(57)【要約】本発明は、ルビジウム−８１を含有する造影組成物の調製に関する。さらに、本発明は、例えば、心筋造影等の画像診断におけるルビジウム−８１含有組成物の使用に関する。１つの局面において、本発明は、放射性非Ｒｂ不純物のないＲｂ−８１を含有する溶液を含む造影組成物を調製する方法を提供する。この方法は、Ｒｂ−８１と結合したカチオン交換材料をカチオン溶液で溶出して樹脂からＲｂ−８１を放出する工程を含む。他の局面において、本発明は、薬学的に許容可能なカチオン溶液中に放射性臭素、マンガン、コバルト等の放射性非Ｒｂ不純物のないＲｂ−８１を含有する薬学的に許容可能な溶液を含む造影組成物を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
実質的に放射性非Ｒｂ不純物のないＲｂ−８１を含有する造影組成物を調製する方法であって、
Ｒｂ−８１と結合したカチオン交換材料を水で洗い放射性非Ｒｂ不純物を除去した後、薬学的に許容可能なカチオン溶液で該カチオン交換混合物を溶出する工程であって、該溶出により該カチオン交換材料からＲｂ−８１を放出する工程を包含する、方法。
【請求項２】
前記薬学的に許容可能なカチオン溶液は等張生理食塩水溶液である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記カチオン交換材料は樹脂ビーズ、ビーズを含む膜、または膜を含む、請求項１〜２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４】
前記カチオン交換材料は、ジビニルベンゼン／スチレンポリマーおよびエチルビニルベンゼンポリマーのうちの少なくとも１つを含む、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
薬学的に許容可能なカチオン溶液中に実質的に非Ｒｂ放射性不純物のないＲｂ−８１を含有する薬学的に許容可能な溶液を含む造影組成物。
【請求項６】
カチオン交換材料上に保持されたＲｂ−８１を含む組成物。
【請求項７】
前記カチオン交換材料は、樹脂ビーズ、ビーズを含む膜、または膜を含む、請求項６に記載の組成物。
【請求項８】
前記カチオン交換材料は、ジビニルベンゼン／スチレンポリマーおよびエチルビニルベンゼンポリマーの少なくとも１つを含む、請求項７に記載の組成物。
【請求項９】
Ｒｂ−８１の薬学的に許容可能な溶液を含む造影組成物の調製方法であって、
（ｉ）濃縮Ｋｒ−８２ガスをサイクロトロン内の標的内に入れる工程と；
（ｉｉ）該サイクロトロン内で該濃縮Ｋｒ−８２ガス標的に放射線照射を行い、放射性Ｒｂ同位体および放射性非Ｒｂ不純物を生成する工程と；
（ｉｉｉ）該標的を水で洗浄して該不純物を含むＲｂ−８１含有水溶液を得る工程と；
（ｉｖ）その結果得られた放射性Ｒｂ含有水溶液をカチオン交換樹脂上に充填する工程と；
（ｖ）該カチオン交換樹脂を水で洗浄して該不純物を除去する工程と；
（ｖｉ）生理学的に許容可能なカチオン溶液で該カチオン交換樹脂を溶出し、該樹脂から放射性Ｒｂを分離する工程と；
（ｖｉｉ）その結果得られた精製Ｒｂ水溶液を回収する工程と；
（ｖｉｉｉ）その結果得られた溶液を滅菌する工程と、
を包含する、方法。
【請求項１０】
工程（ｖｉｉ）の後、前記Ｒｂ−８１含有溶液を工程（ｖｉｉｉ）の前に薬学的に許容可能な希釈剤で希釈する、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記希釈剤は、前記生理学的に許容可能なカチオン溶液の増量分である、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記薬学的に許容可能なカチオン溶液は等張生理食塩水溶液である、請求項９に記載の方法。
【請求項１３】
ＰＥＴまたはＳＰＥＣＴによる画像診断における、実質的に放射性不純物のないＲｂ−８１を含有する薬学的に許容可能なカチオン溶液を含む造影組成物の使用。
【請求項１４】
前記画像は心臓組織の画像である、請求項１３に記載の使用。
【請求項１５】
前記心臓組織は心筋組織である、請求項１４に記載の使用。
【請求項１６】
前記画像は細胞内のカリウムチャネルの画像である、請求項１３に記載の使用。
【請求項１７】
放射性同位体溶出手順を実行する方法であって、
（ｉ）生理学的に許容可能な気体で放射性Ｒｂ−８１を有するカチオン交換樹脂を溶出し、該気体および該放射性Ｒｂ−８１の崩壊によって形成されたＫｒ−８１ｍを含む気体混合物を提供する工程と；
（ｉｉ）続いて、該放射性Ｒｂ−８１が少なくともある程度残留する該カチオン交換樹脂を生理学的に許容可能なカチオン溶液で溶出し、該樹脂から該放射性Ｒｂ−８１を分離する工程と、
を包含する、方法。
【請求項１８】
前記生理学的に許容可能な気体は空気または酸素である、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記生理学的に許容可能なカチオン溶液は等張生理食塩水溶液である、請求項１７に記載の方法。
【請求項２０】
肺撮影用のＫｒ−８１ｍを含有する空気、および心臓撮影用のＲｂ−８１を含有する薬学的に許容可能な溶液を放射性同位体ジェネレーターから連続して得る方法であって、該放射性同位体ジェネレーターは、第１の側および第２の側を有するハウジング、およびそれらの側の間に位置するカチオン交換材料を含み、３本の導管が該ハウジングの第１の側と連通し、１本の導管が該第２の側と連通することによって、
（ａ）Ｋｒ−８１ｍガスを生成するために、該ハウジングの第２の側と連通する導管、および該ハウジングの第１の側と連通する導管のうちの１つを閉じ、該ハウジングの第１の側と連通する残りの２本の導管を開き、該開いた導管の一方を介して該ハウジングに空気を供給して該カチオン交換材料と接触させ、該Ｒｂ−８１の崩壊により形成されたＫｒ−８１ｍを回収し、該開いた導管の他方から該空気を出すことにより、肺撮影に適したＫｒ−８１ｍを充満させた空気を得、その後に
（ｂ）該Ｒｂ−８１含有溶液を生成ために、開いていた該２本の導管を閉じ、閉じていた該２本の導管を開き、該ハウジングの第１の側と連通する開いた導管を介して該ハウジング内に生理学的に許容可能なカチオン溶液を入れることで、該溶液が該カチオン交換膜を通過して該膜からＲｂ−８１を溶出し、そして、その結果得られたＲｂ−８１含有溶液が該第２の側と連通する該導管を介して該ハウジングから出ていく、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
この出願は、特に、放射断層撮影法（ＰＥＴ）または単光子放出コンピュータ断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）による画像診断のための放射性同位体ルビジウム−８１（「Ｒｂ−８１」）の生成および使用に関する。特に、心臓組織（例えば、心筋）の画像診断に適用可能である。
【背景技術】
【０００２】
心疾患においては心筋内のカリウムチャネルに障害が生じる場合があることは公知である。これに対する現在の診断用薬には、代謝マーカー、血流マーカー、またはナトリウム／カリウムＡＴＰアーゼ輸送体と干渉する薬剤がある。他にも明確に規定された種類のカリウムチャネルが公知であり、ルビジウム（カリウムのカチオン置換）は、それらのいくつかを造影するとともに、心機能を評価するための代替的手段を提供することができる。現在まで、心臓組織のＰＥＴ撮影には放射性同位体ルビジウム−８２（「Ｒｂ−８２」）が用いられてきた。しかしながら、この同位体は半減期が非常に短い（７８秒）ため、それを使用する施設でストロンチウム／ルビジウムジェネレーターを溶出することにより得る必要がある。一方、Ｒｂ−８１は半減期が相対的に長い（４．７時間）ため、施設内ジェネレーター、およびＲｂ−８２に必要とされるような複雑な自動注入システムを必要とすることなく、「すぐに使用可能である」ことを特徴とする形態で顧客に届けることができる。
【０００３】
１つの局面では、本発明は、Ｒｂ−８１を高純度形態で調製するための新規な方法であって、例えば、ＰＥＴまたはＳＰＥＣＴ撮影等の撮影を行う患者に安全に投与することができる画像診断組成物への組込みに適した方法を提供する。
【０００４】
半減期が４．７時間のＲｂ−８１は、現在、吸入後に肺血流の研究のために臨床的に用いられる半減期が１３秒の気体クリプトン−８１ｍ（Ｋｒ−８１ｍ）の体内調製における媒介物として生成されている。Ｋｒ−８１ｍの調製に用いる方法は以下の通りである：
サイクロトロンで濃縮クリプトン−８２（Ｋｒ−８２）に放射線照射を行い、この処理によって固体Ｒｂ−８１およびいくらかの不純物を生成する。この結果得られたＲｂ−８１は、前工程の産生物を水で洗浄することにより水溶液として得られる。この水を用いた洗浄によりいくらかの不純物を除去することができるが、放射性Ｂｒ、Ｍｎ、および／またはＣｏ等の特定の放射性非Ｒｂ不純物は、Ｒｂ−８１溶液中に留まることがある。
【０００５】
次いで、Ｒｂ−８１水溶液はカチオン交換樹脂上に吸収され、Ｒｂ−８１がその樹脂の負帯電スルホン酸基に対する結合親和力により当該樹脂と結合する。上述したような不純物は樹脂上に保持され、その樹脂から水で洗い流すことができる。使用する樹脂は、一般に、ジビニルベンゼン−スチレンポリマーまたはエチルビニルベンゼンポリマー等の有機樹脂である。
【０００６】
次いで、カチオン交換樹脂を水で洗浄し、ＫｒｙｐｔｏＳｃａｎＴＭジェネレーター等の適切な放射性同位体ジェネレーター内に配置する。次いで、このジェネレーターを脱気し、ジェネレーターから排出された気体が、Ｒｂ−８１の自然崩壊産物である放射性Ｋｒ−８１ｍガスを含むようにする。次いで、この気体Ｋｒ−８１ｍを含む空気を患者に吸入投与し、ガンマシンチグラフィーによる呼吸器官の撮影に用いることができる。
【０００７】
現在、我々は、Ｋｒ−８１ｍガス産生時のような脱気ではなく、Ｒｂ−８１が結合するイオン交換樹脂をカチオン溶液で洗浄すれば、Ｒｂ−８１が樹脂から放出されることを見出している。カチオン溶液が薬学的に許容可能であれば、樹脂から溶出したＲｂ−８１含有溶液を、必要であれば、生理食塩水（０．９％ＮａＣｌ）等の薬学的に許容可能な希釈剤で希釈し、滅菌した後、公知の技術を用いた画像診断（例えば、ＰＥＴおよび／またはＳＰＥＣＴ）のために患者に直接投与することができる。
【０００８】
よって、この発明は、カチオン交換樹脂に結合した不要な放射性不純物を除去することで薬学的に許容可能な造影組成物として用いることができるＲｂ−８１溶液を得るための手順を提供する。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００９】
それゆえ、本発明の１つの局面に従って、我々は、放射性非Ｒｂ不純物のないＲｂ−８１を含有する溶液を含む造影組成物を調製する方法を提供する。この方法は、Ｒｂ−８１と結合したカチオン交換材料をカチオン溶液で溶出して樹脂からＲｂ−８１を放出する工程を含む。
【００１０】
上記放射性非Ｒｂ不純物は、放射性臭素、放射性マンガン、および放射性コバルトのうちの１つ以上を含んでもよい。
【００１１】
上記薬学的に許容可能なカチオン溶液は、例えば、等張生理食塩水溶液（本明細書中では「生理食塩水」と呼ぶ）であってもよい。
【００１２】
上記カチオン交換材料は、ビーズを含む樹脂、ビーズを含む膜、または膜であってもよい。適切なカチオン交換樹脂としては、例えば、エチルビニルベンゼンポリマーまたはジビニルベンゼン／スチレンポリマーがある。適切な樹脂の例としては、Ｄｏｗｅｘ（例えば、Ｍｏｎｏｓｐｈｅｒｅ  Ｍａｒａｔｈｏｎビーズ）、ＰＲＰ−Ｘ  ８００、およびＯｍｎｉｐａｃ  ＰＣＸという商標名のものが入手可能である。
【００１３】
本発明の他の局面に従って、我々は、薬学的に許容可能なカチオン溶液中に放射性臭素、マンガン、コバルト等の放射性非Ｒｂ不純物のないＲｂ−８１を含有する薬学的に許容可能な溶液を含む造影組成物を提供する。
【００１４】
本発明のさらなる局面に従って、我々は、所与の量のＲｂ−８１がカチオン交換材料上に保持された組成物も提供する。放射性非Ｒｂ不純物のないＲｂ−８１を含有する薬学的に許容可能な溶液を含む造影組成物を得るために、Ｒｂ−８１が結合したカチオン交換材料を水で洗浄し放射性非Ｒｂ不純物を除去した後、その結果得られたカチオン交換混合物を薬学的に許容可能なカチオン溶液で溶出し、この溶出によりカチオン交換材料からＲｂ−８１を放出することができる。Ｒｂ−８１が結合したカチオン交換材料は、前述した材料のいずれであってもよい。
【００１５】
本発明のさらに他の局面に従って、我々は、ＰＥＴまたはＳＰＥＣＴによる画像診断における放射性非Ｒｂ不純物を実質的に有さないＲｂ−８１を含有する薬学的に許容可能なカチオン溶液を含む造影組成物の使用を提供する。
【００１６】
本発明のさらなる局面に従って、我々は、Ｒｂ−８１の薬学的に許容可能な溶液を含む造影組成物の調製方法を提供する。この方法では、濃縮Ｋｒ−８２ガスをサイクロトロンに入れ、サイクロトロン内で放射線照射を行うことにより固体Ｒｂ−８１および放射性非Ｒｂ不純物を生成する。この結果得られた産生物を水で洗浄し、一般に上記放射性非Ｒｂ不純物を少なくともある程度含むＲｂ−８１含有水溶液を得る。次いで、その結果得られたＲｂ−８１含有水溶液をカチオン交換樹脂上に充填した後、カチオン交換樹脂を水で洗浄してカラムから残留する放射性非Ｒｂ不純物を除去する。その後、生理学的に許容可能なカチオン溶液でカチオン交換樹脂を溶出し、樹脂からＲｂ−８１を分離する。次いで、その結果得られたＲｂ−８１水溶液を回収する。所望であれば、その結果得られたＲｂ−８１水溶液を薬学的に許容可能な希釈剤で希釈してもよい。さらに、その結果得られたＲｂ−８１水溶液および／またはその希釈液を滅菌してもよい。
【００１７】
本発明の上述の方法は、上述したように異なる方法でＫｒ−８１ｍの産生に用いられるＫｒｙｐｔｏＳｃａｎＴＭジェネレーターを用いて実施してもよい。ＫｒｙｐｔｏＳｃａｎＴＭジェネレーターにカチオン交換樹脂を充填し、その樹脂が上記で示したようなＲｂ−８１を吸収すると、ジェネレーターを脱気することによってＫｒ−８１ｍを得ることができる。Ｋｒ−８１ｍの半減期は１３秒しかないため、患者が吸入する直前に生成しなければならなず、そのため、撮影を実施する施設にジェネレーターを配置しなければならない。
【００１８】
しかしながら、本発明において用いる場合には、結合させたＲｂ−８１を入れたＫｒｙｐｔｏＳｃａｎＴＭジェネレーターを脱気する代わりに、等張生理食塩水等の薬学的に許容可能なカチオン溶液で溶出し、心筋異常に関するＰＥＴまたはＳＰＥＣＴ検査においてオートクレービング後に患者に対して投与可能なＲｂ−８１を含有する生理学的に許容可能な溶液の調製を可能にする。一方、Ｒｂ−８１はＲｂ−８２よりも遥かに長い半減期を有するため（１．３分に対して４．７時間）、最終的に使用する施設でＲｂ−８１を生成する必要はない。代替的には、一箇所で一元的に製造を行い、すぐに使用可能な溶液として最終利用者に届けることができる。よって、比較的に大規模な工場、およびＫｒｙｐｔｏＳｃａｎＴＭジェネレーター等の小型ジェネレーターにおいてＲｂ−８１ｍを生成することが可能である。滅菌溶液を静脈内投与することで、Ｒｂ−８１によってＲｂ−８２と同様に心筋を造影することができる。
【００１９】
本発明のさらなる局面に従って、我々は、放射性同位体溶出手順を実行する方法であって、
（ｉ）生理学的に許容可能な気体で放射性Ｒｂ−８１を有するカチオン交換樹脂を溶出し、上記気体および上記放射性Ｒｂ−８１の崩壊によって形成されたＫｒ−８１ｍを含む気体混合物を提供する工程と；
（ｉｉ）続いて、上記放射性Ｒｂ−８１が少なくともある程度残留する上記カチオン交換樹脂を生理学的に許容可能なカチオン溶液で溶出し、上記樹脂から上記放射性Ｒｂ−８１を分離する工程と、
を包含する、方法を提供する。
【００２０】
本発明のさらなる局面に従って、我々は、肺撮影用のＫｒ−８１ｍを含有する空気、および心臓撮影用のＲｂ−８１を含有する薬学的に許容可能な溶液を放射性同位体ジェネレーターから連続して得る方法であって、上記放射性同位体ジェネレーターは、第１の側および第２の側を有するハウジング、およびそれらの側の間に位置するカチオン交換材料を含み、３本の導管が上記ハウジングの第１の側と連通し、１本の導管が上記第２の側と連通することによって、
（ａ）Ｋｒ−８１ｍガスを生成するために、上記ハウジングの第２の側と連通する導管、および上記ハウジングの第１の側と連通する導管のうちの１つを閉じ、上記ハウジングの第１の側と連通する残りの２本の導管を開き、上記開いた導管の一方を介して上記ハウジングに空気を供給して上記カチオン交換材料と接触させ、上記Ｒｂ−８１の崩壊により形成されたＫｒ−８１ｍを回収し、上記開いた導管の他方から上記空気を出すことにより、肺撮影に適したＫｒ−８１ｍを充満させた空気を得、その後に
（ｂ）上記Ｒｂ−８１含有溶液を得るために、開いていた上記２本の導管を閉じ、閉じていた上記２本の導管を開き、上記ハウジングの第１の側と連通する開いた導管を介して上記ハウジング内に生理学的に許容可能なカチオン溶液を入れることで、上記溶液が上記カチオン交換膜を通過して上記膜からＲｂ−８１を溶出し、その結果得られたＲｂ−８１含有溶液が上記第２の側と連通する上記導管を介して上記ハウジングから出ていく、方法を提供する。
【００２１】
次に、添付の図面を参照して本発明の実施形態を例示する。
【００２２】
図１は、放射性同位体Ｒｂ−８１を充填する樹脂ビーズ（２４）を含むカチオン交換材料を入れた放射性同位体ジェネレーター（２１）を模式的に示す。第１の矢印（２２）で示すように、カチオン溶液（例えば、生理食塩水）をジェネレーターに入れると、Ｒｂ−８１が樹脂ビーズから溶出され、第２の矢印（２３）で示すように、Ｒｂ−８１を含有する水溶液がジェネレーターから出て行く。必要であれば、この溶液を、例えば、オートクレービングで滅菌したさらなる生理食塩水等の薬学的に許容可能な材料で希釈してから、例えば、ＰＥＴまたはＳＰＥＣＴ法による心臓撮影の前に静脈注射によって患者に投与してもよい。
【００２３】
図２は、市販されるＫｒｙｐｔｏＳｃａｎＴＭジェネレーターの内部コンポーネントを点線で示した平面図および側面図を示す。有害な放射性材料を入れるため、ジェネレーターは鉛で遮蔽している（図示せず）。
【００２４】
図３により詳細に示すように、ジェネレーターはカチオン交換膜（４）上に膜支持部（３）を備えており、これらはともにハウジング（２）内に保持される。ハウジング（２）は注入側（１３）および排出側（１４）を有しており、開閉可能な弁（それぞれ、７ａ、７ｂ）を備えたプラスティック材料で構成される２本の管（１０ａ、１０ｂ）が、図２に示すように、左側からハウジング（２）の注入側（１３）に入る。他にも同様の管（１２）がハウジング（２）の注入側（１３）に通じているが、図２に示すように右側から入っている。
【００２５】
さらに同様の管（１１）が、図２に示すように、右側からハウジング（２）に入っているが、排出側（１４）と連通している。管（１１）および（１２）にはまた、それぞれ、開閉可能な弁（１５）および（１６）が設けられている。
【００２６】
図２および図３に示すＫｒｙｐｔｏＳｃａｎＴＭジェネレーターは、肺撮影用Ｋｒ−８１ｍガスの調製、および心臓撮影用Ｒｂ−８１含有溶液の生成の両方に用いることができる。
【００２７】
Ｋｒ−８１ｍガスの生成に用いる場合、管（１１）および（１２）は、カチオン交換膜（４）にＲｂ−８１を充填するためだけに用いられる。これを行うために、管（１２）を介してハウジング（２）内にＲｂ−８１溶液を入れ、溶液が管（１１）を通ってハウジング（２）から出始めた時点で充填を終了する。次いで、ハウジング（２）を加熱して膜（４）を乾燥させる。
【００２８】
Ｋｒ−８１ｍガスは、弁（７ａ）および（７ｂ）を開き、（１５）および（１６）を閉じた状態で、管（１０ａ）または（１０ｂ）の一方を介して空気を入れることによって生成される。この空気は、膜（４）上を通過する際にＫｒ−８１ｍ（Ｒｂ−８１の崩壊産物）で満たされ、他方の管（１０ｂ）または（１０ａ）を介してハウジングから出る。
【００２９】
あるいは、Ｒｂ−８１水溶液を得るために、弁（７ａ）および（７ｂ）を閉じ、弁（１５）および（１６）を開く。管（１２）を介してハウジング（２）の注入側（１３）に生理学的に許容可能なカチオン溶液（例えば、生理食塩水）を入れ、膜（４）を通過した時点で膜からＲｂ−８１を溶出し、その結果得られたＲｂ−８１を含有する溶出液が管（１１）を介してハウジング（２）の排出側（１４）から出て行く。溶液中のＲｂ−８１の濃度が高すぎて患者に投与できない場合、必要に応じて生理食塩水等の生理学的に許容可能な希釈剤で希釈する。生理学的に許容可能なカチオン材料および希釈剤の両方が生理食塩水であることが好ましい。所望の濃度のＲｂ−８１を有する溶液が得られると、オートクレービングで滅菌することで心臓撮影を行う患者に対する静脈注射の準備が完了する。
【００３０】
本発明の重要な特徴は、最初にＫｒ−８１ｍガスを得た後、同じＫｒｙｐｔｏＳｃａｎＴＭジェネレーターを用いてＲｂ−８１を含有するカチオン溶液を得ることである。
【００３１】
Ｋｒ−８１ｍは、弁（１５）および（１６）を閉じ、弁（７ａ）および（７ｂ）を開き、上述した装置を介して空気を通すことにより得られる。
【００３２】
当然ながら、Ｋｒ−８１ｍの産生が完了した後に未崩壊のＲｂ−８１が十分に残っている場合には、同じジェネレーターを用いて、弁（７ａ）および（７ｂ）を閉じ、弁（１５）および（１６）を開き、管（１２）を介してハウジング内にカチオン溶液を入れ、管（１１）を介してＲｂ−８１を含有するカチオン溶液を回収することによりＲｂ−８１を含有する溶液を得てもよい。
【００３３】
これは、Ｒｂ−８１で満たされた膜を再充填するために供給業者に戻す前に単体装置（例えば、ＫｒｙｐｔｏＳｃａｎＴＭジェネレーター）を２つの異なる手順に連続して用いることができるため、本発明の重要な利点である。
【００３４】
次に、単なる例示のみを目的とするとともに、発明の範囲のいかなる限定も目的としない以下の実施例を参照して本発明をさらに説明する。
【実施例】
【００３５】
（実施例１）
生理的食塩を用いたＲｂ／Ｋｒジェネレーターの溶出
８１Ｒｂを充填した公称値が１８５ＭＢｑの３つの８１Ｒｂ−８１ｍＫｒジェネレーターを５×１ｍｌ生理的食塩を用いて溶出した。低真空下において５ｍｌ／分のポンプ速度で溶出を行った。
【００３６】
下記の８１Ｒｂの溶出プロフィールをガンマ線量較正器を用いて決定した：
【００３７】
【化１】
2010530522.tif 000002
ａ２００５年１０月６日および７日のＧｅ／Ｌｉデータから、誤差＝±１０％。
【００３８】
較正時の溶出液の同位体成分：
【００３９】
【化２】
2010530522.tif 000003
ｂ２００５年１０月６日、７日、および１０日のデータ
ｃ２００５年１０月７日および１０日のデータ。
【００４０】
図４〜図６にスペクトルの一例を示す。
【００４１】
（実施例２）
Ｒｂ−８１を用いた動物実験を実施し以下を行った：
１）ラットにおけるＲｂ−８１の生体内分布（すなわち、ラットの心臓におけるＲｂ−８１の取り込み動態および保持）；
２）小型動物用ＰＥＴスキャナーを用いたラットの心臓撮影；
３）生体内閉塞／再潅流ラットの心臓モデルにおけるＲｂ−８１の取り込み動態；および
４）生体外閉塞／再潅流ラットの心臓モデルにおけるＴｌ−２０１再分配とＲｂ−８１再分配の比較。
【００４２】
材料および方法
ａ）Ｒｂ−８１
等張生理食塩水を用いてＫｒ−８１／Ｒｂ−８１ジェネレーターからＲｂ−８１を溶出し、さらなる精製または除菌を行うことなく用いた。
【００４３】
ｂ）ラットにおけるＲｂ−８１の生体内分布
１．８５〜５．３３ＭＢｑ（５０〜１４４μＣｉ）Ｒｂ−８１を入れた２５０μｌ等張生理食塩水を、体重が１８０〜２２０ｇの非絶食雌ウィスターラット２４匹の側尾静脈に注入した（１２頭／日）。
【００４４】
Ｒｂ−８１溶液の注入時に、イソフルラン（ｉｓｏｆｌｕｒａｎ）（１．５ｖｏｌ．％および２．０ｌ／分Ｏ２）を用いて全ての動物に麻酔をかけた。Ｒｂ−８１溶液を注入した５分後、１０分後、２０分後、３０分後、４５分後、１時間後、２時間後、および４時間後に、それらの動物を炭酸ガス吸入により屠殺した（全ての時点のｎ＝３頭）。
【００４５】
対象器官（心臓、血液、肺、肝臓、胃、脾臓、膵臓、小腸、結腸、腎臓、副腎、筋肉、骨、脳、および尾）の切開、重量測定を行い、井戸型ｇ−カウンタを用いて活量測定を行った。トレーサー蓄積量を器官重量に対して正規化した。全てのデータについて組織１グラム毎の注入量をパーセントで表した（％ＩＤ／ｇ、平均±ＳＤ）。
【００４６】
ｃ）小動物用ＰＥＴスキャナーを用いたラットの心臓撮影
ＰＥＴ測定のために、ｍｉｃｒｏＰＥＴ  ＦＯＣＵＳ  １２０小動物用スキャナー（Ｓｉｅｍｅｎｓ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ  ＵＳＡ，Ｉｎｃ．）を用いた。４匹の雌ウィスターラット（２００〜２５０ｇ）の撮影を行った（表１参照）。１３．９ＭＢｑのＲｂ−８１と、３６．１ＭＢｑのＲｂ−８１を入れた５００μｌ等張生理食塩水の注入時およびその５分後に２匹のラット（１頭／日）に左冠状動脈閉塞（圧迫）が生じた。５分後、閉塞を除去し、それらの動物のＰＥＴ動画撮影を４時間および２時間行った。２匹のラットを閉塞がない（安静）対照として用いた。１匹目のラットには２０．２ＭＢｑのＲｂ−８１を入れた５００μｌ等張生理食塩水を注入し、２匹目のラットには６９．３ＭＢｑのＲｂ−８１を入れた５００μｌ等張生理食塩水を注入した。注入後、それらの動物のＰＥＴ動画撮影を４時間（Ｓ１＃１  ｕｎｄ  Ｓ１＃２）および２時間（Ｓ２＃３およびＳ２＃４）行った。Ｒｂ−８１溶液を全ての動物の側尾静脈に静脈内注入した。閉塞については、小型曲針で左冠状動脈（ＬＣＡ）に７−０ポリプロピレン縫合糸を通し、結紮してＬＣＡを閉塞した。トレーサー注入後、縫合糸を切断して再潅流させた。ＬＣＡ閉塞および再潅流については、心筋表面の変色により確認した。
【００４７】
閉塞時およびその後のＲｂ−８１溶液の注入時に、３３．７５μｇ／ｋｇメデトミジン、０．４５ｍｇ／ｋｇミダゾラム、および１．１２５μ／ｋｇフェンタニルの可逆的３重麻酔で閉塞を有するラットに麻酔をかけた。ＰＥＴ撮影時に４匹のラット全てにイソフルラン麻酔（２．０ｖｏｌ．％および２．０ｌ／分Ｏ２）をかけた。
【００４８】
ＰＥＴ撮影後、炭酸ガス吸入により全ての動物を屠殺し、対象器官（上記参照）の切開、重量測定を行い、井戸型ｇ−カウンタを用いて活量測定測定を行った。トレーサー蓄積量を器官重量に対して正規化した。全てのデータについて組織１グラム毎の注入量をパーセントで表す（％ＩＤ／ｇ、平均値±ＳＤ）。
【００４９】
【化３】
2010530522.tif 000004
。
【００５０】
ｄ）データの取得
正常なラットに麻酔をかけ、スキャナー内に配置した。点光源による透過測定を行った後、Ｒｂ−８１を台上で注入した。閉塞プロトコルに沿った動物を、再潅流を開始した後にスキャナー内に配置した。続いて、測定を開始した（イソフルラン麻酔への切換を伴う）。撮影プロトコルを図７に示す。
【００５１】
ｅ）生体外二重トレーサーオートラジオグラフィ
さらに３匹のラットに２０ＭＢｑのＲｂ−８１と、２．７ＭＢｑのＴｌ−２０１を同時に注入した。閉塞／注入／再潅流手順が完了した後（図８参照）、再潅流を開始してから０分後、１５分後、および４５分後にそれらの動物を屠殺した。
【００５２】
動物の心臓を取り出し液体窒素で新鮮凍結した後、それらを短軸方向に２０μｍの薄片にスライスした。組織切片の放射能を蛍光イメージャを用いて判定した。Ｒｂ−８１が薄片を用意した直後から３時間測定された一方で、Ｒｂ−８１の活動がほぼ終了した後にＴＬ−２０１活性を判定した（Ｒｂ−８１：ｔ１／２＝４．５８時間に対して４日間の崩壊期間）。
【００５３】
正常組織部分および閉塞組織部分の両方における関心領域内での検出数を比較して定量的評価を行った。比較は正常な心臓組織の割合で示す。
【００５４】
結果
１．ラットにおけるＲｂ−８１の生体内分布
尾静脈に対する１３１〜１４４μＣｉ（４．８５〜５．３３ＭＢｑ）のＲｂ−８１の適用後の各種時間間隔における雌ウィスターラットの生体内分布（各時点につきｎ＝３頭）を示す図９〜図１１を参照する。
【００５５】
表２は、尾静脈に対するＲｂ−８１の適用から５分後、１０分後、２０分後、および３０分後の雌ウィスターラットにおける生体内分布実験（各時点につきｎ＝３頭）の概略を示す。
【００５６】
表２
尾静脈に対するＲｂ−８１の適用から５分後、１０分後、２０分後、および３０分後の雌ウィスターラットにおける生体内分布実験（各時点につきｎ＝３頭）の概略
【００５７】
【化４】
2010530522.tif 000005
。
【００５８】
表３は、尾静脈に対するＲｂ−８１の適用から４５分後、１時間後、２時間後、および４時間後の雌ウィスターラットにおける生体内分布実験（各時点につきｎ＝３頭）の概略を示す。
【００５９】
表３
尾静脈に対するＲｂ−８１の適用から４５分後、１時間後、２時間後、および４時間後の雌ウィスターラットにおける生体内分布実験（各時点につきｎ＝３頭）の概略
【００６０】
【化５】
2010530522.tif 000006
。
【００６１】
２．小動物用ＰＥＴスキャナーを用いたラットの心臓撮影
ＰＥＴ測定のために、ｍｉｃｒｏＰＥＴ  ＦＯＣＵＳ  １２０小動物用スキャナー（Ｓｉｅｍｅｎｓ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ  ＵＳＡ，Ｉｎｃ．）を用いた。４匹の雌ウィスターラット（２００〜２５０ｇ）の撮影を行った（表１参照）。図１３〜図１５に画像を示す。
【００６２】
図１３は、心筋における８１−ＲＢの取り込み量が投与後すぐに最大になることを示す。
【００６３】
図１４は、正常な心筋における取り込み量を経時的に示す。
【００６４】
図１５は、ＬＡＣの一時的な閉塞が行われた動物を示す。閉塞の再開通後４０〜５０分の間、異常部位の充填が生じる（８１−ＲＢの再分布）。
【００６５】
３．生体外閉塞／再潅流ラットの心臓モデルにおけるＴＬ−２０１とＲｂ−８１の再分布動態の比較
最初の測定から４日後にＲｂ−８１活性（注入時点では２０ＭＢｑ）がほぼ完全に減衰すると仮定すると、組織片上の残留ＴＬ−２０１活性（注入時点では２．７ＭＢｑ）は、この同位体の注入後０分、１５分、および４５分の再潅流を表す。対照的に、蛍光イメージャ画面の早期像は、主に、Ｒｂ−８１活性分布を表す。
【００６６】
図２２に示すように、注入後０分および１５分の閉塞部分は鮮明に描写することができる一方、４５分の後期像は、Ｒｂ−８１の再分布が進行していることを示す。Ｔｌ−２０１の再分布は、同時点においてすでに相当なレベルに達しているが、Ｒｂ−８１の再分布動態が大幅に速いことが分かった。
【００６７】
心臓の正常部分および閉塞部分に設定された関心領域（ＲＯＩ）における活性判定により定量的関係を求めた。定量的データは、閉塞部分におけるＴｌ−２０１活性が、注入後０分、１５分、および４５分に、それぞれ、正常組織における取り込み量の５％、２８％、および５８％に達したことを明らかにした。対照的に、Ｒｂ−８１の取り込み量は閉塞部分では幾分高く、再分布がより速いことが示された（注入後０分、１５分、および４５分において、それぞれ、７％、３７％、および８２％）。
【００６８】
結論として、Ｒｂ−８１は、ＰＥＴを用いた冠動脈疾患患者において負荷および遅延再分布プロトコルによる心筋の生存能力評価を可能にする長期間に渡るトレーサー蓄積を評価できる独特なＰＥＴトレーサーである。
【図面の簡単な説明】
【００６９】
【図１】図１は、Ｒｂ−８１を充填したカチオン交換樹脂の溶出を示す単純ブロック図である。
【図２】図２は、Ｒｂ−８１含有溶液の生成におけるＫｒｙｐｔｏＳｃａｎＴＭジェネレーターの使用を示す。
【図３】図３は、図１に示すジェネレーターの一部の拡大部分を２段階で示す。
【図４】図４は、２００５年１０月４日におけるジェネレーター１の留分５のスペクトルを示す。
【図５】図５は、２００５年１０月５日におけるジェネレーター１の留分１のスペクトルを示す。
【図６】図６は、２００５年１０月１０日におけるジェネレーター１の留分１のスペクトルを示す。
【図７】図７は、実施例２で用いる閉塞／再潅流プロトコルに従って計画されたＡ）正常なラットおよびＢ）動物の撮影プロトコルを示す。
【図８】図８は、実施例２で用いる生体外オートラジオグラフィのプロトコルを示す。
【図９】図９は、尾静脈に対する１３１〜１４４μＣｉ（４．８５〜５．３３ＭＢｑ）のＲｂ−８１の適用から１０分後（左側の棒）、３０分後（左から２番目の棒）、６０分後（左から３番目の棒）、および４時間後（右側の棒）の雌ウィスターラットにおける生体内分布（各時点につきｎ＝３頭）を示す。
【図１０】図１０は、尾静脈に対する５０〜１３７μＣｉ（１．８５〜５．８７ＭＢｑ）のＲｂ−８１の適用から５分後（左側の棒）、２０分後（左から２番目の棒）、４５分後（左から３番目の棒）、および２時間後（右側の棒）の雌ウィスターラットにおける生体内分布（各時点につきｎ＝３頭）を示す。
【図１１】図１１は、尾静脈に対する１．８５〜５．８７ＭＢｑのＲｂ−８１の適用から５分後、１０分後、２０分後、３０分後、４５分後、１時間後、２時間後、４時間後（左から右）の雌ウィスターラットにおける生体内分布実験（各時点につきｎ＝３頭）の概略を示す。
【図１２】図１２は、動物Ｓ２＃３の横断ＰＥＴ総合画像を示す。
【図１３】図１３は、動物Ｓ２＃３の心臓の短軸総合画像を示す。
【図１４】図１４は、閉塞／再潅流後の動物（動物Ｓ２＃４、詳細については材料および方法の項目を参照されたい）の心臓の短軸総合画像を示す。
【図１５】図１５は、再潅流開始直後に用意した２０μｍの心臓薄片のオートラジオグラフィ、ならびに再潅流開始後１５分および４５分のオートラジオグラフィを示す。
【図１６】図１６は、閉塞心臓組織と正常心臓組織におけるＲｂ−８１とＴｌ−２０１の取り込みの定量的比較を正常心臓組織における取り込みのパーセントで表す。
【図１７】図１７である。
【図１８】図１８である。
【図１９】図１９である。
【図２０】図２０である。
【図２１】図２１である。
【図２２】図２２である。
【図２３】図２３である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【国際調査報告】
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