(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
カタルポールを含む、甲状腺機能亢進症を治療するための医薬組成物。
【請求項２】
カタルポールを含む、甲状腺機能亢進症に関連する甲状腺機能亢進症性心疾患を治療するための医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、カタルポール（Catalpol）の新しい用途に関し、具体的に、甲状腺機能亢進症を治療する薬物又は健康食品の製造におけるカタルポールの応用に関するものであり、漢方薬の技術分野に属するものである。
【背景技術】
【０００２】
甲状腺機能亢進症は、中国語では「甲状腺機能亢進」、「甲亢」とも称し、様々な原因により、甲状腺ホルモンが過剰に分泌され、血液循環に入って、全身の組織と器官に作用することにより、機体の代謝が高まり、神経・精神の興奮度が上がってしまう症候群を主な臨床所見とする臨床症候群である。社会や仕事のストレスの増加、生活リズムの加速化に伴い、甲状腺機能亢進症の発症率が明らかに増えてきている。疫学調査により、男女発症率の割合は１：４〜１：６で、２０〜４０歳で多く見られ、この疾患は女性に多く見られ、我が国における甲状腺機能亢進症の総発症率が３％にも達することが明らかになった。
【０００３】
甲状腺機能亢進症の臨床所見は劇的なこともあれば軽微なこともある。代表的な患者の所見として、（１）神経系：患者が興奮しやすい、神経過敏、多言・多動、不眠・緊張、集中力低下、鬱、イライラ、猜疑心が多いなど、患者が舌を出したり、両手を前に伸ばしたりする時、軽微な振戦があり、（２）代謝能力が高い症候群：患者が暑さに耐えられず、多汗で、よく微熱があり、皮膚が暖かくて湿っぽくなり、疲れやすいと感じ、（３）甲状腺腫大：多くはびまん性対称性、少数は非対称性を呈し、若い女性に多く見られ、健康診断の時、患者の甲状腺から収縮期の雑音が聞こえ、手を当てると振戦を感じることができ、特に甲状腺の上部においてそれが明らかであり、特徴的な症状であり、（４）眼症状：患者は眼球が突出し、瞼裂の幅が広くなり、浸潤性眼球突出と非浸潤性眼球突出に分けられており、（５）心血管系：患者は動悸、息切れがして、運動時にこういった症状が悪化し、症状として、よく頻脈（殆どが洞性頻脈）、不整脈、心臓肥大、充血性心不全などの所見があり、（６）消化系：明らかに食欲が出てよく食べるのに、体重が減り、一部の患者は大便の回数が増え、（７）運動系：筋肉が軟弱・無力となり、（８）生殖系：女性患者の場合は、月経量が減少し、月経周期が延長し、閉経となることさえもあり、男性の場合は、殆どインポテンツとなり、（９）皮膚及び四肢の端部：一部の患者に対称性粘液性水腫が現れ、殆ど脛の下部に見られ、（１０）重症の場合、甲状腺機能亢進症の重篤な有害事象、めまい、生命を脅かすこともある、などがある。
【０００４】
甲状腺機能亢進症の原因や発症のメカニズムは今まで、まだ完全に解明されていない。西洋医学では、この疾患の発生は主に甲状腺ホルモンが過剰に分泌されるためであるとされている。甲状腺の分泌活動は、脳下垂体前葉の甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）から影響を受ける。高級な神経活動に乱れが出た後、脳下垂体前葉が過剰に甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）を分泌し、甲状腺を刺激して増生・肥大化させるが、過剰に分泌された甲状腺ホルモンは生体の代謝率を上昇させ、酸化を加速させるため、一連の甲状腺機能亢進症症候群が現れ、エネルギ、糖、脂肪、タンパク質、ビタミンの代謝異常及び循環系、消化系、造血系、神経系、内分泌系等の機能異常を引き起こす。遺伝や自己免疫の要素がこの疾患に対して主導的役割を果たすと考える人も存在する。
【０００５】
現在、この疾患を治療する薬品は多数の種類があるが、全て一定の欠点や副作用がある。我が国では、治療方法として薬品治療が最もよく使われている。また、よく使われる薬品として、抗甲状腺薬（ＡＴＤ）、β受容体遮断薬、ヨード剤、グルココルチコイド等がある。更に、最もよく用いられるＡＴＤは、チアマゾール（ＭＭＩ）とプロピルチオウラシル（ＰＴＵ）を含み、その主な作用機序が甲状腺ホルモンの合成の抑制である。甲状腺機能亢進症患者にアドレナリン作用の活性が過剰になるという症状と症候があるので、β受容体遮断薬を投与すると、アドレナリンの作用効果に拮抗することができ、頻脈、精神的緊張、多汗、振戦、筋疾患などの症状を改善することができる。塩酸プロプラノロールは、最もよく用いられるβ受容体遮断剤として、更に５’−脱ヨード酵素の活性を抑え、Ｔ４のＴ３への転化を抑制することもできる。ヨウ化物は、最も古い抗甲状腺薬とされている。抗甲状腺薬は、甲状腺への血液供給を減少させ、甲状腺を縮小させることにより、甲状腺ホルモンの合成と放出を抑制することができるので、治療効果が顕著で早いが、２〜３週間投与すると、「逸脱」現象が現れて、甲状腺機能亢進症が悪化し、かつ、その後の甲状腺機能亢進症の治療がもっと困難になることがある。臨床では、一般的に甲状腺機能亢進症の重篤な有害事象や甲状腺機能亢進症の術前準備、甲状腺機能亢進症の放射性ヨードによる治療の治療薬として、複方ヨード液を用いている。現在、公認のグルココルチコイドは主に甲状腺関連性眼疾患（ＴＡＯ）、甲状腺機能亢進症の重篤な有害事象、重症亜急性甲状腺炎の治療に用いられている。しかし、それと同時に、抗甲状腺薬（ＡＴＤ）の副作用が学者らに注目されている。全体的に言えば、ＡＴＤによる治療は安全かつ有効であるが、その臨床上の副作用もよく見られ、例えば、肝臓、血液系への毒性作用や、抗好中球細胞質抗体関連肺小血管炎、低血糖、アレルギ、筋肉損傷などがそれであり、普通、比較的に軽微であり、直ちにＡＴＤの投与を中止すれば、自ら回復することができるが、稀な、重篤な副作用が出ることもあり、その際、潜在的で致命的な危険があるので、臨床医がそれを重視する必要がある。ＭＭＩはＰＴＵに比べて、その副作用がＰＴＵよりも顕著に低くなり、かつ、前者は殆ど投与量依存性があるが、後者は薬物の投与量と明らかな関連性がない。その他、ＰＴＵの肝毒性はＭＭＩよりも高く、致命的な肝損傷や肝不全などが起こることさえある。チオ尿素類抗甲状腺薬の副作用として、薬疹、顆粒球欠乏症、重症肝損傷、抗好中球細胞質抗体（ＡＮＣＡ）関連性血管炎などがあると共に、一定の催奇形作用がある。重症肝損傷やＡＮＣＡ関連性血管炎の発生は、殆どプロピルチオウラシル（ＰＴＵ）と関連性があるが、催奇形作用は主にチアマゾールに見られる。漢方治療では、殆ど複方煎剤による治療方法、又は西洋医学と漢方医学の併用療法であり、特定の事例に対するものが多く、大量の臨床データの統計資料が少ない。
【０００６】
カタルポールは、一種の環アリルエーテルテルペングリコシド類化合物であり、分子式がＣ１５Ｈ２２Ｏ１０である。カタルポールは、合弁花亜綱、マチン科フジウツギ属（馬銭科酔魚草属）、ゴマノハグサ科（玄参科）キリ属（桐族）及びジオウ属（地黄属）、ノウゼンカズラ科ニッケイ属（樟属）、ハマウツボ科（列当科）ホンオニク属、オオバコ科オオバコ属（車前科車前属）などの植物に広く分布し、原料が極めて豊富である。
【０００７】
【化１】
0006270869.tif 000002
カタルポールの化学構造式
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明は、カタルポールの臨床上の薬用価値を十分に発揮するために、カタルポールの新しい用途を提供することを目的とするものである。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
上述した発明の目的を実現するために、本発明において次の技術案を採用し、即ち、
カタルポールの新しい用途であって、甲状腺機能亢進症を治療する薬品又は健康食品の製造におけるカタルポールの応用を指す。
カタルポールの新しい用途であって、甲状腺機能亢進症に関連する甲状腺機能亢進症性心疾患を治療する薬品又は健康食品の製造におけるカタルポールの応用を指す。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
次に実施例に基づき、本発明を更に詳しく、完全に説明する。
１  材料
１．１  実験動物
クリーンな昆明種マウス、１８〜２５ｇ。
【００１１】
１．２  薬物
被験薬：カタルポール（２０ｇ）
対照薬：レボチロキシンナトリウム、チアマゾール錠
【００１２】
１．３  試薬
ヨード［１２５Ｉ］トリヨードチロニン（Ｔ３）放射免疫分析キット。ヨード［１２５Ｉ］チロキシン（Ｔ４）放射免疫分析キット。ヨード［１２５Ｉ］遊離トリヨードサイロニン（ＦＴ３）放射免疫分析キット。ヨード［１２５Ｉ］遊離サイロキシン（ＦＴ４）放射免疫分析キット。
【００１３】
１．４  計器
ＪＡ５００３Ａ電子天秤、ＥＣＧ−６５１１心電図検査機器、ＣＹ−３型デジタル酸素測定器、ＳＮ−６９７放射免疫γ計数器、ＫＫ２５Ｅ７３ＴＩシーメンス製冷蔵庫、Ｓｃａｎｓｐｅｅｄ  ｍｉｎｉ遠心分離機、ＤＬ−５０ＲＣ低温遠心分離機。
【００１４】
２  方法
２．１  動物モデルの作製
実験前に実験動物を、環境に適応するように２日間室内に置く。対照群として、無作為に昆明種マウスを２０匹抽出し、毎日生理食塩水を皮下注射し、他のマウスに、毎日レボチロキシンナトリウム３５０μｇ／ｋｇを皮下注射する。投与量はいずれも１０ｍｌ／ｋｇとし、７日間連続で投与する。
【００１５】
投与６日目の３時間後、対照群とモデル群からそれぞれ１０匹（雄・雌半々）を無作為に抽出して、その心拍数を測定する。麻酔後、心電図を使ってマウスの心拍数を算出し、更に統計分析を行い、両者の差を比較する。
【００１６】
心拍数が顕著に速くなった場合、最終の投与（７日目）後、当日の午後８時から１２時間断食させ、但し、水を飲ませる。翌日午前８時に各群のマウスの体重を計測して記録し、それから、眼球から血を取って、凝血した後３５００ｒ／ｍｉｎで１５分間遠心して、血清を取り、放射免疫分析法でＴ３、Ｔ４の含有量を測定する。マウスを殺して心臓を取り出し、心臓の重量（ＨＷＩ）と左室の重量（ＬＶＷＩ）を測定する。実験終了後、心臓重量指数（ＨＷＩ）と左室重量指数（ＬＶＭＩ）を算出する。［心臓重量指数ＨＷＩ＝心臓の重量（ＨＷ）／体重（ＢＷ）。左室重量指数（ＬＶＭＩ）＝左室の重量／体重（ＢＷ）］。
【００１７】
これらのレベルが顕著に上昇したら、モデルの作製に成功したと見なされる。
【００１８】
２．２  動物の群分けと薬の投与
モデルの作製に成功したマウスを無作為に５群に分け、１群を１０匹とし、即ち、甲状腺機能亢進症モデル群、カタルポール低投与量群（カタルポール低群と略称）、カタルポール中投与量群（カタルポール中群と略称）、カタルポール高投与量群（カタルポール高群と略称）、チアマゾール群、及び対照群（１０匹）に分ける。
【００１９】
カタルポール低投与量群に３０ｍｇ／ｋｇ、カタルポール中投与量群に６０ｍｇ／ｋｇ、カタルポール高投与量群に９０ｍｇ／ｋｇ、カタルポールを、チアマゾール群に７．５ｍｇ／ｋｇでチアマゾールを、それぞれ経口投与し、対照群と甲状腺機能亢進症モデル群に等量の蒸留水を経口投与する。１日１回で、２０日間繰り返して投与する。対照群を除いて、他の各群に毎日１匹ずつ更にチロキシンナトリウムを継続的に３５０μｇ／ｋｇ皮下注射する。
【００２０】
２．３  指標の測定及び方法
２．３．１  マウスの外観・行動に対する観察
実験期間の全過程において、マウスの精神状態や毛色の変化、行動、運動などを含むマウスの全般的状況を観察し、記録する。同時に、１日おきに各群のマウスの食物摂取量を測定する。
【００２１】
２．３．２  マウスの体重変化の測定
マウスへの初回の薬投与の前日の午後８時から１２時間断食させ、但し、その際、水を飲ませる。翌日に全てのマウスの体重（ｂｏｄｙ  ｗｅｉｇｈｔ、ＢＷ）、即ち治療前の体重（ＢＷ１）を測る。最後の薬投与後、当日の午後８時から１２時間断食させ、但し、その際、水を飲ませる。翌日に体重、即ち治療後の体重（ＢＷ２）を測る。そして、治療後と治療前の体重の差を算出して、各群のマウスの体重の変化を比較する。
【００２２】
２．３．３  マウスの酸素消費量の測定
最後の薬投与の２日前にマウスの酸素消費量を測定する。具体的な方法は次の通りであり、ＣＹ−３型酸素測定器を取って、酸素電極を装着する。それを接続し、ゼロ調整を実行し、そして、安定するまで繰り返して調節する。別に５００ｍｌ吸引ろ過ガラス瓶を取って、その外に通じるガラス管をゴムスリーブでしっかり被せた上、ワセリンを使って密封する。そのゴムスリーブは、Ｔ型パイプを介して接続され、Ｔ型パイプのポジション切り替えによって、外部への連通又は封鎖を選択することができる。測定時、マウスを瓶の中に入れ、吸引ろ過瓶の口をコルクせんでしっかり塞いで、瓶の内外の空気が通じないようにした後、吸引ろ過瓶を実験台の上に横たえると同時に、時間を計る。２０分後、注射器を使って、Ｔ型パイプを通して瓶内の空気を１０ｍｌ吸収して、それを直ちにＣＹ−３酸素測定器の給気管の入口に注入すると、酸素測定器に、注入した気体の酸素含有量が表示され、安定した後、そのデータを記録し、当該データは残留酸素含有量である。酸素含有量減少値＝２１％−残留酸素含有量（％）。（空気中の酸素含有量が２１％であるとして計算する）
【００２３】
２．３．４  マウスの心拍数の測定
最後の薬投与の１日前に、全てのマウスに１２時間断食させ、但し、その際、水を飲ませる。翌日に、薬投与の約３時間後、その心拍数を測定する。心電図を通してマウスの心拍数（ｈｅａｒｔ  ｒａｔｅ、ＨＲ）を算出し、更に統計分析を行い、その差異を比較する。
【００２４】
２．３．５  マウスの血漿の甲状腺ホルモンレベルの測定
マウスに最後に薬投与した後、１２時間断食させ、但し、その際、水を飲ませる。眼球を摘出して血を取った後、３５００ｒ／ｍｉｎで１５分間遠心し、血漿を吸い取る。放射免疫分析法で、血清中のＴ３、Ｔ４、ＦＴ３、ＦＴ４の含有量を測定する。具体的な操作は全て放射免疫キットの取扱説明書に従って行う。
【００２５】
２．３．６  マウスの臓器指数の測定
マウスを殺してすぐに心臓を取り出し、心臓の重量（ｈｅａｒｔ  ｗｅｉｇｈｔ、ＨＷ）と左室の重量（ｌｅｆｔ  ｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒ  ｗｅｉｇｈｔ、ＬＶＷ）を測定する。実験終了後、心臓重量指数（ｈｅａｒｔ  ｗｅｉｇｈｔ  ｉｎｄｅｘ、ＨＷＩ）と左室重量指数（ｌｅｆｔ  ｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒ  ｗｅｉｇｈｔ  ｉｎｄｅｘ、ＬＶＭＩ）を算出する（ＬＶＷＩ＝ＬＶＷ／ＢＷ）。
【００２６】
２．４  統計学的方法
実験データは、平均値±標準偏差
【数１】
0006270869.tif 000003
で表し、ＳＰＳＳ１９．０統計ソフトウエアを用いて分析を行う。多群間の比較は一要因分散分析を採用し、２群間の等分散性の比較は、ｑ検定を採用し、分散不均一性の比較は、Ｄｕｎｎｅｔｔ’ｓ  Ｔ３を採用して検定する。Ｐ＜０．０５なら、顕著の差異があるとする。
【００２７】
３  実験結果
３．１  モデルの成否を判定する結果
３．１．１  マウスの心拍数に対する影響
対照群に比べて、モデル作製の６日目においてモデル群マウスの心拍数（ＨＲ）は顕著に速くなり、両者に極めて顕著な差異がある（Ｐ＜０．００１）。（表１を参照）
【００２８】
【表１】
0006270869.tif 000004
【００２９】
３．１．２  マウスの血清Ｔ３、Ｔ４に対する影響
対照群に比べて、７日間連続で薬投与した後、モデル群のマウスのＴ３、Ｔ４が顕著に上昇した（Ｐ＜０．００１）。（表２を参照）
【００３０】
【表２】
0006270869.tif 000005
【００３１】
３．１．３  マウスの心臓重量指数に対する影響
対照群に比べて、７日間連続で薬投与した後、モデルマウスの心臓重量指数と左室重量指数が顕著に増加した（Ｐ＜０．００１）。（表３を参照）
【００３２】
【表３】
0006270869.tif 000006
【００３３】
以上のように、モデル群マウスに７日間連続で薬投与した後、対照群に比べて、その心拍数、血清中のＴ３とＴ４の含有量及び心臓重量指数は、いずれも顕著な増加（Ｐ＜０．００１）を認めたことから、モデル作製に成功したと考えられるので、薬物治療を行うことができると判断した。
【００３４】
３．２  カタルポールの甲状腺機能亢進症発症モデルマウスの外観・行動に対する影響
実験過程において、対照群マウスの行動状況、精神状況、毛色・光沢のいずれにも異常を認めなかった。ところが、甲状腺機能亢進症発症モデルマウスは、５日目からイライラ、落ち着かなくなり、激怒しやすい等の症状が現れ、特に皮下注射する時、そのイライラが更に明らかになる。飲食・飲水の量が増え、籠内が湿っぽくなり、排泄物が多くなる。対照群に比べて、モデル群のマウスは毛が枯れて光沢がなくなる。カタルポール群のマウスは、比較的に落ち着いていて、イライラや激怒しやすさ、毛の枯れなどの症状がモデル群より軽くなる。
【００３５】
３．３  カタルポールの甲状腺機能亢進症発症モデルマウスの体重に対する影響
各群のマウスは、治療前の体重、治療後の体重及び両者の差の値にいずれも顕著な差異がない（Ｐ＞０．０５）が、対照群に比べて、モデル群は体重増加量が少なくなるという傾向を呈する。しかし、モデル群に比べて、カタルポール群とチアマゾール群のマウスの体重増加量は、全て異なる程度でモデル群マウスのそれより多い。（表４を参照）
【００３６】
【表４】
0006270869.tif 000007
【００３７】
３．４  カタルポールの甲状腺機能亢進症発症モデルマウスの酸素消費量に対する影響
対照群マウスに比べて、モデル群マウスの酸素消費量が著明に増加し、両者の比較に、極めて顕著な差異（Ｐ＜０．００１）がある。モデル群に比べて、カタルポール低・高投与量群とチアマゾール群のマウスは、酸素消費量が著明に低減し、モデル群マウスと比較することは統計学的有意性がある（Ｐ＜０．０５）。（表５を参照）
【００３８】
【表５】
0006270869.tif 000008
【００３９】
３．５  カタルポールの甲状腺機能亢進症発症モデルマウスの心拍数に対する影響
対照群に比べて、モデル群マウスの心拍数は著明に増加し、両者を比較すると、Ｐ＜０．００１。モデル群に比べて、カタルポール群とチアマゾール群マウスの心拍数は、いずれも異なる程度で低減し、そのうちカタルポール中・高投与量群マウスの心拍数は、モデル群に比べて、顕著な差異（Ｐ＜０．０１）がある。カタルポール低投与量群とチアマゾール群マウスの心拍数は著明に低減する（Ｐ＜０．００１）。（表６を参照）
【００４０】
【表６】
0006270869.tif 000009
【００４１】
３．６  カタルポールの甲状腺機能亢進症発症モデルマウスのＴ３、Ｔ４に対する影響
対照群マウスに比べて、モデル群マウスの血清Ｔ３レベルが著明に上昇し、両者を比較すると、Ｐ＜０．００１。モデル群に比べて、カタルポール群とチアマゾール群マウスの血清Ｔ３レベルは、いずれも異なる程度の低減を認めた。そのうちカタルポールの３つの投与量群とチアマゾール群のマウスは、それぞれモデル群マウスに比べて、いずれも顕著な差異（Ｐ＜０．０５）がある。（表７を参照）
【００４２】
対照群マウスに比べて、モデル群マウスの血清Ｔ４レベルが著明に上昇し、両者を比較すると、Ｐ＜０．００１。モデル群に比べて、カタルポールの３つの投与量群とチアマゾール群マウスの血清Ｔ４レベルは、いずれも異なる程度の低減を認めた。そのうちチアマゾール群マウスは、それぞれモデル群マウスに比べて、顕著な差異（Ｐ＜０．０５）がある。（表７を参照）
【００４３】
【表７】
0006270869.tif 000010
【００４４】
３．７  カタルポールの甲状腺機能亢進症発症モデルマウスのＦＴ３、ＦＴ４に対する影響
対照群マウスに比べて、モデル群マウスの血清ＦＴ３レベルが著明に上昇し、両者の比較に、極めて顕著な差異（Ｐ＜０．００１）がある。モデル群マウスに比べて、カタルポール群とチアマゾール群マウスの血清ＦＴ３レベルは、いずれも異なる程度の低減を認めた。そのうちカタルポール低投与量群のマウスは、モデル群マウスに比べて、その血清ＦＴ３レベルの低減が極めて著明である（Ｐ＜０．０１）。カタルポール中・高投与量群とチアマゾール群のマウスも、モデル群マウスに比べて、血清ＦＴ３指標に顕著な差異（Ｐ＜０．０５）がある。（表８を参照）
【００４５】
対照群マウスに比べて、モデル群マウスの血清ＦＴ４レベルが著明に上昇し、両者の比較に、極めて顕著な差異（Ｐ＜０．００１）がある。モデル群に比べて、カタルポール群とチアマゾール群マウスの血清ＦＴ４レベルは、いずれも異なる程度の低減を認めた。そのうちカタルポール低投与量群のマウスも、モデル群マウスに比べて、両者に顕著な差異（Ｐ＜０．０５）がある。（表８を参照）
【００４６】
【表８】
0006270869.tif 000011
【００４７】
３．８  カタルポールの甲状腺機能亢進症発症モデルマウスの心臓重量指数に対する影響
対照群マウスに比べて、モデル群マウスの心臓重量指数が著明に上昇し、両者を比較すると、Ｐ＜０．００１。モデル群マウスに比べて、薬投与群とチアマゾール群のマウスの心臓重量指数は、いずれも異なる程度の低減を認めた。そのうちカタルポール中・高低投与量群のマウスの心臓重量指数は、モデル群マウスに比べて、顕著な差異を認めた（Ｐ＜０．０１）。チアマゾール群のマウスも、モデル群マウスに比べて、心臓重量指数が著明に低減した（Ｐ＜０．０５）。（表９を参照）
【００４８】
対照群マウスに比べて、モデル群マウスの左室重量指数が著明に上昇し、両者を比較すると、Ｐ＜０．００１。モデル群マウスに比べて、カタルポールの３つの投与量群とチアマゾール群のマウスの左室重量指数は、いずれも異なる程度の低減を認めた。そのうちカタルポール中・高低投与量群とチアマゾール群のマウスの左室重量指数は、モデル群マウスに比べて、顕著な差異を認めた（Ｐ＜０．０１）。（表９を参照）
【００４９】
【表９】
0006270869.tif 000012
【００５０】
４  結論
カタルポール群に甲状腺機能亢進症及び甲状腺機能亢進症性心疾患を治療する治療効果がある。