(57)【要約】  本願は、５−クロロ−Ｎ−（｛（５Ｓ）−３−［２−フルオロ−４−（３−オキソモルホリン−４−イル）フェニル］−２−オキソ−１,３−オキサゾリジン−５−イル｝メチル）チオフェン−２−カルボキサミドのプロドラッグ誘導体、それらの製造方法、障害の処置および／または予防のためのそれらの使用、並びに、障害、特に血栓塞栓性障害の処置および／または予防用の医薬を製造するためのそれらの使用に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）
【化１】
2010532771.tif 000071
［式中、
Ｒ１は、水素、または、ヒドロキシもしくは（Ｃ１−Ｃ４）−アルコキシにより置換されていてもよい（Ｃ１−Ｃ４）−アルキルであり、
Ｒ２は、水素または（Ｃ１−Ｃ４）−アルキルであり、
そして、
Ｌは、１個のＣＨ２基がＯ原子で置き換えられていてもよい（Ｃ１−Ｃ４）−アルカンジイル基であるか、または、式
【化２】
2010532771.tif 000072
｛式中、
＊は、Ｎ原子への結合点を意味し、
Ｒ３は、天然α−アミノ酸またはそのホモログもしくは異性体の側鎖の基であるか、
または、
Ｒ３は、Ｒ１に結合しており、この２つが一体となって（ＣＨ２）３または（ＣＨ２）４基を形成しており、
Ｒ４は、水素またはメチルであり、
Ｒ５は（Ｃ１−Ｃ４）−アルキルであり、
そして、
Ｒ６は、水素または（Ｃ１−Ｃ４）−アルキルである｝
の基である］
の化合物、並びに、その塩、溶媒和物および塩の溶媒和物。
【請求項２】
式中、
Ｒ１が、水素または（Ｃ１−Ｃ４）−アルキルであり、
Ｒ２が水素であり、
そして、
Ｌが、（Ｃ２−Ｃ４）−アルカンジイル基であるか、または、式
【化３】
2010532771.tif 000073
｛式中、
＊は、Ｎ原子への結合点を意味し、
Ｒ３は、水素、メチル、プロパン−２−イル、プロパン−１−イル、イミダゾール−４−イルメチル、ヒドロキシメチル、１−ヒドロキシエチル、カルバモイルメチル、２−カルバモイルエチル、４−アミノブタン−１−イル、３−アミノプロパン−１−イルまたは３−グアニジノプロパン−１−イルであるか、
または、
Ｒ３は、Ｒ１に結合しており、この２つが一体となって（ＣＨ２）３または（ＣＨ２）４基を形成しており、
Ｒ４は、水素またはメチルであり、
Ｒ５はメチルであり、
そして、
Ｒ６は、水素またはメチルである｝
の基である、
請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物、並びに、その塩、溶媒和物および塩の溶媒和物。
【請求項３】
式中、
Ｒ１が、水素、メチルまたはｎ−ブチルであり、
Ｒ２が水素であり、
そして、
Ｌが、ＣＨ２ＣＨ２基であるか、または、式
【化４】
2010532771.tif 000074
｛式中、
＊は、Ｎ原子への結合点を意味し、
Ｒ３は、水素、メチル、プロパン−２−イル、プロパン−１−イル、イミダゾール−４−イルメチル、ヒドロキシメチル、１−ヒドロキシエチル、カルバモイルメチル、２−カルバモイルエチル、４−アミノブタン−１−イル、３−アミノプロパン−１−イルまたは３−グアニジノプロパン−１−イルであるか、
または、
Ｒ３は、Ｒ１に結合しており、この２つが一体となって（ＣＨ２）３または（ＣＨ２）４基を形成しており、
Ｒ４は、水素またはメチルであり、
そして、
Ｒ６は、水素またはメチルである｝
の基である、
請求項１または請求項２に記載の式（Ｉ）の化合物、並びに、その塩、溶媒和物および塩の溶媒和物。
【請求項４】
請求項１ないし請求項３に記載の式（Ｉ）の化合物の製造方法であって、以下を特徴とする方法；
［Ａ］化合物（Ａ）
【化５】
2010532771.tif 000075
を、先ず、不活性溶媒中、塩基の存在下、式（ＩＩ）
【化６】
2010532771.tif 000076
（式中、Ｒ２は請求項１ないし請求項３に記載の意味を有し、
そして、Ｑは、塩素、臭素またはヨウ素などの脱離基である）
の化合物を用いて、式（ＩＩＩ）
【化７】
2010532771.tif 000077
（式中、ＱおよびＲ２は、上記の意味を有する）
の化合物に変換し、次いで、最後のものを、不活性溶媒中、式（ＩＶ）
【化８】
2010532771.tif 000078
（式中、Ｒ１、Ｒ３およびＲ４は、各々請求項１ないし請求項３に記載の意味を有し、
ＰＧは、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）またはベンジルオキシカルボニル（Ｚ）などのアミノ保護基であり、
そして、Ｘは、ＯまたはＳである）
のα−アミノカルボン酸またはα−アミノチオカルボン酸のセシウム塩と反応させ、式（Ｖ）
【化９】
2010532771.tif 000079
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、ＰＧおよびＸは、各々上記の意味を有する）
の化合物を得、続いて、保護基ＰＧを除去し、式（Ｉ−Ａ）
【化１０】
2010532771.tif 000080
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＸは、各々上記の意味を有する）
の化合物をもたらす、
または、
［Ｂ］化合物（Ａ）を、不活性溶媒中、塩基の存在下で、式（ＶＩ）
【化１１】
2010532771.tif 000081
（式中、ＰＧは上記の意味を有し、
Ｒ１Ａは、ヒドロキシまたは（Ｃ１−Ｃ４）−アルコキシにより置換されていてもよい（Ｃ１−Ｃ４）−アルキルであり、そして、
Ｌ１は、１個のＣＨ２基がＯ原子により置き換えられていてもよい（Ｃ１−Ｃ４）−アルカンジイル基である）
の化合物と反応させ、式（ＶＩＩ）
【化１２】
2010532771.tif 000082
（式中、Ｒ１Ａ、Ｌ１およびＰＧは、各々上記の意味を有する）
の化合物を得、続いて、保護基ＰＧを除去し、式（Ｉ−Ｂ）
【化１３】
2010532771.tif 000083
（式中、Ｒ１ＡおよびＬ１は、上記の意味を有する）
の化合物をもたらす、
または、
［Ｃ］化合物（Ｂ）
【化１４】
2010532771.tif 000084
を、先ず、式（ＶＩＩＩ）
【化１５】
2010532771.tif 000085
｛式中、ＰＧ、Ｒ１、Ｒ２およびＲ５は、各々請求項１ないし請求項３に記載の意味を有し、そして、
Ｌ２は、（ＣＨ２）２またはＣＲ３Ｒ４基（式中、Ｒ３およびＲ４は、各々請求項１ないし請求項３に記載の意味を有する）である｝
の化合物に変換し、次いで、後者を、不活性溶媒中、塩基の存在下、式（ＩＸ）
【化１６】
2010532771.tif 000086
の化合物と反応させ、式（Ｘ）
【化１７】
2010532771.tif 000087
（式中、ＰＧ、Ｌ２、Ｒ１、Ｒ２およびＲ５は、各々上記の意味を有する）
の化合物を得、続いて、保護基ＰＧを除去し、式（Ｉ−Ｃ）
【化１８】
2010532771.tif 000088
（式中、Ｌ２、Ｒ１、Ｒ２およびＲ５は、各々上記の意味を有する）
の化合物をもたらす、
または、
［Ｄ］化合物（Ａ）を、不活性溶媒中、塩基の存在下で、式（ＸＩ）
【化１９】
2010532771.tif 000089
（式中、Ｌ１は、１個のＣＨ２基がＯ原子により置き換えられていてもよい（Ｃ１−Ｃ４）−アルカンジイル基であり、そして、
ＰＧ１およびＰＧ２は、相互に独立して、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）、ベンジルオキシカルボニル（Ｚ）またはｐ−メトキシベンジル（ＰＭＢ）などのアミノ保護基であり、同一であっても異なっていてもよい）
の化合物と反応させ、式（ＸＩＩ）
【化２０】
2010532771.tif 000090
（式中、Ｌ１、ＰＧ１およびＰＧ２は、各々上記の意味を有する）
の化合物を得、続いて、保護基ＰＧ１およびＰＧ２を同時または連続的に除去し、式（Ｉ−Ｄ）
【化２１】
2010532771.tif 000091
（式中、Ｌ１は上記の意味を有する）
の化合物をもたらし、
そして、各場合で得られる式（Ｉ−Ａ）、（Ｉ−Ｂ）、（Ｉ−Ｃ）および（Ｉ−Ｄ）の化合物を、必要に応じて、適当な（ｉ）溶媒および／または（ｉｉ）酸により、それらの溶媒和物、塩および／または塩の溶媒和物に変換する。
【請求項５】
疾患の処置および／または予防のための、請求項１ないし請求項３のいずれかに記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項６】
血栓塞栓性障害の処置および／または予防用の医薬を製造するための、請求項１ないし請求項３のいずれかに記載の式（Ｉ）の化合物の使用。
【請求項７】
請求項１ないし請求項３のいずれかに記載の式（Ｉ）の化合物を、必要に応じて、不活性、非毒性の医薬的に適する補助剤と組み合わせて含む、医薬。
【請求項８】
請求項１ないし請求項３のいずれかに記載の式（Ｉ）の化合物を、さらなる有効成分と組み合わせて含む、医薬。
【請求項９】
血栓塞栓性障害の処置および／または予防のための、請求項７または請求項８に記載の医薬。
【請求項１０】
静脈内使用のための請求項７ないし請求項９のいずれかに記載の医薬。
【請求項１１】
少なくとも１種の請求項１ないし請求項３のいずれかに記載の式（Ｉ）の化合物または請求項７ないし請求項１０のいずれかに記載の医薬を使用する、ヒトおよび動物における血栓塞栓性障害の処置および／または予防方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本願は、５−クロロ−Ｎ−（｛（５Ｓ）−３−［２−フルオロ−４−（３−オキソモルホリン−４−イル）フェニル］−２−オキソ−１,３−オキサゾリジン−５−イル｝メチル）チオフェン−２−カルボキサミドのプロドラッグ誘導体、それらの製造方法、疾患の処置および／または予防のためのそれらの使用、並びに、疾患、特に血栓塞栓性障害の処置および／または予防用の医薬を製造するためのそれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
プロドラッグは、実際の有効成分が遊離する前に、１つまたはそれ以上の段階において、インビボで酵素的および／または化学的な生物変換を受ける有効成分の誘導体である。プロドラッグの残基は、通常、基礎となる有効成分の特性のプロフィールを改善するために使用される［P. Ettmayer et al., J. Med. Chem. 47, 2393 (2004)］。これに関して、最良の効果のプロフィールを達成するために、プロドラッグの残基の設計および所望の遊離メカニズムを、個々の有効成分、適応症、作用部位および投与経路と非常に正確に調和させることが必要である。多数の医薬が、基礎となる有効成分と比較して改良されたバイオアベイラビリティーを示すプロドラッグとして投与され、それは、例えば、物理化学的プロフィール、特に、溶解性、能動的または受動的吸収特性または組織特異的分布を改良することにより達成される。プロドラッグに関する広範な文献から言及し得る例は、H. Bundgaard (Ed.), Design of Prodrugs: Bioreversible derivatives for various functional groups and chemical entities, Elsevier Science Publishers B.V., 1985 である。
【０００３】
５−クロロ−Ｎ−（｛（５Ｓ）−３−［２−フルオロ−４−（３−オキソモルホリン−４−イル）フェニル］−２−オキソ−１,３−オキサゾリジン−５−イル｝メチル）チオフェン−２−カルボキサミド［化合物（Ａ）］は、血液凝固の調節において必須の機能を果たすセリンプロテアーゼＸａ因子の、経口で有効な直接的阻害剤である。オキサゾリジノン化合物は、現在、血栓塞栓性障害の予防および処置用の潜在的な新しい有効医薬成分として、綿密な臨床試験を受けている [S. Roehrig et al., J. Med. Chem. 48, 5900 (2005)]。
【化１】
2010532771.tif 000002
【０００４】
しかしながら、化合物（Ａ）は、水および生理的媒体において限られた溶解性しか有さず、このことは、例えば、有効成分の静脈内投与を困難にしている。従って、上述の媒体において改善された溶解性を有し、同時に、投与後に患者の体内での有効成分（Ａ）の遊離の制御を可能にする、化合物（Ａ）の誘導体またはプロドラッグを同定することが、本発明の目的であった。
【０００５】
ＷＯ２００５／０２８４７３は、経口のバイオアベイラビリティーの上昇に役立つオキサゾリジノンのアシルオキシメチルカルバメートプロドラッグを記載している。ＷＯ０１／００６２２は、イノシン−５'−一リン酸デヒドロゲナーゼのカルバメート阻害剤のアシルプロドラッグを開示している。基礎となる有効成分を多段階の活性化メカニズムにより遊離させるオキサゾリジノン類のアミドプロドラッグのさらなるタイプは、ＷＯ０３／００６４４０に記載されている。
【０００６】
本発明は、一般式（Ｉ）
【化２】
2010532771.tif 000003
［式中、
Ｒ１は、水素、または、ヒドロキシもしくは（Ｃ１−Ｃ４）−アルコキシにより置換されていてもよい（Ｃ１−Ｃ４）−アルキルであり、
Ｒ２は、水素または（Ｃ１−Ｃ４）−アルキルであり、
そして、
Ｌは、１個のＣＨ２基がＯ原子で置き換えられていてもよい（Ｃ１−Ｃ４）−アルカンジイル基であるか、または、式
【化３】
2010532771.tif 000004
｛式中、
＊は、Ｎ原子への結合点を意味し、
Ｒ３は、天然α−アミノ酸またはそのホモログもしくは異性体の側鎖の基であるか、
または、
Ｒ３は、Ｒ１に結合しており、この２つが一体となって（ＣＨ２）３または（ＣＨ２）４基を形成しており、
Ｒ４は、水素またはメチルであり、
Ｒ５は（Ｃ１−Ｃ４）−アルキルであり、
そして、
Ｒ６は、水素または（Ｃ１−Ｃ４）−アルキルである｝
の基である］
の化合物、並びに、それらの塩、溶媒和物および塩の溶媒和物に関する。
【０００７】
本発明による化合物は、式（Ｉ）の化合物およびそれらの塩、溶媒和物および塩の溶媒和物、式（Ｉ）に包含される後述する式の化合物およびそれらの塩、溶媒和物および塩の溶媒和物、並びに、式（Ｉ）に包含される例示的実施態様として後述する化合物およびそれらの塩、溶媒和物および塩の溶媒和物（後述する式（Ｉ）に包含される化合物が、既に塩、溶媒和物および塩の溶媒和物でない場合に）である。
【０００８】
本発明による化合物は、それらの構造によって、立体異性体（エナンチオマー、ジアステレオマー）で存在し得る。従って、本発明は、エナンチオマーまたはジアステレオマーおよびそれらの各々の混合物に関する。そのようなエナンチオマーおよび／またはジアステレオマーの混合物から、立体異性的に純粋な構成分を既知の方法で単離できる。
本発明による化合物が互変異性体で存在できる場合、本発明は、全ての互変異性体を含む。
【０００９】
本発明の目的上、好ましい塩は、本発明による化合物の生理的に許容し得る塩である。しかしながら、それら自体は医薬適用に適さないが、例えば本発明による化合物の単離または精製に使用できる塩も含まれる。
【００１０】
本発明による化合物の生理的に許容し得る塩には、鉱酸、カルボン酸およびスルホン酸の酸付加塩、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ナフタレンジスルホン酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸、乳酸、酒石酸、リンゴ酸、クエン酸、フマル酸、マレイン酸および安息香酸の塩が含まれる。
【００１１】
本発明の目的上、溶媒和物は、固体または液体状態で、溶媒分子との配位により錯体を形成している本発明による化合物の形態を表す。水和物は、配位が水と起こる、溶媒和物の特別な形態である。本発明に関して、好ましい溶媒和物は水和物である。
【００１２】
本発明に関して、断りのない限り、置換基は、以下の意味を有する：
（Ｃ１−Ｃ４）−アルキルおよび（Ｃ１−Ｃ３）−アルキルは、本発明に関して、各々１個ないし４個および１個ないし３個の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖のアルキルラジカルである。１個ないし３個の炭素原子を有する直鎖のアルキルラジカルが好ましい。好ましく言及し得る例は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチルである。
【００１３】
（Ｃ１−Ｃ４）−アルコキシは、本発明に関して、１個ないし４個の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖のアルコキシラジカルである。好ましく言及し得る例は、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシである。
【００１４】
（Ｃ１−Ｃ４）−アルカンジイルは、本発明に関して、１個ないし４個の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖の二価アルキルラジカルである。２個ないし４個の炭素原子を有する直鎖のアルカンジイルラジカルが好ましい。好ましく言及し得る例は、メチレン、１,２−エチレン、エタン−１,１−ジイル、１,３−プロピレン、プロパン−１,１−ジイル、プロパン−１,２−ジイル、プロパン−２,２−ジイル、１,４−ブチレン、ブタン−１,２−ジイル、ブタン−１,３−ジイル、ブタン−２,３−ジイルである。
【００１５】
Ｒ３の意味におけるα−アミノ酸の側鎖の基は、天然産生α−アミノ酸の側鎖の基およびこれらのα−アミノ酸のホモログおよび異性体の側鎖の基の両方を含む。α−アミノ酸は、これに関して、α−アミノ酸は、ＬおよびＤ配置の両方を有し得るか、または、Ｌ体およびＤ体の混合物であり得る。言及し得る側鎖の基の例は、水素（グリシン）、メチル（アラニン）、プロパン−２−イル（バリン）、プロパン−１−イル（ノルバリン）、２−メチルプロパン−１−イル（ロイシン）、１−メチルプロパン−１−イル（イソロイシン）、ブタン−１−イル（ノルロイシン）、フェニル（２−フェニルグリシン）、ベンジル（フェニルアラニン）、ｐ−ヒドロキシベンジル（チロシン）、インドール−３−イルメチル（トリプトファン）、イミダゾール−４−イルメチル（ヒスチジン）、ヒドロキシメチル（セリン）、２−ヒドロキシエチル（ホモセリン）、１−ヒドロキシエチル（スレオニン）、メルカプトメチル（システイン）、メチルチオメチル（Ｓ−メチルシステイン）、２−メルカプトエチル（ホモシステイン）、２−メチルチオエチル（メチオニン）、カルバモイルメチル（アスパラギン）、２−カルバモイルエチル（グルタミン）、カルボキシメチル（アスパラギン酸）、２−カルボキシエチル（グルタミン酸）、４−アミノブタン−１−イル（リジン）、４−アミノ−３−ヒドロキシブタン−１−イル（ヒドロキシリジン）、３−アミノプロパン−１−イル（オルニチン）、３−グアニジノプロパン−１−イル（アルギニン）、３−ウレイドプロパン−１−イル（シトルリン）である。Ｒ３の意味における好ましいα−アミノ酸の側鎖の基は、水素（グリシン）、メチル（アラニン）、プロパン−２−イル（バリン）、プロパン−１−イル（ノルバリン）、イミダゾール−４−イルメチル（ヒスチジン）、ヒドロキシメチル（セリン）、１−ヒドロキシエチル（スレオニン）、カルバモイルメチル（アスパラギン）、２−カルバモイルエチル（グルタミン）、４−アミノブタン−１−イル（リジン）、３−アミノプロパン−１−イル（オルニチン）、３−グアニジノプロパン−１−イル（アルギニン）である。各場合でＬ配置が好ましい。
【００１６】
本発明による化合物中のラジカルが置換されている場合、そのラジカルは、断りのない限り、一置換または多置換されていてよい。本発明に関して、１回より多く出てくる全てのラジカルは、相互に独立の意味を有する。１個または２個の同一かまたは異なる置換基による置換が好ましい。１個の置換基による置換がことさら特に好ましい。
【００１７】
好ましいのは、式中、
Ｒ１が、水素または（Ｃ１−Ｃ４）−アルキルであり、
Ｒ２が水素であり、
そして、
Ｌが、（Ｃ２−Ｃ４）−アルカンジイル基であるか、または、式
【化４】
2010532771.tif 000005
｛式中、
＊は、Ｎ原子への結合点を意味し、
Ｒ３は、水素、メチル、プロパン−２−イル、プロパン−１−イル、イミダゾール−４−イルメチル、ヒドロキシメチル、１−ヒドロキシエチル、カルバモイルメチル、２−カルバモイルエチル、４−アミノブタン−１−イル、３−アミノプロパン−１−イルまたは３−グアニジノプロパン−１−イルであるか、
または、
Ｒ３は、Ｒ１に結合しており、この２つが一体となって（ＣＨ２）３または（ＣＨ２）４基を形成しており、
Ｒ４は、水素またはメチルであり、
Ｒ５はメチルであり、
そして、
Ｒ６は、水素またはメチルである｝
の基である、
式（Ｉ）の化合物、並びに、それらの塩、溶媒和物および塩の溶媒和物である。
【００１８】
これに関して、特に重要なのは、Ｒ１が水素または（Ｃ１−Ｃ３）−アルキルである式（Ｉ）の化合物である。
また、特に重要なのは、Ｌが直鎖の（Ｃ２−Ｃ４）−アルカンジイル基である式（Ｉ）の化合物である。
【００１９】
特に好ましいのは、式中、
Ｒ１が、水素、メチルまたはｎ−ブチルであり、
Ｒ２が水素であり、
そして、
Ｌが、ＣＨ２ＣＨ２基であるか、または、式
【化５】
2010532771.tif 000006
｛式中、
＊は、Ｎ原子への結合点を意味し、
Ｒ３は、水素、メチル、プロパン−２−イル、プロパン−１−イル、イミダゾール−４−イルメチル、ヒドロキシメチル、１−ヒドロキシエチル、カルバモイルメチル、２−カルバモイルエチル、４−アミノブタン−１−イル、３−アミノプロパン−１−イルまたは３−グアニジノプロパン−１−イルであるか、
または、
Ｒ３は、Ｒ１に結合しており、この２つが一体となって（ＣＨ２）３または（ＣＨ２）４基を形成しており、
Ｒ４は、水素またはメチルであり、
そして、
Ｒ６は、水素またはメチルである｝
の基である、
式（Ｉ）の化合物、並びに、それらの塩、溶媒和物および塩の溶媒和物である。
【００２０】
これに関して、特に重要なのは、Ｒ１が水素またはメチルである式（Ｉ）の化合物である。
また、特に重要なのは、Ｌが直鎖のＣＨ２ＣＨ２基である式（Ｉ）の化合物である。
【００２１】
本発明は、さらに、本発明による式（Ｉ）の化合物の製造方法に関し、それは、以下のいずれかを特徴とする；
［Ａ］化合物（Ａ）
【化６】
2010532771.tif 000007
を、先ず、不活性溶媒中、塩基の存在下、式（ＩＩ）
【化７】
2010532771.tif 000008
（式中、Ｒ２は上記の意味を有し、
そして、Ｑは、塩素、臭素またはヨウ素などの脱離基である）
の化合物を用いて、式（ＩＩＩ）
【化８】
2010532771.tif 000009
（式中、ＱおよびＲ２は、上記の意味を有する）
の化合物に変換し、
【００２２】
次いで、最後のものを、不活性溶媒中、式（ＩＶ）
【化９】
2010532771.tif 000010
（式中、Ｒ１、Ｒ３およびＲ４は、上記の意味を有し、
ＰＧは、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）またはベンジルオキシカルボニル（Ｚ）などのアミノ保護基であり、
そして、Ｘは、ＯまたはＳである）
のα−アミノカルボン酸またはα−アミノチオカルボン酸のセシウム塩と反応させ、式（Ｖ）
【化１０】
2010532771.tif 000011
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、ＰＧおよびＸは、上記の意味を有する）
の化合物を得、続いて、保護基ＰＧを常套の方法により除去し、式（Ｉ−Ａ）
【化１１】
2010532771.tif 000012
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＸは、上記の意味を有する）
の化合物をもたらす、
【００２３】
または、
［Ｂ］化合物（Ａ）を、不活性溶媒中、塩基の存在下で、式（ＶＩ）
【化１２】
2010532771.tif 000013
（式中、ＰＧは上記の意味を有し、
Ｒ１Ａは、ヒドロキシまたは（Ｃ１−Ｃ４）−アルコキシにより置換されていてもよい（Ｃ１−Ｃ４）−アルキルであり、そして、
Ｌ１は、１個のＣＨ２基がＯ原子により置き換えられていてもよい（Ｃ１−Ｃ４）−アルカンジイル基である）
の化合物と反応させ、式（ＶＩＩ）
【化１３】
2010532771.tif 000014
（式中、Ｒ１Ａ、Ｌ１およびＰＧは、各々上記の意味を有する）
の化合物を得、続いて、保護基ＰＧを常套の方法により除去し、式（Ｉ−Ｂ）
【化１４】
2010532771.tif 000015
（式中、Ｒ１ＡおよびＬ１は、上記の意味を有する）
の化合物をもたらす、
【００２４】
または、
［Ｃ］化合物（Ｂ）
【化１５】
2010532771.tif 000016
を、先ず、ペプチド化学の標準的な方法により、式（ＶＩＩＩ）
【化１６】
2010532771.tif 000017
｛式中、ＰＧ、Ｒ１、Ｒ２およびＲ５は、各々上記の意味を有し、そして、
Ｌ２は、（ＣＨ２）２またはＣＲ３Ｒ４基（式中、Ｒ３およびＲ４は、各々上記の意味を有する）である｝
の化合物に変換し、次いで、後者を、不活性溶媒中、塩基の存在下、式（ＩＸ）
【化１７】
2010532771.tif 000018
の化合物と反応させ、式（Ｘ）
【化１８】
2010532771.tif 000019
（式中、ＰＧ、Ｌ２、Ｒ１、Ｒ２およびＲ５は、各々上記の意味を有する）
の化合物を得、続いて、保護基ＰＧを常套の方法により除去し、式（Ｉ−Ｃ）
【化１９】
2010532771.tif 000020
（式中、Ｌ２、Ｒ１、Ｒ２およびＲ５は、各々上記の意味を有する）
の化合物をもたらす、
【００２５】
または、
［Ｄ］化合物（Ａ）を、不活性溶媒中、塩基の存在下で、式（ＸＩ）
【化２０】
2010532771.tif 000021
（式中、Ｌ１は、１個のＣＨ２基がＯ原子により置き換えられていてもよい（Ｃ１−Ｃ４）−アルカンジイル基であり、そして、
ＰＧ１およびＰＧ２は、相互に独立して、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）、ベンジルオキシカルボニル（Ｚ）またはｐ−メトキシベンジル（ＰＭＢ）などのアミノ保護基であり、同一であっても異なっていてもよい）
の化合物と反応させ、式（ＸＩＩ）
【化２１】
2010532771.tif 000022
（式中、Ｌ１、ＰＧ１およびＰＧ２は、各々上記の意味を有する）
の化合物を得、続いて、保護基ＰＧ１およびＰＧ２を常套の方法により同時または連続的に除去し、式（Ｉ−Ｄ）
【化２２】
2010532771.tif 000023
（式中、Ｌ１は上記の意味を有する）
の化合物をもたらし、
そして、各場合で得られる式（Ｉ−Ａ）、（Ｉ−Ｂ）、（Ｉ−Ｃ）および（Ｉ−Ｄ）の化合物を、必要に応じて、適当な（ｉ）溶媒および／または（ｉｉ）酸により、それらの溶媒和物、塩および／または塩の溶媒和物に変換する。
【００２６】
式（Ｉ−Ａ）、（Ｉ−Ｂ）、（Ｉ−Ｃ）および（Ｉ−Ｄ）の化合物は、上記の方法による製造中に、それらの塩の形態で直接得てもよい。これらの塩は、必要に応じて、不活性溶媒中で塩基を用いる処理により、クロマトグラフィー的方法により、または、イオン交換樹脂により、各々の遊離塩基に変換できる。
【００２７】
ラジカルＲ１、Ｒ１Ａおよび／またはＲ３中に必要に応じて存在する官能基は、好都合または必要であれば、上記の連続反応において、一時的な保護形態にあってもよい。そのような保護基並びに保護基ＰＧ、ＰＧ１およびＰＧ２の導入および除去は、これに関して、ペプチド化学から知られている常套の方法により行う［例えば、T.W. Greene and P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, Wiley, New York, 1999; M. Bodanszky and A. Bodanszky, The Practice of Peptide Synthesis, Springer-Verlag, Berlin, 1984 参照]。
【００２８】
必要に応じてＲ１、Ｒ１Ａおよび／またはＲ３中に存在するそのような保護基は、これに関して、ＰＧの除去と同時に、または、ＰＧの除去前または後の別の反応工程で、除去し得る。
【００２９】
上記方法において好ましく使用されるアミノ保護基ＰＧ、ＰＧ１またはＰＧ２は、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）、ベンジルオキシカルボニル（Ｚ）またはｐ−メトキシベンジル（ＰＭＢ）である。これらの保護基の除去は、常套の方法により、好ましくは、塩化水素、臭化水素またはトリフルオロ酢酸などの強酸と、ジオキサン、ジクロロメタンまたは酢酸などの不活性溶媒中で反応させることにより、実施する；必要に応じて、さらなる不活性溶媒を用いずに除去を実施することも可能である。
【００３０】
変換（Ｂ）→（ＶＩＩＩ）は、化合物（Ｂ）を適切に保護されたジペプチド誘導体を用いてアシル化することにより、または、必要に応じて適切に保護された個々のアミノ酸成分を連続的にカップリングすることにより、ペプチド化学の標準的な方法で行う［例えば、M. Bodanszky, Principles of Peptide Synthesis, Springer-Verlag, Berlin, 1993; H.-D. Jakubke and H. Jeschkeit, Aminosaeuren, Peptide, Proteine, Verlag Chemie, Weinheim, 1982 を参照]。
【００３１】
工程（Ａ）＋（ＩＩ）→（ＩＩＩ）、（Ａ）＋（ＶＩ）→（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）＋（ＩＸ）→（Ｘ）および（Ａ）＋（ＸＩ）→（ＸＩＩ）で好ましく使用される不活性溶媒は、テトラヒドロフラン、Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミドまたはジメチルスルホキシドである；Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミドが特に好ましい。これらの反応において特に適する塩基は、水素化ナトリウムである。上述の反応は、一般的に、０℃ないし＋４０℃の温度範囲で、大気圧下で実施する。
【００３２】
工程（ＩＩＩ）＋（ＩＶ）→（Ｖ）は、好ましくは、溶媒としてのＮ,Ｎ−ジメチルホルムアミド中で行う。この反応は、一般的に、０℃ないし＋５０℃の温度範囲で、好ましくは＋２０℃ないし＋５０℃で、大気圧下で実施する。この反応は、また、超音波処理により有利に実施できる。
【００３３】
式（ＩＩ）、（ＩＶ）、（ＶＩ）、（ＩＸ）および（ＸＩ）の化合物は、購入できるか、文献から知られているか、または、文献中の常套の方法により製造できる。化合物（Ａ）の製造は、実施例に記載されている。
【００３４】
本発明による化合物の製造は、以下の合成スキームにより例示説明できる：
スキーム１
【化２３】
2010532771.tif 000024
［Ｘ＝ＯまたはＳ；ＰＧ＝アミノ保護基、例えば、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）またはベンジルオキシカルボニル（Ｚ）］
【００３５】
スキーム２
【化２４】
2010532771.tif 000025
［ｍ＝１−４；ＰＧ＝アミノ保護基、例えば、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）またはベンジルオキシカルボニル（Ｚ）］
【００３６】
スキーム３
【化２５】
2010532771.tif 000026
［ｎ＝１または２；ＰＧ＝アミノ保護基、例えば、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）またはベンジルオキシカルボニル（Ｚ）］
【００３７】
スキーム４
【化２６】
2010532771.tif 000027
［ｍ＝１−４；ＰＧ１、ＰＧ２＝アミノ保護基、例えば、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）、ベンジルオキシカルボニル（Ｚ）またはｐ−メトキシベンジル（ＰＭＢ）］
【００３８】
本発明による化合物およびそれらの塩は、有効成分化合物（Ａ）の有用なプロドラッグである。一方では、それらは、ｐＨ４で良好な安定性を示し、他方では、それらは生理的ｐＨおよびインビボで、有効成分化合物（Ａ）への効率的な変換を示す。本発明による化合物は、さらに、水および他の生理的に耐容される媒体中での良好な溶解性を有し、それらを特に静脈内投与での治療的使用に適するものにしている。
【００３９】
本発明はさらに、障害、好ましくは血栓塞栓性障害および／または血栓塞栓性合併症の処置および／または予防のための、本発明による化合物の使用に関する。
【００４０】
本発明に関して、「血栓塞栓性障害」には、特に、ＳＴ上昇型心筋梗塞（ＳＴＥＭＩ）または非ＳＴ上昇型心筋梗塞（非ＳＴＥＭＩ）、安定狭心症、不安定狭心症、血管形成術または大動脈冠動脈バイパス術などの冠動脈介入後の再閉塞および再狭窄、末梢動脈閉塞疾患、肺栓塞症、深部静脈血栓および腎静脈血栓、一過性虚血発作、並びに、血栓性および血栓塞栓性卒中などの障害が含まれる。
【００４１】
従って、これらの物質は、例えば心房細動などの急性、間欠性または持続性心不整脈を有する患者、および、電気的除細動を受けている者、また、心臓弁疾患を有するか、または人工心臓弁を有する患者における、心原性血栓塞栓症、例えば、脳虚血、卒中および全身性血栓塞栓症および虚血の予防および処置にも適する。加えて、本発明による化合物は、汎発性血管内凝固症候群（ＤＩＣ）の処置に適する。
【００４２】
血栓塞栓性合併症は、また、微小血管障害性溶血性貧血、血液透析などの体外循環、および、心臓代用弁と関連して起こる。
【００４３】
さらに、本発明による化合物は、アテローム硬化性血管障害および炎症障害、例えば筋骨格系のリウマチ性障害の予防および／または処置にも、さらに同様に、アルツハイマー病の予防および／または処置にも適する。さらに、本発明による化合物は、腫瘍成長および転移形成の阻害、微小血管障害、加齢に伴う黄斑変性症、糖尿病性網膜症、糖尿病性腎症および他の微小血管の障害、また、例えば、腫瘍患者における、特に大きい外科手術または化学療法もしくは放射線治療を受けている者における、静脈血栓塞栓症などの血栓塞栓性合併症の予防および処置にも用いることができる。
【００４４】
本発明は、さらに、障害、特に上述の障害の処置および／または予防のための、本発明による化合物の使用に関する。
【００４５】
本発明は、さらに、障害、特に上述の障害の処置および／または予防用の医薬を製造するための、本発明による化合物の使用に関する。
【００４６】
本発明は、さらに、本発明による化合物を使用する、障害、特に上述の障害の処置および／または予防方法に関する。
【００４７】
本発明は、さらに、特に上述の障害の処置および／または予防のための、本発明による化合物および１種またはそれ以上のさらなる有効成分を含む医薬に関する。好ましく言及し得る適当な組合せの有効成分の例は、以下のものである：
・脂質低下剤、特にＨＭＧ−ＣｏＡ（３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリル−補酵素Ａ）リダクターゼ阻害剤；
・冠血管治療剤／血管拡張剤、特にＡＣＥ（アンジオテンシン変換酵素）阻害剤；ＡＩＩ（アンジオテンシンＩＩ）受容体アンタゴニスト；β−アドレナリン受容体アンタゴニスト；アルファ−１−アドレナリン受容体アンタゴニスト；利尿剤；カルシウムチャネル遮断剤；環状グアノシン一リン酸（ｃＧＭＰ）の上昇をもたらす物質、例えば、可溶性グアニル酸シクラーゼの刺激剤；
・プラスミノーゲン活性化剤（血栓溶解剤／線維素溶解剤）および血栓溶解／線維素溶解を高める化合物、例えば、プラスミノーゲン活性化因子阻害因子の阻害剤（ＰＡＩ阻害剤）またはトロンビン活性型線維素溶解阻害因子の阻害剤（ＴＡＦＩ阻害剤）；
・凝血活性を有する物質（抗凝血剤）；
・血小板凝集阻害性物質（血小板凝集阻害剤）；
・フィブリノーゲン受容体アンタゴニスト（糖タンパク質ＩＩｂ／ＩＩＩａアンタゴニスト）；
・並びに抗不整脈薬。
【００４８】
本発明は、さらに、少なくとも１種の本発明による化合物を、通常１種またはそれ以上の不活性、非毒性の医薬的に適する補助剤と共に含む医薬、および上述の目的でのそれらの使用に関する。
【００４９】
本発明による化合物は、全身的および／または局所的に作用できる。この目的で、それらは、適する方法で、例えば、経口、非経腸、肺または鼻の経路で、投与できる。本発明による化合物は、これらの投与経路に適する投与形で投与できる。
【００５０】
経口投与に適するのは、先行技術に準じて機能し、本発明による化合物を迅速におよび／または改変された様式で送達し、本発明による化合物を結晶および／または無定形および／または溶解形態で含有する投与形であり、例えば、錠剤（非被覆または被覆錠剤、例えば、腸溶性被覆、または、不溶であるか、または、遅れて溶解し、本発明による化合物の放出を制御する被覆を有する錠剤）、口中で迅速に崩壊する錠剤、またはフィルム／オブラート、フィルム／凍結乾燥剤、カプセル剤（例えば、ハードまたはソフトゼラチンカプセル剤）、糖衣錠、顆粒剤、ペレット剤、散剤、乳剤、懸濁剤、エアゾール剤または液剤などである。
【００５１】
非経腸投与は、吸収段階を回避して（例えば、静脈内、動脈内、心臓内、脊髄内または腰椎内に）、または吸収を含めて（例えば、筋肉内、皮下、皮内、経皮または腹腔内）、行うことができる。非経腸投与に適する投与形は、なかんずく、液剤、懸濁剤、乳剤、凍結乾燥剤または滅菌粉末剤の形態の注射および点滴用製剤である。
【００５２】
他の投与経路に適するのは、例えば、粉末吸入器または噴霧器などの吸入用医薬形、または、点鼻薬、液またはスプレーなどの、鼻腔投与できる医薬形である。
非経腸投与、特に静脈内投与が好ましい。
【００５３】
本発明による化合物は、上述の投与形に変換できる。これは、不活性、非毒性、医薬的に適する補助剤と混合することにより、それ自体既知の方法で行うことができる。これらの補助剤には、なかんずく、担体（例えば微結晶セルロース、ラクトース、マンニトール）、溶媒（例えば液体ポリエチレングリコール類）、乳化剤および分散剤または湿潤剤（例えばドデシル硫酸ナトリウム、ポリオキシソルビタンオレエート）、結合剤（例えばポリビニルピロリドン）、合成および天然ポリマー（例えばアルブミン）、安定化剤（例えば抗酸化剤、例えばアスコルビン酸など）、着色料（例えば無機色素、例えば酸化鉄など）および香味および／または臭気の隠蔽剤が含まれる。
【００５４】
一般に、非経腸投与で約０.００１ないし１ｍｇ／体重ｋｇ、好ましくは約０.０１ないし０.５ｍｇ／体重ｋｇの量を投与するのが、有効な結果を達成するために有利であると明らかになり、経口投与では、投与量は、約０.０１ないし１００ｍｇ／体重ｋｇ、好ましくは約０.０１ないし２０ｍｇ／体重ｋｇ、ことさら特に好ましくは約０.１ないし１０ｍｇ／体重ｋｇである。
【００５５】
それにも拘わらず、必要に応じて、特に、体重、投与経路、有効成分に対する個体の応答、製剤の性質および投与を行う時間または間隔に応じて、上述の量から逸脱することが必要であり得る。従って、上述の最小量より少なくても十分な場合があり、一方、上述の上限を超えなければならない場合もある。大量に投与する場合、これらを１日に亘る数回の個別投与に分割するのが望ましいことがある。
【００５６】
以下の例示的実施態様は、本発明を例示説明する。本発明は、これらの実施例に限定されない。
以下の試験および実施例における百分率のデータは、断りの無い限り、重量パーセントである；部は、重量部である。液体／液体溶液の溶媒比、希釈比および濃度のデータは、各場合で体積に基づく。
【実施例】
【００５７】
Ａ. 実施例
略号および頭字語：
【表１】
2010532771.tif 000028
【００５８】
ＬＣ−ＭＳおよびＨＰＬＣの方法：
方法１：装置：DAD 検出を備えたHP 1100；カラム：Kromasil 100 RP-18, 60 mm x 2.1 mm, 3.5 μm；移動相Ａ：過塩素酸（７０％濃度）５ｍｌ／水１ｌ、移動相Ｂ：アセトニトリル；グラジエント：０分２％Ｂ→０.５分２％Ｂ→４.５分９０％Ｂ→６.５分９０％Ｂ→６.７分２％Ｂ→７.５分２％Ｂ；流速：０.７５ｍｌ／分；カラム温度：３０℃；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【００５９】
方法２：装置：DAD 検出を備えたHP 1100；カラム：Kromasil 100 RP-18, 60 mm x 2.1 mm, 3.5 μm；移動相Ａ：過塩素酸（７０％濃度）５ｍｌ／水１ｌ、移動相Ｂ：アセトニトリル；グラジエント：０分２％Ｂ→０.５分２％Ｂ→４.５分９０％Ｂ→９分０％Ｂ→９.２分２％Ｂ→１０分２％Ｂ；流速：０.７５ｍｌ／分；カラム温度：３０℃；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【００６０】
方法３（ＬＣ−ＭＳ）：ＭＳ装置タイプ：Micromass ZQ；ＨＰＬＣ装置タイプ：HP 1100 Series; UV DAD；カラム：Phenomenex Gemini 3μ 30 mm x 3.00 mm；移動相Ａ：水１ｌ＋５０％濃度のギ酸０.５ｍｌ、移動相Ｂ：アセトニトリル１ｌ＋５０％濃度のギ酸０.５ｍｌ；グラジエント：０.０分９０％Ａ→２.５分３０％Ａ→３.０分５％Ａ→４.５分５％Ａ；流速：０.０分１ｍｌ／分,２.５分／３.０分／４.５分２ｍｌ／分；オーブン：５０℃；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【００６１】
方法４（ＬＣ−ＭＳ）：装置：Micromass GCT, GC6890；カラム：Restek RTX-35MS, 30 m x 250 μm x 0.25 μm；一定のヘリウム流速：０.８８ｍｌ／分；オーブン：６０℃；入口：２５０℃；グラジエント：６０℃（０.３０分間維持）、５０℃／分→１２０℃、１６℃／分→２５０℃、３０℃／分→３００℃（１.７分間維持）。
【００６２】
方法５（分取ＨＰＬＣ）：カラム：GROM-SIL 120 ODS-4 HE, 10 μM, 250 mm x 30 mm；流速：５０ｍｌ／分；移動相およびグラジエントのプログラム：アセトニトリル／０.１％水性ギ酸１０：９０（０−３分）、アセトニトリル／０.１％水性ギ酸１０：９０→９５：５（３−２７分）、アセトニトリル／０.１％水性ギ酸９５：５（２７−３４分）、アセトニトリル／０.１％水性ギ酸１０：９０（３４−３８分）；温度：２２℃；ＵＶ検出：２５４ｎｍ。
【００６３】
方法６（ＬＣ−ＭＳ）：装置：HPLC Agilent Series 1100 を備えた Micromass LCT; カラム: Waters Symmetry C18, 3.5 μm, 50 mm x 2.1 mm；移動相Ａ：水１ｌ＋９８ないし１００％濃度のギ酸１ｍｌ、移動相Ｂ：アセトニトリル１ｌ＋９８ないし１００％濃度のギ酸１ｍｌ；グラジエント：０分１００％Ａ→１分１００％Ａ→６分１０％Ａ→８分０％Ａ→１０分０％Ａ→１０.１分１００％Ａ→１２分１００％Ａ；流速：０−１０分０.５ｍｌ／分→１０.１分１ｍｌ／分→１２分０.５ｍｌ／分；温度：４０℃；ＵＶ検出ＤＡＤ：２０８−５００ｎｍ。
【００６４】
方法７（分析的ＨＰＬＣ）：装置：DAD996 を備えた WATERS 2695；カラム：XTerra 3.9 x 150 WAT 186000478；移動相Ａ：水２.５ｌ中の７０％濃度過塩素酸１０ｍｌ、移動相Ｂ：アセトニトリル；グラジエント：０.０分２０％Ｂ→１分２０％Ｂ→４分９０％Ｂ→９分９０％Ｂ；温度：室温；流速：１ｍｌ／分。
【００６５】
方法８（ＬＣ−ＭＳ）：装置：HPLC Agilent Series 1100 を備えた Micromass Quattro LCZ；カラム：Phenomenex Onyx Monolithic C18, 100 mm x 3 mm；移動相Ａ：水１ｌ＋５０％濃度のギ酸０.５ｍｌ、移動相Ｂ：アセトニトリル１ｌ＋５０％濃度のギ酸０.５ｍｌ；グラジエント：０.０分９０％Ａ→２分６５％Ａ→４.５分５％Ａ→６分５％Ａ；流速：２ｍｌ／分；オーブン：４０℃；ＵＶ検出：２０８−４００ｎｍ。
【００６６】
方法９（ＬＣ−ＭＳ）：ＭＳ装置タイプ：Waters (Micromass) Quattro Micro；ＨＰＬＣ装置タイプ：Agilent 1100 Series；カラム：Thermo Hypersil GOLD 3μ 20 mm x 4 mm；移動相Ａ：水１ｌ＋５０％濃度のギ酸０.５ｍｌ、移動相Ｂ：アセトニトリル１ｌ＋５０％濃度のギ酸０.５ｍｌ；グラジエント：０.０分１００％Ａ→３.０分１０％Ａ→４.０分１０％Ａ→４.０１分１００％Ａ（流速２.５ｍｌ）→５.００分１００％Ａ；オーブン：５０℃；流速：２ｍｌ／分；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【００６７】
方法１０（ＬＣ−ＭＳ）：ＭＳ装置タイプ：Micromass ZQ；ＨＰＬＣ装置タイプ：Waters Alliance 2795；カラム：Phenomenex Synergi 2.5 μ MAX-RP 100A Mercury 20 mm x 4 mm；移動相Ａ：水１ｌ＋５０％濃度のギ酸０.５ｍｌ、移動相Ｂ：アセトニトリル１ｌ＋５０％濃度のギ酸０.５ｍｌ；グラジエント：０.０分９０％Ａ→０.１分９０％Ａ→３.０分５％Ａ→４.０分５％Ａ→４.０１分９０％Ａ；流速：２ｍｌ／分；；オーブン：５０℃；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【００６８】
方法１１（分析的ＨＰＬＣ）：装置：HP1090 Series II；カラム：Waters XTerra C18-5, 3.9 mm x 150 mm WAT 186000478；移動相Ａ：水２.５ｌ中の７０％濃度の過塩素酸１０ｍｌ、移動相Ｂ：アセトニトリル；グラジエント：０.０分２０％Ｂ→１分２０％Ｂ→４分９０％Ｂ→６分９０％Ｂ→８分２０％Ｂ。温度：４０℃；流速：１ｍｌ／分。
【００６９】
方法１２（分析的ＨＰＬＣ）：装置：HP 1090 Series II；カラム：Merck Chromolith Speed ROD RP-18e, 50 mm x 4.6 mm; precolumn Chromolith Guard Cartridge Kit, RP-18e, 5-4.6 mm；移動相Ａ：過塩素酸（７０％濃度）５ｍｌ／水１ｌ、移動相Ｂ：アセトニトリル；グラジエント：０分２０％Ｂ→０.５分２０％Ｂ→３分９０％Ｂ→３.５分９０％Ｂ→３.５１分２０％Ｂ→４分２０％Ｂ；流速：５ｍｌ／分；カラム温度：４０℃；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【００７０】
方法１３（分取ＨＰＬＣ）：装置：ＵＶ検出器を備えた Gilson, カラム: Kromasil C18, 5μm/ 250 mm x 20 mm（流速：２５ｍｌ／分）；移動相Ａ：水（０.０１％トリフルオロ酢酸）、移動相Ｂ：アセトニトリル（０.０１％トリフルオロ酢酸）；グラジエント：０分５−２０％Ｂ、１０分−１５分５−２０％Ｂ、４５分９０％Ｂ、５０分９０％Ｂ；流速：２５ｍｌ／分；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【００７１】
方法１４（分取ＨＰＬＣ）：装置：ＵＶ検出器を備えた Gilson, カラム: YMC ODS AQ C18, 10μm/ 250 mm x 30 mm （流速：５０ｍｌ／分）；移動相Ａ：水（０.０１％トリフルオロ酢酸）、移動相Ｂ：アセトニトリル（０.０１％トリフルオロ酢酸）；グラジエント：０分５−２０％Ｂ、１０分−１５分５−２０％Ｂ、４５分９０％Ｂ、５０分９０％Ｂ；流速：５０ｍｌ／分；波長：２１０ｎｍ。
【００７２】
ＮＭＲ分光法：
ＮＭＲ測定は、プロトン周波数４００.１３ＭＨｚで実施した。サンプルを通常はＤＭＳＯ−ｄ６に溶解した；温度：３０２Ｋ。
【００７３】
出発化合物：
使用した出発物質は、５−クロロ−Ｎ−（｛（５Ｓ）−３−［２−フルオロ−４−（３−オキソモルホリン−４−イル）フェニル］−２−オキソ−１,３−オキサゾリジン−５−イル｝メチル）チオフェン−２−カルボキサミド［化合物（Ａ）］であった。
【化２７】
2010532771.tif 000029
【００７４】
実施例１Ａ
５−クロロチオフェン−２−カルボニルクロリド
【化２８】
2010532771.tif 000030
塩化オキサリル１３７ｍｌ（１.５７ｍｏｌ）を、ジクロロメタン３０７ｍｌ中の５−クロロチオフェン−２−カルボン酸５１.２ｇ（０.３１５ｍｍｏｌ）の懸濁液に添加した。ＤＭＦ２滴の添加後、混合物を室温で１５時間撹拌した。次いで、溶媒および過剰の塩化オキサリルをロータリーエバポレーターで除去した。残渣を減圧下で蒸留した。生成物は、７４−７８℃および４−５ｍｂａｒの圧力で沸騰した。これにより、油状物５０.５ｇ（理論値の８７％）を得、これは、冷蔵庫での保存で凝固した。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3, δ/ppm): 7.79 (d, 1H), 7.03 (d, 1H).
GC/MS (方法 4): Rt = 5.18 分.
MS (EI+, m/z): 180/182/184 (2 35Cl/37Cl) M+.
【００７５】
実施例２Ａ
（（Ｓ）−２,３−ジヒドロキシプロピル）−５−クロロチオフェン−２−カルボキサミド
（C.R. Thomas, Bayer HealthCare AG, DE-10300111-A1 (2004)より)
【化２９】
2010532771.tif 000031
１３−１５℃で、重炭酸ナトリウム４６１ｇ（４.３５ｍｏｌ）および（２Ｓ）−３−アミノプロパン−１,２−ジオール塩酸塩３５０ｇ（３.８５ｍｏｌ）を、先ず、水２.１ｌに加え、２−メチルテトラヒドロフラン９５０ｍｌを添加した。１５−１８℃で冷却しながら、トルエン１８０ｍｌ中の５−クロロチオフェン−２−カルボニルクロリド（実施例１Ａの化合物）５３５ｇ（２.９５ｍｏｌ）をこの混合物に２時間かけて滴下して添加した。後処理に、相を分離し、全部で１.５ｌのトルエンを数段階で有機相に添加した。沈殿した生成物を吸引濾過し、酢酸エチルで洗浄し、乾燥させた。これにより、生成物５９３.８ｇ（理論値の９２％）を得た。
【００７６】
実施例３Ａ
（（Ｓ）−３−ブロモ−２−ヒドロキシプロピル）−５−クロロチオフェン−２−カルボキサミド
（C.R. Thomas, Bayer HealthCare AG, DE-10300111-A1 (2004)より)
【化３０】
2010532771.tif 000032
３０分間かけて、酢酸中の３３％濃度の臭化水素の溶液３０１.７ｍｌを、２１−２６℃で、氷酢酸２５０ｍｌ中の実施例２Ａの化合物１００ｇ（０.４２３ｍｏｌ）の懸濁液に添加した。次いで無水酢酸４０ｍｌを添加し、反応混合物を６０−６５℃で３時間撹拌した。次いで、２０−２５℃で、メタノール９６０ｍｌを３０分間かけて添加した。反応混合物を還流下で２.５時間撹拌し、次いで２０−２５℃で終夜撹拌した。後処理に、溶媒を約９５ｍｂａｒの減圧下で蒸留した。ｎ−ブタノール５０ｍｌおよび水３５０ｍｌを残った懸濁液に添加した。沈殿した生成物を吸引濾過し、水で洗浄し、乾燥させた。これにより、生成物８９.８ｇ（理論値の７１％）を得た。
【００７７】
実施例４Ａ
５−クロロ−Ｎ−［（２Ｓ）−オキシラン−２−イルメチル］チオフェン−２−カルボキサミド
【化３１】
2010532771.tif 000033
粉末状炭酸カリウム１５５ｇ（１.１２ｍｏｌ）を、無水ＴＨＦ５００ｍｌ中の実施例３Ａの化合物５０ｇ（０.１６７ｍｏｌ）の溶液に添加し、混合物を室温で３日間撹拌した。次いで、無機塩を珪藻土層で吸引濾過し、各場合で１００ｍｌのＴＨＦで２回洗浄し、濾液をロータリーエバポレーターで室温で濃縮した。これにより、生成物３６ｇ（理論値の８１％）を得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): 8.81 (t, 1H), 7.68 (d, 1H), 7.19 (d, 1H), 3.55-3.48 (m, 1H), 3.29-3.22 (m, 1H), 3.10-3.06 (m, 1H), 2.75-2.72 (m, 1H), 2.57-2.54 (m, 1H).
HPLC (方法 1): Rt = 3.52 分.
MS (DCI, NH3, m/z): (35Cl/37Cl) 218/220 (M+H)+, 235/237 (M+NH4)+.
【００７８】
実施例５Ａ
Ｎ,Ｎ−ジベンジル−２−フルオロ−４−ヨードアニリン
【化３２】
2010532771.tif 000034
水１００ｍｌおよびジクロロメタン２００ｍｌの混合物中、２−フルオロ−４−ヨードアニリン２４.３７ｇ（０.１０３ｍｏｌ）、臭化ベンジル３１.８ｍｌ（０.２６７ｍｏｌ）、炭酸ナトリウム２３.９８ｇ（０.２２６ｍｏｌ）およびテトラ−ｎ−ブチルアンモニウムヨージド１.９ｇ（５.１４ｍｍｏｌ）を還流で６日間加熱した。室温に冷却後、相を互いに分離した。有機相を水および飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。濾過後、溶媒をロータリーエバポレーターで除去した。得られた残渣をシリカゲルの吸引濾過により、移動相シクロヘキサンを使用して精製した。これにより、表題化合物３５ｇ（理論値の８２％）を得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): 7.48 (1H, dd), 7.32-7.21 (m, 11H), 6.69 (dd, 1H), 4.33 (s, 4H).
HPLC (方法 1): Rt = 5.87 分.
MS (DCI, NH3, m/z): 418 (M+H)+.
【００７９】
実施例６Ａ
４−［４−（ジベンジルアミノ）−３−フルオロフェニル］モルホリン−３−オン
【化３３】
2010532771.tif 000035
実施例５Ａの化合物１.５ｇ（３.５９ｍｍｏｌ）を無水ジオキサン２０ｍｌに溶解し、モルホリノン０.４５ｇ（４.４９ｍｍｏｌ）、ヨウ化銅（Ｉ）１３７ｍｇ（０.７１９ｍｍｏｌ）、リン酸カリウム１.５３ｇ（７.１９ｍｍｏｌ）およびＮ,Ｎ'−ジメチルエチレンジアミン１５３μｌ（１.４４ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。還流器具を、僅かな減圧とアルゴンによる換気を繰り返し適用することにより不活性化した。反応混合物を還流で１５時間加熱した。この期間の後、混合物を室温に放冷した。水を添加し、混合物を酢酸エチルで抽出した。有機抽出物を水および飽和塩化ナトリウム溶液で連続的に洗浄した。抽出物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、次いで濾過し、濾液から溶媒を減圧下で除去した。残渣をシリカゲルの吸引濾過により、移動相シクロヘキサン／酢酸エチル１：１を使用して精製した。これにより、表題化合物１.３８ｇ（理論値の９８％）を得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): 7.32-7.28 (m, 9H), 7.26-7.20 (m, 2H), 7.00-6.92 (m, 2H), 4.33 (s, 4H), 4.15 (s, 2H), 3.91 (dd, 2H), 3.55 (dd, 2H).
HPLC (方法 1): Rt = 4.78 分.
MS (DCI, NH3, m/z): 391 (M+H)+.
【００８０】
実施例７Ａ
４−（４−アミノ−３−フルオロフェニル）モルホリン−３−オン
【化３４】
2010532771.tif 000036
方法１：
実施例６Ａの化合物７００ｍｇ（１.７９ｍｍｏｌ）をエタノール７０ｍｌに溶解し、パラジウム／活性炭（１０％）９５ｍｇを添加した。混合物を室温で、水素圧１ｂａｒで、１時間水素化した。次いで触媒を少量の珪藻土で濾過し、濾液をロータリーエバポレーターで濃縮した。これにより、表題化合物３７８ｍｇ（理論値の９５％）を得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): 7.04 (dd, 1H), 6.87 (dd, 1H), 6.73 (dd, 1H), 5.17 (s, broad, 2H), 4.12 (s, 2H), 3.91 (dd, 2H), 3.62 (dd, 2H).
HPLC (方法 1): Rt = 0.93 分.
MS (DCI, NH3, m/z): 211 (M+H)+, 228 (M+NH4)+.
【００８１】
方法２：
アルゴン下、ジオキサン３００ｍｌ中の２−フルオロ−４−ヨードアニリン２９.６ｇ（１２５ｍｍｏｌ）、モルホリン−３−オン［J.-M. Lehn, F. Montavon, Helv. Chim. Acta 1976, 59, 1566-1583］１５.８ｇ（１５６ｍｍｏｌ、１.２５当量）、ヨウ化銅（Ｉ）９.５ｇ（５０ｍｍｏｌ、０.４当量）、リン酸カリウム５３.１ｇ（２５０ｍｍｏｌ、２当量）およびＮ,Ｎ‘−ジメチルエチレンジアミン８.０ｍｌ（７５ｍｍｏｌ、０.６当量）の懸濁液を、還流下で終夜撹拌した。室温に冷却後、反応混合物を珪藻土層で濾過し、残渣をジオキサンで洗浄した。合わせた濾液を減圧下で濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル６０、ジクロロメタン／メタノール１００：１→１００：３）により精製した。これにより、表題化合物２４ｇ（理論値の７４％）を得た。
LC-MS (方法 3): Rt = 0.87 分; 
MS (ESIpos): m/z = 211 [M+H]+;
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ = 7.05 (dd, 1H), 6.87 (dd, 1H), 6.74 (dd, 1H), 5.14 (s, 2H), 4.11 (s, 2H), 3.92 (dd, 2H), 3.63 (dd, 2H).
【００８２】
実施例８Ａ
５−クロロ−Ｎ−［（２Ｒ）−３−｛［２−フルオロ−４−（３−オキソモルホリン−４−イル）フェニル］アミノ｝−２−ヒドロキシプロピル］チオフェン−２−カルボキサミド
【化３５】
2010532771.tif 000037
過塩素酸マグネシウム６００ｍｇ（２.６９ｍｍｏｌ）を、アセトニトリル１０ｍｌ中の実施例７Ａの生成物３７６ｍｇ（１.７９ｍｍｏｌ）および実施例４Ａの化合物４２９ｍｇ（１.９７ｍｍｏｌ）の溶液に添加し、混合物を室温で１５時間撹拌した。水を添加し、混合物を酢酸エチルで抽出した。有機抽出物を水および飽和塩化ナトリウム溶液で連続的に洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。濾過後、溶媒をロータリーエバポレーターで除去した。残渣を分取ＨＰＬＣ（方法５）により精製した。これにより、表題化合物５０３ｍｇ（理論値の６４％）を得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): 8.61 (t, 1H), 7.68 (d, 1H), 7.18 (d, 1H), 7.11 (dd, 1H),  6.97 (dd, 1H), 6.73 (dd, 1H), 5.33 (t, 1H), 5.14 (d, 1H), 4.13 (s, 2H), 3.92 (dd, 2H), 3.87-3.79 (m, 1H), 3.63 (dd, 2H), 3.39-3.22 (m, 2H, 部分的に水のシグナルが重なる), 3.21-3.15 (m, 1H), 3.08-3.02 (m, 1H).
HPLC (方法 1): Rt = 3.75 分.
MS (DCI, NH3, m/z): 428/430 (35Cl/37Cl) (M+H)+, 445/447 (M+NH4)+.
【００８３】
実施例９Ａ（化合物Ａ）
５−クロロ−Ｎ−（｛（５Ｓ）−３−［２−フルオロ−４−（３−オキソモルホリン−４−イル）フェニル］−２−オキソ−１,３−オキサゾリジン−５−イル｝メチル）チオフェン−２−カルボキサミド
【化３６】
2010532771.tif 000038
４−ジメチルアミノピリジン２.７ｍｇ（０.０２２ｍｍｏｌ）を、ブチロニトリル１０ｍｌ中の実施例８Ａの生成物４７８ｍｇ（１.１２ｍｍｏｌ）およびカルボニルジイミダゾール３６３ｍｇ（２.２４ｍｍｏｌ）の溶液に添加し、混合物を７０℃で加熱した。３日後、溶媒をロータリーエバポレーターで除去した。生成物を残渣から分取ＨＰＬＣ（方法５）により単離した。これにより、表題化合物３４４ｍｇ（理論値の６８％）を得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): 8.98 (t, 1H), 7.70 (d, 1H), 7.52 (dd, 1H), 7.48 (dd, 1H), 7.31 (dd, 1H), 7.21 (d, 1H), 4.91-4.84 (m, 1H), 4.21 (s, 2H), 4.12 (t, 1H), 3.98 (dd, 2H), 3.80 (dd, 1H), 3.76 (dd, 2H), 3.68-3.57 (m, 2H).
HPLC (方法 1): Rt = 3.82 分.
MS (DCI, NH3, m/z): 471/473 (35Cl/37Cl) (M+NH4)+.
【００８４】
実施例１０Ａ
５−クロロ−Ｎ−（クロロアセチル）−Ｎ−（｛（５Ｓ）−２−オキソ−３−［２−フルオロ−４−（３−オキソモルホリン−４−イル）フェニル］−１,３−オキサゾリジン−５−イル｝メチル）チオフェン−２−カルボキサミド
【化３７】
2010532771.tif 000039
この化合物は、実施例１３、１９または２２の工程ａ）と同様に、化合物（Ａ）をクロロアセチルクロリドと反応させることにより製造できる。
【００８５】
実施例１１Ａ
ベンジル（４−クロロ−４−オキソブチル）メチルカルバメート
【化３８】
2010532771.tif 000040
まず、４−［［（ベンジルオキシ）カルボニル］（メチル）アミノ］酪酸を、ベンジルオキシカルボニル保護基を対応するω−Ｎ−メチルアミノアルキルカルボン酸（P. Quitt et al. [Helv. Chim. Acta 46, 327 (1963)］に従い得ることができる）に導入することにより製造した。あるいは、４−［［（ベンジルオキシ）カルボニル］（メチル）アミノ］酪酸は、文献の方法［Y. Aramaki et al., Chem. Pharm. Bull. 52, 258 (2004)］に従い、購入できる４−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝酪酸から製造できる。
４−［［（ベンジルオキシ）カルボニル］（メチル）アミノ］酪酸１.７４ｇ（６.９２ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン３５ｍｌに溶解し、塩化チオニル３.５ｍｌ（４８ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を還流下で１時間加熱した。次いで、混合物を減圧下で濃縮し、さらなるジクロロメタンを残渣に添加し、混合物を再度濃縮した。残ったものは、粘性の油状物であった。それを高真空下で乾燥させた。これにより、標題化合物１.８ｇ（理論値の９６％）を得、これをさらに精製および特徴解析せずに、さらに反応させた。
【００８６】
実施例１２Ａ
ベンジル（５−クロロ−５−オキソペンチル）メチルカルバメート
【化３９】
2010532771.tif 000041
まず、５−［［（ベンジルオキシ）カルボニル］（メチル）アミノ］吉草酸を、既知方法に従い製造した。ここで、ω−ブロモ吉草酸とメチルアミンとの反応により事前に製造したω−Ｎ−メチルアミノ吉草酸に、ベンジルオキシカルボニル保護基を導入した。
５−［［（ベンジルオキシ）カルボニル］（メチル）アミノ］吉草酸１.９７ｇ（７.４３ｍｍｏｌ）をジクロロメタン３０ｍｌに溶解し、塩化チオニル４.９ｍｌ（６７.３ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を還流下で１時間加熱した。次いで、混合物を減圧下で濃縮し、さらなるジクロロメタンを残渣に添加し、混合物を再度濃縮した。残ったものは、粘性の油状物であった。それを高真空下で乾燥させた。これにより、標題化合物２ｇ（理論値の９５％）を得、これをさらに精製および特徴解析せずに、さらに反応させた。
【００８７】
実施例１３Ａ
ベンジル（３−クロロ−３−オキソプロピル）メチルカルバメート
【化４０】
2010532771.tif 000042
まず、３−［［（ベンジルオキシ）カルボニル］（メチル）アミノ］プロピオン酸を、対応するω−Ｎ−メチルアミノアルキルカルボン酸（P. Quitt et al. [Helv. Chim. Acta 46, 327 (1963)] に従って得られる）にベンジルオキシカルボニル保護基を導入することにより製造した。あるいは、３−［［（ベンジルオキシ）カルボニル］（メチル）アミノ］プロピオン酸は、購入できる３−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝プロピオン酸から、文献の方法［Y. Aramaki et al., Chem. Pharm. Bull. 52, 258 (2004)］に従って製造できる。
３−［［（ベンジルオキシ）カルボニル］（メチル）アミノ］プロピオン酸８５０ｍｇ（３.５８ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン１５ｍｌに溶解し、塩化オキサリル１.５ｍｌを添加した。混合物を還流下で３時間加熱した。次いで、混合物を減圧下で濃縮し、さらなるジクロロメタンを残渣に添加し、混合物を再度濃縮した。残ったものは、粘性の油状物であり、これを高真空下で乾燥させた。これにより、標題化合物９１５ｍｇ（定量的）を得、これをさらに精製および特徴解析せずに、さらに反応させた。
【００８８】
実施例１４Ａ
ベンジル（６−クロロ−６−オキソヘキシル）メチルカルバメート
【化４１】
2010532771.tif 000043
まず、６−［［（ベンジルオキシ）カルボニル］（メチル）アミノ］カプロン酸を、対応するω−Ｎ−メチルアミノアルキルカルボン酸（P. Quitt et al. [Helv. Chim. Acta 46, 327 (1963)］に従い製造できる）にベンジルオキシカルボニル保護基を導入することにより製造した。あるいは、６−［［（ベンジルオキシ）カルボニル］（メチル）アミノ］カプロン酸は、文献の方法［Y. Aramaki et al., Chem. Pharm. Bull. 52, 258 (2004)］に従い、購入できる６−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝カプロン酸から製造できる。
６−［［（ベンジルオキシ）カルボニル］（メチル）アミノ］カプロン酸３８５０ｍｇ（１３.８ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン６０ｍｌに溶解し、塩化オキサリル４ｍｌを添加した。混合物を還流下で３時間加熱した。次いで、混合物を減圧下で濃縮し、さらなるジクロロメタンを残渣に添加し、混合物を再度濃縮した。残ったものは、粘性の油状物であり、これを高真空下で乾燥させた。これにより、標題化合物４.１ｇ（定量的）を得、これをさらに精製および特徴解析せずに反応させた。
【００８９】
実施例１５Ａ
ベンジル（５−クロロ−５−オキソペンチル）（４−メトキシベンジル）カルバメート
【化４２】
2010532771.tif 000044
工程ａ）：
５−アミノ吉草酸１０ｇ（８５.４ｍｍｏｌ）、ｐ−アニスアルデヒド１７.４ｇ（１２８ｍｍｏｌ）および硫酸マグネシウム１０.３ｇ（８５.４ｍｍｏｌ）を、エタノール３３０ｍｌに取り、還流下で１時間加熱した。次いで、混合物を濾過し、フィルターの残渣をエタノールで洗浄し、次いで、全部で１.９４ｇ（５１.２ｍｍｏｌ）の水素化ホウ素ナトリウムを少しずつ１５分間かけて濾液に添加した。先ず、水１０ｍｌを添加し、次いで２Ｍ水酸化ナトリウム水溶液１２８ｍｌを添加した。５分後に、混合物を水３００ｍｌで希釈し、次いで各場合で酢酸エチル２００ｍｌで３回抽出した。４Ｍ塩酸を使用して水相をｐＨ２に調節し、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーにより、移動相アセトニトリル／水／酢酸５：１：０.１を使用して精製した。生成物画分を濃縮し、酢酸エチルおよびジエチルエーテルでトリチュレートした。次いで、残渣を吸引濾過し、高真空下で乾燥させた。これにより、ｐ−メトキシベンジル保護５−アミノ吉草酸９.１ｇ（理論値の４５％）を得た。
【００９０】
工程ｂ）：
かくして得られた５−アミノ吉草酸誘導体をジオキサン／水（１：１）に取り、水酸化ナトリウム水溶液を使用してｐＨ１０に調節し、次いで、クロロ炭酸ベンジル１２.９７ｇ（７６ｍｍｏｌ）を滴下して添加した。室温で１５分間撹拌した後、ジオキサンを減圧下で除去し、２Ｍ塩酸を使用して残った溶液をｐＨ２に調節した。混合物を酢酸エチルで抽出し、次いで有機相を水で２回洗浄した。次いで、有機相を濃縮し、残渣を高真空下で乾燥させた。これに続き、シリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーにより、移動相アセトニトリルを使用して精製した。生成物画分を濃縮し、残渣を高真空下で乾燥させた。これにより、Ｚ−保護アミノ酸５.６ｇ（理論値の３８％）を得た。
LC-MS (方法 6): Rt = 2.47 分; m/z = 372 (M+H)+.
【００９１】
工程ｃ）：
かくして得られた５−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］（４−メトキシベンジル）アミノ｝吉草酸５.６ｇ（１５ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン６０ｍｌに溶解し、塩化チオニル２.２ｍｌを添加した。混合物を還流下で３０分間加熱した。次いで混合物を減圧下で濃縮し、さらなるジクロロメタンを残渣に添加し、混合物を再度濃縮した。残った物は、粘性の油状物であり、それを高真空下で乾燥させた。これにより、標題化合物５.７ｇ（理論値の９８％）を得、これをさらに精製および特徴解析せずに、さらに反応させた。
【００９２】
実施例１６Ａ
ベンジル（６−クロロ−６−オキソヘキシル）（４−メトキシベンジル）カルバメート
【化４３】
2010532771.tif 000045
実施例１５Ａと同様に、６−アミノカプロン酸から表題化合物を製造した。
【００９３】
実施例１７Ａ
ベンジル（４−クロロ−４−オキソブチル）（４−メトキシベンジル）カルバメート
【化４４】
2010532771.tif 000046
実施例１５Ａと同様に、４−アミノ酪酸から表題化合物を製造した。
【００９４】
実施例１８Ａ
ベンジルブチル（４−クロロ−４−オキソブチル）カルバメート
【化４５】
2010532771.tif 000047
まず、４−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］（ブチル）アミノ｝酪酸を、文献の方法［Org. Prep. Proc. Int. 9 (2), 49 (1977)］に従い、Ｎ−ブチルピロリドンからのラクタム開環とその後のＺ保護基の導入により製造した。あるいは、製造は、［J. Org.Chem. 1985, 50, 1303］に従って実施することもできる。次いで、対応する酸塩化物を、実施例１１Ａに記載の通りに製造した。
【００９５】
例示的実施態様：
カルボン酸または適切に保護されたアミノ酸誘導体のセシウム塩の製造のための一般的方法１：
適当なカルボン酸またはチオカルボン酸１ｍｍｏｌを、ジオキサン１０ｍｌと水１０ｍｌの混合物に溶解し、炭酸セシウム０.５ｍｍｏｌを添加する。続いて凍結乾燥する。
【００９６】
下記の実施例１ないし１１は、スキーム１に記載の通り、実施例１０Ａの化合物を、一般的方法１に従って得られる適当なカルボン酸またはチオカルボン酸のセシウム塩と反応させることにより製造できる。
【００９７】
実施例１
２−［［（５−クロロ−２−チエニル）カルボニル］（｛（５Ｓ）−２−オキソ−３−［２−フルオロ−４−（３−オキソモルホリン−４−イル）フェニル］−１,３−オキサゾリジン−５−イル｝メチル）アミノ］−２−オキソエチルグリシネート塩酸塩
【化４６】
2010532771.tif 000048
【００９８】
実施例２
２−［［（５−クロロ−２−チエニル）カルボニル］（｛（５Ｓ）−２−オキソ−３−［２−フルオロ−４−（３−オキソモルホリン−４−イル）フェニル］−１,３−オキサゾリジン−５−イル｝メチル）アミノ］−２−オキソエチル２−メチルアラニネート塩酸塩
【化４７】
2010532771.tif 000049
【００９９】
実施例３
２−［［（５−クロロ−２−チエニル）カルボニル］（｛（５Ｓ）−２−オキソ−３−［２−フルオロ−４−（３−オキソモルホリン−４−イル）フェニル］−１,３−オキサゾリジン−５−イル｝メチル）アミノ］−２−オキソエチルＬ−バリネート塩酸塩
【化４８】
2010532771.tif 000050
【０１００】
実施例４
２−［［（５−クロロ−２−チエニル）カルボニル］（｛（５Ｓ）−２−オキソ−３−［２−フルオロ−４−（３−オキソモルホリン−４−イル）フェニル］−１,３−オキサゾリジン−５−イル｝メチル）アミノ］−２−オキソエチルＬ−プロリネート塩酸塩
【化４９】
2010532771.tif 000051
【０１０１】
実施例５
２−［［（５−クロロ−２−チエニル）カルボニル］（｛（５Ｓ）−２−オキソ−３−［２−フルオロ−４−（３−オキソモルホリン−４−イル）フェニル］−１,３−オキサゾリジン−５−イル｝メチル）アミノ］−２−オキソエチルＮ−メチルグリシネート塩酸塩
【化５０】
2010532771.tif 000052
【０１０２】
実施例６
２−［［（５−クロロ−２−チエニル）カルボニル］（｛（５Ｓ）−２−オキソ−３−［２−フルオロ−４−（３−オキソモルホリン−４−イル）フェニル］−１,３−オキサゾリジン−５−イル｝メチル）アミノ］−２−オキソエチルＤ−バリネート塩酸塩
【化５１】
2010532771.tif 000053
【０１０３】
実施例７
２−［［（５−クロロ−２−チエニル）カルボニル］（｛（５Ｓ）−２−オキソ−３−［２−フルオロ−４−（３−オキソモルホリン−４−イル）フェニル］−１,３−オキサゾリジン−５−イル｝メチル）アミノ］−２−オキソエチルＬ−リジネート二塩酸塩
【化５２】
2010532771.tif 000054
【０１０４】
実施例８
２−［［（５−クロロ−２−チエニル）カルボニル］（｛（５Ｓ）−２−オキソ−３−［２−フルオロ−４−（３−オキソモルホリン−４−イル）フェニル］−１,３−オキサゾリジン−５−イル｝メチル）アミノ］−２−オキソエチルＬ−ヒスチジネート二塩酸塩
【化５３】
2010532771.tif 000055
【０１０５】
実施例９
２−［［（５−クロロ−２−チエニル）カルボニル］（｛（５Ｓ）−２−オキソ−３−［２−フルオロ−４−（３−オキソモルホリン−４−イル）フェニル］−１,３−オキサゾリジン−５−イル｝メチル）アミノ］−２−オキソエチルＤ−ヒスチジネート二塩酸塩
【化５４】
2010532771.tif 000056
【０１０６】
実施例１０
Ｓ−｛２−［［（５−クロロ−２−チエニル）カルボニル］（｛（５Ｓ）−２−オキソ−３−［２−フルオロ−４−（３−オキソモルホリン−４−イル）フェニル］−１,３−オキサゾリジン−５−イル｝メチル）アミノ］−２−オキソエチル｝（２Ｓ）−２−アミノ−３−メチルブタンチオエート臭化水素酸塩
【化５５】
2010532771.tif 000057
【０１０７】
実施例１１
Ｓ−｛２−［［（５−クロロ−２−チエニル）カルボニル］（｛（５Ｓ）−２−オキソ−３−［２−フルオロ−４−（３−オキソモルホリン−４−イル）フェニル］−１,３−オキサゾリジン−５−イル｝メチル）アミノ］−２−オキソエチル｝（２Ｓ）−２−アミノ−３−メチルブタンチオエート塩酸塩
【化５６】
2010532771.tif 000058
【０１０８】
実施例１２
５−クロロ−Ｎ−［４−（メチルアミノ）ブタノイル］−Ｎ−（｛（５Ｓ）−２−オキソ−３−［２−フルオロ−４−（３−オキソモルホリン−４−イル）フェニル］−１,３−オキサゾリジン−５−イル｝メチル）チオフェン−２−カルボキサミド臭化水素酸塩
【化５７】
2010532771.tif 000059
【０１０９】
下記の化合物は、実施例１３と同様に、適当な出発化合物から製造できる。ベンジルオキシカルボニル保護基は、直接的に臭化水素を氷酢酸中で使用して標題化合物を得るか、または、化合物をまずトリフルオロ酢酸と反応させ、後続の氷酢酸中での臭化水素との反応の後に標題化合物を単離することにより、除去できる。
【０１１０】
実施例１３
５−クロロ−Ｎ−［４−（メチルアミノ）ブタノイル］−Ｎ−（｛（５Ｓ）−２−オキソ−３−［２−フルオロ−４−（３−オキソモルホリン−４−イル）フェニル］−１,３−オキサゾリジン−５−イル｝メチル）チオフェン−２−カルボキサミド塩酸塩
【化５８】
2010532771.tif 000060
工程ａ）：
化合物（Ａ）３００ｍｇ（０.６６１ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ２０ｍｌに溶解し、水素化ナトリウム４８ｍｇ（１.９８ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で３０分間撹拌した。実施例１１Ａの化合物８９２ｍｇ（３.３ｍｍｏｌ）をＤＭＦ２ｍｌに溶解し、次いで添加した。混合物を室温でさらに１５分間撹拌し、次いで数滴の水を混合物に添加した。次いで、混合物を濃縮し、残渣をジクロロメタン１００ｍｌに取った。塩化水素をこの溶液に飽和まで導入し、次いで、混合物を終夜静置した。溶液を濃縮し、残渣を酢酸エチル１００ｍｌに取った。混合物を、最初の３回は各５０ｍｌの５％濃度の重炭酸ナトリウム溶液で、次いで水５０ｍｌで１回、抽出した。有機相を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、次いで濃縮した。残渣をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーにより、移動相トルエン／エタノール１０：１を使用して精製した。適当な画分を合わせ、濃縮した。残渣を酢酸エチル５０ｍｌの超音波浴で２回処理し、溶媒をデカンタし、次いで残渣を高真空下で乾燥させた。これにより、保護化合物１３０ｍｇ（２９％）を得た。
HPLC (方法 7): Rt = 5.37 分;
LC-MS (方法 9): Rt = 2.34 分; m/z = 687 (M+H)+.
【０１１１】
工程ｂ）：
上記で得られるＺ−保護中間体１２７ｍｇ（０.１８５ｍｍｏｌ）を、トリフルオロ酢酸１５ｍｌに取り、溶液を室温で３日間撹拌した。溶液を濃縮し、残渣を水５０ｍｌに取った。混合物を各５０ｍｌの酢酸エチルで３回抽出し、濃縮した。残渣を水性塩酸に溶解し、これをｐＨ３に調節し、凍結乾燥した。凍結乾燥物をもう一度水性塩酸に取り、それをｐＨ３に調節し、再度凍結乾燥した。残ったものは、表題化合物６７ｍｇ（６２％）であった。
HPLC (方法 7): Rt = 4.15 分;
LC-MS (方法 9): Rt = 0.79 分; m/z = 553 (M+H)+.
【０１１２】
下記の化合物は、実施例１３と同様に、適当な出発化合物から製造できる。まず得られるトリフルオロ酢酸塩を、各場合で、適当な酸との反応により他の塩形態を製造するために使用できる。
【０１１３】
実施例１４
５−クロロ−Ｎ−［５−（メチルアミノ）ペンタノイル］−Ｎ−（｛（５Ｓ）−２−オキソ−３−［２−フルオロ−４−（３−オキソモルホリン−４−イル）フェニル］−１,３−オキサゾリジン−５−イル｝メチル）チオフェン−２−カルボキサミド臭化水素酸塩
【化５９】
2010532771.tif 000061
【０１１４】
実施例１５
Ｎ−メチルグリシル−Ｎ−［（５−クロロ−２−チエニル）カルボニル］−Ｎ２−メチル−Ｎ−（｛（５Ｓ）−２−オキソ−３−［２−フルオロ−４−（３−オキソモルホリン−４−イル）フェニル］−１,３−オキサゾリジン−５−イル｝メチル）グリシンアミド臭化水素酸塩
【化６０】
2010532771.tif 000062
【０１１５】
実施例１６
Ｎ−メチル−β−アラニル−Ｎ−［（５−クロロ−２−チエニル）カルボニル］−Ｎ２−メチル−Ｎ−（｛（５Ｓ）−２−オキソ−３−［２−フルオロ−４−（３−オキソモルホリン−４−イル）フェニル］−１,３−オキサゾリジン−５−イル｝メチル）グリシンアミド臭化水素酸塩
【化６１】
2010532771.tif 000063
【０１１６】
実施例１７
５−クロロ−Ｎ−［５−（メチルアミノ）ペンタノイル］−Ｎ−（｛（５Ｓ）−２−オキソ−３−［２−フルオロ−４−（３−オキソモルホリン−４−イル）フェニル］−１,３−オキサゾリジン−５−イル｝メチル）チオフェン−２−カルボキサミド塩酸塩
【化６２】
2010532771.tif 000064
【０１１７】
実施例１８
５−クロロ−Ｎ−［６−（メチルアミノ）ヘキサノイル］−Ｎ−（｛（５Ｓ）−２−オキソ−３−［２−フルオロ−４−（３−オキソモルホリン−４−イル）フェニル］−１,３−オキサゾリジン−５−イル｝メチル）チオフェン−２−カルボキサミド塩酸塩
【化６３】
2010532771.tif 000065
【０１１８】
実施例１９
Ｎ−（４−アミノブタノイル）−５−クロロ−Ｎ−（｛（５Ｓ）−２−オキソ−３−［２−フルオロ−４−（３−オキソモルホリン−４−イル）フェニル］−１,３−オキサゾリジン−５−イル｝メチル）チオフェン−２−カルボキサミド塩酸塩
【化６４】
2010532771.tif 000066
工程ａ）：
アルゴン雰囲気下、化合物（Ａ）０.５ｇ（１.１ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ２７ｍｌに溶解し、水素化ナトリウム７９ｍｇ（３.３１ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で３０分間撹拌した。次いで、ＤＭＦ３ｍｌに溶解した新たに製造した実施例１７Ａの化合物４.１４ｇ（１１ｍｍｏｌ）を添加した。室温での撹拌をさらに１５分間継続し、次いでメタノール１ｍｌを混合物に添加した。混合物を１０％濃度の重炭酸ナトリウム溶液および酢酸エチルの１：１混合物に注いだ。有機相を分離し、１０％濃度の重炭酸ナトリウム溶液でもう２回洗浄した。次いで、有機相を濃縮し、残渣を室温で、ジクロロメタン中の塩化水素の飽和溶液５ｍｌと共に２０時間撹拌し、最初に形成されたエノールエステルを開裂した。次いで、混合物を濃縮し、残った残渣をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーにより移動相トルエン／酢酸エチルを用いて精製し、混合比を１：１から１：２を経て１：３に高めた。適当な画分を濃縮し、二重に保護された化合物１２４ｍｇ（理論値の８％）を泡状物として得た。
HPLC (方法 12): Rt = 2.3 分;
LC-MS (方法 10): Rt = 2.33 分; m/z = 793 (M+H)+.
【０１１９】
工程ｂ）：
上記で得られた中間体１１８ｍｇ（０.１４９ｍｍｏｌ）を、無水トリフルオロ酢酸６ｍｌ中、室温で終夜撹拌した。次いで、温度を約２０℃で維持しながら、混合物を高真空下で濃縮した。残渣をｐＨ３に調節した水性塩酸５０ｍｌに取り、ジクロロメタン７５ｍｌを溶液に添加した。混合物を振盪し、次いで水相を分離し、高真空下で濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（方法１３）により精製した。適当な画分を合わせ、濃縮し、次いで１Ｎ塩酸から凍結乾燥した。収量：５９ｍｇ（理論値の６９％）
HPLC (方法 12): Rt = 0.98 分;
LC-MS (方法 10): Rt = 0.98 分; m/z = 539 (M+H)+.
【０１２０】
下記の化合物は、実施例１９と同様に、適当な出発化合物から製造できる：
実施例２０
Ｎ−（５−アミノペンタノイル）−５−クロロ−Ｎ−（｛（５Ｓ）−２−オキソ−３−［２−フルオロ−４−（３−オキソモルホリン−４−イル）フェニル］−１,３−オキサゾリジン−５−イル｝メチル）チオフェン−２−カルボキサミド塩酸塩
【化６５】
2010532771.tif 000067
【０１２１】
実施例２１
Ｎ−（６−アミノヘキサノイル）−５−クロロ−Ｎ−（｛（５Ｓ）−２−オキソ−３−［２−フルオロ−４−（３−オキソモルホリン−４−イル）フェニル］−１,３−オキサゾリジン−５−イル｝メチル）チオフェン−２−カルボキサミド塩酸塩
【化６６】
2010532771.tif 000068
【０１２２】
実施例２２
Ｎ−［４−（ブチルアミノ）ブタノイル］−５−クロロ−Ｎ−（｛（５Ｓ）−２−オキソ−３−［２−フルオロ−４−（３−オキソモルホリン−４−イル）フェニル］−１,３−オキサゾリジン−５−イル｝メチル）チオフェン−２−カルボキサミド
【化６７】
2010532771.tif 000069
工程ａ）：
化合物（Ａ）７９０ｍｇ（１.７４ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ６０ｍｌに溶解し、水素化ナトリウム１２５ｍｇ（５.２２ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で１５分間撹拌した。次いで、ＤＭＦ１０ｍｌに溶解した実施例１８Ａ５.４３ｇ（１７.４ｍｍｏｌ）を添加した。室温での撹拌をさらに２０分間継続し、次いで、水１０ｍｌを混合物に添加した。混合物を濃縮し、残渣を酢酸エチル３００ｍｌに取り、各５０ｍｌの１０％濃度の炭酸ナトリウム溶液で２回、そして、飽和塩化ナトリウム溶液で１回抽出した。酢酸エチル相を分離し、濃縮した。移動相ジクロロメタン／アセトニトリルを使用して、混合比を５：１から２：１に高めて、シリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーにより残渣を精製した。適当な画分を濃縮した。残った生成物を分取ＨＰＬＣ（方法１）により精製した。表題化合物のＺ−保護中間体を含有する画分を合わせ、溶媒を減圧下で除去した。続いて、高真空下で乾燥させ、生成物１４０ｍｇ（理論値の１１％）を得た。
HPLC (方法 7): Rt = 6.0 分;
LC-MS (方法 8): Rt = 4.0 分; m/z = 729 (M+H)+.
【０１２３】
工程ｂ）：
保護中間体４.７ｍｇ（０.００６ｍｍｏｌ）を無水トリフルオロ酢酸５ｍｌに取り、混合物を室温で終夜撹拌した。次いで、温度を約２０℃に維持しながら、混合物を減圧下で濃縮した。残渣をｐＨ３に調節した希塩酸３０ｍｌに取り、ジクロロメタン１０ｍｌを添加した。相を分離し、次いで、水相をジクロロメタンで１回、続いて酢酸エチル５ｍｌで抽出した。水相を減圧下で約２０ｍｌの体積に濃縮し、次いで凍結乾燥した。次いで、凍結乾燥物をもう一度塩酸（ｐＨ３）に取り、濾過し、再度凍結乾燥した。これにより、生成物２.７ｍｇ（理論値の６６％）を得た。
HPLC (方法 7): Rt = 4.57 分;
LC-MS (方法 8): Rt = 1.97 分; m/z = 595 (M+H)+.
【０１２４】
下記の化合物は、実施例１９と同様に、適当な出発化合物から製造できる：
実施例２３
Ｎ−［（２−アミノエトキシ）アセチル］−５−クロロ−Ｎ−（｛（５Ｓ）−２−オキソ−３−［２−フルオロ−４−（３−オキソモルホリン−４−イル）フェニル］−１,３−オキサゾリジン−５−イル｝メチル）チオフェン−２−カルボキサミド塩酸塩
【化６８】
2010532771.tif 000070
【０１２５】
Ｂ. 溶解性、安定性および遊離挙動の測定
ａ）溶解度の決定：
試験物質を水または希塩酸（ｐＨ４）に懸濁する。この懸濁液を室温で２４時間振盪する。２２４０００ｇで３０分間の超遠心の後、上清をＤＭＳＯで希釈し、ＨＰＬＣにより分析する。ＤＭＳＯ中の試験化合物の２点較正プロットを定量に使用する。
【０１２６】
ＨＰＬＣの方法：
DAD (G1315A)、quat. ポンプ (G1311A)、オートサンプラー CTC HTS PAL、脱気装置(G1322A) およびカラムサーモスタット (G1316A) を備えた Agilent 1100; カラム: Zorbax Extend-C18 3.5 μ；温度：４０℃；移動相Ａ：水＋過塩素酸５ｍｌ／ｌ、移動相Ｂ：アセトニトリル；流速：０.７ｍｌ／分；グラジエント：０−０.５分９８％Ａ、２％Ｂ；勾配０.５−４.５分１０％Ａ、９０％Ｂ；４.５−６分１０％Ａ、９０％Ｂ；勾配６.５−６.７分９８％Ａ、２％Ｂ；６.７−７.５分９８％Ａ、２％Ｂ。
【０１２７】
ｂ）様々なｐＨ値のバッファー中での安定性：
試験物質０.２５ｍｇを、２ｍｌのＨＰＬＣバイアルに量り入れ、アセトニトリル０.５ｍｌを添加する。物質を、サンプル容器を超音波浴に約１０秒間置くことにより溶解させる。次いで、各バッファー溶液０.５ｍｌを添加し、サンプルを再度超音波浴で処理する。
【０１２８】
用いるバッファー溶液：
ｐＨ４.０：Millipore 水１ｌを、１Ｎ塩酸でｐＨ４.０に調節する；
ｐＨ７.４：塩化ナトリウム９０ｇ、リン酸二水素カリウム１３.６１ｇおよび１Ｍ水酸化ナトリウム溶液８３.３５ｇを、Millipore 水で１ｌとし、次いで１：１０に希釈する。
試験溶液１０μｌ分を、ＨＰＬＣにより、未変化の試験物質の含有量について、３７℃で２４時間にわたり毎時間分析する。適切なピークのパーセントの面積を定量に使用する。
【０１２９】
ＨＰＬＣの方法：
DAD (G1314A)、バイナリーポンプ (G1312A)、オートサンプラー (G1329A)、カラムオーブン (G1316A)、サーモスタット (G1330A) を備えた Agilent 1100; カラム: Kromasil 100 C18, 125 mm x 4.6 mm, 5 μm；カラム温度：３０℃；移動相Ａ：水＋過塩素酸５ｍｌ／ｌ、移動相Ｂ：アセトニトリル。
グラジエント：
０−１.０分９８％Ａ、２％Ｂ→１.０−１３.０分５０％Ａ、５０％Ｂ→１３.０−１７.０分１０％Ａ、９０％Ｂ→１７.０１８.０分１０％Ａ、９０％Ｂ→１８.０−１９.５９８％Ａ、２％Ｂ→１９.５−２３.０分９８％Ａ、２％Ｂ；流速：２.０ｍｌ／分；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
ｐＨ４の溶液中で、実施例２２の化合物は、１６時間を超えて安定であった。
【０１３０】
ｃ）ラット血漿およびヒト血清におけるインビトロの安定性（ＨＰＬＣ検出）：
物質０.５ｍｇを１ｍｌのジメチルスルホキシド／水１：１に溶解する。このサンプル溶液５００μｌをラット血漿５００μｌと３７℃で混合し、振盪する。最初のサンプル（１０μｌ）をすぐにＨＰＬＣ分析用に取る。インキュベーションの開始後２時間までの期間に、さらなるアリコートを２、５、１０、３０、６０および９０分後に取り、各試験物質およびそこから遊離した有効成分化合物（Ａ）の含有量を決定する。
【０１３１】
ＨＰＬＣの方法：
DAD (G1314A)、バイナリーポンプ (G1312A)、オートサンプラー (G1329A)、カラムオーブン (G1316A)、サーモスタット (G1330A) を備えた Agilent 1100; カラム: Kromasil 100 C18, 250 mm x 4.6 mm, 5 μm；カラム温度：３０℃；溶離剤Ａ：水＋過塩素酸５ｍｌ／ｌ、溶離剤Ｂ：アセトニトリル。
グラジエント：
０−３.０分６９％Ａ、３１％Ｂ→３.０−１８.０分６９％Ａ、３１％Ｂ→１８.０−２０.０分１０％Ａ、９０％Ｂ→２０.０−２１.０９０％Ａ、１０％Ｂ→２１.０−２２.５.０分９８％Ａ、２％Ｂ→２２.５−２５.０分９８％Ａ、２％Ｂ；流速：２.０ｍｌ／分；ＵＶ検出：２４８ｎｍ。
【０１３２】
結果：
この試験では、実施例２２の化合物は、ラット血漿およびヒト血漿の両方で、２分より短い半減期で、有効成分の化合物（Ａ）の放出を伴って分解された。ラット血漿では、実施例１３および１９の化合物は、５分以内に、有効成分の化合物（Ａ）に完全に変換された。
【０１３３】
ｄ）ラットおよびヒト血漿におけるインビトロの安定性（ＬＣ／ＭＳ−ＭＳ検出）：
所定の血漿体積（例えば２.０ｍｌ）を、水浴中の密閉試験管で３７℃に温める。意図した温度に達した後、所定の量の試験物質を溶液（溶媒の体積は、血漿体積の２％以下である）として添加する。血漿を振盪し、最初のサンプル（５０−１００μｌ）をすぐに取る。次いで４−６個のさらなるアリコートを、インキュベーション開始後２時間までの期間中に取る。
【０１３４】
アセトニトリルを血漿サンプルに添加し、タンパク質を沈殿させる。遠心分離後、上清中の試験物質および、必要に応じて、試験物質の既知の切断生成物を、適するＬＣ／ＭＳ−ＭＳの方法により定量的に測定する。
ヘパリン化ラットまたはヒト血液における安定性の決定は、血漿について記載した通りに実施する。
【０１３５】
ｅ）Wistar ラットにおけるｉ.ｖ.薬物動態：
物質投与の前日に、実験動物（オスの Wistar ラット、体重２００−２５０ｇ）の頸静脈に、血液を得るためのカテーテルを、イソフルラン（登録商標）麻酔下で移植する。
実験当日、所定の用量の試験物質を、Hamilton（登録商標）ガラスシリンジを使用して、溶液として尾静脈に投与する（ボーラス投与、投与期間＜１０秒）。血液サンプル（８−１２時点）を、カテーテルを通して、物質投与後２４時間の期間にわたり連続的に取る。ヘパリン処理管中でサンプルを遠心分離することにより、血漿を得る。アセトニトリルを時点毎に所定の血漿体積に添加し、タンパク質を沈殿させる。遠心分離後、上清中の試験物質、および、必要に応じて、試験物質の既知の切断生成物を、適するＬＣ／ＭＳ−ＭＳの方法を使用して定量的に測定する。
【０１３６】
測定される血漿濃度を使用して、試験物質およびそこから遊離した有効成分化合物（Ａ）の、ＡＵＣ、Ｃｍａｘ、Ｔ１／２（半減期）およびＣＬ（クリアランス）などの薬物動態的パラメーターを算出する。
【０１３７】
ｆ）代謝的安定性を測定するための肝細胞アッセイ：
肝細胞の存在下の試験化合物の代謝的安定性は、実験において可能な限り線形の動態学的条件を確実にするために、化合物を低濃度（好ましくは１μＭ未満）で、かつ、少数の細胞（好ましくは１ｘ１０６細胞／ｍｌ）とインキュベートすることにより測定する。化合物の半減期（即ち、分解）を測定するために、インキュベーション溶液の７個のサンプルを、固定した時間パターンで、ＬＣ−ＭＳ分析用に取る。様々なクリアランスパラメーター（ＣＬ）およびＦｍａｘ値をこの半減期から算出する（下記参照）。
【０１３８】
ＣＬおよびＦｍａｘ値は、肝細胞における第１相および第２相の化合物の代謝の測定を表す。インキュベーション混合物中の酵素に対する有機溶媒の影響を最小にするために、その濃度を一般的に１％（アセトニトリル）または０.１％（ＤＭＳＯ）に限定する。
【０１３９】
１.１ｘ１０８細胞／肝臓１ｇの肝臓中の肝細胞の細胞数を、全ての種（species and breeds）について計算に使用する。インキュベーション時間（通常９０分間）を超えて延びる半減期に基づいて算出したＣＬパラメーターは、大まかなガイドラインと見なし得るだけである。
【０１４０】
算出したパラメーターおよびそれらの意味は、以下の通りである:
Ｆｍａｘ十分に撹拌［％］    経口投与後の最大の可能なバイオアベイラビリティー
計算：    （１−ＣＬ血液十分に撹拌／ＱＨ）＊１００
ＣＬ血液十分に撹拌［Ｌ／（ｈ＊ｋｇ）］    算出される血液クリアランス（十分に撹拌したモデル）
計算：    （ＱＨ＊ＣＬ'内因性）／（ＱＨ＋ＣＬ'内因性）
ＣＬ'内因性［ｍｌ／（分＊ｋｇ）］    化合物を代謝する肝臓の（肝細胞の）最大能力（肝臓の血流が律速ではないと仮定して）
計算：    ＣＬ'内因性、明白＊種特異的肝細胞数［１.１＊１０８／肝臓１ｇ］＊種特異的肝臓重量［ｇ／ｋｇ］
ＣＬ'内因性、明白［ｍｌ／（分＊ｍｇ）］    用いた肝細胞の細胞数ｘ（ｘ＊１０６／ｍｌ）で除去定数（elimination constant）を除すことにより、それを標準化する
計算：    ｋｅｌ［１／分］／（細胞数［ｘ＊１０６］／インキュベーション体積［ｍｌ］）
（ＱＨ＝種特異的な肝臓の血流）
【０１４１】
ｇ）ラットの動静脈シャントモデルにおける抗血栓効果の測定：
絶食中のオスのラット (系統: HSD CPB:WU) を、Rompun/Ketavet 溶液（１２ｍｇ／ｋｇ／５０ｍｇ／ｋｇ）の腹腔内投与により麻酔する。P.C. Wong et al. [Thrombosis Research 83 (2), 117-126 (1996)] により記載された方法に基づき、動静脈シャントで血栓形成を誘導する。この目的で、左頸静脈および右頸動脈を露出させる。長さ８ｃｍのポリエチレンカテーテル（PE60、Becton-Dickinsonより）を動脈に設置し、続いて、血栓形成性表面をもたらすために、二重ループにした粗いナイロン糸（60 x 0.26 mm、Berkley Trileneより）を含む長さ６ｃｍの Tygon チューブ (R-3606, ID 3.2 mm, Kronlabより）を設置する。長さ２ｃｍのポリエチレンカテーテル（PE60、Becton-Dickinson より）を頸静脈に設置し、長さ６ｃｍのポリエチレンカテーテル（PE160、Becton-Dickinson より) により Tygon チューブに連結する。シャントを開く前に、チューブを生理塩水で満たす。体外循環を１５分間維持する。次いで、シャントを取り除き、血栓を伴うナイロン糸の重量をすぐに量る。ナイロン糸の空の重量は、実験開始前に測定した。体外循環を取り付ける前に、試験物質（０.１Ｎ塩酸でｐＨ４に調節した生理塩水中の溶液として）をボーラス注射として投与する。
【０１４２】
Ｃ. 医薬組成物の例示的実施態様
本発明による化合物は、例えば、以下の方法で医薬製剤に変換できる：
ｉ.ｖ.溶液：
本発明による化合物を、生理的に耐容される溶媒に飽和溶解度より低い濃度で溶解させる（例えば、等張塩水、５％グルコース溶液および／または３０％ＰＥＧ ４００溶液、各々ｐＨ３−５に調節する）。溶液を必要に応じて濾過滅菌し、かつ／または、無菌かつパイロジェン不含の注射容器に分配する。
【国際調査報告】
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