(57)【要約】  有効量の式Ｉの化合物又はその薬学的に許容される塩を投与することを含む、限定されないが、ａ）限定されないが、大うつ病性障害及び気分変調性障害を含むうつ病性障害、ｂ）限定されないが、躁状態、うつ状態及び混合状態の出現を有するものを含む双極Ｉ型障害を含む双極性うつ病及び／又は双極Ｉ型障害、及び双極ＩＩ型障害、ｃ）気分変調性障害、及びｄ）一般的医学的症状に基づく気分障害、に伴う少なくとも１つの症状又は状態を治療する方法。本発明の別の態様において、有効量の式Ｉの化合物又は薬学的に許容されるその塩、及び少なくとも１つの薬学的に許容される１つの担体又は希釈剤を含む医薬組成物が提供される。    【化１】2010522211.tif 000018
2010522211.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ノルエピネフリン輸送体の結合部位に結合するのに十分な量の、１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ[ｂ，ｆ][１，４]チアゼピン又は薬学的に許容されるその塩を含む経口医薬組成物をヒトに対して投与することを含む、ヒトにおける気分障害に伴う少なくとも１つの症状又は状態を治療する方法。
【請求項２】
１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ[ｂ，ｆ][１，４]チアゼピン又は薬学的に許容されるその塩がノルエピネフリン輸送体の結合部位の少なくとも約３０％に結合するのに十分である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ[ｂ，ｆ][１，４]チアゼピン又は薬学的に許容されるその塩がノルエピネフリン輸送体の結合部位の少なくとも約５０％に結合するのに十分である、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ[ｂ，ｆ][１，４]チアゼピン又は薬学的に許容されるその塩がノルエピネフリン輸送体の結合部位の少なくとも約８０％に結合するのに十分である、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ[ｂ，ｆ][１，４]チアゼピン又は薬学的に許容されるその塩がノルエピネフリン輸送体の結合部位の少なくとも約３０％から少なくとも約８０％に結合するのに十分である、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
気分障害が大うつ病性障害である、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
ノルエピネフリンの取り込みを阻害するのに十分な量の、１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ[ｂ，ｆ][１，４]チアゼピン又は薬学的に許容されるその塩を含む経口医薬組成物をヒトに対して投与することを含む、ヒトにおける気分障害に伴う少なくとも１つの症状又は状態を治療する方法。
【請求項８】
ノルエピネフリンの取り込みが少なくとも約３０％阻害される、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
ノルエピネフリンの取り込みが少なくとも約５０％阻害される、請求項７に記載の方法。
【請求項１０】
ノルエピネフリンの取り込みが少なくとも約８０％阻害される、請求項７に記載の方法。
【請求項１１】
ノルエピネフリンの取り込みが少なくとも約３０％から少なくとも約８０％阻害される、請求項７に記載の方法。
【請求項１２】
気分障害が大うつ病性障害である、請求項７に記載の方法。
【請求項１３】
約１ｍｇ／ｋｇの用量をヒトに送達するのに十分な量の、１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ[ｂ，ｆ][１，４]チアゼピン又は薬学的に許容されるその塩を含む経口医薬組成物を該ヒトに対し投与することを含む、ヒトにおける気分障害に伴う少なくとも１つの症状又は状態を治療する方法。
【請求項１４】
用量が約０．４μＭから約０．６μＭのＣMAXをもたらす、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
用量が約０．５μＭのＣMAXをもたらす、請求項１３に記載の方法。
【請求項１６】
用量が７０ｍｇの１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ[ｂ，ｆ][１，４]チアゼピン又は薬学的に許容されるその塩である、請求項１３に記載の方法。
【請求項１７】
約７０ｍｇの１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ[ｂ，ｆ][１，４]チアゼピン又は薬学的に許容されるその塩を、少なくとも１つの薬学的に許容される担体又は希釈剤と共に含む剤形を含む、医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ［ｂ，ｆ][１，４］チアゼピン関連の医薬組成物及び方法を提供する。
【背景技術】
【０００２】
抗精神病薬の開発の目標は、従来の抗精神病薬投与に通常付随する副作用を殆ど示さないと共に、増大した有効性と安全性を有する薬剤を開発することとされている。フマル酸クエチアピンは、特許文献１に記載されており、この特許は、参照することにより本明細書にその全文が取り込まれている。フマル酸クエチアピンは、精神病の陽性症状（幻覚、妄想）及び陰性症状（感情的引きこもり、無気力症）の両者を治療することができ、また、従来の薬剤に比較して、神経性及び内分泌性関連の副作用を伴うことが殆どない。フマル酸クエチアピンは、また、敵意や攻撃性の減退を伴っている。フマル酸クエチアピンは、ＥＰＳ、急性ジストニア、急性ジスキネジア、並びに遅発性ジスキネジアなどのような副作用を殆ど伴わない。フマル酸クエチアピンは、また、患者の治療に対する順守性を増大させ、機能する能力及び生活の質全般を増大させ、その一方で、症状の常習性を減少することを助けている。非特許文献１。フマル酸クエチアピンの増大した耐容性特性の故に、その使用は、特に抗精神病薬の有害作用に過敏な患者（高齢患者などのような）の治療に有利である。
【０００３】
１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ［ｂ，ｆ][１，４］チアゼピンの誘導体及びクエチアピンの代謝物を含む関連化合物は、非特許文献２において調製され、評価された。クエチアピンの代謝は、非特許文献３において報告されているが、その中で、１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ［ｂ，ｆ][１，４］チアゼピン（下記式Ｉの化合物参照）の構造が図１に示された。この化合物は、Schmutz らにより特許文献２に報告された。この化合物は、また、特許文献１に報告されているように、クエチアピンの製造法において使用されている。現在、１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ［ｂ，ｆ][１，４］チアゼピンは、ヒト循環血液中のクエチアピン代謝物であることが見出されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】米国特許第４，８７９，２８８号
【特許文献２】米国特許第３，５３９，５７３号
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】「統合失調症における非定形的抗精神病薬と長期的転帰（Atypical antipsychotic drugs and long-term outcome in schizophrenia）」, P. Weiden et al., 11, J. Clin. Psychiatry, 53-60, 57 (1996)
【非特許文献２】「非ジスキネジア性ドーパミン拮抗薬の行動に関する研究：セロクエルの同定（Behavioral approach to nondyskinetic dopamine antagonists: identification of seroquel）」, E. Warawa et al., 44, J. Med. Chem., 372-389 (2001)
【非特許文献３】C. L. Devane et al., Clin. Pharmacokinet., 40(7), 509-522 (2001)
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ［ｂ，ｆ][１，４］チアゼピンは、式Ｉの化合物：
【化１】
2010522211.tif 000003
に示す構造式を有する。
【０００７】
本明細書において提供されるのは、有効量の式Ｉの化合物又は薬学的に許容されるその塩を哺乳動物に投与することを含む、気分障害に伴う少なくとも１つの症状又は状態を治療する方法である。気分障害の例は、例えば、米国精神医学会：「精神障害の診断及び統計マニュアル（Diagnostic and Statistical Manual of Mental disorders）」、第４版。本文改定版、Washington, DC, American Psychiatric Association, 2000に見出すことが出来る。１つの実施態様では、この気分障害は、大うつ病性障害である。いくつかの実施態様では、この１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ[ｂ，ｆ][１，４]チアゼピン又は薬学的に許容されるその塩の用量は、約１ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施態様では、この１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ[ｂ，ｆ][１，４]チアゼピン又は薬学的に許容されるその塩の用量は、約７０ｍｇの固定用量（solid  dose）である。
【０００８】
また、本明細書において提供されるのは、ノルエピネフリン輸送体結合部位の少なくとも約３０％に結合するのに十分な量の、１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ[ｂ，ｆ][１，４]チアゼピン又は薬学的に許容されるその塩を含む経口用医薬組成物をヒトに対して投与することを含む、ヒトにおける気分障害に伴う少なくとも１つの症状又は状態を治療する方法である。いくつかの実施態様では、１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ[ｂ，ｆ][１，４]チアゼピン又は薬学的に許容されるその塩の結合は、ノルエピネフリン輸送体の結合部位の少なくとも約５０％に結合するのに十分である。いくつかの実施態様では、１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ[ｂ，ｆ][１，４]チアゼピン又は薬学的に許容されるその塩の結合は、ノルエピネフリン輸送体結合部位の少なくとも約８０％に結合するのに十分である。いくつかの実施態様では、１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ[ｂ，ｆ][１，４]チアゼピン又は薬学的に許容されるその塩の結合は、ノルエピネフリン輸送体結合部位の少なくとも約３０％から少なくとも約８０％に結合するのに十分である。いくつかの実施態様では、気分障害は大うつ病性障害である。
【０００９】
本発明は、また、ノルエピネフリンの取り込みを阻害するのに十分な量の、１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ[ｂ，ｆ][１，４]チアゼピン又は薬学的に許容されるその塩を含む経口用医薬組成物を、ヒトに対して投与することを含む、ヒトにおける気分障害に伴う少なくとも１つの症状又は状態を治療する方法を提供する。いくつかの実施態様では、ノルエピネフリンの取り込みは少なくとも約３０％阻害される。いくつかの実施態様では、ノルエピネフリンの取り込みは少なくとも約５０％阻害される。いくつかの実施態様では、ノルエピネフリンの取り込みは少なくとも約８０％阻害される。いくつかの実施態様では、ノルエピネフリンの取り込みは少なくとも約３０％から少なくとも約８０％阻害される。いくつかの実施態様では、気分障害は大うつ病性障害である。
【００１０】
本発明は、また、約１ｍｇ／ｋｇの用量を前述のヒトに送達するのに十分な量の、１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ[ｂ，ｆ][１，４]チアゼピン又は薬学的に許容されるその塩を含む経口用医薬組成物を、ヒトに対して投与することを含む、ヒトにおける気分障害に伴う少なくとも１つの症状又は状態を治療する方法を提供する。いくつかの実施態様では、この用量は、約０．４μＭから０．６μＭのＣMAXをもたらす。いくつかの実施態様では、この用量は０．５μＭのＣMAXをもたらす。いくつかの実施態様では、１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ[ｂ，ｆ][１，４]チアゼピン又は薬学的に許容されるその塩の用量は、７０ｍｇである。
【００１１】
本発明は、また、約７０ｍｇの１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ[ｂ，ｆ][１，４]チアゼピン又は薬学的に許容されるその塩を、少なくとも１つの薬学的に許容される担体又は希釈剤と共に含む剤形を含む、医薬組成物を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】形態Ａを有する結晶状１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ[ｂ，ｆ][１，４]チアゼピンと一致するＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターンを表す。
【図２】マウス強制水泳試験（ＦＳＴ）の結果を表す。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
式Ｉの化合物は、抗ドーパミン作用を示しているジベンゾチアゼピンである。この化合物は、幅広い神経伝達物質受容体と相互作用するが、脳内ではドーパミン（Ｄ2）受容体と比較してセロトニン（５−ＨＴ2）受容体に対してより強い親和性を有することが示されている。霊長類被検者の予備的な陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）スキャンは、式Ｉの化合物は脳に到達し、Ｄ1、Ｄ2、及び５−ＨＴ1A受容体及び５ＨＴ輸送体を占有することを示した。しかしながら、式Ｉの化合物は、マウスの標準アポモルフィネ水泳試験（経口投与）及びラットのＤ−アンフェタミン自発運動試験（皮下投与）では有効であることを示さなかった。
【００１４】
式Ｉの化合物は、また、部分５−ＨＴ1A作動薬の活性を有することが示されており、マウス及びラットのうつ病モデルにおいてインビボでの有効性を示している。式Ｉの化合物は  急性ジストニー、急性ジスキネジー、並びに抗精神病薬に典型的に見られる遅発性ジスキネジーなど副作用を引き起こす可能性を低減した抗精神病薬として使用することができる。アルファ受容体結合データから得られた結果は、更に式Ｉの化合物はクエチアピンよりも改善された耐容性を有するであろうことを示唆し、そして、減少した低血圧症の発生を観測するであろうことを示唆する。更に、式Ｉの化合物は、全ての年齢の患者の治療に用いることができ、そして高齢の患者の治療に有利である。
【００１５】
用語「哺乳動物」は温血動物、好ましくはヒトを意味する。
【００１６】
式Ｉの化合物は、化学的技術分野で公知の種々の方法で作ることができる。式Ｉの化合物は、既知の化合物、又は式ＩＩ：
【化２】
2010522211.tif 000004
ここで、この化合物は、例えば、J. Schmutz et al., Helv. Chim. Acta., 48:336 (1965)に記載されているような文献で公知の方法により、製造することができる；
のラクタムを採用することを含む、容易に製造される中間体を出発物質とすることにより、製造することができる。式ＩＩのラクタムは、塩化リンで処理して式ＩＩＩ：
【化３】
2010522211.tif 000005
のイミノクロリドを生成する。
【００１７】
式ＩＩＩのイミノクロリドは、また、塩化チオニル又は五塩化リンなどの、他の試薬を用いて生成することができる。次いで、イミノクロリドをピペラジンと反応させて、式Ｉの化合物を得る。
【００１８】
本明細書で提供される式Ｉの化合物は、遊離の塩基として有用であるが、薬学的に許容される塩の形態及び／又は薬学的に許容される溶媒和物（水和物を含む）の形態で提供されてもよい。例えば、式Ｉの化合物の薬学的に許容される塩は、例えば、塩酸、硝酸、リン酸、硫酸、ヨウ化水素酸、亜硝酸、及び亜リン酸のような鉱酸から誘導されるものを含む。薬学的に許容される塩は、また、脂肪族モノ・、ジ・カルボン酸及び芳香族酸などの有機酸と生成させてもよい。他の式Ｉの化合物の薬学的に許容される塩は、塩酸塩、硫酸塩、ピロ硫酸塩、重硫酸塩、重亜硫酸塩、硝酸塩、及びリン酸塩を含むが、それらに限定されない。
【００１９】
臨床医は、業界で公知の種々の方法を用いることにより、有効量を決定することが出来る。本発明の文脈の中で用語「治療する」は、有効量の本発明の化合物を投与すること、前から存在する病気の状態、急性若しくは慢性の、又は再発性の症状若しくは状態を緩和することを包含する。この定義は、また、再発状態の予防のための予防的治療及び慢性的障害の継続治療を包含する。
【００２０】
式Ｉの化合物又は薬学的に許容されるその塩の個々の量は、１日約７５０ｍｇまでの量で、特に１日当たり約７５ｍｇ〜約７５０ｍｇの量で投与することが出来る。本発明の別の特別の態様では、式Ｉの化合物又は薬学的に許容されるその塩の量は、１日当たり約１ｍｇ〜６００ｍｇ投与してもよい。本発明の別の態様では、式Ｉの化合物又は薬学的に許容されるその塩の量は、１日当たり約１００ｍｇ〜４００ｍｇ投与してもよい。他の実施態様では、式Ｉの化合物又は薬学的に許容されるその塩の量は、１日当たり約７０ｍｇの固定用量で投与してもよい。別の実施態様では、式Ｉの化合物又は薬学的に許容されるその塩の量は、１日当たり約１ｍｇ／ｋｇの用量で投与してもよい。
【００２１】
式Ｉの化合物又は薬学的に許容されるその塩は、所定の用量の式Ｉの化合物を哺乳動物に対して１日１回から４回の間を含んで投与してもよく、その場合、所定の用量は約１ｍｇ〜約６００ｍｇである。
【００２２】
本発明は、また、初回所定の用量の式Ｉの化合物をヒトの患者に１日当たり２回投与する工程を含む、本明細書の中で与えられる症状又は状態の治療法を提供するが、その場合、この所定の用量は１ｍｇと３０ｍｇの間であり、第２日及び第３日は耐容性があるので、１日２回、１〜５０ｍｇの増分で増量する。その後、更なる用量調節は、２日以上の間隔をおいて行うことが出来る。
【００２３】
本発明の１つの実施様態において、医薬組成物は７５０ｍｇまでの、特に約７５ｍｇ〜約７５０ｍｇの、式Ｉの化合物又は薬学的に許容されるその塩を含む。
【００２４】
本発明の別の実施様態において、医薬組成物は約１ｍｇ〜６００ｍｇの式Ｉの化合物又は薬学的に許容されるその塩を含んでよい。
【００２５】
本発明の別の実施様態において、医薬組成物は約１００ｍｇ〜約４００ｍｇの式Ｉの化合物又は薬学的に許容されるその塩を含んでよい。
【００２６】
本発明の医薬組成物は、従来の医薬用賦型剤を用いた従来の手順によって、適宜得ることが出来る。従って、経口使用を意図した医薬組成物は、例えば、１つ又はそれ以上の着色剤、甘味剤、着香料及び／又は保存剤を含んでよい。
【００２７】
本発明の式Ｉの化合物から医薬組成物を製造するために、不活性の薬学的に許容される担体は、固体又は液体のいずれであってもよい。固体製剤としては、粉剤、錠剤、分散性顆粒、カプセル、カシェ剤、及び坐剤が挙げられる。
【００２８】
本発明の組成物は、経口、筋肉内、皮下、局所、経鼻、腹腔内、胸腔内、静脈内、硬膜外、髄腔内、脳室内及び関節内注射を含む、如何なる経路によっても投与することが出来る。
【００２９】
経口投与剤型のような単一の投与剤型を作るために、１つ又はそれ以上の賦形剤と組み合わされる活性成分の量は、治療される被検者及び個別の投与系路によって必然的に変化するであろう。式Ｉの化合物の治療又は予防目的の用量の規模は、症状や状態の性質や重症度、動物又は患者の年齢や性別、及び投与系路に従って、公知の医薬の原理に従って当然変化するであろう。
【００３０】
本発明の別の態様は、本明細書に示される症状又は状態の治療に使用するための、式Ｉの化合物又は薬学的に許容されるその塩若しくはその溶媒和物を提供する。
【００３１】
更に別の態様において、本発明は、本明細書に示した症状又は状態の治療に使用するための医薬品の製造における、式Ｉの化合物又は薬学的に許容されるその塩若しくはその溶媒和物の使用を提供する。
【００３２】
更に別の態様において、本発明は、有効量の式Ｉの化合物又は薬学的に許容されるその塩、及び他の治療上活性のある薬剤である、ベンゾジアゼピン、５−ＨＴ1Aリガンド、５−ＨＴ1Bリガンド、５−ＨＴ1Dリガンド、ｍＧｌｕＲ２Ａ作動物質、ｍＧｌｕＲ５拮抗剤、向精神薬、ＮＫ１受容体拮抗剤、抗うつ剤、セロトニン取り込み阻害剤、ＧＡＢＡＩＩリガンド、又は同じ医薬組成物の一部として併用して投与される気分安定剤の１つ又はそれ以上を、哺乳動物へ投与することを含む、上記症状又は状態の少なくとも１つを治療する方法、並びにそのような活性薬剤が併用療法の利点を得るために設計した適切な用法の一部として、別個に投与される方法に関連する。適切な用法、投与される活性薬剤の個々の用量及び各活性薬剤の投与間の特定の間隔は、治療される被検者、投与される特定の活性薬剤、及び治療される特定の障害及び状態の性質と重症度に依存するであろう。一般的に、本発明の化合物は、単一の活性薬剤として使用される場合、又は別の活性薬剤と併用して使用される場合のいずれのおいても、被検者に１日当たり約７５０ｍｇまでの量を単回投与又は分割投与で投与されるであろう。このような化合物は、１日当たり６回まで、好ましくは１日当たり１から４回の投薬計画で投与してよい。それにもかかわらず、治療されている被検者、治療に対する個々の応答、並びに選択した医薬製剤のタイプ、及びその様な投与が行われる期間及び間隔に依存して、変更が起こる可能性がある。ある場合は、前述の範囲の下限値未満の用量レベルが、適切量より多くなる可能性があり、その一方他の場合では、所望する効果を得るために、より多い用量が使用される可能性がある。但し、そのようなより多い用量は、最初は、１日を通して、数回の少量の用量に分割される。
【００３３】
典型的なベンゾジアゼピン類は、アジナゾラム、アルプラゾラム、ブロマゼパム、クロナゼパム、クロラゼプ酸塩、クロルジアゼポキシド、ジアゼパム、エスタゾラム、フルラゼパム、バレゼパム、ロラゼパム、ミダゾラム、ニトラゼパム、オキサゼパム、クアゼパム、テマゼパム、トリアゾラム、及びそれらの同等物を含んでよいが、それらに限定されない。
【００３４】
典型的な５−ＨＴ1A及び／又は５−ＨＴ1Bリガンドは、ブスピロン、アルネスピロン、エルザソナン、イプサピロン、ゲピロン、ゾピクロン、及びそれと同等物を含んでよいが、それらに限定されない。
【００３５】
典型的なｍＧｌｕＲ２作動薬は、（１Ｓ、３Ｒ）−１−アミノシクロペンタン−１、３−ジカルボキシル酸、（２Ｓ、３Ｓ、４Ｓ）アルファ−（カルボキシシクロプロピル）グリシン、及び３、５−ジヒドロキシフェニルグリシンを含んでよいが、それらに限定されない。
【００３６】
典型的な抗うつ薬は、マプロチリン、アミトリプチリン、クロミプラミン、デシプラミン、ドキセピン、イミプラミン、ノルトリプチリン、プロトリプチリン、トリミプラミン、（また）フルオキセチン、パロキセチン、シタロプラム、エシタロプラム、セルトラリン、ベンラファキシン、フルオキサミン、及びレボキセチンのようなＳＳＲＩ及びＳＮＲIを含んでよいが、それらに限定されない。
【００３７】
典型的な抗精神病薬は、クロザピン、リスペリドン、クエチアピン、オランザピン、アミスルプリド、スルピリド、ゾテピン、クロルプロマジン、ハロペリドール、ジプラシドン、及びセルチンドールを含んでよいが、それらに限定されない。
【００３８】
典型的な気分安定剤は、バルプロ酸（バルプロ酸塩）及びその誘導体（例えば、ジバルプロエキス）、ラモトリギン、リチウム、ベラパミル、カルバマゼピン、及びガバペンチンを含んでよいが、それらに限定されない。
【００３９】
本明細書で提供されるものは、ノルエピネフリン輸送体の結合部位の約３０％に結合するのに十分な量の、１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ[ｂ，ｆ][１，４]チアゼピン又は薬学的に許容されるその塩を含む経口医薬組成物をヒトに投与することを含む、ヒトにおける気分障害に伴う少なくとも１つの症状又は状態を治療する方法である。いくつかの実施様態では、１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ[ｂ，ｆ][１，４]チアゼピン又は薬学的に許容されるその塩の結合は、ノルエピネフリン輸送体結合部位の少なくとも約５０％に結合するのに十分である。いくつかの実施様態では、１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ[ｂ，ｆ][１，４]チアゼピン又は薬学的に許容されるその塩の結合は、ノルエピネフリン輸送体結合部位の少なくとも約８０％に結合するのに十分である。いくつかの実施様態では、１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ[ｂ，ｆ][１，４]チアゼピン又は薬学的に許容されるその塩の結合は、少なくともノルエピネフリン輸送体の結合部位の少なくとも約３０％から少なくとも約８０％に結合するのに十分である。いくつかの実施態様では、気分障害は大うつ病性障害である。結合は、当業者に公知の結合評価法によって測定することができる。
【００４０】
本発明は、また、ノルエピネフリンの取り込みを少なくとも約３０％阻害するのに十分な量の、１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ[ｂ，ｆ][１，４]チアゼピン又は薬学的に許容されるその塩を含む経口医薬組成物をヒトに投与することを含む、ヒトにおける気分障害に伴う少なくとも１つの症状又は状態を治療する方法を提供する。いくつかの実施態様では、ノルエピネフリンの取り込みは、少なくとも約３０％阻害される。いくつかの実施態様では、ノルエピネフリンの取り込みは、少なくとも約５０％阻害される。いくつかの実施態様では、ノルエピネフリンの取り込みは、少なくとも約８０％阻害される。いくつかの実施態様では、ノルエピネフリンの取り込みは、少なくとも約３０％から少なくとも約８０％阻害される。いくつかの実施態様では、気分障害は大うつ病性障害である。
【００４１】
本発明は、また、ヒトに約１ｍｇ／ｋｇの用量を送達するのに十分な量の、１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ[ｂ，ｆ][１，４]チアゼピン又は薬学的に許容されるその塩を含む経口医薬組成物を該ヒトに投与することを含む、ヒトにおける気分障害に伴う少なくとも１つの症状又は状態を治療する方法を提供する。いくつかの実施態様では、その用量は約０．４μＭから約０．６μＭのＣMAXをもたらす。いくつかの実施態様では、その用量は約０．５μＭのＣMAXをもたらす。いくつかの実施態様では、その用量は７０ｍｇの１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ[ｂ，ｆ][１，４]チアゼピン又は薬学的に許容されるその塩である。
【００４２】
本発明は、また、約７０ｍｇの１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ[ｂ，ｆ][１，４]チアゼピン又は薬学的に許容されるその塩を、少なくとも１つの薬学的に許容される担体又は希釈剤と共に含む剤形を含む医薬組成物を提供する。
【００４３】
本発明の１つの利点は、より少ない用量の１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ[ｂ，ｆ][１，４]チアゼピン又は薬学的に許容されるその塩を投与することができ、一方で、うつ病又は、例えば、大うつ病性障害のような気分障害の治療に効果を得ることである。
【００４４】
提供される以下の例は、本発明を如何なる方法によっても限定するものではなく、例示の目的のみであることを意図するものである。
【実施例】
【００４５】
実施例１
１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ［ｂ，ｆ][１，４］チアゼピンの製造  
【化４】
2010522211.tif 000006
磁気撹拌棒及び窒素導入管付き還流冷却器を装備した丸底フラスコ（１，０００ｍＬ）内へ、乾燥固体としてのジベンゾ［ｂ，ｆ][１，４］チアゼピン−１１（１０Ｈ）−オン（２５．０ｇ、０．１１０ｍｏｌｅ）（J. Schmutz et al., Helv. Chim. Acta., 48: 336 (1965)により開示された方法で製造した）を、次いでＰＯＣｌ3（３１０ｍＬ）及びＮ，Ｎ−ジメチルアニリン（３ｍＬ）を投入した。反応混合物を還流下（１０６℃）で６時間加熱し、透明な橙色の溶液を得た。その後、反応混合液を室温に冷却し、そしてＰＯＣｌ3をロータリーエバポレーターで除去して、橙色の油状物質を得た。この残留物を氷水（５０ｍＬ）及び酢酸エチル（８００ｍＬ）間で分配した。層を分離し、水相を酢酸エチル（３×２００ｍＬ）で抽出した。酢酸エチル抽出物を合わせてＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、次いでロータリーエバポレーターで蒸発させて、粗製のイミノクロリドを薄黄色の固体（２６．２６ｇ、収率：９７％）として得た。構造を、ＮＭＲ及びマススペクトル（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3；ＥＳ＋、Ｍ＋１＝２４６．７）で確認した。粗製のイミノクロリド（２７．３５ｇ、０．１１１ｍｏｌｅ）を、磁気撹拌棒及び還流冷却器を装備した窒素導入管付きの丸底フラスコ（２,０００ｍＬ）内のｏ−キシレン（１,０００ｍＬ）に加えた。この溶液に、室温で、市販のピペラジン（４７．９５ｇ、０．５５７ｍｏｌｅ）を、一度に乾燥固体として加えた。ほとんど全てのピペラジンが溶解するまで混合液を撹拌した。その後、反応混合液を、還流下（１４２℃）で４０時間加熱した（便宜的に）。その後、反応液を室温まで冷却し、そして一定分量を、１ＮのＮａＯＨ／ＣＨ2Ｃｌ2の間で分配した。有機相をＴＬＣ（シリカゲル、ＣＨ2Ｃｌ2／メタノール＝９０：１０、ヨード白金酸塩で可視化）で分析したところ、１つの主生成物（Ｒｆ＝０．４５）への明確な転換が示された。一滴の反応溶液をＣＨ3ＣＮで希釈して、ＬＣ／ＭＳ分析用の試料を調製し、それにより所望の生成物（Ｍ＋１＝２９６．４）の存在を確認した。反応混合液を、高真空下、ロータリーエバポレーターで蒸発させキシレンを除去した。残留物を、１ＮのＮａＯＨ（４００ｍＬ）及びＣＨ2Ｃｌ2（２００ｍＬ）間で分配した。層を分離させ、そして水相を更にＣＨ2Ｃｌ2（３×２００ｍＬ）で抽出した。ＣＨ2Ｃｌ2抽出物を合わせブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、次いでＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、ロータリーエバポレーターで蒸発させ、粗製の標題化合物を黄色のガム状物質（３５．３ｇ）として得た。粗製の遊離塩基を、シリカゲル（６００ｇ）上、０〜２０％ＣＨ2Ｃｌ2／メタノールの傾斜溶離液で溶離するフラッシュクロマトグラフィーで精製した。純粋な所望の生成物を含む画分を合わせ、そしてロータリーエバポレーターで蒸発させ、精製した遊離塩基を薄黄色の泡状体（２５．６７ｇ、収率：７８％）として得た。
【００４６】
実施例２
１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ［ｂ，ｆ][１，４］チアゼピン・二塩酸塩の製造
遊離塩基を、メタノール（１２５ｍＬ）及びジエチルエーテル（１２５ｍＬ）の混合物中に溶解し、次いで、１．０ＭのＨＣｌ／エーテル（２５０ｍＬ）（Aldrich）溶液で処理して、二塩酸塩に転換した。初めに灰色のガム状固体が分離し、そして混合物を更にエーテル（５００ｍＬ）で希釈した。ガム状固体は、長時間撹拌しても固化しなかった。溶媒をガム状物質からデカントして除去した。ガム状物質を無水エタノール（２００ｍＬ）で処理し、次いで、結晶化するまで撹拌し、結晶の濃厚な白色懸濁液を得た。次いで、この混合液をエーテル（８００ｍＬ）で徐々に希釈し、そして終夜撹拌して結晶化を完結させた。二塩酸塩の結晶を濾過して単離し、エーテル（３×５０ｍＬ）で洗浄し、その後減圧下６０℃で乾燥し、標題化合物の二塩酸塩を白色結晶性固体（３１．６４ｇ、転換率：９８．８％）として得た。
分析：
生成物を、ＮＭＲ及びＬＣ／ＭＳ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3；ＡＰ＋、Ｍ＋１  ＝２９６．４）で特徴付けした。
【００４７】
実施例３
結晶性１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ［ｂ，ｆ][１，４］チアゼピン）の製造
製法Ａ：
１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ［ｂ，ｆ][１，４］チアゼピン・塩酸塩を含む水溶液（５８４ｍＬ；例えば、以下に記載する調製方法Ｂのように、１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ［ｂ，ｆ][１，４］チアゼピンをトルエン溶液から水／ＨＣｌへ抽出することにより調製した）をジャケット付きのフラスコ（１Ｌ）に投入した。その後、フラスコに、トルエン（５００ｍＬ）及び水酸化ナトリウム（４８質量％、３３．０ｇ）を投入した。混合液を７０℃で３０分間撹拌したところ、白色に乳濁した。混合液を３０分間放置し、相を分離させた。トルエン層を、７０℃で、水（２×１００ｍＬ）（１回目の洗浄＝ｐＨ１０．３；２回目の洗浄＝ｐＨ８．０）で洗浄した。最終のトルエン体積は５６０ｍＬであり、１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ［ｂ，ｆ][１，４］チアゼピン（７４ｇ）を高純度で含んでいた。
【００４８】
上記の手順を、更に、１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ［ｂ，ｆ][１，４］チアゼピン・塩酸塩の４つの水溶液に対して繰り返し、そして得られた５つのトルエン溶液を合わせ、ロータリーエバポレーターで蒸発乾固した。得られた硬い固体をジャケット付きの容器へ投入し、メチル−ｔ−ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）（５００ｍＬ）でスラリーにした。得られたスラリーを、終夜常温で撹拌し、次いで５℃に冷却し、そして４時間保持した。固体の１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ［ｂ，ｆ][１，４］チアゼピン生成物を、Ｎｏ．３の焼結フィルターで単離し、冷却したＭＴＢＥ（２００ｍＬ）で洗浄した。ケーキを、６０℃で終夜、真空オーブンで乾燥し、生成物（３７３ｇ）を得た。
【００４９】
製法Ｂ
ピペラジンと１１−クロロ−ジベンゾ［ｂ，ｆ][１，４］−チアゼピンとのトルエン中での反応（例えば、米国特許第４８７９２８８号参照）により調製した、１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ［ｂ，ｆ][１，４］チアゼピン（１，５００ｍＬ、０．６８６ｍｏｌ）のトルエン溶液を、脱イオン水（１，５００ｍＬ）及びＨＣｌ（３２質量％、９０ｍＬ）で処理した。得られた混合液を７０℃に加熱し、４５分間撹拌した。撹拌を止め、混合液を３０分間放置して、相分離を定着させた。１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ［ｂ，ｆ][１，４］チアゼピンのＨＣｌ塩を含む下層の水相を分離した。その後、水相をトルエン（１，０００ｍＬ）、及びＮａＯＨ（４７質量％）水溶液（９９ｇ）で処理した。得られた混合液を７０℃に加熱し、４５分間撹拌した。撹拌を止め、混合液を３０分間放置して、相分離を定着させた。下層の水相を除去し、上層の有機相を保持し、それに脱イオン水（３００ｍＬ）を加えた。得られた混合液を１５分間撹拌し、その後３０分間放置した。水相を除去し、有機相を保持した。有機相を、脱イオン水（３００ｍＬ）で再度抽出した。有機相からトルエン（約７５０ｍＬ）を蒸発させた。得られた濃縮物を６０℃に冷却し、その後、メチル−ｔ−ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）（２００ｍＬ）を加えた。得られた混合液を常温に冷却し、形態Ａの種晶を植えつけた。次いで種晶を加えた混合液を１０℃に冷却し、ゆっくり撹拌しながらこの温度に３時間保持した。得られた固体をＮｏ．３の焼結フィルターを用いた吸引ろ過により単離した。固体生成物を、ＭＴＢＥ（１２０ｍＬ）で常温で洗浄し、減圧下、４０℃で乾燥し、結晶性の生成物（１７５ｇ、８６．４％）を得た。分析純度：ＨＰＬＣの面積％より９９．９質量％。
【００５０】
上記の通りに製造された固体、１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ［ｂ，ｆ][１，４］チアゼピン（３０ｇ、０．１０１６ｍｏｌ）を、イソプロパノール（１２０ｍＬ）中でスラリーにした。得られた混合液を、約６３〜６４℃に温め、固体を完全に溶解した。得られた溶液を、６μの孔径を有する濾紙を備えた事前に加熱した（約５５℃）Buchner分液漏斗を通して濾過した。その後、濾液を５５℃に調節し、形態Ａの種晶（０．０２４ｇ）を植えつけた。種晶を加えた溶液を５５℃に約２時間保持し、その後６時間かけて４０℃に直線的に冷却し、２時間かけて２０℃に直線的に冷却し、その後、１時間かけて０℃に直線的に冷却した。得られたスラリーを０℃で１２時間保持し、そして固体の生成物のケーキ（高さ１３ｍｍ×直径６８ｍｍ）を濾過して単離した。生成物のケーキを事前に０℃に冷却したイソプロパノール（３０ｍＬ）で置換洗浄し、そしてケーキを脱液した。次いで、生成物を減圧下４０℃で乾燥し、形態Ａの結晶（２４．９ｇ、８３％）を得た。
ＮＭＲによる分析純度：９８．９質量％。
【００５１】
形態Ａの結晶のＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）のピーク値を、以下のチャートＡに示す。以下の機器の設定条件を用いた。
機器名：          Bruker D8 Discover；
スキャン範囲：    ２〜４０°（２θ）；
ステップサイズ：  ０．００７°（２θ）；
スキャンスピード：０．２秒／ステップ；
スキャンタイプ：  ２ＴＨ／Ｔ；
ランプ強度：      ３５ｋＶ／４５ｍＡ；
【００５２】
【表１】
2010522211.tif 000007
【００５３】
【表２】
2010522211.tif 000008
【００５４】
実施例４
脳セロトニン５−ＨＴ2、Ｄ1及びＤ2受容体のインビトロ結合データ、並びにラット及びマウスでのインビボ研究
ドーパミンの拮抗作用の評価は、げっ歯類モデルで実施した。用いた方法及び手順は、J. Med. Chem., 44 (3), 372-389, 2001に見出すことが出来るが、それらは、参照することにより本明細書に取入れられている。評価の結果、脳セロトニン５−ＨＴ2に対する結合親和力は２７Ｋ1ｎＭであり、そしてドーパミンＤ1及びＤ2受容体に対する結合親和力は、それぞれ１,４８９及び２３４Ｋ1ｎＭであった。これらの結果は、二塩酸塩としての本発明の化合物が、広範囲の神経伝達物質受容体と相互作用することを示しているが、しかし、また、この評価は、二塩酸塩としての本発明の化合物が、ドーパミン（Ｄ2）受容体のそれと比較して、より高い脳内におけるセロトニン（５−ＨＴ2）受容体対する親和性を有することを明らかにしている。式Ｉの化合物又はその薬学的に許容される塩が、強力で非定型の抗精神病薬として作用するであろうということを示唆するのは、Ｄ2受容体より高い親和性を有する５−ＨＴ2を有する、セロトニン及びドーパミン受容体拮抗作用のこの組合せである。クエチアピン・フマル酸塩（セロクエル）：新しい非定型の抗精神病薬（Quetiapine Fumarate (Seroquel): a new atypical antipsychotic）, J. Goldstein, 35(3) Drugs of Today 193-210 (1999)  。
しかし、１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ［ｂ，ｆ][１，４］チアゼピン・二塩酸塩のインビボでの抗精神病活性を、標準的なアポモルヒネ誘発性のマウスの上昇性評価法に従ったマウス（経口投与）において、及びＤ−アンフェタミンによる自発運動の試験におけるラット（遊離塩基）において試験し、この化合物がこれらのモデルで有効であることが認められなかった。
【００５５】
実施例５
α１及びα２受容体のプロフィール
１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ［ｂ，ｆ][１，４］チアゼピンのクエチアピンとの差別化は、以下に示すα受容体への結合データに基づく。
【００５６】
【表３】
2010522211.tif 000009
【００５７】
上記の親和性値は、以下の結果、方法及び基準から誘導された。
【表４】
2010522211.tif 000010
【００５８】
受容体結合法、亜型特異的なα−アドレナリン受容体を、以下に示す。
【表５】
2010522211.tif 000011
【００５９】
【表６】
2010522211.tif 000012
【００６０】
【表７】
2010522211.tif 000013
【００６１】
受容体結合法、非選択性α−アドレナリン受容体を以下に示す。
【表８】
2010522211.tif 000014
【００６２】
【表９】
2010522211.tif 000015
【００６３】
これらの結果より、１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ［ｂ，ｆ][１，４］チアゼピンは、α１及びα２アドレナリン受容体に対して、クエチアピンより低い親和性を有することが分かる。
【００６４】
実施例６
１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ［ｂ，ｆ][１，４］チアゼピンによる５ＨＴ1A作動薬のインビトロ評価
ヒト５−ＨＴ1A受容体を発現するＣＨＯ膜（１０μｇ：蛋白質）を、ｐＨ７．４で、ＭｇＣｌ2（１０ｍＭ）、ＮａＣｌ（１００ｍＭ）、ＢＳＡ（０．１％）、ＧＤＰ（２０μＭ）、ＷＧＡ−ＰＶＴビーズ（２００μｇ）（Amersham RPNQ0001）、ＧＴＰ(35Ｓ（２００ｐＭ）（Perkin Elmer NEG-030H）を含むＨＥＰＥＳ緩衝液（１００μｌ、２０ｍＭ）中で培養した。１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ［ｂ，ｆ][１，４］チアゼピンを、１０μＭ〜１７０ｐＭで変化させた上記の１１の異なる濃度において、Packard OptiPlates中、１．５時間、室温でインキュベーションした。５−ＨＴを、ＥＣ５０（１５．５ｎＭ）と共に評価における陽性対照として用いた。５−ＨＴ（１μＭ）を、化合物の薬効決定のため、最大アゴニスト活性（１００％）として用いた。プレートを遠心分離にかけ、ビーズを定着させ、そして、Parkard TopCountで測定した。この評価法を用いることにより、１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ［ｂ，ｆ][１，４］チアゼピンが、ＥＣ５０（３１０ｎＭ）を有する、５ＨＴ1A受容体の部分アゴニストであり、そして５−ＨＴ（１μＭ）に対して６６％の最大薬効であることが示された。
【００６５】
実施例７
経口バイオアベイラビリティ
１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ［ｂ，ｆ][１，４］チアゼピンを、３匹のSprague-Dawleyラットに、静脈内に又は経口により、クエン酸ナトリウム（ｐＨ＝３）処方中、１０μｍｏｌ／ｋｇ又は３０μｍｏｌ／ｋｇの用量で投与した。血液試料は、各々の動物から、投与の後いくつかの時点で採取された。血液試料を遠心分離にかけ血漿を得た。各々の血漿試料の一定分量を、質量分析検出付きＨＰＬＣ法で分析し、１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ［ｂ，ｆ][１，４］チアゼピンを定量した。静脈内又は経口投与後の試料測定から構築された血漿濃度曲線下の面積（ＡＵＣ）を、経口バイオアベイラビリティを計算するために用いた。本研究結果に基づく経口バイオアベイラビリティの計算値は、ラットに対して１１％であった。
同様の研究デザイン（経口及び静脈内投与に対して異なった用量の）を用いて、ビーグル犬（４２％）及びカニクイザル（３７％）における経口バイオアベイラビリティを計算した。従って、１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ［ｂ，ｆ][１，４］チアゼピンは、３種において、経口的に生体内利用可能であることが示された。
脳への暴露をラットで測定した。１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ［ｂ，ｆ][１，４］チアゼピンを脳内で濃縮させるため、ラットに経口又は静脈内（ｎ＝３／投与経路）で投与した。化合物を投与後１時間で、血液及び脳試料を採取し、次いでＨＰＬＣ／ＭＳを用いた分析用に処理し、１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ［ｂ，ｆ][１，４］チアゼピンの濃度を測定した。３０μｍｏｌ／ｋｇ（経口）での経口投与後１時間でのラットにおける平均濃度は、６５８ｎｍｏｌ／ｍｌ（血漿）及び２,２４０ｎｍｏｌ／ｇ（脳組織）であり、脳／血漿暴露比は３．４であった。静脈内投与後の同様の分析で、脳：血漿濃度比は４．６であり、化合物の中枢神経系（ＣＮＳ）への侵入を示していた。
【００６６】
実施例８
マウス強制水泳試験における１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ［ｂ，ｆ][１，４］チアゼピンの抗鬱効果：クエチアピンとの比較
新規化合物の抗鬱剤としての可能性を評価するために、マウス強制水泳試験（ＦＳＴ）が用いられている（Porsolt; Lucki）。方法：数匹のマウスをシリンダー中の水（２５．０℃±１．５℃）の中に６分間置いた。各回最後の４分間の不動状態の量を定量した。実験観察者には、処理条件は知らされていなかった。１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ［ｂ，ｆ][１，４］チアゼピン（５．０及び１０．０ｍｇ／ｋｇ）、及びクエチアピン（５．０、１０．０及び２０．０ｍｇ／ｋｇ）を塩基として定量し、そして行動評価の１５分前に皮下に投与した。イミプラミン（４５．０ｍｇ／ｋｇ）、及びシタロプラム（１５．０ｍｇ／ｋｇ）を塩として定量し、そして行動評価の６０分前に腹腔内に投与した。結果：１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ［ｂ，ｆ][１，４］チアゼピン（１０．０ｍｇ／ｋｇ）は、この評価で、イミプラミン並みの抗鬱効果を示した。クエチアピンは、試験した用量でのＦＳＴにおいて、効果を示さなかった。これらのデータは、１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ［ｂ，ｆ][１，４］チアゼピンは抗鬱プロフィールを示すが、クエチアピンは示さないことを示唆した。
【００６７】
実施例９
１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ［ｂ，ｆ][１，４］チアゼピンの生体内での抗鬱活性
１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ［ｂ，ｆ][１，４］チアゼピンの抗鬱活性を、尾懸垂試験に従ってマウスで評価した。以下の結果で示す通り、１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ［ｂ，ｆ][１，４］チアゼピンは、マウスにおいて抗鬱活性を有する。
第一の実験において、マウス（ｎ＝１０／群）に、賦形剤と共に１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ［ｂ，ｆ][１，４］チアゼピン（２．０、５．０又は１０．０ｍｇ／ｋｇ）を、試験の１５分前に皮下注入した。マウスを、７分間、尾を上にして吊り下げた。試験の後半の５分間、不動状態の継続時間を記録した。第二の実験において、マウス（ｎ＝１０／群）を、賦形剤と共に１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ［ｂ，ｆ][１，４］チアゼピン（３０ｍｇ／ｋｇ）又はフルオキセチン（３０ｍｇ／ｋｇ）を、試験の６０分前に経口投与した。マウスを、７分間、尾を上にして吊り下げた。試験の後半の５分間、不動状態の継続時間を記録した。
第一の実験の結果は、１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ［ｂ，ｆ][１，４］チアゼピンが、試験した全ての用量において、不動状態を軽減すること示した。１０．０ｍｇ／ｋｇの用量は、対照と比較して不動状態を著しく軽減し（ｐ＜０．０１）、不動状態を賦形剤対照群のそれより１／２以上軽減した。
第二の実験の結果は、試験した用量に対して、処理の著しい主要効果を示した（Ｆ（２，２７）＝８．３９１）。１１−ピペラジン−１−イルジベンゾ［ｂ，ｆ][１，４］チアゼピン及びフルオキセチンの両者は、３０ｍｇ／ｋｇの用量で、ｐ＜０．０１に賦形剤対照群と比較して不動状態を著しく軽減し（ｐ＜０．０１）、不動状態を賦形剤対照群のそれより１／２以上軽減した。
【００６８】
実施例１０
放射性リガンド結合性評価
以下の例は、実施した放射性リガンド結合性評価用のパラメータを説明する。
源：  ヒト組み換えＭＤＣＫ細胞；
リガンド：  ［125Ｉ］ＲＴＩ−５５（０．２ｎＭ）；
賦形剤：  ＤＭＳＯ（１％）；
インキュベーション時間／温度：  ３時間／４℃；
インキュベーション緩衝液：  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（５０ｍＭ）、ｐＨ＝７．４、ＮａＣｌ（１００ｍＭ）、ロイペプチン（１μＭ）、ＰＭＳＦ（１０μＭ）；
非特異的リガンド：  デシプラミン（１０μＭ）；
ＫD：  ０．０２４μＭ*；
ＢMAX：  ２．５ｐｍｏｌｅ／ｍｇ蛋白質；
特異的結合：  ７５％*；
定量法：  放射性リガンド結合；
有意性基準：         最大刺激又は阻害の≧５０％；
*：過去の値
【００６９】
本発明の化合物より得られた結果を以下に示す。
【表１０】
2010522211.tif 000016
【００７０】
実施例１１
ノルエピネフリン取り込み量測定の機能分析
以下の例は、実施したノルエピネフリン取り込み量測定のための機能分析用パラメータを説明する。
目標：  ヒトＭＤＣＫ細胞犬腎臓；
賦形剤：  ＤＭＳＯ（０．４％）；
インキュベーション時間／温度：  １０分／２５℃；
インキュベーション緩衝液：  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（５ｍＭ）、ＨＥＰＥＳ（７．５ｍＭ）、ｐＨ＝７．１；ＮａＣｌ（１２０ｍＭ）、ＫＣｌ（５．４ｍＭ）、ＣａＣｌ2（１．２ｍＭ）、ＭｇＳＯ4（１．２ｍＭ）、グルコース（５ｍＭ）、アスコルビン酸（１ｍＭ）；
定量方法：  ［3Ｈ］ノルエピネフリンの定量；
有意性基準−Ａｇ（Significance Criteria−Ag）：  Ｎ／Ａ
有意性基準−Ａｎｔ（Significance Criteria−Ant）：  デシプラミン応答に比較して、［3Ｈ］ノルエピネフリン取り込み阻害≧５０％；
【００７１】
本発明の化合物より得られた結果を以下に示す。
【表１１】
2010522211.tif 000017
【００７２】
本明細書に記載した事柄に加えて、本発明の種々の改変は、前述の記述から当業者にとって明白であろう。その様な改変も、また、添付した特許請求の範囲の範囲内に入ることを意図している。本出願に引用された参考文献（雑誌記事、米国及び非米国特許、特許出願公報、国際特許出願公報等を含むが、それらに限定されない）は、参照することにより本明細書にそれらの全文が取り入れられている。米国特許出願第６０／８９６４８１号（２００７年３月２２日出願）は、参照することにより、本明細書にその全文が取り入れられている。
【図１】
2010522211.tif 000019
【図２】
2010522211.tif 000020
【国際調査報告】
2010522211.tif 000021