(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
結晶性の形態である、１０μｍ以下の大きさを有しているマクロライド微粒子を調製するための方法であって、以下のステップを含んでいる方法：
（ａ）組成物を形成するために、液体中でマクロライドを溶解および／または分散させるステップ；
（ｂ）過飽和組成物を形成するステップ；
（ｃ）組成物において音波破砕を実施するステップ；
（ｄ）上記組成物を機械的に撹拌し且つ蒸発させるステップ；ここで、上記組成物がスラリーの形態又は湿ケーキの形態になるように、溶剤は攪拌中の上記組成物から蒸発する、
（ｅ）上記組成物から溶剤が完全に蒸発する前に、機械的な撹拌を中断するステップ；並びに、
（ｆ）上記ステップ（ｅ）の後に、上記マクロライド微粒子を得るために、上記組成物から残留している溶剤を除去するステップ。
【請求項２】
上記ステップ（ａ）において、上記過飽和組成物を形成させるために、上記マクロライドは、飽和よりも多い量において、溶解または分散される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
上記溶剤は、キシレンを含んでいる、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
上記溶剤は、オルト−キシレンを含んでいる、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
音波破砕は、プローブ型音波破砕装置によって提供される、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
機械的な撹拌は、磁気ビーズまたは磁気棒を使用することを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
上記ステップ（ｄ）は、１２時間〜３６時間の範囲の期間にわたって、１５℃〜３０℃の範囲の温度にて行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
上記残留している溶剤は、真空下で除去される、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
上記マクロライドは、ラパマイシン、エベロリムス、ピメクロリムス、テムシロリムス、フジマイシン／タクロリムス、デフォロリムス、ゾタロリムスおよびビオリムスからなる群から選択される、請求項１から８の何れか１項に記載の方法。
【請求項１０】
上記マクロライドは、ラパマイシンである、請求項１から９の何れか１項に記載の方法。
【請求項１１】
上記マクロライド微粒子の大部分が１μｍ〜６μｍの範囲の大きさを有している一セットのマクロライド微粒子を提供する、請求項１から１０の何れか１項に記載の方法。
【請求項１２】
請求項１〜１１の何れか１項に記載の方法によって形成されたマクロライド微粒子を用いる、移植可能なもしくは挿入可能な医療用装置の製造方法。
【請求項１３】
前記医療用装置がバルーンカテーテルである、請求項１２に記載の移植可能なもしくは挿入可能な医療用装置の製造方法。
【請求項１４】
上記バルーンカテーテルは重合体の被覆を含み、且つ上記マクロライド微粒子は当該被覆と関連している、請求項１３に記載の移植可能なもしくは挿入可能な医療用装置の製造方法。
【請求項１５】
請求項１〜１１の何れか１項に記載の方法によって形成されたマクロライド微粒子を用いる、注射可能な治療用組成物の製造方法。
【請求項１６】
結晶性の形態である、２０μｍ以下の大きさを有しているマクロライド微粒子を調製するための方法であって、以下のステップを含んでいる方法：
（ａ）マクロライド、第１の溶剤および第２の溶剤を含む有機溶剤の混合物を調製するステップであり、当該第２の溶剤は、アルコール、アセトンおよびアセトニトリルからなる群から選択され、上記有機溶剤の混合物は、上記マクロライドの最大溶解度を、上記第１の溶剤または上記第２の溶剤に個別に溶解した上記マクロライドの最大溶解度よりも大きくするものとして特徴付けられるステップ；並びに、
（ｂ）上記有機溶剤の混合物を機械的に攪拌し、上記有機溶剤の混合物がスラリーの形態又は湿ケーキの形態になるように、上記有機溶剤の混合物から上記有機溶剤を蒸発させるステップ；並びに、
（ｃ）上記マクロライド微粒子を得るために、上記有機溶剤の蒸発が完了する前に機械的に攪拌することを停止するステップ。
【請求項１７】
結晶性の形態である、２０μｍ以下の大きさを有しているマクロライド微粒子を調製するための方法であって、以下のステップを含んでいる方法：
（ａ）マクロライド、第１の溶剤および第２の溶剤を含む有機溶剤の混合物を調製するステップであり、当該第１の溶剤は芳香族化合物であり、当該第２の溶剤は、アルコール、アセトンおよびアセトニトリルからなる群から選択され、上記有機溶剤の混合物は、上記マクロライドの最大溶解度を、上記第１の溶剤または上記第２の溶剤に個別に溶解した上記マクロライドの最大溶解度よりも大きくするものとして特徴付けられるステップ；
（ｂ）上記有機溶剤の混合物を機械的に攪拌し、上記有機溶剤の混合物がスラリーの形態又は湿ケーキの形態になるように、上記有機溶剤の混合物から上記有機溶剤を蒸発させるステップ；並びに、
（ｃ）上記マクロライド微粒子を得るために、上記有機溶剤の蒸発が完了する前に機械的に攪拌することを停止するステップ。
【請求項１８】
上記第１の溶剤および上記第２の溶剤は、それぞれ、５０：５０〜９０：１０の範囲の体積比において存在している、請求項１６または１７に記載の方法。
【請求項１９】
上記第１の溶剤および上記第２の溶剤は、それぞれ、６０：４０〜８０：２０の範囲の体積比において存在している、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
上記マクロライドは、２００ｍｇ／ｍＬまでの濃度で上記有機溶剤の混合物に存在している、請求項１６から１９の何れか１項に記載の方法。
【請求項２１】
上記マクロライドは、７５ｍｇ／ｍＬ〜１７５ｍｇ／ｍＬの範囲の濃度で上記有機溶剤の混合物中に存在している、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
上記ステップ（ａ）は、上記第１の溶剤および上記マクロライドの前駆体組成物を形成するサブステップ（ａ１）を含み、
上記マクロライドは、その最大溶解度よりも多い量で上記前駆体組成物中に存在している、請求項１６から２１の何れか１項に記載の方法。
【請求項２３】
上記ステップ（ａ）は、上記マクロライドを完全に溶解させるために、上記前駆体組成物に上記第２の溶剤を添加するサブステップ（ａ２）を含んでいる、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
上記ステップ（ｂ）の蒸発は、３０℃よりも低い温度で行われる、請求項１６から２３の何れか１項に記載の方法。
【請求項２５】
上記第１の溶剤は、キシレン、ベンゼンおよびトルエンからなる群から選択される、請求項１６から２４の何れか１項に記載の方法。
【請求項２６】
上記第１の溶剤は、オルト−キシレンである、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
上記第２の溶剤は、メタノール、エタノールおよびイソプロパノールからなる群から選択される、請求項１６から２６の何れか１項に記載の方法。
【請求項２８】
上記第２の溶剤はエタノールである、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
上記蒸発させるステップは、更に、窒素ガスの流れの下において上記有機溶剤の混合物を撹拌することを含む、請求項１６から２８の何れか１項に記載の方法。
【請求項３０】
非溶剤を上記マクロライド微粒子に添加し、且つ音波破砕を用いて処理するステップ（ｃ）を更に含む、請求項１６から２９の何れか１項に記載の方法。
【請求項３１】
上記非溶剤は水である、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
上記非溶剤は賦形剤を含み、当該賦形剤はポリ（エチレンイミン）である、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
上記マクロライドは、ラパマイシン、エベロリムス、ピメクロリムス、テムシロリムス、フジマイシン／タクロリムス、デフォロリムス、ゾタロリムスおよびビオリムスからなる群から選択される、請求項１６から３２の何れか１項に記載の方法。
【請求項３４】
上記マクロライドは、ラパマイシンである、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
上記マクロライド微粒子の大部分が２０μｍよりも小さい大きさを有している一セットのマクロライド微粒子を提供する、請求項１６から３４の何れか１項に記載の方法。
【請求項３６】
上記マクロライド微粒子の大部分が０．４μｍ〜４μｍの範囲の大きさを有している一セットのマクロライド微粒子を提供する、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
請求項１６から３６の何れか１項に記載の方法によって形成されたマクロライド微粒子を用いる、移植可能なもしくは挿入可能な医療用装置の製造方法。
【請求項３８】
前記医療用装置はバルーンカテーテルである、請求項３７に記載の移植可能なもしくは挿入可能な医療用装置の製造方法。
【請求項３９】
上記バルーンカテーテルは重合体の被覆を含み、且つ上記マクロライド微粒子は当該被覆と関連している、請求項３８に記載の移植可能なもしくは挿入可能な医療用装置の製造方法。
【請求項４０】
請求項１８から３８の何れか１項に記載の方法によって形成されたマクロライド微粒子を用いる、注射可能な治療用組成物の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
〔関連出願の相互参照〕
本出願は、出願人を同じくする仮出願である出願番号６１／８３４，３２７（出願日：２０１３年６月１２日、発明の名称：ＭＡＣＲＯＬＩＤＥ  ＰＡＲＴＩＣＵＬＡＴＥＳ，ＭＥＴＨＯＤＳ  ＦＯＲ  ＰＲＥＰＡＲＡＴＩＯＮ，ＡＮＤ  ＭＥＤＩＣＡＬ  ＤＥＶＩＣＥＳ  ＩＮＣＬＵＤＩＮＧ  ＳＵＣＨ）の利益を主張するものであり、この出願は、その全体が参照によって本明細書に組み込まれる。
【０００２】
〔技術分野〕
本発明は、固体状態の結晶性(crystallinity) を含むマクロライド微粒子、およびそれらの形成方法に関連する。本発明はまた、マクロライド微粒子を含む組成物、および体内に移植されるもしくは挿入される、且つマクロライド微粒子に関連する医療用装置に関連する。本発明はまた、上記組成物と装置とを使用している治療方法に関連する。
【０００３】
〔背景技術〕
治療用薬剤は幾つかの異なる経路によって患者に導入され得る。最も一般的には、体内で薬剤を体系的に利用できるようにするために、利便性があり、安全で、且つ費用効率に優れた方法であるから、治療用薬剤は経口的に投与される。しかしながら、多くの場合では、例えば注射として、または挿入可能なもしくは移植可能な医療用装置の使用を通して、経口的な投与以外の経路を用いて治療用薬剤を送達することが望まれる。
【０００４】
治療用薬剤の幾つかの調製物は液剤であり、当該治療用薬剤は水溶性の注射組成物に溶解され、その後治療効果を提供するために患者に注入される。治療用薬剤の他の調製物は、挿入可能なもしくは移植可能な医療用装置に関連付けることが可能であり、当該医療用装置から放出されることが可能である。例えば、医療用装置に対する重合体の被覆は、治療用薬物を含み、当該重合体の被覆は、当該被覆から標的の組織への治療用薬剤の運搬のために用いられている。多くの場合、そのような被覆は、治療用薬剤と重合体材料とを一般的な溶剤内で溶解し、且つ被覆の形成のために当該組成物を装置の表面へ塗布することによって調製される。しかしながら、高分子化学に関連した技術的な課題、治療用薬剤の高分子系との親和性、および移植に続いて起こる被覆からの治療用薬剤の放出は、薬剤放出性の被覆をされた装置の調製を非常に困難なものにしている。
【０００５】
例えば、ラパマイシンのような非抗生物質のマクロライドは、種々の医学的疾患の治療と予防に活用されている。ラパマイシンは、炎症、線維症および血栓症に関連付けられた組織の応答を予防または最小化するために活用されており、ラパマイシンの活用は医療用装置の挿入や移植に関連付けられている場合がある。
【０００６】
市販されているラパマイシン粉末は、微粉化のために圧壊され得るもしくは粉砕され得るが、形成された微粒子は、大きさや形において実質的に異質になり得る。そして、この手法は、結晶の形態のみならず活性に対しても不利益なものになり得る。幾つかの調製法において、ラパマイシンは、非晶質の形態における固体の組成物として存在し得るが、この固体の非晶質の形態は、結晶性の形態よりも非常に速く溶解すること、およびこれらの調製は、より長い期間の治療にはあまり有用ではない場合があることが見出されている。結晶性の形態であるラパマイシンを含む微粒子であり、且つ望まれる形および大きさのラパマイシン微粒子の調製に関連付けられた課題が存在する。
【０００７】
〔発明の概要〕
本発明は、微粒子における結晶性の形態であるマクロライドを含むマクロライド微粒子、それらの調製方法、および当該微粒子を含む治療用組成物を対象とし、そして上記微粒子に関連付けることが可能であり、且つ体内でマクロライド治療剤を放出する能力を有することが可能である、移植可能なおよび挿入可能な医療用装置も対象としている。本発明はまた、患者における病状を治療するためのマクロライド微粒子の使用を対象とし、ここでは、当該マクロライド治療剤は患者への治療効果を予防的に提供するか、または、本発明はまた、病状を積極的に治療するためのマクロライド微粒子の使用を対象としている。
【０００８】
本開示は、約１０μｍ以下の大きさと低い多分散性とを有しているマクロライド微粒子の調製を示しており、ここでは、当該微粒子は、結晶性の固体状態の形態であるマクロライドを含んでいる。マクロライド微粒子の結晶性とサイズの特性は、注射可能な調剤、および体内でマクロライドを送達するために設計された、移植可能なもしくは挿入可能な医療用装置の調製にとって価値のあるものである。本開示の創案された方法は、例えば結晶性の固体状態の形態であるラパマイシンを含む、ラパマイシン微粒子のようなマクロライド微粒子を調製する技術における課題を克服しており、ここでは、当該微粒子は、望まれる大きさおよび形の特徴を有している。
【０００９】
結晶性の固体状態のマクロライドは、上記微粒子が体内に導入された後に、当該マクロライドの有効性を長くすることに対して有用である可能性がある。非晶質の固体状態とは対照的に、結晶性の固体状態のマクロライドを含む微粒子は、体内において持続的により長期の溶出速度を有することが可能である。それ故に、本開示のマクロライド微粒子は種々の治療計画において使用されることが可能であり、より広範な治療濃度域にわたって、治療部位にマクロライドを提供することが望まれる。幾つかの治療の様式において、マクロライドが体内にて徐放性の特性を示すように、当該マクロライド微粒子は、組成物において使用されることが可能であり、また移植可能な医療用物品と関連付けることが可能である。徐放性の特性は、より長い治療の過程を示す病状を治療するために、より長くまたより多くの治療学的に有効な期間にわたりマクロライドを利用可能なものとする。
【００１０】
本開示の第１の実施態様（例えば、方法Ｉ）は、１０μｍ以下の平均サイズを有している上記マクロライド微粒子の調製方法を対象とし、ここでは、当該微粒子は、結晶性の形態であるマクロライドを含んでいる。この方法は、以下のステップを含んでいる：（ａ）組成物を形成するために、液体中でマクロライドを溶解および／または分散させるステップ；（ｂ）過飽和組成物を形成するステップ；（ｃ）組成物において音波破砕を実施するステップ；（ｄ）上記組成物を機械的に撹拌し且つ蒸発させるステップ；（ｅ）上記組成物から溶剤が完全に蒸発する前に、機械的な撹拌を中断するステップ；並びに、（ｆ）上記ステップ（ｅ）の後に、上記マクロライド微粒子を得るために、上記組成物から残留している溶剤を除去するステップ。
【００１１】
本開示の第２の実施態様（例えば、方法ＩＩ）は、２０μｍ以下の平均サイズを有しているマクロライド微粒子の調製方法を対象とし、ここでは、当該微粒子は、結晶性の形態におけるマクロライドを含んでいる。上記方法は、ステップ（ａ）と（ｂ）とを含んでいる。ステップ（ａ）において、組成物は、マクロライド、第１の溶剤および第２の溶剤を含むように調製され、当該第２の溶剤は、アルコール、アセトンおよびアセトニトリルからなる群から選択される。上記組成物は、マクロライドの最大溶解度を、第１の溶剤または第２の溶剤に個別に溶解したマクロライドの最大溶解度よりも大きくするものとして特徴付けられる。ステップ（ｂ）において、マクロライド微粒子を得るために、上記第１の溶剤および上記第２の溶剤を、組成物から蒸発させる。
【００１２】
本開示の第３の実施態様はまた、２０μｍ以下の平均サイズを有しているマクロライド微粒子の調製のための方法（例えば、方法ＩＩＩ）を対象とし、ここでは、当該微粒子は、結晶性の形態におけるマクロライドを含んでいる。第３の実施態様のステップ（ａ）において、組成物は、マクロライド、第１の溶剤、および第２の溶剤を含むように調製され、当該第１の溶剤は芳香族化合物であり、当該第２の溶剤は、アルコール、アセトンおよびアセトニトリルからなる群から選択される。ステップ（ｂ）において、マクロライド微粒子を得るために、第１の溶剤および第２の溶剤を、組成物から蒸発させる。
【００１３】
ステップ（ａ）において、上記組成物は、サブステップ（ａ１）とサブステップ（ａ２）とを使用して形成されることが可能である。ステップ（ａ１）において、前駆体組成物が形成され、ここでは、当該マクロライドは、第１の溶剤と混合され、且つその最大溶解度よりも多い量において存在し、例えば、当該前駆体組成物は、スラリーの形態である。ステップ（ａ２）において、マクロライドを完全に溶解するために、前駆体組成物に第２の溶剤が加えられる。
【００１４】
実施態様において、第１の溶剤は、キシレン、ベンゼンおよびトルエンからなる群から選択された芳香族化合物の溶剤であり得る。実施態様において、第２の溶剤は、メタノール、エタノールおよびイソプロパノールからなる群から選択されることが可能であり、特に、エタノールであり得る。
【００１５】
実施態様において、マクロライド微粒子の大部分は、０．４μｍ〜４μｍの範囲の大きさ（平均サイズ）を有している。
【００１６】
幾つかの場合において、マクロライドは、ラパマイシン（シロリムス）、フジマイシン（タクロリムス）、ピメクロリムス、ゾタロリムス、エベロリムス、テムシロリムス、またはリダフォロリムス／デフォロリムスのような、“非抗生物質”のマクロライドである。幾つかの実施態様において、マクロライドは、ラパマイシンである。
【００１７】
本開示の他の実施態様は、マクロライド微粒子それ自体を対象とし、当該マクロライド微粒子は、２０μｍ以下または１０μｍ以下の平均サイズを有しており、ここで、当該微粒子は、結晶性の形態であるマクロライドを含んでいる。本開示の方法は、２０μｍ以下または１０μｍ以下の平均サイズを有している多数のマクロライド微粒子を調製するために使用されることが可能であり、当該方法において、多数の微粒子の間のサイズの分散度は、小さい程度（すなわち、低い多分散性）である。低い多分散性を有するマクロライド微粒子は、多数の微粒子の中に、セットの平均粒子サイズから相当に外れているサイズの少数の微粒子を有する傾向がある。
【００１８】
低い多分散性を有する一セットのマクロライド微粒子は、注射可能な組成物、および移植可能な医療用装置を含んでいる薬剤送達の用途のために、特に望ましいものであり得る。組成物または装置の調製は、改良されることが可能であり、そして、より望ましい放出の特性が達成されることが可能である。例えば、低い程度の多分散性を有するマクロライド微粒子セットは、マクロライド微粒子を含有している被覆を調製するために使用されることが可能である。このマクロライド微粒子を含有している被覆は、均質な被覆特性を有しており、そして、体内において、より予測可能な様式においてマクロライド治療剤を放出することが可能である。それ故に、上記微粒子の低い多分散性と結晶性の固体状態のマクロライドは、十分に制御され且つ持続する放出特性を有する、組成物および装置の調製を容易にすることが可能である。
【００１９】
本開示の他の実施態様は、マクロライド微粒子を含んでいる、治療用組成物および医療用装置を対象としている。例えば、マクロライド微粒子は、注射によって患者に導入されることが可能であるか、またはマクロライドの放出を調節する送達系において使用されることが可能である。幾つかの態様において、マクロライド微粒子は、脈管内の場所にマクロライド治療剤を送達するために使用される。幾つかの実施態様において、マクロライド微粒子は、移植可能なまたは挿入可能な医療用装置との関連において使用される。マクロライド微粒子は、当該マクロライド微粒子が上記装置から放出可能な様式、当該マクロライド微粒子が上記装置上に固定化された様式、もしくは当該マクロライド微粒子が上記装置内に固定化された様式、またはこれらを組み合わせた様式において、装置に関連付けることが可能である。
【００２０】
マクロライド微粒子はまた、高分子系との連結において使用されることが可能であり、当該高分子系は、マクロライド治療剤の放出を調節する。高分子系は、生体安定性であり得るか、もしくは生物分解性であり得る。幾つかの場合において、マクロライド微粒子は、高分子の基質に関連付けられる。そして当該基質は、例えば装置の表面における被覆において、移植可能な医療用装置に関連付けることが可能である。マクロライド微粒子はまた、重合体材料（例えば、架橋されたヒドロゲル）のその場で形成された塊の中で固定化されることが可能である。
【００２１】
〔図面の簡単な説明〕
図１Ａ〜Ｇは、種々の非抗生物質のマクロライドの化学構造を明示している。
【００２２】
図２は、ラパマイシン粉末の電子顕微鏡写真であり、当該ラパマイシン粉末は、ｏ−キシレンにおけるスラリーの作製と、それに続く撹拌を伴わない溶剤の蒸発とによって得られた。
【００２３】
図３は、ラパマイシン微粒子の電子顕微鏡写真であり、当該ラパマイシン微粒子は、およそ１．５μｍの平均サイズを有し、且つ本開示の方法（実施例１）を使用することによって調製された。
【００２４】
図４は、ラパマイシン微粒子を形成するためのステップを含んでいる工程のフローチャートである。
【００２５】
図５は、サイズ分布のヒストグラムであり、当該ヒストグラムは、２〜４ミクロンの範囲の平均粒子サイズを有しているラパマイシン微粒子のレーザー光散乱解析により作成された。
【００２６】
図６ａおよび６ｂは、ラパマイシンの非晶質の形態および結晶性の形態のラマンスペクトルである。
【００２７】
図７Ａ（倍率９．９７Ｋ倍）および図７Ｂ（倍率６９７倍）は、ｏ−キシレンとメタノールとの混合物を使用することにより得られたラパマイシンの結晶性の微粒子の電子顕微鏡写真であり、そして、図１２は、当該ラパマイシンの結晶性の微粒子のレーザー光散乱解析により作成されたサイズ分布のヒストグラムである。
【００２８】
図８Ａ（倍率９．９４Ｋ倍）および図８Ｂ（倍率２．００Ｋ倍）は、ｏ−キシレンとエタノールとの混合物を使用することにより得られたラパマイシンの結晶性の微粒子の電子顕微鏡写真であり、そして、図１３は、当該ラパマイシンの結晶性の微粒子のレーザー光散乱解析により作成されたサイズ分布のヒストグラムである。
【００２９】
図９Ａ（倍率６．７７Ｋ倍）および図９Ｂ（倍率４８６倍）は、ｏ−キシレンとイソプロパノールとの混合物を使用することにより得られたラパマイシンの結晶性の微粒子の電子顕微鏡写真であり、そして、図１４は、当該ラパマイシンの結晶性の微粒子のレーザー光散乱解析により作成されたサイズ分布のヒストグラムである。
【００３０】
図１０Ａ（倍率１０．５５Ｋ倍）および図Ｂ（倍率９９６倍）は、ｏ−キシレンとアセトンとの混合物を使用することにより得られたラパマイシンの結晶性の微粒子の電子顕微鏡写真であり、そして、図１５は、当該ラパマイシンの結晶性の微粒子のレーザー光散乱解析により作成されたサイズ分布のヒストグラムである。
【００３１】
図１１Ａ（倍率９．９９Ｋ倍）および図１１Ｂ（倍率９４５倍）は、ｏ−キシレンとアセトニトリルとの混合物を使用することにより得られたラパマイシンの結晶性の微粒子の電子顕微鏡写真であり、そして、図１６は、当該ラパマイシンの結晶性の微粒子のレーザー光散乱解析により作成されたサイズ分布のヒストグラムである。
【００３２】
図１２〜１６は、それぞれ、図７〜１１に示された粒子に対応する、粒子サイズ分布のヒストグラムである。
【００３３】
図１７は、本開示の粒子のＸＲＤスペクトルである。
【００３４】
図１８Ａ（倍率２．００Ｋ倍）および図１８Ｂ（倍率１０．００Ｋ倍）は、ラパマイシンの結晶性の微粒子の電子顕微鏡写真であり、当該ラパマイシンの結晶性の微粒子は、ｏ−キシレンとエタノールとの混合物を使用し、且つ溶剤の表面から０ｃｍにおいて窒素の流れを用いて蒸発させることにより得られた。そして、図２１は、当該ラパマイシンの結晶性の微粒子のレーザー光散乱解析により作成されたサイズ分布のヒストグラムである。
【００３５】
図１９Ａ（倍率２．００Ｋ倍）および図１９Ｂ（倍率１０．００Ｋ倍）は、ラパマイシンの結晶性の微粒子の電子顕微鏡写真であり、当該ラパマイシンの結晶性の微粒子は、ｏ−キシレンとエタノールとの混合物を使用し、且つ溶剤の表面から０．５ｃｍにおいて窒素の流れを用いて蒸発させることにより得られた。そして、図２２は、当該ラパマイシンの結晶性の微粒子のレーザー光散乱解析により作成されたサイズ分布のヒストグラムである。
【００３６】
図２０Ａ（倍率２．００Ｋ倍）および図２０Ｂ（倍率１０．００Ｋ倍）は、ラパマイシンの結晶性の微粒子の電子顕微鏡写真であり、当該ラパマイシンの結晶性の微粒子は、ｏ−キシレンとエタノールとの混合物を使用し、且つ溶剤の表面から２．５ｃｍにおいて窒素の流れを用いて蒸発させることにより得られた。そして、図２３は、当該ラパマイシンの結晶性の微粒子のレーザー光散乱解析により作成されたサイズ分布のヒストグラムである。
【００３７】
図２１〜２３は、それぞれ、図１８〜２０において示された粒子に対応する、粒子サイズ分布のヒストグラムである。
【００３８】
図２４は、ラパマイシンの結晶性の微粒子の電子顕微鏡写真であり、当該ラパマイシンの結晶性の微粒子は、ｏ−キシレンとエタノールとの混合物を使用し、且つ溶剤の表面から２ｃｍにおいて窒素の流れを用いて蒸発させることにより得られた。そして、図２５は、当該ラパマイシンの結晶性の微粒子のレーザー光散乱解析により作成されたサイズ分布のヒストグラムである。
【００３９】
〔詳細な説明〕
本明細書において記述された本発明の実施態様は、網羅的であることは意図されず、または本発明を、以下の詳細な記述において開示されたそのままの形態に限定することは意図されない。むしろ、当業者が本発明の原理と実施を正しく認識し、且つ理解することが可能であるように、実施態様は選択され、且つ記載される。
【００４０】
本明細書において言及された全ての刊行物および特許は、本明細書において参照によって組み込まれる。本明細書において開示された刊行物および特許は、それらの開示のためだけに、提供される。本明細書において引用された、あらゆる刊行物および／または特許を含む、あらゆる刊行物および／または特許に先行する資格が本発明者にはない、という承認として解釈されることは、本明細書において全くない。
【００４１】
一般に、本開示は、上記微粒子における結晶性の形態であるマクロライドを含むマクロライド微粒子、これらの微粒子を形成するための方法、および当該マクロライド微粒子と関連付けられた、組成物と医療用装置とを提供する。マクロライド微粒子は、２０μｍ以下または１０μｍ以下の、より小さな大きさを含む望ましい特性を有しており、ここでは、上記微粒子は、結晶性の固体状態の形態であるマクロライドを含んでいる。本開示の方法はまた、結晶性の形態であるマクロライドを含んでいる多数のマクロライド微粒子を提供することが可能であり、当該多数のマクロライド微粒子において、サイズの分散度の程度は小さい（例えば、低い多分散性）。
【００４２】
治療方法において、マクロライド微粒子は、当該マクロライドが患者に対して治療上有効になるような様式で、単独で、または送達物品もしくは組成物との関連において、患者の中に配置されることが可能である。幾つかの、より具体的な送達のアプローチにおいて、マクロライド微粒子は、マクロライド治療剤の部位特異的な放出のための移植可能な送達物品と関連付けられる。
【００４３】
マクロライドは大きな大環状のラクトン環によって特徴付けられ、当該ラクトン環は、環における原子の数によって任意で規定され得る。大環状の環は、炭素、窒素、酸素、硫黄、珪素、燐から選択される、少なくとも７つの環原子を含む。環原子は、任意で、酸素と置換されることが可能であり、且つ、一以上の不飽和度（二重結合または三重結合）を含むことが可能である。本開示のマクロライド化合物は、二環式または三環式のような、多環状であるマクロライドを含むことが可能である。幾つかのマクロライドは、マクロライド環に結合された糖分子（例えば、二つ以上）を含む。多くのマクロライドは、天然産物として見つけられ、且つ、種々の原核生物および真核生物からの、二次代謝産物のポリケタイド類に属している。多くのマクロライド治療剤は、天然に生じているマクロライドの化学的に合成された誘導体である。非抗生物質のマクロライドの使用は、種々の適応症に対して、例えば、炎症、線維症および血栓症と関連付けられた組織応答を、予防、または最小化するために、望ましいものであり得る。
【００４４】
非抗生物質のマクロライドは、ラパマイシン（例えば、シロリムス、ラパミューン（商標））、エベロリムス（例えば、ゾートレス（商標））、ピメクロリムス、テムシロリムス、フジマイシン／タクロリムス、デフォロリムス、ゾタロリムス、およびビオリムスである。幾つかの非抗生物質のマクロライドの化学構造は、図１に示されている。
【００４５】
多くの非抗生物質のマクロライド、例えば、ラパマイシンは、望ましい免疫抑制特性および抗増殖特性を有している。ラパマイシン−ＦＫＢＰ１２複合体がエフェクターに結合するとき、ラパマイシンは、成長因子誘導性および分裂促進因子誘導性のＴリンパ球の増殖を阻害することが可能であり、且つ、細胞周期のＧ１からＳへの移行を停止することが可能である。
【００４６】
ラパマイシンは分子量：９１４．１７ｇ／ｍｏｌ、および分子式：Ｃ５１Ｈ７９ＮＯ１３（図１も参照）を有している。ラパマイシンは、水において不溶性であるが、エタノール（２ｍＭ）、メタノール（２５ｍｇ／ｍＬ）、ＤＭＳＯ（２５ｍｇ／ｍＬ）、クロロホルム（５ｍｇ／ｍＬ）、エーテル、アセトンおよびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドにおいて可溶性である。市場に供給されているものとして、ラパマイシンは、溶液中において平衡状態で存在する二つの配座異性体（４：１程度）があるのに対して、Ｘ線によって指示されるように、固体状態において一つの（構造的に同質な）異性体として存在する。
【００４７】
ラパマイシンは、粉末の形態（例えば、“ストック組成物”）である製造会社の製品として市販されている。顕微鏡を用いて観察すると、粉末は、不規則な形状（例えば、ぎざぎざした外面）、および種々の大きさを有している薄片の形態であり得る。薄片の大きさは、かなり大きく、一般に約２５μＭよりも大きい、より典型的には約１００μＭよりも大きい最小体積を有している（図２参照）。粉末の形態であるラパマイシンのストック組成物は、種々の供給源、例えば、ＬＣラボラトリーズ（ウォーバーン、マサチューセッツ州）やシグマアルドリッチ、から市販されている。他の非抗生物質のマクロライド、抗生物質のマクロライド、およびケトライドは、市販されているか、または当該技術分野において公知の手法を用いて調製することが可能である。
【００４８】
実施態様において、製造会社の製品は、本開示の方法のステップに供して、望ましくない不規則な形状と多様な大きさにされたマクロライド材料（例えば、２０μｍよりも大きい不規則な大きさにされた粒子）を望ましい大きさにされた微粒子に変形させることが可能であり、ここでは当該微粒子は結晶性の固体状態の形態であるマクロライドを含む。幾つかの実施態様において、２０μｍよりも大きく、不規則な大きさにされた粒子の形態である、製造会社の製品のマクロライドは、平均サイズ２０μｍ以下を有するマクロライド微粒子を提供するために、本開示の方法に供され、ここでは、当該微粒子は結晶性の形態のマクロライドを含む。当該方法はまた、低い多分散性を持つマクロライド微粒子の製品を提供することが可能である。当該方法は、圧壊するまたは粉砕するステップを避けることが可能であり、これらのステップは、結晶性の形態と同様に活性に対して有害なものであり得る。
【００４９】
マクロライド化合物、例えば、ラパマイシンは、マクロライド微粒子を形成するために用いられるより前に、任意で、あらゆる精製工程または濃縮工程に供されることが可能である。具体例としての、任意の、精製または濃縮の手法は、親和性、疎水性、分子ふるい、遠心分離、および液相クロマトグラフィー（例えば、ＨＰＬＣ）の一つ以上を含む。
【００５０】
実施の幾つかの様式において、製造会社の製品から提供されたマクロライドは、上記微粒子を調製するための工程の最初のステップにおいて、組成物を形成するために液体へ加えることが可能である。上記液体はマクロライドに対する溶剤であり得る。マクロライド治療剤が分散および／または溶解され得る、具体例としての液体（例えば、マクロライド溶剤）は、以下のものを含む：ベンゼン、キシレン（例えば、オルト−キシレン、パラ−キシレン、またはメタ−キシレン）およびトルエンのような芳香族炭化水素；メタノール、エタノール（ＥｔＯＨ）、イソプロパノール（ＩＰＡ）、ｎ−ブタノール、イソブチルアルコールおよびｔ−ブチルアルコールのようなＣ１−Ｃ４アルコール；ジクロロエタン（ＤＣＥ）、ジクロロメタン（ＤＣＭ）、クロロホルム、およびトリフルオロ酢酸エチル（ＥＴＦＡ）のような、ハロゲン化有機溶剤；メチルイソブチルケトン（ＭＩＢＫ）、３−ペンタノン（ジエチルケトン）、アセトン、２−ブタノン（ＭＥＫ）のようなケトン；アセトニトリル（ＡＣＮ）；イソプロピルエーテル（ＩＰＥ）およびテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）のようなエーテル；ヘキサン、ヘプタン等のような脂肪族炭化水素；酢酸エチルのようなエステル。二つ以上の溶剤を含む溶剤の組み合わせまたは混合物が使用され得る。実施の一つの様式において、マクロライド溶剤は、オルト−キシレンのようなキシレンを含んでいる。
【００５１】
方法のステップによって調製された組成物は、“第１の組成物”、“第２の組成物”、“第３の組成物”等と任意で言われてもよい。例えば、第１のステップにおいて、組成物は任意で“第１の組成物”と言われてもよく、当該“第１の組成物”は、溶剤または溶剤の混合物の中に溶解されたマクロライドを含む。続いて起こるステップにおいて、例えば、材料の上記組成物への添加または当該組成物からの除去によって、当該組成物が変更されるまたは変化させられる場合、当該変化は“第２の組成物”の形成をもたらしてもよい。
【００５２】
一般の事柄として、マクロライド治療剤は、マクロライド微粒子を形成するために、溶剤または溶剤の混合物の中で、望ましい量において、溶解および／または分散されることが可能である。一般の事柄として、溶解されているマクロライド同様に、溶剤または溶剤の組み合わせに依存して、組成物において、当該マクロライドは、あらかじめ決められた温度、例えば約２０℃において最大溶解度を提示することが可能であると理解される。最大溶解度において、溶液は“飽和された”と言われることが可能である。溶解されたマクロライドの量は、ｍｇ／ｍＬ、％（ｗｔ／ｖｏｌ）、またはモーラー(molar) のような、慣例に則った用語で記述され得る。例えば、多くの溶剤におけるラパマイシンの飽和点は、１５ｍｇ／ｍＬ〜１５０ｍｇ／ｍＬの範囲である。飽和した溶液への、より多くのマクロライドの添加は、過飽和溶液、またはスラリーの形成を引き起こし、ここでは、組成物における当該マクロライドのある割合は溶解されていないが、例えば、分散されている。過飽和溶液は、組成物におけるマクロライドの全体の（溶解されたおよび溶解されていない）量に対する、溶解されていないマクロライドの割合の観点で記述される場合がある。
【００５３】
マクロライドの濃度が飽和水準未満であるマクロライド組成物、すなわち“不飽和の”マクロライド組成物はまた、ｍｇ／ｍＬ、％（ｗｔ／ｖｏｌ）、またはモーラーのような慣例に則った用語で記述され得る。不飽和溶液におけるマクロライドの濃度は、同じ溶剤におけるその飽和水準に相対的に、例えば飽和水準の割合として、記述され得る。例えば、ラパマイシンは、２０℃のキシレンの中で約７５ｍｇ／ｍＬにおいて、飽和溶液を形成する；ここでは、それ故に、７．５％飽和溶液である。
【００５４】
方法Ｉに従って微粒子を形成する方法のステップにおいて、マクロライドは、溶剤に飽和点を上回る量にて加えることが可能である。添加に続いて、上記組成物は、溶解状態および非溶解状態（例えば、分散のような）であるマクロライドを含み得る。実施の幾つかの様式において、マクロライドは、飽和量よりも最大で約１０％多い、飽和量よりも最大で約１５％多い、飽和量よりも最大で約２０％多い、または飽和量よりも最大で約２５％多い量をもって溶剤に加えることが可能である。
【００５５】
マクロライド組成物が形成され得る、または最終的に配置され得る器は、一つ以上の因子、例えば、生産されることが望まれるマクロライド微粒子の望ましい量、または上記方法において施されるその後のステップに基づいて、選択され得る。当該容器はプラスチック、ガラス、または金属で形成されることが可能であり、その内面は、マクロライド治療剤のその面へのあらゆる非特異的な吸着を最小限にするか、または除去するために、任意で処理され得る。具体例としての熱可塑性容器は、ポリプロピレン、ポリスチレン、ポリ（テトラフルオロエチレン）（ＰＴＦＥ）、およびパーフルオロアルコキシ（ＰＦＡ）ポリマー、例えばテフロン（商標）およびネオフロン（商標）、から製作される。
【００５６】
方法Ｉにおいて、マクロライドが溶剤または溶剤の混合物の中で溶解および／または分散された後に、溶解されたマクロライド組成物において音波破砕を提供するステップに供されることが可能である。“音波破砕”は、組成物をかき混ぜるための、音波または超音波エネルギーの適用をいう。音波破砕を提供するステップにおいて、例えば音波破砕チップ、または音波破砕ホーン等の、音波破砕の機構を有した装置が用いられ得る。超音波処理装置は、通常の交流を高周波、高電位の電気エネルギーへ変えることが可能であり、当該エネルギーは、変換機に供給され、且つ機械的な振動へ変換される。音波のためのエネルギーは電子的に生産され、且つ、マクロライド組成物の中に配置されている音波破砕装置の金属製のチップを通して伝達される。振動チップは、圧縮波および希薄波をその面から引き起こすことが可能である。音波破砕は、試料の中にキャビテーションを提供することが可能であり、これは、液状組成物におけるマイクロバブルの急速且つ繰り返しの形成である。当該マイクロバブルは、この方法のステップの中で、マクロライド組成物に影響を及ぼすために微小な衝撃波を伝搬する。
【００５７】
本開示の方法において使用され得る、具体例としての音波破砕をする器具は、例えば、バーチス（例えば、バーソニック（商標）；ガーディナー、ニューヨーク州）から市販されている。音波破砕をする他の装置は、音波破砕をする浴槽を含む。
【００５８】
音波破砕は、望ましい温度、例えば、約５℃〜約５０℃の範囲において実行され得る。音波破砕はまた、望ましい時間の長さの間実行され得て、それは、組成物、組成物の大きさ、および伝達されるエネルギーの量に依存している。例えば、音波破砕は、約１秒間〜約６０秒間、または約５秒間〜約３０秒間の範囲の間、実行され得る。より長い期間またはより短い期間が、組成物の大きさと音波破砕条件とに依存して、用いられてもよい。音波破砕のステップは、断続的に施されることが可能であり、それは、音波破砕を行わない期間によって中断された二つ以上の音波破砕を実施する期間を伴っている。音波破砕の時間は、組成物中に存在するマクロライドの量に依存して変化してもよい。
【００５９】
音波破砕のステップは、一つ以上の音波破砕のパラメータを用いて、任意で記述され得る。例えば、音波破砕のステップは、組成物に提供された時間（例えば、ジュールとして測定される）にわたる出力量（例えば、ワットとして測定される）によって、任意で記述され得て、例えば、組成物の単位体積あたりに提供された出力量、例えば、Ｊ／ｍＬ、または、組成物中に存在するマクロライドの単位量あたりに提供された出力量、例えば、Ｊ／ｍｇである。出力は、音波破砕のチップまたはホーンの放射表面を駆動するために必要なエネルギーとして、特定の負荷に対する振動の特定の振幅で、装置の共鳴周波数にて記述され得る。
【００６０】
超音波破砕装置は、望ましい音波破砕の時間を設定するためのタイマーを含むことができる。試験液の既知の体積に基づいて、特定の音波破砕の１分間あたりのエネルギーはｋＪ／ｍ３の用語で記述され得る。これ故に、音波破砕のエネルギーは、１分間あたりの特定の音波破砕のエネルギーに音波破砕の時間を乗じたものとして得ることが可能である。パルス様式のために、音波破砕のエネルギーは、連続の様式におけるエネルギーに時間“どおり”(on time) の割合（例えば、パルス２０様式に関して２０％）を乗じたものとして、計算されることが可能である。強度は、試料の単位体積あたりに利用可能なエネルギーの尺度であり、振幅に直接関連付けられている。
【００６１】
方法Ｉにおいて、音波破砕に続いて、組成物を機械的に撹拌および蒸発させるステップが施されることが可能である。このステップにおいて、音波破砕されたマクロライド組成物は、撹拌され、そして溶剤または溶剤の混合物はある一定の期間にわたって蒸発することが認められる。過飽和組成物は撹拌および蒸発のステップの間に、より過飽和されるようになることが可能であり、または幾つかの実施態様において、過飽和組成物が当該ステップの間に形成される。蒸発は、正常な気圧条件または周囲の気圧条件で起こることが可能であるか、または上記組成物は、当該組成物からの溶剤のより速い蒸発を促進するために減圧条件に配置されることが可能である。溶剤が蒸発するとき、マクロライドの濃度は上記組成物において上昇し得る。実施の幾つかの様式において、上記組成物が蒸発の間に飽和点を下回る場合、当該飽和点は交差されることが可能であり、過飽和組成物が形成されることが可能である。
【００６２】
撹拌は手動でまたは撹拌装置を使用して施されることが可能である。具体例としての撹拌装置は、磁気撹拌棒および磁気ビーズを含む。実施の具体例としての様式において、音波破砕されたマクロライド組成物は、磁気撹拌棒を備えたガラスビーカーのような器に配置され、その後一定の期間にわたって低速から中速の設定において撹拌される。器は、撹拌のステップの間、上記組成物からの溶剤の蒸発を促進するために、適切な大きさおよび形状であり得る。例えば、円筒形のビーカーを用いることが可能である。任意で、撹拌のステップは、上記組成物の全体積に対する大気にさらされた液体の面積の観点で（例えば、当該組成物が静止しているときに測定されるように）、記述されてもよい。例えば、あらかじめ決められた直径を有している円筒形のガラスビーカーの中で、望ましい体積の組成物が、（溶媒の蒸発より前の）撹拌の開始において、望ましい表面積／体積比（ｃｍ２／ｍＬ）を提供するために、ビーカーへ加えることが可能である。
【００６３】
撹拌／蒸発は、望ましい温度、例えば約５℃〜約５０℃の範囲において、実行されることが可能である。撹拌／蒸発は正常な大気圧（例えば、約９５ｋＰａ〜約１０５ｋＰａ）で実行されることが可能であるが、任意で減圧下で実行されてもよい。撹拌および蒸発はまた、溶剤露出面を横切って増大した大気流を提供することが可能である領域、例えば層流フードの中で、任意で実行されることが可能である。
【００６４】
上記組成物からの溶剤の蒸発は、望ましい速度で施されることが可能である。蒸発の速度は、数ある方法のうちのいずれか一つをもって記述されることが可能であり、例えば、時間の量あたりの体積の損失、または時間当たりの上記組成物の損失の割合（体積）、または撹拌および蒸発の期間の上記組成物の損失の割合（体積）である。撹拌および蒸発の期間、蒸発は、まず第一の速度で、進めてもよく、そしてその後、上記組成物がより濃縮されるにつれて、撹拌および蒸発の期間にわたって、この速度を低下させてもよい。実施の幾つかの様式において、撹拌および蒸発のステップの間、望ましい範囲における溶剤の量が、上記組成物から蒸発される。組成物の大きさと同様に、撹拌および蒸発のパラメータは、溶媒が望ましい期間、例えば、数時間もしくは数日間の範囲において、蒸発するように、選択されることが可能である。
【００６５】
マクロライド微粒子は上記組成物において方法Ｉのステップの間に形を成すことが可能である。マクロライド微粒子は、上記組成物においてスラリーの形態において、存在することが可能であり、且つ当該スラリーは撹拌され、溶媒が蒸発するにつれて濃くなることが可能である。過飽和溶液からの、溶剤の継続的な蒸発は、形成されたマクロライド微粒子の量を増加させることが可能である。溶剤の蒸発は、器の中に、未だ残留している溶剤がある段階に対して、実行されることが可能であるが、撹拌する行為は、実質的な望まれないマクロライドの粉砕（例えば、実質的な乾式粉砕）を引き起こさない。
【００６６】
撹拌および蒸発を停止させる段階は、もう一つの方法において記述されることができる。例えば、それは、撹拌および蒸発のステップの最初から最後まで、上記組成物から蒸発された溶剤の量に関して、記述されることが可能であり、例えば、上記組成物から蒸発される溶剤の望ましい割合の範囲である。それはまた、マクロライドの割合（ｗｔ．）に関して記述されてもよく、当該マクロライドの割合は、溶剤に溶解したままである量と比較した、微粒子（溶解されていない）の状態であるマクロライドの割合である。
【００６７】
撹拌および蒸発ステップが完了された後に、方法Ｉにおいて、上記組成物から残留している溶剤を除去するステップが施されることが可能である。実施の幾つかの様式において、溶剤は、単純に上記組成物から蒸発され、マクロライド微粒子を含んでいる材料の乾燥ケーキを形成している。他の従来の溶媒の除去方法、例えば濾過分離を用いることが可能である。そのようなアプローチが採られた場合、濾過装置は望ましい孔の大きさを有し、当該孔は、ほとんどまたは全ての形成されたマクロライド微粒子が当該濾過装置を通過することを防ぐ。除去された溶剤は、マクロライド微粒子を形成しなかった、溶解されたマクロライドを含んでいてもよく、そしてこれは、マクロライド微粒子の別のバッチを作製するために、任意で再利用されることが可能である。
【００６８】
本開示の第２および第３の方法の実施態様（方法ＩＩおよびＩＩＩ）において、粒子の調製であるステップとして、製造会社の製品から得られたマクロライドはまた、溶剤（例えば、“第１の溶剤”）に加えることが可能である。マクロライド治療剤が供されてもよい具体例としてのマクロライド溶剤は、芳香族炭化水素、例えば、ベンゼン、キシレン（例えば、オルト−キシレン、パラ−キシレン、またはメタ−キシレン）、およびトルエン、を含む。実施の一つの様式において、方法ＩＩまたはＩＩＩのマクロライド溶剤は、キシレン（例えば、オルト−キシレン）を含む。
【００６９】
一般の事柄として、溶解されているマクロライドと同様に溶剤に依存して、方法ＩＩまたはＩＩＩの上記組成物において、マクロライドはあらかじめ決められた温度、例えば約２０℃、において最大溶解度を提示することが可能であることが、理解される。“飽和されていない”および“飽和された”マクロライド含有組成物は本明細書において記述されている。
【００７０】
方法ＩＩまたはＩＩＩの最初のステップにおいて、マクロライド治療剤は溶剤と混合されることが可能である。マクロライドは、飽和点より多い量において、溶剤に加えられる。添加に続いて、上記組成物は、溶解された状態および溶解されていない状態（例えば、分散として）であるマクロライドを含むことが可能である。実施の幾つかの様式において、方法ＩＩまたはＩＩＩの中で、マクロライドは、溶剤に加えることが可能であり、当該マクロライドは、飽和量よりも最大で約１０％多い量、飽和量よりも最大で約１５％多い量、飽和量よりも最大で約２０％多い量、または飽和量よりも最大で約２５％多い量をもって加えることが可能である。
【００７１】
マクロライド組成物が形成され得る、または最終的に配置され得る、器は、方法ＩＩまたはＩＩＩに従って、当該技術において公知の任意の一つのものであることが可能であり、方法Ｉを参照して記述された器を含んでいる。
【００７２】
方法ＩＩおよびＩＩＩにおいて、マクロライドと第１の溶媒とのスラリーの調製の後、第２の溶媒が当該スラリーへ加えられる。第２の溶剤はアルコール、アセトン、およびアセトニトリルからなる群から選択され得る。例えば、第２の溶剤はメタノール、エタノール、およびイソプロパノールからなる群から選択され、特に、第２の溶剤はエタノールである。
【００７３】
第２の溶剤の添加の間、スラリーの中の溶解されていないマクロライドは、溶解されるようになる。実施の様式において、第２の溶剤は、ある量をもってスラリーに加えられ、ここでは、マクロライドが、第１の溶剤および第２の溶剤の混合物の中で完全に溶解されるようになる量である。幾つかの場合において、第１の溶剤および第２の溶剤は、それぞれ、５０：５０〜９０：１０の範囲である体積比において、または、より特に、それぞれ、６０：４０〜８０：２０の範囲である体積比において、存在する。
【００７４】
方法ＩＩまたはＩＩＩにおいて、第１の溶剤および第２の溶剤を含んでいる上記組成物は、幾つかの実施態様の中で、マクロライドの最大溶解度を、第１の溶剤または第２の溶剤に個別に溶解したマクロライドの最大溶解度よりも大きくするものとして特徴付けられてもよい。例えば、第１の溶剤および第２の溶剤を有する上記組成物において、マクロライドは、２００ｍｇ／ｍＬまでの濃度で存在するか、または幾つかの様態において、マクロライドは、７５ｍｇ／ｍＬ〜１７５ｍｇ／ｍＬの範囲の濃度で、上記組成物中に存在する。第１の溶剤および第２の溶剤の混合およびマクロライド治療剤の溶解を手助けするために、撹拌は、手動で、または撹拌装置を使用して施されることが可能である。
【００７５】
マクロライド治療剤、第１の溶剤および第２の溶剤を有する上記組成物は、任意で、一つ以上の賦形剤化合物を含む。組成物の中に含まれることが可能である賦形剤化合物の一つの型は、抗酸化剤であり、そしてそれは、幾つかの場合において、製造会社の組成物から得られたような、マクロライド治療剤を有する混合物中に存在してもよい。０．５％ｗ／ｗの量である。薬学的に受け入れられる抗酸化剤は当該技術において公知であり、例えば、置換されたフェノール（例えば、ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ））、アスコルビン酸（ビタミンＣ）、カロテン（例えば、レチノール（ビタミンＡ））、トコフェノール（ビタミンＥ）、およびグルタチオンである。
【００７６】
方法ＩＩまたはＩＩＩにおいて、第１の溶剤、第２の溶剤およびマクロライド治療剤を含んでいる上記組成物が調製された後、当該溶剤はマクロライド微粒子を提供するために上記組成物から蒸発させることが可能である。蒸発は望ましい温度、例えば約５℃〜約５０℃の範囲において、実行されることが可能である。蒸発は通常の大気圧（例えば、約９５ｋＰａ〜約１０５ｋＰａ）で実行されることが可能であるが、任意で減圧下で実行されてもよい。蒸発はまた、溶剤露出面を横切って増大した大気流を提供することが可能である領域、例えば層流フードの中で、任意で実行されることが可能である。
【００７７】
実施の一つの様式において、方法ＩＩまたはＩＩＩにおける蒸発のステップは、不活性の気体、例えば窒素の流れの下において、さらに上記組成物を撹拌することを含んでいる。これを実行するために、窒素ガスは、蒸発器の中へ導管、例えばガラスピペットを通して通過されることが可能であり、当該導管は、溶液の表面上に望ましい距離をもって配置されている。実施のもう一つの様式において、溶媒を蒸発させる容器の上部は、蓋を用いて密閉されることが可能であり、当該蓋は、不活性の気体の流入と排気のための出入口を有している。上記組成物からの溶剤混合物の蒸発を促進するために、不活性の気体、例えば窒素は、密封された容器の中に望ましい流量をもって供給されることが可能である。
【００７８】
方法ＩＩまたはＩＩＩにおいて、上記組成物からの溶剤の蒸発は、望ましい速度で施されることが可能である。蒸発速度は、数ある方法のうちのいずれか一つをもって記述されることが可能であり、例えば、時間の量あたりの体積の損失、または時間当たりの上記組成物の損失の割合（体積）、または撹拌と蒸発の期間の上記組成物の損失の割合（体積）である。撹拌と蒸発の期間、蒸発は、まず第一の速度で、任意で進めてもよく、そしてその後、上記組成物がより濃縮されるにつれて、当該期間にわたって、この速度を低下させてもよい。実施の幾つかの様式において、撹拌および蒸発のステップの間、望ましい範囲における溶剤の量が、上記組成物から蒸発される。組成物の大きさと同様に、蒸発のパラメータは、溶媒が望ましい期間、例えば、数時間もしくは数日間の範囲において、蒸発するように、選択されることが可能である。
【００７９】
２０μｍ以下の大きさを有し、望ましい物理特性をもつマクロライド微粒子は、方法ＩＩまたはＩＩＩにおける蒸発ステップの間、上記組成物の中で形を成すことが可能である。第１の溶剤および第２の溶剤が蒸発するにつれて、上記組成物は、スラリーの形態に戻り得るが、そのとき上記組成物は、小さな微粒子（≦２０μｍ）の形態におけるマクロライド治療剤を有し、低い多分散性を有している。スラリーは、溶媒が蒸発するにつれて濃くなることが可能である。スラリーからの、溶剤の継続的な蒸発は、形成されたマクロライド微粒子の量を増加することが可能である。溶剤の量は、上記組成物がスラリーの形態、湿ケーキの形態、または乾燥ケーキの形態となるように、蒸発されることが可能である。
【００８０】
方法ＩＩまたはＩＩＩの実施の幾つかの様式において、蒸発は、上記組成物のかき混ぜ（例えば、撹拌）をなにも適用することなく、施されることが可能である。溶剤は、望ましい形態、例えば、スラリー、湿ケーキ、または乾燥ケーキのために、上記組成物から蒸発されることが可能である。
【００８１】
方法ＩＩまたはＩＩＩの実施の幾つかの様式において、蒸発はまた、上記組成物が撹拌されていると同時に、施されることが可能である。撹拌は、手動でまたは撹拌装置を使用して施されることが可能である。具体例としての撹拌装置は、磁気撹拌棒および磁気ビーズを含む。実施の具体例としての様式において、マクロライド組成物は、磁気撹拌棒を備えたガラスビーカーのような器に配置され、その後一定の期間にわたって低速から中速の設定において撹拌される。器は、撹拌のステップの間、上記組成物からの溶剤の蒸発を促進するために、適切な大きさおよび形状であり得て、不活性の気体の流入と排気のための、出入口を有している密封されたものを含むことが可能である。溶剤の蒸発は、器において未だ残留している溶剤がある段階に対して、実行されることが可能であるが、撹拌する行為は、実質的な望まれないマクロライドの粉砕（例えば、実質的な乾式粉砕）を引き起こさない。
【００８２】
任意で、撹拌のステップは、上記組成物の全体の体積に対する気体にさらされた液体の面積の観点で（例えば、当該組成物が静止しているときに測定されるように）、記述される場合がある。例えば、所定の直径を有している円筒形のガラスビーカーの中で、望ましい体積の組成物は、（溶媒の蒸発より前の）撹拌の開始において、望ましい表面積／体積の比（ｃｍ２／ｍＬ）を提供するために、ビーカーへ加えることが可能である。
【００８３】
方法ＩＩまたはＩＩＩにおいて、撹拌および蒸発を停止させる段階は、もう一つの方法において記述されることができる。例えば、それは、撹拌および蒸発のステップの最初から最後まで、上記組成物から蒸発された溶剤の量に関して記述されることが可能であり、例えば、上記組成物から蒸発される溶剤の望ましい割合の範囲である。それはまた、マクロライドの割合（ｗｔ．）に関して記述されてもよく、当該マクロライドの割合は、溶剤に溶解したままである量と比較した、微粒子（溶解されていない）の状態であるマクロライドの割合である。
【００８４】
方法ＩＩまたはＩＩＩにおいて、溶剤が、上記組成物から完全に蒸発されない場合、上記組成物から残留している溶剤を除去するステップが施されることが可能である。実施の幾つかの様式において、溶剤は、単純に上記組成物から蒸発させて、マクロライド微粒子を含んでいる材料の乾燥ケーキを形成している。他の従来の溶媒の除去方法、例えば濾過分離、を用いることが可能である。そのようなアプローチが採られた場合、濾過装置は望ましい孔の大きさを有し、当該孔は、ほとんどまたは全ての形成されたマクロライド微粒子が当該濾過装置を通過することを防ぐ。除去された溶剤は、マクロライド微粒子を形成しなかった溶解されたマクロライドを含んでいてもよく、そしてこれは、マクロライド微粒子の別のバッチを作製するために、任意で再利用されることが可能である。
【００８５】
方法ＩＩまたはＩＩＩにおいて、マクロライド微粒子が形成された後に、全てまたは一部の溶媒が上記組成物から除去されると共に、非溶剤が微粒子へ加えることが可能である。具体例としての非溶剤は水であるが、マクロライド微粒子の溶解を引き起こさない任意の液体または液体の混合物が使用されることが可能である。
【００８６】
任意で、非溶剤がマクロライド微粒子に加えられた後に、音波破砕は、マクロライド治療剤／非溶剤組成物において、施されることが可能である。“音波破砕”は組成物をかき混ぜるための音波または超音波エネルギーの適用を言い、例えば音波破砕チップ、または音波破砕ホーン等の音波破砕の機構を有した装置を用いることが可能である。本開示の方法において使用され得る、具体例としての音波破砕装置は、例えば、バーチス（例えば、バーソニック（商標）；ガーディナー、ニューヨーク州）から、市販されている。音波破砕をする他の装置は音波破砕をする浴槽を含む。音波破砕はマクロライド微粒子の分散と分離において手助けすることが可能である。
【００８７】
方法Ｉ、ＩＩ、またはＩＩＩの何れか一つに従って作製された、形成されたマクロライド微粒子は、物理的特性を評価するために、任意で一つ以上の解析手法に供されることが可能であり、当該物理的特性は、微粒子のサイズ、形、多分散性、および結晶性を含んでいる。例えば、マクロライド微粒子の調製物は、光学顕微鏡、走査型電子顕微鏡（ＳＥＭ）、広角Ｘ線回折（ＷＡＸＳ）、およびＤＳＣのように、顕微鏡によって解析されることが可能である。顕微鏡は、マクロライド微粒子の調製物の一般的な特性を理解するために、用いることが可能である。顕微鏡によって観察されるような、マクロライド微粒子の可視の外部形状は、微粒子の結晶の性質として言及されることが可能である。例えば、微粒子の結晶の性質は、菱形の、十二面体の、六面体の、星形の、鶏冠形の、立方体の、八面体の、正方の、斜方晶系の、単斜晶系の、または三斜晶系のような形状を含むことが可能である。
【００８８】
上記微粒子はまた、特定の化学的状態であるマクロライドに関して、任意で記述されることが可能であり、当該化学的状態は、固体の形態が水和物、脱水和物、塩、溶媒和物もしくは脱溶媒和物またはこれらの形態の組み合わせとして存在するような状態である。結晶性のマクロライド微粒子の間の、液体の分子、例えば溶剤または水は、付加物または共付加物(co-adduct) として言及されることが可能である。存在する場合、付加物または共付加物は、マクロライドの量に比較して、化学量論的な量をもって存在してもよく、または例えば、マクロライド微粒子の結晶格子内に水分子または溶剤分子が任意に配置されるようにマクロライドの量に比較して、非化学量論的な量をもって存在してもよい。存在する場合、水もしくは溶剤の付加物または共付加物は、マクロライド微粒子を提供するために、結晶格子から任意で取り除かれてもよく、これは、脱水または脱溶媒として言及される場合がある。この過程は、上記微粒子の結晶格子において空洞および／または孔を残す場合がある。
【００８９】
微粒子はまた、結晶格子（例えば、異なる結晶の種類）において特定の結晶多形の形態であるマクロライドを持つ場合がある。マクロライドが特定の多形の形態である、マクロライド微粒子は、特定の特性を有する上記微粒子を提供することが可能であり、当該特性は、例えば、溶解性、融点、硬さ、結晶の形状、および光学的なまたは電気的な特性であり、これらは、異なる多形体の間で異なる場合がある。
【００９０】
ラマン分光器は、試料において、結晶性を解析するために用いることが可能であり、マクロライドは、非晶質の形態である微粒子と識別するために用いることが可能である。マクロライドが結晶性の固体である微粒子のラマン解析は、マクロライドが非晶質の固体の形態であるときよりも、一般に、より高く、およびより鋭利なスペクトルのピークを示すだろう（例えば、図６ａおよび図６ｂを参照）。部分的に結晶性のラパマイシンを有する微粒子は、完全な結晶状態と完全な非晶質の状態との間であるラマンピークプロファイルを有するだろう。コンピューターソフトウェアは、結晶性の定量的な測定を提供するために、ピークの幅および強度を測定するために用いることが可能である。
【００９１】
上記微粒子は、上記微粒子の割合に関して、任意で記述されることが可能であり、当該微粒子は結晶性の形態であるマクロライドを含む。例えば、ラパマイシンのような、マクロライドは、微粒子において、約５０％（ｗｔ）以上、約６０％（ｗｔ）以上、約７０％（ｗｔ）以上、約８０％（ｗｔ）以上、約９０％（ｗｔ）以上、約９５％（ｗｔ）以上、約９８％（ｗｔ）以上、約９９％（ｗｔ）以上、約９９．５％（ｗｔ）以上、または約９９．９％（ｗｔ）以上の量で結晶性の固体状態の形態であることが可能である。
【００９２】
マクロライド微粒子の調製物の粒子サイズおよびサイズ分布は、当該技術において公知の種々の手法の何れか一つを用いて、施されることが可能である。実施の一つの様式において、レーザー回析は粒子サイズおよび分布を測定するために用いることが可能である。レーザー回析において、レーザー光線は分散された微粒子の試料を通って通過し、散乱光の強度において、角度変化量が測定される。光散乱の角度は、大きな粒子に対してより大きく、より小さな粒子に対してより小さく、且つ角散乱強度のデータは、粒子サイズプロファイルを作成するために、収集され、解析されることが可能である。
【００９３】
粒子サイズと分布の解析は、レーザー光散乱装置、例えば、マルバーンシステム４７００（１ｎｍ〜３μｍの粒子に対して）、またはホリバＬＡ−９３０（例えば、１００ｎｍ〜２ｍｍの粒子に対して）、を用いて施されることが可能である。そのような分析器からの出力は、個々のマクロライド微粒子のサイズに関する情報を提供することが可能であり、且つ、サイズに関してマクロライド微粒子の分布を反映している、これらのサイズのマクロライド微粒子の全般的な量を提供することが可能である。サイズ分布に関するデータを提供している解析は、調製物中の全てのマクロライド微粒子のサイズおよびサイズ分布を、グラフを用いて表している、ヒストグラムの形態において提供されることが可能である。
【００９４】
本開示の方法に従って作製されたマクロライド微粒子は、ある粒子サイズ（平均値；直径の測定において、一つの側から他方の側まで微粒子を通して測定されるような）を有していてもよく、当該粒子サイズは、約１００ｎｍ〜約２０μｍまで、より特には約５００ｎｍ〜約１０μｍまで、約７５０ｎｍ〜約７．５μｍまでの範囲において、および、いっそうより特には約１μｍ〜約６μｍまでの大きさである。
【００９５】
この大きさの微粒子に関連した形状は、菱形の、十二面体の、六面体の、星形の、鶏冠形の、立方体の、八面体の、正方の、斜方晶系の、単斜晶系の、または三斜晶系の形状を含むが、これらに限定されない。上記微粒子は、球状の輪郭を有していてもよいが、滑らかな球状の外面よりもむしろ、ぎざぎざした、平坦な表面を含む外面を有していてもよい。
【００９６】
マクロライド微粒子の調製物はまた、サイズ分散性に関して記述されてもよい。本開示の方法は、望ましいサイズの特性、例えば、低い程度のサイズの分散度、を有している多数のマイクロ粒子(microparticles)の調製物（例えば、“バッチ”または“セット”）を提供するために、用いることが可能である。低いサイズ分散性は、調製物における微粒子のサイズにおいて、変量がより小さなものであることを意味している（微粒子のサイズにおいて相当の変量があることを意味する、高いサイズ分散性と比べて）。分散の程度は光散乱解析によって得られたヒストグラムによって理解されることが可能である。
【００９７】
幾つかの実施様態において、本開示の方法は、単一の様式のマクロライド微粒子の調製物を与えることが可能である。単一の様式のマクロライド微粒子の調製物において、上記調製物における微粒子の総数によって除した、当該調製物における各々の微粒子に対する微粒子サイズによって決定される、微粒子の平均サイズがあるだろう。上記調製物はまた、あるサイズの範囲を有することが可能であり、当該範囲は、セットの中で最小の微粒子に言及している範囲の下限値、およびセットの中で最大の微粒子に言及している範囲の上限値を有している。セットの中の中間のサイズ（平均値と比較して、“最頻値”または“ｘ５０”とも言われる）は、範囲の中間である。
【００９８】
幾つかの場合において、図５を参照し、微粒子の調製物のサイズ分散性は、頻度分布曲線の形態において（線ＦＤ１および線ＦＤ２）、グラフを用いて表される。通常ガウス形状（例えば、“鐘の形”）であるこの曲線から、特定の微粒子のサイズ（ｘ軸）と、セットにおいてこのサイズの微粒子同士が出会う頻度（グラフの左手側に沿っているｙ軸）とは、相関があり得る。この曲線の導関数（図５に線ＤＦＤ１および線ＤＦＤ２として示されている）は、上記調製物における上記微粒子の累積分布を示している。図１２〜１６はまた、微粒子の調製物のサイズ分散性を示しており、頻度分布曲線の形態においてグラフを用いて表される。
【００９９】
幾つかの場合において、微粒子の調製物の粒子のサイズ分布はｘ１０、ｘ５０、およびｘ９０の数値によって記述されることが可能であり、当該数値は、それぞれ、微粒子の全体の量の１０％、５０％、および９０％の画分において、累積分布曲線から計算された、上記微粒子の大きさとして規定される。例えば、上記微粒子の全体の量の１０％がそれより小さいかまたはそれと等しくなる微粒子の大きさは、ｘ１０として規定される。
【０１００】
幾つかの場合において、上記微粒子の調製物は“単分散度”（ＤＭ）によって規定され得、下記方程式によって決定されることが可能である：
ＤＭ＝（ｘ９０−ｘ１０）／ｘ５０
微粒子の調製物は、ＤＭの値が０に近づくにつれて、よりホモ分散(homodisperse)である。
【０１０１】
上記微粒子の調製物における微粒子の平均サイズは、当該微粒子の平均サイズｄを知ることにより計算することが可能である。当該平均サイズｄは、全ての大きさｉ（頻度分布曲線下の領域）にわたって、大きさｄｉを有している微粒子の数ｎｉの間の全ての産物を合計し、そして微粒子の全ての数Σｉｎｉによってそれを除することによって計算される：
【０１０２】
【数１】
0006416242.tif 000002
【０１０３】
最頻値は、頻度分布曲線の最大値における微粒子の大きさとして規定される。
【０１０４】
調製の一つの様式において、方法Ｉは、２．３μｍ（直径）の平均サイズ、並びに（セットの頻度分布曲線から演算されるように）２．３μｍのｘ５０におけるサイズ、１．０μｍのｘ１０におけるサイズ、および４．４μｍのｘ９０におけるサイズを有し、且つ１．４８の単分散度（ｘ５０における粒子サイズによって除した、８０％の粒子（ｘ９０−ｘ１０）の範囲内におけるサイズの違いであり、それは１．４８である。）を有する微粒子の調製物を生産する。調製のもう一つの様式において、上記方法は、２．７μｍ（直径）の平均サイズ、並びに（セットの頻度分布曲線から演算されるように）２．５μｍのｘ５０におけるサイズ、１．１μｍのｘ１０におけるサイズ、および５．０μｍのｘ９０におけるサイズを有し、且つ１．５６の単分散度を有する微粒子の調製物を生産する。
【０１０５】
調製の一つの様式において、方法ＩＩまたはＩＩＩは、２．７μｍ（直径）の形式上のサイズ(modal size)、並びに（セットの頻度分布曲線から演算されるように）２．７μｍのｘ５０におけるサイズ、１．１μｍのｘ１０におけるサイズ、および６．２μｍのｘ９０におけるサイズを有し、且つ１．９の単分散度を有する微粒子の調製物を生産する（ｘ５０における粒子のサイズによって除した、８０％の粒子（ｘ９０−ｘ１０）の範囲内におけるサイズの違いである。）。調製のもう一つの様式において、上記方法は、３．４μｍ（直径）の平均サイズ、並びに（セットの頻度分布曲線から演算されるように）３．２μｍのｘ５０におけるサイズ、１．１μｍのｘ１０におけるサイズ、および１１．７μｍのｘ９０におけるサイズを有し、且つ３．４の単分散度を有する微粒子の調製物を生産する。
【０１０６】
マイクロ粒子の体積分布を例示するために、結晶性ラパマイシンのマイクロ微粒子は、窒素ガスの流れの中で、ｏ−キシレン／エタノール溶液の蒸発から調製され、当該窒素ガスの流れは、５００ｍｇのバッチの水準において、５回繰り返された。レーザー回析を用いる粒子の大きさの測定は、正規のガウスのサイズ分布を示し、当該ガウスのサイズ分布は、この方法において適度によく制御された。平均値と標準偏差は、表１において列挙されている。この値は、体積に基づくサイズ分布から計算され、当該体積に基づくサイズ分布は、より大きいサイズをより強調するため、通常、データを非対称にしている。
【０１０７】
【表１】
0006416242.tif 000003
【０１０８】
本開示の方法によって、低い単分散度を有する微粒子セットが調製され得る。
【０１０９】
幾つかの様態において、上記微粒子セットの単分散度は、約５以下（例えば約１〜約５の範囲）、約４以下（例えば約１〜約４の範囲）、約３以下（例えば約１〜約３の範囲）、約２．５以下（例えば約１〜約２．５の範囲）、または約２以下（例えば約１〜約２の範囲）である。幾つかの場合は、上記微粒子セットは上述したような単分散度を有し、且つ当該セットの微粒子は、約０．３μｍ〜約１０μｍ（直径）の範囲における形式上のサイズ、または約０．５μｍ〜約１０μｍ（直径）の範囲における形式上のサイズを有している。
【０１１０】
サイズの多分散性はまた、分散の指数に関して記述されることが可能であり、これは、上記微粒子の調製物の範囲内において、微粒子の大きさおよび分布を考慮している方程式から演算される。
【０１１１】
サイズの多分散性“Ｄ”は、一セットの微粒子の数平均直径（ｄｎ）によって除した、一セットの微粒子の重量平均直径（ｄｗ）、によって規定される（ｄｗ／ｄｎ）。
【０１１２】
下記の定義および方程式がサイズの多分散性を決定するために有用である。
【０１１３】
ｎｉ＝直径ｄｉを有する粒子の数
ｄｉ＝粒子の直径
ｄｎ（数平均）＝累積ｎｉ×ｄｉ／累積ｎｉ
ｄｗ（重量平均）＝累積ｎｉ×ｄｉ２／累積ｎｉ×ｄｉ
形成された結晶性の微粒子は、治療用組成物の調製のため、または医療用装置へ関連付けるために、非溶剤において、任意で懸濁されてもよい。
【０１１４】
本開示のマクロライド微粒子は、病状の治療のために体内の部位に送達されることが可能である。送達の幾つかの様式において、マクロライド治療剤は、体液と接触して配置されたとき、ゆっくりと溶解し、そして当該マクロライド、例えばラパマイシンを放出するだろう。そして、それは、体内において、局所的にまたは全身にわたって、生理活性効果を提供することが可能である。
【０１１５】
幾つかの調製において、マクロライド微粒子は、体液のような水溶性の環境において、マクロライド治療剤を溶解および放出するために、調製される。任意で、個々のマクロライド微粒子は、非常に薄い被覆（例えば、“殻”）と共に供給され得るか、または、カプセルに包まれ得て、これによりマクロライドの結晶性の形態によって提供された調節を超えて、マクロライド治療剤の放出をさらに調節することができる。幾つかの場合において、被覆または殻は、上記微粒子の外面と接触させることが可能であり、且つマクロライド微粒子それ自身の直径よりも小さい厚さを有することが可能である。上記微粒子の周囲の被覆と殻は、患者の中における配置の後、当該微粒子からのマクロライド治療剤の放出を遅らせてもよい。幾つかの実施態様において、マクロライド微粒子は、治療用の液状の送達組成物の中に含まれることが可能である。液状組成物は、体内における標的の場所への注射経由でのマクロライド微粒子の送達のために、調製されることが可能である。例えば、マイクロ粒子組成物は、皮下の、筋肉内の、静脈内の、髄腔内の、腹膜内の、または眼球内の注射のために、調剤されることが可能である。液状組成物におけるマクロライド微粒子は、任意で被覆を含むまたはカプセルに包まれることが可能である。
【０１１６】
幾つかの様態において、マクロライド微粒子は、体内へのマクロライド治療剤の放出を制御する系と関連付けられる。例えば、マクロライド微粒子は、移植可能な医療用装置内に、例えば、移植可能な医療用装置の内部の貯蔵庫に、含まれることが可能である。本体は、一つ以上の開口部を含み得るか、または薄膜を有し得、そして、マクロライド治療剤は、開口部または薄膜を通して、装置から出ている貯蔵庫から放出され得、そして、それは、患者における組織または体液で利用可能なものになり得る。治療剤を放出する能力のある開口部を有している、具体例としての医療用装置は、種々の引用文献において記述されており、例えば、同一出願人による米国出願公開番号２００８／００８１０６４（アンダーソン等）において記述されている。
【０１１７】
幾つかの様態において、マクロライド微粒子は、高分子の基質と関連付けられており、当該基質は、体内で、標的の場所に配置されることが可能であるか、または標的の場所において形成されることが可能である。例えば、上記微粒子は、高分子の基質に同伴させるか、高分子の基質の内部に閉じ込めるか、高分子の基質の表面と関連付けるか、または、これらを組み合わせることが可能である。高分子の基質は、一つ以上の様式の放出の調節によって、マクロライド治療剤の放出を調節してもよい。
【０１１８】
高分子の基質は、その場で形成された高分子の基質の形態、またはインプラントの形態であり得る。高分子の基質はまた、移植可能な医療用装置と例えば、装置の表面上の被覆の形態において、または装置の内部の基質の形態において、関連付けることが可能である。高分子の基質は、生体安定性であることが可能か、生物分解性であることが可能か、または生体安定性の特性および生物分解性の特性の両方を有することが可能である。高分子の基質は、合成のまたは天然の高分子から形成されることが可能である。
【０１１９】
マクロライド微粒子は、医療用装置と関連付けることが可能であり、例えば、医療用装置と関連付けられた高分子の基質において関連付けることが可能である。幾つかの場合において、微粒子を含有している被覆は、医療用物品の表面上に形成されることが可能であり、当該医療用物品は、哺乳動物に、病状の予防または治療のために、一時的にまたは永久に導入されることが可能である。これらの装置は、器官、組織、または器官の内腔の中に、例えば動脈、静脈、心臓の心室、もしくは心房の中に、置くために、皮下に、経皮的に、または外科的に導入されるあらゆるものを含む。
【０１２０】
具体例としての医療用物品は、以下のものを含んでいる：脈管のインプラントおよびグラフト、グラフト、外科的装置；合成の人工器官；内部人工器官、ステントグラフト、および脈管内部のステントの組み合わせを含んでいる、脈管の人工器官；小さな直径のグラフト、腹部大動脈の動脈瘤のグラフト；創傷を手当てする、および創傷を管理する装置；止血作用のある遮蔽物；メッシュおよびヘルニアの詰め物；子宮出血のパッチ、心房中隔欠損（ＡＳＤ）のパッチ、卵円孔開存（ＰＦＯ）のパッチ、心室中隔欠損（ＶＳＤ）のパッチ、および他の一般的な心臓病のパッチを含んでいるパッチ；ＡＳＤ、ＰＦＯ、およびＶＳＤの閉鎖物；経皮的閉鎖の装置、僧帽弁修復の装置；左心耳のフィルター；弁形成術の装置、カテーテル；中心静脈アクセスカテーテル、血管アクセスカテーテル、膿瘍ドレナージカテーテル、薬剤注入カテーテル、非経口的栄養補給カテーテル、静脈内カテーテル（例えば、抗止血剤と共に処理された）、卒中治療カテーテル、血圧およびステントグラフトカテーテル；吻合装置および吻合閉鎖物；動脈瘤排除装置；グルコースセンサーを含んでいる生体センサー；心臓センサー；産児制限装置；乳房インプラント；感染制御装置；膜；組織の足場；組織関連材料；脳脊髄液（ＣＳＦ）シャント、緑内障ドレンシャントを含んでいるシャント；歯科用装置および歯科用インプラント；耳ドレナージチューブ、中耳腔換気用チューブのような耳用装置；眼科用装置；ドレナージチューブカフ、移植薬剤注入チューブカフ、カテーテルカフ、ソーイングカフを含んでいるカフおよび装置のカフ部分；脊髄および神経系の装置；神経再生導管；神経系のカテーテル；神経パッチ；整形外科接合インプラントのような整形外科用装置、骨修復／増大の装置、軟骨修復の装置；泌尿器用装置および泌尿器用インプラントのような尿道の装置、膀胱の装置、腎臓の装置および血液透析の装置、人工肛門バッグ装着の装置；胆汁ドレナージ製品。
【０１２１】
幾つかの様態において、マクロライド微粒子は、バルーンカテーテルと関連しており、例えば、バルーンの表面の一部分または全体を覆う重合体の被覆と関連している。
【０１２２】
バルーンカテーテルの構造は、当該技術において周知であり、下記の種々の文書において記述されている：例えば、米国特許番号４，１９５，６３７、５，０４１，０８９、５，０８７，２４６、５，３１８，５８７、５，３８２，２３４、５，５７１，０８９、５，７７６，１０１、５，８０７，３３１、５，８８２，３３６、６，３９４，９９５、６，５１７，５１５、６，６２３，５０４、６，８９６，８４２、または、７，１６３，５２３である。バルーンカテーテルは、一般に、四つの部分、バルーン、カテーテルの柄、ガイドワイヤーおよび多岐管、を含む。バルーンカテーテルは、一般に、延長されたカテーテルの柄を含み、当該カテーテルの柄は、カテーテルの柄の末端の部分に取り付けられた膨らませることのできるバルーンを有している。カテーテルの柄の基部に近い端部において、通常は多岐管が存在する。多岐管の末端において、ガイドワイヤーを使用して、カテーテルの配置は容易にされることが可能である。ガイドワイヤーは、小さく、動脈の中に挿入されたときに操作しやすい。一旦、ガイドワイヤーが対象の場所へ移動されると、バルーン部分を備えたカテーテルは、その後、バルーンが脈管の中で標的の場所へ到達するまで、ガイドワイヤーによって供給されることが可能である。バルーンは、それから、カテーテルが標的とされた狭窄へ到達したとき、バルーンによって、脈管の拡張を引き起こすために必須の、機械的な力を適応するため、膨らませることが可能である。多岐管はまた、バルーンの膨張のための、柄の中における流体の導入を制御することができる。バルーンは、通常は患者の動脈の内腔の中に挿入され、そして十分に拡張されていない状態において、内腔を通される。
【０１２３】
バルーンは、拡張することが可能であり、且つ体内で用いることに適している、任意の材料または材料の組み合わせから形成されることが可能である。バルーンは、エラストマーから作製されることが可能であり、そしてそれは、弾性特性を有する、熱可塑性の重合体であり得る。具体例としてのエラストマーは、種々の重合体から形成されることが可能であり、当該重合体は、ポリウレタンおよびポリウレタン共重合体、ポリエチレン、スチレン−ブタジエン共重合体、ポリイソプレン、ハロゲン化ブチルゴムを含んでいるイソブチレン−イソプレン共重合体（ブチルゴム）、ブタジエン−スチレン−アクリロニトリル共重合体、シリコーン重合体、フルオロシリコーン重合体、ポリカーボネート、ポリアミド、ポリエステル、ポリ塩化ビニル、ポリエーテル−ポリエステル共重合体、並びにポリエーテル−ポリアミド共重合体を含んでいる。
【０１２４】
バルーンは、単一のエラストマーの材料、または当該材料の組み合わせから作製されることが可能である。バルーンは、弾性のある部分が単層の材料となり得るように、押出し法によって製造されるか、または多層の材料から共押出しされることが可能である。
【０１２５】
弾性のある部分は、本明細書に記載された用途および装置に適切な厚さを有し得る。例えば、弾性のある部分の具体例としての厚さは、約０．００５ｍｍ〜約０．２５ｍｍ、または約０．００５ｍｍ〜約０．１ｍｍ、または約０．００５ｍｍ〜約０．０５ｍｍの範囲である。バルーンの実際の厚さは、例えば、当該バルーンの望ましい柔軟性、カテーテル上のバルーンの総合的なプロファイル（低いプロファイルの装置は、薄い壁のバルーンを使用してもよい）、バルーンの壁に対する圧力の割合、またはバルーンの拡張特性のような、一つ以上の要素に依存してもよい。
【０１２６】
幾つかの様態において、バルーンは、関連付けられるマクロライド微粒子がその上に形成されることが可能であり、当該バルーンは、全体的に滑らかであり、微孔性であり、柔軟であり、弾力のある管状の人工器官の装置であり得、当該装置は、米国特許番号４，６５２，２６３において記述されているような、実質的に非弾力性の織り込まれた構造のチューブから作られている。チューブ外面は、容易に変形させることが可能であり、全体的に滑らかな表面であることが可能であり、当該表面は、糸の間、および糸の繊維の間に、多数の隙間または孔を有している。
【０１２７】
幾つかの実施態様において、バルーンにおける孔は、あらかじめ決められたサイズの開口を有することが可能であり、当該開口は放出され、且つバルーンの表面からのマクロライド微粒子の移動の放出に影響を与える生体適合性の液体にとって適している。幾つかの様態において、上記孔は、約０．００２５ｍｍ〜約２．５ｍｍ、約０．００５ｍｍ〜約１ｍｍ、または約０．０１ｍｍ〜約０．５ｍｍの範囲の大きさを有する。バルーンにおける孔は、任意の形状または形状の組み合わせであることが可能であるが、孔の好ましい形状は円形であり得る。ほかの形状、例えば、楕円形の形状および多角形（三角形、正方形、長方形、六角形）の形状が意図される。
【０１２８】
その上にマクロライド微粒子を含む被覆が形成され得るバルーンは、例えば、Ａｔｒｉｕｍ  Ｍｅｄｉｃａｌから商業的に入手することが可能である（例えば、０．０１４”ガイドワイヤー、６および７Ｆｒのガイドカテーテル、１−４ＡＴＭ注入圧力装置並びに１３４ｃｍのカテーテル作動距離を有している、ＣｌｅａｒＷａｙ（商標）ＲＸ  カテーテル）。
【０１２９】
バルーンは流体を用いて膨らませることが可能であり、当該流体は、膨張ポートを通して注入されることが可能である。バルーンの内部の流体の移動および導入の機構は、カテーテルの特定の設計に従って変化し、そして当該技術において周知である。
【０１３０】
本開示の独創的なマイクロ微粒子に関連した表面を有するバルーンカテーテルは、バルーン血管形成術の処置において使用されることが可能である。バルーン血管形成術は、アテローム性動脈硬化症の狭窄を軽減するための、または閉塞した動脈を再疎通するための、病変した動脈の治療のために、実行されることが可能である。そのような処置において、閉塞した内腔内の通路は、閉塞した部位におけるバルーンの膨張によって、再開されるか、または拡張される。本開示によれば、バルーン部分と関連したマイクロ微粒子を有しているバルーンカテーテルは、経皮的に患者の内腔の通路、例えば、動脈、静脈、または気道、へ挿入されることが可能である。一旦挿入されれば、バルーンは、望まれる治療部位へ進めることが可能であり、そこでは、当該バルーンは内腔内の通路を拡張するために膨張されることが可能である。
【０１３１】
実施の幾つかの様式において、バルーンが膨張すると、バルーンの表面と関連付けられているマイクロ微粒子の少なくとも一部は、標的部位において、管腔の動脈壁の組織に移動される。
【０１３２】
例えば、マイクロ微粒子が、バルーンの表面上の膨張可能な被覆の中に含まれる様態において、バルーンの膨張は、被覆を引き伸ばすことが可能である。バルーンの表面上の被覆は、物理的変化を受けることが可能であり、当該変化は、マクロライド微粒子の放出を促進する。患者の中に挿入したときに、柔軟なヒドロゲル基質の形態である被覆は、より水和されるようになることが可能であり、それは結果として、マクロライド微粒子の周辺の基質材料のゆるみをもたらす。また、（バルーン膨張時の）被覆の引伸ばしは、膨張していない状態におけるバルーン上の被覆よりも、被膜を効果的により薄くなるようにさせることが可能である。加えて、被覆の引伸ばしは、被覆における孔を作ることが可能であり、当該孔から、マクロライド微粒子が漏れ出ることが可能である。被覆の水和、被覆を薄くすることおよび／または孔の作成は、マクロライド微粒子を、バルーン拡張時に被覆から外に出させることが可能である。
【０１３３】
さらに他の実施態様において、開示されたマクロライド微粒子は、哺乳動物への送達のために、種々の重合体（例えば、以下に限定されないが、ポリ（エチレンイミン）およびポリ（ビニルアミン））と関連付けることが可能である。他の用途および組成物は、米国特許出願番号１４／２８０，１７０（発明の名称“ＣＯＭＰＯＳＩＴＩＯＮＳ  ＡＮＤ  ＭＥＴＨＯＤＳ  ＦＯＲ  ＤＥＬＩＶＥＲＹ  ＯＦ  ＨＹＤＲＯＰＨＯＢＩＣ  ＡＣＴＩＶＥ  ＡＧＥＮＴＳ”）に記載されており、その全内容が、本明細書に引用によって組み込まれる。
【０１３４】
実施の幾つかの様式において、移動されるマクロライド微粒子は、標的部位において動脈の組織に付着することが可能である。それ故に、マクロライド微粒子は、標的部位においてマクロライド治療剤を放出することが可能であり、当該マクロライド治療剤は、組織についての治療効果を有している。標的部位におけるマクロライド微粒子は、バルーン膨張の後に、組織の応答を制御するために有用であり得る。例えば、マクロライド微粒子は、シロリムスを放出することが可能であり、当該シロリムスは、膨張した部位において、新生内膜の増殖を阻害することが可能である。
【０１３５】
治療の幾つかの様式において、マクロライド微粒子は、持続的なプロファイルにおいて、標的部位において、マクロライド治療剤を送達するために用いることが可能である。結晶性の形態であるマクロライドを含んでいる上記微粒子は、非晶質の形態であるマクロライドをよりゆっくりと放出することが可能である。治療の幾つかの様式において、マクロライドは、望ましい期間にわたって、上記微粒子から放出されることが可能である。例えば、マクロライド微粒子は、それ自身によって、または任意で微粒子の周囲の賦形剤の材料（例えば、重合体の殻）と関連付けることによって、または医療用装置と関連付けることにおいて、数日間、数週間またはさらに数か月間の期間にわたって、体内において放出されることが可能である。放出のパラメータは、種々の要因によって決定され得、当該要因は、微粒子の特性、組成物または装置における上記微粒子の装填、および組成物または装置の材料（例えば、装置と関連付けられた任意の重合体材料）を含んでいる。
【０１３６】
上記微粒子から放出されたマクロライド治療剤は、特定の疾患の治療のために用いることが可能である。例えば、非抗生物質のマクロライド粒子は、種々の医療の方法、例えば、臓器移植における拒絶を防ぐために免疫抑制活性を提供する方法において用いることが可能である。非抗生物質のマクロライド、例えば、ラパマイシンはまた、組織の応答において炎症、線維症および血栓症と別の方法で関連付けられた過形成および再狭窄を防ぐために用いることが可能である。
【０１３７】
抗生物質のマクロライド粒子は、細菌感染症を治療するために用いることが可能である。例えば、治療は、グラム陽性細菌（例えば、肺炎連鎖球菌（Streptococcus pneumoniae）およびインフルエンザ菌（Haemophilus influenzae））によって引き起こされた感染症を軽減するために実行されることが可能であり、それは、軟部組織および呼吸器官であり得る。抗生物質のマクロライドは、感染症の治療のために用いることが可能であり、当該感染症は、クラミジア属菌、腸球菌、レジオネラニューモフィラ、マイコプラズマ、マイコバクテリア、リケッチア、肺炎球菌、連鎖球菌、およびブドウ球菌のような有機体によって引き起こされる。
【０１３８】
明記されていない全ての試薬の供給源は、シグマ−アルドリッチ（セントルイス、ミズーリ州）から入手可能である。
【０１３９】
〔実施例１〕
１０μｍより小さい平均粒子サイズを有する結晶性のシロリムスの調製
シロリムス（１００ｍｇ；ＬＣラボ、ウォーバーン、マサチューセッツ州から入手可能）をｏ−キシレン（５００μＬ）に加え、そして、当該混合物を、プローブ型音波破砕装置を用いて音波破砕した（それぞれ、２．５の設定、１５秒間を、２回；バーソニック（商標）、ＳＰサイエンティフィック、ウォーミンスター、ペンシルバニア州から入手可能）。混合物を開放的な器において２４時間撹拌し、周辺の温度（〜２５℃）において約１００μＬを残して溶剤が蒸発するのを可能にした。撹拌を中断し、そして残留している溶媒を大気中において蒸発させた。結果として生じた一塊を、周辺の温度（〜２５℃）において、減圧下で２時間、乾燥した（図３）。
【０１４０】
〔実施例２〜６〕
結晶性のシロリムスの調製；空気蒸発
０．５％ｗ／ｗのＢＨＴを含んでいる、シロリムス（５０ｍｇ；ＬＣラボ、ウォーバーン、マサチューセッツ州から入手可能）を、１ｍＬのＨＰＬＣ用の琥珀色の異なるガラス瓶中でｏ−キシレン（２５０μＬ）に加えて、部分的に溶解されたラパマイシンを有するスラリーを生成した。全ての固体が溶解するまで、種々の溶剤を、室温において撹拌しながらゆっくりと混合物に加えた（表３）。溶液を、室温において３日間、乾燥まで、蒸発させるために放置した。結果として生じたケーキを、周辺温度（〜２５℃）において、減圧下で２時間、更に乾燥させた。
【０１４１】
試料のごく一部を、プローブ型音波破砕装置によって、１ｍＬの脱イオン水中に分散させ、そしてレーザー回折（ＣＵＶＥＴＴＥ、シムパテック）によって粒子サイズを解析した。微量の分散液を、顕微鏡用ガラススライド上で乾燥させ、ＳＥＭによって画像を得た（図７〜１１）。体積分布グラフを、図１２〜１６に示す。
【０１４２】
【表２】
0006416242.tif 000004
【０１４３】
【表３】
0006416242.tif 000005
【０１４４】
〔実施例７〕
シロリムス（５０ｍｇ；ＬＣラボ、ウォーバーン、マサチューセッツ州から入手可能）をｏ−キシレン（２５０μＬ）とエタノール（６０μＬ）との混合物に、１ｍＬの琥珀色のガラス瓶中で溶解した。ｏ−キシレンにＢＨＴを１００ｍｇ／ｍＬ含むＢＨＴ溶液２．５μＬを、各々のガラス瓶に加えた。室温にて一晩にわたって撹拌しながら、窒素ガスの流れが溶液の表面上の０ｃｍ、０．５ｃｍまたは２ｃｍのところに配置したガラスピペットを通して、反応ガラス瓶の中へ通過させるようにして、溶剤を蒸発させた。
【０１４５】
試料のごく一部を、プローブ型音波破砕装置によって、１ｍＬの脱イオン水中に分散させ、そしてレーザー回折（ＣＵＶＥＴＴＥ、シムパテック）によって粒子サイズを解析した。微量の分散液を、顕微鏡用ガラススライドの上で乾燥させ、ＳＥＭによって画像を取得した（図１８〜２０）。体積分布グラフを、図２１〜２３に示す。
【０１４６】
【表４】
0006416242.tif 000006
【０１４７】
〔実施例８〕
シロリムス（５００ｍｇ；ＬＣラボ、ウォーバーン、マサチューセッツ州から入手可能）を、ｏ−キシレン（５ｍＬ）とエタノール（１．２ｍＬ）との混合物に、溶解した。ｏ−キシレンにＢＨＴを１００ｍｇ／ｍＬ含むＢＨＴ溶液２．５μＬを加えた。室温にて一晩にわたって撹拌しながら、窒素ガスの流れが溶液の表面上の２ｃｍのところに配置したガラスピペットを通して、約１ＳＣＦＨにおいて、反応ガラス瓶の中へ通過させるようにして、溶剤を蒸発させた。結果として生じたシロリムスの結晶を、真空オーブン内で２時間にわたり、更に乾燥させた。
【０１４８】
試料のごく一部を、プローブ型音波破砕装置によって、１ｍＬの脱イオン水中に分散させ、そしてレーザー回折（ＣＵＶＥＴＴＥ、シムパテック）によって粒子サイズを解析した。微量の分散液を、顕微鏡用ガラススライドの上で乾燥させ、ＳＥＭによって画像を取得した（図２４）。体積分布グラフを、図２５に示す。
【図面の簡単な説明】
【０１４９】
【図１Ａ】図１Ａは、非抗生物質のマクロライドの化学構造を明示している。
【図１Ｂ】図１Ｂは、非抗生物質のマクロライドの化学構造を明示している。
【図１Ｃ】図１Ｃは、非抗生物質のマクロライドの化学構造を明示している。
【図１Ｄ】図１Ｄは、非抗生物質のマクロライドの化学構造を明示している。
【図１Ｅ】図１Ｅは、非抗生物質のマクロライドの化学構造を明示している。
【図１Ｆ】図１Ｆは、非抗生物質のマクロライドの化学構造を明示している。
【図１Ｇ】図１Ｇは、非抗生物質のマクロライドの化学構造を明示している。
【図２】図２は、ラパマイシン粉末の電子顕微鏡写真であり、当該ラパマイシン粉末は、ｏ−キシレンにおけるスラリーの作製と、それに続く撹拌を伴わない溶剤の蒸発とによって得られた。
【図３】図３は、ラパマイシン微粒子の電子顕微鏡写真であり、当該ラパマイシン微粒子は、およそ１．５μｍの平均サイズを有し、且つ本開示の方法（実施例１）を使用することによって調製された。
【図４】図４は、ラパマイシン微粒子を形成するためのステップを含んでいる工程のフローチャートである。
【図５】図５は、サイズ分布のヒストグラムであり、当該ヒストグラムは、２〜４ミクロンの範囲の平均粒子サイズを有しているラパマイシン微粒子のレーザー光散乱解析により作成された。
【図６】図６ａおよび６ｂは、ラパマイシンの非晶質の形態および結晶性の形態のラマンスペクトルである。
【図７】図７Ａ（倍率９．９７Ｋ倍）および図７Ｂ（倍率６９７倍）は、ｏ−キシレンとメタノールとの混合物を使用することにより得られたラパマイシンの結晶性の微粒子の電子顕微鏡写真である。
【図８】図８Ａ（倍率９．９４Ｋ倍）および図８Ｂ（倍率２．００Ｋ倍）は、ｏ−キシレンとエタノールとの混合物を使用することにより得られたラパマイシンの結晶性の微粒子の電子顕微鏡写真である。
【図９】図９Ａ（倍率６．７７Ｋ倍）および図９Ｂ（倍率４８６倍）は、ｏ−キシレンとイソプロパノールとの混合物を使用することにより得られたラパマイシンの結晶性の微粒子の電子顕微鏡写真である。
【図１０】図１０Ａ（倍率１０．５５Ｋ倍）および図Ｂ（倍率９９６倍）は、ｏ−キシレンとアセトンとの混合物を使用することにより得られたラパマイシンの結晶性の微粒子の電子顕微鏡写真である。
【図１１】図１１Ａ（倍率９．９９Ｋ倍）および図１１Ｂ（倍率９４５倍）は、ｏ−キシレンとアセトニトリルとの混合物を使用することにより得られたラパマイシンの結晶性の微粒子の電子顕微鏡写真である。
【図１２】図１２は、図７に示された粒子に対応し、ｏ−キシレンとメタノールとの混合物を使用することにより得られた、ラパマイシンの結晶性の微粒子のレーザー光散乱解析により作成された粒子サイズ分布のヒストグラムである。
【図１３】図１３は、図８に示された粒子に対応し、ｏ−キシレンとエタノールとの混合物を使用することにより得られた、ラパマイシンの結晶性の微粒子のレーザー光散乱解析により作成された粒子サイズ分布のヒストグラムである。
【図１４】図１４は、図９に示された粒子に対応し、ｏ−キシレンとイソプロパノールとの混合物を使用することにより得られた、ラパマイシンの結晶性の微粒子のレーザー光散乱解析により作成された粒子サイズ分布のヒストグラムである。
【図１５】図１５は、図１０に示された粒子に対応し、ｏ−キシレンとアセトンとの混合物を使用することにより得られた、ラパマイシンの結晶性の微粒子のレーザー光散乱解析により作成された粒子サイズ分布のヒストグラムである。
【図１６】図１６は、図１１に示された粒子に対応し、ｏ−キシレンとアセトニトリルとの混合物を使用することにより得られた、ラパマイシンの結晶性の微粒子のレーザー光散乱解析により作成された粒子サイズ分布のヒストグラムである。
【図１７】図１７は、本開示の粒子のＸＲＤスペクトルである。
【図１８】図１８Ａ（倍率２．００Ｋ倍）および図１８Ｂ（倍率１０．００Ｋ倍）は、ラパマイシンの結晶性の微粒子の電子顕微鏡写真であり、当該ラパマイシンの結晶性の微粒子は、ｏ−キシレンとエタノールとの混合物を使用し、且つ溶剤の表面から０ｃｍにおいて窒素の流れを用いて蒸発させることにより得られた。
【図１９】図１９Ａ（倍率２．００Ｋ倍）および図１９Ｂ（倍率１０．００Ｋ倍）は、ラパマイシンの結晶性の微粒子の電子顕微鏡写真であり、当該ラパマイシンの結晶性の微粒子は、ｏ−キシレンとエタノールとの混合物を使用し、且つ溶剤の表面から０．５ｃｍにおいて窒素の流れを用いて蒸発させることにより得られた。
【図２０】図２０Ａ（倍率２．００Ｋ倍）および図２０Ｂ（倍率１０．００Ｋ倍）は、ラパマイシンの結晶性の微粒子の電子顕微鏡写真であり、当該ラパマイシンの結晶性の微粒子は、ｏ−キシレンとエタノールとの混合物を使用し、且つ溶剤の表面から２．５ｃｍにおいて窒素の流れを用いて蒸発させることにより得られた。
【図２１】図２１は、図１８において示された粒子に対応し、ｏ−キシレンとエタノールとの混合物を使用し、且つ溶剤の表面から０ｃｍにおいて窒素の流れを用いて蒸発させることにより得られた、ラパマイシンの結晶性の微粒子のレーザー光散乱解析により作成された粒子サイズ分布のヒストグラムである。
【図２２】図２２は、図１９において示された粒子に対応し、ｏ−キシレンとエタノールとの混合物を使用し、且つ溶剤の表面から０．５ｃｍにおいて窒素の流れを用いて蒸発させることにより得られた、ラパマイシンの結晶性の微粒子のレーザー光散乱解析により作成された粒子サイズ分布のヒストグラムである。
【図２３】図２３は、図２０において示された粒子に対応し、ｏ−キシレンとエタノールとの混合物を使用し、且つ溶剤の表面から２．５ｃｍにおいて窒素の流れを用いて蒸発させることにより得られた、ラパマイシンの結晶性の微粒子のレーザー光散乱解析により作成された粒子サイズ分布のヒストグラムである。
【図２４】図２４は、ラパマイシンの結晶性の微粒子の電子顕微鏡写真であり、当該ラパマイシンの結晶性の微粒子は、ｏ−キシレンとエタノールとの混合物を使用し、且つ溶剤の表面から２ｃｍにおいて窒素の流れを用いて蒸発させることにより得られた。
【図２５】図２５は、図２４に示された、ｏ−キシレンとエタノールとの混合物を使用し、且つ溶剤の表面から２ｃｍにおいて窒素の流れを用いて蒸発させることにより得られた、ラパマイシンの結晶性の微粒子の、レーザー光散乱解析により作成されたサイズ分布のヒストグラムである。
【図１Ａ】
0006416242.tif 000007
【図１Ｂ】
0006416242.tif 000008
【図１Ｃ】
0006416242.tif 000009
【図１Ｄ】
0006416242.tif 000010
【図１Ｅ】
0006416242.tif 000011
【図１Ｆ】
0006416242.tif 000012
【図１Ｇ】
0006416242.tif 000013
【図２】
0006416242.tif 000014
【図３】
0006416242.tif 000015
【図４】
0006416242.tif 000016
【図５】
0006416242.tif 000017
【図６】
0006416242.tif 000018
【図７】
0006416242.tif 000019
【図８】
0006416242.tif 000020
【図９】
0006416242.tif 000021
【図１０】
0006416242.tif 000022
【図１１】
0006416242.tif 000023
【図１２】
0006416242.tif 000024
【図１３】
0006416242.tif 000025
【図１４】
0006416242.tif 000026
【図１５】
0006416242.tif 000027
【図１６】
0006416242.tif 000028
【図１７】
0006416242.tif 000029
【図１８】
0006416242.tif 000030
【図１９】
0006416242.tif 000031
【図２０】
0006416242.tif 000032
【図２１】
0006416242.tif 000033
【図２２】
0006416242.tif 000034
【図２３】
0006416242.tif 000035
【図２４】
0006416242.tif 000036
【図２５】
0006416242.tif 000037