(57)【要約】  ヒトまたは動物の対象において、腫瘍形成に関連するキナーゼ活性を阻害する新規化合物、組成物および方法が提供される。特定の具体的態様において、本化合物および本組成物は、少なくとも１種のセリン／トレオニン・キナーゼまたは受容体チロシンキナーゼの活性を阻害するのに有効である。新規化合物および組成物は、単独でまたは少なくとも１種のセリン／トレオニン・キナーゼまたは受容体チロシンキナーゼが介在する障害、例えば癌を処置するための薬物と組み合わせて使用され得る。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式(Ｉ)：
【化１】
2010520228.tif 000474
[式中、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３およびＸ４は、ＣＲ２およびＮから独立して選択され；ただし、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３およびＸ４のうちＮが２個を超えてはならず；
Ｙは、置換または非置換アミノ、アルコキシ、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールまたはヘテロアリールであり；
Ｚ１、Ｚ２およびＺ３は、ＣＲ２およびＮから独立して選択され；ただし、Ｚ１、Ｚ２およびＺ３のうちＮが１個を超えてはならず；
Ｒ１は、水素、ハロ、アルキル、シクロアルキル、−ＣＮ、−ＮＯ２、および−ＮＨＲ３からなる群から選択され；
Ｒ２はそれぞれ、水素、ハロ、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、ＳＯ３Ｈ、および、置換または非置換アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アミノ、アミノカルボニル、アミノチオカルボニル、アミノカルボニルアミノ、アミノチオカルボニルアミノ、アミノカルボニルオキシ、アミノスルホニル、アミノスルホニルオキシ、アミノスルホニルアミノ、アミジノ、カルボキシル、カルボキシル エステル、(カルボキシル エステル)アミノ、(カルボキシル エステル)オキシ、スルホニル、スルホニルオキシ、チオアシル、チオール、アルキルチオ、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、部分的に飽和のシクロアルキル、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリルオキシ、シクロアルキルオキシ、アシル、アシルアミノおよびアシルオキシからなる群から独立して選択され；
Ｒ３は、水素、−ＣＯ−Ｒ４、および、置換または非置換アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールからなる群から選択され；
Ｒ４は、アルキル、置換アルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、およびアルキルアミノからなる群から選択される。]
の化合物、またはその立体異性体、互変異性体または薬学的に許容される塩。
【請求項２】
Ｘ１がＮであり、Ｘ２、Ｘ３およびＸ４がＣＲ２である、請求項１に記載された化合物。
【請求項３】
Ｘ２がＮであり、Ｘ１、Ｘ３およびＸ４がＣＲ２である、請求項１に記載された化合物。
【請求項４】
Ｘ３がＮであり、Ｘ１、Ｘ２およびＸ４がＣＲ２である、請求項１に記載された化合物。
【請求項５】
Ｘ４がＮであり、Ｘ１、Ｘ２およびＸ３がＣＲ２である、請求項１に記載された化合物。
【請求項６】
Ｙが、置換または非置換ピペリジニルまたはピペラジニルである、請求項１に記載された化合物。
【請求項７】
Ｚ１、Ｚ２およびＺ３がＣＲ２である、請求項１に記載された化合物。
【請求項８】
Ｚ１がＮであり、Ｚ２およびＺ３がＣＲ２である、請求項１に記載された化合物。
【請求項９】
Ｚ２がＮであり、Ｚ１およびＺ３がＣＲ２である、請求項１に記載された化合物。
【請求項１０】
Ｚ３がＮであり、Ｚ１およびＺ２がＣＲ２である、請求項１に記載された化合物。
【請求項１１】
Ｒ１が水素である、請求項１に記載された化合物。
【請求項１２】
Ｒ２がそれぞれ、水素、ハロ、ヒドロキシル、アミノ、ニトロ、シアノ、ＳＯ３Ｈ、および、置換または非置換アルキル、アミノアルキルおよびフェニルからなる群から独立して選択される、請求項１に記載された化合物。
【請求項１３】
式(II)：
【化２】
2010520228.tif 000475
[式中、
Ｙは、置換または非置換アミノ、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールまたはヘテロアリールであり；
Ｚ３は、ＣＲ２およびＮから選択され；
Ｒ１は、水素、ハロ、アルキル、シクロアルキル、−ＣＮ、−ＮＯ２、および−ＮＨＲ３からなる群から選択され；
Ｒ２はそれぞれ、水素、ハロ、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、ＳＯ３Ｈ、および、置換または非置換アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アミノ、アミノカルボニル、アミノチオカルボニル、アミノカルボニルアミノ、アミノチオカルボニルアミノ、アミノカルボニルオキシ、アミノスルホニル、アミノスルホニルオキシ、アミノスルホニルアミノ、アミジノ、カルボキシル、カルボキシル エステル、(カルボキシル エステル)アミノ、(カルボキシル エステル)オキシ、スルホニル、スルホニルオキシ、チオアシル、チオール、アルキルチオ、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、部分的に飽和のシクロアルキル、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリルオキシ、シクロアルキルオキシ、アシル、アシルアミノおよびアシルオキシからなる群から独立して選択され；
Ｒ３は、水素、−ＣＯ−Ｒ４、および、置換または非置換アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールからなる群から選択され；
Ｒ４は、アルキル、置換アルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、およびアルキルアミノからなる群から選択される。]
を有する、請求項１に記載された化合物、またはその立体異性体、互変異性体または薬学的に許容される塩。
【請求項１４】
式(III)：
【化３】
2010520228.tif 000476
[式中、
Ｚ３は、ＣＲ２およびＮから選択され；
Ｒ１は、水素、ハロ、アルキル、シクロアルキル、−ＣＮ、−ＮＯ２、および−ＮＨＲ３からなる群から選択され；
Ｒ２はそれぞれ、水素、ハロ、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、ＳＯ３Ｈ、および、置換または非置換アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アミノ、アミノカルボニル、アミノチオカルボニル、アミノカルボニルアミノ、アミノチオカルボニルアミノ、アミノカルボニルオキシ、アミノスルホニル、アミノスルホニルオキシ、アミノスルホニルアミノ、アミジノ、カルボキシル、カルボキシル エステル、(カルボキシル エステル)アミノ、(カルボキシル エステル)オキシ、スルホニル、スルホニルオキシ、チオアシル、チオール、アルキルチオ、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、部分的に飽和のシクロアルキル、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリルオキシ、シクロアルキルオキシ、アシル、アシルアミノおよびアシルオキシからなる群から独立して選択され；
Ｒ３は、水素、−ＣＯ−Ｒ４、および、置換または非置換アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールからなる群から選択され；
Ｒ４は、アルキル、置換アルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、およびアルキルアミノからなる群から選択される。]
を有する、請求項１３に記載された化合物、またはその立体異性体、互変異性体または薬学的に許容される塩。
【請求項１５】
式(IV)：
【化４】
2010520228.tif 000477
[式中、
Ｒ１は、水素、ハロ、アルキル、シクロアルキル、−ＣＮ、−ＮＯ２、および−ＮＨＲ３からなる群から選択され；
Ｒ２はそれぞれ、水素、ハロ、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、ＳＯ３Ｈ、および、置換または非置換アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アミノ、アミノカルボニル、アミノチオカルボニル、アミノカルボニルアミノ、アミノチオカルボニルアミノ、アミノカルボニルオキシ、アミノスルホニル、アミノスルホニルオキシ、アミノスルホニルアミノ、アミジノ、カルボキシル、カルボキシル エステル、(カルボキシル エステル)アミノ、(カルボキシル エステル)オキシ、スルホニル、スルホニルオキシ、チオアシル、チオール、アルキルチオ、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、部分的に飽和のシクロアルキル、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリルオキシ、シクロアルキルオキシ、アシル、アシルアミノおよびアシルオキシからなる群から独立して選択され；
Ｒ３は、水素、−ＣＯ−Ｒ４、および、置換または非置換アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールからなる群から選択され；
Ｒ４は、アルキル、置換アルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、およびアルキルアミノからなる群から選択される。]
を有する、請求項１４に記載された化合物、またはその立体異性体、互変異性体または薬学的に許容される塩。
【請求項１６】
薬学的に許容される担体と共に、治療有効量の請求項１に記載された化合物、またはその立体異性体、互変異性体または薬学的に許容される塩を含む組成物。
【請求項１７】
さらに、少なくとも１種のさらなる癌処置薬を含む、請求項１４に記載された組成物。
【請求項１８】
細胞において、ＰＩＭキナーゼ活性を阻害する方法であって、該細胞を有効量の請求項１に記載された化合物を接触させることを含む方法。
【請求項１９】
モロニー(Maloney)のプロウイルス組み込みキナーゼ(ＰＩＭキナーゼ)活性の調節によって状態を処置する方法であって、該処置が必要な患者に、有効量の請求項１に記載された化合物を投与することを含む方法。
【請求項２０】
患者において、ＰＩＭキナーゼ活性を阻害する方法であって、該患者に、薬理学的に有効な量の請求項１に記載された化合物を投与することを含む方法。
【請求項２１】
患者において、癌障害を処置する方法であって、患者に、ＰＩＭキナーゼ活性を阻害するのに有効な量の請求項１に記載された化合物を含む組成物を投与することを含む方法。
【請求項２２】
治療薬として使用するための、請求項１〜１５の何れか１項に記載された化合物。
【請求項２３】
癌を処置する医薬の製造に使用するための、請求項１〜１５の何れか１項に記載された化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明の分野
本発明は、癌の予防または処置における新規化合物およびその互変異性体および立体異性体、それらの薬学的に許容される塩、エステル、代謝物、またはプロドラッグ、薬学的に許容される担体を伴う該新規化合物の組成物、および、該新規化合物単独または少なくとも１種のさらなる治療薬と組み合わせた該新規化合物の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
背景
モロニーレトロウイルスの感染および宿主細胞ゲノムへのゲノム組み込みは、マウスにおいて白血病の発症をもたらす。モロニーのプロウイルス組み込みキナーゼ(ＰＩＭキナーゼ)は、レトロウイルス組み込みイベントによって転写活性化され得る高頻度の癌原遺伝子の一つとして同定され(Cuypers HT et al., “Murine leukemia virus-induced T-cell lymphomagenesis: integration of proviruses in a distinct chromosomal region”, Cell 37(1):141-50 (1984); Selten G, et al., “Proviral activation of the putative oncogene Pim-1 in MuLV induced T-cell lymphomas”, EMBO J 4(7):1793-8 (1985))、従って、このキナーゼの過剰発現とその発癌能の間の相関関係が確立された。配列相同性分析により、３つの相同性の高いＰｉｍ−キナーゼ(Ｐｉｍ１、２および３)があることが証明され、Ｐｉｍ１がレトロウイルス組み込みによって最初に識別された癌原遺伝子である。さらに、Ｐｉｍ１またはＰｉｍ２を過剰発現した遺伝子組み換えマウスは、Ｔ細胞リンパ腫の発病率の増大を示し(Breuer M et al., “Very high frequency of lymphoma induction by a chemical carcinogen in pim-1 transgenic mice”, Nature 340(6228):61-3 (1989))、一方、ｃ−ｍｙｃと組み合わせた過剰発現は、Ｂ細胞リンパ腫の発病率に関連している(Verbeek S et al., “Mice bearing the E mu-myc and E mu-pim-1 transgenes develop pre-B-cell leukemia prenatally” Mol Cell Biol 11(2):1176-9 (1991))。従って、これらの動物モデルは、造血器悪性腫瘍において、Ｐｉｍ過剰発現と発癌の間の強い相関関係を確立している。これらの動物モデルに加えて、Ｐｉｍ過剰発現は、他の多くのヒトの悪性腫瘍において報告されている。Ｐｉｍ１、２および３の過剰発現は、しばしば、多くの造血器悪性腫瘍において(Amson R et al., “The human protooncogene product p33pim is expressed during fetal hematopoiesis and in diverse leukemias”, PNAS USA 86(22):8857-61 (1989); Cohen AM et al., “Increased expression of the hPim-2 gene in human chronic lymphocytic leukemia and non-Hodgkin lymphoma”, Leuk Lymph 45(5):951-5 (2004); Huttmann A et al., “Gene expression signatures separate B-cell chronic lymphocytic leukaemia prognostic subgroups defined by ZAP-70 and CD38 expression status”, Leukemia 20:1774-1782 (2006))、そして、前立腺癌において(Dhanasekaran SM, et al., “Delineation of prognostic biomarkers in prostate cancer”, Nature 412(6849):822-6 (2001); Cibull TL, et al., “Overexpression of Pim-1 during progression of prostatic adenocarcinoma”, J Clin Pathol 59(3):285-8 (2006))、観察され、一方、Ｐｉｍ３の過剰発現は、しばしば、肝細胞癌において(Fujii C, et al., “Aberrant expression of serine/threonine kinase Pim-3 in hepatocellular carcinoma development and its role in the proliferation of human hepatoma cell lines”, Int J Cancer 114:209-218 (2005))、そして、膵臓癌において(Li YY et al., “Pim-3, a proto-oncogene with serine/threonine kinase activity, is aberrantly expressed in human pancreatic cancer and phosphorylates bad to block bad-mediated apoptosis in human pancreatic cancer cell lines”, Cancer Res 66(13):6741-7 (2006))、観察される。
【０００３】
Ｐｉｍ１、２および３は、増殖因子およびサイトカインに応答して、造血細胞の生存および増殖において通常機能するセリン／トレオニン・キナーゼである。Ｊａｋ／Ｓｔａｔ経路を介するサイトカインシグナル伝達は、Ｐｉｍ遺伝子の転写および蛋白質合成の活性化をもたらす。キナーゼＰｉｍ活性化のために、さらなる翻訳後修飾は必要とされない。従って、シグナル伝達経路の下流は、主に、転写／翻訳レベルおよび蛋白質ターンオーバーレベルで制御される。Ｐｉｍキナーゼのための基質は、アポトーシスの制御因子、例えばＢｃｌ−２ファミリーメンバーＢＡＤ(Aho T et al., “Pim-1 kinase promotes inactivation of the pro-apoptotic Bad protein by phosphorylating it on the Ser112 gatekeeper site”, FEBS Letters 571: 43-49 (2004))、細胞周期制御因子、例えばｐ２１ＷＦＡ１／ＣＩＰ１(Wang Z, et al., “Phosphorylation of the cell cycle inhibitor p21Cip1/WAF1 by Pim-1 kinase”, Biochim Biophys Acta 1593:45- 55 (2002))、ＣＤＣ２５Ａ(1999)、Ｃ−ＴＡＫ(Bachmann M et al., “The Oncogenic Serine/Threonine Kinase Pim-1 Phosphorylates and Inhibits the Activity of Cdc25C-associated Kinase 1 (C-TAK1).  A novel role for Pim-1 at the G2/M cell cycle checkpoint”, J Biol Chem 179:48319-48328 (2004))、および、ＮｕＭＡ(Bhattacharya N, et al., “Pim-1 associates with protein complexes necessary for mitosis”, Chromosoma 111(2):80-95 (2002))、および、蛋白質合成制御因子４ＥＢＰ１(Hammerman PS et al., “Pim and Akt oncogenes are independent regulators of hematopoietic cell growth and survival”, Blood 105(11):4477-83 (2005))を含む。これらの制御因子におけるＰｉｍの効果は、アポトーシスからの保護および細胞増殖と成長の促進における役割と一致する。従って、癌におけるＰｉｍの過剰発現は、癌細胞の生存および増殖の促進に役割を果たし、従って、その阻害は、それが過剰発現している癌を処置するのに有効な方法であると考えられている。事実、幾つかの報告により、ｓｉＲＮＡでＰｉｍの発現をノックダウンすると、増殖の阻害および細胞死を引き起こすことが示されている(Dai JM, et al., “Antisense oligodeoxynucleotides targeting the serine/threonine kinase Pim-2 inhibited proliferation of DU-145 cells”, Acta Pharmacol Sin 26(3):364-8 (2005); Fujii et al. 2005; Li et al. 2006)。さらに、造血器悪性腫瘍における幾つかの周知の発癌遺伝子の変異による活性化は、少なくとも一部Ｐｉｍを介して、その効果を発揮すると考えられている。例えば、ｐｉｍ発現の標的下方制御は、Ｆｌｔ３およびＢＣＲ／ＡＢＬによって形質転換された造血細胞の生存を損う(Adam et al. 2006)。従って、Ｐｉｍ１、２および３に対する阻害剤は、これらの悪性腫瘍の処置に有用である。癌および骨髄増殖性疾患の処置における可能性のある役割に加えて、当該阻害剤は、他の病理学的状態、例えば自己免疫疾患、アレルギー反応、および臓器移植拒絶反応症候群における免疫細胞の増殖を制御するのに有用であり得る。この考えは、ＩＬ−１２およびＩＦＮ−αによるＴｈ１ヘルパーＴ細胞の分化が、Ｐｉｍ１および２の双方の発現を誘発するという発見によって支持される(Aho T et al., “Expression of human Pim family genes is selectively up-regulated by cytokines promoting T helper type 1, but not T helper type 2, cell differentiation”, Immunology 116: 82-88 (2005))。さらに、Ｐｉｍ発現は、免疫抑制ＴＧＦ−βによって両方の細胞型で阻害される(Aho et al. 2005)。これらの結果は、Ｐｉｍキナーゼが、自己免疫疾患、ア���ルギー反応および組織移植拒絶反応において免疫応答を調整するヘルパーＴ細胞の初期の分化段階に関係していることを示唆している。
【０００４】
ＰＩＭキナーゼに加えて、幾つかの他のキナーゼが癌に直接関与していることが示されている(例えば、Ｆｌｔ３、ＫＤＲおよびＰＫＣε)。例えば、Ｆｌｔ３の幾つかのタイプの活性化変異は、急性骨髄性白血病(ＡＭＬ)を有する患者の２０〜３０％で見出される。これらの活性化変異は、これらの患者における最も関連する形質転換イベントであると考えられ、現在幾つかのＦｌｔ３阻害剤が、臨床試験でこれらの患者に対する処置について試験されている(近年のレビューについては、Tichenbrock L et al., “Emerging Flt3 kinase inhibitors in the treatment of leukaemia”, Expert Opin Emerg Drugs 11:153-165 (2006)を参照のこと)。ＫＤＲは、腫瘍血管新生に重大な役割を果たすＶＥＧＦの受容体の一つであり、そして、それは、臨床的に確認されたベバシズマブにおける標的である(近年のレビューについては、Ranieri G et al., “Vascular endothelial growth factor (VEGF) as a target of bevacizumab in cancer: from the biology to the clinic”, Curr Med Chem 13: 1845-1857 (2006)を参照のこと)。最後に、ＮＩＨ３Ｔ３細胞におけるＰＫＣεの過剰発現は、in vitroで細胞を形質転換し、in vivoで腫瘍形成を促進することが示されている(Perletti et al. Oncogene 12: 847 (1996); Mischak et al., J Biol Chem 268: 6090 (1993))。さらに、ＬＮＣａＰ細胞株におけるＰＫＣεの過剰発現は、ヌード・マウスにおいてアンドロゲン依存性腫瘍増殖への形質転換を引き起こす(Wu et al., Cancer Research 62: 2423 (2002))。さらに、遺伝子導入マウス上皮におけるＰＫＣεの過剰発現は、悪性度が高く転移が速い扁平上皮細胞癌の進行を加速させる(Jansen et al., Cancer Research 61: 808 (2001))。最後に、ヒトの腫瘍におけるＰＫＣεの高発現は、低い無病生存率および低い全生存に関連していることが臨床的に観察されている(Pan et al., Cancer Research 65: 8366 (2005))。従って、本明細書に記載された化合物は、癌の薬のためのこれらの十分に確認された標的を阻害することによって、癌を処置するのに有用であり得る。
【０００５】
毛細血管の増殖を阻害する、腫瘍の増殖を阻害する、癌を処置する、細胞周期抑止を調節する、および／またはＰｉｍ１、Ｐｉｍ２、Ｐｉｍ３、Ｆｌｔ３、ＫＤＲおよびＰＫＣεなどの分子を阻害する化合物、および、該化合物を含む医薬製剤および医薬に対する必要性が引き続き存在する。また、投与が必要な患者または対象に、該化合物、医薬製剤および医薬を投与する方法に対する必要性も存在する。
【発明の概要】
【０００６】
概要
この概要は、詳細な説明において、さらに下に記載された概念の選択肢を簡単な形で紹介している。この概要は、特許請求の範囲に記載した事項の重要な特徴を識別することを意図しない。また、特許請求の範囲に記載した事項の範囲を決定する際の補助として使用されることを意図しない。
【０００７】
式(Ｉ)：
【化１】
2010520228.tif 000002
[式中、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３およびＸ４は、ＣＲ２およびＮから独立して選択され；ただし、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３およびＸ４のうちＮが２個を超えてはならず；
Ｙは、置換または非置換アミノ、アルコキシ、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールまたはヘテロアリールであり；
Ｚ１、Ｚ２およびＺ３は、ＣＲ２およびＮから独立して選択され；ただし、Ｚ１、Ｚ２およびＺ３のうちＮが１個を超えてはならず；
Ｒ１は、水素、ハロ、アルキル、シクロアルキル、−ＣＮ、−ＮＯ２、および−ＮＨＲ３からなる群から選択され；
Ｒ２はそれぞれ、水素、ハロ、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、ＳＯ３Ｈ、および、置換または非置換アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アミノ、アミノカルボニル、アミノチオカルボニル、アミノカルボニルアミノ、アミノチオカルボニルアミノ、アミノカルボニルオキシ、アミノスルホニル、アミノスルホニルオキシ、アミノスルホニルアミノ、アミジノ、カルボキシル、カルボキシル エステル、(カルボキシル エステル)アミノ、(カルボキシル エステル)オキシ、スルホニル、スルホニルオキシ、チオアシル、チオール、アルキルチオ、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、部分的に飽和のシクロアルキル、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリルオキシ、シクロアルキルオキシ、アシル、アシルアミノおよびアシルオキシからなる群から独立して選択され；
Ｒ３は、水素、−ＣＯ−Ｒ４、および、置換または非置換アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールからなる群から選択され；
Ｒ４は、アルキル、置換アルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、およびアルキルアミノからなる群から選択される。]
の新規化合物、その互変異性体、および立体異性体、およびそれらの薬学的に許容される塩、または溶解度を増加させる部分を有するエステル、またはそれらのプロドラッグが、提供される。
【０００８】
別の態様において、式(II)：
【化２】
2010520228.tif 000003
[式中、
Ｙは、置換または非置換アミノ、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールまたはヘテロアリールであり；
Ｚ３は、ＣＲ２およびＮから選択され；
Ｒ１は、水素、ハロ、アルキル、シクロアルキル、−ＣＮ、−ＮＯ２、および−ＮＨＲ３からなる群から選択され；
Ｒ２はそれぞれ、水素、ハロ、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、ＳＯ３Ｈ、および、置換または非置換アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アミノ、アミノカルボニル、アミノチオカルボニル、アミノカルボニルアミノ、アミノチオカルボニルアミノ、アミノカルボニルオキシ、アミノスルホニル、アミノスルホニルオキシ、アミノスルホニルアミノ、アミジノ、カルボキシル、カルボキシル エステル、(カルボキシル エステル)アミノ、(カルボキシル エステル)オキシ、スルホニル、スルホニルオキシ、チオアシル、チオール、アルキルチオ、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、部分的に飽和のシクロアルキル、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリルオキシ、シクロアルキルオキシ、アシル、アシルアミノおよびアシルオキシからなる群から独立して選択され；
Ｒ３は、水素、−ＣＯ−Ｒ４、および、置換または非置換アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールからなる群から選択され；
Ｒ４は、アルキル、置換アルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、およびアルキルアミノからなる群から選択される。]
の新規化合物が提供される。
【０００９】
別の態様において、式(III)：
【化３】
2010520228.tif 000004
[式中、
Ｚ３は、ＣＲ２およびＮから選択され；
Ｒ１は、水素、ハロ、アルキル、シクロアルキル、−ＣＮ、−ＮＯ２、および−ＮＨＲ３からなる群から選択され；
Ｒ２はそれぞれ、水素、ハロ、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、ＳＯ３Ｈ、および、置換または非置換アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アミノ、アミノカルボニル、アミノチオカルボニル、アミノカルボニルアミノ、アミノチオカルボニルアミノ、アミノカルボニルオキシ、アミノスルホニル、アミノスルホニルオキシ、アミノスルホニルアミノ、アミジノ、カルボキシル、カルボキシル エステル、(カルボキシル エステル)アミノ、(カルボキシル エステル)オキシ、スルホニル、スルホニルオキシ、チオアシル、チオール、アルキルチオ、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、部分的に飽和のシクロアルキル、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリルオキシ、シクロアルキルオキシ、アシル、アシルアミノおよびアシルオキシからなる群から独立して選択され；
Ｒ３は、水素、−ＣＯ−Ｒ４、および、置換または非置換アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールからなる群から選択され；
Ｒ４は、アルキル、置換アルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、およびアルキルアミノからなる群から選択される。]
の新規化合物が提供される。
【００１０】
また、下記の式(IV)：
【化４】
2010520228.tif 000005
[式中、
Ｒ１は、水素、ハロ、アルキル、シクロアルキル、−ＣＮ、−ＮＯ２、および−ＮＨＲ３からなる群から選択され；
Ｒ２はそれぞれ、水素、ハロ、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、ＳＯ３Ｈ、および、置換または非置換アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アミノ、アミノカルボニル、アミノチオカルボニル、アミノカルボニルアミノ、アミノチオカルボニルアミノ、アミノカルボニルオキシ、アミノスルホニル、アミノスルホニルオキシ、アミノスルホニルアミノ、アミジノ、カルボキシル、カルボキシル エステル、(カルボキシル エステル)アミノ、(カルボキシル エステル)オキシ、スルホニル、スルホニルオキシ、チオアシル、チオール、アルキルチオ、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、部分的に飽和のシクロアルキル、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリルオキシ、シクロアルキルオキシ、アシル、アシルアミノおよびアシルオキシからなる群から独立して選択され；
Ｒ３は、水素、−ＣＯ−Ｒ４、および、置換または非置換アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールからなる群から選択され；
Ｒ４は、アルキル、置換アルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、およびアルキルアミノからなる群から選択される。]
の化合物が開示される。
【００１１】
別の具体的態様において、Ｙが、置換または非置換ピペリジニルまたはピペラジニルである式(Ｉ)〜(IV)の新規化合物が提供される。別の具体的態様において、Ｒ１が水素である式(Ｉ)〜(IV)の新規化合物が提供される。別の具体的態様において、Ｒ２が、水素、ハロ、ヒドロキシル、アミノ、ニトロ、シアノ、ＳＯ３Ｈおよび置換または非置換アルキル、アミノアルキルおよびフェニルからなる群から独立して選択される、式(Ｉ)〜(IV)の新規化合物が提供される。
【００１２】
別の態様において、本発明は、ＰＩＭ関連障害を処置する必要があるヒトまたは動物の対象において、ＰＩＭ関連障害を処置する方法であって、該対象に、対象のＰＩＭ活性に有効な量の式(Ｉ)、(II)、(III)または(IV)の化合物を投与することを含む方法を提供する。
【００１３】
別の態様において、本発明は、ＰＩＭ関連障害の処置が必要なヒトまたは動物の対象において、ＰＩＭ関連障害を処置する方法であって、該対象に、対象の腫瘍増殖を減退させるまたは予防するのに有効な量の式(Ｉ)、(II)、(III)または(IV)の化合物を投与することを含む方法を提供する。
【００１４】
さらに別の態様において、本発明は、ＰＩＭ関連障害の処置が必要なヒトまたは動物の対象において、ＰＩＭ関連障害を処置する方法であって、該対象に、少なくとも１種のさらなる癌処置薬と組み合わせて、対象の腫瘍増殖を減退させるまたは予防するのに有効な量の式(Ｉ)、(II)、(III)または(IV)の化合物を投与することを含む方法を提供する。
【００１５】
また、別の態様において、本発明は、通常癌治療に用いられる１種以上のさらなる癌処置薬と組み合わせた、少なくとも１種の式(Ｉ)、(II)、(III)または(IV)の化合物を含む治療組成物を提供する。
【００１６】
本発明の化合物は、造血器悪性腫瘍を含む癌、癌腫(例えば肺癌、肝臓癌、膵臓癌、卵巣癌、甲状腺癌、膀胱癌または結腸癌)、黒色腫、骨髄性障害(例えば骨髄性白血病、多発性骨髄腫および赤白血病)、腺腫(例えば繊毛結腸腺腫)、肉腫(例えば骨肉腫)、自己免疫疾患、アレルギー反応および臓器移植拒絶反応症候群の処置に有用である。
【００１７】
別の態様において、本発明は、対象において、Ｊａｋ／Ｓｔａｔシグナル伝達経路中の少なくとも１種のセリン／トレオニン・キナーゼを阻害する方法、あるいは、対象において、Ｊａｋ／Ｓｔａｔシグナル伝達経路中のセリン／トレオニン・キナーゼが介在する生物学的状態を処置する方法であって、対象において、Ｊａｋ／Ｓｔａｔシグナル伝達経路を阻害するのに有効な量の少なくとも１種の式(Ｉ)、(II)、(III)または(IV)の化合物を含む治療組成物を投与することを含む方法に関する。治療組成物は、該阻害剤が必要な患者(例えば異常なＪａｋ／Ｓｔａｔシグナル伝達経路が介在する癌に罹患している患者)を処置するのに有用である。
【００１８】
別の態様において、本発明は、対象において、Ｐｉｍ１、Ｐｉｍ２、Ｐｉｍ３、Ｆｌｔ３、ＫＤＲおよびＰＫＣεからなる群から選択される少なくとも１つのセリン／トレオニン・キナーゼ受容体を阻害する方法、あるいは、少なくとも１つのＰｉｍ１、Ｐｉｍ２、Ｐｉｍ３、Ｆｌｔ３、ＫＤＲおよびＰＫＣεが介在する生物学的状態を処置する方法であって、対象においてキナーゼ受容体を阻害するのに有効な、少なくとも１種の式(Ｉ)、(II)、(III)または(IV)の化合物を含む治療組成物を投与することを含む方法に関する。該治療化合物は、該阻害剤が必要な患者(例えば異常なセリン／トレオニン・キナーゼ受容体シグナル伝達経路が介在する癌に罹患している患者)を処置するのに有用である。
【００１９】
本発明は、さらに、本発明の詳細な記載に記載した組成物、使用方法および製造方法を提供する。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
詳細な記載
本発明の一つの態様によると、式(Ｉ)：
【化５】
2010520228.tif 000006
[式中、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３およびＸ４は、ＣＲ２およびＮから独立して選択され；ただし、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３およびＸ４のうちＮが２個を超えてはならず；
Ｙは、置換または非置換アミノ、アルコキシ、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールまたはヘテロアリールであり；
Ｚ１、Ｚ２およびＺ３は、ＣＲ２およびＮから独立して選択され；ただし、Ｚ１、Ｚ２およびＺ３のうちＮが１個を超えてはならず；
Ｒ１は、水素、ハロ、アルキル、シクロアルキル、−ＣＮ、−ＮＯ２、および−ＮＨＲ３からなる群から選択され；
Ｒ２はそれぞれ、水素、ハロ、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、ＳＯ３Ｈ、および、置換または非置換アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アミノ、アミノカルボニル、アミノチオカルボニル、アミノカルボニルアミノ、アミノチオカルボニルアミノ、アミノカルボニルオキシ、アミノスルホニル、アミノスルホニルオキシ、アミノスルホニルアミノ、アミジノ、カルボキシル、カルボキシル エステル、(カルボキシル エステル)アミノ、(カルボキシル エステル)オキシ、スルホニル、スルホニルオキシ、チオアシル、チオール、アルキルチオ、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、部分的に飽和のシクロアルキル、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリルオキシ、シクロアルキルオキシ、アシル、アシルアミノおよびアシルオキシからなる群から独立して選択され；
Ｒ３は、水素、−ＣＯ−Ｒ４、および、置換または非置換アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールからなる群から選択され；
Ｒ４は、アルキル、置換アルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、およびアルキルアミノからなる群から選択される。]
の化合物、その互変異性体および立体異性体、およびそれらの薬学的に許容される塩、または溶解度を増加させる部分を有するエステル、またはそれらのプロドラッグが提供される。
【００２１】
別の態様において、式(II)：
【化６】
2010520228.tif 000007
[式中、
Ｙは、置換または非置換アミノ、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールまたはヘテロアリールであり；
Ｚ３は、ＣＲ２およびＮから選択され；
Ｒ１は、水素、ハロ、アルキル、シクロアルキル、−ＣＮ、−ＮＯ２、および−ＮＨＲ３からなる群から選択され；
Ｒ２はそれぞれ、水素、ハロ、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、ＳＯ３Ｈ、および、置換または非置換アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アミノ、アミノカルボニル、アミノチオカルボニル、アミノカルボニルアミノ、アミノチオカルボニルアミノ、アミノカルボニルオキシ、アミノスルホニル、アミノスルホニルオキシ、アミノスルホニルアミノ、アミジノ、カルボキシル、カルボキシル エステル、(カルボキシル エステル)アミノ、(カルボキシル エステル)オキシ、スルホニル、スルホニルオキシ、チオアシル、チオール、アルキルチオ、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、部分的に飽和のシクロアルキル、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリルオキシ、シクロアルキルオキシ、アシル、アシルアミノおよびアシルオキシからなる群から独立して選択され；
Ｒ３は、水素、−ＣＯ−Ｒ４、および、置換または非置換アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールからなる群から選択され；
Ｒ４は、アルキル、置換アルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、およびアルキルアミノからなる群から選択される。]
の新規化合物が提供される。
【００２２】
別の態様において、式(III)：
【化７】
2010520228.tif 000008
[式中、
Ｚ３は、ＣＲ２およびＮから選択され；
Ｒ１は、水素、ハロ、アルキル、シクロアルキル、−ＣＮ、−ＮＯ２、および−ＮＨＲ３からなる群から選択され；
Ｒ２はそれぞれ、水素、ハロ、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、ＳＯ３Ｈ、および、置換または非置換アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アミノ、アミノカルボニル、アミノチオカルボニル、アミノカルボニルアミノ、アミノチオカルボニルアミノ、アミノカルボニルオキシ、アミノスルホニル、アミノスルホニルオキシ、アミノスルホニルアミノ、アミジノ、カルボキシル、カルボキシル エステル、(カルボキシル エステル)アミノ、(カルボキシル エステル)オキシ、スルホニル、スルホニルオキシ、チオアシル、チオール、アルキルチオ、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、部分的に飽和のシクロアルキル、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリルオキシ、シクロアルキルオキシ、アシル、アシルアミノおよびアシルオキシからなる群から独立して選択され；
Ｒ３は、水素、−ＣＯ−Ｒ４、および、置換または非置換アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールからなる群から選択され；
Ｒ４は、アルキル、置換アルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、およびアルキルアミノからなる群から選択される。]
の新規化合物が提供される。
【００２３】
また、下記の式(IV)：
【化８】
2010520228.tif 000009
[式中、
Ｒ１は、水素、ハロ、アルキル、シクロアルキル、−ＣＮ、−ＮＯ２、および−ＮＨＲ３からなる群から選択され；
Ｒ２はそれぞれ、水素、ハロ、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、ＳＯ３Ｈ、および、置換または非置換アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アミノ、アミノカルボニル、アミノチオカルボニル、アミノカルボニルアミノ、アミノチオカルボニルアミノ、アミノカルボニルオキシ、アミノスルホニル、アミノスルホニルオキシ、アミノスルホニルアミノ、アミジノ、カルボキシル、カルボキシル エステル、(カルボキシル エステル)アミノ、(カルボキシル エステル)オキシ、スルホニル、スルホニルオキシ、チオアシル、チオール、アルキルチオ、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、部分的に飽和のシクロアルキル、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリルオキシ、シクロアルキルオキシ、アシル、アシルアミノおよびアシルオキシからなる群から独立して選択され；
Ｒ３は、水素、−ＣＯ−Ｒ４、および、置換または非置換アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールからなる群から選択され；
Ｒ４は、アルキル、置換アルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、およびアルキルアミノからなる群から選択される。]
の化合物が開示される。
【００２４】
別の具体的態様において、Ｙが置換または非置換ピペリジニルまたはピペラジニルである式(Ｉ)〜(IV)の新規化合物が提供される。幾つかの具体的態様において、Ｘ１、Ｘ３、およびＸ４が−ＣＨ２−であり、Ｘ２が−ＮＨ−である式(Ｉ)〜(IV)の新規化合物が提供される。幾つかの具体的態様において、Ｘ５が−ＣＨ２−である式(Ｉ)〜(IV)の新規化合物が提供される。幾つかの具体的態様において、Ｘ６が−ＣＨ(ＮＨ２)−である式(Ｉ)〜(IV)の新規化合物が提供される。別の具体的態様において、Ｒ１が水素である式(Ｉ)〜(IV)の新規化合物が提供される。別の具体的態様において、Ｒ２が、水素、ハロ、ヒドロキシル、アミノ、ニトロ、シアノ、ＳＯ３Ｈ、および置換または非置換アルキル、アミノアルキルおよびフェニルからなる群から独立して選択される式(Ｉ)〜(IV)の新規化合物が提供される。
【００２５】
別の態様において、本発明は、ＰＩＭ関連障害を処置する必要があるヒトまたは動物の対象において、ＰＩＭ関連障害を処置する方法であって、該対象に、対象のＰＩＭ活性に有効な量の式(Ｉ)、(II)、(III)または(IV)の化合物を投与することを含む方法を提供する。
【００２６】
別の態様において、本発明は、ＰＩＭ関連障害の処置が必要なヒトまたは動物の対象において、ＰＩＭ関連障害を処置する方法であって、該対象に、対象の腫瘍増殖を減退させるまたは予防するのに有効な量の式(Ｉ)、(II)、(III)または(IV)の化合物を投与することを含む方法を提供する。
【００２７】
さらに別の態様において、本発明は、ＰＩＭ関連障害の処置が必要なヒトまたは動物の対象において、ＰＩＭ関連障害を処置する方法であって、該対象に、少なくとも１種のさらなる癌処置薬と組み合わせて、対象の腫瘍増殖を減退させるまたは予防するのに有効な量の式(Ｉ)、(II)、(III)または(IV)の化合物を投与することを含む方法を提供する。組み合わせ治療薬として用いられる幾つかの適切な抗癌剤は、本発明の方法における使用を意図している。実際、本発明は、多数の抗癌剤、例えばアポトーシス誘発剤；ポリヌクレオチド(例えばリボザイム)；ポリペプチド(例えば酵素)；薬物；生物学的模倣物(mimetics)；アルカロイド；アルキル化剤；抗腫瘍抗生物質；代謝拮抗薬；ホルモン；白金化合物；抗癌剤、毒素、および／または放射性核種と結合したモノクローナル抗体；生物学的応答修飾剤(例えばインターフェロン[例えばＩＦＮ−ａなど]およびインターロイキン[例えばＩＬ−２など]など)；養子免疫治療薬；造血増殖因子；腫瘍細胞分化誘発剤(例えばall-transレチノイン酸など)；遺伝子治療薬；アンチセンス治療薬およびヌクレオチド；腫瘍ワクチン；血管新生阻害剤などの投与(これらに限定されない)を意図している。開示された式(Ｉ)、(II)、(III)または(IV)の化合物と共投与するのに適切な多数の他の化学療法化合物および抗癌治療の例は、当業者に既知である。
【００２８】
好ましい具体的態様において、本発明の化合物と組み合わせて用いられる抗癌剤は、アポトーシスを誘発するまたは刺激する薬物を含む。アポトーシスを誘発する薬物は、放射線(例えばW)；キナーゼ阻害剤(例えば、上皮増殖因子受容体[ＥＧＦＲ]キナーゼ阻害剤、血管増殖因子受容体[ＶＧＦＲ]キナーゼ阻害剤、線維芽細胞増殖因子受容体[ＦＧＦＲ]キナーゼ阻害剤、血小板由来増殖因子受容体[ＰＧＦＲ] Ｉ キナーゼ阻害剤、およびＢｃｒ−Ａｂｌキナーゼ阻害剤、例えばSTI-571、GleevecおよびGlivec])；アンチセンス分子；抗体[例えばハーセプチンおよびリツキサン]；抗エストロゲン剤[例えばラロキシフェンおよびタモキシフェン]；抗アンドロゲン剤[例えば、フルタミド、ビカルタミド、フィナステリド、アミノグルテチミド、ケトコナゾールおよびコルチコステロイド]；シクロオキシゲナーゼ ２(ＣＯＸ−２)阻害剤[例えば、セレコキシブ、メロキシカム、NS-398、および非ステロイド性抗炎症剤(ＮＳＡＩＤ)]；および癌治療薬[例えばイリノテカン(Camptosar)、CPT-11、フルダラビン(Fludara)、ダカルバジン(DTIC)、デキサメタゾン、ミトキサントロン、マイロターグ、VP-16、シスプラチン、5-FU、ドキソルビシン、タキソテールまたはタキソール]；細胞シグナル伝達分子；セラミドおよびサイトカイン；およびスタウロスポリンなどを含み、これらに限定されない。
【００２９】
また、別の態様において、本発明は、薬学的に許容される担体と組み合わせた、かつ所望により通常癌治療に用いられる１種以上のさらなる癌処置薬と組み合わせた、少なくとも１種の式(Ｉ)、(II)、(III)または(IV)の化合物を含む治療組成物を提供する。
【００３０】
本発明の化合物は、造血器悪性腫瘍を含む癌、癌腫(例えば肺癌、肝臓癌、膵臓癌、卵巣癌、甲状腺癌、膀胱癌または結腸癌)、黒色腫、骨髄性障害(例えば骨髄性白血病、多発性骨髄腫および赤白血病)、腺腫(例えば繊毛結腸腺腫)、肉腫(例えば骨肉腫)、自己免疫疾患、アレルギー反応および臓器移植拒絶反応症候群の処置に有用である。
【００３１】
別の態様において、本発明は、対象において、Ｊａｋ／Ｓｔａｔシグナル伝達経路中の少なくとも１種のセリン／トレオニン・キナーゼを阻害する方法、あるいは、対象において、Ｊａｋ／Ｓｔａｔシグナル伝達経路中のセリン／トレオニン・キナーゼが介在する生物学的状態を処置する方法であって、対象において、Ｊａｋ／Ｓｔａｔシグナル伝達経路を阻害するのに有効な少なくとも１種の式(Ｉ)、(II)、(III)または(IV)の化合物を含む治療組成物を投与することを含む方法に関する。治療組成物は、該阻害剤が必要な患者(例えば異常なＪａｋ／Ｓｔａｔシグナル伝達が介在する癌に罹患している患者)を処置するのに有用である。
【００３２】
別の態様において、本発明は、対象において、Ｐｉｍ１、Ｐｉｍ２、Ｐｉｍ３、Ｆｌｔ３、ＫＤＲおよびＰＫＣεからなる群から選択される少なくとも１つのセリン／トレオニン・キナーゼ受容体を阻害する方法、あるいは、少なくとも１つのＰｉｍ１、Ｐｉｍ２、Ｐｉｍ３、Ｆｌｔ３、ＫＤＲおよびＰＫＣεが介在する生物学的状態を処置する方法であって、対象においてキナーゼ受容体を阻害するのに有効な、少なくとも１種の式(Ｉ)、(II)、(III)または(IV)の化合物を含む治療組成物を投与することを含む方法に関する。該治療化合物は、該阻害剤が必要な患者(例えば異常なセリン／トレオニン・キナーゼ受容体シグナル伝達が介在する癌に罹患している患者)を処置するのに有用である。
【００３３】
別の態様において、本発明は、対象において、Ｐｉｍ１、Ｐｉｍ２、Ｐｉｍ３、Ｆｌｔ３、ＫＤＲおよびＰＫＣεからなる群から選択される少なくとも１つのセリン／トレオニン・キナーゼの活性を阻害する方法、あるいは、処置が必要なヒトまたは動物の対象において、少なくとも１つのＰｉｍ１、Ｐｉｍ２、Ｐｉｍ３、Ｆｌｔ３、ＫＤＲおよびＰＫＣεが介在する生物学的状態を処置する方法であって、対象においてキナーゼを阻害するのに有効な量の少なくとも１種の式(Ｉ)、(II)、(III)または(IV)の化合物を投与することを含む方法に関する。該治療化合物は、該阻害剤が必要な患者(例えば異常なセリン／トレオニン・キナーゼ受容体シグナル伝達が介在する癌に罹患している患者)を処置するのに有用である。
【００３４】
別の態様において、本発明は、本明細書で記載した式(Ｉ)、(II)、(III)または(IV)の化合物の製造方法を提供する。
【００３５】
本発明は、さらに、本発明の詳細な記載で記載した組成物、使用方法および製造方法を提供する。
【００３６】
“ＰＩＭ阻害剤”は、本明細書では、ＰＩＭキナーゼ活性に関するＩＣ５０が約１００μＭ以下、より典型的には約５０μＭ以下(下記に記載したＰＩＭ欠損アッセイで測定)を示す化合物を言うために用いられる。
【００３７】
用語“アルキル”は、ヘテロ原子を含まないアルキル基を言う。従って、該用語は、直鎖アルキル基、例えばメチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシルなどを含む。該用語はまた、直鎖アルキル基の分枝鎖異性体を含み、例としては、下記：−ＣＨ(ＣＨ３)２、−ＣＨ(ＣＨ３)(ＣＨ２ＣＨ３)、−ＣＨ(ＣＨ２ＣＨ３)２、−Ｃ(ＣＨ３)３、−Ｃ(ＣＨ２ＣＨ３)３、−ＣＨ２ＣＨ(ＣＨ３)２、−ＣＨ２ＣＨ(ＣＨ３)(ＣＨ２ＣＨ３)、−ＣＨ２ＣＨ(ＣＨ２ＣＨ３)２、−ＣＨ２Ｃ(ＣＨ３)３、−ＣＨ２Ｃ(ＣＨ２ＣＨ３)３、−ＣＨ(ＣＨ３)ＣＨ(ＣＨ３)(ＣＨ２ＣＨ３)、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ(ＣＨ３)２、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ(ＣＨ３)(ＣＨ２ＣＨ３)、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ(ＣＨ２ＣＨ３)２、−ＣＨ２ＣＨ２Ｃ(ＣＨ３)３、−ＣＨ２ＣＨ２Ｃ(ＣＨ２ＣＨ３)３、−ＣＨ(ＣＨ３)ＣＨ２ＣＨ(ＣＨ３)２、−ＣＨ(ＣＨ３)ＣＨ(ＣＨ３)ＣＨ(ＣＨ３)２、−ＣＨ(ＣＨ２ＣＨ３)ＣＨ(ＣＨ３)ＣＨ(ＣＨ３)(ＣＨ２ＣＨ３)などを含み、これらに限定されない。該用語はまた、環状アルキル基、例えばシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、およびシクロオクチル、ならびに、上で定義された直鎖および分枝鎖アルキル基で置換された これらの環を含む。従って、用語アルキル基は、第１級アルキル基、第２級アルキル基、および第３級アルキル基を含む。好ましいアルキル基は、１から１２個の炭素原子を有する、直鎖および分枝鎖のアルキル基、および環状アルキル基を含む。
【００３８】
本明細書で用いられるとき、“低級アルキル”は、１から６個の炭素原子を有する置換または非置換の直鎖または分枝鎖アルキル基の双方を含む。代表的な低級アルキル基は、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ネオペンチル、トリフルオロメチル、ペンタフルオロエチルなどを含む。低級アルキル基は、例えばハロ、ヒドロキシ、アミノ、ニトロおよび／またはシアノ基などで置換されていてもよい。代表的なハロ置換およびヒドロキシ置換低級アルキルは、クロロメチル、トリクロロメチル、クロロエチル、ヒドロキシエチルなどを含む。他の適切な置換低級アルキル部分は、例えば、アラルキル、アミノアルキル、アミノアラルキル、カルボニルアミノアルキル、アルキルカルボニルアミノアルキル、アリールカルボニルアミノアルキル、アラルキルカルボニルアミノアルキル、アミノアルコキシアルキルおよびアリールアミノアルキルを含む。
【００３９】
“低級アルコキシ”は、本明細書で用いられるとき、ＲＯ−{式中、Ｒは低級アルキルである。}を言う。低級アルコキシ基の代表例は、メトキシ、エトキシ、ｔ−ブトキシ、トリフルオロメトキシなどを含む。
【００４０】
本明細書で用いられるとき、用語“ハロゲン”または“ハロ”は、クロロ、ブロモ、フルオロおよびヨード基を言う。“ハロアルキル”は、１個以上のハロゲン原子で置換されたアルキル基を言う。用語“ハロ低級アルキル”は、１個以上のハロゲン原子で置換された低級アルキル基を言う。用語“ハロアルコキシ”は、１個以上のハロゲン原子で置換されたアルコキシ基を言う。用語“ハロ低級アルコキシ”は、１個以上のハロゲン原子で置換された低級アルコキシ基を言う。
【００４１】
“アミノ”は、本明細書で、基−ＮＨ２を言う。用語“アルキルアミノ”は、本明細書で、基−ＮＲＲ' {式中、ＲおよびＲ'はそれぞれ、水素または低級アルキルから独立して選択される。}を言う。用語“アリールアミノ”は、本明細書で、基−ＮＲＲ' {式中、Ｒはアリールであり、Ｒ'は水素、低級アルキル、またはアリールである。}を言う。用語“アラルキルアミノ”は、本明細書で、基−ＮＲＲ' {式中、Ｒは低級アラルキルであり、Ｒ'は水素、低級アルキル、アリール、または低級アラルキルである。}を言う。
【００４２】
用語“アルコキシアルキル”は、基−ａｌｋ１−Ｏ−ａｌｋ２ {式中、ａｌｋ１はアルキルまたはアルケニルであり、ａｌｋ２はアルキルまたはアルケニルである。}を言う。用語“低級アルコキシアルキル”は、ａｌｋ１が低級アルキルまたは低級アルケニルであり、ａｌｋ２が低級アルキルまたは低級アルケニルであるアルコキシアルキルを言う。用語“アリールオキシアルキル”は、基−アルキル−Ｏ−アリールを言う。用語“アラルコキシアルキル”は、基−アルキレニル−Ｏ−アラルキル {式中、アラルキルは低級アラルキルである。}を言う。
【００４３】
用語“アミノカルボニル”は、本明細書で、基−Ｃ(Ｏ)−ＮＨ２を言う。“置換アミノカルボニル”は、本明細書で、基−Ｃ(Ｏ)−ＮＲＲ' {式中、Ｒは低級アルキルであり、Ｒ'は水素または低級アルキルである。}を言う。幾つかの具体的態様において、ＲおよびＲ'は、それらが結合しているＮ原子と一体となって、“ヘテロシクロアルキルカルボニル”基を形成してもよい。用語“アリールアミノカルボニル”は、本明細書で、基−Ｃ(Ｏ)−ＮＲＲ' {式中、Ｒはアリールであり、Ｒ'は、水素、低級アルキルまたはアリールである。}を言う。“アラルキルアミノカルボニル”は、本明細書で、基−Ｃ(Ｏ)−ＮＲＲ' {式中、Ｒは、低級アラルキルであり、Ｒ'は、水素、低級アルキル、アリール、または低級アラルキルである。}を言う。
【００４４】
“アミノスルホニル”は、本明細書で、基−Ｓ(Ｏ)２−ＮＨ２を言う。“置換アミノスルホニル”は、本明細書で、基−Ｓ(Ｏ)２−ＮＲＲ' {式中、Ｒは低級アルキルであり、Ｒ'は水素または低級アルキルである。}を言う。用語“アラルキルアミノスルホニルアリール”は、本明細書で、基−アリール−Ｓ(Ｏ)２−ＮＨ−アラルキル {式中、該アラルキルは低級アラルキルである。}を言う。
【００４５】
“カルボニル”は、二価の基−Ｃ(Ｏ)−を言う。“カルボキシ”は、−Ｃ(＝Ｏ)−ＯＨを言う。“アルコキシカルボニル”は、エステル：−Ｃ(＝Ｏ)−ＯＲ {式中、Ｒはアルキルである。}を言う。“低級アルコキシカルボニル”は、エステル：−Ｃ(＝Ｏ)−ＯＲ {式中、Ｒは低級アルキルである。}を言う。“シクロアルキルオキシカルボニル”は、−Ｃ(＝Ｏ)−ＯＲ {式中、Ｒはシクロアルキルである。}を言う。“アリールオキシカルボニル”は、−Ｃ(＝Ｏ)−ＯＲ {式中、Ｒはアリールである。}を言う。“ヘテロシクリルオキシカルボニル”は、−Ｃ(＝Ｏ)−ＯＲ {式中、Ｒはヘテロシクリルである。}を言う。
【００４６】
用語“アラルコキシカルボニル”は、本明細書で、基−Ｃ(Ｏ)−Ｏ−アラルキル {式中、アラルキルは低級アラルキルである。}を言う。
【００４７】
用語“スルホニル”は、本明細書で、基−ＳＯ２−を言う。用語“スルファニル”は、本明細書で、基−Ｓ−を言う。“低級アルキルスルホニル”は、構造−ＳＯ２Ｒ {式中、Ｒは低級アルキルである。}の置換スルホニルを言う。“低級アルキルスルファニル”は、構造−ＳＲ− {式中、Ｒは低級アルキルである。}の置換スルファニルを言う。本発明の化合物に用いられるアルキルスルホニルおよびアルキルスルファニル基は、典型的には、その骨格構造に１から６個の炭素原子を有する低級アルキルスルホニルまたは低級アルキルスルファニル基である。従って、本発明の化合物に用いられる典型的なアルキルスルホニルおよび低級アルキルスルファニル基は、例えば、メチルスルホニルおよびメチルスルファニル (すなわち、式中、Ｒはメチルである。)、エチルスルホニルおよびエチルスルファニル (すなわち、式中、Ｒはエチルである。)、プロピルスルホニルおよびプロピルスルファニル (すなわち、式中、Ｒはプロピルである。)などを含む。用語“アリールスルホニル”は、本明細書で、基−ＳＯ２−アリールを言う。用語“アラルキルスルホニル”は、本明細書で、基−ＳＯ２−アラルキル {式中、アラルキルは、低級アラルキルである。}を言う。用語“スルホンアミド”は、本明細書で、−ＳＯ２ＮＨ２を言う。
【００４８】
本明細書で用いられるとき、用語“カルボニルアミノ”は、二価の基−ＮＨ−Ｃ(Ｏ)− {式中、カルボニルアミノ基のアミド窒素の水素原子は、低級アルキル、アリールまたは低級アラルキル基によって置き換えられ得る。}を言う。このような基は、例えば、カルバミン酸エステル(−ＮＨ−Ｃ(Ｏ)−Ｏ−Ｒ)およびアミド：−ＮＨ−Ｃ(Ｏ)−Ｒ {式中、Ｒは、直鎖または分枝鎖の低級アルキル、シクロアルキル、または、アリールまたは低級アラルキルである。}の部分を含む。
【００４９】
“シクロアルキル”は、単環式または多環式のヘテロ環状または炭素環状アルキル置換基を言う。典型的なシクロアルキル置換基は、３から８個の骨格(すなわち環)原子を有し、骨格原子はそれぞれ炭素原子またはヘテロ原子の何れかである。用語“ヘテロシクロアルキル”は、本明細書で、環構造中に１から５個の、より典型的には１から４個のヘテロ原子を有するシクロアルキル置換基を言う。本発明の化合物に用いられる適切なヘテロ原子は、窒素、酸素および硫黄である。代表的なヘテロシクロアルキル部分は、例えば、モルホリノ、ピペラジニル、ピペリジニルなどを含む。カルボシクロアルキル基は、全ての環原子が炭素であるシクロアルキル基である。シクロアルキル置換基と関連して用いられるとき、用語“多環式”は、本明細書で、縮合および非縮合アルキル環状構造を言う。
【００５０】
本明細書で用いられる用語“置換ヘテロシクリル”または“ヘテロ環基”またはヘテロシクリルは、窒素、酸素および硫黄から選択される１個のヘテロ原子を含む３員環または４員環、あるいは、窒素、酸素および硫黄からなる群から選択される１から３個のヘテロ原子を含む５員環または６員環を言い；ここで、５員環は０〜２個の二重結合を有し、６員環は０〜３個の二重結合を有し；ここで、該窒素原子および硫黄原子は、所望により酸化されていてもよく；ここで、該窒素原子および硫黄原子は、所望により４級化されていてもよく；そして、上記のヘテロ環の何れかが、上で独立して定義した１個のベンゼン環または他の５員もしくは６員のヘテロ環に縮合している全ての二環式基を含む。用語“ヘテロシクリル”は、従って、窒素が該ヘテロ原子であり、また部分的におよび完全に飽和の環を含む。好ましいヘテロシクリルは、例えばジアザピニル、ピリル、ピロリニル、ピロリジニル、ピラゾリル、ピラゾリニル、ピラゾリジニル、イミダゾイル、イミダゾリニル、イミダゾリジニル、ピリジル、ピペリジニル、ピラジニル、ピペラジニル、Ｎ−メチルピペラジニル、アゼチジニル、Ｎ−メチルアゼチジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、オキサゾリル、オキサゾリジニル、イソオキサゾリル、イソアゾリジニル(isoazolidinyl)、モルホリニル、チアゾリル、チアゾリジニル、イソチアゾリル、イソチアゾリジニル、インドリル、キノリニル、イソキノリニル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾオキサゾリル、フリル、チエニル、トリアゾリルおよびベンゾチエニルを含む。
【００５１】
ヘテロ環状部分は、非置換であってもよく、また、ヒドロキシ、ハロ、オキソ(Ｃ＝Ｏ)、アルキルイミノ(ＲＮ＝ (式中、Ｒは低級アルキルまたは低級アルコキシ基である。))、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アシルアミノアルキル、アルコキシ、チオアルコキシ、ポリアルコキシ、低級アルキル、シクロアルキルおよびハロアルキルから独立して選択される種々の置換基で１置換または２置換されていてもよい。
【００５２】
ヘテロ環基は、本明細書の開示と併せて、有機化学および医薬品化学の分野における技術者に明らかであるように、種々の位置で結合し得る。
【化９】
2010520228.tif 000010
ここで、Ｒは、Ｈまたは本明細書で記載したヘテロ環置換基である。
【００５３】
代表的なヘテロ環は、例えば、イミダゾリル、ピリジル、ピペラジニル、アゼチジニル、チアゾリル、フラニル、トリアゾリル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾオキサゾリル、キノリニル、イソキノリニル、キナゾリニル、キノキサリニル、フタラジニル、インドリル、ナフタピリジニル、インダゾリル、およびキノリジニルを含む。
【００５４】
“アリール”は、３から１４個の骨格炭素原子またはヘテロ原子を有する、所望により置換されている単環式および多環式芳香族基を言い、炭素環アリール基およびヘテロ環アリール基の双方を含む。炭素環アリール基は、芳香環中の全ての環原子が炭素であるアリール基である。用語“ヘテロアリール”は、本明細書で、芳香環中の環原子として１から４個のヘテロ原子を有し、残りの環原子が炭素原子であるアリール基を言う。アリール置換基に関連して用いられるとき、用語“多環式アリール”は、本明細書で、少なくとも１個の環構造が芳香族性である縮合および非縮合環状構造を言い、例えば、ベンゾジオキソゾロ(フェニル基に縮合したヘテロ環構造、すなわち、
【化１０】
2010520228.tif 000011
を有する)、ナフチルなどである。本発明の化合物中の置換基として用いられるアリール部分の例は、フェニル、ピリジル、ピリミジニル、チアゾリル、インドリル、イミダゾリル、オキサジアゾリル、テトラゾリル、ピラジニル、トリアゾリル、チオフェニル、フラニル、キノリニル、プリニル、ナフチル、ベンゾチアゾリル、ベンゾピリジル、および、ベンゾイミダゾリルなどを含む。
【００５５】
“アラルキル”は、アリール基で置換されたアルキル基を言う。典型的には、本発明の化合物に用いられるアラルキル基は、アラルキル基のアルキル位置に組み込まれた１から６個の炭素原子を有する。本発明の化合物に用いられる適切なアラルキル基は、例えば、ベンジル、ピコリルなどを含む。
【００５６】
代表的なヘテロアリール基は、例えば、以下に示すものを含む。これらのヘテロアリール基は、さらに、本明細書の開示と併せて、有機化学および医薬品化学の分野における技術者に明らかであるように、種々の位置で置換され、かつ結合し得る。
【化１１】
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【００５７】
代表的なヘテロアリールは、例えば、イミダゾリル、ピリジル、ピペラジニル、アゼチジニル、チアゾリル、トリアゾリル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾチアゾリル、およびベンゾオキサゾリルを含む。
【００５８】
“所望により置換されている”または“置換されている”は、１個以上の水素原子が一価または二価の基で置き換えられていることを言う。適切な置換基は、例えば、ヒドロキシ、ニトロ、アミノ、イミノ、シアノ、ハロ、チオ、スルホニル、チオアミド、アミジノ、イミジノ、オキソ、オキサミジノ、メトキシアミジノ、イミジノ、グアニジノ、スルホンアミド、カルボキシル、ホルミル、低級アルキル、ハロ低級アルキル、低級アルキルアミノ、ハロ低級アルキルアミノ、低級アルコキシ、ハロ低級アルコキシ、低級アルコキシアルキル、アルキルカルボニル、アミノカルボニル、アリールカルボニル、アラルキルカルボニル、ヘテロアリールカルボニル、ヘテロアラルキルカルボニル、アルキルチオ、アミノアルキル、シアノアルキル、アリールなどを含む。
【００５９】
置換基は、それ自身置換され得る。置換基を置換している基は、カルボキシル、ハロ；ニトロ、アミノ、シアノ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルコキシ、アミノカルボニル、−ＳＲ、チオアミド、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ２Ｒまたはシクロアルキルであり得る。ここで、Ｒは、典型的には、水素、ヒドロキシルまたは低級アルキルである。
【００６０】
置換された置換基が直鎖の基を含むとき、置換は、鎖内(例えば、２−ヒドロキシプロピル、２−アミノブチルなど)または鎖の末端(例えば、２−ヒドロキシエチル、３−シアノプロピルなど)の何れでも起こり得る。置換された置換基は、共有結合した炭素原子またはヘテロ原子の直鎖配置であっても分枝鎖配置であっても環状配置であってもよい。
【００６１】
上記の定義は、許容されない置換パターン(例えば、５個のフルオロ基で置換されたメチル、または、他のハロゲン原子で置換されたハロゲン原子)を含むことを意図しない。このような許容されない置換パターンは、当業者に周知である。
【００６２】
式(Ｉ)、(II)、(III)または(IV)の化合物またはその立体異性体、ならびにその何れかの薬学的に許容される塩、エステル、代謝物およびプロドラッグを含む本発明の化合物は、互変異性を示してもよく、従って、分子の１個の原子のプロトンが他の原子にシフトし、その結果、分子の原子間の結合が再配列されている種々の互変異性体の形態であってもよいことが、当業者に明らかである。例えば、March, Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms and Structures, Fourth Edition, John Wiley & Sons, pages 69-74 (1992)を参照のこと。本明細書で用いるとき、用語“互変異性体”は、プロトンのシフトによって生じる化合物を言い、全ての互変異性体の形態は、それらが存在し得る限り、本発明の範囲内に含まれると理解されるべきである。
【００６３】
式(Ｉ)、(II)、(III)または(IV)の化合物またはその互変異性体、ならびにその何れかの薬学的に許容される塩、エステル、代謝物およびプロドラッグを含む本発明の化合物は、不斉に置換された炭素原子を含んでもよい。このような不斉に置換された炭素原子は、エナンチオマー、ジアステレオマー、および絶対立体化学の用語で定義され得る他の立体異性体、例えば(Ｒ)型または(Ｓ)型が存在する本発明の化合物を生じ得る。結果として、全てのこのような可能な異性体、光学的に純粋な形態の個々の立体異性体、それらの混合物、ラセミ混合物(またはラセミ化合物)、ジアステレオマー混合物、および本発明の化合物の単一のジアステレオマーは、本発明に含まれる。本明細書で用いる用語“Ｓ”および“Ｒ”配置は、IUPAC 1974 RECOMMENDATIONS FOR SECTION E, FUNDAMENTAL STEREOCHEMISTRY, Pure Appl. Chem. 45:13 30 (1976)によって定義された通りである。用語αおよびβは、環状化合物の環の位置について用いられる。参照平面のα側とは、好ましい置換基がより低い数の位置にある側である。該参照平面の反対側にある置換基はβという記載で示す。環状の立体骨格では、これの使用法は異なっていることに注意するべきであり、そこで“α”は“平面の下”を意味し、絶対配置を示す。用語αおよびβ配置は、本明細書で用いるとき、CHEMICAL ABSTRACTS INDEX GUIDE-APPENDIX IV (1987) paragraph 203によって定義された通りである。
【００６４】
本明細書で用いるとき、用語“薬学的に許容される塩”は、式(Ｉ)、(II)、(III)または(IV)の化合物の非毒性の酸またはアルカリ土類金属の塩を言う。これらの塩は、式(Ｉ)、(II)、(III)または(IV)の化合物の最終的な単離および精製の際に、in situ で製造され得るか、または、別個に、塩基または酸官能基を、それぞれ、適切な有機または無機の酸または塩基と反応させることによって、製造され得る。代表的な塩は、次に示すものを含み、これらの限定されない：酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、クエン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、重硫酸塩、酪酸塩、カンファー酸塩、カンファースルホン酸塩、ジグルコン酸塩、シクロペンタンプロパン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、グルコヘプタン酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、フマル酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、メタンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、シュウ酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロパン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロパン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩およびウンデカン酸塩。また、塩基性窒素含有基は、ハロゲン化低級アルキル、例えば塩化、臭化およびヨウ化メチル、エチル、プロピル、およびブチル；硫酸ジアルキル、例えば硫酸ジメチル、ジエチル、ジブチル、およびジアミル、ハロゲン化長鎖、例えば塩化、臭化およびヨウ化デシル、ラウリル、ミリスチルおよびステアリル；ハロゲン化アラルキル、例えば臭化ベンジルおよびフェネチルなどの反応剤で四級化され得る。それによって、水または油に可溶なまたは懸濁可能な生成物が得られる。
【００６５】
薬学的に許容される酸付加塩を形成するために用いられ得る酸の例は、塩酸、硫酸およびリン酸といった無機酸、ならびに、シュウ酸、マレイン酸、メタンスルホン酸、コハク酸およびクエン酸といった有機酸を含む。塩基付加塩は、式(Ｉ)の化合物の最終的な単離および精製の際に、in situで製造され得るか、または、別個に、カルボン酸部分を、適切な塩基、例えば薬学的に許容される金属カチオンの水酸化物、炭酸塩または重炭酸塩、またはアンモニア、または有機の第１級、第２級または第３級アミンと反応させることによって製造され得る。薬学的に許容される塩は、次に示すものを含み、これらに限定されない：アルカリ金属およびアルカリ土類金属をベースとするカチオン(例えばナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、アルミニウムなど)の塩、ならびに非毒性のアンモニウム塩、第４級アンモニウム塩、およびアミンカチオンの塩(アンモニウム塩、テトラメチルアンモニウム塩、テトラエチルアンモニウム塩、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、エチルアミンの塩などを含み、これらに限定されない)。塩基付加塩の形成に有用な他の代表的な有機アミン類は、ジエチルアミン、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペラジンなどを含む。
【００６６】
本明細書で用いるとき、用語“薬学的に許容されるエステル”は、in vivo で加水分解するエステル類を言い、ヒトの体内で容易に切断され親化合物またはその塩が得られるものを含む。適当なエステル基は、例えば、薬学的に許容される脂肪族カルボン酸、特にアルカン酸、アルケン酸、シクロアルカン酸およびアルカンジオン酸から誘導される基を含み、ここで、それぞれのアルキルまたはアルケニル部分は、有利には、最大６個の炭素原子を有する。特定のエステル類の例は、ホルメート類、アセテート類、プロピオネート類、ブチレート類、アクリレート類、およびエチルスクシネート類を含む。
【００６７】
用語“薬学的に許容されるプロドラッグ”は、本明細書で用いるとき、正常な医学的判断の範囲内でヒトおよび下等動物の組織と接触させる使用に適当であり、不適当な毒性、刺激性、アレルギー応答などがなく、合理的な利益／危険比を有し、かつその意図された使用に有効である、ならびに可能であれば本発明の化合物の双性イオンの形態である、本発明の化合物のプロドラッグを言う。用語“プロドラッグ”は、例えば血中で加水分解することによって、in vivo で素早く変換され、上記の式の親化合物を得る化合物を言う。徹底的な議論は、T. Higuchi and V. Stella, Pro-drugs as Novel Delivery Systems, Vol. 14 of the A.C.S. Symposium Series、および、Edward B. Roche, ed., Bioreversible Carriers in Drug Design, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987において提供され、両者は言及することによって本明細書に組み込まれる。
【００６８】
式(Ｉ)、(II)、(III)または(IV)の化合物またはその互変異性体、プロドラッグおよび立体異性体、ならびにその何れかの薬学的に許容される塩、エステルおよびプロドラッグを含む本発明の化合物は、in vivoで、ヒトまたは動物の体内または細胞内で、代謝によって処理され、代謝物を生じ得ることが、当業者に明らかである。用語“代謝物”は、本明細書で用いるとき、親化合物の投与後、対象内で生じる式の何れかの誘導体を言う。該誘導体は、対象内の種々の生化学的変換によって、例えば酸化、還元、加水分解、または結合によって、親化合物から生じ、例えばオキシドおよび脱メチル誘導体を含む。本発明の化合物の代謝物は、当技術分野で既知の慣例の方法を用いて同定され得る。例えば、Bertolini, G. et al., J. Med. Chem. 40:2011-2016 (1997); Shan, D. et al., J. Pharm. Sci. 86(7):765-767; Bagshawe K., Drug Dev. Res. 34:220-230 (1995); Bodor, N., Advances in Drug Res. 13:224-331 (1984); Bundgaard, H., Design of Prodrugs (Elsevier Press 1985); および Larsen, I. K., Design and Application of Prodrugs, Drug Design and Development (Krogsgaard-Larsen et al., eds., Harwood Academic Publishers, 1991)を参照のこと。式(Ｉ)、(II)、(III)または(IV)の化合物、またはその互変異性体、プロドラッグおよび立体異性体、ならびにそれらの何れかの薬学的に許容される塩、エステルおよびプロドラッグの代謝物である個々の化学化合物は、本発明の範囲に含まれると理解されるべきである。
【００６９】
用語“癌”は、例えば、固形癌、例えば癌腫(例えば肺癌、膵臓癌、甲状腺癌、卵巣癌、膀胱癌、乳癌、前立腺癌または大腸癌)、黒色腫、骨髄性障害(例えば骨髄性白血病、多発性骨髄腫および赤白血病)、腺癌(例えば繊毛結腸腺腫)および肉腫(例えば骨肉腫)を含む、Ｐｉｍキナーゼの阻害によって有益に処置され得る癌疾患を言う。
【００７０】
別の態様において、本発明の化合物は、式(Ｉ)、(II)、(III)または(IV)の化合物を製造する方法、および、以下に詳細に記載した方法に有用な合成中間体に関する。
【００７１】
合成方法
本発明の化合物は、当業者に既知の方法によって得られる。例えば、スキーム１に示した通り、４−クロロ−３−ニトロピリジンを求核剤と反応させ、ニトロを還元した後、４位置換３−アミノピリジンＩを得る。あるいは、３−ブロモ−４−ニトロピリジン Ｎ−オキシドを求核剤と反応させ、ニトロおよびＮ−オキシドを還元した後、３位置換４−アミノピリジンIIを得る。置換アミノピリジンＩおよびIIを、カルボン酸類によってカップリング剤を用いて、または酸ハロゲン化物または酸無水物によってアシル化し、３,４−二置換ピリジン類IIIおよびIVを得る。３,４−二置換フェニル類を含む本発明の化合物は、３−ハロ−４−ニトロベンゼン類が出発物質であるとき、スキーム１と類似の化学を用いて得られる。
スキーム１
【化１２】
2010520228.tif 000013
【００７２】
あるいは、スキーム２に記載した３,４−二置換ピリジン類は、次に示す通りに得られる：ハロ−ニトロ−ピリジン類を、ボロン酸類と、Suzuki条件下で反応させ、続いて、ニトロ、またはニトロおよびＮ−オキシドを還元し、アミノ置換ピリジンＶおよびVIIを得る。続いてアミンアシル化し、３,４−二置換ピリジンVIおよびVIIIを得る。３,４−二置換フェニル類を含む本発明の化合物は、３−ハロ−４−ニトロベンゼン類が出発物質であるとき、スキーム２と類似の化学を用いて得られる。
スキーム２
【化１３】
2010520228.tif 000014
【００７３】
別の方法において、３,４−二置換ピリジン類は、スキーム３に記載された通りに得られる。Ｎ−Ｂｏｃ−３−アミノピリジンまたはＮ−ピバロイル−３−アミノピリジンのビス−アニオンを形成し、求電子剤と反応させ、４位置換３−Ｎ−保護アミノピリジンIXを得る。ＢｏｃまたはＰｉｖ保護基を酸で除去し、続いてアシル化し、３,４位置換ピリジンXを得る。３,４−二置換フェニル類を含む本発明の化合物は、適切に保護されたアニリンが出発物質であるとき、スキーム３と類似の化学を用いて得られる。
スキーム３
【化１４】
2010520228.tif 000015
【００７４】
５位置換４−アミノアシルピリミドン類、例えばXIIおよびXIIIを含む本発明の化合物は、スキーム４に記載された通りに得られる。５−ブロモシトシンを求核置換し、またはSuzuki型カップリングさせ、続いてＮ−アシル化し、５位置換４−アミノアシルピリミドン類を得た。
スキーム４
【化１５】
2010520228.tif 000016
【００７５】
置換ピリジン類、ベンゼン類またはピリミドン類のアミド部分が、ハロヘテロアリール基を含むとき、置換ピリジン類、ベンゼン類またはピリミドン類は、スキーム５に記載された通りに修飾され得る。直接炭素結合している基(Ｒ')は、Suzuki、Neghishi、Grignardまたは他の有機金属法を用いて、ヘテロアリール基に結合され得る。あるいは、窒素、酸素、硫黄および炭素求核剤は、ＳｎＡｒまたはBuchwald/Hartwig条件を含む標準的な方法を用いて、該ヘテロアリール基に結合され得る。
スキーム５
【化１６】
2010520228.tif 000017
【００７６】
本発明の化合物は、in vitroまたはin vivoにおいて、癌細胞の増殖を阻害するのに有用である。本化合物は、単独でまたは薬学的に許容される担体と共に用いられ得る。適切な薬学的に許容される担体または賦形剤は、例えば、加工剤(processing agent)および薬物送達修飾剤および増強剤を含み、例えば、リン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、単糖類、二糖類、澱粉、ゼラチン、セルロース、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース ナトリウム、ブドウ糖、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、ポリビニルピロリジノン、低融点ろう、イオン交換樹脂など、ならびにその何れかの２種以上の組み合わせである。他の適切な薬学的に許容される賦形剤は、“Remington's Pharmaceutical Sciences”, Mack Pub. Co., New Jersey (1991)(言及することによって本明細書に組み込まれる)に記載されている。
【００７７】
有効量の本発明の化合物は、一般的に、本明細書で記載された何れかのアッセイによって、当業者に既知の他のＰｉｍキナーゼ活性アッセイによって、または、癌の症状の阻害または緩和を検出することによって、検出可能な程度にＰｉｍ活性を阻害するのに十分な量を含む。
【００７８】
担体物質と組み合わせて１回投与量が得られる活性成分の量は、処置される宿主および特定の投与方法に依存して変化する。しかしながら、何れかの特定の患者の特定の投与量は、用いられる具体的な化合物の活性、年齢、体重、全身の健康状態、性別、食事、投与時間、投与経路、排泄速度、薬物の組み合わせおよび治療を行う具体的な疾患の重症度を含む種々の因子に依存することは理解されるであろう。示された状況についての治療有効量は、慣用の試験によって容易に決定され、通常の臨床医の技術および判断の範囲内である。
【００７９】
本発明の目的において、治療有効量は、一般的に、１回または分割投与で宿主に投与される総１日投与量であり、例えば、１日当たり０.００１から１０００mg/kg体重、より好ましくは１日当たり１.０から３０mg/kg体重である。単位投与組成物は、１日投与量を構成するために、その約数の量を含み得る。
【００８０】
本発明の化合物は、経口で、非経腸で、舌下で、エアゾールまたは吸入スプレーによって、直腸で、または局所で、記載された慣用の非毒性の薬学的に許容される担体、アジュバントおよびビークルを含む単位投与製剤で、投与され得る。局所投与はまた、経皮投与、例えば経皮パッチまたは電気泳動デバイスの使用を含む。用語非経腸は、本明細書で用いるとき、皮下注射、静脈内、筋肉内、関節内注射または点滴を含む。
【００８１】
注射可能な製剤、例えば滅菌処理された注射可能な水性または油性の懸濁液は、当技術分野で知られている通りに、適切な分散剤または湿化剤および懸濁剤を用いて製剤化され得る。滅菌処理された注射可能な製剤はまた、非毒性の非経腸で許容される希釈剤または溶媒中の滅菌処理された注射可能な溶液または懸濁液、例えば１,３−プロパンジオールの溶液であり得る。用いられ得る許容されるビークルおよび溶媒は、水、リンゲル溶液、および等張性塩化ナトリウム溶液である。さらに、滅菌処理された固定化油は、溶媒または懸濁媒体として、慣習的に用いられる。この目的のために、合成モノまたはジグリセリドを含む何れかの混合固定化油が用いられ得る。さらに、脂肪酸(例えばオレイン酸)が、注射可能な製剤に用いられる。
【００８２】
薬物の直腸投与のための坐剤は、薬物を、普通の温度で固体であるが直腸温度で液体であり、そのため直腸内で融解して薬物を放出する非刺激性賦形剤、例えばココアバターおよびポリエチレングリコールと混合することによって製造され得る。
【００８３】
経口投与のための固体投与形は、カプセル剤、錠剤、丸薬、粉剤および顆粒剤を含み得る。このような固体投与形において、活性な化合物は、少なくとも１種の不活性な希釈剤、例えばショ糖、乳糖または澱粉と混合され得る。このような投与形はまた、常法として、不活性な希釈剤以外のさらなる物質、例えば滑沢剤、例えばステアリン酸マグネシウムを含んでもよい。カプセル剤、錠剤および丸薬の場合において、投与形はまた、緩衝剤を含んでもよい。錠剤および丸薬は、さらに、腸溶性コーティングと共に製造され得る。
【００８４】
経口投与のための液体投与形は、当技術分野で一般的に用いられる不活性な希釈剤、例えば水を含む、薬学的に許容されるエマルジョン、溶液、懸濁液、シロップおよびエリキシルを含み得る。このような組成物はまた、アジュバント、例えば湿化剤、乳化剤および懸濁剤、シクロデキストリン、および甘味料、風味剤および香料を含んでもよい。
【００８５】
本発明の化合物はまた、リポソームの形態で投与され得る。当技術分野で知られている通り、リポソームは、一般的に、リン脂質または他の脂質から誘導される。リポソームは、水性媒体に分散された１層または多層の水和した液晶によって形成される。リポソームを形成し得る何れの非毒性の生理学的に許容され且つ代謝可能な脂質も、使用され得る。リポソーム中の本組成物は、本発明の化合物に加えて、安定剤、保存料、賦形剤などを含み得る。好ましい脂質は、天然および合成のリン脂質およびホスファチジルコリン(レシチン)である。リポソームを形成する方法は、当技術分野で既知である。例えば、Prescott, Ed., Methods in Cell Biology, Volume XIV, Academic Press, New York, N.W., p. 33 et seq. (1976)を参照のこと。
【００８６】
本発明の化合物は、唯一の活性な薬物として投与され得るが、それらはまた、１種以上の他の癌の処置に用いられる薬物と組み合わせて用いられ得る。本発明の化合物はまた、既知の治療薬および抗癌剤との組み合わせに有用であり、また、本明細書で開示されている化合物と、他の抗癌剤または化学療法剤との組み合わせは、本発明の範囲内である。このような薬物の例は、Cancer Principles and Practice of Oncology, V. T. Devita and S. Hellman (editors), 6th edition (Feb. 15, 2001), Lippincott Williams & Wilkins Publishersで見出され得る。当業者は、薬物の具体的な特性および関係する癌に基づいて、薬物のどの組み合わせが有用であるか認識し得る。このような抗癌剤は、次に示すものを含み、これらに限定されない：エストロゲン受容体モジュレーター、アンドロゲン受容体モジュレーター、レチノイド受容体モジュレーター、細胞毒／細胞増殖阻害剤、抗増殖剤、プレニル蛋白質トランスフェラーゼ阻害剤、ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤および他の血管新生阻害剤、細胞増殖および生存シグナル伝達阻害剤、アポトーシス誘発剤、および細胞周期チェックポイントを妨害する薬剤。本発明の化合物はまた、放射能治療と共投与される際に有用である。
【００８７】
従って、本発明の一つの具体的態様において、本発明の化合物はまた、例えばエストロゲン受容体モジュレーター、アンドロゲン受容体モジュレーター、レチノイド受容体モジュレーター、細胞毒、抗増殖剤、プレニル蛋白質トランスフェラーゼ阻害剤、ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤、ＨＩＶプロテアーゼ阻害剤、逆転写酵素阻害剤および他の血管新生阻害剤を含む、既知の抗癌剤と組み合わせて用いられる。
【００８８】
エストロゲン受容体モジュレーターは、メカニズムにかかわらず、エストロゲンとその受容体の結合を妨害するまたは阻害する化合物である。エストロゲン受容体モジュレーターの例は、タモキシフェン、ラロキシフェン、イドキシフェン、LY353381、LY117081、トレミフェン、フルベストラント、４−[７−(２,２−ジメチル−１−オキソプロポキシ−４−メチル−２−[４−[２−(１−ピペリジニル)エトキシ]フェニル]−２Ｈ−１−ベンゾピラン−３−イル]−フェニル−２,２−ジメチルプロパノエート、４,４'−ジヒドロキシベンゾフェノン−２,４−ジニトロフェニル−ヒドラゾンおよびSH646を含み、これらに限定されない。
【００８９】
アンドロゲン受容体モジュレーターは、アンドロゲンとアンドロゲン受容体の結合を妨害するまたは阻害する化合物である。アンドロゲン受容体モジュレーターの代表例は、フィナステリドおよび他の５α−還元酵素阻害剤、ニルタミド、フルタミド、ビカルタミド、リアロゾール(liarozole)、および酢酸アビラテロン(abiraterone acetate)を含む。レチノイド受容体モジュレーターは、レチノイドとレチノイド受容体の結合を妨害するまたは阻害する化合物である。レチノイド受容体モジュレーターの例は、ベキサロテン、トレチノイン、１３−ｃｉｓ−レチノイン酸、９−ｃｉｓ−レチノイン酸、α−ジフルオロメチルオルニチン、LX23-7553、ｔｒａｎｓ−Ｎ−(４'−ヒドロキシフェニル)レチンアミド、およびＮ４−カルボキシフェニル−レチンアミドを含む。
【００９０】
細胞毒および／または細胞増殖阻害剤は、細胞死を引き起こすか、または主に細胞の機能を直接妨害することによって細胞増殖を阻害するか、または細胞有糸分裂を阻害するまたは妨害する化合物であり、アルキル化剤、腫瘍壊死因子、干渉物質、低酸素活性化化合物、微小管阻害剤／微小管安定剤、有糸分裂キネシン阻害剤、有糸分裂進行に関するキナーゼの阻害剤、代謝拮抗薬；生物学的応答修飾剤；ホルモン剤／抗ホルモン治療薬、造血性増殖因子、モノクローナル抗体標的治療薬、トポイソメラーゼ阻害剤、プロテアソーム阻害剤、およびユビキチンリガーゼ阻害剤を含む。細胞毒の例は、セルテネフ(sertenef)、カケクチン、イホスファミド、タソネルミン、ロニダミン、カルボプラチン、アルトレタミン、プレドニムスチン、ジブロモズルシトール、ラニムスチン、ホテムスチン、ネダプラチン、オキサリプラチン、テモゾロミド、ヘプタプラチン(heptaplatin)、エストラムスチン、トシル酸インプロスルファン、トロホスファミド、ニムスチン、塩化ジブロスピジウム(dibrospidium chloride)、プミテパ(pumitepa)、ロバプラチン(lobaplatin)、サトラプラチン、ポルフィロマイシン(profiromycin)、シスプラチン、イロフルベン、デキシホスファミド(dexifosfamide)、ｃｉｓ−アミンジクロロ(２−メチル−ピリジン)白金、ベンジルグアニン、グルフォスファミド(glufosfamide)、GPX100、(trans, trans, trans)−ビス−ｍｕ−(ヘキサン−１,６−ジアミン)−ｍｕ−[ジアミン−白金(II)]ビス[ジアミン(クロロ)白金(II)]テトラクロライド、ジアリジジニルスペルミン(diarizidinylspermine)、三酸化砒素、１−(１１−ドデシルアミノ−１０−ヒドロキシウンデシル)−３,７−ジメチルキサンチン、ゾルビシン、イダルビシン、ダウノルビシン、ビサントレン(bisantrene)、ミトキサントロン、ピラルビシン、ピナフィド(pinafide)、バルルビシン、アムルビシン、アンチネオプラストン(antineoplaston)、３'−デアミノ−３'−モルホリノ−１３−デオキソ−１０−ヒドロキシカルミノマイシン、アンナマイシン(annamycin)、ガラルビシン(galarubicin)、エリナフィド(elinafide)、MEN10755、および４−デメトキシ−３−デアミノ−３−アジリジニル−４−メチルスルホニル−ダウノルビシン(WO 00/50032を参照のこと)を含み、これらに限定されない。低酸素活性化化合物の代表例は、チラパザミンである。プロテアソーム阻害剤は、ラクタシスチンおよびボルテゾミブを含み、これらに限定されない。微小管阻害剤／微小管安定剤の例は、パクリタキセル、硫酸ビンデシン、３',４'−ジデヒドロ−４'−デオキシ−８'−ノルビンカロイコブラスチン、ドセタキセル(docetaxol)、リゾキシン(rhizoxin)、ドラスタチン、イセチオン酸ミボブリン(mivobulin isethionate)、オーリスタチン(auristatin)、セマドチン(cemadotin)、RPR109881、BMS184476、ビンフルニン、クリプトフィシン、２,３,４,５,６−ペンタフルオロ−Ｎ−(３−フルオロ−４−メトキシフェニル)−ベンゼン−スルホンアミド、アンヒドロビンブラスチン(anhydrovinblastine)、Ｎ,Ｎ−ジメチル−Ｌ−バリル−Ｌ−バリル−Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｌ−プロリル−Ｌ−プロリン−ｔ−ブチルアミド、TDX258、エポチロン類(例えば 米国特許第6,284,781号および第6,288,237号を参照のこと)およびBMS188797を含む。トポイソメラーゼ阻害剤の代表例は、トポテカン、ヒカプタミン(hycaptamine)、イリノテカン、ルビテカン(rubitecan)、６−エトキシプロピオニル−３',４'−Ｏ−エキソ−ベンジリデン−カルトロイシン、９−メトキシ−Ｎ,Ｎ−ジメチル−５−ニトロピラゾロ[３,４,５−ｋｌ]アクリジン−２−(６Ｈ)−プロパンアミン、１−アミノ−９−エチル−５−フルオロ−２,３−ジヒドロ−９−ヒドロキシ−４−メチル−１Ｈ,１２Ｈ−ベンゾ[デ]ピラノ[３',４'：ｂ,７]−インドリジノ[１,２ｂ]キノリン−１０,１３(９Ｈ,１５Ｈ)ジオン、ルートテカン(lurtotecan)、７−[２−(Ｎ−イソプロピルアミノ)エチル]−(２０Ｓ)−カンプトテシン、BNP1350、BNPI1100、BN80915、BN80942、リン酸エトポシド、テニポシド、ソブゾキサン、２'−ジメチルアミノ−２'−デオキシ−エトポシド、GL331、Ｎ−[２−(ジメチルアミノ)エチル]−９−ヒドロキシ−５,６−ジメチル−６Ｈ−ピリド[４,３−ｂ]カルバゾール−１−カルボキサミド、アスラクリン(asulacrine)、(５ａ,５ａＢ,８ａａ,９ｂ)−９−[２−[Ｎ−[２−(ジメチルアミノ)エチル]−Ｎ−メチルアミノ]エチル]−５−[４−ヒドロオキシ−３,５−ジメトキシフェニル]−５,５ａ,６,８,８ａ,９−ヘキサヒドロフロ(３',４'：６,７)ナフト(２,３−ｄ)−１,３−ジオキソール−６−オン、２,３−(メチレンジオキシ)−５−メチル−７−ヒドロキシ−８−メトキシベンゾ[ｃ]−フェナントリジニウム、６,９−ビス[(２−アミノエチル)アミノ]ベンゾ[ｇ]イソキノリン(isoguinoline)−５,１０−ジオン、５−(３−アミノプロピルアミノ)−７,１０−ジヒドロキシ−２−(２−ヒドロキシエチルアミノメチル)−６Ｈ−ピラゾロ[４,５,１'−ｄｅ]アクリジン−６−オン、Ｎ−[１−[２−(ジエチルアミノ)エチルアミノ]−７−メトキシ−９−オキソ−９Ｈ−チオキサンテン−４−イルメチル]ホルムアミド、Ｎ−(２−(ジメチルアミノ)エチル)アクリジン−４−カルボキサミド、６−[[２−(ジメチルアミノ)エチル]アミノ]−３−ヒドロキシ−７Ｈ−インデノ[２,１−ｃ]キノリン−７−オンおよびジメスナを含む。有糸分裂キネシン(例えばヒト有糸分裂キネシンＫＳＰ)の阻害剤の例は、ＰＣＴ公開公報 WO 01/30768およびWO 01/98278、WO 03/050,064 (2003年6月19日)、WO 03/050,122 (2003年6月19日)、WO 03/049,527 (2003年6月19日)、WO 03/049,679 (2003年6月19日)、WO 03/049,678 (2003年6月19日)およびWO 03/39460 (2003年5月15日)および出願中のＰＣＴ出願番号US03/06403 (2003年3月4日出願)、US03/15861 (2003年5月19日出願)、US03/15810 (2003年5月19日出願)、US03/18482 (2003年6月12日出願)およびUS03/18694 (2003年6月12日出願)に記載されている。一つの具体的態様において、有糸分裂キネシン阻害剤は、ＫＳＰ阻害剤、ＭＫＬＰ１阻害剤、ＣＥＮＰ−Ｅ阻害剤、ＭＣＡＫ阻害剤、Ｋｉｆ１４阻害剤、Ｍｐｈｏｓｐｈ１阻害剤およびＲａｂ６−ＫＩＦＬ阻害剤を含み、これらに限定されない。
【００９１】
有糸分裂進行に関するキナーゼの阻害剤は、オーロラキナーゼ阻害剤、Ｐｏｌｏ様キナーゼ(ＰＬＫ)の阻害剤(例えばＰＬＫ−１阻害剤)、ｂｕｂ−１阻害剤、および、ｂｕｂ−Ｒ１阻害剤を含み、これらに限定されない。抗増殖剤は、アンチセンスＲＮＡおよびＤＮＡオリゴヌクレオチド、例えばG3139、ODN698、RVASKRAS、GEM231およびINX3001、および、代謝拮抗薬、例えばエノシタビン、カルモフール、テガフール、ペントスタチン、ドキシフルリジン、トリメトレキサート、フルダラビン、カペシタビン、ガロシタビン(galocitabine)、シタラビン オクホスファート、フォステアビン(fosteabine)ナトリウム水和物、ラルチトレキセド、パルチトレキシド(paltitrexid)、エミテフル(emitefur)、チアゾフリン、デシタビン、ノラトレキセド(nolatrexed)、ペメトレキセド、ネララビン(nelzarabine)、２'−デオキシ−２'−メチリデンシチジン、２'−フルオロメチレン−２'−デオキシシチジン、Ｎ−[５−(２,３−ジヒドロ-ベンゾフリル)スルホニル]−Ｎ'−(３,４−ジクロロフェニル)ウレア、Ｎ６−[４−デオキシ−４−[Ｎ２−[２(Ｅ),４(Ｅ)−テトラデカジエノイル]グリシルアミノ]−Ｌ−グリセロ−Ｂ−Ｌ−マンノ−ヘプトピラノシル]アデニン、アプリジン(aplidine)、エクチナサイジン、トロキサシタビン、４−[２−アミノ−４−オキソ−４,６,７,８−テトラヒドロ−３Ｈ−ピリミジノ[５,４−ｂ][１,４]チアジン−６−イル−(Ｓ)−エチル]−２,５−チエノイル−Ｌ−グルタミン酸、アミノプテリン、５−フルオロウラシル、アラノシン、１１−アセチル−８−(カルバモイルオキシメチル)−４−ホルミル−６−メトキシ−１４−オキサ−１,１−ジアザテトラシクロ(７.４.１.０.０)−テトラデカ−２,４,６−トリエン−９−イル 酢酸エステル、スウェインソニン、ロメトレキソール(lometrexol)、デクスラゾキサン、メチオニン分解酵素、２'−シアノ−２'−デオキシ−Ｎ４−パルミトイル−１−Ｂ−Ｄ−アラビノフラノシルシトシン、および、３−アミノピリジン−２−カルボアルデヒド、チオセミカルバゾンを含む。モノクローナル抗体標的治療薬の例は、癌細胞に特異的または標的細胞に特異的なモノクローナル抗体に結合している細胞毒または放射性同位体を有する治療薬を含む。例は、例えばBexxarを含む。ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤は、３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリル−ＣｏＡ還元酵素の阻害剤である。ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素の阻害活性を有する化合物は、当技術分野で周知のアッセイ、例えば米国特許第4,231,938号およびWO 84/02131に記載または引用されたアッセイを用いることによって、容易に同定され得る。用いられ得るＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤の例は、ロバスタチン(MEVACOR(登録商標); 米国特許第4,231,938号、第4,294,926号および第4,319,039号を参照のこと)、シンバスタチン(ZOCOR(登録商標); 米国特許第4,444,784号、第4,820,850号および第4,916,239号を参照のこと)、プラバスタチン(PRAVACHOL(登録商標)；米国特許第4,346,227号、第4,537,859号、第4,410,629号、第5,030,447号および第5,180,589号を参照のこと)、フルバスタチン(LESCOL(登録商標); 米国特許第5,354,772号、第4,911,165号、第4,929,437号、第5,189,164号、第5,118,853号、第5,290,946号および第5,356,896号を参照のこと)、および、アトルバスタチン(LIPITOR(登録商標); 米国特許第5,273,995号、第4,681,893号、第5,489,691号および第5,342,952号を参照のこと)を含み、これらに限定されない。本方法で用いられ得るこれらの、およびさらなるＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤の構造式は、M. Yalpani, “Cholesterol Lowering Drugs”, Chemistry & Industry, pp. 85-89 (1996年2月5日)の87頁、および、米国特許第4,782,084号および第4,885,314号に記載されている。一つの具体的態様において、ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤は、ロバスタチンおよびシンバスタチンから選択される。
【００９２】
プレニル蛋白質トランスフェラーゼ阻害剤は、ファルネシル蛋白質トランスフェラーゼ(ＦＰＴａｓｅ)、Ｉ型ゲラニルゲラニル蛋白質トランスフェラーゼ(ＧＧＰＴａｓｅ−Ｉ)、および、II型ゲラニルゲラニル蛋白質トランスフェラーゼ(ＧＧＰＴａｓｅ−II、Ｒａｂ ＧＧＰＴａｓｅとも言う)を含む、プレニル蛋白質トランスフェラーゼ酵素の何れか１つまたは何れかの組み合わせを阻害する化合物である。プレニル蛋白質トランスフェラーゼ阻害化合物の例は、(±)−６−[アミノ(４−クロロフェニル)(１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−５−イル)メチル]−４−(３−クロロフェニル)−１−メチル−２(１Ｈ)キノリノン、(−)−６−[アミノ(４−クロロフェニル)(１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−５−イル)メチル]−４−(３−クロロフェニル)−１−メチル−２(１Ｈ)−キノリノン、(＋)−６−[アミノ(４−クロロフェニル)(１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−５−イル)−メチル]−４−(３−クロロフェニル)−１−メチル−２(１Ｈ)−キノリノン、５(Ｓ)−ｎ−ブチル−１−(２,３−ジメチルフェニル)−４−[１−(４−シアノベンジル)−５−イミダゾリルメチル−２−ピペラジノン、(Ｓ)−１−(３−クロロフェニル)−４−[１−(４−シアノベンジル)−５−イミダゾリルメチル]−５−[２−(エタンスルホニル)−メチル)−２−ピペラジノン、５(Ｓ)−ｎ−ブチル−１−(２−メチルフェニル)−４−[１−(４−シアノベンジル)−５−イミダゾリルメチル]−２−ピペラジノン、１−(３−クロロフェニル)−４−[１−(４−シアノベンジル)−２−メチル−５−イミダゾリルメチル]−２−ピペラジノン、１−(２,２−ジフェニルエチル)−３−[Ｎ−(１−(４−シアノベンジル)−１Ｈ−イミダゾール−５−イルエチル)カルバモイル]ピペリジン、４−{−[４−ヒドロキシメチル−４−(４−クロロピリジン−２−イルメチル)−ピペリジン−１−イルメチル]−２−メチルイミダゾール−１−イルメチル}ベンゾニトリル、４−{５−[４−ヒドロキシメチル−４−(３−クロロベンジル)−ピペリジン−１−イルメチル]−２−メチルイミダゾール−１−イルメチル}ベンゾニトリル、４−{３−[４−(２−オキソ−２Ｈ−ピリジン−１−イル)ベンジル]−３Ｈ−イミダゾール−４−イルメチル}ベンゾニトリル、４−{３−[４−(５−クロロ−２−オキソ−２Ｈ−[１,２']ビピリジン−５'−イルメチル]−３Ｈ−イミダゾール−４−イルメチル}ベンゾニトリル、４−{３−[４−(２−オキソ−２Ｈ−[１,２']ビピリジン−５'−イルメチル]−３Ｈ−イミダゾール−４−イルメチル}ベンゾニトリル、４−[３−(２−オキソ−１−フェニル−１,２−ジヒドロピリジン−４−イルメチル)−３Ｈ−イミダゾール−４−イルメチル}ベンゾニトリル、１８,１９−ジヒドロ−１９−オキソ−５Ｈ,１７Ｈ−６,１０：１２,１６−ジメテノ−１Ｈ−イミダゾ[４,３−ｃ][１,１１,４]ジオキサアザシクロ−ノナデシン−９−カルボニトリル、(±)−１９,２０−ジヒドロ−１９−オキソ−５Ｈ−１８,２１−エタノ−１２,１４−エテノ−６,１０−メテノ−２２Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾ[４,３−ｋ][１,６,９,１２]オキサトリアザ−シクロオクタデシン−９−カルボニトリル、１９,２０−ジヒドロ−１９−オキソ−５Ｈ,１７Ｈ−１８,２１−エタノ−６,１０：１２,１６−ジメテノ−２２Ｈ−イミダゾ[３,４−ｈ][���,８,１１,１４]オキサトリアザシクロエイコシン−９−カルボニトリル、および、(±)−１９,２０−ジヒドロ−３−メチル−１９−オキソ−５Ｈ−１８,２１−エタノ−１２,１４−エテノ−６,１０−メテノ−２２Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾ[４,３−ｋ][１,６,９,１２]オキサトリアザシクロオクタデシン−９−カルボニトリルを含む。他のプレニル蛋白質トランスフェラーゼ阻害剤の例は、次に示す公報および特許で見出され得る：WO 96/30343、WO 97/18813、WO 97/21701、WO 97/23478、WO 97/38665、WO 98/28980、WO 98/29119、WO 95/32987、米国特許第5,420,245号、米国特許第5,523,430号、米国特許第5,532,359号、米国特許第5,510,510号、米国特許第5,589,485号、米国特許第5,602,098号、欧州特許公開第0 618 221号、欧州特許公開第0 675 112号、欧州特許公開第0 604 181号、欧州特許公開第0 696 593号、WO 94/19357、WO 95/08542、WO 95/11917、WO 95/12612、WO 95/12572、WO 95/10514、米国特許第5,661,152号、WO 95/10515、WO 95/10516、WO 95/24612、WO 95/34535、WO 95/25086、WO 96/05529、WO 96/06138、WO 96/06193、WO 96/16443、WO 96/21701、WO 96/21456、WO 96/22278、WO 96/24611、WO 96/24612、WO 96/05168、WO 96/05169、WO 96/00736、米国特許第5,571,792号、WO 96/17861、WO 96/33159、WO 96/34850、WO 96/34851、WO 96/30017、WO 96/30018、WO 96/30362、WO 96/30363、WO 96/31111、WO 96/31477、WO 96/31478、WO 96/31501、WO 97/00252、WO 97/03047、WO 97/03050、WO 97/04785、WO 97/02920、WO 97/17070、WO 97/23478、WO 97/26246、WO 97/30053、WO 97/44350、WO 98/02436、および米国特許第5,532,359号。血管新生におけるプレニル蛋白質トランスフェラーゼ阻害剤の役割の例は、European J. of Cancer 35(9):1394-1401 (1999)を参照のこと。
【００９３】
血管新生阻害剤は、メカニズムに関わらず新しい血管の形成を阻害する化合物を言う。血管新生阻害剤の例は、チロシンキナーゼ阻害剤、例えばチロシンキナーゼ受容体Ｆｌｔ−１(ＶＥＧＦＲ１)およびＦｌｋ−１／ＫＤＲ(ＶＥＧＦＲ２)の阻害剤、上皮由来、線維芽細胞由来、または血小板由来増殖因子の阻害剤、ＭＭＰ(マトリックスメタロプロテアーゼ)阻害剤、インテグリン遮断薬、インターフェロン−α、インターロイキン−１２、ペントサン ポリサルフェート、次に示すものを含むシクロオキシゲナーゼ阻害剤：非ステロイド性抗炎症剤(ＮＳＡＩＤ)、例えばアスピリンおよびイブプロフェン、ならびに選択的シクロオキシゲナーゼ−２阻害剤、例えばセレコキシブおよびロフェコキシブ(PNAS 89:7384 (1992); JNCI 69:475 (1982); Arch. Ophthalmol. 108:573 (1990); Anat. Rec., (238):68 (1994); FEBS Letters 372:83 (1995); Clin, Orthop. 313:76 (1995); J. Mol. Endocrinol. 16:107 (1996); Jpn. J. Pharmacol. 75:105 (1997); Cancer Res. 57:1625 (1997); Cell 93:705 (1998); Intl. J. Mol. Med. 2:715 (1998); J. Biol. Chem. 274:9116 (1999))、ステロイド性抗炎症剤(例えばコルチコステロイド、ミネラルコルチコイド、デキサメタゾン、プレドニゾン、プレドニゾロン、メチルプレド(methylpred)、ベタメタゾン)、カルボキシアミドトリアゾール、コンブレタスタチン Ａ４、スクアラミン、６−Ｏ−クロロアセチル−カルボニル)−フマギロール(fumagillol)、サリドマイド、アンジオスタチン、トロポニン−１、アンジオテンシン II アンタゴニスト(Fernandez et al., J. Lab. Clin. Med. 105:141-145 (1985)を参照のこと)、およびＶＥＧＦに対する抗体(Nature Biotechnology, 17:963-968 (October 1999); Kim et al., Nature, 362:841-844 (1993); WO 00/44777; および WO 00/61186を参照のこと)を含み、これらに限定されない。血管新生を調節しまたは阻害し、かつ本発明の化合物との組み合わせで使用され得る他の治療薬は、凝固および線溶系を調節するまたは阻害する薬物(Clin. Chem. La. Med. 38:679-692 (2000)のレビューを参照のこと)を含む。凝固および線溶経路を調節するまたは阻害する薬物の例は、ヘパリン(Thromb. Haemost. 80:10-23 (1998)を参照のこと)、低分子量ヘパリンおよびカルボキシペプチダーゼ Ｕ阻害剤(活性トロンビン活性化線溶阻害因子[ＴＡＦＩａ]の阻害剤としても知られる)(Thrombosis Res. 101:329-354 (2001)を参照のこと)を含み、これらに限定されない。ＴＡＦＩａ阻害剤は、ＰＣＴ公報 WO 03/013,526および米国特許出願第60/349,925号(2002年1月18日出願)に記載されている。本発明はまた、選択的ＣＯＸ−２阻害剤(一般的に、細胞またはミクロソームのアッセイによって評価されるＣＯＸ−２のＩＣ５０対ＣＯＸ−１のＩＣ５０の比を測定したとき、ＣＯＸ−２阻害についてＣＯＸ−１の少なくとも１００倍の選択性を有するものと定義される)であるＮＳＡＩＤと、本発明の化合物との組み合わせを含む。このような化合物は、米国特許第5,474,995号(1995年12月12日登録)、米国特許第5,861,419号(1999年1月19日登録)、米国特許第6,001,843号(1999年12月14日登録)、米国特許第6,020,343号(2000年2月1日登録)、米国特許第5,409,944号(1995年4月25日登録)、米国特許第5,436,265号(1995年7月25日登録)、米国特許第5,536,752号(1996年7月16日登録)、米国特許第5,550,142号(1996年8月27日登録)、米国特許第5,604,260号(1997年2月18日登録)、米国特許第5,698,584号(1997年12月16日登録)、米国特許第5,710,140号(1998年1月20日登録)、WO 94/15932(1994年7月21日公開)、米国特許第5,344,991号(1994年6月6日登録)、米国特許第5,134,142号(1992年7月28日登録)、米国特許第5,380,738号(1995年1月10日登録)、米国特許第5,393,790号(1995年2月20日登録)、米国特許第5,466,823号(1995年11月14日登録)、米国特許第5,633,272号(1997年5月27日登録)、および米国特許第5,932,598号(1999年8月3日登録)(これらは全て言及することによって本明細書に組み込まれる)に開示されている化合物を含み、これらに限定されない。本発明の方法に有用である代表的なＣＯＸ−２阻害剤は、３−フェニル−４−(４−(メチルスルホニル)フェニル)−２−(５Ｈ)−フラノン；および５−クロロ−３−(４−メチルスルホニル)フェニル−２−(２−メチル−５−ピリジニル)ピリジンを含む。特定のＣＯＸ−２阻害剤として記載され、従って本発明に有用である化合物およびその合成方法は、下記の特許、出願中の明細書および公報(言及することによって本明細書に組み込まれる)で見出されうる：WO 94/15932 (1994年7月21日公開)、米国特許第5,344,991号(1994年6月6日登録)、米国特許第5,134,142号(1992年7月28日登録)、米国特許第5,380,738号(1995年1月10日登録)、米国特許第5,393,790号(1995年2月20日登録)、米国特許第5,466,823号(1995年11月14日登録)、米国特許第5,633,272号(1997年5月27日登録)、米国特許第5,932,598号(1999年8月3日登録)、米国特許第5,474,995号(1995年12月12日登録)、米国特許第5,861,419号(1999年1月19日登録)、米国特許第6,001,843号(1999年12月14日登録)、米国特許第6,020,343号(2000年2月1日登録)、米国特許第5,409,944号(1995年4月25日登録)、米国特許第5,436,265号(1995年7月25日登録)、米国特許第5,536,752号(1996年7月16日登録)、米国特許第5,550,142号(1996年8月27日登録)、米国特許第5,604,260号(1997年2月18日登録)、米国特許第5,698,584号(1997年12月16日登録)および米国特許第5,710,140号(1998年1月20日登録)。他の血管新生阻害剤の例は、エンドスタチン、ウクライン(ukrain)、ランピルナーゼ(ranpirnase)、IM862、５−メトキシ−４−[２−メチル−３−(３−メチル−２−ブテニル)オキシラニル]−１−オキサスピロ[２,５]オクタ−６−イル(クロロアセチル)カルバメート、アセチルジナナリン(acetyldinanaline)、５−アミノ−１−[[３,５−ジクロロ−４−(４−クロロベンゾイル)フェニル]メチル]−１Ｈ−１,２,３−トリアゾール−４−カルボキサミド、CM101、スクアラミン、コンブレタスタチン、RPI4610、NX31838、硫酸化マンノペンタノーゼ ホスフェート、７,７−(カルボニル−ビス[イミノ−Ｎ−メチル−４,２−ピロロカルボニルイミノ−[Ｎ−メチル−４,２−ピロール]−カルボニルイミノ]−ビス−(１,３−ナフタレン ジスルホネート)、および、３−[(２,４−ジメチルピロール−５−イル)メチレン]−２−インドリノン(SU5416)を含み、これらに限定されない。
【００９４】
細胞周期チェックポイントを妨害する薬剤は、細胞周期チェックポイントシグナルを伝達する蛋白質キナーゼを阻害し、それによって、癌細胞をＤＮＡ傷害剤に感作する化合物である。このような薬物は、ＡＴＲ、ＡＴＭ、Ｃｈｋ１およびＣｈｋ２キナーゼの阻害剤、および、ｃｄｋおよびｃｄｃキナーゼ阻害剤を含み、特に、７−ヒドロキシスタウロスポリン、フラボピリドール、CYC202 (Cyclacel)、およびBMS-387032によって例示される。
【００９５】
細胞増殖および生存シグナル伝達阻害剤は、細胞表面受容体および該表面受容体の下流のシグナル伝達カスケードを阻害する薬物である。このような薬物は、ＥＧＦＲ阻害剤(例えばゲフィチニブおよびエルロチニブ)、ＥＲＢ−２阻害剤(例えばトラスツズマブ)、ＩＧＦＲ阻害剤、サイトカイン受容体阻害剤、ＭＥＴ阻害剤、ＰＩ３Ｋ阻害剤(例えばLY294002)、セリン／トレオニン・キナーゼ阻害剤(Ａｋｔ阻害剤、例えばWO 02/083064、WO 02/083139、WO 02/083140およびWO 02/083138に記載されたものを含み、これらに限定されない)、Ｒａｆキナーゼ阻害剤(例えばBAY-43-9006)、ＭＥＫ阻害剤(例えばCI-1040およびPD-098059)、およびｍＴＯＲ阻害剤(例えばWyeth CCI-779)を含む。このような薬物は、小分子阻害化合物および抗体アンタゴニストを含む。
【００９６】
アポトーシス誘発剤は、ＴＮＦ受容体ファミリーメンバー(ＴＲＡＩＬ受容体を含む)のアクチベーターを含む。
【００９７】
本発明の特定の現在好ましい具体的態様において、本発明の化合物との組み合わせに有用な代表的な癌処置薬は、例えば、イリノテカン、トポテカン、ゲムシタビン、５−フルオロウラシル、ロイコボリン、カルボプラチン、シスプラチン、タキサン類、テザシタビン(tezacitabine)、シクロホスファミド、ビンカアルカロイド類、イマチニブ(Gleevec)、アントラサイクリン類、リツキシマブ、トラスツズマブ、および他の癌化学療法薬を含む。
【００９８】
本発明の化合物と組み合わせて用いられる上記化合物は、Physicians' Desk Reference (PDR) 47th Edition (1993)(言及することによって本明細書に組み込まれる)に示された治療量または当業者に既知の治療有効量で用いられる。
【００９９】
本発明の化合物および他の抗癌剤は、推奨される最大臨床投与量またはそれより少ない投与量で投与され得る。本発明の組成物中の活性化合物の投与量は、投与経路、疾患の重症度および患者の応答に依存して、望ましい治療応答を得るよう変更し得る。組み合わせは、別個の組成物として、または両方の薬物を含む１個の投与形として投与され得る。組み合わせとして投与されるとき、治療薬は、同時にまたは異なる時間で摂取される別個の組成物として製剤化され得るか、または、治療薬は、１個の組成物として摂取される。
【０１００】
抗エストロゲン剤、例えばタモキシフェンは、細胞周期阻害因子p27Kipの作用を必要とする細胞周期抑止を誘発することによって乳癌の増殖を阻害する。近年、Ｒａｓ−Ｒａｆ−ＭＡＰキナーゼ経路の活性化が、p27Kipのホスホリル化状態を変化させ、その結果、細胞周期抑止におけるその阻害活性が減少し、それによって、抗エストロゲン剤抵抗性に寄与していることが示された(Donovan et al., J. Biol. Chem. 276:40888, 2001)。Donovan らによって報告されたところによると、ＭＥＫ阻害剤の処置によるＭＡＰＫシグナル伝達の阻害は、ホルモン抵抗性乳癌細胞株のp27のホスホリル化状態を変化させ、そうすることで、ホルモン感受性を回復する。従って、一つの態様において、式(Ｉ)、(II)、(III)および(IV)の化合物は、ホルモン依存性癌、例えば乳癌および前立腺癌の処置において、これらの癌で一般的に見られる慣用の抗癌剤へのホルモン抵抗性を逆転させるために用いられ得る。
【０１０１】
血液癌、例えば慢性骨髄性白血病(ＣＭＬ)において、染色体転座は、構成的に活性化されたＢＣＲ−ＡＢ１チロシンキナーゼの原因である。罹患した患者は、小分子チロシンキナーゼ阻害剤であるGleevecに応答性であり、その結果として、Ａｂ１キナーゼ活性を阻害する。しかし、進行期の疾患を有する多くの患者は、始めはGleevecに応答するが、Ａｂ１キナーゼドメインの耐性付与変異のために後に再発する。In vitro試験は、ＢＣＲ−Ａｖ１がＲａｆキナーゼ経路を用いてその効果を表すことを証明した。さらに、同じ経路において、１種以上のキナーゼを阻害すると、耐性付与変異に対してさらに保護される。従って、本発明の別の態様において、式(Ｉ)、(II)、(III)および(IV)の化合物は、血液癌、例えば慢性骨髄性白血病(ＣＭＬ)の処置において、少なくとも１種のさらなる薬物(例えばGleevec)と組み合わせて、当該少なくとも１種のさらなる薬物に対する抵抗性を逆転させるまたは予防するために用いられる。
【０１０２】
別の態様において、本発明は、対象において、Ｊａｋ／Ｓｔａｔシグナル伝達経路中の少なくとも１種のセリン／トレオニン・キナーゼを阻害する方法、あるいは、対象において、Ｊａｋ／Ｓｔａｔシグナル伝達経路中のセリン／トレオニンキナーゼが介在する生物学的状態を処置する方法であって、対象において、Ｊａｋ／Ｓｔａｔシグナル伝達経路中の少なくとも１種のセリン／トレオニン・キナーゼの活性を阻害するのに有効な量の、少なくとも１種の式(Ｉ)、(II)、(III)または(IV)の化合物を含む治療組成物を投与することを含む方法に関する。
【０１０３】
本発明のこの態様に従う治療組成物は、該阻害剤が必要な患者(例えば異常なＪａｋ／Ｓｔａｔシグナル伝達が介在する癌に罹患している患者)を処置するのに有用である。異常なＪａｋ／Ｓｔａｔシグナル伝達が介在する癌のタイプは、例えば、黒色腫、乳頭癌、甲状腺癌、卵巣癌、大腸癌、膵臓癌、非小細胞性肺癌(ＮＳＣＬＣ)、急性リンパ芽球性白血病(ＡＬＬ)、および急性骨髄性白血病を含む。
【０１０４】
一つの具体的態様において、本発明は、ヒトまたは動物の対象において、Ｐｉｍ１、Ｐｉｍ２、Ｐｉｍ３、Ｆｌｔ３、ＫＤＲまたはＰＫＣεを阻害する方法を提供する。該方法は、有効量の式(Ｉ)、(II)、(III)または(IV)の化合物の何れかの具体的態様の化合物またはその薬学的に許容される塩を、必要な対象に投与することを含む。
【０１０５】
本発明は、下記の実施例の記載によって、より容易に理解されるであろう。該実施例は、説明の目的で提供され、本発明を限定することを意図しない。
【０１０６】
下記の実施例の化合物に使用する代表的な側鎖は、一般的に、下記の手順に従って製造され得る。
【０１０７】
実施例
下記の実施例に関して、好ましい具体的態様の化合物を、本明細書に記載された方法または当技術分野で既知の他の方法を用いて合成した。
【０１０８】
本化合物および／または中間体を、2695 Separation Moduleを備えたWaters Millenium chromatography system (Milford, MA)を用いる高速液体クロマトグラフィー(ＨＰＬＣ)によって特性決定した。分析カラムは、逆相 Phenomenex Luna C18, 5μ, 4.6×50mm, (Alltech (Deerfield, IL))であった。濃度勾配溶出を用い(流速２.５ml/分)、典型的には、５％  アセトニトリル／９５％  水から出発し、１０分かけて１００％  アセトニトリルへと増大させる。全ての溶媒は、０.１％  トリフルオロ酢酸 (ＴＦＡ)を含む。化合物は、２２０または２５４nmでの紫外線(ＵＶ)吸収によって検出された。ＨＰＬＣ溶媒は、Burdick and Jackson (Muskegan, MI)またはFisher Scientific (Pittsburgh, PA)から得た。
【０１０９】
幾つかの例において、純度を、ガラスまたはプラスチック支持シリカゲルプレート、例えばBaker Flex Silica Gel 1B2 F flexible sheetを用いる薄層クロマトグラフィー(ＴＬＣ)によって測定した。ＴＬＣの結果は、紫外線下で可視化するか、または周知のヨウ素蒸気および他の種々の染色法を用いることによって、容易に検出された。
【０１１０】
質量分析は、以下の３種のＬＣＭＳ装置のうちの１つで行った：
Waters System (Alliance HT HPLC および Micromass ZQ mass spectrometer；カラム＝Eclipse XDB C18, 2.1×50mm；濃度勾配＝０.０５％ＴＦＡを含む水中５〜９５％(または３５〜９５％、または６５〜９５％、または９５〜９５％) アセトニトリル, ４分；流速＝０.８ml/分；分子量範囲＝２００〜１５００；コーン電圧＝２０Ｖ；カラム温度＝４０℃)
別の Waters System (ACQUITY UPLC system および ZQ 2000 system；カラム＝ACQUITY UPLC HSS-C18, 1.8μm, 2.1×50mm；濃度勾配＝０.０５％ＴＦＡを含む水中５〜９５％(または３５〜９５％、または６５〜９５％、または９５〜９５％) アセトニトリル, １.３分；流速＝１.２ml/分；分子量範囲＝１５０〜８５０；コーン電圧＝２０Ｖ；カラム温度＝５０℃)
または、Hewlett Packard System (Series 1100 HPLC；カラム＝Eclipse XDB C18, 2.1×50mm；濃度勾配＝０.０５％ＴＦＡを含む水中５〜９５％ アセトニトリル, ４分；流速＝０.８ml/分；分子量範囲＝１５０〜８５０；コーン電圧＝５０Ｖ；カラム温度＝３０℃)。全ての質量を、プロトン化された親イオンの質量として報告した。
【０１１１】
ＧＣＭＳ分析は、Hewlett Packard装置(Mass Selective Detector 5973を備えたHP6890 シリーズ ガスクロマトグラフ；注入体積＝１μｌ；初期カラム温度＝５０℃；最終カラム温度＝２５０℃；傾斜時間(ramp time)＝２０分；ガス流速＝１ml/分；カラム＝５％ フェニルメチルシロキサン, Model No. HP 190915 443, 容積＝30.0 m×25 m×0.25 m)で行った。
【０１１２】
核磁気共鳴(ＮＭＲ)分析は、幾つかの化合物について、Varian 300 MHz NMR (Palo Alto, CA)で行った。参照スペクトルは、ＴＭＳまたは溶媒の既知の化学シフトの何れかであった。幾つかの化合物サンプルは、サンプルの溶解度を高めるために高温(例えば７５℃)で行った。
【０１１３】
幾つかの化合物の純度は、元素分析(Desert Analytics, Tucson, AZ)によって評価される。
【０１１４】
融点は、Laboratory Devices Mel Temp apparatus (Holliston, MA)で測定される。
【０１１５】
分取分離は、Flash 40 クロマトグラフィー・システムおよび KP Sil, 60A (Biotage, Charlottesville, VA)を用いて、または、シリカゲル(230〜400メッシュ)充填剤を用いたフラッシュ・カラム・クロマトグラフィーによって、または、Waters 2767 Sample Manager、C 18 逆相カラム, 30×50mm、流速７５ml/分を用いたＨＰＬＣによって行われる。Flash 40 Biotage systemおよびフラッシュ・カラム・クロマトグラフィーに用いられる典型的な溶媒は、ジクロロメタン、メタノール、酢酸エチル、ヘキサン、アセトン、水性アンモニア(または水酸化アンモニウム)、およびトリエチル アミンである。逆相ＨＰＬＣに用いられる典型的な溶媒は、０.１％トリフルオロ酢酸を含む、アセトニトリルと水の濃度変化である。
【０１１６】
好ましい具体的態様による有機化合物は、互変異性の現象を示し得ると理解されるべきである。本明細書内の化学構造は、可能性のある１個の互変異性体の形態のみを示しており、好ましい具体的態様は、描かれた構造の全ての互変異性体の形態を含むと理解されるべきである。
【０１１７】
本発明は、説明のために本明細書で示された具体的態様に限定されず、上記の開示の範囲内の全ての形態を含むと理解される。
【０１１８】
下記の実施例および本明細書全体において、下記の略語は、下記の意味を有する。定義していなければ、用語は、その一般的に受け入れられている意味を有する。
【表１】
2010520228.tif 000018
【実施例】
【０１１９】
実施例１
３−ニトロ−４−(ピペリジン−１−イル)ピリジンの合成
【化１７】
2010520228.tif 000019
エタノール中の濃度０.５Ｍの４−クロロ−３−ニトロピリジン(１.０当量)およびピペリジン(２.０当量)の溶液を、室温で４８時間撹拌し、エタノールを真空で除去した。残渣をＥｔＯＡｃ(３００ml)とＮａ２ＣＯ３(飽和)(７５ml)の層間に分配し、さらに、Ｈ２Ｏ(５０ml)で、そしてＮａＣｌ(飽和)(５０ml)で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、揮発成分を真空で除去し、３−ニトロ−４−(ピペリジン−１−イル)ピリジンを得た(９５％)。
LCMS (m/z): 207.7 (MH+);
LC Rt = 1.60分。
1H NMR (CDCl3): δ 8.80 (s, 1H), 8.31 (d, J=5.7, 1H), 6.84 (d, J=6.3, 1H), 3.18-3.21 (m, 4H), 1.64-1.78 (m, 6H).
【０１２０】
実施例２
１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化１８】
2010520228.tif 000020
それぞれ１当量の４−クロロ−３−ニトロピリジン、３−Ｎ−Ｂｏｃ−アミノピペリジンおよびジイソプロピルエチルアミンを用いて、実施例１の方法を行い、１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル(８９％)を得た。
LCMS (m/z): 323.1 (MH+);
LC Rt = 2.13分。
【０１２１】
実施例３
(Ｒ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメートの合成
【化１９】
2010520228.tif 000021
それぞれ１当量の４−クロロ−３−ニトロピリジン、(Ｒ)−３−Ｎ−Ｂｏｃ−アミノピペリジンおよびジイソプロピルエチルアミンを用いて、実施例１の方法を行い、(Ｒ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメートを得た(９９％)。
LCMS (m/z): 323.1 (MH+);
LC Rt = 2.13分。
【０１２２】
実施例４
(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメートの合成
【化２０】
2010520228.tif 000022
それぞれ１当量の４−クロロ−３−ニトロピリジン、(Ｓ)−３−Ｎ−Ｂｏｃ−アミノピペリジンおよびジイソプロピルエチルアミンを用いて、実施例１の方法を行い、(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメートを得た(９９％)。
LCMS (m/z): 323.1 (MH+);
LC Rt = 2.13分。
【０１２３】
実施例５
(１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イル)メチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化２１】
2010520228.tif 000023
それぞれ１当量の４−クロロ−３−ニトロピリジン、ピペリジン−３−イルメチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルおよびジイソプロピルエチルアミンを用いて、実施例１の方法を行い、(１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イル)メチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９９％)。
LCMS (m/z): 336.9 (MH+);
LC Rt = 2.27分。
1H NMR (CDCl3): δ 8.80 (s, 1H), 8.33 (d, J=6.0Hz, 1H), 6.85 (d, J=6.3Hz, 1H),  4.63 (bs, 1H),  3.28-3.46 (m, 2H), 2.89-3.15 (m, 3H), 2.69-2.86 (m, 1H), 1.55-1.99 (m, 5H), 1.45 (s, 9H).
【０１２４】
実施例６
１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペラジンの合成
【化２２】
2010520228.tif 000024
１当量の４−クロロ−３−ニトロピリジンおよび１０当量のピペラジンを用いて、実施例１の方法を行い、１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペラジンを得た(９９％)。
LCMS (m/z): 208.6 (MH+);
LC Rt = 0.42分。
1H NMR (CDCl3): δ 8.83(s, 1H), 8.37 (d, J=6.0, 1H), 6.85 (d, J=6.0, 1H), 3.20-3.23 (m, 4H), 3.00-3.03 (m, 4H).  
【０１２５】
実施例７
１−(２−ニトロフェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化２３】
2010520228.tif 000025
１−フルオロ−２−ニトロベンゼン(１.０当量)、３−Ｎ−Ｂｏｃ−アミノピペリジン(１.０当量)およびＤＩＥＡ(２.０当量)を用いて、ＥｔＯＨ中、５０℃で４８時間で、実施例１の方法を行い、１−(２−ニトロフェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(８５％)。
LCMS (m/z): 322.2 (MH+);
LC Rt = 3.23分。
【０１２６】
実施例８
１−(２−ニトロフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化２４】
2010520228.tif 000026
１−フルオロ−２−ニトロベンゼン(１.０当量)、４−Ｎ−Ｂｏｃ−アミノピペリジン(１.２当量)およびＴＥＡ(２.０当量)を用いて、ＥｔＯＨ中、５５℃で４８時間で、実施例１の方法を行い、１−(２−ニトロフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(１００％)。
LCMS (m/z): 322.2 (MH+);
LC Rt = 3.15分。
【０１２７】
実施例９
４−(２−ニトロフェニル)ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化２５】
2010520228.tif 000027
１−フルオロ−２−ニトロベンゼン(１.０当量)、１−Ｂｏｃ−ピペラジン(１.２当量)およびＴＥＡ(２.０当量)を用いて、ＥｔＯＨ中、５５℃で７２時間で、実施例１の方法を行い、４−(２−ニトロフェニル)ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(１００％)。
LCMS (m/z): 308.1 (MH+);
LC Rt = 3.25分。
【０１２８】
実施例１０
１−(３−ニトロピリジン−２−イル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化２６】
2010520228.tif 000028
２−クロロ−３−ニトロピリジン(１.０当量)、３−Ｎ−Ｂｏｃ−アミノピペリジン(１.２当量)およびＤＩＥＡ(２.０当量)を用いて、実施例１の方法を行い、１−(３−ニトロピリジン−２−イル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９５％)。
LCMS (m/z): 323.2 (MH+);
LC Rt = 3.00分。
【０１２９】
実施例１１
Ｎ,Ｎ−ジメチル−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−４−アミンの合成
【化２７】
2010520228.tif 000029
４−ジメチルアミノ−ピペリジンを用いて、実施例１の方法を行い、Ｎ,Ｎ−ジメチル−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−４−アミンを得た。
LCMS (m/z): 251.2 (MH+).
【０１３０】
実施例１２
８−(３−ニトロピリジン−４−イル)−１,４−ジオキサ−８−アザスピロ[４.５]デカンの合成
【化２８】
2010520228.tif 000030
１,４−ジオキサ−８−アザスピロ[４.５]デカンを用いて、実施例１の方法を行い、８−(３−ニトロピリジン−４−イル)−１,４−ジオキサ−８−アザスピロ[４.５]デカンを得た。
LCMS (m/z): 266.2 (MH+).
【０１３１】
実施例１３
４−(３−ニトロピリジン−４−イル)−１,４−ジアゼパン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化２９】
2010520228.tif 000031
１−Ｂｏｃ−ホモピペラジンを用いて、実施例１の方法を行い、４−(３−ニトロピリジン−４−イル)−１,４−ジアゼパン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た。
LCMS (m/z): 293.3 (MH+);
【０１３２】
実施例１４
Ｎ１,Ｎ１,Ｎ２−トリメチル−Ｎ２−(３−ニトロピリジン−４−イル)エタン−１,２−ジアミンの合成
【化３０】
2010520228.tif 000032
４−クロロ−３−ニトロピリジン(１.０当量)、Ｎ１,Ｎ１,Ｎ２−トリメチルエタン−１,２−ジアミン(２.０当量)およびＤＩＥＡ(２.０当量)を用いて、ＥｔＯＨ中で、実施例１の方法を行い、Ｎ１,Ｎ１,Ｎ２−トリメチル−Ｎ２−(３−ニトロピリジン−４−イル)エタン−１,２−ジアミンを得た。これを濃縮してそのまま用いた。
LCMS (m/z): 225.1 (MH+);
LC Rt = 0.574分。
【０１３３】
実施例１５
１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピロリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化３１】
2010520228.tif 000033
４−クロロ−３−ニトロピリジン(１.０当量)、ピロリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル(２.０当量)およびＤＩＥＡ(２.０当量)を用いて、ＥｔＯＨ中で、実施例１の方法を行い、１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピロリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９５％)。
LCMS (m/z): 309.1 (MH+);
LC Rt = 1.922分。
【０１３４】
実施例１６
(Ｒ)−ｔｅｒｔ−ブチル [１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピロリジン−２−イル]メチルカルバメートの合成
【化３２】
2010520228.tif 000034
４−クロロ−３−ニトロピリジン(１.０当量)、(Ｒ)−ピロリジン−２−イルメタンアミン(２.０当量)およびＤＩＥＡ(２.０当量)を用いて、ＥｔＯＨ中で、実施例１の方法を行い、(Ｒ)−ｔｅｒｔ−ブチル [１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピロリジン−２−イル]メチルカルバメートを得た(９５％)。
LCMS (m/z): 323.1 (MH+);
LC Rt = 1.855分。
【０１３５】
実施例１７
２−クロロ−５−ニトロ−４−(ピペリジン−１−イル)ピリミジンの合成
【化３３】
2010520228.tif 000035
２,４−ジクロロ−５−ニトロピリミジン(１.０当量)およびピペリジン(２.０当量)を用いて、ＥｔＯＨ中、０℃から室温で、方法１を行い、１Ｍ  クエン酸で、そして１Ｍ  ＨＣｌ(ビス付加生成物を除去)で洗浄した後、２−クロロ−５−ニトロ−４−(ピペリジン−１−イル)ピリミジンを得た(６７％)。
LCMS (m/z): 242.9 (MH+);
LC Rt = 4.09分。
【０１３６】
実施例１８
１−(３−フルオロ−２−ニトロフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化３４】
2010520228.tif 000036
それぞれ１当量の２,６−ジフルオロニトロベンゼン、４−(Ｎ−Ｂｏｃ−アミノ)ピペリジンおよびＴＥＡを用いて、ＥｔＯＨ中で、方法１を行い、１−(３−フルオロ−２−ニトロフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９３％)。
LCMS (m/z): 340.1 (MH+);
LC Rt = 3.30分。
【０１３７】
実施例１９
１−(５−フルオロ−２−ニトロフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化３５】
2010520228.tif 000037
それぞれ１当量の１,３−ジフルオロ−４−ニトロベンゼン、４−(Ｎ−Ｂｏｃ−アミノ)ピペリジンおよびＴＥＡを用いて、方法１を行い、１−(５−フルオロ−２−ニトロフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９３％)。
LCMS (m/z): 340.1 (MH+);
LC Rt = 3.24分。
【０１３８】
実施例２０
１−(４−フルオロ−２−ニトロフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化３６】
2010520228.tif 000038
２,５−ジフルオロニトロベンゼン(１.０当量)、４−(Ｎ−Ｂｏｃ−アミノ)ピペリジン(１.４当量)およびＴＥＡ(２.０当量)を用いて、５５℃で終夜で、方法１を行い、１−(４−フルオロ−２−ニトロフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９７％)。
LCMS (m/z): 340.1 (MH+);
LC Rt = 3.28分。
【０１３９】
実施例２１
１−(４−ベンゾイル−２−ニトロフェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化３７】
2010520228.tif 000039
４−クロロ−３−ニトロベンゾフェノン(１.０当量)、３−(Ｎ−Ｂｏｃ−アミノ)ピペリジン(１.１当量)およびＴＥＡ(２.０当量)を用いて、ＮＭＰ中で、方法１を行い、１−(４−ベンゾイル−２−ニトロフェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９０％)。
LCMS (m/z): 426.2 (MH+);
LC Rt = 3.49分。
【０１４０】
実施例２２
１−(４−ベンゾイル−２−ニトロフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化３８】
2010520228.tif 000040
４−クロロ−３−ニトロベンゾフェノン(１.０当量)、４−(Ｎ−Ｂｏｃ−アミノ)ピペリジン(１.１当量)およびＴＥＡ(２.０当量)を用いて、ＮＭＰ中で、方法１を行い、１−(４−ベンゾイル−２−ニトロフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９５％)。
LCMS (m/z): 426.2 (MH+);
LC Rt = 3.46分。
【０１４１】
実施例２３
４−(４−ベンゾイル−２−ニトロフェニル)ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化３９】
2010520228.tif 000041
４−クロロ−３−ニトロベンゾフェノン(１.０当量)、１−Ｂｏｃ−ピペラジン(１.１当量)およびＴＥＡ(２.０当量)を用いて、ＮＭＰ中で、方法１を行い、４−(４−ベンゾイル−２−ニトロフェニル)ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９３％)。
LCMS (m/z): 412.2 (MH+);
LC Rt = 3.59分。
【０１４２】
実施例２４
４−(４−アセチル−２−ニトロフェニル)ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化４０】
2010520228.tif 000042
４−クロロ−３−ニトロアセトフェノン(１.０当量)、１−Ｂｏｃ−ピペラジン(１.２当量)およびＴＥＡ(２.０当量)を用いて、５５℃で終夜で、方法１を行い、４−(４−アセチル−２−ニトロフェニル)ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９９％)。
LCMS (m/z): 350.1 (MH+);
LC Rt = 3.06分。
【０１４３】
実施例２５
１−(４−アセチル−２−ニトロフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化４１】
2010520228.tif 000043
４−クロロ−３−ニトロアセトフェノン(１.０当量)、４−(Ｎ−Ｂｏｃ−アミノ)ピペリジン(１.２当量)およびＴＥＡ(２.０当量)を用いて、５５℃で終夜で、方法１を行い、１−(４−アセチル−２−ニトロフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９５％)。
LCMS (m/z): 364.1 (MH+);
LC Rt = 2.99分。
【０１４４】
実施例２６
１−(４−アセチル−２−ニトロフェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化４２】
2010520228.tif 000044
４−クロロ−３−ニトロアセトフェノン(１.０当量)、３−(Ｎ−Ｂｏｃ−アミノ)ピペリジン(１.２当量)およびＴＥＡ(２.０当量)を用いて、５５℃で終夜で、方法１を行い、１−(４−アセチル−２−ニトロフェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９９％)。
LCMS (m/z): 364.1 (MH+);
LC Rt = 3.03分。
【０１４５】
実施例２７
１−(４−アセチル−２−ニトロフェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化４３】
2010520228.tif 000045
４−クロロ−３−ニトロアニソール(１.０当量)、３−(Ｎ−Ｂｏｃ−アミノ)ピペリジン(１.２当量)およびＴＥＡ(２.０当量)を用いて、６０℃で７２時間で、方法１を行い、１−(４−メトキシ−２−ニトロフェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(５０％)。
LCMS (m/z): 352.1 (MH+);
LC Rt = 3.27分。
【０１４６】
実施例２８
１−(４−メトキシ−２−ニトロフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化４４】
2010520228.tif 000046
４−クロロ−３−ニトロアニソール(１.０当量)、４−(Ｎ−Ｂｏｃ−アミノ)ピペリジン(１.２当量)およびＴＥＡ(２.０当量)を用いて、６０℃で７２時間で、方法１を行い、１−(４−メトキシ−２−ニトロフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(７５％)。
LCMS (m/z): 352.1 (MH+);
LC Rt = 3.22分。
【０１４７】
実施例２９
４−(４−メトキシ−２−ニトロフェニル)ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化４５】
2010520228.tif 000047
４−クロロ−３−ニトロアニソール(１.０当量)、１−Ｂｏｃ−ピペラジン(１.２当量)およびＴＥＡ(２.０当量)を用いて、ＮＭＰ中、１００℃で１６時間で、方法１を行い、４−(４−メトキシ−２−ニトロフェニル)ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(５０％)。
LCMS (m/z): 338.2 (MH+);
LC Rt = 3.37分。
【０１４８】
実施例３０
４−(４−クロロ−２−ニトロフェニル)ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化４６】
2010520228.tif 000048
それぞれ１当量の４−クロロ−１−フルオロ−２−ニトロベンゼン、１−Ｂｏｃ−ピペラジンおよびＴＥＡを用いて、方法１を行い、４−(４−クロロ−２−ニトロフェニル)ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９５％)。
LCMS (m/z): 342.0 (MH+);
LC Rt = 3.50分。
【０１４９】
実施例３１
１−(４−クロロ−２−ニトロフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化４７】
2010520228.tif 000049
それぞれ１当量の４−クロロ−１−フルオロ−２−ニトロベンゼン、４−Ｎ−Ｂｏｃ−アミノピペリジンおよびＴＥＡを用いて、方法１を行い、１−(４−クロロ−２−ニトロフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９５％)。
LCMS (m/z): 356.1 (MH+);
LC Rt = 3.43分。
【０１５０】
実施例３２
１−(４−クロロ−２−ニトロフェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化４８】
2010520228.tif 000050
それぞれ１当量の４−クロロ−１−フルオロ−２−ニトロベンゼン、３−(Ｎ−Ｂｏｃ−アミノ)ピペリジンおよびＴＥＡを用いて、方法１を行い、１−(４−クロロ−２−ニトロフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９７％)。
LCMS (m/z): 356.1 (MH+);
LC Rt = 3.47分。
【０１５１】
実施例３３
４−(４−メチル−２−ニトロフェニル)ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化４９】
2010520228.tif 000051
４−フルオロ−３−ニトロトルエン(１.０当量)、１−Ｂｏｃ−ピペラジン(１.２当量)およびＴＥＡ(１.５当量)を用いて、５５℃で４８時間で、方法１を行い、４−(４−メチル−２−ニトロフェニル)ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９０％)。
LCMS (m/z): 322.1 (MH+);
LC Rt = 3.46分。
【０１５２】
実施例３４
１−(４−メチル−２−ニトロフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化５０】
2010520228.tif 000052
４−フルオロ−３−ニトロトルエン(１.０当量)、４−(Ｎ−Ｂｏｃ−アミノ)ピペリジン(１.２当量)およびＴＥＡ(１.５当量)を用いて、５５℃で４８時間で、方法１を行い、１−(４−メチル−２−ニトロフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(８７％)。
LCMS (m/z): 336.1 (MH+);
LC Rt = 3.32分。
【０１５３】
実施例３５
１−(４−メチル−２−ニトロフェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化５１】
2010520228.tif 000053
４−フルオロ−３−ニトロトルエン(１.０当量)、３−(Ｎ−Ｂｏｃ−アミノ)ピペリジン(１.２当量)およびＴＥＡ(１.５当量)を用いて、５５℃で４８時間で、方法１を行い、１−(４−メチル−２−ニトロフェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(８７％)。
LCMS (m/z): 336.1 (MH+);
LC Rt = 3.41分。
【０１５４】
実施例３６
１−(２−ニトロ−４−(トリフルオロメチル)フェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化５２】
2010520228.tif 000054
１−フルオロ−２−ニトロ−４−(トリフルオロメチル)ベンゼン(１.０当量)、３−(Ｎ−Ｂｏｃ−アミノ)ピペリジン(１.２当量)およびＴＥＡ(１.５当量)を用いて、５５℃で１時間で、方法１を行い、１−(２−ニトロ−４−(トリフルオロメチル)フェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９９％)。
LCMS (m/z): 390.1 (MH+);
LC Rt = 3.58分。
【０１５５】
実施例３７
１−(２−ニトロ−４−(トリフルオロメチル)フェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化５３】
2010520228.tif 000055
１−フルオロ−２−ニトロ−４−(トリフルオロメチル)ベンゼン(１.０当量)、４−(Ｎ−Ｂｏｃ−アミノ)ピペリジン(１.２当量)およびＴＥＡ(２.０当量)を用いて、５５℃で１時間で、方法１を行い、１−(２−ニトロ−４−(トリフルオロメチル)フェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９９％)。
LCMS (m/z): 390.1 (MH+);
LC Rt = 3.51分。
【０１５６】
実施例３８
４−(２−ニトロ−４−(トリフルオロメチル)フェニル)ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化５４】
2010520228.tif 000056
１−フルオロ−２−ニトロ−４−(トリフルオロメチル)ベンゼン(１.０当量)、１−Ｂｏｃ−ピペラジン(１.２当量)およびＴＥＡ(２.０当量)を用いて、５５℃で１時間で、方法１を行い、４−(２−ニトロ−４−(トリフルオロ−メチル)フェニル)ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９９％)。
LCMS (m/z): 376.1 (MH+);
LC Rt = 3.58分。
【０１５７】
実施例３９
４−(５−メチル−２−ニトロフェニル)ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化５５】
2010520228.tif 000057
３−フルオロ−４−ニトロトルエン(１.０当量)、１−Ｂｏｃ−ピペラジン(１.２当量)およびＴＥＡ(２.０当量)を用いて、５５℃で４８時間で、方法１を行い、４−(５−メチル−２−ニトロフェニル)ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９７％)。
LCMS (m/z): 322.1 (MH+);
LC Rt = 3.43分。
【０１５８】
実施例４０
１−(５−メチル−２−ニトロフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化５６】
2010520228.tif 000058
３−フルオロ−４−ニトロトルエン(１.０当量)、４−(Ｎ−Ｂｏｃ−アミノ)ピペリジン(１.２当量)およびＴＥＡ(２.０当量)を用いて、５５℃で４８時間で、方法１を行い、１−(５−メチル−２−ニトロフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９７％)。
LCMS (m/z): 336.1 (MH+);
LC Rt = 3.32分。
【０１５９】
実施例４１
１−(４−メチル−２−ニトロフェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化５７】
2010520228.tif 000059
３−フルオロ−４−ニトロトルエン(１.０当量)、３−(Ｎ−Ｂｏｃ−アミノ)ピペリジン(１.２当量)およびＴＥＡ(２.０当量)を用いて、５５℃で４８時間で、方法１を行い、１−(４−メチル−２−ニトロフェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９８％)。
LCMS (m/z): 336.1 (MH+);
LC Rt = 3.40分。
【０１６０】
実施例４２
１−(４−シアノ−２−ニトロフェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化５８】
2010520228.tif 000060
４−クロロ−３−ニトロベンゾニトリル(１.０当量)、３−(Ｎ−Ｂｏｃ−アミノ)ピペリジン(１.０当量)およびＤＩＥＡ(２.４当量)を用いて、５５℃で２４時間で、方法１を行い、１−(４−シアノ−２−ニトロフェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９５％)。
LCMS (m/z): 347.2 (MH+);
LC Rt = 3.06分。
【０１６１】
実施例４３
１−(２−ニトロ−４−(１Ｈ−ピラゾール−５−イル)フェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化５９】
2010520228.tif 000061
５−(４−クロロ−３−ニトロフェニル)−１Ｈ−ピラゾール(１.０当量)、４−(Ｎ−Ｂｏｃ−アミノ)ピペリジン(１.１当量)およびＴＥＡ(２.０当量)を用いて、５５℃で２４時間で、方法１を行い、１−(２−ニトロ−４−(１Ｈ−ピラゾール−５−イル)フェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た。
LCMS (m/z): 388.1 (MH+);
LC Rt = 2.84分。
【０１６２】
実施例４４
１−(４−(メチルスルホニル)−２−ニトロフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化６０】
2010520228.tif 000062
１−フルオロ−４−(メチルスルホニル)−２−ニトロベンゼン(１.０当量)、４−(Ｎ−Ｂｏｃ−アミノ)ピペリジン(１.１当量)およびＴＥＡ(２.０当量)を用いて、５５℃で２４時間で、方法１を行い、１−(４−(メチルスルホニル)−２−ニトロフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た。
LCMS (m/z): 400.1(MH+);
LC Rt = 2.83分。
【０１６３】
実施例４５
４−(４−(シクロプロパンカルボニル)−２−ニトロフェニル)ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化６１】
2010520228.tif 000063
４−クロロ−３−ニトロフェニル シクロプロピル ケトン(１.０当量)、１−Ｂｏｃ−ピペラジン(１.２当量)およびＴＥＡ(１.５当量)を用いて、５５℃で４８時間で、方法１を行い、４−(４−(シクロプロパンカルボニル)−２−ニトロフェニル)ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９８％)。
LCMS (m/z): 376.1 (MH+);
LC Rt = 3.33分。
【０１６４】
実施例４６
１−(４−(シクロプロパンカルボニル)−２−ニトロフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化６２】
2010520228.tif 000064
４−クロロ−３−ニトロフェニル シクロプロピル ケトン(１.０当量)、４−(Ｎ−Ｂｏｃ−アミノ)ピペリジン(１.２当量)およびＴＥＡ(１.５当量)を用いて、５５℃で４８時間で、方法１を行い、１−(４−(シクロプロパンカルボニル)−２−ニトロフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９５％)。
LCMS (m/z): 390.1 (MH+);
LC Rt = 3.25分。
【０１６５】
実施例４７
１−(４−(シクロプロパンカルボニル)−２−ニトロフェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化６３】
2010520228.tif 000065
４−クロロ−３−ニトロフェニル シクロプロピル ケトン(１.０当量)、３−(Ｎ−Ｂｏｃ−アミノ)ピペリジン(１.２当量)およびＴＥＡ(１.５当量)を用いて、５５℃で４８時間で、方法１を行い、１−(４−(シクロプロパンカルボニル)−２−ニトロフェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９６％)。
LCMS (m/z): 390.1 (MH+);
LC Rt = 3.28分。
【０１６６】
実施例４８
２−(３−ニトロピリジン−４−イルオキシ)エチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化６４】
2010520228.tif 000066
ＴＨＦ中の２−ヒドロキシエチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル(１.１当量)の冷却(０℃)した溶液に、ＮａＨ(１.３当量)を加え、１時間攪拌し、次いで４−クロロ−３−ニトロピリジン(１.０当量)を加えた。該反応混合物を室温で終夜撹拌し、冷水に注ぎ、ＥｔＯＡｃで抽出する。有機層をＮａ２ＣＯ３で乾燥し、濾過し、濃縮し、２−(３−ニトロピリジン−４−イルオキシ)エチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た。
LCMS (m/z): 284.1 (MH+);
LC Rt = 2.09分。
【０１６７】
＜方法２＞
実施例４９
４−(ピペリジン−１−イル)ピリジン−３−アミンの合成
【化６５】
2010520228.tif 000067
エタノール中の濃度０.１Ｍの３−ニトロ−４−(ピペリジン−１−イル)ピリジン(１.０当量)の溶液に、１０％  パラジウム／炭素(０.１当量)を加えた。得られた不均一な溶液を、水素雰囲気下に置き、１５時間撹拌した。その時点で、該混合物をセライトのパッドで濾過し、メタノールで溶出した。揮発成分を真空で除去し、４−(ピペリジン−１−イル)ピリジン−３−アミンを油状物として得た(９３％)。
LCMS (m/z): 178.0 (MH+);
LC Rt = 1.68分。
1H NMR (CDCl3): δ 8.01 (s, 1H), 7.96 (d, J=5.4, 1H), 6.78 (d, J=5.1, 1H), 3.64-3.74 (m, 2H), 2.86-2.94 (m, 4H), 1.66-1.78 (m, 4H), 1.58-1.64 (m, 2H).  
【０１６８】
実施例５０
１−(３−アミノピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化６６】
2010520228.tif 000068
実施例４９の方法(方法２)に従って、１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを還元し、１−(３−アミノピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(６５％)。
LCMS (m/z): 293.1 (MH+);
LC Rt = 2.10分。
【０１６９】
実施例５１
(Ｒ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−アミノピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメートの合成
【化６７】
2010520228.tif 000069
実施例４９の方法(方法２)に従って、(Ｒ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメートを還元し、(Ｒ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−アミノピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメートを得た(８９％)。
LCMS (m/z): 293.1 (MH+);
LC Rt = 2.08分。
【０１７０】
実施例５２
(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−アミノピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメートの合成
【化６８】
2010520228.tif 000070
実施例４９の方法(方法２)に従って、(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメートを還元し、(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−アミノピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメートを得た(７８％)。
LCMS (m/z): 293.1 (MH+);
LC Rt = 2.08分。
【０１７１】
実施例５３
(１−(３−アミノピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イル)メチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化６９】
2010520228.tif 000071
実施例４９の方法(方法２)に従って、(１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イル)メチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを還元し、(１−(３−アミノピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イル)メチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(７２％)。
LCMS (m/z): 307.2 (MH+);
LC Rt = 2.28分。
1H NMR (CDCl3): δ 8.01 (s, 1H), 7.96 (d, J=5.4Hz, 1H), 6.78 (d, J=5.4Hz, 1H), 4.60 (bs, 1H), 3.68 (bs, 2H), 3.04-3.28 (m, 4H), 2.53-2.65 (m, 1H), 2.35-2.47 (m, 1H), 1.77-1.93 (m, 3H), 1.55-1.75 (m, 2H), 1.44 (s, 9H).
【０１７２】
実施例５４
１−(２−アミノフェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化７０】
2010520228.tif 000072
実施例４９の方法(方法２)に従って、１−(２−ニトロフェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを還元し、１−(２−アミノフェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９０％)。
LCMS (m/z): 292.2 (MH+).
LC Rt = 2.17分。
【０１７３】
実施例５５
１−(２−アミノフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化７１】
2010520228.tif 000073
実施例４９の方法(方法２)に従って、１−(２−ニトロフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを還元し、１−(２−アミノフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９０％)。
LCMS (m/z): 292.1 (MH+);
LC Rt = 2.13分。
【０１７４】
実施例５６
４−(２−アミノフェニル)ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化７２】
2010520228.tif 000074
実施例４９の方法(方法２)に従って、４−(２−ニトロフェニル)ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを２時間還元し、４−(２−アミノフェニル)ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９９％)。
LCMS (m/z): 278.2 (MH+);
LC Rt = 2.22分。
【０１７５】
実施例５７
１−(３−アミノピリジン−２−イル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化７３】
2010520228.tif 000075
実施例４９の方法(方法２)に従って、１−(３−ニトロピリジン−２−イル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを還元し、１−(３−アミノピリジン−２−イル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９５％)。
LCMS (m/z): 293.2 (MH+);
LC Rt = 1.87分。
【０１７６】
実施例５８
４−(４−(ジメチルアミノ)ピペリジン−１−イル)ピリジン−３−アミンの合成
【化７４】
2010520228.tif 000076
実施例４９の方法(方法２)に従って、Ｎ,Ｎ−ジメチル−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−４−アミンを還元し、４−(４−(ジメチルアミノ)ピペリジン−１−イル)ピリジン−３−アミンを得た。
LCMS (m/z): 221.2 (MH+);
【０１７７】
実施例５９
４−(１,４−ジオキサ−８−アザスピロ[４.５]デカン−８−イル)ピリジン−３−アミンの合成
【化７５】
2010520228.tif 000077
実施例４９の方法(方法２)に従って、８−(３−ニトロピリジン−４−イル)−１,４−ジオキサ−８−アザスピロ[４.５]デカンを還元し、４−(１,４−ジオキサ−８−アザスピロ[４.５]デカン−８−イル)ピリジン−３−アミンを得た。
LCMS (m/z): 236.2 (MH+).
【０１７８】
実施例６０
４−(３−アミノピリジン−４−イル)−１,４−ジアゼパン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化７６】
2010520228.tif 000078
実施例４９の方法(方法２)に従って、４−(３−ニトロピリジン−４−イル)−１,４−ジアゼパン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを還元し、４−(３−アミノピリジン−４−イル)−１,４−ジアゼパン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た。
LCMS (m/z): 293.3 (MH+).
【０１７９】
実施例６１
Ｎ４−[２−(ジメチルアミノ)エチル]−Ｎ４−メチルピリジン−３,４−ジアミンの合成
【化７７】
2010520228.tif 000079
実施例４９の方法(方法２)に従って、Ｎ１,Ｎ１,Ｎ２−トリメチル−Ｎ２−(３−ニトロピリジン−４−イル)エタン−１,２−ジアミンを還元し、Ｎ４−[２−(ジメチルアミノ)エチル]−Ｎ４−メチルピリジン−３,４−ジアミンを得た。これを濃縮してそのまま用いた。
LCMS (m/z): 195.2 (MH+);
LC Rt = 0.31分。
【０１８０】
実施例６２
１−(３−アミノピリジン−４−イル)ピロリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化７８】
2010520228.tif 000080
実施例４９の方法(方法２)に従って、１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピロリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを還元し、１−(３−アミノピリジン−４−イル)ピロリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た。これを濃縮してそのまま用いた。
LCMS (m/z): 279.1 (MH+);
LC Rt = 1.75分。
【０１８１】
実施例６３
(Ｒ)−ｔｅｒｔ−ブチル [１−(３−アミノピリジン−４−イル)ピロリジン−２−イル]メチルカルバメートの合成
【化７９】
2010520228.tif 000081
実施例４９の方法(方法２)に従って、(Ｒ)−ｔｅｒｔ−ブチル [１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピロリジン−２−イル]メチルカルバメートを還元し、(Ｒ)−ｔｅｒｔ−ブチル [１−(３−アミノピリジン−４−イル)ピロリジン−２−イル]メチルカルバメートを得た。これを濃縮してそのまま用いた。
LCMS (m/z): 293.1 (MH+);
LC Rt = 1.79分。
【０１８２】
実施例６４
４−(ピペリジン−１−イル)ピリミジン−５−アミンの合成
【化８０】
2010520228.tif 000082
実施例４９の方法(方法２)に従って、２−クロロ−５−ニトロ−４−(ピペリジン−１−イル)ピリミジンを還元し、４−(ピペリジン−１−イル)ピリミジン−５−アミンを塩酸塩として得た(１００％)。
LCMS (m/z): 179.0 (MH+);
LC Rt = 1.51分。
【０１８３】
実施例６５
１−(２−アミノ−３−フルオロフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化８１】
2010520228.tif 000083
実施例４９の方法(方法２)に従って、１−(３−フルオロ−２−ニトロフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを７５分間還元し、１−(２−アミノ−３−フルオロフェニル)ピペリジン−４−イル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９５％)。
LCMS (m/z): 310.2 (MH+);
LC Rt = 2.64分。
【０１８４】
実施例６６
１−(２−アミノ−５−フルオロフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化８２】
2010520228.tif 000084
実施例４９の方法(方法２)に従って、１−(５−フルオロ−２−ニトロフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを７５分間還元し、１−(２−アミノ−５−フルオロフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９７％)。
LCMS (m/z): 310.1 (MH+);
LC Rt = 2.25分。
【０１８５】
実施例６７
１−(２−アミノ−４−フルオロフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化８３】
2010520228.tif 000085
実施例４９の方法(方法２)に従って、１−(４−フルオロ−２−ニトロフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを還元し、１−(２−アミノ−４−フルオロフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９０％)。
LCMS (m/z): 310.1 (MH+);
LC Rt = 2.36分。
【０１８６】
実施例６８
１−(２−アミノ−４−メトキシフェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化８４】
2010520228.tif 000086
実施例４９の方法(方法２)に従って、１−(４−メトキシ−２−ニトロフェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを２４時間還元し、１−(２−アミノ−４−メトキシフェニル)ピペリジン−３−イル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(２５％)。
LCMS (m/z): 322.2 (MH+);
LC Rt = 2.27分。
【０１８７】
実施例６９
１−(２−アミノ−４−メトキシフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化８５】
2010520228.tif 000087
実施例４９の方法(方法２)に従って、１−(４−メトキシ−２−ニトロフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを２４時間還元し、１−(２−アミノ−４−メトキシフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(５０％)。
LCMS (m/z): 322.2 (MH+);
LC Rt = 2.16分。
【０１８８】
実施例７０
４−(２−アミノ−４−メトキシフェニル)ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化８６】
2010520228.tif 000088
実施例４９の方法(方法２)に従って、４−(４−メトキシ−２−ニトロフェニル)ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを２４時間還元し、４−(２−アミノ−４−メトキシフェニル)ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(２０％)。
LCMS (m/z): 308.2 (MH+);
LC Rt = 2.35分。
【０１８９】
実施例７１
４−(２−アミノ−４−メチルフェニル)ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化８７】
2010520228.tif 000089
実施例４９の方法(方法２)に従って、４−(４−メチル−２−ニトロフェニル)ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを２時間還元し、４−(２−アミノ−４−メチルフェニル)ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９３％)。
LCMS (m/z): 292.1 (MH+);
LC Rt = 2.33分。
【０１９０】
実施例７２
１−(２−アミノ−４−メチルフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化８８】
2010520228.tif 000090
実施例４９の方法(方法２)に従って、１−(４−メチル−２−ニトロフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを２時間還元し、１−(２−アミノ−４−メチルフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９５％)。
LCMS (m/z): 306.2 (MH+);
LC Rt = 2.22分。
【０１９１】
実施例７３
１−(２−アミノ−４−メチルフェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化８９】
2010520228.tif 000091
実施例４９の方法(方法２)に従って、１−(４−メチル−２−ニトロフェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを２時間還元し、１−(２−アミノ−４−メチルフェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９５％)。
LCMS (m/z): 306.2 (MH+);
LC Rt = 2.30分。
【０１９２】
実施例７４
４−(２−アミノ−５−メチルフェニル)ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化９０】
2010520228.tif 000092
実施例４９の方法(方法２)に従って、４−(５−メチル−２−ニトロフェニル)ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを還元し、４−(２−アミノ−５−メチルフェニル)ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９０％)。
LCMS (m/z): 292.1 (MH+);
LC Rt = 2.29分。
【０１９３】
実施例７５
１−(２−アミノ−５−メチルフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化９１】
2010520228.tif 000093
実施例４９の方法(方法２)に従って、１−(５−メチル−２−ニトロフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを１時間還元し、１−(２−アミノ−５−メチルフェニル)ピペリジン−４−イル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９３％)。
LCMS (m/z): 306.2 (MH+);
LC Rt = 2.25分。
【０１９４】
実施例７６
１−(２−アミノ−５−メチルフェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化９２】
2010520228.tif 000094
実施例４９の方法(方法２)に従って、１−(５−メチル−２−ニトロフェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを１時間還元し、１−(２−アミノ−５−メチルフェニル)ピペリジン−３−イル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９５％)。
LCMS (m/z): 306.2 (MH+);
LC Rt = 2.29分。
【０１９５】
実施例７７
１−(２−アミノ−４−(トリフルオロメチル)フェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化９３】
2010520228.tif 000095
実施例４９の方法(方法２)に従って、１−(２−ニトロ−４−(トリフルオロメチル)フェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを、ＭｅＯＨ中で還元し、１−(２−アミノ−４−(トリフルオロメチル)フェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９５％)。
LCMS (m/z): 360.1 (MH+);
LC Rt = 3.30分。
【０１９６】
実施例７８
１−(２−アミノ−４−(トリフルオロメチル)フェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化９４】
2010520228.tif 000096
実施例４９の方法(方法２)に従って、１−(２−ニトロ−４−(トリフルオロメチル)フェニル)ピペリジン−４−イル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを、ＭｅＯＨ中で還元し、１−(２−アミノ−４−(トリフルオロメチル)フェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９７％)。
LCMS (m/z): 360.1 (MH+);
LC Rt = 3.20分。
【０１９７】
実施例７９
４−(２−アミノ−４−(トリフルオロメチル)フェニル)ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化９５】
2010520228.tif 000097
実施例４９の方法(方法２)に従って、４−(２−ニトロ−４−(トリフルオロ−メチル)フェニル)ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを、ＭｅＯＨ中で還元し、４−(２−アミノ−４−(トリフルオロメチル)フェニル)ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９９％)。
LCMS (m/z): 346.1 (MH+);
LC Rt = 3.38分。
【０１９８】
実施例８０
１−(２−アミノ−４−シアノフェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化９６】
2010520228.tif 000098
実施例４９の方法(方法２)に従って、１−(４−シアノ−２−ニトロフェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを還元し、１−(２−アミノ−４−シアノフェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９５％)。
LCMS (m/z): 317.2 (MH+);
LC Rt = 2.92分。
【０１９９】
実施例８１
１−(２−アミノ−４−(１Ｈ−ピラゾール−５−イル)フェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化９７】
2010520228.tif 000099
実施例４９の方法(方法２)に従って、１−(２−ニトロ−４−(１Ｈ−ピラゾール−５−イル)フェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを還元し、１−(２−アミノ−４−(１Ｈ−ピラゾール−５−イル)フェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(８７％)。
LCMS (m/z): 258.1 (MH+);
LC Rt = 2.15分。
【０２００】
実施例８２
１−(２−アミノ−４−(メチルスルホニル)フェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化９８】
2010520228.tif 000100
実施例４９の方法(方法２)に従って、１−(４−(メチルスルホニル)−２−ニトロフェニル)ピペリジン−４−イル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを還元し、１−(２−アミノ−４−(メチルスルホニル)フェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(７６％)。
LCMS (m/z): 370.1 (MH+);
LC Rt = 2.52分。
【０２０１】
実施例８３
２−(３−アミノピリジン−４−イルオキシ)エチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化９９】
2010520228.tif 000101
実施例４９の方法(方法２)に従って、２−(３−ニトロピリジン−４−イルオキシ)エチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを還元し、２−(３−アミノピリジン−４−イルオキシ)エチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た。
LCMS (m/z): 254.1 (MH+);
LC Rt = 1.76分。
【０２０２】
＜方法３＞
実施例８４
３−(４−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペラジン−１−イル)−３−オキソプロピルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化１００】
2010520228.tif 000102
ＤＣＭ中の濃度０.１Ｍのそれぞれ１.０当量の１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペラジン、Ｎ−Ｂｏｃ−β−アラニン、ＨＯＡＴおよびＥＤＣを含む溶液を、１６時間撹拌した。該溶液をＥｔＯＡｃで希釈し、Ｈ２Ｏで、Ｎａ２ＣＯ３(飽和)で、そしてＮａＣｌ(飽和)で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、揮発成分を真空で除去し、３−(４−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペラジン−１−イル)−３−オキソプロピルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９３％)。
LCMS (m/z): 379.9  (MH+);
LC Rt = 1.92分。
【０２０３】
実施例８５
３−(４−(３−アミノピリジン−４−イル)ピペラジン−１−イル)−３−オキソプロピルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化１０１】
2010520228.tif 000103
実施例４９の方法(方法２)に従って、３−(４−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペラジン−１−イル)−３−オキソプロピルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを還元し、３−(４−(３−アミノピリジン−４−イル)ピペラジン−１−イル)−３−オキソプロピルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(収率９９％)。
LCMS (m/z): 349.9 (MH+);
LC Rt = 1.84分。
【０２０４】
実施例８６
２−(４−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペラジン−１−イル)−２−オキソエチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化１０２】
2010520228.tif 000104
実施例８４の方法(方法３)に従って、１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペラジンを、Ｎ−Ｂｏｃ−グリシンとカップリングさせ、２−(４−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペラジン−１−イル)−２−オキソエチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(収率９９％)。
LCMS (m/z): 365.8 (MH+);
LC Rt = 1.81分。
【０２０５】
実施例８７
２−(４−(３−アミノピリジン−４−イル)ピペラジン−１−イル)−２−オキソエチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化１０３】
2010520228.tif 000105
実施例４９の方法(方法２)に従って、２−(４−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペラジン−１−イル)−２−オキソエチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを還元し、２−(４−(３−アミノピリジン−４−イル)ピペラジン−１−イル)−２−オキソエチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(収率８８％)。
LCMS (m/z): 335.8 (MH+);
LC Rt = 1.79分。
【０２０６】
＜方法４＞
実施例８８
４−ニトロ−３−(ピペリジン−１−イル)ピリジン １−オキシドの合成
【化１０４】
2010520228.tif 000106
エタノール中の濃度０.２Ｍの３−ブロモ−４−ニトロピリジン−Ｎ−オキシド(１.０当量)およびピペリジン(２.０当量)を、１６時間還流した。冷却後、エタノールを真空で除去した。残渣をＥｔＯＡｃとＮａ２ＣＯ３(飽和)の層間に分配し、Ｈ２Ｏで、そしてＮａＣｌ(飽和)でさらに洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、揮発成分を真空で除去し、４−ニトロ−３−(ピペリジン−１−イル)ピリジン １−オキシドを得た(９２％)。
LCMS (m/z): 224.0 (MH+);
LC Rt = 2.48分。
【０２０７】
実施例８９
１−(４−ニトロピリジン−３−イル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化１０５】
2010520228.tif 000107
それぞれ１当量の３−ブロモ−４−ニトロピリジン−Ｎ−オキシド、３−Ｎ−Ｂｏｃ−アミノピペリジンおよびジイソプロピルエチルアミンを用いて、実施例８８の方法(方法４)を行い、１−(４−ニトロピリジン−３−イル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(６５％)。
LCMS (m/z): 339.1 (MH+);
LC Rt = 2.88分。
【０２０８】
＜方法５＞
実施例９０
３−(ピペリジン−１−イル)ピリジン−４−アミンの合成
【化１０６】
2010520228.tif 000108
エタノール中の濃度０.１Ｍの４−ニトロ−３−(ピペリジン−１−イル)ピリジン １−オキシド(１.０当量)の溶液に、１０％  パラジウム／炭素(０.１当量)を加えた。得られた不均一な溶液を水素雰囲気下に置き、１５時間撹拌した。このとき、ＬＣ／ＭＳ分析により、ニトロがアミンに還元されたが、Ｎ−オキシドが残っていることが示された。さらに１０％  パラジウム／炭素(０.２当量)を加え、該混合物を水素バルーン雰囲気に再度置いた。２４時間撹拌した後、さらに１０％  パラジウム／炭素(０.２当量)を加え、該混合物を水素バルーン雰囲気に再度置いた。さらに３日間撹拌した後、該混合物をセライトのパッドで濾過し、メタノールで溶出した。揮発成分を真空で除去し、３−(ピペリジン−１−イル)ピリジン−４−アミンを得た(７３％)。
LCMS (m/z): 178.0 (MH+);
LC Rt = 1.66分。
【０２０９】
実施例９１
１−(４−アミノピリジン−３−イル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化１０７】
2010520228.tif 000109
１当量の１−(４−ニトロピリジン−３−イル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを用いて、１：１  エタノール／酢酸エチル中、３０psiで７２時間で、実施例９０の方法(方法５)を行い、１−(４−アミノピリジン−３−イル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(７９％)。
LCMS (m/z): 293.1 (MH+);
LC Rt = 2.14分。
【０２１０】
＜方法６＞
実施例９２
４−シクロヘキセニル−３−ニトロピリジンの合成
【化１０８】
2010520228.tif 000110
３：１  ＤＭＥ／２Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３中の濃度０.１Ｍの４−クロロ−３−ニトロピリジン(１当量)、シクロヘキセニルボロン酸(１.７当量)およびＰｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＣＨ２Ｃｌ２(０.０５当量)の溶液を、９５℃で１６時間加熱した。冷却後、該反応物をＥｔＯＡｃとＨ２Ｏの層間に分配し、ＮａＣｌ(飽和)で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、揮発成分を真空で除去した。該物質を、ＳｉＯ２クロマトグラフィーによって精製し(２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン溶出液)、４−シクロヘキセニル−３−ニトロピリジンを得た(８２％)。
LCMS (m/z): 205.0 (MH+);
LC Rt = 3.84分。
【０２１１】
実施例９３
３−ニトロ−４−ｏ−トリルピリジンの合成
【化１０９】
2010520228.tif 000111
オルト−トリルボロン酸を用いて、３時間で、実施例９２の方法(方法６)を行い、３−ニトロ−４−ｏ−トリルピリジンを得た(８８％)。
LCMS (m/z): 215.1 (MH+);
LC Rt = 3.58分。
【０２１２】
＜方法７＞
実施例９４
４−シクロヘキセニルピリジン−３−アミンの合成
【化１１０】
2010520228.tif 000112
酢酸中の濃度０.４Ｍの４−シクロヘキセニル−３−ニトロピリジン(１.０当量)および鉄(６.０当量)の均一な溶液を、２時間激しく撹拌した。次いで、該混合物をセライトのパッドに通し、ＭｅＯＨで溶出した。揮発成分を真空で除去した後、残渣をＥｔＯＡｃに溶解し、Ｎａ２ＣＯ３(飽和)で、そしてＮａＣｌ(飽和)で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、揮発成分を真空で除去し、４−シクロヘキセニルピリジン−３−アミンを油状物として得た(９９％)。
LCMS (m/z): 175.0 (MH+);
LC Rt = 1.86分。
【０２１３】
実施例９５
４−ｏ−トリルピリジン−３−アミンの合成
【化１１１】
2010520228.tif 000113
３−ニトロ−４−ｏ−トリルピリジンを用いて、実施例９４の方法(方法７)を行い、４−ｏ−トリルピリジン−３−アミンを得た(９７％)。
LCMS (m/z): 185.1 (MH+);
LC Rt = 1.78分。
【０２１４】
実施例９６
１−(２−アミノ−４−ベンゾイルフェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化１１２】
2010520228.tif 000114
方法７に従って、１−(４−ベンゾイル−２−ニトロフェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを１６時間還元し、濾過し、濃縮した。水を残渣に加えた。得られた固体を濾過によって集め、真空で乾燥し、１−(２−アミノ−４−ベンゾイルフェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９０％)。
LCMS (m/z): 396.2 (MH+);
LC Rt = 3.07分。
【０２１５】
実施例９７
１−(２−アミノ−４−ベンゾイルフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化１１３】
2010520228.tif 000115
方法７に従って、１−(４−ベンゾイル−２−ニトロフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを１６時間還元し、濾過し、濃縮した。水を残渣に加えた。得られた固体を濾過によって集め、真空で乾燥し、１−(２−アミノ−４−ベンゾイルフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(８３％)。
LCMS (m/z): 396.2 (MH+);
LC Rt = 2.81分。
【０２１６】
実施例９８
４−(２−アミノ−４−ベンゾイルフェニル)ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化１１４】
2010520228.tif 000116
方法７に従って、１−(４−ベンゾイル−２−ニトロフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを１６時間還元し、濾過し、濃縮した。水を残渣に加えた。得られた固体を濾過によって集め、真空で乾燥し、４−(２−アミノ−４−ベンゾイルフェニル)ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(６１％)。
LCMS (m/z): 382.2 (MH+);
LC Rt = 3.01分。
【０２１７】
実施例９９
４−(４−アセチル−２−アミノフェニル)ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化１１５】
2010520228.tif 000117
方法７に従って、４−(４−アセチル−２−ニトロフェニル)ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを還元し、濾過し、濃縮した。水を残渣に加えた。得られた固体を濾過によって集め、真空で乾燥し、４−(４−アセチル−２−アミノフェニル)ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(８７％)。
LCMS (m/z): 320.2 (MH+);
LC Rt = 2.58分。
【０２１８】
実施例１００
１−(４−アセチル−２−アミノフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化１１６】
2010520228.tif 000118
方法７に従って、１−(４−アセチル−２−ニトロフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを還元し、濾過し、濃縮した。水を残渣に加えた。得られた固体を濾過によって集め、真空で乾燥し、１−(４−アセチル−２−アミノフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９０％)。
LCMS (m/z): 334.2 (MH+);
LC Rt = 2.42分。
【０２１９】
実施例１０１
１−(４−アセチル−２−アミノフェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化１１７】
2010520228.tif 000119
方法７に従って、１−(４−アセチル−２−ニトロフェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを還元し、濾過し、濃縮した。水を残渣に加えた。得られた固体を濾過によって集め、真空で乾燥し、１−(４−アセチル−２−アミノフェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(８８％)。
LCMS (m/z): 334.2 (MH+);
LC Rt = 2.49分。
【０２２０】
実施例１０２
４−(２−アミノ−４−クロロフェニル)ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化１１８】
2010520228.tif 000120
方法７に従って、４−(４−クロロ−２−ニトロフェニル)ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを還元し、濾過し、濃縮した。水を残渣に加えた。得られた固体を濾過によって集め、真空で乾燥し、４−(２−アミノ−４−クロロフェニル)ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(８０％)。
LCMS (m/z): 312.1 (MH+);
LC Rt = 2.85分。
【０２２１】
実施例１０３
１−(２−アミノ−４−クロロフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化１１９】
2010520228.tif 000121
方法７に従って、１−(４−クロロ−２−ニトロフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを還元し、濾過し、濃縮した。水を残渣に加えた。得られた固体を濾過によって集め、真空で乾燥し、１−(２−アミノ−４−クロロフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(６８％)。
LCMS (m/z): 326.1 (MH+);
LC Rt = 2.67分。
【０２２２】
実施例１０４
１−(２−アミノ−４−クロロフェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化１２０】
2010520228.tif 000122
方法７に従って、１−(４−クロロ−２−ニトロフェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを還元し、濾過し、濃縮した。水を残渣に加えた。得られた固体を濾過によって集め、真空で乾燥し、１−(２−アミノ−４−クロロフェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(８５％)。
LCMS (m/z): 326.1 (MH+);
LC Rt = 2.76分。
【０２２３】
実施例１０５
４−(４−(シクロプロパンカルボニル)−２−ニトロフェニル)ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化１２１】
2010520228.tif 000123
方法７に従って、４−(４−(シクロプロパンカルボニル)−２−ニトロフェニル)ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを還元し、濾過し、濃縮した。水を残渣に加えた。得られた固体を濾過によって集め、真空で乾燥し、１−(２−アミノ−４−クロロフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９０％)。
LCMS (m/z): 346.2 (MH+);
LC Rt = 2.83分。
【０２２４】
実施例１０６
１−(２−アミノ−４−(シクロプロパンカルボニル)フェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化１２２】
2010520228.tif 000124
方法７に従って、１−(４−(シクロプロパンカルボニル)−２−ニトロフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを還元し、濾過し、濃縮した。水を残渣に加えた。得られた固体を濾過によって集め、真空で乾燥し、１−(２−アミノ−４−(シクロプロパンカルボニル)フェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９３％)。
LCMS (m/z): 360.1 (MH+);
LC Rt = 2.65分。
【０２２５】
実施例１０７
１−(２−アミノ−４−(シクロプロパンカルボニル)フェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化１２３】
2010520228.tif 000125
方法７に従って、１−(４−(シクロプロパンカルボニル)−２−ニトロフェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを還元し、濾過し、濃縮した。水を残渣に加えた。得られた固体を濾過によって集め、真空で乾燥し、１−(２−アミノ−４−(シクロプロパンカルボニル)フェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９０％)。
LCMS (m/z): 360.1 (MH+);
LC Rt = 2.74分。
【０２２６】
＜方法８＞
実施例１０８
６−アミノ−５−(４−(トリフルオロメチル)ピペリジン−１−イル)ピリミジン−２(１Ｈ)−オンの合成
【化１２４】
2010520228.tif 000126
Ｎ−メチルピロリジノン(ＮＭＰ)中の濃度０.５２５Ｍの、５−ブロモシトシン(１.０当量)、４−(トリフルオロメチル)ピペリジン(１.２５当量)およびジイソプロピルエチルアミン(１.２５当量)の溶液を、１２５mlの高圧ガラス容器中で、アルゴンを１０分間通気することによって脱気した。次いで、ガラス容器を密封し、１２０℃で３日間加熱した。該反応混合物を直接逆相ＨＰＬＣによって精製し、凍結乾燥し、生成物のＴＦＡ塩を崩壊性(crunchy)の橙色の固体として得た(５０％)。
LCMS (m/z): 263.0 (MH+);
LC Rt = 1.81分。
【０２２７】
実施例１０９
６−アミノ−５−(４,４−ジフルオロピペリジン−１−イル)ピリミジン−２(１Ｈ)−オンの合成
【化１２５】
2010520228.tif 000127
１当量の５−ブロモシトシン、１.２５当量の３−フルオロピペリジンおよび２.５当量のジイソプロピルエチルアミンを用いて、１２０℃で２日間で、方法８を行い、６−アミノ−５−(４,４−ジフルオロピペリジン−１−イル)ピリミジン−２(１Ｈ)−オンを橙色の崩壊性固体として得た(３４％)。
LCMS (m/z): 231.0 (MH+);
LC Rt = 1.28分。
【０２２８】
実施例１１０
６−アミノ−５−(３−フルオロピペリジン−１−イル)ピリミジン−２(１Ｈ)−オンの合成
【化１２６】
2010520228.tif 000128
１当量の５−ブロモシトシン、１.２５当量の３−フルオロピペリジンおよび２.５当量のジイソプロピルエチルアミンを用いて、１２０℃で２日間で、方法８を行い、６−アミノ−５−(３−フルオロピペリジン−１−イル)ピリミジン−２(１Ｈ)−オンを橙色の崩壊性固体として得た(２４％)。
LCMS (m/z): 213.0 (MH+);
LC Rt = 1.07分。
【０２２９】
実施例１１１
(１−(６−アミノ−２−オキソ−１,２−ジヒドロピリミジン−５−イル)ピペリジン−３−イル)メチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化１２７】
2010520228.tif 000129
１当量の５−ブロモシトシン、１.０５当量のピペリジン−３−イルメチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル、および１.０５当量のジイソプロピルエチルアミンを用いて、方法８を行い、(１−(６−アミノ−２−オキソ−１,２−ジヒドロピリミジン−５−イル)ピペリジン−３−イル)メチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを橙色の崩壊性固体として得た(１８％)。
LCMS (m/z): 324.1 (MH+);
LC Rt = 1.90分。
【０２３０】
実施例１１２
(１−(６−アミノ−２−オキソ−１,２−ジヒドロピリミジン−５−イル)ピペリジン−３−イル)カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化１２８】
2010520228.tif 000130
１当量の５−ブロモシトシン、１.０５当量のピペリジン−３−イルメチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルおよび１.０５当量のジイソプロピルエチルアミンを用いて、方法８を行い、(１−(６−アミノ−２−オキソ−１,２−ジヒドロピリミジン−５−イル)ピペリジン−３−イル)カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを橙色の崩壊性固体として得た(２６％)。
LCMS (m/z): 310.1 (MH+);
LC Rt = 1.78分。
【０２３１】
実施例１１３
３−(４−(６−アミノ−２−オキソ−１,２−ジヒドロピリミジン−５−イル)ピペラジン−１−イル)−３−オキソプロピルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化１２９】
2010520228.tif 000131
１当量の５−ブロモシトシン、１.５当量の３−オキソ−３−(ピペラジン−１−イル)プロピルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルおよび１.２当量のジイソプロピルエチルアミンを用いて、方法８を行い、３−(４−(６−アミノ−２−オキソ−１,２−ジヒドロピリミジン−５−イル)ピペラジン−１−イル)−３−オキソプロピルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを橙色の崩壊性固体として得た(６５％)。
LCMS (m/z): 367.2 (MH+);
LC Rt = 1.68分。
【０２３２】
実施例１１４
６−アミノ−５−(ピペリジン−１−イル)ピリミジン−２(１Ｈ)−オンの合成
【化１３０】
2010520228.tif 000132
１当量の５−ブロモシトシンおよび１５当量のピペリジン(溶媒として)を用いて、方法８を行った。該反応物を冷却し、ＣＨ２Ｃｌ２およびＨ２Ｏに加えた。固体を濾過し、Ｈ２Ｏで濯ぎ、乾燥し、６−アミノ−５−(ピペリジン−１−イル)ピリミジン−２(１Ｈ)−オンを固体として得た(８９％)。
LCMS (m/z): 195.0 (MH+);
LC Rt = 1.28分。
【０２３３】
＜方法９＞
実施例１１５
３−アミノ−Ｎ−(４−(ピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)ピラジン−２−カルボキサミドの合成
【化１３１】
2010520228.tif 000133
ＮＭＰ中の濃度０.２Ｍの１当量の４−(ピペリジン−１−イル)ピリジン−３−アミン、およびそれぞれ２当量の３−アミノピラジン−２−カルボン酸、ＨＯＡＴおよびＥＤＣの溶液を４８時間撹拌した。この後、該混合物を直接ＨＰＬＣによって精製した。凍結乾燥後、３−アミノ−Ｎ−(４−(ピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)ピラジン−２−カルボキサミドのＴＦＡ塩が得られた(６１％)。あるいは、該ＨＰＬＣフラクションをＥｔＯＡｃおよび固体のＮａ２ＣＯ３に加え、分離し、ＮａＣｌ(飽和)で洗浄した。ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、揮発成分を真空で除去した後、遊離塩基が得られた。ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏに溶解した後、１当量の１Ｎ  ＨＣｌを加え、凍結乾燥し、３−アミノ−Ｎ−(４−(ピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)ピラジン−２−カルボキサミドの塩酸塩が得られた(４０％)。
LCMS (m/z): 298.8 (MH+);
LC Rt = 1.88分。
1H NMR (HCl塩) (DMSOd-6): δ 10.45(s, 1H), 8.55(d, J=0.9, 1H), 8.32(d, J=2.1, 1H), 8.27(dd, J=5.7, 1H), 7.93(d, J=1.8, 1H), 7.57(s, 1H), 7.32(d, J=6.9, 1H), 3.76(s, 4H), 1.59(s, 6H).
【０２３４】
実施例１１６
３−アミノ−６−ブロモ−Ｎ−(４−(ピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)ピコリンアミドの合成
【化１３２】
2010520228.tif 000134
４−(ピペリジン−１−イル)ピリジン−３−アミンを用いて、実施例１１５の方法(方法９)を行い、３−アミノ−６−ブロモ−Ｎ−(４−(ピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)ピコリンアミドを得た(３２％)。
LCMS (m/z): 376.1 (MH+);
LC Rt = 2.77分。
【０２３５】
実施例１１７
３−アミノ−６−ブロモ−Ｎ−(４−ｏ−トリルピリジン−３−イル)ピコリンアミドの合成
【化１３３】
2010520228.tif 000135
４−ｏ−トリルピリジン−３−アミンを用いて、実施例１１５の方法(方法９)を行い、３−アミノ−６−ブロモ−Ｎ−(４−ｏ−トリルピリジン−３−イル)ピコリンアミドを得た(７４％)。
LCMS (m/z): 383.0 (MH+);
LC Rt = 2.99分。
【０２３６】
下記の化合物は、方法９を用いて製造された。
【表２】
2010520228.tif 000136
【０２３７】
【表３】
2010520228.tif 000137
【０２３８】
【表４】
2010520228.tif 000138
【０２３９】
【表５】
2010520228.tif 000139
【０２４０】
【表６】
2010520228.tif 000140
【０２４１】
【表７】
2010520228.tif 000141
【０２４２】
【表８】
2010520228.tif 000142
【０２４３】
【表９】
2010520228.tif 000143
【０２４４】
【表１０】
2010520228.tif 000144
【０２４５】
実施例１７０
３−アミノ−Ｎ−(５−カルバモイル−２−(ピペリジン−１−イル)フェニル)ピラジン−２−カルボキサミド
【化１３４】
2010520228.tif 000145
ＮＭＰ中の濃度０.１８２Ｍの３−アミノ−４−(ピペリジン−１−イル)ベンズアミド(１.０当量)、ＨＯＡＴ(１.３当量)およびＥＤＣ(１.３当量)の溶液を１５時間撹拌し、次いで直接逆相ＨＰＬＣによって精製し、凍結乾燥し、３−アミノ−Ｎ−(５−カルバモイル−２−(ピペリジン−１−イル)フェニル)ピラジン−２−カルボキサミドのＴＦＡ塩を黄褐色の粉末として得た(８２％)。
LCMS (m/z): 341.1 (MH+);
LC Rt = 3.10分。
【０２４６】
実施例１７１
３−アミノ−Ｎ−(５−シアノ−２−(ピペリジン−１−イル)フェニル)ピラジン−２−カルボキサミドの合成
【化１３５】
2010520228.tif 000146
ジクロロメタン中の３−アミノ−Ｎ−(５−カルバモイル−２−(ピペリジン−１−イル)フェニル)ピラジン−２−カルボキサミド(１当量)の不透明な黄色の懸濁液(０.０２４７Ｍ)を、氷浴中で冷却した。ジクロロメタン中無水トリフルオロ酢酸(４.４当量)の溶液(０.０４０５Ｍ)を、溶液の内部温度を＜２.５℃に保ちながら滴下した。５分後、該反応物を６mlの水でクエンチし、該溶液を室温まで昇温し、次いでジクロロメタンで抽出した。有機物をＮａ２ＣＯ３(飽和)で、次いで塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。粗製の残渣を逆相ＨＰＬＣによって精製し、凍結乾燥し、３−アミノ−Ｎ−(５−シアノ−２−(ピペリジン−１−イル)フェニル)ピラジン−２−カルボキサミドのＴＦＡ塩を黄色の綿状固体として得た(２４％)。
LCMS (m/z): 323.1 (MH+);
LC Rt = 4.62分。
【０２４７】
＜方法１０＞
実施例１７２
３−アミノ−Ｎ−(４−(３−アミノピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)ピラジン−２−カルボキサミドの合成
【化１３６】
2010520228.tif 000147
方法９に従って、３−アミノピラジン−２−カルボン酸を、１−(３−アミノピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルとカップリングさせ、ＨＰＬＣ生成物フラクションを凍結乾燥した後、１−(３−(３−アミノピラジン−２−カルボキサミド)ピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルをＴＦＡ塩として得た。あるいは、遊離塩基を方法８に記載された通りに得た(収率８３％)。
LCMS (m/z): 414.2 (MH+);
LC Rt = 2.18分。
【０２４８】
２５％  ＴＦＡ／ＤＣＭ中の１−(３−(３−アミノピラジン−２−カルボキサミド)ピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルのＴＦＡ塩または遊離塩基の何れかの不均一な溶液を、２時間放置した。揮発成分を真空で除去した後、残渣をＨＰＬＣによって精製した。直接凍結乾燥し、３−アミノ−Ｎ−(４−(３−アミノピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)ピラジン−２−カルボキサミドをＴＦＡ塩として単離した。あるいは、遊離塩基およびＨＣｌ塩を方法８に記載された通りに得た。
LCMS (m/z): 314.1 (MH+);
LC Rt = 1.02分。
【０２４９】
Ｂｏｃ保護基を除去し、ＨＣｌ塩を単離する別の方法は、以下の通りであった：４Ｍ  ＨＣｌ／ジオキサン中の濃度０.０１Ｍの１−(３−(３−アミノピラジン−２−カルボキサミド)ピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの不均一な溶液を、２４時間撹拌した。その時点で、揮発成分を真空で除去した。ジエチルエーテルで磨砕して濯いだ後、得られた固体をＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏに溶解し、凍結乾燥し、３−アミノ−Ｎ−(４−(３−アミノピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)ピラジン−２−カルボキサミドを塩酸塩として得た。
【０２５０】
下記の化合物は、方法１０を用いて製造された。
【表１１】
2010520228.tif 000148
【０２５１】
【表１２】
2010520228.tif 000149
【０２５２】
【表１３】
2010520228.tif 000150
【０２５３】
【表１４】
2010520228.tif 000151
【０２５４】
【表１５】
2010520228.tif 000152
【０２５５】
【表１６】
2010520228.tif 000153
【０２５６】
【表１７】
2010520228.tif 000154
【０２５７】
【表１８】
2010520228.tif 000155
【０２５８】
【表１９】
2010520228.tif 000156
【０２５９】
【表２０】
2010520228.tif 000157
【０２６０】
【表２１】
2010520228.tif 000158
【０２６１】
【表２２】
2010520228.tif 000159
【０２６２】
【表２３】
2010520228.tif 000160
【０２６３】
【表２４】
2010520228.tif 000161
【０２６４】
【表２５】
2010520228.tif 000162
【０２６５】
【表２６】
2010520228.tif 000163
【０２６６】
【表２７】
2010520228.tif 000164
【０２６７】
【表２８】
2010520228.tif 000165
【０２６８】
【表２９】
2010520228.tif 000166
【０２６９】
【表３０】
2010520228.tif 000167
【０２７０】
【表３１】
2010520228.tif 000168
【０２７１】
【表３２】
2010520228.tif 000169
【０２７２】
実施例３０４
Ｎ−(４−(３−アセトアミドピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)−３−アミノ−６−ブロモピラジン−２−カルボキサミドの合成
【化１３７】
2010520228.tif 000170
ＣＨ２Ｃｌ２中の濃度０.５Ｍの３−アミノ−Ｎ−(４−(３−アミノピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)−６−ブロモピラジン−２−カルボキサミドの溶液に、室温で、トリエチルアミン(３当量)を加え、続いて無水酢酸(１.２当量)を加えた。該反応物を室温で３０分間撹拌し、濃縮し、逆相ＨＰＬＣによって精製し、凍結乾燥し、Ｎ−(４−(３−アセトアミドピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)−３−アミノ−６−ブロモピラジン−２−カルボキサミドをＴＦＡ塩として得た。
LCMS (m/z): 434.1 (MH+).
【０２７３】
＜方法１１＞
実施例３０５
１−(３−(３−アミノ−６−ブロモピラジン−２−カルボキサミド)ピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化１３８】
2010520228.tif 000171
ＤＭＦ中の濃度０.５Ｍのそれぞれ１当量の１−(３−アミノピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル、３−アミノ−６−ブロモピラジン−２−カルボン酸、ＨＯＡＴおよびＥＤＣを含む溶液を６０時間撹拌した。該溶液をＥｔＯＡｃで希釈し、Ｈ２Ｏ(４×)で、そしてＮａＣｌ(飽和)で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、揮発成分を真空で除去した。シリカゲルのクロマトグラフィーによって精製した後(溶出液：ＥｔＯＡｃ)、１−(３−(３−アミノ−６−ブロモピラジン−２−カルボキサミド)ピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(７８％)。
LCMS (m/z): 492.2 (MH+);
LC Rt = 2.68分。
【０２７４】
実施例３０６
１−(２−(３−アミノ−６−ブロモピラジン−２−カルボキサミド)−４−ベンゾイルフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化１３９】
2010520228.tif 000172
方法１１に従って、１−(２−アミノ−４−ベンゾイルフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを、３−アミノ−６−ブロモピラジン−２−カルボン酸と、ＴＥＡ(１.５当量)で、ＡＣＮ中、５５℃で４８時間、カップリングさせた。濃縮し、冷ＡＣＮ中で磨砕し、濾過し、真空で乾燥し、１−(２−(３−アミノ−６−ブロモピラジン−２−カルボキサミド)−４−ベンゾイルフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(４６％)。
LCMS (m/z): 595.2 (MH+);
LC Rt = 3.94分。
【０２７５】
実施例３０７
１−(２−(３−アミノ−６−ブロモピラジン−２−カルボキサミド)−４−ベンゾイルフェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化１４０】
2010520228.tif 000173
方法１１に従って、１−(２−アミノ−４−ベンゾイルフェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを、３−アミノ−６−ブロモピラジン−２−カルボン酸と、ＴＥＡ(１.５当量)で、ＡＣＮ中、５５℃で４８時間、カップリングさせた。濃縮し、冷ＡＣＮ中で磨砕し、濾過し、真空で乾燥し、１−(２−(３−アミノ−６−ブロモピラジン−２−カルボキサミド)−４−ベンゾイルフェニル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(３０％)。
LCMS (m/z): 595.1 (MH+);
LC Rt = 3.87分。
【０２７６】
実施例３０８
４−(２−(３−アミノ−６−ブロモピラジン−２−カルボキサミド)−４−ベンゾイルフェニル)ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化１４１】
2010520228.tif 000174
方法１１に従って、４−(２−アミノ−４−ベンゾイルフェニル)ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを、３−アミノ−６−ブロモピラジン−２−カルボン酸と、ＴＥＡ(１.５当量)で、ＡＣＮ中、５５℃で４８時間、カップリングさせた。濃縮し、冷ＡＣＮ中で磨砕し、濾過し、真空で乾燥し、４−(２−(３−アミノ−６−ブロモピラジン−２−カルボキサミド)−４−ベンゾイルフェニル)ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(５０％)。
LCMS (m/z): 581.1 (MH+);
LC Rt = 4.00分。
【０２７７】
実施例３０９
１−(２−(３−アミノ−６−ブロモピラジン−２−カルボキサミド)−４−メトキシフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化１４２】
2010520228.tif 000175
方法１１に従って、１−(２−アミノ−４−メトキシフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを、３−アミノ−６−ブロモピラジン−２−カルボン酸と、ＴＥＡ(３当量)で、ＡＣＮ中、５５℃で４８時間、カップリングさせた。濃縮し、冷ＡＣＮ中で磨砕し、濾過し、真空で乾燥し、１−(２−(３−アミノ−６−ブロモピラジン−２−カルボキサミド)−４−メトキシフェニル)ピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(７％)。
LCMS (m/z): 521.1 (MH+);
LC Rt = 3.63分。
【０２７８】
実施例３１０
３,５−ジアミノ−６−クロロピラジン−２−カルボン酸の合成
【化１４３】
2010520228.tif 000176
２：１  ＴＨＦ／ＭｅＯＨ(９０ml)中の、３,５−ジアミノ−６−クロロピラジン−２−カルバミン酸メチル(５ｇ, ０.０２５mol)の溶液に、１Ｍ  ＬｉＯＨ(６２ml, ０.０６２mol)を加えた。該反応物を室温で７２時間撹拌した後、１Ｎ  ＨＣｌ(６２ml, ０.０６２mol)を加えた。該反応物を濾過し、水(３×１０ml)で洗浄し、３,５−ジアミノ−６−クロロピラジン−２−カルボン酸を白色の固体として４.３ｇ得た(収率９３％)。
LCMS (m/z): 189.1 (MH+);
LC Rt = 1.05分。
【０２７９】
実施例３１１
３,５−ジアミノ−６−クロロ−Ｎ−(４−(ピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)ピラジン−２−カルボキサミドの合成
【化１４４】
2010520228.tif 000177
方法１１に従って、４−(ピペリジン−１−イル)ピリジン−３−アミンを、３,５−ジアミノ−６−クロロピラジン−２−カルボン酸とカップリングさせ、３,５−ジアミノ−６−クロロ−Ｎ−(４−(ピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)ピラジン−２−カルボキサミドを得た(７６％)。
LCMS (m/z):  347.8 (MH+);
LC Rt = 2.17分。
【０２８０】
実施例３１２
３,５−ジアミノ−Ｎ−(４−(ピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)ピラジン−２−カルボキサミドの合成
【化１４５】
2010520228.tif 000178
方法２に従って、ジエチルアミン(４.０当量)も含め、また、該反応物に２日後および４日後に再度Ｐｄ／ＣおよびＨ２を入れ、３,５−ジアミノ−６−クロロ−Ｎ−(４−(ピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)ピラジン−２−カルボキサミドを７日間還元し、３,５−ジアミノ−Ｎ−(４−(ピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)ピラジン−２−カルボキサミドをＴＦＡ塩として得た。
LCMS (m/z):  314.1 (MH+);
LC Rt = 1.67分。
【０２８１】
実施例３１３
１−(３−(３,５−ジアミノ−６−クロロピラジン−２−カルボキサミド)ピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化１４６】
2010520228.tif 000179
方法１１に従って、１−(３−アミノピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを、３,５−ジアミノ−６−クロロピラジン−２−カルボン酸とカップリングさせ、(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−(３,５−ジアミノ−６−クロロピラジン−２−カルボキサミド)ピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメートを得た(５７％)。
LCMS (m/z): 463.1 (MH+);
LC Rt = 2.36分。
【０２８２】
実施例３１４
３−アミノ−６−ブロモピコリン酸の合成
【化１４７】
2010520228.tif 000180
２：１  ＴＨＦ／ＭｅＯＨ(５１ml)中の３−アミノ−６−ブロモピコリン酸メチル(２.３１ｇ, １０mmol)の溶液に、１.０Ｍ  ＬｉＯＨ(１７ml, １７mmol)を加えた。１６時間撹拌した後、１Ｎ  ＨＣｌ(１７ml, １７mmol)を加え、ＴＨＦ／ＭｅＯＨを真空で除去した。得られた固体を濾過し、冷Ｈ２Ｏ(４×２０ml)で濯ぎ、吸引し(pumped)、３−アミノ−６−ブロモピコリン酸を得た(９７％)。
LCMS (m/z): 216.9 (MH+);
LC Rt = 1.93分。
【０２８３】
実施例３１５
(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−(３−アミノ−６−ブロモピコリンアミド)ピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメートの合成
【化１４８】
2010520228.tif 000181
方法１１に従って、(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−アミノピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメートを、３−アミノ−６−ブロモピコリン酸とカップリングさせ、ＳｉＯ２のクロマトグラフィーによって精製し(溶出液：ＥｔＯＡｃ)、(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−(３−アミノ−６−ブロモピコリンアミド)ピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメートを得た(４５％)。
LCMS (m/z): 491.1 (MH+);
LC Rt = 2.89分。
【０２８４】
＜方法１２＞
実施例３１６
３−アミノ−Ｎ−(４−(３−アミノピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)−６−(２−クロロフェニル)ピラジン−２−カルボキサミドの合成
【化１４９】
2010520228.tif 000182
ジメチルアセトアミド中の１−(３−(３−アミノ−６−ブロモピラジン−２−カルボキサミド)ピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル(１.０当量)、オルト−クロロフェニルボロン酸(３.０当量)、Ｐｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＣＨ２Ｃｌ２およびトリエチルアミン(９.０当量)の溶液(濃度＝０.１Ｍ)を、１３０℃で、９００秒間のマイクロ波照射によって加熱した。冷却後、Ｎ−Ｂｏｃ−Suzuki生成物を直接逆相ＨＰＬＣによって精製した。生成物のフラクションを凍結乾燥し、得られた固体を、２５％  ＴＦＡ／ＤＣＭ(得られた濃度０.０５Ｍ)で処理した。２時間放置した後、揮発成分を真空で除去し、残渣を逆相ＨＰＬＣによって精製した。凍結乾燥後、３−アミノ−Ｎ−(４−(３−アミノピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)−６−(２−クロロフェニル)ピラジン−２−カルボキサミドをＴＦＡ塩として得た(５６％)。
LCMS (m/z): 424.1 (MH+);
LC Rt = 1.94分。
【０２８５】
あるいは、方法９に記載された通りに、遊離塩基および塩酸塩が得られた。
【０２８６】
下記の化合物を、方法１２を用いて製造した。幾つかの例において、ＮＭＰまたはＤＭＦをジメチルアセトアミドの代わりに用いた。
【表３３】
2010520228.tif 000183
【０２８７】
【表３４】
2010520228.tif 000184
【０２８８】
【表３５】
2010520228.tif 000185
【０２８９】
【表３６】
2010520228.tif 000186
【０２９０】
【表３７】
2010520228.tif 000187
【０２９１】
【表３８】
2010520228.tif 000188
【０２９２】
【表３９】
2010520228.tif 000189
【０２９３】
【表４０】
2010520228.tif 000190
【０２９４】
【表４１】
2010520228.tif 000191
【０２９５】
【表４２】
2010520228.tif 000192
【０２９６】
【表４３】
2010520228.tif 000193
【０２９７】
【表４４】
2010520228.tif 000194
【０２９８】
【表４５】
2010520228.tif 000195
【０２９９】
【表４６】
2010520228.tif 000196
【０３００】
【表４７】
2010520228.tif 000197
【０３０１】
＜方法１３＞
実施例４０６
(Ｓ)−３−アミノ−Ｎ−(４−(３−アミノピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)−６−(２−フルオロ−４−メチルフェニル)ピコリンアミドの合成
【化１５０】
2010520228.tif 000198
３：１  ＤＭＥ／２Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３中の、(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−(３−アミノ−６−ブロモピコリンアミド)ピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメート(１.０当量)、２−フルオロ−４−メチルフェニルボロン酸(３.０当量)、Ｐｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＣＨ２Ｃｌ２(０.１５当量)の溶液(濃度＝０.１Ｍ)を、１２０℃で、１２００秒間のマイクロ波照射によって加熱した。冷却した後、有機層を分離し、濃縮し、Ｎ−Ｂｏｃ−Suzuki生成物を、直接逆相ＨＰＬＣによって精製した。生成物のフラクションを凍結乾燥し、得られた固体を２５％  ＴＦＡ／ＤＣＭ(得られた濃度０.０５Ｍ)で処理した。２時間放置した後、揮発成分を真空で除去し、残渣を逆相ＨＰＬＣによって精製した。凍結乾燥後、(Ｓ)−３−アミノ−Ｎ−(４−(３−アミノピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)−６−(２−フルオロ−４−メチルフェニル)ピコリンアミドがＴＦＡ塩として得られた(４４％)。
LCMS (m/z): 2.23 (MH+);
LC Rt = 421.2分。
【０３０２】
あるいは、(Ｓ)−３−アミノ−Ｎ−(４−(３−アミノピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)−６−(２−フルオロ−４−メチルフェニル)ピコリンアミドの遊離塩基および塩酸塩は、方法９に記載された通りに得られる。
【０３０３】
下記の化合物は、方法１３を用いて製造された。
【表４８】
2010520228.tif 000199
【０３０４】
【表４９】
2010520228.tif 000200
【０３０５】
【表５０】
2010520228.tif 000201
【０３０６】
【表５１】
2010520228.tif 000202
【０３０７】
【表５２】
2010520228.tif 000203
【０３０８】
【表５３】
2010520228.tif 000204
【０３０９】
【表５４】
2010520228.tif 000205
【０３１０】
【表５５】
2010520228.tif 000206
【０３１１】
【表５６】
2010520228.tif 000207
【０３１２】
【表５７】
2010520228.tif 000208
【０３１３】
【表５８】
2010520228.tif 000209
【０３１４】
【表５９】
2010520228.tif 000210
【０３１５】
【表６０】
2010520228.tif 000211
【０３１６】
【表６１】
2010520228.tif 000212
【０３１７】
【表６２】
2010520228.tif 000213
【０３１８】
【表６３】
2010520228.tif 000214
【０３１９】
【表６４】
2010520228.tif 000215
【０３２０】
【表６５】
2010520228.tif 000216
【０３２１】
【表６６】
2010520228.tif 000217
【０３２２】
【表６７】
2010520228.tif 000218
【０３２３】
【表６８】
2010520228.tif 000219
【０３２４】
【表６９】
2010520228.tif 000220
【０３２５】
【表７０】
2010520228.tif 000221
【０３２６】
【表７１】
2010520228.tif 000222
【０３２７】
【表７２】
2010520228.tif 000223
【０３２８】
【表７３】
2010520228.tif 000224
【０３２９】
＜方法１４＞
実施例５８３
３−アミノ−６−(２−フルオロフェニル)−Ｎ−(４−(ピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)ピコリンアミドの合成
【化１５１】
2010520228.tif 000225
３：１  ＤＭＥ／２Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３(濃度＝０.１Ｍ)中の、３−アミノ−６−ブロモ−Ｎ−(４−(ピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)ピコリンアミド(１.０当量)、２−フルオロフェニルボロン酸(３.０当量)、Ｐｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＣＨ２Ｃｌ２(０.１５当量)の溶液を、１２０℃で、マイクロ波照射で１２００秒間加熱した。有機層を分離し、濃縮し、直接逆相ＨＰＬＣによって精製した。凍結乾燥後、(Ｓ)−３−アミノ−Ｎ−(４−(３−アミノピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)−６−(２−フルオロ−４−メチルフェニル)ピコリンアミドをＴＦＡ塩として得た(４４％)。
LCMS (m/z): 421.2 (MH+);
LC Rt = 2.23分。
【０３３０】
あるいは、３−アミノ−６−(２−フルオロフェニル)−Ｎ−(４−(ピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)ピコリンアミドの遊離塩基およびＨＣｌ塩は、方法８に記載された通りに得られる。
【０３３１】
下記の化合物は方法１４を用いて製造された。幾つかの場合において、方法１２の無水Suzuki条件(ＤＭＦを溶媒として、１０当量のトリエチルアミンで)を用いた。
【表７４】
2010520228.tif 000226
【表７５】
2010520228.tif 000227
【０３３２】
＜方法１５＞
実施例５９７
３−アミノ−６−ブロモ−Ｎ−(４−(３−(１−メチルピペリジン−４−イルアミノ)ピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)ピラジン−２−カルボキサミドの合成
【化１５２】
2010520228.tif 000228
ＣＨ２Ｃｌ２中の３−アミノ−Ｎ−(４−(３−アミノピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)−６−ブロモピラジン−２−カルボキサミドの溶液に、室温で、１−メチルピペリジン−４−オン(１.５当量)を加え、続いてトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム(５.０当量)を加えた。該反応物を室温で１２時間撹拌し、濃縮し、逆相ＨＰＬＣによって精製し、凍結乾燥し、３−アミノ−６−ブロモ−Ｎ−(４−(３−(１−メチルピペリジン−４−イルアミノ)ピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)ピラジン−２−カルボキサミドを得た(６６％)。
LCMS (m/z): 489.2 (MH+).
【０３３３】
方法１５に従って、下記の化合物が製造された。
【表７６】
2010520228.tif 000229
【０３３４】
ｔｒａｎｓ−(＋／−)−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−４−ヒドロキシピペリジン−１−カルボキシレートの合成
【化１５３】
2010520228.tif 000230
【０３３５】
ｔｒａｎｓ−(＋／−)−ベンジル ４−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−３−ヒドロキシピペリジン−１−カルボキシレートの合成
【化１５４】
2010520228.tif 000231
飽和水酸化アンモニウム水溶液およびエタノール(１：１, ０.０５Ｍ溶液)中の、(＋／−)−ベンジル ７−オキサ−３−アザビシクロ[４.１.０]ヘプタン−３−カルボキシレート(１.０当量)の溶液を、密封された鋼鉄製容器中で、７０℃で５時間加熱する。全ての揮発性物質をＮ２気流によって除去した後、酢酸エチルおよび水を後処理のために加えた。粗製の回転異性体混合物である、(＋／−)−ベンジル ３−アミノ−４−ヒドロキシピペリジン−１−カルボキシレート、および、(＋／−)−ベンジル ４−アミノ−３−ヒドロキシピペリジン−１−カルボキシレートを、ジクロロメタン中Ｂｏｃ２Ｏ(１.０当量)およびトリエチルアミン(１.０当量)(０.１Ｍ溶液)と反応させた。室温で２時間撹拌した後、該反応混合物をジクロロメタンで抽出した。極性の(＋／−)−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−４−ヒドロキシピペリジン−１−カルボキシレート、および、非極性の(＋／−)−ベンジル ４−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−３−ヒドロキシピペリジン−１−カルボキシレートを、フラッシュ・カラム・クロマトグラフィーによって得た(ヘキサン中２０％から４０％  ＥｔＯＡｃ, それぞれ２８％および５１％)。
LCMS (m/z): 351.1 (MH+), Rt = 0.81分,
LCMS (m/z): 351.1 (MH+), Rt = 0.83分。
【０３３６】
エナンチオマーとして純粋な(３Ｓ,４Ｓ)−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−４−ヒドロキシピペリジン−１−カルボキシレート、および、(３Ｒ,４Ｒ)−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−４−ヒドロキシピペリジン−１−カルボキシレートを、キラルＨＰＬＣによって分離した(分析において、それぞれＲｔ＝６.８分および９.１分；ｎ−ヘプタン：エタノール＝７０：３０(v:v), Chiralpak AD-H prep 250×4.6 mm, １ml／分。分取分離のために、ｎ−ヘプタン：エタノール＝８０：２０(v:v), Chiralpak AS  50×500mm, ９０ml／分)。
【０３３７】
＜方法１６＞
(＋／−)−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−１−カルボキシレートの合成
【化１５５】
2010520228.tif 000232
ジクロロメタン中の、(＋／−)−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−４−ヒドロキシピペリジン−１−カルボキシレート(１.０当量)の溶液(０.１Ｍ溶液)に、イミダゾール(１.１当量)、ＤＭＡＰ(０.１当量)およびＴＢＤＭＳＣｌ(１.１当量)を連続して加え、該反応混合物を室温で２０時間撹拌した。ジクロロメタンで後処理した後、粗製の(＋／−)−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−１−カルボキシレートを、シリカのカラムクロマトグラフィーによって精製した(ヘキサン中１０％から２０％  ＥｔＯＡｃ, ７６％)。
LCMS (m/z): 365.2。
【０３３８】
(３Ｒ,４Ｒ)−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−１−カルボキシレートの合成
【化１５６】
2010520228.tif 000233
方法１６に従って、(３Ｒ,４Ｒ)−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−４−ヒドロキシピペリジン−１−カルボキシレートを、ＴＢＤＭＳＣｌ、イミダゾールおよびＤＭＡＰと反応させ、(３Ｒ,４Ｒ)−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−１−カルボキシレートを得た。
LCMS (m/z): 365.2 (MH+);
LC Rt = 6.05分。
【０３３９】
(３Ｓ,４Ｓ)−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−１−カルボキシレートの合成
【化１５７】
2010520228.tif 000234
方法１６に従って、(３Ｓ,４Ｓ)−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−４−ヒドロキシピペリジン−１−カルボキシレートを、ＴＢＤＭＳＣｌ、イミダゾールおよびＤＭＡＰと反応させ、(３Ｓ,４Ｓ)−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−１−カルボキシレートを得た。
LCMS (m/z): 365.2 (MH+);
LC Rt = 6.05分。
【０３４０】
(＋／−)−ベンジル ４−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−１−カルボキシレートの合成
【化１５８】
2010520228.tif 000235
方法１６に従って、(＋／−)−ベンジル ４−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−３−ヒドロキシピペリジン−１−カルボキシレートを、ＴＢＤＭＳＣｌ、イミダゾールおよびＤＭＡＰと反応させ、(＋／−)−ベンジル ４−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−１−カルボキシレートを得た(８１％)。
LCMS (m/z): 365.2 (MH+);
LC Rt = 6.05分。
【０３４１】
(３Ｒ,４Ｒ)−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−４−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート、および、(３Ｓ,４Ｓ)−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−４−フルオロピペリジン−１−カルボキシレートの合成
【化１５９】
2010520228.tif 000236
ジクロロメタン中の(＋／−)−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−４−ヒドロキシピペリジン−１−カルボキシレート(１.０当量)の溶液(０.３Ｍ溶液)に、ＤＡＳＴを−７８℃で加えた。該反応混合物をゆっくりと室温まで１５時間温めた。飽和重炭酸ナトリウム水溶液でクエンチした後、後処理のために酢酸エチルおよび水を加えた。(＋／−)−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−４−フルオロピペリジン−１−カルボキシレートを、シリカのカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中３０％  ＥｔＯＡｃ, ４０％)によって得た。LCMS (m/z): 253.1; LC Rt = 4.08分。エナンチオマーとして純粋な(３Ｒ,４Ｒ)−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−４−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート、および、(３Ｓ,４Ｓ)−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−４−フルオロピペリジン−１−カルボキシレートを、キラルＨＰＬＣによって分離した(分析において、それぞれＲｔ＝９.４分および１２.６分；ｎ−ヘプタン：イソプロパノール＝９０：１０(v:v), Chiralpak AS 250×4.6mm, １ml/分。分取分離において、ｎ−ヘプタン：イソプロパノール＝９０：１０(v:v), Chiralpak AS 50×500mm, ９０ml/分)。
【０３４２】
ｔｒａｎｓ−(＋／−)−ベンジル ４−フルオロ−３−ヒドロキシピペリジン−１−カルボキシレートの合成
【化１６０】
2010520228.tif 000237
密封したガラスフラスコ中で、(＋／−)−ベンジル ７−オキサ−３−アザビシクロ[４.１.０]ヘプタン−３−カルボキシレート(１.０当量)、および、Ｅｔ３Ｎ・３ＨＦ(１当量)の溶液を、１００℃で１５時間加熱した。該反応混合物を酢酸エチルで抽出した。これを、水で、そして塩水で洗浄した。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。揮発性物質を除去した後、(＋／−)−ベンジル ４−フルオロ−３−ヒドロキシピペリジン−１−カルボキシレートを、シリカのカラムクロマトグラフィーによって得た(ヘキサン中２０％から４０％  ＥｔＯＡｃ, ５３％)。
LCMS (m/z): 254.1 (MH+);
LC Rt = 2.86分。
【０３４３】
ｔｒａｎｓ−(＋／−)−ベンジル ３−(１,３−ジオキソイソインドリン−２−イル)−４−フルオロピペリジン−１−カルボキシレートの合成
【化１６１】
2010520228.tif 000238
トルエン中のトリフェニルホスフィン(３.０当量)の溶液(０.２５Ｍ溶液)に、ＤＥＡＤ(３.０当量)を室温で加えた。これを１５分間撹拌した。次いで、(＋／−)−ベンジル ４−フルオロ−３−ヒドロキシピペリジン−１−カルボキシレート(１.０当量)を、該反応混合物に加えた。１０分間撹拌した後、フタルイミド(３.０当量)を加え、該反応混合物を１５時間撹拌した。該反応混合物を酢酸エチルで抽出した。これを、水で、そして塩水で洗浄した。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。揮発性物質を除去した後、(＋／−)−ベンジル ３−(１,３−ジオキソイソインドリン−２−イル)−４−フルオロピペリジン−１−カルボキシレートを、シリカのカラムクロマトグラフィーによって得た(ヘキサン中１０％から２０％  ＥｔＯＡｃ, ２０％)。
LCMS (m/z): 383.0 (MH+),
Rt = 1.0分。
【０３４４】
(＋／−)−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−４−オキソピペリジン−１−カルボキシレートの合成
【化１６２】
2010520228.tif 000239
ジクロロメタン中の、(＋／−)−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−４−ヒドロキシピペリジン−１−カルボキシレートの溶液(０.１Ｍ溶液)に、デス・マーチン・ペルヨージナン(１.５当量)を加えた。該反応混合物を室温で１６時間撹拌した。次いで、飽和ＮａＨＣＯ３および０.１Ｎ  Ｎａ２Ｓ２Ｏ３水溶液を、該反応混合物に加えた。これを３０分間撹拌し、酢酸エチルで後処理した。粗製の３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−４−オキソピペリジン−１−カルボン酸ベンジルを、フラッシュクロマトグラフィーによって精製した(ヘキサン中３０％  ＥｔＯＡｃ, ７０％)。
LCMS (m/z): 249.2 (MH+);
LC Rt = 3.98分。
1H NMR (CDCl3): 1.41 (1H, s), 2.1-2.59 (1H, m), 2.73 (1H, m), 3.09 (1H, m), 4.30 (1H, m), 4.52 (1H, m), 4.90 (1H, m), 5.19 (2H, m), 5.45 (1H, m), 7.39 (5H, m).
【０３４５】
(＋／−)−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−４,４−ジフルオロピペリジン−１−カルボキシレートの合成
【化１６３】
2010520228.tif 000240
ジクロロメタン中の、(＋／−)−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−４−オキソピペリジン−１−カルボキシレートの溶液(０.３Ｍ溶液)に、ＤＡＳＴ(３.０当量)を加えた。該反応混合物を室温で２０時間撹拌した。発泡しなくなるまで飽和ＮａＨＣＯ３水溶液でクエンチした後、該反応混合物をＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。粗製の(＋／−)−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−４,４−ジフルオロピペリジン−１−カルボキシレートを、フラッシュクロマトグラフィーによって精製した(ヘキサン中１０％から４０％  ＥｔＯＡｃ, ３５％)。
LCMS (m/z): 271.0 (MH+),
LC Rt = 4.2分。
1H NMR (CDCl3): 1.26 (9H, s), 1.90 (1H, m), 2.11 (1H, m), 2.98 (1H, t , J = 11.2 Hz), 3.20 (1H, t , J = 11.6), 4.00 (1H, m), 4.13 (1H, m), 4.76 (1H, m), 5.11(1H, m), 7.36 (1H, m). 
【０３４６】
＜方法１７＞
ｃｉｓ−(＋／−)−２−(４−フルオロピペリジン−３−イル)イソインドリン−１,３−ジオンの合成
【化１６４】
2010520228.tif 000241
エタノールおよび酢酸エチル(１：１)中の、(＋／−)−ベンジル ３−(１,３−ジオキソイソインドリン−２−イル)−４−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート(１.０当量)の溶液(０.２Ｍ溶液)に、Ｐｄ／Ｃ(２０ｗｔ％)を、Ｎ２雰囲気下で加えた。該反応混合物を、Ｈ２ガスでフラッシュし、Ｈ２ガス・バルーンを取り付け、室温で１６時間撹拌した。該反応混合物をセライト(登録商標)のパッドで濾過し、濾液を真空で乾燥した。粗製の(＋／−)−２−(４−フルオロピペリジン−３−イル)イソインドリン−１,３−ジオンを、さらに精製することなく次の段階に用いた(＞９９％)。
LCMS (m/z): 249.1 (MH+),
Rt = 0.49分。
【０３４７】
ｔｒａｎｓ−(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル ４−フルオロピペリジン−３−イルカルバメートの合成
【化１６５】
2010520228.tif 000242
(＋／−)−ｔｒａｎｓ−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−４−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート(１.０当量)を用いて、方法１７を行い、粗製の(＋／−)−ｔｒａｎｓ−ｔｅｒｔ−ブチル ４−フルオロピペリジン−３−イルカルバメートを得た(９３％)。
LCMS (m/z): 219.2 (MH+),
LC Rt = 0.45分。
【０３４８】
(３Ｒ,４Ｒ)−４−フルオロピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化１６６】
2010520228.tif 000243
(３Ｒ,４Ｒ)−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−４−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート(１.０当量)を用いて、方法１７を行い、粗製の(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル ４−フルオロピペリジン−３−イルカルバメート(９３％)を得た。
LCMS (m/z): 219.2 (MH+),
LC Rt = 0.45分。
【０３４９】
(３Ｓ,４Ｓ)−４−フルオロピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化１６７】
2010520228.tif 000244
(３Ｓ,４Ｓ)−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−４−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート(１.０当量)を用いて、方法１７を行い、粗製の(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル ４−フルオロピペリジン−３−イルカルバメートを得た(９３％)。
LCMS (m/z): 219.2 (MH+),
LC Rt = 0.45分。
【０３５０】
ｔｒａｎｓ−(＋／−)−ブチル ４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−３−イルカルバメートの合成
【化１６８】
2010520228.tif 000245
(＋／−)−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−１−カルボキシレート(１.０当量)を用いて、方法１７を行い、粗製の(＋／−)−ブチル ４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−３−イルカルバメートを得た(＞９９％)。
LCMS (m/z): 331.3 (MH+).
【０３５１】
(３Ｒ,４Ｒ)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化１６９】
2010520228.tif 000246
(３Ｒ,４Ｒ)−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−１−カルボキシレート(１.０当量)を用いて、方法１７を行い、粗製の(３Ｒ,４Ｒ)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(＞９９％)。
LCMS (m/z): 331.3 (MH+).
【０３５２】
(３Ｒ,４Ｒ)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化１７０】
2010520228.tif 000247
(３Ｓ,４Ｓ)−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−１−カルボキシレート(１.０当量)を用いて、方法１７を行い、粗製の(３Ｓ,４Ｓ)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(＞９９％)。
LCMS (m/z): 331.3 (MH+).
【０３５３】
ｔｒａｎｓ−(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル  ３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−４−イルカルバメートの合成
【化１７１】
2010520228.tif 000248
(＋／−)−ベンジル ４−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−３−ヒドロキシピペリジン−１−カルボキシレート(１.０当量)を用いて、方法１７を行い、(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル ３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−４−イルカルバメートを得た(＞９９％)。
LCMS (m/z): 331.2 (MH+).
【０３５４】
(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル ４,４−ジフルオロピペリジン−３−イルカルバメートの合成
【化１７２】
2010520228.tif 000249
(＋／−)−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−４,４−ジフルオロピペリジン−１−カルボキシレート(１.０当量)を用いて、方法１７を行い、粗製の(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル ４,４−ジフルオロピペリジン−３−イルカルバメートを得た(＞９９％)。
LCMS (m/z): 237.0 (MH+).
【０３５５】
ｔｒａｎｓ−(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル ４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメートの合成
【化１７３】
2010520228.tif 000250
それぞれ１当量の４−クロロ−３−ニトロピリジン、ｔｒａｎｓ−(＋／−)−ブチル ４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−３−イルカルバメート、および、トリエチルアミンを用いて、ＤＭＦ中で、実施例１の方法１を行い、(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル ４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメートを得た(９８％)。
LCMS (m/z): 453.3 (MH+);
LC Rt = 4.01分。
【０３５６】
(３Ｒ,４Ｒ)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化１７４】
2010520228.tif 000251
それぞれ１当量の４−クロロ−３−ニトロピリジン、(３Ｒ,４Ｒ)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル、および、トリエチルアミンを用いて、ＤＭＦ中で、実施例１の方法１を行い、(３Ｒ,４Ｒ)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９８％)。
LCMS (m/z): 453.3 (MH+);
LC Rt = 4.01分。
【０３５７】
(３Ｓ,４Ｓ)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化１７５】
2010520228.tif 000252
それぞれ１当量の４−クロロ−３−ニトロピリジン、(３Ｓ,４Ｓ)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル、および、トリエチルアミンを用いて、ＤＭＦ中で、実施例１の方法１を行い、(３Ｓ,４Ｓ)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９８％)。
LCMS (m/z): 453.3 (MH+);
LC Rt = 4.01分。
【０３５８】
ｔｒａｎｓ−(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル ３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−４−イルカルバメートの合成
【化１７６】
2010520228.tif 000253
それぞれ１当量の４−クロロ−３−ニトロピリジン、(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル ３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−４−イルカルバメート、および、トリエチルアミンを用いて、エタノール中で、実施例１の方法１を行い、(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル ３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−４−イルカルバメートを得た(７５％)。
LCMS (m/z): 453.2 (MH+);
LC Rt = 3.46分。
【０３５９】
ｔｒａｎｓ−(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル ４−フルオロ−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメートの合成
【化１７７】
2010520228.tif 000254
それぞれ１当量の４−クロロ−３−ニトロピリジン、(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル ４−フルオロピペリジン−３−イルカルバメート、および、トリエチルアミンを用いて、エタノール中で、実施例１の方法１を行い、(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル ４−フルオロ−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメートを得た(９１％)。
LCMS (m/z): 341.0 (MH+);
LC Rt = 2.37分。
【０３６０】
(３Ｒ,４Ｒ)−４−フルオロ−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化１７８】
2010520228.tif 000255
それぞれ１当量の４−クロロ−３−ニトロピリジン、(３Ｒ,４Ｒ)−４−フルオロピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル、および、トリエチルアミンを用いて、エタノール中で、実施例１の方法１を行い、(３Ｒ,４Ｒ)−４−フルオロ−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９１％)。
LCMS (m/z): 341.0 (MH+);
LC Rt = 2.37分。
【０３６１】
(３Ｓ,４Ｓ)−４−フルオロ−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化１７９】
2010520228.tif 000256
それぞれ１当量の４−クロロ−３−ニトロピリジン、(３Ｓ,４Ｓ)−４−フルオロピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル、および、トリエチルアミンを用いて、エタノール中で、実施例１の方法１を行い、(３Ｓ,４Ｓ)−４−フルオロ−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(９１％)。
LCMS (m/z): 341.0 (MH+);
LC Rt = 2.37分。
【０３６２】
(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル ４,４−ジフルオロ−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメートの合成
【化１８０】
2010520228.tif 000257
それぞれ１当量の４−クロロ−３−ニトロピリジン、(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル ４,４−ジフルオロピペリジン−３−イルカルバメート、および、トリエチルアミンを用いて、エタノール中で、実施例１の方法１を行い、(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル ４,４−ジフルオロ−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメートを得た(９１％)。
LCMS (m/z): 359.1 (MH+).
【０３６３】
ｃｉｓ−(＋／−)−２−(４−フルオロ−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イル)イソインドリン−１,３−ジオンの合成
【化１８１】
2010520228.tif 000258
それぞれ１当量の４−クロロ−３−ニトロピリジン、(＋／−)−２−(４−フルオロピペリジン−３−イル)イソインドリン−１,３−ジオン、および、トリエチルアミンを用いて、ＤＭＦ中で、実施例１の方法１を行い、(＋／−)−２−(４−フルオロ−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イル)イソインドリン−１,３−ジオンを得た(４５％)。
LCMS (m/z): 371.1 (MH+);
LC Rt = 2.23分。
【０３６４】
ｔｒａｎｓ−(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−アミノピリジン−４−イル)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−３−イルカルバメートの合成
【化１８２】
2010520228.tif 000259
実施例４９の方法２に従って、エタノールおよび酢酸エチル(１：１)中の(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル ４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメート(０.１Ｍ溶液)を還元し、(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−アミノピリジン−４−イル)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−３−イルカルバメートを得た(＞９９％)。
LCMS (m/z): 423.2 (MH+);
LC Rt = 3.78分。
【０３６５】
(３Ｒ,４Ｒ)−１−(３−アミノピリジン−４−イル)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化１８３】
2010520228.tif 000260
実施例４９の方法２に従って、エタノールおよび酢酸エチル(１：１)中の(３Ｒ,４Ｒ)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル(０.１Ｍ溶液)を還元し、(３Ｒ,４Ｒ)−１−(３−アミノピリジン−４−イル)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(＞９９％)。
LCMS (m/z): 423.2 (MH+);
LC Rt = 3.78分。
【０３６６】
(３Ｓ,４Ｓ)−１−(３−アミノピリジン−４−イル)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化１８４】
2010520228.tif 000261
実施例４９の方法２に従って、エタノールおよび酢酸エチル(１：１)中の(３Ｒ,４Ｒ)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル(０.１Ｍ溶液)を還元し、(３Ｒ,４Ｒ)−１−(３−アミノピリジン−４−イル)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(＞９９％)。
LCMS (m/z): 423.2 (MH+);
LC Rt = 3.78分。
【０３６７】
ｔｒａｎｓ−(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−アミノピリジン−４−イル)−３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−４−イルカルバメートの合成
【化１８５】
2010520228.tif 000262
実施例４９の方法２に従って、エタノールおよび酢酸エチル(１：１)中の(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル ３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−４−イルカルバメート(０.１Ｍ溶液)を還元し、(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−アミノピリジン−４−イル)−３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−４−イルカルバメートを得た(＞９９％)。
LCMS (m/z): 423.3 (MH+);
LC Rt = 3.62分。
【０３６８】
ｔｒａｎｓ−(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−アミノピリジン−４−イル)−４−フルオロピペリジン−３−イルカルバメートの合成
【化１８６】
2010520228.tif 000263
実施例４９の方法２に従って、エタノールおよび酢酸エチル(１：１)中の(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル ４−フルオロ−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメート(０.１Ｍ溶液)を還元し、(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−アミノピリジン−４−イル)−４−フルオロピペリジン−３−イルカルバメートを得た(＞９９％)。
LCMS (m/z): 311.2 (MH+);
LC Rt = 2.14分。
【０３６９】
(３Ｒ,４Ｒ)−１−(３−アミノピリジン−４−イル)−４−フルオロピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化１８７】
2010520228.tif 000264
実施例４９の方法２に従って、エタノールおよび酢酸エチル(１：１)中の(３Ｒ,４Ｒ)−４−フルオロ−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル(０.１Ｍ溶液)を還元し、(３Ｒ,４Ｒ)−１−(３−アミノピリジン−４−イル)−４−フルオロピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(＞９９％)。
LCMS (m/z): 311.2 (MH+);
LC Rt = 2.14分。
【０３７０】
(３Ｓ,４Ｓ)−１−(３−アミノピリジン−４−イル)−４−フルオロピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化１８８】
2010520228.tif 000265
実施例４９の方法２に従って、エタノールおよび酢酸エチル(１：１)中の(３Ｓ,４Ｓ)−４−フルオロ−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル(０.１Ｍ溶液)を還元し、(３Ｒ,４Ｒ)−１−(３−アミノピリジン−４−イル)−４−フルオロピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(＞９９％)。
LCMS (m/z): 311.2 (MH+);
LC Rt = 2.14分。
【０３７１】
(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−アミノピリジン−４−イル)−４,４−ジフルオロピペリジン−３−イルカルバメートの合成
【化１８９】
2010520228.tif 000266
実施例４９の方法２に従って、エタノールおよび酢酸エチル(１：１)中の(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル ４,４−ジフルオロ−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメートおよびトリエチルアミン(０.１Ｍ溶液)を還元し、(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−アミノピリジン−４−イル)−４,４−ジフルオロピペリジン−３−イルカルバメートを得た(＞９９％)。
LCMS (m/z): 329.1 (MH+).
【０３７２】
ｃｉｓ−(＋／−)−２−(１−(３−アミノピリジン−４−イル)−４−フルオロピペリジン−３−イル)イソインドリン−１,３−ジオンの合成
【化１９０】
2010520228.tif 000267
実施例４９の方法２に従って、エタノールおよび酢酸エチル(１：１)中の(＋／−)−２−(４−フルオロ−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イル)イソインドリン−１,３−ジオン(０.１Ｍ溶液)を還元し、(＋／−)−２−(１−(３−アミノピリジン−４−イル)−４−フルオロピペリジン−３−イル)イソインドリン−１,３−ジオンを得た(８７％)。
LCMS (m/z): 341.1 (MH+);
LC Rt = 2.23分。
【０３７３】
＜方法１８＞
３−メチルピペリジン−３−カルボン酸の合成
【化１９１】
2010520228.tif 000268
ＴＦＡを、ＣＨ２Ｃｌ２中の１−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)−３−メチルピペリジン−３−カルボン酸(１当量)の溶液(０.５Ｍ)に加えた。室温で３時間撹拌した後、該反応混合物を真空で濃縮し、トルエンと共に１回共沸し、３−メチルピペリジン−３−カルボン酸(ＴＦＡ塩)を得た。粗生成物をさらに精製することなく次の段階に用いた。
【０３７４】
＜方法１９＞
３−メチル−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−カルボン酸の合成
【化１９２】
2010520228.tif 000269
４−クロロ−３−ニトロピリジン(１.１当量)を、ｉＰｒＯＨ中の３−メチルピペリジン−３−カルボン酸(１当量)およびＤＩＥＡ(３当量)の溶液(０.１Ｍ)に加えた。該反応混合物を６０℃の油浴中で３時間加熱し、次いで真空で濃縮した。粗製の残渣をＥｔＯＡｃで希釈し、１.０Ｎ  ＮａＯＨで洗浄した。合わせた水性洗浄液を１.０Ｎ  ＨＣｌでｐＨ＝４まで酸性にし、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出し、合わせた有機相を、無水ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空で濃縮し、３−メチル−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−カルボン酸を得た。
LC/MS (m/z): 266.2 (MH+).
【０３７５】
３−メチル−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化１９３】
2010520228.tif 000270
ジフェニルホスホリル アジド(１.２当量)を、３−メチル−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−カルボン酸(１当量)および無水ｔＢｕＯＨ(０.３Ｍ)の混合物に加え、すぐ後に、Ｅｔ３Ｎ(２当量)を加えた。反応フラスコに空冷還流コンデンサーと通気口(bubble vent)を付け、次いで８５℃の油浴中で３日間加熱した。粗製の混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、塩水で洗浄し、次いで無水ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。粗製の残渣をＣＨ２Ｃｌ２に溶解し、ＳｉＯ２カラムに負荷し、フラッシュクロマトグラフィーによって精製し(ヘキサン中１０−２０−４０％  ＥｔＯＡｃ)、３−メチル−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た。
LC/MS (m/z): 337.2 (MH+).
【０３７６】
１−(３−アミノピリジン−４−イル)−３−メチルピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化１９４】
2010520228.tif 000271
１０％  パラジウム／炭素(０.１当量)を、Ｎ２をフラッシュしたＭｅＯＨ中の３−メチル−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル(１当量)の溶液(０.２Ｍ)に加えた。該反応物に、Ｈ２を、大気圧下、室温で１６時間パージした。粗製の固体を、濾紙をひいたブフナー漏斗上のセライトのパッドで濾過し、ＥｔＯＡｃで、そしてＭｅＯＨで洗浄し、次いで真空で濃縮した。粗製の残渣をＣＨ２Ｃｌ２に溶解し、ＳｉＯ２カラムに負荷し、フラッシュクロマトグラフィーによって精製し(１：２  ヘキサン中ＥｔＯＡｃ＋５％ＭｅＯＨ)、１−(３−アミノピリジン−４−イル)−３−メチルピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た。
LC/MS (m/z): 307.2 (MH+).
【０３７７】
３−(トリフルオロメチル)−３−(トリメチルシリルオキシ)ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化１９５】
2010520228.tif 000272
ＴＨＦ中の３−オキソピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル(１当量)の氷冷した溶液(０.４Ｍ)に、トリメチル(トリフルオロメチル)シラン(１.２当量)を加え、すぐ後に、ＴＨＦ中のＴＢＡＦの１.０Ｍ溶液(０.０５当量)を加えた。該反応物を室温まで温め、４時間撹拌し、次いで真空で濃縮した。得られた残渣をＥｔＯＡｃに溶解し、塩水で洗浄し、次いで無水ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空で濃縮し、３−(トリフルオロメチル)−３−(トリメチルシリルオキシ)ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た。これを、粗製で、さらに精製することなく用いた。
【０３７８】
３−ヒドロキシ−３−(トリフルオロメチル)ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化１９６】
2010520228.tif 000273
ＴＨＦ中のＴＢＡＦの１.０Ｍ溶液(１当量)を、ＴＨＦ中の３−(トリフルオロメチル)−３−(トリメチルシリルオキシ)ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル(１当量)の溶液(０.２Ｍ)に加えた。室温で１６時間撹拌した後、該反応混合物を真空で濃縮した。得られた残渣をＥｔＯＡｃに溶解し、塩水で洗浄し、次いで無水ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。粗製の残渣をＣＨ２Ｃｌ２に溶解し、ＳｉＯ２カラムに負荷し、フラッシュクロマトグラフィーによって精製し、３−ヒドロキシ−３−(トリフルオロメチル)ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た。
19F NMR (282 MHz, CDCl3): δ -83.74 ppm;
1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 4.04-4.16 (m, 2H), 2.72-3.01 (m, 2H), 1.50-2.04 (m, 4H), 1.47 (s, 9 H).
【０３７９】
３−(トリフルオロメチル)ピペリジン−３−オールの合成
【化１９７】
2010520228.tif 000274
３−ヒドロキシ−３−(トリフルオロメチル)ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを用いて、方法１８を行い、３−(トリフルオロメチル)ピペリジン−３−オール(ＴＦＡ塩)を得た。粗生成物をさらに精製することなく次の段階に用いた。
【０３８０】
１−(３−ニトロピリジン−４−イル)−３−(トリフルオロメチル)ピペリジン−３−オールの合成
【化１９８】
2010520228.tif 000275
３−(トリフルオロメチル)ピペリジン−３−オールを用いて、方法１９を行い、１−(３−ニトロピリジン−４−イル)−３−(トリフルオロメチル)ピペリジン−３−オールを得た。
LC/MS (m/z): 292.0 (MH+).
【０３８１】
１−(３−アミノピリジン−４−イル)−３−(トリフルオロメチル)ピペリジン−３−オールの合成
【化１９９】
2010520228.tif 000276
１−(３−ニトロピリジン−４−イル)−３−(トリフルオロメチル)ピペリジン−３−オールを用いて、実施例４９の方法２を行い、１−(３−アミノピリジン−４−イル)−３−(トリフルオロメチル)ピペリジン−３−オールを得た。
LC/MS (m/z): 262.0 (MH+).
【０３８２】
(３Ｓ,５Ｒ)−５−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化２００】
2010520228.tif 000277
(３Ｓ,５Ｒ)−５−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルは、Y, Zhou; WO 2005 028467に記載された特許の手順に従って製造された。
【０３８３】
(３Ｓ,５Ｒ)−５−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化２０１】
2010520228.tif 000278
(３Ｓ,５Ｒ)−５−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを用いて、方法１９を行い、(３Ｓ,５Ｒ)−５−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た。
LC/MS (m/z): 453.2 (MH+).
【０３８４】
(３Ｓ,５Ｒ)−１−(３−アミノピリジン−４−イル)−５−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化２０２】
2010520228.tif 000279
(３Ｓ,５Ｒ)−５−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを用いて、方法２を行い、(３Ｓ,５Ｒ)−１−(３−アミノピリジン−４−イル)−５−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た。
LC/MS (m/z): 423.2 (MH+).
【０３８５】
ｃｉｓ−(＋／−)−１−(ベンジルオキシカルボニル)−５−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)ピペリジン−３−カルボン酸の合成
【化２０３】
2010520228.tif 000280
ジクロロメタン中の、ｃｉｓ−(＋／−)−５−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)ピペリジン−３−カルボン酸(１.０当量)の溶液(０.２Ｍ)に、ＤＩＥＡ(１.１当量)を加え、続いてＮ−(ベンジルオキシカルボニルオキシ)スクシンイミド(１.０当量)を加え、該反応物を室温で終夜撹拌した。溶媒を減圧下で除去した。粗製の物質に、ＥｔＯＡｃおよび１Ｎ  ＨＣｌを加えた。抽出後、有機層を塩水で洗浄し、乾燥し、濾過し、濃縮し、ｃｉｓ−(＋／−)−１−(ベンジルオキシカルボニル)−５−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)ピペリジン−３−カルボン酸を得た(収率９９％)。
LCMS (m/z): 379.2 (MH+);
LC Rt = 3.55分。
【０３８６】
ｃｉｓ−(＋／−)−ベンジル ３,５−ビス(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)ピペリジン−１−カルボキシレートの合成
【化２０４】
2010520228.tif 000281
ｔ−ＢｕＯＨ(１０ml)中の、ｃｉｓ−(＋／−)−１−(ベンジルオキシカルボニル)−５−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)ピペリジン−３−カルボン酸(１.２ｇ, ３.１７mmol)、ＤＰＰＡ(ジフェニルホスホリル アジド, １.０４ｇ, ３.８１mmol)およびＤＩＥＡ(１.１ml, ６.３５mmol)の溶液を、９０℃で終夜加熱した。溶媒を減圧下で除去した。粗製の物質にＥｔＯＡｃ(３００ml)を加え、有機層を、飽和ＮａＨＣＯ３(１５０ml)で、そして塩水で洗浄し、乾燥し、濾過し、濃縮し、粗製の物質を得た。粗製の物質を、さらに、シリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し、ｃｉｓ−(＋／−)−ベンジル ３,５−ビス(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)ピペリジン−１−カルボキシレートを得た(２３％)。
LCMS (m/z): 350(−１個のBoc(MH+);
LC Rt = 4.40分。
【０３８７】
ｃｉｓ−(＋／−)−ピペリジン−３,５−ジイルジカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化２０５】
2010520228.tif 000282
ｃｉｓ−(＋／−)−ベンジル ３,５−ビス(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)ピペリジン−１−カルボキシレートを用いて、方法１７を行い、ｃｉｓ−(＋／−)−ピペリジン−３,５−ジイルジカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(％収率  ９９％)。
LCMS (m/z): 316.2 (MH+).
【０３８８】
ｃｉｓ−(＋／−)−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３,５−ジイルジカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化２０６】
2010520228.tif 000283
それぞれ１当量の４−クロロ−３−ニトロピリジン、ｃｉｓ−(＋／−)−ピペリジン−３,５−ジイルジカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルおよびトリエチルアミンを用いて、ＤＭＦ中で、実施例１の方法１を行い、ｃｉｓ−(＋／−)−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３,５−ジイルジカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た。
LCMS (m/z): 438.2 (MH+);
LC Rt = 2.95分。
【０３８９】
ｃｉｓ−ｔｅｒｔ−ブチル (＋／−)−１−(３−アミノピリジン−４−イル)ピペリジン−３,５−ジイルジカルバメートの合成
【化２０７】
2010520228.tif 000284
実施例４９の方法２に従って、エタノール中のｃｉｓ−(＋／−)−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３,５−ジイルジカルバメートを還元し、ｃｉｓ−ｔｅｒｔ−ブチル (＋／−)−１−(３−アミノピリジン−４−イル)ピペリジン−３,５−ジイルジカルバメートを得た(７８％)。
LCMS (m/z): 408.2 (MH+);
LC Rt = 2.63分。
【０３９０】
(Ｓ)−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−オールの合成
【化２０８】
2010520228.tif 000285
それぞれ１当量の４−クロロ−３−ニトロピリジン、(Ｓ)−３−ヒドロキシピペリジンおよびトリエチルアミンを用いて、ＤＭＦ中で、実施例１の方法１を行い、(Ｓ)−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−オールを得た。
LCMS (m/z): 224.1 (MH+);
LC Rt = 1.06分。
【０３９１】
(Ｒ)−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−オールの合成
【化２０９】
2010520228.tif 000286
それぞれ１当量の４−クロロ−３−ニトロピリジン、(Ｒ)−３−ヒドロキシピペリジン、および、トリエチルアミンを用いて、ＤＭＦ中で、実施例１の方法１を行い、(Ｒ)−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−オールを得た。
LCMS (m/z): 224.1 (MH+);
LC Rt = 1.06分。
【０３９２】
(＋／−)−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−オールの合成
【化２１０】
2010520228.tif 000287
それぞれ１当量の４−クロロ−３−ニトロピリジン、(＋／−)−３−ヒドロキシピペリジン、および、トリエチルアミンを用いて、ＤＭＦ中で、実施例１の方法１を行い、(＋／−)−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−オールを得た。
LCMS (m/z): 224.1 (MH+);
LC Rt = 1.06分。
【０３９３】
(Ｓ)−４−(３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−１−イル)−３−ニトロピリジンの合成
【化２１１】
2010520228.tif 000288
ＤＭＦ中の(Ｓ)−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−オールおよびＴＢＤＭＳＣｌ(２.１当量)の溶液に、イミダゾール(４当量)を加えた。該反応物を５０℃で終夜加熱した。該反応物をＥｔＯＡＣに溶解し、水で、続いて飽和塩水で洗浄し、乾燥し、濾過し、濃縮し、粗製の物質を得た。粗製の物質を、さらに、シリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し、望ましい生成物である(Ｓ)−４−(３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−１−イル)−３−ニトロピリジンを得た。
LCMS (m/z): 338.2 (MH+);
LC Rt = 3.43 分。
【０３９４】
(Ｒ)−４−(３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−１−イル)−３−ニトロピリジンの合成
【化２１２】
2010520228.tif 000289
ＤＭＦ中の(Ｒ)−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−オールおよびＴＢＤＭＳＣｌ(２.１当量)の溶液に、イミダゾール(４当量)を加えた。該反応物を５０℃で終夜加熱した。該反応物をＥｔＯＡｃに溶解し、水で、続いて飽和塩水で洗浄し、乾燥し、濾過し、濃縮し、粗製の物質を得た。粗製の物質を、さらに、シリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し、望ましい生成物である(Ｒ)−４−(３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−１−イル)−３−ニトロピリジンを得た。
LCMS (m/z): 338.2 (MH+);
LC Rt = 3.43分。
【０３９５】
(＋／−)−４−(３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−１−イル)−３−ニトロピリジンの合成
【化２１３】
2010520228.tif 000290
ＤＭＦ中の(＋／−)−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−オールおよびＴＢＤＭＳＣｌ(２.１当量)の溶液に、イミダゾール(４当量)を加えた。該反応物を５０℃で終夜加熱した。該反応物をＥｔＯＡｃに溶解し、水で洗浄し、続いて塩水で洗浄し、乾燥し、濾過し、濃縮し、粗製の物質を得た。粗製の物質を、さらに、シリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し、望ましい生成物である(＋／−)−４−(３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−１−イル)−３−ニトロピリジンを得た。
LCMS (m/z): 338.2 (MH+);
LC Rt = 3.43 分。
【０３９６】
(＋／−)−４−(３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−１−イル)ピリジン−３−アミンの合成
【化２１４】
2010520228.tif 000291
実施例４９の方法２に従って、エタノール中の(＋／−)−４−(３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−１−イル)−３−ニトロピリジンを還元し、(＋／−)−４−(３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−１−イル)ピリジン−３−アミンを得た。
LCMS (m/z): 308.2 (MH+);
LC Rt = 3.47分。
【０３９７】
(Ｓ)−４−(３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−１−イル)ピリジン−３−アミンの合成
【化２１５】
2010520228.tif 000292
実施例４９の方法２に従って、エタノール中の(Ｓ)−４−(３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−１−イル)−３−ニトロピリジンを還元し、(Ｓ)−４−(３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−１−イル)ピリジン−３−アミンを得た(３段階での収率６７％)。
LCMS (m/z): 308.2 (MH+);
LC Rt = 3.47分。
【０３９８】
(Ｒ)−４−(３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−１−イル)ピリジン−３−アミンの合成
【化２１６】
2010520228.tif 000293
実施例４９の方法２に従って、エタノール中の(Ｒ)−４−(３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−１−イル)−３−ニトロピリジンを還元し、(Ｒ)−４−(３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−１−イル)ピリジン−３−アミンを得た。
LCMS (m/z): 308.2 (MH+);
LC Rt = 3.47分。
【０３９９】
３−アミノ−６−ブロモ−Ｎ−(４−(３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)ピコリンアミドの合成
【化２１７】
2010520228.tif 000294
実施例３０５の方法１１に従って、ｔｅｒｔ−ブチル (＋／−)−４−(３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−１−イル)ピリジン−３−アミンを、３−アミノ−６−ブロモピコリン酸とカップリングさせ、３−アミノ−６−ブロモ−Ｎ−(４−(３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)ピコリンアミドを得た。
LCMS (m/z): 506.2 (MH+);
LC Rt = 4.03分。
【０４００】
３−アミノ−６−ブロモ−Ｎ−(４−(３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)ピコリンアミドの合成
【化２１８】
2010520228.tif 000295
実施例３０５の方法１１に従って、ｔｅｒｔ−ブチル (＋／−)−４−(３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−１−イル)ピリジン−３−アミンを、３−アミノ−６−ブロモピコリン酸とカップリングさせ、３−アミノ−６−ブロモ−Ｎ−(４−(３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)ピコリンアミドを得た。
LCMS (m/z): 506.2 (MH+);
LC Rt = 4.03分。
【０４０１】
(Ｓ)−３−アミノ−６−ブロモ−Ｎ−(４−(３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)ピコリンアミドの合成
【化２１９】
2010520228.tif 000296
実施例３０５の方法１１に従って、ｔｅｒｔ−ブチル (Ｓ)−４−(３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−１−イル)ピリジン−３−アミンを、３−アミノ−６−ブロモピコリン酸とカップリングさせ、(Ｓ)−３−アミノ−６−ブロモ−Ｎ−(４−(３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)ピコリンアミドを得た。
LCMS (m/z): 506.2 (MH+);
LC Rt = 4.03分。
【０４０２】
(Ｒ)−３−アミノ−６−ブロモ−Ｎ−(４−(３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)ピコリンアミドの合成
【化２２０】
2010520228.tif 000297
実施例３０５の方法１１に従って、ｔｅｒｔ−ブチル (Ｒ)−４−(３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−１−イル)ピリジン−３−アミンを、３−アミノ−６−ブロモピコリン酸とカップリングさせ、(Ｒ)−３−アミノ−６−ブロモ−Ｎ−(４−(３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)ピコリンアミドを得た。
LCMS (m/z): 506.2 (MH+);
LC Rt = 4.03分。
【０４０３】
３−ヒドロキシ−３−メチルピペリジン−１−カルボン酸ベンジルの合成
【化２２１】
2010520228.tif 000298
乾燥ＴＨＦ(５０ml)中の、３−オキソピペリジン−１−カルボン酸ベンジル(２.３３ｇ, １０mmol)の溶液に、−７８℃で、ＭｅＭｇＢｒ(３.６ml, ＴＨＦ中３Ｍ溶液, １１mmol)を、ゆっくりと加えた。該反応物を−７８℃で１０分間撹拌し、次いでゆっくりと室温まで温めた。該反応物をＮＨ４Ｃｌでクエンチし、ＥｔＯＡｃ(３００ml)に溶解し、飽和ＮＨ４Ｃｌで、そして塩水で洗浄し、乾燥し、濾過し、濃縮し、粗製の物質を得た。粗製の物質を、さらにシリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し、３−ヒドロキシ−３−メチルピペリジン−１−カルボン酸ベンジルを得た(収率５３％)。
LCMS (m/z): 250.1 (MH+);
LC Rt = 2.98分。
【０４０４】
３−メチルピペリジン−３−オールの合成
【化２２２】
2010520228.tif 000299
３−ヒドロキシ−３−メチルピペリジン−１−カルボン酸ベンジルを用いて、方法１７を行い、３−メチルピペリジン−３−オールを得た(７０％)。
LCMS (m/z): 116.1 (MH+).
【０４０５】
３−メチル−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−オールの合成
【化２２３】
2010520228.tif 000300
それぞれ１当量の４−クロロ−３−ニトロピリジン、３−メチルピペリジン−３−オールおよびトリエチルアミンを用いて、ＤＭＦ中で、実施例１の方法１を行い、３−メチル−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−オールを得た。
LCMS (m/z): 238.1 (MH+);
LC Rt = 1.39分。
【０４０６】
１−(３−アミノピリジン−４−イル)−３−メチルピペリジン−３−オールの合成
【化２２４】
2010520228.tif 000301
実施例４９の方法２に従って、エタノール中の３−メチル−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−オールを還元し、１−(３−アミノピリジン−４−イル)−３−メチルピペリジン−３−オールを得た(８０％)。
LCMS (m/z): 208.1 (MH+);
LC Rt = 1.32分。
【０４０７】
３−アミノ−５−フルオロピコリン酸メチルの合成
【化２２５】
2010520228.tif 000302
無水メタノール中の２−ブロモ−５−フルオロピリジン−３−アミン(１.０当量)、トリエチルアミン(１.６当量)およびＰｄ(ＢＩＮＡＰ)Ｃｌ２(０.００１５当量)の溶液(０.４Ｍ溶液)を、密封した鋼製容器中で、１００℃に加熱した。３時間後、さらにＰｄ触媒(０.００１５当量)を加え、該反応混合物を同じ温度で３時間再度加熱した。室温まで冷却した後、褐色の沈殿物を濾過して取り、濾液をＥｔＯＡｃで抽出した。これを、水で、そして塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。揮発性物質を除去した後、黄色の粗生成物を得て、さらに精製することなく次の段階に用いた(４０％)。
LCMS (m/z): 271.2 (MH+);
LC Rt = 3.56分。
【０４０８】
３−アミノ−６−ブロモ−５−フルオロピコリン酸メチルの合成
【化２２６】
2010520228.tif 000303
アセトニトリル中の３−アミノ−５−フルオロピコリン酸メチル(１.０当量)の溶液(０.３Ｍ溶液)に、ＮＢＳ(１.１当量)を、室温で２分間加えた。水でクエンチした後、該反応混合物をＥｔＯＡｃで抽出する。粗生成物を、シリカのカラムクロマトグラフィーによって精製し(ヘキサン中２０％から５０％  ＥｔＯＡｃ)、３−アミノ−６−ブロモ−５−フルオロピコリン酸メチルを得た(４１％)。
LCMS (m/z): 249.1 (MH+);
LC Rt = 2.80分。
【０４０９】
３−アミノ−６−ブロモ−５−フルオロピコリン酸の合成
【化２２７】
2010520228.tif 000304
テトラヒドロフランおよびメタノール(２：１)中の３−アミノ−５−フルオロピコリン酸メチル(１.０当量)の溶液(０.２Ｍ溶液)に、ＬｉＯＨ(１.８当量, １Ｍ  水溶液)を、室温で加えた。該反応混合物を３時間撹拌し、１.０Ｎ  ＨＣｌ水溶液で中性にした。次いで、該反応混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。これを、水で、そして塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。揮発性物質を除去した後、粗製の３−アミノ−６−ブロモ−５−フルオロピコリン酸を得て、さらに精製することなく次の段階に用いた(９２％)。
LCMS (m/z): 234.2 (MH+);
LC Rt = 2.25分。
【０４１０】
３−アミノ−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリン酸の合成
【化２２８】
2010520228.tif 000305
マイクロ波バイアルに入れた、ＤＭＥ／２Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３(３：１)中の３−アミノ−５−フルオロピコリン酸メチル(１.０当量)の溶液(０.０５Ｍ)に、２,６−ジフルオロフェニルボロン酸(３.０当量)およびＰｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.１当量)を加えた。該反応混合物を、１４０℃で１０分間、マイクロ波反応器中で加熱した。さらに２,６−ジフルオロフェニルボロン酸(３.０当量)を加えた後、該反応混合物を、１回以上、１４０℃で１０分間、マイクロ波反応器中で、加熱した。該反応混合物を室温まで冷却した後、Ｈ２ＯおよびＥｔＯＡｃを加え、有機相を塩水で洗浄し、次いでＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮した。粗製の物質を分取ＨＰＬＣを介して精製した。純粋な３−アミノ−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリン酸メチルが得られ、純粋なフラクションをＮａＨＣＯ３で中性にした後、ＥｔＯＡｃで抽出し、濃縮した(３４％)。該３−アミノ−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリン酸メチル(１.０当量)を、ＴＨＦおよびＭｅＯＨ(２：１, ０.２Ｍ)に溶解し、続いてＬｉＯＨ(１.８当量, １Ｍ水溶液)を加えた。該反応混合物を室温で１.５時間撹拌した後、該反応混合物を１Ｎ  ＨＣｌ溶液(１.８当量)でクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出する。有機相を塩水で洗浄し、次いでＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮した。粗製の３−アミノ−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリン酸を、さらに精製することなく次の段階に用いた(８８％)。
LCMS (m/z): 269.0 (MH+);
LC Rt = 3.26分。
【０４１１】
３−アミノ−Ｎ−(４−クロロピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリンアミドの合成
【化２２９】
2010520228.tif 000306
ＮＭＰ中の４−クロロピリジン−３−アミン(１.０当量)および３−アミノ−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリン酸(１.０当量)の溶液(１Ｍ)に、ＨＯＡｔおよびＥＤＣＩを連続して加えた。該反応混合物を室温で２日間撹拌した。粗製の反応物を分取ＨＰＬＣによって精製し、３−アミノ−Ｎ−(４−クロロピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリンアミドを得た(１４％)。
LCMS (m/z): 379.0 (MH+);
LC Rt = 3.49分。
【０４１２】
ｔｒａｎｓ−(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル  １−(３−(３−アミノ−６−ブロモピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−４−フルオロピペリジン−３−イルカルバメートの合成
【化２３０】
2010520228.tif 000307
実施例３０５の方法１１に従って、ｔｒａｎｓ−(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−アミノピリジン−４−イル)−４−フルオロピペリジン−３−イルカルバメート、および、３−アミノ−６−ブロモピコリン酸を反応させ、精製した後、(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−(３−アミノ−６−ブロモピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−４−フルオロピペリジン−３−イルカルバメートを得た(２０％)。
LCMS (m/z): 510.9 (MH+).
【０４１３】
ｔｒａｎｓ−(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−(３−アミノ−６−ブロモピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−３−イルカルバメートの合成
【化２３１】
2010520228.tif 000308
実施例３０５の方法１１に従って、ｔｒａｎｓ−(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−アミノピリジン−４−イル)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−３−イルカルバメート、および、３−アミノ−６−ブロモ−ピコリン酸を反応させ、ｔｒａｎｓ−(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−(３−アミノ−６−ブロモ−ピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−３−イルカルバメートを得た(２７％)。
LCMS (m/z): 621.2 (MH+);
LC Rt = 4.41分。
【０４１４】
(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−(３−アミノ−６−ブロモピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−４−イルカルバメートの合成
【化２３２】
2010520228.tif 000309
実施例３０５の方法１１に従って、ｔｒａｎｓ−(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−アミノピリジン−４−イル)−３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−４−イルカルバメート、および、３−アミノ−６−ブロモ−ピコリン酸を反応させ、ｔｒａｎｓ−(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−(３−アミノ−６−ブロモピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−４−イルカルバメートを得た(２０％)。
LCMS (m/z): 623.2 (MH+);
LC Rt = 4.12分。
【０４１５】
ｔｒａｎｓ−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−(３−アミノ−６−ブロモ−５−フルオロピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−３−イルカルバメートの合成
【化２３３】
2010520228.tif 000310
実施例３０５の方法１１に従って、ｔｒａｎｓ−(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−アミノピリジン−４−イル)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−３−イルカルバメート、および、３−アミノ−６−ブロモ−５−フルオロピコリン酸を反応させ、ｔｒａｎｓ−(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−(３−アミノ−６−ブロモ−５−フルオロピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−３−イルカルバメートを得た。
LCMS (m/z): 641.2 (MH+);
LC Rt = 4.47分。
【０４１６】
ｔｒａｎｓ−(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−(３−アミノ−６−ブロモ−５−フルオロピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−４−イルカルバメートの合成
【化２３４】
2010520228.tif 000311
実施例３０５の方法１１に従って、ｔｒａｎｓ−(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−アミノピリジン−４−イル)−３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−４−イルカルバメート、および、３−アミノ−６−ブロモ−５−フルオロピコリン酸を反応させ、ｔｒａｎｓ−(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−(３−アミノ−６−ブロモ−５−フルオロピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−４−イルカルバメートを得た。
LCMS (m/z): 641.2 (MH+);
LC Rt = 4.73分。
【０４１７】
＜方法２０＞
５−アミノ−２−(２,６−ジフルオロフェニル)ピリミジン−４−カルボン酸の合成
【化２３５】
2010520228.tif 000312
ＥｔＯＨ中の２.６８Ｍ  ＮａＯＥｔ溶液(３当量)を、ＥｔＯＨ中の２,６−ジフルオロベンズイミドアミド塩酸塩(２当量)の氷浴で冷却した混合物(０.１Ｍ)に加えた。得られた混合物を室温まで昇温し、Ｎ２下、３０分間撹拌した。該反応混合物に、ＥｔＯＨ中のムコブロム酸(１当量)の溶液を滴下し、該反応物を、５０℃の油浴中で、２.５時間加熱した。室温まで冷却した後、該反応混合物を真空で濃縮した。Ｈ２Ｏおよび１.０Ｎ  ＮａＯＨを加え、水性混合物をＥｔＯＡｃで洗浄した。水相を１.０Ｎ  ＨＣｌでｐＨ＝４まで酸性にし、次いでＥｔＯＡｃで抽出する。合わせた有機抽出物を塩水で１回洗浄し、次いで無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空で濃縮し、５−ブロモ−２−(２,６−ジフルオロフェニル)ピリミジン−４−カルボン酸を得た。粗生成物を、さらに精製することなく次の段階に用いた。
LC/MS (m/z): 316.9 (MH+).
LC: Rt: 2.426分。
【０４１８】
ＣｕＳＯ４(０.１当量)を、５−ブロモ−２−(２,６−ジフルオロフェニル)ピリミジン−４−カルボン酸(１当量)および２８％水酸化アンモニウム水溶液の混合物に、マイクロ波反応容器中で加えた。該反応混合物を、マイクロ波反応器中、１１０℃で２５分間加熱した。反応容器をドライアイスで３０分間冷却し、封をはずし、真空で濃縮した。得られた固体に、１.０Ｎ  ＨＣｌを加え、該混合物をＥｔＯＡｃで抽出する。合わせた有機抽出物を塩水で１回洗浄し、次いで無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空で濃縮し、５−アミノ−２−(２,６−ジフルオロフェニル)ピリミジン−４−カルボン酸を得た。粗生成物をさらに精製することなく次の段階に用いた。
LC/MS (m/z): 252.0 (MH+).
LC: Rt: 2.043分。
【０４１９】
５−アミノ−２−(２−フルオロフェニル)ピリミジン−４−カルボン酸の合成
【化２３６】
2010520228.tif 000313
方法２０に従って、５−アミノ−２−(２−フルオロフェニル)ピリミジン−４−カルボン酸を、２−フルオロベンズイミドアミド塩酸塩から出発して製造した。
LC/MS (m/z): 234.0 (MH+),
Rt: 0.70分。
【０４２０】
５−アミノ−２−フェニルピリミジン−４−カルボン酸の合成
【化２３７】
2010520228.tif 000314
方法２０に従って、５−アミノ−２−フェニルピリミジン−４−カルボン酸を、ベンズイミドアミド塩酸塩から出発して製造した。
LC/MS (m/z): 216.1 (MH+).
【０４２１】
５−アミノ−２−クロロピリミジン−４−カルボン酸エチルの合成
【化２３８】
2010520228.tif 000315
１０％  パラジウム／炭素(０.２当量)を、１,４−ジオキサン中の２,６−ジクロロ−５−ニトロピリミジン−４−カルボン酸エチル(１当量)および酸化マグネシウム(２当量)のＮ２をフラッシュした混合物(０.１５Ｍ)に加えた。該反応物に、Ｈ２を、大気圧下、室温でパージした。１６時間後、さらに１０％  Ｐｄ／Ｃ(０.３当量)およびＭｇＯ(５当量)を加え、続けて、該反応物に、Ｈ２を、大気圧下、室温で６時間パージした。粗製の固体を、濾紙をひいたブフナー漏斗上のセライトのパッドで濾過し、ＣＨ２Ｃｌ２で洗浄した。濾液を分離漏斗に移し、Ｈ２Ｏで２回、塩水で１回洗浄し、次いで無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。粗生成物をＣＨ２Ｃｌ２に溶解し、ＳｉＯ２カラムに負荷し、フラッシュクロマトグラフィーによって精製し(ヘキサン中１０−２０−３０％  ＥｔＯＡｃ)、５−アミノ−２−クロロピリミジン−４−カルボン酸エチルを得た。
LC/MS (m/z): 202.0 (MH+).
【０４２２】
５−アミノ−２−クロロピリミジン−４−カルボン酸の合成
【化２３９】
2010520228.tif 000316
ＬｉＯＨの０.５Ｍ  水溶液(１.５当量)を、Ｈ２ＯおよびＴＨＦ中の５−アミノ−２−クロロピリミジン−４−カルボン酸エチル(１当量)の混合物(０.１Ｍ)に、撹拌しながら加えた。該反応物を室温で２時間維持した。１.０Ｎ  ＨＣｌを加え、粗製の混合物を真空で濃縮し、残ったＴＨＦを除去した。得られた固体を濾紙をひいたブフナー漏斗上に集め、真空下で１６時間乾燥し、５−アミノ−２−クロロピリミジン−４−カルボン酸を得た。
LC/MS (m/z): 174.0 (MH+).
HPLC: Rt: 1.148分。
【０４２３】
３−ニトロ−５−フェニルピコリノニトリルの合成
【化２４０】
2010520228.tif 000317
５−ブロモ−３−ニトロピコリノニトリル(１当量)およびフェニルボロン酸(１.５当量)を、１５mlの１,４−ジオキサンおよび５mlの２Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３水溶液と、ガラス圧力管中で混合した。該反応混合物を乾燥Ｎ２流によって５分間脱気し、続いてＰｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.１当量)を加えた。該反応混合物を１００℃で３時間撹拌した。次いで、該混合物を１００mlの酢酸エチルで希釈し、水で、そして塩水で洗浄し、次いでＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で蒸発させ、粗生成物を得た。これを、ＤＣＭ、エーテル、ヘキサンで磨砕し、純粋な表題化合物を得た。
LC/MS (m/z): 226.1 (MH+).
【０４２４】
３−アミノ−５−フェニルピコリン酸の合成
【化２４１】
2010520228.tif 000318
１０mlのＤＭＦ中の３−ニトロ−５−フェニルピコリノニトリル(１当量)の溶液に、塩化錫(II)二水和物(７.０当量)を、室温で加えた。該反応混合物をその温度で終夜撹拌した。該混合物を１５０mlの酢酸エチルおよび３０mlのトリエチルアミンで希釈した。濾過後、濾液を減圧下で濃縮し、固体を得た。これに２mlの濃塩酸を加えた。該混合物を、マイクロ波中、９０℃で１０分間撹拌した。終夜放置した後、固体を濾過によって集めた。これを１０mlの１Ｎ  ＮａＯＨに溶解した。得られた混合物を５０mlの酢酸エチルで抽出した。水層を、１Ｎ  ＨＣｌでｐＨ  ７.０まで酸性にし、３−アミノ−５−フェニルピコリン酸を得た。これを濾過によって集めた。
LC/MS (m/z): 215.1 (MH+).
【０４２５】
６−ブロモ−５−フルオロピコリン酸の合成
【化２４２】
2010520228.tif 000319
Ｈ２Ｏ(３０ml)中の２−ブロモ−３−フルオロ−６−メチルピリジン(２.０ｇ, １０.５８mmol)に、過マンガン酸カリウム(１.６７ｇ, １０.５８mmol)を加えた。該溶液を１００℃で５時間加熱し、さらに過マンガン酸カリウム(１.６７ｇ, １０.５８mmol)を加えた。さらに４８時間加熱した後、該物質をセライト(４cm×２インチ)で濾過し、Ｈ２Ｏ(１５０ml)で濯いだ。合わせた水性物質を、１Ｎ  ＨＣｌで、ｐＨ４まで酸性にし、酢酸エチル(２００ml)で抽出し、ＮａＣｌ(飽和)で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮し、６−ブロモ−５−フルオロピコリン酸を白色の固体として得た(１７％)。
LCMS (m/z):  221.9 (MH+);
LC Rt = 2.05分。
【０４２６】
(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−(６−ブロモ−５−フルオロピコリンアミド)ピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメートの合成
【化２４３】
2010520228.tif 000320
方法１１(実施例３０５)に従って、(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−アミノピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメートを、６−ブロモ−５−フルオロピコリン酸とカップリングさせ、粗製の(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−(６−ブロモ−５−フルオロピコリンアミド)ピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメートを得た(９２％)。これをそのまま用いた。
LCMS (m/z):  496.2 (MH+);
LC Rt = 2.90分。
【０４２７】
６−ブロモ−３−フルオロピコリン酸の合成
【化２４４】
2010520228.tif 000321
Ｈ２Ｏ(２００ml)中の６−ブロモ−３−フルオロ−２−メチルピリジン(２.０ｇ, １０.５８mmol)に、過マンガン酸カリウム(１.６７ｇ, １０.５８mmol)を加えた。該溶液を１００℃で１６時間加熱した。冷却した後、該物質をセライト(４cm×２インチ)で濾過し、Ｈ２Ｏ(１５０ml)で濯いだ。合わせた水性物質を、１Ｎ  ＨＣｌでｐＨ  ４まで酸性にして、酢酸エチル(２×２００ml)で抽出し、ＮａＣｌ(飽和)で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮し、６−ブロモ−３−フルオロピコリン酸を白色の固体として得た(１８％)。
LCMS (m/z):  221.9 (MH+);
LC Rt = 1.71分。
【０４２８】
(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−(６−ブロモ−３−フルオロピコリンアミド)ピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメートの合成
【化２４５】
2010520228.tif 000322
方法１１(実施例３０５)に従って、(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−アミノピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメートを、６−ブロモ−３−フルオロピコリン酸とカップリングさせ、(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−(６−ブロモ−３−フルオロピコリンアミド)ピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメートを得た。これをそのまま直接用いた。
LCMS (m/z):  496.2 (MH+);
LC Rt = 2.71分。
【０４２９】
(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−(６−ブロモピコリンアミド)ピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメートの合成
【化２４６】
2010520228.tif 000323
方法１１(実施例３０５)に従って、(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−アミノピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメートを、６−ブロモピコリン酸とカップリングさせ、カラムクロマトグラフィー(溶出液としてＥｔＯＡｃ)にかけた後、(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−(６−ブロモピコリンアミド)ピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメートを得た(８２％)。
LCMS (m/z):  478.1 (MH+);
LC Rt = 2.84分。
【０４３０】
(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−(５−アミノ−２−クロロピリミジン−４−カルボキサミド)ピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメートの合成
【化２４７】
2010520228.tif 000324
方法１１(実施例３０５)に従って、(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−アミノピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメートを、５−アミノ−２−クロロピリミジン−４−カルボン酸とカップリングさせ、カラムクロマトグラフィー(溶出液としてＥｔＯＡｃ)にかけた後、(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−(５−アミノ−２−クロロピリミジン−４−カルボキサミド)ピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメートを得た(１０％)。
LCMS (m/z):  433.1 (MH+);
LC Rt = 2.46分。
【０４３１】
＜方法２１＞
２−クロロ−６−イソブトキシピラジンの合成
【化２４８】
2010520228.tif 000325
火炎乾燥(flame-dried)した丸底フラスコに、無水ＴＨＦ中９５％  ＮａＨ(１.１当量)の懸濁液(０.３Ｍ)を入れた。該混合物を撹拌しながら氷−水浴中で０℃に冷却し、２−メチル−１−プロパノール(１当量)を、シリンジを介して滴下した。３０分後、２,６−ジクロロピラジン(１当量)を加え、該反応物を室温まで温め、３時間撹拌した。粗製の混合物を飽和水性ＮＨ４Ｃｌでクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出する。合わせた有機相を、Ｈ２Ｏで、そして塩水でそれぞれ１回洗浄し、次いで無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。粗製の残渣をＣＨ２Ｃｌ２に溶解し、ＳｉＯ２カラムに負荷し、フラッシュクロマトグラフィーによって精製し(溶出液＝９：１  ヘキサン／ＥｔＯＡｃ)、２−クロロ−６−イソブトキシピラジンを得た。
LC/MS (m/z): 187.1 (MH+).
【０４３２】
２−クロロ−６−(シクロプロピルメトキシ)ピラジンの合成
【化２４９】
2010520228.tif 000326
方法２１に従って、２−クロロ−６−(シクロプロピルメトキシ)ピラジンが製造された。
LC/MS (m/z): 185.0 (MH+).
【０４３３】
２−クロロ−６−エトキシピラジンの合成
【化２５０】
2010520228.tif 000327
方法２１に従って、２−クロロ−６−エトキシピラジンが製造された。
LC/MS (m/z): 159.0 (MH+).
【０４３４】
２−クロロ−６−イソプロポキシピラジンの合成
【化２５１】
2010520228.tif 000328
方法２１に従って、２−クロロ−６−イソプロポキシピラジンが製造された。
LC/MS (m/z): 173.1 (MH+).
【０４３５】
２−クロロ−６−プロポキシピラジンの合成
【化２５２】
2010520228.tif 000329
方法２１に従って、２−クロロ−６−プロポキシピラジンが製造された。
LC/MS (m/z): 173.1 (MH+).
【０４３６】
２−(ベンジルオキシ)−６−クロロピラジンの合成
【化２５３】
2010520228.tif 000330
方法２１に従って、２−(ベンジルオキシ)−６−クロロピラジンが製造された。
LC/MS (m/z): 221.0 (MH+).
【０４３７】
＜方法２２＞
５−ブロモ−３−(２−メトキシエトキシ)ピラジン−２−アミンの合成
【化２５４】
2010520228.tif 000331
火炎乾燥した丸底フラスコに、無水ＴＨＦ中９５％  ＮａＨ(１.３当量)の懸濁液(０.２Ｍ)を入れた。該混合物を撹拌しながら氷−水浴中で０℃に冷却し、２−メトキシエタノール(１.２当量)を、シリンジを介して滴下した。３０分後、３,５−ジブロモピラジン−２−アミン(１当量)を加え、該反応物を室温まで温め、３時間撹拌した。粗製の混合物を飽和水性ＮＨ４Ｃｌでクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出する。合わせた有機相を、Ｈ２Ｏで、そして塩水でそれぞれ１回洗浄し、次いで、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空で濃縮し、５−ブロモ−３−(２−メトキシエトキシ)ピラジン−２−アミンを得た。
LC/MS (m/z): 250.0 (MH+).
【０４３８】
５−ブロモ−３−(２,２,２−トリフルオロエトキシ)ピラジン−２−アミンの合成
【化２５５】
2010520228.tif 000332
方法２２に従って、５−ブロモ−３−(２,２,２−トリフルオロエトキシ)ピラジン−２−アミンが製造された。
LC/MS (m/z): 274.0 (MH+).
【０４３９】
＜方法２３＞
３−(２−メトキシエトキシ)−５−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)ピラジン−２−アミンの合成
【化２５６】
2010520228.tif 000333
ジオキサン中の５−ブロモ−３−(２−メトキシエトキシ)ピラジン−２−アミン(１当量)の溶液(０.２５Ｍ)に、マイクロ波反応容器中で、ビス(ピナコレート)ジボラン(２当量)、Ｐｄ(ｄｂａ)２(０.０５当量)、ＰＣｙ３(０.０７５当量)およびＫＯＡｃ(３当量)を加えた。次いで、該反応混合物を、マイクロ波反応器中、１１０℃で６００秒間、２回加熱した。粗生成物を後処理またはさらなる精製を行うことなく次の段階に用いた。
LC/MS (m/z): 214.1/296.1 (MH+).
【０４４０】
５−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)−３−(２,２,２−トリフルオロエトキシ)ピラジン−２−アミンの合成
【化２５７】
2010520228.tif 000334
方法２３に従って、５−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)−３−(２,２,２−トリフルオロエトキシ)ピラジン−２−アミンは、５−ブロモ−３−(２,２,２−トリフルオロエトキシ)ピラジン−２−アミンから製造された。
LC/MS (m/z): 238.1 (MH+).
【０４４１】
＜方法２４＞
６−クロロ−２−メチルピリミジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化２５８】
2010520228.tif 000335
ＴＨＦ中の６−クロロ−２−メチルピリミジン−４−アミン(１.０当量)の溶液(０.１７Ｍ)に、ＢＯＣ２Ｏ(１.１当量)およびＤＭＡＰ(触媒量)を加えた。該反応物を終夜撹拌し、次いで、濃縮し、黄色の粗製の物質とし、ＥｔＯＡｃおよびヘキサン(１：１)で溶出するＳｉＯ２のパッドで濾過し、灰白色の固体を得た(７８％)。
LCMS (m/z): 244.1 (MH+);
LC Rt = 3.69分。
【０４４２】
４−クロロ−Ｎ,Ｎ−ジ−ＢＯＣ−６−メチルピリミジン−２−アミンの合成
【化２５９】
2010520228.tif 000336
４−クロロ−６−メチルピリミジン−２−アミン(１.０当量)、ＢＯＣ２Ｏ(２.０当量)およびＤＭＡＰ(触媒量)を用いて、方法２４を行い、４−クロロ−Ｎ,Ｎ−ジ−ＢＯＣ−６−メチルピリミジン−２−アミンを、７１％で得た。
LCMS (m/z): 344.2 (MH+);
LC Rt = 4.3分。
【０４４３】
４−クロロ−Ｎ,Ｎ−ジ−ＢＯＣ−６−メトキシピリミジン−２−アミンの合成
【化２６０】
2010520228.tif 000337
４−クロロ−６−メトキシピリミジン−２−アミン(１.０当量)、Ｂｏｃ２Ｏ(２.０当量)およびＤＭＡＰ(触媒量)を用いて、方法２４を行い、４−クロロ−Ｎ,Ｎ−ジ−ＢＯＣ−６−メトキシピリミジン−２−アミンを＞９５％で得た。
LCMS (m/z): 360.2 (MH+);
LC Rt = 5.70分。
【０４４４】
６−クロロ−Ｎ,Ｎ−ジ−ＢＯＣ−２−(メチルチオ)ピリミジン−４−アミンの合成
【化２６１】
2010520228.tif 000338
６−クロロ−２−(メチルチオ)ピリミジン−４−アミン(１.０当量)、ＢＯＣ２Ｏ(２.０当量)およびＤＭＡＰ(触媒量)を用いて、方法２４を行い、６−クロロ−Ｎ,Ｎ−ジ−ＢＯＣ−２−(メチルチオ)ピリミジン−４−アミンを＞９５％で得た。
LCMS (m/z): 376.1 (MH+);
LC Rt = 4.9分。
【０４４５】
６−クロロ−２−(トリフルオロメチル)ピリミジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化２６２】
2010520228.tif 000339
６−クロロ−２−(トリフルオロメチル)ピリミジン−４−アミン(１.０当量)、ＢＯＣ２Ｏ(１.０当量)およびＤＭＡＰ(触媒量)を用いて、方法２４を行い、６−クロロ−２−(トリフルオロメチル)ピリミジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを６４％で得た。
LCMS (m/z): 298.1 (MH+);
LC Rt = 4.73分。
【０４４６】
４−クロロピリジン−３−イルカルバミン酸ベンジルの合成
【化２６３】
2010520228.tif 000340
ＴＨＦ中クロロ蟻酸ベンジル(１.１当量)の溶液(１.８５Ｍ)を、ＴＨＦ中の３−アミノ−４−クロロピリジン(１.０当量)およびピリジン(１.５当量)の溶液(１.０Ｍ)に、ゆっくりと加え、室温で３.５時間撹拌した(時間とともに沈殿物が形成)。該反応物をＨ２Ｏ(１００ml)でクエンチし、ＥｔＯＡｃ(２００ml)で抽出し、ＮａＣｌ(飽和)(７５ml)で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、揮発成分を真空で除去した。ヘキサン／ＥｔＯＡｃの混合物から生成物を沈殿させ、４−クロロピリジン−３−イルカルバミン酸ベンジルを得た(３４％)。
LCMS (m/z): 263.1 (MH+);
LC Rt = 2.33分。
【０４４７】
４−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)ピリジン−３−イルカルバミン酸ベンジルの合成
【化２６４】
2010520228.tif 000341
ジオキサン中の、４−クロロピリジン−３−イルカルバミン酸ベンジル(１.０当量)、ビス(ピナコレート)ジボラン(２.０当量)、Ｐｄ２(ｄｂａ)３(０.０５当量)、ＰＣｙ３(０.０７５当量)、ＫＯＡｃ(２.０当量)の溶液(０.１９Ｍ)を、窒素を１０分間丸底フラスコに通気することによって脱気した。該フラスコを９０℃で３時間加熱し、室温まで冷却し、活性炭とセライトで濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。濾液を濃縮した後、粘稠な暗褐色の生成物が得られた。
LCMS (m/z): 273 (MH+, 対応するボロン酸について);
LC Rt = 1.93分。
【０４４８】
＜方法２５＞
６−(３−(ベンジルカルバメート−アミノ)−ピリジン−４−イル)−２−(トリフルオロメチル)ピリミジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化２６５】
2010520228.tif 000342
４−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)ピリジン−３−イルカルバミン酸ベンジル(３.０当量)の粗製の溶液に、Ｐｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.１０当量)、６−クロロ−２−(トリフルオロメチル)ピリミジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル(１.０当量)、およびＤＭＥ／２Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３(３：１, ０.０８Ｍ)を加えた。該反応物を９０℃で１時間加熱し、次いで室温まで冷却し、Ｈ２ＯおよびＥｔＯＡｃを加え、有機層を抽出し、塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。濃縮後、粗製の物質をＳｉＯ２のパッドに通し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。該反応物を、ほぼ乾固するまで濃縮し、ヘキサンを加えた。沈殿物を濾過し、明黄色の粉末として得た。濾液をほぼ乾固するまで濃縮し、さらにヘキサンを加え、沈殿物を濾過した。総収率＝５０％。
LCMS (m/z): 490.1 (MH+);
LC Rt = 4.11分。
【０４４９】
４−(２−(ジ−ＢＯＣ−アミノ)−６−メチルピリミジン−４−イル)ピリジン−３−イルカルバミン酸ベンジルの合成
【化２６６】
2010520228.tif 000343
４−クロロ−Ｎ,Ｎ−ジ−ＢＯＣ−６−メチルピリミジン−２−アミン(１.０当量)、４−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)ピリジン−３−イルカルバミン酸ベンジル(３当量)、Ｐｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.１０当量)を用いて、ＤＭＥ／２Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３(３：１, ０.０７Ｍ)中で、７０℃で３０分間で、方法２５を行った。ＥｔＯＡｃおよびヘキサン(２.５：１)で溶出するＳｉＯ２のカラムクロマトグラフィーによって精製し、４−(２−(ジ−ＢＯＣ−アミノ)−６−メチルピリミジン−４−イル)ピリジン−３−イルカルバミン酸ベンジルを収率６９％で得た。
LCMS (m/z): 536.2 (MH+);
LC Rt = 4.2分。
【０４５０】
＜方法２６＞
６−(３−アミノピリジン−４−イル)−２−(トリフルオロメチル)ピリミジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化２６７】
2010520228.tif 000344
ＥｔＯＡｃおよびＥｔＯＨ(３：１,  Ｍ)中の６−(３−(ベンジルカルバメート−アミノ)ピリジン−４−イル)−２−(トリフルオロメチル)ピリミジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの溶液(不均一な溶液)を撹拌した。Ｐｄ／Ｃ(１０重量％)を加え、該反応物を水素バルーン下で２日間撹拌した。完了後、該溶液をセライトで濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。濾液を濃縮し、褐色の固体を得た(＞９５％)。
LCMS (m/z): 356.1 (MH+);
LC Rt = 2.80分。
【０４５１】
４−(３−アミノピリジン−４−イル)−Ｎ,Ｎ−ジ−ＢＯＣ−６−メチルピリミジン−２−アミンの合成
【化２６８】
2010520228.tif 000345
４−(２−(ジ−ＢＯＣ−アミノ)−６−メチルピリミジン−４−イル)ピリジン−３−イルカルバミン酸ベンジル(１.０当量)、Ｐｄ／Ｃ(２０重量％)を用いて、ＥｔＯＡｃ中で、方法２６を行い、４−(３−アミノピリジン−４−イル)−Ｎ,Ｎ−ジ−ＢＯＣ−６−メチルピリミジン−２−アミンを収率９０％で得た。
LCMS (m/z): 402.3 (MH+);
LC Rt = 3.0分。
【０４５２】
４−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)ピリジン−３−アミンの合成
【化２６９】
2010520228.tif 000346
ジオキサン中の４−クロロピリジン−３−イルカルバミン酸ベンジル(１.０当量)、ビス(ピナコレート)ジボラン(２.０当量)、Ｐｄ２(ｄｂａ)３(０.０５当量)、ＰＣｙ３(０.０７５当量)、ＫＯＡｃ(２当量)の溶液(０.１９Ｍ)を、窒素を１０分間丸底フラスコに通気することによって脱気した。該フラスコを９０℃で１６時間加熱し、室温まで冷却し、活性炭とセライトで濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄し、濃縮し、粘稠な暗褐色の生成物を得た。
LCMS (m/z): 139.0 (MH+, 対応するボロン酸について).
【０４５３】
６−(３−アミノピリジン−４−イル)−Ｎ,Ｎ−ジ−ＢＯＣ−２−(メチルチオ)ピリミジン−４−アミンの合成
【化２７０】
2010520228.tif 000347
６−クロロ−Ｎ,Ｎ−ジ−ＢＯＣ−２−(メチルチオ)ピリミジン−４−アミン(１.０当量)、４−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)ピリジン−３−アミン(３.０当量)、Ｐｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.１０当量)を用いて、ＤＭＥ／２Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３(０.０７Ｍ)中で、９０℃で３０分間で、方法２６を行った。ＥｔＯＡｃおよびヘキサン(１：１)で溶出するＳｉＯ２のカラムクロマトグラフィーによって精製し、６−(３−アミノピリジン−４−イル)−Ｎ,Ｎ−ジ−ＢＯＣ−２−(メチルチオ)ピリミジン−４−アミンを収率３２％で得た。
LCMS (m/z): 434.2 (MH+);
LC Rt = 3.56分。
【０４５４】
６−(３−アミノピリジン−４−イル)−２−メチルピリミジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化２７１】
2010520228.tif 000348
６−クロロ−２−メチルピリミジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル(１.０当量)、４−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)ピリジン−３−アミン(３.０当量)、Ｐｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.１０当量)を用いて、ＤＭＥ／２Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３(３：１, ０.０７Ｍ)中で、８０℃で３０分間で、方法２６を行った。ＥｔＯＡｃで溶出するＳｉＯ２のカラムクロマトグラフィーによって精製し、６−(３−アミノピリジン−４−イル)−２−メチルピリミジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを収率２６％で得た。
LCMS (m/z): 302.1 (MH+);
LC Rt = 2.23分。
【０４５５】
４−(３−アミノピリジン−４−イル)−６−メトキシ−Ｎ,Ｎ−ジ−ＢＯＣ−ピリミジン−２−アミンの合成
【化２７２】
2010520228.tif 000349
４−クロロ−Ｎ,Ｎ−ジ−ＢＯＣ−６−メトキシピリミジン−２−アミン(１.０当量)、４−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)ピリジン−３−アミン(３.０当量)、Ｐｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.１０当量)を用いて、ＤＭＥ／２Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３(０.０７Ｍ)中で、９０℃で３０分間で、方法２６を行った。ＥｔＯＡｃおよびヘキサン(１：１)で溶出するＳｉＯ２のカラムクロマトグラフィーによって精製し、４−(３−アミノピリジン−４−イル)−６−メトキシ−Ｎ,Ｎ−ジ−ＢＯＣ−ピリミジン−２−アミンを収率１３％で得た。
LCMS (m/z): 418.1 (MH+).
【０４５６】
Ｎ２−(３,４−ジメトキシベンジル)−６−(トリフルオロメチル)−４,４'−ビピリジン−２,３'−ジアミンの合成
【化２７３】
2010520228.tif 000350
Ｎ−(３,４−ジメトキシベンジル)−４−ヨード−６−(トリフルオロメチル)ピリジン−２−アミン(１.０当量)、４−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)ピリジン−３−アミン(３当量)、Ｐｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.１０当量)を用いて、ＤＭＥ／２Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３(３：１, ０.０７Ｍ)中で、５０℃で４５分間で、方法２６を行った。逆相ＨＰＬＣによって精製し、Ｎ２−(３,４−ジメトキシベンジル)−６−(トリフルオロメチル)−４,４'−ビピリジン−２,３'−ジアミンを収率３８％で得た。
LCMS (m/z): 402.1 (MH+);
LC Rt = 3.0分。
【０４５７】
＜方法２７＞
６−(３−(３−アミノ−６−ブロモピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−２−(トリフルオロメチル)ピリミジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化２７４】
2010520228.tif 000351
ＤＭＦ中の濃度０.２Ｍの６−(３−アミノピリジン−４−イル)−２−(トリフルオロメチル)ピリミジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル(１.０当量)、３−アミノ−６−ブロモピコリン酸(１.０当量)、ＨＯＡｔ(１.０当量)およびＥＤＣ(１.０当量)の溶液を３時間撹拌し、次いで５０℃で終夜加熱した(均一な溶液)。水を該反応物に加え、沈殿物を濾過した。該固体を、さらに、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ(１０％)で溶出するＳｉＯ２のカラムクロマトグラフィーによって精製し、褐色の固体を望ましい生成物として得た(８１％)。
LCMS (m/z): 554.1/556.1 (MH+);
LC Rt = 3.77分。
【０４５８】
３−アミノ−６−ブロモ−Ｎ−(４−(６−(ジ−ＢＯＣ−アミノ)−２−(メチルチオ)ピリミジン−４−イル)ピリジン−３−イル)ピコリンアミドの合成
【化２７５】
2010520228.tif 000352
６−(３−アミノピリジン−４−イル)−Ｎ,Ｎ−ジ−ＢＯＣ−２−(メチルチオ)ピリミジン−４−アミン(１.０当量)、３−アミノ−６−ブロモピコリン酸(１.０当量)、ＥＤＣ(１.０当量)およびＨＯＡｔ(１.０当量)を用いて、ＤＭＦ中で、方法２７を行い、３−アミノ−６−ブロモ−Ｎ−(４−(６−(ジ−ＢＯＣ−アミノ)−２−(メチルチオ)ピリミジン−４−イル)ピリジン−３−イル)ピコリンアミドを収率３０％で得た。
LCMS (m/z): 632.1/634.0 (MH+);
LC Rt = 4.55分。
【０４５９】
６−(３−(３−アミノ−６−ブロモピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−２−メチルピリミジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化２７６】
2010520228.tif 000353
６−(３−アミノピリジン−４−イル)−２−メチルピリミジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル(１.０当量)、３−アミノ−６−ブロモピコリン酸(１.０当量)、ＥＤＣ(１.０当量)およびＨＯＡｔ(１.０当量)を用いて、ＤＭＦ中で、方法２７を行い、６−(３−(３−アミノ−６−ブロモピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−２−メチルピリミジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを収率７４％で得た。
LCMS (m/z): 499.9/501.9 (MH+);
LC Rt = 3.36分。
【０４６０】
３−アミノ−６−ブロモ−Ｎ−(４−(２−(ジ−ＢＯＣ−アミノ)−６−メチルピリミジン−４−イル)ピリジン−３−イル)ピコリンアミドの合成
【化２７７】
2010520228.tif 000354
４−(３−アミノピリジン−４−イル)−Ｎ,Ｎ−ジ−ＢＯＣ−６−メチルピリミジン−２−アミン(１.０当量)、３−アミノ−６−ブロモピコリン酸(１.０当量)、ＥＤＣ(１.０当量)およびＨＯＡｔ(１.０当量)を用いて、ＤＭＦ中で、方法２７を行い、３−アミノ−６−ブロモ−Ｎ−(４−(２−(ジ−ＢＯＣ−アミノ)−６−メチルピリミジン−４−イル)ピリジン−３−イル)ピコリンアミドを収率１２％で得た。
LCMS (m/z): 602.2 (MH+);
LC Rt = 3.60分。
【０４６１】
６−(３−(３−アミノ−６−ブロモ−５−フルオロピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−２−メチルピリミジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化２７８】
2010520228.tif 000355
６−(３−アミノピリジン−４−イル)−２−メチルピリミジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル(１.０当量)、３−アミノ−６−ブロモ−５−フルオロピコリン酸(１.０当量)、ＥＤＣ(１.０当量)およびＨＯＡｔ(１.０当量)を用いて、ＤＭＦ中で、方法２７を行い、６−(３−(３−アミノ−６−ブロモ−５−フルオロピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−２−メチルピリミジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを収率１５％で得た。
LCMS (m/z): 520.1 (MH+);
LC Rt = 3.4分。
【０４６２】
４−(３−(３−アミノ−６−ブロモ−５−フルオロピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−６−メチルピリミジン−２−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化２７９】
2010520228.tif 000356
４−(３−アミノピリジン−４−イル)−２−メチルピリミジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル(１.０当量)、３−アミノ−６−ブロモ−５−フルオロピコリン酸(１.０当量)、ＥＤＣ(１.０当量)およびＨＯＡｔ(１.０当量)を用いて、ＤＭＦ中で、方法２７を行い、４−(３−(３−アミノ−６−ブロモ−５−フルオロピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−６−メチルピリミジン−２−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを収率２０％で得た。
LCMS (m/z): 618.1 (MH+);
LC Rt = 3.5分。
【０４６３】
６−(３−(６−ブロモピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−２−(トリフルオロメチル)ピリミジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化２８０】
2010520228.tif 000357
６−(３−アミノピリジン−４−イル)−２−(トリフルオロメチル)ピリミジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル(１.０当量)、６−ブロモピコリン酸(１.０当量)、ＥＤＣ(１.０当量)およびＨＯＡｔ(１.０当量)を用いて、ＮＭＰ中で、方法２７を行い、６−(３−(６−ブロモピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−２−(トリフルオロメチル)ピリミジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを収率＞９５％で得た。
LCMS (m/z): 539/541 (MH+);
LC Rt = 3.97分。
【０４６４】
２−クロロ−３−ヨード−６−(トリフルオロメチル)ピリジンの合成
【化２８１】
2010520228.tif 000358
ＴＨＦ中のｎ−ＢｕＬｉ(１.０当量)の冷却(−７８℃)した溶液(０.８Ｍ)に、内部温度を−７０℃以下に維持しながら、ジイソプロピルアミン(１.０当量)を滴下した。該溶液を３０分間撹拌し、次いでＴＨＦ中の２−クロロ−６−(トリフルオロメチル)ピリジン(１.０当量)を滴下した。該溶液をさらに３０分間撹拌し、次いでＩ２を固体として加えた。−７８℃で１時間撹拌し、次いで該反応物を終夜室温まで昇温した。Ｈ２Ｏを添加することによって該溶液をクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出し、次いで塩水で洗浄し、濃縮した。粗製の物質を、ＥｔＯＡｃおよびヘキサン(１：１０)で溶出するＳｉＯ２のカラムクロマトグラフィーによって精製し、２−クロロ−３−ヨード−６−(トリフルオロメチル)ピリジンを収率３５％で得た。
LCMS (m/z): 307.8 (MH+);
LC Rt = 4.18分。
【０４６５】
２−クロロ−４−ヨード−６−(トリフルオロメチル)ピリジンの合成
【化２８２】
2010520228.tif 000359
ＴＨＦの冷却(−７５℃)した溶液に、ｎ−ＢｕＬｉ(１.１当量)を加え、続いてジイソプロピルアミン(１.１当量)を滴下した。該反応物を１０分間撹拌し、次いで、ＴＨＦ中で、２−クロロ−３−ヨード−６−(トリフルオロメチル)ピリジン(１.０当量)を滴下した。該溶液を−７５℃で１時間撹拌し、次いで１Ｎ  ＨＣｌを添加してクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出し、塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濃縮し、黄褐色の固体を収率８５％で得た。
LCMS (m/z): 307.8 (MH+);
LC Rt = 4.28分。
【０４６６】
Ｎ−(３,４−ジメトキシベンジル)−４−ヨード−６−(トリフルオロメチル)ピリジン−２−アミンの合成
【化２８３】
2010520228.tif 000360
ＮＭＰ中の、２−クロロ−４−ヨード−６−(トリフルオロメチル)ピリジン(１.０当量)、(３,４−ジメトキシフェニル)メタンアミド(５.０当量)およびＥｔ３Ｎ(５.０当量)の溶液(０.７Ｍ)を、１００℃で１０分間マイクロ波照射した。該溶液を直接逆相ＨＰＬＣによって精製し、純粋なフラクションを固体のＮａＨＣＯ３で中性にして、ＥｔＯＡｃで抽出し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濃縮し、Ｎ−(３,４−ジメトキシベンジル)−４−ヨード−６−(トリフルオロメチル)ピリジン−２−アミンを収率３６％で得た。
LCMS (m/z): 347.1 (MH+);
LC Rt = 3.96分。
【０４６７】
３−アミノ−６−(２,６−ジフルオロフェニル)ピコリン酸メチルの合成
【化２８４】
2010520228.tif 000361
３：１  ＤＭＥ／２Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３中の、３−アミノ−６−ブロモピコリン酸メチル(１.０当量)、２,６−ジフルオロフェニル−ボロン酸(３.０当量)およびＰｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.１当量)の溶液(０.５Ｍ)を、１２０℃で１５分間間隔でマイクロ波照射した。該反応物を濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。有機物をＨ２Ｏ(２５ml)で分配し、さらにＮａＣｌ(飽和)(２５ml)で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、揮発成分を真空で除去した。残渣をＥｔＯＡｃで希釈し、シリカゲルのプラグに通し、揮発成分を真空で除去し、３−アミノ−６−(２,６−ジフルオロフェニル)ピコリン酸メチルを得た(４７％)。
LCMS (m/z): 265.1 (MH+);
LC Rt = 2.70分。
【０４６８】
３−アミノ−６−(２,６−ジフルオロフェニル)ピコリン酸の合成
【化２８５】
2010520228.tif 000362
ＴＨＦ中の３−アミノ−６−(２,６−ジフルオロフェニル)ピコリン酸メチル(１.０当量)の溶液(０.５Ｍ)に、１Ｍ  ＬｉＯＨ(４.０当量)を加えた。６０℃で４時間撹拌した後、１Ｎ  ＨＣｌ(４.０当量)を加え、ＴＨＦを真空で除去した。得られた固体を濾過し、冷水(３×２０ml)で濯ぎ、３−アミノ−６−(２,６−ジフルオロフェニル)ピコリン酸を得た(９０％)。
LCMS (m/z): 251.1 (MH+);
LC Rt = 2.1分。
【０４６９】
３−アミノ−６−(チアゾール−２−イル)ピコリン酸メチルの合成
【化２８６】
2010520228.tif 000363
ＴＨＦ中０.５Ｍの３−アミノ−６−ブロモピコリン酸メチル(１.０当量)、臭化 ２−チアゾリル亜鉛の溶液(３.０当量)、および、Ｐｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.０５当量)の溶液を、８０℃で１.５時間撹拌した。該反応物を濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。有機物をＨ２Ｏ(１００ml)で洗浄し、さらにＮａＣｌ(飽和)(５０ml)で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、揮発成分を真空で除去した。該生成物をヘキサン／ＥｔＯＡｃ(１：１)で結晶化し、３−アミノ−６−(チアゾール−２−イル)ピコリン酸メチルを得た(５１％)。
LCMS (m/z): 236.1 (MH+);
LC Rt = 2.3分。
【０４７０】
３−アミノ−６−(チアゾール−２−イル)ピコリン酸の合成
【化２８７】
2010520228.tif 000364
ＴＨＦ中の３−アミノ−６−(チアゾール−２−イル)ピコリン酸メチル(１.０当量)の溶液(０.５Ｍ)に、１Ｍ  ＬｉＯＨ(４.０当量)を加えた。６０℃で４時間撹拌した後、１Ｎ  ＨＣｌ(４.０当量)を加え、ＴＨＦを真空で除去した。得られた固体を濾過し、冷水(３×２０ml)で濯ぎ、３−アミノ−６−(チアゾール−２−イル)ピコリン酸を得た(６１％)。
LCMS (m/z): 222.1 (MH+);
LC Rt = 1.9分。
【０４７１】
３−アミノ−６−(２−フルオロ−５−イソプロピルカルバモイル)フェニル)ピコリン酸メチルの合成
【化２８８】
2010520228.tif 000365
ＤＭＥ／２Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３(３：１)中の濃度０.５Ｍの３−アミノ−６−ブロモピコリン酸メチル(１.０当量)、Ｎ−イソプロピル ３−ブロモ−４−フルオロベンズアミド(１.１当量)、および、Ｐｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.１５当量)の溶液を、１２０℃で１.５時間撹拌した。該反応物を濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。有機物をＨ２Ｏ(２５ml)で分配し、ＮａＣｌ(飽和)(２５ml)で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、揮発成分を真空で除去した。残渣をＥｔＯＡｃで希釈し、シリカゲルのプラグに通し、揮発成分を真空で除去し、３−アミノ−６−(２−フルオロ−５−イソプロピルカルバモイル)フェニル)ピコリン酸メチルを得た(６０％)。
LCMS (m/z): 332.2 (MH+);
LC Rt = 2.9分。
【０４７２】
３−アミノ−６−(２−フルオロ−５−イソプロピルカルバモイル)フェニル)ピコリン酸の合成
【化２８９】
2010520228.tif 000366
ＴＨＦ中の３−アミノ−６−(２−フルオロ−５−イソプロピルカルバモイル)フェニル)ピコリン酸メチル(１.０当量)の溶液(０.５Ｍ)に、１Ｍ  ＬｉＯＨ(４.０当量)を加えた。６０℃で４時間撹拌した後、１Ｎ  ＨＣｌ(４.０当量)を加え、ＴＨＦを真空で除去した。得られた固体を濾過し、冷水(３×２０ml)で濯ぎ、３−アミノ−６−(２−フルオロ−５−イソプロピルカルバモイル)フェニル)ピコリン酸を得た(９８％)。
LCMS (m/z): 318.1 (MH+);
LC Rt = 2.4分。
【０４７３】
３−アミノ−Ｎ−(４−クロロピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)ピコリンアミドの合成
【化２９０】
2010520228.tif 000367
ＤＣＭ中の濃度０.２Ｍの３−アミノ−６−(２,６−ジフルオロフェニル)ピコリン酸(１.０当量)、４−クロロピリジン−３−アミン(２.０当量)、ＨＯＡｔ(１.０当量)、および、ＥＤＣ(１.０当量)の溶液を２４時間撹拌した。水を該反応物に加え、続いてＥｔＯＡｃを加えた。有機層を分離し、塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濃縮した。粗製の物質を、ＥｔＯＡｃおよびヘキサン(１：１)で溶出するＳｉＯ２のカラムクロマトグラフィーによって精製し、生成物を明黄色の固体として得た(収率２１％)。
LCMS (m/z): 361.1(MH+);
LC Rt = 3.28分。
【０４７４】
＜方法２８＞
３−アミノ−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−Ｎ−(３'−フルオロ−４,４'−ビピリジン−３−イル)ピコリンアミドの合成
【化２９１】
2010520228.tif 000368
ＤＭＥ／２Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３(３：１)中の、３−アミノ−Ｎ−(４−クロロピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)ピコリンアミド(１.０当量)、３−フルオロピリジン−４−イル ボロン酸(３.０当量)、および、Ｐｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.１０当量)の溶液を、１２０℃で、マイクロ波照射により、１０分間加熱した。冷却後、該反応物をＥｔＯＡｃで抽出し、有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮した。粗製の物質を逆相ＨＰＬＣによって精製した。生成物のフラクションを凍結乾燥し、３−アミノ−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−Ｎ−(３'−フルオロ−４,４'−ビピリジン−３−イル)ピコリンアミドをＴＦＡ塩として収率１２％で得た。
LCMS (m/z): 404.1 (MH+);
LC Rt = 2.92分。
【０４７５】
下記の化合物は、方法２８を用いて製造された：
【表７７】
2010520228.tif 000369
【０４７６】
【表７８】
2010520228.tif 000370
【０４７７】
【表７９】
2010520228.tif 000371
【０４７８】
＜方法２９＞
３−アミノ−Ｎ−(４−(６−アミノピラジン−２−イル)ピリジン−３−イル)−６−(２−フルオロフェニル)ピコリンアミドの合成
【化２９２】
2010520228.tif 000372
ジオキサン中の、３−アミノ−Ｎ−(４−クロロピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)ピコリンアミド(１.０当量)、ビス(ピナコレート)ジボラン(２.０当量)、Ｐｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.１０当量)、ＫＯＡｃ(２.０当量)の溶液(０.１９Ｍ)を、マイクロ波中で、１２０℃で５分間、次いで１２０℃で１０分間撹拌した。該反応物を濾過し、濃縮した。粗製の物質に、ＤＭＥ／２Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３(３：１)中の６−クロロピラジン−２−アミン(２.０当量)およびさらなるＰｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.１０当量)(０.１Ｍ)を加えた。該反応物を、１００℃で、油浴中で２時間加熱した。室温まで冷却し、Ｈ２ＯおよびＥｔＯＡｃを加え、有機層を抽出し、塩水で、そしてＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮した。粗製の混合物を逆相ＨＰＬＣを介して精製し、純粋なフラクションを凍結乾燥し、３−アミノ−Ｎ−(４−(６−アミノピラジン−２−イル)ピリジン−３−イル)−６−(２−フルオロフェニル)ピコリンアミドをＴＦＡ塩として収率１９％で得た。
LCMS (m/z): 402.1 (MH+);
LC Rt = 2.58分。
【０４７９】
下記の化合物は、方法２９を用いて製造された：
【表８０】
2010520228.tif 000373
【０４８０】
【表８１】
2010520228.tif 000374
【０４８１】
＜方法３０＞
(ｓ)−３−アミノ−Ｎ−(４−(３−アミノピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)−６−シクロヘキシルピコリンアミドの合成
【化２９３】
2010520228.tif 000375
(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−(３−アミノ−６−ブロモピコリンアミド)ピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメート(１.０当量)、臭化 シクロヘキシル亜鉛(ＴＨＦ中０.５Ｍ溶液, ３.０当量)、Ｐｄ２(ｄｂａ)３(０.１当量)、および、Ｐ(２−フリル)３(０.２当量)の溶液を、６５℃で１８時間加熱した。１８時間後に反応が完了していなければ、２当量以上の臭化亜鉛反応剤を加えた。該混合物を室温まで冷却し、濃縮し、粗製の物質を得た。次いで、完了するまで、粗製の混合物を、ＤＣＭ／ＴＦＡ(２５％)中で撹拌した。反応物を濃縮して乾固させ、逆相ＨＰＬＣを介して精製した。純粋なフラクションを凍結乾燥し、ＴＦＡ塩である生成物を得た(４０％)。
LCMS (m/z): 395.3 (MH+);
LC Rt = 2.34分。
【０４８２】
３−アミノ−Ｎ−(４−(６−アミノ−２−(トリフルオロメチル)ピリミジン−４−イル)ピリジン−３−イル)−６−(チアゾール−２−イル)ピコリンアミドの合成
【化２９４】
2010520228.tif 000376
方法３０に従って、ＴＨＦ中の、６−(３−(３−アミノ−６−ブロモピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−２−(トリフルオロメチル)ピリミジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル(１.０当量)、臭化２−チアゾリル−亜鉛(３.５当量)、および、Ｐｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.１０当量)の溶液を、１００℃で１５分間マイクロ波照射した。該反応物を真空下で濃縮乾固し、次いで、ＤＣＭ／ＴＦＡ(２５％)中で、２時間撹拌した。濃縮し、逆相ＨＰＬＣによって精製した後、３−アミノ−Ｎ−(４−(６−アミノ−２−(トリフルオロメチル)ピリミジン−４−イル)ピリジン−３−イル)−６−(チアゾール−２−イル)ピコリンアミドをＴＦＡ塩として収率４８％で得た。
LCMS (m/z): 459.1 (MH+);
LC Rt = 2.46分。
【０４８３】
下記の化合物はまた、方法３０を用いて製造された：
【表８２】
2010520228.tif 000377
【０４８４】
【表８３】
2010520228.tif 000378
【０４８５】
【表８４】
2010520228.tif 000379
【０４８６】
４−クロロ−６−メチルピリジン−２−アミンの合成
【化２９５】
2010520228.tif 000380
ジオキサンの１０％  水溶液(０.１Ｍ)を、４,６−ジクロロピリジン−２−アミン(１.０当量)、トリメチルボロキシン(１.５当量)、Ｐｄ(ＰＰｈ３)４(０.１０当量)およびＫ２ＣＯ３(３.０当量)を加えた。該溶液を、油浴中で、１２０℃で１８時間加熱し、室温まで冷却し(全ての出発物質が消費されたわけではない)、ＥｔＯＡｃで抽出し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮した。粗製の物質を５％  ＭｅＯＨ／ＤＣＭで溶出するＳｉＯ２のカラムクロマトグラフィーによって精製し、灰白色の固体を収率２３％で得た。
LCMS (m/z): 143 (MH+);
LC Rt = 1.11分。
【０４８７】
６−メチル−３'−ニトロ−４,４'−ビピリジン−２−アミンの合成
【化２９６】
2010520228.tif 000381
ジオキサン中の４−クロロ−６−メチルピリジン−２−アミン(１.０当量)の溶液に、ビス(ピナコレート)ジボラン(２.０当量)、Ｐｄ２(ｄｂａ)３(０.０５当量)、ＰＣｙ３(０.０７５当量)およびＫＯＡｃ(３.０当量)を加えた。該反応物を１１０℃で３時間加熱し、次いで濾過し、濃縮した。粗製の物質を真空下で乾燥させ、次いでＤＭＥ／２Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３(３：１)に溶解し、４−クロロ−３−ニトロピリジン(２.０当量)を加え、続いてＰｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.１当量)を加えた。該混合物を１２０℃で１時間加熱し、次いでＥｔＯＡｃおよびＨ２Ｏを加え、有機相を除去し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮した。ＥｔＯＡｃで溶出するＳｉＯ２のカラムクロマトグラフィーによって精製し、６−メチル−３'−ニトロ−４,４'−ビピリジン−２−アミンを収率３５％で得た。
LCMS (m/z): 231.1 (MH+)
LC Rt = 1.47分。
【０４８８】
６−エチル−Ｎ,Ｎ−ジ−ＢＯＣ−３'−ニトロ−４,４'−ビピリジン−２−アミンの合成
【化２９７】
2010520228.tif 000382
ＴＨＦ中の６−メチル−３'−ニトロ−４,４'−ビピリジン−２−アミンの溶液(０.０９Ｍ)に、ＢＯＣ２Ｏ(２.２当量)、Ｅｔ３Ｎ(２.５当量)およびＤＭＡＰ(触媒量)を加えた。５時間後、該溶液を濃縮し、ＥｔＯＡｃで溶出するＳｉＯ２のプラグで濾過し、６−エチル−Ｎ,Ｎ−ジ−ＢＯＣ−３'−ニトロ−４,４'−ビピリジン−２−アミンを収率＞９５％で得た。
LCMS (m/z): 431.1 (MH+);
LC Rt = 4.29分。
【０４８９】
６−エチル−Ｎ２,Ｎ２−ジ−ＢＯＣ−４,４'−ビピリジン−２,３'−ジアミンの合成
【化２９８】
2010520228.tif 000383
ＥｔＯＨ／ＥｔＯＡｃ(１：１)中の、６−メチル−Ｎ,Ｎ−ジ−ＢＯＣ−３'−ニトロ−４,４'−ビピリジン−２−アミンの溶液(０.２Ｍ)に、Ｐｄ／Ｃ(１０重量％)を加え、該反応物をＨ２のバルーン下で１８時間撹拌した。セライトで濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄し、濾液を濃縮し、６−エチル−Ｎ２,Ｎ２−ジ−ＢＯＣ−４,４'−ビピリジン−２,３'−ジアミンを収率＞９５％で得た。
LCMS (m/z): 401.0 (MH+);
LC Rt = 2.81分。
【０４９０】
３−アミノ−６−ブロモ−Ｎ−(２'−(ジ−ＢＯＣ−アミノ)−６'−メチル−４,４'−ビピリジン−３−イル)ピコリンアミドの合成
【化２９９】
2010520228.tif 000384
６−メチル−Ｎ２,Ｎ２−ジ−ＢＯＣ−４,４'−ビピリジン−２,３'−ジアミン(１.０当量)、３−アミノ−６−ブロモピコリン酸(１.０当量)、ＥＤＣ(１.０当量)、ＨＯＡｔ(１.０当量)を用いて、ＮＭＰ(０.４８Ｍ)中で、方法２７を行い、３−アミノ−６−ブロモ−Ｎ−(２'−(ジ−ＢＯＣ−アミノ)−６'−メチル−４,４'−ビピリジン−３−イル)ピコリンアミドを得た(３５％)。
LCMS (m/z): 599.1/601.1 (MH+);
LC Rt = 3.69分。
【０４９１】
４−クロロ−６−エチルピリジン−２−アミンの合成
【化３００】
2010520228.tif 000385
ＴＨＦ中の４,６−ジクロロピリジン−２−アミン(１.０当量)の溶液(０.１Ｍ)に、Ｐｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.１Ｍ)、Ｋ２ＣＯ３(３.０当量)およびＥｔ２Ｚｎ(１.２当量)を加えた。該反応物を７０℃で１８時間加熱した。室温まで冷却した後、ＮＨ４Ｃｌ(飽和)を加え、該混合物をＥｔＯＡｃで抽出し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮した。粗製の物質を、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ(２％)で溶出するＳｉＯ２のカラムクロマトグラフィーによって精製し、４−クロロ−６−エチルピリジン−２−アミンを収率３３％で得た。
LCMS (m/z): 157.1 (MH+).
【０４９２】
４−クロロ−６−エチル−Ｎ,Ｎ−ジ−ＢＯＣ−ピリジン−２−アミンの合成
【化３０１】
2010520228.tif 000386
４−クロロ−６−エチルピリジン−２−アミン(１.０当量)、ＢＯＣ２Ｏ(２.０当量)およびＤＭＡＰ(触媒量)を用いて、ＤＣＭ中で、方法２４を行い、４−クロロ−６−エチル−Ｎ,Ｎ−ジ−ＢＯＣ−ピリジン−２−アミンを得た(収率２７％)。
LCMS (m/z): 357.1 (MH+);
LC Rt = 4.11分。
【０４９３】
６−エチル−Ｎ,Ｎ−ジ−ＢＯＣ−４−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)ピリジン−２−アミンの合成
【化３０２】
2010520228.tif 000387
ジオキサン中の、４−クロロ−６−エチル−Ｎ,Ｎ−ジ−ＢＯＣ−ピリジン−２−アミン(１.０当量)、ビス(ピナコレート)ジボラン(２.０当量)、Ｐｄ２(ｄｂａ)３(０.０５当量)、ＰＣｙ３(０.０７５当量)、ＫＯＡｃ(２.０当量)の溶液(０.１９Ｍ)を、窒素を丸底フラスコに１０分間通気することによって脱気した。該フラスコを９０℃で３時間加熱し、室温まで冷却し、活性炭とセライトで濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。濾液を濃縮した後、粘稠な暗褐色の粗製の６−エチル−Ｎ,Ｎ−ジ−ＢＯＣ−４−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)ピリジン−２−アミンを得た。
LCMS (m/z): 367.1 (MH+, 対応するボロン酸について).
【０４９４】
３−アミノ−Ｎ−(２'−アミノ−６'−フルオロ−４,４'−ビピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)ピコリンアミドの合成
【化３０３】
2010520228.tif 000388
ＮＭＰおよびＮＨ４ＯＨ(２：３)中の３−アミノ−Ｎ−(２',６'−ジフルオロ−４,４'−ビピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)ピコリンアミド(１.０当量)の溶液(０.０５Ｍ)を、マイクロ波中、１２０℃で８分間加熱した。該混合物を直接逆相ＨＰＬＣによって精製し、３−アミノ−Ｎ−(２'−アミノ−６'−フルオロ−４,４'−ビピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)ピコリンアミドをＴＦＡ塩として得た。
LCMS (m/z): 437.1 (MH+);
LC Rt = 2.79分。
【０４９５】
５−アミノ−Ｎ−(２'−アミノ−６'−メチル−４,４'−ビピリジン−３−イル)−３'−フルオロ−２,２'−ビピリジン−６−カルボキサミドの合成
【化３０４】
2010520228.tif 000389
ジオキサンの脱気した溶液(０.０３Ｍ)に、３−アミノ−６−ブロモ−Ｎ−(２'−(ジ−ＢＯＣ−アミノ)−６'−メチル−４,４'−ビピリジン−３−イル)ピコリンアミド(１.０当量)、ビス(ピナコレート)ジボラン(２.０当量)、Ｐｄ２(ｄｂａ)３(０.０５当量)、ＰＣｙ３(０.０７５当量)およびＫＯＡｃ(３.０当量)を加えた。全ての出発物質が消費されるまで、該溶液を９０℃で１６時間加熱した。該反応物を濾過し、濾液を濃縮した。粗製の物質を真空下で乾燥し、次いでＤＭＥ／２Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３(３：１, ０.０５Ｍ)に溶解し、続いて２−ブロモ−３−フルオロピリジン(２.０当量)およびＰｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.１０当量)を加えた。ボロン酸エステルが消費されるまで、該反応物を油浴中で１００℃で加熱した。室温まで冷却し、Ｈ２ＯおよびＥｔＯＡｃを加え、有機相を塩水で洗浄し、次いでＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮した。粗製の物質を、ＥｔＯＡｃおよびヘキサン(１：１)で溶出するＳｉＯ２のカラムクロマトグラフィーによって精製し、純粋な生成物を濃縮し、脱保護が完了するまでＤＣＭ／ＴＦＡ(２５％)中で撹拌した。該反応物を濃縮乾固し、逆相ＨＰＬＣによって精製し、５−アミノ−Ｎ−(２'−アミノ−６'−メチル−４,４'−ビピリジン−３−イル)−３'−フルオロ−２,２'−ビピリジン−６−カルボキサミドを得た。
LCMS (m/z): 416.2 (MH+);
LC Rt = 1.77分。
【０４９６】
＜方法３１＞
３−アミノ−Ｎ−(４−(６−アミノ−２−(トリフルオロメチル)−ピリミジン−４−イル)ピリジン−３−イル)−６−(チアゾール−４−イル)ピコリンアミドの合成
【化３０５】
2010520228.tif 000390
ジオキサン中の６−(３−(３−アミノ−６−ブロモピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−２−(トリフルオロメチル)ピリミジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル(１.０当量)、４−(トリブチルスタンニル)チアゾール(３.０当量)、および、Ｐｄ(ＰＰｈ３)４(０.１０当量)の溶液(０.１０Ｍ)を、１２０℃で１０分間マイクロ波照射した。次いで該反応物を直接逆相ＨＰＬＣによって精製し、凍結乾燥した。次いで、脱保護が完了するまで、生成物をＤＣＭ／ＴＦＡ(２５％)中で撹拌し、濃縮し、逆相ＨＰＬＣによって精製し、凍結乾燥し、３−アミノ−Ｎ−(４−(６−アミノ−２−(トリフルオロメチル)ピリミジン−４−イル)ピリジン−３−イル)−６−(チアゾール−４−イル)ピコリンアミドを収率１４％でＴＦＡ塩として得た。
LCMS (m/z): 459.1 (MH+);
LC Rt = 2.49分。
【０４９７】
(Ｓ)−３−アミノ−Ｎ−(４−(３−アミノピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)−６−(オキサゾール−２−イル)ピコリンアミドの合成
【化３０６】
2010520228.tif 000391
(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−(３−アミノ−６−ブロモピコリンアミド)ピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメート(１.０当量)、２−(トリブチルスタンニル)オキサゾール(３.０当量)、および、Ｐｄ(ＰＰｈ３)４(０.１０当量)を用いて、ジオキサン中で、方法３１を行い、(Ｓ)−３−アミノ−Ｎ−(４−(３−アミノピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)−６−(オキサゾール−２−イル)ピコリンアミドを収率５５％でＴＦＡ塩として得た。
LCMS (m/z): 380.1 (MH+);
LC Rt = 1.55分。
【０４９８】
(Ｓ)−３−アミノ−Ｎ−(４−(３−アミノピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)−６−シクロプロピルピコリンアミドの合成
【化３０７】
2010520228.tif 000392
(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−(３−アミノ−６−ブロモピコリンアミド)ピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメート(１.０当量)、２−シクロプロピル−４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン(borolante)(３.０当量)およびＰｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.１０当量)を用いて、１４０℃で１０分間、方法３１を行い、(Ｓ)−３−アミノ−Ｎ−(４−(３−アミノピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)−６−シクロプロピルピコリンアミドを収率８％で得た。
LCMS (m/z): 353.1 (MH+);
LC Rt = 1.59分。
【０４９９】
＜方法３２＞
３−アミノ−Ｎ−(４−((３Ｒ,４Ｒ)−３−アミノ−４−ヒドロキシピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)ピコリンアミドの合成
【化３０８】
2010520228.tif 000393
方法１１(実施例２４９)に従って、３−アミノ−６−(２,６−ジフルオロフェニル)ピコリン酸、および、(３Ｒ,４Ｒ)−１−(３−アミノピリジン−４−イル)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルをカップリングさせ、ＨＰＬＣ精製後、(３Ｒ,４Ｒ)−１−(３−(３−アミノ−６−(２,６−ジフルオロフェニル)ピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た。あるいは、(３Ｒ,４Ｒ)−１−(３−(３−アミノ−６−(２,６−ジフルオロフェニル)ピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルは、(３Ｒ,４Ｒ)−１−(３−(３−アミノ−６−ブロモ−ピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルおよび２,６−ジフルオロフェニルボロン酸から出発し、方法１４に概略されたSuzuki法に従って得られた。(３Ｒ,４Ｒ)−１−(３−(３−アミノ−６−(２,６−ジフルオロフェニル)ピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルのＴＢＤＭＳ脱保護を、６Ｎ  ＨＣｌ、ＴＨＦ、メタノール(１：２：１)で、室温で２時間行った。揮発性物質を除去した後、粗製の物質を、ジクロロメタン中３０％  ＴＦＡ中で、２時間撹拌した。揮発性物質を真空で除去し、精製し、凍結乾燥した後、３−アミノ−Ｎ−(４−((３Ｒ,４Ｒ)−３−アミノ−４−ヒドロキシピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)ピコリンアミドを得た。
HPLC. LCMS (m/z): 441.2 (MH+); 
LC Rt = 2.03分。
【０５００】
下記の化合物は、方法３２を用いて合成される：
【表８５】
2010520228.tif 000394
【０５０１】
【表８６】
2010520228.tif 000395
【０５０２】
【表８７】
2010520228.tif 000396
【０５０３】
【表８８】
2010520228.tif 000397
【０５０４】
【表８９】
2010520228.tif 000398
【０５０５】
【表９０】
2010520228.tif 000399
【０５０６】
＜方法３３＞
(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−(３−アミノ−６−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)ピコリンアミド)ピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメートの合成
【化３０９】
2010520228.tif 000400
ジオキサン中の、(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−(３−アミノ−６−ブロモ−ピコリンアミド)ピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメート(１.０当量)、ビス(ピナコレート)ジボラン(２.０当量)、ＫＯＡｃ(３当量)、トリスシクロヘキシルホスフィン(０.０７５当量)の溶液(０.１６Ｍ)を、アルゴンを１０分間通気することによって脱気した。その時点で、Ｐｄ２(ｄｂａ)３(０.０５当量)を加えた。ガラス容器を密封し、９０℃で３時間加熱し、室温まで冷却し、濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄し、濃縮し、粘稠な褐色の粗生成物を得た。これをそのまま用いた。
LCMS (m/z): 457.2 (MH+, 対応するボロン酸について).
【０５０７】
(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−(３−アミノ−６−ブロモ−５−フルオロピコリンアミド)ピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメートの合成
【化３１０】
2010520228.tif 000401
実施例３０５の方法１１に従って、(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−アミノピリジン−４−イル)−４−フルオロピペリジン−３−イルカルバメート、および、３−アミノ−６−ブロモ−５−フルオロピコリン酸を反応させ、(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−(３−アミノ−６−ブロモ−５−フルオロピコリンアミド)ピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメートを得た(４０％)。
LCMS (m/z): 509.0 (MH+),
LC Rt = 3.04分。
【０５０８】
(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−(３−アミノ−５−フルオロ−６−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)ピコリンアミド)ピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメートの合成
【化３１１】
2010520228.tif 000402
(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−(３−アミノ−６−ブロモ−５−フルオロピコリンアミド)ピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメートで出発して、方法３３を行い、(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−(３−アミノ−５−フルオロ−６−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)ピコリンアミド)ピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメートを得た。
LCMS (m/z): 475.2 (MH+, 対応するボロン酸について);
LC Rt = 2.16分。
【０５０９】
(３Ｒ,４Ｒ)−１−(３−(３−アミノ−６−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)ピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化３１２】
2010520228.tif 000403
(３Ｒ,４Ｒ)−１−(３−(３−アミノ−６−ブロモ−ピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルで出発して、方法３３を行い、(３Ｒ,４Ｒ)−１−(３−(３−アミノ−６−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)ピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た。
LCMS (m/z): 587.3  (MH+, 対応するボロン酸について).
【０５１０】
＜方法３４＞
(Ｓ)−５−アミノ−Ｎ−(４−(３−アミノピペリジン−１−イル)−ピリジン−３−イル)−２,２'−ビピリジン−６−カルボキサミドの合成
【化３１３】
2010520228.tif 000404
３：１  ジメトキシエタン／２Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３中の、(Ｓ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−(３−アミノ−６−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)ピコリンアミド)ピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメート(１.０当量)、２−ブロモピリジン(１.０当量)、および、Ｐｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.１０当量)の溶液を、マイクロ波中、１１０℃で１５分間加熱した。有機層を分離し、揮発成分を真空で除去し、粗製の物質をＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し、凍結乾燥した後、Ｎ−Ｂｏｃ生成物を得た。２５％  ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２で２時間処理することによって、Ｂｏｃ基を除去した。真空で揮発成分を除去し、ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し、凍結乾燥した後、(Ｓ)−５−アミノ−Ｎ−(４−(３−アミノピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)−２,２'−ビピリジン−６−カルボキサミドが得られた(１２％)。遊離塩基および塩酸塩が、方法９に記載された通りに得られた(実施例１１５)。
HPLC. LCMS (m/z): 390.2 (MH+);
LC Rt = 1.11分。
1H NMR (HCl塩) (DMSOd6): δ 10.46(s, 1H), 9.15(s, 1H), 8.61-8.65(m, 1H), 8.44-8.47(m, 1H), 8.34(d, J=9.0Hz, 2H), 7.90-8.05(m, 3H), 7.41(d, J=8.7Hz, 2H), 7.22-7.33(m, 3H), 2.75-3.60 (m, 5H), 1.20-1.95(m, 4H).
【０５１１】
ヒドロキシル官能基を含む方法３４を用いて製造された化合物について、方法３２に記載された通りにＢｏｃを除去する前に、シリル保護基を除去した。
【０５１２】
下記の化合物は、方法３４を用いて製造された：
【表９１】
2010520228.tif 000405
【０５１３】
【表９２】
2010520228.tif 000406
【０５１４】
【表９３】
2010520228.tif 000407
【０５１５】
【表９４】
2010520228.tif 000408
【０５１６】
【表９５】
2010520228.tif 000409
【０５１７】
【表９６】
2010520228.tif 000410
【０５１８】
【表９７】
2010520228.tif 000411
【０５１９】
【表９８】
2010520228.tif 000412
【０５２０】
【表９９】
2010520228.tif 000413
【０５２１】
実施例７５１
３−アミノ−Ｎ−(４−((Ｓ)−３−アミノピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロ−３−ヒドロキシフェニル)−５−フルオロピコリンアミド
【化３１４】
2010520228.tif 000414
３−アミノ−Ｎ−(４−((Ｓ)−３−アミノピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)−６−(３−(ベンジルオキシ)−２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリンアミドを、２０ｗｔ％  Ｐｄ／Ｃと共に用いて、メタノール中で(０.１Ｍ溶液)、実施例４９の方法２を行った。Ｂｏｃ保護生成物を分取ＨＰＬＣによって精製した。揮発性物質を除去した後、粗製の物質をジクロロメタン中３０％  ＴＦＡ中で撹拌した。揮発性物質を真空で除去した後、３−アミノ−Ｎ−(４−((Ｓ)−３−アミノピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロ−３−ヒドロキシフェニル)−５−フルオロピコリンアミドが、分取ＨＰＬＣによって得られた。
LCMS (m/z): 459.2 (MH+);
LC Rt = 2.10分。
【０５２２】
３−アミノ−６−シクロヘキシルピコリン酸メチルの合成
【化３１５】
2010520228.tif 000415
３−アミノ−６−ブロモピコリン酸メチル(１.０当量)、ＴＨＦ中０.５Ｍの臭化シクロヘキシル亜鉛の溶液(１.５当量)、および、テトラキス(トリフェニルホスフィン)−パラジウム(0)(０.０５当量)の溶液を５０℃で１５分間撹拌した。該反応物を濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。有機物を、Ｈ２Ｏ(１００ml)で、そしてＮａＣｌ(飽和)(５０ml)で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、揮発成分を真空で除去した。生成物を、シリカで、Isco の０〜６５％のヘキサン／ＥｔＯＡｃの濃度勾配を利用して精製し、３−アミノ−６−シクロヘキシルピコリン酸メチルを得た(９８％)。
LCMS (m/z): 235.2 (MH+);
LC Rt = 1.89分。
【０５２３】
３−アミノ−６−シクロヘキシルピコリン酸の合成
【化３１６】
2010520228.tif 000416
ＴＨＦ中濃度０.５Ｍの３−アミノ−６−シクロヘキシルピコリン酸メチル(１.０当量)の溶液に、１Ｍ  ＬｉＯＨ(４.０当量)を加えた。室温で４時間撹拌した後、１Ｎ  ＨＣｌ(４.０当量)を加え、ＴＨＦを真空で除去した。得られた固体を濾過し、冷水(３×２０ml)で濯ぎ、３−アミノ−６−シクロヘキシルピコリン酸を得た(１８％)。
LCMS (m/z): 221.0 (MH+);
LC Rt = 4.1分。
【０５２４】
３０mlのメタノール中の(３Ｒ,５Ｒ)−３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−フルオロピペリジン(１当量)の溶液に、イソプロパノール中３.８Ｍ  ＨＣｌ(４当量)を加えた。該反応混合物を室温で３時間放置した。その時点で、それを減圧下で濃縮した。得られた残渣を１２０mlのＥｔＯＡｃで希釈し、飽和水性重炭酸ナトリウムで、そして塩水で洗浄し、次いで無水ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。粗製の残渣をフラッシュクロマトグラフィーによって精製し(ＥｔＯＡｃ：ヘキサン＝２：１)、(３Ｒ,５Ｒ)−ベンジル−３−フルオロ−５−ヒドロキシピペリジン−１−カルボキシレートを得た(９４％)。
LC/MS (m/z): 254.2 (MH+). 
【０５２５】
(３Ｓ,５Ｒ)−ベンジル ３−アジド−５−フルオロピペリジン−１−カルボキシレートの合成
【化３１７】
2010520228.tif 000417
１４mlのジクロロメタン中の(３Ｒ,５Ｒ)−ベンジル ３−フルオロ−５−ヒドロキシピペリジン−１−カルボキシレート(１当量)の溶液に、トリエチルアミン(３当量)および塩化メタンスルホニル(１.５当量)を０℃で加えた。該反応混合物を室温で１.５時間撹拌した。粗製の混合物を１２０mlのジエチルエーテルで希釈し、飽和水性重炭酸ナトリウムで、そして塩水で洗浄し、次いで無水ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。粗製の残渣を１６mlのＮＭＰに溶解した。アジ化ナトリウム(３.０当量)を加え、得られた懸濁液を８０℃で終夜撹拌した。該反応混合物を、２００mlのＥｔＯＡｃおよび１００mlのヘキサンで希釈し、水で、そして塩水で洗浄し、次いで無水ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。粗製の残渣をフラッシュクロマトグラフィーによって精製し(ＥｔＯＡｃ：ヘキサン＝１：３)、表題化合物を得た(９０％)。
LC/MS (m/z): 251.1 (MH+-28). 
【０５２６】
(３Ｓ,５Ｒ)−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−５−フルオロピペリジン−１−カルボキシレートの合成
【化３１８】
2010520228.tif 000418
１１mlのピリジンおよび１.５mlの水酸化アンモニウムの混合物中の、(３Ｓ,５Ｒ)−ベンジル ３−アジド−５−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート(１当量)の溶液に、１Ｍ  トリメチルホスフィン(３当量)を室温で加えた。該反応混合物を室温で３時間撹拌した。その時点で、溶媒を減圧下で除去し、黄色の油状物を得た。再度油状物を１００mlのエタノールに溶解し、濃縮し、水酸化アンモニウムを完全に除去した。残渣を１２mlの１,４−ジオキサンに溶解し、１２mlの飽和水性ＮａＨＣＯ３を加えた。６mlのＴＨＦ中のジ−ｔｅｒｔ−ブチル ジカーボネート(４当量)を０℃で滴下した。該混合物を室温で１時間撹拌した。粗製の混合物を１５０mlのＥｔＯＡｃで希釈し、塩水で洗浄し、次いで無水ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。粗製の残渣をフラッシュクロマトグラフィーによって精製し(ＥｔＯＡｃ：ヘキサン＝１：１)、表題化合物を得た(９５％)。
LC/MS (m/z): 253.1 (MH+-100).
【０５２７】
(３Ｓ,５Ｒ)−５−フルオロ−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化３１９】
2010520228.tif 000419
２８  メタノール中の、(３Ｓ,５Ｒ)−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−５−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート(１当量)の溶液に、１０％  Ｐｄ／Ｃ(０.１当量)を加えた。得られた懸濁液をＨ２雰囲気で１時間撹拌した。粗製の固体を濾紙をひいたブフナー漏斗上のセライトのパッドで濾過し、ＭｅＯＨで洗浄し、次いで真空で濃縮した。残渣を３３mlのイソプロパノールに溶解し、ＤＩＰＥＡ(２.５当量)および４−クロロ−３−ニトロピリジン(１.５当量)を加えた。該反応混合物を８０℃で２時間撹拌した。その時点で、該反応混合物を室温まで冷却し、減圧下で濃縮した。残渣を１５０mlのＥｔＯＡｃで希釈し、塩水で洗浄し、次いで無水ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。粗製の残渣をフラッシュクロマトグラフィーによって精製し(ＥｔＯＡｃ中５％メタノール：ヘキサン＝１：１)、表題化合物を得た(９０％)。
LC/MS (m/z): 341.1 (MH+).
HPLC: Rt: 2.115分。
【０５２８】
(３Ｓ,５Ｒ)−１−(３−アミノピリジン−４−イル)−５−フルオロピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化３２０】
2010520228.tif 000420
実施例４９の方法２に従って、(３Ｓ,５Ｒ)−５−フルオロ−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを還元し、(３Ｓ,５Ｒ)−１−(３−アミノピリジン−４−イル)−５−フルオロピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た。
LC/MS (m/z): 311.1 (MH+).
【０５２９】
(３Ｓ,５Ｒ)−１−(３−(３−アミノ−６−ブロモピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−５−フルオロピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化３２１】
2010520228.tif 000421
実施例３０５の方法１１に従って、(３Ｓ,５Ｒ)−１−(３−アミノピリジン−４−イル)−５−フルオロピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル、および、３−アミノ−６−ブロモピコリン酸をカップリングさせ、カラムクロマトグラフィーにかけた後、(３Ｓ,５Ｒ)−１−(３−(３−アミノ−６−ブロモピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−５−フルオロピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た。
LC/MS (m/z): 509.1/511.1 (MH+).
【０５３０】
ｃｉｓ−(＋／−)−１−ベンジル ３−メチル−５−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)ピペリジン−１,３−ジカルボキシレートの合成
【化３２２】
2010520228.tif 000422
ジクロロメタン中の濃度０.２５Ｍのｃｉｓ−(＋／−)−１−(ベンジルオキシカルボニル)−５−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)ピペリジン−３−カルボン酸(１.０当量)、メタノール(２０当量)およびＥＤＣ(１.３当量)の溶液に、０℃で、ジメチルアミノピリジン(０.１当量)を加えた。４８時間撹拌した後、該反応物を室温まで昇温し、揮発成分を真空で除去した。酢酸エチルを添加した後、Ｈ２Ｏ(３×)で、１Ｎ  ＨＣｌで、ＮａＨＣＯ３(飽和)で、そして塩水で洗浄し、該溶液をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮し、カラムクロマトグラフィーによって精製し(２５％  酢酸エチル／ヘキサン)、ｃｉｓ−(＋／−)−１−ベンジル ３−メチル−５−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)ピペリジン−１,３−ジカルボキシレートを得た。
LCMS (m/z): 293.1 (MH-Boc+ );
LC Rt = 4.09分。
【０５３１】
ｃｉｓ−(＋／−)−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−５−(ヒドロキシメチル)ピペリジン−１−カルボキシレートの合成
【化３２３】
2010520228.tif 000423
ＴＨＦ中の濃度０.０８Ｍのｃｉｓ−(＋／−)−１−ベンジル ３−メチル−５−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)ピペリジン−１,３−ジカルボキシレート(１.０当量)の溶液を０℃で冷却し、次いでＬｉＣｌ(２.３当量)および水素化ホウ素ナトリウム(２.３当量)を加えた。該反応物を室温まで温めながら、２０時間撹拌した後、ｐＨを、１Ｍ  クエン酸で、ｐＨ  ４〜５に調節した。真空で揮発成分を除去した後、該生成物をジクロロメタン中に抽出し、Ｈ２Ｏで、そして塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥した。濾過し、真空で揮発成分を除去した後、ｃｉｓ−(＋／−)−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−５−(ヒドロキシメチル)ピペリジン−１−カルボキシレートを、白色の泡状固体として得た。
LCMS (m/z): 265.0 (MH-Boc+ );
LC Rt = 3.37分。
【０５３２】
ｃｉｓ−(＋／−)−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−５−((ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)メチル)ピペリジン−１−カルボキシレートの合成
【化３２４】
2010520228.tif 000424
ジクロロメタン中の濃度０.１Ｍのｃｉｓ−(＋／−)−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−５−(ヒドロキシメチル)ピペリジン−１−カルボキシレート(１.０当量)、イミダゾール(１.１当量)、塩化 ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル(１.１当量)およびジメチルアミノピリジン(０.１当量)の溶液を、１８時間撹拌し、その時点で、揮発成分を真空で除去した。粗製の物質を直接カラムクロマトグラフィーによって精製し(２０％  酢酸エチル／ヘキサン)、ｃｉｓ−(＋／−)−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−５−((ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)メチル)ピペリジン−１−カルボキシレートを得た。
LCMS (m/z): 379.0 (MH-Boc+ );
LC Rt = 5.95分。
【０５３３】
ｃｉｓ−(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル ５−((ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−メチル)ピペリジン−３−イルカルバメートの合成
【化３２５】
2010520228.tif 000425
方法１７を行って、ｃｉｓ−(＋／−)−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−５−((ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)メチル)ピペリジン−１−カルボキシレートを脱保護し、ｃｉｓ−(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル ５−((ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)メチル)ピペリジン−３−イルカルバメートを得た。
LCMS (m/z): 344.1 (MH+).
【０５３４】
ｃｉｓ−(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル ５−((ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)メチル)−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメートの合成
【化３２６】
2010520228.tif 000426
ｃｉｓ−(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル ５−((ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)メチル)ピペリジン−３−イルカルバメート、および、４−クロロ−３−ニトロピリジンを用いて、実施例１の方法１を行い、ｃｉｓ−(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル ５−((ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)メチル)−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメートを得た。
LCMS (m/z): 467.0 (MH+); 
LC Rt = 4.02分。
【０５３５】
ｃｉｓ−(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−アミノピリジン−４−イル)−５−((ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)メチル)ピペリジン−３−イルカルバメートの合成
【化３２７】
2010520228.tif 000427
実施例４９の方法２に従って、ｃｉｓ−(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル ５−((ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)メチル)−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメートを還元し、ｃｉｓ−(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−アミノピリジン−４−イル)−５−((ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)メチル)ピペリジン−３−イルカルバメートを得た。
LCMS (m/z): 437.2  (MH+);
LC Rt = 3.86分。
【０５３６】
ｃｉｓ−(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−(３−アミノ−６−ブロモピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−５−(ヒドロキシメチル)ピペリジン−３−イルカルバメートの合成
【化３２８】
2010520228.tif 000428
実施例３０５の方法１１に従って、ｃｉｓ−(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−アミノピリジン−４−イル)−５−((ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)メチル)ピペリジン−３−イルカルバメート、および、６−ブロモ−３−アミノピコリン酸をカップリングさせた。続いてＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し、生成物のフラクションを、０.１％ＴＦＡ−アセトニトリル／水の溶液中で、室温で終夜放置し、シリル基を除去した。続いて凍結乾燥した後、ｃｉｓ−(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−(３−アミノ−６−ブロモピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−５−(ヒドロキシメチル)ピペリジン−３−イルカルバメートが得られた。これを直接Suzuki反応に用いた。
LCMS (m/z): 521.0/523.1  (MH+);
LC Rt = 2.58分。
【０５３７】
ｃｉｓ−(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−(６−ブロモ−３−フルオロピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−５−(ヒドロキシメチル)ピペリジン−３−イルカルバメートの合成
【化３２９】
2010520228.tif 000429
実施例３０５の方法１１に従って、ｃｉｓ−(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−アミノピリジン−４−イル)−５−((ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)メチル)ピペリジン−３−イルカルバメート、および、６−ブロモ−３−フルオロピコリン酸をカップリングさせた。ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製した後、生成物のフラクションを、０.１％  ＴＦＡ−アセトニトリル／水の溶液中で、室温で終夜放置し、シリル基を除去した。続いて凍結乾燥した後、ｃｉｓ−(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−(６−ブロモ−３−フルオロピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−５−(ヒドロキシメチル)ピペリジン−３−イルカルバメートが得られ、これを直接Suzuki反応に用いた。
LCMS (m/z): 524.0/526.0  (MH+);
LC Rt = 2.90分。
【０５３８】
ｃｉｓ−(＋／−)−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−５−(フルオロメチル)ピペリジン−１−カルボキシレートの合成
【化３３０】
2010520228.tif 000430
テトラヒドロフラン中の濃度０.１６Ｍの、ｃｉｓ−(＋／−)−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−５−(ヒドロキシメチル)ピペリジン−１−カルボキシレート(１当量)、フッ化 ペルフルオロブタンスルホニル(２当量)、トリエチルアミン−ＨＦ(４当量)およびトリエチルアミン(６当量)の溶液を、３６時間撹拌した。酢酸エチル(５０倍)で希釈した後、該溶液を、１Ｎ  ＨＣｌで、ＮａＨＣＯ３(飽和)で、そして塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮し、カラムクロマトグラフィーによって精製し(２５〜４０％  酢酸エチル／ヘキサン)、ｃｉｓ−(＋／−)−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−５−(フルオロメチル)ピペリジン−１−カルボキシレートを得た(収率４５％)。
LCMS (m/z): 267.1  (MH+);
LC Rt = 4.23分。
【０５３９】
ｃｉｓ−(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル ５−(フルオロメチル)ピペリジン−３−イルカルバメートの合成
【化３３１】
2010520228.tif 000431
方法１７を行って、ｃｉｓ−(＋／−)−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−５−(フルオロメチル)ピペリジン−１−カルボキシレートを脱保護し、ｃｉｓ−(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル ５−(フルオロメチル)ピペリジン−３−イルカルバメートを得た。
LCMS (m/z): 233.1 (MH+).
【０５４０】
ｃｉｓ−(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル ５−(フルオロメチル)−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメートの合成
【化３３２】
2010520228.tif 000432
ｃｉｓ−(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル ５−(フルオロメチル)ピペリジン−３−イルカルバメート、および、４−クロロ−３−ニトロピリジンを用いて、実施例１の方法１を行い、ｃｉｓ−(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル ５−(フルオロメチル)−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメートを得た。
LCMS (m/z): 355.1 (MH+);
LC Rt = 2.41分。
【０５４１】
ｃｉｓ−(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−アミノピリジン−４−イル)−５−(フルオロメチル)ピペリジン−３−イルカルバメートの合成
【化３３３】
2010520228.tif 000433
実施例４９の方法２に従って、ｃｉｓ−(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル ５−(フルオロメチル)−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメートを還元し、ｃｉｓ−(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−アミノピリジン−４−イル)−５−(フルオロメチル)ピペリジン−３−イルカルバメートを得た。
LCMS (m/z): 325.1 (MH+);
LC Rt = 2.27分。
【０５４２】
(３Ｒ,４Ｒ)−１−(３−(６−ブロモ−５−フルオロピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化３３４】
2010520228.tif 000434
実施例３０５の方法１１に従って、(３Ｒ,４Ｒ)−１−(３−アミノピリジン−４−イル)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル、および、６−ブロモ−５−フルオロピコリン酸をカップリングさせ、(３Ｒ,４Ｒ)−１−(３−(６−ブロモ−５−フルオロピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た。
LCMS (m/z): 510.0/512.0  (MH+);
LC Rt = 4.51分。
【０５４３】
(３Ｓ,５Ｒ)−１−(３−(６−ブロモ−５−フルオロピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−５−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化３３５】
2010520228.tif 000435
実施例３０５の方法１１に従って、(３Ｓ,５Ｒ)−１−(３−アミノピリジン−４−イル)−５−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル、および、６−ブロモ−５−フルオロピコリン酸をカップリングさせ、(３Ｓ,５Ｒ)−１−(３−(６−ブロモ−５−フルオロピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−５−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た。
LCMS (m/z): 624.1/626.1 (MH+).
【０５４４】
(３Ｓ,５Ｒ)−１−(３−(３−アミノ−６−ブロモピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−５−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【化３３６】
2010520228.tif 000436
実施例３０５の方法１１に従って、(３Ｓ,５Ｒ)−１−(３−アミノピリジン−４−イル)−５−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル、および、６−ブロモ−３−アミノピコリン酸をカップリングさせ、(３Ｓ,５Ｒ)−１−(３−(３−アミノ−６−ブロモピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−５−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た。
LCMS (m/z): 621.1/623.2  (MH+).
【０５４５】
(３Ｒ,４Ｒ)−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−４−(メチルスルホニルオキシ)ピペリジン−１−カルボキシレートの合成
【化３３７】
2010520228.tif 000437
ジクロロメタン中の(３Ｒ,４Ｒ)−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−４−ヒドロキシピペリジン−１−カルボキシレートの溶液(０.１３Ｍ)に、トリエチルアミン(１.５当量)を加え、続いて塩化メタンスルホニル(１.３当量)を加えた。該反応物を室温で１５時間撹拌した。次いで、該溶液を飽和ＮａＨＣＯ３でクエンチし、ジクロロメタンで抽出し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮し、粗生成物を収率＞９５％で得た。
LCMS (m/z): 428.9/328.9 (MH+),
LC Rt = 3.81分。
【０５４６】
(３ａＲ,７ａＳ)−ベンジル ２−オキソヘキサヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−５(６Ｈ)−カルボキシレートの合成
【化３３８】
2010520228.tif 000438
ピリジン中の(３Ｒ,４Ｒ)−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−４−(メチルスルホニルオキシ)ピペリジン−１−カルボキシレートの溶液(０.１６Ｍ)を、１２０℃で、マイクロ波中、１０分間加熱した。次いで、該溶液をほぼ乾固するまで濃縮し、形成した固体を濾過し、望ましい生成物を得た。濾液を、さらに、酢酸エチル(１００％)で溶出するシリカゲルのカラムクロマトグラフィーによって精製し、生成物を、合わせた収率７５％で得た。
LCMS (m/z): 277.1 (MH+),
LC Rt = 2.33分。
【０５４７】
(３Ｓ,４Ｓ)−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−４−(メチルスルホニルオキシ)ピペリジン−１−カルボキシレートの合成
【化３３９】
2010520228.tif 000439
ジクロロメタン中の(３Ｓ,４Ｓ)−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−４−ヒドロキシピペリジン−１−カルボキシレートの溶液(０.１３Ｍ)に、トリエチルアミン(１.５当量)を加え、続いて塩化メタンスルホニル(１.３当量)を加えた。該反応物を室温で１５時間撹拌した。次いで、該溶液を飽和ＮａＨＣＯ３でクエンチし、ジクロロメタンで抽出し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮し、粗生成物を収率＞９５％で得た。
LCMS (m/z): 428.9/328.9 (MH+),
LC Rt = 3.81分。
【０５４８】
(３ａＳ,７ａＲ)−ベンジル ２−オキソヘキサヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−５(６Ｈ)−カルボキシレートの合成
【化３４０】
2010520228.tif 000440
(３Ｓ,４Ｓ)−ベンジル ３−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−４−(メチルスルホニルオキシ)ピペリジン−１−カルボキシレート(１.０当量)を用いて、エナンチオマー化合物について先に記載した方法を行い、(３ａＳ,７ａＲ)−ベンジル ２−オキソヘキサヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−５(６Ｈ)−カルボキシレートを収率６２％で得た。
LCMS (m/z): 277.1 (MH+), 
LC Rt = 2.33分。
【０５４９】
(３ａＲ,７ａＳ)−５−ベンジル ３−ｔｅｒｔ−ブチル ２−オキソテトラヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−３,５(２Ｈ,６Ｈ)−ジカルボキシレートの合成
【化３４１】
2010520228.tif 000441
ジクロロメタン中の、(３ａＲ,７ａＳ)−ベンジル ２−オキソヘキサヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−５(６Ｈ)−カルボキシレート(１.０当量)の溶液(０.０９Ｍ)に、ＢＯＣ２Ｏ(１.１当量)、トリエチルアミン(１.１当量)、および、触媒量のＤＭＡＰを加えた。該反応物を室温で１時間撹拌し、その時点で、それを真空下で濃縮し、酢酸エチルで溶出するシリカゲルのプラグで濾過し、該生成物を真空下で乾燥し、白色の固体を収率７５％で得た。
LCMS (m/z): 277.2 (MH+),
LC Rt = 3.43分。
【０５５０】
(３ａＳ,７ａＲ)−５−ベンジル ３−ｔｅｒｔ−ブチル ２−オキソテトラヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−３,５(２Ｈ,６Ｈ)−ジカルボキシレートの合成
【化３４２】
2010520228.tif 000442
(３ａＳ,７ａＲ)−ベンジル ２−オキソヘキサヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−５(６Ｈ)−カルボキシレート(１.０当量)を用いて、エナンチオマー化合物について先に記載した方法を行い、(３ａＳ,７ａＲ)−５−ベンジル ３−ｔｅｒｔ−ブチル ２−オキソテトラヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−３,５(２Ｈ,６Ｈ)−ジカルボキシレートを収率９０％で得た。
LCMS (m/z): 277.2 (MH+),
LC Rt = 3.43分。
【０５５１】
(３ａＲ,７ａＳ)−ｔｅｒｔ−ブチル ５−(３−ニトロピリジン−４−イル)−２−オキソヘキサヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−３(２Ｈ)−カルボキシレートの合成
【化３４３】
2010520228.tif 000443
方法１７に従って、(３ａＲ,７ａＳ)−５−ベンジル ３−ｔｅｒｔ−ブチル ２−オキソテトラヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−３,５(２Ｈ,６Ｈ)−ジカルボキシレートのＣｂｚ基を除去し、得られたアミンを、方法１に従って、４−クロロ−３−ニトロピリジンと反応させ、(３ａＲ,７ａＳ)−ｔｅｒｔ−ブチル ５−(３−ニトロピリジン−４−イル)−２−オキソヘキサヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−３(２Ｈ)−カルボキシレートを、黄色の泡状物質として、収率８９％で得た。
LCMS (m/z): 365.1 (MH+),
LC Rt = 1.79分。
【０５５２】
(３ａＳ,７ａＲ)−ｔｅｒｔ−ブチル ５−(３−ニトロピリジン−４−イル)−２−オキソヘキサヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−３(２Ｈ)−カルボキシレートの合成
【化３４４】
2010520228.tif 000444
(３ａＳ,７ａＲ)−５−ベンジル ３−ｔｅｒｔ−ブチル ２−オキソテトラヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−３,５(２Ｈ,６Ｈ)−ジカルボキシレート(１.０当量)を用いて、エナンチオマー化合物について先に記載した方法を行い、(３ａＳ,７ａＲ)−ｔｅｒｔ−ブチル ５−(３−ニトロピリジン−４−イル)−２−オキソヘキサヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−３(２Ｈ)−カルボキシレートを収率８８％で得た。
LCMS (m/z): 365.1 (MH+),
LC Rt = 1.79分。
【０５５３】
(３ａＲ,７ａＳ)−ｔｅｒｔ−ブチル ５−(３−アミノピリジン−４−イル)−２−オキソヘキサヒドロ−オキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−３(２Ｈ)−カルボキシレートの合成
【化３４５】
2010520228.tif 000445
実施例４９の方法２に従って、ＥｔＯＨおよびＥｔＯＡｃ(１：１)中の(３ａＲ,７ａＳ)−ｔｅｒｔ−ブチル ５−(３−ニトロピリジン−４−イル)−２−オキソヘキサヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−３(２Ｈ)−カルボキシレート(０.１５Ｍ)を還元し、(３ａＲ,７ａＳ)−ｔｅｒｔ−ブチル ５−(３−アミノピリジン−４−イル)−２−オキソヘキサヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−３(２Ｈ)−カルボキシレートを収率＞９５％で得た。
LCMS (m/z): 335.0 (MH+),
LC Rt = 1.68分。
【０５５４】
(３ａＳ,７ａＲ)−ｔｅｒｔ−ブチル ５−(３−アミノピリジン−４−イル)−２−オキソヘキサヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−３(２Ｈ)−カルボキシレートの合成
【化３４６】
2010520228.tif 000446
エナンチオマー化合物について先に記載した方法を行い、(３ａＳ,７ａＲ)−ｔｅｒｔ−ブチル ５−(３−アミノピリジン−４−イル)−２−オキソヘキサヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−３(２Ｈ)−カルボキシレートを収率９７％で得た。
LCMS (m/z): 335.0 (MH+),
LC Rt = 1.68分。
【０５５５】
(３ａＲ,７ａＳ)−ｔｅｒｔ−ブチル ５−(３−(３−アミノ−６−(２,６−ジフルオロフェニル)ピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−２−オキソヘキサヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−３(２Ｈ)−カルボキシレートの合成
【化３４７】
2010520228.tif 000447
ＤＭＦ中(３ａＲ,７ａＳ)−ｔｅｒｔ−ブチル ５−(３−アミノピリジン−４−イル)−２−オキソヘキサヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−３(２Ｈ)−カルボキシレート(１.０当量)の溶液(０.３Ｍ)に、３−アミノ−６−(２,６−ジフルオロフェニル)ピコリン酸(１.２当量)、ＥＤＣ(１.２当量)およびＨＯＡｔ(１.２当量)を加えた。該溶液を１５時間撹拌した。該混合物に水を加え、沈殿物を濾過した。濾液にＥｔＯＡｃを加え、有機溶液を抽出し(３回)、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮し、橙色のシロップ状物質を得た。粗製の物質をＥｔＯＡｃとヘキサンの混合物で磨砕し、沈殿物を濾過して取り、純粋な生成物を収率４６％で得た。
LCMS (m/z): 567.0 (MH+),
LC Rt = 3.03分。
【０５５６】
(３ａＳ,７ａＲ)−ｔｅｒｔ−ブチル ５−(３−(３−アミノ−６−(２,６−ジフルオロフェニル)ピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−２−オキソヘキサヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−３(２Ｈ)−カルボキシレートの合成
【化３４８】
2010520228.tif 000448
(３ａＳ,７ａＲ)−ｔｅｒｔ−ブチル ５−(３−アミノピリジン−４−イル)−２−オキソヘキサヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−３(２Ｈ)−カルボキシレートを用いて、エナンチオマー化合物について先に記載した方法を行い、(３ａＳ,７ａＲ)−ｔｅｒｔ−ブチル ５−(３−(３−アミノ−６−(２,６−ジフルオロフェニル)ピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−２−オキソヘキサヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−３(２Ｈ)−カルボキシレートを得た。
LCMS (m/z): 567.0 (MH+),
Rt = 2.86分。
【０５５７】
(３ａＲ,７ａＳ)−ｔｅｒｔ−ブチル ５−(３−(３−アミノ−６−(２−フルオロ−５−(イソプロピルカルバモイル)フェニル)ピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−２−オキソヘキサヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−３(２Ｈ)−カルボキシレートの合成
【化３４９】
2010520228.tif 000449
ＤＭＦ中の(３ａＲ,７ａＳ)−ｔｅｒｔ−ブチル ５−(３−アミノピリジン−４−イル)−２−オキソヘキサヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−３(２Ｈ)−カルボキシレート(１.０当量)の溶液(０.３Ｍ)に、３−アミノ−６−(２−フルオロ−５−(イソプロピルカルバモイル)フェニル)ピコリン酸(１.２当量)、ＥＤＣ(１.２当量)およびＨＯＡｔ(１.２当量)を加えた。該溶液を１５時間撹拌した。該混合物に水を加え、沈殿物を濾過した。濾液にＥｔＯＡｃを加え、有機溶液を抽出し(３回)、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮し、橙色のシロップ状物質を得た。粗製の物質をＥｔＯＡｃとヘキサンの混合物で磨砕し、沈殿物を濾過して取り、(３ａＲ,７ａＳ)−ｔｅｒｔ−ブチル ５−(３−(３−アミノ−６−(２−フルオロ−５−(イソプロピルカルバモイル)フェニル)ピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−２−オキソヘキサヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−３(２Ｈ)−カルボキシレートを得た。
LCMS (m/z): 634.3。
【０５５８】
＜方法３５＞
３−アミノ−Ｎ−(４−((３Ｒ,４Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシピペリジン−１−イル)−ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)ピコリンアミドの合成
【化３５０】
2010520228.tif 000450
ＭｅＯＨ中の(３ａＲ,７ａＳ)−ｔｅｒｔ−ブチル ５−(３−(３−アミノ−６−(２,６−ジフルオロフェニル)ピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−２−オキソヘキサヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−３(２Ｈ)−カルボキシレートの溶液(０.０６Ｍ)に、Ｃｓ２ＣＯ３(０.５当量)を加え、該反応物を３時間撹拌した。次いで、該混合物を真空下で濃縮乾固し、完了するまで粗製の物質をＴＦＡおよびＤＣＭ(２５％  ＴＦＡ)中で撹拌した。該反応物を濃縮し、逆相ＨＰＬＣによって精製した。凍結乾燥した後、白色の粉末をＴＦＡ塩として得た。
LCMS (m/z): 441.1 (MH+),
LC Rt = 1.95分。
【０５５９】
下記の化合物は、方法３５を用いて製造された：
【表１００】
2010520228.tif 000451
【０５６０】
実施例７５５
(Ｓ)−３−アミノ−Ｎ−(４−(３−アミノピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)−６−(２−フルオロ−５−イソペンチルフェニル)ピコリンアミドの合成
【化３５１】
2010520228.tif 000452
(Ｓ,Ｚ)−ｔｅｒｔ−ブチル １−(３−(３−アミノ−６−(２−フルオロ−５−(３−メチルブタ−１−エニル)フェニル)ピコリンアミド)ピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメートを用いて、実施例４９の方法２を行い、２５％  ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２でＢｏｃ脱保護した後、(Ｓ)−３−アミノ−Ｎ−(４−(３−アミノピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)−６−(２−フルオロ−５−イソペンチルフェニル)ピコリンアミドを得た(３５％)。
LCMS (m/z): 477.3 (MH+);
LC Rt = 2.91分。
【０５６１】
実施例７５６
Ｐｉｍ１のＡＴＰ消費(depletion)アッセイ
ルシフェラーゼ−ルシフェリンをベースとするＡＴＰ検出試薬を用いて、ペプチド基質へのキナーゼ触媒ホスホリル移動に由来するＡＴＰ消費を定量して、ＰＩＭ１の活性を測定する。試験化合物を１００％  ＤＭＳＯに溶解し、直接白色３８４ウェル・プレートに０.５μｌ／ウェルで入れる。反応を開始させるために、１０μｌのアッセイ緩衝液(５０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ(pH 7.5)、５ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１ｍＭ  ＤＴＴ、０.０５％  ＢＳＡ)中５ｎＭ  Ｐｉｍ１キナーゼおよび８０μＭ  ＢＡＤペプチド(RSRHSSYPAGT-OH)を、それぞれのウェルに加える。１５分後、１０μｌのアッセイ緩衝液中４０μＭ  ＡＴＰを加える。最終アッセイ濃度は、２.５ｎＭ  ＰＩＭ１、２０μＭ  ＡＴＰ、４０μＭ  ＢＡＤペプチドおよび２.５％  ＤＭＳＯである。約５０％のＡＴＰが消費されるまで反応を行い、次いで、２０μｌのKinaseGlo Plus (Promega Corporation)溶液を添加することによって停止させる。停止させた反応物を１０分間インキュベートし、残ったＡＴＰをVictor2 (Perkin Elmer)の発光によって検出する。前述の実施例の化合物をＰｉｍ１のＡＴＰ消費アッセイによって試験し、下記の実施例７６３で示したＩＣ５０値を示すことが分かった。ＩＣ５０、すなわち最大の半分を阻害する濃度は、in vitroでその標的の５０％阻害に必要な試験化合物の濃度を表す。
【０５６２】
実施例７５７
Ｐｉｍ２のＡＴＰ消費アッセイ
ルシフェラーゼ−ルシフェリンをベースとするＡＴＰ検出試薬を用いて、ペプチド基質へのキナーゼ触媒ホスホリル移動に由来するＡＴＰ消費を定量して、ＰＩＭ２の活性を測定する。試験化合物を１００％  ＤＭＳＯに溶解し、直接白色３８４ウェル・プレートに０.５μｌ／ウェルで入れる。反応を開始させるために、１０μｌのアッセイ緩衝液(５０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ(pH 7.5)、５ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１ｍＭ  ＤＴＴ、０.０５％  ＢＳＡ)中１０ｎＭ  Ｐｉｍ２キナーゼおよび２０μＭ  ＢＡＤペプチド(RSRHSSYPAGT-OH)を、それぞれのウェルに加える。１５分後、１０μｌのアッセイ緩衝液中８μＭ  ＡＴＰを加える。最終アッセイ濃度は、５ｎＭ  ＰＩＭ２、４μＭ  ＡＴＰ、１０μＭ  ＢＡＤペプチドおよび２.５％  ＤＭＳＯである。約５０％のＡＴＰが消費されるまで反応を行い、次いで、２０μｌのKinaseGlo Plus (Promega Corporation)溶液を添加することによって停止させる。停止させた反応物を１０分間インキュベートし、残ったＡＴＰをVictor2 (Perkin Elmer)の発光によって検出する。前述の実施例の化合物をＰｉｍ２のＡＴＰ消費アッセイによって試験し、下記の実施例７６３で示したＩＣ５０値を示すことが分かった。
【０５６３】
実施例７５８
Ｐｉｍ３のＡＴＰ消費アッセイ
ルシフェラーゼ−ルシフェリンをベースとするＡＴＰ検出試薬を用いて、ペプチド基質へのキナーゼ触媒ホスホリル移動に由来するＡＴＰ消費を定量して、ＰＩＭ３の活性を測定する。試験化合物を１００％  ＤＭＳＯに溶解し、直接白色３８４ウェル・プレートに０.５μｌ／ウェルで入れる。反応を開始させるために、１０μｌのアッセイ緩衝液(５０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ(pH 7.5)、５ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１ｍＭ  ＤＴＴ、０.０５％  ＢＳＡ)中１０ｎＭ  Ｐｉｍ３キナーゼおよび２００μＭ  ＢＡＤペプチド(RSRHSSYPAGT-OH)を、それぞれのウェルに加える。１５分後、１０μｌのアッセイ緩衝液中８０μＭ  ＡＴＰを加える。最終アッセイ濃度は、５ｎＭ  ＰＩＭ３、４０μＭ  ＡＴＰ、１００μＭ  ＢＡＤペプチドおよび２.５％  ＤＭＳＯである。約５０％のＡＴＰが消費されるまで反応を行い、次いで、２０μｌのKinaseGlo Plus (Promega Corporation)溶液を添加することによって停止させる。停止させた反応物を１０分間インキュベートし、残ったＡＴＰをVictor2 (Perkin Elmer)の発光によって検出する。前述の実施例の化合物をＰｉｍ３のＡＴＰ消費アッセイによって試験し、下記の実施例７６３で示したＩＣ５０値を示すことが分かった。
【０５６４】
実施例７５９
Ｆｌｔ３ AlphaScreenアッセイ
均一なビーズをベースとする系を用いて、ペプチド基質へのキナーゼ触媒ホスホリル移動に由来するホスホリル化されたペプチド基質の量を定量して、Ｆｌｔ３の活性を測定する。試験化合物を１００％  ＤＭＳＯに溶解し、直接白色３８４ウェル・プレートに、０.５μｌ／ウェルで入れる。反応を開始させるために、１０μｌのアッセイ緩衝液(５０ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ(pH=7.5)、５ｍＭ  ＭｇＣｌ２、０.０５％  ＢＳＡ、１ｍＭ  ＤＴＴ)中３００ｐＭ  Ｆｌｔ３キナーゼおよび７００μＭ  ＡＴＰを、それぞれのウェルに加え、続いてアッセイ緩衝液中１０μｌの５００ｎＭ  ＳＨＣペプチド(ビオチン−GGLFDDPSYVNVQNL-NH2)を加える。最終アッセイ濃度は、１５０ｐＭ  Ｆｌｔ３、３５０μＭ  ＡＴＰ、２５０ｎＭ  ＳＨＣペプチド、および２.５％  ＤＭＳＯである。反応を２.５時間行い、次いで、１０μｌの６０ｍＭ  ＥＤＴＡを添加することによって停止させる。２５μｌの検出緩衝液(５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ(pH 7.5)、０.０１％  Tween-20)中１.２μg/ml  ＰＹ２０抗体、４８.４μg/ml  プロテインＡ AlphaScreen ビーズ、および、４８.４μg/ml  ストレプトアビジンでコートした AlphaScreen ビーズを、停止させた反応液に加える。停止させた反応液を暗所で終夜インキュベートする。Envision plate reader (Perkin Elmer)を用いて、酸素アニオンで開始する化学発光／蛍光カスケードによって、ホスホリル化ペプチドを検出する。前述の実施例の化合物をＦｌｔ３ Alpha アッセイによって試験し、下記の実施例７６２で示したＩＣ５０値を示すことが分かった。
【０５６５】
実施例７６０
ＫＤＲ AlphaScreen アッセイ
均一なビーズをベースとする系を用いて、ペプチド基質へのキナーゼ触媒ホスホリル移動に由来するホスホリル化されたペプチド基質の量を定量して、ＫＤＲの活性を測定する。試験化合物を１００％  ＤＭＳＯに溶解し、直接白色３８４ウェル・プレートに、０.５μｌ／ウェルで入れる。反応を開始させるために、１０μｌのアッセイ緩衝液(５０ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ(pH=7.5)、５ｍＭ  ＭｎＣｌ２、０.１％  ＢＳＡ、０.０１％  Tween-20、１ｍＭ  ＤＴＴ)中２μＭ  ＶＥＧＦ５ペプチド(ビオチン−GGGGQDGKDYIVLPI-NH2)を、それぞれのウェルに加え、続いて１０μｌのアッセイ緩衝液中２５０ｐＭ  ＫＤＲキナーゼおよび２μＭ  ＡＴＰを加える。最終アッセイ濃度は、１２５ｐＭ  ＫＤＲ、１μＭ  ＡＴＰ、１μＭ  ＶＥＧＦ５ペプチドおよび２.５％  ＤＭＳＯである。反応を２時間行い、次いで、２５μｌの停止／検出緩衝液(５０ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ(pH=7.5)、１０ｍＭ  ＥＤＴＡ、０.１％  ＢＳＡ、０.０１％  Tween-20)中０.２４μg/ml  ＰＹ２０抗体、９６.８μg/ml  プロテインＡ AlphaScreen ビーズ、および９６.８μg/ml  ストレプトアビジンでコートした AlphaScreen ビーズを加えることによって、反応を停止させる。停止させた反応液を暗所で終夜インキュベートする。Envision plate reader (Perkin Elmer)を用いて、酸素アニオンで開始する化学発光／蛍光カスケードによって、ホスホリル化ペプチドを検出する。前述の実施例の化合物をＫＤＲ AlphaScreen アッセイによって試験し、下記の実施例７６２で示したＩＣ５０値を示すことが分かった。
【０５６６】
実施例７６１
細胞増殖アッセイ
ＨＥＬ ９２.１.７細胞(ＡＴＴＣ番号 TIB-180, 悪性末梢血由来の赤白血病株)、ＭＶ４−１１細胞(ＡＴＣＣ番号 CRL-9591, ヒト急性単球性白血病株)およびＰＣ３細胞(ＡＴＣＣ番号 CRL-1435, ヒト前立腺腺癌株)を、１０％  ＦＢＳ、ピルビン酸ナトリウムおよび抗生物質を加えたＲＰＭＩ１６４０中で培養した。同じ培地中で、１０００細胞／ウェルの密度で、アッセイの日に、９６ウェル組織培養プレートに、細胞を、外側のウェルは空けて、播種した。
【０５６７】
ＫＭＳ１１(ヒト骨髄腫細胞株)を、１０％  ＦＢＳ、ピルビン酸ナトリウムおよび抗生物質を加えたＩＭＤＭ中で培養した。同じ培地中で、２０００細胞／ウェルの密度で、アッセイの日に、９６ウェル組織培養プレートに、細胞を、外側のウェルは空けて、播種した。ＭＭ１.ｓ(ヒト骨髄腫細胞株)を、１０％  ＦＢＳ、ピルビン酸ナトリウムおよび抗生物質を加えたＲＰＭＩ１６４０中で培養した。同じ培地中で、５０００細胞／ウェルの密度で、アッセイの日に、９６ウェル組織培養プレートに、細胞を、外側のウェルは空けて、播種した。
【０５６８】
ＤＭＳＯ中に加えられた試験化合物を、ＤＭＳＯで望ましい最終濃度の５００倍に希釈した後、培養培地で最終濃度の２倍に希釈した。等体積の２×化合物を９６ウェルプレート中の細胞に加え、３７℃で３日間インキュベートした。
【０５６９】
３日後、プレートを室温に平衡化し、等体積のCellTiter-Glow試薬(Promega)を培養ウェルに加えた。該プレートを短時間激しく撹拌し、発光シグナルをルミノメーターで測定した。ＤＭＳＯのみで処理した細胞で見られるシグナル対コントロール化合物で処理した細胞で見られるシグナルの％阻害を計算し、実施例７６３で示した試験化合物についてのＥＣ５０値(すなわち細胞における最大効果の５０％を得るのに必要な試験化合物の濃度)を決定するために用いた。
【０５７０】
実施例７６２
In vitroのＰＫＣεアッセイ
１０ｎＭの最終濃度のInVitrogenから購入したヒト全長ＰＫＣε酵素を用いて、in vitroのＰＫＣεアッセイを行った。配列ERMRPRKRQGSVRRRV-OHを有するペプチド基質を最終濃度４０μＭで用い、ＡＴＰを２０μＭで用いた。脂質アクチベーター、０.０５mg/mlのホスファチジルセリンおよび０.００５mg/mlのジアシルグリセロールをMilliporeから購入した。反応緩衝液は、２０ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ(pH7.4)、５ｍＭ  ＭｇＣｌ２および０.０３％  Triton X-100からなる。２〜３時間の反応時間後、アッセイの読み出しをKinaseGlo Plus試薬(Promega)で行った。前述の実施例の代表的な化合物を、ＰＫＣεアッセイによって試験し、以下に示したＩＣ５０を示すことが分かった。ここで、(+)は２５μＭ以上のＩＣ５０を表し、(++)は１０μＭ以上２５μＭ未満のＩＣ５０を表し、(+++)は１μＭ以上１０μＭ未満のＩＣ５０を表し、(++++)は１μＭ未満のＩＣ５０を表す。
【表１０１】
2010520228.tif 000453
【０５７１】
【表１０２】
2010520228.tif 000454
【０５７２】
【表１０３】
2010520228.tif 000455
【０５７３】
【表１０４】
2010520228.tif 000456
【０５７４】
【表１０５】
2010520228.tif 000457
【０５７５】
【表１０６】
2010520228.tif 000458
【０５７６】
【表１０７】
2010520228.tif 000459
【０５７７】
実施例７６３
本発明の化合物のＩＣ５０およびＥＣ５０活性
実施例７５６(Ｐｉｍ１のＡＴＰ消費アッセイ)、７５７(Ｐｉｍ２のＡＴＰ消費アッセイ)および７５８(Ｐｉｍ３のＡＴＰ消費アッセイ)の手順を用いて、先の実施例の化合物のＩＣ５０濃度を下記の表に示した通り決定した。ここで、(+)は２５μＭ以上のＩＣ５０を表し、(++)は１０μＭ以上２５μＭ未満のＩＣ５０を表し、(+++)は１μＭ以上１０μＭ未満のＩＣ５０を表し、(++++)は１μＭ未満のＩＣ５０を表す。
【０５７８】
実施例７６１(細胞増殖アッセイ)の手順を用いて、先の実施例の化合物のＥＣ５０濃度を、下記の表に示した通り、ＨＥＬ ９２.１.７、ＭＶ４−１１細胞およびＰＣ３細胞において決定した。ここで、(+)は１０μＭより大きいＥＣ５０を表し、(++)は５μＭより大きいが１０μＭ以下のＥＣ５０を表し、(+++)は１μＭより大きいが５μＭ以下のＥＣ５０を表し、(++++)は１μＭ以下のＥＣ５０を表す。
【表１０８】
2010520228.tif 000460
【０５７９】
【表１０９】
2010520228.tif 000461
【０５８０】
【表１１０】
2010520228.tif 000462
【０５８１】
【表１１１】
2010520228.tif 000463
【０５８２】
【表１１２】
2010520228.tif 000464
【０５８３】
【表１１３】
2010520228.tif 000465
【０５８４】
【表１１４】
2010520228.tif 000466
【０５８５】
【表１１５】
2010520228.tif 000467
【０５８６】
【表１１６】
2010520228.tif 000468
【０５８７】
【表１１７】
2010520228.tif 000469
【０５８８】
【表１１８】
2010520228.tif 000470
【０５８９】
【表１１９】
2010520228.tif 000471
【０５９０】
【表１２０】
2010520228.tif 000472
【０５９１】
【表１２１】
2010520228.tif 000473
【０５９２】
実例となる具体的態様を例示し、記載しているが、本発明の精神および範囲を逸脱することなく、その中で種々の変更を行い得ると認められる。
【国際調査報告】
2010520228.tif 000478
2010520228.tif 000479
2010520228.tif 000480
2010520228.tif 000481