(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
銅を含有する酵母を、抽出促進剤を含む溶液に懸濁させるか、又は銅を含有する酵母を懸濁させた溶液に抽出促進剤を添加及び混合し、得られた懸濁液のｐＨを７．０〜１１．０に調整し、加熱した後、固体成分と液体成分とを分離し、液体成分を得る抽出工程を含み、
前記抽出促進剤が、酵母エキスであることを特徴とする銅含有酵母抽出物の製造方法。
【請求項２】
下記式で表される銅の抽出率が、５０％以上である請求項１に記載の銅含有酵母抽出物の製造方法。
銅抽出率（％）＝｛抽出物中の銅全量（質量）／抽出に用いた酵母に含まれる銅全量（質量）｝×１００
【請求項３】
銅を含有する酵母を、抽出促進剤を含む溶液に懸濁させるか、又は銅を含有する酵母を懸濁させた溶液に抽出促進剤を添加及び混合し、得られた懸濁液のｐＨを７．０〜１１．０に調整し、加熱した後、固体成分と液体成分とを分離し、液体成分を得る抽出工程、及び
前記液体成分を食品に添加する添加工程を含み、
前記抽出促進剤が、酵母エキスであることを特徴とする食品の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、銅含有酵母抽出物及びその製造方法、並びに食品に関する。
【背景技術】
【０００２】
銅は、近時の厚生労働省が発表したデータによると成人男性での１日の推定平均必要量としては約０．７ｍｇ（成人女性では約０．６ｍｇ）とされており、生体内で欠乏すると、貧血や心臓疾患等を引き起こす可能性がある（非特許文献１参照）。このため、銅を効率良く生体内に摂取乃至吸収することができ、銅欠乏による貧血、心臓疾患等を改善し得る流動食、飲料等の安全な食品素材の開発が必要である。
一方、酵母は古くから人類が食品素材として利用しており、例えば、ビール酵母が食物繊維、ビタミンあるいはミネラル分の供給源としても用いられてきた。特に菌体内に銅を取り込ませた酵母（銅含有酵母）又はその抽出物は、銅を補強した安全な食品素材として利用可能であると考えられる。
しかしながら、従来の銅含有酵母においては、酵母臭等の独特の臭い及び酵母味等の独特の味が十分に低減されていないため、食品としての用途においては十分満足いくものではなかった。
【０００３】
上記問題を解決するため、前記銅含有酵母から抽出された銅含有酵母抽出物とすることが考えられる。これまで、銅等のミネラル含有酵母からの抽出には、（１）熱水抽出法、（２）自己消化法、（３）酵素分解法などが用いられてきた（非特許文献２参照）。しかしながら、前記（１）〜（３）の方法では、ミネラルの回収率（以下、「抽出率」と称することがある）が低いという問題があった。ミネラルの中でも、特に銅の抽出率は低く、その抽出率を高めることができる技術の開発が強く求められている。
【０００４】
銅の抽出率を高める方法としては、カルボン酸及びカルボン酸塩の少なくともいずれかを用いる方法が提案されている（例えば、特許文献１参照）。前記提案によれば、高い抽出率で銅を抽出することができるものの、食品用途に用いる観点からは、前記提案と同等の銅抽出率を有し、より食品用途に適した素材による抽出方法が求められているのが現状である。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】「日本人の食事摂取基準  ２０１０年版」  厚生労働省「日本人の食事摂取基準」策定検討会報告書、第一出版株式会社、ｐ．２３１−ｐ．２３３、付録ＸＬＩＸ（２０１０年）
【非特許文献２】杉本  洋  「酵母エキス製造法の変遷（Ｉ）−国内の特許出願の傾向から−」  Ｎｅｗ  Ｆｏｏｄ  Ｉｎｄｕｓｔｒｙ  １９９４，  Ｖｏｌ．３６，  Ｎｏ．１０，  ｐ．４１−４８
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】国際公開第２０１３／１４６４６５号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、このような要望に応え、現状を打破し、従来における前記諸問題を解決し、以下の目的を達成することを課題とする。即ち、本発明は、銅を含有する酵母から、高い抽出率で銅を抽出することができ、食品用途により適した銅含有酵母抽出物の製造方法、該製造方法により得られる銅含有酵母抽出物、及び該銅含有酵母抽出物を含む食品を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
前記課題を解決するための手段としては、以下の通りである。即ち、
＜１＞  銅を含有する酵母を、抽出促進剤を含む溶液に懸濁させるか、又は銅を含有する酵母を懸濁させた溶液に抽出促進剤を添加及び混合し、得られた懸濁液の固体成分と液体成分とを分離する抽出工程を含み、
前記抽出促進剤が、ペプチド及びタンパク質の少なくともいずれかを含む（ただし、アミノ酸のみからなる場合を除く）ことを特徴とする銅含有酵母抽出物の製造方法である。
＜２＞  抽出促進剤が、酵母エキスである前記＜１＞に記載の銅含有酵母抽出物の製造方法である。
＜３＞  下記式で表される銅の抽出率が、５０％以上である前記＜１＞から＜２＞のいずれかに記載の銅含有酵母抽出物の製造方法である。
銅抽出率（％）＝｛抽出物中の銅全量（質量）／抽出に用いた酵母に含まれる銅全量（質量）｝×１００
＜４＞  抽出工程の前に、酵母を６０℃〜１２０℃の熱水に懸濁させ、得られた懸濁液の固体成分と液体成分とを分離する熱水処理工程を含む前記＜１＞から＜３＞のいずれかに記載の銅含有酵母抽出物の製造方法である。
＜５＞  前記＜１＞から＜４＞のいずれかに記載の銅含有酵母抽出物の製造方法により製造されたことを特徴とする銅含有酵母抽出物である。
＜６＞  酵母が、食用酵母である前記＜５＞に記載の銅含有酵母抽出物である。
＜７＞  食用酵母が、パン酵母、ビール酵母、ワイン酵母、清酒酵母及び味噌醤油酵母から選択される少なくとも１種である前記＜６＞に記載の銅含有酵母抽出物である。
＜８＞  食用酵母が、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅである前記＜７＞に記載の銅含有酵母抽出物である。
＜９＞  食品に添加されて用いられる前記＜５＞から＜８＞のいずれかに記載の銅含有酵母抽出物である。
＜１０＞  前記＜５＞から＜９＞のいずれかに記載の銅含有酵母抽出物を含むことを特徴とする食品である。
【発明の効果】
【０００９】
本発明によると、従来における前記問題を解決することができ、銅を含有する酵母から、高い抽出率で銅を抽出することができ、食品用途により適した銅含有酵母抽出物の製造方法、該製造方法により得られる銅含有酵母抽出物、及び該銅含有酵母抽出物を含む食品を提供することができる。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
（銅含有酵母抽出物の製造方法）
本発明の銅含有酵母抽出物の製造方法は、抽出工程を含み、更に必要に応じて、熱水処理工程、乾燥工程などのその他の工程を含む。
【００１１】
＜抽出工程＞
前記抽出工程は、銅を含有する酵母を、抽出促進剤を含む溶液に懸濁させるか、又は銅を含有する酵母を懸濁させた溶液に抽出促進剤を添加及び混合し、得られた懸濁液の固体成分と液体成分とを分離する工程である。前記抽出工程により、銅を含有する液体成分（以下、「抽出液」と称することがある）を得ることができる。
【００１２】
＜＜酵母＞＞
前記酵母は、菌体内に銅を含んでいる限り、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。前記酵母における銅含有量としては、銅含有酵母抽出物を銅強化食品素材等として用いる場合には多いほど好ましいが、酵母における銅の取込みの限界、及び銅含有酵母抽出物を効率的に製造する観点からは、乾燥菌体質量当たり０．０１質量％〜１０質量％が好ましく、０．５質量％〜２質量％がより好ましい。
【００１３】
ここで、前記銅含有量とは、酵母菌体内における銅含有量を指し、例えば、水等で洗浄した菌体であっても、洗浄後においても銅含有量が高く維持されることが好ましい。このような酵母は、洗浄を行っても該銅は除去されず菌体内部に保持されたままであるので、菌体由来の銅であって安全性が高く、酵母特有の臭いや味を低減するための熱水処理（洗浄）を行った場合に、添加した食品の風味等を損なうことがなく、しかも銅を高濃度含有しているので、食品素材等として好適である。
なお、前記酵母における銅含有量は、公知の方法で測定することができ、例えば、原子吸光法により測定することができる。
【００１４】
前記銅を含有する酵母は、培養液に銅を添加して酵母を培養することにより、酵母菌体内に銅を取り込ませて作製してもよいし、市販品を用いてもよい。市販品としては、例えば、ミネラル酵母銅１．１％、イーストミネラル銅（以上、オリエンタル酵母工業株式会社製）などが挙げられる。
【００１５】
前記銅を含有する酵母は、更に、破砕されていてもよい。前記酵母が破砕物である場合でも、銅含有量が多いほど好ましく、破砕物を水等で洗浄した沈殿画分における乾燥菌体質量当たりの銅含有量が、破砕を行う前の菌体における乾燥菌体質量当たりの銅含有量の７０質量％以上が好ましく、８０質量％以上がより好ましく、９０質量％以上が特に好ましい。
【００１６】
なお、前記破砕の方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、物理的破砕処理であってもよいし、化学的破砕処理であってもよく、具体的には、０．５ｍｍ径のビーズをシリンダーに５０容量％充填したダイノミルを用いる方法などが好適に挙げられる。
【００１７】
また、前記銅を含有する酵母の態様としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、湿菌体の態様、粉末の態様などが挙げられる。
【００１８】
前記酵母は、銅以外に、更にその他のミネラル成分を含有していてもよく、該ミネラル成分としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、鉄、マグネシウム、マンガン、亜鉛などが挙げられる。これらのミネラル成分は、酵母中に、１種単独で含まれていてもよいし、２種以上含まれていてもよく、また、含まれている濃度としては、目的に応じて異なり一概に規定することはできないが、一般に高濃度であることが好ましい。
【００１９】
前記酵母としては、前記銅含有酵母抽出物を食品素材等として用いる場合には、食用酵母であることが特に好ましい。
前記食用酵母としては、特に制限はなく、公知のものの中から選択することができ、例えば、パン酵母、ビール酵母、ワイン酵母、清酒酵母、味噌醤油酵母などが挙げられる。これらの中でも、パン酵母が特に好ましい。
【００２０】
前記食用酵母の菌株としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、サッカロミセス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）属、トルロプシス（Ｔｏｒｕｌｏｐｓｉｓ）属、ミコトルラ（Ｍｙｃｏｔｏｒｕｌａ）属、トルラスポラ（Ｔｏｒｕｌａｓｐｏｒａ）属、キャンディダ（Ｃａｎｄｉｄａ）属、ロードトルラ（Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ）属、ピキア（Ｐｉｃｈｉａ）属などが挙げられる。
【００２１】
前記食用酵母の菌株の具体例としては、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃａｒｌｓｂｅｒｇｅｎｓｉｓ、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｕｖａｒｕｍ、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｒｏｕｘｉｉ、Ｔｏｒｕｌｏｐｓｉｓ ｕｔｉｌｉｓ、Ｔｏｒｕｌｏｐｓｉｓ ｃａｎｄｉｄａ、Ｍｙｃｏｔｏｒｕｌａ ｊａｐｏｎｉｃａ、Ｍｙｃｏｔｏｒｕｌａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ、Ｔｏｒｕｌａｓｐｏｒａ ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ、Ｔｏｒｕｌａｓｐｏｒａ ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉ、Ｃａｎｄｉｄａ ｓａｋｅ、Ｃａｎｄｉｄａ ｔｒｏｐｉｃａｌｉｓ、Ｃａｎｄｉｄａ ｕｔｉｌｉｓ、Ｈａｎｓｅｎｕｌａ ａｎｏｍａｌａ、Ｈａｎｓｅｎｕｌａ ｓｕａｖｅｏｌｅｎｓ、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｏｐｓｉｓ ｆｉｂｌｉｇｅｒａ、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ、Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ ｒｕｂｒａ、Ｐｉｃｈｉａ ｆａｒｉｎｏｓａなどが挙げられる。
これらの中でも、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃａｒｌｓｂｅｒｇｅｎｓｉｓが好ましく、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅが特に好ましい。
【００２２】
＜＜抽出促進剤を含む溶液＞＞
前記抽出促進剤を含む溶液は、抽出促進剤を少なくとも含み、更に必要に応じてその他の成分を含む。
前記抽出促進剤を含む溶液は、前記抽出促進剤を溶媒に添加して調製してもよいし、銅を含有する酵母を懸濁させた溶液に前記抽出促進剤を添加及び混合して調製してもよい。
【００２３】
−抽出促進剤−
前記抽出促進剤は、ペプチド及びタンパク質の少なくともいずれかを含む。従って、前記抽出促進剤がアミノ酸のみからなる場合は、本発明の実施形態から除かれる。
前記抽出促進剤は、ペプチド及びタンパク質の少なくともいずれかのみからなるものであってもよいし、その他の成分を含むものであってもよい。
【００２４】
前記ペプチドとは、５０アミノ酸未満の長さで、分子量が１，０００〜６，０００未満のポリペプチド及び２〜１０アミノ酸の長さで、分子量が１，０００未満のオリゴペプチドをいう。
【００２５】
前記タンパク質とは、５０アミノ酸以上の長さで、分子量が６，０００以上のポリペプチドをいう。
【００２６】
前記抽出促進剤におけるペプチド及びタンパク質の少なくともいずれかの含有量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、１０質量％〜９０質量％が好ましい。
前記ペプチド及びタンパク質の定量方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ケルダール法、ローリー法、Ｂｒａｄｆｏｒｄ法などが挙げられる。
【００２７】
前記抽出促進剤は、ペプチドを主として含有するものが好ましく、オリゴペプチドを主として含有し、さらにポリペプチド及びタンパク質の少なくともいずれかを含むものがより好ましい。また、前記抽出促進剤は、アミノ酸の混合物を含有していてもよい。
【００２８】
前記抽出促進剤におけるその他の成分としては、本発明の効果を損なわない限り、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、酵母エキスに含まれる核酸などが挙げられる。
前記抽出促進剤におけるその他の成分の含有量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
【００２９】
前記抽出促進剤としては、酵母エキスが好ましい。
前記酵母エキスとしては、ペプチド及びタンパク質の少なくともいずれかを含む限り、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
【００３０】
前記酵母エキスの総核酸量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、３．０質量％〜１０．０質量％が好ましく、５．０質量％〜７．０質量％がより好ましく、６．０質量％超７．０質量％未満が特に好ましい。前記好ましい範囲内であると、銅抽出率がより優れる点で、有利である。
前記酵母エキスの総核酸量は、前記酵母エキスを１０質量％含有する水溶液を調製し、波長２６０ｎｍと、２８０ｎｍの吸光度を測定し、Ａ２６０／Ａ２８０比による簡易法により分析することができる。
【００３１】
前記酵母エキスの分子量分布としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、分子量  ６，０００未満が、８０％〜９９％、分子量  ６，０００以上が、０．１％〜５％などが挙げられる。
前記分子量分布は、例えば、後述する実施例の項目に記載したように、高速液体クロマトグラフにより測定し、ピーク面積百分率から算出することができる。
【００３２】
前記酵母エキスは、市販品を用いることができる。前記酵母エキスは、１種単独で使用してもよいし、２種以上を併用してもよい。
【００３３】
前記酵母エキスの市販品としては、例えば、Ｃ−１０１（販売元  オリエンタル酵母工業株式会社）、ＢＳＰ−Ｂ（販売元  オリエンタル酵母工業株式会社）などが挙げられる。これらの中でも、Ｃ−１０１が、銅抽出率がより優れる点で、好ましい。
【００３４】
前記抽出促進剤を含む溶液における前記抽出促進剤の含有量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、０．１質量％〜２０質量％が好ましく、１質量％〜１０質量％がより好ましい。前記好ましい範囲内であると、銅抽出率がより優れる点で、有利である。
【００３５】
−溶媒−
前記抽出促進剤を含む溶液に用いられる溶媒としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、通常水であり、水とアルコール等の有機溶媒との混合溶液であってもよい。
【００３６】
−その他の成分−
前記抽出促進剤を含む溶液におけるその他の成分としては、本発明の効果を損なわない限り、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、水酸化ナトリウムなどが挙げられる。
前記抽出促進剤を含む溶液における前記その他の成分の含有量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
【００３７】
＜＜懸濁＞＞
前記銅を含有する酵母を、抽出促進剤を含む溶液に懸濁させるか、又は銅を含有する酵母を懸濁させた溶液に抽出促進剤を添加及び混合する方法としては、特に制限はなく、公知の攪拌方法や振とう方法を用いることができる。
また、前記抽出工程において、前記懸濁液を更に振とうしてもよい。前記振とうの条件としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
【００３８】
前記懸濁液における前記銅を含有する酵母の含有量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、１質量％〜１５質量％が好ましく、３質量％〜１０質量％がより好ましい。前記好ましい範囲内であると、銅抽出率がより優れる点で、有利である。
【００３９】
前記懸濁液における、前記銅含有酵母の質量に対する前記抽出促進剤の量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、１質量％〜２００質量％が好ましく、１０質量％〜１５０質量％がより好ましい。前記好ましい範囲内であると、銅抽出率がより優れる点で、有利である。
【００４０】
前記懸濁液のｐＨとしては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、７．０〜１１．０が好ましい。前記懸濁液のｐＨを調整する方法としては、公知の方法を適宜選択することができる。
【００４１】
前記懸濁液の温度としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、２０℃〜８０℃が好ましい。
【００４２】
前記抽出工程における抽出時間としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、１０分間〜３０時間が好ましく、３０分間〜１５時間がより好ましく、１時間〜５時間が特に好ましい。
【００４３】
＜＜固体成分と液体成分との分離＞＞
前記懸濁液の固体成分と液体成分とを分離する方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、濾過による分離、遠心による分離などが挙げられる。
前記濾過の方法としては、特に制限はなく、公知の濾過装置を適宜選択して行うことができ、例えば、フィルタープレス、ラインフィルターなどを用いることができる。なお、これらは併用してもよい。
前記遠心分離の方法としては、特に制限はなく、公知の遠心装置を適宜選択して行うことができる。また、前記遠心の条件としても、特に制限はなく、前記懸濁液の量に応じて適宜選択することができ、例えば、前記懸濁液の量が５ｍＬの場合は、３，０００ｒｐｍで５分間という条件とすることが挙げられる。
【００４４】
前記抽出工程における銅抽出率（以下、「銅溶出率」と称することもある）としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、５０％以上が好ましく、５５％以上がより好ましく、６０％以上が特に好ましい。
前記銅抽出率は、下記式により求めることができる。
銅抽出率（％）＝｛抽出物中の銅全量（質量）／抽出に用いた酵母に含まれる銅全量（質量）｝×１００
【００４５】
＜その他の工程＞
前記その他の工程としては、本発明の効果を損なわない限り、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、熱水処理工程、乾燥工程、濃縮工程、希釈工程などが挙げられる。これらの中でも、熱水処理工程を含むことが好ましい。
【００４６】
＜＜熱水処理工程＞＞
前記熱水処理工程は、前記抽出工程の前に、銅を含有する酵母を６０℃〜１２０℃の熱水に懸濁させ、得られた懸濁液の固体成分と液体成分とを分離する工程である。前記抽出工程の前に、前記熱水処理工程を行うことにより、酵母特有の臭い及び味（酵母臭、酵母味）を低減することができ、得られた銅含有酵母抽出物は、食品等に添加した際に食品等の風味を損なわない点で好ましい。
前記熱水の温度としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、温度が高いほど酵母臭及び酵母味の低減効果が高い点で、８０℃〜１２０℃が好ましく、９５℃〜１２０℃がより好ましい。
前記酵母を懸濁させる方法及び得られた懸濁液の固体成分と液体成分とを分離する方法としては、特に制限はなく、前述した抽出工程と同様の方法が挙げられる。
【００４７】
前記熱水処理工程においては、酵母特有の臭い及び味を低減させるため、酵母臭や酵母味の抽出（除去）を促進する酵母臭及び酵母味抽出促進剤を熱水に添加することが好ましい。前記酵母臭及び酵母味抽出促進剤としては、前記抽出工程における銅の抽出率に悪影響を与えない限り、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
前記酵母臭及び酵母味抽出促進剤の添加量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、乾燥酵母菌体質量当たり、５質量％〜５０質量％が好ましく、２０質量％〜５０質量％がより好ましい。
【００４８】
＜＜乾燥工程、濃縮工程、希釈工程＞＞
前記乾燥工程は、前記銅含有酵母抽出物を乾燥させる工程である。
前記乾燥の方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、スプレードライヤーＬ−８（大川原化工機株式会社製）を用いて行うことができる。これにより、銅を含有した酵母抽出固形物（粉体）を得ることができる。なお、前記固形物とする際には、デキストリン等の賦形剤を適宜含有させてもよい。
前記濃縮工程は、前記銅含有酵母抽出物を濃縮する工程であり、前記希釈工程は、前記銅含有酵母抽出物を希釈する工程である。
前記濃縮及び希釈の方法としては、特に制限はなく、公知の方法を適宜選択して用いることができる。
【００４９】
（銅含有酵母抽出物）
本発明の銅含有酵母抽出物は、本発明の銅含有酵母抽出物の製造方法により製造される。
前記銅含有酵母抽出物は、前記銅含有酵母抽出物の製造方法により製造されるため、天然物由来の銅を高濃度に含有する。また、前記銅含有酵母抽出物は、水への溶解性にも優れる。
【００５０】
前記銅含有酵母抽出物の形態としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、前記抽出工程によって得られた液体（ろ液、上清等の抽出液）であってもよいし、粉末（パウダー）、粒子状、シート状等の固形物であってもよいし、ゲル状、スラリー状等の半固形物であってもよい。
【００５１】
前記銅含有酵母抽出物の使用時の形態としては、特に制限はなく、用途に応じて適宜選択することができ、乾燥された粉末の状態（例えば、抽出物をスプレードライ等により乾燥したものなど）で使用してもよいし、溶媒に溶解された溶液の状態で使用してもよいし、半固形物の状態（例えば、ゲル状、クリーム状のものなど）で使用してもよい。なお、前記使用形態にするための銅含有抽出物の調製方法としては、特に制限はなく、公知の装置等を用い公知の方法に従って行うことができる。
【００５２】
（食品）
本発明の食品は、本発明の銅含有酵母抽出物を含み、更に必要に応じてその他の成分を含む。
ここで、前記食品とは、人の健康に危害を加えるおそれが少なく、通常の社会生活において、経口又は消化管投与により摂取されるものをいい、行政区分上の食品、医薬品、医薬部外品などの区分に制限されるものではなく、例えば、経口的に摂取される一般食品、健康食品、保健機能食品、医薬部外品、医薬品などを幅広く含むものを意味する。
前記食品の種類としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、例えば、流動食、パン、ビスケット、クラッカー等の製菓、水産加工品、食肉加工品、麺類、味噌等の調味料、加工野菜製品、ジュース等の飲料、アイスクリーム等の氷菓、健康食品等が好ましく、流動食、飲料が特に好ましい。
【００５３】
前記食品への前記銅含有酵母抽出物の添加量としては、特に制限はなく、用途、目的等に応じて適宜選択することができる。
【００５４】
前記その他の成分としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、食品を製造するにあたって通常用いられる、補助的原料又は添加物などが挙げられる。
前記補助的原料又は添加物としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ブドウ糖、果糖、ショ糖、マルトース、ソルビトール、ステビオサイド、ルブソサイド、コーンシロップ、乳糖、クエン酸、酒石酸、リンゴ酸、コハク酸、乳酸、Ｌ−アスコルビン酸、ｄｌ−α−トコフェロール、エリソルビン酸ナトリウム、グリセリン、プロピレングリコール、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、アラビアガム、カラギーナン、カゼイン、ゼラチン、ペクチン、寒天、ビタミンＢ類、ニコチン酸アミド、パントテン酸カルシウム、アミノ酸類、カルシウム塩類、色素、香料、保存剤などが挙げられる。
前記その他の成分の含有量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
【実施例】
【００５５】
以下、本発明の実施例及び比較例を説明するが、本発明はこれらの実施例に何ら限定されるものではない。
【００５６】
（実施例１及び２、比較例１：各種抽出促進剤による銅の抽出）
＜抽出促進剤＞
抽出促進剤として以下のものを用意した。
（１）  実施例１：酵母エキス−１
製品名  ：  Ｃ−１０１（販売元  オリエンタル酵母工業株式会社）
分子量分布  ：
分子量  ６，０００以上  ・・・  ５％
分子量  ３，０００以上６，０００未満  ・・・  ２％
分子量  １，０００以上３，０００未満  ・・・  ４％
分子量  ５００以上１，０００未満  ・・・  ５％
分子量  ５００未満  ・・・  ８４％
総核酸量  ：  ６．５質量％
（２）  実施例２：酵母エキス−２
製品名  ：  ＢＳＰ−Ｂ（販売元  オリエンタル酵母工業株式会社）
分子量分布  ：
分子量  ６，０００以上  ・・・  微量
分子量  ３，０００以上６，０００未満  ・・・  １％
分子量  １，０００以上３，０００未満  ・・・  １２％
分子量  ５００以上１，０００未満  ・・・  ９％
分子量  ５００未満  ・・・  ７８％
総核酸量  ：  ６．０質量％
（３）  比較例１：グルタミン酸ナトリウム「グルエースＳ−１」（ＭＣフードスペシャリティーズ株式会社製）
【００５７】
−分子量分布−
下記高速液体クロマトグラフ操作条件により測定し、ピーク面積百分率で分子量分布を算出した。
−−検量線−−
以下の分子量標準品を、水、アセトニトリル、及びトリフルオロ酢酸の混液（水：アセトニトリル：トリフルオロ酢酸＝５５：４５：０．１）に溶解させ、分子量及び溶出時間の関係式を求めた。
〔分子量標準品〕
１．  チトクロムＣ（Ｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅ  Ｃ）  ・・・  分子量  １２，５００
２．  アプロチニン（Ａｐｒｏｔｉｎｉｎ）  ・・・  分子量  ６，５１２
３．  バシトラシン（Ｂａｃｉｔｒａｃｉｎ）  ・・・  分子量  １，４５０
４．  アンジオテンシンＩＩ（Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ  ＩＩ）  ・・・  分子量  １，０４６
５．  Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ（ペプチド）  ・・・  分子量  ４５１
６．  Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ（ペプチド）  ・・・  分子量  １８９
【００５８】
−−試験溶液の調製−−
検体（抽出促進剤）  約０．０２ｇを採取し、水、アセトニトリル、及びトリフルオロ酢酸の混液（水：アセトニトリル：トリフルオロ酢酸＝５５：４５：０．１）を１０ｍＬ加える。室温で一晩放置した後、孔径０．４５μｍのメンブランフィルターでろ過し、得られた液を試験溶液とした。
【００５９】
−−高速液体クロマトグラフ操作条件−−
機種  ：  Ｓｈｏｄｅｘ  ＧＰＣ−１０１（昭和電工株式会社製）
検出器  ：  紫外分光光度計  ＵＶ−４１（昭和電工株式会社製）
カラム  ：  ＴＳＫｇｅｌ  ＧＰ２５００ＰＷＸＬ、φ７．８ｍｍ×３００ｍｍ（東ソー株式会社製）
カラム温度  ：  ４０℃
移動相  ：  水、アセトニトリル、及びトリフルオロ酢酸の混液（水：アセトニトリル：トリフルオロ酢酸＝５５：４５：０．１）
流量  ：  ０．５ｍＬ／分間
測定波長  ：  ２２０ｎｍ
注入量  ：  ２０μＬ
【００６０】
−総核酸量−
前記酵母エキスの総核酸量は、前記酵母エキスを１０質量％含有する水溶液を調製し、波長２６０ｎｍと、２８０ｎｍの吸光度を測定し、Ａ２６０／Ａ２８０比による簡易法により分析した。
【００６１】
＜抽出＞
乾物質量２５０ｍｇの銅含有酵母粉末（ミネラル酵母Ｃｕ１、銅含有量：１１，４２２質量ｐｐｍ、オリエンタル酵母工業株式会社製）に、３質量％の抽出促進剤と、１００ミリモル／ＬのＮａＯＨとを含む水溶液を５ｍＬ加え、撹拌し、銅含有酵母を懸濁させ、懸濁液（ｐＨ９〜１１）を得た。
前記懸濁液をスターラーによって撹拌しながら、７０℃で１時間加熱した後、３，０００ｒｐｍで５分間遠心分離した。
得られた上清をＩＣＰ発光分光分析装置用フィルターで濾過し、試験管に採取し、酵母抽出物（以下、「抽出液」と称することがある）を得て、その質量を測定した。
銅の抽出率は、前記酵母抽出物中の銅含有量を、ＩＣＰ発光分光分析装置（Ｏｐｔｉｍａ２１００ＤＶ、パーキンエルマー社製）を用いてＩＣＰ発光分光分析法により測定し、抽出液へ溶出された銅の割合を下記式から算出した。結果を表１に示した。
銅抽出率（％）＝｛抽出物中の銅全量（質量）／抽出に用いた酵母に含まれる銅全量（質量）｝×１００
【００６２】
【表１】
0006368194.tif 000002
【００６３】
表１の結果から、ペプチド及びタンパク質の少なくともいずれかを含む抽出促進剤を用いることにより、高い抽出率で銅を抽出できることが示された。また、抽出促進剤の中でも、前記酵母エキス−１を用いた場合に銅の抽出率がより高くなることがわかった。
【産業上の利用可能性】
【００６４】
本発明の銅含有酵母抽出物の製造方法によれば、高い抽出率で銅を抽出することができ、天然物由来の銅を高濃度に含有する銅含有酵母抽出物を効率的に製造することができる。
本発明の銅含有酵母抽出物は、流動食、飲料等の経口経管栄養組成物、食品素材、野菜の緑色保持復元剤などとして好適に利用可能である。また、前記経口経管栄養組成物、前記食品素材として本発明の銅含有酵母抽出物を用いることにより、銅欠乏による貧血、心臓疾患等を予防乃至改善し得る。