(57)【要約】本発明は、化粧品の分野およびとりわけ皮膚と皮膚付属器の手入れに関するものである。本発明は、より特徴的には、化粧品組成物における、ガンマアミノ酪酸または無機酸もしくは有機酸との塩のうちの一つまたはエステルのようなその誘導体のうちの一つの、０．４から１０％の濃度での、化粧品組成物の形での利用を目的としており、該ガンマアミノ酪酸またはその塩のうちの一つまたはその誘導体のうちの一つは、単独か、または水性あるいは油性の媒質においてポリフェノールやタンニンが豊富な植物の抽出物および／またはα−ヒドロキシ酸に配合されるものである。皮膚あるいは外皮用の１日１回から４回塗布する色素脱失剤としての利用。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ガンマアミノ酪酸、その塩のうちの一つ、またはその低級アルキルエステルもしくはポリオールエステルのうちの一つの、色素脱失剤またはメラニン調節剤としての利用方法。
【請求項２】
遊離ガンマアミノ酪酸を色素脱失剤またはメラニン調節剤として利用する、請求項１に記載の利用方法。
【請求項３】
ガンマアミノ酪酸の塩を色素脱失剤またはメラニン調節剤として利用する、請求項１に記載の利用方法。
【請求項４】
ガンマアミノ酪酸の塩が、生理的に相いれる無機酸あるいは有機酸との塩である、請求項１に記載の利用方法。
【請求項５】
ガンマアミノ酪酸の塩が、ガンマアミノ酪酸塩酸塩である、請求項１または請求項４に記載の利用方法。
【請求項６】
ガンマアミノ酪酸の低級アルキルエステルを色素脱失剤またはメラニン調節剤として利用する、請求項１に記載の利用方法。
【請求項７】
低級アルキルエステルとして、水において可溶性であるかあるいは有機溶媒において可溶性のガンマアミノ酪酸の低級アルキルエステルを利用する、請求項１および請求項６に記載の利用方法。
【請求項８】
ガンマアミノ酪酸に、色素脱失剤あるいはメラニン調節剤として、ポリフェノールやタンニンが豊富な植物の抽出物が添加される、請求項１に記載の利用方法。
【請求項９】
ガンマアミノ酪酸、その塩、またはその低級アルキルエステルもしくはポリオールエステルの、局所用化粧品組成物における利用方法。
【請求項１０】
乳液、ローション、水中油型乳剤あるいは油中水型乳剤、クリーム、ジェル、および化粧水の中から選ばれる、水性または油性の組成物における、請求項９に記載のガンマアミノ酪酸の利用方法。
【請求項１１】
０．４から１０％の間で変動する濃度での、化粧品組成物における請求項１に記載のガンマアミノ酪酸、その塩のうちの一つ、またはそのエステルのうちの一つの利用方法。
【請求項１２】
０．５から５％の間を変動する濃度での色素脱失剤としての、請求項１１に記載のガンマアミノ酪酸の利用方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、生活必需品またより特徴的には身体の手入れに関するものである。
【０００２】
本発明はより正確には、化粧品組成物を対象としており、該化粧品組成物は、とりわけ、異常なあるいは過度の不規則な色素沈着に結びついた美的欠陥の場合に、皮膚の美白を保証することを目的としたものであり、またはくすんだ表現型からより明るい表現型に変化することを目指して正常な皮膚の美白を保証することを目的としたものである。
【０００３】
そのうえ、本発明による組成物は、明るい色の皮膚の被験者の集団において、肝斑あるいはそばかすの影響を和らげるための利用を見出している。
【０００４】
本発明は特に、皮膚および外皮に塗布することを目的とした色素脱失組成物の実現のためのガンマアミノ酪酸（ＧＡＢＡ）またはその塩もしくはその誘導体の利用を対象としている。
【背景技術】
【０００５】
ガンマアミノ酪酸は、皮膚科学において、とりわけ組織修復剤としての利用をすでに見出している。そのうえ、特許出願ＰＣＴ／ＦＲ９６／０１０５１において、本出願人は既に、α−ヒドロキシ酸および植物の抽出物と配合したガンマアミノ酪酸の利用を記載している。色素脱失剤としては、この記載は非常に簡潔であり、この作用の実情についていかなる詳細も提供していない。また、この記載は請求項の対象になっていない。
【０００６】
先行技術は、皮膚を通しての通過を保証するために界面活性剤に配合されるガンマアミノ酪酸を挙げる、かなりの数の参考文献によって例示することができる。特開平９−０５９１４２号公報（鐘紡株式会社）が示すところによると、それはパンテテイン−Ｓ−スルホン酸（あるいはその塩のうちの一つ）、ジイソプロピルアミンジクロロアセテート、およびガンマアミノ酪酸あるいはその誘導体のうちの一つと、およそ１６のＨＬＢ値を有する非イオン性界面活性剤、例えばモノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン（２０）とから成る配合である。該混合物における界面活性剤の濃度は高く（１〜１０）、該濃度は皮膚の角質層の中への通過率を助長するために成分Ａの経皮吸収を改善することを目的としている。
【０００７】
非イオン性界面活性剤の存在により、メラニンタイプの色素生成の抑制剤の作用が有効成分の経皮吸収に依存していることがうかがえる。
【０００８】
ガンマアミノ酪酸、その塩のうちの一つ、またはそのエステルのうちの一つは、単独で作用し、細胞の細胞内メラニン量をただ一度の塗布によって有意に減少させる。
【発明の概要】
【０００９】
本発明が、異なる効果を生み出す異なるメカニズムによって作用する異なる組成物に関することは明らかである。
【００１０】
先行技術は、鐘紡株式会社の別の日本特許出願（特開平１０−１９４９６０号公報）もまた記載している。英語での要約から明らかになるように、それは光保護特性を有する、皮膚のための化粧品組成物に関するものである（色黒の皮膚を予防し、色黒の皮膚を速やかに淡色化する・・・）。それは組成が明らかに異なる調製物であり、すなわち、血液の循環を促進する、０．００１〜５重量％の少なくとも一つのタイプの生成物（ガンマアミノ酪酸などのようなもの）と、好ましくは分解剤から得られる物質とであって、該物質は、アクチナーゼ、ペプシン、あるいはトリプシンのような酵素によってコメあるいはコメの外皮に由来する抽出物を処理し、そして精製水のような中性溶媒による抽出を行うことによって得られる、酵素性の性質のものである。
【００１１】
そのような酵素によって処理され、また水で抽出されたコメの抽出物の性質は既知ではない。有効物質が、循環を促進する物質あるいは細胞活性化剤とコメ由来の酵素の分解剤（酵素分解剤）との混合物であることが考えられる。これもまた、おそらく血液の循環を変えることによって作用する、非常に異なる組成の調製物である。
【００１２】
該文献は、さらに参考文献Ｇｏｕｄｚｅｎｋｏ  ｊａｎｎａ  Ｐｒｏｋｏｖｉｅｖｎａの米国特許第５８１７６２１号明細書を挙げている。この参考文献が、ＧＡＢＡ作動性物質の利用、とりわけＬ−ＤｏｐａとＧＡＢＡの同時の利用を３段落目で記載していることは確かである。
【００１３】
しかしながら、詳細が提供されているそのような組成物は、ガンマアミノ酪酸のようなＧＡＢＡ作動性物質の利用にはまったく関係なく、ビタミンＡ、サリチル酸、ｄ−カンフル、ＧＡＢＡ作動性物質、ドーパミン作動性物質、抗コリン性物質（アトロピン）、パンクレアチン、アスコルビン酸、カルシウム塩の形状のパントテン酸、およびビタミンＢ１２の複合混合物の利用に関している。
【００１４】
そのような調製物は、栄養特性を示しており、またとりわけＧＡＢＡ作動性ニューロンに作用することによって皮膚の生理的機能性を正常に戻す。この特許は、皮膚の色素沈着が正常に戻り肌は健康的な肌色になることを明らかにしている（３段落５３行目）。色素脱失あるいは再色素沈着はまったく問題になっていない。
【００１５】
参考文献ＹＵ（米国特許第６７６７９２４号明細書Ｂ２）は、水性組成物あるいは油性組成物が記載されている限りにおいて先行参考文献に相当するものである（３段落３７〜３９行目および請求項４）。
【００１６】
該参考文献は、引用節の３段落目が、染み、ほくろ、肝斑、染みのある皮膚、色素沈着過剰の皮膚のような皮膚のさまざまな病気における組成物の利用を記載していることから、本発明にほとんど関係しない。
【００１７】
このことは、引用される特許ＹＵにおいて記載される組成物が、染みのある皮膚の脱色にも皮膚の色素沈着過剰にも、あらゆるタイプの色素沈着障害に適していることを意味する。
【００１８】
参考文献ＹＵにおいて記載される組成物が、両性あるいは擬両性の性質を有する界面活性剤とポリヒドロキシル化されたαヒドロキシ酸との混合物であることを明確にすることが重要である。
【００１９】
ヒドロキシ酸溶液は酸性度が非常に強いので、両性界面活性剤を加えて、強い酸性度を中和して該酸性度を皮膚と相いれるようにする。
【００２０】
このことは、この参考文献において引用されるガンマアミノ酪酸が、中和能力を有するにすぎず、有効成分とみなすことができないことを意味する。
【００２１】
この酸が、より細胞毒性が少なくありながら、ヒドロキノンの誘導体（アルブチン）あるいはコウジ酸のような慣例の従来の物質の利用と比べ、色素脱失剤としての優れた用途を見出すこともまた明確にされた。
【００２２】
そのような組成物において利用されるガンマアミノ酪酸およびその塩およびその誘導体を、単離した細胞においてまたとりわけ正常なヒトのメラニン細胞の培養物において調査した。利用した実験モデルで、それは、チロシナーゼに対する阻害作用を示し、メラニンの合成の明らかな減少をもたらす。培養細胞の細胞内メラニン量の有意な減少がとりわけ確認される。得られる結果は用量依存的であり、このことはこのタイプのパラメータに対するガンマアミノ酪酸の特異的な効果を裏付けるものである。
【図面の簡単な説明】
【００２３】
【図１】単層培養される正常なヒトのメラニン細胞に対する有効成分の細胞毒性を示す図である。
【図２】単層培養される正常なヒトのメラニン細胞に対する乳酸の細胞毒性を示す図である。
【図３】単層培養される正常なヒトのメラニン細胞に対するＧＡＢＡの細胞毒性を示す図である。
【図４】単層培養のヒトのメラニン細胞のモデルにおける、被験複合成分の存在下でのメラニン合成を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００２４】
本発明による組成物は、有効成分として、ガンマアミノ酪酸を、そのままか、または生理的に相いれる無機酸もしくは有機酸との塩の形で、または低級アルキルエステルもしくはポリオールエステルの形で含む。
【００２５】
利用可能なガンマアミノ酪酸の塩のうち、塩酸塩、硫酸塩、リン酸塩、酢酸塩、プロピオン酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、安息香酸塩、ピドロ酸塩、グルコースリン酸塩、メタンスルホン酸塩、あるいはｐ−トルエンスルホン酸塩を挙げることができよう。
【００２６】
本発明の実施において利用することができるガンマアミノ酪酸エステルは、メチルエステル、エチルエステル、プロピルエステル、ブチルエステル、ヘキシルエステル、またはポリエチレングリコールエステル、ポリブチレングリコールエステル、またはさらに、マンニトール、ソルビトール、もしくはグリセロールのような、糖エステルもしくはポリオールエステルでありうる。
【００２７】
必要に応じて、これらのエステルは、水において可溶性であるかあるいは油のような有機溶媒において可溶性である。それらの選択は、それらが有効成分として加えられる化粧品組成物の性質によって決定される。
【００２８】
本発明による組成物は、カラヤマグワの抽出物ような、ポリフェノールやタンニンが豊富な植物の抽出物、または乳酸のようなα−ヒドロキシ酸、または、同じくα−ヒドロキシ酸が豊富なレモンやグレープフルーツの抽出物のような果物の抽出物などの、他の有効成分を含むことができる。
【００２９】
ガンマアミノ酪酸を主成分とした組成物に、粘稠剤、ゲル化剤、乳化剤、芳香剤、安定剤、保存料、感触や流動性を改善する物質を添加することができる。
【００３０】
この点で、乳化剤として、ステアリン酸ポリエチレングリコールまたはショ糖エステルのような糖エステルを挙げることができる。
【００３１】
粘稠剤としては、メチルセルロース、エチルセルロース、β−ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、またはＡｃｄｉｓｏｌ（登録商標）のような架橋カルボキシメチルセルロースのような、セルロースの誘導体を挙げることができる。
【００３２】
ゲル化剤はたとえば、Ｃａｒｂｏｐｏｌ（登録商標）（Ｇｏｏｄｒｉｃｈ社）の名称で市販されているカルボマーのような、アクリル酸系ポリマーあるいはアクリルアミド系ポリマーである。
【００３３】
組成物におけるガンマアミノ酪酸の濃度は、全組成の０．４〜１０％の間、好ましくは０．５〜５％の間を変動することができる。
【００３４】
以下の実施例は本発明を例示するものであり本発明を限定するものではない。
【実施例１】
【００３５】
実施例１：ガンマアミノ酪酸塩酸塩を主成分としたクリーム
ガンマアミノ酪酸塩酸塩  ７．５ｇ
カラヤマグワの抽出物  ０．５ｇ
レモンの抽出液ＢＧ  ２．０ｇ
Ｃｉｒｅ  Ｌａｎｅｔｔｅ（登録商標）  ３．７５ｇ
乳化剤  ０．５ｇ
水  １００ｇを満たす量
【実施例２】
【００３６】
実施例２：ガンマアミノ酪酸を主成分としたジェル
ガンマアミノ酪酸  ２ｇ
プロピレングリコール  ５ｇ
スイートアーモンドオイル  １０ｇ
シリコーンオイル  ０．１ｇ
ＧｅｒｍａｂｅｎＩＩ  ０．０２ｇ
Ｃａｒｂｏｐｏｌ（登録商標）９３６  ０．４ｇ
トリエタノールアミン  ０．１ｇ
花香料  適量
精製水  ８０ｇ
【実施例３】
【００３７】
実施例３：ガンマアミノ酪酸を主成分とした組成物の細胞毒性の調査
この調査の目的は、個別に測定されたガンマアミノ酪酸の細胞毒性、カラヤマグワの抽出物の細胞毒性およびレモンの抽出液の細胞毒性を、乳酸（化合物Ｅ）のように周知であるα−ヒドロキシ酸の細胞毒性と比較して評価することであった。
【００３８】
若い被験者（４歳）から得た正常なヒトのメラニン細胞についての測定が行われる。試験の実施のために、細胞を培養し、コンフルエントな単層を得た。
【００３９】
細胞のインキュベーション
細胞は、濃度を漸増させた化合物Ｅまたは各被験生成物の不存在下（対照試験）または存在下で、７２時間の間インキュベートした。化合物Ｅについては、０．００３、０．０３、０．０７５、０．１５、０．５、０．７５、１．５および３％（ｖ／ｖ）の濃度を、本発明による生成物については０．０１、０．１、０．２５、０．５、１、２．５、５、１０％（ｖ／ｖ）の濃度を試験した。
【００４０】
被験生成物は、超高純度の水の中に、１００％（ｖ／ｖ）を満たす量のガンマアミノ酪酸を直接希釈することによって調製した。
【００４１】
比較対照として、１０％コウジ酸溶液および３０％乳酸（化合物Ｅ）溶液を調製した。
【００４２】
被験調製物をついでメラニン細胞のインキュベーション培地の中に直接希釈した。
【００４３】
効果の評価：
インキュベーション期間の終わりに、細胞内のホスファターゼ活性を定量するための分光測光法によって、細胞の生存率を評価した。
【００４４】
Ｙａｎ  Ｔ他の方法（『Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．』１９９６年第２４巻１０３〜１０８ページ）にしたがって、生存細胞の細胞内ホスファターゼによるｐ−ニトロフェニルリン酸の変化から生じる、ｐ−ニトロフェノールを定量する。４０５ｎｍでの遊離したｐ−ニトロフェノールの吸光度は、培養ウェルの中に存在する生存細胞の数に直接比例する。
【００４５】
結果：
７２時間のインキュベート後の乳酸（化合物Ｅ）は、培養ウェルの中に存在する生存メラニン細胞の数を有意に減少させる。この効果は、０．０３％の含有量からすでに検出可能である（培養ウェルの中になお存在する生存細胞は８０％未満）。乳酸はしたがって明らかに細胞毒性である。
【００４６】
ガンマアミノ酪酸は、同じ条件における検出可能な細胞毒性効果を０．５％の含有量からしか示さない。したがって、ガンマアミノ酪酸を１０％含む本発明による色素脱失組成物は、より多い実験分量でしか細胞毒性効果を示さない（図１、２、３および表Ｉを参照）。
【００４７】
【表１】
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【００４８】
カラヤマグワの抽出物やレモンの抽出物を主成分とした組成物もまた低い効果を有する。
【実施例４】
【００４９】
実施例４：本発明による組成物内に含まれる有効成分の「メラニン調節」効果
メラニン調節効果の調査は、２つの過程で行われた：
‐細胞毒性テストにおいて所定の濃度で個別に測定される各成分のメラニン調節効果。
‐複合成分、すなわちカラヤマグワ、レモン、および乳酸の各成分と配合されたＧＡＢＡのメラニン調節効果。
【００５０】
第一の過程
これらの試験は、単層培養された正常なヒトのメラニン細胞のモデルに対して行われた。
【００５１】
ガンマアミノ酪酸、レモンの抽出物、およびカラヤマグワの抽出物は、可溶化して培地内に直接希釈した。
【００５２】
被験生成物を用いた細胞のインキュベーション：
正常なヒトのメラニン細胞は、基準生成物（コウジ酸２５０μＭ）または濃度を漸増させた被験有効生成物の、不存在下（対照）または存在下で、７２時間の間インキュベートした。
【００５３】
ガンマアミノ酪酸（組成物Ａ）０．００１、０．０１、０．１％
カラヤマグワの抽出物（組成物Ｃ）０．０１、０．１、０．５％
レモンの抽出物（組成物Ｄ）０．０１、０．１、１％
【００５４】
この方法において、メラニン対タンパク質の割合を対照に対するパーセンテージで決定する。溶媒のみを用いて得た値、および基準物質として選ばれる、この溶媒（ＤＭＳＯ）におけるコウジ酸の２５０μＭの溶液を用いて得た値もまた測定した。
【００５５】
表ＩＩは、個別の有効成分Ａ（ガンマアミノ酪酸）、Ｃ、Ｄ、および乳酸（化合物Ｅ）について得た結果を示す。ガンマアミノ酪酸は、０．１％の濃度からすでに統計学的に有意な結果を示す。化合物ＣおよびＤは、低いメラニン調節効果を有する。
【００５６】
第二の過程
単層培養された正常なヒトのメラニン細胞のモデルにおけるメラニンの合成についての比較要素として、有効成分Ａ（ガンマアミノ酪酸）、Ｃ、Ｄ、および乳酸（化合物Ｅ）を含む複合成分の効果もまた評価した。
【００５７】
【表２】
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【００５８】
被験生成物：
組成物は、ガンマアミノ酪酸Ａ、成分ＣおよびＤ、および乳酸（化合物Ｅ）を以下の濃度で超高純度の水の中に直接希釈して調製した。
‐ガンマアミノ酪酸１０％
‐カラヤマグワの抽出物１％
‐レモンの抽出物１％
‐乳酸１．５％
‐超高純度の水
【００５９】
被験組成物は、ついで０．１、０．５、および１％（ｖ／ｖ）の濃度でメラニン細胞のインキュベーション培地の中に直接希釈した。
【００６０】
テスト方式：
４歳の若い被験者から得た正常なヒトのメラニン細胞を利用した。該メラニン細胞を８０％のコンフルエンスにいたるまで単層培養した。
【００６１】
基準生成物：
基準のチロシナーゼ阻害剤として、２５０μＭのコウジ酸を使用した。
【００６２】
細胞のインキュベーション：
メラニン細胞は、コウジ酸または濃度を漸増させた被験有効成分（０．１、０．５、１％）の不存在下（対照）または存在下で、湿潤環境および５％ＣＯ2のもと３７℃で７２時間の間インキュベートした。
【００６３】
抗メラニン効果の評価：
１．メラニンの定量：
インキュベート期間の終わりに、細胞内のメラニン量を、細胞溶解の後、４０５ｎｍでの分光測光測定によって定量した。
２．タンパク質の定量：
インキュベート期間の終わりに、細胞溶解産物の中に含まれるタンパク質を、クマシーブルー（Ｂｒａｄｆｏｒｄ  Ｍ．著『Ａｎａｌ．  Ｂｉｏｃｈｅｍ．』１９７６年第７２巻２４８〜２５４ページの方法による）を用いた分光測色法によって定量した。
３．結果：
結果は、対照に対するメラニンのパーセンテージ（平均＋／−ＳＤ（標準偏差））の形で示され、該パーセンテージは、細胞層の全タンパク質の量ｍｇ当たりの細胞内メラニン量μｇで得られる値から計算される。
【００６４】
一要因分散分析（ＡＮＯＶＡ）およびその後のＨｏｌｍ−Ｓｉｄａｋ検定にしたがって「対照」と「被験生成物」の各条件の間で認められる差の統計学的有意性を判定した（＊＝μ＜０．０５）。
【００６５】
ガンマアミノ酪酸を主成分とした組成物を用いて得た結果は、培養細胞の細胞内メラニン量の有意な減少を示す。
【００６６】
０．１％の有効成分を用いて得た値は、有意なものではない。０．５％（−１９．７％）および１％（−２５．４％）の濃度を用いて得た各値は、統計学的に有意である（ｐ＜０．０５）。これらの結果は、図３および表ＩＩＩに示す。
【００６７】
比較として、基準のメラニン形成阻害剤として利用するコウジ酸２５０μＭは、培養した細胞の細胞内メラニン量の有意な減少をもたらす（１５．５％の減少）（ｐ＜０．０５）。
【００６８】
表ＩＩＩに示されるこの結果は、調査方法の有効性を立証するものである。
【００６９】
ガンマアミノ酪酸を主成分とした組成物を用いて得た結果は、用量依存的であり、このことは調査されたパラメータに対する複合成分の特異的な効果を裏付けるものである。
【００７０】
結果
図４および以下の表ＩＩＩにおいて示す結果は、採用された実験条件において、被験複合成分が培養細胞の細胞内メラニン量を有意に減らすことを示す。
０．１％（ｖ／ｖ）の複合成分  →  −１４．１％（ｎｓ）
０．５％（ｖ／ｖ）の複合成分  →  −１９．７％（ｐ＜０．０５）
１％（ｖ／ｖ）の複合成分  →  −２５．４％（ｐ＜０．０５）
【００７１】
【表３】
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【００７２】
ガンマアミノ酪酸または無機酸もしくは有機酸とのその塩またはその誘導体は、乳液、ローション、水中油型乳剤あるいは油中水型乳剤、クリーム、ジェル、および化粧水の中から選ばれる、水性または油性の化粧品組成物の形で利用される。
【００７３】
ガンマアミノ酪酸の濃度は、全組成の０．４から１０重量％の幅広い程度で変動することができる。さらに好ましい濃度は、０．５から５重量％の間を変動する。
【００７４】
ガンマアミノ酪酸が塩または誘導体の形で利用されるとき、利用される量は、塩または誘導体におけるガンマアミノ酪酸含有量を考慮に入れなければならない。ポリフェノールエステルの場合、ガンマアミノ酪酸の濃度は、本発明の化粧品組成物において０．４から１０重量％の間を変動する有効成分含有量を実現するように計算されなければならない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００７５】
【特許文献１】特開平１０−１９４９６０号公報
【特許文献２】米国特許第５８１７６２１号明細書
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【国際調査報告】
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2010511021.tif 000012
2010511021.tif 000013
2010511021.tif 000014
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