(57)【要約】  本発明は、サイトカイン及びケモカイン受容体又はｃ＿タンパク質共役受容体の少なくとも一部分を含むペプチドを含む医薬組成物を提供する。本発明の医薬組成物は、免疫系機能を改変するのに使用して、例えば自己免疫疾患、多発性硬化症、移植拒絶反応、乾癬及び喘息などの免疫系障害を治療することができる。本発明は、医薬組成物中で使用することができるペプチド、及び本発明の医薬組成物を調製するための方法も提供する。本発明は、自己免疫疾患、多発性硬化症、移植拒絶反応、乾癬及び喘息などの免疫系障害を治療するための方法をさらに提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）サイトカインと、
（ｂ）サイトカイン受容体又はＧタンパク質共役受容体（ＧＰＣＲ）の少なくとも一部分を含むペプチドと、
（ｃ）生理的に許容される担体と
を含む医薬組成物。
【請求項２】
注射に適した形である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
サイトカインがケモカインである、請求項１又は請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
受容体がサイトカイン受容体である、請求項１から３までのいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項５】
サイトカイン受容体がケモカイン受容体である、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項６】
受容体がＧＰＣＲ受容体である、請求項１から３までのいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項７】
ペプチドがサイトカインと結合する、請求項１から６までのいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項８】
ペプチドがサイトカイン受容体の細胞外ドメインの少なくとも一部分を含む、請求項１から７までのいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項９】
ペプチドがサイトカイン受容体の制御配列の少なくとも一部分を含む、請求項１から８までのいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
サイトカインが炎症性サイトカインである、請求項１から９までのいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
サイトカインが構成的サイトカインである、請求項１から１０までのいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
サイトカインが二重機能性サイトカインである、請求項１から１０までのいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
サイトカインが
（ａ）ＧＲＯ−α；
（ｂ）ＧＲＯ−β；
（ｃ）ＮＡＰ−２；
（ｄ）ＩＬ−８；
（ｅ）ＩＬ−８；
（ｆ）ＭＩＧ；
（ｇ）ＩＰ−１０；
（ｈ）Ｉ−ＴＡＣ；
（ｉ）Ｉ−３０９；
（ｊ）ＭＣＰ−１；
（ｋ）ＭＣＰ−２；
（ｌ）ＭＣＰ−４；
（ｍ）ＭＩＰ−１；
（ｎ）ＭＩＰ−１α；
（ｏ）ＲＡＮＴＥＳ；
（ｐ）エオタキシン；
（ｑ）エオタキシン２；
（ｒ）エオタキシン３；
（ｓ）ＴＡＲＣ；
（ｔ）ＭＤＣ；
（ｕ）ＳＤＦ−１α；
（ｖ）ＳＤＦ−１β；
（ｗ）ＢＣＡ−１；
（ｘ）ＭＩＰ−３α；
（ｙ）ＭＩＰ−３β；
（ｚ）エキソダス−２；
（ａａ）ＴＥＣＫ；
（ｂｂ）ＣＴＡＣ；
（ｃｃ）フラクタルカイン；
（ｄｄ）リンホタクチン；及び
（ｅｅ）ＰＦ−４
から選択される、請求項１から１０までのいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
ペプチドが、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１及び配列番号１２から選択される配列を含む、請求項１から１３までのいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
ペプチドが、ペプチド配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１及び配列番号１２のいずれか１つと少なくとも７０％の相同性を有する、請求項７のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
ペプチド中の１つ又は複数のアミノ酸が化学修飾されたアミノ酸である、請求項１から１５までのいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
１つ又は複数のアミノ酸が、立体光学異性体（Ｄ異性体）、植物由来の稀なアミノ酸、非天然アミノ酸若しくはアミノ酸模倣体であり、又はアセチル化、アシル化、リン酸化、脱リン酸化、グリコシル化、ミリストレーション、アミド化、アスパラギン酸／アスパラギンヒドロキシル化、ホスホパンテタン結合、メチル化、メチルチオール化、プレンジル基結合、インテインＮ−／Ｃ−末端スプライシング、ＡＤＰ−リボシル化、臭素化、シトルリン化、脱アミノ化、ジヒドロキシル化、ホルミル化、ゲラニル−ゲラニル化、糖化、及びパルミトイル化から選択される任意の１つ又は複数の修飾によって修飾されている、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
免疫系機能を改変するための、請求項１から１７までのいずれか一項に記載の医薬組成物の使用。
【請求項１９】
免疫系障害を治療するための、請求項１８に記載の使用。
【請求項２０】
免疫系障害が、自己免疫疾患、多発性硬化症、移植拒絶反応、乾癬及び喘息から選択される、請求項１９に記載の使用。
【請求項２１】
免疫系障害を治療するための方法であって、
（ａ）サイトカインと、
（ｂ）サイトカイン受容体又はＧＰＣＲの少なくとも一部分を含むペプチドと、
（ｃ）生理的に許容される担体と
を含む医薬組成物を、このような治療を必要とする個体に投与することを含む上記方法。
【請求項２２】
注射に適した形である、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
サイトカインがケモカインである、請求項２１又は２２に記載の方法。
【請求項２４】
受容体がサイトカイン受容体である、請求項２１から２３までのいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５】
サイトカイン受容体がケモカイン受容体である、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
受容体がＧＰＣＲである、請求項２１から２３までのいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７】
ペプチドがサイトカインと結合する、請求項２１から２６までのいずれか一項に記載の方法。
【請求項２８】
ペプチドが受容体の細胞外ドメインの少なくとも一部分を含む、請求項２１から２７までのいずれか一項に記載の方法。
【請求項２９】
ペプチドが受容体の制御配列の少なくとも一部分を含む、請求項２７又は２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３０】
サイトカインが炎症性サイトカインである、請求項２１から２９までに記載の方法。
【請求項３１】
サイトカインが構成的サイトカインである、請求項２１から２９までのいずれか一項に記載の方法。
【請求項３２】
サイトカインが二重機能性サイトカインである、請求項２１から２９までのいずれか一項に記載の方法。
【請求項３３】
サイトカインが
（ａ）ＧＲＯ−α；
（ｂ）ＧＲＯ−β；
（ｃ）ＮＡＰ−２；
（ｄ）ＩＬ−８；
（ｅ）ＩＬ−８；
（ｆ）ＭＩＧ；
（ｇ）ＩＰ−１０；
（ｈ）Ｉ−ＴＡＣ；
（ｉ）Ｉ−３０９；
（ｊ）ＭＣＰ−１；
（ｋ）ＭＣＰ−２；
（ｌ）ＭＣＰ−４；
（ｍ）ＭＩＰ−１；
（ｎ）ＭＩＰ−１α；
（ｏ）ＲＡＮＴＥＳ；
（ｐ）エオタキシン；
（ｑ）エオタキシン２；
（ｒ）エオタキシン３；
（ｓ）ＴＡＲＣ；
（ｔ）ＭＤＣ；
（ｕ）ＳＤＦ−１α；
（ｖ）ＳＤＦ−１β；
（ｗ）ＢＣＡ−１；
（ｘ）ＭＩＰ−３α；
（ｙ）ＭＩＰ−３β；
（ｚ）エキソダス−２；
（ａａ）ＴＥＣＫ；
（ｂｂ）ＣＴＡＣ；
（ｃｃ）フラクタルカイン；
（ｄｄ）リンホタクチン；及び
（ｅｅ）ＰＦ−４
から選択される、請求項２１から２９までのいずれか一項に記載の方法。
【請求項３４】
ペプチドが、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１及び配列番号１２から選択される配列を含む、請求項２１から３３までのいずれか一項に記載の方法。
【請求項３５】
ペプチドが、ペプチド配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１及び配列番号１２のいずれか１つと少なくとも７０％の相同性を有する、請求項２７に記載の方法。
【請求項３６】
ペプチド中の１つ又は複数のアミノ酸が、化学修飾されたアミノ酸である、請求項２１から３５までのいずれか一項に記載の方法。
【請求項３７】
１つ又は複数のアミノ酸が、アセチル化、アシル化、リン酸化、脱リン酸化、グリコシル化、ミリストレーション、アミド化、アスパラギン酸／アスパラギンヒドロキシル化、ホスホパンテタン結合、メチル化、メチルチオール化、プレンジル基結合、インテインＮ−／Ｃ−末端スプライシング、ＡＤＰ−リボシル化、臭素化、シトルリン化、脱アミノ化、ジヒドロキシル化、ホルミル化、ゲラニル−ゲラニル化、糖化、及びパルミトイル化から選択される任意の１つ又は複数の修飾によって修飾されている、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
免疫系障害が自己免疫疾患、多発性硬化症、移植拒絶反応、乾癬及び喘息から選択される、請求項２１から３７までのいずれか一項に記載の方法。
【請求項３９】
（ａ）可溶化サイトカインと、
（ｂ）サイトカイン受容体又はＧＰＣＲの少なくとも一部分を含む可溶化ペプチドと
を含む医薬組成物を調製するための方法であって、サイトカインとペプチドをｅｘ  ｖｉｖｏで組み合わせることを含む方法。
【請求項４０】
前記組合せを所定の時間インキュベートすることをさらに含む、請求項４０に記載の方法。
【請求項４１】
（ａ）配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１及び配列番号１２から選ばれるペプチド、
（ｂ）サイトカインと結合することができる（ａ）のペプチドと少なくとも７０％の相同性を有するペプチド、及び
（ｃ）少なくとも１つのアミノ酸が化学修飾されている（ａ）又は（ｂ）のペプチド
から選択されるペプチド。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、サイトカインと結合するペプチド、及び免疫障害におけるそれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
以下の刊行物は、本発明を理解するのに妥当であると考えられる。
Ａｎｄｅｒｓ、Ｈ．Ｊ．、Ｆｒｉｎｋ、Ｍ．、Ｌｉｎｄｅ、Ｙ．、Ｂａｎａｓ、Ｂ．、Ｗｏｒｎｌｅ、Ｍ．、Ｃｏｈｅｎ、Ｃ．Ｄ．、Ｖｉｅｌｈａｕｅｒ、Ｖ．、Ｎｅｌｓｏｎ、Ｐ．Ｊ．、Ｇｒｏｎｅ、Ｈ．Ｊ．及びＳｃｈｌｏｎｄｏｒｆｆ、Ｄ．（２００３）「ＣＣケモカインリガンド５／ＲＡＮＴＥＳケモカインアンタゴニストは、糸球体白血球浸潤を低下させるにもかかわらず、糸球体腎炎を悪化させる。（ＣＣ  ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ  ｌｉｇａｎｄ５／ＲＡＮＴＥＳ  ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ  ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ  ａｇｇｒａｖａｔｅ  ｇｌｏｍｅｒｕｌｏｎｅｐｈｒｉｔｉｓ  ｄｅｓｐｉｔｅ  ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｇｌｏｍｅｒｕｌａｒ  ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ  ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ．）」Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １７０、５６５８〜６６。
Ａｔｔｗｏｏｄ、Ｍ．、Ｂｏｒｋａｋｏｔｉ、Ｎ．、Ｂｏｔｔｏｍｌｅｙ、Ｇ．、Ｃｏｎｗａｙ、Ｅ．、Ｃｏｗａｎ、Ｉ．Ｆａｌｌｏｗｆｉｅｌｄ、Ａ．、Ｈａｎｄａ、Ｂ．、Ｊｏｎｅｓ、Ｐ．、Ｋｅｅｃｈ、Ｅ．、Ｋｉｒｔｌａｎｄ、Ｓ．、Ｗｉｌｌｉａｍｓ、Ｇ．及びＷｉｌｓｏｎ、Ｆ．（１９９６）「インターロイキン−８の阻害剤の同定及び特徴付け：受容体系手法。（Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｎ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｏｆ  ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−８：ａ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｂａｓｅｄ  ａｐｐｒｏａｃｈ．）」Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ  ＆  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  ６、１８６９〜７４。
Ａｔｔｗｏｏｄ、Ｍ．、Ｃｏｎｗａｙ、Ｅ．、Ｄｕｎｓｄｏｎ、Ｒ．、Ｇｒｅｅｎｉｎｇ、Ｊ．、Ｈａｎｄａ、Ｂ．、Ｊｏｎｅｓ、Ｐ．、Ｊｏｒｄａｎ、Ｓ．、Ｋｅｅｃｈ、Ｅ．及びＷｉｌｓｏｎ、Ｆ．（１９９７）「インターロイキン−８のペプチドに基づく阻害剤：構造簡略化及び増大した効能。（Ｐｅｐｔｉｄｅ  ｂａｓｅｄ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｏｆ  ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−８：  ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ  ｓｉｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｅｎｈａｎｃｅｄ  ｐｏｔｅｎｃｙ．）」Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ  ＆  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  ７、４２９〜３２。
Ｂｌａｎｐａｉｎ、Ｃ．、Ｍｉｇｅｏｔｔｅ、Ｉ．、Ｌｅｅ、Ｂ．、Ｖａｋｉｌｉ、Ｊ．、Ｄｏｒａｎｚ、Ｂ．Ｊ．、Ｇｏｖａｅｒｔｓ、Ｃ．、Ｖａｓｓａｒｔ、Ｇ．、Ｄｏｍｓ、Ｒ．Ｗ．及びＰａｒｍｅｎｔｉｅｒ、Ｍ．（１９９９）「ＣＣＲ５は複数のＣＣ−ケモカインと結合する：ＭＣＰ−３は天然アンタゴニストとして作用する。（ＣＣＲ５  ｂｉｎｄｓ  ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ＣＣ−ｃｈｅｍｏｋｉｎｅｓ：  ＭＣＰ−３  ａｃｔｓ  ａｓ  ａ  ｎａｔｕｒａｌ  ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ．）」Ｂｌｏｏｄ  ９４、１８９９〜９０５。
Ｂｒｕｈｌ、Ｈ．、Ｃｉｈａｋ、Ｊ．、Ｓｃｈｎｅｉｄｅｒ、Ｍ．Ａ．、Ｐｌａｃｈｙ、Ｊ．、Ｒｕｐｐ、Ｔ．、Ｗｅｎｚｅｌ、Ｉ．、Ｓｈａｋａｒａｍｉ、Ｍ．、Ｍｉｌｚ、Ｓ．、Ｅｌｌｗａｒｔ、Ｊ．Ｗ．、Ｓｔａｎｇａｓｓｉｎｇｅｒ、Ｍ．、Ｓｃｈｌｏｎｄｏｒｆｆ、Ｄ．及びＭａｃｋ、Ｍ．（２００４）「コラーゲン誘導関節炎の惹起及び進行の間におけるＣＣＲ２の二重の役割：ＣＣＲ２＋Ｔ細胞の制御活性に関する証拠。（Ｄｕａｌ  ｒｏｌｅ  ｏｆ  ＣＣＲ２  ｄｕｒｉｎｇ  ｉｎｉｔｉａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ｃｏｌｌａｇｅｎ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ａｒｔｈｒｉｔｉｓ：ｅｖｉｄｅｎｃｅ  ｆｏｒ  ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  ＣＣＲ２＋  Ｔ  ｃｅｌｌｓ．）」Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ１７２、８９０〜８。
Ｃｈｒｉｓｔｅｎ、Ｕ．及びｖｏｎ  Ｈｅｒｒａｔｈ、Ｍ．Ｇ．（２００４）「１型糖尿病における１型対２型のバランスの操作。（Ｍａｎｉｐｕｌａｔｉｎｇ  ｔｈｅ  ｔｙｐｅ１  ｖｓ  ｔｙｐｅ  ２  ｂａｌａｎｃｅ  ｉｎ  ｔｙｐｅ  １  ｄｉａｂｅｔｅｓ．）」Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｒｅｓ  ３０、３０９〜２５。
Ｃｏｘ、Ｍ．Ａ．、Ｊｅｎｈ、Ｃ．Ｈ．、Ｇｏｎｓｉｏｒｅｋ、Ｗ．、Ｆｉｎｅ、Ｊ．、Ｎａｒｕｌａ、Ｓ．Ｋ．、Ｚａｖｏｄｎｙ、Ｐ．Ｊ．及びＨｉｐｋｉｎ、Ｒ．Ｗ．（２００１）「ヒトインターフェロン誘導性１０−ｋＤａタンパク質及びヒトインターフェロン誘導性Ｔ細胞α化学誘因物質は、ヒトＣＸＣＲ３の異地性リガンドである：受容体状態との示差的結合。（Ｈｕｍａｎ  ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ−ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ  １０−ｋＤａ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ａｎｄ  ｈｕｍａｎ  ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ−ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ  Ｔ  ｃｅｌｌ  ａｌｐｈａ  ｃｈｅｍｏａｔｔｒａｃｔａｎｔ  ａｒｅ  ａｌｌｏｔｏｐｉｃ  ｌｉｇａｎｄｓ  ｆｏｒ  ｈｕｍａｎ  ＣＸＣＲ３：ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ  ｂｉｎｄｉｎｇ  ｔｏ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｓｔａｔｅｓ．）」Ｍｏｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  ５９、７０７〜１５。
Ｄｏｇａｎ、Ｒ．Ｎ．及びＫａｒｐｕｓ、Ｗ．Ｊ．（２００４）「中枢神経系炎症疾患制御のモデルとしての、自己免疫性脳脊髄炎におけるケモカイン及びケモカイン受容体。（Ｃｈｅｍｏｋｉｎｅｓ  ａｎｄ  ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  ｉｎ  ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ  ｅｎｃｅｐｈａｌｏｍｙｅｌｉｔｉｓ  ａｓ  ａ  ｍｏｄｅｌ  ｆｏｒ  ｃｅｎｔｒａｌ  ｎｅｒｖｏｕｓ  ｓｙｓｔｅｍ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｄｉｓｅａｓｅ  ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ．）」Ｆｒｏｎｔ  Ｂｉｏｓｃｉ  ９、１５００〜５。
Ｆｅｒｒｅｉｒａ、Ａ．Ｍ．、Ｒｏｌｌｉｎｓ、Ｂ．Ｊ．、Ｆａｕｎｃｅ、Ｄ．Ｅ．、Ｂｕｒｎｓ、Ａ．Ｌ．、Ｚｈｕ、Ｘ．及びＤｉｐｉｅｔｒｏ、Ｌ．Ａ．（２００５）「ケモカイン及びケモカイン関連遺伝子の発現に対するＭＣＰ−１欠乏の影響：急性炎症における複雑なネットワークに関する証拠。（Ｔｈｅ  ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ＭＣＰ−１  ｄｅｐｌｅｔｉｏｎ  ｏｎ  ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ  ａｎｄ  ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ−ｒｅｌａｔｅｄ  ｇｅｎｅ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ：ｅｖｉｄｅｎｃｅ  ｆｏｒ  ａ  ｃｏｍｐｌｅｘ  ｎｅｔｗｏｒｋ  ｉｎ  ａｃｕｔｅ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ．）」Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  ３０、６４〜７１。
Ｆｕｌｋｅｒｓｏｎ、Ｐ．Ｃ．、Ｚｉｍｍｅｒｍａｎｎ、Ｎ．、Ｂｒａｎｄｔ、Ｅ．Ｂ．、Ｍｕｎｔｅｌ、Ｅ．Ｅ．、Ｄｏｅｐｋｅｒ、Ｍ．Ｐ．、Ｋａｖａｎａｕｇｈ、Ｊ．Ｌ．、Ｍｉｓｈｒａ、Ａ．、Ｗｉｔｔｅ、Ｄ．Ｐ．、Ｚｈａｎｇ、Ｈ．、Ｆａｒｂｅｒ、Ｊ．Ｍ．、Ｙａｎｇ、Ｍ．、Ｆｏｓｔｅｒ、Ｐ．Ｓ．及びＲｏｔｈｅｎｂｅｒｇ、Ｍ．Ｅ．（２００４）「ＩＦＮ−γ（Ｍｉｇ、ＣＸＣＬ９）によって誘導されるケモカインモノカインによる肺への好酸球動員の負の制御。（Ｎｅｇａｔｉｖｅ  ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｅｏｓｉｎｏｐｈｉｌ  ｒｅｃｒｕｉｔｍｅｎｔ  ｔｏ  ｔｈｅ  ｌｕｎｇ  ｂｙ  ｔｈｅ  ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ  ｍｏｎｏｋｉｎｅ  ｉｎｄｕｃｅｄ  ｂｙ  ＩＦＮ−ｇａｍｍａ（Ｍｉｇ、ＣＸＣＬ９）．）Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  Ｕ  Ｓ  Ａ  １０１、１９８７〜９２。
Ｇａｕｐｐ、Ｓ．、Ｐｉｔｔ、Ｄ．、Ｋｕｚｉｅｌ、Ｗ．Ａ．、Ｃａｎｎｅｌｌａ、Ｂ．及びＲａｉｎｅ、Ｃ．Ｓ．（２００３）「ＣＣＲ２（−／−）マウスにおける実験的自己免疫性脳脊髄炎（ＥＡＥ）：多数の系統における感受性。（Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ  ｅｎｃｅｐｈａｌｏｍｙｅｌｉｔｉｓ（ＥＡＥ）  ｉｎ  ＣＣＲ２（−／−）ｍｉｃｅ：ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ  ｉｎ  ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｓｔｒａｉｎｓ．）」Ａｍ  Ｊ  Ｐａｔｈｏｌ  １６２、１３９〜５０。
Ｇａｙｌｅ、Ｒ．Ｂ．、３ｒｄ、Ｓｌｅａｔｈ、Ｐ．Ｒ．、Ｓｒｉｎｉｖａｓｏｎ、Ｓ．、Ｂｉｒｋｓ、Ｃ．Ｗ．、Ｗｅｅｒａｗａｍａ、Ｋ．Ｓ．、Ｃｅｒｒｅｔｔｉ、Ｄ．Ｐ．、Ｋｏｚｌｏｓｋｙ、Ｃ．Ｊ．、Ｎｅｌｓｏｎ、Ｎ．、Ｖａｎｄｅｎ  Ｂｏｓ、Ｔ．及びＢｅｃｋｍａｎｎ、Ｍ．Ｐ．（１９９３）「リガンド相互作用におけるインターロイキン−８受容体のアミノ末端の重要性。（Ｉｍｐｏｒｔａｎｃｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  ａｍｉｎｏ  ｔｅｒｍｉｎｕｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−８  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｉｎ  ｌｉｇａｎｄ  ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ．）」Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２６８、７２８３〜９。
Ｇｅｒａｒｄ、Ｃ．及びＲｏｌｌｉｎｓ、Ｂ．Ｊ．（２００１）「ケモカイン及び疾患。（Ｃｈｅｍｏｋｉｎｅｓ  ａｎｄ  ｄｉｓｅａｓｅ．）」Ｎａｔ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２、１０８〜１５。
Ｇｏｄｅｓｓａｒｔ、Ｎ．及びＫｕｎｋｅｌ、Ｓ．Ｌ．（２００１）「自己免疫疾患におけるケモカイン。（Ｃｈｅｍｏｋｉｎｅｓ  ｉｎ  ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ  ｄｉｓｅａｓｅ．）」Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １３、６７０〜５。
Ｈｏｒｕｋ、Ｒ．（２００３）「ケモカイン受容体を標的とする薬剤の開発及び評価。（Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ａｎｄ  ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  ａｇｅｎｔｓ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ．）」Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２９、３６９〜７５。
Ｋｉｍ、Ｍ．Ｙ．、Ｂｙｅｏｎ、Ｃ．Ｗ．、Ｈｏｎｇ、Ｋ．Ｈ．、Ｈａｎ、Ｋ．Ｈ．及びＪｅｏｎｇ、Ｓ．（２００５）「ＭＣＰ−１（単球遊走タンパク質１受容体）結合ペプチドによる血管新生の阻害。（Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ  ｂｙ  ｔｈｅ  ＭＣＰ−１（ｍｏｎｏｃｙｔｅ  ｃｈｅｍｏａｔｔｒａｃｔａｎｔ  ｐｒｏｔｅｉｎ−１）ｂｉｎｄｉｎｇ  ｐｅｐｔｉｄｅ．）」ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ  ５７９、１５９７〜６０１。
Ｌｏｅｔｓｃｈｅｒ、Ｐ．、Ｐｅｌｌｅｇｒｉｎｏ、Ａ．、Ｇｏｎｇ、Ｊ．Ｈ．、Ｍａｔｔｉｏｌｉ、Ｉ．、Ｌｏｅｔｓｃｈｅｒ、Ｍ．、Ｂａｒｄｉ、Ｇ．、Ｂａｇｇｉｏｌｉｎｉ、Ｍ．及びＣｌａｒｋ−Ｌｅｗｉｓ、Ｉ．（２００１）「ＣＸＣケモカイン受容体３、Ｉ−ＴＡＣ、Ｍｉｇ、及びＩＰ１０のリガンドはＣＣＲ３の天然アンタゴニストである。（Ｔｈｅ  ｌｉｇａｎｄｓ  ｏｆ  ＣＸＣ  ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ３、Ｉ−ＴＡＣ、Ｍｉｇ、ａｎｄ  ＩＰ１０、ａｒｅ  ｎａｔｕｒａｌ  ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ  ｆｏｒ  ＣＣＲ３．）」Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２７６、２９８６〜９１。
Ｍａｃｋａｙ、Ｃ．Ｒ．（２００１）「ケモカイン：免疫学の非常に重要な因子。（Ｃｈｅｍｏｌｉｎｅｓ：ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ′ｓ  ｈｉｇｈ  ｉｍｐａｃｔ  ｆａｃｔｏｒｓ．）」Ｎａｔ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２、９５〜１０１。
Ｎａｋａｊｉｍａ、Ｈ．、Ｓｕｇｉｎｏ、Ｍ．、Ｋｉｍｕｒａ、Ｆ．、Ｈａｎａｆｕｓａ、Ｔ．、Ｉｋｅｍｏｔｏ、Ｔ．及びＳｈｉｍｉｚｕ、Ａ．（２００４）「進行性多発性硬化症において減少したＣＤ１４＋ＣＣＲ２＋単球。（Ｄｅｃｒｅａｓｅｄ  ＣＤ１４＋ＣＣＲ２＋  ｍｏｎｏｃｙｔｅｓ  ｉｎ  ａｃｔｉｖｅ  ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ．）」Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  Ｌｅｔｔ  ３６３、１８７〜９。
Ｏｇｉｌｖｉｅ、Ｐ．、Ｂａｒｄｉ、Ｇ．、Ｃｌａｒｋ−Ｌｅｗｉｓ、Ｉ．、Ｂａｇｇｉｏｌｉｎｉ、Ｍ．及びＵｇｕｃｃｉｏｎｉ、Ｍ．（２００１）「エオタキシンは、ＣＣＲ２の天然アンタゴニスト及びＣＣＲ５のアゴニストである。（Ｅｏｔａｘｉｎ  ｉｓ  ａ  ｎａｔｕｒａｌ  ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ  ｆｏｒ  ＣＣＲ２  ａｎｄ  ａｎ  ａｇｏｎｉｓｔ  ｆｏｒ  ＣＣＲ５．）」Ｂｌｏｏｄ  ９７、１９２０〜４。
Ｏｎｕｆｆｅｒ、Ｊ．Ｊ．及びＨｏｒｕｋ、Ｒ．（２００２）「ケモカイン、ケモカイン受容体及び小分子アンタゴニスト：近年の発展。（Ｃｈｅｍｏｋｉｎｅｓ、ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  ａｎｄ  ｓｍａｌｌ−ｍｏｌｅｃｕｌｅ  ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ：ｒｅｃｅｎｔ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｓ．）」Ｔｒｅｎｄｓ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｓｃｉ  ２３、４５９〜６７。
Ｐｅｔｋｏｖｉｃ、Ｖ．、Ｍｏｇｈｉｎｉ、Ｃ．、Ｐａｏｌｅｔｔｉ、Ｓ．、Ｕｇｕｃｃｉｏｎｉ、Ｍ．及びＧｅｒｂｅｒ、Ｂ．（２００４ａ）「エオタキシン−３／ＣＣＬ２６は、ＣＣケモカイン受容体１及び５の天然アンタゴニストである。制御的役割を有するヒトケモカイン。（Ｅｏｔａｘｉｎ−３／ＣＣＬ２６  ｉｓ  ａ  ｎａｔｕｒａｌ  ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ  ｆｏｒ  ＣＣ  ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  １  ａｎｄ  ５．Ａ  ｈｕｍａｎ  ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ  ｗｉｔｈ  ａ  ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ  ｒｏｌｅ．）」Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２７９、２３３５７〜６３。
Ｐｅｔｋｏｖｉｃ、Ｖ．、Ｍｏｇｈｉｎｉ、Ｃ．、Ｐａｏｌｅｔｔｉ、Ｓ．、Ｕｇｕｃｃｉｏｎｉ、Ｍ．及びＧｅｒｂｅｒ、Ｂ．（２００４ｂ）「Ｉ−ＴＡＣ／ＣＸＣＬ１１はＣＣＲ５の天然アンタゴニストである。（Ｉ−ＴＡＣ／ＣＸＣＬ１１  ｉｓ  ａ  ｎａｔｕｒａｌ  ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ  ｆｏｒ  ＣＣＲ５．）」Ｊ  Ｌｅｕｋｏｃ  Ｂｉｏｌ  ７６、７０１〜８。
Ｐｒｏｕｄｆｏｏｔ、Ａ．Ｅ．、Ｐｏｗｅｒ、Ｃ．Ａ．、Ｒｏｍｍｅｌ、Ｃ．及びＷｅｌｌｓ、Ｔ．Ｎ．（２００３）「治療薬としてのケモカインアンタゴニストの戦略。（Ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ  ｆｏｒ  ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ  ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ  ａｓ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ．）」Ｓｅｍｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １５、５７〜６５。
Ｑｕｉｎｏｎｅｓ、Ｍ．Ｐ．、Ａｈｕｊａ、Ｓ．Ｋ．、Ｊｉｍｅｎｅｚ、Ｆ．、Ｓｃｈａｅｆｅｒ、Ｊ．、Ｇａｒａｖｉｔｏ、Ｅ．、Ｒａｏ、Ａ．、Ｃｈｅｎａｕｘ、Ｇ．、Ｒｅｄｄｉｃｋ、Ｒ．Ｌ．、Ｋｕｚｉｅｌ、ＷＡ．及びＡｈｕｊａ、Ｓ．Ｓ．（２００４）「ＣＣケモカイン受容体２を含まないマウスにおける実験的関節炎は、重度のヒト関節リウマチと非常に似ている。（Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  ｉｎ  ＣＣ  ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ２−ｎｕｌｌ  ｍｉｃｅ  ｃｌｏｓｅｌｙ  ｍｉｍｉｃｓ  ｓｅｖｅｒｅ  ｈｕｍａｎ  ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ  ａｒｔｈｒｉｔｉｓ．）」Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔ  １１３、８５６〜６６。
Ｒｏｓｓｉ、Ｄ．及びＺｌｏｔｎｉｋ、Ａ．（２０００）「ケモカイン及びその受容体の生物学。（Ｔｈｅ  ｂｉｏｌｏｇｙ  ｏｆ  ｃｈｅｍｏｋｉｎｅｓ  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ．）」Ａｎｎｕ  Ｒｅｖ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １８、２１７〜４２。
Ｓａｂｒｏｅ、Ｉ．、Ｐｅｃｋ、Ｍ．Ｊ．、Ｖａｎ  Ｋｅｕｌｅｎ、Ｂ．Ｊ．、Ｊｏｒｒｉｔｓｍａ、Ａ．、Ｓｉｍｍｏｎｓ、Ｇ．、Ｃｌａｐｈａｍ、Ｐ．Ｒ．、Ｗｉｌｌｉａｍｓ、Ｔ．Ｊ．及びＰｅａｓｅ、Ｊ．Ｅ．（２０００）「ケモカイン受容体ＣＣＲ１及びＣＣＲ３の小分子アンタゴニスト。好酸球の機能及びＣＣＲ３媒介性ＨＩＶ−１侵入の強力な阻害。（Ａ  ｓｍａｌｌ  ｍｏｌｅｃｕｌｅ  ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ  ｏｆ  ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  ＣＣＲ１  ａｎｄ  ＣＣＲ３．  Ｐｏｔｅｎｔ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｅｏｓｉｎｏｐｈｉｌ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  ＣＣＲ３−ｍｅｄｉａｔｅｄ  ＨＩＶ−１  ｅｎｔｒｙ．）」Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２７５、２５９８５〜９２。
Ｓｃｈｗａｒｚ、Ｍ．Ｋ．及びＷｅｌｌｓ、Ｔ．Ｎ．（２００２）「ケモカインのネットワークを調節する新たな治療薬。（Ｎｅｗ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  ｔｈａｔ  ｍｏｄｕｌａｔｅ  ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ  ｎｅｔｗｏｒｋｓ．Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ  １、３４７〜５８。
Ｓｚｅｋａｎｅｃｚ、Ｚ．、Ｋｉｍ、Ｊ．及びＫｏｃｈ、Ａ．Ｅ．（２００３）「関節リウマチにおけるケモカイン及びケモカイン受容体。（Ｃｈｅｍｏｋｉｎｅｓ  ａｎｄ  ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  ｉｎ  ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ  ａｒｔｈｒｉｔｉｓ．）」Ｓｅｍｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １５、１５〜２１。
Ｔｈｏｍａｓ、Ｍ．Ｓ．、Ｋｕｎｋｅｌ、Ｓ．Ｌ．及びＬｕｋａｃｓ、Ｎ．Ｗ．（２００２）「アレルギー性気道過敏症のゴキブリ抗原誘導モデルにおけるＩＦＮ−γ誘導性タンパク質１０ｋＤａの差異的役割：全身対局所の効果。（Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ  ｒｏｌｅ  ｏｆ  ＩＦＮ−ｇａｍｍａ−ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ  ｐｒｏｔｅｉｎ  １０ｋＤａ  ｉｎ  ａ  ｃｏｃｋｒｏａｃｈ  ａｎｔｉｇｅｎ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  ａｌｌｅｒｇｉｃ  ａｉｒｗａｙ  ｈｙｐｅｒｒｅａｃｔｉｖｉｔｙ：ｓｙｓｔｅｍｉｃ  ｖｅｒｓｕｓ  ｌｏｃａｌ  ｅｆｆｅｃｔｓ．）」Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １６９、７０４５〜５３。
Ｔｈｏｍａｓ、Ｍ．Ｓ．、Ｋｕｎｋｅｌ、Ｓ．Ｌ．及びＬｕｋａｃｓ、Ｎ．Ｗ．（２００４）「ＣＸＣＲ３リガンドＣＸＣＬ９によるゴキブリ抗原誘導アレルギー性気道過敏症の制御。（Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃｏｃｋｒｏａｃｈ  ａｎｔｉｇｅｎ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ａｌｌｅｒｇｉｃ  ａｉｒｗａｙ  ｈｙｐｅｒｒｅａｃｔｉｖｉｔｙ  ｂｙ  ｔｈｅ  ＣＸＣＲ３  ｌｉｇａｎｄ  ＣＸＣＬ９．）」Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １７３、６１５〜２３。
Ｗｅｌｌｓ、Ｔ．Ｎ．、Ｐｏｗｅｒ、Ｃ．Ａ．、Ｓｈａｗ、Ｊ．Ｐ．及びＰｒｏｕｄｆｏｏｔ、Ａ．Ｅ．（２００６）「ケモカインブロッカー−−作製中の治療薬？（Ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ  ｂｌｏｃｋｅｒｓ−−ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｍａｋｉｎｇ？）」Ｔｒｅｎｄｓ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｓｃｉ  ２７、４１〜７。
Ｘａｎｔｈｏｕ、Ｇ．、Ｄｕｃｈｅｓｎｅｓ、Ｃ．Ｅ．、Ｗｉｌｌｉａｍｓ、Ｔ．Ｊ．及びＰｅａｓｅ、Ｊ．Ｅ．（２００３）「ＣＣＲ３の機能応答は、ＣＸＣＲ３とそのリガンドＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０及びＣＸＣＬ１１の両方によって制御される。（ＣＣＲ３  ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ  ａｒｅ  ｒｅｇｕｌａｔｅｄ  ｂｙ  ｂｏｔｈ  ＣＸＣＲ３  ａｎｄ  ｉｔｓ  ｌｉｇａｎｄｓ  ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０  ａｎｄ  ＣＸＣＬ１１．）」Ｅｕｒ  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ３３、２２４１〜５０。
Ｚｌｏｔｎｉｋ、Ａ．及びＹｏｓｈｉｅ、Ｏ．（２０００）「ケモカイン：新たな分類系及び免疫におけるそれらの役割。（Ｃｈｅｍｏｋｉｎｅｓ：ａ  ｎｅｗ  ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｓｙｓｔｅｍ  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  ｒｏｌｅ  ｉｎ  ｉｍｍｕｎｉｔｙ．）」Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  １２、１２１〜７。
ｗｗｗ．ｌｅａｄｄｉｓｃｏｖｅｒｙ．ｃｏ．ｕｋ、２００５年２月。
【０００３】
健康及び疾患におけるケモカイン
免疫系は外来病原体と戦い、内因性疾患を緩和し、及び物理的損傷を修復することによって健康を促進する。感染、損傷、又はその他の形で損なわれた組織は、ケモカイン（ＣＫ）と呼ばれる化学遊走物質を血流中に放出することによって免疫系の細胞を動員する。同じＣＫは白血球の活性化を誘導し、リンパ球の分化を誘発する［Ｒｏｓｓｉ、２０００；Ｚｌｏｔｎｉｋ、２０００］。免疫細胞の配置は、病原体の攻撃に立ち向かうためだけでなく、免疫監視及び「自己」に対する寛容性にも不可欠である［Ｍａｃｋａｙ、２００１］。５０個に近い異なるヒトＣＫ及び２０個のＣＫ受容体（ＣＫＲ）が、種々の病原体及び病状に応答する。ＣＫ系の厳密な制御調節は、様々な病原体の攻撃に対する迅速、規則的且つ適切な応答をもたらす。健康と同じく重要なのは、免疫系が「自己」に対して作用することを妨げる制御である。病的損傷に対して不適切であり、過剰であり、又は長期化する免疫応答は、存在する場合、健康な組織に対して損傷を引き起こす。このような異常な免疫応答は、多発性硬化症、炎症性腸疾患（クローン病、潰瘍性結腸炎）、関節リウマチ、乾癬、喘息及び若年性糖尿病、主要且つ一般的な自己免疫疾患の臨床状態の原因となる。疾患の動物モデルを用いた実験による研究［Ｇｅｒａｒｄ、２００１；Ｄｏｇａｎ、２００４；Ｓｚｅａｎｅｃｚ、２００３］及び臨床的観察［Ｇｅｒａｒｄ、２００１；Ｇｏｄｅｓｓａｒｔ、２００１］から、ＣＫ及びその同系受容体のレベルが特定の自己免疫疾患と相関関係があることが示唆された。
【０００４】
自己免疫疾患の現在の治療
個々の自己免疫疾患の病因は知られていないが、疾患の病因は個々の場合、「自己」を対象とする免疫細胞の活動の結果である。したがって、「最先端の」治療は疾患の寛解の誘導及び維持に限られるということになる。若年成人における神経性障害の最も一般的な原因である多発性硬化症（ＭＳ）は再発−寛解の過程を示し、第二次進行期が続く。ステロイドは、再発の期間を短縮し回復を加速させるための治療の第一選択肢である。非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）を用いた長期の治療を与えて、寛解を維持するか、或いは延長させる。炎症性腸疾患（ＩＢＤ）は、今日１００万人を超えるアメリカ人を侵している［ｗｗｗ．ｌｅａｄｄｉｓｃｏｖｅｒｙ．ｃｏ．ｕｋ、２００５年２月］。重度の腹痛及び下痢によって示されるように、炎症性腸疾患は腸癌の高いリスクと関係がある。軽度のＩＢＤに罹患している患者に関しては、ＮＳＡＩＤを用いて寛解を誘導する。その悪い副作用のために、ステロイドは適度〜重度の疾患を有する患者及びＮＳＡＩＤに応答しない患者用に保留されている。ステロイドが疾患に無効であるときは、免疫抑制剤を使用する。
【０００５】
自己免疫の確立された新たな治療は、免疫系を調節し、必要な場合は免疫系を抑制することによって働く。両方の手法が副作用のリスクを負い、短期の副作用は知られており、長期の副作用は常に予想することができる訳ではない。重度のＭＳ及びＩＢＤ用の第一選択治療薬であるステロイドの欠点：胃腸、皮膚、神経、内分泌、眼及び代謝の副作用は充分文書化されている。ＭＳにおける寛解はインターフェロンβ及び酢酸グラチラマー（コパキソン）によって「延長される」が、再発頻度の３０％の低下に等しい薬効は、疲労、痛み及び膀胱機能障害などの重度の副作用によって相殺される。ＩＢＤにおける寛解を延長する薬剤の範囲は広いが、その副作用はやはり重大である。ＮＳＩＡＤは相当数のＩＢＤ患者に容認し得ず、その代替薬である、免疫抑制剤５−ＡＺＴ及び６−ｍｐは重度の副作用を引き起こす。レミケードによって例示される新世代の抗体薬剤の長期の使用は、負の側面を明らかにし始めている。レミケードは結核、日和見感染及び潜在性ＭＳの活性化と関連付けられてきている（Ｃｅｎｔｏｃｏｒ、Ｉｎｃ．２００５）。この悪下した安全性プロファイルに、高いコスト及び静脈内注入による投与を加味すると、この革新的治療は、試行及び試験済みの薬剤に対する魅力的な代替手段に満たないものとなる。疾患再発における急性炎症を治療し、長期の治療をもたらして寛解を維持する改良型薬剤が必要である。
【０００６】
従来の薬剤標的としてのケモカイン受容体（ＣＫＲ）
ＣＫＲというＧタンパク質共役受容体（ＧＰＣＲ）ファミリーの構成要素は、薬剤標的の系統を有する。４５％を超える全ての市場の薬剤がＧＰＣＲを標的とする［Ｈｏｒｕｋ、２００３］。ＧＰＣＲのリガンドが低分子量ペプチド（ヒスタミン、ドーパミン、セロトニン）であることを考慮して、ＣＫＲは小分子薬剤の御しやすい標的であり得ると予想された（Ｐｒｏｕｄｆｏｏｔら、２００３）。開発中の候補及び破棄されてしまった候補を含めた、ＣＫＲを標的とする薬剤候補の大部分は実際、小分子の阻害剤である［Ｗｅｌｌｓ、２００６］。立体的及びエネルギー的考慮事項［Ｏｎｕｆｆｅｒ、２００２］及び経験的試験［Ｓａｂｒｏｅ、２０００］に基づいて、ＣＫＲの小分子アンタゴニストは、不活性立体配座で受容体を安定化させることによってリガンド−受容体相互作用を阻害する、ＣＫの非競合的阻害剤であるに違いないと提案された。
【０００７】
ＣＫＲはそれらの同系及び無関係なＣＫリガンドの両方と相互作用することが知られており、これは「冗長性」として知られる現象である。ＣＫ−ＣＫＲ相互作用の機能定義として、「同系」ＣＫＲ−ＣＫ対は、ＣＫＲがナノグラムのＣＫにより活性化されて細胞内シグナル伝達（カルシウム動員、キナーゼ及びリパーゼ活性化）を誘導するＣＫＲ及びＣＫとして定義する。同じＣＫ−ＣＫＲ系に関して、「無関係な」ＣＫＲ−ＣＫの組合せは、正の、負の、又は非生産的な細胞内応答を誘導するために少なくとも３桁程度を超えるＣＫ、マイクログラムを必要とするＣＫＲとして定義する。
【０００８】
ＣＫＲのＧＰＣＲとの同一性は、薬剤開発における明らかな有利点である。しかし、生理的免疫におけるこれらのＧＰＣＲの不規則な関与によって、ＣＫＲは不確かな薬剤標的となり、さらには治療に不向きなものとなる。炎症性Ｔ細胞及び単球によって発現される受容体、ＣＣＲ２に対する抗体を使用して、実験的コラーゲン誘導関節炎を治療した［Ｂｒｕｈｌ、２００４］。治療は疾患初期中（第０〜１５日）は効果があったが、疾患進行中（第２１〜３６日）は有害であった。免疫寛容を担う制御Ｔ細胞の亜集団が、疾患進行期中に数倍に増殖することが明らかとなった。抗体は、制御Ｔ細胞のＣＣＲ２受容体を阻害することによって、疾患の症状を悪化させた。実施例中では、異なる細胞型によって発現された同じ薬剤標的、ＣＣＲ２、の阻害は、標的ＣＫＲを発現する細胞の機能に応じて治療的、又は病的である可能性がある。ＣＫ、ＲＡＮＴＥＳ／ＣＣＬ５＊（＊ＣＫ分類：［Ｚｌｏｔｎｉｋ、２０００］）及びその同系受容体のＣＣＲ５は、生理的免疫にも不可欠な疾患関連タンパク質の例である。高レベルのＣＣＬ５及びＣＣＲ５は、実験的糸球体腎炎において糸球体細胞増殖及びマクロファージ浸潤と関係があった。受容体を阻害するＣＫ類似体（Ｍｅｔ−ＲＡＮＴＥＳ及びアミノ−オキシペンタン−ＲＡＮＴＥＳ）は、糸球体細胞増殖及びマクロファージ浸潤を低下させたが、臨床症状は悪化させた［Ａｎｄｅｒｓ、２００３］。ＣＫ類似体は白血球動員の治療アンタゴニストであるが、常在マクロファージの病原性活性化物質であることが観察された。ＧＰＣＲ薬剤の標的であることが確証されたＣＫＲは、生理的免疫のメディエータとして治療に不向きである可能性がある。
【０００９】
ＣＫ及びＣＫＲは、相互作用タンパク質のネットワークを構成する［Ｓｃｈｗａｒｚ、２００２］。ネットワークの個々のタンパク質を対象とする薬剤は、概してネットワークを乱す危険がある。したがって、ネットワークの相互作用及び相互依存タンパク質が生理的免疫に不可欠であるとき、そのタンパク質の１つを標的とすることは免疫系の全体機能に影響を与える能性があり、したがって薬剤の有効性を低下させる可能性があるということになる。ＣＫ遺伝子のノックアウトは、ＣＫネットワーク干渉の生理的結果を試験するための好ましい実験的手法となっている。ＭＣＰ１／ＣＣＬ２欠損マウス及びそれらの野生型相当物由来の炎症細胞の比較試験において、ＭＣＰ−１／ＣＣＬ２の除去は疾患に対する免疫応答を変えたことが見出された［Ｆｅｒｒｅｉｒａ、２００５］。欠損及び野生型疾患マウス由来の同等の組織及び細胞は、その各々のＣＫ及びＣＫ受容体プロファイルの有意な差異を示した。ネットワーク原理もＭＣＰ−１／ＣＣＬ２欠損マウス由来の組織において観察した。ＣＫノックアウトマウスのマクロファージにおけるＭＣＰ−１／ＣＣＬ２の再構成系発現は、ＣＫ、ＭＣＰ−１／ＣＣＬ２不活性化により特異的に誘導されたＣＫの発現を選択的に抑制した。遺伝的に改変された動物における生理的免疫は、それらの野生型相当物と同様に、ネットワークの応答及び適合の原理によって決定された。
【００１０】
疾患の実験動物モデルでは、ネットワークの関連性は細胞レベルで最も顕著である。多発性硬化症のげっ歯類モデルである実験的自己免疫性脳脊髄炎（ＥＡＥ）を使用して、疾患の発症におけるＣＣＲ２の役割を試験した［Ｇａｕｐｐ、２００３］。ＣＮＳへの単球及びマクロファージの動員を、ＣＣＲ２ノックアウト、疾患誘導マウスにおいて調べた。予想したこととは反対に、ＣＣＲ２の不活性化はマウスにおけるＥＡＥに耐性を与えなかった。ＣＮＳの病変は低レベルの単球、害された単球機能の証拠を含んでいたが、さらに高レベルの好中球を含んでいた。実験マウスのＣＫ（ＩＬ−８／ＣＸＣＬ８）及びＣＫ受容体（ＣＣＲ１、ＣＣＲ５）プロファイルは、病変中の増大した好中球レベルと一致したことが見出された。ＣＣＲ２欠損マウスのＣＫ−ＣＫＲネットワークは、代替の免疫制御分子及びエフェクター細胞が関与する「代償性」免疫応答による疾患誘導に応答したことが提案された。前述の例は、ネットワーク原理のさらに他の表現である。疾患関連タンパク質、一般に生理的プロセスに重要であるタンパク質の中和は、それ自体が病的であり得る逆の応答を誘導する可能性がある。重度のヒト関節リウマチの症状を再現する実験的関節炎のネズミモデルは、ネットワーク干渉の生理的結果の他の例証を与えた［Ｑｕｉｎｏｎｅｓ、２００４］。ＣＣＲ２ノックアウトマウスを使用して、実験的関節炎における受容体の役割を試験した。ＣＫＲは疾患の病因と関係があり、したがって、ＣＣＲ２ノックアウトマウスの表現型が、重度のヒト関節炎、高いＴ細胞レベル及び炎症関節中に濃縮された単球及びマクロファージにおいて見られた表現型と類似している可能性があることは予想されなかった。ＣＫＲ不全マウスにおける疾患が、他のＣＫＲの発現を刺激して炎症細胞を動員したと説明された。生理的に、また治療効果にとっても不可欠なネットワークを乱す結果から、代償反応が誘導されて、現状が統合される可能性があるが、潜在的に悪化する可能性もある。
【００１１】
ＣＫ−ＣＫＲ軸は、ＧＰＣＲ及びそれらの小分子リガンドの「薬剤的」属性にもかかわらず、薬剤標的として明らかに問題である。ＣＫ−ＣＫＲ軸は、生理的免疫の中核をなす相互作用及び相互依存的制御タンパク質のネットワークとして機能する。代償的及びおそらく有害である応答は、したがってこのネットワークの薬理学的介入の不可避な結果である可能性がある。
【００１２】
ケモカイン−ケモカイン受容体のネットワーク
ｉｎ  ｖｉｔｒｏで不均衡な数のケモカイン（ＣＫ）リガンド、明確に定義されていないリガンド特異性及び不確かなＣＫ機能が、ＣＫの「冗長性」及びさらに悪いことに「混乱」の証拠として挙げられた。このような形容辞は、当時のデータと一致するが、生理的免疫及び病的自己免疫に不可欠であるＣＫ−ケモカイン受容体（ＣＫＲ）のネットワークと適合しない。後の機能試験及び構造−活性分析に照らし合わせたオリジナルデータの再検討によって、リガンド対受容体の比と表面上無差別的な受容体の活性化の両方における生理的関連が明らかになる。まず始めに、その同系受容体のアゴニストであるＣＫは、遊走及びＣａ２＋フラックスアッセイにより測定して、無関係な受容体の天然アンタゴニストであることが見出された。受容体の３個のアゴニスト、ＣＸＣＲ３、ＭＩＧ／ＣＸＣＬ９、ＩＰ１０／ＣＸＣＬ１０及びＩ−ＴＡＣ／ＣＸＣＬ−１１は、無関係な受容体、ＣＣＲ３のアンタゴニストであることが示された［Ｌｏｅｔｓｃｈｅｒ、２００１］。３個の中で最も強力なＩ−ＴＡＣ／ＣＸＣＬ１１は、ＣＣＲ５の天然アンタゴニストであることが見出された［Ｐｅｔｋｏｖｉｃ、２００４］。エオタキシン／ＣＣＬ１１、ＣＣＲ３のアゴニストは、それぞれ無関係な受容体ＣＣＲ５及びＣＣＲ２のアゴニスト及び天然アンタゴニストであることがさらに示された［Ｏｇｉｌｖｉｅ、２００１］。ＣＣＲ３、エオタキシン３／ＣＣＬ２６の他の同系リガンド及びアゴニストは、無関係な受容体ＣＣＲ１及びＣＣＲ５の天然アンタゴニストであることが見出された［Ｐｅｔｋｏｖｉｃ、２００４］。ＭＣＰ３／ＣＣＬ７、受容体ＣＣＲ１、２及び３の同系アゴニストは受容体、ＣＣＲ５の天然アンタゴニストであることが示された［Ｂｌａｎｐａｉｎ、１９９９］。ＣＫＲの同時活性化と阻害は、機能的に異なる白血球の亜集団の動員を制御するための機構であると解釈された。その点を実証するために、ＭＩＧ／ＣＸＣＬ９及びエオタキシン／ＣＣＬ１１は、Ｔｈ１細胞とＴｈ２細胞の間の均衡を変えることによって、アレルギー性気道炎症の過程を測定することができた［Ｔｈｏｍａｓ、２００４；Ｆｕｌｋｅｒｓｏｎ、２００４］。ＭＩＧ／ＣＸＣＬ９は、Ｔｈ１細胞によって発現されるＣＸＣＲ３のアゴニスト、及びＴｈ２細胞によって発現されるＣＣＲ３のアンタゴニストである。エオタキシン／ＣＣＬ１１、ＣＣＲ３の同系リガンドは、無関係な受容体、ＣＸＣＲ３において高親和性結合部位を有することも示された［Ｘａｎｔｈｏｕ、２００３］。改善点、ＣＫＲの活性化／阻害は、同じ受容体の差異的活性化によるＴ細胞動員の制御であった［Ｔｈｏｍａｓ、２００２］。ＩＰ−１０／ＣＸＣＬ１０及びＭＩＧ／ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＲ３の同系リガンドは、それぞれ好酸球蓄積及び気道過敏症を増大、又は低下させることができた。累積データは現在、免疫細胞の疾患に関連する分布及び活性が実際、種々のＣＫＲに関するＣＫの多様性及び特異性の結果生じるものであることを示している。
【００１３】
実験データも臨床的証拠も野生型と疾患関連ＣＫを区別していないので、生理的及び病的免疫応答の免疫細胞を動員するのはおそらく同じ化学誘引物質である。ＣＫの病原性は、過度の、不適切且つ持続的な野生型ＣＫの活性、ＣＫネットワークの脱制御と一致する現象の結果であるようである。ＣＫと受容体の結合の分析を実施して、ＣＫ−ＣＫＲ相互作用の制御に関する分子的基盤を解明した。ＭＩＧ／ＣＸＣＬ９及びＩＰ−１０／ＣＸＣＬ１０は受容体ＣＸＣＲ３とは競合的に結合するが、第三の関連ＣＫ、ＩＴＡＣ／ＣＸＣＬ１１に関しては非競合的に結合する［Ｃｏｘ、２００１］。この実施例では、機能的関連があるＣＫは、それらの同系受容体中の別々の重複部位と相互作用することが示された。ＣＫの異常な活性、無関係な受容体と相互作用するＣＫの活性は、ＣＫネットワーク制御自体に関するより多くの情報を与える可能性がある。例えば、ＣＸＣＲ３の同系リガンドはＣＣＲ３の機能的応答を阻害し、その受容体の同系リガンド、エオタキシン／ＣＣＬ１１を置換することが観察された［Ｌｏｅｔｓｃｈｅｒ、２００１］。同系のより詳細な試験は、ＩＴＡＣ／ＣＸＣＬ１１、ＣＸＣＲ３の同系リガンドは、後者の受容体、ＣＣＲ３の細胞外ループ由来のエオタキシン／ＣＣＬ１１を効率良く置換したことを開示した。同系リガンドと無関係なリガンドは、したがって、同じ受容体中に重複する結合部位を共有し得る［Ｘａｎｔｈｏｕ、２００３］。他の異常ではあるが、情報を与える観察結果は、エオタキシン／ＣＣＬ１１及びその無関係な受容体、ＣＸＣＲ３に関する。エオタキシン／ＣＣＬ１１はｉｎ  ｖｉｔｒｏにおいてＣＸＣＲ３のアゴニストでもアンタゴニストでもないが、この受容体は、競合によってＩＴＡＣ／ＣＸＣＬ１１により占有され得る、このＣＫに対する高親和性結合部位を有する［Ｘａｎｔｈｏｕ、２００３］。
【００１４】
革新的な薬剤標的としてのケモカイン
分子構造−活性分析及び結合試験の結果は、文脈を考慮するとＣＫ活性の制御物質であるＣＫ結合配列を受容体が含むということである。ＣＫＲの文脈では、制御要素は考えられるが、受容体は生理的免疫に不可欠であるので問題のある薬剤標的である。
【００１５】
ＣＫ受容体の機能試験及び相補的分子分析は、生理的及び疾患関連ＣＫの受容体における制御配列を開示している。無関係な受容体とのＣＫの異常な相互作用は、一般的なＣＫ−ＣＫＲネットワーク活性に重要である偏在する謎の制御配列を示す。ＣＫの結合活性を改変することができるＣＫＲ由来ＣＢＰは、前例がない訳ではない。ＩＬ−８／ＣＸＣＬ８とＧＲＯ−α／ＣＸＣＬ１の結合を担う受容体配列を同定及び定義するための試験では、受容体由来の配列はＣＫ結合の競合阻害剤であることが示された［Ｇａｙｌｅ、１９９３］。同じ受容体、ＣＸＣＲ１の細胞外ドメイン由来のペプチドは、同系ＣＫ、ＩＬ−８／ＣＸＣＬ８のアンタゴニストであることが見出され［Ａｔｔｗｏｏｄ、１９９６］、化学修飾すると、このペプチドはさらに強力な阻害剤となった［Ａｔｔｗｏｏｄ、１９９７］。さらに近年、ＣＫＲのＣＣＲ２及びＣＣＲ３の細胞外ループ中の配列と相同的なＭＣＰ１／ＣＣＬ２結合ペプチドは、ＣＣＲ２とのＭＣＰ−１／ＣＣＬ２の結合をアンタゴナイズすることによってアンギオスタチック状態であることが示された［Ｋｉｍ、２００５］。
【００１６】
薬剤作用のメカニズム−免疫不均衡の再調整
全ての自己免疫疾患の病原性は明らかに、無秩序且つ機能障害性の免疫活性である。任意の治療手法の課題は、同一個体において臨床症状を引き起こし且つ疾患に対して防御する、免疫プロセスを操作することである。今日まで、いずれの療法もこの課題を満足に満たしていない。自己免疫疾患は、相当な副作用を引き起こす低有効性の薬剤で治療される。現在の薬剤の大部分は、その欠陥がそれらの作用機構、疾患関連タンパク質の不可逆的阻害におそらく由来する小さな合成分子である。
【００１７】
ＣＫＲを標的とする薬剤候補は、小さな合成分子のクラスに属する［Ｗｅｌｌｓ、２００６］。前の考察に従うと、この型の薬剤は本質的に欠陥がある。生理的免疫に不可欠であるネットワークとしてのＣＫ及びそれらの受容体の編成を考慮すると、ＣＫＲを無難に阻害及び中和することは全く予想することができない。ネットワーク活性の原理が分子及び細胞レベルで免疫応答を支配し、阻害薬剤活性の治療的、又は有害な結果を決定する。ネットワークの最大の目的は、均衡を再調整するための応答を誘導するネットワークの免疫均衡、任意の摂動を維持することである。自己免疫疾患の実験モデル及び臨床的証拠は、疾患そのものが免疫不均衡として現れ、均衡を再調整することによって健康が回復されるネットワーク活性の多数の例をもたらす。例えば、有害な好酸球及び防御Ｔｈ１リンパ球を誘導する肺中のアレルゲン攻撃誘発を行う［Ｆｕｌｋｅｒｓｏｎ、２００４；Ｔｈｏｍａｓ、２００２］。アレルゲン誘導型ＣＫ、エオタキシン／ＣＣＬ１１は炎症性好酸球を動員する。同時に、Ｔｈ１細胞はＣＫ、ＭＩＧ／ＣＸＣＬ９、好酸球の天然阻害剤を発現する。推測されたのは、アレルギー肺の炎症状態は、正の制御ＣＫと負の制御ＣＫの間の競合によって決定され、その競合の結果はＴｈ１と好酸球細胞の間の均衡に変わったということであった。１型糖尿病、疱疹間質性角膜炎及び多発性硬化症の臨床症状は、１型環境による感染、Ｔヘルパー（Ｔｈ）リンパ球均衡の傾きである［Ｃｈｒｉｓｔｅｎ、２００４］。この仮説の支持は、糖尿病誘発ＲＩＰ−ＬＣＭＶマウスモデルによって与えられた。１型ＣＫ及びサイトカインは、ＲＩＰ−ＬＣＭＶマウスの糖尿病状態の原因であることが示された。１型誘導因子の阻害、又は２型サイトカインの投与による免疫不均衡の再調整は治療的であり得ることが、検証によって示唆された。免疫均衡は、再発−寛解する多発性硬化症における疾患進行の顕著な決定要因であると論じられた［Ｎａｋａｊｉｍａ、２００４］。Ｔｈ１関連ＣＫのレベルはＭＳの活性期において上昇するが、一方Ｔｈ２反応を誘導することが報告されているＭＣＰ−ｌ／ＣＣＬ２は寛解中に上昇する。活性ＭＳを有する患者由来の血液の分析によって、上昇したレベルのＴｈ１リンパ球及び有意に低下したレベルのＣＣＲ２、ＭＣＰ−ｌ／ＣＣＬ２の同系受容体を発現する単球が明らかになった。上昇したＭＣＰ−１／ＣＣＬ２及びＣＣＲ２を発現する末梢血単球の一部はＴｈｌ／Ｔｈ２の不均衡を正して、疾患寛解の状態を作り出すことができるという証拠として、これらの結果は解釈された。
【００１８】
Ｔｈｌ−Ｔｈ２の二分は生理的免疫における免疫均衡に影響を与え、自己免疫疾患に特徴的である免疫不均衡を引き起こす際の決定要因である。最も一般的な生理条件下において、Ｔｈｌ及びＴｈ２様細胞は平衡状態にあり、免疫均衡の確定及び維持に貢献する。固有及び外来刺激が、新たな、一時的平衡及び免疫不均衡を作り出すＴｈｌ及びＴｈ２様免疫応答を誘導する。免疫細胞レパートリーの改変を伴う応答は、新たなＴｈｌ−Ｔｈ２平衡を確定し、免疫均衡を回復させる。自己免疫疾患では、寛容の消失は病的なＴｈｌ−Ｔｈ２の不均衡及び免疫不均衡として表される。治療の不在下では、Ｔｈｌ−Ｔｈ２の不均衡の解決は一時的であり、持続的な免疫不均衡が再発をもたらす。したがって自己免疫疾患の有効な治療は、Ｔｈｌ−Ｔｈ２細胞平衡を回復させて、寛容性と疾患寛解の免疫不均衡を再調整するはずである。したがって、自己免疫疾患を治療するための１つの方法は、病的平衡状態を変えることであるということになる。新たな平衡を作り出し寛容性の免疫不均衡を再調整するために、薬理学的介入が必要とされる。その適用はますます増加し、最大の治療効果、及び最少の、有害な副作用に関する平衡動力学の原理と一致するはずである。
【００１９】
自己免疫疾患の研究において頻発する主題は、生理的免疫及び病的自己免疫の介入である。免疫制御物質とエフェクターが均衡状態にあるとき前者の状態が得られ、それらが不均衡状態にあるとき後者、疾患状態が得られることを示すために、証拠が提示されてきている。均衡は制御タンパク質のネットワークに偶発的であることを考慮して、タンパク質、ただし疾患関連タンパク質の不在は不均衡の前兆となる。したがって、ネットワーク関連タンパク質の疾患関連活性を調節し無効にしない薬剤の、有効性を探求しなければならない。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００２０】
本発明は、ケモカイン及びケモカイン受容体タンパク質の少なくとも１つの断片からなる組合せは、免疫系機能に影響を与えることができるという、新規で予想外の発見に基づく。本発明者は、ケモカイン及びケモカイン受容体の少なくとも１つの断片からなる組合せは、ケモカイン又はケモカイン受容体の少なくとも１つの断片を単独で投与するときに観察される影響と異なる形式で、免疫系機能に影響を与えることができることを見出している。本発明の医薬組成物を使用して免疫系機能を改変することができ、したがって免疫系疾患を治療することができる。
【課題を解決するための手段】
【００２１】
したがって、その第一の態様において、本発明は、
（ａ）サイトカインと、
（ｂ）サイトカイン受容体又はＧタンパク質共役受容体（ＧＰＣＲ）の少なくとも一部分を含むペプチドと、
（ｃ）生理的に許容される担体と
を含む医薬組成物を提供する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２２】
サイトカインはケモカインであってよい。受容体がサイトカイン受容体であり得る場合、それはケモカイン受容体であってよい。
【００２３】
好ましい実施形態では、医薬組成物のペプチドは、受容体の細胞外ドメインの少なくとも一部分を含む。さらにより好ましい実施形態では、医薬組成物のペプチドは、受容体の制御配列の少なくとも一部分を含む。医薬組成物は、受容体の少なくとも一部分の不在下で、炎症性サイトカイン、構成的サイトカイン又は二重機能性サイトカインであるサイトカインを含むことができる。ペプチドはケモカインと結合することができる。
【００２４】
例えば、ケモカインＭＩＧは炎症状態において高レベルで発現され、炎症性ＣＫとして分類される。本明細書で「ペプチド８」と呼ぶペプチドＷＶＦＧＮＡＭＣＫは、ヒトＣ−Ｃケモカイン受容体２型（ＣＣＲ２；単球遊走タンパク質１受容体）のＥＣＬ−２の断片である。以下に実証するように、ペプチド８は疾患誘導マウスに単独で投与するとき炎症誘発効果を有し、疾患を誘導した未治療動物と比較して４４％炎症を増大させる。しかし、全く予想外なことに、ＭＩＧとペプチド８の組合せは、疾患誘導動物に投与するとき抗炎症効果を有する。
【００２５】
他の例として、ケモカインＲＡＮＴＥＳは疾患誘導マウスに単独で投与するとき炎症誘発性であり、ペプチド８は疾患誘導マウスに単独で投与するとき炎症誘発効果を有する。しかし、ＲＡＮＴＥＳとペプチド８の組合せは、疾患誘導マウスに一緒に投与するとき抗炎症効果を有する。
【００２６】
特定の理論に拘束するものではないが、サイトカインと受容体の少なくとも一部分を組み合わせて投与すると、受容体の少なくとも一部分はサイトカインと結合し、したがってｉｎ  ｖｉｖｏでのサイトカインと受容体の結合性を改変すると考えられる。したがって、現在好ましい実施形態では、ペプチドはサイトカインと結合する。
【００２７】
医薬組成物は、投与に適した任意の形であってよい。好ましい実施形態では、医薬組成物は注射に適した形である。
【００２８】
医薬組成物のペプチドは、以下に記載する配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１及び配列番号１２から選択される配列を含むことができる。医薬組成物のペプチドは、ペプチド配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１及び配列番号１２のいずれか１つと少なくとも７０％の相同性を有し、ケモカインと結合することができる。
【００２９】
ペプチド中の１つ又は複数のアミノ酸は、立体光学異性体（Ｄ異性体）、植物由来の稀なアミノ酸、非天然アミノ酸又はアミノ酸模倣体、又は化学修飾されたアミノ酸であってよい。このような化学修飾されたアミノ酸は当技術分野でよく知られており、アセチル化、アシル化、リン酸化、脱リン酸化、グリコシル化、ミリストレーション、アミド化、アスパラギン酸／アスパラギンヒドロキシル化、ホスホパンテタン結合、メチル化、メチルチオール化、プレンジル基結合、インテインＮ−／Ｃ−末端スプライシング、ＡＤＰ−リボシル化、臭素化、シトルリン化、脱アミノ化、ジヒドロキシル化、ホルミル化、ゲラニル−ゲラニル化、糖化、又はパルミトイル化によって修飾されたアミノ酸を含む。
【００３０】
その第二の態様において、本発明は、自己免疫疾患、多発性硬化症、移植拒絶反応、乾癬及び喘息などの免疫系機能を改変するための本発明の医薬組成物の使用を提供する。
【００３１】
その第三の態様において、本発明は、免疫系障害を治療するための方法であって、
（ａ）サイトカインと、
（ｂ）サイトカイン受容体又はＧＰＣＲの少なくとも一部分を含むペプチドと、
（ｃ）生理的に許容される担体と
を含む医薬組成物を、このような治療を必要とする個体に投与することを含む方法を提供する。
【００３２】
その第四の態様において、本発明は、
（ａ）可溶化サイトカインと、
（ｂ）サイトカイン受容体又はＧＰＣＲの少なくとも一部分を含む可溶化ペプチドと
を含む医薬組成物を調製するための方法であって、サイトカインとペプチドをｅｘ  ｖｉｖｏで組み合わせることを含む方法を提供する。
【００３３】
その第五の態様において、本発明は、
（ｃ）配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１及び配列番号１２、
（ｄ）サイトカインと結合することができるペプチドと少なくとも７０％の相同性を有するペプチド、及び
（ｅ）少なくとも１つのアミノ酸が化学修飾されている（ａ）又は（ｂ）のペプチド
から選択されるペプチドを提供する。
【００３４】
本発明を理解し、それを実際どのようにして実施することができるかを見るために、添付の図面を参照しながら、単なる非制限的な実施例により実施形態を次に記載する。
【実施例】
【００３５】
物質及び方法
ケモカイン（ＣＫ）：以下のＣＫを、ＰｒｅｐｒｏＴｅｃｈ  Ｉｎｃ．（Ｒｏｃｋｙ  Ｈｉｌｌ、ＮＪ  ＵＳＡ）から得た。
【００３６】
炎症性ＣＫ：（１）ＧＲＯ−α（ＣＸＣＬ１カタログ番号３００−１１）、（２）ＧＲＯ−β（ＣＸＣＬ２カタログ番号３００−３９）、（３）ＮＡＰ−２（ＣＸＣＬ７カタログ番号３００−１４）、（４）ＩＬ−８（７２ａａ）（ＣＸＣＬ８カタログ番号２００−０８Ｍ）、（５）ＩＬ−８（７７ａａ）（ＣＸＣＬ８カタログ番号２００−０８）、（６）ＭＩＧ（ＣＸＣＬ９カタログ番号３００−２６）、（７）ＩＰ−１０（ＣＸＣＬ１０カタログ番号３００−１２）、（８）Ｉ−ＴＡＣ（ＣＸＣＬ１１カタログ番号３００−４６）、（９）Ｉ−３０９（ＣＣＬ１カタログ番号３００−３７）、（１０）ＭＣＰ−１（ＣＣＬ２カタログ番号３００−０４）、（１１）ＭＣＰ−２（ＣＣＬ８カタログ番号３００−１５）、（１１）ＭＣＰ−４（ＣＣＬ１３カタログ番号３００−２４）、（１２）ＭＩＰ−１α（ＣＣＬ３カタログ番号３００−０８）、（１３）ＭＩＰ−１α（ＣＣＬ４カタログ番号３００−０９）、（１４）ＲＡＮＴＥＳ（ＣＣＬ５カタログ番号３００−０６）、（１５）エオタキシン（ＣＣＬ１１カタログ番号３００−２１）、（１６）エオタキシン２（ＣＣＬ２４カタログ番号３００−３３）、（１７）エオタキシン３（ＣＣＬ２６カタログ番号３００−４８）。
【００３７】
構成的ＣＫ：（１）ＴＡＲＣ（ＣＣＬ１７カタログ番号３００−３０）、（２）ＭＤＣ（６９ａａ）、（ＣＣＬ２２カタログ番号３００−３６Ａ）、（３）ＳＤＦ−１α（ＣＸＣＬ１２カタログ番号３００−２８ａ）、（４）ＳＤＦ−１β（ＣＸＣＬ１２カタログ番号３００−２８ｂ）、（５）ＢＣＡ−１（ＣＸＣＬ１３、カタログ番号３００−４７）、（６）ＭＩＰ−３α（ＣＣＬ２０カタログ番号３００−２９Ａ）、（７）ＭＩＰ−３β（ＣＣＬ１９カタログ番号３００−２９Ｂ）、（８）エキソダス−２（ＣＣＬ２１カタログ番号３００−３５）、（９）ＴＥＣＫ（ＣＣＬ２５カタログ番号３００−４５）、（１０）ＣＴＡＣ（ＣＣＬ２７カタログ番号３００−５４）。
【００３８】
二重機能性（炎症性及び構成的）ＣＫ：（１）フラクタルカイン（ＣＸ３ＣＬ１カタログ番号３００−３１）、（２）リンホタクチン（ＸＣＬ−１カタログ番号３００−２０）、（３）ＰＦ−４（ＣＸＣＬ４カタログ番号３００−１６）。
【００３９】
ＣＫＲ制御領域に由来する以下の１３個のアミノ酸配列を使用した。
【００４０】
配列番号１：ＳＹＹＤＤＶＧＬ、本明細書では「ペプチド１」と呼ぶ。由来：ヒトＣ−Ｃケモカイン受容体３型（ＣＣＲ３；好酸球エオタキシン受容体）のＮ末端。ビオチン化ペプチド（Ｎ末端）はＢｉｏｍｅｒＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、ＵＳＡによって合成され、ＤＭＳＯ（０．０５％、Ｈ２Ｏ中）に溶かした。
【００４１】
配列番号２：ＷＶＦＧＦＩＧＭＣＫ、本明細書では「ペプチド２」と呼ぶ。由来：ヒトＣ−Ｃケモカイン受容体３型（ＣＣＲ３；好酸球エオタキシン受容体）の細胞外ループ（ＥＣＬ）−２。ビオチン化ペプチド（Ｎ末端）はＳｉｇｍａ、イスラエルによって合成され、Ｈ２Ｏ中に溶かした。
【００４２】
配列番号３：ＬＦＧＮＤＣＥ、本明細書では「ペプチド５」と呼ぶ。由来：ヒトＣ−Ｃケモカイン受容体３型（ＣＣＲ３；好酸球エオタキシン受容体）のＥＣＬ−４。ビオチン化ペプチド（Ｎ末端）はＳｉｇｍａ、イスラエルによって合成され、Ｈ２Ｏ中に溶かした。
【００４３】
配列番号４：ＷＶＦＧＴＦＬＣＫ、本明細書では「ペプチド７」と呼ぶ。由来：ヒトＣ−Ｃケモカイン受容体２型（ＣＣＲ２；単球遊走タンパク質１受容体）のＥＣＬ−２。ビオチン化ペプチド（Ｎ末端）はＢｉｏｍｅｒＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、ＵＳＡによって合成され、ＤＭＳＯ（０．１％、Ｈ２Ｏ中）に溶かした。
【００４４】
配列番号５：ＷＶＦＧＮＡＭＣＫ、本明細書では「ペプチド８」と呼ぶ。由来：ヒトＣ−Ｃケモカイン受容体２型（ＣＣＲ２；単球遊走タンパク質１受容体）のＥＣＬ−２。ビオチン化ペプチド（Ｎ末端）はＢｉｏｍｅｒＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、ＵＳＡによって合成され、ＤＭＳＯ（０．１％、Ｈ２Ｏ中）に溶かした。
【００４５】
配列番号６：ＦＦＧＬＮＮＣ、本明細書では「ペプチド１０」と呼ぶ。由来：ヒトＣ−Ｃケモカイン受容体５型（ＣＣＲ５；ＨＩＶ−１融合共受容体）のＥＣＬ−４。ビオチン化ペプチド（Ｎ末端）はＢｉｏｍｅｒＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、ＵＳＡによって合成され、ＤＭＳＯ（０．１％、Ｈ２Ｏ中）に溶かした。
【００４６】
配列番号７：ＴＴＦＦＤＹＤＹＧ、本明細書では「ファージ提示（Ｐｈ）ペプチド１１」と呼ぶ。由来：ヒトＣ−Ｃケモカイン受容体２型（ＣＣＲ２；単球遊走タンパク質１受容体）のＮ末端。組換えペプチドをクローニングし、Ｍ１３クローニングベクターによって発現させた。
【００４７】
配列番号８：ＥＤＳＶＹ、本明細書では「Ｐｈ−ペプチド１３」と呼ぶ。由来：ヒトＣ−Ｃケモカイン受容体２型（ＣＣＲ２；単球遊走タンパク質１受容体）のＥＣＬ−３。組換えペプチドをクローニングし、Ｍ１３クローニングベクターによって発現させた。
【００４８】
配列番号９：ＷＶＦＧＳＧＬＣＫ、本明細書では「Ｐｈ−ペプチド１５」と呼ぶ。由来：ヒトＣ−Ｘ−Ｃケモカイン受容体２型（ＣＸＣＲ３；インターフェロン誘導性タンパク質１０受容体）のＥＣＬ−２。組換えペプチドをクローニングし、Ｍ１３クローニングベクターによって発現させた。
【００４９】
配列番号１０：ＨＨＴＣＳＬＨＦＰ、本明細書では「Ｐｈ−ペプチド１６」と呼ぶ。由来：ヒトＣ−Ｃケモカイン受容体１型（ＣＣＲ１；マクロファージ炎症性タンパク質１−α受容体）のＥＣＬ−３。組換えペプチドをクローニングし、Ｍ１３クローニングベクターによって発現させた。
【００５０】
配列番号１１：ＨＹＴＣＳＳＨＦＰ、本明細書では「Ｐｈ−ペプチド１７」と呼ぶ。由来：ヒトＣ−Ｃケモカイン受容体５型（ＣＣＲ５；ＨＩＶ−１融合共受容体）のＥＣＬ−３。組換えペプチドをクローニングし、Ｍ１３クローニングベクターによって発現させた。
【００５１】
配列番号１２：ＤＲＹＬＮＩＶＨＡＴ、本明細書では「Ｐｈ−ペプチド１８」と呼ぶ。由来：ヒトＣ−Ｘ−Ｃケモカイン受容体３型（ＣＸＣＲ３；インターフェロン誘導性タンパク質１０受容体）のＥＣＬ−３。組換えペプチドをクローニングし、Ｍ１３クローニングベクターによって発現させた。
【００５２】
配列番号１３：ＴＫＣＱＫＥ、本明細書では「Ｐｈ−ペプチド２０」と呼ぶ。由来：ヒトＣ−Ｃケモカイン受容体２型（ＣＣＲ２；単球遊走タンパク質１受容体）のＥＣＬ−３。組換えペプチドをクローニングし、Ｍ１３クローニングベクターによって発現させた。
【００５３】
ケモカイン結合ペプチドの結合のマイクロアレイ分析
（１）プリンティング：ケモカイン（ＣＫ）溶液（水中）を、５０及び２５ｇ／ｍｌの最終濃度までプリンティング試薬（ＧｅｎＴｅｌ  ＢｉｏＳｕｒｆａｃｅｓ  ＵＳＡ）を用いて連続希釈した。ＢＳＡ（Ａｍｒｅｓｃｏ、カタログ番号００３２−２５６）／ＢＳＡ−ビオチン（Ｓｉｇｍａ、カタログ番号Ａ８５４９）対照溶液（水中）は、１００ｕｇ／ｍｌまでプリンティング試薬を用いて希釈した。自動点滴ロボット（１６ピンのプリンティングツール、０．４ｍｍのヘッド；ＢｉｏＲｏｂｏｔｉｃｓ、ＵＫ）を使用して、サンプル当たり５回反復して（２５μｇ／ｍｌ及び５０μｇ／ｍｌ）、２０℃〜３０℃、５０〜７０％の相対湿度でＰＡＴＨタンパク質マイクロアレイスライド（ＧｅｎＴｅｌ、製品番号．２−１００５／−１０２５）上にＣＫ／ＢＳＡ対照をプリンティングした。プリンティングしたマイクロアレイスライドは、使用前に少なくとも２４時間、室温又は４℃で保存した。
（２）；ブロッキング：ブロッキングバッファー（５００μｌ／区画；ＰＡＴＨｂｌｏｃｋ、ＧｅｎＴｅｌ、製品番号２−１０１４）をスライドに添加して、室温（ＲＴ）で１時間置いた。ブロッキングバッファーを除去した後、スライドは２５分間空気乾燥させた。
（３）ペプチド結合：ペプチドは区画毎に洗浄バッファー、３００μｌ（ＧｅｎＴｅｌ、ＰＡＴＨｗａｓｈ、製品番号２−１０１６）に添加し、穏やかに攪拌しながら１時間室温でインキュベートした。
（４）洗浄：スライドは洗浄バッファーを用いて二回洗浄した（３００μｌ／区画）。
（５）一次標識結合：室温で４５分間Ｃｙ３標識ストレプトアビジン（１ｍｇ／ｍｌ、３００μｌ／区画、ＤｙＬｉｇｈｔ５４７、Ｐｉｅｒｃｅ製品番号２１４２４）を用いて直接光から保護しながら、スライドをインキュベートした。
（６）一次洗浄：スライドは洗浄バッファーを用いて二回洗浄した（３００μｌ／区画）。
（７）二次標識結合：ステップ（５）を繰り返した。
（８）二次洗浄：ステップ（６）を繰り返した。
（９）リンス：スライドはリンスバッファーを用いて二回洗浄し（ＰＡＴＨｒｉｎｓｅ、ＧｅｎＴｅｌ、製品番号２−１０１８）、充分乾燥させた。
（１０）スキャニング：ＳｃａｒｎＡｒｒａｙ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃａｎｎｅｒ（Ｐａｃｋａｒｄ  ＢｉｏＣｈｉｐ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、ＵＳＡ）を用いてペプチド結合、標識スライドをスキャンした（レーザー強度６０％、ゲイン８０％、解像１０μｍ）。
【００５４】
分析：マイクロアレイの定量分析はＮｉｌｅｓ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ（ＵＳＡ）のＳｐｏｔＲｅａｄｅｒプログラムによって実施し、ＣＫ濃度の関数として相対蛍光（ＲＦ）として表した。マイクロアレイの読取値（Ｃｙ３蛍光）を定量化して、ＣＫに関するＣＢＰの相対的結合親和性を測定し、且つ推測によってＣＫとの結合に対するＣＢＰの特異性を測定した。
【００５５】
ファージ提示ケモカイン結合ペプチドの結合のマイクロアレイ分析
（１）プリンティング：ケモカイン（ＣＫ）溶液（水中）を、５０μｇ及び２５μｇ／ｍｌの最終濃度までプリンティング試薬（ＧｅｎＴｅｌ  ＢｉｏＳｕｒｆａｃｅｓ  ＵＳＡ）を用いて連続希釈した。ＢＳＡ／ＢＳＡ−ビオチン対照溶液（水中）を、１００μｇ／ｍｌまでプリンティング試薬を用いて希釈した。Ｍ１３ファージ対照（Ｍ１３ＫＥｇＩＩＩクローニングベクター、Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｂｉｏｌａｂｓ、カタログ番号Ｅ８１０１Ｓ）の増幅ストックを、トリス緩衝生理食塩水（ＴＢＳ；ｐＨ７．５、４℃）中に保存し、作用力価（１０８ｐｆｕ／μｌ）までプリンティング試薬を用いて希釈した。自動点滴ロボット（１６ピンのプリンティングツール、０．４ｍｍのヘッド；ＢｉｏＲｏｂｏｔｉｃｓ、ＵＫ）を使用して、ＣＫ／ＢＳＡ対照／Ｍ１３対照をプリンティングした、サンプル当たり５回の反復（ＣＫ２５μｇ／ｍｌ及び５０μｇ／ｍｌ、ＢＳＡμｇ／ｍｌ、Ｍ１３  ２０μｌ）、２０℃〜３０℃、及び５０〜７０％の相対湿度でＰＡＴＨタンパク質マイクロアレイスライド（ＧｅｎＴｅｌ、製品番号２−１００５／−１０２５）上。プリンティングしたマイクロアレイスライドは、使用前に少なくとも２４時間、室温又は４℃で保存した。
（２）ブロッキング：ブロッキングバッファー（５００μｌ／区画；ＰＡＴＨｂｌｏｃｋ、ＧｅｎＴｅｌ、製品番号２−１０１４）をスライドに添加して、室温（ＲＴ）で１時間置いた。ブロッキングバッファーを除去した後、スライドは２５分間空気乾燥させた。
（２）ファージ提示結合ペプチド：増幅させた組換えファージのストックをＴＢＳ中に保存し、作用力価（１０７ｐｆｕ／μｌ）まで洗浄バッファーを用いて希釈した。組換えファージの懸濁液（３００μｌ）を区画毎に添加し、穏やかに攪拌しながら１時間室温でインキュベートした。
（３）一次洗浄：スライドは洗浄バッファーを用いて二回洗浄した（３００μｌ／区画）。
（４）一次抗体（Ａｂ）標識：室温で４５分間、一次Ａｂ（１ｍｇ／ｍｌ、２５００倍希釈（洗浄試薬）、３００μｌ；マウス抗Ｍ１３モノクローナルＡｂ；Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、ＵＫ；製品コード２７−９４２０−０１）と共に、スライドをインキュベートした。
（５）二次洗浄：スライドは洗浄バッファーを用いて二回洗浄した（３００μｌ／区画）。
（６）二次Ａｂ標識：二次Ａｂ（１．５ｍｇ／ｍｌ、５０００倍希釈（洗浄試薬）、３００μｌ；Ｃｙ３結合ＡｆｆｉｎｉＰｕｒｅヤギ抗マウスＩｇＧ；Ｊａｃｋｓｏｎ  ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅｒｃｈ  Ｌａｂｓ、ＵＳＡ；製品コード１１５−１６５−０６２）と共に、スライドをインキュベートした。
（７）三次洗浄：スライドは洗浄バッファーを用いて二回洗浄した（３００μｌ／区画）。
（８）リンス：スライドはリンスバッファーを用いて二回洗浄し（ＰＡＴＨｒｉｎｓｅ、ＧｅｎＴｅｌ、製品番号２−１０１８）、次いで充分乾燥させた。
（９）スキャニング：ＳｃａｒｎＡｒｒａｙ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃａｎｎｅｒ（Ｐａｃｋａｒｄ  ＢｉｏＣｈｉｐ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、ＵＳＡ）を用いてペプチド結合、標識スライドをスキャンした（レーザー強度６０％、ゲイン８０％、解像１０μｍ）。
（１０）分析：マイクロアレイの定量分析はＮｉｌｅｓ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ（ＵＳＡ）のＳｐｏｔＲｅａｄｅｒプログラムによって実施し、ＣＫ濃度の関数として相対蛍光（ＲＦ）として表した。マイクロアレイの読取値（Ｃｙ３蛍光）を定量化して、ＣＫに関するＣＢＰの相対的結合親和性を測定し、且つ推測によってＣＫとの結合に対するＣＢＰの特異性を測定した。
【００５６】
ＣＫ−ペプチドの組合せ
ＣＫとペプチドの特異的組合せを含む試験サンプルを、試験管内でＣＫとペプチドを混合することによって調製し、実験動物に注射する前に１時間〜３時間氷上に混合物を保存した。
【００５７】
抗炎症性対照試薬
デキサメタゾンリン酸ナトリウム（Ｄｅｘａｃｏｒｔ  Ｆｏｒｔｅ、Ｔｅｖａ）を、１ｍｇ／ｍｌの最終濃度までリン酸バッファー生理食塩水（ＰＢＳ、ＧＩＢＣＯ）に溶かし、２００μｌ（２００μｇ）で注射した。
【００５８】
疾患（一般的な炎症）の動物モデル：遅延型過敏症
遅延型過敏症（ＤＴＨ）反応は、抗原に応じて、免疫機能の有益な（例えば、ウイルス、細菌及び真菌に対する耐性）、又は有害な（例えば、アレルギー性皮膚炎及び自己免疫）態様を媒介する抗原特異的な細胞性免疫応答である。遅延型過敏症（ＤＴＨ）反応は、慢性炎症疾患のモデルとして一般に使用される、何故ならそれらはいずれも抗原によって開始され、抗原特異的Ｔ細胞によって持続されるからである。
【００５９】
ペプチドをマウスモデルにおいて、それらの抗炎症又は炎症誘発効果に関して試験した。
【００６０】
マウスにおける接触過敏症（ＣＨＳ）反応は、強い刺激性がなく攻撃誘発前に感作曝露を必要とするオキサゾロン（４−エトキシメチレン−２−オキサゾリン−５−オン）などの物質を使用する点で、典型的な皮膚炎症モデルとは異なる。オキサゾロン特異的Ｔ細胞の役割は、非投薬レシピエントに反応を移動させる感作ドナーマウス由来の精製Ｔ細胞の能力によって実証されてきており［Ａｓｈｅｒｓｏｎ、１９６８］、ＣＤ４＋Ｔ細胞とＣＤ８＋Ｔ細胞の両方が、炎症応答を開始させ他の白血球を動員するために必要とされる［Ｇｏｃｉｎｓｋｉ、１９９０］。
【００６１】
感作：第０日に腹部の皮膚に油（Ｋｏｄａｋ））に溶かしたオキサゾロン（ＳｉｇｍａＥ０７５３、１００μｌ（２％（ｗｔ／ｖｏｌ）を施すことによって、動物（ＢａｌｂＣ、メス、７〜８週齢、群当たり５匹）を感作させた。
【００６２】
攻撃誘発：左耳にオキサゾロン（１０μｌ（０．５％（ｗｔ／ｖｏｌ）油中）を施すことによって、動物を攻撃誘発した。１０μｌの担体（油）は第６日に右耳に施した。
【００６３】
治療：試験試薬（ＣＫ、ペプチド、ＣＫ−ペプチドの組合せ、抗炎症対照）を治療日に凍結ストック（−２０℃）から調製し、攻撃誘発１時間前及び攻撃誘発１時間後に（注射当たり０．２ｍｌで）腹膜内注射するまで氷上に保存した。
【００６４】
測定：第７日に攻撃誘発後２４時間で、ダイアル式厚さゲージ（Ｍｉｔｕｔｏｙｏ、日本）を用いて耳の厚さを測定した。個々のペプチド及びＣＫ、及びペプチドとＣＫの複合体の炎症誘発活性又は抗炎症活性を、デキサメタゾン（Ｄｅｘａ）の抗炎症活性に対して計算した。Ｄｅｘａは、この実施例では、測定炎症値を３６％低下させ、試験試薬の炎症誘発活性又は抗炎症活性の計算値に関する１００％の標準物質として使用した抗炎症標準物質である。抗炎症効果は、未治療群の動物及びＤｅｘａの有効性（１００％の抗炎症効果）に対して計算したその値と比較した、炎症の低下として測定した。炎症誘発効果は、未治療群及びＤｅｘａに対して計算したその値と比較した、炎症の増大として測定した。
【００６５】
結果
炎症性ＣＫ、構成的に発現されたＣＫ及び二重機能性ＣＫとケモカイン結合ペプチド５（ＣＢＰ５）の結合のマイクロアレイ分析。図１は、数種のケモカインとＣＢＰ５の結合親和性を示す。ＣＢＰ５は、比較的高い親和性（＞３０００相対蛍光単位（ＲＦＵ）、０〜１２０００ＲＦＵの上方７５％の範囲の応答）で、炎症性ＣＫ、エオタキシン、エオタキシン３、ＭＣＰ−４及びＲＡＮＴＥＳ、ＣＢＰ５が由来する受容体の同系ＣＫリガンドと結合した。同じペプチドが、比較的高い親和性でＩＬ−８、ＭＩＧ、Ｉ−３０９、ＭＣＰ−１及びＴＡＲＣ、ＣＫＲ、ＣＣＲ３の無関係な炎症性ＣＫリガンドと結合した。ＣＢＰ５は構成的に発現されたＣＫ、ＳＤＦ１−α／β、ＭＩＰ３−α及びＴＥＣＫ及び二重機能性ＣＫ、フラクタルカインとも結合したが、これらはいずれもＣＫＲ、ＣＣＲ３の同系リガンドではない。
【００６６】
炎症性ＣＫ、構成的に発現されたＣＫ及び二重機能性ＣＫとケモカイン結合ペプチド８（ＣＢＰ８）の結合のマイクロアレイ分析。図２中に示すように、ＣＢＰ８は、比較的高い親和性（＞１５００相対蛍光単位（ＲＦＵ）、０〜６０００ＲＦＵの上方７５％の範囲の応答）で、炎症性ＣＫ、ＭＣＰ−１及び−４、ＣＢＰ８が由来する受容体の同系ＣＫリガンドと結合した。同じペプチドが、比較的高い親和性でＭＩＧ、Ｉ−３０９、エオタキシン、エオタキシン３、及び構成的に発現されたＣＫ、ＳＤＦ１−β、ＢＣＡ−１、エキソダス−２、ＴＥＣＫ、及び二重機能性ＣＫ、フラクタルカインと結合し、これらはいずれもＣＢＰ８が由来するＣＫＲの無関係なＣＫリガンドである。
【００６７】
炎症性ＣＫ、構成的に発現されたＣＫ及び二重機能性ＣＫとケモカイン結合ペプチド１０（ＣＢＰ１０）の結合のマイクロアレイ分析。図３中に示すように、ＣＢＰ１０は、比較的高い親和性（＞５０００相対蛍光単位（ＲＦＵ）、０〜２００００ＲＦＵの上方７５％の範囲の応答）で、炎症性ＣＫ、ＭＣＰ２、ＣＢＰ１０が由来するＣＫＲの同系リガンドと結合した。同じペプチドが、比較的高い親和性で炎症性ＣＫ、ＧＲＯ−β、ＩＰ−１０、Ｉ−ＴＡＣ、Ｉ−３０９、ＭＣＰ−１、−４、エオタキシン、エオタキシン２／３及び構成的に発現されたＣＫ、ＳＤＦ１−α／β  ＢＣＡ−１  エキソダス−２及びＴＥＣＫ、及び二重機能性ＣＫ、フラクタルカイン及びリンホタクチンと結合し、これらはいずれもＣＢＰ１０が由来するＣＫＲの無関係なＣＫリガンドである。
【００６８】
ＣＢＰ２（ＷＶＦＧＨＧＭＣＫ；ヒトＣ−Ｃ  ＣＫＲ３型（ＣＣＲ３）の細胞外ループ（ＥＣＬ）−２由来）  ヒト炎症性ＣＫ、ＩＬ−８（７２ａａ；ＣＸＣＬ８）、ＭＩＧ（ＣＸＣＬ９）、Ｉ−３０９（ＣＣＬ１）、ＭＣＰ−１（ＣＣＬ２）、ＭＩＰ−１α（ＣＣＬ３）、ＲＡＮＴＥＳ（ＣＣＬ５）、（１５）エオタキシン（ＣＣＬ１１）、エオタキシン２（ＣＣＬ２４）、エオタキシン３（ＣＣＬ２６）、ＴＡＲＣ（ＣＣＬ１７）、ヒト構成的ＣＫ、ＳＤＦ−１α（ＣＸＣＬｌ２）、ＳＤＦ−１β（ＣＸＣＬ１２）、ＭＩＰ−３α（ＣＣＬ２０）及びＣＫ、ＰＦ−４（ＣＸＣＬ４）に対してＣＢＰ２をスクリーニングした。結果は図４Ａ／Ｂ中に示す。実験の読取値（Ｃｙ３蛍光）を定量化して、ＣＫに関するＣＢＰの相対的結合親和性を測定し、且つ推測によってＣＫとの結合に対するＣＢＰの結合特異性を測定した。
ＣＢＰ２は、比較的高い親和性（＞１００００相対蛍光単位（ＲＦＵ）、０〜６００００ＲＦＵの上方７５％の範囲の応答）で、炎症性ＣＫ、エオタキシン及びエオタキシン３、ＣＢＰ２が由来する受容体の同系ＣＫリガンドと結合した。同じペプチドが、比較的高い親和性で炎症性ＣＫ、ＭＩＧ及びＩ−３０９及び構成的に発現されたＣＫ、ＳＤＦ１−α／β及びＭＩＰ３−αと結合し、これらはいずれもＣＢＰ２が由来するＣＫＲの無関係なＣＫリガンドである。
【００６９】
ＣＫＲのＥＣＬ−２に由来するＣＢＰ２、ＣＣＲ３は、エオタキシン３、受容体の同系ＣＫリガンドと比較的高い親和性で結合した。エオタキシン３とのＣＢＰ２の相互作用は、その同系受容体とのＣＫの生理的相互作用と一致する。同じペプチドが、比較的高い親和性でＭＩＧ及びＩ−３０９、ＣＫＲ、ＣＣＲ３の無関係な炎症性ＣＫリガンドと結合した。ＣＢＰ２は構成的に発現されたＣＫ、ＳＤＦ１−α／β及びＭＩＰ３−αとも結合したが、これらはいずれもＣＫＲ、ＣＣＲ３の同系リガンドではない。無関係な炎症性及び構成的ＣＫは、ＣＫＲ、ＣＣＲ３の構造的状況でＣＢＰ２配列と相互作用することによってＣＣＲ２活性を変えることが、後者の観察結果から推測される。その天然ＣＫＲとは無関係に、ＣＢＰ３はＣＫ活性、ＣＫＲ、ＣＣＲ３の同系及び無関係なＣＫリガンドの活性の考えられる制御物質である。
【００７０】
ＣＢＰ７（ＷＶＦＧＴＦＬＣＫ；ヒトＣ−Ｃケモカイン受容体２型（ＣＣＲ２）のＥＣＬ−２由来）  ヒト炎症性ＣＫ、ＩＬ−８（７２ａａ；ＣＸＣＬ８）、ＭＩＧ（ＣＸＣＬ９）、ＩＰ−１０（ＣＸＣＬ１０）、Ｉ−ＴＡＣ（ＣＸＣＬ１１）、Ｉ−３０９（ＣＣＬ１）、ＭＣＰ−１（ＣＣＬ２）、ＭＩＰ−１α（ＣＣＬ３）、ＲＡＮＴＥＳ（ＣＣＬ５）、エオタキシン（ＣＣＬ１１）、エオタキシン２（ＣＣＬ２４）、エオタキシン３（ＣＣＬ２６）、ＴＡＲＣ（ＣＣＬ１７）、ヒト構成的ＣＫ、ＳＤＦ−１α（ＣＸＣＬ１２）、ＳＤＦ−１β（ＣＸＣＬ１２）、ＭＩＰ−３α（ＣＣＬ２０）及び機能が不明なＣＫ、ＰＦ−４（ＣＸＣＬ４）に対してペプチド７（ＣＢＰ７）をスクリーニングし、マイクロアレイ形式で表した。実験の読取値（Ｃｙ３蛍光）を定量化して、ＣＫに関するＣＢＰの相対的結合親和性を測定し、且つ推測によってＣＫに対するＣＢＰ７の結合特異性を測定した。
【００７１】
結果は図５中に示す。ＣＢＰ７は、比較的高い親和性（＞２０００相対蛍光単位（ＲＦＵ）、０〜１００００ＲＦＵの上方７５％の範囲の応答）で、ＣＫＩ−３０９、エオタキシン及びエオタキシン３、並びに構成的に発現されたＣＫ、ＳＤＦ１−α及び−βと結合し、これらはいずれもＣＢＰ７が由来するＣＫＲの同系ＣＫリガンドではない。
【００７２】
炎症性ＣＫ、構成的に発現されたＣＫ及び二重機能性ＣＫとケモカイン結合ペプチドの結合の陰性対照マイクロアレイ分析。ペプチド不在下での結合のマイクロアレイ分析（陰性対照）を、ペプチド存在下での分析と平行して実施した。ＣＢＰ５、−８、及び１０に関する陰性対照の結果は図６中に示す。ＣＢＰ７に関する陰性対照の結果は図７中に示す。ＣＢＰ２に関する陰性対照の結果は図８Ａ及び８Ｂ中に示す。
【００７３】
炎症性ＣＫ、構成的に発現されたＣＫ及び二重機能性ＣＫとファージ提示ペプチド、Ｐｈ−ｐ１１の結合のマイクロアレイ分析。図９中に示すように、Ｐｈ−ｐ１１は、比較的高い親和性（＞５０００相対蛍光単位（ＲＦＵ）０〜２００００ＲＦＵの上方７５％の範囲の応答）で、炎症性ＣＫ、ＭＣＰ−１、−２及び−４、Ｐｈ−ｐ１１のペプチドが由来した受容体の同系ＣＫリガンドと結合する。同じペプチドが、比較的高い親和性で炎症性ＣＫ、ＧＲＯ−β、ＭＩＧ、ＲＡＮＴＥＳ、エオタキシン、エオタキシン３、及び構成的に発現されたＣＫ、ＴＥＣＫ、及び二重機能性リンホタクチンと結合し、これらはいずれもＰｈ−ｐ１１のペプチドが由来するＣＫＲの無関係なＣＫリガンドである。組換えファージのＲＦＵ値は、ファージ自体（陰性対照）のＲＦＵ値を差し引くことによって計算した。
【００７４】
炎症性ＣＫ、構成的に発現されたＣＫ及び二重機能性ＣＫとファージ提示ペプチド、Ｐｈ−ｐ１３の結合のマイクロアレイ分析。図１０中に示すように、Ｐｈ−ｐ１３は、比較的高い親和性（＞１５００相対蛍光単位（ＲＦＵ）０〜６０００ＲＦＵの上方７５％の範囲の応答）で、炎症性ＣＫ、ＭＣＰ−４、Ｐｈ−ｐ１３のペプチドが由来する受容体の同系ＣＫリガンドと結合する。同じペプチドが、比較的高い親和性で炎症性ＣＫ、ＧＲＯ−β、エオタキシン、エオタキシン３、及び構成的に発現されたＣＫ、ＴＥＣＫと結合し、これらはいずれもＰｈ−ｐ１３のペプチドが由来するＣＫＲの無関係なＣＫリガンドである。組換えファージのＲＦＵ値は、ファージ自体（陰性対照）のＲＦＵ値を差し引くことによって計算した。
【００７５】
炎症性ＣＫ、構成的に発現されたＣＫ及び二重機能性ＣＫとファージ提示ペプチド、Ｐｈ−ｐ１５の結合のマイクロアレイ分析。図１１中に示すように、Ｐｈ−ｐ１５は、比較的高い親和性（＞３００００相対蛍光単位（ＲＦＵ）０〜６００００ＲＦＵの上方７５％の範囲の応答）で、炎症性ＣＫ、ＭＩＧ、ＩＰ−１０及びＩ−ＴＡＣ、Ｐｈ−ｐ１５のペプチドが由来する受容体の同系ＣＫリガンドと結合する。同じペプチドが、比較的高い親和性で炎症性ＣＫ、ＧＲＯ−β、ＩＬ−８（７７）、ＭＣＰ１／２／４、ＲＡＮＴＥＳ、エオタキシン、エオタキシン２、エオタキシン３、及び構成的に発現されたＣＫ、ＢＣＡ−１、エキソダス２及びＴＥＣＫ及び二重機能性ＣＫ、フラクタルカイン及びリンホタクチンと結合し、これらはいずれもＰｈ−ｐ１５のペプチドが由来するＣＫＲの無関係なＣＫリガンドである。組換えファージのＲＦＵ値は、ファージ自体（陰性対照）のＲＦＵ値を差し引くことによって計算した。
【００７６】
炎症性ＣＫ、構成的に発現されたＣＫ及び二重機能性ＣＫとファージ提示ペプチド、Ｐｈ−ｐ１６の結合のマイクロアレイ分析。図１２中に示すように、Ｐｈ−ｐ１６は、比較的高い親和性（＞３００００相対蛍光単位（ＲＦＵ）０〜６００００ＲＦＵの上方７５％の範囲の応答）で、炎症性ＣＫ、ＭＣＰ−４及びＲＡＮＴＥＳ、Ｐｈ−ｐ１６のペプチドが由来する受容体の同系ＣＫリガンドと結合する。同じペプチドが、比較的高い親和性で炎症性ＣＫ、ＧＲＯ−β、ＭＩＧ、ＭＣＰ１／２、エオタキシン、エオタキシン２、エオタキシン３、及び構成的に発現されたＣＫ、ＢＣＡ−１、エキソダス２及びＴＥＣＫ及び二重機能性ＣＫ、フラクタルカイン及びリンホタクチンと結合し、これらはいずれもＰｈ−ｐ１６のペプチドが由来するＣＫＲの無関係なＣＫリガンドである。組換えファージのＲＦＵ値は、ファージ自体（陰性対照）のＲＦＵ値を差し引くことによって計算した。
【００７７】
炎症性ＣＫ、構成的に発現されたＣＫ及び二重機能性ＣＫとファージ提示ペプチド、Ｐｈ−ｐ１７の結合のマイクロアレイ分析。図１３中に示すように、Ｐｈ−ｐ１７は、比較的高い親和性（＞４５００相対蛍光単位（ＲＦＵ）０〜２２０００ＲＦＵの上方７５％の範囲の応答）で、炎症性ＣＫ、ＭＣＰ−２及びＲＡＮＴＥＳ、Ｐｈ−ｐ１７のペプチドが由来する受容体の同系ＣＫリガンドと結合する。同じペプチドが、比較的高い親和性で炎症性ＣＫ、ＧＲＯ−β、ＩＬ−８（７７）、ＭＩＧ、ＩＰ−１０、Ｉ−ＴＡＣ、ＭＣＰ１／４、エオタキシン、エオタキシン２及びエオタキシン３、及び構成的に発現されたＣＫ、ＢＣＡ−１、エキソダス２及びＴＥＣＫ及び二重機能性ＣＫリンホタクチンと結合し、これらはいずれもＰｈ−ｐ１７のペプチドが由来するＣＫＲの無関係なＣＫリガンドである。組換えファージのＲＦＵ値は、ファージ自体（陰性対照）のＲＦＵ値を差し引くことによって計算した。
【００７８】
炎症性ＣＫ、構成的に発現されたＣＫ及び二重機能性ＣＫとファージ提示ペプチド、Ｐｈ−ｐ１８の結合のマイクロアレイ分析。図１４中に示すように、Ｐｈ−ｐ１８は、比較的高い親和性（＞６５００相対蛍光単位（ＲＦＵ）０〜２６０００ＲＦＵの上方７５％の範囲の応答）で、炎症性ＣＫ、ＭＩＧ及びＩ−ＴＡＣ、Ｐｈ−ｐ１８のペプチドが由来する受容体の同系ＣＫリガンドと結合する。同じペプチドが、比較的高い親和性で炎症性ＣＫ、ＧＲＯ−β、ＩＬ−８（７２）、ＩＬ−８（７７）、ＭＣＰ１／２／４、ＲＡＮＴＥＳ、エオタキシン、エオタキシン２、エオタキシン３、及び構成的に発現されたＣＫ、ＢＣＡ−１、エキソダス２及びＴＥＣＫ及び二重機能性ＣＫ、フラクタルカイン及びリンホタクチンと結合し、これらはいずれもＰｈ−ｐ１８のペプチドが由来するＣＫＲの無関係なＣＫリガンドである。組換えファージのＲＦＵ値は、ファージ自体（陰性対照）のＲＦＵ値を差し引くことによって計算した。
【００７９】
炎症性ＣＫ、構成的に発現されたＣＫ及び二重機能性ＣＫとファージ提示ペプチド、Ｐｈ−ｐ２０の結合のマイクロアレイ分析。図１５中に示すように、Ｐｈ−ｐ２０は、比較的高い親和性（＞１２５００相対蛍光単位（ＲＦＵ）０〜５００００ＲＦＵの上方７５％の範囲の応答）で、炎症性ＣＫ、ＭＣＰ−１、−２及び−４、Ｐｈ−ｐ２０のペプチドが由来する受容体の同系ＣＫリガンドと結合する。同じペプチドが、比較的高い親和性で炎症性ＣＫ、ＧＲＯ−β、ＩＬ−８（７２）、ＩＬ−８（７７）、ＩＰ−１０、Ｉ−ＴＡＣ、ＲＡＮＴＥＳ、エオタキシン、エオタキシン３、及び構成的に発現されたＣＫ、ＢＣＡ−１、エキソダス２及びＴＥＣＫ及び二重機能性ＣＫ、フラクタルカイン及びリンホタクチンと結合し、これらはいずれもＰｈ−ｐ２０のペプチドが由来するＣＫＲの無関係なＣＫリガンドである。組換えファージのＲＦＵ値は、ファージ自体（陰性対照）のＲＦＵ値を差し引くことによって計算した。
【００８０】
ＣＫ  ＭＩＧ（ＣＸＣＬ９）、ペプチド８及びＭＩＧと組み合わせた異なる投与量のペプチド８の有効性。ＣＫ  ＭＩＧは炎症状態において高レベルで発現され、炎症性ＣＫとして定義する。図１６中に示すように、疾患誘導マウスに投与した２００ｎｇのＭＩＧは炎症誘発性であり、疾患を誘導した未治療動物と比較して炎症が３８％増大した（−３８、図１６中）。１１００ｎｇのペプチド８は疾患誘導マウスに投与したとき炎症誘発効果を有しており、疾患を誘導した未治療動物と比較して炎症が４４％増大した（−４４）。ＭＩＧとペプチド８の組合せは、疾患誘導動物に投与したとき抗炎症効果を有していた。２０ｎｇのＭＩＧ及び１００ｎｇのペプチド８からなる投与量を用いると、抗炎症効果は疾患を誘導した未治療動物と比較して５％（５）であった。１００ｎｇのＭＩＧ及び５５０ｎｇのペプチド８からなる投与量、並びに２００ｎｇのＭＩＧ及び１０００ｎｇのペプチド８からなる投与量を用いると、抗炎症効果はそれぞれ５５％（５５）及び１４％（１４）であった。それぞれの投与量の分子比は１：５０（ＣＫ：ペプチド）であった。
【００８１】
ＣＫ、ＲＡＮＴＥＳ（ＣＣＬ５）及びペプチド５並びにＲＡＮＴＥＳと組み合わせた異なる投与量のペプチド５の有効性。ＣＫ  ＲＡＮＴＥＳは炎症状態において高レベルで発現され、炎症性ＣＫとして分類する。図１７中に示すように、疾患誘導マウスに投与した２００ｎｇのＲＡＮＴＥＳはわずかに炎症誘発性であり、疾患を誘導した未治療動物と比較して炎症が＜３％増大した（＜−３％、図１７中）。１３００ｎｇのペプチド５は疾患誘導マウスに投与したとき抗炎症効果を有しており、疾患を誘導した未治療動物と比較して炎症が１１％（１１）低下した。ＲＡＮＴＥＳとペプチド５の組合せは、２０ｎｇのＲＡＮＴＥＳ及び１３０ｎｇのペプチド５からなる投与量で疾患誘導動物に投与したとき１８％（−１８）の炎症誘発効果を有していた。１００ｎｇのＲＡＮＴＥＳ及び５５０ｎｇのペプチド５からなる投与量では、この組合せの抗炎症効果は疾患を誘導した未治療動物と比較して３４％（３４）であった。２００ｎｇのＲＡＮＴＥＳ及び１３００ｎｇのペプチド５からなる投与量では、抗炎症効果は１８％（１８）であった。それぞれの投与量の分子比は１：５０（ＣＫ：ペプチド）であった。ＲＡＮＴＥＳ単独の炎症誘発活性及びペプチド５自体の抗炎症活性を考慮すると、ＣＫ−ペプチドの組合せの活性は、ＲＡＮＴＥＳ−ペプチド５複合体の形成及びその複合体の安定性の証拠である。次善の投与量（ＲＡＮＴＥＳ：２０ｎｇ−ペプチド５  １３０ｎｇ）では、複合体は炎症誘発活性を示し、ＣＫの二相性と一致した。低濃度では、ＣＫは標的（炎症）細胞の移動を誘導する化学誘引物質である。比較的高濃度では、ＣＫは標的細胞の移動を阻害する。最適投与量（ＲＡＮＴＥＳ：１００ｎｇ−ペプチド６：−５５０ｎｇ）が、疾患関連、野生型ＣＫの競合阻害剤の生物活性と一致する最大の抗炎症効果に必要であった。最適を超える投与量では、活性複合体は疾患状態の無関係なＣＫ受容体を活性化し、反指標的な、炎症誘発応答を誘導した。
【００８２】
ＣＫ  ＲＡＮＴＥＳ（ＣＣＬ５）、ペプチド８及びＲＡＮＴＥＳと組み合わせた異なる投与量のペプチド８の有効性。ここで図１８を参照すると、前に示したように、疾患誘導マウスに投与したとき２００ｎｇのＣＫ  ＲＡＮＴＥＳは炎症誘発性であり、疾患を誘導した未治療動物と比較して炎症が＜３％増大した（＜−３、図１８中）。１１００ｎｇのペプチド８は疾患誘導マウスに投与したとき炎症誘発効果を有しており、疾患を誘導した未治療動物と比較して炎症が４４％増大した（−４４）。ＲＡＮＴＥＳとペプチド８の組合せは、２つの投与量、ＲＡＮＴＥＳ：２ｎｇ及びペプチド８：２０ｎｇ（５２％（５２））及びＲＡＮＴＥＳ：１０ｎｇ及びペプチド８：１００ｎｇ（２５％（２５））で疾患誘導動物に投与したとき抗炎症効果を有していた。ＲＡＮＴＥＳ：５０ｎｇ及びペプチド８：５００ｎｇの投与量を用いると、炎症誘発効果は疾患を誘導した未治療動物と比較して３６％（−３６）であった。それぞれの投与量の分子比は１：５０（ＣＫ：ペプチド）であった。個々の要素（ＲＡＮＴＥＳ及びペプチド８）の炎症誘発活性及びＣＫ−ペプチドの組合せの抗炎症活性は、安定した複合体の形成の証拠である。最大の抗炎症活性を、ＲＡＮＴＥＳ：２ｎｇ及びペプチド８：２０ｎｇからなる組合せを用いて観察し、疾患関連、野生型ＣＫの競合阻害剤の生物活性と一致した。最適を超える投与量では、活性複合体は疾患状態と無関係なＣＫ受容体を活性化し、示唆されるものとは反対の炎症誘発応答を誘導した。
【００８３】
ＣＫ  ＭＣＰ１（ＣＣＬ２）、ペプチド１及びＭＣＰ１と組み合わせた異なる投与量のペプチド１の有効性。ＣＫ  ＭＣＰ１は炎症状態において高レベルで発現され、炎症性ＣＫとして分類する。図１９中に示すように、疾患誘導マウスに投与した２００ｎｇのＭＣＰ１は炎症誘発性であり、疾患を誘導した未治療動物と比較して炎症が２３％増大した（−２３、図１９中）。１４００ｎｇのペプチド１は疾患誘導マウスに投与したとき炎症誘発効果を有しており、疾患を誘導した未治療動物と比較して炎症が３４％増大した（−３４）。ＭＣＰ１とペプチド１の組合せは、２つの投与量、ＭＣＰ１：２０ｎｇ及びペプチド１：１４０ｎｇ（５５％（５５））及びＭＣＰ１：１００ｎｇ及びペプチド１：７００ｎｇ（２３％（２３））で疾患誘導動物に投与したとき炎症誘発効果を有していた。ＭＣＰ１：２００ｎｇ及びペプチド１：１４００ｎｇの投与量では、抗炎症効果は疾患を誘導した未治療動物と比較して３３％（３３）であった。それぞれの投与量の分子比は１：５０、ＣＫ：ペプチドであった。個々の要素（ＭＩＧ及びペプチド１）の炎症誘発活性及びＣＫ−ペプチドの組合せの抗炎症活性は、安定した複合体の形成の証拠である。次善の投与量（ＭＣＰ１：２０ｎｇ−ペプチド１：１４０ｎｇ；ＭＣＰ１：１００ｎｇ−ペプチド１：７００ｎｇ）では、複合体は炎症誘発活性を示し、ＣＫの二相性と一致した。低濃度では、ＣＫは標的（炎症）細胞の移動を誘導する化学誘引物質である。比較的高濃度では、ＣＫは標的細胞の移動を阻害する。最適投与量（ＭＣＰ１：２００ｎｇ及びペプチド１：１４００ｎｇが、疾患関連、野生型ＣＫの競合阻害剤の生物活性と一致する最大の抗炎症効果に必要であった。
【００８４】
ＣＫ、ＭＣＰ１（ＣＣＬ２）、ペプチド５及びＭＣＰ１と組み合わせた異なる投与量のペプチド５の有効性。ＣＫ  ＭＣＰ１は炎症状態において高レベルで発現され、炎症性ＣＫとして分類する。図２０中に示すように、疾患誘導マウスに投与したとき２００ｎｇのＭＣＰ１は炎症誘発性であり、疾患を誘導した未治療動物と比較して炎症が２３％増大した（−２３、図２０中）。１３００ｎｇのペプチド５は疾患誘導マウスに投与したとき抗炎症効果を有しており、疾患を誘導した未治療動物と比較して炎症が１１％（１１）低下した。ＭＣＰ１とペプチド５の組合せは、２つの投与量、ＭＣＰ１：２０ｎｇ及びペプチド５：１２０ｎｇ（２３％（−２３））及びＭＣＰ１：２００ｎｇ及びペプチド５：１２００ｎｇ（１１％（−１１））で疾患誘導動物に投与したとき炎症誘発効果を有していた。ＭＣＰ１：１００ｎｇ及びペプチド５：６００ｎｇの投与量を用いると、抗炎症効果は疾患を誘導した未治療動物と比較して７９％（７９）であった。それぞれの投与量の分子比は１：５０、ＣＫ：ペプチドであった。個々の要素（ＭＣＰ１及びペプチド５）の炎症誘発活性及びＣＫ−ペプチドの組合せの抗炎症活性は、安定した複合体の形成の証拠である。次善の投与量（ＭＣＰ１：２０ｎｇ−ペプチド５：１２０ｎｇ）では、複合体は炎症誘発活性を示し、ＣＫの二相性と一致した。低濃度では、ＣＫは標的（炎症）細胞の移動を誘導する化学誘引物質である。比較的高濃度では、ＣＫは標的細胞の移動を阻害する。最適投与量（ＭＣＰ１：１００ｎｇ及びペプチド５：６００ｎｇが、疾患関連、野生型ＣＫの競合阻害剤の生物活性と一致する抗炎症効果に必要であった。最適を超える投与量では、活性複合体は疾患状態の無関係なＣＫ受容体を活性化し、反指標的な、炎症誘発応答を誘導した。
【００８５】
別々及び一緒にした、ＣＫ−ペプチドの組合せ、ＲＡＮＴＥＳ（ＣＣＬ５）−ペプチド１及びＲＡＮＴＥＳ−ペプチド８の有効性。図２１中に示すように、１００ｎｇのＲＡＮＴＥＳと７５０ｎｇのペプチド１の組合せからなる投与量は、疾患誘導マウスに投与すると炎症誘発性であり、疾患を誘導した未治療動物と比較して炎症が３０％増大した（−３０、図２１中）。これとは対照的に、１０ｎｇのＲＡＮＴＥＳと１００ｎｇのペプチド８の組合せからなる投与量は抗炎症性であり、炎症は２５％（２５）低下した。それぞれＲＡＮＴＥＳ−ペプチドの組合せ、ＲＡＮＴＥＳ−ペプチド１及びＲＡＮＴＥＳ−ペプチド８の反指標的治療活性は、ペプチドのそれぞれが相反する方法でＲＡＮＴＥＳ活性を調節し、それぞれの組合せは安定した複合体であった証拠であった。疾患誘導動物にＲＡＮＴＥＳ−ペプチド１及びＲＡＮＴＥＳ−ペプチド８を投与した正味の影響は（３８％（３８）抗炎症性）、複合体の薬理学的性質と関係がある。正味の抗炎症性の影響は、同じ疾患関連ＣＫ受容体の機能的に異なる複合体間の競合の結果、或いは代替的に機能的に対抗する炎症誘発性受容体と抗炎症性受容体の活性化の結果であり得る。
【００８６】
別々及び一緒にした、ＣＫ−ペプチドの組合せ、ＩＰ１０（ＣＸＣＬ１０）−ペプチド８及びＲＡＮＴＥＳ（ＣＣＬ５）−ペプチド８の有効性。１００ｎｇのＩＰ１０と７５０ｎｇのペプチド８の組合せからなる投与量は、疾患誘導マウスに投与すると炎症誘発性であり、疾患を誘導した未治療動物と比較して炎症が６０％増大した（−６０、図２２中）。１０ｎｇのＲＡＮＴＥＳと１００ｎｇのペプチド８の組合せからなる投与量は抗炎症性であり、炎症は２５％（２５）低下した。この２つのＣＫ−ペプチドの組合せの反指標的治療活性は、ペプチド８が炎症性ＣＫＩＰ１０及びＲＡＮＴＥＳの活性を相反する方法で調節した証拠である。正味の抗炎症性の影響は、同じ疾患関連ＣＫ受容体の機能的に異なる複合体間の競合の結果、或いは代替的に機能的に対抗する炎症誘発性受容体と抗炎症性受容体の活性化の結果であり得る。
【００８７】
治療指標
関節リウマチ  臨床的観察及び実証的証拠は、関節リウマチの病原性におけるＲＡＮＴＥＳ、ＭＩＧ、ＭＣＰ−１及びＩＰ１０及びこれらそれぞれの同系受容体の役割を示している［ｗｗｗ．ｉｄｄｂ３．ｃｏｍ、Ｗｅｌｌｓ、２００６］。ＲＡＮＴＥＳとＣＢＰ５（図１７参照）、ＲＡＮＴＥＳとＣＢＰ８（図１８参照）、ＭＥＧとＣＢＰ８（図１６参照）、ＭＣＰ−１とＣＢＰ１（図１９参照）、ＭＣＰ１とＣＢＰ５（図２０参照）、又はＩＰ１０とＣＢＰ８（図２２参照）からなる組合せを、関節リウマチの治療において使用することができる。
【００８８】
喘息  ＣＫ、ＲＡＮＴＥＳ及びＭＣＰ−１並びにＣＫ受容体、ＣＣＲ３、ＣＢＰ１及びＣＢＰ５の原型、ＣＣＲ２、ＣＢＰ８の原型は喘息の病原性と関係がある［ｗｗｗ．ｉｄｄｂ３．ｃｏｍ、Ｗｅｌｌｓ、２００６］。ＲＡＮＴＥＳとＣＢＰ５（図１７参照）、ＲＡＮＴＥＳとＣＢＰ８（図１８参照）、ＭＣＰ−１とＣＢＰ１（図１９参照）、又はＭＣＰ１とＣＢＰ５（図２０参照）の組合せを、喘息の治療において使用することができる。
【００８９】
移植拒絶反応  ＣＫ、ＭＩＧ、ＲＡＮＴＥＳ、ＭＣＰ−１及びＩＰ１０並びにＣＫ受容体、ＣＣＲ２、ＣＢＰ８の原型のレベルは臓器移植拒絶反応と相関関係がある（ｗｗｗ．ｉｄｄｂ３．ｃｏｍ、Ｗｅｌｌｓ、２００６）。ＭＩＧとＣＢＰ８（図１６参照）、ＲＡＮＴＥＳとＣＢＰ５（図１７参照）、ＲＡＮＴＥＳとＣＢＰ８（図１８参照）、ＭＣＰ−１とＣＢＰ１（図１９参照）、ＭＣＰ１とＣＢＰ５（図２０参照）、又はＩＰ１０とＣＢＰ８（図２２参照）の組合せを、移植拒絶反応の治療において使用することができる。
【００９０】
多発性硬化症  ＭＩＧ、ＲＡＮＴＥＳ、ＭＣＰ−１及びＩＰ１０は多発性硬化症関連ＣＫであり、ＣＫ受容体、ＣＣＲ２、ＣＢＰ８の原型は、この疾患と関係がある（ｗｗｗ．ｉｄｄｂ３．ｃｏｍ、Ｗｅｌｌｓ、２００６）。ＭＩＧとＣＢＰ８（図１６参照）、ＲＡＮＴＥＳとＣＢＰ５（図１７参照）、ＲＡＮＴＥＳとＣＢＰ８（図１８参照）、ＭＣＰ−１とＣＢＰ１（図１９参照）、ＭＣＰ１とＣＢＰ５（図２０参照）、又はＩＰ１０とＣＢＰ８（図２２参照）の組合せを、移植拒絶反応の治療において使用することができる。
【００９１】
炎症性腸疾患  ＣＫ、ＲＡＮＴＥＳは炎症性腸疾患の病原性と関係がある（ｗｗｗ．ｉｄｄｂ３．ｃｏｍ、Ｗｅｌｌｓ、２００６）。ＲＡＮＴＥＳとＣＢＰ５（図１７参照）、又はＲＡＮＴＥＳとＣＢＰ８（図１８参照）の組合せを、この疾患の治療において使用することができる。
【００９２】
乾癬  ＣＫ、ＭＩＧ及びＲＡＮＴＥＳは乾癬の病原性と関係がある（ｗｗｗ．ｉｄｄｂ３．ｃｏｍ、Ｗｅｌｌｓ、２００６）。ＭＩＧとＣＢＰ８（図１６参照）、ＲＡＮＴＥＳとＣＢＰ５（図１７参照）、又はＲＡＮＴＥＳとＣＢＰ８（図１８参照）の組合せを、この疾患の治療において使用することができる。
【００９３】
ＡＩＤＳ  ＲＡＮＴＥＳの同系受容体、ＣＣＲ５はＨＩＶ感染及びＡＩＤＳの治療用の有効な薬剤標的と関係がある（ｗｗｗ．ｉｄｄｂ３．ｃｏｍ、Ｗｅｌｌｓ、２００６）。ＲＡＮＴＥＳとＣＢＰ５（図１７参照）、又はＲＡＮＴＥＳとＣＢＰ８（図１８参照）の組合せを、この疾患の治療においてウイルスの競合阻害剤として使用することができる。
【００９４】
癌  転移及び血管新生は癌の病原性に不可欠である。ＣＫは転移の細胞移動、及び血管新生の血管形成を媒介する。ＣＫ−ＣＢＰの組合せは、これらの病原性の過程の潜在的な調節物質であり、したがって、その過程に対する治療剤である。
【図面の簡単な説明】
【００９５】
【図１】ケモカイン結合ペプチド（ＣＢＰ）５のケモカイン結合を示す図である。
【図２】ＣＢＰ８のケモカイン結合を示す図である。
【図３】ＣＢＰ１０のケモカイン結合を示す図である。
【図４】ＣＢＰ２のケモカイン結合を示す図である。
【図５】ＣＢＰ７のケモカイン結合を示す図である。
【図６】それぞれ図１、２及び３の結合実験と平行して実施したＣＢＰ５、ＣＢＰ８、及びＣＢＰ１０ペプチドの不在下（陰性対照）での陰性対照のマイクロアレイ分析を示す図である。
【図７】図５の結合実験と平行して実施したＣＢＰ７の不在下（陰性対照）での陰性対照のマイクロアレイ分析を示す図である。
【図８】図４の結合実験と平行して実施したＣＢＰ２の不在下（陰性対照）での陰性対照のマイクロアレイ分析を示す図である。
【図９】ファージ提示ペプチド（Ｐｈ−ｐ）１１のケモカイン結合を示す図である。
【図１０】Ｐｈ−ｐ１３のケモカイン結合を示す図である。
【図１１】Ｐｈ−ｐ１５のケモカイン結合を示す図である。
【図１２】Ｐｈ−ｐ１６のケモカイン結合を示す図である。
【図１３】Ｐｈ−ｐ１７のケモカイン結合を示す図である。
【図１４】Ｐｈ−ｐ１８のケモカイン結合を示す図である。
【図１５】Ｐｈ−ｐ２０のケモカイン結合を示す図である。
【図１６】疾患、遅延型過敏症（ＤＴＨ）誘導マウスに投与したときの、ＣＫ、ＭＩＧと組み合わせたＣＢＰ８の効果を示す図である。
【図１７】疾患、ＤＴＨ誘導マウスに投与したときの、ＣＫ、ＲＡＮＴＥＳと組み合わせたＣＢＰ５の効果を示す図である。
【図１８】疾患、ＤＴＨ誘導マウスに投与したときの、ＣＫ、ＲＡＮＴＥＳと組み合わせたＣＢＰ８の効果を示す図である。
【図１９】疾患、ＤＴＨ誘導マウスに投与したときの、ＣＫ、ＭＣＰ−１と組み合わせたＣＢＰ１の効果を示す図である。
【図２０】疾患、ＤＴＨ誘導マウスに投与したときの、ＣＫ、ＭＣＰ−１と組み合わせたＣＢＰ５の効果を示す図である。
【図２１】疾患、ＤＴＨ誘導マウスに投与したときの、ＣＢＰ８−ＲＡＮＴＥＳと組み合わせたＣＢＰ−ＣＫの組合せ、ＣＢＰ１−ＲＡＮＴＥＳの効果を示す図である。
【図２２】疾患、ＤＴＨ誘導マウスに投与したときの、ＣＢＰ８−ＲＡＮＴＥＳと組み合わせたＣＢＰ−ＣＫの組合せ、ＣＢＰ８−ＩＰ−１０の効果を示す図である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【国際調査報告】
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