(57)【要約】  ａ）成長因子と、ｂ）生分解性非重合体の非水溶性液体キャリア材料（例えば、ＳＡＩＢ）と、ｃ）成長因子安定剤と、ｄ）生分解性非重合体の非水溶性液体キャリア材料およびタンパク質安定剤の両方が混和性である溶媒と、ｅ）揮発性アルコール（例えば、エタノール）とを含む組成物でコーティングされた縫合糸。【特許請求の範囲】
【請求項１】
外科用縫合糸において、
当該縫合糸上にコーティングを有し、
前記コーティングは、有効量の、成長因子、および生分解性非重合体の非水溶性液体キャリアを含む、縫合糸。
【請求項２】
請求項１に記載の縫合糸において、
前記成長因子は、ＢＭＰである、縫合糸。
【請求項３】
請求項２に記載の縫合糸において、
前記ＢＭＰは、rhGDF-5である、縫合糸。
【請求項４】
請求項１に記載の縫合糸において、
前記コーティングはさらに、両親媒性溶媒を含む、縫合糸。
【請求項５】
請求項４に記載の縫合糸において、
前記両親媒性溶媒は、ＮＭＰである、縫合糸。
【請求項６】
請求項１に記載の縫合糸において、
前記コーティングはさらに、アルコールを含む、縫合糸。
【請求項７】
請求項６に記載の縫合糸において、
前記アルコールは、エタノールである、縫合糸。
【請求項８】
請求項１に記載の縫合糸において、
前記コーティングはさらに、タンパク質安定剤を含む、縫合糸。
【請求項９】
請求項８に記載の縫合糸において、
前記タンパク質安定剤は、トレハロースである、縫合糸。
【請求項１０】
請求項１に記載の縫合糸において、
前記キャリアは、ショ糖酢酸イソ酪酸エステル（ＳＡＩＢ）、ショ糖酢酸エステル、ショ糖八酢酸エステル、アジピン酸ジオクチル、１０〜２４個の炭素原子を有する中鎖および長鎖の脂肪酸エステル、１０〜２４個の炭素原子を有する中鎖および長鎖のリン脂質、１０〜２４個の炭素原子を有する中鎖および長鎖のジグリセリド、１０〜２４個の炭素原子を有する中鎖および長鎖のトリグリセリド、ブチルフタル酸エステル、ステロールエステル、ステロイドエステル、ならびにビタミンＥエステルからなる群より選択される、縫合糸。
【請求項１１】
請求項１に記載の縫合糸において、
前記キャリアは、ショ糖酢酸イソ酪酸エステル（ＳＡＩＢ）である、縫合糸。
【請求項１２】
請求項１１に記載の縫合糸において、
前記成長因子は、ＢＭＰである、縫合糸。
【請求項１３】
請求項１２に記載の縫合糸において、
前記ＢＭＰは、rhGDF-5である、縫合糸。
【請求項１４】
外科用縫合糸において、
当該縫合糸の上にコーティングを有し、
前記コーティングは、有効量の、
ａ）生物学的活性物質、および、
ｂ）生分解性非重合体の非水溶性液体キャリア材料、
を含む、縫合糸。
【請求項１５】
請求項１４に記載の縫合糸において、
前記液体キャリア材料は、ショ糖酢酸イソ酪酸エステルである、縫合糸。
【請求項１６】
請求項１４に記載の縫合糸において、
前記キャリア材料は、３７℃で少なくとも１０，０００ｃＰの粘度を有する、縫合糸。
【請求項１７】
請求項１６に記載の縫合糸において、
前記キャリア材料は、３７℃で少なくとも１５，０００ｃＰの粘度を有する、縫合糸。
【請求項１８】
請求項１７に記載の縫合糸において、
前記キャリア材料は、３７℃で少なくとも２０，０００ｃＰの粘度を有する、縫合糸。
【請求項１９】
請求項１８に記載の縫合糸において、
前記キャリア材料は、３７℃で少なくとも２５，０００ｃＰの粘度を有する、縫合糸。
【請求項２０】
請求項１９に記載の縫合糸において、
前記キャリア材料は、３７℃で少なくとも５０，０００ｃＰの粘度を有する、縫合糸。
【請求項２１】
請求項１５に記載の縫合糸において、
前記キャリア材料は、前記コーティングの全重量に対して、約９５重量％〜約１重量％の量で存在する、縫合糸。
【請求項２２】
請求項１５に記載の縫合糸において、
前記キャリア材料は、前記コーティングの全重量に対して、約９０重量％〜約５重量％の量で存在する、縫合糸。
【請求項２３】
請求項１５に記載の縫合糸において、
前記キャリア材料は、前記コーティングの全重量に対して、約９０重量％〜約１０重量％の量で存在する、縫合糸。
【請求項２４】
請求項１４に記載の組成物において、
前記キャリアは、二糖アセテートブチレートである、組成物。
【請求項２５】
請求項１４に記載の組成物において、
前記キャリアは、二糖エステルである、組成物。
【請求項２６】
請求項１４に記載の縫合糸において、
前記コーティングはさらに、添加物を含む、縫合糸。
【請求項２７】
請求項２６に記載の縫合糸において、
前記添加物は、生分解性ポリマー、非生分解性ポリマー、天然油、合成油、炭水化物、炭水化物誘導体、無機塩、および不活性有機化合物からなる群より選択される、縫合糸。
【請求項２８】
請求項２６に記載の縫合糸において、
前記添加物は、ポリ（ラクチド）、ポリ（ラクチド−コ−グリコリド）、ポリ（グリコリド）、ポリ（カプロラクトン）、酸化セルロース、ポリ（Ｄ，Ｌ−乳酸）、非生分解性ポリマー、生分解性ポリマー、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール、セルロースアセテートブチレート、セルロースアセテートプロピオネート、ピーナッツ油、ゴマ油、ショ糖、ドキシサイクリン、および炭水化物からなる群より選択される、縫合糸。
【請求項２９】
請求項１５に記載の縫合糸において、
前記コーティングはさらに、前記非重合体の非水不溶性液体キャリア材料が可溶である溶媒を含む、縫合糸。
【請求項３０】
請求項２９に記載の縫合糸において、
前記溶媒は、ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）、Ｎ−Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、およびジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）からなる群より選択される、縫合糸。
【請求項３１】
請求項２９に記載の縫合糸において、
前記溶媒は、前記組成物の重量に対して、約１０重量％〜約５０重量％の量で存在している、縫合糸。
【請求項３２】
請求項２９に記載の縫合糸において、
前記溶媒は、Ｎ−メチルピロリドンである、縫合糸。
【請求項３３】
請求項１５に記載の縫合糸において、
前記コーティングはさらに、低粘度の液体キャリア材料を含む、縫合糸。
【請求項３４】
請求項３３に記載の縫合糸において、
前記低粘度の液体キャリア材料は、１０００ｃｐ未満の粘度を有する、縫合糸。
【請求項３５】
請求項１５に記載の縫合糸において、
前記生物学的活性物質は、ペプチド、タンパク質、核タンパク質、ムコタンパク質、リポタンパク質、および合成ポリペプチドからなる群より選択される、縫合糸。
【請求項３６】
請求項１４に記載の縫合糸において、
前記生物学的活性物質は、ペプチドである、縫合糸。
【請求項３７】
請求項１４に記載の縫合糸において、
前記生物学的活性物質は、成長因子である、縫合糸。
【請求項３８】
請求項３７に記載の縫合糸において、
前記成長因子は、ＴＧＦβスーパーファミリーのメンバーである、縫合糸。
【請求項３９】
請求項３７に記載の縫合糸において、
前記成長因子は、ＢＭＰである、縫合糸。
【請求項４０】
請求項３９に記載の縫合糸において、
前記ＢＭＰは、rhGDF-5である、縫合糸。
【請求項４１】
請求項１４に記載の縫合糸において、
前記キャリア材料は、１種以上のカルボン酸の、非重合体エステルまたは混合エステルを含む、縫合糸。
【請求項４２】
請求項４１に記載の縫合糸において、
前記エステルは、約２〜約２０個のヒドロキシ部分を有するポリオールでエステル化されたカルボン酸から形成される、縫合糸。
【請求項４３】
請求項４１に記載の縫合糸において、
前記エステルはさらに、１〜約２０個のエーテル化ポリオールを含む、縫合糸。
【請求項４４】
請求項４２に記載の縫合糸において、
前記カルボン酸は、ラクトンもしくは環状炭酸エステルの開環加アルコール分解、または無水カルボン酸の加アルコール分解により得られるヒドロキシ基を有する、縫合糸。
【請求項４５】
請求項４１に記載の縫合糸において、
前記エステルは、約２〜約２０個のヒドロキシ部分を有するポリオールでエステル化されたアミノ酸から形成される、縫合糸。
【請求項４６】
請求項４１に記載の縫合糸において、
前記エステル化カルボン酸は、グリコール酸、乳酸、ε−ヒドロキシカプロン酸、セリン、ならびに任意の対応するラクトンまたはラクタム、炭酸トリメチレン、およびジオキサノンからなる群より選択される、縫合糸。
【請求項４７】
請求項４１に記載の縫合糸において、
前記エステルまたは混合エステルのアルコール部分は、約２〜約２０個のヒドロキシ基を有するポリヒドロキシアルコールから誘導される、縫合糸。
【請求項４８】
請求項４７に記載の縫合糸において、
前記アルコール部分は、単官能性Ｃ１〜Ｃ２０アルコール、二官能性Ｃ１〜Ｃ２０アルコール、三官能性アルコール、ヒドロキシ含有カルボン酸、ヒドロキシ含有アミノ酸、リン酸エステル含有アルコール、四官能性アルコール、糖アルコール、単糖類、二糖類、糖酸、およびポリエーテルポリオールからなる群より選択される化合物から１つ以上の水素原子を除去することにより誘導される、縫合糸。
【請求項４９】
請求項４１に記載の縫合糸において、
前記カルボン酸部分のそれぞれは、少なくとも１つのオキシ部分を含む、縫合糸。
【請求項５０】
請求項４１に記載の縫合糸において、
前記エステルまたは混合エステルの前記カルボン酸部分の少なくとも１つは、２〜４個の炭素原子を含む、縫合糸。
【請求項５１】
請求項５０に記載の縫合糸において、
前記カルボン酸部分の少なくとも１つは、少なくとも１つのオキシ部分を含む、縫合糸。
【請求項５２】
ある組成物でコーティングされた縫合糸において、
前記組成物は、
ａ）成長因子と、
ｂ）生分解性非重合体の非水溶性液体キャリア材料と、
ｃ）成長因子安定剤と、
ｄ）前記生分解性非重合体の非水溶性液体キャリア材料および前記タンパク質安定剤の両方が混和性である溶媒と、
ｅ）揮発性アルコールと、
を含む、縫合糸。
【請求項５３】
請求項５２に記載の縫合糸において、
前記成長因子は、rhGDF-5である、縫合糸。
【請求項５４】
請求項５３に記載の縫合糸において、
前記生分解性非重合体の非水溶性液体キャリア材料は、ＳＡＩＢである、縫合糸。
【請求項５５】
請求項５４に記載の縫合糸において、
前記成長因子安定剤は、トレハロースである、縫合糸。
【請求項５６】
請求項５５に記載の縫合糸において、
前記溶媒は、両親媒性溶媒である、縫合糸。
【請求項５７】
請求項５６に記載の縫合糸において、
前記揮発性アルコールは、エタノールである、縫合糸。
【請求項５８】
ある組成物でコーティングされた縫合糸において、
前記組成物は、
ａ）生分解性非重合体の非水溶性液体キャリア材料と、
ｂ）成長因子安定剤と、
ｃ）両親媒性溶媒と、
を含む、縫合糸。
【請求項５９】
請求項５８に記載の縫合糸において、
前記キャリア材料は、ＳＡＩＢである、縫合糸。
【請求項６０】
請求項５９に記載の縫合糸において、
前記安定剤は、トレハロースである、縫合糸。
【請求項６１】
請求項６０に記載の縫合糸において、
前記両親媒性溶媒は、ＮＭＰである、縫合糸。
【請求項６２】
ある組成物でコーティングされた縫合糸において、
前記組成物は、
ａ）両親媒性溶媒と、
ｂ）揮発性アルコールと、
を含む、縫合糸。
【請求項６３】
請求項６２に記載の縫合糸において、
前記両親媒性溶媒は、ＮＭＰである、縫合糸。
【請求項６４】
請求項６３に記載の縫合糸において、
前記アルコールは、エタノールである、縫合糸。
【請求項６５】
コーティングされた縫合糸を作製するためのキットにおいて、
ａ）成長因子および成長因子安定剤を収容している第１のバイアルと、
ｂ）第２のバイアルであって、
ｉ）生分解性非重合体の非水溶性液体キャリア材料、
ii）前記生分解性非重合体の非水溶性液体キャリア材料および前記タンパク質安定剤の両方が混和性である溶媒、および、
iii）揮発性アルコール、
を収容している、第２のバイアルと、
を具備する、キット。
【請求項６６】
請求項６５に記載のキットにおいて、
前記成長因子は、rhGDF-5である、キット。
【請求項６７】
請求項６６に記載のキットにおいて、
前記生分解性非重合体の非水溶性液体キャリア材料は、ＳＡＩＢである、キット。
【請求項６８】
請求項６７に記載のキットにおいて、
前記溶媒は、両親媒性溶媒である、キット。
【請求項６９】
請求項６８に記載のキットにおいて、
前記安定剤は、トレハロースである、キット。
【請求項７０】
請求項６９に記載のキットにおいて、
前記アルコールは、エタノールである、キット。
【発明の詳細な説明】
【開示の内容】
【０００１】
〔発明の背景〕
組織修復の文献は、成長因子がコーティングされた縫合糸の使用を報告して来ており、特に、rhGDF-5といったBMPの使用を腱、軟骨、骨、および靭帯のような構造体を形成するそれらの能力のために記述している。例えば、Rickert et al., Growth Factors, 19, 2001, 115-126は、ラットのアキレス腱モデルにおける腱の治癒を刺激するために、rhGDF-5を縫合糸上で使用することを開示している。また、米国特許第5,658,882号（Celeste）；米国特許第6,187,742号（Wozney）；米国特許第6,284,872号（Celeste II）；米国特許第6,719,968号（Celeste III）；および米国特許出願公開第2004/ 0146923号（Celeste IV）も参照のこと。
【０００２】
（コラーゲン、酪酸、および種々の成長因子で）コーティングされた縫合糸およびインプラントが、軟部組織の修復において使用されて来た。例えば、Mazzocca, AAOS Abstract #338, 2005；Wright, 50th ORS, #1234, 2004；Petersen, 51st ORS, #0076, 2005；Schmidmaier, J. Biomedical Materials Res (Appl Biomat) 58, 449-455, 2001を参照のこと。これらの論文は、有望なインビトロおよびインビボのデータを報告している。しかしながら、これらの技術を用いたこれらのインプラントのヒトへの植え込みは、現在不可能であり、これは、インビトロモデルがさらなる発展を必要とし、また、追加のデータがインビボモデルをより良く特徴付けるために必要とされているからである。
【０００３】
上述のWrightは、インビボのヒツジモデルの両側半月板（bilateral meniscal）の裂け目において、酪酸処理されたシリコンコーティングされた縫合糸を使用することを報告している。Wrightは、コーティングされた縫合糸で修復された裂け目は、修復部位での新血管形成（neo-angiogenesis）を含めた新しく修復された組織を持っていたと報告している。この研究は、結合性の組織修復の可能性を実証している。
【０００４】
上述のPetersenは、インビボのヒツジモデルの使用を報告しており、ポリ（Ｄ，Ｌラクチド）縫合糸を用いたＶＥＧＦの局所的な適用が、血管の増殖を刺激したが、増強されたメニスカス治癒は示さなかったことを報告している。
【０００５】
抗菌剤でコーティングされた縫合糸は、臨床的な使用のために商業的に入手可能である。現在、商品名Coated VICRYL PLUS (polyglactin 910) Suture（Ethicon, Somerville, NJ）で販売されている抗生物質がコーティングされたポリグラクチン（polyglactin）縫合糸は、手術部位の感染症の大多数を引き起こす細菌のコロニー形成を阻害するために、ＦＤＡにより承認されている最初で唯一の細菌性縫合糸である。VICRYL PLUS縫合糸は、縫合糸の周りに阻害性ゾーンを生み出し、ここでは細菌がコロニーを作るのが妨げられる。Rothenberger, Surgical Infection Society Journal (Supp) Dec. 2002, pp. 579-87、およびMangram, Infection control and Hospital Epidemiology , 1999, 20(40, 247-280を参照のこと。VICRYL PLUS縫合糸は、商品名IRGACARE MP*（Ciba Specialty Chemicals Corp., Tarrytown, NY）で販売されている静菌薬を含有しており、この静菌薬は、トリクロサン（triclosan）の最も純粋な形態であり、３０年を超えて消費製品で有効に使用されている、検証された広域スペクトルの抗菌薬である。VICRYL PLUS縫合糸は、眼、心血管、および神経性の組織を除いた全身の軟部組織の近置および／または結紮に使用するためのものであることが表示されている。
【０００６】
rhGDF-5コーティングされた縫合糸の効力は動物モデルにおいて実証されて来たが、rhGDF-5は４．５未満のｐＨで水溶液に自由に可溶性であるので、そのような溶液中のrhGDF-5の高い溶解性が縫合糸のコーティング有効性を制限するかも知れないと認識されて来た。特に、rhGDF-5が所望よりも遥かに急速にインビボで縫合糸から放出されることがあることが懸念されている。
【０００７】
この問題を克服するために、コーティングにGDF-5と共にゼラチンといった生分解性キャリアを含めることが提案されて来た。この場合のキャリアは、縫合糸上にrhGDF-5を保持し、rhGDF-5を創傷へとゆっくりと放出することができるはずであった。
【０００８】
GDF-5／ゼラチンコーティングされた縫合糸は組織修復の成功をもたらしたが、ゼラチンの存在により多数の懸念が持ち上がった。すなわち、１）ゼラチンは天然の動物性生成物であり、そのため大規模製造には受け入れられないこと、２）ゼラチンは膨潤することから、乾燥に長時間かかること、３）ゼラチンがコーティングのために均一な溶液を得るために約４５℃までの加熱を必要とする（しかし、GDF-5タンパク質はその温度では安定しないことがある）こと、および４）湿っているコーティングされた縫合糸は、過剰な水分を除去するために加熱されるか、または長時間風乾されなければならず、このことが、タンパク質の安定性と手術室での縫合糸の使用の容易性とに影響を及ぼし得ること、である。これらの懸念のために、ゼラチンは、rhGDF-5を縫合糸にコーティングするための理想的なキャリアと見なされては来なかった。
【０００９】
したがって、縫合糸をrhGDF-5でコーティングするための生分解性の合成キャリアを選択することが本発明のさらなる目的である。
【００１０】
薬剤送達のための放出制御キャリア（controlled release carrier）として、ショ糖酢酸イソ酪酸エステル（sucrose acetate isobutyrate）（ＳＡＩＢ）を使用することを文献が報告している。例えば、WO2005100399（Bing）は、抗体の徐放のためにＳＡＩＢを使用することを開示している。WO2005115438（Robyn）は、形態形成タンパク質の徐放のためにＳＡＩＢを使用することを開示している。WO2005107765（Igo）は、囲心空間（pericardial space）への薬剤の放出制御のためにＳＡＩＢを使用することを開示している。WO2003030923（Van Vlassalaer）は、放出制御システムにおいてＳＡＩＢを使用することを開示している。WO2003000282（Genentech）は、タンパク質のために制御されたシステムにおいてＳＡＩＢを使用することを開示している。WO2004037265（Allan）は、放出制御システムにおいてＳＡＩＢを使用することを開示しており、WO20010786683（Genentech）は、成長ホルモンのための放出制御システムにおいてＳＡＩＢを使用することを開示している。米国特許第6,992,065号（Durect）は、成長ホルモンのための放出制御システムにおいてＳＡＩＢを使用することを開示している。米国特許第6,911,411号（Akzo Nobel NV）は、セフキノム（Cefquinome）の放出制御のための装置においてＳＡＩＢを使用することを開示している。米国特許第5747058号（Southern Biosystems）は、高粘度液体制御された送達システムにおいてＳＡＩＢを使用することを記述している。WO 2004052336 A3（Durect）は、高粘度液体制御された送達システムおよび医療用または外科用装置の使用を記述している。米国特許第6,051,558号（Southern Biosystems）は、GnRHホルモンの放出制御のための装置においてＳＡＩＢを使用することを開示している。米国特許出願公開US20060121113（Gruenenthal）は、放出制御装置においてＳＡＩＢを使用することを開示している。EP1274459 B1（Durect）は、成長ホルモンの放出制御のためにＳＡＩＢを使用することを開示している。これらの刊行物のいずれも、縫合糸上のコーティング中のキャリアとしてＳＡＩＢを使用することを開示していない。
【００１１】
〔発明の概要〕
本発明は、ｉ）活性物質と、ii）制御式の生物学的な活性物質のコーティングおよび送達のために好適な液体の（好ましくは、高粘度の）材料を形成する非重合体化合物（non-polymeric compound）とを含有するコーティングを有する新規の縫合糸に関する。コーティング物質は任意で、より低い粘度の材料を形成し、その材料が縫合糸を一様にコーティングし易くするために、両親媒性溶媒（ampiphilic solvent）で希釈されることができる。この溶媒は、脂溶性および水溶性の両方であり、急速に揮発して縫合糸上に薄いコーティングを残して行く。
【００１２】
コーティングは概して、液体形態で縫合糸上に適用され、少なくとも１種の非水溶性液体キャリア材料を含有しており、この非水溶性液体キャリア材料は好ましくは、１種以上のカルボン酸の非重合体エステルまたは混合エステルを含み、より好ましくは、３７℃で少なくとも５，０００ｃＰの粘度を有し、好ましくは、周囲条件または生理学的条件下でニート（neat）を結晶化しない。コーティング組成物は、その粘度を低下させるために生理学的に許容可能な両親媒性溶媒中に溶解され、その材料が縫合糸をよりコーティングし易くなるようにすることができる。縫合糸に溶媒を含有する組成物をコーティングした後、両親媒性溶媒は、乾燥中にその材料から急速に揮発するため、それ故コーティング材料は、粘度が有意に増加し、それによって、コーティング中に含有された生理活性物質のための放出制御マトリックスを形成する。
【００１３】
他の側面において、本発明は、ある組成物を有する縫合糸を施すことによりヒトに生物学的活性物質を投与する方法に関し、かかる組成物は、ｉ）１種以上のカルボン酸の非重合体エステルまたは混合エステル含み、好ましくは、３７℃で少なくとも５，０００ｃＰの粘度を有する非水溶性液体キャリア材料であって、好ましくは、周囲条件または生理学的条件下でニートを結晶化しない、非水溶性液体キャリア材料と、ii）生物学的活性物質とを含有する。
【００１４】
他の側面において、本発明は、非水溶性液体キャリア材料を含有するコーティングを有する縫合糸に関し、この非水溶性液体キャリア材料は、１種以上のカルボン酸の非重合体エステルまたは混合エステル含んでいて、好ましくは３７℃で少なくとも５，０００ｃＰの粘度を有し、好ましくは、周囲条件または生理学的条件下でニートを結晶化しない。
【００１５】
本発明のある一つの好ましい実施形態において、上にコーティングを有する外科用縫合糸が提供され、このコーティングは、有効量の、ｉ）成長因子（好ましくは、rhGDF-5といった骨形成タンパク質（ＢＭＰ））と、ii）生分解性非重合体の非水溶性液体キャリア材料とを含み、この非水溶性液体キャリア材料は好ましくは、３７℃で少なくとも５，０００ｃＰの粘度を有する。そのような好ましいキャリア材料は、周囲条件で、縫合糸上にコーティングされた後、短時間で乾燥するという能力により特徴付けられる。
【００１６】
そのような短時間で乾燥する小さい分子のキャリアを使用する利点は、このキャリアが、タンパク質rhGDF-5を熱に曝すことを必要とすることなく、安定化されたrhGDF-5を含有するコーティングを提供することである。このことが、従来のゼラチンに基づくアプローチに比べて、適用が容易で、タンパク質がより安定であるという利点をもたらす。
【００１７】
ある実施形態において、縫合糸は、ある組成物でコーティングされ、この組成物は、
ａ）成長因子（好ましくは、rhGDF-5）と、
ｂ）生分解性非重合体の非水溶性液体キャリア材料（例えば、ショ糖酢酸イソ酪酸エステル（ＳＡＩＢ））と、
ｃ）成長因子安定剤および緩衝剤（例えば、トレハロースおよびグリシン）と、
ｄ）生分解性非重合体の非水溶性液体キャリア材料およびタンパク質安定剤の両方が混和性である溶媒（好ましくは、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）といった両親媒性溶媒）と、
ｅ）揮発性アルコール（例えば、エタノール）と、
を含む。
【００１８】
本発明者らが直面したある一つの問題は、疎水性キャリア材料（例えば、ＳＡＩＢ）および親水性安定剤（例えば、トレハロース）の両方を可溶化することができる溶媒を同定する必要があることであった。本発明者らは、両親媒性溶媒（例えば、ＮＭＰ）を使用することにより、それぞれの材料に対して良好な溶解性を提供することを見出した。
【００１９】
したがって、ある実施形態において、ある組成物でコーティングされた縫合糸が提供され、この組成物は、
ａ）生分解性非重合体の非水溶性液体キャリア材料（例えば、ＳＡＩＢ）と、
ｂ）成長因子安定剤および緩衝剤（例えば、トレハロースおよびグリシン）と、
ｃ）両親媒性溶媒（例えば、ＮＭＰ）と、
を含む。
【００２０】
しかしながら、本発明者らが直面したのは、両親媒性溶媒ＮＭＰを単独で使用すると、やや長い乾燥時間（８〜１０分のオーダー）につながるという他の問題であった。典型的には、約５分未満のオーダーの乾燥時間が望ましく、２分未満であることがさらにより望ましい。本発明者らは、揮発性アルコール（例えば、エタノール）を追加することで、組成物の乾燥時間がおよそ１０秒まで縮められることを見出した。
【００２１】
したがって、ある実施形態において、ある組成物でコーティングされた縫合糸が提供され、この組成物は、
ａ）両親媒性溶媒（例えば、ＮＭＰ）と、
ｂ）揮発性アルコール（例えば、エタノール）と、
を含む。
【００２２】
〔発明の詳細な説明〕
本発明の目的のために、「非重合体」は、約２０００ダルトン（３．３２１×１０−２１ｇ）未満のものであると考えられる。用語「非重合体」および「小さい分子」は互換可能に使用される。
【００２３】
本発明の生分解性非重合体の非水溶性液体キャリア材料としては、限定されるものではないが、ショ糖酢酸イソ酪酸エステル（ＳＡＩＢ）、ショ糖酢酸エステル（sucrose acetate）、ショ糖八酢酸エステル（sucrose octa acetate）、アジピン酸ジオクチル、１０〜２４個の炭素原子を有する中鎖および長鎖（medium and long chain）の脂肪酸エステル、１０〜２４個の炭素原子を有する中鎖および長鎖のリン脂質、１０〜２４個の炭素原子を有する中鎖および長鎖のジグリセリド、１０〜２４個の炭素原子を有する中鎖および長鎖のトリグリセリド、ブチルフタル酸エステル、ステロールエステル、ステロイドエステル、ならびにビタミンＥエステルを含む。
【００２４】
直前に説明されている生分解性非重合体の非水溶性液体キャリア材料の多くは、高粘度材料である。一つの例外は、リン脂質類のものである。これらの材料は一般的に、非常に高価である。したがって、多くの好ましい実施形態において、生分解性非重合体の非水溶性液体キャリア材料は、高粘度液体キャリア材料（ＨＶＬＣＭ）である。
【００２５】
＜非水溶性高粘度液体キャリア＞
好ましい実施形態において、高粘度液体キャリア材料（ＨＶＬＣＭ）は、非重合体で非水溶性であり、３７℃で少なくとも５，０００ｃＰ（任意で、少なくとも１０，０００、１５，０００、２０，０００、２５，０００、または、さらには５０，０００ｃＰ）の粘度を有し、周囲条件または生理学的条件下でニートを結晶化しない。用語「非水溶性」は、周囲条件下で１重量％未満の程度まで水中に可溶である材料をさしている。用語「非重合体」は、エステルの酸部分における繰り返し単位を本質的に有していないエステルまたは混合エステルだけでなく、酸部分における機能単位が少数回繰り返されている酸部分を有するエステルまたは混合エステル（すなわち、オリゴマー）もさしている。全般的に、エステルの酸部分における５つを超える同一の隣接した繰り返し単位（すなわちmer）を有する材料は、本明細書で使用される用語「非重合体」から除外されるが、二量体、三量体、四量体、または五量体を含む材料は、この用語の範囲内に含まれる。エステルが、乳酸またはグリコール酸といったさらにエステル化することができるヒドロキシ含有カルボン酸部分から形成されている場合、繰り返し単位の数は、乳酸またはグリコール酸部分の数に基づいてではなく、ラクチドまたはグリコリド（glycolide）部分の数に基づいて算出される。ここで、ラクチド繰り返し単位は、それぞれがヒドロキシおよびカルボキシ部分によりエステル化された２つの乳酸部分を含んでおり、グリコリド繰り返し単位は、それぞれヒドロキシおよびカルボキシ部分によりエステル化された２つのグリコール酸部分を含んでいる。アルコール部分に１〜約２０個のエーテル化されたポリオールを有するか、またはアルコール部分に１〜約１０個のグリセロールを有するエステルは、この用語が本明細書中で使用されているように非重合体と見なされる。
【００２６】
特別な実施形態において、高粘度液体キャリア材料（ＨＶＬＣＭ）は、生物学的活性物質と混合され、かつ活性物質の制御された送達のための縫合糸上のコーティングとして使用されることができる低粘度液体キャリア材料（ＬＶＬＣＭ）を形成するために溶媒と混合されると、時には有意に、粘度が低下する。ＬＶＬＣＭ／生物学的活性物質組成物は、典型的には、ＨＶＬＣＭ／生物学的活性物質組成物よりもコーティングとして使用するのがより容易であり、これは、前者が縫合糸上および縫合糸の周りでより容易に流れるからである。ＬＶＬＣＭは、あらゆる所望の粘度を有することができる。ＬＶＬＣＭに対する粘度範囲は、約６，０００ｃＰ未満、より詳細には約４，０００ｃＰ未満、さらにより詳細には約１，０００ｃＰ未満、なおさらに詳細には２００ｃＰ未満であることが典型的には有用であると考えられている。
【００２７】
本発明で使用される好ましいＨＶＬＣＭは、１種以上の種々の材料とすることができる。好適な材料としては、１種以上のカルボン酸の、非重合体エステルまたは混合エステルを含む。特別な実施形態において、エステルは、約２〜約２０個のヒドロキシ部分を有するポリオールでエステル化され、１〜約２０個のエーテル化されたポリオールを含むこともある、カルボン酸から形成される。詳細には、ＨＶＬＣＭのエステルの酸部分を形成するための好適なカルボン酸としては、１つ以上のヒドロキシ基を有するカルボン酸、例えば、ラクトンまたは環状炭酸エステルの開環加アルコール分解、または無水カルボン酸の加アルコール分解により得られるものを含む。アミノ酸もまた、ポリオールを備えたエステルを形成するために好適である。特別な実施形態において、エステルまたは混合エステルは、環状無水物といった無水カルボン酸の加アルコール分解により得られる１つ以上のカルボン酸でエステル化された１つ以上の末端ヒドロキシ部分を有するアルコール部分を含有する。
【００２８】
本発明のＨＶＬＣＭを形成するためにエステル化されることができる好適なカルボン酸の非限定的な例としては、グリコール酸、乳酸、ε−ヒドロキシカプロン酸、セリン、ならびにいずれかの対応するラクトンまたはラクタム、炭酸トリメチレン、およびジオキサノン（dioxanone）を含む。ヒドロキシ含有酸はそれ自体が、追加のカルボン酸部分でそれらのヒドロキシ部分の反応を介してさらにエステル化されてもよい。追加のカルボン酸部分は、材料中のその他のカルボン酸部分と同じであっても、または異なってもよい。好適なラクトンとしては、限定されるものではないが、グリコリド、ラクチド、ε−カプロラクトン、ブチロラクトン、およびバレロラクトンを含む。好適な炭酸エステルとしては、限定されるものではないが、炭酸トリメチレン、および炭酸プロピレンを含む。
【００２９】
エステルまたは混合エステルのアルコール部分は、約２〜約２０個のヒドロキシ基を有するポリヒドロキシアルコールから誘導されてもよく、上述で示されたように、１〜２０個のポリオール分子をエーテル化することにより形成されてもよい。好適なアルコール部分としては、単官能性Ｃ１〜Ｃ２０アルコール、二官能性Ｃ１〜Ｃ２０アルコール、三官能性アルコール、ヒドロキシ含有カルボン酸、ヒドロキシ含有アミノ酸、リン酸エステル含有アルコール、四官能性アルコール、糖アルコール、単糖類、二糖類、糖酸、およびポリエーテルポリオールから１つ以上の水素原子を除去することにより誘導されるものを含む。より詳しくは、アルコール部分は、ドデカノール、ヘキサンジオール（hexanediol）、より詳細には１，６−ヘキサンジオール、グリセロール、グリコール酸、乳酸、ヒドロキシ酪酸、ヒドロキシ吉草酸、ヒドロキシカプロン酸、セリン、ＡＴＰ、ペンタエリスリトール、マンニトール、ソルビトール、グルコース、果糖、ショ糖、グルクロン酸、１〜約１０個のグリセロール単位を含むポリグリセロールエーテル、１〜約２０個のエチレングリコール単位を含むポリエチレングリコールのうちの１種以上を含んでもよい。
【００３０】
本発明の特別な実施形態において、本発明のエステルまたは混合エステルのカルボン酸部分の少なくとも１つが、少なくとも１つのオキシ部分を含む。さらにより特別な実施形態において、カルボン酸部分のそれぞれは、少なくとも１つのオキシ部分を含む。
【００３１】
他の特別な実施形態において、本発明のエステルまたは混合エステルのカルボン酸部分の少なくとも１つは、２〜４個の炭素原子を含む。さらにより特別な実施形態において、本発明のエステルまたは混合エステルのカルボン酸部分のそれぞれが、２〜４個の炭素原子を含む。
【００３２】
本発明の他のより特別な実施形態において、本発明のエステルまたは混合エステルのカルボン酸部分の少なくとも１つは、２〜４個の炭素原子を有し、少なくとも１つのオキシ部分を含む。本発明の他のより特別な実施形態において、本発明のエステルまたは混合エステルのカルボン酸部分のそれぞれが、２〜４個の炭素原子を有し、少なくとも１つのオキシ部分を含む。
【００３３】
本発明のアシルオキシ置換基を形成するアシル基は、用語「アシル」の一般的に受け入れられている定義に従って、カルボン酸から誘導されたあらゆる部分であり得る。
【００３４】
本発明のエステルまたは混合エステルにおいては、比較的小さい鎖（２〜６個の炭素原子）のオキシ置換されたカルボン酸部分を使用することが有利である。これらの酸部分がオリゴマーエステル（すなわち、前のオキシとの次のカルボキシのエステル化を介して前の酸部分に結び付いた次の酸部分）の形態で存在する場合、材料の加水分解は、６個を超える炭素原子で作製されたオリゴマーに対する加水分解よりもかなり容易になり、これは、この材料がより親水性であるためである。一般に、薬剤送達のためには、ＨＶＬＣＭが水に不溶性であるが、やや親水性であることが望ましい。一般に、より親水性の単位（より高いＯ：Ｃ比率により決定される）で合成されたＨＶＬＣＭは、より急速に水を吸収し、より短時間で分解することが予期されるであろう。例えば、４モルのグリコリドを１モルのグリセロールに共通結合でつなげることにより作製されたＨＶＬＣＭは、２モルのグリコリドと２モルのラクチドとを１モルのグリセロールに共有結合でつなげることにより作製されたＨＶＬＣＭよりも、より急速に水を吸収し、より短時間で分解することが予期されるであろう。同様の上昇が、より柔軟な分子、および、体積についての議論をしないものとして（based on free volume arguments）より分岐した球状の分子についても、予期され得る。柔軟で分岐した分子を使用することでも、ＬＶＬＣＭの粘度を低下させる利点を有し得る。異なる鎖長のカルボン酸および／またはポリオールを使用すること、および、オキシ置換を有するカルボン酸を使用することで、結果として得られるエステルの親水性および溶解性の程度を正確に制御することが可能になる。これらの材料は、インビボでの溶解に対して十分な耐性を有し、インビボでのオキシ結合の加水分解に付随するか、またはその加水分解に続く、身体への生理活性物質の放出制御を提供することができる。
【００３５】
さらにより特別な実施形態において、本発明は、酢酸部分とイソ酪酸部分との比率が２：６であるショ糖の酢酸・イソ酪酸エステル（acetate and isobutyrate ester）を除外する。しかしながら、酢酸エステル部分とイソ酪酸エステル部分との比率が２：６であるショ糖酢酸イソ酪酸エステルは、エアロゾル製剤での使用のため、ならびに、リゾチーム、パクリタキセル、５−フルオロウラシル、および、ＡＺＴやｄｄＣのような抗レトロウイルス剤の送達のために、本発明の範囲内に含まれる。この材料は、米国特許第2,931,802号で説明されている手順に従って作製されることができる。
【００３６】
一般に、本発明のＨＶＬＣＭは、１つ以上のアルコール、特には、結果として得られるエステルのアルコール部分を形成するであろう１つ以上のポリオールを、結果として得られるエステルの酸部分を形成するであろう１つ以上のカルボン酸、ラクトン、ラクタム、炭酸エステル、またはカルボン酸の無水物と反応させることにより作製されることができる。エステル化反応は、強酸または強塩基のエステル化触媒の追加が使用される場合もあるが、単に加熱することによっても引き起こされ得る。代替的に、２−ヘキサノン酸エチル第一スズ（stannous 2-ethylhexanoate）といったエステル化触媒が使用され得る。加熱された反応混合物は、触媒があってもなくても、攪拌しながら加熱され、その後、あらゆる未反応の出発原料を除去するために、例えば減圧下で、乾燥され、液体生成物を生成する。ショ糖酢酸イソ酪酸エステルは、米国特許第2,931,802号で説明されている手順に従って作製されることができる。
【００３７】
これに関連して、ポリオールは、カルボン酸、特に、ラクチド、グリコリド、またはその他のエステル化されたヒドロキシ置換されたカルボン酸のオリゴマーのエステル化のための基質を提供するという意味で、オリゴマー形成開始剤とみなされ得る。
【００３８】
ある好ましい実施形態において、キャリアはＳＡＩＢである。ＳＡＩＢは、縫合糸上に薄い被膜を形成し、通常の取り扱い中は縫合糸上にそのまま残ることから、望ましい。ＳＡＩＢはまた、好ましい成長因子がＳＡＩＢ中に可溶であり、そのため縫合糸上で均一に分散できることがわかっていることから、望ましい。最後に、ＳＡＩＢは、縫合糸上に比較的柔軟な被膜を生成することから、望ましい。
【００３９】
ＨＶＬＣＭ（好ましくは、ＳＡＩＢ）は典型的には、組成物の全重量に対して、約１重量％〜約９５重量％、より詳細には、約５ｗｔ％〜約９０ｗｔ％の範囲の量で組成物に加えられる。さらにより詳細には、溶媒は、約１０重量％〜約９０重量％の範囲の量で組成物中に存在する。その他の詳細な範囲は、約３０重量％〜約７０重量％、および約４０重量％〜約６０重量％を含む。ある一つの特に好ましい実施形態において、ＳＡＩＢは、約５０重量％の濃度で存在する。
【００４０】
予備実験により、ＳＡＩＢの濃度が１０ｗｔ％〜２５ｗｔ％から約５０ｗｔ％に増加すると、組成物の溶解性時間がわずかに増加するが、乾燥時間にはそれほど影響を及ぼさなかった（１分未満のままであった）ことがわかった。このように、ＳＡＩＢがこの範囲内にある組成物は好ましい。５０ｗｔ％ＳＡＩＢの組成物は、縫合糸上に非常に良好な被膜を生成することから、さらなる研究のために選択された。
【００４１】
＜溶媒＞
前述で説明されたように、本発明のある一つの実施形態において、ＨＶＬＣＭは、粘度を低下させる溶媒と混合されて、より低い粘度の液体キャリア材料（ＬＶＬＣＭ）を形成することができ、ＬＶＬＣＭはその後、生物学的活性物質と混合されて、縫合糸をコーティングするための組成物を形成することができる。溶媒は、３つの品質を提供しなければならない。第一に、組成物のその他の成分のそれぞれが、この溶媒中に可溶でなければならない。この品質は、均一なコーティングを提供する。第二に、組成物のその他の成分のそれぞれが、約５分以内（「溶解性時間（solubility time）」）に溶媒中で可溶化しなければならない。最後に、ひとたび組成物が縫合糸に適用されたら、溶媒は、約５分以内（「乾燥時間」）に縫合糸から蒸発しなければならない。低い溶解性および乾燥時間は、外科医が許容可能な時間枠内で選択された縫合糸を術中にコーティングすることを可能にする。
【００４２】
ある好ましい実施形態において、溶媒は、疎水性のキャリア材料（例えば、ＳＡＩＢ）と親水性の安定剤（例えば、トレハロース／グリシン）の両方を可溶化することができる。本発明者らは、両親媒性の溶媒（例えば、ＮＭＰ）を使用することにより、各材料に良好な溶解性を提供できることを見出した。その上、そのような系の溶解性時間は、許容可能なものであることも分った（すなわち、約２〜３分以内）。したがって、ある実施形態において、溶媒は、両親媒性溶媒である。好適な両親媒性溶媒としては、Ｎ−メチル−２−ピロリドン（ＮＭＰ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、およびＮ−Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）を含む。Ｎ−メチル−２−ピロリドンは、無毒であり、すでにＦＤＡ承認製剤中に存在していることから、特に好ましい。
【００４３】
全般的に、溶媒は、水溶性、非水溶性、または水混和性とすることができ、溶媒としては、アセトン、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、Ｎ−（ベタヒドロメチル）ラクトアミド（N-(betahydromethyl) lactamide）、ブチレングリコール、カプロラクタム、カプロラクトン、コーン油、デシルメチルスルホキシド、ジメチルエーテル、ジメチルスルホキシド、１−ドデシルアザシクロヘプタン−２−オン（1-dodecylazacycloheptan-2-one）、エタノール、酢酸エチル、乳酸エチル、オレイン酸エチル、グリセロール、グリコフロール（テトラグリコール）（glycofurol (tetraglycol)）、ミリスチン酸イソプロピル、酢酸メチル、メチルエチルケトン、Ｎ−メチル−２−ピロリドン、MIGLYOL（カプリル酸および／またはカプリン酸とグリセロールまたはアルキレングリコール（例えば、MIGLYOL 810もしくは812（カプリル酸／カプリン酸トリグリセリド）、MIGLYOL 818（カプリル酸／カプリン酸／リノール酸トリグリセリド）、MIGLYOL 829（カプリル酸／カプリン酸／コハク酸トリグリセリド）、MIGLYOL 840（プロピレングリコールジカプリル酸／カプリン酸エステル））とのエステル）、オレイン酸、ピーナッツ油、ポリエチレングリコール、炭酸プロピレン、２−ピロリドン、ゴマ油、SOLKETAL（−２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−メタノール）（SOLKETAL (-2,2-dimethyl-1,3-dioxolane-4-methanol)）、テトラヒドロフラン、TRANSCUTOL（ジエチレングリコールモノエチルエーテル、すなわちカルビトール）、トリアセチン、クエン酸トリエチル、ならびにこれらの組み合わせを含む。特に好適な溶媒／噴霧剤としては、安息香酸ベンジル、ジメチルスルホキシド、エタノール、乳酸エチル、グリセロール、グリコフロール（テトラグリコール）、Ｎ−メチル−２−ピロリドン、MIGLYOL 810、ポリエチレングリコール、炭酸プロピレン、２−ピロリドン、およびテトラフルオロエタンを含む。
【００４４】
加えて、組成物がエアロゾルとして縫合糸に適用されるべきである場合、溶媒は、トリクロロフルオロメタンおよびジクロロフルオロメタンのようなＣＦＣ噴霧剤、テトラフルオロエタン（Ｒ−１３４ａ）、１，１，１，２，３，３，３−ヘプタフルオロプロパン（Ｒ−２２７）、ジメチルエーテル、プロパン、およびブタンのような非ＣＦＣ噴霧剤（non-CFC propellants）といった１種以上の噴霧剤であっても、あるいはそのような噴霧剤を含んでもよい。
【００４５】
コーティング組成物は、生物学的活性物質と組み合わせたＬＶＬＣＭとして使用される場合、ＨＶＬＣＭが可溶である溶媒を含有するべきである。ある場合には、送達されるべき活性物質もまた、溶媒に可溶である。溶媒は、無毒であり、そうでなくても生体適合性であるべきである。
【００４６】
１，６−ヘキサンジオールまたはグリセロールのエステルがＨＶＬＣＭとして使用される場合、可能な溶媒の中には、エタノール、Ｎ−メチルピロリドン、炭酸プロピレン、およびPEG 400がある。
【００４７】
溶媒は典型的には、組成物の全重量に対して、約１重量％〜約９５重量％、より詳細には、約５ｗｔ％〜約９０ｗｔ％の範囲の量で組成物に加えられる。さらにより詳細には、溶媒は、約１０重量％〜約５５重量％の範囲の量で組成物中に存在する。その他の詳細な範囲としては、約１０重量％〜約５０重量％、および約１０重量％〜約３０重量％を含む。
【００４８】
非重合体エステルまたは混合エステルが非常に高い粘度、例えば３７℃で１００，０００ｃＰのオーダーを有する状態では、両親媒性溶媒中に溶解することが特に有用であるが、本発明での使用のために好適ないくつかの非重合体エステルまたは混合エステルは、３７℃で５，０００ｃＰを超える粘度を有しているが、粘稠性ではないので、コーティングニートとして、すなわち溶媒を添加することなく、適用されてもよい。
【００４９】
＜アルコール＞
しかしながら、本発明者らが直面したのは、両親媒性溶媒ＮＭＰの低い乾燥時間（low drying time）という他の問題であった。ＮＭＰは比較的不揮発性であることから、ＮＭＰの単独での使用は、やや長い乾燥時間（８〜１０分のオーダー）につながった。典型的には、約５分未満のオーダーの乾燥時間が望ましい。本発明者らは、組成物に揮発性アルコール（例えば、エタノール）を加えることが、ＮＭＰの揮発度を増加させ、それにより組成物の乾燥時間をおよそ１０秒まで減らすことを見出した。
【００５０】
したがって、ある実施形態において、本発明の組成物は、揮発性アルコールを含む。例示的なアルコールとしては、エタノール、イソプロパノール、およびｎ−プロパノールを含む。アルコールは典型的には、組成物の全重量に対して、約１重量％〜約１０重量％、より詳細には約３ｗｔ％〜約７ｗｔ％の範囲の量で組成物に加えられる。さらにより詳細には、アルコールは、約４重量％〜約６重量％の範囲の量で組成物中に存在する。
【００５１】
＜活性物質＞
ＨＶＬＣＭまたはＬＶＬＣＭが、活性物質の送達または放出制御のための媒体として使用されるべきである場合、この物質は、所望の特性を示すあらゆる物質であってよい。特別な実施形態において、この物質は、生物学的活性物質である。
【００５２】
本明細書中で使用される用語「生物学的活性物質」は、薬剤、ペプチド、タンパク質、炭水化物（単糖、オリゴ糖、および多糖を含む）、核タンパク質、ムコタンパク質、リポタンパク質、合成ポリペプチドもしくはタンパク質、またはタンパク質につながった小さい分子、糖タンパク質、ステロイド、核酸（ｃＤＮＡもしくはＲＮＡまたはこれらの断片を含めた、あらゆる形態のＤＮＡ）、ヌクレオチド、ヌクレオシド、オリゴヌクレオチド（アンチセンスオリゴヌクレオチドを含む）、遺伝子、脂質、ホルモン、ビタミンＣおよびビタミンＥを含めたビタミン、あるいはこれらの混合物を含めた、無機分子または有機分子をさしており、限定されるものではないが、鳥類およびヒトを含む哺乳類を含めた動物に対してインビボで投与されると生物学的な影響を引き起こす。
【００５３】
好適なタンパク質としては、限定されるものではないが、ヒト成長ホルモン、線維芽細胞成長因子（ＦＧＦ）、エリスロポイエチン（ＥＰＯ）、血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）、顆粒球コロニー刺激因子（ｇ−ＣＳＦ）、ウシソマトトロピン（ＢＳＴ）、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）、トランスフォーミング成長因子−ベータ（ＴＧＦ−β）スーパーファミリーのメンバー、インターロイキン、インシュリン、およびインターフェロンを含む。
【００５４】
＜成長因子＞
ある実施形態において、「生物学的活性物質」は、成長因子である。本明細書中で使用される用語「成長因子」は、あらゆる細胞生成物であって、その他の細胞、特に結合組織前駆細胞の成長または分化を調節する、細胞生成物を包含する。本明細書に従って使用され得る成長因子としては、限定されるものではないが、酸性および塩基性線維芽細胞成長因子（ＦＧＦ−１および−２）およびＦＧＦ−４を含めた線維芽細胞成長因子ファミリーのメンバー、ＰＤＧＦ−ＡＢ、ＰＤＧＦ−ＢＢ、およびＰＤＧＦ−ＡＡを含めた血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）ファミリーのメンバー；ＥＧＦ、ＩＧＦ−Ｉおよび−ＩＩを含めたインシュリン様成長因子（ＩＧＦ）ファミリーのメンバー；ＴＧＦ−β１、２、および３（ＭＰ−５２を含む）を含めたＴＧＦ−βスーパーファミリー、類骨誘発因子（osteoid-inducing factor）（ＯＩＦ）、アンジオゲニン（類）、エンドセリン、肝細胞成長因子およびケラチン合成細胞成長因子；骨形成タンパク質（ＢＭＰ）のメンバーＢＭＰ−１；ＢＭＰ−３；ＢＭＰ−２；ＯＰ−１；ＢＭＰ−２Ａ、−２Ｂ、−４、−７、および−１４；ＧＤＦ−５；ＨＢＧＦ−１およびＨＢＧＦ−２；成長分化因子（ＧＤＦ）、インディアン、ソニック、およびデザートヘッジホッグを含めた、タンパク質のヘッジホッグファミリーのメンバー；ＡＤＭＰ−１；および、ＣＳＦ−１、Ｇ−ＣＳＦ、およびＧＭ−ＣＳＦを含めたコロニー刺激因子（ＣＳＦ）ファミリーのメンバー；ならびにこれらのアイソフォームを含む。
【００５５】
ある実施形態において、成長因子はＢＭＰである。明細書の全体が参照により組み込まれる米国特許第6,936,582号に開示されているＢＭＰは、本発明で使用されることが企図されている。
【００５６】
本発明のＯＰ／ＢＭＰモルフォゲンは、タンパク質のＴＧＦ−βスーパーファミリー内の造骨性タンパク質／骨形成タンパク質（ＯＰ／ＢＭＰ）ファミリー中の、天然で生じるタンパク質、または天然で生じるタンパク質の機能性変異体である。すなわち、これらのタンパク質は、ＴＧＦ−βスーパーファミリーとして既知の配列関連タンパク質（sequence-related proteins）の進化上ルーズなグループ（loose evolutionary grouping）内の、本明細書中で「ＯＰ／ＢＭＰモルフォゲン」と称される別のサブグループを形成する。このタンパク質ファミリーのメンバーは、共通の構造上の特徴部を共有し、カルボキシ末端成熟タンパク質を得るためにプロタンパク質から同様に処理された、分泌ポリペプチド（secreted polypeptides）を含む。成熟タンパク質内では、全てのメンバーが、97-106アミノ酸ドメインを定める６または７システイン残基の保存されたパターンを共有し、これらのタンパク質の活性型は、単一のファミリーメンバーのジスルフィド結合したホモ二量体か、２つの異なるメンバーのヘテロ二量体か、のいずれかである。例えば、Massague, Annu. Rev. Cell Biol. 6:597 (1990)；Sampath et al., J. Biol. Chem. 265:13198 (1990)を参照のこと。例えば、その成熟未変性形態（mature, native form）では、天然源ヒトＯＰ−１（natural-sourced human OP-1）は、典型的にはＳＤＳ−ＰＡＧＥにより決定されたときに約３０〜３６ｋＤａ（約４．９８２×１０−２０〜５．９７８×１０−２０ｇ）の見かけの分子量を有する、グリコシル化二量体である。還元されると、３０ｋＤａ（４．９８２×１０−２０ｇ）タンパク質は、約１６ｋＤａ（約２．６５７×１０−２０ｇ）および１８ｋＤａ（２．９８９×１０−２０ｇ）の見かけの分子量を有する２つのグリコシル化ペプチドサブユニットを生じる。グリコシル化されていないタンパク質は、約２７ｋＤａ（約４．４８３×１０−２０ｇ）の見かけの分子量を有する。還元されると、２７ｋＤａ（４．４８３×１０−２０ｇ）タンパク質は、約１４ｋＤａ〜１６ｋＤａ（約２．３２５×１０−２０ｇ〜２．６５７×１０−２０ｇ）の分子量を有する、２つのグリコシル化されていないポリペプチド鎖を生じる。
【００５７】
典型的には、天然で生じるＯＰ／ＢＭＰタンパク質は、前駆体として翻訳され、Ｎ−末端シグナルペプチド配列、「プロ（pro）」ドメイン、および「成熟」タンパク質ドメインを有する。シグナルペプチドは典型的には、３０未満の残基であり、翻訳により、Von Heijne, Nucleic Acids Research 14:4683-4691 (1986)の方法を用いて予想されることができる切断部位で急速に切断される。「プロ」ドメインは、配列および長さの両方が変異可能であり、約２００〜４００を上回る残基の範囲にわたる。プロドメインは、約１１５〜１８０の残基の「成熟」Ｃ−末端ドメインをもたらすように切断され、９７〜１０６の残基の保存された６−システインまたは７−システインのＣ−末端ドメインを含む。本明細書中で使用される「プロ形態」のＯＰ／ＢＭＰファミリーメンバーは、折りたたみ対（folded pair）のポリペプチドを含むタンパク質を含み、各ポリペプチドは、ＯＰ／ＢＮＰポリペプチドの成熟ドメインに付随する共有結合または非共有結合のいずれかでプロドメインを含む。典型的には、プロ形態のタンパク質は、生理学的条件下で成熟形態よりも可溶性である。プロ形態は、培養された哺乳類細胞から分泌された初期形態（primary form）のようである。「成熟形態」のタンパク質は、共有結合または非共有結合のいずれでも、プロドメインと関連していない成熟Ｃ−末端ドメインを含む。ＯＰ−１のいずれの組成も、この組成におけるプロドメインの量が「成熟」Ｃ−末端ドメインの量の５％以下である場合に、成熟形態を含むと見なされる。
【００５８】
本明細書中で有用なＯＰ／ＢＭＰファミリーメンバーとしては、系統学的対立遺伝子対応物（allelic, phylogenetic counterparts）、および、天然由来であるか、または生合成で生成された、その他のその変異体（例えば、「ムテイン」または「突然変異タンパク質」を含む）だけでなく、ＯＰ／ＢＭＰファミリーのタンパク質の新しい活性なメンバーをも含めた、既知の天然で生じる未変性タンパク質のいずれかを含む。
【００５９】
特に有用な配列としては、哺乳動物、好ましくはヒトのＣ−末端７システインドメインを含むもの、ヒトＯＰ−１、ＯＰ−２、ＯＰ−３、ＢＭＰ２、ＢＭＰ３、ＢＭＰ４、ＢＭＰ５、ＢＭＰ６、ＢＭＰ８、およびＢＭＰ９を含む。本発明の実施において有用なその他のタンパク質としては、活性型のＧＤＦ−５、ＧＤＦ−６、ＧＤＦ−７、ＤＰＰ、Ｖｇ１、Ｖｇｒ−１、６０Ａ、ＧＤＦ−１、ＧＤＦ−３、ＧＤＦ−５、ＧＤＦ−６、ＧＤＦ−７、ＢＭＰ１０、ＢＭＰ１１、ＢＭＰ１３、ＢＭＰ１５、ＵＮＩＶＩＮ、ＮＯＤＡＬ、ＳＣＲＥＷ、ＡＤＭＰ、またはＮＵＲＡＬ、およびそれらのアミノ酸配列変異体を含む。ある一つの現在好ましい実施形態において、本発明のＯＰ／ＢＭＰモルフォゲンは、ＯＰ−１、ＯＰ−２、ＯＰ−３、ＢＭＰ２、ＢＭＰ３、ＢＭＰ４、ＢＭＰ５、ＢＭＰ６、およびＢＭＰ９のいずれか１つから選択される。
【００６０】
これらの配列、ならびにそれらの化学的および物理的性質を開示している刊行物としては、ＯＰ−１およびＯＰ−２に関しては、米国特許第5,011,691号、米国特許第5,266,683号、およびOzkaynak el al., EMBO J. 9:2085-2093 (1990)；ＯＰ−３に関しては、WO94/10203；ＢＭＰ２、ＢＭＰ３、およびＢＭＰ４に関しては米国特許第5,013,649号、WO91/18098、WO88/00205、およびWozney et al., Science 242:1528-1534 (1988)；ＢＭＰ５およびＢＭＰ６に関してはWO90/11366、およびCeleste et aL, Proc. Natl. Acad. Sci. (USA) 87:9843-9847 (1991)；Ｖｇｒ−１に関してはLyons et at., Proc. Natl. Acad. Sci. (USA) 86:4554-4558 (1989)；ＤＰＰに関してはPadgett et al., Nature 325:81-84 (1987)；Ｖｇ１に関してはWeeks, Cell 51:861-867 (1987)；ＢＭＰ９に関してはWO95/33830；ＢＭＰ１０に関してはWO94/26893；ＢＭＰ−１１に関してはWO94/26892；ＢＭＰ１２に関してはWO95/16035；ＢＭＰ−１３に関してはWO95/16035、ＧＤＦ−１に関してはWO92/00382、およびLee et al., Proc. Natl. Acad. Sci (USA) 88:4250-4254 (1991)；ＧＤＦ−８に関してはWO94/21681；ＧＤＦ−９に関してはWO94/15966；ＧＤＦ−１０に関してはWO95/10539；ＧＤＦ−１１に関してはWO96/01845；ＢＭＰ−１５に関してはWO96/36710号；ＭＰ１２１に関してはWO96/01316；ＧＤＦ−５（ＣＤＭＰ−１、ＭＰ５２）に関してはWO94/15949、WO96/14335、WO93/16099、およびStorm el al., Nature 368:639-643 (1994)；ＧＤＦ−６（ＣＤＭＰ−２、ＢＭＰ１３）に関してはWO95/01801、WO96/14335、およびWO95/10635；ＧＤＦ−７（ＣＤＭＰ−３、ＢＭＰ１２）に関してはWO95/10802、およびWO95/10635；ＢＭＰ−３ｂに関してはTakao et al., Biochem. Biophys. Res. Comm. 219:656-662 (1996)；ＧＤＦ−３に関してはWO94/15965；６０Ａに関してはBasler et al., Cell 73:687-702 (1993)、およびGenBank Accession No. L12032を含む。他の実施形態において、有用なタンパク質としては、新規の生合成タンパク質、および２つ以上の既知のＯＰ／ＢＮＴファミリータンパク質からの配列を用いて設計されたキメラタンパク質を含めた、生物学的に活性な生合成作成物を含む。開示が参照により本明細書中に組み込まれる米国特許第5,011,691号で開示された生合成作成物（例えば、ＣＯＰ−１、ＣＯＰ−３、ＣＯＰ−４、ＣＯＰ−５、ＣＯＰ−７、およびＣＯＰ−１６）も参照のこと。
【００６１】
他の好ましい実施形態において、本明細書中で有用なＯＰ／ＢＭＰモルフォゲンとしては、活性型のヒトＯＰ−１（すなわち、米国特許第5,266,683号のSEQ ID NO: 2に示されているような、残基３３０−４３１）またはＧＤＦ−５に存在しているＣ−末端７システインドメインと少なくとも７０％のアミノ酸配列「相同性」、好ましくは７５％または８０％の相同性を共有しているアミノ酸配列を含むタンパク質を含む。その他の好ましい実施形態において、本明細書中で有用なＯＰ／ＢＭＰモルフォゲンとしては、活性型のヒトＯＰ−１またはＧＤＦ−５に存在しているＣ−末端７システインドメインと少なくとも約６０％のアミノ酸配列同一性、好ましくは６５％または７０％の同一性を共有しているアミノ酸配列を含むタンパク質を含む。このように、候補アミノ酸配列は、好都合には、Align program（DNAstar, Inc.）といったコンピュータープログラムにより実行される、Needleman el al., J. Mol. Biol. 48:443-453 (1970)の方法を用いて、ヒトＯＰ−１のＣ−末端７システインドメインのアミノ酸配列と整列されることができる。当業者により理解され得るように、相同性の配列または機能的に等しい配列としては、保存されたシステイン骨格内にシステイン残基の機能的に等しい配置を含み、これは、これらのシステインの直線的な配置を変質するが、生物学的活性のために必要であるかも知れないので、そのような鎖内または鎖間（intra- or inter-chain）のジスルフィド結合を形成する能力を含めた二量体タンパク質の折りたたみ構造における相関性を著しく損なうことはない、アミノ酸の挿入または欠失を含む。したがって、候補配列における内部ギャップおよびアミノ酸挿入は、候補配列と基準配列との間のアミノ酸配列の相同性または同一性のレベルを算出するためには無視される。
【００６２】
「アミノ酸配列相同性」は、アミノ酸配列の同一性および類似性の両方を含むものと本明細書中では理解される。このため、本明細書中で使用される２つのアミノ酸配列間の「相同性」は、配列間で同一であるか、または類似している、アミノ酸残基のパーセンテージを示している。「類似」の残基は、Dayhoffel al., Atlas of Protein Sequence and Structure Vol. 5 (Suppl. 3), pp. 354-352 (1978), Natl. Biomed. Res. Found., Washington, D.Cの「許容される点突然変異（accepted point mutation）」について規定されている判断基準を満たす「保存的置換」である。このため、「保存的アミノ酸置換」は、サイズ、形状、電荷、および／または共有結合または水素結合を形成する能力といった化学特性などが類似している対応する基準残基と物理的または機能的に類似している残基である。保存的置換の例としては、あるアミノ酸を類似の特性を備えた別のものと置換すること、例えば、下記のグループ内の置換を含む。すなわち、（ａ）バリン、グリシン、（ｂ）グリシン、アラニン；（ｃ）バリン、イソロイシン、ロイシン；（ｄ）アスパラギン酸、グルタミン酸；（ｅ）アスパラギン、グルタミン；（ｆ）セリン、スレオニン；（ｇ）リジン、アルギニン、メチオニン；および（ｈ）フェニルアラニン、チロシンである。用語「保存的置換」または「保存的変異」もまた、結果として置換されたポリペプチド鎖が本発明で有用な生物学的活性を有することを条件として、所与のポリペプチド鎖において未置換の親アミノ酸の代わりに置換されたアミノ酸を使用することを含む。
【００６３】
本発明のＯＰ／ＢＭＰモルフォゲンは、当業者により容易に確認され得る生物学的活性により特徴付けられる。
【００６４】
本明細書中で企図されているＯＰ／ＢＭＰモルフォゲンは、無傷の、または切断された、ゲノムまたはｃＤＮＡから、または原核または真核のホスト細胞中の合成ＤＮＡから、発現され得る。二量体タンパク質は、培地から単離される、および／または、生物学的活性調製物を形成するために、インビトロで再び折りたたまれ、二量体化されることができる。ヘテロ二量体は、分離した別々のポリペプチド鎖を組み合わせることによりインビトロで形成されることができる。代替的に、ヘテロ二量体は、分離した別々のポリペプチド鎖をコード化する核酸を同時発現させることにより単一細胞において形成されることができる。例えば、いくつかの例示的な組み換え型ヘテロ二量体タンパク質生成プロトコルについての、WO93/09229または米国特許第5,411,941号を参照のこと。現在好適なホスト細胞としては、限定することなく、E. coliを含めた原核生物、あるいは、Saccharomyces, insect.細胞といった酵母、またはＣＨＯ、ＣＯＳ、またはＢＳＣ細胞といった哺乳類細胞を含めた真核生物を含む。当業者は、その他のホスト細胞が有利に利用されることができることを認識するであろう。作り方、使い方、およびテストのやり方を含めた、本発明の実施において有用なタンパク質の詳細な説明は、開示が参照により本明細書中に組み込まれる米国特許第5,266,683号および同第5,011,691号を含めた、多数の刊行物で開示されている。
【００６５】
ある実施形態において、成長因子はＧＤＦ−５である。成長因子としてＧＤＦ−５が選択される場合、ＧＤＦ−５はＰＬＧＡキャリアと組み合わされてもよい。
【００６６】
本明細書中で使用される薬剤という用語は、疾病または障害の処置、治癒、または予防のためのクスリとして内部的に使用されるあらゆる物質をさしており、限定されるものではないが、免疫抑制薬、抗酸化薬、麻酔薬、鎮痛薬、化学療法剤、ステロイド（レチノイドを含む）、ホルモン、抗生物質、抗ウイルス薬、抗真菌薬、増殖抑制薬、抗ヒスタミン薬、抗凝固薬、抗光老化薬剤（antiphotoaging agents）、メラノトロピックペプチド（melanotropic peptides）、非ステロイド系およびステロイド系抗炎症性化合物、抗精神病薬、ならびにＵＶ吸収剤を含めた放射線吸収剤を含む。
【００６７】
薬理学的材料の非限定的な例としては、抗感染薬、例えば、ニトロフラゾン、プロピオン酸ナトリウム、抗生物質（ペニシリン、テトラサイクリン、オキシテトラサイクリン、クロロテトラサイクリン、バシトラシン、ナイスタチン、ストレプトマイシン、ネオマイシン、ポリミキシン、グラミシジン、クロラムフェニコール、エリスロマイシン、およびアジスロマイシンを含む）；スルホンアミド（スルファセタミド、スルファメチゾール、スルファメチアジン、スルファジアジン、ルファメラジン、およびスルフイソキサゾールを含む）、ならびに抗ウイルス薬（イドクスウリジンを含む）；抗アレルギー性物質、例えば、アンタゾリン、メタピリテン（methapyritene）、クロルフェニラミン、ピリラミンマレイン酸フェニラミン、ヒドロコルチゾン、コルチゾン、酢酸ヒドロコルチゾン、デキサメサゾン、デキサメサゾン２１−リン酸塩、フルオシノロン、トリアムシノロン、メドリゾン、プレドニゾロン、プレドニゾロン２１−コハク酸ナトリウム、および酢酸プレドニゾロン；除痛薬剤（desensitizing agents）、例えば、ブタクサ花粉抗原、アレルギー性鼻炎花粉抗原、ダスト抗原、およびミルク抗原；ワクチン、例えば、天然痘、黄熱病、ジステンパー、豚コレラ、水痘、抗毒素、猩紅熱、ジフテリアトキソイド、テタヌストキソイド、トリポックス（pigeon pox）、百日咳、インフルエンザ 狂犬病、おたふく風邪、はしか、小児麻痺、およびニューカッスル病；鬱血除去薬、例えば、フェニレフリン、ナファゾリン、およびテトラヒドロゾリン（tetrahydrazoline）；縮瞳薬およびアンチコリンエステラーゼ、例えば、ピロカルピン、サリチル酸エスペリン、カルバコール、フルオロリン酸ジイソプロピル、ヨー化ホスフォリン（phospholine iodide）、および臭化デメカリウム；副交感神経抑制薬（parasympatholytics）、例えば、硫酸アトロピン、シクロペントレート、ホマトロピン、スコポラミン、トロピカミド、アトロピン、およびハイドロキシアンフェタミン；交感神経模倣薬、例えば、エピネフリン；鎮静薬および催眠薬、例えば、ペントバルビタールナトリウム、フェノバルビタール、セコバルビタールナトリウム、コデイン、（ａ−ブロモイソバレリル）尿素、カルブロマール；精神賦活薬、例えば、３−（２−アミノプロピル）酢酸インドール（3-(2-aminopropyl) indole acetate）、および３−（２−アミノブチル）酢酸インドール；トランキライザー、例えば、レセルピン、クロルプロマイリン（chlorpromayline）、およびチオプロパゼート；麻酔薬、例えば、ノボケイン（novicaine）、およびブピバカイン；アンドロゲンステロイド、例えば、メチル−テストステロン、およびフルオリメステロン；エストロゲン、例えば、エストロン、１７−フレストラジオール（17-flestradiol）、エチニルエストラジオール、およびジエチルスチルベストロール；プロゲステロン性薬剤、例えば、プロゲステロン、メゲストロール、メレンゲストロール、クロルマジノン、エチステロン、ノルエチノドレル、１９−ノルプロゲステロン、ノルエチンドロン、メドロキシプロゲステロン、および１７−０−ヒドロキシプロゲステロン；体液性薬剤、例えば、プロスタグランジン（例えば、ＰＧＥＩ、ＰＧＥ２、およびＰＧＦ２）；解熱薬、例えば、アスピリン��サリチル酸ナトリウム、およびサリチルアミド；鎮痙薬、例えば、アトロピン、メタンテリン、パパベリン、および臭化メトスコポラミン；抗マラリア薬、例えば、４−アミノキノリン、８−アミノキノリン、クロロキン、およびピリメタミン（pyrimethamine）、抗ヒスタミン薬、例えば、ジフェンヒドラミン、ジメンヒドリナート、トリペレナミン、ペルフェナジン、およびクロルフェナジン（chlorphenazine）；心臓作用性薬剤、例えば、ジベンズヒドロフルメサイアザイド（dibenzhydroflume thiazide）、フルメサイアザイド、クロロチアジド、およびアミノトレート（aminotrate）；栄養性薬剤、例えば、ビタミン、天然および合成の生理活性ペプチド、ならびにタンパク質（成長因子、細胞接着因子、サイトカイン、および生物学的応答改質剤（biological response modifiers）を含む。
【００６８】
活性化合物は、所望の効果を達成するのに有効な量をホスト患者に送達するのに十分な量で組成物中に含まれる。組成物に組み込まれる薬剤または生物学的活性薬剤の量は、所望の放出プロフィール、生物学的効果のために望まれる薬剤の濃度、および薬剤の所望の放出期間に依存する。
【００６９】
組成物中の活性化合物の濃度もまた、薬剤の吸収速度、不活性化速度、および排出速度だけでなく、当業者に既知のその他の因子にも依存するであろう。また、投薬量の値も、軽減されるべき症状の重症度に伴って変化するであろうことに注意しなければならない。いずれかの特別な対象に対しては、特定の投薬量療法は、個々の必要に従い、かつ組成物を投与するか、または組成物の投与を監督する人物の専門の判断に従う時間にわたって調節されるべきであること、ならびに、本明細書中に示される濃度範囲が、単に例示的なものであり、請求されている組成物の範囲または実施を制限することを意図するものではないことが、さらに理解されなければならない。組成物は、１回の投与で投与されてもよいし、あるいは、多様な時間間隔で投与されるべき、多数のより少ない用量に分割されてもよい。
【００７０】
生物学的活性物質は典型的には、組成物の全重量に対して、約０．１重量％〜約２０重量％、より詳細には約０．５重量％〜約２０重量％の範囲で、より典型的には約１重量％〜約１５重量％以上の間で組成物中に存在する。他の好ましい範囲は、約２重量％〜約１０重量％である。成長因子のように、非常に活性のある薬剤については、好ましい範囲は、１重量％未満、および０．０００１％未満である。
【００７１】
＜添加物＞
材料の特性を望まれるように改善するため、特には、組成物に含有される生物学的活性物質に関する組成物の放出特性を改善するために、任意で、種々の添加物が、ＨＶＬＣＭまたはＬＶＬＣＭに加えられることができる。添加物は、組成物に所望の特性を分け与えるのに十分な、いずれかの量で存在することができる。使用される添加物の量は、一般に、添加物の性質、および達成されるべき効果の関数となるであろう。そして、この量は、熟練者により容易に決定されることができる。好適な添加物は、内容全体が参照により本明細書中に組み込まれる米国特許第5,747,058号で説明されている。より詳細には、好適な添加物としては、水、生分解性ポリマー、非生分解性ポリマー、天然油、合成油、炭水化物または炭水化物誘導体、無機塩、ＢＳＡ（ウシ血清アルブミン）、界面活性物質、糖といった有機化合物、ならびに、クエン酸ナトリウムといった有機塩を含む。これらの分類の添加物の中には、下記により詳細が説明されているものがある。一般に、添加物の水溶性が低ければ低いほど、すなわち親油性が高ければ高いほど、添加物の無い同じ組成物に比べて、基質の放出速度がより低下していくであろう。加えて、組成物の強度または多孔度といった特性を増す添加物を含むことが望ましいであろう。
【００７２】
添加物の追加は、活性成分についての送達時間を長くし、組成物を、より長期間の投与に応答した障害または症状の処置のために好適にするために使用されてもよい。この点で好適な添加物としては、米国特許第5,747,058号に開示されているものを含む。特に、この目的のために好適な添加物としては、セルロースポリマーおよび生分解性ポリマーといったポリマー添加物を含む。好適なセルロースポリマーとしては、酢酸セルロース、セルロースエーテル、およびセルロースアセテートブチレートを含む。好適な生分解性ポリマーとしては、ポリラクトン、ポリ無水物、およびポリオルトエステル、特には、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリカプロラクトン、およびこれらのコポリマーを含む。
【００７３】
添加物が存在する場合、その添加物は典型的には、組成物の全重量に対して、約０．０１重量％〜約２０重量％、より詳細には約０．１重量％〜約２０重量％の範囲の量で組成物中に存在し、より典型的には、約１、２、または５重量％〜約１０重量％の範囲の量で組成物中に存在する。緩衝剤といったある添加物は、組成物中に少量存在するに過ぎない。
【００７４】
下記のカテゴリーは、組成物中に用いられることができる添加物の分類の非限定的な例である。
【００７５】
添加物のある一つのカテゴリーは、生分解性ポリマーおよびオリゴマーである。ポリマーは、送達されるべき物質の放出プロフィールを変えるため、組成物に結着性を加えるため、あるいは、組成物の特性を改善するために、使用されることができる。好適な生分解性ポリマーおよびオリゴマーの非限定的な例としては、ポリ（ラクチド）、ポリ（ラクチド−コグリコリド）、ポリ（グリコリド）、ポリ（カプロラクトン）、ポリアミド、ポリ無水物、ポリアミノ酸、ポリオルトエステル、ポリシアノアクリレート、ポリ（ホスファジン）（poly(phosphazines)）、ポリ（リン酸エステル）、ポリエステルアミド、ポリジオキサノン、ポリアセタール、ポリケタール、ポリカーボネート、ポリオルトカーボネート、分解性ポリウレタン、ポリヒドロキシブチレート、ポリヒドロキシバレレート、ポリアルキレンオキサレート、ポリアルキレンスクシナート、ポリ（リンゴ酸）、キチン、キトサン、および、コポリマー、ターポリマー、酸化セルロース、あるいは、上述の材料の組み合わせまたは混合物を含む。
【００７６】
ポリ（α−ヒドロキシ酸）としては、ポリ（グリコール酸）、ポリ（ＤＬ−乳酸）、およびポリ（Ｌ−乳酸）、ならびにこれらのコポリマーを含む。ポリラクトンの例としては、ポリ（ε−カプロラクトン）、ポリ（δ−バレロラクトン）、およびポリ（χ−ブチロラクトン）を含む。
【００７７】
本発明の組成物と共に使用するための他の添加物は、非生分解性ポリマー（non-biodegradable polymers）である。添加物として使用されることができる非腐食性ポリマー（nonerodible polymers）の非限定的な例としては、ポリアクリラート、エチレン−ビニルアセテートポリマー、セルロースおよびセルロース誘導体、アシル置換セルロースアセテートおよびその誘導体、非腐食性ポリウレタン、ポリスチレン、ポリ塩化ビニル、ポリフッ化ビニル、ポリビニル（イミダゾール）、クロロスルホン化ポリオレフィン（chlorosulphonated polyolefins）、ポリエチレンオキシド、およびポリエチレンを含む。
【００７８】
好ましい非生分解性ポリマーとしては、ポリビニルピロリドン、エチレンビニルアセテート、ポリエチレングリコール、セルロースアセテートブチレート（「ＣＡＢ」）、およびセルロースアセテートプロピオネート（「ＣＡＰ」）を含む。
【００７９】
本発明のコーティング組成物において使用されることができる添加物のさらなる分類は、天然および合成の油および脂肪である。動物または植物の種もしくはナッツから誘導される油としては、典型的には、脂肪酸、主として、オレイン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、およびリノール酸のグリセリドを含む。概して、分子が水素をより含めば含むほど、油はより濃厚になる。
【００８０】
好適な天然油および合成油の非限定的な例としては、未精製であるか、または精製されたかのいずれかである、植物油、ピーナッツ油、中鎖トリグリセリド（medium chain triglycerides）、ダイズ油、アーモンド油、オリーブ油、ゴマ油、ピーナッツ油、ウイキョウ油、ツバキ油、コーン油、ヒマシ油、綿実油、およびダイズ油、ならびに、中鎖脂肪酸トリグリセリドを含む。
【００８１】
脂肪は典型的には、ステアリン酸およびパルミチン酸といったより高級な脂肪酸（higher fatty acids）のグリセリルエステルである。そのようなエステルおよびそれらの混合物は、室温で固体であり、結晶構造を示す。ラードおよび硬脂がその例である。一般に、油および脂肪は、ＨＶＬＣＭの疎水性、ゆっくりとした分解（slowing degradation）、および水の取り込みを増加させる。
【００８２】
本発明の組成物において使用されることができる添加物のその他の分類は、炭水化物および炭水化物誘導体である。これらの化合物の非限定的な例としては、単糖類（monosaccarides）（果糖およびその異性体、グルコース（ブドウ糖）といった単糖（simple sugars））；ショ糖、麦芽糖、セロビオース、および乳糖といった二糖類；ならびに、多糖類を含む。
【００８３】
＜安定剤および緩衝剤＞
活性物質が成長因子といったタンパク質である場合、溶液中のタンパク質が、タンパク質活性の損失へとつながり得る変性および凝集に対して影響されやすいであろうという危険がある。したがって、ある実施形態（特に、成長因子を含む実施形態）では、本発明の組成物は、タンパク質安定剤を含む。ある実施形態において、タンパク質安定剤は、成長因子の周りにガラス相を形成し、これにより、タンパク質の構造を保護する。ある実施形態において、タンパク質安定剤は、トレハロースである。本発明に従う、トレハロースを含む調合物、およびトレハロースを使用する方法は、２００６年１２月１４日、「Protein Stabilization Formulations」という名称で出願された、米国特許仮出願番号第60/870,032号（代理人整理番号DEP-5877）に開示されており、この明細書はその全体が参照により組み込まれる。
【００８４】
緩衝剤の中でもグリシンが、トレハロース製剤においてrhGDF-5をトレハロース単独よりもより良好に守ることが分った。
【００８５】
＜縫合糸＞
本発明の組成物は、広く種々にわたる縫合糸において好適に使用されることができることが分った。本発明の組成物に好適なコーティング特性、乾燥時間、および溶解性時間を提供することが実証された特定の縫合糸としては、限定されるものではないが、Orthocord-223104、Vicryl-J496、Plain Gut-844、Chronic Gut-S114、PDS II-Z347、およびEthibond Excel-X412を含む。
【００８６】
コーティングされた縫合糸を予言的に製造することにおいて、凍結乾燥したrhGDF-5がトレハロースタンパク質安定剤およびグリシンと共にＳＡＩＢ溶液中に溶解される。その後、縫合糸は、特定の時間の間、この溶液中に浸漬され、乾燥した被膜を形成するために、特定の時間の間、自然の風乾条件に曝される。コーティングされた縫合糸はその後、直接、臨床的な適用のために使用されることができる。
【００８７】
ある一つの好ましい予言的な製造方法において、好適な量のＳＡＩＢキャリアは、エタノール、ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）、Ｎ−Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、または、これらの溶媒のうちの少なくとも２つを１：９〜９：１の容積比で混合したものにおいて、溶解される。キャリアの濃度は、約２ｗｔ％〜９５ｗｔ％の間である。キャリア溶液は、rhGDF-5およびトレハロース／グリシンを溶解するために使用されることができるであろう。縫合糸は、特定の時間の間、反応容器内に収容された薬剤／キャリア溶液中に、縫合糸表面が実質的に完全に薬剤／キャリア溶液に接触した状態で、浸漬されるであろう。湿った縫合糸は、反応容器から取り出され、自然に風乾するために空気中に数秒間曝されるであろう。ヘルスケアの専門家はその後、外科処置のために直ちにこのコーティングされた縫合糸を使用することができる。
【００８８】
他の好ましい予言的な製造方法において、好適な量のＳＡＩＢは、無菌バイアルにおいて、キャリアとしてのＮ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）およびエタノール（ＥｔＯＨ）中に溶解されるであろう。ＮＭＰおよびＥｔＯＨは、ＳＡＩＢキャリアと共に、溶媒として使用される。このキャリア溶液は、凍結乾燥したrhGDF-5とトレハロースから構成される第２のバイアルの中身を溶解するために使用されるであろう。トレハロースは、２８℃でrhGDF-5タンパク質を安定化するために使用される。縫合糸は、この再構成されたrhGDF-5 ＳＡＩＢ溶液に、特定の時間の間（典型的には、およそ２分間）、縫合糸表面がrhGDF-5 ＳＡＩＢ溶液中に完全に接触した状態で、浸漬されるであろう。湿った縫合糸は、バイアルから取り出され、周囲温度で特定の時間の間、風乾されるであろう。多くの場合、これは数秒間かかる。ヘルスケアの専門家は、外科処置のために直ちにこのコーティングされた縫合糸を使用することができる。
【００８９】
＜キット＞
ある実施形態において、コーティングされた縫合糸を作製するためのキットが提供され、このキットは、
ａ）成長因子（好ましくは、rhGDF-5）、および成長因子安定剤（例えば、トレハロース／グリシン）を収容している第１のバイアルと、
ｂ）第２のバイアルであって、
ｉ）生分解性非重合体の非水溶性液体キャリア材料（例えば、ＳＡＩＢ）、
ii）生分解性非重合体の非水溶性液体キャリア材料およびタンパク質安定剤の両方が混和性である溶媒（好ましくは、ＮＭＰといった両親媒性溶媒）、および、
iii）揮発性アルコール（例えば、エタノール）
を収容している、第２のバイアルと、
を具備する。
【００９０】
ある実施形態において、生分解性の小さい分子のキャリアを有するrhGDF-5コーティングされた縫合糸は、軟部組織修復の治癒を高め、腱、靭帯、および回旋筋腱板の損傷における治癒を改善するために使用される。これは、回旋筋腱板裂傷、アキレス腱断裂、屈筋腱裂傷、およびＡＣＬ再建を含む。
【００９１】
ある実施形態において、本発明は、製品パッケージで提供され、この製品パッケージは、
ａ）無菌縫合糸を備えたパッケージと、
ｂ）トレハロース／グリシンを備えた、rhGDF-5の無菌「凍結乾燥したタンパク質」バイアルであって、rhGDF-5は、バイアル当たり０．５ｍｇまたは１ｍｇの用量である、（２〜８℃の条件で貯蔵されることができる）バイアルと、
ｃ）ＮＭＰおよびＥｔＯＨ「キャリア溶液」を備えた、ＳＡＩＢの無菌バイアル（これは２〜８℃、または室温条件で貯蔵されることができる）と、
ｄ）この製品の使い方の指示書と、
を収容している。
【００９２】
第１のバイアルは、０．５〜２ｍｇの凍結乾燥したrhGDF-5、５０ｍｇのトレハロース、および０．３７５ｍｇのグリシンを収容する。第２のバイアルは、１．５ｍＬの液体を収容し、ＮＭＰ：エタノールが１：３〜３：１の間の比率のバランスとなるような状態で、１０％〜７５％のＳＡＩＢを有する。
【００９３】
ある一つの実施形態において、製品を使用するための指示書は、下記のとおりである。すなわち、まず、液体「キャリア溶液」バイアルのシールを引き剥がし、アルコール綿棒でストッパー表面をぬぐう。針を装着した無菌シリンジを用いて「キャリア溶液」１ｍＬを注意深く取り出す。「凍結乾燥したタンパク質」バイアルのシールを引き剥がし、アルコール綿棒でストッパー表面をぬぐう。ステップ２で取り出した「キャリア溶液」１ｍＬを「凍結乾燥したタンパク質」バイアルに注意深く注入し、数秒間、バイアルを静かにかき回す（gently swirl）。凍結乾燥したケーキが完全に再構成されるようにする。これには概ね２〜３分間かかる。ケーキが完全に可溶になった後で、バイアルのキャップを外す。ステップ６のバイアルに無菌の縫合糸を約３０秒間、浸漬する。使用前に、浸漬した縫合糸を取り出し、少なくとも１５〜３０秒間この縫合糸を乾燥させる。コーティングされた縫合糸を手術部位に適用する。
【００９４】
〔実施例〕
＜実験１＞
前述の試薬の種々の組み合わせの溶解性を理解するために最初の実験を行った。下記の組成物をテストした。すなわち、
特定の溶媒組成：
EtOH:NMP (1:3) >                  3.3mL EtOHおよび10mL NMP
EtOH:NMP (1:1) >                  10mL EtOHおよび10mL NMP
10% SAIB >                        10mL EtOH中の1.0g SAIBおよび10mL NMP
25% SAIB >                        10mL EtOH中の2.5g SAIBおよび10mL NMP
50% SAIB >                        3.3mL EtOH中の5.0g SAIBおよび10mL NMP
EtOH:H2O (1:1) >                  5mL EtOHおよび5mL H2O
EtOH:H2O (1:1) & 10% SAIB >       5mL EtOHおよび5mL H2O & 10mL EtOH中の
1.0g SAIBおよび10mL NMP
【００９５】
溶解性時間は、２０秒以下〜３０秒（~20-30 seconds）から６００秒（５分）までの範囲であった。２５％ＳＡＩＢ溶液が、６００秒（５分）の最長の溶解性時間を有していた。ほとんどの縫合糸についての乾燥時間は、数分間ではなく数秒間だけ続いた。さらなる実験で、乾燥時間を決定するために、６種類の異なる縫合糸のタイプ（前述のもの）と種々のトレハロース／グリシン組成との間の相互作用を調査した。最も早い乾燥時間は５秒以下〜１０秒であった。
【００９６】
ＥｔＯＨ：ＮＭＰの比率が増えても、Orthocord縫合糸の乾燥時間に対して影響が最小限であるか、影響が無い（has a minimal / no effect）。また、ＥｔＯＨ：ＮＭＰの増加が溶解性時間に影響を与えることを示す別のパターンはなく、一方（as）、２５％ＳＡＩＢおよび５０％ＳＡＩＢでのデータ点は明らかに、より高い溶解性時間点を有していた。このことは、ＳＡＩＢがOrthocord縫合糸において溶解性時間を増加させ得ることを示唆している。
【００９７】
＜実験２＞
種々のトレハロース組成の単一コーティングの被覆がマルチフィラメント縫合糸（VICRYLおよびEthibond Excel）ならびにモノフィラメント縫合糸（PDS II）における均一性および一貫性にどのように影響を及ぼすかを理解するために、３種の縫合糸タイプについてＳＥＭデータを作成した。
【００９８】
下記の溶媒を使用した。すなわち、
EtOH:NMP (1:3) >                  3.3mL EtOHおよび10mL NMP
25% SAIB >                        10mL EtOH中の2.5g SAIBおよび10mL NMP
EtOH:H2O & 10% SAIB >             5 mL EtOHおよび5mL H20 & 10 mL EtOH中の
1.5g SAIBおよび10mL NMP
【００９９】
繊維コーティング間で明白な相違は現れなかった。VicrylのＳＥＭデータは、使用された異なる溶液間で、いくらかの有意なコーティングの違いも示していない。それでも、EtOH:H2O &10% SAIB組成は、１５０倍の倍率で、より一貫性のあるコーティングを示した。PDS IIのＳＥＭデータは、１５０倍の倍率で、使用された異なる溶液間で、いくからの有意なコーティングの違いも示していない。Ethibond ExcelのＳＥＭデータは、１５０倍の倍率で、使用された異なる溶液間で、いくからの有意なコーティングの違いも示していない。それでも、EtOH:H2O &10% SAIB組成は、１５０倍の倍率で、より粗いコーティングを示した。
【０１００】
＜実験３＞
Orthocord、Ethibond Excel、およびPDS II縫合糸で、他の一連の実験を実施した。トレハロース／グリシンを備えた溶媒混合物中で複数回（０、１、２、３回）縫合糸をコーティングした（５秒間の浸漬コーティングにつき、浸漬コーティングの間の間隔は５秒間とした）。溶媒混合物は、EtOH:H2O & 10% SAIB（5 mL EtOHおよび5mL H20 & 10mL EtOH中の1.5g SAIBおよび10mL NMP）であった。
【０１０１】
ＳＥＭの結果は、縫合糸上の複数の浸漬コーティング間で、いくらかの有意な違いも示さなかった。縫合糸表面上に存在する調合物から結晶化したいくらかの粒子があった。潜在的に、これらの粒子は、修復組織の中への縫合、および修復組織を貫通する縫合の間に、剥がれ落ちるかも知れない。複数回浸漬コーティングの縫合糸テストは、１００倍の倍率でのＳＥＭの下、いくらかの有意な違いも示さなかった。OrthocordおよびEthibond Excelについての縫合糸乾燥時間は、複数回浸漬コーティングで増加した。PDS IIについての縫合糸乾燥時間は、複数回浸漬コーティングでも同じままだった。
【０１０２】
＜実験４＞
ＳＡＩＢの濃度の増加が、縫合糸浸漬コーティング試験（Suture Dip Coat Testing）に何らかの影響を及ぼすかどうか評価するために、実験を行った。Orthocord縫合糸を、コーティングし（各縫合糸に２回ずつ）、その後、垂直で風乾した。ＳＡＩＢ濃度は、２５％から５０％および７５％まで（トレハロース／グリシン有りと無しで）増加させた。
【０１０３】
下記の溶媒を使用した。すなわち、
25% SAIB >                5mL EtOH中の2.5g SAIBおよび5mL NMP
50% SAIB >                5mL EtOH中の5.0g SAIBおよび5mL NMP
75% SAIB >                5mL EtOH中の7.5g SAIBおよび5mL NMP.
【０１０４】
１００倍でのＳＥＭの結果は、トレハロース／グリシンコーティングされた縫合糸が縫合糸を覆う微細な層を有したのに対して、コーティングされていない縫合糸は層が無かったことを示した。
【０１０５】
この実験は、ＳＡＩＢを２５％〜５０％から７５％まで（from 25% to 50% to 75%）（トレハロース有りと無しで）増やすことが、Orthocord縫合糸について、乾燥時間の上昇を引き起こすことを示した。また、トレハロース有りの乾燥時間は、トレハロース／グリシン無しよりも少ない。このデータは、ＳＡＩＢ濃度を増加させることで乾燥時間が増加することを示唆している。
【０１０６】
＜実験５＞
この実験は、rhGDF-5タンパク質で縫合糸をコーティングする影響、および３７℃の緩衝剤中、コーティングされた縫合糸からのインビトロでのrhGDF-5の放出を示した。
【０１０７】
Orthocord縫合糸（本来の長さ３６インチ（９１４．４ｍｍ））をこの研究のために１２インチ（３０４．８ｍｍ）に切断し、rhGDF-5（１ｍｇ）／トレハロース（５０ｍｇ）／グリシン（０．３７５ｍｇ）の溶液１ｍＬで３回、合計１分間、浸漬コーティングした。タンパク質／トレハロース／グリシンのケーキは、１：１のＥｔＯＨ：ＮＭＰ中、１ｍＬの５０％ＳＡＩＢに溶解した。乾燥時間を８０秒とし、その後、この縫合糸を３７℃で１０ｍＬのリン酸塩緩衝剤に沈めた。
【０１０８】
この緩衝剤溶液を下記のスケジュールに従って新しいものに交換し、タンパク質濃度をELISAを用いて決定した。下記の結果は、縫合糸からのタンパク質の累積放出（cumulative release）を示している。
【表１】
2010522036.tif 000002
【０１０９】
これらの結果は、タンパク質が、引き延ばされた時間の期間にわたって制御式で放出されることを示している。
【手続補正書】
【提出日】平成21年12月3日(2009.12.3)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
外科用縫合糸において、
当該縫合糸上にコーティングを有し、
前記コーティングは、有効量の、成長因子、および生分解性非重合体の非水溶性液体キャリアを含む、縫合糸。
【請求項２】
請求項１に記載の縫合糸において、
前記成長因子は、ＢＭＰである、縫合糸。
【請求項３】
請求項２に記載の縫合糸において、
前記ＢＭＰは、rhGDF-5である、縫合糸。
【請求項４】
請求項１に記載の縫合糸において、
前記コーティングはさらに、両親媒性溶媒を含む、縫合糸。
【請求項５】
請求項４に記載の縫合糸において、
前記両親媒性溶媒は、ＮＭＰである、縫合糸。
【請求項６】
請求項１に記載の縫合糸において、
前記コーティングはさらに、アルコールを含む、縫合糸。
【請求項７】
請求項６に記載の縫合糸において、
前記アルコールは、エタノールである、縫合糸。
【請求項８】
請求項１に記載の縫合糸において、
前記コーティングはさらに、タンパク質安定剤を含む、縫合糸。
【請求項９】
請求項８に記載の縫合糸において、
前記タンパク質安定剤は、トレハロースである、縫合糸。
【請求項１０】
請求項１に記載の縫合糸において、
前記キャリアは、ショ糖酢酸イソ酪酸エステル（ＳＡＩＢ）、ショ糖酢酸エステル、ショ糖八酢酸エステル、アジピン酸ジオクチル、１０〜２４個の炭素原子を有する中鎖および長鎖の脂肪酸エステル、１０〜２４個の炭素原子を有する中鎖および長鎖のリン脂質、１０〜２４個の炭素原子を有する中鎖および長鎖のジグリセリド、１０〜２４個の炭素原子を有する中鎖および長鎖のトリグリセリド、ブチルフタル酸エステル、ステロールエステル、ステロイドエステル、ならびにビタミンＥエステルからなる群より選択される、縫合糸。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１０９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１０９】
これらの結果は、タンパク質が、引き延ばされた時間の期間にわたって制御式で放出されることを示している。
〔実施の態様〕
（１）外科用縫合糸において、
当該縫合糸上にコーティングを有し、
前記コーティングは、有効量の、成長因子、および生分解性非重合体の非水溶性液体キャリアを含む、縫合糸。
（２）実施態様１に記載の縫合糸において、
前記成長因子は、ＢＭＰである、縫合糸。
（３）実施態様２に記載の縫合糸において、
前記ＢＭＰは、rhGDF-5である、縫合糸。
（４）実施態様１に記載の縫合糸において、
前記コーティングはさらに、両親媒性溶媒を含む、縫合糸。
（５）実施態様４に記載の縫合糸において、
前記両親媒性溶媒は、ＮＭＰである、縫合糸。
（６）実施態様１に記載の縫合糸において、
前記コーティングはさらに、アルコールを含む、縫合糸。
（７）実施態様６に記載の縫合糸において、
前記アルコールは、エタノールである、縫合糸。
（８）実施態様１に記載の縫合糸において、
前記コーティングはさらに、タンパク質安定剤を含む、縫合糸。
（９）実施態様８に記載の縫合糸において、
前記タンパク質安定剤は、トレハロースである、縫合糸。
（１０）実施態様１に記載の縫合糸において、
前記キャリアは、ショ糖酢酸イソ酪酸エステル（ＳＡＩＢ）、ショ糖酢酸エステル、ショ糖八酢酸エステル、アジピン酸ジオクチル、１０〜２４個の炭素原子を有する中鎖および長鎖の脂肪酸エステル、１０〜２４個の炭素原子を有する中鎖および長鎖のリン脂質、１０〜２４個の炭素原子を有する中鎖および長鎖のジグリセリド、１０〜２４個の炭素原子を有する中鎖および長鎖のトリグリセリド、ブチルフタル酸エステル、ステロールエステル、ステロイドエステル、ならびにビタミンＥエステルからなる群より選択される、縫合糸。
（１１）実施態様１に記載の縫合糸において、
前記キャリアは、ショ糖酢酸イソ酪酸エステル（ＳＡＩＢ）である、縫合糸。
（１２）実施態様１１に記載の縫合糸において、
前記成長因子は、ＢＭＰである、縫合糸。
（１３）実施態様１２に記載の縫合糸において、
前記ＢＭＰは、rhGDF-5である、縫合糸。
（１４）外科用縫合糸において、
当該縫合糸の上にコーティングを有し、
前記コーティングは、有効量の、
ａ）生物学的活性物質、および、
ｂ）生分解性非重合体の非水溶性液体キャリア材料、
を含む、縫合糸。
（１５）実施態様１４に記載の縫合糸において、
前記液体キャリア材料は、ショ糖酢酸イソ酪酸エステルである、縫合糸。
（１６）実施態様１４に記載の縫合糸において、
前記キャリア材料は、３７℃で少なくとも１０，０００ｃＰの粘度を有する、縫合糸。
（１７）実施態様１６に記載の縫合糸において、
前記キャリア材料は、３７℃で少なくとも１５，０００ｃＰの粘度を有する、縫合糸。
（１８）実施態様１７に記載の縫合糸において、
前記キャリア材料は、３７℃で少なくとも２０，０００ｃＰの粘度を有する、縫合糸。
（１９）実施態様１８に記載の縫合糸において、
前記キャリア材料は、３７℃で少なくとも２５，０００ｃＰの粘度を有する、縫合糸。
（２０）実施態様１９に記載の縫合糸において、
前記キャリア材料は、３７℃で少なくとも５０，０００ｃＰの粘度を有する、縫合糸。
（２１）実施態様１５に記載の縫合糸において、
前記キャリア材料は、前記コーティングの全重量に対して、約９５重量％〜約１重量％の量で存在する、縫合糸。
（２２）実施態様１５に記載の縫合糸において、
前記キャリア材料は、前記コーティングの全重量に対して、約９０重量％〜約５重量％の量で存在する、縫合糸。
（２３）実施態様１５に記載の縫合糸において、
前記キャリア材料は、前記コーティングの全重量に対して、約９０重量％〜約１０重量％の量で存在する、縫合糸。
（２４）実施態様１４に記載の縫合糸において、
前記キャリアは、二糖アセテートブチレートである、縫合糸。
（２５）実施態様１４に記載の縫合糸において、
前記キャリアは、二糖エステルである、縫合糸。
（２６）実施態様１４に記載の縫合糸において、
前記コーティングはさらに、添加物を含む、縫合糸。
（２７）実施態様２６に記載の縫合糸において、
前記添加物は、生分解性ポリマー、非生分解性ポリマー、天然油、合成油、炭水化物、炭水化物誘導体、無機塩、および不活性有機化合物からなる群より選択される、縫合糸。
（２８）実施態様２６に記載の縫合糸において、
前記添加物は、ポリ（ラクチド）、ポリ（ラクチド−コ−グリコリド）、ポリ（グリコリド）、ポリ（カプロラクトン）、酸化セルロース、ポリ（Ｄ，Ｌ−乳酸）、非生分解性ポリマー、生分解性ポリマー、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール、セルロースアセテートブチレート、セルロースアセテートプロピオネート、ピーナッツ油、ゴマ油、ショ糖、ドキシサイクリン、および炭水化物からなる群より選択される、縫合糸。
（２９）実施態様１５に記載の縫合糸において、
前記コーティングはさらに、前記非重合体の非水不溶性液体キャリア材料が可溶である溶媒を含む、縫合糸。
（３０）実施態様２９に記載の縫合糸において、
前記溶媒は、ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）、Ｎ−Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、およびジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）からなる群より選択される、縫合糸。
（３１）実施態様２９に記載の縫合糸において、
前記溶媒は、前記組成物の重量に対して、約１０重量％〜約５０重量％の量で存在している、縫合糸。
（３２）実施態様２９に記載の縫合糸において、
前記溶媒は、Ｎ−メチルピロリドンである、縫合糸。
（３３）実施態様１５に記載の縫合糸において、
前記コーティングはさらに、低粘度の液体キャリア材料を含む、縫合糸。
（３４）実施態様３３に記載の縫合糸において、
前記低粘度の液体キャリア材料は、１０００ｃｐ未満の粘度を有する、縫合糸。
（３５）実施態様１５に記載の縫合糸において、
前記生物学的活性物質は、ペプチド、タンパク質、核タンパク質、ムコタンパク質、リポタンパク質、および合成ポリペプチドからなる群より選択される、縫合糸。
（３６）実施態様１４に記載の縫合糸において、
前記生物学的活性物質は、ペプチドである、縫合糸。
（３７）実施態様１４に記載の縫合糸において、
前記生物学的活性物質は、成長因子である、縫合糸。
（３８）実施態様３７に記載の縫合糸において、
前記成長因子は、ＴＧＦβスーパーファミリーのメンバーである、縫合糸。
（３９）実施態様３７に記載の縫合糸において、
前記成長因子は、ＢＭＰである、縫合糸。
（４０）実施態様３９に記載の縫合糸において、
前記ＢＭＰは、rhGDF-5である、縫合糸。
（４１）実施態様１４に記載の縫合糸において、
前記キャリア材料は、１種以上のカルボン酸の、非重合体エステルまたは混合エステルを含む、縫合糸。
（４２）実施態様４１に記載の縫合糸において、
前記エステルは、約２〜約２０個のヒドロキシ部分を有するポリオールでエステル化されたカルボン酸から形成される、縫合糸。
（４３）実施態様４１に記載の縫合糸において、
前記エステルはさらに、１〜約２０個のエーテル化ポリオールを含む、縫合糸。
（４４）実施態様４２に記載の縫合糸において、
前記カルボン酸は、ラクトンもしくは環状炭酸エステルの開環加アルコール分解、または無水カルボン酸の加アルコール分解により得られるヒドロキシ基を有する、縫合糸。
（４５）実施態様４１に記載の縫合糸において、
前記エステルは、約２〜約２０個のヒドロキシ部分を有するポリオールでエステル化されたアミノ酸から形成される、縫合糸。
（４６）実施態様４１に記載の縫合糸において、
前記エステル化カルボン酸は、グリコール酸、乳酸、ε−ヒドロキシカプロン酸、セリン、ならびに任意の対応するラクトンまたはラクタム、炭酸トリメチレン、およびジオキサノンからなる群より選択される、縫合糸。
（４７）実施態様４１に記載の縫合糸において、
前記エステルまたは混合エステルのアルコール部分は、約２〜約２０個のヒドロキシ基を有するポリヒドロキシアルコールから誘導される、縫合糸。
（４８）実施態様４７に記載の縫合糸において、
前記アルコール部分は、単官能性Ｃ１〜Ｃ２０アルコール、二官能性Ｃ１〜Ｃ２０アルコール、三官能性アルコール、ヒドロキシ含有カルボン酸、ヒドロキシ含有アミノ酸、リン酸エステル含有アルコール、四官能性アルコール、糖アルコール、単糖類、二糖類、糖酸、およびポリエーテルポリオールからなる群より選択される化合物から１つ以上の水素原子を除去することにより誘導される、縫合糸。
（４９）実施態様４１に記載の縫合糸において、
前記カルボン酸部分のそれぞれは、少なくとも１つのオキシ部分を含む、縫合糸。
（５０）実施態様４１に記載の縫合糸において、
前記エステルまたは混合エステルの前記カルボン酸部分の少なくとも１つは、２〜４個の炭素原子を含む、縫合糸。
（５１）実施態様５０に記載の縫合糸において、
前記カルボン酸部分の少なくとも１つは、少なくとも１つのオキシ部分を含む、縫合糸。
（５２）ある組成物でコーティングされた縫合糸において、
前記組成物は、
ａ）成長因子と、
ｂ）生分解性非重合体の非水溶性液体キャリア材料と、
ｃ）成長因子安定剤と、
ｄ）前記生分解性非重合体の非水溶性液体キャリア材料および前記タンパク質安定剤の両方が混和性である溶媒と、
ｅ）揮発性アルコールと、
を含む、縫合糸。
（５３）実施態様５２に記載の縫合糸において、
前記成長因子は、rhGDF-5である、縫合糸。
（５４）実施態様５３に記載の縫合糸において、
前記生分解性非重合体の非水溶性液体キャリア材料は、ＳＡＩＢである、縫合糸。
（５５）実施態様５４に記載の縫合糸において、
前記成長因子安定剤は、トレハロースである、縫合糸。
（５６）実施態様５５に記載の縫合糸において、
前記溶媒は、両親媒性溶媒である、縫合糸。
（５７）実施態様５６に記載の縫合糸において、
前記揮発性アルコールは、エタノールである、縫合糸。
（５８）ある組成物でコーティングされた縫合糸において、
前記組成物は、
ａ）生分解性非重合体の非水溶性液体キャリア材料と、
ｂ）成長因子安定剤と、
ｃ）両親媒性溶媒と、
を含む、縫合糸。
（５９）実施態様５８に記載の縫合糸において、
前記キャリア材料は、ＳＡＩＢである、縫合糸。
（６０）実施態様５９に記載の縫合糸において、
前記安定剤は、トレハロースである、縫合糸。
（６１）実施態様６０に記載の縫合糸において、
前記両親媒性溶媒は、ＮＭＰである、縫合糸。
（６２）ある組成物でコーティングされた縫合糸において、
前記組成物は、
ａ）両親媒性溶媒と、
ｂ）揮発性アルコールと、
を含む、縫合糸。
（６３）実施態様６２に記載の縫合糸において、
前記両親媒性溶媒は、ＮＭＰである、縫合糸。
（６４）実施態様６３に記載の縫合糸において、
前記アルコールは、エタノールである、縫合糸。
（６５）コーティングされた縫合糸を作製するためのキットにおいて、
ａ）成長因子および成長因子安定剤を収容している第１のバイアルと、
ｂ）第２のバイアルであって、
ｉ）生分解性非重合体の非水溶性液体キャリア材料、
ii）前記生分解性非重合体の非水溶性液体キャリア材料および前記タンパク質安定剤の両方が混和性である溶媒、および、
iii）揮発性アルコール、
を収容している、第２のバイアルと、
を具備する、キット。
（６６）実施態様６５に記載のキットにおいて、
前記成長因子は、rhGDF-5である、キット。
（６７）実施態様６６に記載のキットにおいて、
前記生分解性非重合体の非水溶性液体キャリア材料は、ＳＡＩＢである、キット。
（６８）実施態様６７に記載のキットにおいて、
前記溶媒は、両親媒性溶媒である、キット。
（６９）実施態様６８に記載のキットにおいて、
前記安定剤は、トレハロースである、キット。
（７０）実施態様６９に記載のキットにおいて、
前記アルコールは、エタノールである、キット。
【国際調査報告】
2010522036.tif 000003
2010522036.tif 000004
2010522036.tif 000005