(57)【要約】本発明は、精神障害および神経内分泌系障害、神経系疾患およびメタボリックシンドロームの治療における副腎皮質刺激ホルモン放出因子１（ＣＲＦ１）受容体アンタゴニストとしての式Ｉの化合物、その医薬組成物、ならびにかかる化合物の使用に関する。2010504343.tif 000034
2010504343.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化１】
2010504343.tif 000029
［式中、
Ｒ１およびＲ２は独立に水素またはＣ１−Ｃ３アルキルであり、
Ｒ３は
【化２】
2010504343.tif 000030
であり、
Ｒ４はＣｌまたはメチルであり、
Ｒ５は水素、Ｂｒ、ニトロ、メトキシ、メトキシメチル、ジメチルアミノ、エトキシカルボニル、アセトアミド、アセトキシ、
【化３】
2010504343.tif 000031
である］
の化合物またはその薬理学的に許容できる塩。
【請求項２】
Ｒ１およびＲ２が独立にエチルまたはｎ−プロピルである、請求項１に記載の化合物またはその薬理学的に許容できる塩。
【請求項３】
Ｒ３が
【化４】
2010504343.tif 000032
である、請求項１または２に記載の化合物またはその薬理学的に許容できる塩。
【請求項４】
Ｒ５がメトキシ、メトキシメチル、ジメチルアミノまたは
【化５】
2010504343.tif 000033
である、請求項１から３のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項５】
請求項１から４のいずれか１項に記載の化合物またはその薬理学的に許容できる塩と薬理学的に許容できる賦形剤とを含む、医薬組成物。
【請求項６】
患者のうつ病、不安神経症、アルコール濫用または薬物濫用、肥満、高血圧、メタボリックシンドローム、過敏性大腸症候群、癲癇、発作、睡眠障害、アレルギー、片頭痛、月経前症候群、不妊症、性的機能不全、先天性副腎過形成、クッシング病、早産、ストレスにより誘発される胃潰瘍、炎症性障害、下垂体または異所性下垂体由来の腫瘍、慢性疲労症候群、線維筋痛、内臓痛または多発性硬化症を治療する方法であって、それを必要とする患者に治療上有効量の請求項１から４のいずれか１項に記載の化合物またはその薬理学的に許容できる塩を投与することを含む、方法。
【請求項７】
患者の不安神経症またはうつ病を治療する方法であって、それを必要とする患者に治療上有効量の請求項１から４のいずれか１項に記載の化合物またはその薬理学的に許容できる塩を投与することを含む、方法。
【請求項８】
患者のアルコール濫用または薬物濫用を治療する方法であって、それを必要とする患者に治療上有効量の請求項１から４のいずれか１項に記載の化合物またはその薬理学的に許容できる塩を投与することを含む、方法。
【請求項９】
うつ病、不安神経症、アルコール濫用または薬物濫用、肥満、高血圧、メタボリックシンドローム、過敏性大腸症候群、癲癇、発作、睡眠障害、アレルギー、片頭痛、月経前症候群、不妊症、性的機能不全、先天性副腎過形成、クッシング病、早産、ストレスにより誘発される胃潰瘍、炎症性障害、下垂体または異所性下垂体由来の腫瘍、慢性疲労症候群、線維筋痛、内臓痛または多発性硬化症の治療のための医薬の製造のための、請求項１から４のいずれか１項に記載の化合物またはその薬理学的に許容できる塩の使用。
【請求項１０】
不安神経症またはうつ病の治療のための医薬の製造のための、請求項１から４のいずれか１項に記載の化合物またはその薬理学的に許容できる塩の使用。
【請求項１１】
アルコール濫用または薬物濫用の治療のための医薬の製造のための、請求項１から４のいずれか１項に記載の化合物またはその薬理学的に許容できる塩の使用。
【請求項１２】
医薬として使用するための、請求項１から４のいずれか１項に記載の化合物またはその薬理学的に許容できる塩。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、精神障害および神経内分泌系障害、神経系疾患およびメタボリックシンドロームの治療におけるＣＲＦ１受容体アンタゴニストとしての新規なチオフェンピラゾロピリミジン化合物、その医薬組成物およびそれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
副腎皮質刺激ホルモン放出因子（ＣＲＦ）は、脳下垂体前葉からのプロオピオメラノコルチン（ＰＯＭＣ）由来のペプチド分泌の主要な生理的調節因子である４１アミノ酸のペプチドである。下垂体でのその内分泌の役割に加えて、ＣＲＦの免疫組織化学的局在から、このホルモンが中枢神経系の幅広い視床下部外分布を有し、脳での神経伝達物質または神経修飾物質としての役割と整合した広い範囲の自律神経的効果、電子生理的効果および行為への効果を生じることが証明された。免疫系における生理的、心理的、および免疫学的ストレス因子に対する反応を統合する面でＣＲＦが重要な役割を果たすという証拠もある。
【０００３】
ＣＲＦは、うつ病および神経不安症を含めた精神障害および神経系疾患、ならびに以下の病状、すなわちアルツハイマー病、ハンチントン病、進行性核上麻痺、筋萎縮性側索硬化症、パーキンソン病、癲癇、片頭痛、アルコール濫用および薬物濫用および関連する禁断症状、肥満、メタボリックシンドローム、先天性副腎過形成、クッシング病、高血圧、発作、過敏性大腸症候群、ストレスにより誘発される胃潰瘍、月経前症候群、性的機能不全、早産、炎症性障害、アレルギー、多発性硬化症、内臓痛、睡眠障害、下垂体部腫瘍または異所性下垂体由来の腫瘍、慢性疲労症候群および線維筋痛に関連付けられてきた。
【０００４】
ＣＲＦ受容体亜型（ＣＲＦ１およびＣＲＦ２）が確認されており、これらは脳内に不均一に分布しており、これは機能的多様性の可能性を示唆している。例えば、広く分布した脳ＣＲＦ１受容体は、環境ストレス因子への曝露に付随する情動性に強く関係する。重要なことは、ＣＲＦ２受容体ではなくＣＲＦ１受容体が、不安惹起様行動の選択を媒介するように見えることである。より離散的な中隔／視床下部分布および別の内在性リガンドの入手可能性は、ＣＲＦ２受容体の異なる機能的な役割を示唆する。例えば、ＣＲＦ１受容体よりもＣＲＦ２受容体に対して優先的な親和性を有する新規なＣＲＦ族の神経ペプチドが、選択的なＣＲＦ１アゴニズムで観察される行動活性化の外観を生成することのなく食欲を抑制することが報告されている。他の場合には、ＣＲＦ２アゴニズムは、ＣＲＦ１アンタゴニストまたはＣＲＦ１遺伝子欠失について報告されている効果に類似の効果をもたらす。例えば、ＣＲＦ２アゴニストが抗肥満薬として提唱されてきたが、ＣＲＦ１アンタゴニストも同様に肥満に対する重要な治療法であるかも知れない。
【０００５】
ＣＲＦアンタゴニストとして有用な特定のピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン、ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン、ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン、１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジン、およびピラゾロ［１，５−ａ］−１，３，５−トリアジンが特許文献１、特許文献２、特許文献３、および特許文献４に記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】国際公開第９４／１３６７６号パンフレット
【特許文献２】国際公開第９７／２９１０９号パンフレット
【特許文献３】国際公開第９８／０８８４７号パンフレット
【特許文献４】国際公開第９８／０３５１０号パンフレット
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、ＣＲＦ１受容体アンタゴニストとして有用な新規なチオフェンピラゾロピリミジンを提供する。上記からみて、精神障害および神経内分泌系障害、神経系疾患およびメタボリックシンドロームの治療のための潜在的に有益な治療薬としてのＣＲＦ１の新しい有効かつ選択的なアンタゴニストを発見することが望ましい。さらに、大多数の市販のＣＮＳ薬および心臓脈管薬が望ましくないバイオアベイラビリティプロフィールを呈するため、公知のＣＲＦアンタゴニスト（例えばＣＰ１５４５２６およびＮＢＩ３０７７５）よりも優れたバイオアベイラビリティプロフィールを有する新規化合物を発見することも望ましい。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
一実施形態において、本発明は、式Ｉの化合物
【０００９】
【化１】
2010504343.tif 000003
（式中、
Ｒ１およびＲ２は独立に水素またはＣ１−Ｃ３アルキルであり、
Ｒ３は
【００１０】
【化２】
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であり、
Ｒ４はＣｌまたはメチルであり、
Ｒ５は水素、Ｂｒ、ニトロ、メトキシ、メトキシメチル、ジメチルアミノ、エトキシカルボニル，アセトアミド、アセトキシ、
【００１１】
【化３】
2010504343.tif 000005
である）
またはその薬理学的に許容できる塩に関する。
【００１２】
別の実施形態において、本発明は、患者のうつ病もしくは大うつ病性障害、不安神経症、アルコール濫用または薬物濫用、肥満、高血圧、メタボリックシンドローム、過敏性大腸症候群、癲癇、発作、睡眠障害、アレルギー、片頭痛、月経前症候群（ＰＭＳ）、不妊症、性的機能不全、先天性副腎過形成、クッシング病、早産、ストレスにより誘発される胃潰瘍、炎症性障害、下垂体または異所性下垂体由来の腫瘍、慢性疲労症候群、線維筋痛、内臓痛または多発性硬化症を治療する方法であって、それを必要とする患者に治療上有効量の式Ｉの化合物またはその薬理学的に許容できる塩を投与することを含む、方法に関する。
【００１３】
別の実施形態において、本発明は、うつ病もしくは大うつ病性障害、不安神経症、アルコール濫用または薬物濫用、肥満、高血圧、メタボリックシンドローム、過敏性大腸症候群、癲癇、発作、睡眠障害、アレルギー、片頭痛、月経前症候群（ＰＭＳ）、不妊症、性的機能不全、先天性副腎過形成、クッシング病、早産、ストレスにより誘発される胃潰瘍、炎症性障害、下垂体または異所性下垂体由来の腫瘍、慢性疲労症候群、線維筋痛、内臓痛または多発性硬化症の治療のための医薬の製造のための、式Ｉの化合物またはその薬理学的に許容できる塩の使用に関する。
【００１４】
別の実施形態において、本発明は、医薬として使用するための式Ｉの化合物またはその薬理学的に許容できる塩に関する。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
上記で使用したように、そして本発明の説明全体を通して、以下の用語は、別段の記載がない限り以下の意味を有するものと理解されるものとする。
【００１６】
「アルキル」は、鎖中に１〜５個の炭素原子を有する、直鎖であってもよく分枝鎖であってもよい飽和脂肪族炭化水素基を意味する。
【００１７】
「薬理学的に許容できる賦形剤」とは、製剤特性を高めるための薬理学的に許容できる製剤担体、溶液、または添加剤を指す。かかる賦形剤は、その製剤の他の成分と適合するものでなければならならず、その服用者に有害であってはならない。かかる賦形剤は、当業者に周知である（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，第１９版，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，１９９５を参照）．
【００１８】
「薬理学的に許容できる塩」とは、本発明の化合物の比較的無毒な無機および有機の酸付加塩、ならびに塩基付加塩を指す。これらの塩は、その化合物の最終の単離および精製段階でその場で調製することができる。特に酸付加塩は、遊離塩基形態の精製した化合物を適切な有機酸または無機酸と別個に反応させ、こうして生成した塩を単離することにより調製することができる（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，第１９版，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，１９９５を参照）。
【００１９】
「治療上有効量」または「有効量」は、研究者、獣医、医師または他の臨床医が求めている組織、系、動物またはヒトの生物学的反応または医学的反応、あるいはそれらに対する所望の治療効果を引き起こす、本発明の式Ｉの化合物または本発明の式Ｉの化合物を含有する医薬組成物の量を意味する。
【００２０】
「治療」、「治療する」、「治療すること」などの用語は、障害の進行を遅くすることおよび回復に向かわせることの両方を含むことが意図されている。これらの用語はまた、たとえ障害または病状が実際に解消されないとしても、そしてたとえその障害または病状の進行がそれ自体で遅くならず回復に向かわないとしても、その障害または病状の１つ以上の症状を緩和すること、改善すること、軽減すること、解消すること、または低下させることも含む。「治療」と言う用語および類似の用語は、防止的（例えば予防的）治療および苦痛緩和目的の治療も含む。疾患の予防は、その疾患の症状の発症を引き延ばすかまたは遅延させることをもたらす。
【００２１】
分子構造における記号
【００２２】
【化４】
2010504343.tif 000006
は、その特定の置換基についての結合位置を示す。
【００２３】
任意の可変因子が任意の構成要素または式Ｉにおいて２回以上出現する場合、それぞれ現れるときのその定義は、他で現れるときのその定義とは独立である。また、置換基および／または可変因子の組合せは、かかる組合せが安定な化合物をもたらす場合にのみ許容できる。本発明の化合物を選択する際に、当業者は、種々の置換基、すなわちＲ１、Ｒ２などが化学構造連結性の周知の原理に適合して選択されるべきであることを認識するであろう。
【００２４】
本開示全体を通して使用する標準的な命名法の下では、指定された側鎖の末端部分が最初に記載され、次に、隣接する官能性が結合点に向かって記載される。例えば、アリールカルボニルアミノアルキル置換基はアリール−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−アルキル−と等価である。
【００２５】
本発明は以下のような具体的な種類の発明を企図している：
（ａ）Ｒ１およびＲ２が独立にエチルまたはｎ−プロピルである、式Ｉの化合物またはその薬理学的に許容できる塩；
（ｂ）Ｒ３が
【００２６】
【化５】
2010504343.tif 000007
である、式Ｉの化合物またはその薬理学的に許容できる塩；
（ｃ）Ｒ５がメトキシ、メトキシメチル、ジメチルアミノまたは
【００２７】
【化６】
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である式Ｉの化合物またはその薬理学的に許容できる塩；
（ｄ）うつ病または神経不安症を治療するための式Ｉの化合物またはその薬理学的に許容できる塩の使用；
（ｅ）アルコール濫用または薬物濫用を治療するための式Ｉの化合物またはその薬理学的に許容できる塩の使用；
（ｆ）ＣＲＦ１結合について５００ｎＭ以下のＫｉ値を示す式Ｉの化合物またはその薬理学的に許容できる塩；
（ｇ）ＣＲＦ１結合について５０ｎＭ以下のＫｉ値を示す式Ｉの化合物またはその薬理学的に許容できる塩；
（ｈ）ＣＲＦ１結合について５ｎＭ以下のＫｉ値を示す式Ｉの化合物またはその薬理学的に許容できる塩；
（ｉ）ＣＲＦ１結合について５００ｎＭ以下のＫｉ値を示し、かつＣＲＦ２よりもＣＲＦ１に対して選択的に結合する（すなわち、より小さいＫｉ）式Ｉの化合物またはその薬理学的に許容できる塩；
（ｊ）ＣＲＦ１結合について５０ｎＭ以下のＫｉ値を示し、かつＣＲＦ２よりもＣＲＦ１に対して選択的に結合する（すなわち、より小さいＫｉ）式Ｉの化合物またはその薬理学的に許容できる塩；
（ｋ）ＣＲＦ１結合について５ｎＭ以下のＫｉ値を示し、かつＣＲＦ２よりもＣＲＦ１に対して選択的に結合する（すなわち、より小さいＫｉ）式Ｉの化合物またはその薬理学的に許容できる塩；ならびに／あるいは
（ｌ）公知のＣＲＦアンタゴニスト（例えば、ＣＰ１５４５２６およびＮＢＩ３０７７５）よりも優れたバイオアベイラビリティプロフィールを有する式Ｉの化合物またはその薬理学的に許容できる塩。
【００２８】
本発明の化合物は、種々の経路によって投与される医薬組成物として処方されることが好ましい。かかる組成物は経口投与用のものであることが好ましい。かかる医薬組成物、およびかかる医薬組成物を調製するためのプロセスは当該技術分野で周知である（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ａ．Ｇｅｎｎａｒｏら編集，第１９版，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，１９９５を参照）。
【００２９】
式Ｉの化合物は、一般的に広い投薬量範囲にわたって有効である。例えば、１日当りの投薬量は、通常、体重１ｋｇあたり約０．０００１〜約３０ｍｇの範囲に入る。いくつかの例では、前述の範囲の下限未満の投薬量レベルで十分過ぎる場合があり、他方、ある場合にはさらにより大きい用量が有害な副作用をまったく引き起こすことなく用いられることもあり、それゆえ、上記の投薬量範囲は、本発明の範囲を決して限定することを意図したものではない。実際に投与される上記化合物の量は、治療しようとする病状、選択された投与経路、投与される実際の化合物（複数種であってもよい）、個々の患者の年齢、体重、および反応、ならびに患者の症状の重篤性を含めた関連する状況を考慮して、医師によって決定されるであろうということを理解されたい。
【００３０】
式Ｉの化合物はＣＲＦ−１アンタゴニストであり、従って、ＣＲＦ１受容体の緊張または刺激を低下させることによって治療できる病状の治療のために有用である。脳下垂体前葉からのプロオピオメラノコルチン（ＰＯＭＣ）由来のペプチド分泌の主要な生理的調節因子である４１アミノ酸のペプチドである副腎皮質刺激ホルモン放出因子（ＣＲＦ）［Ｊ．Ｒｉｖｉｅｒら，  Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ（ＵＳＡ）８０：４８５１（１９８３）；Ｗ．Ｖａｌｅら，  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２１３：１３９４（１９８１）］は、多くの医学的病状と関連付けられている。例えば、下垂体でのその内分泌の役割に加えて、ＣＲＦの免疫組織化学的局在から、このホルモンが中枢神経系の幅広い視床下部外分布を有し、脳での神経伝達物質または神経修飾物質としての役割と整合した広い範囲の自律神経的効果、電子生理的効果および行為への効果を生じることが証明された［Ｗ．Ｖａｌｅら，  Ｒｅｃ．Ｐｒｏｇ．Ｈｏｒｍ．Ｒｅｓ．３９：２４５（１９８３）；Ｇ．Ｆ．Ｋｏｏｂ，  Ｐｅｒｓｐ．Ｂｅｈａｖ．Ｍｅｄ．２：３９（１９８５）；Ｅ．Ｂ．Ｄｅ  Ｓｏｕｚａら，  Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．５：３１８９（１９８５）］。免疫系における生理的、心理的、および免疫学的ストレス因子に対する反応を統合する面でＣＲＦが重要な役割を果たすという証拠もある［例えば、Ｊ．Ｅ．Ｂｌａｌｏｃｋ，  Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  ６９：１（１９８９）；Ｊ．Ｅ．Ｍｏｒｌｅｙ，  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ．４１：５２７（１９８７）を参照］。
【００３１】
ＣＲＦは、うつ病および神経不安症を含めた精神障害および神経系疾患に関連する［Ｄ．Ｍ．Ｎｉｅｌｓｅｎ，  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ．７８：９０９−９１９；Ｈ．Ｅ．Ｋｕｎｚｅｌら，  Ｊ．Ｐｓｙｃｈｉａｔｒ．Ｒｅｓ．３７：５２５−５３３；Ｄ．Ｒ．Ｇｅｈｌｅｒｔら，  Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．５０９：１４５−１５３］。アルツハイマー病、ハンチントン病、進行性核上麻痺および筋萎縮性側索硬化症の病因および病態生理においてもＣＲＦの役割が前提とされてきた。なぜなら、それらは中枢神経系におけるＣＲＦニューロンの機能不全に関連するためである［総説として、Ｅ．Ｂ．Ｄｅ  Ｓｏｕｚｅ，  Ｈｏｓｐ．Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ２３：５９（１９８８）を参照］。ＣＲＦの慢性投与がドーパミン系の機能障害を生み出すことが示されており、これはパーキンソン病における役割を示唆する［Ｅ．Ｉｚｚｏら，  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｅｈａｖ．８１：７０１−７０８（２００５）］。ＣＲＦが関与する他の神経障害としては、癲癇［Ｔ．Ｚ．Ｂａｒａｍら，  Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ．７７０：８９−９５（１９９７）］および片頭痛［Ｔ．Ｃ．Ｔｈｅｏｈａｒｉｄｅｓら，  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ  １３６：５７４５−５７５０（１９９５）］が挙げられる。ＣＲＦはアルコール濫用および薬物濫用ならびに関連する禁断症状に関連付けられてきた［Ｄ．Ｈ．Ｏｖｅｒｓｔｒｅｅｔら，  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｅｈａｖ．７７：４０５−４１３；Ｙ．Ｓｈａｈａｍら，  Ｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ（Ｂｅｒｌ）１３７：１８４−１９０］。さらに、ＣＲＦが種々の内分泌障害および心血管疾患（例えば、肥満［Ｅ．ＴｉｍｏｆｅｅｖａおよびＤ．Ｒｉｃｈａｒｄ，  Ｎｅｕｒｏｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ  ６６：３２７−３４０（１９９７）］、メタボリックシンドローム［Ａ．Ｍ．Ｗａｒｄら，  Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ５３：７２０−７２６（２００４）］、先天性副腎過形成［Ｄ．Ｐ．ＭｅｒｋｅおよびＧ．Ｂ．Ｃｕｔｌｅｒ  Ｊｒ．，  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｍｅｔａｂ．Ｃｌｉｎ．Ｎｏｒｔｈ  Ａｍ．３０：１２１−１３５（２００１）］、クッシング病［Ｍ．Ｌａｂｅｕｒら，  Ｃｕｒｒ．Ｄｒｕｇ  Ｔａｒｇｅｔｓ  Ｉｍｍｕｎｅ  Ｅｎｄｏｃｒ．Ｍｅｔａｂｏｌ．Ｄｉｓｏｒｄ．４：３３５−３４２（２００４）］、高血圧［Ｒ．Ｊ．Ｂｒｉｓｃｏｅら，  Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ．８８１：２０４−２０７（２０００）］、および発作［Ｓ．Ｌ．Ｓｔｅｖｅｎｓら，  Ｊ．Ｃｅｒｅｂ．Ｂｌｏｏｄ  Ｆｌｏｗ  Ｍｅｔａｂ．２３：１１５１−１１５９（２００３）］）において役割を果たす、という証拠がある。胃障害（例えば、過敏性大腸症候群［Ｙ．Ｔａｃｈｅら，  Ｅｕｒ  Ｊ．Ｓｕｒｇ．Ｓｕｐｐｌ：１６−２２（２００２）］およびストレスにより誘発される胃潰瘍［Ｋ．Ｅ．Ｇａｂｒｙら，  Ｍｏｌ．Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ  ７：４７４−４８３，４３３（２００２）］）は、ＣＲＦに関連することが示されている。加えて、ＣＲＦが、ヒトの女性の健康の種々の領域、例えば、月経前症候群［Ｆ．Ｆａｃｃｈｉｎｅｔｔｉら，  Ｐｓｙｃｈｏｓｏｍ．Ｍｅｄ．５６：４１８−４２２（１９９４）］、不妊症［Ｌ．Ｇｈｉｚｚｏｎｉら��  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ  １３８：４８０６−４８１１（１９９７）］、性的機能不全［Ｊ．Ｅ．Ｊｏｎｅｓら，  Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｒｅｇｕｌ．Ｉｎｔｅｇｒ．Ｃｏｍｐ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．２８３：Ｒ５９１−５９７（２００２）］、および早産［Ｐ．Ｄ．Ｗａｄｈｗａら，  Ａｍ．Ｊ．Ｏｂｓｔｅｔ．Ｇｙｎｅｃｏｌ．１９１：１０６３−１０６９（２００４）］において役割を果たすという指摘がある。ＣＲＦが免疫系において重要な役割を果たすという証拠もある。これは、炎症性障害［Ａ．ＧｒａｖａｎｉｓおよびＡ．Ｎ．Ｍａｒｇｉｏｒｉｓ，  Ｃｕｒｒ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１２：１５０３−１５１２（２００５）］、アレルギー［Ｌ．Ｋ．Ｓｉｎｇｈら，  Ｂｒａｉｎ  Ｂｅｈａｖ．Ｉｍｍｕｎ．１３：２２５−２３９（１９９９）］、多発性硬化症および他の自己免疫障害［Ｃ．Ｂｅｎｏｕら，  Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１７４：５４０７−５４１３（２００５）］を治療するための治療的可能性を示す。上述のものに加えて、ＣＲＦは、内臓痛［Ｍ．Ｎｉｊｓｅｎら，  Ｎｅｕｒｏｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．Ｍｏｔｉｌ．１７：４２３−４３２（２００５）］、睡眠障害［Ｔ．Ｍ．ＢｕｃｋｌｅｙおよびＡ．Ｆ．Ｓｃｈａｔｚｂｅｒｇ，  Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｍｅｔａｂ．９０：３１０６−３１１４（２００５）］、下垂体部腫瘍または異所性下垂体由来の腫瘍［Ｋ．Ｄ．Ｄｉｅｔｅｒｉｃｈら，  Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｍｅｔａｂ．８３：３３２７−３３３１（１９９８）］、慢性疲労症候群および線維筋痛［Ｇ．ＮｅｅｃｋおよびＬ．Ｊ．Ｃｒｏｆｆｏｒｄ，  Ｒｈｅｕｍ．Ｄｉｓ．Ｃｌｉｎ．Ｎｏｒｔｈ  Ａｍ．２６：９８９−１００２（２０００）］に関連付けられてきた。
【００３２】
ＣＲＦ受容体亜型（ＣＲＦ１およびＣＲＦ２）が確認されており、これらは脳内に不均一に分布しており［Ｄ．Ｔ．Ｃｈａｌｍｅｒｓら，  ＴＩＰＳ  １７：１６６−７２（１９９６）］、これは機能的多様性の可能性を示唆している［Ｓ．Ｃ．Ｈｅｉｎｒｉｃｈｓら，  Ｒｅｇｕｌ．Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ７１：１５（１９９７）］。例えば、広く分布した脳ＣＲＦ１受容体は、環境ストレス因子への曝露に付随する情動性に強く関係する［Ｇ．Ｌｉｅｂｓｃｈら，  Ｒｅｇｕｌ．Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ５９：２２９−３９（１９９５）；Ｄ．Ｗ．Ｓｃｈｕｌｚ，  ＰＮＡＳ  ９３：１０４７７−８２（１９９６）］。重要なことは、ＣＲＦ２受容体ではなくＣＲＦ１受容体が、不安惹起様行動の選択を媒介するように見えることである［Ｈｅｉｎｒｉｃｈｓら，  １９９７］。より離散的な中隔／視床下部分布［Ｄ．Ｔ．Ｃｈａｌｍｅｒｓら，  Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．１５（１０）：６３４０−５０（１９９５）］および別の内在性リガンドの入手可能性［Ｊ．Ｖａｕｇｈａｎら，  Ｎａｔｕｒｅ  ３７８：２８７−９２（１９９５）］は、ＣＲＦ２受容体の異なる機能的な役割を示唆する［Ｈｅｉｎｒｉｃｈｓら，  １９９７］。例えば、ＣＲＦ１受容体よりもＣＲＦ２受容体に対して優先的な親和性を有する新規なＣＲＦ族の神経ペプチドが、選択的なＣＲＦ１アゴニズムで観察される行動活性化の外観を生成することのなく食欲を抑制することが報告されている［Ｈ．Ｔｅｚｖａｌら，  ＰＮＡＳ  １０１（２５）：９４６８−９４７３（２００４）］。ある場合には、ＣＲＦ２アゴニズムは、ＣＲＦ１アンタゴニストまたはＣＲＦ１遺伝子欠失について報告されている効果に類似の効果をもたらす［Ｓ．Ｃ．Ｈｅｉｎｒｉｃｈｓ，  Ｔｒｅｎｄｓ  ｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ２０（８）：３１１−５（１９９９）］。例えば、ＣＲＦ２アゴニストが抗肥満薬として提唱されてきたが、ＣＲＦ１アンタゴニストも同様に肥満に対する重要な治療法であるかも知れない［Ｃ．Ｃｏｎｔｏｒｅｇｇｉら，Ｎｅｕｒｏｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ  ８０（２）：１１１−２３（２００４）］。
【００３３】
（本発明の化合物の調製）
本発明の化合物のすべては、例えば以下のスキームに示す合成経路に従って化学的に調製することができる。しかしながら、以下の考察は、本発明の範囲を限定することは決して意図されていない。例えば、記載された経路の各々についての具体的な合成ステップは、式（Ｉ）のさらなる化合物を調製するために、異なる様式で組み合わせてもよいし、異なるスキームからのステップと関連させて組み合わせてもよい。各ステップの生成物は、抽出、エバポレーション、沈殿、クロマトグラフィ、濾過、粉末化、結晶化などを含めた従来の方法によって回収することができる。下記のスキームでは、すべての置換基は、別段の記載がない限り、これまで定義されたとおりであり、適切な試薬は、当該分野で周知であり、かつ認識されている。
【００３４】
【化７】
2010504343.tif 000009
【００３５】
式（Ｉ）の化合物の形成は、スキーム１に示す反応に従って実施することができる。適切な式（Ｉ）の化合物は、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が式Ｉについて定義されたとおりである化合物である。
【００３６】
ステップ１では、アセト酢酸エチルおよび５−メチル−２Ｈ−ピラゾール−３−イルアミンは還流酢酸中で縮合され、２，５−ジメチル−４Ｈ−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−７−オン（１）を形成する。
【００３７】
式（１）のピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−７−オンは、引き続いてステップ２で、不活性溶媒（トルエンなど）中その溶媒の還流温度でオキシ塩化リンおよびジメチルアニリンを使用して７−クロロ−２，５−ジメチル−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジンに変換される。
【００３８】
スキーム１、ステップ３では、式（３）のＧｒｉｇｎａｒｄ試薬（Ｘ＝ＣｌまたはＢｒ）は不活性溶媒（トルエンなど）中、還流温度で式（２）のクロリドと反応し、式（４）の７−アルキルピラゾロピリミジンを与える。あるいは、式（４）の７−アルキルピラゾロピリミジンは、ステップ４に示すように、ジケトンと５−メチル−２Ｈ−ピラゾール−３−イルアミンとの縮合により得られる。この反応は、エタノール中で触媒量のピペリジンを用いて６０〜８０℃の温度で実施される（Ｎｏｖｉｎｓｏｎ，Ｔ．ら，  Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９７５，１８，４６０）。Ｒ１＝Ｈの場合で、かつ例えばＲ２＝プロピルの場合は位置異性体の混合物が得られ、それらの位置異性体はステップ５のヨウ素化の後で分離される。
【００３９】
式（４）のピラゾロピリミジンは、アセトニトリル中の過剰のＮ−ヨードスクシンイミドを使用して、ステップ５で式（５）のヨードピラゾロピリミジンへと官能化される。
【００４０】
スキーム１、ステップ６では、式（５）のヨードピラゾロピリミジンは、Ｎｅｇｉｓｈｉクロスカップリング反応において複素環式亜鉛ハライド（Ｒ３ＺｎＸ）（Ｘ＝ＣｌまたはＢｒ）と反応させる。この複素環式亜鉛ハライドは、当業者に周知の方法を使用して生成することができる。例えば、この有機亜鉛試薬は、複素環式ブロミドを亜鉛金属と反応させることにより、あるいは非ハロゲン化複素環を使用しｎ−ブチルリチウム、ｓｅｃ−ブチルリチウム、またはｔｅｒｔ−ブチルリチウムを用いて複素環式リチウム試薬を生成し、次いでＺｎＣｌ２を使ってリチウム−亜鉛交換を行うことにより生成される。この有機亜鉛試薬は、パラジウム触媒（例えば、ジクロロ［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウム（ＩＩ）ジクロロメタンなど）の存在下で、不活性溶媒（ＴＨＦなど）中、還流温度で約１２〜３６時間、式（５）のヨードピラゾロピリミジンとカップリングし、式（Ｉ）のピラゾロピリミジンを与える。
【００４１】
あるいは、ステップ７では、複素環式ボロン酸（Ｒ３Ｂ（ＯＨ）２）が使用され、式（５）のヨード化合物とＳｕｚｕｋｉカップリング反応が行われる。このカップリング手順について、当業者が利用できる多くの反応条件が存在する。好ましい条件では、パラジウム触媒，例えばビス（トリ−ｔ−ブチルホスフィン）パラジウム（０）とともにトルエン／エタノール／２Ｍ  炭酸ナトリウムの溶媒混合物が使用され、６０℃から還流温度で約１２〜３６時間反応が行われる。
【００４２】
容易に理解されるとおり、ヘテロアリールボロン酸は、当該分野で周知の手順を使用して、本願明細書に記載される方法と類似の方法によって調製することができる。例えば、チオフェンおよびベンゾチオフェンはＮ−ブロモスクシンイミドを使用して臭素化することができ、これは引き続いてアルキルリチウム試薬を使ったハロゲン−金属交換、次いでホウ酸トリメチルでの処理およびワークアップ時の加水分解を使用してボロン酸に変換できる。
【００４３】
例えば式（Ｉｃ）の化合物のようなチエノピリジンは、市販のチエノ［３，２−ｂ］ピリジン−７−オールをブロミドに変換し、次いでハロゲン−金属交換し、プロトン源（メタノール／水など）でクエンチすることにより容易に得られることを当業者は理解するであろう。引き続く臭素を用いた３位の臭素化、および続くメチルボロン酸とのＳｕｚｕｋｉカップリングにより３−メチル−チエノ［３，２−ｂ］ピリジンが得られ、これは上述のようにＺｎＣｌ２を使用して式（５）のヨードピラゾロピリミジンとカップリングされる。
【００４４】
【化８】
2010504343.tif 000010
【００４５】
式（７）、式（８）、または式（９）の化合物の形成は、スキーム２に示す反応に従って実施することができる。式（７）、式（８）、または式（９）の適切な化合物は、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ４が式Ｉについて定義されたとおりであり、「Ｈｅｔ」が示されているように定義される化合物である。
【００４６】
スキーム２、ステップ１では、式（６）のチオフェンは不活性溶媒（ジクロロメタンまたはクロロホルムなど）中でＮ−ブロモスクシンイミドにより臭素化される。
【００４７】
ステップ２では、式（７）のブロモチオフェンは複素環式亜鉛試薬とカップリングされ、式（８）のチオフェン複素環を与える。この複素環式亜鉛試薬はブロモ複素環および亜鉛金属から形成され、その場で式（７）のブロモチオフェンと反応させる。この反応は、不活性溶媒（ＴＨＦなど）中、その溶媒の還流温度で行われる。あるいは、複素環式リチウム試薬は、例えば１−メチル−１，２，４−トリアゾールに対してｎ−ブチルリチウム、ｓｅｃ−ブチルリチウム、またはｔｅｒｔ−ブチルリチウムを使用して形成することができ、次いでこれをＺｎＣｌ２を使ってリチウム−亜鉛交換することによって複素環式亜鉛試薬が得られる。
【００４８】
スキーム２、ステップ３では、式（６）のチオフェンはニトロ化され式（９）のニトロチオフェンを与える。好ましい条件では、ジクロロメタンおよびＴＦＡと７０％硝酸との溶媒混合物が使用される。式（９）のニトロチオフェンはさらなる官能化のための中間体として働くことができるということを当業者は理解するであろう。例えば、このニトロ基を還元し、アシル化してアセトアミドを得ることができるし、アルキル化してジアルキルアミンを得ることができる。
【００４９】
また、２−複素環チオフェンは当該分野で公知の方法を使用して調製することができ、次いでブロモチオフェンまたはチオフェニルボロン酸として官能化でき、次いで式（５）のヨードピラゾロピリミジンとカップリングさせるというように、式（８）の化合物を調製するために必要とされるステップは任意の順番で実施することができるということを認識されたい。
【００５０】
【化９】
2010504343.tif 000011
【００５１】
式（１０）の化合物の形成は、スキーム３に示す反応に従って実施することができる。適切な式（１０）の化合物は、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ４が式Ｉについて定義されたとおりであり、Ｒ５ａ＝−ＯＣＨ３、−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ３、−ＣＨ２ＯＣＨ３、または−ＣＯ２ＣＨ２ＣＨ３である化合物である。
【００５２】
容易に理解されるとおり、式（７）のブロモチオフェンは、当業者が種々の置換チオフェンへと容易に変換できる有用な中間体を代表する。例えば、チエニルＧｒｉｇｎａｒｄ試薬の形成、続く酸素での処理（Ｈｕｒｄ，Ｃ．Ｄ．およびＫｒｅｕｚ，Ｋ．  ＪＡＣＳ  １９５０，７２，５５４３）により２−ヒドロキシオフェンが得られ、これはアシル化されアセトキシ誘導体を与える。上記Ｇｒｉｇｎａｒｄ試薬はまた、求電子剤（シアノギ酸エチルなど）で処理されてエトキシカルボニル置換チオフェンを与えることもできる。ｎ−ブチルリチウム、ｓｅｃ−ブチルリチウム、またはｔｅｒｔ−ブチルリチウムとのハロゲン−リチウム交換によって、チエニルリチウム試薬を与えることができる。この試薬は引き続いて求電子剤（ヨードメチルメチルエーテルのようなアルキルハライドなど）と反応させることができる。加えて、酸化銅、ヨウ化ナトリウム、およびナトリウムメトキシドで処理することにより２−メトキシチオフェンが得られる。
【００５３】
本願明細書で使用する場合、「ＴＬＣ」とは薄層クロマトグラフィを指し、「ＨＰＬＣ」とは高速液体クロマトグラフィを指し、「δ」とはテトラメチルシランから低磁場へのｐｐｍを指し、「ＴＨＦ」とはテトラヒドロフランを指し、「ＥｔＯＡｃ」とは酢酸エチルを指し、「ＨＯＡｃ」とは酢酸を指し、「ＭｅＯＨ」とはメタノールを指し、「ＤＭＥ」とはジメトキシエタンを指す。
【実施例】
【００５４】
さらに詳述することはしないが、当業者は前述の説明を使用して本発明を完全に実施できると考えられる。以下の調製例および実施例は、本発明をさらに詳細に説明するために提供される。それらは、本発明を例示することを意図しており、本発明を限定することは決して意図していない。試薬および出発物質は、当業者には容易に入手できるものであるか、または容易に合成できるものである。実施例１〜実施例２７は代表的な化合物を提供し、その調製を例示する。実施例Ａ〜実施例Ｃは、本発明の化合物の生物学的特性を測定するために使用することができる種々の生物学的試験を例示する。当業者は、実施例に記載された手順から適切なバリエーションをすぐに認識するであろう。本発明の化合物の名称は、ＣｈｅｍＤｒａｗ  Ｕｌｔｒａ（登録商標）バージョン７．０．１によって提供されたものである。
【００５５】
（調製例１）
２，５−ジメチル−４Ｈ−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−７−オン
温度を２５−２８℃に維持しながら、アセト酢酸エチル（１２８ｇ、０．９８ｍｏｌ）を５−メチル−２Ｈ−ピラゾール−３−イルアミン（１００ｇ、０．９５ｍｏｌ）の酢酸溶液（５００ｍＬ）に滴下した。この混合物を還流状態で１０時間加熱し、室温まで冷却した。この反応液を、温度を１０℃より低く保って、５℃に冷却したｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（５Ｌ）に加えた。５℃で１時間撹拌し、濾過した。生成した物質を真空中で一晩乾燥し、白色固体（１５８ｇ、９６％）を得た。
【００５６】
（調製例２）
７−クロロ−２，５−ジメチル−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン
トルエン（１５０ｍＬ）中の２，５−ジメチル−４Ｈ−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−７−オン（１０．０ｇ、６１．３ｍｍｏｌ）の懸濁液にＮ，Ｎ−ジメチルアニリン（９．７ｍＬ、７６．７ｍｍｏｌ）を加えた。オキシ塩化リン（１１．２ｍＬ、１２２．６ｍｍｏｌ）をこの白色懸濁液に滴下した。不活性雰囲気下で３時間還流させ、室温まで冷却し、減圧を使用してこの反応液を褐色油状物にまで濃縮した。この油状物を酢酸エチル（２５０ｍＬ）に溶解し、１Ｎ  ＮａＯＨを用いて塩基性にした。層分離させ、この塩基性の水相をさらなる酢酸エチル（２×１００ｍＬ）で抽出した。この有機相を合わせ、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し褐色固体を得た。フラッシュクロマトグラフィを使用して、２０％増分の段階勾配で８０％ヘキサン／２０％（３０％ＴＨＦ／ヘキサン）から０％ヘキサン／１００％（３０％ＴＨＦ／ヘキサン）を用いて溶出してこの生成物を精製し、淡緑色固体（６．６５ｇ、５９％）を得た。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ（３５Ｃｌ）１８２．３（Ｍ＋１）＋。
【００５７】
（調製例３）
７−（１−エチル−プロピル）−２，５−ジメチル−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン
【００５８】
【化１０】
2010504343.tif 000012
還流冷却器を取り付けたオーブン乾燥したフラスコに、不活性雰囲気下で触媒量のヨウ素およびＲｉｅｋｅ（登録商標）マグネシウム（１．０Ｍ  ＴＨＦ溶液、５２ｍＬ、５２ｍｍｏｌ）を入れた。４５℃に加熱し、３−ブロモペンタン（５．３ｍＬ、４２．９ｍｍｏｌ）をこの反応液に加えた。温度は、Ｇｒｉｇｎａｒｄ反応が開始するにつれて急上昇した。この反応液を５０℃でさらに４時間撹拌し、室温まで冷却した。マグネシウム金属を沈降させ、アルゴンの陽圧でこのＧｒｉｇｎａｒｄ試薬を無水トルエン（５０ｍＬ）中の７−クロロ−２，５−ジメチルピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（５．１９ｇ、２８．６ｍｍｏｌ）が入っているフラスコにカニューレで移動させた。加熱して、不活性雰囲気下で４８時間還流させた。反応液を室温まで冷却し、水でクエンチした。この反応液を酢酸エチル（１５０ｍＬ）で希釈し、水（５０ｍＬ）を加えた。層分離させ、水相を酢酸エチル（７５ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせ、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィを使用して、２０％増分の段階勾配で８０％ペンタン／２０％（３０％ＴＨＦ／ペンタン）から０％ペンタン／１００％（３０％ＴＨＦ／ペンタン）を用いて溶出して精製し、黄色油状物（２．５９ｇ、４２％）を得た。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ２１８．１（Ｍ＋１）＋。
【００５９】
市販のＧｒｉｇｎａｒｄ試薬を使用して、または上記のようにしてＧｒｉｇｎａｒｄ試薬を調製して、基本的に調製例３に記載したようにして、以下の化合物を調製した。
【００６０】
【表１】
2010504343.tif 000013
【００６１】
（調製例６）
７−ブチル−２，５−ジメチル−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン
５−メチル−２Ｈ−ピラゾール−３−イルアミン（２１７ｍｇ、２．１７ｍｍｏｌ）、ノナン−２，４−ジオン（３３９ｍｇ、２．３９ｍｍｏｌ）およびピペリジン（１滴）をエタノール（１０ｍＬ）に加え、８０℃で一晩加熱した。室温まで冷却し、乾固するまで濃縮した。シリカゲルカラムクロマトグラフィ（０−２０％酢酸エチルを含むヘキサン）によって精製し、２つの異性体の混合物（２ｇ）を得た。
【００６２】
（調製例７）
７−（１−エチル−プロピル）−３−ヨード−２，５−ジメチル−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン
【００６３】
【化１１】
2010504343.tif 000014
７−（１−エチル−プロピル）−２，５−ジメチル−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（２．１４ｇ、９．８４ｍｍｏｌ）を無水アセトニトリル（２５ｍＬ）に溶解させ、Ｎ−ヨードスクシンイミド（３．０ｇ、１３．３ｍｍｏｌ）を１０分間隔で６回（各回に０．５ｇずつ）に分けて加えた。この反応液を４時間撹拌した。アセトニトリルを留去し、生成した油状物をジクロロメタン（１００ｍＬ）で希釈した。この橙色溶液を飽和塩化アンモニウム溶液（２×５０ｍＬ）で洗浄した。有機相を集め、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、暗赤色油状物を得た。フラッシュクロマトグラフィを使用して、５０％増分の段階勾配で１００％ペンタン／０％（２０％酢酸エチル／ペンタン）から０％ペンタン／１００％（２０％酢酸エチル／ペンタン）を用いて溶出して精製し、橙色油状物（３．２８ｇ、９７％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：６．４４（ｓ，１Ｈ），３．５９（ｍ，１Ｈ），２．６１（ｓ，３Ｈ），２．４９（ｓ，３Ｈ），１．８６−１．７６（ｍ，４Ｈ），０．８５（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，６Ｈ）。
【００６４】
基本的に調製例７に記載したようにして以下の化合物を調製した。
【００６５】
【表２】
2010504343.tif 000015
＊ワークアップ：有機層をＮａ２Ｓ２Ｏ３水溶液で洗浄した。調製例６からの異性体の混合物に対して反応を行った。シリカゲル上でこの２つの異性体を分離した（０−２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）。
【００６６】
（実施例１）
３−（３−クロロ−チオフェン−２−イル）−７−（１−エチル−プロピル）−２，５−ジメチル−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン
【００６７】
【化１２】
2010504343.tif 000016
Ｒｅｉｋｅ（登録商標）亜鉛（５ｇ／１００ｍＬ  ＴＨＦ、２０ｍＬ、１５．０ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（１０ｍＬ）に懸濁させ、２−ブロモ−３−クロロチオフェン（１．９８ｇ、１０．０ｍｍｏｌ）を加えた。オイルバス（８５℃）中、不活性雰囲気下で３時間この混合物を還流させた。この反応液を室温まで冷却し、残存する亜鉛金属を遠心分離した。アルゴンの陽圧下で、カリューレによってこの試薬溶液を新しい容器に移し、７−（１−エチル−プロピル）−３−ヨード−２，５−ジメチル−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（１．７２ｇ、５．０ｍｍｏｌ）を加えた。この溶液をアルゴンの陽圧によって１０〜１５分間脱気し、ジクロロ［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウム（ＩＩ）ジクロロメタン（０．２２５ｇ、０．２７５ｍｍｏｌ）を加えた。不活性雰囲気下で、還流温度で一晩撹拌した。この反応液を室温まで冷却し、飽和塩化アンモニウムでクエンチし、酢酸エチル（７５ｍＬ）で希釈した。層分離させ、水層部分を酢酸エチル（５０ｍＬ）で抽出し、有機相を合わせ、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィを使用して、１０％増分の段階勾配で１００％ヘキサン／０％（１５％酢酸エチル／ヘキサン）から０％ヘキサン／１００％（１５％酢酸エチル／ヘキサン）を用いて溶出してこの生成した残渣を精製し、黄色固体（１．３５ｇ、４０％）を得た。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ（３５Ｃｌ）３３４．４（Ｍ＋１）＋。
【００６８】
基本的に実施例１に記載したようにして以下の化合物を調製した。
【００６９】
【表３】
2010504343.tif 000017
【００７０】
（実施例４）
３−（３−メチル−チオフェン−２−イル）−７−（１−エチル−プロピル）−２，５−ジメチル−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン
オーブン乾燥したフラスコに３−メチル−２−チエニル亜鉛ブロミド（１１．０ｍＬ、５．５ｍｍｏｌ）、無水ＴＨＦ（６．０ｍＬ）および７−（１−エチル−プロピル）−３−ヨード−２，５−ジメチル−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（０．５３６ｇ、１．５６ｍｍｏｌ）を入れた。アルゴンの陽圧で１０〜１５分間脱気し、ジクロロ［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウム（ＩＩ）ジクロロメタン（０．１２ｇ、０．１５ｍｍｏｌ）を加えた。オイルバス（１００℃）中、不活性雰囲気下で一晩還流させた。この反応液を室温まで冷却し、飽和塩化アンモニウムでクエンチし、酢酸エチル（７５ｍＬ）で希釈した。層分離させ、水層部分を酢酸エチル（５０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせ、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィを使用して、１０％増分の段階勾配で１００％ペンタン／０％（２５％酢酸エチル／ペンタン）から０％ペンタン／１００％（２５％酢酸エチル／ペンタン）を用いて溶出してこの生成した残渣を精製し、白色フォーム状物を得た。ヘキサンで粉末化し、濾過した（０．４３２ｇ、８％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：７．２６（ｄ，Ｊ＝４．８，ＭＨｚ，１Ｈ），６．９６（ｄ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，１Ｈ），６．４２（ｓ，１Ｈ），３．６４−３．６０（ｍ，１Ｈ），２．５３（ｓ，３Ｈ），２．４３（ｓ，３Ｈ），２．１４（ｓ，３Ｈ），１．８７−１．７９（ｍ，４Ｈ），０．８８（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，６Ｈ）。
【００７１】
（実施例５）
３−（５−ブロモ−３−クロロ−チオフェン−２−イル）−７−（１−エチル−プロピル）−２，５−ジメチル−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン
【００７２】
【化１３】
2010504343.tif 000018
３−（３−クロロ−チオフェン−２−イル）−７−（１−エチル−プロピル）−２，５−ジメチル−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（１．１６ｇ、３．５ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１５ｍＬ）に溶解させ、Ｎ−ブロモスクシンイミド（０．６９ｇ、３．８５ｍｍｏｌ）を一度に加えた。不活性雰囲気下で２時間撹拌し、この反応が完結していることをＴＬＣを用いて確認した。この反応液をジクロロメタン（５０ｍＬ）で希釈し、水（７５ｍＬ）、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、黄色固体（１．５６ｇ、定量的収率）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：７．３９（ｓ，１Ｈ），６．８８（ｓ，１Ｈ），３．４８−３．４４（ｍ，１Ｈ），２．４５（ｓ，３Ｈ），２．３９（ｓ，３Ｈ），１．８０−１．７３（ｍ，４Ｈ），０．７６（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，６Ｈ）。
【００７３】
基本的に実施例５に記載したようにして以下の化合物を調製した。
【００７４】
【表４】
2010504343.tif 000019
＊ヘキサン／酢酸エチルを用いて溶出するカラムクロマトグラフィによって精製した。
【００７５】
（実施例９）
３−［３−クロロ−５−（２−メチル−２Ｈ−［１，２，４］トリアゾール−３−イル）−チオフェン−２−イル］−７−（１−エチル−プロピル）−２，５−ジメチル−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン
【００７６】
【化１４】
2010504343.tif 000020
Ｒｅｉｋｅ（登録商標）亜鉛（５ｇ／１００ｍＬ  ＴＨＦ、５．５ｍＬ、４．２ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（５ｍＬ）に懸濁させ、１−メチル−５−ブロモ−１，２，４−トリアゾール（０．４ｇ、２．５ｍｍｏｌ）を加えた。オイルバス（８５℃）中、不活性雰囲気下で３時間還流させた。この反応液を室温まで冷却し、残存する亜鉛金属を遠心分離した。アルゴンの陽圧下で、カリューレによってこの試薬溶液を新しい容器に移し、３−（５−ブロモ−３−クロロ−チオフェン−２−イル）−７−（１−エチル−プロピル）−２，５−ジメチル−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（０．６４ｇ、１．４５ｍｍｏｌ）を加えた。この溶液をアルゴンの陽圧で１０−１５分間脱気し、ジクロロ［１，１−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウム（ＩＩ）ジクロロメタン（０．１３６ｇ、０．１６７ｍｍｏｌ）を加えた。不活性雰囲気下で一晩還流させた。この反応液を室温まで冷却し、飽和塩化アンモニウムでクエンチし、酢酸エチル（７５ｍＬ）で希釈した。層分離させ、水層部分を酢酸エチル（５０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせ、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィを使用して、１０％増分の段階勾配で１００％ヘキサン／０％（３０％ＴＨＦ／ヘキサン）から０％ヘキサン／１００％（３０％ＴＨＦ／ヘキサン）を用いて溶出してこの生成した残渣を精製し、黄色固体（０．２９８ｇ、５０％）を得た。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ（３５Ｃｌ）４１５．０（Ｍ＋１）＋。
【００７７】
市販の６−メチル−２−ピリジル亜鉛ブロミドを使用して、基本的に実施例９に記載したようにして、以下の化合物を調製した。
【００７８】
【表５】
2010504343.tif 000021
【００７９】
（実施例１１）
３−（３−クロロ−５−メトキシ−チオフェン−２−イル）−７−（１−エチル−プロピル）−２，５−ジメチル−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン
オーブン乾燥したフラスコに３−（５−ブロモ−３−クロロ−チオフェン−２−イル）−７−（１−エチル−プロピル）−２，５−ジメチル−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（０．４６ｇ、１．１ｍｍｏｌ）、酸化銅（０．０４５ｇ、０．５６ｍｍｏｌ）、ヨウ化ナトリウム（０．０２０ｇ、０．１１ｍｍｏｌ）、２５％ナトリウムメトキシド／メタノール溶液（１０ｍＬ）および無水メタノール（１０ｍＬ）を入れた。オイルバス（９０℃）中で、この反応液を不活性雰囲気下で週末にわたって還流させた。この反応液を氷水でクエンチし、エーテル（３×１００ｍＬ）で抽出した。有機部分を合わせ、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィを使用して、１０％増分の段階勾配で１００％ヘキサン／０％（３５％酢酸エチル／ヘキサン）から０％ヘキサン／１００％（３５％酢酸エチル／ヘキサン）を用いて溶出してこの生成した残渣を精製し、白色フォーム状物（０．０８６ｇ、２１％）を得た。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ（３５Ｃｌ）３６３．７（Ｍ＋１）＋。
【００８０】
（実施例１２）
酢酸  ４−クロロ−５−［７−（１−エチル−プロピル）−２，５−ジメチル−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル］エステル
臭化イソプロピル（０．２５ｍＬ、２．７ｍｍｏｌ）を、Ｒｅｉｋｅ（登録商標）マグネシウム（１．０Ｍ  ＴＨＦ溶液、２．７ｍＬ、２．７ｍｍｏｌ）および無水ＴＨＦ（３ｍＬ）中の３−（５−ブロモ−３−クロロ−チオフェン−２−イル）−７−（１−エチル−プロピル）−２，５−ジメチル−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（０．７４、１．８ｍｍｏｌ）の懸濁液に加えた。不活性雰囲気下で１時間還流させ、この反応液を室温まで冷却した。陽圧下、室温で９０分間、この発熱性反応液に酸素を吹き込んだ。この反応液を飽和塩化アンモニウム（３０ｍＬ）でクエンチし、酢酸エチル（２×１００ｍＬ）で抽出し、減圧下で濃縮した。この油状物をエーテル（１５０ｍＬ）に溶解させ、０．１Ｎ  水酸化ナトリウム（３×７５ｍＬ）で洗浄し、この塩基性の水相をエーテル（５０ｍＬ）で逆抽出した。この水相を飽和塩化アンモニウムで酸性にし、ジクロロメタン（４×７５ｍＬ）で抽出した。ジクロロメタン部分を合わせ、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。この粗油状物（０．１３８ｇ、０．３９ｍｍｏｌ）をトリエチルアミン（０．２３ｍＬ、１．６ｍｍｏｌ）および塩化アセチル（０．０３４ｍＬ、０．４７ｍｍｏｌ）を含むジクロロメタン（２ｍＬ）に溶解させた。不活性雰囲気下で１時間撹拌し、ジクロロメタン（５０ｍＬ）で希釈し、水（５０ｍＬ）で洗浄した。この有機相を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィを使用して、１０％増分の段階勾配で１００％ヘキサン／０％（２５％酢酸エチル／ヘキサン）から０％ヘキサン／１００％（２５％酢酸エチル／ヘキサン）を用いて溶出してこの生成した残渣を精製し、白色フォーム状物（０．０８４ｇ、２１％）を得た。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ（３５Ｃｌ）３９２．０（Ｍ＋１）＋。
【００８１】
（実施例１３）
３−（３−クロロ−５−メトキシメチル−チオフェン−２−イル）−７−（１−エチル−プロピル）−２，５−ジメチル−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン
オーブン乾燥したフラスコに３−（５−ブロモ−３−クロロ−チオフェン−２−イル）−７−（１−エチル−プロピル）−２，５−ジメチル−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（０．４１、１．０ｍｍｏｌ）および無水ＴＨＦ（５ｍＬ）を入れた。不活性雰囲気下で−７０℃まで冷却し、ｎ−ブチルリチウム（２．５Ｍ  ヘキサン溶液、０．４２ｍＬ、１．０５ｍｍｏｌ）を加えた。この黄色反応液は暗赤色に変わった。ヨードメチルメチルエーテル（０．０９ｍＬ、１．１０ｍｍｏｌ）を加え、この反応液を室温まで戻した。この反応混合物を酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈し、水（７５ｍＬ）およびブライン（７５ｍＬ）で洗浄した。この有機部分を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下で橙色油状物になるまで濃縮した。フラッシュクロマトグラフィを使用して、１０％増分の段階勾配で１００％ヘキサン／０％（２０％酢酸エチル／ヘキサン）から０％ヘキサン／１００％（２０％酢酸エチル／ヘキサン）を用いて溶出してこの生成した残渣を精製し、黄色固体（０．１０７ｇ、２８％）を得た。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ（３５Ｃｌ）３７８．３（Ｍ＋１）＋。
【００８２】
（実施例１４）
４−クロロ−５−［７−（１−エチル−プロピル）−２，５−ジメチル−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル］−チオフェン−２−カルボン酸  エチルエステル
無水ＴＨＦ（５ｍＬ）中の３−（５−ブロモ−３−クロロ−チオフェン−２−イル）−７−（１−エチル−プロピル）−２，５−ジメチルピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（０．６２ｇ、１．５ｍｍｏｌ）の混合物を不活性雰囲気下で０℃まで冷却し、エチルマグネシウムクロリド（２Ｍ  ＴＨＦ溶液、０．８３ｍＬ、１．６５ｍｍｏｌ）を加えた。この反応液を５分間撹拌し、室温まで加温し、さらに１５分間撹拌し、次いでこの反応液の温度を０℃まで下げた。無水ＴＨＦ（１ｍＬ）で希釈したシアノギ酸エチル（０．１６ｍＬ、１．５８ｍｍｏｌ）を加えた。この反応液を室温まで加温し、１時間撹拌した。この反応液を飽和炭酸水素ナトリウム（２０ｍＬ）でクエンチし、エーテル（２×７５ｍＬ）で抽出した。有機部分を合わせ、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィを使用して、１０％増分の段階勾配で１００％ヘキサン／０％（２０％酢酸エチル／ヘキサン）から０％ヘキサン／１００％（２０％酢酸エチル／ヘキサン）を用いて溶出して精製した。この生成物を真空下で乾燥し、白色固体（０．１１４ｇ、１９％）を得た。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ（３５Ｃｌ）４０６．３（Ｍ＋１）＋。
【００８３】
（調製例１１）
２−（５−ブロモ−４−メチル−チオフェン−２−イル）−６−メチル−ピリジン
２．０Ｍ  リチウムジイソプロピルアミド（９．７６ｍＬ、１９．５２ｍｍｏｌ）を２−ブロモ−３−メチル−チオフェン（２．０ｍＬ、１７．７５ｍｍｏｌ）およびＴＨＦ（３０ｍＬ）の−７８℃の溶液に加えた。４５分後ＺｎＣｌ２（０．５Ｍ  ＴＨＦ溶液、３９．０ｍＬ、１９．５０ｍｍｏｌ）を加え、この溶液を３０分間撹拌した。２−ブロモ−６−メチル−ピリジン（２．４ｍＬ、２１．２９ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ＰＰｈ３）４（０．５０ｇ、０．４４ｍｍｏｌ）を加えた。この溶液を周囲温度まで加温し、２時間撹拌した。この反応液を飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液（２０ｍＬ）で洗浄した。水層をＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍＬ）で洗浄した。有機層を合わせ、飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮した。シリカゲルカラムクロマトグラフィ（１０％−２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン勾配）によってこの生成した残渣を精製し、標題の化合物（２．３４ｇ、４９％）を得た。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ（７９Ｂｒ／８１Ｂｒ）２６７．７／２６９．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
【００８４】
（調製例１２）
３−メチル−５−（６−メチル−ピリジン−２−イル）−チオフェン−２−ボロン酸
２−（５−ブロモ−４−メチル−チオフェン−２−イル）−６−メチル−ピリジン（３７．６ｇ、０．１４ｍｏｌ）およびホウ酸トリイソプロピル（３４．２ｇ、０．１８２ｍｏｌ、４２．３ｍＬ）を窒素雰囲気下でトルエン（１００ｍＬ）およびＴＨＦ（１６０ｍＬ）に溶解させた。この溶液を−４０℃まで冷却した。ｎ−ブチルリチウム（２．５Ｍ  ヘキサン溶液、７０ｍＬ、０．１７５ｍｏｌ）を、滴下ロートを使用して、４０分間かけてゆっくり加えた。溶液内の温度は−４０℃から−３５℃まで変化した。添加終了後、この混合物を−４０℃で２時間撹拌した。この反応液を０℃まで加温し、ＴＨＦ（４０ｍＬ）、次いで２Ｎ  ＨＣｌ水溶液（１２０ｍＬ）を加えて白色固体を形成させた。ｐＨ＝７になりすべての塩が溶解するまで１Ｎ  ＮａＯＨを加えた。有機層を分離し、水層をジエチルエーテル（３×）で抽出した。有機層を合わせ、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮した。ＴＨＦをこの残渣に加え、次いでヘキサンを加えた。生成した黄色沈殿物を濾過し、沈殿ステップを数回繰り返し、標題の化合物（１９．７ｇ、６０％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ  ２．４７（ｂｓ，３Ｈ），２．６１（ｓ，３Ｈ），７．２０（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），７．６０（ｂｓ，１Ｈ），７．６４（ｂｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），７．７５（ｔ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ）。
【００８５】
（実施例１５）
７−（１−エチル−プロピル−２，５−ジメチル−３−［３−メチル−５−（６−メチル−ピリジン−２−イル）チオフェン−２−イル］−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン
【００８６】
【化１５】
2010504343.tif 000022
オーブン乾燥したフラスコに２−（５−ボロン酸−４−メチル−チオフェン−２−イル）−６−メチル−ピリジン（０．２９ｇ、１．２４ｍｍｏｌ）、無水トルエン（４ｍＬ）、無水エタノール（１ｍＬ）、２Ｍ  炭酸ナトリウム（１．１ｍＬ、２．２ｍｍｏｌ）および７−（１−エチル−プロピル）−３−ヨード−２，５−ジメチル−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（０．２５ｇ、０．７３ｍｍｏｌ）を入れた。アルゴンの陽圧で３０分間この混合物を脱気し、ビス（トリ−ｔ−ブチルホスフィン）パラジウム（０）（０．１０ｇ、０．０８６ｍｍｏｌ）を加えた。オイルバス（１００℃）中、この反応液を不活性雰囲気下で一晩還流させた。この反応液を室温まで冷却し、酢酸エチル（７５ｍＬ）および水（２５ｍＬ）で希釈した。層分離させ、水層部分を酢酸エチル（５０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせ、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィを使用して、１０％増分の段階勾配で１００％ヘキサン／０％（２５％酢酸エチル／ヘキサン）から０％ヘキサン／１００％（２５％酢酸エチル／ヘキサン）を用いて溶出してこの生成した残渣を精製し、オフホワイトのフォーム状物（０．２１５ｇ、７３％）を得た。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ４０５．４（Ｍ＋１）＋。
【００８７】
（調製例１３）
７−ブロモ−チエノ［３，２−ｂ］ピリジン
チエノ［３，２−ｂ］ピリジン−７−オール（５．００ｇ、３３ｍｍｏｌ）およびオキシ臭化リン（５０ｇ、１７４ｍｍｏｌ）を一緒に１１０℃で３時間加熱した。この熱反応混合物を氷および５Ｎ  ＮａＯＨの混合物に注ぎ込み、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機部分をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、エバポレーションした。この生成した粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィカラム（ヘキサン：ＥｔＯＡＣ＝３：１）を使用して精製し、標題の化合物（４．１９ｇ、５９％）を得た。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ（８１Ｂｒ）２１５（Ｍ＋）。
【００８８】
（調製例１４）
チエノ［３，２−ｂ］ピリジン
７−ブロモ−チエノ［３，２−ｂ］ピリジン（３．６９ｇ、１７ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（２０ｍＬ）に溶解させ、−７８℃まで冷却した。ｎ−ＢｕＬｉ（１．６Ｍ  ヘキサン溶液、２１．２ｍＬ、３４ｍｍｏｌ）を−７８℃でこの混合物にゆっくり加え、−７８℃で２０分間撹拌した。ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ＝１／１（２０ｍＬ）を加え、室温で１時間撹拌した。この反応混合物をＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。この有機部分を飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、エバポレーションした。シリカゲルクロマトグラフィを使用して、１００％ヘキサンからヘキサン：酢酸エチル＝１０：１を用いて溶出してこの生成した残渣を精製し、標題の化合物（１．４４ｇ、６２％）を得た。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  １３６（Ｍ＋１）＋。
【００８９】
（調製例１５）
３−ブロモ−チエノ［３，２−ｂ］ピリジン
ＣＨＣｌ３（６０ｍＬ）中でチエノ［３，２−ｂ］ピリジン（３．４５ｇ、２５．６ｍｍｏｌ）、炭酸水素ナトリウム（２．１５ｇ、２５．６ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＨＰＯ４（６．６９ｇ、３８．４ｍｍｏｌ）およびＭｇＳＯ４（４．０１ｇ、３３．３ｍｍｏｌ）を混合した。この混合物を還流状態で撹拌し、Ｂｒ２（１．５７ｍＬ、３０．７ｍｍｏｌ）をゆっくり加えた。この反応混合物を還流状態で一晩撹拌した。さらに臭素（０．７ｍＬ）を加え、この反応液を還流状態で４時間撹拌した。室温まで冷却し、水を加え、そしてＣＨＣｌ３で抽出した。この有機部分を飽和Ｎａ２Ｓ２Ｏ３溶液および飽和ブラインで洗浄した。Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、エバポレーションした。この生成物をヘキサン／ＣＨ２Ｃｌ２から再結晶して、標題の化合物（３．９４ｇ、７２％）を得た。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ（８１Ｂｒ）２１５（Ｍ＋）。
【００９０】
（調製例１６）
３−メチル−チエノ［３，２−ｂ］ピリジン
ＤＭＥ／水／ＥｔＯＨ＝７／３／１（４ｍＬ）中に３−ブロモ−チエノ［３，２−ｂ］ピリジン（２１４ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）およびメチルボロン酸（１８０ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ）が入っている３つのマイクロ波処理できる反応バイアルを調製した。２Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３（１．５ｍＬ、３．０ｍｍｏｌ）を加え、窒素ガスを１５分間吹き込んだ。Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（５８ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）を加え、このバイアルを封管した。マイクロ波中で、このバイアルを１３０℃で３０分間加熱した。すべてのこの反応混合物を合わせ、水およびＣＨ２Ｃｌ２を加え、抽出した。ＣＨ２Ｃｌ２層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、エバポレーションした。シリカゲルクロマトグラフィを使用して、ヘキサン：酢酸エチル：ＭｅＯＨ中の２Ｍ  ＮＨ３＝２０：４：１を用いて溶出してこの生成物を精製し、標題の化合物（１９３ｍｇ、４３％）を得た。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  １５０（Ｍ＋１）＋。
【００９１】
（実施例１６）
７−（１−エチル−プロピル）−２，５−ジメチル−３−（３−メチル−チエノ［３，２−ｂ］ピリジン−２−イル）−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン
【００９２】
【化１６】
2010504343.tif 000023
オーブン乾燥したシュレンク型フラスコに３−メチルチエノ［３，２−ｂ］ピリジン（０．２１３ｇ、１．４２ｍｍｏｌ）および無水ＴＨＦ（５ｍＬ）を入れ、不活性雰囲気下で−７８℃に冷却した。ｎ−ブチルリチウム（２．５Ｍ  ヘキサン、０．７２ｍＬ、１．７８ｍｍｏｌ）を加え、低温で３０分間撹拌した。無水塩化亜鉛（０．５８ｇ、４．２６ｍｍｏｌ）を一度に加え、低温で１５分間撹拌した。この反応液を室温まで上げ、さらに３０分間撹拌した。この反応液を無水ＴＨＦ（５ｍＬ）で希釈し、７−（１−エチル−プロピル）−３−ヨード−２，５−ジメチル−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（０．４０６ｇ、０．０８ｍｍｏｌ）を加えた。アルゴンの陽圧で１５分間脱気し、ジクロロ［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウム（ＩＩ）ジクロロメタン（０．０９３ｇ、０．１１４ｍｍｏｌ）を加えた。オイルバス（９０℃）中、不活性雰囲気下でこの反応液を一晩還流させた。この反応液を室温まで冷却し、飽和塩化アンモニウムでクエンチし、酢酸エチル（７５ｍＬ）で希釈した。層分離させ、水層部分を酢酸エチル（５０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせ、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィを使用して、１０％増分の段階勾配で１００％ヘキサン／０％（１５％酢酸エチル／ヘキサン）から０％ヘキサン／１００％（１５％酢酸エチル／ヘキサン）を用いて溶出して精製し、白色フォーム状物（０．０５９ｇ、１４％）を得た。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ３６５．０（Ｍ＋１）＋。
【００９３】
（実施例１７）
３−［３−メチル−５−（２−メチル−２Ｈ−［１，２，４］トリアゾール−３−イル）−チオフェン−２−イル］−７−（１−エチル−プロピル）−２，５−ジメチル−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン
オーブン乾燥したフラスコに１−メチル−１，２，４−トリアゾール（０．３２０、３．８１ｍｍｏｌ）、無水ＴＨＦ（１０ｍＬ）を入れ、不活性雰囲気下で−７８℃まで冷却した。ｎ−ブチルリチウム（２．５Ｍ  ヘキサン、１．５２ｍＬ、３．８１ｍｍｏｌ）を加え、低温で３０分間撹拌した。無水塩化亜鉛（１．０６ｇ、７．７５ｍｍｏｌ）を一度に加え、低温で１５分間撹拌した。この反応液を室温まで加温し、さらに３０分間撹拌した。無水ＴＨＦ（５ｍＬ）中の３−（５−ブロモ−３−メチル−チオフェン−２−イル）−７−（１−エチル−プロピル）−２，５−ジメチル−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（０．５０ｇ、１．２７ｍｍｏｌ）をこの反応液に加えた。アルゴンの陽圧で１５分間脱気し、ジクロロ［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウム（ＩＩ）ジクロロメタン（０．１４７ｇ、０．１２７ｍｍｏｌ）を加えた。オイルバス（９０℃）中、不活性雰囲気下でこの反応液を一晩還流させた。この反応液を室温まで冷却し、飽和塩化アンモニウムでクエンチし、酢酸エチル（７５ｍＬ）で希釈した。層分離させ、水層部分を酢酸エチル（５０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせ、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィを使用して、１０％増分の段階勾配で１００％ヘキサン／０％（４０％ＴＨＦ／ヘキサン）から０％ヘキサン／１００％（４０％ＴＨＦ／ヘキサン）を用いて溶出して精製した。生成物をヘキサン／エーテル（３：１）で粉末化し白色固体（０．３７１ｇ、７４％）を得た。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ３９５．０（Ｍ＋１）＋。
【００９４】
（実施例１８）
３−（５−ニトロ−３−メチル−チオフェン−２−イル）−７−（１−エチル−プロピル）−２，５−ジメチルピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン
３−（３−メチル−チオフェン−２−イル）−７−（１−エチル−プロピル）−２，５−ジメチル−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（０．４１９ｇ、１．３３ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（２．５ｍＬ）に溶解させ、不活性雰囲気下で撹拌し、氷浴中で０℃に冷却し、トリフルオロ酢酸（５ｍＬ）を加えた。濃硝酸（７０％）（０．１３２ｇ、１．４７ｍｍｏｌ）をこの反応液に滴下した。この溶液は、黄色から暗緑色へと色が変化した。氷浴中、不活性雰囲気下で１時間撹拌し、この反応が完結していることをＴＬＣを用いて確認した。この反応液をジクロロメタン（８０ｍＬ）で希釈し、飽和炭酸水素ナトリウムでクエンチした。層分離させ、塩基性の水層をジクロロメタン（５０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせ、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィを使用して、１０％増分の段階勾配で１００％ヘキサン／０％（３０％酢酸エチル／ヘキサン）から０％ヘキサン／１００％（３０％酢酸エチル／ヘキサン）を用いて溶出してこの生成した残渣を精製し、黄色固体（０．３６３ｇ、７６％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ７．８１（ｓ，１Ｈ），６．５１（ｓ，１Ｈ），３．６２−３．５８（ｍ，１Ｈ），２．５６（ｓ，３Ｈ），２．４８（ｓ，３Ｈ），２．１８（ｓ，３Ｈ），１．８８−１．７０（ｍ，４Ｈ），０．８８（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，６Ｈ）。
【００９５】
（実施例１９）
Ｎ−｛５−［７−（１−エチル−プロピル）−２，５−ジメチルピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル］−４−メチル−チオフェン−２−イル｝アセトアミド
３−（５−ニトロ−３−メチル−チオフェン−２−イル）−７−（１−エチル−プロピル）−２，５−ジメチル−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（０．３３ｇ、０．９２ｍｍｏｌ）を、１０％パラジウム炭素（０．１０ｇ）を含むＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解させ、真空／水素雰囲気フラッシュ（３×）により脱気し、水素雰囲気下（５５ｐｓｉ）（約３７９ｋＰａ）、室温で３時間撹拌した。この反応が完結していることをＴＬＣを用いて確認した。この反応液をＴＨＦ（５０ｍＬ）で希釈し、珪藻土を通して濾過し、次いで橙色粗油状物（０．３２８ｇ）まで濃縮した。この油状物をジクロロメタン（４ｍＬ）および１．０Ｍ  ＮａＯＨ（１ｍＬ）に溶解させた。塩化アセチル（０．０３８ｍＬ、０．５２ｍｍｏｌ）をこの反応液に加え、封鎖した反応容器中で、週末にわたって室温で撹拌した。この反応液をジクロロメタン（１００ｍＬ）で希釈し、水で洗浄した。有機相を集め、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下で赤色油状物まで濃縮した。フラッシュクロマトグラフィを使用して、１０％増分の段階勾配で１００％ヘキサン／０％（１５％酢酸エチル／１０％  ７Ｎ  アンモニア性メタノール／７５％ヘキサン）から０％ヘキサン／１００％（１５％酢酸エチル／１０％  ７Ｎ  アンモニア性メタノール／７５％ヘキサン）を用いて溶出してこの油状物を精製し、褐色フォーム状物（０．０４８ｇ、２６％）を得た。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ３７１．０（Ｍ＋１）＋。
【００９６】
（実施例２０）
３−［３−クロロ−５−（２−メチル−２Ｈ−［１，２，４］トリアゾール−３−イル）−チオフェン−２−イル］−７−（１−プロピル−ブチル）−２，５−ジメチル−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン
【００９７】
【化１７】
2010504343.tif 000024
オーブン乾燥したフラスコに１−メチル−１，２，４−トリアゾール（０．１２０、１．４３ｍｍｏｌ）および無水ＴＨＦ（５ｍＬ）を入れ、不活性雰囲気下で−７８℃まで冷却した。ｎ−ブチルリチウム（２．５Ｍ  ヘキサン、０．６０ｍＬ、１．４３ｍｍｏｌ）を加え、低温で３０分間撹拌した。無水塩化亜鉛（０．４００ｇ、２．９０ｍｍｏｌ）を一度に加え、低温で１５分間撹拌した。この反応液を室温まで加温し、さらに３０分間撹拌した。無水ＴＨＦ（５ｍＬ）中の３−（５−ブロモ−３−クロロ−チオフェン−２−イル）−７−（１−プロピル−ブチル）−２，５−ジメチル−ピラゾロ［１，５ａ］ピリミジン（０．５００ｇ、１．２７ｍｍｏｌ）をこの反応液に加えた。アルゴンの陽圧で１５分間脱気し、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０．０６０ｇ、０．０５２ｍｍｏｌ）を加えた。オイルバス（９０℃）中、不活性雰囲気下で一晩還流させた。この反応液を室温まで冷却し、飽和塩化アンモニウムでクエンチし、酢酸エチル（７５ｍＬ）で希釈した。層分離させ、水層部分を酢酸エチル（５０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせ、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。２０％増分の段階勾配で１００％ヘキサン／０％（２５％ＴＨＦ／ヘキサン）から０％ヘキサン／１００％（２５％ＴＨＦ／ヘキサン）を用いて溶出するフラッシュクロマトグラフィを使用して、この生成した残渣を精製し、黄色固体（０．１４０ｇ、６６％）を得た。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  （３５Ｃｌ）４４１．７（Ｍ＋１）＋。
【００９８】
基本的に実施例２０に記載したようにして以下の化合物を調製した。
【００９９】
【表６】
2010504343.tif 000025
【０１００】
（調製例１７）
２−ブロモ−５−フルオロ−３−メチルベンゾ［ｂ］チオフェン
アセトニトリル（３５０ｍＬ）中の機械的に撹拌した５−フルオロ−３−メチルベンゾ［ｂ］チオフェン（５０．３２ｇ、０．３０３ｍｏｌ）溶液をＮ−ブロモスクシンイミド（５６．３２ｇ、０．３１８ｍｏｌ、１．０５当量）で処理した。初期の吸熱のため、この反応液の温度は１７℃まで低下した。その後、発熱が起こりこの反応液の温度は１０分間かけて４０℃まで上昇し、この時点で、氷水浴を使用することによりこの反応液を１８〜２０℃まで冷却した。この反応液を室温でさらに３５分間撹拌し、生成したスラリーを水（３５０ｍＬ）でゆっくり希釈した。このスラリーを１０分間撹拌した。この生成物を濾過し、５０：５０のアセトニトリル：水（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥して無色の結晶性固体（６５．５６ｇ、８８％）を得た。
【０１０１】
（実施例２２）
３−（５−フルオロ−３−メチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−イル）−７−イソプロピル−２，５−ジメチルピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン
【０１０２】
【化１８】
2010504343.tif 000026
オーブン乾燥したフラスコに２−ブロモ−５−フルオロ−３−メチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン（０．４９０、２．００ｍｍｏｌ）および無水ＴＨＦ（５ｍＬ）を入れ、不活性雰囲気下で−５０℃まで冷却した。ｎ−ブチルリチウム（２．５Ｍ  ヘキサン、０．８０ｍＬ、２．０ｍｍｏｌ）を滴下し、３０分間撹拌した。無水塩化亜鉛（０．５５０ｇ、４．００ｍｍｏｌ）を一度に加え、３０分間低温で撹拌した。この反応液を室温まで加温し、さらに３０分間撹拌した。無水ＴＨＦ（５ｍＬ）中の７−イソプロピル−３−ヨード−２，５−ジメチル−ピラゾロ［１，５ａ］ピリミジン（０．３１６ｇ、１．００ｍｍｏｌ）を加えた。アルゴンの陽圧で１５分間脱気し、ジクロロ［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウム（ＩＩ）ジクロロメタン（０．０８２ｇ、０．１ｍｍｏｌ）を加えた。オイルバス（９０℃）中、不活性雰囲気下で一晩還流させた。この反応液を室温まで冷却し、飽和塩化アンモニウムでクエンチし、酢酸エチル（７５ｍＬ）で希釈した。層分離させ、水層部分を酢酸エチル（５０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせ、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィを使用し、２０％増分の段階勾配で１００％ヘキサン／０％（２０％酢酸エチル／ヘキサン）から０％ヘキサン／１００％（２０％酢酸エチル／ヘキサン）を用いて溶出して、この生成した残渣を精製し、オフホワイトのフォーム状物（０．２０６ｇ、５８％）を得た。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ３５４．０（Ｍ＋１）＋。
【０１０３】
基本的に実施例２２に記載したようにして以下の化合物を調製した。
【０１０４】
【表７】
2010504343.tif 000027
【０１０５】
（調製例１８）
ボロン酸、５−フルオロ−３−メチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−イル
乾燥したフラスコで、５−フルオロ−３−メチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン（３１２ｍｇ、１．８８ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（４ｍＬ）と混合した。−７８℃まで冷却し、ｎ−ブチルリチウム（１．６Ｎ  ヘキサン溶液、１．１８ｍＬ、１．９０ｍｍｏｌ）を加えた。−７８℃で１．５時間撹拌し、次いでホウ酸トリメチル（０．２３ｍＬ、２．０２ｍｍｏｌ）を加えた。３時間撹拌し、この浴を−２０℃まで上げた。この反応液が酸性（ｐＨ＝４）になるまで５Ｎ  塩化水素を加えた。水で希釈し、酢酸エチル（３×）で抽出した。有機部分を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、エバポレーションした。塩化メチレン中で粉末化し、白色固体（２５８ｍｇ、６５％）を得た。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ２０９（Ｍ−１）−。
【０１０６】
（実施例２５）
７−ブチル−３−（５−フルオロ−３−メチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−イル）−２，５−ジメチル−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン
テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（３１ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ）および７−ブチル−３−ヨード−２，５−ジメチル−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（１７４ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）を脱気した無水ＴＨＦ（１０ｍＬ）に加えた。この混合物を１０分間撹拌した。２−ボロン酸−５−フルオロ−３−メチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン（１１１ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）および炭酸ナトリウム水溶液（５ｍＬの水の中に１１２ｍｇ、１．０６ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を７０℃で２４時間加熱した。室温まで冷却した。エーテルで希釈し、次いで水およびブラインで洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。アセトニトリル／水／ＴＦＡを用いて溶出するＨＰＬＣによりこの残渣を精製し、標題の化合物（５５ｍｇ、２８％）を得た。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ３６８（Ｍ＋１）＋。
【０１０７】
（調製例１９）
４−クロロ−チオフェン−２−カルボニトリル
２２Ｌ反応フラスコに冷却浴、空気撹拌機、ガス添加管、および温度計プローブを取り付けた。このフラスコに窒素をパージし、次いでＡｌＣｌ３（１０２５ｇ、７．６９ｍｏｌ）およびＣＨＣｌ３（６．６Ｌ、１６．５倍量）を入れた。この混合物を０〜５℃に冷却し、温度を１０℃以下に保ちながら、滴下ロートを使用して１０〜１５分間かけて２−チオフェンカルボニトリル（４００ｇ、３．６６ｍｏｌ）を滴下した。この混合物に、１０℃以下で１．２５時間にわたって液面下にＣｌ２ガス（３００ｇ、４．２３ｍｏｌ、１．１６当量）を導入した。この反応の進行をＧＣによってモニタリングした。この反応混合物の一部分を６Ｎ  ＨＣｌの中へとクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を注入した。
【０１０８】
ＧＣ分析によりこの反応が完結していることが分かった時点で（（出発物質：生成物：ジクロロ化合物）の比がＧＣの面積％で約（１：５．８：１）となったときにこの反応は完結していると考えた）、温度を２０℃以下に保ちながら、滴下ロートを使用して１．５時間にわたって６Ｎ  ＨＣｌ（８．０Ｌ）を滴下した。このＨＣｌ添加は非常に発熱的であり、ガスが発生した。この反応液を分液ロートに移し、層分離させた。水層をＣＨＣｌ３（４．０Ｌ）で抽出し、クロロホルム層を合わせ、水（６．０Ｌ）で洗浄した。有機部分をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空下で濃縮し、淡黄色の半固体（５７５ｇ、１０９％）を得た。ＧＣ（６０℃〜２８０℃温度勾配）面積％分析は、約６８％の生成物（ｔｒｅｔ＝６．５分）が含まれており、主要な不純物は未反応の出発物質（ｔｒｅｔ＝５．１分）およびジクロロ化生成物（ｔｒｅｔ＝７．４分）であることを示した。ＧＣ方法：カラム：ＤＢ１；Ｔ注入＝３００℃；Ｔ最初＝６０℃、ｔ＝２．０分；Ｔ最終＝２８０℃、速度＝１８℃／分。
【０１０９】
（調製例２０）
４−クロロ−２−チオフェンカルボキサミド
１２Ｌ反応フラスコに冷却浴、空気撹拌機、および温度計プローブを取り付け、ＫＯＨ（２８８．６ｇ、５．１４３ｍｏｌ）および水（６．０４Ｌ）を入れて溶液を形成した。この溶液は約３１℃まで発熱した。この溶液を約２８℃まで冷却し、この混合物に４−クロロ−２−チオフェンカルボニトリル（６７１．３ｇ、４．６７５ｍｏｌ）を加えた（少量の固体は溶解しなかった）。ＥｔＯＨ（６７５ｍＬ）を加え、この時点で徐々に発熱が起こり、１〜１．５時間にわたって約３８℃まで発熱が続いた。この反応液を周囲温度で一晩撹拌した。この反応合物を真空下で濾過し、水で洗浄し、乾燥し、粗生成物を得た。この固体をＥｔＯＡｃ（１０．０Ｌ）に溶解させ、Ｎａ２ＳＯ４および活性炭で１〜２時間処理し、濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。固体が沈殿し始めるまで、この濾液を４５℃でロータリーエバポレータで濃縮した。真空を開放し、温度を６０〜６５℃まで上昇させ、この固体を再溶解させた。６０℃で撹拌しながら、ヘプタン（３．５Ｌ）をゆっくり加え、固体を沈殿させた。６０℃で１５〜２０分間撹拌し、次いでこの混合物を３０〜４０℃まで冷却し、濾過した。この固体をヘプタン（２×０．７５Ｌ）で洗浄し、乾燥して、標題の化合物を白色固体（２３５．４ｇ、３１％）として得た。濾液から第２の収量（６７．８ｇ、９％）を得た。
【０１１０】
（調製例２１）
４−クロロ−Ｎ−ジメチルアミノメチレン−２−チオフェンカルボキサミド
５Ｌ反応フラスコに加熱マントル、空気撹拌機、ディーン−スターク装置、および温度計プローブを取り付けた。４−クロロ−２−チオフェンカルボキサミド（３００ｇ、１．８５６ｍｏｌ）およびジメチルホルムアミドジメチルアセタール（８７２ｍＬ）を入れ、スラリーを形成させた。留出分（ほとんどがＭｅＯＨ）を集めながら、この混合物を徐々に９６℃まで加熱した。加熱マントルを取り除き、２５℃以下まで冷却した。滴下ロートを使用して水（３．０Ｌ）を加え、温度を３５℃以下に保った。この反応混合物をＥｔＯＡｃ（３．０Ｌ、１．５Ｌ）で抽出した。有機層を合わせ、水（１．５Ｌ）で洗浄した。この有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空下で濃縮し、粗生成物（４００ｇ）を得た。
【０１１１】
この生成物を５０〜６０℃でＥｔＯＡｃ（３２０  ｍＬ、０．８倍量）に溶解させた。温度を徐々に７０℃まで上昇させながら、ヘプタン（１７００ｍＬ、４．２５倍量）をゆっくり加えた。この濁った溶液に種晶を加え、沈殿を開始させた。生成した混合物を室温で一晩撹拌し、濾過し、ヘプタンで洗浄した。この固体を乾燥し、標題の化合物を白色固体（３２９．８ｇ、８２％）として得た。
【０１１２】
（調製例２２）
５−（４−クロロ−チオフェン−２−イル）−１−メチル−１Ｈ−［１，２，４］トリアゾール
３Ｌ反応フラスコに冷却浴、空気撹拌機、および温度計プローブを取り付け、４−クロロ−Ｎ−ジメチルアミノメチレン−２−チオフェンカルボキサミド（１５５ｇ、０．７１５ｍｏｌ）およびＨＯＡｃ（１５００ｍＬ）を入れ、溶液を形成させた。温度を３０℃以下に保つために氷水冷却浴を使用して、滴下ロートを用いて１５〜２０分間かけてメチルヒドラジン（３３．２ｇ、０．７２１ｍｏｌ）を滴下し、淡黄色スラリーを形成させた。この反応液を徐々に９０℃まで加熱し、９０℃で３０分間保持した。ＧＣによりこの混合物を分析し、それからこの反応液を約７０℃まで冷却し、濃厚な油状物／スラリーまで濃縮した。水（１．６７Ｌ）をゆっくりと加えて固体を沈殿させ、この混合物を３０℃未満まで冷却し、濾過し、水（１．６７Ｌ）で洗浄した。この湿った固体（１２５．８ｇ）を暖めたｔ−ブチルメチルエーテル（１．６４Ｌ）に溶解させ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、乾固するまで濃縮し、標題の化合物を淡黄色固体（８５．８ｇ、６０％）として得た。
【０１１３】
（調製例２３）
５−（５−ブロモ−４−クロロ−チオフェン−２−イル）−１−メチル−１Ｈ−［１，２，４］トリアゾール
３Ｌ反応フラスコに冷却浴、空気撹拌機、および温度計プローブを取り付け、５−（４−クロロ−チオフェン−２−イル）−１−メチル−１Ｈ−［１，２，４］トリアゾール（１０５．３ｇ、０．５２７ｍｏｌ）、アセトニトリル（１０５３ｍＬ）およびＨＯＡｃ（１０５ｍＬ）を入れ、溶液を形成させた。Ｎ−ブロモスクシンイミド（１０３．２ｇ、０．５８０ｍｏｌ）を、温度を３１℃以下に維持しながら３０〜６０分間かけて少しずつ加えた。１時間撹拌し、この時点でＧＣ分析を行ったところ、反応が完結していることがわかった。この反応混合物を水（２．１Ｌ、２０倍量）に注ぎ込み、３０分間撹拌し、濾過し、水（２×１Ｌ）で洗浄した。この生成物を真空オーブン中で４５℃で一晩乾燥し、標題の化合物を淡黄色固体（１２３．０ｇ、８４％）として得た。
【０１１４】
（実施例２６）
７−ブチル−３−［３−クロロ−５−（２−メチル−２Ｈ−［１，２，４］トリアゾール−３−イル）−チオフェン−２−イル］−２，５−ジメチル−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン
【０１１５】
【化１９】
2010504343.tif 000028
５−（５−ブロモ−４−クロロ−チオフェン−２−イル）−１−メチル−１Ｈ−［１，２，４］トリアゾール（１６９ｍｇ、０．６１ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（５ｍＬ）に加えた。−７８℃まで冷却した。ｔｅｒｔ−ブチルリチウム（０．８１ｍＬ、１．３７ｍｍｏｌ、１．７Ｍペンタン溶液）を加えた。４５分間撹拌し、次いで塩化亜鉛（１．５ｍＬ、１．７６ｍｍｏｌ、０．５Ｍ  ＴＨＦ溶液）をゆっくり加えた。５分間撹拌し、室温まで加温し、１５分間撹拌した。ビス（トリ−ｔ−ブチルホスフィン）パラジウム（０）（６２ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）および７−ブチル−３−ヨード−２，５−ジメチル−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（２００ｍｇ、０．６１ｍｍｏｌ）を加えた。加熱して一晩還流させた。この反応液をセライト（登録商標）を通して濾過し、乾固するまで濃縮した。０〜５０％酢酸エチルを含むヘキサンを用いて溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィを使用して精製し、標題の化合物（３６ｍｇ、１５％）を得た。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ（３５Ｃｌ）４０１（Ｍ＋１）＋。
【０１１６】
（実施例２７）
｛５−［７−（１−エチル−プロピル）−２，５−ジメチル−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル］−４−メチル−チオフェン−２−イル｝−ジメチル−アミン塩酸塩
３−（５−ニトロ−３−メチル−チオフェン−２−イル）−７−（１−エチル−プロピル）−２，５−ジメチル−ピラゾロ［１，５ａ］ピリミジン（０．３６ｇ、１．０ｍｍｏｌ）を、１０％パラジウム炭素（０．２０ｇ）を含むＴＨＦ（５ｍＬ）に溶解させ、真空／水素雰囲気フラッシュ（３×）によって脱気し、水素雰囲気下（５５ｐｓｉ）（約３７９ｋＰａ）で室温で３時間撹拌した。この反応が完結していることをＴＬＣを用いて確認した。この反応液をＴＨＦ（５０ｍＬ）で希釈し、セライト（登録商標）で濾過した。水素化ナトリウム（０．１０ｇ、２．２５ｍｍｏｌ）を６０％オイル懸濁液として加え、室温で２０分間撹拌した。ヨードメタン（０．１４０ｍＬ、２．２５ｍｍｏｌ）をこの反応液に加え、密閉した反応容器中で５０℃で一晩撹拌した。この反応液を水でクエンチし、酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈した。この有機部分を水、飽和塩化アンモニウム、およびブラインで洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下で油状物まで濃縮した。フラッシュクロマトグラフィを使用して、１０％増分の段階勾配で１００％ヘキサン／０％（２５％酢酸エチル／ヘキサン）から０％ヘキサン／１００％（２５％酢酸エチル／ヘキサン）を用いて溶出してこの生成した残渣を精製し、フォーム状物（０．１４５ｇ、４１％）を得た。この生成物（０．１３ｇ、０．３６５ｍｍｏｌ）をメタノール（３ｍＬ）に溶解させ、４．０Ｍ  ＨＣｌ−ジオキサン（３ｍＬ）を加えた。この反応液を３０分間撹拌し、この反応液に窒素の陽圧を吹き込んだ。真空オーブン中で乾燥し、白色固体（０．１２５ｇ）を得た。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ３５７．２（Ｍ＋１）＋。
【０１１７】
（実施例Ａ）
（生体外結合を使用する生体内効力評価）
生体内効力を評価するために、生体外結合を使用して本発明の化合物を評価した。Ｄ．Ｒ．Ｇｅｈｌｅｒｔら，  ＥＪＰ  ５０９：１４５−１５３（２００５）に提供された手順を使用して、化合物を経口経路によってラットに投与した。Ｇｅｈｌｅｒｔらによって記載されたようにして、小脳への１２５Ｉ−ソーバジンの結合を生体外で評価した。例えば、実施例２０は、１０ｍｇ／ｋｇで７４％阻害をもたらした。
【０１１８】
（実施例Ｂ）
（ＣＲＦ１フィルター結合法）
結合試験を展開するために充分な受容体密度を有する組換え細胞株を生成するという点でのプラスミドベースのヒトＣＲＦ１発現の限界は、スタンフォードからライセンス供与されたＰｈｏｅｎｉｘレトロウイルス発現系を用いて克服した。安定なＨＥＫ−ｈＣＲＦ１細胞株を使用して膜を調製し、結合反応（２００μｌ）を、以下のとおりに設定した：５０μｌの１２５Ｉ−ソーバジン（０．２ｎＭの最終濃度）、５０μｌの化合物および１００μｌのＣＲＦ１膜（２５μｇ／反応）。この反応液を室温で２時間インキュベーションし、前処理したＦＢ  Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅガラス繊維フィルタープレート（９６ウェル）を通して濾過することによって停止させた。このプレートを氷冷した試験緩衝液（５０ｍＭ  トリス、１２．５ｍＭ  ＮａＣｌ、１ｍＭ  ＥＤＴＡ、１０ｍＭ  ＭｇＣｌ２、０．０５％  ＢＳＡ、ｐＨ７．２）で２回洗浄し、一晩風乾し、ＭｉｃｒｏＢｅｔａカウンタ中で１００μｌ  Ｍｉｃｒｏｓｃｉｎｔ４０を用いてカウントした。非特異的結合（ＮＳＢ）を、０．５μＭ非標識ソーバジンの存在下で測定した。通常は３回の測定を行い、平均のデータ点をＧｒａｐｈ  Ｐａｄ  Ｐｒｉｓｍによってプロットした。
【０１１９】
この試験を使用すると、（他の実施例のための中間体として使用したため試験しなかった実施例２、  ３、６、７、および８を除いて）本発明の例示した化合物は、ローラー／接着細胞において５００ｎＭ以下のＫｉ（阻害定数）で１２５Ｉ−ソーバジン（４ｎＭ）の結合を阻害した。例えば、実施例２０は４．４ｎＭのＫｉを示した。
【０１２０】
（実施例Ｃ）
（ＣＲＦ２フィルター結合法）
結合試験を展開するために充分な受容体密度を有する組換え細胞株を生成するという点についてのプラスミドベースのヒトのＣＲＦ２発現の限界は、スタンフォードからライセンス供与されたＰｈｏｅｎｉｘレトロウイルス発現系を用いて克服した。安定なＨＥＫ−ｈＣＲＦ２細胞株を使用して膜を調製し、結合反応（２００μｌ）を、以下のとおりに設定した：５０μｌの１２５Ｉ−ソーバジン（０．２ｎＭの最終濃度）、５０μｌの化合物および１００μｌのＣＲＦ２膜（２５μｇ／反応）。この反応液を室温で２時間インキュベーションし、前処理したＦＢ  Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅガラス繊維フィルタープレート（９６ウェル）を通して濾過することによって停止させた。このプレートを氷冷した試験緩衝液（５０ｍＭ  トリス、１２．５ｍＭ  ＮａＣｌ、１ｍＭ  ＥＤＴＡ、１０ｍＭ  ＭｇＣｌ２、０．０５％  ＢＳＡ、ｐＨ７．２）で２回洗浄し、一晩風乾し、ＭｉｃｒｏＢｅｔａカウンタ中で１００μｌ  Ｍｉｃｒｏｓｃｉｎｔ４０を用いてカウントした。非特異的結合（ＮＳＢ）を、０．５μＭ非標識ソーバジンの存在下で測定した。あるいは、化合物をシンチレーション近接アッセイを使用して評価した。この試験法を、以下のように設定した：５０μｌの１２５Ｉ−ソーバジン（０．２ｎＭ  最終濃度）、５０μｌの化合物または非標識ソーバジン（ＮＳＢ）、ならびに２５０μｇのコムギ胚芽凝集素（ＷＧＡ）ＳＰＡビーズおよびＣＲＦ２膜（１．５μｇ／反応）を含む１００μｌ。プレートを４〜５時間室温でインキュベーションし、２００×ｇで１０分間遠心分離した。結合した放射活性を、Ｗａｌｌａｃ  Ｔｒｉｌｕｘシンチレーションカウンタを用いて評価した。通常は３回の測定を行って結合を評価し、平均のデータ点をＧｒａｐｈ  Ｐａｄ  Ｐｒｉｓｍによってプロットした。最初に固定した濃度で化合物をスクリーニングし、十分な活性が認められると、引き続いて濃度−応答曲線を作成した。
【０１２１】
本発明の化合物は、好ましいことに、（ＣＲＦ１よりも）ＣＲＦ２受容体に対して弱い親和性を示した。例えば、実施例２０は、５０μＭの濃度で３９％阻害を示した。
【０１２２】
（実施例Ｄ）
（バイオアベイラビリティおよび薬物動態特性）
分布容積（Ｖｄｉｓｔ）は、体内の薬物量を血中または血漿中の薬物濃度に関連付ける。分布容積とは、血中または血漿中と同じ濃度で薬物の全量を体内に含むのに必要とされるであろう流体の体積を指す：Ｖｄｉｓｔ＝体内の薬物量／血中または血漿中の薬物濃度（ＧｏｏｄｍａｎおよびＧｉｌｌｍａｎの文献）。１０ｍｇ用量および１０ｍｇ／Ｌの血漿濃度に対しては、分布容積は１リットルになる。分布容積は、その薬物が血管外組織中に存在する程度を反映する。大きい分布容積は、ある化合物が血漿タンパク質結合よりも組織成分に結合しようとする傾向があることを反映する。臨床の場面では、Ｖｄｉｓｔは定常状態濃度を実現するための負荷用量を決定するのに使用することができる。
【０１２３】
分布容積について試験するために、雄性Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙラット（Ｎ＝３）に、１回の１ｍｇ／ｋｇの静脈内投与で化合物投与した。複数個の血漿試料を、投与後０．０８〜２４時間の時点で採取した。この血漿試料をＬＣ／ＭＳ／ＭＳによって分析し、血漿濃度を測定した。血漿中の薬物動態計算を行って、Ｖｄｉｓｔおよび血漿クリアランス（Ｃｌｐ）を含めた薬物動態パラメータを決定した。
【０１２４】
本発明の化合物は、好ましいことに、ＣＰ１５４５２６（Ｓｃｈｕｌｚら，  Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．（ＵＳＡ），９３：１０４７７（１９９６））およびＮＢＩ３０７７５（Ｃｈｅｎら，  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，６５：２１６（２００５））などの他のＣＲＦアンタゴニストよりも好適なバイオアベイラビリティプロフィールを有する。
【国際調査報告】
2010504343.tif 000035
2010504343.tif 000036
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