(57)【要約】本発明は、式（Ｉ）で示される化合物を提供する（式中、Ｒ1は、Ｃ1-6アルキル、ハロまたはハロＣ1-6アルキルであり；Ｒ2は、水素またはＣ1-6アルキルであり；2010504367.tif 000074は、単結合または二重結合であり；各Ｒ3およびＲ4は、同一であっても異なっていてもよく、水素、Ｃ1-6アルキルまたはハロＣ1-6アルキルであり；ここで、ｉ）2010504367.tif 000075が二重結合である場合には、ｐおよびｑは１であり、そして、ｉｉ）2010504367.tif 000076が単結合である場合には、ｐおよびｑは２であり、１個のＲ3および１個のＲ4がそれらの相互接続原子と一緒になって、同一であっても異なっていてもよい１個または２個のハロまたはメチル基によって置換されていてもよいシクロプロパン環を形成し；Ｘは、ＣＨまたはＮであり；存在する場合の各Ｒ5は、同一であっても異なっていてもよく、Ｃ1-6アルキルまたはハロであるか；または２個のＲ5基が連結して、１個または２個の原子を含有する橋を形成していてもよく；ｎは、０、１、２または３であり；存在する場合の各Ｒ6は、同一であっても異なっていてもよく、Ｃ1-6アルキルまたはハロであり；ｍは、０、１、２または３である）。2010504367.tif 000077
2010504367.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
2010504367.tif 000065
［式中、
Ｒ1は、Ｃ1-6アルキル、ハロまたはハロＣ1-6アルキルであり；
Ｒ2は、水素またはＣ1-6アルキルであり；
【化２】
2010504367.tif 000066
は、単結合または二重結合であり（ここで、
【化３】
2010504367.tif 000067
が二重結合である場合、ｐおよびｑは１であり；
【化４】
2010504367.tif 000068
が単結合である場合、ｐおよびｑは２である）；
各Ｒ3およびＲ4は、同一であっても異なっていてもよく、水素、Ｃ1-6アルキルまたはハロＣ1-6アルキルであるか；または
【化５】
2010504367.tif 000069
が単結合である場合、１個のＲ3および１個のＲ4がそれらの相互接続原子と一緒になって、同一であっても異なっていてもよい１個または２個のハロまたはメチル基によって置換されていてもよいシクロプロパン環を形成し；
Ｘは、ＣＨまたはＮであり；
存在する場合の各Ｒ5は、同一であっても異なっていてもよく、Ｃ1-6アルキルまたはハロであるか；または２個のＲ5基が連結して、１個または２個の原子を含有する橋を形成してもよく；
ｎは、０、１、２または３であり；
存在する場合の各Ｒ6は、同一であっても異なっていてもよく、Ｃ1-6アルキルまたはハロであり；
ｍは、０、１、２または３である］
で示される化合物。
【請求項２】
Ｒ1がＣ1-6アルキル、ハロまたはハロＣ1-6アルキルであり；
Ｒ2が水素またはＣ1-6アルキルであり；
【化６】
2010504367.tif 000070
が単結合または二重結合であり；
各Ｒ3およびＲ4が、同一であっても異なっていてもよく、水素、Ｃ1-6アルキルまたはハロＣ1-6アルキルであり；ここで、
ｉ）
【化７】
2010504367.tif 000071
が二重結合である場合、ｐおよびｑが１であり、
ｉｉ）
【化８】
2010504367.tif 000072
が単結合である場合、ｐおよびｑが２であり、１個のＲ3および１個のＲ4が、それらの相互接続原子と一緒になって、同一であっても異なっていてもよい１個または２個のハロまたはメチル基によって置換されていてもよいシクロプロパン環を形成し；
ＸがＣＨまたはＮであり；
存在する場合の各Ｒ5が、同一であっても異なっていてもよく、Ｃ1-6アルキルまたはハロであるか；または２個のＲ5基が連結して、１個または２個の原子を含有する橋を形成してもよく；
ｎが０、１、２または３であり；
存在する場合の各Ｒ6が、同一であっても異なっていてもよく、Ｃ1-6アルキルまたはハロであり；
ｍが０、１、２または３である、
請求項１記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ1がＣ1-6アルキルである、請求項１または２記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ1がＣ1-3アルキルである、請求項１〜３いずれか１項記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ1がメチルである、請求項１〜４いずれか１項記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ2が水素またはＣ1-6アルキルである、請求項１〜５いずれか１項記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ2が水素またはＣ1-3アルキルである、請求項１〜６いずれか１項記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ2が水素またはメチルである、請求項１〜７いずれか１項記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ2が水素である、請求項１〜８いずれか１項記載の化合物。
【請求項１０】
【化９】
2010504367.tif 000073
が単結合であり、各Ｒ3および各Ｒ4が水素である、請求項１〜９いずれか１項記載の化合物。
【請求項１１】
ＸがＮである、請求項１〜１０いずれか１項記載の化合物。
【請求項１２】
ｎが０、１または２である、請求項１〜１１いずれか１項記載の化合物。
【請求項１３】
ｎが０または１である、請求項１〜１２いずれか１項記載の化合物。
【請求項１４】
ｎが０である、請求項１〜１３いずれか１項記載の化合物。
【請求項１５】
存在する場合の各Ｒ5がＣ1-6アルキルである、請求項１〜１４いずれか１項記載の化合物。
【請求項１６】
存在する場合の各Ｒ5がＣ1-3アルキルである、請求項１〜１５いずれか１項記載の化合物。
【請求項１７】
存在する場合のＲ5がメチルである、請求項１〜１６いずれか１項記載の化合物。
【請求項１８】
存在する場合の各Ｒ5が、式（Ｉ）におけるエチレン鎖と結合した窒素の隣の炭素原子の一方または両方にてピペラジンまたはピペリジン環と結合している、請求項１〜１７いずれか１項記載の化合物。
【請求項１９】
２個のＲ5基が結合して橋を形成する場合、該橋が２個の炭素原子を含有し、該橋が非隣接炭素原子に結合している、請求項１〜１２いずれか１項記載の化合物。
【請求項２０】
ｍが０または１である、請求項１〜１９いずれか１項記載の化合物。
【請求項２１】
ｍが０である、請求項１〜２０いずれか１項記載の化合物。
【請求項２２】
存在する場合の各Ｒ6がキノリン環の７位に結合している、請求項１〜２１いずれか１項記載の化合物。
【請求項２３】
式（Ｉ）で示される化合物が以下のものからなる群から選択される、請求項１記載の化合物：
６−メチル−５−｛２−[４−(２−メチルキノリン−５−イル)ピペラジン−１−イル]エチル｝−３,４−ジヒドロキノリン−２(１Ｈ)−オン（化合物１）；
５−｛２−[(２Ｓ)−４−(７−フルオロ−２−メチルキノリン−５−イル)−２−メチルピペラジン−１−イル]エチル｝−６−メチル−３,４−ジヒドロキノリン−２(１Ｈ)−オン（化合物２）；
１,６−ジメチル−５−｛２−[４−(２−メチルキノリン−５−イル)ピペラジン−１−イル]エチル｝−３,４−ジヒドロキノリン−２(１Ｈ)−オン（化合物７）；
６−メチル−５−｛２−[４−(２−メチル−５−キノリニル)−１−ピペラジニル]エチル｝−２(１Ｈ)−キノリノン（化合物１４）；
５−｛２−[４−(７−フルオロ−２−メチル−５−キノリニル)−１−ピペラジニル]エチル｝−６−メチル−２(１Ｈ)−キノリノン（化合物１５）；
６−メチル−５−｛２−[４−(２−メチル−５−キノリニル)−１−ピペリジニル]エチル｝−２(１Ｈ)−キノリノン（化合物１６）；
５−｛２−[４−(７−フルオロ−２−メチル−５−キノリニル)−１−ピペラジニル]エチル｝−１,６−ジメチル−２(１Ｈ)−キノリノン（化合物１９）；
１,６−ジメチル−５−｛２−[(２Ｓ)−２−メチル−４−(２−メチル−５−キノリニル)−１−ピペラジニル]エチル｝−２(１Ｈ)−キノリノン（化合物２１）；
５−｛２−[(２Ｓ)−４−(７−フルオロ−２−メチル−５−キノリニル)−２−メチル−１−ピペラジニル]エチル｝−１,６−ジメチル−２(１Ｈ)−キノリノン（化合物２３）；および
３,６−ジメチル−７−｛２−[(２Ｓ)−２−メチル−４−(２−メチル−５−キノリニル)−１−ピペラジニル]エチル｝−１,１ａ,３,７ｂ−テトラヒドロ−２Ｈ−シクロプロパ[ｃ]キノリン−２−オン（化合物３３）。
【請求項２４】
式（Ｉ）で示される化合物が６−メチル−５−｛２−[４−(２−メチルキノリン−５−イル)ピペラジン−１−イル]エチル｝−３,４−ジヒドロキノリン−２(１Ｈ)−オン（化合物１）である、請求項１記載の化合物。
【請求項２５】
請求項１〜２４いずれか１項記載の化合物の医薬上許容される塩。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規キノリノン誘導体に関する。本発明はまた、５−ＨＴ1A受容体のアンタゴニズムによって媒介される疾患および状態の治療における該誘導体の使用に関する。加えて、本発明は、該誘導体を含有する組成物およびそれらの製造方法に関する。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００２】
第一の態様によると、本発明は、式（Ｉ）：
【化１】
2010504367.tif 000003
［式中、
Ｒ1は、Ｃ1-6アルキル、ハロまたはハロＣ1-6アルキルであり；
Ｒ2は、水素またはＣ1-6アルキルであり；
【化２】
2010504367.tif 000004
は、単結合または二重結合であり（ここで、
【化３】
2010504367.tif 000005
が二重結合である場合、ｐおよびｑは１であり；
【化４】
2010504367.tif 000006
が単結合である場合、ｐおよびｑは２である）；
各Ｒ3およびＲ4は、同一であっても異なっていてもよく、水素、Ｃ1-6アルキルまたはハロＣ1-6アルキルであるか；または
【化５】
2010504367.tif 000007
が単結合である場合、１個のＲ3および１個のＲ4がそれらの相互接続原子と一緒になって、同一であっても異なっていてもよい１個または２個のハロまたはメチル基によって置換されていてもよいシクロプロパン環を形成し；
Ｘは、ＣＨまたはＮであり；
存在する場合の各Ｒ5は、同一であっても異なっていてもよく、Ｃ1-6アルキルまたはハロであるか；または２個のＲ5基が連結して、１個または２個の原子を含有する橋を形成してもよく；
ｎは、０、１、２または３であり；
存在する場合の各Ｒ6は、同一であっても異なっていてもよく、Ｃ1-6アルキルまたはハロであり；
ｍは、０、１、２または３である］
で示される化合物を提供する。
【発明を実施するための形態】
【０００３】
他に特記しない限り、アルキル基は、それがアルコキシ、ハロアルキルおよびハロアルコキシのような別の基の一部を形成するか否かに関係なく、直鎖または分枝鎖である。
【０００４】
本明細書で使用する場合、ハロアルキル基は、１個またはそれ以上のハロゲン原子によって置換されているアルキル基を意味する。ハロアルコキシ基は、同様に解釈される。
【０００５】
ハロは、フルオロ、クロロ、ブロモまたはヨードを意味する。
【０００６】
誤解を避けるために、存在する場合の１個、２個または３個のＲ5基は、いずれかの適当な位置でピペラジンまたはピペリジン環と結合することができる。
【０００７】
誤解を避けるために、存在する場合の１個、２個または３個のＲ6基は、いずれかの適当な位置でキノリン環と結合することができる。
【０００８】
一の実施態様では、
Ｒ1は、Ｃ1-6アルキル、ハロまたはハロＣ1-6アルキルであり；
Ｒ2は、水素またはＣ1-6アルキルであり；
【化６】
2010504367.tif 000008
は、単結合または二重結合であり；
各Ｒ3およびＲ4は、同一であっても異なっていてもよく、水素、Ｃ1-6アルキルまたはハロＣ1-6アルキルである（ここで、
ｉ）
【化７】
2010504367.tif 000009
が二重結合である場合、ｐおよびｑは１であり、
ｉｉ）
【化８】
2010504367.tif 000010
が単結合である場合、ｐおよびｑは２であり、１個のＲ3および１個のＲ4がそれらの相互接続原子と一緒になって、同一であっても異なっていてもよい１個または２個のハロまたはメチルによって置換されていてもよいシクロプロパン環を形成し；
Ｘは、ＣＨまたはＮであり；
存在する場合の各Ｒ5は、同一であっても異なっていてもよく、Ｃ1-6アルキルまたはハロであるか；または２個のＲ5基が連結して、１個または２個の原子を含有する橋を形成してもよく；
ｎは、０、１、２または３であり；
存在する場合の各Ｒ6は、同一であっても異なっていてもよく、Ｃ1-6アルキルまたはハロであり；
ｍは、０、１、２または３である。
【０００９】
一の実施態様では、Ｒ1はＣ1-6アルキルである。さらなる実施態様では、Ｒ1はＣ1-3アルキルである。さらなる実施態様では、Ｒ1はメチルである。
【００１０】
一の実施態様では、Ｒ2は、水素またはＣ1-6アルキルである。さらなる実施態様では、Ｒ2は、水素またはＣ1-3アルキルである。さらなる実施態様では、Ｒ2は、水素またはメチルである。さらなる実施態様では、Ｒ2は水素である。
【００１１】
一の実施態様では、
【化９】
2010504367.tif 000011
は、単結合であり、各Ｒ3および各Ｒ4は水素である。
【００１２】
一の実施態様では、ＸはＮである。
【００１３】
一の実施態様では、ｎは、０、１または２である。さらなる実施態様では、ｎは０または１である。さらなる実施態様では、ｎは０である。
【００１４】
一の実施態様では、存在する場合の各Ｒ5はＣ1-6アルキルである。さらなる実施態様では、存在する場合の各Ｒ5はＣ1-3アルキルである。さらなる実施態様では、存在する場合の各Ｒ5はメチルである。
【００１５】
一の実施態様では、存在する場合の各Ｒ5は、式（Ｉ）におけるエチレン鎖と結合した窒素の隣の炭素原子の一方または両方にてピペラジンまたはピペリジン環と結合する。
【００１６】
一の実施態様では、２個のＲ5基が結合して橋を形成する場合、該橋は、２個の炭素原子を含有し、該橋は、ピペラジンまたはピペリジン環における非隣接炭素原子に結合する。
【００１７】
一の実施態様では、ｍは０または１である。さらなる実施態様では、ｍは０である。
【００１８】
一の実施態様では、存在する場合のＲ6は、キノリン環の７位に結合する。
【００１９】
一の実施態様では、
Ｒ1はＣ1-6アルキルであり；
Ｒ2は水素であり；
【化１０】
2010504367.tif 000012
は、単結合であり、各Ｒ3およびＲ4は水素であり；
ＸはＮであり；
ｎは０、１または２であり；
存在する場合の各Ｒ5はＣ1-6アルキルであり；
ｍは０または１であり；
存在する場合のＲ6はＣ1-6アルキルまたはハロである。
【００２０】
一の実施態様では、式（Ｉ）で示される化合物は、
６−メチル−５−｛２−[４−(２−メチルキノリン−５−イル)ピペラジン−１−イル]エチル｝−３,４−ジヒドロキノリン−２(１Ｈ)−オン（化合物１）；
５−｛２−[(２Ｓ)−４−(７−フルオロ−２−メチルキノリン−５−イル)−２−メチルピペラジン−１−イル]エチル｝−６−メチル−３,４−ジヒドロキノリン−２(１Ｈ)−オン（化合物２）；
１,６−ジメチル−５−｛２−[４−(２−メチルキノリン−５−イル)ピペラジン−１−イル]エチル｝−３,４−ジヒドロキノリン−２(１Ｈ)−オン（化合物７）；
６−メチル−５−｛２−[４−(２−メチル−５−キノリニル)−１−ピペラジニル]エチル｝−２(１Ｈ)−キノリノン（化合物１４）；
５−｛２−[４−(７−フルオロ−２−メチル−５−キノリニル)−１−ピペラジニル]エチル｝−６−メチル−２(１Ｈ)−キノリノン（化合物１５）；
６−メチル−５−｛２−[４−(２−メチル−５−キノリニル)−１−ピペリジニル]エチル｝−２(１Ｈ)−キノリノン（化合物１６）；
５−｛２−[４−(７−フルオロ−２−メチル−５−キノリニル)−１−ピペラジニル]エチル｝−１,６−ジメチル−２(１Ｈ)−キノリノン（化合物１９）；
１,６−ジメチル−５−｛２−[(２Ｓ)−２−メチル−４−(２−メチル−５−キノリニル)−１−ピペラジニル]エチル｝−２(１Ｈ)−キノリノン（化合物２１）；
５−｛２−[(２Ｓ)−４−(７−フルオロ−２−メチル−５−キノリニル)−２−メチル−１−ピペラジニル]エチル｝−１,６−ジメチル−２(１Ｈ)−キノリノン（化合物２３）；および
３,６−ジメチル−７−｛２−[(２Ｓ)−２−メチル−４−(２−メチル−５−キノリニル)−１−ピペラジニル]エチル｝−１,１ａ,３,７ｂ−テトラヒドロ−２Ｈ−シクロプロパ[ｃ]キノリン−２−オン（化合物３３）
からなる群から選択される。
【００２１】
さらなる実施態様では、式（Ｉ）で示される化合物は、６−メチル−５−｛２−[４−(２−メチルキノリン−５−イル)ピペラジン−１−イル]エチル｝−３,４−ジヒドロキノリン−２(１Ｈ)−オン（化合物１）である。
【００２２】
第一の態様で定義された化合物は、医薬上または獣医学上許容される塩を形成してもよい。したがって、さらなる態様によると、本発明は、第一の態様およびその実施態様において定義した化合物の医薬上許容される塩を提供する。
【００２３】
第一の態様で定義した化合物は、塩基性中心を含有しており、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸およびリン酸のような無機酸で、カルボン酸で、または、有機スルホン酸で形成された非毒性酸付加塩を形成することができる。例としては、ＨＣｌ、ＨＢｒ、ＨＩ、硫酸塩または重硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩またはリン酸水素塩、酢酸塩、安息香酸塩、コハク酸塩、サッカラート、フマル酸塩、マレイン酸塩、乳酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、グルコン酸塩、カンシル酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩およびパモン酸塩が挙げられる。好適な医薬塩について検討については、Berge et al, J. Pharm, Sci., 66, 1-19, 1977；P L Gould, International Journal of Pharmaceutics, 33 (1986), 201-217；およびBighley et al, Encyclopedia of Pharmaceutical Technology, Marcel Dekker Inc, New York 1996, Volume 13, page 453-497を参照のこと。
【００２４】
当業者にとって当然のことながら、最終脱保護段階の前に調製され得る第一の態様において定義した化合物のある保護誘導体は、そのままでは薬理活性を有することができないかもしれないが、場合によっては、経口もしくは非経口投与することができ、その後、体内で代謝されて、薬理学的に活性がある第一の態様において定義した化合物を形成することができる。したがって、かかる誘導体は、「プロドラッグ」として記載され得る。第一の態様で定義された化合物の保護誘導体およびプロドラッグは全て、本発明の範囲内に包含される。本発明の化合物に適当なプロドラッグの例は、Drugs of Today, Volume 19, Number 9, 1983, pp 499−538およびTopics in Chemistry, Chapter 31, pp 306−316および“Design of Prodrugs” by H. Bundgaard, Elsevier, 1985, Chapter 1に記載されている（該文献の開示内容は出典明示により本明細書の一部を構成する）。また、当業者にとって当然のことながら、H. Bundgaard in “Design of Prodrugs”（該文献の開示内容は出典明示により本明細書の一部を構成する）によって記載されているような「前駆部分」として当業者に知られているある部分は、適当な官能基が第一の態様において定義した化合物内に存在する場合にはかかる官能基上にあってもよい。
【００２５】
第一の態様において定義した化合物またはそれらの医薬上許容される塩は、溶媒和化形態または水和化形態で存在することができる。
【００２６】
第一の態様において定義した化合物、それらの医薬上許容される塩、または該化合物もしくは塩の溶媒和物／水和物は、１つまたはそれ以上の多形形態で存在することができる。
【００２７】
したがって、さらなる態様では、本発明は、第一の態様において定義した化合物の医薬上許容される塩、溶媒和物またはプロドラッグを提供する。
【００２８】
以下、第一の態様において定義した化合物、それらの医薬上許容される塩、溶媒和物およびプロドラッグを「本発明の化合物」という。
【００２９】
本発明の化合物は、１個またはそれ以上のキラル中心を有することができて、多数の立体異性体形で存在することができる。全ての立体異性体およびそれらの混合物は本発明の範囲内に包含される。ラセミ化合物は、分取ＨＰＬＣおよびキラル固定相をもつカラムを使用して分離され得るか、または当業者に知られている方法を用いて個々のエナンチオマーを得るように分割され得る。さらに、キラル中間化合物は、分割され得、本発明のキラル化合物を調製するために使用され得る。
【００３０】
本発明の化合物は、１種類またはそれ以上の互変異性体形態で存在し得る。全ての互変異性体およびそれらの混合物は本発明の範囲に包含される。例えば、２−ヒドロキシキノリニルに関する請求項は、その互変異性体であるα−キノリノニルに及ぶ。
【００３１】
本発明の化合物のジアステレオ異性体は、文献周知の方法に従って、例えば、分取ＨＰＬＣによって、またはクロマトグラフィー精製法によって得ることができる。ラセミ化合物は、分取ＨＰＬＣおよびキラル固定相をもつカラムを使用して分離され得るか、または当業者に知られている方法を用いて個々のエナンチオマーを得るように分割され得る。さらに、キラル中間化合物は、分割され得、本発明のキラル化合物を調製するために使用され得る。
【００３２】
本発明また、本発明の化合物の全ての好適な同位体変種を包含する。本発明の化合物の同位体変種は、少なくとも１個の原子が、同じ原子数を有するが自然界にて通常見られる原子量とは異なる原子量を有する原子によって置き換えられたものであると定義される。本発明の化合物に取り込まれ得る同位体の例としては、水素、炭素、窒素、酸素、リン、硫黄、フッ素および塩素の同位体が挙げられ、例えば、それぞれ、2Ｈ、3Ｈ、11Ｃ、13Ｃ、14Ｃ、15Ｎ、17Ｏ、18Ｏ、31Ｐ、32Ｐ、35Ｓ、18Ｆおよび36Ｃｌが挙げられる。本発明のある同位体変種、例えば、3Ｈまたは14Ｃのような放射性同位体が取り込まれているものは、薬物および／または基質組織分布研究に有用である。トリチウム同位体、すなわち3Ｈ、炭素−１４同位体、すなわち14Ｃは、それらの製造の容易さおよび検出能のために特に好ましい。また、ジューテリウム、すなわち2Ｈのような同位体での置換は、大きい代謝安定性によりもたらされるある種の治療的利点、例えば、インビボ半減期の増加または必要用量の減少をもたらすことができ、故に、状況によっては好ましい。本発明の化合物の同位体変種は、一般に、慣用の方法によって、例えば、例示した方法によって、または適当な試薬の適当な同位体変種を使用して以下の実施例および調製例に記載される調製法によって、製造され得る。
【００３３】
本発明の化合物は、様々な方法で調製することができる。以下の反応スキームおよびそれ以降では、特記しない限り、Ｒ1〜Ｒ6、Ｘ、ｎ、ｍ、ｐおよびｑは、第一の態様において定義したとおりである。これらの方法は、本発明のさらなる態様を形成する。
【００３４】
本明細書の全体にわたって、一般式は、ローマ数字（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）などで指定される。これらの一般式の下位は、（Ｉａ）、（Ｉｂ）、（Ｉｃ）など、（ＩＶａ）、（ＩＶｂ）、（ＩＶｃ）などと定義される。
【００３５】
一般式（Ｉ）で示される化合物は、反応スキーム１に示されるように式（ＩＩ）で示される化合物を式（ＩＩＩ）で示される化合物と反応させることによって調製され得る。典型的な反応条件は、適当な溶媒（例えば、１,２−ジクロロエタン）中にて室温で３０分間、（ＩＩ）および（ＩＩＩ）を撹拌すること、次いで、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウムのような還元剤で処理することを含む。
【００３６】
【化１１】
2010504367.tif 000013
【００３７】
式（ＩＩＩａ）で示される化合物、すなわち、Ｒ1およびＲ2がアルキルであり、
【化１２】
2010504367.tif 000014
が二重結合であり、Ｒ3およびＲ4が水素である一般式（ＩＩＩ）で示される化合物は、反応スキーム２に従って調製され得る。第一工程では、式（ＩＶ）で示される化合物が、３−クロロ過安息香酸による処理のような当該技術分野で知られている条件下でＮ−オキシド（Ｖ）に変換される。式（Ｖ）で示される化合物を無水トリフルオロ酢酸で処理することによりキノリノン（ＶＩ）が得られる。水素化ナトリウムおよびヨードメタンによるＮ−アルキル化により、（ＶＩＩ）が得られる。パラジウムの触媒作用下にて式（ＶＩ）で示される化合物をアリルトリブチルスタンナンで処理することにより、式（ＶＩＩＩ）で示される化合物が得られた。この工程の典型的な条件は、高温（例えば、１００℃）でジメチルホルムアミド中におけるパラジウム(０)テトラキストリフェニルホスフィンおよび塩化リチウムでの処理を含む。最後に、熟練化学者に知られている条件下にて四酸化オスミウムおよび過ヨウ素酸ナトリウムで式（ＶＩＩＩ）で示される化合物を処理することにより式（ＩＩＩａ）で示される化合物が得られる。
【００３８】
一般式（ＩＶ）で示される化合物は、商業的に入手可能であるか、または当業者に知られている方法によって調整され得る。
【００３９】
【化１３】
2010504367.tif 000015
【００４０】
式（ＩＩＩｂ）で示される化合物、すなわち、Ｒ1がアルキルであり、
【化１４】
2010504367.tif 000016
が単結合であり、各Ｒ3および各Ｒ4が水素である一般式（ＩＩＩ）で示される化合物は、熟練化学者に知られている条件下にて式（ＩＸ）で示される化合物を四酸化オスミウムおよび過ヨウ素酸ナトリウムで処理することにより反応スキーム３に従って調製され得る。式（ＩＸ）で示される化合物は、ＷＯ２００６／０２４５１７のＤｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ７２に記載されているものと同様の方法を使用して調製され得る。
【００４１】
【化１５】
2010504367.tif 000017
【００４２】
式（ＩＩＩｃ）で示される化合物、すなわち、Ｒ1がアルキルであり、Ｒ2が水素であり、
【化１６】
2010504367.tif 000018
が二重結合であり、Ｒ3およびＲ4が水素である一般式（ＩＩＩ）で示される化合物は、反応スキーム４に従って調製され得る。最初に、式（ＶＩ）で示される化合物（反応スキーム２を参照）をパラジウムの触媒作用下で２−(エテニルオキシ)−Ｎ,Ｎ−ジメチルエタンアミンと反応させて、式（Ｘ）で示される化合物を得る。典型的な反応条件は、高温（例えば、１００℃）での酢酸パラジウム(ＩＩ)、トリフェニルホスフィンおよびトリエチルアミンによる処理を含む。酸性条件下（典型的には、室温での希硫酸水溶液）で（Ｘ）を処理することにより、式（ＩＩＩｃ）で示される化合物が得られる。
【００４３】
【化１７】
2010504367.tif 000019
【００４４】
式（ＩＩＩｄ）で示される化合物、すなわち、Ｒ1がハロであり、Ｒ2がアルキルであり、
【化１８】
2010504367.tif 000020
が二重結合であり、Ｒ3およびＲ4が水素である一般式（ＩＩＩ）で示される化合物は、反応スキーム５に従って調製され得る。最初に、典型的には氷浴温度でトリエチルアミンの存在にて、式（ＸＩ）で示される化合物を塩化ピバロイルで処理することにより、式（ＸＩＩ）で示される化合物が調製され得る。（ＸＩＩ）を強塩基（例えば、ｎ−ブチルリチウム）で処理し、次いで、ジメチルホルムアミドを添加することにより、式（ＸＩＩＩ）で示される化合物が得られる。室温で適当な溶媒（例えば、トルエン）中にて(カルボエトキシメチレン)トリフェニル−ホスホランで処理することにより式（ＸＩＶ）で示される化合物が得られ、これを酸性条件下で環化することができ、式（ＸＶ）で示される化合物が得られる。トリフラートの形成、次いで、反応スキーム２に記載した条件と同様の条件下でのリルトリブチルスタンナンとの反応により、式（ＸＶＩＩＩ）で示される化合物が得られる。標準条件下での四酸化オスミウムおよび過ヨウ素酸ナトリウムとの反応により式（ＩＩＩｄ）で示される化合物が得られる。
【００４５】
一般式（ＸＩ）で示される化合物は、商業的に入手可能であるか、または、当業者に知られている方法によって調製され得る。
【００４６】
【化１９】
2010504367.tif 000021
【００４７】
式（ＩＩＩｅ）で示される化合物、すなわち、Ｒ1およびＲ2がアルキルであり、
【化２０】
2010504367.tif 000022
が単結合であり、１個のＲ3および１個のＲ4がそれらの相互接続原子と一緒になってシクロプロパン環を形成する一般式（ＩＩＩ）で示される化合物は、反応スキーム６に従って調製され得る。式（ＸＩＸ）で示される化合物は、ヨウ化トリメチルスルホニウムの溶液中にて塩基（例えば、水素化ナトリウム）に（ＶＩＩ）を添加し、次いで、高温で加熱することにより式（ＶＩＩ）で示される化合物（反応セクション２を参照）から調製され得る。式（ＩＩＩｅ）で示される化合物は、反応スキーム２について記載された方法を使用して（ＸＩＸ）から得ることができる。
【００４８】
【化２１】
2010504367.tif 000023
【００４９】
式（ＩＩａ）で示される化合物、すなわち、ＸがＮである一般式（ＩＩ）で示される化合物は、反応スキーム７に従って製造され得る。典型的には、式（ＸＸＩ）および（ＸＸＩＩ）で示される化合物を、パラジウム触媒（例えば、酢酸パラジウム(ＩＩ)）、塩基（例えば、炭酸セシウム）およびＢＩＮＡＰの存在下、高温にて適当な溶媒（例えば、トルエン）中で反応させる。
【００５０】
【化２２】
2010504367.tif 000024
【００５１】
一般式（ＸＸＩａ／ｂ）で示される化合物は、商業的に入手可能であるか、文献公知であるか、または、当業者に知られている方法によって製造され得る。
【００５２】
式（ＩＩｂ）で示される化合物は、適当な溶媒（例えば、ＤＭＦ）中、パラジウム触媒および塩基（例えば、炭酸カリウム）の存在下、高温で、式（ＸＸＩｂ）で示される化合物を式（ＸＸＩＩＩ）で示される化合物と反応させ、次いで、標準的な条件下で（ＷＯ ２００４／０４６１２４、Ｄｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎｓ １６および１８を参照）、二重結合の還元およびブトキシカルボニル（ＢＯＣ）保護基の除去を行うことによって、反応スキーム８に従って製造され得る。
【００５３】
2010504367.tif 000025
【００５４】
本発明の化合物は、５−ＨＴ1A受容体の有効なアンタゴニストである。加えて、本発明の化合物には、有効なセロトニン再取り込み阻害剤であるものがある。加えて、本発明の化合物は、５−ＨＴ1B受容体よりも５−ＨＴ1A受容体に対して選択的である、すなわち、当該化合物は、５−ＨＴ1B受容体のアンタゴニストであるよりもむしろ５−ＨＴ1A受容体のアンタゴニストである。
【００５５】
したがって、さらなる態様によると、本発明は、薬物として、好適にはヒト用薬物として使用するための本発明の化合物を提供する。
【００５６】
さらなる態様によると、本発明は、性機能障害を治療または予防するための薬物の製造における本発明の化合物の使用を提供する。
【００５７】
一の実施態様では、性機能障害は、性的欲求の障害（性的欲求低下障害（３０２.７１）および性嫌悪障害（３０２.７９）を含む）；性的興奮の障害（女性の性的興奮の障害（３０２.７２）および男性の勃起障害（３０２.７２）を含む）；オルガズム障害（女性オルガズム障害（３０２.７３）、男性オルガズム障害（３０２.７４）および早漏（３０２.７５）を含む）；性交疼痛障害（性交疼痛症（３０２.７６）および膣痙攣（３０６.５１）を含む）；特定不能の性機能障害（３０２.７０）；性嗜好異常（露出症（３０２.４）、フェティシズム（３０２.８１）、窃触症（３０２.８９）、小児性愛（３０２.２）、性的マゾヒズム（３０２.８３）、性的サディズム（３０２.８４）、服装倒錯的フェティシズム（３０２.３）、窃視症（３０２.８２）および特定不能の性嗜好異常（３０２.９）を含む）；性同一性障害（小児の性同一性障害（３０２.６）および青年期または成人の性同一性障害（３０２.８５）を含む）；ならびに特定不能の性障害（３０２.９）からなる群から選択される。
【００５８】
さらなる実施態様では、性機能障害は、早漏である。
【００５９】
さらなる態様によると、本発明は、疾患に伴う認知障害の治療を含む認知を増強する薬物の製造における本発明の化合物の使用を提供する。
【００６０】
一の実施態様では、「認知障害」なる用語としては、例えば、注意、見当識を含む認知機能の障害、学習障害、記憶（すなわち、記憶障害、健忘症、健忘性障害、一過性全健忘症候群および加齢に伴った記憶障害）および言語機能の障害；脳卒中の結果としての認知障害、アルツハイマー病、ハンチントン病、ピック病、エイズ関連認知症、または多発梗塞性認知症、アルコール性認知症、甲状腺機能低下症関連認知症、ならびに小脳萎縮症および筋萎縮性側策硬化症のような他の変性障害に関連する認知症のような他の認知症状態；せん妄またはうつ病（仮性認知症状態）心的外傷、頭部外傷、年齢関連認知低下、脳卒中、神経変性、薬物誘発性状態、神経毒性物質、軽度認知障害、年齢関連認知障害、自閉症関連認知障害、ダウン症候群、精神病に関連する失認、および電気ショック療法後関連認知障害のような認知低下を引き起こす可能性のある他の急性または亜急性病態；ならびにパーキンソン病、神経遮断薬誘発性パーキンソニズムおよび遅発性ジスキネジーのような運動障害性障害が挙げられる。
【００６１】
一の実施態様では、認知障害を伴う疾患は、認知障害を伴う、統合失調症、双極性障害、うつ病、他の精神障害および精神病状態、例えば、アルツハイマー病からなる群から選択される。
【００６２】
本発明の化合物は、性機能障害の治療、および疾患に伴う認知障害の治療を含む認知を増強するための治療に加えて、以下の挙げられるものからなる群から選択される疾患または状態を治療することができる［以下の疾患名の後の括弧内の番号は、Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders, 4th Edition, published by the American Psychiatric Association（ＤＳＭ−ＩＶ）および／またはInternational Classification of Diseases, 10th Edition（ＩＣＤ−１０）における分類コードを表す］：
【００６３】
ｉ）精神障害、例えば、統合失調症（亜型である、妄想型（２９５.３０）、解体型（２９５.１０）、緊張型（２９５.２０）、鑑別不能型（２９５.９０）および残遺型（２９５.６０）を含む）；統合失調症様障害（２９５.４０）；統合失調感情障害（２９５.７０）（亜型である双極型およびうつ病型を含む）；妄想性障害（２９７.１）（亜型である色情型、誇大型、嫉妬型、被害型、身体型、混合型、および特定不能型を含む）；短期精神病性障害（２９８.８）；共有精神病性障害（２９７.３）；一般身体疾患を示す精神病性障害（妄想を伴う亜型および幻覚を伴う亜型を含む）；物質誘発性精神病性障害（妄想を伴う亜型（２９３.８１）および幻覚を伴う亜型（２９３.８２）を含む）；ならびに特定不能の精神病性障害（２９８.９）。
【００６４】
ｉｉ）うつ病および気分障害、例えば、うつ病エピソード（大うつ病エピソード、躁病エピソード、混合性エピソードおよび軽躁病エピソードを含む）；うつ病性障害（大うつ病性障害、気分変調性障害（３００.４）、特定不能のうつ病性障害（３１１）を含む）；双極性障害（双極性Ｉ型障害、双極性ＩＩ型障害（すなわち、軽躁病エピソードを伴う反復性大うつ病エピソード）（２９６.８９）、気分循環性障害（３０１.１３）および特定不能の双極性障害（２９６.８０）を含む）；他の気分障害（うつ病性の特徴を伴う亜型、大うつ病様エピソードを伴う亜型、躁病性の特徴を伴う亜型および混合性の特徴を伴う亜型を含む一般健康状態に因る気分障害（２９３.８３）を含む）；物質誘発性気分障害（うつ病性の特徴を伴う亜型、躁病性の特徴を伴う亜型および混合性の特徴を伴う亜型を含む）；ならびに特定不能の気分障害（２９６.９０）。
【００６５】
ｉｉｉ）不安障害、例えば、社会不安障害；パニック発作；広場恐怖、パニック障害；パニック障害の既往歴のない広場恐怖（３００.２２）；特定の恐怖症（３００.２９）（動物型、自然環境型、血液・注射・外傷型、状況型およびその他の型の亜型を含む）；社会恐怖（３００.２３）；強迫性障害（３００.３）；心的外傷後ストレス障害（３０９.８１）；急性ストレス障害（３０８.３）；全般性不安障害（３００.０２）；一般健康状態に因る不安障害（２９３.８４）；物質誘発性不安障害；および特定不能の不安障害（３００.００）。
【００６６】
ｉｖ）物質関連障害、例えば、物質使用障害（物質依存、物質渇望および物質乱用を含む）；物質誘発性障害（物質中毒、物質離脱、物質誘発性せん妄、物質誘発性持続性認知症、物質誘発性持続性健忘性障害、物質誘発性精神病性障害、物質誘発性気分障害、物質誘発性不安障害、物質誘発性性機能障害、物質誘発性睡眠障害および幻覚剤持続性知覚障害（フラッシュバック）を含む）；アルコール関連障害（アルコール依存（３０３.９０）、アルコール乱用（３０５.００）、アルコール中毒（３０３.００）、アルコール離脱（２９１.８１）、アルコール中毒せん妄、アルコール離脱せん妄、アルコール誘発性持続性認知症、アルコール誘発性持続性健忘性障害、アルコール誘発性精神病性障害、アルコール誘発性気分障害、アルコール誘発性不安障害、アルコール誘発性性機能障害、アルコール誘発性睡眠障害および特定不能のアルコール関連障害（２９１.９）を含む）；アンフェタミン（またはアンフェタミン様）関連障害（例えば、アンフェタミン依存（３０４.４０）、アンフェタミン乱用（３０５.７０）、アンフェタミン中毒（２９２.８９）、アンフェタミン離脱（２９２.０）、アンフェタミン中毒せん妄、アンフェタミン誘発性精神病性障害、アンフェタミン誘発性気分障害、アンフェタミン誘発性不安障害、アンフェタミン誘発性性機能障害、アンフェタミン誘発性睡眠障害および特定不能のアンフェタミン関連障害（２９２.９））；カフェイン関連障害（カフェイン中毒（３０５.９０）、カフェイン誘発性不安障害、カフェイン誘発性睡眠障害および特定不能のカフェイン関連障害（２９２.９）を含む）；大麻関連障害（大麻依存（３０４.３０）、大麻乱用（３０５.２０）、大麻中毒（２９２.８９）、大麻中毒せん妄、大麻誘発性精神病性障害、大麻誘発性不安障害および特定不能の大麻関連障害（２９２.９）を含む）；コカイン関連障害（コカイン依存（３０４.２０）、コカイン乱用（３０５.６０）、コカイン中毒（２９２.８９）、コカイン離脱（２９２.０）、コカイン中毒せん妄、コカイン誘発性精神病性障害、コカイン誘発性気分障害、コカイン誘発性不安障害、コカイン誘発性性機能障害、コカイン誘発性睡眠障害および特定不能のコカイン関連障害（２９２.９）を含む）；幻覚剤関連障害（幻覚剤依存（３０４.５０）、幻覚剤乱用（３０５.３０）、幻覚剤中毒（２９２.８９）、幻覚剤持続性知覚障害（フラッシュバック）（２９２.８９）、幻覚剤中毒せん妄、幻覚剤誘発性精神病性障害、幻覚剤誘発性気分障害、幻覚剤誘発性不安障害および特定不能の幻覚剤関連障害（２９２.９）を含む）；吸入剤関連障害（吸入剤依存（３０４.６０）、吸入剤乱用（３０５.９０）、吸入剤中毒（２９２.８９）、吸入剤中毒せん妄、吸入剤誘発性持続性認知症、吸入剤誘発性精神病性障害、吸入剤誘発性気分障害、吸入剤誘発性不安障害および特定不能の吸入剤関連障害（２９２.９）を含む）；ニコチンに関連する障害（ニコチン依存（３０５.１）、ニコチン離脱（２９２.０）および特定不能のニコチン関連障害（２９２.９）を含む）；オピオイド関連障害（オピオイド依存（３０４.００）、オピオイド乱用（３０５.５０）、オピオイド中毒（２９２.８９）、オピオイド離脱（２９２.０）、オ��オイド中毒せん妄、オピオイド誘発性精神病性障害、オピオイド誘発性気分障害、オピオイド誘発性性機能障害、オピオイド誘発性睡眠障害および特定不能のオピオイド関連障害（２９２.９）を含む）；フェンシクリジン（またはフェンシクリジン様）関連障害（フェンシクリジン依存（３０４.６０）、フェンシクリジン乱用（３０５.９０）、フェンシクリジン中毒（２９２.８９）、フェンシクリジン中毒せん妄、フェンシクリジン誘発性精神病性障害、フェンシクリジン誘発性気分障害、フェンシクリジン誘発性不安障害および特定不能のフェンシクリジン関連障害（２９２.９）を含む）；鎮静剤、催眠剤または抗不安薬関連障害（鎮静剤、催眠剤または抗不安薬依存（３０４.１０）、鎮静剤、催眠剤または抗不安薬乱用（３０５.４０）、鎮静剤、催眠剤または抗不安薬中毒（２９２.８９）、鎮静剤、催眠剤または抗不安薬離脱（２９２.０）、鎮静剤、催眠剤または抗不安薬中毒せん妄、鎮静剤、催眠剤または抗不安薬離脱せん妄、鎮静剤、催眠剤または抗不安薬持続性認知症、鎮静剤、催眠剤または抗不安薬持続性健忘性障害、鎮静剤、催眠剤または抗不安薬誘発性精神病性障害、鎮静剤、催眠剤または抗不安薬誘発性気分障害、鎮静剤、催眠剤または抗不安薬誘発性不安障害、鎮静剤、催眠剤または抗不安薬誘発性性機能障害、鎮静剤、催眠剤または抗不安薬誘発性睡眠障害および特定不能の鎮静剤、催眠剤または抗不安薬関連障害（２９２.９）を含む）；多物質関連障害（多物質依存（３０４.８０）を含む）；ならびに他の（または不明の）物質関連障害（タンパク質同化ステロイド、硝酸塩吸入剤および亜酸化窒素を含む）。
【００６７】
ｖ）睡眠障害、例えば、睡眠異常（原発性不眠症（３０７.４２）、原発性過眠症（３０７.４４）、ナルコレプシー（３４７）、呼吸関連睡眠障害（７８０.５９）、概日リズム睡眠障害（３０７.４５）および特定不能の睡眠異常（３０７.４７）を含む）のような原発性睡眠障害；睡眠時随伴症（悪夢障害（３０７.４７）、睡眠驚愕障害（３０７.４６）、睡眠時遊行症（３０７.４６）および特定不能の睡眠時随伴症（３０７.４７）を含む）のような原発性睡眠障害；他の精神疾患に関連した睡眠障害（他の精神障害に関連した不眠症（３０７.４２）および他の精神疾患に関連した過眠症（３０７.４４）を含む）；一般健康状態に因る睡眠障害；ならびに物質誘発性睡眠障害（亜型である不眠症型、過眠症型、睡眠時随伴症型および混合型を含む）。
【００６８】
ｖｉ）摂食障害、例えば、神経性無食欲症（３０７.１）（亜型である制限型およびむちゃ食い／排出型を含む）；神経性大食症（３０７.５１）（亜型である排出型および非排出型を含む）；肥満；強迫性摂食障害；過食症；ならびに特定不能の摂食障害（３０７.５０）。
【００６９】
ｖｉｉ）自閉性障害（２９９.００）、アスペルガー障害、レット障害、小児期崩壊性障害および特定不能の広汎性発達障害を含む自閉症スペクトラム障害。
【００７０】
ｖｉｉｉ）注意欠陥／多動性障害（亜型である注意欠陥／多動性障害混合型（３１４.０１）、注意欠陥／多動性障害不注意優勢型（３１４.００）、注意欠陥／多動性障害多動性−衝動性優勢型（３１４.０１）および特定不能の注意欠陥／多動性障害（３１４.９）を含む）；多動性障害；破壊的行動障害、例えば、行為障害（亜型である小児期発症型（３２１.８１）、青年期発症型（３１２.８２）および発症年齢特定不能（３１２.８９）を含む）、反抗挑戦性障害（３１３.８１）および特定不能の破壊的行動障害；ならびにトウレット障害（３０７.２３）のようなチック障害。
【００７１】
ｉｘ）亜型である妄想性人格障害（３０１.０）、統合失調質人格障害（３０１.２０）、統合失調型人格障害（３０１.２２）、反社会性人格障害（３０１.７）、境界性人格障害（３０１.８３）、演技性人格障害（３０１.５０）、自己愛性人格障害（３０１.８１）、回避性人格障害（３０１.８２）、依存性人格障害（３０１.６）、強迫性人格障害（３０１.４）および特定不能の人格障害（３０１.９）を含む人格障害。
【００７２】
当然のことながら、本明細書における「治療」に対する言及は、予防、再発防止、および症状（軽度であろうと、中等度であろうと、または重度であろうと）の抑制または寛解、ならびに確立した症状の治療に及ぶ。本発明の化合物は、化合物そのものとして投与され得るが、好適には、該活性成分は、医薬製剤として提供される。
【００７３】
本発明の化合物は、男性性機能障害を治療または予防するために以下の薬剤と組み合わせて使用することができる：ｉ）ホスホジエステラーゼＶ阻害剤、例えば、バルデナフィルおよびシルデナフィル；ｉｉ）ドーパミンアゴニスト／ドーパミン輸送阻害剤、例えば、アポモルヒネおよびブプロピオン；ｉｉｉ）αアドレナリン受容体アンタゴニスト、例えば、フェントラミン；ｉｖ）プロスタグランジンアゴニスト、例えば、アルプロスタジル；ｖ）テストステロンアゴニスト、例えば、テストステロン；ｖｉ）セロトニン再取り込み阻害剤、例えば、シタロプラム、エシタロプラム、フルオキセチン、パロキセチン、ダポキセチン、セルトラリン、フェモキセチン、フルボキサミン、インダルピンおよびジメルジン；ｖ）ノルアドレナリン輸送阻害剤、例えば、レボキセチン。
【００７４】
本発明の化合物は、女性性機能障害を治療または予防するために、男性性機能障害に関して特定された同薬剤と、および、加えて、エストラジオールのようなエストロゲンと組み合わせて使用することができる
【００７５】
本発明の化合物は、精神障害を治療または予防するために以下の薬剤と組み合わせて使用することができる：ｉ）抗精神病薬；ｉｉ）錐体外路副作用に関する薬物、例えば、抗コリン薬（例えば、ベンズトロピン、ピペリデン、プロシクリジンおよびトリヘキシフェニジル）、抗ヒスタミン薬（例えば、ジフェンヒドラミン）およびドーパミン作動薬（例えば、アマンタジン）；ｉｉｉ）抗うつ薬；ｉｖ）抗不安薬；およびｖ）向知性薬、例えば、コリンエステラーゼ阻害剤（例えば、タクリン、ドネペジル、リバスチグミンおよびガランタミン）。
【００７６】
本発明の化合物は、うつ病および気分障害を治療まはた予防するために抗うつ薬と組み合わせて使用することができる。
【００７７】
本発明の化合物は、双極性障害を治療または予防するために以下の薬剤と組み合わせて使用することができる：ｉ）気分安定剤；ｉｉ）抗精神病薬；およびｉｉｉ）抗うつ薬。
【００７８】
本発明の化合物は、不安障害を治療または予防するために以下の薬剤と組み合わせて使用することができる：ｉ）抗不安薬；およびｉｉ）抗うつ薬。
【００７９】
抗精神病薬としては、定型抗精神病薬（例えば、クロルプロマジン、チオリダジン、メソリダジン、フルフェナジン、ペルフェナジン、プロクロルペラジントリフルオペラジン、チオチキセン、ハロペリドール、モリンドンおよびロキサピン）；および非定型抗精神病薬（例えば、クロザピン、オランザピン、リスペリドン、クエチアピン、アリピラゾール、ジプラシドンおよびアミスルプリド）が挙げられる。
【００８０】
抗うつ薬としては、セロトニン再取り込み阻害剤（例えば、シタロプラム、エシタロプラム、フルオキセチン、パロキセチン、ダポキセチン、セルトラリン、フェモキセチン、フルボキサミン、インダルピンおよびジメルジン）；セロトニン／ノルアドレナリン二重再取り込み阻害剤（例えば、ベンラファキシン、デュロキセチンおよびミルナシプラン）；ノルアドレナリン再取り込み阻害剤（例えば、レボキセチンおよびベンラファキシン）；三環系抗うつ薬（例えば、アミトリプチリン、クロミプラミン、イミプラミン、マプロチリン、ノルトリプチリンおよびトリミプラミン）；モノアミンオキシダーゼ阻害剤（例えば、イソカルボキサジド、モクロペミド、フェネルジンおよびトラニルシプロミン）；ならびに他のもの（例えば、ブプロピオン、ミアンセリン、ミルタザピン、ナファドゾンおよびトラゾドン）が挙げられる。
【００８１】
気分安定剤としては、リチウム、バルプロ酸ナトリウム／バルプロ酸／ジバルプロエックス、カルバマゼピン、ラモトリギン、ガバペンチン、トピラマートおよびチアガビンが挙げられる。
【００８２】
抗不安薬としては、アルプラゾラムおよびロラゼパムのようなベンゾジアゼピン系薬物が挙げられる。
【００８３】
加えて、本発明の化合物は、５−ＨＴ3アンタゴニスト（例えば、オンダンセトロン、グラニセトロンおよびメトクロプラミド）；セロトニン作動薬（例えば、スマトリプタン、ロオルシン、ヨヒンビンおよびメトクロプラミド）；およびＮＫ−１アンタゴニストと組み合わせて投与することができる。
【００８４】
当然のことながら、組合せまたは組成物の化合物は、同時に（同一のまたは異なる医薬製剤中にて）、別々に、または連続的に投与することができる。
【００８５】
当然のことながら、本明細書における「治療」に対する言及は、予防、再発防止、および症状（軽度であろうと、中等度であろうと、または重度であろうと）の抑制または寛解、ならびに確立した症状の治療に及ぶ。
【００８６】
本発明の化合物は、通常、患者への投与の前に医薬組成物に製剤化されるが、必ずしもそうではない。したがって、別の態様では、本発明は、本発明の化合物および１種類またはそれ以上の医薬上許容される賦形剤を含む医薬組成物を対象とする。
【００８７】
本発明の医薬組成物は、本発明の化合物の安全かつ有効な量が抽出され、次いで、患者に投与される、散剤またはシロップ剤のようなバルク形態で調製およびパッケージ化され得る。
【００８８】
別法として、本発明の医薬組成物は、各物理的に別個の単位が本発明の化合物の安全かつ有効な量を含有する単位投与形態で調製およびパッケージ化され得る。単位投与形態で調製される場合、本発明の医薬組成物は、典型的には、０.０１ｍｇ〜５０ｍｇを含有する。
【００８９】
本発明の医薬組成物は、典型的には、本発明の化合物を１種類含有する。しかしながら、ある実施態様では、本発明の医薬組成物は、本発明の化合物を２種類以上含有する。例えば、ある実施態様では、本発明の医薬組成物は、本発明の化合物を２種類含有する。加えて、本発明の医薬組成物は、さらに、さらなる医薬的に活性な化合物を１種類またはそれ以上含んでもよい。
【００９０】
本明細書で使用する場合、「医薬上許容される賦形剤」とは、医薬組成物に形態または一貫性を与えることに関与する医薬上許容される物質、組成物またはビヒクルを意味する。各賦形剤は、患者へ投与した場合に本発明の化合物の効力を実質的に減少させる相互作用および医薬上許容されない医薬組成物をもたらす相互作用が回避されるように、混ぜ合わせた場合に医薬組成物の他の成分と適合しなければならない。加えて、各賦形剤は、もちろん、それを医薬上許容なものにするのに十分に高い純度のものでなければならない。
【００９１】
本発明の化合物および医薬上許容される賦形剤は、典型的には、望ましい投与経路による患者への投与に適した投与形態に製剤化される。例えば、投与剤形としては、（１）錠剤、カプセル剤、カプレット剤、丸剤、トローチ剤、散剤、シロップ剤、エリキシル剤、懸濁剤、液剤、乳剤、サシェ剤、およびカシェ剤のような経口投与に適したもの、（２）滅菌液剤、懸濁剤、および復元用散剤のような非経口投与に適したもの、（３）経皮パッチ剤のような経皮投与に適したもの、（４）坐剤のような直腸投与に適したもの、（５）乾燥散剤、エアゾール剤、懸濁剤、および液剤のような吸入に適したもの；および（６）クリーム剤、軟膏剤、ローション剤、液剤、ペースト剤、スプレー剤、フォーム剤およびゲル剤のような局所投与に適したものが挙げられる。
【００９２】
適当な医薬上許容される賦形剤は、選択された特定の投与形態に依存して変わるであろう。加えて、適当な医薬上許容される賦形剤は、それらが組成物において果たし得る特定の機能で選ぶことができる。例えば、ある医薬上許容される賦形剤は、それらの均一な投与形態の製造を容易にする能力で選ぶことができる。ある医薬上許容される賦形剤は、それらの安定な投与形態の製造を容易にする能力で選ぶことができる。ある医薬上許容される賦形剤は、それらの、一旦患者へ投与された場合の本発明の化合物の一の臓器または身体の一部から別の臓器または身体の別の部分への運搬または輸送を容易にする能力で選ぶことができる。ある医薬上許容される賦形剤は、それらの、患者の服薬遵守を高める能力で選ぶことができる。
【００９３】
適当な医薬上許容される賦形剤としては、以下の種類の賦形剤が挙げられる：希釈剤、充填剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、流動促進剤、造粒剤、コーティング剤、湿潤剤、溶媒、共溶媒、懸濁化剤、乳化剤、甘味剤、フレーバー剤、フレーバーマスキング剤、着色料、アンチケーキング剤、保湿剤、キレート化剤、可塑剤、増粘剤、抗酸化剤、保存剤、安定剤、界面活性剤、および緩衝剤。当業者にとって当然のことながら、ある医薬上許容される賦形剤は、２つ以上の機能を果たすことがあり、存在する該賦形剤の量および製剤中に存在する他の成分に依存して別の機能を果たすことがある。
【００９４】
当業者は、本発明で使用するのに適当な量の適当な医薬上許容される賦形剤を該当業者に選択させ得る技術的知識およびスキルをもっている。加えて、医薬上許容される賦形剤を記載する熟練技術者が利用可能であり、適当な医薬上許容される賦形剤を選択するのに有用であり得る多くの資料がある。例として、Remington's Pharmaceutical Sciences（Mack Publishing Company）、The Handbook of Pharmaceutical Additives（Gower Publishing Limited）、およびThe Handbook of Pharmaceutical Excipients（the American Pharmaceutical Association and the Pharmaceutical Press）が挙げられる。
【００９５】
本発明の医薬組成物は、当業者に公知の技術および方法を使用して調製される。当該技術分野で一般的に使用される方法のいくつかは、Remington's Pharmaceutical Sciences（Mack Publishing Company）に記載されている。
【００９６】
一の態様では、本発明は、本発明の化合物の安全かつ有効な量および希釈剤または充填剤を含む錠剤またはカプセル剤のような固体経口投与形態を対象とする。適当な希釈剤および充填剤としては、ラクトース、シュークロース、デキストロース、マンニトール、ソルビトール、デンプン（例えば、コーンスターチ、ジャガイモデンプン、およびアルファ化デンプン）、セルロースおよびその誘導体（例えば、微結晶性セルロース）、硫酸カルシウムおよび第二リン酸カルシウムが挙げられる。固体経口投与形態は、さらに、結合剤を含むことができる。適当な結合剤としては、デンプン（例えば、コーンスターチ、ジャガイモデンプン、およびアルファ化デンプン）、ゼラチン、アカシア、アルギン酸ナトリウム、アルギン酸、トラガカント、グアーガム、ポビドン、ならびにセルロースおよびその誘導体（例えば、微結晶性セルロース）が挙げられる。固体経口投与形態は、さらに、崩壊剤を含むことができる。適当な崩壊剤としては、クロスポビドン、デンプングリコール酸ナトリウム、クロスカルメロース、アルギン酸、およびカルボキシメチルセルロースナトリウムが挙げられる。固体経口投与形態は、さらに、滑沢剤を含むことができる。適当な滑沢剤としては、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウムおよびタルクが挙げられる。
【００９７】
本明細書にて引用した特許および特許出願を包含するがこれらに限定されない全ての刊行物は、個々の刊行物が十分に開示されているかの如く具体的かつ個別的に出典明示により本明細書の一部とすることが明示されているかのように出典明示により本明細書の一部とする。
【００９８】
当然のことながら、本発明は、以下のさらなる態様を包含する。最初の態様について記載した実施態様は、これらのさらなる態様にまで及ぶ。上記の疾患および状態は、適当な場合には、これらのさらなる態様にまで及ぶ。
【００９９】
ｉ）早漏症のような性機能障害の治療または予防に使用するための本発明の化合物。
ｉｉ）疾患に伴う認知障害の治療を含む認知増強に使用するための本発明の化合物。
ｉｉｉ）本発明の化合物の有効量を投与することを含む、哺乳動物における性機能障害（例えば、早漏症）の治療方法または予防方法。
ｉｖ）本発明の化合物の有効量を投与することを含む、哺乳動物における疾患に伴う認知障害の治療方法または予防方法。
【０１００】
支持化合物
多くの本発明の化合物を調製し、生物学的アッセイで試験した。これらの化合物、それらの製造およびアッセイを以下に記載する。
【０１０１】
以下の手順において、各出発物質の後に、典型的には中間体に対する言及を行う。これは、熟練化学者への単なる補助のために行われる。出発物質は、必ずしも、言及されるバッチから調製されたわけではない。
【０１０２】
本発明の化合物および中間体は、ＡＣＤ／Ｎａｍｅ ＰＲＯ ６.０２ 化合物命名ソフトウェア（カナダ国Ｍ５Ｈ２Ｌ３オンタリオ、トロントのAdvanced Chemistry Development Inc.）を使用して命名される。
【０１０３】
プロトン磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトルは、Ｖａｒｉａｎ装置にて３００、４００または５００ＭＨｚで、Ｂｒｕｋｅｒ装置にて３００または４００ＭＨｚで記録された。化学シフトは残留溶媒線を内部標準として用いてｐｐｍ（δ）にて記録される。分裂パターンは、ｓ：一重線；ｄ：二重線；ｔ：三重線；ｑ：四重線；ｍ：多重線；ｂ：幅広いとして記載した。ＮＭＲスペクトルは、２５〜９０℃の範囲の温度で記録したものである。２種類以上の配座異性体が検出された場合には、最も豊富なものについての化学シフトを記載する。
【０１０４】
質量スペクトル（ＭＳ）は以下のいずれかを使用して測定した：
ａ）４ ＩＩ 三連四重極質量分析計（Micromass UK）、またはＥＳ（＋）およびＥＳ（−）イオン化モードで操作するＡｇｉｌｅｎｔ ＭＳＤ １１００ 質量分析計、またはＨＰＬＣ装置Ａｇｉｌｅｎｔ １１００ Ｓｅｒｉｅｓと連結したＥＳ（＋）およびＥＳ（−）イオン化モードで操作するＡｇｉｌｅｎｔ ＬＣ／ＭＳＤ １１００質量分析計［ＬＣ／ＭＳ − ＥＳ（＋）：分析はＳｕｐｅｌｃｏｓｉｌ ＡＢＺ ＋Ｐｌｕｓ（３３×４.６ｍｍ、３μｍ）で行った（移動相：１００％［水＋０.１％ ＨＣＯ2Ｈ］で１分間、次いで、５分間の間に１００％［水＋０.１％ ＨＣＯ2Ｈ］から５％［水＋０.１％ ＨＣＯ2Ｈ］および９５％［ＣＨ3ＣＮ］、最後に、これらの条件下で２分間；Ｔ＝４０℃；流量＝１ｍＬ／分；ＬＣ／ＭＳ − ＥＳ（−）：分析はＳｕｐｅｌｃｏｓｉｌ ＡＢＺ ＋Ｐｌｕｓ（３３×４.６ｍｍ、３μｍ）で行った（移動相：１００％［水＋０.０５％ ＮＨ3］で１分間、次いで、５分間の間に１００％［水＋０.０５％ ＮＨ3］から５％［水＋０.０５％ ＮＨ3］および９５％［ＣＨ3ＣＮ］、最後にこれらの条件下で２分間；Ｔ＝４０℃；流量＝１ｍＬ／分］。該マススペクトルでは、分子イオンクラスターにおけるピークを１つだけ記録する；または
ｂ）総イオン電流（ＴＩＣ）およびＤＡＤ ＵＶクロマトグラフィートレースならびにピークを伴うＭＳおよびＵＶスペクトルは、２９９６ ＰＤＡ検出器を装着し、ポジティブまたはネガティブ・エレクトロスプレーイオン化モードで操作するＷａｔｅｒｓ Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ ＺＱTM質量分析計と連結したＵＰＬＣ／ＭＳ ＡｃｑｕｉｔｙTMシステムで採取した。［ＬＣ／ＭＳ − ＥＳ（＋／−）：分析はＡｃｑｕｉｔｙTM ＵＰＬＣ ＢＥＨ Ｃ１８カラム（５０×２１ｍｍ、１.７μｍ粒径）、カラム温度４０℃（移動相：Ａ−水＋０.１％ ＨＣＯＯＨ／Ｂ−ＭｅＣＮ＋０.０７５％ ＨＣＯＯＨ、流速：１.０ｍＬ／分、勾配：ｔ＝０分 ３％Ｂ、ｔ＝０.０５分 ６％Ｂ、ｔ＝０.５７分 ７０％Ｂ、ｔ＝１.４分 ９９％Ｂ、ｔ＝１.４５分 ３％Ｂ）を使用して行った］。
【０１０５】
旋光度は、ＪＡＳＣＯ ＤＩＰ−３６０デジタル旋光計（λ＝５８９ｎｍ、Ｔ＝２０℃、ｃ＝１（ＭｅＯＨ中））で測定することができる。
【０１０６】
シリカ固相抽出は、Varianにより供給されるＳＰＥ−ＳｉカラムまたはInternational Supplied Technologyにより供給されるＩｓｏｌｕｔｅ Ｓｉ ＩＩのいずれかを使用して行った。
【０１０７】
ＳＰＥ−ＳＣＸカートリッジは、Varianにより供給されるイオン交換固相抽出カラムである。ＳＰＥ−ＳＣＸカートリッジと一緒に使用される溶離液は、メタノール、次いで、メタノール中２Ｎアンモニア溶液である。
【０１０８】
使用する略語を下記表に記載する：
【表１】
2010504367.tif 000026
【実施例】
【０１０９】
化合物１：  ６−メチル−５−｛２−[４−(２−メチル−５−キノリニル)−１−ピペラジニル]エチル｝−３,４−ジヒドロ−２(１Ｈ)−キノリノン・二塩酸塩
【化２３】
2010504367.tif 000027
(６−メチル−２−オキソ−１,２,３,４−テトラヒドロ−５−キノリニル)アセトアルデヒド（中間体１）（７０ｍｇ、０.３４５ｍｍｏｌ）および２−メチル−５−(１−ピペラジニル)キノリン（ＷＯ ２００４／０４６１２４、Ｄｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ３）（１１７ｍｇ、０.５１７ｍｍｏｌ）の乾燥１,２−ジクロロエタン（４ｍｌ）中混合物を室温で３０分間撹拌した。次いで、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（１１０ｍｇ、０.５１７ｍｍｏｌ）を添加し、得られた反応混合物を４.５時間撹拌した。反応混合物をＮａＨＣＯ3の飽和水溶液でクエンチし、ＤＣＭで抽出した。合わせた有機物を乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、真空濃縮した。粗生成物をＳＰＥカートリッジ（シリカゲル、１０ｇ）によって精製し、メタノールのＤＣＭ中勾配液（２％から３％まで）で溶離して、標記化合物の遊離塩基を得た（７８ｍｇ、５５％）；ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ：４１５.２ [ＭＨ+]；Ｃ26Ｈ30Ｎ4Ｏの理論値：４１４.５。この標記化合物の遊離塩基（２７ｍｇ、０.０７ｍｍｏｌ）をメタノール／ＤＣＭ（１／１、２ｍｌ）に溶解し、０℃にてＨＣｌ（メタノール中１.２５Ｍ溶液０.１１５ｍｌ、０.１４３ｍｍｏｌ）で処理した。得られた混合物を室温で２時間撹拌した。揮発性物質の蒸発およびジエチルエーテルを用いた粉砕によって、黄色固体として標記化合物（２７ｍｇ）を得た；1Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ：１０.９５（ｂｒ.ｓ，１Ｈ）、１０.００（ｓ，１Ｈ）、８.５８（ｂｒ.ｓ，１Ｈ）、７.７０−７.８６（ｍ，２Ｈ）、７.４８−７.６８（ｍ，１Ｈ）、７.２２−７.４１（ｍ，１Ｈ）、６.９９（ｄ，１Ｈ）、６.７０（ｄ，１Ｈ）、３.７７（ｄ，２Ｈ）、３.４５−３.５５（ｍ，４Ｈ）、３.２３−３.３４（ｍ，２Ｈ）、３.１５−３.２３（ｍ，２Ｈ）、３.０７−３.１６（ｍ，２Ｈ）、２.９６（ｔ，２Ｈ）、２.７５（ｓ，３Ｈ）、２.４４（ｔ，２Ｈ）、２.３１（ｓ，３Ｈ）。
【０１１０】
適当なアリールピペラジンまたはアリールピペリジンおよび(６−メチル−２−オキソ−１,２,３,４−テトラヒドロ−５−キノリニル)アセトアルデヒド（中間体１）から出発して、化合物１の製造について記載した一般的な還元アミノ化法に従って、式（Ｉａ）で示される以下の化合物を製造した。
【０１１１】
【表２】
2010504367.tif 000028
【０１１２】
化合物７：  １,６−ジメチル−５−｛２−[４−(２−メチル−５−キノリニル)−１−ピペラジニル]エチル｝−３,４−ジヒドロ−２(１Ｈ)−キノリノン・二塩酸塩
【化２４】
2010504367.tif 000029
６−メチル−５−｛２−[４−(２−メチル−５−キノリニル)−１−ピペラジニル]エチル｝−３,４−ジヒドロ−２(１Ｈ)−キノリノン（化合物１の遊離塩基）（５０ｍｇ、０.１２１ｍｍｏｌ）の０℃での乾燥ＤＭＦ（３ｍｌ）中溶液に水素化ナトリウム（鉱油中６０％分散体７ｍｇ、０.１６９ｍｍｏｌ）およびヨードメタン（０.０９ｍｌ、０.１４５ｍｍｏｌ）を添加した。２時間後、反応物を水でクエンチし、ＤＣＭで抽出した。合わせた有機物を乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、真空濃縮した。粗生成物をＳＰＥカートリッジ（シリカゲル、１０ｇ）によって精製し、メタノールのＤＣＭ中勾配液（２％から３％まで）で溶離して、標記化合物の遊離塩基を得た（４０ｍｇ、７７％）；ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ：４２９.１ [ＭＨ+]；Ｃ27Ｈ32Ｎ4Ｏの理論値：４２８.６。遊離塩基（４０ｍｇ、０.０９ｍｍｏｌ）をメタノール（３ｍｌ）に溶解し、０℃にてＨＣｌ（メタノール中１.２５Ｍ溶液０.１６４ｍｌ、０.２０６ｍｍｏｌ）で処理した。得られた混合物を室温で２時間撹拌した。揮発性物質の蒸発およびジエチルエーテルを用いた粉砕によって、黄色固体として標記化合物を得た（４０ｍｇ）；1Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ：１０.７７（ｂｒ.ｓ，１Ｈ）、８.６０（ｂｒ.ｓ，１Ｈ）、７.７４（ｂｒ.ｓ，２Ｈ）、７.５４（ｂｒ.ｓ，１Ｈ）、７.３０（ｂｒ.ｓ，１Ｈ）、７.１３（ｄ，１Ｈ）、６.９６（ｄ，１Ｈ）、３.６４−３.９０（ｍ，２Ｈ）、３.４４−３.６１（ｍ，４Ｈ）、３.２２−３.２５（ｍ，３Ｈ）、３.１６−３.１８（ｍ，１Ｈ）、３.１２−３.４０（ｍ，６Ｈ）、２.８４−３.０１（ｍ，２Ｈ）、２.７１（ｂｒ.ｓ，３Ｈ）、２.４７−２.５７（ｍ，２Ｈ）、２.３２−２.４０（ｍ，３Ｈ）。
【０１１３】
適当なアリールピペラジンおよび(１,６−ジメチル−２−オキソ−１,２,３,４−テトラヒドロ−５−キノリニル)アセトアルデヒド（中間体３）から出発して、化合物１の製造について記載した一般的な還元アミノ化法に従って、式（Ｉｂ）で示される以下の化合物を製造した。
【０１１４】
【表３】
2010504367.tif 000030
【０１１５】
化合物１３：  １,６−ジメチル−５−｛２−[４−(２−メチル−５−キノリニル)−１−ピペリジニル]エチル｝−３,４−ジヒドロ−２(１Ｈ)−キノリノン・二塩酸塩
【化２５】
2010504367.tif 000031
化合物６の遊離塩基から出発して、化合物７の製造と同様の方法で標記化合物を製造した。標記化合物の遊離塩基により、ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ：４２８.３ [ＭＨ+]；Ｃ28Ｈ33Ｎ3Ｏの理論値：４２７.６；1Ｈ ＮＭＲ（塩）（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ：１１.１６（ｂｒ.ｓ，１Ｈ）、９.０８（ｂｒ.ｓ，１Ｈ）、８.３−７.５（ｍ，４Ｈ）、７.１１（ｄ，１Ｈ）、６.９２（ｄ，１Ｈ）、４.０−２.８（ｍ，１７Ｈ）、２.４０−２.０（ｔ，９Ｈ）が得られた。
【０１１６】
適当なアリールピペラジンまたはアリールピペリジンおよび(６−メチル−２−オキソ−１,２−ジヒドロ−５−キノリニル)アセトアルデヒド（中間体１４）から出発して、化合物１の製造について記載した一般的な還元アミノ化法に従って、式（Ｉｃ）で示される以下の化合物を製造した。
【０１１７】
【表４】
2010504367.tif 000032
【０１１８】
適当なアリールピペラジンまたはアリールピペリジンおよび(１,６−ジメチル−２−オキソ−１,２−ジヒドロ−５−キノリニル)アセトアルデヒド（中間体１２）から出発して、化合物１の製造について記載した一般的な還元アミノ化法に従って、式（Ｉｄ）で示される以下の化合物を製造した。
【０１１９】
【表５−１】
2010504367.tif 000033
【表５−２】
2010504367.tif 000034
【０１２０】
適当なアリールピペラジンまたはアリールピペリジンおよび(６−クロロ−１−メチル−２−オキソ−１,２−ジヒドロ−５−キノリニル)アセトアルデヒド（中間体２３）から出発して、化合物１の製造について記載した一般的な還元アミノ化法に従って、式（Ｉｅ）で示される以下の化合物を製造した。
【０１２１】
【表６】
2010504367.tif 000035
【０１２２】
化合物３１および３２：  ３,６−ジメチル−７−｛２−[４−(２−メチル−５−キノリニル)−１−ピペラジニル]エチル｝−１,１ａ,３,７ｂ−テトラヒドロ−２Ｈ−シクロプロパ[ｃ]キノリン−２−オン・二塩酸塩の分離エナンチオマー
【化２６】
2010504367.tif 000036
２−メチル−５−(１−ピペラジニル)キノリンのラセミ混合物および(３,６−ジメチル−２−オキソ−１ａ,２,３,７ｂ−テトラヒドロ−１Ｈ−シクロプロパ[ｃ]キノリン−７−イル)アセトアルデヒド（中間体２６）から出発して、一般的な還元アミノ化法（実施例１）に従って、標記化合物の遊離塩基をラセミ混合物として製造した；ＭＳ：（ＥＳ）m／z：４４１ [ＭＨ+]。Ｃ28Ｈ34Ｎ4Ｏの理論値：４４０.５９。遊離塩基をセミ分取ＨＰＬＣクロマトグラフィーＣＨＩＲＡＬＣＥＬ ＯＤ［２５×２.１ｃｍ；移動相（ｎ−ヘキサン、モディファイヤー：３０％エタノール）、流速＝１３ｍｌ／分；ＵＶ波長：２２５ｎｍ］によって分離して、化合物３１（エナンチオマー１）の遊離塩基（２９ｍｇ）および化合物３２（エナンチオマー２）の遊離塩基（２８ｍｇ）を得た。両エナンチオマーのエナンチオマー過剰率を分析用ＨＰＬＣ条件［キラルカラム：ＣＨＩＲＡＬＣＥＬ ＯＤ、２５×０.４６ｃｍ；移動相（ｎ−ヘキサン、モディファイヤー：２８％エタノール）、流速＝０.８ｍｌ／分；ＵＶ波長：ＤＡＤ（２１０〜３４０ｎｍ）；ＣＤ＝２３０ｎｍ（円偏光二色性）］によって証明した。
化合物３１（エナンチオマー１）の有離塩基：＞９９.５％ ａ／ａ（ＵＶによる）、保持時間：８.８分、ｅ.ｅ. ＞９９.５％；ＭＳ：（ＥＳ）ｍ／ｚ：４４１ [ＭＨ+]。Ｃ28Ｈ34Ｎ4Ｏの理論値：４４０.５９。
化合物３２（エナンチオマー２）の遊離塩基：９６.８％ ａ／ａ（ＵＶによる）、保持時間１０.６分；ｅ.ｅ.＝９３.７４％；エナンチオマー１を３.１％含有する；ＭＳ：（ＥＳ）ｍ／ｚ：４４１ [ＭＨ+]。Ｃ28Ｈ34Ｎ4Ｏの理論値：４４０.５９。
【０１２３】
常法にて遊離塩基を塩酸塩に変換した。
化合物３１（エナンチオマー１）：1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ：１１.６１（ｂｒ.ｓ，１Ｈ）、８.９３（ｂｒ.ｓ，１Ｈ）、７.９１−８.０４（ｍ，２Ｈ）、７.７７−７.８９（ｍ，１Ｈ）、７.４８（ｂｒ.ｓ，１Ｈ）、７.１０（ｄ，１Ｈ）、６.９１（ｄ，１Ｈ）、３.２３−４.０２（ｍ，１２Ｈ）、３.１９−３.２３（ｍ，３Ｈ）、２.８９−２.９６（ｍ，３Ｈ）、２.８１−２.９１（ｍ，１Ｈ）、２.３４−２.４０（ｍ，３Ｈ）、２.１４−２.２２（ｍ，１Ｈ）、１.６６−１.７４（ｍ，１Ｈ）、０.４７−０.５４（ｍ，１Ｈ）。
化合物３２（エナンチオマー２）：1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ：１１.６４（ｂｒ.ｓ，１Ｈ）、８.９５（ｂｒ.ｓ，１Ｈ）、７.９１−８.１０（ｍ，２Ｈ）、７.７７−７.９０（ｍ，１Ｈ）、７.４８（ｂｒ.ｓ，１Ｈ）、７.１０（ｄ，１Ｈ）、６.９２（ｄ，１Ｈ）、３.２４−３.９３（ｍ，１２Ｈ）、３.１９−３.２４（ｍ，３Ｈ）、２.９１−２.９５（ｍ，３Ｈ）、２.８１−２.９１（ｍ，１Ｈ）、２.３４−２.４０（ｍ，３Ｈ）、２.１３−２.２１（ｍ，１Ｈ）、１.６３−１.７４（ｍ，１Ｈ）、０.４６−０.５４（ｍ，１Ｈ）。
【０１２４】
化合物３３および３４：  ３,６−ジメチル−７−｛２−[(２Ｓ)−２−メチル−４−(２−メチル−５−キノリニル)−１−ピペラジニル]エチル｝−１,１ａ,３,７ｂ−テトラヒドロ−２Ｈ−シクロプロパ[ｃ]キノリン−２−オン・二塩酸塩の分離ジアステレオ異性体
【化２７】
2010504367.tif 000037
２−メチル−５−[(３Ｓ)−３−メチル−１−ピペラジニル]キノリンおよび(３,６−ジメチル−２−オキソ−１ａ,２,３,７ｂ−テトラヒドロ−１Ｈ−シクロプロパ[ｃ]キノリン−７−イル)アセトアルデヒド（中間体２６）から出発して、一般的な還元アミノ化法（実施例１）に従って、標記化合物の遊離塩基をジアステレオ異性体の混合物として製造した；ＭＳ：（ＥＳ）ｍ／ｚ：４５５ [ＭＨ+]。Ｃ28Ｈ34Ｎ4Ｏの理論値：４５４.６。該混合物をセミ分取ＨＰＬＣクロマトグラフィー［ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ ＡＤ−Ｈ、２５×２.１ｃｍ；移動相（ｎ−ヘキサン、モディファイヤー：４５％エタノール）、流速＝１１ｍｌ／分；ＵＶ波長：２２５ｎｍ］により分離して、化合物３３（ジアステレオ異性体１）の遊離塩基（３８ｍｇ）および化合物３４（ジアステレオ異性体２）の遊離塩基（３１ｍｇ）を得た。常法にて遊離塩基を塩酸塩に変換した。ジアステレオ異性体のエナンチオマー純度を分析用ＨＰＬＣ条件［キラルカラム：ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ ＡＤ−Ｈ、２５×０.４６ｃｍ；移動相（ｎ−ヘキサン、モディファイヤー：４５％エタノール）、流速＝０.８ｍｌ／分；ＵＶ波長：ＤＡＤ（２１０〜３４０ｎｍ）；ＣＤ＝２３０ｎｍ（円偏光二色性）］によって証明した。
【０１２５】
化合物３３（ジアステレオ異性体１）：＞９９.５％ ａ／ａ（ＵＶによる）、保持時間１０.１分（化合物３４（ジアステレオ異性体２）の痕跡は検出されなかった）；1Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ：１１.３３（ｂｒ.ｓ，１Ｈ）、８.８９（ｂｒ.ｓ，１Ｈ）、７.９７（ｂｒ.ｓ，２Ｈ）、７.７８（ｂｒ.ｓ，１Ｈ）、７.４２（ｂｒ.ｓ，１Ｈ）、７.００−７.１９（ｍ，１Ｈ）、６.８９−６.９４（ｍ，１Ｈ）、３.１９（ｂｒ.ｓ，３Ｈ）、３.０８−４.１３（ｍ，１１Ｈ）、２.８９（ｂｒ.ｓ，３Ｈ）、２.７５−２.８８（ｍ，１Ｈ）、２.２８−２.４０（ｍ，３Ｈ）、２.０９−２.２４（ｍ，１Ｈ）、１.６１−１.７４（ｍ，１Ｈ）、１.３９−１.５９（ｍ，３Ｈ）、０.４４−０.５９（ｍ，１Ｈ）。
化合物３４（ジアステレオ異性体２）：＞９９.５％ ａ／ａ（ＵＶによる）、保持時間１４.６分（化合物３３（ジアステレオ異性体１）の痕跡は検出されなかった）；1Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ：１１.１３−１１.７９（ｍ，１Ｈ）、８.９２（ｂｒ.ｓ，１Ｈ）、７.９４（ｂｒ.ｓ，２Ｈ）、７.８１（ｂｒ.ｓ，１Ｈ）、７.４４（ｂｒ.ｓ，１Ｈ）、７.０６−７.１４（ｍ，１Ｈ）、６.８８−６.９５（ｍ，１Ｈ）、３.２１（ｓ，３Ｈ）、３.１１−４.１４（ｍ，１１Ｈ）、２.８９（ｂｒ.ｓ，３Ｈ）、２.７８−２.８７（ｍ，１Ｈ）、２.３１−２.４１（ｍ，３Ｈ）、２.１３−２.２２（ｍ，１Ｈ）、１.６１−１.７１（ｍ，１Ｈ）、１.４０−１.６３（ｍ，３Ｈ）、０.４５−０.５６（ｍ，１Ｈ）。
【０１２６】
化合物３５および３６：  ３,６−ジメチル−７−｛２−[(２Ｒ)−２−メチル−４−(２−メチル−５−キノリニル)−１−ピペラジニル]エチル｝−１,１ａ,３,７ｂ−テトラヒドロ−２Ｈ−シクロプロパ[ｃ]キノリン−２−オン・二塩酸塩の分離ジアステレオマー
【化２８】
2010504367.tif 000038
２−メチル−５−[(３Ｒ)−３−メチル−１−ピペラジニル]キノリンおよび(３,６−ジメチル−２−オキソ−１ａ,２,３,７ｂ−テトラヒドロ−１Ｈ−シクロプロパ[ｃ]キノリン−７−イル)アセトアルデヒド（中間体２６）から出発して、一般的な還元アミノ化法（実施例１）に従って、標記化合物の遊離塩基をジアステレオマーの混合物として製造した；ＭＳ：（ＥＳ）ｍ／ｚ：４５５ [ＭＨ+]。Ｃ28Ｈ34Ｎ4Ｏの理論値：４５４.６。該混合物をセミ分取ＨＰＬＣクロマトグラフィー［ＣＨＩＲＡＬＣＥＬ ＯＤ、２５×２.１ｃｍ；移動相（ｎ−ヘキサン、モディファイヤー：３０％イソプロパノール）、流速＝１５ｍｌ／分；ＵＶ波長：２２０ｎｍ］により分離して、化合物３５（ジアステレオ異性体１）の遊離塩基（４０ｍｇ）および化合物３６（ジアステレオ異性体２）の遊離塩基（３７ｍｇ）を得た。常法にて遊離塩基を塩酸塩に変換した。ジアステレオ異性体のエナンチオマー純度を分析用ＨＰＬＣ条件［キラルカラム：ＣＨＩＲＡＬＣＥＬ ＯＤ、２５×０.４６ｃｍ；移動相（ｎ−ヘキサン、モディファイヤー：２５％イソプロパノール）、流速＝０.９ｍｌ／分；ＵＶ波長：ＤＡＤ（２１０〜３４０ｎｍ）；ＣＤ＝２２５ｎｍ（円偏光二色性）］によって証明した。
化合物３５（ジアステレオ異性体１）：９９.８％ ａ／ａ（ＵＶによる）、保持時間１１.８分（化合物３６（ジアステレオ異性体２）は検出されなかった）；1Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ：１１.６２−１１.８８（ｍ，１Ｈ）、８.９９（ｂｒ.ｓ，１Ｈ）、８.００（ｂｒ.ｓ，２Ｈ）、７.８４（ｂｒ.ｓ，１Ｈ）、７.４７（ｂｒ.ｓ，１Ｈ）、７.０５−７.１６（ｍ，１Ｈ）、６.８６−６.９７（ｍ，１Ｈ）、３.２０（ｂｒ.ｓ，３Ｈ）、３.０８−４.１２（ｍ，１１Ｈ）、２.９３（ｂｒ.ｓ，３Ｈ）、２.７９−２.９２（ｍ，１Ｈ）、２.３２−２.４１（ｍ，３Ｈ）、２.１３−２.２４（ｍ，１Ｈ）、１.６２−１.７５（ｍ，１Ｈ）、１.４２−１.６０（ｍ，３Ｈ）、０.４６−０.５９（ｍ，１Ｈ）。
化合物３６（ジアステレオ異性体２）：（９９.８％ ａ／ａ（ＵＶによる）、保持時間１８.３分（化合物３５（ジアステレオ異性体１）は検出されなかった）；1Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ：１１.５３−１２.１３（ｍ，１Ｈ）、９.０５（ｂｒ.ｓ，１Ｈ）、７.９４−８.１１（ｍ，２Ｈ）、７.８７（ｂｒ.ｓ，１Ｈ）、７.４１−７.５８（ｍ，１Ｈ）、７.０５−７.１６（ｍ，１Ｈ）、６.８４−６.９８（ｍ，１Ｈ）、３.１６−３.２４（ｍ，３Ｈ）、３.１４−４.１３（ｍ，１１Ｈ）、２.９５（ｂｒ.ｓ，３Ｈ）、２.８０−２.９２（ｍ，１Ｈ）、２.３１−２.４３（ｍ，３Ｈ）、２.１０−２.２４（ｍ，１Ｈ）、１.６０−１.７２（ｍ，１Ｈ）、１.４２−１.６３（ｍ，３Ｈ）、０.４４−０.５５（ｍ，１Ｈ）。
【０１２７】
中間体１：  (６−メチル−２−オキソ−１,２,３,４−テトラヒドロ−５−キノリニル)アセトアルデヒド
【化２９】
2010504367.tif 000039
四酸化オスミウム（水中４重量％溶液１.４ｍｌ、０.１２５当量）を６−メチル−５−(２−プロペン−１−イル)−３,４−ジヒドロ−２(１Ｈ)−キノリノン（製造について、ＷＯ ２００６０２４５１７、Ｄｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ １２３を参照）（３５０ｍｇ、１.７４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ／水（２：１；３０ｍｌ）中撹拌溶液に添加した。１０分後、過ヨウ素酸ナトリウム（９３０ｍｇ、４.３５ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を２時間撹拌した。ＴＨＦを蒸発させた後、残留物を水と酢酸エチルとの間で分配させた。有機層を合わせ、乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、真空濃縮した。粗生成物をＳＰＥ−Ｓｉカートリッジにより精製し、酢酸エチル／シクロヘキサン（７／３）で溶離して、標記化合物（２１９ｍｇ、６２％）を得た；1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ：９.７（ｔ，１Ｈ）、７.０４（ｄ，１Ｈ）、６.６０（ｄ，１Ｈ）、３.８０（ｄ，２Ｈ）、２.８８（ｔ，２Ｈ）、２.６０（ｔ，２Ｈ）、２.２７（ｓ，３Ｈ）。
【０１２８】
中間体２：  １,６−ジメチル−５−(２−プロペン−１−イル)−３,４−ジヒドロ−２(１Ｈ)−キノリノン
【化３０】
2010504367.tif 000040
６−メチル−５−(２−プロペン−１−イル)−３,４−ジヒドロ−２(１Ｈ)−キノリノン（製造について、ＷＯ ２００６０２４５１７、Ｄｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ １２３を参照）（４００ｍｇ、１.９９ｍｍｏｌ）の０℃での乾燥ＤＭＦ（２ｍｌ）中溶液に水素化ナトリウム（鉱油中６０％分散体８８ｍｇ、２.１９ｍｍｏｌ）およびヨードメタン（０.１３６ｍｌ、２.１９ｍｍｏｌ）を添加した。３時間後、反応混合物をＮＨ4Ｃｌ飽和水溶液でクエンチし、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機抽出物を水およびブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、真空濃縮した。粗生成物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーによって精製し、酢酸エチル／シクロヘキサン（１／４）で溶離して、薄橙色の油状物として標記化合物を得た（３２６ｍｇ、７６％）；ＭＳ；（ＥＳ）ｍ／ｚ：２１６.２ [ＭＨ+]。Ｃ14Ｈ17ＮＯの理論値：２１５.２９。
【０１２９】
中間体３：  (１,６−ジメチル−２−オキソ−１,２,３,４−テトラヒドロ−５−キノリニル)アセトアルデヒド（Ｄ３）
【化３１】
2010504367.tif 000041
１,６−ジメチル−５−(２−プロペン−１−イル)−３,４−ジヒドロ−２(１Ｈ)−キノリノン（中間体２、３２５ｍｇ、１.５１ｍｍｏｌ）から出発して、中間体１の製造と同様の方法で、標記化合物を収率６５％で製造した；1Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ： ９.７４（ｔ，１Ｈ）、７.１６（ｄ，１Ｈ）、６.９１（ｄ，１Ｈ）、３.８５（ｄ，２Ｈ）、３.３５（ｓ，３Ｈ）、２.８０−２.８６（ｍ，２Ｈ）、２.５９−２.６５（ｍ，２Ｈ）、２.３１（ｓ，３Ｈ）。
【０１３０】
中間体４：  ５−[(３Ｒ,５Ｓ)−３,５−ジメチル−１−ピペラジニル]−２−メチルキノリン
【化３２】
2010504367.tif 000042
トリフルオロメタンスルホン酸２−メチル−５−キノリニル（製造について、ＷＯ ２００４０４６１２４、Ｄｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ １を参照；０.５ｇ、１.７２ｍｍｏｌ）の乾燥トルエン（２０ｍｌ）中溶液にシス−２,６−ジメチルピペラジン（０.２ｇ、１.８ｍｍｏｌ）、炭酸セシウム（０.８４ｇ、２.５８ｍｍｏｌ）、酢酸パラジウム(ＩＩ)（０.０２ｇ、０.０８６ｍｍｏｌ）およびＢＩＮＡＰ（０.２１４ｇ、０.３４４ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を９０℃で１８時間加熱し、溶媒を蒸発させ、粗生成物をシリカフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ ９５：５）により精製して、茶色の油状体として標記化合物を得た（０.２ｇ）；1Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ：８.８（ｄ，１Ｈ）、７.８（ｄ，１Ｈ）、７.６５（ｔ，１Ｈ）、７.３２（ｄ，１Ｈ）、７.０５（ｄ，１Ｈ）、３.３８（ｍ，２Ｈ）、３.２５（ｄ，２Ｈ）、２.６０（ｔ，２Ｈ）、２.３１（ｓ，３Ｈ）、１.１（ｓ，６Ｈ）。
【０１３１】
中間体５：  ５−(３,３−ジメチル−１−ピペラジニル)−２−メチルキノリン
【化３３】
2010504367.tif 000043
トリフルオロメタンスルホン酸２−メチル−５−キノリニルおよび２,２−ジメチルピペラジン（商業的に入手可能）から出発して、中間体４と同様の方法で標記化合物を製造した；ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ：２５６ [ＭＨ+]。
【０１３２】
中間体６：  ５−(３,８−ジアザビシクロ[３.２.１]オクタ−３−イル)−２−メチルキノリン
【化３４】
2010504367.tif 000044
中間体４について記載した方法に従って、トリフルオロメタンスルホン酸２−メチル−５−キノリニルを３,８−ジアザビシクロ[３.２.１]オクタン−８−カルボン酸１,１−ジメチルエチルと反応させ、次いで、ＤＣＭ（１：１）中におけるトリフルオロ酢酸での室温にて１時間の処理によりｔ−ブトキシカルボニル基を除去することによって、標記化合物を製造した。溶媒を除去し、ＳＣＸカートリッジを使用して粗生成物を精製し、ＮＨ4ＯＨ／ＭｅＯＨ ９８／２で溶離した；ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ：２５４ [ＭＨ+]。
【０１３３】
中間体７：  ７−フルオロ−２−メチル−５−[(３Ｓ)−３−メチル−１−ピペラジニル]キノリン
【化３５】
2010504367.tif 000045
トリフルオロメタンスルホン酸７−フルオロ−２−メチル−５−キノリニル（製造について、ＷＯ ２００４０４６１２４、Ｄｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ １０１を参照）および(２Ｓ)−２−メチルピペラジンから中間体４の製造と同様の方法で標記化合物を製造した；1Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ：８.３１（ｄ，１Ｈ）、７.２９ −７.４２（ｍ，１Ｈ）、７.２２（ｄ，１Ｈ）、６.７６−６.８８（ｍ，１Ｈ）、３.１２−３,３１（ｍ，５Ｈ）、２.７６−２.９１（ｍ，１Ｈ）、２.６６−２.７６（ｍ，３Ｈ）、２.４２−２.５６（ｍ，１Ｈ）、１.０９−１.２１（ｍ，３Ｈ）。
【０１３４】
中間体８：  ５−ブロモ−６−メチルキノリン１−オキシド
【化３６】
2010504367.tif 000046
３−クロロ過安息香酸（７７％、２４.１ｇ、１３９.４ｍｍｏｌ）を５−ブロモ−６−メチルキノリン（１９.９ｇ、８９.５ｍｍｏｌ、製造について、Chem. Heterocycl. Compd.(Engl.Trans.)1998 vol 24, 8, 892を参照）の０℃でのにＤＣＭ（３３１ｍｌ）中溶液に添加した。反応混合物を室温で２時間撹拌し、次いで、ＮａＨＣＯ3飽和水溶液でクエンチした。反応混合物をＤＣＭで抽出し、合わせた有機抽出物をＮａＨＣＯ3飽和水溶液で再度洗浄し、次いで、乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、真空蒸発させて、標記化合物を固体として得た（２１.３０ｇ、１００％）；ＭＳ；（ＥＳ）ｍ／ｚ：２３８、２４０ [ＭＨ+]。Ｃ10Ｈ8ＢｒＮＯの理論値：２３８.０８；1Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ：８.６７（ｄ，１Ｈ）、８.５４（ｄ，１Ｈ）、８.１９（ｄ，１Ｈ）、７.６５（ｄ，１Ｈ）、７.３８（ｄｄ，１Ｈ）、２.６６（ｓ，３Ｈ）。
【０１３５】
中間体９：  ５−ブロモ−６−メチル−２(１Ｈ)−キノリノン
【化３７】
2010504367.tif 000047
無水トリフルオロ酢酸（４８.５ｍｌ、３４８.６ｍｍｏｌ）を５−ブロモ−６−メチルキノリン１−オキシド（中間体８）（１６.６ｇ、６９.７ｍｍｏｌ）の０℃でのＤＭＦ（４６ｍｌ）中溶液に添加した。反応混合物を室温で一夜撹拌し、次いで、ＮａＨＣＯ3飽和水溶液（６００ｍｌ）中に注いだ。得られた沈殿物を濾過し、ジエチルエーテルを用いて粉砕して、標記化合物を得た（１３.５ｇ、８１％）；ＭＳ：（ＥＳ）ｍ／ｚ：２３８、２４０ [ＭＨ+]。Ｃ10Ｈ8ＢｒＮＯの理論値：２３８.０８；1Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ：１１.９２（ｂｒ.ｓ.，１Ｈ）、８.０８（ｄ，１Ｈ）、７.４７（ｄ，１Ｈ）、７.２４（ｄ，１Ｈ）、６.６０（ｄ，１Ｈ）、２.４２（ｓ，３Ｈ）。
【０１３６】
中間体１０：  ５−ブロモ−１,６−ジメチル−２(１Ｈ)−キノリノン
【化３８】
2010504367.tif 000048
５−ブロモ−６−メチル−２(１Ｈ)−キノリノン（中間体９）（７.０ｇ、２９.４ｍｍｏｌ）の０℃での乾燥ＤＭＦ（１００ｍｌ）中溶液に水素化ナトリウム（鉱油中６０％分散体１.６５ｇ、４１.２ｍｍｏｌ）およびヨードメタン（２.２ｍｌ、３５.３ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で１時間撹拌し、次いで、水でクエンチし、ＤＣＭで抽出した。合わせた有機物を乾燥し(Ｎａ2ＳＯ4）、真空濃縮した。ジエチルエーテルを用いて粗生成物を粉砕して、標記化合物を得た（４.９８ｇ、６７％）；ＭＳ；（ＥＳ）ｍ／ｚ：２５２、２５４ [ＭＨ+]。Ｃ11Ｈ10ＢｒＮＯの理論値：２５２.１１。
【０１３７】
中間体１１：  １,６−ジメチル−５−(２−プロペン−１−イル)−２(１Ｈ)−キノリノン
【化３９】
2010504367.tif 000049
５−ブロモ−１,６−ジメチル−２(１Ｈ)−キノリノン（中間体１０）（４.９８ｇ、１９.７６ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（１００ｍｌ）中溶液にアリルトリブチルスタンナン（７.８５ｇ、２３.７ｍｍｏｌ）、パラジウム(０)テトラキストリフェニルホスフィン（２.２８ｇ、１.９８ｍｍｏｌ）および塩化リチウム（０.０１６ｇ、０.４ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を１００℃で１.５時間加熱し、次いで、水で希釈し、ＤＣＭで抽出した。有機層を合わせ、乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、真空蒸発させた。粗物質をシリカフラッシュクロマトグラフィー（酢酸エチル／シクロヘキサン（７：３））により精製して、標記化合物を得た（３.９５ｇ、９４％）；ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ：２１４.１７ [ＭＨ+]；Ｃ14Ｈ15ＮＯの理論値：２１３.２８。
【０１３８】
中間体１２：  (１,６−ジメチル−２−オキソ−１,２−ジヒドロ−５−キノリニル)アセトアルデヒド
【化４０】
2010504367.tif 000050
１,６−ジメチル−５−(２−プロペン−１−イル)−２(１Ｈ)−キノリノン（中間体１１）（３.９５ｇ、１８.５１ｍｍｏｌ）から出発して、中間体１の製造と同様の方法で、標記化合物を収率６４％（２.５５ｇ）で製造した；1Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ：９.７７（ｔ，１Ｈ）、７.７９（ｄ，１Ｈ）、７.４６（ｄ，１Ｈ）、７.２８（ｄ，１Ｈ）、６.７６（ｄ，１Ｈ）、４.０８（ｄ，２Ｈ）、３.７４（ｓ，３Ｈ）、２.４２（ｓ，３Ｈ）。
【０１３９】
中間体１３：  ５−((Ｅ／Ｚ)−２−｛[２−(ジメチルアミノ)エチル]オキシ｝エテニル)−６−メチル−２(１Ｈ)−キノリノン
【化４１】
2010504367.tif 000051
５−ブロモ−６−メチル−２(１Ｈ)−キノリノン（中間体９）（１.５ｇ、６.３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５０ｍｌ）中溶液に酢酸パラジウム(ＩＩ)（５６６ｍｇ、２.５２ｍｍｏｌ）、トリフェニルホスフィン（６６１ｍｇ、２.５２ｍｍｏｌ）、２−(エテニルオキシ)−Ｎ,Ｎ−ジメチルエタンアミン（５.８ｇ、５０.４ｍｍｏｌ）およびＴＥＡ（７.０４ｍｌ、５０.４ｍｍｏｌ）を添加し、該混合物を１００℃で加熱した。２時間後、さらにに、酢酸パラジウム(ＩＩ)（２８３ｍｇ、１.２６ｍｍｏｌ）、トリフェニルホスフィン（３３１ｍｇ、１.２６ｍｍｏｌ）、２−(エテニルオキシ)−Ｎ,Ｎ−ジメチルエタンアミン（２.９ｇ、２５.２ｍｍｏｌ）およびＴＥＡ（３.５２ｍｌ、２５.２ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を１００℃で一夜撹拌した。該反応はまだ完了していなかったので、さらに酢酸パラジウム(ＩＩ)（１４２ｍｇ、０.６３ｍｍｏｌ）、トリフェニルホスフィン（１６６ｍｇ、０.６３ｍｍｏｌ）、２−(エテニルオキシ)−Ｎ,Ｎ−ジメチルエタンアミン（１.４５ｇ、１２.６ｍｍｏｌ）およびＴＥＡ（１.７６ｍｌ、１２.６２ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を１００℃でさらに６時間撹拌した。反応物を冷却し、水でクエンチし、ＤＣＭで抽出した。合わせた有機層を乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、真空濃縮した。粗生成物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、メタノールの酢酸エチル中勾配液（５％から１０％まで）で溶離して、標記化合物を得た（６８５ｍｇ、４０％）；（ＥＳ）ｍ／ｚ：２７３.１ [ＭＨ+]；Ｃ16Ｈ20Ｎ2Ｏ2の理論値：２７２.３５。
【０１４０】
中間体１４：  (６−メチル−２−オキソ−１,２−ジヒドロ−５−キノリニル)アセトアルデヒド
【化４２】
2010504367.tif 000052
５−((Ｅ／Ｚ)−２−｛[２−(ジメチルアミノ)エチル]オキシ｝エテニル)−６−メチル−２(１Ｈ)−キノリノン（中間体１３）（６８５ｍｇ、２.５２ｍｍｏｌ）のＤＣＭ／ペンタン（５０ｍｌ／１２.５ｍｌ）中溶液にＨ2ＳＯ4（９６％）／Ｈ2Ｏ（１２.５ｍｌ／５０ｍｌ）の混合物を添加した。反応混合物を室温で４時間撹拌した後、ＮａＨＣＯ3（飽和溶液）およびＫ2ＣＯ3で中和した。混合物をＤＣＭで抽出し、合わせた有機層を乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、真空濃縮して、標記化合物（４４２ｍｇ）を得、これをさらなる精製を行わずに次工程で使用した；1Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ：１２.３（ｂｒ.ｓ，１Ｈ）９.７７（ｓ，１Ｈ）、７.９５（ｄ，１Ｈ）、７.４３（ｄ，１Ｈ）、７.３５（ｄ，１Ｈ）、６.７７（ｄ，１Ｈ）、４.０８（ｄ，２Ｈ）、２.４３（ｓ，３Ｈ）。
【０１４１】
中間体１５：  Ｎ−[４−クロロ−３−(メチルオキシ)フェニル]−２,２−ジメチルプロパンアミド
【化４３】
2010504367.tif 000053
４−クロロ−３−(メチルオキシ)アニリン（商業的に入手可能）（９.０ｇ、５７ｍｍｏｌ）およびＴＥＡ（８.７４ｍｌ、６３ｍｍｏｌ）の氷浴温度でのＤＣＭ（６０ｍｌ）中溶液に塩化ピバロイル（７.０２ｍｌ、５７ｍｍｏｌ）を２０分間にわたって添加した。温度を室温に加温し、２.５時間後、反応混合物を水でクエンチした。該混合物をＤＣＭで抽出し、有機層を合わせ、乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、真空濃縮した。ジエチルエーテルを用いて粗固体を粉砕して、標記化合物を得た（１１.０ｇ、８０％）；（ＥＳ）ｍ／ｚ：２４２.１ [ＭＨ+]；Ｃ12Ｈ16ＣｌＮＯ2の理論値：２４１.７２。
【０１４２】
中間体１６：  Ｎ−[４−クロロ−２−ホルミル−３−(メチルオキシ)フェニル]−２,２−ジメチルプロパンアミド
【化４４】
2010504367.tif 000054
ブチルリチウム（ＴＨＦ中１.６Ｍ溶液７１ｍｌ、１１４ｍｍｏｌ）をＮ−[４−クロロ−３−(メチルオキシ)フェニル]−２,２−ジメチルプロパンアミド（中間体１５）（１１.０ｇ、４５.６ｍｍｏｌ）の０℃でのＴＨＦ（５０ｍｌ）中溶液にゆっくりと添加した。該反応物を０℃で２時間撹拌し、次いで、ＤＭＦ（８.８ｍｌ、１１４ｍｍｏｌ）を添加した。温度を室温に上昇させ、撹拌をさらに１６時間続けた。反応物をＮＨ4Ｃｌ飽和水溶液でクエンチし、酢酸エチルで抽出した。有機層を合わせ、乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、真空濃縮した。この粗生成物をさらなる精製を行わずに次工程で使用した；1Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ：１１.６（ｂｒ.ｓ，１Ｈ）、１０.３５（ｓ，１Ｈ）、８.５０（ｄ，１Ｈ）、７.５２（ｄ，１Ｈ）、３.９５（ｓ，３Ｈ）、１.３０（ｓ，９Ｈ）。
【０１４３】
中間体１７：  (２Ｅ／Ｚ)−３−[３−クロロ−６−[(２,２−ジメチルプロパノイル)アミノ]−２−(メチルオキシ)フェニル]−２−プロペン酸エチル
【化４５】
2010504367.tif 000055
(カルボエトキシメチレン)トリフェニル−ホスホラン（商業的に入手可能）（１７.７ｇ、５０.９ｍｍｏｌ）をＮ−[４−クロロ−２−ホルミル−３−(メチルオキシ)フェニル]−２,２−ジメチルプロパンアミド（中間体１６）（１３.７ｇ、５０.９ｍｍｏｌ）の室温でのトルエン（６０ｍｌ）中溶液に添加した。反応混合物を５時間撹拌し、溶媒を減圧除去し、粗生成物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、酢酸エチル／シクロヘキサン（３／７）で溶離して、標記化合物（１３.９ｇ、９０％）を得た；（ＥＳ）ｍ／ｚ：３４０.１ [ＭＨ+]；Ｃ17Ｈ22ＣｌＮＯ4の理論値：３３９.８２。
【０１４４】
中間体１８：  ６−クロロ−５−(メチルオキシ)−２(１Ｈ)−キノリノン
【化４６】
2010504367.tif 000056
(２Ｅ／Ｚ)−３−[３−クロロ−６−[(２,２−ジメチルプロパノイル)アミノ]−２−(メチルオキシ)フェニル]−２−プロペン酸エチル（中間体１７）（１１.３ｇ、３３.３ｍｍｏｌ）のエタノール（５０ｍｌ）中溶液に塩酸水溶液（Ｈ2Ｏ中１０％溶液２１０ｍｌ）を添加し、該混合物を還流させながら２０時間加熱した。エタノールを減圧除去し、標記生成物を濾過し、ジエチルエーテルで洗浄した（４.４２ｇ、６３％）；（ＥＳ）ｍ／ｚ：２１０.１ [ＭＨ+]；Ｃ10Ｈ8ＣｌＮＯ2の理論値：２０９.６３。
【０１４５】
中間体１９：  ６−クロロ−５−ヒドロキシ−２(１Ｈ)−キノリノン
【化４７】
2010504367.tif 000057
臭化水素（Ｈ2Ｏ中４８％、６０ｍｌ）を６−クロロ−５−(メチルオキシ)−２(１Ｈ)−キノリノン（中間体１８）（２.０ｇ、９.６ｍｍｏｌ）にゆっくりと添加し、該混合物を１３０℃で２.５時間加熱した。溶媒を減圧除去して、固体を得、これを水およびジエチルエーテルで洗浄して、標記化合物を得た（２.１９ｇ、１００％）；（ＥＳ）ｍ／ｚ：１９６.０ [ＭＨ+]；Ｃ9Ｈ6ＣｌＮＯ2の理論値：１９５.６０。
【０１４６】
中間体２０：  トリフルオロメタンスルホン酸６−クロロ−２−オキソ−１,２−ジヒドロ−５−キノリニル
【化４８】
2010504367.tif 000058
１,１,１−トリフルオロ−Ｎ−フェニル−Ｎ−[(トリフルオロメチル)スルホニル]メタンスルホンアミド（５.２１ｇ、１４.６ｍｍｏｌ）を６−クロロ−５−ヒドロキシ−２(１Ｈ)−キノリノン（中間体１９）（２.１９ｇ、１１.２ｍｍｏｌ）の０℃でのＣＨ3ＣＮ（６０ｍｌ）およびトリエチルアミン（４.７ｍｌ、３３.７ｍｍｏｌ）中撹拌懸濁液に滴下した。反応混合物を室温で７時間撹拌し、次いで、水でクエンチし、ＤＣＭで抽出した。合わせた有機層を乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、真空濃縮した。粗生成物を、ジエチルエーテルを用いた粉砕により精製して、標記化合物を得た（２.６９ｇ、７３％）；（ＥＳ）ｍ／ｚ：３２８.２ [ＭＨ+]；Ｃ10Ｈ5ＣｌＦ3ＮＯ4Ｓの理論値：３２７.６７。
【０１４７】
中間体２１：  ６−クロロ−５−(２−プロペン−１−イル)−２(１Ｈ)−キノリノン
【化４９】
2010504367.tif 000059
トリフルオロメタンスルホン酸６−クロロ−２−オキソ−１,２−ジヒドロ−５−キノリニル（中間体２０）（２.００ｇ、６.１２ｍｍｏｌ）から出発して、中間体１１の製造と同様の方法で、標記化合物を収率７１％で製造した（９５２ｍｇ）；（ＥＳ）ｍ／ｚ：２２０.１ [ＭＨ+]；Ｃ12Ｈ10ＣｌＮＯの理論値：２１９.６７。
【０１４８】
中間体２２：  ６−クロロ−１−メチル−５−(２−プロペン−１−イル)−２(１Ｈ)−キノリノン
【化５０】
2010504367.tif 000060
６−クロロ−５−(２−プロペン−１−イル)−２(１Ｈ)−キノリノン（中間体２１）（８３７ｍｇ、３.８２ｍｍｏｌ）から出発して、中間体２の製造と同様の方法で、標記化合物を収率５３％で製造した（４６９ｍｇ）；（ＥＳ）ｍ／ｚ：２３４.１ [ＭＨ+]；Ｃ13Ｈ12ＣｌＮＯの理論値：２３３.７０。
【０１４９】
中間体２３：  (６−クロロ−１−メチル−２−オキソ−１,２−ジヒドロ−５−キノリニル)アセトアルデヒド
【化５１】
2010504367.tif 000061
６−クロロ−１−メチル−５−(２−プロペン−１−イル)−２(１Ｈ)−キノリノン（中間体２２）（４６９ｍｇ、２.０１ｍｍｏｌ）から出発して、中間体１の製造と同様の方法で、標記化合物を収率５２％で製造した（２２０ｍｇ）；1Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ：９.８（ｔ，１Ｈ）、７.７１（ｄ，１Ｈ）、７.６４（ｄ，１Ｈ）、７.３４（ｄ，１Ｈ）、６.８０（ｄ，１Ｈ）、４.２８（ｄ，２Ｈ）、３.７５（ｓ，３Ｈ）。
【０１５０】
中間体２４：  (±)−７−ブロモ−３,６−ジメチル−１,１ａ,３,７ｂ−テトラヒドロ−２Ｈ−シクロプロパ[ｃ]キノリン−２−オン
【化５２】
2010504367.tif 000062
水素化ナトリウム（鉱油中６０％分散体３６８ｍｇ、６.７ｍｍｏｌ）をヨウ化トリメチルスルホニウム（１.４３ｇ、６.５ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（４ｍｌ）中溶液に添加し、該混合物を室温で１時間撹拌した。反応温度を０℃に冷却し、５−ブロモ−１,６−ジメチル−２(１Ｈ)−キノリノン（中間体１０）のＤＭＳＯ（２ｍｌ）中溶液を滴下した。次いで、得られた混合物を９０℃で２日間加熱した。反応混合物を氷上に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機物を乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、真空濃縮した。粗生成物をＳＰＥカートリッジ（シリカゲル、２０ｇ）により精製し、シクロヘキサン／酢酸エチル（３：１）で溶離して、標記化合物を得た（７７ｍｇ、３１％）；ＭＳ：（ＥＳ）ｍ／ｚ：２６６、２６８ [ＭＨ+]。Ｃ12Ｈ12ＢｒＮＯの理論値：２６６.１４。
【０１５１】
中間体２５：  (±)−３,６−ジメチル−７−(２−プロペン−１−イル)−１,１ａ,３,７ｂ−テトラヒドロ−２Ｈ−シクロプロパ[ｃ]キノリン−２−オン
【化５３】
2010504367.tif 000063
７−ブロモ−３,６−ジメチル−１,１ａ,３,７ｂ−テトラヒドロ−２Ｈ−シクロプロパ[ｃ]キノリン−２−オン（中間体２４、４９８ｍｇ、１.９ｍｍｏｌ）から出発して、中間体１１の製造と同様の方法で、標記化合物を収率９４％で製造した；ＭＳ；（ＥＳ）ｍ／ｚ：２２８.１ [ＭＨ+]。Ｃ15Ｈ17ＮＯの理論値：２２７.１４。
【０１５２】
中間体２６：  (±)−(３,６−ジメチル−２−オキソ−１ａ,２,３,７ｂ−テトラヒドロ−１Ｈ−シクロプロパ[ｃ]キノリン−７−イル)アセトアルデヒド
【化５４】
2010504367.tif 000064
３,６−ジメチル−７−(２−プロペン−１−イル)−１,１ａ,３,７ｂ−テトラヒドロ−２Ｈ−シクロプロパ[ｃ]キノリン−２−オン（中間体２５、３９８ｍｇ、１.７５ｍｍｏｌ）から出発して、中間体１の製造と同様の方法で、標記化合物を収率５２％で製造した；1Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ：９.７９（ｓ，１Ｈ）、７.１３（ｄ，１Ｈ）、６.８６（ｄ，１Ｈ）、３.８７−４.０６（ｍ，２Ｈ）、３.３５（ｓ，３Ｈ）、２.３７−２.５０（ｍ，１Ｈ）、２.３２（ｓ，３Ｈ）、２.２２−２.３３（ｍ，１Ｈ）、１.５７−１.６６（ｍ，１Ｈ）、０.５３−０.６１（ｍ，１Ｈ）。
【０１５３】
生物学的アッセイ
ａ）機能的能力  −  一次スクリーン
機能的能力は、以下のＧＴＰγＳ結合プロトコールによって決定され得る。該研究で使用される細胞はＣＨＯ細胞およびヒト胚腎臓（ＨＥＫ２９３）である。以下のとおり、ヒト受容体をコードするＤＮＡを細胞にトランスフェクトした：ＨＥＫ２９３  ５−ＨＴ1A；ＣＨＯ  ５−ＨＴ1B；およびＣＨＯ  ５−ＨＴ1D。試験化合物を最初に１００％ジメチルスルホキシドに溶解して１０ｍＭの濃度にした。試験化合物の１００％ジメチルスルホキシド中段階希釈を、３８４ウェルアッセイプレート中にてＢｉｏｍｅｋ ＦＸを使用して行って、アッセイにおける試験化合物の最終最高濃度を３μＭとする。固体白色３８４ウェルアッセイプレート（Costar）に１.０％総アッセイ容量（ＴＡＶ）で試験化合物を添加した。２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ ｐＨ ７.４、１００ｍＭ ＮａＣｌ、３ｍＭ ＭｇＣｌ2および１０μＭ ＧＤＰ中にて５０％ＴＡＶの前結合した（室温で９０分間）膜（５ｕｇ／ウェル）、Ｗｈｅａｔｇｅｒｍ Ａｇｇｌｕｔｉｎｉｎ Ｐｏｌｙｓｔｙｒｅｎｅ Ｓｃｉｎｔｉｌｌａｔｉｏｎ Ｐｒｏｘｉｍｉｔｙ Ａｓｓａｙ ビーズ（ＲＰＮＱ０２６０ Amersham International）（０.２５ｍｇ／ウェル）を添加した。３回目の投与は、アッセイバッファー中で調製した、２０％ＴＡＶのバッファー、アゴニストフォーマット、またはＥＣ80最終アッセイ濃度（ＦＡＣ）のアゴニスト、５ＨＴアンタゴニストフォーマットの添加であった。該アッセイは、２９％ＴＡＶのＧＴＰγＳ ０.３８ｎＭ ＦＡＣの添加によって開始した。全ての添加後、アッセイプレートを室温で２〜３時間インキュベートした。アッセイプレートをＶｉｅｗｌｕｘ、６１３／５５フィルターで５分間カウントした。最後の添加の後、２〜６時間、アッセイプレートを読み取った。
アッセイａ）を使用した場合、全ての支持化合物１〜３６から得られた５−ＨＴ1Aに対するｆｐＫｉは７.７よりも大きかった。
アッセイａ）を使用した場合、支持化合物１〜１１、１３〜１６、および２０〜３５から得られた５−ＨＴ1Aに対するｆｐＫｉは８よりも大きく、５−ＨＴ1Bに対するｆｐＫｉは７以下であった。
アッセイａ）を使用した場合、支持化合物１、２、６〜１１、１３〜１５、１７〜２０、２６〜２９、３１、３２および３４から得られた５−ＨＴ1Aに対するｆｐＫｉは８.５以上であり、５−ＨＴ1Bに対するｆｐＫｉは７以下であった。
【０１５４】
ｂ）受容体親和性
本発明の化合物の５−ＨＴ1A受容体、５−ＨＴ1B受容体および５−ＨＴ1D受容体に対する親和性は、以下のアッセイによって決定され得る。
Ｔｒｉｓバッファー中にて５−ＨＴ1A受容体を発現するチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞（４×１０7細胞／ｍｌ）をホモジナイズし、１ｍｌのアリコートに分けて貯蔵した。Ｔｒｉｓバッファー中にて５−ＨＴ1B受容体を発現するＣＨＯ細胞（４×１０7細胞／ｍｌ）をホモジナイズし、１.５ｍｌのアリコートに分けて貯蔵した。Ｔｒｉｓバッファー中にて５−ＨＴ1D受容体を発現するＣＨＯ細胞（１×１０8／ｍｌ）をホモジナイズし、１ｍｌのアリコートに分けて貯蔵した。結合アッセイは、総容量５００μｌで行われる。各試験化合物について０.３ｍＭ〜０.３ｎＭ（最終濃度の１００倍の濃度）の濃度範囲の７つの溶液を調製した。１ウェルにつき試験化合物を含有する溶液５μｌを分配し、所望の最終のアッセイ濃度の５倍の濃度で、すなわち、５−ＨＴ1B／1D受容体についてはＴｒｉｓ Ｍｇ ＨＣｌ バッファー（ｐＨ ７.７）中にて[3Ｈ]−５−ＨＴ １５ｎＭ（最終アッセイ濃度：３ｎＭ）、そして、５−ＨＴ1A受容体については１５０μＭ ＧＰＰ(ＮＨ)ｐ（最終アッセイ濃度：３０μＭ）を含有するＴｒｉｓ Ｍｇ ＨＣｌバッファー（ｐＨ ７.７）中にて[3Ｈ]ＷＡＹ１００６３５ ２.５ｎＭ（最終濃度：０.５ｎＭ）放射性リガンド１００μｌを添加した。Ｔｒｉｓ Ｍｇ ＨＣｌバッファー（ｐＨ ７.７）中の細胞膜懸濁液４００μｌ／ウェルを添加して、総容量５０５μｌを調製した。３７℃で４５分間インキュベートした。５−ＨＴ1B／1D受容体については０.０１ｍＭ ５−ＨＴを使用し、そして、５−ＨＴ1A受容体については０.０１ｍＭ ＷＡＹ１００６３５を使用して非特異的結合を決定した。Ｐａｃｋａｒｄ Ｆｉｌｔｅｒｍａｔｅを用いる急速濾過によりインキュベーションを終わらせた。Ｔｏｐｃｏｕｎｔシンチレーションカウンティングを用いて放射能を測定した。反復性最小二乗カーブフィッティングプログラムによって得られたＩＣ50からｐＫｉ値を計算した。
【０１５５】
ｃ）ヒトＳＥＲＴについての濾過[3Ｈ]シタロプラム結合アッセイ
セロトニン輸送体（ＳＥＲＴ）の再取り込み部位を結合する化合物の親和性は、ヒトＳＥＲＴ（ｈＳＥＲＴ／ＬＬＣＰＫ）をトランスフェクトした組換え型ブタ腎臓上皮細胞において行われる[3Ｈ]シタロプラム結合アッセイを用いて評価され得る。５００ｃｍ2のペトリ皿中にて細胞を増殖させ、８０％の集密度の膜調製物を使用した。５ｍＭ ＥＤＴＡを含有するリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）中で細胞を収集し、４℃で８分間、９００ｇにて遠心分離した。３０〜５０容量のアッセイバッファー（５０ｍＭ Ｔｒｉｓ、１２０ｍＭ ＮａＣｌ、５ｍＭ ＫＣｌ、１０μＭパルギリン、０.１％アスコルベート（ｐＨ＝７.７)）中にてペレットをホモジナイズし、４℃で２０分間、４８０００ｇにて遠心分離した。同容量でペレットを再懸濁し、３７℃で２０分間インキュベートした後、上記のように遠心分離し、最後に、冷アッセイバッファー中タンパク質約０.２ｍｇ／ｍｌのアリコートに分けた。[3Ｈ]シタロプラム結合アッセイについては、試験化合物（ＤＭＳＯ原液で１００倍）（総結合を規定するため）または最終濃度１０μＭのＤＭＳＯ中フルオキセチン（非特異的結合を規定するため）４μl、アッセイバッファー中０.２５ｎＭの最終濃度の[3Ｈ]シタロプラム２００μｌ、およびタンパク質２μｇ／ウェルの濃度のアッセイバッファーで希釈した膜（最終アッセイ容量４００μｌ）２００μｌを添加した。膜を添加して、反応を開始し、室温で２時間インキュベートした。Ｐａｃｋａｒｄセルハーベスターを用いて０.５％ポリエチレンイミン（ＰＥＩ）中に前浸漬したＧＦ／Ｂ ９６−フィルタープレートで急速濾過することによって反応を停止させた。９６−フィルタープレートを１ｍｌ／ウェルの冷０.９％ＮaＣｌ溶液で３回洗浄し、Ｐａｃｋａｒｄ ＴｏｐＣｏｕｎｔで放射能をカウントした。
【０１５６】
ｄ）ヒトＳＥＲＴについてのシンチレーション近接アッセイ（ＳＰＡ）
ヒトＳＥＲＴ輸送体に対する化合物親和性はまた、組換え型ヒトＳＥＲＴ膜中にて[3Ｈ]シタロプラムＳＰＡ結合アッセイを使用することによって評価され得る。Ｂａｃｍａｍ形質導入２９３−Ｆ細胞のホモジナイズ、次いで、低速での遠心分離、および５０ｍＭ ＴＲＩＳ、１３０ｍＭ ＮａＣｌバッファー（膜を−８０℃で数ヶ月間貯蔵することができる）中における再懸濁によって膜を調製した。ＳＰＡ結合アッセイは、３８４−ウェルプレートフォーマット（Ｇｒｅｉｎｅｒ ７８１０９５）中にて行われる。簡単に言えば、ＤＭＳＯ原液中の試験化合物０.５μＬは、アッセイバッファー（２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１４５ｍＭ ＮａＣｌ、５ｍＭ ＫＣｌ、ｐＨ ７.３）中に２ｍｇ／ｍＬ ＳＰＡビーズ（Amersham ＲＰＮＱ０００１）、４μｇ／ｍＬ ｈＳＥＲＴ Ｂａｃｍａｍ膜、０.０１％プルロニックＦ−１２７、２.５ｎＭ [3Ｈ]シタロプラムを含有するＳＰＡ混合物５０μＬによって添加する。インキュベーションは、室温で少なくとも２時間行う。カウントは、安定しており、Ｔｒｉｌｕｘ装置を用いて３日目まで読み取ることができる。結合放射能だけがビーズを励起することができる（ＳＰＡ技術）。
【国際調査報告】
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2010504367.tif 000079
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