(57)【要約】  トリプトファンヒドロキシラーゼ阻害剤を含む組成物及びその使用方法が開示される。特に、幾つかの薬剤に関連するセロトニン媒介性の有害作用を軽減又は回避する方法に関する。【選択図】図１
2010531889.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
第１の薬学的活性成分と、第２の薬学的活性成分とを含む薬学的組成物であって、該第１の薬学的活性成分がセロトニン媒介性の有害作用に関連しており、該第２の薬学的活性成分がトリプトファンヒドロキシラーゼ阻害剤である、薬学的組成物。
【請求項２】
前記第１の薬学的活性成分がモノアミンオキシダーゼ阻害剤である、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記第１の薬学的活性成分が選択的セロトニン再取り込み阻害剤である、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
前記第１の薬学的活性成分がトリプタンである、請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
前記モノアミンオキシダーゼ阻害剤が、ブロファロミン、デクスフェンフルラミン、イソカルボキサジド、イソニアジド、イプロニアジド、フェンフルラミン、モクロベミド、フェネルジン、プソイドエフェドリン、セレギリン、トロキサトン、若しくはトラニルシプロミン、又はそれらの薬学的に許容される塩、又はそれらの薬理学的に活性のある立体異性体若しくは代謝体である、請求項２に記載の組成物。
【請求項６】
前記選択的セロトニン再取り込み阻害剤が、アミトリプチリン、シタロプラム、ドキセピン、フルオキセチン、フルボキサミン、イミプラミン、ノルフルオキセチン、パロキセチン、セルトラリン、ベンラファキシン、若しくはジメリジン、又はそれらの薬学的に許容される塩、又はそれらの薬理学的に活性のある立体異性体若しくは代謝体である、請求項３に記載の組成物。
【請求項７】
前記トリプタンが、ナラトリプタン、リザトリプタン、スマトリプタン、若しくはゾルミトリプタン、又はそれらの薬学的に許容される塩、又はそれらの薬理学的に活性のある立体異性体若しくは代謝体である、請求項４に記載の組成物。
【請求項８】
前記トリプトファンヒドロキシラーゼ阻害剤が強力なＴＰＨ１阻害剤である、請求項１に記載の組成物。
【請求項９】
前記強力なＴＰＨ１阻害剤が、式：
【化１】
2010531889.tif 000107
（式中、Ａは必要に応じて置換されたシクロアルキル、アリール、又は複素環であり、
Ｘは結合、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｒ４）＝、＝Ｃ（Ｒ４）−、−Ｃ（Ｒ３Ｒ４）−、−Ｃ（Ｒ４）＝Ｃ（Ｒ４）−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｎ（Ｒ５）−、−Ｎ（Ｒ５）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ５）−、−Ｃ（Ｒ３Ｒ４）Ｎ（Ｒ５）−、−Ｎ（Ｒ５）Ｃ（Ｒ３Ｒ４）−、−ＯＮＣ（Ｒ３）−、−Ｃ（Ｒ３）ＮＯ−、−Ｃ（Ｒ３Ｒ４）Ｏ−、−ＯＣ（Ｒ３Ｒ４）−、−Ｓ（Ｏ２）−、−Ｓ（Ｏ２）Ｎ（Ｒ５）−、−Ｎ（Ｒ５）Ｓ（Ｏ２）−、−Ｃ（Ｒ３Ｒ４）Ｓ（Ｏ２）−、又は−Ｓ（Ｏ２）Ｃ（Ｒ３Ｒ４）−であり、
Ｄは必要に応じて置換されたアリール又は複素環であり、
Ｒ１は水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アルキル−アリール、アルキル−複素環、アリール、若しくは複素環であり、
Ｒ２は水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アルキル−アリール、アルキル−複素環、アリール、若しくは複素環であり、
Ｒ３は水素、アルコキシ、アミノ、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、又は必要に応じて置換されたアルキルであり、
Ｒ４は水素、アルコキシ、アミノ、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、又は必要に応じて置換されたアルキル若しくはアリールであり、
各Ｒ５は独立して、水素又は必要に応じて置換されたアルキル若しくはアリールであり、
ｎは０〜３である）又はその薬学的に許容される塩を有する、請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
前記強力なＴＰＨ１阻害剤が、式：
【化２】
2010531889.tif 000108
（式中、Ｅは必要に応じて置換されたアリール又は複素環である）
を有する、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記強力なＴＰＨ１阻害剤が、式：
【化３】
2010531889.tif 000109
（式中、Ａ１及びＡ２はそれぞれ独立して、必要に応じて置換された単環式のシクロアルキル、アリール又は複素環である）
を有する、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記強力なＴＰＨ１阻害剤が、式：
【化４】
2010531889.tif 000110
を有する、請求項９に記載の方法。
【請求項１３】
前記強力なＴＰＨ１阻害剤が、式：
【化５】
2010531889.tif 000111
（式中、Ｚ’’１、Ｚ’’２、Ｚ’’３、及びＺ’’４のそれぞれは独立して、Ｎ又はＣＲ１０であり、
各Ｒ１０は独立して、アミノ、シアノ、ハロゲン、水素、ＯＲ１１、ＳＲ１１、ＮＲ１２Ｒ１３、又は必要に応じて置換されたアルキル、アルキル−アリール若しくはアルキル−複素環であり、
各Ｒ１１は独立して、水素又は必要に応じて置換されたアルキル、アルキル−アリール若しくはアルキル−複素環であり、
各Ｒ１２は独立して、水素又は必要に応じて置換されたアルキル、アルキル−アリール若しくはアルキル−複素環であり、
各Ｒ１３は独立して、水素又は必要に応じて置換されたアルキル、アルキル−アリール若しくはアルキル−複素環である）
を有する、請求項９に記載の方法。
【請求項１４】
前記強力なＴＰＨ１阻害剤が、式：
【化６】
2010531889.tif 000112
を有する、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記トリプトファンヒドロキシラーゼ阻害剤が、式：
【化７】
2010531889.tif 000113
（式中、Ａは必要に応じて置換されたシクロアルキル、アリール、又は複素環であり、
Ｘは結合、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｒ４）＝、＝Ｃ（Ｒ４）−、−Ｃ（Ｒ３Ｒ４）−、−Ｃ（Ｒ４）＝Ｃ（Ｒ４）−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｎ（Ｒ５）−、−Ｎ（Ｒ５）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ５）−、−Ｃ（Ｒ３Ｒ４）Ｎ（Ｒ５）−、−Ｎ（Ｒ５）Ｃ（Ｒ３Ｒ４）−、−ＯＮＣ（Ｒ３）−、−Ｃ（Ｒ３）ＮＯ−、−Ｃ（Ｒ３Ｒ４）Ｏ−、−ＯＣ（Ｒ３Ｒ４）−、−Ｓ（Ｏ２）−、−Ｓ（Ｏ２）Ｎ（Ｒ５）−、−Ｎ（Ｒ５）Ｓ（Ｏ２）−、−Ｃ（Ｒ３Ｒ４）Ｓ（Ｏ２）−、又は−Ｓ（Ｏ２）Ｃ（Ｒ３Ｒ４）−であり、
Ｅは必要に応じて置換されたアリール又は複素環であり、
Ｒ１は水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アルキル−アリール、アルキル−複素環、アリール、若しくは複素環であり、
Ｒ２は水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アルキル−アリール、アルキル−複素環、アリール、若しくは複素環であり、
Ｒ３は水素、アルコキシ、アミノ、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、又は必要に応じて置換されたアルキルであり、
Ｒ４は水素、アルコキシ、アミノ、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、又は必要に応じて置換されたアルキル若しくはアリールであり、
各Ｒ５は独立して、水素又は必要に応じて置換されたアルキル若しくはアリールであり、
各Ｒ１０は独立して、アミノ、シアノ、ハロゲン、水素、ＯＲ１１、ＳＲ１１、ＮＲ１２Ｒ１３、又は必要に応じて置換されたアルキル、アルキル−アリール若しくはアルキル−複素環であり、
各Ｒ１１は独立して、水素又は必要に応じて置換されたアルキル、アルキル−アリール若しくはアルキル−複素環であり、
各Ｒ１２は独立して、水素又は必要に応じて置換されたアルキル、アルキル−アリール若しくはアルキル−複素環であり、
各Ｒ１３は独立して、水素又は必要に応じて置換されたアルキル、アルキル−アリール若しくはアルキル−複素環であり、
ｎは０〜３であり、
ｑは１〜２である）
の化合物又はその薬学的に許容される塩である、請求項１に記載の組成物。
【請求項１６】
Ｅがアリールである、請求項１５に記載の組成物。
【請求項１７】
Ｘが−Ｏ−、−Ｃ（Ｒ３Ｒ４）Ｏ−、又は−ＯＣ（Ｒ３Ｒ４）−である、請求項１５に記載の組成物。
【請求項１８】
Ｒ３が水素又は必要に応じて置換されたアルキルであり、Ｒ４が水素又は必要に応じて置換されたアルキルである、請求項１６に記載の組成物。
【請求項１９】
Ｒ３が水素であり、Ｒ４がトリフルオロメチルである、請求項１６に記載の組成物。
【請求項２０】
ｎが１である、請求項１５に記載の組成物。
【請求項２１】
ｑが１である、請求項１５に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
１．発明の分野
本発明は、トリプトファンヒドロキシラーゼ阻害剤を含む組成物と、該組成物を使用する方法とに関する。
【０００２】
本願は、２００７年６月２６日付けで出願された米国仮特許出願第６０／９４６，２７４号明細書に対する優先権を主張し、その内容が参照により本明細書中に援用される。
【背景技術】
【０００３】
２．背景
神経伝達物質セロトニン（５−ヒドロキシトリプタミン（５−ＨＴ））は、複数の中枢神経ファセットの気分調整、並びに睡眠、不安、アルコール依存、薬物乱用、食物摂取、及び性行動の調節に関わる。セロトニンは血管緊張、腸運動性、及び細胞媒介性免疫応答の調節にも関わる（Walther, D.J., et al., Science 299:76（2003））。またセロトニンは、凝血及び止血に関与し、自身ではセロトニンを産出することができない血小板は、末梢５−ＨＴを大量に取り込む（Goodman & Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics, 10thed., p. 274-5（McGraw-Hill, 2001））。
【０００４】
セロトニンは、アミノ酸トリプトファンから２段階で合成される（Goodman & Gilman's, p. 270）。第１の段階は律速であり、末梢で発現するＴＰＨ１と、主に脳で発現するＴＰＨ２との２つの既知のアイソフォームを有するトリプトファンヒドロキシラーゼ（ＴＰＨ）酵素によって触媒される（Walther、同上）。セロトニンが身体から取り除かれる主な経路はモノアミンオキシダーゼ（ＭＡＯ）酵素を包含し、これは化合物を５−ヒドロキシインドールアセトアルデヒドに変換した後、アルデヒドデヒドロゲナーゼ酵素によって５−ヒドロキシインドール酢酸（５−ＨＩＡＡ）に変換する（Goodman & Gilman's, p. 270-2）。
【０００５】
ｔｐｈ１遺伝子が遺伝的に欠損したマウス（「ノックアウトマウス」）が報告されている。報告によると、１つのケースでは、このマウスは古典的にセロトニン作動性の脳領域では正常な量のセロトニンを発現したが、末梢ではセロトニンをほとんど欠いていた（Walther、同上）。別のケースでは、ノックアウトマウスが異常な心臓の活動を示し、このことは末梢セロトニンの欠失に起因していた（Cote, F., et al., PNAS 100（23）: 13525-13530（2003））。特発性肺動脈高血圧症における酵素の役割を理解することを目的とする研究では、ｔｐｈ１ノックアウトマウスが、低酸素の影響に対して野生型マウスとは異なる反応を示すことが見出された（Morecroft, I. et al., Hypertension 49:232-236（2007））。
【０００６】
血小板の５−ＨＴを取り込む能力を阻害することができる、セロトニンレベルに作用する薬剤（ＭＡＯ阻害剤及び選択的セロトニン再取り込み阻害剤（ＳＳＲＩ）等）は、有害作用を伴うことが多い。特に深刻な例は、「フェン−フェン」として知られるフェンフラミンとフェンテルミンとのダイエット併合薬に関連する心毒性であり、これは、身体の血中セロトニンレベルを制御する能力に対する併合効果に起因すると考えられている。ＭＩＴ  Ｎｅｗｓ  Ｏｆｆｉｃｅ、「古い標識によって、「フェン−フェン」の併合毒性がもたらされるおそれがある（Outdates [sic] label may have led to toxic combination of 'fen-phen'）」（http://web.mit.edu/newsoffice/1998/fenphen-0902.html）（1998）。
【０００７】
最近になって、ＴＰＨ１の安全且つ効果的な阻害のために開発された化合物が開示されてきている。特許文献１を参照されたい。かかる化合物が、広範な疾患及び障害を治療、管理及び予防する全く新しいアプローチを可能にする。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】米国特許出願公開第２００７−０１９１３７０号明細書
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００９】
３．発明の概要
本発明は一部、１つ又は複数の薬剤の投与に関連するセロトニン媒介性の有害作用を軽減及び／又は緩和する方法に関する。特定の方法は、トリプトファンヒドロキシラーゼ（ＴＰＨ）の阻害を含む。
【００１０】
本発明は、２つの薬学的活性成分を含む組成物も包含し、これらの１つはＴＰＨ阻害剤であり、もう１つはセロトニン媒介性の有害作用を引き起こし得る薬剤である。
【００１１】
特定のＴＰＨ阻害剤は、式Ｉ：
【００１２】
【化１】
2010531889.tif 000003
【００１３】
（式中、Ａは必要に応じて置換されたシクロアルキル、アリール、又は複素環であり、Ｘは結合（すなわち、ＡがＤと直接結合する）、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｒ４）＝、＝Ｃ（Ｒ４）−、−Ｃ（Ｒ３Ｒ４）−、−Ｃ（Ｒ４）＝Ｃ（Ｒ４）−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｎ（Ｒ５）−、−Ｎ（Ｒ５）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ５）−、−Ｃ（Ｒ３Ｒ４）Ｎ（Ｒ５）−、−Ｎ（Ｒ５）Ｃ（Ｒ３Ｒ４）−、−ＯＮＣ（Ｒ３）−、−Ｃ（Ｒ３）ＮＯ−、−Ｃ（Ｒ３Ｒ４）Ｏ−、−ＯＣ（Ｒ３Ｒ４）−、−Ｓ（Ｏ２）−、−Ｓ（Ｏ２）Ｎ（Ｒ５）−、−Ｎ（Ｒ５）Ｓ（Ｏ２）−、−Ｃ（Ｒ３Ｒ４）Ｓ（Ｏ２）−、又は−Ｓ（Ｏ２）Ｃ（Ｒ３Ｒ４）−であり、Ｄは必要に応じて置換されたアリール又は複素環であり、Ｒ１は水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アルキル−アリール、アルキル−複素環、アリール、若しくは複素環であり、Ｒ２は水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アルキル−アリール、アルキル−複素環、アリール、若しくは複素環であり、Ｒ３は水素、アルコキシ、アミノ、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、又は必要に応じて置換されたアルキルであり、Ｒ４は水素、アルコキシ、アミノ、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、又は必要に応じて置換されたアルキル若しくはアリールであり、各Ｒ５は独立して、水素又は必要に応じて置換されたアルキル若しくはアリールであり、ｎは０〜３である）の化合物及びその薬学的に許容される塩を有する。
【００１４】
４．図面の簡単な説明
添付の図面を参照して本発明の態様が理解され得る。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】経口投与後のマウスの胃腸管及び脳における本発明の強力なＴＰＨ１阻害剤の効果を示す図である。全てのデータは、対照（ビヒクル投与）群の平均％として表される。誤差バーは標準誤差（Ｓ．Ｅ．Ｍ）である。Ｎ＝１群当たり５回。記号＊は、対照群に比べてｐ値が０．０５未満であるものである。脳のデータに関しては、片側ＡＮＯＶＡ（ｐ＝０．５）である。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
５．詳細な説明
モノアミンオキシダーゼ（ＭＡＯ）阻害剤及び選択的セロトニン再取り込み阻害剤（ＳＳＲＩ）は、多様の有害作用をもたらし得るように、末梢セロトニンの代謝及び運命（fate）に作用する。セロトニン作動性経路に作用する他の薬剤（トリプタン等）も、セロトニン媒介性の有害作用を引き起こし得る。本発明の方法及び組成物によって、セロトニン関連の有害作用の軽減及び／又は緩和が可能になる。
【００１７】
マウスでｔｐｈ１遺伝子をノックアウトすることによって、ＧＩセロトニンのレベルが有意に低減し、中枢神経系（ＣＮＳ）に対する測定可能な効果は、たとえあったとしてもほとんど引き起こされないという発見に、本発明は一部基づいている。本発明は、ＴＰＨ（例えばＴＰＨ１）を阻害する化合物の発見にも基づいている。
【００１８】
５．１．定義
特に明示のない限り、「アルケニル」という用語は、２〜２０（例えば２〜１０又は２〜６）個の炭素原子を有し、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を含む直鎖、分岐鎖、及び／又は環式の炭化水素を意味する。代表的なアルケニル部分としては、ビニル、アリル、１−ブテニル、２−ブテニル、イソブチレニル、１−ペンテニル、２−ペンテニル、３−メチル−１−ブテニル、２−メチル−２−ブテニル、２，３−ジメチル−２−ブテニル、１−ヘキセニル、２−ヘキセニル、３−ヘキセニル、１−ヘプテニル、２−ヘプテニル、３−ヘプテニル、１−オクテニル、２−オクテニル、３−オクテニル、１−ノネニル、２−ノネニル、３−ノネニル、１−デセニル、２−デセニル、及び３−デセニルが挙げられる。
【００１９】
特に明示のない限り、「アルキル」という用語は、１〜２０（例えば１〜１０又は１〜４）個の炭素原子を有する直鎖、分岐鎖、及び／又は環式（「シクロアルキル」）の炭化水素を意味する。１〜４個の炭素原子を有するアルキル部分は「低級アルキル」と称される。アルキル基の例としては、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、イソブチル、ペンチル、ヘキシル、イソヘキシル、ヘプチル、４，４−ジメチルペンチル、オクチル、２，２，４−トリメチルペンチル、ノニル、デシル、ウンデシル、及びドデシルが挙げられる。シクロアルキル部分は単環又は多環であってもよく、例としてはシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、及びアダマンチルが挙げられる。アルキル部分のさらなる例は直鎖部分、分岐部分、及び／又は環状部分（例えば、１−エチル−４−メチル−シクロヘキシル）を有する。「アルキル」という用語は飽和炭化水素、並びにアルケニル部分及びアルキニル部分を含む。
【００２０】
特に明示のない限り、「アルコキシ」という用語は、−Ｏ−アルキル基を意味する。アルコキシ基の例としては、−ＯＣＨ３、−ＯＣＨ２ＣＨ３、−Ｏ（ＣＨ２）２ＣＨ３、−Ｏ（ＣＨ２）３ＣＨ３、−Ｏ（ＣＨ２）４ＣＨ３、及び−Ｏ（ＣＨ２）５ＣＨ３が挙げられる。
【００２１】
特に明示のない限り、「アルキルアリール」又は「アルキル−アリール」という用語は、アリール部分に結合したアルキル部分を意味する。
【００２２】
特に明示のない限り、「アルキルヘテロアリール」又は「アルキル−ヘテロアリール」という用語は、ヘテロアリール部分に結合したアルキル部分を意味する。
【００２３】
特に明示のない限り、「アルキル複素環」又は「アルキル−複素環」という用語は、複素環部分に結合したアルキル部分を意味する。
【００２４】
特に明示のない限り、「アルキニル」という用語は、２〜２０（例えば２〜２０又は２〜６）個の炭素原子を有し、少なくとも１つの炭素−炭素三重結合を含む直鎖、分岐鎖、又は環式の炭化水素を意味する。代表的なアルキニル部分としては、アセチレニル、プロピニル、１−ブチニル、２−ブチニル、１−ペンチニル、２−ペンチニル、３−メチル−１−ブチニル、４−ペンチニル、１−ヘキシニル、２−ヘキシニル、５−ヘキシニル、１−ヘプチニル、２−ヘプチニル、６−ヘプチニル、１−オクチニル、２−オクチニル、７−オクチニル、１−ノニニル、２−ノニニル、８−ノニニル、１−デシニル、２−デシニル、及び９−デシニルが挙げられる。
【００２５】
特に明示のない限り、「アリール」という用語は、芳香環、又は炭素原子及び水素原子で構成される芳香環若しくは一部が芳香環の系を意味する。アリール部分は共に結合又は縮合した複数の環を含んでも良い。アリール部分の例としては、アントラセニル、アズレニル、ビフェニル、フルオレニル、インダン、インデニル、ナフチル、フェナントレニル、フェニル、１，２，３，４−テトラヒドロ−ナフタレン、及びトリルが挙げられる。
【００２６】
特に明示のない限り、「アリールアルキル」又は「アリール−アルキル」という用語は、アルキル部分に結合したアリール部分を意味する。
【００２７】
特に明示のない限り、「生加水分解性（biohydrolyzable）アミド」、「生加水分解性エステル」、「生加水分解性カルバメート」、「生加水分解性カーボネート」、「生加水分解性ウレイド」、及び「生加水分解性ホスフェート」という用語は、それぞれ、１）化合物の生物活性を妨げないが、ｉｎ  ｖｉｖｏで、吸収、作用の持続時間、若しくは作用の開始等の有益な特性を化合物に付与することができる化合物、又は２）生物学的に不活性であるがｉｎ  ｖｉｖｏで生物学的に活性な化合物に変換される化合物のアミド、エステル、カルバメート、カーボネート、ウレイド、又はホスフェートを意味する。生加水分解性エステルの例としては、低級アルキルエステル、アルコキシアシルオキシエステル、アルキルアシルアミノアルキルエステル、及びコリンエステルが挙げられる。生加水分解性アミドの例としては、低級アルキルアミド、α−アミノ酸アミド、アルコキシアシルアミド、及びアルキルアミノアルキル−カルボニルアミドが挙げられる。生加水分解性カルバメートの例としては、低級アルキルアミン、置換エチレンジアミン、アミノ酸、ヒドロキシアルキルアミン、複素環アミン及び複素芳香族アミン、並びにポリエーテルアミンが挙げられる。
【００２８】
特に明示のない限り、「ハロゲン」及び「ハロ」という用語は、フッ素、塩素、臭素、及びヨウ素を包含する。
【００２９】
特に明示のない限り、「ヘテロアルキル」という用語は、炭素原子の少なくとも１つがヘテロ原子（例えばＮ、Ｏ又はＳ）に置換されているアルキル部分（例えば直鎖、分岐鎖又は環式）を表す。
【００３０】
特に明示のない限り、「ヘテロアリール」という用語は、炭素原子の少なくとも１つがヘテロ原子（例えばＮ、Ｏ又はＳ）に置換されているアリール部分を意味する。例としては、アクリジニル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾイソチアゾリル、ベンゾイソオキサゾリル、ベンゾキナゾリニル、ベンゾチアゾリル、ベンゾオキサゾリル、フリル、イミダゾリル、インドリル、イソチアゾリル、イソオキサゾリル、オキサジアゾリル、オキサゾリル、フタラジニル、ピラジニル、ピラゾリル、ピリダジニル、ピリジル、ピリミジニル、ピリミジル、ピロリル、キナゾリニル、キノリニル、テトラゾリル、チアゾリル、及びトリアジニルが挙げられる。
【００３１】
特に明示のない限り、「ヘテロアリールアルキル」又は「ヘテロアリール−アルキル」という用語は、アルキル部分に結合したヘテロアリール部分を意味する。
【００３２】
特に明示のない限り、「複素環」という用語は、炭素、水素及び少なくとも１つのヘテロ原子（例えばＮ、Ｏ又はＳ）で構成される芳香族、部分芳香族若しくは非芳香族の単環式若しくは多環式の環又は環系を表す。複素環には、共に縮合又は結合した複数（すなわち２つ以上）の環を含んでもよい。複素環はヘテロアリールを含む。例としては、ベンゾ［１，３］ジオキソリル、２，３−ジヒドロ−ベンゾ［１，４］ジオキシニル、シンノリニル、フラニル、ヒダントイニル、モルホリニル、オキセタニル、オキシラニル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピロリジノニル、ピロリジニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロピリジニル、テトラヒドロピリミジニル、テトラヒドロチオフェニル、テトラヒドロチオピラニル、及びバレロラクタミルが挙げられる。
【００３３】
特に明示のない限り、「複素環アルキル」又は「複素環−アルキル」という用語は、アルキル部分に結合した複素環部分を表す。
【００３４】
特に明示のない限り、「ヘテロシクロアルキル」という用語は、非芳香族の複素環を表す。
【００３５】
特に明示のない限り、「ヘテロシクロアルキルアルキル」又は「ヘテロシクロアルキル−アルキル」という用語は、アルキル部分に結合したヘテロシクロアルキル部分を表す。
【００３６】
特に明示のない限り、「薬学的に許容される塩」という用語は、薬学的に許容される非毒性の酸又は塩基（無機酸及び無機塩基並びに有機酸及び有機塩基を含む）から調製される塩を表す。好適な薬学的に許容される塩基付加塩としては、アルミニウム、カルシウム、リチウム、マグネシウム、カリウム、ナトリウム、及び亜鉛から生成される金属塩、又はリジン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、クロロプロカイン、コリン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、メグルミン（Ｎ−メチルグルカミン）、及びプロカインから生成される有機塩が挙げられる。好適な非毒性の酸としては、酢酸、アルギン酸、アントラニル酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、クエン酸、エテンスルホン酸、ギ酸、フマル酸、フロ酸、ガラクツロン酸、グルコン酸、グルクロン酸、グルタミン酸、グリコール酸、臭化水素酸、塩化水素酸、イセチオン酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、ムチン酸、硝酸、パモン酸、パントテン酸、フェニル酢酸、リン酸、プロピオン酸、サリチル酸、ステアリン酸、コハク酸、スルファニル酸、硫酸、酒石酸、及びｐ−トルエンスルホン酸等の無機酸及び有機酸が挙げられる。特定の非毒性酸としては、塩化水素酸、臭化水素酸、リン酸、硫酸、及びメタンスルホン酸が挙げられる。したがって、特定の塩の例としては、塩酸塩及びメシル酸塩が挙げられる。他のものも当該技術分野において既知である。例えばRemington's Pharmaceutical Sciences（第１８版、Mack Publishing, Easton PA: 1990）、及びRemington: The Science and Practice of Pharmacy（第１９版、Mack Publishing, Easton PA: 1995）を参照されたい。
【００３７】
特に明示のない限り、「強力なＴＰＨ１阻害剤」という用語は、ＴＰＨ１＿ＩＣ５０が約１０μＭ未満である化合物である。
【００３８】
特に明示のない限り、「プロドラッグ」という用語は、本明細書に開示の化合物の薬学的に許容されるエステル、カーボネート、チオカーボネート、Ｎ−アシル誘導体、Ｎ−アシルオキシアルキル誘導体、第３級アミンの第４級誘導体、Ｎ−マンニッヒ塩基、シッフ塩基、アミノ酸抱合体、リン酸エステル、金属塩、及びスルホン酸エステルを包含する。プロドラッグの例としては、生加水分解性部分（例えば、生加水分解性アミド、生加水分解性カルバメート、生加水分解性カーボネート、生加水分解性エステル、生加水分解性ホスフェート、又は生加水分解性ウレイド類似体）を含む化合物が挙げられる。本明細書に開示の化合物のプロドラッグは当業者によって容易に構想及び調製される。例えば、Design of Prodrugs（Bundgaard, A. Ed., Elseview, 1985）、Bundgaard, H.著Design and Application of Prodrugs（A Textbook of Drug Design and Development, Krosgaard-Larsen and H. Bundgaard, Ed., 1991, Chapter 5, p. 113-191）、及びBundgaard, H.著Advanced Drug Delivery Review（1992, 8, 1-38）を参照されたい。
【００３９】
特に明示のない限り、化合物の「予防的に有効な量」は、疾患若しくは病態、又は疾患若しくは病態に関連する１つ若しくは複数の症状を予防する、又はその再発を予防するのに十分な量である。化合物の予防的に有効な量は、単独で又は他の薬剤と併用して、疾患の予防において予防的利点を与える治療剤の量である。「予防的に有効な量」という用語は、予防法を全体的に改善する、又は別の予防剤の予防的な有効性を高める量を包含し得る。
【００４０】
特に明示のない限り、化学反応を受ける分子の一部分を表すのに用いられる場合、「保護性基（protecting group）」又は「保護基（protective group）」という用語は、この化学反応の条件下で反応性がなく、これらの条件下で反応性がある部分を与えるために取り除くことができる化学的部分を意味する。保護性基は当該技術分野で既知である。例えば、Greene, T. W. and Wuts, P.G.M.著Protective Groups in Organic Synthesis（第３版、John Wiley & Sons: 1999）、Larock, R. C.著Comprehensive Organic Transformations（第２版、John Wiley & Sons:1999）を参照されたい。幾つかの例としては、ベンジル、ジフェニルメチル、トリチル、Ｃｂｚ、Ｂｏｃ、Ｆｍｏｃ、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、及びフタルイミドが挙げられる。
【００４１】
特に明示のない限り、「擬ハロゲン」という用語は、その酸−塩基、置換及び酸化還元化学においてハロゲン化物イオンに類似し、一般的に弱塩基性であり、原子移動ラジカル重合条件下でフリーラジカルを形成する多原子陰イオンを表す。擬ハロゲンの例としては、アジドイオン、シアニド、シアネート、チオシアネート、チオスルフェート、スルホネート、及びハロゲン化スルホニルが挙げられる。
【００４２】
特に明示のない限り、「選択的ＴＰＨ１阻害剤」という用語は、ＴＰＨ２＿ＩＣ５０がＴＰＨ１＿ＩＣ５０より少なくとも約１０倍大きい化合物である。
【００４３】
特に明示のない限り、「セロトニン媒介性の有害効果」という用語は、末梢５−ヒドロキシトリプタミン（５−ＨＴ）のレベルの増大に起因する有害効果を表す。
【００４４】
特に明示のない限り、化合物の「立体異性体的に豊富な組成物」という用語は、特定の化合物をその立体異性体（複数可）よりも多く含有する、特定の化合物とその立体異性体（複数可）との混合物を表す。例えば、（Ｓ）−ブタン−２−オールの立体異性体的に豊富な組成物は、例えば約６０／４０、７０／３０、８０／２０、９０／１０、９５／５及び９８／２の比の（Ｓ）−ブタン−２−オールと、（Ｒ）−ブタン−２−オールとの混合物を包含する。
【００４５】
特に明示のない限り、「立体異性体混合物」という用語は、ラセミ混合物、及び立体異性体的に豊富な混合物を包含する（例えば、Ｒ／Ｓ＝３０／７０、３５／６５、４０／６０、４５／５５、５５／４５、６０／４０、６５／３５及び７０／３０）。
【００４６】
特に明示のない限り、「立体異性体的に純粋である」という用語は、化合物の１つの立体異性体を含み、その化合物の他の立体異性体を実質的に含まない組成物を意味する。例えば、１つの立体中心を有する化合物の立体異性体的に純粋である組成物は、化合物の反対の立体異性体を実質的に含まない。２つの立体中心を有する化合物の立体異性体的に純粋である組成物は、化合物の他のジアステレオマーを実質的に含まない。典型的な立体異性体的に純粋である化合物は、約８０重量％を超える化合物の１つの立体異性体と、約２０重量％未満の化合物の他の立体異性体とを含むか、約９０重量％を超える化合物の１つの立体異性体と、約１０重量％未満の化合物の他の立体異性体とを含むか、約９５重量％を超える化合物の１つの立体異性体と、約５重量％未満の化合物の他の立体異性体とを含むか、約９７重量％を超える化合物の１つの立体異性体と、約３重量％未満の化合物の他の立体異性体とを含むか、又は約９９重量％を超える化合物の１つの立体異性体と、約１重量％未満の化合物の他の立体異性体とを含む。
【００４７】
特に明示のない限り、「置換された」という用語は、化学構造又は部分を記載するために用いる場合は、その構造又は部分の誘導体を表し、ここで、１つ又は複数の水素原子は、アルコール、アルデヒド、アルコキシ、アルカノイルオキシ、アルコキシカルボニル、アルケニル、アルキル（例えば、メチル、エチル、プロピル、ｔ−ブチル）、アルキニル、アルキルカルボニルオキシ（−ＯＣ（Ｏ）アルキル）、アミド（−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−アルキル−又は−アルキルＮＨＣ（Ｏ）アルキル）、アミジニル（−Ｃ（ＮＨ）ＮＨ−アルキル又は−Ｃ（ＮＲ）ＮＨ２）、アミン（アルキルアミノ、アリールアミノ、アリールアルキルアミノ等の第１級、第２級及び第３級のアミン）、アロイル、アリール、アリールオキシ、アゾ、カルバモイル（−ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ−アルキル−又は−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−アルキル）、カルバミル（例えば、ＣＯＮＨ２、並びにＣＯＮＨ−アルキル、ＣＯＮＨ−アリール、及びＣＯＮＨ−アリールアルキル）、カルボニル、カルボキシル、カルボン酸、カルボン酸無水物、カルボン酸塩化物、シアノ、エステル、エポキシド、エーテル（例えば、メトキシ、エトキシ）、グアニジノ、ハロ、ハロアルキル（例えば、−ＣＣｌ３、−ＣＦ３、−Ｃ（ＣＦ３）３）、ヘテロアルキル、ヘミアセタール、イミン（第１級及び第２級）、イソシアネート、イソチオシアネート、ケトン、ニトリル、ニトロ、酸素（すなわち、オキソ基を与える）、ホスホジエステル、スルフィド、スルホンアミド（例えばＳＯ２ＮＨ２）、スルホン、スルホニル（アルキルスルホニル、アリールスルホニル及びアリールアルキルスルホニルを含む）、スルホキシド、チオール（例えばスルフヒドリル、チオエーテル）並びに尿素（−ＮＨＣＯＮＨ−アルキル−）（これらに限定されない）等の原子、化学的部分又は官能基で置換される。
【００４８】
特に明示のない限り、化合物の「治療的に有効な量」は、疾患又は病態の治療又は管理において治療的利点を与えるのに、又は疾患又は病態に関連した１つ又は複数の症状を遅延又は最小にするのに十分な量である。化合物の治療的に有効な量は、疾患又は病態の治療又は管理に治療的利点を与える、治療剤の単独の又は他の療法を併用した量を意味する。「治療的に有効な量」という用語は、療法全体を改善させるか、疾患若しくは病態の症状若しくは病因を軽減又は回避するか、又は別の治療剤の治療的有効性を高める量を包含することができる。
【００４９】
特に明示のない限り、「ＴＰＨ１＿ＩＣ５０」という用語は、以下の実施例に記載されるｉｎ  ｖｉｔｒｏ阻害アッセイを用いて求められるようなＴＰＨ１に対する化合物のＩＣ５０である。
【００５０】
特に明示のない限り、「ＴＰＨ２＿ＩＣ５０」という用語は、以下の実施例に記載されるｉｎ  ｖｉｔｒｏ阻害アッセイを用いて求められるようなＴＰＨ２に対する化合物のＩＣ５０である。
【００５１】
特に明示のない限り、「治療する（treat）」、「治療している（treating）」及び「治療（treatment）」という用語は、患者が特定の疾患又は障害を患っている間に行う処置を意図し、これによって疾患若しくは障害の重症度、又は１つ若しくは複数のその症状が軽減されるか、又は疾患若しくは障害の進行が遅延又は減速する。
【００５２】
特に明示のない限り、「挙げられる（複数形）（include）」という用語は、「挙げられる（include）」と同じ意味を有し、「挙げられる（単数形）（includes）」という用語は、「挙げられるが、限定されない」と同じ意味を有する。同様に、「等」という用語は、「等（限定されない）」と同じ意味を有する。
【００５３】
特に明示のない限り、一連の名詞の直前にくる１つ又は複数の形容詞は、それぞれの名詞を修飾するものとして解釈される。例えば、「必要に応じて置換されたアルキル、アリール又はヘテロアリール」という語句は、「必要に応じて置換されたアルキル、必要に応じて置換されたアリール又は必要に応じて置換されたヘテロアリール」と同じ意味を有する。
【００５４】
より大きい化合物部分を形成する化学的部分は、単一分子として存在する場合に一般的に指す名称、又はその基を一般的に指す名称を用いて本明細書に記載され得ることに留意すべきである。例えば、「ピリジン」及び「ピリジル」という用語は、他の化学的部分と結合する部分を記載するのに用いる場合に、同じ意味を表す。したがって、「ＸＯＨ（式中、Ｘはピリジルである）」及び「ＸＯＨ（式中、Ｘはピリジンである）」という２つの語句は同じ意味を表し、ピリジン−２−オール、ピリジン−３−オール及びピリジン−４−オールの化合物を包含する。
【００５５】
構造の立体化学、又は構造の一部分が例えば太線又は破線で示されない場合、構造又は構造の一部分はその全ての立体異性体を包含すると解釈されることに留意すべきである。同様に、キラル中心の立体化学が指定されていない１つ又は複数のキラル中心を有する化合物の名称は、その純粋な立体異性体及びそれらの混合物を包含する。さらに、図で示された満足な原子価を有しない任意の原子はこの原子価を満たすのに十分な水素原子と結合すると推測される。さらに、一本の破線に平行して一本の実線で示された化学結合は、原子価が許容される場合、単結合及び二重（例えば、芳香族）結合の両方を包含する。
【００５６】
５．２．化合物
本発明の特定の実施形態は、トリプトファンヒドロキシラーゼ（ＴＰＨ）を阻害することができる化合物を利用する。好ましい化合物は強力なＴＰＨ１阻害剤である。強力なＴＰＨ１阻害剤の例は、特許文献１に開示されている。
【００５７】
特定の実施形態は、式Ｉ：
【００５８】
【化２】
2010531889.tif 000004
【００５９】
（式中、Ａは必要に応じて置換されたシクロアルキル、アリール、又は複素環であり、Ｘは結合、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｒ４）＝、＝Ｃ（Ｒ４）−、−Ｃ（Ｒ３Ｒ４）−、−Ｃ（Ｒ４）＝Ｃ（Ｒ４）−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｎ（Ｒ５）−、−Ｎ（Ｒ５）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ５）−、−Ｃ（Ｒ３Ｒ４）Ｎ（Ｒ５）−、−Ｎ（Ｒ５）Ｃ（Ｒ３Ｒ４）−、−ＯＮＣ（Ｒ３）−、−Ｃ（Ｒ３）ＮＯ−、−Ｃ（Ｒ３Ｒ４）Ｏ−、−ＯＣ（Ｒ３Ｒ４）−、−Ｓ（Ｏ２）−、−Ｓ（Ｏ２）Ｎ（Ｒ５）−、−Ｎ（Ｒ５）Ｓ（Ｏ２）−、−Ｃ（Ｒ３Ｒ４）Ｓ（Ｏ２）−、又は−Ｓ（Ｏ２）Ｃ（Ｒ３Ｒ４）−であり、Ｄは必要に応じて置換されたアリール又は複素環であり、Ｒ１は水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アルキル−アリール、アルキル−複素環、アリール、若しくは複素環であり、Ｒ２は水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アルキル−アリール、アルキル−複素環、アリール、若しくは複素環であり、Ｒ３は水素、アルコキシ、アミノ、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、又は必要に応じて置換されたアルキルであり、Ｒ４は水素、アルコキシ、アミノ、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、又は必要に応じて置換されたアルキル若しくはアリールであり、各Ｒ５は独立して、水素又は必要に応じて置換されたアルキル若しくはアリールであり、ｎは０〜３である）の化合物及びその薬学的に許容される塩を利用する。
【００６０】
特定の化合物は、式Ｉ（Ａ）：
【００６１】
【化３】
2010531889.tif 000005
【００６２】
を有する。
【００６３】
他のものとしては、式ＩＩ：
【００６４】
【化４】
2010531889.tif 000006
【００６５】
（式中、Ａは必要に応じて置換されたシクロアルキル、アリール、又は複素環であり、Ｘは結合、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｒ４）＝、＝Ｃ（Ｒ４）−、−Ｃ（Ｒ３Ｒ４）−、−Ｃ（Ｒ４）＝Ｃ（Ｒ４）−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｎ（Ｒ５）−、−Ｎ（Ｒ５）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ５）−、−Ｃ（Ｒ３Ｒ４）Ｎ（Ｒ５）−、−Ｎ（Ｒ５）Ｃ（Ｒ３Ｒ４）−、−ＯＮＣ（Ｒ３）−、−Ｃ（Ｒ３）ＮＯ−、−Ｃ（Ｒ３Ｒ４）Ｏ−、−ＯＣ（Ｒ３Ｒ４）−、−Ｓ（Ｏ２）−、−Ｓ（Ｏ２）Ｎ（Ｒ５）−、−Ｎ（Ｒ５）Ｓ（Ｏ２）−、−Ｃ（Ｒ３Ｒ４）Ｓ（Ｏ２）−、又は−Ｓ（Ｏ２）Ｃ（Ｒ３Ｒ４）−であり、Ｄは必要に応じて置換されたアリール又は複素環であり、Ｅは必要に応じて置換されたアリール又は複素環であり、Ｒ１は水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アルキル−アリール、アルキル−複素環、アリール、若しくは複素環であり、Ｒ２は水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アルキル−アリール、アルキル−複素環、アリール、若しくは複素環であり、Ｒ３は水素、アルコキシ、アミノ、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、又は必要に応じて置換されたアルキルであり、Ｒ４は水素、アルコキシ、アミノ、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、又は必要に応じて置換されたアルキル若しくはアリールであり、Ｒ５は水素又は必要に応じて置換されたアルキル若しくはアリールであり、ｎは０〜３である）及びその薬学的に許容される塩を有する。
【００６６】
特定の化合物は、式ＩＩ（Ａ）：
【００６７】
【化５】
2010531889.tif 000007
【００６８】
を有する。
【００６９】
本明細書に開示された式（例えば、式Ｉ、式Ｉ（Ａ）、式ＩＩ及び式ＩＩ（Ａ））に関して、特定の化合物としては、式中、Ａが必要に応じて置換されたシクロアルキル（例えば、６員環及び５員環）であるものが挙げられる。幾つかでは、Ａは必要に応じて置換されたアリール（例えば、フェニル又はナフチル）である。他では、Ａは必要に応じて置換された複素環（例えば、６員環及び５員環）である。６員環の複素環の例としては、ピリジン、ピリダジン、ピリミジン、ピラジン、及びトリアジンが挙げられる。５員環の複素環の例としては、ピロール、イミダゾール、トリアゾール、チアゾール、チオフェン、及びフランが挙げられる。幾つかの化合物では、Ａは芳香族である。他の化合物では、Ａは芳香族ではない。幾つかの化合物では、Ａは必要に応じて置換された二環式部分（例えば、インドール、イソインドール、ピロロピリジン、又はナフチレン（napthylene））である。
【００７０】
特定の化合物は、式：
【００７１】
【化６】
2010531889.tif 000008
【００７２】
（式中、Ａ１及びＡ２のそれぞれは独立して、単環の必要に応じて置換されたシクロアルキル、アリール、又は複素環である）を有する。この式によって包含される化合物としては、式中、Ａ１及び／又はＡ２が必要に応じて置換されたシクロアルキル（例えば、６員環及び５員環）であるものが挙げられる。幾つかでは、Ａ１及び／又はＡ２は必要に応じて置換されたアリール（例えば、フェニル又はナフチル）である。他では、Ａ１及び／又はＡ２は必要に応じて置換された複素環（例えば、６員環及び５員環）である。６員環の複素環の例としては、ピリジン、ピリダジン、ピリミジン、ピラジン、及びトリアジンが挙げられる。５員環の複素環の例としては、ピロール、イミダゾール、トリアゾール、チアゾール、チオフェン、及びフランが挙げられる。幾つかの化合物では、Ａ１及び／又はＡ２は芳香族である。他の化合物では、Ａ１及び／又はＡ２は芳香族ではない。
【００７３】
本明細書に開示された式に関して、特定の化合物としては、式中、Ｄが必要に応じて置換されたアリール（例えば、フェニル又はナフチル）であるものが挙げられる。他では、Ｄは必要に応じて置換された複素環（例えば、６員環及び５員環）である。６員環の複素環の例としては、ピリジン、ピリダジン、ピリミジン、ピラジン、及びトリアジンが挙げられる。５員環の複素環の例としては、ピロール、イミダゾール、トリアゾール、チアゾール、チオフェン、及びフランが挙げられる。幾つかの化合物では、Ｄは芳香族である。他の化合物では、Ｄは芳香族ではない。幾つかの化合物では、Ｄは必要に応じて置換された二環式部分（例えば、インドール、イソインドール、ピロロピリジン、又はナフチレン）である。
【００７４】
本明細書に開示される様々な式に関して、特定の化合物としては、式中、Ｅが必要に応じて置換されたアリール（例えば、フェニル又はナフチル）であるものが挙げられる。他では、Ｅは必要に応じて置換された複素環（例えば、６員環及び５員環）である。６員環の複素環の例としては、ピリジン、ピリダジン、ピリミジン、ピラジン、及びトリアジンが挙げられる。５員環の複素環の例としては、ピロール、イミダゾール、トリアゾール、チアゾール、チオフェン、及びフランが挙げられる。幾つかの化合物では、Ｅは芳香族である。他の化合物では、Ｅは芳香族ではない。幾つかの化合物では、Ｅは必要に応じて置換された二環式部分（例えば、インドール、イソインドール、ピロロピリジン、又はナフチレン）である。
【００７５】
本明細書に開示される様々な式に関して、特定の化合物としては、式中、Ｒ１が水素又は必要に応じて置換されたアルキルであるものが挙げられる。
【００７６】
幾つかでは、Ｒ２は水素又は必要に応じて置換されたアルキルである。
【００７７】
幾つかでは、ｎは１又は２である。
【００７８】
幾つかでは、Ｘは結合又はＳである。他では、Ｘは−Ｃ（Ｒ４）＝、＝Ｃ（Ｒ４）−、−Ｃ（Ｒ３Ｒ４）−、−Ｃ（Ｒ４）＝Ｃ（Ｒ４）−、又は−Ｃ≡Ｃ−であり、例えばＲ４は独立して、水素又は必要に応じて置換されたアルキルである。他では、Ｘは−Ｏ−、−Ｃ（Ｒ３Ｒ４）Ｏ−、又は−ＯＣ（Ｒ３Ｒ４）−であり、例えばＲ３は水素又は必要に応じて置換されたアルキルであり、Ｒ４は水素又は必要に応じて置換されたアルキルである。幾つかでは、Ｒ３は水素であり、Ｒ４はトリフルオロメチルである。幾つかの化合物では、Ｘは−Ｓ（Ｏ２）−、−Ｓ（Ｏ２）Ｎ（Ｒ５）−、−Ｎ（Ｒ５）Ｓ（Ｏ２）−、−Ｃ（Ｒ３Ｒ４）Ｓ（Ｏ２）−、又は−Ｓ（Ｏ２）Ｃ（Ｒ３Ｒ４）−であり、例えばＲ３は水素又は必要に応じて置換されたアルキルであり、Ｒ４は水素又は必要に応じて置換されたアルキルであり、Ｒ５は水素又は必要に応じて置換されたアルキルである。他の化合物では、Ｘは−Ｎ（Ｒ５）−、−Ｎ（Ｒ５）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ５）−、−Ｃ（Ｒ３Ｒ４）Ｎ（Ｒ５）−、又は−Ｎ（Ｒ５）Ｃ（Ｒ３Ｒ４）−であり、例えばＲ３は水素又は必要に応じて置換されたアルキルであり、Ｒ４は水素又は必要に応じて置換されたアルキルであり、各Ｒ５は独立して、水素又は必要に応じて置換されたアルキルである。
【００７９】
他の化合物は、式：
【００８０】
【化７】
2010531889.tif 000009
【００８１】
（式中、例えばＲ３はトリフルオロメチルである）を有する。他は、式：
【００８２】
【化８】
2010531889.tif 000010
【００８３】
（式中、例えばＲ３は水素である）によって包含される。
【００８４】
幾つかの化合物は、式：
【００８５】
【化９】
2010531889.tif 000011
【００８６】
（式中、Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３及びＺ４のそれぞれは独立して、Ｎ又はＣＲ６であり、各Ｒ６は独立して、水素、シアノ、ハロゲン、ＯＲ７、ＮＲ８Ｒ９、アミノ、ヒドロキシル、又は必要に応じて置換されたアルキル、アルキル−アリール若しくはアルキル−複素環であり、各Ｒ７は独立して、水素又は必要に応じて置換されたアルキル、アルキル−アリール若しくはアルキル−複素環であり、各Ｒ８は独立して、水素又は必要に応じて置換されたアルキル、アルキル−アリール若しくはアルキル−複素環であり、各Ｒ９は独立して、水素又は必要に応じて置換されたアルキル、アルキル−アリール若しくはアルキル−複素環であり、ｍは１〜４である）によって包含される。或る特定のこのような化合物は、式：
【００８７】
【化１０】
2010531889.tif 000012
【００８８】
を有する。他のものとしては、式：
【００８９】
【化１１】
2010531889.tif 000013
【００９０】
（式中、例えばＲ３はトリフルオロメチルである）を有する。他のものとしては、式：
【００９１】
【化１２】
2010531889.tif 000014
【００９２】
（式中、例えばＲ３は水素である）を有する。
【００９３】
上記の様々な式に関して、幾つかの化合物は、Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３及びＺ４の全てがＮであるようなものである。他の化合物では、Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３及びＺ４のうちの３つだけがＮである。他の化合物では、Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３及びＺ４のうちの２つだけがＮである。他の化合物では、Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３及びＺ４のうちの１つだけがＮである。他の化合物では、Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３及びＺ４のいずれもがＮではない。
【００９４】
幾つかの化合物は、式：
【００９５】
【化１３】
2010531889.tif 000015
【００９６】
（式中、Ｚ’１、Ｚ’２及びＺ’３のそれぞれは独立して、Ｎ、ＮＨ、Ｓ、Ｏ又はＣＲ６であり、各Ｒ６は独立して、アミノ、シアノ、ハロゲン、水素、ＯＲ７、ＳＲ７、ＮＲ８Ｒ９、又は必要に応じて置換されたアルキル、アルキル−アリール若しくはアルキル−複素環であり、各Ｒ７は独立して、水素又は必要に応じて置換されたアルキル、アルキル−アリール若しくはアルキル−複素環であり、各Ｒ８は独立して、水素又は必要に応じて置換されたアルキル、アルキル−アリール若しくはアルキル−複素環であり、各Ｒ９は独立して、水素又は必要に応じて置換されたアルキル、アルキル−アリール若しくはアルキル−複素環であり、ｐは１〜３である）を有する。或る特定のこのような化合物は、式：
【００９７】
【化１４】
2010531889.tif 000016
【００９８】
を有する。他のものとしては、式：
【００９９】
【化１５】
2010531889.tif 000017
【０１００】
（式中、例えばＲ３はトリフルオロメチルである）を有する。他のものとしては、式：
【０１０１】
【化１６】
2010531889.tif 000018
【０１０２】
（式中、例えばＲ３は水素である）を有する。
【０１０３】
上記の様々な式に関して、幾つかの化合物は、Ｚ’１、Ｚ’２及びＺ’３の全てがＮ又はＮＨであるようなものである。他の化合物では、Ｚ’１、Ｚ’２及びＺ’３のうちの２つだけがＮ又はＮＨである。他の化合物では、Ｚ’１、Ｚ’２及びＺ’３のうちの１つだけがＮ又はＮＨである。他の化合物では、Ｚ’１、Ｚ’２及びＺ’３のいずれもがＮ又はＮＨではない。
【０１０４】
幾つかの化合物は、式：
【０１０５】
【化１７】
2010531889.tif 000019
【０１０６】
（式中、Ｚ’’１、Ｚ’’２、Ｚ’’３及びＺ’’４のそれぞれは独立して、Ｎ又はＣＲ１０であり、各Ｒ１０は独立して、アミノ、シアノ、ハロゲン、水素、ＯＲ１１、ＳＲ１１、ＮＲ１２Ｒ１３、又は必要に応じて置換されたアルキル、アルキル−アリール若しくはアルキル−複素環であり、各Ｒ１１は独立して、水素又は必要に応じて置換されたアルキル、アルキル−アリール若しくはアルキル−複素環であり、各Ｒ１２は独立して、水素又は必要に応じて置換されたアルキル、アルキル−アリール若しくはアルキル−複素環であり、各Ｒ１３は独立して、水素又は必要に応じて置換されたアルキル、アルキル−アリール若しくはアルキル−複素環である）によって包含される。或る特定のこのような化合物は、式：
【０１０７】
【化１８】
2010531889.tif 000020
【０１０８】
を有する。他のものとしては、式：
【０１０９】
【化１９】
2010531889.tif 000021
【０１１０】
（式中、例えばＲ３はトリフルオロメチルである）を有する。他のものとしては、式：
【０１１１】
【化２０】
2010531889.tif 000022
【０１１２】
（式中、例えばＲ３は水素である）を有する。
【０１１３】
上記の様々な式に関して、幾つかの化合物は、Ｚ’’１、Ｚ’’２、Ｚ’’３及びＺ’’４の全てがＮであるようなものである。他の化合物では、Ｚ’’１、Ｚ’’２、Ｚ’’３及びＺ’’４のうちの３つだけがＮである。他の化合物では、Ｚ’’１、Ｚ’’２、Ｚ’’３及びＺ’’４のうちの２つだけがＮである。他の化合物では、Ｚ’’１、Ｚ’’２、Ｚ’’３及びＺ’’４のうちの１つだけがＮである。他の化合物では、Ｚ’’１、Ｚ’’２、Ｚ’’３及びＺ’’４のいずれもがＮではない。
【０１１４】
幾つかの化合物は、式：
【０１１５】
【化２１】
2010531889.tif 000023
【０１１６】
（式中、Ｚ’’１、Ｚ’’２、Ｚ’’３及びＺ’’４のそれぞれは独立して、Ｎ又はＣＲ１０であり、各Ｒ１０は独立して、アミノ、シアノ、ハロゲン、水素、ＯＲ１１、ＳＲ１１、ＮＲ１２Ｒ１３、又は必要に応じて置換されたアルキル、アルキル−アリール若しくはアルキル−複素環であり、各Ｒ１１は独立して、水素又は必要に応じて置換されたアルキル、アルキル−アリール若しくはアルキル−複素環であり、各Ｒ１２は独立して、水素又は必要に応じて置換されたアルキル、アルキル−アリール若しくはアルキル−複素環であり、各Ｒ１３は独立して、水素又は必要に応じて置換されたアルキル、アルキル−アリール若しくはアルキル−複素環である）を有する。或る特定のこのような化合物は、式：
【０１１７】
【化２２】
2010531889.tif 000024
【０１１８】
を有する。他のものとしては、式：
【０１１９】
【化２３】
2010531889.tif 000025
【０１２０】
（式中、例えばＲ３はトリフルオロメチルである）を有する。他のものとしては、式：
【０１２１】
【化２４】
2010531889.tif 000026
【０１２２】
（式中、例えばＲ３は水素である）を有する。
【０１２３】
上記の様々な式に関して、幾つかの化合物は、Ｚ’’１、Ｚ’’２、Ｚ’’３及びＺ’’４の全てがＮであるようなものである。他の化合物では、Ｚ’’１、Ｚ’’２、Ｚ’’３及びＺ’’４のうちの３つだけがＮである。他の化合物では、Ｚ’’１、Ｚ’’２、Ｚ’’３及びＺ’’４のうちの２つだけがＮである。他の化合物では、Ｚ’’１、Ｚ’’２、Ｚ’’３及びＺ’’４のうちの１つだけがＮである。他の化合物では、Ｚ’’１、Ｚ’’２、Ｚ’’３及びＺ’’４のいずれもがＮではない。
【０１２４】
幾つかは、式：
【０１２５】
【化２５】
2010531889.tif 000027
【０１２６】
を有し、この置換基は本明細書中で定義される。他のものとしては、式：
【０１２７】
【化２６】
2010531889.tif 000028
【０１２８】
を有し、この置換基は本明細書中で定義される。他のものとしては、式：
【０１２９】
【化２７】
2010531889.tif 000029
【０１３０】
を有し、この置換基は本明細書中で定義される。他のものとしては、式：
【０１３１】
【化２８】
2010531889.tif 000030
【０１３２】
を有し、この置換基は本明細書中で定義される。
【０１３３】
本明細書に開示される様々な式に関して、特定の化合物としては、式中、Ａ及びＥの両方が必要に応じて置換されたフェニルであり、例えばＸが−Ｏ−、−Ｃ（Ｒ３Ｒ４）Ｏ−、又は−ＯＣ（Ｒ３Ｒ４）−であり、例えばＲ３が水素であり、Ｒ４がトリフルオロメチルであり、例えばｎが１であるようなものが挙げられる。
【０１３４】
本発明は、立体異性体的に純粋である化合物、及びそれらの立体異性体的に豊富な組成物を包含する。立体異性体は、キラルカラム、キラル分割剤又は酵素分割等の標準的な技法を用いて非対称に合成又は分割され得る。例えば、Jacques, J., et al.著Enantiomers, Racemates and Resolutions（Wiley Interscience, New York, 1981）、Wilen, S. H., et al.著Tetrahedron（33: 2725（1977））、Eliel, E. L.著Stereochemistry of Carbon Compounds（McGraw Hill, NY, 1962）、及びWilen, S. H.著Tables of Resolving Agents and Optical Resolutions p. 268（E.L. Eliel, Ed., Univ. of Notre Dame Press, Notre Dame, IN, 1972）を参照されたい。
【０１３５】
本発明の特定の化合物は、強力なＴＰＨ１阻害剤である。特定の化合物は、ＴＰＨ１＿ＩＣ５０が約１０μＭ、５μＭ、２．５μＭ、１μＭ、０．７５μＭ、０．５μＭ、０．４μＭ、０．３μＭ、０．２μＭ、０．１μＭ又は０．０５μＭ未満である。
【０１３６】
特定の化合物は、選択的ＴＰＨ１阻害剤である。特定の化合物は、ＴＰＨ１＿ＩＣ５０がＴＰＨ２＿ＩＣ５０の約１０、２５、５０、１００、２５０、５００又は１０００分の１である。
【０１３７】
特定の化合物は、ヒトチロシンヒドロキシラーゼ（ＴＨ）を有意に阻害しない。例えば、特定の化合物は、ＴＨに対するＩＣ５０が約１００μＭ、２５０μＭ、５００μＭ又は１０００μＭを超える。
【０１３８】
特定の化合物は、ヒトのフェニルアラニンヒドロキシラーゼ（ＰＡＨ）を有意に阻害しない。例えば、特定の化合物は、ＰＡＨに対するＩＣ５０が約１００μＭ、２５０μＭ、５００μＭ又は１０００μＭを超える。
【０１３９】
本発明の特定の化合物は、アンギオテンシン変換酵素、エリスロポイエチン（ＥＰＯ）レセプタ、第ＩＸ因子、第ＸＩ因子、インテグリン（例えば、α４）、イソオキサゾリン又はイソオキサゾールフィブリノゲンレセプタ、メタロプロテアーゼ、中性エンドペプチダーゼ（ＮＥＰ）、ホスファターゼ（例えば、チロシンホスファターゼ）、ホスホジエステラーゼ（例えば、ＰＤＥ−４）、ポリメラーゼ、ＰＰＡＲγ、ＴＮＦ−α、血管細胞接着分子−１（ＶＣＡＭ−１）、又はビトロネクチンレセプタの１つ又は複数と有意に結合（例えば、約１０μＭ、２５μＭ、５０μＭ、１００μＭ、２５０μＭ、５００μＭ、７５０μＭ又は１０００μＭを超えるＩＣ５０で阻害）しない。これらの標的のいずれかと結合（例えば阻害）する化合物の能力は、上記の参考文献に記載されたように、当該技術分野で既知の方法を用いて容易に求めることができる。本発明の特定の化合物は細胞接着を阻害しない。
【０１４０】
哺乳動物（例えば、マウス、ラット、イヌ、サル又はヒト）に投与する場合、本発明の或る特定の化合物は、血液脳関門を容易には通らない（例えば、血中、約５％、２．５％、２％、１．５％、１％、０．５％又は０．０１％未満の化合物が脳に移行する）。化合物が血液脳関門を通ることができるか又はできないかは、当該技術分野で既知の方法によって求めることができる。例えば、Riant, P. et al., Journal of Neurochemistry 51: 421-425（1988）、Kastin, A. J., Akerstrom, V., J. Pharmacol. Exp. Therapeutics 294: 633-636（2000）、W. A. Banks, W.A., et al., J. Pharmacol. Exp. Therapeutics 302: 1062-1069（2002）を参照されたい。
【０１４１】
５．３．化合物の合成
本発明の化合物は、当該技術分野で既知の方法によって、及び本明細書に記載の方法によって調製することができる。
【０１４２】
例えば、式Iを参照して、Eがフェニルであり、Dが必要に応じて置換されたピラジン、ピリジアジン、ピリジン又はフェニルである化合物は、スキーム１：
【０１４３】
【化２９】
2010531889.tif 000031
【０１４４】
（スキーム中、例えば
【０１４５】
【化３０】
2010531889.tif 000032
【０１４６】
は、
【０１４７】
【化３１】
2010531889.tif 000033
【０１４８】
である）で示される方法によって一般的に調製することができる。
【０１４９】
Ｘが−ＯＣＲ３−である化合物は、スキーム２：
【０１５０】
【化３２】
2010531889.tif 000034
【０１５１】
（スキーム中、例えばＡは必要に応じて置換されたフェニル、ビフェニル又はナフチル（napthyl）である）で示される方法を用いて一般的に調製することができる（この化合物においてＲ３はＣＦ３であり、Ｄはピリミジンである）。
【０１５２】
本発明の化合物は、以下のスキーム３：
【０１５３】
【化３３】
2010531889.tif 000035
【０１５４】
（スキーム中、Ｐ１はＲ１又は保護基であり、Ｐ２は保護基であり、Ｐ３はＯＲ２又は保護基であり、Ｘ’は例えば、Ｏ又はＮであり、Ｙ１及びＹ３はハロゲン（例えば、Ｂｒ、Ｃｌ）又は適切な擬ハロゲン化物（例えば、トリフラート）であり、各Ｒ’は独立して、水素又は必要に応じて置換されたアルキル、アルキル−アリール、アルキル−複素環、アリール若しくは複素環であるか、又は結合する酸素原子と合わせて、環状ジオキサボロラン（例えば、４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン）を提供する）で示されたアプローチを用いても調製することができる。Ａ基、Ｒ１基、Ｒ２基、Ｒ３基、Ｒ６基及びｍ基は本明細書の他の場所で定義されている。Ｚ’’１部分、Ｚ’’２部分、Ｚ’’３部分及びＺ’’４部分も本明細書でも定義されているが、上記のスキームに関して、これらの１つがフェニル環と結合することを理解するべきである。例えば、Ｚ’’１及びＺ’’４は独立してＣＲ１０であり得る一方で（本明細書で定義される）、Ｚ’’２はＮであり、Ｚ’’３は隣接したフェニル環と結合した炭素原子である。
【０１５５】
上記で示された個々の反応は、当該技術分野で既知の条件を用いて行うことができる。例えば、パラジウム触媒、並びにホウ素及びハロゲン含有部分の鈴木カップリングに好適な条件が既知であり、例が以下で与えられる。さらに、保護基の種類及び適切な使用が既知であり、これらの除去方法及び水素等（これに限定されない）の部分への置換方法（例えば、酸性又は塩基性条件下での加水分解）も既知である。
【０１５６】
Ａ部分は二環式（例えば、必要に応じて置換されたビフェニル）であり得る。このような場合、Ａを含有する出発材料は、以下：
【０１５７】
【化３４】
2010531889.tif 000036
【０１５８】
（式中、Ｙ２はハロゲン又は擬ハロゲンであり、各Ｒは独立して、水素又は必要に応じて置換されたアルキル、アルキル−アリール、アルキル−複素環、アリール若しくは複素環であるか、又は結合する酸素原子と合わせて、環状ジオキサボロラン（例えば、４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン）を提供する）で示されるように調製することができる。
【０１５９】
Ｄが必要に応じて置換されたピリミジン又はトリアジンである化合物の調製に対する別のアプローチは、以下のスキーム４：
【０１６０】
【化３５】
2010531889.tif 000037
【０１６１】
（スキーム中、例えばＸはＮ、Ｏ又はＳであり、ＦＧは以下のように定義される：Ｅが必要に応じて置換されたフェニルである場合、ＦＧはＢ（ＯＨ）２であり、Ｅが
【０１６２】
【化３６】
2010531889.tif 000038
【０１６３】
である場合、ＦＧは
【０１６４】
【化３７】
2010531889.tif 000039
【０１６５】
であり、Ｅが
【０１６６】
【化３８】
2010531889.tif 000040
【０１６７】
である場合、ＦＧはＨである）で示される。
【０１６８】
本発明のこれらの化合物及び他の化合物のエステル誘導体は、以下のスキーム５（スキーム中、Ｅは必要に応じて置換されたフェニルである）：
【０１６９】
【化３９】
2010531889.tif 000041
【０１７０】
で示されるような方法を用いて容易に調製することができる。
【０１７１】
トリアジン系化合物の調製に対する代替アプローチは、以下のスキーム６：
【０１７２】
【化４０】
2010531889.tif 000042
【０１７３】
で示される。
【０１７４】
環状部分Ｄは、本発明の化合物に容易に組み込まれる任意の様々な構造であり得る。例えば、Ｄがオキサゾールである化合物は、以下のスキーム７：
【０１７５】
【化４１】
2010531889.tif 000043
【０１７６】
で示されるように調製することができる。
【０１７７】
当該技術分野で既知の方法を用いて、上記に示す合成アプローチは、広範な化合物を得るように容易に修正される。例えば、キラルクロマトグラフィ及び当該技術分野で既知の他の技法は、最終生成物の立体異性体を単離するために用いられ得る。例えば、Jacques, J., et al.著Enantiomers, Racemates and Resolutions（Wiley Interscience, New York, 1981）、Wilen, S . H., et al.著Tetrahedron（33: 2725 （1977））、Eliel, E. L.著Stereochemistry of Carbon Compounds（McGraw Hill, NY, 1962）、及びWilen, S. H.著Tables of Resolving Agents and Optical Resolutions p. 268 （E.L. Eliel, Ed., Univ. of Notre Dame Press, Notre Dame, IN, 1972）を参照されたい。さらに、上記のスキームの幾つかで示されるように、合成にはキラル出発材料が利用され、立体異性体的に豊富な生成物、又は立体異性体的に純粋である生成物を得ることができる。
【０１７８】
５．４．使用方法
本発明は、１つ又は複数の薬剤の投与に関連する、１つ又は複数のセロトニン媒介性の有害作用を軽減及び／又は緩和する方法を包含する。特定の方法は、セロトニン媒介性の有害作用を軽減又は緩和するのに十分な量のＴＰＨ阻害剤（例えば強力なＴＰＨ１阻害剤）を、それを必要とする患者に投与することを含む。
【０１７９】
セロトニン媒介性の有害作用の例としては、心臓血管及び胃腸管（ＧＩ）の有害作用が挙げられる。心臓血管の有害作用としては、血管（例えば肺内）及び心臓弁への損傷等の心臓及び肺の損傷が挙げられる。かかる損傷は、必ずしもそうとは限らないが、肺高血圧症及び心臓弁障害（lesions）を引き起こし得る。胃腸管の有害作用としては、ＧＩの不快感及びＧＩ痛と、腸運動の不良（motility and immotility）が挙げられる。
【０１８０】
一実施形態において、セロトニン媒介性の有害作用は、モノアミンオキシダーゼ（ＭＡＯ）阻害剤に関連する。別の実施形態では、これは、選択的セロトニン再取り込み阻害剤（ＳＳＲＩ）に関連する。別の実施形態では、これは、トリプタンに関連する。別の実施形態では、これは、ＭＡＯ阻害剤、ＳＳＲＩ、及び／又はトリプタンの少なくとも２つの組合せに関連する。
【０１８１】
ＭＡＯ阻害剤の例としては、ブロファロミン、デクスフェンフルラミン、イソカルボキサジド（isocarboxazide）、イソニアジド、イプロニアジド、フェンフルラミン、モクロベミド、フェネルジン、プソイドエフェドリン、セレギリン、トロキサトン、又はトラニルシプロミン、及びそれらの薬学的に許容される塩、並びにそれらの薬理学的に活性のある立体異性体及び代謝体が挙げられる。
【０１８２】
ＳＳＲＩの例としては、アミトリプチリン、シタロプラム、ドキセピン、フルオキセチン、フルボキサミン、イミプラミン、ノルフルオキセチン、パロキセチン、セルトラリン、ベンラファキシン、又はジメリジン、及びそれらの薬学的に許容される塩、並びにそれらの薬理学的に活性のある立体異性体及び代謝体が挙げられる。
【０１８３】
トリプタンの例としては、ナラトリプタン、リザトリプタン、スマトリプタン、又はゾルミトリプタン、及びそれらの薬学的に許容される塩、並びにそれらの薬理学的に活性のある立体異性体及び代謝体が挙げられる。
【０１８４】
ＴＰＨ阻害剤の投与用量及び投与方法は、当業者が容易に決定することができる。例えば、セロトニン媒介性の有害作用の重症度が縮小するまで、阻害剤を滴定することができる。代替的に、血中５−ＨＴレベルは、直接測定し、投与されるＴＰＨ阻害剤の量に関連付けることができる。
【０１８５】
５．５．薬学的組成物
本発明はＴＰＨ阻害剤（例えば強力なＴＰＨ１阻害剤）と、患者（例えばヒト）に投与すると末梢セロトニンのレベル又は分布に作用し得る、少なくとも１つの他の薬学的活性成分とを含む薬学的組成物を包含する。特定の組成物は、ＴＰＨ阻害剤と、ＭＡＯ阻害剤、ＳＳＲＩ、及び／又はトリプタンの少なくとも１つとを含む。
【０１８６】
或る特定の薬学的組成物は、患者への経口、経粘膜（例えば鼻、舌下、膣、口腔、又は直腸）、非経口（例えば皮下、静脈内、ボーラス注入、筋肉内、又は動脈内）、又は経皮投与に好適な単一の単位剤形である。剤形の例としては、限定されるものではないが、錠剤；キャプレット；軟ゼラチンカプセル等のカプセル；カシェ（cachets：カプセル）；トローチ；ロゼンジ；分散液；坐剤；軟膏；パップ（湿布）；ペースト；粉末；包帯剤；クリーム；硬膏；溶液；パッチ；エアロゾル（例えば経鼻スプレー又は吸入器）；ジェル；懸濁液（例えば水性又は非水性の液体懸濁液、水中油型エマルジョン、又は油中水型エマルジョン）、溶液、及びエリキシルを含む患者への経口投与又は経粘膜投与に好適な液体剤形；患者への非経口投与に好適な液体剤形；並びに再構成して患者への非経口投与に好適な液体剤形を提供することができる滅菌固体（例えば結晶性又は非結晶性の固体）が挙げられる。
【０１８７】
製剤は、投与方式に合わせる必要がある。例えば、胃で分解しやすい化合物の経口投与は、腸溶性コーティングを用いて達成され得る。同様に、製剤は作用部位への活性成分（複数可）の送達を容易にする成分を含有し得る。例えば、化合物は、分解酵素から保護し、循環系における輸送を容易にし、細胞膜を通るこれらの送達に影響させるために、リポソーム製剤で投与され得る。
【０１８８】
同様に、難溶性化合物は、可溶化剤、乳化剤及びシクロデキストリン（例えば、α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、Ｃａｐｔｉｓｏｌ（登録商標）、及びＥｎｃａｐｓｉｎ（商標）（例えば、Davis及びBrewster, Nat. Rev. Drug Disc. 3: 1023-1034 （2004）を参照されたい））（これらに限定されない）等の界面活性剤、Ｌａｂｒａｓｏｌ（登録商標）、Ｌａｂｒａｆｉｌ（登録商標）、Ｌａｂｒａｆａｃ（登録商標）、ｃｒｅｍａｆｏｒ、並びにエチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、生体適合性油（例えば、綿実油、ラッカセイ油、トウモロコシ油、胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油及びゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレングリコール、ソルビタンの脂肪酸エステル、及びこれらの混合物（例えば、ＤＭＳＯ：トウモロコシ油）（これらに限定されない）等の非水性溶媒を用いて、液体投与形態（及び再構成に最適な投与形態）に組み込むことができる。
【０１８９】
難溶性化合物は、当該技術分野で既知の他の技法を用いても懸濁液に組み込むことができる。例えば、ナノ粒子の化合物を液体に懸濁させ、ナノ懸濁液を与えることができる（例えば、Rabinow, Nature Rev. Drug Disc. 3: 785-796 （2004）を参照されたい）。本明細書に記載のナノ粒子形態の化合物は、米国特許出願公開第２００４−０１６４１９４号明細書、同第２００４−０１９５４１３号明細書、同第２００４−０２５１３３２号明細書、同第２００５−００４２１７７号明細書、同第２００５−００３１６９１号明細書、及び米国特許第５，１４５，６８４号明細書、同第５，５１０，１１８号明細書、同第５，５１８，１８７号明細書、同第５，５３４，２７０号明細書、同第５，５４３，１３３号明細書、同第５，６６２，８８３号明細書、同第５，６６５，３３１号明細書、同第５，７１８，３８８号明細書、同第５，７１８，９１９号明細書、同第５，８３４，０２５号明細書、同第５，８６２，９９９号明細書、同第６，４３１，４７８号明細書、同第６，７４２，７３４号明細書、同第６，７４５，９６２号明細書（これらの全体がそれぞれ、参照により本明細書に援用される）に記載の方法によって調製され得る。一実施形態では、ナノ粒子形態は、平均粒径が約２０００ｎｍ未満、約１０００ｎｍ未満、又は約５００ｎｍ未満である粒子を含む。
【０１９０】
剤形の組成、形状、及び種類は、典型的には用途に応じて異なる。例えば、疾患の急性期治療に用いる剤形は、１つ又は複数の活性成分を、同一疾患の慢性期治療に用いる剤形よりも多量に含有することができる。同様に、非経口剤形は、１つ又は複数の活性成分を、同一疾患を治療するために用いる経口剤形よりも少量含有することができる。このような違いを説明する方法は、当業者には明らかである。例えば「レミントンの薬学（Remington's Pharmaceutical Sciences）」、第１８版、Mack Publishing, Easton PA（1990）を参照されたい。
【０１９１】
５．５．１．経口剤形
経口投与に好適な本発明の薬学的組成物は、錠剤（例えばチュアブル錠）、キャプレット、カプセル、及び液体（例えば香りのするシロップ）（これらに限定されない）等の個別の剤形として提供することができる。このような剤形は所定量の活性成分を含有し、当業者に既知の製薬法によって調製することができる。一般に、「レミントンの薬学」、第１８版、Mack Publishing, Easton PA（1990）を参照されたい。
【０１９２】
典型的な経口剤形は、慣用の薬学的配合技法に従い、密接な混合剤中で活性成分（複数可）を少なくとも１つの賦形剤と組み合わせることによって調製する。賦形剤は、投与に望ましい製剤の形態に応じて広範な形態を取ることができる。
【０１９３】
投与のしやすさのため、錠剤及びカプセルが最も有益な経口単位剤形である。所望であれば、錠剤は、標準の水性又は非水性技法によってコーティングすることができる。このような剤形は、慣用の製薬法でも調製することができる。一般に、薬学的組成物及び剤形は、活性成分を液体担体、微粉固体担体、又は両方と均一且つ密接に混合し、次に生成物を必要に応じて所望の形状にすることによって調製する。崩壊剤は、固体剤形に組み込み、迅速な溶解を容易にすることができる。また、滑沢剤を組み込んで、剤形（例えば錠剤）の調製を容易にすることができる。
【０１９４】
５．５．２．非経口剤形
非経口剤形は、皮下、静脈内（ボーラス注入を含む）、筋肉内、及び動脈内を含むさまざまな経路によって患者に投与することができる。典型的には汚染物質に対する患者の自然の防御を介さずに投与するため、非経口剤形は特に滅菌されているか、又は患者に投与する前に滅菌可能である。非経口剤形の例としては、すぐに注入できる溶液、注入のために薬学的に許容されるビヒクルにすぐに溶解又は懸濁できる乾燥産物、すぐに注入できる懸濁液、及びエマルジョンが挙げられる。
【０１９５】
本発明の非経口剤形を提供するために用いることができる好適なビヒクルは、当業者に既知である。例としては、注射用水ＵＳＰ；塩化ナトリウム注射液、リンゲル液、デキストロース注射液、デキストロース及び塩化ナトリウム注射液、及び乳酸加リンゲル液等の水性ビヒクル；エチルアルコール、ポリエチレングリコール、及びポリプロピレングリコール等の水混和性ビヒクル；並びにトウモロコシ油、綿実油、ラッカセイ油、ゴマ油、オレイン酸エチル、ミリスチン酸イソプロピル、及び安息香酸ベンジル等の非水性ビヒクルが挙げられる。
【実施例】
【０１９６】
６．実施例
６．１．ｔｐｈ１遺伝子破壊マウスの生成
マウスＴＰＨ１遺伝子のエキソン３は、基本的にWattler et al.（Biotechniques 26（6）: 1150-6 （1999））によって記載されたような遺伝子標的化によって取り除かれた。得られたノックアウト動物は、脳において正常なＴＰＨ活性を示したが、腸において劇的にＴＰＨ発現が低減した。
【０１９７】
６．２．ｔｐｈ１遺伝子破壊の生理学的影響
ｔｐｈ１の破壊に関して同型（−／−）のマウスを、野生型（＋／＋）同腹子と共に、遺伝子の破壊に関して異型（＋／−）のマウスと併せて研究した。この分析の間、哺乳動物被験体における主要な組織系の機能を評価するように設計された、一連の統合された医学的診断手法を用いて、マウスを医学的に精密検査した。記載の数で、異型（＋／−）及び野生型（＋／＋）の同腹子と併せて同型（−／−）ノックアウトマウスを研究することによって、より信頼性及び再現性のあるデータが得られた。
【０１９８】
ｔｐｈ１遺伝子の破壊は主にＴＰＨのＧＩ管アイソフォーム（ＴＰＨ１）に影響し、ＴＰＨの脳アイソフォーム（ＴＰＨ２）にはほとんど又は全く影響しなかった。遺伝子の破壊は、中枢神経系において測定可能な悪影響を引き起こさなかった。このことは、セロトニン免疫化学によって確認され、これによってセロトニンが胃、十二指腸、空腸、回腸、盲腸及び結腸で大きく低減したか、又は存在しなかったのに対し、縫線ニューロンではセロトニンレベルは影響を受けなかったことが示された。
【０１９９】
ｔｐｈ１遺伝子の破壊に関して同型（−／−）のマウスは、出血又は他の悪い兆候の有意な増大なく、血栓症を低減させた。
【０２００】
６．３．ＨＰＬＣ特徴付け
以下の幾つかの合成例において、高速液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）の保持時間が与えられる。特に明示のない限り、これらの保持時間を得るのに用いられる様々な条件は、以下に示される：
方法Ａ：ＹＭＣ−ＰＡＣＫ  ＯＤＳ−Ａ  ３．０×５０ｍｍ；溶媒Ａ＝９０％水、１０％ＭｅＯＨ、０．１％ＴＦＡ；溶媒Ｂ＝９０％ＭｅＯＨ、１０％水、０．１％ＴＦＡ；Ｂ％  ４分で０％〜１００％；流量＝２ｍｌ／分；観測波長＝２２０ｎｍ。
方法Ｂ：ＹＭＣ−ＰＡＣＫ  ＯＤＳ−Ａ  ３．０×５０ｍｍ；溶媒Ａ＝９０％水、１０％ＭｅＯＨ、０．１％ＴＦＡ；溶媒Ｂ＝９０％ＭｅＯＨ、１０％水、０．１％ＴＦＡ；％Ｂ  ４分で１０％〜１００％；流量＝３ｍｌ／分；観測波長＝２２０ｎｍ。
方法Ｃ：ＹＭＣ−ＰＡＣＫ  ＯＤＳ−Ａ  ３．０×５０ｍｍ；溶媒Ａ＝９０％水、１０％ＭｅＯＨ、０．１％ＴＦＡ；溶媒Ｂ＝９０％ＭｅＯＨ、１０％水、０．１％ＴＦＡ；Ｂ％  ５分で０％〜１００％；流量＝２ｍｌ／分；観測波長＝２２０ｎｍ。
方法Ｄ：Ｓｈｉｍ  ＶＰ  ＯＤＳ  ４．６×５０ｍｍ；溶媒Ａ＝９０％水、１０％ＭｅＯＨ、０．１％ＴＦＡ；溶媒Ｂ＝９０％ＭｅＯＨ、１０％水、０．１％ＴＦＡ；Ｂ％  ４分で０％〜１００％；流量＝３ｍｌ／分；観測波長＝２２０ｎｍ。
方法Ｅ：Ｓｈｉｍ  ＶＰ  ＯＤＳ  ４．６×５０ｍｍ；溶媒Ａ＝９０％水、１０％ＭｅＯＨ、０．１％ＴＦＡ；溶媒Ｂ＝９０％ＭｅＯＨ、１０％水、０．１％ＴＦＡ；Ｂ％  ４分で０％〜１００％；流量＝３ｍｌ／分；観測波長＝２５４ｎｍ。
方法Ｆ：ＹＭＣ−ＰＡＣＫ  ＯＤＳ−Ａ  ４．６×３３ｍｍ；溶媒Ａ＝９０％水、１０％ＭｅＯＨ、０．１％ＴＦＡ；溶媒Ｂ＝９０％ＭｅＯＨ、１０％水、０．１％ＴＦＡ；Ｂ％  ４分で０％〜１００％；流量＝３ｍｌ／分；観測波長＝２２０ｎｍ。
方法Ｇ：ＹＭＣ−ＰＡＣＫ  ＯＤＳ−Ａ  ４．６×５０ｍｍ；溶媒Ａ＝９０％水、１０％ＭｅＯＨ、０．１％ＴＦＡ；溶媒Ｂ＝９０％ＭｅＯＨ、１０％水、０．１％ＴＦＡ；Ｂ％  ２分で０％〜１００％；流量＝２．５ｍｌ／分；観測波長＝２２０ｎｍ。
方法Ｈ：Ｃ１８  ４．６×２０ｍｍ；溶媒Ａ＝９０％水、１０％ＭｅＯＨ、０．１％ＴＦＡ；溶媒Ｂ＝９０％ＭｅＯＨ、１０％水、０．１％ＴＦＡ；Ｂ％  ２分で０％〜１００％；流量＝２ｍｌ／分；観測波長＝２２０ｎｍ。
方法Ｉ：ＹＭＣ−ＰＡＣＫ  ＯＤＳ−Ａ  ３．０×５０ｍｍ；溶媒Ａ＝９０％水、１０％ＭｅＯＨ、０．１％ＴＦＡ；溶媒Ｂ＝９０％ＭｅＯＨ、１０％水、０．１％ＴＦＡ；Ｂ％  ４分で１０％〜１００％；流量＝２ｍｌ／分；観測波長＝２２０ｎｍ。
方法Ｊ：ＹＭＣ−ＰＡＣＫ  ＯＤＳ−Ａ  ３．０×５０ｍｍ；溶媒Ａ＝Ｈ２Ｏ、０．１％ＴＦＡ；溶媒Ｂ＝ＭｅＯＨ、０．１％ＴＦＡ；％Ｂ  ４分で約１０％〜約９０％；流量＝２ｍｌ／分；観測波長＝２２０ｎｍ。
方法Ｋ：Ｓｕｎｆｉｒｅ  Ｃ１８  ５０ｍｍ×４．６ｍｍ×３．５μｍ；溶媒Ａ＝１０ｍＭ  ＮＨ４ＯＡｃ水溶液；溶媒Ｂ＝ＭｅＣＮ；Ｂ％  ２分で１０％〜９５％；流量＝４．５ｍｌ／分．；観測波長＝２２０ｎｍ。
方法Ｌ：Ｓｕｎｆｉｒｅ  Ｃ１８  ５０ｍｍ×４．６ｍｍ×３．５μｍ；溶媒Ａ＝１０ｍＭ  ＮＨ４ＯＡｃ；溶媒Ｂ＝ＭｅＣＮ；Ｂ％  ０．８分で２〜２０％、次に２分で９５％Ｂ；流量＝４．５ｍｌ／分；観測波長＝２２０ｎｍ。
方法Ｍ：ＹＭＣ−ＰＡＣＫ  ＯＤＳ−Ａ  ４．６×３３ｍｍ；溶媒Ａ＝９０％水、１０％ＭｅＯＨ、０．１％ＴＦＡ；溶媒Ｂ＝９０％ＭｅＯＨ、１０％水、０．１％ＴＦＡ；Ｂ％  ５分で０％〜１００％；流量＝２．５ｍｌ／分；観測波長＝２５４ｎｍ。
方法Ｎ：ＹＭＣ−ＰＡＣＫ  ＯＤＳ−Ａ  ３．０×５０ｍｍ；溶媒Ａ＝Ｈ２Ｏ、０．１％ＴＦＡ；溶媒Ｂ＝ＭｅＯＨ、０．１％ＴＦＡ；Ｂ％  ４分で１０％〜９０％；流量＝２ｍｌ／分；観測波長＝２２０ｎｍ及び２５４ｎｍ。
方法Ｏ：ＹＭＣ−ＰＡＣＫ  ＯＤＳ−Ａ  ３．０×５０ｍｍ；溶媒Ａ＝９０％水、１０％ＭｅＯＨと０．１％ＴＦＡ；溶媒Ｂ＝９０％ＭｅＯＨ、１０％水と０．１％ＴＦＡ；Ｂ％  ４分で０％〜１００％；流量＝２ｍｌ／分；観測波長＝２２０ｎｍ及び２５４ｎｍ。
方法Ｐ：ＳｈｉｍＰａｃｋ  ＶＰ  ＯＤＳ  ４．６×５０ｍｍ；溶媒Ａ＝９０％Ｈ２Ｏ、１０％ＭｅＯＨ、１％ＴＦＡ；溶媒Ｂ＝１０％Ｈ２Ｏ、９０％ＭｅＯＨ、１％ＴＦＡ；Ｂ％  ２分で０％〜１００％；流量＝３．５ｍｌ／分；観測波長＝２２０ｎｍ及び２５４ｎｍ。
方法Ｑ：Ｓｈｉｍ  ＶＰ  ＯＤＳ  ４．６×５０ｍｍ；溶媒Ａ＝Ｈ２Ｏと０．１％ＴＦＡ；溶媒Ｂ＝ＭｅＯＨと０．１％ＴＦＡ；Ｂ％  ４分で０％〜１００％；流量＝３ｍｌ／分；観測波長＝２５４ｎｍ。
方法Ｒ：ＹＭＣ−ＰＡＣＫ  ＯＤＳ−Ａ  ４．６×３３ｍｍ；溶媒Ａ＝Ｈ２Ｏ、０．１％ＴＦＡ；溶媒Ｂ＝ＭｅＯＨと０．１％ＴＦＡ；Ｂ％  ３分で１０％〜９０％；流量２ｍｌ／分；観測波長２２０ｎｍ及び２５４ｎｍ。
方法Ｓ：ＹＭＣ−ＰＡＣＫ  ＯＤＳ−Ａ  ３．０×５０ｍｍ；溶媒Ａ＝９０％Ｈ２Ｏ、１０％ＭｅＯＨ、１％ＴＦＡ；溶媒Ｂ＝１０％Ｈ２Ｏ、９０％ＭｅＯＨ、１％ＴＦＡ；Ｂ％  ４分で１０％〜９０％；流量＝２ｍｌ／分；観測波長＝２２０ｎｍ及び２５４ｎｍ。
【０２０１】
６．４．（Ｓ）−２−アミノ−３−（４−（４−アミノ−６−（（Ｒ）−１−（ナフタレン−２−イル）エチルアミノ）−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル）プロピオン酸の合成
【０２０２】
【化４２】
2010531889.tif 000044
【０２０３】
２−アミノ−４，６−ジクロロ−［１，３，５］トリアジン（２００ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ）と、（Ｒ）−（＋）−１−（２−ナフチル）エチルアミン（２０７ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ）と、ジイソプロピル−エチルアミン（３．６３ｍｍｏｌ）との混合物を１，４−ジオキサン１５０ｍｌに溶解した。溶液を９０℃で３時間還流させた。反応（ＬＣＭＳでモニタリング）終了後、溶媒を取り除き、反応混合物をＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍｌ）及びＨ２Ｏ（１００ｍｌ）で抽出した。有機層を分離し、Ｈ２Ｏ（２×１００ｍｌ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空下で濃縮させて、粗中間体を得た。粗化合物を２０ｍｌ容のマイクロ波反応バイアル中のＭｅＣＮ  ５ｍｌ及びＨ２Ｏ  ５ｍｌに溶解した。この溶液に、Ｌ−ｐ−ボロノ−フェニルアラニン（２５３ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ）、炭酸ナトリウム（２５６ｍｇ、２．４２ｍｍｏｌ）及び触媒量のジクロロビス（トリフェニルホスフィン）−パラジウム（ＩＩ）（４２．１ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ）を添加した。混合物に封をし、１５０℃で５分間マイクロ波リアクターで撹拌させた後、セライトで濾過した。濾液を濃縮し、ＭｅＯＨ及びＨ２Ｏ（１：１）に溶解し、ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ／ＴＦＡ溶媒系を用いた調製ＨＰＬＣによって精製した。組み合わせた純度の高い画分を真空下で蒸発させ、凍結乾燥機でさらに乾燥させて、２３８ｍｇの２−アミノ−３−｛４−［４−アミノ−６−（１−ナフタレン−２−イル）−エチルアミノ）−［１，３，５］トリアジン−２−イル］−フェニル｝−プロピオン酸を得た。（収率：４６％、ＬＣ：カラム：ＹＭＣ−ＰＡＣＫ  ＯＤＳ−Ａ  ３．０×５０ｍｍ、％Ｂ＝０％〜１００％、勾配時間＝４分、流量＝２ｍｌ／分、波長＝２２０、溶媒Ａ＝９０：１０  水：ＭｅＯＨと０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝９０：１０  ＭｅＯＨ：水と０．１％ＴＦＡ、ＲＴ＝２．７８５分、ＭＳ：Ｍ＋１＝４２９）。ＮＭＲ：１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ１．６５（ｄ，３Ｈ）、３．２２〜３．４２（ｍ，２Ｈ）、４．３（ｍ，１Ｈ）、５．４５（ｍ，１Ｈ）、７．４（ｍ，１Ｈ）、７．６（ｍ，４Ｈ）、７．８（ｍ，４Ｈ）、８．２（ｍ，２Ｈ）。
【０２０４】
６．５．（Ｓ）−２−アミノ−３−（４−（４−アミノ−６−（（Ｒ）−１−（ナフタレン−２−イル）エチルアミノ）−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル）プロピオン酸の代替合成
（Ｒ）−１−（１−（ナフタレン−２−イル）エチル）シアノグアニジンを、ｎ−ＢｕＯＨ：Ｈ２Ｏ（１：１）中でナフタレンアミン（１当量）と、二シアン化ナトリウム（０．９５当量）、及びその後５ＮのＨＣｌ（１当量）との混合物を形成することによって調製した。混合物を１６０℃で１日、封管で還流させ、反応の進行をＬＣＭＳによってモニタリングした。反応終了後、溶媒（ｎ−ＢｕＯＨ）を減圧下で取り除き、１ＮのＨＣｌを添加して、ｐＨを３〜５の範囲に調節した。水溶液をＥｔＯＡｃ（２×１００）で抽出し、組み合わせた有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥した。溶媒を真空下で取り除き、粗生成物を得た。溶媒系としてＥｔＯＡｃ：ヘキサン（７：３及び１：１）を用いたＩＳＣＯカラムクロマトグラフィによって化合物を精製し、１ｇ〜２２．５ｇ規模に対して４８％〜７１％の収率で白色固体を得た。ＮＭＲ：１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ１．５（ｄ，３Ｈ）、５．１（ｍ，１Ｈ）、７．５（ｍ，４Ｈ）、７．８（ｓ，１Ｈ）、７．９（ｍ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ：ＲＴ１．６９、Ｍ＋１：２３９、収率：７１％。
【０２０５】
スキーム６に示された方法に従って、表題の化合物を（Ｒ）−１−（１−（ナフタレン−２−イル）エチル）シアノグアニジンから調製した。
【０２０６】
６．６．（Ｓ）−２−アミノ−３−（４−（４−アミノ−６−（（４’−メチルビフェニル−４−イル）メチルアミノ）−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル）プロピオン酸の合成
【０２０７】
【化４３】
2010531889.tif 000045
【０２０８】
２−アミノ−４，６−ジクロロ−［１，３，５］トリアジン（１００ｍｇ、０．６０６ｍｍｏｌ）と、４’−メチル−ビフェニル−４−イル−メチルアミン（１４２ｍｇ、０．６０６ｍｍｏｌ）と、炭酸セシウム（３９４ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ）との混合物を５ｍｌ容のマイクロ波バイアル中の１，４−ジオキサン（１．５ｍｌ）及びＨ２Ｏ（１．５ｍｌ）に溶解した。混合物を１００℃で１５分間マイクロ波リアクターで撹拌した。溶媒を取り除き、残渣をＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍｌ）に溶解し、Ｈ２Ｏ（２×２０ｍｌ）で洗浄させ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた後、真空下で取り除いた。それから、粗中間体を５ｍｌ容のマイクロ波バイアル中のＭｅＣＮ  １．５ｍｌ及びＨ２Ｏ  １．５ｍｌに溶解した。この溶液に、Ｌ−ｐ−ボロノ−フェニルアラニン（１２６ｍｇ、０．６０６ｍｍｏｌ）、炭酸ナトリウム（１２８ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ）及び触媒量のジクロロビス（トリフェニルホスフィン）−パラジウム（ＩＩ）（２１．１ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ）を添加した。混合物に封をし、１５０℃で５分間、マイクロ波リアクターで撹拌した後、セライトで濾過した。濾液を濃縮し、ＭｅＯＨ及びＨ２Ｏ（１：１）に溶解し、ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ／ＴＦＡ溶媒系を用いた調製ＨＰＬＣによって精製した。組み合わせた純度の高い画分を真空下で蒸発させ、凍結乾燥機でさらに乾燥させて、２１．６ｍｇの２−アミノ−３−（４−｛４−アミノ−６−［（４’−メチル−ビフェニル−４−イルメチル）−アミノ］−［１，３，５］トリアジン−２−イル｝−フェニル）−プロピオン酸を得た（ＬＣ：カラム：ＹＭＣ−ＰＡＣＫ  ＯＤＳ−Ａ、３．０×５０ｍｍ、％Ｂ＝０％〜１００％、勾配時間＝４分、流量＝２ｍｌ／分、波長＝２２０、溶媒Ａ＝９０：１０  水：ＭｅＯＨと０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝９０：１０  ＭｅＯＨ：水と０．１％ＴＦＡ、ＲＴ＝３．０９６分、ＭＳ：Ｍ＋１＝４５５）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）d２．３３（ｓ，３Ｈ）、３．２４〜３．４４（ｍ，２Ｈ）、４．３８（ｍ，１Ｈ）、７．０２（ｄ，２Ｈ）、７．４２（ｍ，２Ｈ）、７．５０〜７．６０（ｍ，６Ｈ）、８．２２（ｍ，２Ｈ）。
【０２０９】
６．７．（Ｓ）−２−アミノ−３−（４−（４−モルホリノ−６−（ナフタレン−２−イルメチルアミノ）−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル）プロピオン酸の合成
【０２１０】
【化４４】
2010531889.tif 000046
【０２１１】
２，４−ジクロロ−６−モルホリン−４−イル−［１，３，５］トリアジン（１２１ｍｇ、０．５１６ｍｍｏｌ）、Ｃ−ナフタレン−２−イル−メチルアミン塩酸塩（１００ｍｇ、０．５１６ｍｍｏｌ）と、炭酸セシウム（３３６ｍｇ、１．０３ｍｍｏｌ）との混合物を５ｍｌ容のマイクロ波バイアル中の１，４−ジオキサン（１．５ｍｌ）及びＨ２Ｏ（１．５ｍｌ）に溶解した。混合物を１８０℃で６００秒間マイクロ波リアクターで撹拌した。溶媒を取り除き、残渣をＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍｌ）に溶解し、Ｈ２Ｏ（２×１０ｍｌ）で洗浄させ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた後、真空下で取り除いた。残渣を調製ＨＰＬＣによって精製し、２０ｍｇの中間体（収率１１％、Ｍ＋１＝３５６）を得た。それから、中間体を２ｍｌ容のマイクロ波バイアル中のＭｅＣＮ  ０．５ｍｌ及びＨ２Ｏ  ０．５ｍｌに溶解した。この溶液に、Ｌ−ｐ−ボロノ−フェニルアラニン（１１．７ｍｇ、０．０５６２ｍｍｏｌ）、炭酸ナトリウム（１１．９ｍｇ、０．１１２ｍｍｏｌ）及び触媒量のジクロロビス（トリフェニルホスフィン）−パラジウム（ＩＩ）（２．０ｍｇ、５％）を添加した。混合物に封をし、１５０℃で５分間、マイクロ波リアクターで撹拌した後、セライトで濾過した。濾液を濃縮し、ＭｅＯＨ及びＨ２Ｏ（１：１）に溶解し、ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ／ＴＦＡ溶媒系を用いた調製ＨＰＬＣによって精製した。組み合わせた純度の高い画分を真空下で蒸発させ、凍結乾燥機でさらに乾燥させて、１７ｍｇの２−アミノ−３−（４−｛４−モルホリン−４−イル−６−［（ナフタレン−２−イルメチル）−アミノ］−［１，３，５］トリアジン−２−イル｝−フェニル）−プロピオン酸を得た（収率：６３％、ＬＣ：方法Ｂ、ＲＴ＝３．１０８分、ＭＳ：Ｍ＋１＝４８６）。
【０２１２】
６．８．（２Ｓ）−２−アミノ−３−（４−（２−アミノ−６−（２，２，２−トリフルオロ−１−（２−（トリフルオロメチル）フェニル）エトキシ）ピリミジン−４−イル）フェニル）プロピオン酸の合成
【０２１３】
【化４５】
2010531889.tif 000047
【０２１４】
フッ化テトラブチルアンモニウム（０．１ｍｌ、１．０Ｍのテトラヒドロフラン溶液）を、２−トリフルオロメチル−ベンズアルデヒド（１．７４ｇ、１０ｍｍｏｌ）及びトリフルオロメチルトリメチルシラン（ＴＭＳＣＦ３）（１．８ｍｌ、１２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液１０ｍｌに０℃で添加した。形成された混合物を室温まで温め、４時間撹拌した。それから、反応混合物を１ＮのＨＣｌ  １２ｍｌで処理し、一晩撹拌した。生成物を酢酸エチル（３×２０ｍｌ）で抽出した。有機層を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。有機溶媒を蒸発させ、２．２ｇの１−（２−トリフルオロメチルフェニル）−２，２，２−トリフルオロ−エタノール（収率９０％）を得た。
【０２１５】
ＮａＨ（８０ｍｇ、６０％、３．０ｍｍｏｌ）を、１−（２−トリフルオロメチルフェニル）−２，２，２−トリフルオロ−エタノール（２４４ｍｇ、１ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ溶液１０ｍｌに添加した。混合物を２０分間撹拌し、２−アミノ−４，６−ジクロロ−ピリミジン（１６４ｍｇ、１ｍｍｏｌ）を添加した後、反応混合物を７０℃で１時間加熱した。冷却後、水５ｍｌを添加し、酢酸エチル（２０ｍｌ）を用いて、生成物を抽出した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒をロータリーエバポレータ（rotovap）によって取り除き、２６７ｍｇの４−クロロ−６−［２，２，２−トリフルオロ−１−（２−トリフルオロメチルフェニル）−エトキシ］−ピリミジン−２−イルアミン（収率７１％）を得た。
【０２１６】
マイクロ波バイアル中で、４−クロロ−２−アミノ−６−［１−（２−トリフルオロメチルフェニル）−２，２，２−トリフルオロ−エトキシ］−ピリミジン（３３ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）、４−ボロノ−Ｌ−フェニルアラニン（３１ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）及びアセトニトリル１ｍｌ、水０．７ｍｌ、１Ｎの炭酸ナトリウム水溶液０．３ｍｌ、その後５モル％のジクロロビス（トリフェニルホスフィン）−パラジウム（ＩＩ）を上記の溶液に添加した。反応容器に封をし、マイクロ波照射で１５０℃で５分間加熱した。冷却後、乾燥するまで反応混合物を蒸発させた。残渣をメタノール２．５ｍｌに溶解した後、調製ＬＣによって精製し、５．６ｍｇの２−アミノ−３−（４−｛２−アミノ−６−［２，２，２−トリフルオロ−１−（２−トリフルオロメチルフェニル）−エトキシ］−ピリミジン−４−イル｝−フェニル）−プロピオン酸を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ７．９６（ｍ，３Ｈ）、７．８０（ｄ，Ｊ＝８．０６Ｈｚ，１Ｈ）、７．７４（ｔ，Ｊ＝７．９１Ｈｚ，１Ｈ）、７．６３（ｔ，Ｊ＝８．０６Ｈｚ，１Ｈ）、７．４１（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ）、７．２１（ｍ，１Ｈ）、６．６９（ｓ，１Ｈ）、３．８７（ｍ，１Ｈ）、３．３４（ｍ，１Ｈ）、３．０８（ｍ，１Ｈ）。
【０２１７】
６．９．（２Ｓ）−２−アミノ−３−（４−（２−アミノ−６−（２，２，２−トリフルオロ−１−ｐ−トリルエトキシ）ピリミジン−４−イル）フェニル）プロピオン酸の合成
【０２１８】
【化４６】
2010531889.tif 000048
【０２１９】
フッ化テトラブチルアンモニウム（０．１ｍｌ、１．０Ｍのテトラヒドロフラン溶液）を、４−メチル−ベンズアルデヒド（１．２ｇ、１０ｍｍｏｌ）及びＴＭＳＣＦ３（１．８ｍｌ、１２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液１０ｍｌに０℃で添加した。形成された混合物を室温まで温め、４時間撹拌した。それから、反応混合物を１ＮのＨＣｌ  １２ｍｌで処理し、一晩撹拌した。生成物を酢酸エチル（３×２０ｍｌ）で抽出した。有機層を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。有機溶媒を蒸発させ、１．６ｇの１−（４−メチルフェニル）−２，２，２−トリフルオロ−エタノール（収率８６％）を得た。
【０２２０】
ＮａＨ（８０ｍｇ、６０％、３．０ｍｍｏｌ）を、１−（４−メチルフェニル）−２，２，２−トリフルオロ−エタノール（１９０ｍｇ、１ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ溶液１０ｍｌに添加した。混合物を２０分間撹拌し、２−アミノ−４，６−ジクロロ−ピリミジン（１６４ｍｇ、１ｍｍｏｌ）を添加した後、反応混合物を７０℃で１時間加熱した。冷却後、水５ｍｌを添加し、酢酸エチル（２０ｍｌ）を用いて、生成物を抽出した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒をロータリーエバポレータによって取り除き、２０９ｍｇの４−クロロ−６−［１−（４−メチルフェニル）−２，２，２−トリフルオロ−エトキシ］−ピリミジン−２−イルアミン（収率６６％）を得た。
【０２２１】
４−クロロ−２−アミノ−６−［１−（４−メチルフェニル）−２，２，２−トリフルオロ−エトキシ］−ピリミジン（３３ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）、４−ボロノ−Ｌ−フェニルアラニン（３１ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）、アセトニトリル１ｍｌ、水０．７ｍｌをマイクロ波バイアルに入れた。炭酸ナトリウム水溶液（０．３ｍｌ、１Ｎ）、その後５モル％のジクロロビス（トリフェニルホスフィン）−パラジウム（ＩＩ）を上記溶液に添加した。反応容器に封をし、マイクロ波で１５０℃に５分間加熱した。冷却後、乾燥するまで反応混合物を蒸発させた。残渣をメタノール２．５ｍｌに溶解した後、調製ＬＣによって精製し、１４．６ｍｇの２−アミノ−３−（４−｛２−アミノ−６−［２，２，２−トリフルオロ−１−（４−メチルフェニル）−エトキシ］−ピリミジン−４−イル｝−フェニル）−プロピオン酸を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ７．９４（ｄ，Ｊ＝８．２０Ｈｚ，２Ｈ）、７．４７（ｄ，Ｊ＝７．２４Ｈｚ，４Ｈ）、７．２７（ｄ，Ｊ＝８．０１Ｈｚ，２Ｈ）６．８０（ｓ，１Ｈ）、６．７５（ｍ，１Ｈ）、４．３０（ｔ，１Ｈ）、３．２１〜３．４４（ｍ，２Ｈ）、２．３７（ｓ，３Ｈ）。
【０２２２】
６．１０．（２Ｓ）−２−アミノ−３−（４−（２−アミノ−６−（１−シクロヘキシル−２，２，２−トリフルオロエトキシ）ピリミジン−４−イル）フェニル）プロピオン酸の合成
【０２２３】
【化４７】
2010531889.tif 000049
【０２２４】
シクロヘキサンカルバルデヒド（０．９ｇ、５ｍｍｏｌ）を１，４−ジオキサン水溶液１０ｍｌに溶解し、それに２００ｍｇ（１０ｍｍｏｌ）の水素化ホウ素ナトリウムを添加した。反応を室温で一晩行った。反応終了後、１０％ＨＣｌ溶液５ｍｌを添加し、生成物を酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。有機溶媒を蒸発させ、０．８ｇの１−シクロヘキシル−２，２，２−トリフルオロ−エタノール（収率８８％）を得た。
【０２２５】
ＮａＨ（８０ｍｇ、６０％、３．０ｍｍｏｌ）を、１−シクロヘキシル−２，２，２−トリフルオロ−エタノール（１８２ｍｇ、１ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ溶液１０ｍｌに添加し、混合物を２０分間撹拌して、２−アミノ−４，６−ジクロロ−ピリミジン（１６４ｍｇ、１ｍｍｏｌ）を添加した後、反応混合物を７０℃で１時間加熱した。冷却後、水５ｍｌを添加し、酢酸エチル（２０ｍｌ）を用いて、生成物を抽出した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒をロータリーエバポレータによって取り除き、２０２ｍｇの４−クロロ−６−［１−シクロヘキシル−２，２，２−トリフルオロ−エトキシ］−ピリミジン−２−イルアミン（収率６５％）を得た。
【０２２６】
マイクロ波バイアルに、４−クロロ−２−アミノ−６−［１−シクロヘキサン−２，２，２−トリフルオロ−エトキシ］−ピリミジン（３３ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）、４−ボロノ−Ｌ−フェニルアラニン（３１ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）及びアセトニトリル１ｍｌ、水０．７ｍｌ、炭酸ナトリウム水溶液（１Ｍ）０．３ｍｌ、その後５モル％のジクロロビス（トリフェニルホスフィン）−パラジウム（ＩＩ）を上記の溶液に添加した。反応容器に封をし、マイクロ波で１５０℃に５分間加熱した。冷却後、乾燥するまで反応混合物を蒸発させた。残渣をメタノール２．５ｍｌに溶解し、生成物を調製ＬＣによって精製して、４．９ｍｇの２−アミノ−３−｛４−［２−アミノ−６−（１−シクロヘキシル−２，２，２−トリフルオロ−エトキシ］−ピリミジン−４−イル｝−フェニル）−プロピオン酸を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３Ｃｌ）δ７．９５（ｄ，Ｊ＝８．３９Ｈｚ，２Ｈ）、７．４９（ｄ，Ｊ＝８．３９Ｈｚ，２Ｈ）、６．７２（ｓ，１Ｈ）、５．９０（ｍ，１Ｈ）、４．３３（ｔ，１Ｈ）、３．２１〜３．４４（ｍ，２Ｈ）、１．７３〜２．００（ｍ，６Ｈ）、１．２３〜１．３９（ｍ，５Ｈ）。
【０２２７】
６．１１．（Ｓ）−２−アミノ−３−（４−（６−（２−フルオロフェノキシ）ピリミジン−４−イル）フェニル）プロピオン酸の合成
【０２２８】
【化４８】
2010531889.tif 000050
【０２２９】
ＮａＨ（８０ｍｇ、６０％、３．０ｍｍｏｌ）を、２−フルオロフェノール（１１２ｍｇ、１ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ溶液１０ｍｌに添加し、混合物を２０分間撹拌して、４，６−ジクロロ−ピリミジン（１４９ｍｇ、１ｍｍｏｌ）を添加した後、反応混合物を７０℃で１時間加熱した。冷却後、水５ｍｌを添加し、酢酸エチル（２０ｍｌ）を用いて、生成物を抽出した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒をロータリーエバポレータによって取り除き、１４６ｍｇの４−クロロ−６−（２−フルオロフェノキシ）−ピリミジン（収率６５％）を得た。
【０２３０】
４−クロロ−６−［２−フルオロフェノキシ］−ピリミジン（３３ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）、４−ボロノ−Ｌ−フェニルアラニン（３１ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）、及びアセトニトリル１ｍｌ、水０．７ｍｌをマイクロ波バイアル（２ｍｌ）に入れ、炭酸ナトリウム水溶液（１Ｍ）０．３ｍｌ、その後５モル％のジクロロビス（トリフェニルホスフィン）−パラジウム（ＩＩ）を上記溶液に添加した。反応容器に封をし、マイクロ波によって１５０℃に５分間加熱した。冷却後、乾燥するまで反応混合物を蒸発させ、残渣をメタノール２．５ｍｌに溶解し、生成物を調製ＬＣによって精製し、４．９ｍｇの２−アミノ−３−｛４−［２−アミノ−６−（１−２−フルオロフェニル−２，２，２−トリフルオロ−エトキシ］−ピリミジン−４−イル｝−フェニル）−プロピオン酸を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ８．７４（ｓ，１Ｈ）、８．１７（ｄ，Ｊ＝８．０６Ｈｚ，２Ｈ）、７．６３（ｓ，１Ｈ）、７．５０（ｄ，Ｊ＝８．０６Ｈｚ，２Ｈ）、７．３０（ｍ，５Ｈ）、４．３３（ｍ，１Ｈ）、３．３４（ｍ，１Ｈ）。
【０２３１】
６．１２．（２Ｓ）−２−アミノ−３−（４−（４−（３−（４−クロロフェニル）ピペリジン−１−イル）−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル）プロピオン酸の合成
【０２３２】
【化４９】
2010531889.tif 000051
【０２３３】
３−（４−クロロフェニル）ピペリジン（２３２ｍｇ、１ｍｍｏｌ）を、２，４−ジクロロトリアジン（１４９．９７ｍｇ、１ｍｍｏｌ）及び３００ｍｇのジイソプロピルエチルアミンのＴＨＦ溶液１０ｍｌに０℃で添加した。形成された混合物を室温まで温め、１時間撹拌した。生成物を酢酸エチル（３×２０ｍｌ）で抽出した。有機層を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。有機溶媒を蒸発させ、３２８ｍｇの２−クロロ−４−［３−（４−クロロフェニル）−ピペリジン−１−イル］−［１，３，５］トリアジンを得た。
【０２３４】
２−クロロ−４−［３−（４−クロロフェニル）−ピペリジン−１−イル］−［１，３，５］トリアジン（６２ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）、４−ボロノ−Ｌ−フェニルアラニン（６０ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）、アセトニトリル１ｍｌ、及び水０．７ｍｌをマイクロ波バイアルに入れた。炭酸ナトリウム水溶液（０．６ｍｌ、１Ｍ）、その後５モル％のジクロロビス（トリフェニルホスフィン）−パラジウム（ＩＩ）を溶液に添加した。反応容器に封をし、マイクロ波で１５０℃に５分間加熱した。冷却後、乾燥するまで反応混合物を蒸発させた。残渣をメタノール２．５ｍｌに溶解した後、調製ＬＣによって精製し、５．１ｍｇの２−アミノ−３−（４−｛４−［３−（４−クロロフェニル）−ピペリジン−１−イル］−［１，３，５］トリアジン−２−イル｝−フェニル）−プロピオン酸を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３Ｃｌ）δ８．５８（ｄ，２Ｈ）、８．０５（ｄ，２Ｈ）、７．４７（ｍ，５Ｈ）、４．９６（ｍ，１Ｈ）、４．２３（ｍ，２Ｈ）、３．２１〜３．４４（ｍ，４Ｈ）、２．３７（ｍ，５Ｈ）。
【０２３５】
６．１３．（２Ｓ）−２−アミノ−３−（４−（４−アミノ−６−（２，２，２−トリフルオロ−１−フェニルエトキシ）−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル）プロピオン酸の合成
【０２３６】
【化５０】
2010531889.tif 000052
【０２３７】
ＮａＨ（８０ｍｇ、６０％、３．０ｍｍｏｌ）を、２，２，２−トリフルオロ−１−フェニル−エタノール（１７６ｍｇ、１ｍｍｏｌ）の無水１，４−ジオキサン溶液１０ｍｌに添加した。混合物を２０分間撹拌した後、２−アミノ−４，６−ジクロロ−トリアジン（１６４ｍｇ、１ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン溶液３０ｍｌに０℃で１時間添加した。それから、反応混合物を室温まで温めた。反応終了後、水５ｍｌを添加し、酢酸エチル（２０ｍｌ）を用いて、生成物を抽出した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒をロータリーエバポレータによって取り除き、１９８ｍｇの４−クロロ−６−［２，２，２−トリフルオロ−１−フェニル−エトキシ］−［１，３，５］トリアジン−２−イルアミン（収率６５％）を得た。
【０２３８】
４−クロロ−６−［２，２，２−トリフルオロ−１−フェニル−エトキシ］−［１，３，５］トリアジン−２−イルアミン（３３ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）、４−ボロノ−Ｌ−フェニルアラニン（３１ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）、アセトニトリル１ｍｌ、及び水０．７ｍｌをマイクロ波バイアルに入れた。炭酸ナトリウム水溶液（０．３ｍｌ、１Ｍ）、その後５モル％のジクロロビス（トリフェニルホスフィン）−パラジウム（ＩＩ）を上記溶液に添加した。反応容器に封をし、マイクロ波によって１５０℃に５分間加熱した。冷却後、乾燥するまで反応混合物を蒸発させた。残渣をメタノール２．５ｍｌに溶解した後、調製ＬＣによって精製し、３．２ｍｇの２−アミノ−３−｛４−［４−アミノ−６−（１−フェニル−２，２，２−トリフルオロ−エトキシ］−［１，３，５］トリアジン−２−イル］−フェニル）−プロピオン酸を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ８．２２（ｄ，Ｊ＝８．２０Ｈｚ，２Ｈ）、７．５２（ｍ，２Ｈ）、７．３３（ｍ，５Ｈ）６．６２（ｍ，１Ｈ）、４．１９（ｔ，１Ｈ）、３．１〜３．３３（ｍ，２Ｈ）。
【０２３９】
６．１４．（Ｓ）−２−アミノ−３−（５−（４−アミノ−６−（（Ｒ）−１−（ナフタレン−２−イル）エチルアミノ）−１，３，５−トリアジン−２−イル）ピリジン−２−イル）プロピオン酸の合成
【０２４０】
【化５１】
2010531889.tif 000053
【０２４１】
６−クロロ−Ｎ−［１−ナフタレン−２−イル−エチル］−［１，３，５］トリアジン−２，４−ジアミン（３０ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）、２−ｂｏｃ保護アミノ−３−｛５−［４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−ピリジン−２−イル−］−プロピオン酸（５０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）、アセトニトリル１ｍｌ、及び水０．７ｍｌをマイクロ波バイアルに入れた。炭酸ナトリウム水溶液（０．３ｍｌ、１Ｎ）、その後５モル％のジクロロビス（トリフェニルホスフィン）−パラジウム（ＩＩ）を溶液に添加した。反応容器に封をし、マイクロ波によって１５０℃に５分間加熱した。冷却後、乾燥するまで反応混合物を蒸発させた。残渣をメタノール２．５ｍｌに溶解した後、調製ＬＣによって精製し、７ｍｇのｂｏｃ保護２−アミノ−３−｛５−［４−アミノ−６−（１−ナフタレン−２−イル−エチルアミノ）−［１，３，５］トリアジン−２−イル］−ピリジン−２−イル｝プロピオン酸（proionic acid）を得た。
【０２４２】
上記の生成物（７．０ｍｇ）を１０％ＴＦＡ／ＤＣＭ溶液０．１ｍｌで２時間溶解し、１．１ｍｇの２−アミノ−３−｛３−［４−アミノ−６−（１−ナフタレン−２−イル−エチルアミノ）−［１，３，５］トリアジン−２−イル］−ピリジン−２−イル｝プロピオン酸を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３Ｃｌ）δ９．３５（ｄ，１Ｈ）、８．５７（ｍ，１Ｈ）、７．８５（ｍ，４Ｈ）、７．４５（ｍ，４Ｈ）、６．９４（ｓ，１Ｈ）、５．５８（ｍ，１Ｈ）、４．７２（ｍ，２Ｈ）、４．４４（ｍ，１Ｈ）、１．４２（ｄ，３Ｈ）。
【０２４３】
６．１５．（Ｓ）−２−アミノ−３−（３−（４−アミノ−６−（（Ｒ）−１−（ナフタレン−２−イル）エチルアミノ）−１，３，５−トリアジン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）プロピオン酸の合成
【０２４４】
【化５２】
2010531889.tif 000054
【０２４５】
６−クロロ−Ｎ−［１−ナフタレン−２−イル−エチル］−［１，３，５］トリアジン−２，４−ジアミン（３０ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）、２−ｂｏｃ保護アミノ−３−｛３−［４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−ピラゾール−１−イル］−プロピオン酸（５０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）、アセトニトリル１ｍｌ、及び水０．７ｍｌ、炭酸ナトリウム水溶液（０．３ｍｌ、１Ｎ）、その後５モル％のジクロロビス（トリフェニルホスフィン）−パラジウム（ＩＩ）をマイクロ波バイアルに加えた。反応容器に封をし、マイクロ波によって１５０℃に５分間加熱した。冷却後、乾燥するまで反応混合物を蒸発させ、残渣をメタノール２．５ｍｌに溶解した後、調製ＬＣによって精製し、６．８ｍｇのｂｏｃ保護２−アミノ−３−｛３−［４−アミノ−６−（１−ナフタレン−２−イル−エチルアミノ）−［１，３，５］トリアジン−２−イル］−ピラゾール−１−イル｝プロピオン酸を得た。
【０２４６】
上記の生成物（６．８ｍｇ）を１０％ＴＦＡ／ＤＣＭ溶液０．１ｍｌで２時間撹拌し、３ｍｇの２−アミノ−３−｛３−［４−アミノ−６−（１−ナフタレン−２−イル−エチルアミノ）−［１，３，５］トリアジン−２−イル］−ピラゾール−１−イル｝プロピオン酸を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３Ｃｌ）δ８．５２（ｓ，１Ｈ）、８．２１（ｓ，１Ｈ）、７．７４（ｍ，４Ｈ）、７．３６（ｍ，３Ｈ）、５．３５（ｍ，１Ｈ）、４．７２（ｍ，２Ｈ）、４．４４（ｍ，１Ｈ）、１．５５（ｄ，３Ｈ）。
【０２４７】
６．１６．（Ｓ）−２−アミノ−３−（４’−（３−（シクロペンチルオキシ）−４−メトキシベンジルアミノ）ビフェニル−４−イル）プロピオン酸の合成
【０２４８】
【化５３】
2010531889.tif 000055
【０２４９】
トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（４７０ｍｇ、２．２１ｍｍｏｌ）を、４−ブロモ−フェニルアミン（２５２ｍｇ、１．４７ｍｍｏｌ）及び３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシ−ベンズアルデヒド（３２４ｍｇ、１．４７ｍｍｏｌ）の１，２−ジクロロエタン（dicloroethtane）（ＤＣＥ）溶液１０ｍｌに添加し、ＨＯＡｃ  ０．５ｍｌを添加した。混合物を室温で一晩撹拌した後、ＤＣＥ  １５ｍｌを添加した。有機相を水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒をロータリーエバポレータによって取り除き、６５６ｍｇの粗（４−ブロモ−フェニル）−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシ−ベンジル）−アミンを得た。それをさらに精製せずに次の工程に用いた。
【０２５０】
（４−ブロモ−フェニル）−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシ−ベンジル）−アミン（８４ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）、４−ボロノ−Ｌ−フェニルアラニン（４６ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）、及びアセトニトリル２ｍｌをマイクロ波用のエムリスプロセスバイアル（２ｍｌ〜５ｍｌ）に入れた。炭酸ナトリウム水溶液（２ｍｌ、１Ｍ）、その後５モル％のジクロロビス（トリフェニルホスフィン）−パラジウム（ＩＩ）を上記溶液に添加した。反応容器に封をし、マイクロ波によって１５０℃に５分間加熱した。冷却後、乾燥するまで反応混合物を蒸発させた。残渣をメタノール２．５ｍｌに溶解し、調製ＬＣによって精製して、５ｍｇの２−アミノ−３−［４’−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシ−ベンジルアミノ）−ビフェニル−４−イル］−プロピオン酸（収率５％）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１．４６（ｍ，２Ｈ）、１．６２（ｍ，４Ｈ）、３．０１（ｍ，２Ｈ）、３．６４（ｓ，３Ｈ）、４．１４（ｓ，３Ｈ）、４．６６（ｍ，１Ｈ）、６．６１（ｄ，２Ｈ）、６．８１（ｓ，２Ｈ）、６．８８（ｓ，１Ｈ）、７．１８（ｄ，２Ｈ）、７．３１（ｄ，２Ｈ）、７．４４（ｄ，２Ｈ）、７．６０（ｍ，１Ｈ）、８．１９（ｓ，３Ｈ）。
【０２５１】
６．１７．（Ｓ）−２−アミノ−３−（４−（６−（３−（シクロペンチルオキシ）−４−メトキシベンジルアミノ）ピリミジン−４−イル）フェニル）プロピオン酸の合成
【０２５２】
【化５４】
2010531889.tif 000056
【０２５３】
トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（９８５ｍｇ、４．６５ｍｍｏｌ）を、６−クロロ−ピリミジン−４−イルアミン（２００ｍｇ、１．５５ｍｍｏｌ）及び３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシ−ベンズアルデヒド（６８２ｍｇ、３．１ｍｍｏｌ）のＤＣＥ溶液２５ｍｌに添加した。ＨＯＡｃ  １ｍｌを添加し、混合物を５０℃で一晩撹拌した後、ＤＣＥ  ２５ｍｌを添加した。有機相を水で洗浄し、生成物をカラム（シリカゲル、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ  ５：１）で精製し、６４ｍｇの（６−クロロ−ピリミジン−４−イル）−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシ−ベンジル）−アミン（収率１２％）を得た。
【０２５４】
（６−クロロ−ピリミジン−４−イル）−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシ−ベンジル）−アミン（６４ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）、４−ボロノ−Ｌ−フェニルアラニン（４０ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）、及びアセトニトリル２ｍｌをマイクロ波用のエムリスプロセスバイアル（２ｍｌ〜５ｍｌ）に入れた。炭酸ナトリウム水溶液（２ｍｌ、１Ｍ）、その後５モル％のジクロロビス（トリフェニルホスフィン）−パラジウム（ＩＩ）を上記溶液に添加した。反応容器に封をし、マイクロ波によって１５０℃に５分間加熱した。冷却後、乾燥するまで反応混合物を蒸発させた。残渣をメタノール２．５ｍｌに溶解し、調製ＬＣによって精製して、５．３ｍｇの２−アミノ−３−｛４−［６−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシ−ベンジルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−フェニル｝−プロピオン酸（収率６％）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１．４６（ｍ，２Ｈ）、１．６２（ｍ，４Ｈ）、３．０１（ｍ，２Ｈ）、３．０８（ｍ，２Ｈ）、３．６５（ｓ，３Ｈ）、４．２０（ｍ，１Ｈ）、４．４６（ｄ，２Ｈ）、４．６８（ｍ，１Ｈ）、６．８２（ｔ，２Ｈ）、６．８７（ｄ，２Ｈ）、７．４０（ｄ，２Ｈ）、７．９０（ｓ，２Ｈ）、８．２５（ｓ，２Ｈ）、８．６（ｓ，１Ｈ）。
【０２５５】
６．１８．（Ｓ）−２−アミノ−３−（４−（６−（３−（シクロペンチルオキシ）−４−メトキシベンジルアミノ）ピラジン−２−イル）フェニル）プロピオン酸の合成
【０２５６】
【化５５】
2010531889.tif 000057
【０２５７】
トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（sodium triacetoxy-borohydride）（１３１５ｍｇ、６．２ｍｍｏｌ）を、６−クロロ−ピラジン−２−イル−アミン（４００ｍｇ、３．１０ｍｍｏｌ）及び３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシ−ベンズアルデヒド（８１８ｍｇ、３．７ｍｍｏｌ）のＤＣＥ溶液５０ｍｌに添加し、ＨＯＡｃ  １ｍｌを添加して、混合物を５０℃で一晩撹拌した後、さらにＤＣＥ  ５０ｍｌを添加した。有機相を水で洗浄し、生成物をカラム（シリカゲル、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ  ６：１）で精製し、５０ｍｇの（６−クロロ−ピラジン−２−イル）−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシ−ベンジル）−アミン（収率１０％）を得た。
【０２５８】
（６−クロロ−ピラジン−２−イル）−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシ−ベンジル）−アミン（５０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）、４−ボロノ−Ｌ−フェニルアラニン（３１ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）、及びアセトニトリル２ｍｌをマイクロ波用のエムリスプロセスバイアル（２ｍｌ〜５ｍｌ）に入れた。炭酸ナトリウム水溶液（２ｍｌ、１Ｍ）、その後５モル％のジクロロビス（トリフェニルホスフィン）−パラジウム（ＩＩ）を溶液に添加した。反応容器に封をし、マイクロ波によって１５０℃に５分間加熱した。冷却後、乾燥するまで反応混合物を蒸発させた。残渣をメタノール２．５ｍｌに溶解し、生成物を調製ＬＣによって精製して、５．５ｍｇの２−アミノ−３−｛４−［６−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシ−ベンジルアミノ）−ピラジン−２−イル］−フェニル｝−プロピオン酸（収率６％）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１．４６（ｍ，２Ｈ）、１．６２（ｍ，４Ｈ）、３．０１（ｍ，２Ｈ）、３．０８（ｍ，２Ｈ）、３．６５（ｓ，３Ｈ）、４．０（ｍ，１Ｈ）、４．４５（ｄ，２Ｈ）、４．６５（ｍ，１Ｈ）、６．９０（ｓ，２Ｈ）、６．９５（ｓ，１Ｈ）、７．３２（ｄ，２Ｈ）、７．６０（ｔ，１Ｈ）、７．９０（ｓ，１Ｈ）、７．９５（ｄ，２Ｈ）、８．２５（ｓ，１Ｈ）。
【０２５９】
６．１９．（Ｓ）−２−アミノ−３−（４−（５−（（４’−メチルビフェニル−２−イル）メチルアミノ）ピラジン−２−イル）フェニル）プロピオン酸の合成
【０２６０】
【化５６】
2010531889.tif 000058
【０２６１】
トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（２１５ｍｇ、１．０２ｍｍｏｌ）を、４’−メチル−ビフェニル−２−カルバルデヒド及び５−ブロモ−ピラジン−２−イルアミンのＤＣＥ溶液５ｍｌに添加し、ＨＯＡｃ  ０．１ｍｌを添加し、混合物を室温で一晩撹拌した後、ＤＣＥ  ５ｍｌを添加した。有機相を水で洗浄し、カラム（シリカゲル、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ  ６：１）で精製し、１００ｍｇの（５−ブロモ−ピラジン−２−イル）−（４’−メチル−ビフェニル−２−イルメチル）−アミン（収率５５％）を得た。
【０２６２】
（５−ブロモ−ピラジン−２−イル）−（４’−メチル−ビフェニル−２−イルメチル）−アミン（２５ｍｇ、０．０７１ｍｍｏｌ）、４−ボロノ−Ｌ−フェニルアラニン（２２ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）、及びアセトニトリル１ｍｌをマイクロ波用のエムリスプロセスバイアル（２ｍｌ〜５ｍｌ）に入れた。炭酸ナトリウム水溶液（１ｍｌ、１Ｍ）、その後５モル％のジクロロビス（トリフェニルホスフィン）−パラジウム（ＩＩ）を溶液に添加した。反応容器に封をし、マイクロ波によって１５０℃に５分間加熱した。冷却後、乾燥するまで反応混合物を蒸発させた。残渣をメタノール２．５ｍｌに溶解し、生成物を調製ＬＣによって精製して、１９ｍｇの２−アミノ−３−｛４−［６−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシ−ベンジルアミノ）−ピラジン−２−イル］−フェニル｝−プロピオン酸（収率６３％）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ２．２２（ｓ，３Ｈ）、３．０９（ｍ，１Ｈ）、３．２５（ｍ，１Ｈ）、４．１８（ｔ，１Ｈ）、４．４０（ｓ，２Ｈ）、７．０７（ｄ，２Ｈ）、７．１４（ｍ，３Ｈ）、７．２４（ｍ，４Ｈ）、７．３６（ｍ，１Ｈ）、７．７２（ｄ，２Ｈ）、７．８４（ｓ，１Ｈ）、８．２０（ｄ，１Ｈ）。
【０２６３】
６．２０．（２Ｓ）−２−アミノ−３−（４−（６−（２，２，２−トリフルオロ−１−フェニルエトキシ）−ピリミジン−４−イル）フェニル）プロピオン酸の合成
【０２６４】
【化５７】
2010531889.tif 000059
【０２６５】
ＮａＨ（６０％、１２０ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ）を、２，２，２−トリフルオロ−１−フェニル−エタノール（３５０ｍｇ、２．０３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液５ｍｌに添加した。混合物を室温で２０分間撹拌した。４，６−ジクロロ−ピリミジン（３００ｍｇ、２．０３ｍｍｏｌ）を添加した後、反応混合物を７０℃で１時間加熱した。冷却後、ＴＨＦを蒸発させ、残渣を得て、これをＥｔＯＡｃ  １５ｍｌに溶解した後、水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒をロータリーエバポレータによって取り除き、５５０ｍｇの４−クロロ−６−（２，２，２−トリフルオロ−１−フェニル−エトキシ）−ピリミジン（収率９５％）を得た。
【０２６６】
４−クロロ−６−（２，２，２−トリフルオロ−１−フェニル−エトキシ）−ピリミジン（３０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）、４−ボロノ−Ｌ−フェニルアラニン（３２ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）、アセトニトリル  １ｍｌ、及び水０．６ｍｌをマイクロ波用のエムリスプロセスバイアル（２ｍｌ〜５ｍｌ）に入れた。炭酸ナトリウム水溶液（０．４２ｍｌ、１Ｍ）、その後１０モル％のＰＯＰｄ２（ジ−μ−クロロジクロロビス（ジ−ｔｅｒｔ−ブチルホスフィニト−κＰ）ジパラジウム酸二水素）を上記溶液に添加した。反応容器に封をし、マイクロ波によって１２０℃に３０分間加熱した。冷却後、乾燥するまで反応混合物を蒸発させた。残渣をメタノール２．５ｍｌに溶解し、生成物を調製ＬＣによって精製して、４．８ｍｇの２−アミノ−３−｛４−［６−（２，２，２−トリフルオロ−１−フェニル−エトキシ）−ピリミジン−４−イル］−フェニル｝−プロピオン酸（収率１１％）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ３．２０（ｍ，１Ｈ）、３．４０（ｍ，１Ｈ）、４．２５（ｔ，１Ｈ）、６．８２（ｄｄ，１Ｈ）、７．４３（ｍ，５Ｈ）、７．５７（ｓ，１Ｈ）、７．６０（ｍ，２Ｈ）、８．１０（ｄ，２Ｈ）、８．７５（ｓ，１Ｈ）。
【０２６７】
６．２１．（２Ｓ）−２−アミノ−３−（４−（６−（１−（３，４−ジフルオロフェニル）−２，２，２−トリフルオロエトキシ）ピリミジン−４−イル）フェニル）プロピオン酸の合成
【０２６８】
【化５８】
2010531889.tif 000060
【０２６９】
ＴＨＦ中のフッ化テトラブチルアンモニウム（ＴＢＡＦ：０．１ｍｌ、１Ｍ）を、３，４−ジフルオロ（difluro）−ベンズアルデヒド（１．４２ｇ、１０ｍｍｏｌ）及び（トリフルオロ（trifluro）メチル）トリメチルシラン（１．７０ｇ、１２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液１０ｍｌに０℃で添加した。混合物を室温まで温め、４時間撹拌した。反応混合物を１ＭのＨＣｌ  １２ｍｌで処理し、一晩撹拌した。生成物をジクロロメタン（３×２０ｍｌ）で抽出し、有機層を組み合わせて、シリカゲルパッドに通した。有機溶媒を蒸発させて、１．９ｇの１−（３，４−ジフルオロ−フェニル）−２，２，２−トリフルオロ−エタノール（収率９０％）を得た。
【０２７０】
ＮａＨ（８０ｍｇ、６０％、３．０ｍｍｏｌ）を、１−（３，４−ジフルオロ−フェニル）−２，２，２−トリフルオロ−エタノール（２１２ｍｇ、１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液５ｍｌに添加し、混合物を２０分間室温で撹拌した。４，６−ジクロロ−ピリミジン（１４９ｍｇ、１ｍｍｏｌ）を添加した後、反応混合物を７０℃で１時間加熱した。冷却後、ＴＨＦを蒸発させた。残渣をＥｔＯＡｃ  １５ｍｌに溶解した後、水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒をロータリーエバポレータによって取り除き、２３０ｍｇの４−クロロ−６−［１−（３，４−ジフルオロ−フェニル）−２，２，２−トリフルオロ−エトキシ］−ピリミジン（収率７０％）を得た。
【０２７１】
４−クロロ−６−［１−（３，４−ジフルオロ−フェニル）−２，２，２−トリフルオロ−エトキシ］−ピリミジン（３３ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）、４−ボロノ−Ｌ−フェニルアラニン（３１ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）、アセトニトリル１ｍｌ、及び水０．７ｍｌをマイクロ波用のエムリスプロセスバイアル（２ｍｌ〜５ｍｌ）に入れた。炭酸ナトリウム水溶液（０．３ｍｌ、１Ｍ）、その後５モル％のジクロロビス（トリフェニルホスフィン）−パラジウム（ＩＩ）を上記溶液に添加した。反応容器に封をし、マイクロ波によって１５０℃に５分間加熱した。冷却後、乾燥するまで反応混合物を蒸発させた。残渣をメタノール２．５ｍｌに溶解した後、調製ＬＣによって精製して、１０ｍｇの２−アミノ−３−（４−｛６−［１−（３，４−ジフルオロ−フェニル）−２，２，２−トリフルオロ−エトキシ］−ピリジン−４−イル｝−フェニル）−プロピオン酸（収率２１％）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ３．１１（ｍ，１Ｈ）、３．２７（ｍ，１Ｈ）、４．１９（ｄｄ，１Ｈ）、６．７８（ｑ，１Ｈ）、７．２６（ｍ，２Ｈ）、７．３５（ｄ，３Ｈ）、７．４９（ｍ，２Ｈ）、８．０２（ｄ，２Ｈ）、８．６６（ｓ，１Ｈ）。
【０２７２】
６．２２．（Ｓ）−２−アミノ−３−（４−（５−（３−（シクロペンチルオキシ）−４−メトキシベンジルアミノ）−ピラジン−２−イル）フェニル）プロピオン酸の合成
【０２７３】
【化５９】
2010531889.tif 000061
【０２７４】
ジクロロメタン（１０ｍｌ）中の３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシ−ベンズアルデヒド（４１７ｍｇ、１．８９５ｍｍｏｌ）と、２−アミノ−５−ブロモピラジン（３００ｍｇ、１．７２４ｍｍｏｌ）と、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（１．５当量）と、氷酢酸（３当量）との混合物を室温で一晩撹拌した。それから、反応混合物を酢酸エチルで希釈し、水で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過した。濾液を濃縮し、粗生成物を得て、それをＩＳＣＯ（ＳｉＯ２フラッシュカラムクロマトグラフィ）（ヘキサン／酢酸エチル＝１００／０→３／２）によって精製して、約４００ｍｇの６−ブロモ−ピラジン−２−イル）−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシ−ベンジル）−アミン（収率：６１％）を得た。
【０２７５】
５ｍｌ容のマイクロ波バイアルに、上記の６−ブロモ−ピラジン−２−イル）−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシ−ベンジル）−アミン（５０ｍｇ、０．１３２ｍｍｏｌ）、４−ボロノ−Ｌ−フェニルアラニン（３０ｍｇ、０．１４４ｍｍｏｌ）、Ｎａ２ＣＯ３（３１ｍｇ、０．２８８ｍｍｏｌ）、アセトニトリル（２ｍｌ）、及び水（２ｍｌ）、ジクロロビス（トリフェニルホスフィン）−パラジウム（５ｍｇ、０．００７ｍｍｏｌ）を添加した。バイアルに蓋をし、マイクロ波照射下で１５０℃で５分間撹拌した。反応混合物を冷却し、シリンジフィルタで濾過した後、ＹＭＣ−ＰＡＣＫ  ＯＤＳの１００×３０ｍｍのＩＤカラム（ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ／ＴＦＡ溶媒系）を用いて逆相調製ＨＰＬＣによって単離させた。純度の高い画分を真空下で濃縮した。それから、生成物を水５ｍｌで懸濁させ、凍結乾燥して、トリフルオロ塩（１２ｍｇ、２０％）として表題の化合物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ８．４１（ｓ，１Ｈ）、７．９９（ｓ，１Ｈ）、７．８３（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ）、７．３７（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ）、６．９０〜６．９５（ｍ，３Ｈ）、４．７８（ｍ，１Ｈ）、４．５０（ｓ，２Ｈ）、４．２２〜４．２６（ｍ，１Ｈ）、３．７９（ｓ，３Ｈ）、３．１２〜３．３９（ｍ，２Ｈ）、１．８０〜１．８１（ｍ，６Ｈ）、１．６０（ｍ，２Ｈ）。Ｍ＋１＝４６３。
【０２７６】
６．２３．（Ｓ）−２−アミノ−３−（４−（５−（（３−（シクロペンチルオキシ）−４−メトキシベンジル）−（メチル）アミノ）ピラジン−２−イル）フェニル）プロピオン酸の合成
【０２７７】
【化６０】
2010531889.tif 000062
【０２７８】
（６−ブロモ−ピラジン−２−イル）−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシ−ベンジル）−アミン（７０ｍｇ、０．１８５ｍｍｏｌ）のアセトニトリル溶液（１０ｍｌ）に、ホルムアルデヒド（１８．５ｍｍｏｌ）及びシアノ水素化ホウ素ナトリウム(sodium cyanoborohydride)（１７ｍｇ、０．２７８ｍｍｏｌ）を添加した。それから、濃ＨＣｌ水溶液をｐＨが約２になるまで滴下した。混合物を室温で約６時間撹拌した。それから、それを酢酸エチルで希釈し、水（３×５ｍｌ）で洗浄して、ＭｇＳＯ４で乾燥させた。溶媒を真空によって取り除き、７０ｍｇの粗生成物５−（ブロモ−ピラジン−２−イル）−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシ−ベンジル）−メチル−アミン（粗収率９５％）を得て、それをさらに精製せずに次の工程に用いた。
【０２７９】
５−（ブロモ−ピラジン−２−イル）−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシ−ベンジル）−メチル−アミン（３７ｍｇ、０．０９４ｍｍｏｌ）を上記のように鈴木カップリング反応にかけ、６ｍｇの表題の化合物（収率：１３％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ８．５９（ｓ，１Ｈ）、８．１２（ｓ，１Ｈ）、７．８５（ｄ，２Ｈ）、７．３９（ｄ，２Ｈ）、６．８１〜６．９１（ｍ，３Ｈ）、４．７２（ｍ，１Ｈ）、４．３０（ｍ，１Ｈ）、３．７９（ｓ，３Ｈ）、３．２０〜３．４０（ｍ，２Ｈ）、３．１８（ｓ，３Ｈ）、３．７９（ｓ，３Ｈ）、１．８０（ｍ，６Ｈ）、１．５８（ｍ，２Ｈ）。Ｍ＋１＝４７７。
【０２８０】
６．２４．（Ｓ）−２−アミノ−３−（４−（５−（（１，３−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メチルアミノ）ピラジン−２−イル）フェニル）プロピオン酸の合成
【０２８１】
【化６１】
2010531889.tif 000063
【０２８２】
無水メタノール（３ｍｌ）中の１，３−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルバルデヒド（１４２ｍｇ、１．１４５ｍｍｏｌ）と、２−アミノ−５−ブロモピラジン（２００ｍｇ、１．１４９ｍｍｏｌ）と、ボラントリメチルアミン錯体（１２６ｍｇ、１．７３ｍｍｏｌ）と、氷酢酸（１３７ｍｇ、２．２９ｍｍｏｌ）との混合物を室温で一晩撹拌した。それから、反応混合物を酢酸エチルで希釈し、水で洗浄して、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過した。濾液を濃縮し、粗生成物として、３００ｍｇの（５−ブロモ−ピラジン−２−イル）−（１，３−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イルメチル）アミン（粗収率：９３％）を得て、それをさらに精製せずに次の工程の反応に用いた。
【０２８３】
（５−ブロモ−ピラジン−２−イル）−（１，３−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イルメチル）アミン（４０ｍｇ、０．１４２ｍｍｏｌ）を上記のように鈴木カップリング反応に用い、１９ｍｇの表題の化合物（収率：３６．５％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ８．４８（ｓ，１Ｈ）、８．０５（ｓ，１Ｈ）、７．８７（ｄ，２Ｈ）、７．３９（ｄ，２Ｈ）、６．１０（ｓ，１Ｈ）、４．８１（ｓ，２Ｈ）、４．３０（ｍ，１Ｈ）、３．８３（ｓ，３Ｈ）、３．１１〜３．３８（ｍ，２Ｈ）、２．１０（ｓ，３Ｈ）。Ｍ＋１＝３６７。
【０２８４】
６．２５．（Ｓ）−２−アミノ−３−（４−（４−アミノ−６−（（Ｓ）−１（ナフタレン−２−イル）エチルアミノ）−１，３，５−トリアジン−２−イルオキシ）フェニル）プロピオン酸の合成
【０２８５】
【化６２】
2010531889.tif 000064
【０２８６】
２５０ｍｌ容のフラスコに、Ｒ−（＋）−１−（２−ナフチル）エチルアミン（４００ｍｇ、２．４２４ｍｍｏｌ）、２−アミノ−４，６−ジクロロトリアジン（３７３ｍｇ、２．１８１ｍｍｏｌ）、無水１，４−ジオキサン（４０ｍｌ）、及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１ｍｌ、５．７３２ｍｍｏｌ）を添加し、約４時間ゆっくりと加熱還流させた。二置換生成物の形成を避けるために、反応を注意深くモニタリングした。（反応が長ければ長いほど、より多くの二置換生成物が形成されることが観察された）。４時間後、反応混合物を冷却し、溶媒を減圧下で取り除いた。水を残渣に添加し、溶液を２分〜３分超音波処理した。それから、溶媒を濾過し、水で洗浄して、乾燥させ、５４０ｍｇ（粗収率８３％）の一塩化物、６−クロロ−Ｎ−（１−ナフタレン−２−イル−エチル）−［１，３，５］トリアジン−２，２−ジアミンを得て、それをさらに精製することなく次の工程の反応に用いた。
【０２８７】
イソプロパノール（８ｍｌ）中の６−クロロ−Ｎ−（１−ナフタレン−２−イル−エチル）−［１，３，５］トリアジン−２，２−ジアミン（９０ｍｇ、０．３００ｍｍｏｌ）と、２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（４−ヒドロキシ−フェニル）−プロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１０２ｍｇ、０．３０３ｍｍｏｌ）と、炭酸カリウム（８２ｍｇ、０．５９４ｍｍｏｌ）との混合物を一晩還流させた。溶媒を減圧下で取り除き、残渣を酢酸エチルで懸濁した。固体を濾過し、酢酸エチルで洗浄した。濾液を濃縮した後、メタノール／水（９０：１０）の混合物で再び溶解し、Ｓｕｎｆｉｒｅ  Ｃ１８  ＯＢＤの１００×３０ｍｍのＩＤカラム（ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ／ＴＦＡ溶媒系）を用いて調製ＬＣによって精製した。純度の高い画分を組み合わせて、濃縮し、５０ｍｇの純生成物、３−｛４−［４−アミノ−６−（１−ナフタレン−２−イル−エチルアミノ）−［１，３，５］トリアジン−２−イルオキシ］−フェニル｝２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（carbonvl）アミノ−プロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（収率２８％）を得た。
【０２８８】
上記の生成物（５０ｍｇ、０．０８３ｍｍｏｌ）をトリフルオロ酢酸／ジクロロメタン（８ｍｌ／２ｍｌ）に溶解し、室温で一晩撹拌した。溶媒を減圧下で取り除いた。それから、残渣をメタノール／水（９０：１０）の混合物で再び溶解し、Ｓｕｎｆｉｒｅ  Ｃ１８  ＯＢＤの１００×３０ｍｍのＩＤカラム（ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ／ＴＦＡ溶媒系）を用いて調製ＬＣによって精製した。純度の高い画分を組み合わせて、減圧下で濃縮し、約４ｍｌを得て、それを凍結乾燥して、ＴＦＡ塩として４ｍｇの表題の化合物（収率１１％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ７．３７〜７．８１（ｍ，８Ｈ）、７．１９（ｍ，２Ｈ）、６．９８（ｍ，１Ｈ）、５．３７（ｍ，１Ｈ）、４．１９（ｍ，１Ｈ）、３．１７〜３．３８（ｍ，２Ｈ）、１．５６（ｍ，３Ｈ）。Ｍ＋１＝４４５。
【０２８９】
６．２６．（Ｓ）−２−アミノ−３−（４−（４−アミノ−６−（（Ｒ）−１−（ビフェニル−２−イル）−２，２，２−トリフルオロエトキシ）−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル）プロピオン酸の合成
【０２９０】
【化６３】
2010531889.tif 000065
【０２９１】
ＴＨＦ（８ｍｌ）中の１−ビフェニル−２−イル−２，２，２−トリフルオロ−エタノン（３００ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）と、ボランテトラヒドロフラン錯体（１．２ｍｌ、ＴＨＦ中１Ｍ、１．２ｍｍｏｌ）と、Ｓ−２−メチル−ＣＢＳ−オキサアザボロリジン（０．２４ｍｌ、トルエン中１Ｍ、０．２４ｍｍｏｌ）との混合物を室温で一晩撹拌した。数滴の濃ＨＣｌを添加し、混合物を３０分間撹拌した。生成物をＳｉＯ２クロマトグラフィ（ヘキサン／酢酸エチル＝１００／０→３／１）によって精製し、２９０ｍｇの１−ビフェニル−２−イル−２，２，２−トリフルオロ−エタノール（収率９６％）を得た。
【０２９２】
上記のアルコール（２９０ｍｇ、１．１５１ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（１０ｍｌ）に溶解した。水素化ナトリウム（５５ｍｇ、１．３７５ｍｍｏｌ）を一度に全て添加し、混合物を室温で３０分間撹拌した。それから、溶液を２−アミノ−４，６−ジクロロ−トリアジン（１９０ｍｇ、１．１５２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ懸濁液（２０ｍｌ）が入ったフラスコに移した。混合物を室温で一晩撹拌した。水を添加した後、混合物を酢酸エチルで希釈した。有機層を水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させた後、濃縮して、４００ｍｇの粗生成物２−アミノ−４−（１−ビフェニル−２−イル−２，２，２−トリフルオロ−エトキシ−６−クロロ−トリアジンを得た。
【０２９３】
２−アミノ−４−（１−ビフェニル−２−イル−２，２，２−トリフルオロ−エトキシ−６−クロロ−トリアジン（４０ｍｇ、０．１０５ｍｍｏｌ）を、上記と同じ鈴木カップリング反応にかけ、５ｍｇの表題の化合物（収率９．４％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ８．１８（ｄ，２Ｈ）、７．８６（ｍ，１Ｈ）、７．４０〜７．５２（ｍ，９Ｈ）、７．３２（ｍ，１Ｈ）、７．０７（ｍ，１Ｈ）、４．３２（ｍ，１Ｈ）、３．２２〜３．４１（ｍ，２Ｈ）。Ｍ＋１＝５１０。
【０２９４】
６．２７．（２Ｓ）−２−アミノ−３−（４−（４−アミノ−６−（１−（６，８−ジフルオロナフタレン−２−イル）エチルアミノ）−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル）プロピオン酸の合成
【０２９５】
【化６４】
2010531889.tif 000066
【０２９６】
三つ口フラスコ中に、ヨウ化銅（ＣｕＩ）（２９９ｍｇ、１．５１５ｍｍｏｌ）及び塩化リチウム（ＬｉＣｌ）（１４５ｍｇ、３．４５２ｍｍｏｌ）を窒素下で無水ＴＨＦ（６０ｍｌ）に添加した。淡黄色の溶液が得られるまで、混合物を室温で撹拌した。０℃に冷却後、メチルビニルケトン及びクロロトリメチルシランを添加し、橙色が観察されるまで混合物を撹拌した（約２０分）。約−４０℃に冷却後、３，５−ジフルオロフェニルマグネシウム臭化物（２７．６５ｍｌ、１３．８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（０．５Ｍ）をゆっくり添加した。反応混合物を約−４０℃で０．５時間撹拌した後、冷浴を取り外し、温度を室温までゆっくりと温めた。溶媒を蒸発させ、残渣をヘキサン（４×２０ｍｌ）で抽出した。回収した抽出物を冷１０％ＮａＨＣＯ３水溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を減圧下で蒸発させ、３，５−ジフルオロフェニル−１−トリメチルシリルオキシアルケン（２．０３ｇ、７．９２９ｍｍｏｌ、粗収率５７％）を得て、それをさらに精製することなく逐次反応に用いた。
【０２９７】
炭酸カルシウム粉末（３．８０６ｇ、３８．０６ｍｍｏｌ）及びエチルビニルエーテル（２．１８４ｇ、３０．３２９ｍｍｏｌ）を硝酸セリウムアンモニウム（１０．４３０ｇ、１９．０３３ｍｍｏｌ）のメタノール溶液（４０ｍｌ）に窒素雰囲気下で添加した。得られた懸濁液に、上記で調製された３，５−ジフルオロフェニル−１−トリメチルシリルオキシアルケン（２．０３ｇ、７．９２９ｍｍｏｌ）のエチルビニル溶液（６ｍｌ、４．５１８ｇ、６２．７５ｍｍｏｌ）を激しく撹拌させながら滴下し、混合物を室温で一晩撹拌した。固体をセライト層で濾過し、濾液を最初の容量の４分の１まで濃縮させた。得られた濃い混合物を激しく撹拌しながら、１：１（ｖ／ｖ）のジエチルエーテル−１０％ＮａＨＣＯ３水溶液にゆっくり注いだ。析出物を濾過し、エーテル溶液を分離し、溶媒を減圧下で蒸発させ、透明な液体を得た。得られた液体（非環状アセテートと環状アセテートとの混合物）のメタノール溶液（４ｍｌ）を０℃でジクロロジシアノベンゾキノン（１．７７ｇ、７．７９７ｍｍｏｌ）の８０％硫酸懸濁水溶液に滴下した。添加終了後、氷浴を取り外し、撹拌を３０分間続けた。混合物を氷水に注ぎ、得られた茶色の析出物を濾過し、アセトンに溶解した。シリカゲルを添加し、プラグを作製して、粗生成物をクロマトグラフィ（ヘキサン／酢酸エチル＝１００／０→３／１）によって精製し、淡黄色の固体として７６０ｍｇの１−（５，７−ジフルオロ−ナフタレン−２−イル）−エタノン（２工程で収率４８％）を得た。
【０２９８】
上記のケトン（７６０ｍｇ、３．６８９ｍｍｏｌ）をメタノール（４０ｍｌ）に溶解した。それから、酢酸アンモニウム（２．８４１ｇ、３６．８９６ｍｍｏｌ）、シアノ水素化ホウ素ナトリウム（２３２ｍｇ、３．３８９ｍｍｏｌ）、及びモレキュラーシーブ（３Å、７．６ｇ）を添加した。混合物を室温で２日間撹拌した。固体を濾過し、濾液を濃縮した。残渣を水に溶解し、ｐＨが約２になるまで濃ＨＣｌ水溶液を滴下した。それから、混合物を酢酸エチルで抽出し、最終生成物ではない（unfinished）ケトン及び他の副産物を取り除いた。水層を水酸化ナトリウム水溶液（１Ｍ）でｐＨを約１０まで塩基性化し、ジクロロメタンで抽出して、有機層を組み合わせて、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮して、２９０ｍｇの１−（５，７−ジフルオロ−ナフタレン−２−イル）−エチルアミン（収率３８％）を得た。
【０２９９】
新たに生成されたアミン（２９０ｍｇ、１．４０１ｍｍｏｌ）を２−アミノ−４，６−ジクロロトリアジン（２７７ｍｇ、１．６７８ｍｍｏｌ）の無水１，４−ジオキサン懸濁液（６０ｍｌ）に直接添加した後、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１ｍｌ、５．７３２ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を約３時間ゆっくりと加熱還流させた。それから、反応混合物を冷却し、溶媒を減圧下で取り除いた。残渣に水を添加し、混合物を２分〜３分超音波処理した。得られた固体を濾過し、水で洗浄して、乾燥させて、３９５ｍｇ（粗収率６０％）の６−クロロ−Ｎ−［１−（６，８−ジフルオロ−ナフタレン−２−イル−エチル］−［１，３，５］トリアジン−２，４−ジアミンを得て、それをさらに精製することなく直接次の工程の反応に用いた。
【０３００】
上記の生成された一塩化物（４８ｍｇ、０．１４４ｍｍｏｌ）を上記と同じ鈴木カップリング反応にかけ、１２ｍｇの表題の生成物（収率１７．９％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ８．１４〜８．２２（ｍ，２Ｈ）、８．０５（ｍ，１Ｈ）、７．９２（ｍ，１Ｈ）、７．６３（ｍ，１Ｈ）、７．３２〜７．５１（ｍ，３Ｈ）、７．１１（ｍ，１Ｈ）、５．４８（ｍ，１Ｈ）、４．１３（ｍ，１Ｈ）、３．１３〜３．４１（ｍ，２Ｈ）、１．６６（ｄ，３Ｈ）。Ｍ＋１＝４６５。
【０３０１】
６．２８．（２Ｓ）−２−アミノ−３−（４−（４−アミノ−６−（２，２，２−トリフルオロ−１−（３’−メチルビフェニル−２−イル）エトキシ）−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル）プロピオン酸の合成
【０３０２】
【化６５】
2010531889.tif 000067
【０３０３】
ＴＨＦ（３ｍｌ）中の３’−メチル−１−ビフェニル−２−カルバルデヒド（５００ｍｇ、２．５５１ｍｍｏｌ）と、トリフルオロメチルトリメチルシラン（４３５ｍｇ、３．０６１ｍｍｏｌ）との混合物にテトラブチルアンモニウムフッ化物（１３ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。温度を室温まで温めた。混合物を室温で５時間撹拌した後、酢酸エチルで希釈し、水及びブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４によって乾燥させた。溶媒を減圧下で取り除き、粗生成物として、６６０ｍｇ（粗収率９７％）の２，２，２−トリフルオロ−１−（３’−メチル−ビフェニル−２−イル）−エタノールを得て、それをさらに精製することなく次の工程に用いた。
【０３０４】
上記で生成したアルコール（６６０ｍｇ、２．４８１ｍｍｏｌ）を無水１，４−ジオキサン（１０ｍｌ）に溶解した。水素化ナトリウム（１１９ｍｇ、鉱油中６０％、２．９７５ｍｍｏｌ）を一度に全て添加し、混合物を室温で３０分間撹拌した。溶液を２−アミノ−４，６−ジクロロ−トリアジン（４９１ｍｇ、２．９７６ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン懸濁液（７０ｍｌ）が入ったフラスコに移した。混合物を室温で６時間撹拌した。溶媒を除去し、残渣を酢酸エチルで懸濁して、それを水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させた後、濃縮して、所望の生成物２−アミノ−４−（１−（３’−メチル−ビフェニル−２−イル−２，２，２−トリフルオロ−エトキシ−６−クロロ−トリアジンを約５７％、及び副産物（二置換生成物）を約４３％含有した粗生成物７９０ｍｇを得た。粗生成物をさらに精製することなく用いた。
【０３０５】
２−アミノ−４−（１−（３’−メチル−ビフェニル−２−イル−２，２，２−トリフルオロ−エトキシ−６−クロロ−トリアジン（９８ｍｇ、純度５７％、０．１４２ｍｍｏｌ）を用いて、上記と同じ鈴木カップリング反応を行い、９ｍｇの表題の化合物（収率１２．０％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ８．０９（ｍ，２Ｈ）、７．８５（ｍ，１Ｈ）、７．５０（ｍ，２Ｈ）、７．２８〜７．４３（ｍ，５Ｈ）、７．１７〜７．２６（ｍ，２Ｈ）、７．１８（ｍ，１Ｈ）、３．８５（ｍ，１Ｈ）、３．０８〜３．４４（ｍ，２Ｈ）、２．３３（ｓ，３Ｈ）。Ｍ＋１＝５２４。
【０３０６】
６．２９．（Ｓ）−２−アミノ−３−（４−（５−（３，４−ジメトキシフェニルカルバモイル）−ピラジン−２−イル）フェニル）プロピオン酸の合成
【０３０７】
【化６６】
2010531889.tif 000068
【０３０８】
ジクロロメタン（２０ｍｌ）中の３，４−ジメトキシフェニルアミン（０．３０６ｇ、２ｍｍｏｌ）と、トリエチルアミン（０．５５７ｍｌ、４ｍｍｏｌ）との混合物に、５−クロロ−ピラジン−２−カルボニル塩化物（０．３５４ｇ、２ｍｍｏｌ）を０℃〜５℃で添加した。混合物を室温で３時間撹拌させた。混合物を塩化メチレン（２０ｍｌ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３（２０ｍｌ）、ブライン（２０ｍｌ）で洗浄し、乾燥させて（無水Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮して、０．４２ｇの粗５−クロロ−ピラジン−２−カルボン酸（３，４−ジメトキシ−フェニル）−アミドを得て、それを次の反応に直接用いた。
【０３０９】
５−クロロ−ピラジン−２−カルボン酸（３，４−ジメトキシ−フェニル）−アミド（０．１８ｇ、０．６１ｍｍｏｌ）、Ｌ−ｐ−ボロノフェニルアラニン（０．１４６ｇ、０．７０ｍｍｏｌ）、ＣＨ３ＣＮ（２．５ｍｌ）、Ｈ２Ｏ（２．５ｍｌ）、Ｎａ２ＣＯ３（０．１２９ｇ、１．２２ｍｍｏｌ）をマイクロ波バイアル中で組み合わせた。混合物に封をし、１５０℃で５分間維持した。混合物を濾過し、濃縮した。残渣をメタノール／水（１：１）に溶解し、溶媒系としてＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ／ＴＦＡを用いて、調製ＨＰＬＣによって精製して、ＴＦＡ塩として２−アミノ−３−｛４−［５−（３，４−ジメトキシ−フェニルカルボミル）−ピラジン−２−イル］−フェニル｝−プロピオン酸を得た（ＨＰＬＣ：方法Ａ、保持時間＝２．８４６分、ＬＣＭＳ  Ｍ＋１  ４２３）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ３．１０〜３．３０（ｍ，２Ｈ）、３．７２（ｄ，６Ｈ）、４．０５（ｍ，１Ｈ）、７．４２〜７．６２（ｍ，４Ｈ）、８．２２（ｍ，３Ｈ）、９．３０（ｍ，２Ｈ）。
【０３１０】
６．３０．（Ｓ）−２−アミノ−３−（４−（２−アミノ−６−（４−（２−（トリフルオロメチル）フェニル）−ピペリジン−１−イル）ピリミジン−４−イル）フェニル）プロピオン酸の合成
【０３１１】
【化６７】
2010531889.tif 000069
【０３１２】
２−アミノ−４，６−ジクロロピリミジン（０．１６４ｇ、１ｍｍｏｌ）、４−（２−トリフルオロメチル−フェニル）−ピペリジン塩酸塩（０．２６６ｇ、１ｍｍｏｌ）、及び炭酸セシウム（０．６８４ｇ、２．１ｍｍｏｌ）を、２０ｍｌ容のマイクロ波バイアル中の１，４−ジオキサン（５ｍｌ）と、Ｈ２Ｏ（５ｍｌ）との混合物に溶解した。混合物をマイクロ波リアクターで２１０℃で２０分間撹拌した。溶媒を取り除き、残渣をＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍｌ）中の５％メタノールに溶解し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮して、粗中間体４−クロロ−６−［４−（２−トリフルオロメチル−フェニル）−ピペリジン−１−イル］−ピリミジン−２−イルアミン（０．４２ｇ）を得て、それを以下の工程で直接用いた。
【０３１３】
粗中間体（０．４２ｇ）、Ｌ−ｐ−ボロノ−フェニルアラニン（０．２０９ｇ、１ｍｍｏｌ）、炭酸ナトリウム（０．２１０ｇ、２ｍｍｏｌ）、及びジクロロビス（トリフェニルホスフィン）−パラジウム（ＩＩ）（３５ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）を、１０ｍｌ容のマイクロ波バイアル中のＭｅＣＮ（２．５ｍｌ）と、Ｈ２Ｏ（２．５ｍｌ）との混合物に溶解した。バイアルに封をし、マイクロ波リアクターで１５０℃で６分間撹拌した。混合物を濾過し、濾液を濃縮させた。残渣をＭｅＯＨ及びＨ２Ｏ（１：１）に溶解し、溶媒系としてＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ／ＴＦＡを用いて、調製ＨＰＬＣによって精製して、ＴＦＡ塩として２−アミノ−３−（４−｛４−（２−トリフルオロメチル−フェニル）−ピペリジン−１−イル］−ピリミジン−４−イル｝−フェニル）−プロピオン酸を得た（ＨＰＬＣ：方法Ａ、保持時間＝３．２０３分、ＬＣＭＳ  Ｍ＋１  ４８６）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ１．８０〜２．２０（ｍ，５Ｈ）、３．０〜３．１６（ｍ，２Ｈ）、３．２２〜３．４２（ｍ，２Ｈ）、４．２２（ｔ，１Ｈ）、４．４２〜４．５４（ｍ，１Ｈ）、５．２２〜５．３４（ｍ，１Ｈ）、６．８０（ｓ，１Ｈ）、７．４０（ｔ，１Ｈ）、７．５０〜７．６０（ｍ，４Ｈ）、７．６８（ｄ，１Ｈ）、７．８２（ｄ，２Ｈ）。
【０３１４】
６．３１．（Ｓ）−２−アミノ−３−（４−（２−アミノ−６−（（Ｒ）−１−（ナフタレン−２−イル）エチルアミノ）ピリミジン−４−イル）フェニル）プロピオン酸の合成
【０３１５】
【化６８】
2010531889.tif 000070
【０３１６】
２−アミノ−４，６−ジクロロピリミジン（０．１６４ｇ、１ｍｍｏｌ）、（Ｒ）−（＋）−１−（２−ナフチル）−エチルアミン（０．１７１ｇ、１ｍｍｏｌ）、及び炭酸セシウム（０．３５８ｇ、１．１ｍｍｏｌ）を、２０ｍｌ容のマイクロ波バイアル中の１，４−ジオキサン（４ｍｌ）と、Ｈ２Ｏ（４ｍｌ）との混合物に溶解した。バイアルに封をし、マイクロ波リアクターで２１０℃で２０分間撹拌した。溶媒を取り除き、残渣をＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍｌ）に溶解し、水（２０ｍｌ）、ブライン（２０ｍｌ）で洗浄して、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮して、粗中間体６−クロロ−Ｎ−４−（ナフタレン−２−イル−エチル）−ピリミジン−２，４−ジアミン（０．２７０ｇ）を得て、それを以下の工程で直接用いた。
【０３１７】
粗中間体（０．２７ｇ）、Ｌ−ｐ−ボロノ−フェニルアラニン（０．２１０ｇ、１ｍｍｏｌ）、炭酸ナトリウム（０．２１０ｇ、２ｍｍｏｌ）、及びジクロロビス（トリフェニルホスフィン）−パラジウム（ＩＩ）（２５ｍｇ、０．０３６ｍｍｏｌ）を、マイクロ波バイアル中のＭｅＣＮ（２．５ｍｌ）と、Ｈ２Ｏ（２．５ｍｌ）との混合物に溶解した。バイアルに封をし、マイクロ波リアクターで１５０℃で６分間撹拌した。混合物を濾過し、濾液を濃縮させた。残渣をＭｅＯＨ及びＨ２Ｏ（１：１）に溶解し、溶媒系としてＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ／ＴＦＡを用いて、調製ＨＰＬＣによって精製して、ＴＦＡ塩として２−アミノ−３−｛４−［２−アミノ−６−（１−ナフタレン−２−イル−エチルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−フェニル｝−プロピオン酸を得た（ＨＰＬＣ：方法Ａ、保持時間＝３．２７６分、ＬＣＭＳ  Ｍ＋１  ４２８）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ１．６８（ｄ，３Ｈ）、３．２２〜３．４０（ｍ，２Ｈ）、４．３０（ｔ，１Ｈ）、５．６０（ｑ，１Ｈ）、６．４２（ｓ，１Ｈ）、７．４２〜７．５４（ｍ，５Ｈ）、７．７２（ｍ，２Ｈ）、７．８２〜７．８４（ｍ，４Ｈ）。
【０３１８】
６．３２．（Ｓ）−２−アミノ−３−（４−（２−アミノ−６−（メチル（（Ｒ）−１−（ナフタレン−２−イル）エチル）アミノ）ピリミジン−４−イル）フェニル）プロピオン酸の合成
【０３１９】
【化６９】
2010531889.tif 000071
【０３２０】
２−アミノ−４，６−ジクロロピリミジン（０．３２７ｇ、２ｍｍｏｌ）、メチル−（１−ナフタレン−２−イル−エチル）−アミン（０．３６０ｇ、２ｍｍｏｌ）、及び炭酸セシウム（０．７１７ｇ、２．２ｍｍｏｌ）を２０ｍｌ容のマイクロ波バイアル中の１，４−ジオキサン（７．５ｍｌ）と、Ｈ２Ｏ（７．５ｍｌ）との混合物中に溶解した。バイアルに封をし、マイクロ波リアクター中で２１０℃で２０分間撹拌した。溶媒を取り除き、残渣をＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍｌ）に溶解し、水（２０ｍｌ）、ブライン（２０ｍｌ）で洗浄して、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮して、粗中間体６−クロロ−Ｎ−４−メチル−Ｎ−４−（１−ナフタレン−２−イル−エチル）−ピリミジン−２，４−ジアミン（０．６００ｇ）を得て、それを以下の工程で直接用いた。
【０３２１】
粗中間体（０．３０ｇ）、Ｌ−ｐ−ボロノ−フェニルアラニン（０．２１０ｇ、１ｍｍｏｌ）、炭酸ナトリウム（０．２１０ｇ、２ｍｍｏｌ）、及びジクロロビス（トリフェニルホスフィン）−パラジウム（ＩＩ）（２５ｍｇ、０．０３６ｍｍｏｌ）を、マイクロ波バイアル中のＭｅＣＮ（２．５ｍｌ）と、Ｈ２Ｏ（２．５ｍｌ）との混合物に溶解した。バイアルに封をし、マイクロ波リアクターで１５０℃で６分間撹拌した。混合物を濾過し、濾液を濃縮させた。残渣をＭｅＯＨ及びＨ２Ｏ（１：１）に溶解し、溶媒系としてＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ／ＴＦＡを用いて、調製ＨＰＬＣによって精製して、ＴＦＡ塩として２−アミノ−３−（４−｛２−アミノ−６−［メチル−（１−ナフタレン−２−イル−エチル）アミノ］−ピリミジン−４−イル｝−フェニル）−プロピオン酸を得た（ＨＰＬＣ：方法Ｃ、保持時間＝２．９４５分、ＬＣＭＳ  Ｍ＋１  ４４２）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ１．７０（ｍ，３Ｈ）、２．９２（ｓ，３Ｈ）、３．２２〜３．４２（ｍ，２Ｈ）、４．２８（ｍ，１Ｈ）、６．６０（ｓ，１Ｈ）、６．７２（ｍ，１Ｈ）、７．４０〜７．９２（ｍ，１１Ｈ）。
【０３２２】
６．３３．（Ｓ）−２−アミノ−３−（４−（２−アミノ−６−（（Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−（６−メトキシナフタレン−２−イル）エトキシ）ピリミジン−４−イル）フェニル）プロピオン酸の合成
【０３２３】
【化７０】
2010531889.tif 000072
【０３２４】
２−アミノ−４，６−ジクロロピリミジン（０．０９６ｇ、０．６ｍｍｏｌ）、２，２，２−トリフルオロ−１−（６−メトキシ−ナフタレン−２−イル）−エタノール（０．１４０ｇ、０．５５ｍｍｏｌ）、及びＮａＨ（９６ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下で無水ジオキサン（２０ｍｌ）に添加した。反応物を８０℃で１２時間撹拌し、室温に冷却して、水（０．２ｍｌ）でクエンチした。反応混合物を濃縮し、残渣をＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍｌ）に溶解して、水（２０ｍｌ）、ブライン（２０ｍｌ）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮して、粗中間体４−クロロ−６−［２，２，２−トリフルオロ−１−（６−メトキシ−ナフタレン−２−イル）−エトキシ］−ピリミジン−２−イルアミン（０．２２ｇ）を得て、それを以下の工程で直接用いた。
【０３２５】
粗中間体（０．２２ｇ）、Ｌ−ｐ−ボロノ−フェニルアラニン（０．１２６ｇ、０．６ｍｍｏｌ）、炭酸ナトリウム（０．１２６ｇ、１．２ｍｍｏｌ）、及びジクロロビス（トリフェニルホスフィン）−パラジウム（ＩＩ）（１５ｍｇ、０．０２１ｍｍｏｌ）を、マイクロ波バイアル中のＭｅＣＮ（２．０ｍｌ）と、Ｈ２Ｏ（２．０ｍｌ）との混合物に溶解した。バイアルに封をし、マイクロ波リアクターで１５０℃で６分間撹拌した。混合物を濾過し、濾液を濃縮させた。残渣をＭｅＯＨ及びＨ２Ｏ（１：１）に溶解し、溶媒系としてＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ／ＴＦＡを用いて、調製ＨＰＬＣによって精製して、ＴＦＡ塩として２−アミノ−３−（４−｛２−アミノ−６−［２，２，２−トリフルオロ−１−（６−メトキシ−ナフタレン−２−イル）−エトキシ］−ピリミジン−４−イル］−フェニル）−プロピオン酸を得た（ＨＰＬＣ：方法Ｃ、保持時間＝３．１９０分、ＬＣＭＳ  Ｍ＋１  ５１３）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ３．２２〜３．４２（ｍ，２Ｈ）、３．８６（ｓ，３Ｈ）、４．３２（１Ｈ）、６．８８（ｍ，１Ｈ）、６．９２（１Ｈ）、７．２０（ｄｄ，１Ｈ）、７．２６（ｓ，１Ｈ）、７．５０（ｄ，２Ｈ）、７．６３（ｄ，１Ｈ）、７．８０〜７．９０（ｍ，４Ｈ）、８．０５（ｓ，１Ｈ）。
【０３２６】
６．３４．（Ｓ）−２−アミノ−３−（４−（５−（ビフェニル−４−イルメチルアミノ）ピラジン−２−イル）フェニル）プロピオン酸の合成
【０３２７】
【化７１】
2010531889.tif 000073
【０３２８】
４−フェニルベンズアルデヒド（０．３ｇ、１．６５ｍｍｏｌ）及び２−アミノ−５−ブロモピラジン（０．２４ｇ、１．３７ｍｍｏｌ）を、室温で１８時間、ジクロロエタン（７．０ｍｌ）及び酢酸（０．２５ｍｌ）中でＮａ（ＯＡｃ）３ＢＨ（０．４４ｇ、２．０６ｍｍｏｌ）で処理した。混合物をジクロロメタンで希釈し、１．０ＮのＮａＯＨで洗浄し、ブラインで洗浄して、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。クロマトグラフィ（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ：Ｈｅｘ、１：１）によって、０．１８ｇのＮ−（ビフェニル−４−イルメチル）−５−ブロモピラジン−２−アミンを得た。
【０３２９】
Ｎ−（ビフェニル−４−イルメチル）−５−ブロモピラジン−２−アミン（６０ｍｇ、０．１７６ｍｍｏｌ）、Ｌ−ｐ−ボロノフェニルアラニン（３７ｍｇ、０．１７６ｍｍｏｌ）、パラジウムトリフェニルホスフィン二塩化物（３．６ｍｇ、０．００５２ｍｍｏｌ）、Ｎａ２ＣＯ３（３７ｍｇ、０．３５３ｍｍｏｌ）、アセトニトリル（１．２５ｍｌ）及び水（１．２５ｍｌ）を１５０℃で５分間、マイクロ波リアクターで加熱した。混合物を濃縮し、１．０ＮのＨＣｌに溶解して、エーテルで２回洗浄し、濃縮して、調製ＨＰＬＣによって精製し、４１ｍｇの表題の化合物を得た。Ｍ＋１＝４２５；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ８．４２（ｓ，１Ｈ）、８．０５（ｓ，１Ｈ）、７．９２（ｄ，２Ｈ）、７．５８（ｄ，４Ｈ）、７．４０（ｍ，７Ｈ）、４．６０（ｓ，２Ｈ）、４．２５（ｍ，１Ｈ）、３．４０（ｍ，１Ｈ）、３．２０（ｍ，１Ｈ）。
【０３３０】
６．３５．（Ｓ）−２−アミノ−３−（４−（５−（ナフタレン−２−イルメチルアミノ）ピラジン−２−イル）フェニル）プロピオン酸の合成
【０３３１】
【化７２】
2010531889.tif 000074
【０３３２】
２−ナフトアルデヒド（０．６ｇ、３．８４ｍｍｏｌ）及び２−アミノ−５−ブロモピラジン（０．５６ｇ、３．２０１ｍｍｏｌ）を、室温で１８時間、ジクロロエタン（１５．０ｍｌ）及び酢酸（０．５ｍｌ）中でＮａ（ＯＡｃ）３ＢＨ（１．０２ｇ、４．８０２ｍｍｏｌ）で処理した。混合物をジクロロメタンで希釈し、１．０ＮのＮａＯＨで洗浄し、ブラインで洗浄して、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。クロマトグラフィ（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ：Ｈｅｘ、１：１）によって、０．４９ｇの５−ブロモ−Ｎ−（ナフタレン−２−イルメチル）ピラジン−２−アミンを得た。
【０３３３】
５−ブロモ−Ｎ−（ナフタレン−２−イルメチル）ピラジン−２−アミン（０．２ｇ、０．６３７ｍｍｏｌ）、Ｌ−ｐ−ボロノフェニルアラニン（０．１３ｇ、０．６３７ｍｍｏｌ）、パラジウムトリフェニルホスフィン二塩化物（１３ｍｇ、０．０１９ｍｍｏｌ）、Ｎａ２ＣＯ３（０．１３ｇ、１．２７ｍｍｏｌ）、アセトニトリル（５ｍｌ）及び水（５ｍｌ）を１５０℃で５分間、マイクロ波リアクターで加熱した。混合物を濃縮し、１．０ＮのＨＣｌに溶解して、エーテルで２回洗浄し、濃縮して、メタノールに溶解し、濾過し、濃縮して、０．１２ｇの表題の化合物を得た。Ｍ＋１＝３９９；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ８．５１（ｓ，１Ｈ）、８．３７（ｓ，１Ｈ）、７．９０（ｍ，６Ｈ）、７．５０（ｍ，５Ｈ）、４．８５（ｓ，２Ｈ）、４．３０（ｔ，１Ｈ）、３．３８（ｍ，１Ｈ）、３．２２（ｍ，１Ｈ）。
【０３３４】
６．３６．（Ｓ）−２−（Ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−（４−（５−（ナフタレン−２−イルメチルアミノ）ピラジン−２−イル）フェニル）プロピオン酸の合成
【０３３５】
【化７３】
2010531889.tif 000075
【０３３６】
（Ｓ）−２−アミノ−３−（４−（５−（ナフタレン−２−イルメチルアミノ）ピラジン−２−イル）フェニル）プロピオン酸（０．１５ｇ、０．３４５ｍｍｏｌ）を、０℃でジオキサン（３ｍｌ）及びＨ２Ｏ（３ｍｌ）中のトリエチルアミン（８７ｍｇ、０．８６２ｍｍｏｌ）、及びｂｏｃ−無水物（８４ｍｇ、０．３７９）で処理した。混合物を室温に温め、一晩撹拌した。混合物を濃縮し、ＥｔＯＡｃと、Ｈ２Ｏとに分配した。水相を１．０ＮのＨＣｌで酸性化させｐＨを１にして、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機物を組み合わせて、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濃縮して、４８ｍｇの表題の化合物を得た。
【０３３７】
６．３７．（Ｓ）−２−モルホリノエチル ２−アミノ−３−（４−（５−（ナフタレン−２−イルメチルアミノ）ピラジン−２−イル）フェニル）プロピオネートの合成
【０３３８】
【化７４】
2010531889.tif 000076
【０３３９】
（Ｓ）−２−（Ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−（４−（５−（ナフタレン−２−イルメチルアミノ）ピラジン−２−イル）フェニル）プロピオン酸（４８ｍｇ、０．０９０ｍｍｏｌ）、４−（２−ヒドロキシエチル）モルホリン（１２ｍｇ、０．０９０ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（１８ｍｇ、０．１８０ｍｍｏｌ）、及びベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス（ジメチルアミノ）−ホスホニウムヘキサフルオロリン酸塩（ＢＯＰ、１８ｍｇ、０．０９０ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（３．０ｍｌ）中で室温で５時間撹拌した。さらに、トリエチルアミン（１８ｍｇ、０．１８０ｍｍｏｌ）及びＢＯＰ（１８ｍｇ、０．０９０ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を一晩撹拌した。混合物を濃縮し、調製ＨＰＬＣで精製して、２ｍｇの表題の化合物を得た。
【０３４０】
６．３８．（２Ｓ）−２−アミノ−３−（４−（２−アミノ−６−（２，２，２−トリフルオロ−１−（３’−フルオロビフェニル−４−イル）エトキシ）ピリミジン−４−イル）フェニル）プロピオン酸の合成
【０３４１】
【化７５】
2010531889.tif 000077
【０３４２】
０℃のＴＨＦ（５０ｍｌ）中の４’−ブロモ−２，２，２−トリフルオロアセトフェノン（５．０ｇ、１９．７６ｍｍｏｌ）に、ＮａＢＨ４（１．５ｇ、３９．５２ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温に温め、１時間撹拌した。反応をＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２）によって終了させた。混合物をＨ２Ｏでクエンチし、ロータリーエバポレータで処理して、大部分のＴＨＦを取り除き、ＣＨ２Ｃｌ２で２回抽出した。有機物を組み合わせて、ブラインで洗浄し、少量に濃縮して、シリカゲルプラグで濾過した。シリカをＣＨ２Ｃｌ２で洗浄し、生成物を溶離して、得られた溶液を濃縮し、４．６５ｇの１−（４−ブロモフェニル）−２，２，２−トリフルオロエタノール（収率９２％）を得た。
【０３４３】
Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（２．１ｇ、１．８２３ｍｍｏｌ）に、３−フルオロフェニルマグネシウム臭化物（５５ｍｌ、ＴＨＦ中１．０Ｍ、５５ｍｍｏｌ）を１５分かけて０℃で添加した。氷浴を取り外し、混合物を３０分間撹拌させた。ＴＨＦ（５０ｍｌ）中の１−（４−ブロモフェニル）−２，２，２−トリフルオロエタノール（４．６５ｇ、１８．２３ｍｍｏｌ）を１０分かけて添加した。混合物を加熱し、３時間還流させ、ＬＣ（Ｓｕｎｆｉｒｅカラム、ＴＦＡ）によって完全に示された。混合物を冷却し、Ｈ２Ｏでクエンチして、ロータリーエバポレータで処理して、大部分のＴＨＦを取り除き、ＣＨ２Ｃｌ２で３回抽出した。有機物を組み合わせて、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。クロマトグラフィ（ＳｉＯ２、ＣＨ２Ｃｌ２）によって、４．６４ｇの２，２，２−トリフルオロ−１−（３’−フルオロビフェニル−４−イル）エタノール（収率９４％）を得た。
【０３４４】
０℃のＴＨＦ（５０ｍｌ）中の２，２，２−トリフルオロ−１−（３’−フルオロビフェニル−４−イル）エタノール（１．４ｇ、５．１８ｍｍｏｌ）に、ＮａＨ（鉱油中６０％、０．３１ｇ、７．７７ｍｍｏｌ）を添加した。氷浴を取り外し、混合物を３０分間撹拌させた。ＴＨＦ（２５ｍｌ）中の２−アミノ−４，６−ジクロロピリミジン（１．０ｇ、６．２２ｍｍｏｌ）を１度に全て添加した。混合物を５０℃に５時間加熱した。反応をＬＣＭＳ（Ｓｕｎｆｉｒｅ、ＴＦＡ）によって終了させた。混合物を冷却し、ブラインでクエンチして、ＣＨ２Ｃｌ２で３回抽出した。有機物を組み合わせて、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。クロマトグラフィ（ＳｉＯ２、ＣＨ２Ｃｌ２）によって、１．４８ｇの４−クロロ−６−（２，２，２−トリフルオロ−１−（３’−フルオロビフェニル−４−イル）エトキシ）ピリミジン−２−アミン（収率７３％）を得た。
【０３４５】
４−クロロ−６−（２，２，２−トリフルオロ−１−（３’−フルオロビフェニル−４−イル）エトキシ）ピリミジン−２−アミン（０．７５ｇ、１．８９ｍｍｏｌ）、Ｌ−ｐ−ボロノフェニルアラニン（０．４７ｇ、２．２６ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＰＰｈ３）２Ｃｌ２（７９ｍｇ、０．１１３ｍｍｏｌ）、Ｎａ２ＣＯ３（０．４４ｇ、４．１５ｍｍｏｌ）、アセトニトリル（１０ｍｌ）、及びＨ２Ｏ（１０ｍｌ）を２０ｍｌ容のマイクロ波リアクターで組み合わせて、マイクロ波で１５０℃で７分間加熱した。反応をＬＣＭＳ（Ｓｕｎｆｉｒｅ、中性）によって終了させた。混合物を濃縮し、ＮａＯＨ（２０ｍｌ、０．５Ｎ）に溶解して、濾過し、エーテルで３回抽出して、０℃に冷却した。０℃で、ｐＨが６．５になるまで、１．０ＮのＨＣｌをゆっくり添加した。混合物を０℃で３０分間撹拌し、生成物を濾過して、空気乾燥し、エーテル中の過剰な２．０ＮのＨＣｌで処理して、濃縮した後、ＣＨ２Ｃｌ２で粉砕して、１．１２ｇ、９９％（純度９５．５％）を得た。３８５ｍｇを調製ＨＰＬＣ（Ｓｕｎｆｉｒｅ、ＴＦＡ）で精製し、濃縮して、過剰な１．０ＮのＨＣｌ（水溶液）で処理し、少量に濃縮して、凍結乾燥させて、２４０ｍｇの表題の化合物を得た。Ｍ＋１＝５２７；１Ｈ  ＮＭＲδ（ＣＤ３ＯＤ）７．８６（ｄ，２Ｈ）、７．６４（ｓ，４Ｈ）、７．４９（ｄ，２Ｈ）、７．３６（ｍ，２Ｈ）、７．２８（ｍ，１Ｈ）、７．０２（ｍ，１Ｈ）、６．９５（ｓ，１Ｈ）、６．７５（ｑ，１Ｈ）、４．２６（ｔ，１Ｈ）、３．３２（ｍ，１Ｈ）、３．２１（ｍ，１Ｈ）。
【０３４６】
６．３９．（Ｓ）−２−アミノ−３−（４−（２−アミノ−６−（ベンジルチオ）ピリミジン−４−イル）フェニル）プロピオン酸の合成
【０３４７】
【化７６】
2010531889.tif 000078
【０３４８】
ベンジルメルカプタン（０．１４ｇ、１．１１ｍｍｏｌ）を、３０分間乾燥ＴＨＦ（１５ｍｌ）中のＮａＨ（鉱油中６０％、６７ｍｇ、１．６６ｍｍｏｌ）で処理した。２−アミノ−４，６−ジクロロピリミジン（０．２ｇ、１．２２ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を一晩撹拌した。混合物を塩化メチレンで希釈し、水、その後ブラインで洗浄して、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濃縮して、０．１１ｇの４−（ベンジルチオ）−６−クロロピリミジン−２−アミンを得た。
【０３４９】
４−（ベンジルチオ）−６−クロロピリミジン−２−アミン（０．１ｇ、０．３９７ｍｍｏｌ）、Ｌ−ｐ−ボロノフェニルアラニン（０．１ｇ、０．４７７ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＰＰｈ３）２Ｃｌ２（１７ｍｇ、０．０２４ｍｍｏｌ）、Ｎａ２ＣＯ３（９３ｍｇ、０．８７４ｍｍｏｌ）、ＭｅＣＮ（２．５ｍｌ）及び水（２．５ｍｌ）をマイクロ波で１５０℃で５分間加熱した。混合物を濃縮し、調製ＨＰＬＣで精製して、０．４２ｇの表題の化合物を得た。Ｍ＋１＝３８１；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ７．８（ｄ，２Ｈ）、７．３７（ｔ，４Ｈ）、７．２３（ｍ，２Ｈ）、７．１６（ｍ，１Ｈ）、６．９８（ｓ，１Ｈ）、４．４３（ｓ，２Ｈ）、４．２０（ｔ，１Ｈ）、３．２９（ｍ，１Ｈ）、３．１３（Ｍ，１Ｈ）。
【０３５０】
６．４０．（Ｓ）−２−アミノ−３−（４−（２−アミノ−６−（ナフタレン−２−イルメチルチオ）ピリミジン−４−イル）フェニル）プロピオン酸の合成
【０３５１】
【化７７】
2010531889.tif 000079
【０３５２】
２−メルカプトナフタレン（０．２ｇ、１．１４８）を、３０分間乾燥ＴＨＦ（１０ｍｌ）中のＮａＨ（鉱油中６０％、９２ｍｇ、２．３０ｍｍｏｌ）で処理した。２−アミノ−４，６−ジクロロピリミジン（０．２１ｇ、１．２６ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を一晩撹拌した。混合物を塩化メチレンで希釈し、水、その後ブラインで洗浄して、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濃縮して、０．１８ｇの４−クロロ−６−（ナフタレン−２−イルメチルチオ）ピリミジン−２−アミンを得た。
【０３５３】
４−クロロ−６−（ナフタレン−２−イルメチルチオ）ピリミジン−２−アミン（０．１ｇ、０．３３１ｍｍｏｌ）、Ｌ−ｐ−ボロノフェニルアラニン（８３ｍｇ、０．３９７ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＰＰｈ３）２Ｃｌ２（１４ｍｇ、０．０２０ｍｍｏｌ）、Ｎａ２ＣＯ３（７７ｍｇ、０．７２９ｍｍｏｌ）、ＭｅＣＮ（２．５ｍｌ）及び水（２．５ｍｌ）をマイクロ波で１５０℃で５分間加熱した。混合物を濃縮し、調製ＨＰＬＣで精製して、５７ｍｇの表題の化合物を得た。Ｍ＋１＝４３１；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ７．８５（ｓ，１Ｈ）、７．７９（ｄ，２Ｈ）、７．７２（ｄ，３Ｈ）、７．４６（ｄｄ，１Ｈ）、７．３５（ｍ，４Ｈ）、６．９５（ｓ，１Ｈ）、４．５８（ｓ，２Ｈ）、４．１７（ｍ，１Ｈ）、３．２６（ｍ，１Ｈ）、３．１１（ｍ，１Ｈ）。
【０３５４】
６．４１．（２Ｓ）−２−アミノ−３−（４−（２−アミノ−６−（１−（３，４−ジフルオロフェニル）−２，２，２−トリフルオロエトキシ）ピリミジン−４−イル）フェニル）プロピオン酸の合成
【０３５５】
【化７８】
2010531889.tif 000080
【０３５６】
３，５−ジフルオロフェニル−トリフルオロメチルケトンを、ＴＨＦ（５ｍｌ）中のＮａＢＨ４（０．１８ｇ、４．７６ｍｍｏｌ）で２時間処理した。混合物を水でクエンチして、塩化メチレンで（２回）抽出した。有機物を組み合わせて、シリカゲルで濾過し、濃縮して、０．４６ｇの１−（３，４−ジフルオロフェニル）−２，２，２−トリフルオロエタノールを得た。
【０３５７】
１−（３，４−ジフルオロフェニル）−２，２，２−トリフルオロエタノール（０．１ｇ、０．４７１ｍｍｏｌ）を、３０分間乾燥ＴＨＦ（３ｍｌ）中でＮａＨ（鉱油中６０％、３８ｍｇ、０．９４３ｍｍｏｌ）で処理した。２−アミノ−４，６−ジクロロピリミジン（７７ｍｇ、０．４７１ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を５０℃で６時間撹拌した。混合物を水でクエンチし、塩化メチレンで（２回）抽出した。有機物を組み合わせて、水、その後ブラインで洗浄して、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濃縮して、０．１４ｇの４−クロロ−６−（１−（３，４−ジフルオロフェニル）−２，２，２−トリフルオロエトキシ）−ピリミジン−２−アミンを得た。
【０３５８】
４−クロロ−６−（１−（３，４−ジフルオロフェニル）−２，２，２−トリフルオロエトキシ）ピリミジン−２−アミン（０．１４ｇ、０．４２１ｍｍｏｌ）、Ｌ−ｐ−ボロノフェニルアラニン（１１０ｍｇ、０．５０５ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＰＰｈ３）２Ｃｌ２（１８ｍｇ、０．０２５ｍｍｏｌ）、Ｎａ２ＣＯ３（９８ｍｇ、０．９２６ｍｍｏｌ）、ＭｅＣＮ（２．５ｍｌ）及び水（２．５ｍｌ）をマイクロ波で１５０℃で５分間加熱した。混合物を濃縮し、調製ＨＰＬＣで精製して、７４ｍｇの表題の化合物を得た。Ｍ＋１＝４６９；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ７．８３（ｄ，２Ｈ）、７．４７（ｍ，１Ｈ）、７．３８（ｍ，４Ｈ）、７．２８（ｍ，１Ｈ）、４．２１（ｔ，１Ｈ）、３．２９（ｍ，１Ｈ）、３．１５（ｍ，１Ｈ）。
【０３５９】
６．４２．（２Ｓ）−２−アミノ−３−（４−（２−アミノ−６−（２，２，２−トリフルオロ−１−（３’−メチルビフェニル−２−イル）エトキシ）ピリミジン−４−イル）フェニル）プロピオン酸の合成
【０３６０】
【化７９】
2010531889.tif 000081
【０３６１】
０℃のＴＨＦ（５０ｍｌ）中の４’−ブロモ−２，２，２−トリフルオロアセトフェノン（５．０ｇ、１９．７６ｍｍｏｌ）に、ＮａＢＨ４（１．５ｇ、３９．５２ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温に温め、１時間撹拌した。反応をＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２）によって終了させた。混合物をＨ２Ｏでクエンチし、ロータリーエバポレータで処理して、大部分のＴＨＦを取り除き、ＣＨ２Ｃｌ２で２回抽出した。有機物を組み合わせて、ブラインで洗浄し、少量に濃縮して、シリカゲルプラグで濾過した。シリカをＣＨ２Ｃｌ２で洗浄し、生成物を溶離して、得られた溶液を濃縮し、４．６５ｇの１−（４−ブロモフェニル）−２，２，２−トリフルオロエタノール（収率９２％）を得た。
【０３６２】
１−（４−ブロモフェニル）−２，２，２−トリフルオロエタノール（０．１３ｇ、０．５２５ｍｍｏｌ）、ｍ−トリルボロン酸（０．１ｇ、０．７３６ｍｍｏｌ）、Ｆｉｂｅｒｃａｔ（４．２８％のＰｄ、４７ｍｇ、０．０１５７ｍｍｏｌのＰｄ）、Ｋ２ＣＯ３（０．２２ｇ、１．５７６ｍｍｏｌ）、ＥｔＯＨ（３ｍｌ）、及びＨ２Ｏ（０．５ｍｌ）を組み合わせて、８０℃で４時間加熱した。反応をＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２）によって完全に示した。混合物を冷却し、濾過して、濃縮させ、ＣＨ２Ｃｌ２中でスラリー状にし、シリカゲル（ＣＨ２Ｃｌ２）でクロマトグラフィにかけ、０．１ｇの２，２，２−トリフルオロ−１−（３’−メチルビフェニル−２−イル）エタノール（収率：７２％）を得た。
【０３６３】
代替的に、１−（４−ブロモフェニル）−２，２，２−トリフルオロエタノール（０．９８ｇ、３．８６ｍｍｏｌ）、ｍ−トリルボロン酸（０．６３ｇ、４．６３ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＰＰｈ３）２Ｃｌ２（０．１６ｇ、０．２３２ｍｍｏｌのＰｄ）、Ｎａ２ＣＯ３（０．９０ｇ、８．４９ｍｍｏｌ）、ＡｃＣＮ（１０ｍｌ）、及びＨ２Ｏ（１０ｍｌ）を組み合わせて、マイクロ波で１５０℃で１０分間加熱した。反応をＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２）によって完全に示した。混合物を冷却し、濃縮させ、ＣＨ２Ｃｌ２中でスラリー状にし、濾過して、シリカゲル（ＣＨ２Ｃｌ２）でクロマトグラフィにかけ、０．８０ｇの２，２，２−トリフルオロ−１−（３’−メチルビフェニル−２−イル）エタノール（収率：７９％）を得た。
【０３６４】
代替的に、フッ化テトラブチルアンモニウム（ＴＨＦ１３μＬ中の１．０ＮのＴＢＡＦ、３．３ｍｇ、０．０１３ｍｍｏｌ）を、０℃のＴＨＦ（１．５ｍｌ）中の３−メチル−ビフェニル−２−カルボキシアルデヒド（０．２５ｇ、１．２７ｍｍｏｌ）と、トリフルオロメチルトリメチルシラン（０．２５ｇ、１．５３ｍｍｏｌ）との混合物に添加した。反応物を室温に温めて、４時間撹拌した。ＨＣｌ（３．０Ｎ、２．０ｍｌ）を添加し、混合物を３時間撹拌した。混合物を濃縮し、塩化メチレンに溶解し、シリカゲルで濾過し、濃縮して、０．１５ｇの２，２，２−トリフルオロ−１−（３’−メチルビフェニル−２−イル）エタノールを得た。
【０３６５】
２，２，２−トリフルオロ−１−（３’−メチルビフェニル−２−イル）エタノール（０．１５ｇ、０．５６３ｍｍｏｌ）を、３０分間乾燥ＴＨＦ（５ｍｌ）中でＮａＨ（鉱油中６０％、４５ｍｇ、１．１２ｍｍｏｌ）で処理した。２−アミノ−４，６−ジクロロピリミジン（９２ｍｇ、０．５６３３ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を５０℃で６時間撹拌した。混合物を水でクエンチし、塩化メチレンで（２回）抽出した。有機物を組み合わせて、水、その後ブラインで洗浄して、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濃縮して、０．１６ｇの４−クロロ−６−（２，２，２−トリフルオロ−１−（３’−メチルビフェニル−２−イル）エトキシ）ピリミジン−２−アミンを得た。
【０３６６】
４−クロロ−６−（２，２，２−トリフルオロ−１−（３’−メチルビフェニル−２−イル）エトキシ）ピリミジン−２−アミン（０．１６ｇ、０．４０６ｍｍｏｌ）、Ｌ−ｐ−ボロノフェニルアラニン（１０ｍｇ、０．４８７ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＰＰｈ３）２Ｃｌ２（１７ｍｇ、０．０２４ｍｍｏｌ）、Ｎａ２ＣＯ３（９５ｍｇ、０．８９４ｍｍｏｌ）、ＭｅＣＮ（２．５ｍｌ）及び水（２．５ｍｌ）をマイクロ波で１５０℃で５分間加熱した。混合物を濃縮し、調製ＨＰＬＣで精製して、１０５ｍｇの表題の化合物を得た。Ｍ＋１＝５２３；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ７．８５（ｄ，２Ｈ）、７．７０（ｄ，１Ｈ）、７．４４（ｍ，４Ｈ）、７．３１（ｔ，１Ｈ）、７．２１（ｍ，２Ｈ）、７．１０（ｍ，２Ｈ）、６．８７（ｑ，１Ｈ）、６．８４（ｓ，１Ｈ）、４．２５（ｔ，１Ｈ）、３．３０（ｍ，１Ｈ）、３．１８（ｍ，１Ｈ）。
【０３６７】
６．４３．（Ｓ）−２−アミノ−３−（４−（５−（３−（シクロペンチルオキシ）−４−メトキシベンジルアミノ）ピリジン−３−イル）フェニル）プロピオン酸の合成
【０３６８】
【化８０】
2010531889.tif 000082
【０３６９】
トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（２４５ｍｇ、１．１６ｍｍｏｌ）を、５−ブロモ−ピリジン−３−アミン（１００ｍｇ、０．５７ｍｍｏｌ）及び３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシ−ベンズアルデヒド（１２７ｍｇ、０．５７ｍｍｏｌ）の１，２−ジクロロエタン（ＤＣＥ）溶液１０ｍｌに添加し、ＨＯＡｃ（６６μＬ、２当量、１．１６ｍｍｏｌ）を添加して、混合物を室温で一晩撹拌した後、ＤＣＥ  １５ｍｌを添加した。有機相を水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を減圧下で取り除き、２００ｍｇの粗５−ブロモ−Ｎ−（３−（シクロペンチルオキシ）−４−メトキシベンジル）ピリジン−３−アミンを得て、それをさらに精製することなく次の工程に用いた。
【０３７０】
５−ブロモ−Ｎ−（３−（シクロペンチルオキシ）−４−メトキシベンジル）ピリジン−３−アミン（４０ｍｇ、０．１０６ｍｍｏｌ）、４−ボロノ−Ｌ−フェニルアラニン（２２ｍｇ、０．１０６ｍｍｏｌ）、及びアセトニトリル２ｍｌをマイクロ波用のエムリスプロセスバイアル（２ｍｌ〜５ｍｌ）に入れた。炭酸ナトリウム水溶液（２ｍｌ、１Ｍ）、その後１０モル％のジクロロビス（トリフェニルホスフィン）−パラジウム（ＩＩ）を上記溶液に添加した。反応容器に封をし、マイクロ波で１８０℃に１０分間加熱した。冷却後、乾燥するまで反応混合物を蒸発させた。残渣をメタノール２．５ｍｌに溶解し、調製ＬＣで精製して、２０ｍｇの（Ｓ）−２−アミノ−３−（４−（５−３−（シクロペンチルオキシ−４−メトキシ−ベンジルアミノ）ピリジン−３−イル）フェニル）−プロピオン酸を得た。ＮＭＲ：１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ１．５９（ｍ，２Ｈ）、１．７（ｍ，６Ｈ）、３．１７（ｍ，１Ｈ）、３．３（ｍ，１Ｈ）、３．７５（ｓ，３Ｈ）、４．２（ｄｄ，１Ｈ）、４．３９（ｓ，２Ｈ）、４．７（ｍ，１Ｈ）、６．９（ｍ，３Ｈ）、７．４（ｄ，２Ｈ）、７．６（ｄ，２Ｈ）、７．７（ｓ，１Ｈ）、７．９（ｓ，１Ｈ）、８．１５（ｓ，１Ｈ）；分析ＨＰＬＣ：ＲＴ２．６９；Ｍ＋１：４６２（ＲＴ：１．２８５）。
【０３７１】
６．４４．  ２−アミノ−３−（３−（４−アミノ−６−（（Ｒ）−１−（ナフタレン−２−イル）エチルアミノ）−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル）プロピオン酸の合成
【０３７２】
【化８１】
2010531889.tif 000083
【０３７３】
２−（ジフェニルメチレン−アミノ）酢酸ｔｅｒｔ−ブチル（４００ｍｇ、１．３５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（２５ｍｌ）に、ＬＤＡ溶液（ＴＨＦ中１．８Ｍ、２当量、２．７ｍｍｏｌ、Aldrich製の未使用のボトル）を−７８℃で５分かけて添加し、得られた混合物を２０分間撹拌した。２−（３−（ブロモメチル）フェニル）−５，５−ジメチル−１，３，２−ジオキサボリナン（４６０ｍｇ、１．２当量、１．６２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（１０ｍｌ）を５分かけて反応混合物に滴下した。反応を同じ温度（−７８℃）で３０分間続けて、室温で３時間置いた。反応物を飽和ＮＨ４Ｃｌでクエンチした後、水（３０ｍｌ）を添加して、ＥｔＯＡｃ（２×４０ｍｌ）で抽出した。有機画分を組み合わせて、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。それから、溶媒を減圧下で濃縮し、粗３−（３−（５，５−ジメチル−１，３，２−ジオキサボリナン−２−イル）フェニル）−２−（ジフェニルメチレンアミノ）プロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチルを、カラムクロマトグラフィによって精製し、半固体として生成物を得た。
【０３７４】
（Ｒ）−６−クロロ−Ｎ２−（１−（ナフタレン−２−イル）エチル）−１，３，５−トリアジン−２，４−ジアミン（１００ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）、３−（３−（５，５−ジメチル−１，３，２−ジオキサボリナン−２−イル）フェニル）−２−（ジフェニルメチレンアミノ）プロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチル（２４８ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ、１．５当量）、及びアセトニトリル６ｍｌをマイクロ波用のエムリスプロセスバイアル（２０ｍｌ）に入れ、さらに炭酸ナトリウム水溶液（１Ｍ）６ｍｌ、その後１０モル％のジクロロビス（トリフェニルホスフィン）−パラジウム（ＩＩ）を上記溶液に添加した。反応容器に封をし、マイクロ波で１９０℃に１０分間加熱した。冷却後、乾燥するまで反応混合物を蒸発させた。残渣をＴＨＦ  １０ｍｌに溶解し、それに５ＮのＨＣｌ（５ｍｌ）を添加した。ベンゾホン及びｔｅｒｔ−ブチル基を脱保護するために、混合物を２時間還流させた。得られた反応混合物を濃縮し、メタノール（８ｍｌ）に溶解し、調製ＬＣで精製して、１５ｍｇの２−アミノ−３−（４−（４−アミノ−６−（（Ｒ）−１−（ナフタレン−２−イル）エチルアミノ）−１，３，５−トリジン−２−イル）フェニル）プロピオン酸を得た。ＮＭＲ：１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ１．８５（ｄ，３Ｈ）、３．２〜３．４５（ｍ，２Ｈ）、４．３７（ｍ，１Ｈ）、５．５（ｍ，１Ｈ）、７．４（ｍ，１Ｈ）、７．６（ｍ，４Ｈ）、７．９（ｍ，４Ｈ）、８．１８（ｍ，２Ｈ）、分析ＨＰＬＣ：ＲＴ２．７９、Ｍ＋１：４２９（ＲＴ：１．３５）。
【０３７５】
６．４５．  ２−アミノ−３−（４−（４−アミノ−６−（（Ｒ）−１−（ナフタレン−２−イル）エチルアミノ）−１，３，５−トリアジン−２−イル）−２−フルオロフェニル）プロピオン酸の合成
【０３７６】
【化８２】
2010531889.tif 000084
【０３７７】
２−（ジフェニルメチレン−アミノ）酢酸ｔｅｒｔ−ブチル（１．１ｇ、３．７３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（３０ｍｌ）に、ＬＤＡ溶液（ＴＨＦ中１．８Ｍ、１当量、３．７３ｍｍｏｌ、Aldrich製の未使用のボトル）を−７８℃で５分かけて添加し、得られた混合物を２０分間撹拌した。４−ブロモ−１−（ブロモメチル）−２−フルオロベンゼン（１ｇ、３．７４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（１０ｍｌ）を５分かけて反応混合物に滴下した。反応を−７８℃で３０分間続けた後、室温で３時間置いた。反応物を飽和ＮＨ４Ｃｌでクエンチした後、水（３０ｍｌ）を添加した。生成物をＥｔＯＡｃ（２×４０ｍｌ）で抽出し、有機画分を組み合わせて、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を減圧下で濃縮し、粗３−（４−ブロモ−２−フルオロフェニル）−２−（ジフェニルメチレンアミノ）−プロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチルを、カラムクロマトグラフィによって精製した。生成物を固体として得た。
【０３７８】
３−（４−ブロモ−２−フルオロフェニル）−２−（ジフェニルメチレンアミノ）−プロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチル（６００ｍｇ、１．２４ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ｄｂａ）２（７１ｍｇ、０．１２４ｍｍｏｌ）、ＰＣｙ３（３５ｍｇ、０．１２４ｍｍｏｌ）、４，４，４’，４’，５，５，５’，５’−オクタメチル−２，２’−ビ（１，３，２−ジオキサボロラン（３４６ｍｇ、１．１当量、１．３６ｍｍｏｌ）及びＫＯＡｃ（１８２ｍｇ、１．５当量、１．８６ｍｍｏｌ）と、ＤＭＦ  ２０ｍｌとをマイクロ波用のエムリスプロセスバイアル（２０ｍｌ）に入れた。反応容器に封をし、マイクロ波によって１６０℃に２０分間加熱した。冷却後、乾燥するまで減圧下で反応混合物を蒸発させた。残渣をＨ２Ｏ（３０ｍｌ）に溶解し、ＥｔＯＡｃ（２×４０ｍｌ）で抽出し、調製ＬＣで精製して、２２０ｍｇの２−（ジフェニルメチレンアミノ）−３−（２−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニル）プロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た。
【０３７９】
（Ｒ）−６−クロロ−Ｎ２−（１−（ナフタレン−２−イル）エチル）−１，３，５−トリアジン−２，４−ジアミン（６７ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）、２−（ジフェニルメチレンアミノ）−３−（２−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニル）プロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１２０ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）、及びアセトニトリル２ｍｌをマイクロ波用のエムリスプロセスバイアル（５ｍｌ）に入れた。炭酸ナトリウム水溶液（２ｍｌ、１Ｍ）、その後１０モル％のジクロロビス（トリフェニルホスフィン）−パラジウム（ＩＩ）を上記溶液に添加した。反応容器に封をし、マイクロ波によって１９０℃に１０分間加熱した。冷却後、乾燥するまで反応混合物を蒸発させた。残渣をＴＨＦ  １０ｍｌに溶解し、それに５ＮのＨＣｌ（２ｍｌ）を添加した。混合物を２時間還流させた（ベンゾホン及びｔｅｒｔ−ブチル基の脱保護）。２つの基の脱保護後、混合物を濃縮し、メタノール（５ｍｌ）に溶解し、調製ＬＣで精製して、１０ｍｇの２−アミノ−３−（４−（４−アミノ−６−（（Ｒ）−１−（ナフタレン−２−イル）エチルアミノ）−１，３，５−トリジン−２−イル）−２−フルオロフェニル）プロピオン酸を得た。ＮＭＲ：１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ１．６（ｄ，３Ｈ）、３．０７（ｍ，１Ｈ）、３．４５（ｍ，１Ｈ）、３．８（ｍ，１Ｈ）、５．４５（ｍ，１Ｈ）、７．４（ｍ，４Ｈ）、７．６（ｍ，１Ｈ）、７．８（ｍ，４Ｈ）、８．０８（ｍ，１Ｈ）、分析ＨＰＬＣ：ＲＴ２．８８、Ｍ＋１：４４７（ＲＴ：１．４４）。
【０３８０】
６．４６．（２Ｓ）−２−アミノ−３−（４−（４−アミノ−６−（１−（アダマンチル）エチルアミノ）−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル）プロピオン酸の合成
【０３８１】
【化８３】
2010531889.tif 000085
【０３８２】
アダマンタン（adamantine）アミン（１当量）、２−アミノ−４，６−ジクロロ−［１，３，５］トリアジン（１当量）及びジイソプロピルエチルアミン（５当量、Aldrich）の無水１，４−ジオキサン溶液を１３０℃で３時間還流させた。反応終了後、ジオキサンを減圧下で取り除いた。それから、反応物を室温に冷却し、水を添加して、生成物をジクロロメタン（２×４０ｍｌ）で抽出した。組み合わせた有機溶液をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮して、生成物を得て、精製することなく次の工程に用いた。
【０３８３】
アダマンタントリジン塩化物（２００ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）、４−ボロノ−Ｌ−フェニルアラニン（１３５ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）、及びアセトニトリル５ｍｌをマイクロ波用のエムリスプロセスバイアル（２０ｍｌ）に入れた。炭酸ナトリウム水溶液（５ｍｌ、１Ｍ）、その後５モル％のジクロロビス（トリフェニルホスフィン）−パラジウム（ＩＩ）を上記溶液に添加した。反応容器に封をし、マイクロ波で１９０℃に２０分間加熱した。冷却後、乾燥するまで反応混合物を蒸発させた。残渣をメタノール４ｍｌに溶解し、調製ＬＣで精製して、６０ｍｇ（収率２１％）の結合生成物を得た。ＮＭＲ：１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ１．２２（ｍ，３Ｈ）、１．６〜１．８（ｍ，１２Ｈ）、２．０１（ｄ，３Ｈ）、３．２５〜３．４２（ｍ，２Ｈ）、４．０（ｍ，１Ｈ）、４．４０（ｍ，１Ｈ）、７．６（ｄ，２Ｈ）、８．２（ｄ，２Ｈ）、分析ＨＰＬＣ：ＲＴ３．１１、Ｍ＋１：４３７（ＲＴ：１．７６）。
【０３８４】
６．４７．（２Ｓ）−２−アミノ−３−（４−（４−アミノ−６−（１−（（アダマンチル）エチルアミノ）−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル）プロピオン酸の代替合成
シアノグアニジン（１当量）、（Ｓ）−２−アミノ−３−（４−シアノフェニルプロピオン酸（１当量）及びカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（３．５当量、Aldrich）の乾燥ｎ−ＢｕＯＨ溶液を形成することによって、アダマンタン−（２−イル）エチルシアノグアニジンを調製し、これを封管中で１６０℃で２日間激しく還流させた。反応終了後、混合物を室温に冷却させ、反応物を水でクエンチした。溶媒を減圧下で取り除いた。再び、室温に冷却させた後、１ＮのＮａＯＨを添加することによって、反応混合物のｐＨを１２〜１４にした。それから、エーテル：ＥｔＯＡｃ（９：１、２×１００ｍｌ）で抽出しながら不純物を取り除いた。水溶液を０℃に冷却した後、１ＮのＨＣｌを添加し、ｐＨを７に調節した。淡黄色の生成物をＨ２Ｏ中でゆっくりと粉砕し、混合物を３０分間、冷却装置に置き、固体を濾過によって９２％の純度で得た。化合物をＭｅＯＨから結晶化し、白色固体（純度９８％超、収率４８％〜７８％）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ１．０（ｄ，３Ｈ）、１．４５〜１．６（ｍ，６Ｈ）、４．６２〜４．８（ｍ，４Ｈ）、２．０（ｍ，２Ｈ）、３．３（ｍ，１Ｈ）、３．５（ｍ，１Ｈ）；分析ＨＰＬＣ：ＲＴ２．６９；Ｍ＋１：４６２（ＲＴ：１．２８５）。
【０３８５】
スキーム６で示された方法を用いて、表題の化合物をアダマンタン−（２−イル）エチルシアノグアニジンから調製した。
【０３８６】
６．４８．（Ｓ）−２−アミノ−３−（４−（５−フルオロ−４−（（Ｒ）−１−（ナフタレン−２−イル）エチルアミノ）ピリミジン−２−イル）フェニル）プロピオン酸の合成
【０３８７】
【化８４】
2010531889.tif 000086
【０３８８】
（Ｒ）−（＋）−１−（２−ナフチル）エチルアミン（１０２．６ｍｇ、０．５９９ｍｍｏｌ）と、２，４−ジクロロ−５−フルオロピリミジン（１００ｍｇ、０．５９９ｍｍｏｌ）と、炭酸セシウム（３９０ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）との混合物を１０ｍｌ容のマイクロ波バイアル中の１，４−ジオキサン（３ｍｌ）及びＨ２Ｏ（３ｍｌ）に溶解した。混合物をマイクロ波リアクター中で８０℃で１０分間撹拌した。残渣をＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍｌ）に溶解し、水（２０ｍｌ）、ブライン（２０ｍｌ）で洗浄して、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮して、粗中間体２−クロロ−５−フルオロ−ピリミジン−４−イル）−（１−ナフタレン−２−イル−エチル）−アミンを得た。
【０３８９】
それから、粗中間体（２５０ｍｇ、０．８３ｍｍｏｌ）を、２０ｍｌ容のマイクロ波バイアル中のＭｅＣＮ  ６．０ｍｌ及びＨ２Ｏ  ６ｍｌに溶解した。この溶液に、Ｌ−ｐ−ボロノ−フェニルアラニン（１７３．６ｍｇ、０．８３ｍｍｏｌ）、炭酸ナトリウム（１７３．６ｍｇ、１．６６ｍｍｏｌ）及び触媒量のジクロロビス（トリフェニルホスフィン）−パラジウム（ＩＩ）（１１．６ｍｇ、０．０１６６ｍｍｏｌ）を添加した。それから、反応バイアルに封をし、マイクロ波リアクターで１５０℃で７分間撹拌した。それから内容物を濾過し、濾液を濃縮させ、ＭｅＯＨ及びＨ２Ｏ（１：１）に溶解し、溶媒系としてＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ／ＴＦＡを用いて、調製ＨＰＬＣによって精製した。組み合わせた純度の高い画分を真空下で蒸発させ、さらに凍結乾燥器で乾燥して、１５４ｍｇの２−アミノ−３−｛４−［５−フルオロ−４−（１−ナフタレン−２−イル−エチルアミノ）−ピリミジン−２−イル］−フェニル｝−プロピオン酸を得た。ＮＭＲ：１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ１．８（ｄ，３Ｈ）３．２〜３．４（ｍ，２Ｈ）、４．３５（ｍ，１Ｈ）、５．７（ｑ，１Ｈ）、７．５（ｍ，４Ｈ）、７．６（ｄ，１Ｈ）、７．８〜７．９（ｍ，４Ｈ）、８．１（ｄ，２Ｈ）、８．３（ｄ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ：Ｍ＋１＝４３１。
【０３９０】
６．４９．（Ｓ）−２−アミノ−３−（４−（２−アミノ−６−（４−（トリフルオロメチル）−ベンジルアミノ）−ピリミジン−４−イル）フェニル）プロピオン酸の合成
【０３９１】
【化８５】
2010531889.tif 000087
【０３９２】
トリフルオロメチルベンジルアミン（１０６．８ｍｇ、０．６１０ｍｍｏｌ）と、２−アミノ−４，６−ジクロロピリミジン（１００ｍｇ、０．６１０ｍｍｏｌ）と、炭酸セシウム（２１７ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）との混合物を２０ｍｌ容のマイクロ波バイアル中の１，４−ジオキサン（６ｍｌ）及びＨ２Ｏ（６ｍｌ）に溶解した。混合物をマイクロ波リアクター中で２１０℃で２５分間撹拌した。それから、溶媒を取り除いた。残渣をＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍｌ）に溶解し、水（２０ｍｌ）、ブライン（２０ｍｌ）で洗浄して、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮して、粗中間体６−クロロ−Ｎ−４’−（トリフルオロメチル−ベンジル）−ピリミジン（pryrimidine）−２，４−ジアミンを得た。
【０３９３】
それから、粗中間体（１５０ｍｇ、０．４９７ｍｍｏｌ）を、１０ｍｌ容のマイクロ波バイアル中のＭｅＣＮ  ３．０ｍｌ及びＨ２Ｏ  ３ｍｌに溶解した。この溶液に、Ｌ−ｐ−ボロノ−フェニルアラニン（１０４ｍｇ、０．４９７ｍｍｏｌ）、炭酸ナトリウム（１５０ｍｇ、０．９９４ｍｍｏｌ）及び触媒量のジクロロビス（トリフェニルホスフィン）−パラジウム（ＩＩ）（６．９ｍｇ、０．００９９４ｍｍｏｌ）を添加した。それから、反応バイアルに封をし、マイクロ波リアクターで１５０℃で５分間撹拌した。内容物を濾過し、濾液を濃縮させ、ＭｅＯＨ及びＨ２Ｏ（１：１）に溶解し、ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ／ＴＦＡ溶媒系を用いて、調製ＨＰＬＣによって精製した。組み合わせた純度の高い画分を真空下で蒸発させ、さらに凍結乾燥器で乾燥して、２−アミノ−３−｛４−［２−アミノ−６−（４−トリフルオロメチル−ベンジルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−フェニル｝−プロピオン酸を得た。ＮＭＲ：１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ３．１〜３．３（ｍ，２Ｈ）、４．２（ｔ，１Ｈ）、４．７（ｓ，２Ｈ）、６．３（ｓ，１Ｈ）、７．４〜７．５（ｍ，４Ｈ）、７．６（ｄ，２Ｈ）、７．７（ｄ，２Ｈ）。ＬＣＭＳ：Ｍ＋１＝４３２。
【０３９４】
６．５０．  ２−アミノ−３−（５−（５−フェニルチオフェン−２−イル）−１Ｈ−インドール−３−イル）プロピオン酸の合成
【０３９５】
【化８６】
2010531889.tif 000088
【０３９６】
５−フェニル−チオフェン−２−ボロン酸（０．０１６ｇ、０．０７８ｍｍｏｌ）、Ｎａ２ＣＯ３（０．０１５ｇ、０．１４２ｍｍｏｌ）、アセトニトリル（１．５ｍｌ）／水（１．５ｍｌ）、及びジクロロビス（トリフェニルホスフィン）−パラジウム（３ｍｇ、０．００３ｍｍｏｌ）の入った５ｍｌ容のマイクロ波バイアルに、２−アミノ−３−（５−ブロモ−１Ｈ−インドール−３−イル）−プロピオン酸（０．０２０ｇ、０．０７１ｍｍｏｌ）を添加した。マイクロ波バイアルに蓋をし、マイクロ波照射下で１５０℃で５分間撹拌した。反応混合物を冷却し、シリンジフィルタで濾過した後、ＹＭＣ−ＰＡＣＫ  ＯＤＳ  １００×３０ｍｍのＩＤカラム（ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ／ＴＦＡ溶媒系）を用いて、逆相調製ＨＰＬＣによって単離した。純度の高い画分を真空下で濃縮した。それから、生成物を水５ｍｌで懸濁し、凍結乾燥して、５ｍｇの純生成物２−アミノ−３−［５−（５−フェニル−チオフェン−２−イル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオン酸を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：３．２１〜３．２６（ｍ，２Ｈ）、４．２５（ｑ，１Ｈ）、７．１５〜７．３５（ｍ，８Ｈ）、７．５８（ｄ，２Ｈ）、７．８２（ｄ，１Ｈ）。
【０３９７】
６．５１．  （Ｓ）−２−アミノ−３−（４−（４−（４−フェノキシフェニル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）フェニル）プロピオン酸の合成
【０３９８】
【化８７】
2010531889.tif 000089
【０３９９】
Ｈ２Ｏ：ジオキサン（５：１）中の１−エチニル−４−フェノキシ−ベンゼン（１２６ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）と、（Ｓ）−３−（４−アジド−フェニル）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−プロピオン酸（２００ｍｇ、０．６５ｍｇ）の混合物を封管中で１００℃で一晩加熱した。反応終了後、３ＮのＨＣｌ（５ｍｌ）を添加して、混合物を５０℃で２時間撹拌した。溶媒の除去によって、粗生成物が得られ、それをＭｅＯＨに溶解し、調製ＨＰＬＣによって精製して、４５ｍｇの所望の生成物（収率：２９％）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：d（ｐｐｍ）３．２（ｍ，１Ｈ）、３．４（ｍ，１Ｈ）、４．３（ｍ，１Ｈ）、６．９（ｄ，２Ｈ）、７．０（ｄ，２Ｈ）、７．２（ｍ，１Ｈ）、７．３（ｄ，２Ｈ）、７．４〜７．５５（ｍ，６Ｈ）、８．０（ｓ，１Ｈ）。
【０４００】
６．５２．  （Ｓ）−２−アミノ−３−（４−（４−（４−（チオフェン−２−カルボキサミド）フェニル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）フェニル）プロピオン酸及び（Ｓ）−２−アミノ−３−（４−（５−（４−（チオフェン−２−カルボキサミド）フェニル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）フェニル）プロピオン酸の合成
【０４０１】
【化８８】
2010531889.tif 000090
【０４０２】
５ｍｌのＨ２Ｏ：ジオキサン（５：１）中のチオフェン−２−カルボン酸（４−エチル−フェニル）アミド（１１７ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）と、（Ｓ）−３−（４−アジド−フェニル）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−プロピオン酸（１５０ｍｇ、０．４９ｍｇ）の混合物を封管中で１００℃で一晩加熱した。反応終了後、３ＮのＨＣｌ（５ｍｌ）を添加して、混合物を５０℃で２時間撹拌した。溶媒の除去によって、粗生成物が得られ、それをＭｅＯＨに溶解し、調製ＨＰＬＣによって精製した。ＬＣＭＳ（保持時間）及びＮＭＲに従って、２つの位置異性体（全収率：７０ｍｇ、６６％）を得た。主な生成物は（Ｓ）−２−アミノ−３−（４−（４−（４−（チオフェン−２−カルボキサミド）フェニル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）フェニル）プロピオン酸である。ＮＭＲ：１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ３．２（ｍ，１Ｈ）、３．４（ｍ，１Ｈ）、４．３（ｍ，１Ｈ）、７．１５（ｍ，１Ｈ）、７．３（ｄ，２Ｈ）、７．６（ｍ，４Ｈ）、７．０（ｍ，３Ｈ）、７．９５（ｄ，１Ｈ）、８．０（ｓ，１Ｈ）。少量の生成物は（Ｓ）−２−アミノ−３−（４−（５−（４−（チオフェン−２−カルボキサミド）フェニル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）フェニル）プロピオン酸である。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ３．２（ｍ，１Ｈ）、３．４（ｍ，１Ｈ）、４．３５（ｍ，１Ｈ）、７．２（ｍ，１Ｈ）、７．３（ｄ，２Ｈ）、７．５〜７．６（ｍ，４Ｈ）、７．７５（ｍ，３Ｈ）、７．９５（ｄ，１Ｈ）、８．０５（ｓ，１Ｈ）。
【０４０３】
６．５３．（Ｓ）−２−アミノ−３−（４−（２−アミノ−６−（フェニルエチニル）ピリミジン−４−イル）フェニル）プロピオン酸の合成
【０４０４】
【化８９】
2010531889.tif 000091
【０４０５】
２−アミノ−４，６−ジクロロピリミジン（０．１８０ｇ、１．１ｍｍｏｌ）、トリメチル−フェニルエチニル−スタンナン（０．２６４ｇ、１ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（２０ｍｌ）中に溶解し、混合物を６５℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳによって反応の終了が示された。溶媒を取り除き、残渣を以下の工程で直接用いた。
【０４０６】
粗中間体（０．４２ｇ）、Ｌ−ｐ−ボロノ−フェニルアラニン（０．２１０ｇ、１ｍｍｏｌ）、炭酸ナトリウム（０．２１０ｇ、２ｍｍｏｌ）、及びジクロロビス（トリフェニルホスフィン）−パラジウム（ＩＩ）（２５ｍｇ、０．０３６ｍｍｏｌ）を、１０ｍｌ容のマイクロ波バイアル中のＭｅＣＮ（３ｍｌ）及びＨ２Ｏ（３ｍｌ）の混合物に溶解した。バイアルに封をし、１５０℃で６分間マイクロ波リアクターで撹拌した。混合物を濾過し、濾液を濃縮した。溶媒系としてＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ／ＴＦＡを用いて、調製ＨＰＬＣによって残渣を精製し、ＴＦＡ塩として（Ｓ）−２−アミノ−３−［４−（２−アミノ−６−フェニルエチニル−ピリミジン−４−イル（−フェニル］−プロピオン酸を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：d（ｐｐｍ）３．２０〜３．４２（ｍ，２Ｈ）、４．３１（ｍ，１Ｈ）、７．４０〜７．５１（ｍ，６Ｈ）、７．６２（ｄ，２Ｈ）、８．１８（ｄ，２Ｈ）。
【０４０７】
６．５４．付加的な化合物
当該技術分野で既知及び／又は本明細書に記載の方法を用いて調製した付加的な化合物は以下に挙げられる。
【０４０８】
【表１】
2010531889.tif 000092
2010531889.tif 000093
2010531889.tif 000094
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2010531889.tif 000104
2010531889.tif 000105
【０４０９】
６．５５．ｉｎ  ｖｉｔｒｏ阻害アッセイ
ヒトＴＰＨ１、ＴＰＨ２、チロシンヒドロキシラーゼ（ＴＨ）及びフェニルアラニンヒドロキシラーゼ（ＰＨ）をそれぞれ以下のアクセッション番号を有する遺伝子を用いて全て生成した：Ｘ５２８３６、ＡＹ０９８９１４、Ｘ０５２９０、及びＵ４９８９７。
【０４１０】
ヒトＴＰＨ１の全長コード配列を細菌発現ベクターｐＥＴ２４（Novagen, Madison, WI, USA）にクローン化した。発現ベクターを内在するＢＬ２１（ＤＥ３）細胞の単一コロニーが、Ｌブロス（ＬＢ）−カナマイシン培地５０ｍｌに接種され、振盪しながら３７℃で終夜培養させた。それから、培地の半分（２５ｍｌ）を、１．５％酵母抽出物、２％ Ｂａｃｔｏ  Ｐｅｐｔｏｎｅ、０．１ｍＭのトリプトファン、０．１ｍＭの硫酸第一鉄アンモニウム、及び５０ｍＭのリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）を含有する３Ｌの培地に移し、酸素を４０％で供給し、ｐＨを７．０に維持して、グルコースを添加しながら３７℃でＯＤ６００が６になるまで培養した。２５℃で１０時間にわたって１５％Ｄ−ラクトースでＴＰＨ１の発現を誘導した。細胞を遠沈して、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で１回洗浄した。
【０４１１】
プテリンとの結合に基づき、アフィニティクロマトグラフィによって、ＴＰＨ１を精製した。細胞ペレットを、５０ｍＭのトリス−Ｃｌ（ｐＨ７．６）、０．５ＭのＮａＣｌ、０．１％Ｔｗｅｅｎ−２０、２ｍＭのＥＤＴＡ、５ｍＭのＤＴＴ、プロテアーゼ阻害混合物（Roche Applied Science, Indianapolis, IN, USA）、及び１ｍＭのフッ化フェニルメタンスルホニル（ＰＭＳＦ）を含有する溶解緩衝液（１００ｍｌ／２０ｇ）に再懸濁し、細胞をマイクロフルイダイザー(microfluidizer)で溶解した。溶解物を遠心分離し、５０ｍＭのトリス（ｐＨ８．０）、２ＭのＮａＣｌ、０．１％Ｔｗｅｅｎ−２０、０．５ｍＭのＥＤＴＡ、及び２ｍＭのＤＴＴを含有する緩衝液で平衡化したプテリン結合セファロース４Ｂカラムに上清を充填した。カラムをこの緩衝液５０ｍｌで洗浄し、３０ｍＭのＮａＨＣＯ３（ｐＨ１０．５）、０．５ＭのＮａＣｌ、０．１％Ｔｗｅｅｎ−２０、０．５ｍＭのＥＤＴＡ、２ｍＭのＤＴＴ、及び１０％グリセロールを含有する緩衝液でＴＰＨ１を溶離した。溶離した酵素を、２００ｍＭのＫＨ２ＰＯ４（ｐＨ７．０）、０．５ＭのＮａＣｌ、２０ｍＭのＤＴＴ、０．５ｍＭのＥＤＴＡ、及び１０％グリセロールで迅速に中和して、−８０℃で保存した。
【０４１２】
ヒトのトリプトファンヒドロキシラーゼＩＩ型（ＴＰＨ２）、チロシンヒドロキシラーゼ（ＴＨ）及びフェニルアラニンヒドロキシラーゼ（ＰＡＨ）は、増殖中にＴＨに対してはチロシン及びＰＡＨに対してはフェニルアラニンを細胞に供給したことを除いて本質的に同じ方法で発現させ精製した。
【０４１３】
５０ｍＭの４−モルホリンプロパンスルホン酸（ＭＯＰＳ）（ｐＨ７．０）、６０μＭのトリプトファン、１００ｍＭの硫酸アンモニウム、１００μＭの硫酸第一鉄アンモニウム、０．５ｍＭのトリス（２−カルボキシエチル）ホスフィン（ＴＣＥＰ）、０．３ｍＭの６−メチルテトラヒドロプテリン、０．０５ｍｇ／ｍｌのカタラーゼ、及び０．９ｍＭのＤＴＴを含有する反応混合物でＴＰＨ１活性及びＴＰＨ２活性を測定した。ＴＰＨ１を７．５ｎＭの最終濃度まで添加することによって、反応を開始させた。３６０ｎｍ（励起波長＝３００ｎｍ）での蛍光の変化に従って、反応の開始速度を求めた。様々な化合物濃度でのこれらの活性を測定することによって、ＴＰＨ１及びＴＰＨ２の阻害を求め、式：
【０４１４】
【数１】
2010531889.tif 000106
【０４１５】
（式中、ｖは所定の化合物濃度Ｃでの開始速度であり、Ｃが０の場合ｖ０はｖであり、ｂはバックグラウンドシグナルであり、Ｄはおよそ１に等しいHill勾配であり、Ｉｃ５０は最大の酵素活性の半分を阻害する化合物の濃度である）を用いて、所定の化合物の効力を算出した。
【０４１６】
ヒトのＴＨ活性及びＰＡＨ活性は、それぞれＬ−［３，４−３Ｈ］−チロシン及びＬ−［４−３Ｈ］−フェニルアラニンを用いて生成された３Ｈ２Ｏの量を測定することによって求めた。初めに、酵素（１００ｎＭ）を０．１ｍＭのその基質で約１０分間インキュベートして、５０ｍＭのＭＯＰＳ（ｐＨ７．２）、１００ｍＭの硫酸アンモニウム、０．０５％Ｔｗｅｅｎ−２０、１．５ｍＭのＴＣＥＰ、１００μＭの硫酸第一鉄アンモニウム、０．１ｍＭのチロシン又はフェニルアラニン、０．２ｍＭの６−メチルテトラヒドロプテリン、０．０５ｍｇ／ｍｌのカタラーゼ、及び２ｍＭのＤＴＴを含有する反応混合物に添加した。反応を１０分〜１５分間進行させ、２ＭのＨＣｌを添加することによって停止させた。それから、混合物を活性炭で濾過し、濾液の放射活性をシンチレーション計測によって求めた。このアッセイを用いてＴＨ及びＰＡＨに対する化合物の活性を求め、ＴＰＨ１及びＴＰＨ２と同じ方法で算出した。
【０４１７】
６．５６．細胞ベースの阻害アッセイ
２つの種類の細胞株をスクリーニングに用いた：ＲＢＬ２Ｈ３は、ＴＰＨ１を含有し、自然に５−ヒドロキシトリプタミン（５ＨＴ）を生成するラット肥満細胞腫細胞株であり、ＢＯＮは、ＴＰＨ１を含有し、５−ヒドロキシトリプトファン（５ＨＴＰ）を生成するヒトカルチノイド細胞株である。ＣＢＡを９６ウェルプレートフォーマットで行った。ＨＰＬＣで用いる移動相は、１００ｍＭの酢酸ナトリウム（ｐＨ３．５）を９７％及びアセトニトリルを３％含有していた。WatersのＣ１８カラム（４．６×５０ｍｍ）をWatersのＨＰＬＣ（モデル２７９５）に用いた。多チャンネル蛍光光度計（モデル２４７５）を用いて、励起波長を２８０ｎｍ、及び発光波長を３６０ｎｍに設定して、通過液をモニタリングした。
【０４１８】
ＲＢＬ  ＣＢＡ：細胞を３時間〜４時間完全培地（５％ウシ血清含有）で増殖し、細胞をプレートウェル（７Ｋ細胞／ウェル）に結合させた。それから、化合物を０．０１６μＭ〜１１．３６μＭの濃度範囲でそれぞれのウェルに添加した。対照は、化合物が全く存在しない完全培地中の細胞であった。３７℃で３日間のインキュベート後に細胞を採取した。化合物が存在しない細胞の集密度(confluent)は９５％を超えていた。培地をプレートから取り除き、細胞を等量の０．１ＮのＮａＯＨに溶解した。等量の１ＭのＴＣＡと混合することによって、細胞溶解物の大部分を処理した後、ガラス繊維で濾過した。５ＨＴ濃度を分析するために、濾液を逆相ＨＰＬＣに充填した。また、細胞溶解物をごくわずか採取して、用いた濃度での化合物の細胞毒性を反映する細胞のタンパク質濃度を測定した。ＢＣＡ法を用いることによって、タンパク質濃度を測定した。
【０４１９】
化合物で処理されない細胞における平均５ＨＴレベルを、上記の式に従ったＩＣ５０誘導の最大値として用いた。５ＨＴの最小値は、０であるか、又は細胞毒性がない最大濃度の化合物で処理した細胞から求められる。
【０４２０】
ＢＯＮ  ＣＢＡ：等量のＤＭＥＭ及びＦ１２Ｋにおいて５％ウシ血清で３時間〜４時間細胞を増殖して（２０Ｋ細胞／ウェル）、化合物を０．０７μＭ〜５０μＭの濃度範囲で添加した。細胞を３７℃で一晩インキュベートした。それから、５０μＭの培養上清を５ＨＴＰ測定のために採取した。上清を等量の１ＭのＴＣＡと混合した後、ガラス繊維で濾過した。５ＨＴＰ濃度測定のために、濾液を逆相ＨＰＬＣに充填した。PromegaのＣｅｌｌｔｉｔｅｒ−Ｇｌｏ発光細胞生存率アッセイで残存細胞を処理することによって、細胞生存率を測定した。それから、ＲＢＬ  ＣＢＡと同じ方法で化合物の効力を算出した。
【０４２１】
６．５７．ｉｎ  ｖｉｖｏ効果
化合物の経口投与後のマウスの腸及び脳における５−ＨＴレベルの変化を求めることによって、本発明の強力なＴＰＨ１阻害剤のｉｎ  ｖｉｖｏ効果を幾つかの研究で評価した。
【０４２２】
化合物を異なるビヒクルに配合して、懸濁液又は溶液のいずれかを準備した。一般的に、１４週齢の雄のＣ５７アルビノマウスに、４日間連続して１日１回、５ｍｌ／ｋｇを胃チューブで投与した。最後の投与の５時間後、動物を速やかに犠牲にした。腸管及び全脳の様々な領域を採取し、迅速に凍結した。５−ＨＴを組織から抽出し、ＨＰＬＣによって測定した。曝露分析のために血液サンプルを採取した。
【０４２３】
強力なＴＰＨ１阻害剤は、小腸及び大腸の両方で５−ＨＴレベルを低減させたが、脳では低減しなかったことが見出された。或る研究では、化合物をＨ２Ｏに配合させ、４つの異なる用量レベル：１５、５０、１５０、及び５００ｍｇ／ｋｇで、胃チューブによって１日１回マウスに投与した。図１で示されるように、化合物は、用量依存的な空腸及び回腸における５−ＨＴの有意な低減を引き起こした。結腸では、５−ＨＴの統計的に有意な低減が、５０、１５０、及び５００ｍｇ／ｋｇ／日の用量レベルで見られた。いずれの用量レベルでも脳では、５−ＨＴレベルの有意な変化は見られなかった。
【０４２４】
上記で言及した全ての公報（例えば、特許及び特許出願）はその全体が、参照により本明細書中に援用される。
【図１】
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【国際調査報告】
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