(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
クロリンｅ４ナトリウム。
【請求項２】
クロリンｅ４およびナトリウムを１：２の比率で含む、クロリンｅ４ナトリウム。
【請求項３】
以下の構造：
【化１】
0006396919.tif 000012
を有する、クロリンｅ４ナトリウム。
【請求項４】
以下の構造：
【化２】
0006396919.tif 000013
を有する、クロリンｅ４ナトリウム。
【請求項５】
クロリンｅ４ナトリウムを調製するプロセスであって、クロリンｅ４をナトリウム化合物と反応させるステップを含む、プロセス。
【請求項６】
得られたクロリンｅ４ナトリウムは、クロリンｅ４およびナトリウムを１：２の比率で含む、請求項５に記載のプロセス。
【請求項７】
得られたクロリンｅ４ナトリウムは、以下の構造：
【化３】
0006396919.tif 000014
を有する、請求項５または６に記載のプロセス。
【請求項８】
得られたクロリンｅ４ナトリウムは、以下の構造：
【化４】
0006396919.tif 000015
を有する、請求項５〜７のうちいずれか１項に記載のプロセス。
【請求項９】
前記ナトリウム化合物は水酸化ナトリウムである、請求項５〜８のうちいずれか１項に記載のプロセス。
【請求項１０】
塩基の存在下でクロリンｅ４をナトリウム化合物と反応させる、請求項５〜９のうちいずれか１項に記載のプロセス。
【請求項１１】
医薬に使用するための、請求項１〜４のうちいずれか１項に記載のクロリンｅ４ナトリウム。
【請求項１２】
光線力学療法または細胞発光療法に使用するための、請求項１〜４、１１のうちいずれか１項に記載のクロリンｅ４ナトリウム。
【請求項１３】
アテローム性動脈硬化；多発性硬化症；糖尿病；糖尿病性網膜症；関節炎；関節リウマチ；菌、ウイルス、クラミジア、バクテリア、ナノ細菌、もしくは寄生虫による感染症；ＨＩＶ；エイズ；ｓａｒｓウィルス、アジア（鶏）インフルエンザウイルス、単純疱疹もしくは帯状疱疹による感染；肝炎；ウイルス性肝炎；心疾患；冠状動脈狭窄症；頚動脈狭窄；間欠性跛行；皮膚科的状態；座瘡；乾癬；良性もしくは悪性細胞の過剰増殖、または血管新生の領域を特徴とする疾病；良性もしくは悪性腫瘍、早期癌；子宮頚部異形成；軟部組織肉腫；生殖細胞腫瘍；網膜芽細胞腫；加齢黄斑変性症；リンパ腫；ホジキンリンパ腫；頭頸部癌；口もしくは口腔癌；または血液、前立腺、頚部、子宮、膣もしくは他の女性付属器、胸部、鼻咽頭、気管、喉頭、気管支、細気管支、肺、管腔器官、食道、胃、胆管、腸、結腸、結直腸、直腸、膀胱、尿管、腎臓、肝臓、胆嚢、脾臓、脳、リンパ系、硬骨、皮膚、もしくは膵臓の癌の治療のための、請求項１〜４、１１、１２のうちいずれか１項に記載のクロリンｅ４ナトリウム。
【請求項１４】
良性もしくは悪性細胞の過剰増殖または血管新生の領域を特徴とする疾病の治療のための、請求項１〜４、１１〜１３のうちいずれか１項に記載のクロリンｅ４ナトリウム。
【請求項１５】
良性または悪性腫瘍の治療のための、請求項１〜４、１１〜１４のうちいずれか１項に記載のクロリンｅ４ナトリウム。
【請求項１６】
早期癌；子宮頚部異形成；軟部組織肉腫；生殖細胞腫瘍；網膜芽細胞腫；加齢黄斑変性症；リンパ腫；ホジキンリンパ腫；頭頸部癌；口もしくは口腔癌；または血液、前立腺、頚部、子宮、膣もしくは他の女性付属器、胸部、鼻咽頭、気管、喉頭、気管支、細気管支、肺、管腔器官、食道、胃、胆管、腸、結腸、結直腸、直腸、膀胱、尿管、腎臓、肝臓、胆嚢、脾臓、脳、リンパ系、硬骨、皮膚、もしくは膵臓の癌の治療のための、請求項１〜４、１１〜１５のうちいずれか１項に記載のクロリンｅ４ナトリウム。
【請求項１７】
光線力学診断に使用するための、請求項１〜４、１１のうちいずれか１項に記載のクロリンｅ４ナトリウム。
【請求項１８】
前記クロリンｅ４ナトリウムは、照射の適用前の投与に適合される、請求項１１〜１７のうちいずれか１項に記載のクロリンｅ４ナトリウム。
【請求項１９】
照射は、５００ｎｍから１０００ｎｍの範囲の波長による電磁放射である、請求項１８に記載のクロリンｅ４ナトリウム。
【請求項２０】
請求項１〜４、１１〜１９のうちいずれか１項に記載のクロリンｅ４ナトリウムと、薬学的に許容可能な担体または希釈剤とを含む、医薬組成物。
【請求項２１】
光線力学療法または細胞発光療法に使用するための、請求項２０に記載の医薬組成物。
【請求項２２】
アテローム性動脈硬化；多発性硬化症；糖尿病；糖尿病性網膜症；関節炎；関節リウマチ；菌、ウイルス、クラミジア、バクテリア、ナノ細菌、もしくは寄生虫による感染症；ＨＩＶ；エイズ；ｓａｒｓウィルス、アジア（鶏）インフルエンザウイルス、単純疱疹もしくは帯状疱疹による感染；肝炎；ウイルス性肝炎；心疾患；冠状動脈狭窄症；頚動脈狭窄；間欠性跛行；皮膚科的状態；座瘡；乾癬；良性もしくは悪性細胞の過剰増殖、または血管新生の領域を特徴とする疾病；良性もしくは悪性腫瘍、早期癌；子宮頚部異形成；軟部組織肉腫；生殖細胞腫瘍；網膜芽細胞腫；加齢黄斑変性症；リンパ腫；ホジキンリンパ腫；頭頸部癌；口もしくは口腔癌；または血液、前立腺、頚部、子宮、膣もしくは他の女性付属器、胸部、鼻咽頭、気管、喉頭、気管支、細気管支、肺、管腔器官、食道、胃、胆管、腸、結腸、結直腸、直腸、膀胱、尿管、腎臓、肝臓、胆嚢、脾臓、脳、リンパ系、硬骨、皮膚、もしくは膵臓の癌の治療のための、請求項２０または２１に記載の医薬組成物。
【請求項２３】
良性もしくは悪性細胞の過剰増殖または血管新生の領域を特徴とする疾病の治療のための、請求項２０〜２２のうちいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２４】
良性または悪性腫瘍の治療のための、請求項２０〜２３のうちいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２５】
早期癌；子宮頚部異形成；軟部組織肉腫；生殖細胞腫瘍；網膜芽細胞腫；加齢黄斑変性症；リンパ腫；ホジキンリンパ腫；頭頸部癌；口もしくは口腔癌；または血液、前立腺、頚部、子宮、膣もしくは他の女性付属器、胸部、鼻咽頭、気管、喉頭、気管支、細気管支、肺、管腔器官、食道、胃、胆管、腸、結腸、結直腸、直腸、膀胱、尿管、腎臓、肝臓、胆嚢、脾臓、脳、リンパ系、硬骨、皮膚、もしくは膵臓の癌の治療のための、請求項２０〜２４のうちいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２６】
光線力学診断において使用するための、請求項２０に記載の医薬組成物。
【請求項２７】
医薬組成物は、照射の適用前の投与に適合される、請求項２０〜２６のうちいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２８】
照射は、５００ｎｍから１０００ｎｍの範囲の波長による電磁放射である、請求項２７に記載の医薬組成物。
【請求項２９】
前記医薬組成物は、経口、非経口（静脈内、皮下、筋肉内、皮内、気管内、腹膜内、関節内、腹腔内、頭蓋内、および硬膜外を含む）、経皮的、気道（エーロゾル）、直腸、膣、または局所的（口内、粘膜および舌下を含む）投与に好適な形態である、請求項２０〜２８のうちいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項３０】
アテローム性動脈硬化；多発性硬化症；糖尿病；糖尿病性網膜症；関節炎；関節リウマチ；菌、ウイルス、クラミジア、バクテリア、ナノ細菌、もしくは寄生虫による感染症；ＨＩＶ；エイズ；ｓａｒｓウィルス、アジア（鶏）インフルエンザウイルス、単純疱疹もしくは帯状疱疹による感染；肝炎；ウイルス性肝炎；心疾患；冠状動脈狭窄症；頚動脈狭窄；間欠性跛行；皮膚科的状態；座瘡；乾癬；良性もしくは悪性細胞の過剰増殖、または血管新生の領域を特徴とする疾病；良性もしくは悪性腫瘍、早期癌；子宮頚部異形成；軟部組織肉腫；生殖細胞腫瘍；網膜芽細胞腫；加齢黄斑変性症；リンパ腫；ホジキンリンパ腫；頭頸部癌；口もしくは口腔癌；または血液、前立腺、頚部、子宮、膣もしくは他の女性付属器、胸部、鼻咽頭、気管、喉頭、気管支、細気管支、肺、管腔器官、食道、胃、胆管、腸、結腸、結直腸、直腸、膀胱、尿管、腎臓、肝臓、胆嚢、脾臓、脳、リンパ系、硬骨、皮膚、もしくは膵臓の癌の治療のための薬品の製造における、請求項１〜４、１１〜１９のうちいずれか１項に記載のクロリンｅ４ナトリウムの使用。
【請求項３１】
光線力学療法または細胞発光療法に使用するための光線療法剤の製造における、請求項１〜４、１１〜１９のうちいずれか１項に記載のクロリンｅ４ナトリウムの使用。
【請求項３２】
前記光線療法剤は、アテローム性動脈硬化；多発性硬化症；糖尿病；糖尿病性網膜症；関節炎；関節リウマチ；菌、ウイルス、クラミジア、バクテリア、ナノ細菌、もしくは寄生虫による感染症；ＨＩＶ；エイズ；ｓａｒｓウィルス、アジア（鶏）インフルエンザウイルス、単純疱疹もしくは帯状疱疹による感染；肝炎；ウイルス性肝炎；心疾患；冠状動脈狭窄症；頚動脈狭窄；間欠性跛行；皮膚科的状態；座瘡；乾癬；良性もしくは悪性細胞の過剰増殖、または血管新生の領域を特徴とする疾病；良性もしくは悪性腫瘍、早期癌；子宮頚部異形成；軟部組織肉腫；生殖細胞腫瘍；網膜芽細胞腫；加齢黄斑変性症；リンパ腫；ホジキンリンパ腫；頭頸部癌；口もしくは口腔癌；または血液、前立腺、頚部、子宮、膣もしくは他の女性付属器、胸部、鼻咽頭、気管、喉頭、気管支、細気管支、肺、管腔器官、食道、胃、胆管、腸、結腸、結直腸、直腸、膀胱、尿管、腎臓、肝臓、胆嚢、脾臓、脳、リンパ系、硬骨、皮膚、もしくは膵臓の癌の治療のためのものである、請求項３１に記載の使用。
【請求項３３】
前記薬品または前記光線療法剤は、良性もしくは悪性細胞の過剰増殖または血管新生の領域を特徴とする疾病の治療のためのものである、請求項３０〜３２のうちいずれか１項に記載の使用。
【請求項３４】
前記薬品または前記光線療法剤は、良性または悪性腫瘍の治療のためのものである、請求項３０〜３３のうちいずれか１項に記載の使用。
【請求項３５】
前記薬品または前記光線療法剤は、早期癌；子宮頚部異形成；軟部組織肉腫；生殖細胞腫瘍；網膜芽細胞腫；加齢黄斑変性症；リンパ腫；ホジキンリンパ腫；頭頸部癌；口もしくは口腔癌；または血液、前立腺、頚部、子宮、膣もしくは他の女性付属器、胸部、鼻咽頭、気管、喉頭、気管支、細気管支、肺、管腔器官、食道、胃、胆管、腸、結腸、結直腸、直腸、膀胱、尿管、腎臓、肝臓、胆嚢、脾臓、脳、リンパ系、硬骨、皮膚、もしくは膵臓の癌の治療のためのものである、請求項３０〜３４のうちいずれか１項に記載の使用。
【請求項３６】
光線力学診断に使用するための光線診断剤の製造における、請求項１〜４、１１〜１９のうちいずれか１項に記載のクロリンｅ４ナトリウムの使用。
【請求項３７】
前記薬品、前記光線療法剤または光線診断剤は、照射の適用前の投与に適合される、請求項３０〜３６のうちいずれか１項に記載の使用。
【請求項３８】
照射は、５００ｎｍから１０００ｎｍの範囲の波長による電磁放射である、請求項３７に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、クロリンｅ４ナトリウムおよびその調製のプロセスに関する。クロリンｅ４ナトリウムは、たとえば腫瘍を治療または検出するための光線力学療法、細胞発光（cytoluminescent）療法および光線力学診断における使用に好適である。本発明は、クロリンｅ４ナトリウムを含む医薬組成物、光線療法または光線診断剤の製造におけるクロリンｅ４ナトリウムの使用、たとえば腫瘍を治療もしくは検出するための光線力学療法、細胞発光療法または光線力学診断の方法にも関する。
【背景技術】
【０００２】
ポルフィリンおよびそれらの誘導体は、光量子を吸収し、より高い波長でそれらを放射することができる既知の感光性化学的化合物である。そのような固有の特性については多くの用途があり、ＰＤＴ（光線力学療法）はそれらのうちの１つである。
【０００３】
光活性化中に、分子は、基底状態（Ｓ０）から一重項励起状態（Ｓ１）に移動し（Ｓ０→Ｓ１遷移）、次いで基底状態（Ｓ０）に戻り（Ｓ１→Ｓ０遷移）、蛍光の形でより高い波長において光を放射する。三重項状態（Ｔ１）として知られている別のエネルギ状態がある。三重項状態（Ｔ１）は、直接励起によって効率的に存在することができない。しかし系間交差Ｓ１→Ｔ１は等エネルギで生じ、Ｔ１への失活が続く。Ｓ１→Ｔ１の変化は形式上スピン禁制されているが、それはダウンヒルプロセスであり、いくつかの分子では、系間交差が非常に効率的に生じるため、蛍光が消光される。そのような化合物は、系間交差が最小である分子において励起移動（増感として知られている現象）によって励起した三重項を生成するのに有用である。
【０００４】
図１は、典型的な光増感剤についての修正されたヤブロンスキー図を示し、関心対象の原則光物理プロセスを概説する。
【０００５】
三重項状態（Ｔ１）では、分子は非常に不安定になり、分子酸素（３Ｏ２）と反応する可能性があり、後者は２つの一重項酸素（１Ｏ２）に分割される。一重項酸素（１Ｏ２）は「捕捉剤」として知られており、異常な生物細胞を破壊することができ、遊離基を除去することができる。
【０００６】
そのような固有の特性により、多くの感光性分子がＰＤＴのための良好な光増感剤となる。
【０００７】
現在、ＰＤＴのための光増感剤には２つの世代がある。第一世代はヘムポルフィリン（血液製剤）を含み、第２世代は、大部分はクロロフィル誘導体である。最新の化合物は、クロリンおよびバクテリオクロリンとして知られている。
【０００８】
クロリンはポルフィリン系と同様の光物理的特性を示すが、強化され、赤色にシフトしたＱ帯（６７０ｎｍ）を有し、これにより、クロリン含有系がＰＤＴのためのより良好な候補となる。緑色の同化色素であるクロロフィルａは、クロリンクラスの天然物の１つの原型である。それまたはその誘導体は、クロロフィルｂによって汚染されていないあるスピルリナプラテンシス種から抽出され、したがって煩雑なクロマトグラフ分離を回避することができる。
【０００９】
３ナトリウム銅（ＩＩ）クロリンｅ６として知られている水溶性クロロフィル誘導体は、毒性、皮膚感作、または他の重大な副作用の証拠なしに、様々な人間の疾患の治療において用いられてきた。
【００１０】
クロリンｅ４は最近研究され、良好な光増感作用を示すことが明らかにされた。クロリンｅ４は、インドメタシンにより誘発されたラットにおける胃の病変と、ＴＡＡまたはＣＣｌ４により誘発されたマウスにおける急性肝臓損傷とに対して保護効果を有することが示された。したがって、クロリンｅ４が抗胃潰瘍および肝臓損傷保護のための有望な新薬候補であり得ることが示唆された。ＷＯ２００９／０４０４１１は、光線力学療法におけるクロリンｅ４亜鉛錯体の使用を示唆している。
【００１１】
【化１】
0006396919.tif 000002
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
しかし、より良好な光増感剤が引き続き必要とされている。高い一重項酸素量子収率を有する化合物と、好ましくは有機および水性溶媒において強い光増感力を有する化合物とが必要とされている。高い蛍光量子収率を有する化合物も必要とされている。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
発明の概要
本発明の第１の局面は、クロリンｅ４ナトリウムを提供する。好ましくは、クロリンｅ４ナトリウムは、クロリンｅ４およびナトリウムを１：２の比率で含む。好ましくは、クロリンｅ４ナトリウムは、以下の構造：
【００１４】
【化２】
0006396919.tif 000003
【００１５】
を有する。
好ましくは、クロリンｅ４ナトリウムは、以下の構造：
【００１６】
【化３】
0006396919.tif 000004
【００１７】
を有する。
当業者は、上記の図に示されるクロリン構造に対する負電荷は共役系上に非局在化されることを理解するであろう。
【００１８】
クロリンｅ４ナトリウムは、２つのキラル中心を有する。本発明のクロリンｅ４ナトリウムは、好ましくは、実質的に鏡像異性的に純粋である。これは、クロリンｅ４ナトリウムが１０％未満の他の立体異性体、好ましくは５％未満、好ましくは３％未満、好ましくは２％未満、好ましくは１％未満を含むことを意味する。
【００１９】
本発明の第２の局面は、クロリンｅ４をナトリウム化合物と反応させるステップを含む、クロリンｅ４ナトリウムを調製するプロセスを提供する。好ましくは、得られたクロリンｅ４ナトリウムは、クロリンｅ４およびナトリウムを１：２の比率で含む。好ましくは、得られたクロリンｅ４ナトリウムは、以下の構造：
【００２０】
【化４】
0006396919.tif 000005
【００２１】
を有する。
好ましくは、得られたクロリンｅ４ナトリウムは、以下の構造：
【００２２】
【化５】
0006396919.tif 000006
【００２３】
を有する。
当業者は、上記の図に示されるクロリン構造に対する負電荷は共役系上に非局在化されることを理解するであろう。
【００２４】
好ましくは、ナトリウム化合物は、水酸化ナトリウム、炭酸ナトリウム、カルボン酸ナトリウム塩（ステアリン酸ナトリウムまたは酢酸ナトリウムなど）、ハロゲン化ナトリウム（フッ化ナトリウムなど）、または水素化ナトリウムである。好ましくは、ナトリウム化合物は、水酸化ナトリウム、カルボン酸ナトリウム塩（ステアリン酸ナトリウムまたは酢酸ナトリウムなど）、ハロゲン化ナトリウム（フッ化ナトリウムなど）、または水素化ナトリウムである。好ましくは、ナトリウム化合物は水酸化ナトリウムまたは炭酸ナトリウムである。より好ましくは、ナトリウム化合物は水酸化ナトリウムである。
【００２５】
任意に、塩基の存在下でクロリンｅ４をナトリウム化合物と反応させる。好ましくは、塩基は、アミン塩基、好ましくはチアミンピロリン酸塩またはＤＭＡＰなどの芳香族アミン塩基である。使用される場合は、塩基は好ましくはチアミンピロリン酸塩である。
【００２６】
好ましくは、クロリンｅ４、ナトリウム化合物および任意の塩基は０．１５〜１：４５〜６０：０〜１２のモル比で用いられる。
【００２７】
好ましくは、溶媒の存在下でクロリンｅ４をナトリウム化合物と反応させる。好ましくは、溶媒は、アルコール（メタノール、エタノール、ｎ−プロパノールまたはイソプロパノールなど）、水、ＤＭＦ、クロロホルム、ＤＭＳＯ、トルエン、またはそれらの混合物から選択される。好ましくは、溶媒は、メタノール、エタノール、水、またはそれらの混合物から選択される。好ましくは、溶媒は、メタノール、水、またはそれらの混合物から選択される。好ましくは、溶媒は、メタノールと水との混合物である。
【００２８】
好ましくは、反応は６０℃以下の温度で行なわれる。好ましくは、反応は２５〜６０℃の範囲の温度で行なわれる。
【００２９】
好ましくは、反応は、１〜１２時間にわたって、好ましくは３〜８時間にわたって行なわれる。
【００３０】
得られたクロリンｅ４ナトリウムは、たとえば４５μｍミリポアフィルタによるフィルタリングによって精製され得る。代替的に、またはその上、得られたクロリンｅ４ナトリウムは、クロマトグラフィーによって、たとえばシリカゲルカラムでのフラッシュクロマトグラフィーによって精製され得る。クロリンｅ４ナトリウムは、凍結乾燥によって分離され得る。
【００３１】
本発明の第３の局面は、本発明の第２の局面に係るプロセスによって調製可能なクロリンｅ４ナトリウムを提供する。本発明の第２の局面に係るプロセスによって調製されると、本発明の第３の局面もクロリンｅ４ナトリウムを提供する。
【００３２】
本発明の第４の局面は、本発明の第１または第３の局面に係るクロリンｅ４ナトリウムと、薬学的に許容可能な担体または希釈剤とを含む医薬組成物を提供する。
【００３３】
好ましくは、本発明の第１または第３の局面に係るクロリンｅ４ナトリウムは、医薬における使用に好適である。
【００３４】
好ましくは、本発明の第１または第３の局面に係るクロリンｅ４ナトリウムおよび本発明の第４の局面に係る医薬組成物は、光線力学療法または細胞発光療法における使用に好適である。
【００３５】
好ましくは、本発明の第１または第３の局面に係るクロリンｅ４ナトリウムおよび本発明の第４の局面に係る医薬組成物は、アテローム性動脈硬化；多発性硬化症；糖尿病；糖尿病性網膜症；関節炎；関節リウマチ；菌、ウイルス、クラミジア、バクテリア、ナノ細菌、もしくは寄生虫による感染症；ＨＩＶ；エイズ；重症急性呼吸器症候群（ｓａｒｓ）ウィルス、アジア（鶏）インフルエンザウイルス、単純疱疹もしくは帯状疱疹による感染；肝炎；ウイルス性肝炎；心疾患；冠状動脈狭窄症；頚動脈狭窄；間欠性跛行；皮膚科的状態；座瘡；乾癬；良性もしくは悪性細胞の過剰増殖、または血管新生の領域を特徴とする疾病；良性もしくは悪性腫瘍；早期癌；子宮頚部異形成；軟部組織肉腫；生殖細胞腫瘍；網膜芽細胞腫；加齢黄斑変性症；ホジキンリンパ腫；または血液、前立腺、頚部、子宮、膣もしくは他の女性付属器、胸部、鼻咽頭、気管、喉頭、気管支、細気管支、肺、管腔器官、食道、胃、胆管、腸、結腸、結直腸、直腸、膀胱、尿管、腎臓、肝臓、胆嚢、脾臓、脳、リンパ系、もしくは硬骨の癌の治療に好適である。
【００３６】
好ましくは、本発明の第１または第３の局面に係るクロリンｅ４ナトリウムおよび本発明の第４の局面に係る医薬組成物は、良性もしくは悪性細胞の過剰増殖または血管新生の領域を特徴とする疾病の治療に好適である。
【００３７】
好ましくは、本発明の第１または第３の局面に係るクロリンｅ４ナトリウムおよび本発明の第４の局面に係る医薬組成物は、良性または悪性腫瘍の治療に好適である。
【００３８】
好ましくは、本発明の第１または第３の局面に係るクロリンｅ４ナトリウムおよび本発明の第４の局面に係る医薬組成物は、早期癌；子宮頚部異形成；軟部組織肉腫；生殖細胞腫瘍；網膜芽細胞腫；加齢黄斑変性症；リンパ腫；ホジキンリンパ腫；頭頸部癌；口もしくは口腔癌；または血液、前立腺、頚部、子宮、膣もしくは他の女性付属器、胸部、鼻咽頭、気管、喉頭、気管支、細気管支、肺、管腔器官、食道、胃、胆管、腸、結腸、結直腸、直腸、膀胱、尿管、腎臓、肝臓、胆嚢、脾臓、脳、リンパ系、硬骨、皮膚、もしくは膵臓の癌の治療に好適である。好ましくは、早期癌；子宮頚部異形成；軟部組織肉腫；生殖細胞腫瘍；網膜芽細胞腫；加齢黄斑変性症；ホジキンリンパ腫；または血液、前立腺、頚部、子宮、膣もしくは他の女性付属器、胸部、鼻咽頭、気管、喉頭、気管支、細気管支、肺、管腔器官、食道、胃、胆管、腸、結腸、結直腸、直腸、膀胱、尿管、腎臓、肝臓、胆嚢、脾臓、脳、リンパ系、もしくは硬骨の癌の治療に好適である。好ましくは、リンパ腫；ホジキンリンパ腫；口もしくは口腔癌；または前立腺、頚部、膣もしくは他の女性付属器、胸部、鼻咽頭、肺、食道、腎臓、肝臓、脳、リンパ系、硬骨、皮膚、もしくは膵臓の癌の治療に好適である。好ましくは、リンパ腫；口もしくは口腔癌；または前立腺、頚部、膣もしくは他の女性付属器、胸部、鼻咽頭、肺、食道、硬骨、もしくは皮膚の癌の治療に好適である。
【００３９】
好ましくは、本発明の第１または第３の局面に係るクロリンｅ４ナトリウムおよび本発明の第４の局面に係る医薬組成物は、光線力学診断における使用に好適である。
【００４０】
好ましくは、本発明の第１または第３の局面に係るクロリンｅ４ナトリウムおよび本発明の第４の局面に係る医薬組成物は、アテローム性動脈硬化；多発性硬化症；糖尿病；糖尿病性網膜症；関節炎；関節リウマチ；菌、ウイルス、クラミジア、バクテリア、ナノ細菌、もしくは寄生虫による感染症；ＨＩＶ；エイズ；ｓａｒｓウィルス、アジア（鶏）インフルエンザウイルス、単純疱疹もしくは帯状疱疹による感染；肝炎；ウイルス性肝炎；心疾患；冠状動脈狭窄症；頚動脈狭窄；間欠性跛行；皮膚科的状態；座瘡；乾癬；良性もしくは悪性細胞の過剰増殖、または血管新生の領域を特徴とする疾病；良性もしくは悪性腫瘍；早期癌；子宮頚部異形成；軟部組織肉腫；生殖細胞腫瘍；網膜芽細胞腫；加齢黄斑変性症；ホジキンリンパ腫；または血液、前立腺、頚部、子宮、膣もしくは他の女性付属器、胸部、鼻咽頭、気管、喉頭、気管支、細気管支、肺、管腔器官、食道、胃、胆管、腸、結腸、結直腸、直腸、膀胱、尿管、腎臓、肝臓、胆嚢、脾臓、脳、リンパ系、もしくは硬骨の癌の検出に好適である。
【００４１】
好ましくは、本発明の第１または第３の局面に係るクロリンｅ４ナトリウムおよび本発明の第４の局面に係る医薬組成物は、良性もしくは悪性細胞の過剰増殖によって、または血管新生によって影響される領域の検出に好適である。
【００４２】
好ましくは、本発明の第１または第３の局面に係るクロリンｅ４ナトリウムおよび本発明の第４の局面に係る医薬組成物は、良性または悪性腫瘍の検出に好適である。
【００４３】
好ましくは、本発明の第１または第３の局面に係るクロリンｅ４ナトリウムおよび本発明の第４の局面に係る医薬組成物は、早期癌；子宮頚部異形成；軟部組織肉腫；生殖細胞腫瘍；網膜芽細胞腫；加齢黄斑変性症；リンパ腫；ホジキンリンパ腫；頭頸部癌；口もしくは口腔癌；または血液、前立腺、頚部、子宮、膣もしくは他の女性付属器、胸部、鼻咽頭、気管、喉頭、気管支、細気管支、肺、管腔器官、食道、胃、胆管、腸、結腸、結直腸、直腸、膀胱、尿管、腎臓、肝臓、胆嚢、脾臓、脳、リンパ系、硬骨、皮膚、もしくは膵臓の癌の検出に好適である。好ましくは、早期癌；子宮頚部異形成；軟部組織肉腫；生殖細胞腫瘍；網膜芽細胞腫；加齢黄斑変性症；ホジキンリンパ腫；または血液、前立腺、頚部、子宮、膣もしくは他の女性付属器、胸部、鼻咽頭、気管、喉頭、気管支、細気管支、肺、管腔器官、食道、胃、胆管、腸、結腸、結直腸、直腸、膀胱、尿管、腎臓、肝臓、胆嚢、脾臓、脳、リンパ系、もしくは硬骨の癌の検出に好適である。好ましくは、リンパ腫；ホジキンリンパ腫；口もしくは口腔癌；または前立腺、頚部、膣もしくは他の女性付属器、胸部、鼻咽頭、肺、食道、腎臓、肝臓、脳、リンパ系、硬骨、皮膚、もしくは膵臓の癌の検出に好適である。好ましくは、リンパ腫；口もしくは口腔癌；または前立腺、頚部、膣もしくは他の女性付属器、胸部、鼻咽頭、肺、食道、硬骨、もしくは皮膚の癌の検出に好適である。
【００４４】
好ましくは、本発明の第１または第３の局面に係るクロリンｅ４ナトリウムおよび本発明の第４の局面に係る医薬組成物は、上掲の疾病の蛍光性またはリン光性の検出、好ましくは前述の疾病の蛍光性またはリン光性の検出および定量化に好適である。
【００４５】
好ましくは、本発明の第１または第３の局面に係るクロリンｅ４ナトリウムおよび本発明の第４の局面に係る医薬組成物は、照射もしくは音声の適用と同時かまたは適用前の投与、好ましくは照射の適用前の投与に適合される。
【００４６】
本発明の第１もしくは第３の局面に係るクロリンｅ４ナトリウムまたは本発明の第４の局面に係る医薬組成物が光線力学療法または細胞発光療法において使用するためのものである場合、照射の５〜１００時間前、好ましくは照射の６〜７２時間前、好ましくは照射の２４〜４８時間前の投与に適合されることが好ましい。
【００４７】
本発明の第１もしくは第３の局面に係るクロリンｅ４ナトリウムまたは本発明の第４の局面に係る医薬組成物が光線力学診断において使用するためのものである場合、照射の３〜６０時間前、好ましくは照射の８〜４０時間前の投与に適合されることが好ましい。
【００４８】
好ましくは、光線力学療法、細胞発光療法または光線力学診断において用いられる照射は、５００ｎｍ〜１０００ｎｍ、好ましくは６００ｎｍ〜７９０ｎｍの範囲の波長による電磁放射である。電磁放射は、約５〜６０分間、好ましくは約１５〜２０分間、約０．１〜５Ｗ、好ましくは約１Ｗで施され得る。本発明の一実施形態では、２つの電磁放射線源が用いられ（たとえばレーザ光およびＬＥＤ光）、一方の光源は６００ｎｍ〜６９０ｎｍの範囲、好ましくは約６６０ｎｍの波長を有し、他方の光源は７００ｎｍ〜７９０ｎｍの範囲、好ましくは約７６０ｎｍの波長を有する。本発明の別の実施形態では、２つの電磁放射線源が用いられ（たとえばレーザ光およびＬＥＤ光）、両方の光源は、６００ｎｍ〜６９０ｎｍの範囲、好ましくは約６６０ｎｍの波長による照射、および７００ｎｍ〜７９０ｎｍの範囲、好ましくは約７６０ｎｍの波長による照射を提供するように適合される。本発明の別の実施形態では、照射は、体腔内に挿入するための前立腺、肛門、膣、口、および鼻装置によって提供され得る。本発明の別の実施形態では、照射は、たとえば細い針を用いて肺、肝臓、リンパ節、または胸部に光ファイバレーザを挿入する侵入型光活性化によって提供され得る。本発明の別の実施形態では、照射は、たとえば肺、胃、結腸、膀胱、または頚部に光を送るための内視鏡光活性化によって提供され得る。
【００４９】
本発明の第４の局面に係る医薬組成物は、経口、非経口（静脈内、皮下、筋肉内、皮内、気管内、腹膜内、関節内、腹腔内、頭蓋内、および硬膜外を含む）、経皮的、気道（エーロゾル）、直腸、膣、または局所的（口内、粘膜および舌下を含む）投与に好適な形態であり得る。医薬組成物は、浣腸による投与、または腫瘍への注射による投与に好適な形態であり得る。好ましくは、医薬組成物は、経口、非経口、または気道投与に好適な形態、好ましくは経口または非経口投与に好適な形態、好ましくは経口投与に好適な形態である。
【００５０】
好ましい一実施形態では、医薬組成物は、経口投与に好適な形態である。好ましくは、医薬組成物は、タブレット、カプセル、固いもしくは柔らかいゼラチンカプセル、カプレット、トローチもしくはロゼンジの形態で、粉末もしくは粒剤として、または水溶液、懸濁液もしくは分散液として提供される。より好ましくは、医薬組成物は、経口投与のための水溶液、懸濁液もしくは分散液の形態で、または代替的に、投与前に水と混合させて経口投与のための水溶液、懸濁液もしくは分散液を提供することができるフリーズドライパウダーの形態で提供される。医薬組成物は、クロリンｅ４ナトリウムを０．０１〜１０ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは０．１〜５ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは約３ｍｇ／ｋｇ／日を提供するのに好適な形態であることが好ましい。
【００５１】
別の好ましい実施形態では、医薬組成物は、非経口投与に好適な形態である。好ましくは、医薬組成物は、静脈内投与に好適な形態である。好ましくは、医薬組成物は、非経口投与のための水溶液の形態で、または代替的に、投与前に水と混合させて非経口投与のための水溶液を提供することができるフリーズドライパウダーの形態で提供される。好ましくは、医薬組成物は、６〜８．５のｐＨを有する水溶液または懸濁液である。
【００５２】
別の好ましい実施形態では、医薬組成物は、気道投与に好適な形態である。好ましくは、医薬組成物は、気道投与のための水溶液、懸濁液もしくは分散液の形態で、または代替的に、投与前に水と混合させて気道投与のための水溶液、懸濁液もしくは分散液を提供することができるフリーズドライパウダーの形態で提供される。医薬組成物は、クロリンｅ４ナトリウムを０．０１〜１０ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは０．１〜５ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは約３ｍｇ／ｋｇ／日を提供するのに好適な形態であることが好ましい。
【００５３】
本発明の第５の局面は、アテローム性動脈硬化；多発性硬化症；糖尿病；糖尿病性網膜症；関節炎；関節リウマチ；菌、ウイルス、クラミジア、バクテリア、ナノ細菌、もしくは寄生虫による感染症；ＨＩＶ；エイズ；ｓａｒｓウィルス、アジア（鶏）インフルエンザウイルス、単純疱疹もしくは帯状疱疹による感染；肝炎；ウイルス性肝炎；心疾患；冠状動脈狭窄症；頚動脈狭窄；間欠性跛行；皮膚科的状態；座瘡；乾癬；良性もしくは悪性細胞の過剰増殖、または血管新生の領域を特徴とする疾病；良性もしくは悪性腫瘍；早期癌；子宮頚部異形成；軟部組織肉腫；生殖細胞腫瘍；網膜芽細胞腫；加齢黄斑変性症；ホジキンリンパ腫；または血液、前立腺、頚部、子宮、膣もしくは他の女性付属器、胸部、鼻咽頭、気管、喉頭、気管支、細気管支、肺、管腔器官、食道、胃、胆管、腸、結腸、結直腸、直腸、膀胱、尿管、腎臓、肝臓、胆嚢、脾臓、脳、リンパ系、もしくは硬骨の癌の治療のための薬品の製造における本発明の第１または第３の局面に係るクロリンｅ４ナトリウムの使用を提供する。
【００５４】
本発明の第５の局面は、光線力学療法または細胞発光療法において使用するための光線療法剤の製造における本発明の第１または第３の局面に係るクロリンｅ４ナトリウムの使用も提供する。好ましくは、光線療法剤は、アテローム性動脈硬化；多発性硬化症；糖尿病；糖尿病性網膜症；関節炎；関節リウマチ；菌、ウイルス、クラミジア、バクテリア、ナノ細菌、もしくは寄生虫による感染症；ＨＩＶ；エイズ；ｓａｒｓウィルス、アジア（鶏）インフルエンザウイルス、単純疱疹もしくは帯状疱疹による感染；肝炎；ウイルス性肝炎；心疾患；冠状動脈狭窄症；頚動脈狭窄；間欠性跛行；皮膚科的状態；座瘡；乾癬；良性もしくは悪性細胞の過剰増殖、または血管新生の領域を特徴とする疾病；良性もしくは悪性腫瘍；早期癌；子宮頚部異形成；軟部組織肉腫；生殖細胞腫瘍；網膜芽細胞腫；加齢黄斑変性症；ホジキンリンパ腫；または血液、前立腺、頚部、子宮、膣もしくは他の女性付属器、胸部、鼻咽頭、気管、喉頭、気管支、細気管支、肺、管腔器官、食道、胃、胆管、腸、結腸、結直腸、直腸、膀胱、尿管、腎臓、肝臓、胆嚢、脾臓、脳、リンパ系、もしくは硬骨の癌の治療に好適である。
【００５５】
好ましくは、本発明の第５の局面の薬品または光線療法剤は、良性もしくは悪性細胞の過剰増殖または血管新生の領域を特徴とする疾病の治療に好適である。
【００５６】
好ましくは、本発明の第５の局面の薬品または光線療法剤は、良性または悪性腫瘍の治療に好適である。
【００５７】
好ましくは、本発明の第５の局面の薬品または光線療法剤は、早期癌；子宮頚部異形成；軟部組織肉腫；生殖細胞腫瘍；網膜芽細胞腫；加齢黄斑変性症；リンパ腫；ホジキンリンパ腫；頭頸部癌；口もしくは口腔癌；または血液、前立腺、頚部、子宮、膣もしくは他の女性付属器、胸部、鼻咽頭、気管、喉頭、気管支、細気管支、肺、管腔器官、食道、胃、胆管、腸、結腸、結直腸、直腸、膀胱、尿管、腎臓、肝臓、胆嚢、脾臓、脳、リンパ系、硬骨、皮膚、もしくは膵臓の癌の治療に好適である。好ましくは、早期癌；子宮頚部異形成；軟部組織肉腫；生殖細胞腫瘍；網膜芽細胞腫；加齢黄斑変性症；ホジキンリンパ腫；または血液、前立腺、頚部、子宮、膣もしくは他の女性付属器、胸部、鼻咽頭、気管、喉頭、気管支、細気管支、肺、管腔器官、食道、胃、胆管、腸、結腸、結直腸、直腸、膀胱、尿管、腎臓、肝臓、胆嚢、脾臓、脳、リンパ系、もしくは硬骨の癌の治療に好適である。好ましくは、リンパ腫；ホジキンリンパ腫；口もしくは口腔癌；または前立腺、頚部、膣もしくは他の女性付属器、胸部、鼻咽頭、肺、食道、腎臓、肝臓、脳、リンパ系、硬骨、皮膚、もしくは膵臓の癌の治療に好適である。好ましくは、リンパ腫；口もしくは口腔癌；または前立腺、頚部、膣もしくは他の女性付属器、胸部、鼻咽頭、肺、食道、硬骨、もしくは皮膚の癌の治療に好適である。
【００５８】
本発明の第５の局面は、光線力学診断において使用するための光線診断剤の製造における本発明の第１または第３の局面に係るクロリンｅ４ナトリウムの使用も提供する。
【００５９】
好ましくは、本発明の第５の局面の光線診断剤は、アテローム性動脈硬化；多発性硬化症；糖尿病；糖尿病性網膜症；関節炎；関節リウマチ；菌、ウイルス、クラミジア、バクテリア、ナノ細菌、もしくは寄生虫による感染症；ＨＩＶ；エイズ；ｓａｒｓウィルス、アジア（鶏）インフルエンザウイルス、単純疱疹もしくは帯状疱疹による感染；肝炎；ウイルス性肝炎；心疾患；冠状動脈狭窄症；頚動脈狭窄；間欠性跛行；皮膚科的状態；座瘡；乾癬；良性もしくは悪性細胞の過剰増殖、または血管新生の領域を特徴とする疾病；良性もしくは悪性腫瘍；早期癌；子宮頚部異形成；軟部組織肉腫；生殖細胞腫瘍；網膜芽細胞腫；加齢黄斑変性症；ホジキンリンパ腫；または血液、前立腺、頚部、子宮、膣もしくは他の女性付属器、胸部、鼻咽頭、気管、喉頭、気管支、細気管支、肺、管腔器官、食道、胃、胆管、腸、結腸、結直腸、直腸、膀胱、尿管、腎臓、肝臓、胆嚢、脾臓、脳、リンパ系、もしくは硬骨の癌の検出に好適である。
【００６０】
好ましくは、本発明の第５の局面の光線診断剤は、良性もしくは悪性細胞の過剰増殖、または血管新生によって影響される領域の検出に好適である。
【００６１】
好ましくは、本発明の第５の局面の光線診断剤は、良性または悪性腫瘍の検出に好適である。
【００６２】
好ましくは、本発明の第５の局面の光線診断剤は、早期癌；子宮頚部異形成；軟部組織肉腫；生殖細胞腫瘍；網膜芽細胞腫；加齢黄斑変性症；リンパ腫；ホジキンリンパ腫；頭頸部癌；口もしくは口腔癌；または血液、前立腺、頚部、子宮、膣もしくは他の女性付属器、胸部、鼻咽頭、気管、喉頭、気管支、細気管支、肺、管腔器官、食道、胃、胆管、腸、結腸、結直腸、直腸、膀胱、尿管、腎臓、肝臓、胆嚢、脾臓、脳、リンパ系、硬骨、皮膚、もしくは膵臓の癌の検出に好適である。好ましくは、早期癌；子宮頚部異形成；軟部組織肉腫；生殖細胞腫瘍；網膜芽細胞腫；加齢黄斑変性症；ホジキンリンパ腫；または血液、前立腺、頚部、子宮、膣もしくは他の女性付属器、胸部、鼻咽頭、気管、喉頭、気管支、細気管支、肺、管腔器官、食道、胃、胆管、腸、結腸、結直腸、直腸、膀胱、尿管、腎臓、肝臓、胆嚢、脾臓、脳、リンパ系、もしくは硬骨の癌の検出に好適である。好ましくは、リンパ腫；ホジキンリンパ腫；口もしくは口腔癌；または前立腺、頚部、膣もしくは他の女性付属器、胸部、鼻咽頭、肺、食道、腎臓、肝臓、脳、リンパ系、硬骨、皮膚、もしくは膵臓の癌の検出に好適である。好ましくは、リンパ腫；口もしくは口腔癌；または前立腺、頚部、膣もしくは他の女性付属器、胸部、鼻咽頭、肺、食道、硬骨、もしくは皮膚の癌の検出に好適である。
【００６３】
好ましくは、本発明の第５の局面の光線診断剤は、前述の疾病の蛍光性またはリン光性の検出、好ましくは前述の疾病の蛍光性もしくはリン光性の検出および定量化に好適である。
【００６４】
好ましくは、薬品、光線療法剤または光線診断剤は、照射もしくは音声の適用と同時かまたは適用前の投与、好ましくは照射の適用前の投与に適合される。
【００６５】
薬品または光線療法剤が光線力学療法または細胞発光療法において使用するためのものである場合、照射の５〜１００時間前、好ましくは照射の６〜７２時間前、好ましくは照射の２４〜４８時間前の投与に適合されることが好ましい。
【００６６】
光線診断剤が光線力学診断において使用するためのものである場合、照射の３〜６０時間前、好ましくは照射の８〜４０時間前の投与に適合されることが好ましい。
【００６７】
光線力学療法、細胞発光療法または光線力学診断において用いられる照射は、５００ｎｍ〜１０００ｎｍ、好ましくは６００ｎｍ〜７９０ｎｍの範囲の波長による電磁放射であることが好ましい。電磁放射は、約５〜６０分間、好ましくは約１５〜２０分間、約０．１〜５Ｗ、好ましくは約１Ｗで施され得る。本発明の一実施形態では、２つの電磁放射線源が用いられ（たとえばレーザ光およびＬＥＤ光）、一方の光源は６００ｎｍ〜６９０ｎｍの範囲、好ましくは約６６０ｎｍの波長を有し、他方の光源は７００ｎｍ〜７９０ｎｍの範囲、好ましくは約７６０ｎｍの波長を有する。本発明の別の実施形態では、２つの電磁放射線源が用いられ（たとえばレーザ光およびＬＥＤ光）、両方の光源は、６００ｎｍ〜６９０ｎｍの範囲、好ましくは約６６０ｎｍの波長による照射、および７００ｎｍ〜７９０ｎｍの範囲、好ましくは約７６０ｎｍの波長による照射を提供するように適合される。本発明の別の実施形態では、照射は、体腔内に挿入するための前立腺、肛門、膣、口、および鼻装置によって提供され得る。本発明の別の実施形態では、照射は、たとえば細い針を用いて肺、肝臓、リンパ節、または胸部に光ファイバレーザを挿入する侵入型光活性化によって提供され得る。本発明の別の実施形態では、照射は、たとえば肺、胃、結腸、膀胱、または頚部に光を送るための内視鏡光活性化によって提供され得る。
【００６８】
本発明の第６の局面は、アテローム性動脈硬化；多発性硬化症；糖尿病；糖尿病性網膜症；関節炎；関節リウマチ；菌、ウイルス、クラミジア、バクテリア、ナノ細菌、もしくは寄生虫による感染症；ＨＩＶ；エイズ；ｓａｒｓウィルス、アジア（鶏）インフルエンザウイルス、単純疱疹もしくは帯状疱疹による感染；肝炎；ウイルス性肝炎；心疾患；冠状動脈狭窄症；頚動脈狭窄；間欠性跛行；皮膚科的状態；座瘡；乾癬；良性もしくは悪性細胞の過剰増殖、または血管新生の領域を特徴とする疾病；良性もしくは悪性腫瘍；早期癌；子宮頚部異形成；軟部組織肉腫；生殖細胞腫瘍；網膜芽細胞腫；加齢黄斑変性症；ホジキンリンパ腫；または血液、前立腺、頚部、子宮、膣もしくは他の女性付属器、胸部、鼻咽頭、気管、喉頭、気管支、細気管支、肺、管腔器官、食道、胃、胆管、腸、結腸、結直腸、直腸、膀胱、尿管、腎臓、肝臓、胆嚢、脾臓、脳、リンパ系、もしくは硬骨の癌を治療する方法を提供する。当該方法は、本発明の第１または第３の局面に係るクロリンｅ４ナトリウムの治療上有効な量を、それを必要とする人間または動物に投与することを含む。
【００６９】
本発明の第６の局面は、人間または動物の疾病の光線力学療法または細胞発光療法の方法を提供する。当該方法は、本発明の第１または第３の局面に係るクロリンｅ４ナトリウムの治療上有効な量を、それを必要とする人間または動物に投与することを含む。好ましくは、人間または動物の疾病はアテローム性動脈硬化；多発性硬化症；糖尿病；糖尿病性網膜症；関節炎；関節リウマチ；菌、ウイルス、クラミジア、バクテリア、ナノ細菌、もしくは寄生虫による感染症；ＨＩＶ；エイズ；ｓａｒｓウィルス、アジア（鶏）インフルエンザウイルス、単純疱疹もしくは帯状疱疹による感染；肝炎；ウイルス性肝炎；心疾患；冠状動脈狭窄症；頚動脈狭窄；間欠性跛行；皮膚科的状態；座瘡；乾癬；良性もしくは悪性細胞の過剰増殖、または血管新生の領域を特徴とする疾病；良性もしくは悪性腫瘍；早期癌；子宮頚部異形成；軟部組織肉腫；生殖細胞腫瘍；網膜芽細胞腫；加齢黄斑変性症；ホジキンリンパ腫；または血液、前立腺、頚部、子宮、膣もしくは他の女性付属器、胸部、鼻咽頭、気管、喉頭、気管支、細気管支、肺、管腔器官、食道、胃、胆管、腸、結腸、結直腸、直腸、膀胱、尿管、腎臓、肝臓、胆嚢、脾臓、脳、リンパ系、もしくは硬骨の癌である。
【００７０】
好ましくは、本発明の第６の局面の方法は、良性もしくは悪性細胞の過剰増殖または血管新生の領域を治療する方法である。
【００７１】
好ましくは、本発明の第６の局面の方法は、良性または悪性腫瘍を治療する方法である。
【００７２】
好ましくは、本発明の第６の局面の方法は、早期癌；子宮頚部異形成；軟部組織肉腫；生殖細胞腫瘍；網膜芽細胞腫；加齢黄斑変性症；リンパ腫；ホジキンリンパ腫；頭頸部癌；口もしくは口腔癌；または血液、前立腺、頚部、子宮、膣もしくは他の女性付属器、胸部、鼻咽頭、気管、喉頭、気管支、細気管支、肺、管腔器官、食道、胃、胆管、腸、結腸、結直腸、直腸、膀胱、尿管、腎臓、肝臓、胆嚢、脾臓、脳、リンパ系、硬骨、皮膚、もしくは膵臓の癌を治療する方法である。好ましくは、当該方法は、早期癌；子宮頚部異形成；軟部組織肉腫；生殖細胞腫瘍；網膜芽細胞腫；加齢黄斑変性症；ホジキンリンパ腫；または血液、前立腺、頚部、子宮、膣もしくは他の女性付属器、胸部、鼻咽頭、気管、喉頭、気管支、細気管支、肺、管腔器官、食道、胃、胆管、腸、結腸、結直腸、直腸、膀胱、尿管、腎臓、肝臓、胆嚢、脾臓、脳、リンパ系、もしくは硬骨の癌を治療する方法である。好ましくは、当該方法は、リンパ腫；ホジキンリンパ腫；口もしくは口腔癌；または前立腺、頚部、膣もしくは他の女性付属器、胸部、鼻咽頭、肺、食道、腎臓、肝臓、脳、リンパ系、硬骨、皮膚、もしくは膵臓の癌を治療する方法である。好ましくは、当該方法は、リンパ腫；口もしくは口腔癌；または前立腺、頚部、膣もしくは他の女性付属器、胸部、鼻咽頭、肺、食道、硬骨、もしくは皮膚の癌を治療する方法である。
【００７３】
本発明の第６の局面は、人間または動物の疾病の光線力学診断の方法も提供する。当該方法は、本発明の第１または第３の局面に係るクロリンｅ４ナトリウムの治療上有効な量を人間または動物に投与することを含む。好ましくは、人間または動物の疾病は、アテローム性動脈硬化；多発性硬化症；糖尿病；糖尿病性網膜症；関節炎；関節リウマチ；菌、ウイルス、クラミジア、バクテリア、ナノ細菌、もしくは寄生虫による感染症；ＨＩＶ；エイズ；ｓａｒｓウィルス、アジア（鶏）インフルエンザウイルス、単純疱疹もしくは帯状疱疹による感染；肝炎；ウイルス性肝炎；心疾患；冠状動脈狭窄症；頚動脈狭窄；間欠性跛行；皮膚科的状態；座瘡；乾癬；良性もしくは悪性細胞の過剰増殖、または血管新生の領域を特徴とする疾病；良性もしくは悪性腫瘍；早期癌；子宮頚部異形成；軟部組織肉腫；生殖細胞腫瘍；網膜芽細胞腫；加齢黄斑変性症；ホジキンリンパ腫；または血液、前立腺、頚部、子宮、膣もしくは他の女性付属器、胸部、鼻咽頭、気管、喉頭、気管支、細気管支、肺、管腔器官、食道、胃、胆管、腸、結腸、結直腸、直腸、膀胱、尿管、腎臓、肝臓、胆嚢、脾臓、脳、リンパ系、もしくは硬骨の癌である。好ましくは、人間または動物の疾病は、良性もしくは悪性細胞の過剰増殖、または血管新生の領域を特徴とする。好ましくは、人間または動物の疾病は、良性または悪性腫瘍である。好ましくは、人間または動物の疾病は、早期癌；子宮頚部異形成；軟部組織肉腫；生殖細胞腫瘍；網膜芽細胞腫；加齢黄斑変性症；リンパ腫；ホジキンリンパ腫；頭頸部癌；口もしくは口腔癌；または血液、前立腺、頚部、子宮、膣もしくは他の女性付属器、胸部、鼻咽頭、気管、喉頭、気管支、細気管支、肺、管腔器官、食道、胃、胆管、腸、結腸、結直腸、直腸、膀胱、尿管、腎臓、肝臓、胆嚢、脾臓、脳、リンパ系、硬骨、皮膚、もしくは膵臓の癌である。好ましくは、人間または動物の疾病は、早期癌；子宮頚部異形成；軟部組織肉腫；生殖細胞腫瘍；網膜芽細胞腫；加齢黄斑変性症；ホジキンリンパ腫；または血液、前立腺、頚部、子宮、膣もしくは他の女性付属器、胸部、鼻咽頭、気管、喉頭、気管支、細気管支、肺、管腔器官、食道、胃、胆管、腸、結腸、結直腸、直腸、膀胱、尿管、腎臓、肝臓、胆嚢、脾臓、脳、リンパ系、もしくは硬骨の癌である。好ましくは、人間または動物の疾病は、リンパ腫；ホジキンリンパ腫；口もしくは口腔癌；または前立腺、頚部、膣もしくは他の女性付属器、胸部、鼻咽頭、肺、食道、腎臓、肝臓、脳、リンパ系、硬骨、皮膚、もしくは膵臓の癌である。好ましくは、人間または動物の疾病は、リンパ腫；口もしくは口腔癌；または前立腺、頚部、膣もしくは他の女性付属器、胸部、鼻咽頭、肺、食道、硬骨、もしくは皮膚の癌である。好ましくは、光線力学診断の方法は、前述の疾病の蛍光性またはリン光性の検出、好ましくは前述の疾病の蛍光性またはリン光性の検出および定量化に好適である。
【００７４】
本発明の第６の局面の方法のうちのいずれかにおいて、人間または動物は、好ましくはさらに、クロリンｅ４ナトリウムの投与と同時かまたは投与後に照射または音声を受ける。好ましくは、人間または動物は、クロリンｅ４ナトリウムの投与後に照射を受ける。
【００７５】
方法が光線力学療法または細胞発光療法の方法である場合、人間または動物は、クロリンｅ４ナトリウムの投与の５〜１００時間後、好ましくは投与の６〜７２時間後、好ましくは投与の２４〜４８時間後に、照射を受けることが好ましい。
【００７６】
方法が光線力学診断の方法である場合、人間または動物は、クロリンｅ４ナトリウムの投与の３〜６０時間後、好ましくは投与の８〜４０時間後に照射を受けることが好ましい。
【００７７】
照射は、５００ｎｍ〜１０００ｎｍ、好ましくは６００ｎｍ〜７９０ｎｍの範囲の波長による電磁放射であることが好ましい。電磁放射は、約５〜６０分間、好ましくは約１５〜２０分間、約０．１〜５Ｗ、好ましくは約１Ｗで施され得る。本発明の一実施形態では、２つの電磁放射線源が用いられ（たとえばレーザ光およびＬＥＤ光）、一方の光源は６００ｎｍ〜６９０ｎｍの範囲、好ましくは約６６０ｎｍの波長を有し、他方の光源は７００ｎｍ〜７９０ｎｍの範囲、好ましくは約７６０ｎｍの波長を有する。本発明の別の実施形態では、２つの電磁放射線源が用いられ（たとえばレーザ光およびＬＥＤ光）、両方の光源は、６００ｎｍ〜６９０ｎｍの範囲、好ましくは約６６０ｎｍの波長による照射、および７００ｎｍ〜７９０ｎｍの範囲、好ましくは約７６０ｎｍの波長による照射を提供するように適合される。本発明の別の実施形態では、照射は、体腔内に挿入するための前立腺、肛門、膣、口、および鼻装置によって提供され得る。本発明の別の実施形態では、照射は、たとえば細い針を用いて肺、肝臓、リンパ節、または胸部に光ファイバレーザを挿入する侵入型光活性化によって提供され得る。本発明の別の実施形態では、照射は、たとえば肺、胃、結腸、膀胱、または頚部に光を送るための内視鏡光活性化によって提供され得る。
【００７８】
好ましくは、人間または動物は人間である。
【図面の簡単な説明】
【００７９】
【図１】典型的な光増感剤のための修正されたヤブロンスキー図を示し、関心対象の原則光物理プロセスを概説する図である。
【図２】ポルフィリン環の金属化および脱金属化を概略的に示す図である。
【図３】２つの一重項酸素（１Ｏ２）との１，３−ジフェニルイソベンゾフラン（ＤＰＩＢＦ）の反応を概略的に示す図である。
【図４】エタノール中のクロリンｅ４ナトリウム溶液（約１０μＭ）の吸収スペクトルを示す図である。
【図５】水中のクロリンｅ４ナトリウム溶液（約１０μＭ）の吸収スペクトルを示す図である。
【図６】０．２Ｍの洗浄性ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）を有する水中のクロリンｅ４ナトリウム溶液（約１０μＭ）の吸収スペクトルを示す図である。
【図７】励起波長が４０３ｎｍ、この波長における吸収度が０．１０、キュベット寸法が１ｃｍである、エタノール中のクロリンｅ４ナトリウム溶液（約１０μＭ）の蛍光スペクトルを示す図である。
【図８】励起波長が４０３ｎｍ、この波長における吸収度が０．１３、キュベット寸法が１ｃｍである、水中のクロリンｅ４ナトリウム溶液（約１０μＭ）の蛍光スペクトルを示す図である。
【図９】励起波長が４０３ｎｍ、この波長における吸収度が０．１３、キュベット寸法が１ｃｍである、０．２Ｍの洗浄性ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）を有する水中のクロリンｅ４ナトリウム溶液（約１０μＭ）の蛍光スペクトルを示す図である。
【図１０】蛍光が７１０ｎｍにおいて測定され、４０３ｎｍでの吸収度が１ｃｍで０．１５、光路長が０．５ｃｍである、エタノール中のクロリンｅ４ナトリウム溶液（約１０μＭ）の蛍光励起スペクトルを示す図である。
【図１１】赤色光（６６０ｎｍ）による照射前、および照射１４分後の、エタノール中のＤＰＩＢＦおよびクロリンｅ４ナトリウムの溶液の吸収スペクトルを示す図である。
【図１２】エタノール中のクロリンｅ４ナトリウムのパルスレーザ励起後の、キネティックトレース（１）と一重項酸素リン光のスペクトル（２）とを示す図である。
【図１３】水中のクロリンｅ４ナトリウムのパルスレーザ励起後のキネティックトレース（１）と、一重項酸素リン光のスペクトル（２）とを示す図である。
【図１４】０．２Ｍの洗浄性ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）を有する水中のクロリンｅ４ナトリウムのパルスレーザ励起後の一重項酸素リン光のキネティックトレースを示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００８０】
発明の詳細な説明
ポルフィリンまたはクロリン環の中央部への金属挿入は金属化として知られており、概略的な化学プロセスを図２に表す。ポルフィリンおよびクロリンは、多様な金属（Ｍ）との錯体を形成することができる。これらの金属錯体は、内部のチッ素原子を親電子試薬および強塩基から保護するだけでなく、マクロ環状体の反応性に明白な影響も有する。これらの錯体の共通の幾何構造は八面体であり、金属イオンがＮ４ポルフィリン面の中心を占め、金属配位子がトランス位置にある（図２）。
【００８１】
クロリンｅ４は９つの側鎖を有し、そのうち２つはカルボン酸部分を担持する。これらのカルボン酸部分は、多様な金属（Ｍ）と塩を形成することができる。
【実施例】
【００８２】
実験内容
実施例−概略的な合成内容
方法１：０．１５〜１ｍｍｏｌのクロリンｅ４を６０〜１００ｍｌのメタノールに溶解させる。この溶液に、１５〜２０ｍｌの水酸化ナトリウム（３Ｍ水溶液）を加える。約６時間後に合成が完了するまで混合物を撹拌する。次いで、混合物を４５μｍミリポアフィルタによってフィルタリングする。メタノール移動相によりフラッシュクロマトグラフィーによって生成物を精製する。次いで、溶液を蒸留し、凍結乾燥させる。本発明の好ましい実施形態では、２５〜６０℃の範囲の温度で反応が行なわれる。
【００８３】
方法２：０．１５〜１ｍｍｏｌのクロリンｅ４を６０〜１００ｍｌのメタノールに溶解させる。この溶液に、１５〜２０ｍｌの水酸化ナトリウム（３Ｍ水溶液）を加える。別個に、５〜１２ｍｍｏｌのチアミンピロリン酸塩を４０〜６０ｍｌの水に溶解させ、後者の溶液を先の溶液に加える。約６時間後に合成が完了するまで混合物を撹拌する。次いで、混合物を４５μｍミリポアフィルタによってフィルタリングする。メタノール移動相によりフラッシュクロマトグラフィーによって生成物を精製する。次いで、溶液を蒸留し、凍結乾燥させる。本発明の好ましい実施形態では、２５〜６０℃の範囲の温度で反応が行なわれる。
【００８４】
実施例−クロリンｅ４ナトリウムの合成
方法１：０．５ｍｍｏｌ（２７６ｍｇ）のクロリンｅ４を６０ｍｌのメタノールに溶解させ、４０℃で１０分間ゆっくり溶液を撹拌した。１５ｍｌの水酸化ナトリウム（３Ｍ水溶液）を加え、６０℃でさらに６時間撹拌を続けた。次いで、反応混合物を４５μｍミリポアフィルタによってフィルタリングした。メタノール移動相を用いて、乾燥シリカゲルカラムでのフラッシュクロマトグラフィーによって生成物を精製した。次いで、回転蒸発装置によって溶液の体積を減少させ、生成物を収率８５％で凍結乾燥によって乾燥粉末として分離した。
【００８５】
クロリンｅ４ナトリウム生成物の特徴は、１Ｈおよび１３Ｃ  ＮＭＲにあった。
１Ｈ  ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）（ｐｐｍ）：８．８２（１Ｈ）、８．６４（１Ｈ）、６．５２（１Ｈ）、６．３５（１Ｈ）、５．２５（１Ｈ）、５．１２（１Ｈ）、４．６８（２Ｈ）、４．０９（３Ｈ）、３．５２（３Ｈ）、２．８７（１Ｈ）、２．７１（２Ｈ）、２．５９（３Ｈ）、２．４４（２Ｈ）、２．０６（１Ｈ）、１．８２（３Ｈ）、０．９９（６Ｈ）。
１３Ｃ  ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）（ｐｐｍ）：１８５．７（ＣＯ２Ｈ）、１８０．８（ＣＯ２Ｈ）、１７１．６（Ｃｑｕａｔ＝）、１７０．７（Ｃｑｕａｔ＝）、１４８．０（Ｃｑｕａｔ＝）、１４４．７（Ｃｑｕａｔ＝）、１３９．０（Ｃｑｕａｔ＝）、１３７．５（Ｃｑｕａｔ＝）、１３６．５（Ｃｑｕａｔ＝）、１３６．２（Ｃｑｕａｔ＝）、１３５．３（Ｃｑｕａｔ＝）、１３３．９（Ｃｑｕａｔ＝）、１３３．６（Ｃｑｕａｔ＝）、１３２．５（Ｃｑｕａｔ＝）、１３１．２（Ｃｑｕａｔ＝）、１２９．５（ＣＨ＝）、１２１．６（ＣＨ２＝）、１２１．４（Ｃｑｕａｔ＝）、１０９．４（Ｃｑｕａｔ＝）、１０１．２（ＣＨ＝）、９７．４（ＣＨ＝）、９６．２（ＣＨ＝）、５６．８（ＣＨ）、５０．９（ＣＨ）、３８．０（ＣＨ２）、３４．５（ＣＨ２）、２６．１（Ｍｅ）、２１．７（Ｍｅ）、２０．１（ＣＨ２）、１８．７（Ｍｅ）、１４．０（Ｍｅ）、１２．６（Ｍｅ）、１０．７（Ｍｅ）。
【００８６】
方法２：０．５ｍｍｏｌ（２７６ｍｇ）のクロリンｅ４を６０ｍｌのメタノールに溶解させ、４０℃で１０分間ゆっくり溶液を撹拌した。１５ｍｌの水酸化ナトリウム（３Ｍ水溶液）を加え、さらに２０分間撹拌を続けた。別個に、６ｍｍｏｌ（３７８ｍｇ）のチアミンピロリン酸塩を５０ｍｌの水に溶解させ、６０℃で溶液を撹拌した。チアミンピロリン酸塩溶液をクロリンｅ４溶液に加え、６０℃で６時間ゆっくり反応混合物を撹拌した。次いで、反応混合物を４５μｍミリポアフィルタによってフィルタリングした。メタノール移動相を用いて、乾燥シリカゲルカラムでのフラッシュクロマトグラフィーによって生成物を精製した。次いで、回転蒸発装置によって溶液の体積を減少させ、生成物を収率８５％で凍結乾燥によって乾燥粉末として分離した。
【００８７】
クロリンｅ４ナトリウム生成物の特徴は１Ｈおよび１３Ｃ  ＮＭＲにあった。方法１と同じ結果が得られた。
【００８８】
実施例−ｉｎ  ｖｉｔｒｏ試験
以下の実験を行い、３つの系−エタノール、純水、および洗浄性硫酸ドデシルナトリウム（ＳＤＳ）を含有する水中の溶液におけるクロリンｅ４ナトリウムの吸収および蛍光スペクトル、クロリンｅ４ナトリウム蛍光の量子収率、ならびにクロリンｅ４ナトリウムの光増感力を検討した。
【００８９】
吸収度および蛍光の測定
コンピュータ化分光光度計Ｈｉｔａｃｈｉ３４００（日本）およびＳＦ−２０００（ロシア）を用いて吸収スペクトルを記録した。コンピュータ化分光蛍光計Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ  ＭＰＦ−４４Ｂで蛍光スペクトルを測定した。吸収および蛍光の測定には、１０ｍｍ幅の石英キュベットを用いた。励起ビームに対して直角に蛍光を検出した。モノクロメーターのスペクトル帯域幅は３ｎｍであった。色素分子による蛍光再吸収を回避するため、１ｃｍのキュベットにおいて０．２ｃｍを超えない４０３ｎｍの吸収度で希釈クロリンｅ４ナトリウム溶液を用いた。エタノール中のＴＰＰＳ（ｍ−テトラキス（ｐ−スルホナトフェニル）ポルフィン）溶液を基準として用いて、蛍光量子収率（ФＦ）を求めた。文献によれば、空気飽和水およびエタノール中のＴＰＰＳの最も可能性の高い蛍光量子収率は０．０８に等しい（K.KalyanasundaramおよびM.Neumann-Spallart, Photophysical and redox properties of water soluble porphyrins in aqueous media, J. Phys. Chem., 1982, 86, 5163-5169; ならびにA.T. Gradyushko, A.N. Sevchenko, K.N. SolovyovおよびM.P. Tsvirko, Energetics of photophysical processes in chlorophyll-like molecules, Photochem. Photobiol., 1970, 11, 387-400）。ソーレー帯の最大値：エタノール中のＴＰＰＳについては４１５ｎｍ、水中のＴＰＰＳについては４０３ｎｍ、水およびエタノール中のクロリンｅ４ナトリウムについては４１３ｎｍに対応する単色光によって、試料の蛍光を励起した。モノクロメーター帯域幅は３ｎｍであった。以下の式を用いて、蛍光量子収率（ФＦ）を算出した。
【００９０】
【数１】
0006396919.tif 000007
【００９１】
ここで、ФＴＰＰはＴＰＰＳ蛍光の量子収率であり、Ｓｃはクロリンｅ４ナトリウム試料の蛍光スペクトル下の２乗（the square under the fluorescence spectrum of the chlorin e4 sample）であり、ＳＴＰＰはＴＰＰＳの蛍光スペクトル下の２乗（the square under the fluorescence spectrum of the TPPS）であり、ＤｃおよびＤＴＰＰは励起波長におけるクロリンｅ４ナトリウムおよびＴＰＰＳそれぞれの吸収度（光学濃度）である。励起波長における励起光の強度の相対単位を用いて、得られた結果を照合した。ソーラボ社（ドイツ国カールスフェルト）のオプティカルパワーメータシステムの目盛り付きシリコン検出器を用いて、単色光の強度を測定した。
【００９２】
一重項酸素リン光の検出
一重項から三重項状態への酸素分子の遷移に対応する１２７０ｎｍにおける赤外線リン光の測定を用いて、一重項酸素リン光を検出した。A.A.Krasnovsky Jr., Photodynamic action and singlet oxygen, Biofizika, 2004, 49, 305-321;およびA.A. Krasnovsky Jr., Singlet oxygen and primary mechanisms of photodynamic therapy and photodynamic diseases, In: Photodynamic therapy at the cellular level, ed. A.B. Uzdensky, Research Singpost, Kerala, India, 2007, 17-62に記載されているレーザリン光分光計によって室温でリン光を記録した。励起には、銅蒸気レーザ（トロイツク、ロシア科学アカデミー物理学研究所）からのナノ秒パルスの５１１ｎｍ照射を採用した。レーザ照射は、レーザ光を透過させ、レーザ管の加熱によって生じたＩＲレーザ照射を遮断する緑色光フィルタＳＺＳ−２２（４ｍｍ）を追加的に通過した。パルス幅は２０ｎｓであり、パルスエネルギは１８〜４０μＪであり、パルス繰り返し率は１２ｋＨｚであった。１ｃｍの矩形の石英キュベットの表面上でレーザ光を平行化した。細胞の表面上の照光されたスポットの直径は５ｍｍであった。キネティック測定には、モノクロメーターではなく別の分光計を用いた。この場合、励起ビームに対する直角に由来するリン光を、１２７０ｎｍにおける透過極大でカットオフＩＲ色フィルタおよび干渉フィルタを介して空冷式Ｓ−１光電子増倍管（ＦＥＵ−１１２）の光陰極に集中させた。ＭＳ−８０ハイスループットグリッドモノクロメーターを用いて、リン光スペクトルを測定した。この場合、このモノクロメーターの入口スリットにリン光を集中させた。モノクロメーターの帯域幅は２０ｎｍのスペクトル間隔に対応するものであった。空冷式Ｓ−１光電子増倍管（ＦＥＵ−８３）の光陰極に単色光を集中させた。時間相関単一光子計数法を用いて光電子増倍管信号を記録し、多くのレーザパルスにわたって平均した。大部分の実験では、オン時の１チャネルは８１ｎｓと等しかった。色素漂白が１０％に達すると、溶液を新鮮なものに取替え、測定を継続した。クロリンｅ４ナトリウムはかなり急速に漂白されるため、各６０〜１８０ｓの照射後に溶液を交換した。１０〜２０分の信号蓄積後に合理的なリン光曲線が得られ、したがって試料を何度も交換した。先に述べたように（D.A. Butorina, A.A. Krasnovsky Jr.およびA.V. Priezzev, Investigation of the kinetic parameters of singlet molecular oxygen in aqueous porphyrin solutions, Influence of detergents and the quencher sodium azide, Biofizika, 2003, 48, 189-196;A.A. Krasnovsky Jr., Luminescence and photochemical studies of singlet oxygen photonics, J. Photochem. Photobiol. A: Chem., 2008, 196, 210-218;ならびにN. Kuznetsova, D. Makarov, O. Yuzhakova, A. Strizhakov, Y. Roumbal, L. Ulanova, A. KrasnovskyおよびO. Kaliya, Photophysical properties and photodynamic activity of octacationic oxotitanium(IV) phthalocyanines, Photochemical Photobiological Sciences, 2009, 8, 1724-1733）、コンピュータ解析には以下の２指数方程式を用いた。
【００９３】
【数２】
0006396919.tif 000008
【００９４】
ここで、ｋｄｅｃａｙおよびｋｒｉｓｅはレーザパルス後のリン光曲線の減衰および立上がり段階の速度定数であり、ｎは光電子増倍管のオフノイズであり、Ｉ０はゼロ時間リン光強度であり、Ｉ（ｔ）は時間ｔにおけるリン光強度である。レーザパルスの直後に観察された、石英キュベットにおける色素の発光の寄与率を低下させるために、エタノール中ではレーザパルスの４００ｎｓ後、水中では１μｓ後から読取りを行なった。さらに、完全に一重項酸素をクエンチする高濃度のアジ化ナトリウムを含有する対照クロリンｅ４ナトリウム溶液からもリン光およびキネティックトレースを測定した。この手順により、アジ化ナトリウムによってあまり容易にクエンチされないクロリンｅ４ナトリウム溶液における遅延発光の、強く急速に減衰する成分が明らかになった。対照溶液から得られた発光曲線を指数関数によって近似し、アジ化ナトリウムを加えていないクロリンｅ４ナトリウム溶液について得られた実験用キネティックトレースから減算した。
【００９５】
測定にはＯｒｉｇｉｎ６．０ソフトウェアを用いた。このソフトウェアは、最小自乗近似法を用いて作動する。Ｏｒｉｇｉｎにより、最小係数ｘ２に対応するそれらの値を得るために、パラメータＩ０、ｋｄｅｃａｙ、ｋｒｉｓｅ、およびｎの変動が可能となった。クロリンｅ４ナトリウム溶液では、測定により常にｋｄｅｃａｙが生じた。これは同じ溶媒におけるＴＰＰＳの対照溶液よりもやや短かった。この検討で用いられる溶媒では、ｋｄｅｃａｙに関わる一重項酸素の寿命は、色素とは無関係である。したがって、この結果は、「アジ化物制御」によって、全体的な減衰曲線から急速に減衰する成分を完全に除去することが可能とならないことを示す。この成分に関わる発光がアジ化ナトリウムによって部分的にクエンチされることは可能である。この効果によって引起される誤差をなくすために、クロリンｅ４ナトリウム溶液におけるリン光曲線の最終測定には、ＴＰＰＳ溶液において得られた固定されたｋｄｅｃａｙを用いた。この場合、Ｏｒｉｇｉｎが示すように、相関係数Ｒ２は９８％以上であり、ｋｒｉｓｅ判定の誤差はすべての溶媒において±５％未満であった。クロリンｅ４ナトリウム溶液と、同じ溶媒におけるＴＰＰＳの対照溶液とにおける全体的な一重項酸素リン光強度の比較から、クロリンｅ４ナトリウムによる一重項酸素光生成の量子収率（ФΔ）を求めた。文献によれば、ＴＰＰＳによる一重項酸素光生成の量子収率の最確値は、水中では０．６であり、エタノールおよび洗浄剤を含有する水中では０．７である（F. Wilkinson, W.P. HelmanおよびA.B. Ross, Quantum yields of the photosensitized formation of the lowest electronically excited singlet states of molecular oxygen, J. Phys. Chem. Ref. Data, 1993, 22(2), 113-262;ならびにC. Tanielian, C. WolfおよびM. Esch, Singlet oxygen production in water: Aggregation and charge transfer effects, J. Phys. Chem., 1996, 100, 6555-6560）。リン光キネティックトレースを積分することによって、全体的なリン光強度を算出した。５１１ｎｍでの色素溶液の吸収度は、５ｍｍのキュベットでは通常約０．１〜０．２であった。これは、約２０μＭに等しい色素濃度に対応するものであった。
【００９６】
化学的複合体を用いた一重項酸素の検出
一重項酸素検出の第２の方法は、一重項酸素複合体、１，３−ジフェニルイソベンゾフラン（ＤＰＩＢＦ）（英国、アクロスオーガニック社）の光増感酸素化に基づくものであった。ＤＰＩＢＦは、２つの一重項酸素（１Ｏ２）（図３）に化学的に結合する。この方法を、エタノール中のクロリンｅ４ナトリウム溶液に適用した。ＤＰＩＢＦの主な吸収帯は４１４〜４１５ｎｍに位置する。この最大値におけるモル吸収係数εＤＰＩＢＦは２３５００Ｍ−１ｃｍ−１であることが知られている。分光蛍光計Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ  ＭＰＦ−４４Ｂの励起システムを用いて、キセノンランプからの単色光によって試験済み溶液を照射した。モノクロメーター帯域幅のスペクトル幅は５ｎｍに対応する。目盛り付き検出器ＴｈｏｒＬａｂｓ  ＰＭ−１００（ドイツ）を用いて放射力を測定した。一重項酸素量子収率（ФΔ）を以下の式に従って算出した。
【００９７】
【数３】
0006396919.tif 000009
【００９８】
ここで、ΔＤＤＰＩＢＦは、照射時間中の４１４ｎｍにおけるＤＰＩＢＦの光学濃度の減少であり、εＤＰＩＢＦは４１４ｎｍでのＤＰＩＢＦのモル吸収係数であり、ｌは１ｃｍに等しい光路長であり、Ｖは試験済み溶液（通常１．２〜１．５ｍｌ）の体積であり、ＮＡはアボガドロ定数であり、Ｉｉｒｒは、キセノンランプおよび励起モノクロメーターを含み、帯域幅が５ｎｍの波長幅に対応するＰｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ分光蛍光計の励起システムからの単色光の放射力（Ｗ単位）であり、ｈνはＪ単位の１つの光子のエネルギであり、Ｊ（１−Ｔ）は試験済み溶液の吸収係数であり、ｔｉｒｒは秒単位の照射時間であり、ηＰは、検討した溶液中のＤＰＩＢＦによって捕獲される１Ｏ２分子の留分である。化学的複合体による一重項酸素消費についての既知の反応速度式と、１０９Ｍ−１ｓ−１に等しいＤＰＩＢＦとの一重項酸素反応の速度定数とを用いて、このパラメータを算出した（A.A. Krasnovsky Jr., Y.V. RоumbalおよびA.A. Strizhakov, Rates of 1O2 production upon direct excitation of molecular oxygen by 1270 nm laser radiation in air-saturated alcohols and micellar aqueous dispersions, Chem. Phys. Lett., 2008, 458, 195-199、およびその中の引例参照）。
【００９９】
結果
エタノール、純水、および洗浄性硫酸ドデシルナトリウム（ＳＤＳ）を含有する水におけるクロリンｅ４ナトリウムの吸収スペクトルを図４〜図６に示す。主な吸収帯を表１に挙げる。４０３ｎｍにおけるソーレー帯および６５４〜６６２ｎｍにおける赤色帯が最も強い。吸収スペクトルの解析は、クロリンｅ４ナトリウムはすべての溶媒において概ねモノマーであったことを示唆している。洗浄剤を有さない水では、赤色吸収極大が短波長領域（６６２〜６５４ｎｍ）にわずかにシフトし、約６６５〜６７０ｎｍにおいて弱いショルダーが見られた。さらに、緑色領域において観察された吸収度は、エタノールおよび洗浄剤含有溶液と比較して上昇した。これらのデータは、洗浄剤を有さない水中の溶液は、洗浄剤がある状態では分解するクロリンｅ４ナトリウムの凝集した（二量体およびオリゴマー）分子を含有し得ることを示す。
【０１００】
【表１】
0006396919.tif 000010
【０１０１】
蛍光測定はこの想定（図７〜図９）を支持した。蛍光スペクトルは、エタノールおよびＳＤＳを含有する水においてかなり同様であった。図１０は、エタノールにおけるクロリンｅ４ナトリウム蛍光の励起スペクトルを示す。この色素の吸収スペクトルと実際に一致することが分かる。この観察は、蛍光がクロリンｅ４ナトリウムに属することを示す。ＳＤＳのない水では、蛍光最大値はより短い波長にシフトし、約７１０ｎｍにおけるショルダーはエタノールよりも著しく強くなった。蛍光量子収率は、エタノールにおいて最高であり、ＳＤＳを含有する水ではやや小さく、ＳＤＳのない水では最小であることが分かった。これらのデータは、クロリンｅ４ナトリウムの凝集が水中で生じることを示す。しかし、ＳＤＳのない水におけるクロリンｅ４ナトリウム蛍光量子収率は依然として高く、かなりの量のモノマーのクロリンｅ４ナトリウム分子が洗浄剤のない水溶液中に存在することを示している。これらの実験は、クロリンｅ４ナトリウムが高蛍光顔料であって、大量の光子を放射することを示している。したがって、クロリンｅ４ナトリウムは、光線力学診断のための蛍光顔料として効率的に用いることができる。
【０１０２】
化学的一重項酸素複合体ＤＰＩＢＦおよび１２７０ｎｍにおける一重項酸素のクロリンｅ４ナトリウム光増感リン光の測定の両方を用いて、エタノール溶液における一重項酸素生成を検討した。図１１は、ＤＰＩＢＦによる実験を例示する。ＤＰＩＢＦの吸収極大は４２０ｎｍにある。ＤＰＩＢＦではなくクロリンｅ４ナトリウムによって吸収される赤色光（６６０ｎｍ）による、クロリンｅ４ナトリウムおよびＤＰＩＢＦの両方を含有するエタノール溶液の照射によって、４２０ｎｍにおいて最大のＤＰＩＢＦの漂白が生じたことが図１１から分かる。この効果は、クロリンｅ４ナトリウムの照射によって形成される一重項酸素とのＤＰＩＢＦの反応に起因する。この実験から得られた一重項酸素生成の量子収率は、エタノール中では０．６８±０．０５であることが示された。レーザパルス後の一重項酸素のクロリンｅ４ナトリウム光増感リン光のキネティックトレースを図１２〜図１４に示す。表２は、リン光曲線のキネティックパラメータを要約する。立上り時間は、三重項色素分子による一重項酸素生成の速度を反映する。それは空気飽和色素溶液中の色素三重項状態の寿命に対応する。エタノールでは、立上り時間は３００ｎｓに等しかった。減衰時間は、エタノール中の一重項酸素寿命に相当する（１３．５μｓ）。これらのキネティック曲線を用いて求められたエタノール中の一重項酸素量子収率は、０．６３±０．０５に等しかった。これは、ＤＰＩＢＦを用いて得られたものに近い。したがって、両方の方法は同様の結果をもたらした。表２は、クロリンｅ４ナトリウムはアルコールおよび水性系における一重項酸素形成の有力な光増感剤であるが、ＳＤＳのない水では光増感作用がエタノールよりも低かったことを示す。この効果は、光増感作用の損失に至ることが知られている色素分子の部分的な凝集によるものであった可能性がある。これらの実験は、クロリンｅ４ナトリウムが有機溶媒（アルコール）および水性溶媒において強い光増感力を有し、一重項酸素量子収率が高いことを示す。したがって、光線力学療法においてクロリンｅ４ナトリウムを効率的に用いることができる。
【０１０３】
【表２】
0006396919.tif 000011
【０１０４】
結論
クロリンｅ４ナトリウムは、有機溶媒（アルコール）および水性溶媒において、強い蛍光および強い光増感力を示す。水中では、色素分子の凝集によってクロリンｅ４ナトリウム光増感作用が減少するものの、依然として高い。洗浄剤を追加すると、分解と、蛍光および光増感力双方の増大とが生じる。これは、クロリンｅ４ナトリウムが親水性溶媒および水性溶媒の両方において活性があることを示す。したがって、この色素は光力学的薬剤における用途に有望である。
【０１０５】
実施例−ｉｎ  ｖｉｔｒｏ試験
以下の癌患者は、クロリンｅ４ナトリウムによる治療に成功した。大部分の患者は、以前に従来の治療法を用いたが不成功であった後期転移癌患者であった。大部分の患者は、クロリンｅ４ナトリウムによる治療以前は健康不良であった。
【０１０６】
例１
右側腋窩における浸潤性乳管癌およびリンパ節転移の７０歳の女性患者の治療に成功した。治療前は、右側胸部に大きな癌塊、右側腋窩に小さな癌塊が観察された。治療は３つの過程からなるものであった。各過程ごとに、６２．５〜１８７．５ｍｇのクロリンｅ４ナトリウムを８日間にわたって５回経口投与した。クロリンｅ４ナトリウムの各経口服用の２４〜４８時間後に、６６０ｎｍおよび７６０ｎｍの波長を有するレーザおよびＬＥＤ光によって患者を治療した。
【０１０７】
治療後、ドップラー超音波解析により、胸部の大きな癌塊が血管新生をほとんど示さず、血管がそれに繋がっていないことが示された。癌塊の寸法は縮小していなかったが、塊の外形は固体であり滑らかであった。これは、不活性であり成長していない腫瘍を示す。小さい方のリンパ節癌塊も血管新生をほとんど示さず、寸法が１．９ｃｍから１ｃｍに縮小していた。
【０１０８】
その後、さらなる２つの過程によって患者を治療した。再び、各過程ごとに、６２．５〜１８７．５ｍｇのクロリンｅ４ナトリウムを８日間にわたって５回経口投与した。クロリンｅ４ナトリウムの各経口服用の２４〜４８時間後に、６６０ｎｍおよび７６０ｎｍの波長を有するレーザおよびＬＥＤ光によって患者を治療した。加えて、細い針を用いる侵入型光線療法を、６６０ｎｍおよび７６０ｎｍの波長を有する光ファイバレーザによって胸部に対して行なった。
【０１０９】
４回目の治療過程後に得られたドップラー超音波解析により、胸部の大きな癌塊の寸法が約２５％縮小したことが示された。５回目かつ最後の治療過程後に得られたＰＥＴ／ＣＴスキャンによると、胸部およびリンパ節における完全寛解が示された。各治療過程後に、胸部腫瘍部位において炎症反応が観察された。これは、免疫系が腫瘍を攻撃するため、典型的なことである。２回目の治療過程の終わりごろ、患者は、自身の胸部の腫瘍部位に灼熱感を感じた。患者は、治療開始の２年３か月後、および治療完了の５か月後の現在、存命しており健康である。
【０１１０】
例２
左側頸部のリンパ節に拡大した上咽頭癌の６２歳の男性患者の治療に成功した。治療は３つの過程からなるものであった。各過程ごとに、６２．５〜１８７．５ｍｇのクロリンｅ４ナトリウムを８日間にわたって５回経口投与した。クロリンｅ４ナトリウムの各経口服用の２４〜４８時間後に、６６０ｎｍおよび７６０ｎｍの波長を有するレーザおよびＬＥＤ光によって患者を治療した。
【０１１１】
治療直後、頸部の治療したリンパ節の生検は良性または非癌性のリンパ節を示し、癌細胞は検出されなかった。治療の１０か月後に別の生検によってこれを確認した。治療の１か月前および１０か月後に得られたＣＴスキャンを比較すると、腫瘍は広がっておらず、腫瘍の寸法が縮小したことが分かった。
【０１１２】
その後、さらなる過程によって患者を治療した。再び当該過程について、６２．５〜１８７．５ｍｇのクロリンｅ４ナトリウムを８日間にわたって５回経口投与した。クロリンｅ４ナトリウムの各経口服用の２４〜４８時間後に、６６０ｎｍおよび７６０ｎｍの波長を有するレーザおよびＬＥＤ光によって患者を治療した。
【０１１３】
最終治療過程後に得られた超音波映像および生検により、完全寛解が示された。患者は副作用を受けなかったが、各治療後に炎症反応が観察された。これは、免疫系が腫瘍を攻撃するため、典型的なことである。患者は、治療開始の２年６か月後、および治療完了の５か月後の現在、存命しており健康である。
【０１１４】
例３
胆嚢、肝臓および肺に転移した進行転移性腎疾患の７１歳の男性患者の治療に成功した。治療は３つの過程からなるものであった。各過程ごとに、６２．５〜１８７．５ｍｇのクロリンｅ４ナトリウムを８日間にわたって５回経口投与した。クロリンｅ４ナトリウムの各経口服用の２４〜４８時間後に、６６０ｎｍおよび７６０ｎｍの波長を有するレーザおよびＬＥＤ光によって患者を治療した。
【０１１５】
治療直前と治療の２か月後、３か月後、５か月後、および１５か月とに得られたＰＥＴ／ＣＴスキャンによると、患者の体全体にわたっていくつかの腫瘍が完全に消滅し、残存する腫瘍の寸法が縮小したことが示された。さらなる転移は観察されなかった。
【０１１６】
その後、さらなる２つの過程によって患者を治療した。再び、各過程ごとに、６２．５〜１８７．５ｍｇのクロリンｅ４ナトリウムを８日間にわたって５回経口投与した。クロリンｅ４ナトリウムの各経口服用の２４〜４８時間後に、６６０ｎｍおよび７６０ｎｍの波長を有するレーザおよびＬＥＤ光によって患者を治療した。加えて、細い針を用いる侵入型光線療法を、６６０ｎｍおよび７６０ｎｍの波長を有する光ファイバレーザにより、肝臓および肺に対して行なった。
【０１１７】
ＰＥＴ／ＣＴスキャンは再び良好な治療反応を示した。患者は、治療の副作用を受けなかった。残念ながら、患者は最近亡くなった。５回の治療過程前は余命わずか６か月の末期癌患者であったが、２年４か月間活動的な生活を送ることができた。
【０１１８】
例４
肝臓、リンパ系、脾臓、肺、および硬骨に転移したステージＩＶＢのホジキンリンパ腫の２０歳の女性患者の治療に成功した。治療は３つの過程からなるものであった。各過程ごとに、６２．５〜１８７．５ｍｇのクロリンｅ４ナトリウムを８日間にわたって５回経口投与した。クロリンｅ４ナトリウムの各経口服用の２４〜４８時間後に、６６０ｎｍおよび７６０ｎｍの波長を有するレーザおよびＬＥＤ光によって患者を治療した。
【０１１９】
ＣＴスキャンによると、レーザおよびＬＥＤ光によってそれまでに治療した患者の体の領域において、いくつかの腫瘍が完全に消え、いくつかの腫瘍の寸法が縮小したことが示された。
【０１２０】
その後、さらなる２つの過程によって患者を治療した。再び、各過程ごとに、６２．５〜１８７．５ｍｇのクロリンｅ４ナトリウムを８日間にわたって５回経口投与した。クロリンｅ４ナトリウムの各経口服用の２４〜４８時間後に、６６０ｎｍおよび７６０ｎｍの波長を有するレーザおよびＬＥＤ光によって患者を治療した。
【０１２１】
ＰＥＴ／ＣＴスキャンは再び良好な治療反応を示した。残念ながら、患者は最近亡くなった。５回の治療過程前は極めて悪い状態であり、極端な体重減少および虚脱状態に苦しみ、歩行できないほど虚弱であり、持続的な鎮痛を必要としていた。治療前には余命わずか２週間であったが、２年２か月間生きることができ、少なくともその一部は活動的であった。
【０１２２】
例５
肺癌の８２歳の男性患者の治療に成功した。治療は、６２．５〜１８７．５ｍｇのクロリンｅ４ナトリウムを８日間にわたって５回経口投与する１つの過程からなるものであった。クロリンｅ４ナトリウムの各経口服用の２４〜４８時間後に、６６０ｎｍおよび７６０ｎｍの波長を有するレーザおよびＬＥＤ光によって患者を治療した。
【０１２３】
治療の３か月後、患者は血液および腫瘍組織を吐き出した。ＣＴスキャンによると、腫瘍の破壊が示された。
【０１２４】
例６
肺癌の４６歳の男性患者の治療に成功した。治療は３つの過程からなるものであった。各過程ごとに、６２．５〜１８７．５ｍｇのクロリンｅ４ナトリウムを８日間にわたって５回経口投与した。クロリンｅ４ナトリウムの各経口服用の２４〜４８時間後に、６６０ｎｍおよび７６０ｎｍの波長を有するレーザおよびＬＥＤ光によって患者を治療した。
【０１２５】
最終治療過程直後に得られたＣＴスキャンによると、肺癌の完全寛解が示された。
例７
肝臓に転移した進行膵臓癌の５４歳の女性患者の治療に成功した。治療以前は患者は概ね健康不良であり、極端な体重減少、疼痛、および進行膵臓癌の他の典型的な症状に苦しんでいた。治療は３つの過程からなるものであった。各過程ごとに、６２．５〜１８７．５ｍｇのクロリンｅ４ナトリウムを８日間にわたって５回経口投与した。クロリンｅ４ナトリウムの各経口服用の約２４時間後に、６６０ｎｍおよび７６０ｎｍの波長を有するレーザおよびＬＥＤ光によって患者を治療した。
【０１２６】
治療前後に得られた膵臓のＰＥＴ／ＣＴスキャンによると、膵臓領域における好転および良好な治療反応が示された。患者には光増感反応はなく、疼痛で苦しむこともあまりなかった。残念ながら、患者は腸閉塞および栄養失調により亡くなった。
【０１２７】
例８
リンパ節および硬骨に転移した非小細胞肺癌の６７歳の女性患者の治療に成功した。治療は２つの過程からなるものであった。各過程ごとに、６２．５〜１８７．５ｍｇのクロリンｅ４ナトリウムを８日間にわたって５回経口投与した。クロリンｅ４ナトリウムの各経口服用の約２４時間後に、６６０ｎｍおよび７６０ｎｍの波長を有するレーザおよびＬＥＤ光によって患者を治療した。
【０１２８】
治療前後に得られた肺のＰＥＴ／ＣＴスキャンによると、多くの腫瘍がなくなり、残存する腫瘍は治療後に代謝活性を全く示さなかったかまたは代謝活性が低いという、治療に対する著しい反応が示された。患者は副作用を受けず、健康状態が改善した。患者は、治療開始の１０か月後、および治療完了の７か月後の現在、存命しており健康である。
【０１２９】
例９
右側胸部の乳癌の５４歳の女性患者の治療に成功した。治療は３つの過程からなるものであった。各過程ごとに、６２．５〜１８７．５ｍｇのクロリンｅ４ナトリウムを８日間にわたって５回経口投与した。クロリンｅ４ナトリウムの各経口服用の２４〜４８時間後に、６６０ｎｍおよび７６０ｎｍの波長を有するレーザおよびＬＥＤ光によって患者を治療した。
【０１３０】
治療前後に得られた胸部のマンモグラフィ、超音波およびＰＥＴ／ＣＴスキャンによると、完全寛解が示された。患者は副作用を受けなかった。患者は、治療開始の１年７か月後、および治療完了の１０か月後の現在、存命しており健康である。
【０１３１】
例１０
左側頸部のリンパ節および肺に転移した上咽頭癌の３３歳の男性患者の治療に成功した。治療は５つの過程からなるものであった。各過程ごとに、６２．５〜１８７．５ｍｇのクロリンｅ４ナトリウムを８日間にわたって５回経口投与した。クロリンｅ４ナトリウムの各経口服用の２４〜４８時間後に、６６０ｎｍおよび７６０ｎｍの波長を有するレーザおよびＬＥＤ光によって患者を治療した。加えて、細い針を用いる侵入型光線療法を、６６０ｎｍおよび７６０ｎｍの波長を有する光ファイバレーザにより、左肺において寸法が大きい腫瘍に対して行なった。
【０１３２】
ＰＥＴ／ＣＴスキャンによると、非常に良好な治療反応が示された。患者は、治療開始の１年５か月後、および治療完了の２か月後の現在、存命しており健康である。
【０１３３】
例１１
リンパ節および仙骨に転移した肺癌の４４歳の女性患者の治療に成功した。患者は、肺の主要な腫瘍を除去するための手術を受け、４つのサイクルの化学療法を完了した。その後のＰＥＴ／ＣＴスキャンによると、頸部のリンパ節、左側腋窩のリンパ節および仙骨に腫瘍が示された。治療は５つの過程からなるものであった。各過程ごとに、６２．５〜１８７．５ｍｇのクロリンｅ４ナトリウムを８日間にわたって５回経口投与した。クロリンｅ４ナトリウムの各経口服用の２４〜４８時間後に、６６０ｎｍおよび７６０ｎｍの波長を有するレーザおよびＬＥＤ光によって患者を治療した。加えて、治療過程のうち２つについて、細い針を用いる侵入型光線療法を、６６０ｎｍおよび７６０ｎｍの波長を有する光ファイバレーザにより、仙骨に対して行なった。加えて、最後の２つの治療過程について、中皮骨成長治療を施した。
【０１３４】
ＰＥＴ／ＣＴスキャンによると完全寛解が示され、患者の体内には活性腫瘍はなかった。患者は、治療開始の１０か月後、および治療完了の４か月後の現在、存命しており健康である。
【０１３５】
例１２
肺およびリンパ節に転移した脳腫瘍の５２歳の男性患者の治療に成功した。ＭＲＩスキャンにより、脳内に大きな腫瘤が見られた。患者は、脳を圧迫する腫瘍を小さくするための手術を受けたが、化学療法または放射線治療を受けていなかった。その後のＰＥＴ／ＣＴスキャンによると、両肺ならびに右側首領域および右側鎖骨上部領域のリンパ節に転移した活性腫瘍が脳に見られた。患者には癲癇性発作および激しい頭痛が時折起こった。治療は２つの過程からなるものであった。各過程ごとに、６２．５〜１８７．５ｍｇのクロリンｅ４ナトリウムを８日間にわたって５回経口投与した。クロリンｅ４ナトリウムの各経口服用の２４〜４８時間後に、６６０ｎｍおよび７６０ｎｍの波長を有するレーザおよびＬＥＤ光によって患者を治療した。
【０１３６】
ＰＥＴ／ＣＴスキャンによると、肺において完全寛解が示され、脳腫瘍の領域には代謝活性がなかった。リンパ節はまだ回復しておらず、患者は３回目の治療過程を受けることになっている。
【０１３７】
実施例−進行非小細胞肺癌を患う患者による臨床研究
病理学または細胞学診断によって、６６人の進行非小細胞肺癌患者を選び、２つのグループに無作為に分割した。グループＡには、クロリンｅ４ナトリウムによって治療した３２人の患者がいた。グループＢには、化学療法および放射線治療の両方によって治療した３４人の患者がいた。
【０１３８】
グループＡについては、体重１キログラム当たり２ｍｇの服用量でクロリンｅ４ナトリウムを投与した。三分の二は吸入によって投与し、三分の一は経口投与した。照射ターゲットを決定した後、レーザ治療用途の光ファイバを侵入型処置によって肺腫瘍に誘導した。照射光度は２００Ｊ／ｃｍ２であり、照射パワーは１，０００ｍＷであり、照射を８〜１０分間続けた。腫瘍へのレーザ照射は、深さ２〜５センチメートルであった。照射は、腫瘍サイズに基づいて段階ごとに行なった（サブパラグラフ治療）、または繰り返して行なった。
【０１３９】
グループＢについては、放射線治療のために、１５ＭＶのＸ線照射治療照射野は主な肺腫瘍病変および縦隔リンパ排液領域を包含し、１週間の放射線治療の初日ごとに６５〜７０Ｇｙの放射線量を施した。化学療法のために、２０ｍｇのシスプラチンを静脈投与によって投与した。
【０１４０】
グループＡおよびＢの１年および２年生存率は、それぞれ９３．７５％、７０．６０％および６８．７５％、３２．３５％であり、差異は統計的に有意であった（Ｐ＜０．０５）。グループＡおよびＢの完全および部分的な寛解率の組合せは５６．２０％および２１．３０％であり、グループＡの率がグループＢよりも有意に高く、差異は統計的に有意であった（Ｐ＜０．０５）。
【０１４１】
実施例−皮下Ｓ１８０肉腫のマウスによる研究
この実験では、３つの異なる光増感剤、すなわち重ポルフィリン、クロリンｅ４ナトリウム、および５−ＡＬＡによって左右される光線力学療法の、マウスのＳ１８０肉腫に対する効果を観察した。重ポルフィリンおよび５−ＡＬＡは、ポルフィリン誘導体である。
【０１４２】
十分に成長した皮下Ｓ１８０肉腫の昆明マウス４０匹を無作為に４つのグループ：（Ａ）重ポルフィリングループ（１０ｍｇ／ｋｇ）、（Ｂ）クロリンｅ４ナトリウムグループ（２０ｍｇ／ｋｇ）、（Ｃ）５−ＡＬＡグループ（１００ｍｇ／ｋｇ）、および（Ｄ）ブランクの対照グループに分割した。グループＡおよびＢのマウスには、光増感剤を尾静脈注射した８〜１０時間後に照射を行い、グループＣのマウスには、光増感剤を尾静脈注射した３時間後に照射を行った。グループＡおよびＣには６３０ｎｍの波長を有するレーザを使用し、グループＢには６６０ｎｍおよび７６０ｎｍの波長を有する２周波レーザを使用した。局所的な腫瘍部位を垂直に照射した。レーザスポットの直径は１．２〜１．５ｃｍであった。レーザは、腫瘍全体および腫瘍のまわりの３〜５ｍｍの正常組織をカバーした。出力密度１５０ｍＷ／ｃｍ２およびエネルギ密度１８０Ｊ／ｃｍ２にて、２０分間、グループＡ、ＢおよびＣにレーザを当てた。対照グループＤのマウスには照射は行わなかった。
【０１４３】
治療後、外観の腫瘍変化を観察した。グループＡおよびＢでは治療後に黒いかさぶたが見られたが、グループＣで観察されたかさぶたは色がより薄く、褐色を帯びた赤色であった。かさぶたが剥がれおちた後、３つの治療グループすべてにおいて皮膚および毛皮が完全に回復した。グループＣは皮膚修復が最も速かった。
【０１４４】
腫瘍成長曲線から、治療の６日後に治療グループＡ、ＢおよびＣと対照グループＤとの間で腫瘍の寸法において明白な差異がなかったことが分かった。これは、照射部位に生じた、治療によってもたらされた浮腫およびかさぶたによって恐らく生じたものである。治療の２１日後に腫瘍の寸法を観察すると、すべてのグループＡ、ＢおよびＣと対照グループＤとの間の平均体積差は統計的に有意である（Ｐ＜０．０５）ことが示され、対照グループＤよりも、治療グループＡ、ＢおよびＣの方が平均体積が統計的に有意に小さい。グループＢとグループＣとの間の平均体積差も統計的に有意であり（Ｐ＜０．０５）、グループＣよりもグループＢの方が平均体積が統計的に有意に小さい。
【０１４５】
また、すべての治療グループは対照グループＤと比較して統計的に有意な腫瘍抑制を示し、グループＢは、グループＣより統計的に有意により良好な治療効果を示した（Ｐ＜０．０５）。グループＡ、ＢおよびＣの腫瘍抑制率は、それぞれ６２．５％、７５．４％および３７．２％であった。
【０１４６】
治療の２４時間後のＦＣＭによるアポトーシスおよび壊死腫瘍細胞の解析に基づくと、アポトーシスおよび壊死腫瘍細胞の割合は、対照グループＤよりもすべての治療グループＡ、ＢおよびＣにおいての方がはるかに高く、生細胞は明らかに少なく、癌細胞を死滅させる際にすべての治療グループが明白な効果を示したことを表している。
【０１４７】
腫瘍組織の病理部分をＨＥ染色によって観察した。治療の２４時間後の治療グループＡ、ＢおよびＣにおける腫瘍組織の病理変化は、広範囲の腫瘍壊死、腫瘍血管分裂および好中球浸潤を含むものであった。
【０１４８】
光線力学療法によって腫瘍細胞を死滅させるメカニズムは、腫瘍細胞を直接死滅させ、腫瘍血管を損壊し、患者の免疫系を刺激することを含む。これらの要因は互いに利する場合があり、すべて長期的な腫瘍制御メカニズムである。
【０１４９】
要約すると、この研究は、重ポルフィリン、クロリンｅ４ナトリウムおよび５−ＡＬＡによる光線力学療法がマウスにおけるＳ１８０肉腫の成長を阻止することができることを実証した。クロリンｅ４ナトリウムは重ポルフィリンと同様かまたはやや良好な治療効果があり、５−ＡＬＡよりも統計的に有意により良好な治療効果があった。
【０１５０】
例示のためだけに本発明を上記したことが理解されるであろう。例は、発明の範囲を限定するものとは意図されていない。以下の請求項のみによって規定される発明の範囲および精神から逸脱することなく、様々な修正および実施形態をなすことができる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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