(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
試料中の代謝物質の検出方法であって、
代謝物質を含む試料および下記式（Ｉ）又は（ＩＩ）の化合物を接触させること、
【化１】
0006285917.tif 000041
ここで、
前記代謝物質と、式（Ｉ）又は（ＩＩ）の前記化合物とが反応して付加物を形成するものであり、
および、
前記付加物を検出すること、
を含み、
式中、
各Ｒ１とＲ２は、それぞれ独立して水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のアルケニル、置換若しくは非置換のアルキニル、置換若しくは非置換の炭素環、置換若しくは非置換の複素環、置換若しくは非置換のアリール、置換若しくは非置換のヘテロアリール、−Ｃ（＝Ｏ）ＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２、若しくはアミノ基の保護基であるか、又は、Ｒ１とＲ２が結合して置換若しくは非置換の複素環を形成し、
各ＲＡは、それぞれ独立して水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のアルケニル、置換若しくは非置換のアルキニル、置換若しくは非置換の炭素環、置換若しくは非置換の複素環、置換若しくは非置換のアリール、置換若しくは非置換のヘテロアリール、酸素原子と結合した場合に酸素の保護基、若しくは窒素原子と結合した場合に窒素の保護基であるか、又は、２つのＲＡ基が結合して置換若しくは非置換の複素環を形成し、
Ｒ３は、水素であり、
Ｒ５とＲ６は、独立して−ＯＲＢ、−Ｎ（ＲＢ）２、及び下記式（ｉ）の基から選択され、
【化２】
0006285917.tif 000042
ただし、Ｒ５とＲ６の少なくともいずれか一方が、式（ｉ）の基であり、
各ＲＢは、それぞれ独立して水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のアルケニル、置換若しくは非置換のアルキニル、置換若しくは非置換の炭素環、置換若しくは非置換の複素環、置換若しくは非置換のアリール、置換若しくは非置換のヘテロアリール、酸素原子と結合した場合に酸素の保護基、若しくは窒素原子と結合した場合に窒素の保護基であるか、又は、２つのＲＢ基が結合して置換若しくは非置換の複素環を形成し、
各Ｒ４は、それぞれ独立して置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のアルケニル、置換若しくは非置換のアルキニル、置換若しくは非置換の炭素環、置換若しくは非置換の複素環、置換若しくは非置換のアリール、置換若しくは非置換のヘテロアリール、若しくはアミノ基の保護基であるか、又は、２つのＲ４基が結合して置換若しくは非置換の複素環を形成し、
ｎは、１、２、３、４、５又は６であり、
Ｘ−は、対アニオンである、
前記検出方法。
【請求項２】
試験化合物を含む試料中で生成する代謝物質の検出方法であって、
試験化合物、酵素系および下記式（Ｉ）又は（ＩＩ）の化合物を接触させること、
【化３】
0006285917.tif 000043
ここで、
前記試験化合物が、前記酵素系により代謝され、代謝物質となり、該代謝物質が式（Ｉ）又は（ＩＩ）の化合物と反応して付加物を形成するものであり、
および、
前記付加物を検出すること
を含み、
式中、
各Ｒ１とＲ２は、それぞれ独立して水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のアルケニル、置換若しくは非置換のアルキニル、置換若しくは非置換の炭素環、置換若しくは非置換の複素環、置換若しくは非置換のアリール、置換若しくは非置換のヘテロアリール、−Ｃ（＝Ｏ）ＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２、若しくはアミノ基の保護基であるか、又は、Ｒ１とＲ２が結合して置換若しくは非置換の複素環を形成し、
各ＲＡは、それぞれ独立して水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のアルケニル、置換若しくは非置換のアルキニル、置換若しくは非置換のカルボシクリル、置換若しくは非置換の複素環、置換若しくは非置換のアリール、置換若しくは非置換のヘテロアリール、酸素原子と結合した場合に酸素の保護基、若しくは窒素原子と結合した場合に窒素の保護基であるか、又は、２つのＲＡ基が結合して置換若しくは非置換の複素環を形成し、
Ｒ３は、水素であり、
Ｒ５とＲ６は、独立して−ＯＲＢ、−Ｎ（ＲＢ）２、及び下記式（ｉ）の基から選択され、
【化４】
0006285917.tif 000044
ただし、Ｒ５とＲ６の少なくともいずれか一方が、式（ｉ）の基であり、
各ＲＢは、それぞれ独立して水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のアルケニル、置換若しくは非置換のアルキニル、置換若しくは非置換の炭素環、置換若しくは非置換の複素環、置換若しくは非置換のアリール、置換若しくは非置換のヘテロアリール、酸素原子と結合した場合に酸素の保護基、若しくは窒素原子と結合した場合に窒素の保護基であるか、又は、２つのＲＢ基が結合して置換若しくは非置換の複素環を形成し、
各Ｒ４は、それぞれ独立して置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のアルケニル、置換若しくは非置換のアルキニル、置換若しくは非置換の炭素環、置換若しくは非置換の複素環、置換若しくは非置換のアリール、置換若しくは非置換のヘテロアリール、若しくはアミノ基の保護基であるか、又は、２つのＲ４基が結合して置換若しくは非置換の複素環を形成し、
ｎは、１、２、３、４、５又は６であり、
Ｘ−は、対アニオンである、
前記検出方法。
【請求項３】
化合物は、下記式（Ｉ−ｃ）で示される化合物であり、
【化５】
0006285917.tif 000045
式中、
各Ｒ１とＲ２は、それぞれ独立して水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のアルケニル、置換若しくは非置換のアルキニル、置換若しくは非置換の炭素環、置換若しくは非置換の複素環、置換若しくは非置換のアリール、置換若しくは非置換のヘテロアリール、−Ｃ（＝Ｏ）ＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２、若しくはアミノ基の保護基であるか、又は、Ｒ１とＲ２が結合して置換若しくは非置換の複素環を形成し、
各ＲＡは、それぞれ独立して水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のアルケニル、置換若しくは非置換のアルキニル、置換若しくは非置換の炭素環、置換若しくは非置換の複素環、置換若しくは非置換のアリール、置換若しくは非置換のヘテロアリール、酸素原子と結合した場合に酸素の保護基、若しくは窒素原子と結合した場合に窒素の保護基であるか、又は、２つのＲＡ基が結合して置換若しくは非置換の複素環を形成し、
Ｒ３は、水素、又は硫黄の保護基であり、
Ｘ−は、対アニオンである、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
化合物は、下記式からなる群：
【化６】
0006285917.tif 000046
から選択される、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記試料は、酵素系をさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記酵素系は、Ｐ４５０ミクロソーム酵素系である、請求項２又は５に記載の方法。
【請求項７】
Ｐ４５０ミクロソーム酵素系は、ミクロソーム、Ｓ９画分、及びＰ４５０酵素から成る群から選択される、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
代謝物質は、試験化合物を試料に加えることにより生成される、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記付加物の形成は、ＮＡＤＰＨ生成系、又は、ＮＡＤＰＨを添加することにより開始される、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
前記付加物は、質量分析計、または質量分析計に接続した液体クロマトグラフィにより検出される、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
前記質量分析計は、タンデム質量分析計と接続したエレクトロスプレーイオン化質量分析による質量分析計(ESI-MS/MS)である、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記液体クロマトグラフィは、高速液体クロマトグラフィ(HPLC)である、請求項１０に記載の方法。
【請求項１３】
下記式（Ｉ）で示される化合物：
【化７】
0006285917.tif 000047
式中、
Ｒ１は水素であり、Ｒ２は、−Ｃ（＝Ｏ）ＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＡ、又は、
−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＲＡであり、ＲＡは、下記式で示される基であり、
【化８】
0006285917.tif 000048
式中、ｐは、０、１又は、２であり、ｍは、１、２、３、４、又は、５であり、Ｒ７はハロゲンであり、
Ｒ３は、水素、又は硫黄の保護基であり、
各Ｒ４は、それぞれ独立して置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のアルケニル、置換若しくは非置換のアルキニル、置換若しくは非置換の炭素環、置換若しくは非置換の複素環、置換若しくは非置換のアリール、置換若しくは非置換のヘテロアリール、若しくはアミノ基の保護基であるか、又は、２つのＲ４基が結合して置換若しくは非置換の複素環を形成し、
ｎは、１、２、３、４、５又は６であり、
Ｘ−は、対アニオンである。
【請求項１４】
下記式（II）で示される化合物：
【化９】
0006285917.tif 000049
式中、
各Ｒ１とＲ２は、それぞれ独立して水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のアルケニル、置換若しくは非置換のアルキニル、置換若しくは非置換の炭素環、置換若しくは非置換の複素環、置換若しくは非置換のアリール、置換若しくは非置換のヘテロアリール、−Ｃ（＝Ｏ）ＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２、若しくはアミノ基の保護基であるか、又は、Ｒ１とＲ２が結合して置換若しくは非置換の複素環を形成し、
各ＲＡは、それぞれ独立して水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のアルケニル、置換若しくは非置換のアルキニル、置換若しくは非置換の炭素環、置換若しくは非置換の複素環、置換若しくは非置換のアリール、置換若しくは非置換のヘテロアリール、酸素原子と結合した場合に酸素の保護基、若しくは窒素原子と結合した場合に窒素の保護基であるか、又は、２つのＲＡ基が結合して置換若しくは非置換の複素環を形成し、
Ｒ３は、水素又は、硫黄の保護基であり、
Ｒ５とＲ６は、独立して−ＯＲＢ、−Ｎ（ＲＢ）２、及び下記式（ｉ）の基から選択され、
【化１０】
0006285917.tif 000050
ただし、Ｒ５とＲ６の少なくともいずれか一方が、式（ｉ）の基であり、
各ＲＢは、それぞれ独立して水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のアルケニル、置換若しくは非置換のアルキニル、置換若しくは非置換の炭素環、置換若しくは非置換の複素環、置換若しくは非置換のアリール、置換若しくは非置換のヘテロアリール、酸素原子と結合した場合に酸素の保護基、若しくは窒素原子と結合した場合に窒素の保護基であるか、又は、２つのＲＢ基が結合して置換若しくは非置換の複素環を形成し、
各Ｒ４は、それぞれ独立して置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のアルケニル、置換若しくは非置換のアルキニル、置換若しくは非置換の炭素環、置換若しくは非置換の複素環、置換若しくは非置換のアリール、置換若しくは非置換のヘテロアリール、若しくはアミノ基の保護基であるか、又は、２つのＲ４基が結合して置換若しくは非置換の複素環を形成し、
ｎは、１、２、３、４、５又は６であり、
Ｘ−は、対アニオンである。
【請求項１５】
Ｒ１は水素であり、
（ａ）Ｒ２は水素、−Ｃ（＝Ｏ）ＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２又はアミノ基の保護基であるか；又は、
（ｂ）Ｒ２は水素であるか；又は、
（ｃ）Ｒ２は−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ３であるか；又は、
（ｄ）Ｒ２は、−Ｃ（＝Ｏ）ＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＡ又は−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＲＡであり、ＲＡは、下記式で示される基であり、
【化１１】
0006285917.tif 000051
式中、ｐは、０、１又は、２であり、ｍは、１、２、３、４、又は、５であり、Ｒ７はハロゲンである；
請求項１４に記載の化合物。
【請求項１６】
Ｒ７はブロモ又はフルオロである、請求項１３または１５に記載の化合物。
【請求項１７】
ｍは１であり、Ｒ７はブロモである、請求項１６に記載の化合物。
【請求項１８】
ｍは５であり、Ｒ７はフルオロである、請求項１６に記載の化合物。
【請求項１９】
ＲＢは、下記式の基であり、
【化１２】
0006285917.tif 000052
ｐは、０、１、又は、２であり、ｍは、１、２、３、４、又は、５であり、Ｒ７は、ハロゲンである、請求項１４に記載の化合物。
【請求項２０】
Ｒ７はブロモ又はフルオロである、請求項１９に記載の化合物。
【請求項２１】
ｍは１であり、Ｒ７はブロモである、請求項２０に記載の化合物。
【請求項２２】
ｍは５であり、Ｒ７はフルオロである、請求項２０に記載の化合物。
【請求項２３】
Ｒ３は水素である、請求項１３又は１４に記載の化合物。
【請求項２４】
Ｒ４は、それぞれ独立して、置換または非置換のアルキルである、請求項１３又は１４に記載の化合物。
【請求項２５】
Ｒ４は、それぞれ独立して、置換または非置換のＣ１−６アルキルである、請求項２４に記載の化合物。
【請求項２６】
Ｒ４は、それぞれ-ＣＨ３である、請求項２５に記載の化合物。
【請求項２７】
ｎは２である、請求項１３又は１４に記載の化合物。
【請求項２８】
Ｘ−は、クロリド対アニオンである、請求項１３又は１４に記載の化合物。
【請求項２９】
下記式
【化１３】
0006285917.tif 000053
又は
【化１４】
0006285917.tif 000054
で示される、請求項１３に記載の化合物。
【請求項３０】
下記式（Ｉ−ｃ）で示される化合物：
【化１５】
0006285917.tif 000055
式中、
各Ｒ１とＲ２は、それぞれ独立して水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のアルケニル、置換若しくは非置換のアルキニル、置換若しくは非置換の炭素環、置換若しくは非置換の複素環、置換若しくは非置換のアリール、置換若しくは非置換のヘテロアリール、−Ｃ（＝Ｏ）ＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２、若しくはアミノ基の保護基であるか、又は、Ｒ１とＲ２が結合して置換若しくは非置換の複素環を形成し、
各ＲＡは、それぞれ独立して水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のアルケニル、置換若しくは非置換のアルキニル、置換若しくは非置換の炭素環、置換若しくは非置換の複素環、置換若しくは非置換のアリール、置換若しくは非置換のヘテロアリール、酸素原子と結合した場合に酸素の保護基、若しくは窒素原子と結合した場合に窒素の保護基であるか、又は、２つのＲＡ基が結合して置換若しくは非置換の複素環を形成し、
Ｒ３は、水素、又は硫黄の保護基であり、
Ｘ−は、対アニオンである。
【請求項３１】
下記式からなる群：
【化１６】
0006285917.tif 000056
から選択される、請求項３０に記載の化合物。
【請求項３２】
下記式からなる群：
【化１７】
0006285917.tif 000057
【化１８】
0006285917.tif 000058
【化１９】
0006285917.tif 000059
【化２０】
0006285917.tif 000060
【化２１】
0006285917.tif 000061
【化２２】
0006285917.tif 000062
および
【化２３】
0006285917.tif 000063
から選択される、請求項１４に記載の化合物。
【請求項３３】
下記式からなる群：
【化２４−１】
0006285917.tif 000064
【化２４−２】
0006285917.tif 000065
【化２４−３】
0006285917.tif 000066
から選択される、請求項１４に記載の化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願
本出願は、米国特許法第１１９条（ｅ）により、２０１２年５月２２日に出願された米国特許仮出願第６１／６５０，４４８号に基づく優先権を主張し、全ての記載内容を援用する。
【背景技術】
【０００２】
承認候補の薬剤が承認されない、また、承認された薬剤が市場から撤去されてしまう主要な原因の一つは薬剤が引き起こす毒性によることが多い。例えば、Olson et al., Regul. Toxicol. Pharmacol. （2000） 32:56-67を参照。薬剤の化学的反応性を持つ求電子性代謝物質は、毒性のメディエータになりやすく、不可欠な細胞機構の共有結合修飾剤として機能する可能性がある。例えば、Guengerich et al., Arch. Biochem. Biophys. （2005） 433:369-378、Kalgutkar et al., Curr. Drug. Metab. （2005） 6:161-225を参照。薬剤は、しばしば体内で、代謝物質へ変化することがあり、その代謝物は、グルタチオン（ＧＳＨ）に対して、本来の化学的反応を通じて細胞機能を干渉しうる。これによりグルタチオンが減少し、機能的に重要な別の高分子へと向かい、可逆的修飾、不可逆的な付加物形成、又は、不可逆的作用損失を引き起こす。例えば、 Srivastava et al., Handb. Exp. Pharmacol. （2010） 196:165-194を参照。反応性代謝物質は、アセトアミノフェン、タモキシフェン、イソニアジド及びアモジアキンなどの肝毒性を引き起こすとして知られる薬剤から形成されることを示す多くの根拠がある。
【０００３】
創薬における初期段階で、生体内活性化における不利益を少なくするように、前臨床スクリーンの開発が行われてきた。例えば、Ma and Subramanian, J. Mass. Spectrom. （2006） 41:1121-1139、を参照。前臨床スクリーンで用いられる最も一般的な分析技術は、質量分析器（ＭＳ）に接続したガスクロマトグラフィ（ＧＣ）又は、液体クロマトグラフィ（ＬＣ）、例えば、タンデム質量分析計(MS/MS)スキャンニングに接続したガスクロマトグラフィ（ＧＣ）や液体クロマトグラフィ（ＬＣ）などが挙げられる。質量分析器は、核磁気共鳴（ＮＭＲ）分光法などの他の方法よりも、更に感度が高く、数多くの低量の代謝物質の分析を行うことができるが、定量的な精度は、本来劣っている。質量分析器法を用いて、代謝物質の検出を高める方法は、“ヘビー”及び“ライト”に種類分けした同位体の標識剤を用いて試料を扱い、“ヘビー”及び“ライト”に種類分けし標識した代謝物質を作成することである。例えば、Lamos et al., Anal. Chem. （2007） 79:5143-5149を参照。正に帯電した官能基を配置することによっても、陽イオンモードエレクトロスプレーイオン化質量分析器（ＥＳＩ−ＭＳ）でのイオン効率及び、それに対応する検出感度が高まることが分かっている。例えば、Lamos in supra, Yang et al., Anal. Chem. （2006） 78:4702-4708、 Johnson, Rapid Commun. Mass. Spectrom. （2000）14:2019-2024、 Barry et al., Rapid Commun. Mass. Spectrom. （2003） 17:603-620、Mirzaei et al., Anal. Chem. （2006） 78:4175-4183、 Soglia et al., Chem. Res. Toxicol. （2006） 19:480-490、及び、米国特許第 ２００４／０２４８２３４号を参照。
【０００４】
しかし、これらの取り組みにも関わらず、薬剤により引き起こされ毒性の原因となりえ、化学的反応性を持つ可能性のある求電子性代謝物質を特定及び／又は定量化するために、初期スクリーニング分析の更なる改良、開発の必要性があった。
【発明の概要】
【０００５】
生体内で活性された化合物のほとんどは、遊離チオールに捕獲され得る穏やかな求電子性を生成することで知られているため、研究者らはグルタチオン（ＧＳＨ）を有望な捕獲剤として見ていた。例えば、 Baille et al., J. Pharm. Biomed. Anal. （1989） 7:1351-1360を参照。トリチウム標識したグルタチオンの捕獲は、直接的にコンジュゲートを定量化することができる一方、［３Ｈ］グルタチオン付加物を非反応物質から適切に分離することは、困難であり、しばしば十分な感度が得られない結果になることが判明した。例えば、 Soglia et al., Chem. Res. Toxicol. （2006） 19:480-490 及び米国特許第２００４／０２４８２３４号を参照。蛍光ダンシルタグと結合したグルタチオン類似体を使用することで、放射性標識の使用を回避することが可能であった。しかし、この方法は、蛍光標識したコンジュゲートを未反応出発物質から高圧液体クロマトグラフィによって分離させることが必要である。例えば、 Gan et al., Chem. Res. Toxicol. （2005） 18:896-903及び米国特許第７，１６９，５７６号を参照。Soglia及びその同僚らは、その時から、高処理スクリーニングに適し、かつ、高圧液体クロマトグラフィによる分離を必要としないとみられる固定された正電荷を含む第４級アンモニウムグルタチオン類似体（ＱＡ−ＧＳＨ）の開発を行った。例えば、 Soglia in supraを参照。他の研究者らは、三重四重極質量分析計で、プロトン化したグルタチオン付加物を用いて、ＥＰＩ（エンハンストプロダクトイオン）スペクトルの取得を引き起こす目的で、多重反応モニタリング（ＭＲＭ）をサーベイスキャンとして使用した。例えば、Zheng et al., Chem. Res. Toxicol. （2007） 20:757-766を参照。しかしながら、現在では、グルタチオンのスクリーニング分析の感度は、常に十分であるとはいえない。加えて、現在の方法は、実験ごと、試料ごとにクロマトグラフィ及びイオン抑制にばらつきが見られ、十分に定量化できない。 
【０００６】
本発明の態様は、第４級アミンコラミン(“ｃｙｓ−ｃｈｏｌ”)を標識剤として用いて修飾されたシステインは、非修飾システイン又はグルタチオンのいずれかを用いた場合とを比べると、高いイオン化効率及びそれに基づく検出感度を脅かすという観察に、少なくとも一部は基づく。これにより、従来知られていなかった薬剤試料中の更なる反応性求電子性を持つ代謝物質特定の改良がなされた。
【化１】
0006285917.tif 000002
【０００７】
コラミンと結合した別のチオール含有化合物も同様に検出感度が改善されると考えられる。この例から、コラミン修飾のグルタチオンも同様に検出感度が改善されると考えられる。
【化２】
0006285917.tif 000003
【０００８】
この発見を幅広く適用し、薬剤試料中の反応性求電子性を持つ代謝物質を検出する標識剤として、コラミン以外の他の第４級アミン、システインやグルタチオン以外のチオールとコンジュゲートする第４級アミンへ適用を広げることが考えられる。
【０００９】
したがって、ある態様において、本発明は、代謝物質を捕獲する式（Ｉ）のｃｙｓ−ｃｈｏｌコンジュゲートを包含する新たな標識剤を提供する。
【化３】
0006285917.tif 000004
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４、Ｘ及びｎは、前記定義に同じであり、標識剤として使用される場合、Ｒ３は、水素であり、又は、Ｒ３は、硫黄保護基である。
【００１０】
別の態様において、本発明は、代謝物質を捕獲する式（II）のＧＳＨ−ｃｈｏｌコンジュゲートを包含する新たな標識剤を提供する。
【化４】
0006285917.tif 000005
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４、Ｘ及びｎは、前記定義に同じであり、標識剤として使用される場合、Ｒ３は、水素であり、又は、Ｒ３は、硫黄保護基であり、及びＲ５とＲ６の少なくともいずれか一方が、式（ｉ）の基である。
【化５】
0006285917.tif 000006
式中、Ｒ４、Ｘ及びｎは、前記定義に同じである。
【００１１】
別の態様において、本発明は、代謝物質を含む試料と、下記式（Ｉ）又は（ＩＩ）の化合物とを接触させることを含む試料中の代謝物質の検出方法を提供する。
【化６】
0006285917.tif 000007
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｘ及びｎは、前記定義に同じであり、Ｒ３は、水素であり、前記代謝物質と、式（Ｉ）又は（ＩＩ）の前記化合物とを反応させて付加物を形成し、
前記付加物を、
例えば、質量分析法により検出する検出方法。
【００１２】
ある実施形態において、試料は、酵素系を含有する。ある実施形態において、試料は、試験化合物を含有する。ある実施形態において、試験化合物を含む試料と酵素系とを接触させ、試験化合物の前記代謝物質は、酵素系による代謝から生成される。ある実施形態において、前記酵素系は、Ｐ４５０ミクロソーム酵素系である。ある実施形態において、Ｐ４５０ミクロソーム酵素は、ミクロソーム、Ｓ９画分、及びＰ４５０酵素から成る群から選択される。ある実施形態において、ミクロソームは、哺乳動物肝臓ミクロソームであり、例えば、ヒト肝臓ミクロソームである。ある実施形態において、Ｓ９画分は、哺乳動物Ｓ９画分であり、例えば、ヒト肝臓Ｓ９画分である。
【００１３】
ある実施形態において、代謝物質と、式（Ｉ）又は（ＩＩ）との化合物反応による付加物の形成は、ＮＡＤＰＨ生成系、又は、ＮＡＤＰＨを添加することにより開始される。ある実施形態において、付加物の形成は、ＮＡＤＰＨを添加することにより、開始される。
【００１４】
ある実施形態において、付加物は、質量分析器を用いて検出される。ある実施形態において、付加物は、質量分析計に接続した液体クロマトグラフィにより検出される。ある実施形態において、質量分析器は、タンデム質量分析計と接続したエレクトロスプレーイオン化質量分析による質量分析計（ＥＳＩ−ＭＳ／ＭＳ）である。ある実施形態において、液体クロマトグラフィは、高圧液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）である。ある実施形態において、液体クロマトグラフィは、超高圧液体クロマトグラフィ（ＵＰＬＣ又はＵＨＰＬＣ）である。
【００１５】
別の態様によれば、試験化合物、酵素系を式（Ｉ）又は（ＩＩ）の化合物とを接触させることを含む試料中の代謝物質の検出方法を提供する。
【化７】
0006285917.tif 000008
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｘ及びｎは、前記定義に同じであり、Ｒ３は、水素であり、
前記試験化合物は、前記酵素系により代謝され、代謝物質となり、前記代謝物質を、式（Ｉ）又は（ＩＩ）の化合物と反応させ、付加物を形成し、
例えば、質量分析法により、前記付加物を検出する検出方法。
【００１６】
ある実施形態において、本明細書中に記載された方法は、低い量の既知の代謝物質を検出する方法である。ある実施形態において、本明細書中に記載された方法は、新たな代謝物質を特定する方法である。ある実施形態において、本明細書中に記載された方法は、代謝物質の検出の分析や確実性を高める方法である。
【００１７】
本発明のいくつかの実施形態は、以下の発明を実施するための形態に詳細に記載される。本発明のその他の特徴、目的、利点は、定義、実施例、図、請求項から明らかにされる。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１Ａ】図１Ａ及び１Ｂは、クロザピン（+TOF MS-MS （100-1000）: 632.21 +/-0.05 Da）及び２個の反応性クロザピン代謝物質を用いて形成したグルタチオン付加物ののＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析を示す。
【図１Ｂ】同上。
【００１９】
【図２Ａ】図２Ａ及び２Ｂは、クロザピン（+TOF MS/MS （100-1000）: 446.14 +/-0.05 Da）及び２個の反応性クロザピン代謝物質を用いて形成したシステイン付加物のＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析を示す。
【図２Ｂ】同上。
【００２０】
【図３Ａ】図３Ａ及び３Ｂは、クロザピン（+TOF MS-MS （100-1000）: 530.25 +/-0.05 Da）及び３個の反応性クロザピン代謝物質を用いて形成したｃｙｓ−ｃｈｏｌ付加物のＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析を示す。グルタチオン又はシステインを用いた場合よりもｃｙｓ−ｃｈｏｌを用いた捕獲反応性代謝物質の方が、より高いイオン化効率及び検出感度を示す。
【図３Ｂ】同上。
【００２１】
【図４−１】図４は、特定されたアトルバスタチン（Ａｔｏｒ）の反応性ｃｙｓ−ｃｈｏｌ代謝物質のＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析を示す。
【図４−２】同上。
【００２２】
【図５−１】図５は、特定されたカルバマゼピン（ＣＭＺ）の反応性ｃｙｓ−ｃｈｏｌ代謝物質のＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析を示す。
【図５−２】同上。
【００２３】
【図６Ａ】図６Ａ及び６Ｂは、カルバマゼピン（+TOF MS/MS （100-1000）: 440.21 +/-0.05 Da）を用いて形成したｃｙｓ−ｃｈｏｌ付加物のＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析を示す。グルタチオン及びシステイン（Ｃｙｓ）を捕獲剤として用いた同様の実験では、検出可能なコンジュゲートは得られなかった。
【図６Ｂ】同上。
【００２４】
【図７Ａ】図７Ａ及び７Ｂは、スプロフェン （+TOF MS/MS （100-1000）: 380.06 +/-0.05 Da）を用いて形成したシステイン（Ｃｙｓ）付加物のＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析を示す。
【図７Ｂ】同上。
【００２５】
【図８Ａ】図８Ａ及び８Ｂは、スプロフェン（+TOF MS/MS （100-1000）: 464.17 +/-0.05 Da）を用いて形成したｃｙｓ−ｃｈｏｌ付加物のＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析を示し、システイン付加物の形成と比べるとより高いイオン化効率及び検出感度（２０倍）を示す（図７Ａを参照。）。
【図８Ｂ】同上。
【００２６】
定義
特定の官能基及び化学的な用語の定義を下記に詳細に示す。化学元素は、CAS version, Handbook of Chemistry and Physics, 75th Ed., の内表紙にある元素周期表に基づき特定され、又、官能基についても概ねその中で定義される。更に、有機化学の一般原則や、特定の機能的部分及び反応性については、Organic Chemistry, Thomas Sorrell, University Science Books, Sausalito, 1999、 Smith and March March’s Advanced Organic Chemistry, 5th Edition, John Wiley & Sons, Inc., New York, 2001、 Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers, Inc., New York, 1989、及びCarruthers, Some Modern Methods of Organic Synthesis, 3rd Edition, Cambridge University Press, Cambridge, 1987に記載がある。
【００２７】
本明細書に記載される化合物は、１以上の不斉中心を含むことができ、よって、様々な異性体、例えば、エナンチオマー及び／又はジアステレオマー、の中に存在する。例えば、本明細書に記載される化合物は、個々のエナンチオマー、ジアステレオマー若しくは幾何異性体であり得、又は、立体異性体の混合体であり得、ラセミ混合物及び１以上の立体異性体中に濃縮された混合物などが含まれる。異性体は、当業者に既知の方法で、混合物から分離することができ、キラル高圧液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）及びキラル塩の結晶の形成が含まれる。また、異性体は、不斉合成により、作成される。例えば、 Jacques et al., Enantiomers, Racemates and Resolutions （Wiley Interscience, New York, 1981）、 Wilen et al., Tetrahedron 33:2725 （1977）、Eliel, E.L. Stereochemistry of Carbon Compounds（McGraw-Hill, NY, 1962）及び、Wilen, S.H. Tables of Resolving Agents and Optical Resolutions p. 268 （E.L. Eliel, Ed., Univ. of Notre Dame Press, Notre Dame, IN 1972）を参照。本発明は、実質的に他の異性体を含まない個々の異性体としての化合物、又は、様々な異性体の混合体を包含する。
【００２８】
値の範囲を列挙する場合、その範囲の各値とそのサブレンジを包含することを意図するものとする。例えば、“Ｃ１-６アルキル”は、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ１-６、Ｃ１-５、Ｃ１-４、Ｃ１-３、Ｃ１-２、Ｃ２-６、Ｃ２-５、Ｃ２-４、Ｃ２-３、Ｃ３-６、Ｃ３-５、Ｃ３-４、Ｃ４-６、Ｃ４-５、及びＣ５-６アルキルを含むことを意図している。
【００２９】
ここで用いられる“アルキル”とは、１〜１０個の炭素原子（“Ｃ１-１０アルキル”）を有する直鎖または分岐の飽和炭化水素基の基を意味する。いくつかの実施形態において、アルキル基は、１〜９個の炭素原子（“Ｃ１-９アルキル”）を有する。いくつかの実施形態において、アルキル基は、１〜８個の炭素原子（“Ｃ１-８アルキル”）を有する。いくつかの実施形態において、アルキル基は、１〜７個の炭素原子（“Ｃ１-７アルキル”）を有する。いくつかの実施形態において、アルキル基は、１〜６個の炭素原子（“Ｃ１-６アルキル”）を有する。いくつかの実施形態において、アルキル基は、１〜５個の炭素原子（“Ｃ１-５アルキル”）を有する。いくつかの実施形態において、アルキル基は、１〜４個の炭素原子（“Ｃ１-４アルキル”）を有する。いくつかの実施形態において、アルキル基は、１〜３個の炭素原子（“Ｃ１-３アルキル”）を有する。いくつかの実施形態において、アルキル基は、１〜２個の炭素原子（“Ｃ１-２アルキル”）を有する。いくつかの実施形態において、アルキル基は、１炭素原子（“Ｃ１アルキル”）を有する。いくつかの実施形態において、アルキル基は、２〜６個の炭素原子（“Ｃ２-６アルキル”）を有する。Ｃ１-６アルキル基類の例としては、メチル（Ｃ１）、エチル（Ｃ２）、ｎ‐プロピル（Ｃ３）、イソプロピル（Ｃ３）、ｎ-ブチル（Ｃ４）、ｔｅｒｔ-ブチル（Ｃ４）、ｓｅｃ-ブチル（Ｃ４）、ｉｓｏ-ブチル（Ｃ４）、ｎ-ペンチル（Ｃ５）、３-ペンタニル（Ｃ５）、アミル（Ｃ５）、ネオペンチル（Ｃ５）、３-メチル-２-ブタニル（Ｃ５）、第三級アミル（Ｃ５）及び、ｎ-ヘキシル（Ｃ６）などが挙げられる。前記アルキル基には、ｎ-ヘプチル（Ｃ７）、ｎ-オクチル（Ｃ８）等なども含まれる。明記されていない限り、各アルキル基は、それぞれ独立して置換されない（“非置換アルキル”）又は、１以上の置換基で置換される（“置換アルキル”）。ある実施形態において、前記アルキル基は、非置換のＣ１-１０アルキルである。ある実施形態において、アルキル基は、置換Ｃ１-１０アルキルである。
【００３０】
ここで用いられる“アルケニル”とは、２〜１０個の炭素原子、及び、１以上の炭素-炭素二重結合（“Ｃ２-１０アルケニル”）を有する直鎖または分岐の炭化水素基の基を意味する。いくつかの実施形態において、アルケニル基は、２〜９個の炭素原子（“Ｃ２-９アルケニル”）を有する。いくつかの実施形態において、アルケニル基は、２〜８個の炭素原子（“Ｃ２-８アルケニル”）を有する。いくつかの実施形態において、アルケニル基は、２〜７個の炭素原子（“Ｃ２-７アルケニル”）を有する。いくつかの実施形態において、アルケニル基は、２〜６個の炭素原子（“Ｃ２-６アルケニル”）を有する。いくつかの実施形態において、アルケニル基は、２〜５個の炭素原子（“Ｃ２-５アルケニル”）を有する。いくつかの実施形態において、アルケニル基は、２〜４個の炭素原子（“Ｃ２-４アルケニル”）を有する。いくつかの実施形態において、アルケニル基は、２〜３個の炭素原子（“Ｃ２-３アルケニル”）を有する。いくつかの実施形態において、アルケニル基は、２炭素原子（“Ｃ２アルケニル”）を有する。１以上の炭素-炭素二重結合は、内部にあってもよく（例えば、２-ブテニル）、又は、末端にあっても良い（例えば、１-ブテニル）。Ｃ２-４アルケニル基としては、エテニル（Ｃ２）、１-プロペニル（Ｃ３）、２-プロペニル（Ｃ３）、１-ブテニル（Ｃ４）、２-ブテニル（Ｃ４）、ブタジエニル（Ｃ４）等が含まれる。Ｃ２-６アルケニル基としては、前述のＣ２-４アルケニル基とペンテニル（Ｃ５）、ペンタジエニル（Ｃ５）、ヘキセニル（Ｃ６）等が含まれる。アルケニルとしては、ヘプテニル（Ｃ７）、オクテニル（Ｃ８）、オクタトリエニル（Ｃ８）等も挙げられる。明記されていない限り、アルケニル基は、それぞれ独立して置換されない（“非置換アルケニル”）又は、１以上の置換基で置換される（“置換アルケニル”）。ある実施形態において、アルケニル基は、非置換のＣ２-１０アルケニルである。ある実施形態において、アルケニル基は、置換Ｃ２-１０アルケニルである。
【００３１】
ここで用いられる“アルキニル”とは、２〜１０個の炭素原子、及び、１以上の炭素‐炭素三重結合（“Ｃ２-１０アルキニル”）を有する直鎖または分岐の炭化水素基の基を意味する。いくつかの実施形態において、アルキニル基は、２〜９個の炭素原子（“Ｃ２-９アルキニル”）を有する。いくつかの実施形態において、アルキニル基は、２〜８個の炭素原子（“Ｃ２-８アルキニル”）を有する。いくつかの実施形態において、アルキニル基は、２〜７個の炭素原子（“Ｃ２-７アルキニル”）を有する。いくつかの実施形態において、アルキニル基は、２〜６個の炭素原子（“Ｃ２-６アルキニル”）を有する。いくつかの実施形態において、アルキニル基は、２〜５個の炭素原子（“Ｃ２-５アルキニル”）を有する。いくつかの実施形態において、アルキニル基は、２〜４個の炭素原子（“Ｃ２-４アルキニル”）を有する。いくつかの実施形態において、アルキニル基は、２〜３個の炭素原子（“Ｃ２-３アルキニル”）有する。いくつかの実施形態において、アルキニル基は、２炭素原子（“Ｃ２アルキニル”）を有する。１以上の炭素-炭素三重結合は、内部にあってもよく（例えば、２−ブチニル）、末端にあってもよい（例えば、１−ブチニル）。Ｃ２-４アルキニル基は、例えばエチニル（Ｃ２）、１-プロピニル（Ｃ３）、２-プロピニル（Ｃ３）、１-ブチニル（Ｃ４）、２-ブチニル（Ｃ４）等であるが、これらに限定されない。Ｃ２-６アルケニル基には、例えば、前述のＣ２-４アルキニル基やペンチニル（Ｃ５）、ヘキシニル（Ｃ６）等が含まれる。アルキニルの別の例としては、ヘプチニル（Ｃ７）、オクチニル（Ｃ８）等である。明記されていない限り、アルキニル基は、それぞれ独立して置換されない（“非置換アルキニル”）又は、１以上の置換基と置換される（“置換アルキニル”）。ある実施形態において、アルキニル基は、非置換のＣ２-１０アルキニルである。ある実施形態において、アルキニル基は、置換Ｃ２-１０アルキニルである。
【００３２】
ここで用いられる“カルボシクリル”又は、“カルボサイクリック”とは、３〜１０個の環炭素原子（“Ｃ３-１０カルボシクリル”）を有し、ヘテロ原子を非芳香族環系に有さない非芳香族環状炭化水素基の基を意味する。いくつかの実施形態において、カルボシクリル基は、３〜８個の環炭素原子（“Ｃ３-８カルボシクリル”）を有する。いくつかの実施形態において、カルボシクリル基は、３〜７個の環炭素原子（“Ｃ３-７カルボシクリル”）を有する。いくつかの実施形態において、カルボシクリル基は、３〜６個の環炭素原子（“Ｃ３-６カルボシクリル”）を有する。いくつかの実施形態において、カルボシクリル基は、５〜１０個の環炭素原子（“Ｃ５-１０カルボシクリル”）を有する。例示的なＣ３-６カルボシクリル基類は、シクロプロピル（Ｃ３）、シクロプロペニル（Ｃ３）、シクロブチル（Ｃ４）、シクロブテニル（Ｃ４）、シクロペンチル（Ｃ５）、シクロペンテニル（Ｃ５）、シクロヘキシル（Ｃ６）、シクロヘキセニル（Ｃ６）、シクロヘキサジエニル（Ｃ６）等であるが、これらに限定されない。例示的なＣ３-８カルボシクリル基類は、前述のＣ３-６カルボシクリル基類、シクロヘプチル（Ｃ７）、シクロヘプテニル（Ｃ７）、シクロヘプタジエニル（Ｃ７）、シクロヘプタトリエニル（Ｃ７）、シクロオクチル（Ｃ８）、シクロオクテニル（Ｃ８）、ビシクロ［２．２．１］ヘプタニル（Ｃ７）、ビシクロ［２．２．２］オクタニル（Ｃ８）等が含まれるが、これらに限定されない。例示的なＣ３-１０カルボシクリル基類は、前述のＣ３-８カルボシクリル基類、シクロノニル（Ｃ９）、シクロノネニル（Ｃ９）、シクロデシル（Ｃ１０）、シクロデセニル（Ｃ１０）、オクタヒドロ-１Ｈ-インデニル（Ｃ９）、デカヒドロナフタレニル（Ｃ１０）、スピロ［４．５］デカニル（Ｃ１０）等であるが、これらに限定されない。前述の例で示したように、ある実施形態において、カルボシクリル基は、単環（“単環カルボシクリル”）又は、多環（例えば、二環系（“二環カルボシクリル”）若しくは三環系（“三環カルボシクリル”）の縮合、架橋又はスピロ環系を含む）であり、飽和され、１以上の炭素-炭素二重又は三重結合を含む。“カルボシクリル”には、前記に定義したカルボシクリル環が１以上のアリール又は、ヘテロアリール基と縮合する環系が含まれ、付着点は、カルボシクリル環であり得る。このような例では、炭素の数が、カルボサイクリック環系の中の炭素数を指定し続ける。明記されていない限り、カルボシクリル基は、それぞれ独立して置換されない（“非置換カルボシクリル”）又は、１以上の置換基と置換される（“置換カルボシクリル”）。ある実施形態において、カルボシクリル基は、非置換のＣ３-１０カルボシクリルである。ある実施形態において、カルボシクリル基は、置換されたＣ３-１０カルボシクリルである。
【００３３】
いくつかの実施形態において、“カルボシクリル”とは、３〜１０個の環炭素原子を有する単環、又は、二環飽和カルボシクリル基（“Ｃ３-１０シクロアルキル”）である。いくつかの実施形態において、シクロアルキル基は、３〜８個の環炭素原子（“Ｃ３-８シクロアルキル”）を有する。いくつかの実施形態において、シクロアルキル基は、３〜６個の環炭素原子（“Ｃ３-６シクロアルキル”）を有する。いくつかの実施形態において、シクロアルキル基は、５〜６個の環炭素原子（“Ｃ５-６シクロアルキル”）を有する。いくつかの実施形態において、シクロアルキル基は、５〜１０個の環炭素原子（“Ｃ５-１０シクロアルキル”）を有する。Ｃ５-６不飽和シクロアルキル基としては、例えば、シクロペンチル（Ｃ５）及び、シクロヘキシル（Ｃ５）が含まれる。Ｃ３-６シクロアルキル基としては、例えば、前述のＣ５-６シクロアルキル基や、シクロプロピル（Ｃ３）及び、シクロブチル（Ｃ４）が含まれる。Ｃ３-８シクロアルキル基としては、例えば、前述のＣ３-６シクロアルキル基やシクロヘプチル（Ｃ７）及びシクロオクチル（Ｃ８）含まれる。明記されていない限り、シクロアルキル基は、それぞれ独立して置換されない（“非置換シクロアルキル”）又は、１以上の置換基と置換される（“置換シクロアルキル”）。ある実施形態において、前記シクロアルキル基は、非置換のＣ３-１０シクロアルキルである。ある実施形態において、前記シクロアルキル基は、置換Ｃ３-１０シクロアルキルである。
【００３４】
ここで用いられる“ヘテロシクリル”又は“複素環の（ヘテロサイクリック）”とは、環炭素原子及び１〜４個の環ヘテロ原子を有する３-１４員環非芳香族環系の基であり、各ヘテロ原子がそれぞれ独立して窒素、酸素、及び硫黄（“３-１４員環ヘテロシクリル”）から選択される。１以上の窒素原子を含むヘテロシクリル基は、原子価数が許せば、付着点は、炭素又は窒素原子であり得る。ヘテロシクリル基は、単環（“単環ヘテロシクリル”）若しくは、多環（例えば、二環系などの縮合、架橋若しくはスピロ環系（“二環ヘテロシクリル”）又は、三環系（“三環ヘテロシクリル”））であり、飽和され若しくは１以上の炭素-炭素二重又は三重結合を含むことができる。ヘテロシクリル多環系は、１以上のヘテロ原子を片方又は両方の環に含むことができる。“ヘテロシクリル”には、前記に定義したヘテロシクリル環が１以上のカルボシクリル基と縮合する環系を含み、その際の付着点は、カルボシクリル若しくはヘテロシクリル環上であり、又は、前記に定義したヘテロシクリル環が１以上のアリール若しくはヘテロアリールを縮合する環系であり、その際の付着点は、ヘテロシクリル上であり、このような例では、環員数が、ヘテロシクリル環系の環員数を指定し続ける。明記されていない限り、各ヘテロシクリルは、それぞれ独立して置換されない（“非置換ヘテロシクリル”）又は、１以上の置換基で置換される（“置換ヘテロシクリル”）。ある実施形態において、ヘテロシクリル基は、非置換の３-１４員環ヘテロシクリルある。実施形態において、ヘテロシクリル基は、置換された３-１４員環ヘテロシクリルである。
【００３５】
いくつかの実施形態において、ヘテロシクリル基は、環炭素原子と１-４環へテロ原子を有する５-１０員環非芳香族環系であり、各ヘテロ原子は、それぞれ独立して窒素、酸素、及び硫黄から選択される（“５-１０員環ヘテロシクリル”）。いくつかの実施形態において、ヘテロシクリル基は、環炭素原子及び１-４環へテロ原子を有する５-８員環非芳香族環系であり、各ヘテロ原子は、それぞれ独立して窒素、酸素、及び硫黄から選択される（“５-８員環ヘテロシクリル”）。いくつかの実施形態において、ヘテロシクリル基は、環炭素原子及び１-４環へテロ原子を有する５−６員環非芳香族環系であり、各ヘテロ原子それぞれ独立して窒素、酸素、及び硫黄（“５-６員環ヘテロシクリル”）から選択される。いくつかの実施形態において、５-６員環ヘテロシクリルは、窒素、酸素、及び硫黄から選択される１-３環へテロ原子を有する。いくつかの実施形態において、５-６員環ヘテロシクリルは、窒素、酸素、及び硫黄から選択される１-２環へテロ原子を有する。いくつかの実施形態において、５-６員環ヘテロシクリルは、窒素、酸素、及び硫黄から選択される１個の環へテロ原子を有する。
【００３６】
例示的な１個のヘテロ原子を含む３員環ヘテロシクリル基類は、アジリジニル、オキシラニル、チオレニルであるが、これらに限定されない。例示的な１個のヘテロ原子を含む４員環ヘテロシクリル基類は、アゼチジニル、オキセタニル及びチエタニルであるが、これらに限定されない。例示的な１個のヘテロ原子を含む５員環ヘテロシクリル基類は、テトラヒドロフラニル、ジヒドロフラニル、テトラヒドロチオフェニル、ジヒドロチオフェニル、ピロリジニル、ジヒドロピロリル及びピロリル-２，５-ジオンであるが、これらに限定されない。例示的な２個のヘテロ原子を含む５員環ヘテロシクリル基類は、ジオキソラニル、オキサチオラニル及びジチオラニルであるが、これらに限定されない。例示的な３個のヘテロ原子を含む５員環ヘテロシクリル基類は、トリアゾリニル、オキサジアゾリニル、及びチアジアゾリニルであるが、これらに限定されない。例示的な１個のヘテロ原子を含む６員環ヘテロシクリル基類は、ピペリジニル、テトラヒドロピラニル、ジヒドロピリジニル、及びチアニルであるが、これらに限定されない。例示的な２個のヘテロ原子を含む６員環ヘテロシクリル基類は、ピペラジニル、モルホリニル、ジチアニル、ジオキサニルであるが、これらに限定されない。例示的な２個のヘテロ原子を含む６員環ヘテロシクリル基類は、トリアジナニルであるが、これに限定されない。例示的な１個のヘテロ原子を含む７員環ヘテロシクリル基類は、アゼパニル、オキセパニル及びチエパニルであるが、これらに限定されない。例示的な１個のヘテロ原子を含む８員環ヘテロシクリル基類は、アゾカニル、オキセカニル及びチオカニルであるが、これらに限定されない。例示的な二環ヘテロシクリル基類は、インドリニル、イソインドリニル、ジヒドロベンゾフラニル、ジヒドロベンゾチエニル、テトラヒドロベンゾチエニル、テトラヒドロベンゾフラニル、テトラヒドロインドリル、テトラヒドロキノリニル、テトラヒドロイソキノリニル、デカヒドロキノリニル、デカヒドロイソキノリニル、オクタヒドロクロメニル、オクタヒドロイソクロメニル、デカヒドロナフチリジニル、デカヒドロ-１，８-ナフチリジニル、オクタヒドロピロロ［３，２-ｂ］ピロール、インドリニル、フタルイミジル、ナフタルイミジル、クロマニル、クロメニル、１Ｈ-ベンゾ［ｅ］［１，４］ジアゼピニル、１，４，５，７-テトラヒドロピラノ［３，４-ｂ］ピロリル、５，６-ジヒドロ-４Ｈ-フロ［３，２-ｂ］ピロリル、６，７-ジヒドロ-５Ｈ-フロ［３，２-ｂ］ピラニル、５，７-ジヒドロ-４Ｈ-チエノ［２，３-ｃ］ピラニル、２，３-ジヒドロ-１Ｈ-ピロロ［２，３-ｂ］ピリジニル、２，３-ジヒドロフロ［２，３-ｂ］ピリジニル、４，５，６，７−テトラヒドロ-１Ｈ-ピロロ［２，３-ｂ］ピリジニル、４，５，６，７-テトラヒドロフロ［３，２-ｃ］ピリジニル、４，５，６，７-テトラヒドロチエノ［３，２-ｂ］ピリジニル、１，２，３，４-テトラヒドロ-１，６-ナフチリジニル等であるが、これらに限定されない。
【００３７】
ここで用いられる“アリール”とは、６〜１４個の環炭素原子を有し且つヘテロ原子を芳香族環系に有さない単環、又は、多環（例えば、二環、又は、三環）の４ｎ＋２芳香族環系（例えば、環状配置状に共有される６、１０、又は１４π電子）の基を意味する（“Ｃ６-１４アリール”）。いくつかの実施形態において、アリール基は、６個の炭素原子を有する（“Ｃ６アリール”、例えば、フェニル）。いくつかの実施形態において、アリール基は、１０個の環炭素原子（“Ｃ１０アリール”、例えば、１-ナフチル及び２-ナフチルなどのナフチル）を有する。いくつかの実施形態において、アリール基は、１４環炭素原子（“Ｃ１４アリール”、例えば、アントラシル）を有する。“アリール”は、更に、前記定義のアリール環が１以上のカルボシクリル又はヘテロシクリル基と縮合する環系を含み、その際の付着点は、アリール環上であり得る。このような例では、炭素の数が、アリール環系の中の炭素原子数を指定し続ける。明記されていない限り、アリール基は、それぞれ独立して置換されない（“非置換アリール”）又は、１以上の置換基で置換される（“置換アリール”）。ある実施形態において、アリール基は、非置換のＣ６-１４アリールである。ある実施形態において、アリール基は、置換Ｃ６-１４アリールである。
【００３８】
ここで用いられる“ヘテロアリール”とは、環炭素原子と１-４環へテロ原子を芳香族環系に有する５-１４員環単環、又は、多環（例えば、二環、又は三環）４ｎ＋２芳香族環系（例えば、環状配置状に共有される６、１０、又は１４π電子）の基を意味し、各ヘテロ原子は、独立して窒素、酸素及び硫黄（“５-１４員環ヘテロアリール”）から選択される。１以上の窒素原子を含むヘテロアリール基は、原子価数が許せば、付着点は、炭素又は窒素原子であり得る。“ヘテロアリール多環系”は、１以上のヘテロ原子を片方又は両方の環に含めることができる。“ヘテロアリール”には、前記に定義したヘテロアリール環が１以上のカルボシクリル又はヘテロシクリル基と縮合する環系を含み、その際の付着点は、ヘテロアリール環上にあり、このような例では、環員数がヘテロアリール環系の環員数を指定し続ける。“ヘテロアリール”は、前記に定義したヘテロアリール環が、１以上のアリール基と縮合する環系を含み、その際の付着点は、アリール又はヘテロアリール環のいずれかにあり、このような例では、環員数は、縮合多環（アリール／ヘテロアリール）系の環員数を指定し続ける。１つの環にヘテロ原子（例えば、インドリル，キノリニル，カルバゾリル等）が含まれない多環ヘテロアリール基は、付着点は環上、すなわちヘテロ原子（例えば、２-インドリル）を持つ環若しくはヘテロ原子を有しない環（例えば、５-インドリル）である。
【００３９】
いくつかの実施形態において、ヘテロアリール基は、環炭素原子及び１-４環へテロ原子を芳香族環系に有する５-１０員環芳香族環系であり、各ヘテロ原子がそれぞれ独立して窒素、酸素、及び硫黄（“５-１０員環ヘテロアリール”）から選択される。いくつかの実施形態において、ヘテロアリール基は、環炭素原子及び１-４環へテロ原子を芳香族環系に有する５-８員環芳香族環系であり、各ヘテロ原子がそれぞれ独立して窒素、酸素、及び硫黄（“５-８員環ヘテロアリール”）から選択される。いくつかの実施形態において、ヘテロアリール基は、環炭素原子及び１-４環へテロ原子を芳香族環系に有する５-６員環芳香族環系であり、各ヘテロ原子がそれぞれ独立して窒素、酸素、及び硫黄（“５-６員環ヘテロアリール”）から選択される。いくつかの実施形態において、前記５-６員環ヘテロアリールは、窒素、酸素、及び硫黄から選択される１-３環へテロ原子を有する。いくつかの実施形態において、前記５-６員環ヘテロアリールは、窒素、酸素、及び硫黄から選択される１-２環へテロ原子を有する。いくつかの実施形態において、前記５-６員環ヘテロアリールは、窒素、酸素、及び硫黄から選択される1環へテロ原子を有する。明記されていない限り、ヘテロアリール基は、それぞれ独立して置換されない（“非置換ヘテロアリール”）又は、１以上の置換基で置換される（“置換ヘテロアリール”）。ある実施形態において、前記ヘテロアリール基は、非置換の５-１４員環ヘテロアリールである。ある実施形態において、前記ヘテロアリール基は、置換５-１４員環ヘテロアリールである。
【００４０】
例示的な、１ヘテロ原子を含む５員環ヘテロアリール基は、ピロリル、フラニル及び、チオフェニルであるが、これらに限定されない。例示的な２個のヘテロ原子を含む５員環ヘテロアリール基は、イミダゾリル、ピラゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、及びイソチアゾリルであるが、これらに限定されない。例示的な３個のヘテロ原子を含む５員環ヘテロアリール基は、トリアゾリル、オキサジアゾリル、及びチアジアゾリルであるが、これらに限定されない。例示的な４個のヘテロ原子を含む５員環ヘテロアリール基は、テトラゾリルであるが、これらに限定されない。例示的な１個のヘテロ原子を含む６員環ヘテロアリール基は、ピリジニルである。例示的な２ヘテロ原子を含む６員環ヘテロアリール基は、ピリダジニル、ピリミジニル、及びピラジニルであるが、これらに限定されない。例示的な３又は４個のヘテロ原子を含む６員環ヘテロアリール基は、それぞれトリアジニル及びテトラジニルであるが、これらに限定されない。例示的な１個のヘテロ原子を含む７員環ヘテロアリール基は、アゼピニル、オキセピニル、及びチエピニルであるが、これらに限定されない。例示的な５，６-二環ヘテロアリール基は、インドリル、イソインドリル、インダゾリル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾチオフェニル、イソベンゾチオフェニル、ベンゾフラニル、ベンゾイソフラニル、ベンズイミダゾリル、ベンゾオキサゾリル、ベンズイソオキサゾリル、ベンゾキサジアゾリル、ベンズチアゾリル、ベンズイソチアゾリル、ベンズチアジアゾリル、インドリジニル、及びプリニルであるが、これらに限定されない。例示的な６，６-二環ヘテロアリール基は、ナフチリジニル、プテリジニル、キノリニル、イソキノリニル、シンノリニル、キノキサリニル、フタルアジニル、及びキナゾリニルであるが、これらに限定されない。例示的な三環ヘテロアリール基は、フェナントリジニル、ジベンゾフラニル、カルバゾリル、アクリジニル、フェノチアジニル、フェノキサジニル及びフェナジニルであるが、これらに限定されない。
【００４１】
ここで用いられる“部分的に不飽和”とは、少なくとも１個の二重又は三重結合を含む環の一部分を意味する。“部分的に不飽和”とは、複数の不飽和部分を有する環を包含することを意図するが、明細書中に定義した芳香族基類（例えば、アリール又はヘテロアリールの一部分）を、含むことを意図するものではない。
【００４２】
本明細書中に定義されるアルキル、アルケニル、アルキニル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール、及びテロアリール基は、置換または非置換であり、本明細書では“任意に置換される”とも記載される。通常、“置換”という用語は、“任意に”という用語がある否かに関わらず、少なくとも、基に存在する１つの水素（例えば、炭素又は、窒素原子）が許容される置換基、例えば、置換の結果、安定した化合物になる置換基、例えば、転位、環化、脱離、又は他の反応などによって、自発的に変化しない化合物）で置き換えられることを意味する。記載がない限りは、“置換”基は、１又は複数の基の置換可能な位置に置換基を有し、任意の構造の１以上の位置が置換された場合、その置換基は同一の位置である、又は、異なる位置である。“置換”とは、全ての許容される有機化合物の置換基で置換することを含むことを想定しており、安定した化合物を形成する本明細書中に記載されたいずれの置換基を含む。本発明は、安定した化合物に達するために、いずれの化合物、及びそれらの組み合わせを想定している。本発明の目的を達成するために、窒素などのヘテロ原子は、水素置換基を有する、及び／又は、本明細書中に記載されるヘテロ原子の価数を満たす好適な置換基を有し、安定した部分の形成を図る。
【００４３】
例示的な炭素原子置換基には、ハロゲン、-ＣＮ、-ＮＯ２、-Ｎ３、-ＳＯ２Ｈ、-ＳＯ３Ｈ、-ＯＨ、-ＯＲａａ、-ＯＮ（Ｒｂｂ）２、-Ｎ（Ｒｂｂ）２、-Ｎ（Ｒｂｂ）３＋Ｘ-、-Ｎ（ＯＲｃｃ）Ｒｂｂ、-ＳｅＨ、-ＳｅＲａａ、-ＳＨ、-ＳＲａａ、-ＳＳＲｃｃ、-Ｃ（＝Ｏ）Ｒａａ、-ＣＯ２Ｈ、-ＣＨＯ、-Ｃ（ＯＲｃｃ）２、-ＣＯ２Ｒａａ、-ＯＣ（＝Ｏ）Ｒａａ、-ＯＣＯ２Ｒａａ、-Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、-ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、-ＮＲｂｂＣ（＝Ｏ）Ｒａａ、-ＮＲｂｂＣＯ２Ｒａａ、-ＮＲｂｂＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、-Ｃ（＝ＮＲｂｂ）Ｒａａ、-Ｃ（＝ＮＲｂｂ）ＯＲａａ、-ＯＣ（＝ＮＲｂｂ）Ｒａａ、-ＯＣ（＝ＮＲｂｂ）ＯＲａａ、-Ｃ（＝ＮＲｂｂ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、-ＯＣ（＝ＮＲｂｂ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、-ＮＲｂｂＣ（＝ＮＲｂｂ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、-Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｂｂＳＯ２Ｒａａ、-ＮＲｂｂＳＯ２Ｒａａ、-ＳＯ２Ｎ（Ｒｂｂ）２、-ＳＯ２Ｒａａ、-ＳＯ２ＯＲａａ、-ＯＳＯ２Ｒａａ、-Ｓ（＝Ｏ）Ｒａａ、-ＯＳ（＝Ｏ）Ｒａａ、-Ｓｉ（Ｒａａ）３、-ＯＳｉ（Ｒａａ）３-Ｃ（＝Ｓ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、-Ｃ（＝Ｏ）ＳＲａａ、-Ｃ（＝Ｓ）ＳＲａａ、-ＳＣ（＝Ｓ）ＳＲａａ、-ＳＣ（＝Ｏ）ＳＲａａ、-ＯＣ（＝Ｏ）ＳＲａａ、-ＳＣ（＝Ｏ）ＯＲａａ、-ＳＣ（＝Ｏ）Ｒａａ、-Ｐ（＝Ｏ）２Ｒａａ、-ＯＰ（＝Ｏ）２Ｒａａ、-Ｐ（＝Ｏ）（Ｒａａ）２、-ＯＰ（＝Ｏ）（Ｒａａ）２、-ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲｃｃ）２、-Ｐ（＝Ｏ）２Ｎ（Ｒｂｂ）２、-ＯＰ（＝Ｏ）２Ｎ（Ｒｂｂ）２、-Ｐ（＝Ｏ）（ＮＲｂｂ）２、-ＯＰ（＝Ｏ）（ＮＲｂｂ）２、-ＮＲｂｂＰ（＝Ｏ）（ＯＲｃｃ）２、-ＮＲｂｂＰ（＝Ｏ）（ＮＲｂｂ）２、-Ｐ（Ｒｃｃ）２、-Ｐ（Ｒｃｃ）３、-ＯＰ（Ｒｃｃ）２、-ＯＰ（Ｒｃｃ）３、-Ｂ（Ｒａａ）２、-Ｂ（ＯＲｃｃ）２、-ＢＲａａ（ＯＲｃｃ）、Ｃ１-５０アルキル、Ｃ２-５０アルケニル、Ｃ２-５０アルキニル、Ｃ３-１０カルボシクリル、３-１４員環ヘテロシクリル、Ｃ６-１４アリール、及び５-１４員環ヘテロアリールが含まれるが、これらに限定されず、各アルキル、アルケニル、アルキニル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール、及びヘテロアリールは、それぞれ独立して０、１、２、３、４、５Ｒｄｄ基に置き換えられ、
又は、炭素原子上の２個のジェミナルな水素が、基＝Ｏ、＝Ｓ、＝ＮＮ（Ｒｂｂ）２、＝ＮＮＲｂｂＣ（＝Ｏ）Ｒａａ、＝ＮＮＲｂｂＣ（＝Ｏ）ＯＲａａ、＝ＮＮＲｂｂＳ（＝Ｏ）２Ｒａａ、＝ＮＲｂｂ、又は＝ＮＯＲｃｃと置換され、
各Ｒａａは、それぞれ独立して、Ｃ１-５０アルキル、Ｃ２-５０アルケニル、Ｃ２-５０アルキニル、Ｃ３-１０カルボシクリル、３-１４員環ヘテロシクリル、Ｃ６-１４アリール、及び５-１４員環ヘテロアリールから選択され、又は、２つのＲａａ基が結合し、３-１４員環ヘテロシクリル若しくは５-１４員環ヘテロアリール環を形成し、各アルキル、アルケニル、アルキニル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール、及びヘテロアリールは、それぞれ独立して０、１、２、３、４、又は５Ｒｄｄ基に置き換えられ、
各Ｒｂｂは、それぞれ独立して水素、-ＯＨ、-ＯＲａａ、-Ｎ（Ｒｃｃ）２、-ＣＮ、-Ｃ（＝Ｏ）Ｒａａ、-Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｃｃ）２、-ＣＯ２Ｒａａ、-ＳＯ２Ｒａａ、-Ｃ（＝ＮＲｃｃ）ＯＲａａ、-Ｃ（＝ＮＲｃｃ）Ｎ（Ｒｃｃ）２、-ＳＯ２Ｎ（Ｒｃｃ）２、-ＳＯ２Ｒｃｃ、-ＳＯ２ＯＲｃｃ、-ＳＯＲａａ、-Ｃ（＝Ｓ）Ｎ（Ｒｃｃ）２、-Ｃ（＝Ｏ）ＳＲｃｃ、-Ｃ（＝Ｓ）ＳＲｃｃ、-Ｐ（＝Ｏ）２Ｒａａ、-Ｐ（＝Ｏ）（Ｒａａ）２、-Ｐ（＝Ｏ）２Ｎ（Ｒｃｃ）２、-Ｐ（＝Ｏ）（ＮＲｃｃ）２、Ｃ１-５０アルキル、Ｃ２-５０アルケニル、Ｃ２-５０アルキニル、Ｃ３-１０カルボシクリル、３-１４員環ヘテロシクリル、Ｃ６-１４アリール、及び５-１４員環ヘテロアリールから選択され、又は、２個のＲｂｂ基が結合し、３-１４員環ヘテロシクリル若しくは５-１４員環ヘテロアリール環を形成し、各アルキル、アルケニル、アルキニル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール、及びヘテロアリールが、それぞれ独立して０、１、２、３、４、又は５Ｒｄｄ基に置き換えられ、
Ｒｃｃは、それぞれ独立して水素、Ｃ１-５０アルキル、Ｃ２-５０アルケニル、Ｃ２-５０アルキニル、Ｃ３-１０カルボシクリル、３-１４員環ヘテロシクリル、Ｃ６-１４アリール、及び５-１４員環ヘテロアリール、又は、２つのＲｃｃ基が結合し、３-１４員環ヘテロシクリル若しくは５-１４員環ヘテロアリール環を形成し、各アルキル、アルケニル、アルキニル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール、及びヘテロアリールは、それぞれ独立して０、１、２、３、４、又は５Ｒｄｄ基に置き換えられ、
Ｒｄｄは、それぞれ独立してハロゲン、-ＣＮ、-ＮＯ２、-Ｎ３、-ＳＯ２Ｈ、-ＳＯ３Ｈ、-ＯＨ、-ＯＲｅｅ、-ＯＮ（Ｒｆｆ）２、-Ｎ（Ｒｆｆ）２、-Ｎ（Ｒｆｆ）３＋Ｘ-、-Ｎ（ＯＲｅｅ）Ｒｆｆ、-ＳＨ、-ＳＲｅｅ、-ＳＳＲｅｅ、-Ｃ（＝Ｏ）Ｒｅｅ、-ＣＯ２Ｈ、-ＣＯ２Ｒｅｅ、-ＯＣ（＝Ｏ）Ｒｅｅ、-ＯＣＯ２Ｒｅｅ、-Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｆｆ）２、-ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｆｆ）２、-ＮＲｆｆＣ（＝Ｏ）Ｒｅｅ、-ＮＲｆｆＣＯ２Ｒｅｅ、-ＮＲｆｆＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｆｆ）２、-Ｃ（＝ＮＲｆｆ）ＯＲｅｅ、-ＯＣ（＝ＮＲｆｆ）Ｒｅｅ、-ＯＣ（＝ＮＲｆｆ）ＯＲｅｅ、-Ｃ（＝ＮＲｆｆ）Ｎ（Ｒｆｆ）２、-ＯＣ（＝ＮＲｆｆ）Ｎ（Ｒｆｆ）２、-ＮＲｆｆＣ（＝ＮＲｆｆ）Ｎ（Ｒｆｆ）２、-ＮＲｆｆＳＯ２Ｒｅｅ、-ＳＯ２Ｎ（Ｒｆｆ）２、-ＳＯ２Ｒｅｅ、-ＳＯ２ＯＲｅｅ、-ＯＳＯ２Ｒｅｅ、-Ｓ（＝Ｏ）Ｒｅｅ、-Ｓｉ（Ｒｅｅ）３、-ＯＳｉ（Ｒｅｅ）３、-Ｃ（＝Ｓ）Ｎ（Ｒｆｆ）２、-Ｃ（＝Ｏ）ＳＲｅｅ、-Ｃ（＝Ｓ）ＳＲｅｅ、-ＳＣ（＝Ｓ）ＳＲｅｅ、-Ｐ（＝Ｏ）２Ｒｅｅ、-Ｐ（＝Ｏ）（Ｒｅｅ）２、-ＯＰ（＝Ｏ）（Ｒｅｅ）２、-ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲｅｅ）２、Ｃ１-５０アルキル、Ｃ２-５０アルケニル、Ｃ２-５０アルキニル、Ｃ３-１０カルボシクリル、３−１０員環ヘテロシクリル、Ｃ６-１０アリール、５-１０員環ヘテロアリール、から選択され、各アルキル、アルケニル、アルキニル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール、及びヘテロアリールは、それぞれ独立して０、１、２、３、４、５又はＲｇｇ基と置換される、又は、２つのジェミナルなＲｄｄ置換基が結合して＝Ｏ若しくは＝Ｓを形成し得、
各Ｒｅｅは、それぞれ独立して、Ｃ１-５０アルキル、Ｃ２-５０アルケニル、Ｃ２-５０アルキニル、Ｃ３-１０カルボシクリル、Ｃ６-１０アリール、３-１０員環ヘテロシクリル、及び３-１０員環ヘテロアリールから選択され、各アルキル、アルケニル、アルキニル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール、及びヘテロアリールは、それぞれ独立して０、１、２、３、４、又は、５Ｒｇｇ基に置き換えられ、
各Ｒｆｆは、それぞれ独立して、水素、Ｃ１-５０アルキル、Ｃ２-５０アルケニル、Ｃ２-５０アルキニル、Ｃ３-１０カルボシクリル、３-１０員環ヘテロシクリル、Ｃ６-１０アリール及び５-１０員環ヘテロアリールから選択され、又は、２つのＲｆｆ基が結合し、３-１４員環ヘテロシクリル又は５-１４員環ヘテロアリール環を形成し、各アルキル、アルケニル、アルキニル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール、及びヘテロアリールは、それぞれ独立して０、１、２、３、４、又は５Ｒｇｇ基に置き換えられ、
各Ｒｇｇは、それぞれ独立して、ハロゲン、-ＣＮ、-ＮＯ２、-Ｎ３、-ＳＯ２Ｈ、-ＳＯ３Ｈ、-ＯＨ、-ＯＣ１-５０アルキル、-ＯＮ（Ｃ１-５０アルキル）２、-Ｎ（Ｃ１-５０アルキル）２、-Ｎ（Ｃ１-５０アルキル）３＋Ｘ-、-ＮＨ（Ｃ１-５０アルキル）２＋Ｘ-、-ＮＨ２（Ｃ１-５０アルキル）＋Ｘ-、-ＮＨ３＋Ｘ-、-Ｎ（ＯＣ１-５０アルキル）（Ｃ１-５０アルキル）、-Ｎ（ＯＨ）（Ｃ１-５０アルキル）、-ＮＨ（ＯＨ）、-ＳＨ、-ＳＣ１-５０アルキル、-ＳＳ（Ｃ１-５０アルキル）、-Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１-５０アルキル）、-ＣＯ２Ｈ、-ＣＯ２（Ｃ１-５０アルキル）、-ＯＣ（＝Ｏ）（Ｃ１-５０アルキル）、-ＯＣＯ２（Ｃ１-５０アルキル）、-Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２、-Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｃ１-５０アルキル）２、-ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ（Ｃ１-５０アルキル）、-ＮＨＣ（＝Ｏ）（Ｃ１-５０アルキル）、-Ｎ（Ｃ１-５０アルキル）Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１-５０アルキル）、-ＮＨＣＯ２（Ｃ１-５０アルキル）、-ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｃ１-５０アルキル）２、-ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ（Ｃ１-５０アルキル）、-ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、-Ｃ（＝ＮＨ）Ｏ（Ｃ１-５０アルキル）、-ＯＣ（＝ＮＨ）（Ｃ１-５０アルキル）、-ＯＣ（＝ＮＨ）ＯＣ１-５０アルキル、-Ｃ（＝ＮＨ）Ｎ（Ｃ１-５０アルキル）２、-Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ（Ｃ１-５０アルキル）、-Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ２、-ＯＣ（＝ＮＨ）Ｎ（Ｃ１-５０アルキル）２、-ＯＣ（ＮＨ）ＮＨ（Ｃ１-５０アルキル）、-ＯＣ（ＮＨ）ＮＨ２、-ＮＨＣ（ＮＨ）Ｎ（Ｃ１-５０アルキル）２、-ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２、-ＮＨＳＯ２（Ｃ１-５０アルキル）、-ＳＯ２Ｎ（Ｃ１-５０アルキル）２、-ＳＯ２ＮＨ（Ｃ１-５０アルキル）、-ＳＯ２ＮＨ２、-ＳＯ２Ｃ１-５０アルキル、-ＳＯ２ＯＣ１-５０アルキル、-ＯＳＯ２Ｃ１-６アルキル、-ＳＯＣ１-６アルキル、-Ｓｉ（Ｃ１-５０アルキル）３、-ＯＳｉ（Ｃ１-６アルキル）３-Ｃ（＝Ｓ）Ｎ（Ｃ１-５０アルキル）２、Ｃ（＝Ｓ）ＮＨ（Ｃ１-５０アルキル）、Ｃ（＝Ｓ）ＮＨ２、-Ｃ（＝Ｏ）Ｓ（Ｃ１-６アルキル）、-Ｃ（＝Ｓ）ＳＣ１-６アルキル、-ＳＣ（＝Ｓ）ＳＣ１-６アルキル、-Ｐ（＝Ｏ）２（Ｃ１-５０アルキル）、-Ｐ（＝Ｏ）（Ｃ１-５０アルキル）２、-ＯＰ（＝Ｏ）（Ｃ１-５０アルキル）２、-ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＣ１-５０アルキル）２、Ｃ１-５０アルキル、Ｃ２-５０アルケニル、Ｃ２-５０アルキニル、Ｃ３-１０カルボシクリル、Ｃ６-１０アリール、３-１０員環ヘテロシクリル、５-１０員環ヘテロアリールから選択され、又は、２個のジェミナルなＲｇｇ置換基が、結合して＝Ｏ若しくは＝Ｓを形成し得、
Ｘ-は、対アニオンである。
【００４４】
ここで用いられる“ハロ”又は”ハロゲン”とは、フッ素（フルオロ、-Ｆ）、塩素（クロロ、-Ｃｌ）、臭素（ブロモ、-Ｂｒ）又はヨウ素（ヨード、-Ｉ）を意味する。
【００４５】
ここで用いられる“対アニオン”とは、正に帯電した第四級アミンと結合する、負に帯電した基、を意味する。例示的な対アニオンは、ハロゲン化物イオン（例えば、フッ化物、塩化物、臭化物、ヨウ化物）、ＮＯ３-、ＣｌＯ４-、ＯＨ-、Ｈ２ＰＯ４-、ＨＳＯ４-、スルホン酸イオン（例えば、メタンスルホネート、トリフルオロメタンスルホネート、ｐ-トルエンスルホネート、ベンゼンスルホネート、１０-カンファースルホネート、ナフタレン-２-スルホネート、ナフタレン-１-スルホン酸-５-スルホネート、エタン-１-スルホン酸-２-スルホネート）、及びカルボン酸イオン（例えば、酢酸塩、エタン酸、プロパン酸、安息香酸、グリセリン酸塩、乳酸塩、酒石酸塩、グリコール酸塩）である。
【００４６】
窒素原子は、原子価数が許せば、置換される、又は、置換されず、第一級、第二級、第三級、及び、第四級窒素原子を含む。例示的な窒素原子置換基は、水素、-ＯＨ、-ＯＲａａ、-Ｎ（Ｒｃｃ）２、-ＣＮ、-Ｃ（＝Ｏ）Ｒａａ、-Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｃｃ）２、-ＣＯ２Ｒａａ、-ＳＯ２Ｒａａ、-Ｃ（＝ＮＲｂｂ）Ｒａａ、-Ｃ（＝ＮＲｃｃ）ＯＲａａ、-Ｃ（＝ＮＲｃｃ）Ｎ（Ｒｃｃ）２、-ＳＯ２Ｎ（Ｒｃｃ）２、-ＳＯ２Ｒｃｃ、-ＳＯ２ＯＲｃｃ、-ＳＯＲａａ、-Ｃ（＝Ｓ）Ｎ（Ｒｃｃ）２、-Ｃ（＝Ｏ）ＳＲｃｃ、-Ｃ（＝Ｓ）ＳＲｃｃ、-Ｐ（＝Ｏ）２Ｒａａ、-Ｐ（＝Ｏ）（Ｒａａ）２、-Ｐ（＝Ｏ）２Ｎ（Ｒｃｃ）２、-Ｐ（＝Ｏ）（ＮＲｃｃ）２、Ｃ１-１０アルキル、Ｃ１-１０ペルハロアルキル、Ｃ２-１０アルケニル、Ｃ２-１０アルキニル、Ｃ３-１０カルボシクリル、３-１４員環ヘテロシクリル、Ｃ６-１４アリール、及び５-１４員環ヘテロアリールが含まれるが、これらに限定されない。又は、１個の窒素原子と結合した２個のＲｃｃ基が、結合して、３-１４員環ヘテロシクリル、若しくは、５-１４員環ヘテロアリール環を形成し、各アルキル、アルケニル、アルキニル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール、及びヘテロアリールは、それぞれ独立して０、１、２、３、４又は、５Ｒｄｄ基類と置き換えられるが、Ｒａａ、Ｒｂｂ、Ｒｃｃ、及びＲｄｄは前記定義に同じである。
【００４７】
ある実施形態において、窒素原子に存在する置換基は、アミノ保護基であり、ここでは窒素保護基とも呼ばれる。アミノ保護基は、当該技術分野において、既知であり、詳細は、Protecting Groups in Organic Synthesis, T. W. Greene and P. G. M. Wuts, 3rd edition, John Wiley & Sons, 1999に記載されており、その記載内容を本明細書に援用するものとする。
【００４８】
アミド基類などの窒素保護基（例えば、-Ｃ（＝Ｏ）Ｒａａ）には、ホルムアミド、アセトアミド、クロロアセトアミド、トリクロロアセトアミド、トリフルオロアセトアミド、フェニルアセトアミド、３-フェニルプロパンアミド、ピコリンアミド、３-ピリジルカルボキサミド、Ｎ-ベンゾイルフェニルアラニル誘導体、ベンズアミド、ｐ-フェニルベンズアミド、ｏ-ニトフェニルアセトアミド、ｏ-ニトロフェノキシアセトアミド、アセトアセタミド、（Ｎ’-ジチオベンジルオキシアシルアミノ）アセトアミド、３-（ｐ-ヒドロキシフェニル）プロパンアミド、３-（ｏ-ニトロフェニル）プロパンアミド、２-メチル-２-（ｏ-ニトロフェノキシ）プロパンアミド、２-メチル-２-（ｏ-フェニルアゾフェノキシ）プロパンアミド、４-クロロブタンアミド、３-メチル-３-ニトロブタンアミド、ｏ-ニトロシンナミド、Ｎ-アセチルメチオニン誘導体、ｏ-ニトロベンズアミド及びｏ-（ベンゾイルオキシメチル）ベンズアミドなどが含まれるが、これらに限定されない。
【００４９】
カルバメート基（例えば、-Ｃ（＝Ｏ）ＯＲａａ）などの窒素保護基には、メチルカルバメート、エチルカルバメート、９-フルオレニルメチルカルバメート（Ｆｍｏｃ）、９-（２-スルホ）フルオレニルメチルカルバメート、９-（２，７-ジブロモ）フルオレニルメチルカルバメート、２，７-ジ-ｔ-ブチル-［９-（１０，１０-ジオキソ-１０，１０，１０，１０-テトラヒドロチオキサンチル）］メチルカルバメート（ＤＢＤ-Ｔｍｏｃ）、４-メトキシフェナシルカルバメート（Ｐｈｅｎｏｃ）、２，２，２-トリクロロエチルカルバメート（Ｔｒｏｃ）、２-トリメチルシリルエチルカルバメート（Ｔｅｏｃ）、２-フェニルエチルカルバメート（ｈＺ）、１-（１-アダマンチル）-１-メチルエチルカルバメート（Ａｄｐｏｃ）、１，１-ジメチル-２-ハロエチルカルバメート、１，１-ジメチル-２，２-ジブロモエチルカルバメート（ＤＢ-ｔ-ＢＯＣ）、１，１-ジメチル-２、２、２-トリクロロエチルカルバメート（ＴＣＢＯＣ）、１-メチル-１-（４-ビフェニルイル）エチルカルバメート（Ｂｐｏｃ）、１-（３、５-ジ-ｔ-ブチルフェニル）-１-メチルエチルカルバメート（ｔ-Ｂｕｍｅｏｃ）、２-（２’-及び４’-ピリジル）エチルカルバメート（Ｐｙｏｃ）、２-（Ｎ、Ｎ-ジシクロヘキシルカルボキシアミド）エチルカルバメート、ｔ-ブチルカルバメート（ＢＯＣ）、１-アダマンチルカルバメート（Ａｄｏｃ）、ビニルカルバメート（Ｖｏｃ）、アリルカルバメート（Ａｌｌｏｃ）、１-イソプロピルアリルカルバメート（Ｉｐａｏｃ）、シンナミルカルバメート（Ｃｏｃ）、４-ニトロシンナミルカルバメート（Ｎｏｃ）、８-キノリルカルバメート、Ｎ-ヒドロキシピペリジニルカルバメート、アルキルジチオカルバメート、ベンジルカルバメート（Ｃｂｚ）、ｐ-メトキシベンジルカルバメート（Ｍｏｚ）、ｐ-ニトベンジルカルバメート、ｐ-ブロモベンジルカルバメート、ｐ-クロロベンジルカルバメート、２，４-ジクロロベンジルカルバメート、４-メチルスルフィニルベンジルカルバメート（Ｍｓｚ）、９-アントリルメチルカルバメート、ジフェニルメチルカルバメート、２-メチルチオエチルカルバメート、２-メチルスルホニルエチルカルバメート、２-（ｐ-トルエンスルホニル）エチルカルバメート、［２-（１，３-ジチアニル）］メチルカルバメート（Ｄｍｏｃ）、４-メチルチオフェニルカルバメート（Ｍｔｐｃ）、２，４-ジメチルチオフェニルカルバメート（Ｂｍｐｃ）、２-ホスホニオエチルカルバメート（Ｐｅｏｃ）、２-トリフェニルホスホニオイソプロピルカルバメート（Ｐｐｏｃ）、１，１-ジメチル-２-シアノエチルカルバメート、ｍ-クロロ-ｐ-アシルオキシベンジルカルバメート、ｐ-（ジヒドロキシボリル）ベンジルカルバメート、５-ベンズイソオキサゾリルメチルカルバメート、２-（トリフルオロメチル）-６-クロモニルメチルカルバメート（Ｔｃｒｏｃ）、ｍ-ニトロフェニルカルバメート、３，５-ジメトキシベンジルカルバメート、ｏ-ニトロベンジルカルバメート、３，４-ジメトキシ-６-ニトロベンジルカルバメート、フェニル（ｏ-ニトロフェニル）メチルカルバメート、ｔ-アミルカルバメート、Ｓ-ベンジルチオカルバメート、ｐ-シアノベンジルカルバメート、シクロブチルカルバメート、シクロヘキシルカル��メート、シクロペンチルカルバメート、シクロプロピルメチルカルバメート、ｐ-デシルオキシベンジルカルバメート、２、２-ジメトキシアシルビニルカルバメート、ｏ-（Ｎ、Ｎ-ジメチルカルボキシアミド）ベンジルカルバメート、１，１-ジメチル-３-（Ｎ、Ｎ-ジメチルカルボキシアミド）プロピルカルバメート、１，１-ジメチルプロピニルカルバメート、ジ（２-ピリジル）メチルカルバメート、２-フラニルメチルカルバメート、２-ヨードエチルカルバメート、イソボリニルカルバメート、イソブチルカルバメート、イソニコチニルカルバメート、ｐ-（ｐ’-メトキシフェニルアゾ）ベンジルカルバメート、１-メチルシクロブチルカルバメート、１-メチルシクロヘキシルカルバメート、１-メチル-１-シクロプロピルメチルカルバメート、１-メチル-１-（３，５-ジメトキシフェニル）エチルカルバメート、１-メチル-１-（ｐ-フェニルアゾフェニル）エチルカルバメート、１-メチル-１-フェニルエチルカルバメート、１-メチル-１-（４-ピリジル）エチルカルバメート、フェニルカルバメート、ｐ-（フェニルアゾ）ベンジルカルバメート、２，４，６-トリ-ｔ-ブチルフェニルカルバメート、４-（トリメチルアンモニウム）ベンジルカルバメート、及び２，４，６-トリメチルベンジルカルバメートなどが含まれるが、これらに限定されない。
【００５０】
スルホンアミド基（例えば、-Ｓ（＝Ｏ）２Ｒａａ）などの窒素保護基には、ｐ-トルエンスルホンアミド（Ｔｓ）、ベンゼンスルホンアミド、２，３，６，-トリメチル-４-メトキシベンゼンスルホンアミド（Ｍｔｒ）、２，４，６-トリメトキシベンゼンスルホンアミド（Ｍｔｂ）、２，６-ジメチル-４-メトキシベンゼンスルホンアミド（Ｐｍｅ）、２，３，５，６-テトラメチル-４-メトキシベンゼンスルホンアミド（Ｍｔｅ）、４-メトキシベンゼンスルホンアミド（Ｍｂｓ）、２，４，６-トリメチルベンゼンスルホンアミド（Ｍｔｓ）、２，６-ジメトキシ-４-メチルベンゼンスルホンアミド（ｉＭｄｓ）、２，２，５，７，８-ペンタメチルクロマン-６-スルホンアミド（Ｐｍｃ）、メタンスルホンアミド（Ｍｓ）、β-トリメチルシリルエタンスルホンアミド（ＳＥＳ）、９-アントラセンスルホンアミド、４-（４’，８’-ジメトキシナフチルメチル）ベンゼンスルホンアミド（ＤＮＭＢＳ）、ベンジルスルホンアミド、トリフルオロメチルスルホンアミド、及びフェナシルスルホンアミドなどが含まれるが、これらに限定されない。
【００５１】
その他の窒素保護基には、フェノチアジニル-（１０）-アシル誘導体、Ｎ’-ｐ-トルエンスルホニルアミノアシル誘導体、Ｎ’-フェニルアミノチオアシル誘導体、Ｎ-ベンゾイルフェニルアラニル誘導体、Ｎ-アセチルメチオニン誘導体、４，５-ジフェニル-３-オキサゾリン-２-オン、Ｎ-フタルイミド、Ｎ-ジチアスクシンイミド（Ｄｔｓ）、Ｎ-２，３-ジフェニルマレイミド、Ｎ-２，５-ジメチルピロール、Ｎ-１，１，４，４-テトラメチルジシリルアザシクロペンタン付加物（ＳＴＡＢＡＳＥ）、５-置換１，３-ジメチル-１，３，５-トリアザシクロヘキサン-２-オン、５-置換１，３-ジベンジル-１，３，５-トリアザシクロヘキサン-２-オン、１-置換３，５-ジニトロ-４-ピリドン、Ｎ-メチルアミン、Ｎ-アリルアミン、Ｎ-［２-（トリメチルシリル）エトキシ］メチルアミン（ＳＥＭ）、Ｎ-３-アセトキシプロピルアミン、Ｎ-（１-イソプロピル-４-ニトロ-２-オキソ-３-ピロオリン-３-イル）アミン、第四級アンモニウム塩、Ｎ-ベンジルアミン、Ｎ-ジ（４-メトキシフェニル）メチルアミン、Ｎ-５-ジベンゾスベリルアミン、Ｎ-トリフェニルメチルアミン（Ｔｒ）、Ｎ-［（４-メトキシフェニル）ジフェニルメチル］アミン、（ＭＭＴｒ）、Ｎ-９-フェニルフルオレニルアミン（ＰｈＦ）、Ｎ-２，７-ジクロロ-９-フルオレニルメチレンアミン、Ｎ-フェロセニルメチルアミノ（Ｆｃｍ）、Ｎ-２-ピコリルアミノＮ’-オキシド、Ｎ-１，１-ジメチルチオメチレンアミン、Ｎ-ベンジリデンアミン、Ｎ-ｐ-メトキシベンジリデンアミン、Ｎ-ジフェニルメチレンアミン、Ｎ-［（２-ピリジル）メシチル］メチレンアミン、Ｎ-（Ｎ’，Ｎ’-ジメチルアミノメチレン）アミン、Ｎ，Ｎ’-イソプロピリデンジアミン、Ｎ-ｐ-ニトロベンジリデンアミン、Ｎ-サリチリデンアミン、Ｎ-５-クロロサリチリデンアミン、Ｎ-（５-クロロ-２-ヒドロキシフェニル）フェニルメチレンアミン、Ｎ-シクロヘキシリデンアミン、Ｎ-（５，５-ジメチル-３-オキソ-１-シクロヘキセニル）アミン、Ｎ-ボラン誘導体、Ｎ-ジフェニルボリン酸誘導体、Ｎ-［フェニル（ペンタアシルクロミウム-又はタングステン）アシル］アミン、Ｎ-銅キレート、Ｎ-亜鉛キレート、Ｎ-ニトロアミン、Ｎ-ニトロソアミン、アミン、Ｎ-酸化物、ジフェニルホスフィンアミド（Ｄｐｐ）、ジメチルチオホスフィンアミド（Ｍｐｔ）、ジフェニルチオホスフィンアミド（Ｐｐｔ）、ジアルキルホスホロアミド酸、ジベンジルホスホロアミド酸、ジフェニルホスホロアミド酸、ベンゼンスルフェンアミド、ｏ-ニトロベンゼンスルフェンアミド（Ｎｐｓ）、２、４-ジニトロベンゼンスルフェンアミド、ペンタクロロベンゼンスルフェンアミド、２-ニトロ-４-メトキシベンゼンスルフェンアミド、トリフェニルメチルスルフェンアミド、及び３-ニトロピリジンスルフェンアミド（Ｎｐｙｓ）などが含まれるが、これらに限定されない。
【００５２】
ある実施形態において、酸素原子に存在する置換基は、酸素保護基である。酸素保護基は-Ｒａａ、-Ｃ（＝Ｏ）ＳＲａａ、-Ｃ（＝Ｏ）Ｒａａ（“ａｃｙｌ”）、-ＣＯ２Ｒａａ、-Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、-Ｃ（＝ＮＲｂｂ）Ｒａａ、-Ｃ（＝ＮＲｂｂ）ＯＲａａ、-Ｃ（＝ＮＲｂｂ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、及び-Ｓｉ（Ｒａａ）３が含まれるが、これらに限定されず、Ｒａａ、Ｒｂｂ及びＲｃｃは、前記定義に同じである。ヒドロキシ保護基は、当該技術分野では既知であり、参考文献としてここに含まれるProtecting Groups in Organic Synthesis, T. W. Greene and P. G. M. Wuts, 3rd edition, John Wiley & Sons, 1999,に詳細な記述がある。
【００５３】
例示的な酸素保護基には、メチル、メトキシルメチル（ＭＯＭ）、メチルチオメチル（ＭＴＭ）、ｔ-ブチルチオメチル、（フェニルジメチルシリル）メトキシメチル（ＳＭＯＭ）、ベンジルオキシメチル（ＢＯＭ）、ｐ-メトキシベンジルオキシメチル（ＰＭＢＭ）、（４-メトキシフェノキシ）メチル（ｐ-ＡＯＭ）、グアヤコールメチル（ＧＵＭ）、ｔ-ブトキシメチル、４-ペンテンイルオキシメチル（ＰＯＭ）、シロキシメチル、２-メトキシエトキシメチル（ＭＥＭ）、２，２，２-トリクロロエトキシメチル、ビス（２-クロロエトキシ）メチル、２-（トリメチルシリル）エトキシメチル（ＳＥＭＯＲ）、テトラヒドロピラニル（ＴＨＰ）、３-ブロモテトラヒドロピラニル、テトラヒドロチオピラニル、１-メトキシシクロヘキシル、４-メトキシテトラヒドロピラニル（ＭＴＨＰ）、４-メトキシテトラヒドロチオピラニル、４-メトキシテトラヒドロチオピラニルＳ、Ｓ-ジオキシド、１-［（２-クロロ-４-メチル）フェニル］-４-メトキシピペリジン-４-イル（ＣＴＭＰ）、１，４-ジオキサン-２-イル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロチオフラニル、２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ-オクタヒドロ-７，８，８-トリメチル-４，７-メタノベンゾフラン-２-イル、１-エトキシエチル、１-（２-クロロエトキシ）エチル、１-メチル-１-メトキシエチル、１-メチル-１-ベンジルオキシエチル、１-メチル-１-ベンジルオキシ-２-フルオロエチル、２，２，２-トリクロロエチル、２-トリメチルシリルエチル、２-（フェニルセレニル）エチル、ｔ-ブチル、アリル、ｐ-クロロフェニル、ｐ-メトキシフェニル、２、４-ジニトロフェニル、ベンジル（Ｂｎ）、ｐ-メトキシベンジル、３、４-ジメトキシベンジル、ｏ-ニトロベンジル、ｐ-ニトロベンジル、ｐ-ハロベンジル、２、６-ジクロロベンジル、ｐ-シアノベンジル、ｐ-フェニルベンジル、２-ピコリル、４-ピコリル、３-メチル-２-ピコリルＮ-オキシド、ジフェニルメチル、ｐ，ｐ’-ジニトロベンズヒドリル、５-ジベンゾスベリル、トリフェニルメチル、α-ナフチルジフェニルメチル、ｐ-メトキシフェニルジフェニルメチル、ジ（ｐ-メトキシフェニル）フェニルメチル、トリ（ｐ-メトキシフェニル）メチル、４-（４′-ブロモフェナシルオキシフェニル）ジフェニルメチル、４，４′，４″-トリス（４，５-ジクロロフタルイミドフェニル）メチル、４，４′，４″-トリス（レブリノイルオキシフェニル）メチル、４，４′，４″-トリス（ベンゾイルオキシフェニル）メチル、３-（イミダゾール-１-イル）ビス（４′，４″-ジメトキシフェニル）メチル、１，１-ビス（４-メトキシフェニル）-１′-ピレニルメチル、９-アントリル、９-（９-フェニル）キサンテニル、９-（９-フェニル-１０-オキソ）アントリル、１，３-ベンゾジスルフラン-２-イル、ベンズイソチアゾリルＳ，Ｓ-ジオキシド、トリメチルシリル（ＴＭＳ）、トリエチルシリル（ＴＥＳ）、トリイソプロピルシリル（ＴＩＰＳ）、ジメチルイソプロピルシリル（ＩＰＤＭＳ）、ジエチルイソプロピルシリル（ＤＥＩＰＳ）、ジメチルテキシルシリル、ｔ-ブチルジメチルシリル（ＴＢＤＭＳ）、ｔ-ブチルジフェニルシリル（ＴＢＤＰＳ）、トリベンジルシリル、トリ-ｐ-キシリルシリル、トリフェニルシリル、ジフェニ��メチルシリル（ＤＰＭＳ）、ｔ-ブチルメトキシフェニルシリル（ＴＢＭＰＳ）、ギ酸、ベンゾイルギ酸、アセテート、クロロアセテート、ジクロロアセテート、トリクロロアセテート、トリフルオロアセテート、メトキシアセテート、トリフェニルメトキシアセテート、フェノキシアセテート、ｐ-クロロフェノキシアセテート、３-フェニルプロピオネート、４-オキソペンタノアート（レブリネート）、４，４-（エチレンジチオ）ペンタノアート（レブリノイルジチオアセタール）、ピバロエート、アダマントエート、クロトネート、４-メトキシクロトナート、安息香酸、ｐ-フェニル安息香酸、２，４，６-トリメチル安息香酸（メシトエート）、アルキルメチルカーボネート、９-フルオレニルメチルカーボネート（Ｆｍｏｃ）、アルキルエチルカーボネート、アルキル２，２，２-トリクロロエチルカーボネート（Ｔｒｏｃ）、２-（トリメチルシリル）エチルカーボネート（ＴＭＳＥＣ）、２-（フェニルスルホニル）エチルカーボネート（Ｐｓｅｃ）、２-（トリフェニルホスホニオ）エチルカーボネート（Ｐｅｏｃ）、アルキルイソブチルカーボネート、アルキルビニルカーボネートアルキルアリルカーボネート、アルキルｐ-ニトロフェニルカーボネート、アルキルベンジルカーボネート、アルキルｐ-メトキシベンジルカーボネート、アルキル３、４-ジメトキシベンジルカーボネート、アルキルｏ-ニトロベンジルカーボネート、アルキルｐ-ニトロベンジルカーボネート、アルキルＳ-ベンジルチオカーボネート、４-エトキシ-１-ナチフルカーボネート、メチルジチオカーボネート、２-ヨード安息香酸、４-アジドブチラート、４-ニトロ-４-メチルペンタノアート、ｏ-（ジブロモメチル）安息香酸、２-ホルミルベンゼンスルホネート、２-（メチルチオメトキシ）エチル、４-（メチルチオメトキシ）ブチラート、２-（メチルチオメトキシメチル）安息香酸、２，６-ジクロロ-４-メチルフェノキシアセテート、２，６-ジクロロ-４-（１，１，３，３-テトラメチルブチル）フェノキシアセテート、２，４-ビス（１，１-ジメチルプロピル）フェノキシアセテート、クロロジフェニルアセテート、イソブチラート、モノスクシノエート，（Ｅ）-２-メチル-２-ブテノアート、ｏ-（メトキシアシル）安息香酸、α-ナフトエート、硝酸塩、アルキルＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’-テトラメチルホスホロジアミデート、アルキルＮ-フェニルカルバメート、ホウ酸塩、ジメチルホスフィノチオイル、アルキル２，４-ジニトロフェニルスルフェナート、硫酸塩、メタンスルホネート（メシラート）、ベンジルスルホネート、及びトシレート（Ｔｓ）が含まれるが、これらに限定されない。
【発明を実施するための形態】
【００５４】
本明細書中に記載される通り、本発明は、薬剤及び薬剤候補の反応性代謝物質を捕獲及び検出する新たな標識剤を提供する。そのような試薬は、例えば、代謝物質が試料中の存在する又は、試験化合物の代謝から生成される場合に、試料中の反応性代謝物質を検出する方法において有益であり得、代謝物質及び式（Ｉ）又は（ＩＩ）の試薬が反応し、例えば、質量分析器により検出可能な付加物を形成する。本発明は、更に、例えば、付加物が全く検出されない場合、反応性代謝物質が試料中に存在しないことを確認する場合にも有益であると考えられる。
【００５５】
したがって、ある態様において、Ｒ３が水素であるとき、標識剤として使用されうる式（I）の化合物を提供する。
【化８】
0006285917.tif 000009
式中、
各Ｒ１とＲ２は、それぞれ独立して水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のアルケニル、置換若しくは非置換のアルキニル、置換若しくは非置換のカルボシクリル、置換若しくは非置換のヘテロシクリル、置換若しくは非置換のアリール、置換若しくは非置換のヘテロアリール、−Ｃ（＝Ｏ）ＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２、若しくはアミノ保護基、又は、Ｒ１とＲ２が結合して置換若しくは非置換の複素環を形成し、
各ＲＡは、それぞれ独立して水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のアルケニル、置換若しくは非置換のアルキニル、置換若しくは非置換のカルボシクリル、置換若しくは非置換のヘテロシクリル、置換若しくは非置換のアリール、置換若しくは非置換のヘテロアリール、酸素原子と結合した場合に酸素保護基、若しくは窒素原子と結合した場合に窒素保護基、又は、２つのＲＡ基が結合して置換若しくは非置換の複素環を形成し、
Ｒ３は、水素、又は硫黄保護基であり、
各Ｒ４は、それぞれ独立して置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のアルケニル、置換若しくは非置換のアルキニル、置換若しくは非置換のカルボシクリル、置換若しくは非置換のヘテロシクリル、置換若しくは非置換のアリール、置換若しくは非置換のヘテロアリール、若しくはアミノ保護基、又は、２つのＲ４基が結合して置換若しくは非置換の複素環を形成し、
ｎは、１、２、３、４、５又は６であり、
Ｘ−は、対アニオンである。
【００５６】
更に、別の態様によれば、Ｒ３が水素であるとき、標識剤として使用されうる式（II）の化合物を提供する。
【化９】
0006285917.tif 000010
式中、
各Ｒ１とＲ２は、それぞれ独立して水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のアルケニル、置換若しくは非置換のアルキニル、置換若しくは非置換のカルボシクリル、置換若しくは非置換のヘテロシクリル、置換若しくは非置換のアリール、置換若しくは非置換のヘテロアリール、−Ｃ（＝Ｏ）ＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２、若しくはアミノ保護基、又は、Ｒ１とＲ２が結合して置換若しくは非置換の複素環を形成し、
各ＲＡは、それぞれ独立して水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のアルケニル、置換若しくは非置換のアルキニル、置換若しくは非置換のカルボシクリル、置換若しくは非置換のヘテロシクリル、置換若しくは非置換のアリール、置換若しくは非置換のヘテロアリール、酸素原子と結合した場合に酸素保護基、若しくは窒素原子と結合した場合に窒素保護基、又は、２つのＲＡ基が結合して置換若しくは非置換の複素環を形成し、
Ｒ３は、水素又は、硫黄保護基であり、
Ｒ５とＲ６は、独立して−ＯＲＢ、−Ｎ（ＲＢ）２、及び式（ｉ）の基から選択され、
【化１０】
0006285917.tif 000011
ただし、Ｒ５とＲ６の少なくともいずれか一方が、式（ｉ）の基であり、
各ＲＢは、それぞれ独立して水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のアルケニル、置換若しくは非置換のアルキニル、置換若しくは非置換のカルボシクリル、置換若しくは非置換のヘテロシクリル、置換若しくは非置換のアリール、置換若しくは非置換のヘテロアリール、酸素原子と結合した場合に酸素保護基、若しくは窒素原子と結合した場合に窒素保護基、又は、２つのＲＢ基が結合して置換若しくは非置換の複素環を形成し、
各Ｒ４は、それぞれ独立して置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のアルケニル、置換若しくは非置換のアルキニル、置換若しくは非置換のカルボシクリル、置換若しくは非置換のヘテロシクリル、置換若しくは非置換のアリール、置換若しくは非置換のヘテロアリール、若しくはアミノ保護基、又は、２つのＲ４基が結合して置換若しくは非置換の複素環を形成し、
ｎは、１、２、３、４、５又は６であり、
Ｘ−は、対アニオンである。
【００５７】
前記に一般的に記載された通り、式（Ｉ）又は（ＩＩ）の化合物は、ある実施形態において、Ｒ３が水素である標識剤として有益であり得る。本発明これらの化合物の保護形なども含まれ、例えば、対応する合成中間体であり、式中、Ｒ３は、硫黄保護基である。
【００５８】
ある実施形態において、Ｒ１は、水素である。ある実施形態において、Ｒ１は、置換若しくは非置換のアルキルであり、例えば、−ＣＨ３、又は、置換若しくは非置換のアラルキルである。ある実施形態において、Ｒ１は、置換又は非置換のアルケニルであり、例えば、アリルである。ある実施形態において、Ｒ１は、置換または非置換のアルキニルであり、例えば、プロピニルである。ある実施形態において、Ｒ１は、置換または非置換のカルボシクリルである。ある実施形態において、Ｒ１は、置換または非置換のヘテロシクリルである。ある実施形態において、Ｒ１は、置換または非置換のアリールである。ある実施形態において、Ｒ１は、置換または非置換のヘテロアリールである。ある実施形態において、Ｒ１は、−Ｃ（＝Ｏ）ＲＡである。ある実施形態において、Ｒ１は、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＡである。ある実施形態において、Ｒ１は、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２である。ある実施形態において、Ｒ１は、アミノ保護基である。
【００５９】
ある実施形態において、Ｒ２は、水素である。ある実施形態において、Ｒ２は、置換若しくは非置換のアルキルであり、例えば、−ＣＨ３、又は、置換若しくは非置換のアラルキルである。ある実施形態において、Ｒ２は、置換または非置換のアルケニルであり、例えば、アリルである。ある実施形態において、Ｒ２は、置換または非置換のアルキニルであり、例えば、プロピニルである。ある実施形態において、Ｒ２は、置換または非置換のカルボシクリルである。ある実施形態において、Ｒ２は、置換または非置換のヘテロシクリルである。ある実施形態において、Ｒ２は、置換または非置換のアリールである。ある実施形態において、Ｒ２は、置換または非置換のヘテロアリールである。ある実施形態において、Ｒ２は、−Ｃ（＝Ｏ）ＲＡである。ある実施形態において、Ｒ２は、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＡである。ある実施形態において、Ｒ２は、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２である。ある実施形態において、Ｒ２は、アミノ保護基である。
【００６０】
ある実施形態において、Ｒ１とＲ２が結合して置換若しくは非置換の複素環を形成し、例えば、置換又は非置換のピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、モルホリニル環である。
【００６１】
また、Ｒ１とＲ２が結合して置換または非置換のヘテロアリール環、例えば、５、６員環ヘテロアリール環を形成しても良い。
【００６２】
ある実施形態において、Ｒ１は、水素であり、Ｒ２は、水素、−Ｃ（＝Ｏ）ＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２、又は、アミノ保護基である。ある実施形態において、Ｒ１は、水素であり、Ｒ２は、−Ｃ（＝Ｏ）ＲＡ，−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＡ，又は、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２である。ある実施形態において、Ｒ１は、水素であり、Ｒ２は、−Ｃ（＝Ｏ）ＲＡである。ある実施形態において、Ｒ１は、水素であり、Ｒ２は、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＡである。ある実施形態において、Ｒ１は、水素であり、Ｒ２は、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２である。ある実施形態において、Ｒ１は、水素であり、Ｒ２は、水素である。
【００６３】
ある実施形態において、少なくともＲＡは、それぞれ水素である。ある実施形態において、少なくともＲＡは、それぞれ置換若しくは非置換のアルキル、例えば、-ＣＨ３、又は、置換若しくは非置換のアラルキルである。ある実施形態において、少なくともＲＡは、それぞれ置換または非置換のアルケニル、例えば、アリルである。ある実施形態において、少なくともＲＡは、それぞれ置換または非置換のアルキニル、例えば、プロピニルである。ある実施形態において、少なくともＲＡは、それぞれ置換または非置換のカルボシクリルである。ある実施形態において、少なくともＲＡは、それぞれ置換または非置換のヘテロシクリルである。ある実施形態において、少なくともＲＡは、それぞれ置換または非置換のアリールである。ある実施形態において、少なくともＲＡは、それぞれ置換または非置換のヘテロアリールである。ある実施形態において、ＲＡは、酸素保護基である。ある実施形態において、少なくともＲＡは、それぞれ窒素保護基である。
【００６４】
ある実施形態において、２個のＲＡ基は、１個のＮ原子と結合し、その２個のＲＡ基は、置換または非置換の複素環を形成するように結合され、例えば、置換若しくは非置換のピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、又はモルホリニル環である。
【００６５】
また、２個のＲＡ基は、置換または非置換のヘテロアリール環、例えば、５、６員環ヘテロアリール環を形成するように結合されても良い。
【００６６】
ある実施形態において、少なくとも１個のＲＡは、-ＣＨ３であり、例えば、−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ３、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＣＨ３、又は、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＣＨ３の式の基である。ある実施形態において、Ｒ１は、水素であり、Ｒ２は、−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ３、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＣＨ３、又は、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＣＨ３である。ある実施形態において、Ｒ１は、水素であり、Ｒ２は、−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ３である。ある実施形態において、Ｒ１は、水素であり、Ｒ２は、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＣＨ３である。ある実施形態において、Ｒ１は、水素であり、Ｒ２は、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＣＨ３である。
【００６７】
ある実施形態において、少なくとも１個のＲＡは、置換若しくは非置換のアリール、または、置換若しくは非置換のアラルキルである。この例では、ある実施形態において、少なくとも１個のＲＡは、式（ａ）の基であり、
【化１１】
0006285917.tif 000012
式中、
ｐは、０であり、置換若しくは非置換のアリールとなる、又は、
ｐは、１又は２であり、置換若しくは非置換のアラルキルとなる、
ｍは、１、２、３、４、又は５であり、
Ｒ７は、それぞれ独立してハロゲン、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のアルケニル、置換若しくは非置換のアルキニル、置換若しくは非置換のカルボシクリル、置換若しくは非置換のヘテロシクリル、置換若しくは非置換のアリール、置換若しくは非置換のヘテロアリールである。
【００６８】
例えば、ある実施形態において、Ｒ１は、水素であり、Ｒ２は、−Ｃ（＝Ｏ）ＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＡ、又は、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２であり、ＲＡは、式（ａ）の基である。ある実施形態において、Ｒ１は、水素であり、Ｒ２は、−Ｃ（＝Ｏ）ＲＡであり、ＲＡは、式（ａ）の基である。ある実施形態において、Ｒ１は、水素であり、Ｒ２は、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＡであり、ＲＡは、式（ａ）の基である。ある実施形態において、Ｒ１は、水素であり、Ｒ２は、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（ＲＡ）であり、ＲＡは、式（ａ）の基である。
【００６９】
ある実施形態において、ｐは、０である。ある実施形態において、ｐは、１又は２である。ある実施形態において、ｐは、１である。ある実施形態において、ｐは、２である。
【００７０】
ある実施形態において、Ｒ７は、それぞれ独立してハロゲン、例えば、フルオロ、ブロモ、ヨード、クロロから成る群から選択される。ある実施形態において、Ｒ７ それぞれ独立してブロモ及びフルオロから成る群から選択される。ある実施形態において、Ｒ７は、それぞれブロモである。ある実施形態において、Ｒ７は、それぞれフルオロである。
【００７１】
モノ-、ジ-、トリ-、及びテトラ-により置換された数多くの式（a）の基が、検討された。例えば、ある実施形態において、式中、ｍは、1であり、式（ａ）の基は、オルト、メタ、又は、パラにより置換された式の基である。
【化１２】
0006285917.tif 000013
【００７２】
ある実施形態において、式中、ｍは、2であり、式（ａ）の基は、下記式のいずれか一つの二置換基である。
【化１３】
0006285917.tif 000014
【００７３】
ある実施形態において、式中、ｍは、3であり、式（ａ）の基は、下記式のいずれか一つの三置換基である。
【化１４】
0006285917.tif 000015
【００７４】
ある実施形態において、式中、ｍは、4であり、式（ａ）の基は、下記式のいずれか一つの四置換基である。
【化１５】
0006285917.tif 000016
【００７５】
ある実施形態において、式中、ｍは、５であり、式（ａ）の基は、五置換基である。
【化１６】
0006285917.tif 000017
【００７６】
ある実施形態において、ｍは、1であり、Ｒ７は、ブロモである。ある実施形態において、Ｒ７は、オルトブロモ基である。
【００７７】
ある実施形態において、ｍは、５であり、Ｒ７は、フルオロである。
【００７８】
ある実施形態において、少なくとも１個のＲ４は、それぞれ置換若しくは非置換のアルキルであり、例えば、−ＣＨ３、置換若しくは非置換のアラルキルである。ある実施形態において、少なくとも１個のＲ４は、それぞれ置換または非置換のアルケニルであり、例えば、アリルである。ある実施形態において、少なくとも１個のＲ４は、それぞれ置換または非置換のアルキニルであり、例えば、プロピニルである。ある実施形態において、少なくとも１個のＲ４は、それぞれ置換または非置換のカルボシクリルである。ある実施形態において、少なくとも１個のＲ４は、置換または非置換のヘテロシクリルである。ある実施形態において、少なくとも１個のＲ４は、それぞれ置換または非置換のアリールである。ある実施形態において、少なくとも１個のＲ４は、それぞれ置換または非置換のヘテロアリールである。ある実施形態において、少なくとも１個のＲ４は、それぞれアミノ保護基である。
【００７９】
ある実施形態において、２個のＲ４は、同一である。ある実施形態において、Ｒ４は、それぞれ同様である。ある実施形態において、Ｒ４は、それぞれ異なる。
【００８０】
ある実施形態において、少なくとも１個のＲ４は、置換若しくは非置換のアルキルであり、例えば、置換若しくは非置換のＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ１-６、Ｃ１-５、Ｃ１-４、Ｃ１-３、Ｃ１-２、Ｃ２-６、Ｃ２-５、Ｃ２-４、Ｃ２-３、Ｃ３-６、Ｃ３-５、Ｃ３-４、Ｃ４-６、Ｃ４-５、又は、Ｃ５-６アルキルである。ある実施形態において、Ｒ４は、それぞれ置換若しくは非置換のＣ１アルキルであり、例えば、-ＣＨ３である。ある実施形態において、Ｒ４は、それぞれ-ＣＨ３である。
【００８１】
ある実施形態において、２個のＲ４基は、置換若しくは非置換の複素環を形成するように結合され、例えば、置換若しくは非置換のピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、又はモルホリニル環である。
【００８２】
また、１個のＲ４基は、存在しないか、または、別の２個のＲ４基が結合して置換または非置換のヘテロアリール環、例えば、５、６員環ヘテロアリール環を形成しても良い。
【００８３】
ある実施形態において、ｎは、１である。ある実施形態において、ｎは、２である。ある実施形態において、ｎは、３である。ある実施形態において、ｎは、４である。ある実施形態において、ｎは、５である。ある実施形態において、ｎは、６である。  
【００８４】
ここで用いられる“対アニオン”又は、”アニオン”とは、正に帯電する第四級アミンと結合した、負に帯電した基、を意味する。例示的な対アニオンは、ハロゲン化物イオン（例えば、フッ化物、塩化物、臭化物、ヨウ化物）、ＮＯ３-、ＣｌＯ４-、ＯＨ-、Ｈ２ＰＯ４-、ＨＳＯ４-、スルホン酸イオン（例えば、メタンスルホネート、トリフルオロメタンスルホネート、ｐ-トルエンスルホネート、ベンゼンスルホネート、１０-カンファースルホネート、ナフタレン-２-スルホネート、ナフタレン-１-スルホン酸-５-スルホネート、エタン-１-スルホン酸-２-スルホネート）、及びカルボン酸イオン（例えば、酢酸塩、エタン酸、プロパン酸、安息香酸、グリセリン酸塩、乳酸塩、酒石酸塩、グリコール酸塩）である。ある実施形態において、Ｘは、ハロゲン化物対アニオンであり、例えば、クロリド対アニオンである。
【００８５】
一般的に上記に定義された通り、式（ＩＩ）において、Ｒ５とＲ６は、独立して−ＯＲＢ、−Ｎ（ＲＢ）２及び下記式（ｉ）の基から選択される。
【化１７】
0006285917.tif 000018
ただし、Ｒ５とＲ６の少なくともいずれか一方が、式（ｉ）の基であり、Ｘ−、Ｒ４、及び、ｎは、前記定義に同じである。
【００８６】
ある実施形態において、Ｒ５は、−ＯＲＢであり、Ｒ６は、式（ｉ）の基である。
【００８７】
ある実施形態において、Ｒ５は、−Ｎ（ＲＢ）２であり、Ｒ６は、式（ｉ）の基である。
【００８８】
ある実施形態において、Ｒ６は、−ＯＲＢであり、Ｒ５は、式（ｉ）の基である。
【００８９】
ある実施形態において、Ｒ６は、−Ｎ（ＲＢ）２であり、Ｒ５は、式（ｉ）の基である。
【００９０】
ある実施形態において、少なくとも１個のＲＢは、水素である。ある実施形態において、少なくとも１個のＲＢは、置換または非置換のアルキル、例えば、−ＣＨ３、置換または非置換のアラルキルである。ある実施形態において、少なくとも１個のＲＢは、置換または非置換のアルケニル、例えば、アリルである。ある実施形態において、少なくとも１個のＲＢは、置換または非置換のアルキニル、例えば、プロピニルである。ある実施形態において、少なくとも１個のＲＢは、置換または非置換のカルボシクリルである。ある実施形態において、少なくとも１個のＲＢは、置換または非置換のヘテロシクリルである。ある実施形態において、少なくとも１個のＲＢは、置換または非置換のアリールである。ある実施形態において、少なくとも１個のＲＢは、置換または非置換のヘテロアリールである。ある実施形態において、ＲＢは、酸素保護基である。ある実施形態において、少なくとも１個のＲＢは、窒素保護基である。
【００９１】
ある実施形態において、２個のＲＢ基は、１個のＮ原子と結合し、その２個のＲＢ基は、置換若しくは非置換の複素環を形成すように結合され、例えば、置換または非置換のピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、又はモルホリニル環である。
【００９２】
また、２個のＲＢ基は、置換または非置換のヘテロアリール環、例えば５、６員環ヘテロアリール環を形成するように結合されても良い。
【００９３】
ある実施形態において、少なくとも１個のＲＢは、置換若しくは非置換のアリール、又は、置換若しくは非置換のアラルキルである。この例では、ある実施形態において、少なくとも１個のＲＢは、前記に定義した式（ａ）の基である。
【００９４】
当業者には理解されるように、本明細書中に記載したＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、ＲＡ、ＲＢ、Ｘ及びｎについては、本発明は、多くの組み合わせが可能であり、意図している。本発明は、明記されたされた特定の式や条件に限定されない。
【００９５】
ある実施形態において、Ｒ３は、水素であり、式（I）の化合物は、式（Ｉ−ａ）で示される。
【化１８】
0006285917.tif 000019
【００９６】
ある実施形態において、ｎは、2であり、式（Ｉ）の化合物は、式（Ｉ−ｂ）で示される。
【化１９】
0006285917.tif 000020
式（Ｉ−ｂ）のある実施形態において、Ｒ３は、水素である。
【００９７】
ある実施形態において、ｎは、２であり、各Ｒ４は、それぞれ-ＣＨ３であり、式（Ｉ）の化合物は、式（Ｉ−ｃ）で示される。
【化２０】
0006285917.tif 000021
式（Ｉ−ｃ）のある実施形態において、Ｒ３は、水素である。
【００９８】
式（Ｉ）の例示的な化合物は、下記に示されるが、これらに限定されない。
【化２１】
0006285917.tif 000022
式中、Ｘ−は、対アニオンである。ある実施形態において、Ｘ−は、クロリド対アニオンである。
【００９９】
ある実施形態において、Ｒ３は、水素であり、式（ＩＩ）の化合物は、式（II-a）で示される。
【化２２】
0006285917.tif 000023
【０１００】
ある実施形態において、式中、Ｒ５は、式（ｉ）の基であり、Ｒ６は、-ＯＲＢであり、式（ＩＩ）の化合物は、式（ＩＩ−ｂ）で示される。
【化２３】
0006285917.tif 000024
式（ＩＩ−ｂ）のある実施形態において、Ｒ３は、水素である。
【０１０１】
ある実施形態において、ｎは、２であり、Ｒ５は、式（ｉ）の基であり、及びＲ６は、-ＯＲＢであり、式（ＩＩ）の化合物は、式（ＩＩ−ｃ）で示される。
【化２４】
0006285917.tif 000025
式（ＩＩ−ｃ）のある実施形態において、Ｒ３は、水素である。
【０１０２】
ある実施形態において、ｎは、２であり、Ｒ４は、それぞれ-ＣＨ３、Ｒ５は、式（ｉ）の基であり、Ｒ６は、-ＯＲＢであり、式（ＩＩ）の化合物は、式（ＩＩ−ｄ）で示される。
【化２５】
0006285917.tif 000026
式（ＩＩ−ｄ）のある実施形態において、Ｒ３は、水素である。
【０１０３】
ある実施形態において、式中、Ｒ６は、式（ｉ）の基であり、及びＲ５は、-ＯＲＢ、式（ＩＩ）の化合物は、式（ＩＩ−ｅ）で示される。
【化２６】
0006285917.tif 000027
式（ＩＩ−ｅ）のある実施形態において、Ｒ３は、水素である。
【０１０４】
ある実施形態において、ｎは、２であり、Ｒ６は、式（ｉ）の基であり、Ｒ５は、-ＯＲＢであり、式（ＩＩ）の化合物は、式（ＩＩ−ｆ）で示される。
【化２７】
0006285917.tif 000028
式（ＩＩ−ｆ）の実施形態において、Ｒ３は、水素である。
【０１０５】
ある実施形態において、ｎは、２であり、Ｒ４は、それぞれ-ＣＨ３，Ｒ６は、式（ｉ）の群であり、Ｒ５は、-ＯＲＢであり、式（ＩＩ）の化合物は、式（ＩＩ−ｇ）で示される。
【化２８】
0006285917.tif 000029
式（ＩＩ−ｆ）の実施形態において、Ｒ３は、水素である。
【０１０６】
式（ＩＩ）の例示的な化合物には、下記のものが含まれるが、それらに限定されない。
【化２９−１】
0006285917.tif 000030
【化２９−２】
0006285917.tif 000031
【化２９−３】
0006285917.tif 000032
式中、Ｘ−は、対アニオンである。ある実施形態において、Ｘ−は、クロリド対アニオンである。
【０１０７】
スクリーニング方法及びキット
ある態様において、本発明は、代謝物質を含む試料と、下記式（Ｉ）又は（ＩＩ）の試薬とを接触させることを含む試料中の代謝物質の検出方法を提供する。
【化３０】
0006285917.tif 000033
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｘ及びｎは、前記定義に同じであり、Ｒ３は、水素であり、
式中、代謝物質及び式（Ｉ）又は（ＩＩ）の試薬とを、反応させて付加物を形成し、例えば、質量分析器により、前記付加物を検出する。
【０１０８】
ある実施形態において、試料には、酵素系が含まれる。ある実施形態において、試料には、試験化合物が含まれる。ある実施形態において、試験化合物を含む試料を酵素系と接触させ、代謝物質は、酵素系による代謝により、試験化合物に生成される。ある実施形態において、酵素系は、Ｐ４５０ミクロソーム酵素系である。体内のＰ４５０ミクロソーム酵素系は、例えば、一般的には肝臓にあり、人体の解毒を促進する。したがって、薬剤や薬剤候補などの試験化合物が体内に取り入れられると、Ｐ４５０ミクロソーム酵素系は、前記薬剤や薬剤候補を代謝させる。前記工程による副成物は、反応性代謝物質であり得る。ある実施形態において、Ｐ４５０ミクロソーム酵素系は、ミクロソーム、Ｓ９画分、及びＰ４５０酵素から成る群から選択される。ある実施形態において、ミクロソームは、哺乳動物の肝臓ミクロソーム、例えば、ヒト肝臓ミクロソームである。ある実施形態において、Ｓ９画分は、哺乳動物のＳ９画分、例えば、ヒト肝臓Ｓ９画分である。種々のＰ４５０ミクロソーム酵素系の記載については、米国特許第５，４７８，７２３号、及び第５，８９１，６９６号参照。
【０１０９】
別の態様によれば、前記スクリーニング方法は、試験化合物、酵素系を式（Ｉ）又は（ＩＩ）の化合物とを接触させることを含む試料中の代謝物質の検出方法である。
【化３１】
0006285917.tif 000034
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｘ及びｎは、前記定義に同じであり、Ｒ３ は、水素であり、
前記試験化合物は、前記酵素系により代謝され、代謝物質となり、前記代謝物質を、式（Ｉ）又は（ＩＩ）の化合物と反応させ、付加物を形成し、例えば、質量分析法により前記付加物を検出する方法である。
【０１１０】
ある実施形態において、試験化合物の濃度は、約１ｎＭから約１ｍＭ、例えば、約１００ｎＭから１００ｕＭである。ある実施形態において、試験化合物の濃度は、約１０ｕＭである。しかし、他の濃度を用いても良い。
【０１１１】
ある実施形態において、式（Ｉ）又は（ＩＩ）の化合物の濃度は、約１ｎＭから約１ｍＭ、例えば、約１００ｎＭから１００ｕＭである。ある実施形態において、式（Ｉ）又は（ＩＩ）の化合物の濃度は、約５ｕＭである。しかし、他の濃度を用いても良い。
【０１１２】
ある実施形態において、代謝物質の濃度は、約１ｎＭから約１ｍＭであり、例えば、約１００ｎＭから１００ｕＭである。しかし、他の濃度を用いても良い。
【０１１３】
ある実施形態において、試験化合物、酵素系、及び式（Ｉ）又は（ＩＩ）の化合物は、例えば、水溶液などの溶液中に用意する。ある実施形態において、前記水溶液には、水、有機溶剤、又はそれらの混合溶液が含まれる。ある実施形態において、前記水溶液は、例えば、リン酸カリウム緩衝液を用いて緩衝化される。ある実施形態において、水溶液のｐＨ値は、約７．０〜７．６であり、例えば、約７．４である。
【０１１４】
ある実施形態において、前記接触は、ＮＡＤＰＨ生成系、又は、ＮＡＤＰＨを添加する前に、約１〜１０分間のプレインキュベーションを含む。ある実施形態において、ＮＡＤＰＨ生成系、又は、ＮＡＤＰＨを添加することにより付加物の形成が開始される。ある実施形態において、プレインキュベーションは、約３〜５分間である。ある実施形態において、プレインキュベーションは、約３分間である。
【０１１５】
ある実施形態において、ＮＡＤＰＨ生成系、又は、ＮＡＤＰＨを添加後、混合物を更に、約３０分から約２時間インキュベーションする。ある実施形態において、混合物を更に、約1時間インキュベーションする。
【０１１６】
ある実施形態において、インキュベーション中の溶液の温度は、約３０°Ｃ〜約４０°Ｃである。ある実施形態において、インキュベーション中の溶液の温度は、約３７°Ｃである。
【０１１７】
ある実施形態において、前記反応を、検出を行う前に急冷する。ある実施形態において、前記反応を酸で急冷する。ある実施形態において、酸は、例えば、塩酸などの無機酸である。ある実施形態において、酸は、例えば、ギ酸などの有機酸である。ある実施形態において、前記反応を、０．１％のギ酸を用いて、例えば、アセトニトリルなどの有機溶剤中で急冷する。ある実施形態において、急冷後、前記反応は、遠心分離させ、精製又は追加的な検査を行うことなく、試料を直接分析する。
【０１１８】
ある実施形態において、前記付加物は、質量分析法（ＭＳ）により検出される。ここで用いられる“検出する（detecting）”とは、付加物の生成物の特徴的な部分や断片の特定から付加物の存在を推定して、付加物の存在を直接的又は間接的に特定すること、例えば、付加物が更に処理される場合（例えば、三連四重極型質量分析計により生じる衝突誘起解離）をも包含する。ある実施形態において、質量分析計は、タンデム質量分析計（ＭＳ／ＭＳ）である。ある実施形態において、質量分析計は、タンデム質量分析計と接続したエレクトロスプレーイオン化質量分析による質量分析計（ＥＳＩ−ＭＳ／ＭＳ）である。ある実施形態において、質量分析計に接続した液体クロマトグラフィの組み合わせを使用して、付加物を検出する。ある実施形態において、液体クロマトグラフィは、高圧液体クロマトグラフィ(ＨＰＬＣ)である。ある実施形態において、液体クロマトグラフィは、超高圧液体クロマトグラフィ（ＵＰＬＣ又はＵＨＰＬＣ）である。
【０１１９】
ある実施形態において、本明細書中に記載された方法は、既知の代謝物質を低いレベルで検出する方法である。ある実施形態において、本明細書中に記載された方法は、新たな代謝物質を特定する方法である。ある実施形態において、本明細書中に記載された方法は、代謝物質検出の分析や確実性を高める方法である。
【０１２０】
本明細書中に記載される分析を行うためのキットを提供する。前記キットは、１以上の酵素系、標準的な試験化合物、薬瓶及び／又は容器、溶液、式（Ｉ）又は（ＩＩ）の１以上の化合物、及び、使用説明書が含まれるが、これらに限定されない。
【０１２１】
共有結合付加物の形成  インビボで、グルタチオン（ＧＳＨ）は、その求核性チオール基を通じて反応性種の反応性求電子性部分と共有結合し、安定したＳ−置換コンジュゲートを形成する。これらは、体内から排出されることにより、そのような反応性種が重要な細胞構成と結合することを防ぐ本来の機能を付与している。本明細書中に記載されたスクリーニング分析によれば、インビボでグルタチオンに似た性質を示すと考えられる。１以上の反応性代謝物質が、試料中に存在し、共有結合付加体を形成する式（Ｉ）又は（ＩＩ）の化合物において、遊離チオール基の反応は、当該技術分野では既知の化学反応である。例えば、Fluharty, Biochemistry of the Thiol Group, In the Chemistry of the Thiol Group, ed. S. Patai, Wiley, New York, 1974; Clark, Chemical Reviews （1980） 80:429-452; Fujita et al., Bioorganic Chemistry （1977） 6:287-309; 及び Perlmutter, Conjugated Addition Reactions in Organic Synthesis, Pergamon, Oxford, 1992、参照。例えば、チオール基は、１，４−付加により、マイケル受容体若しくはジオン、又は、１，２−付加により、活性カルボニル基類若しくはオレフィン基類と反応して、結合付加体を形成しうる。
【０１２２】
したがって、別の態様によれば、代謝物質と式（Ｉ）又は（ＩＩ）の化合物の共有結合付加体を提供する。
【化３２】
0006285917.tif 000035
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｘ及びｎは、前記定義に同じであり、付加物が形成される前の代謝物質は、任意の試験化合物であり、例えば、求電子反応性部分を含む薬剤又は薬剤候補である。例えば、遊離チオール基との共有結合コンジュゲーションが可能であり、付加物を形成するマイケル受容体、ジエン、オレフィン、又は、活性カルボニル基である。
【０１２３】
代謝物質に対する例示的な被験薬剤は、本明細書中に記載されたチオール試薬を用いて共有結合付加体を形成し得、また被験薬剤は、アメリカ食品医薬品局に承認され、連邦規則集（ＣＦＲ）に記載された任意の薬品が含まれるが、これらに限定されない。薬剤候補は、未承認であるものの、ある対象、例えば、ヒト（すなわち,あらゆる年齢層の男性又は女性、例えば、小児対象（例えば、幼児、子ども、青年）又は成人対象（例えば、若年成人、中年成人、若しくは、老人）及び／又は人間以外の動物、例えば、哺乳動物［例えば、霊長類（例えば、カニクイザル、アカゲザル）、及び商業的に入手可能な哺乳動物、例えば、マウス、ラット、ハムスター、ウシ、ブタ、ウマ、ヒツジ、ヤギ、ネコ、及び／又はイヌ］並びに鳥類（例えば、商業的に入手可能な鳥類、例えば、ニワトリ、アヒル、ガチョウ、及び／又はシチメンチョウ）に生物実験が行われ開発中の化合物である。
【０１２４】
いくつかの実施形態においては、試料中の付加物の検出は、好ましくない反応性代謝物質を示す場合があると理解するべきである（例えば、ある対象にとって潜在的に毒性となりうるもの）。いくつかの実施形態において、付加物が検出された場合（例えば、薬剤候補）、付加物の分析を更に行い、反応性代謝物質を特定するために役立てることができる。いくつかの実施形態において、ある特定の反応性代謝物質の存在及び／若しくはその不十分な量、又は、１以上反応性代謝物質が存在する場合は、薬剤又は薬剤候補が治療目的には選択されないおそれがある。いくつかの実施形態において、特定の反応性代謝物質及び／若しくは不十分な量、又は、１以上反応性代謝物質が試料中に検出される場合、薬剤候補は変更できる、及び／又は、薬剤や薬剤候補の１以上の合成工程を１以上変更して、１以上の反応性代謝物の量を回避する又は減らすことができる。
【実施例】
【０１２５】
これまでに記載された本発明の態様及び別の態様は、下記の実施例の検討により、更に理解されるであろう。下記の実施例は、本発明の特定の実施形態を記載することを意図するもので、請求項に記載された範囲を限定することを意図するものではない。
コラミン修飾システイン（ｃｙｓ−ｃｈｏｌ）の合成
【化３３】
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【０１２６】
保護されたシステインを標準的なペプチド結合条件の下で、コラミンと結合させた。脱保護により最終生成物ｃｙｓ−ｃｈｏｌが得られ、それをＷＣＸカートリッジを用いてＳＰＥにより精製した。最終生成物の純度を液体クロマトグラフィー質量分析器により確認した。
【０１２７】
インビトロ肝臓ミクロソームのインキュベーション
保管されたヒト肝臓ミクロソーム（ＨＬＭ）を入手し、ヒト肝臓ミクロソームｍａｓｔｅｒ ｍｉｘを３２０ｕＬ（ＨＬＭ，２０ｍｇ／ｍＬ；１ｍｇ／ｍＬ  最終濃度）をリン酸緩衝液（最終濃度０．１Ｍ、ｐＨ７．４）中のシステイン又はｃｙｓ−ｃｈｏｌを含むインキュベーションチューブに添加し、水に１００ｕＭの試験化合物を４０ｕＬ添加した（最終濃度１０ｕＭ）。３７度で３分間プレインキュベーションした後、１０ｍＭのＮＡＤＰＨ生成系を４０ｕＬ添加することにより、反応が開始され、６．２ｍＭのＤＬ−イソクエン酸、及び０．５ｕｎｉｔｓ／ｍＬのイソクエン酸デヒドロゲナーゼを添加する。最終インキュベーション量は、２５０ｕＬであった。基質を持たない試料、又は、添加されたＮＡＤＰＨを、負の制御として用いた。３７℃及び４００ｒｐｍで、６０分間インキュベーションした後、０．１％のギ酸と共に、アセトニトリルを４００ｕＬインキュベーションに添加し、遠心分離機にかけた（最大回毎分、５分間）。得られた上澄み（２００ｕＬ）を９６穴プレートに移し、蒸発工程を行うことなく、直接、液体クロマトグラフィー質量分析を行った。
【０１２８】
結果
液体クロマトグラフィ及びエレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ）‐タンデム質量分析計を用いた。システイン又は、ｃｙｓ−ｃｈｏｌを捕獲試薬として用いて、９の試験薬剤から得られた代謝物質をＵＰＬＣ−ＬＴＱ  Ｏｒｂｉｔｒａｐ又は、ＵＰＬＣ−ＡＢ  ＳＣＩＥＸ  ５６００を用いて分析した。表１参照。これらの実験から、ｃｙｓ−ｃｈｏｌを用いた捕獲は、システインを用いた捕獲より、高感度であることが判明した。表２参照。
【表１】
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【表２】
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【化３４】
0006285917.tif 000039
【０１２９】
３種類の捕獲剤の感度比較  表３は、グルタチオン、システイン（Ｃｙｓ）、及びＣｙｓ−ｃｈｏｌコンジュゲートを用いた捕獲クロザピン及びクロザピン代謝物質、の感度の比較を示す。図１Ａ、１Ｂ、２Ａ、２Ｂ、３Ａ、及び３Ｂを参照。
【表３】
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【０１３０】
均等物および範囲
本特許請求の範囲において、“ａ”、“ａｎ”及び“ｔｈｅ”などの冠詞は、反対のことが示されていないか、または文脈から明らかでない限り、１つまたは複数を意味する。あるグループの１つ以上のメンバーに“または”を含む請求項または明細書は、反対のことが示されていないか、または文脈から別途明らかでない限り、１つ、複数、またはすべてのグループのメンバーが、ある生成物または工程に存在するか、採用されているか、または関連があることを満たすとみなされる。本発明は、そのグループの１つ以上のグループのメンバー、又は全てのメンバーが、ある生成物または工程に存在するか、使用されているか、または関連がある、実施形態を含む。
【０１３１】
さらに、本発明には、限定、構成要素、節、記述的な用語を、記載された請求項から、別の請求項へ１つ以上用いた場合における、全ての変形、組合せ、置き換えが含まれる。例えば、ある従属請求項は、同一のグループ請求項に従属する請求項に記載された１以上の限定を含むように修正することができる。同じグループとなる請求項に従属する他の請求項に要素が列挙され、例えば、マーカッシュ形式（Markush group format）で提示されている場合、それらのメンバーの各サブグループもまた開示され、任意のメンバー（複数可）が、その群から除去され得る。通常、本発明または本発明の態様が、特定のメンバー、特徴などを含むと言及される場合、本発明のある実施形態または本発明の態様は、このような構成要素、特徴などからなるか、本質的にそのような構成要素、特徴から成ると理解するべきである。単純化のため、これらの言葉で本明細書中に具体的に示されていない。“含む（comprising, containing）”及び“包含する（comprising）”という用語は、非制限語句として用いられ、構成要素や工程を更に含めることができる。範囲が記載されている場合、エンドポイントは含まれる。さらに、別途記載されていないか、または文脈および当業者の理解から明らかでない限り、範囲として示される値は、本発明の様々な実施形態において、記載される範囲内の任意の特定の値または部分領域を、文脈が明らかに別のことを示していない限りその範囲の下限の単位の１０分の１まで想定し得ると理解されるべきである。
【０１３２】
本出願は許可された特許、公開特許出願、学術誌の記事、その他の出版物について参照しているが、それらは、参考文献として全て援用される。参考文献と本明細書に矛盾がある場合は、本明細書を優先するものとする。さらに、従来技術に包含される本発明の任意の特定の実施形態は、本請求項の任意の１つまたは複数から明確に除外され得る。このような実施形態は、当業者に公知であるとみなされるので、それらは、その除外が本明細書中で明確に示されていない場合も除外され得る。本発明のある特定の実施形態は、従来技術の存在に関係があるか否かに関わらず、いかなる理由があっても任意の１つまたは複数の請求項から除外され得る。
【０１３３】
当業者は、本明細書中に記載される特定の実施形態に対する多くの均等物を、認識する、または通常の実験を用いて確かめることができるであろう。本明細書中に記載された実施形態の範囲は、明細書の範囲を限定することを意図するものではなく、添付した特許請求の範囲に基づく。本明細書に対する数多くの変更および改良が、以下のクレームの定義に基づき、本発明の趣旨から外れることなく実施されうることは、同業者には理解されるであろう。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図４−１】
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【図４−２】
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【図５−１】
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【図５−２】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図８Ａ】
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【図８Ｂ】
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