(57)【要約】  新規ピラゾール化合物、プロテインキナーゼＢ活性の阻害物質としてのかかる化合物の使用、ならびに癌および関節炎の治療におけるかかる化合物の使用が発明されている。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
2010522770.tif 000116
［式中、
Ｑは、フェニル、置換フェニル、ベンジル、および芳香環が置換されているベンジルから選択され；
Ｒ1は、水素、トリフルオロメチル、ヒドロキシ、−Ｃ1〜Ｃ2アルキルおよびハロゲンから選択され；
Ｌは、窒素および−Ｃ(Ｈ)−から選択され；
Ｐは、窒素および−Ｃ(Ｒ40)−から選択され（ここで、Ｒ40は、水素、−Ｃ1〜Ｃ4アルキルおよびハロゲンから選択される）；
Ａは、−Ｃ(Ｏ)−および−Ｎ(Ｈ)−から選択され；
Ｂは、−Ｃ(Ｏ)−および−Ｎ(Ｈ)−から選択され；
Ｘ、ＹおよびＺは、独立して、窒素、−Ｃ(Ｈ)−および−Ｃ(Ｒ2)−から選択される（ここで、Ｒ2は、ハロゲン、トリフルオロメチル、ヒドロキシおよび−Ｃ1〜Ｃ4アルキルから選択される）］
で示される化合物またはその医薬上許容される塩（ただし、
ＡおよびＢは同じものではなく；
Ｘ、ＹおよびＺは全てが窒素であるわけではなく；
ＰおよびＬのうち窒素であるのは多くても１つである）。
【請求項２】
以下のものから選択される請求項１記載の化合物またはその医薬上許容される塩：
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−５−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−２−ピリジンカルボキサミド；
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−６−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−３−ピリジンカルボキサミド；
Ｎ−(２−アミノ−１−ベンジルエチル)−５−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ピリミジン−２−カルボキサミド；
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−２−クロロ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−３−クロロ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−３−(トリフルオロメチル)ベンズアミド；
Ｎ−((１Ｓ)−２−アミノ−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−５−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−２−ピリジンカルボキサミド；
Ｎ−((１Ｓ)−２−アミノ−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−３−クロロ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−４−クロロ−５−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−２−ピリジンカルボキサミド；
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−６−クロロ−５−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−２−ピリジンカルボキサミド；
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−３−メチル−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−((１Ｓ)−２−アミノ−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−３−フルオロ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−((１Ｓ)−２−アミノ−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−３−メチル−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−３−ヒドロキシ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−３−フルオロ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−((１Ｓ)−２−アミノ−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−４−クロロ−５−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−２−ピリジンカルボキサミド；
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−４−(４−クロロ−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−３−フルオロベンズアミド；
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−３−クロロ−４−(４−クロロ−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−((１Ｓ)−２−アミノ−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−３−フルオロ−４−(４−クロロ−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−((１Ｓ)−２−アミノ−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−３−クロロ−４−(４−クロロ−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−３−ブロモ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−((１Ｓ)−２−アミノ−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−３−ブロモ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミド；
３−アミノ−Ｎ−[３−クロロ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)フェニル]−２−フェニルプロパンアミド；
３−アミノ−Ｎ−[３−クロロ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)フェニル]−２−(フェニルメチル)プロパンアミド；
Ｎ−((１Ｓ)−２−アミノ−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−[(１Ｓ)−２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−｛(１Ｓ)−２−アミノ−１−[(３−フルオロフェニル)メチル]エチル｝−４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−((１Ｓ)−２−アミノ−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−３−クロロ−４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−｛(１Ｓ)−２−アミノ−１−[(３−フルオロフェニル)メチル]エチル｝−３−クロロ−４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−[(１Ｓ)−２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−３−クロロ−４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−((１Ｓ)−２−アミノ−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,３−トリアゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−((１Ｓ)−２−アミノ−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−４−(４−クロロ−１−メチル−１Ｈ−１,２,３−トリアゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−[(１Ｓ)−２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−４−(４−クロロ−１−メチル−１Ｈ−１,２,３−トリアゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−｛(１Ｓ)−２−アミノ−１−[(３−フルオロフェニル)メチル]エチル｝−４−(４−クロロ−１−メチル−１Ｈ−１,２,３−トリアゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−[(１Ｓ)−２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,３−トリアゾール−５−イル)ベンズアミド；および
Ｎ−｛(１Ｓ)−２−アミノ−１−[(３−フルオロフェニル)メチル]エチル｝−４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,３−トリアゾール−５−イル)ベンズアミド。
【請求項３】
請求項１記載の化合物および医薬上許容される担体を含む医薬組成物。
【請求項４】
医薬上許容される担体または希釈剤および請求項１記載の式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩の有効量を含む医薬組成物の調製方法であって、式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩を医薬上許容される担体または希釈剤と配合させることを含む方法。
【請求項５】
癌および関節炎から選択される疾患または状態の治療またはその重篤度の低下を必要とする哺乳動物における該疾患または状態を治療するかまたはその重篤度を低下させる方法であって、かかる哺乳動物に請求項１記載の式Ｉで示される化合物またはその医薬上許容される塩の治療上有効量を投与することを含む方法。
【請求項６】
哺乳動物がヒトである、請求項５記載の方法。
【請求項７】
癌および関節炎から選択される疾患または状態の治療またはその重篤度の低下を必要とする哺乳動物における該疾患または状態を治療するかまたはその重篤度を低下させる方法であって、かかる哺乳動物に請求項２記載の化合物の治療上有効量を投与することを含む方法。
【請求項８】
哺乳動物がヒトである、請求項７記載の方法。
【請求項９】
癌が、脳腫瘍（神経膠腫）、神経膠芽腫、白血病、バンナヤン−ゾナナ症候群、カウデン病、レルミット−デュクロ病、乳癌、炎症性乳癌、ウィルムス腫瘍、ユーイング肉腫、横紋筋肉腫、上衣腫、骨芽細胞腫、結腸癌、頭頚部癌、腎臓癌、肺癌、肝臓癌、黒色腫、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、肉腫、骨肉腫、骨巨細胞腫、甲状腺癌、
リンパ芽球性Ｔ細胞白血病、慢性骨髄性白血病、慢性リンパ球性白血病、ヘアリーセル白血病、急性リンパ芽球性白血病、急性骨髄性白血病、慢性好中球性白血病、急性リンパ芽球性Ｔ細胞白血病、プラズマ細胞腫、免疫芽球性大細胞型白血病、マントル細胞白血病、多発性骨髄腫、巨核芽球性白血病、多発性骨髄腫、急性巨核球性白血病、前骨髄球性白血病、赤白血病、
悪性リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、リンパ芽球性Ｔ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、濾胞性リンパ腫、
神経芽細胞腫、膀胱癌、尿路上皮癌、肺癌、外陰癌、子宮頚癌、子宮内膜癌、腎臓癌、中皮腫、食道癌、唾液腺癌、肝細胞癌、胃癌、上咽頭癌、口腔癌、口の癌、ＧＩＳＴ（胃腸間質性腫瘍）および精巣癌
から選択される、請求項５記載の方法。
【請求項１０】
癌が、脳（神経膠腫）、神経膠芽腫、白血病、バンナヤン−ゾナナ症候群、カウデン病、レルミット−デュクロ病、乳癌、炎症性乳癌、ウィルムス腫瘍、ユーイング肉腫、横紋筋肉腫、上衣腫、骨芽細胞腫、結腸癌、頭頚部癌、腎臓癌、肺癌、肝臓癌、黒色腫、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、肉腫、骨肉腫、骨巨細胞腫、甲状腺癌、
リンパ芽球性Ｔ細胞白血病、慢性骨髄性白血病、慢性リンパ球性白血病、ヘアリーセル白血病、急性リンパ芽球性白血病、急性骨髄性白血病、慢性好中球性白血病、急性リンパ芽球性Ｔ細胞白血病、プラズマ細胞腫、免疫芽球性大細胞型白血病、マントル細胞白血病、多発性骨髄腫、巨核芽球性白血病、多発性骨髄腫、急性巨核球性白血病、前骨髄球性白血病、赤白血病、
悪性リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、リンパ芽球性Ｔ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、濾胞性リンパ腫、
神経芽細胞腫、膀胱癌、尿路上皮癌、肺癌、外陰癌、子宮頚癌、子宮内膜癌、腎臓癌、中皮腫、食道癌、唾液腺癌、肝細胞癌、胃癌、上咽頭癌、口腔癌、口の癌、ＧＩＳＴ（胃腸間質性腫瘍）および精巣癌
から選択される、請求項７記載の方法。
【請求項１１】
癌および関節炎から選択される疾患または状態の治療またはその重篤度の低下に用いるための薬剤の製造における請求項１記載の式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩の使用。
【請求項１２】
Ａｋｔ活性の阻害を必要とする哺乳動物におけるＡｋｔ活性の阻害方法であって、かかる哺乳動物に請求項１記載の式Ｉで示される化合物またはその医薬上許容される塩の治療上有効量を投与することを含む方法。
【請求項１３】
哺乳動物がヒトである、請求項１２記載の方法。
【請求項１４】
癌の治療を必要とする哺乳動物における癌の治療方法であって、かかる哺乳動物に
ａ）  請求項１記載の式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩；および
ｂ）  少なくとも１種類の抗腫瘍剤
の治療上有効量を投与することを含む方法。
【請求項１５】
少なくとも１種類の抗腫瘍剤が、基本的に、微小管阻害薬、白金配位錯体、アルキル化剤、抗生物質製剤、トポイソメラーゼＩＩ阻害物質、代謝拮抗薬、トポイソメラーゼＩ阻害物質、ホルモンおよびホルモンアナログ、シグナル伝達経路阻害物質；非受容体型チロシンキナーゼ血管新生阻害物質；免疫療法剤；アポトーシス促進剤；ならびに細胞周期シグナル伝達阻害物質からなる群から選択される、請求項１４記載の方法。
【請求項１６】
少なくとも１種類の抗腫瘍剤が、ジテルペノイドおよびビンカアルカロイドから選択される微小管阻害薬である、請求項１４記載の方法。
【請求項１７】
少なくとも１種類の抗腫瘍剤がジテルペノイドである、請求項１６記載の方法。
【請求項１８】
少なくとも１種類の抗腫瘍剤がビンカアルカロイドである、請求項１６記載の方法。
【請求項１９】
少なくとも１種類の抗腫瘍剤が白金配位錯体である、請求項１５記載の方法。
【請求項２０】
少なくとも１種類の抗腫瘍剤が、パクリタキセル、カルボプラチンまたはビノレルビンである、請求項１４記載の方法。
【請求項２１】
少なくとも１種類の抗腫瘍剤がパクリタキセルである、請求項２０記載の方法。
【請求項２２】
少なくとも１種類の抗腫瘍剤がカルボプラチンである、請求項２０記載の方法。
【請求項２３】
少なくとも１種類の抗腫瘍剤がビノレルビンである、請求項２０記載の方法。
【請求項２４】
少なくとも１種類の抗腫瘍剤がシグナル伝達経路阻害物質である、請求項１４記載の方法。
【請求項２５】
シグナル伝達経路阻害物質が、ＶＥＧＦＲ２、ＴＩＥ２、ＰＤＧＦＲ、ＢＴＫ、ＩＧＦＲ−１、ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢ、ＴｒｋＣおよびｃ−ｆｍｓからなる群から選択される増殖因子受容体キナーゼの阻害物質である、請求項２４記載の方法。
【請求項２６】
シグナル伝達経路阻害物質が、ｒａｆｋ、ａｋｔ、およびＰＫＣ−ζからなる群から選択されるセリン／スレオニンキナーゼの阻害物質である、請求項２４記載の方法。
【請求項２７】
シグナル伝達経路阻害物質が、ｓｒｃファミリーのキナーゼから選択されるセリン／スレオニンキナーゼの阻害物質である、請求項２４記載の方法。
【請求項２８】
シグナル伝達経路阻害物質がｃ−ｓｒｃの阻害物質である、請求項２４記載の方法。
【請求項２９】
シグナル伝達経路阻害物質が、ファルネシルトランスフェラーゼおよびゲラニルゲラニルトランスフェラーゼの阻害物質から選択されるＲａｓオンコジーンの阻害物質である、請求項２４記載の方法。
【請求項３０】
シグナル伝達経路阻害物質が、ＰＩ３Ｋからなる群から選択されるセリン／スレオニンキナーゼの阻害物質である、請求項２４記載の方法。
【請求項３１】
少なくとも１種類の抗腫瘍剤が細胞周期シグナル伝達阻害物質である、請求項１４記載の方法。
【請求項３２】
細胞周期シグナル伝達阻害物質が、ＣＤＫ２、ＣＤＫ４およびＣＤＫ６群の阻害物質から選択される、請求項３１記載の方法。
【請求項３３】
治療に用いる請求項３記載の医薬的組合せ。
【請求項３４】
癌の治療に有用な薬剤の製造のための請求項１４記載の医薬的組合せの使用。
【請求項３５】
式（ＩＩ）：
【化２】
2010522770.tif 000117
［式中、
Ｑは、フェニル、置換フェニル、ベンジル、および芳香環が置換されているベンジルから選択され；
Ｒ1は、水素、トリフルオロメチル、ヒドロキシ、−Ｃ1〜Ｃ2アルキルおよびハロゲンから選択され；
Ｒ3は、水素、トリフルオロメチル、ヒドロキシ、−Ｃ1〜Ｃ2アルキルおよびハロゲンから選択され；
Ｌは、窒素および−Ｃ(Ｈ)−から選択され；
Ｐは、窒素および−Ｃ(Ｒ45)−から選択され（ここで、Ｒ45は、水素、−Ｃ1〜Ｃ4アルキルおよびハロゲンから選択される）；
Ａは、−Ｃ(Ｏ)−および−Ｎ(Ｈ)−から選択され；
Ｂは、−Ｃ(Ｏ)−および−Ｎ(Ｈ)−から選択され；
ＸおよびＹは、独立して、窒素、−Ｃ(Ｈ)−および−Ｃ(Ｒ2)−から選択され（ここで、Ｒ2は、ハロゲン、トリフルオロメチル、ヒドロキシおよび−Ｃ1〜Ｃ4アルキルから選択される）］
で示される化合物またはその医薬上許容される塩（ただし、
ＡおよびＢは同じものではなく；
ＰおよびＬのうち窒素であるのは多くても１つである）。
【請求項３６】
請求項３５記載の化合物および医薬上許容される担体を含む医薬組成物。
【請求項３７】
医薬上許容される担体または希釈剤および請求項３５記載の式（ＩＩ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩の有効量を含む医薬組成物の調製方法であって、式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩を医薬上許容される担体または希釈剤と配合させることを含む方法。
【請求項３８】
癌および関節炎から選択される疾患または状態の治療またはその重篤度の低下を必要とする哺乳動物における該疾患または状態を治療するかまたはその重篤度を低下させる方法であって、かかる哺乳動物に請求項３５記載の式ＩＩで示される化合物またはその医薬上許容される塩の治療上有効量を投与することを含む方法。
【請求項３９】
哺乳動物がヒトである、請求項３８記載の方法。
【請求項４０】
癌が、脳腫瘍（神経膠腫）、神経膠芽腫、白血病、バンナヤン−ゾナナ症候群、カウデン病、レルミット−デュクロ病、乳癌、炎症性乳癌、ウィルムス腫瘍、ユーイング肉腫、横紋筋肉腫、上衣腫、骨芽細胞腫、結腸癌、頭頚部癌、腎臓癌、肺癌、肝臓癌、黒色腫、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、肉腫、骨肉腫、骨巨細胞腫、甲状腺癌、
リンパ芽球性Ｔ細胞白血病、慢性骨髄性白血病、慢性リンパ球性白血病、ヘアリーセル白血病、急性リンパ芽球性白血病、急性骨髄性白血病、慢性好中球性白血病、急性リンパ芽球性Ｔ細胞白血病、プラズマ細胞腫、免疫芽球性大細胞型白血病、マントル細胞白血病、多発性骨髄腫、巨核芽球性白血病、多発性骨髄腫、急性巨核球性白血病、前骨髄球性白血病、赤白血病、
悪性リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、リンパ芽球性Ｔ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、濾胞性リンパ腫、
神経芽細胞腫、膀胱癌、尿路上皮癌、肺癌、外陰癌、子宮頚癌、子宮内膜癌、腎臓癌、中皮腫、食道癌、唾液腺癌、肝細胞癌、胃癌、上咽頭癌、口腔癌、口の癌、ＧＩＳＴ（胃腸間質性腫瘍）および精巣癌
から選択される、請求項３８記載の方法。
【請求項４１】
癌および関節炎から選択される疾患または状態の治療またはその重篤度の低下に用いるための薬剤の製造における請求項３５記載の式（ＩＩ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩の使用。
【請求項４２】
Ａｋｔ活性の阻害を必要とする哺乳動物におけるＡｋｔ活性の阻害方法であって、かかる哺乳動物に請求項３５記載の式ＩＩで示される化合物またはその医薬上許容される塩の治療上有効量を投与することを含む方法。
【請求項４３】
哺乳動物がヒトである、請求項４２記載の方法。
【請求項４４】
癌の治療を必要とする哺乳動物における癌の治療方法であって、かかる哺乳動物に
ａ）  請求項３５記載の式（ＩＩ）で示される化合物および／またはその医薬上許容される塩；および
ｂ）  少なくとも１種類の抗腫瘍剤
の治療上有効量を投与することを含む方法。
【請求項４５】
少なくとも１種類の抗腫瘍剤が、基本的に、微小管阻害薬、白金配位錯体、アルキル化剤、抗生物質製剤、トポイソメラーゼＩＩ阻害物質、代謝拮抗薬、トポイソメラーゼＩ阻害物質、ホルモンおよびホルモンアナログ、シグナル伝達経路阻害物質；非受容体型チロシンキナーゼ血管新生阻害物質；免疫療法剤；アポトーシス促進剤；ならびに細胞周期シグナル伝達阻害物質から選択される、請求項４４記載の方法。
【請求項４６】
少なくとも１種類の抗腫瘍剤が、ジテルペノイドおよびビンカアルカロイドから選択される微小管阻害薬である、請求項４４記載の方法。
【請求項４７】
少なくとも１種類の抗腫瘍剤がジテルペノイドである、請求項４６記載の方法。
【請求項４８】
少なくとも１種類の抗腫瘍剤がビンカアルカロイドである、請求項４６記載の方法。
【請求項４９】
少なくとも１種類の抗腫瘍剤が白金配位錯体である、請求項４５記載の方法。
【請求項５０】
少なくとも１種類の抗腫瘍剤が、パクリタキセル、カルボプラチンまたはビノレルビンである、請求項４４記載の方法。
【請求項５１】
少なくとも１種類の抗腫瘍剤がパクリタキセルである、請求項５０記載の方法。
【請求項５２】
少なくとも１種類の抗腫瘍剤がカルボプラチンである、請求項５０記載の方法。
【請求項５３】
少なくとも１種類の抗腫瘍剤がビノレルビンである、請求項５０記載の方法。
【請求項５４】
少なくとも１種類の抗腫瘍剤がシグナル伝達経路阻害物質である、請求項４４記載の方法。
【請求項５５】
シグナル伝達経路阻害物質が、ＶＥＧＦＲ２、ＴＩＥ２、ＰＤＧＦＲ、ＢＴＫ、ＩＧＦＲ−１、ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢ、ＴｒｋＣおよびｃ−ｆｍｓからなる群から選択される増殖因子受容体キナーゼの阻害物質である、請求項５４記載の方法。
【請求項５６】
シグナル伝達経路阻害物質が、ｒａｆｋ、ａｋｔ、およびＰＫＣ−ζからなる群から選択されるセリン／スレオニンキナーゼの阻害物質である、請求項５４記載の方法。
【請求項５７】
シグナル伝達経路阻害物質が、ｓｒｃファミリーのキナーゼから選択されるセリン／スレオニンキナーゼの阻害物質である、請求項５４記載の方法。
【請求項５８】
シグナル伝達経路阻害物質がｃ−ｓｒｃの阻害物質である、請求項５４記載の方法。
【請求項５９】
シグナル伝達経路阻害物質が、ファルネシルトランスフェラーゼおよびゲラニルゲラニルトランスフェラーゼの阻害物質から選択されるＲａｓオンコジーンの阻害物質である、請求項５４記載の方法。
【請求項６０】
シグナル伝達経路阻害物質が、ＰＩ３Ｋからなる群から選択されるセリン／スレオニンキナーゼの阻害物質である、請求項５４記載の方法。
【請求項６１】
少なくとも１種類の抗腫瘍剤が細胞周期シグナル伝達阻害物質である、請求項４４記載の方法。
【請求項６２】
細胞周期シグナル伝達阻害物質が、ＣＤＫ２、ＣＤＫ４およびＣＤＫ６群の阻害物質から選択される、請求項６１記載の方法。
【請求項６３】
治療に用いる請求項２記載の医薬的組合せ。
【請求項６４】
癌の治療に有用な薬剤の製造のための請求項４４記載の医薬的組合せの使用。
【請求項６５】
以下のものから選択される請求項３５記載の化合物またはその医薬上許容される塩：
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−２−ピリジンカルボキサミド；
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−６−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−２−ピリジンカルボキサミド；
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−５−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−３−ピリジンカルボキサミド；
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−２−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−４−ピリジンカルボキサミド；
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−３−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−３−クロロ−５−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−２−クロロ−５−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−４−クロロ−３−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−((１Ｓ)−２−アミノ−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−４−クロロ−３−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミド；および
３−アミノ−Ｎ−[３−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)フェニル]−２−(フェニルメチル)プロパンアミド。
【請求項６６】
癌および関節炎から選択される疾患または状態の治療またはその重篤度の低下を必要とする哺乳動物における該疾患または状態を治療するかまたはその重篤度を低下させる方法であって、かかる哺乳動物に請求項６５記載の化合物の治療上有効量を投与することを含む方法。
【請求項６７】
哺乳動物がヒトである、請求項６６記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規ピラゾール化合物、プロテインキナーゼＢ（以下、ＰＫＢ／Ａｋｔ、ＰＫＢまたはＡｋｔ）活性の阻害物質としての、そして、癌および関節炎の治療におけるかかる化合物の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
本発明は、セリン／スレオニンキナーゼ、Ａｋｔ（プロテインキナーゼＢとしても知られている）の１種類またはそれ以上のアイソフォームの活性の阻害物質である１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｃ]ピリジン−２−イル含有化合物に関する。本発明はまた、該化合物を含む医薬組成物ならびに癌および関節炎の治療において該化合物を使用する方法に関する（非特許文献１）。
【０００３】
アポトーシス（プログラム細胞死）は、胚発生、ならびに神経変性疾患、心血管疾患および癌のような種々の疾患の病因において重要な役割を果たす。最近の研究では、プログラム細胞死の調節または遂行に関与する様々なアポトーシス促進遺伝子産物および抗アポトーシス遺伝子産物が同定された。Ｂｃｌ２またはＢｃｌ−ｘLのような抗アポトーシス遺伝子の発現は様々な刺激によって誘発されるアポトーシス細胞死を阻害する。他方、ＢａｘまたはＢａｄのようなアポトーシス促進遺伝子の発現はプログラム細胞死へと至らしめる（非特許文献２）。プログラム細胞死の遂行は、カスパーゼ−３、カスパーゼ−７、カスパーゼ−８およびカスパーゼ−９などを含むカスパーゼ−１関連プロテイナーゼによって媒介される（非特許文献３）。
【０００４】
ホスファチジルイノシトール３'−ＯＨキナーゼ（ＰＩ３Ｋ）／Ａｋｔ／ＰＫＢ経路は、細胞生存／細胞死を調節するのに重要であると思われる（非特許文献４；非特許文献５；非特許文献６；非特許文献７；非特許文献８）。血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）、神経成長因子（ＮＧＦ）およびインスリン様増殖因子−１（ＩＧＦ−ｌ）のような生存因子は、ＰＩ３Ｋの活性を誘発することによって様々な条件下での細胞生存を促進する（非特許文献４、非特許文献７）。活性ＰＩ３Ｋは、プレクストリンホモロジー（ＰＨ）−ドメインを含有するセリン／スレオニンキナーゼＡｋｔと結合してその活性を促進させるホスファチジルイノシトール(３,４,５)−トリホスフェート（ＰｔｄＩｎｓ(３,４,５)−Ｐ３）を生産させる（非特許文献９；非特許文献１０；非特許文献１１；非特許文献１２）。ＰＩ３ＫまたはドミナントネガティブＡｋｔ／ＰＫＢ変異体の特異的阻害物質は、これらの成長因子またはサイトカインの生存促進活性を消滅させる。ＰＩ３Ｋの阻害物質（ＬＹ２９４００２またはｗｏｒｔｍａｎｎｉｎ）が上流キナーゼによるＡｋｔ／ＰＫＢの活性化を遮断したことが従前に記載されている。加えて、構成的活性型ＰＩ３ＫまたはＡｋｔ／ＰＫＢ変異体の導入は、細胞が一般にアポトーシス細胞死を起こす条件下での細胞生存を促進する（非特許文献４、非特許文献８）。
【０００５】
ヒト腫瘍におけるＡｋｔレベルの分析により、Ａｋｔ２が有意な数の卵巣癌（非特許文献１３）および膵臓癌（非特許文献１４）において過剰発現されることが分かった。同様に、Ａｋｔ３は、乳癌細胞株および前立腺癌細胞株において過剰発現されることが判明した（非特許文献１５）。Ａｋｔ−２が卵巣癌の１２％において過剰発現したこと、そして、Ａｋｔの増幅が特に未分化腫瘍の５０％において頻繁であったことが立証され、Ａｋｔもまた腫瘍の攻撃性に関連する可能性があることが示唆されている（非特許文献１６）。乳癌、卵巣癌および前立腺癌におけるＡｋｔ１キナーゼ活性の増加が報告されている（非特許文献１７）。
【０００６】
ＰｔｄＩｎｓ(３,４,５)−Ｐ３の３'ホスフェートを特異的に除去するタンパク質および脂質ホスファターゼである腫瘍抑制物質ＰＴＥＮは、ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ経路の負の調節因子である（非特許文献１８、非特許文献１９、非特許文献２０）。ＰＴＥＮの生殖細胞系列変異はカウデン病のようなヒトの癌症候群の原因である（非特許文献２１）。ＰＴＥＮはヒトの腫瘍の大部分において欠失しており、機能性ＰＴＥＮを有しない腫瘍細胞株は高レベルの活性Ａｋｔを示す（非特許文献１８、非特許文献２２、非特許文献２３）。
【０００７】
これらの観察により、ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ経路が腫瘍形成において細胞生存またはアポトーシスを調節するための重要な役割を果たすことが実証される。
【０００８】
Ａｋｔ／ＰＫＢサブファミリーのセカンドメッセンジャー調節セリン／スレオニンプロテインキナーゼの３つのメンバーが同定され、それぞれ、Ａｋｔ１／ＰＫＢα、Ａｋｔ２／ＰＫＢβおよびＡｋｔ３／ＰＫＢγと称されている。このアイソフォームは、特に触媒ドメインをコードしている領域において相同である。Ａｋｔ／ＰＫＢは、ＰＩ３Ｋシグナル伝達に反応して生じるリン酸化事象によって活性化される。ＰＩ３Ｋは、膜イノシトールリン脂質をリン酸化して、Ａｋｔ／ＰＫＢのＰＨドメインと結合することが示されているセカンドメッセンジャーであるホスファチジル−イノシトール３,４,５−トリホスフェートおよびホスファチジルイノシトール３,４−ビスホスフェートを生じさせる。Ａｋｔ／ＰＫＢ活性化の現行モデルは、３'−リン酸化ホスホイノシチドによって該酵素を膜へ動員し、そこで上流キナーゼによるＡｋｔ／ＰＫＢの調節部位のリン酸化が生じることを提案している（非特許文献７；非特許文献２４；非特許文献２５）。
【０００９】
Ａｋｔ１／ＰＫＢαのリン酸化は２つの調節部位、触媒ドメイン活性化ループにおけるＴｈｒ308およびカルボキシ末端付近のＳｅｒ473で生じる（非特許文献２６および非特許文献２７）。Ａｋｔ２／ＰＫＢβおよびＡｋｔ３／ＰＫＢγにおいて等価な調節リン酸化部位が生じる。活性化ループ部位でＡｋｔ／ＰＫＢをリン酸化する上流キナーゼは、クローン化されており、３'−ホスホイノシチド依存性プロテインキナーゼ１（ＰＤＫ１）と称されている。ＰＤＫ１は、Ａｋｔ／ＰＫＢだけではなく、ｐ７０リボソームＳ６キナーゼ、ｐ９０ＲＳＫ、血清およびグルココルチコイド調節キナーゼ(ＳＧＫ）、ならびにプロテインキナーゼＣをもリン酸化する。カルボキシ末端付近のＡｋｔ／ＰＫＢの調節部位をリン酸化している上流キナーゼはまだ同定されていないが、最近の報告では、インテグリン結合キナーゼ（ＩＬＫ−１）、セリン／スレオニンプロテインキナーゼ、または自己リン酸化に関する役割が示唆されている。
【００１０】
Ａｋｔ活性化および活性の阻害は、ＬＹ２９４００２およびｗｏｒｔｍａｎｎｉｎのような阻害物質を用いてＰＩ３Ｋを阻害することによって行うことができる。しかしながら、ＰＩ３Ｋ阻害は、３種類のＡｋｔイソ酵素全てだけではなく、ＴｅｃファミリーのチロシンキナーゼのようなＰｄｔＩｎｓ(３,４,５)−Ｐ３に依存する他のＰＨドメイン含有シグナル伝達分子にも無差別的に影響を及ぼす可能性を有する。さらにまた、ＡｋｔがＰＩ３Ｋから独立している成長シグナルによって活性化され得ることが記載されている。
【００１１】
別法として、Ａｋｔ活性は、上流キナーゼＰＤＫ１の活性を遮断することによって阻害することができる。化合物ＵＣＮ−０１は、報告されたＰＤＫ１阻害物質である。非特許文献２８。さらに、ＰＤＫ１の阻害は、活性が非定型ＰＫＣアイソフォームのようなＰＤＫ１に左右される複数のプロテインキナーゼ、ＳＧＫおよびＳ６キナーゼの阻害を引き起こす（非特許文献２９）。
【００１２】
Ａｋｔの小分子阻害物質は、腫瘍、特に活性Ａｋｔを有する腫瘍（例えば、ＰＴＥＮヌル腫瘍、およびｒａｓ変異を有する腫瘍）の治療において有用である。ＰＴＥＮはＡｋｔの決定的な負の制御因子であり、その機能は、乳癌および前立腺癌を含む多くの癌、神経膠芽腫、ならびにバンナヤン−ゾナナ症候群（非特許文献３０）、カウデン病（非特許文献３１）およびレルミット−デュクロ病（非特許文献３２）を含む数種類の癌症候群において失われる。Ａｋｔの阻害はまた白血病の治療に関与していた（非特許文献３３）。Ａｋｔ３はエストロゲン受容体欠損型乳癌細胞株およびアンドロゲン非依存性前立腺癌細胞株においてアップレギュレートされ、Ａｋｔ２は膵臓癌および卵巣癌において過剰発現される。Ａｋｔ１は胃癌において増幅され（非特許文献３４）、そして、乳癌においてアップレギュレートされる（非特許文献３５）。したがって、小分子Ａｋｔ阻害物質はこれらのタイプの癌および他のタイプの癌の治療に有用であると予想される。Ａｋｔ阻害物質はまたさらなる化学療法剤と組み合わせても有用である。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００１３】
【非特許文献１】Liu et al. Current Opin. Pharmacology 3:317-22 (2003)
【非特許文献２】Adams et al. Science, 281:1322-1326 (1998)
【非特許文献３】Thornberry et al. Science, 281:1312-1316 (1998)
【非特許文献４】Kulik et al. Mol.Cell.Biol. 17:1595-1606 (1997)
【非特許文献５】Franke et al, Cell, 88:435-437 (1997)
【非特許文献６】Kauffmann-Zeh et al. Nature 385:544-548 (1997)
【非特許文献７】Hemmings Science, 275:628-630 (1997)
【非特許文献８】Dudek et al., Science, 275:661-665 (1997)
【非特許文献９】Franke et al Cell, 81:727-736 (1995)
【非特許文献１０】Hemmings Science, 277:534 (1997)
【非特許文献１１】Downward, Curr. Opin. Cell Biol. 10:262-267 (1998)
【非特許文献１２】Alessi et al., EMBO J. 15: 6541-6551 (1996)
【非特許文献１３】J. Q. Cheung et al. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 89:9267-9271(1992)
【非特許文献１４】J. Q. Cheung et al. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 93:3636-3641 (1996)
【非特許文献１５】Nakatani et al. J. Biol.Chem. 274:21528-21532 (1999)
【非特許文献１６】Bellacosa, et al., Int. J. Cancer, 64, pp. 280-285, 1995
【非特許文献１７】Sun et al. Am. J. Pathol. 159: 431-7 (2001)
【非特許文献１８】Li et al. Science 275:1943-1947 (1997)
【非特許文献１９】Stambolic et al. Cell 95:29-39 (1998)
【非特許文献２０】Sun et al. Proc. Nati. Acad. Sci. U.S.A. 96:6199-6204 (1999)
【非特許文献２１】Liaw et al. Nature Genetics 16:64-67 (1997)
【非特許文献２２】Guldberg et al. Cancer Research 57:3660-3663 (1997)
【非特許文献２３】Risinger et al. Cancer Research 57:4736-4738 (1997)
【非特許文献２４】B.A. Hemmings, Science 276:534 (1997)
【非特許文献２５】J. Downward, Science 279:673-674 (1998)
【非特許文献２６】D. R. Alessi et al. EMBO J. 15:6541-6551 (1996)
【非特許文献２７】R. Meier et al. J. Biol. Chem. 272:30491-30497 (1997)
【非特許文献２８】Biochem. J. 375(2):255 (2003)
【非特許文献２９】Williams et al. Curr. Biol. 10:439-448 (2000)
【非特許文献３０】Maehama, T. et al. Annual Review of Biochemistry, 70: 247 (2001)
【非特許文献３１】Parsons, R.; Simpson, L. Methods in Molecular Biology (Totowa, NJ, United States), 222 (Tumor Suppressor Genes, Volume 1): 147 (2003)
【非特許文献３２】Backman, S. et al. Current Opinion in Neurobiology, 12(5): 516 (2002)
【非特許文献３３】J.C. Byrd, S. Stilgenbauer and I.W. Flinn “Chronic lymphocytic leukemia.” Hematology ／ the Education Program of the American Society of Hematology. American Society of Hematology. Education Program  (2004), 163-83
【非特許文献３４】Staal, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 84: 5034-7 (1987)
【非特許文献３５】Stal et al. Breast Cancer Res. 5: R37-R44 (2003)
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
本発明は、Ａｋｔ／ＰＫＢの阻害物質である新規化合物を提供することを目的とする。
【００１５】
本発明はまた、本発明の方法において有用な医薬担体および化合物を含む医薬組成物を提供することを目的とする。
【００１６】
本発明はまた、このようなＡｋｔ／ＰＫＢ活性の阻害物質を投与することを含む、癌の治療方法を提供することを目的とする。
【００１７】
本発明はまた、このようなＡｋｔ／ＰＫＢ活性の阻害物質を投与することを含む、関節炎の治療方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１８】
（発明の概要）
本発明は、式（Ｉ）：
【化１】
2010522770.tif 000002
［式中、
Ｑは、フェニル、置換フェニル、ベンジル、および芳香環が置換されているベンジルから選択され；
Ｒ1は、水素、トリフルオロメチル、ヒドロキシ、−Ｃ1〜Ｃ2アルキルおよびハロゲンから選択され；
Ｌは、窒素および−Ｃ(Ｈ)−から選択され；
Ｐは、窒素および−Ｃ(Ｒ40)−から選択され（ここで、Ｒ40は、水素、−Ｃ1〜Ｃ4アルキルおよびハロゲンから選択される）；
Ａは、−Ｃ(Ｏ)−および−Ｎ(Ｈ)−から選択され；
Ｂは、−Ｃ(Ｏ)−および−Ｎ(Ｈ)−から選択され；
Ｘ、ＹおよびＺは、独立して、窒素、−Ｃ(Ｈ)−および−Ｃ(Ｒ2)−から選択される（ここで、Ｒ2は、ハロゲン、トリフルオロメチル、ヒドロキシおよび−Ｃ1〜Ｃ4アルキルから選択される）］
で示される新規化合物またはその医薬上許容される塩（ただし、
ＡおよびＢは同じものではなく；
Ｘ、ＹおよびＺは全てが窒素であるわけではなく；
ＰおよびＬのうち窒素であるのは多くても１つである）
に関する。
【００１９】
本発明は、式（ＩＩ）：
【化２】
2010522770.tif 000003
［式中、
Ｑは、フェニル、置換フェニル、ベンジル、および芳香環が置換されているベンジルから選択され；
Ｒ1は、水素、トリフルオロメチル、ヒドロキシ、−Ｃ1〜Ｃ2アルキルおよびハロゲンから選択され；
Ｒ3は、水素、トリフルオロメチル、ヒドロキシ、−Ｃ1〜Ｃ2アルキルおよびハロゲンから選択され；
Ｌは、窒素および−Ｃ(Ｈ)−から選択され；
Ｐは、窒素および−Ｃ(Ｒ45)−から選択され（ここで、Ｒ45は、水素、−Ｃ1〜Ｃ4アルキルおよびハロゲンから選択される）；
Ａは、−Ｃ(Ｏ)−および−Ｎ(Ｈ)−から選択され；
Ｂは、−Ｃ(Ｏ)−および−Ｎ(Ｈ)−から選択され；そして、
ＸおよびＹは、独立して、窒素、−Ｃ(Ｈ)−および−Ｃ(Ｒ2)−から選択され（ここで、Ｒ2は、ハロゲン、トリフルオロメチル、ヒドロキシおよび−Ｃ1〜Ｃ4アルキルから選択される）］
で示される新規化合物またはその医薬上許容される塩（ただし、
ＡおよびＢは同じものではなく；そして、
ＰおよびＬのうち窒素であるのは多くても１つである）
に関する。
【００２０】
本発明は、癌の治療方法であって、該治療を必要とする対象体に式（Ｉ）または式（ＩＩ）で示されるＡｋｔ／ＰＫＢ阻害化合物の有効量を投与することを含む方法に関する。
【００２１】
本発明は、関節炎の治療方法であって、該治療を必要とする対象体に式（Ｉ）または式（ＩＩ）で示されるＡｋｔ／ＰＫＢ阻害化合物の有効量を投与することを含む方法に関する。
【００２２】
本発明はまた、式（Ｉ）および式（ＩＩ）で示される化合物がＡｋｔ／ＰＫＢの阻害物質として活性であるという知見に関する。
【００２３】
本発明のさらなる態様では、本発明のＡｋｔ／ＰＫＢ阻害化合物の製造に有用な新規製造方法が提供される。
【００２４】
本発明は、本発明の方法に有用な医薬担体および化合物を含む医薬組成物を包含する。
【００２５】
また、本発明は、本発明のＡｋｔ／ＰＫＢ阻害化合物をさらなる活性成分と一緒に共投与する方法を包含する。
【発明を実施するための形態】
【００２６】
（発明の詳細な説明）
本発明は、上記式（Ｉ）および式（ＩＩ）で示される化合物に関する。
【００２７】
本発明の式（Ｉ）および式（ＩＩ）で示される化合物は、Ａｋｔ／ＰＫＢ活性を阻害する。特に、本明細書に記載された化合物は、３種類のＡｋｔ／ＰＫＢアイソフォームの各々を阻害する。
【００２８】
式（Ｉ）で示される本発明の化合物には、式（ＩＡ）：
【化３】
2010522770.tif 000004
［式中、
Ｑは、フェニル、置換フェニル、ベンジル、および芳香環が置換されているベンジルから選択され；
Ｒ1は、水素、−Ｃ1〜Ｃ2アルキルおよびハロゲンから選択され；
Ｒ4は、水素、−Ｃ1〜Ｃ4アルキルおよびハロゲンから選択され；
Ａは、−Ｃ(Ｏ)−および−Ｎ(Ｈ)−から選択され；
Ｂは、−Ｃ(Ｏ)−および−Ｎ(Ｈ)−から選択され；そして、
Ｘ、ＹおよびＺは、独立して、窒素、−Ｃ(Ｈ)−および−Ｃ(Ｒ2)−から選択され（ここで、Ｒ2は、ハロゲンおよび−Ｃ1〜Ｃ4アルキルから選択される）］
で示される化合物またはその医薬上許容される塩（ただし、
ＡおよびＢは同じものではなく；そして、
Ｘ、ＹおよびＺは全てが窒素であるわけではない）
が含まれる。
【００２９】
式（ＩＩ）で示される本発明の化合物には、式（ＩＩＡ）：
【化４】
2010522770.tif 000005
［式中、
Ｑは、フェニル、置換フェニル、ベンジル、および芳香環が置換されているベンジルから選択され；
Ｒ1は、水素、−Ｃ1〜Ｃ2アルキルおよびハロゲンから選択され；
Ｒ3は、水素、−Ｃ1〜Ｃ2アルキルおよびハロゲンから選択され；
Ａは、−Ｃ(Ｏ)−および−Ｎ(Ｈ)−から選択され；
Ｂは、−Ｃ(Ｏ)−および−Ｎ(Ｈ)−から選択され；そして、
ＸおよびＹは、独立して、窒素、−Ｃ(Ｈ)−および−Ｃ(Ｒ2)−から選択され（ここで、Ｒ2は、ハロゲンおよび−Ｃ1〜Ｃ4アルキルから選択される）］
で示される化合物またはその医薬上許容される塩（ただし、
ＡおよびＢは同じものではない）
が含まれる。
【００３０】
式（Ｉ）および式（ＩＩ）で示される本発明の化合物には以下の化合物またはその医薬上許容される塩が含まれる：
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−５−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−２−ピリジンカルボキサミド；
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−６−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−３−ピリジンカルボキサミド；
Ｎ−(２−アミノ−１−ベンジルエチル)−５−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ピリミジン−２−カルボキサミド；
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−２−クロロ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−３−クロロ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−３−(トリフルオロメチル)ベンズアミド；
Ｎ−((１Ｓ)−２−アミノ−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−５−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−２−ピリジンカルボキサミド；
Ｎ−((１Ｓ)−２−アミノ−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−３−クロロ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−４−クロロ−５−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−２−ピリジンカルボキサミド；
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−２−ピリジンカルボキサミド；
【００３１】
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−６−クロロ−５−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−２−ピリジンカルボキサミド；
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−６−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−２−ピリジンカルボキサミド；
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−５−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−３−ピリジンカルボキサミド；
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−２−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−４−ピリジンカルボキサミド；
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−３−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−３−メチル−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−((１Ｓ)−２−アミノ−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−３−フルオロ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−((１Ｓ)−２−アミノ−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−３−メチル−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−３−ヒドロキシ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−３−フルオロ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−３−クロロ−５−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−２−クロロ−５−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミド；
【００３２】
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−４−クロロ−３−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−((１Ｓ)−２−アミノ−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−４−クロロ−５−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−２−ピリジンカルボキサミド；
Ｎ−((１Ｓ)−２−アミノ−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−４−クロロ−３−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−４−(４−クロロ−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−３−フルオロベンズアミド；
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−３−クロロ−４−(４−クロロ−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−((１Ｓ)−２−アミノ−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−３−フルオロ−４−(４−クロロ−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−((１Ｓ)−２−アミノ−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−３−クロロ−４−(４−クロロ−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−３−ブロモ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−((１Ｓ)−２−アミノ−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−３−ブロモ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミド；
３−アミノ−Ｎ−[３−クロロ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)フェニル]−２−フェニルプロパンアミド；
３−アミノ−Ｎ−[３−クロロ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)フェニル]−２−(フェニルメチル)プロパンアミド；
３−アミノ−Ｎ−[３−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)フェニル]−２−(フェニルメチル)プロパンアミド；
【００３３】
Ｎ−((１Ｓ)−２−アミノ−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−[(１Ｓ)−２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−｛(１Ｓ)−２−アミノ−１−[(３−フルオロフェニル)メチル]エチル｝−４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−((１Ｓ)−２−アミノ−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−３−クロロ−４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−｛(１Ｓ)−２−アミノ−１−[(３−フルオロフェニル)メチル]エチル｝−３−クロロ−４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−[(１Ｓ)−２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−３−クロロ−４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−((１Ｓ)−２−アミノ−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,３−トリアゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−((１Ｓ)−２−アミノ−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−４−(４−クロロ−１−メチル−１Ｈ−１,２,３−トリアゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−[(１Ｓ)−２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−４−(４−クロロ−１−メチル−１Ｈ−１,２,３−トリアゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−｛(１Ｓ)−２−アミノ−１−[(３−フルオロフェニル)メチル]エチル｝−４−(４−クロロ−１−メチル−１Ｈ−１,２,３−トリアゾール−５−イル)ベンズアミド；
Ｎ−[(１Ｓ)−２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,３−トリアゾール−５−イル)ベンズアミド；および
Ｎ−｛(１Ｓ)−２−アミノ−１−[(３−フルオロフェニル)メチル]エチル｝−４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,３−トリアゾール−５−イル)ベンズアミド。
【００３４】
式（Ｉ）および式（ＩＩ）で示される化合物は、本発明の医薬組成物中に含まれ、本発明の方法で使用される。
【００３５】
本明細書に記載の化合物のある種のものは、１個またはそれ以上のキラル原子を含んでいてもよく、または、２種類のエナンチオマーとして存在することが可能である。したがって、本発明の化合物は、エナンチオマーの混合物および精製したエナンチオマーまたは鏡像異性的に豊富な混合物を包含する。また、全ての互変異性体および互変異性体の混合物が式（Ｉ）および式（ＩＩ）で示される化合物の範囲内に含まれると解される。
【００３６】
本明細書に記載のある種の化合物は、溶質（本発明では、式（Ｉ）で示される化合物もしくはその塩、または式（ＩＩ）で示される化合物もしくはその塩）および溶媒によって形成される可変化学量の錯体であると解される溶媒和物を形成することができる。本発明の目的のためのかかる溶媒は、溶質の生物学的活性を妨げない。好適な溶媒の例としては、水、メタノール、エタノールおよび酢酸が挙げられるが、これらに限定されるものではない。好ましくは、使用される溶媒は、医薬上許容される溶媒である。好適な医薬上許容される溶媒の例としては、水、エタノールおよび酢酸が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００３７】
本明細書で用いられる場合、単独で用いられるかまたは「−(ＣＨ2)mアリール」におけるような大きな分子の一部として用いられる「アリール」なる用語およびその派生語は、特に明記しない限り、フェニル、ナフタレン、テトラヒドロナフタレンおよびビフェニルのような、合計５〜１４個の環原子を有する単環式、二環式および三環式環系（ここで、少なくとも１つの環系は芳香族であり、該系における各環は３〜７個の環原子を含有する）を意味する。
【００３８】
本明細書で用いられる場合、単独で用いられるかまたは「−(ＣＨ2)mＣ5〜Ｃ12アリール」におけるような大きな分子の一部として用いられる「Ｃ5〜Ｃ12アリール」なる用語は、フェニル、ナフタレン、テトラヒドロナフタレンおよびビフェニルから選択される芳香族基を意味する。
【００３９】
本明細書で用いられる場合、「置換されている」なる用語は、特に明記しない限り、対象の化学基が、−ＣＯ2Ｒ20、Ｃ1〜Ｃ4アルキル、ヒドロキシＣ1〜Ｃ4アルキル、Ｃ1〜Ｃ4アルキルオキシ、アミノ、Ｃ1〜Ｃ4アルキルアミノ、アミノＣ1〜Ｃ4アルキル、ジＣ1〜Ｃ4アルキルアミノ、ヒドロキシ、ニトロ、テトラゾール、シアノ、オキソ、ハロゲンおよびトリフルオロメチルからなる群から選択される（ここで、Ｒ20は、水素、Ｃ1〜Ｃ4アルキルおよびトリフルオロメチルから選択される）１〜５個の置換基、好適には１〜３個の置換基を有することを意味する。
【００４０】
好適には、本明細書で用いられる場合、「置換されている」なる用語は、対象化学基が、Ｃ1〜Ｃ4アルキル、ヒドロキシＣ1〜Ｃ4アルキル、Ｃ1〜Ｃ4アルキルオキシ、アミノ、Ｃ1〜Ｃ4アルキルアミノ、アミノＣ1〜Ｃ4アルキル、ヒドロキシ、テトラゾール、ハロゲンおよびトリフルオロメチルからなる群から選択される１〜３個の置換基を有することを意味する。
【００４１】
好適には、本明細書で用いられる場合、「置換されている」なる用語は、対象化学基が、フッ素およびトリフルオロメチルからなる群から選択される、１個の置換基を有することを意味する。
【００４２】
本明細書で用いられる場合、「ヘテロ原子」なる用語は、酸素、窒素および硫黄を意味する。
【００４３】
本明細書で用いられる場合、「ハロゲン」なる用語は、臭素、ヨウ素、塩素およびフッ素から選択される置換基を意味する。
【００４４】
本明細書で用いられる場合、「−(ＣＨ2)n」なる用語、「−(ＣＨ2)m」なる用語および類似のものによって定義されるアルキル鎖を包含する「アルキル」およびその派生語ならびに全ての炭素鎖における派生語は、直鎖状または分枝鎖状の飽和または不飽和炭化水素鎖を意味し、特に明記しない限り、該炭素鎖は１〜１２個の炭素原子を含有する。本明細書で用いられる場合、アルキルの例としては、−ＣＨ3、−ＣＨ2−ＣＨ3、−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ3、−ＣＨ(ＣＨ3)2、−ＣＨ2−ＣＨ2−Ｃ(ＣＨ3)3、−Ｃ≡Ｃ−Ｃ(ＣＨ3)3、−Ｃ(ＣＨ3)3、−(ＣＨ2)3−ＣＨ3、−ＣＨ2−ＣＨ(ＣＨ3)2、−ＣＨ(ＣＨ3)−ＣＨ2−ＣＨ3、−ＣＨ＝ＣＨ2および−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ3が挙げられる。
【００４５】
本明細書で用いられる場合、「治療する」なる用語およびその派生語は、予防的治療および治療的治療を意味する。予防的治療は、例えば、対象体が癌を発生するリスクが高いと考えられる場合または対象体が発癌性物質に暴露された場合に適している。
【００４６】
本明細書で用いられる場合、「治療的な程度に」、「治療する」および「治療上有効な量」なる語句およびその派生語は、特に明記しない限り、例えば研究者または臨床医の標的となる組織、系、動物またはヒトの生物学的または医学的応答を引き起こす薬物または薬剤の量を意味する。さらにまた、「治療上有効な量」なる用語は、このような量を投与されない対応する対象体と比べて、所定の癌の改善された治療、治癒、予防、重篤度の低下または寛解をもたらす量を意味する。
【００４７】
本発明の化合物の医薬上許容される塩は、当業者によって容易に調製される。
【００４８】
式（Ｉ）および式（ＩＩ）で示される化合物は本発明の医薬組成物中に含まれ、本発明の方法で使用される。−ＣＯＯＨ基または−ＯＨ基が存在する場合、医薬上許容されるエステル、例えば、−ＣＯＯＨに関しては、メチル、エチル、ピバロイルオキシメチルおよび同類のもの、そして、−ＯＨに関しては、アセテート、マレエートおよび同類のものを用いることができ、これらのエステルは、当該技術分野において、徐放性製剤またはプロドラッグ製剤として用いるために溶解特性または加水分解特性を変更することが知られている。
【００４９】
式（Ｉ）および式（ＩＩ）で示される化合物は、下記スキーム１〜３において、または類似の方法によって、調製される。出発物質は全て、市販品であるか、当業者によって市販の出発物質から容易に製造されるか、または、実験セクションに特に明記しない限り文献のレポートに従って調製される。
【００５０】
【化５】
2010522770.tif 000006
【００５１】
試薬：（ａ）フタルイミド、ＰＰｈ3、ＤＥＡＤ、ＴＨＦ、室温；（ｂ）ＮＨ2ＮＨ2、ＭｅＯＨ、５０℃。
【００５２】
アミノアルコール（Ｉ−１）をミツノブ条件下にて反応させて、別々に保護されたジアミン（Ｉ−２）を得た。ミツノブ反応は有機合成分野の当業者に周知である。かかる変換のための方法および反応条件は、Synthesis 1981, 1-28に述べられている。メタノールのような極性溶媒中にてヒドラジンまたはメチルアミンのような求核アミンを用いて、（Ｉ−２）のフタルイミド基の選択的脱保護を行ってアミン（Ｉ−３）を得た。様々な保護基が当業者に利用可能であり、本明細書に挙げられた方法を妨げない限りそれらを使用することができる。アミンの保護方法は、Greene “Protective Groups in Organic Synthesis”(published by Wiley-Interscience)のような標準参考書に記載されている。
【００５３】
【化６】
2010522770.tif 000007
【００５４】
試薬：（ａ）ＰｙＢｒｏｐ、(ｉ−Ｐｒ)2ＮＥｔ、(２−アミノ−３−フェニルプロピル)カルバミン酸１,１−ジメチルエチル、ＤＣＭ、室温；（ｂ）５−(５,５−ジメチル−１,３,２−ジオキサボリナン−２−イル)−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール、Ｋ2ＣＯ3、Ｐｄ(ＰＰｈ3)4、ジオキサン／Ｈ2Ｏ；（ｃ）ＨＣｌ／ジオキサン、ＭｅＯＨ、室温。
【００５５】
カルボン酸（ＩＩ−１）を(２−アミノ−３−フェニルプロピル)カルバミン酸１,１−ジメチルエチルと反応させてアミド（ＩＩ−２）を得た。ＥＤＣ、ＰｙＢｒｏｐ等のような様々なアミドカップリング試薬が商業的に入手可能である。アミドカップリング反応は、一般に、Ｅｔ3Ｎまたは(ｉ−Ｐｒ)2ＮＥｔのような有機塩基を用いてＤＣＭまたはＤＭＦのような溶媒中で行われる。スズキ・カップリング法を用いて臭化物（ＩＩ−２）を５−(５,５−ジメチル−１,３,２−ジオキサボリナン−２−イル)−１−メチル−１Ｈ−ピラゾールとカップリングさせた。スズキ法のようなカップリングは、典型的には、ＤＭＥ、ジオキサンまたはＴＨＦのようなエーテル系溶媒を含有する水性混合物中にて無機塩基（例えば、Ｋ2ＣＯ3、Ｎa2ＣＯ3またはＫ3ＰＯ4）と一緒にＰｄ(ＰＰｈ3)4のようなパラジウム(０)触媒を用いて行われる。パラジウム介在カップリング方法は、Schlosser “Organometallics in Synthesis”(published by Wiley and sons)のような標準参考書に記載されている。ＩＩ−３のＨＣｌまたはＴＦＡによる酸性処理によってＢｏｃ保護基を除去してアミン（ＩＩ−４）を得た。様々な保護基が当業者に利用可能であり、本明細書に挙げられた方法を妨げない限りそれらを使用することができる。アミンの保護方法は、Greene “Protective Groups in Organic Synthesis”(published by Wiley-Interscience)のような標準参考書に記載されている。
【００５６】
【化７】
2010522770.tif 000008
【００５７】
試薬：（ａ）Ｐｄ(ＰＰｈ3)2Ｃｌ2、Ｅｔ3Ｎ、トルエン、１００℃；（ｂ）２Ｎ ＮａＯＨ、ＴＨＦ；（ｃ）ＰｙＢｒｏｐ、(ｉ−Ｐｒ)2ＮＥｔ、ＤＣＭ、室温；（ｄ）ＮＣＳ、ＤＭＦ、５０℃；（ｅ）ヒドラジン・水和物、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ。
【００５８】
Ｓｔｉｌｌｅカップリング法を用いて１−メチル−５−(トリブチルスタンナニル)−１Ｈ−１,２,３−トリアゾール（ＩＩＩ−Ｉ）を４−ブロモ安息香酸メチル（ＩＩＩ−２）とカップリングさせた。Ｓｔｉｌｌｅ法のようなカップリングは、典型的には、トルエン、ＤＭＦおよびジオキサン中にて有機塩基（例えば、Ｅｔ3Ｎ）と一緒にＰｄ(ＰＰｈ3)4のようなパラジウム(０)触媒によって触媒される。パラジウム介在カップリング方法は、Schlosser “Organometallics in Synthesis”(published by Wiley and sons)のような標準参考書に記載されている。カルボン酸（ＩＩＩ−３）を２−｛(２Ｓ)−２−アミノ−３−[２−(トリフルオロメチル)フェニル]プロピル｝−１Ｈ−イソインドール−１,３(２Ｈ)−ジオンと反応させてアミド（ＩＩＩ−５）を得た。ＥＤＣ、ＰｙＢｒｏｐ等のような様々なアミドカップリング試薬が商業的に入手可能である。アミドカップリング反応は、一般に、Ｅｔ3Ｎまたは(ｉ−Ｐｒ)2ＮＥｔのような有機塩基を用いてＤＣＭまたはＤＭＦのような溶媒中にて行われる。ＤＭＦ中にてＮＣＳを用いてトリアゾールの塩素化を行った。ＩＩＩ−６のヒドラジン・水和物による処理によってフタルイミド保護基を除去してアミン（ＩＩＩ−７）を得た。
【００５９】
本明細書で用いられる場合、「共投与」なる用語およびその派生語は、本明細書に記載されているようなＡＫＴ阻害化合物、および化学療法および放射線療法を含む癌の治療に有用であることまたは関節炎の治療に有用であることが知られているさらなる活性成分の同時投与またはあらゆる種類の別々の連続投与を意味する。本明細書で用いられる場合、さらなる活性成分なる用語は、癌または関節炎の治療を必要とする患者に投与した場合に有利な特性を示すことが知られているかまたは該特性を示す化合物または治療薬を含む。好ましくは、投与が同時ではない場合、これらの化合物は、お互いに近接した時間で投与される。さらにまた、化合物が同一剤形で投与されるかどうかは問題ではなく、例えば、１つの化合物が局所投与され、別の化合物が経口投与されてもよい。
【００６０】
典型的には、本発明の癌の治療において、治療される感受性腫瘍に対する活性を有する抗腫瘍剤を共投与することができる。かかる薬剤の例は、Cancer Principles and Practice of Oncology by V.T. Devita and S. Hellman (editors), 6th edition (February 15, 2001), Lippincott Williams & Wilkins Publishersに見ることができる。当業者は、薬剤および関係する癌の個々の特徴に基づいて薬剤のどの組合せが有用であるか識別することができる。本発明に有用な典型的な抗腫瘍剤としては、ジテルペノイドおよびビンカアルカロイドのような微小管阻害薬；白金配位錯体；ナイトロジェンマスタード、オキサザホスホリン、アルキルスルホネート、ニトロソ尿素およびトリアゼンのようなアルキル化剤；アントラサイクリン、アクチノマイシンおよびブレオマイシンのような抗生物質製剤；エピポドフィロトキシンのようなトポイソメラーゼＩＩ阻害物質；プリンおよびピリミジンアナログならびに葉酸代謝拮抗化合物のような代謝拮抗薬；カンプトテシンのようなトポイソメラーゼＩ阻害物質；ホルモンおよびホルモンアナログ；シグナル伝達経路阻害物質；非受容体型チロシンキナーゼ血管新生阻害物質；免疫療法剤；アポトーシス促進剤；および細胞周期シグナル伝達阻害物質が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００６１】
本発明のＡＫＴ阻害化合物と組み合わせて使用するためまたは共投与するためのさらなる活性成分（抗腫瘍剤）の例は化学療法剤である。
【００６２】
微小管阻害薬または有糸分裂阻害薬は、細胞周期のＭ期または有糸分裂期の間、腫瘍細胞の微小管に対して活性な期特異的薬剤である。微小管阻害薬の例としては、ジテルペノイドおよびビンカアルカロイドが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００６３】
天然原料由来のジテルペノイドは細胞周期のＧ2／Ｍ期で効果をもたらす期特異的抗癌剤である。ジテルペノイドは、このタンパク質と結合することによって微小管のβ−チューブリンサブユニットを安定化させると思われる。タンパク質の分解は、有糸分裂の停止および細胞死の続行を伴って阻害されると考えられる。ジテルペノイドの例としては、パクリタキセルおよびそのアナログ、ドセタキセルが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００６４】
パクリタキセル、５β,２０−エポキシ−１,２α,４,７β,１０β,１３α−ヘキサ−ヒドロキシタクス−１１−エン−９−オン４,１０−ジ酢酸エステル２−安息香酸エステルの(２Ｒ,３Ｓ)−Ｎ−ベンゾイル−３−フェニルイソセリンとの１３−エステルは、タイヘイヨウイチイTaxus brevifoliaから単離された天然ジテルペンであり、注射液ＴＡＸＯＬ（登録商標）として商業的に入手可能である。それは、タキサンファミリーのテルペンの一員である。それは、まず、１９７１年に、化学的およびＸ線結晶学的方法によってその構造を特徴付けたWaniらによって単離された（J. Am. Chem, Soc., 93:2325. 1971）。その活性についての一のメカニズムは、パクリタキセルのチューブリン結合能に関連しており、それにより、癌細胞増殖を阻害する。Schiff et al., Proc. Natl, Acad, Sci. USA, 77:1561-1565(1980)；Schiff et al., Nature, 277:665-667(1979)；Kumar, J. Biol, Chem, 256: 10435-10441(1981)。いくつかのパクリタキセル誘導体の合成および抗癌活性の概説については以下の文献を参照：D. G. I. Kingston et al., Studies in Organic Chemistry vol. 26, entitled “New trends in Natural Products Chemistry 1986”, Attaur-Rahman, P.W. Le Quesne, Eds. (Elsevier, Amsterdam, 1986) pp 219-235。
【００６５】
パクリタキセルは、米国では難治性卵巣癌の治療（Markman et al., Yale Journal of Biology and Medicine, 64:583, 1991；McGuire et al., Ann. lntem, Med., 111:273, 1989）および乳癌の治療（Holmes et al., J. Nat. Cancer Inst., 83:1797,1991.）において臨床用に承認されている。それは、皮膚における新生物（Einzig et. al., Proc. Am. Soc. Clin. Oncol., 20:46）および頭頚部癌（Forastire et. al., Sem. Oncol., 20:56, 1990）の治療のための有望な候補である。該化合物はまた、多発性嚢胞腎疾患（Woo et. al., Nature, 368:750. 1994）、肺癌およびマラリアの治療の可能性を示している。患者のパクリタキセルによる治療は、閾値濃度（５０ｎＭ）以上を投与する期間と関連して（Kearns, C.M. et. al., Seminars in Oncology, 3(6) p.16-23, 1995）、骨髄抑制をもたらす（複数の細胞系譜、Ignoff, R.J. et. al, Cancer Chemotherapy Pocket Guide, 1998）。
【００６６】
ドセタキセル、(２Ｒ,３Ｓ)−Ｎ−カルボキシ−３−フェニルイソセリン,Ｎ−tert−ブチルエステルの５β−２０−エポキシ−１,２α,４,７β,１０β,１３α−ヘキサヒドロキシタクス−１１−エン−９−オン４−酢酸エステル２−安息香酸エステルとの１３−エステルの三水和物は、注射液としてＴＡＸＯＴＥＲＥ（登録商標）として商業的に入手可能である。ドセタキセルは、乳癌の治療に適応される。ドセタキセルは、ヨーロッパイチイの針葉から抽出した天然の前駆物質、１０−デアセチル−バッカチンＩＩＩを使用して調製された任意量のパクリタキセルの半合成誘導体である。ドセタキセルの用量規制毒性は好中球減少である。
【００６７】
ビンカアルカロイドは、ニチニチソウ由来の期特異的抗腫瘍剤である。ビンカアルカロイドは、チューブリンと特異的に結合することによって細胞周期のＭ期（有糸分裂）にて作用する。その結果、結合したチューブリン分子は、微小管へと重合され得ない。有糸分裂は、細胞死の続行を伴って分裂中期に停止されると考えられる。ビンカアルカロイドの例としては、ビンブラスチン、ビンクリスチンおよびビノレルビンが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００６８】
ビンブラスチン、硫酸ビンカロイコブラスチンは、注射液としてＶＥＬＢＡＮ（登録商標）として入手可能である。それは、様々な固形腫瘍の第二次治療として可能な適応を有するが、主に、精巣癌、ならびにホジキン病、リンパ球性および組織球性リンパ腫を含む様々なリンパ腫の治療に適応とされる。骨髄抑制がビンブラスチンの用量規制副作用である。
【００６９】
ビンクリスチン、ビンカロイコブラスチン、２２−オキソ−、硫酸エステル、は、注射液としてＯＮＣＯＶＩＮ（登録商標）として商業的に入手可能である。ビンクリスチンは、急性白血病の治療に適応とされ、また、ホジキンおよび非ホジキン悪性リンパ腫の治療計画における使用を見出した。脱毛症および神経学的作用が最も一般的なビンクリスチンの副作用であり、それほどではないにせよ骨髄抑制および胃腸粘膜炎作用が生じる。
【００７０】
ビノレルビン、３',４'−ジデヒドロ−４'−デオキシ−Ｃ'−ノルビンカロイコブラスチン[Ｒ−(Ｒ*,Ｒ*)−２,３−ジヒドロキシブタン二酸エステル（１：２）（塩）]は、酒石酸ビノレルビン（ＮＡＶＥＬＢＩＮＥ（登録商標））の注射液として商業的に入手可能であり、半合成ビンカアルカロイドである。ビノレルビンは、単剤としてまたはシスプラチンのような他の化学療法剤と組み合わせて、様々な固形腫瘍、特に、非小細胞肺癌、進行性乳癌およびホルモン難治性前立腺癌の治療に適応とされる。骨髄抑制がビノレルビンの最も一般的な用量規制副作用である。
【００７１】
白金配位錯体は、ＤＮＡと相互作用する期非特異的抗癌剤である。該白金錯体は、腫瘍細胞に侵入し、アクア化を受け、腫瘍に対して有害な生物学的影響を及ぼすＤＮＡとストランド内およびストランド間架橋を形成する。白金配位錯体の例としては、シスプラチンおよびカルボプラチンが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００７２】
シスプラチン、シスジアンミンジクロロ白金は、注射液としてＰＬＡＴＩＮＯＬ（登録商標）として商業的に入手可能である。シスプラチンは、主に、転移性の精巣癌および卵巣癌ならびに進行性膀胱癌の治療に適応とされる。シスプラチンの主要な用量規制副作用は、水分補給および利尿によって制御することができる腎毒性、ならびに聴器毒性である。
【００７３】
カルボプラチン、白金、ジアンミン[１,１−シクロブタン−ジカルボン酸(２−)−Ｏ,Ｏ']は、注射液としてＰＡＲＡＰＬＡＴＩＮ（登録商標）として商業的に入手可能である。カルボプラチンは、主に、進行性卵巣癌の第一次および第二次治療に適応とされる。骨髄抑制がカルボプラチンの用量規制毒性である。
【００７４】
アルキル化剤は、期非特異的抗癌剤であり、かつ、強い求電子試薬である。典型的には、アルキル化剤は、アルキル化によりホスフェート、アミノ、スルフヒドリル、ヒドロキシル、カルボキシルおよびイミダゾール基のようなＤＮＡ分子の求核部分を介してＤＮＡと共有結合を形成する。かかるアルキル化は核酸機能を破壊して細胞死へと導く。アルキル化剤の例としては、シクロホスファミド、メルファランおよびクロラムブシルのようなナイトロジェンマスタード；ブスルファンのようなアルキルスルフォナート；カルムスチンのようなニトロソ尿素；ならびにダカルバジンのようなトリアゼンが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００７５】
シクロホスファミド、２−[ビス(２−クロロエチル)アミノ]テトラヒドロ−２Ｈ−１,３,２−オキサザホスホリン２−オキシド・一水和物は、注射液または錠剤としてＣＹＴＯＸＡＮ（登録商標）として商業的に入手可能である。シクロホスファミドは、単剤としてまたは他の化学療法剤と組み合わせて、悪性リンパ腫、多発性骨髄腫および白血病の治療に適応とされる。脱毛症、悪心、嘔吐および白血球減少がシクロホスファミドの最も一般的な用量規制副作用である。
【００７６】
メルファラン、４−[ビス(２−クロロエチル)アミノ]−Ｌ−フェニルアラニンは、注射液または錠剤としてＡＬＫＥＲＡＮ（登録商標）として商業的に入手可能である。メルファランは、多発性骨髄腫および卵巣の切除不可能上皮癌の対症療法に適応とされる。骨髄抑制がメルファランの最も一般的な用量規制副作用である。
【００７７】
クロラムブシル、４−[ビス(２−クロロエチル)アミノ]ベンゼンブタン酸は、ＬＥＵＫＥＲＡＮ（登録商標）錠剤として商業的に入手可能である。クロラムブシルは、慢性リンパ性白血病、ならびにリンパ肉腫、巨大濾胞性リンパ腫およびホジキン病のような悪性リンパ腫の対症療法に適応とされる。骨髄抑制がクロラムブシルの最も一般的な用量規制副作用である。
【００７８】
ブスルファン、ジメタンスルホン酸１,４−ブタンジオールは、ＭＹＬＥＲＡＮ（登録商標）錠剤として商業的に入手可能である。ブスルファンは、慢性骨髄性白血病の対症療法に適応とされる。骨髄抑制がブスルファンの最も一般的な用量規制副作用である。
【００７９】
カルムスチン、１,３−[ビス(２−クロロエチル)−１−ニトロソ尿素は、ＢｉＣＮＵ（登録商標）として凍結乾燥剤の単剤バイアルとして商業的に入手可能である。カルムスチンは、単剤としてまたは脳腫瘍、多発性骨髄腫、ホジキン病および非ホジキンリンパ腫のためには他の薬剤と組み合わせて、対症療法に適応とされる。遅発性骨髄抑制がカルムスチンの最も一般的な用量規制副作用である。
【００８０】
ダカルバジン、５−(３,３−ジメチル−１−トリアゼノ)−イミダゾール−４−カルボキサミドは、ＤＴＩＣ−Ｄｏｍｅ（登録商標）として単剤バイアルとして商業的に入手可能である。ダカルバジンは、転移性悪性黒色腫の治療に適応とされ、ホジキン病の第二次治療のためには他の薬剤と組み合わせて適応とされる。悪心、嘔吐および食欲不振がダカルバジンの最も一般的な用量規制副作用である。
【００８１】
抗生物質抗腫瘍剤は、ＤＮＡと結合するかまたはインターカレートする期非特異的薬剤である。典型的には、かかる作用により安定なＤＮＡ複合体またはストランド切断が生じ、通常の核酸の機能を破壊して細胞死へと導く。抗生物質抗腫瘍剤の例としては、ダクチノマイシンのようなアクチノマイシン、ダウノルビシンおよびドキソルビシンのようなアントラサイクリン；ならびにブレオマイシンが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００８２】
Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｉｎ Ｄとしても知られているダクチノマイシンは、注射液形のＣＯＳＭＥＧＥＮ（登録商標）として商業的に入手可能である。ダクチノマイシンは、ウィルムス腫瘍および横紋筋肉腫の治療に適応とされる。悪心、嘔吐および食欲不振がダクチノマイシンの最も一般的な用量規制副作用である。
【００８３】
ダウノルビシン、(８Ｓ−cis−)−８−アセチル−１０−[(３−アミノ−２,３,６−トリデオキシ−α−Ｌ−リキソ−ヘキソピラノシル)オキシ]−７,８,９,１０−テトラヒドロ−６,８,１１−トリヒドロキシ−１−メトキシ−５,１２−ナフタセンジオン・塩酸塩は、リポソーム注射液形としてＤＡＵＮＯＸＯＭＥ（登録商標）として、または注射液としてＣＥＲＵＢＩＤＩＮＥ（登録商標）として商業的に入手可能である。ダウノルビシンは、急性非リンパ球性白血病および進行性ＨＩＶ関連カポジ肉腫の治療における寛解導入に適応とされる。骨髄抑制がダウノルビシンの最も一般的な用量規制副作用である。
【００８４】
ドキソルビシン、(８Ｓ,１０Ｓ)−１０−[(３−アミノ−２,３,６−トリデオキシ−α−Ｌ−リキソ−ヘキソピラノシル)オキシ]−８−グリコロイル,７,８,９,１０−テトラヒドロ−６,８,１１−トリヒドロキシ−１−メトキシ−５,１２−ナフタセンジオン・塩酸塩は、注射液形としてＲＵＢＥＸ（登録商標）またはＡＤＲＩＡＭＹＣＩＮ ＲＤF（登録商標）として商業的に入手可能である。ドキソルビシンは、主に、急性リンパ芽球性白血病および急性骨髄芽球性白血病の治療に適応とされるが、いくつかの固形腫瘍およびリンパ腫の治療において有用な成分でもある。骨髄抑制がドキソルビシンの最も一般的な用量規制副作用である。
【００８５】
ブレオマイシン、ストレプトマイセス・ヴェルチシルス（Streptomyces verticillus）の株から単離された細胞障害性グリコペプチド系抗生物質の混合物は、ＢＬＥＮＯＸＡＮＥ（登録商標）として商業的に入手可能である。ブレオマイシンは、単剤としてまたは他の薬剤と組み合わせて、扁平上皮癌、リンパ腫および精巣癌の対症療法として適応とされる。肺毒性および皮膚毒性がブレオマイシンの最も一般的な用量規制副作用である。
【００８６】
トポイソメラーゼＩＩ阻害物質としては、エピポドフィロトキシンが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００８７】
エピポドフィロトキシンは、マンドレイク由来の期特異的抗腫瘍剤である。エピポドフィロトキシンは、典型的には、トポイソメラーゼＩＩおよびＤＮＡとの三元複合体を形成してＤＮＡストランド切断を引き起こすことによって、細胞周期のＳ期およびＧ2期において細胞に影響を及ぼす。このストランド切断は蓄積し、次いで細胞死が起こる。エピポドフィロトキシンの例としては、エトポシドおよびテニポシドが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００８８】
エトポシド、４'−デメチル−エピポドフィロトキシン９[４,６−０−(Ｒ)−エチリデン−β−Ｄ−グルコピラノシド]は、注射液またはカプセル剤としてＶｅＰＥＳＩＤ（登録商標）として商業的に入手可能であり、一般にＶＰ−１６として知られている。エトポシドは、単剤としてまたは他の化学療法剤と組み合わせて、精巣癌および非小細胞肺癌の治療に適応とされる。骨髄抑制がエトポシドの最も一般的な副作用である。白血球減少症の発生は、血小板減少症よりも重篤である傾向にある。
【００８９】
テニポシド、４'−デメチル−エピポドフィロトキシン９[４,６−０−(Ｒ)−テニリデン−β−Ｄ−グルコピラノシド]は、注射液としてＶＵＭＯＮ（登録商標）として商業的に入手可能であり、一般にＶＭ−２６として知られている。テニポシドは、単剤としてまたは他の化学療法剤と組み合わせて、小児における急性白血病の治療に適応とされる。骨髄抑制がテニポシドの最も一般的な用量規制副作用である。テニポシドは、白血球減少症および血小板減少症の両方を誘発する可能性がある。
【００９０】
代謝拮抗性抗腫瘍剤は、ＤＮＡ合成を阻害することによってまたはプリンもしくはピリミジン塩基合成を阻害してＤＮＡ合成を制限することによって細胞周期のＳ期（ＤＮＡ合成）で作用する期特異的抗腫瘍剤である。その結果、Ｓ期は進行せず、次いで細胞死が起こる。代謝拮抗性抗腫瘍剤の例としては、フルオロウラシル、メトトレキサート、シタラビン、メルカプトプリン、チオグアニンおよびゲムシタビンが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００９１】
５−フルオロウラシル、５−フルオロ−２,４−(１Ｈ,３Ｈ)ピリミジンジオンは、フルオロウラシルとして商業的に入手可能である。５−フルオロウラシルの投与は、チミジル酸合成の阻害をもたらし、ＲＮＡおよびＤＮＡの両方に取り込まれる。結果は、典型的には、細胞死である。５−フルオロウラシルは、単剤としてまたは他の化学療法剤と組み合わせて、乳癌、結腸癌、直腸癌、胃癌および膵臓癌の治療に適応とされる。骨髄抑制および粘膜炎が５−フルオロウラシルの用量規制副作用である。他のフルオロピリミジンアナログとしては、５−フルオロデオキシウリジン（フロクスウリジン）および５−フルオロデオキシウリジン一リン酸が挙げられる。
【００９２】
シタラビン、４−アミノ−１−β−Ｄ−アラビノフラノシル−２(１Ｈ)−ピリミジノンは、ＣＹＴＯＳＡＲ−Ｕ（登録商標）として商業的に入手可能であり、一般的にＡｒａ−Ｃとして知られている。シタラビンは成長しているＤＮＡ鎖へシタラビンを末端取り込みすることによりＤＮＡ鎖伸長を阻害することによってＳ期で細胞期特異性を示すと考えられる。シタラビンは、単剤としてまたは他の化学療法剤と組み合わせて、急性白血病の治療に適応とされる。他のシチジンアナログとしては、５−アザシチジンおよび２',２'−ジフルオロデオキシシチジン（ゲムシタビン）が挙げられる。シタラビンは、白血球減少症、血小板減少症および粘膜炎を誘発する。
【００９３】
メルカプトプリン、１,７−ジヒドロ−６Ｈ−プリン−６−チオン・一水和物は、ＰＵＲＩＮＥＴＨＯＬ（登録商標）として商業的に入手可能である。メルカプトプリンは、現時点で詳細不明のメカニズムによりＤＮＡ合成を阻害することによってＳ期にて細胞期特異性を示す。メルカプトプリンは、単剤としてまたは他の化学療法剤と組み合わせて、急性白血病の治療に適応とされる。骨髄抑制および胃腸粘膜炎が高用量のメルカプトプリンの副作用と思われる。有用なメルカプトプリンアナログはアザチオプリンである。
【００９４】
チオグアニン、２−アミノ−１,７−ジヒドロ−６Ｈ−プリン−６−チオンは、ＴＡＢＬＯＩＤ（登録商標）として商業的に入手可能である。チオグアニンは、現時点で詳細不明のメカニズムによりＤＮＡ合成を阻害することによってＳ期にて細胞期特異性を示す。チオグアニンは、単剤としてまたは他の化学療法剤と組み合わせて、急性白血病の治療に適応とされる。白血球減少症、血小板減少症および貧血症を含む骨髄抑制がチオグアニン投与の最も一般的な用量規制副作用である。しかしながら、胃腸管副作用が生じ、用量規制となる可能性がある。他のプリンアナログとしては、ペントスタチン、エリスロヒドロキシノニルアデニン、リン酸フルダラビンおよびクラドリビンが挙げられる。
【００９５】
ゲムシタビン、２'−デオキシ−２',２'−ジフルオロシチジン・一塩酸塩（β−異性体）は、ＧＥＭＺＡＲ（登録商標）として商業的に入手可能である。ゲムシタビンは、Ｓ期にて、そしてＧ１／Ｓ境界を介して細胞の進行を遮断することによって、細胞期特異性を示す。ゲムシタビンは、シスプラチンと組み合わせて局所進行性非小細胞肺癌の治療に適応とされ、単独で局所進行性膵臓癌の治療に適応とされる。白血球減少症、血小板減少症および貧血症を含む骨髄抑制がゲムシタビン投与の最も一般的な用量規制副作用である。
【００９６】
メトトレキサート、Ｎ−[４[[(２,４−ジアミノ−６−プテリジニル)メチル]メチルアミノ]ベンゾイル]−Ｌ−グルタミン酸は、メトトレキサートナトリウムとして商業的に入手可能である。メトトレキサートは、プリンヌクレオチドおよびチミジル酸エステルの合成に必要とされるジヒドロ葉酸レダクターゼの阻害を介してＤＮＡ合成、修復および／または複製を阻害することによってＳにて細胞期特異性を示す。メトトレキサートは、単剤としてまたは他の化学療法剤と組み合わせて、絨毛癌、髄膜白血病、非ホジキンリンパ腫ならびに乳癌、頭頚部癌、卵巣癌および膀胱癌の治療に適応とされる。骨髄抑制（白血球減少症、血小板減少症および貧血症）ならびに粘膜炎がメトトレキサート投与の副作用と考えられる。
【００９７】
カンプトテシンおよびカンプトテシン誘導体を含むカンプトテシンは、トポイソメラーゼＩ阻害物質として入手可能であるか、または開発中である。カンプトテシン細胞障害活性は、そのトポイソメラーゼＩ阻害活性に関連していると考えられる。カンプトテシンの例としては、イリノテカン、トポテカン、ならびに下記７−(４−メチルピペラジノ−メチレン)−１０,１１−エチレンジオキシ−２０−カンプトテシンの様々な光学形態が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００９８】
イリノテカンＨＣｌ、(４Ｓ)−４,１１−ジエチル−４−ヒドロキシ−９−[(４−ピペリジノピペリジノ)カルボニルオキシ]−１Ｈ−ピラノ[３',４',６,７]インドリジノ[１,２−ｂ]キノリン−３,１４(４Ｈ,１２Ｈ)−ジオン・塩酸塩は、注射液ＣＡＭＰＴＯＳＡＲ（登録商標）として商業的に入手可能である。
【００９９】
イリノテカンは、その活性代謝産物ＳＮ−３８と一緒に、トポイソメラーゼＩ−ＤＮＡ複合体と結合しているカンプトテシンの誘導体である。トポイソメラーゼＩ：ＤＮＡ：イリノテカンまたはＳＮ−３８三元複合体と複製酵素との相互作用により引き起こされる回復不能な二本鎖切断の結果として細胞障害性が生じると考えられる。イリノテカンは、結腸または直腸の転移性癌の治療に適応とされる。イリノテカン・ＨＣｌの用量規制副作用は、好中球減少を含む骨髄抑制、および下痢を含むＧＩ作用である。
【０１００】
トポテカン・ＨＣｌ、(Ｓ)−１０−[(ジメチルアミノ)メチル]−４−エチル−４,９−ジヒドロキシ−１Ｈ−ピラノ[３',４',６,７]インドリジノ[１,２−ｂ]キノリン−３,１４−(４Ｈ,１２Ｈ)−ジオン・一塩酸塩は、注射液ＨＹＣＡＭＴＩＮ（登録商標）として商業的に入手可能である。トポテカンは、トポイソメラーゼＩ−ＤＮＡ複合体と結合しているカンプトテシンの誘導体であり、ＤＮＡ分子のねじれ歪みに応答してトポイソメラーゼＩにより引き起こされる一本鎖切断の再連結を防止する。トポテカンは、転移性の卵巣癌および小細胞肺癌の第二次治療に適応とされる。トポテカン・ＨＣｌの用量規制副作用は骨髄抑制、主に好中球減少である。
【０１０１】
現在開発中の、化学名「７−(４−メチルピペラジノ−メチレン)−１０,１１−エチレンジオキシ−２０(Ｒ,Ｓ)−カンプトテシン」（ラセミ混合物）または「７−(４−メチルピペラジノ−メチレン)−１０,１１−エチレンジオキシ−２０(Ｒ)−カンプトテシン」（Ｒエナンチオマー）または「７−(４−メチルピペラジノ−メチレン)−１０,１１−エチレンジオキシ−２０(Ｓ)−カンプトテシン」（Ｓエナンチオマー）によって知られている、下記式Ａで示されるカンプトテシン誘導体（ラセミ混合物（Ｒ,Ｓ）形ならびにＲエナンチオマーおよびＳエナンチオマーを含む）もまた興味深いものである：
【０１０２】
【化８】
2010522770.tif 000009
かかる化合物および関連化合物（製造方法を含む）は、米国特許第６,０６３,９２３号；第５,３４２,９４７号；第５,５５９,２３５号；第５,４９１,２３７号、および１９９７年１１月２４日に出願された出願係属中の米国特許出願第０８／９７７,２１７号に記載されている。
【０１０３】
ホルモンおよびホルモンアナログは、ホルモンと癌の増殖および／または増殖欠如との間に関係がある癌の治療に有用な化合物である。癌治療に有用なホルモンおよびホルモンアナログの例としては、小児における悪性リンパ腫および急性白血病の治療に有用な、プレドニゾンおよびプレドニゾロンのようなアドレノコルチコステロイド；副腎皮質癌およびエストロゲン受容体を含有するホルモン依存性乳癌の治療に有用な、アミノグルテチミド、およびアナストロゾール、レトラゾール、ボラゾールおよびエキセメスタンのような他のアロマターゼ阻害物質；ホルモン依存性乳癌および子宮内膜癌の治療に有用な、酢酸メゲストロールのようなプロゲストリン；前立腺癌および良性前立腺肥大症の治療に有用な、エストロゲン、アンドロゲン、およびフルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、酢酸シプロテロンのような抗アンドロゲン、およびフィナステリドおよびデュタステリドのような５α−レダクターゼ；ホルモン依存性乳癌および他の感受性癌の治療に有用な、タモキシフェン、トレミフェン、ラロキシフェン、ドロロキシフェン、ヨードキシフェンのような抗エストロゲン、ならびに米国特許第５,６８１,８３５号、第５,８７７,２１９号および第６,２０７,７１６号に記載されているもののような選択的エストロゲン受容体調節因子（ＳＥＲＭＳ）；ならびに前立腺癌の治療のための、黄体ホルモン（ＬＨ）および／または濾胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）の放出を刺激するゴナドトロピン放出ホルモン（ＧｎＲＨ）およびそのアナログ、例えば、酢酸ゴセレリンおよびロイプロリドのようなＬＨＲＨアゴニストおよびアンタゴニストが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【０１０４】
シグナル伝達経路阻害物質は、細胞内変化を引き起こす化学プロセスを遮断または阻害する阻害物質である。本明細書で用いられる場合、この変化は、細胞増殖または細胞分化である。本発明において有用なシグナル伝達阻害物質としては、受容体型チロシンキナーゼ、非受容体型チロシンキナーゼ、ＳＨ２／ＳＨ３ドメイン遮断薬、セリン／スレオニンキナーゼ、ホスファチジルイノシトール−３キナーゼ、ミオイノシトールシグナル伝達およびＲａｓオンコジーンの阻害物質が挙げられる。
【０１０５】
いくつかのプロテインチロシンキナーゼは、細胞増殖の調節に関与している様々なタンパク質における特定のチロシル残基のリン酸化を触媒する。かかるプロテインチロシンキナーゼは受容体型または非受容体型キナーゼとして大きく分類することができる。
【０１０６】
受容体型チロシンキナーゼは、細胞外リガンド結合ドメイン、膜貫通ドメインおよびチロシンキナーゼドメインを有する膜貫通タンパク質である。受容体型チロシンキナーゼは、細胞増殖の調節に関与しており、一般に、増殖因子受容体と称される。例えば過剰発現または変異による、これらのキナーゼの多くの不適当な活性化または非制御の活性化、すなわち、異常なキナーゼ増殖因子受容体活性が非制御の細胞増殖を引き起こすことが示されている。したがって、かかるキナーゼの異常な活性は悪性の組織増殖と関連している。その結果、かかるキナーゼの阻害物質は癌治療方法をもたらすことができる。増殖因子受容体としては、例えば、上皮増殖因子受容体（ＥＧＦｒ）、血小板由来増殖因子受容体（ＰＤＧＦｒ）、ｅｒｂＢ２、ｅｒｂＢ４、血管内皮増殖因子受容体（ＶＥＧＦｒ）、イムノグロブリン様および上皮増殖因子ホモロジードメイン（ＴＩＥ−２）を有するチロシンキナーゼ、インスリン増殖因子−Ｉ（ＩＧＦＩ）受容体、マクロファージコロニー刺激因子（ｃｆｍｓ）、ＢＴＫ、ｃｋｉｔ、ｃｍｅｔ、線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）受容体、Ｔｒｋ受容体（ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢおよびＴｒｋＣ）、エフリン（ｅｐｈ）受容体ならびにＲＥＴプロトオンコジーンが挙げられる。増殖受容体のいくつかの阻害物質は開発中であり、リガンドアンタゴニスト、抗生物質、チロシンキナーゼ阻害物質およびアンチセンスオリゴヌクレオチドが挙げられる。増殖因子受容体、および増殖因子受容体機能を阻害する薬剤は、例えば、Kath, John C., Exp. Opin. Ther. Patents(2000) 10(6):803-818；Shawver et al DDT Vol 2, No. 2 February 1997；およびLofts, F. J. et al, “Growth factor receptors as targets”, New Molecular Targets for Cancer Chemotherapy, ed. Workman, Paul and Kerr, David, CRC press 1994, Londonに記載されている。
【０１０７】
増殖因子受容体キナーゼではないチロシンキナーゼは非受容体型チロシンキナーゼと称される。抗癌剤の標的または標的候補である本発明に用いるための非受容体型チロシンキナーゼとしては、ｃＳｒｃ、Ｌｃｋ、Ｆｙｎ、Ｙｅｓ、Ｊａｋ、ｃＡｂｌ、ＦＡＫ（接着斑キナーゼ）、ＢｒｕｔｏｎｓチロシンキナーゼおよびＢｃｒ−Ａｂｌが挙げられる。かかる非受容体型キナーゼ、および非受容体型チロシンキナーゼ機能を阻害する薬剤は、Sinh, S. and Corey, S.J., (1999) Journal of Hematotherapy and Stem Cell Research 8(5): 465-80；およびBolen, J.B., Brugge, J.S., (1997) Annual review of Immunology. 15: 371-404に記載されている。
【０１０８】
ＳＨ２／ＳＨ３ドメイン遮断薬は、ＰＩ３−Ｋ ｐ８５サブユニット、Ｓｒｃファミリーキナーゼ、アダプター分子（Ｓｈｃ、Ｃｒｋ、Ｎｃｋ、Ｇｒｂ２）およびＲａｓ−ＧＡＰを包含する様々な酵素またはアダプタータンパク質におけるＳＨ２またはＳＨ３ドメイン結合を破壊する薬剤である。抗癌剤の標的としてのＳＨ２／ＳＨ３ドメインは、Smithgall, T.E. (1995), Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 34(3)125-32に記載されている。
【０１０９】
セリン／トレオニンキナーゼの阻害物質としては、Ｒａｆキナーゼ（ｒａｆｋ）、マイトジェンまたは細胞外調節キナーゼ（ＭＥＫ）および細胞外調節キナーゼ（ＥＲＫ）の遮断薬を含むＭＡＰキナーゼカスケード遮断薬；ならびにＰＫＣ（α、β、γ、ε、μ、λ、ι、ζ）、ＩｋＢキナーゼファミリー（ＩＫＫａ、ＩＫＫｂ）、ＰＫＢファミリーキナーゼ、ａｋｔキナーゼファミリーメンバー、およびＴＧＦβ受容体キナーゼの遮断薬を含むプロテインキナーゼＣファミリーメンバー遮断薬が挙げられる。かかるセリン／トレオニンキナーゼおよびその阻害物質は、Yamamoto, T., Taya, S., Kaibuchi, K., (1999), Journal of Biochemistry. 126(5) 799-803；Brodt, P, Samani, A., and Navab, R. (2000), Biochemical Pharmacology, 60. 1101-1107；Massague, J., Weis-Garcia, F. (1996) Cancer Surveys. 27:41-64；Philip, P.A., and Harris, A.L. (1995), Cancer Treatment and Research. 78: 3-27；Lackey, K. et al Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, (10), 2000, 223-226；米国特許第６,２６８,３９１号；およびMartinez-Iacaci, L., et al, Int. J. Cancer (2000), 88(1), 44-52に記載されている。
【０１１０】
ＰＩ３−キナーゼ、ＡＴＭ、ＤＮＡ−ＰＫおよびＫｕの遮断薬を包含するホスファチジルイノシトール−３キナーゼファミリーメンバーの阻害物質もまた本発明において有用であり得る。かかるキナーゼは、Abraham, R.T. (1996), Current Opinion in Immunology. 8(3) 412-8；Canman, C.E., Lim, D.S. (1998), Oncogene 17(25) 3301-3308；Jackson, S.P. (1997), International Journal of Biochemistry and Cell Biology. 29(7):935-8；およびZhong, H. et al, Cancer res, (2000) 60(6), 1541-1545に記載されている。
【０１１１】
ホスホリパーゼＣ遮断薬およびミオイノシトールアナログのようなミオイノシトールシグナル伝達阻害物質もまた本発明において興味深いものである。かかるシグナル阻害物質は、Powis, G., and Kozikowski A., (1994) New Molecular Targets for Cancer Chemotherapy ed., Paul Workman and David Kerr, CRC press 1994, Londonに記載されている。
【０１１２】
別のグループのシグナル伝達経路阻害物質は、Ｒａｓオンコジーンの阻害物質である。かかる阻害物質としては、ファルネシルトランスフェラーゼ、ゲラニル−ゲラニルトランスフェラーゼおよびＣＡＡＸプロテアーゼの阻害物質、ならびにアンチセンスオリゴヌクレオチド、リボザイムおよび免疫療法が挙げられる。かかる阻害物質は、野生型変異体ｒａｓを含有する細胞においてｒａｓ活性化を遮断することにより抗増殖剤として作用することが示された。Ｒａｓオンコジーン阻害は、Scharovsky, O.G., Rozados, V.R., Gervasoni, S.I. Matar, P. (2000), Journal of Biomedical Science. 7(4)292-8；Ashby, M.N. (1998), Current Opinion in Lipidology. 9(2)99-102；およびBioChim. Biophys. Acta, (19899) 1423(3):19-30に記載されている。
【０１１３】
上記のように、受容体キナーゼリガンド結合に対する抗体アンタゴニストはまた、シグナル伝達阻害物質としての機能を果たすこともできる。このグループのシグナル伝達経路阻害物質は、受容体型チロシンキナーゼの細胞外リガンド結合ドメインに対するヒト化抗生物質の使用を含む。例えば、Ｉｍｃｌｏｎｅ Ｃ２２５ ＥＧＦＲ特異的抗体（Green, M.C. et al, Monoclonal Antibody Therapy for Solid Tumors, Cancer Treat. Rev., (2000), 26(4), 269-286を参照）；Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（登録商標）ｅｒｂＢ２抗体（Tyrosine Kinase Signalling in Breast cancer:erbB Family Receptor Tyrosine Kniases, Breast cancer Res., 2000, 2(3), 176-183を参照）；および２ＣＢ ＶＥＧＦＲ２特異的抗体（Brekken, R.A. et al, Selective Inhibition of VEGFR2 Activity by a monoclonal Anti-VEGF antibody blocks tumor growth in mice, Cancer Res. (2000) 60, 5117-5124を参照）。
【０１１４】
非受容体型キナーゼ血管新生阻害物質もまた本発明において有用であり得る。血管新生関連ＶＥＧＦＲおよびＴＩＥ２の阻害物質はシグナル伝達阻害物質に関して上記にて記載されている（両者の受容体は受容体型チロシンキナーゼである）。ｅｒｂＢ２およびＥＧＦＲの阻害物質が血管新生、主に、ＶＥＧＦ発現を阻害することが示されているので、血管新生は一般にｅｒｂＢ２／ＥＧＦＲシグナル伝達に関連している。したがって、非受容体型チロシンキナーゼ阻害物質を本発明の化合物と組み合わせて用いてもよい。例えば、ＶＥＧＦＲ（受容体型チロシンキナーゼ）を認識しないがリガンドと結合する抗ＶＥＧＦ抗生物質；血管新生を阻害するインテグリン（αvβ3）の小分子阻害物質；エンドスタチンおよびアンジオスタチン（非ＲＴＫ）もまた本明細書に記載した化合物と組み合わせて有用である。（Bruns CJ et al (2000), Cancer Res., 60: 2926-2935；Schreiber AB, Winkler ME, and Derynck R.(1986), Science, 232: 1250-1253；Yen L et al.(2000), Oncogene 19: 3460-3469を参照）。
【０１１５】
免疫療法計画で用いられる薬剤もまた式（Ｉ）および式（ＩＩ）で示される化合物と組み合わせて有用であり得る。免疫応答を生じさせるための多くの免疫学的ストラテジーがある。これらのストラテジーは一般に腫瘍ワクチン投与の分野におけるものである。免疫学的アプローチの効力は、小分子阻害物質を用いてシグナル伝達経路の複合阻害により非常に増強することができる。ｅｒｂＢ２／ＥＧＦＲに対する免疫学的／腫瘍ワクチンアプローチは、Reilly RT et al. (2000), Cancer Res. 60: 3569-3576；およびChen Y, Hu D, Eling DJ, Robbins J, and Kipps TJ. (1998), Cancer Res. 58: 1965-1971に記載されている。
【０１１６】
アポトーシス促進計画で用いられる薬剤（例えば、ｂｃｌ−２アンチセンスオリゴヌクレオチド）もまた本発明の組合せにおいて用いることができる。ｂｃｌ−２ファミリーのタンパク質のメンバーはアポトーシスを遮断する。したがって、ｂｃｌ−２のアップレギュレーションは化学療法剤耐性と関連している。上皮増殖因子（ＥＧＦ）がｂｃｌ−２ファミリー（すなわち、ｍｃｌ−１）の抗アポトーシスメンバーを刺激することを示している研究がある。したがって、腫瘍におけるｂｃｌ−２の発現をダウンレギュレートするように設計されたストラテジーは、臨床的有用性を立証しており、現在、第ＩＩ／ＩＩＩ相試験中であり、すなわち、Genta社のＧ３１３９ ｂｃｌ−２アンチセンスオリゴヌクレオチドである。ｂｃｌ−２に対してアンチセンスオリゴヌクレオチドストラテジーを使用するかかるアポトーシス促進性ストラテジーは、Water JS et al. (2000), J. Clin. Oncol. 18: 1812-1823；およびKitada S et al.(1994), Antisense Res. Dev. 4: 71-79に記載されている。
【０１１７】
細胞周期シグナル伝達阻害物質は細胞周期の制御に関与する分子を阻害する。サイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）と称されるプロテインキナーゼのファミリー、およびサイクリンと称されるタンパク質のファミリーとそれらとの相互作用は真核生物細胞周期の進行を制御する。細胞周期の正常な進行には様々なサイクリン／ＣＤＫ複合体の協調的な活性化および不活性化が必要である。細胞周期シグナル伝達のいくつかの阻害物質は開発中である。例えば、ＣＤＫ２、ＣＤＫ４およびＣＤＫ６を包含するサイクリン依存性キナーゼならびにそれらの阻害物質の例は、例えば、Rosania et al, Exp. Opin. Ther. Patents (2000) 10(2):215-230に記載されている。
【０１１８】
一の実施態様では、本発明の癌治療方法は、式（Ｉ）または式（ＩＩ）で示される化合物および／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物またはプロドラッグ、および少なくとも１種類の抗腫瘍剤（例えば、微小管阻害薬、白金配位錯体、アルキル化剤、抗生物質製剤、トポイソメラーゼＩＩ阻害物質、代謝拮抗薬、トポイソメラーゼＩ阻害物質、ホルモンおよびホルモンアナログ、シグナル伝達経路阻害物質、非受容体型チロシンキナーゼ血管新生阻害物質、免疫療法剤、アポトーシス促進剤ならびに細胞周期シグナル伝達阻害物質からなる群から選択されるもの）の共投与を含む。
【０１１９】
本発明の医薬活性化合物はＡＫＴ阻害物質として活性があるので、それらは癌および関節炎の治療において治療的有用性を示す。
【０１２０】
したがって、本発明は、癌が以下のものから選択されるものであるヒトを含む哺乳動物における癌の治療方法であって、本発明のＡＫＴ阻害化合物の有効量を投与することを含む方法を提供する：脳腫瘍（神経膠腫）、神経膠芽腫、白血病、バンナヤン−ゾナナ症候群、カウデン病、レルミット−デュクロ病、乳癌、炎症性乳癌、ウィルムス腫瘍、ユーイング肉腫、横紋筋肉腫、上衣腫、骨芽細胞腫、結腸癌、頭頚部癌、腎臓癌、肺癌、肝臓癌、黒色腫、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、肉腫、骨肉腫、骨巨細胞腫、甲状腺癌、
リンパ芽球性Ｔ細胞白血病、慢性骨髄性白血病、慢性リンパ球性白血病、ヘアリーセル白血病、急性リンパ芽球性白血病、急性骨髄性白血病、慢性好中球性白血病、急性リンパ芽球性Ｔ細胞白血病、プラズマ細胞腫、免疫芽球性大細胞型白血病、マントル細胞白血病、多発性骨髄腫、巨核芽球性白血病、多発性骨髄腫、急性巨核球性白血病、前骨髄球性白血病、赤白血病、
悪性リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、リンパ芽球性Ｔ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、濾胞性リンパ腫、
神経芽細胞腫、膀胱癌、尿路上皮癌、肺癌、外陰癌、子宮頚癌、子宮内膜癌、腎臓癌、中皮腫、食道癌、唾液腺癌、肝細胞癌、胃癌、上咽頭癌、口腔癌、口の癌、ＧＩＳＴ（胃腸間質性腫瘍）および精巣癌。
【０１２１】
好適には、本発明は、脳腫瘍（神経膠腫）、神経膠芽腫、白血病、バンナヤン−ゾナナ症候群、カウデン病、レルミット−デュクロ病、乳癌、結腸癌、頭頚部癌、腎臓癌、肺癌、肝臓癌、黒色腫、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、肉腫および甲状腺癌から選択される癌の治療方法に関する。
【０１２２】
好適には、本発明は、乳癌、卵巣癌、膵臓癌および前立腺癌から選択される癌の治療方法に関する。
【０１２３】
Ｈｉｓ標識ＡＫＴ１（ａａ １３６−４８０）の単離および精製
ポリトロンを用いて、Ｈｉｓ標識ＡＫＴ１（ａａ １３６−４８０）を発現している昆虫細胞を２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１００ｍＭ ＮａＣｌ、２０ｍＭイミダゾール（ｐＨ７.５）に溶解した（細胞１ｇにつき溶解バッファー５ｍＬ）。２８,０００×ｇで３０分間遠心分離して細胞片を除去した。上清を４.５ミクロンフィルターで濾過し、次いで、溶解バッファーで前平衡化したニッケルキレート化カラムに加えた。該カラムを５カラム容量（ＣＶ）の溶解バッファーで洗浄し、次いで、５ＣＶの２０％バッファーＢで洗浄した（ここで、バッファーＢは、２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１００ｍＭ ＮａＣｌ、３００ｍＭイミダゾール（ｐＨ７.５）である）。Ｈｉｓ標識ＡＫＴ１（ａａ １３６−４８０）を、２０〜１００％線形勾配の１０ＣＶを超えるバッファーＢで溶離した。Ｈｉｓ標識ＡＫＴ１（１３６−４８０）溶出フラクションを集め、バッファーＣで３倍希釈した（ここで、バッファーＣは、２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７.５）である）。次いで、該試料を、バッファーＣで前平衡化したＱ−Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＨＰカラムでクロマトグラフィー処理した。該カラムを５ＣＶのバッファーＣで洗浄し、次いで、５ＣＶの１０％Ｄ、５ＣＶの２０％Ｄ、５ＣＶの３０％Ｄ、５ＣＶの５０％Ｄおよび５ＣＶの１００％Ｄで逐次溶離した；ここで、バッファーＤは、２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１０００ｍＭ ＮａＣｌ（ｐＨ７.５）である。Ｈｉｓ標識ＡＫＴ１（ａａ １３６−４８０）含有フラクションを集め、１０ｋＤａ分子量カットオフ濃縮器中にて濃縮した。Ｈｉｓ標識ＡＫＴ１（ａａ １３６−４８０）を、２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ、２００ｍＭ ＮａＣｌ、１ｍＭ ＤＴＴ（ｐＨ７.５）で前平衡化したＳｕｐｅｒｄｅｘ ７５ゲル濾過カラムでクロマトグラフィー処理した。Ｈｉｓ標識ＡＫＴ１（ａａ １３６−４８０）フラクションを、ＳＤＳ−ＰＡＧＥおよび質量スペクトルを用いて試験した。タンパク質を集め、濃縮し、−８０℃で冷凍した。
【０１２４】
同様の方法でＨｉｓ標識ＡＫＴ２（ａａ １３８−４８１）およびＨｉｓ標識ＡＫＴ３（ａａ １３５−４７９）を単離し精製した。
【０１２５】
Ｈｉｓ標識ＡＫＴ酵素アッセイ
基質リン酸化アッセイにおいて本発明の化合物をＡＫＴ１、２および３プロテインセリンキナーゼ阻害活性について試験した。このアッセイは、小分子有機化合物の、ペプチド基質のセリンリン酸化を阻害する能力を試験する。該基質リン酸化アッセイはＡＫＴ１、２または３の触媒ドメインを使用する。ＡＫＴ１、２および３は、Upstate USA, Inc.から商業的に入手可能である。該方法は、単離した酵素の、ＡＴＰからのγリン酸エステルをビオチン化合成ペプチド配列番号１（ビオチン−ａｈｘ−ＡＲＫＲＥＲＡＹＳＦＧＨＨＡ−アミド）のセリン残基へトランスファーすることを触媒する能力を測定する。以下の方法によって基質リン酸化を検出した：
アッセイは、３８４ウェルＵ底白色プレート中にて行った。１０ｎＭ活性ＡＫＴ酵素を、１００％ＤＭＳＯ中に５０ｍＭ ＭＯＰＳ、ｐＨ７.５、２０ｍＭ ＭｇＣｌ2、４ｕＭ ＡＴＰ、８ｕＭペプチド、０.０４ｕＣｉ[ｇ−33Ｐ]ＡＴＰ／ウェル、１ｍＭ ＣＨＡＰＳ、２ｍＭ ＤＴＴおよび１ｕｌの試験化合物を含有する２０ｕｌのアッセイ容量中にて室温で４０分間インキュベートした。ＳＰＡビーズミックス（Ｍｇ2+およびＣａ2+を含まないダルベッコのＰＢＳ、０.１％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００、５ｍＭ ＥＤＴＡ、５０ｕＭ ＡＴＰ、２.５ｍｇ／ｍｌのストレプトアビジン被覆ＳＰＡビーズ）５０ｕｌを添加して反応を止めた。該プレートを密封し、ビーズを一夜定着させ、次いで、該プレートをＰａｃｋａｒｄ Ｔｏｐｃｏｕｎｔ Ｍｉｃｒｏｐｌａｔｅ Ｓｃｉｎｔｉｌｌａｔｉｏｎ Ｃｏｕｎｔｅｒ（Packard Instrument Co.、コネティカット州メリデン）にて計数した。
【０１２６】
用量応答のデータは、データ整理式１００＊(Ｕ１−Ｃ２)／(Ｃ１−Ｃ２)対化合物濃度（ここで、Ｕは未知の値であり、Ｃ１はＤＭＳＯについて得られた平均制御値であり、Ｃ２は０.１Ｍ ＥＤＴＡについて得られた平均制御値である）を用いて制御％としてプロットした。データは、ｙ＝((Ｖｍａｘ＊ｘ)／(Ｋ＋ｘ))（ここで、Ｖｍａｘは上部漸近線であり、ＫはＩＣ５０である）によって記載される曲線に適合する。
【０１２７】
全長ヒト（ＦＬ）ＡＫＴ１のクローニング：
５'プライマー：配列番号２  ５'ＴＡＴＡＴＡＧＧＡＴＣＣＡＴＧＡＧＣＧＡＣＧＴＧＧＣ３'および３'プライマー：配列番号３  ＡＡＡＴＴＴＣＴＣＧＡＧＴＣＡＧＧＣＣＧＴＧＣＴＧＣＴＧＧ３'を使用して、全長ヒトＡＫＴ１遺伝子を、プラスミド含有ミリスチル化ＡＫＴ１−ＥＲ（Robert T. Abrahamから寄贈物、Duke University under MTA、Klippel et al. in Molecular and Cellular Biology 1998 Volume 18 p.5699に記載されている）からＰＣＲによって増幅させた。クローニングの目的のために、５'プライマーはＢａｍＨＩ部位を含んでおり、３'プライマーはＸｈｏＩを含んでいた。得られたＰＣＲ産物をＢａｍＨＩ／ＸｈｏＩフラグメントとしてｐｃＤＮＡ３中にてサブクローン化した。ＱｕｉｋＣｈａｎｇｅ（登録商標）Ｓｉｔｅ Ｄｉｒｅｃｔｅｄ Ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ Ｋｉｔ（Stratagene）を使用して、システイン25をコードしている配列（ＴＧＣ）における変異を、部位特異的変異誘発によって、アルギニン25をコードしている野生型ＡＫＴ１配列（ＣＧＣ）に変換した。ＡＫＴ１変異原性プライマー：配列番号４  ５'ＡＣＣＴＧＧＣＧＧＣＣＡＣＧＣＴＡＣＴＴＣＣＴＣＣおよび選択プライマー：配列番号５  ５'ＣＴＣＧＡＧＣＡＴＧＣＡＡＣＴＡＧＡＧＧＧＣＣ（ｐｃＤＮＡ３の多重クローニング部位においてＸｂａＩ部位を破壊するように設計された）を製造者の指示に従って使用した。発現／精製の目的のために、ＡＫＴ１をＢａｍＨＩ／ＸｈｏＩフラグメントとして単離し、ｐＦａｓｔｂａｃＨＴｂ（Invitrogen）のＢａｍＨＩ／ＸｈｏＩ部位にクローン化した。
【０１２８】
ＦＬヒトＡＫＴ１の発現：
InvitrogenからのＢＡＣ−ｔｏ−ＢＡＣ Ｂａｃｕｌｏｖｉｒｕｓ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍ（カタログ＃１０３５９−０１６）を使用して発現を行った。簡単に言うと、１）ｃＤＮＡをＦａｓｔＢａｃベクターからバクミドＤＮＡへトランスファーさせ、２）該バクミドＤＮＡを単離し、Ｓｆ９昆虫細胞にトランスフェクトするのに使用し、３）該ウイルスをＳｆ９細胞中にて産生させ、４）Ｔ．ｎｉ細胞をこのウイルスに感染させ、精製のために送った。
【０１２９】
ＦＬヒトＡＫＴ１の精製：
全長ＡＫＴ１の精製のために、Ｓｆ９細胞（バッチ＃４１６４６Ｗ０２）１３０ｇを、２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１００ｍＭ ＮａＣｌおよび２０ｍＭイミダゾールを含有する溶解バッファー（バッファーＡ、１Ｌ、ｐＨ７.５）に再懸濁させた。該細胞溶解はＡｖｅｓｔｉｎによって行った（１５Ｋ−２０Ｋ ｐｓｉで２回）。１６Ｋ ｒｐｍで１時間遠心分離して細胞片を除去し、上清をＮｉｃｋｅｌ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＨＰビーズ１０ｍｌに４℃で一夜バッチ結合させた。次いで、ビーズをカラムに移し、結合した物質をバッファーＢ（２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１００ｍＭ ＮａＣｌ、３００ｍＭイミダゾール、ｐＨ７.５）で溶離した。ＡＫＴ溶出フラクションを集め、バッファーＣ（２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ、５ｍＭ ＤＴＴ；ｐＨ７.５）を用いて３倍希釈した。該試料を濾過し、バッファーＣで前平衡化した１０ｍＬのＱ−ＨＰカラムにて２ｍＬ／分でクロマトグラフィー処理した。
【０１３０】
Ｑ−ＨＰカラムを３カラム容量（ＣＶ）のバッファーＣで洗浄し、次いで、５ＣＶの１０％Ｄ、５ＣＶの２０％Ｄ、５ＣＶの３０％Ｄ、５ＣＶの５０％Ｄおよび５ＣＶの１００％Ｄで逐次溶離した；ここで、バッファーＤは、２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１０００ｍＭ ＮａＣｌ、５ｍＭ ＤＴＴ（ｐＨ７.５）である。フラクション５ｍＬを集めた。ＡＫＴ含有フラクションを集め、５ｍｌに濃縮した。次に、タンパク質を、２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ、２００ｍＭ ＮａＣｌ、５ｍＭ ＤＴＴ（ｐＨ７.５）で前平衡化した１２０ｍｌのＳｕｐｅｒｄｅｘ ７５サイジングカラムに加えた。フラクション２.５ｍＬを集めた。
【０１３１】
ＡＫＴ１溶出フラクションを集め、アリコート化し（１ｍｌ）、−８０℃で貯蔵した。精製した全長ＡＫＴ１の純度および同定を確認するために質量スペクトルおよびＳＤＳ−ＰＡＧＥ分析を使用した。
【０１３２】
同様の方法で全長（ＦＬ）ＡＫＴ２および（ＦＬ）ＡＫＴ３を単離し精製した。
【０１３３】
全長ＡＫＴ酵素アッセイ
基質リン酸化アッセイにおいて本発明の化合物をＡＫＴ１、２および３プロテインセリンキナーゼ阻害活性について試験した。このアッセイは、小分子有機化合物の、ペプチド基質のセリンリン酸化を阻害する能力を試験した。該基質リン酸化アッセイはＡＫＴ１、２または３の触媒ドメインを使用する。該方法は、単離した酵素の、ＡＴＰからのγリン酸エステルをビオチン化合成ペプチド配列番号１（ビオチン−ａｈｘ−ＡＲＫＲＥＲＡＹＳＦＧＨＨＡ−アミド）のセリン残基へトランスファーすることを触媒する能力を測定する。以下の方法で基質リン酸化を検出した。
【０１３４】
アッセイは、３８４ウェルＵ底白色プレートにて行った。１０ｎＭ活性ＡＫＴ酵素を、１００％ＤＭＳＯ中に５０ｍＭ ＭＯＰＳ、ｐＨ７.５、２０ｍＭ ＭｇＣｌ2、４ｕＭ ＡＴＰ、８ｕＭペプチド、０.０４ｕＣｉ[ｇ−33Ｐ]ＡＴＰ／ウェル、１ｍＭ ＣＨＡＰＳ、２ｍＭ ＤＴＴおよび試験化合物１ｕｌを含有する２０ｕｌのアッセイ容量中にて室温で４０分間インキュベートした。ＳＰＡビーズ混合物（Ｍｇ2+およびＣａ2+を含まないダルベッコのＰＢＳ、０.１％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００、５ｍＭ ＥＤＴＡ、５０ｕＭ ＡＴＰ、２.５ｍｇ／ｍｌのストレプトアビジン被覆ＳＰＡビーズ）５０ｕｌの添加により反応を止めた。該プレートを密封し、ビーズを一夜定着させ、次いで、該プレートをＰａｃｋａｒｄ Ｔｏｐｃｏｕｎｔ Ｍｉｃｒｏｐｌａｔｅ Ｓｃｉｎｔｉｌｌａｔｉｏｎ Ｃｏｕｎｔｅｒ（Packard Instrument Co.、コネティカット州メリデン）にて計数した。
【０１３５】
用量応答のデータは、データ整理式１００＊(Ｕ１−Ｃ２)／(Ｃ１−Ｃ２)対化合物濃度（ここで、Ｕは未知の値であり、Ｃ１はＤＭＳＯについて得られた平均制御値であり、Ｃ２は０.１Ｍ ＥＤＴＡについて得られた平均制御値である）を用いて制御％としてプロットした。データは、ｙ＝((Ｖｍａｘ＊ｘ)／(Ｋ＋ｘ))（ここで、Ｖｍａｘは上部漸近線であり、ＫはＩＣ５０である）によって記載される曲線に適合する。
【０１３６】
上記アッセイの１つまたはそれ以上にて本発明の化合物をＡＫＴ１、ＡＫＴ２およびＡＫＴ３に対する活性について試験する。
【０１３７】
実施例の化合物は、上記ＡＫＴ酵素アッセイに従って一般的に試験され、少なくとも１つの実験において全長ＡＫＴ１に対してｐＩＣ５０値≧５.５を示した。
【０１３８】
実施例２の化合物は、上記ＡＫＴ酵素アッセイに従って一般的に試験され、少なくとも１つの実験において全長ＡＫＴ１に対してｐＩＣ５０値８.０を示した。
【０１３９】
上記データにおいて、ｐＩＣ５０は、ＩＣ５０値をモル単位で表した場合のｌｏｇ(ＩＣ５０)と定義される。
【０１４０】
本発明の範囲内の医薬活性化合物は、それを必要とする哺乳動物（特に、ヒト）においてＡＫＴ阻害物質として有用である。
【０１４１】
したがって、本発明は、癌、関節炎、およびＡＫＴ阻害を必要とする他の症状の治療方法であって、式（Ｉ）または式（ＩＩ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物またはプロドラッグの有効量を投与することを含む方法を提供する。式（Ｉ）および式（ＩＩ）で示される化合物はまた、それらの立証されたＡｋｔ阻害物質として作用する能力のために、上記適応とされた病態の治療方法を提供する。該薬物は、それを必要とする患者へ、静脈内投与、筋肉内投与、経口投与、皮下投与、皮内投与および非経口投与が挙げられるがこれらに限定されるものではない慣用の投与経路によって投与され得る。
【０１４２】
本発明の医薬活性化合物は、カプセル剤、錠剤または注射用製剤のような好都合な投与剤形に取り込まれる。固体または液体の医薬担体が用いられる。固体担体としては、デンプン、ラクトース、硫酸カルシウム・二水和物、白土、シュークロース、タルク、ゼラチン、寒天、ペクチン、アカシア、ステアリン酸マグネシウムおよびステアリン酸が挙げられる。液体担体としては、シロップ、落花生油、オリーブ油、生理食塩水および水が挙げられる。同様に、該担体は、モノステアリン酸グリセリルまたはジステアリン酸グリセリルのような持続放出材を単独でまたはワックスと共に含むことができる。固体担体の量は大きく異なるが、好ましくは、一投与単位あたり約２５ｍｇ〜約１ｇである。液体担体を用いる場合、製剤は、例えば、シロップ、エリキシル、エマルション、軟ゼラチンカプセル、アンプルのような滅菌注射液、または水性もしくは非水性液体懸濁液の形態である。
【０１４３】
医薬製剤は、所望の経口または非経口製剤を得るために、成分の混合、造粒、および錠剤形態について必要な場合には圧縮、または適当な場合には混合、充填および溶解を含む製薬化学の慣用的な技術に従って調製される。
【０１４４】
上記した医薬投与単位での本発明の医薬活性化合物の用量は、好ましくは０.００１〜１００ｍｇ／ｋｇの活性化合物、好ましくは、０.００１〜５０ｍｇ／ｋｇの範囲から選択される有効な無毒性量である。Ａｋｔ阻害物質を必要とするヒト患者を治療する場合、選択された用量は、好ましくは１日１〜６回、経口または非経口投与される。非経口投与の好ましい形態としては、局所投与、直腸投与、経皮投与、注射による投与、および輸液による連続投与が挙げられる。ヒト投与のための経口および／または非経口投与単位は、好ましくは、活性化合物０.０５〜３５００ｍｇを含有する。
【０１４５】
投与されるべき最適な用量は、当業者が容易に決定することができ、使用される個々のＡｋｔ阻害物質、製剤の強度、投与方法、および病態の進行によって異なる。患者の年齢、体重、食事および投与の時を含む治療される個々の患者に依存するさらなる因子によって用量を調節する必要が生じる。
【０１４６】
本発明のヒトを含む哺乳動物におけるＡｋｔ阻害活性の誘発方法は、本発明の医薬活性化合物の有効なＡｋｔ阻害量を必要とする対象体に投与することを含む。
【０１４７】
本発明はまた、Ａｋｔ阻害物質として用いるための薬剤の製造における式（Ｉ）または式（ＩＩ）で示される化合物の使用を提供する。
【０１４８】
本発明はまた、治療に用いる薬剤の製造における式（Ｉ）または式（ＩＩ）で示される化合物の使用を提供する。
【０１４９】
本発明はまた、癌の治療に用いる薬剤の製造における式（Ｉ）または式（ＩＩ）で示される化合物の使用を提供する。
【０１５０】
本発明はまた、関節炎の治療に用いる薬剤の製造における式（Ｉ）または式（ＩＩ）で示される化合物の使用を提供する。
【０１５１】
本発明はまた、式（Ｉ）または式（ＩＩ）で示される化合物および医薬上許容される担体を含む、Ａｋｔ阻害物質として用いるための医薬組成物を提供する。
【０１５２】
本発明はまた、式（Ｉ）または式（ＩＩ）で示される化合物および医薬上許容される担体を含む、癌の治療に用いる医薬組成物を提供する。
【０１５３】
本発明はまた、式（Ｉ）または式（ＩＩ）で示される化合物および医薬上許容される担体を含む、関節炎の治療に用いる医薬組成物を提供する。
【０１５４】
本発明の化合物を本発明に従って投与した場合、許容されない毒物学的作用は考えられない。
【０１５５】
加えて、本発明の医薬活性化合物は、癌または関節炎を治療することが知られている他の化合物、またはＡｋｔ阻害物質と併用する場合に有用性を有することが知られている化合物のようなさらなる活性成分と共投与することができる。
【０１５６】
当業者は、さらに詳述しなくとも上記説明を用いて本発明を最大限に利用することができると考えられる。したがって、以下の実施例は、単なる説明と解釈され、如何なる場合も本発明の範囲を制限するものではない。
【実施例】
【０１５７】
実験的詳細
実施例１〜４７の化合物は、スキーム１〜３に従って、または類似の方法によって容易に製造される。
【０１５８】
製造例１
(２−アミノ−２−フェニルエチル)カルバミン酸１,１−ジメチルエチルの製造
【化９】
2010522770.tif 000010
【０１５９】
ａ）  (２−ヒドロキシ−２−フェニルエチル)カルバミン酸１,１−ジメチルエチル
【化１０】
2010522770.tif 000011
２５℃での２−アミノ−１−フェニルエタノール（５ｇ、３６.４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１８２ｍＬ）中溶液にＢｏｃ2Ｏ（８.７ｇ、４０.１ｍｍｏｌ）を一度に添加した。０.５時間後、該溶液を濃縮し、残留物を、さらなる精製を行わずにそのまま使用した：LC-MS (ES) m/z = 238 (M+H)+。
【０１６０】
ｂ）  [２−(１,３−ジオキソ−１,３−ジヒドロ−２Ｈ−イソインドール−２−イル)−２−フェニルエチル]カルバミン酸１,１−ジメチルエチル
【化１１】
2010522770.tif 000012
２５℃での(２−ヒドロキシ−２−フェニルエチル)カルバミン酸１,１−ジメチルエチル（２ｇ、８.４４ｍｍｏｌ）、フタルイミド（１ｇ、７.０３ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（２.７６ｇ、１０.５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３５ｍＬ）中溶液にＤＥＡＤ（１.７ｍＬ、１０.５ｍｍｏｌ）を滴下した。０.５時間後、該溶液を濃縮し、カラムクロマトグラフィー（シリカ、ヘキサン中１５％ＥｔＯＡｃ）により精製して、白色泡沫体として標記化合物を得た（２ｇ、８０％）：LC-MS (ES) m/z = 367 (M+H)+。
【０１６１】
ｃ）  (２−アミノ−２−フェニルエチル)カルバミン酸１,１−ジメチルエチル
【化１２】
2010522770.tif 000013
【０１６２】
[２−(１,３−ジオキソ−１,３−ジヒドロ−２Ｈ−イソインドール−２−イル)−２−フェニルエチル]カルバミン酸１,１−ジメチルエチル（２ｇ、５.４６ｍｍｏｌ）、およびＭｅＮＨ2（Ｈ2Ｏ中４０ｗｔ％、１０当量）またはＮＨ2ＮＨ2（１０当量）のＭｅＯＨ（０.５Ｍ、１０ｍＬ）中溶液を密閉管中にて６０℃に加熱した。１２時間後、該溶液を濃縮し、カラムクロマトグラフィー（シリカ−乾燥負荷、ＤＣＭ（１％ＮＨ4ＯＨ）中２％ＭｅＯＨ）により精製して、白色固体として標記化合物を得た（１.１ｇ、８５％）：LC-MS (ES) m/z = 237 (M+H)+。
【０１６３】
製造例２
【化１３】
2010522770.tif 000014
(２−アミノ−３−フェニルプロピル)カルバミン酸１,１−ジメチルエチルの製造
【０１６４】
ａ）  １−アミノ−３−フェニル−２−プロパノール
【化１４】
2010522770.tif 000015
２−(フェニルメチル)オキシラン（７.５ｇ、５６.３ｍｍｏｌ）のＮＨ4ＯＨ（１００ｍＬ）中溶液を密閉管中にて２５℃で撹拌した。１２時間後、該溶液を濃縮し、そのまま使用した：LCMS (ES) m/e 152 (M+H)+。
【０１６５】
ｂ）  (２−ヒドロキシ−３−フェニルプロピル)カルバミン酸１,１−ジメチルエチル
【化１５】
2010522770.tif 000016
室温での１−アミノ−３−フェニル−２−プロパノール（７.６ｇ、５０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５０ｍＬ）中溶液に(Ｂｏｃ)2Ｏ（１２.０ｇ、５５ｍｍｏｌ）を添加した。室温で２時間撹拌した後、反応溶液を真空下にて濃縮し、残留物をシリカゲルにて精製して（ＤＣＭ（０.５％ＮＨ4ＯＨ）中５％ＭｅＯＨ）、透明な黄色油状物として標記化合物を得た（１３.１ｇ、９１％）：LCMS (ES) m/z 252 (M+H)+。
【０１６６】
ｃ）  [２−(１,３−ジオキソ−１,３−ジヒドロ−２Ｈ−イソインドール−２−イル)−３−フェニルプロピル]カルバミン酸１,１−ジメチルエチル
【化１６】
2010522770.tif 000017
室温での(２−ヒドロキシ−３−フェニルプロピル)カルバミン酸１,１−ジメチルエチル（１０.０ｇ、３９.８ｍｍｏｌ）、ＰＰｈ3（１２.５ｇ、４７.８ｍｍｏｌ）およびフタルイミド（６.４４ｇ、４３.８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１２５ｍＬ）中溶液にＤＥＡＤ（９.４ｍＬ、５９.７ｍｍｏｌ）を５分間にわたって添加した。室温で１時間後、反応溶液を濃縮し、シリカにて精製して（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、２：１）、白色固体として標記化合物を得た（１２.６ｇ、８３％）：LCMS (ES) m/z 381 (M+H)+。
【０１６７】
ｃ）  (２−アミノ−３−フェニルプロピル)カルバミン酸１,１−ジメチルエチル
(２−アミノ−４−フェニルブチル)カルバミン酸１,１−ジメチルエチル（７.５ｇ、１９.７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ／ＭｅＯＨ（５０ｍＬ／５０ｍＬ）溶液にＮＨ2ＮＨ2（１２.５ｍＬ、３９４ｍｍｏｌ）を添加し、密閉系中にて５０℃で撹拌した。１２時間後、固体を濾過し、メタノールで洗浄した。濾液を濃縮し、０.５％ＮＨ4ＯＨを含有するＣＨＣｌ3中５％ＭｅＯＨを使用してカラムクロマトグラフィーによって精製して、白色固体として標記化合物を得た（３.７５ｇ、７６％）：LC-MS (ES) m/z = 251 (M+H)+。
【０１６８】
製造例３
【化１７】
2010522770.tif 000018
２−｛(２Ｓ)−２−アミノ−３−[２−(トリフルオロメチル)フェニル]プロピル｝−１Ｈ−イソインドール−１,３(２Ｈ)−ジオンの製造
【０１６９】
ａ）  ((１Ｓ)−２−ヒドロキシ−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)カルバミン酸１,１−ジメチルエチル
【化１８】
2010522770.tif 000019
０℃でのＮ−｛[(１,１−ジメチルエチル)オキシ]カルボニル｝−２−(トリフルオロメチル)−Ｌ−フェニルアラニン（５ｇ、１５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（７５ｍＬ）中撹拌溶液にＢＨ3−ＴＨＦ（４５ｍＬ、４５ｍｍｏｌ−ＴＨＦ中１Ｍ）を添加した。１２時間後、該反応物をＡｃＯＨ：ＭｅＯＨ（１：５、２４ｍＬ）でクエンチし、ＮａＨＣＯ3飽和水溶液とＤＣＭとの間で分配させた。次いで、水性相をＤＣＭで数回抽出した。合わせた有機フラクションをＮａ2ＳＯ4で乾燥させ、そのまま使用した（４.２ｇ、８８％）：LCMS (ES) m/e 320 (M+H)+。
【０１７０】
ｂ）  ((１Ｓ)−２−(１,３−ジオキソ−１,３−ジヒドロ−２Ｈ−イソインドール−２−イル)−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)カルバミン酸１,１−ジメチルエチル
【化１９】
2010522770.tif 000020
２５℃での((１Ｓ)−２−ヒドロキシ−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)カルバミン酸１,１−ジメチルエチル（４.２ｇ、１３.２ｍｍｏｌ）、トリフェニルホスフィン（４.５ｇ、１７.１ｍｍｏｌ）およびフタルイミド（１.９ｇ、１３.２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（６６ｍＬ）中溶液にアゾジカルボン酸ジエチル（２.７ｍＬ、１７.１ｍｍｏｌ）を添加した。室温で１時間撹拌した後、反応溶液を真空下にて濃縮し、残留物をシリカゲルにて精製し（ＤＣＭ中１％ＭｅＯＨ）、白色固体として標記化合物を得た（３.２ｇ、５４％）：LCMS (ES) m/z 449 (M+H)+。
【０１７１】
ｃ）  ｛(２Ｓ)−２−アミノ−３−[２（トリフルオロメチル)フェニル]プロピル｝カルバミン酸１,１−ジメチルエチル
室温での((１Ｓ)−２−(１,３−ジオキソ−１,３−ジヒドロ−２Ｈ−イソインドール−２−イル)−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)カルバミン酸１,１−ジメチルエチル（３.２ｇ、７.１ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（３５ｍＬ）中溶液にジオキサン中４Ｍ ＨＣｌ（１８ｍＬ）を添加した。１２時間後、該溶液を濃縮して、標記化合物をＨＣｌ塩として得た（２.７ｇ、定量的）：LCMS (ES) m/z 349 (M+H)+。
【０１７２】
製造例４
【化２０】
2010522770.tif 000021
５−(５,５−ジメチル−１,３,２−ジオキサボリナン−２−イル)−１−メチル−１Ｈ−ピラゾールの製造
０℃での１−メチルピラゾール（４.１ｇ、５０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１００ｍＬ）中溶液にｎ−ＢｕＬｉ（ＴＨＦ中２.２Ｍ、５５ｍｍｏｌ）を添加した。該反応溶液を室温で１時間撹拌し、次いで、−７８℃に冷却した［J. Heterocyclic Chem. 41, 931 (2004)]。該反応溶液に２−イソプロポキシ−４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン（１２.３ｍＬ、６０ｍｍｏｌ）を添加した。−７８℃で１５分後、反応物を１時間にわたって０℃に加温した。反応物をＮＨ4Ｃｌ飽和溶液で希釈し、ＤＣＭで抽出した。有機物をＮａ2ＳＯ4で乾燥させ、真空下にて濃縮して、黄褐色の固体（８.０ｇ、７７％）を得、これをさらなる精製を行わずに使用した。［ＲＢ(ＯＨ)2］について、LCMS (ES) m/z 127 (M+H)+; 1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ 7.57(s, 1H), 6.75(s, 1H), 4.16(s, 3H)および1.41(s, 12H)。
【０１７３】
製造例５
【化２１】
2010522770.tif 000022
３−(｛[(１,１−ジメチルエチル)オキシ]カルボニル｝アミノ)−２−(フェニルメチル)プロパン酸の製造
【０１７４】
ａ）  ２−[(１,３−ジオキソ−１,３−ジヒドロ−２Ｈ−イソインドール−２−イル)メチル]−２−(フェニルメチル)ブタン二酸ジエチル
【化２２】
2010522770.tif 000023
ＮａＨ（２.２ｇ、５４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２００ｍＬ）中懸濁液に２−(フェニルメチル)ブタン二酸ジエチル（１２.５ｇ、４９.９ｍｍｏｌ）を添加した。室温で３０分後、該反応混合物にブロモメチルフタルイミドを添加し、内容物を室温で１４時間撹拌した。該反応物をＨ2Ｏ（１５ｍＬ）でクエンチし、Ｅｔ2Ｏ（３００ｍＬ）で希釈し、層を分取した。有機層を真空下にて濃縮し、得られた残留物をＥｔＯＨ（０°）から再結晶して、白色固体として標記化合物を得た（１３ｇ、６４％）：LCMS (ES) m/z 410 (M+H)+。
【０１７５】
ｂ）  ３−アミノ−２−(フェニルメチル)プロパン酸
【化２３】
2010522770.tif 000024
２−[(１,３−ジオキソ−１,３−ジヒドロ−２Ｈ−イソインドール−２−イル)メチル]−２−(フェニルメチル)ブタン二酸ジエチル（１３ｇ、３１.８ｍｍｏｌ）の濃ＨＣｌ（１２５ｍＬ）およびＨＯＡｃ（３０ｍＬ）中溶液を１Ｌのスクリューキャップ反応容器中に密封し、内容物を１２０℃に４８時間加熱した。該反応溶液を真空下にて濃縮し、得られた固体をＥｔ2Ｏで洗浄して、白色固体として標記化合物を得た（定量的）：LCMS (ES) m/z 181 (M+H)+。
【０１７６】
ｃ）  ３−(｛[(１,１−ジメチルエチル)オキシ]カルボニル｝アミノ)−２−(フェニルメチル)プロパン酸
３−アミノ−２−(フェニルメチル)プロパン酸（前の反応から）のジオキサン（１００ｍＬ）およびＨ2Ｏ（２０ｍＬ）中溶液にＢｏｃ無水物（１０.１ｇ、４６.５ｍｍｏｌ）および６Ｍ ＮａＯＨ溶液（２６ｍＬ）を添加した。室温で１２時間撹拌した後、該反応溶液を真空下にて濃縮し、３Ｍ ＨＣｌで中和し、ＤＣＭで抽出した。有機層をＮａ2ＳＯ4で乾燥させ、粘着性油状物に濃縮した。該油状物をペンタンで洗浄し、高真空下にて乾燥させて、白色固体として標記化合物を得た（５.０ｇ、１７.９ｍｍｏｌ、二工程で５８％）：LCMS (ES) m/z 280 (M+H)+。
【０１７７】
製造例６
【化２４】
2010522770.tif 000025
５−ヨード−１−メチル−１Ｈ−１,２,４−トリアゾールの製造
−７０℃でのｎＢｕＬｉのＥｔ2Ｏ溶液に１−メチル−１Ｈ−１,２,４−トリアゾール（２.０５ｇ、２４.７ｍｍｏｌ）を１５分間にわたってゆっくり添加した。該混合物を−７０℃で６０分間撹拌し、−３０℃に加温した。Ｉ2（６.５ｇ、２５.６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２７ｍＬ）中溶液を１５分間にわたってゆっくり添加し、該混合物を室温に加温し、６０分間撹拌した。該混合物を、飽和Ｎａ2Ｓ2Ｏ3を用いて分配させ、相を分取し、有機溶媒を除去した。粗ヨウ化物を、さらなる精製を行わずに使用した：LCMS (ES) m/z 210 (M+H)+。
【０１７８】
実施例１
【化２５】
2010522770.tif 000026
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−５−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−２−ピリジンカルボキサミドの製造
【０１７９】
ａ）  (２−｛[(５−ブロモ−２−ピリジニル)カルボニル]アミノ｝−３−フェニルプロピル)カルバミン酸１,１−ジメチルエチル
【化２６】
2010522770.tif 000027
２５℃での５−ブロモ−２−ピリジンカルボン酸（０.５２ｇ、２.６ｍｍｏｌ）、ＰｙＢｒＯＰ（１.４ｇ、３.０ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（１.０ｍＬ、６.０ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（７０ｍＬ）中溶液に(２−アミノ−３−フェニルプロピル)カルバミン酸１,１−ジメチルエチル（０.５ｇ、２.０ｍｍｏｌ）を添加した。１６時間後、該溶液をＨ2Ｏとの間で分配させ、ＤＣＭで洗浄した。合わせた有機フラクションを乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、濃縮し、カラムクロマトグラフィーにより精製して（シリカ、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、１：１）、白色固体として標記化合物を得た（０.６０ｇ、６９％）：LC-MS (ES) m/z = 435 (M+H)+。
【０１８０】
ｂ）  [２−(｛[５−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−２−ピリジニル]カルボニル｝アミノ)−３−フェニルプロピル]カルバミン酸１,１−ジメチルエチル
【化２７】
2010522770.tif 000028
(２−｛[(５−ブロモ−２−ピリジニル)カルボニル]アミノ｝−３−フェニルプロピル)カルバミン酸１,１−ジメチルエチル（０.５８ｇ、１.３４ｍｍｏｌ）のジオキサン／Ｈ2Ｏ（５：１、５５ｍＬ）中溶液にＫ2ＣＯ3（０.５５ｇ、４.０ｍｍｏｌ）、テトラキストリフェニルホスフィンＰｄ(０)（０.１５ ｍｇ、０.１３ｍｍｏｌ）、および５−(５,５−ジメチル−１,３,２−ジオキサボリナン−２−イル)−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール（０.３９ｇ、２.０ｍｍｏｌ）を添加した。該反応混合物を密閉管中にて８０℃に１２時間加熱した。反応溶液をＨ2Ｏ（１００ｍＬ）上に注ぎ、ＤＣＭで抽出した。有機物を乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、真空下にて濃縮し、シリカゲルにて精製して（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ、９５：５）、白色固体として標記化合物を得た（０.３９ｇ、６７％）：LC-MS (ES) m/z = 436 (M+H)+。
【０１８１】
ｃ）  Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−５−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−２−ピリジンカルボキサミド
[２−(｛[５−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−２−ピリジニル]カルボニル｝アミノ)−３−フェニルプロピル]カルバミン酸１,１−ジメチルエチル（０.３９ｇ、０,９０ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（１０ｍＬ）およびＴＨＦ（５ｍＬ）に溶解し、ジオキサン中４Ｍ ＨＣｌ（５ｍＬ）で処理した。３時間後、該溶液を濃縮して、白色粉末として標記化合物のＨＣｌ塩を得た（０.３２ｇ、９０％）：LC-MS (ES) m/z = 336 (M+H)+、1H NMR (d4-MeOH, 400MHz) δ 8.87(s, 1H), 8.22(m, 2H), 7.81(s, 1H), 7.32(m, 4H), 7.24(m, 1H), 6.73(s, 1H), 4.62(m, 1H), 4.00(s, 1H), 3.27(m, 2H), 3.05(d, J=7.3Hz, 2H)。
【０１８２】
実施例２
【化２８】
2010522770.tif 000029
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−６−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−３−ピリジンカルボキサミドの製造
５−ブロモ−２−ピリジンカルボン酸の代わりに２−ブロモ−５−ピリジンカルボン酸（０.５２ｇ、２.６ｍｍｏｌ）を用いた以外は実施例１に従って標記化合物を白色固体として製造した：LC-MS (ES) m/z 336 (M+H)+、1H NMR (d4-MeOH, 400MHz) δ 9.10(s, 1H), 8.43(d, J=8.3Hz, 1H), 8.04(d, J=8.3Hz, 1H), 7.82(d, J=2.3Hz, 1H), 7.35(m, 4H), 7.30(m, 1H), 7.01(s, 1H), 4.59(m, 1H), 4.39(s, 3H), 3.26(m, 2H), 3.05(m, 2H)。
【０１８３】
実施例３
【化２９】
2010522770.tif 000030
Ｎ−(２−アミノ−１−ベンジルエチル)−５−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ピリミジン−２−カルボキサミドの製造
【０１８４】
ａ）５−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ピリミジン−２−カルボン酸
【化３０】
2010522770.tif 000031
１−メチル−５−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)−１Ｈ−ピラゾール（１.３５ｇ、６.５ｍｍｏｌ）のジオキサン／Ｈ2Ｏ（５：１、５９ｍＬ）中溶液にＫ2ＣＯ3（２.８ｇ、２０.３ｍｍｏｌ）、テトラキストリフェニルホスフィンＰｄ(０)（３４０ ｍｇ、０.３ｍｍｏｌ）、および５−ブロモ−２−ピリミジンカルボン酸（１.２ｇ、５.９ｍｍｏｌ）を添加した。該反応混合物を密閉管中にて８０℃に１２時間加熱した。該反応溶液をＨ2Ｏ（１００ｍＬ）上に注ぎ、ＤＣＭで抽出した。有機物を乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、真空下にて濃縮して、黄褐色の固体として標記化合物を得た（０.９ｇ、３６％）：LC-MS (ES) m/z = 437 (M+H)+。
【０１８５】
ｂ）[２−(｛[５−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−２−ピリミジニル]カルボニル｝アミノ)−３−フェニルプロピル]カルバミン酸１,１−ジメチルエチル
【化３１】
2010522770.tif 000032
２５℃での５−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ピリミジン−２−カルボン酸（１９４ｍｇ、０.４ｍｍｏｌ）、ＰｙＢｒＯＰ（３３０ｍｇ、０.７１ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（０.２７ｍＬ、１.５ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（７ｍＬ）中溶液に(２−アミノ−３−フェニルプロピル)カルバミン酸１,１−ジメチルエチル（１７４ｍｇ、０.７ｍｍｏｌ）を添加した。１６時間後、該溶液を濃縮し、カラムクロマトグラフィーにより精製して（シリカ、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、２：１）、白色固体として標記化合物を得た（７６ｍｇ、３９％）：LC-MS (ES) m/z = 437 (M+H)+。
【０１８６】
ｃ）  Ｎ−(２−アミノ−１−ベンジルエチル)−５−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ピリミジン−２−カルボキサミド
[２−(｛[５−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−２−ピリミジニル]カルボニル｝アミノ)−３−フェニルプロピル]カルバミン酸１,１−ジメチルエチル（７６ｍｇ、０.１７ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（１ｍＬ）およびＣＨＣｌ3（１０ｍＬ）に溶解し、ジオキサン中４Ｍ ＨＣｌ（５ｍＬ）で処理した。３時間後、該溶液を濃縮し、カラムクロマトグラフィーにより精製して（シリカ、ＣＨＣｌ3／ＭｅＯＨ、９０：１０（１％ＮＨ4ＯＨを含有））、白色の粉末として標記化合物の遊離塩基を得た（４０ｍｇ、６８％）。
ＨＣｌ塩は、過剰のＥｔ2Ｏ中１Ｍ ＨＣｌを添加してＨＣｌ塩としての最終化合物を得ることによって製造された：LC-MS (ES) m/z = 337 (M+H)+、1H NMR (d4-MeOH, 400MHz) d ppm 2.91-3.01(m, 4H)4.00(s, 3H)4.37-4.46(m, 1H)6.69(d, J=2.02Hz, 1H)7.18(t, J=7.20Hz, 1H)7.23-7.33(m, 4H)7.62(d, J=2.02Hz, 1H)9.11(s, 2H)。
【０１８７】
実施例４
【化３２】
2010522770.tif 000033
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミドの製造
５−ブロモ−２−ピリミジンカルボン酸の代わりに４−ブロモ安息香酸（１０２ｍｇ、０.５ｍｍｏｌ）を用いた以外は実施例３の方法に従って標記化合物を白色固体として製造した：LC-MS (ES) m/z = 335 (M+H)+、1H NMR (d4-MeOH, 400MHz) δ 7.96(d, J=12Hz, 2H), 7.63(d, J=12Hz, 2H), 7.4(m, 1H), 7.34(m, 4H), 7.23(m, 1H), 6.58(s, 1H), 4.63(m, 1H), 3.96(s, 3H), 3.25(m, 2H), 3.05(m, 2H)。
【０１８８】
実施例５
【化３３】
2010522770.tif 000034
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−２−クロロ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミドの製造
５−ブロモ−２−ピリミジンカルボン酸の代わりに４−ブロモ−２−クロロ安息香酸（１１８ｍｇ、０.５ｍｍｏｌ）を用いた以外は実施例３の方法に従って標記化合物を白色固体として製造した：LC-MS (ES) m/z = 369 (M+H)+、1H NMR (d4-MeOH, 400MHz) δ 7.70(s, 1H), 7.65(m, 1H), 7.54(m, 2H), 7.36(m, 4H), 7.29(m, 1H), 6.57(m, 1H), 4.63(m, 1H), 4.89(s, 3H), 3.21(m, 2H), 3.08(m,1H), 2.98(m, 1H)。
【０１８９】
実施例６
【化３４】
2010522770.tif 000035
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−３−クロロ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミドの製造
５−ブロモ−２−ピリミジンカルボン酸の代わりに４−ブロモ−３−クロロ安息香酸（１１８ｍｇ、０.５ｍｍｏｌ）を用いた以外は実施例３の方法に従って標記化合物を黄色固体として製造した：LC-MS (ES) m/z = 369 (M+H)+、1H NMR (d4-MeOH, 400MHz) δ 8.03(s, 1H), 7.9(m, 2H), 7.6(m, 1H), 7.38(m, 1H), 7.32(m, 1H), 7.25(m, 1H), 6.64(m, 1H), 4.62(m, 1H), 3.83(s, 3H), 3.24(m, 2H), 3.04(m, 2H)。
【０１９０】
実施例７
【化３５】
2010522770.tif 000036
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−３−(トリフルオロメチル)ベンズアミドの製造
【０１９１】
ａ）  [２−(｛[４−ヒドロキシ−３−(トリフルオロメチル)フェニル]カルボニル｝アミノ)−３−フェニルプロピル]カルバミン酸１,１−ジメチルエチル
【化３６】
2010522770.tif 000037
２５℃での４−ヒドロキシ−３−トリフルオロメチル安息香酸（０.５４ｍｇ、２.６ｍｍｏｌ）、ＰｙＢｒＯＰ（０.７７ｇ、６.０ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（１ｍＬ、６.０ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５０ｍＬ）中溶液に(２−アミノ−３−フェニルプロピル)カルバミン酸１,１−ジメチルエチル（０.５０ｍｇ、２.０ｍｍｏｌ）を添加した。１２時間後、該溶液を濃縮し、シリカにて精製して（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、２：１）、無色の油状物として標記化合物を得た（０.１９ｇ、１７％）：LC-MS (ES) m/z = 439 (M+H)+。
【０１９２】
ｂ）  ４−(｛[２−(｛[(１,１−ジメチルエチル)オキシ]カルボニル｝アミノ)−１−(フェニルメチル)エチル]アミノ｝カルボニル)−２−(トリフルオロメチル)フェニルのトリフルオロメタンスルホン酸エステル
【化３７】
2010522770.tif 000038
室温での[２−(｛[４−ヒドロキシ−３−(トリフルオロメチル)フェニル]カルボニル｝アミノ)−３−フェニルプロピル]カルバミン酸１,１−ジメチルエチル（０.１８ｇ、０.４１ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１５ｍＬ）中溶液にトリエチルアミン（０.１７ｍＬ、１.２ｍｍｏｌ）およびＮ−フェニルトリフルオロメタンスルホンイミド（０.１９ｇ、０.５３ｍｍｏｌ）を添加した。２４時間後、該溶液を濃縮し、カラムクロマトグラフィーにより精製して（シリカ、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、４：１）、白色固体として標記化合物を得た（１００ｍｇ、４３％）：LC-MS (ES) m/z = 571 (M+H)+。
【０１９３】
ｃ）  [２−(｛[４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−３−(トリフルオロメチル)フェニル]カルボニル｝アミノ)−３−フェニルプロピル]カルバミン酸１,１−ジメチルエチル
【化３８】
2010522770.tif 000039
４−(｛[２−(｛[(１,１−ジメチルエチル)オキシ]カルボニル｝アミノ)−１−(フェニルメチル)エチル]アミノ｝カルボニル)−２−(トリフルオロメチル)フェニルのトリフルオロメタンスルホン酸エステル（０.２１ｇ、０.３７ｍｍｏｌ）のジオキサン／Ｈ2Ｏ（５：１、１０ｍＬ）中溶液にＫ2ＣＯ3（１５０ｍｇ、１.１ｍｍｏｌ）、テトラキストリフェニルホスフィンＰｄ(０)（４６ｍｇ、３７ｕｍｏｌ）および５−(５,５−ジメチル−１,３,２−ジオキサボリナン−２−イル)−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール（１４０ｍｇ、０.７４ｍｍｏｌ）を添加した。該反応混合物を密閉管中にて８０℃に１２時間加熱した。該反応溶液をＨ2Ｏ（１００ｍＬ）上に注ぎ、ＤＣＭで抽出した。有機物を乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、真空下にて濃縮し、シリカにて精製して（ＥｔＯＡｃ）、白色固体として標記化合物を得た（０.１６ｇ、８６％）：LC-MS (ES) m/z = 503 (M+H)+。
【０１９４】
ｄ）  Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−３−(トリフルオロメチル)ベンズアミド
[２−(｛[４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−３−(トリフルオロメチル)フェニル]カルボニル｝アミノ)−３−フェニルプロピル]カルバミン酸１,１−ジメチルエチル（０.１６ｇ、０.３２ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（１０ｍＬ）およびＴＨＦ（３ｍＬ）に溶解し、過剰のジオキサン中４Ｍ ＨＣｌで処理した。室温で２時間後、反応溶液を真空下にて濃縮して、白色固体として標記化合物のＨＣｌ塩を得た（１５０ｍｇ、定量的）：LC-MS (ES) m/z = 403 (M+H)+、1H NMR (MeOD, 400MHz) δ 8.29(s, 1H), 8.17(d, J=7.8Hz, 1H), 7.84(s, 1H), 7.34(m, 4H), 7.25(m, 1H), 6.53(s, 1H), 4.65(m, 1H), 3.73(s, 3H), 3.26(m, 2H)および3.04(m, 2H)。
【０１９５】
実施例８
【化３９】
2010522770.tif 000040
Ｎ−((１Ｓ)−２−アミノ−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−５−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−２−ピリジンカルボキサミドの製造
【０１９６】
ａ）  ５−ブロモ−Ｎ−((１Ｓ)−２−(１,３−ジオキソ−１,３−ジヒドロ−２Ｈ−イソインドール−２−イル)−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−２−ピリジンカルボキサミド
【化４０】
2010522770.tif 000041
２５℃での５−ブロモ−２−ピリジンカルボン酸（９７ｍｇ、２.６ｍｍｏｌ）、ＰｙＢｒＯＰ（２６９ｍｇ、０.５７８ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（４１９ｕＬ、２.４１ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５ｍＬ）中溶液に２−｛(２Ｓ)−２−アミノ−３−[２−(トリフルオロメチル)フェニル]プロピル｝−１Ｈ−イソインドール−１,３(２Ｈ)−ジオン（１６８ｍｇ、０.４８１ｍｍｏｌ）［製造例３で製造した］を添加した。１６時間後、該溶液をＨ2Ｏとの間で分配させ、ＤＣＭで洗浄した。合わせた有機フラクションを乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、濃縮し、さらなる精製を行わずにそのまま使用した：LC-MS (ES) m/z = 435 (M+H)+。
【０１９７】
ｂ）  ｛(２Ｓ)−２−｛[(５−ブロモ−２−ピリジニル)カルボニル]アミノ｝−３−[２−(トリフルオロメチル)フェニル]プロピル｝カルバミン酸１,１−ジメチルエチル
【化４１】
2010522770.tif 000042
ｉ）  ５−ブロモ−Ｎ−((１Ｓ)−２−(１,３−ジオキソ−１,３−ジヒドロ−２Ｈ−イソインドール−２−イル)−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−２−ピリジンカルボキサミド（工程ａからの粗生成物）のＭｅＯＨ−ＴＨＦ（１：１、５ｍＬ）中溶液にヒドラジン（１５１ｕＬ、４.８０ｍｍｏｌ）を２５℃で添加した。１２時間後、該溶液を濾過し、濾液を濃縮した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して（シリカ、ＤＣＭ（１％ＮＨ4ＯＨ）中２％ＭｅＯＨ）、標記化合物の遊離塩基を得た（１９２ｍｇ、定量的）：LCMS (ES) m/e 402 (M+H)+。
ｉｉ）  該遊離塩基（１９２ｍｇ、０.４７８ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（６ｍＬ）に溶解し、Ｂｏｃ2Ｏ（１４４ｍｇ、０.６６９ｍｍｏｌ）で処理した。３０分後、該溶液を濃縮して、透明な油状物として標記化合物を得（３００ｍｇ、定量的）、それをそのまま使用した：LCMS (ES) m/e 502 (M+H)+。
【０１９８】
ｃ）  ｛(２Ｓ)−２−(｛[５−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−２−ピリジニル]カルボニル｝アミノ)−３−[２−(トリフルオロメチル)フェニル]プロピル｝カルバミン酸１,１−ジメチルエチル
【化４２】
2010522770.tif 000043
｛(２Ｓ)−２−｛[(５−ブロモ−２−ピリジニル)カルボニル]アミノ｝−３−[２−(トリフルオロメチル)フェニル]プロピル｝カルバミン酸１,１−ジメチルエチル（３００ｍｇ、０.６０ｍｍｏｌ）のジオキサン／Ｈ2Ｏ（５：１、６ｍＬ）中溶液にＫ2ＣＯ3（３３１ｍｇ、２.４ｍｍｏｌ）、テトラキストリフェニルホスフィンＰｄ(０)（３５ｍｇ、２９.９ｍｍｏｌ）、および５−(５,５−ジメチル−１,３,２−ジオキサボリナン−２−イル)−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール（１６２ｍｇ、０.７８ｍｍｏｌ）を添加した。該反応混合物を密閉管中にて８０℃に１２時間加熱した。該反応溶液をＨ2Ｏ（１００ｍＬ）上に注ぎ、ＤＣＭで抽出した。有機物を乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、真空下にて濃縮して、標記化合物を得、これをさらなる精製を行わずにそのまま使用した：LC-MS (ES) m/z = 504 (M+H)+。
【０１９９】
ｄ）  Ｎ−((１Ｓ)−２−アミノ−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−５−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−２−ピリジンカルボキサミド
｛(２Ｓ)−２−(｛[５−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−２−ピリジニル]カルボニル｝アミノ)−３−[２−(トリフルオロメチル)フェニル]プロピル｝カルバミン酸１,１−ジメチルエチル（工程ｃからの粗生成物）をＤＣＭ（２ｍＬ）に溶解し、ＴＦＡ（１ｍＬ）で処理した。３０分後、該溶液を濃縮し、シリカプラグによって中和して（ＤＣＭ（１％ＮＨ4ＯＨ）中２％ＭｅＯＨ）、標記化合物の遊離塩基を得た。
該遊離塩基をＭｅＯＨ（２ｍＬ）に溶解し、過剰のジオキサン中４Ｍ ＨＣｌ（５００ｕＬ）で処理して、白色固体として標記化合物のＨＣｌ塩を得た（１１０ｍｇ、４５％−３工程）：LCMS (ES) m/z = 404 (M+H)+、1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.07(d, J=9.60Hz, 1H), 8.85(d, J=1.52Hz, 1H), 8.18(dd, J=8.08, 2.27Hz, 1H), 8.03(d, J=8.08Hz, 4H), 7.69(d, J=7.83Hz, 1H), 7.57(d, J=2.02Hz, 1H), 7.47-7.54(m, 2H), 7.41(dd, J=7.96, 2.15Hz, 1H), 6.65(d, J=2.02Hz, 1H), 4.51-4.55(m, 1H), 3.92(s, 3H), 3.13-3.16(m, 4H)。
【０２００】
実施例９
【化４３】
2010522770.tif 000044
Ｎ−((１Ｓ)−２−アミノ−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−３−クロロ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミドの製造
５−ブロモ−２−ピリジンカルボン酸の代わりに４−ブロモ−３−クロロ安息香酸（８８ｍｇ、０.３７２ｍｍｏｌ）を用いた以外は実施例８の方法に従って標記化合物を白色固体として製造した：LCMS (ES) m/z = 437 (M+H)+、1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.88(br. s., 1H), 8.08(bs, 4H), 7.87(br. s., 1H), 7.71(d, J=7.83Hz, 1H), 7.54-7.61(m, 4H), 7.44(s, 1H), 6.40(d, J=1.77Hz, 1H), 4.59(d, J=4.80Hz, 1H), 3.66(s, 3H), 3.06-3.17(m, 4H)。
【０２０１】
実施例１０
【化４４】
2010522770.tif 000045
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−４−クロロ−５−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−２−ピリジンカルボキサミドの製造
【０２０２】
ａ）  ５−ブロモ−２−メチルピリジンＮ−オキシド
【化４５】
2010522770.tif 000046
０℃での５−ブロモ−２−メチルピリジン（１ｇ、５.８１ｍｍｏｌ）および過酸化尿素（１.１ｇ、１２.２ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（３０ｍＬ）中溶液に無水トリフルオロ酢酸（１.６ｍＬ、１１.６ｍｍｏｌ）を添加した。２５℃に１２時間にわたって加温した後、該溶液をＨ2Ｏ−ＤＣＭ間で分配させた。水性相をＤＣＭで数回洗浄し、合わせた有機フラクションをＮａ2ＳＯ4で乾燥させ、濃縮し、カラムクロマトグラフィーにより精製して（シリカ、ＤＣＭ（１％ＮＨ4ＯＨ）中１％ＭｅＯＨ）、白色固体として標記化合物を得た（６６０ｍｇ、６０％）：LCMS (ES) m/z = 190 (M+H)+。
【０２０３】
ｂ）  ５−ブロモ−２−メチル−４−ニトロピリジンＮ−オキシド
【化４６】
2010522770.tif 000047
０℃での５−ブロモ−２−メチルピリジンＮ−オキシド（６６０ｍｇ、３.５１ｍｍｏｌ）の硫酸（１.６ｍＬ）中溶液に硝酸（１.５ｍＬ）の硫酸（２.５ｍＬ）中プレミックス溶液を添加した。得られた反応物を２５℃に加温し、次いで、８０℃に加熱した。１２時間後、該溶液を氷中に注ぎ、次いで、６Ｎ ＮａＯＨで中和し、ＤＣＭで数回抽出した。合わせた有機フラクションをＮａ2ＳＯ4で乾燥させ、濃縮し、カラムクロマトグラフィーにより精製して（シリカ、ＤＣＭ中１％ＭｅＯＨ）、黄色固体として標記化合物を得た（５５８ｍｇ、８１％）：LCMS (ES) m/z = 235 (M+H)+。
【０２０４】
ｃ）  ５−ブロモ−４−クロロ−２−メチルピリジンＮ−オキシド
【化４７】
2010522770.tif 000048
０℃での５−ブロモ−２−メチル−４−ニトロピリジンＮ−オキシド（５５８ｍｇ、２.４１ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（３ｍＬ）中溶液にＰＯＣｌ3（１.３ｍＬ、７.２２ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（３.２ｍＬ）中溶液を滴下した。２５℃で１２時間後、該溶液を氷に添加し、ｐＨ約８に調節し、ＤＣＭで数回抽出した。合わせた有機フラクションをＮａ2ＳＯ4で乾燥させ、濃縮し、カラムクロマトグラフィーにより精製して（シリカ、ＤＣＭ中１.５％ＭｅＯＨ）、白色固体として標記化合物を得た（４２６ｍｇ、８０％）：LCMS (ES) m/z = 224 (M+H)+。
【０２０５】
ｄ）  ５−ブロモ−４−クロロ−２−ピリジニル)メタノール
【化４８】
2010522770.tif 000049
０℃での５−ブロモ−２−メチル−４−ニトロピリジンＮ−オキシド（４２６ｍｇ、１.９３ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５ｍＬ）中溶液に無水トリフルオロ酢酸（８１７ｕＬ、５.７８ｍｍｏｌ）を添加した。２５℃に１２時間にわたって加温した後、該溶液を６Ｎ ＮａＯＨ−ＤＣＭ間で分配させた。水性相をＤＣＭで数回洗浄し、合わせた有機フラクションをＮａ2ＳＯ4で乾燥させ、濃縮し、カラムクロマトグラフィーにより精製して（シリカ、ＤＣＭ中１％ＭｅＯＨ）、白色固体として標記化合物を得た（１８７ｍｇ、４４％）：LCMS (ES) m/z = 223 (M+H)+。
【０２０６】
ｅ）  ５−ブロモ−４−クロロ−２−ピリジンカルボン酸
【化４９】
2010522770.tif 000050
Ｈ2Ｏ中のＫＭｎＯ4（１７４ｍｇ、１.１ｍｍｏｌ）を(５−ブロモ−４−クロロ−２−ピリジニル)メタノール（１８７ｍｇ、０.８４６ｍｍｏｌ）の１０％Ｎａ2ＣＯ3（１ｍＬ）中溶液に滴下した。２時間後、該溶液をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）で濾過し、ｐＨ約４に調節し、得られた沈殿物を濾過し、次いで、トルエンと一緒に共沸乾燥させて、白色粉末として標記化合物を得た（１３５ｍｇ、６８％）：LCMS (ES) m/z = 237 (M+H)+。
【０２０７】
ｆ）  Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−４−クロロ−５−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−２−ピリジンカルボキサミド
５−ブロモ−２−ピリジンカルボン酸の代わりに５−ブロモ−４−クロロ−２−ピリジンカルボン酸 （１３５ｍｇ、０.５７２ｍｍｏｌ）を用いた以外は実施例１に従って標記化合物を白色固体として製造した：LCMS (ES) m/z = 370 (M+H)+、1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.07(d, J=9.35Hz, 1H), 8.75(s, 1H), 8.14(s, 1H), 8.03(br. s., 3H), 7.61(d, J=2.02Hz, 1H), 7.26(d, J=3.28Hz, 3H), 7.23-7.30(m, 1H), 7.17-7.22(m, 1H), 6.53(d, J=2.02Hz, 1H), 4.53(d, J=4.29Hz, 1H), 3.71(s, 3H), 2.96-3.17(m, 4H)。
【０２０８】
実施例１１
【化５０】
2010522770.tif 000051
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−２−ピリジンカルボキサミドの製造
５−ブロモ−２−ピリジンカルボン酸の代わりに４−ブロモ−２−ピリジンカルボン酸（３００ｍｇ、１.４８ｍｍｏｌ）を用いた以外は実施例１に従って標記化合物を白色固体として製造した：LCMS (ES) m/z = 436 (M+H)+、1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.99(d, J=9.09Hz, 1H), 8.77(d, J=5.05Hz, 1H), 8.08(d, J=1.01Hz, 1H), 8.01(s, 3H), 7.84(dd, J=5.05, 1.77Hz, 1H), 7.57(d, J=2.02Hz, 1H), 7.23-7.30(m, 4H), 7.19(td, J=6.19, 2.53Hz, 1H), 6.71(d, J=1.77Hz, 1H), 4.52(m, 1H), 3.96(s, 3H), 2.97-3.10(m, 4H)。
【０２０９】
実施例１２
【化５１】
2010522770.tif 000052
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−６−クロロ−５−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−２−ピリジンカルボキサミドの製造
【０２１０】
ａ）  ３−ブロモ−２−クロロ−６−メチルピリジンＮ−オキシド
【化５２】
2010522770.tif 000053
０℃での３−ブロモ−２−クロロ−６−メチルピリジン（１ｇ、４.８４ｍｍｏｌ）および過酸化尿素（９１１ｍｇ、９.６９ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２４ｍＬ）中溶液に無水トリフルオロ酢酸（１.４ｍＬ、９.６９ｍｍｏｌ）を添加した。２５℃に１２時間にわたって加温した後、該溶液をＨ2Ｏ−ＤＣＭ間で分配させた。水性相をＤＣＭで数回洗浄し、合わせた有機フラクションをＮａ2ＳＯ4で乾燥させ、濃縮し、カラムクロマトグラフィーにより精製して（シリカ、ＤＣＭ中１％ＭｅＯＨ）、白色固体として標記化合物を得た（１.１ｇ、定量的）：LCMS (ES) m/z = 223 (M+H)+。
【０２１１】
ｂ）  Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−６−クロロ−５−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−２−ピリジンカルボキサミド
５−ブロモ−４−クロロ−２−メチルピリジンＮ−オキシドの代わりに３−ブロモ−２−クロロ−６−メチルピリジンＮ−オキシド（１.１ｇ、４.９５ｍｍｏｌ）を用いた以外は実施例１０に従って標記化合物を白色固体として製造した：LCMS (ES) m/z = 370 (M+H)+、1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.83(d, J=9.35Hz, 1H), 8.10-8.17(m, 1H), 8.06(d, J=7.83Hz, 4H), 7.58(d, J=2.02Hz, 1H), 7.24-7.32(m, 4H), 7.18-7.23(m, 1H), 6.49(d, J=1.77Hz, 1H), 4.53(d, J=3.79Hz, 1H), 3.70(s, 3H), 3.17(s, 1H), 2.98(d, J=7.83Hz, 3H)。
【０２１２】
実施例１３
【化５３】
2010522770.tif 000054
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−６−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−２−ピリジンカルボキサミドの製造
５−ブロモ−２−ピリミジンカルボン酸の代わりに６−ブロモ−２−ピリジンカルボン酸（１.２ｇ、５.９ｍｍｏｌ）を用いた以外は実施例３の方法に従って標記化合物を白色固体として製造した：LC-MS (ES) m/z 336 (M+H)+、1H NMR (400MHz, MeOD) δ ppm 2.98-3.09(m, 4H), 4.07(s, 3H), 4.51(ddd, J=7.89, 4.99, 2.53Hz, 1H), 6.77(d, J=2.02Hz, 1H), 7.17-7.22(m, 1H), 7.23-7.30(m, 4H), 7.54(d, J=2.27Hz, 1H), 7.89(q, J=4.55Hz, 1H), 8.04(d, J=4.04Hz, 2H)。
【０２１３】
実施例１４
【化５４】
2010522770.tif 000055
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−５−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−３−ピリジンカルボキサミドの製造
５−ブロモ−２−ピリミジンカルボン酸の代わりに５−ブロモ−３−ピリジンカルボン酸（２.１ｇ、１０.４ｍｍｏｌ）を用いた以外は実施例３の方法に従って標記化合物を白色固体として製造した：LC-MS (ES) m/z 336 (M+H)+、1H NMR (400MHz, MeOD) δ ppm 2.77-3.04(m, 4H), 3.91(s, 3H), 4.39(s, 1H), 6.54(d, J=2.02Hz, 1H), 7.16-7.23(m, 1H), 7.25-7.31(m, 4H), 7.58(d, J=2.02Hz, 1H), 8.23(t, J=2.15Hz, 1H), 8.81(d, J=2.27Hz, 1H), 8.92(d, J=2.02Hz, 1H)。
【０２１４】
実施例１５
【化５５】
2010522770.tif 000056
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−２−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−４−ピリジンカルボキサミドの製造
５−ブロモ−２−ピリミジンカルボン酸の代わりに２−ブロモ−４−ピリジンカルボン酸（１.０ｇ、５.２ｍｍｏｌ）を用いた以外は実施例３の方法に従って標記化合物を白色固体として製造した：LC-MS (ES) m/z 336 (M+H)+、1H NMR (400MHz, MeOD) δ ppm 2.84-2.94(m, 2H), 2.96-3.02(m, 2H), 4.16(s, 3H), 4.40(ddd, J=8.34, 4.80, 2.27Hz, 1H), 6.75(d, J=2.02Hz, 1H), 7.19(td, J=6.00, 2.65Hz, 1H), 7.25-7.30(m, 4H), 7.53(d, J=2.02Hz, 1H), 7.60(dd, J=5.18, 1.64Hz, 1H), 7.95(s, 1H), 8.73(d, J=5.31Hz, 1H)。
【０２１５】
実施例１６
【化５６】
2010522770.tif 000057
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−３−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミドの製造
５−ブロモ−２−ピリミジンカルボン酸の代わりに３−ブロモ−安息香酸（１０１ｍｇ、０.５ｍｍｏｌ）を用いた以外は実施例３の方法に従って標記化合物を白色固体として製造した：LC-MS (ES) m/z 335 (M+H)+、1H NMR (400MHz, MeOD) δ ppm 3.01-3.08(m, 2H), 3.21-3.28(m, 2H), 4.00(d, J=1.77Hz, 3H), 4.60-4.67(m, 1H), 6.71(d, J=2.53Hz, 1H), 7.20-7.25(m, 1H), 7.29-7.35(m, 4H), 7.66(t, J=7.71Hz, 1H), 7.76(dd, J=7.83, 1.26Hz, 1H), 7.92-7.97(m, 3H)。
【０２１６】
実施例１７
【化５７】
2010522770.tif 000058
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−３−メチル−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミドの製造
５−ブロモ−２−ピリミジンカルボン酸の代わりに４−ブロモ−３−メチル安息香酸（１０８ｍｇ、０.５ｍｍｏｌ）を用いた以外は実施例３の方法に従って標記化合物を白色固体として製造した：LC-MS (ES) m/z 349 (M+H)+、1H NMR (400MHz, MeOD) δ ppm 2.28(s, 3H), 3.02-3.08(m, 2H), 3.21-3.28(m, 2H), 3.80(s, 3H), 4.59-4.67(m, 1H), 6.62-6.63(m, 1H) 7.22-7.27(m, 1H)7.30-7.36(m, 4H)7.43(d, J=8.08Hz, 1H), 7.76(dd, J=7.83, 1.26Hz, 1H), 7.82(s, 1H), 8.01-8.03(m, 1H)。
【０２１７】
実施例１８
【化５８】
2010522770.tif 000059
Ｎ−((１Ｓ)−２−アミノ−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−３−フルオロ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミドの製造
【０２１８】
ａ）  ３−フルオロ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)安息香酸
【化５９】
2010522770.tif 000060
４−ブロモ−３−フルオロ安息香酸（１１０ｍｇ、０.５ｍｍｏｌ）のジオキサン／Ｈ2Ｏ（５：１、６ｍＬ）中溶液にＫ2ＣＯ3（２０７ｍｇ、１.５ｍｍｏｌ）、テトラキストリフェニルホスフィンＰｄ(０)（２９ｍｇ、０.０２５ｍｍｏｌ）および５−(５,５−ジメチル−１,３,２−ジオキサボリナン−２−イル)−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール（１０７ｍｇ、０.５５ｍｍｏｌ）を添加した。該反応混合物を密閉管中にて８０℃に１２時間加熱し、次いで、６Ｎ ＮａＯＨとＤＣＭとの間で分配させた。水性相のｐＨを３Ｍ ＨＣｌで約３に調節し、ＤＣＭで数回洗浄した。合わせた有機フラクションを乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、真空下にて濃縮し、さらなる精製を行わずにそのまま使用した（９８ｍｇ、８９％）：LC-MS (ES) m/z = 221 (M+H)+。
【０２１９】
ｂ）  Ｎ−((１Ｓ)−２−(１,３−ジオキソ−１,３−ジヒドロ−２Ｈ−イソインドール−２−イル)−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−３−フルオロ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミド
【化６０】
2010522770.tif 000061
２５℃での３−フルオロ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)安息香酸（６６ｍｇ、０.３ｍｍｏｌ）、ＰｙＢｒＯＰ（１６９ｍｇ、０.３７ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（２６３μＬ、１.５ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（３ｍＬ）中溶液に２−｛(２Ｓ)−２−アミノ−３−[２−(トリフルオロメチル)フェニル]プロピル｝−１Ｈ−イソインドール−１,３(２Ｈ)−ジオン−ＨＣｌ（１０５ｍｇ、０.３ｍｍｏｌ）［製造例３に従って製造した]を添加した。１６時間後、該溶液をＨ2Ｏとの間で分配させ、ＤＣＭで洗浄した。合わせた有機フラクションを乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、濃縮し、カラムクロマトグラフィー（シリカ）により精製して、白色固体として標記化合物を得た（１１２ｍｇ、６８％）：LC-MS (ES) m/z = 551 (M+H)+。
【０２２０】
ｃ）  Ｎ−((１Ｓ)−２−アミノ−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−３−フルオロ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミド
室温でのＮ−((１Ｓ)−２−(１,３−ジオキソ−１,３−ジヒドロ−２Ｈ−イソインドール−２−イル)−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−３−フルオロ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミド（１１２ｍｇ、０.２ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ／ＴＨＦ（２ｍＬ、１：１）中溶液にヒドラジン（０.１２ｍＬ、３.９３ｍｍｏｌ）を添加した。室温で１８時間撹拌した後、反応溶液を真空下にて濃縮し、カラムクロマトグラフィーにより精製して（シリカ、ＤＣＭ（１％ＮＨ4ＯＨ）中３％ＭｅＯＨ）、標記化合物を得た。
上記からの中性化合物をＭｅＯＨ（２ｍＬ）に溶解し、過剰のジオキサン中４Ｍ ＨＣｌ（０.５ｍＬ）で処理し、濃縮して、白色固体として標記化合物のＨＣｌ塩を得た：LC-MS (ES) m/z 421 (M+H)+、1H NMR (400MHz, MeOD) δ ppm 3.12-3.20(m, 1H), 3.24-3.32(m, 3H), 3.86(d, J=1.26Hz, 3H), 4.72-4.79(m, 1H), 6.55(d, J=2.02Hz, 1H), 7.41-7.48(m, 1H), 7.52-7.58(m, 2H), 7.58-7.63(m, 1H), 7.70-7.74(m, 2H), 7.74-7.82(m, 2H)。
【０２２１】
実施例１９
【化６１】
2010522770.tif 000062
Ｎ−((１Ｓ)−２−アミノ−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−３−メチル−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミドの製造
４−ブロモ−３−フルオロ安息香酸の代わりに４−ブロモ−３−メチル安息香酸（１０９ｍｇ、０.５ｍｍｏｌ）を用いた以外は実施例１８の方法に従って標記化合物を白色固体として製造した：LC-MS (ES) m/z 417 (M+H)+、1H NMR (400MHz, MeOD) δ ppm 2.24(s, 3H), 3.09-3.17(m, 1H), 3.21-3.29(m, 3H), 3.65(s, 3H), 4.73(s, 1H),  6.31-6.32(m, 1H), 7.37(d, J=8Hz, 1H), 7.44-7.47(m, 1H), 7.52-7.59(m, 3H), 7.69-7.75(m, 2H), 7..78-7.80(m, 1H)。
【０２２２】
実施例２０
【化６２】
2010522770.tif 000063
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−３−ヒドロキシ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミドの製造
５−ブロモ−２−ピリミジンカルボン酸の代わりに４−ブロモ−３−ヒドロキシ安息香酸（１０８ｍｇ、０.５ｍｍｏｌ）を用いた以外は実施例３の方法に従って標記化合物を黄色固体として製造した：LC-MS (ES) m/z 351 (M+H)+、1H NMR (400MHz, MeOD) δ ppm 3.01(s, 2H), 3.18(s, 2H), 3.76(s, 3H), 4.60(s, 1H), 6.35(s, 2H), 7.25(s, 1H), 7.30(s, 2H), 7.32(s, 4H), 7.37(s, 1H), 7.57(s, 1H), 。
【０２２３】
実施例２１
【化６３】
2010522770.tif 000064
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−３−フルオロ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミドの製造
５−ブロモ−２−ピリミジンカルボン酸の代わりに４−ブロモ−３−フルオロ安息香酸（１１０ｍｇ、０.５ｍｍｏｌ）を用いた以外は実施例３に従って標記化合物を白色固体として製造した：LC-MS (ES) m/z 421 (M+H)+、1H NMR (400MHz, MeOD) δ ppm 3.06(d, J=7.07Hz, 2H), 3.23-3.30(m, 2H), 4.02(s, 3H), 4.60-4.68(m, 1H), 6.89-6.91(m, 1H), 7.24(d, J=5.81Hz, 1H), 7.28-7.36(m, 4H), 7.71(t, J=7.33Hz, 1H), 7.77-7.87(m, 2H), 8..22-8.32(m, 1H)。
【０２２４】
実施例２２
【化６４】
2010522770.tif 000065
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−３−クロロ−５−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミドの製造
５−ブロモ−２−ピリミジンカルボン酸の代わりに３−ブロモ−５−クロロ安息香酸（２８２ｍｇ、１.２ｍｍｏｌ）を用いた以外は実施例３に従って標記化合物を白色固体として製造した：LC-MS (ES) m/z 369 (M+H)+、1H NMR (400MHz, MeOD) δ ppm 3.05(d, J=7.83Hz, 2H), 3.26(d, J=6.57Hz, 2H), 4.09(s, 3H), 4.59-4.67(m, J=7.14, 7.14, 7.14, 7.14Hz, 1H), 6.92(d, J=2.78Hz, 1H), 7.23(t, J=6.82Hz, 1H), 7.28-7.36(m, 4H), 7.86(s, 1H), 8.00(s, 2H), 8.20(s, 1H)。
【０２２５】
実施例２３
【化６５】
2010522770.tif 000066
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−２−クロロ−５−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミドの製造
５−ブロモ−２−ピリジンカルボン酸の代わりに５−ブロモ−２−クロロ安息香酸（２８２ｍｇ、１.２ｍｍｏｌ）を用いた以外は実施例３の方法に従って標記化合物を白色固体として製造した：LC-MS (ES) m/z 369 (M+H)+、1H NMR (400MHz, MeOD) δ ppm 2.93-3.02(m, 1H), 3.04-3.11(m, 1H), 3.15-3.27(m, 2H), 4.04(s, 3H), 4.60-4.68(m, 1H), 6.82(s, 1H), 7.23-7.30(m, 1H), 7.30-7.37(m, 4H), 7.58-7.69(m, 3H), , 8.12(s, 1H)。
【０２２６】
実施例２４
【化６６】
2010522770.tif 000067
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−４−クロロ−３−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミドの製造
５−ブロモ−２−ピリジンカルボン酸の代わりに３−ブロモ−４−クロロ安息香酸（２８２ｍｇ、１.２ｍｍｏｌ）を用いた以外は実施例３に従って標記化合物をオフホワイト色の固体として製造した：LC-MS (ES) m/z 369 (M+H)+、1H NMR (400MHz, MeOD) δ ppm 2.98-3.06(m, 2H), 3.17-3.26(m, 2H), 3.79-3.83(m, 3H), 4.59(s, 1H), 6.59(d, J=2.27Hz, 1H), 7.23(dt, J=6.00, 2.94Hz, 1H), 7.28-7.34(m, 4H), 7.73(d, J=8.59Hz, 1H), 7.85-7.95(m, 3H)。
【０２２７】
実施例２５
【化６７】
2010522770.tif 000068
Ｎ−((１Ｓ)−２−アミノ−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−４−クロロ−５−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−２−ピリジンカルボキサミドの製造
４−ブロモ−３−フルオロ安息香酸の代わりに５−ブロモ−４−クロロ−２−ピリジンカルボン酸（１４２ｍｇ、０.６ｍｍｏｌ）［実施例１０に従って製造した］を用いた以外は実施例８に従って標記化合物を白色固体として製造した：LC-MS (ES) m/z 438 (M+H)+、1H NMR (400MHz, MeOD) δ ppm 3.12-3.21(m, 1H), 3.30(d, J=4.04Hz, 3H), 3.80(s, 3H), 4.73(d, J=4.55Hz, 1H), 6.56-6.62(m, 1H), 7.41(t, J=7.07Hz, 1H), 7.50(t, J=7.33Hz, 1H), 7.53-7.59(m, 1H), 7.70(d, J=7.83Hz, 1H), 7.73-7.79(m, 1H), 8.20(s, 1H), 8.72(s, 1H), 
【０２２８】
実施例２６
【化６８】
2010522770.tif 000069
Ｎ−((１Ｓ)−２−アミノ−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−４−クロロ−３−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミドの製造
４−ブロモ−３−フルオロ安息香酸の代わりに３−ブロモ−４−クロロ安息香酸（２８２ｇ、１.２ｍｍｏｌ）を用いた以外は実施例１８に従って標記化合物を白色固体として製造した：LC-MS (ES) m/z 437 (M+H)+、1H NMR (400MHz, MeOD) δ ppm 3.18(d, J=9.85Hz, 1H), 3.22-3.31(m, 3H), 3.91(d, J=7.33Hz, 3H), 4.70-4.76(m, 1H), 6.65-6.78(m, 1H), 7.43(t, J=7.45Hz, 1H), 7.50-7.58(m, 2H), 7.71(d, J=7.83Hz, 1H), 7.77(d, J=8.84Hz, 1H), 7.98-8.08(m, 3H)。
【０２２９】
実施例２７
【化６９】
2010522770.tif 000070
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−４−(４−クロロ−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−３−フルオロベンズアミドの製造
【０２３０】
ａ）３−フルオロ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)安息香酸
【化７０】
2010522770.tif 000071
４−ブロモ−３−フルオロ安息香酸（２２０ｍｇ、１.０ｍｍｏｌ）のジオキサン／Ｈ2Ｏ（５：１、１２ｍＬ）中溶液にＫ2ＣＯ3（４１４ｍｇ、３.０ｍｍｏｌ）、テトラキストリフェニルホスフィンＰｄ(０)（５８ｍｇ、０.０５ｍｍｏｌ）および５−(５,５−ジメチル−１,３,２−ジオキサボリナン−２−イル)−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール（２１４ｍｇ、１.１ｍｍｏｌ）を添加した。該反応混合物を密閉管中にて８０℃に１２時間加熱し、次いで、６Ｎ ＮａＯＨとＤＣＭとの間で分配させた。水性相のｐＨを３Ｍ ＨＣｌで約３に調節し、ＤＣＭで数回洗浄した。合わせた有機フラクションを乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、真空下にて濃縮し、さらなる精製を行わずにそのまま使用した（１９６ｍｇ、８９％）：LC-MS (ES) m/z = 221 (M+H)+。
【０２３１】
ｂ）  ４−(４−クロロ−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−３−フルオロ安息香酸
【化７１】
2010522770.tif 000072
３−フルオロ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)安息香酸（１９６ｍｇ、０.８９ｍｍｏｌ）およびＮ−クロロスクシンイミド（１１９ｍｇ、０.８９ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５ｍＬ）中溶液を密閉管中にて７０℃で撹拌した。１時間後、該溶液をＨ2Ｏ−ＤＣＭ間で分配させ、水性相をｐＨ３に調節し、水性相をＤＣＭで数回洗浄した。合わせた有機フラクションを乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、真空下にて濃縮し、さらなる精製を行わずにそのまま使用した（１９２ｍｇ、８５％）：LC-MS (ES) m/z = 255 (M+H)+。
【０２３２】
ｃ）  [２−(｛[４−(４−クロロ−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−３−フルオロフェニル]カルボニル｝アミノ)−３−フェニルプロピル]カルバミン酸１,１−ジメチルエチル
【化７２】
2010522770.tif 000073
４−(４−クロロ−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−３−フルオロ安息香酸（１００ｍｇ、０.４３ｍｍｏｌ）、(２−アミノ−３−フェニルプロピル)カルバミン酸１,１−ジメチルエチル（１０８ｍｇ、０.４３ｍｍｏｌ）、ジイソプロピルエチルアミン（０.４ｍＬ、２.１４ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５ｍＬ）中溶液にＰｙＢｒｏｐ（３３０ｍｇ、０.７１ｍｍｏｌ）を一度に添加した。１時間後、反応内容物をＨ2Ｏ／ＤＣＭ間で分配させた。水性相をＤＣＭで数回洗浄した。合わせた有機フラクションを乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、濃縮し、カラムクロマトグラフィー（シリカ）により精製して、白色固体として標記化合物を得た（７９ｍｇ、３８％）：LCMS (ES) m/z = 487 (M+H)+。
【０２３３】
ｄ）  Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−４−(４−クロロ−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−３−フルオロベンズアミド
[２−(｛[４−(４−クロロ−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−３−フルオロフェニル]カルボニル｝アミノ)−３−フェニルプロピル]カルバミン酸１,１−ジメチルエチルのＴＦＡ−ＤＣＭ（３ｍＬ、１：２）中溶液を２５℃で撹拌した。３０分後、該溶液を濃縮し、残留物をシリカプラグで中和して（ＤＣＭ（１％ＮＨ4ＯＨ）中４％ＭｅＯＨ）、標記化合物の遊離塩基を得た。
次いで、該遊離塩基をＭｅＯＨ中溶液として過剰のジオキサン中４Ｍ ＨＣｌで処理して、白色固体として標記化合物のＨＣｌ塩を得た（１７ｍｇ、１７％）：LC-MS (ES) m/z 387 (M+H)+、1H NMR (400MHz, MeOD) δ ppm 3.01-3.07(m, 2H), 3.18-3.29(m, 2H), 3.73-3.79(m, 3H), 4.61(d, J=3.54Hz, 1H), 7.26(d, J=4.80Hz, 1H), 7.34(d, J=3.03Hz, 4H), 7.57(t, J=7.45Hz, 1H), 7.60-7.66(m, 1H), 7.71-7.80(m, 2H)。
【０２３４】
実施例２８
【化７３】
2010522770.tif 000074
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−３−クロロ−４−(４−クロロ−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミドの製造
４−ブロモ−３−フルオロ安息香酸の代わりに４−ブロモ−３−クロロ安息香酸（２８２ｇ、１.２ｍｍｏｌ）を用いた以外は実施例２７に従って標記化合物を白色固体として製造した：LC-MS (ES) m/z 403 (M+H)+、1H NMR (400MHz, MeOD) δ ppm 2.99-3.10(m, 2H), 3.19-3.29(m, 2H), 3.69(s, 3H), 4.59-4.67(m, 1H), 7.22-7.28(m, 1H), 7.30-7.36(m, 4H), 7.52(d, J=8.08Hz, 1H), 7.59(s, 1H), 7.88(ddd, J=7.96, 3.92, 1.77Hz, 1H), 8.02(dd, J=4.17, 1.64Hz, 1H)。
【０２３５】
実施例２９
【化７４】
2010522770.tif 000075
Ｎ−((１Ｓ)−２−アミノ−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−３−フルオロ−４−(４−クロロ−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミドの製造
【０２３６】
ａ）  ３−フルオロ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)安息香酸
【化７５】
2010522770.tif 000076
４−ブロモ−３−フルオロ安息香酸（２２０ｍｇ、１.０ｍｍｏｌ）のジオキサン／Ｈ2Ｏ（５：１、１２ｍＬ）中溶液にＫ2ＣＯ3（４１４ｍｇ、３.０ｍｍｏｌ）、テトラキストリフェニルホスフィンＰｄ(０)（５８ｍｇ、０.０５ｍｍｏｌ）および５−(５,５−ジメチル−１,３,２−ジオキサボリナン−２−イル)−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール（２１４ｍｇ、１.１ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を密閉管中にて８０℃に１２時間加熱し、次いで、６Ｎ ＮａＯＨとＤＣＭとの間で分配させた。水性相のｐＨを３Ｍ ＨＣｌで約３に調節し、ＤＣＭで数回洗浄した。合わせた有機フラクションを乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、真空下にて濃縮し、さらなる精製を行わずにそのまま使用した（１９６ｍｇ、８９％）：LC-MS (ES) m/z = 221 (M+H)+。
【０２３７】
ｂ）  ４−(４−クロロ−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−３−フルオロ安息香酸
【化７６】
2010522770.tif 000077
３−フルオロ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)安息香酸（１９６ｍｇ、０.８９ｍｍｏｌ）およびＮ−クロロスクシンイミド（１１９ｍｇ、０.８９ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５ｍＬ）中溶液を密閉管中にて７０℃で撹拌した。１時間後、該溶液をＨ2Ｏ−ＤＣＭ間で分配させ、水性相をｐＨ３に調節し、水性相をＤＣＭで数回洗浄した。合わせた有機フラクションを乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、真空下にて濃縮し、さらなる精製を行わずにそのまま使用した（１９２ｍｇ、８５％）：LC-MS (ES) m/z = 255 (M+H)+。
【０２３８】
ｃ）  ４−(４−クロロ−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−Ｎ−((１Ｓ)−２−(１,３−ジオキソ−１,３−ジヒドロ−２Ｈ−イソインドール−２−イル)−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−３−フルオロベンズアミド
【化７７】
2010522770.tif 000078
４−(４−クロロ−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−３−フルオロ安息香酸（１００ｍｇ、０.４３ｍｍｏｌ）、２−｛(２Ｓ)−２−アミノ−３−[２−(トリフルオロメチル)フェニル]プロピル｝−１Ｈ−イソインドール−１,３(２Ｈ)−ジオン−ＨＣｌ（１５１ｍｇ、０.４３ｍｍｏｌ）［製造例３に従って製造した］、ジイソプロピルエチルアミン（０.４ｍＬ、２.１４ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５ｍＬ）中溶液にＰｙＢｒｏｐ（３３０ｍｇ、０.７１ｍｍｏｌ）を一度に添加した。１時間後、反応内容物をＨ2Ｏ／ＤＣＭ間で分配させた。水性相をＤＣＭで数回洗浄した。合わせた有機フラクションを乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、濃縮し、カラムクロマトグラフィー（シリカ）により精製して、白色固体として標記化合物を得た（９０ｍｇ、３６％）：LCMS (ES) m/z = 585 (M+H)+。
【０２３９】
ｄ）  Ｎ−((１Ｓ)−２−アミノ−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−３−フルオロ−４−(４−クロロ−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミド
室温での４−(４−クロロ−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−Ｎ−((１Ｓ)−２−(１,３−ジオキソ−１,３−ジヒドロ−２Ｈ−イソインドール−２−イル)−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−３−フルオロベンズアミド（９０ｍｇ、０.１５ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ／ＴＨＦ（２ｍＬ、１：１）中溶液にヒドラジン（０.１２ｍＬ、３.９３ｍｍｏｌ）を添加した。室温で１８時間撹拌した後、該反応溶液を真空下にて濃縮し、カラムクロマトグラフィーにより精製して（シリカ、ＤＣＭ（１％ＮＨ4ＯＨ）中３％ＭｅＯＨ）、標記化合物を得た（１４ｍｇ、２１％）。
上記からの中性化合物をＭｅＯＨ（２ｍＬ）に溶解し、過剰のジオキサン中４Ｍ ＨＣｌ（０.５ｍＬ）で処理し、濃縮して、淡黄色固体として標記化合物のＨＣｌ塩を得た：LC-MS (ES) m/z 455 (M+H)+、1H NMR (400MHz, MeOD) δ ppm 3.17(d, J=9.09Hz, 1H), 3.26(d, J=6.32Hz, 3H), 3.72-3.80(m, 3H), 4.74(s, 1H), 7.41-7.49(m, 1H), 7.54-7.64(m, 4H), 7.72-7.84(m, 3H)。
【０２４０】
実施例３０
【化７８】
2010522770.tif 000079
Ｎ−((１Ｓ)−２−アミノ−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−３−クロロ−４−(４−クロロ−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミドの製造
４−ブロモ−３−フルオロ安息香酸の代わりに４−ブロモ−３−クロロ安息香酸（２８２ｍｇ、１.２ｍｍｏｌ）を用いた以外は実施例２９に従って標記化合物を白色固体として製造した：LC-MS (ES) m/z 471 (M+H)+、1H NMR (400MHz, MeOD) δ ppm 3.20(d, J=9.35Hz, 1H), 3.28(d, J=3.54Hz, 2H), 3.37(s, 1H), 3.70(s, 3H), 4.75(d, J=4.55Hz, 1H), 7.41-7.47(m, 1H), 7.55(d, J=7.83Hz, 2H), 7.59-7.62(m, 2H), 7.72(d, J=7.58Hz, 1H), 7.96(d, J=8.08Hz, 1H), 8.09(s, 1H)。
【０２４１】
実施例３１
【化７９】
2010522770.tif 000080
Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−３−ブロモ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミドの製造
【０２４２】
ａ）  ３−ブロモ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)安息香酸メチル
【化８０】
2010522770.tif 000081
３−ブロモ−４−ヨード安息香酸メチル（４０９ｍｇ、１.２ｍｍｏｌ）のジオキサン／Ｈ2Ｏ（４：１、１０ｍＬ）中溶液にＫ2ＣＯ3（４９７ｍｇ、３.６ｍｍｏｌ）、テトラキストリフェニルホスフィンＰｄ(０)（６９ｍｇ、０.０６ｍｍｏｌ）および５−(５,５−ジメチル−１,３,２−ジオキサボリナン−２−イル)−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール（３４９ｍｇ、３.６ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を密閉管中にて８０℃に１２時間加熱し、次いで、６Ｎ ＮａＯＨとＤＣＭとの間で分配させた。水性相のｐＨを３Ｍ ＨＣｌで約３に調節し、ＤＣＭで数回洗浄した。合わせた有機フラクションを乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、真空下にて濃縮し、さらなる精製を行わずにそのまま使用した（３０７ｍｇ、８７％）：LC-MS (ES) m/z = 296 (M+H)+。
【０２４３】
ｂ）  ３−ブロモ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)安息香酸
【化８１】
2010522770.tif 000082
３−ブロモ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)安息香酸メチル（２７５ｍｇ、０９３ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中溶液にＮａＯＨ溶液（２.５Ｍ、３.７２ｍＬ、９.３ｍｍｏｌ）を添加した。２５℃で１２時間後、該溶液をＨ2Ｏ−ＤＣＭ間で分配させ、水性相のｐＨを６Ｎ ＨＣｌ溶液で約４に調節した。水性相をＤＣＭで数回洗浄し、合わせた有機フラクションをＮａ2ＳＯ4で乾燥させ、濃縮して、白色固体として標記化合物を得た（２３０.１ｍｇ、８８％）：LC-MS (ES) m/z = 282 (M+H)+。
【０２４４】
ｃ）  [２−(｛[３−ブロモ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)フェニル]カルボニル｝アミノ)−３−フェニルプロピル]カルバミン酸１,１−ジメチルエチル
【化８２】
2010522770.tif 000083
２５℃での３−ブロモ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)安息香酸（１００ｍｇ、０.３６ｍｍｏｌ）、ＰｙＢｒＯＰ（２７７ｍｇ、０.５９ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（０.１１ｍＬ、０.５９ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（６ｍＬ）中溶液に(２−アミノ−３−フェニルプロピル)カルバミン酸１,１−ジメチルエチル（９０ｍｇ、０.３６ｍｍｏｌ）［製造例２で製造した］を添加した。１６時間後、該溶液を濃縮し、カラムクロマトグラフィーにより精製して（シリカ、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、２：１）、白色固体として標記化合物を得た（８７ｍｇ、４７％）：LC-MS (ES) m/z = 514 (M+H)+。
【０２４５】
ｄ）  Ｎ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−３−ブロモ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミド
[２−(｛[３−ブロモ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)フェニル]カルボニル｝アミノ)−３−フェニルプロピル]カルバミン酸１,１−ジメチルエチル（８７ｇ、０.１７ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（１ｍＬ）およびＣＨＣｌ3（１０ｍＬ）に溶解し、ジオキサン中４Ｍ ＨＣｌ（５ｍＬ）で処理した。３時間後、該溶液を濃縮し、カラムクロマトグラフィーにより精製して（シリカ、ＣＨＣｌ3／ＭｅＯＨ、９０：１０（１％ＮＨ4ＯＨ含有））、白色粉末として標記化合物の遊離塩基を得た（３０.７ｍｇ、４４％）。
該遊離塩基をＭｅＯＨ（２ｍＬ）中の溶液として過剰のＥｔ2Ｏ中１Ｍ ＨＣｌで処理して、最終化合物をＨＣｌ塩として得た：LC-MS (ES) m/z 413 (M+H)+、1H NMR (400MHz, MeOD) δ ppm 2.98-3.08(m, 2H), 3.14-3.29(s, 2H), 3.70(s, 3H), 4.63(s, 1H), 6.38(s, 1H), 7.25(s, 1H), 7.33(s, 4H), 7.50(s, 1H), 7.60(s, 1H), 7.84(d, J=7.83Hz, 1H), 8.12(s, 1H)。
【０２４６】
実施例３２
【化８３】
2010522770.tif 000084
Ｎ−((１Ｓ)−２−アミノ−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−３−ブロモ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミドの製造
【０２４７】
ａ）  ３−ブロモ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)安息香酸メチル
【化８４】
2010522770.tif 000085
３−ブロモ−４−ヨード安息香酸メチル（４０９ｍｇ、１.２ｍｍｏｌ）のジオキサン／Ｈ2Ｏ（４：１、１０ｍＬ）中溶液にＫ2ＣＯ3（４９７ｍｇ、３.６ｍｍｏｌ）、テトラキストリフェニルホスフィンＰｄ(０)（６９ｍｇ、０.０６ｍｍｏｌ）および５−(５,５−ジメチル−１,３,２−ジオキサボリナン−２−イル)−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール（３４９ｍｇ、３.６ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を密閉管中にて８０℃に１２時間加熱し、次いで、６Ｎ ＮａＯＨとＤＣＭとの間で分配させた。水性相のｐＨを３Ｍ ＨＣｌで約３に調節し、ＤＣＭで数回洗浄した。合わせた有機フラクションを乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、真空下にて濃縮し、さらなる精製を行わずにそのまま使用した（３０７ｍｇ、８７％）：LC-MS (ES) m/z = 296 (M+H)+。
【０２４８】
ｂ）  ３−ブロモ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)安息香酸
【化８５】
2010522770.tif 000086
３−ブロモ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)安息香酸メチル（２７５ｍｇ、０.９３ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中溶液にＮａＯＨ溶液（２.５Ｍ、３.７２ｍＬ、９.３ｍｍｏｌ）を添加した。２５℃で１２時間後、該溶液をＨ2Ｏ−ＤＣＭ間で分配させ、水性相のｐＨを６Ｎ ＨＣｌ溶液で約４に調節した。水性相をＤＣＭで数回洗浄し、合わせた有機フラクションをＮａ2ＳＯ4で乾燥させ、濃縮して、白色固体として標記化合物を得た（２３０.１ｍｇ、８８％）：LC-MS (ES) m/z = 282 (M+H)+。
【０２４９】
ｃ）  ３−ブロモ−Ｎ−((１Ｓ)−２−(１,３−ジオキソ−１,３−ジヒドロ−２Ｈ−イソインドール−２−イル)−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミド
【化８６】
2010522770.tif 000087
２５℃での３−ブロモ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)安息香酸（１００ｍｇ、０.３６ｍｍｏｌ）、ＰｙＢｒＯＰ（２７７ｍｇ、０.５９ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（０.１１ｍＬ、０.５９ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（６ｍＬ）中溶液に２−｛(２Ｓ)−２−アミノ−３−[２−(トリフルオロメチル)フェニル]プロピル｝−１Ｈ−イソインドール−１,３(２Ｈ)−ジオン （１６１ｍｇ、０.３６ｍｍｏｌ）［製造例３に従って製造した］を添加した。１６時間後、該溶液を濃縮し、カラムクロマトグラフィーにより精製して（シリカ、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、２：１）、白色固体として標記化合物を得た（１７２ｍｇ、７８％）：LC-MS (ES) m/z = 612 (M+H)+。
【０２５０】
ｄ）  Ｎ−((１Ｓ)−２−アミノ−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−３−ブロモ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミド
室温での３−ブロモ−Ｎ−((１Ｓ)−２−(１,３−ジオキソ−１,３−ジヒドロ−２Ｈ−イソインドール−２−イル)−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ベンズアミド（１７２ｍｇ、０.２８ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ／ＴＨＦ（４ｍＬ、１：１）中溶液にヒドラジン（０.１７ｍＬ、５.５ｍｍｏｌ）を添加した。室温で１８時間撹拌した後、反応溶液を真空下にて濃縮し、カラムクロマトグラフィーにより精製して（シリカ、ＤＣＭ（１％ＮＨ4ＯＨ）中３％ＭｅＯＨ）標記化合物を得た（６０.４ｍｇ、４５％）。
上記からの中性化合物をＭｅＯＨ（２ｍＬ）に溶解し、過剰のジオキサン中４Ｍ ＨＣｌ（５００μＬ）で処理し、濃縮して、白色固体として標記化合物のＨＣｌ塩を得た：LC-MS (ES) m/z 482 (M+H)+、1H NMR (400MHz, MeOD) δ ppm 3.09-3.19(m, 1H), 3.26(d, J=6.32Hz, 3H), 3.74(s, 3H), 4.73(s, 1H), 6.45(s, 1H), 7.46(s, 1H), 7.55(t, J=3.79Hz, 3H), 7.73(d, J=7.83Hz, 2H), 7.92(s, 1H), 8.22(s, 1H)。
【０２５１】
実施例３３
【化８７】
2010522770.tif 000088
３−アミノ−Ｎ−[３−クロロ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)フェニル]−２−フェニルプロパンアミドの製造
【０２５２】
ａ）  ｛３−[(４−ブロモ−３−クロロフェニル)アミノ]−３−オキソ−２−フェニルプロピル｝カルバミン酸１,１−ジメチルエチル
【化８８】
2010522770.tif 000089
２５℃での３−(｛[(１,１−ジメチルエチル)オキシ]カルボニル｝アミノ)−２−フェニルプロパン酸（１５９ｍｇ、０.６ｍｍｏｌ）、ＰｙＢｒＯＰ（４６２ｍｇ、０.９９ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（０.３５ｍＬ、２.０ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（６ｍＬ）中溶液に４−ブロモ−３−クロロアニリン（１２４ｍｇ、０.６ｍｍｏｌ）を添加した。１６時間後、該溶液を濃縮し、カラムクロマトグラフィーにより精製して（シリカ、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、２：１）、白色固体として標記化合物を得た（２４８ｍｇ、９１％）：LC-MS (ES) m/z = 454 (M+H)+。
【０２５３】
ｂ）  (３−｛[３−クロロ−４−(１,３−ジメチル−１Ｈ−ピロール−２−イル)フェニル]アミノ｝−３−オキソ−２−フェニルプロピル)カルバミン酸１,１−ジメチルエチル
【化８９】
2010522770.tif 000090
(３−｛[３−クロロ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−イル)フェニル]アミノ｝−３−オキソ−２−フェニルプロピル)カルバミン酸１,１−ジメチルエチル（２４７ｍｇ、０.５４ｍｍｏｌ）のジオキサン／Ｈ2Ｏ（４：１、１０ｍＬ）中溶液にＫ2ＣＯ3（２２４ｍｇ、１.６２ｍｍｏｌ）、テトラキストリフェニルホスフィンＰｄ(０)（３１ｍｇ、０.０３ｍｍｏｌ）および５−(５,５−ジメチル−１,３,２−ジオキサボリナン−２−イル)−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール（１５７ｍｇ、１.６２ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を密閉管中にて８０℃に１２時間加熱し、次いで、Ｈ2Ｏ−ＤＣＭ間で分配させた。水性相をＤＣＭで数回洗浄し、合わせた有機フラクションを乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、真空下にて濃縮し、さらなる精製を行わずにそのまま使用した（２２８ｍｇ、９３％）：LC-MS (ES) m/z = 455 (M+H)+。
【０２５４】
ｃ）  ３−アミノ−Ｎ−[３−クロロ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)フェニル]−２−フェニルプロパンアミド
(３−｛[３−クロロ−４−(１,３−ジメチル−１Ｈ−ピロール−２−イル)フェニル]アミノ｝−３−オキソ−２−フェニルプロピル)カルバミン酸１,１−ジメチルエチル（２２８ｍｇ、０.５ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（１ｍＬ）およびＣＨＣｌ3（１０ｍＬ）に溶解し、ジオキサン中４Ｍ ＨＣｌ（５ｍＬ）で処理した。３時間後、該溶液を濃縮し、カラムクロマトグラフィーにより精製して（シリカ、ＣＨＣｌ3／ＭｅＯＨ、９０：１０（１％ＮＨ4ＯＨを含有））、白色粉末として標記化合物の遊離塩基を得た（１４６.４ｍｇ、８３％）。
該遊離塩基をＭｅＯＨ中の溶液として過剰のＥｔ2Ｏ中１Ｍ ＨＣｌで処理して、最終化合物をＨＣｌ塩として得た：LC-MS (ES) m/z 355 (M+H)+、1H NMR (400MHz, MeOD) δ ppm 3.28(dd, J=12.88, 5.31Hz, 1H), 3.59-3.70(m, 1H), 3.87(d, J=11.37Hz, 3H), 4.22(d, J=2.27Hz, 1H),  6.67(s, 1H)7.39-7.50(m, 6H), 7.67(s, 1H), 8.14(d, J=5.05Hz, 2H)。
【０２５５】
実施例３４
【化９０】
2010522770.tif 000091
３−アミノ−Ｎ−[３−クロロ−４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)フェニル]−２−(フェニルメチル)プロパンアミドの製造
３−(｛[(１,１−ジメチルエチル)オキシ]カルボニル｝アミノ)−２−フェニルプロパン酸の代わりに３−(｛[(１,１−ジメチルエチル)オキシ]カルボニル｝アミノ)−２−(フェニルメチル)プロパン酸（１６８ｍｇ、０.６ｍｍｏｌ）［製造例５に従って製造した］を用いた以外は実施例３３に従って標記化合物を白色固体として製造した：LC-MS (ES) m/z 355 (M+H)+、1H NMR (400MHz, MeOD) δ ppm 2.97(dd, J=13.52, 7.20Hz, 1H), 3.07(dd, J=12.51, 3.41Hz, 1H), 3.11-3.18(m, 1H), 3.27(s, 1H), 3.34-3.39(m, 1H)3.88(s, 3H), 6.71(s, 1H), 7.25(d, J=4.29Hz, 1H), 7.32(d, J=4.04Hz, 4H), 7.46(d, J=8.59Hz, 1H), 7.62-7.66(m, 1H), 8.08(d, J=1.77Hz, 1H), 8.11(s, 1H)。
【０２５６】
実施例３５
３−アミノ−Ｎ−[３−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)フェニル]−２−(フェニルメチル)プロパンアミドの製造
【化９１】
2010522770.tif 000092
【０２５７】
ａ）  [３−[(３−ブロモフェニル)アミノ]−３−オキソ−２−(フェニルメチル)プロピル]カルバミン酸１,１−ジメチルエチル
【化９２】
2010522770.tif 000093
２５℃での３−(｛[(１,１−ジメチルエチル)オキシ]カルボニル｝アミノ)−２−(フェニルメチル)プロパン酸（３６０ｍｇ、１.２９ｍｍｏｌ）、ＰｙＢｒＯＰ（９００ｍｇ、１.９３ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（０.９ｍＬ、５ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）中溶液に３−ブロモアニリン（０.２９ｍｇ、１.６６ｍｍｏｌ）を添加した。２時間後、該溶液を濃縮し、カラムクロマトグラフィーにより精製して（シリカ、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、１０：１〜３：１）、白色固体として標記化合物を得た（４００ｍｇ、７２％）：LC-MS (ES) m/z = 434 (M+H)+。
【０２５８】
ｂ）  [３−｛[３−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)フェニル]アミノ｝−３−オキソ−２−(フェニルメチル)プロピル]カルバミン酸１,１−ジメチルエチル
【化９３】
2010522770.tif 000094
[３−[(３−ブロモフェニル)アミノ]−３−オキソ−２−(フェニルメチル)プロピル]カルバミン酸１,１−ジメチルエチル（２３０ｍｇ、０.５３ｍｍｏｌ）のジオキサン／Ｈ2Ｏ（５：１、６ｍＬ）中溶液にＫ2ＣＯ3（２２０ｍｇ、１.５９ｍｍｏｌ）、テトラキストリフェニルホスフィンＰｄ(０)（６１ｍｇ、５２μｍｏｌ）および１−メチル−５−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)−１Ｈ−ピラゾール（１６４ｍｇ、０.７９ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を密閉管中にて７０℃に加熱した。１０時間後、反応混合物を真空下にて濃縮し、シリカで精製して（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、３０〜６０％）、淡黄色固体として標記化合物を得た（０.１７ｇ、７４％）：LC-MS (ES) m/z = 435 (M+H)+。
【０２５９】
ｃ）  ３−アミノ−Ｎ−[３−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)フェニル]−２−(フェニルメチル)プロパンアミド 
【化９４】
2010522770.tif 000095
[３−｛[３−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)フェニル]アミノ｝−３−オキソ−２−(フェニルメチル)プロピル]カルバミン酸１,１−ジメチルエチル（１７０ｍｇ、０.３９ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１０ｍＬ）に溶解し、ＴＦＡ（１ｍＬ）で処理した。１時間後、該溶液を濃縮し、逆相ＨＰＬＣを使用して精製して（Ｃ１８カラム：Ｈ2Ｏ／ＣＨ3ＣＮ、４０〜１０％）、白色固体として標記化合物のビスＴＦＡ塩を得た（１１５ｍｇ、５２％）。LC-MS (ES) m/z = 335 (M+H)+、1H NMR (d4-MeOD, 400MHz) δ 7.76(br s, 1H), 7.43(br s, 1h), 7.35-7.23(m, 9H), 4.55(m, 1H), 3.72(s, 3H), 3.23(dd, J=3.5, 13.1Hz, 1H), 3.13(dd, J=10.4, 13.1Hz, 1H)および3.03-2.95(m, 2H)。
【０２６０】
実施例３６
【化９５】
2010522770.tif 000096
Ｎ−((１Ｓ)−２−アミノ−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−５−イル)ベンズアミドの製造
【０２６１】
ａ）  ４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−５−イル)安息香酸
【化９６】
2010522770.tif 000097
５−ヨード−１−メチル−１Ｈ−１,２,４−トリアゾール（４１８ｍｇ、２.００ｍｍｏｌ）、｛４−[(エチルオキシ)カルボニル]フェニル｝ボロン酸（４６６ｍｇ、２.４０ｍｍｏｌ）およびビス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(ＩＩ)クロリド（７０.２ｍｇ、０.１０ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）（１０ｍＬ）中混合物を２５ｍＬのマイクロ波反応容器中にてＮ2下で撹拌した。炭酸ナトリウム（１０００μｌ、２.００ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物をＮ2でパージし、密封し、１３８℃で２８分間、マイクロ波を照射した。粗反応混合物をそのまま２５Ｍ Ｂｉｏｔａｇｅカラムに負荷し、５０〜１００％のＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶離して、エステル中間体を得た。このエステルを７０℃でＴＨＦ（８ｍＬ）中にて２Ｎ ＮａＯＨ（４ｍＬ）で加水分解した。該反応は１時間で完了した。
有機層をＨ2Ｏで３回洗浄し、廃棄した。合わせた水性層を２Ｎ ＨＣｌで酸性化した。該生成物の溶解性は低く、ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ3で５回抽出した。合わせた抽出物を乾燥させ、濃縮して、淡黄色固体０.３６ｇを得た（８９％）。LC-MS (ES) m/z = 204 (M+H)+。
【０２６２】
ｂ）  Ｎ−((１Ｓ)−２−(１,３−ジオキソ−１,３−ジヒドロ−２Ｈ−イソインドール−２−イル)−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−５−イル)ベンズアミド
【化９７】
2010522770.tif 000098
ヒューニッヒ塩基（０.０８４ｍｌ、０.４８ｍｍｏｌ）を４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−５−イル)安息香酸（３９.３ｍｇ、０.１９ｍｍｏｌ）、２−｛(２Ｓ)−２−アミノ−３−[２−(トリフルオロメチル)フェニル]プロピル｝−１Ｈ−イソインドール−１,３(２Ｈ)−ジオン（６２ｍｇ、０.１６ｍｍｏｌ）、およびＰｙＢｒｏＰ（７５ｍｇ、０.１６ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１ｍｌ）中懸濁液に添加した。反応混合物は透明になり、これを室温で一夜撹拌した。反応混合物をそのまま２５Ｓ Ｂｉｏｔａｇｅカラムに負荷し、５０〜１００％のＥＡ／ＤＣＭで溶離して、生成物６７.３ｍｇを得た。LC-MS (ES) m/z = 534 (M+H)+。
【０２６３】
ｃ）  Ｎ−((１Ｓ)−２−アミノ−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−５−イル)ベンズアミド
【化９８】
2010522770.tif 000099
Ｎ−((１Ｓ)−２−(１,３−ジオキソ−１,３−ジヒドロ−２Ｈ−イソインドール−２−イル)−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−５−イル)ベンズアミド（６７.３ｍｇ、０.１１６ｍｍｏｌ）のＤＣＭ／ＭｅＯＨ（１／０.１ｍｌ）中溶液にヒドラジン・水和物（０.０２８ｍｌ、０.５８ｍｍｏｌ）を添加した。
反応混合物を室温で一夜撹拌した。白色沈殿物を形成した。反応混合物をシリンジフィルターで濾過し、濃縮し、ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製した。生成物を含有するフラクションを濃縮し、２Ｎ ＨＣｌ水溶液で３回処理して、白色固体として生成物を得た（１９.３ｍｇ、３６％）。LC-MS (ES) m/z = 404 (M+H)+、1H NMR (d4-MeOD, 400MHz) δ 8.74(s, 1H), 8.13(m, 2H), 7.95(m, 2H), 7.72(m, 1H), 7.60-7.51(m, 2H), 7.44(m, 1H), 4.71(m, 1H), 4.15(s, 3H), 3.35-3.15(m, 4H)。
【０２６４】
実施例３７
【化９９】
2010522770.tif 000100
Ｎ−[(１Ｓ)−２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−５−イル)ベンズアミドの製造
２−｛(２Ｓ)−２−アミノ−３−[２−(トリフルオロメチル)フェニル]プロピル｝−１Ｈ−イソインドール−１,３(２Ｈ)−ジオンの代わりに２−[(２Ｓ)−２−アミノ−３−フェニルプロピル]−１Ｈ−イソインドール−１,３(２Ｈ)−ジオン［製造例３に従って製造した］を用いた以外は実施例３６に従って標記化合物を白色固体として製造した：LC-MS (ES) m/z 336 (M+H)+、1H NMR (400MHz, MeOD) δ ppm 8.82(s, 1H), 8.09-8.07(m, 2H), 7.95-7.92(m, 2H), 7.35-7.23(m, 5H), 4.65(m, 1H), 4.15(s, 3H), 3.3-3.0(m, 4H)。
【０２６５】
実施例３８
【化１００】
2010522770.tif 000101
Ｎ−｛(１Ｓ)−２−アミノ−１−[(３−フルオロフェニル)メチル]エチル｝−４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−５−イル)ベンズアミドの製造
２−｛(２Ｓ)−２−アミノ−３−[２−(トリフルオロメチル)フェニル]プロピル｝−１Ｈ−イソインドール−１,３(２Ｈ)−ジオンの代わりに２−[(２Ｓ)−２−アミノ−３−(３−フルオロフェニル)プロピル]−１Ｈ−イソインドール−１,３(２Ｈ)−ジオン［製造例３に従って製造した］を用いた以外は実施例３６に従って標記化合物を白色固体として製造した：LC-MS (ES) m/z 354 (M+H)+、1H NMR (400MHz, MeOD) δ ppm 8.91(s, 1H), 8.12-8.10(m, 2H), 7.31(m, 1H), 7.18-7.10(m, 2H), 6.96(m, 1H), 4.65(m, 1H), 4.16(s, 3H), 3.3-3.0(m, 4H)。
【０２６６】
実施例３９
【化１０１】
2010522770.tif 000102
Ｎ−((１Ｓ)−２−アミノ−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−３−クロロ−４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−５−イル)ベンズアミドの製造
｛４−[(エチルオキシ)カルボニル]フェニル｝ボロン酸の代わりに｛２−クロロ−４−[(メチルオキシ)カルボニル]フェニル｝ボロン酸を用いた以外は実施例３６に従って標記化合物を白色固体として製造した：LC-MS (ES) m/z 404.2 (M+H)+、1H NMR (d4-MeOH, 400MHz) δ 8.38(m, 1H), 8.11(m, 1H), 7.96(m, 1H), 7.73(m, 2H), 7.56(m, 2H), 7.45(m, 1H),  4.76(m, 1H), 3.88(s, 3H), 3.26(m, 2H), 3.16(m, 2H)。
【０２６７】
実施例４０
【化１０２】
2010522770.tif 000103
Ｎ−｛(１Ｓ)−２−アミノ−１−[(３−フルオロフェニル)メチル]エチル｝−３−クロロ−４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−５−イル)ベンズアミド製造
｛４−[(エチルオキシ)カルボニル]フェニル｝ボロン酸の代わりに｛２−クロロ−４−[(メチルオキシ)カルボニル]フェニル｝ボロン酸を用いた以外は実施例３８に従って標記化合物を白色固体として製造した：LC-MS (ES) m/z 388.2 (M+H)+、1H NMR (400MHz, MeOD) δ ppm 8.13(m, 1H)8.01(s, 1H)7.87(d, 1H), 7.66(d, 1H)7.33(m, 1H)7.15-6.98(m, 3H)4.65(m, 1H)3.80(s, 3H)3.23(m, 2H)3.05(m, 2H)。
【０２６８】
実施例４１
【化１０３】
2010522770.tif 000104
Ｎ−[(１Ｓ)−２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−３−クロロ−４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−５−イル)ベンズアミドの製造
｛４−[(エチルオキシ)カルボニル]フェニル｝ボロン酸の代わりに｛２−クロロ−４−[(メチルオキシ)カルボニル]フェニル｝ボロン酸を用いた以外は実施例３７に従って標記化合物を白色固体として製造した：LC-MS (ES) m/z 370 (M+H)+、1H NMR (400MHz, MeOD) δ ppm 8.65(s, 1H), 8.09(d, J = 1 Hz, 1H), 7.96(dd, J = 8, 1 Hz, 1H), 7.79(d, J = 8 Hz, 1H), 7.34-7.24(m, 5H), 4.62(m, 1H), 4.16(s, 3H), 3.3-3.0(m, 4H)。
【０２６９】
実施例４２
Ｎ−((１Ｓ)−２−アミノ−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,３−トリアゾール−５−イル)ベンズアミド製造
【化１０４】
2010522770.tif 000105
【０２７０】
ａ）４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,３−トリアゾール−５−イル)安息香酸
【化１０５】
2010522770.tif 000106
トリエチルアミン（０.２８ｍｌ、２.００ｍｍｏｌ）を１−メチル−５−(トリブチルスタンナニル)−１Ｈ−１,２,３−トリアゾール（７８１ｍｇ、２.１ｍｍｏｌ）、４−ブロモ安息香酸メチル（４３０ｍｇ、２.０ｍｍｏｌ）、およびビス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(ＩＩ)クロリド（７０.２ｍｇ、０.１０ｍｍｏｌ）のトルエン（１０ ｍｌ）中混合物に添加して黄色懸濁液を得た。反応混合物をＮ2でパージし、密封し、１００℃で３時間撹拌した。フッ化カリウム（４６５ｍｇ、８.００ｍｍｏｌ）およびＭｅＯＨ（２ｍＬ）を添加した。該混合物を室温で２時間撹拌し、セライトで濾過し、ＥｔＯＡｃですすいだ。合わせた濾液を濃縮し、残留物を２５Ｍ Ｂｉｏｔａｇｅカラムで精製して、黄褐色固体として４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,３−トリアゾール−５−イル)安息香酸メチル０.５ｇを得た
４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,３−トリアゾール−５−イル)安息香酸メチル（０.５ｇ、２.３０ｍｍｏｌ）および水酸化ナトリウム（４.６０ｍｌ、９.２１ｍｍｏｌ、２Ｎ水溶液）のテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）中混合物を７０℃で１時間加熱した。有機層をＨ2Ｏで３回洗浄し、廃棄した。合わせた水性層を２Ｎ ＨＣｌ水溶液で酸性化した。生成物が沈殿し、これを濾過し、Ｈ2Ｏですすぎ、真空下にて乾燥させて、黄褐色固体として０.３ｇ（７４％）を得た。LC-MS (ES) m/z = 204 (M+H)+。
【０２７１】
ｂ）  Ｎ−((１Ｓ)−２−(１,３−ジオキソ−１,３−ジヒドロ−２Ｈ−イソインドール−２−イル)−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,３−トリアゾール−５−イル)ベンズアミド
【化１０６】
2010522770.tif 000107
４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−５−イル)安息香酸の代わりに４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,３−トリアゾール−５−イル)安息香酸を用いた以外は方法３６（ｂ）に従って標記化合物を製造した：LC-MS (ES) m/z = 534 (M+H)+。
【０２７２】
ｃ）  Ｎ−((１Ｓ)−２−アミノ−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,３−トリアゾール−５−イル)ベンズアミド
【化１０７】
2010522770.tif 000108
Ｎ−((１Ｓ)−２−(１,３−ジオキソ−１,３−ジヒドロ−２Ｈ−イソインドール−２−イル)−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−５−イル)ベンズアミドの代わりにＮ−((１Ｓ)−２−(１,３−ジオキソ−１,３−ジヒドロ−２Ｈ−イソインドール−２−イル)−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,３−トリアゾール−５−イル)ベンズアミドを用いた以外は方法３６（ｃ）に従って標記化合物を製造した：LC-MS (ES) m/z = 404 (M+H)+、1H NMR (d4-MeOD, 400MHz) δ 8.34(s, 1H), 8.05-8.02(m, 2H), 7.78-7.71(m, 3H), 7.58-7.52(m, 2H), 7.43(m, 1H), 4.73(m, 1H), 4.26(s, 3H), 3.3-3.1(m, 4H)。
【０２７３】
実施例４３
Ｎ−((１Ｓ)−２−アミノ−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−４−(４−クロロ−１−メチル−１Ｈ−１,２,３−トリアゾール−５−イル)ベンズアミドの製造
【化１０８】
2010522770.tif 000109
Ｎ−((１Ｓ)−２−(１,３−ジオキソ−１,３−ジヒドロ−２Ｈ−イソインドール−２−イル)−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,３−トリアゾール−５−イル)ベンズアミド（０.１ｇ、０.１６ｍｍｏｌ）およびＮＣＳ（０.０４３ｇ、０.３２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１ｍＬ）中混合物を５０℃で２時間加熱した。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、Ｈ2Ｏで３回洗浄し、乾燥させ、濃縮して、粗生成物を得た。
該粗クロロトリアゾールをＭｅＯＨ（０.１ｍＬ）およびＤＣＭ（１ｍＬ）に溶解した。ヒドラジン・水和物（０.０４ ｍｌ、０.８０ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で一夜撹拌した。白色沈殿物が形成し、これをシリンジフィルターで濾過した。濾液を濃縮し、残留物をＲＰ−ＨＰＬＣで精製した。生成物フラクションを濃縮し、２Ｎ ＨＣｌ水溶液で処理し、これを濃縮して、淡黄色固体として生成物６５.８ｍｇを得た。LC-MS (ES) m/z = 438.2 (M+H)+、1H NMR (d4-MeOD, 400MHz) δ ppm 8.34(s, 1H), 8.02(m, 2H), 7.74-7.68(m, 3H), 7.56(m, 2H), 7.43(m, 1H), 4.73(m, 1H), 4.08(s, 3H), 3.36-3.12(m, 4H)。
【０２７４】
実施例４４
Ｎ−[(１Ｓ)−２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−４−(４−クロロ−１−メチル−１Ｈ−１,２,３−トリアゾール−５−イル)ベンズアミドの製造
【化１０９】
2010522770.tif 000110
Ｎ−((１Ｓ)−２−(１,３−ジオキソ−１,３−ジヒドロ−２Ｈ−イソインドール−２−イル)−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,３−トリアゾール−５−イル)ベンズアミドの代わりにＮ−((１Ｓ)−２−(１,３−ジオキソ−１,３−ジヒドロ−２Ｈ−イソインドール−２−イル)−１−[(２−フェニル)メチル]エチル)−４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,３−トリアゾール−５−イル)ベンズアミドを用いた以外は実施例４３の方法に従って標記化合物を白色固体として製造した：LC-MS (ES) m/z 370.2 (M+H)+、1H NMR (400MHz, MeOD) δ ppm 7.98(m, 2), 7.66(m, 2H), 7.34-7.23(m, 5H), 7.33(m, 1H), 4.63(m, 1H), 4.07(s, 3H)3.3-3.0(m, 4H)。
【０２７５】
実施例４５
Ｎ−｛(１Ｓ)−２−アミノ−１−[(３−フルオロフェニル)メチル]エチル｝−４−(４−クロロ−１−メチル−１Ｈ−１,２,３−トリアゾール−５−イル)ベンズアミドの製造
【化１１０】
2010522770.tif 000111
Ｎ−((１Ｓ)−２−(１,３−ジオキソ−１,３−ジヒドロ−２Ｈ−イソインドール−２−イル)−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,３−トリアゾール−５−イル)ベンズアミドの代わりにＮ−｛(１Ｓ)−２−(１,３−ジオキソ−１,３−ジヒドロ−２Ｈ−イソインドール−２−イル)−１−[(３−フルオロフェニル)メチル]エチル｝−４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,３−トリアゾール−５−イル)ベンズアミドを用いた以外は実施例４３の方法に従って標記化合物を白色固体として製造した。標記化合物はＴＦＡ塩であった：LC-MS (ES) m/z 388.2 (M+H)+、1H NMR (400MHz, MeOD) δ ppm 7.95(m, 2H), 7.68(m, 2H), 7.34(m, 1H), 7.15-7.07(m, 2H), 6.98(m, 1H), 4.63(m, 1H), 4.07(s, 3H), 3.29-2.95(m, 4H)。
【０２７６】
実施例４６
Ｎ−[(１Ｓ)−２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,３−トリアゾール−５−イル)ベンズアミドの製造
【化１１１】
2010522770.tif 000112
Ｎ−((１Ｓ)−２−(１,３−ジオキソ−１,３−ジヒドロ−２Ｈ−イソインドール−２−イル)−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,３−トリアゾール−５−イル)ベンズアミドの代わりにＮ−((１Ｓ)−２−(１,３−ジオキソ−１,３−ジヒドロ−２Ｈ−イソインドール−２−イル)−１−[(２−フェニル)メチル]エチル)−４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,３−トリアゾール−５−イル)ベンズアミドを用いた以外は実施例４２の方法に従って標記化合物を白色固体として製造した：LC-MS (ES) m/z 336.2 (M+H)+、1H NMR (400MHz, MeOD) δ ppm 8.65(s, 1H), 8.02(m, 2H), 7.80(m, 2H), 7.36-7.22(m, 5H), 4.64(m, 1H), 4.32(s, 3H), 3.3-3.0(m, 4H)。
【０２７７】
実施例４７
Ｎ−｛(１Ｓ)−２−アミノ−１−[(３−フルオロフェニル)メチル]エチル｝−４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,３−トリアゾール−５−イル)ベンズアミドの製造
【化１１２】
2010522770.tif 000113
Ｎ−((１Ｓ)−２−(１,３−ジオキソ−１,３−ジヒドロ−２Ｈ−イソインドール−２−イル)−１−｛[２−(トリフルオロメチル)フェニル]メチル｝エチル)−４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,３−トリアゾール−５−イル)ベンズアミドの代わりにＮ−｛(１Ｓ)−２−(１,３−ジオキソ−１,３−ジヒドロ−２Ｈ−イソインドール−２−イル)−１−[(３−フルオロフェニル)メチル]エチル｝−４−(１−メチル−１Ｈ−１,２,３−トリアゾール−５−イル)ベンズアミドを用いた以外は実施例４３の方法に従って標記化合物を白色固体として製造した。標記化合物はＴＦＡ塩であった：LC-MS (ES) m/z 354.2 (M+H)+、1H NMR (400MHz, MeOD) δ ppm 7.94-7.90(m, 3H), 7.69(m, 2H), 7.33(m, 1H)7.15-7.07(m, 2H), 6.98(m, 1H), 4.62(m, 1H), 4.15(s, 3H), 3.30-2.96(m, 4H)。
【０２７８】
実施例４８  −  カプセル組成物
本発明を投与するための経口投与剤形は、下記表Ｉに示される成分をツーピース硬ゼラチンカプセルに充填することによって調製される。
【０２７９】
【表１】
2010522770.tif 000114
【０２８０】
実施例４９  −  注射用非経口組成物
本発明を投与するための注射用剤形は、水中１０容量％のプロピレングリコール中にて１.５重量％のＮ−[２−アミノ−１−(フェニルメチル)エチル]−６−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)−３−ピリジンカルボキサミド（実施例２の化合物）を撹拌することによって調製される。
【０２８１】
実施例５０  −  錠剤組成物
下記表ＩＩに示されるシュークロース、硫酸カルシウム・二水和物およびＡｋｔ阻害物質を示された割合で１０％ゼラチン溶液と一緒に混合し、造粒した。湿顆粒をスクリーンし、乾燥させ、デンプン、タルクおよびステアリン酸と混合し、スクリーンし、錠剤に圧縮した。
【０２８２】
【表２】
2010522770.tif 000115
【０２８３】
上記は本発明の好ましい実施態様を示するものであるが、本発明は本明細書に開示された明確な説明に限定されるものではなく、特許請求の範囲の範囲内となるあらゆる変更に対する権利が留保されるものと解されるべきである。
【配列表】
2010522770000001.xml
【手続補正書】
【提出日】平成21年12月22日(2009.12.22)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】配列表
【補正方法】変更
【補正の内容】
【配列表】
2010522770000001.app
【国際調査報告】
2010522770.tif 000120