(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式：
【化１】
0006389529.tif 000082
（式中、
＝Ｘ−は、独立に、＝ＣＨ−又は＝Ｎ−であり；
−Ｙは、独立に、−Ｙ1、−Ｙ2、−Ｙ3、−Ｙ4、−Ｙ5、又は−Ｙ6であり；
−Ｙ1は、独立に、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、又は−Ｉであり；
−Ｙ2は、直鎖又は分岐飽和Ｃ1〜4アルキルであり；
−Ｙ3は、直鎖又は分岐飽和Ｃ1〜4ハロアルキルであり；
−Ｙ4は、−ＯＨであり；
−Ｙ5は、直鎖又は分岐飽和Ｃ1〜4アルコキシであり；及び
−Ｙ6は、直鎖又は分岐飽和Ｃ1〜4ハロアルコキシである）
の化合物、並びにその薬学的に許容される塩、Ｎ−オキシド、水和物、及び溶媒和物から選択される化合物。
【請求項２】
＝Ｘ−が、＝ＣＨ−である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
＝Ｘ−が、＝Ｎ−である、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
−Ｙ1が、存在する場合、−Ｆであり、
−Ｙ2が、存在する場合、−Ｍｅであり、
−Ｙ3が、存在する場合、−ＣＦ3であり、
−Ｙ5が、存在する場合、−Ｏ−Ｍｅであり、及び
−Ｙ6が、存在する場合、−Ｏ−ＣＦ3である、
請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５】
以下の化合物並びにその薬学的に許容される塩、Ｎ−オキシド、水和物、及び溶媒和物から選択される、請求項１に記載の化合物。
【化２】
0006389529.tif 000083
(TBAP-01)
【請求項６】
以下の化合物並びにその薬学的に許容される塩、Ｎ−オキシド、水和物、及び溶媒和物から選択される、請求項１に記載の化合物。
【化３】
0006389529.tif 000084
(TBAP-02)
【請求項７】
以下の化合物並びにその薬学的に許容される塩、Ｎ−オキシド、水和物、及び溶媒和物から選択される、請求項１に記載の化合物。
【化４】
0006389529.tif 000085
(TBAP-03)
【請求項８】
以下の化合物並びにその薬学的に許容される塩、Ｎ−オキシド、水和物、及び溶媒和物から選択される、請求項１に記載の化合物。
【化５】
0006389529.tif 000086
(TBAP-04)
【請求項９】
以下の化合物並びにその薬学的に許容される塩、Ｎ−オキシド、水和物、及び溶媒和物から選択される、請求項１に記載の化合物。
【化６】
0006389529.tif 000087
(TBAP-05)
【請求項１０】
請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物と、薬学的に許容される担体又は希釈剤とを含む医薬組成物。
【請求項１１】
療法によるヒト又は動物身体の治療方法における使用のための、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
増殖性障害；癌；炎症；免疫障害；ウイルス感染症；線維性障害；ＲＡＦの突然変異型に関連する障害；ＲＡＦの阻害により改善される障害；突然変異型ＢＲＡＦの阻害により改善される障害；ＢＲＡＦ及びＣＲＡＦの阻害により改善される障害；ＲＡＳ突然変異及び／又はＭＡＰＫ経路活性化に関連する障害；ＳＲＣ、ｐ３８、ＦＧＦＲＡ、ＶＥＧＦＲ−２（ＫＤＲ）、及び／又はＬＣＫの阻害により改善される障害の治療方法における使用のための、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
増殖性障害の治療方法における使用のための、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
癌の治療方法における使用のための、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
膵臓癌；非小細胞肺癌；卵巣腫瘍；腹膜腫瘍；卵管腫瘍；肺癌及び関連の胸水；頭部及び頚部の再発性若しくは転移性扁平上皮癌；局所進行鼻咽頭癌；グリア芽細胞腫；多形グリア芽細胞腫；巨細胞グリア芽細胞腫；神経膠肉腫；びまん性内在性橋グリオーマ；ＨＩＶ関連カポジ肉腫；多発性骨髄腫；腎細胞癌；転移性胃腺癌；急性骨髄性白血病；肝細胞癌；皮膚線維肉腫；甲状腺髄様癌；甲状腺乳頭癌；甲状腺濾胞癌；骨髄異形成症候群；神経線維腫症１型；叢状神経線維腫；脊髄神経線維腫；乳癌；胆管癌；子宮頚癌；前立腺癌；黒色腫；膀胱癌；尿道癌；尿管癌；腎臓癌；腎盂癌；肉腫；脂肪肉腫；結腸癌；骨肉腫；滑膜癌；神経芽細胞腫；又は横紋筋肉腫の治療方法における使用のための、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
悪性黒色腫；大腸癌；転移性大腸癌；甲状腺濾胞癌；甲状腺島状癌；甲状腺乳頭癌；卵巣癌；低悪性度卵巣癌；非小細胞肺癌；ヘアリーセル白血病；胆管癌；小児低悪性度グリオーマ；毛様細胞性星状細胞腫；神経節膠腫；多型黄色星細胞腫；多発性骨髄腫；膵臓の髄様癌；又は膵管腺癌の治療方法における使用のための、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
悪性黒色腫の治療方法における使用のための、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
大腸癌の治療方法における使用のための、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
膵臓腺癌の治療方法における使用のための、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
ＲＡＦの突然変異型に関連する障害の治療方法における使用のための、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
公知のＲＡＦ阻害剤による治療に対して耐性である障害の治療方法における使用のための、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項２２】
公知のＲＡＦ阻害剤と、公知のＭＥＫ阻害剤との併用による治療に対して耐性である障害の治療方法における使用のための、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項２３】
公知の抗体による治療に対して耐性である障害の治療方法における使用のための、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項２４】
嚢胞性線維症；肺高血圧症；肺サルコイドーシス；特発性肺線維症；慢性閉塞性肺疾患；慢性気管支炎；気腫；喘息；小児喘息；アトピー性皮膚炎；アレルギー性皮膚炎；接触皮膚炎；乾癬；アレルギー性鼻炎；鼻炎；副鼻腔炎；結膜炎；アレルギー性結膜炎；乾性角結膜炎；緑内障；糖尿病性網膜症；黄斑浮腫；糖尿病性黄斑浮腫；網膜中心静脈閉塞症；ドライ及び／又はウェット型加齢性黄斑変性；白内障術後炎症；ブドウ膜炎；後部ブドウ膜炎；前部ブドウ膜炎；汎ブドウ膜炎；角膜移植片拒絶反応；角膜縁細胞移植片拒絶反応；グルテン過敏性腸疾患；好酸球性食道炎；腸管移植片対宿主病；クローン病；及び潰瘍性大腸炎から選択される炎症性疾患の治療方法における使用のための、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項２５】
喘息又は慢性閉塞性肺疾患の治療方法における使用のための、請求項１０に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願
本出願は、２０１３年１１月２５日に提出された英国特許出願第１３２０７２９．５号明細書に関する。尚、上記出願の内容は、その全体を参照により本明細書に組み込むものとする。
【０００２】
本発明は、概して治療化合物の分野に関する。より具体的には、本発明は、中でも、ＲＡＦ（例えば、ＢＲＡＦ、ＣＲＡＦなど）を阻害する特定の１−（５−ｔｅｒｔ−ブチル−２−アリール−ピラゾール−３−イル）−３−［２−フルオロ−４−［（３−オキソ−４Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］ピラジン−８−イル）オキシ］フェニル］尿素化合物（本明細書では「ＴＢＡＰ化合物」と呼ぶ）に関する。本発明はまた、このような化合物を含む医薬組成物、並びにＲＡＦ（例えば、ＢＲＡＦ、ＣＲＡＦなど）を阻害し；且つ以下に挙げる障害：増殖性障害；癌（例えば、悪性黒色腫、大腸癌、膵臓腺癌など）；炎症；免疫障害；ウイルス感染症；線維性疾患；ＲＡＦ（例えば、ＢＲＡＦ、ＣＲＡＦなど）の突然変異型に関連する障害；ＲＡＦ（例えば、ＢＲＡＦ、ＣＲＡＦなど）の阻害により改善される障害；突然変異型ＢＲＡＦの阻害により改善される障害；ＢＲＡＦ及びＣＲＡＦの阻害により改善される障害；ＲＡＳ突然変異及び／又はＭＡＰＫ経路活性化に関連する障害；ＳＲＣ、ｐ３８、ＦＧＦＲＡ、ＶＥＧＦＲ−２（ＫＤＲ）、及び／又はＬＣＫの阻害により改善される障害などを治療するための、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ及びｉｎ  ｖｉｖｏ両方でのこうした化合物及び組成物の使用にも関する。
【背景技術】
【０００３】
本発明、並びに本発明が関連する分野の最新技術をより詳細に説明及び開示するために、いくつかの刊行物が引用される。これらの参照文献は各々、個々の参照文献がそれぞれ、明示的かつ個別に、参照により組み込まれることが示されているのと同じ範囲まで、その全体を参照により本開示に組み込むものとする。
【０００４】
文脈から別の意味に解釈すべき場合を除き、添付の特許請求の範囲を含む本明細書全体を通じて、「含む」という単語、並びに「含む」及び「含むこと」などのその変形は、記載する整数若しくはステップ又は整数若しくはステップの群の包含を意味するが、いずれか他の整数若しくはステップ又は整数若しくはステップの群の除外を意味するわけではない。
【０００５】
明細書及び添付の特許請求の範囲において用いる場合、単数形「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」、及び「その（ｔｈｅ）」は、文脈から別の意味を明確に示す場合を除き、複数の指示対象を含む。従って、例えば、「医薬用担体」への言及は、２つ以上のこうした担体の混合物などを含む。
【０００６】
範囲は、本明細書において、多くの場合、「約」１つの具体的値から、及び／又は「約」別の具体的値までのように表現される。このような範囲が表現されるとき、別の実施形態は、１つの具体的値から、及び／又は別の具体的値までを包含する。同様に、値が、先行詞「約」の使用により、近似として表される場合、具体的値が、別の実施形態を形成することは理解されよう。
【０００７】
本開示は、本発明を理解する上で有用となり得る情報を含む。これは、本明細書に提供する情報のいずれかが従来技術であること、又は特許請求の範囲に記載されている発明に関連すること、あるいは明示的又は暗黙に参照したいずれかの刊行物が従来技術であることの承認ではない。
【０００８】
ＲＡＦ、増殖性障害及び癌
細胞増殖及び分化を直接的又は間接的に制御する遺伝子の突然変異が、癌の主因であると一般に考えられている。悪性腫瘍は、一連の段階的で進行性の変化により発生するが、こうした変化は、癌細胞の増殖制御性の喪失、すなわち、連続的非制御増殖、周囲組織に侵入する能力、異なる臓器部位に転移する能力、血管新生の刺激、アポトーシスに対する耐性、免疫系を回避する能力、異常な代謝経路、並びに局所炎症をもたらす。注意深く制御されたｉｎ  ｖｉｔｒｏ研究は、正常及び新生細胞の増殖を特徴付ける因子を明確化する上で役立ち、これによって細胞増殖及び分化を制御する特定のタンパク質の同定に到った。
【０００９】
ＲＡＦは、ＲＡＳグアニン−ヌクレオチド結合／ＧＴＰａｓｅタンパク質の主要な下流標的であり、ＲＡＦ−ＭＥＫ−ＥＲＫから構成されるＭＡＰキナーゼカスケードの活性化を媒介する。活性化ＥＲＫは、中でも、経路の増殖、生存、及び転写機能の媒介を担ういくつかのタンパク質を後にターゲティングするキナーゼである。これらは、転写因子ＥＬＫ１、Ｃ−ＪＵＮ、Ｅｔｓファミリー（Ｅｔｓ１、２、及び７）、並びにＦＯＳファミリーを包含する。ＲＡＳ−ＲＡＦ−ＭＥＫ−ＥＲＫシグナル伝達経路は、ＥＧＦ、ＰＤＧＦ、ＫＧＦなどの増殖因子を含む多数の細胞刺激に応答して活性化される。この経路は、増殖因子作用の主要標的であるため、ＲＡＦ−ＭＥＫ−ＥＲＫの活性は、多くの因子依存性腫瘍において上方制御されることがわかっている。全腫瘍の約２０％が、ＲＡＳタンパク質の１つで活性化突然変異を受けるという観測結果は、経路が、腫瘍の発生において、より広範に重要であることを示している。
【００１０】
ＲＡＦ癌遺伝子ファミリーは、ＡＲＡＦ、ＢＲＡＦ及びＣＲＡＦ（Ｒａｆ−１とも呼ばれる）という名称の３つの高度に保存された遺伝子を含む。ＲＡＦ遺伝子は、細胞増殖を調節するシグナル伝達プロセスにおいて重要な調節の役割を果たすと考えられるタンパク質キナーゼをコード化する。ＲＡＦ遺伝子は、高度に保存されたセリン−トレオニン特異的タンパク質キナーゼをコードするが、これらは、ＲＡＳへの直接的結合（ＲＡＳ活性化の開始イベントである）の後、形質膜に動員される。ＲＡＳタンパク質は、転写因子を含むいくつかの細胞基質を最終的にリン酸化する、受容体チロシンキナーゼ、ｐ２１ＲＡＳ、ＲＡＦ、Ｍｅｋ１（ＥＲＫ活性化因子若しくはＭＡＰＫＫ）キナーゼ及びＥＲＫ（ＭＡＰＫ）キナーゼから構成されると考えられるシグナル伝達経路の一部である。この経路を介するシグナル伝達は、様々な細胞の状況において、分化、増殖、又は発癌性形質転換を媒介することができる。従って、ＲＡＦキナーゼは、多数の増殖因子をその最終的な作用である細胞増殖につなげ、正常な細胞シグナル伝達経路に必須の役割を果たすと考えられる。ＲＡＦタンパク質は、ＲＡＳタンパク質の直接下流のエフェクターであるため、ＲＡＦキナーゼに対して指令される治療薬は、ＲＡＳ依存性腫瘍の治療に有用であると考えられる。
【００１１】
ＲＡＦキナーゼは、差次的に調節及び発現される。ＣＲＡＦは、試験されたあらゆる臓器及びあらゆる細胞株において発現される。また、ＡＲＡＦ及びＢＲＡＦは、遍在性であると思われるが、それぞれ、泌尿生殖器及び脳組織において最も高度に発現される。ＢＲＡＦは、神経組織において高度に発現されるため、かつてはこれらの組織に限定されると考えられていたが、その後、より広範に発現されることが判明している。全てのＲＡＦタンパク質は、活性ＲＡＳに結合することができるが、ＢＲＡＦは、発癌性ＲＡＳによって最も強力に活性化される。
【００１２】
ＢＲＡＦは、悪性黒色腫及び甲状腺乳頭癌の約半分、低悪性度卵巣癌の３０％、結腸癌の１５％で突然変異し、有毛細胞白血病に非常に高い頻度を有すると共に、他のいくつかの癌（ヒトの癌の７％を占める）でも低い頻度で発生することから、癌において重要である。例えば、ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｓａｎｇｅｒ．ａｃ．ｕｋ／ｇｅｎｅｔｉｃｓ／ＣＧＰ／ｃｏｓｍｉｃ／を参照されたい。膵臓癌の特定のサブタイプである、膵臓のＫＲＡＳ２野生型髄様癌は、３０％のサンプルにＢＲＡＦ突然変異を呈する（例えば、Ｃａｌｈｏｕｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００３を参照）。対照的に、ＡＲＡＦ及びＣＲＡＦ突然変異は、ヒトの癌では非常に稀である。
【００１３】
【表１】
0006389529.tif 000002
【００１４】
癌におけるＢＲＡＦについて１００を超える異なる突然変異が記載されているが、単一の突然変異（６００位でのバリン（Ｖ）のグルタミン酸（Ｅ）置換）が、癌における全ＢＲＡＦ突然変異の約８０％を占める。この突然変異体はＢＲＡＦを５００倍活性化し、ＢＲＡＦが構成性ＥＲＫ及びＮＦｋＢシグナル伝達を刺激することを可能にして、生存及び増殖を刺激する。その結果、V600EＢＲＡＦは、線維芽細胞及びメラノサイトなどの細胞を形質転換することができる。癌細胞中のV600EＢＲＡＦの阻害は、細胞増殖を阻害し、アポトーシスをｉｎ  ｖｉｔｒｏで誘導し；ｉｎ  ｖｉｖｏで、これは、腫瘍細胞増殖を抑制することから、治療薬標的としてのV600EＢＲＡＦを証明している。
【００１５】
黒色腫において同定されている他のＶ６００ＢＲＡＦ突然変異は、Ｖ６００Ｋ、Ｖ６００Ｄ及びＶ６００Ｒである（例えば、Ｄａｖｉｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，２００２；Ｗａｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００４；Ｌｏｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１；Ｒｕｂｉｎｓｔｅｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０を参照）。さらに、６００以外の位置にＢＲＡＦ突然変異を有する、黒色腫の小さな亜群もみいだされた。これらの非Ｖ６００位ＢＲＡＦ突然変異体は、必ずしもＢＲＡＦキナーゼを直接活性化するわけではないが、そのＭＡＰＫシグナル伝達をトランス活性化するためには、ＣＲＡＦの存在が必要である（例えば、Ｓｍａｌｌｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，２００９を参照）。このような場合、ＲＡＦ活性の阻害は、依然として癌治療における有益な目標として残るであろう。
【００１６】
重要なことには、突然変異型ＢＲＡＦを阻害する薬剤、例えば、ベムラフェニブ（ＰＬＸ４０３２、ＲＧ７２０４、Ｚｅｌｏｂｒａｆ）（例えば、Ｆｌａｈｅｒｔｙ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０を参照）及びダブラフェニブ（ＧＳＫ−２１１８４３６）（例えば、Ｆａｌｃｈｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２を参照）は、腫瘍が発癌性ＢＲＡＦを発現する患者において強力な応答を媒介することができる（Ｓａｌａｍａ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３に論述）。特に、ベムラフェニブは、突然変異型ＢＲＡＦに駆動される黒色腫において有望な結果を示している（例えば、Ｃｈａｐｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１；Ｓｏｓｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２を参照）。これは、２０１１年に、Ｖ６００Ｅ  ＢＲＡＦ突然変異進行期転移性又は切除不能黒色腫の治療のために米国医薬品局（ＦＤＡ）により、また、２０１２年には、あらゆるＢＲＡＦ  Ｖ６００突然変異陽性切除不能又は転移性黒色腫を有する成人患者の治療のための単剤療法として欧州薬品庁（ＥＭＡ）によって承認された。ダブラフェニブは、同じ適応症について、２０１３年にＦＤＡ及びＥＭＡにより承認された。
【００１７】
これらのデータは、黒色腫における治療標的、並びにＢＲＡＦが突然変異したその他の癌及び増殖性疾患の標的候補としての突然変異型ＢＲＡＦを証明している。上記及びその他のエビデンスは、ＲＡＦ（例えば、ＢＲＡＦ）活性の阻害が、癌の治療に有益となり得ること、並びに、ＲＡＦ（例えば、ＢＲＡＦ）活性の阻害が、構成性活性化ＢＲＡＦ突然変異を含む癌において特に有益であり得ることを示している。
【００１８】
ＢＲＡＦ阻害剤に対する耐性
有意な臨床応答を媒介することができるにもかかわらず、ベルムラフェニブ及びダブラフェニブで治療したほとんどの患者は、いくつかの機構により媒介され得る耐性の獲得のために（例えば、Ｓｕｌｌｉｖａｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１を参照）、治療時にやがては進行する（例えば、Ｆｌａｈｅｒｔｙ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０；Ｓｏｓｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２を参照）。さらに、患者の約３０％が、初回耐性を呈示し、ＢＲＡＦ突然変異の存在にもかかわらず応答しない（例えば、Ｃｈａｐｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１を参照）。
【００１９】
ＫＲＡＳの突然変異（Ｇ１２Ｓ、Ｇ１２Ｖ、Ｇ１２Ｄ、Ｇ１２Ａ、Ｇ１２Ｃ、Ｇ１３Ａ、Ｇ１３Ｄ）は、突然変異型ＢＲＡＦ阻害剤治療に対して感受性ではない腫瘍をみいだすための予測マーカとして提案されている（例えば、Ｈａｔｚｉｖａｓｓｉｌｉｏｕ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１を参照）。ＮＲＡＳのＱ１６Ｋ突然変異は、ＢＲＡＦ阻害剤ベムラフェニブに対する耐性を付与する（例えば、Ｎａｚａｒｉａｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０を参照）。同様に、ＢＲＡＦ阻害剤ダブラフェニブによる治療に対する耐性は、ＮＲＡＳタンパク質のＱ１６Ｋ及びＡ１４６Ｔ突然変異により予測されている（例えば、Ｇｒｅｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２を参照）。突然変異によるＲＡＳの活性化は、ＲＡＦ二量体化（ＣＲＡＦとＢＲＡＦタンパク質のヘテロ二量体及び／又はＣＲＡＦ／ＢＲＡＦホモ二量体の形成）の増大を招き、これは、ＭＡＰＫカスケードを介したシグナル伝達の増大及び細胞増殖の増大を伴う（例えば、Ｐｏｕｌｉｋａｋｏｓ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０を参照）。
【００２０】
ＣＲＡＦの上方制御（及び突然変異）は、ＢＲＡＦ阻害剤で治療した耐性黒色腫に認められるもう１つの耐性機構である（例えば、Ｈｅｉｄｏｒｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０；Ｍｏｎｔａｇｕｔ  ｅｔ  ａｌ．，２００８；Ａｎｔｏｎｙ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３を参照）。従って、複数のＲＡＦアイソフォーム（特に、ＢＲＡＦ及びＣＲＡＦ）のｐａｎＲＡＦ阻害剤は、ＲＡＳ突然変異黒色腫及びＲＡＳ突然変異癌において増強された効果を有すると共に、選択的ＢＲＡＦ阻害剤に対する１つの重要な耐性機構に対処すると考えられる。
【００２１】
ＢＲＡＦＶ６００Ｅ遺伝子のコピー数増加は、ＢＲＡＦ突然変異黒色腫（例えば、Ｓｈｉ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２を参照）及び大腸癌（例えば、Ｃｏｒｃｏｒａｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０を参照）におけるＢＲＡＦ阻害剤耐性に関連している。これらのモデルは、ＢＲＡＦ及びＭＥＫの同時阻害に対して感受性であるが、増幅されたＢＲＡＦ突然変異黒色腫のみが、ＭＥＫ阻害剤単独に対して感受性である。この耐性の機構は、ＢＲＡＦのみの阻害剤に対するよりも、ｐａｎＲＡＦ阻害剤に対して感受性であると思われる。
【００２２】
一部の黒色腫では、ベムラフェニブに対する耐性は、ＢＲＡＦＶ６００Ｅのスプライス変異体アイソフォームの発現を介して獲得された。ＢＲＡＦＶ６００Ｅの６１ｋＤａスプライス変異体（ｐ６１ＢＲＡＦＶ６００Ｅ）は、ＲＡＳ結合ドメインをコード化するエキソン４〜８が欠如し、ベムラフェニブに対して耐性であった。ｐ６１ＢＲＡＦＶ６００Ｅは、活性化ＲＡＳの非存在下で構成的に二量体化する。ｐ６１ＢＲＡＦＶ６００Ｅの二量体化は、ＢＲＡＦ阻害剤耐性を媒介するために重要であることがわかっている（例えば、Ｐｏｕｌｉｋａｋｏｓ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０を参照）。
【００２３】
ＢＲＡＦ及びＣＲＡＦ遺伝子融合は、ＭＡＰＫ経路活性化の代替機構である。これらの活性化遺伝子融合産物は、前立腺癌、胃癌及び黒色腫（ＳＬＣ４５Ａ３−ＢＲＡＦ及びＥＳＲＰ１−ＲＡＦ１）（例えば、Ｐａｌａｎｉｓａｍｙ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０を参照）、甲状腺癌（ＡＫＡＰ９−ＢＲＡＦ）（例えば、Ｃｉａｍｐｉ  ｅｔ  ａｌ．，２００５を参照）及び小児星状細胞腫（ＫＩＡＡ１５４９−ＢＲＡＦ）（例えば、Ｓｉｅｖｅｒｔ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３を参照）において同定されている。ＲＡＦ融合物（例えば、ＳＬＣ４５Ａ３−ＢＲＡＦ）を発現する一部のモデルは、ＢＲＡＦ及びＭＥＫ阻害に対して感受性であり；対照的に、ＫＩＡＡ１５４９−ＢＲＡＦモデルは、ＰＬＸ４７２０に対して感受性であるが、第２世代ＢＲＡＦ阻害剤に対しては感受性である。
【００２４】
Ｒａｓのキナーゼ阻害剤（ＫＳＲ）は、ＲＡＳ−ＲＡＦ−ＭＥＫ−ＥＲＫ経路の保存された正のモジュレータである。ＫＳＲ１は、ＭＥＫと構成的に相互作用し、形質膜で、ＲＡＦと一緒にＭＥＫを同時局在化させる上で重要な役割を果たすことが知られている。ＫＳＲ１は、ＲＡＳ−突然変異型又は活性化ＲＡＳ細胞において、ＢＲＡＦ阻害剤によるＭＡＰＫ経路活性化に関与している（例えば、ＭｃＫａｙ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１を参照）。経路の薬剤活性化の２つの機構が提案されている。１つの機構は、ＣＲＡＦ−ＫＳＲ１二量体の形成、ＭＥＫとの複合体形成、及びＫＳＲ１−ＣＲＡＦ二量体によるＭＥＫリン酸化を含む（例えば、Ｈｕ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１を参照）。他方の機構では、ＫＳＲ１は、ＢＲＡＦと二量体化し、ＭＥＫリン酸化の駆動因子であるＢＲＡＦ−ＣＲＡＦヘテロ二量体と競合する。ＫＳＲ１の発現が低いＲＡＳ活性化細胞は、より奇異性の経路活性化を示すことが示唆されている（例えば、ＭｃＫａｙ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１を参照）。いずれの機構においても、ｐａｎＲＡＦ阻害剤は、ＫＳＲ１の発現レベルとは無関係に経路活性化を低下すると考えられる。
【００２５】
受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）の過剰発現は、ＢＲＡＦ阻害剤に対する耐性のもう１つの機構である。ＥＧＦＲ（表皮増殖因子受容体）の過剰発現は、ＥＧＦＲ媒介ＭＡＰＫ経路再活性化、並びにＢＲＡＦ突然変異型大腸癌におけるベムラフェニブに対する耐性をもたらす（例えば、Ｃｏｒｃｏｒａｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２を参照）。薬剤耐性ＢＲＡＦ突然変異黒色腫細胞株では、ＥＧＦＲ−ＳＦＫ−ＳＴＡＴ３シグナル伝達は、黒色腫において、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ及びｉｎ  ｖｉｖｏでＢＲＡＦ阻害剤に対する耐性を媒介することができる（例えば、Ｇｉｒｏｔｔｉ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３を参照）。ＳｒｃファミリーキナーゼＳＦＫは、黒色腫細胞において、ＢＲＡＦ阻害剤に対する耐性を媒介する上で重要な役割を果たす（例えば、Ｇｉｒｏｔｔｉ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３；Ｖｅｒｇａｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１を参照）。ＳＦＫ  ＬＹＮ、ＹＥＳ及びＦＹＮのリン酸化増強がベムラフェニブ耐性株において認められる。耐性細胞の増殖は、ＳＦＫ阻害に対して感受性であり；ダサチニブと、ＳＲＣ及びＬＹＮの欠失はいずれも、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでの耐性細胞の侵入を抑制した。極めて重要なことは、ベムラフェニブに対する内因性耐性を有する患者からの腫瘍においてＳＦＫシグナル伝達が増大し、ダサチニブが、マウスにおいてこの腫瘍の増殖及び転移を阻害したことである。
【００２６】
Ｃｏｒｃｏｒａｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２，“ＥＧＦＲ−ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｒｅａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  ＭＡＰＫ  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅｓ  ｔｏ  ｉｎｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  ＢＲＡＦ−ｍｕｔａｎｔ  ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ  ｃａｎｃｅｒｓ  ｔｏ  ＲＡＦ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｗｉｔｈ  ｖｅｍｕｒａｆｅｎｉｂ”，Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ，Ｖｏｌ．２，ｐｐ．２２７−２３５。
【００２７】
ＰＤＧＦＲ−βは、ベムラフェニブに対して耐性の突然変異型ＢＲＡＦ細胞株において過剰発現及び過剰リン酸化されて、患者からのベムラフェニブ耐性腫瘍のいくつかの態様で上方制御されることが判明しているが、これは、この機構が臨床的に関連する可能性があることを示している（例えば、Ｎａｚａｒｉａｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０を参照）。ＰＤＧＦＲ−βの上方制御は、他のＥＲＫ１／２非依存性下流経路（ＰＩ３Ｋ、ＰＬＣγ）を活性化することにより、耐性を駆動し得る。
【００２８】
機構研究により、ＩＧＦＲ１シグナル伝達が、ＢＲＡＦ阻害剤耐性を獲得した細胞において増大したＰＩ３Ｋ／ＡＫＴシグナル伝達を媒介すること、並びにこの耐性は、ＰＩ３ＫとＭＥＫ阻害剤又はＩＧＦ１ＲとＭＥＫ阻害剤の組合せで細胞を処置することによって逆転され得ることが明らかにされた（例えば、Ｖｉｌｌａｎｕｅｖａ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１を参照）。この知見の翻訳との関連性は、ベムラフェニブを受けなかった患者からの５つの黒色腫サンプルのうちの１つが、増加したレベルのＩＧＦＲ１を発現したという観測結果によって確認された（例えば、Ｖｉｌｌａｎｕｅｖａ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１を参照）。
【００２９】
間質による増殖因子上方制御は、耐性の機構である。ＢＲＡＦ突然変異型黒色腫を有する患者におけるＨＧＦの間質細胞発現と、ＲＡＦ阻害剤治療に対する自然耐性との間に有意な相関が証明されている（例えば、Ｗｉｌｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２を参照）。ｃＭＥＴ及び／又はそのリガンドは、ＢＲＡＦ阻害剤に対して感受性ではない腫瘍を識別するための予測マーカとして記載されている（例えば、Ｈａｔｚｉｖａｓｓｉｌｉｏｕ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１；Ｓｔｒａｕｓｓｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２を参照）。ＲＡＦと、ＨＧＦ又はＭＥＴのいずれかとの二重阻害によって、薬剤耐性の逆転が起こったが、これは、治療戦略候補としてのＲＡＦとＨＧＦ又はＭＥＴの阻害併用療法を示唆している（例えば、Ｈａｔｚｉｖａｓｓｉｌｉｏｕ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１；Ｓｔｒａｕｓｓｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２を参照）。
【００３０】
ＦＧＦＲ１は、黒色腫の進行に関与しており、ＦＧＦＲ１のノックダウンによって、ｉｎ  ｖｉｖｏでの黒色腫増殖の阻害が起こる（例えば、Ｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７を参照）。線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）は、ＰＬＸ４０３２による治療からの一部のＢＲＡＦ突然変異体細胞をレスキューし（例えば、Ｗｉｌｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２を参照）、ＦＧＦＲ１阻害は、多標的キナーゼ／ＢＲＡＦ阻害剤ソラフェニブ及び特定のＢＲＡＦ阻害剤ＲＧ７０２４と相乗作用性である（例えば、Ｍｅｔｚｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２を参照）。これらの知見は、ＥＧＦＲ、ＰＤＧＦＲ−β、ＨＧＦＲ、ＩＧＦ１Ｒ及びＦＧＦＲなどのＲＴＫの阻害、並びにＳＦＫの阻害は、いくつかの耐性機構を選択的ＢＲＡＦ阻害剤にターゲティングし、従って、ＢＲＡＦ−選択的阻害剤に対して耐性になったＢＲＡＦ突然変異腫瘍において有用となるであろうことを示唆している。
【００３１】
癌及びＲＡＳ
ＲＡＳタンパク質は、増殖因子、サイトカイン及びホルモン受容体の下流にある低分子量グアニンヌクレオチド結合タンパク質である。これらの細胞表面受容体は、グアニン−ヌクレオチド交換因子（ＧＮＥＦ）と呼ばれるタンパク質を活性化し、このタンパク質は、ＲＡＳタンパク質のＧＴＰをＧＤＰに置換して、ＲＡＳ活性化を刺激する。ＧＴＰａｓｅ活性化タンパク質（ＧＡＰ）と呼ばれる他のタンパク質は、ＲＡＳの固有ＧＴＰａｓｅ活性を刺激し、これによって、ＧＴＰ加水分解を促進すると共に、ＲＡＳをその不活性ＧＤＰ結合状態に戻す。活性化ＲＡＳは、複数のエフェクタータンパク質に結合するが、こうしたタンパク質として、ホスホイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）、タンパク質キナーゼのＲＡＦファミリー、及びＲａｌグアニン−ヌクレオチド交換因子がある。次に、これらのエフェクターが、細胞増殖、老化、生存、及び分化を制御するシグナル伝達経路の活性を調節する。哺乳動物には３つのＲＡＳ遺伝子（ＨＲＡＳ、ＫＲＡＳ及びＮＲＡＳ）があり、これらは、オーバーラップするが、非保存的機能を果たす。
【００３２】
ＲＡＳタンパク質はまた、癌において重要である。２０〜３０％のヒト腫瘍は、ＲＡＳ遺伝子の１つに体細胞機能獲得型突然変異を保有している。最も一般的には、これらは、グリシン１２（Ｇ１２）、グリシン１３（Ｇ１３）及びグルタミン６１（Ｑ６１）のコドンを含み、これらの突然変異は、様々な機構によって、ＧＡＰが刺激したＲＡＳの固有ＧＴＰａｓｅ活性を障害し、それを活性ＧＴＰ結合状態に到らせて、それが腫瘍発生を促進することを可能にする。例えば、Ｄｏｗｎｗａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，２００３；Ｙｏｕｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，２００９；Ｂｏｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９８９を参照されたい。
【００３３】
【表２】
0006389529.tif 000003
【００３４】
その他の癌は、ＲＡＳファミリー遺伝子の低頻度突然変異を有するが、それらの突然変異は、予後、例えば、神経芽細胞腫（８％  ＮＲＡＳ突然変異）、胃腺癌（６％  ＫＲＡＳ突然変異体）を予測させるものである。
【００３５】
ＲＡＳ及びＲＡＦ
活性ＲＡＳタンパク質は、ＲＡＳファミリーのタンパク質などのいくつかの下流エフェクターを活性化する。３つのＲＡＦタンパク質、ＡＲＡＦ、ＢＲＡＦ及びＣＲＡＦがある。活性化ＲＡＦは、ＭＥＫと呼ばれる第２タンパク質キナーゼをリン酸化及び活性化し、次に、これが、ＥＲＫと呼ばれる第３タンパク質キナーゼをリン酸化及び活性化する。ＥＲＫは、多数の細胞質ゾル及び核基質をリン酸化し、これによって、増殖、生存、分化及び老化などの細胞プロセスを調節する。
【００３６】
しかし、特に、癌細胞の場合、発癌性ＲＡＳは、ＢＲＡＦを介してシグナル伝達しないが、その代わり、ＭＥＫを活性化するために、もっぱらＣＲＡＦを介してシグナルを伝達する。
【００３７】
大部分の癌において、ＢＲＡＦ及びＲＡＳ突然変異は、互いに排他的である。これは、これらのタンパク質が、同じ経路上にあり、癌細胞において同じプロセスを駆動することを示唆する遺伝学的エビデンスを提供する。しかし、癌細胞において、発癌性ＢＲＡＦ機能と発癌性ＲＡＳ機能の間には明らかな相違がある。第一に、ＲＡＳは、複数の経路を活性化するが、ＢＲＡＦは、ＭＥＫ／ＥＲＫ経路を活性化することしかわかっていない。結果として、ＢＲＡＦ突然変異細胞は、ＭＥＫ／ＥＲＫシグナル伝達により多く依存するため、ＲＡＳが突然変異した細胞よりも、ＢＲＡＦ又はＭＥＫ阻害剤に対して感受性がかなり高い。例えば、Ｇａｒｎｅｔｔ  ｅｔ  ａｌ．，２００４；Ｗｅｌｌｂｒｏｃｋ  ｅｔ  ａｌ．，２００４；Ｇｒａｙ−Ｓｃｈｏｐｆｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２００７；Ｓｏｌｉｔ  ｅｔ  ａｌ．，２００６を参照されたい。
【００３８】
突然変異とは別に、ＭＡＰＫカスケードにおけるシグナル伝達タンパク質は、いくつかの悪性腫瘍で過剰発現される。例えば、ＨＲＡＳ及びＮＲＡＳは、子宮頸部癌で過剰発現される。ＲＡＳ突然変異は、副腎皮質癌では稀であるが、ＲＡＳ、ＢＲＡＦ及びＥＧＦＲ中の突然変異を有する腫瘍の集団は、上記経路を介したシグナル伝達増大を示し、ＭＡＰＫ経路阻害剤の標的となり得る（例えば、Ｋｏｔｏｕｌａ  ｅｔ  ａｌ．，２００９を参照）。低悪性度卵巣癌及び腹膜癌は、ＲＡＳ／ＲＡＦ突然変異状態とは独立して、ＭＥＫ阻害剤セルメチニブによるＭＡＰＫ経路の遮断に応答する。ブドウ膜黒色腫の場合、ブドウ膜黒色腫の５０％を占めるＧＮＡＱの突然変異を介して、ＭＡＰＫ経路が活性化される（例えば、Ｇａｕｄｉ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１を参照）。ｃＲＡＦは、多様なヒトの原発癌、例えば、肺、肝臓、前立腺、原始神経外胚葉腫瘍、頭部及び頸部扁平上皮癌などに過剰発現される（例えば、Ｄａｍｏｄａｒ  Ｒｅｄｄｙ  ｅｔ  ａｌ．，２００１；Ｈｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，２００４；Ｍｕｋｔｅｒｊｅｅ  ｅｔ  ａｌ．，２００５；Ｓｃｈｒｅｃｋ  ｅｔ  ａｌ．，２００６；Ｒｉｖａ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５を参照）。ＭＡＰＫ経路は、７４％の急性骨髄性白血病患者サンプルの７４％で活性化される（例えば、Ｍｉｌｅｌｌａ  ｅｔ  ａｌ．，２００１を参照）。神経線維腫症１型の場合、ＮＦ１腫瘍抑制遺伝子の喪失により、過剰活性化ＲＡＳシグナル伝達と共に、脱調節Ｒａｓ／ＥＲＫシグナル伝達（ＮＦ１抹消神経腫瘍の増殖に必須である）が起こる（例えば、Ｊｅｓｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３を参照）。ｐａｎＲＡＦ阻害剤は、ＢＲＡＦ突然変異型腫瘍及びＲＡＳ突然変異型腫瘍のＭＡＰＫ経路の有効な遮断を誘発し、ＭＡＰＫシグナル伝達経路の脱調節を伴う癌に対して広範な適用を有する。
【００３９】
従って、ＲＡＳ、ＲＡＦ及びＥＧＦＲの活性化突然変異、又はＲＡＳ、ＲＡＦ及びＥＧＦＲ（そのアイソフォームのいずれかを含む）の過剰発現を有する癌は、ｐａｎＲＡＦ（例えば、ＣＲＡＦ及びＢＲＡＦ）阻害に対して特に感受性であり得る。上方制御されたＲＡＦ−ＭＥＫ−ＥＲＫ経路シグナルを招くその他の異常を有する癌もまた、ｐａｎＲＡＦ（例えば、ＣＲＡＦ及びＢＲＡＦ）活性の阻害剤による治療に対して特に感受性であり得る。こうした異常の例として、増殖因子受容体の構成的活性化；１つ又は複数の増殖因子受容体の過剰発現；１つ又は複数の増殖因子の過剰発現；ＫＳＲ媒介経路活性化；並びにＢＲＡＦ又はＣＲＡＦ遺伝子融合物が挙げられる。
【００４０】
他の疾患におけるＭＡＰＫ経路
ＲＡＦ−ＭＥＫ−ＥＲＫ経路は、多数の受容体及び刺激因子の下流で機能するが、これは、細胞機能の調節における広範な役割を示している。この理由から、ＲＡＦの阻害剤は、上記経路を介したシグナル伝達の上方制御に関連する他の病態に有用となり得る。ＲＡＦ−ＭＥＫ−ＥＲＫ経路は、増殖因子作用に対する非形質転換細胞の正常応答の重要な成分でもある。従って、ＲＡＦの阻害剤は、正常組織の不適切又は過剰な増殖がある疾患において、有用となり得る。こうした疾患として、例えば、糸球体腎炎及び乾癬がある。
【００４１】
炎症細胞の機能は、多くの因子によって制御され、その作用は、様々なシグナル伝達経路により媒介される。一部の重要な炎症誘発機能は、ｐ３８Ｍａｐキナーゼにより媒介される（例えば、ＴＮＦ放出）が、それ以外は、他の経路により媒介される。特に、ＲＡＦ−ＭＥＫ−ＥＲＫ経路は、多くの炎症細胞において重要な活性化及び増殖シグナルである。とりわけ、Ｂ及びＴリンパ球は、クローン拡大及びエフェクター集団の産生のためにＲＡＦ−ＭＥＫ−ＥＲＫ経路の活性化を必要とする（例えば、Ｃａｎｔｒｅｌｌ，２００３；Ｇｅｎｏｔ  ｅｔ  ａｌ．，２０００を参照）。ＲＡＦがその一部である細胞シグナル伝達経路は、Ｔ細胞増殖（Ｔ細胞活性化及び増殖）を特徴とする炎症性障害、例えば、組織移植片拒絶反応、エンドトキシンショック、及び糸球体腎炎などに関与している。
【００４２】
ＭＡＰＫ／ＥＲＫシグナル伝達の活性化は、疾患モデルの多数のモデルにおいて立証されており、例えば、ＭＥＫ阻害剤を用いた経路の阻害は、以下に挙げるような多様な疾患において有益となり得ることが明らかにされている：
・疼痛：疼痛モデルにおける効力のエビデンス：ＭＥＫ経路は、持続的疼痛の場合、脊髄後角ニューロンにおいて上方制御される（例えば、Ｊｉ  ｅｔ  ａｌ．，２００２；Ｓｏｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，２００５；Ｍａ  ｅｔ  ａｌ．，２００５；Ｋａｒｉｍ  ｅｔ  ａｌ．，２００６を参照）；神経障害性疼痛におけるＭｅｋ阻害剤（例えば、Ｄｉｘｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００１を参照）。
・発作：ＭＥＫの阻害による虚血性脳傷害に対する発作モデルの有意な神経保護における効力のエビデンス（例えば、Ｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，２００３；Ｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，２００４；Ｍａｄｄａｈｉ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０を参照）。
・糖尿病：糖尿病合併症におけるエビデンス（例えば、Ｆｕｊｉｔａ  ｅｔ  ａｌ．，２００４を参照）。
・炎症：炎症モデルにおける効力のエビデンス（例えば、Ｊａｆｆｅｅ  ｅｔ  ａｌ．，２０００；Ｔｈａｌｈａｍｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２００８；Ｇｅｐｐｅｒｔ  ｅｔ  ａｌ．，１９９４を参照）。
・関節炎：実験骨関節炎における効力のエビデンス（例えば、Ｐｅｌｌｅｔｉｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２００３を参照）；関節リウマチのモデル（例えば、Ｃｈｕｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００２；Ｄｕｄｌｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，２０００を参照）；Ｔｈａｌｈａｍｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２００８に論述。
・例えば、代謝症候群における心臓リモデリング（例えば、Ａｓｒｉｈ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３を参照）。
・例えば、シスプラチン誘導性腎傷害における臓器傷害（例えば、Ｊｏ  ｅｔ  ａｌ．，２００５を参照）。
・異常ヘモグロビン症：鎌状赤血球症、βサラセミア、ヘモグロビンＨ病（例えば、Ｚｅｎｎａｄｉ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２を参照）。
・喘息（例えば、Ｂｒｉｄｇｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，２０００を参照）。
・移植片拒絶反応（例えば、Ｇｉｌｂｅｒｔｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０００を参照）。
・敗血症性ショック（例えば、Ｇｅｐｐｅｒｔ  ｅｔ  ａｌ．，１９９４を参照）。
・ウイルス感染症、例えば、Ｂ型肝炎（例えば、Ｂｅｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９４を参照）、Ｃ型肝炎（例えば、Ｚｈａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２を参照）、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）（例えば、Ｙａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，１９９９を参照）、エプスタイン・バーウイルス（ＥＢＶ）（例えば、Ｆｕｋｕｄａ  ｅｔ  ａｌ．，２００７を参照）、ＨＰＶ（例えば、Ｐａｙｎｅ  ｅｔ  ａｌ．，２００１を参照）、カポジ肉腫に関連するヒトヘルペスウイルス−８（ＨＨＶ）（例えば、Ａｋｕｌａ  ｅｔ  ａｌ．，２００４を参照）、ヒトサイトメガロウイルス（例えば、Ｊｏｈｎｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００１を参照）、コクサッキーウイルスＢ３（例えば、Ｌｕｏ  ｅｔ  ａｌ．，２００２を参照）、ボルナ病ウイルス（例えば、Ｐｌａｎｚ  ｅｔ  ａｌ．，２００１を参照）、インフルエンザウイルス（例えば、Ｐｌｅｓｃｈｋａ  ｅｔ  ａｌ．，２００１を参照）。
・例えば、調節Ｔ細胞活性を阻害することによる慢性感染症及び自己免疫疾患（例えば、Ｋｊｅｔｉｌ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３を参照）。
・アテローム性動脈硬化（例えば、Ｍｉｕｒａ  ｅｔ  ａｌ．，２００４を参照）。
・再狭窄（例えば、Ｇｒａｆ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７を参照）。
・心筋症（例えば、Ｌｏｒｅｎｚ  ｅｔ  ａｌ．，２００９を参照）。
・心虚血再灌流傷害（例えば、Ｚｏｕｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，２０００を参照）。
・乾癬（例えば、Ｈａａｓｅ  ｅｔ  ａｌ．，２００１を参照）。
・アルツハイマー病（例えば、Ｍｅｉ  ｅｔ  ａｌ．，２００６を参照）、並びに他の誘導性神経障害、例えば、ＨＴＬＶ−Ｉ関連脊髄症／熱帯痙性寄生体又は神経変性疾患、例えば、パーキンソン病若しくはアミロイド側索硬化症（ＣＤ４４スプライス変異体調節による）（例えば、Ｐｉｎｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２００６を参照）。
・慢性閉塞性肺疾患（例えば、Ｍｅｒｃｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２００６を参照）。
・炎症性腸疾患（例えば、Ｌｏｗｅｎｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．，２００５を参照）。
・嚢胞性線維症（例えば、Ｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，１９９８を参照）、肝線維症、例えば、肝硬変（例えば、Ｄａｖｉｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９６を参照）などの線維形成性疾患。
・遺伝性ＲＡＳ突然変異は、ラソパシー（ｒａｓｏｐａｔｈｙ）と集合的に称される１群の疾患を引き起こす。これらの疾患におけるＭＡＰＫ経路のターゲティングが、こうしたタイプの疾患、例えば、ヌーナン症候群（例えば、Ｇｕ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３を参照）、心臓・顔・皮膚症候群（例えば、Ａｎａｓｔａｓａｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２を参照）及び毛細血管奇形（例えば、Ｖｉｋｋｕｌａ  ｅｔ  ａｌ．，２００４を参照）などの治療アプローチとして提案されている。
【００４３】
ＲＴＫ
受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）は、細胞の形質膜を介した生化学的シグナル伝達に重要である。これらの膜貫通分子は、形質膜中の１セグメントを介して細胞内チロシンキナーゼドメインに結合した細胞外リガンド結合ドメインから構成されることを特徴とする。受容体にリガンド結合することによって受容体結合チロシンキナーゼ活性の刺激が起こり、これは、受容体及び他の細胞内タンパク質の両方でのチロシン残基のリン酸化を招き、多様な細胞応答をもたらす。今日まで、アミノ酸配列相同性によって明確にされる少なくとも１９の異なるＲＴＫサブファミリーが同定されている。
【００４４】
ＦＧＦＲ
シグナル伝達ポリペプチドの線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）ファミリーは、多様な生理学的機能、例えば、細胞分裂促進、創傷治癒、細胞分化及び血管新生、並びに発生などを調節する。正常及び悪性細胞増殖の両方並びに増殖は、これらの細胞外シグナル伝達分子の局所濃度の変化によって影響を受けるが、こうした分子は、自己分泌並びにパラ分泌因子として作用する。自己分泌ＦＧＦシグナル伝達は、特に、ステロイドホルモン依存性癌の進行において、また、ホルモン非依存性状態にとって重要であると考えられる（例えば、Ｐｏｗｅｒｓ  ｅｔ  ａｌ．，２０００を参照）。
【００４５】
ＦＧＦ及びその受容体は、いくつかの組織及び細胞株において、増大したレベルで発現され、過剰発現は、悪性表現型に寄与すると考えられる。さらに、いくつかの癌遺伝子は、増殖因子受容体をコード化する遺伝子の相同体であり、ヒト膵臓癌におけるＦＧＦ依存性シグナル伝達の異常な活性化の可能性がある（例えば、Ｏｚａｗａ  ｅｔ  ａｌ．，２００１を参照）。
【００４６】
２つのプロトタイプメンバーは、酸性線維芽細胞増殖因子（ａＦＧＦ又はＦＧＦ１）及び塩基性線維芽細胞増殖因子（ｂＦＧＦ又はＦＧＦ２）であり、現在まで、少なくとも２０の異なるＦＧＦファミリーメンバーが同定されている。ＦＧＦに対する細胞応答は、１〜４までの番号が付いた４つのタイプの高親和性膜貫通チロシン−キナーゼ線維芽細胞増殖因子受容体（ＦＧＦＲ−１〜ＦＧＦＲ−４）を介して伝達される。リガンド結合時に、受容体は、特定の細胞質チロシン残基を二量体化し、自己リン酸化又はリン酸基転移して、細胞内シグナルを伝達し、これが、最終的に核転写因子エフェクターに到達する。
【００４７】
ＦＧＦＲ−１（ＦＧＦＲＡ）経路の破壊は、このキナーゼが、内皮細胞の増殖に加え、多くの腫瘍タイプにおいて活性化されることから、腫瘍細胞増殖に影響を与えるはずである。腫瘍関連血管系におけるＦＧＦＲ−１の過剰発現及び活性化は、腫瘍血管新生におけるこれらの分子の役割を示唆している。
【００４８】
ＦＧＦＲ−２は、酸性及び／又は塩基性線維芽細胞増殖因子、並びにケラチノサイト増殖因子リガンドに対して高い親和性を有する。ＦＧＦＲ−２はまた、骨芽細胞増殖及び分化中にＦＧＦの強力な骨形成作用も増大させる。ＦＧＦＲ−２の突然変異は、複雑な機能改変を招き、頭蓋縫合（頭蓋骨縫合）の骨化異常を誘導することがわかっており、これは、膜内骨形成におけるＦＧＦＲシグナル伝達の主要な役割を意味している。例えば、早期頭蓋縫合骨化を特徴とするアペール（ＡＰ）症候群の場合、ほとんどの症例は、ＦＧＦＲ−２における機能獲得型点突然変異に関連している（例えば、Ｌｅｍｏｎｎｉｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２００１を参照）。
【００４９】
Ｌｅｍｏｎｎｉｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２００１，“Ｒｏｌｅ  ｏｆ  Ｎ−ｃａｄｈｅｒｉｎ  ａｎｄ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｋｉｎａｓｅ  Ｃ  ｉｎ  ｏｓｔｅｏｂｌａｓｔ  ｇｅｎｅ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｉｎｄｕｃｅｄ  ｂｙ  ｔｈｅ  Ｓ２５２Ｗ  ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ  ｇｒｏｗｔｈ  ｆａｃｔｏｒ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ２  ｍｕｔａｔｉｏｎ  ｉｎ  Ａｐｅｒｔ  ｃｒａｎｉｏｓｙｎｏｓｔｏｓｉｓ”，Ｊ．Ｂｏｎｅ  Ｍｉｎｅｒ．Ｒｅｓ．，Ｖｏｌ．１６，ｐｐ．８３２−８４５。
【００５０】
アペール症候群、クルーゾン症候群、ジャクソン・ワイス症候群、ベアレ・スティーブンソン脳回状頭皮（Ｂｅａｒｅ−Ｓｔｅｖｅｎｓｏｎ  ｃｕｔｉｓ  ｇｙｒａｔａ）症候群、及びファイファー症候群などのヒト骨格発達におけるいくつかの重度の異常は、ＦＧＦＲ−２における突然変異の発生に関連する。ファイファー症候群（ＰＳ）の全部ではないにしろ、その大部分の症例も、ＦＧＦＲ−２遺伝子のｄｅ  ｎｏｖｏ突然変異に起因するものであり（例えば、Ｍｅｙｅｒｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９６；Ｐｌｏｍｐ  ｅｔ  ａｌ．，１９９８を参照）、近年、ＦＧＦＲ−２の突然変異が、リガンド特異性を支配する基本原則の１つに反することが判明した。すなわち、線維芽細胞増殖因子受容体の２つの突然変異スプライス形態である、ＦＧＦＲ２ｃ及びＦＧＦＲ２ｂが、非典型的ＦＧＦリガンドに結合して、これにより活性化される能力を獲得した。このリガンド特異性の喪失は、異常なシグナル伝達を引き起こし、これらの疾患症候群の重症表現型は、ＦＧＦＲ−２の異所的リガンド依存性活性化によって生じることを示唆している（例えば、Ｙｕ  ｅｔ  ａｌ．，２０００を参照）。
【００５１】
染色体転位又は点突然変異などのＦＧＦＲ−３受容体チロシンキナーゼの突然変異の活性化によって、脱調節で、構成的に活性のＦＧＦＲ−３受容体が生じるが、これは、多発性骨髄腫並びに膀胱及び子宮頸癌に関与している（例えば、Ｐｏｗｅｒｓ  ｅｔ  ａｌ．，２０００を参照）。従って、ＦＧＦＲ−３阻害は、多発性骨髄腫、膀胱及び子宮頸癌の治療に有用となり得る。
【００５２】
血管新生
慢性増殖性疾患は、多くの場合、重度の血管新生を伴うが、これは、炎症及び／若しくは増殖状態に寄与し得る、若しくはそれを維持し得るか、又は血管の侵襲性増殖による組織破壊を招く。例えば、Ｆｏｌｋｍａｎ，１９９５；Ｆｏｌｋｍａｎ，１９９７；Ｆｏｌｋｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９２を参照されたい。
【００５３】
血管新生は、一般に、新たな血管若しくは置換血管の発生、又は新血管形成を説明するために用いられる。これは、血管系が胚に樹立される、必要かつ生理学的な正常プロセスである。血管新生は、一般に、排卵、月経及び創傷治癒の部位を除いて、ほとんどの正常な成体組織では起こらない。しかし、多くの疾患は、持続的かつ非制御血管新生を特徴とする。例えば、関節炎の場合、新たな毛細血管が、関節に侵入して、軟骨を破壊する（例えば、Ｃｏｌｖｉｌｌｅ−Ｎａｓｈ  ａｎｄ  Ｓｃｏｔｔ，１９９２を参照）。糖尿病（及び多くの様々な眼病）の場合には、新たな血管が、黄斑若しくは網膜又は他の眼構造に侵入し、失明を引き起こす恐れがある（例えば、Ａｌｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５を参照）。アテローム性動脈硬化のプロセスは、血管新生に関連している（例えば、Ｋａｈｌｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９２を参照）。腫瘍増殖及び転移は、血管新生依存性であることが判明している（例えば、Ｆｏｌｋｍａｎ，１９９２；Ｄｅｎｅｋａｍｐ，１９９３；Ｆｉｄｌｅｒ  ａｎｄ  Ｅｌｌｉｓ，１９９４を参照）。
【００５４】
主要な疾患における血管新生の関与の認識は、血管新生の阻害物質を同定及び開発するための研究によって達成された。これらの阻害物質は、一般に、血管新生カスケードにおける異なる標的、例えば、血管新生シグナルによる内皮細胞の活性化；分解酵素の合成及び放出；内皮細胞移動；内皮細胞の増殖；及び毛細管の形成などに応じて分類される。従って、血管新生は、多数の段階で起こり、これらの様々な段階で血管新生を阻止するように作用する化合物をみいだし、開発する試みが進行中である。
【００５５】
多様な機構により作用する血管新生の阻害物質が、癌及び転移（例えば、Ｏ’Ｒｅｉｌｌｙ  ｅｔ  ａｌ．，１９９４；Ｉｎｇｂｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９０を参照）、眼病（例えば、Ｆｒｉｅｄｌａｎｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５を参照）、関節炎（例えば、Ｐｅａｃｏｃｋ  ｅｔ  ａｌ．，１９９２；Ｐｅａｃｏｃｋ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５を参照）、並びに血管腫（例えば、Ｔａｒａｂｏｌｅｔｔｉ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５を参照）などの疾患に有益であることを教示する多数の刊行物が存在する。
【００５６】
ＶＥＧＦＲ
ポリペプチドである血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで内皮細胞の分裂促進性であり、ｉｎ  ｖｉｖｏで血管新生応答を刺激する。ＶＥＧＦは、不適切な血管新生にも関連している（例えば、Ｐｉｎｅｄｏ  ｅｔ  ａｌ．，２０００を参照）。ＶＥＧＦＲは、受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）である。ＲＴＫは、細胞増殖及び分化の調節に関与するタンパク質における特定のチロシル残基のリン酸化を触媒する（例えば、Ｗｉｌｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９０；Ｃｏｕｒｔｎｅｉｄｇｅ  ｅｔ  ａｌ．，１９９３；Ｃｏｏｐｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９４；Ｐａｕｌｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５；Ｃｈａｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９６を参照）。
【００５７】
ＶＥＧＦの３つのＲＴＫ受容体：ＶＥＧＦＲ−１（Ｆｌｔ−１）、ＶＥＧＦＲ−２（Ｆｌｋ−１又はＫＤＲ）、及びＶＥＧＦＲ−３（Ｆｌｔ−４）が同定されている。これらの受容体は、血管新生に関与し、シグナル伝達に参加する（例えば、Ｍｕｓｔｏｎｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５）。
【００５８】
特に興味深いのは、ＶＥＧＦＲ−２（ＫＤＲ）であり、これは、主として内皮細胞に発現される膜貫通受容体ＲＴＫである。ＶＥＧＦによるＶＥＧＦＲ−２の活性化は、腫瘍血管新生を開始するシグナル伝達経路において重要なステップである。ＶＥＧＦ発現は、腫瘍細胞にとって重要であり、特定の刺激因子に応答して上方制御もされ得る。このような刺激因子の１つは低酸素であり、その場合、ＶＥＧＦ発現は、腫瘍及び関連宿主組織の両方で上方制御される。ＶＥＧＦリガンドは、その細胞外ＶＥＧＦ結合部位と結合することにより、ＶＥＧＦＲ−２を活性化する。これによって、ＶＥＧＦＲの受容体二量体化と、ＶＥＧＦＲ−２の細胞内キナーゼドメインでのチロシン残基の自己リン酸化が起こる。キナーゼドメインが作動して、ＡＴＰからのリン酸塩をチロシン残基に輸送し、これは、ＶＥＧＦＲ−２の下流にシグナル伝達タンパク質のための結合部位をもたらし、これによって、最終的に血管新生の開始が起こる（例えば、ＭｃＭａｈｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０００を参照）。
【００５９】
ＶＥＧＦＲ−２のキナーゼドメイン結合部位での阻害は、チロシン残基のリン酸化を阻止するため、血管新生の開始を中断する上で役立つ。
【００６０】
ＶＥＧＦＲ−２（及びＶＥＧＦＲ−３）は、主として腫瘍血管系（血液及び／又はリンパ液）に局在化し、大部分の固形腫瘍を支持し、有意に上方制御される。ＶＥＧＦシグナル伝達阻害剤の作用の主要な臨床機構は、腫瘍細胞ではなく、むしろ腫瘍血管のターゲティングによるものと考えられる（例えば、Ｓｍｉｔｈ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０を参照）が、その他の機構も記載されている。血管内皮細胞増殖因子（ＶＥＧＦ）ターゲティング剤は、単剤として、又は化学療法との併用のいずれかで投与され、進行期悪性腫瘍を有する患者に利益をもたらすことが証明されている（例えば、Ｅｌｌｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，２００８を参照）。
【００６１】
ＫＤＲは、他の疾患において重要な役割を果たすことから、ＫＤＲの阻害剤は、以下の状態に有用となり得る。
【００６２】
アテローム性動脈硬化：ＫＤＲは、血管新生中の内皮細胞上及びヒトアテローム性動脈硬化血管の管腔内皮上の両方に強力に発現されるが、正常な動脈又は静脈には発現されない（例えば、Ｂｅｌｇｏｒｅ  ｅｔ  ａｌ．，２００４を参照）。ＶＥＧＦ及びＶＥＧＦ受容体２（ＫＤＲ、ヒト；Ｆｌｋ−１、マウス）同士の相互作用は、病的血管新生に重要であり、アテローム性動脈硬化病変の発生に関与している（例えば、Ｉｎｏｕｅ  ｅｔ  ａｌ．，１９９８を参照）。ＫＤＲに対するワクチン接種によって、Ｔ細胞活性化、血管新生の抑制、及びアテローム性動脈硬化（雄及び雌マウスのいずれにおいても高コレステロール血症とは無関係であった）の顕著な軽減がもたらされた（例えば、Ｐｅｔｒｏｖａｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００７を参照）。
【００６３】
肥満：食餌誘導性肥満の過程での脂肪組織中の新たな血管の形成は、ｄｅ  ｎｏｖｏ脈管形成というより、むしろ大部分が血管新生に起因する。ＶＥＧＦＲ１ではなくＶＥＧＦＲ２の阻止による抗血管新生治療は、脂肪組織拡大を制限し得る（例えば、Ｔａｍ  ｅｔ  ａｌ．，２００９を参照）。
【００６４】
網膜症及び黄斑症：ＶＥＧＦ−ＶＥＧＦＲ系の異常な活性化は、加齢黄斑変性（ＡＭＤ）の進行に深く関与している。従って、ＶＥＧＦ−Ａ165に対するアプタマー、ＶＥＧＦ−中和抗体（Ｆａｂタイプ）及びＶＥＧＦ−Ｔｒａｐが現在、ＡＭＤ治療のために承認されている（例えば、Ｍａｓａｂｕｍｉ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３を参照）。抗ＶＥＧＦ抗体であるベバツシマブ抗体は、ＡＭＤ、糖尿病性網膜症、及び糖尿病性黄斑浮腫（ＤＭＥ）などの状態に適応外使用されている（例えば、Ｒｏｔｓｏｓ  ｅｔ  ａｌ．，２００８を参照）。
【００６５】
神経障害性疼痛症候群：ＶＥＧＦ及びＶＥＧＦＲ２は、神経障害性疼痛の病因に関与している。ＣＣＩラットにおける抗ｒＶＥＧＦ治療は、ＤＲＧニューロン上のＶＥＧＦＲ２及びＰ２Ｘ２／３受容体の発現を低減して、神経障害性疼痛シグナル伝達を阻害することによって、慢性神経障害性疼痛を緩和し得る（例えば、Ｌｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０を参照）。
【００６６】
関節リウマチ：ＶＥＧＦＲに対する特異的活性を有する受容体チロシンキナーゼ阻害剤であり、かつＶＥＧＦ−Ｒ２（ＫＤＲ）の強力な阻害を示すと共に、ＶＥＧＦＲ１（Ｆｌｔ−１）、Ｆｌｋ−１（ＫＤＲのマウス相同体）、及びＦｌｔ−４（リンパ系にみいだされる受容体）のやや弱い阻害を呈示するＰＴＫ７８７／ＺＫ２２２５８４は、コラーゲン誘導性関節炎を有するマウスにおいて、４０％の、重症度スコア（５１％）及び全節組織学的スコアで、膝浮腫を阻害した（例えば、Ｇｒｏｓｉｏｓ  ｅｔ  ａｌ．，２００４を参照）。
【００６７】
ＴＩＥ
内皮特異的受容体チロシンキナーゼＴＩＥ−２のリガンドであるアンジオポエチン１（Ａｎｇ１）は、血管新生因子である（例えば、Ｄａｖｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９６；Ｐａｒｔａｎｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９２；Ｄａｖｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９４；Ｄａｖｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９６；Ａｌｉｔａｌｏ  ｅｔ  ａｌ．，１９９６；Ｇｏｄｏｗｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７を参照）。頭字語ＴＩＥは、「Ｉｇ及びＥＧＦ相同性ドメインを含有するチロシンキナーゼ」を表す。ＴＩＥは、血管内皮細胞及び早期造血細胞にのみ発現される受容体チロシンキナーゼのクラスを明示するのに用いられる。典型的に、ＴＩＥ受容体キナーゼは、鎖内ジスルフィド結合により安定化される、ＥＧＦ様ドメイン及び免疫グロブリン（ＩＧ）様ドメイン（細胞外フォールディング単位から構成される）の存在を特徴とする（例えば、Ｐａｒｔａｎｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９９を参照）。血管発生の早期に機能するＶＥＧＦとは異なり、Ａｎｇ１及びその受容体ＴＩＥ−２は、血管発生の後期、すなわち、血管リモデリング（リモデリングとは、血管内腔の形成を指す）及び成熟中に機能する（例えば、Ｙａｎｃｏｐｏｕｌｏｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９８；Ｐｅｔｅｒｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９８；Ｓｕｒｉ  ｅｔ  ａｌ．，１９９６を参照）。
【００６８】
その結果、ＴＩＥ−２の阻害は、血管新生により開始された新たな血管のリモデリング及び成熟を破壊し、これによって、血管新生プロセスを破壊する上で役立つことが予想される。
【００６９】
ｐ３８
ｐ３８は、ストレスに応答して活性化され、免疫応答並びに細胞生存及び分化に重要な役割を果たす３８ｋＤａのＭＡＰＫファミリーメンバーである。４つのｐ３８ＭＡＰＫキナーゼが記載されており；これらのタンパク質は、高度の相同性（ｐ３８α、β、γ、及びδ）を共有する。ｐ３８ＭＡＰＫは、増殖因子、炎症性サイトカイン、又は多様な環境ストレスなど、様々な刺激因子によって活性化され得る。次にｐ３８ＭＡＰＫは、いくつかの下流標的（タンパク質キナーゼ、細胞質基質、転写因子及びクロマチンリモデリング因子など）を活性化し得る。サイトカイン及び細胞ストレスによるｐ３８ＭＡＰＫの強力な活性化は、一般に、細胞増殖の阻害を促進して、アポトーシスを誘導する（例えば、Ｃｕａｄｒａｄｏ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０の論文を参照）。さらに最近では、ｐ３８αは、ホメオスタシス及び関連疾患の維持において重要な役割を果たすことが判明している。疾患におけるｐ３８αの最もよく知られ、最も広く報告されている役割は、サイトカインシグナル伝達及び病的炎症の促進におけるその機能に関連する。いくつかの研究は、ｐ３８αが、どのようにして一連の疾患モデル（関節リウマチ、乾癬、アルツハイマー病、炎症性腸疾患、クローン病、腫瘍発生、心血管病、及び発作を含む）を媒介することができるかを明らかにしている。さらに、いくつかの肺疾患（例えば、喘息、嚢胞性線維症、特発性肺線維症、及び慢性閉塞性肺疾患など）の発生及び維持におけるｐ３８ＭＡＰＫの役割のエビデンスがある。従って、ｐ３８αは、特に、炎症性疾患におけるその重要な役割のために、興味深い薬剤標的である（例えば、Ｏｅｚｔｕｅｒｋ−Ｗｉｎｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２の論文を参照）。ＳＢ２０３５８０などのピリジニル−イミダゾール薬は、ＡＴＰ結合ポケットに競合的に結合することがみいだされた最初のｐ３８ＭＡＰＫ阻害剤であり、ｐ３８ＭＡＰＫ機能を研究するために広く用いられている（例えば、Ｃｏｕｌｔｈａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，２００９を参照）。
【００７０】
ＳＲＣ
ｃ−ＳＲＣは、非受容体ＳＲＣファミリーキナーゼ（ＳＦＫ）に属する。これらのタンパク質は、増殖、生存、及び細胞運動性などの多くの細胞イベントに関与している。従って、ＳＲＣシグナル伝達の過剰活性化は、多様な態様の腫瘍発生に寄与する。ｃ−ＳＲＣの最も重要な機能は、そのＳＨ２及びＳＨ３ドメインを介した、細胞膜での膜貫通受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）との広範な相互作用である。ｃ−ＳＲＣは、表皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）、ヒト表皮増殖因子受容体２（ＨＥＲ２）、血小板由来増殖因子受容体（ＰＤＧＦＲ）、インスリン様増殖因子１受容体（ＩＧＦ−１Ｒ）及びｃ−Ｍｅｔ／肝細胞増殖因子受容体（ＨＧＦＲ）などの多くのＲＴＫと相互作用する。３つの相互作用により、ｃ−ＳＲＣは、ＲＴＫシグナル伝達を組み込み、これを調節して、生存シグナルを下流のエフェクター（例えば、ホスホイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）Ａｋｔ、並びにシグナル伝達性転写因子３（ＳＴＡＴ３）に直接伝達する（例えば、Ｚｈａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２を参照）。インテグリンなどの他の膜受容体もまた、ｃ−ＳＲＣを活性化することができるため、細胞移動、接着及び侵入を調節するシグナルカスケードをトリガーする。ｐ１２０カテニンとの相互作用によるｃ−Ｓｒｃ活性化は、細胞−細胞間の接着結合の分離を促進し、これによって細胞運動性を増強する。ｃ−ＳＲＣは、局所接着複合体（ＦＡＫ、パキシリン、ＲｈｏＡ、及びその他の成分から構成される）を安定化する局所接着キナーゼ（ＦＡＫ）を直接リン酸化し、細胞外マトリックスとの細胞接着を増強する。さらに、ｃ−ＳＲＣは、腫瘍微小環境を調節する上でも重要な役割を果たす。低酸素でのｃ−ＳＲＣ活性化は、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）、マトリックスメタロプロテイナーゼ（ＭＭＰ）及びインターロイキン−８（ＩＬ−８）の発現の刺激による血管新生を促進する（例えば、Ｙｅａｔｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００４を参照）。
【００７１】
ＳＦＫのターゲティングは、多くのタイプの癌についての十分に確立された治療アプローチである。ダサチニブは、経口投与が可能な小分子多標的キナーゼ阻害剤であり、これは、ＳＲＣファミリーキナーゼ（ＳＲＣ、ＬＣＫ、ＹＥＳ、ＦＹＮ）だけでなく、ＢＣＲ−ＡＢＬ、ｃ−ＫＩＴ、ＰＤＧＦＲ−α及びβ、並びにエフリン受容体キナーゼを強力に阻害する（例えば、Ｌｉｎｄａｕｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０を参照）。さらに最近の研究では、Ｓｒｃが、炎症関連シグナル伝達経路にも関与していることが報告されている。多くの研究によって、ｃ−ＳＲＣが、マクロファージ介在性炎症応答に重要な役割を果たすことが明らかにされている。重要なことには、多様な炎症性疾患が、マクロファージ活性化と密接に関連しており；従って、ｃ−ＳＲＣ阻害は、マクロファージ介在性疾患のための有用な治療戦略を提供し得る（例えば、Ｂｙｅｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０を参照）。
【００７２】
Ｌｃｋ
Ｌｃｋ（リンパ球特異的キナーゼ）は、Ｔ細胞活性化に重要なＳＦＫのキナーゼであり、その活性は、Ｔ−細胞受容体（ＴＣＲ）によって誘導される。Ｌｃｋにより開始されるＴＣＲシグナルは、遺伝子調節イベントを招き、その結果、サイトカインの放出、抗原特異的Ｔ−細胞の増殖及び生存が起こり、これによって、特定の免疫応答を増幅する。Ｌｃｋの阻害は、Ｔ−細胞媒介性自己免疫及び炎症性障害並びに／又は臓器移植片拒絶反応の治療のための新規治療アプローチを提供すると考えられる（例えば、Ｍａｒｔｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０を参照）。
【００７３】
公知の化合物
Ｎｉｃｕｌｅｓｃｕ−Ｄｕｖａｚ  ｅｔ  ａｌ．，２００６は、中でも、ＲＡＦ（例えば、ＢＲＡＦ）活性を阻害し、癌などの増殖性障害の治療に有用な特定のイミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−オン及びオキサゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−２−オン化合物を記載している。そこに示されるいくつかの化合物は、５−（ｔｅｒｔ−ブチル）−２−（フェニル）−ピラゾール−３−イル基又は５−（ｔｅｒｔ−ブチル）−２−（ピリジル）−ピラゾール−３−イル基を有する。しかし、いずれの場合にも、フェニル及びピリジル基は、非置換であるか、パラ−置換、又はオルト、パラ−二置換されており；それがメタ−置換されている化合物はない。以下の化合物が示されている。
【００７４】
【表３】
0006389529.tif 000004
【００７５】
【表４】
0006389529.tif 000005
【００７６】
Ｎｉｃｕｌｅｓｃｕ−Ｄｕｖａｚ  ｅｔ  ａｌ．，２００７は、中でも、ＲＡＦ（例えば、ＢＲＡＦ）活性を阻害し、癌などの増殖性障害の治療に有用な特定のイミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−オン及びオキサゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−２−オン化合物を記載している。そこに示されるいくつかの化合物は、５−（ｔｅｒｔ−ブチル）−２−（フェニル）−ピラゾール−３−イル基を有する。しかし、いずれの場合にも、フェニル基は、非置換であるか、又はパラ−置換されており；それがメタ−置換されている化合物はない。以下の化合物が示されている。
【００７７】
【表５】
0006389529.tif 000006
【００７８】
Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２００９は、中でも、ＲＡＦ（例えば、ＢＲＡＦ）活性を阻害し、癌などの増殖性障害の治療に有用な特定のピリド［２，３−ｂ］ピラジン−８−置換化合物を記載している。そこに示されるいくつかの化合物は、５−（ｔｅｒｔ−ブチル）−２−（フェニル）−ピラゾール−３−イル基又は５−（ｔｅｒｔ−ブチル）−２−（ピリジル）−ピラゾール−３−イル基を有する。しかし、いずれの場合にも、フェニル及びピリジル基は、非置換であるか、パラ−置換されており；それがメタ−置換されている化合物はない。以下の化合物が示されている。
【００７９】
【表６】
0006389529.tif 000007
【００８０】
Ｎｉｃｕｌｅｓｃｕ−Ｄｕｖａｚら  ｅｔ  ａｌ．，２００９は、中でも、ＲＡＦ（例えば、ＢＲＡＦ）活性を阻害し、癌などの増殖性障害の治療に有用な特定のアリール−キノリニル化合物を記載している。そこに示されるいくつかの化合物は、５−（ｔｅｒｔ−ブチル）−２−（フェニル）−ピラゾール−３−イル基を有する。しかし、いずれの場合にも、フェニル基は、非置換であるか、又はパラ−置換されており；それがメタ−置換されている化合物はない。以下の化合物が示されている。
【００８１】
【表７】
0006389529.tif 000008
【００８２】
Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１は、中でも、ＲＡＦ（例えば、ＢＲＡＦ）活性を阻害し、癌などの増殖性障害の治療に有用な特定の１−（５−ｔｅｒｔ−ブチル−２−フェニル−２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−３−［２−フルオロ−４−（１−メチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−７−イルオキシ）−フェニル］尿素化合物を記載している。以下の化合物が示されている。
【００８３】
【表８】
0006389529.tif 000009
【００８４】
Ｍｕｒｒａｙ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１は、炎症性疾患又は呼吸器障害の治療に使用するための特定の化合物を記載している。そこに示される少数の化合物は、５−（ｔｅｒｔ−ブチル）−２−（フェニル）−ピラゾール−３−イル基又は５−（ｔｅｒｔ−ブチル）−２−（ピリジル）−ピラゾール−３−イル基を有する。しかし、いずれの場合にも、フェニル及びピリジル基は、非置換であるか、パラ−置換、又はメタ、パラ−置換されており；それがメタ−置換されている、パラ非置換である化合物はない。以下の化合物が示されている。
【００８５】
【表９】
0006389529.tif 000010
【００８６】
５−（ｔｅｒｔ−ブチル）−２−（３−フルオロ−フェニル）−ピラゾール−３−イル基を有するいくつかの化合物が公知であり、以下のものが挙げられる。
【００８７】
【表１０】
0006389529.tif 000011
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００８８】
本発明の一態様は、本明細書に記載する特定の１−（５−ｔｅｒｔ−ブチル−２−アリール−ピラゾール−３−イル）−３−［２−フルオロ−４−［（３−オキソ−４Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］ピラジン−８−イル）オキシ］−フェニル］尿素化合物（本明細書では「ＴＢＡＰ化合物」と呼ぶ）に関する。
【００８９】
本発明の別の態様は、本明細書に記載するＴＢＡＰ化合物と、薬学的に許容される担体又は希釈剤とを含む組成物（例えば、医薬組成物）に関する。
【００９０】
本発明の別の態様は、組成物（例えば、医薬組成物）を調製する方法であって、本明細書に記載するＴＢＡＰ化合物を、薬学的に許容される担体又は希釈剤と混合するステップを含む、方法に関する。
【００９１】
本発明の別の態様は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ又はｉｎ  ｖｉｖｏで、ＲＡＦ（例えば、ＢＲＡＦ、ＣＲＡＦなど）機能（例えば、細胞における）を阻害する方法であって、細胞を、本明細書に記載する有効量のＴＢＡＰ化合物と接触させるステップを含む、方法に関する。
【００９２】
本発明の別の態様は、療法によるヒト又は動物の治療方法に使用するための、例えば、本明細書に記載する障害（例えば、疾患）の治療方法に使用するための本明細書に記載のＴＢＡＰ化合物に関する。
【００９３】
本発明の別の態様は、例えば、治療方法に使用するための、例えば、本明細書に記載する障害（例えば、疾患）の治療方法に使用するための、薬剤の製造における本明細書に記載のＴＢＡＰ化合物の使用に関する。
【００９４】
本発明の別の態様は、治療方法、例えば、本明細書に記載する障害（例えば、疾患）の治療方法に関し、治療を必要とする被験者に、好ましくは医薬組成物の形態で、本明細書に記載する治療有効量のＴＢＡＰ化合物を投与するステップを含む、方法に関する。
【００９５】
本発明の別の態様は、（ａ）好ましくは医薬組成物として、並びに好適な容器中に及び／又は好適なパッケージングを用いて提供される、本明細書に記載するＴＢＡＰ化合物と；（ｂ）使用のための説明、例えば、化合物の投与方法に関する説明書とを含むキットに関する。
【００９６】
本発明の別の態様は、本明細書に記載する合成方法、又は本明細書に記載する合成方法を含む方法により取得可能なＴＢＡＰ化合物に関する。
【００９７】
本発明の別の態様は、本明細書に記載する合成方法、又は本明細書に記載する合成方法を含む方法により取得されるＴＢＡＰ化合物に関する。
【００９８】
本発明の別の態様は、本明細書に記載する合成方法での使用に好適な、本明細書に記載する新規の中間物に関する。
【００９９】
本発明の別の態様は、本明細書に記載する合成方法における、本明細書に記載のこうした新規中間物の使用に関する。
【０１００】
当業者には理解されるように、本発明の一態様の特徴及び好ましい実施形態は、本発明の他の態様にも関連する。
【発明を実施するための形態】
【０１０１】
化合物
本発明の一態様は、下記化合物：
【化１】
0006389529.tif 000012
に構造的に関連する特定の１−（５−ｔｅｒｔ−ブチル−２−アリール−ピラゾール−３−イル）−３−［２−フルオロ−４−［（３−オキソ−４Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］ピラジン−８−イル）オキシ］−フェニル］尿素化合物に関する。
【０１０２】
より具体的には、本発明は、単一のメタ（ｍｅｔａ）置換基（本明細書では−Ｙとして示す）を追加的に有する、特定の関連化合物に関する。
【０１０３】
従って、本発明の一態様は、下記式：
【化２】
0006389529.tif 000013
（ここで、＝Ｘ−及び−Ｙは、本明細書に定義する通りである）
の化合物、並びにその薬学的に許容される塩、Ｎ−オキシド、水和物、及び溶媒和物から選択される化合物に関する（便宜上、本明細書では集合的に「ＴＢＡＰ化合物」と呼ぶ）。
【０１０４】
本発明の一部の実施形態は、以下を包含する：
（１）下記式：
【化３】
0006389529.tif 000014
（式中、
＝Ｘ−は、独立に、＝ＣＨ−又は＝Ｎ−であり；
−Ｙは、独立に、−Ｙ1、−Ｙ2、−Ｙ3、−Ｙ4、−Ｙ5、又は−Ｙ6であり；
−Ｙ1は、独立に、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、又は−Ｉであり；
−Ｙ2は、直鎖又は分岐飽和Ｃ1〜4アルキルであり；
−Ｙ3は、直鎖又は分岐飽和Ｃ1〜4ハロアルキルであり；
−Ｙ4は、−ＯＨであり；
−Ｙ5は、直鎖又は分岐飽和Ｃ1〜4アルコキシであり；及び
−Ｙ6は、直鎖又は分岐飽和Ｃ1〜4ハロアルコキシである）
の化合物、並びにその薬学的に許容される塩、Ｎ−オキシド、水和物、及び溶媒和物から選択される化合物。
【０１０５】
以下に示すように、３−オキソ−３，４−ジヒドロピリド［３，２−ｂ］ピラジン−８−イル基に対して互変異性化が可能であることに留意されたい。別に指示されていない限り、１つの互変異性体について述べるとき、両方の互変異性体を指すことが意図される。
【化４】
0006389529.tif 000015
は、
【化５】
0006389529.tif 000016
の互変異性体である。
【０１０６】
−Ｘ＝が−Ｎ＝であり、−Ｙが−Ｙ4（すなわち、−ＯＨ）であるとき、以下に示すように、得られる２−ヒドロキシ−ピリド−４−イル基に対して互変異性化が可能であることに留意されたい。別に指示されていない限り、１つの互変異性体について述べるとき、両方の互変異性体を指すことが意図される。
【化６】
0006389529.tif 000017
は
【化７】
0006389529.tif 000018
の互変異性体である。
【０１０７】
＝Ｘ−が−Ｎ＝であるとき、得られる基は、ピリジル−４−イル基であり、以下に示すように、Ｎ−オキシドが形成され得ることに留意されたい。
【化８】
0006389529.tif 000019
【０１０８】
誤解を避けるために、「直鎖又は分岐飽和Ｃ1〜4ハロアルキル」という用語は、１個又は複数個（例えば、１、２、３個など）のハロゲン（例えば、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ）置換基を有する直鎖又は分岐飽和Ｃ1〜4アルキル基に関する。こうした基の一例は、−ＣＦ3である。
【０１０９】
誤解を避けるために、「直鎖又は分岐飽和Ｃ1〜4アルコキシ」という用語は、基−ＯＲに関し、ここで、Ｒは、直鎖又は分岐飽和Ｃ1〜4アルキル基である。こうした基の一例は、−ＯＭｅである。
【０１１０】
同様に、「直鎖又は分岐飽和Ｃ1〜4ハロアルコキシ」という用語は、Ｒが直鎖又は分岐飽和Ｃ1〜4ハロアルキル基である基−ＯＲに関する。こうした基の一例は、−ＯＣＦ3である。
【０１１１】
誤解を避けるために、メチルは、−Ｍｅと略され；エチルは、−Ｅｔと略され；ｎ−プロピルは、−ｎＰｒと略され；イソ−プロピルは、−ｉＰｒと略され；ｎ−ブチルは、−ｎＢｕと略され；イソ−ブチルは、−ｉＢｕと略され；ｓｅｃ−ブチルは、−ｓＢｕと略され；ｔｅｒｔ−ブチルは、−ｔＢｕと略され；フェニルは、−Ｐｈと略される。
【０１１２】
基＝Ｘ−
（２）（１）（ここで、＝Ｘ−は、＝ＣＨ−である）の化合物。
（３）（１）（ここで、＝Ｘ−は、＝Ｎ−である）の化合物。
【０１１３】
基−Ｙ
（４）（１）〜（３）（ここで、−Ｙは、−Ｙ1である）のいずれか１つの化合物。
（５）（１）〜（３）（ここで、−Ｙは、−Ｙ2である）のいずれか１つの化合物。
（６）（１）〜（３）（ここで、−Ｙは、−Ｙ3である）のいずれか１つの化合物。
（７）（１）〜（３）（ここで、−Ｙは、−Ｙ4である）のいずれか１つの化合物。
（８）（１）〜（３）（ここで、−Ｙは、−Ｙ5である）のいずれか１つの化合物。
（９）（１）〜（３）（ここで、−Ｙは、−Ｙ6である）のいずれか１つの化合物。
【０１１４】
基−Ｙ1
（１０）（１）〜（９）（ここで、−Ｙ1は、存在する場合、独立に、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒである）のいずれか１つの化合物。
（１１）（１）〜（９）（ここで、−Ｙ1は、存在する場合、独立に、−Ｆ又は−Ｃｌである）のいずれか１つの化合物。
（１２）（１）〜（９）（ここで、−Ｙ1は、存在する場合、−Ｆである）のいずれか１つの化合物。
（１３）（１）〜（９）（ここで、−Ｙ1は、存在する場合、−Ｃｌである）のいずれか１つの化合物。
（１４）（１）〜（９）（ここで、−Ｙ1は、存在する場合、−Ｂｒである）のいずれか１つの化合物。
（１５）（１）〜（９）（ここで、−Ｙ1は、存在する場合、−Ｉである）のいずれか１つの化合物。
【０１１５】
基−Ｙ2
（１６）（１）〜（１５）（ここで、−Ｙ2は、存在する場合、独立に、−Ｍｅ、−Ｅｔ、−ｎＰｒ、−ｉＰｒ、−ｎＢｕ、−ｉＢｕ、−ｓＢｕ、又は−ｔＢｕである）のいずれか１つの化合物。
（１７）（１）〜（１５）（ここで、−Ｙ2は、存在する場合、独立に、−Ｍｅ、−Ｅｔ、−ｎＰｒ、又は−ｉＰｒである）のいずれか１つの化合物。
（１８）（１）〜（１５）（ここで、−Ｙ2は、存在する場合、独立に、−Ｍｅ又は−Ｅｔである）のいずれか１つの化合物。
（１９）（１）〜（１５）（ここで、−Ｙ2は、存在する場合、独立に、−Ｍｅである）のいずれか１つの化合物。
【０１１６】
基−Ｙ3
（２０）（１）〜（１９）（ここで、−Ｙ3は、存在する場合、直鎖又は分岐飽和Ｃ1〜4フルオロアルキルである）のいずれか１つの化合物。
（２１）（１）〜（１９）（ここで、−Ｙ3は、存在する場合、独立に、−ＣＨ2Ｆ、−ＣＨＦ2、−ＣＦ3、−ＣＨ2ＣＨ2Ｆ、−ＣＨ2ＣＨＦ2、又は−ＣＨ2ＣＦ3である）のいずれか１つの化合物。
（２２）（１）〜（１９）（ここで、−Ｙ3は、存在する場合、独立に、−ＣＨ2Ｆ、−ＣＨＦ2、又は−ＣＦ3である）のいずれか１つの化合物。
（２３）（１）〜（１９）（ここで、−Ｙ3は、存在する場合、−ＣＦ3である）のいずれか１つの化合物。
【０１１７】
基−Ｙ5
（２４）（１）〜（２３）（ここで、−Ｙ5は、存在する場合、独立に、−Ｏ−Ｍｅ、−Ｏ−Ｅｔ、−Ｏ−ｎＰｒ、−Ｏ−ｉＰｒ、−Ｏ−ｎＢｕ、−Ｏ−ｉＢｕ、−Ｏ−ｓＢｕ、又は−Ｏ−ｔＢｕである）のいずれか１つの化合物。
（２５）（１）〜（２３）（ここで、−Ｙ5は、存在する場合、独立に、−Ｏ−Ｍｅ、−Ｏ−Ｅｔ、−Ｏ−ｎＰｒ、又は−Ｏ−ｉＰｒである）のいずれか１つの化合物。
（２６）（１）〜（２３）（ここで、−Ｙ5は、存在する場合、独立に、−Ｏ−Ｍｅ又は−Ｏ−Ｅｔである）のいずれか１つの化合物。
（２７）（１）〜（２３）（ここで、−Ｙ5は、存在する場合、−Ｏ−Ｍｅである）のいずれか１つの化合物。
【０１１８】
基−Ｙ6
（２８）（１）〜（２７）（ここで、−Ｙ6は、存在する場合、直鎖又は分岐飽和Ｃ1〜4フルオロアルコキシである）のいずれか１つの化合物。
（２９）（１）〜（２７）（ここで、−Ｙ6は、存在する場合、独立に、−Ｏ−ＣＨ2Ｆ、−Ｏ−ＣＨＦ2、−Ｏ−ＣＦ3、−Ｏ−ＣＨ2ＣＨ2Ｆ、−Ｏ−ＣＨ2ＣＨＦ2、又は−Ｏ−ＣＨ2ＣＦ3である）のいずれか１つの化合物。
（３０）（１）〜（２７）（ここで、−Ｙ6は、存在する場合、独立に、−Ｏ−ＣＨ2Ｆ、−Ｏ−ＣＨＦ2、又は−Ｏ−ＣＦ3である）のいずれか１つの化合物。
（３１）（１）〜（２７）（ここで、−Ｙ6は、存在する場合、−Ｏ−ＣＦ3である）のいずれか１つの化合物。
【０１１９】
一部の好ましい化合物
（３２）下記式の化合物並びにその薬学的に許容される塩、Ｎ−オキシド、水和物、及び溶媒和物から選択される（１）の化合物。
【０１２０】
【表１１】
0006389529.tif 000020
【０１２１】
【表１２】
0006389529.tif 000021
【０１２２】
組合せ
明瞭化のために、個別の実施形態に関連して記載される本発明のいくつかの特徴が、単一の実施形態で、組み合わせて提供される場合もあることは理解される。反対に、簡略化のために、単一の実施形態に関連して記載される本発明の様々な特徴を、個別に、又は任意の好適な部分組合せで提供される場合もある。変数（例えば、＝Ｘ−、−Ｙ、−Ｙ1、−Ｙ2、−Ｙ3、−Ｙ4、−Ｙ5、−Ｙ6など）により表される化学基に関する実施形態のあらゆる組合せが、本発明に具体的に包含され、このような組合せが安定な化合物（すなわち、単離、特性決定、及び生物学的活性について試験することができる化合物）である化合物を包含するような範囲まで、全ての組合せが個別かつ明示的に開示されているのと全く同様に、本明細書に開示される。さらに、このような変数を表す実施形態に記載される化学基のあらゆる部分組合せもまた、本発明により具体的に包含され、化学基のこうした部分組合せの全てが個別かつ明示的に本明細書に開示されているのと全く同様に、本明細書に開示される。
【０１２３】
実質的に精製された形態
本発明の一態様は、実質的に精製された形態の、及び／又は実質的に混入物を含まない形態の、本明細書に記載するＴＢＡＰ化合物に関する。
【０１２４】
一実施形態では、化合物は、実質的に精製された形態及び／又は混入物を実質的に含まない形態である。
【０１２５】
一実施形態では、化合物は、少なくとも５０重量％、例えば、少なくとも６０重量％、例えば、少なくとも７０重量％、例えば、少なくとも８０重量％、例えば、少なくとも９０重量％、例えば、少なくとも９５重量％、例えば、少なくとも９７重量％、例えば、少なくとも９８重量％、例えば、少なくとも９９重量％の純度で実質的に精製された形態である。
【０１２６】
一実施形態では、化合物は、混入物を実質的に含まない形態であり、ここで、混入物は、５０重量％以下、例えば、４０重量％以下、例えば、３０重量％以下、例えば、２０重量％以下、例えば、１０重量％以下、例えば、５重量％以下、例えば、３重量％以下、例えば、２重量％以下、例えば、１重量％以下を示す。指定されない限り、混入物は、他の化合物を指す。
【０１２７】
異性体
特定の化合物は、１つ又は複数の特定の幾何異性体、光学異性体、鏡像異性体、ジアステレオマー、エピマー、アトロプ、立体異性体、互変異性体、配座異性体、又はアノマー形態で存在し得るが、このようなものとして、限定はしないが、シス及びトランス形態；Ｅ及びＺ型；ｃ、ｔ及びｒ型；エンド（ｅｎｄｏ−）及びエキソ（ｅｘｏ−）型；Ｒ、Ｓ、及びメソ型；Ｄ及びＬ型；ｄ及びｌ型；（＋）及び（−）型；ケト、エノール、及びエノレート型；シン（ｓｙｎ）及びアンチ（ａｎｔｉ）型；シンクリナル及びアンチクリナル型；α及びβ型；アキシャル及びエクアトリアル型；ボート（ｂｏａｔ）、チェア（ｃｈａｉｒ）、ツイスト、エンベロープ、及びハーフチェア型；並びにこれらの組合せが挙げられ、これらは、以後、集合的に「異性体」（又は「異性体型」）と呼ぶ。
【０１２８】
互変異性体型について後述する場合を除いて、構造（ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ）（又は構造（ｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ））異性体（すなわち、単に空間中の原子の位置ではなく、原子同士の結合が異なる異性体）は、本明細書で用いる用語「異性体」から明確に除外されることに留意されたい。例えば、メトキシ基、−ＯＣＨ3について述べるとき、これは、その構造異性体、ヒドロキシメチル基、−ＣＨ2ＯＨを指すものとして解釈すべきではない。同様に、オルト−クロロフェニルと述べるとき、これは、その構造異性体、メタ−クロロフェニルを指すものとして解釈すべきではない。しかし、１クラスの構造というとき、これは、そのクラスに属する構造異性体を十分に包含し得る（例えば、Ｃ1〜7アルキルは、ｎ−プロピル及びイソ−プロピルを含み；ブチルは、ｎ−、イソ−、及びｔｅｒｔ−ブチルを含み；メトキシフェニルは、オルト−、メタ−、及びパラ−メトキシフェニルを含む）。
【０１２９】
前述の除外は、互変異性体型、例えば、ケト、エノール、並びに例えば、以下の互変異性体ペアにあるようなエノレート型：ケト／エノール（以下に示す）、イミン／エナミン、アミド／イミノアルコール、アミジン／アミジン、ニトロソ／オキシム、チオケトン／エネチオール、Ｎ−ニトロソ／ヒドロキシアゾ、及びニトロ／アシ−ニトロには適用されない。
【化９】
0006389529.tif 000022
【０１３０】
用語「異性体」には、１つ又は複数の同位体置換を含む化合物が明確に含まれることに留意されたい。例えば、Ｈは、1Ｈ、2Ｈ（Ｄ）、及び3Ｈ（Ｔ）などの任意の同位体型であってよく；Ｃは、12Ｃ、13Ｃ、及び14Ｃなどの任意の同位体型であってよく；Ｏは、16Ｏ、及び18Ｏなどの任意の同位体型であってよい。
【０１３１】
別に指定されていない限り、具体的化合物について述べるとき、上記のような異性体型（それらの混合物を含む）を全て包含する。こうした異性体型の調製及び分離の方法は、当技術分野で公知であり、あるいは、本明細書に教示する、又は公知の方法を周知のように適合させることによって容易に得られる。
【０１３２】
塩
化合物の対応する塩、例えば、薬学的に許容される塩を調製、精製、及び／若しくは処理することが好都合であるか、又は望ましい場合がある。薬学的に許容される塩の例は、Ｂｅｒｇｅ  ｅｔ  ａｌ．，１９７７，“Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｌｙ  Ａｃｃｅｐｔａｂｌｅ  Ｓａｌｔｓ，”Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．，Ｖｏｌ．６６，ｐｐ．１−１９に記載されている。
【０１３３】
例えば、化合物がアニオン系であるか、又はアニオン系であり得る官能基（例えば、−ＣＯＯＨは、−ＣＯＯ-であり得る）を有する場合、塩は、好適なカチオンと共に形成することができる。好適な無機カチオンの例として、限定はしないが、Ｎａ+及びＫ+などのアルカリ金属イオン、Ｃａ2+及びＭｇ2+などのアルカリ土類カチオン、並びにＡｌ3+などの他のカチオンが挙げられる。好適な有機カチオンの例として、限定はしないが、アンモニウムイオン（すなわち、ＮＨ4+）及び置換アンモニウムイオン（例えば、ＮＨ3Ｒ+、ＮＨ2Ｒ2+、ＮＨＲ3+、ＮＲ4+）が挙げられる。一部の好適な置換アンモニウムイオンの例は、以下：エチルアミン、ジエチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、トリエチルアミン、ブチルアミン、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペラジン、ベンジルアミン、フェニルベンジルアミン、コリン、メグルミン、及びトロメタミン、並びにアミノ酸、例えば、リシン及びアルギニンから得られるものである。一般的第四アンモニウムイオンの一例は、Ｎ（ＣＨ3）4+である。
【０１３４】
化合物が、カチオン系であるか、又はカチオン系であり得る官能基（例えば、−ＮＨ2は、−ＮＨ3+であり得る）を有する場合、塩は、好適なアニオンと共に形成することができる。好適な無機アニオンの例として、限定はしないが、以下の無機酸：塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、亜硫酸、硝酸、亜硝酸、リン酸、及び亜リン酸から得られるものが挙げられる。
【０１３５】
好適な有機アニオンの例として、限定はしないが、以下の有機酸：２−アセチオキシ安息香酸、酢酸、アスコルビン酸、アスパラギン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、ケイ皮酸、クエン酸、エデト酸、エタンジスルホン酸、エタンスルホン酸、ギ酸、フマル酸、グルケプトン酸、グルコン酸、グルタミン酸、グリコール酸、ヒドロキシマレイン酸、ヒドロキシナフタレンカルボン酸、イセチオン酸、乳酸、ラクトビオン酸、ラウリン酸、マレイン酸、リンゴ酸、メタンスルホン酸、ムチン酸、オレイン酸、シュウ酸、パルミチン酸、パモイン酸、パントテン酸、フェニル酢酸、フェニルスルホン酸、プロピオン酸、ピルビン酸、サリチル酸、ステアリン酸、スクシン酸、スルファニリル酸、酒石酸、トルエンスルホン酸、及び吉草酸から得られるものが挙げられる。好適なポリマー有機アニオンの例として、限定はしないが、以下のポリマー酸：タンニン酸、カルボキシメチルセルロースから得られるものが挙げられる。
【０１３６】
別に指定されていない限り、特定の化合物について述べるとき、その塩形態も含む。
【０１３７】
Ｎ−オキシド
化合物の対応するＮ−オキシドを調製、精製、及び／若しくは処理することが好都合であるか、又は望ましい場合がある。例えば、ピリジル基を有する化合物を、対応するＮ−オキシドとして調製、精製、及び／又は処理することができる。
【化１０】
0006389529.tif 000023
【０１３８】
別に指定されていない限り、特定の化合物について述べるとき、そのＮ−オキシド形態も含む。
【０１３９】
水和物及び溶媒和物
化合物の対応する溶媒和物を調製、精製、及び／又は処理することが好都合であるか、又は望ましい場合がある。「溶媒和物」という用語は、本明細書において、溶質（例えば、化合物、化合物の塩）及び溶媒の複合体を指す従来の意味で用いられる。溶媒が水であれば、溶媒和物は、便宜的に、水和物、例えば、一水和物、二水和物、三水和物などと呼ばれることがある。
【０１４０】
別に指定されていない限り、特定の化合物について述べるとき、その溶媒和物及び水和物形態も含む。
【０１４１】
化学的に保護された形態
化学的に保護された形態の化合物を調製、精製、及び／若しくは処理することが好都合であるか、又は望ましい場合がある。「化学的に保護された形態」という用語は、本明細書において、従来の化学的な意味で用いられ、１つ又は複数の反応性官能基が、指定条件（例えば、ｐＨ、温度、放射線、溶媒など）下での望ましくない化学反応から保護されている化合物に関する。実際には、公知の化学的方法を使用して、そうでなければ反応性となり得る官能基を、指定条件下で、可逆的に非反応性にする。化学的に保護された形態において、１つ又は複数の反応性官能基は、被保護又は保護基（また、被マスク若しくはマスク基又は被遮断若しくは遮断基としても知られる）の形態である。反応性官能基を保護することによって、他の保護されていない反応性官能基を含む反応を、被保護基に影響を与えることなく、実施することができ；保護基は、通常次のステップで、分子の残り部分に実質的に影響を与えることなく、除去することができる。例えば、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（Ｔ．Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｐ．Ｗｕｔｓ；４ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ；Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，２００６）を参照されたい。
【０１４２】
こうした多様な「保護」、「遮断」、又は「マスキング」方法は、有機合成において広く用いられ、よく知られている。例えば、２つの非同等反応性官能基（いずれも、指定条件下で反応性であり得る）を有する化合物は、官能基の１つを指定条件下で「被保護」にする、従って、非反応性にするように、誘導体化することができ；このように保護されると、化合物は、実際上ただ１つの反応性官能基を有する試薬として用いることができる。所望の反応（他方の官能基が関与する）が完了したら、被保護基を「脱保護」して、その本来の官能性に戻すこともできる。
【０１４３】
例えば、ヒドロキシ基は、エーテル（−ＯＲ）又はエステル（−ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ）、例えば、ｔ−ブチルエーテル；ベンジル、ベンズヒドリル（ジフェニルメチル）、若しくはトリチル（トリフェニルメチル）エーテル；トリメチルシリル若しくはｔ−ブチルジメチルシリルエーテル；又はアセチルエステル（−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ3、−ＯＡｃ）として保護することができる。
【０１４４】
例えば、アルデヒド又はケトン基は、それぞれ、アセタール（Ｒ−ＣＨ（ＯＲ）2）又はケタール（Ｒ2Ｃ（ＯＲ）2）として保護することができ、ここで、カルボニル基（＞Ｃ＝Ｏ）は、例えば、第一級アルコールとの反応により、ジエーテル（＞Ｃ（ＯＲ）2）に変換される。アルデヒド又はケトン基は、酸の存在下で大量の水を用いた加水分解により、容易に再生される。
【０１４５】
プロドラッグ
プロドラッグの形態の化合物を調製、精製、及び／若しくは処理することが好都合であるか、又は望ましい場合がある。本明細書で用いる場合、「プロドラッグ」という用語は、代謝される（例えば、ｉｎ  ｖｉｖｏで）と、所望の活性化合物をもたらす化合物に関する。典型的に、プロドラッグは、不活性であるか、又は所望の活性化合物より活性が低いが、有利な管理、投与、若しくは代謝特性を賦与し得る。
【０１４６】
例えば、一部のプロドラッグは、活性化合物のエステル（例えば、生理学的に許容される代謝不安定性エステル）である。代謝の間、エステル基（−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ）が切断されて、活性薬剤をもたらす。このようなエステルは、例えば、親化合物（適切であれば、親化合物中に存在する任意の他の反応性基の事前の保護を有する）中のカルボン酸基（−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ）のいずれかのエステル化により形成することができ、その後、必要に応じて脱保護を行う。
【０１４７】
また、一部のプロドラッグを酵素により活性化して、活性化合物、又はさらなる化学反応後に、活性化合物（例えば、ＡＤＥＰＴ、ＧＤＥＰＴ、ＬＩＤＥＰＴなどとして）をもたらす化合物を取得する。例えば、プロドラッグは、糖誘導体若しくは他のグリコシドコンジュゲートであるか、又はアミノ酸エステル誘導体であってもよい。
【０１４８】
化学合成
本発明の化合物の化学合成の方法を本明細書に記載する。これらの及び／又は他の公知の方法は、本発明の範囲内で、別の化合物の合成を容易にするために、周知の方法で、変更及び／又は適合化してもよい。
【０１４９】
本明細書に記載する化合物の調製に有用な一般的実験方法及び手順の説明は、Ｖｏｇｅｌ’ｓ  Ｔｅｘｔｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，５ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，１９８９（編者：Ｆｕｒｎｉｓｓ、Ｈａｎｎａｆｏｒｄ、Ｓｍｉｔｈ、及びＴａｔｃｈｅｌｌ）（Ｌｏｎｇｍａｎｎ，ＵＫにより出版）に記載されている。
【０１５０】
特に、ピリジン化合物の合成方法は、Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，３ｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，１９９８（編者：Ｊｏｕｌｅ、Ｍｉｌｌｓ、及びＳｍｉｔｈ）（Ｃｈａｐｍａｎ＆Ｈａｌｌ，ＵＫにより出版）に記載されている。
【０１５１】
本明細書に記載するＴＢＡＰ化合物は、鍵中間体（２）を介して調製することができる。この中間体は、市販の出発材料、２−アミノ−３−ニトロ−４−クロロピリジン（１）、及び３−フルオロ−４−アミノフェノールから調製することができる。中間体（２）は、例えば、ＢＯＣカルバメートのように、アミノ基を選択的に保護することにより、中間体（３）を取得することができる。
【０１５２】
このような方法の一例を以下のスキームに示す。
【化１１】
0006389529.tif 000024
中間体（３）はまた、２−アミノ−３−ニトロ−４−クロロピリジン（１）及びＮ−ＢＯＣ−被保護３−フルオロ−４−アミノフェノールから直接得ることもできる。
【０１５３】
このような方法の一例を以下のスキームに示す。
【化１２】
0006389529.tif 000025
被保護中間体（３）のニトロ基を還元して、アミノ基を取得することができ、例えば、Ｐｄ／Ｃ及びギ酸アンモニウム又は水素を用いて、又はＮｉＣｌ2及びＮａＢＨ4を用いて、ジアミノ中間体（４）を得ることができる。
【０１５４】
このような方法の一例を以下のスキームに示す。
【化１３】
0006389529.tif 000026
中間体（４）から、エチルグリオキシレート又はグリオキシル酸との反応により、ピリドピラジノンを得ることができる。異性体（５）及び（６）の両方を、（４）とエチルグリオキシレート又はグリオキシル酸との反応から取得することができる。２つの異性体の比は、試薬及び溶媒の選択に影響され得るため、一方が優先的に得られる。要望される異性体（５）は、混合物からのカラムクロマトグラフィー又は選択的結晶化により混合物から分離することができる。
【０１５５】
このような方法の一例を以下のスキームに示す。
【化１４】
0006389529.tif 000027
例えば、Ｂｏｃ保護基の場合、フッ化テトラブチルアンモニウム（ＴＢＡＦ）を用いた保護基（ＰＧ）の脱保護によって、共通中間体（７）が生成される。
【０１５６】
このような方法の一例を以下のスキームに示す。
【化１５】
0006389529.tif 000028
鍵中間体（７）を３−ｔｅｒｔ−ブチル−５−イソシアナト−１−アリール−１Ｈ−ピラゾール（１０）と反応させることにより、対応する尿素（１１）が得られる。
【０１５７】
このような方法の一例を以下のスキームに示す。
【化１６】
0006389529.tif 000029
例えば、アミン（９）と、ホスゲン、トリホスゲン若しくはそれらの誘導体との反応、又は例えば、ジフェニルホスホリルアジドを用いた、対応するカルボン酸（８）のアシルアジドへの変換、それに続くクルチウス転移により、それぞれのイソシアネート（１０）を取得することができる。これらの試薬は、例示のために記載するにすぎず、アミン又はカルボン酸をイソシアネートに変換するために同様に用いることができる他の好適な試薬が当技術分野において公知であることは留意すべきである。
【０１５８】
このような方法の例を以下のスキームに示す。
【化１７】
0006389529.tif 000030
例えば、対応するメタ置換フェニル若しくはピリジルボロン酸（ＲはＨである）又はボロン酸エステル（Ｒはアルキルである）（１２）と３−ｔｅｒｔ−ブチル−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸エステルとの反応、これに続くエステルのカルボン酸への加水分解により、要望されるカルボン酸（８）を取得することができる。ボロン酸エステル、Ｂ（ＯＲ）2は、４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イルなどの環状エステルを含む。
【０１５９】
このような方法の一例を以下のスキームに示す。
【化１８】
0006389529.tif 000031
例えば、対応するメタ置換フェニル又はピリジルヒドラジン（１４）と４，４−ジメチル−３−オキソペンタンニトリルとの反応により、要望されるアミン（９）を取得することができる。
【０１６０】
このような方法の一例を以下のスキームに示す。
【化１９】
0006389529.tif 000032
別のアプローチでは、中間体（７）を３−ｔｅｒｔ−ブチル−５−アミノ−１−アリール−１Ｈ−ピラゾールの活性化カルバメートと反応させることにより、対応する尿素が得られる。
【０１６１】
このような方法の一例を以下のスキームに示す。
【化２０】
0006389529.tif 000033
アミン（９）を、クロロギ酸エステル、例えば、クロロギ酸フェニルと反応させて、フェニル（３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−１−アリール−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）カルバメート（１５）を形成するか、又は１−メチルビニルクロロギ酸エステルと反応させて、１−メチルビニル（３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−１−アリール−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）カルバメートを形成することにより、それぞれの活性化カルバメートを取得することができる。
【０１６２】
あるいは、共通中間体（７）のアミノ位置は、例えば、クロロギ酸フェニル又はギ酸１−メチルビニルクロロとの反応により活性化することができる。
【０１６３】
このような方法の一例を以下のスキームに示す。
【化２１】
0006389529.tif 000034
このようにして形成した活性化カルバメートを次に芳香族アミンと反応させて、対応する尿素を得ることができる。
【０１６４】
このような方法の一例を以下のスキームに示す。
【化２２】
0006389529.tif 000035
上のスキーム１０〜１２に示す活性化カルバメートは、あくまで例に過ぎない。当技術分野で公知の他の活性化カルバメートを用いてもよく、例えば、４−ニトロフェニルカルバメート及びＮ−ヒドロキシスクシンイミドカルバメートなどが挙げられる。
【０１６５】
別のアプローチでは、まず尿素を形成した後、環状化を行う。
【０１６６】
このような方法の一例を以下のスキームに示す。
【化２３】
0006389529.tif 000036
別のアプローチでは、アミノフェノールを尿素に変換して、中間体（２０）を形成することができる。
【０１６７】
このような方法の一例を以下のスキームに示す。
【化２４】
0006389529.tif 000037
次に、中間体（２０）を（１）と結合させて、（１７）を取得することができる。例えば、上のスキーム１３に示したように、さらなる変換によって、生成物（１１）が得られる。
【０１６８】
このような方法の一例を以下のスキームに示す。
【化２５】
0006389529.tif 000038
【０１６９】
組成物
本発明の一態様は、本明細書に記載するＴＢＡＰ化合物と、薬学的に許容される担体、希釈剤、若しくは賦形剤を含む組成物（例えば、医薬組成物）に関する。
【０１７０】
本発明の別の態様は、本明細書に記載するＴＢＡＰ化合物と、薬学的に許容される担体、希釈剤、若しくは賦形剤とを混合するステップを含む、組成物（例えば、医薬組成物）を調製する方法に関する。
【０１７１】
使用
本明細書に記載するＴＢＡＰ化合物は、例えば、増殖性障害（「抗増殖剤」として）、癌（「抗癌剤」として）、炎症性疾患（「抗炎症剤」として）、ウイルス感染症（「抗ウイルス剤」として）、神経変性疾患（「抗神経変性剤」として）、線維性疾患（「抗線維化剤」として）の治療に有用である。
【０１７２】
ＲＡＦ（例えば、ＢＲＡＦ、ＣＲＡＦなど）を阻害する方法における使用
本発明の一態様は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ又はｉｎ  ｖｉｖｏで、ＲＡＦ（例えば、ＢＲＡＦ、ＣＲＡＦなど）機能（例えば、細胞における）を阻害する方法であって、細胞を、本明細書に記載する有効量のＴＢＡＰ化合物と接触させるステップを含む方法に関する。
【０１７３】
当業者であれば、候補化合物がＲＡＦ（例えば、ＢＲＡＦ、ＣＲＡＦなど）を阻害するか否かを容易に決定することができる。例えば、好適なアッセイは、本明細書に記載されているか、又は当技術分野において公知である。
【０１７４】
一実施形態において、本方法は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで実施される。
【０１７５】
一実施形態において、本方法は、ｉｎ  ｖｉｖｏで実施される。
【０１７６】
一実施形態において、ＴＢＡＰ化合物は、薬学的に許容される組成物の形態で提供される。
【０１７７】
あらゆるタイプの細胞を処置することができ、そうした細胞として、脂肪、肺、胃腸（例えば、腸、結腸など）、胸部（乳房）、卵巣、前立腺、肝臓（肝）、腎臓（腎）、膀胱、膵臓、脳、及び皮膚が挙げられる。
【０１７８】
例えば、細胞のサンプルをｉｎ  ｖｉｔｒｏで増殖させて、化合物を前記細胞と接触させてから、これらの細胞に対する化合物の作用を観察してもよい。「作用」の一例として、細胞の形態学的状態（例えば、生存又は死滅など）を決定してもよい。化合物が、細胞に影響を及ぼすことが認められれば、同じ細胞型の細胞を有する患者を治療する方法における化合物の効力の予後又は診断マーカとして、この化合物を用いることができる。
【０１７９】
細胞増殖などを阻害する方法における使用
本明細書に記載するＴＢＡＰ化合物は、例えば、（ａ）細胞増殖を調節（例えば、阻害）し；（ｂ）細胞周期の進行を阻害し；（ｃ）アポトーシスを促進するか；又は（ｄ）これらのうち１つ又は複数の組合せを行う。
【０１８０】
本発明の一態様は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ又はｉｎ  ｖｉｖｏで、細胞増殖（例えば、細胞の増殖）を調節（例えば、阻害）し、細胞周期の進行を阻害し、アポトーシスを促進するか、又はこれらのうちの１つ又は複数の組合せを行う方法であって、細胞を、本明細書に記載する有効量のＴＢＡＰ化合物と接触させるステップを含む方法に関する。
【０１８１】
一実施形態では、方法は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ又はｉｎ  ｖｉｖｏで、細胞増殖（例えば、細胞の増殖）を調節（例えば、阻害）する方法であって、細胞を、本明細書に記載する有効量のＴＢＡＰ化合物と接触させるステップを含む方法に関する。
【０１８２】
一実施形態では、方法は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで実施する。
【０１８３】
一実施形態では、方法は、ｉｎ  ｖｉｖｏで実施する。
【０１８４】
一実施形態では、ＴＢＡＰ化合物は、薬学的に許容される組成物の形態で提供される。
【０１８５】
あらゆるタイプの細胞を処置することができ、そうした細胞として、肺、胃腸（例えば、腸、結腸など）、胸部（乳房）、卵巣、前立腺、肝臓（肝）、腎臓（腎）、膀胱、膵臓、脳、及び皮膚が挙げられる。
【０１８６】
当業者であれば、候補化合物が細胞増殖を調節（例えば、阻害）するか否かを容易に決定することができる。例えば、特定の化合物によって付与される活性を評価するために好都合に用いることができるアッセイは、本明細書に記載されている。
【０１８７】
例えば、細胞のサンプル（例えば、腫瘍由来）をｉｎ  ｖｉｔｒｏで増殖させて、化合物を前記細胞と接触させてから、これらの細胞に対する化合物の作用を観察してもよい。「作用」の一例として、細胞の形態学的状態（例えば、生存又は死滅など）を決定してもよい。化合物が、細胞に影響を及ぼすことが認められれば、同じ細胞型の細胞を有する患者を治療する方法における化合物の効力の予後又は診断マーカとして、この化合物を用いることができる。
【０１８８】
治療方法における使用
本発明の別の態様は、療法によるヒト又は動物身体の治療方法に使用するための、例えば、本明細書に記載する障害（例えば、疾患）の治療方法に使用するための、本明細書に記載するＴＢＡＰ化合物に関する。
【０１８９】
薬剤の製造における使用
本発明の別の態様は、例えば、治療方法に使用するための、例えば、本明細書に記載する障害（例えば、疾患）の治療方法に使用するための、薬剤の製造における本明細書に記載するＴＢＡＰ化合物の使用に関する。
【０１９０】
一実施形態では、薬剤は、ＴＢＡＰ化合物を含む。
【０１９１】
治療方法
本発明の別の態様は、治療方法、例えば、本明細書に記載する障害（例えば、疾患）の治療の方法であって、治療を必要とする被験者に、好ましくは医薬組成物の形態で、本明細書に記載する治療有効量のＴＢＡＰ化合物を投与するステップを含む方法に関する。
【０１９２】
治療対象の障害  −  増殖性障害
（例えば、治療方法における使用のための、薬剤の製造における使用の、治療方法の）一実施形態において、治療は、増殖性障害の治療である。
【０１９３】
本明細書で用いる用語「増殖性障害」は、新形成又は過形成増殖のように、望ましくない過剰若しくは異常細胞の不要又は非制御細胞増殖に関する。
【０１９４】
一実施形態では、治療は、以下：良性、前悪性、又は悪性細胞増殖を特徴とする増殖性障害の治療である。
【０１９５】
一実施形態では、治療は、以下：過形成；新生物；腫瘍（例えば、組織球腫、グリオーマ、星状細胞腫、骨腫）；癌；乾癬；骨疾患；線維増殖性障害（例えば、結合組織）；肺線維症；アテローム性動脈硬化；又は血管における平滑筋細胞増殖（例えば、血管形成術後の狭窄若しくは再狭窄）の治療である。
【０１９６】
治療対象の障害  −  癌
（例えば、治療方法における使用の、薬剤の製造における使用の、治療方法の）一実施形態において、治療は、癌の治療である。
【０１９７】
一実施形態では、治療は、癌転移の治療である。
【０１９８】
癌には以下のものが含まれる：
（１）以下を含む癌腫：重層扁平上皮由来の腫瘍（扁平上皮癌）及び臓器又は腺内に発生する腫瘍（腺癌）。例として、乳癌、大腸癌、肺癌、膵臓癌、前立腺癌、卵巣癌が挙げられる。
（２）以下を含む肉腫：骨肉腫及び骨原性肉腫（骨）；軟骨肉腫（軟骨）；平滑筋肉腫（平滑筋）；横紋筋肉腫（骨格筋）；中皮肉腫及び中皮腫（体腔の膜ライニング）；線維肉腫（線維組織）；血管肉腫及び血管内肉腫（血管）；脂肪肉腫（脂肪組織）；グリオーマ及び星状細胞腫（脳にみいだされる神経原性結合組織）；粘液肉腫（原始胚結合組織）；間葉及び混合性中胚葉腫瘍（混合結合組織型）。
（３）骨髄腫。
（４）以下を含む黒色腫：例えば、表在拡大型黒色腫、結節型黒色腫、悪性黒子型黒色腫、末端性黒色腫、及びブドウ膜黒色腫。
（５）以下を含む造血器腫瘍：骨髄性及び顆粒球性白血病（骨髄及び顆粒球系白血球群の悪性疾患）；リンパ性、リンパ球性、及びリンパ芽球性白血病（リンパ及びリンパ球系血液細胞群の悪性疾患）；真性多血症（赤血病としても知られる）（赤血球が優勢である、多様な血液細胞産物の悪性疾患）。
（６）以下を含むリンパ腫：ホジキン及び非ホジキンリンパ腫。
（７）以下を含む混合型：例えば、腺扁平上皮癌；混合性中胚葉腫瘍（癌肉腫；奇形癌腫。
【０１９９】
一実施形態では、癌は、癌幹細胞を特徴とするか、又はこれをさらに特徴とする。
【０２００】
一実施形態では、治療は、抗体、例えば、公知の抗体、例えば、法的に承認された抗体による治療に対して耐性の癌の治療である。一実施形態では、治療は、抗体、例えば、公知の抗体、例えば、法的に承認された抗体による治療に対して耐性の黒色腫の治療である。黒色腫を治療するために公知であるこうした抗体の例として、以下のものが挙げられる：ＣＴＬＡ−４（細胞傷害性Ｔリンパ球関連抗原４）に結合する抗体、例えば、イピリムマブ（承認済）；ＰＤ−１（プログラム化細胞死１受容体）に結合する抗体、例えば、ペムブロリズマブ（承認済）及びニボルマブ（承認済）；ＰＤ−Ｌ１（プログラム化細胞死リガンド１）に結合する抗体、例えば、ＭＥＤＩ４７３６（臨床試験中）及びＭＰＤＬ３２８０Ａ（臨床試験中）；黒色腫抗原糖タンパク質ＮＭＢに結合する抗体及び抗体コンジュゲート、例えば、グレムバツムマブベドチン（臨床試験中）；抗腫瘍内皮マーカ１に結合する抗体、例えば、オンツキシズマブ（臨床試験中）；ＶＥＧＦに結合する抗体、例えば、単独、又は標準的化学療法若しくは低用量ＩＦＮ−α２ｂと併用されるベバシズマブ（臨床試験中）；ガングリオシドＧＤ３に結合する抗体、例えば、ＫＷ−２８７１（臨床試験中）；インテグリンアイソフォーム（例えば、αvβ1、αvβ3、αvβ5、及びαvβ6）に結合する抗体、例えば、インテツムマブ（臨床試験中）。
【０２０１】
抗癌作用は、１つ又は複数の機構を通して起こり得るが、こうした機構として、限定はしないが、細胞増殖の調節、細胞周期進行の阻害、血管新生（新しい血管の形成）の阻害、転移（腫瘍の、その起源からの広がり）の阻害、細胞移動（癌細胞の、身体の他の部分への広がり）の阻害、侵入（腫瘍細胞の、周辺の正常構造への広がり）の阻害、アポトーシス（プログラム化細胞死）の促進、壊死による細胞死、又は自食作用による細胞死の誘導が挙げられる。本明細書に記載する化合物は、本明細書で述べる機構とは関係なく、本明細書に記載する癌の治療に用いることができる。
【０２０２】
治療対象の障害  −  炎症
（例えば、治療方法における使用の、薬剤の製造における使用の、治療方法の）一実施形態において、治療は、炎症（例えば、炎症性障害又は反応）の治療である。
【０２０３】
一実施形態では、治療は、急性炎症（例えば、急性感染症により媒介される）の治療である。
【０２０４】
一実施形態では、治療は、慢性炎症（例えば、慢性感染症により媒介される）の治療である。
【０２０５】
一実施形態では、炎症性疾患は、以下：肺の炎症性疾患（例えば、喘息；慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ））；眼の炎症性疾患（例えば、ブドウ膜炎）；及び消化管の炎症性疾患（例えば、クローン病；潰瘍性大腸炎）から選択される。
【０２０６】
一実施形態では、炎症性疾患は、以下のものから選択される：
（ｉ）炎症性要素を有する肺疾患又は障害、例えば、嚢胞性線維症、肺高血圧症、肺サルコイドーシス、特発性肺線維症、並びに特に、ＣＯＰＤ（慢性気管支炎及び気腫を含む）、喘息、及び小児喘息；
（ｉｉ）炎症性要素を有する皮膚疾患又は障害、例えば、アトピー性皮膚炎、アレルギー性皮膚炎、接触皮膚炎、及び乾癬；
（ｉｉｉ）炎症性要素を有する鼻疾患又は障害、例えば、アレルギー性鼻炎、鼻炎、及び副鼻腔炎；
（ｉｖ）炎症性要素を有する眼疾患又は障害、例えば、結膜炎、アレルギー性結膜炎、乾性角結膜炎（ドライアイ）、緑内障、糖尿病性網膜症、黄斑浮腫（糖尿病性黄斑浮腫を含む）、網膜中心静脈閉塞症（ＣＲＶＯ）、ドライ及び／又はウェット型加齢性黄斑変性（ＡＭＯ）、白内障術後炎症、及び特に、ブドウ膜炎（後部、前部及び汎ブドウ膜炎を含む）、角膜移植片及び角膜縁細胞移植片拒絶反応；並びに
（ｖ）炎症性要素を有する消化管疾患又は障害、例えば、グルテン過敏性腸疾患（セリアック病）、好酸球性食道炎、腸管移植片対宿主病、並びに特に、クローン病及び潰瘍性大腸炎。
【０２０７】
一実施形態では、炎症性疾患は、以下から選択される：嚢胞性線維症；肺高血圧症；肺サルコイドーシス；特発性肺線維症；慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）（慢性気管支炎及び気腫を含む）；喘息；小児喘息；アトピー性皮膚炎；アレルギー性皮膚炎；接触皮膚炎；乾癬；アレルギー性鼻炎；鼻炎；副鼻腔炎；結膜炎；アレルギー性結膜炎；乾性角結膜炎（ドライアイ）；緑内障；糖尿病性網膜症；黄斑浮腫（糖尿病性黄斑浮腫を含む）；網膜中心静脈閉塞症（ＣＲＶＯ）；ドライ及び／又はウェット型加齢性黄斑変性（ＡＭＤ）；白内障術後炎症；ブドウ膜炎（後部、前部及び汎ブドウ膜炎を含む）、角膜移植片及び角膜縁細胞移植片拒絶反応；グルテン過敏性腸疾患（セリアック病）；好酸球性食道炎；腸管移植片対宿主病；クローン病；及び潰瘍性大腸炎。
【０２０８】
一実施形態では、炎症性疾患は、喘息又はＣＯＰＤである。
【０２０９】
一実施形態では、炎症性疾患は、ブドウ膜炎、クローン病、又は潰瘍性大腸炎である。
【０２１０】
治療対象の障害  −  自己免疫障害
（例えば、治療方法における使用の、薬剤の製造における使用の、治療方法の）一実施形態において、治療は、自己免疫障害の治療である。
【０２１１】
一実施形態では、治療は、アレルギーの治療である。
【０２１２】
一実施形態では、治療は、喘息などの炎症性気道疾患の治療である。
【０２１３】
一実施形態では、治療は、アレルギー性接触皮膚炎の治療である。
【０２１４】
一実施形態では、治療は、免疫系の疾患の治療である。
【０２１５】
一実施形態では、治療は、自己免疫疾患、例えば、関節リウマチ；全身性エリテマトーデス（狼瘡）；炎症性腸疾患（ＩＢＤ）；多発性硬化症（ＭＳ）；１型糖尿病；ギランバレー症候群；乾癬；グレーブス病；橋本甲状腺炎；重症筋無力症；脈管炎；免疫不全症；重症複合免疫不全症（ＳＣＩＤ）；分類不能型免疫不全症（ＣＶＩＤ）；ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）；後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）；薬剤誘発性免疫不全；又は移植片対宿主症候群の治療である。
【０２１６】
治療対象の障害  −  ウイルス感染症
（例えば、治療方法における使用の、薬剤の製造における使用の、治療方法の）一実施形態において、治療は、ウイルス感染症の治療である。
【０２１７】
一実施形態では、治療は、以下のものによるウイルス感染症の治療である：
（Ｉ群：）ｄｓＤＮＡウイルス、例えば、アデノウイルス、ヘルペスウイルス、ポックスウイルス；
（ＩＩ群：）ｓｓＤＮＡウイルス、例えば、パルボウイルス；
（ＩＩＩ群：）ｄｓＲＮＡウイルス、例えば、レオウイルス；
（ＩＶ群：）（＋）ｓｓＲＮＡウイルス、例えば、ピコルナウイルス、トガウイルス；
（Ｖ群：）（−）ｓｓＲＮＡウイルス、例えば、オルトミクソウイルス、ラブドウイルス；
（ＶＩ群：）ｓｓＲＮＡ−ＲＴウイルス、例えば、レトロウイルス；又は
（ＶＩＩ群：）ｄｓＤＮＡ−ＲＴウイルス、例えば、ヘパドナウイルス。
【０２１８】
上で用いる場合：ｄｓ：二本鎖；ｓｓ：＋鎖；（＋）ｓｓＲＮＡ：＋鎖ＲＮＡ；（−）ｓｓＲＮＡ：−鎖ＲＮＡ；ｓｓＲＮＡ−ＲＴ：生活環にＤＮＡ中間体を有する（＋鎖）ＲＮＡ。
【０２１９】
一実施形態では、治療は、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）；Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）；Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）；ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）；サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）；又はエプスタイン−バールウイルス（ＥＢＶ）；カポジ肉腫に関連するヒトヘルペスウイルス８（ＨＨＶ）；コクサッキーウイルスＢ３；ボルナウイルス；インフルエンザウイルスの治療である。
【０２２０】
治療対象の障害  −  線維性障害
（例えば、治療方法における使用の、薬剤の製造における使用の、治療方法の）一実施形態において、治療は、線維性障害（過剰線維症、例えば傷害に応答して、例えば修復若しくは反応プロセスによりトリガーされる、例えば、組織若しくは臓器における線維結合組織の過剰を特徴とする障害（例えば、瘢痕化、治癒）、又は単一細胞株から発生する過剰線維組織を特徴とする障害（例えば、線維腫））の治療である。
【０２２１】
一実施形態では、治療は、以下：
（肺の場合：）肺線維症；嚢胞性線維症に続発する肺線維症；特発性肺線維症；炭鉱夫進行性塊状線維症；
（肝臓の場合：）硬変；
（心臓の場合：）心内膜心筋線維症；陳旧性心筋梗塞；動脈線維症；
（隔膜の場合：）隔膜線維症；
（骨の場合：）骨髄線維症；
（後腹膜腔の場合：）後腹膜線維症；
（皮膚の場合：）腎性全身性線維症；ケロイド瘢痕化；全身性硬化症；強皮症；
（腸の場合：）クローン病；
（結合組織の場合：）関節線維化；又は関節包炎
の治療である。
【０２２２】
治療対象の障害  −  突然変異型ＢＲＡＦの阻害により改善される障害
（例えば、治療方法における使用の、薬剤の製造における使用の、治療方法の）一実施形態において、治療は、ＲＡＦ（例えば、ＢＲＡＦ）の突然変異形態、例えば、Ｄａｖｉｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，２００２；Ｗａｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００４；及びＳｔｒａｔｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００３に記載される突然変異などに関連する障害（例えば、疾患）（例えば、増殖性障害、例えば、癌）の治療である。
【０２２３】
（例えば、治療方法における使用の、薬剤の製造における使用の、治療方法の）一実施形態において、治療は、ＲＡＦ（例えば、ＢＲＡＦ）の阻害により改善される障害（例えば、疾患）（例えば、増殖性障害、例えば、癌）の治療である。
【０２２４】
一実施形態では、治療は、突然変異型ＲＡＦ（例えば、ＢＲＡＦ）を過剰発現する（例えば、対応する正常細胞と比較して；例えば、過剰発現は、１．５、２、３、５、１０、２０若しくは５０の倍数で起こる）細胞を特徴とする障害（例えば、疾患）の治療である。
【０２２５】
増殖性障害：
一実施形態では、治療は、以下：悪性黒色腫；大腸癌；転移性大腸癌；甲状腺濾胞癌；甲状腺島状癌；甲状腺乳頭癌；卵巣癌；低悪性度卵巣癌；非小細胞肺癌；ヘアリーセル白血病；胆管癌；小児低悪性度グリオーマ（例えば、毛様細胞性星状細胞腫；神経節膠腫；多型黄色星細胞腫）；多発性骨髄腫；又は膵臓の髄様癌の治療である。一実施形態では、治療は、膵管腺癌の治療である。
【０２２６】
一実施形態では、治療は、ＲＡＦの突然変異型（例えば、ＢＲＡＦ、ＣＲＡＦなど）に関連するが、公知の（例えば、承認済）ＲＡＦ（例えば、ＢＲＡＦ、ＣＲＡＦなど）阻害剤による治療に対して耐性の障害（例えば、疾患）の治療である。公知の（例えば、承認済）ＢＲＡＦ阻害剤の例として、ベムラフェニブ（ＰＬＸ４０３２、ＲＧ７２０４、ゼルボラフ）（承認済）及びダブラフェニブ（ＧＳＫ−２１１８４３６）（承認済）がある。
【０２２７】
一実施形態では、治療は、ＲＡＦの突然変異型（例えば、ＢＲＡＦ、ＣＲＡＦなど）に関連するが、公知の（例えば、承認済）ＲＡＦ（例えば、ＢＲＡＦ、ＣＲＡＦなど）阻害剤と公知の（例えば、承認済）ＭＥＫ阻害剤との併用による治療に対して耐性の障害（例えば、疾患）の治療である。ＭＥＫ阻害剤の例として、以下：トラメチニブ（ＧＳＫ１１２０２１２）（承認済）；セルメチニブ（ＡＺＤ６２４４）（臨床試験中）；ＰＤ３２５９０１（臨床試験中）；コビメチニブ（ＧＤＣ０９７３、ＸＬ５１８）（臨床試験中）；及びＣＩ１０４０（ＰＤ１８４３５２）（臨床試験中）が挙げられる。
【０２２８】
一実施形態では、治療は、以下：ベムラフェニブに対して内因的に耐性のＢＲＡＦ突然変異型黒色腫；ベムラフェニブ治療に対する耐性を獲得したＢＲＡＦ突然変異型黒色腫；ダブラフェニブに対して内因的に耐性のＢＲＡＦ突然変異型黒色腫；ダブラフェニブ治療に対する耐性を獲得したＢＲＡＦ突然変異型黒色腫；又はＢＲＡＦ阻害剤及びＭＥＫ阻害剤（例えば、ダブラフェニブ及びトラメチニブ）の併用に対する耐性を獲得したＢＲＡＦ突然変異型黒色腫の治療である。
【０２２９】
他の疾患：
一実施形態では、治療は、以下：ランゲルハンス細胞組織球症（ＬＣＨ）又はエルドハイム・チェスター病の治療である。
【０２３０】
治療対象の障害  −  ＢＲＡＦ及びＣＲＡＦ両方の阻害により改善される障害
例えば、ＲＡＳ、ＲＡＦ、及びＥＧＦＲの活性化突然変異又はＲＡＳ、ＲＡＦ、及びＥＧＦＲ（そのアイソフォームのいずれかを含む）の過剰発現を有する癌は、ｐａｎＲＡＦ（例えば、ＣＲＡＦ及びＢＲＡＦ）阻害に対して特に感受性となり得る。ＲＡＦ−ＭＥＫ−ＥＲＫ経路シグナルの上方制御を引き起こす他の異常を有する癌もまた、ｐａｎＲＡＦ（例えば、ＣＲＡＦ及びＢＲＡＦ）阻害に対して特に感受性となり得る。こうした異常の例として、増殖因子受容体の構成的活性化；１つ又は複数の増殖因子受容体の過剰発現；１つ又は複数の増殖因子の過剰発現；ＫＳＲ媒介経路活性化；並びにＢＲＡＦ又はＣＲＡＦ遺伝子融合物が挙げられる。
【０２３１】
（例えば、治療方法における使用の、薬剤の製造における使用の、治療方法の）一実施形態において、治療は、ＢＲＡＦ及びＣＲＡＦの両方の阻害により改善される障害（例えば、疾患）（例えば、増殖性障害、例えば、癌）の治療である。
【０２３２】
一実施形態では、治療は、以下：増殖因子受容体の構成的活性化；１つ又は複数の増殖因子受容体の過剰発現（例えば、対応する正常細胞と比較して；例えば、過剰発現は、１．５、２、３、５、１０、２０若しくは５０の倍数で起こる）；１つ又は複数の増殖因子の過剰発現（例えば、対応する正常細胞と比較して；例えば、過剰発現は、１．５、２、３、５、１０、２０若しくは５０の倍数で起こる）；並びに／又はＢＲＡＦ及び／若しくはＣＲＡＦ活性化遺伝子融合物を特徴とする障害（例えば、疾患）（例えば、増殖性障害、例えば、癌）の治療である。
【０２３３】
一実施形態では、治療は、以下：
（ａ）ＲＡＳ及び／又はＲＡＦの突然変異体の活性化；
（ｂ）ＲＡＳ及び／又はＲＡＦの上方制御；
（ｃ）ＲＡＦ−ＭＥＫ−ＥＲＫ経路シグナルの上方制御；並びに
（ｄ）増殖因子受容体（例えば、ＥＲＢＢ２及びＥＧＦＲ）の上方制御
の１つ又は複数又は全部を特徴とする障害（例えば、疾患）（例えば、増殖性障害、例えば、癌）
の治療である。
【０２３４】
一実施形態では、治療は、以下：炎症性疾患；感染症；自己免疫障害；発作；虚血；心機能障害；神経障害；線維形成性障害、増殖性障害；過剰増殖性障害；非癌過剰増殖性障害；腫瘍；白血病；新生物；癌；癌腫；代謝疾患；悪性疾患；血管再狭窄；乾癬；アテローム性動脈硬化；関節リウマチ；骨関節炎；心不全；慢性疼痛；神経障害性疼痛；ドライアイ；閉塞角緑内障；又は広角緑内障の治療である。
【０２３５】
治療対象の障害  −  ＲＡＳ突然変異及び／又はＭＡＰＫ経路活性化に関連する障害
（例えば、治療方法における使用の、薬剤の製造における使用の、治療方法の）一実施形態において、治療は、ＲＡＳ（例えば、ＫＲＡＳ、ＮＲＡＳ、ＨＲＡＳ）突然変異及び／又はＭＡＰＫ経路活性化（例えば、ＭＡＰＫ経路の過剰活性）に関連する障害（例えば、疾患）の治療である。
【０２３６】
増殖性障害：
一実施形態では、治療は、ＲＡＳ（例えば、ＫＲＡＳ、ＮＲＡＳ、ＨＲＡＳ）突然変異及び／又はＭＡＰＫ経路活性化（例えば、ＭＡＰＫ経路の過剰活性）に関連する増殖性障害（例えば、癌）の治療である。
【０２３７】
一実施形態では、治療は、以下の治療である：非小細胞肺癌腫；大腸癌；転移性大腸癌；肝細胞癌腫；膵臓腺癌腫；悪性黒色腫；造血器悪性疾患（例えば、若年性骨髄単球性白血病（ＪＭＭＬ）；慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）；骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）；慢性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）；多発性骨髄腫（ＭＭ）；バーキットリンパ腫；ホジキンリンパ腫）；Ｉ型上皮卵巣癌；原発腹膜癌；胆道腺癌；甲状腺濾胞癌；未分化甲状腺乳頭癌；軟組織肉腫（例えば、血管肉腫；平滑筋肉腫；横紋筋肉腫；粘液腫；悪性線維性組織球腫）；１型神経線維腫（ＮＦ１）；手術不能の叢状神経線維腫（ＰＮ）；ブドウ膜黒色腫；毛様体黒色腫；脈絡膜黒色腫；虹彩黒色腫；転移性眼内黒色腫；副腎皮質癌；腎臓癌；精上皮腫；膀胱癌；子宮内膜癌；子宮頚癌；神経芽細胞腫；胃腺癌；頭部及び頚部扁平上皮癌；又は前立腺癌。
【０２３８】
他の障害：
一実施形態では、治療は、以下の治療である：移植片（例えば、異種移植片；皮膚；手足；臓器；骨髄）拒絶反応；骨関節炎；関節リウマチ；嚢胞性線維症；糖尿病の合併症（例えば、糖尿病性網膜症；糖尿病性神経障害）；肝肥大；心臓肥大；ヌーナン症候群；心臓・顔・皮膚症候群；肥大型心筋症；発作（例えば、急性局所虚血性発作；全脳虚血）；心不全；敗血症性ショック；喘息；慢性閉塞性肺疾患；アルツハイマー病；慢性疼痛（例えば、特発性疼痛；慢性アルコール中毒、ビタミン欠乏、尿毒症、又は甲状腺機能低下症に関連する疼痛；炎症に関連する慢性疼痛；慢性術後疼痛）；又は神経障害性疼痛（例えば、炎症に関連するもの；手術後疼痛；幻肢痛；熱傷痛；痛風；三叉神経痛；急性帯状疱疹痛；帯状疱疹後痛；カウザルギー；糖尿病性神経障害；神経叢裂離；神経腫；脈管炎；ウイルス感染；圧挫損傷；絞扼損傷；組織損傷；手足切断；抹消神経系及び中枢神経系間の神経損傷）。
【０２３９】
治療対象の障害  −  ＳＲＣの阻害により改善される障害
（例えば、治療方法における使用の、薬剤の製造における使用の、治療方法の）一実施形態において、治療は、ＳＲＣの阻害により改善される障害（例えば、疾患）の治療である。
【０２４０】
一実施形態では、治療は、ＳＲＣ突然変異；ＳＲＣ過剰発現（例えば、対応する正常細胞と比較して；例えば、過剰発現は、１．５、２、３、５、１０、２０若しくは５０の倍数で起こる）；又はＳＲＣの上流経路活性化（例えば、ＲＴＫシグナル伝達の増強による）に関連する障害（例えば、疾患）（例えば、増殖性障害）の治療である。
【０２４１】
一実施形態では、治療は、以下の治療である：子宮内膜癌；非小細胞肺癌；悪性胸膜中皮腫；悪性黒色腫；慢性骨髄性白血病（例えば、イマチニブ耐性）；骨転移；ホルモン耐性前立腺癌；再発性前立腺癌；再発性骨肉腫；急性リンパ芽球性白血病；大腸癌；転移性大腸癌；乳癌；卵巣癌；再発性若しくは転移性頭部及び頚部癌（例えば、原発不明扁平上皮癌を伴う転移性扁平上皮頚部癌；原発不明癌を伴う再発性転移性扁平上皮頚部癌；下咽頭の再発性扁平上皮癌；喉頭の再発性扁平上皮癌；口唇及び口腔の再発性扁平上皮癌；鼻咽頭の再発性扁平上皮癌；中咽頭の再発性扁平上皮癌；副鼻腔及び鼻腔の再発性扁平上皮癌；喉頭の再発性疣贅性癌；口腔の再発性疣贅性癌；下咽頭の扁平上皮癌；喉頭の扁平上皮癌；口唇及び口腔の扁平上皮癌；鼻咽頭の扁平上皮癌；中咽頭の扁平上皮癌；副鼻腔及び鼻腔の扁平上皮癌；喉頭の疣贅性癌；口腔の疣贅性癌；舌癌）；再発性皮膚癌；皮膚の扁平上皮癌；急性骨髄性白血病；グリア芽細胞腫；又はびまん性内在性橋膠腫。
【０２４２】
治療対象の障害  −  ｐ３８の阻害により改善される障害
（例えば、治療方法における使用の、薬剤の製造における使用の、治療方法の）一実施形態において、治療は、ｐ３８（例えば、ｐ３８α、ｐ３８γ）の阻害により改善される障害（例えば、疾患）の治療である。
【０２４３】
一実施形態では、治療は、ｐ３８（例えば、ｐ３８α、ｐ３８γ）突然変異；ｐ３８（例えば、ｐ３８α、ｐ３８γ）過剰発現（例えば、対応する正常細胞と比較して；例えば、過剰発現は、１．５、２、３、５、１０、２０若しくは５０の倍数で起こる）；又はｐ３８（例えば、ｐ３８α、ｐ３８γ）の上流経路活性化に関連する障害（例えば、疾患）（例えば、増殖性障害）の治療である。
【０２４４】
増殖性障害：
一実施形態では、治療は、以下：卵巣癌；口腔扁平上皮癌；多発性骨髄腫；骨髄新生物；又は骨髄異形成症候群の治療である。
【０２４５】
その他の障害：
一実施形態では、治療は、以下：Ｔ細胞増殖（例えば、Ｔ細胞活性化及び増殖）を特徴とする炎症性障害の治療である。
【０２４６】
一実施形態では、治療は、以下：関節リウマチ；骨関節炎；乾癬性関節炎；ライター症候群；外傷性関節炎；風疹性関節炎；急性滑膜炎；痛風性関節炎；又は脊椎炎の治療である。
【０２４７】
一実施形態では、治療は、以下：乾癬；湿疹；アレルギー性鼻炎；アレルギー性結膜炎；喘息；成人性呼吸窮迫症候群；急性肺傷害（ＡＬＩ）；急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）；慢性肺炎症；慢性閉塞性肺疾患；全身性悪液質；糸球体腎炎；慢性心不全；アテローム性動脈硬化；急性冠動脈症候群；心臓虚血；又は心筋梗塞の治療である。
【０２４８】
一実施形態では、治療は、以下：内毒素中毒症；毒素性ショック症候群；炎症性腸疾患；アテローム性動脈硬化；過敏性腸症候群；クローン病；潰瘍性大腸炎；骨吸収疾患；骨粗鬆症；糖尿病；虚血再灌流傷害；移植片対宿主反応；同種移植片拒絶反応；敗血症；敗血症性ショック；内毒素ショック；グラム陰性敗血症；糸球体腎炎；再狭窄；又は血栓症の治療である。
【０２４９】
一実施形態では、治療は、疼痛の治療である。
【０２５０】
一実施形態では、治療は、以下：慢性疼痛；神経筋痛；頭痛；癌性痛；骨関節炎又は関節リウマチに関連する急性若しくは慢性炎症性疼痛；術後炎症性疼痛；神経障害性疼痛；糖尿病性神経障害；三叉神経痛；肝炎後神経痛；炎症性神経障害；片頭痛；腰仙部神経根障害；歯痛；神経外傷；又は神経虚血の治療である。
【０２５１】
治療対象の障害  −  ＦＧＦＲ１の阻害により改善される障害
（例えば、治療方法における使用の、薬剤の製造における使用の、治療方法の）一実施形態において、治療は、ＦＧＦＲ１の阻害により改善される障害（例えば、疾患）の治療である。
【０２５２】
一実施形態では、治療は、ＦＧＦＲ１突然変異；ＦＧＦＲ１過剰発現（例えば、対応する正常細胞と比較して；例えば、過剰発現は、１．５、２、３、５、１０、２０若しくは５０の倍数で起こる）；又はＦＧＦＲ１の上流経路活性化に関連する障害（例えば、疾患）（例えば、増殖性障害）の治療である。
【０２５３】
一実施形態では、治療は、以下：乳癌；肺扁平上皮癌；胃癌；尿路上皮癌；多発性骨髄腫；８ｐ１１骨髄増殖症候群；又は肝細胞癌の治療である。
【０２５４】
治療対象の障害  −  ＶＥＧＦＲ−２（ＫＤＲ）の阻害により改善される障害
（例えば、治療方法における使用の、薬剤の製造における使用の、治療方法の）一実施形態において、治療は、ＶＥＧＦＲ−２（ＫＤＲ）の阻害により改善される障害（例えば、疾患）の治療である。
【０２５５】
一実施形態では、治療は、ＶＥＧＦＲ−２突然変異；ＶＥＧＦＲ−２過剰発現（例えば、対応する正常細胞と比較して；例えば、過剰発現は、１．５、２、３、５、１０、２０若しくは５０の倍数で起こる）；又はＶＥＧＦＲ−２の上流経路活性化に関連する障害（例えば、疾患）（例えば、増殖性障害）の治療である。
【０２５６】
一実施形態では、治療は、ＶＥＧＦの産生増大（例えば、癌細胞又は間質細胞のいずれかによる）を特徴とする障害（例えば、疾患）の治療である。
【０２５７】
増殖性障害：
一実施形態では、治療は、以下の治療である：膵臓癌；非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）；卵巣腫瘍；腹膜腫瘍；卵管腫瘍；肺癌及び関連の胸水；頭部及び頚部の再発性若しくは転移性扁平上皮癌；局所進行鼻咽頭癌；グリア芽細胞腫（例えば、多形グリア芽細胞腫；巨細胞グリア芽細胞腫）；神経膠肉腫；びまん性内在性橋グリオーマ；ＨＩＶ関連カポジ肉腫；多発性骨髄腫；腎細胞癌；転移性胃腺癌；急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）；肝細胞癌；皮膚線維肉腫；甲状腺髄様癌（ＭＴＣ）；甲状腺乳頭癌；甲状腺濾胞癌；骨髄異形成症候群；神経線維腫症１型；叢状神経線維腫；脊髄神経線維腫；乳癌；胆管癌；子宮頚癌；前立腺癌；黒色腫；膀胱癌；尿道癌；尿管癌；腎臓癌；腎盂癌；肉腫；脂肪肉腫；結腸癌；骨肉腫；滑膜癌；神経芽細胞腫；又は横紋筋肉腫。
【０２５８】
その他の障害：
一実施形態では、治療は、以下：アテローム性動脈硬化；肥満；神経障害性疼痛症候群；加齢性黄斑変性；糖尿病性網膜症；糖尿病性黄斑浮腫；又は関節リウマチの治療である。
【０２５９】
治療対象の障害  −  ＬＣＫの阻害により改善される障害
（例えば、治療方法における使用の、薬剤の製造における使用の、治療方法の）一実施形態において、治療は、ＬＣＫの阻害により改善される障害（例えば、疾患）の治療である。
【０２６０】
一実施形態では、治療は、ＬＣＫ突然変異；ＬＣＫ過剰発現（例えば、対応する正常細胞と比較して；例えば、過剰発現は、１．５、２、３、５、１０、２０若しくは５０の倍数で起こる）；又はＬＣＫの上流経路活性化に関連する障害（例えば、疾患）の治療である。
【０２６１】
一実施形態では、治療は、以下：免疫疾患又は免疫要素に関連する病態の治療である。
【０２６２】
一実施形態では、治療は、以下：関節リウマチ；炎症性腸疾患（例えば、潰瘍性大腸炎；クローン病）；乾癬；乾癬性関節炎；組織若しくは臓器移植片拒絶反応（例えば、その予防を含む）；急性若しくは慢性移植片対宿主病；同種移植片拒絶反応；異種移植片拒絶反応；アレルギー性喘息；多発性硬化；１型糖尿病；肺線維症；又は皮膚の過敏性反応の治療である。
【０２６３】
治療
「治療」という用語は、障害の治療に関連して本明細書で用いる場合、一般に、ヒト又は動物（例えば、獣医学用途）の治療に関し、その際、一部の要望される治療効果、例えば、障害の進行の阻害が達成され、こうした効果は、進行速度の減速、進行速度の停止、障害の症状の緩和、障害の改善、及び障害の治癒を含む。また、予防措置としての治療（すなわち予防）も含まれる。例えば、障害をまだ発生していないが、障害を発生するリスクがある患者についての使用も、用語「治療」に包含される。
【０２６４】
例えば、治療は、癌の予防、癌の発生率の減少、癌の症状の緩和などを含む。
【０２６５】
「治療有効量」という用語は、本明細書で用いる場合、化合物、又は化合物を含む材料、組成物若しくは投与形態の量であって、要望される治療レジメンに従って投与されると、適度な利益／リスク比に相応する要望の治療効果を生み出すのに有効な量に関する。
【０２６６】
併用療法
用語「治療」は、２つ以上の治療又は療法を、例えば、連続的若しくは同時に併用する併用治療及び療法を包含する。例えば、本明細書に記載する化合物は、併用療法で、例えば、他の薬剤と一緒に用いることもできる。治療及び療法の例として、化学療法（例えば、薬剤、抗体（例えば、免疫療法）、プロドラッグ（例えば、光線力学的療法、ＧＤＥＰＴ、ＡＤＥＰＴなど）を含む活性薬剤の投与；手術；放射線療法；光線力学的療法；遺伝子療法；及び制限食が挙げられる。
【０２６７】
本発明の一態様は、１種又は複数（例えば、１、２、３、４種など）の以下に記載する追加的な治療薬と併用する本明細書に記載の化合物に関する。
【０２６８】
具体的併用は、共通の一般知識及び専門医には周知の投与レジメンを用いて、投薬量を選択する医師の判断で行われる。
【０２６９】
薬剤（すなわち、本明細書に記載の化合物と、１種又は複数の他の薬剤）は、同時若しくは連続的のいずれで投与してもよく、また、それぞれ個別に変動する用量スケジュール及び異なる経路で投与することができる。例えば、連続的に投与する場合、薬剤は、短い間隔（例えば、５〜１０分間隔）又はより長い間隔（例えば、１、２、３、４時間若しくはそれを超える間隔、又は必要に応じてそれより長い間隔）で投与することができ、正確な投与レジメンは、治療薬の特性に相応のものとする。
【０２７０】
薬剤（すなわち、本明細書に記載の化合物と、１種又は複数の他の薬剤）は、一緒に単一投与形態に製剤化してもよく、あるいは、個々の薬剤を個別に製剤化して、キット（任意選択で、それらの使用の説明を含む）の形態で一緒に提供してもよい。
【０２７１】
本明細書に記載するＴＢＡＰ化合物による治療と共投与／併用することができる別の薬剤／療法薬の例として、以下のものが挙げられる：代謝拮抗物質；アルキル化剤；紡錘体阻害剤；トポイソメラーゼ阻害剤；ＤＮＡ結合剤；キナーゼ阻害剤；治療用抗体；ＰＡＲＰ阻害剤；ＮＡＤ代謝阻害剤；代謝阻害剤；標的因子；エンドクリン剤など。
【０２７２】
その他の用途
本明細書に記載するＴＢＡＰ化合物は、ＲＡＦ（例えば、ＢＲＡＦ、ＣＲＡＦなど）を阻害するために、細胞培養添加剤として用いてもよい。
【０２７３】
また、本明細書に記載するＴＢＡＰ化合物は、例えば、候補宿主が、該当する化合物による治療から利益を受けるか否かを決定するために、ｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイの一部として使用してもよい。
【０２７４】
さらに、本明細書に記載するＴＢＡＰ化合物は、例えば、他の活性化合物、他のＲＡＦ（例えば、ＢＲＡＦ、ＣＲＡＦなど）阻害剤などを同定するために、アッセイにおいて、標準として用いることもできる。
【０２７５】
キット
本発明の一態様は、（ａ）例えば、好適な容器内に及び／又は好適なパッケージングを用いて提供される、本明細書に記載するＴＢＡＰ化合物、若しくは本明細書に記載するＴＢＡＰ化合物を含む組成物と；（ｂ）使用説明、例えば、化合物若しくは組成物を投与する方法についての説明書を含むキットに関する。
【０２７６】
説明書はまた、活性成分が好適な治療薬である適応症のリストも含んでよい。
【０２７７】
投与経路
ＴＢＡＰ化合物、又はＴＢＡＰ化合物を含む医薬組成物は、全身／腹腔内若しくは局所（すなわち、要望される作用の部位）にかかわらず、任意の投与経路により、被験者に投与することができる。
【０２７８】
投与経路の例として、以下のものが挙げられる：経口（例えば、摂取による）；口腔；舌下；経皮（例えば、パッチ、膏肓などによる）；経粘膜（例えば、パッチ、膏肓などによる）；鼻内（例えば、点鼻スプレーによる）；眼（例えば、点眼剤による）；肺（例えば、口若しくは鼻へのエアゾールを用いた吸入又は送気による）；直腸（例えば、坐薬若しく浣腸剤による）；膣内（例えば、ペッサリーによる）；例えば、皮下、皮内、筋内、静脈内、動脈内、心臓内、髄腔内、脊髄内、嚢内、被膜下、眼窩内、腹腔内、気管内、表皮下、関節内、クモ膜下、及び胸骨内注射などの注射による非経口；例えば、表皮下若しくは筋内のデポー又はレザバーの移植による。
【０２７９】
被験者／患者
被験者／患者は、脊索動物、脊椎動物、哺乳動物、胎盤を有する哺乳動物、有袋類（例えば、カンガルー、ウォンバット）、げっ歯類（例えば、モルモット、ハムスター、ラット、マウス）、ネズミ科動物（例えば、マウス）、ウサギ目動物（例えば、ウサギ）、鳥類（例えば、トリ）、イヌ科動物（例えば、イヌ）、ネコ科動物（例えば、ネコ）、ウマ科動物（例えば、ウマ）、ブタ（例えば、ブタ）、ヒツジ（例えば、ヒツジ）、ウシ科動物（例えば、ウシ）、霊長類、真猿亜目動物（例えば、サル若しくは類人猿）、サル（例えば、キヌザル、ヒヒ）、類人猿（例えば、ゴリラ、チンパンジー、オランウータン、テナガザル）、又はヒトであってよい。
【０２８０】
さらに、被験者／患者は、その発生形態のいずれか、例えば、胎児であってもよい。
【０２８１】
１つの好ましい実施形態では、被験者／患者は、ヒトである。
【０２８２】
製剤
ＴＢＡＰ化合物を単独で投与することも可能であるが、当業者には周知の他の薬学的に許容される１つ又は複数の成分と一緒に、本明細書に記載の少なくとも１種のＴＢＡＰ化合物を含む医薬製剤（例えば、組成物、調合剤、薬剤）として提供することが好ましく、こうした成分として、薬学的に許容される担体、希釈剤、賦形剤、アジュバント、充填剤、緩衝剤、防腐剤、抗酸化剤、潤滑剤、安定剤、可溶化剤、界面活性剤（例えば、湿潤剤）、マスキング剤、着色剤、香味料、及び甘味料などが挙げられる。製剤はさらに、他の活性薬剤、例えば、他の治療又は予防薬を含んでもよい。
【０２８３】
従って、本発明はさらに、上に定義した医薬組成物、並びに、本明細書に記載の少なくとも１種のＴＢＡＰ化合物を、当業者には周知の他の薬学的に許容される１つ又は複数の成分（例えば、担体、希釈剤、賦形剤など）と混合するステップを含む、医薬組成物の製造方法も提供する。個別の単位（例えば、錠剤など）として製剤化される場合、各単位は、予め決定した量（用量）の化合物を含有する。
【０２８４】
「薬学的に許容される」という用語は、本明細書で用いる場合、信頼できる医学的判断の範囲内で、過剰な毒性、刺激、アレルギー反応、又は他の障害若しくは合併症を引き起こすことなく、該当する被験者（例えば、ヒト）の組織との接触に使用する上で好適な化合物、成分、材料、組成物、投与形態などに関し、これは、適度な利益／リスク比に相応するものである。加えて、担体、希釈剤、賦形剤などは各々、製剤の他の成分と適合性であるという意味でも、「許容される」ものでなければならない。
【０２８５】
好適な担体、希釈剤、賦形剤などは、標準的薬学文献、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１８ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．，１９９０；及びＨａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ，５ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，２００５にみいだすことができる。
【０２８６】
製剤は、薬学の分野で公知である任意の方法によって調製することができる。こうした方法は、化合物を、１種又は複数の補助成分を成す担体と結合させるステップを含む。一般に、製剤は、化合物を担体（例えば、液体担体、微粉砕固体担体など）と均質かつ十分に結合させるステップ、次に、必要であれば、生成物を成形するステップを含む。
【０２８７】
製剤は、速放又は徐放；即時、遅延、指定時間、若しくは持続放出；又はこれらの組合せを提供するように調製することができる。
【０２８８】
製剤は、好適には、液体、溶液（例えば、水性、非水性）、懸濁液（例えば、水性、非水性）、エマルジョン（例えば、水中油型、油中水型）、エリキシル、シロップ、舐剤、洗口液、ドロップ、錠剤（例えば、コーティング錠）、顆粒、粉末、ロゼンジ、香錠、カプセル（例えば、硬質及び軟質ゼラチンカプセル）、カシェ、丸薬、アンプル、巨丸薬、座薬、ペッサリー、チンキ剤、ゲル、ペースト、軟膏、クリーム、ローション、オイル、フォーム、スプレー、ミスト、又はエアゾールの形態であってよい。
【０２８９】
製剤は、好適には、１種又は複数の化合物、並びに任意選択で１種又は複数の他の薬学的に許容される成分（例えば、浸透、透過、及び吸収増強剤など）を含浸させたパッチ、絆創膏、包帯、ドレッシングなどとして提供してもよい。製剤はまた、好適には、デポー又はレザバーの形態で提供してもよい。
【０２９０】
化合物は、１種又は複数の他の薬学的に許容される成分に溶解、懸濁されるか、又はこれらと混合してもよい。化合物は、その化合物を、例えば、血液成分又は１つ又は複数の臓器にターゲティングするように設計されたリポソーム又は他の微粒子中に提供してもよい。
【０２９１】
経口投与（例えば、摂取による）に好適な製剤としては、液体、溶液（例えば、水性、非水性）、懸濁液（例えば、水性、非水性）、エマルジョン（例えば、水中油型、油中水型）、エリキシル、シロップ、舐剤、錠剤、顆粒、粉末、カプセル、カシェ、丸薬、アンプル、巨丸薬が挙げられる。
【０２９２】
口腔投与に好適な製剤としては、洗口液、ロゼンジ、香錠、並びにパッチ、絆創膏、デポー、及びレザバーが挙げられる。ロゼンジは、典型的に、香味付けされた主成分、通常スクロース及びアカシア又はトラガカンス中に化合物を含む。香錠は、典型的に、ゼラチン及びグリセリン、又はスクロース及びアカシアなどの不活性マトリックス中に化合物を含む。洗口液は、典型的に、好適な液体担体を含む。
【０２９３】
舌下投与に好適な製剤としては、錠剤、ロゼンジ、香錠、カプセル、及び丸薬が挙げられる。
【０２９４】
口腔粘膜投与に好適な製剤としては、液体、溶液（例えば、水性、非水性）、懸濁液（例えば、水性、非水性）、エマルジョン（例えば、水中油型、油中水型）、洗口液、ロゼンジ、香錠、並びにパッチ、絆創膏、デポー、及びレザバーが挙げられる。
【０２９５】
非口腔粘膜投与に好適な製剤としては、液体、溶液（例えば、水性、非水性）、懸濁液（例えば、水性、非水性）、エマルジョン（例えば、水中油型、油中水型）、座薬、ペッサリー、ゲル、ペースト、軟膏、クリーム、ローション、オイル、並びにパッチ、絆創膏、デポー、及びレザバーが挙げられる。
【０２９６】
経皮投与に好適な製剤としては、ゲル、ペースト、軟膏、クリーム、ローション、及びオイル、並びにパッチ、絆創膏、包帯、ドレッシング、デポー、及びレザバーが挙げられる。
【０２９７】
錠剤は、例えば、任意選択で１つ又は複数の補助成分と一緒に、従来の手段、例えば、圧縮又は成形により、製造することができる。圧縮錠剤は、粉末又は顆粒などの自由流動形態の化合物を、好適な機械で圧縮することによって調製することができ、化合物は、任意選択で、１種又は複数の結合剤（例えば、ポビドン、ゼラチン、アカシア、ソルビトール、トラガカンス、ヒドロキシプロピルメチルセルロース）；充填剤又は希釈剤（例えば、ラクトース、微結晶性セルロース、リン酸水素カルシウム）；潤滑剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム、タルク、シリカ）；崩壊剤（例えば、デンプングリコール酸ナトリウム、架橋ポビドン、架橋ナトリウムカルボキシメチルセルロース）；界面活性剤若しくは分散剤若しくは湿潤剤（例えば、ラウリル硫酸ナトリウム）；防腐剤（例えば、ｐ−ヒドロキシ安息香酸メチル、ｐ−ヒドロキシ安息香酸プロピル、ソルビン酸）；香味料、香味増強剤、及び甘味料と混合する。成形錠剤は、不活性液体希釈剤で湿潤させた粉末化合物の混合物を、好適な機械での成形により製造することができる。錠剤は、任意選択でコーティングしてもよく、又は刻み目を付けてもよく、例えば、要望される放出プロフィールを提供するために様々な比率でヒドロキシプロピルメチルセルロースを用いて、本明細書に記載する化合物の徐放又は制御放出を提供するように製剤化してもよい。錠剤に、任意選択で、放出に影響を与えるコーティング、例えば、腸溶コーティングを施すことによって、胃以外の消化管の部分で放出するようにしてもよい。
【０２９８】
軟膏は、典型的に、化合物と、パラフィン又は水和性軟膏ベースとから調製される。
【０２９９】
クリームは、典型的に、化合物と水中油型クリーム基剤とから調製される。要望されれば、クリームベースの水相は、例えば、少なくとも約３０％ｗ／ｗの多価アルコール、すなわち、２種以上のヒドロキシル基を有するアルコール、例えば、プロピレングリコール、ブタン−１，３−ジオール、マンニトール、ソルビトール、グリセロール及びポリエチレングリコール、並びにこれらの混合物を含んでもよい。局所製剤は、望ましくは、皮膚又は他の患部を介した化合物の吸収又は透過を増強する化合物を含んでもよい。このような皮膚透過増強剤の例として、ジメチルスルホキシド及び関連類似物がある。
【０３００】
エマルジョンは、典型的に、化合物と油相とから調製され、油相は、任意選択で、単に乳化剤（そうでなければ、エマルジェント（ｅｍｕｌｇｅｎｔ）として知られる）のみを含んでもよく、あるいは、少なくとも１種の乳化剤と脂肪若しくは油又は脂肪及び油の両方との混合物を含んでもよい。好ましくは、親水性乳化剤は、安定剤として作用する親油性乳化剤と一緒に含まれる。また、油及び脂肪の両方を含むのも好ましい。まとめると、乳化剤は、安定剤と共に又は安定剤なしで、いわゆる乳化蝋を構成し、この蝋は、油及び／又は脂肪と共に、クリーム製剤の油性分散相を形成する、いわゆる乳化軟膏基剤を構成する。
【０３０１】
好適なエマルジェント及び乳化安定剤としては、Ｔｗｅｅｎ６０、Ｓｐａｎ８０、セトステアリルアルコール、ミリスチルアルコール、一ステアリン酸グリセリル及びラウリル硫酸ナトリウムが挙げられる。医薬エマルジョン製剤に用いられ得る大部分の油中での化合物の溶解度は非常に低いと考えられるため、製剤化のための適切な油又は脂肪の選択は、要望される美容剤特性を達成することに基づく。従って、クリームは、好ましくは、チューブ又は他の容器からの漏出を回避するのに適した粘稠度を有しており、ベタベタせず、汚れず、しかも可洗性の生成物であるべきである。直鎖又は分岐鎖、一塩基性又は二塩基性アルキルエステル、例えば、ジイソアジピン酸塩、ステアリン酸イソセチル、ヤシ脂肪酸のプロピレングリコールジエステル、ミリスチン酸イソプロピル、オレイン酸デシル、パルミチン酸イソプロピル、ステアリン酸ブチル、パルミチン酸２−エチルヘキシル又はＣｒｏｄａｍｏｌ  ＣＡＰとして知られる分枝鎖エステルのブレンドを使用することができ、後者の３つが好ましいエステルである。これらは、必要な特性に応じて単独で、又は組み合わせて使用することができる。あるいは、高融点脂質、例えば、白色ワセリン及び／又は流動パラフィン又は他の鉱油を使用することができる。
【０３０２】
担体が液体である鼻内投与に好適な製剤としては、例えば、鼻腔用スプレー、点鼻剤があり、又はネブライザーを用いたエアゾール投与による製剤としては、化合物の水性若しくは油性液剤がある。
【０３０３】
担体が固体である鼻内投与に好適な製剤としては、例えば、約２０〜約５００ミクロンの範囲の粒度を有する粗い粉末形態として提供されるものがあり、これは、吸い込みを行う方法、すなわち、鼻に接近させて保持される粉末の容器から鼻孔を通した急速な吸入によって投与される。
【０３０４】
肺投与（例えば、吸入又は送気療法による）に好適な製剤としては、好適な噴射剤、例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素、又はその他の好適なガスを用いて、加圧パックからエアゾールスプレーとして提供されるものがある。
【０３０５】
眼投与に好適な製剤としては、化合物を好適な担体、特に、化合物用の水性溶媒中に溶解又は懸濁させた点眼剤がある。
【０３０６】
直腸投与に好適な製剤は、例えば、天然又は硬化油、蝋、脂肪、半流動体若しくは液体ポリオール、例えば、カカオ脂若しくはサリチル酸塩を含有する好適な基剤を含む坐剤として；又は浣腸による処置のための溶液若しくは懸濁液として提供することができる。
【０３０７】
膣内投与に好適な製剤は、化合物に加えて、適切であることが当技術分野で公知の担体を含有するペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、フォーム又はスプレー製剤として提供してよい。
【０３０８】
非経口投与（例えば、注射による）に好適な製剤としては、化合物が溶解、懸濁した、あるいは、別の方法（例えば、リポソーム若しくは他の微粒子中に）で供給される水性若しくは非水性、等張性、発熱物質非含有滅菌液体（例えば、溶液、懸濁液）が挙げられる。このような液体は、さらに別の薬学的に許容される成分、例えば、抗酸化剤、緩衝液、防腐剤、安定化剤、静菌剤、懸濁化剤、増粘剤、並びに溶質を含有してもよく、溶質は、製剤を、意図されるレシピエントの血液（又は関連する体液）と等張性にする。賦形剤の例として、例えば、水、アルコール、ポリオール、グリセロール、植物油などが挙げられる。このような製剤に用いるのに好適な等張担体の例として、塩化ナトリウム注射液、リンゲル液、又は乳酸加リンゲル液が挙げられる。典型的に、液体中の化合物の濃度は、約１ｎｇ／ｍＬ〜約１０μｇ／ｍＬ、例えば、約１０ｎｇ／ｍＬ〜約１μｇ／ｍＬである。製剤は、単位用量若しくは多用量密封容器、例えば、アンプル及びバイアル中に提供してもよく、フリーズドライ（凍結乾燥）状態で保存してもよく、その場合には、使用の直前に、滅菌担体、例えば、注射のための水を添加するだけでよい。即時注射液及び懸濁液は、滅菌粉末、顆粒、及び錠剤から調製することができる。
【０３０９】
投与量
当業者であれば、ＴＢＡＰ化合物、及びＴＢＡＰ化合物を含む組成物の適切な投与量が、患者によって変動し得ることは理解されよう。最適な投与量の決定は、一般に、任意のリスク又は有害な副作用に対して治療利益のレベルを均衡させることを含む。選択された投与量レベルは、特定のＴＢＡＰ化合物の活性、投与経路、投与時間、ＴＢＡＰ化合物の排泄速度、治療の期間、併用する他の薬剤、化合物、及び／又は材料、疾患の重症度、患者の種、性別、年齢、体重、状態、全身の健康状態、これまでの医療歴を含む様々な要因に左右される。ＴＢＡＰ化合物の量及び投与経路は、最終的に、医師、獣医師、又は臨床医の判断に委ねられるが、一般に、投与量は、実質的に有害若しくは有毒な副作用を引き起こすことなく、要望される効果をもたらす、作用部位での局所濃度を達成するように選択される。
【０３１０】
投与は、治療コース全体を通して、１用量で、連続的又は断続的に（例えば、適切な間隔をあけた分割用量で）実施することができる。投与の最も有効な手段及び量を決定する方法は、当業者には周知であり、治療に用いる製剤、治療の目的、治療対象の標的細胞、及び治療対象の被験者に応じて変動し得る。医師、獣医師、又は臨床医によって選択される投与量レベル及びパターンを用いて、単一又は複数回の投与を実施することができる。
【０３１１】
一般に、ＴＢＡＰ化合物の好適な用量は、１日当たり被験者の体重ｋｇ当たり約１０μｇ〜約２５０ｍｇ（より典型的には、約１００μｇ〜約２５ｍｇ）の範囲である。化合物が塩、エステル、アミド、プロドラッグなどである場合には、投与する量は、親化合物に基づいて計算され、従って、使用する実際の重量は、比例して増加する。
【０３１２】
化学的合成
反応のための出発材料、試薬及び溶媒は全て、試薬グレードであり、購入した状態のまま使用した。クロマトグラフィー溶媒は、ＨＰＬＣグレードであり、それ以上精製せずに使用した。反応は、Ｍｅｒｃｋシリカゲル６０Ｆ−２５４薄層プレートを用いた薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）分析によりモニターした。Ｍｅｒｃｋシリカゲル６０（０．０１５〜０．０４０ｍｍ）上、又はディスポーザブルＩｓｏｌｕｔｅ  Ｆｌａｓｈ  Ｓｉ及びＳｉ  ＩＩシリカゲルカラム中でフラッシュカラムクロマトグラフィーを実施した。Ｓｕｐｅｌｃｏ製のＤｉｓｃｏｖｅｒｙ  ５μｍ、Ｃ１８、５０ｍｍ×４．６ｍｍ（内径）カラムを備えるＭｉｃｒｏｍａｓｓ  ＬＣＴ／Ｗａｔｅｒ’ｓ  Ａｌｌｉａｎｃｅ  ２７９５  ＨＰＬＣシステムにより、温度２２℃、流量１ｍＬ／分で下記の溶媒系：溶媒Ａ：メタノール；溶媒Ｂ：水中の０．１％ギ酸を用いて、ＬＣＭＳ分析を実施した。勾配は、０〜０．５分まで１０％  Ａ／９０％  Ｂ（容量）で開始し、次に０．５分〜６．５分まで１０％  Ａ／９０％  Ｂから９０％  Ａ／１０％  Ｂへ、そして１０分まで９０％  Ａ／１０％  Ｂを継続する。１０〜１０．５分までに、勾配を１０％  Ａ／９０％  Ｂに戻し、その際、濃度は１２分まで維持する。ＵＶ検出は２５４ｎｍであり、イオン化は、正又は負イオンエレクトロスプレー法であった。分子量スキャン範囲は、５０〜１０００である。サンプルは、ＤＭＳＯ又はメタノール中の１ｍｇ／ｍＬとして供給し、３μＬをパーシャルループフィル（ｐａｒｔｉａｌ  ｌｏｏｐ  ｆｉｌｌ）上に注射した。Ｂｒｕｋｅｒ  Ａｄｖａｎｃｅ  ５００  ＭＨｚ分光計により、ＤＭＳＯ−ｄ6中でＮＭＲスペクトルを記録した。
【０３１３】
（Ｉ）部：ピラゾールカルボキシレートエステルのＮ−アリール化
方法Ａ：エチル、３−ｔｅｒｔ−ブチル−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシレート（１当量）、要望されるボロン酸（２当量）、酢酸銅（ＩＩ）（１．５当量）及び乾燥ＤＭＦを攪拌しながら添加して、青色の溶液を得た。乾燥ピリジン（２当量）を添加し（その時点で、色が緑色に変化した）、続いて、オーブンで乾燥させた粉末状の４Å（０．４ｎｍ）モレキュラーシーブを少量添加した。アルゴン雰囲気下、室温で混合物を反応完了（ＬＣ−ＭＳにより確認される）まで攪拌した。反応完了後、混合物をＡｃＯＥｔ及びＮＨ4Ｃｌ溶液で希釈した。有機相を単離し、ＮＨ4Ｃｌ溶液、飽和水性ＮａＨＣＯ3で洗浄し、乾燥（Ｃｕレジンを含むＭｇＳＯ4）させ、濾過した後、蒸発させることにより、油状物質を取得し、これを、一部の態様では、カラムクロマトグラフィーによりさらに精製した。
【０３１４】
合成１
エチル、３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−（３−メトキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシレート
【化２６】
0006389529.tif 000039
エチル、３−ｔｅｒｔ−ブチル−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシレート（３２０ｍｇ、１．６３１ｍモル）及び３−メトキシフェニルボロン酸（３０７ｍｇ、２．０２０ｍモル）と共に、方法Ａを用いた。室温で２２時間攪拌した後、反応を終了させた。後処理後、得られた黄色の油をＤＣＭ／ヘキサン中に溶解させてから、５０ｇＳＮＡＰカラムにロードし、これをヘキサン中の２→２０％（容量）ＥｔＯＡｃで溶離した。無色の油として表題の化合物が得られた。
収率：４６２ｍｇ（９４％、９２％純度）。1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）、δ（ｐｐｍ）、Ｊ（Ｈｚ）：１．１７（ｔ，３Ｈ，3ＪHH＝７．１，ＣＨ3）、１．３０（ｓ，９Ｈ，ｔｅｒｔ−Ｂｕ）、３．７９（ｓ，３Ｈ，ＯＣＨ3）、４．１７（ｑ，２Ｈ，3ＪHH＝７．１，ＯＣＨ2ＣＨ3）、６．９８（ｍ，４Ｈ，ＡｒＨ）、７．３６（ｔ，１Ｈ，3ＪHH＝８．１，ＡｒＨ）。ＬＣ−ＭＳ（２．７９ｍｉｎ）：Ｃ17Ｈ22Ｎ2Ｏ3［Ｍ＋Ｈ］+についてのｍ／ｚ計算値：３０３．１；実測値：３０３．２。
【０３１５】
合成２
エチル、３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−（３−トリフルオロメチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシレート
【化２７】
0006389529.tif 000040
エチル、３−ｔｅｒｔ−ブチルピラゾール−５−カルボキシレート（３２０ｍｇ、１．６０ｍモル）、及び３−トリフルオロメチルフェニルボロン酸（３０７ｍｇ、１．６０ｍモル）と共に、方法Ａを用いた。２０時間後、反応混合物をＡｃＯＥｔ（２０ｍＬ）で希釈し、２×２０ｍＬの水、ＮａＨＣＯ3（２０ｍＬ、濃縮）、そして最後に２０ｍＬの塩水で洗浄した。有機層を乾燥（ＭｇＳＯ4）させ、乾燥まで蒸発させることにより、油（４１７ｍｇ）を取得した。この化合物を、それ以上精製せずに、次の加水分解ステップに用いた。
【０３１６】
合成３
エチル、３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−（３−メチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシレート
【化２８】
0006389529.tif 000041
エチル、３−ｔｅｒｔ−ブチルピラゾール−５−カルボキシレート（３２０ｍｇ、１．６０ｍモル）、及び３−メチルフェニルボロン酸（２１８ｍｇ、１．６０ｍモル）と共に、方法Ａを用いた。２０時間後、反応混合物をＡｃＯＥｔ（２０ｍＬ）で希釈し、２×２０ｍＬの水、ＮａＨＣＯ3（２０ｍＬ；濃縮）、そして最後に２０ｍＬの塩水で洗浄した。有機層を乾燥（ＭｇＳＯ4）させ、乾燥まで蒸発させることにより、油（４６６ｍｇ）を取得した。この化合物を、それ以上精製せずに、次の加水分解ステップに用いた。
【０３１７】
合成４
エチル、３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−（３−フルオロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシレート
【化２９】
0006389529.tif 000042
エチル、３−ｔｅｒｔ−ブチルピラゾール−５−カルボキシレート（３２０ｍｇ、１．６０ｍモル）、及び３−フルオロフェニルボロン酸（２２４ｍｇ、１．６０ｍモル）と共に、方法Ａを用いた。２０時間後、反応混合物をＡｃＯＥｔ（２０ｍＬ）で希釈し、２×２０ｍＬの水、ＮａＨＣＯ3（２０ｍＬ、濃縮）、そして最後に２０ｍＬの塩水で洗浄した。有機層を乾燥（ＭｇＳＯ4）させ、乾燥まで蒸発させることにより、油（４６３ｍｇ）を取得した。この化合物を、それ以上精製せずに、次の加水分解ステップに用いた。
【０３１８】
合成５
エチル、３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−（２−メトキシピリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシレート
【化３０】
0006389529.tif 000043
エチル、３−ｔｅｒｔ−ブチルピラゾール−５−カルボキシレート（２０２ｍｇ、１．０３ｍモル）、及び２−メトキシピリジン−４−イルボロン酸（２０８ｍｇ、１．３６０ｍモル）と共に、方法Ａを用いた。ヘキサン中の２→５０％（容量）ＥｔＯＡｃを用いた精製により、無色の油として表題の化合物が得られた。
収率：２４３ｍｇ（５９％）。1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）、δ（ｐｐｍ）、Ｊ（Ｈｚ）：１．２２（ｔ，３Ｈ，3ＪHH＝７．１，ＣＨ3）、１．２９（ｓ，９Ｈ，ｔｅｒｔ−Ｂｕ）、３．９０（ｓ，３Ｈ，ＯＣＨ3）、４．２３（ｑ，２Ｈ，3ＪHH＝７．１，ＯＣＨ2ＣＨ3）、６．９４（ｄ，１Ｈ，3ＪHH＝１．７，ＰｙｒＨ）、７．０７（ｓ，１Ｈ，ＡｒＨ）、７．１３（ｄｄ，１Ｈ，3ＪHH＝５．６，１．７，ＰｙｒＨ）、８．２３（ｄ，１Ｈ，3ＪHH＝５．６，ＰｙｒＨ）。ＬＣ−ＭＳ（２．８３ｍｉｎ）：Ｃ16Ｈ21Ｎ3Ｏ3［Ｍ＋Ｈ］+についてのｍ／ｚ計算値：３０４．１；実測値：３０３．１。
【０３１９】
（ＩＩ）部：エチルエステル加水分解
方法Ｂ：適切な１−置換エチル、３−ｔｅｒｔ−ブチル−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシレート（１当量）をＴＨＦ／ＭｅＯＨ／Ｈ2Ｏの４：１：１混合物中に溶解させ、水酸化リチウム一水和物（１．１当量）を添加した後、無色の混合物を室温で１６時間攪拌した。続いて、揮発物を蒸発させ、得られた固体をＨ2Ｏ中に再溶解させた後、１０％水性ＨＣｌで溶液のｐＨを１に調節した。得られた乳状混合物をＥｔＯＡｃで２回抽出した後、合わせた有機画分を塩水で洗浄し、乾燥させてから、乾燥まで濃縮することによって、白色の結晶性固体を得た。
【０３２０】
方法Ｃ：適切な１−置換エチル、３−ｔｅｒｔ−ブチルピラゾール−５−カルボキシレート（１当量）を１０ｍＬのＥｔＯＨ及び３ｍＬのＮａＯＨ溶液（２Ｍ）中に３０分間還流させた。室温で冷却した後、反応混合物をｐＨ４．０（ＡｃＯＨ）に中和し、２０ｍＬの水で希釈してから、ＡｃＯＥｔで抽出した。有機層を２×２０ｍＬの水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ4）させ、乾燥まで蒸発させて、得られた残留物を、Ｂｉｏｔａｇｅ  Ｉｓｏｌｅｒａシステムを用いて精製した。
【０３２１】
合成６
３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−（３−メトキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸
【化３１】
0006389529.tif 000044
エチル、３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−（４−メトキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシレート（４４２ｍｇ、１．３４５ｍモル）と共に、方法Ｂを用いて、白色結晶として表題の化合物を取得した。
収率：３００ｍｇ（８１％）。1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）、δ（ｐｐｍ）、Ｊ（Ｈｚ）：１．２９（ｓ，９Ｈ，ｔｅｒｔ−Ｂｕ）、３．７８（ｓ，３Ｈ，ＯＣＨ3）、６．９０（ｓ，１Ｈ，ＡｒＨ）、６．９７（ｍ，４Ｈ，ＡｒＨ）、７．３５（ｔ，１Ｈ，3ＪHH＝８．１，ＡｒＨ）、１３．１４（ｓ，１Ｈ，ＣＯＯＨ）。ＬＣ−ＭＳ（２．５１ｍｉｎ）：Ｃ15Ｈ18Ｎ2Ｏ3［Ｍ＋Ｈ］+についてのｍ／ｚ計算値：２７５．１；実測値：２７５．０。
【０３２２】
合成７
３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−（３−トリフルオロメチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸
【化３２】
0006389529.tif 000045
粗エチル、３−ｔｅｒｔ−１−（３−トリフルオロメチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシレート（４７１ｍｇ）と共に方法Ｃを用いて、固体生成物を取得し、これを、Ｂｉｏｔａｇｅ  Ｉｓｏｌｅｒａ  Ｓｙｓｔｅｍと、溶出剤としてのシクロヘキサン：ＥｔＯＡｃ  １：１混合物を用いたさらなる精製（イソクラティックモード）に付すことにより、表題の化合物を得た。
収率：１３３ｍｇ（２ステップにわたり２６．６％）。1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）、□H（ｐｐｍ）、Ｊ（Ｈｚ）：１．３１（ｓ，９Ｈ，（ＣＨ3）3Ｃ）、６．９９（ｓ，１Ｈ，Ｐｙｒ−Ｈ）、７．７０（ｔ，１Ｈ，Ａｒｏｍ−Ｈ5，Ｊ＝７．７Ｈｚ）、７．７６〜７．８２（ｍ，３Ｈ，Ａｒｏｍ−Ｈ2+4+6）、１３．３２（ｓ，１Ｈ，Ｐｙｒ−ＣＯ2Ｈ）。Ａｃ．質量：（Ｃ15Ｈ16Ｆ3Ｎ2Ｏ2）計算値：３１３．１１５７、実測値：３１３．１１５５。
【０３２３】
合成８
３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−（３−メチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸
【化３３】
0006389529.tif 000046
粗エチル、３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−（３−メチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシレート（４６０ｍｇ）と共に方法Ｃを使用し、Ｂｉｏｔａｇｅ  Ｉｓｏｌｅｒａ  Ｓｙｓｔｅｍと、溶出剤としてのシクロヘキサン：ＥｔＯＡｃ  １：１混合物を用いた精製（イソクラティックモード）の後、表題の化合物を得た。
収率：１０１ｍｇ（２ステップにわたり２４．％）。1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）、□H（ｐｐｍ）、Ｊ（Ｈｚ）：１．２９（ｓ，９Ｈ，（ＣＨ3）3Ｃ）、２．３５（ｓ，３Ｈ，３−ＣＨ3）、６．８９（ｓ，１Ｈ，Ｐｙｒ−Ｈ）、７．１８（ｔ，１Ｈ，Ａｒｏｍ−Ｈ2，Ｊ＝７．２Ｈｚ）、７．２０〜７．２４（ｍ，２Ｈ，Ａｒｏｍ−Ｈ4+6）、７．３２（ｔ，１Ｈ，Ａｒｏｍ−Ｈ5，Ｊ＝７．３Ｈｚ）、１３．０９（ｓ，１Ｈ，Ｐｙｒ−ＣＯ2Ｈ）。Ａｃ．質量：（Ｃ15Ｈ18Ｎ2Ｏ2）計算値：２５８．１３６８、実測値：２５８．１３７３。
【０３２４】
合成９
３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−（３−フルオロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸
【化３４】
0006389529.tif 000047
粗エチル、３−ｔｅｒｔ−１−（３−フルオロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシレート（４６３ｍｇ）と共に方法Ｃを使用して、表題の化合物を得た。例えば、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１を参照されたい。
収率：１６６ｍｇ（２ステップにわたり３９．６％）。1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）、□H（ｐｐｍ）、Ｊ（Ｈｚ）：１．２９（ｓ，９Ｈ，（ＣＨ3）3Ｃ）、６．９５（ｓ，１Ｈ，Ｐｙｒ−Ｈ）、７．２３〜７．３０（ｍ，２Ｈ，Ａｒｏｍ−Ｈ4+5）、７．３５（ｄ，１Ｈ，Ａｒｏｍ−Ｈ2，Ｊ＝９．８Ｈｚ）、７．４４〜７．５３（ｍ，１Ｈ，Ａｒｏｍ−Ｈ6）、１３．２４（ｓ，１Ｈ，Ｐｙｒ−ＣＯ2Ｈ）。Ａｃ．質量：（Ｃ14Ｈ15ＦＮ2Ｏ2）計算値：２６２．１１１８、実測値：２６２．１１１７。
【０３２５】
合成１０
３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−（２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸塩酸塩
【化３５】
0006389529.tif 000048
方法Ｄ：エチル、３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−（２−メトキシピリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシレート（１１０ｍｇ、０，３６３ｍモル）をＨ2Ｏ中の６Ｍ  ＨＣｌ（４．５ｍＬ、２７．００ｍモル）に溶解させ、無色の溶液を９０℃まで４８時間かけて加熱した。次に、揮発物を全て蒸発させ、得られた無色の油をＤＣＭ（１０ｍＬ）、続いてＥｔ2Ｏ（１０ｍＬ）で共蒸発させることによって、白色の固体として表題の化合物を得た。
収率：９３ｍｇ（９８％）。1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）、δ（ｐｐｍ）、Ｊ（Ｈｚ）：１．２８（ｓ，９Ｈ，ｔｅｒｔ−Ｂｕ）、６．３２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．９，ＡｒＨ）、６．３７（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．１，１．９，ＡｒＨ）、６．９９（ｓ，１Ｈ，ＡｒＨ）、７．４６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．１，ＡｒＨ）、ＬＣ−ＭＳ（２．１４ｍｉｎ）：Ｃ13Ｈ16Ｎ3Ｏ3［Ｍ−Ｃｌ］+についてのｍ／ｚ計算値：２６２．１；実測値：２６２．０。
【０３２６】
（ＩＩＩ）部：５−アミノピラゾールの形成
合成１１
３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−１−（３−フルオロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−アミン
【化３６】
0006389529.tif 000049
方法Ｅ：４，４−ジメチル−３−オキソペンタンニトリル（７７ｇ、０．６２モル）と３−フルオロフェニルヒドラジン塩酸塩（１００ｇ、０．６２モル）との混合物をトルエン（１Ｌ）に添加し、１００℃まで２４時間かけて加熱し、その後、反応物を２０℃まで冷却させた。混合物を濾過し、トルエン（２×２５０ｍＬ）で洗浄した後、乾燥させた。粗ＨＣｌ塩を、事前のバッチ（１８０ｇの３−フルオロフェニルヒドラジン塩酸塩と２３４ｇの３−フルオロフェニルヒドラジン塩酸塩を用いて実施した）と合わせて、ＤＣＭ（４Ｌ）と飽和水性ＮａＨＣＯ3（４Ｌ）との間で分配した。混合物を固体が一切残らなくなるまで攪拌した。ＤＣＭ層を分離により除去し、乾燥（ＭｇＳＯ4）させ、濾過した後、真空で濃縮させることにより、５２％の収率でオレンジ色の固体（２１０ｇ）として表題の化合物を得た。純度＞９５％（モルベース）（ＮＭＲによる）及び９４．４％（モルベース）（ＬＣＭＳによる）。
【０３２７】
（ＩＶ）部：５−アミノピラゾールカルバメートの形成
合成１２
フェニルＮ−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−（３−フルオロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル］カルバメート
【化３７】
0006389529.tif 000050
方法Ｆ：３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−１−（３−フルオロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−アミン（２１０ｇ、０．９０モル）を０℃でＴＨＦ（５Ｌ）に溶解させた後、ピリジン（１４６ｍＬ、１．８０モル）を添加した。ＴＨＦ（３００ｍＬ）中のクロロギ酸フェニル（１１３ｍＬ、０．９０モル）を０〜５℃で滴下しながら３０分にわたり添加した。反応混合物を０℃で３０分間攪拌した後、室温に到らせた。４時間後、ＨＰＬＣは、段階１の８％が残留することを示した。追加量のクロロギ酸フェニル（１１ｍＬ、０．０８８モル）を添加し、３０分後、ＨＰＬＣ分析は、反応が完了したことを示した。ＥｔＯＡｃ（５Ｌ）を添加してから、有機層を１Ｍ  ＨＣｌ（２×１．２Ｌ）、水（１．２Ｌ）、飽和水性ＮａＨＣＯ3（１．２Ｌ）及び飽和塩水（１．２Ｌ）で洗浄した。有機層を乾燥（ＭｇＳＯ4）させ、濾過した後、真空で濃縮させた。粗油を取り出して、ＥｔＯＡｃ／ヘプタンの１：３混合物に導入した後、真空で濃縮させることにより、固体を得た。固体をヘプタン（２．５Ｌ）中で１時間スラリー化し、濾過した後、ヘプタン（２００ｍＬ）で洗浄した。材料を４０℃で一晩乾燥させて、９０％の収率で表題の化合物（２８６ｇ）を得た。純度＞９５％（ＮＭＲによる）。
【０３２８】
（Ｖ）部：尿素リンカーの形成によるアリールピラゾールと４−アミノフェノキシ−ピリドピラジノン断片の結合
合成１３
１−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−［（３−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル］３−［２−フルオロ−４（３−オキソ−３，４−ジヒドロピリド［２，３−ｂ］ピラジン−８−イルオキシ）フェニル］尿素（ＴＢＡＰ−００１）
【化３８】
0006389529.tif 000051
方法Ｇ：８１ｍｇ（０．３１ｍモル）の３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−（３−フルオロフェニル）−ピラゾール−５−カルボン酸をＣａｒｏｕｓｅチューブ中の２ｍＬのＤＨＦに、攪拌しながら、不活性雰囲気下で溶解させた。次に、０．０４４ｍＬ（０．３２ｍモル）トリエチルアミンと０．０６７ｍＬ（０．０３２ｍモル）のＤＰＰＡを添加し、攪拌を０℃で３０分、さらに室温で１時間続けた。この反応混合物に、４−（３−フルオロ−４−アミノフェニル）−ピリジン−［２，３−ｂ］−ピラジン−２−オン（４０ｍｇ、０．１５ｍモル）（例えば、Ｚａｍｂｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０を参照）を一度に添加してから、反応混合物の入ったチューブを、攪拌しながらアルゴン雰囲気下で、１００℃で３０分間加熱した。室温で冷却した後、溶液を１０ｍＬのＡｃＯＥｔで希釈した。有機層を２×１０ｍＬの塩水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ4）させた後、乾燥まで蒸発させた。こうして得られた残留物をＥｔ2Ｏで粉砕し、濾過することにより、薄茶色の非晶質固体として表題の化合物を得た。
収率：６６ｍｇ（８３．０％）。1Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）、δ：１．２９（ｓ，９Ｈ，ｔ−Ｂｕ）、６．４１（ｓ，１Ｈ，ＨPyrazol）、６．６４（ｄ，１Ｈ，ＨPyr，Ｊ＝５．６Ｈｚ）、７．０２〜７．０７（ｍ，１Ｈ，ＨArom central）、７．２２〜７．３０（ｍ，２Ｈ，ＨArom pyrazol）、７．４０〜７．４４（ｍ，２Ｈ，ＨArom central＋ＨArom pyrazol）、７．５３〜７．６０（ｍ，１Ｈ，ＨArom pyrazol）、８．１４（ｔ，１Ｈ，ＨArom central，Ｊ＝９．１Ｈｚ）、８．１７（ｓ，１Ｈ，Ｈpyrazinone）、８．３６（ｄ，１Ｈ，Ｈpyr，Ｊ＝５．６Ｈｚ）、８．８７（ｓ，１Ｈ，ＮＨurea）、８．９８（ｓ，１Ｈ，ＮＨurea）、１２．９０（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）。ＬＣ−ＭＳ、ｔR＝２．６１ｍｉｎ、ｍ／ｚ：５３１．２（Ｍ）+、Ｃ27Ｈ23Ｆ2Ｎ7Ｏ3の計算値。ＨＲＭＳ：（Ｍ）+Ｃ27Ｈ23Ｆ2Ｎ7Ｏ3の計算値：５３１．１８３０、実測値：５３１．１８３２。
【０３２９】
方法Ｈ：４−（３−フルオロ−４−アミノフェニル）−ピリジン−［２，３−ｂ］−ピラジン−２−オン（１６９．５ｇ、０．６２３ｍモル）に、フェニルＮ−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−（３−フルオロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル］カルバメート（２２０ｇ、０．６２３モル）及びＤＭＳＯ（１．７Ｌ）を添加した。反応混合物を２０〜２２℃で一晩攪拌した。1Ｈ−ＮＭＲは、反応が完了したことを示した。反応を水（８．６Ｌ）にクエンチングし、１時間攪拌した後、濾過し、水（２×２Ｌ）で洗浄した。材料を６０℃で週末の間乾燥させた。固体をＥｔＯＡｃ（３．３９Ｌ）で１時間スラリー化し、濾過した後、ＥｔＯＡｃ（７５０ｍＬ）で洗浄することにより、３２０ｇの表題化合物を得た。ＮＭＲは、フェノールがまだ存在することを示した。材料をＥｔＯＡｃ（３．２Ｌ）で１時間再スラリー化し、濾過した後、ＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させて、ＮＭＲにより２９３ｇの表題化合物（９重量％  ＥｔＯＡｃ）が得られ、単一不純物は０．８重量％であった）。固体をＴＨＦ（５．７Ｌ）及びヘプタン（２．８５Ｌ）から再結晶化し、バッチを室温まで冷却させた後、固体を濾過により取り出した。濾過ケークをヘプタン（２．８５Ｌ）で洗浄し、４５℃で一晩乾燥させることにより、２２１ｇの表題の化合物を得た。ＨＰＬＣ分析によって、前の０．８％（重量）の不純物が、０．２３％（重量）に減少したが；尿素不純物は、０．５８％（重量）に濃縮されたことが判明した。1Ｈ−ＮＭＲは、５％ヘプタン（重量）を示した。材料を１１０℃で１２時間乾燥させて、ＮＭＲによりヘプタンレベルを＜０．５％（重量）にし、合計２１１ｇの表題化合物を白色の結晶性固体として６４％収率で得た。ＨＰＬＣ純度：９８．８％（重量）、単一不純物：０．５８％（重量）。
【０３３０】
合成１４
１−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−［（３−メチル−フェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル］３−［２−フルオロ−４（３−オキソ−３，４−ジヒドロピリド［２，３−ｂ］ピラジン−８−イルオキシ）フェニル］尿素（ＴＢＡＰ−００２）
【化３９】
0006389529.tif 000052
３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−（３−メチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸（８０ｍｇ、０．３１ｍモル）と４−（３−フルオロ−４−アミノフェニル）−ピリジン−［２，３−ｂ］−ピラジン−２−オン（４０ｍｇ、０．１５ｍモル）と共に、方法Ｇを用いて、オフホワイトの固体として表題の化合物を得た。
収率：６９ｍｇ（８７．４％）。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ：１．２８（ｓ，９Ｈ，ｔ−Ｂｕ）、２．４０（ｓ，３Ｈ，３−ＣＨ3）、６．３９（ｓ，１Ｈ，ＨPyrazol）、６．６４（ｄ，１Ｈ，ＨPyr，Ｊ＝５．６Ｈｚ）、７．０２〜７．０６（ｍ，１Ｈ，ＨArom central）、７．２２〜７．３６（ｍ，４Ｈ，３ＨArom pyrazol＋１ＨArom central）、７．４３（ｔ，１Ｈ，ＨArom pyrazol，Ｊ＝７．７Ｈｚ）、８．１６（ｔ，１Ｈ，ＨArom central，Ｊ＝９．１Ｈｚ）、８．１７（ｓ，１Ｈ，Ｈpyrazinone）、８．３６（ｄ，１Ｈ，Ｈpyr，Ｊ＝５．６Ｈｚ）、８．８１（ｓ，１Ｈ，ＮＨurea）、８．９８（ｓ，１Ｈ，ＮＨurea）、１２．９０（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）。ＬＣ−ＭＳ、ｔR＝２．６５ｍｉｎ、ｍ／ｚ：５２７．２（Ｍ）+、Ｃ28Ｈ26ＦＮ7Ｏ3についての計算値。ＨＲＭＳ：Ｃ28Ｈ26ＦＮ7Ｏ3についての（Ｍ＋Ｈ）+計算値：５２７．２０８１、実測値：５２７．２０８８。
【０３３１】
合成１５
１−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−［（３−トリフルオロメチル−フェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル］３−［２−フルオロ−４（３−オキソ−３，４−ジヒドロピリド［２，３−ｂ］ピラジン−８−イルオキシ）フェニル］尿素（ＴＢＡＰ−００３）
【化４０】
0006389529.tif 000053
３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−（３−トリフルオロメチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸（９７ｍｇ、０．３１ｍモル）と４−（３−フルオロ−４−アミノフェニル）−ピリジン−［２，３−ｂ］−ピラジン−２−オン（４０ｍｇ、０．１５ｍモル）と共に、方法Ｇを用いて、オフホワイトの固体として表題化合物を得た。
収率：７０ｍｇ（８０．４％）。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ：１．３０（ｓ，９Ｈ，ｔ−Ｂｕ）、６．４２（ｓ，１Ｈ，ＨPyrazol）、６．６４（ｄ，１Ｈ，ＨPyr，Ｊ＝５．６Ｈｚ）、７．０２〜７．０６（ｍ，１Ｈ，ＨArom central）、７．２７〜７．３６（ｍ，１Ｈ，ＨArom central）、７．７４〜７．８０（ｍ，２Ｈ，ＨArom pyrazol）、７．８６〜７．９０（ｍ，２Ｈ，ＨArom pyrazol）、８．０５（ｔ，１Ｈ，ＨArom central，Ｊ＝９．１Ｈｚ）、８．１７（ｓ，１Ｈ，Ｈpyrazinone）、８．３６（ｄ，１Ｈ，Ｈpyr，Ｊ＝５．６Ｈｚ）、８．８７（ｓ，１Ｈ，ＮＨurea）、８．９３（ｓ，１Ｈ，ＮＨurea）、１２．９０（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）。ＬＣ−ＭＳ、ｔR＝２．７１ｍｉｎ、ｍ／ｚ：５８１．２（Ｍ）+、Ｃ28Ｈ23Ｆ4Ｎ7Ｏ3についての計算値。ＨＲＭＳ：Ｃ28Ｈ23Ｆ4Ｎ7Ｏ3についての（Ｍ＋Ｈ）+計算値：５８１．１７９８、実測値：５８１．１７９６。
【０３３２】
合成１６
１−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−（３−メトキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）−３−（２−フルオロ−４−（３−オキソ−３，４−ジヒドロピリド［３，２−ｂ］ピラジン−８−イルオキシ）フェニル）尿素（ＴＢＡＰ−００４）
【化４１】
0006389529.tif 000054
３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−（３−メトキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸（６０ｍｇ、０．２２ｍモル）と８−（４−アミノ−３−フルオロフェノキシ）−ピリド［２，３−ｂ］ピラジン−３（４Ｈ）−オン（３１．６ｍｇ、０．１２ｍモル）と共に、方法Ｇを用いて、薄黄色の固体として表題化合物を得た。
収率：５０ｍｇ（８４％）。1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）、δ（ｐｐｍ）、Ｊ（Ｈｚ）：１．２９（ｓ，９Ｈ，ｔｅｒｔ−Ｂｕ）、３．８３（ｓ，３Ｈ，ＯＣＨ3）、６．４１（ｓ，１Ｈ，ＰｙｚＨ）、６．６６（ｄ，3ＪHH＝５．７，１Ｈ，ＰｙｒＨ）、７．０１〜７．１２（ｍ，４Ｈ，ＡｒＨ）、７．３１（ｍ，１Ｈ，ＡｒＨ）、７．４６（ｔ，3ＪHH＝８．１，１Ｈ，ＡｒＨ）、８．１８（ｍ，２Ｈ，ＡｒＨ）、８．３８（ｄ，3ＪHH＝５．７、１Ｈ，ＰｙｒＨ）、８．８５（ｂｒ  ｓ，１Ｈ，ＮＨ）、９．０３（ｂｒ  ｓ，１Ｈ，ＮＨ），１２．９２（ｂｒ  ｓ，１Ｈ，ＮＨ）；19Ｆ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6），δ（ｐｐｍ）：−１２４．８。ＬＣ−ＭＳ（２．５９ｍｉｎ）：Ｃ28Ｈ27ＦＮ7Ｏ4［Ｍ＋Ｈ］+についてのｍ／ｚ計算値：５４４．１；実測値：５４４．１。ＨＲＭＳ（３．１９ｍｉｎ）：Ｃ28Ｈ27ＦＮ7Ｏ4［Ｍ＋Ｈ］+についてのｍ／ｚ計算値：５４４．２１０３１；実測値：５４４．２１０２９。
【０３３３】
合成１７
１−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−（２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）−３−（２−フルオロ−４−（３−オキソ−３，４−ジヒドロピリド［３，２−ｂ］ピラジン−８−イルオキシ）フェニル］尿素（ＴＢＡＰ−００５）
【化４２】
0006389529.tif 000055
３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−（２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸塩酸塩（７０．８ｍｇ、０．２３８ｍモル）と８−（４−アミノ−３−フルオロフェノキシ）−ピリド［２，３−ｂ］ピラジン−３（４Ｈ）−オン（３２．４ｍｇ、０．１１９ｍモル）と共に、方法Ｇを用いて、固体が得られ、ＤＣＭ中５→３０％（容量）のＭｅＯＨで溶離するシリカゲル上のカラムクロマトグラフィーにより上記固体を精製することによって、白色の固体として表題化合物を得た。
収率：１５ｍｇ（２４％）。1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）、δ（ｐｐｍ）、Ｊ（Ｈｚ）：１．２８（ｓ，９Ｈ，ｔｅｒｔ−Ｂｕ）、６．４３（ｓ，１Ｈ，ＰｙｚＨ）、６．５０（ｄ，3ＪHH＝２．２，１Ｈ，ＡｒＨ）、６．５８（ｄｄ，3ＪHH＝７．２，２．２，１Ｈ，ＡｒＨ）、６．６６（ｄ，3ＪHH＝５．６，１Ｈ，ＰｙｒＨ）、７．０６（ｍ，１Ｈ，ＡｒＨ）、７．３２（ｍ，１Ｈ，ＡｒＨ）、７．５０（ｄ，3ＪHH＝７．２，１Ｈ，ＡｒＨ）、８．１３（ｍ，１Ｈ，ＡｒＨ）、８．１８（ｍ，１Ｈ，ＡｒＨ）、８．３７（ｄ，3ＪHH＝５．６、１Ｈ，ＰｙｒＨ）、９．０５（ｂｒ  ｓ，１Ｈ，ＮＨ）、９．１３（ｓ，１Ｈ，ＮＨ），１１．６６（ｂｒ  ｓ，１Ｈ，ＮＨ），１２．９０（ｂｒ  ｓ，１Ｈ，ＮＨ）。ＬＣ−ＭＳ（２．３６ｍｉｎ）：Ｃ26Ｈ24ＦＮ8Ｏ4［Ｍ＋Ｈ］+についてのｍ／ｚ計算値：５３１．１；実測値：５３１．２。ＨＲＭＳ（２．９７ｍｉｎ）：Ｃ26Ｈ24ＦＮ8Ｏ4［Ｍ＋Ｈ］+についてのｍ／ｚ計算値：５３１．１８９９１；実測値：５３１．１８９５２。
【０３３４】
生物学的方法及びデータ
ＤＥＬＦＩＡキナーゼアッセイ
化合物を、以下のプロトコルに従い実施するキナーゼアッセイで評価した。
【０３３５】
V600EＢＲＡＦ調製：
Ｎ末端ヒスチジンタグを有する完全長ヒトＢＲＡＦを含有するバキュロウイルスを含むＳＦ−９００ＩＩ培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，Ｐａｉｓｌｅｙ，Ｓｃｏｔｌａｎｄ）中に培養されるＳＦ９昆虫細胞の感染によって、V600EＢＲＡＦを作製した後、ニッケル−アガロースアフィニティクロマトグラフィーにより精製した。
【０３３６】
ＧＳＴ−ＭＥＫ調製：
完全長ウサギＭＥＫ１タンパク質を、Ｎ末端のＧＳＴタグ及びＣ末端ヒスチジンタグと共に、大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）ＪＭ１０９において発現させた後、ニッケル−アガロースアフィニティクロマトグラフィーにより精製した。
【０３３７】
V600EＢＲＡＦ及びＧＳＴ−ＭＥＫの精製：
手順：
１．再懸濁緩衝液中で細胞を溶解させ（ＢＲＡＦ又はＭＥＫについて、それぞれＳＦ９培養物又はＪＭ１０９培養物１０ｍＬ当たり１ｍＬ）、１〜２分間超音波処理した後、１４，０００ｒｐｍ（２ｍＬチューブ中）で１０分間沈降させる。
２．溶解物１０ｍＬ当たり１．５ｍＬのニッケルアガロース「ビーズ」を取り出し、カラム（Ｂｉｏ−ｒａｄ）に添加する。
３．カラムを再懸濁緩衝液で３回洗浄する。
４．溶解物をカラムに添加する。
５．１０ｍＬの洗浄緩衝液で３回洗浄する。
６．１０ｍＬの溶出緩衝液をビーズに添加し、２ｍＬチューブ中に回収する。
７．溶出液のタンパク質濃度を調べ、透析緩衝液中、４℃で一晩透析する。
【０３３８】
緩衝液：
【０３３９】
【表１３】
0006389529.tif 000056
【０３４０】
透析緩衝液（低温室において混合及び保存）：
【０３４１】
【表１４】
0006389529.tif 000057
【０３４２】
ＤＥＬＦＩＡキナーゼ緩衝液（ＤＫＢ）：
【０３４３】
【表１５】
0006389529.tif 000058
【０３４４】
ＭＯＰＳ＝３−［Ｎ−モルホリノ］プロパンスルホン酸（Ｓｉｇｍａ  Ｍ３１８３）。
ＥＧＴＡ＝エチレングリコール−ビス（２−アミノエチルエーテル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−四酢酸（Ｓｉｇｍａ  Ｅ３８８９）。
【０３４５】
ＤＫＢ１（ＢＲＡＦ及びＭＥＫタンパク質を含むＤＫＢ）：
４９５０μＬのＤＫＢと、前述のようにして取得した２．５ｍｇ／ｍＬ  ＧＳＴ−ＭＥＫ原液５０μＬを合わせる（これにより、４０μＬ当たり１ｍｇのＭＥＫを得る）。次に、前述のようにして取得したＢＲＡＦ原液２２．５μＬを添加して、４０μＬ当たり約０．２μＬのＢＲＡＦを得る。
【０３４６】
ＤＫＢ２（ＭＥＫタンパク質を含むＤＫＢ）：
４９５０μＬのＤＫＢと、２．５ｍｇ／ｍＬ  ＧＳＴ−ＭＥＫ原液５０μＬを合わせる（これにより、４０μＬ当たり１ｍｇのＭＥＫを得る）。その５００μＬをブローアウト（ＢＯ）及び空ベクター（ＥＶ）対照に使用する。
【０３４７】
ＡＴＰ：
蒸留水中の１００ｍＭ  ＡＴＰ原液を５００μＭに希釈し、アッセイにおいて１００μＭ最終濃度を得る。
【０３４８】
阻害剤（試験化合物）：
１００ｍＭ原液を、薬剤プレート内のＤＭＳＯ中で１０、３、１、０．３、０．１、０．０３、０．０１、０．００３、０．００１、０．０００３、及び０．０００１ｍＭに希釈し、アッセイにおいて１００、３０、１０、３、１、０．３、０．１、０．０３、０．０１、０．００３、及び０．００１μＭの濃度を得る。
【０３４９】
一次抗体：
ホスホ−ＭＥＫ１／２ＣＳＴ＃９１２１ＳをＤＥＬＦＩＡアッセイ緩衝液（ＡＢ）で１：１０００希釈する。使用前に、抗体をＡＢ中、室温で３０分間プレインキュベートする。
【０３５０】
二次抗体：
抗ウサギ−Ｅｕｒ標識二次Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ♯ＡＤ０１０５をＤＥＬＦＩＡアッセイ緩衝液（ＡＢ）中で１：１０００希釈する。使用前に、抗体をＡＢ中、室温で３０分間プレインキュベートする。（一次及び二次抗体を一緒にインキュベートした。）
【０３５１】
Ｔｗｅｅｎ：
水中の０．１％  Ｔｗｅｅｎ２０。
【０３５２】
アッセイバッファー：
ＤＥＬＦＩＡアッセイ緩衝液Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ♯４００２−００１０。
【０３５３】
増強溶液：
ＤＥＬＦＩＡ増強溶液Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ♯４００１−００１０。
【０３５４】
アッセイプレート：
９６ウェルグルタチオンコーティング黒色プレートＰｅｒｂｉｏ＃１５３４０。
【０３５５】
手順：
１．ＴＢＳ中の５％脱脂粉乳で１時間、ウェルをプレブロックする。
２．ウェルを２００μＬのＴＢＳで３回洗浄する。
３．全ての阻害剤（試験化合物）、ＤＭＳＯ対照、及び任意選択で他の対照化合物について、４０μＬのＤＫＢ１を平板培養する。
４．ＢＯ及びＥＶウェルについて、４０μＬのＤＫＢ２を平板培養する。
５．要望されるプレート配置に従って、ウェル当たり０．５μＬで阻害剤（試験化合物）を添加する。
６．０．５μＬのＤＭＳＯをビヒクル対照ウェルに添加する。
７．２μＬのＢＲＡＦをＢＯ及びＥＶウェルに添加する。
８．振盪しながら、試験化合物を室温で１０分間プレインキュベートする。
９．ＤＫＢに１０μＬの５００μＭ  ＡＴＰ原液を添加して、１００μＭアッセイ濃度を得る。
１０．プレートをＴｏｐＳｅａｌで密封し、振盪しながら、室温で４５分間インキュベートする。
１１．プレートを２００μＬの０．１％  Ｔｗｅｅｎ２０／水で３回洗浄することにより、反応を停止する。
１２．抗体混合物のウェル毎に５０μＬを添加し、振盪しながら、室温で１時間インキュベートする。
１３．プレートを２００μＬの０．１％  Ｔｗｅｅｎ２０／水で３回洗浄する。
１４．ウェル毎に１００μＬのＤＥＬＦＩＡ増強溶液を添加し、ホイルで被覆した後、振盪しながら、室温で３０分間インキュベートする。
１５．ユーロピウムプロトコルを用いて、Ｖｉｃｔｏｒプレートリーダ（Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ，Ｔｕｒｋｕ，Ｆｉｎｌａｎｄ）で読取りを行う。
【０３５６】
ブランク（空ベクター）の値を全ての値から差し引く。ＤＭＳＯ対照を１００％活性として設定し、アッセイポイント（応答）をＤＭＳＯ対照のパーセンテージとして計算する。Ｇｒａｐｈｐａｄ  Ｐｒｉｓｍソフトウェアを用いて、データをプロットし、非線形回帰線を、可変傾斜シグモイド用量−応答式：
Ｙ＝最小値＋［最大値−最小値］／［１＋１０＾（（ＬｏｇＥＣ５０−Ｘ）＊ＨｉｌｌＳｌｏｐｅ）］
（式中、Ｘは、濃度の対数であり、Ｙは、応答である）
を用いて計算する。この手順により得られるＩＣ50は、飽和及びゼロエフェクトプラトー間の中間のコントロール蛍光値（％）をもたらす薬剤の濃度である。通常、３つの独立したアッセイを実施し、平均ＩＣ50を記録する。
【０３５７】
データを以下の表にまとめる。
【０３５８】
【表１６】
0006389529.tif 000059
【０３５９】
細胞を用いたホスホ−ＥＲＫアッセイ（突然変異型ＢＲＡＦ  ＷＭ２６６．４細胞）
以下のプロトコルに従って実施した細胞アッセイを用いて、化合物をアッセイした。
【０３６０】
０日目：
９６ウェルプレート内の９９μＬ培地中で、１６，０００突然変異型ＢＲＡＦ  ＷＭ２６６．４細胞／ウェルを平板培養する。
【０３６１】
１日目：
１．１μＬの試験化合物を細胞に添加する（合計１μＬ溶液）。
２．細胞を試験化合物と一緒に３７℃で６時間インキュベートする。
３．全てのウェルから溶液を吸引して除去する。
４．ウェル当たり１００μＬの４％ホルムアルデヒド／０．２５％  Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００ＰＢＳで細胞を固定する。
５．プレートを４℃で１時間インキュベートする。
６．固定液を吸引して除去し、ウェル当たり３００μＬのＴＢＳを添加する。
７．プレートを４℃で一晩放置する。
【０３６２】
２日目：
１．プレートをウェル当たり２００μＬのＰＢＳで２回洗浄する。
２．ＴＢＳ中５％脱脂粉乳１００μＬでブロックする。
３．プレートを３７℃で２０分間インキュベートする。
４．プレートを０．１％  ｔｗｅｅｎ／Ｈ2Ｏで２回洗浄する。
５．５％脱脂粉乳／ＴＢＳで希釈した、５０μＬの３μｇ／ｍＬ一次抗体ｐＥＲＫ（Ｓｉｇｍａ  Ｍ８１５９）を各ウェルに添加する。
６．プレートを３７℃で２時間インキュベートする。
７．プレートを０．１％  ｔｗｅｅｎ／Ｈ2Ｏで３回洗浄する。
８．５０μＬの０．４５μｇ／ｍＬ二次ユーロピウム標識抗マウス抗体（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）を各ウェルに添加する。
９．プレートを３７℃で１時間インキュベートする。
１０．プレートを０．１％  ｔｗｅｅｎ／Ｈ2Ｏで３回洗浄する。
１１．１００μＬの増強液（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）を各ウェルに添加する。
１２．プレートを室温で約１０分間放置した後、プレートを穏やかに振盪する。
１３．Ｖｉｃｔｏｒ２プレートリーダ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ，Ｔｕｒｋｕ，Ｆｉｎｌａｎｄ）においてユーロピウム時間分解蛍光を読み取る。
１４．プレートを０．１％  ｔｗｅｅｎ／Ｈ2Ｏで２回洗浄する。
１５．ウェル当たり２００μＬの溶液を添加することにより、ビシンコニン酸アッセイ（ＢＣＡ，Ｓｉｇｍａ）でタンパク質濃度を測定する。
１６．プレートを３７℃で３０分間インキュベートする。
１７．プレートリーダにより５７０ｎｍの吸光度レベルを読み取る。
【０３６３】
ユーロピウムカウントは、カウントを吸光度で割ることにより、タンパク質レベルについて正規化することに留意されたい。
【０３６４】
全ての値から、ブランク（無細胞）の値を差し引く。ＤＭＳＯ対照を１００％活性として設定し、アッセイポイント（応答）をＤＭＳＯ対照のパーセンテージとして計算する。Ｇｒａｐｈｐａｄ  Ｐｒｉｓｍソフトウェアを用いて、データをプロットし、非線形回帰線を、可変傾斜シグモイド用量−応答式：
Ｙ＝最小値＋［最大値−最小値］／［１＋１０＾（（ＬｏｇＥＣ５０−Ｘ）＊ＨｉｌｌＳｌｏｐｅ）］
（式中、Ｘは、濃度の対数であり、Ｙは、応答である）
を用いて計算する。この手順により得られるＩＣ50は、飽和と、ゼロエフェクトプラトー間の中間のコントロール蛍光値（％）をもたらす薬剤の濃度である。通常、３つの独立したアッセイを実施し、平均ＩＣ50を記録する。
【０３６５】
データを以下の表にまとめる。
【０３６６】
【表１７】
0006389529.tif 000060
【０３６７】
ＳＲＢ細胞増殖アッセイ（ＳＲＢ  ＧＩ50）
１０％ウシ胎仔血清を補充したＤＭＥＭ又はＲＰＭＩ１６４０中で、１０％  ＣＯ2水飽和雰囲気下、３７℃で細胞株を常用的に培養する。培養物は、継代培養により、密集になるまで対数増殖期を維持する（３〜５日間隔）。５ｍＬの市販のトリプシンＥＤＴＡを含む８０ｃｍ2組織培養フラスコを回収することにより、単一細胞懸濁物を調製する。５分後、脱離した細胞を５ｍＬの十分に補充した培地と混合した後、遠心分離によりペレット化した（１０００ｒｐｍで７分）。上清を吸引した後、細胞ペレットを１０ｍＬの新鮮な培地中に再懸濁させた後、１９ゲージ針を通して全量を５回吸引／排出することにより、細胞を完全に脱凝集させた。血球計を用いて、細胞の濃度を決定する（１／１０希釈）。実施しようとする数の試験のために少なくとも２倍過剰量を付与するのに好適な量、典型的に、１００〜２００ｍＬを、細胞懸濁液を１０，０００〜４０，０００／ｍＬに希釈することによって調製し、プログラム可能な８チャンネル蠕動ポンプを用いて、１００μＬ／ウェルを９６ウェルプレートに配分し、１０００〜４０００細胞／ウェルを付与し、カラム１２をブランクのままにする。プレートをインキュベータに２４時間戻して、細胞を再結合させる。
【０３６８】
試験しようとする化合物をＤＭＳＯ中に１０ｍＭで調製する。アリコート（２４μＬ）を１．２ｍＬ培地中に希釈して２００μＭを取得した後、８０μＬを１６０μＬに移すことにより、１０連続希釈を３回実施する。８チャンネルピペッターを用いて、各希釈のアリコート（１００μＬ）をウェルに添加し、このようにして最終的にさらに２×希釈を実施し、１００μＭ〜０．００５μＭの用量を付与する。カラム１１には、無添加の培地のみをもたらす。各化合物を４回反復して試験し、各反復は、４ウェルの平均である。
【０３６９】
さらに５日の増殖後、プレートを空にしてから、細胞を１０％トリクロロ酢酸中に４℃で３０分間固定する。水道水で入念にすすいだ後、プレートを乾燥させて、１％酢酸中の０．１％スルホロダミン−Ｂの溶液５０μＬを室温で１０分間添加することにより、染色する。染剤を流し落とし、１％酢酸を流しながらプレートを入念にすすぎ（こうして、非結合染剤を除去する）、乾燥させる。１００μＬのＴｒｉｓ緩衝液ｐＨ８の添加により、結合染剤を溶液中に溶解させた後、プレートシェーカ（約５００ｒｐｍ）上に１０分間載せる。各ウェルの５４０ｎｍでの吸光度（存在する細胞の数に比例する）を、プレートリーダを用いて決定する。
【０３７０】
カラム１２のブランクの値を平均した後、これを全ての値から差し引き、結果を非処理の値（カラム１１）のパーセンテージとして表す。このようにして得られた１０の値（４回反復で）を薬剤濃度の対数に対してプロットし、４パラメータロジスティク式に対する非線形回帰により分析し、その際、調査により示唆されれば、制約を設定する。この手順により得られるＧＩ50は、飽和と、ゼロエフェクトプラトー間の中間のコントロールＡ540（％）をもたらす薬剤の濃度である。
【０３７１】
様々な細胞株についての結果を以下の表にまとめる。
【０３７２】
【表１８】
0006389529.tif 000061
【０３７３】
【表１９】
0006389529.tif 000062
【０３７４】
【表２０】
0006389529.tif 000063
【０３７５】
【表２１】
0006389529.tif 000064
【０３７６】
異種移植片試験
標準的細胞株の場合、懸濁液（０．２ｍＬ）中の細胞を雌無胸腺又は重症複合免疫不全合併症マウスの脇腹に皮下接種した。７〜８匹のマウスの群を腫瘍体積の層化割り付け後の処置に割り当てた。ＴＢＡＰ−０１による処置は、細胞投与から１１〜１４日後に開始した。強制投与のために、２００μＬの懸濁液（１０ｍＬ／ｋｇで、ＤＭＳＯ：水、１：１９、ｖ／ｖ）を投与した。対照マウスは、同等用量のビヒクル（ＤＭＳＯ：水、１：１９、ｖ／ｖ）を受けた。ＴＢＡＰ−０１による処置は、２４用量について毎日１回継続した。
【０３７７】
患者由来の異種移植片（ＰＤＸ）の場合、新鮮な組織を手術直後に採取して、１０％  ＦＢＳを補充したＲＰＭＩに導入した。組織を滅菌ペトリ皿に移した。腫瘍の壊死部分を除去し、５×５×５ｍｍの切片をＣｂ１７ＮＯＤ  ＳＣＩＤマウスの脇腹に皮下移植した。腫瘍が、ホームオフィス（Ｈｏｍｅ  Ｏｆｆｉｃｅ）ライセンスサイズ範囲に達したら、これを切除し、生存組織を５×５×５ｍｍ立方体に切断して、同じ手順により別のＣｂ１７ＮＯＤ  ＳＣＩＤマウスに移植した。幾何学及び組織学的分析によって、各地点の腫瘍が、出発材料に由来することが確認された。移植後、腫瘍ＲＭ−２（ＬＩＮＥ２）（ＢＲＡＦ突然変異体、内因性ベムラフェニブ耐性患者由来の異種移植片）、腫瘍ＲＭ−１７（ＬＩＮＥ３）（ダブラフェニブ＋トラメチニブ組合せに耐性のＢＲＡＦ突然変異患者由来の異種移植片）、及びＲＭ３３Ｓ（イピリムマブ不応性の患者由来のＢＲＡＦ野生型Ｒａｓ野生型）を約５０〜６０ｍｍ3まで増殖させた後、それぞれ２４又は１７日間にわたる２０ｍｇ／ｋｇ／日のＴＢＡＰ−０１又はビヒクルの毎日の経口胃管投与による処置を開始した。患者由来細胞ＬＰ２−ＣＬ２（ＬＩＮＥ１）（３ヵ月の治療後に診療機関でベムラフェニブ耐性を獲得した患者に由来するＢＲＡＦ突然変異体）を手術後に採取した新鮮な組織から樹立した。１０％  ＦＢＳで置換したＲＰＭＩ中で細胞を増殖させた。
【０３７８】
結果を以下の表にまとめる。
【０３７９】
【表２２】
0006389529.tif 000065
【０３８０】
バイオマーカ試験
懸濁液（０．２ｍＬ）中の細胞を雌無胸腺マウスの脇腹に皮下接種した。３〜６匹のマウスの群を、細胞投与から１４〜２１日後に、試験化合物の１回用量（表１３に記載するイムノブロッティング試験のため）又は４回の１日用量（表１３に記載する免疫組織学的試験のため）による処置に割り当てた。強制投与のために、ＤＭＳＯ：水中の４０〜５０ｍｇ／ｋｇＴＢＡＰ−０１懸濁液２００μＬを投与した。対照マウスは、同等用量のビヒクル（ＤＭＳＯ：水、１：１９、ｖ／ｖ）を受けた。投与の２〜８時間後に、腫瘍を採取して、組織ホモジナイザー（Ｐｒｅｃｅｌｌｙｓ  ２４）を用い、１％  ＮＰ４０溶解緩衝液（１００μＬの緩衝液／１５ｍｇの組織）中で溶解させた。６６０ｎｍ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ａｓｓａｙ（Ｐｉｅｒｃｅ）を用いて、全タンパク質含量を測定してから、４０μｇの全タンパク質を、さらなるイムノブロッティングのためにＳＤＳ−ｐａｇｅにロードした。ＥＲＫ２（Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、ホスホ−ＭＥＫ（Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ）、及びホスホ−ＥＲＫ（Ｓｉｇｍａ）抗体をイムノブロッティングのために使用し；Ｏｄｉｓｓｅｙシステム（Ｌｉ−ｃｏｒ）上での蛍光二次抗体（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ及びＬｉ−ｃｏｒ）を用いて、シグナルを明らかにした。あるいは、療法の終了時（２４回の１日用量）の最終投与から１時間後に腫瘍を採取し、前述と同様に処理した。
【０３８１】
免疫組織学（ＩＨＣ）：腫瘍をホルマリン固定した後、ヘマトキシリン及びエオシン、ウサギｐＳＲＣ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  ４４６６０Ｇ）及びｐＥＲＫ（Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ２０Ｇ１１）による染色のために他所（例えば、Ｄｈｏｍｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００９）に記載されているように調製した。各実験にポジティブ及びネガティブ対照を含ませた。染色のパターン及び強度のスコアリングを盲検式に実施した。
【０３８２】
データを以下の表にまとめるが、この表は、ＴＢＡＰ−０１について、ビヒクル処置対照と比較した、ホスホ−ＭＥＫ（ｐｐＭＥＫ）及びホスホ−ＥＲＫ（ｐｐＥＲＫ）の減少率（％）を示す。ｐＭＥＫ及びｐＥＲＫを、処理サンプル並びに対照サンプル中の総ＥＲＫに対して正規化する。
【０３８３】
【表２３】
0006389529.tif 000066
【０３８４】
薬物動態試験
少なくとも６週齢の雌ＢＡＬＢ／ｃＡｎＮＣｒｌマウスをＰＫ分析に用いた。マウスに、静脈内投与（２ｍｇ／ｋｇ、ＤＭＳＯ：Ｔｗｅｅｎ２０：水  １０：１：８９ｖ／ｖ中）又は強制経口投与により投薬した。サンプルを、静脈内経路の場合には５分から１８若しくは２４時間の間に７又は８の時点で、また経口経路の場合には１５分から１８若しくは２４時間の間に６又は８の時点で採取した。各経路につき各時点で、３匹のマウスを使用した。マウスをハロタン又はイソフルラン麻酔下に置き、血漿調製のための血液を終末心臓穿刺により、ヘパリン処理シリンジ中に採取した。血漿サンプルを液体窒素中で急速凍結してから、分析まで−７０℃で保存した。動物を使用する全ての手順は、動物（科学手順）法（Ａｎｉｍａｌｓ（Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ）Ａｃｔ）１９８６の下で英国内務省（Ｈｏｍｅ  Ｏｆｆｉｃｅ）規則に従い、また、研究機関の動物倫理委員会（Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ’ｓ  Ａｎｉｍａｌ  Ｅｔｈｉｃｓ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ）及び腫瘍実験における動物の福祉に関する英国癌研究調整委員会（Ｕｎｉｔｅｄ  Ｋｉｎｇｄｏｍ  Ｃｏｏｒｄｉｎａｔｉｎｇ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ  ｆｏｒ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ’ｓ  ａｄ  ｈｏｃ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ  ｏｎ  ｔｈｅ  Ｗｅｌｆａｒｅ  ｏｆ  Ａｎｉｍａｌｓ  ｉｎ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｎｅｏｐｌａｓｉａ）により規定される指針を順守して実施した。
【０３８５】
データを以下の表にまとめる。
【０３８６】
【表２４】
0006389529.tif 000067
【０３８７】
ｈＥＲＧ阻害
試験は、Ｃｙｐｒｏｔｅｘ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ（Ｃｈｅｓｈｉｒｅ，ＵＫ）において、契約者のプロトコルに従って実施した。試験は、ＩｏｎＷｏｒｋｓ（商標）ＨＴ計器（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）で実施したが、これは、専用の３８４ウェルプレート（ＰａｔｃｈＰｌａｔｅ（商標））において同時に４８単一細胞の電気生理学測定を自動的に実施する。用いた細胞は、ｈＥＲＧ（Ｃｙｔｏｍｙｘ，ＵＫから取得した細胞株）で安定にトランスフェクトしたチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞であった。単一細胞懸濁液を細胞外液（カルシウム及びマグネシウムを含むダルベッコリン酸緩衝食塩水ｐＨ７〜７．２）中に調製し、アリコートをＰａｔｃｈＰｌａｔｅ（商標）の各ウェルに自動的に添加した。次に、プレートの下方に真空を適用して電気シールを形成することにより、各ウェルの底部の小さい孔に細胞を配置した。細胞内液（ＨＥＰＥＳでｐＨ７．２に緩衝）を満たした全てのウェルに共通の単一コンパートメントを通して真空を適用した。細胞内コンパートメント内の共通の接地電極と、上部ウェルの各々に配置された個々の電極によって、各シールの抵抗を測定した。
【０３８８】
次に、ＰａｔｃｈＰｌａｔｅ（商標）の下方に、穿孔剤であるアンホテリシンを循環させた後、化合物前ｈＥＲＧ電流を測定することにより、細胞に対する電気的アクセスを達成した。細胞外コンパートメント内に電極を配置し、−８０ｍＶの保持電位を１５秒間適用した。次に、＋４０ｍＶまで５秒間脱分極ステップを適用することにより、ｈＥＧＲチャネルを活性化し、続いて、−５０ｍＶに４秒間保持することにより、ｈＥＲＧ末尾電流を誘発した後、−８０ｍＶに０．３秒間戻した。次に、様々な濃度の化合物ＴＢＡＰ−０１を含有する９６ウェルマイクロタイタープレートから、ＰａｔｃｈＰｌａｔｅ（商標）の上部ウェルに試験化合物を自動的に添加した。確立されたｈＥＧＲ阻害剤であるキニジンを実験対照として含ませた。ＴＢＡＰ−０１をＤＭＳＯに溶解させた後、０．２５％  ＤＭＳＯ中１００μＭ〜３２ｎＭの最終濃度でアッセイした。０．２５％  ＤＭＳＯを含有する緩衝液を負の対照として含めた。試験化合物を細胞と３００秒間接触させておいた後、化合物前スキャンと同じ電圧ステッププロトコルを用いて電流を記録した。各濃度は、４回反復ウェルで試験した。
【０３８９】
化合物後電流を化合物前電流のパーセンテージとして表し、各化合物の濃度に対してプロットした。濃度依存的阻害が認められた場合、データを下記式に当てはめた：
ｙ＝（ｙmax−ｙmin）／（１＋（ｘ／ｘ50）s）＋ｙmin
式中：
ｙ＝（化合物後電流／化合物前電流）×１００；
ｘ＝濃度；
ｘ50＝電流を５０％阻害するのに必要な濃度（ＩＣ50）；及び
ｓ＝グラフの傾き。
【０３９０】
データを以下の表にまとめる。
【０３９１】
【表２５】
0006389529.tif 000068
【０３９２】
他の標的に対する活性
試験は、契約者のプロトコルに従い、ペイズリー（Ｐａｉｓｌｅｙ）所在のＬｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓで実施した。ＴＢＡＰ−０１をＤＭＳＯに溶解させた後、１％  ＤＭＳＯ中１０μＭ〜０．５ｎＭの最終濃度で、１００μＭのＡＴＰ濃度の存在下、アッセイした。タンパク質分解切断に対するリン酸化及び非リン酸化ペプチドの感受性差に基づく、蛍光ベースの共役酵素フォーマットを使用するＺ’−ＬＹＴＥ（登録商標）生化学アッセイを用いて、試験化合物のＩＣ５０値を決定した。
【０３９３】
別の試験を、契約者のプロトコルに従い、ダンディー（Ｄｕｎｄｅｅ）所在のＴｈｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｅｎｔｒｅ  ｆｏｒ  Ｋｉｎａｓｅ  Ｐｒｏｆｉｌｉｎｇで実施した。ＴＢＡＰ−０１をＤＭＳＯに溶解させた後、２％  ＤＭＳＯ中１μＭの最終濃度で、１３１キナーゼに対してアッセイした。アッセイは、放射性（33Ｐ−ＡＴＰ）フィルター結合アッセイを用いて実施した。
【０３９４】
データを以下の表にまとめる。
【０３９５】
【表２６】
0006389529.tif 000069
【０３９６】
【表２７】
0006389529.tif 000070
【０３９７】
例えば、ＴＡＫ１が、リンパ腫及び大腸癌及び膵臓癌などの癌における標的であり；ＴｒｋＡが、肺癌及び乳癌の標的であり；ＤＤＲ２は、扁平上皮肺癌などの癌における標的であり；ＶＥＧＦＲ及びＴｉｅ−２が、抗血管新生標的であり；ＡＢＬが、白血病の標的であり；また、ＹＥＳ１が、黒色腫及び乳癌などの癌の標的であることは公知であることに留意されたい。
【０３９８】
抗ウイルス活性
ＨｅｐＧ２細胞の脳心筋炎ウイルス（Ｅｎｃｅｐｈａｌｏｍｙｏｃａｒｄｉｔｉｓ  ｖｉｒｕｓ）（ＥＣＭＶ）ＡＴＣＣ（登録商標）ＶＲ−１２９Ｂ感染；ベロ細胞の単純ヘルペスウイルスＨＳＶ−１、ＳＣ１６感染；及びＭＤＣＫ細胞におけるインフルエンザＡウイルス、Ａ／Ｐａｎａｍａ／２００７／９９（Ｈ３Ｎ２）に対する化合物の抗ウイルス活性を、契約者のプロトコルに従い、ＫＷＳＢｉｏｔｅｓｔ（Ｂｒｉｓｔｏｌ，ＵＫ）で評価した。
【０３９９】
ウイルス複製を許容する細胞を、補充物を含む増殖培地において十分な数まで増殖させた。細胞が密集になったら、これらを９６ウェル平底プレートに接種した。ＥＣ50（５０％有効濃度）決定の場合、培地を除去し、ウイルス感染の１０分前に、化合物を０．４％  ＤＭＳＯ中１０×最終濃度で添加した。感染から１時間後、オーバーレイ培地をウェルに添加して、試験期間中１×濃度の化合物を付与した。ビヒクル及び正の対照ウェルを、細胞生存性に対するあらゆる影響の対照とするように設定した。ＣＣ50（５０％細胞傷害濃度）決定の場合、ウイルス接種材料の代わりに培地のみを添加した以外は、同じ方法を実施した。
【０４００】
次に、ＭＴＴアッセイを用いて、個々のウェルをアッセイしたが、これは、哺乳動物細胞生存の定量的比色アッセイである。細胞を１ｍｇ／ｍＬのＭＴＴ溶液と一緒に３時間インキュベートした。続いて、適切な波長での吸光度を定量することにより、色彩強度を決定した。結果は、ＥＣ50としての各化合物の抗ウイルス効果の指標、並びにウイルス感染の非存在下での細胞に対する化合物の細胞傷害作用を示すＣＣ50をもたらす。ウイルス感染ウェルも、ＣＰＥ又は合胞体形成について肉眼で検査した。
【０４０１】
有効濃度（ＥＣ50）：化合物がウイルス誘導細胞死を低減する能力を、哺乳動物細胞生存についてのＭＴＴ比色アッセイを用いて評価した。アッセイからの結果を、ＥＬＩＳＡプレートリーダを用いて定量し、各ウイルスについて評価される化合物各々のＥＣ50を決定した。結果は、各群についての平均値（ＳＥＭ）の標準偏差と一緒に、グラフとして表示した。各化合物の効力の統計的有意性を計算した。
【０４０２】
細胞傷害濃度（ＣＣ50）：化合物の細胞傷害作用を、哺乳動物細胞生存についてのＭＴＴ比色アッセイを用いて評価した。アッセイからの結果を、ＥＬＩＳＡプレートリーダを用いて定量し、評価される化合物各々のＣＣ50を決定した。結果は、各群についての平均値（ＳＥＭ）の標準偏差と一緒に、グラフとして表示した。各化合物の効力の統計的有意性を計算した。
【０４０３】
ヒト末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）からのＬＰＣ刺激ＴＮＦ−α放出
１７ｋＤａ分泌サイトカインである腫瘍壊死因子α（ＴＮＦ−α）は、炎症性疾患及び免疫障害において重要な役割を果たす。ＴＮＦ−αは、主として、活性化マクロファージ（例えば、Ｓｈａｋｈｏｖ  ｅｔ  ａｌ．，１９９０を参照）及び単球（例えば、Ｙａｏ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７を参照）により、いくつかの炎症性及び免疫学的刺激に応答して分泌される。例えば、細菌感染の間、グラム陰性菌細胞壁の成分である、リポ多糖（ＬＰＳ）は、ＴＮＦ−αの放出を誘導する（例えば、Ｍａｒｔｉｃｈ  ｅｔ  ａｌ．，１９９１を参照）。
【０４０４】
ＴＮＦ−αなどの炎症性サイトカインの過剰生産は、炎症性障害、例えば、クローン病（ＣＤ）及び炎症性腸疾患（例えば、Ｋａｍ  ｅｔ  ａｌ．，２０００；Ｎａｋａｍｕｒａ  ｅｔ  ａｌ．，２００６を参照）、関節リウマチ（例えば、Ｋｅｆｆｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９１；ＭｃＣａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０を参照）、敗血症性ショック（例えば、Ｌｉｎｋ  ｅｔ  ａｌ．，２００８；Ｓｈａｐｉｒａ  ｅｔ  ａｌ．，１９９６を参照）、喘息（例えば、Ｂｅｒｒｙ  ｅｔ  ａｌ．，２００７を参照）、慢性気管支炎（ＣＢ）、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、急性肺傷害（ＡＬＩ）、及び急性呼吸不全症候群（ＡＲＤＳ）（例えば、Ｍｕｋｈｏｐａｄｈｙａｙ  ｅｔ  ａｌ．，２００６を参照）に関連している。ＴＮＦ−αレベルの低下は、これらの状態の改善に関連している。
【０４０５】
ヒト末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）からのＬＰＣ刺激ＴＮＦα放出における化合物ＴＢＡＰ−０１の活性を、オックスフォード（Ｏｘｆｏｒｄ）所在のＡｒｇｅｎｔａ／Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ，Ｃｏｗｌｅｙで、契約者のプロトコルに従って実施した。ＰＢＭＣは、標準的密度勾配遠心分離技術を用いて、健康なヒトボランティアの血液から単離した。ＰＢＭＣを培地に懸濁させ、９６ウェルプレートに分配し、加湿インキュベータにおいて、３７℃で３時間インキュベートした。インキュベーション後、培地を取り替えてから、試験化合物、標準化合物（ＢＩＲＢ７９６）、又は適切なビヒクルを細胞に添加し、プレートを３７℃で１時間インキュベートした。インキュベーション後、ＬＰＳ（大腸菌（Ｅ  ｃｏｌｉ）０１１１：８４、１０ｎｇ／ｍＬ）、又は適切なビヒクル対照を細胞に添加し、プレートをインキュベータに一晩戻した。インキュベーション後、プレートを室温で４分間３００×ｇの遠心分離に付した。無細胞上澄みを除去し、市販のＥＵＳＡキット（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）を用いて、ＴＮＦ−αレベルについてアッセイするまで、保存（凍結）した。
【０４０６】
試験化合物をＤＭＳＯに溶解させた後、アリコートを凍結保存した。個別のアリコートを各実験に用いた。各実験のために、試験化合物をＤＭＳＯで希釈（最終アッセイ濃度の１０００倍まで）した後、細胞培地に希釈して、一定のＤＭＳＯ濃度を維持しながら、必要な濃度を付与した（アッセイでは、最終濃度０．１％  ＤＭＳＯ）。
【０４０７】
３回の個別試験（ｎ＝３）により、８ポイント用量応答曲線を実施した。各実験における試験化合物の効果は、ＬＰＳ刺激応答の阻害率（％）として表した。各実験において各試験化合物について阻害率（％）データをプールして、各試験化合物の単一ＩＣ50値を決定した。
【０４０８】
化合物ＴＢＡＰ−０１は、このアッセイを用いて、ＩＣ50は、３．４ｎＭで、９５％信頼区間は２．０〜５．７ｎＭと、強力な阻害を示すことが判明した。
【０４０９】
比較データ  −  １
ＴＢＡＰ−０１及び構造的に関連する公知の化合物（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１におけるＡＡ−０４；及びＳｐｒｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２００９におけるＡＡ−０１８、ＡＡ−０１９、ＡＡ−０６２、ＡＡ−０８４）についてのデータを以下にまとめる。
【０４１０】
【表２８】
0006389529.tif 000071
【０４１１】
【表２９】
0006389529.tif 000072
【０４１２】
【表３０】
0006389529.tif 000073
【０４１３】
【表３１】
0006389529.tif 000074
【０４１４】
【表３２】
0006389529.tif 000075
【０４１５】
比較データ  −  ２
Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１における化合物ＡＡ−０４と比較して、ＴＢＡＰ−０１は、以下：
（ａ）ＢＲＡＦキナーゼアッセイに関して、１０倍強力であり；
（ｂ）ｐＥＲＫ細胞アッセイに関して、８倍強力であり；
（ｃ）細胞増殖阻害アッセイに関して、５倍強力である。
【化４３】
0006389529.tif 000076
【０４１６】
比較データ  −  ３
Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２００９における化合物ＡＡ−０１８と比較して、ＴＢＡＰ−０１は、以下：
（ａ）最大有効用量で、突然変異型ＢＲＡＦ黒色腫異種移植片Ａ３７５Ｍについて７倍有効であり；
（ｂ）経口バイオアベイラビリティが２倍高い。
【化４４】
0006389529.tif 000077
【０４１７】
比較データ  −  ４
Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２００９における化合物ＡＡ−０１９と比較して、ＴＢＡＰ−０１は、以下：
（ａ）同じ用量で、Ｃmax及びＡＵＣが、ＡＡ−０１９より高いにもかかわらず、２倍高い用量（すなわち、４０〜５０ｍｇ／ｋｇ）で、ｉｎ  ｖｉｖｏで許容され；
（ｂ）ＢＲＡＦ突然変異型ナイーブ又は承認薬剤耐性細胞株及び突然変異型ＲＡＳ細胞株について細胞増殖阻害が最大１６倍強力であり；
（ｃ）２倍可溶性であり（すなわち、２倍高い熱力学的溶解度を有する）；
（ｄ）最大有効用量で、突然変異型ＢＲＡＦ黒色腫異種移植片Ａ３７５Ｍ及び突然変異型ＢＲＡＦ黒色腫異種移植片ＷＭ２６６．４について２倍有効であり；
（ｅ）最大有効用量で、突然変異型ＲＡＳ大腸異種移植片ＳＷ６２０について１．２倍有効であり；
（ｆ）最大有効用量で、ベムラフェニブ耐性患者由来の突然変異型ＢＲＡＦ黒色腫異種移植片ＲＭ−２（ＬＩＮＥ２）及び突然変異型ＢＲＡＦ黒色腫異種移植片Ａ３７５Ｒについて１．２〜１．５倍有効であり；
（ｇ）最大有効用量で、ダブラフェニブ＋トラメチニブ耐性患者由来の突然変異型ＢＲＡＦ黒色腫異種移植片ＲＭ−１７（ＬＩＮＥ３）について２．４倍有効であり；
（ｈ）最大有効用量で、膵臓ＰＤＡＣ  Ｒ１７２Ｈ同種移植片におけるｐＥＲＫバイオマーカの阻害が、＞６．５倍有効であり；
（ｉ）最大有効用量で、膵臓ＰＤＡＣ  Ｒ１７２Ｈ同種移植片におけるｐＳＲＣバイオマーカの阻害が、２．５倍有効である。
【化４５】
0006389529.tif 000078
【０４１８】
比較データ  −  ５
Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２００９における化合物ＡＡ−０６２と比較して、ＴＢＡＰ−０１は、最大有効用量で、突然変異型ＢＲＡＦ黒色腫異種移植片Ａ３７５Ｍについて９倍有効である。これは、ＡＡ−０６２が、ＴＢＡＰ−０１と比較して、５倍高いＣmax及び１２倍高いＡＵＣを有することから、驚くべきことであり、予想外である。
【化４６】
0006389529.tif 000079
【０４１９】
比較データ  −  ６
Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２００９における化合物ＡＡ−０８４と比較して、ＴＢＡＰ−０１は、以下：
（ａ）ＢＲＡＦキナーゼアッセイに関して、１１倍強力であり；
（ｂ）ｐＥＲＫ細胞アッセイに関して、８倍強力であり；
（ｃ）細胞増殖阻害アッセイに関して、５倍強力である。
【化４７】
0006389529.tif 000080
【０４２０】
以上、本発明の原理、好ましい実施形態、操作方法を記載してきた。しかし、本発明は、記載した特定の実施形態に限定されるものとして解釈すべきではない。そうではなく、前述した実施形態は、限定的ではなく、むしろ例示的とみなすべきである。本発明の範囲を逸脱することなく、当業者によりこれらの実施形態に変更が加えられ得ることは理解すべきである。
本願は、例えば以下の態様を含む。
［項１］
下記式：
【化４８】
0006389529.tif 000081
（式中、
＝Ｘ−は、独立に、＝ＣＨ−又は＝Ｎ−であり；
−Ｙは、独立に、−Ｙ1、−Ｙ2、−Ｙ3、−Ｙ4、−Ｙ5、又は−Ｙ6であり；
−Ｙ1は、独立に、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、又は−Ｉであり；
−Ｙ2は、直鎖又は分岐飽和Ｃ1〜4アルキルであり；
−Ｙ3は、直鎖又は分岐飽和Ｃ1〜4ハロアルキルであり；
−Ｙ4は、−ＯＨであり；
−Ｙ5は、直鎖又は分岐飽和Ｃ1〜4アルコキシであり；及び
−Ｙ6は、直鎖又は分岐飽和Ｃ1〜4ハロアルコキシである）
の化合物、並びにその薬学的に許容される塩、Ｎ−オキシド、水和物、及び溶媒和物から選択される化合物。
［項２］
＝Ｘ−が、＝ＣＨ−である、項１に記載の化合物。
［項３］
＝Ｘ−が、＝Ｎ−である、項１に記載の化合物。
［項４］
−Ｙが、−Ｙ1である、項１〜３のいずれか一項に記載の化合物。
［項５］
−Ｙが、−Ｙ2である、項１〜３のいずれか一項に記載の化合物。
［項６］
−Ｙが、−Ｙ3である、項１〜３のいずれか一項に記載の化合物。
［項７］
−Ｙが、−Ｙ4である、項１〜３のいずれか一項に記載の化合物。
［項８］
−Ｙが、−Ｙ5である、項１〜３のいずれか一項に記載の化合物。
［項９］
−Ｙが、−Ｙ6である、項１〜３のいずれか一項に記載の化合物。
［項１０］
−Ｙ1が、存在する場合、独立に、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒである、項１〜９のいずれか一項に記載の化合物。
［項１１］
−Ｙ1が、存在する場合、独立に、−Ｆ又は−Ｃｌである、項１〜９のいずれか一項に記載の化合物。
［項１２］
−Ｙ1が、存在する場合、−Ｆである、項１〜９のいずれか一項に記載の化合物。
［項１３］
−Ｙ1が、存在する場合、−Ｃｌである、項１〜９のいずれか一項に記載の化合物。
［項１４］
−Ｙ1が、存在する場合、−Ｂｒである、項１〜９のいずれか一項に記載の化合物。
［項１５］
−Ｙ1が、存在する場合、−Ｉである、項１〜９のいずれか一項に記載の化合物。
［項１６］
−Ｙ2が、存在する場合、独立に、−Ｍｅ、−Ｅｔ、−ｎＰｒ、−ｉＰｒ、−ｎＢｕ、−ｉＢｕ、−ｓＢｕ、又は−ｔＢｕである、項１〜１５のいずれか一項に記載の化合物。
［項１７］
−Ｙ2が、存在する場合、独立に、−Ｍｅ、−Ｅｔ、−ｎＰｒ、又は−ｉＰｒである、項１〜１５のいずれか一項に記載の化合物。
［項１８］
−Ｙ2が、存在する場合、独立に、−Ｍｅ又は−Ｅｔである、項１〜１５のいずれか一項に記載の化合物。
［項１９］
−Ｙ2が、存在する場合、−Ｍｅである、項１〜１５のいずれか一項に記載の化合物。
［項２０］
−Ｙ3が、存在する場合、直鎖又は分岐飽和Ｃ1〜4フルオロアルキルである、項１〜１９のいずれか一項に記載の化合物。
［項２１］
−Ｙ3が、存在する場合、独立に、−ＣＨ2Ｆ、−ＣＨＦ2、−ＣＦ3、−ＣＨ2ＣＨ2Ｆ、−ＣＨ2ＣＨＦ2、又は−ＣＨ2ＣＦ3である、項１〜１９のいずれか一項に記載の化合物。
［項２２］
−Ｙ3が、存在する場合、独立に、−ＣＨ2Ｆ、−ＣＨＦ2、又は−ＣＦ3である、項１〜１９のいずれか一項に記載の化合物。
［項２３］
−Ｙ3が、存在する場合、−ＣＦ3である、項１〜１９のいずれか一項に記載の化合物。
［項２４］
−Ｙ5が、存在する場合、独立に、−Ｏ−Ｍｅ、−Ｏ−Ｅｔ、−Ｏ−ｎＰｒ、−Ｏ−ｉＰｒ、−Ｏ−ｎＢｕ、−Ｏ−ｉＢｕ、−Ｏ−ｓＢｕ、又は−Ｏ−ｔＢｕである、項１〜２３のいずれか一項に記載の化合物。
［項２５］
−Ｙ5が、存在する場合、独立に、−Ｏ−Ｍｅ、−Ｏ−Ｅｔ、−Ｏ−ｎＰｒ、又は−Ｏ−ｉＰｒである、項１〜２３のいずれか一項に記載の化合物。
［項２６］
−Ｙ5が、存在する場合、独立に、−Ｏ−Ｍｅ又は−Ｏ−Ｅｔである、項１〜２３のいずれか一項に記載の化合物。
［項２７］
−Ｙ5が、存在する場合、−Ｏ−Ｍｅである、項１〜２３のいずれか一項に記載の化合物。
［項２８］
−Ｙ6が、存在する場合、直鎖又は分岐飽和Ｃ1〜4フルオロアルコキシである、項１〜２７のいずれか一項に記載の化合物。
［項２９］
−Ｙ6が、存在する場合、独立に、−Ｏ−ＣＨ2Ｆ、−Ｏ−ＣＨＦ2、−Ｏ−ＣＦ3、−Ｏ−ＣＨ2ＣＨ2Ｆ、−Ｏ−ＣＨ2ＣＨＦ2、又は−Ｏ−ＣＨ2ＣＦ3である、項１〜２７のいずれか一項に記載の化合物。
［項３０］
−Ｙ6が、存在する場合、独立に、−Ｏ−ＣＨ2Ｆ、−Ｏ−ＣＨＦ2、又は−Ｏ−ＣＦ3である、項１〜２７のいずれか一項に記載の化合物。
［項３１］
−Ｙ6が、存在する場合、−Ｏ−ＣＦ3である、項１〜２７のいずれか一項に記載の化合物。
［項３２］
以下の化合物並びにその薬学的に許容される塩、Ｎ−オキシド、水和物、及び溶媒和物：ＴＢＡＰ−０１、ＴＢＡＰ−０２、ＴＢＡＰ−０３、ＴＢＡＰ−０４、及びＴＢＡＰ−０５から選択される、項１に記載の化合物。
［項３３］
ＴＢＡＰ−０１並びにその薬学的に許容される塩、水和物、及び溶媒和物から選択される、項１に記載の化合物。
［項３４］
項１〜３３のいずれか一項に記載の化合物と、薬学的に許容される担体又は希釈剤とを含む組成物。
［項３５］
項１〜３３のいずれか一項に記載の化合物と、薬学的に許容される担体又は希釈剤とを混合するステップを含む、組成物の調製方法。
［項３６］
ｉｎ  ｖｉｔｒｏ又はｉｎ  ｖｉｖｏで、細胞におけるＲＡＦ機能を阻害する方法であって、前記細胞と、項１〜３３のいずれか一項に記載の有効量の化合物とを接触させるステップを含む方法。
［項３７］
療法によるヒト又は動物身体の治療方法における使用のための、項１〜３３のいずれか一項に記載の化合物。
［項３８］
障害の治療方法における使用のための、項１〜３３のいずれか一項に記載の化合物。
［項３９］
障害の治療方法で使用する薬剤の製造における、項１〜３３のいずれか一項に記載の化合物の使用。
［項４０］
項１〜３３のいずれか一項に記載の治療有効量の化合物を、治療が必要な被験者に投与するステップを含む、障害の治療方法。
［項４１］
前記障害が、増殖性障害；癌；炎症；免疫障害；ウイルス感染症；線維性障害；ＲＡＦ（例えば、ＢＲＡＦ、ＣＲＡＦなど）の突然変異型に関連する障害；ＲＡＦ（例えば、ＢＲＡＦ、ＣＲＡＦなど）の阻害により改善される障害；突然変異型ＢＲＡＦの阻害により改善される障害；ＢＲＡＦ及びＣＲＡＦの阻害により改善される障害；ＲＡＳ突然変異及び／又はＭＡＰＫ経路活性化に関連する障害；ＳＲＣ、ｐ３８、ＦＧＦＲＡ、ＶＥＧＦＲ−２（ＫＤＲ）、及び／又はＬＣＫの阻害により改善される障害である、項３８に記載の使用のための化合物、項３９に記載の使用、又は項４０に記載の方法。
［項４２］
前記障害が、増殖性障害である、項３８に記載の使用のための化合物、項３９に記載の使用、又は項４０に記載の方法。
［項４３］
前記障害が、癌である、項３８に記載の使用のための化合物、項３９に記載の使用、又は項４０に記載の方法。
［項４４］
前記障害が、悪性黒色腫；大腸癌；転移性大腸癌；甲状腺濾胞癌；甲状腺島状癌；甲状腺乳頭癌；卵巣癌；低悪性度卵巣癌；非小細胞肺癌；ヘアリーセル白血病；胆管癌；小児低悪性度グリオーマ（例えば、毛様細胞性星状細胞腫；神経節膠腫；多型黄色星細胞腫）；多発性骨髄腫；膵臓の髄様癌；又は膵管腺癌である、項３８に記載の使用のための化合物、項３９に記載の使用、又は項４０に記載の方法。
［項４５］
前記障害が、悪性黒色腫である、項３８に記載の使用のための化合物、項３９に記載の使用、又は項４０に記載の方法。
［項４６］
前記障害が、大腸癌である、項３８に記載の使用のための化合物、項３９に記載の使用、又は項４０に記載の方法。
［項４７］
前記障害が、膵臓腺癌である、項３８に記載の使用のための化合物、項３９に記載の使用、又は項４０に記載の方法。
［項４８］
前記障害が、ＲＡＦ（例えば、ＢＲＡＦ、ＣＲＡＦなど）の突然変異型に関連する、項４２〜４７のいずれか一項に記載の使用のための化合物、項４２〜４７のいずれか一項に記載の使用、又は項４２〜４７のいずれか一項に記載の方法。
［項４９］
前記障害が、公知のＲＡＦ（例えば、ＢＲＡＦ、ＣＲＡＦなど）阻害剤（例えば、ベムラフェニブ、ダブラフェニブ）による治療に対して耐性である、項４８に記載の使用のための化合物、項４８に記載の使用、又は項４８に記載の方法。
［項５０］
前記障害が、公知のＲＡＦ（例えば、ＢＲＡＦ、ＣＲＡＦなど）阻害剤（例えば、ベムラフェニブ、ダブラフェニブ）と、公知のＭＥＫ阻害剤（例えば、トラメチニブ、セルメチニブ、ＰＤ３２５９０１、コビメチニブ、ＣＩ１０４０）との併用による治療に対して耐性である、項４８に記載の使用のための化合物、項４８に記載の使用、又は項４８に記載の方法。
［項５１］
前記障害が、公知の抗体（例えば、ＣＴＬＡ−４に結合する抗体、例えば、イピリムマブ；ＰＤ−１に結合する抗体、例えば、ペムブロリズマブ、ニボルマブ；ＰＤ−Ｌ１に結合する抗体、例えば、ＭＥＤＩ４７３６及びＭＰＤＬ３２８０Ａ）；黒色腫抗原糖タンパク質ＮＭＢに結合する抗体又は抗体コンジュゲート、例えば、グレムバツムマブベドチン；抗腫瘍内皮マーカ１に結合する抗体、例えば、オンツキシズマブ；単独、又は標準的化学療法若しくは低用量ＩＦＮ−α２ｂと併用される、ＶＥＧＦに結合する抗体、例えば、ベバシズマブ；ガングリオシドＧＤ３に結合する抗体、例えば、ＫＷ−２８７１；インテグリンアイソフォーム、例えば、αvβ1、αvβ3、αvβ5、及びαvβ6に結合する抗体、例えば、インテツムマブ）による治療に対して耐性である、項４８に記載の使用のための化合物、項４８に記載の使用、又は項４８に記載の方法。
［項５２］
前記障害が、以下：嚢胞性線維症；肺高血圧症；肺サルコイドーシス；特発性肺線維症；慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）（慢性気管支炎及び気腫を含む）；喘息；小児喘息；アトピー性皮膚炎；アレルギー性皮膚炎；接触皮膚炎；乾癬；アレルギー性鼻炎；鼻炎；副鼻腔炎；結膜炎；アレルギー性結膜炎；乾性角結膜炎（ドライアイ）；緑内障；糖尿病性網膜症；黄斑浮腫（糖尿病性黄斑浮腫を含む）；網膜中心静脈閉塞症（ＣＲＶＯ）；ドライ及び／又はウェット型加齢性黄斑変性（ＡＭＤ）；白内障術後炎症；ブドウ膜炎（後部、前部及び汎ブドウ膜炎を含む）；角膜移植片及び角膜縁細胞移植片拒絶反応；グルテン過敏性腸疾患（セリアック病）；好酸球性食道炎；腸管移植片対宿主病；クローン病；及び潰瘍性大腸炎から選択される炎症性疾患である、項３８に記載の使用のための化合物、項３９に記載の使用、又は項４０に記載の方法。
［項５３］
前記障害が、喘息又はＣＯＰＤである、項３８に記載の使用のための化合物、項３９に記載の使用、又は項４０に記載の方法。
［項５４］
前記障害が、ブドウ膜炎、クローン病、又は潰瘍性大腸炎である、項３８に記載の使用のための化合物、項３９に記載の使用、又は項４０に記載の方法。
【０４２１】
参照文献
本発明、並びに本発明が関連する最新技術をより詳細に説明及び開示するために、多数の刊行物が本明細書に引用される。これらの参照文献の完全な出典を以下に記載する。これらの参照文献は各々、各個別の参照文献が、参照により組み込まれると具体的かつ個別に示されているのと同じ範囲まで、参照によりその全体を本明細書に組み込むものとする。
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Ａｌｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５，“Ｖａｓｃｕｌａｒ  ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  ｇｒｏｗｔｈ  ｆａｃｔｏｒ  ａｃｔｓ  ａｓ  ａ  ｓｕｒｖｉｖａｌ  ｆａｃｔｏｒ  ｆｏｒ  ｎｅｗｌｙ  ｆｏｒｍｅｄ  ｒｅｔｉｎａｌ  ｖｅｓｓｅｌｓ  ａｎｄ  ｈａｓ  ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｆｏｒ  ｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ  ｏｆ  ｐｒｅｍａｔｕｒｉｔｙ”，Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄ．，Ｖｏｌ．１，ｐｐ．１０２４−１０２８．
Ａｎａｓｔａｓａｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２，“Ｃｏｎｔｉｎｕａｌ  ｌｏｗ−ｌｅｖｅｌ  ＭＥＫ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ａｍｅｌｉｏｒａｔｅｓ  ｃａｒｄｉｏ−ｆａｃｉｏ−ｃｕｔａｎｅｏｕｓ  ｐｈｅｎｏｔｙｐｅｓ  ｉｎ  ｚｅｂｒａｆｉｓｈ”，Ｄｉｓｅａｓｅ  Ｍｏｄｅｌｓ＆Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ，Ｖｏｌ．５，ｐｐ．５４６−５５２．
Ａｎｔｏｎｙ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，“Ｃ−ＲＡＦ  Ｍｕｔａｔｉｏｎｓ  Ｃｏｎｆｅｒ  Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｔｏ  ＲＡＦ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ”，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｖｏｌ．７３，ｐｐ．４８４０−４８５１．
Ａｒｃａｉｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２，“Ｔｈｅ  ＢＲＡＦ  Ｖ６００Ｅ  ｍｕｔａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｈａｉｒｙ  ｃｅｌｌ  ｌｅｕｋｅｍｉａ  ａｎｄ  ｏｔｈｅｒ  ｍａｔｕｒｅ  Ｂ  ｃｅｌｌ  ｎｅｏｐｌａｓｍｓ”，Ｂｌｏｏｄ，Ｖｏｌ．１１９，ｐｐ．１８８−１９１．
Ａｓｒｉｈ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，“Ｒｏｌｅ  ｏｆ  Ｍｉｔｏｇｅｎ−Ａｃｔｉｖａｔｅｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｋｉｎａｓｅ  Ｐａｔｈｗａｙｓ  ｉｎ  ｍｕｌｔｉｆａｃｔｏｒｉａｌ  ａｄｖｅｒｓｅ  ｃａｒｄｉａｃ  ｒｅｍｏｄｅｌｉｎｇ  ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｃ  Ｓｙｎｄｒｏｍｅ”，Ｍｅｄｉａｔｏｒｓ  ｏｆ  Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ，Ｖｏｌ．２０１３，Ａｒｔｉｃｌｅ  ＩＤ  Ｎｏ．３６７２４５．
Ｂａｄａｌｉａｎ  Ｖｅｒｙ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１，“Ｒｅｃｅｎｔ  ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｉｎｇ  ｏｆ  Ｌａｎｇｅｒｈａｎｓ  ｃｅｌｌ  ｈｉｓｔｉｏｃｙｔｏｓｉｓ”，Ｂｒｉｔｉｓｈ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｈａｅｍａｔｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．１５６，ｐｐ．１６３−１７２．
Ｂｅｌｇｏｒｅ  ｅｔ  ａｌ．，２００４，“Ｌｏｃａｌｉｓａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｍｅｍｂｅｒｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｖａｓｃｕｌａｒ  ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  ｇｒｏｗｔｈ  ｆａｃｔｏｒ（ＶＥＧＦ）ｆａｍｉｌｙ  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｔｉｃ  ａｒｔｅｒｉｅｓ”，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｐａｔｈｏｌ．，Ｖｏｌ．５７，ｐｐ．２６６−２７２．
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Ｃｏｕｒｔｎｅｉｄｇｅ  ｅｔ  ａｌ．，１９９３，“Ｔｈｅ  Ｓｒｃ  ｆａｍｉｌｙ  ｏｆ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｔｙｒｏｓｉｎｅ  ｋｉｎａｓｅｓ：ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ”，Ｄｅｖ．Ｓｕｐｐｌ．，ｐｐ．５７−６４．
Ｃｕａｄｒａｄｏ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０，“Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ａｎｄ  ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｐ３８  ＭＡＰＫ  ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ”，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．，Ｖｏｌ．４２９，ｐｐ．４０３−４１７．
Ｄａｍｏｄａｒ  Ｒｅｄｄｙ  ｅｔ  ａｌ．，２００１，“Ｒｏｌｅ  ｏｆ  ＭＡＰ  ｋｉｎａｓｅ  ｐａｔｈｗａｙｓ  ｉｎ  ｐｒｉｍｉｔｉｖｅ  ｎｅｕｒｏｅｃｔｏｄｅｒｍａｌ  ｔｕｍｏｕｒｓ”，Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｖｏｌ．２１，ｐｐ．２７３３−２７３８．
Ｄａｖｉｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９６，“Ｒａｆ  ａｎｄ  Ｍｉｔｏｇｅｎ−ａｃｔｉｖａｔｅｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｋｉｎａｓｅ  Ｒｅｇｕｌａｔｅ  Ｓｔｅｌｌａｔｅ  Ｃｅｌｌ  Ｃｏｌｌａｇｅｎ  Ｇｅｎｅ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ”，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，Ｖｏｌ．２７１，ｐｐ．１１０３９−１１０４２．
Ｄａｖｉｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，２００２，“Ｍｕｔａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ＢＲＡＦ  ｇｅｎｅ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｃａｎｃｅｒ”，Ｎａｔｕｒｅ，Ｖｏｌ．４１７，ｐｐ．９４９−９５４．
Ｄａｖｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９４，“Ｔｉｅ  ２  ｌｉｇａｎｄ  １”，米国特許第５，８７９，６７２号明細書，１９９９年３月９日登録．
Ｄａｖｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９４，“ＴＩＥ  ２  ｌｉｇａｎｄ，ａｎｄ  ｍｅｔｈｏｄ  ｏｆ  ｍａｋｉｎｇ”，米国特許第５，５２１，０７３号明細書，１９９６年５月２８日登録．
Ｄａｖｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９６，“Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ａｎｇｉｏｐｏｉｅｔｉｎ−１，ａ  Ｌｉｇａｎｄ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ＴＩＥ２  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ｂｙ  Ｓｅｃｒｅｔｉｏｎ−Ｔｒａｐ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ｃｌｏｎｉｎｇ”，Ｃｅｌｌ，Ｖｏｌ．８７，ｐｐ．１１６１−１１６９．
Ｄｅｎｅｋａｍｐ，１９９３，“Ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ，ｎｅｏｖａｓｃｕｌａｒ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｖａｓｃｕｌａｒ  ｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ  ａｓ  ｔａｒｇｅｔｓ  ｆｏｒ  ｃａｎｃｅｒ  ｔｈｅｒａｐｙ”，Ｂｒ．Ｊ．Ｒａｄ．，Ｖｏｌ．６６，ｐｐ．１８１−１９６．
Ｄｈｏｍｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００９，“Ｏｎｃｏｇｅｎｉｃ  Ｂｒａｆ  ｉｎｄｕｃｅｓ  ｍｅｌａｎｏｃｙｔｅ  ｓｅｎｅｓｃｅｎｃｅ  ａｎｄ  ｍｅｌａｎｏｍａ  ｉｎ  ｍｉｃｅ”，Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌ，Ｖｏｌ．１５，ｐｐ．２９４−３０３．
Ｄｉｘｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００１，“Ｍｅｔｈｏｄ  ｆｏｒ  ｔｒｅａｔｉｎｇ  ｃｈｒｏｎｉｃ  ｐａｉｎ  ｕｓｉｎｇ  ＭＥＫ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ”，国際（ＰＣＴ）特許出願公開番号国際公開第０１／０５３９２号パンフレット，２００１年１月２５日公開．
Ｄｏｗｎｗａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，２００３，“Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ＲＡＳ  ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ  ｐａｔｈｗａｙｓ  ｉｎ  ｃａｎｃｅｒ  ｔｈｅｒａｐｙ”，Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  Ｃａｎｃｅｒ，Ｖｏｌ．３，ｐｐ．１１−２２．
Ｄｕｄｌｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，２０００，“Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  ｗｉｔｈ  ＭＥＫ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ”，国際（ＰＣＴ）特許出願公開番号国際公開第００／３５４３６号パンフレット，２０００年６月２２日公開．
Ｅｌｌｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，２００８，“ＶＥＧＦ−ｔａｒｇｅｔｅｄ  ｔｈｅｒａｐｙ：ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ｏｆ  ａｎｔｉ−ｔｕｍｏｕｒ  ａｃｔｉｖｉｔｙ”，Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  Ｃａｎｃｅｒ，Ｖｏｌ．８，ｐｐ．５７９  ５９１．
Ｆａｌｃｈｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２，“Ｄａｂｒａｆｅｎｉｂ  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｍｅｌａｎｏｍａ，ｕｎｔｒｅａｔｅｄ  ｂｒａｉｎ  ｍｅｔａｓｔａｓｅｓ，ａｎｄ  ｏｔｈｅｒ  ｓｏｌｉｄ  ｔｕｍｏｕｒｓ：ａ  ｐｈａｓｅ  １  ｄｏｓｅ−ｅｓｃａｌａｔｉｏｎ  ｔｒｉａｌ”，Ｔｈｅ  Ｌａｎｃｅｔ，Ｖｏｌ．３７９，ｐｐ．１８９３−１９０１．
Ｆｅｒｎａｎｄｅｓ−Ｍｅｄａｒｄｅ，２０１１，“Ｒａｓ  ｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  ａｎｄ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ  Ｄｉｓｅａｓｅｓ”，Ｇｅｎｅｓ＆Ｃａｎｃｅｒ，Ｖｏｌ．２，ｐｐ．３４４−３５８．
Ｆｉｄｌｅｒ  ａｎｄ  Ｅｌｌｉｓ，１９９４，“Ｔｈｅ  ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｂｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  ｔｈｅｒａｐｙ  ｏｆ  ｃａｎｃｅｒ  ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ”，Ｃｅｌｌ，Ｖｏｌ．７９，ｐｐ．１８５−１８８．
Ｆｌａｈｅｒｔｙ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０，“Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｍｕｔａｔｅｄ，ａｃｔｉｖａｔｅｄ  ＢＲＡＦ  ｉｎ  ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ  ｍｅｌａｎｏｍａ”，Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｖｏｌ．３６３，ｐｐ．８０９−８１９．
Ｆｌｙｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００８，“Ｅｎｚｙｍｅ  ｍｏｄｕｌａｔｏｒｓ  ａｎｄ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ”，米国特許出願公開第２００８／０１１３９６７  Ａ１号明細書，２００８年５月１５日公開．
Ｆｏｌｋｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９２，“Ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ”，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，Ｖｏｌ．２６７，ｐｐ．１０９３１−１０９３４．
Ｆｏｌｋｍａｎ，１９９２，“Ｔｈｅ  ｒｏｌｅ  ｏｆ  ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ  ｉｎ  ｔｕｍｏｕｒ  ｇｒｏｗｔｈ”，Ｓｅｍｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｂｉｏｌ．，Ｖｏｌ．３，ｐｐ．６５−７１．
Ｆｏｌｋｍａｎ，１９９５，“Ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ  ｉｎ  ｃａｎｃｅｒ，ｖａｓｃｕｌａｒ，ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ  ａｎｄ  ｏｔｈｅｒ  ｄｉｓｅａｓｅ”，Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｖｏｌ．１，ｐｐ．２７−３１．
Ｆｏｌｋｍａｎ，１９９７，“Ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ  ａｎｄ  ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ：ａｎ  ｏｖｅｒｖｉｅｗ”，ＥＸＳ，Ｖｏｌ．７９，ｐｐ．１−８１．
Ｆｒｉｅｄｌａｎｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５，“Ｄｅｆｉｎｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｗｏ  ａｎｇｉｏｇｅｎｉｃ  ｐａｔｈｗａｙｓ  ｂｙ  ｄｉｓｔｉｎｃｔ  ａｌｐｈａ  ｖ  ｉｎｔｅｇｒｉｎｓ”，Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｖｏｌ．２７０，ｐｐ．１５００−１５０２．
Ｆｕｊｉｔａ  ｅｔ  ａｌ．，２００４，“ＥＲＫ  ａｎｄ  ｐ３８  ｍｅｄｉａｔｅ  ｈｉｇｈ−ｇｌｕｃｏｓｅ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｈｙｐｅｒｔｒｏｐｈｙ  ａｎｄ  ＴＧＦ−α  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｉｎ  ｒｅｎａｌ  ｔｕｂｕｌａｒ  ｃｅｌｌｓ”，Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｒｅｎａｌ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．，Ｖｏｌ．２８６，ｐ．Ｆ１２０．
Ｆｕｋｕｄａ  ｅｔ  ａｌ．，２００７，“Ｅｐｓｔｅｉｎ−Ｂａｒｒ  Ｖｉｒｕｓ  Ｌａｔｅｎｔ  Ｍｅｍｂｒａｎｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  ２Ａ  Ｍｅｄｉａｔｅｓ  Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ｔｈｒｏｕｇｈ  Ｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｖｅ  Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｒａｓ／ＰＩ３−Ｋ／Ａｋｔ  Ｐａｔｈｗａｙ”，Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．，Ｖｏｌ．８１，ｐｐ．９２９９−９３０６．
Ｆｕｒｕｔａ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２，“Ｎｉｔｒｏｇｅｎａｔｅｄ  ａｒｏｍａｔｉｃ  ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ  ｒｉｎｇ  ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ”，国際（ＰＣＴ）特許出願公開番号国際公開第２０１２／００８５６４  Ａ１号パンフレット，２０１２年１月１９日公開．
Ｇａｒｎｅｔｔ  ｅｔ  ａｌ．，２００４，“Ｇｕｉｌｔｙ  ａｓ  ｃｈａｒｇｅｄ：Ｂ−ＲＡＦ  ｉｓ  ａ  ｈｕｍａｎ  ｏｎｃｏｇｅｎｅ”，Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌ，Ｖｏｌ．６，ｐｐ．３１３−３１９．
Ｇａｕｄｉ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１，“Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂａｓｅｓ  ｏｆ  Ｃｕｔａｎｅｏｕｓ  ａｎｄ  Ｕｖｅａｌ  Ｍｅｌａｎｏｍａｓ”，Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｖｏｌ．２０１１，Ａｒｔｉｃｌｅ  ＩＤ  Ｎｏ．１５９４２１．
Ｇｅｎｏｔ  ｅｔ  ａｌ．，２０００，“Ｒａｓ  ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ  ｉｎ  ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ”，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，Ｖｏｌ．１２，ｐｐ．２８９−２９４．
Ｇｅｐｐｅｒｔ  ｅｔ  ａｌ．，１９９４，“Ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ  ｓｉｇｎａｌｓ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｔｕｍｏｕｒ  Ｎｅｃｒｏｓｉｓ  Ｆａｃｔｏｒ  ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｔｈｒｏｕｇｈ  ｔｈｅ  Ｒａｓ／Ｒａｆ−１／ＭＥＫ／ＭＡＰＫ  ｐａｔｈｗａｙ”，Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．，Ｖｏｌ．１，ｐｐ．９３−１０３．
Ｇｉｌｂｅｒｔｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０００，“Ｕｓｅ  ｏｆ  ａ  ＭＥＫ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｆｏｒ  ｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇ  ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ  ｒｅｊｅｃｔｉｏｎ”，国際（ＰＣＴ）特許出願公開番号国際公開第００／３５４３５号パンフレット，２０００年６月２２日公開．
Ｇｉｒｏｔｔｉ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，“Ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ  ＥＧＦ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｏｒ  ＳＲＣ  ｆａｍｉｌｙ  ｋｉｎａｓｅ  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ｏｖｅｒｃｏｍｅｓ  ＢＲＡＦ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｉｎ  ｍｅｌａｎｏｍａ”，Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ，Ｖｏｌ．３，ｐｐ．１５８−１６７．
Ｇｏｄｏｗｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７，“Ｔｉｅ  ｌｉｇａｎｄ  ｈｏｍｏｌｏｇｕｅｓ”，米国特許第６，０３０，８３１号明細書，２０００年２月２９日登録．
Ｇｒａｆ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７，“Ｍｉｔｏｇｅｎ−Ａｃｔｉｖａｔｅｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｋｉｎａｓｅ  Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  Ｉｓ  Ｉｎｖｏｌｖｅｄ  ｉｎ  Ｐｌａｔｅｌｅｔ−Ｄｅｒｉｖｅｄ  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｆａｃｔｏｒ−Ｄｉｒｅｃｔｅｄ  Ｍｉｇｒａｔｉｏｎ  ｂｙ  Ｖａｓｃｕｌａｒ  Ｓｍｏｏｔｈ  Ｍｕｓｃｌｅ  Ｃｅｌｌｓ”，Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ，Ｖｏｌ．２９，ｐｐ．３３４−３３９．
Ｇｒａｙ  Ｓｃｈｏｐｆｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２００７，“Ｍｅｌａｎｏｍａ  ｂｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  ｎｅｗ  ｔａｒｇｅｔｅｄ  ｔｈｅｒａｐｙ”，Ｎａｔｕｒｅ，Ｖｏｌ．４４５，ｐｐ．８５１−８５７．
Ｇｒｅｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２，“Ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ＢＲＡＦ，ＭＥＫ，ａｎｄ  ＰＩ３Ｋ／ｍＴＯＲ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  Ｏｖｅｒｃｏｍｅ  Ａｃｑｕｉｒｅｄ  Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｔｏ  ｔｈｅ  ＢＲＡＦ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ＧＳＫ２１１８４３６  Ｄａｂｒａｆｅｎｉｂ，Ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｂｙ  ＮＲＡＳ  ｏｒ  ＭＥＫ  Ｍｕｔａｔｉｏｎｓ”，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，Ｖｏｌ．１１，ｐｐ．９０９−９２０．
Ｇｒｏｓｉｏｓ  ｅｔ  ａｌ．，２００４，“Ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｂｙ  ｔｈｅ  ｎｏｖｅｌ  ＶＥＧＦ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｔｙｒｏｓｉｎｅ  ｋｉｎａｓｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ，ＰＴＫ７８７／ＺＫ２２２５８４，ｃａｕｓｅｓ  ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ  ａｎｔｉ−ａｒｔｈｒｉｔｉｃ  ｅｆｆｅｃｔｓ  ｉｎ  ｍｏｄｅｌｓ  ｏｆ  ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ  ａｒｔｈｒｉｔｉｓ”，Ｉｎｆｌａｍｍ．Ｒｅｓ．，Ｖｏｌ．５３，ｐｐ．１３３−１４２．
Ｇｕ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，“Ｕｓｅ  ｏｆ  ｏｒｇａｎｉｃ  ｃｏｍｐｏｕｎｄ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｎｏｏｎａｎ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ”，国際（ＰＣＴ）特許出願公開番号国際公開第２０１３／０３３１３３号パンフレット，２０１３年３月７日公開．
Ｈａａｓｅ  ｅｔ  ａｌ．，２００１，“Ａ  ｒｏｌｅ  ｆｏｒ  ｍｉｔｏｇｅｎ−ａｃｔｉｖａｔｅｄ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｋｉｎａｓｅ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｂｙ  ｉｎｔｅｇｒｉｎｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ  ｏｆ  ｐｓｏｒｉａｓｉｓ”，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．，Ｖｏｌ．１０８，ｐｐ．５２７−５３６．
Ｈａｒｏｃｈｅ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２，“Ｈｉｇｈ  ｐｒｅｖａｌｅｎｃｅ  ｏｆ  ＢＲＡＦ  Ｖ６００Ｅ  ｍｕｔａｔｉｏｎｓ  ｉｎ  Ｅｒｄｈｅｉｍ−Ｃｈｅｓｔｅｒ  ｄｉｓｅａｓｅ  ｂｕｔ  ｎｏｔ  ｉｎ  ｏｔｈｅｒ  ｎｏｎ−Ｌａｎｇｅｒｈａｎｓ  ｃｅｌｌ  ｈｉｓｔｉｏｃｙｔｏｓｅｓ”，Ｂｌｏｏｄ，Ｖｏｌ．１２０，ｐｐ．２７００−２７０３．
Ｈａｔｚｉｖａｓｓｉｌｉｏｕ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１，“Ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ  ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  ｃｅｌｌｓ  ｔｏ  Ｂ−Ｒａｆ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｂｙ  ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ  Ｋ−ｒａｓ  ｍｕｔａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ＲＴＫ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｌｅｖｅｌｓ”，国際（ＰＣＴ）特許出願公開番号国際公開第２０１１／０２８５４０号パンフレット，２０１１年３月１０日公開．
Ｈａｔｚｉｖａｓｓｉｌｉｏｕ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１，“Ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ  ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  ｃｅｌｌｓ  ｔｏ  Ｂ−Ｒａｆ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｂｙ  ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ  Ｋ−ｒａｓ  ｍｕｔａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ＲＴＫ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｌｅｖｅｌｓ”，国際（ＰＣＴ）特許出願公開番号国際公開第２０１１／０２８５４０号パンフレット，２０１１年３月１０日公開．
Ｈｅｉｄｏｒｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０，“Ｋｉｎａｓｅ−ｄｅａｄ  ＢＲＡＦ  ａｎｄ  ｏｎｃｏｇｅｎｉｃ  ＲＡＳ  ｃｏｏｐｅｒａｔｅ  ｔｏ  ｄｒｉｖｅ  ｔｕｍｏｕｒ  ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ  ｔｈｒｏｕｇｈ  ＣＲＡＦ”，Ｃｅｌｌ，Ｖｏｌ．１４０，ｐｐ．２０９−２２１．
Ｈｕ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１，“Ｍｕｔａｔｉｏｎ  ｔｈａｔ  ｂｌｏｃｋｓ  ＡＴＰ  ｂｉｎｄｉｎｇ  ｃｒｅａｔｅｓ  ａ  ｐｓｅｕｄｏｋｉｎａｓｅ  ｓｔａｂｉｌｉｚｉｎｇ  ｔｈｅ  ｓｃａｆｆｏｌｄｉｎｇ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｋｉｎａｓｅ  ｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒ  ｏｆ  Ｒａｓ，ＣＲＡＦ  ａｎｄ  ＢＲＡＦ”，ＰＮＡＳ，Ｖｏｌ．１８，ｐｐ．６０６７−６０７２．
Ｈｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，２００４，“Ｏｖｅｒ−ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ｃ−ｒａｆ−１  ｐｒｏｔｏ−ｏｎｃｏｇｅｎｅ  ｉｎ  ｌｉｖｅｒ  ｃｉｒｒｈｏｓｉｓ  ａｎｄ  ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ”，Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｖｏｌ．２９，ｐｐ．１１３−１２１．
Ｉｎｇｂｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９０，“Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  ａｎａｌｏｇｕｅｓ  ｏｆ  ｆｕｍａｇｉｌｌｉｎ  ｔｈａｔ  ｉｎｈｉｂｉｔ  ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ  ａｎｄ  ｓｕｐｐｒｅｓｓ  ｔｕｍｏｕｒ  ｇｒｏｗｔｈ”，Ｎａｔｕｒｅ，Ｖｏｌ．３４８，ｐｐ．５５５−５５７．
Ｉｎｏｕｅ  ｅｔ  ａｌ．，１９９８，“Ｖａｓｃｕｌａｒ  ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  ｇｒｏｗｔｈ  ｆａｃｔｏｒ（ＶＥＧＦ）ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｃｏｒｏｎａｒｙ  ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｔｉｃ  ｌｅｓｉｏｎｓ：ｐｏｓｓｉｂｌｅ  ｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ  ｏｆ  ＶＥＧＦ  ｉｎ  ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ”，Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，Ｖｏｌ．９８，ｐｐ．２１０８−２１１６．
Ｊａｆｆｅｅ  ｅｔ  ａｌ．，２０００，“Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ＭＡＰ  Ｋｉｎａｓｅ  Ｋｉｎａｓｅ（ＭＥＫ）Ｒｅｓｕｌｔｓ  ｉｎ  ａｎ  Ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｉｎ  Ｖｉｖｏ”，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍ．，Ｖｏｌ．２６８，ｐ．６４７．
Ｊｅｓｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，“ＭＥＫ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｅｘｈｉｂｉｔｓ  ｅｆｆｉｃａｃｙ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ａｎｄ  ｍｏｕｓｅ  ｎｅｕｒｏｆｉｂｒｏｍａｔｏｓｉｓ  ｔｕｍｏｕｒｓ”，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ，Ｖｏｌ．１２３，ｐｐ．３４０  ３４７．
Ｊｉ  ｅｔ  ａｌ．，２００２，“ＥＲＫ  ＭＡＰ  Ｋｉｎａｓｅ  Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｉｎ  Ｓｕｐｅｒｆｉｃｉａｌ  Ｓｐｉｎａｌ  Ｃｏｒｄ  Ｎｅｕｒｏｎｓ  Ｉｎｄｕｃｅｓ  Ｐｒｏｄｙｎｏｒｐｈｉｎ  ａｎｄ  ＮＫ−１  Ｕｐｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅｓ  ｔｏ  Ｐｅｒｓｉｓｔｅｎｔ  Ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  Ｐａｉｎ  Ｈｙｐｅｒｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ”，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，Ｖｏｌ．２２，ｐ．４７８．
Ｊｏ  ｅｔ  ａｌ．，２００５，“ＭＥＫ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ，Ｕ０１２６，ａｔｔｅｎｕａｔｅｓ  ｃｉｓｐｌａｔｉｎ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｒｅｎａｌ  ｉｎｊｕｒｙ  ｂｙ  ｄｅｃｒｅａｓｉｎｇ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ａｐｏｐｔｏｓｉｓ，Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔｌ．，Ｖｏｌ．６７，ｐｐ．４５８−４６６．
Ｊｏｈｎｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００１，“Ｔｈｅ  ｒｏｌｅ  ｏｆ  ＭＫＫ１／２  ｋｉｎａｓｅ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ”，Ｊ．Ｇｅｎ．Ｖｉｒｏｌ．，Ｖｏｌ．８２，ｐｐ．４９３−４９７．
Ｋａｈｌｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９２，“Ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ  ｉｎ  ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ”，Ｃａｎ．Ｊ．Ｃａｒｄｉｏｌ．，Ｖｏｌ．８，ｐ．６０．
Ｋａｍ  ｅｔ  ａｌ．，２０００，“ＴＮＦ−ａｌｐｈａ  ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｃｒｏｈｎ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ”，Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒ．，Ｖｏｌ．１，ｐｐ．６１５−６２２．
Ｋａｒｉｍ  ｅｔ  ａｌ．，２００６，“Ｉｍｐａｉｒｅｄ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｐａｉｎ  ａｎｄ  ｔｈｅｒｍａｌ  ｈｙｐｅｒａｌｇｅｓｉａ  ｉｎ  ｍｉｃｅ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ  ｎｅｕｒｏｎ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｄｏｍｉｎａｎｔ  ｎｅｇａｔｉｖｅ  ｍｉｔｏｇｅｎ  ａｃｔｉｖａｔｅｄ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｋｉｎａｓｅ  ｋｉｎａｓｅ（ＭＥＫ）”，Ｍｏｌ．Ｐａｉｎ．，Ｖｏｌ．２，ｐ．２．
Ｋｅｆｆｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９１，“Ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ  ｍｉｃｅ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ  ｈｕｍａｎ  ｎｅｃｒｏｓｉｓ  ｆａｃｔｏｒ：ａ  ｐｒｅｄｉｃｔｉｖｅ  ｇｅｎｅｔｉｃ  ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  ａｒｔｈｒｉｔｉｓ”，ＥＭＢＯ  Ｊ．，Ｖｏｌ．１０，Ｎｏ．１３，ｐｐ．４０２５−４０３１．
Ｋｊｅｔｉｌ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，“Ｍｅｔｈｏｄｓ  ａｎｄ  ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ  ｆｏｒ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ”，国際（ＰＣＴ）特許出願公開番号国際公開第２０１３／００１３７２号パンフレット，２０１３年１月３日公開．
Ｋｏｔｏｕｌａ  ｅｔ  ａｌ．，２００９，“Ｍｕｔａｔｉｏｎａｌ  ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ＢＲＡＦ，ＲＡＳ  ａｎｄ  ＥＧＦＲ  ｇｅｎｅｓ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ａｄｒｅｎｏｃｏｒｔｉｃａｌ  ｃａｒｃｉｎｏｍａｓ”，Ｅｎｄｏｃｒｉｎｅ−Ｒｅｌａｔｅｄ  Ｃａｎｃｅｒ，Ｖｏｌ．１６，ｐｐ．５６５  ５７２．
Ｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，１９９８，“Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  ＮＦ−ｋＢ  ｖｉａ  ａ  Ｓｒｃ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  Ｒａｓ−ＭＡＰＫ−ｐｐ９０ｒｓｋ  ｐａｔｈｗａｙ  ｉｓ  ｒｅｑｕｉｒｅｄ  ｆｏｒ  Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｍｕｃｉｎ  ｏｖｅｒｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｉｎ  ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ  ｃｅｌｌｓ”，ＰＮＡＳ，Ｖｏｌ．９５，ｐｐ．５７１８−５７２３．
Ｌｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０，“ＶＥＧＦ  ａｎｄ  ｉｔｓ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ−２  ｉｎｖｏｌｖｅｄ  ｉｎ  ｎｅｕｒｏｐａｔｈｉｃ  ｐａｉｎ  ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ  ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｂｙ  Ｐ２Ｘ２／３  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｏｆ  ｐｒｉｍａｒｙ  ｓｅｎｓｏｒｙ  ｎｅｕｒｏｎｓ”，Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｂｕｌｌｅｔｉｎ，Ｖｏｌ．８３，ｐｐ．２８４−２９１．
Ｌｉｎｄａｕｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２，“Ｄａｓａｔｉｎｉｂ”，Ｒｅｃｅｎｔ  Ｒｅｓｕｌｔｓ  ｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｖｏｌ．１８４，ｐｐ．８３−１０２．
Ｌｉｎｋ  ｅｔ  ａｌ．，２００８，“Ｐｈｏｓｐｈｏｄｉｅｓｔｅｒａｓｅ  ４  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｂｕｔ  ｎｏｔ  ｂｅｔａ−ａｄｒｅｎｅｒｇｉｃ  ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ  ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓ  ｔｕｍｏｒ  ｎｅｃｒｏｓｉｓ  ｆａｃｔｏｒ−ａｌｐｈａ  ｒｅｌｅａｓｅ  ｉｎ  ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ  ｂｌｏｏｄ  ｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒ  ｃｅｌｌｓ  ｉｎ  ｓｅｐｔｉｃ  ｓｈｏｃｋ”，Ｃｒｉｔ．Ｃａｒｅ，Ｖｏｌ．１２，Ｎｏ．６，Ｒ１５９．
Ｌｏｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１，“Ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ  ａｎｄ  ｃｌｉｎｉｃｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃ  ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｏｎｃｏｇｅｎｉｃ  ＢＲＡＦ  ｉｎ  ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ  ｍｅｌａｎｏｍａ”，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．，Ｖｏｌ．２９，Ｎｏ．１０，ｐｐ．１２３９−１２４６．
Ｌｏｒｅｎｚ  ｅｔ  ａｌ．，２００９，“Ｃａｒｄｉａｃ  ｈｙｐｅｒｔｒｏｐｈｙ：Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  Ｒａｆ／ＭＥＫ／ＥＲＫ１／２−ｓｉｇｎａｌｉｎｇ”，Ｔｈｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ＆Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．４１，ｐｐ．２３５１  ２３５５．
Ｌｏｗｅｎｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．，２００５，“Ｓｐｅｃｉｆｉｃ  Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃ−Ｒａｆ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｂｙ  Ｓｅｍａｐｉｍｏｄ  Ｉｎｄｕｃｅｓ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｒｅｍｉｓｓｉｏｎ  ｉｎ  Ｓｅｖｅｒｅ  Ｃｒｏｈｎ’ｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ”，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，Ｖｏｌ．１７５，ｐｐ．２２９３−２３００．
Ｌｕｏ  ｅｔ  ａｌ．，２００２，“Ｃｏｘｓａｃｋｉｅｖｉｒｕｓ  Ｂ３  Ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｉｓ  Ｒｅｄｕｃｅｄ  ｂｙ  Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｓｉｇｎａｌ−Ｒｅｇｕｌａｔｅｄ  Ｋｉｎａｓｅ（ＥＲＫ）Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  Ｐａｔｈｗａｙ”，Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．，Ｖｏｌ．７６，ｐｐ．３３６５−３３７３．
Ｍａ  ｅｔ  ａｌ．，２００５，“Ｔｈｅ  ＥＲＫ／ＭＡＰＫ  ｐａｔｈｗａｙ，ａｓ  ａ  ｔａｒｇｅｔ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｎｅｕｒｏｐａｔｈｉｃ  ｐａｉｎ”，Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ  Ｔｈｅｒ  Ｔａｒｇｅｔｓ，Ｖｏｌ．９，ｐ．６９９．
Ｍａｄｄａｈｉ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０，“Ｃｅｒｅｂｒａｌ  ｉｓｃｈｅｍｉａ  ｉｎｄｕｃｅｓ  ｍｉｃｒｏｖａｓｃｕｌａｒ  ｐｒｏ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｃｙｔｏｋｉｎｅ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｖｉａ  ｔｈｅ  ＭＥＫ／ＥＲＫ  ｐａｔｈｗａｙ，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ，Ｖｏｌ．７，ｐｐ．１  １４．
Ｍａｍｍａｓ  ｅｔ  ａｌ．，２００５，“Ｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｒａｓ  ｇｅｎｅｓ  ｉｎ  ｆｅｍａｌｅ  ｇｅｎｉｔａｌ  ｔｒａｃｔ  ｃａｎｃｅｒ（Ｒｅｖｉｅｗ）”，Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．２６，ｐｐ．１２４１−１２５５．
Ｍａｒｔｉｃｈ  ｅｔ  ａｌ．，１９９１，“Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ８  ａｎｄ  ｔｕｍｏｒ  ｎｅｃｒｏｓｉｓ  ｆａｃｔｏｒ  ｉｎ  ｎｏｒｍａｌ  ｈｕｍａｎｓ  ａｆｔｅｒ  ｉｎｔｒａｖｅｎｏｕｓ  ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ：ｔｈｅ  ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ａｎｔｉｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ａｇｅｎｔｓ”，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，Ｖｏｌ．１７３，ｐｐ１０２１−１０２４．
Ｍａｒｔｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０，“Ｕｐｄａｔｅ  ｏｎ  ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ  ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｋｉｎａｓｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ：ａ  ｐａｔｅｎｔ  ｓｕｒｖｅｙ”，Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ．Ｔｈｅｒ．Ｐａｔ．，Ｖｏｌ．２０，ｐｐ．１５７３−１５９３．
Ｍａｓａｂｕｍｉ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，“Ｖａｓｃｕｌａｒ  ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  ｇｒｏｗｔｈ  ｆａｃｔｏｒ  ａｎｄ  ｉｔｓ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｓｙｓｔｅｍ：ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ  ｉｎ  ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ  ａｎｄ  ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ  ｒｏｌｅｓ  ｉｎ  ｖａｒｉｏｕｓ  ｄｉｓｅａｓｅｓ”，Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，Ｖｏｌ．１５３，ｐｐ．１３−１９．
ＭｃＣａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０，“Ａｐｒｅｍｉｌａｓｔ，ａ  ｎｏｖｅｌ  ＰＤＥ４  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ，ｉｎｈｉｂｉｔｓ  ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓ  ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｕｍｏｕｒ  ｎｅｃｒｏｓｉｓ  ｆａｃｔｏｒ−ａｌｐｈａ  ｆｒｏｍ  ｈｕｍａｎ  ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ  ｓｙｎｏｖｉａｌ  ｃｅｌｌｓ  ａｎｄ  ａｍｅｌｉｏｒａｔｅｓ  ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ａｒｔｈｒｉｔｉｓ”，Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  Ｒｅｓ．Ｔｈｅｒ．，Ｖｏｌ．１２，Ｎｏ．３，Ｒ１０７．
ＭｃＫａｙ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１，“Ｃｏｍｐｌｅｘｉｔｙ  ｉｎ  ＫＳＲ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ  ｒｅｖｅａｌｅｄ  ｂｙ  Ｒａｆ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ａｎｄ  ＫＳＲ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ｓｔｕｄｉｅｓ”，Ｓｍａｌｌ  ＧＴＰａｓｅｓ，Ｖｏｌ．２，ｐｐ．２７６−２８１．
ＭｃＭａｈｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０００，“ＶＥＧＦ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ｉｎ  ｔｕｍｏｕｒ  ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ”，Ｔｈｅ  Ｏｎｃｏｌｏｇｉｓｔ，Ｖｏｌ．５，ｐｐ．３−１０．
Ｍｅｉ  ｅｔ  ａｌ．，２００６，“Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ，ｌｅｖｅｌｓ  ａｎｄ  ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｒａｆ−１  ｉｎ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ”，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．，Ｖｏｌ．９９，ｐｐ．１３７７−１３８８．
Ｍｅｒｃｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２００６，“Ｅｍｅｒｇｉｎｇ  ｒｏｌｅ  ｏｆ  ＭＡＰ  ｋｉｎａｓｅ  ｐａｔｈｗａｙｓ  ａｓ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｔａｒｇｅｔｓ  ｉｎ  ＣＯＰＤ”，Ｉｎｔ．Ｊ．ｏｆ  ＣＯＰＤ，Ｖｏｌ．１，ｐｐ．１３７−１５０．
Ｍｅｔｚｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２，“Ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｆａｃｔｏｒ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  ａｓ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ｔａｒｇｅｔｓ  ｉｎ  Ｈｕｍａｎ  Ｍｅｌａｎｏｍａ：Ｓｙｎｅｒｇｉｓｍ  ｗｉｔｈ  ＢＲＡＦ  Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ”，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｖｅ  Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．１３１，ｐｐ．２０８７−２０９５．
Ｍｅｙｅｒｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９６，“ＦＧＦＲ２  ｅｘｏｎ  ＩＩＩａ  ａｎｄ  ＩＩＩｃ  ｍｕｔａｔｉｏｎｓ  ｉｎ  Ｃｒｏｕｚｏｎ，Ｊａｃｋｓｏｎ−Ｗｅｉｓｓ，ａｎｄ  Ｐｆｅｉｆｆｅｒ  ｓｙｎｄｒｏｍｅｓ：ｅｖｉｄｅｎｃｅ  ｆｏｒ  ｍｉｓｓｅｎｓｅ  ｃｈａｎｇｅｓ，ｉｎｓｅｒｔｉｏｎｓ，ａｎｄ  ａ  ｄｅｌｅｔｉｏｎ  ｄｕｅ  ｔｏ  ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅ  ＲＮＡ  ｓｐｌｉｃｉｎｇ”，Ａｍ．Ｊ．Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅｔ．，Ｖｏｌ．５８，ｐｐ．４９１−４９８．
Ｍｉｌｅｌｌａ  ｅｔ  ａｌ．，２００１，“Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｏｆ  ｔｈｅ  ＭＥＫ／ＭＡＰＫ  ｓｉｇｎａｌ  ｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ  ｍｏｄｕｌｅ  ｉｎ  ａｃｕｔｅ  ｍｙｅｌｏｉｄ  ｌｅｕｋｅｍｉａ”，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ，Ｖｏｌ．１０８，ｐｐ．８５１−８５９．
Ｍｉｕｒａ  ｅｔ  ａｌ．，２００４，“Ｓｉｍｖａｓｔａｔｉｎ  ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓ  ｃｏｒｏｎａｒｙ  ａｒｔｅｒｙ  ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  ｔｕｂｅ  ｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ｂｙ  ｄｉｓｒｕｐｔｉｎｇ  Ｒａｓ／Ｒａｆ／ＥＲＫ  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ”，Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ，Ｖｏｌ．１７５，ｐｐ．２３５−２４３．
Ｍｏｎｔａｇｕｔ  ｅｔ  ａｌ．，２００８，“Ｅｌｅｖａｔｅｄ  ＣＲＡＦ  ａｓ  ａ  Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  Ｍｅｃｈａｎｉｓｍ  ｏｆ  Ａｃｑｕｉｒｅｄ  Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｔｏ  ＢＲＡＦ  Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｉｎ  Ｍｅｌａｎｏｍａ”，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｖｏｌ．６８，ｐｐ．４８５３−４８６１．
Ｍｕｋｈｅｒｊｅｅ  ｅｔ  ａｌ．，２００５，“Ｒａｆ−１  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｍａｙ  ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ  ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ  ｔｏ  ａｎｄｒｏｇｅｎ  ｉｎｓｅｎｓｉｔｉｖｅ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｎｃｅｒ”，Ｐｒｏｓｔａｔｅ，Ｖｏｌ．６４，ｐｐ．１０１−１０７．
Ｍｕｋｈｏｐａｄｈｙａｙ  ｅｔ  ａｌ．，２００６，“Ｒｏｌｅ  ｏｆ  ＴＮＦａｌｐｈａ  ｉｎ  ｐｕｌｍｏｎａｒｙ  ｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ”，Ｒｅｓｐｉｒ．Ｒｅｓ．，Ｖｏｌ．７，ｐ．１２５．
Ｍｕｒｒａｙ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１，“Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ  ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ  ｆｏｒ  ｕｓｅ  ｔｈｅｒｅｉｎ”，国際（ＰＣＴ）特許出願公開番号国際公開第２０１１／１５８０４４  Ａ２号パンフレット，２０１１年１２月２２日公開．
Ｍｕｓｔｏｎｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５，“Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｔｙｒｏｓｉｎｅ  ｋｉｎａｓｅｓ  ｉｎｖｏｌｖｅｄ  ｉｎ  ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ”，Ｊ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．，Ｖｏｌ．１２９，ｐｐ．８９５−８９８．
Ｎａｋａｍｕｒａ  ｅｔ  ａｌ．，２００６，Ｎｏｖｅｌ  ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｂｏｗｅｌ  ｄｉｓｅａｓｅ：Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ  ａｎｄ  ａｄｈｅｓｉｏｎ  ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ”，Ｗｏｒｌｄ  Ｊ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．，Ｖｏｌ．１２，ｐｐ．４６２８−４２３５．
Ｎａｚａｒｉａｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０，“Ｍｅｌａｎｏｍａｓ  ａｃｑｕｉｒｅ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｔｏ  Ｂ−ＲＡＦ（Ｖ６００Ｅ）ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｂｙ  ＲＴＫ  ｏｒ  Ｎ−ＲＡＳ  ｕｐｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ”，Ｎａｔｕｒｅ，Ｖｏｌ．４６８，ｐｐ．９７３−９７９．
Ｎｉｃｕｌｅｓｃｕ−Ｄｕｖａｚ  ｅｔ  ａｌ．，２００６，“Ｉｍｉｄａｚｏ［４，５−ｂ］ｐｙｒｉｄｉｎ−２−ｏｎｅ  ａｎｄ  ｏｘａｚｏｌｏ［４，５−ｂ］ｐｙｒｉｄｉｎ−２−ｏｎｅ  ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ  ａｎｄ  ａｎａｌｏｇｓ  ｔｈｅｒｅｏｆ  ａｓ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ”，国際（ＰＣＴ）特許出願公開番号国際公開第２００６／０４３０９０  Ａ１号パンフレット，２００６年４月２７日公開．
Ｎｉｃｕｌｅｓｃｕ−Ｄｕｖａｚ  ｅｔ  ａｌ．，２００７，“Ｉｍｉｄａｚｏ［４，５−ｂ］ｐｙｒｉｄｉｎ−２−ｏｎｅ  ａｎｄ  ｏｘａｚｏｌｏ［４，５−ｂ］ｐｙｒｉｄｉｎ−２−ｏｎｅ  ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ  ａｎｄ  ａｎａｌｏｇｓ  ｔｈｅｒｅｏｆ  ａｓ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ”，国際（ＰＣＴ）特許出願公開番号国際公開第２００７／１２５３３０  Ａ１号パンフレット，２００７年１１月８日公開．
Ｎｉｃｕｌｅｓｃｕ−Ｄｕｖａｚ  ｅｔ  ａｌ．，２００９，“Ａｒｙｌ−ｑｕｉｎｏｌｙｌ  ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  ｕｓｅ”，国際（ＰＣＴ）特許出願公開番号国際公開第２００９／１３０４８７  Ａ１号パンフレット，２００９年１０月２９日公開．
Ｏ’Ｒｅｉｌｌｙ  ｅｔ  ａｌ．，１９９４，“Ａｎｇｉｏｓｔａｔｉｎ：ａ  ｎｏｖｅｌ  ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｔｈａｔ  ｍｅｄｉａｔｅｓ  ｔｈｅ  ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ｍｅｔａｓｔａｓｅｓ  ｂｙ  ａ  Ｌｅｗｉｓ  ｌｕｎｇ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ．”，Ｃｅｌｌ，Ｖｏｌ．７９，ｐｐ．３１５−３２８．
Ｏｅｚｔｕｅｒｋ−Ｗｉｎｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２，“Ｔｈｅ  ｍａｎｙ  ｆａｃｅｓ  ｏｆ  ｐ３８  ｍｉｔｏｇｅｎ−ａｃｔｉｖａｔｅｄ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｋｉｎａｓｅ  ｉｎ  ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ／ｓｔｅｍ  ｃｅｌｌ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ”，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．，Ｖｏｌ．４４５，ｐｐ．１−１０．
Ｏｚａｗａ  ｅｔ  ａｌ．，２００１，“Ｇｒｏｗｔｈ  ｆａｃｔｏｒｓ  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  ｉｎ  ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ  ｃａｎｃｅｒ”，Ｔｅｒａｔｏｇ．Ｃａｒｃｉｎｏｇ．Ｍｕｔａｇｅｎ．，Ｖｏｌ．２１，ｐｐ．２７−４４．
Ｐａｌａｎｉｓａｍｙ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０，“Ｒｅａｒｒａｎｇｅｍｅｎｔｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ＲＡＦ  Ｋｉｎａｓｅ  Ｐａｔｈｗａｙ  ｉｎ  Ｐｒｏｓｔａｔｅ  Ｃａｎｃｅｒ，Ｇａｓｔｒｉｃ  Ｃａｎｃｅｒ  ａｎｄ  Ｍｅｌａｎｏｍａ”，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．，Ｖｏｌ．１６，ｐｐ．７９３−７９８．
Ｐａｒｔａｎｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９２，“Ａ  ｎｏｖｅｌ  ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  ｃｅｌｌ  ｓｕｒｆａｃｅ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｔｙｒｏｓｉｎｅ  ｋｉｎａｓｅ  ｗｉｔｈ  ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  ｅｐｉｄｅｒｍａｌ  ｇｒｏｗｔｈ  ｆａｃｔｏｒ  ｈｏｍｏｌｏｇｙ  ｄｏｍａｉｎｓ”，Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．，Ｖｏｌ．１２，ｐｐ．１６９８−１７０７．
Ｐａｒｔａｎｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９９，“Ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｔｉｅ１  ａｎｄ  Ｔｉｅ２  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  Ｔｙｒｏｓｉｎｅ  Ｋｉｎａｓｅｓ  ｉｎ  Ｖａｓｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ”，Ｃｕｒｒ．Ｔｏｐｉｃｓ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，Ｖｏｌ．２３７，ｐｐ．１５９−１７２．
Ｐａｕｌｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５，“Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｔｙｒｏｓｉｎｅ  ｋｉｎａｓｅｓ  ａｎｄ  ｔｈｅ  ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｓｉｓ”，Ｓｅｍｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，Ｖｏｌ．７，Ｎｏ．４，ｐｐ．２６７−２７７．
Ｐａｙｎｅ  ｅｔ  ａｌ．，２００１，“Ｈｕｍａｎ  Ｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒｕｓ  Ｔｙｐｅ  ６ｂ  Ｖｉｒｕｓ−Ｌｉｋｅ  Ｐａｒｔｉｃｌｅｓ  Ａｒｅ  Ａｂｌｅ  Ｔｏ  Ａｃｔｉｖａｔｅ  ｔｈｅ  Ｒａｓ−ＭＡＰ  Ｋｉｎａｓｅ  Ｐａｔｈｗａｙ  ａｎｄ  Ｉｎｄｕｃｅ  Ｃｅｌｌ  Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ”，Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．，Ｖｏｌ．７５，ｐｐ．４１５０−４１５７．
Ｐｅａｃｏｃｋ  ｅｔ  ａｌ．，１９９２，“Ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓ  ｃｏｌｌａｇｅｎ  ａｒｔｈｒｉｔｉｓ”，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，Ｖｏｌ．１７５，ｐｐ．１１３５−１１３８．
Ｐｅａｃｏｃｋ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５，“Ａ  ｎｏｖｅｌ  ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓ  ｒａｔ  ａｄｊｕｖａｎｔ  ａｒｔｈｒｉｔｉｓ”，Ｃｅｌｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，Ｖｏｌ．１６０，ｐｐ．１７８−１８４．
Ｐｅｌｌｅｔｉｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２００３，“Ｉｎ  ｖｉｖｏ  ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｍｉｔｏｇｅｎ−ａｃｔｉｖａｔｅｄ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｋｉｎａｓｅ  ｋｉｎａｓｅ  １／２  ｉｎ  ｒａｂｂｉｔ  ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ｏｓｔｅｏａｒｔｈｒｉｔｉｓ  ｉｓ  ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ａ  ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ  ｃｈａｎｇｅｓ”，Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ＆Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ，Ｖｏｌ．４８，ｐ．１５８２−１５９３．
Ｐｅｔｅｒｓ，１９９８，“Ｖａｓｃｕｌａｒ  Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｆａｃｔｏｒ  ａｎｄ  ｔｈｅ  Ａｎｇｉｏｐｏｉｅｔｉｎｓ：Ｗｏｒｋｉｎｇ  Ｔｏｇｅｔｈｅｒ  ｔｏ  Ｂｕｉｌｄ  ａ  Ｂｅｔｔｅｒ  Ｂｌｏｏｄ  Ｖｅｓｓｅｌ”，Ｃｉｒｃ．Ｒｅｓ．，Ｖｏｌ．８３，Ｎｏ．３，ｐｐ．３４２−３４３．
Ｐｅｔｒｏｖａｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００７，“ＤＮＡ  Ｖａｃｃｉｎａｔｉｏｎ  Ａｇａｉｎｓｔ  ＶＥＧＦ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ２  Ｒｅｄｕｃｅｓ  Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ  ｉｎ  ＬＤＬ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ_Ｄｅｆｉｃｉｅｎｔ  Ｍｉｃｅ”，Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ，Ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ，ａｎｄ  Ｖａｓｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．２７，ｐｐ．１０９５−１１００．
Ｐｉｎｅｄｏ  ｅｔ  ａｌ．，２０００，“Ｔｈｅ  Ｒｏｌｅ  ｏｆ  ＶＥＧＦ  ｉｎ  Ｔｕｍｏｕｒ  Ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ”，Ｔｈｅ  Ｏｎｃｏｌｏｇｉｓｔ，Ｖｏｌ．５，ｐｐ．１−２．
Ｐｉｎｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２００９，“ＣＤ４４  ｓｐｌｉｃｅ  ｖａｒｉａｎｔｓ  ｉｎ  ｎｅｕｒｏｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｖｅ  ｄｉｓｅａｓｅｓ”，国際（ＰＣＴ）特許出願公開番号国際公開第２００９／００７９３４号パンフレット，２００９年１月１５日公開．
Ｐｌａｎｚ  ｅｔ  ａｌ．，２００１，“ＭＥＫ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  Ｕ０１２６  ｂｌｏｃｋｓ  ｓｐｒｅａｄ  ｏｆ  Ｂｏｒｎａ  ｄｉｓｅａｓｅ  ｖｉｒｕｓ  ｉｎ  ｃｕｌｔｕｒｅｄ  ｃｅｌｌｓ”，Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．，Ｖｏｌ．７５，ｐｐ．４８７１−４８７７．
Ｐｌｅｓｃｈｋａ  ｅｔ  ａｌ．，２００１，“Ｉｎｆｌｕｅｎｚａ  ｖｉｒｕｓ  ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ  ｉｓ  ｉｍｐａｉｒｅｄ  ｂｙ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｒａｆ／ＭＥＫ／ＥＲＫ  ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ  ｃａｓｃａｄｅ”，Ｎａｔｕｒｅ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．３，ｐｐ．３０１−３０５．
Ｐｌｏｍｐ  ｅｔ  ａｌ．，１９９８，“Ｐｆｅｉｆｆｅｒ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ  ｔｙｐｅ  ２：ｆｕｒｔｈｅｒ  ｄｅｌｉｎｅａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｒｅｖｉｅｗ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｌｉｔｅｒａｔｕｒｅ”，Ａｍ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｇｅｎｅｔ．，Ｖｏｌ．７５，ｐｐ．２４５−２５１．
Ｐｏｕｌｉｋａｋｏｓ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０，“ＲＡＦ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｔｒａｎｓａｃｔｉｖａｔｅ  ＲＡＦ  ｄｉｍｅｒｓ  ａｎｄ  ＥＲＫ  ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ  ｉｎ  ｃｅｌｌｓ  ｗｉｔｈ  ｗｉｌｄ−ｔｙｐｅ  ＢＲＡＦ”，Ｎａｔｕｒｅ，Ｖｏｌ．４６４，ｐｐ．４２７−４３０．
Ｐｏｕｌｉｋａｋｏｓ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１，“ＲＡＦ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｉｓ  ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｂｙ  ｄｉｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｂｅｒｒａｎｔｌｙ  ｓｐｌｉｃｅｄ  ＢＲＡＦ（Ｖ６００Ｅ）”，Ｎａｔｕｒｅ，Ｖｏｌ．４８０，ｐｐ．３８７−３９０．
Ｐｏｗｅｒｓ  ｅｔ  ａｌ．，２０００，“Ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ  ｇｒｏｗｔｈ  ｆａｃｔｏｒｓ，ｔｈｅｉｒ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  ａｎｄ  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ”，Ｅｎｄｏｃｒ．Ｒｅｌａｔ．Ｃａｎｃｅｒ，Ｖｏｌ．７，ｐｐ．１６５−１９７．
Ｒｉｖａ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５，“Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ  ｃ−ｍｙｃ，ｃ−ｊｕｎ，ｃ−ｒａｆ  ａｎｄ  ｐ５３  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｉｎ  ｓｑｕａｍｏｕｓ  ｃｅｌｌ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｈｅａｄ  ａｎｄ  ｎｅｃｋ：Ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｄｒｕｇ  ａｎｄ  ｒａｄｉｏｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ”，Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｐａｒｔ  Ｂ：Ｏｒａｌ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．３１，ｐｐ．３８４−３９１．
Ｒｏｔｓｏｓ  ｅｔ  ａｌ．，２００８，“Ｃｙｓｔｏｉｄ  ｍａｃｕｌａｒ  ｅｄｅｍａ”，Ｃｌｉｎ．Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．，Ｖｏｌ．２，ｐｐ．９１９−９３０．
Ｒｕｂｉｎｓｔｅｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０，“Ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｖ６００Ｋ  ｍｕｔａｔｉｏｎ  ａｍｏｎｇ  ｍｅｌａｎｏｍａ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ＢＲＡＦ  ｍｕｔａｔｉｏｎｓ，ａｎｄ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｔｏ  ｔｈｅ  ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ＢＲＡＦ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ＰＬＸ４０３２”，Ｊ．Ｔｒａｎｓｌ．Ｍｅｄ．，Ｖｏｌ．８，ｐ．６７．
Ｓａｌａｍａ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，“ＢＲＡＦ  ｉｎ  Ｍｅｌａｎｏｍａ：Ｃｕｒｒｅｎｔ  ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ  ａｎｄ  ｆｕｔｕｒｅ  ｄｉｒｅｃｔｉｏｎｓ”，Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｖｏｌ．１９，Ｎｏ．１６，ｐｐ．４３２６−４３３４．
Ｓｃｈｉｎｄｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１，“Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  ＢＲＡＦ  Ｖ６００Ｅ  ｍｕｔａｔｉｏｎ  ｉｎ  １，３２０  ｎｅｒｖｏｕｓ  ｓｙｓｔｅｍ  ｔｕｍｏｕｒｓ  ｒｅｖｅａｌｓ  ｈｉｇｈ  ｍｕｔａｔｉｏｎ  ｆｒｅｑｕｅｎｃｉｅｓ  ｉｎ  ｐｌｅｏｍｏｒｐｈｉｃ  ｘａｎｔｈｏａｓｔｒｏｃｙｔｏｍａ，ｇａｎｇｌｉｏｇｌｉｏｍａ  ａｎｄ  ｅｘｔｒａ−ｃｅｒｅｂｅｌｌａｒ  ｐｉｌｏｃｙｔｉｃ  ａｓｔｒｏｃｙｔｏｍａ”，Ａｃｔａ  Ｎｅｕｒｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａ，Ｖｏｌ．１２１，ｐｐ．３９７−４０５．
Ｓｃｈｒｅｃｋ  ｅｔ  ａｌ．，２００６，“Ｒａｆ  ｋｉｎａｓｅｓ：Ｏｎｃｏｇｅｎｅｓｉｓ  ａｎｄ  ｄｒｕｇ  ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ”，Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ，Ｖｏｌ．１１９，ｐｐ．２２６１−２２７１．
Ｓｈａｋｈｏｖ  ｅｔ  ａｌ．，１９９０，“Ｋａｐｐａ  Ｂ−ｔｙｐｅ  ｅｎｈａｎｃｅｒｓ  ａｒｅ  ｉｎｖｏｌｖｅｄ  ｉｎ  ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ−ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｔｕｍｏｒ  ｎｅｃｒｏｓｉｓ  ｆａｃｔｏｒ  ａｌｐｈａ  ｇｅｎｅ  ｉｎ  ｐｒｉｍａｒｙ  ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ”，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，Ｖｏｌ．１７１，ｐｐ．３５−４７．
Ｓｈａｐｉｒａ  ｅｔ  ａｌ．，１９９６，“Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  ａｇａｉｎｓｔ  ｅｎｄｏｔｏｘｉｃ  ｓｈｏｃｋ  ａｎｄ  ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｌｏｃａｌ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  ｂｙ  ｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ：ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ  ｗｉｔｈ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃｙｔｏｋｉｎｅ  ｓｅｃｒｅｔｉｏｎ”，Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．，Ｖｏｌ．６４，Ｎｏ．３，ｐｐ．８２５−８２８．
Ｓｈｉ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２，“Ｍｅｌａｎｏｍａ  ｗｈｏｌｅ−ｅｘｏｍｅ  ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ  ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｓ（Ｖ６００Ｅ）Ｂ−ＲＡＦ  ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ−ｍｅｄｉａｔｅｄ  ａｃｑｕｉｒｅｄ  Ｂ−ＲＡＦ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ”，Ｎａｔｕｒｅ  Ｃｏｍｍｕｎ．，Ｖｏｌ．３，ｐ．７２４．
Ｓｉｅｖｅｒｔ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３“Ｐａｒａｄｏｘｉｃａｌ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ＲＡＦ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｏｆ  ＢＲＡＦ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｋｉｎａｓｅ  ｆｕｓｉｏｎｓ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｉｎｇ  ｐｅｄｉａｔｒｉｃ  ａｓｔｒｏｃｙｔｏｍａｓ”，ＰＮＡＳ，Ｖｏｌ．１１０，ｐｐ．５９５７−５９６２．
Ｓｍａｌｌｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，２００９，“ＣＲＡＦ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｉｎｄｕｃｅｓ  ａｐｏｐｔｏｓｉｓ  ｉｎ  ｍｅｌａｎｏｍａ  ｃｅｌｌｓ  ｗｉｔｈ  ｎｏｎ  Ｖ６００Ｅ  ＢＲＡＦ  ｍｕｔａｔｉｏｎｓ”，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ，Ｖｏｌ．２８，ｐｐ．８５−９４．
Ｓｍｉｔｈ  ｅｔ  ａｌ．，２００７，“Ｕｒｅａ  ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ  ｕｓｅｆｕｌ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｃａｎｃｅｒ”，国際（ＰＣＴ）特許出願公開番号国際公開第２００７／０６４８７２  Ａ２号パンフレット，２００７年６月７日公開．
Ｓｍｉｔｈ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０，“Ｖａｓｃｕｌａｒ  Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｆａｃｔｏｒ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  ＶＥＧＦＲ  ２  ａｎｄ  ＶＥＧＦＲ  ３  Ａｒｅ  Ｌｏｃａｌｉｚｅｄ  Ｐｒｉｍａｒｉｌｙ  ｔｏ  ｔｈｅ  Ｖａｓｃｕｌａｔｕｒｅ  ｉｎ  Ｈｕｍａｎ  Ｐｒｉｍａｒｙ  Ｓｏｌｉｄ  Ｃａｎｃｅｒｓ”，Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，Ｖｏｌ．１６，ｐｐ．３５４８−３５６１．
Ｓｏｌｉｔ  ｅｔ  ａｌ．，２００６，“ＢＲＡＦ  ｍｕｔａｔｉｏｎ  ｐｒｅｄｉｃｔｓ  ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ  ｔｏ  ＭＥＫ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ”，Ｎａｔｕｒｅ，Ｖｏｌ．４３９，ｐｐ．３５８−３６２．
Ｓｏｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，２００５，“Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  ＥＲＫ／ＣＲＥＢ  ｐａｔｈｗａｙ  ｉｎ  ｓｐｉｎａｌ  ｃｏｒｄ  ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅｓ  ｔｏ  ｃｈｒｏｎｉｃ  ｃｏｎｓｔｒｉｃｔｉｖｅ  ｉｎｊｕｒｙ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｎｅｕｒｏｐａｔｈｉｃ  ｐａｉｎ  ｉｎ  ｒａｔｓ”，Ａｃｔａ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｓｉｎ．，Ｖｏｌ．２６，ｐ．７８９．
Ｓｏｓｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２，“Ｓｕｒｖｉｖａｌ  ｉｎ  ＢＲＡＦ  Ｖ６００−ｍｕｔａｎｔ  ａｄｖａｎｃｅｄ  ｍｅｌａｎｏｍａ  ｔｒｅａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ｖｅｍｕｒａｆｅｎｉｂ”，Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｖｏｌ．３６６，ｐｐ．７０７−７１４．
Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２００９，“Ｐｙｒｉｄｏ［２，３−ｂ］ｐｙｒａｚｉｎｅ−８−ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ  ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  ｕｓｅ”，国際（ＰＣＴ）特許出願公開番号国際公開第２００９／０７７７６６  Ａ１号パンフレット，２００９年６月２５日公開．
Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１，“１−（５−ｔｅｒｔ−Ｂｕｔｙｌ−２−ｐｈｅｎｙｌ−２Ｈ−ｐｙｒａｚｏｌ−３−ｙｌ）−３−［２−ｆｌｕｏｒｏ−４−（１−ｍｅｔｈｙｌ−２  ｏｘｏ  ２，３−ｄｉｈｙｄｒｏ−１Ｈ−ｉｍｉｄａｚｏ［４，５−ｂ］ｐｙｒｉｄｉｎ−７−ｙｌｏｘｙ）−ｐｈｅｎｙｌ］ｕｒｅａ  ａｎｄ  ｒｅｌａｔｅｄ  ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  ｕｓｅ  ｉｎ  ｔｈｅｒａｐｙ”，国際（ＰＣＴ）特許出願公開番号国際公開第２０１１／０９２４６９  Ａ１号パンフレット，２０１１年８月４日公開．
Ｓｔｒａｔｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００３，“Ｇｅｎｅｓ”，国際（ＰＣＴ）特許出願公開番号国際公開第０３／０５６０３６  Ａ２号パンフレット，２００３年７月１０日公開．
Ｓｔｒａｕｓｓｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２，“Ｔｕｍｏｕｒ  ｍｉｃｒｏ−ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ  ｅｌｉｃｉｔｓ  ｉｎｎａｔｅ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｔｏ  ＲＡＦ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｔｈｒｏｕｇｈ  ＨＧＦ  ｓｅｃｒｅｔｉｏｎ”，Ｎａｔｕｒｅ，Ｖｏｌ．４８７，ｐｐ．５００−５０６．
Ｓｕｉｊｋｅｒｂｕｉｊｋ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０，“Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  ｎｏｖｅｌ，ｈｉｇｈｌｙ  ｐｏｔｅｎｔ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｏｆ  Ｖ−ＲＡＦ  ｍｕｒｉｎｅ  ｓａｒｃｏｍａ  ｖｉｒａｌ  ｏｎｃｏｇｅｎｅ  ｈｏｍｏｌｏｇｕｅ  Ｂ１（ＢＲＡＦ）：ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ  ｃｅｌｌｕｌａｒ  ｐｏｔｅｎｃｙ  ｔｈｒｏｕｇｈ  ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ｄｉｓｔａｌ  ｈｅｔｅｒｏａｒｏｍａｔｉｃ  ｇｒｏｕｐ”，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，Ｖｏｌ．５３，ｐｐ．２７４１−２７５６．
Ｓｕｌｌｉｖａｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１，“ＢＲＡＦ  ｉｎ  ｍｅｌａｎｏｍａ：ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ，ｄｉａｇｎｏｓｉｓ，ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ，ａｎｄ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ”，Ｊ．Ｓｋｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ，Ｖｏｌ．２０１１，Ａｒｔｉｃｌｅ  ＩＤ  Ｎｏ．４２３２３９．
Ｓｕｒｉ  ｅｔ  ａｌ．，１９９６，“Ｒｅｑｕｉｓｉｔｅ  Ｒｏｌｅ  ｏｆ  Ａｎｇｉｏｐｏｉｅｔｉｎ  １，ａ  Ｌｉｇａｎｄ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ＴＩＥ２  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ｄｕｒｉｎｇ  Ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ  Ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ”，Ｃｅｌｌ，Ｖｏｌ．８７，ｐｐ．１１７１−１１８０．
Ｔａｍ  ｅｔ  ａｌ．，２００９，“Ｂｌｏｃｋａｄｅ  ｏｆ  ＶＥＧＦＲ２  ａｎｄ  Ｎｏｔ  ＶＥＧＦＲ１  Ｃａｎ  Ｌｉｍｉｔ  Ｄｉｅｔ−Ｉｎｄｕｃｅｄ  Ｆａｔ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｅｘｐａｎｓｉｏｎ：Ｒｏｌｅ  ｏｆ  Ｌｏｃａｌ  ｖｅｒｓｕｓ  Ｂｏｎｅ  Ｍａｒｒｏｗ−Ｄｅｒｉｖｅｄ  Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  Ｃｅｌｌｓ”，ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ，Ｖｏｌ．４，ｅ４９７４．
Ｔａｒａｂｏｌｅｔｔｉ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５，“Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ  ａｎｄ  ｍｕｒｉｎｅ  ｈｅｍａｎｇｉｏｍａ  ｇｒｏｗｔｈ  ｂｙ  ｂａｔｉｍａｓｔａｔ，ａ  ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｏｆ  ｍａｔｒｉｘ  ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ”，Ｊ．Ｎａｔｌ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ．，Ｖｏｌ．８７，ｐ．２９３．
Ｔｈａｌｈａｍｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２００８，“ＭＡＰＫｓ  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  ｒｅｌｅｖａｎｃｅ  ｔｏ  ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  ａｎｄ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ”，Ｒｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．４７，ｐｐ．４０９−４１４．
Ｖｅｒｇａｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１，“  Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ＭＥＴ  ａｎｄ  ＳＲＣ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｍｅｌａｎｏｍａ  ｃｅｌｌ  ｌｉｎｅｓ  ｓｈｏｗｉｎｇ  ｐｒｉｍａｒｙ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｔｏ  ＰＬＸ４０３２”，Ｎｅｏｐｌａｓｉａ，Ｖｏｌ．１３，ｐｐ．１１３２−１１４２．
Ｖｉｋｋｕｌａ  ｅｔ  ａｌ．，２００４，“Ｍｅｄｉｃａｌ  ｕｓｅ  ｏｆ  ｒａｓ  ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｃａｐｉｌｌａｒｙ  ｍａｌｆｏｒｍａｔｉｏｎ”，国際（ＰＣＴ）特許出願公開番号国際公開第２００４／０８３４５８号パンフレット，２００４年９月３０日公開．
Ｖｉｌｌａｎｕｅｖａ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１，“Ａｃｑｕｉｒｅｄ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｔｏ  ＢＲＡＦ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｂｙ  ａ  ＲＡＦ  ｋｉｎａｓｅ  ｓｗｉｔｃｈ  ｉｎ  ｍｅｌａｎｏｍａ  ｃａｎ  ｂｅ  ｏｖｅｒｃｏｍｅ  ｂｙ  ｃｏ−ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ＭＥＫ  ａｎｄ  ＩＧＦ−１Ｒ／ＰＩ３Ｋ”，Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌ，Ｖｏｌ．１８，ｐｐ．６８３−６９５．
Ｗａｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００４，“Ｍｅｃｈａｎｉｓｍ  ｏｆ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  ＲＡＦ−ＥＲＫ  ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ  ｐａｔｈｗａｙ  ｂｙ  ｏｎｃｏｇｅｎｉｃ  ｍｕｔａｔｉｏｎｓ  ｉｎ  Ｂ−ＲＡＦ”，Ｃｅｌｌ，Ｖｏｌ．１１６，ｐｐ．８５５−８６７．
Ｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７，“Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｏｆ  ｂａｓｉｃ  ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ  ｇｒｏｗｔｈ  ｆａｃｔｏｒ  ａｎｄ  ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ  ｇｒｏｗｔｈ  ｆａｃｔｏｒ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  １  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｍｅｌａｎｏｍａｓ  ｂｌｏｃｋｓ  ｉｎｔｒａｔｕｍｏｕｒａｌ  ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ  ａｎｄ  ｔｕｍｏｕｒ  ｇｒｏｗｔｈ”，Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｖｏｌ．３，ｐｐ．８８７−８９３．
Ｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，２００３，“Ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ  Ｎｅｕｒｏｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  ａｇａｉｎｓｔ  Ｉｓｃｈｅｍｉｃ  Ｂｒａｉｎ  Ｉｎｊｕｒｙ  ｂｙ  Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ＭＥＫ１  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｋｉｎａｓｅ  ｉｎ  Ｍｉｃｅ：Ｅｘｐｌｏｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  Ｍｅｃｈａｎｉｓｍ  Ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ”，Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．，Ｖｏｌ．３０４，ｐ．１７２．
Ｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，２００４，“Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ＭＥＫ／ＥＲＫ  １／２  ｐａｔｈｗａｙ  ｒｅｄｕｃｅｓ  ｐｒｏ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｃｙｔｏｋｉｎｅ  ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−１  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｉｎ  ｆｏｃａｌ  ｃｅｒｅｂｒａｌ  ｉｓｃｈｅｍｉａ”，Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ．，Ｖｏｌ．９９６，ｐ．５５．
Ｗａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２，“Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｏｎｃｏｇｅｎｉｃ  Ｒａｓ  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ｉｎ  ｈｅｍａｔｏｌｏｇｉｃ  ｍａｌｉｇｎａｎｃｉｅｓ”，Ｂｌｏｏｄ，Ｖｏｌ．１２０，ｐｐ．３３９７−３４０６．
Ｗｅｌｌｂｒｏｃｋ  ｅｔ  ａｌ．，２００４，“Ｖ５９９ＥＢ−ＲＡＦ  ｉｓ  ａｎ  ｏｎｃｏｇｅｎｅ  ｉｎ  ｍｅｌａｎｏｃｙｔｅｓ”，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｖｏｌ．６４，ｐｐ．２３３８−２３４２．
Ｗｈｉｔｔａｋｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０，“Ａ  ｎｏｖｅｌ，ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ａｎｄ  ｅｆｆｉｃａｃｉｏｕｓ  ｎａｎｏｍｏｌａｒ  ｐｙｒｉｄｏｐｙｒａｚｉｎｏｎｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｏｆ  Ｖ６００ＥＢＲＡＦ”，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｖｏｌ．７０，Ｎｏ．２０，ｐｐ．８０３６−８０４４．
Ｗｉｌｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９０，“Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ａｎｄ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｔｙｒｏｓｉｎｅ  ｋｉｎａｓｅｓ”，Ｐｒｏｇｒｅｓｓ  ｉｎ  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｆａｃｔｏｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｖｏｌ．２，ｐｐ．９７−１１１．
Ｗｉｌｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２，“Ｗｉｄｅｓｐｒｅａｄ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｆｏｒ  ｇｒｏｗｔｈ−ｆａｃｔｏｒ−ｄｒｉｖｅｎ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｔｏ  ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  ｋｉｎａｓｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ”，Ｎａｔｕｒｅ，Ｖｏｌ．４８７，ｐｐ．５０５−５０９．
Ｘｉｎｇ，２０１３，“Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ  ａｎｄ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ｏｆ  ｔｈｙｒｏｉｄ  ｃａｎｃｅｒ”，Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  Ｃａｎｃｅｒ，Ｖｏｌ．１３，ｐｐ．１８４−１９９．
Ｙａｎｃｏｐｏｕｌｏｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９８，“Ｖａｓｃｕｌｏｇｅｎｅｓｉｓ，Ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ，ａｎｄ  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｆａｃｔｏｒｓ：Ｅｐｈｒｉｎｓ  Ｅｎｔｅｒ  ｔｈｅ  Ｆｒａｙ  ａｔ  ｔｈｅ  Ｂｏｒｄｅｒ  ”，Ｃｅｌｌ，Ｖｏｌ．９３，ｐｐ．６６１−６６４．
Ｙａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，１９９９，“Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｈｕｍａｎ  Ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  Ｖｉｒｕｓ  Ｔｙｐｅ  １  Ｉｎｆｅｃｔｉｖｉｔｙ  ｂｙ  ｔｈｅ  ＥＲＫ  Ｍｉｔｏｇｅｎ−Ａｃｔｉｖａｔｅｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｋｉｎａｓｅ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  Ｐａｔｈｗａｙ”，Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．，Ｖｏｌ．７３，ｐｐ．３４６０−３４６６．
Ｙａｏ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７，“Ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ  ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｔｕｍｏｒ  ｎｅｃｒｏｓｉｓ  ｆａｃｔｏｒ−ａｌｐｈａ  ｐｒｏｍｏｔｅｒ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｍｏｎｏｃｙｔｉｃ  ｃｅｌｌｓ．Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｂｙ  Ｅｇｒ−１，ｃ−Ｊｕｎ  ａｎｄ  ＮＦ−ｋａｐｐａＢ  ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ  ｆａｃｔｏｒｓ”，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，Ｖｏｌ．２７２，ｐｐ．１７７９５−１７８０１．
Ｙｅａｔｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００４，“Ａ  ｒｅｎａｉｓｓａｎｃｅ  ｆｏｒ  ＳＲＣ”，Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  Ｃａｎｃｅｒ，Ｖｏｌ．４，ｐｐ．４７０−４８０．
Ｙｏｕｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，２００９，“Ｒａｓ  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ａｎｄ  ｔｈｅｒａｐｉｅｓ”，Ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｖｏｌ．１０２，ｐｐ．１−１７．
Ｙｕ  ｅｔ  ａｌ．，２０００，“Ｌｏｓｓ  ｏｆ  ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ  ｇｒｏｗｔｈ  ｆａｃｔｏｒ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ２  ｌｉｇａｎｄ  ｂｉｎｄｉｎｇ  ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ  ｉｎ  Ａｐｅｒｔ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ”，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．，Ｖｏｌ．９７，ｐｐ．１４５３６−１４５４１．
Ｚａｍｂｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０，“Ｎｏｖｅｌ  ｈｉｎｇｅ  ｂｉｎｄｅｒ  ｉｍｐｒｏｖｅｓ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ａｎｄ  ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃ  ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ｏｆ  ＢＲＡＦ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ”，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，Ｖｏｌ．５３，Ｎｏ．１５，ｐｐ．５６３９−５６５５．
Ｚｅｎｎａｄｉ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２，“Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｏｆ  ｔｒｅａｔｉｎｇ  ｈｅｍｏｇｌｏｂｉｎｏｐａｔｈｉｅｓ”，国際（ＰＣＴ）特許出願公開番号国際公開第２０１２／１４９５４７号パンフレット，２０１２年１１月１日公開．
Ｚｈａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２，“Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｒａｓ／Ｒａｆ／ＭＥＫ  Ｐａｔｈｗａｙ  Ｆａｃｉｌｉｔａｔｅｓ  Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｃ  Ｖｉｒｕｓ  Ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｖｉａ  Ａｔｔｅｎｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ−ＪＡＫ−ＳＴＡＴ  Ｐａｔｈｗａｙ”，Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．，Ｖｏｌ．８６，ｐｐ．１５４４−１５５４．
Ｚｈａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２，“Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  Ｓｒｃ  ｆａｍｉｌｙ  ｋｉｎａｓｅｓ  ｉｎ  ａｎｔｉ−ｃａｎｃｅｒ  ｔｈｅｒａｐｉｅｓ：ｔｕｒｎｉｎｇ  ｐｒｏｍｉｓｅ  ｉｎｔｏ  ｔｒｉｕｍｐｈ”，Ｔｒｅｎｄｓ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｓｃｉ．Ｍｅｄ．，Ｖｏｌ．３３，ｐｐ．１２２−１２８．
Ｚｏｕｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，２０００，“Ｐｅｒｏｘｙｎｉｔｒｉｔｅ  ｉｎｄｕｃｅｓ  ｉｎｔｅｇｒｉｎ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ａｄｈｅｓｉｏｎ  ｏｆ  ｈｕｍａｎ  ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌｓ  ｔｏ  ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  ｃｅｌｌｓ  ｖｉａ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｒａｆ−１／ＭＥＫ／Ｅｒｋ  ｐａｔｈｗａｙ”，ＦＡＳＥＢ  Ｊ．，Ｖｏｌ．１５，ｐｐ．２５−２７．