(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
0006333267.tif 000021
Ｉ、［上式中：
Ｗは、Ｃ１−６−アルキルであり；
Ｙは、Ｃ１−６−アルキルであり；
Ｚは、Ｎであり；
Ｒ１は、Ｃ１−６−アルキルであり；
Ｒ２は、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ６、ＮＨＳＯ２Ｒ５、ＮＨＣＯＯＲ６及び  ＮＨＲ６で置換されていてもよいＣ１−６−アルキルであり；
Ｒ３及びＲ４は、Ｈであり；
Ｒ５は、群：
Ｃ１−６−アルキル、及び
アリール
から選択され；
Ｒ６は、群：
アリール、
アリールで置換されていてもよいＣ１−６−アルキル、
ＯＲ５、及び
ＮＲ７Ｒ８
から選択され；且つ
Ｒ７及びＲ８は、同じでも異なっていてもよく、それぞれ独立に、群：
Ｈ、
Ｃ１−６−アルキル、及び
アリール
から選択される］
の化合物、又は薬学的に許容可能なその塩。
【請求項２】
Ｗがメチルである請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｙがメチルである請求項１又は２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１がプロパニルである請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ２が、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ６で置換されているＣ１−６−アルキルである請求項１から４のいずれか一項に記載の化合物、又は薬学的に許容可能なその塩。
【請求項６】
Ｒ２が、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ６で置換されているメチルであり、Ｒ６がアリール及び  Ｃ１−６−アルキルから選択される、請求項５に記載の化合物、又は薬学的に許容可能なその塩。
【請求項７】
Ｒ２が、ＮＨＳＯ２Ｒ５で置換されているＣ１−６−アルキルである請求項１から４のいずれか一項に記載の化合物、又は薬学的に許容可能なその塩。
【請求項８】
Ｒ２が、ＮＨＳＯ２Ｒ５で置換されているメチルである請求項７に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ５がメチル又はフェニルである請求項８に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ２が、ＮＨＣＯＯＲ６で置換されているＣ１−６−アルキルである請求項１から４のいずれか一項に記載の化合物、又は薬学的に許容可能なその塩。
【請求項１１】
Ｒ６が、フェニルで置換されていてもよいメチル又はベンジルである請求項１０に記載の化合物、又は薬学的に許容可能なその塩。
【請求項１２】
Ｒ２が、ＮＨＲ６で置換されているＣ１−６−アルキルである請求項１から４のいずれか一項に記載の化合物、又は薬学的に許容可能なその塩。
【請求項１３】
Ｒ６がアリールである請求項１２に記載の化合物、又は薬学的に許容可能なその塩。
【請求項１４】
Ｒ６がフェニル又はナフタレニルである請求項１３に記載の化合物、又は薬学的に許容可能なその塩。
【請求項１５】
Ｒ６がＮＲ７Ｒ８である請求項１から５のいずれか一項に記載の化合物、又は薬学的に許容可能なその塩。
【請求項１６】
Ｒ７及びＲ８が、独立に、Ｈ、メチル、及びフェニルから選択される請求項１５に記載の化合物。
【請求項１７】
Ｗ、Ｙ及びＲ１がＣ１−６−アルキルであり；Ｒ２が、ＮＨＣＯＲ６で置換されたＣ１−６−アルキルであり；Ｒ６が、ａ）フェニル、ｂ）フェニルで置換されていてもよいＣ１−６−アルキル、及びｃ）ＮＲ７Ｒ８から選択され；且つＲ７  及びＲ８  が、それぞれ独立に、Ｈ、Ｃ１−６−アルキル、及びフェニルから選択される、請求項１に記載の化合物、又は薬学的に許容可能なその塩。
【請求項１８】
Ｗ、Ｙ及びＲ１がＣ１−６−アルキルであり；Ｒ２がＮＨＳＯ２Ｒ５で置換されたＣ１−６−アルキルであり；且つＲ５がＣ１−６−アルキル又はフェニルである、請求項１に記載の化合物、又は薬学的に許容可能なその塩。
【請求項１９】
Ｒ５がメチル又はフェニルである請求項１８に記載の化合物。
【請求項２０】
Ｗ、Ｙ及びＲ１がＣ１−６−アルキルであり；Ｒ２が、ＮＨＣＯＯＲ６で置換されたＣ１−６−アルキルであり；且つＲ６が、ａ）アリール、及びｂ）アリールで置換されていてもよいＣ１−６−アルキルから選択される、請求項１に記載の化合物、又は薬学的に許容可能なその塩。
【請求項２１】
Ｒ６が、ａ）フェニルで置換されていてもよいメチル、及びｂ）フェニルから選択される、請求項２０に記載の化合物、又は薬学的に許容可能なその塩。
【請求項２２】
Ｗ、Ｙ及びＲ１がＣ１−６−アルキルであり；Ｒ２が、ＮＨＲ６によって置換されたＣ１−６−アルキルであり；且つＲ６がアリールである、請求項１に記載の化合物、又は薬学的に許容可能なその塩。
【請求項２３】
Ｒ６がフェニル及びナフタレニルから選択される請求項２２に記載の化合物。
【請求項２４】
Ｎ−｛（Ｓ）−１−［（Ｓ）−３−メチル−２−（（Ｓ）−２−メチルアミノ−プロピオニルアミノ）−ブチリル］−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−イルメチル｝−ベンズアミド塩酸塩；
（Ｓ）−Ｎ−｛（Ｓ）−１−［２−（アセチルアミノ−メチル）−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル］−２−メチル−プロピル｝−２−メチルアミノ−プロピオンアミド塩酸塩；
（Ｓ）−２−メチルアミノ−Ｎ−（（Ｓ）−２−メチル−１−｛２−［（３−メチル−ウレイド）−メチル］−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル｝−プロピル）−プロピオンアミド塩酸塩；
（Ｓ）−２−メチルアミノ−Ｎ−｛（Ｓ）−２−メチル−１−［（Ｓ）−２−（フェニルアセチルアミノ−メチル）−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル］−プロピル｝−プロピオンアミド塩酸塩；
（Ｓ）−Ｎ−｛（Ｓ）−１−［（Ｓ）−２−（３，３−ジメチル−ウレイドメチル）−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル］−２−メチル−プロピル｝−２−メチルアミノ−プロピオンアミド塩酸塩；
（Ｓ）−２−メチルアミノ−Ｎ−（（Ｓ）−２−メチル−１−｛（Ｓ）−２−［（３−フェニル−ウレイド）−メチル］−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル｝−プロピル）−プロピオンアミド塩酸塩；及び
（Ｓ）−２−メチルアミノ−Ｎ−（（Ｓ）−２−メチル−１−｛（Ｓ）−２−［（２−フェニル−プロピオニルアミノ）−メチル］−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル｝−プロピル）−プロピオンアミド塩酸塩；
から選択される請求項５に記載の化合物、又は前記化合物のいずれかの薬学的に許容可能な塩。
【請求項２５】
（Ｓ）−Ｎ−｛（Ｓ）−１−［（Ｓ）−２−（メタンスルホニルアミノ−メチル）−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル］−２−メチル−プロピル｝−２−メチルアミノ−プロピオンアミド塩酸塩；及び
（Ｓ）−Ｎ−｛（Ｓ）−１−［（Ｓ）−２−（ベンゼンスルホニルアミノ−メチル）−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル］−２−メチル−プロピル｝−２−メチルアミノ−プロピオンアミド塩酸塩；
から選択される請求項７に記載の化合物、又は前記化合物のいずれかの薬学的に許容可能な塩。
【請求項２６】
｛（Ｓ）−１−［（Ｓ）−３−メチル−２−（（Ｓ）−２−メチルアミノ−プロピオニルアミノ）−ブチリル］−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−イルメチル｝−カルバミン酸メチルエステル塩酸塩；
｛（Ｓ）−１−［（Ｓ）−３−メチル−２−（（Ｓ）−２−メチルアミノ−プロピオニルアミノ）−ブチリル］−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−イルメチル｝−カルバミン酸ベンジルエステル塩酸塩；及び
｛（Ｓ）−１−［（Ｓ）−３−メチル−２−（（Ｓ）−２−メチルアミノ−プロピオニルアミノ）−ブチリル］−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−イルメチル｝−カルバミン酸フェニルエステル塩酸塩；
から選択される請求項１０に記載の化合物、
又は前記化合物のいずれかの薬学的に許容可能な塩。
【請求項２７】
（Ｓ）−２−メチルアミノ−Ｎ−［（Ｓ）−２−メチル−１−（（Ｓ）−２−フェニルアミノメチル−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル）−プロピル］−プロピオンアミド塩酸塩；及び
（Ｓ）−２−メチルアミノ−Ｎ−｛（Ｓ）−２−メチル−１−［（Ｓ）−２−（ナフタレン−２−イルアミノメチル）−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル］−プロピル｝−プロピオンアミド塩酸塩；
から選択される請求項１２に記載の化合物、
又は前記化合物のいずれかの薬学的に許容可能な塩。
【請求項２８】
薬学的に許容可能な担体又は賦形剤と共に、請求項１から２７のいずれか一項に記載の化合物、又は薬学的に許容可能なその塩を活性成分として含む医薬組成物。
【請求項２９】
治療的に活性な物質として使用するための、請求項１から２７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項３０】
がんの治療的及び／又は予防的処置のための使用のための、請求項１から２７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項３１】
がんの治療的及び／又は予防的処置のための薬物の製造のための、請求項１から２７のいずれか一項に記載の化合物、又は薬学的に許容可能なその塩の使用。
【請求項３２】
請求項１から２７のいずれか一項に記載の化合物の治療的有効量を含む、がんを治療又は改善するための医薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アポトーシスインヒビタータンパク質（ＩＡＰ）に結合するＳＭＡＣタンパク質のインヒビター、及び／又はＩＡＰに結合する活性化カスパーゼタンパク質のインヒビターとして作用するアザインドリンに関する。これらの分子は、がん、特に固形腫瘍の改善、治療、又は制御に有用である。
【０００２】
これらの化合物は、ＸＩＡＰ及びｃＩＡＰを含むＩＡＰタンパク質のＢＩＲ２及び／又はＢＩＲ２領域に結合することにより、カスパーゼカスケードの活性化又は再活性化を引き起こし、したがって、がんを含む増殖性疾患の治療に有用である。
【背景技術】
【０００３】
がんは、腫瘍の局所的拡大を引き起こし、遠隔転移を起こす可能性のある制御されない細胞増殖の疾患である。がん細胞を増殖させる一のメカニズムは、アポトーシス、すなわちプログラム細胞死の回避である。アポトーシス経路の変化が、標準的な治療、例えば化学療法又は放射線に抵抗性のがん細胞、並びにがんの発生及び進行にリンクしていた。例えば、E. Dean et al., “X-linked inhibitor of apoptosis protein as a therapeutic target,” Expert Opin. Ther. Targets （2007) 11（11):1459-1471を参照されたい。
【０００４】
アポトーシス細胞死の二つの基本的な経路は、内因経路と外因経路である。内因アポトーシス経路は、細胞ストレス及び薬剤誘発ＤＮＡ損傷を含む様々なメカニズムによって開始されうる。外因経路は、ケモカインによるデスレセプターの活性化により開始されうる。いずれの経路の開始も、最終的にはカスパーゼと呼ばれるプロテアーゼのファミリーを活性化させる。活性化すると、カスパーゼは様々な基質を切断するように作用することができ、エフェクターカスパーゼ３及び７の活性化、及び最終的な細胞死に繋がる事象のカスケードを生成する。タンパク質のＩＰＡファミリーは、カスパーゼに結合してその活性を阻害することによりアポトーシスを阻害することができる。例えば、Dean, supra at 1460を参照されたい。
ＩＡＰは、バキュロウイルスＩＡＰ反復（ＢＩＲ）ドメインと呼ばれる相同構造ドメインの最大三つのコピー、ＢＩＲ１、ＢＩＲ２、及びＢＩＲ３を含有することができる。原型ＩＡＰ、ｃＩＡＰ、及びＸＩＡＰのＢＩＲ３ドメインは、活性化されたカスパーゼ９に結合してこれを阻害することができる。対照的に、ＢＩＲ２ドメインは、カスパーゼ３及び７に結合してこれらを阻害する。プロアポトーシスＳｍａｃ（ＤＩＡＢＬＯとしても知られる）は、活性化したカスパーゼと競合するＩＡＰのＢＩＲ２及びＢＩＲ３ドメインをブロックすることができ、その結果、ＩＡＰから活性カスパーゼが放出されてアポトーシスプログラムが完了する。例えば、S. Wang, “Design of Small-Molecule Smac Mimetics as IAP Antagonists,” Current Topics in Microbiology and Immunology 348, DOI 10.1007/82_2010_111, pp. 89-113を参照されたい。
【０００５】
ペプチド及び小分子は、ＸＩＡＰ及びｃＩＡＰのＢＩＲ３領域に結合し、Ｓｍａｃタンパク質の作用を模倣して活性カスパーゼを放出することが報告されている。例えば、Dean, supra; and M. Gyrd-Hanse et al., “IAPs: From caspase inhibitors to modulators of NF-κB, inflammation and cancer,” Nature Review/Cancer, August 2010, Vol 10:561-574を参照されたい。
【発明の概要】
【０００６】
本発明の一態様は、式Ｉ
0006333267.tif 000002
の化合物又は薬学的に許容可能なその塩である。ここで、Ｗ、Ｙ、Ｚ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４は、本出願に記載される通りである。
【０００７】
本発明は、本発明の一又は複数の化合物又は薬学的に許容可能なその塩と、薬学的に許容可能な担体若しくは賦形剤とを含む医薬組成物にも関する。
【０００８】
本発明はさらに、がん、具体的には、哺乳動物、具体的にはヒトの、固形腫瘍、例えば肺、膵臓、結腸、乳房、骨及び前立腺のがん含むがんを、改善、制御、又は治療する方法であって、前記哺乳動物に対し、本発明による化合物、又は薬学的に許容可能なその塩の治療的有効量を投与することを含む方法に関する。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
定義
別に規定されない限り、本明細書において使用されるすべての技術用語及び科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって一般的に理解されるものと同じ意味を持つ。
【００１０】
本明細書で使用される以下の用語は以下の定義を有するものとする。
【００１１】
「アルキル」は、１〜１２の炭素原子からなる一価の直鎖又は分枝鎖飽和炭化水素を意味する。特定の実施態様では、アルキルは１〜６の炭素原子を有し、さらに特定の実施態様では１〜４の炭素原子を有する。本明細書で使用される「低級アルキル」は、１〜６の炭素原子を有するアルキル基を表す（「Ｃ１−６−アルキル」）。アルキルの例には、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル（ｎ−ブチルとしても知られる）、イソ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシルなどが含まれる。アルキル基は、任意選択的に、重水素、例えば、−ＣＤ３、−ＣＤ２ＣＤ３などに富んでいてよい。
【００１２】
「アリール」は、６〜１９の炭素環原子を含む、一価の芳香族炭素環式の一、二、又は三環系を意味する。アリール部分の例には、限定されないが、フェニル、ナフチル（ナフタレニルとしても知られる）、トリル、キシリル、ピリジニル、キノリニル、ピリミジニル、イミダゾリル、チアゾリル、アントラセニル、テトラゾリル、及びフルオレニルが含まれる。
【００１３】
「ベンジル」は、−ＣＨ２−フェニルを意味する。
【００１４】
「シアノ」は−Ｃ≡Ｎを意味する。
【００１５】
「シクロアルキル」は、３〜１０の環炭素原子からなる置換又は未置換の安定な一価の飽和した単環、二環、又は三環系を意味する。特定の実施態様では、シクロアルキルは、３〜８の環炭素原子からなる一価の飽和した単環式炭化水素基、特に３〜７の環炭素原子からなる一価の飽和した単環式炭化水素基（「Ｃ３−７−シクロアルキル」）を表す。特定のシクロアルキル基は単環式である。単環式シクロアルキルの例は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロフェニル、シクロヘキシル、又はシクロヘプチルである。二環式とは、一又は複数の炭素原子を共通に有する二つの飽和炭素環からなることを意味する。二環式シクロアルキルの例は、ビシクロ［２．２．１］ヘプタニル、又はビシクロ［２．２．２］オクタニルである。三環式とは、二以上の炭素原子を共通に有する三つの飽和炭素環からなることを意味する。三環式シクロアルキルの例にはアダマンタンが含まれる。
【００１６】
「ハロゲン」又は「ハロ」は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、又はＩから選択される原子を意味する。特定の実施態様では、ハロゲンはＦ及びＣｌを意味する。
【００１７】
「ヘテロ原子」は、Ｎ、Ｏ、又はＳから選択される原子を意味する。
【００１８】
「ヘテロアリール」は、うち少なくとも一つの環が１、２、又は３のヘテロ原子を含み、残りの環原子が炭素である、最大二つの環を含有する飽和又は未飽和芳香族複素環式環系を意味する。ヘテロアリール基の例には、限定されないが、チエニル（チオフェニルとしても知られる）、フリル（フラニルとしても知られる）、インドリル、ピロリル、ピリジニル、ピラジニル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、オキサジアゾリル、チアゾリル、キノリニル、イソキノリニル、インダゾリル、ピリミジニル、イミダゾリル、トリアゾリル、テトラアゾリル、トリアジニル、ピラゾリル、ベンゾ［ｄ］イソオキサゾリル、２−オキソ−２Ｈ−クロメン−４−イル、ベンゾ［ｄ］イソオキサゾリル、ベンゾチオフェニル、ベンゾイミダゾリル、ナルチリジニル、及びシンノリニルが含まれる。
【００１９】
−二環式であるヘテロアリールの場合、一つの環がアリールで他方がヘテロアリールでありえ、双方が独立に置換又は未置換でありうると理解される。
【００２０】
「ヘテロシクリル」、「複素環」、又は「複素環式」とは、Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１、２、又は３の環ヘテロ原子を含む３〜９の環原子であって、残りの環原子が炭素である３〜９の環原子からなる、置換されているか又は置換されていない一価の飽和又は部分不飽和単環式又は二環式環の、非芳香族炭化水素系を意味する。特定の実施態様では、ヘテロシクロアルキルは、Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１、２、又は３の環ヘテロ原子を含む４〜７の環原子であって、残りの環原子が炭素である４〜７の環原子からなる、一価の飽和単環式環形である。単環式飽和ヘテロシクロアルキルの例は、アジリジニル、オキシラニル、アゼチジニル、オキセタニル、ピロリジニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロ−チエニル、ピラゾリジニル、イミダゾリジニル、オキサゾリジニル、イソオキサゾリジニル、チアゾリジニル、ピペリジニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロチオピラニル、テトラヒドロフラニル、ピペラジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、１，１−ジオキソ−チオモルホリン−４−イル、アゼパニル、ジアゼパニル、ホモピペラジニル、又はオキサゼパニルである。部分的に未飽和のヘテロシクロアルキルの例は、ジヒドロフリル、イミダゾリニル、ジヒドロ−オキサゾリル、ジヒドロ−オキサジアゾリル、ジヒドロ−トリアゾリル、テトラヒドロ−ピリジニル、テトラヒドロ−トリアジニル、又はジヒドロピラニルである。
【００２１】
二環式である複素環の場合、一つの環が複素環で他方がシクロアルキルでありえ、一方又は双方が独立に置換されていてよいと理解される。二環式飽和ヘテロシクロアルキルの例は、８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクチル、キヌクリジニル、８−オキサ−３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクチル、９−アザ−ビシクロ［３．３．１］ノニル、３−オキサ−９−アザ−ビシクロ［３．３．１］ノニル、又は３−チア−９−アザ−ビシクロ［３．３．１］ノニルである。
【００２２】
「ＩＣ５０」とは、測定された比活性の５０％を阻害するために必要な特定の化合物の濃度を指す。ＩＣ５０は、とりわけ、実施例１５において後述するように測定することができる。
【００２３】
薬学的に受容可能な担体、賦形剤などの「薬学的に許容可能」とは、特定の化合物が投与される対象に対して薬理学的に許容され、実質的に非毒性であることを意味する。
【００２４】
「薬学的に許容可能な塩」とは、本発明の化合物の生物学的効果及び特性を保持し、適切な非毒性の有機若しくは無機酸又は有機若しくは無機塩基から形成される、一般的な酸付加塩又は塩基付加塩を指す。サンプルとなる酸付加塩は、無機酸、例えば塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、スルファミン酸、リン酸及び硝酸等に由来するもの、並びに、有機酸、例えばｐ−トルエンスルホン酸、サリチル酸、メタンスルホン酸、シュウ酸、コハク酸、クエン酸、リンゴ酸、乳酸、フマル酸、トリフルオロ酢酸等に由来するものを含む。サンプルとなる塩基付加塩は、アンモニウム、カリウム、ナトリウム、及び水酸化第４級アンモニウム、例えば水酸化テトラメチルアンモニウム等に由来するものを含む。薬学的化合物（すなわち、薬物）の塩への化学修飾は、化合物の改善された物理的及び化学的安定性、吸湿性、流動性及び溶解性を得るために、薬化学者にとってよく知られた技術である。例えば、Ansel et al., Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems （1995) at pgs. 456-457を参照されたい。
【００２５】
置換されたアルキル、アリール、又はヘテロアリールの「置換された」とは、一又は複数の位置において置換（すなわち、一の水素原子の交換）が起こりうること、また別途示されない限り、各置換位置における置換基が独立に指定の選択肢から選択されることを意味する。用語「置換されていてもよい」とは、化学基（一又は複数の水素原子を含む）の一又は複数の水素原子が、必須ではないが、別の置換基で置換されうることを指す。
【００２６】
本明細書での使用において、式又は基に外見上置換基が欠けている場合、すなわち、原子価が完全でないように見える場合、欠けている置換基はＨであるとみなされる。
【００２７】
本明細書に提示される構造式において、破線の結合線（ａ）は置換基が紙面の下方にあることを表し、楔状の結合線（ｂ）は置換基が紙面の上方にあることを表す。
【００２８】
一実施態様では、本発明は式Ｉ
0006333267.tif 000003
Ｉ
［上式中：
Ｗは、群：
ａ）Ｈ、
ｂ）１〜３の重水素原子を含んでもよいアルキル、
ｃ）ＳＯ２Ｒ５及びＯＲ５で置換されていてもよいアルキル
から選択され；
Ｙは、ＯＲ５で置換されていてもよいアルキルであり；
ＺはＮであり；
Ｒ１は、群：
ａ）ＳＯ２Ｒ５で置換されていてもよい低級アルキル、
ｂ）シクロアルキル、
ｃ）複素環、及び
ｄ）アリール
から選択され；
Ｒ２は、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ６、ＮＨＳＯ２Ｒ５、ＮＨＣＯＯＲ６及びＮＨＲ６で置換されていてもよい低級アルキルであり；
Ｒ３及びＲ４は、同じでも異なっていてもよく、それぞれ独立に、群：
ａ）Ｈ、及び
ｂ）低級アルキル
から選択され；
Ｒ５は、群：
ａ）Ｈ、
ｂ）低級アルキル、
ｃ）ＮＲ７Ｒ８及び
ｄ）アリール
から選択され；
Ｒ６は、群：
ａ）Ｈ、
ｂ）低級アルキル、ＯＲ５、ハロゲン、Ｃ（Ｏ）ＯＲ５、Ｃ（Ｏ）ＮＲ７Ｒ８、アリール、ヘテロシクリル、Ｃ（Ｏ）Ｒ９、ＳＯ２Ｒ５、シアノ及びＣＦ３で置換されていてもよい、アリール、
ｃ）低級アルキル及びハロゲンで置換されていてもよいアリール、ＳＯ２Ｒ５及びＣＦ３で置換されていてもよい、低級アルキル、
ｄ）ＯＲ５、
ｅ）ＮＲ７Ｒ８、
ｆ）低級アルキル、ＯＲ５、ハロゲン、アリール及びオキソで置換されていてもよい、ヘテロアリール、並びに
ｇ）ヘテロシクリル
から選択され；
Ｒ７及びＲ８は、同じでも異なっていてもよく、それぞれ独立に、群：
ａ）Ｈ、
ｂ）低級アルキル、及び
ｃ）アリール
から選択され；且つ
Ｒ９は、群：
ａ）低級アルキル、及び
ｂ）アリール
から選択される］
の化合物、又は薬学的に許容可能なその塩に関する。
【００２９】
本発明の一実施態様は、Ｗが群：
ａ）Ｈ、
ｂ）１〜３の重水素原子を含んでもよいＣ１−６−アルキル、
ｃ）ＳＯ２Ｒ５及びＯＲ５で置換されていてもよい、Ｃ１−６−アルキル
から選択され；
Ｙが、ＯＲ５で置換されていてもよいＣ１−６−アルキルであり；
ＺがＮであり；
Ｒ１が、群：
ａ）ＳＯ２Ｒ５で置換されていてもよいＣ１−６−アルキル、
ｂ）Ｃ３−７−シクロアルキル、
ｃ）複素環、及び
ｄ）アリール
から選択され；
Ｒ２が、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ６、ＮＨＳＯ２Ｒ５、ＮＨＣＯＯＲ６及びＮＨＲ６で置換されていてもよい、Ｃ１−６−アルキルであり；
Ｒ３及びＲ４が、同じでも異なっていてもよく、それぞれ独立に、群：
ａ）Ｈ、及び
ｂ）Ｃ１−６−アルキル
から選択され；
Ｒ５が、群：
ａ）Ｈ、
ｂ）Ｃ１−６−アルキル、
ｃ）ＮＲ７Ｒ８、及び
ｄ）アリール
から選択され；
Ｒ６が、群：
ａ）Ｈ、
ｂ）Ｃ１−６−アルキル、ＯＲ５、ハロゲン、Ｃ（Ｏ）ＯＲ５、Ｃ（Ｏ）ＮＲ７Ｒ８、アリール、ヘテロシクリル、Ｃ（Ｏ）Ｒ９、ＳＯ２Ｒ５、シアノ及びＣＦ３で置換されていてもよい、アリール、
ｃ）Ｃ１−６−アルキル及びハロゲンで置換されていてもよいアリール、ＳＯ２Ｒ５及びＣＦ３で置換されていてもよい、Ｃ１−６−アルキル、
ｄ）ＯＲ５、
ｅ）ＮＲ７Ｒ８、
ｆ）Ｃ１−６−アルキル、ＯＲ５、ハロゲン、アリール及びオキソで置換されていてもよい、ヘテロアリール、並びに
ｇ）ヘテロシクリル
から選択され；
Ｒ７及びＲ８が、同じでも異なっていてもよく、それぞれ独立に、群：
ａ）Ｈ、
ｂ）Ｃ１−６−アルキル、及び
ｃ）アリール
から選択され；且つ
Ｒ９が、群：
ａ）Ｃ１−６−アルキル、及び
ｂ）アリール
から選択される、式Ｉの化合物、又は薬学的に許容可能なその塩に関する。
【００３０】
本発明の一実施態様は、
ＷがＣ１−６−アルキルであり；
ＹがＣ１−６−アルキルであり；
ＺがＮであり；
Ｒ１がＣ１−６−アルキルであり；
Ｒ２が、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ６、ＮＨＳＯ２Ｒ５、ＮＨＣＯＯＲ６及びＮＨＲ６で置換されていてもよい、Ｃ１−６−アルキルであり；
Ｒ３  及びＲ４が共にＨであり；
Ｒ５が、群：
ａ）Ｃ１−６−アルキル、及び
ｂ）アリール
から選択され；
Ｒ６が、群：
ａ）アリール、
ｂ）アリールで置換されていてもよいＣ１−６−アルキル、及び
ｃ）ＮＲ７Ｒ８
から選択され；
Ｒ７及びＲ８が、同じでも異なっていてもよく、それぞれ独立に、群：
ａ）Ｈ、
ｂ）Ｃ１−６−アルキル、及び
ｃ）アリール
から選択される、
式Ｉの化合物、又は薬学的に許容可能なその塩に関する。
【００３１】
本発明の一実施態様は、
ＷがＣ１−６−アルキルであり；
ＹがＣ１−６−アルキルであり；
ＺがＮであり；
Ｒ１が  Ｃ１−６−アルキルであり；
Ｒ２が、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ６、ＮＨＳＯ２Ｒ５、ＮＨＣＯＯＲ６及びＮＨＲ６で置換されていてもよい、Ｃ１−６−アルキルであり；
Ｒ３及びＲ４が共にＨであり；
Ｒ５が、群：
ａ）メチル、及び
ｂ）フェニル
から選択され；
Ｒ６が、群：
ａ）フェニル、
ｂ）ベンジル、
ｃ）−Ｃ（Ｈ，ＣＨ３）−フェニル、
ｄ）ナフチル、
ｅ）メチル、
ｆ）ＮＨ２、
ｇ）Ｎ（メチル）２、
ｈ）Ｎ（Ｈ，メチル）；及び
ｉ）Ｎ（Ｈ，フェニル）
から選択される、
式Ｉの化合物、又は薬学的に許容可能なその塩に関する。
【００３２】
本発明の一実施態様は、
ＷがＣ１−６−アルキルであり；
ＹがＣ１−６−アルキルであり；
ＺがＮであり；
Ｒ１がＣ１−６−アルキルであり；
Ｒ２が、−ＣＨ２−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ６であり、
Ｒ３及びＲ４が共にＨであり；
Ｒ６が、群：
ａ）フェニル、
ｂ）ベンジル、
ｃ）−Ｃ（Ｈ，ＣＨ３）−フェニル、
ｄ）ナフチル、
ｅ）メチル、
ｆ）ＮＨ２ＮＨ、
ｇ）Ｎ（メチル）２、
ｈ）Ｎ（Ｈ，メチル）；及び
ｉ）Ｎ（Ｈ，フェニル）
から選択される、
式Ｉの化合物、又は薬学的に許容可能なその塩に関する。
【００３３】
本発明の一実施態様は、
ＷがＣ１−６−アルキルであり；
ＹがＣ１−６−アルキルであり；
ＺがＮであり；
Ｒ１がＣ１−６−アルキルであり；
Ｒ２が、−ＣＨ２−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ６であり、
Ｒ３及びＲ４が共にＨであり；
Ｒ６が、群：
ａ）フェニル、
ｂ）−Ｃ（Ｈ，ＣＨ３）−フェニル、
ｃ）メチル、
ｄ）Ｎ（メチル）２、
ｅ）Ｎ（Ｈ，メチル）；及び  
ｆ）Ｎ（Ｈ，フェニル）
から選択される、
式Ｉの化合物、又は薬学的に許容可能なその塩に関する。
【００３４】
本発明の一実施態様は、ＷがＣ１−６−アルキルである式Ｉの化合物に関する。
【００３５】
本発明の一実施態様は、Ｗがメチルである式Ｉの化合物に関する。
【００３６】
本発明の一実施態様は、ＹがＣ１−６−アルキルである式Ｉの化合物に関する。
【００３７】
本発明の一実施態様は、Ｙがメチルである式Ｉの化合物に関する。
【００３８】
本発明の一実施態様は、Ｒ１がＣ１−６−アルキルである式Ｉの化合物、又は薬学的に許容可能なその塩に関する。
【００３９】
本発明の一実施態様は、Ｒ１がプロパニルである式Ｉの化合物に関する。
【００４０】
本発明の一実施態様は、Ｒ２が、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ６で置換されているＣ１−６−アルキルである式Ｉの化合物、又は薬学的に許容可能なその塩に関する。
【００４１】
本発明の一実施態様は、Ｒ２が、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ６で置換されているメチルであり、Ｒ６が、アリール及びＣ１−６−アルキルから選択される式Ｉの化合物、又は薬学的に許容可能なその塩に関する。
【００４２】
本発明の一実施態様は、Ｒ２が、ＮＨＳＯ２Ｒ５で置換されているＣ１−６−アルキルである式Ｉの化合物、又は薬学的に許容可能なその塩に関する。
【００４３】
本発明の一実施態様は、Ｒ２が、ＮＨＳＯ２Ｒ５で置換されているメチルである式Ｉの化合物に関する。
【００４４】
本発明の一実施態様は、Ｒ５がメチル又はフェニルである式Ｉの化合物に関する。
【００４５】
本発明の一実施態様は、Ｒ２が、ＮＨＣＯＯＲ６で置換されているＣ１−６−アルキルである式Ｉの化合物、又は薬学的に許容可能なその塩に関する。
【００４６】
本発明の一実施態様は、Ｒ６が、フェニルで置換されていてもよいメチル又はベンジルである式Ｉの化合物、又は薬学的に許容可能なその塩に関する。
【００４７】
本発明の一実施態様は、Ｒ２が、ＮＨＲ６で置換されているＣ１−６−アルキルである式Ｉの化合物、又は薬学的に許容可能なその塩に関する。
【００４８】
本発明の一実施態様は、Ｒ６がアリールである式Ｉの化合物、又は薬学的に許容可能なその塩に関する。
【００４９】
本発明の一実施態様は、Ｒ６がフェニル又はナフタレニルである式Ｉの化合物、又は薬学的に許容可能なその塩に関する。
【００５０】
本発明の一実施態様は、Ｒ３及びＲ４がＨである式Ｉの化合物、又は薬学的に許容可能なその塩に関する。
【００５１】
本発明の一実施態様は、Ｒ６が、Ｃ１−６−アルキル、ＯＲ５、ハロゲン、Ｃ（Ｏ）ＯＲ５、Ｃ（Ｏ）ＮＲ７Ｒ８、アリール、ヘテロシクリル、Ｃ（Ｏ）Ｒ９、ＳＯ２Ｒ５、シアノ及びＣＦ３で置換されていてもよい、フェニルである式Ｉの化合物、又は薬学的に許容可能なその塩に関する。
【００５２】
本発明の一実施態様は、Ｒ６がＮＲ７Ｒ８である式Ｉの化合物、又は薬学的に許容可能なその塩に関する。
【００５３】
本発明の一実施態様は、Ｒ７及びＲ８が独立に、Ｈ、メチル及びフェニルから選択される、式Ｉの化合物に関する。
【００５４】
本発明の一実施態様は、Ｗ、Ｙ及びＲ１がＣ１−６−アルキルであり；Ｒ２が、ＮＨＣＯＲ６で置換されたＣ１−６−アルキルであり；Ｒ６が、ａ）フェニル、ｂ）フェニルで置換されていてもよいＣ１−６−アルキル、及びｃ）ＮＲ７Ｒ８から選択され；Ｒ７  及びＲ８  が、それぞれ独立に、Ｈ、Ｃ１−６−アルキル及びフェニルから選択される、式Ｉの化合物、又は薬学的に許容可能なその塩に関する。
【００５５】
本発明の一実施態様は、Ｗ、Ｙ及びＲ１がＣ１−６−アルキルであり；Ｒ２が、ＮＨＳＯ２Ｒ５で置換されたＣ１−６−アルキルであり；且つＲ５が、Ｃ１−６−アルキル又はフェニルである、式Ｉの化合物、又は薬学的に許容可能なその塩に関する。
【００５６】
本発明の一実施態様は、Ｒ５がメチル又はフェニルである式Ｉの化合物に関する。
【００５７】
本発明の一実施態様は、Ｗ、Ｙ及びＲ１がＣ１−６−アルキルであり；Ｒ２が、ＮＨＣＯＯＲ６で置換されたＣ１−６−アルキルであり；且つＲ６が、ａ）アリール、及びｂ）アリールで置換されていてもよいＣ１−６−アルキルから選択される、式Ｉの化合物、又は薬学的に許容可能なその塩に関する。
【００５８】
本発明の一実施態様は、Ｒ６が、ａ）フェニルで置換されていてもよいメチル、及びｂ）フェニルから選択される、式Ｉの化合物、又は薬学的に許容可能なその塩に関する。
【００５９】
本発明の一実施態様は、Ｗ、Ｙ、及びＲ１がＣ１−６−アルキルであり；Ｒ２が、ＮＨＲ６によって置換されたＣ１−６−アルキルであり；Ｒ６がアリールである、式Ｉの化合物、又は薬学的に許容可能なその塩に関する。
【００６０】
本発明の一実施態様は、Ｒ６がフェニル及びナフタレニルから選択される式Ｉの化合物に関する。
【００６１】
本発明の一実施態様は、
Ｎ−｛（Ｓ）−１−［（Ｓ）−３−メチル−２−（（Ｓ）−２−メチルアミノ−プロピオニルアミノ）−ブチリル］−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−イルメチル｝−ベンズアミド塩酸塩；
（Ｓ）−Ｎ−｛（Ｓ）−１−［２−（アセチルアミノ−メチル）−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル］−２−メチル−プロピル｝−２−メチルアミノ−プロピオンアミド塩酸塩；
（Ｓ）−２−メチルアミノ−Ｎ−（（Ｓ）−２−メチル−１−｛２−［（３−メチル−ウレイド）−メチル］−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル｝−プロピル）−プロピオンアミド塩酸塩；
（Ｓ）−２−メチルアミノ−Ｎ−｛（Ｓ）−２−メチル−１−［（Ｓ）−２−（フェニルアセチルアミノ−メチル）−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル］−プロピル｝−プロピオンアミド塩酸塩；
（Ｓ）−Ｎ−｛（Ｓ）−１−［（Ｓ）−２−（３，３−ジメチル−ウレイドメチル）−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル］−２−メチル−プロピル｝−２−メチルアミノ−プロピオンアミド塩酸塩；
（Ｓ）−２−メチルアミノ−Ｎ−（（Ｓ）−２−メチル−１−｛（Ｓ）−２−［（３−フェニル−ウレイド）−メチル］−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル｝−プロピル）−プロピオンアミド塩酸塩；及び
（Ｓ）−２−メチルアミノ−Ｎ−（（Ｓ）−２−メチル−１−｛（Ｓ）−２−［（２−フェニル−プロピオニルアミノ）−メチル］−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル｝−プロピル）−プロピオンアミド塩酸塩；
から選択される式Ｉの化合物、又は前記化合物のいずれかの薬学的に許容可能な塩に関する。
【００６２】
本発明の一実施態様は、
（Ｓ）−Ｎ−｛（Ｓ）−１−［（Ｓ）−２−（メタンスルホニルアミノ−メチル）−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル］−２−メチル−プロピル｝−２−メチルアミノ−プロピオンアミド塩酸塩；及び
（Ｓ）−Ｎ−｛（Ｓ）−１−［（Ｓ）−２−（ベンゼンスルホニルアミノ−メチル）−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル］−２−メチル−プロピル｝−２−メチルアミノ−プロピオンアミド塩酸塩；
から選択される式Ｉの化合物、又は前記化合物のいずれかの薬学的に許容可能な塩に関する。
【００６３】
本発明の一実施態様は、
｛（Ｓ）−１−［（Ｓ）−３−メチル−２−（（Ｓ）−２−メチルアミノ−プロピオニルアミノ）−ブチリル］−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−イルメチル｝−カルバミン酸メチルエステル塩酸塩；
｛（Ｓ）−１−［（Ｓ）−３−メチル−２−（（Ｓ）−２−メチルアミノ−プロピオニルアミノ）−ブチリル］−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−イルメチル｝−カルバミン酸ベンジルエステル塩酸塩；及び
｛（Ｓ）−１−［（Ｓ）−３−メチル−２−（（Ｓ）−２−メチルアミノ−プロピオニルアミノ）−ブチリル］−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−イルメチル｝−カルバミン酸フェニルエステル塩酸塩；
から選択される式Ｉの化合物、又は前記化合物のいずれかの薬学的に許容可能な塩に関する。
【００６４】
本発明の一実施態様は、
（Ｓ）−２−メチルアミノ−Ｎ−［（Ｓ）−２−メチル−１−（（Ｓ）−２−フェニルアミノメチル−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル）−プロピル］−プロピオンアミド塩酸塩；及び
（Ｓ）−２−メチルアミノ−Ｎ−｛（Ｓ）−２−メチル−１−［（Ｓ）−２−（ナフタレン−２−イルアミノメチル）−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル］−プロピル｝−プロピオンアミド塩酸塩；
から選択される式Ｉの化合物、又は前記化合物のいずれかの薬学的に許容可能な塩に関する。
【００６５】
本発明の一実施態様は、薬学的に許容可能な担体又は賦形剤と共に、本明細書に記載の化合物のいずれか、又は薬学的に許容可能なその塩を活性成分として含む医薬組成物に関する。
【００６６】
本発明の一実施態様は、治療的に活性な物質としての使用のための、本明細書に記載される式Ｉの化合物に関する。
【００６７】
本発明の一実施態様は、がんの治療的及び／又は予防的処置のための使用のための、本明細書に記載される式Ｉの化合物に関する。
【００６８】
本発明の一実施態様は、がんの治療的及び／又は予防的処置のための薬物の製造のための、本明細書に記載される化合物、又は薬学的に許容可能なその塩の使用に関する。
【００６９】
本発明の一実施態様は、そのような処置を必要とする対象に対し、本明細書に記載される化合物の治療的有効量を投与することを含む、がんを治療又は改善する方法に関する。
【００７０】
本発明の一実施態様は、Ｗが低級アルキルである式Ｉの化合物に関する。特定の実施態様では、Ｗはメチルである。
【００７１】
本発明の別の実施態様は、Ｙが低級アルキルである式１の化合物に関する。特定の実施態様では、Ｙはメチルである。
【００７２】
本発明の別の実施態様は、Ｒ１が低級アルキルである式Ｉの化合物、又は薬学的に許容可能なその塩に関する。特定の実施態様では、Ｒ１はプロパニルである。
【００７３】
本発明の別の実施態様は、Ｒ２が、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ６で置換されている低級アルキルである式Ｉの化合物、又は薬学的に許容可能なその塩に関する。特定の実施態様では、Ｒ２が、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ６で置換されているメチルであり、Ｒ６が、各々が上記のように置換されていてよいアリール及び低級アルキルから選択される。
【００７４】
本発明の別の実施態様は、Ｒ２が、ＮＨＳＯ２Ｒ５で置換されている低級アルキルである式Ｉの化合物、又は薬学的に許容可能なその塩に関する。特定の実施態様では、Ｒ２は、ＮＨＳＯ２Ｒ５で置換されているメチルであり、Ｒ５はメチル又はフェニルである。
【００７５】
本発明の別の実施態様は、Ｒ２が、ＮＨＣＯＯＲ６で置換されている低級アルキルである式Ｉの化合物、又は又は薬学的に許容可能なその塩に関する。特定の実施態様では、Ｒ２は、ＮＨＣＯＯＲ６で置換されているメチルであり、Ｒ６は、フェニルで置換されていてもよいメチル又はベンジルである。
【００７６】
本発明の別の実施態様は、Ｒ２が、ＮＨＲ６で置換されている低級アルキルである式Ｉの化合物、又は薬学的に許容可能なその塩に関する。特定の実施態様では、Ｒ２は、ＮＨＲ６で置換されている低級アルキルであり、Ｒ６はアリール、特にフェニル又はナフタレニルである。
【００７７】
本発明の別の実施態様では、Ｒ３及び  Ｒ４がＨである式Ｉの化合物、又は薬学的に許容可能なその塩に関する。
【００７８】
本発明の別の実施態様は、Ｒ５が低級アルキル又はアリールである式Ｉの化合物に関する。特定の実施態様では、Ｒ５はメチルである。別の実施態様では、Ｒ５はフェニルである。
【００７９】
本発明の別の実施態様は、Ｒ６が、低級アルキル、ＯＲ５、ハロゲン、Ｃ（Ｏ）ＯＲ５、Ｃ（Ｏ）ＮＲ７Ｒ８、アリール、ヘテロシクリル、Ｃ（Ｏ）Ｒ９、ＳＯ２Ｒ５、シアノ及びＣＦ３で置換されていてもよい、フェニルである式Ｉの化合物、又は薬学的に許容可能なその塩に関する。
【００８０】
本発明の別の実施態様は、Ｒ６が低級アルキル及びアリールから選択される式Ｉの化合物、又は薬学的に許容可能なその塩に関する。
【００８１】
本発明の別の実施態様は、Ｒ６がＮＲ７Ｒ８である式Ｉの化合物、又は薬学的に許容可能なその塩に関する。特定の実施態様では、Ｒ７及びＲ８は、独立に、Ｈ、メチル及びフェニルから選択される。
【００８２】
本発明の別の実施態様は、Ｗ、Ｙ及びＲ１が低級アルキルであり、Ｒ２が、ＮＨＣＯＲ６によって置換された低級アルキルであり、Ｒ６が、ａ）フェニル、ｂ）フェニルで置換されていてもよい低級アルキル、ｃ）ＮＲ７Ｒ８から選択され、Ｒ７及びＲ８がそれぞれ独立に、Ｈ、低級アルキル及びフェニルから選択される式Ｉの化合物、又は薬学的に許容可能なその塩に関する。
【００８３】
本発明の別の実施態様は、Ｗ、Ｙ及びＲ１が低級アルキルであり、Ｒ２が、ＮＨＳＯ２Ｒ５によって置換された低級アルキルであり、Ｒ５が低級アルキル又はフェニルである式Ｉの化合物、又は薬学的に許容可能なその塩に関する。一実施態様では、Ｒ５はメチルである。別の実施態様では、Ｒ５はフェニルである。
【００８４】
本発明の別の実施態様は、Ｗ、Ｙ及びＲ１が低級アルキルであり、Ｒ２が、ＮＨＣＯＯＲ６によって置換された低級アルキルであり、Ｒ６が、ａ）アリール、ｂ）アリールで置換されていてもよい低級アルキルから選択される式Ｉの化合物、又は薬学的に許容可能なその塩に関する。一実施態様では、Ｒ６は、フェニルで置換されていてもよいメチルである。別の実施態様では、Ｒ６  はフェニルである。
【００８５】
本発明の別の実施態様は、Ｗ、Ｙ及びＲ１が低級アルキルであり、Ｒ２が、ＮＨＲ６によって置換された低級アルキルであり、Ｒ６がアリールである式Ｉの化合物、又は薬学的に許容可能なその塩に関する。一実施態様では、Ｒ６はフェニルである。別の実施態様では、Ｒ６はナフタレニルである。
【００８６】
Ｒ２がＮＨＣＯＲ６で置換されている低級アルキルである本発明による化合物には：
Ｎ−｛（Ｓ）−１−［（Ｓ）−３−メチル−２−（（Ｓ）−２−メチルアミノ−プロピオニルアミノ）−ブチリル］−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−イルメチル｝−ベンズアミド塩酸塩（実施例１）；
（Ｓ）−Ｎ−｛（Ｓ）−１−［２−（アセチルアミノ−メチル）−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル］−２−メチル−プロピル｝−２−メチルアミノ−プロピオンアミド塩酸塩（実施例２）；
（Ｓ）−２−メチルアミノ−Ｎ−（（Ｓ）−２−メチル−１−｛２−［（３−メチル−ウレイド）−メチル］−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル｝−プロピル）−プロピオンアミド塩酸塩（実施例３）；
（Ｓ）−２−メチルアミノ−Ｎ−｛（Ｓ）−２−メチル−１−［（Ｓ）−２−（フェニルアセチルアミノ−メチル）−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル］−プロピル｝−プロピオンアミド塩酸塩（実施例４）；
（Ｓ）−Ｎ−｛（Ｓ）−１−［（Ｓ）−２−（３，３−ジメチル−ウレイドメチル）−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル］−２−メチル−プロピル｝−２−メチルアミノ−プロピオンアミド塩酸塩（実施例６）；
（Ｓ）−２−メチルアミノ−Ｎ−（（Ｓ）−２−メチル−１−｛（Ｓ）−２−［（３−フェニル−ウレイド）−メチル］−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル｝−プロピル）−プロピオンアミド塩酸塩（実施例７）；及び
（Ｓ）−２−メチルアミノ−Ｎ−（（Ｓ）−２−メチル−１−｛（Ｓ）−２−［（２−フェニル−プロピオニルアミノ）−メチル］−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル｝−プロピル）−プロピオンアミド塩酸塩（実施例８）；又は前記化合物のいずれかの薬学的に許容可能な塩
が含まれる。
【００８７】
Ｒ２が、ＮＨＳＯ２Ｒ５で置換されている低級アルキルである本発明による化合物には：
（Ｓ）−Ｎ−｛（Ｓ）−１−［（Ｓ）−２−（メタンスルホニルアミノ−メチル）−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル］−２−メチル−プロピル｝−２−メチルアミノ−プロピオンアミド塩酸塩（実施例９）；及び
（Ｓ）−Ｎ−｛（Ｓ）−１−［（Ｓ）−２−（ベンゼンスルホニルアミノ−メチル）−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル］−２−メチル−プロピル｝−２−メチルアミノ−プロピオンアミド塩酸塩（実施例１０）；
又は前記化合物のいずれかの薬学的に許容可能な塩が含まれる。
【００８８】
Ｒ２がＮＨＣＯＯＲ６で置換されている低級アルキルである本発明による化合物には：
｛（Ｓ）−１−［（Ｓ）−３−メチル−２−（（Ｓ）−２−メチルアミノ−プロピオニルアミノ）−ブチリル］−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−イルメチル｝−カルバミン酸メチルエステル塩酸塩（実施例５）；
｛（Ｓ）−１−［（Ｓ）−３−メチル−２−（（Ｓ）−２−メチルアミノ−プロピオニルアミノ）−ブチリル］−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−イルメチル｝−カルバミン酸ベンジルエステル塩酸塩（実施例１１）；及び
｛（Ｓ）−１−［（Ｓ）−３−メチル−２−（（Ｓ）−２−メチルアミノ−プロピオニルアミノ）−ブチリル］−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−イルメチル｝−カルバミン酸フェニルエステル塩酸塩（実施例１２）；
又は前記化合物のいずれかの薬学的に許容可能な塩が含まれる。
【００８９】
Ｒ２がＮＨＲ６で置換されている低級アルキルである本発明による化合物には：
（Ｓ）−２−メチルアミノ−Ｎ−［（Ｓ）−２−メチル−１−（（Ｓ）−２−フェニルアミノメチル−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル）−プロピル］−プロピオンアミド塩酸塩（実施例１３）；及び
（Ｓ）−２−メチルアミノ−Ｎ−｛（Ｓ）−２−メチル−１−［（Ｓ）−２−（ナフタレン−２−イルアミノメチル）−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル］−プロピル｝−プロピオンアミド塩酸塩（実施例１４）；又は前記化合物のいずれかの薬学的に許容可能な塩
が含まれる。
【００９０】
式（Ｉ）の化合物並びにそれらの塩は、少なくとも一つの不斉炭素原子を有し、したがって異なる立体異性体の混合物として存在しうる。種々の異性体は、既知の分離法、例えばクロマトグラフィーによって単離することができる。
【００９１】
ここに開示され、また上記の式（Ｉ）に包含される化合物は、互変異性又は構造異性を呈しうる。本発明は、これらの化合物の任意の互変異性又は構造異性の形態、又はかかる形態の混合物を包含し、上記の式に示されたいずれか一つの互変異性又は構造異性の形態に限定されないことを意図する。
【００９２】
投与量
本発明の化合物は、好ましくは、ＩＡＰのＢＩＲドメインに結合し、ＩＡＰが他のタンパク質に結合することを防止する。Ｂｉｒ結合タンパク質の例には、限定されないが、カスパーゼ３、カスパーゼ７、カスパーゼ９、Ｓｍａｃなどが含まれる。ＩＡＰの例には、限定されないが、ＸＩＡＰ、ｃＩＡＰ１、ｃＩＡＰ２、又はＮＡＩＰが含まれる。一態様では、本発明の化合物は、ＸＩＡＰ、ｃＩＡＰ１及び／又はｃＩＡＰ２のＢＩＲ２及び／又はＢＩＲ３ドメインに結合する。別の態様では、本発明の化合物は、ＸＩＡＰ、ｃＩＡＰ１、及び／又はｃＩＡＰ２のＢＩＲ２ドメインに結合する。
【００９３】
本発明の化合物は、特にがん細胞について、細胞内にアポトーシスを誘導するため、又はアポトーシスシグナルに対して細胞を感受性にするために有用である。アポトーシスシグナルは、例えば放射線治療、又は腫瘍に対する放射線療法によって、がん細胞内に誘導することができる。代替的に、アポトーシスシグナルは、デスレセプターアゴニストによるデスレセプターの活性化によってがん細胞内に誘導することができる。デスレセプターアゴニストは、自然発生的な、例えば腫瘍壊死因子α（ＴＮＦ−α）、又は非自然発生的な、例えばＤＲ４又はＤＲ５抗体のような合成抗体でありうる。
【００９４】
このように、本発明の化合物は、細胞増殖性疾患、特に腫瘍学的疾患の改善、制御又は治療において有用である。これらの化合物及び前記化合物を含む製剤は、血液がん、例えば急性骨髄性白血病、及び固形腫瘍、例えば乳房、結腸、肺及び前立腺の腫瘍の、治療又は制御において有用であると期待される。
【００９５】
本発明による化合物の「治療的有効量」又は「有効量」は、治療されている対象の疾病の症状を予防、軽減若しくは改善するため又は生存を延長するために有効な化合物の量を意味する。治療的有効量の決定は、当技術分野の技術の範囲内である。
【００９６】
本発明による化合物の治療的有効量又は投薬量は、広範囲で変化する可能性があり、当技術分野で既知の方法で決定されうる。このような投薬量は、投与されている特定の化合物、投与経路、治療されている病状、並びに治療されている患者を含む、各特定の症例における、個々の要件に従って調節されるであろう。一般に、約７０Ｋｇの体重の成人に経口又は非経口投与する場合、一日の投薬量は約１０ｍｇから約１００００ｍｇ、好ましくは約２００ｍｇから約１０００ｍｇが適切であると考えられるが、必要であれば上限を超えてもよい。一日の投与量は、単回投与として、又は分割投与で、又は非経口投与で投与することが可能であり、一又は複数回のボーラス注入として、又は持続注入として投与されてもよい。
【００９７】
本発明の実施において有用な医薬品、すなわち本発明の化合物を含む医薬品は、経口により（例えば、錠剤、コーティングされた錠剤、ドラジェ、硬質及び軟質のゼラチンカプセル、溶液、乳濁液、又は懸濁液の形態で）、経鼻的に（例えば、点鼻薬の形態で）、又は直腸的に（例えば、坐薬の形態で）など、内部的に投与することができる。しかしながら、投与は、筋肉内又は静脈内になど、非経口的に（例えば、注射液の形態で）行われてもよい。さらには、投与は局所的に（例えば、軟膏、クリーム、又はオイルの形態で）行うことができる。
【００９８】
組成物／製剤
代替的な一実施態様では、本発明は、少なくとも一の式Ｉの化合物、又は薬学的に許容可能なその塩と、薬学的に許容可能な賦形剤及び／又は担体とを含む医薬組成物を含む。
【００９９】
医薬組成物は、経口、経鼻、局所（頬及び舌下を含む）、直腸、膣及び／又は非経口投与に適したものとすることができる。製剤は、単位投与形態で簡便に提供することができ、薬学の分野においてよく知られた任意の方法によって調製されうる。単一投与形態を製造するために担体物質と組み合わせることができる活性成分の量は、治療されている宿主、並びに特定の投与様式によって様々であろう。単一投与形態を製造するために担体物質と組み合わせることができる活性成分の量は通常、治療効果を生じさせる式Ｉの化合物の量であろう。一般に、１００％のうち、活性成分のこのような量は、約１％から約９９％、好ましくは約５％から約７０％、最も好ましくは約１０％から３０％である。
【０１００】
これらの製剤又は組成物を調製する方法は、本発明の化合物を、担体と、任意選択的に一又は複数の副成分と混合する工程を含む。一般に、製剤は、本発明の化合物を、液体担体又は微粉化された固体担体、若しくはその両方と均一かつ密に混合し、次いで、必要であれば生成物を成形することによって調製される。
【０１０１】
式Ｉの化合物、並びに薬学的に許容可能なそれらの塩及びエステルは、錠剤、コーティングされた錠剤、ドラジェ、及び硬質ゼラチンカプセルの製造のための、薬学的に不活性な、無機又は有機アジュバントを用いて処理することができる。ラクトース、ポリビニルピロリドン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、結晶セルロース、コーンスターチ若しくはその誘導体、タルク、ステアリン酸若しくはその塩などを、例えば錠剤、ドラジェ、及び硬質ゼラチンカプセルのためのそのようなアジュバントとして使用することができる。
【０１０２】
軟質のゼラチンプセルに適したアジュバントは、例えば、植物油、ワックス、脂肪、半固体物質及び液体ポリオールなどである。溶液及びシロップの製造に適したアジュバントは、例えば、Ｈ２Ｏ、ポリオール、サッカロース、転化糖、グルコースなどである。注射液に適したアジュバントは、例えば、Ｈ２Ｏ、アルコール、ポリオール、グリセロール、植物油などである。坐薬に適したアジュバントは、例えば、天然又は硬化油、ワックス、脂肪、半固体又は液体ポリオールなどである。局所用調合剤に適したアジュバントは、グリセリド、半合成及び合成グリセリド、硬化油、液体ワックス、液体パラフィン、液体脂肪アルコール、ステロール、ポリエチレングリコール、及びセルロース誘導体である。
【０１０３】
さらには、薬学的調合剤は、防腐剤、可溶化剤、粘度増加物質、安定剤、湿潤剤、乳化剤、甘味料、着色料、香味料、浸透圧を変化させるための塩、バッファー、マスキング剤、又は抗酸化剤を含有することができる。これらは他の治療成分も含むことができる。
【０１０４】
本発明における化合物（一般式Ｉの化合物）は、以下のスキームに規定される一般反応スキームを用いて調製することができる。
【０１０５】
スキーム１ａ
0006333267.tif 000004
【０１０６】
一般構造２の適切に保護されたインドリン又はアザインドリンのアミン保護基ＰＧ２を除去することにより、一般式３の化合物を提供することができる。一般式３の化合物を一般式４の化合物を用いてアシル化することにより、一般式５の化合物を生じさせることができる。アシル化の方法には、限定されないが、ハロゲン化アシル、アジ化アシル、及び標準のペプチドカップリング試薬が含まれる。一般式５の化合物中のアミン保護基ＰＧ３を除去することにより、一般式６の化合物を提供することができる。一般式６の化合物を一般式７の化合物を用いてアシル化することにより、一般式８の化合物を生じさせることができる。アシル化の方法には、限定されないが、標準のペプチドカップリング試薬が含まれる。一般構造８の化合物のカルボン酸保護基ＰＧ１を除去することにより、一般構造９の化合物を形成することができる。
【０１０７】
スキーム１ｂ
0006333267.tif 000005
【０１０８】
次いで、一般構造９の適切に保護されたインドリン又はアザインドリンのカルボン酸基を還元することにより、一般式２１の化合物を提供することができる。還元方法には、限定されないが、酸の塩化アシル又は混合無水化物への転換と、その後の水素化ホウ素ナトリウムを用いた処理が含まれる。一般式２１の化合物のヒドロキシル基を適切な脱離基へ転換することにより、一般式２２の化合物を生じさせることができる。この転換のための方法には、メタンスルホニルクロリド又はトルエンスルホニルクロリドを用いた処理が含まれる。一般式２２の化合物を、適切な窒素求核試薬を用いた処理と、その後の主アミン部分の一般式の脱マスキングにより、一般式２３のアミンに転換することができる。このような変換のための方法には、アジ化ナトリウムの使用及びその後のアミンへの還元が含まれる。一般式２３の化合物のアミン部分を、一般式２４の化合物を用いてアシル化又はスルホニル化する（ここで、ＱはＣＯ又はＳＯ２である）ことにより、一般式２５の化合物を生じさせることができる。次いで、アミン保護基ＰＧ４を除去することにより、一般式２６の化合物を提供することができる。
【０１０９】
スキーム２
0006333267.tif 000006
【０１１０】
一般式２２の化合物は、適切な芳香族窒素求核試薬を用いた処理により、一般式２８のアミンに転換することができる。次いで、アミン保護基ＰＧ４を除去することにより、一般式２９の化合物を提供することができる。
【０１１１】
スキーム３
0006333267.tif 000007
【０１１２】
一般式２１の化合物は、標準の酸化試薬を用いて一般式３０の化合物に酸化することができる。一般式３０の化合物は、還元条件の下における式２７の適切な芳香族窒素求核試薬を用いた処理により、一般式２８のアミンに転換することができる。次いで、アミン保護基ＰＧ４を除去することにより、一般式２９の化合物を提供することができる。
【０１１３】
上記反応及び処理を実行する方法は、本開示内容に基づいて当業者には明らかであるか、又は実施例から類似のものを類推することができる。出発物質は、市販されているか、又は以下の実施例に記載のものと類似の方法により作製することができる。
【０１１４】
結晶形
本発明の化合物が固形であるとき、当業者であれば理解するように、これら化合物及びその塩が、異なる結晶又は多形相で存在しうること、及びそれらすべてが本発明の範囲及び特定される式に含まれることが意図されている。
【実施例】
【０１１５】
本発明の化合物は、既知の技術に従って合成される。以下の実施例及び言及は、本発明の理解を助けるために提供されている。しかしながら、実施例は、本発明、すなわち特許請求の範囲に記載されているの真の範囲を限定することを意図していない。実施例の最終生成物の名称は、ＡｕｔｏＮｏｍ  ２０００  Ａｄｄ−ｉｎ  ｖ４．０  ＳＰ２（ＩＳＩＳ  Ｄｒａｗの関数、Ｅｌｓｅｖｉｅｒ／ＭＤＬ）、又はＡｕｔｏＮｏｍ  ２０００  ＴＴ  ｖ４．０１．３０５（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ／ＭＤＬ）、又はＣｈｅｍＤｒａｗ  Ｐｒｏ  Ｃｏｎｔｒｏｌ  １１．０．２（ＣａｍｂｒｉｄｇｅＳｏｆｔ  Ｃｏｒｐ．）において利用可能な関数、又は電子手帳のＳｔｒｕｃｔ＝Ｎａｍｅ機能を用いて生成された。
【０１１６】
中間体の調製
中間体１
（Ｓ）−１−｛（Ｓ）−２−［（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−メチル−アミノ）−プロピオニルアミノ］−３−メチル−ブチリル｝−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−カルボン酸
0006333267.tif 000008
工程１：室温のＤＣＭ中、Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−メチルブタン酸（６．３ｇ、２９．０ｍｍｏｌ、当量：１．００）の溶液に対し、ピリジン（４．０１ｇ、４．１ｍＬ、５０．７ｍｍｏｌ、当量：１．７５）を、次いでフッ化シアヌル（５．９８ｇ、３．８ｍＬ、４４．３ｍｍｏｌ、当量：１．５３）を加えた。その結果得られた混合物を、室温で２時間撹拌した。氷（１６０ｍＬ）を加え、結果として得られた混合物を１５分間急速に撹拌した。その結果得られた混合物を、ＤＣＭ（２×６０ｍＬ）を用いて粗いフリット漏斗を通して濾過することにより沈殿物を洗浄した。組み合わせたフィルタを分液漏斗中に入れて層を分離させた。ＤＣＭ（１×５０ｍＬ）を用いて水層を抽出し、次いで組み合わせた有機層を、氷水（２×１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で短時間乾燥させ、次いで真空内で〜２０ｍＬの容積に濃縮した。この溶液を、ＤＣＭ（５０ｍＬ）中、エチル（Ｒ，Ｓ）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−カルボキシレート（２．７ｇ、１４．０ｍｍｏｌ、当量：１．００）及びＮ−メチルモルヒネ（５．７ｇ、６．２ｍＬ、５６．４ｍｍｏｌ、当量：４．０１）の溶液に加え、反応混合物を室温で一晩撹拌した。反応混合物を、ＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）で希釈し、０．１Ｍの水性ＫＨＳＯ４で洗浄した。水層を、全ての生成物がＥｔＯＡｃ層内に入るまで、ＥｔＯＡｃ（一度に５０ｍＬ）を用いて逆抽出した。組み合わせたＥｔＯＡｃ層を、〜２５０ｍＬに濃縮し、０．２Ｍの水性ＮａＯＨ及び塩水で洗浄し、真空中で濃縮した。原料を、フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、８０ｇ、ヘキサン中０％〜３０％のＥｔＯＡｃ）により精製した。得られた物質をＥｔＯＡｃ／ヘキサン（〜２００ｍＬ）中にとり、０．１ＭのＮａＯＨで洗浄し、真空中で濃縮することにより、無色の粘性オイルとして所望のラセミ生成物（４．４８ｇ）を生じさせた。次いでジアステレオマーをフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、１２０ｇ、０％〜２０のＥｔＯＡｃ／トルエン）により分離して、（Ｓ）−エチル  １−（（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−メチルブタノイル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−カルボキシレート（１．９ｇ）及び（Ｒ）−エチル  １−（（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−メチルブタノイル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−カルボキシレート（２．１ｇ）を生じさせた。ｍ／ｚ＝３９２（Ｍ＋Ｈ）。
【０１１７】
工程２：ＥｔＯＨ（１０．１ｍＬ）中、（Ｓ）−エチル  １−（（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−メチルブタノイル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−カルボキシレート（１．９ｇ、４．８５ｍｍｏｌ、当量：１．００）の溶液に対し、ＨＣｌ（エーテル中２Ｍ、３８．０ｍＬ、７６．０ｍｍｏｌ、当量：１５．７）を加え、結果として得られた溶液を室温で一晩撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮し、ｎ−ヘプタン（１×７５ｍＬ）と共沸混合することにより、白色固形物（１．６ｇ）として（Ｓ）−エチル  １−（（Ｓ）−２−アミノ−３−メチルブタノイル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−カルボキシレート塩酸塩を生じさせた。
【０１１８】
工程３：ＤＭＦ（２０ｍＬ）中、（Ｓ）−エチル  １−（（Ｓ）−２−アミノ−３−メチルブタノイル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−カルボキシレート塩酸塩（１．６ｇ、４．８８ｍｍｏｌ、当量：１．００）の溶液に対し、（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（メチル）アミノ）プロパン酸（１．２ｇ、５．９ｍｍｏｌ、当量：１．２１）及びＨＡＴＵ（２．２ｇ、５．７９ｍｍｏｌ、当量：１．１９）を加えた。次いでジイソプロピルエチルアミン（１．６３ｇ、２．２ｍＬ、１２．６ｍｍｏｌ、当量：２．５８）を加え、結果として得られた黄色の溶液を室温で１時間撹拌した。反応混合物を、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）及びヘキサン（５０ｍＬ）で希釈し、０．１Ｍの水性ＫＨＳＯ４、０．１Ｍの水性ＮａＯＨ、及び塩水で洗浄し、真空中で濃縮した。原材料を、フラッシュクロマトグラフィー（第１のスポットが溶出した後、シリカゲル、８０ｇ、０％〜２０％のＥｔＯＡｃ／（ＤＣＭ：ヘキサン  １：１）、次いで２０％〜４０％のＥｔＯＡｃ／（ＤＣＭ：ヘキサン  １：１）により精製し、（Ｓ）−エチル  １−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（メチル）アミノ）プロパンアミド）−３−メチルブタノイル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−カルボキシレート（１．９ｇ）を生じさせた。ｍ／ｚ＝４７７（Ｍ＋Ｈ）。
【０１１９】
工程４：ＴＨＦ（３６ｍＬ）及びＭｅＯＨ（１２ｍＬ）中、（Ｓ）−エチル  １−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（メチル）アミノ）プロパンアミノ）−３−メチルブタノイル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−カルボキシレート（１．９ｇ、３．９９ｍｍｏｌ、当量：１．００）の溶液を、氷浴中で冷却した。この溶液に対し、水（１２ｍＬ）中水酸化リチウム一水和物（０．５ｇ、１１．９ｍｍｏｌ、当量：２．９９）の溶液を加え、氷浴を取り除いた。１時間後、０．１Ｍの水性ＫＨＳＯ４（２００ｍＬ）を加えることにより反応物をクエンチし、ＤＣＭ（２×１００ｍＬ）を用いて混合物を抽出した。組み合わせたＤＣＭ層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮した。残留物を、ｎ−ヘプタン（１×１００ｍＬ）と共沸混合することにより、白色固形物として（Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（メチル）アミノ）プロパンアミド）−３−メチルブタノイル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−カルボン酸（１．８ｇ）を生じさせた。ｍ／ｚ＝４４９（Ｍ＋Ｈ）。
【０１２０】
中間体２
トルエン−４−スルホン酸（Ｓ）−１−｛（Ｓ）−２−［（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−メチル−アミノ）−プロピオニルアミノ］−３−メチル−ブチリル｝−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−イルメチルエステル
0006333267.tif 000009
工程１：ＴＨＦ（６５ｍＬ）中、１−｛（Ｓ）−２−［（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−メチル−アミノ）−プロピオニルアミノ］−３−メチル−ブチリル｝−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−カルボン酸（中間体１）（３．８ｇ、８．４８ｍｍｏｌ）の撹拌された溶液に対し、Ｎ−メチルモルヒネ（１．１１ｍＬ、１０．１７ｍｍｏｌ）を加えた後、−２０℃でクロロギ酸イソブチル（１．３２ｍＬ、１０．１７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を−２０℃で１０分間撹拌し、Ｎ−メチルモルホリン塩酸塩の白色沈殿物を濾過により除去した。濾液を−２０℃に冷却し、ＮａＢＨ４（４８３ｍｇ、１２．７２ｍｍｏｌ）を、次いで−２０℃の冷水（３０ｍＬ）を加えた。３０分後、反応混合物を水（２５ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（８０ｍＬ×２）を用いて抽出した。組み合わせた有機層を、水、塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮した。その結果得られた残留物を、フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサン中２８％のＥｔＯＡｃ）により精製し、｛（Ｓ）−１−［（Ｓ）−１−（２−ヒドロキシメチル−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル）−２−メチル−プロピルカルバモイル］−エチル｝−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２．７ｇ）を生じさせた。ｍ／ｚ＝４３５（Ｍ＋Ｈ）。
【０１２１】
工程２：ＤＣＭ（１５０ｍＬ）中、｛（Ｓ）−１−［（Ｓ）−１−（２−ヒドロキシメチル−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル）−２−メチル−プロピルカルバモイル］−エチル｝−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（４．５ｇ、１０．３６ｍｍｏｌ）の溶液に対し、トリエチルアミン（４．２５ｍＬ、３１．１０６ｍｍｏｌ）を加え、その後０℃で塩化トシル（３．０ｇ、１５．５５ｍｍｏｌ）をゆっくりと加えた。反応混合物を室温で１６時間撹拌し、次いで反応混合物を真空中で濃縮した。残留物に水を加え、その結果得られた混合物を、ＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ×２）を用いて抽出した。組み合わせた有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、真空中で濃縮した。その結果得られた残留物を、フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサン中１８％のＥｔＯＡｃ）によって精製し、トルエン−４−スルホン酸（Ｓ）−１−｛（Ｓ）−２−［（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−メチル−アミノ）−プロピオニルアミノ］−３−メチル−ブチリル｝−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−イルメチルエステル（２．７ｇ）、及びトルエン−４−スルホン酸（Ｒ）−１−｛（Ｓ）−２−［（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−メチル−アミノ）−プロピオニルアミノ］−３−メチル−ブチリル｝−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−イルメチルエステル（１ｇ）を生じさせた。ｍ／ｚ＝５８９（Ｍ＋Ｈ）。
【０１２２】
中間体３
｛（Ｓ）−１−［（Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−アミノメチル−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル）−２−メチル−プロピルカルバモイル］−エチル｝−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
0006333267.tif 000010
工程１：ＤＭＦ（４ｍＬ）中、トルエン−４−スルホン酸（Ｓ）−１−｛（Ｓ）−２−［（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−メチル−アミノ）−プロピオニルアミノ］−３−メチル−ブチリル｝−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−イルメチルエステル（中間体２）（２００ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）の撹拌された溶液に対し、ＮａＮ３（２６．５３ｍｇ、０．４０８ｍｍｏｌ）を加え、結果として得られた混合物を９０℃で３時間加熱した。反応物を真空中で濃縮し、得られた残留物を酢酸エチル（２５ｍＬ）中に溶解させ、水及び塩水で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、真空中で濃縮した。その結果得られた残留物を、フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサン中１２％のＥｔＯＡｃ）により精製し、｛（Ｓ）−１−［（Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−アジドメチル−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル）−２−メチル−プロピルカルバモイル］−エチル｝−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１４０ｍｇ）を生じさせた。ｍ／ｚ＝４６０（Ｍ＋Ｈ）。
【０１２３】
工程２：メタノール（４ｍＬ）中、｛（Ｓ）−１−［（Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−アジドメチル−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル）−２−メチル−プロピルカルバモイル］−エチル｝−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（５５０ｍｇ）及び炭素上１０％のパラジウムの混合物を、水素雰囲気（バルーン）下において２時間撹拌した。反応混合物を、セライトパッドを通して濾過し、濾液を蒸発させて｛（Ｓ）−１−［（Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−アミノメチル−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル）−２−メチル−プロピルカルバモイル］−エチル｝−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（４７０ｍｇ）を生じるまで乾燥させた。ｍ／ｚ＝４３４（Ｍ＋Ｈ）。
【０１２４】
実施例１
Ｎ−｛（Ｓ）−１−［（Ｓ）−３−メチル−２−（（Ｓ）−２−メチルアミノ−プロピオニルアミノ）−ブチリル］−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−イルメチル｝−ベンズアミド，塩酸塩
0006333267.tif 000011
工程１：ＤＣＭ（４ｍＬ）中、｛（Ｓ）−１−［（Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−アミノメチル−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル）−２−メチル−プロピルカルバモイル］−エチル｝−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（中間体３）（１００ｍｇ  ０．２３ｍｍｏｌ）の溶液を、０〜５℃に冷却し、トリエチルアミン（０．０８ｍＬ  ０．５７ｍｍｏｌ）を加えた後塩化ベンゾイル（０．０２７ｍＬ、０．２３ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を室温で４時間撹拌した。反応混合物を水とＤＣＭとに分割し、次いで有機層を水（３０ｍＬ×２）及び塩水（３０ｍＬ）で洗浄した。組み合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮した。その結果得られた残留物を、分取−ＨＰＬＣ（アセトニトリル及びＮＨ４ＯＡｃ）により精製し、白色固形物（３５ｍｇ）として（（Ｓ）−１−｛（Ｓ）−１−［（Ｓ）−２−（ベンゾイルアミノ−メチル）−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル］−２−メチル−プロピルカルバモイル｝−エチル）−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルを生じさせた。ｍ／ｚ＝５３８（Ｍ＋Ｈ）。
【０１２５】
工程２：ジオキサン（（０．５ｍＬ）中、（（Ｓ）−１−｛（Ｓ）−１−［（Ｓ）−２−（ベンゾイルアミノ−メチル）−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル］−２−メチル−プロピルカルバモイル｝−エチル）−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（３０ｍｇ、０．０５６ｍｍｏｌ）の溶液に対し、０℃のジオキサン（０．３ｍＬ）中４ＭのＨＣｌを液滴で加えた。反応混合物を２時間室温で撹拌し、次いで真空中で溶媒を除去した。ヘキサンを用いた残留物の粉砕により、オフホワイトの固形物（２５ｍｇ）としてＮ−｛（Ｓ）−１−［（Ｓ）−３−メチル−２−（（Ｓ）−２−メチルアミノ−プロピオニルアミノ）−ブチリル］−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−イルメチル｝−ベンズアミド，塩酸塩を生じさせた。ｍ／ｚ＝４３８（Ｍ＋Ｈ）。
【０１２６】
表１に示す以下の実施例は、表中に記載のように反応物を変更し、実施例１と同じ手順を用いて調製された。
【０１２７】
0006333267.tif 000012
0006333267.tif 000013
0006333267.tif 000014
【０１２８】
実施例１３
（Ｓ）−２−メチルアミノ−Ｎ−［（Ｓ）−２−メチル−１−（（Ｓ）−２−フェニルアミノメチル−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル）−プロピル］−プロピオンアミド，塩酸塩
0006333267.tif 000015
工程１：１，４−ジオキサン（０．５ｍＬ）中、トルエン−４−スルホン酸（Ｓ）−１−｛（Ｓ）−２−［（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−メチル−アミノ）−プロピオニルアミノ］−３−メチル−ブチリル｝−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−イルメチルエステル（中間体２）（５０ｍｇ、０．０８５ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（２９．３ｍｇ、０．１２７ｍｍｏｌ）の撹拌された溶液に対し、アニリン（０．０１２ｍＬ、０．１２７ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物をマイクロウェーブ内において１２５℃で１時間照射した。反応混合物をＤＣＭ（１０ｍＬ）で希釈し、水及び塩水で洗浄し、分離した有機層を真空中で濃縮させた。原材料を、分取ＨＰＬＣ（Ｘ  Ｂｒｉｄｇｅ  Ｐｒｅｐ  Ｃ１８（２５０ｘ１９．０ｍｍ）５μ、アセトニトリル及び０．０５％の  ギ酸）により精製し、メチル−｛（Ｓ）−１−［（Ｓ）−２−メチル−１−（（Ｓ）−２−フェニルアミノメチル−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル）−プロピルカルバモイル］−エチル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（３０ｍｇ）を生じさせた。ｍ／ｚ＝５１０．６（Ｍ＋Ｈ）。
【０１２９】
１，４−ジオキサン（０．５ｍＬ）中、メチル−｛（Ｓ）−１−［（Ｓ）−２−メチル−１−（（Ｓ）−２−フェニルアミノメチル−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル）−プロピルカルバモイル］−エチル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２５ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）の溶液に対し、ジオキサン（０．５ｍＬ）中４ＭのＨＣｌを０℃で液滴により加えた。反応混合物を室温で３時間撹拌し、次いで真空中で濃縮することにより（Ｓ）−２−メチルアミノ−Ｎ−［（Ｓ）−２−メチル−１−（（Ｓ）−２−フェニルアミノメチル−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル）−プロピル］−プロピオンアミド塩酸塩（１８ｍｇ）を得た。ｍ／ｚ＝４１０．４（Ｍ＋Ｈ）。
【０１３０】
実施例１４
（Ｓ）−２−メチルアミノ−Ｎ−｛（Ｓ）−２−メチル−１−［（Ｓ）−２−（ナフタレン−２−イルアミノメチル）−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル］−プロピル｝−プロピオンアミド塩酸塩
0006333267.tif 000016
工程１：ＴＨＦ（６５ｍＬ）中、１−｛（Ｓ）−２−［（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−メチル−アミノ）−プロピオニル  アミノ］−３−メチル−ブチリル｝−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−カルボン酸（中間体１）（３．８ｇ、８．４８ｍｍｏｌ）の撹拌された溶液に対し、Ｎ−メチルモルホリン（１．１１ｍＬ、１０．１７ｍｍｏｌ）を加え、その後−２０℃のクロロギ酸イソブチル（１．３２ｍＬ、１０．１７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を−２０℃で１０分間撹拌し、Ｎ−メチルモルホリン塩酸塩の白色沈殿物を濾過により除去した。濾液を−２０℃に冷却し、ＮａＢＨ４（４８３ｍｇ、１２．７２ｍｍｏｌ）を、次いで−２０℃の冷水（３０ｍＬ）を加えた。３０分後、反応混合物を水（２５ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（８０ｍＬ×２）を用いて抽出した。組み合わせた有機層を、水、塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮した。その結果得られた残留物を、フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサン中２８％のＥｔＯＡｃ）により精製し、｛（Ｓ）−１−［（Ｓ）−１−（２−ヒドロキシメチル−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル）−２−メチル−プロピルカルバモイル］−エチル｝−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２．７ｇ）を生じさせた。ｍ／ｚ＝４３５（Ｍ＋Ｈ）。
【０１３１】
工程２：０℃のＤＣＭ（０．４ｍＬ）中、｛（Ｓ）−１−［（Ｓ）−１−（２−ヒドロキシメチル−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル）−２−メチル−プロピルカルバモイル］−エチル｝−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１６．５ｍｇ、０．０３８ｍｍｏｌ）に対し、ＫＢｒ（３．１ｇ、０．０２７ｍｍｏｌ）、ＴＥＭＰＯ（０．３ｍｇ）及び８％のＮａＯＣｌ溶液（０．３５ｍＬ、１０ｅｑ）を連続して加え、反応物を１時間勢いよく撹拌した。反応混合物を、ＤＣＭを用いて希釈し、水及び塩水で洗浄し、次いで真空中で濃縮することにより｛（Ｓ）−１−［（Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−ホルミル−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル）−２−メチル−プロピルカルバモイル］−エチル｝−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１２ｍｇ）を生じさせた。
【０１３２】
工程３：乾燥したＭｅＯＨ（１．０ｍＬ）中、｛（Ｓ）−１−［（Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−ホルミル−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル）−  ２−メチル−プロピルカルバモイル］−エチル｝−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（３０ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ）の撹拌された溶液に対し、２−ナフチルアミン（２０ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）を加え、反応物を室温で１８時間撹拌した。酢酸を加え、ｐＨを〜４に調整した。ＮａＣＮＢＨ３（８．７ｍｇ、０．１３９ｍｍｏｌ）を加え、反応物を室温で１８時間撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮した。残留物をＥｔＯＡｃ（２５ｍＬ）中に取り、飽和した水性ＮａＨＣＯ３（１０ｍＬ×２）、水（１０ｍＬ×２）、及び塩水（４ｍＬ×２）で洗浄し、真空中で濃縮した。原材料を、分取ＨＰＬＣ（Ｘ  Ｂｒｉｄｇｅ  Ｐｒｅｐ  Ｃ１８（２５０ｘ１９．０ｍｍ）５μ、アセトニトリル、及び５ｍＭのＮＨ４ＯＡｃ）により精製し、メチル−（（Ｓ）−１−｛（Ｓ）−２−メチル−１−［（Ｓ）−２−（ナフタレン−２−イルアミノメチル）−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル］−プロピルカルバモイル｝−エチル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（３２ｍｇ）を生じさせた。ｍ／ｚ＝５６０（Ｍ＋Ｈ）。
【０１３３】
工程４：１，４−ジオキサン（０．５ｍＬ）中、メチル−（（Ｓ）−１−｛（Ｓ）−２−メチル−１−［（Ｓ）−２−（ナフタレン−２−イルアミノメチル）−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル］−プロピルカルバモイル｝−エチル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２７ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）の溶液に対し、ジオキサン（０．５ｍＬ）中４ＭのＨＣｌを０℃の液滴により加えた。反応混合物を室温で３時間撹拌し、次いで溶媒を真空中で除去することにより（Ｓ）−２−メチルアミノ−Ｎ−｛（Ｓ）−２−メチル−１−［（Ｓ）−２−（ナフタレン−２−イルアミノメチル）−２，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−カルボニル］−プロピル｝−プロピオンアミド塩酸塩（２３ｍｇ）を生じさせた。ｍ／ｚ＝４６０（Ｍ＋Ｈ）。
【０１３４】
実施例１５
生化学分析
ＢＩＲ２及びＢＩＲ３のためのＴＲ−ＦＲＥＴアッセイ
ＸＩＡＰタンパク質のＢＩＲ２及び／又はＢＩＲ３ドメインの、ペプチドＡ（ＳＭＡＣ−由来のペプチド、後述）に対する結合を阻害する試験化合物の能力は、試験化合物がＳＭＡＣ模倣剤として作用する結果、細胞のアポトーシス経路が再活性化されることを実証するものである。
【０１３５】
Sweeny et al. （Biochemistry, 2006, 45, 14740 14748)により報告された配列に基づいて合成された一組２９のペプチドに対し、６ｘヒスチジンでタグ付したＸＩＡＰのＢＩＲ２ドメイン及びＢＩＲ３ドメインをスクリーニングすることにより、ペプチドＡＶＰＩＡＱＫＳＥＫ−（ε−ビオチン）−ＯＨ  １：２  ＴＦＡ（「ペプチドＡ」）が、ＴＲ−ＦＲＥＴアッセイのための基質として同定された。ペプチドは蛍光タグＦＩＴＣ又はＴＡＭＲＡにより標識され、Ｋｄ値が蛍光偏光アッセイにより決定された。配列ＡＶＰＩＡＱＫＳＥＫは、アッセイで使用するために最適なものとして同定された。ビオチンを用いてペプチド配列を誘導体化することにより、ＴＲ−ＦＲＥＴアッセイのための基質としてＡＶＰＩＡＱＫＳＥＫ−（ε−ビオチン）−ＯＨ  １：２  ＴＦＡが提供された。
【０１３６】
ＸＩＡＰタンパク質配列は、ＳＷＩＳＳ−ＰＲＯＴタンパク質配列データベースから得られ、そこからＢＩＲ２及びＢＩＲ３ドメインが得られた。ＴＲ−ＦＲＥＴアッセイに使用されるＢＩＲ２ドメインの配列は、ＭＲＨＨＨＨＨＨＲＤＨＦＡＬＤＲＰＳＥＴＨＡＤＹＬＬＲＴＧＱＶＶＤＩＳＤＴＩＹＰＲＮＰＡＭＹＳＥＥＡＲＬＫＳＦＱＮＷＰＤＹＡＨＬＴＰＲＥＬＡＳＡＧＬＹＹＴＧＩＧＤＱＶＱＣＦＡＣＧＧＫＬＫＮＷＥＰＧＤＲＡＷＳＥＨＲＲＨＦＰＮＣＦＦＶＬＧＲＮＬＮＩＲＳＥである。
【０１３７】
ＴＲ−ＦＲＥＴアッセイに使用されるＢＩＲ３ドメインの配列は、ＭＲＨＨＨＨＨＨＲＳＤＡＶＳＳＤＲＮＦＰＮＳＴＮＬＰＲＮＰＳＭＡＤＹＥＡＲＩＦＴＦＧＴＷＩＹＳＶＮＫ
ＥＱＬＡＲＡＧＦＹＡＬＧＥＧＤＫＶＫＣＦＨＣＧＧＧＬＴＤＷＫＰＳＥＤＰＷＥＱＨＡＫＷＹＰＧＣＫＹＬＬ
ＥＱＫＧＱＥＹＩＮＮＩＨＬＴＨＳＬＥＥＣＬＶＲＴＴ
である。
【０１３８】
１０ナノモルの、６ｘヒスチジンでタグ付された、ＸＩＡＰのアミノ酸１２４−２４０に対応するＢＩＲ２ドメイン、又は、ＸＩＡＰのアミノ酸２４１−３５６に対応するＢＩＲ３ドメインを、５０ｍＭのＴｒｉｓ−Ｃｌ、ｐＨ７．５、１００  ｍＭのＮａＣｌ、１ｍＭのジチオスレイトール（ＤＴＴ）及び０．１ｍｇ／ｍＬのウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）の存在下で、２０ｎＭのペプチドＡＶＰＩＡＱＫＳＥＫ−（ε−ビオチン）−ＯＨ  １：２  ＴＦＡと混合した。４５分にわたる３７℃でのインキュベーションの後、ユーロピウム−ストレプトアビジン及びアロフィコシアニンにコンジュゲートした抗ヒスチジン抗体を加え、それぞれの最終濃度を１．５ｎＭ及び１５ｎＭにした。時間分解蛍光共鳴エネルギー移動（ＴＲ−ＦＲＥＴ）シグナルを１時間後に室温で測定した。試験化合物の効力を、連続的に希釈された１０の濃度で評価した。各濃度における阻害の割合（％）を決定し、各試験化合物についてＩＣ５０値を生成した。
【０１３９】
これらの値を下記の表２に示す。
【０１４０】
0006333267.tif 000017
0006333267.tif 000018
0006333267.tif 000019
0006333267.tif 000020
【配列表】
0006333267000001.app