(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
i）トルエン/MTBEの混合物中において、促進剤の存在下にて、式A5：
【化１】
0006339673.tif 000044
の化合物を、式BC8：
【化２】
0006339673.tif 000045
の化合物と接触させて、式ABC1：
【化３】
0006339673.tif 000046
の化合物を設ける工程；を含む、式ABC1の化合物を調製するための方法であって、
前記促進剤は、トリエチルシリルトリフルオロメタンスルホネート(TESOTf）、トリメチルシリルトリフルオロメタンスルホネート(TMSOTf）、tert-ブチルジメチルシリルトリフルオロメタンスルホネート(TBSOTf）、およびそれらの混合物からなる群から選択される、前記方法。
【請求項２】
MTBEにおけるトルエンの割合は20%である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記方法は、
ii-1）促進剤およびアシル化剤の存在下にて、式ABC1の化合物を、式ABC2：
【化４】
0006339673.tif 000047
の化合物に変換する工程、
ii-2）塩基の存在下にて、式ABC2の化合物を、式ABC3：
【化５】
0006339673.tif 000048
の化合物に変換する工程、
ii-3）トリクロロアセトニトリルの存在下にて、式ABC3の化合物を、式ABC4：
【化６】
0006339673.tif 000049
の化合物に変換する工程、
ii-4）促進剤およびチオールの存在下にて、式ABC4の化合物を、式ABC5：
【化７】
0006339673.tif 000050
の化合物に変換する工程、
ii-5）促進剤および／またはラジカル開始剤の存在下にて、式ABC5の化合物を、式DE4：
【化８】
0006339673.tif 000051
の化合物と接触させて、式ABCDE1：
【化９】
0006339673.tif 000052
の化合物を得る工程、
ii-6）過酸化物および塩基の存在下にて、式ABCDE1の化合物を、式ABCDE2：
【化１０】
0006339673.tif 000053
の化合物に変換する工程、
ii-7）硫酸化剤の存在下にて、式ABCDE2の化合物を、式ABCDE3：
【化１１】
0006339673.tif 000054
の化合物に変換する工程、
ii-8）水素化触媒およびH2の存在下にて、式ABCDE3の化合物を、式ABCDE4：
【化１２】
0006339673.tif 000055
の化合物に変換する工程、
ii-9）硫酸化剤の存在下にて、式ABCDE4の化合物を、式ABCDE5：
【化１３】
0006339673.tif 000056
のフォンダパリヌクスに変換する工程；を更に含み、
Rは、アルキル、フェニル、ベンジル、置換アルキル、置換フェニル、および置換ベンジルからなる群から選択され；
前記促進剤は、トリエチルシリルトリフルオロメタンスルホネート(TESOTf）、トリメチルシリルトリフルオロメタンスルホネート(TMSOTf）、tert-ブチルジメチルシリルトリフルオロメタンスルホネート(TBSOTf）、トリフルオロメタンスルホン酸(TfOH）、およびそれらの混合物からなる群から選択され；
前記ラジカル開始剤は、N-ヨードスクシンイミドおよびN-ブロモスクシンイミドからなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記工程 i）は、
a）塩基およびトリクロロアセトニトリルの存在下にて、式A4：
【化１４】
0006339673.tif 000057
の化合物を、式A5の化合物に変換する工程、を更に含む、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記塩基は、DBUおよび炭酸カリウムからなる群から選択される、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
ABC5は、ABC5a：
【化１５】
0006339673.tif 000058
である、請求項３に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、フォンダパリヌクスナトリウム（Fondaparinux sodium）を製造するための方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
フォンダパリヌクスナトリウム（CAS 114870-03-0）は、Choay, S.A.（米国特許第4,818,816号参照）により開発された、O-[2-デオキシ-6-O-スルホ-2-(スルホアミノ）-α-D-グルコピラノシル]-(1--4)-O-(β-D-グルコピラヌロノシル)-(1--4)-O-[2-デオキシ-3,6-ジ-O-スルホ-2-(スルホアミノ)-α-D-グルコピラノシル]-(1--4)-O-(2-O-スルホ-α-L-イドピラヌロノシル)-(1--4)-O-[2-デオキシ-1-O-メチル-6-O-スルホ-2-(スルホアミノ)-α-D-グルコピラノシド]デカナトリウム塩という化学名を持つオリゴ糖／ヘパリンのメンバーである。この化合物は、整形外科手術を受けた患者における深部静脈血栓症の予防、ならびに深部静脈血栓症および肺塞栓症の治療に使用され、抗凝固薬として指示される合成五糖類Xa因子阻害剤である。これは、2001年に米国食品医薬品局によって承認され、商品名Arixtra（商標）の下で皮下投与用として販売されている。
【０００３】
米国特許第4,818,816号に開示されたフォンダパリヌクスナトリウムの調製方法は、最終生成物を得るために60を超える工程を要し、収率も低いため大規模生産には不向きである。
【０００４】
米国特許第8,288,515号は、フォンダパリヌクスナトリウムを調製するために保護および脱保護工程を適用する。しかし、脱保護工程により、収率が低くなり追加的な反応時間がかかってしまう。
【０００５】
もう一つの方法としては、米国特許出願第2011/0306757号に開示のものがあるが、追加的なアジドの還元工程により更なる精製が必要であり、最終的なN-スルホン化工程での収率は低い（68％）ままである。
【０００６】
米国特許出願第2012/0116066号は、フォンダパリヌクスナトリウムおよびその中間体の調製について記載する。しかし、EMod3といったいくつかの中間体の調製にカラム精製が必要である。また、CモノマーおよびDモノマーとの間の結合におけるα／β比が低く、そして、時間のかかる手続きが数多くあるので最適ではない。
【０００７】
上記の観点より、フォンダパリヌクスナトリウムの工業的製造のために、より高い収率／純度が得られる単純な方法の必要性が依然として存在する。
【発明の概要】
【０００８】
本発明は、フォンダパリヌクスナトリウムを調製するための経済的な方法を提供する。
【０００９】
一の態様では、本発明は、式ABC5：
【００１０】
【化１】
0006339673.tif 000002
【００１１】
の化合物を、式DE4：
【００１２】
【化２】
0006339673.tif 000003
【００１３】
の化合物と反応させて、式ABCDE1：
【００１４】
【化３】
0006339673.tif 000004
【００１５】
の化合物を得る工程、および、
上記工程後、該式ABCDE1の化合物をフォンダパリヌクスナトリウム：
【００１６】
【化４】
0006339673.tif 000005
【００１７】
(式中、Rは、アルキル、フェニル、ベンジル、置換アルキル、置換フェニル、および置換ベンジルからなる群から選択され；R1はアセチルまたはベンジルであり；かつ、R2はアジドまたはNHCbzである）に変換する工程を含む、フォンダパリヌクスナトリウムを調製するための新規な方法を提供する。ABCDE1からフォンダパリヌクスナトリウムへの変換は、下記の詳細な説明にて説明する。
【００１８】
本明細書に記載の方法では、まず、ドナー三糖類ABC4：
【００１９】
【化５】
0006339673.tif 000006
【００２０】
を、アクセプター二糖類DE4：
【００２１】
【化６】
0006339673.tif 000007
【００２２】
と反応させてABCDE1を調製し、その後カラムカラムクロマトグラフィーによる精製をすると、24%の収率で得られる。
【００２３】
トリクロロアセトイミデートドナーABC4は水と急速に反応し、このことにより収量が減少することが発見された。チオドナー（ABC5）は活性が低いものの、H2Oとの迅速な反応が回避できるので、このことにより反応収率を増加させることが可能になる。驚くべきことに、ABC5、特に、以下に示すフェニルスルファニル中間体ABC5aから得られたABCDE1を、カラムクロマトグラフィーなしで単離したところ、収率が65％に増加した。
【００２４】
【化７】
0006339673.tif 000008
【００２５】
第2の態様では、本発明は、促進剤の存在下にて、式ABC4：
【００２６】
【化８】
0006339673.tif 000009
【００２７】
の化合物を、式ABC5：
【００２８】
【化９】
0006339673.tif 000010
【００２９】
の化合物に変換する工程を含む、
(式中、Rは、アルキル、フェニル、ベンジル、置換アルキル、置換フェニル、および置換ベンジルからなる群から選択される）、式ABC5の化合物を調製するための方法を提供する。
【００３０】
促進剤は、トリアルキルシリル、トリフルオロメタンスルホネート、およびトリアルキルシリルとトリフルオロメタンスルホネートの混合物から選択される。いくつかの実施形態では、促進剤は、tert-ブチルジメチルシリルトリフルオロメタンスルホネート(TBSOTf)、トリメチルシリルトリフルオロメタンスルホネート(TMSOTf)、トリエチルシリルトリフルオロメタンスルホネート(TESOTf)、およびそれらの混合物からなる群から選択される。
【００３１】
第3の態様では、本発明は、
a)促進剤が存在する有機溶媒中で、式A5：
【００３２】
【化１０】
0006339673.tif 000011
【００３３】
の化合物を、式BC8：
【化１１】
0006339673.tif 000012
【００３４】
の化合物と接触させて、式ABC1：
【００３５】
【化１２】
0006339673.tif 000013
【００３６】
の化合物を設ける工程；および、
b）式ABC1の化合物を、式ABC4：
【００３７】
【化１３】
0006339673.tif 000014
【００３８】
の化合物に変換する工程、を含む、ABC4を調製するための方法を提供する。
【００３９】
好ましくは、工程(a)で使用される有機溶媒は、ジエチルエーテル、メチルtert-ブチルエーテル(MTBE)、イソプロピルエーテル(IPE)、ジグリム、トルエン、キシレン、およびそれらの混合物、からなる群から選択される。好ましくは、その混合物はトルエン/MTBEである。より好ましくは、MTBEにおけるトルエンの割合は0〜30%である。より好ましくは、MTBEにおけるトルエンの割合は15〜25%、さらにより好ましくは約20%である。
【００４０】
ABC1のα/β比は、本発明の溶媒系を適用することによって改善される。例えば、トルエン/MTBEの場合、結果は、トルエン/IPE (12%)またはトルエン/ジグリム(18%)のいずれかで得られた場合よりもABC1のβ型が低い（4〜9％）ことが示された。
【００４１】
工程(a)で使用される好ましい促進剤は、トリメチルシリルトリフルオロメタンスルホネート(TMSOTf)、トリエチルシリルトリフルオロメタンスルホネート(TESOTf)、tert-ブチルジメチルシリルトリフルオロメタンスルホネート(TBSOTf)、およびそれらの混合物である。個々のトリアルキルシリルトリフラートまたはそれらの混合物を本明細書では包括的に「トリアルキルシリル」と総称する。より好ましくは、促進剤はTBSOTfである。
【００４２】
工程(b)、つまり、ABC1からABC4への変換は、以下の詳細な説明にて説明する。
【００４３】
更に別の態様では、塩基およびトリクロロアセトニトリルの存在下にて、A5：
【００４４】
【化１４】
0006339673.tif 000015
【００４５】
を、A4：
【００４６】
【化１５】
0006339673.tif 000016
【００４７】
から調製する。
【００４８】
好ましくは、塩基は、炭酸ナトリウムまたは炭酸カリウムから選択されるアルカリ炭酸塩である。より好ましくは、塩基は炭酸カリウムである。
【００４９】
米国特許出願第2012/0116066号では、A4をトリクロロアセトニトリルおよびDBUを反応させて粗A5を得て、カラム精製した後、収率はわずか53%である。次の工程では、この生成物をBC8と反応させるが、これらの2つの工程を総合すると全体の収率は34%である。本方法にて示したように、DBUをK2CO3等の無機塩基(これらは、有機溶媒から容易に濾過できる)に代えると、2つの工程を総合した全体の収率は62%に向上した。
【００５０】
第4の態様では、本発明は、式ABC5：
【００５１】
【化１６】
0006339673.tif 000017
【００５２】
(式中、Rは、アルキル、フェニル、ベンジル、置換アルキル、置換フェニル、および置換ベンジルからなる群から選択される）の化合物を提供する。
【００５３】
特に、ABC5はABC5a：
【００５４】
【化１７】
0006339673.tif 000018
【００５５】
である。
【図面の簡単な説明】
【００５６】
【図１Ａ】図１Ａは、本明細書に記載の方法を採用する本発明による改善したフォンダパリヌクスナトリウムの合成経路を示す。
【図１Ｂ】図１Ｂは、本明細書に記載の方法を採用する本発明による改善したフォンダパリヌクスナトリウムの合成経路を示す。
【発明を実施するための形態】
【００５７】
Ｉ．概要
本発明は、フォンダパリヌクスナトリウムを調製するための方法を提供する。この新規な方法は、収率がより高くかつ不純物が少ないことが発見された。また、本願に記載の方法は、数多くの変換（合成工程）を完了するのに必要な時間も減ずる。
【００５８】
II．定義
本明細書で使用する用語「接触」とは、少なくとも2つの異なる種同士が反応できるように接触させるプロセスを指す。しかし、得られる反応生成物は、添加試薬同士の反応から直接的に生じてもよく、あるいは反応混合物中で生じる添加試薬の1つまたは複数由来の中間体からも生じてもよいことが、理解されるべきである。
【００５９】
特に明記しない限り、本明細書で使用する用語「アルキル」は、それ自体または他の置換基の一部としての、直鎖または分枝鎖炭化水素ラジカルを意味する。アルキル置換基並びに他の炭化水素置換基は、当該置換基中の炭素原子数を示す指示子を含んでもよい（すなわち、C1〜C8は、1〜8個の炭素原子数を意味する）が、このような指示子は省略されていてもよい。特に明記しない限り、本発明のアルキル基は、1〜12個の炭素原子を含む。例えば、アルキル基は、1〜2、1〜3、1〜4、1〜5、1〜6、1〜7、1〜8、1〜9、1〜10、1〜11、1〜12、2〜3、2〜4、2〜5、2〜6、3〜4、3〜5、3〜6、4〜5、4〜6または5〜6個の炭素原子を含み得る。アルキル基の例として、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル、t-ブチル、イソブチル、sec-ブチル、n-ペンチル、n-ヘキシル、n-ヘプチル、n-オクチル、等が挙げられる。
【００６０】
アルキル、フェニル、およびベンジルについて言及する際に本明細書で使用する用語「置換された」は、1つまたは複数の置換基、典型的には、ハロゲン、アミノ、ヒドロキシ、ニトロ、シアノ、低級アルキル（例えば、C1-4アルキル）、低級アルコキシ（例えば、C1-4アルキル-O-）、低級アルキルアミノ（例えば、C1-4アルキル-NH-）、ジ-低級アルキルアミノ（例えば、ジ-C1-4アルキルアミノ）、およびハロアルキル、等の非干渉置換基から選択される1個〜3個の置換基により置換されたことを指す。当業者は、追加的な置換されたアルキル、フェニル、およびベンジルが、公知であり、本発明の文脈において有用であることを理解するであろう。
【００６１】
本明細書では、溶媒混合物は、第１の溶媒をある割合で第２の溶媒内に含むこともある。特に明記しない限り、割合は体積パーセントによる。
【００６２】
様々な保護基および保護試薬（ヒドロキシル保護試薬を含む）が当業者に知られており、例えば、その全体が参照により本明細書に援用されるProtective Groups in Organic Synthesis, 4th edition,T. W. Greene, and P. G. M. Wuts,John Wiley & Sons,New York,2006に開示されている化合物が挙げられる。
【００６３】
III．発明の実施形態
一の態様では、式ABCDE5：
【００６４】
【化１８】
0006339673.tif 000019
のフォンダパリヌクスナトリウムを調製するための方法であって、
式ABC5：
【００６５】
【化１９】
0006339673.tif 000020
【００６６】
の化合物を、式DE4：
【００６７】
【化２０】
0006339673.tif 000021
【００６８】
の化合物と反応させて、式ABCDE1：
【００６９】
【化２１】
0006339673.tif 000022
【００７０】
の化合物を得る工程、および
上記工程後、該式ABCDE1の化合物をフォンダパリヌクスナトリウムに変換する工程を含む(式中、Rは、アルキル、フェニル、ベンジル、置換アルキル、置換フェニル、および置換ベンジルからなる群から選択され；R1はアセチルまたはベンジルであり；かつ、R2はアジドまたはNHCbzである）、前記方法を提供する。
【００７１】
ABCDE1からフォンダパリヌクスナトリウムへの変換は、下記の詳細な説明にて説明する。
【００７２】
一群の実施形態では、促進剤およびチオールの存在下にて、式ABC4：
【００７３】
【化２２】
0006339673.tif 000023
【００７４】
の化合物を変換して式ABC5の化合物を設ける工程を含む方法により、式ABC5の化合物を得る。本実施形態で使用される促進剤は、TESOTf、TMSOTf、TfOH、TBSOTf、およびそれらの混合物からなる群から選択される。
【００７５】
別の一群の実施形態では、式A4：
【００７６】
【化２３】
0006339673.tif 000024
【００７７】
の化合物を変換して、式A5：
【００７８】
【化２４】
0006339673.tif 000025
【００７９】
の化合物を設ける工程；
b）式ABC1：
【００８０】
【化２５】
0006339673.tif 000026
【００８１】
の化合物を設けるのに十分な条件下で、式A5の化合物を式BC8：
【００８２】
【化２６】
0006339673.tif 000027
【００８３】
の化合物と接触させる工程；および、
c）式ABC1の化合物を変換して、式ABC4：
【化２７】
0006339673.tif 000028
の化合物を設ける工程、を含む方法により、ABC4を調製する。
【００８４】
上記工程（a）において、A4からA5への変換は塩基およびトリクロロアセトニトリルの存在下にて実施される。一群の実施形態では、塩基は有機アミン（例えば、DBU、ピリジン、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ピロリジン、またはかかる他の任意の有機塩基）である。別の一群の実施形態では、塩基は、無機塩基（例えば、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、重炭酸カリウム、重炭酸ナトリウム、炭酸セシウム、リン酸カリウム、またはかかる他の任意の無機塩基）である。特にDBU、炭酸カリウム、およびそれらの混合物では、塩基の数が上記変換において有用である。好ましくは、使用される塩基は、アルカリ塩基である。
【００８５】
上記工程（b）における、式A5の化合物を式BC8の化合物と接触させて式ABC1の化合物を設ける工程は、一般的に促進剤の存在下、有機溶媒中で実施される。エーテル（例えば、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン）、MTBE、IPE、ジグリム、トルエン、DCM、DCE、およびそれらの混合物等の様々な溶媒が有用である。一群の実施形態では、溶媒は、ジエチルエーテル、MTBE、IPE、ジグリム、トルエン、DCM、およびそれらの混合物から選択される。一群の実施形態では、溶媒は、MTBEに0〜20％のトルエンまたはDCMを含む混合物である。別の実施形態では、溶媒は、MTBEに約15〜25％のトルエンを含む、より好ましくは、MTBEに約20％のトルエンを含む混合物である。ABC4からABC5への上記変換において、当該一群の実施形態において使用される促進剤は、TESOTf、TMSOTf、TfOH、TBSOTf、およびそれらの混合物からなる群から選択される。
【００８６】
上記工程（c）において、ABC1から式ABC4の化合物への変換は一般的に以下の一連の工程を経て実施される。（c-1）まず、促進剤、有機溶媒、塩基、およびアシル化剤の存在下にて、ABC1をケタール加水分解生成物ABC2に変換する。一般的に、反応は、おおよそ周囲温度（例えば、20℃〜30℃）、場合により更に高い温度で、実施される。適切な促進剤として、トリアルキルシリル、トリフルオロメタンスルホネート、およびトリアルキルシリルとトリフルオロメタンスルホネートとの混合物が挙げられる。例示的なケタール加水分解およびアノマーアシル化を実施例2に示す。（c-2）ABC2におけるアノマー位のアセチル基を、塩基および非プロトン性溶媒の存在下にて切断し、化合物ABC3を設ける。非プロトン性溶媒の例として、トルエン、キシレン、THF、EA、DCM、DCE、等が挙げられる。例示的なアセチル基の切断を実施例3に記載する。（c-3）脱離基を、ABC3のアノマー基に導入して、化合物ABC4を設ける。適切な脱離基の例として、ハロゲン、活性化エステル、アセトイミデート、等が挙げられる。一般的に、反応は、非プロトン性溶媒中で実施される。非プロトン性溶媒の例として、トルエン、キシレン、THF、EA、DCM、DCE、等が挙げられる。トリクロロアセトイミデート（TCA）脱離基の例示的な導入を実施例4に示す。
【００８７】
別の態様では、式ABC5：
【００８８】
【化２８】
0006339673.tif 000029
【００８９】
(式中、Rは、アルキル、フェニル、ベンジル、置換アルキル、置換フェニル、および置換ベンジルからなる群から選択される）を有する新規な中間体を提供する。一群の実施形態では、本明細書に記載の式ABC5の化合物は、式ABC5a：
【００９０】
【化２９】
0006339673.tif 000030
【００９１】
を有する。
【００９２】
別の一群の実施形態では、ABC5におけるRは置換フェニルである。更に別の一群の実施形態では、ABC5におけるRはベンジルまたは置換ベンジルである。また更に実施形態では、ABC5におけるRはアルキルまたは置換アルキルである。
【００９３】
また、
i)トルエン/MTBEの混合物中において、式A5：
【００９４】
【化３０】
0006339673.tif 000031
【００９５】
の化合物を、
式BC8：
【００９６】
【化３１】
0006339673.tif 000032
【００９７】
の化合物と接触させて、式ABC1：
【００９８】
【化３２】
0006339673.tif 000033
【００９９】
の化合物を設ける工程；および、
ii)式ABC1の化合物を変換して、式ABCDE5：
【０１００】
【化３３】
0006339673.tif 000034
【０１０１】
のフォンダパリヌクスを設ける工程：を含む、フォンダパリヌクスナトリウムを調製するための方法も提供する。
【０１０２】
一群の実施形態では、上記工程（i）は、塩基が存在するトルエン/MTBE中において実施される。特定の実施形態では、塩基は、有機アミン(例えば、DBU、ピリジン、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ピロリジン、または他の任意のかかる有機塩基)である。別の一群の実施形態では、塩基は、無機塩基(例えば、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、重炭酸カリウム、重炭酸ナトリウム、炭酸セシウム、リン酸カリウム、または他の任意のかかる無機塩基)である。
【０１０３】
上記工程（ii）では、以下のような一連の工程を経てABC1をABCDE5に変換する。（ii-1）まず、促進剤、有機溶媒、塩基、およびアシル化剤の存在下にて、ABC1をケタール加水分解生成物ABC2に変換する。一般的に、反応は、おおよそ周囲温度（例えば、20℃〜30℃）、場合により更に高い温度で、実施される。適切な促進剤として、トリアルキルシリル、トリフルオロメタンスルホネート、およびトリアルキルシリルとトリフルオロメタンスルホネートとの混合物が挙げられる。例示的なケタール加水分解およびアノマーアシル化を実施例2に示す。（ii-2）ABC2におけるアノマー位のアセチル基を、塩基および非プロトン性溶媒の存在下にて切断し、化合物ABC3を設ける。非プロトン性溶媒の例として、トルエン、キシレン、THF、EA、DCM、DCE、等が挙げられる。例示的なアセチル基の切断を実施例3に記載する。（ii-3）脱離基を、ABC3のアノマー基に導入して、化合物ABC4を設ける。適切な脱離基の例として、ハロゲン、活性化エステル、アセトイミデート、等が挙げられる。一般的に、反応は、非プロトン性溶媒中で実施される。非プロトン性溶媒の例として、トルエン、キシレン、THF、EA、DCM、DCE、等が挙げられる。トリクロロアセトイミデート（TCA）脱離基の例示的な導入を実施例4に示す。（ii-4）促進剤が存在する有機溶媒中でABC4をチオールと反応させることにより、ABC4からチオドナー化合物ABC5を生成する。一般的に、反応は、非プロトン性溶媒中で実施される。非プロトン性溶媒の例として、トルエン、キシレン、THF、EA、DCM、DCE、等が挙げられる。適切な促進剤として、トリアルキルシリル、トリフルオロメタンスルホネート、およびトリアルキルシリルとトリフルオロメタンスルホネートとの混合物が挙げられる。チオフェニル基の例示的な導入を実施例4に記載する。一般的に、反応混合物は塩基を含む。塩基の例として、トリエチルアミン、ジイソプロピルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、等の有機塩基，または炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸セシウム、等の無機塩基が挙げられる。当業者は、チオドナー部分の導入は、様々な条件下で可能であり、化合物中に存在する脱離基に依存することを理解するであろう。（ii-5）チオドナー化合物ABC5を、DE4等のアクセプター化合物と反応させて、オリゴ糖ABCDE1を得る。反応は、ラジカル開始剤および／または促進剤が存在する有機溶媒中で実施される。一般的に、反応は、非プロトン性溶媒中で実施される。非プロトン性溶媒の例として、トルエン、キシレン、THF、EA、DCM、DCE、等が挙げられる。反応は、一般的に約-30℃〜約40℃の範囲の温度で実施される。適切な促進剤として、トリアルキルシリル、トリフルオロメタンスルホネート、およびトリアルキルシリルとトリフルオロメタンスルホネートとの混合物が挙げられる。ラジカル開始剤の非限定的な例としてN-ヨードスクシンイミド、N-ブロモスクシンイミド、等が挙げられる。ドナーとアクセプター化合物との例示的な反応を実施例5に示す。当業者は、ドナー-アクセプター反応は、様々な条件下で可能であり、化合物中に存在するチオドナー部分およびアクセプター部分に依存することを理解するであろう。
【０１０４】
ABCDE1からABCDE5への変換は、以下のように達成される。（ii-6）ABCDE1のエステル基を、過酸化物および塩基が存在する非プロトン性溶媒中で切断して、ABCDE2を設ける。非プロトン性溶媒の例として、トルエン、キシレン、THF、EA、DCM、DCE、等が挙げられる。反応は、一般的に最初は10℃未満の温度で、その後周囲温度（例えば、20℃〜30℃）に温めて実施される。実施例6は、オリゴ糖におけるエステル切断の例示的な手順を示す。（ii-7）その後、ABCDE2を塩基の存在下にてO-硫酸化し、ABCDE3を設ける。反応は、一般的に、非プロトン性溶媒中で硫酸化試薬を用いて硫酸基を導入し、その後塩基を添加して硫酸基に対イオンを導入することにより実施される。実施例7は、硫酸ナトリウム基の導入の例示的な手順を示す。（ii-8）適切な条件下でABCDE3内のCbz保護基を除去して、ABCDE4を設ける。いくつかの場合、アジド基をアミン基に還元する水素化を利用する。水素化は、典型的には周囲温度（例えば、20℃〜30℃）で1〜5日間、好ましくは、1〜3日間の期間実施される。実施例8は、ABCDE3からABCDE4への変換の例示的な手順を示す。（ii-9）硫酸化試薬を用い、その後塩基を添加して対イオンを硫酸基に導入するN-硫酸化工程により、ABCDE4をフォンダパリヌクスに変換する。その後この化合物を脱塩する。実施例9は、硫酸ナトリウム基の導入についての例示的な手順を示す。最終工程でナトリウム塩を脱塩し、フォンダパリヌクスを得る。
【０１０５】
特定の一群の実施形態では、上記工程（i）においてA5をBC8と反応させるための溶媒混合物は、MTBEにおけるトルエンの割合が10%〜30%、または15%〜25%、好ましくは、20%であるトルエン/MTBE混合物である。
【実施例】
【０１０６】
本発明をさらに詳細に説明するために、以下の実施例を示す。しかしながら、本発明は、本明細書に記載の特定の実施形態に限定されるものではない。本明細書及び実施例において以下の略語を使用する：DCMはジクロロメタンである；EAは酢酸エチルである；THFはテトラヒドロフランである；MTBEはメチルtert-ブチルエーテルである；DMAcはジメチルジメチルアセトアミドである；OTCAはトリクロロアセトイミデート基である；DCEはジクロロエタンである；IPEはイソプロピルエーテルである；CBzはカルボキシベンジル、カルバメート保護基である。化合物BC8は、米国出願公開第2012/0083594号に従って調製できる。化合物A4は、J. Am Chem Soc.,2005,127,3767-3773；またはTetrahedron：Asymmetry,2005,16(2),411-424の手順に従って調製できる。
【０１０７】
実施例1
ABC1の調製
【０１０８】
【化３４】
0006339673.tif 000035
【０１０９】
A4→A5
四つ口丸底フラスコに、機械的撹拌機と温度計を備え付けた。このフラスコに、A4（32g，75mmol，1.4当量）、トルエン（64mL）、K2CO3（52g，374mmol，7.0当量）、およびCCl3CN（37mL，374mmol，7.0当量）を、20〜30℃で窒素下にて添加した。この混合物を、20〜30℃で4時間撹拌した。この混合物を濾過し、濾過ケーキをトルエン（64mL）で洗浄した。濾液と洗浄液を混合し、A5を含むトルエン溶液を得た。-10℃未満に冷却した後、A5／トルエン溶液を使用する準備が整った。
【０１１０】
BC8→ABC1
四つ口丸底フラスコに、機械的撹拌機と温度計を備え付けた。このフラスコに、BC8（32g，53mmol，1当量）およびMTBE（576mL）を、20〜30℃で窒素下にて添加した。この混合物を、溶解するために45℃未満に加熱した。20〜30℃に冷却した後、3Åの分子篩（15g）をこの混合物に添加し、得られた混合物をこの温度で2時間撹拌した。その後、この混合物を-35〜-25℃に冷却した。TBSOTf（5mL，21mmol，0.4当量）を-35〜-25℃で添加し、この混合物をこの温度で約15分間撹拌した。得られたBC8および3Åの分子篩をMTBE内に含有する混合物を、使用する準備が整った。
【０１１１】
A5／トルエン溶液を含むフラスコに、BC8および3Åの分子篩を含むMTBEの混合物を、温度を-35〜-25℃に保ちつつ30分かけて添加した。この混合物を、-35〜-25℃で1時間撹拌した。トリエチルアミン（23mL，160mmol，3当量）およびAc2O（5mL，53mmol，1当量）を、-35〜-25℃で順次添加した。この混合物を、約50℃に加熱し6時間撹拌した。この混合物を濾過し、濾過ケーキをMTBE（64mL）で洗浄した。濾液と洗浄液を混合し、濃縮して粗ABC1溶液を得た。粗ABC1溶液を、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル；溶出溶媒：EtOAc／n-ヘプタン（最初の溶出溶媒は1：4、その後2：3））を用いて精製し、その後濃縮してABC1を含むEtOAc／n-ヘプタン（1／1、(1/1(v/v))）の溶液（50g，88％）を得た。
【０１１２】
実施例2
ABC2の調製
【０１１３】
【化３５】
0006339673.tif 000036
【０１１４】
三つ口丸底フラスコに、機械的撹拌機と温度計を備え付けた。このフラスコに、前もって調製したABC1を含むEtOAc／n-ヘプタン溶液（162mL，1／1（v／v））を、20〜30℃で窒素下にて添加した。この混合物を0〜10℃に冷却した後、Ac2O（16.3g，0.16mol，3.0当量）およびTMSOTf（3.6g，0.02mol，0.3当量）を、この温度で順次添加した。この混合物を、0〜10℃で10時間以上撹拌した。トリエチルアミン（45mL，0.27mol，6.0当量）を0〜10℃でゆっくりと加えた。この混合物を、0〜10℃で1時間撹拌した。20％NaCl水溶液（64mL，2vol）を0〜10℃でゆっくりと加えた。この混合物を2時間撹拌した。分離した水性部分は廃棄した。ABC2を含有するEtOAc／n-ヘプタン（1／1（v／v））溶液を含む分離有機部分を、次の工程に使用する準備が整った。
【０１１５】
実施例3
ABC3の調製
【０１１６】
【化３６】
0006339673.tif 000037
【０１１７】
三つ口丸底フラスコに、機械的撹拌機と温度計を備え付けた。このフラスコに、前もって調製したABC2を含むEtOAc／n-ヘプタン（1／1（v／v））溶液を、20〜30℃で窒素下にて添加した。H2NNH2-H2O（3.8g，80mmol，1.4当量）を20〜30℃で添加し、この混合物をこの温度で3時間撹拌した。5％NaCl水溶液（160mL）を20〜30℃で添加し、この混合物をこの温度で1時間撹拌した。相を分離させるために撹拌を停止した。分離した水相は廃棄した。有機部分とエマルジョン部分を混合して濃縮し、粗ABC3を含むEtOAc／n-ヘプタン溶液を得た。粗ABC3溶液を、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル；溶出溶媒：アセトン／トルエン（0.05％（v／v）のEt3Nを含む，5／95（v／v）））により精製し、その後濃縮してABC3を含むトルエン溶液（44g，94％）を得た。
【０１１８】
実施例4
ABC5の調製
【０１１９】
【化３７】
0006339673.tif 000038
【０１２０】
ABC3→ABC4
四つ口丸底フラスコに、機械的撹拌機と温度計を備え付けた。このフラスコに、ABC3／トルエン溶液（約96mL，3vol）を、20〜30℃で窒素下にて添加した。K2CO3（74g，0.53mol，10当量）およびCCl3CN（77g，0.53mol，10当量）を、20〜30℃で順次添加した。この混合物を、20〜30℃で4時間以上撹拌した。この混合物を濾過し、濾過ケーキをトルエン（64mL，2vol）で洗浄した。濾液と洗浄液を混合し、ABC4を含むトルエン溶液を得た。-5℃未満に冷却した後、ABC4／トルエン溶液（約160mL，5vol）を、使用する準備が整った。
【０１２１】
ABC4→ABC5
四つ口丸底フラスコに、機械的撹拌機と温度計を備え付けた。このフラスコに、チオフェノール（24g，0.2mmol，4当量）およびトルエン（260mL）を、20〜30℃で窒素下にて添加した。この混合物を-20〜-10℃に冷却した。TBSOTf（21g，0.08mol，1.5当量）を-20〜-10℃で添加した。得られたチオフェノールおよびTBSOTfをトルエン中に含む混合物を、使用する準備が整った。
【０１２２】
ABC4溶液を含むフラスコに、チオフェノールおよびTBSOTfを含むトルエンの混合物を、温度を-20〜-10℃に保ちつつ30分かけて添加した。この混合物を-20〜-10℃で2時間撹拌した。Et3N／トルエン（15mL／65mL）を、温度を-5℃未満に保ちつつ30分かけてゆっくりと添加した。この混合物を-5℃未満で30分間撹拌した。この混合物を濃縮して粗ABC5をトルエン中に含む溶液を得た。ABC5溶液を、カラム（シリカゲル；溶出溶媒：EtOAc／トルエン（0.05％（v／v）のEt3Nを含む，2／98（v／v）））を用いて精製し、ABC5を含むトルエン溶液（42g，88％）を得た。
【０１２３】
実施例5
ABCDE1の調製
【０１２４】
【化３８】
0006339673.tif 000039
【０１２５】
ABC5（35g，0.03mol，1.0当量）、DE4（28g，0.033mol，1.1当量）、およびDCM（700g）を、20〜40℃で窒素下にて機械的撹拌機と温度計を備え付けた四つ口丸底フラスコに添加した。この混合物を20〜40℃で30分間撹拌し、均一な溶液を得た。3Åの分子篩（35g）を20〜40℃で添加し、この混合物をこの温度で1時間撹拌した。
【０１２６】
この混合物を-30〜-20℃に冷却した後、N-ヨードスクシンイミド（NIS）（10.2g，1.5当量，0.045mol）をこの温度で添加し、15分間撹拌した。TfOH（1.8g，0.012mol，0.4当量）を含むDCM（10mL）を-30〜-20℃でゆっくりと加え、この混合物をこの温度で2時間撹拌した。Et3N（6.1g，0.06mol，2当量）を-30〜-20℃で添加し、この混合物をこの温度で30分間撹拌した。この混合物をセライトパッドを用いて濾過し、濾過ケーキをDCM（140mL）で洗浄した。濾液と洗浄液を混合し、30％Na2S2O3・5H2O水溶液（105mL，3vol）を20〜40℃で添加した。混合物を20〜40℃で1時間撹拌した後、相を分離させるために撹拌を約5分間停止した。分離した水性部分は廃棄した。分離した有機部分を濃縮して、粗ABCDE1溶液を含むDCMを得た。粗ABCDE1溶液をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル；溶出溶媒：EtOAc／トルエン（Et3N（0.1％（v／v））を含む，1／9（v／v））により精製し、ABCDE1溶液を含むトルエン溶液を得た。
【０１２７】
ABCDE1を含むトルエン溶液（約105mL）を、機械的撹拌機と温度計を備え付けた四つ口丸底フラスコに窒素下にて添加した。この混合物を35〜45℃に加熱した後、IPA（105mL）およびn-ヘプタン（105mL）をこの温度で順次添加した。ABCDE1種（0.035g）を35〜45℃で添加し、この混合物をこの温度で1時間撹拌した。n-ヘプタン（175mL）を35〜45℃で添加した後、この混合物を15〜25℃に冷却し、1時間撹拌した。この混合物を濾過し、濾過ケーキをn-ヘプタン（70mL）で洗浄した。湿ったケーキを60℃未満で乾燥し、ABCDE1を白色固体として得た（39g，65％）。
【０１２８】
実施例6
ABCDE2の調製
【０１２９】
【化３９】
0006339673.tif 000040
【０１３０】
THF（250mL）およびABCDE1（50g，26.4mmol，1.0当量）を、四つ口丸底フラスコに、20〜40℃で窒素下にて添加した。この混合物を10℃に冷却し、35％H2O2水溶液（102.5mL，1161mmol，44当量）を、この温度で添加した。2N NaOH水溶液（356mL，712.4mmol，27当量）を10℃で添加した。この混合物を20〜30℃に加熱し、48時間撹拌した。相を分離させるために撹拌を約5分間停止した。分離した有機部分は保存し、分離した水性部分は廃棄した。保存した有機部分に30％Na2S2O3・5H2O水溶液（250mL，5vol）を添加し、この混合物を約5分間撹拌した。相を分離させるために撹拌を約5分間停止した。分離した有機部分は保存し、分離した水性部分は廃棄した。保存した有機部分に30％Na2S2O3・5H2O水溶液（250mL，5vol）を添加し、この混合物を約5分間撹拌した。相を分離させるために撹拌を約5分間停止した。分離した有機部分は保存し、分離した水性部分は廃棄した。保存した有機部分にH2O（500mL，10vol）を添加し、1N HCl水溶液（45mL，0.9vol）を混合物のpHが4〜5に達するまで添加した。アセトン（250mL，5vol）を添加し、混合物を35〜60℃で約700mLの容積まで濃縮した。1N HCl水溶液（5mL）を、混合物のpHが約2.5〜3.5に達するまで添加した。20〜30℃で30分間撹拌した後、混合物を濾過し、濾過ケーキをH2O（250mL）で洗浄した。湿ったケーキを60℃未満で乾燥し、ABCDE2を白色の固体として得た（38.4g，82％収率）。
【０１３１】
実施例7
ABCDE3の調製
【０１３２】
【化４０】
0006339673.tif 000041
【０１３３】
ABCDE2（8g，1.0当量，5.02mmol）、SO3-TMA錯体（38.4g，55当量，275.92mmol）、およびDMAc（88mL）を、機械的撹拌機と温度計を備え付けた丸底フラスコに、20〜40℃で窒素下にて添加した。このスラリー混合物を55〜65℃に加熱し、6時間撹拌した。10℃未満に冷却した後、この混合物に8％NaHCO3水溶液（40mL）を30℃未満で添加した。この混合物を濾過し、濾過ケーキをDMAc（96mL）で洗浄した。濾液と洗浄液を混合し10℃未満に冷却した後、温度を30℃に保ちつつ水（88mL）をゆっくりと加えた。粗ABCDE3を含むDMAc／水の溶液を含有する混合物を、このようにして得た。ABCDE3を、HP20SS樹脂を用い、溶出溶媒としてNaCl水溶液（10％）、その後MeOH、その後水で溶媒交換を行い精製し、ABCDE3水溶液を得た。
【０１３４】
実施例8
ABCDE4の調製
【０１３５】
【化４１】
0006339673.tif 000042
【０１３６】
ABCDE3水溶液（8gのABCDE2に基づく）および10％Pd／C（3.2g，40％wt）を、20〜30℃のオートクレーブに添加した。この混合物を、水素（0〜0.5kgのゲージ圧）に20〜30℃で48時間曝した。この混合物をセライトパッドを用いて濾過し、濾過ケーキを水（32mL）で洗浄した。濾液と洗浄液を混合した後、活性炭（1.6g）を20〜30℃で加え、この混合物をこの温度で3時間撹拌した。この混合物をセライトパッドを用いて濾過し、濾液を保存した。反応物をＰＰＷ（32mL）でリンスし、溶液を0.2ミクロンのフィルターを用いて濾過した。2つの濾液を混合しABCDE4水溶液を得た。
【０１３７】
実施例9
フォンダパリヌクスの調製
【０１３８】
【化４２】
0006339673.tif 000043
【０１３９】
ABCDE4水溶液（8gのABCDEに基づく）を、機械的撹拌機と温度計を備え付けた丸底フラスコに20〜40℃で添加した。この混合物に1N HCl水溶液を、pHが8〜9に達するまで添加した。SO3・TMA（23.04g，33当量，165.5mmol）を20〜40℃で添加した後，この混合物を40〜50℃に加熱し10時間撹拌した。この混合物を10℃未満に冷却した。この混合物を濾過し、濾過ケーキを水（32mL）で洗浄した。濾液に1N NaOH水溶液を、pHが9〜10に達するまで添加した。この混合物を45〜55℃に加熱し、20時間撹拌した。この混合物を30℃未満に冷却した。このようにして、粗フォンダパリヌクスナトリウム水溶液を含有する混合物を得た。
【０１４０】
粗フォンダパリヌクスナトリウム水溶液（2.4g）を、Q Sepharose Fast Flow樹脂（QSFF）（190mL）により0.4M NaCl水溶液、0.8M NaCl水溶液、および2M NaCl水溶液を溶出溶媒として用いて精製し、フォンダパリヌクスナトリウム溶液を得た。フォンダパリヌクスナトリウムを、0.1m2の1 kDa regenerousセルロース（RC）膜よりタンジェンシャルフロー濾過（TFF）を用いて脱塩し、その後凍結乾燥してフォンダパリヌクス（2.2g，80％）を得た。
【０１４１】
前述の発明は、明確に理解する目的のために例示および実施例によっていくらか詳細に記載されているが、当業者は、特定の変更および改変が、添付の特許請求の範囲内で実施され得ることを理解するであろう。各文献は個別に参照により援用されるのと同程度に、その全体が参照により本明細書に援用される。本出願と本明細書中に援用される文献との間に矛盾が存在する場合、本出願が支配するものとする。
【図１Ａ】
0006339673.tif 000059
【図１Ｂ】
0006339673.tif 000060