(57)【要約】  ５−［４−（２−メチルフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル］−２，４−ジヒドロキシ−Ｎ−メチル−Ｎ−ブチルベンズアミドは、ＨＳＰ９０阻害剤であり、ＨＳＰ９０の阻害、調節および／または調整が関与する疾患の処置のための医薬を製造するために用いることができる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
化合物：５−［４−（２−メチルフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル］−２，４−ジヒドロキシ−Ｎ−メチル−Ｎ−ブチルベンズアミド、
またはその薬学的に使用し得る誘導体、塩、溶媒和物、互変異性体もしくは立体異性体、あるいはそれらの全ての比率での混合物。
【請求項２】
薬学的に使用し得る誘導体が、一および二リン酸誘導体、チオキソ誘導体、モノおよびジグルクロン酸誘導体の群から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
５−［４−（２−メチルフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル］−２，４−ジヒドロキシ−Ｎ−メチル−Ｎ−ブチルベンズアミド、および／またはその薬学的に使用し得る誘導体、塩、溶媒和物、互変異性体もしくは立体異性体、あるいはそれらの全ての比率での混合物、ならびに任意に賦形剤および／またはアジュバントを含む、医薬。
【請求項４】
５−［４−（２−メチルフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル］−２，４−ジヒドロキシ−Ｎ−メチル−Ｎ−ブチルベンズアミド、またはその薬学的に使用し得る誘導体、塩、溶媒和物、互変異性体もしくは立体異性体、あるいはそれらの全ての比率での混合物の、ＨＳＰ９０の阻害、調節および／または調整が関与する疾患の、処置および／または予防のための医薬の製造のための使用。
【請求項５】
５−［４−（２−メチルフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル］−２，４−ジヒドロキシ−Ｎ−メチル−Ｎ−ブチルベンズアミド、またはその薬学的に使用し得る誘導体、塩、溶媒和物、互変異性体もしくは立体異性体、あるいはそれらの全ての比率での混合物の、
腫瘍疾患、ウイルス疾患、移植における免疫抑制、炎症誘発性疾患、嚢胞性線維症、脈管形成が関与する疾患、感染症、自己免疫疾患、虚血、線維形成疾患の処置および／または予防のための、
神経再生の促進のための、
癌の増殖、腫瘍細胞および腫瘍転移の抑制のための、
化学療法による毒性から正常細胞を保護するための、
不正確なタンパク質の折りたたみまたは凝集が主要な原因因子である疾患の処置のための、
医薬の製造のための、請求項４に記載の使用。
【請求項６】
腫瘍疾患が、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨肉腫、脊索腫、血管肉腫、内皮肉腫、リンパ管肉腫、リンパ管内皮肉腫、骨膜腫、中皮腫、ユーイング腫瘍、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、大腸癌、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、扁平上皮癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳頭状癌、乳頭状腺癌、嚢胞腺癌、骨髄癌、気管支原生癌、腎細胞癌、肝細胞癌、胆管癌、絨毛癌、精上皮腫、胎生期癌、ウィルムス腫瘍、頸部癌、精巣腫瘍、肺癌、小細胞肺癌、膀胱癌、上皮癌、神経膠腫、星状細胞腫、髄芽細胞腫、頭蓋咽頭腫、脳室上衣細胞腫、松果体腫、血管芽細胞腫、聴神経腫、乏突起神経膠腫、髄膜腫、黒色腫、神経芽細胞腫、網膜芽細胞腫、白血病、リンパ腫、多発性骨髄腫、ワルデンストレームマクログロブリン血症、およびＨ鎖病である、請求項５に記載の使用。
【請求項７】
ウイルス疾患のウイルス病原体が、Ａ型肝炎、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、インフルエンザ、水痘、アデノウイルス、Ｉ型単純ヘルペス（ＨＳＶ−Ｉ）、ＩＩ型単純ヘルペス（ＨＳＶ−ＩＩ）、牛疫、ライノウイルス、エコーウイルス、ロタウイルス、呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）、パピローマウイルス、パポバウイルス、サイトメガロウイルス、エキノウイルス、アルボウイルス、ハンタウイルス、コクサッキーウイルス、耳下腺炎ウイルス、麻疹ウイルス、風疹ウイルス、ポリオウイルス、ヒトＩ型免疫不全ウイルス（ＨＩＶ−Ｉ）およびヒトＩＩ型免疫不全ウイルス（ＨＩＶ−ＩＩ）からなる群から選択される、請求項５に記載の使用。
【請求項８】
炎症誘発性疾患が、関節リューマチ、喘息、多発性硬化症、１型糖尿病、紅斑性狼瘡（エリテマトーデス）、乾癬、および炎症性腸疾患である、請求項５に記載の使用。
【請求項９】
脈管形成が関与する疾患が、糖尿病性網膜症、血管腫、子宮内膜症、および腫瘍脈管形成である、請求項５に記載の使用。
【請求項１０】
線維形成疾患が、硬腫、多発性筋炎、全身性狼瘡、肝硬変、ケロイド形成、間質性腎炎、および肺線維症である、請求項５に記載の使用。
【請求項１１】
不正確なタンパク質の折りたたみまたは凝集が主要な原因因子である疾患が、スクレイピー、クロイツフェルト−ヤコブ病、ハンチントン病またはアルツハイマー病である、請求項５に記載の使用。
【請求項１２】
５−［４−（２−メチルフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル］−２，４−ジヒドロキシ−Ｎ−メチル−Ｎ−ブチルベンズアミド、および／またはその薬学的に使用し得る誘導体、塩、溶媒和物、互変異性体および立体異性体、またはそれらの全ての比率での混合物、および少なくとも１種のさらなる医薬活性成分を含む、医薬。
【請求項１３】
（ａ）有効量の５−［４−（２−メチルフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル］−２，４−ジヒドロキシ−Ｎ−メチル−Ｎ−ブチルベンズアミド、および／またはその薬学的に使用し得る誘導体、塩、溶媒和物、互変異性体および立体異性体、またはそれらの全ての比率での混合物の、
および
（ｂ）有効量のさらなる医薬活性成分
の個別のパックからなるセット（キット）。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の背景
本発明は、価値ある特性を有する新規化合物、特に医薬の製造に用いることができる化合物を見出すとの目的に基づく。
本発明は、ＨＳＰ９０の阻害、調節および／または調整が関与する化合物に関し、さらにこの化合物を含む医薬組成物に関し、およびＨＳＰ９０が関与する疾患の処置のための前記化合物の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
細胞におけるタンパク質の正しい折りたたみ(folding)および立体配座(conformation)は、分子シャペロンにより確保されており、タンパク質の合成と分解の間の平衡を調節するのに重要である。シャペロンは、例えば細胞増殖およびアポトーシスなどの、細胞の多くの中心的機能の調節に重要である（Jolly and Morimoto, 2000；Smith et al., 1998; Smith, 2001）。
【０００３】
熱ショックタンパク質
組織の細胞は、例えば熱、低酸素、酸化ストレスなどの外的ストレス、または例えば重金属もしくはアルコールなどの毒性物質に対して、「熱ショックタンパク質（ＨＳＰ）」の名称で知られている多数のシャペロンを活性化させて反応する。ＨＳＰの活性化は、かかるストレス因子による損傷から細胞を保護し、生理学的状態の回復を促進し、細胞のストレス耐性状態をもたらす。ＨＳＰにより促進される、外的ストレスに対するこの最初に発見された防御機構に加えて、時とともに、個別のＨＳＰに対し、さらなる重要なシャペロン機能がストレスのない通常状態において記載されている。したがって種々のＨＳＰは、例えば、細胞の生物学的に重要な多数のタンパク質の、正しい折りたたみ、細胞内局在や機能、または調節された分解などを調節している。ＨＳＰは、異なる細胞においてその細胞発現や機能、局在化が異なる個別の遺伝子産物を有する、遺伝子ファミリーを形成する。ファミリー内での名称および分類は、その分子量に基づき、例えばＨＳＰ２７、ＨＳＰ７０、およびＨＳＰ９０などである。
【０００４】
いくつかのヒト疾患は、タンパク質の誤った折りたたみ（例えばTytell et al., 2001；Smith et al., 1998の概説を参照）に基づく。シャペロンに依存したタンパク質の折りたたみの機構に関わる治療法の開発は、したがって、そのようなケースにおいて有用となり得る。例えば、誤った折りたたみのタンパク質は、アルツハイマー病、プリオン病またはハンチントン症候群の場合には、神経変性の進行を伴うタンパク質の凝集をもたらす。誤った折りたたみのタンパク質はまた、野生型機能の消失ももたらし、その結果、分子および生理学的機能の誤った調節が生じる。
【０００５】
ＨＳＰは、腫瘍疾患においても重要性を有する。例えば、ある種のＨＳＰの発現が、腫瘍の進行ステージと相関することが指摘されている（Martin et al., 2000；Conroy et al., 1996；Kawanishi et al., 1999；Jameel et al., 1992；Hoang et al., 2000；Lebeau et al., 1991）。
ＨＳＰ９０が細胞の多数の中心的発癌性シグナル伝達経路に関与し、癌阻害活性を有するある天然の産物がＨＳＰ９０を標的とするとの事実は、ＨＳＰ９０の機能の阻害が、腫瘍疾患の処置に感受性があるであろうと考えさせる。ＨＳＰ９０阻害剤である、ゲルダナマイシンの誘導体１７−アリルアミノ−１７−デメトキシゲルダナマイシン（１７ＡＡＧ）は、現在臨床試験されている。
【０００６】
ＨＳＰ９０
ＨＳＰ９０は、全細胞タンパク質質量の約１〜２％を占める。これは通常、細胞内で二量体の形態であり、タンパク質の多様性に関与し、いわゆるコシャペロンである（例えばPratt, 1997参照）。ＨＳＰ９０は細胞の活力に不可欠であり（Young et al., 2001）、細胞ストレスに対する応答において、その天然の折りたたみが熱ショックなどの外的ストレスにより変更させられた多くのタンパク質と相互作用することにより、重要な役割を果たして、元の折りたたみを回復させるか、またはタンパク質の凝集を妨げる（Smith et al., 1998）。
【０００７】
ＨＳＰ９０は、おそらくは、突然変異による誤ったタンパク質の折りたたみを正すことによって、突然変異の効果に対する緩衝装置としても重要であるとの指摘がある（Rutherford and Lindquist, 1998）。さらに、ＨＳＰ９０は、調節的な重要性も有する。生理学的条件下において、ＨＳＰ９０は、その相同体と共に細胞小胞体ＧＲＰ９４において、立体配座の安定性を保証するため、および種々の重要なクライアントタンパク質を成熟させるための、細胞の平衡にも関与する。これらは、３つのグループに分けられる：ステロイドホルモン、Ｓｅｒ／Ｔｈｒまたはチロシンキナーゼの受容体（例えばＥＲＢＢ２、ＲＡＦ−１、ＣＤＫ４およびＬＣＫ）；および例えば変異ｐ５３などの、種々のタンパク質のコレクション；またはテロメラーゼｈＴＥＲＴの触媒サブユニット。これらタンパク質の各々は、細胞の生理学的および生化学的プロセスの調節に重要な役割を果たす。ヒトにおける保存されたＨＳＰ９０ファミリーは、４つの遺伝子からなる：細胞質ＨＳＰ９０α、誘導性ＨＳＰ９０βアイソフォーム（Hickey et al., 1989）、細胞小胞体のＧＲＰ９４（Argon et al., 1999）、およびミトコンドリアマトリクスのＨＳＰ７５／ＴＲＡＰ１（Felts et al., 2000）。ファミリーの全メンバーは、作用の類似モードを有するが、しかし、その細胞内での局在化に応じて、異なるクライアントタンパク質に結合する。例えば、ＥＲＢＢ２はＧＲＰ９４の特異的なクライアントタンパク質であり（Argon et al., 1999）、一方腫瘍壊死因子の１型受容体（ＴＮＦＲ１）または網膜芽細胞腫タンパク質（Ｒｂ）は、ＴＲＡＰ１のクライアントであることが見出された（Song et al., 1995；Chen et al., 1996）。
【０００８】
ＨＳＰ９０は、多数のクライアントタンパク質および調節タンパク質との多くの複雑な相互作用に関与する（Smith, 2000）。正確な分子的詳細はまだ明らかにされていないが、近年の生化学的実験およびＸ線結晶学の支援による研究により、次第にＨＳＰ９０のシャペロン機能の詳細が解読できるようになってきた（Prodromou et al., 1997；Stebbins et al., 1997）。それにより、ＨＳＰ９０は、ＡＴＰ依存性分子シャペロンであり（Prodromou et al, 1997）、二量体化がＡＴＰ加水分解に重要である。ＡＴＰの結合はドーナツ型の二量体構造の形成をもたらし、この中で２つのＮ末端ドメインが互いに密接に接触して、立体配座におけるスイッチとして作用する（Prodromou and Pearl, 2000）。
【０００９】
既知のＨＳＰ９０阻害剤
発見された第１のクラスのＨＳＰ９０阻害剤は、化合物ハービマイシンＡおよびゲルダナマイシンを伴うベンゾキノンアンサマイシンであった。最初に、ｖ−Ｓｒｃオンコジーンによる形質転換により誘発された、線維芽細胞における悪性表現型の復帰突然変異（reversion）が、それらと共に発見された（Uehara et al., 1985）。
次に強力な抗腫瘍活性が、in vitro（Schulte et al., 1998）で、およびin vivoの動物モデルにおいて（Supko et al., 1995）実証された。
【００１０】
そして免疫沈降および親和性マトリクスの研究により、ゲルダナマイシンの作用の主要なメカニズムに、ＨＳＰ９０への結合が関与することが示された（Whitesell et al., 1994；Schulte and Neckers, 1998）。さらに、Ｘ線結晶学研究により、ゲルダナマイシンがＡＴＰ結合部位に対して競合し、ＨＳＰ９０の内因性ＡＴＰアーゼ活性を阻害することが示された（Prodromou et al., 1997；Panaretou et al., 1998）。これは、クライアントタンパク質に対するシャペロンとして機能するその特性により、多量体ＨＳＰ９０複合体の形成を妨害する。その結果、クライアントタンパク質がユビキチン−プロテアソーム経路を介して分解される。
【００１１】
ゲルダナマイシン誘導体１７−アリルアミノ−１７−デメトキシゲルダナマイシン（１７ＡＡＧ）は、ＨＳＰ９０の阻害下においても不変の特性、すなわちクライアントタンパク質の分解ならびに、細胞培養物中および異種移植腫瘍モデルにおける抗腫瘍活性（Schulte et al., 1998；Kelland et al., 1999）を示したが、しかし、ゲルダナマイシンよりも顕著に低い肝臓毒性を有していた（Page et al., 1997）。１７ＡＡＧは現在、第Ｉ／ＩＩ相の臨床試験中である。
大環状抗生物質であるラディシコールも同様に、線維芽細胞のｖ−Ｓｒｃおよびｖ−Ｈａ−Ｒａｓ誘発性の悪性表現型の復帰突然変異を示す（Kwon et al., 1992；Zhao et al., 1995）。ラディシコールは、ＨＳＰ９０の阻害の結果、多数のシグナルタンパク質を分解する（Schulte et al., 1009）。Ｘ線結晶解析により、ラディシコールも同様にＨＳＰ９０のＮ末端ドメインに結合し、内因性ＡＴＰアーゼ活性を抑制することが示された（Roe et al., 1998）。
【００１２】
クマリン型の抗生物質は、知られているように、バクテリア内のＨＳＰ９０相同体ＤＮＡギラーゼのＡＴＰ結合部位に結合する。クマリンであるノボビオシンは、ＨＳＰ９０のカルボキシ末端、すなわち、ＨＳＰ９０のＮ末端に結合するベンゾキノン−アンサマイシンおよびラディシコールとは別のＨＳＰ９０の部位に結合する（Marcu et al., 2000b）。
ノボビオシンによるＨＳＰ９０の阻害は、多数のＨＳＰ９０依存性シグナルタンパク質の分解を引き起こす（Marcu et al., 2000a）。
例えばＥＲＢＢ２などのシグナルタンパク質の分解は、プリン由来のＨＳＰ９０阻害剤であるＰＵ３を用いて実証された。ＰＵ３は、乳癌細胞系において細胞周期の停止および分化を引き起こす（Chiosis et al., 2001）。
【００１３】
治療標的としてのＨＳＰ９０
腫瘍の表現型において非常に重要である多数のシグナル伝達経路の調節にＨＳＰ９０が関わっていること、またある天然産物が、ＨＳＰ９０の活性の阻害を通してそれらの生物学的効果を発揮するとの発見により、現在ＨＳＰ９０は、腫瘍治療剤の開発の新規な標的として試験されている（Neckers et al., 1999）。
【００１４】
ゲルダナマイシン１７ＡＡＧおよびラディシコールの主要なメカニズムには、ＡＴＰの、タンパク質のＮ末端のＡＴＰ結合部位への結合の阻害、およびその結果としての、ＨＳＰ９０の内因性ＡＴＰアーゼ活性の阻害が含まれる（例えばProdromou et al., 1997；Stebbins et al., 1997；Panaretou et al., 1998を参照のこと）。ＨＳＰ９０のＡＴＰアーゼ活性の阻害は、コシャペロンの動員を妨げ、ＨＳＰ９０ヘテロ複合体の形成を有利にし、これは、クライアントタンパク質を、ユビキチン−プロテアーゼ経路を介して分解させる（例えばNeckers et al., 1999；Kelland et al., 1999を参照のこと）。ＨＳＰ９０阻害剤を用いて腫瘍細胞を処置することにより、細胞増殖、細胞周期およびアポトーシスの調節などのプロセスに対して、基本的な重要性を有する重要なタンパク質の選択的分解がもたらされる。これらのプロセスは、腫瘍においてはしばしば調節が解除される（例えばHostein et al., 2001参照）。ＨＳＰ９０の阻害剤の開発についての魅力的な理論的根拠は、強力な腫瘍治療活性が、形質転換された表現型に関連する多数のタンパク質の同時分解により実現できることである。
【００１５】
詳細には、本発明は、ＨＳＰ９０を阻害、調節および／または調整する化合物、この化合物を含む医薬組成物、およびＨＳＰ９０が誘発する疾患の処置のためのこれらの使用に関し、前記疾患とは例えば以下である：腫瘍疾患、ウイルス疾患、例えばＢ型肝炎（Waxman, 2002）；移植における免疫抑制（Bijlmakers, 2000およびYorgin, 2000）；炎症誘発性疾患（Bucci, 2000）、例えば関節リューマチ、喘息、多発性硬化症、１型糖尿病、紅斑性狼瘡（エリテマトーデス）、乾癬および炎症性腸疾患；嚢胞性繊維症（Fuller, 2000）；脈管形成が関与する疾患（Hur, 2002およびKurebayashi, 2001）、例えば糖尿病性網膜症、血管腫、子宮内膜症、および腫瘍脈管形成；感染症；自己免疫疾患；虚血；神経再生の促進（Rosen et al., WO 02/09696；Degranco et al., WO 99/51223；Gold, US 6,210,974 B1）；線維形成疾患（fibrogenetic disease）、例えば、硬腫、多発性筋炎、全身性狼瘡、肝硬変、ケロイド形成、間質性腎炎、および肺線維症（Strehlow, WO 02/02123）。
【００１６】
本発明はまた、本発明による化合物の、化学療法による毒性から正常細胞を保護するための使用に、および、タンパク質の誤った折りたたみまたは凝集が主要な原因因子である疾患、例えば、スクレイピー、クロイツフェルト−ヤコブ病、ハンチントン病またはアルツハイマー病（Sittler, Hum. Mol. Genet., 10, 1307, 2001；Tratzelt et al., Proc. Nat. Acad. Sci., 92, 2944, 1995；Winklhofer et al., J. Biol. Chem., 276, 45160, 2001）における使用に関する。WO 01/72779には、プリン化合物およびその使用であって、ＧＲＰ９４（ＨＳＰ９０の相同体またはパラログ（paralogue））誘発性の疾患、例えば腫瘍疾患などの、癌組織が以下からから選択される肉腫または癌腫を含むものの処置のための、前記使用について記載されている：線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨肉腫、脊索腫、血管肉腫、内皮肉腫、リンパ管肉腫、リンパ管内皮肉腫、
【００１７】
骨膜腫、中皮腫、ユーイング腫瘍、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、大腸癌、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、扁平上皮癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳頭状癌、乳頭状腺癌、嚢胞腺癌、骨髄癌（bone marrow carcinoma）、気管支原生癌、腎細胞癌、肝細胞癌、胆管癌、絨毛癌、精上皮腫、胎生期癌、ウィルムス腫瘍、頸部癌、精巣腫瘍、肺癌、小細胞肺癌、膀胱癌、上皮癌、神経膠腫、星状細胞腫、髄芽細胞腫、頭蓋咽頭腫、脳室上衣細胞腫、松果体腫、血管芽細胞腫、聴神経腫、乏突起神経膠腫、髄膜腫、黒色腫、神経芽細胞腫、網膜芽細胞腫、白血病、リンパ腫、多発性骨髄腫、ワルデンストレームマクログロブリン血症、およびＨ鎖病。
【００１８】
A. Kamal et al.によるTrends in Molecular Medicine, Vol. 10 No. 6 June 2004には、ＨＳＰ９０活性化の、特に中枢神経系の疾患および循環器疾患の処置のための、治療的および診断的用途が記載されている。
したがって、ＨＳＰ９０を特異的に阻害、調節および／または調整する小化合物の同定は望ましく、本発明の目的である。
【００１９】
５−［４−（２−メチルフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル］−２，４−ジヒドロキシ−Ｎ−メチル−Ｎ−ブチルベンズアミドおよびその塩類が、良好に耐容されつつ、非常に価値ある薬理学的特性を有することが見出された。特に、これはＨＳＰ９０阻害特性を示す。
したがって本発明は、前記疾患の処置および／または予防における医薬および／または医薬活性成分としての５−［４−（２−メチルフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル］−２，４−ジヒドロキシ−Ｎ−メチル−Ｎ−ブチルベンズアミドに、ならびに、５−［４−（２−メチルフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル］−２，４−ジヒドロキシ−Ｎ−メチル−Ｎ−ブチルベンズアミドの、前記疾患の処置および／または予防のための薬剤の製造のための使用に、ならびにまた、前記疾患の処置のための方法であって、５−［４−（２−メチルフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル］−２，４−ジヒドロキシ−Ｎ−メチル−Ｎ−ブチルベンズアミドを、かかる投与が必要な患者に投与することを含む前記方法に関する。
【００２０】
宿主または患者は、任意の哺乳類種に属してよく、例えば、霊長類種、特にヒト；マウス、ラットおよびハムスターを含むげっ歯類；ウマ、ウシ、イヌ、ネコなどである。動物モデルは、実験的研究において興味深く、ここで動物モデルはヒト疾患の処置のためのモデルを提供する。
【００２１】
従来技術
WO 2006/087077には、ＨＳＰ９０阻害剤としてのトリアゾール誘導体が記載されている。本発明は、これに対する選択発明とみなされるべきである。これから言及すべき最も近い従来技術は、化合物５−［４−（２−メチルフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル］−２，４−ジヒドロキシ−Ｎ−メチル−Ｎ−プロピルベンズアミド（“Ａ４７”）である。
【００２２】
WO 00/53169には、クマリンまたはクマリン誘導体によるＨＳＰ９０の阻害が記載されている。
WO 03/041643 A2には、ＨＳＰ９０を阻害するゼアララノール誘導体が開示されている。
３−または５位において芳香族基により置換された、ＨＳＰ９０を阻害するピラゾール誘導体は、WO 2004/050087 A1およびWO 2004/056782 A1に開示されている。
WO 03/055860 A1には、ＨＳＰ９０阻害剤としての３，４−ジアリールピラゾールが記載されている。
ＨＳＰ９０阻害特性を有するプリン誘導体は、WO 02/36075 A2に開示されている。
【００２３】
WO 01/72779には、プリン化合物およびその使用であって、ＧＲＰ９４（ＨＳＰ９０の相同体またはパラログ）誘発性の疾患、例えば腫瘍疾患などの、癌組織が以下からから選択される肉腫または癌腫を含むものの処置のための、前記使用について記載されている：線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨肉腫、脊索腫、血管肉腫、内皮肉腫、リンパ管肉腫、リンパ管内皮肉腫、骨膜腫、中皮腫、ユーイング腫瘍、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、大腸癌、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、扁平上皮癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳頭状癌、乳頭状腺癌、嚢胞腺癌、骨髄癌、気管支原生癌、腎細胞癌、肝細胞癌、胆管癌、絨毛癌、精上皮腫、胎生期癌、ウィルムス腫瘍、頸部癌、精巣腫瘍、肺癌、小細胞肺癌、膀胱癌、上皮癌、神経膠腫、星状細胞腫、髄芽細胞腫、頭蓋咽頭腫、脳室上衣細胞腫、松果体腫、血管芽細胞腫、聴神経腫、乏突起神経膠腫、髄膜腫、黒色腫、神経芽細胞腫、網膜芽細胞腫、白血病、リンパ腫、多発性骨髄腫、ワルデンストレームマクログロブリン血症、およびＨ鎖病。
【００２４】
WO 01/72779にはさらに、その中で言及されている化合物の、ウイルス疾患の処置のための使用が開示されており、ここでウイルス病原体は、Ａ型肝炎、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、インフルエンザ、水痘、アデノウイルス、Ｉ型単純ヘルペス（ＨＳＶ−Ｉ）、ＩＩ型単純ヘルペス（ＨＳＶ−ＩＩ）、牛疫、ライノウイルス、エコーウイルス、ロタウイルス、呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）、パピローマウイルス、パポバウイルス、サイトメガロウイルス、エキノウイルス、アルボウイルス、ハンタウイルス、コクサッキーウイルス、耳下腺炎ウイルス、麻疹ウイルス、風疹ウイルス、ポリオウイルス、ヒトＩ型免疫不全ウイルス（ＨＩＶ−Ｉ）およびヒトＩＩ型免疫不全ウイルス（ＨＩＶ−ＩＩ）からなる群から選択される。
【００２５】
WO 01/72779にはさらに、その中で言及されている化合物の、ＧＲＰ９４の調節のための使用が開示されており、ここで調節された生物学的ＧＲＰ９４活性は、個人における免疫反応、小胞体からのタンパク質輸送、低酸素／無酸素ストレスからの回復、栄養失調からの回復、熱ストレスからの回復、もしくはこれらの組合せを引き起こし、および／または、ここで疾患が、癌、感染症、小胞体からのタンパク質輸送の破壊に関連する疾患、虚血／再灌流に関連する疾患の種類、もしくはこれらの組合せである場合であり、ここで虚血／再灌流に関連する疾患が、心停止、アジストリーおよび心室性不整脈遅延、心臓手術、心肺バイパス手術、臓器移植、脊髄外傷、頭部外傷、卒中、血栓塞栓性卒中、出血性脳卒中、脳血管けいれん、低血圧、低血糖、てんかん重積症、てんかん発作、不安神経症、統合失調症、神経変性疾患、アルツハイマー病、ハンチントン病、筋萎縮性側策硬化症（ＡＬＳ）もしくは新生児ストレスの結果生じた場合である。
【００２６】
最後に、WO 01/72779には、ＧＲＰ９４タンパク質調節剤の有効量の、個人の組織部位において虚血状態への続く細胞反応を変化させるための医薬の製造のための使用であって、該組織部位の細胞のＧＲＰ９４タンパク質調節剤による処置により、細胞内でのＧＲＰ９４活性を、続く虚血状態への細胞反応を変化させる程度に高めるための前記使用が記載されており、ここで続く虚血状態は好ましくは、心停止、アジストリーおよび心室性不整脈遅延、心臓手術、心肺バイパス手術、臓器移植、脊髄外傷、頭部外傷、卒中、血栓塞栓性卒中、出血性脳卒中、脳血管けいれん、低血圧、低血糖、てんかん重積症、てんかん発作、不安神経症、統合失調症、神経変性疾患、アルツハイマー病、ハンチントン病、筋萎縮性側策硬化症（ＡＬＳ）または新生児ストレスによるものであり、またはここで、組織部位は移植についてのドナーの組織である。
【００２７】
下記の明細書には、ＨＳＰ９０阻害剤ゲルダナマイシンと、他の医薬活性成分との組合せが記載されている：WO 2004/108080 A2；WO 2005/002506 A2；WO 2005/000211 A2；WO 2005/000212 A2；WO 2005/000213 A2；WO 2005/000214 A2；WO 2005/000314 A1。
【００２８】
さらなる文献は以下である：
【表１】
2010516639.tif 000002
【００２９】
【表２】
2010516639.tif 000003
【００３０】
【表３】
2010516639.tif 000004
【００３１】
【表４】
2010516639.tif 000005
【００３２】
【表５】
2010516639.tif 000006
【００３３】
【表６】
2010516639.tif 000007
【００３４】
【表７】
2010516639.tif 000008
【００３５】
【表８】
2010516639.tif 000009
【発明の概要】
【００３６】
本発明は、化合物５−［４−（２−メチルフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル］−２，４−ジヒドロキシ−Ｎ−メチル−Ｎ−ブチルベンズアミド、およびその薬学的に使用し得る誘導体、塩、溶媒和物、互変異性体および立体異性体、ならびにそれらの全ての比率での混合物に関する。
【００３７】
特に、本発明は、化合物５−［４−（２−メチルフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル］−２，４−ジヒドロキシ−Ｎ−メチル−Ｎ−ブチルベンズアミド、およびその薬学的に使用し得る誘導体、互変異性体および立体異性体、ならびにそれらの全ての比率での混合物に関する。
【００３８】
本発明は特に好ましくは、化合物５−［４−（２−メチルフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル］−２，４−ジヒドロキシ−Ｎ−メチル−Ｎ−ブチルベンズアミド、およびその一および二リン酸誘導体、チオキソ誘導体、モノおよびジグルクロン酸誘導体、互変異性体および立体異性体、ならびにそれらの全ての比率での混合物に関する。
【００３９】
本発明はさらに特に好ましくは、化合物５−［４−（２−メチルフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル］−２，４−ジヒドロキシ−Ｎ−メチル−Ｎ−ブチルベンズアミドに関する。
【００４０】
本発明はまた、これらの化合物の水和物および溶媒和物に関する。化合物の溶媒和物とは、相互の引力により形成される、化合物への不活性溶媒分子の付加を意味すると解釈される。溶媒和物は、例えば、一水和物または二水和物またはアルコラートである。
【００４１】
本発明による化合物はまた、次の互変異性体形態で存在してもよい。
【化１】
2010516639.tif 000010
【００４２】
薬学的に使用し得る誘導体とは、例えば、本発明の化合物の塩を意味すると解釈され、また、いわゆるプロドラッグ化合物でもある。
プロドラッグ誘導体とは、例えば、アルキルまたはアシル基、糖またはオリゴペプチドにより修飾されており、本発明の活性な化合物を生じさせるために生物内で急速に開裂する、本発明の化合物を意味すると解釈される。
これらはまた、例えば、Int. J. Pharm. 115, 61-67 (1995)に記載されているように、本発明の化合物の生分解性ポリマー誘導体も含む。
【００４３】
特に好ましいプロドラッグは、例えば一および／または二リン酸エステル誘導体などのリン酸エステル誘導体；例えばモノおよび／またはジグルクロニドまたは５−チオキソ誘導体などの糖誘導体である。
【００４４】
表現「有効量」は、組織、系、動物またはヒトにおいて、例えば、研究者または医者により求められまたは望まれる、生物学的または医学的応答をもたらす医薬または医薬活性成分の量を意味する。加えて、表現「治療有効量」は、この量を受けていない対応する対象に比べて、以下の結果を生じる量を意味する：疾患、疾患ピクチャー、病態、愁訴、障害または副作用の改善された治療処置、治癒、予防または除去、あるいはまた、疾患、愁訴または障害の進行の低減。
【００４５】
用語「治療有効量」はまた、正常な生理機能を増加させるのに効果的な量も包含する。
【００４６】
本発明はまた、本発明の化合物の混合物、例えば、１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：１０、１：１００または１：１０００の比率の２種のジアステレオマーの混合物に関する。
これらは、特に好ましくは立体異性体化合物の混合物である。
【００４７】
本発明の化合物およびこれらの製造のための出発物質は、さらに、文献（例えば、Houben-Weyl, Methoden der organischen Chemie （有機化学の方法）, Georg-Thieme-Verlag, Stuttgartなどの標準的文献）に記載されているそれ自体知られている方法により、正確には該反応に対して知られている好適な反応条件のもとで、製造される。本明細書では詳細に触れていないが、それ自体が知られている変法も用いることができる。
【００４８】
所望であれば、出発物質の生成をin situで行うことができるところ、この場合には反応混合物から単離する代わりに、本発明の化合物への変換を直ちに行う。
【００４９】
出発化合物は一般に知られている。しかし、それらが新規の場合は、それ自体知られている方法により製造することができる。
【００５０】
本発明の化合物は、WO 2006/087077に記載されている方法により製造される。
【００５１】
反応は、当業者に公知の方法により行われる。反応は、好適な不活性溶媒中で行われる。
【００５２】
好適な不活性溶媒の例は、ヘキサン、石油エーテル、ベンゼン、トルエンまたはキシレンなどの炭化水素類；トリクロロエチレン、１，２−ジクロロエタン、四塩化炭素、クロロホルムまたはジクロロメタンなどの塩素化炭化水素類；メタノール、エタノール、イソプロパノール、ｎ−プロパノール、ｎ−ブタノールまたはｔｅｒｔ−ブタノールなどのアルコール類；ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）またはジオキサンなどのエーテル類；エチレングリコールモノメチルまたはモノエチルエーテル、エチレングリコールジメチルエーテル（ジグリム）などのグリコールエーテル類；アセトンまたはブタノンなどのケトン類；アセトアミド、ジメチルアセトアミドまたはジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）などのアミド類；アセトニトリルなどのニトリル類；ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）などのスルホキシド類；二硫化炭素；ギ酸または酢酸などのカルボン酸類；ニトロメタンまたはニトロベンゼンなどのニトロ化合物；酢酸エチルなどのエステル類、または前記溶媒の混合物である。
特に好ましい溶媒は、例えばテトラヒドロフランである。
【００５３】
用いる条件に依存して、反応時間は数分間〜１４日間であり、反応温度は約−３０°〜１４０°、通常は−１０°〜１３０°、特に約３０°〜約１２５°である。
保護基は、当業者に公知の方法により除去する。例えばメチルエーテルなどのエーテルの開裂は、上記のような好適な溶媒中で、好ましくは三臭化ホウ素の付加により行う。
【００５４】
反応は、特に好ましくは、ジクロロメタン中、約−３０°〜５０°、通常は−２０°〜２０°、特に約−１５°〜約０°の反応温度で行う。
本発明の化合物はさらに、これらをその官能性誘導体から、加溶媒分解により、特に加水分解、または水素化分解により遊離することにより得ることができる。
【００５５】
加溶媒分解または水素化分解のための好ましい出発物質は、対応する保護アミノおよび／またはヒドロキシル基を、１または２以上の遊離のアミノおよび／またはヒドロキシル基の代わりに含むもの、好ましくはアミノ保護基を、Ｎ原子に結合したＨ原子の代わりに含むもの、例えば、式Ｉに適合するものであって、ただしＮＨＲ’基（式中Ｒ’はアミノ保護基、例えばＢＯＣまたはＣＢＺを表わす）をＮＨ２基の代わりに含むものである。
【００５６】
さらに好ましいのは、ヒドロキシル保護基をヒドロキシル基のＨ原子の代わりに含む出発物質、例えば、式Ｉに適合するものであって、ただしＲ”Ｏ−フェニル基（式中Ｒ”はヒドロキシル保護基を表わす）をヒドロキシフェニル基の代わりに含むものである。
複数の、−同一または異なる−保護アミノおよび／またはヒドロキシル基が、出発物質の分子中に存在することも可能である。存在する保護基が互いに異なる場合、これらは多くの場合、選択的に開裂して除去することができる。
【００５７】
用語「アミノ保護基」は一般用語において知られており、化学反応に対してアミノ基を保護する（ブロックする）のに好適であるが、分子内の別の部位で所望の化学反応が行われた後には容易に除去される基に関する。代表的なかかる基は、特に、非置換または置換アシル、アリール、アラルコキシメチルまたはアラルキル基である。アミノ保護基は所望の反応（または反応順序）の後に除去されるため、それらの種類および大きさは重要ではない；しかし、１〜２０個の、特に１〜８個の炭素原子を有するものが好ましい。用語「アシル基」は、本方法との関連において最も広い意味で理解される。これには、脂肪族、脂環式、芳香族または複素環カルボン酸もしくはスルホン酸に由来するアシル基を、特に、アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニルおよび特にアラルコキシカルボニル基を含む。かかるアシル基の例は、アルカノイル、例えばアセチル、プロピオニルおよびブチリル；アラルカノイル、例えばフェニルアセチル；およびアロイル、例えばベンゾイルおよびトリル；アリールオキシアルカノイル、例えばＰＯＡ；アルコキシカルボニル、例えばメトキシカルボニル、エトキシカルボニル、２，２，２−トリクロロエトキシカルボニル、ＢＯＣおよび２−ヨードエトキシカルボニル；アラルコキシカルボニル、例えばＣＢＺ（「カルボベンゾキシ」）、４−メトキシ−ベンジルオキシカルボニルおよびＦＭＯＣ；およびアリールスルホニル、例えばＭｔｒ、ＰｂｆまたはＰｍｃである。好ましいアミノ保護基はＢＯＣおよびＭｔｒであり、さらにＣＢＺ、Ｆｍｏｃ、ベンジルおよびアセチルである。
【００５８】
用語「ヒドロキシル保護基」は、同様に一般用語において知られており、化学反応に対してヒドロキシル基を保護するのに好適であるが、分子内の別の部位で所望の化学反応が行われた後には容易に除去される基に関する。代表的なかかる基は、上記の非置換または置換アリール、アラルキルまたはアシル基であり、さらにまたアルキル基である。ヒドロキシル保護基は所望の反応または反応順序の後に除去されるため、それらの性質および大きさは重要ではない；しかし、１〜２０個の、特に１〜１０個の炭素原子を有する基が好ましい。ヒドロキシル保護基の例は、特に、ベンジル、ｐ−ニトロベンゾイル、ｐ−トルエンスルホニル、ｔｅｒｔ−ブチルおよびアセチルであり、ここでベンジルおよびｔｅｒｔ−ブチルが特に好ましい。ＣＯＯＨ基は好ましくは、そのｔｅｒｔ−ブチルエステルの形態において保護される。
【００５９】
本発明の化合物をその官能性誘導体から遊離するが、このとき、−用いる保護基に依存して−、例えば強酸類を用いて、有利にはＴＦＡまたは過塩素酸を用いて、さらにまた他の強無機酸類、例えば塩酸もしくは硫酸、強有機カルボン酸類、例えばトリクロロ酢酸、またはスルホン酸類、例えばベンゼン−もしくはｐ−トルエンスルホン酸を用いて、遊離する。追加の不活性溶媒を存在させることも可能であるが、常に必要ではない。好適な不活性溶媒は、好ましくは有機の、例えば、酢酸などのカルボン酸類、テトラヒドロフランもしくはジオキサンなどのエーテル類、ＤＭＦなどのアミド類、ジクロロメタンなどのハロゲン化炭化水素類、さらにメタノール、エタノールもしくはイソプロパノールなどのアルコール類、および水である。上記の溶媒の混合物もまた好適である。ＴＦＡは、好ましくは、さらなる溶媒の添加なしで過剰量で用い、過塩素酸は好ましくは、酢酸と７０％過塩素酸の９：１比率の混合物形態で用いる。開裂のための反応温度は、有利には約０〜約５０°、好ましくは１５〜３０°（室温）である。
【００６０】
ＢＯＣ、ＯＢｕｔ、Ｐｂｆ、ＰｍｃおよびＭｔｒ基は、例えば、好ましくはジクロロメタン中のＴＦＡを用いて、またはジオキサン中約３〜５ＮのＨＣｌを用いて１５〜３０°にて、開裂して除去でき、ＦＭＯＣ基は、ＤＭＦ中のジメチルアミン、ジエチルアミンまたはピペリジンの約５〜５０％溶液を用いて１５〜３０°にて、開裂して除去できる。
【００６１】
水素化分解的に除去可能な保護基（例えばＣＢＺまたはベンジル）は、例えば触媒の存在下で（例えばパラジウムなどの貴金属触媒を、有利には炭素などの支持体上で）、水素での処理により、開裂して除去することができる。ここでの好適な溶媒は、上記のものであり、特に、例えば、メタノールもしくはエタノールなどのアルコール類、またはＤＭＦなどのアミド類である。水素化分解は一般に、約０〜１００°の温度および約１〜２００ｂａｒの圧力において、好ましくは２０〜３０°および１〜１０ｂａｒにおいて、実施する。ＣＢＺ基の水素化分解は、例えば、メタノール中５〜１０％Ｐｄ／Ｃ上で、または（水素の変わりに）ギ酸アンモニウムを用いてメタノール／ＤＭＦ中Ｐｄ／Ｃ上で、２０〜３０°において成功裡に実施される。
【００６２】
薬学的塩および他の形態
本発明の前述の化合物を、その最終的な非塩形態で用いることができる。一方、本発明はまた、この化合物を、当該分野において知られている手順により、種々の有機および無機酸類および塩基類から由来し得るその薬学的に許容し得る塩の形態で用いることを包含する。本発明の化合物の薬学的に許容し得る塩形態は、大部分、慣用の方法により調製される。好適な塩は、当該化合物を好適な塩基と反応させて対応する塩基付加塩を得ることにより、生成することができる。このような塩基は、例えば、水酸化カリウム、水酸化ナトリウムおよび水酸化リチウムを含むアルカリ金属水酸化物；アルカリ土類金属水酸化物、例えば水酸化バリウムおよび水酸化カルシウム；アルカリ金属アルコキシド類、例えばカリウムエトキシドおよびナトリウムプロポキシド；ならびに種々の有機塩基、例えばピペリジン、ジエタノールアミンおよびＮ−メチルグルタミンである。
【００６３】
本発明の化合物のアルミニウム塩は、同様にして包含される。当該化合物を、薬学的に許容し得る有機および無機酸類、例えばハロゲン化水素、例えば塩化水素、臭化水素またはヨウ化水素、他の鉱酸およびこれらの対応する塩、例えば硫酸塩、硝酸塩またはリン酸塩など、ならびにアルキルおよびモノアリールスルホン酸塩類、例えばエタンスルホン酸塩、トルエンスルホン酸塩およびベンゼンスルホン酸塩、ならびに他の有機酸およびこれらの対応する塩、例えば酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、酒石酸塩、マレイン酸塩、コハク酸塩、クエン酸塩、安息香酸塩、サリチル酸塩、アスコルビン酸塩などで処理することにより、酸付加塩を生成することができる。したがって、本発明の化合物の薬学的に許容し得る酸付加塩には、以下のものが含まれる：酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アルギニン酸塩(arginate)、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩（ベシル酸塩）、重硫酸塩、重亜硫酸塩、臭化物、酪酸塩、樟脳酸塩、樟脳スルホン酸塩、カプリル酸塩、塩化物、クロロ安息香酸塩、クエン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、リン酸二水素塩、ジニトロ安息香酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、フマル酸塩、ガラクタル酸塩（ムチン酸から）、ガラクツロン酸塩、グルコヘプタン酸塩、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミコハク酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、
【００６４】
馬尿酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、ヨウ化物、イセチオン酸塩、イソ酪酸塩、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、マンデル酸塩、メタリン酸塩、メタンスルホン酸塩、メチル安息香酸塩、リン酸一水素塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、シュウ酸塩、オレイン酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、フェニル酢酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ホスホン酸塩、フタル酸塩、ただしこれは、限定を表すものではない。
【００６５】
さらに、本発明の化合物の塩基性塩には、アルミニウム、アンモニウム、カルシウム、銅、鉄（ＩＩＩ）、鉄（ＩＩ）、リチウム、マグネシウム、マンガン（ＩＩＩ）、マンガン（ＩＩ）、カリウム、ナトリウムおよび亜鉛塩が含まれるが、これは、限定を表すことを意図しない。前述の塩の中で、好ましいのは、アンモニウム；アルカリ金属塩、ナトリウムおよびカリウム、ならびにアルカリ土類金属塩、カルシウムおよびマグネシウムである。薬学的に許容し得る有機無毒性塩基から誘導される、本発明の化合物の塩には、第一、第二および第三アミン類、置換アミン類、天然発生置換アミン類もまた含む、環状アミン類、ならびに塩基性イオン交換樹脂、例えばアルギニン、ベタイン、カフェイン、クロロプロカイン、コリン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン（ベンザチン）、ジシクロヘキシルアミン、ジエタノールアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチルモルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン、イソプロピルアミン、リドカイン、リシン、メグルミン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、ポリアミン樹脂、プロカイン、プリン類、テオブロミン、トリエタノールアミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミンおよびトリス（ヒドロキシメチル）メチルアミン（トロメタミン）の塩が含まれるが、これは、限定を表すことを意図しない。
【００６６】
塩基性窒素含有基を含む本発明の化合物を、剤、例えば（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルハロゲン化物、例えば塩化、臭化およびヨウ化メチル、エチル、イソプロピルおよびｔｅｒｔ−ブチル；ジ（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル硫酸塩、例えば硫酸ジメチル、ジエチルおよびジアミル；（Ｃ１０〜Ｃ１８）アルキルハロゲン化物、例えば塩化、臭化およびヨウ化デシル、ドデシル、ラウリル、ミリスチルおよびステアリル；ならびにアリール（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルハロゲン化物、例えば塩化ベンジルおよび臭化フェネチルを用いて四級化することができる。本発明の水溶性および油溶性の化合物を共に、このような塩を用いて調製することができる。
【００６７】
好ましい前述の薬学的塩には、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、ベシル酸塩、クエン酸塩、フマル酸塩、グルコン酸塩、ヘミコハク酸塩、馬尿酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、イセチオン酸塩、マンデル酸塩、メグルミン、硝酸塩、オレイン酸塩、ホスホン酸塩、ピバリン酸塩、リン酸ナトリウム、ステアリン酸塩、硫酸塩、スルホサリチル酸塩、酒石酸塩、チオリンゴ酸塩、トシル酸塩およびトロメタミンが含まれるが、これは、限定を表すことを意図しない。
【００６８】
本発明の化合物の酸付加塩を、遊離塩基形態を十分な量の所望の酸と接触させ、慣用の方法で塩を生成させることにより、調製する。遊離塩基を、塩形態を塩基と接触させ、慣用の方法で遊離塩基を単離することにより、再生することができる。遊離塩基形態は、ある観点において、一定の物理的特性、例えば極性溶媒への溶解性の点で、これらの対応する塩形態と異なる；しかし、本発明の目的のために、当該塩は、他の点では、これらのそれぞれの遊離塩基形態に相当する。
【００６９】
上述のように、本発明の化合物の薬学的に許容し得る塩基付加塩は、金属またはアミン類、例えばアルカリ金属およびアルカリ土類金属または有機アミン類を用いて生成する。好ましい金属は、ナトリウム、カリウム、マグネシウムおよびカルシウムである。好ましい有機アミン類は、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、クロロプロカイン、コリン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミンおよびプロカインである。
塩基付加塩を、遊離酸形態を十分な量の所望の塩基と接触させ、慣用の方法で塩の生成を生じることにより、調製する。遊離酸を、塩形態を酸と接触させ、慣用の方法で遊離酸を単離することにより、再生することができる。遊離酸形態は、ある観点において、一定の物理的特性、例えば極性溶媒への溶解性の点で、これらの対応する塩形態と異なる；しかし、本発明の目的のために、当該塩は、他の点では、これらのそれぞれの遊離酸形態に相当する。
【００７０】
上で述べたことに関して、本関連における表現「薬学的に許容し得る塩」は、特に、この塩形態が活性成分に対して、前に用いられていた活性成分の遊離形態または活性成分のすべての他の塩形態と比較して改善された薬物動態学的特性を付与する場合には、本発明の化合物をこの塩の１種の形態で含む活性成分を意味するものと解釈されることが、明らかである。活性成分の薬学的に許容し得る塩形態はまた、この活性成分に、初めて、前には有していなかった所望の薬物動態学的特性を付与することができ、さらに、身体におけるその治療的有効性に関して、この活性成分の薬力学に対する正の影響を有することができる。
【００７１】
本発明はさらに、本発明の化合物および／またはその生理学的に許容し得る塩の、医薬（医薬組成物）の製造、特に非化学的方法による製造のための使用に関する。これらは、ここで少なくとも１種の固体、液体および／または半液体の賦形剤またはアジュバントと一緒に、必要に応じて、１または２以上のさらなる活性成分と組み合わせて、好適な投与形態に変換可能である。
【００７２】
本発明はさらに、５−［４−（２−メチルフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル］−２，４−ジヒドロキシ−Ｎ−メチル−Ｎ−ブチルベンズアミド、および／またはその薬学的に使用し得る誘導体、塩、溶媒和物、互変異性体および立体異性体、ならびにそれらの全ての比率での混合物、任意に賦形剤および／またはアジュバントを含む、医薬に関する。
医薬製剤を、投与単位あたり所定量の活性成分を含む投与単位の形態で、投与することができる。このような単位は、処置される疾患の状態、投与の方法ならびに患者の年齢、体重および状態に依存して、例えば０．１ｍｇ〜３ｇ、好ましくは１ｍｇ〜７００ｍｇ、特に好ましくは５ｍｇ〜１００ｍｇの本発明の化合物を含むことができるか、または医薬製剤を、投与単位あたり所定量の活性成分を含む投薬単位の形態で投与することができる。好ましい投与単位製剤は、前に示したように、毎日の用量もしくは部分的用量を含むもの、または活性成分のこの対応する部分である。さらに、このタイプの医薬製剤を、薬学分野において周知の方法を用いて製造することができる。
【００７３】
医薬製剤を、すべての所望の好適な方法による、例えば経口（口腔内もしくは舌下を含む）、直腸内、鼻腔内、局所的（口腔内、舌下もしくは経皮を含む）、膣内または非経口（皮下、筋肉内、静脈内もしくは皮内を含む）方法による投与のために適合させることができる。このような製剤を、薬学分野において知られているすべての方法を用いて、例えば活性成分を賦形剤（１種もしくは２種以上）またはアジュバント（１種もしくは２種以上）と混ぜ合わせることにより、製造することができる。
【００７４】
経口投与に適合する医薬製剤を、別個の単位、例えばカプセルもしくは錠剤；粉末もしくは顆粒；水性もしくは非水性液体中の溶液もしくは懸濁液；食用発泡体もしくは発泡体食品；または水中油型液体エマルジョンもしくは油中水型液体エマルジョンとして、投与することができる。
【００７５】
したがって、例えば、錠剤またはカプセルの形態での経口投与の場合において、活性成分要素を、経口的な、無毒性の、かつ薬学的に許容し得る不活性賦形剤、例えばエタノール、グリセロール、水などと混ぜ合わせることができる。粉末を、化合物を好適な微細な大きさに粉砕し、これを同様にして粉砕した薬学的賦形剤、例えば食用炭水化物、例えばデンプンまたはマンニトールと混合することにより、製造する。風味剤、保存剤、分散剤および染料が、同様に存在してもよい。
【００７６】
カプセルを、上記のように粉末混合物を調製し、成形したゼラチン殻にこれを充填することにより、製造する。流動促進剤および潤滑剤、例えば固体形態において高度に分散性のケイ酸、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウムまたはポリエチレングリコールを、充填操作の前に粉末混合物に加えることができる。崩壊剤または可溶化剤、例えば寒天、炭酸カルシウムまたは炭酸ナトリウムを、同様に加えて、カプセルを服用した後の医薬の有用性を改善することができる。
【００７７】
さらに、所望により、または所要に応じて、好適な結合剤、潤滑剤および崩壊剤ならびに染料を、同様に混合物中に包含させることができる。好適な結合剤には、デンプン、ゼラチン、天然糖類、例えばグルコースまたはベータ−ラクトース、トウモロコシから製造された甘味剤、天然および合成ゴム、例えばアカシア、トラガカントまたはアルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール、ろうなどが含まれる。これらの投与形態において用いられる潤滑剤には、オレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウムなどが含まれる。崩壊剤には、限定されずに、デンプン、メチルセルロース、寒天、ベントナイト、キサンタンゴムなどが含まれる。錠剤を、例えば粉末混合物を調製し、混合物を顆粒化または乾燥圧縮し、潤滑剤および崩壊剤を加え、混合物全体を圧縮して錠剤を得ることにより、製剤化する。粉末混合物を、好適な方法で粉砕した化合物を上記のように希釈剤または塩基と、および随意に結合剤、例えばカルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチンまたはポリビニルピロリドン、溶解遅延剤、例えばパラフィン、吸収促進剤、例えば第四級塩および／または吸収剤、例えばベントナイト、カオリンまたはリン酸二カルシウムと混合することにより、調製する。
【００７８】
粉末混合物を、これを結合剤、例えばシロップ、デンプンペースト、アカシア粘液またはセルロースの溶液またはポリマー材料で湿潤させ、これをふるいを通して押圧することにより、顆粒化することができる。顆粒化の代替として、粉末混合物を、打錠機に通し、不均一な形状の塊を得、これを崩壊させて、顆粒を形成することができる。顆粒を、ステアリン酸、ステアリン酸塩、タルクまたは鉱油を加えることにより潤滑化して、錠剤流延型への粘着を防止することができる。次に、潤滑化した混合物を圧縮して、錠剤を得る。本発明の化合物をまた、自由流動の不活性賦形剤と混ぜ合わせ、次に直接圧縮して、顆粒化または乾燥圧縮工程を行わずに錠剤を得ることができる。セラック密封層、糖またはポリマー材料の層およびろうの光沢層からなる透明な、または不透明な保護層が、存在してもよい。染料をこれらのコーティングに加えて、異なる投与単位間を区別することができるようにすることができる。
【００７９】
経口液体、例えば溶液、シロップおよびエリキシル剤を、投与単位の形態で調製し、したがって所定量が予め特定された量の化合物を含むようにすることができる。シロップを、化合物を水性溶液に好適な風味剤と共に溶解することにより調製することができ、一方エリキシル剤を、無毒性アルコール性ビヒクルを用いて調製する。懸濁液を、化合物を無毒性ビヒクル中に分散させることにより、処方することができる。可溶化剤および乳化剤、例えばエトキシル化イソステアリルアルコール類およびポリオキシエチレンソルビトールエーテル類、保存剤、風味添加剤、例えばペパーミント油もしくは天然甘味剤もしくはサッカリン、または他の人工甘味料などを、同様に加えることができる。
【００８０】
経口投与用の投与単位製剤は、所望により、マイクロカプセル内に封入することができる。製剤はまた、例えば粒子状材料をコーティングするか、ポリマー、ワックスなどに包埋させるなどして、その開放が延長されるかまたは遅延されるように調製することもできる。
【００８１】
本発明の化合物および／またはその薬学的に許容し得る誘導体、塩、溶媒和物、互変異性体および立体異性体、ならびにそれらの全ての比率での混合物、任意に賦形剤および／またはアジュバントおよびその塩、溶媒和物、および生理学的な官能性誘導体を、リポソーム送達系、例えば小さい単層ベシクル(unilamellar vesicles)、大きい単層ベシクルおよび多層ベシクル(multilamellar vesicles)の形態で投与することもできる。リポソームを、種々のリン脂質、例えばコレステロール、ステアリルアミンまたはホスファチジルコリン類から生成することができる。
【００８２】
本発明の化合物およびその塩、溶媒和物およびこれらの生理学的な官能性誘導体をまた、化合物分子が結合した個別の担体としてモノクローナル抗体を用いて送達することができる。化合物をまた、標的とする医薬担体としての可溶性ポリマーに結合させることができる。このようなポリマーは、パルミトイル基により置換されたポリビニルピロリドン、ピランコポリマー、ポリヒドロキシプロピルメタクリルアミドフェノール、ポリヒドロキシエチルアスパルトアミドフェノール(polyhydroxyethylaspartamidophenol)またはポリエチレンオキシドポリリシンを包含することができる。化合物をさらに、医薬の制御された放出を達成するのに適する生分解性ポリマーの群、例えばポリ乳酸、ポリ−イプシロン−カプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル類、ポリアセタール類、ポリジヒドロキシピラン類、ポリシアノアクリレート類、およびヒドロゲルの架橋または両親媒性のブロックコポリマーに結合することができる。
【００８３】
経皮的投与用に適合する医薬製剤を、レシピエントの表皮との長期間の、密接な接触のための独立した硬膏剤として投与することができる。したがって、例えば、活性成分を、総括的にPharmaceutical Research, 3(6), 318 (1986)に記載されているように、イオン泳動により硬膏剤から送達することができる。
局所的投与用に適合する医薬化合物を、軟膏、クリーム、懸濁液、ローション、粉末、溶液、ペースト、ゲル、スプレー、エアゾールまたは油として製剤化することができる。
【００８４】
眼または他の外部組織、例えば口および皮膚の処置のために、製剤を、好ましくは、局所的軟膏またはクリームとして適用する。軟膏を施与するための製剤の場合において、活性成分を、パラフィン系または水混和性クリームベースのいずれかと共に用いることができる。あるいはまた、活性成分を製剤化して、水中油型クリームベースまたは油中水型ベースを有するクリームを得ることができる。
眼への局所的適用に適合する医薬製剤には点眼剤が含まれ、ここで、活性成分を、好適な担体、特に水性溶媒中に溶解するかまたは懸濁させる。
【００８５】
口における局所的適用に適合する医薬製剤は、ロゼンジ、パステル剤および洗口剤を包含する。
直腸内投与に適合する医薬製剤を、坐剤または浣腸剤の形態で投与することができる。
担体物質が固体である鼻腔内投与に適合する医薬製剤は、例えば２０〜５００ミクロンの範囲内の粒子の大きさを有する粗粉末を含み、これを、嗅ぎタバコを服用する方法で、即ち鼻に近接して保持した粉末を含む容器からの鼻孔を介しての迅速な吸入により、投与する。担体物質としての液体を有する、鼻腔内スプレーまたは鼻腔内ドロップとしての投与に適する製剤は、水または油に溶解した活性成分溶液を包含する。
【００８６】
吸入による投与に適合する医薬製剤は、微細な粒子状ダストまたはミストを包含し、これは、エアゾール、噴霧器または吸入器を有する種々のタイプの加圧ディスペンサーにより作成し得る。
膣内投与に適合する医薬製剤を、膣坐薬、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、発泡体またはスプレー製剤として投与することができる。
【００８７】
非経口投与に適合する医薬製剤には、製剤が処置されるべきレシピエントの血液と等張になるような、酸化防止剤、緩衝剤、静菌剤および溶質を含む水性および非水性の無菌注射溶液；ならびに懸濁媒体および増粘剤を含むことができる水性および非水性の無菌懸濁液が含まれる。製剤を、単一用量または多重用量の容器、例えば密封したアンプルおよびバイアルにおいて投与し、フリーズドライした（凍結乾燥）状態で貯蔵し、したがって使用の直前の、無菌の担体液体、例えば注射目的での水の添加のみが必要であるようにすることができる。
【００８８】
処方箋に従い製造する注射溶液および懸濁液を、無菌の粉末、顆粒および錠剤から調製することができる。
上で特定的に述べた構成成分に加えて、製剤はまた、製剤の特定のタイプに関して当該分野において通例の他の剤を含むことができることは、言うまでもない；したがって、例えば、経口投与に適する製剤は、風味剤を含んでいてもよい。
【００８９】
本発明の化合物の治療有効量は、例えば、ヒトまたは動物の年齢および体重、処置が必要である正確な疾患状態、およびその重篤度、製剤の性質および投与の方法を含む多くの要因に依存し、最終的には、処置する医師または獣医師により決定される。しかし、本発明の化合物の有効量は、一般的に、１日あたり０．１〜１００ｍｇ／レシピエント（哺乳類）の体重１ｋｇの範囲内、特に典型的には１日あたり１〜１０ｍｇ／体重１ｋｇの範囲内である。したがって、体重が７０ｋｇである成体の哺乳類についての１日あたりの実際の量は、通常７０〜７００ｍｇであり、ここで、この量を、１日あたり個別の用量として、または通常には１日あたり一連の部分用量（例えば２回分、３回分、４回分、５回分または６回分）において投与し、したがって合計の毎日の用量が同一であるようにすることができる。この塩または溶媒和物または生理学的な官能性誘導体の有効量を、本発明の化合物自体の有効量の比として決定することができる。同様の用量が、前述の他の状態の処置に適すると、推測することができる。
【００９０】
本発明はさらに、本発明の少なくとも１種の化合物および／または、その薬学的に使用可能な誘導体、溶媒和物および立体異性体、およびそれらのすべての比率での混合物、ならびに少なくとも１種の他の医薬活性成分を含む医薬に関する。
【００９１】
さらなる医薬活性成分は、好ましくは化学療法剤であり、特に、血管形成を阻害するもの、したがって腫瘍細胞の増殖および広がりを阻害するものである；本明細書において好ましいのは、ＶＥＧＦ受容体を対象とするロボザイムおよびアンチセンスを含むＶＥＧＦ受容体阻害剤、およびアンギオスタチンおよびエンドスタチンである。
本発明の化合物と組み合わせて用いることのできる抗悪性腫瘍薬の例は、一般に、アルキル化剤、代謝拮抗物質；エピドフィロトキシン；抗悪性腫瘍酵素；トポイソメラーゼ阻害剤；プロカルバジン；ミトキサントロンまたはプラチナ配位錯体を含む。
【００９２】
抗悪性腫瘍薬は好ましくは以下のクラスから選択する：アントラサイクリン、ビンカ薬物、マイトマイシン、ブレオマイシン、細胞毒性ヌクレオシド、エポチロン、ジスコデルモリド、プテリジン、ジイネン、およびポドフィロトキシン。
前記のクラスにおいて特に好ましいのは、例えば、カルミノマイシン、ダウノルビシン、アミノプテリン、メトトレキサート、メトプテリン、ジクロロメトトレキサート、マイトマイシンＣ，ポルフィロマイシン、５−フルオロウラシル、５−フルオロデオキシウリジン一リン酸、シタラビン、５−アザシチジン、チオグアニン、アザチオプリン、アデノシン、ペントスタチン、エリスロヒドロキシノニルアデニン、クラドリビン、６−メルカプトプリン、ゲムシタビン、シトシンアラビノシド、ポドフィロトキシンまたはポドフィロトキシン誘導体、例えばエトポシド、リン酸エトポシドまたはテニポシド、メルファラン、ビンブラスチン、ビノレルビン、ビンクリスチン、ロイロシジン、ビンデシン、ロイロシン、ドセタキセルおよびパクリタキセルである。他の好ましい抗悪性腫瘍薬は、ジスコデルモリド、エポチロンＤ、エストラムスチン、カルボプラチン、シスプラチン、オキサリプラチン、シクロホスファミド、ブレオマイシン、ゲムシタビン、イフォスファミド、メルファラン、ヘキサメチルメラミン、チオテパ、イダトレキセート、トリメトレキセート、ダカルバジン、Ｌ−アルパラギナーゼ、カンプトテシン、ＣＰＴ−１１、トプテカン、アラビノシルシトシン、ビカルタミド、フルタミド、ロイプロリド、ピリドベンゾインドール誘導体、インターフェロンおよびインターロイキンの群から選択される。
【００９３】
さらなる医薬活性成分は、好ましくは抗生物質である。好ましい抗生物質は、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、イダルビシン、エピルビシン、ミトキサントロン、ブレオマイシン、プリカマイシン、マイトマイシンの群から選択される。
さらなる医薬活性成分は、好ましく酵素阻害剤である。好ましい酵素阻害剤は、ヒストン脱アセチル化阻害剤（例えばスベロイルアニリドヒドロキサム酸［ＳＡＨＡ］およびチロシンキナーゼ阻害剤（例えばＺＤ１８３９［イレッサ］）の群から選択される。
【００９４】
さらなる医薬活性成分は、好ましくは核外移行阻害剤である。核外移行阻害剤は、バイオポリマー（例えばＲＮＡ）の細胞核からの出力を防ぐ。好ましい核外移行阻害剤は、カリスタチン、レプトマイシンＢ、ラトジャドンの群から選択される。
さらなる医薬活性成分は、好ましくは免疫抑制剤である。好ましい免疫抑制剤は、ラパマイシン、ＣＣＩ−７７９（Wyeth）、ＲＡＤ００１（Novartis）、ＡＰ２３５７３（Ariad Pharmaceuticals）の群から選択される。
【００９５】
本発明はまた、
（ａ）本発明の化合物および／または、この薬学的に使用可能な誘導体、溶媒和物および立体異性体、ならびにそれらの全ての比率での混合物の有効量、
および
（ｂ）さらなる医薬活性成分の有効量、
の個別のパックからなるセット（キット）に関する。
【００９６】
このセットは、好適な容器、例えば箱、個別のビン、袋またはアンプルを含む。このセットは、例えば、個別のアンプルを含むことができ、その各々は、本発明の化合物および／または、その薬学的に使用可能な誘導体、溶媒和物および立体異性体、ならびにそれらの全ての比率での混合物の有効量、ならびに、溶解したかまたは凍結乾燥された形態での、さらなる医薬活性成分の有効量を含む。
【００９７】
使用
本発明の化合物は、ＨＳＰ９０が関与する疾患の処置における、哺乳類のための、特にヒトのための医薬活性成分として好適である。
したがって、本発明は、５−［４−（２−メチルフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル］−２，４−ジヒドロキシ−Ｎ−メチル−Ｎ−ブチルベンズアミド、およびその薬学的に使用し得る誘導体、溶媒和物および立体異性体、ならびにそれらの全ての比率での混合物の、ＨＳＰ９０の阻害、調節および／または調整が関与する疾患の処置のための医薬の製造のための使用に関する。
【００９８】
本発明は、５−［４−（２−メチルフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル］−２，４−ジヒドロキシ−Ｎ−メチル−Ｎ−ブチルベンズアミド、およびその薬学的に使用し得る誘導体、溶媒和物および立体異性体、ならびにそれらの全ての比率での混合物の使用であって、以下の疾患の処置のための、医薬の製造のための前記使用を包含する：腫瘍疾患、例えば、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨肉腫、脊索腫、血管肉腫、内皮肉腫、リンパ管肉腫、リンパ管内皮肉腫、骨膜腫、中皮腫、ユーイング腫瘍、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、大腸癌、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、扁平上皮癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳頭状癌、乳頭状腺癌、嚢胞腺癌、骨髄癌、気管支原生癌、腎細胞癌、肝細胞癌、胆管癌、絨毛癌、精上皮腫、胎生期癌、ウィルムス腫瘍、頸部癌、精巣腫瘍、肺癌、小細胞肺癌、膀胱癌、上皮癌、神経膠腫、星状細胞腫、髄芽細胞腫、頭蓋咽頭腫、脳室上衣細胞腫、松果体腫、血管芽細胞腫、聴神経腫、乏突起神経膠腫、髄膜腫、黒色腫、神経芽細胞腫、網膜芽細胞腫、白血病、リンパ腫、多発性骨髄腫、ワルデンストレームマクログロブリン血症、およびＨ鎖病；
【００９９】
ウイルス疾患、ここでウイルス病原体は、Ａ型肝炎、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、インフルエンザ、水痘、アデノウイルス、Ｉ型単純ヘルペス（ＨＳＶ−Ｉ）、ＩＩ型単純ヘルペス（ＨＳＶ−ＩＩ）、牛疫、ライノウイルス、エコーウイルス、ロタウイルス、呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）、パピローマウイルス、パポバウイルス、サイトメガロウイルス、エキノウイルス、アルボウイルス、ハンタウイルス、コクサッキーウイルス、耳下腺炎ウイルス、麻疹ウイルス、風疹ウイルス、ポリオウイルス、ヒトＩ型免疫不全ウイルス（ＨＩＶ−Ｉ）およびヒトＩＩ型免疫不全ウイルス（ＨＩＶ−ＩＩ）からなる群から選択されるものであり；
移植における免疫抑制のため；炎症誘発性疾患、例えば関節リューマチ、喘息、多発性硬化症、１型糖尿病、紅斑性狼瘡（エリテマトーデス）、乾癬、炎症性腸疾患；嚢胞性繊維症；脈管形成が関与する疾患、例えば糖尿病性網膜症、血管腫、子宮内膜症、腫瘍脈管形成；感染症；自己免疫疾患；虚血；神経再生の促進；線維形成疾患、例えば硬腫、多発性筋炎、全身性狼瘡、肝硬変、ケロイド形成、間質性腎炎、および肺線維症。
【０１００】
５−［４−（２−メチルフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル］−２，４−ジヒドロキシ−Ｎ−メチル−Ｎ−ブチルベンズアミドは、特に、癌の増殖、腫瘍細胞および腫瘍転移を阻害することができ、したがって腫瘍治療に好適である。
【０１０１】
本発明はさらに、５−［４−（２−メチルフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル］−２，４−ジヒドロキシ−Ｎ−メチル−Ｎ−ブチルベンズアミド、および／またはその生理学的に許容し得る塩および溶媒和物の、化学療法による毒性に対する正常細胞の保護のための、誤ったタンパク質の折りたたみまたは凝固が主要な原因因子である疾患、例えばクロイツフェルト・ヤコブ病、ハンチントン病またはアルツハイマー病の処置のための、医薬の製造のための使用を包含する。
【０１０２】
本発明はまた、５−［４−（２−メチルフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル］−２，４−ジヒドロキシ−Ｎ−メチル−Ｎ−ブチルベンズアミド、および／またはその生理学的に許容し得る塩および溶媒和物の、中枢神経系の疾患、循環器疾患および悪液質の処置のための、医薬の製造のための使用に関する。
【０１０３】
さらなる態様において、本発明はまた、５−［４−（２−メチルフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル］−２，４−ジヒドロキシ−Ｎ−メチル−Ｎ−ブチルベンズアミド、および／またはその生理学的に許容し得る塩および溶媒和物の、ＨＳＰ９０調節のための医薬の製造のための使用に関し、ここで、調節された生物学的ＨＳＰ９０活性は、個人における免疫反応、小胞体からのタンパク質輸送、低酸素／無酸素ストレスからの回復、栄養失調からの回復、熱ストレスからの回復、またはこれらの組合せを引き起こし、および／またはここで、疾病は、癌の種類、感染症、小胞体からのタンパク質輸送の破壊に関連する疾患、虚血／再かん流に関連する疾患、またはこれらの組合せであり、ここで、虚血／再かん流に関連する疾患は、以下の結果によるものである：心停止、アジストリー、および遅延性心室性不整脈、心臓手術、心肺バイパス手術、臓器移植、脊髄損傷、頭部損傷、卒中、血栓塞栓発作、出血発作、脳血管けいれん、低血圧、低血糖、てんかん重積、てんかん発作、不安神経症、統合失調症、神経変性疾患、アルツハイマー病、ハンチントン病、筋萎縮性軸索硬化症（ＡＬＳ）または新生児ストレス。
【０１０４】
さらなる態様において、本発明はまた、５−［４−（２−メチルフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル］−２，４−ジヒドロキシ−Ｎ−メチル−Ｎ−ブチルベンズアミド、および／またはその生理学的に許容し得る塩および溶媒和物の、心停止、アジストリー、および遅延性心室性不整脈、心臓手術、心肺バイパス手術、臓器移植、脊髄損傷、頭部損傷、卒中、血栓塞栓発作、出血発作、脳血管けいれん、低血圧、低血糖、てんかん重積、てんかん発作、不安神経症、統合失調症、神経変性疾患、アルツハイマー病、ハンチントン病、筋萎縮性軸索硬化症（ＡＬＳ）または新生児ストレスの結果としての虚血の処置のための医薬の製造のための使用に関する。
【図面の簡単な説明】
【０１０５】
【図１】図１は２つの多形形態の粉末Ｘ線回折スペクトルを示すグラフである。
【０１０６】
ＨＳＰ９０阻害剤の測定のための試験方法
ゲルダナマイシンまたは１７−アリルアミノ−１７−デメトキシゲルダナマイシン（１７ＡＡＧ）のＨＳＰ９０への結合、およびその競合的阻害は、本発明の化合物の阻害活性を決定するために利用可能である（Carreras et al. 2003, Chiosis et al. 2002）。特定の場合においては、放射性リガンドフィルタ結合試験を用いる。ここで用いる放射性リガンドは、トリチウム標識１７−アリルアミノゲルダナマイシン、［３Ｈ］１７ＡＡＧである。このフィルタ結合試験により、ＡＴＰ結合部位を妨害する阻害剤を標的とした探索が可能となる。
【０１０７】
材料
組換えヒトＨＳＰ９０α（大腸菌発現、９５％純度）；
［３Ｈ］１７ＡＡＧ（１７−アリルアミノゲルダナマイシン、［アリルアミノ−２，３−３Ｈ．特異的活性：１．１１×１０１２Ｂｑ／ｍｍｏｌ（Moravek, MT-1717）；
ＨＥＰＥＳフィルタ緩衝液（５０ｍＭのＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．０、５ｍＭのＭｇＣｌ２、ＢＳＡ０．０１％）
マルチスクリーンＦＢ（１μｍ）フィルタプレート（Millipore, MAFBNOB 50）。
【０１０８】
方法
９６ウェルマイクロタイターフィルタプレートを最初に洗浄し、０．１％のポリエチレンイミンで被覆する。試験は次の条件下で行う：
反応温度２２℃
反応時間：３０分、８００ｒｐｍにて振とう
試験容積：５０μｌ
最終濃度：
５０ｍＭのＨＥＰＥＳ ＨＣｌ、ｐＨ７．０、５ｍＭのＭｇＣｌ２、０．０１％（ｗ／ｖ）ＢＳＡ
ＨＳＰ９０：１．５μｇ／アッセイ
［３Ｈ］１７ＡＡＧ：０．０８μＭ。
【０１０９】
反応の最後に、フィルタプレートの上清を真空マニホールド（Multiscreen Separation System, Millipore）の支援により吸引して除去し、フィルタを２回洗浄する。フィルタプレートを次にシンチレーター（Microscint 20, Packard）付きベータカウンター（Microbeta, Wallac）で測定する。
「対照の％」は、「１分あたりの計測数」の値から決定し、化合物のＩＣ５０値はこれから計算する。
以下の表は、本発明の化合物の、従来技術における最も近い化合物“Ａ４７”との比較測定を示す。本発明の化合物“Ｃ１”は、約１０倍高いＨＳＰ９０阻害活性を有する。
【０１１０】
試験結果
【表９】
2010516639.tif 000011
【０１１１】
本明細書中、すべての温度は℃で示す。以下の例において、「慣用のワークアップ」は以下のことを意味する：必要に応じて水を加え、ｐＨを必要に応じて、最終生成物の構成に依存して２〜１０の値に調整し、混合物を、酢酸エチルまたはジクロロメタンで抽出し、相を分離し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、蒸発させ、生成物をシリカゲル上でのクロマトグラフィーにより、および／または結晶化により精製する。シリカゲル上でのＲｆ値；溶離剤：酢酸エチル／メタノール９：１。
【０１１２】
ＬＣ−ＭＳ条件
Hewlett Packard SystemのＨＰ１１００シリーズは以下の特徴を有する：イオン源：エレクトロスプレー（陽モード）；スキャン：１００〜１０００ｍ／ｅ；断片化電圧：６０Ｖ；気体温度：３００℃、ＤＡＤ：２２０ｎｍ。
流速：２．４ｍｌ／分。用いたスプリッターは、ＭＳ用の流速をＤＡＤ後に０．７５ｍｌ／分に低下させた。
カラム：Chromolith SpeedROD RP-18e 50-4.6
溶媒：Merck KGaAのLiChrosolvグレード
溶媒Ａ：Ｈ２Ｏ（ＴＦＡの０．０１％）
溶媒Ｂ：ＡＣＮ（ＴＦＡの０．００８％）
勾配：
２０％のＢ→１００％のＢ：０分〜２．８分
１００％のＢ：２．８分〜３．３分
１００％のＢ→２０％のＢ：３．３分〜４分
以下の例に示す保持時間ＲｆまたはＲｔ［分］およびＭ＋Ｈ＋データＭＷは、ＬＣ−ＭＳ測定の測定結果である。
【０１１３】
参照例１
５−（２，４−ジヒドロキシ−５−フェネチルフェニル）−４−（２−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール（“Ａ１”）の製造
１．１
１００ｍｌのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）中の１５ｇの５−ブロモ−２，４−ジヒドロキシ安息香酸、１４．４ｍｌのヨードメタンおよび６２．９ｇの炭酸セシウムを、還流下で１６時間加熱する。混合物を慣用のワークアップに供して、１６．７ｇの５−ブロモ−２，４−ジメトキシ安息香酸（“１”）を得る。
【０１１４】
１．２
４０ｍｌの塩化チオニル中の４ｇの“１”とＤＭＦ２滴の混合物を、室温で１６時間撹拌する。溶媒を除去して、４．３ｇの５−ブロモ−２，４−ジメトキシベンゾイルクロリド（“２”）、Ｒｆ１．６１０；ＭＷ２８０．５を得る。生成物は、さらなる精製なしで反応させる。
１．３
２５ｍｌのジクロロメタン中３．８ｇの“２”の溶液を１滴ずつ、２５ｍｌのジクロロメタン中の１．３１４ｍｌの２−フルオロアニリンおよび１．１３ｍｌのピリジンの氷冷溶液に加え、混合物を室温で５時間撹拌する。慣用のワークアップおよびイソプロパノールからの結晶化により、４．５ｇの５−ブロモ−Ｎ−（２−フルオロフェニル）−２，４−ジメトキシベンズアミド（“３”）、Ｒｆ２．２１７；ＭＷ３５５．２を得る。
【０１１５】
１．４
２．９ｇのＰＣｌ５を、窒素雰囲気下で、６０ｍｌのトルエン中の４．５ｇの“３”の溶液に加え、混合物を還流下で３時間加熱する。溶媒を除去し、残留物を１００ｍｌのＴＨＦに溶解し、溶液を１滴ずつ、０℃にてＴＨＦ中の１３８ｍｌの１Ｍヒドラジン溶液に加える。混合物をさらに１６時間撹拌し、慣用のワークアップおよびイソプロパノールからの結晶化により、３．６ｇのＮ−（２−フルオロフェニル）−３−ブロモ−４，６−ジメトキシベンズアミドヒドラゾン（“４”）、Ｒｆ０．９５２；ＭＷ３６９．２を得る。
【化２】
2010516639.tif 000012
【０１１６】
１．５
１．８６ｇの１，１’−カルボニルジイミダゾール（“５”）を、３００ｍｌのＴＨＦ中の３．６ｇの“４”の溶液に加え、混合物をさらに１６時間撹拌する。混合物を慣用のワークアップに供し、残留物をＭＴＢエーテルと共に煮沸して冷却し、結晶を分離して、７００ｍｇの５−（２，４−ジメトキシ−５−ブロモフェニル）−４−（２−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール（“６”）、Ｒｆ１．４１３；ＭＷ３９５．２を得る。
【０１１７】
１．６
６００ｍｇの“６”、１７８．４μｌのスチレン（安定化）、４３０．２μｌのトリエチルアミン、１４．１ｍｇの酢酸パラジウム（ＩＩ）（Ｐｄ４７％）、１９．１７ｍｇのトリ−ｏ−トリルホスフィンおよび４ｍｌのアセトニトリルを、１０ｍｌのバイアルに導入する。混合物を電子レンジで３０分間１７０℃で照射する。少量の触媒を加え、混合物をさらに２回照射する。トルエンを混合物に加え、これを次に、水で多数回抽出する。有機相を乾燥し、濃縮する。残留物をＲＰクロマトグラフィで精製し、１４０ｍｇの“７”、Ｒｆ１．７６５；ＭＷ４１８．４、および４ｍｇの“８”を得る。
【化３】
2010516639.tif 000013
【０１１８】
１．７
１４０ｍｇの“７”を、標準の条件下で、０．１４ｇのＰｔ／Ｃ（５％）の存在下、１０ｍｌのＴＨＦ中において水素化する。次に触媒を分離し、慣用のワークアップに供して、１４０ｍｇの“９”、Ｒｆ１．９２０；ＭＷ４２０．５を得る。
【化４】
2010516639.tif 000014
【０１１９】
１．８
１５８．５μｌの三臭化ホウ素を、−１０℃で、２ｍｌのジクロロメタン中の１４０ｍｇの“９”の溶液に加え、混合物を室温でさらに１６時間撹拌する。メタノールを０℃で加え、溶媒を分離し、残留物をＲＰクロマトグラフィで精製して、７４ｍｇの“Ａ１”、Ｒｆ１．５３７；ＭＷ３９２．４、および２７ｍｇの“Ａ２”、Ｒｆ１．８８４；ＭＷ３９８．４を得る。
【化５】
2010516639.tif 000015
【０１２０】
参照例２
５−［４−（２−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル］−２，４−ジヒドロキシ−Ｎ−メチル−Ｎ−プロピルベンズアミド（“Ａ４６”）の製造
２．１
２０ｍｌのメタノール中の、１００ｍｇの５−（２，４−ジメトキシ−５−ブロモフェニル）−４−（２−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール（“６”）、７ｍｇの［（Ｒ）−（＋）−２，２’−ビス−（ジフェニルホスフィノ）−１，１’−ビナフチル］パラジウム（ＩＩ）クロリド、５．７ｍｌの一酸化炭素および３５μｌのトリエチルアミンの溶液を、オートクレーブ中１００℃、７．５ｂａｒで２０時間処理する。得られた溶液を次に濃縮し、エタノールから結晶化させて、９１ｍｇの５−［４−（２−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル］−２，４−ジメトキシ安息香酸メチルを得る。
【化６】
2010516639.tif 000016
, Rt 1.057分, m/e 374.
【０１２１】
２．２
例１．８と同様にして、９０ｍｇの５−［４−（２−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル］−２，４−ジメトキシ安息香酸メチルの反応により、５７．２ｍｇの化合物５−［４−（２−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル］−２，４−ジヒドロキシ安息香酸、Ｒｔ０．５９８分、ｍ／ｅ３３２を得る。
【０１２２】
２．３
２ｍｌのＴＨＦ中、５５ｍｇの５−［４−（２−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル］−２，４−ジヒドロキシ安息香酸、２モル当量のｔ−ブチルジメチルクロロシランおよび３モル当量のイミダゾールを室温で３時間撹拌し、次の化合物を得る。
【化７】
2010516639.tif 000017
【０１２３】
２．４
２．３で得た生成物を１．５ｍｌのＴＨＦに溶解し、２当量の１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩を加える。室温で１時間後に、１．２当量のプロピルメチルアミンを加え、混合物をさらに１８時間撹拌する。３当量のフッ化テトラメチルアンモニウムを次に加え、混合物を室温で２時間撹拌する。濃縮後、生成物を分離し、４２ｍｇの“Ａ４６”、Ｒｔ１．１３９分、ｍ／ｅ３８７；ＭＷ３８６を得る。
【化８】
2010516639.tif 000018
以下の化合物を、同様にして得る：
５−［４−（２−メチルフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル］−２，４−ジヒドロキシ−Ｎ−メチル−Ｎ−プロピルベンズアミド（“Ａ４７”）、ＭＷ３８３．４。
【０１２４】
例１
本発明の化合物５−［４−（２−メチルフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル］−２，４−ジヒドロキシ−Ｎ−メチル−Ｎ−ブチルベンズアミド（“Ｃ１”）を、“Ａ４７”の製造と同様にして得る。
【数１】
2010516639.tif 000019
【０１２５】
例２
“Ｃ１”の合成を次のようにして行う：
【化９】
2010516639.tif 000020
【０１２６】
２．１    ５−ブロモ−２，４−ジヒドロキシ安息香酸（１）：
３．５５ｋｇの２，４−ジヒドロキシ安息香酸を、３０Ｌの氷酢酸に溶解する。１０Ｌの氷酢酸中の１０６０ｍｌのブロミンの溶液を、次に、１滴ずつ１５℃で８時間かけて加える。次に２０℃で１６時間撹拌を続け、混合物を真空で蒸発させ、結晶残留物を２０Ｌのジクロロメタン中にスラリー化し、１時間撹拌する。ろ過および空中乾燥により、４．９ｋｇの白色粗生成物を得る。３０Ｌのトルエン／アセトニトリル（１：１）からの再結晶化および乾燥により、３．５４９ｋｇ（収率６６％）の５−ブロモ−２，４−ジヒドロキシ安息香酸（ｍ．ｐ．２１０〜２１１．５℃；ＭＷ２３３．０）を得る。
【０１２７】
２．２    ５−ブロモ−２，４−ジヒドロキシ安息香酸メチル（２）：
８．９ｋｇの５−ブロモ−２，４−ジヒドロキシ安息香酸を、７０Ｌのメタノールに溶解し、５５℃に加熱する。次に８００ｍｌの硫酸（ｗ＝９５〜９８％）を計測して入れ、混合物をゆっくり還流しつつ４日間撹拌し、この間、さらに５００ｍｌの硫酸（ｗ＝９５〜９８％）を毎日加える（３回）。反応混合物を、１００Ｌの水中の９ｋｇの炭酸水素ナトリウムの冷却溶液（５℃）に撹拌して入れる。ろ過および５０℃真空中での乾燥により、７．８７ｋｇ（８３％）の５−ブロモ−２，４−ジヒドロキシ安息香酸メチル（白色結晶）、ＭＷ２４７．１を得る。
【０１２８】
２．３    ２，４−ビスベンジルオキシ−５−ブロモ安息香酸メチル（３）：
７．８６ｋｇ（８３％）の５−ブロモ−２，４−ジヒドロキシ安息香酸メチルおよび９．６５ｋｇの炭酸カリウムを、１００Ｌのアセトニトリル中に０℃で懸濁させる。混合物を次に８０℃に加熱し、７５７５ｍｌの臭化ベンジルを、４０分かけて滴下ジョウゴ（dropping funnel）を介して加える。８０℃で１６時間の撹拌後、混合物をろ過し、集めたろ液を真空で濃縮する：１２．９５ｋｇ（９５％）の２，４−ビスベンジルオキシ−５−ブロモ安息香酸メチル（わずかに黄色の結晶）；ＭＷ４２７．３。
【０１２９】
２．４    ２，４−ビスベンジルオキシ−５−ブロモ安息香酸（４）：
１８ＬのＴＨＦ中の６．４ｋｇの２，４−ビスベンジルオキシ−５−ブロモ安息香酸メチルを、３０Ｌの水中の３ｋｇの水酸化ナトリウム溶液に加える。６８℃で一晩撹拌した後、混合物を１０℃に冷却し、７．５ＬのＨＣｌ（ｗ：３７％）を滴下ジョウゴを介して加える（ｐＨ１）。混合物をさらに１時間撹拌し、続いてろ過する。残留物を、６０℃の真空で定重量まで乾燥する；５．６８７ｋｇ（９１％）の２，４−ビスベンジルオキシ−５−ブロモ安息香酸（ｍ．ｐ．１５０〜１５２℃；ＭＷ４１３．３）。
【０１３０】
２．５    ２，４−ビスベンジルオキシ−５−ブロモ−Ｎ−ｏ−トリルベンズアミド（５）：
８０ｍｌのＤＭＦを、４２Ｌの塩化チオニルに加える。混合物を２〜９℃に冷却し、１１．５５ｋｇの２，４−ビスベンジルオキシ−５−ブロモ安息香酸を１時間かけて加える。この温度で撹拌をさらに１時間続け、次に２５℃で１６時間続ける。塩化チオニルを次に真空で蒸留して除去する（３００ｍｂａｒ、４６℃）。得られた残留物に３Ｌのトルエンを加え、混合物を再度蒸発乾固し、この操作をさらに２回繰り返す。得られた生成物を、さらなる精製なしで次の反応に用いる。１３．６ｋｇ（トルエンを加えて）。
【０１３１】
２．８Ｌのｏ−トルイジンおよび２．５Ｌのピリジンを、５０Ｌのジクロロメタンに３℃で加える。３５Ｌのジクロロメタン中に懸濁させた１３．６ｋｇの２，４−ビスベンジルオキシ−５−ブロモベンゾイルクロリド（トルエン湿潤）を、この溶液に２時間かけて加える。混合物を次に、２３℃で一晩撹拌し、固体をろ別し、ジクロロメタン（各回５Ｌで２回）ですすぐ。この方法で得られた粗生成物（８ｋｇ）を４０Ｌのジクロロメタンに溶解し、４０Ｌの蒸留水および５０Ｌの塩酸（〜１ｍｏｌ／Ｌ；５ＬのＨＣｌｗ：３７％および５０Ｌの水から調製）で続いて抽出する。有機相を続いて５０Ｌの水で洗浄する。有機相を３日間、６ｋｇの硫酸ナトリウムを用いて乾燥する。乾燥剤を吸引フィルターを介して吸引ろ過して除去し、ろ液を回転蒸発器内で蒸発乾固する。エタノール（３５Ｌ、６５℃）からの再結晶化および定重量までの乾燥（５０℃／３５ｍｂａｒ）により、１０．８４ｋｇ（８２％）の２，４−ビスベンジルオキシ−５−ブロモ−Ｎ−ｏ−トリルベンズアミド（ｍ．ｐ．１７４．５℃〜１７６℃；ＭＷ５０２．４）を得る。
【０１３２】
２．６    ５−（２，４−ビスベンジルオキシ−５−ブロモフェニル）−４−（２−メチルフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール（６）：
１．７５ｋｇの五塩化リンを、３℃で、６０Ｌのトルエン中の３．５ｋｇの２，４−ビスベンジルオキシ−５−ブロモ−Ｎ−ｏ−トリルベンズアミドに加える。混合物を次に１３５℃で４時間加熱し、次に撹拌を２５℃で１６時間続ける。真空での蒸発により、３．６ｋｇの結晶物質を得る。後者を１８ＬのＴＨＦにとり、３０ＬのＴＨＦ中の１．３８ｋｇのＢｏｃ−ヒドラジン溶液に、３℃で１．５時間かけて加える。２５℃に温めて１６時間撹拌した後、生成物を吸引してろ別し（４．３ｋｇの白色生成物、ＴＨＦ湿潤）、これを続く反応に直接用いる。
【０１３３】
生成物を３０ＬのＴＨＦに溶解し、７Ｌの塩酸（ｗ：３７％）を１℃で２０分かけて加える。混合物を２３℃で１６時間撹拌し、−５℃に冷却し、７．５Ｌの水酸化ナトリウム溶液（ｗ：３２％）を１滴ずつ１．５時間かけて加える。相を分離し、有機相を２５Ｌの飽和塩化ナトリウム溶液（８．７５ｋｇの塩化ナトリウムおよび２５Ｌの水から調製）で洗浄する。有機相を６ｋｇの硫酸ナトリウムを用いて乾燥し、乾燥剤を吸引ろ過で除去し、ろ液を回転蒸発器で蒸発乾固する。２×５Ｌのトルエンを残留物に加え、「シャープな」蒸留を行って、残った水を「中に閉じ込める」。この方法で得た残留物を、直接、さらに反応させる。
【０１３４】
１．３ｋｇのカルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）を１００ＬのＴＨＦに溶解する。３℃に冷却した後、前の反応からの生成物を、ゆっくりと１滴ずつ２５ＬのＴＨＦに加える。混合物を次に２５℃で１６時間撹拌し、３０Ｌの飽和塩化ナトリウム溶液で抽出し、次に有機相を２５Ｌの１ＮのＨＣｌで抽出する。有機相を続いて２５Ｌの飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、１０ｋｇの硫酸ナトリウムを用いて乾燥する。有機相の真空でのろ過および蒸発により固体残留物を得て、これを５Ｌのトルエンにとり、再度真空で蒸発乾固する。２０Ｌの２−プロパノールからの７０℃での再結晶化により、２．７ｋｇ（７６％）の５−（２，４−ビスベンジルオキシ−５−ブロモフェニル）−４−（２−メチルフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール、ＭＷ５４２．４を得る。
【０１３５】
２．７    ５−［４−（２−メチルフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル］−２，４−ビスベンジルオキシ−Ｎ−メチル−Ｎ−ブチルベンズアミド（７）：
２５ＬのＴＨＦ中の、２ｋｇの５−（２，４−ビスベンジルオキシ−５−ブロモフェニル）−４−（２−メチルフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール、９０ｇの（１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−フェロセン）パラジウム（ＩＩ）塩化物、８３Ｌの一酸化炭素、４７９ｇのトリエチルアミンおよび４００ｇのＮ−メチルブチルアミンの溶液を、１２０℃および５〜１０ｂａｒで２０時間、オートクレーブ内で処理する。得られた溶液を続いて蒸発させ、エタノールから結晶化させて、１．４ｋｇ（７０％）の５−［４−（２−メチルフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル］−２，４−ビスベンジルオキシ−Ｎ−メチル−Ｎ−ブチルベンズアミド、ＭＷ４７６．７を得る。
【０１３６】
２．８    ５−［４−（２−メチルフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル］−２，４−ジヒドロキシ−Ｎ−メチル−Ｎ−ブチルベンズアミド（“Ａ１”）：
１０ＬのＴＨＦ中の、１．１ｋｇの５−［４−（２−メチルフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル］−２，４−ビスベンジルオキシ−Ｎ−メチル−Ｎ−ブチルベンズアミド、５％Ｐｄ／Ｃ（水５０．５％）および８５Ｌの水素の溶液を、２３℃で７時間オートクレーブ内で処理する。得られた溶液を続いて蒸発させ、エタノールから結晶化させて、７３８ｇ（９５％）の５−［４−（２−メチルフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル］−２，４−ジヒドロキシ−Ｎ−メチル−Ｎ−ブチルベンズアミド（“Ｃ１”）；ＭＷ３９６．５を得る。
【０１３７】
本発明の化合物“Ｃ１”の、２つの多形形態Ａ１およびＡ２を単離することができる。
融点：
Ａ１形態：ｍ．ｐ．２３８．５±０．１℃（ｎ＝６）
Ａ２形態：ｍ．ｐ．２０９．６±０．２℃（ｎ＝６）
Ａ１形態は熱力学的により安定な形態である。
２つの多形形態の粉末Ｘ線回折スペクトルを図１に示す。
【０１３８】
Ａ２形態はＡ１に、例えばメタノール、エタノール、アセトン、ＤＭＦ、酢酸、ギ酸、ＴＨＦまたはイソプロパノールなどの溶媒中で撹拌することにより、転換可能である。
多形Ａ１およびＡ２の粉末ＸＲＤスペクトルデータ：
各ケースにおいて、１０個の特性ピークを評価に用いた。
【表１０】
2010516639.tif 000021
【０１３９】
手順および結果：
Ｘ線粉末回折法（ＸＲＤ）
全試料をＸＲＤにより測定した。
ＲＴ１６２−０７：
・Ｄ５０００回折計［Bruker AXS］
・透過モード
・ジェネレータ電力３０ｋＶ／４０ｍＡ
・ＣｕＫα１−放射、１．５４０６Å（一次モノクロメータ）
・位置敏感型検出器  
【０１４０】
ＸＲＤ測定条件：
範囲：３〜６５°２θ
解像度：０．０５°２θ
ステップ時間：１．４ｓ
ＲＴ２２１４−０７：
・Ｓｔｏｅ粉末Ｘ線回折システムSTADIP 611 KL
・透過モード
・ジェネレータ電力４０ｋＶ／４０ｍＡ
・ＣｕＫα１−放射、１．５４０６Å（一次モノクロメータ）
・位置敏感型検出器
【０１４１】
ＸＲＤ測定条件：
範囲：３〜６５°２θ
解像度：０．５°２θ
ステップ時間：１５ｓ
【０１４２】
【表１１】
2010516639.tif 000022
【０１４３】
プロドラッグ化合物の製造
例３
モノ−［２−（ブチルメチルカルバモイル）−５−ヒドロキシ−４−（５−オキソ−４−ｏ−トリル−４，５−ジヒドロ−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）フェニル］ホスフェートの製造
【化１０】
2010516639.tif 000023
【０１４４】
７００ｍｇの５−［４−（２−メチルフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル］−４−ベンジルオキシ−２−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−Ｎ−ブチルベンズアミドをまず、冷却しつつ２０ｍｌのアセトニトリルに導入し、１０ｍｌの四塩化炭素を加える。０．５ｍｌのＮ−エチルジイソプロピルアミンおよび５０ｍｇの４−（ジメチルアミノ）ピリジンおよび、−１０℃でゆっくりと、３２６μｌのジベンジルホスホナイト（phosphonite）を、次に１滴ずつ加える。混合物をこの温度でさらに３０分撹拌し、１０ｍｌの０．５ＭのＫＨ２ＰＯ４水溶液を加え、混合物をエチルエーテルで抽出し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、ろ過して濃縮する。カラムクロマトグラフィにより、５５０ｍｇ（５１％）の５−［４−（２−メチルフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル］−４−ベンジルオキシ−２−（ジベンジルホスフェート）−Ｎ−メチル−Ｎ−ブチルベンズアミド（Ｒｆ２．１９６分；ＭＷ７４６．８）を得る。
【０１４５】
１０ｍｌのＴＨＦ中の、５５０ｍｇの５−［４−（２−メチルフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル］−４−ベンジルオキシ−２−（ジベンジルホスファイト）−Ｎ−メチル−Ｎ−ブチルベンズアミド、５％Ｐｄ／Ｃ（水５０．５％）および４９．５ｍｌの水素の溶液を、２３℃で１９時間、オートクレーブ内で処理する。得たれた溶液を次に濃縮し、エチルエーテルから結晶化する；２８０ｍｇ（７９．８％）のモノ−［２−（ブチルメチルカルバモイル）−５−ヒドロキシ−４−（５−オキソ−４−ｏ−トリル−４，５−ジヒドロ−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）フェニル］ホスフェート（Ｒｆ０．６４５分；ＭＷ４７６．４）を得る。
【０１４６】
例４
モノ−［４−（ブチルメチルカルバモイル）−２−（５−オキソ−４−ｏ−トリル−４，５−ジヒドロ−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）−５−ホスホノオキシフェニル］ホスフェート（Ｅ）の製造
【化１１】
2010516639.tif 000024
合成は、例３と同様にして行う；Ｄ：ＭＷ９１６；Ｒｆ２．３３５分、Ｅ：ＭＷ５５６．４；Ｒｆ０．８８３分。
【０１４７】
例５
モノ−［４−（ブチルメチルカルバモイル）−５−ヒドロキシ−２−（５−オキソ−４−ｏ−トリル−４，５−ジヒドロ−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）フェニル］ホスフェート（Ｆ）の製造
【化１２】
2010516639.tif 000025
合成は、例３と同様にして行う；Ｆ：ＭＷ４７６．４；Ｒｆ１．３２１分。
【０１４８】
例６
Ｎ−ブチル−２，４−ジヒドロキシ−Ｎ−メチル−５−（５−チオキソ−４−ｏ−トリル−４，５−ジヒドロ−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ベンズアミド（Ｇ）の製造
【化１３】
2010516639.tif 000026
【０１４９】
例７
“Ｃ１”のグルクロン酸誘導体の製造
【化１４】
2010516639.tif 000027
４ｍｌのリン酸カリウム緩衝液（１．０ｍＭのＭｇＣｌ２と共に０．１Ｍ／ｐＨ７．４）、１００ｍｇのウリジン−５’−ジホスホグルクロン酸ナトリウム塩、１０ｍｇの“Ｃ１”（１ｍｌの２０％アセトニトリルに懸濁）および１ｍｌのブタ肝臓ホモジェネートを、試料バイアルに導入する。バッチを３７℃でインキュベーションする。２４時間後、アセトニトリルを加え、混合物を遠心分離し、上清を次に蒸発乾固する。
【０１５０】
３つの位置異性体の分離および分析を、ＬＣ−ＭＳにより行う。
ＬＣ−ＭＳ条件
以下の特性のHewlett Packard HP 1100シリーズのシステム：
イオン源：エレクトロスプレー（陽モード）；スキャン：１００〜１０００ｍ／ｅ；
断片化電圧：６０Ｖ；
気体温度：３００℃；
ＤＡＤ：２２０ｎｍ。
【０１５１】
流速：２．４ｍｌ／分。用いたスプリッタは、ＭＳの流速をＤＡＤ後に０．７５ｍｌ／分まで低下させる。
カラム：Chromolith SpeedROD RP-18e 50-4.6
溶媒： Merck KGaAのLiChrosolvグレード
溶媒Ａ：Ｈ２Ｏ（ＴＦＡの０．０１％）
溶媒Ｂ：アセトニトリル（ＴＦＡの０．００８％）
分極勾配：
５％のＢ→１００％のＢ：０分〜３．０分
１００％のＢ→３．０分〜３．３分
１００％のＢ→２０％のＢ：３．３分〜４分。
【０１５２】
等質量の３つの化合物に対して、次のＲＴ値を見出す：
１．３０７、１．４０６および１．４６５分。
異性体Ｈは、ＮＭＲ分光法により曖昧さなしで同定された。
１次元１Ｈ−ＮＭＲスペクトルならびに２次元ＨＳＱＣ、ＨＭＢＣおよびＲＯＥＳＹスペクトルを、次の条件下で得た：
Bruker DRX 500分光計；ＴＭＳを標準として、ＤＭＳＯ−ｄ６、３０３Ｋ。
【０１５３】
１Ｈ−ＮＭＲスペクトルの割当て：
【化１５】
2010516639.tif 000028
【０１５４】
【表１２】
2010516639.tif 000029
以下の例は、医薬組成物に関する。
【０１５５】
例Ａ：注射バイアル
１００ｇの本発明の活性成分および５ｇのリン酸水素二ナトリウムを３Ｌの２回蒸留水に溶解した溶液を、２Ｎ塩酸を用いてｐＨ６．５に調整し、滅菌濾過し、注射バイアル中に移送し、滅菌条件下で凍結乾燥し、滅菌条件下で密封する。各々の注射バイアルは、５ｍｇの活性成分を含む。
例Ｂ：座剤
２０ｇの本発明の活性成分と１００ｇの大豆レシチンおよび１４００ｇのココアバターとの混合物を、溶融し、型中に注入し、放冷する。各々の座剤は、２０ｍｇの活性成分を含む。
【０１５６】
例Ｃ：溶液
１ｇの本発明の活性成分、９．３８ｇのＮａＨ２ＰＯ４・２Ｈ２Ｏ、２８．４８ｇのＮａ２ＨＰＯ４・１２Ｈ２Ｏおよび０．１ｇの塩化ベンザルコニウムから、９４０ｍｌの２回蒸留水中に溶液を調製する。ｐＨを６．８に調整し、溶液を１Ｌにし、放射線により滅菌する。この溶液を、点眼剤の形態で用いることができる。
例Ｄ：軟膏
５００ｍｇの本発明の活性成分を、９９．５ｇのワセリンと、無菌条件下で混合する。
【０１５７】
例Ｅ：錠剤
１ｋｇの本発明の活性成分、４ｋｇのラクトース、１．２ｋｇのジャガイモデンプン、０．２ｋｇのタルクおよび０．１ｋｇのステアリン酸マグネシウムの混合物を、慣用の方法で圧縮して錠剤を得、各々の錠剤が１０ｍｇの活性成分を含むようにする。
例Ｆ：糖衣錠
例Ｅと同様にして、錠剤を圧縮し、次に、慣用の方法で、スクロース、ジャガイモデンプン、タルク、トラガカントおよび染料の被膜で被覆する。
【０１５８】
例Ｇ：カプセル
２ｋｇの本発明の活性成分を、硬質ゼラチンカプセル中に、慣用の方法で導入して、各々のカプセルが２０ｍｇの活性成分を含むようにする。
例Ｈ：アンプル
１ｋｇの本発明の活性成分を６０Ｌの２回蒸留水に溶解した溶液を、滅菌濾過し、アンプル中に移送し、滅菌条件下で凍結乾燥し、滅菌条件下で密封する。各々のアンプルは、１０ｍｇの活性成分を含む。
【図１】
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【国際調査報告】
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