(57)【要約】  本開示は、４−ＭＭＰＰＯ［２−メチル−１−（４−メチルフェニル）−プロペノン］の濃度が極めて低いトルペリゾンを生じさせる方法ばかりでなく関連した組成物に向けたものである。本発明は、更に、被験体にトルペリゾンを用いた治療をとりわけ前記被験体がさらされる４−ＭＭＰＰＯの度合を許容される度合に制限する条件下で受けさせる方法にも関する。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
２−メチル−１−（４−メチルフェニル）−プロパノン（４−ＭＭＰＰＯ）の含有量が約１０ｐｐｍ未満のトルペリゾン。
【請求項２】
４−ＭＭＰＰＯの含有量が約７ｐｐｍ未満である請求項１記載のトルペリゾン。
【請求項３】
４−ＭＭＰＰＯの含有量が約３ｐｐｍ未満である請求項１または２記載のトルペリゾン。
【請求項４】
請求項１−３のいずれか１項記載のトルペリゾンおよび１種以上の製薬学的に許容される賦形剤を含有して成る製薬学的組成物。
【請求項５】
精製されたトルペリゾン組成物を生じさせる方法であって、
（ｉ）４−ＭＭＰＰＯを１０ｐｐｍ以上の初期濃度で含有しかつ場合により追加的不純物も含有して成るトルペリゾンを準備し、そして
（ｉｉ）前記トルペリゾンを精製することで４−ＭＭＰＰＯの濃度が約１０ｐｐｍ未満の精製されたトルペリゾンを生じさせる、
ことを含んで成る方法。
【請求項６】
前記精製が４−ＭＭＰＰＯの濃度を初期濃度に比べて少なくとも５倍低くするに有効である請求項５記載の方法。
【請求項７】
前記精製されたトルペリゾンの４−ＭＭＰＰＯ濃度が約７ｐｐｍ未満である請求項５または請求項６記載の方法。
【請求項８】
更に前記準備段階の前に４−ＭＭＰＰＯが前記トルペリゾンの中に混入物として存在することを同定することも含んで成る請求項５記載の方法。
【請求項９】
更に前記同定に加えて前記トルペリゾンの中に入っている４−ＭＭＰＰＯの初期濃度を測定することも含んで成る請求項８記載の方法。
【請求項１０】
前記精製に単一の溶媒もしくは溶媒の組み合わせを用いた再結晶化を含める請求項５−９のいずれか１項記載の方法。
【請求項１１】
前記再結晶化に単一もしくは複数いずれかの再結晶化段階を含める請求項１０記載の方法。
【請求項１２】
前記再結晶化を混合有機溶媒系中で実施する請求項１１記載の方法。
【請求項１３】
前記溶媒系に低級ケトンおよび低級アルコールを含める請求項１２記載の方法。
【請求項１４】
前記溶媒系にメチルエチルケトンおよびイソプロパノールを含める請求項１３記載の方法。
【請求項１５】
更に前記再結晶化の結果として精製されたトルペリゾンを集めることも含んで成る請求項１０−１４のいずれか１項記載の方法。
【請求項１６】
前記再結晶化に
トルペリゾンを酸性溶媒の中に場合により加熱しながら溶解させることでトルペリゾンの
溶液を生じさせ、そして
前記溶液からトルペリゾンの結晶を生じさせる、
ことを含める請求項１０−１５のいずれか１項記載の方法。
【請求項１７】
前記精製に乾燥段階を含める請求項５記載の方法。
【請求項１８】
トルペリゾンを生じさせる合成方法であって、４−ＭＭＰＰＯの生成が最小限になるように酸を触媒量で添加することを含んで成る改良が成された方法。
【請求項１９】
前記酸が無水塩化水素ガスである請求項１８記載の方法。
【請求項２０】
請求項５−１７のいずれか１項記載の方法で製造された精製トルペリゾン。
【請求項２１】
トルペリゾンを投与する必要のある被験体にそれを投与する方法であって、改良が２−メチル−１−（４−メチルフェニル）−プロパノン（４−ＭＭＰＰＯ）の含有量が約１０ｐｐｍ未満のトルペリゾン組成物を投与することを含んでなる、上記方法。
【請求項２２】
前記投与の結果として４−ＭＭＰＰＯの存在に関連して前記組成物が前記被験体に対して示す遺伝毒性効果が最小限になる請求項２１記載の方法。
【請求項２３】
適切な容器の中に乾燥剤と一緒に包装されている請求項１−３のいずれか１項記載のトルペリゾン。
【請求項２４】
トルペリゾン含有組成物に入っている４−ＭＭＰＰＯの濃度を検出する方法であって、（ａ）トルペリゾンおよび場合により１種以上の賦形剤を含有して成る組成物を準備し、（ｂ）追加的４−ＭＭＰＰＯの生成が防止されるように酸性にしておいたアルコールに前記組成物を溶解させることでトルペリゾンの酸性溶液を生じさせ、
（ｃ）前記１種以上の賦形剤を存在させた場合には有機溶媒を用いた抽出で前記トルペリゾンを前記賦形剤から分離することでトルペリゾンの酸性抽出液を生じさせ、
（ｄ）前記（ｂ）または（ｃ）の溶液に４−ＭＭＰＰＯの量を計るための内部標準を添加することでサンプル溶液を生じさせ、そして
（ｅ）前記サンプル溶液を液クロ／質量分析にかけて前記液クロで用いる少なくとも１種の溶離剤を酸性にして前記サンプルに入っている４−ＭＭＰＰＯの濃度を検出することで前記サンプル溶液中の５００ｐｐｍ未満であり得る４−ＭＭＰＰＯの量を分析する、
ことを含んで成る方法。
【請求項２５】
前記酸性アルコールが塩酸、臭化水素酸、トリフルオロ酢酸およびメタンスルホン酸から選択した酸で酸性にしたアルコールである請求項２４記載の方法。
【請求項２６】
前記酸性アルコールが塩酸のメタノール溶液である請求項２５記載の方法。
【請求項２７】
前記（ｃ）における有機溶媒がエーテルまたは親油性エステルである請求項２４−２６のいずれか１項記載の方法。
【請求項２８】
前記溶媒がジイソプロピルエーテルである請求項２７記載の方法。
【請求項２９】
前記内部標準が重水素化４−ＭＭＰＰＯである請求項２４−２８のいずれか１項記載の方法。
【請求項３０】
請求項１−３のいずれか１項記載の組成物の使用であって、前記組成物を投与した被験
体における４−ＭＭＰＰＯの存在に関連した遺伝毒性効果を最小限にするための使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願に対する相互参照
本出願は、２００７年４月２６日付けで出願したオーストリア特許出願受取証番号Ｗ５−２３４０００ＰＡＴおよび２００８年１月２５日付けで出願した米国仮特許出願番号６１／０２３，７９９（これらの内容は引用することによって全体が本明細書に組み入れられる）の優先権の利点を請求するものである。
【０００２】
本開示は、一般に、４−ＭＭＰＰＯ（２−メチル−１−（４−メチルフェニル）−１−プロペノン）の濃度が極めて低いトルペリゾン、即ち２−メチル−１−（４−メチルフェニル）−３−（ピペリジニル）−１−プロパノンおよびこれの製造方法ばかりでなくこれに関連した組成物に関する。本発明は、更に、被験体にトルペリゾンを用いた治療をとりわけ前記被験体が４−ＭＭＰＰＯにさらされる度合を許容される度合に制限する条件下で受けさせる方法にも関する。
【背景技術】
【０００３】
トルペリゾンは、痙性および筋けいれんの症状の治療で用いられる中枢作用性筋弛緩薬である（非特許文献１）。トルペリゾンはまた月経困難症、更年期不快感、開口障害およびニューロラティリスム（ｎｅｕｒｏｌａｔｙｒｉｓｍ）を包含する疾患の治療でも用いられる。
【０００４】
トルペリゾンの化学的構造を以下に示す。
【０００５】
【化１】
2010525060.tif 000002
【０００６】
この上に示した構造で分かるであろうように、トルペリゾンはキラル中心（星印で示す如き）を含有する。ラセミ型トルペリゾンが塩酸塩として商業的に入手可能であり、Ｍｙｄｅｔｏｎ（商標）、Ｍｙｄｏｃａｌｍ（商標）、Ｍｉｄｏｃａｌｍ（商標）およびＭｕｓｃａｌｍ（商標）などの如き商標名で販売されている。
【０００７】
トルペリゾンをＲ（−）およびＳ（＋）鏡像異性体にキラル分離することが記述された（例えば特許文献１を参照）。
【０００８】
トルペリゾンは中枢および末梢神経系中で膜安定化効果を示すことが示された（非特許文献２）。トルペリゾンおよびこれの塩はけいれん性麻痺に関連したいろいろな症状の改善ばかりでなくまた頸部症候群、関節の炎症および背部の痛みなどの如き病気または疾患に由来する筋緊張の改善でも用いられる。最近、トルペリゾンをまた神経障害性痛およびいろいろな中枢神経系障害に関連した痛みの治療でも用いることが記述された（例えば特許文献２を参照）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】ＪＰ−Ａ−５３−４０７７９
【特許文献２】米国特許出願番号２００６／０００４０５０
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】Ｍａｒｔｉｎｄａｌｅ、Ｔｈｅ  Ｅｘｔｒａ  Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ、３０版、１２１１頁
【非特許文献２】Ｏｎｏ，Ｈ．他、Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｂｉｏ．Ｄｙｎａｍ．１９８４、７、１７１−１７８
【発明の概要】
【００１１】
要約
トルペリゾンの調製は多種多様な合成方策を用いて実施可能である。本発明者らが認識するように、現在のトルペリゾン製造方法は、副反応および出発材料中に存在するか或はトルペリゾン合成中または製剤の貯蔵寿命の間に生じる化学的不純物の結果としてトルペリゾンによる治療を受ける患者にとって存在量が極めて少量であっても毒であり得る不純物をある濃度で含有する最終的生成物がもたらされると言った関連した欠点を有する。
【００１２】
本開示は、１つの面において、遺伝毒性因子である４−ＭＭＰＰＯなどの如き不純物の濃度が無視出来るほどの濃度であるトルペリゾンを生じさせる改良方法の必要性を取り扱うものである。別の面において、本開示は、とりわけトルペリゾン含有製薬学的組成物に入っている遺伝毒性因子、例えば４−ＭＭＰＰＯなどにさらされる度合が最小限であるようにトルペリゾンを投与することで被験体を治療する方法を提供するものである。
【００１３】
具体的には、少なくとも１つの面において、本開示は、２−メチル−１−（４−メチルフェニル）−プロパノン（４−ＭＭＰＰＯ）の含有量が約１０ｐｐｍ未満のトルペリゾンおよびこれの組成物に向けたものである。
【００１４】
特別な態様において、本明細書で提供する如きトルペリゾンが含有する４−ＭＭＰＰＯの量は約７ｐｐｍ未満である。
【００１５】
更に別の態様におけるトルペリゾンが含有する４−ＭＭＰＰＯの量は約３ｐｐｍ未満である。
【００１６】
好適な態様において、本明細書では４−ＭＭＰＰＯの含有量が約１．５から１０ｐｐｍのトルペリゾンを提供する。
【００１７】
加うるに、本明細書では、上述した如きトルペリゾンおよび１種以上の製薬学的に許容される賦形剤を含有して成る製薬学的組成物を提供する。
【００１８】
前記態様の中の１つの態様では、前記１種以上の製薬学的に許容される賦形剤に酸を含める。
【００１９】
更に別の面において、本明細書では精製されたトルペリゾン組成物を生じさせる方法を提供する。この方法は、（ｉ）４−ＭＭＰＰＯを１０ｐｐｍ以上の初期濃度で含有しかつ
場合により追加的不純物も含有して成るトルペリゾンを準備しそして（ｉｉ）前記トルペリゾンを精製することで４−ＭＭＰＰＯの濃度が約１０ｐｐｍ未満の精製されたトルペリゾンを生じさせる段階を含んで成る。
【００２０】
前記方法の中の１つの態様における精製段階は、４−ＭＭＰＰＯの濃度を初期濃度に比べて少なくとも５倍低くするに有効である。
【００２１】
更に別の態様において、本方法で製造した精製されたトルペリゾンの４−ＭＭＰＰＯ濃度は約７ｐｐｍ未満であり、例えば上述した如き純度を有する。
【００２２】
本方法に、更にまた、前記準備段階の前に４−ＭＭＰＰＯが前記トルペリゾンの中に混入物として存在することを同定しそして場合により前記トルペリゾンの中に入っている４−ＭＭＰＰＯの初期濃度を測定することも含めてもよい。
【００２３】
本方法の追加的態様では、前記精製に単一の溶媒もしくは溶媒の組み合わせを用いた再結晶化を行って再結晶化トルペリゾンを生じさせることを含める。
【００２４】
本方法の別の態様では、前記再結晶化に単一もしくは複数いずれかの再結晶化段階を含める。
【００２５】
更に別の態様では、前記再結晶化を混合有機溶媒系中で実施する。特別な態様では、そのような溶媒系に低級ケトンおよび低級アルコールを含める。更に別の態様では、その溶媒系に２−ブタノン（メチルエチルケトン）およびイソプロパノールを含める。
【００２６】
さらなる態様では、前記再結晶化に、トルペリゾンを酸性溶媒の中に場合により加熱しながら溶解させることでトルペリゾンの溶液を生じさせそして前記溶液からトルペリゾンの結晶を生じさせることを含める。
【００２７】
本方法の更に別の代替態様では、精製に乾燥段階を含める。この乾燥段階は大気圧または減圧下で実施可能である。乾燥は周囲温度または高温、例えば３０℃から約６０℃の温度で実施可能である。
【００２８】
更に別の面において、本明細書では、トルペリゾンを生じさせる合成方法における改良を提供し、この改良は、４−ＭＭＰＰＯの生成が最小限になるように酸を触媒量で添加することを包含する。
【００２９】
前記改良の特別な態様における酸は無水塩化水素ガスである。
【００３０】
本明細書では、また、前記方法およびそれらの態様の全部およびいずれかで製造した精製トルペリゾンおよびこれの組成物も提供する。
【００３１】
更に別の面において、本明細書では、トルペリゾンを投与する必要のある被験体にそれを投与する方法における改良を提供し、この改良は、２−メチル−１−（４−メチルフェニル）−プロパノン（４−ＭＭＰＰＯ）の含有量が約１０ｐｐｍ未満、例えば４−ＭＭＰＰＯの含有量が約１．５から約１０ｐｐｍのトルペリゾン組成物を投与することを包含する。
【００３２】
前記の特別な態様では、前記投与の結果として４−ＭＭＰＰＯの存在に関連して前記組成物が前記被験体に対して示す遺伝毒性効果が最小限になる。
【００３３】
更に別の面において、本明細書では、適切な容器の中に乾燥剤と一緒に包装しておいた４−ＭＭＰＰＯ含有量が約１０ｐｐｍ未満のトルペリゾンを提供する。
【００３４】
さらなる追加的面において、本明細書では、トルペリゾン含有組成物に入っている４−ＭＭＰＰＯの濃度を検出する方法を提供する。この方法は、（ａ）トルペリゾンおよび場合により１種以上の賦形剤を含有して成る組成物を準備し、（ｂ）追加的４−ＭＭＰＰＯの生成が防止されるように酸性にしておいたアルコールに前記組成物を溶解させることでトルペリゾンの酸性溶液を生じさせ、（ｃ）前記１種以上の賦形剤を存在させた場合には有機溶媒を用いた抽出で前記トルペリゾンを前記賦形剤から分離することでトルペリゾンの酸性抽出液を生じさせ、（ｄ）前記（ｂ）または（ｃ）の溶液に４−ＭＭＰＰＯの量を計るための内部標準を添加することでサンプル溶液を生じさせ、そして（ｅ）前記サンプル溶液を液クロ／質量分析にかけて前記液クロで用いる少なくとも１種の溶離剤を酸性にして前記サンプルに入っている４−ＭＭＰＰＯの濃度を検出することで前記サンプル溶液中の５００ｐｐｍ未満であり得る４−ＭＭＰＰＯの量を分析する段階を含んで成る。
【００３５】
前記方法の１つの態様における酸性アルコールは塩酸で酸性にしたアルコールである。特別な態様における酸性アルコールは塩酸のメタノール溶液である。
【００３６】
前記検出方法の更に別の態様において、前記（ｃ）における有機溶媒はエーテルである。
【００３７】
更に別の態様における溶媒はジイソプロピルエーテルである。
【００３８】
更に別の態様における内部標準は重水素化ＭＭＰＰＯである。
【００３９】
以下の説明、図、実施例および請求項から本方法、組成物などの追加的態様が明らかになるであろう。前記および以下の説明から理解され得るであろうように、本明細書に記述する特徴の各々および全ておよび前記特徴の中の２種以上の組み合わせの各々および全てを本開示の範囲内に前記組み合わせの中に含まれる特徴が互いに矛盾しないことを条件として包含させる。加うるに、特徴または特徴の組み合わせのいずれかが本発明のいずれかの態様から具体的に排除される可能性もある。本発明の追加的面および利点を以下の説明および請求項に示し、特に添付実施例および図と協力させて考慮して示す。
【図面の簡単な説明】
【００４０】
【図１】図１に、４−ＭＭＰＰＯがトルペリゾンのβ脱離反応によって生じることに関して提案する化学的機構を示す。
【図２】図２に、４−ＭＭＰＰＯがトルペリゾンのγ−ヒドロキシケトン副生成物のβ脱離反応によって生じることに関して提案する化学的機構を示す。
【発明を実施するための形態】
【００４１】
詳細な説明
ここに、本発明を本明細書の以下により詳細に説明する。しかしながら、本発明は多種多様な形態で具体化可能であり、本明細書に示す態様に限定すると解釈されるべきでなく、むしろ、本態様は本開示が完全かつ徹底的でありそして本発明の範囲が当業者に完全に伝わるように示すものである。
【００４２】
本明細書に引用する出版物、特許および特許出願は全部本明細書の上または以下に示すかに拘わらず引用することによって全体が本明細書に組み入れられる。
【００４３】
定義
本明細書で用いる如き単数形「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は文脈で明らかに他の様式であると示さない限り複数指示対象を包含することを注目すべきである。
【００４４】
本発明の説明および請求では、下記の用語を以下に記述する定義に従って用いる。
【００４５】
用語「トルペリゾン」ばかりでなく他の化学的化合物を本明細書で言及する場合、それに製薬学的に許容される形態のいずれの当該化合物も包含させることを意味し、そのような形態には、適宜、本明細書に記述する化合物の異性体、例えばジアステレオマーおよび鏡像異性体など、塩、溶媒和物および多形体、個々の結晶形態ばかりでなくラセミ混合物および高純度の異性体が含まれる。
【００４６】
「製薬学的に許容される賦形剤または担体」は、場合により本発明の組成物に含有させてもよくかつ投与時に患者に不利な毒学的影響を有意にはもたらさない賦形剤を指す。
【００４７】
「製薬学的に許容される塩」には、これらに限定するものでないが、アミノ酸の塩、無機酸を用いて生じさせた塩、例えば塩化物、硫酸塩、燐酸塩、二燐酸塩、臭化物および硝酸塩などの如き塩、または前記のいずれかの相当する無機酸形態物から生じさせた塩、例えば塩酸塩など、または有機酸を用いて生じさせた塩、例えばリンゴ酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、酒石酸塩、こはく酸塩、エチルこはく酸塩、クエン酸塩、酢酸塩、乳酸塩、メタンスルホン酸塩、安息香酸塩、アスコルビン酸塩、パラ−トルエンスルホン酸塩、パルモ酸塩、サリチル酸塩およびステアリン酸塩などばかりでなく塩であるエストレート、グルセプテートおよびラクトビオネートなどが含まれる。同様に、製薬学的に許容されるカチオンを含有する塩には、これらに限定するものでないが、ナトリウム、カリウム、カルシウム、アルミニウム、リチウムおよびアンモニウム（置換アンモニウムを包含）が含まれる。
【００４８】
用語「アルキル」は、原子数が典型的に約１から２０の範囲の長さの炭化水素鎖を指す。そのような炭化水素鎖は、必ずしもではないが好適には飽和であり、かつ分枝または直鎖であり得るが、典型的には直鎖が好適である。典型的なアルキル基には、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ペンチル、１−メチルブチル、１−エチルプロピル、３−メチルペンチルなどが含まれる。本明細書で用いる如き「アルキル」には、示す炭素原子数が３以上の時のシクロアルキルが含まれる。
【００４９】
個々の官能基を言及する時の「低級」は、炭素原子数が１−６の基を意味する。
【００５０】
例えば、「低級アルキル」は、炭素原子数が１から６のアルキル基を指し、これは直鎖または分枝していてもよく、その例はメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、１−エチルプロピル、１，２−ジメチルプロピル、ｎ−ブチル、ｉ−ブチル、ｓ−ブチル、ｔ−ブチルなどである。
【００５１】
「任意」または「場合により」は、それの以降に記述する状況が存在し得るか或は存在しなくてもよいことを意味し、その結果として、その記述はそのような状況が起こる場合およびそのような状況が起こらない場合を包含する。
【００５２】
特定の特徴または実体が「実質的に存在しない」または「実質的に無い」は、そのような特徴または実体がほぼ完全または完璧に存在しないことを意味する。４−ＭＭＰＰＯが実質的に存在しないトルペリゾン製剤を本明細書で用いる場合、それが含有する４−ＭＭＰＰＯの量は約１０ｐｐｍ未満である。
【００５３】
「無水条件」下で貯蔵したトルペリゾン組成物は、約１８−２５℃の範囲の温度で湿度を制御した条件（相対湿度が５−２５パーセント）下で貯蔵した組成物である。そのようなトルペリゾン組成物は製薬学的有効成分（ＡＰＩ）またはトルペリゾンと１種以上の製薬学的に許容される賦形剤を含有して成る製薬学的組成物（粉末など）または完成品、例えばカプセル、錠剤などであり得る。そのような組成物を密封型容器、例えばボトル、ブリスター、パウチまたはこれらの組み合わせなどの中に入れる。そのような組成物をまた乾燥剤、例えばシリカなどの存在下で貯蔵することも可能であり、典型的には水蒸気の吸収に適したパックの中に入れて貯蔵してもよい。
【００５４】
「無水」は、ある材料に水が実質的に存在しないことを意味する。
【００５５】
本明細書では用語「被験体」、「個体」または「患者」を互換的に用い、この用語は脊椎動物、好適には哺乳動物を指す。哺乳動物には、これらに限定するものでないが、ヒトが含まれる。
【００５６】
本明細書に示す如きトルペリゾン組成物の用語「薬理学的に有効な量」または「治療的に有効な量」は、当該組成物または薬剤が所望の反応、例えばけいれん性麻痺に関連した症状の改善をもたらすか或は神経障害性痛またはいろいろな神経系障害に関連した痛みを治療するに充分でありかつ毒性を与えない量を指す。正確な必要量は、当該被験体の種、年齢および一般的状態、治療すべき疾患のひどさ、当該被験体が服用している追加的薬剤、投与様式などに応じて、被験体から被験体で異なるであろう。通常の当業者は、本明細書に示す情報を基にした常規実験を用いることで、個々の如何なる症例にも適した「有効な」量を決定することができるであろう。
【００５７】
用語「約」は、特に所定量を言及する場合、±５パーセントの偏差を包含することを意味する。
【００５８】
また、以下の章に追加的定義を示すこともあり得る。
【００５９】
概説
上述したように、本開示は、４−ＭＭＰＰＯの濃度が商業的製剤または上述した製剤に見られる濃度に比べて有意かつ好適に一貫して低いトルペリゾン製剤を提供する必要性を取り扱うものである。本発明者らは、トルペリゾン組成物を調製または得て分析、特に低濃度の４−ＭＭＰＰＯ、例えばトルペリゾン製剤に入っているそれを検出するに適した極めて高い感度の検定を考案して分析を行ったところ、純度が向上、特に遺伝毒性因子である４−ＭＭＰＰＯに関して純度が向上したトルペリゾン製剤を提供する必要があることを認識した。その結果として、本明細書に記述する如き製剤は、トルペリゾンによる治療に反応する疾患を治療する目的で被験体に投与する製剤であり、そのような投与の結果として、前記トルペリゾンに存在する４−ＭＭＰＰＯに関連した遺伝毒性効果が最小限になる。ここに、本発明の前記および他の面を以下により詳細に説明する。
【００６０】
本方法の特徴
トルペリゾンおよび関連不純物
トルペリゾン［また２−メチル−１−（４−メチルフェニル）−３−（ピペリジニル）−１−プロパノンとも呼ぶ］は以下に示す化学的構造を有する。
【００６１】
【化２】
2010525060.tif 000003
【００６２】
トルペリゾンはキラル中心（この上に示した構造の中に星印で示す如き）を含有する。ラセミ型トルペリゾンが塩酸塩として商業的に入手可能であり、Ｍｙｄｅｔｏｎ（商標）、Ｍｙｄｏｃａｌｍ（商標）、Ｍｉｄｏｃａｌｍ（商標）およびＭｕｓｃａｌｍ（商標）などの如き商標名で販売されている。本明細書でトルペリゾンを言及する場合、それにラセミ型トルペリゾン、それの鏡像異性体の各々、それらがいずれかの比率で入っている混合物ばかりでなくそれの製薬学的に許容される塩、いろいろな結晶形態物および水化物を包含させることを意味する。
【００６３】
トルペリゾンは商業的に入手可能であることに加えて当該技術分野で公知のいろいろな方法を用いて合成可能である。例えば米国特許出願公開番号２００６／００４１１４１；Ｄｉｔｒｉｅｃｈ他（１９９９）Ｊ．Ｌａｂｅｌｅｄ  Ｃｐｄ．Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ、４２：１１２５−１１３４；日本特許番号０４００５２８３  １９９２０１０９；日本特許番号５４０３２４８０  １９７９０３０９；日本特許番号５４０３６２７４  １９７９０３１６；日本特許番号５４０３０１７８  １９７９０３０６；日本特許番号５４０２７５７１  １９７９０３０１；Ｋａｚｕｈａｒｕ他（１９９４）Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌｅｔｉｎ  ４２（８）１６７６；日本特許番号２０，３９０（１９６５）；およびハンガリー特許番号１４４，９９７（１９５６）（各々引用することによって全体が本明細書に組み入れられる）を参照のこと。
【００６４】
トルペリゾンの調製は例えば以下の単一段階合成スキームに従って実施可能である：
【００６５】
【化３】
2010525060.tif 000004
【００６６】
ここでは、４−メチルプロピオフェノンを出発材料として用いる。前記典型的な反応では、１，２−ジオキソランが反応体および溶媒の両方として作用する。１，２−ジオキソランをホルムアルデヒドの代わりに用いてトルペリゾン粗生成物を直接単離すると高い収率が得られることで、そのような単一段階の反応が特に有利であり、例えばとりわけ産業規模で費用効果的であることなどが理由で有利である。例えばＵ．Ｓ．２００６／００４１１４１を参照のこと。
【００６７】
個々の鏡像異性体が必要、例えばＲ（−）およびＳ（＋）鏡像異性体のいずれかまたは両方が必要な場合には、例えばＪＰ−Ａ−５３−４０７７９に記述されているように、キラル分離を実施してもよい。キラル分離をまたＶｅｌｍｕｒｕｇａｎ他、Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉａ、５６（３−４）２００２年８月、２２９−２３２に記述されているようにして実施することも可能である。Ｖｅｌｍｕｒｕｇａｎは、トルペリゾンに逆相ＨＰＬＣ分離を受けさせて鏡像異性体の各々を得ることを記述している。
【００６８】
トルペリゾンの組成物は、用いた合成方策に応じて、下記の不純物の中のいずれか１種以上を含有する可能性がある：塩酸ピペリジン、塩酸２−メチル−１−（３−メチルフェニル）−３−（１−ピペリジニル）−プロパノン（塩酸３−トルペリゾン）、１−（４−メチルフェニル）−プロパノン（４−メチルプロピオフェノン）、２−メチル−１−（４−メチルフェニル）−プロペノン（４−ＭＭＰＰＯ）および塩酸２−メチル−１−（２−メチルフェニル）−３−（１−ピペリジニル）−プロパノン（塩酸２−トルペリゾン）。米国特許出願公開番号ＵＳ  ２００６／００４１１４１には、異性体である２−トルペリゾンおよび３−トルペリゾンに関して従来の製剤に比べて実質的に向上した最終的純度を有するトルペリゾンが生じるように４−トルペリゾン製剤に入っている前記異性体の含有量を有意に低くする合成方法が記述されている。しかしながら、本発明者らの認識では、４−ＭＭＰＰＯが実質的に存在せずそして／または分解物である４−ＭＭＰＰＯの生成に対して安定である製剤、例えば本明細書に記述する製剤を信頼できる一貫した様式で生じさせることも提供することも今までは行われていなかった。また、本明細書で提供する製剤の如き製剤の重要さも以前には認識されていなかった。本製剤は投与に極めて有利である、と言うのは、トルペリゾンによる治療を受けている被験体が４−ＭＭＰＰＯに生体内で接触する度合を４−ＭＭＰＰＯに関連した遺伝毒性効果が理由で厳密な濃度未満に維持する必要があるからである。
【００６９】
理論で範囲を限定するものでないが、化合物である４−ＭＭＰＰＯは図１に機構的に示した如きβ脱離反応によって生じる可能性があると考えている。４−ＭＭＰＰＯはまた合成条件に応じて図２に示す如きアルドール縮合反応で生じ得る副生成物であるγ−ヒドロキシケトンから水がβ脱離することでも生じ得る。４−ＭＭＰＰＯの構造を以下に示す。
【００７０】
【化４】
2010525060.tif 000005
【００７１】
このように、４−ＭＭＰＰＯはトルペリゾン合成中に副生成物として生じ得るか、或はトルペリゾン貯蔵中にそれを単独［即ち、活性薬剤自体（一般に「ＡＰＩ」または「製薬学的有効成分」と呼ぶ）として］でか或は製薬学的製剤の一部［即ち、１種以上の製薬学的に許容される賦形剤と組み合わせた状態］として貯蔵している時に生じ得る。加うるに、ＡＰＩの精製で用いる再結晶化手順の溶解または加熱段階中に４−ＭＭＰＰＯが生じる可能性もある。そのようにしていくらか生じた４−ＭＭＰＰＯは大部分が典型的に母液１種または２種以上の中に残存したままであるが、少量は再結晶化トルペリゾンに付随したままである可能性がある。再結晶化トルペリゾンを集めた後、次に行う乾燥段階によってまた４−ＭＭＰＰＯの生成が助長、特に高温で助長される可能性もある。
【００７２】
分析
本発明者らは、本明細書に示すトルペリゾン製剤を得ようとして、極めて少量の４−ＭＭＰＰＯを検出するに最適な分析方法を考案し、この方法は、約０．０５重量％（５００ｐｐｍ）未満の濃度の４−ＭＭＰＰＯを検出する能力を有する。この方法は、好適には、約４００ｐｐｍ未満、または３００ｐｐｍ未満の濃度さえ検出する能力を有する。更により好適には、この方法は、約２００ｐｐｍ未満、または１００ｐｐｍ未満であっても４−
ＭＭＰＰＯの濃度を検出する能力を有する。本明細書に示す方法は極めて低い濃度の４−ＭＭＰＰＯ、例えば約５０ｐｐｍ未満、または２５ｐｐｍ未満、より好適には約１０ｐｐｍ未満の４−ＭＭＰＰＯを検出する能力を有すると考えている。本明細書に示す実施例では、約９ｐｐｍ未満、約８ｐｐｍ未満、約７ｐｐｍ未満、約６ｐｐｍ未満、約５ｐｐｍ未満、約４ｐｐｍ未満、約３ｐｐｍ未満、約２ｐｐｍ未満、約１．５ｐｐｍ未満、または約１ｐｐｍ未満の濃度さえ検出することができる。本方法は少なくとも約０．５ｐｐｍに及んで４−ＭＭＰＰＯの濃度を検出する能力を有すると考えている。
【００７３】
この用いる方法は液クロ−質量分析（ＬＣ−ＭＳ）の組み合わせが基になっている。本方法は、４−ＭＭＰＰＯの濃度が約５００ｐｐｍ未満であるとそれを検出することができない従来の方法の欠点を克服するものである。４−ＭＭＰＰＯは遺伝毒性因子であることから、それの濃度が５００ｐｐｍより大きく低くても検出することができることが極めて重要である、と言うのは、トルペリゾンの製造業者は製薬学的製剤中の可能な遺伝毒性因子、例えば４−ＭＭＰＰＯなどの含有量を計ることができる必要があるばかりでなくまた組成物に入っているそのような遺伝毒性因子の量が無視出来るほどであることで投与時に遺伝毒性障害をもたらさないことを立証することができる必要もあるからである。
【００７４】
この方法は、一般に、トルペリゾンの組成物を準備することを伴う。そのトルペリゾンは、合成反応中に生じた粗トルペリゾン、１つ以上の精製段階を受けた精製されたトルペリゾン、商業源または委託製造業者から入手したトルペリゾン、または製薬学的製剤、例えば錠剤［例えばＭｙｄｅｔｏｎ（商標）、Ｍｙｄｏｃａｌｍ（商標）、Ｍｉｄｏｃａｌｍ（商標）およびＭｕｓｃａｌｍ（商標）］または他の送達形態物などから抽出したトルペリゾンであってもよい。製薬学的製剤、例えば錠剤などの場合には、典型的に、そのサンプルを最初に錠剤製剤を崩壊させるに適した溶媒を用いて均一にして当該製剤の成分が入っている均一な溶液もしくは懸濁液を生じさせることでトルペリゾン（およびそれにいくらか入っている４−ＭＭＰＰＯ）の抽出をより行い易くする。均一化に適した溶媒には、ＨＣｌガスを約１％または無水トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）を約１％用いて酸性にしておいた無水イソプロパノールが含まれる。
【００７５】
そのトルペリゾンを適切な溶媒系、例えば酸性アルコールなどに溶解させる。具体的な溶媒には、メタノール、イソプロパノール、ブタノールおよび他の低級アルコールが含まれる。そのような溶媒を酸性にする目的で使用可能な酸には、とりわけ、例えば塩酸、臭化水素酸、クエン酸、蟻酸、酢酸、メタンスルホン酸およびトリフルオロ酢酸が含まれる。本発明者らは、分析で行ったいろいろな試みの中で、４−ＭＭＰＰＯが塩基触媒によって追加的に生じることがないようにしかつ分析中のトルペリゾンを安定にする、即ちサンプルに入っている４−ＭＭＰＰＯの量をより正確に示す目的で酸性条件を用いることができることを確認した。そのサンプルを溶解／懸濁させる目的で用いる溶媒１種または２種以上は好適には無水である、と言うのは、水が少量でも存在していると４−ＭＭＰＰＯの生成量が多くなり得るからである。１つの好適な酸性アルコール溶液はＨＣｌのメタノール溶液である。そのアルコールに入れる酸の濃度は典型的に約１０ｍＭから約１００ｍＭの範囲であり、この濃度は４−ＭＭＰＰＯのさらなる劣化に対抗するようにトルペリゾンを安定にするに有効である。トルペリゾンが製薬学的製剤、例えば錠剤などの一部である場合、トルペリゾンを当該製剤にいくらか入っている可能性のある結合剤、充填剤、賦形剤などから抽出、例えば有機溶媒を用いた抽出などで抽出してもよい。使用可能な溶媒は、好適には酸性アルコール溶媒、例えば上述した溶媒などであるが、他の溶媒、例えばエーテルまたは親油性エステルなども同様に使用可能である。適切であり得る個々の溶媒には、ジクロロメタン、クロロホルム、アセトニトリル、酢酸アミルおよびジオキサンが含まれる。
【００７６】
典型的には、分析を行う前のサンプルに内部標準を添加しておく。本方法に好適な標準
は重水素化４−ＭＭＰＰＯであり、その標準はサンプルに入っている４−ＭＭＰＰＯから容易に区別可能である。その使用する内部標準は、勿論、使用する検出方法に伴って変わるであろう。好適には、酸性溶液を維持する目的で、分析すべき溶液に緩衝剤を添加する。具体的緩衝剤には、クエン酸塩、燐酸塩および酢酸塩が含まれる。その溶液のｐＨを好適には５．５未満、更により好適には４未満にする。分析すべき溶液に適したｐＨは５．５以下、５以下、４．５以下、４以下、３．５以下、３以下、２．５以下、２以下、１．５以下または１．０以下である。
【００７７】
次に、そのサンプルに４−ＭＭＰＰＯ含有量に関する分析を受けさせる。いろいろな分析技術、例えば核磁気共鳴（ＮＭＲ）、ガスクロ（ＧＣ）、質量分析（ＭＳ）およびこれらの組み合わせ、例えばＬＣ（液クロ）／ＭＳ、ＧＣ／ＭＳ、負化学イオン化を伴うＧＣ／ＭＳ、ＧＣ／ＭＳ／ＭＳ、ＭＳ／ＭＳ／ＬＩＴ（線形イオントラップ）、高性能液クロ、ＨＰＬＣ／ＭＳ／ＭＳ、ＦＴ／ＩＲ（フーリエ変換赤外）などを分析で用いることができるが、好適な方法は液クロ／質量分析／質量分析（ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ）、特にＨＰＬＣ／ＭＳ／ＭＳである。
【００７８】
質量スペクトルを得る目的でいろいろな方法を用いることができ、そのような方法には飛行時間（ＴＯＦ）、四重極、イオントラップ、磁場およびこれらの組み合わせが含まれる。タンデム四重極質量分析（ＭＳ／ＭＳ）が好適である、と言うのは、ノイズに対するシグナルの比率（Ｓ／Ｎ）が高いからである。本明細書に記述、例えば実施例１に記述する方法は、４−ＭＭＰＰＯが５００ｐｐｍ未満の濃度から約０．２ｐｐｍに及ぶ濃度の検出を達成する能力を有する。
【００７９】
ＨＰＬＣ使用分析方法で溶離剤として用いるに適した溶媒には、水、アルコール、例えばメタノール、エタノール、イソプロパノールなど、アセトニトリルおよびこれらの組み合わせなどが含まれる。好適には、分析中に追加的に生じる４−ＭＭＰＰＯの量が最小限になるように、可動相として用いる少なくとも１種の溶媒を酸性にする。適切な酸には、蟻酸、塩酸、燐酸、トリフルオロ酢酸などが含まれる。ＨＰＬＣカラムはいろいろな商業的供給業者、例えばＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ、ＥＭＳｃｉｅｎｃｅ、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘなどから入手可能である。例えば、Ｓｈｉｓｅｉｄｏ、Ｓｈｏｄｅｘ、Ａｇｉｌｅｎｔ（ＺＯＲＢＡＸ）およびＬＵＮＡなどが製造しているカラムなどを固体状担体として用いてもよい。順相または逆相カラムを用いることができ、好適な固体状担体にはシリカゲルが含まれる。成分の分離および混入物、例えば４−ＭＭＰＰＯなどの量化を得るに適した条件を当業者は決定することができるであろう。
【００８０】
本明細書に示す実施例１に、トルペリゾン含有製剤を分析して４−ＭＭＰＰＯ含有量を測定するに適した典型的実験条件を示す（表１および２）。本明細書に記述する分析方法を用いると、４−ＭＭＰＰＯを以前の方法では検出不可能であった濃度まで量化することができる。表３に示す値で分かるであろうように、いろいろな代表的な製剤（ＡＰＩおよび商業的製薬学的製剤の両方）に入っている４−ＭＭＰＰＯの値は約１５ｐｐｍから４００ｐｐｍ以上の範囲であることを確認した。商業的製剤であるＭｙｄｅｔｏｎ（商標）およびＭｙｄｏｃａｌｍ（商標）の全部に入っている４−ＭＭＰＰＯの濃度は１００ｐｐｍ以上であった。本発明者らは、４−ＭＭＰＰＯに関連した遺伝毒性副作用が理由で、４−ＭＭＰＰＯの濃度が表３に示す製剤で検出した濃度より実質的に低い、即ち約１０ｐｐｍ未満である製剤を提供する必要があることを認識した。
【００８１】
精製
本発明者らは、以前に製造された組成物に比べて４−ＭＭＰＰＯに関する純度が高いトルペリゾン組成物を好適には一貫した様式で提供する必要があることを認識した。これに関して、４−ＭＭＰＰＯ含有量が約１０ｐｐｍ未満のトルペリゾン製剤を達成するいろい
ろな方策を探求した。本明細書に記述する方法は、４−ＭＭＰＰＯの濃度が約１０ｐｐｍ未満のトルペリゾンを生じさせる能力を有する。このように、本明細書に示す如きトルペリゾン製剤に入っている４−ＭＭＰＰＯの量は約１０ｐｐｍ未満、約９ｐｐｍ未満、約８ｐｐｍ未満、約７ｐｐｍ未満、約６ｐｐｍ未満、約５ｐｐｍ未満、約４ｐｐｍ未満、約３ｐｐｍ未満、約２ｐｐｍ未満でさえある。好適な態様として本明細書で提供する如きトルペリゾンが含有する４−ＭＭＰＰＯの量は約１．５ｐｐｍから約１０ｐｐｍである。
【００８２】
再結晶化−単一段階
本明細書に示す如き精製で用いる「高純度ではない」トルペリゾン組成物に入っている４−ＭＭＰＰＯの量は典型的に約１０ｐｐｍ以上である。痕跡量の４−ＭＭＰＰＯを除去するに特に有用な１つの方法は再結晶化である。実施例２に、トルペリゾンの精製で用いられる通常の再結晶化方策を記述する。分かるであろうように、トルペリゾンを有機溶媒混合物に溶解（還流に加熱することで達成）させた後、熱濾過を行いそしてその濾液を冷却することで結晶性のトルペリゾンを生じさせる。その再結晶化生成物を分析した時の４−ＭＭＰＰＯ含有量はトルペリゾンが約０．１４重量パーセント（１４００ｐｐｍ）であることが分かり、次の再結晶化バッチでそれが約５００ｐｐｍまたはそれよりいくらか低い値にまで低下した。しかしながら、４−ＭＭＰＰＯがそのような濃度であると、トルペリゾンの製薬学的組成物には適さない。
【００８３】
しかしながら、以下の章に詳述するようにして単一段階の再結晶化を４−ＭＭＰＰＯの生成を最小限にするか或は抑制する１つ以上の追加的方策と組み合わせると、それは本明細書に記述する純度を有するトルペリゾンを生じさせるに適し得る。
【００８４】
多段階再結晶化
代替再結晶化方法を探求することで、４−ＭＭＰＰＯが実質的に存在しない精製されたトルペリゾンを生じさせるに適した下記の方策を見つけ出した。
【００８５】
１つの再結晶化方策では、単一段階の再結晶化を実施する。ある場合には、所望純度を有するトルペリゾンを単一の再結晶化で達成することができる。例えば実施例３を参照のこと。
【００８６】
別の方策として多段階再結晶化を実施する。例えば、４−ＭＭＰＰＯを有意な量で含有、即ち約１０ｐｐｍ以上の量で含有するトルペリゾンに多段階再結晶化、即ち再結晶化を２回以上、好適には再結晶化を２回またはそれ以上の回数受けさせることで、４−ＭＭＰＰＯが実質的に存在しないトルペリゾンを生じさせる。再結晶化の回数を典型的には２、３、４、５および６から選択する。理想的には、２、３または４再結晶化段階で所望の純度を達成する。トルペリゾンの再結晶化で用いるに適した溶媒には、単一溶媒ばかりでなく混合溶媒系も含まれる。混合溶媒系は２種類の溶媒、３種類の溶媒、４種類の溶媒、５種類の溶媒またはそれ以上の種類の溶媒の組み合わせを含有していてもよいが、それに好適には異なる２種類から４種類の溶媒を含有させる。そのような溶媒を場合により酸性にしてもよい。酸性溶媒の使用はベータ脱離反応の抑制に有効であり得る、と言うのは、そのような反応には塩基が触媒として作用するからである。
【００８７】
トルペリゾンの再結晶化で用いるに適した溶媒には、エステル、例えば酢酸エチル、酢酸メチル、酢酸アミルなど、エーテル、好適には低級アルキルのエーテル、例えばジエチルエーテル、メチルｔ−ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）など、ケトン、好適には低級アルキルのケトン、例えば２−ブタノン（メチルエチルケトンまたはＭＥＫ）、メチルイソブチルケトン（ＭＩＢＫ）、メチルプロピルケトン、アセトンなど、およびアルコールが含まれる。低級アルコール、例えばメタノール、エタノール、イソプロパノールなどが好適である。前記いずれかの混合物を用いることも可能である。１つの好適な溶媒系は低級ケト
ンと低級アルコールの組み合わせ、例えばメチルエチルケトンとイソプロパノールの組み合わせである。典型的には、トルペリゾンを最初に１種以上の再結晶化用溶媒に溶解させる。ある場合には、使用する溶媒１種または２種以上に応じて、トルペリゾンが当該溶媒系中で示す溶解を補助する目的で熱を用いてもよい。好適には、トルペリゾンが約１００ｍｇ／ｍｌから約２００ｍｇ／ｍｌの度合で溶解する溶媒系を用いる。その用いる溶媒の沸点に応じて、トルペリゾンの溶液を必要ならば約８０℃に加熱してもよい。また、溶解を補助する目的で撹拌を用いることも可能である。次に、加熱を行った場合には、その結果として生じた溶液を典型的には室温以下に冷却する。理想的には、冷却をゆっくり行い、数分または１時間以上から数時間かけて行う。ある場合には、そのトルペリゾン溶液を更に冷却する目的で氷浴を用いてもよい。結晶が生じている時の溶液を場合により撹拌してもよい。また、結晶の生成を誘発する目的で種晶を添加することも可能である。
【００８８】
結晶を集めた後、適切な溶媒、例えばトルペリゾンが不溶であるか或は溶解するとしても無視出来るほどである溶媒を用いて洗浄する。使用に適した１つの溶媒は２−ブタノン、好適には冷２−ブタノンである。
【００８９】
次に、前記結晶を乾燥させる。好適な乾燥条件を表題が「乾燥」の下の章に記述する。乾燥を典型的には周囲温度または若干の高温、即ち約３０℃から約４５℃、好適には約３０℃から約４０℃で実施する。
【００９０】
次に、その結果として得た精製されたトルペリゾンに典型的には上述した如き分析を受けさせることで４−ＭＭＰＰＯの含有量を測定する。トルペリゾン組成物に入っている４−ＭＭＰＰＯの量が約１０ｐｐｍ以上の場合、上述した如き再結晶化を繰り返し実施する。実施例３を参照のこと。
【００９１】
酸処理
酸を存在させると４−ＭＭＰＰＯの生成が抑制され得ることを認識したことから、好適な精製方法には、トルペリゾンに酸を用いた処理を受けさせることが含まれる。例えば、再結晶化トルペリゾンを酸性溶液、例えば酸含有量が約１０％（体積／体積）から約０．５％、好適には酸含有量が約７％（体積／体積）から約１％（体積／体積）の溶液などで洗浄してもよい。無機酸、例えば塩酸、臭化水素酸および硫酸などが使用可能であり、また、有機酸、例えば蟻酸、しゅう酸、酢酸、クエン酸、トリフルオロ酢酸、トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸、こはく酸なども使用可能である。その酸溶液は酸水溶液であってもよいか、或は酸性溶媒、例えば酸性アルコールなどであってもよいが、その酸性溶液がトルペリゾンが不溶であるか或は溶解するとしても若干のみである酸性溶液であることを条件とする。そのような１つの典型的な溶媒系はＨＣｌ／イソプロパノールである。例えば実施例４を参照のこと。トルペリゾンに酸を用いた処理（合成中または合成後のいずれか）を受けさせる処理はトルペリゾン生成物に入っている４−ＭＭＰＰＯの濃度を実質的に低くするに有効であり、その結果として、４−ＭＭＰＰＯが実質的に存在しないトルペリゾンが得られることを見いだした。
【００９２】
酸洗浄の代替として、上述した如き再結晶化を酸性溶媒／溶媒系を用いて実施することも可能である。酸性溶媒系を用いた典型的なトルペリゾン再結晶化を実施例５および６に示す。単一もしくは多段階の再結晶化を用いることができる。好適には、酸、例えば上述した酸の中の１種以上を再結晶化用溶媒／溶媒系に添加する。酸を活性薬剤であるトルペリゾンを決して有意な度合で分解させることなく当該溶液を酸性にするに有効な量で用いる。好適には、酸を当該再結晶化用溶液に酸の総重量／体積パーセントが約１０パーセントから約０．５パーセント、好適には約５パーセントから約１パーセント（重量／体積）の範囲になるように添加する。酸の具体的量には５、４、３、２および１％の酸（重量／体積）が含まれる。使用する溶媒系に入れる酸の量は典型的に約１％（重量／体積）であ
る。再結晶化を酸性条件下で行うと４−ＭＭＰＰＯの生成が防止される傾向があることで、４−ＭＭＰＰＯが実質的に存在しない精製されたトルペリゾンがもたらされる。
【００９３】
トルペリゾンに酸洗浄または酸性溶媒を用いた再結晶化のいずれかを受けさせる場合、ある場合には、無水の酸性溶媒、即ち水が実質的に存在しない酸性溶媒を用いるのが好適であり得る。例えば、溶媒が本質的に無水の溶媒系の中に無水ＨＣｌガスを吹き込むことで無水もしくはほぼ無水である酸性溶媒系を生じさせることができる。追加的酸には、クエン酸、トリフルオロ酢酸およびこはく酸が含まれる。本発明者らは、特定の検定で、水の存在に起因して４−ＭＭＰＰＯの濃度が高くなり得ることを観察し、このように、無水条件の使用が好適であり得る。
【００９４】
乾燥
４−ＭＭＰＰＯが実質的に存在しないトルペリゾンを生じさせる更に別の方策として、トルペリゾン、好適には上述した如き精製を受けさせておいたトルペリゾンを１時間から数時間の範囲の長時間に渡って乾燥させる。典型的な乾燥時間は１時間から数時間、例えば７２時間以上に及び得る。乾燥は室温および部屋の圧力下で実施可能であり、かつ乾燥を乾燥剤、例えば五酸化燐などの存在下で実施することも可能である。乾燥を高温、例えば乾燥用オーブン、好適には温度が約３０℃から約４０℃のオーブン内で行ってもよい。乾燥をまた減圧（場合により上述した如き穏やかな加熱を伴わせてもよい）、例えば低真空度（例えば約１００，０００から約３，０００パスカル）、中真空度（約３，０００から約０．１パスカル）または高真空度（約０．１から約０．０００１パスカル）下で行うことも可能である。そのような乾燥工程は４−ＭＭＰＰＯをトルペリゾンから蒸発（揮発）で選択的に除去するに有効である。トルペリゾンの揮発性と４−ＭＭＰＰＯの揮発性に差があることから、４−ＭＭＰＰＯを当該組成物から選択的に除去することができる。揮発による４−ＭＭＰＰＯの除去を同様に真空オーブン、パドルドライヤー、流動床乾燥機、フラッシュドライヤー、トレードライヤー、噴霧乾燥機または他の同様な乾燥技術のいずれかを用いて実施することも可能であり、そのような乾燥を場合によりいくらか高温、例えば約３０℃から約４０℃で実施することも可能である。
【００９５】
上述した精製方法の結果として、ある場合には、トルペリゾンに含まれている４−ＭＭＰＰＯの初期量に応じて、除去すべき４−ＭＭＰＰＯの量が劇的に低くなる、即ち初期濃度に比べて少なくとも５倍低くなる。例えば、実施例３を参照して、４−ＭＭＰＰＯの初期含有量が約５００ｐｐｍ以上のトルペリゾン組成物に精製を受けさせたところ４−ＭＭＰＰＯの含有量が約１．５ｐｐｍから約１０ｐｐｍの精製されたトルペリゾンがもたらされた、即ち元々の組成物のそれの約５０倍（５０ｘ）から約３００倍（３００ｘ）の減少度がもたらされたことが分かるであろう。このように、４−ＭＭＰＰＯの初期量に応じて、本明細書に示す精製方法は結果としてもたらされる精製組成物に入っている４−ＭＭＰＰＯの量を少なくとも約５倍（または５ｘ）、または少なくとも約１０倍、または少なくとも約２０倍、または少なくとも約３０倍、または少なくとも約５０倍、または少なくとも１００倍以上減少させるに有効であり得る。
【００９６】
合成中
別法として、トルペリゾンの精製を上述したように合成後に行って４−ＭＭＰＰＯを除去する代わりに、修飾を受けさせた合成を特定の修飾を受けさせた反応条件下で実施することも可能である。そのような条件には、酸性および／または無水反応条件の使用が含まれる。
【００９７】
例えば、上述した如きトルペリゾン合成を触媒量の酸の存在下で実施することも可能である。そのような使用に適した酸には、ＨＣｌ（好適には気体状）、硫酸、硝酸、蟻酸、しゅう酸、酢酸、クエン酸などが含まれる。
【００９８】
無水条件を無水溶媒の使用に託してもよく、例えば乾燥剤の上に静止した状態で維持することでか、或は溶媒をモレキュラーシーブなどの上に置いて貯蔵しかつ不活性な無水雰囲気下で貯蔵することなどで無水条件を直接得てもよい。そのような合成を不活性な無水雰囲気、例えば窒素またはアルゴンなど下で実施することで無水反応条件を更に助長することも可能である。
【００９９】
即ち、改良としてトルペリゾン生成を触媒量の酸の存在および／または無水条件下で起こさせることを除いて、トルペリゾンの合成を本明細書に記述するか或は以前から公知の経路のいずれかで実施してもよい。
【０１００】
トルペリゾンの貯蔵
実施例７に、錠剤にする製薬学的組成物の製造で用いる薬剤ロットに入っている４−ＭＭＰＰＯの量を前記錠剤を３カ月からほぼ４年の範囲の期間に渡って貯蔵した後のそれに入っている４−ＭＭＰＰＯの量と対比させて比較したデータを示す。試験を受けさせた製剤のほぼ全部において、４−ＭＭＰＰＯの量が注目すべきほど多くなることを観察した。４−ＭＭＰＰＯの生成は少なくともある程度であるが錠剤製造条件に起因し得るが、また、４−ＭＭＰＰＯは当該製薬学的製剤の貯蔵寿命の間、即ち貯蔵下でも生じると思われる。４−ＭＭＰＰＯが生成する源に関係なく、被験体に投与すべき製薬学的トルペリゾン製剤に入っている４−ＭＭＰＰＯの濃度は理想的には実施例７に示すそれよりも有意に低くあるべきであり、好適には、入っている４−ＭＭＰＰＯの濃度は約１０ｐｐｍ未満であるべきである。更により好適には、製薬学的トルペリゾン製剤に入っている４−ＭＭＰＰＯの量が約９ｐｐｍ未満、約８ｐｐｍ未満、約７ｐｐｍ未満、約６ｐｐｍ未満、約５ｐｐｍ未満、約４ｐｐｍ未満、約３ｐｐｍ未満、約２ｐｐｍ未満から約１．５ｐｐｍになるようにする。
【０１０１】
本明細書に記述する如きトルペリゾンおよびトルペリゾン組成物を好適には無水条件下で貯蔵する。本明細書で用いる如き無水条件は、温度が約１８から２３℃の範囲で相対湿度が５−２５％の条件を指す。本主題製剤はＡＰＩ製剤、ＡＰＩに加え１種以上の製薬学的に許容される賦形剤を含有して成る製薬学的組成物、または密封型容器、例えばボトル、ブリスターパック、パウチまたはこれらの組み合わせなどの中に入っている投与に適した製薬学的製剤であり得る。そのような組成物をまた乾燥剤、例えばシリカなどの存在下で貯蔵することも可能であり、典型的にはそれを水蒸気の吸収に適したパックの中に封じ込める。
【０１０２】
本明細書に示す如きトルペリゾン組成物に好適には酸付加塩形態のトルペリゾンを含有させる。好適な態様では、本明細書に示す如きトルペリゾン組成物にまた酸性添加剤または酸付加塩形態のトルペリゾンが示す酸性度よりも高い酸性度を示す環境を確立する賦形剤も追加的量で含有させる。そのような添加剤には、酢酸、こはく酸、アジピン酸、プロピオン酸、クエン酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸などが含まれる。好適な酸は二酸もしくはそれ以上の酸（例えば酸性プロトンを２個以上有する二酸、三酸など）である。トルペリゾン組成物用安定剤として用いるに適した酸が示すｐＫａは好適には約３未満である。そのような酸は好適には無水である。特に好適な酸には、クエン酸およびこはく酸が含まれる。
【０１０３】
トルペリゾンをガラス状のマトリクスの中に組み合わせてもよく、ガラス形成剤は当該技術分野で良く知られており、トルペリゾンから４−ＭＭＰＰＯが生じる化学的劣化を防止するに有効であり得る。
【０１０４】
理想的には、トルペリゾンをこれの製剤とは関係なく貯蔵中に乾燥剤と組み合わせるこ
とでそれが水分にさらされる度合を最小限にする。
【０１０５】
４−ＭＭＰＰＯが示す遺伝毒性
４−ＭＭＰＰＯは遺伝毒性を示す、即ち遺伝的変異を引き起こすことで腫瘍発生の一因になる可能性があると見なされている。遺伝毒性は一般に特定の化学的作用剤の固有の特性であると見なされている。そのような化合物は、化合物の化学的構造を基にして、細胞内の巨大分子、例えばＤＮＡなどの中の求核性部位と結合するに充分な親電子性を有する可能性がある。
【０１０６】
本明細書に示すトルペリゾン組成物は、これを遺伝毒物学的試験で評価した時に、理想的には、遺伝毒性の可能性を示さない、即ち少なくともある程度であるがそれに含まれている４−ＭＭＰＰＯの濃度が極めて低いことで示さない。遺伝毒性障害を評価するに適した遺伝毒物学的研究には下記のインビトロ齧歯類検定が含まれる：細菌３Ｂを用いて遺伝子変異を試験する検定、哺乳動物の細胞を用いて染色体の損傷をインビトロで評価する検定またはインビトロマウスリンパ腫ｔｋ＋／−検定、および齧歯類の造血細胞を用いて染色体の損傷をインビボで試験する検定。発癌性の評価で用いるに適した代替モデルを産業Ｓ１Ｂ  Ｔｅｓｔｉｎｇ  ｆｏｒ  Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｉｃｉｔｙ  ｏｆ  ＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓのＩＣＨ指針に見ることができる。
【０１０７】
また、インビボ検定を用いて遺伝毒性の可能性がないことを更に示すことも可能であり、特にインビトロ試験の結果が遺伝毒性障害の可能性を示唆し得る場合にそれを用いることができる。本明細書に示すトルペリゾン組成物が遺伝毒性を示さないことを示す目的で使用可能なインビボ検定には下記が含まれる。例えば、マウスを用いた用量毒性試験を繰り返し行うことで得た末梢血標本に小核誘導に関する評価を受けさせてもよい。ラットまたはサルを用いた用量試験を繰り返し行うことで得た末梢血リンパ球を培養した後、中期スプレッド（ｍｅｔａｐｈａｓｅ  ｓｐｒｅａｄｓ）の中の染色体の損傷に関する評価を行う。加うるに、可能な標的組織の中のＤＮＡ損傷（例えばＣｏｍｅｔまたはアルカリ性溶離検定を用いてＤＮＡ付加体もしくはＤＮＡストランドの分解）を評価してもよい。また、形質転換ラットもしくはマウスを用いて可能な標的組織の中の変異原性を評価することも可能である。
【０１０８】
また、Ｓｙｒｉａｎハムスター胚細胞（ＳＨＥ）形質転換検定を用いることも可能である。その上、形質転換マウス株、例えばｐ５３ハプロ不全マウスを短期発癌性試験で用いることも可能である。
【０１０９】
４−ＭＭＰＰＯ含有量が約１０ｐｐｍ未満のトルペリゾン組成物を被験体に製薬学的に許容される用量で投与することに関して、本明細書に示す如き製剤が遺伝毒性副作用（即ち遺伝毒性）を実質的に示さないことを、上述した３種類のインビトロ検定の中の少なくとも１つの結果が陰性であることを基にして示す。好適には、前記インビトロ検定の中の少なくとも２つが陰性であり、更により好適には、前記インビトロ検定の中の３つ全部が遺伝毒性に関して陰性である。上述したインビトロ検定の中の１つ以上が陽性であるか或は遺伝毒性がないと言った結論的結果より悪い結果がもたらされた場合、遺伝毒性がないことを立証する目的で、上述したインビボ試験の中の１つ以上の結果が陰性であることに頼ることができる。
【０１１０】
製薬学的製剤の成分
本発明の製剤は、トルペリゾンを含有することに加えて、場合により１種以上の追加的成分を含有していてもよい。
【０１１１】
本発明の組成物は、トルペリゾンに加えて、１種以上の製薬学的に許容される賦形剤も
しくは担体を含有して成り得る。典型的な賦形剤には、これらに限定するものでないが、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、水添ヒマシ油（ＨＣＯ）、クレモフォア（ポリエトキシル化ヒマシ油）、炭水化物、澱粉（例えばトウモロコシ澱粉）、無機塩、抗菌剤、抗酸化剤、結合剤／充填剤、界面活性剤、滑剤（例えばステアリン酸カルシウムもしくはマグネシウム）、流動促進剤、例えばタルクなど、崩壊剤、希釈剤、緩衝剤、酸、塩基、フィルムコート、これらの組み合わせなどが含まれる。
【０１１２】
本発明の組成物に１種以上の炭水化物、例えば糖など、誘導体化糖、例えばアジトール、アルドン酸、エステル化糖および／または糖重合体などを含有させてもよい。具体的な炭水化物である賦形剤には例えば下記が含まれる：単糖、例えばフルクトース、マルトース、ガラクトース、グルコース、Ｄ−マンノース、スルボースなど、二糖、例えばラクトース、スクロース、トレハロース、セロビオースなど、多糖、例えばラフィノース、メレジトース、マルトデキストリン、デキストラン、澱粉など、およびアルジトール、例えばマンニトール、キシリトール、マルチトール、ラクチトール、キシリトール、ソルビトール（グルシール）、ピラノシルソルビトール、ミオイノシトールなど。
【０１１３】
また、本発明の組成物ではジャガイモおよびトウモロコシが基になった澱粉、例えば澱粉グリコール酸ナトリウムおよび直接圧縮可能な修飾澱粉などの使用も適する。
【０１１４】
さらなる代表的賦形剤には、無機塩もしくは緩衝剤、例えばクエン酸、塩化ナトリウム、塩化カリウム、硫酸ナトリウム、硝酸カリウム、一塩基性燐酸ナトリウム、二塩基性燐酸ナトリウムおよびこれらの組み合わせが含まれる。
【０１１５】
トルペリゾン組成物にまた抗菌剤、例えば菌の増殖を防止または遅らせる作用剤などを含有させることも可能である。本発明で用いるに適した抗菌剤の非限定例には、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、ベンジルアルコール、塩化セチルピリジニウム、クロロブタノール、フェノール、フェニルエチルアルコール、硝酸フェニル水銀、チメルソール（ｔｈｉｍｅｒｓｏｌ）およびこれらの組み合わせが含まれる。
【０１１６】
本明細書に示す如き組成物にまた１種以上の抗酸化剤を含有させることも可能である。抗酸化剤を酸化の防止で用いることで、本製剤に入っているトルペリゾンまたは他の成分の劣化を防止する。本発明で用いるに適した抗酸化剤には、例えばパルミチン酸アスコルビル、ブチル化ヒドロキシアニソール、ブチル化ヒドロキシトルエン、次亜燐酸、モノチオグリセロール、没食子酸プロピル、重亜硫酸ナトリウム、ホルムアルデヒドスルホキシル酸ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウムおよびこれらの組み合わせが含まれる。
【０１１７】
追加的賦形剤には、界面活性剤、例えばポリソルベート、例えば「Ｔｗｅｅｎ  ２０」および「Ｔｗｅｅｎ  ８０」など、およびプルロニック、例えばＦ６８およびＦ８８［両方ともＢＡＳＦ（Ｍｏｕｎｔ  Ｏｌｉｖｅ、ニュージャージー州）から入手可能］、ソルビタンエステル、脂質（例えば燐脂質、例えばレシチンおよび他のホスファチジルコリンおよびホスファチジルエタノールアミン）、脂肪酸および脂肪エステル、ステロイド、例えばコレステロールなど、およびキレート剤、例えばＥＤＴＡなど、亜鉛および他、例えば適切なカチオンなどが含まれる。
【０１１８】
その上、上述したように、本発明の組成物に場合により１種以上の酸を含有させることも可能である。使用可能な酸の非限定例には、塩酸、酢酸、燐酸、クエン酸、こはく酸、アジピン酸、プロピオン酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、リンゴ酸、乳酸、蟻酸、トリフルオロ酢酸、硝酸、過塩素酸、燐酸、硫酸、フマル酸およびこれらの組み合わせから成る群より選択した酸が含まれる。
【０１１９】
好適な態様では、本明細書に示す如き組成物に塩基性成分を存在させない。
【０１２０】
本組成物に入れる個々の賦形剤のいずれの量も当該賦形剤の役割、活性薬剤（即ちトルペリゾン）の投薬必要性および当該組成物の個々の必要性に応じて変わるであろう。個々の賦形剤のいずれの最適な量も典型的には常規実験、即ち当該賦形剤をいろいろな量（低い量から高い量の範囲）で含有させた組成物を調製し、安定性および他のパラメーターを試験した後、最適な性能が有意な副作用なしに得られる範囲を決定することで決定する。
【０１２１】
しかしながら、そのような賦形剤を本組成物に一般に約１から約９９重量％、好適には約５から約９８重量％、より好適には約１５から約９５重量％の賦形剤量で存在させる。本発明のトルペリゾン組成物に存在させる賦形剤の量を一般に下記から選択する：少なくとも約２重量％、５重量％、１０重量％、１５重量％、２０重量％、２５重量％、３０重量％、３５重量％、４０重量％、４５重量％、５０重量％、５５重量％、６０重量％、６５重量％、７０重量％、７５重量％、８０重量％、８５重量％、９０重量％または９５重量％。
【０１２２】
投与に適した典型的な製剤は、現在市場に出ている製剤、例えばＭｙｄｅｔｏｎ（商標）、Ｍｙｄｏｃａｌｍ（商標）、Ｍｉｄｏｃａｌｍ（商標）およびＭｕｓｃａｌｍ（商標）および同様なそのような製剤である。経口投与に適した製剤のトルペリゾン含有量は例えば約５０から約７５０ｍｇ、好適なトルペリゾン含有量は約１００から約５００ｍｇであり得る。ある場合には、経口投与用の製剤にトルペリゾンを下記の量の中のいずれかの量で含有させてもよい：トルペリゾンを１００ｍｇ、１５０ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、３５０ｍｇ、４００ｍｇ、４５０ｍｇまたは５００ｍｇ。
【０１２３】
トルペリゾンを持続放出製剤として提供することも可能である。例えば、実施例９および国際特許公開番号ＷＯ  ２００５／０９４８２５を参照のこと。制御もしくは持続放出製剤の調製を典型的にはトルペリゾンを担体もしくは賦形剤、例えばリポソーム、非吸収性で非透過性の重合体、例えばエチレン酢酸ビニル共重合体およびＨｙｔｒｅｌ（商標）共重合体など、膨潤性重合体、例えばヒドロゲルなど、または吸収性重合体、例えばコラーゲンなど、および特定のポリ酸またはポリエステル、例えば吸収性縫合糸の製造で用いられるそれらなどの中に混合することで実施する。
【０１２４】
１つの典型的な制御放出製剤は、アニオン性とカチオン性の重合体の混合物、例えばＥｕｄｒａｇｉｔ  ＲＳ、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  ＬおよびＥｕｄｒａｇｉｔ  Ｓなどを含有する。加うるに、トルペリゾンを粒状の担体の中に封じ込めるか、吸着させるか或は結合させることも可能である。粒状担体の例には、ポリメタアクリル酸メチル重合体から作られた粒子ばかりでなくポリ（ラクチド）およびポリ（ラクチド−コ−グリコリド）（ＰＬＧとして知られる）から作られた微細粒子が含まれる。例えばＪｅｆｆｅｒｙ他、Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．（１９９３）１０：３６２−３６８およびＭｃＧｅｅ他、Ｊ．Ｍｉｃｒｏｅｎｃａｐ．（１９９６）を参照のこと。また、錠剤またはカプレットに水に不溶な重合体、例えばＡｑｕａｃｏａｔ（商標）およびＥｕｄｒａｇｉｔ（商標）などによる被覆を受けさせることも可能である。
【０１２５】
この上に示した製薬学的賦形剤に加えて他の賦形剤が「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ＆  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ」、１９版、Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｌｉａｍｓ（１９９５）、「Ｐｈｙｓｃｉｃｉａｎ’ｓ  Ｄｅｓｋ
Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ」、５２版、Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｅｃｏｎｏｍｉｃｓ、Ｍｏｎｔｖａｌｅ、ＮＪ（１９９８）およびＫｉｂｂｅ，Ａ．Ｈ．、Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ、３版、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ、Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ．Ｃ．、２０
００に記述されている。
【０１２６】
製薬学的製剤／送達形態物
本明細書に記述するトルペリゾンは投与に適した如何なる形態にも構築可能である。経口投薬形態物には、錠剤、ロゼンジ、カプセル、シロップ、経口用懸濁液、乳液、顆粒、ペレットが含まれる。代替製剤には、エーロゾル、経皮パッチ、ゲル、クリーム、軟膏、座薬、水で戻すことができる粉末または凍結乾燥品ばかりでなく液体が含まれる。液状の製薬学的組成物に関しては溶液および懸濁液が考えられる。好適には、トルペリゾンを経口投与に適した形態で提供する。
【０１２７】
例えば、錠剤の製造は場合により１種以上の補助材料または添加剤を用いた圧縮または成形で実施可能である。圧縮錠剤の調製では、例えば適切な製錠機を用いて自由流れする形態、例えば粉末または顆粒などの形態の有効成分を場合により結合剤（例えばポビドン、ゼラチン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース）、滑剤、不活性希釈剤、防腐剤、崩壊剤（例えば澱粉グリコール酸ナトリウム）、架橋ポビドン、架橋ナトリウムカルボキシメチルセルロース）および／または表面活性もしくは分散剤と混合して圧縮することなどで調製を実施する。
【０１２８】
成形錠剤の調製では、例えば適切な製錠機を用いて不活性な液状希釈剤で湿らせておいた粉末化合物の混合物を成形することなどで調製を実施する。そのような錠剤に場合により被覆を受けさせるか或は刻み目を付けてもよく、かつ有効成分の徐放もしくは制御放出がもたらされるように例えばヒドロキシプロピルメチルセルロースを所望の放出プロファイルをもたらすいろいろな比率で用いることなどで構築してもよい。錠剤に場合により被膜、例えば薄膜、糖被膜または腸溶性被膜などを与えることで胃以外の腸部分内で放出が起こるようにしてもよい。錠剤およびカプセルを製造する方法、装置および委託製造業者は当該技術分野で良く知られている。
【０１２９】
また、本発明の組成物を獣医学的用途で用いるに適した形態に調製することも可能である。
【０１３０】
投与
治療用トルペリゾン製剤を投与する方法には、これらに限定するものでないが、経口、動脈内、髄腔内、脊髄内、筋肉内、腹腔内、静脈内、鼻内および吸入経路が含まれる。好適な投与経路は筋肉内、静脈内および経口である。特に好適な態様では、トルペリゾンを経口投与する。しかしながら、トルペリゾンを適切な如何なる経路で投与してもよく、そのような経路には、これらに限定するものでないが、経口、直腸、鼻、局所（経皮、エーロゾル、口腔および舌下を包含）、膣、非経口（皮下、筋肉内、静脈内および皮内を包含）、髄腔内および肺が含まれる。勿論、好適な経路は当該受益者の状態および年齢、治療すべき個々の状態および用いる薬剤の特定の組み合わせ（もしあれば）に伴って変わるであろう。
【０１３１】
本明細書では、被験体にトルペリゾンを用いた治療を４−ＭＭＰＰＯへの接触度合を最小限にする条件下で受けさせる方法を提供する。特定の態様では、４−ＭＭＰＰＯの含有量が１０ｐｐｍ未満、好適には約７ｐｐｍ未満である本発明のトルペリゾン組成物を投与することで４−ＭＭＰＰＯへの接触を最小限にする。そのような組成物の調製は本明細書に記述する方法のいずれかを用いて実施可能である。好適な態様では、４−ＭＭＰＰＯの含有量が約１０ｐｐｍから約１．５ｐｐｍのトルペリゾン組成物を用いて当該被験体を治療する。
【０１３２】
治療
トルペリゾンは、中枢系に作用する中枢作用性筋弛緩剤であり、これは主に筋肉の高い張りおよび緊張の治療で用いられるばかりでなく四肢における特定の循環問題の治療でも用いられる。トルペリゾンは実験的筋緊張高進および除脳硬直を軽減するばかりでなく網様体脊髄路反射促進を皮質機能に影響を与えることなく抑制することが分かっている。また、それは末梢血流も向上させる［Ｔｏｐｅｒｉｎ（商標）Ｐａｃｋａｇｅ  Ｉｎｓｅｒｔ］。
【０１３３】
トルペリゾンはいろいろな疾患の治療で用いるに有用である。例えば、トルペリゾンは下記を包含する疾患の中の１つ以上に苦しんでいる被験体に投与可能である：筋けいれん、痙性症候群、筋肉痛、ミオトニー、月経困難症、更年期不快感、開口障害、ニューロラティリスム、変形性関節炎または関節リウマチ（非ステロイド系抗炎症薬と組み合わせて投与した時）、リウマチ性疾患、線維筋痛症候群、職業およびスポーツ関連ストレス、背部痛、神経学的疾患によって引き起こされる痙直、多発性硬化症、脊髄症、脳脊髄炎、卒中、筋高血圧、筋拘縮、脊髄自動運動、閉塞性血管疾患（例えば閉塞性アテローム性動脈硬化症、糖尿病性血管症、閉塞性血栓血管炎、レイノー病、汎発性強皮症）、血管の神経支配障害による疾患（肢端チアノーゼ、間欠性血管神経症歩行困難）、神経障害性痛、および個々の症例における血栓後の静脈およびリンパ循環障害、糖尿病性神経障害、ヘルペス後神経痛および下肢腫瘍［Ｍｙｏｌａｘ（商標）Ｐａｃｋａｇｅ  ｉｎｓｅｒｔ］。
【０１３４】
トルペリゾンが投与可能な被験体には、子供（年齢が３カ月から１８歳）および成人（１８歳以上）の両方が含まれる。
【０１３５】
投薬量
トルペリゾンの治療量を経験的に決定することができ、これは治療すべき個々の状態、当該被験体などに伴って変わるであろう。投与すべき正確な量は当該被験体の年齢、体重および一般的状態ばかりでなく治療すべき疾患のひどさ、ヘルスケア専門家の判断および投与すべき個々の投薬形態物に応じて変わるであろう。
【０１３６】
トルペリゾンの治療的に有効な量を当業者は決定することができ、そしてそれを個々の症例各々の要求に合うように調整する。成人一人当たりのトルペリゾンの治療的に有効な量は、一般に、１日当たりの総投薬量が約１０から３０００ｍｇ／日の範囲、好適には２５−２０００ｍｇ／日の範囲の量、より好適には約５０−１８００ｍｇ／日の範囲の量であろう。成人一人当たりの典型的な投薬量範囲には、１日当たりの総投薬量が約１５０−１０００ｍｇ／日、好適には約１５０から約７５０ｍｇ／日の範囲が含まれ、それを１回の投薬または複数の投薬のいずれかで投与する。特定の態様では、投薬量を１日かけて分割、例えば１日当たりの推奨量を５回、４回、３回または２回などに分割するのが好適である。好適な投薬量には、１日当たり２回または１日当たり３回で約５０ｍｇから４５０ｍｇの投薬量が含まれる。即ち、投薬量を５０ｍｇ／日、１００ｍｇ／日、１５０ｍｇ／日、２００ｍｇ／日、２５０ｍｇ／日、３００ｍｇ／日、３５０ｍｇ／日、４００ｍｇ／日、４５０ｍｇ／日、５００ｍｇ／日またはそれ以上から選択してもよい。
【０１３７】
投与は、投薬量および治療すべき正確な疾患に応じて、日に１回、２回または３回の回数で１日から数日、数週、数カ月および数年の期間に渡るか或は当該患者の寿命に渡る期間でさえあってもよい。具体的な投与療法の持続期間は少なくとも約１日、１週間、約１−４週間、１−３カ月、１−６カ月、１−５０週間、１−１２カ月またはそれ以上の期間である。年齢が３カ月から年齢が１８歳の範囲の子供の場合の投薬量は、約１−２５ｍｇ／ｋｇ／日、好適には約２−１５ｍｇ／日の範囲であり、それを約２−４回、好適には３回に分ける。子供の場合の典型的な推奨投薬量には、５−１０ｍｇ／ｋｇ／日、２−４ｍｇ／ｋｇ／日が含まれ、それを２−３回に分ける。
【０１３８】
実用的に言えば、本発明の所定組成物もしくは活性薬剤の単位投与量を当該臨床医の判断、当該患者の必要性などに応じていろいろな投与計画で投与してもよい。通常の当業者は具体的な投与計画を認識しているか或は常規方法を用いてそれを実験的に決めてもよい。
【０１３９】
加うるに、ある被験体に投与すべきトルペリゾン組成物の投薬量を当該被験体が４−ＭＭＰＰＯに過度に接触しないように制限してもよい。好適な態様では、当該被験体に投与するトルペリゾン１回分当たりの４−ＭＭＰＰＯの量が４５μｇ未満になるようにし、当該被験体に１日当たりに投与される４−ＭＭＰＰＯの量が１３５μｇ未満になるようにする。また、４−ＭＭＰＰＯの濃度を当該被験体が許容し得る限界内に保持する目的で、ある被験体にトルペリゾンによる治療を受けさせる期間を比較的短く（２週間以下）にすることも可能である。
【０１４０】
以下の実施例に本発明の特定の面および利点を例示するが、しかしながら、本発明を決して以下に記述する特定の態様に限定するとして見なされるべきでない。
【０１４１】
本発明の実施では、特に明記しない限り、製薬学的製剤、分離、薬理学などの技術を用いるが、それらは本明細書に示す指針を基にして当該技術分野の技術の範囲内である。例えばＨａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｉｎｇ  Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｓ、Ｓ．Ｋ．Ｎｉａｚｉ（編集）、ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ、２００４；Ｇｏｏｄｍａｎ  ＆  Ｇｉｌｍａｎ、Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｕｔｉｃｓ、９版、Ｈａｒｍａｎ，Ｊ．Ｇ．、Ｇｉｌｍａｎ，Ａ．Ｇ．、Ｌｉｍｂｉｒｄ，Ｌ．Ｅ．（編集）、ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、１９９５；Ｂａｓｉｃ  ａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ、１８版、Ｋａｔｚｕｎｇ，Ｂ．Ｇ．（編集）、Ａｐｐｌｅｔｏｎ  ＆  Ｌａｎｇｅ、Ｎｏｒｗａｌｋ、ＣＮ、２００１を参照のこと。
【０１４２】
以下に示す実施例では、用いる数値（例えば量、温度など）に関して正確さを確保する努力を払ったが、ある程度の実験誤差および偏差を計上すべきである。以下の実施例は各々が本明細書に記述する態様の中の１つ以上を実施するに通常の当業者に有益であると考えている。
【実施例１】
【０１４３】
４−ＭＭＰＰＯ含有量に関する商業的トルペリゾン組成物の分析
トルペリゾン組成物をいろいろな商業的給源から入手して、４−ＭＭＰＰＯ含有量に関してＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳで分析した。
【０１４４】
この分析手順で用いるサンプル全部の調製を分析の目的で下記の如く実施した。必要ならば（例えば錠剤）、サンプルを均一にした後、重量を測定した。各トルペリゾンサンプル毎にサンプルを約２０ｍｇの量で２０ｍＬのフラスコに加えた。そのフラスコにＭｅＯＨ中５０ｍＭのＨＣｌを２０ｍＬ加えた後、そのフラスコを超音波浴の中に約５分間置いた。前記フラスコの内容物を渦巻き装置で約２０秒間混合した。トルペリゾンサンプルの初期形態が錠剤の場合、次に、その溶液を４０００ｒｐｍの遠心分離に２分間かけた。次に、そのサンプルを２００μＬの量で小型の遠心分離用円錐形瓶の中に移した。その瓶に重水素化４−ＭＭＰＰＯが入っている内部標準溶液を２０μＬ、ｐＨが１の緩衝液を２００μＬおよびジイソプロピルエーテル（ＤＩＰＥ）を０．４ｍＬ加えた。次に、そのサンプルをＤＶＸ−２５００多管渦巻き装置で約２分間渦巻き（２１００ｒｐｍ）撹拌（サイクル：５秒間の運転、１秒間の休止時間）した後に遠心分離（相分離）を４０００ｒｐｍで２分間実施することで抽出を行った。空の指定円錐形オートサンプラー瓶にＭｅＯＨ／ＤＭＳＯ（１／２）中５０ｍＭのＨＣｌを１５０μＬ加えた。遠心分離後、１００μＬの
上澄み液を前記円錐形オートサンプラー瓶の中に移した。前記瓶をクリンプ止めした後、ＤＶＸ−２５００多管渦巻き装置で約１分間渦巻き（２１００ｒｐｍ）撹拌した。次に、そのようにして調製したサンプルを７μＬの量でＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ装置の中に直接注入するか或はサンプルを分析まで−２０℃未満の温度で貯蔵した。４−ＭＭＰＰＯの分析で用いたクロマトグラフィー条件および質量分析パラメーターをそれぞれ以下の表１および２に示す。
【０１４５】
【表１】
2010525060.tif 000006
【０１４６】
【表２】
2010525060.tif 000007
【０１４７】
【表３】
2010525060.tif 000008
【０１４８】
本発明者らが開発した４−ＭＭＰＰＯ分析検定およびそれが極めて低い濃度の検出に敏感である結果として、この上の表に示したデータは、試験を受けさせた各サンプルに入っている４−ＭＭＰＰＯの量が有意な量でありかつ本明細書に記述する精製されたトルペリゾン製剤および以下の実施例に示す製剤に含まれている濃度より明らかに多いことを示していた。サンプル１、２、３、５および１０、１１、１２を最も注目すべきであり、これらの各々に含まれている４−ＭＭＰＰＯの濃度は驚くべきほど高い、即ち４−ＭＭＰＰＯの濃度は５０ｐｐｍ以上である。４−ＭＭＰＰＯは遺伝毒性と関連していることから、本発明者らは、４−ＭＭＰＰＯの濃度が現在の商業的製剤、例えばこの上に示した製剤などに入っている４−ＭＭＰＰＯ濃度より有意に低いトルペリゾン製剤を得ると言った差し迫った必要性が存在することを認識した。
【０１４９】
現在入手可能なトルペリゾン製剤が有するそのような欠点を認識したことで、本発明者らは、４−ＭＭＰＰＯの濃度が従来技術の製剤、例えば上述した製剤およびまた米国特許出願番号２００６／００４１１４１に記述されている製剤などに見られる濃度より有意に低い高純度のトルペリゾン組成物を提供する目的で探求をいろいろな方策で行ってそれに到達した。本明細書に示す製剤は、４−ＭＭＰＰＯの濃度が低い（即ち最小限）であることで４−ＭＭＰＰＯに関連した遺伝毒性副作用が従来技術の製剤（例えばこの上に例示した例で代表される製剤）が示すそれに比べて有意に低いと言った利点を有する。
【実施例２】
【０１５０】
トルペリゾンの標準的再結晶化
４−ＭＭＰＰＯを製造中に０．５重量％以上の濃度で含有するとして同定したトルペリゾンサンプルを出発材料として用いた（「粗」と呼ぶ）。粗トルペリゾンを２−ブタノン（メチルエチルケトン）とイソプロパノールが８５：１５（体積／体積）の混合物に還流下で３０分かけて溶解させた。その結果として生じた溶液を８０℃に冷却した後、その溶液を熱濾過した。次に、その濾過した溶液を５℃に冷却して更に７時間撹拌した。その結果として生じた結晶性沈澱物を濾過で分離した後、メチルエチルケトンで洗浄した。その
再結晶化材料を真空下４５−８５℃で乾燥させた。
【０１５１】
その再結晶化トルペリゾンはＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析を基にして４−ＭＭＰＰＯを０．１４重量％有し、次の製造バッチで検出した４−ＭＭＰＰＯの量は約０．０５％（５００ｐｐｍ）未満であったが、１０ｐｐｍ以下の所望濃度近くではなかった。それは、出発材料に含まれていた４−ＭＭＰＰＯの量が単一の再結晶化で実質的に除去可能な量より多いことが理由であるか、或は再結晶化生成物に残存メチルエチルケトンが存在したことでその生成物を乾燥させる目的で加熱した時に４−ＭＭＰＰＯの生成が助長されたか、或はそれらの組み合わせによるものである可能性がある。
【０１５２】
その結果として得た再結晶化トルペリゾンに入っている４−ＭＭＰＰＯの濃度は、４−ＭＭＰＰＯの濃度に関連した遺伝毒性副作用をもたらす可能性があることから、被験体に投与するには問題があると見なした。
【実施例３】
【０１５３】
トルペリゾンの多段階再結晶化
多段階（繰り返し）再結晶化を実施する以外は前記実施例２で用いた方策を繰り返した。
【０１５４】
【表４】
2010525060.tif 000009
【０１５５】
表４に示した結果から分かるであろうように、溶媒／溶媒系、例えばメチルエチルケトンおよびイソプロパノールなどを用いた多段階再結晶化は４−ＭＭＰＰＯが実質的に存在しないトルペリゾンを生じさせるに有効であり得る。
【実施例４】
【０１５６】
トルペリゾンの再結晶化に続く酸洗浄
４−ＭＭＰＰＯ含有量が０．０５重量％以上の粗トルペリゾンを２−ブタノン（ＭＥＫ）とイソプロパノールが８５：１５の混合物に入れて還流下で１２時間かけて溶解させた。温度を８０℃にまで下げた後の溶液を熱濾過した。その濾過した溶液を５℃に冷却して５℃で７時間撹拌した。
【０１５７】
結晶性沈澱物を濾過で分離し、１％ＨＣｌ／イソプロパノール混合物で洗浄した後、真空下４５から８５℃で乾燥させた。
【０１５８】
本発明者らは、図１および２に示すように、トルペリゾンの副反応が起こり得ることを認識したことを基にして、４−ＭＭＰＰＯの生成をもたらすトルペリゾンまたはそれの相当するα−ヒドロキシケトン副生成物いずれかのβ脱離が起こる度合を最小限にするには塩基を存在させないのが有益でありかつ生成物の再結晶化および／または洗浄を酸の存在
下で行うことに価値があることを認識した。
【０１５９】
その結晶化生成物に含まれる４−ＭＭＰＰＯの含有量はＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析を基にして１．５から１０ｐｐｍの範囲内であることを検出し、このことは、現在入手可能な商業的トルペリゾン製剤に比べて驚くべきほど有意な向上であることを示している。
【実施例５】
【０１６０】
酸性溶媒系を用いたトルペリゾンの再結晶化
粗トルペリゾンをＨＣｌを１％添加しておいた２−ブタノン（ＭＥＫ）とイソプロパノールが８５：１５（体積／体積）の混合物に入れて還流下で１２時間かけて溶解させた。温度を低くして８０℃にした後の溶液を熱濾過した。その溶液を５℃に冷却して５℃で７時間撹拌した。
【０１６１】
結晶性沈澱物を濾過で分離し、イソプロパノールで洗浄した後、真空下４５から８５℃で乾燥させたが、乾燥温度を低くする方が好適であった。
【０１６２】
再結晶化中に酸を存在させるとトルペリゾンが向上した安定性を示すことが分かった。再結晶化用混合物に濃ＨＣｌ水溶液を１％（体積／体積）添加すると最終的再結晶化トルペリゾン生成物に入っている４−ＭＭＰＰＯの濃度が６．６ｐｐｍ未満にまで降下した。
【実施例６】
【０１６３】
酸性溶媒系を用いたトルペリゾンの多段階再結晶化
粗トルペリゾン（ロットＳＰＨ−３０４７、バッチ１および２）をＨＣｌを１％添加しておいた２−ブタノン（ＭＥＫ）とイソプロパノールが８５：１５（体積／体積）の混合物に入れて還流下で１２時間かけて溶解させた。温度を低くして８０℃にした後の溶液を熱濾過した。その溶液を５℃に冷却して５℃で７時間撹拌した。
【０１６４】
結晶性沈澱物を濾過で分離し、イソプロパノールで洗浄した後、真空下４５から８５℃で乾燥させたが、温度を低くする方が好適であった。
【０１６５】
この上に示した再結晶化工程を４回繰り返した。
【０１６６】
【表５】
2010525060.tif 000010
【０１６７】
１回目の再結晶化を酸性条件下で行うと４−ＭＭＰＰＯの非常に有意な除去およびトルペリゾンの精製が起こることが分かったが、また、最終的薬剤生成物に入っている４−ＭＭＰＰＯの含有量を更に低くしようとする時には追加的再結晶化が有効であった。
【実施例７】
【０１６８】
トルペリゾン薬剤ロットに入っている４−ＭＭＰＰＯの濃度を製造錠剤に入っているそれと対比させて調査
【０１６９】
【表６】
2010525060.tif 000011
【０１７０】
トルペリゾンのロットを最終的製造錠剤製剤と同様に製造業者ＡおよびＢから入手した。分析を実施例１に記述したようにして実施することで薬剤のロットおよび最終的製造製剤の両方に入っている４−ＭＭＰＰＯの濃度を測定した。この上に示した表５を検査することで分かるであろうように、これらのケースの中のほぼ９０％において、薬剤のロット（ＡＰＩ、製造された薬剤自体、即ち添加剤、安定剤、賦形剤などが存在しない）を最終的製薬学的製剤（このケースでは錠剤）と比較することでこれらの４−ＭＭＰＰＯ濃度の方が注目すべきほど高いことが分かった。
【０１７１】
この検査の結果として、本発明者らは、４−ＭＭＰＰＯが薬剤のロットに存在すると言った問題ばかりでなく最終的製薬学的製剤に存在することも問題であることを認識した。この上に示した錠剤に関する結果を基にして、４−ＭＭＰＰＯはトルペリゾン（ＡＰＩ）製造時および／または精製中および／または構築（例えば混合）中に生じるばかりでなくまた最終的製薬学的製剤の貯蔵寿命中（即ち貯蔵時）にも分解物として生じると思われる。このように、このデータを基にして、本発明者らは、更に、トルペリゾン製造中または精製された薬剤生成物自体の中に生じる４−ＭＭＰＰＯの量を最小限にするばかりでなくまた最終的製薬学的製剤の貯蔵寿命に渡ってそれの中に生じる４−ＭＭＰＰＯの量を最小限にするのが有利であることを認識した。
【実施例８】
【０１７２】
瞬間放出カプレット製剤
無水クエン酸と２−ブタノンとイソプロピルアルコールの溶液を調製する。４−ＭＭＰ
ＰＯ含有量が１０ｐｐｍ未満の塩酸トルペリゾンを造粒機の中に移し、それの中に、この上で既に調製しておいた溶液を入れる。その混合物を均一にした後、乾燥機に入れて６０℃、より好適には４０℃で乾燥させる。生じた顆粒を１．８ｍｍのスクリーンに通してふるい分けする。二酸化ケイ素およびタルクを添加した後、同様に混合する。その後、その混合物をステアリン酸マグネシウムと一緒にして更に混合する。
【０１７３】
直径が８ｍｍで重量が１５５．８−１７２．２ｇの錠剤を製造する。その完成顆粒にヒプロメロース／フタル酸ヒプロメロースをエタノール／水、染料および添加剤に入れることで生じさせた懸濁液による被覆を温度が５５−６０℃の被覆用タンク内で受けさせる。その後、その被覆を受けさせた錠剤を室温で乾燥させる。
【実施例９】
【０１７４】
制御放出製剤
本明細書に記述した如き４−ＭＭＰＰＯ含有量が１０ｐｐｍのトルペリゾンを塩酸塩として混合装置にＥｕｄｒａｇｉｔ  ＲＳを無水クエン酸を添加しておいたブタノンに入れることで構成させた溶液と一緒に入れて顆粒状にする。その後、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  ＳおよびＥｕｄｒａｇｉｔ  Ｌを均一に混合し、その混合物を乾燥させた後、ふるい分けする。そのふるい分けした顆粒に製錠補助剤を加えた後、その顆粒を錠剤にする。直径が８ｍｍで重量が１９０ｍｇの錠剤を圧縮成形する。
【０１７５】
その後、前記錠剤にＥｕｄｒａｇｉｔ  Ｌと染料と多種多様な補助剤をブタノールに溶解させることで構成させた膜材料を用いたコーティング（「被覆」）を受けさせる。
【０１７６】
【表７】
2010525060.tif 000012
【図１】
2010525060.tif 000013
【図２】
2010525060.tif 000014
【国際調査報告】
2010525060.tif 000015
2010525060.tif 000016