(57)【要約】  本発明は、高次挙動を担う脳ネットワーク内のシナプスでの受容体機能の増強など、脳機能不全の予防および治療に関する。これらの脳ネットワークは、記憶障害に関連する認知能、例えば様々な認知症、および異なる脳領域間の神経活動の不均衡で観察されるもの、パーキンソン病、統合失調症、および情動障害などの障害で示唆されるものなどに関与する。特定の態様において、本発明は、そのような状態の処置に有用な化合物、およびそのような処置のためにこの化合物を使用する方法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：
【化６】
2010514838.tif 000007
で示される化合物または酸もしくは塩基の薬学的に許容され得るその付加塩。
【請求項２】
８−シクロプロピル−３−［２−（３−フルオロフェニル）エチル］−７，８−ジヒドロ−３Ｈ−［１，３］オキサジノ［６，５−ｇ］［１，２，３］ベンゾトリアジン−４，９−ジオン、または酸もしくは塩基の薬学的に許容され得るその付加塩である、請求項１記載の式で示される化合物。
【請求項３】
低グルタミン酸作動性状態、または興奮性シナプスの数もしくは強度の欠損、またはＡＭＰＡ受容体数の欠損により、記憶または他の認知機能が障害を受けたほ乳類対象に、薬学的に許容され得る担体中の、請求項１または２のいずれか記載の化合物の有効量を投与することを含む、ほ乳類対象の処置方法。
【請求項４】
低グルタミン酸作動性状態、または興奮性シナプスの数もしくは強度の欠損、またはＡＭＰＡ受容体数の欠損により、皮質／線条体不均衡が生じて、統合失調症または統合失調症様挙動をきたしたほ乳類対象に、薬学的に許容され得る担体中の、請求項１または２のいずれか記載の化合物の有効量を投与することを含む、ほ乳類の処置方法。
【請求項５】
前記状態が、統合失調症である、請求項４記載の方法。
【請求項６】
前記状態が、パーキンソン病である、請求項３記載の方法。
【請求項７】
前記状態が、アルツハイマー病である、請求項３記載の方法。
【請求項８】
請求項１〜２のいずれか記載の化合物の有効量を、薬学的に許容され得る担体、添加剤または賦形剤と共に含む医薬組成物。
【請求項９】
前記化合物が、前記組成物の約０．５〜約７５重量％含まれ、前記担体、添加剤または賦形剤が、前記組成物の約２５〜約９５．５％含まれる、請求項８記載の組成物。
【請求項１０】
低グルタミン酸作動性状態、または興奮性シナプスの数もしくは強度の欠損、またはＡＭＰＡ受容体数の欠損により、記憶または他の認知機能が障害を受けたほ乳類対象の処置に使用される医薬の製造における、請求項１〜２のいずれか記載の化合物の使用。
【請求項１１】
統合失調症の処置に使用される医薬の製造における、請求項１および２のいずれか記載の化合物の使用。
【請求項１２】
パーキンソン病の処置に使用される医薬の製造における、請求項１および２のいずれか記載の化合物の使用。
【請求項１３】
ＡＤＨＤの処置に使用される医薬の製造における、請求項１および２のいずれか記載の化合物の使用。
【請求項１４】
レット症候群の処置に使用される医薬の製造における、請求項１および２のいずれか記載の化合物の使用。
【請求項１５】
脆弱Ｘ症候群の処置に使用される医薬の製造における、請求項１および２のいずれか記載の化合物の使用。
【請求項１６】
アルツハイマー病の処置用の医薬の製造における、請求項１および２のいずれか記載の化合物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
【０００２】
本発明は、高次挙動を担う脳ネットワーク内のシナプスでの受容体機能の増強など、脳機能不全の予防および治療に使用される化合物、医薬組成物および方法に関する。これらの脳ネットワークは、認知能に関与し、記憶障害、例えば加齢および様々な認知症、異なる脳領域間の神経活動の不均衡で観察されるもの、パーキンソン病、統合失調症、注意欠陥および情動または気分障害など、ならびに向神経性因子の欠損が関与する障害において示唆されるものに関連する。特定の態様において、本発明は、そのような状態の処置に有用な化合物、およびそのような処置にこれらの化合物を使用する方法に関する。
【０００３】
関連出願
【０００４】
本願は、２００７年１月３日に出願された米国仮出願ＵＳ６０／８７８，５０３および２００７年４月２日に出願されたＵＳ６０／９２１，４３３の優先権の利益を主張するものであり、それらの出願の関連部分は、本明細書に参考として援用される。
【０００５】
発明の背景
【０００６】
ほ乳類前脳の多くの部位にあるシナプスでのグルタミン酸放出は、２つの分類のシナプス後イオンチャネル型受容体を刺激する。これらの分類は、通常、ＡＭＰＡ／キスカル酸受容体およびＮ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸（ＮＭＤＡ）受容体と呼ばれる。ＡＭＰＡ／キスカル酸受容体は、電位非依存性の高速興奮性シナプス後電流（高速ＥＰＳＣ）を仲介するが、ＮＭＤＡ受容体は、電位依存性の緩徐興奮性電流を発生させる。海馬または皮質の切片において実施された試験では、ＡＭＰＡ受容体を介した高速ＥＰＳＣが、一般に、ほとんどのグルタミン酸作動性シナプスではるかにドミナントな成分であることが示された。
【０００７】
ＡＭＰＡ受容体は、脳全域に均等に分布しているのではなく、むしろ終脳および小脳に大きく限定される。これらの受容体は、Brain Research 324:160-164 (1984)においてMonaghan et alにより報告されたとおり、新皮質の表層、海馬の主なシナプスゾーンのそれぞれ、および線条体複合体に高濃度で見出される。動物およびヒトでの試験では、これらの構造が、複雑な知覚−運動過程を組織して、高次挙動の基質を提供することが示された。つまり、ＡＭＰＡ受容体は、認知活動のホストを担うそれらの脳ネットワーク内の伝達を仲介する。
【０００８】
先に示された理由から、ＡＭＰＡ受容体を調節し、それによりその受容体の機能を増強する薬物が、認知および知的パフォーマンスへの顕著な利益を有する可能性がある。そのような薬物は、記憶のコード化も促進するはずである。実験的研究、例えば、Arai and Lynch, Brain Research 598:173-184(1992):173-184 (1992)に報告されたもので、ＡＭＰＡ受容体介在性シナプス応答のサイズが大きくなると、長期増強（ＬＴＰ）の誘導が高まることが示された。ＬＴＰは、シナプス接触の強度の安定的増加であり、学習時に脳に生じることが公知のある型の反復生理活性を起こす。
【０００９】
グルタミン酸受容体のＡＭＰＡ形態の機能を増強する化合物は、多数のパラダイムで測定されたとおり、げっ歯類およびヒトにおけるＬＴＰの誘導および学習タスクの取得を促進する。例えば、Granger et al., Synapse 15:326-329 (1993); Staubli et al., PNAS 91:777-781 (1994); Arai et al., Brain Res. 638:343-346 (1994); Staubli et al., PNAS 91; 11158-11162 (1994); Shors et al., Neurosci. Let. 186: 153-156 (1995); Larson et al., J. Neurolosci. 15:8023-8030(1995); Granger et al., Synapse 22:332-337(1996); Arai et al., JPET 278：627-638(1996); Lynch et al., Internat. Clin. Psychopharm. 11: 13-19(1996); Lynch et al., Exp. Neurology 145: 89-92 (1997); Ingvar et al., Exp. Neurology 146: 553-559 (1997); Hampson, et al., J. Neurosci. 18: 2748-2763 (1998); Porrino et al., PLoS Biol 3(9):1-14 (2006)およびLynch and Rogers,米国特許第５，７４７，４９２を参照されたい。ＬＴＰが記憶の基質であることを示すかなり大量の証拠が存在する。例えば、Cerro and Lynch, Neuroscience 49;1-6 (1992)に報告されたとおり、ＬＴＰを遮断する化合物は、動物の記憶形成を妨害し、ヒトの学習を崩壊させる特定の薬物は、ＬＴＰの安定化と競合する。単純なタスクの学習は、海馬にＬＴＰを誘導して、高頻度刺激により生じたＬＴＰを封鎖し（Whitlock et al., Science 313: 1093-1097 (2006)）、ＬＴＰを保持するメカニズムは、空間記憶を持続させる（Pastalkova, et al., Science 313: 1141-1144 (2006)）。学習の分野で非常に重要なことは、ポジティブＡＭＰＡ型グルタミン酸受容体モジュレータでのインビボ処置が、中年期動物の基底樹状突起ＬＴＰの安定化を回復させるという発見である（Rex et al., J. Neurophysiol. 96: 677-685 (2006)）。
【００１０】
興奮性シナプス伝達は、向神経性因子を特異的脳領域内で増加させる主な経路を提供する。こうして、モジュレーターによるＡＭＰＡ受容体機能の強化が、ニューロトロフィン（詳細には、脳由来向神経性因子すなわちＢＤＮＦ）のレベルを増加させることが見出された。例えば、Lauterborn, et al., J. Neurosci. 20:8-21 (2000); Gall, et al., 米国特許第６，０３０，９６８；Lauterborn, et al., JPET 307: 297-305 (2003);およびMackowiak, et al., Neuropharmacology 43:1-10 (2002)を参照されたい。他の試験は、ＢＤＮＦレベルを多数の神経障害、例えば、パーキンソン病、注意欠陥多動性障害（ＡＤＨＤ）、自閉症、脆弱Ｘ症候群、およびレット症候群（ＲＴＴ）に関連づけている。例えば、O'Neill, et al., Eur. J. Pharmacol. 486: 163-174 (2004); Kent, et al., Mol. Psychiatry 10: 939-943(2005); Riikonen et al., J. Child Neurol. 18: 693-697(2003)およびChang et al., Neuron 49:341-348 (2006)を参照されたい。したがって、ＡＭＰＡ受容体増強剤は、これらの処置に有用となり得るだけでなく、グルタミン酸作動性不均衡または向神経性因子の欠損の結果である他の神経疾患処置にも有用となり得る。
【００１１】
ＡＭＰＡ受容体機能を高める化合物のプロトタイプが、Ito et al., J. Physiol. 424:533-543(1990)に記載された。これらの著者は、向知性薬：アニラセタム（Ｎ−アニソイル−２−ピロリジノン）が、γ−アミノ酪酸（ＧＡＢＡ）、カイニン酸（ＫＡ）、またはＮＭＤＡ受容体による応答に影響を与えずに、Xenopus卵母細胞に発現された脳ＡＭＰＡ受容体が仲介する電流を増加させることを見出した。アニラセタムを海馬の切片に注入させると、残りの膜特性を変化させずに高速シナプス電位のサイズを実質的に増加させることも示された。その後、アニラセタムが、海馬の複数の部位でのシナプス応答を増強すること、そしてそれがＮＭＤＡ受容体介在性電位に影響を及ぼさないことが確認された（Saubli et al., Psychobiology 18:377-381 (1990) and Xiao et al., Hippocampus 1:373-380(1991)）。
【００１２】
アニラセタムは、極めて急速な発現および消失を有することが見出され、明白な持続効果を有さず反復使用することができ、それが挙動関連薬として所望の特徴である。しかしアニラセタムには、複数の欠点が存在する。アニラセタムの末梢投与は、脳受容体に影響を与えないと思われる。その薬物は、高濃度（約１０００μM）でのみ作用し、ヒトにおける末梢投与の後、薬物の約８０％がアニソイル−ＧＡＢＡに変換される（Guenzi and Zanetti, J. Chromatogr. 530:397-406(1990)）。代謝産物のアニソイル−ＧＡＢＡは、アニラセタムよりも低いシナプス活性を有することが見出された。これらの議論に加えて、アニラセタムは、脳の他の神経伝達物質および酵素標的の多数に推定的影響を有し、そのため幾つかの請求された治療薬効果のメカニズムは不確実である。例えば、Himori, et al., Pharmacology Biochemistry and Behavior 47:219-225(1994); Pizzi et al., J. Neurochem. 61:683-689(1993); Nakamura and Shirane, Eur. J. Pharmacol. 380: 81-89(1999); Spignoli and Pepeu, Pharmacol. Biochem. Behav. 27:491-495(1987); Hall and Von Voigtlander, Neuropharmacology 26:1573-1579(1987);およびYoshimoto et al., J. Pharmacobiodyn. 10:730-735(1987)を参照されたい。
【００１３】
アニラセタムに特徴的な低い能力および本質的不安定性を示さないＡＭＰＡ受容体調節化合物のクラスが、記載されている（Lynch and Rogers,米国特許第５，７４７，４９２）。「Ampakines（登録商標）」と呼ばれるこれらの化合物は、置換ベンズアミドであってもよく、例えば、１−（キノキサリン−６−イルカルボニル）ピペリジン（CX516；Ampalex（登録商標）が包含される。代表的には、それらは、アニラセタムよりも化学的に安定性があり、改善された生物学的利用性を示す。CX516は、記憶障害、統合失調症、およびうつ病の処置に有効な薬物を検出するのに用いられる動物実験で活性である。３種の別々の臨床試験において、CX516は、様々な形態のヒト記憶を改善する有効性の証拠を示した（Lynch et al., Internat. Clin. Psychopharm. 11:13-19(1996); Lynch et al., Exp. Neurology 145:89-92 (1997); Ingvar et al., Exp. Neurology 146:553-559(1997)）。
【００１４】
Ampakinesの別のクラスであるベンゾキサジンは、認知を向上させる見込みを評価するインビトロおよびインビボモデルにおいて、非常に高い活性を有することが発見された（Rogers and Lynch;米国特許第５，７３６，５４３）。置換ベンゾキサジンは、柔軟なベンズアミド：CX516とは異なる受容体調節性を有する強固なベンズアミド類似体である。
【００１５】
特定の置換ベンゾフラザンおよびベンゾチアジアゾール化合物は、統合失調症の動物モデルにおいて、これまでの化合物よりも有意に、そして意外なほど強力であり、認知向上にも効果的であることが見出された。これらの化合物は、Lynch and Rogersの米国特許第５，７３６，５４３に開示されたものと構造的に類似している。
【００１６】
１，３−ベンゾキサジン−４−オン  ファーマコフォアを含むこれまで開示された構造は、ベンゼン部分が窒素または酸素などのヘテロ原子により（米国特許第５，７３６，５４３および同第５，９６２，４４７）、置換アルキル基により（米国特許第５，６５０，４０９および５，７８３，５８７）置換されているか、または非置換であった（ＷＯ９９／４２４５６）。１，３−ベンゾキサジン化合物の更に別のクラスは、ベンゼン環構造上の置換基とは異なり、オキサジン環の外部にカルボニルを含んでいた（米国特許第６，１２４，２７８）。ここに、ＡＭＰＡ受容体を介した海馬シナプス応答および神経全細胞電流に対して有意な活性を示す新しいクラスのトリアジノン化合物が、発見された。３−置換−ベンゾ［１，２，３］トリアジン−４−オン化合物は、対応するビスベンゾキサジノンよりも有意に代謝安定性がある強力なＡＭＰ受容体モジュレーターである。
【００１７】
【化１】
2010514838.tif 000002
【００１８】
トリアジノンの生物活性は、予測されておらず、ＡＭＰＡ受容体での能力は、意外なほど高く、これらの分類のうち最も強力なトリアジノンは、３nMもの低濃度でＡＭＰＡ受容体電流を二倍にする。ＡＭＰＡ受容体モジュレーターとしてのベンゾ［１，２，３］トリアジン−４−オン化合物を、本明細書において開示する。
【００１９】
発明の概要
【００２０】
本発明は、一態様において、構造Ｉで示された化合物を包含し、以下の詳細な説明のセクションIIに記載されている。この分類の化合物の投与が、ＡＭＰＡ受容体を介したシナプス応答を増強することが見出された。本発明の化合物は、ニューロン初代培養物およびラット海馬の切片におけるＡＭＰＡ受容体機能の上昇、ならびに認知行動（例えば、遅延見本合わせ課題における行動）の向上において、これまで記載された化合物よりも有意に、そして予測されないほど強力である。この予測されない活性は、医薬化合物および対応する使用方法（先行技術の組成物に比較して有意に低濃度（mol/mol濃度を基にして）の本発明の化合物を使用する処置方法など）になる。
【００２１】
本発明の化合物の、ＡＭＰＡ受容体介在性応答を増加させる能力により、該化合物が様々な目的に有用となる。これらには、グルタミン酸受容体に依存する挙動の学習を促進すること、ＡＭＰＡ受容体またはこれらの受容体を利用するシナプスの数または効率が低下した状態を処置すること、および脳の小領域間の不均衡を回復させるため、または向神経性因子のレベルを増加させるために、興奮性シナプル活性を増強すること、が挙げられる。
【００２２】
別の態様において、本発明は、低グルタミン酸作動性状態、または興奮性シナプスの数もしくは強度の欠損、またはＡＭＰＡ受容体数の欠損により、記憶または他の認知機能が障害を受けたほ乳類対象の処置方法を包含する。そのような状態は、皮質／線条体の不均衡も引き起こし、統合失調症または統合失調症様挙動をきたす可能性がある。該方法により、そのような対象は、薬学的に許容され得る担体中の、構造Ｉにより示され、以下の詳細な説明のセクションIIに記載された化合物の有効量で処置される。
【００２３】
本発明のこれらおよび他の目的および特徴は、以下の発明の詳細な説明を添付の図面と併せて読めば、より完全に明らかになる。
【００２４】
発明の詳細な説明
Ｉ．定義
【００２５】
以下の用語は、他に断りがなければ、以下の定義を有する。本発明の説明に用いられる他の用語は、当業者に一般に用いられるそれらの用語と同じ定義を有する。
【００２６】
用語「アルキル」は、本明細書において、炭素および水素を含み、直鎖、分枝鎖または環状であってもよい、完全に飽和された一価基を指すために用いられる。アルキル基の例は、メチル、エチル、ｎ−ブチル、ｎ−ヘプチル、イソプロピル、２−メチルプロピル、シクロプロピル、シクロプロピルメチル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロペンチルエチルおよびシクロヘキシルである。
【００２７】
用語「アルケニル」は、本明細書において、不飽和の部位を１または２箇所含み、直鎖、分枝鎖または環状であってもよい、炭素および水素を含む一価基を指すために用いられる。アルキル基の例は、エテニル、ｎ−ブテニル、ｎ−ヘプテニル、イソプロペニル、シクロペンテニル、シクロペンテニルエチルおよびシクロヘキセニルである。
【００２８】
用語「置換アルキル」は、官能基を１個以上含む先に記載されたアルキル、例えば、炭素原子を１〜６個含む低級アルキル、アリール、置換アリール、アシル、ハロゲン（即ち、アルキルハロ、例えばＣＦ３）、ヒドロキシ、アルコキシ、アルコキシアルキル、アミノ、アルキルおよびジアルキルアミノ、アシルアミノ、アシルオキシ、アリールオキシ、アリールオキシアルキル、カルボキシアルキル、カルボキシアミド、チオ、チオエーテル、飽和および不飽和両方の環状炭化水素、複素環などを指す。
【００２９】
用語「アリール」は、単環（例えば、フェニル）または多環式縮合環（例えば、ナフチル）を有する置換または非置換一価芳香族基を指す。他の例としては、環内に窒素、酸素、または硫黄原子を１個以上有する複素環式芳香族環基、例えば、オキサゾリル、イソキサゾリル、ピラゾリル、チアゾリル、チアジアゾリル、テトラゾリル、ピリダジニル、ピリミジル、ベンゾフリル、ベンゾチエニル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾキサゾリル、ベンゾチアゾリル、キノリル、イソキノリル、イミダゾリル、フリル、ピロリル、ピリジル、チエニルおよびインドリルが挙げられる。
【００３０】
本明細書において用語「置換アリール、置換芳香族、置換へテロアリール、または置換複素芳香族」において用いられる用語「置換」は、置換基が１個以上存在してもよく、前記置換基が、存在する時に、化合物がＡＭＰＡ受容体機能の増強剤として機能するのを妨害しない原子および基から選択されることを意味する。置換芳香族または複素芳香族基に存在し得る置換基の例としては、非限定的に、（Ｃ１〜Ｃ７）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ７）アシル、アリール、ヘテロアリール、置換アリールおよびヘテロアリール、ハロゲン、シアノ、ニトロ、（Ｃ１〜Ｃ７）アルキルハロ（例えば、ＣＦ３）、ヒドロキシ、（Ｃ１〜Ｃ７）アルコキシ、アルコキシアルキル、アミノ、アルキルおよびジアルキルアミノ、アシルアミノ、アシルオキシ、アリールオキシ、アリールオキシアルキル、カルボキシアルキル、カルボキシアミド、チオ、チオエーテル、飽和および不飽和両方の（Ｃ３〜Ｃ８）環状炭化水素、（Ｃ３〜Ｃ８）複素環などの基が挙げられる。
【００３１】
「複素環」または「複素環式」は、炭素原子１個以上が、ヘテロ原子（例えば、窒素、酸素または硫黄）１個以上で置換された炭素環を指す。複素環の例としては、非限定的に、ピペリジン、ピロリジン、モルホリン、チオモルホリン、ピペラジン、テトラヒドロフラン、テトラヒドロピラン、２−ピロリジノン、δ−ベレロラクタム、δ−ベレロラクトンおよび２−ケトピペラジンが挙げられる。
【００３２】
用語「置換複素環」は、官能基（例えば、低級アルキル、アシル、アリール、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシ、アルコキシ、アルコキシアルキル、アミノ、アルキルおよびジアルキルアミノ、アシルアミノ、アシルオキシ、アリールオキシ、アリールオキシアルキル、カルボキシアルキル、カルボキシアミド、チオ、チオエーテル、飽和および不飽和両方の環状炭化水素、複素環など）を１個以上含む先に記載された複素環を指す。
【００３３】
用語「化合物」は、本明細書において、本明細書に開示された特定の化学的化合物を指すために用いられる。本明細書の使用範囲内では、その用語は、概して、単一化合物を指すが、特定の例においては、開示された化合物の立体異性体および／または光学異性体（ラセミ混合物を含む）を指す場合もある。
【００３４】
用語「有効量」は、ＡＭＰＡ受容体活性を上昇させることによりグルタミン酸作動性シナプス応答を増強するために用いられる、選択された式Ｉで示される化合物の量を指す。用いられる正確な量は、選択される特定の化合物、意図される使用、対象者の年齢および体重、投与経路などに応じて変動するが、日常の実験法により容易に決定することができる。状態または疾患状況の処置の場合、有効量は、特定の状態または疾患状態を効果的に処置するために用いられるその量である。
【００３５】
用語「薬学的に許容され得る担体」は、投与される対象に許容され得ないほどの毒性がない担体または賦形剤を指す。薬学的に許容され得る賦形剤は、E. W. Martinにより「Remington's Pharmaceutical Sciences」に詳細に記載されている。
【００３６】
アミン化合物の「薬学的に許容され得る塩」、例えば本発明で予期されるものは、無機陰イオン（例えば、塩化物イオン、臭化物イオン、ヨウ化物イオン、硫酸イオン、亜硫酸イオン硝酸イオン、亜硝酸イオン、リン酸イオンなど）または有機陰イオン（例えば、酢酸イオン、マロン酸イオン、ピルビン酸イオン、プロピオン酸イオン、フマル酸イオン、桂皮酸イオン、トシル酸イオンなど）を対イオンとして有するアンモニウム塩である。
【００３７】
用語「患者」または「対象」は、本発明の化合物または組成物の処置または使用を提供される動物、一般にはヒトなどのほ乳類動物を記載するために本明細書を通して用いられる。各動物（特に、例えばヒト対象または患者）に特異的なそれらの状態または疾患状況の処置またはその使用では、用語：患者または対象は、その特定の動物を指す。
【００３８】
用語「感覚運動の問題」は、患者または対象が運動および活動などの適切な身体反応に向けられる公知の五感から得られる外部情報を整理することができない患者または対象に生じた問題を記載するために用いられる。
【００３９】
用語「認知タスク」または「認知機能」は、思考または知識を含む患者または対象による試みまたは処理を記載するために用いられる。全てのヒト脳組織の約７５％を占める頭頂葉、側頭葉および前頭葉の関連皮質の多様な機能は、感覚入力と運動出力の間で起こる情報処理のかなり部分を担う。関連皮質の多様な機能は、多くの場合、認知と呼ばれ、それは文字通り、我々が世界を知るようになる工程を意味する。特定の刺激を選択的に注意すること、これらの関連刺激の特徴を認識および同定すること、ならびに反応を計画および経験することは、認知に関連するヒト脳を介した処理または能力の一部である。
【００４０】
用語「脳ネットワーク」は、神経細胞のシナプス活性を介して互いに連絡する脳の異なる解剖学的領域を記載するために用いられる。
【００４１】
用語「ＡＭＰＡ受容体」は、幾つかの膜内に見出される蛋白質の集合体を指し、ＮＭＤＡではなくグルタミン酸またはＡＭＰＡ（ＤＬ−α−アミノ−３−ヒドロキシ−５−メチル−４−イソキサゾールプロピオン酸）の結合に応答して、陽イオンに膜を通過させる。
【００４２】
用語「興奮性シナプス」は、一つの細胞による化学的メッセンジャーの放出が、他の細胞の外部膜の脱分極を起こす、細胞間接合を記載するために用いられる。興奮性シナプスは、閾値電位よりも陽性の逆電位を有するシナプス後ニューロンを記載しており、その結果そのようなシナプスでは、神経伝達物質により、興奮性シナプス後電位が得られる（ニューロンが興奮して、活動電位が生じる）可能性が高まる。逆電位および閾値電位は、シナプス後興奮および抑制を決定する。シナプス後電位（「ＰＳＰ」）の逆電位が、活動電位の閾値よりも陽性である場合、伝達物質の作用は、興奮性であり、興奮性シナプス後電位（「ＥＰＳＰ」）およびニューロンによる活動電位の興奮を生じる。シナプス後電位の逆電位が、活動電位の閾値よりも陰性である場合、伝達物質は、抑制性であり、抑制性シナプス後電位（ＩＰＳＰ）を生じる可能性があり、こうしてシナプスが活動電位を興奮する可能性が低下する。シナプス後活動の原則は：逆電位が閾値よりも陽性であれば興奮となり、逆電位が閾値よりも陰性であれば抑制が生じる、ということである。例えば、Dale Purves, Sinauer Associates, Inc., Sunderland, MA 1997により編集されたChapter 7, NEUROSCIENCEを参照されたい。
【００４３】
用語「運動タスク」は、運動または活動に関与する、患者または対象による試みを記載するために用いられる。
【００４４】
用語「知覚タスク」は、感覚入力に注意を向ける、患者または対象による活動を記載するために用いられる。
【００４５】
用語「シナプス応答」は、密に接触している別の細胞による化学的メッセンジャーの放出の結果である、一つの細胞内の生物物理学的反応を記載するために用いられる。 
【００４６】
用語「低グルタミン酸作動性状態」は、グルタミン酸（または関連の興奮性アミノ酸）を介した伝達が、正常レベル未満に低下した状況または状態を記載するために用いられる。伝達は、グルタミン酸の放出、シナプス後受容体への結合、およびそれらの受容体に不可欠なチャネルの開口からなる。低グルタミン酸作動性状態の終点は、興奮性シナプス後電流を低下させる。それは、３種の上記伝達相のうちのいずれからも生じる可能性がある。低グルタミン酸作動性状態が考えられる、本発明の化合物、組成物および方法を用いて処置され得る状態または疾患状況としては、例えば、記憶喪失、認知症、うつ、注意疾患、性機能不全、運動障害（パーキンソン病を含む）、統合失調症または統合失調症様挙動、記憶および学習障害（加齢から生じるそれらの障害を含む）、心的傷害、卒中および神経変性疾患（例えば、薬物に誘導された状況に関連するもの）、神経毒性物質、アルツハイマー病ならびに加齢が挙げられる。これらの状態は、当業者により容易に認識および診断される。
【００４７】
用語「皮質−線条体不均衡」は、相互連結する皮質と横たわる線条体複合体との神経活動のバランスが、通常見出されるものから逸脱した状態を記載するために用いられる。「活動」は、電気記録または分子生物学的技術により評価することができる。不均衡は、これらの測定値を２種の構造に当てはめることにより、または機能的（挙動的または生理学的）規準により確定することができる。
【００４８】
用語「情動障害」または「気分障害」は、悲しみまたは発揚状態が過度に強く、ストレス性生命事象の予測される影響を超えてそれが継続する状態、または内因的に生じる状態を記載する。本明細書において用いられる用語「情動障害」は、例えば、Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders, Fourth Edition (DSM IV), p317-319に記載された全ての型の気分障害を包含する。
【００４９】
用語「統合失調症」は、思考過程の障害（例えば、妄想および幻覚）、患者の興味が他人または外界から大きく逸脱していること、および患者自身の中にそれが埋没していることを特徴とする一般的型の精神病の状態を記載するために用いられる。統合失調症は、現在では、一つの独立した存在というよりむしろ精神障害の群とみなされており、反応性統合失調症と進行性統合失調症とを区別される。本明細書で用いられる用語：統合失調症または「統合失調症様」は、外来統合失調症、緊張型統合失調症、解体型統合失調症、潜在性統合失調症、進行性統合失調症、偽神経性統合失調症、反応性統合失調症、単一性統合失調症、および統合失調症に類似するが必ずしも統合失調症そのものと診断されない関連の精神障害、の全ての型の統合失調症を包含する。統合失調症および他の精神障害は、例えば、Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders, Fourth Edition (DSM IV) Section 293.81, 293.82, 295.10, 295.20, 295.30, 295.40, 295.60, 295.70, 295.90, 297.1, 297.3, および298.8において確立されたガイドラインを用いて診断してもよい。
【００５０】
用語「脳機能」は、外部刺激および内的動機づけ過程を知覚および統合しフィルターにかけて応答する混合タスクを記載するために用いられる。
【００５１】
用語「障害を受けた」は、正常よりも低いレベルの機能動作を記載するために用いられる。障害を受けた機能は、著しく影響を受けた可能性があり、機能がほとんど実施されないか、事実上存在しないか、または正常よりも著しく低い様式で動作している。障害を受けた機能は、最適以下となる可能性がある。機能の障害は、患者の重症度および処置される状態により変動する。
【００５２】
II．ＡＰＭＡ受容体機能を高める化合物
【００５３】
本発明は、一態様において、ＡＭＰＡ受容体機能を増強する特性を有する化合物を対象とする。本発明の具体的化合物は、以下の構造Ｉ：
【００５４】
【化２】
2010514838.tif 000003
【００５５】
を有する。
【００５６】
本発明の化合物：８−シクロプロピル−３−［２−（３−フルオロフェニル）エチル］−７，８−ジヒドロ−３Ｈ−［１，３］オキサジノ［６，５−ｇ］［１，２，３］ベンゾトリアジン−４，９−ジオンの合成は、好ましくは以下の合成スキームにより実施されるが、その置換されたサリチルアミドの合成は、有機合成の分野で周知である。
【００５７】
【化３】
2010514838.tif 000004
【００５８】
スキーム１において、ステップＡは、標準の条件（中でも、ホルムアルデヒドシントンの酸触媒挿入）の下で実施してもよい。例えば、サリチルアミド（１）を、トリオキサンおよび硫酸または塩酸と共に適切な有機溶媒に溶解して加熱する。ステップＢは、ニトロ化反応であり、有機合成の当業者に公知の穏やかな条件下で実施することができ、Reagents for Organic Synthesis (Fieser and Fieser) and Organic Syntheses (ウェブサイト  http://www.orgsyn.org/を参照) にそのような内容が詳述されている。ステップＣは、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドジメチルアセタールおよび過ヨウ化ナトリウム、そして次にオキソンを用い、中間体アルデヒドを介して化合物：３のメチル基をカルボン酸に二段階で酸素化することを含む。ステップＤは、第一級アミンをニトロ酸にカップリングすることを含み、それは熟練の化学者が公知の様々なカップリング試薬を用いて遂行することができる。一般に用いられる非限定的実施例の幾つかは、塩化チオニル、塩化オキサリルまたはカルボニルジイミダゾールである。ステップＥは、アリールニトロをアニリンに還元することであり、様々な触媒（非限定的に、ＰｄまたはＰｔまたはラネーニッケルと水素またはＺｎ／Ｃｕなど）を用いた還元により実施することができる。ステップＦは、トリアジノン環を形成し、ＤＭＦ中で亜硝酸イソアミルを添加することにより実施することができる。
【００５９】
本願に開示された組成物は全て、本明細書に記載された実施例に具体的に示されたものおよび当該技術分野で公知のものと類似の合成ステップを用いて、上記の方法により合成してもよい。薬学的に許容され得るその酸または塩基での付加塩全ても、請求されている。
【００６０】
III.  処置方法
【００６１】
本発明の一態様によれば、低グルタミン酸作動性状態、または興奮性シナプスの数もしくは強度の欠損、またはＡＭＰＡ受容体の数の欠損をきたしたほ乳類対象を処置する方法が提供される。そのような対象において、記憶もしくは他の認知機能が障害を受け、または皮質／線条体不均衡が生じて、記憶喪失、認知症、うつ、注意疾患、性機能不全、運動障害、統合失調症または統合失調症様挙動をきたす可能性がある。本発明により処置され得る記憶障害および学習障害としては、加齢から生じるそれらの障害、心的傷害、卒中および神経変性疾患が挙げられる。神経変性疾患の例としては、非限定的に、薬物に誘導された状況に関連するもの、神経毒性物質、アルツハイマー病ならびに加齢が挙げられる。これらの状態は、当業者により容易に認識および診断され、本発明の化合物１種以上の有効量を患者に投与することにより処置される。
【００６２】
本発明において、処置方法は、薬学的に許容され得る担体中の、式：
【００６３】
【化４】
2010514838.tif 000005
【００６４】
を有する８−シクロプロピル−３−［２−（３−フルオロフェニル）エチル］−７，８−ジヒドロ−３Ｈ−［１，３］オキサジノ［６，５−ｇ］［１，２，３］ベンゾトリアジン−４，９−ジオンまたは酸または塩基の薬学的に許容され得るその付加塩の有効量を、処置を必要とする対象に投与することを含む。
【００６５】
上記のとおり、本発明の方法による対象の処置は、ＡＭＰＡ受容体活性を増強するのに有用であり、こうしてＡＭＰＡ受容体に依存する挙動の学習を促進し、ＡＭＰＡ受容体またはこれらの受容体を用いるシナプスが数または効率を低下させた状態（例えば、記憶障害）を処置するのに用いてもよい。その方法は、統合失調症もしくは統合失調症様挙動、または上記の他の挙動において症状発現し得る脳の小領域の間の不均衡を回復させるために、興奮性シナプス活性を増強するのにも有用である。本発明の方法により投与される化合物は、以下に記載されたインビトロまたはインビボテストで示されるとおり、ＡＭＰＡ受容体活性を増強する際に過去に記載された化合物よりも効果的であることが見出された。
【００６６】
IV．生物活性：ＡＭＰＡ受容体機能の増強
【００６７】
ＡＭＰＡ受容体を介したシナプス応答は、本明細書に記載された化合物を用いて、本発明の方法により高められる。該化合物は、培養ニューロンでのＡＭＰＡ介在性の全細胞電流の増加において、過去に記載された化合物よりも実質的に強力であることが実証された。インビトロアッセイを以下に記載する。皮質細胞を胚齢１８〜１９日の胚Sprague-Dawleyラットから調製し、培養３日後に記録した。細胞外溶液（ＥＣＳ）は、（mMで）ＮａＣｌ（１４５）、ＫＣｌ（５．４）、ＨＥＰＥＳ（１０）、ＭｇＣｌ２（０．８）、ＣａＣｌ２（１．８）、グルコース（１０）、ショ糖（３０）（pH７．４）を含んでいた。電圧依存性ナトリウム電流を遮断するために、４０nM  ＴＴＸを記録溶液に添加した。細胞内溶液は、（mMで）グルコン酸カリウム（１４０）、ＨＥＰＥＳ（２０）、ＥＧＴＡ（１．１）、ホスホクレアチン（５）、ＭｇＡＴＰ（３）、ＧＴＰ（０．３）、ＭｇＣｌ２（５）、およびＣａＣｌ２（０．１）（pH７．２）を含んでいた。テスト化合物およびグルタミン酸溶液は全て、細胞外溶液中で作製した。
【００６８】
全細胞電流を、パッチクランプ増幅器（Axopatch 200B）で測定し、２kHzでフィルターにかけ、５kHzでデジタル化して、pClamp 8によりＰＣで記録した。細胞を−８０mVで電位固定した。溶液をDAD-12装置に適用した。各細胞のベースライン応答を、ＥＳＣに溶解した５００μMグルタミン酸の１ｓパルスを利用して記録した。その後、テスト化合物への応答を、テスト化合物１０ｓパルス、続いて同濃度のテスト化合物＋５００μMグルタミン酸１ｓパルス、その後生理食塩水１０ｓの適用により測定した。安定した読取が得られるまで、または十分なデータポイントが測定されて計算された最大変動に外挿することができるまで、このパルスシーケンスを繰り返した。
【００６９】
グルタミン酸またはテスト化合物＋グルタミン酸の適用後に、６００ms〜９０００msのプラトー電流の平均値を計算し、パラメータとして用いて薬物効果を測定した。増加割合を計算するために、様々な濃度のテスト化合物の存在下でのプラトー応答をベースライン応答で割った。３μM以下のテスト濃度で、化合物がグルタミン酸単独の適用により測定された定常状態電流の値を１００％増加を超えて生成させた場合、化合物がこのテストにおいて活性であると判断する。グルタミン酸による電流を１００％上昇させた濃度を、一般にＥＣ２ｘ値と呼ぶ。
【００７０】
本発明の化合物：８−シクロプロピル−３−［２−（３−フルオロフェニル）エチル］−７，８−ジヒドロ−３Ｈ−［１，３］オキサジノ［６，５−ｇ］［１，２，３］ベンゾトリアジン−４，９−ジオンは、０．１μMのＥＣ２ｘ値を示した。
【００７１】
Ｖ．投与、投与量および配合剤
上記のとおり、本発明の化合物および方法は、ＡＭＰＡ受容体介在性応答を増加させ、低グルタミン酸作動性状態の処置に有用である。該化合物は、興奮性シナプスの数もしくは強度、またはＡＭＰＡ受容体の数の欠損を起こした、記憶または他の認知機能の障害などの状態の処置にも有用である。該化合物は、皮質／線条体不均衡による統合失調症または統合失調症様挙動の処置、およびＡＰＭＡ受容体による挙動の学習の促進に用いてもよい。
【００７２】
本発明の化合物、医薬組成物および方法で処置された対象において、記憶または他の認知機能が、障害を受けているか、または皮質／線条体不均衡が生じて、記憶喪失、認知症、うつ、注意疾患、性機能不全、運動障害、統合失調症または統合失調症様挙動をきたしていてもよい。本発明により処置され得る記憶障害および学習障害としては、加齢から生じるそれらの障害、心的傷害、卒中および神経変性疾患が挙げられる。神経変性疾患の例としては、非限定的に、薬物に誘導された状況に関連するもの、神経毒性物質、アルツハイマー病および加齢が挙げられる。これらの状態は、当業者により容易に認識および診断され、本発明の化合物１種以上の有効量を患者に投与することにより処置される。
【００７３】
一般に該化合物の投与量および投与経路は、対象の寸法および状態に応じて、標準の医薬実務により決定される。用いられる用量レベルは、大きく変動してもよく、当業者が容易に決定することができる。代表的にはミリグラム〜グラム量までの量が用いられる。該組成物は、様々な経路、例えば、経口、経皮、神経周囲または非経口的に、即ち、静脈内、皮下、腹腔内、または筋肉内注射により（とりわけ、口腔、直腸および経皮投与などにより）対象に投与してもよい。本発明の方法による処置が予期される対象としては、ヒト、ペット、実験動物などが挙げられる。
【００７４】
本発明の化合物を含む配合剤は、固体、半固体、凍結乾燥粉末、または液体投与形態、例えば、錠剤、カプセル、粉末、徐放性配合剤、溶液、懸濁液、エマルション、坐剤、クリーム、軟膏、ローション、エアロゾル、パッチなどの形態で、好ましくは正確な投与量の簡便な投与に適した単位投与形態で摂取されてもよい。
【００７５】
本発明の医薬組成物は、代表的には従来の医薬担体または賦形剤を含み、追加として他の医薬剤、担体、佐剤、添加剤などを含んでいてもよい。好ましくは該組成物は、本発明の化合物が約０．５〜７５重量％であり、残りが主として適切な医薬賦形剤からなる。経口投与では、そのような賦形剤としては、医薬等級のマンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、ナトリウムサッカリン、タルク、セルロース、グルコース、ゼラチン、ショ糖、炭酸マグネシウムなどが挙げられる。所望なら、該組成物は、微量の非毒性補助物質、例えば湿潤剤、乳化剤、または緩衝剤などを含んでいてもよい。
【００７６】
液体組成物は、担体（例えば、水性生理食塩水、水性デキストロース、グリセリン、またはエタノール）に該化合物（約０．５〜約２０重量％以上）および任意の医薬佐剤を溶解または分散させて、溶液または懸濁液を形成させることにより調製することができる。経口液体製剤での使用では、該組成物は、水または通常の生理食塩水への水和に適した液体または乾燥形態のいずれかで提供される、溶液、懸濁液、エマルションまたはシロップとして調製してもよい。
【００７７】
該組成物が経口投与用の固体製剤の形態で用いられる場合、該製剤は、錠剤、顆粒、粉末、カプセルなどであってもよい。錠剤形態では、該組成物は、代表的には、添加剤、例えば賦形剤（例えば、糖類またはセルロース製剤）、結合剤（例えば、デンプンペーストまたはメチルセルロース）、充填剤、崩壊剤、および医薬製剤の業界で代表的に用いられる他の添加剤と共に配合される。
【００７８】
非経口投与用の注射可能性組成物は、代表的には、適切な静注溶液、例えば滅菌生理食塩溶液中に化合物を含む。該組成物は、脂質もしくはリン脂質中、リポソーム懸濁液中、または水性エマルション中の懸濁液として配合されてもよい。
【００７９】
そのような投与形態を製造する方法は、当業者に公知または明白であり、例えば、Remington's Pharmaceutical Sciences（17th Ed., Mack Pub. Co., 1985）を参照されたい。投与される組成物は、選択された化合物を、対象で高ＡＭＰＡ受容体電流を実行するのに薬学上効果的な量で含む。
【００８０】
以下の実施例は、本発明を例示しており、限定するものではない。他に断りがなければ、温度は全て、℃で示される。他に断りがなければ、ＮＭＲスペクトルは全て、１Ｈ  ＮＭＲスペクトルであり、テトラメチルシランを内部標準として用いて、溶媒としての重水素クロロホルムまたは重水素化ＤＭＳＯ中で得られた。実施例の化合物の名称は、ACD Labsによるコンピュータソフトウエア：ChemSketchにより提供されたＩＵＰＡＣ命名法に適合させた。
【００８１】
実施例１
８−シクロプロピル−３−［２−（３−フルオロフェニル）エチル］−７，８−ジヒドロ−３Ｈ−［１，３］オキサジノ［６，５−ｇ］［１，２，３］ベンゾトリアジン−４，９−ジオン  
【００８２】
【化５】
2010514838.tif 000006
【００８３】
４−メチルサリチル酸（２１．３ｇ、１４０mmol）を、塩化メチレン（１２０mL）に溶解し、次にＣＤＩ（２２．７ｇ、１４０mmol）を少しずつ溶解した。混合物を室温で２４時間撹拌し、その後、短時間に加熱して沸騰させた。トリエチルアミン（５mL、３６mmol）中のシクロプロピルアミン（８．０ｇ、１４０mmol）の溶液を、混合物に添加して、３日間撹拌した。水（２００mL）を添加し、１２Ｍ塩酸を用いてpHを２に調整した。相を分離させて、水相をクロロホルム（２００mL）で抽出した。ひとまとめにした有機相を重炭酸ナトリウム溶液（１００mL）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。濃縮して、アミド２２．７ｇをオフホワイト色の固体として得た。
【００８４】
アミド（２２．７ｇ、１１９mmol）およびトリオキサン（３６ｇ、０．４mol）を、クロロホルム（２５０mL）に溶解し、室温で撹拌した。硫酸ナトリウム（３２ｇ）および濃硫酸（８０滴）を添加して、混合物を３０分間還流し、その後、濃硫酸を更に４０滴添加した。９０分後に、ろ過により固体を除去し、酢酸エチルで洗浄した。ひとまとめにした溶媒を真空除去して、油状物３０ｇを得た。油状物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル２５０ｇ、酢酸エチル：ヘキサン  ３０：７０、その後、４０：６０）を用いて精製し、７−メチルベンゾキサジノン２０．１ｇを無色油状物として得た。
【００８５】
ベンゾキサジノン（１６ｇ、７９mmol）を塩化メチレン（２００mL）に溶解して、酢酸（３０mL）を添加した。アイスバスを用いて混合物を〜０℃に冷却し、硝酸（１４mL、９０％）を１５分間かけて滴下して、オレンジ色溶液を生成させた。反応混合物を９０分間撹拌し、その後、破砕した氷／水（３００mL）に注いだ。水酸化ナトリウム溶液を、pHが５に達するまで緩やかに添加した。反応混合物をクロロホルム（２００mL）で抽出し、硫酸ナトリウムで乾燥させて、真空下で〜４０mLまで濃縮した。酢酸エチル（２００mL）を添加して、混合物を真空下で〜６０mLまで濃縮した。形成された結晶をろ別して、所望の６−ニトロ異性体８．１ｇ（３３mmol、収率＝４１％）をオフホワイト色の固体として得た。母液を濃縮して、更なる生成物（１．２９ｇ）をオフホワイト色の固体として結晶化させた。次に、混合異性体の更なる５ｇを母液から単離し、この混合物を以下のステップで用いた。
【００８６】
これまでのステップから得られた混合異性体固体（５ｇ、２０mmol）を、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドジメチルアセタール（３０mL）およびＤＭＦ（１０mL）に懸濁させて、１２５℃まで１６時間加熱した。溶媒を真空下で除去し、暗褐色残渣を得た。残渣をＴＨＦ（１００mL）に溶解した。過ヨウ化ナトリウム（１１ｇ、５１mmol）を水（１００mL）に溶解して、反応混合物に添加し、室温で１５分間撹拌した。ベージュ色のスラリーをクロロホルム（２００mL）で抽出して、硫酸ナトリウムで乾燥させ、酢酸エチル（２００mL）で希釈した。溶媒を緩やかに蒸発させて、所望の異性体の結晶（２．０ｇ、７．６mmol）をオフホワイト色の固体として得た。
【００８７】
ニトロアルデヒド中間体（５２４mg、２．０mmol）を、４０℃のＤＭＦ（１０mL）に溶解した。溶液を周囲温度まで冷却した後、オキソン（１．４７ｇ、２．４mmol）を添加して、混合物を一晩撹拌した。水（２５mL）および酢酸エチル（３０mL）を添加して二相にし、分離して、有機相をろ過し、水で洗浄した。水相を酢酸エチルで抽出して、ひとまとめにした有機相を水で２回洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させて、真空下で濃縮し、湿性の黄色残渣（０．５４ｇ、１．９mmol）を得て、更に精製せずに用いた。
【００８８】
塩化メチレン中のニトロ酸中間体（０．５４ｇ、１．９mmol）の溶液を、２、３滴のＤＭＦと共に塩化チオニル（１．４mL、２０mmol）と混和して、周囲温度で一晩撹拌した。混合物を真空下で濃縮し、塩化メチレン（１０mL）に再溶解した。３−フルオロフェネチルアミン（０．５６mL、４．３mmol）およびトリエチルアミン（１．１mL、７．９mmol）を塩化メチレン（１５mL）に溶解して、それに新たに調製された酸塩化物溶液を添加した。２時間撹拌した後、溶液を水性ＨＣｌ（１Ｍ）および飽和重炭酸ナトリウムで洗浄して、硫酸マグネシウムで乾燥させた。生成物溶液を真空下で濃縮し、黄色固体を得て、酢酸エチル中で摩砕して、薄いベージュ色の結晶（０．５３ｇ、１．３mmol）を得た。
【００８９】
これまでのステップから得られたベージュ色の固体（０．５３ｇ、１．３mmol）を、ＴＨＦ（２０mL）とメタノール（２０mL）との混合物に溶解して、新たに調製されたＺｎ／Ｃｕ試薬（１０ｇ、以下参照）に添加した。ギ酸（１０滴）を添加して、混合物を周囲温度で一晩撹拌して、その後、ＴＬＣで反応の完了が示された。ＤＭＦ（２mL）を添加した後、混合物を１０分間撹拌し、その後、シリカゲル（２cm）でろ過した。シリカをＴＨＦ／メタノール（１：１）で洗浄し、ひとまとめにしたろ液および洗浄液を真空下で濃縮した。クロロホルムを添加して蒸発させ、残留する水を除去した。ＤＭＦ（２mL）および過剰の亜硝酸イソアミル（５mL）を添加して、混合物を２．５時間撹拌し、その後、ＴＬＣで反応の完了が示された。ジエチルエーテル（５mL）を添加して生成物を沈殿させ、酢酸エチルで洗浄して空気乾燥し、黄色固体０．２９ｇを以下の特性で得た：ＭＰ１８１〜１８２℃；１Ｈ  ＮＭＲ（３００MHz、ＣＤＣｌ３）δ８．７８（１Ｈ，ｓ），７．８２（１Ｈ，ｓ），７．３−６．８（４Ｈ，ｍ），５．３３（２Ｈ，ｓ），４．６７（２Ｈ，ｍ）３．２１（２Ｈ，ｍ）２．７６（１Ｈ，ｍ）１．０２（２Ｈ，ｍ）および０．８６ppm（２Ｈ，ｍ）。
【００９０】
Ｚｎ／Ｃｕ試薬（先に使用）を、以下の手法で新たに調製した：濃ＨＣｌ（３mL）を、水１００mL中の亜鉛１０ｇに激しく撹拌しながら添加した。撹拌を２分間続け（塊が形成し始める）、その後、水をデカンテーションにより除去した。激しく撹拌しながら、水を更に１００mL添加した。残留した塊をスパチュラで破砕した。濃ＨＣｌ（３mL）を添加して、２分間撹拌し続けた。デカンテーションにより水を除去した後、固体を更なる水１００mLで洗浄した。水（５０mL）を固体に添加して、撹拌し続けながら、ＣｕＳＯ４（水５０mL中の３００mg）の溶液を緩やかに添加した。亜鉛が黒色に変わった後、水をデカンテーションにより除去した。残渣をメタノール（５０mL）およびＴＨＦ（５０mL）で順次洗浄した。
【００９１】
実施例２
【００９２】
インビボ生理学的テスト
【００９３】
本発明の化合物の生理学的影響を、麻酔した動物でインビボで、以下の手順によりテストした。
【００９４】
動物は、ハミルトンシリンジポンプを用いて投与されたフェノバルビタールにより麻酔を保持された。刺激および記録電極を、それぞれ海馬の緩通路−歯状回に挿入した。電極がインプラントされたら、３回／分で刺激電極に送達された単相パルス（single monophasic pulses）（１００μsパルス時間）を利用して、誘発応答の安定したベースラインを得た。安定したベースラインに達するまで（約２０〜３０分）、フィールドＥＰＳＰをモニタリングし、その後、ＨＰＣＤ中のテスト化合物の溶液を腹腔内注入し、誘発フィールド電位を記録した。薬物投与後約２時間の間、またはフィールドＥＰＳＰの増幅がベースラインに戻るまで、誘発電位を記録した。後者の場合、適切な用量の同一テスト化合物で、静脈内投与も実施するのが一般的である。
【００９５】
静脈内投与を利用すると、８−シクロプロピル−３−［２−（３−フルオロフェニル）エチル］−７，８−ジヒドロ−３Ｈ−［１，３］オキサジノ［６，５−ｇ］［１，２，３］ベンゾトリアジン−４，９−ジオンは、５mg/kgの用量で、フィールドＥＰＳＰの増幅を１０％上昇させた。
【００９６】
本発明を具体的な方法および実施形態を参照して記録したが、本発明を逸脱することなく様々な改良を施し得ることは理解されよう。
【国際調査報告】
2010514838.tif 000008