２つ以上の環式環を有し、環のうちの少なくとも１つは芳香族であり、例えば、他の環式環は、シクロアルキル、シクロアルケニル、および／またはヘテロシクリルであってよい多環式環系も含む。
【００６１】
オルト、メタ、およびパラという用語は、それぞれ、１，２−、１，３−および１，４−二置換ベンゼンに当てはまる。例えば、名称１，２−ジメチルベンゼンおよびオルト−ジメチルベンゼンは同義である。
【００６２】
「ヘテロシクリル」または「複素環基」という用語は、３〜１０員環構造、より好ましくは３〜７員環を指し、その環構造は、１〜４個のヘテロ原子を含む。ヘテロ環はまた、多環式であってもよい。ヘテロシクリル基は、例えば、チオフェン、チアントレン、フラン、ピラン、イソベンゾフラン、クロメン、キサンテン、フェノキサチイン、ピロール、イミダゾール、ピラゾール、イソチアゾール、イソオキサゾール、ピリジン、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、インドリジン、イソインドール、インドール、インダゾール、プリン、キノリジン、イソキノリン、キノリン、フタラジン、ナフチリジン、キノキサリン、キナゾリン、シンノリン、プテリジン、カルバゾール、カルボリン、フェナントリジン、アクリジン、ピリミジン、フェナントロリン、フェナジン、フェナルサジン、フェノチアジン、フラザン、フェノキサジン、ピロリジン、オキソラン、チオラン、オキサゾール、ピペリジン、ピペラジン、モルホリン、ラクトン、アゼチジノンおよびピロリジノン等のラクタム、スルタム、スルトン等を含む。複素環は、１つまたは複数の環位置で、上記のような置換基、例えば、ハロゲン、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヒドロキシル、アミノ、ニトロ、スルフヒドリル、イミノ、アミド、ホスホナート、ホスフィナート、カルボニル、カルボキシル、シリル、エーテル、アルキルチオ、スルホニル、ケトン、アルデヒド、エステル、ヘテロシクリル、芳香族またはヘテロ芳香族部分、−ＣＦ３、−ＣＮ等によって置換されていてよい。
【００６３】
「ポリシクリル」または「多環式基」という用語は、２つ以上の炭素が２つの隣接環に共通である、例えば環が「縮合環」である、２つ以上の環（例えば、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、アリール、および／またはヘテロシクリル）を指す。非隣接原子を介して結合している環を、「架橋」環と称する。多環の環のそれぞれは、上記のような置換基、例えば、ハロゲン、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヒドロキシル、アミノ、ニトロ、スルフヒドリル、イミノ、アミド、ホスホナート、ホスフィナート、カルボニル、カルボキシル、シリル、エーテル、アルキルチオ、スルホニル、ケトン、アルデヒド、エステル、ヘテロシクリル、芳香族またはヘテロ芳香族部分、−ＣＦ３、−ＣＮ等によって置換されていてよい。
【００６４】
「炭素環」という用語は、本明細書において使用する場合、環の各原子が炭素である芳香族環または非芳香族環を指す。
【００６５】
本明細書において使用する場合、「ニトロ」という用語は−ＮＯ２を意味し、「ハロゲン」という用語は、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒまたは−Ｉを指し、「スルフヒドリル」という用語は−ＳＨを意味し、「ヒドロキシル」という用語は−ＯＨを意味し、「スルホニル」という用語は−ＳＯ２−を意味する。
【００６６】
「アミン」および「アミノ」という用語は、当該技術分野において認識されており、非置換および置換アミンの両方、例えば、一般式
【化６】
2010514772.tif 000008
【００６７】
によって表すことができる部分を指し、式中、Ｒ９、Ｒ１０およびＲ’１０は、それぞれ独立に、水素、アルキル、アルケニル、−（ＣＨ２）ｍ−Ｒ８を表すか、あるいは、Ｒ９およびＲ１０は、それらが結合したＮ原子と一緒になって、環構造中に４〜５個の原子を有するヘテロ環を完成させ、Ｒ８は、アリール、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロ環または多環を表し、ｍは、０または１〜８の範囲内の整数である。好ましい実施形態において、Ｒ９またはＲ１０の一方のみがカルボニルであってよく、例えば、Ｒ９、Ｒ１０および窒素は、一緒になってイミドを形成しない。さらに一層好ましい実施形態において、Ｒ９およびＲ１０（および場合によってＲ’１０）は、それぞれ独立に、水素、アルキル、アルケニルまたは−（ＣＨ２）ｍ−Ｒ８を表す。よって、「アルキルアミン」という用語は、本明細書において使用する場合、それらに結合している置換または非置換のアルキルを有する（すなわち、Ｒ９およびＲ１０のうちの少なくとも一方がアルキル基である）、上記で定義されたアミン基を意味する。
【００６８】
「アシルアミノ」という用語は、当該技術分野において認識されており、一般式
【化７】
2010514772.tif 000009
【００６９】
によって表すことができる部分を指し、式中、Ｒ９は上記で定義された通りであり、Ｒ’１１は、水素、アルキル、アルケニル、または−（ＣＨ２）ｍ−Ｒ８［ここで、ｍおよびＲ８は上記で定義された通りである］を表す。
【００７０】
「アミド」という用語は、当該技術分野においてアミノ置換カルボニルとして認識されており、一般式
【化８】
2010514772.tif 000010
【００７１】
によって表すことができる部分を含み、式中、Ｒ９、Ｒ１０は上記で定義された通りである。アミドの好ましい実施形態は、不安定な場合があるイミドを含まない。
【００７２】
「アルキルチオ」という用語は、それらに結合している硫黄基を有する、上記で定義されたアルキル基を指す。好ましい実施形態において、「アルキルチオ」部分は、−Ｓ−アルキル、−Ｓ−アルケニル、−Ｓ−アルキニル、および−（ＣＨ２）ｍ−Ｒ８［ここで、ｍおよびＲ８は上記で定義された通りである］のうちの１つによって表される。代表的なアルキルチオ基は、メチルチオ、エチルチオ等を含む。
【００７３】
「カルボニル」という用語は、当該技術分野において認識されており、一般式
【化９】
2010514772.tif 000011
【００７４】
によって表すことができるような部分を含み、式中、Ｘは、結合であるか、または酸素もしくは硫黄を表し、Ｒ１１は、水素、アルキル、アルケニル、−（ＣＨ２）ｍ−Ｒ８または薬学的に許容可能な塩を表し、Ｒ’１１は、水素、アルキル、アルケニル、または−（ＣＨ２）ｍ−Ｒ８［ここで、ｍおよびＲ８は上記で定義された通りである］を表す。Ｘが酸素であり、Ｒ１１またはＲ’１１が水素ではない場合、式は「エステル」を表す。Ｘが酸素であり、Ｒ１１が上記で定義された通りである場合、この部分は、本明細書においてはカルボキシル基と称され、特に、Ｒ１１が水素である場合、式は「カルボン酸」を表す。Ｘが酸素であり、Ｒ’１１が水素である場合、式は「ギ酸エステル」を表す。概して、上記式の酸素原子が硫黄によって置き換えられている場合、式は「チオールカルボニル」基を表す。Ｘが硫黄であり、Ｒ１１またはＲ’１１が水素ではない場合、式は「チオールエステル」を表す。Ｘが硫黄であり、Ｒ１１が水素である場合、式は「チオールカルボン酸」を表す。Ｘが硫黄であり、Ｒ’１１が水素である場合、式は「チオールギ酸エステル」を表す。一方、Ｘが結合であり、Ｒ１１が水素ではない場合、上記式は「ケトン」基を表す。Ｘが結合であり、Ｒ１１が水素である場合、上記式は「アルデヒド」基を表す。
【００７５】
「アルコキシル」または「アルコキシ」という用語は、本明細書において使用する場合、それらに結合している酸素基を有する、上記で定義されたアルキル基を指す。代表的なアルコキシル基は、メトキシ、エトキシ、プロピルオキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ等を含む。「エーテル」は、酸素によって共有結合されている２個の炭化水素である。したがって、アルキルをエーテルにするアルキルの置換基は、−Ｏ−アルキル、−Ｏ−アルケニル、−Ｏ−アルキニル、−Ｏ−（ＣＨ２）ｍＲ８［ここで、ｍおよびＲ８は上記で定義された通りである］のうちの１つによって表すことができるもの等のアルコキシルであるか、またはアルコキシルに似ている。
【００７６】
「スルホナート」という用語は、当該技術分野において認識されており、一般式
【化１０】
2010514772.tif 000012
【００７７】
によって表すことができる部分を含み、式中、Ｒ４１は、電子対、水素、アルキル、シクロアルキル、またはアリールである。
【００７８】
トリフリル、トシル、メシル、およびノナフリルという用語は、当該技術分野において認識されており、それぞれ、トリフルオロメタンスルホニル、ｐ−トルエンスルホニル、メタンスルホニル、およびノナフルオロブタンスルホニル基を指す。トリフラート、トシラート、メシラート、およびノナフラートという用語は、当該技術分野において認識されており、それぞれ、トリフルオロメタンスルホナートエステル、ｐ−トルエンスルホナートエステル、メタンスルホナートエステル、およびノナフルオロブタンスルホナートエステル官能基、ならびにこれらの基を含有する分子を指す。
【００７９】
Ｍｅ、Ｅｔ、Ｐｈ、Ｔｆ、Ｎｆ、ＴｓおよびＭｓという略号は、それぞれ、メチル、エチル、フェニル、トリフルオロメタンスルホニル、ノナフルオロブタンスルホニル、ｐ−トルエンスルホニル、およびメタンスルホニルを表す。有機化学の当業者によって利用される略号のさらに包括的なリストは、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙの各巻の創刊号に掲載されており、このリストは、典型的には、Ｓｔａｎｄａｒｄ  Ｌｉｓｔ  ｏｆ  Ａｂｂｒｅｖｉａｔｉｏｎｓと題された表中に提示されている。このリストに収められている略号、および有機化学の当業者によって利用されるすべての略号は、参照により本明細書に組み込まれる。
【００８０】
「スルファート」という用語は、当該技術分野において認識されており、一般式
【化１１】
2010514772.tif 000013
【００８１】
によって表すことができる部分を含み、式中、Ｒ４１は、上記で定義された通りである。
【００８２】
「スルホンアミド」という用語は、当該技術分野において認識されており、一般式
【化１２】
2010514772.tif 000014
【００８３】
によって表すことができる部分を含み、式中、Ｒ９およびＲ’１１は、上記で定義された通りである。
【００８４】
「スルファモイル」という用語は、当該技術分野において認識されており、一般式
【化１３】
2010514772.tif 000015
【００８５】
によって表すことができる部分を含み、式中、Ｒ９およびＲ１０は、上記で定義された通りである。
【００８６】
「スルホニル」という用語は、本明細書において使用する場合、一般式
【化１４】
2010514772.tif 000016
【００８７】
によって表すことができる部分を指し、式中、Ｒ４４は、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、またはヘテロアリールからなる群から選択される。
【００８８】
「スルホキシド」という用語は、本明細書において使用する場合、一般式
【化１５】
2010514772.tif 000017
【００８９】
によって表すことができる部分を指し、式中、Ｒ４４は、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アラルキル、またはアリールからなる群から選択される。
【００９０】
同様の置換をアルケニル基およびアルキニル基に行い、例えば、アミノアルケニル、アミノアルキニル、アミドアルケニル、アミドアルキニル、イミノアルケニル、イミノアルキニル、チオアルケニル、チオアルキニル、カルボニル置換アルケニルまたはアルキニルを生成することができる。
【００９１】
本明細書において使用する場合、各表現、例えば、アルキル、ｍ、ｎ等の定義は、それが任意の構造中に複数回出現する場合、同じ構造中の他の場所におけるその定義とは無関係であることが意図されている。
【００９２】
「置換」または「で置換されている」は、そのような置換が、置換されている原子および置換基の容認される価数に従っていること、ならびにその置換が、安定な化合物、例えば、転位、環化、脱離等による変換を自発的にはしない化合物をもたらすことという、暗黙の条件を含むことが理解されるであろう。
【００９３】
本明細書において使用する場合、「置換されている」という用語は、有機化合物の容認できる置換基をすべて含むことを企図している。広範な態様において、容認できる置換基は、有機化合物の、非環式および環式、分岐鎖および非分岐鎖、炭素環式および複素環式、芳香族および非芳香族の置換基を含む。実例となる置換基は、例えば、本明細書において上記したものを含む。容認できる置換基は、適切な有機化合物について、１つまたは複数であってよく、同じであっても異なっていてもよい。本発明の目的のために、窒素等のヘテロ原子は、水素置換基、および／または、ヘテロ原子の価数を満たす、本明細書に記載されている有機化合物の任意の容認できる置換基を有し得る。本発明は、有機化合物の容認できる置換基により、いかなる様式にも限定されることを意図しない。
【００９４】
「保護基」という語句は、本明細書において使用する場合、潜在的に反応性の官能基を望ましくない化学変換から保護する一時的な置換基を意味する。そのような保護基の例は、カルボン酸のエステル、アルコールのシリルエーテル、ならびにそれぞれアルデヒドおよびケトンのアセタールおよびケタールを含む。保護基化学の分野は総説されている（Ｇｒｅｅｎｅ，Ｔ．Ｗ．；Ｗｕｔｓ，Ｐ．Ｇ．Ｍ．，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、第２版；Ｗｉｌｅｙ：Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、１９９１）。
【００９５】
「血管新生関連疾患」は、本明細書で定義されている通り、（それだけに限らないが）内皮細胞の過剰もしくは異常刺激（例えば、アテローム性動脈硬化症）、血液由来腫瘍、固形腫瘍および腫瘍転移、良性腫瘍、例えば、血管腫、聴神経腫、神経線維腫、トラコーマおよび化膿性肉芽腫、血管機能不全、異常な創傷治癒、炎症性および免疫障害、ベーチェット病、痛風もしくは痛風性関節炎、糖尿病性網膜症、ならびに未熟児網膜症（水晶体後線維増殖症）、黄斑変性症、角膜移植拒絶反応、血管新生緑内障等の他の眼球血管新生疾患、ならびにＯｓｌｅｒ  Ｗｅｂｅｒ症候群（Ｏｓｌｅｒ−Ｗｅｂｅｒ−Ｒｅｎｄｕ病）を含む。本発明によって治療することができる癌は、（それだけに限らないが）乳癌、前立腺癌、腎細胞癌、脳腫瘍、卵巣癌、結腸癌、膀胱癌、膵癌、胃癌、食道癌、皮膚黒色腫、肝癌、肺癌、精巣癌、腎癌、膀胱癌、子宮頸癌、リンパ腫、副甲状腺癌、陰茎癌、直腸癌、小腸癌、甲状腺癌、子宮癌、ホジキンリンパ腫、口唇および口腔癌、皮膚癌、白血病、または多発性骨髄腫を含む。
【００９６】
本発明のいくつかの化合物は、特定の幾何異性形態または立体異性形態で存在し得る。本発明は、シス−およびトランス−異性体、Ｒ−およびＳ−エナンチオマー、ジアステレオマー、（Ｄ）−異性体、（Ｌ）−異性体、それらのラセミ混合物、ならびにそれらの他の混合物を含む、このような化合物すべてを本発明の範囲内に入るものとして企図する。さらなる不斉炭素原子が、アルキル基等の置換基中に存在し得る。そのような異性体およびそれらの混合物はすべて、本発明に含まれることが意図されている。
【００９７】
例えば、本発明の化合物の特定のエナンチオマーが望ましい場合、この異性体は、不斉合成によって、またはキラル補助基による誘導によって調製することができ、ここで、結果として生じたジアステレオマー混合物を分離し、補助基を切断して、純粋な所望のエナンチオマーを提供する。あるいは、分子がアミノ等の塩基性官能基またはカルボキシル等の酸性官能基を含有する場合、適切な光学活性な酸または塩基とのジアステレオマー塩が形成され、続いて、そのようにして形成されたジアステレオマーを、当該技術分野においてよく知られている分別結晶またはクロマトグラフ手段によって光学分割し、その後、純粋なエナンチオマーを回収する。
【００９８】
上記の化合物の企図される均等物は、その他の点ではこの化合物に対応し、その化合物と同じ一般的性質を有しているが、化合物の効能に悪影響を及ぼさない１つまたは複数の単純な置換基の変動が為されている化合物を含む。概して、本発明の化合物は、例えば以下に記載するような一般的な反応スキームに示されている方法によって、または容易に入手可能な出発材料、試薬、および従来の合成手順を使用するその変更形態によって調製することができる。これらの反応において、それ自体既知であるがここでは言及しない変形形態を活用することも可能である。
【００９９】
本発明の目的のために、化学元素は、Ｐｅｒｉｏｄｉｃ  Ｔａｂｌｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｅｌｅｍｅｎｔｓ、ＣＡＳ版、Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｐｈｙｓｉｃｓ、第６７版、１９８６〜８７、内表紙に従って特定され、これは参照により本明細書に組み込まれる。
【０１００】
（アロステリックエフェクターおよび治療剤としての使用）
本発明は、ヘモグロビンのアロステリックエフェクターおよび治療剤としての、本発明のポリリン酸化シクリトール誘導体およびピロリン酸シクリトール誘導体の使用を包含する。一実施形態において、アロステリックエフェクターはポリリン酸化イノシトールである。さらに別の実施形態において、アロステリックエフェクターはイノシトールピロリン酸誘導体である。ヘモグロビンを低酸素親和性状態へとアロステリックに修飾するプロセスは、虚血、癌等の血管新生関連疾患、および、アルツハイマー病、認知症、脳卒中、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、骨粗鬆症、成人呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）等の虚血介在性疾患の治療において、および血液の保存期限を延長または期限切れの血液の酸素運搬能を回復させる上で、およびｘ線照射用の増感剤としての多様な用途に、ならびに多くの他の用途に使用することができる。
【０１０１】
本発明の化合物、組成物および方法は、ヘモグロビンをアロステリックに修飾して低酸素親和性「Ｔ」状態を促進することができるため、本発明の化合物は、その組織が、癌、虚血、アルツハイマー病、認知症、および脳卒中等の低酸素圧に罹患している、ヒトを含む哺乳動物における多様な病態を治療する上で有用となり得る。さらに、Ｈｉｒｓｔら（２３）によって記載されている通り、循環血液中のヘモグロビンの酸素親和性を低下させることは、腫瘍の放射線療法において有益であることが示されている。本発明の化合物はまた、酸素に対するヘモグロビンの親和性が異常に高い患者に投与してもよい。例えば、いくつかの異常ヘモグロビン症、いくつかの呼吸窮迫症候群、例えば、高い胎児性ヘモグロビンレベルによって増悪される新生児の呼吸窮迫症候群、および組織へのヘモグロビン／酸素のアベイラビリティが低下している状態（例えば、末梢血管疾患、冠動脈閉塞、うっ血性心不全、脳血管発作、または組織移植等の虚血状態において）である。化合物および組成物はまた、血小板凝集阻害、抗血栓目的、および創傷治癒に使用することもできる。
【０１０２】
さらに、ヘモグロビンからの酸素の解離を促進し、血液の酸素送達能を改善するために、本発明の化合物および組成物を、好ましくは貯蔵時または輸血時に、全血または濃厚血球（ｐａｃｋｅｄ  ｃｅｌｌｓ）に添加することができる。血液が貯蔵されている場合、血液中のヘモグロビンは、２，３−ジホスホグリセリドを失って酸素に対するその親和性を上昇させる傾向がある。上記の通り、本発明の化合物および組成物は、全血または濃厚血球が貯蔵されている場合に観察される、ヘモグロビンの機能的異常を逆転および／または予防することができる。化合物および組成物は、貯蔵前に化合物もしくは組成物を入れる適切な容器、または血液収集バッグ内の抗凝固溶液中に存在する適切な容器を使用し、閉鎖系内の全血または赤血球画分に添加することができる。
【０１０３】
本発明の化合物、組成物および方法を使用して、低血流量および低温でより多くの酸素を送達させ、典型的には低酸素状態に関連する、例えば、心筋またはニューロンの細胞損傷を低下させるか、または予防する能力を提供することができる。
【０１０４】
本発明の化合物、組成物および方法を使用して、酸素を送達する効率を上昇させることにより、出血性ショックを治療するために必要な赤血球の数を減少させることができる。
【０１０５】
より良好な血流量および酸素圧の上昇があれば、損傷組織はより速く治癒する。したがって、本発明の化合物、組成物および方法を使用して、創傷治癒を促進することができる。さらに、創傷組織への酸素送達を増加させることにより、本発明の化合物、組成物および方法は、創傷における感染を引き起こすバクテリアの破壊において役割を果たすことができる。
【０１０６】
本発明の化合物、組成物および方法は、特に、脳卒中後に発生し得るもの等の、フリーラジカル形成によって完全閉塞および再灌流傷害が発生する前に、脳への酸素の送達を増加させる上で有効となり得る。加えて、内側側頭葉の酸素代謝は、軽度から中等度のアルツハイマー病に罹患している患者において顕著に影響を受けることが知られている。内側側頭葉、ならびに頭頂葉および外側側頭葉皮質における平均酸素代謝は、アルツハイマー病に罹患している患者において、アルツハイマー病に罹患していない対照群よりも著しく低いことも知られている（２２）。よって、アルツハイマー病に罹患している患者を治療する１つの手段は、本発明に従うアロステリックエフェクターを使用して、血液脳関門を横切る酸素を増加させることである。
【０１０７】
本発明の化合物、組成物および方法は、塞がった動脈ならびに周囲の筋肉および組織への酸素送達を増加させることができ、それにより、狭心症発作の苦痛を緩和する。
【０１０８】
急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）は、間質および／または肺胞の損傷および出血、ならびにヒアリン膜に関連する脈管周囲の肺水腫、コラーゲン繊維の増殖、および飲作用の増加による上皮の腫大を特徴とする。本発明の化合物、組成物および方法によってＲＢＣに提供される酸素送達能の増強は、正常よりも低い肺への酸素送達を緩和することにより、ＡＲＤＳの治療および予防において使用することができる。
【０１０９】
本発明の化合物または組成物または方法の使用を魅力的にする心臓バイパス手術の態様がいくつかある。第１に、本発明の化合物および組成物は、神経保護剤として作用することができる。心臓バイパス手術後、患者の最大５０％は、認知機能の試験に基づく脳虚血の兆候をいくつか示す。これらの患者の最大５％は、脳卒中の痕跡を示す。第２に、心停止法は、心臓手術中、心臓を停止させ、心臓を虚血から保護するプロセスである。心停止法は、冠血管に塩化カリウムの溶液を灌流させ、氷水中に心臓を浸すことによって実施される。しかしながら、血液心停止法もまた使用される。これは、塩化カリウムが、塩水の代わりに血液中に溶解されている場合である。手術中、心臓からは酸素が奪われ、冷温が代謝の減速に役立つ。このプロセス中、周期的に、心臓に心停止液を灌流させて代謝産物および反応種を洗い流す。血液を冷却することによりヘモグロビンの酸素親和性を上昇させ、よって、酸素放出の効率を低くする。しかしながら、本発明の化合物または組成物であらかじめ処理し、その後精製したＲＢＣまたは全血による血液心停止法の治療は、酸素親和性に対する冷温の効果を相殺し、虚血心筋への酸素放出をより効率的にすることができ、それにより、心臓が再度拍動し始めた後の心機能を改善する。第３に、バイパス手術中、患者の血液は、ポンプ充填(pump prime)のプロセスのために希釈される。この血液希釈は、本質的には急性貧血である。本発明の化合物および組成物は、酸素輸送をより効率的にするため、血液希釈中におけるそれらの使用は、（バイパス手術であるか、整形外科または血管等の他の手術であるかにかかわらず）さもなければ損なわれた状態において組織の酸素化を増強するであろう。さらに、本発明の化合物および方法はまた、血管形成術を受けており、例えばこの方法において使用される染料による急性虚血性傷害を経験し得る患者において有用である。
【０１１０】
最近では、Ｎｉｃｏｌａｕら（米国特許出願公開第２００６／０２５８６２６号）が、ＶＥＧＦ発現を低下させるイノシトールトリピロリン酸の能力を実証した。ＶＥＧＦは、生理的血管新生における重大な律速段階を表し、ＶＥＧＦはまた、腫瘍増殖に関連する血管新生等の病的血管新生においても重要である（２０）。ＶＥＧＦはまた、血管漏出を誘発するその能力に基づいて、血管透過性因子としても知られている（２１）。数種の固形腫瘍は、多量のＶＥＧＦを産生し、これが内皮細胞の増殖および移動を刺激し、それによって新血管形成を誘発する（２１、３０）。ＶＥＧＦ発現は、様々な種類のヒト癌の予後に著しく影響を及ぼすことが示されている。腫瘍中の酸素圧は、ＶＥＧＦ遺伝子の発現を調節する上で主要な役割を有する。ＶＥＧＦ  ｍＲＮＡ発現は、多様な病態生理学的状況下、低酸素圧への暴露によって誘発される（２１）。増殖する腫瘍は低酸素を特徴とし、これが、ＶＥＧＦの発現を誘発し、転移性疾患の発生の予測因子にもなり得る。したがって、本発明の化合物および組成物は、ＶＥＧＦ発現の下方制御においても有用となり得、癌等の血管新生関連疾患を治療する際に使用することができる。
【０１１１】
（細胞シグナル伝達類似体としての使用）
多様な細胞表面受容体の活性化は、イノシトール１，４，５−三リン酸およびジアシルグリセロールの同時形成とともに、副次的な原形質膜リン脂質ホスファチジルイノシトール４，５−二リン酸のホスホリパーゼＣ触媒加水分解をもたらす（４）。イノシトール１，４，５−三リン酸は、小胞体に関連する貯蔵からＣａ２＋を放出する重大な第２メッセンジャーであること、ならびにこのような細胞質ゾルＣａ２＋シグナルは、細胞増殖および発育、受精、分泌、平滑筋収縮、知覚、および神経調節を含む多種多様な細胞応答を誘発することが認識されている（２４、２５）。しかしながら、キナーゼ、ホスファターゼ、および受容体を含み、それによってイノシトール中間体がこのシグナル伝達を促進する代謝経路は、図２に示されている通り、驚くほど複雑である。実際には、イノシトールの他のポリリン酸化形態が、重大な細胞内メッセンジャーとしての役割、またはおそらくタンパク質リン酸化における独自の役割を果たし得るという認識が増加しつつある（２６、２７）。イノシトール（１，４，５）−三リン酸に対するイノシトール三リン酸受容体の高親和性は、細胞および組織抽出物からイノシトール三リン酸の質量を数量化するための単純な放射性受容体アッセイの開発を可能にした（２８）。このメッセンジャー、ならびにその脂質前駆体およびそのキナーゼ由来の生成物イノシトール四リン酸についての質量アッセイの利用しやすさは、これらの細胞内経路の最近の研究において、およびこのシグナル伝達経路を使用する膨大な数のＧＰＣＲの評価においては、非常に貴重であった（２４）。
【０１１２】
イノシトール受容体特異的リガンドを開発することができるか、またはイノシトールを代謝する酵素の細胞透過性阻害剤が有用な治療剤であることが判明するか否かを判断するために、このシグナル伝達経路およびその関連タンパク質についてのより良い理解が必要となる（２４）。本発明によって提供されるポリリン酸化誘導体およびピロリン酸イノシトール誘導体が容易に合成できることは、このシグナル伝達経路をさらに理解し、有効な治療標的を特定および設計する上で有用となる。
【０１１３】
（製剤および医薬組成物）
本明細書に記載されている化合物および組成物は、既知の技術を使用して、生理的に許容可能な製剤として提供することができ、この製剤は、標準的な経路によって投与することができる。概して、組成物は、局所、経口、直腸、経鼻、吸入、または非経口（例えば、静脈内、皮下、筋肉内、皮内、眼内、気管内、もしくは硬膜外）経路によって投与することができる。加えて、組成物をポリマー中に組み込んで持続放出を可能にすることができ、ポリマーは、送達が所望される場所の近傍、例えば、腫瘍部位、または眼内もしくはその付近に埋め込まれてもよく、またポリマーは、組成物の類似体の全身送達をもたらすために、例えば、皮下もしくは筋肉内に埋め込まれるか、または静脈内もしくは腹腔内に送達されてもよい。本発明において有用な治療剤の制御された長時間放出のための他の製剤は、米国特許第６，７０６，２８９号において開示されている。
【０１１４】
本発明の一部として企図される製剤は、米国特許出願第１０／３９２，４０３号（公開第２００４／００３３２６７号）に開示されている方法によって作製されるナノ粒子製剤を含む。ナノ粒子を形成することにより、本明細書において開示されている組成物は、バイオアベイラビリティが増大していることが示されている。好ましくは、本発明の化合物の粒子は、光散乱法、顕微鏡検査法、または当業者に既知である他の適切な方法によって計測した場合、約２ミクロン未満、約１９００ｎｍ未満、約１８００ｎｍ未満、約１７００ｎｍ未満、約１６００ｎｍ未満、約１５００ｎｍ未満、約１４００ｎｍ未満、約１３００ｎｍ未満、約１２００ｎｍ未満、約１１００ｎｍ未満、約１０００ｎｍ未満、約９００ｎｍ未満、約８００ｎｍ未満、約７００ｎｍ未満、約６００ｎｍ未満、約５００ｎｍ未満、約４００ｎｍ未満、約３００ｎｍ未満、約２５０ｎｍ未満、約２００ｎｍ未満、約１５０ｎｍ未満、約１００ｎｍ未満、約７５ｎｍ未満、または約５０ｎｍ未満の有効平均粒径を有する。
【０１１５】
本発明に従う製剤は、錠剤、カプセル、ロゼンジ錠、カシェ剤、溶液、懸濁液、エマルション、散剤、エアロゾル、坐剤、スプレー、香錠、軟膏、クリーム、ペースト、フォーム、ゲル、タンポン、ペッサリー、顆粒剤、ボーラス、洗口液、または経皮貼布の形態で投与することができる。
【０１１６】
製剤は、経口、直腸、経鼻、吸入、局所（皮膚、経皮、口腔内、および舌下を含む）、膣内、非経口（皮下、筋肉内、静脈内、皮内、眼内、気管内、および硬膜外を含む）、または吸入投与に適切なものを含む。製剤は、好都合なことに、単位剤形で提示することができ、従来の医薬技術によって調製することができる。そのような技術は、活性成分と医薬担体または賦形剤とを組み合わせるステップを含む。概して、製剤は、活性成分を液体担体もしくは微粉化した固体担体またはその両方と均一かつ緊密に組み合わせ、その後、必要に応じて、生成物を成形することによって調製される。
【０１１７】
経口投与に適した本発明の製剤は、それぞれが所定量の活性成分（１種または複数）を含有するカプセル、カシェ剤、または錠剤等の別個の単位として、散剤または顆粒剤として、水性液体または非水性液体中の溶液または懸濁液として、あるいは、水中油型液体エマルションまたは油中水型エマルション等として提示することができる。
【０１１８】
錠剤は、場合によって１種または複数の副成分とともに圧縮または成型することにより、作製することができる。圧縮錠は、場合によって結合剤、潤滑剤、不活性希釈剤、保存剤、界面活性剤、または分散剤と混合された散剤または顆粒剤等の自由流動形態の活性成分を適切な機械で圧縮することにより、調製することができる。成型錠は、不活性液体希釈剤で湿らせた粉末化化合物（１種または複数）の混合物を、適切な機械で成型することにより、作製することができる。錠剤は、場合によって、コーティングするかまたは刻み目を付けてよく、錠剤中の活性成分の徐放または制御放出を提供するように製剤化することができる。
【０１１９】
口内への局所投与に適した製剤は、風味付けした基剤、通常はスクロースおよびアラビアゴムまたはトラガカント中に成分を含むロゼンジ錠、ゼラチンおよびグリセリン等の不活性基剤またはスクロースおよびアラビアゴム中に活性成分を含む香錠、ならびに適切な液体担体中で投与される成分を含む洗口液を含む。
【０１２０】
皮膚への局所投与に適した製剤は、薬学的に許容可能な担体中で投与される成分を含む軟膏、クリーム、ゲル、またはペーストとして提示することができる。一実施形態において、局所送達システムは、投与される成分を含有する経皮貼布である。
【０１２１】
直腸投与用の製剤は、例えば、カカオ脂またはサリチラートを含む適切な基剤を用いて坐剤として提示することができる。
【０１２２】
経鼻投与に適した製剤は、担体が固体である場合、薬用粉末を摂取する様式で、すなわち鼻に近づけて保持された粉末の容器からの鼻孔を介する迅速な吸入により投与される、例えば２０〜５００ミクロンの範囲内の粒径を有する粗粉末を含む。例えば鼻腔用スプレーまたは点鼻薬としての投与に適切な製剤は、担体が液体である場合、活性成分の水性または油性溶液を含む。
【０１２３】
膣内投与に適した製剤は、活性成分に加えて、適切であることが当該技術分野において既知である担体等の成分を含有する、ペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、フォーム、またはスプレー製剤として提示することができる。
【０１２４】
吸入に適した製剤は、活性成分に加えて、適切であることが当該技術分野において既知である担体等の成分を含有する、ミスト、ダスト、粉末、またはスプレー製剤として提示することができる。
【０１２５】
非経口投与に適した製剤は、酸化防止剤、緩衝剤、静菌剤、およびこの製剤を対象レシピエントの血液と等張にする溶質を含有し得る水性および非水性無菌注射液、ならびに懸濁化剤および増粘剤を含み得る水性および非水性無菌懸濁液を含む。非経口投与に適した製剤は、（それだけに限らないが）低ミクロンまたはナノメートル（例えば、平均断面積が、２０００ナノメートル未満、好ましくは１０００ナノメートル未満、最も好ましくは５００ナノメートル未満、特に７５ナノメートル未満）サイズの粒子であって、２−メトキシエストラジオール類似体および／または１種もしくは複数の抗癌剤を単独で、あるいは副成分と組み合わせて、または持続放出用のポリマー中に含有する粒子を含む、抗血管新生剤の粒子製剤を含む。製剤は、単位用量または複数回用量の容器、例えば、密閉されたアンプルおよびバイアル中に提示することができ、使用直前に、無菌液体担体、例えば注射用水を添加するだけでよいフリーズドライ（凍結乾燥）状態で貯蔵することができる。既に記載した種類の無菌散剤、顆粒剤、および錠剤から、即席の注射液および懸濁液を調製することができる。
【０１２６】
本発明の製剤は、具体的に上述した成分に加えて、当該製剤の種類を考慮して、当技術分野で慣行の他の作用物質を含み得ること、例えば、経口投与に適した製剤は矯味剤を含んでよく、ナノ粒子製剤（例えば、平均断面積が、２０００ナノメートル未満、好ましくは１０００ナノメートル未満、最も好ましくは５００ナノメートル未満、特に７５ナノメートル未満）は、粒子凝集を防止するために選択された１種または１種を超える賦形剤を含んでよいことを理解すべきである。
【０１２７】
（本発明の化合物）
一実施形態において、ポリリン酸化シクリトール誘導体はポリリン酸化イノシトールである。ポリリン酸化イノシトールは、１種または複数の遊離ヒドロキシル基またはヒドロキシル誘導体基を含み得る。遊離ヒドロキシル基またはヒドロキシル誘導体基は、立体選択的または非立体選択的な様式で合成することができる。イノシトールのすべての配座異性体のポリリン酸化誘導体が本発明に包含される。
【０１２８】
別の実施形態において、シクリトールのピロリン酸誘導体はイノシトールのピロリン酸誘導体である。ピロリン酸誘導体は、モノピロリン酸、ビスピロリン酸、またはトリスピロリン酸イノシトールであってよい。本発明のシクリトールピロリン酸、特にイノシトールピロリン酸は、その対応するホスホルイミドまたはチオピロリン酸に変換できる。イノシトールのすべての配座異性体のピロリン酸誘導体が本発明に包含される。
【０１２９】
以下のスキーム１〜７および実験的記述は、本発明の化合物を調製するために使用できる合成方法を概説する。以下で概説される合成変換は、所望の反応を実現するように機能する多様な代替試薬によって行い得ることが理解される。
【０１３０】
（シクリトールのポリリン酸エステル）
活性化剤の存在下、シクリトールとリン酸化剤との反応により、保護されたポリリン酸化誘導体を得て、その後、これを脱保護し、得られたポリリン酸化シクリトールを最適に単離し、精製し、そのナトリウム塩として保存する。アンモニウム塩、またはアルカリ土類金属、アルカリ性土類金属、もしくは有機カチオンの塩等の他の塩を調製し、同様の目的に供してよい。
【０１３１】
これらのポリリン酸化誘導体を調製するための合成経路は、スキーム２の化合物１０および１１、スキーム４の化合物８および９、ならびにスキーム５の化合物１および２の調製において以下に記載する。
【０１３２】
さらに、アルコキシ、アシルオキシ、またはアリールオキシ化合物等、正確に配置された遊離ヒドロキシル基またはその誘導体を含有するシクリトールの選択的にリン酸化された誘導体を調製することが可能である。本発明のシクリトールの選択的にリン酸化された誘導体はまた、ピニトール、クエブラキトール、およびボルネシトール等の−ＯＭｅ誘導体；クエルシトール等の、ヒドロキシル基のうちの１つが除去されたシクロヘキサン−ペントール；および２個のヒドロキシル基が除去されたシクロヘキサン−テトラオールも含む。これらの化合物はまた、上記に示したような塩の形態で調製してもよい。
【０１３３】
本発明によって開示されている選択的にリン酸化されたシクリトールの調製のための合成経路は、スキーム１、２、３および４に要約されている。スキーム１、２および３は、遊離ヒドロキシル、アルコキシ、アリールオキシ、およびアシルオキシ基を含有するポリリン酸化シクリトールの調製を示す。スキーム４は、保護された２，４，６−三リン酸の調製を示す。特定の事例において、保護基の性質または上記反応の順序は、所望の生成物に到達するために変更しなくてはならない場合がある。一般合成スキームに対するこれらの変更は、当業者には十分に理解されるであろう。これらの合成経路は、イノシトールの配座異性体すべてに適用可能である。
【０１３４】
スキーム１および２において、保護されたジオールシクリトール誘導体が、ＮａＨ、ＤＭＦ、およびヨウ化アルキルまたは臭化アリールと反応し、ジアルキルまたはジアリールエーテルが得られる。その後、ジアルキルまたはジアリールエーテルをトリフルオロ酢酸と反応させ、テトラオールを得る。次に、テトラオールをアセトニトリル中のテトラゾール、およびジベンジルＮ，Ｎ−ジイソプロピルホスホロアミダイトと反応させ、続いて、ＣＨ２Ｃｌ２中のｍ−クロロ−過安息香酸を添加することにより、テトラオールを四リン酸エステルに変換する。その後、パラジウム触媒を使用して四リン酸エステルを水素化し、対応するナトリウム塩を調製する。
【化１６】
2010514772.tif 000018
【化１７】
2010514772.tif 000019
【０１３５】
スキーム３において、２，４，６−Ｏ−トリアシル−イノシトールに、テトラゾール、続いてジベンジルＮ，Ｎ−ジイソプロピルホスホロアミダイトおよびｍ−クロロ過安息香酸を添加し、化合物１０を生成する（スキーム３に示す）。次に、パラジウム触媒を使用して化合物１０を水素化し、１，３，５−（２，４，６−トリ−Ｏ−アシル）−イノシトール三リン酸六ナトリウムを生成する。
【化１８】
2010514772.tif 000020
【０１３６】
スキーム４において、イノシトールモノオルトギ酸をテトラゾールおよびジベンジルＮ，Ｎ−ジイソプロピルホスホロアミダイトおよびｍ−クロロ過安息香酸と反応させ、化合物８を得る（スキーム４に示す）。パラジウム触媒を使用して化合物８を水素化し、２，４，６−三リン酸イノシトールのオルトギ酸エステルを得る。
【０１３７】
以下のスキーム６に記載されているように、その対応するピロリン酸誘導体の加水分解および加アルコール分解から、ポリリン酸シクリトール誘導体を誘導することも可能である。
【化１９】
2010514772.tif 000021
【０１３８】
（シクリトールのピロリン酸エステル）
上記のシクリトールポリリン酸は、ジシクロヘキシルカルボジイミド等の作用物質または関連する作用物質を使用する脱水により、環状ピロリン酸基を含有する誘導体に変換することができる。この変換は、全体的であってもよく、あるいは、リン酸およびピロリン酸官能基の両方を含有する化合物を得てもよい。得られた化合物を最適に単離し、精製し、そのナトリウム塩として保管する。アンモニウム塩、またはアルカリ土類金属、アルカリ性土類金属、もしくは有機カチオンの塩等の他の塩を調製し、同様の目的に供してよい。完全にリン酸化されたイノシトール化合物を使用して、（＋）もしくは（−）−カイロ−イノシトール、エピ−イノシトール、シロ−イノシトール、アロ−イノシトール、ムコ−イノシトール、ネオ−イノシトール、またはミオ−イノシトールのトリスピロリン酸エステル等の、１、２または３個のピロリン酸誘導体を含有する化合物を誘導することができる。
【０１３９】
本発明によって開示されているピロリン酸誘導体の調製のための合成経路は、スキーム５、６および７に要約されている。スキーム５は、シロ−イノシトールのトリスピロリン酸六ナトリウムの調製を示す。スキーム６は、どのようにして、シクリトールのトリピロリン酸エステルの加水分解および加アルコール分解により、非立体選択的な様式でビスピロリン酸エステルおよびポリリン酸誘導体を得ることができるかを示す。スキーム７は、どのようにして、ビスピロリン酸シクリトールを立体選択的な様式で調製することができるかを示す。特定の事例において、所望の生成物に到達するために、ステップの順序または試薬を変更することが必要になる場合がある。一般合成スキームに対するこれらの変更は、当業者には良く理解されるであろう。これらの合成経路は、イノシトールの配座異性体すべてに適用可能である。
【０１４０】
スキーム５において、イノシトールを、テトラゾール、ジベンジルＮ，Ｎ−ジイソプロピルホスホロアミダイトと反応させ、イノシトールヘキサキス（ジベンジルホスファート）を得る。その後、パラジウム触媒を使用してイノシトールヘキサキス（ジベンジルホスファート）を水素化し、イノシトール六リン酸を得る。脱ベンジル化生成物をトリエチルアンモニウム中に溶解し、イノシトール六リン酸のヘキサトリエチルアンモニウム塩を生成する。その後、イノシトール六リン酸の塩を１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミドと反応させ、シロ−イノシトールの１，２：３，４：５，６−トリスピロリン酸ヘキサトリエチルアンモニウム塩を得る。その後、そのナトリウム形態のＤｏｗｅｘ樹脂上での交換により、この塩を対応する六ナトリウム塩に変換する。
【化２０】
2010514772.tif 000022
【０１４１】
スキーム６において、イノシトールトリスピロリン酸をＤｏｗｅｘ  ５０ＷＸ８−２００カラムに通過させ、酸分画をプールする。反応の完了後、ｐＨを約７に調整し、部分的にリン酸化された加水分解生成物の混合物を得る。あるいは、イノシトールトリスピロリン酸を、アルコールの存在下、塩化アセチルと反応させ、スキーム６の化合物６および７によって示されているような、ピロリン酸開環生成物(open pyrophosphate product)の混合物を得てもよい。
【化２１】
2010514772.tif 000023
【０１４２】
スキーム７において、ミオ−イノシトールを、ＰＴＳＡの存在下、シクロヘキサノンと縮合させ、１，２−シクロヘキシリデン ミオ−イノシトールを得て、これを臭化ベンジルおよびＮａＨで処理し、完全に保護されたミオ−イノシトールを得る。その後、シクロヘキシリデン基を除去し、続いてアシル化し、ジアシル化生成物を得る。次に、脱ベンジル化によってテトラオールを得て、これをリン酸化、続いて酸化し、テトラキス（ジベンジルホスファート）誘導体を得る。Ｎ，Ｎ−ジメチルシクロヘキシルアミンの存在下Ｐｄ／Ｃによる脱ベンジル化、続いてＤＣＣを用いた縮合により、ビスピロリン酸誘導体をもたらす。ビスピロリン酸誘導体の鹸化、続いてリン酸化／酸化により、ベンジル保護ビスピロリン酸二リン酸誘導体を得る。最後に、脱ベンジル化、続いてナトリウムイオン交換により、所望のビスピロリン酸二リン酸誘導体のナトリウム塩５を得る（スキーム７）。同様の合成戦略を使用して、１つのみのピロリン酸基ならびに４つのホスファート基および／またはリン酸エステル基を含有する誘導体を調製することもできる。
【化２２】
2010514772.tif 000024
【０１４３】
（シクリトールのホスホルイミド誘導体およびチオピロリン酸誘導体）
シクリトールピロリン酸、特にイノシトールトリスピロリン酸は、一連の開環／閉環反応により、その対応するホスホルイミドまたはチオピロリン酸エステルに変換することができる。例えば、環状ピロリン酸を一般式Ｒ−ＮＨ２のアミンで開環することによりホスホロアミダートを得て、続いてＤＣＣのような作用物質を用いてホスホロアミダートを閉環することにより、対応するホスホルイミドを得ることができる。あるいは、環状ピロリン酸を金属硫化物（ＮａＳＨまたはＮａ２Ｓ等）を用いて開環し、チオリン酸基（−ＰＯ２−ＳＨ）およびリン酸基（ＰＯ３）の混合を含む化合物を生成し、その後、脱水剤を使用して閉環して環状形態−ＰＯ２−Ｓ−ＰＯ２−に戻し、チオピロリン酸エステルを得てもよい。これらの化合物の一般構造は式Ｉに提供されており、
【化２３】
2010514772.tif 000025
【０１４４】
式中、Ｘ＝Ｏはトリスピロリン酸エステルを示し、Ｘ＝ＮＲはトリスホスホルイミドを示し、Ｘ＝Ｓはトリスチオピロリン酸エステルを示す。ホスホルイミドの場合、Ｒは、Ｈ、および有機残基、式ＣｎＨ２ｎ＋１の炭化水素鎖、または、酸素等のヘテロ原子を含有する鎖もしくは基であってよい。
【０１４５】
本明細書に記載されている合成手順のいずれかにおいて必要な場合、適切な保護基を使用してよい。保護基の例は、「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」‐第３版（Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ、Ｐ．Ｇ．Ｍ  Ｗｕｔｓ、Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、ＮＹ、１９９９）を含む文献において見ることができる。本発明は下記実施例の参照によりさらに容易に理解されるが、これらの実施例は例示するものとして提供されており、本発明の限定を意図しない。
【実施例】
【０１４６】
（実験例）
１，６：３，４−ビス−［Ｏ−（２，３−ジメトキシブタン−２，３−ジイル）］−２，５−ジ−Ｏ−メチル−ミオ−イノシトール（スキーム１、化合物２）
ジオール（スキーム１、化合物１）（４９０ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）を高真空下で８時間乾燥させた。その後、乾燥ＤＭＦ（１０ｍＬ）をＮ２雰囲気下で添加し、得られた懸濁液を０℃まで冷却した。９０％ＮａＨ（１２０ｍｇ、４．８ｍｍｏｌ）を一度に添加し、得られたスラリーを同じ温度で１時間攪拌した。ヨウ化メチル（２６０μＬ、４．２ｍｍｏｌ）を滴下添加し、混合物を室温で１２時間攪拌し続けた。その後、ＭｅＯＨ（３００μＬ）をゆっくり添加し、混合物を室温で１時間攪拌し続けた。ＣＨ２Ｃｌ２（２５ｍＬ）を添加し、反応混合物を水（２５ｍＬ）で洗浄した。水相をＣＨ２Ｃｌ２（２５ｍＬ）で逆抽出し、合わせた有機相を飽和ブライン（２５ｍＬ）で洗浄し、乾燥させた（ＭｇＳＯ４）。溶媒を減圧下除去し（３０〜５５℃）、残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘプタン→ヘプタン中３０％酢酸エチル）によって精製し、ジメチルエーテル（スキーム１、化合物２）（５００ｍｇ、９６％）を白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）：δ  ３．９９（ｄｄ，Ｊ＝１０．２，９．６Ｈｚ，２Ｈ）、３．６３（ｓ，３Ｈ）、３．５７（ｓ，３Ｈ）、３．５５（ｔ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ）、３．５２（ｄｄ，Ｊ＝１０．２Ｈｚ，２．３Ｈｚ，２Ｈ）、３．２８（ｔ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，１Ｈ，不明瞭）、３．２８（ｓ，６Ｈ）、３．２５（ｓ，６Ｈ）、１．３０（ｓ，６Ｈ）、１．２９（ｓ，６Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１００ＭＨｚ）：δ  ９９．５、９８．９、７９．９、７７．８、６９．７、６９．４、６０．８、６０．４、４７．９、４７．７、１７．８、１７．６；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｅ  Ｃ２０Ｈ３６ＮａＯ１０についての計算値［（Ｍ＋Ｎａ）＋］：４５９．２２０１、実測値：４５９．２２０３。
【０１４７】
２，５−ジ−Ｏ−メチル−ミオ−イノシトール（スキーム１、化合物３）
ジメチルエーテル（スキーム１、化合物２）（４７０ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）を９０％トリフルオロ酢酸水溶液（５ｍＬ）中に溶解し、混合物を室温で２時間攪拌した。揮発物を減圧下除去した（４０℃）後、無水エタノール（１０ｍＬ）を添加し、溶媒を再度減圧下除去した。この手順を３回繰り返し、テトラオール（スキーム１、化合物３）（２２０ｍｇ）を白色固体として得た。この物質を、それ以上精製することなく次の反応において使用した。融点２６８〜２７０（ＥｔＯＨ）；１Ｈ  ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，４００ＭＨｚ）：δ  ３．６４（ｔ，Ｊ＝２．６Ｈｚ，１Ｈ）、３．５７−３．４７（ｍ，４Ｈ）、３．５０（ｓ，３Ｈ）、３．４９（ｓ，３Ｈ）、２．９３（ｔ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，１００ＭＨｚ）：δ  ８４．１、８２．５、７１．８、７１．５、６２．１、５９．５；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｅ  Ｃ８Ｈ１６ＬｉＯ６についての計算値［（Ｍ＋Ｌｉ）＋］：２１５．１１０２、実測値：２１５．１１３３。
【０１４８】
オクタベンジル１，３，４，６−（２，５−ジ−Ｏ−メチル−ミオ−イノシチル）四リン酸（スキーム１、化合物４）
テトラオール（スキーム１、化合物３）（２２０ｍｇ）を高真空下で２４時間乾燥させた。その後、アセトニトリル中のテトラゾールの０．４５Ｍ溶液（２８．３ｍＬ、１２．７ｍｍｏｌ）およびジベンジルＮ，Ｎ−ジイソプロピルホスホロアミダイト（２．３ｍＬ、６．８ｍｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下、室温で添加した。得られたスラリーを室温で２４時間激しく攪拌した。ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）を添加し、混合物を−４０℃まで冷却した。ＣＨ２Ｃｌ２（１４ｍＬ）中の７０％ｍ−クロロ−過安息香酸（２．２５ｇ、９．１ｍｍｏｌ）の溶液を滴下添加し、混合物を０℃で５時間攪拌し続けた。その後、混合物をＣＨ２Ｃｌ２（１２０ｍＬ）で希釈し、亜硫酸ナトリウムの１０％水溶液（２×８０ｍＬ）、重炭酸ナトリウムの飽和水溶液（２×６０ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（６０ｍＬ）および飽和ブライン（６０ｍＬ）で連続的に洗浄した。有機相を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を減圧下除去した（３０℃）。得られた残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘプタン→ヘプタン中６０％酢酸エチル）によって精製し、四リン酸エステル（スキーム１、化合物４）（１．２０ｇ、２からの全収率９１％）を濃厚な無色油状物質として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）：δ  ７．３５−７．２６（ｍ，４０Ｈ）、５．１６−５．００（ｍ，１６Ｈ）、４．９４（ｑ，Ｊ＝９．４Ｈｚ，２Ｈ）、４．５０（ｂｓ，１Ｈ）、４．２５（ｄｄｄ，３ＪＨＨ＝９．６，２．３Ｈｚ，３ＪＨＰ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ）、３．５７（ｓ，３Ｈ）、３．５０（ｓ，３Ｈ）、３．２５（ｔ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，１Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１００ＭＨｚ）：δ  １３５．４（ｄ，３ＪＣＰ＝６．９Ｈｚ，２Ｃ）、１３５．１（ｄ，３ＪＣＰ＝６．９Ｈｚ）、１３５．０（ｄ，３ＪＣＰ＝６．９Ｈｚ）、１２８．００、１２７．９８、１２７．９、１２７．７５、１２７．７１、１２７．６、１２７．５、１２７．３２、１２７．２５、８０．２、７７．６、７６．２（ｔ，２ＪＣＰ＝６．９Ｈｚ）、７５．２、６９．３（ｄ，３ＪＣＰ＝５．３Ｈｚ）、６９．０（ｄ，３ＪＣＰ＝５．３Ｈｚ）、６８．８（ｄ，３ＪＣＰ＝６．１Ｈｚ）、６８．７（ｄ，３ＪＣＰ＝５．３Ｈｚ）、５９．６、５９．２；３１Ｐ  ＮＭＲ（１６２ＭＨｚ）：δ  −１．２、−１．７；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｅ  Ｃ６４Ｈ６８ＮａＯ１８Ｐ４についての計算値［（Ｍ＋Ｎａ）＋］：１２７１．３２４８、実測値：１２７１．３４３４。
【０１４９】
１，３，４，６−（２，５−ジ−Ｏ−メチル−ミオ−イノシチル）四リン酸四ナトリウム（スキーム１、化合物５）
四リン酸エステル（スキーム１、化合物４）（１３０ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）を、エタノールおよびＨ２Ｏの１：１混合物（１０ｍＬ）中に溶解した。得られたエマルションに、重炭酸ナトリウム（３４ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ）、続いて１０％Ｐｄ／Ｃ（１００ｍｇ）を添加した。この混合物を、Ｈ２雰囲気（１気圧）下、室温で２４時間激しく攪拌し続けた。ＬＣＲ／ＰＴＦＥ親水性膜（０．５μｍ）に通すろ過によって触媒を除去し、膜をエタノールおよびＨ２Ｏの１：１混合物（３×１０ｍＬ）で洗浄した。合わせたろ液を減圧下蒸発させ（６０℃）、得られた残渣を高真空下で２４時間乾燥させ、四ナトリウム塩（スキーム１、化合物５）をガラス状の白色固体（６０ｍｇ、９７％）として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，４００ＭＨｚ）：δ  ４．２７（ｑ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，２Ｈ）、４．０５（ｔ，Ｊ＝１０．１Ｈｚ，２Ｈ）、３．８８（ｓ，１Ｈ）、３．６０（ｓ，３Ｈ）、３．５４（ｓ，３Ｈ）、３．２６（ｔ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，１Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，１００ＭＨｚ）：δ  ８３．２、８１．２、７５．６、７４．０、６１．９、５９．９。
【０１５０】
１，６：３，４−ビス−［Ｏ−（２，３−ジメトキシブタン−２，３−ジイル）］−２，５−ジ−Ｏ−エチル−ミオ−イノシトール（スキーム１、化合物６）
ジオール（スキーム１、化合物１）（４９０ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）を高真空下で８時間乾燥させた。その後、乾燥ＤＭＦ（１０ｍＬ）をＮ２雰囲気下で添加し、得られた懸濁液を０℃まで冷却した。９０％ＮａＨ（１２０ｍｇ、４．８ｍｍｏｌ）を一度に添加し、得られたスラリーを同じ温度で１時間攪拌した。ヨウ化エチル（３４０μＬ、４．２ｍｍｏｌ）を滴下添加し、混合物を室温で１２時間攪拌し続けた。その後、ＭｅＯＨ（３００μＬ）をゆっくり添加し、混合物を室温で１時間攪拌し続けた。ＣＨ２Ｃｌ２（２５ｍＬ）を添加し、反応混合物を水（２５ｍＬ）で洗浄した。水相をＣＨ２Ｃｌ２（２５ｍＬ）で逆抽出し、合わせた有機相を飽和ブライン（２５ｍＬ）で洗浄し、乾燥させた（ＭｇＳＯ４）。溶媒を減圧下除去し（３０〜５５℃）、残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘプタン→ヘプタン中３０％酢酸エチル）によって精製し、ジエチルエーテル（スキーム１、化合物６）（５５０ｍｇ、９９％）を濃厚な淡黄色油状物質として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）：δ  ３．９２（ｔ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，２Ｈ）、３．７４（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ）、３．６９（ｑ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ）、３．５７（ｔ，Ｊ＝２．２Ｈｚ，１Ｈ）、３．４０（ｄｄ，Ｊ＝１０．２，２．２Ｈｚ，２Ｈ）、３．２２（ｔ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，１Ｈ）、３．２０（ｓ，６Ｈ）、３．１６（ｓ，６Ｈ）、１．２０（２×ｓ，２×６Ｈ）、１．１０（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，６Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１００ＭＨｚ）：δ  ９９．３、９８．７、７８．５、７６．１、６９．７、６９．２、６８．２、６７．３、４７．６、４７．５、１７．７、１７．５、１５．７、１５．５；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｅ  Ｃ２２Ｈ４０ＮａＯ１０についての計算値［（Ｍ＋Ｎａ）＋］：４８７．２５１４、実測値：４８７．２４６６。
【０１５１】
２，５−ジ−Ｏ−エチル−ミオ−イノシトール（スキーム１、化合物７）
ジエチルエーテル（スキーム１、化合物６）（５４０ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）を９０％トリフルオロ酢酸水溶液（５ｍＬ）中に溶解し、混合物を室温で２時間攪拌した。揮発物を減圧下除去した（４０℃）後、無水エタノール（１０ｍＬ）を添加し、溶媒を再度減圧下除去した。この手順を３回繰り返し、テトラオール（スキーム１、化合物７）（２７０ｍｇ）を白色固体として得た。この物質を、それ以上精製することなく次の反応において使用した。１Ｈ  ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，４００ＭＨｚ）：δ  ３．７７−３．６３（ｍ，５Ｈ）、３．５２（ｔ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，２Ｈ）、３．４１（ｄｄ，Ｊ＝１０．２，２．６Ｈｚ，２Ｈ）、２．９６（ｔ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ）；１．０８（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）、１．０５（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，１００ＭＨｚ）：δ  ８２．９、８０．２、７２．１、７１．４、６９．９、６８．５、１４．７；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｅ  Ｃ１０Ｈ２０ＮａＯ６についての計算値［（Ｍ＋Ｎａ）＋］：２５９．１１５２、実測値：２５９．１１４８。
【０１５２】
オクタベンジル１，３，４，６−（２，５−ジ−Ｏ−エチル−ミオ−イノシチル）四リン酸（スキーム１、化合物８）
テトラオール（スキーム１、化合物７）（２７０ｍｇ）を高真空下で２４時間乾燥させた。その後、アセトニトリル中のテトラゾールの０．４５Ｍ溶液（３０．５ｍＬ、１３．７ｍｍｏｌ）およびジベンジルＮ，Ｎ−ジイソプロピルホスホロアミダイト（２．５ｍＬ、７．３ｍｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下、室温で添加した。得られたスラリーを室温で２４時間激しく攪拌した。ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）を添加し、混合物を−４０℃まで冷却した。ＣＨ２Ｃｌ２（１５ｍＬ）中の７０％ｍ−クロロ−過安息香酸（２．４２ｇ、９．８ｍｍｏｌ）の溶液を滴下添加し、混合物を０℃で５時間攪拌し続けた。その後、混合物をＣＨ２Ｃｌ２（１５０ｍＬ）で希釈し、亜硫酸ナトリウムの１０％水溶液（２×１００ｍＬ）、重炭酸ナトリウムの飽和水溶液（２×７５ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（７５ｍＬ）および飽和ブライン（７５ｍＬ）で連続的に洗浄した。有機相を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を減圧下除去した（３０℃）。得られた残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘプタン→ヘプタン中６０％酢酸エチル）によって精製し、四リン酸エステル（スキーム１、化合物８）（１．３１ｇ、６からの全収率９０％）を濃厚な淡黄色油状物質として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）：δ  ７．３０−７．２１（ｍ，４０Ｈ）、５．０８−４．９９（ｍ，１６Ｈ）、４．９０（ｑ，Ｊ＝９．４Ｈｚ，２Ｈ）、４．５５（ｂｓ，１Ｈ）、４．１５（ｄｄｄ，３ＪＨＨ＝９．６，２．０Ｈｚ，３ＪＨＰ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ）、３．７５（ｑ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ）、３．７１（ｑ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ）、３．２７（ｔ，Ｊ＝９．４Ｈｚ，１Ｈ）、１．０７（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）、１．０６（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１００ＭＨｚ）：δ  １３５．９（ｄ，３ＪＣＰ＝７．６Ｈｚ）、１３５．８（ｄ，３ＪＣＰ＝６．９Ｈｚ）、１３５．５（ｄ，３ＪＣＰ＝６．９Ｈｚ）、１３５．４（ｄ，３ＪＣＰ＝６．９Ｈｚ）、１２８．３４、１２８．３２、１２８．３０、１２８．２３、１２８．２１、１２８．１２、１２８．０７、１２８．０１、１２８．０、１２７．８２、１２７．７９、１２７．７７、１２７．７３、１２７．６７、７８．９、７７．６（ｔ，２ＪＣＰ＝７．６Ｈｚ）、７６．５、７５．６（ｔ，２ＪＣＰ＝４．２Ｈｚ）、６９．６（ｄ，３ＪＣＰ＝６．１Ｈｚ）、６９．５、６９．４（ｄ，３ＪＣＰ＝５．３Ｈｚ）、６９．３（ｄ，３ＪＣＰ＝５．３Ｈｚ）、６９．２（ｄ，３ＪＣＰ＝５．３Ｈｚ）、６７．７、１５．５、１４．７；３１Ｐ  ＮＭＲ（１６２ＭＨｚ）：δ  −１．５、−１．７；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｅ  Ｃ６６Ｈ７３Ｏ１８Ｐ４についての計算値［（Ｍ＋Ｈ）＋］：１２７７．３７４２、実測値：１２７７．３８５４。
【０１５３】
１，３，４，６−（２，５−ジ−Ｏ−エチル−ミオ−イノシチル）四リン酸四ナトリウム（スキーム１、化合物９）
四リン酸エステル（スキーム１、化合物８）（３２０ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）を、エタノールおよびＨ２Ｏの１：１混合物（２０ｍＬ）中に溶解した。得られたエマルションに、重炭酸ナトリウム（８４ｍｇ、１ｍｍｏｌ）、続いて１０％Ｐｄ／Ｃ（２５０ｍｇ）を添加した。この混合物を、Ｈ２雰囲気（１気圧）下、室温で２２時間激しく攪拌し続けた。ＬＣＲ／ＰＴＦＥ親水性膜（０．５μｍ）に通すろ過によって触媒を除去し、膜をエタノールおよびＨ２Ｏの１：１混合物（３×１０ｍＬ）で洗浄した。合わせたろ液を減圧下蒸発させ（６０℃）、得られた残渣を高真空下で２４時間乾燥させ、四ナトリウム塩（スキーム１、化合物９）をガラス状の白色固体（１６０ｍｇ、９９％）として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，４００ＭＨｚ）：δ  ４．２６（ｑ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ）、４．０４（ｔ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ）、４．００（ｓ，１Ｈ）、３．７８（ｑ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ）、３．７４（ｑ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ）、３．３１（ｔ，Ｊ＝９．４Ｈｚ，１Ｈ）、１．１１（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）、１．１０（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，１００ＭＨｚ）：δ  ８０．４、７８．５、７６．５、７４．５、６９．９、６８．５、１４．８。
【０１５４】
１，６：３，４−ビス−［Ｏ−（２，３−ジメトキシブタン−２，３−ジイル）］−２，５−ジ−Ｏ−ブチル−ミオ−イノシトール（スキーム２、化合物１０）
ジオール（スキーム２、化合物１）（４９０ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）を高真空下で８時間乾燥させた。その後、乾燥ＤＭＦ（１０ｍＬ）をＮ２雰囲気下で添加し、得られた懸濁液を０℃まで冷却した。９０％ＮａＨ（１２０ｍｇ、４．８ｍｍｏｌｅｓ）を一度に添加し、得られたスラリーを同じ温度で１時間攪拌した。ヨウ化ブチル（４８０μＬ、４．２ｍｍｏｌ）を滴下添加し、混合物を室温で１２時間攪拌し続けた。その後、ＭｅＯＨ（３００μＬ）をゆっくり添加し、混合物を室温で１時間攪拌し続けた。ＣＨ２Ｃｌ２（２５ｍＬ）を添加し、反応混合物を水（２５ｍＬ）で洗浄した。水相をＣＨ２Ｃｌ２（２５ｍＬ）で逆抽出し、合わせた有機相を飽和ブライン（２５ｍＬ）で洗浄し、乾燥させた（ＭｇＳＯ４）。溶媒を減圧下除去し（３０〜５５℃）、残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘプタン→ヘプタン中３０％酢酸エチル）によって精製し、ジブチルエーテル（スキーム２、化合物１０）（６１０ｍｇ、９８％）を濃厚な黄色油状物質として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）：δ  ３．９５（ｔ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，２Ｈ）、３．７３（ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，２Ｈ）、３．６６（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ）、３．５６（ｔ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ）、３．４２（ｄｄ，Ｊ＝１０．２，２．３Ｈｚ，２Ｈ）、３．２４（ｔ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ）、３．２３（ｓ，６Ｈ）、３．２０（ｓ，６Ｈ）、１．５５−１．４６（ｍ，４Ｈ）、１．４２−１．３２（ｍ，４Ｈ）、１．２４（ｓ，１２Ｈ）、０．８７（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，３Ｈ）、０．８７（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１００ＭＨｚ）：δ  ９９．４、９８．８、７８．５、７６．５、７２．５、７２．０、６９．８、６９．３、４７．７、４７．５、３２．３、３２．２、１９．１、１９．０、１７．８、１７．５、１３．９、１３．７；ＨＲＭＳ（ＥＳＬ）：ｍ／ｅ  Ｃ２６Ｈ４８ＮａＯ１０についての計算値［（Ｍ＋Ｎａ）＋］：５４３．３１４０、実測値：５４３．３１１２。
【０１５５】
２，５−ジ−Ｏ−ブチル−ミオ−イノシトール（スキーム２、化合物１１）
ジブチルエーテル（スキーム１、化合物１０）（６００ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）を９０％トリフルオロ酢酸水溶液（５ｍＬ）中に溶解し、混合物を室温で２時間攪拌した。揮発物を減圧下除去した（４０℃）後、無水エタノール（１０ｍＬ）を添加し、溶媒を再度減圧下除去した。この手順を３回繰り返し、テトラオール（スキーム２、化合物１１）（３３２ｍｇ）を白色固体として得た。この物質を、それ以上精製することなく次の反応において使用した。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｅ  Ｃ１４Ｈ２８ＬｉＯ６についての計算値［（Ｍ＋Ｌｉ）＋］：２９９．２０４１、実測値：２９９．２０５６。
【０１５６】
オクタベンジル１，３，４，６−（２，５−ジ−Ｏ−ブチル−ミオ−イノシチル）四リン酸（スキーム２、化合物１２）
テトラオール（スキーム２、化合物１１）（３３２ｍｇ）を高真空下で２４時間乾燥させた。その後、アセトニトリル中のテトラゾールの０．４５Ｍ溶液（３０．１ｍＬ、１３．６ｍｍｏｌ）およびジベンジルＮ，Ｎ−ジイソプロピルホスホロアミダイト（２．４ｍＬ、７．２ｍｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下、室温で添加した。得られたスラリーを室温で２４時間激しく攪拌した。ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）を添加し、混合物を−４０℃まで冷却した。ＣＨ２Ｃｌ２（１５ｍＬ）中の７０％ｍ−クロロ−過安息香酸（２．４ｇ、９．７ｍｍｏｌ）の溶液を滴下添加し、混合物を０℃で５時間攪拌し続けた。その後、混合物をＣＨ２Ｃｌ２（１５０ｍＬ）で希釈し、亜硫酸ナトリウムの１０％水溶液（２×１００ｍＬ）、重炭酸ナトリウムの飽和水溶液（２×７５ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（７５ｍＬ）および飽和ブライン（７５ｍＬ）で連続的に洗浄した。有機相を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を減圧下除去した（３０℃）。得られた残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘプタン→ヘプタン中６０％酢酸エチル）によって精製し、四リン酸エステル（スキーム２、化合物１２）（１．２３ｇ、１０からの全収率８２％）を濃厚な淡黄色油状物質として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）：δ  ７．３２−７．２１（ｍ，４０Ｈ）、５．１１−４．９８（ｍ，１６Ｈ）、４．９０（ｑ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，２Ｈ）、４．５４（ｂｓ，１Ｈ）、４．１８（ｄｄｄ，３ＪＨＨ＝９．６，２．０Ｈｚ，３ＪＨＰ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ）、３．６７（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ）、３．６６（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）、３．２８（ｔ，Ｊ＝９．４Ｈｚ，１Ｈ）、１．５２−１．４０（ｍ，４Ｈ）、１．２７−１．２１（ｍ，２Ｈ）、１．０８−１．０３（ｍ，２Ｈ）、０．８０（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ）、０．６９（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１００ＭＨｚ）：δ  １３５．９（ｄ，３ＪＣＰ＝７．６Ｈｚ）、１３５．８（ｄ，３ＪＣＰ＝６．９Ｈｚ）、１３５．５４（ｄ，３ＪＣＰ＝７．６Ｈｚ）、１３５．４８（ｄ，３ＪＣＰ＝７．６Ｈｚ）、１２８．４０、１２８．３８、１２８．３６、１２８．３３、１２８．２７、１２８．２６、１２８．１４、１２８．０９、１２８．９９、１２７．９４、１２７．８８、１２７．７７、１２７．７３、１２７．７１、１２７．７０、１２７．６８、１２７．６５、７９．２、７７．２（ｔ，２ＪＣＰ＝６．９Ｈｚ）、７６．６、７５．７（ｔ，２ＪＣＰ＝４．０Ｈｚ）、７３．９、７２．６、６９．６（３ＪＣＰ＝５．３Ｈｚ）、６９．４（３ＪＣＰ＝５．３Ｈｚ）、６９．３（３ＪＣＰ＝５．３Ｈｚ）、６９．２（３ＪＣＰ＝５．３Ｈｚ）、３２．１、３１．５、１８．９、１８．７、１３．９、１３．７；３１Ｐ  ＮＭＲ（１６２ＭＨｚ）：δ  −１．４、−１．７；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｅ  Ｃ７０Ｈ８０ＮａＯ１８Ｐ４についての計算値［（Ｍ＋Ｎａ）＋］：１３５５．４１８７、実測値：１３５５．４２２０。
【０１５７】
１，３，４，６−（２，５−ジ−Ｏ−ブチル−ミオ−イノシチル）四リン酸四ナトリウム（スキーム２、化合物１３）
四リン酸エステル（スキーム２、化合物１２）（３２０ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）を、エタノールおよびＨ２Ｏの１：１混合物（１０ｍＬ）中に溶解した。得られたエマルションに、重炭酸ナトリウム（８１ｍｇ、０．９６ｍｍｏｌ）、続いて１０％Ｐｄ／Ｃ（２４０ｍｇ）を添加した。この混合物を、Ｈ２雰囲気（１気圧）下、室温で２１時間激しく攪拌し続けた。ＬＣＲ／ＰＴＦＥ親水性膜（０．５μｍ）に通すろ過によって触媒を除去し、膜をエタノールおよびＨ２Ｏの１：１混合物（３×１０ｍＬ）で洗浄した。合わせたろ液を減圧下蒸発させ（６０℃）、得られた残渣を高真空下で２４時間乾燥させ、四ナトリウム塩（スキーム２、化合物１３）をガラス状の白色固体（１６３ｍｇ、９７％）として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，４００ＭＨｚ）：δ  ４．３６（ｑ，Ｊ＝９．４Ｈｚ，２Ｈ）、４．０８（ｄｔ，Ｊ＝９．９，２．０Ｈｚ，２Ｈ）、４．０６（ｓ，１Ｈ）、３．８１（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ）、３．７５（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）、３．３９（ｔ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，１Ｈ）、１．６１−１．５２（ｍ，４Ｈ）、１．３９−１．２３（ｍ，４Ｈ）、０．８７（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ）、０．８５（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，１００ＭＨｚ）：δ  ８０．８、７８．９、７６．５、７４．７、７４．２、７２．８、３１．４、１８．６５、１８．５５、１３．５、１３．４。
【０１５８】
２，５−ジ−Ｏ−ベンジル−１，６：３，４−ビス−［Ｏ−（２，３−ジメトキシブタン−２，３−ジイル）］−ミオ−イノシトール（スキーム２、化合物１４）
ジオール（スキーム２、化合物１）（１．４７ｇ、３．６ｍｍｏｌ）を高真空下で８時間乾燥させた。その後、乾燥ＤＭＦ（３０ｍＬ）をＮ２雰囲気下で添加し、得られた懸濁液を０℃まで冷却した。９０％ＮａＨ（３４５ｍｇ、１４．４ｍｍｏｌ）を一度に添加し、得られたスラリーを同じ温度で１時間攪拌した。臭化ベンジル（１．５ｍＬ、１２．６ｍｍｏｌ）を滴下添加し、混合物を４０℃で２０時間攪拌し続けた。その後、それを室温まで冷却し、ＭｅＯＨ（１ｍＬ）をゆっくり添加し、混合物を室温で１時間攪拌し続けた。ＣＨ２Ｃｌ２（７５ｍＬ）を添加し、反応混合物を水（７５ｍＬ）で洗浄した。水相をＣＨ２Ｃｌ２（７５ｍＬ）で逆抽出し、合わせた有機相を飽和ブライン（７５ｍＬ）で洗浄し、乾燥させた（ＭｇＳＯ４）。溶媒を減圧下除去し（３０〜５５℃）、残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘプタン→ヘプタン中１０％酢酸エチル）によって精製し、ジベンジルエーテル（スキーム２、化合物１４）（１．７４ｇ、８２％）を白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）：δ  ７．５０（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，２Ｈ）、７．４１（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，２Ｈ）、７．３１−７．２７（ｍ，４Ｈ）、７．２４−７．２０（ｍ，２Ｈ）、４．８７（ｓ，２Ｈ）、４．８５（ｓ，２Ｈ）、４．２０（ｔ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，２Ｈ）、３．８０（ｂｓ，１Ｈ）、３．５８（ｂｄ，Ｊ＝１０．５Ｈｚ，２Ｈ）、３．２６（ｓ，６Ｈ）、３．２５（ｔ，Ｊ＝９．４Ｈｚ，１Ｈ，不明瞭）、３．２３（ｓ，６Ｈ）、１．３３（ｓ，６Ｈ）、１．３１（ｓ，６Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１００ＭＨｚ）：δ  １３９．５、１２７．９、１２７．７、１２７．５、１２７．４、１２７．１、１２６．８、９９．５、９８．９、７８．８、７６．０、７４．９、７３．７、６９．９、６９．２、４７．８、４７．７、１７．８、１７．６；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｅ  Ｃ３２Ｈ４４ＮａＯ１０についての計算値［（Ｍ＋Ｎａ）＋］：６１１．２８２７、実測値：６１１．２８２４。
【０１５９】
２，５−ジ−Ｏ−ベンジル−ミオ−イノシトール（スキーム２、化合物１５）
ジベンジルエーテル（スキーム２、化合物１４）（２．０７ｇ、３．５ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（２．８ｍＬ）中に溶解した。９０％トリフルオロ酢酸水溶液（１４ｍＬ）を添加し、混合物を室温で７５分間攪拌した。揮発物を減圧下除去した（４０℃）後、無水エタノール（２５ｍＬ）を添加し、溶媒を再度減圧下除去した。この手順を３回繰り返し、テトラオール（スキーム２、化合物１５）（１．０６ｇ）を白色固体として得た。この物質を、それ以上精製することなく次の反応において使用した。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｅ  Ｃ２０Ｈ２４ＮａＯ６についての計算値［（Ｍ＋Ｎａ）＋］：３８３．１４５６、実測値：３８３．１４４２。
【０１６０】
オクタベンジル１，３，４，６−（２，５−ジ−Ｏ−ベンジル−ミオ−イノシチル）四リン酸（スキーム２、化合物１６）
テトラオール（スキーム２、化合物１５）（１．０６ｇ）を高真空下で２４時間乾燥させた。その後、アセトニトリル中のテトラゾールの０．４５Ｍ溶液（９３ｍＬ、４２ｍｍｏｌ）およびジベンジルＮ，Ｎ−ジイソプロピルホスホロアミダイト（７．５ｍＬ、２２．４ｍｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下、室温で添加した。得られたスラリーを室温で２４時間激しく攪拌した。ＣＨ２Ｃｌ２（３５ｍＬ）を添加し、混合物を−４０℃まで冷却した。ＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ）中の７０％ｍ−クロロ−過安息香酸（５．８ｇ、２３．４ｍｍｏｌ）の溶液を滴下添加し、混合物を０℃で５時間攪拌し続けた。その後、混合物をＣＨ２Ｃｌ２（５００ｍＬ）で希釈し、亜硫酸ナトリウムの１０％水溶液（２×３５０ｍＬ）、重炭酸ナトリウムの飽和水溶液（２×２５０ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（２５０ｍＬ）および飽和ブライン（２５０ｍＬ）で連続的に洗浄した。有機相を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を減圧下除去した（３０℃）。得られた残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘプタン→ヘプタン中５０％酢酸エチル）によって精製し、四リン酸エステル（スキーム２、化合物１６）（３．９０ｇ、スキーム２、化合物１４からの全収率８０％））を濃厚な淡黄色油状物質として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）：δ  ７．４４（ｂｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ）、７．２８−７．１１（ｍ，４４Ｈ）、７．００（ｂｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，４Ｈ）、５．０９（ｑ，Ｊ＝９．４Ｈｚ，２Ｈ）、５．０４−４．９４（ｍ，１０Ｈ）、４．９１−４．８６（ｍ，６Ｈ）、４．７８（ｂｓ，３Ｈ）、４．７０（ｄｄ，Ｊ＝１１．７，９．１Ｈｚ，２Ｈ）、４．２９（ｄｄｄ，３ＪＨＨ＝９．７，２．１Ｈｚ，３ＪＨＰ＝７．４Ｈｚ，２Ｈ）、３．５１（ｔ，Ｊ＝９．４Ｈｚ，１Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１００ＭＨｚ）：δ  １３８．０、１３７．８、１３５．８（ｄ，３ＪＣＰ＝７．６Ｈｚ）、１３５．７（ｄ，３ＪＣＰ＝６．９Ｈｚ）、１３５．５（ｄ，３ＪＣＰ＝６．９Ｈｚ）、１３５．４（ｄ，３ＪＣＰ＝６．９Ｈｚ）、１２８．４３、１２８．４０、１２８．３、１２８．２２、１２８．１８、１２８．１１、１２８．０８、１２８．０、１２７．９５、１２７．９１、１２７．７、１２７．４、１２７．３、１２７．２、１２７．１、７８．９、７７．２（ｔ，２ＪＣＰ＝６．９Ｈｚ）、７７．１、７５．８、７５．６（ｄ，２ＪＣＰ＝５．３Ｈｚ）、７３．８、６９．８（ｄ，３ＪＣＰ＝６．１Ｈｚ）、６９．５（ｄ，３ＪＣＰ＝５．３Ｈｚ）、６９．３（ｄ，３ＪＣＰ＝６．１Ｈｚ）、６９．２（ｄ，３ＪＣＰ＝５．３Ｈｚ）；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｅ  Ｃ７６Ｈ７６ＮａＯ１８Ｐ４についての計算値［（Ｍ＋Ｎａ）＋］：１４２３．３８７４、実測値：１４２３．３８８４。
【０１６１】
１，３，４，６−ミオ−イノシチル四リン酸四ナトリウム（スキーム２、化合物１７）
オクタベンジル化四リン酸エステル（スキーム２、化合物１６）（３８０ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）を、エタノールおよびＨ２Ｏの１：１混合物（２０ｍＬ）中への溶解により、水素化分解した。得られたエマルションに、重炭酸ナトリウム（９１ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ）、続いて１０％Ｐｄ／Ｃ（２７０ｍｇ）を添加した。この混合物を、Ｈ２雰囲気（１気圧）下、出発物質が完全に消費されるまで、室温で激しく攪拌し続けた。
【０１６２】
ヘキサベンジル１，３，５−（２，４，６−トリ−Ｏ−ブチリル−ミオ−イノシチル）三リン酸（スキーム３、化合物１０）
ＤＣＭ（５ｍＬ）中の２，４，６−トリ−Ｏ−ブチリル−ミオ−イノシトール３１（２３０ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に、ＣＨ３ＣＮ中のテトラゾール（０．４５Ｍ、５．８９ｍＬ、２．６５ｍｍｏｌ、４．５当量）、続いてジベンジルＮ，Ｎ−ジイソプロピルホスホロアミダイト（０．８７ｍＬ、２．６５ｍｍｏｌ、４．５当量）を室温で添加した。２４時間攪拌後、反応混合物を−４０℃まで冷却し、ｍ−クロロ過安息香酸（５０８ｍｇ、２．９４ｍｍｏｌ、５当量）を少量ずつ添加し、−４０℃から室温まで１２時間攪拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、１Ｎ  ＨＣｌ、飽和ＮａＨＣＯ３、ブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、真空下濃縮した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ｎ−ヘプタン、１０：９０〜９０：１０）によって精製し、４７１ｍｇ（６８％）のヘキサベンジル１，３，５−（２，４，６−トリ−Ｏ−ブチリル−ミオ−イノシチル）三リン酸（スキーム３、化合物１０）を得た。ＴＬＣ（ＳｉＯ２）：Ｒｆ＝０．２４（ＥｔＯＡｃ／ｎ−ヘプタン、６０：４０）；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ，２５℃）：δ＝７．３４−７．２３（ｍ，３０Ｈ）、５．９４（ｔ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ）、５．５８（ｔ，Ｊ＝９．９Ｈｚ，２Ｈ）、５．０３−４．８９（ｍ，１２Ｈ）、４．４３（ｄｔ，Ｊ＝１０．０，２．８Ｈｚ，２Ｈ）、４．３９（ｑ，Ｊ＝９．５Ｈｚ，１Ｈ）、２．３８（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，２Ｈ）、２．０６（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，２Ｈ）、２．０５（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，２Ｈ）、１．６７−１．５８（ｍ，２Ｈ）、１．３９−１．２９（ｍ，４Ｈ）、０．９３（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，３Ｈ）、０．６５（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，６Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１００ＭＨｚ，２５℃）：δ＝１７２．７、１７２．０、１３５．５（ｄ，３ＪＣＰ＝７．２Ｈｚ）、１３５．４（ｄ，３ＪＣＰ＝６．０Ｈｚ）、１３５．３（ｄ，３ＪＣＰ＝５．９Ｈｚ）、１２８．６３、１２８．５９、１２８．０、１２７．９６、１２７．９５、７５．９（ｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ）、７２．９（ｄ，Ｊ＝５．１Ｈｚ）、６９．８（ｄ，Ｊ＝５．７Ｈｚ）、６９．６３（ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ）、６９．５６（ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ）、６９．４（ｂｓ）、３５．９、３５．５、１８．５、１７．５、１３．５；３１Ｐ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１６２ＭＨｚ，２５℃）：δ＝−１．５０、−１．７３；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＭＳ）：ｍ／ｚ：Ｃ６０Ｈ６９Ｏ１８Ｐ３Ｎａ２についての計算値：６０８．１７４１［Ｍ＋２Ｎａ］＋２；実測値：６０８．１７０４。
【０１６３】
１，３，５−（２，４，６−トリ−Ｏ−ブチリル−ミオ−イノシチル）三リン酸六ナトリウム（スキーム３、化合物１１）
ＥｔＯＨ：Ｈ２Ｏ（１：１、６ｍＬ）中の化合物１０（スキーム３）（１６０ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ、１．０当量）に、１０％Ｐｄ炭素（９６ｍｇ）を添加し、室温で５時間水素化した。溶液をＬＣＲ／ＰＴＦＥ親水性膜フィルターに通してろ過し、ＥｔＯＨ：Ｈ２Ｏ（１：１、１０ｍＬ）で洗浄し、合わせたろ液を濃縮した。残渣を水中に再溶解し、０．１Ｎ  ＮａＯＨ溶液で中和した。溶媒を濃縮し、高真空下で乾燥させ、１，３，５−（２，４，６−トリ−Ｏ−ブチリル−ミオ−イノシチル）三リン酸六ナトリウム（スキーム３、化合物１１）（１０２ｍｇ、９８％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，４００ＭＨｚ，２５℃）：δ＝５．８３（ｂｓ，１Ｈ）、５．２９（ｔ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，２Ｈ）、４．２５（ｑ，Ｊ＝９．４Ｈｚ，１Ｈ）、４．１９（ｔ，Ｊ＝９．７Ｈｚ，２Ｈ）、２．５５（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，２Ｈ）、２．５４（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，４Ｈ）、１．７８−１．６８（ｍ，２Ｈ）、１．６６−１．５７（ｍ，４Ｈ）、１．０１（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，３Ｈ）、０．９４（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，６Ｈ）；３１Ｐ  ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，１６２ＭＨｚ，２５℃）：δ＝３．６８、２．７９。
【０１６４】
ミオ−イノシトール２，４，６−トリス（ジベンジルホスファート）のオルトギ酸エステル（スキーム４、化合物８）
ＤＣＭ（５ｍＬ）中のミオ−イノシトールモノオルトギ酸３２（４００ｍｇ、２．１ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に、ＣＨ３ＣＮ中のテトラゾール（０．４５Ｍ、２１．０ｍＬ、９．４７ｍｍｏｌ、４．５当量）、続いてジベンジルＮ，Ｎ−ジイソプロピルホスホロアミダイト（３．１ｍＬ、９．４７ｍｍｏｌ、４．５当量）を室温で添加した。２４時間攪拌後、反応混合物を−４０℃まで冷却し、ｍ−クロロ過安息香酸（１．８１ｇ、１０．５ｍｍｏｌ、５当量）を少量ずつ添加し、−４０℃から室温まで１２時間攪拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、１Ｎ  ＨＣｌ、飽和ＮａＨＣＯ３、ブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、真空下濃縮した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ｎ−ヘプタン、１０：９０〜８０：２０）によって精製し、１．８５ｇ（９０％）の化合物８（スキーム４）を得た。ＴＬＣ（ＳｉＯ２）：Ｒｆ＝０．２５（ＥｔＯＡｃ／ｎ−ヘプタン、５０：５０）；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ，２５℃）：δ＝７．３３−７．２５（ｍ，３０Ｈ）、５．４９（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ）、５．１０−５．０２（不明瞭，２Ｈ）、５．０６（ｄ，３ＪＣＨ＝８．０Ｈｚ，４Ｈ）、５．０１（ｄ，３ＪＣＨ＝８．５Ｈｚ，８Ｈ）、４．８９（ｄｄ，Ｊ＝７．１，１．３Ｈｚ，１Ｈ）、４．４３−４．４０（ｍ，１Ｈ）、４．３７（ｄｄ，Ｊ＝２．５，１．６Ｈｚ，２Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１００ＭＨｚ，２５℃）：δ＝１３５．２（ｄ，３ＪＣＰ＝６．９Ｈｚ）、１３５．１（ｄ，３ＪＣＰ＝６．４Ｈｚ）、１２８．４５、１２８．４０、１２８．３６、１２７．８、１２７．７、１０２．３、７０．２−７０．０（ｍ）、６９．７（ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ）、６９．６７（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ）、６９．４（ｄ，Ｊ＝５．７Ｈｚ）、６７．６−６７．４（ｍ）、６５．５（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ）；３１Ｐ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１２１ＭＨｚ，２５℃）：δ＝−０．６３；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＭＳ）：ｍ／ｚ：Ｃ４９Ｈ４９Ｏ１５Ｐ３Ｌｉについての計算値：９７７．２４４０［Ｍ＋Ｌｉ］＋；実測値：９７７．２４９１。
【０１６５】
ミオ−イノシトール２，４，６−三リン酸六ナトリウムのオルトギ酸エステル（スキーム４、化合物９）
ＥｔＯＨ：Ｈ２Ｏ（１：１、１０ｍＬ）中の化合物８（スキーム４）（３１０ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ、１．０当量）に、１０％Ｐｄ炭素（１６０ｍｇ）、ＮａＨＣＯ３（１６１ｍｇ、１．９１ｍｍｏｌ、６．０当量）を添加し、室温で１２時間水素化した。溶液をＬＣＲ／ＰＴＦＥ親水性膜フィルターに通してろ過し、ＥｔＯＨ：Ｈ２Ｏ（１：１、２０ｍＬ）で洗浄し、合わせたろ液を濃縮し、高真空下で乾燥させ、１７５ｍｇ（９７％）の化合物９（スキーム４）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，４００ＭＨｚ，２５℃）：δ＝５．６２（ｓ，１Ｈ）、４．８４−４．７５（不明瞭，２Ｈ）、４．６１（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ）、４．４８（ｂｓ，１Ｈ）、４．４３（ｂｓ，２Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，１００ＭＨｚ，２５℃）：δ＝１０２．３、７３．０（ｔ，Ｊ＝３．１Ｈｚ）、７０．０（ｔ，Ｊ＝３．９Ｈｚ）、６８．４（ｄ，Ｊ＝４．３Ｈｚ）、６２．６（ｄ，Ｊ＝４．１Ｈｚ）；３１Ｐ  ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，１６２ＭＨｚ，２５℃）：δ＝４．４３、４．０６；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＭＳ）：ｍ／ｚ：Ｃ７Ｈ８Ｏ１５Ｐ３Ｎａ６についての計算値：５６２．８４５７［Ｍ＋Ｈ］＋；実測値：５６２．８４８８。
【０１６６】
シロ−イノシトールヘキサキス（ジベンジルホスファート）（スキーム５、化合物１）
ＤＭＦ（４０ｍＬ）中のシロ−イノシトール（３６０ｍｇ、２ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に、ＣＨ３ＣＮ中のテトラゾール（０．４５Ｍ、５３．３ｍＬ、２４ｍｍｏｌ、１２当量）、続いてジベンジルＮ，Ｎ−ジイソプロピルホスホロアミダイト（５．９ｍＬ、１８ｍｍｏｌ、９当量）を室温で添加した。２４時間攪拌後、反応混合物を０℃まで冷却した。その後、リン酸ナトリウム緩衝液（１Ｎ、ｐＨ＝７、５０ｍＬ）、続いて３０％Ｈ２Ｏ２（５０ｍＬ）を添加し、０℃から室温まで１２時間攪拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、水相を分離した。有機層を、１Ｎ  ＨＣｌ、飽和ＮａＨＣＯ３、ブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、真空下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ｎ−ヘプタン、１０：９０〜８０：２０）によって精製し、１．９４ｇ（５５％）のシロ−イノシトールヘキサキス（ジベンジルホスファート）（スキーム５、化合物１）を淡黄色油状物質として得た。ＴＬＣ（ＳｉＯ２）：Ｒｆ＝０．２５（ＥｔＯＡｃ／ｎ−ヘプタン、５０：５０）；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ，２５℃）：δ＝７．２２−７．１８（ｍ，６０Ｈ）、５．１８（ｄ，３ＪＨＰ＝７．４Ｈｚ，６Ｈ）、５．０７−４．９５（ｍ，２４Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１００ＭＨｚ，２５℃）：δ＝１３５．６（ｄ，３ＪＣＰ＝７．０Ｈｚ）、１２８．３７、１２８．２７、１２８．０２、７６．６（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ）、６９．９（ｄ，２ＪＣＰ＝５．６Ｈｚ）；３１Ｐ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１２１ＭＨｚ，２５℃）：δ＝−０．７３；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＭＳ）：ｍ／ｚ：Ｃ９０Ｈ９０Ｏ２４Ｐ６ＮａＬｉについての計算値：８８５．２１４８［Ｍ＋Ｎａ＋Ｌｉ］＋２；実測値：８８５．２２９３。
【０１６７】
ヘキサトリエチルアンモニウム シロ−イノシトール六リン酸（スキーム５、化合物２）
ＥｔＯＨ：Ｈ２Ｏ（１：１、５０ｍＬ）中のシロ−イノシトールヘキサキス（ジベンジルホスファート）（スキーム５、化合物１）（８７０ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ、１．０当量）に、１０％Ｐｄ炭素（５００ｍｇ）を添加し、室温で１２時間水素化した。溶液をＬＣＲ／ＰＴＦＥ親水性膜フィルターに通してろ過し、ＥｔＯＨ：Ｈ２Ｏ（１：１、４０ｍＬ）で洗浄し、合わせたろ液を蒸発させ、高真空下で乾燥させ、脱ベンジル化生成物を得た。この生成物（３２３ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ、１．０当量）をＨ２Ｏ（５ｍＬ）中に溶解し、Ｅｔ３Ｎ（１．６３ｍＬ、１１．７６ｍｍｏｌ、２４当量）を室温で添加し、３０分間攪拌した。その後、溶媒を濃縮し、高真空下で乾燥させ、６０７ｍｇ（２ステップで９８％）のヘキサトリエチルアンモニウム シロ−イノシトール六リン酸（スキーム５、化合物２）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，４００ＭＨｚ，２５℃）：δ＝４．２０（ｄ，３ＪＨＰ＝４．８Ｈｚ，６Ｈ）、３．１６（ｑ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，３６Ｈ）、１．２３（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，５４Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，１００ＭＨｚ，２５℃）：δ＝７６．６（ｂｓ）、４６．８、８．４；３１Ｐ  ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，１２１ＭＨｚ，２５℃）：δ＝１．６７。
【０１６８】
ヘキサトリエチルアンモニウム シロ−イノシトール１，２：３，４：５，６−トリスピロリン酸（スキーム５、化合物３）
Ｈ２Ｏ（３ｍＬ）中のヘキサトリエチルアンモニウム シロ−イノシトール六リン酸（スキーム５、化合物２）（６０７ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に、ＣＨ３ＣＮ（６ｍＬ）中の１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド（５９４ｍｇ、２．８７ｍｍｏｌ、６当量）を添加し、６時間還流させた。さらに２当量の１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド（９９ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ、１当量）を４時間間隔で添加し、さらに８時間還流させた。反応混合物を水（５ｍＬ）で希釈し、ジシクロヘキシル尿素を焼結漏斗に通してろ過し、水（２×１０ｍＬ）で洗浄した。合わせたろ液をロータリエバポレーター（５５℃）で蒸発させ、高真空下で乾燥させた。得られた残渣を２０ｍＬの水中に再溶解し、焼結漏斗に通してろ過し、水（２×５ｍＬ）で洗浄し、アセトニトリル中に溶解していたすべての更なる量のジシクロヘキシル尿素を除去した。合わせたろ液をロータリエバポレーター（５５℃）で蒸発させ、高真空下で乾燥させ、ヘキサトリエチルアンモニウム シロ−イノシトール１，２：３，４：５，６−トリスピロリン酸（スキーム５、化合物３）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，４００ＭＨｚ，２５℃）：δ＝４．４１（ｂｓ，６Ｈ）、３．２０（ｑ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，３６Ｈ）、１．２８（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，５４Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，１００ＭＨｚ，２５℃）：δ＝７６．２（ｂｓ）、４６．８、８．４；３１Ｐ  ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，１２１ＭＨｚ，２５℃）：δ＝−１０．１０。
【０１６９】
シロ−イノシトール１，２：３，４：５，６−トリスピロリン酸六ナトリウム（スキーム５、化合物４）
ヘキサトリエチルアンモニウム シロ−イノシトール１，２：３，４：５，６−トリスピロリン酸（スキーム５、化合物３）を水（１０ｍＬ）中に溶解し、Ｄｏｗｅｘ  Ｎａ＋形態（１０ｇ）で１時間処理した。溶液をろ過し、水（２×５ｍＬ）で洗浄した。ろ液に新鮮なＤｏｗｅｘ  Ｎａ＋形態（１０ｇ）を添加し、１時間攪拌し、ろ過した。すべてのトリエチルアンモニウムイオンがナトリウムイオンと交換されるまで、このプロセスを繰り返した。最後に、溶媒を減圧下蒸発させ、高真空下で乾燥させ、シロ−イノシトール１，２：３，４：５，６−トリスピロリン酸六ナトリウム ４（スキーム５、３３９ｍｇ、９６％）を少量のピロリン酸加水分解生成物とともに得た。１Ｈ  ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，４００ＭＨｚ，２５℃）：δ＝４．４４（ｓ，６Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，１００ＭＨｚ，２５℃）：δ＝７６．２（ｓ）；３１Ｐ  ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，１２１ＭＨｚ，２５℃）：δ＝−９．９２；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＭＳ）：ｍ／ｚ：Ｃ６Ｈ６Ｏ２１Ｐ６Ｎａ７についての計算値：７６０．７１０６［Ｍ＋Ｎａ］＋；実測値：７６０．７１４２。
【０１７０】
ミオ−イノシトール１，６：２，３：４：５−トリスピロリン酸六ナトリウム塩の加水分解および加アルコール分解（スキーム６）
水（５ｍＬ）中のミオ−イノシトール１，６：２，３：４：５−トリスピロリン酸六ナトリウム塩（４００ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ、１当量）の溶液をＤｏｗｅｘ  ５０ＷＸ８−２００（１０ｇ）カラムに通過させ、カラムを水（４×５ｍＬ）で洗浄した。あるいは、トリスピロリン酸六ナトリウム塩を１規定のＨＣｌ溶液中に溶解することにより、加水分解を実現することができる。酸性画分をプールし、室温で２４時間攪拌した。その後、溶液のｐＨを、０．１Ｎ  ＮａＯＨ溶液で７前後に調整した。その後、溶媒を蒸発乾固させ、部分的ピロリン酸加水分解生成物５の混合物（スキーム６、４２４ｍｇ）を白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，４００ＭＨｚ，２５℃）：δ＝４．９９−４．８８（ｄ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，全体的積分  １Ｈ）、４．６２−４．３５（ｍ，全体的積分  ５Ｈ）；３１Ｐ  ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，１６２ＭＨｚ，２５℃）：δ＝０．４１、０．１７、０．０７、−０．２４、−０．３１、−０．４５、−０．９０、−１．１２、−１．２８、−１．３４、−１．４２（それぞれ一重線，全体的積分  ２．７Ｐ）、−１０．８１、−１１．１６から−１１．４２（ＡＢおよび多重線，２ＪＰＰ＝１７．５Ｈｚ，全体的積分  ３．３Ｐ）；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＭＳ）：ｍ／ｚ：Ｃ６Ｈ７Ｏ２２Ｐ６Ｎａ８についての計算値：８００．７０３１［Ｍ＋Ｈ］＋；実測値：８００．７０３１。
【０１７１】
乾燥ＭｅＯＨ（４ｍＬ）中のミオ−イノシトール１，６：２，３：４：５−トリスピロリン酸六ナトリウム塩（３００ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に、塩化アセチル（１．０ｍＬ、１４．０ｍｍｏｌ、３５当量）を０℃で添加し、０℃から室温まで４時間攪拌した。その後、溶液を減圧下蒸発させ、高真空下で乾燥させた。得られた残渣を水中に溶解し、０．１Ｎ  ＮａＯＨ溶液でｐＨを７前後に調整した。その後、溶媒を濃縮し、高真空下で乾燥させ、ピロリン酸開環生成物(pyrophosphate opened product)６の混合物（スキーム６、３６５ｍｇ）を白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，４００ＭＨｚ，２５℃）：δ＝５．０５、４．９７、４．８９−４．８６（各二重線および多重線，Ｊ＝９．２Ｈｚ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，全体的積分  １Ｈ）、４．５６−４．４５（ｍ，全体的積分  ２Ｈ）、４．２５−４．０８（ｍ，全体的積分  ３Ｈ）、３．７３−３．６４（ｍ，全体的積分  ９Ｈ）；３１Ｐ  ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，１６２ＭＨｚ，２５℃）：δ＝２．２４、２．１１、１．８３、１．６９、１．５０、１．４５、１．３２、１．１７、１．１０、１．０１、０．８９、０．６３、０．４４、０．０１、−０．４６、（各一重線，全体的積分  ６Ｐ）；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＭＳ）：ｍ／ｚ：Ｃ９Ｈ１５Ｏ２４Ｐ６Ｎａ１０についての計算値：９２２．７３５０［Ｍ＋Ｎａ］＋；実測値：９２２．７４０８。
【０１７２】
乾燥ＭｅＯＨ（４ｍＬ）中のミオ−イノシトール１，６：２，３：４：５−トリスピロリン酸六ナトリウム塩（３００ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に、塩化アセチル（０．１ｍＬ、１．４ｍｍｏｌ、３．５当量）を０℃で添加し、０℃から室温まで３６時間攪拌した。その後、溶液を真空下濃縮し、得られた残渣を水中に溶解し、０．１Ｎ  ＮａＯＨ溶液でｐＨを７前後に調整した。その後、溶媒を蒸発させ、高真空下で乾燥させ、部分的ピロリン酸開環生成物７の混合物（スキーム６、３２１ｍｇ）を少量の出発物質とともに得た。１Ｈ  ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，４００ＭＨｚ，２５℃）：δ＝５．１９−４．８７（ｍ，全体的積分  １Ｈ）、４．６７−４．１３（ｍ，全体的積分  ５Ｈ）、３．７８−３．６７（ｍ，全体的積分  ３Ｈ）；３１Ｐ  ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，１６２ＭＨｚ，２５℃）：δ＝２．３６から−１．１１（多数の一重線，全体的積分  ３．５Ｐ）、−９．３８、−１０．０４から−１１．５１、−１４．１８（ＡＢおよび多重線，２ＪＰＰ＝２１．６Ｈｚ，全体的積分  ２．５Ｐ）；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＭＳ）：ｍ／ｚ：Ｃ７Ｈ９Ｏ２２Ｐ６Ｎａ８についての計算値：８１４．７１８７［Ｍ＋Ｈ］＋；実測値：８１４．７２０１。
【０１７３】
（実施例１）
遊離ヘモグロビンおよびヒト全血に対してインビトロ実験を実施した。
【０１７４】
本明細書に記載されている化合物のうちのいくつかを、１２０ｍＭ溶液として、遊離ヘモグロビン（Ｈｂ）およびヒト全血（ＷＢ）に対するＰ５０について試験した。ヘモグロビン溶液は、１倍体積量の生理食塩水（１５００×ｇ、１０分間）で３回洗浄することによって、赤血球濃縮物（ＥＦＳ−Ａｌｓａｃｅ）から調製し、２倍体積量の冷蒸留水の添加によって赤血球を溶血させた。ストロマの除去のために遠心分離（７０００×ｇ、３０分間）した後、５ｍｌの透明なヘモグロビン溶液を、０．１Ｍ塩化ナトリウム＋１０−５Ｍ  ＥＤＴＡで平衡化したＳｅｐｈａｄｅｘ  Ｇ−２５の２．５ｃｍ×３０ｃｍカラム上に載置した。約２０ｍｌ／時の速度で、同じ溶液によってタンパク質を溶離した［Ｂｅｎｅｓｃｈ，Ｒ．；Ｂｅｎｅｓｃｈ，Ｒ．Ｅ．およびＹｕ，Ｃ．Ｉ．Ｒｅｃｉｐｒｏｃａｌ  ｂｉｎｄｉｎｇ  ｏｆ  ｏｘｙｇｅｎ  ａｎｄ  ｄｉｐｈｏｓｐｈｏｇｌｙｃｅｒａｔｅ  ｂｙ  ｈｕｍａｎ  ｈｅｍｏｇｌｏｂｉｎ、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ（１９６８）５９、５２６〜５３２］。
【０１７５】
ｐ５０、半飽和の酸素分圧における変化により、エフェクターのアロステリック調節を計測した。ミオ−イノシトール六リン酸（ミオ−ＩＨＰ）はＳｉｇｍａから購入した。下記条件下、Ｈｅｍｏｘ  Ａｎａｌｙｚｅｒ（ＴＣＳ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｃｏ．）を用いて酸素平衡曲線（ＯＥＣ）を行った：ｐＨ７．４、１３５ｍＭのＮａＣｌ、５ｍＭのＫＣｌ、および３０ｍＭのＴＥＳ（Ｎ−［トリス（ヒドロキシメチル）メチル］−２−アミノエタンスルホン酸）緩衝液、３７℃。遊離ヘモグロビンの濃度は１００μＭ（５７７ｎｍ、ε＝四量体１分子当たり５８．４ｍＭ−１ｃｍ−１）であり、キュベット中のアロステリックエフェクターの最終濃度は２ｍＭであったため、エフェクター／Ｈｂ比は２０という結果になった。
【０１７６】
ヒト血液は、へパリン化した管内へ新たに吸引した。化合物溶液のｐＨを約７．０に調整し、体積比１：１の全血を個々に、上記化合物とともに、３７℃で２時間インキュベーションした。インキュベーションに続いて、血球をＢｉｓ−Ｔｒｉｓ緩衝液で３回洗浄した。酸素解離曲線の計測をＨｅｍｏｘ−Ａｎａｌｙｚｅｒ計器（ＴＣＳ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｃｏｒｐ．）で行った。化合物によって誘発された全血についてのＰ５０値の概要を表１に提示する。
【表１】
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【０１７７】
（参考文献）
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【図１】
2010514772.tif 000027
【図２】
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【国際調査報告】
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