(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
竹から切り分けた枝部分、若しくは幹表皮部分を粉砕して、アルコール若しくはアルコール含有溶媒を用いてメラニン生合成阻害活性抽出物を抽出する工程を備え、
前記幹表皮部分は、竹の節部分を含まないことを特徴とする
メラニン生合成阻害活性抽出物の製造方法。
【請求項２】
竹から切り分けた枝部分を粉砕して、アルコール若しくはアルコール含有溶媒を用いてメラニン生合成阻害活性抽出物を抽出する工程を備える
メラニン生合成阻害活性抽出物の製造方法。
【請求項３】
前記メラニン生合成阻害活性抽出物は、
Ｂ１６メラノーマ細胞の生存率がコントロール値の８０％以上であると共に、メラニン生合成量がコントロール値の６０％未満である
請求項１または請求項２に記載のメラニン生合成阻害活性抽出物の製造方法。
【請求項４】
前記幹表皮部分は、地上高５ｍの幹表皮または地上高１ｍの幹表皮である
請求項１に記載のメラニン生合成阻害活性抽出物の製造方法。
【請求項５】
竹から切り分けた枝部分、若しくは幹表皮部分を粉砕して、アルコール若しくはアルコール含有溶媒を用いてメラニン生合成阻害活性抽出物を抽出する工程を備え、
前記幹表皮部分は、竹の節部分を含まないことを特徴とする
メラニン生合成阻害活性抽出物を有効成分とする美白剤の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はメラニン生合成阻害活性抽出物の製造方法及び美白剤の製造方法に関する。詳しくは、安全性が高く、原料の入手が容易であり、かつメラニン生合成阻害活性抽出物の効率的な抽出が可能な、メラニン生合成阻害活性抽出物の製造方法及び美白剤の製造方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
日本では、肌が白くくすみやシミが無い状態を好む価値観は古くから存在し、「色の白いは七難隠す（色白の女性は、少しぐらい醜い点があっても、目立たない。）」ということわざもあるほどである。
【０００３】
昨今では、メラニンの生成を抑えるための美白化粧品が注目されている。このメラニン生成を阻害する成分は美白成分と呼ばれ、様々な種類がある。
【０００４】
しかし、これらの中には、安全性に問題がある成分もあり、現に昨今のメディアに被害状況が報道された例も記憶に新しい。
【０００５】
このため、安全性が高く、かつ、美白効果を有する化粧品の開発が期待されており、現に特許文献１に示すように、茶葉抽出のポリフェノール成分の色素沈着生成抑制作用を検討した結果、ポリフェノール誘導体であるテアデノールに充分な美白作用が確認されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特開２０１４−８８３６０号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
しかしながら、特許文献１に記載された発明は、微生物発酵茶葉を原料とした微生物発酵抽出物であるため、原料の入手が容易ではなく、また、茶葉のみに着目しているため、植物の茶葉以外の部分（枝、幹、根など）についての検討は行われていなかった。
【０００８】
本発明は、以上の点に鑑みて発明されたものであり、安全性が高く、原料の入手が容易であり、かつメラニン生合成阻害活性抽出物の効率的な抽出が可能な、メラニン生合成阻害活性抽出物の製造方法及び美白剤の製造方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
上記の目的を達成するために、本発明のメラニン生合成阻害活性抽出物は、アルコール若しくはアルコール含有溶媒を用いて、竹から抽出される。
【００１０】
ここで、竹（特に孟宗竹）は、放置竹林が問題となっており、竹の処分には手を焼いているのが現状であり、竹を原料とすることで、原料の入手が比較的容易となる。そのため、本発明者は竹に着目し、放置竹林の問題に対処すると共に、安全なメラニン生合成阻害活性抽出物の抽出を試みたのである。
【００１１】
また、アルコール若しくはアルコール含有溶媒を用いることによって、竹の各部位に含まれる脂溶性の物質が抽出されやすくなる。
【００１２】
また、竹から抽出されることによって、自然由来の天然成分を抽出することとなり、安全性を確保しやすくなる。
【００１３】
また、メラニン生合成阻害活性抽出物が竹の枝部分から抽出された場合には、竹の枝部分には、他の部位よりもメラニン生合成阻害活性抽出物が多く含まれるので、効率的にメラニン生合成阻害活性抽出物を抽出することができる。
【００１４】
また、メラニン生合成阻害活性抽出物が竹の幹表皮部分から抽出された場合には、竹の幹表皮部分には、他の部位よりもメラニン生合成阻害活性抽出物が多く含まれるので、効率的にメラニン生合成阻害活性抽出物を抽出することができる。
【００１５】
また、メラニン生合成阻害活性抽出物の抽出溶媒としてエタノールを用いた場合には、より安全に抽出することができる。
【００１６】
また、上記の目的を達成するために、本発明の美白剤は、竹の枝部分および幹表皮部分の少なくともひとつから抽出されたメラニン生合成阻害活性成分が含まれる。
【００１７】
ここで、竹の枝部分から抽出されたメラニン生合成阻害活性成分が含まれることによって、安全な美白剤を提供することができる。
【００１８】
また、メラニン生合成阻害活性抽出物が竹の枝部分から抽出されることによって、竹の枝部分には、他の部位よりもメラニン生合成阻害活性抽出物が多く含まれるので、効率的にメラニン生合成阻害活性抽出物を抽出することができる。
【００１９】
また、竹の幹表皮部分から抽出されたメラニン生合成阻害活性成分が含まれることによって、安全な美白剤を提供することができる。
【００２０】
また、メラニン生合成阻害活性抽出物が竹の幹表皮部分から抽出されることによって、竹の幹表皮部分には、他の部位よりもメラニン生合成阻害活性抽出物が多く含まれるので、効率的にメラニン生合成阻害活性抽出物を抽出することができる。
【００２１】
なお、竹の枝部分や竹の幹表皮部分からの抽出方法として、アルコール若しくはアルコール含有溶媒を用いる方法が挙げられる。
【００２２】
また、竹の枝部分や竹の幹表皮部分を原料とすることで、その入手が比較的容易である点は、上述の通りである。
【００２３】
また、上記の目的を達成するために、本発明のメラニン生合成阻害活性抽出物の製造方法は、竹の各部位を切り分け、粉砕したものからアルコール若しくはアルコール含有溶媒を用いて抽出する工程を備える。
【００２４】
ここで、竹の各部位を切り分け、粉砕したものから、抽出することによって、安全な天然成分としてのメラニン生合成阻害活性抽出物を調製することができる。
【００２５】
また、アルコール若しくはアルコール含有溶媒を用いて、抽出することによって、脂溶性の物質が抽出されやすくなる。
【００２６】
また、竹の部位を切り分けて、抽出することによって、効率的にメラニン生合成阻害活性抽出物を抽出することができる。
【００２７】
また、竹の枝部分や竹の幹表皮部分を原料とすることで、その入手が比較的容易である点は、上述の通りである。
【発明の効果】
【００２８】
本発明のメラニン生合成阻害活性抽出物の製造方法及び美白剤の製造方法は、安全性が高く、原料の入手が容易であり、かつメラニン生合成阻害活性抽出物の効率的な抽出が可能な方法となっている。
【図面の簡単な説明】
【００２９】
【図１】竹の各部位の位置の説明図である。
【図２Ａ】竹の葉のメタノール抽出物について、メラノーマ細胞の細胞生存率とメラニン生合成量との対比図である。
【図２Ｂ】竹の枝のメタノール抽出物について、メラノーマ細胞の細胞生存率とメラニン生合成量との対比図である。
【図２Ｃ】竹の幹表皮のメタノール抽出物について、メラノーマ細胞の細胞生存率とメラニン生合成量との対比図である。
【図２Ｄ】竹の幹内皮のメタノール抽出物について、メラノーマ細胞の細胞生存率とメラニン生合成量との対比図である。
【図２Ｅ】竹の節のメタノール抽出物について、メラノーマ細胞の細胞生存率とメラニン生合成量との対比図である。
【図２Ｆ】竹の地下茎のメタノール抽出物について、メラノーマ細胞の細胞生存率とメラニン生合成量との対比図である。
【図２Ｇ】竹の根のメタノール抽出物について、メラノーマ細胞の細胞生存率とメラニン生合成量との対比図である。
【図３】竹の抗酸化活性を部位別に表した図である。
【図４】竹の抗菌活性を部位別に表した図である。
【図５】竹の部位別抽出物の持つ生理活性を表した図である。
【発明を実施するための形態】
【００３０】
以下、本発明の実施の形態について図１ないし図５参照しながら説明し、本発明の理解に供する。
【００３１】
〔抽出物の抽出方法〕
本発明を適用したメラニン生合成阻害活性抽出物を得るために、先ず、竹（孟宗竹）を各部位に切り分けた。
【００３２】
具体的には、図１に示す様に、葉、枝、幹表皮（地上高５ｍ）、幹表皮（地上高１ｍ）、幹内皮（地上高５ｍ）、幹内皮（地上高１ｍ）、節（地上高５ｍ）、節（地上高１ｍ）、地下茎、根に切り分けた。
【００３３】
ここで、孟宗竹は、我が国で蓄積量が最も多いため、本発明を適用したメラニン生合成阻害活性抽出物の原料とすることで、原料の調達を容易に行うことができ、かつ、孟宗竹を伐採するため、放置竹林の問題も解消されやすくなる。
【００３４】
また、幹表皮とは、竹の幹表面の緑色の皮部分をいい、約１ｍｍ程度の厚み部分を言い、幹内皮とは、幹表皮の下にある白い部分をいう。
【００３５】
次に、各部位を粉砕して、粉末化し、凍結乾燥した。その後、エタノールを溶媒として、室温にて２００ｒｐｍで４８時間振とう抽出後、エバポレータを使い、減圧濃縮して抽出液を調製することで、本発明を適用したメラニン生合成阻害活性抽出物を得た。
【００３６】
ここで、エタノールを溶媒として抽出することにより、水蒸気蒸留法を用いた場合と異なり、高温、かつ、長時間の煮沸プロセスや、水蒸気蒸留法を用いるための特殊な機材が不要となるため、水蒸気蒸留法よりも簡便に行うことができる。
【００３７】
また、必ずしも溶媒は、エタノールに限るものではなく、アルコールやアルコール含有溶媒であればよい。しかし、利便性の点においてエタノールが望ましい。
【００３８】
また、抽出方法は、他にも熱水抽出方法が考えられるが、図５に示すように、熱水抽出法では、メラニン生合成抽出物を抽出することができなかったため、エタノールを溶媒とした抽出方法にて行った。
【００３９】
また、図５に示す、メラニン生合成を阻害する（メラニン生合成阻害活性を有する）とは、メラニン生合成量がコントロール値と比べて減少した場合をいい、メラニン生合成を促進する（メラニン生合成促進活性を有する）とは、メラニン生合成量がコントロール値と比べて増加した場合をいう。
【００４０】
また、コントロール値とは、竹の各部位からの抽出物が含まれていない培地を計測した際の数値であり、これを１００％として表示したものである。図２Ａ〜Ｇにおいて、竹の各部位との比較として用いるために、各グラフの左端に表示している。
【００４１】
また、ノルマルヘキサン抽出やメタノール抽出は、毒性が強いため、肌に直接塗る美白剤に用いる成分を抽出する方法としては適切ではない。
【００４２】
〔抽出物の生理活性測定〕
本発明を適用したメラニン生合成阻害活性抽出物について、以下の方法で生理活性測定を行った。
【００４３】
先ず、各部位ごとの抽出液を３つの培地に含ませ、それぞれ１２０μｇ／ｍｌ、６０μｇ／ｍｌ、２０μｇ／ｍｌの濃度になるよう調整した。
【００４４】
次に、各部位ごとの培地を、上記の３つの濃度について、Ｂ１６メラノーマ細胞の細胞残存率およびメラニン生合成量を計測した。
【００４５】
図２は、竹の各部位ごとのメタノール抽出物について、メラノーマ細胞の細胞生存率とメラニン生合成量の対比図を示している。なお、図２Ａ〜Ｇ中の白い棒グラフはＢ１６メラノーマ細胞の細胞生存率を示し、図２Ａ〜Ｇ中の黒い棒グラフはメラニン生合成量を示している。
【００４６】
また、各図の左端には、コントロール値、および美白成分であるアルブチンの値も示している。
【００４７】
なお、アルブチン（Ａｒｂｕｔｉｎ）とは、現在有効な美白成分とされている成分の一例としてグラフに表しており、竹の各部位との比較として用いるために、図２Ａ〜Ｇの各グラフ内に表示している。
【００４８】
ここで、メラニン生合成量が高い値を示す場合は、メラニンの生成を促進する成分が含まれていると考えられ、また、メラニン生合成量が低い値を示す場合は、メラニンの生成を阻害する成分が含まれていると考えられる。
【００４９】
また、メラノーマ細胞の細胞生存率が高い値を示す場合は、細胞へのダメージが抑えられ、安全性が高いことを表し、一方、メラノーマ細胞の細胞生存率が低い値を示す場合は、細胞がダメージを受けやすい状態であると考えられるため、安全性が低いことを表す。
【００５０】
これらのことを考え合わせると、Ｂ１６メラノーマ細胞の細胞生存率が高く、メラニン生合成量が低い値を示すものが、肌へのダメージが少ないため安全性が高く、また美白効果が高いと考えられる。以下、各部位ごとに検討する。
【００５１】
図２Ａに示すように、葉の部位のＢ１６メラノーマ細胞の細胞生存率は、３つの濃度のそれぞれについてコントロール値と比較した場合、濃度１２０μｇ／ｍｌにおいて約９０％、濃度６０μｇ／ｍｌにおいて約９５％、濃度２０μｇ／ｍｌにおいて約１００％であり、濃度が低くなるに従い、高い値を示している。
【００５２】
また、葉の部位のメラニン生合成量は、３つの濃度のそれぞれについてコントロール値と比較した場合、濃度１２０μｇ／ｍｌにおいて約１０５％、濃度６０μｇ／ｍｌにおいて約９８％、濃度２０μｇ／ｍｌにおいて約１０２％であり、いずれもコントロール値とほぼ同値であるか、それよりも高い値を示している。
【００５３】
なお、アルブチン値と比較すると、Ｂ１６メラノーマ細胞の細胞生存率は高い値を示すが、メラニン生合成量については、アルブチン値が約３５％であるのに対し、約３倍近い値を示している。
【００５４】
図２Ｂに示すように、枝の部位のＢ１６メラノーマ細胞の細胞生存率は、３つの濃度のそれぞれについてコントロール値と比較した場合、濃度１２０μｇ／ｍｌにおいて約８５％、濃度６０μｇ／ｍｌにおいて約９０％、濃度２０μｇ／ｍｌにおいて約８８％であり、いずれの濃度においてもコントロール値より低い値を示している。
【００５５】
また、枝の部位のメラニン生合成量は、３つの濃度のそれぞれについてコントロール値と比較した場合、濃度１２０μｇ／ｍｌにおいて約５５％、濃度６０μｇ／ｍｌにおいて約７５％、濃度２０μｇ／ｍｌにおいて約８５％である。いずれもコントロール値と比べて低い値を示し、特に濃度１２０μｇ／ｍｌで最も低い値を示している。
【００５６】
なお、アルブチン値と比較すると、Ｂ１６メラノーマ細胞の細胞生存率について低い値を示すが、メラニン生合成量については、アルブチン値が約４５％であるのに対し、濃度１２０μｇ／ｍｌにおいて約５５％である。
【００５７】
図２Ｃに示すように、幹表皮（地上高５ｍ）の部位のＢ１６メラノーマ細胞の細胞生存率は、３つの濃度のそれぞれについてコントロール値と比較した場合、濃度１２０μｇ／ｍｌにおいて約８５％、濃度６０μｇ／ｍｌにおいて約１００％、濃度２０μｇ／ｍｌにおいて約１１５％であり、濃度が低くなるに従い、高い値を示している。
【００５８】
また、幹表皮（地上高５ｍ）の部位のメラニン生合成量は、３つの濃度のそれぞれについてコントロール値と比較した場合、濃度１２０μｇ／ｍｌにおいて約４３％、濃度６０μｇ／ｍｌにおいて約７５％、濃度２０μｇ／ｍｌにおいて約１０５％である。濃度１２０μｇ／ｍｌ、濃度６０μｇ／ｍｌにおいては、コントロール値と比べて低い値を示しており、特に濃度１２０μｇ／ｍｌにおいては、最も低い高い値を示している。
【００５９】
なお、アルブチン値と比較すると、Ｂ１６メラノーマ細胞の細胞生存率については、濃度１２０μｇ／ｍｌにおいて、アルブチン値よりもやや低い値を示しているが、メラニン生合成量については、アルブチン値とほぼ同等の値を示している。
【００６０】
図２Ｃに示すように、幹表皮（地上高１ｍ）の部位のＢ１６メラノーマ細胞の細胞生存率は、３つの濃度のそれぞれについてコントロール値と比較した場合、濃度１２０μｇ／ｍｌにおいて約１２５％、濃度６０μｇ／ｍｌにおいて約１１０％、濃度２０μｇ／ｍｌにおいて約１２５％であり、全ての濃度においてコントロール値よりも非常に高い値を示している。
【００６１】
また、幹表皮（地上高１ｍ）の部位のメラニン生合成量は、３つの濃度のそれぞれについてコントロール値と比較した場合、濃度１２０μｇ／ｍｌにおいて約５０％、濃度６０μｇ／ｍｌにおいて約８０％、濃度２０μｇ／ｍｌにおいて約１１５％である。濃度１２０μｇ／ｍｌ、濃度６０μｇ／ｍｌにおいては、コントロール値と比べて低い値を示しているが、濃度２０μｇ／ｍｌにおいては、コントロール値よりも高い値を示している。
【００６２】
なお、アルブチン値と比較すると、メラニン生合成量については、濃度１２０μｇ／ｍｌにおいてアルブチン値とほぼ同等の値を示すと共に、Ｂ１６メラノーマ細胞の細胞生存率については、アルブチン値よりも高い値を示している。
【００６３】
また、濃度６０μｇ／ｍｌにおいても、メラニン生合成量はアルブチン値よりも高い値を示すが、コントロール値よりも低い値であり、Ｂ１６メラノーマ細胞の細胞生存率については、アルブチン値およびコントロール値よりも高い値を示している。
【００６４】
なお、竹の幹表皮であれば、美白成分が含まれると考えられるので、幹表皮の採取地点は、地上高５ｍに限られるものではない。なお、詳細な調査の結果、地上高５ｍ若しくは、１ｍが好ましいと考える。
【００６５】
図２Ｄに示すように、幹内皮（地上高５ｍ）の部位のＢ１６メラノーマ細胞の細胞生存率は、３つの濃度のそれぞれについてコントロール値と比較した場合、濃度１２０μｇ／ｍｌにおいて約９９％、濃度６０μｇ／ｍｌにおいて約８８％、濃度２０μｇ／ｍｌにおいて約９５％であり、全ての濃度においてコントロール値よりも低い値を示しており、特に濃度６０μｇ／ｍｌでの値が最も低い。
【００６６】
また、幹内皮（地上高５ｍ）の部位のメラニン生合成量は、３つの濃度のそれぞれについてコントロール値と比較した場合、濃度１２０μｇ／ｍｌにおいて約１１０％、濃度６０μｇ／ｍｌにおいて約１０５％、濃度２０μｇ／ｍｌにおいて約１０３％である。全ての濃度において、コントロール値と比べて高い値を示している。
【００６７】
なお、アルブチン値と比較すると、メラニン生合成量については、全ての濃度においてアルブチン値よりも高い値を示している。Ｂ１６メラノーマ細胞の細胞生存率については、アルブチン値とほぼ同値、若しくは高い値を示している。
【００６８】
図２Ｄに示すように、幹内皮（地上高１ｍ）の部位のＢ１６メラノーマ細胞の細胞生存率は、３つの濃度のそれぞれについてコントロール値と比較した場合、濃度１２０μｇ／ｍｌにおいて約１０５％、濃度６０μｇ／ｍｌにおいて約１０５％、濃度２０μｇ／ｍｌにおいて約１００％であり、全ての濃度においてコントロール値と同等、若しくはやや高い値を示している。
【００６９】
また、幹内皮（地上高１ｍ）の部位のメラニン生合成量は、３つの濃度のそれぞれについてコントロール値と比較した場合、濃度１２０μｇ／ｍｌにおいて約１４０％、濃度６０μｇ／ｍｌにおいて約１５０％、濃度２０μｇ／ｍｌにおいて約１３５％である。全ての濃度において、コントロール値と比べて非常に高い値を示している。
【００７０】
なお、アルブチン値と比較すると、メラニン生合成量については、全ての濃度においてアルブチン値よりも非常に高い値を示している。Ｂ１６メラノーマ細胞の細胞生存率については、アルブチン値よりも高い値を示している。
【００７１】
図２Ｅに示すように、節（地上高５ｍ）の部位のＢ１６メラノーマ細胞の細胞生存率は、３つの濃度のそれぞれについてコントロール値と比較した場合、濃度１２０μｇ／ｍｌにおいて約９５％、濃度６０μｇ／ｍｌにおいて約９３％、濃度２０μｇ／ｍｌにおいて約９５％であり、全ての濃度においてコントロール値よりもやや低い値を示している。
【００７２】
また、節（地上高５ｍ）の部位のメラニン生合成量は、３つの濃度のそれぞれについてコントロール値と比較した場合、濃度１２０μｇ／ｍｌにおいて約１００％、濃度６０μｇ／ｍｌにおいて約１０５％、濃度２０μｇ／ｍｌにおいて約１００％である。全ての濃度において、コントロール値とほぼ同値、若しくはやや高い値を示している。
【００７３】
なお、アルブチン値と比較すると、メラニン生合成量については、全ての濃度においてアルブチン値よりも非常に高い値を示している。Ｂ１６メラノーマ細胞の細胞生存率については、アルブチン値よりも高い値を示している。
【００７４】
図２Ｅに示すように、節（地上高１ｍ）の部位のＢ１６メラノーマ細胞の細胞生存率は、３つの濃度のそれぞれについてコントロール値と比較した場合、濃度１２０μｇ／ｍｌにおいて約１０２％、濃度６０μｇ／ｍｌにおいて約１００％、濃度２０μｇ／ｍｌにおいて約１００％であり、全ての濃度においてコントロール値とほぼ同等、若しくはわずかに高い値を示している。
【００７５】
また、節（地上高１ｍ）の部位のメラニン生合成量は、３つの濃度のそれぞれについてコントロール値と比較した場合、濃度１２０μｇ／ｍｌにおいて約１３５％、濃度６０μｇ／ｍｌにおいて約１２０％、濃度２０μｇ／ｍｌにおいて約１１０％である。全ての濃度において、コントロール値よりも高い値を示している。
【００７６】
なお、アルブチン値と比較すると、メラニン生合成量については、全ての濃度においてアルブチン値よりも非常に高い値を示している。Ｂ１６メラノーマ細胞の細胞生存率については、アルブチン値よりも高い値を示している。
【００７７】
図２Ｆに示すように、地下茎の部位のＢ１６メラノーマ細胞の細胞生存率は、３つの濃度のそれぞれについてコントロール値と比較した場合、濃度１２０μｇ／ｍｌにおいて約１２０％、濃度６０μｇ／ｍｌにおいて約１１８％、濃度２０μｇ／ｍｌにおいて約１１５％であり、全ての濃度においてコントロール値よりも非常高い値を示している。
【００７８】
また、地下茎の部位のメラニン生合成量は、３つの濃度のそれぞれについてコントロール値と比較した場合、濃度１２０μｇ／ｍｌにおいて約１４０％、濃度６０μｇ／ｍｌにおいて約１４２％、濃度２０μｇ／ｍｌにおいて約１２０％である。全ての濃度において、コントロール値よりも非常に高い値を示している。
【００７９】
なお、アルブチン値と比較すると、メラニン生合成量については、全ての濃度においてアルブチン値よりも非常に高い値を示している。Ｂ１６メラノーマ細胞の細胞生存率については、アルブチン値よりも高い値を示している。
【００８０】
図２Ｇに示すように、根の部位のＢ１６メラノーマ細胞の細胞生存率は、３つの濃度のそれぞれについてコントロール値と比較した場合、濃度１２０μｇ／ｍｌにおいて約９０％、濃度６０μｇ／ｍｌにおいて約８８％、濃度２０μｇ／ｍｌにおいて約１０５％であり、濃度１２０μｇ／ｍｌ、濃度６０μｇ／ｍｌにおいてコントロール値よりも低い値を示している。
【００８１】
また、根の部位のメラニン生合成量は、３つの濃度のそれぞれについてコントロール値と比較した場合、濃度１２０μｇ／ｍｌにおいて約１１８％、濃度６０μｇ／ｍｌにおいて約１２５％、濃度２０μｇ／ｍｌにおいて約１１０％である。全ての濃度において、コントロール値よりも非常に高い値を示している。
【００８２】
なお、アルブチン値と比較すると、メラニン生合成量については、全ての濃度においてアルブチン値よりも非常に高い値を示している。Ｂ１６メラノーマ細胞の細胞生存率については、アルブチン値よりも濃度１２０μｇ／ｍｌ、濃度６０μｇ／ｍｌにおいて低い値を示しているが、濃度２０μｇ／ｍｌにおいてはアルブチン値よりも高い値を示している。
【００８３】
以上のように、竹の各部位ごとの抽出物を詳細に分析した結果、Ｂ１６メラノーマ細胞の細胞生存率が高い部位と、Ｂ１６メラノーマ細胞の細胞生存率が低い部位があり、メラニン生合成阻害活性を有している部位とメラニン生合成促進活性を有している部位があることが分かる。
【００８４】
そして、各部位の中でも、Ｂ１６メラノーマ細胞の細胞生存率が高く、かつ、メラニン生合成阻害活性を有している部位は、幹表皮（地上高５ｍ及び１ｍ）部分、枝部分であることが明らかになった。
【００８５】
したがって、これらの部分から抽出された抽出物は、肌へのダメージが少ないため安全性が高く、また、メラニン生合成が阻害されるので、美白剤に適していると言える。
【００８６】
また、幹表皮（地上高５ｍ及び１ｍ）部分および枝部分のみから、本発明を利用したメラニン生合成阻害活性抽出物を抽出することで、メラニン生合成促進活性抽出物を含むことなく、より効率的にメラニン生合成阻害活性抽出物のみを抽出することができる。
【００８７】
なお、メラニン生合成阻害活性を有している部位から美白効果を有する成分を抽出する場合には、幹表皮（地上高５ｍ及び１ｍ）部分、枝部分以外の部位が含まれていてもよい。
【００８８】
ただし、美白効果を有しないメラニン生合成促進活性を有している部位（幹内皮（１ｍ）や節（１ｍ）、地下茎、根の部分など）は含まないようにする必要がある。メラニン生合成阻害活性による美白効果が薄れることが考えられるからである。
【００８９】
また、本発明を適用したメラニン生合成阻害活性抽出物について、抗酸化、抗菌についても生理活性の評価を行った。
【００９０】
〔抗酸化活性について〕
抗酸化活性は、肌のハリやつやなどを低下させ、肌の老化を進める過酸化脂質の元となる活性酸素を消去する。皮膚老化を防ぐという観点から、美白効果と並び重要視される成分である。
【００９１】
抗酸化活性は、ＯＲＡＣ（Ｏｘｙｇｅｎ  Ｒａｄｉｃａｌ  Ａｂｓｏｒｂａｎｃｅ  Ｃａｐａｃｉｔｙ）法、ＳＯＤ（Ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ  Ｄｉｓｍｕｔａｓｅ）様活性、ＡＢＴＳ（２，２'−ａｚｉｎｏ−ｂｉｓ（３−ｅｔｈｙｌｂｅｎｚｏｔｈｉａｚｏｌｉｎｅ−６−ｓｕｌｐｈｏｎｉｃａｃｉｄ））から評価した。
【００９２】
図３は、竹の抗酸化活性を部位別に表した図であるが、図３に示すように、メラニン生合成阻害成分が多く含まれ、かつ、細胞生存率が高い値を示した部位（幹表皮（地上高５ｍ及び１ｍ）部分、枝部分）の中で、相対ＯＲＡＣ値について最も高い値を示したのは、枝部分の「０．６９±０．０４（ｍｇＴＥ／ｍｇ）」である。
【００９３】
なお、図５で示すように、抗酸化活性がみられた部位は、枝、幹内皮（地上高５ｍ）、幹内皮（地上高１ｍ）および地下茎である。これらの部位の欄に、「○」を付して示している。
【００９４】
また、図５において○が付された部位は、相対ＯＲＡＣ値が０．５ｍｇＴＥ／ｍｇ以上、ＳＯＤ様活性、ＡＢＴＳラジカル消去活性でＩＣ５０が検出できた部位である。
【００９５】
以上のことから、枝部分からエタノールを溶媒として抽出すれば、メラニン生合成阻害成分による美白効果、細胞生存率の高さから皮膚への安全性に加え、抗酸化機能が付加された美白剤の実現が可能であることが分かる。
【００９６】
なお、抗酸化作用を有する成分を抽出する場合には、枝部分以外の部位が含まれていてもよい。ただし、抗酸化作用を阻害する成分が含まない部位であることが必要である。抗酸化作用の効果が薄れることが考えられるからである。
【００９７】
〔抗菌活性について〕
抗菌活性は、皮膚表面の常在菌である、アレルギーの原因となる菌の増殖を防ぐ。この様に菌の増殖を防ぐという観点から、美白効果と並び重要視される成分である。
【００９８】
抗菌活性は、黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ）の増殖に与える影響から評価した。
【００９９】
図４は、竹の抗菌活性を部位別に表した図である。図４中の左端の１％ＤＭＳＯは、溶媒であり、コントロール値として表示されている。また、ソルビン酸を１％ＤＭＳＯに加えた棒グラフも併せて表示されており、実験系が正常に動いているかを確認するためのものである。また、竹の各部位と共にカッコ書きで示された数字は、抽出物の濃度（μｇ／ｍｌ）を示している。
【０１００】
図４に示すように、メラニン生合成阻害成分が多く含まれ、かつ、細胞生存率が高い値を示した部位（幹表皮（地上高５ｍ及び１ｍ）部分、枝部分）の中で、最も低い値を示したのは、幹表皮部分であり、特に幹表皮（地上高１ｍ）部分については、ほとんど検出されなかった。
【０１０１】
なお、図５において、抗菌活性がみられた部位の欄には、「○」を付して示している。
【０１０２】
また、図５において○が付された部位は、黄色ブドウ球菌の増殖がコントロール値（１％ＤＭＳＯ）と比べて有意に低下していた部位である。
【０１０３】
以上のことから、幹表皮部分（特に地上高１ｍの部分）を材料としてエタノールを溶媒として抽出すれば、メラニン生合成阻害成分を化粧品に含有させた場合に、抗菌機能を付加できることが分かる。
【０１０４】
なお、抗菌作用を有する成分を抽出する場合には、幹表皮部分以外の部位が含まれていてもよい。ただし、抗菌作用を阻害する成分を含まない部位であることが必要である。抗菌作用の効果が薄れることが考えられるからである。
【０１０５】
〔抽出物を用いた化粧品について〕
以上述べたように、竹は部位ごとに異なる生理活性を有するので、幹表皮（地上高５ｍ及び１ｍ）部分、枝部分から抽出した抽出物を用いれば、美白効果を有する、安全な化粧品を効率よく製造することができる。
【０１０６】
また、抗酸化成分は枝部分に多く含まれているので、美白効果および安全性を有する化粧品について、さらに抗酸化作用を強めたい場合には、原料を竹の枝部分のみに限定することで、美白効果に加えて、抗酸化機能をも含む、多機能な化粧品を作ることができる。
【０１０７】
また、抗菌成分は幹表皮部分に多く含まれているので、美白効果および安全性を有する化粧品について、さらに抗菌作用を強めたい場合には、原料を竹の幹表皮部分のみに限定することで、美白効果に加えて、抗菌機能をも含む、多機能な化粧品を作ることができる。
【０１０８】
また、枝部分と幹表皮部分の双方から抽出した抽出物を用いれば、美白効果に加えて、抗酸化作用および抗菌作用を有する、多機能な化粧品を製造することができる。
【０１０９】
このように、本発明のメラニン生合成阻害活性抽出物の製造方法及び美白剤の製造方法は、安全性が高く、原料の入手が容易であり、かつメラニン生合成阻害活性抽出物の効率的な抽出が可能な方法となっている。
【図１】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図２Ｃ】
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【図２Ｄ】
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【図２Ｅ】
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【図２Ｆ】
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【図２Ｇ】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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