(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
クロキサシリンおよびセファピリンから選択される、治療有効量の少なくとも１種の抗生物質であって、少なくとも１種の抗生物質の濃度が２％ｗ／ｗから９．１８％ｗ／ｗである、抗生物質と、
前記少なくとも１種の抗生物質の制御放出を提供するために構成された基剤であって、
所定量の疎水性コロイド状シリカ、
少なくとも１種の油および
ソルビタンモノオレアートおよびＰＥＧ１２−オレアートから選択される、少なくとも１種の界面活性剤
を含有する基剤と
を含有し、
１００  １／ｓの剪断速度および２０℃の温度において、粘度が１０００ｍＰａｓ未満である、乳房内注入に適する組成物。
【請求項２】
少なくとも1種の追加の活性薬剤を含有する、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記追加の活性薬剤が非ステロイド性抗炎症剤である、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
前記抗生物質が微粉化される、請求項１〜３のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項５】
前記疎水性コロイド状シリカが、ヒュームド疎水性コロイド状二酸化ケイ素である、請求項１〜４のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項６】
前記疎水性コロイド状シリカの濃度が、０．１〜５％ｗ／ｗである、請求項１〜５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項７】
前記疎水性コロイド状シリカの濃度が、１〜３％ｗ／ｗである、請求項１〜６のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項８】
前記界面活性剤の濃度が、０．０１〜１０％ｗ／ｗである、請求項１〜７のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項９】
前記基剤中の前記コロイド状シリカ／界面活性剤の比率が、１：１００〜５００：１である、請求項１〜８のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１０】
前記基剤中の前記疎水性コロイド状シリカ／界面活性剤の比率が、１：５〜６：１である、請求項１〜９のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１１】
前記基剤が、２種以上の界面活性剤を含有する、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１２】
前記油の粘度が、２０℃において１〜１００ｍＰａｓである、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１３】
前記油の粘度が、２０℃において４０ｍＰａｓ未満である、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１４】
前記油が、中鎖トリグリセリド、軽質流動パラフィン、エチルオレアートおよびゴマ油からなる群より選択される、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１５】
前記油の密度が、０．８０〜０．９９ｇ／ｃｍ３である、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１６】
前記組成物の粘度が、１００  １／ｓの剪断速度および２０℃の温度において３００ｍＰａｓ未満である、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１７】
前記組成物の粘度が、１００  １／ｓの剪断速度および２０℃の温度において１５０ｍＰａｓ未満である、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１８】
請求項１〜１７のいずれか１項に記載の組成物を製造する方法であって、
ａ）容器中で前記油と界面活性剤を混合し、均質な油混合物を形成するステップと、
ｂ）前記抗生物質を前記油混合物中に分散させるステップと、
ｃ）その後、前記疎水性コロイド状シリカを前記油混合物に添加するステップと
を含む方法。
【請求項１９】
治療を必要としている非ヒト動物を請求項１〜１７のいずれか１項に記載の組成物で治療する方法であって、前記組成物を乳房内注入により前記動物に投与するステップを含む方法。
【請求項２０】
５ｇ製剤組成物の１〜６用量を０〜１２０時間にわたり３回×２４時間または６回×２４時間投与する投与計画を含む、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
非ヒト動物の授乳期中の乳房炎の治療または予防のための、請求項１９または２０のいずれかに記載の方法。
【請求項２２】
治療または予防を必要としている動物の前臨床もしくは臨床型乳房炎の治療または予防のための、請求項１〜１７のいずれか１項に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、制御放出組成物およびその使用方法に関し、特に限定するものではないが、好ましくは、泌乳動物の乳房炎の治療のための低粘度制御放出組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
乳房炎または別の微生物感染症に罹患した泌乳動物を治療するために抗生物質組成物が使用されることが多い。授乳期中の乳房炎治療に使用される多くの抗生物質組成物が市販されている。
【０００３】
しかし、抗生物質治療に伴う主要な問題の１つとして、治療期間の間の活性薬剤の不十分な制御放出がある。この結果、９０％の微生物が死滅する最小阻止濃度（ＭＩＣ９０と呼ばれる）を超える活性薬剤濃度の維持に関し問題を生ずる場合がある。例えば、抗生物質があまりに早期に放出されると、投与後、抗生物質が最初の搾乳と共に排出される可能性がある。その後、次の投与（１２時間後の場合が多い）を受けるまでの間の残りの期間、抗生物質の濃度が低くなりすぎる場合がある。この結果として、感染症の効果的な治療の失敗、長い治療期間、および／または最終的に抗生物質耐性の増加に繋がる可能性がある。
【０００４】
これらの問題に対処するために、ＮｉｔｒｏＣｌｏｘ（商標）（長時間作用型）ＬＡ、Ｏｒｂｅｎｉｎ（商標）ＬＡなどのように、公知技術である高粘度化により活性薬剤の組成物からの放出プロファイルを遅らせるように組成物を設計する場合が多い。実際、これは、長時間作用型製剤として知られている授乳期および乾乳期乳房炎治療薬で採用されている手法であり、この場合、通常、高粘度ペースト剤から長期間にわたり活性薬剤が徐放される。例えば、抗生物質が授乳期中に４８時間毎に投与される場合、治療後約３６時間の間、抗生物質はＭＩＣ９０超の濃度で徐々に放出される。その後、抗生物質の濃度は、次の投与（多くの場合１２時間後）までの残りの期間中、低すぎる濃度である。またしても、これが感染症の効果的な治療の失敗に繋がる可能性がある。
【０００５】
化学者が高粘度組成物を開発するさらなる理由は、それにより組成物の物理的安定性を高めることができるからである。
【０００６】
しかし、授乳期中の乳房炎などの多くの状態の治療では、高粘度によりその他の問題を生ずる場合がある。例えば、高粘度は、乳汁中に長期にわたる低レベルの抗生物質を生ずる場合があり、このような乳汁は、販売を控えるべきである。長期にわたる出荷制限期間（ＷＨＰ）は収入減に繋がる。
【０００７】
また、高粘度組成物は、配合物の注入または注射時により強い力が必要となる。これにより、シリンジによる乳房への注入の困難さ（本明細書では注入性）が増すことと関連する問題を生ずる可能性がある。
【０００８】
また、乳房炎治療では、組成物の高粘度が乳房中でのより不十分な分布を生ずる可能性がある。
【０００９】
また、組成物の粘度を高めるための増粘剤またはその他の賦形剤の必要性により、より時間のかかる、出費のかさむ製造プロセスになる可能性がある。さらに、産業界では、組成物の粘度が高くなればなるほど、製造プロセス中での取扱が困難になるであろうと考えられている。
【００１０】
乳房炎治療組成物として使用される多くの懸濁液で発生すると思われるさらなる問題は、貯蔵中の懸濁液の沈殿である。むろん、組成物の高粘度は懸濁液の物理的な安定化に役立ち得るが、通常、沈殿を防ぐことはできず、沈殿を遅らせるに過ぎない。従って、粘稠な懸濁液であっても、最終的には、沈殿し、その後沈殿物は固まり、多くの場合、投与の前に再分散させるのは困難であることが解っている。高粘度組成物は、沈降物の再分散を妨害する可能性がある。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１１】
【特許文献１】米国特許第４，７８１，９２０号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
従って、動物の授乳期中に乳房炎などの状態の治療用として産業界で長く望まれてきた改善された組成物の開発に関するニーズが存在する。乳房炎治療の場合には、このような組成物の望ましい特性としては、
−活性薬剤の制御可能な放出プロファイル
−例えば、動物の授乳期中の乳房炎などの状態の治療における短い出荷制限期間（ＷＨＰ）；
−貯蔵後または投与前の良好な再分散性
−注入または他の投与方法の容易さ
−治療領域への組成物の良好な分布
−任意の疾患または状態の治療または予防用の異なる活性薬剤と一緒の使用に適合させることができ、さらに、その活性薬剤の制御および／または持続放出に適合可能な組成物基剤
−異なる治療計画（すなわち、異なる制御放出プロファイル）に対応できるように適合可能な組成物基剤、および／または
−製造の容易さ、および薬学的に許容可能な賦形剤が使用可能であること、
が挙げられ得る。
【００１３】
本発明の１つの目的は、上記の問題に対処するか、または、少なくとも広く一般に有用な選択を提供することにある。
【００１４】
本明細書で引用されるいずれかの特許または特許出願などの全ての文献は、参照により本明細書に組み込まれる。いずれの言及も先行技術であることを自認するものではない。文献中での考察は、著者が何を主張するか述べるものであり、本出願人は引用文献の正確さと適切性を吟味する権利を保有する。多くの先行技術関連出版物が本明細書で言及されているが、この言及は、これらのいずれかの文献がニュージーランドや他のいずれかの国における当技術分野での共通の一般的知識の一部を形成することを承認するものではないことは明確に理解されよう。
【００１５】
本明細書の全体を通して、「含有する」、または「含む」もしくは「有する」などの文言その変形は、述べられた要素、全体もしくは部分、または要素、全体もしくは部分のグループを包含することを意味するが、いずれかの他の要素、全体もしくは部分も、要素、全体もしくは部分のグループも排除しないことを意味することは理解されよう。
【００１６】
本発明のさらなる態様および利点は、例示のみの目的で提示される次の記載から明らかになろう。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
【図１】複数の乳房炎治療組成物（授乳期治療）間の動的粘度の比較を示す図である。
【図２】活性薬剤回収率に対する界面活性剤の影響を示す図である（インビトロ）。
【図３】活性薬剤回収率に対する界面活性剤の影響を示す図である（インビトロ）。
【図４】活性薬剤回収率に対するコロイド状シリカ濃度の影響を示す図である（インビトロ）。
【図５】活性薬剤回収率に対するコロイド状シリカ型（疎水性ｖｓ親水性）の影響を示す図である（インビトロ）。
【図６】活性薬剤回収率に対する油の影響を示す図である（インビトロ）。
【図７】治療２時間後のクロキサシリンの組織中のバイオアベイラビリティを例示する図である（インビボ）。
【図８】乳汁中の活性薬剤濃度に与える活性薬剤の型の影響を示す図である（インビボ）。
【図９】乳汁中の活性薬剤濃度に与える活性薬剤の型の影響を示す図である（インビボ）。
【図１０】ＷＨＰに与える組成物特性の影響を示す図である（インビボ）。
【図１１】ＷＨＰに与える実施例１の組成物の治療回数の影響を示す図である（インビボ）。
【図１２】ＡＣＶＭガイドラインに基づく実施例１の組成物のＷＨＰ測定を示す図である（インビボ）。
【図１３】実施例１の組成物とＮｉｔｒｏＣｌｏｘ（商標）ＬＡとの間の治療の比較を示す図である（インビボ）。
【図１４】実施例１の組成物とＮｉｔｒｏＣｌｏｘ（商標）ＬＡとの間のＷＨＰの比較を示す図である（インビボ）。
【図１５】実施例１の組成物とＯｒｂｅｎｉｎ（商標）ＬＡとの間の治療の比較を示す図である（インビボ）。
【図１６】実施例１の組成物とＯｒｂｅｎｉｎ（商標）ＬＡとの間のＷＨＰの比較を示す図である（インビボ）。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
本発明の一態様では、組成物が提供され、この組成物は、治療有効量の１種以上の活性薬剤と、
所定量のコロイド状シリカ
少なくとも１種の油および
少なくとも１種の界面活性剤、
を含有する基剤と、を含有し、
組成物の粘度は、１００  １／ｓの剪断速度と２０℃の温度において１０００ｍＰａｓ未満である。
【００１９】
意外にも、本発明者らは、この組成物は、乳房炎治療の場合に特に効果的であることを発見した。理由は、この組成物が、
−例えば、治療期間中、活性薬剤濃度をＭＩＣ９０超に維持するのに使用できる活性薬剤の制御可能な放出プロファイル
−注入、再分散および／または乳房中の良好な分布を容易にする低粘度、および／または
−他の現在入手可能な乳房炎組成物に比べてより短いＷＨＰ、
の提供に役立つためである。
【００２０】
以降で考察されるように、本発明者らは乳房炎の抗生物質治療に対する本発明の特別な重要性に気付いた。しかし、同じ開示組成物の発明概念は、他の状態の治療のために必要な実質的に全ての活性薬剤または化合物の制御可能な放出プロファイルに適用できると考えられることがいずれかの当業者により合理的に予測されるであろう。
【００２１】
特定の作用態様に限定されることを望むものではないが、この制御可能な放出は、コロイド状シリカと相互作用する界面活性剤に起因し、その結果、活性薬剤の組成物からの放出プロファイルに変化が生じ得ると考えられている。
【００２２】
重要な点は、この活性薬剤の放出プロファイル制御は、組成物粘度の過度な変更をせずに、特に、組成物の粘度を実質的に増加させることなく実現できることである。
【００２３】
図２の例では、インビトロの試験は、本発明者らが、１８０分間にわたる溶解溶媒中の薬剤回収率（インビボ放出プロファイルの遅延と同義）を約５０％ｗ／ｗから５％ｗ／ｗに低減させることができたことを示す。この有益な効果は、わずかに９０ｍＰａｓから１１８ｍＰａｓ（１００  １／ｓの剪断速度と２０℃の温度で）への組成物の粘度の増加に対して得られた。図２に示すように、この５％ｗ／ｗの回収率は、競合製品のＯｒｂｅｎｉｎ（商標）ＬＡにより得られる数値と同じであった。しかし、Ｏｒｂｅｎｉｎ（商標）ＬＡは、１０８０ｍＰａｓの粘度で、本発明のこの実施例の粘度の約１０倍である。
【００２４】
当然、高粘度組成物の必要がある場合は、当業界で公知の増粘剤を使用することにより実現できる。
【００２５】
例えば、授乳期中の乳房炎の治療の場合、容易な再分散、注入、製造、および／または、より短いＷＨＰなどの多くの有利な特徴の提供に役立つ低粘度組成物を実現できる。このような特徴は、所望の要求に適合するように組成物の活性薬剤の放出プロファイルを変えるのと同時に提供できる。例えば、乳房炎の治療では、この制御放出を使用して、全治療期間にわたり活性薬剤がＭＩＣ９０超で保持されるのを確実にすることができる。
【００２６】
本発明者らは、本明細書で例示されるような大きな利点を示す予備試験を行った。
【００２７】
組成物の好ましい実施形態
活性薬剤
好ましくは、活性薬剤は、抗生物質、抗生物質の組み合わせ、または非抗生物質活性薬剤と組み合わせた抗生物質である。本発明者らは、乳房炎の治療で有効であるという理由により、好ましい抗生物質は、クロキサシリンであることを認めている。
【００２８】
好ましくは、クロキサシリンは、クロキサシリンナトリウムとして投与される。当然、クロキサシリンベンザチンなどの他の形のクロキサシリンも使用可能である。
【００２９】
他の好ましい活性薬剤としては、ベータラクタム、ペニシリン、セファロスポリン、アミノグリコシド、キノロン、ホスホマイシン、スルホンアミド、テトラサイクリンおよびマクロライド系抗生物質が挙げられる。
【００３０】
好ましい活性薬剤の組み合わせとしては、アモキシシリンおよびクラブラン酸；ペニシリン活性薬剤およびアミノグリコシド；クロキサシリンおよびタイロシン；ならびに抗生物質および非ステロイド性抗炎症剤が挙げられる。
【００３１】
しかし、実質的に全ての抗生物質、非抗生物質活性薬剤、またはその機能性誘導体は、本発明で使用可能である。
【００３２】
例えば、活性薬剤がタイロシン基剤、セファピリンナトリウムまたはセファピリンベンザチン抗生物質である場合も、本発明が同様に機能することを本発明者らは例証した。
【００３３】
また、放出速度が使用される活性薬剤の型に依存して影響を受ける場合があることを発見したことも意外であった。シリカおよび界面活性剤の型／量が一定に保持される場合、セファピリンをクロキサシリン（両方共、約４．５％ｗ／ｗの濃度に保持）に活性薬剤を変えると、非常に異なる放出速度が得られた。セファピリンは、クロキサシリンよりはるかにゆっくり放出された。これは、型、および、場合によっては活性薬剤（さらに、必要に応じ、シリカと界面活性剤）の濃度を調節することによって、実質的に全ての活性薬剤の所望の放出を実現できることを例証している。
【００３４】
好ましくは、活性薬剤は微粒子化されている。用語の微粒子化は、１〜２０μｍの質量平均直径ｄ５０の粒子を意味すると解釈されるべきである。微粒子化は、沈殿速度を下げるのに役立つ。さらに、より大きな粒子はシリンジノズルの先頭でブリッジを形成する場合があり、シリンジ通過性に影響を及ぼすことがある。
【００３５】
本明細書の全体を通し、用語の注入性またはシリンジ通過性は、シリンジを介した動物への薬物の投与の容易さを意味すると解釈されるべきである。これは、通常、粘度、ならびに薬剤または処方賦形剤の粒径により影響を受け、薬物の投与中にシリンジの通路の先端を部分的にまたは完全に閉塞することも起こりうる。
【００３６】
コロイド状シリカ
本明細書の全体を通して、用語のコロイド状シリカは、約１ｎｍ〜１０００ｎｍ（１μｍ）の最大直径の単一シリカ粒子を含む粒子状無定形ヒュームドシリカを意味するものと解釈されるべきである。
【００３７】
コロイド状シリカの公知の性質および用途に関するさらなる考察は、本明細書で後程行われる。これは、コロイド状シリカの本発明の使用が、増粘、および／または固化防止剤としての以前に公知の使用とは非常に異なることを示すのに役立つ。
【００３８】
好ましくは、コロイド状シリカは、ヒュームドコロイド状二酸化ケイ素である。
【００３９】
現在、多くの異なる型のヒュームドコロイド状シリカを入手可能である。全ての現在入手可能な、および将来型のヒュームドコロイド状シリカは、本明細書で考察したものと同じ利点を提供すると思われることを当業者なら理解するであろう。本明細書で例示されるように、ヒュームドコロイド状二酸化ケイ素は、特に効果的であることが明らかになった。
【００４０】
好ましくは、ヒュームドコロイド状シリカは、疎水性である。
【００４１】
本発明者らは、粘度を比較的低く、および／または実質的に不変で保持している一方で、活性薬剤の放出プロファイルを変えるという点で、疎水性のコロイド状シリカは、親水性のコロイド状シリカより、著しく効果が大きい場合があることを明らかにした。
【００４２】
疎水性のコロイド状シリカを使用した製剤は、その親水性の相当物を使用した製剤より低い粘度であることから考えて、これは意外な結果であった。親水性のコロイド状シリカは、増粘剤として使用されていることが知られており、増粘された組成物の結果としてより遅い放出プロファイルを付与する。
【００４３】
それよりむしろ、本発明者らが親水性のシリカを使用した場合、界面活性剤の包含により、疎水性のシリカを使用した場合よりも多く組成物の粘度を高める傾向を示した。本発明で親水性のシリカの代わりに疎水性のシリカの使用により、活性薬剤の放出のより大きな制御を行える傾向があったということは、特に意外な結果であった。
【００４４】
好ましい市販の疎水性のコロイド状二酸化ケイ素は、Ａｅｒｏｓｉｌ（登録商標）Ｒ９７２（Ａｅｒｏｓｉｌから供給）である。
【００４５】
好ましくは、コロイド状シリカの濃度は、０．１〜５％ｗ／ｗである。本明細書で考察の好ましい投与計画に従って、授乳期中の乳房炎の治療に使用される場合、この量が特に効果的であることが明らかになった。
【００４６】
より好ましくは、コロイド状シリカの濃度は、１〜３％ｗ／ｗである。特に好ましいコロイド状シリカの量は、ほぼ１．７５％ｗ／ｗ程度であった。例えば、これは、治療期間（典型的な例では、２４時間）の間、活性薬剤の適切な放出を可能とし、クロキサシリンをＭＩＣ９０超に維持し、しかも、同時に競合参照製品より有益な短いＷＨＰを与えることが明らかになった。これは、本発明の制御放出機序がいかに効果的に利用可能かを示す単なる一例に過ぎない。
【００４７】
上記において考察したように、使用されるコロイド状シリカの量の一部は、使用される活性薬剤の型、および所望の放出速度により調節できる。例えば、セファピリンは、クロキサシリンよりもかなりゆっくり組成物の基剤から放出されることが示されている。
【００４８】
この理由のため、クロキサシリンを使用した場合と類似の放出速度を達成する（それが所望の場合）ためにコロイド状シリカの量を下げるのを決めることができる。
【００４９】
インビボプロトコルが当業界で公知であり、所与の組成物から乳汁中の生じた活性薬剤濃度を直接測定する試験を提供する。このような試験から、当業者なら、コロイド状シリカの量（またはさらに言えば、活性薬剤、または界面活性剤の量／型）を容易に調節でき、実質的に全ての組成物の所望の放出速度を達成できるであろう。
【００５０】
全体として、組成物の基剤中のコロイド状シリカの濃度が高くなるほど、活性薬剤の放出速度が遅くなることが本発明者らによって発見された。重要なのは、この遅延化放出速度は、組成物の粘度に過度に影響することなく、達成できることである。ＮｉｔｒｏＣｌｏｘ（商標）ＬＡまたはＯｒｂｅｎｉｎ（商標）ＬＡなどの競合組成物では、類似の放出速度は、はるかに高粘度によってのみ達成でき、これにより、考察したように多くの不利益がある。
【００５１】
界面活性剤
本明細書の全体を通し、用語の界面活性剤は、液体の表面張力を下げる任意の化合物、２種の液体間の界面張力を下げる任意の化合物、または液体と固体との間の界面張力を下げる任意の化合物を意味すると解釈されるべきである。また、界面活性剤は、乳化剤、洗浄剤、湿潤剤、などとしての役割もできる。
【００５２】
好ましくは、界面活性剤は非イオン性界面活性剤である。
【００５３】
しかし、本発明者らは、両性、陰イオン性または陽イオン性界面活性剤も同様に機能するはずであると考えている。
【００５４】
好ましくは、非イオン性界面活性剤は、０．５〜３０の範囲の親水性親油性バランス（ＨＬＢ）を有する。
【００５５】
より好ましくは、非イオン性界面活性剤は、４〜１６の範囲のＨＬＢである。
【００５６】
より好ましくは、界面活性剤は、ソルビタンエステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンヒマシ油誘導体、ステアリン酸ポリオキシエチレン、およびポリエチレンオキシドモノオレアート、およびこれらの組み合わせ、から選択される群から選ばれる。
【００５７】
意外にも、一部の界面活性剤は、選択活性薬剤の放出速度の制御の点で、他のものより良好に作用するように見えた。
【００５８】
例えば、全ての他の変数を一定に保持している間、０．１％ｗ／ｗのＰＥＧ１２−オレアートは、０．１％ｗ／ｗ  スパン８０よりも、クロキサシリンの放出速度を遅らせる上で大きな効果があった。
【００５９】
好ましくは、界面活性剤は、０．０１〜１０％ｗ／ｗの濃度である。
【００６０】
本発明者らは、組成物基剤中の界面活性剤が多いほど、活性薬剤の放出速度が遅くなることを発見した。
【００６１】
この理由のために、界面活性剤の量／型、および／または界面活性剤／コロイド状シリカの比率は、活性薬剤の放出速度を制御する手段を提供できる。
【００６２】
好ましくは、コロイド状シリカ／界面活性剤の比率は、１：１００〜５００：１である。
【００６３】
最も好ましくは、コロイド状シリカ／界面活性剤の比率は、１：５〜６：１である。
【００６４】
任意選択で、基剤は、２種以上の型の界面活性剤を含有してもよい。治療の過程の間に投与される単一組成物、および／または異なる組成物中の界面活性剤の組み合わせを使用することにより、得られる組成物の放出プロファイル（およびＷＨＰなどの他の特性）をさらに細かく制御できると予測することは理にかなっているであろう。
【００６５】
油
多くの組成物で、油はビークルとして必要である。例えば、クロキサシリンまたはセファピリンなどの活性薬剤を含有する抗生物質組成物は、通常、油状ビークルをベースにしている。例えば、これは、組成物が乳頭管を介した注入または注射として投与されるのを容易にし、および／またはその保存可能期間中に充分な化学安定性を得るのに役立つ。
【００６６】
好ましくは、油は、低粘度である。
【００６７】
低粘度油の使用は、得られた組成物を確実に低粘度で保持するのに役立つ。これは、組成物が乳房内で確実に良好に分布するのを助けることができ、貯蔵後再分散させるのを容易にし、シリンジによる投与を容易にする。
【００６８】
好ましくは、油の粘度は、２０℃において１〜１００ｍＰａｓである。
【００６９】
より好ましくは、油の粘度は、２０℃において４０ｍＰａｓ未満である。
【００７０】
より好ましくは、油は、中鎖トリグリセリド（例えば、ミグリオール８１２またはミグリオール８４０）、エチルオレアート、軽質流動パラフィン、ゴマ油およびピーナッツ油、からなる群より選択される。しかし、他の類似の低粘度油も本発明で利用可能であることは理解されるべきである。
【００７１】
好ましくは、油は、０．８０〜０．９９ｇ／ｃｍ３の低密度である。
【００７２】
図６で例示されるように、本発明者らは、異なる油の使用により活性薬剤の回収率が変わることを見出した。この効果は、使用される界面活性剤、コロイド状シリカまたは活性薬剤の型／量の場合に起こる変化ほど顕著ではなかった。従って、このような変化は、単純に油の粘度および得られた組成物の粘度に起因する可能性がある。従って、好ましい実施形態では、より低い粘度の油を使用して、組成物のより低い粘度が維持される。
【００７３】
またさらに、本発明者らは、油は、組成物の基剤中の１種または複数種の成分と相互作用し、単なる粘度関連制御放出とは別の方式で活性薬剤の収率に影響を与えることができると考えている。
【００７４】
最終組成物の粘度
明らかに、組成物の粘度は、必要とされる特定の要求に合わせることができる。１部の組成物に対し、比較的高粘度を使用してもよい。他のものでは、増粘剤または高粘度油などの賦形剤を加えないで低粘度を維持できる。必要があれば、このような粘度調節剤も活性薬剤の放出プロファイルに寄与できる。
【００７５】
以下で考察の好ましい粘度範囲および粘度値は、本発明者らが授乳期中の乳房炎の乳房内治療のために特に有用であることを見出したものである。
【００７６】
別段の指定がない限り、本明細書内で言及される組成物の粘度は、１００  １／ｓの剪断速度、２０℃の温度で同心円筒法を使用した測定値に基づいている。これらの条件で測定すると、本発明による組成物の粘度は、１０００ｍＰａｓ未満である。
【００７７】
より好ましくは、最終組成物は、３００ｍＰａｓ未満の粘度である。
【００７８】
最も好ましくは、組成物は、１５０ｍＰａｓ未満の粘度である。
【００７９】
ＮｉｔｒｏＣｌｏｘ（商標）ＬＡおよびＯｒｂｅｎｉｎ（商標）ＬＡは、１００  １／ｓの剪断速度、２０℃の温度で１０００ｍＰａｓを超える粘度である。同様に、コロイド状シリカを含有する乾乳期乳房炎治療薬または他の組成物は、通常、この上限を軽く超える粘度である。
【００８０】
本発明者らは、好ましくは、１０００ｍＰａｓ未満（さらに、より好ましくは、３００ｍＰａｓ未満）の粘度の授乳期中の乳房炎の治療用の組成物が、ＮｉｔｒｏＣｌｏｘ（商標）ＬＡおよびＯｒｂｅｎｉｎ（商標）ＬＡなどの競合組成物に比べて、良好なシリンジ通過性、再分散性、乳房内分布および／または短いＷＨＰの観点からより良好な特性を提供できることを明らかにした。活性薬剤の放出プロファイルを適切に制御して、全治療期間のあいだ実質的にＭＩＣ９０超に維持することを可能とする一方で、これらの長所を保持できる。
【００８１】
好ましい治療方法
好ましくは、本明細書記載の組成物を使用して、授乳期中に乳房内注入により乳房炎が治療される。
【００８２】
授乳期に起こる乳房炎の場合には、組成物は、ウシ、ヒツジ、または市販乳汁生産に通常使用される他の動物に使用可能である。
【００８３】
これは、本発明の好ましい使用を乾乳期乳房炎治療（すなわち、授乳期以外の治療）から区別するのに役立つ。
【００８４】
また、本発明を使用して、選択された活性薬剤に依存する実質的に全ての状態または疾患を治療できることは明らかである。基本となる組成物の概念は、乳房炎の乳房内治療用組成物に限定されるべきではない。
【００８５】
本発明のさらなる態様では、治療を必要としている動物の微生物感染症を、本明細書で大略記載の組成物で治療する方法を提供し、この方法は、乳房内注入により組成物を投与するステップを含む。
【００８６】
組成物を投与する方法は、通常、乳頭管を介した注入であってもよい。
【００８７】
好ましくは、方法は、１２、２４または４８時間毎投与の治療計画による１〜１０ｇの組成物の１〜１２用量の投与計画を含む。
【００８８】
より好ましくは、方法は、２４時間の治療計画による５ｇ組成物の３または６用量の投与計画を含み、４８時間（３用量）〜１２０時間（６用量）の治療期間にわたり投与を行う。
【００８９】
この投与計画は、授乳期中の前臨床または臨床型乳房炎の動物の治療に成功するのに充分であろう。
【００９０】
計算されたＷＨＰ期間後、正常な搾乳生産を再開できる。再度、本発明者らは、同じ治療期間で比較した場合、本発明のＷＨＰは、ＮｉｔｒｏＣｌｏｘ（商標）ＬＡなどの他の現在入手可能な製剤より実質的に短い可能性があることを見出した。
【００９１】
図１４は、１０８時間のＷＨＰのＮｉｔｒｏＣｌｏｘ（商標）ＬＡと比較して、７２時間のＷＨＰの本発明の１つの組成物を例示する（治療計画：２４時間間隔で３回投与）。下記の段落での仮定に基づいて、これは、３６時間の短いＷＨＰに起因して、乳牛当たり２４ドルの利益の増加に相当すると思われる。これを大きな酪農場全体で、または実際に全国で積算してみると、本発明の重要性を容易に理解できる。
【００９２】
乳牛当たり２４ドルの増益は、下記に概略を示すようなニュージーランド酪農業において通常理解されている内容を仮定している。通常、各搾乳は、約１０Ｌの乳汁（１ｋｇの乳固形分に相当）を与え、農家は１ｋｇの乳固形分を８ドルでＦｏｎｔｅｒｒａなどの会社に販売する。さらに、各乳牛は、通常、１２時間毎に搾乳されるであろう。
【００９３】
本発明の特に有利な使用は、治療期間中に異なる放出プロファイルを有する異なる組成物の併用療法であろう。
【００９４】
これを示すために、乳房炎治療では、治療期間の最初の部分で、比較的遅い活性薬剤放出組成物の最初の使用を含めることができ、さらに後半の治療で、より速い活性薬剤放出組成物を使用できる。
【００９５】
これは治療期間の開始側では、より少ない治療薬しか必要でないという意味で役に立つと思われる。また、活性薬剤がＭＩＣ９０超で確実に保持されるのを支援できる。治療期間の終わり側では、より速い放出組成物を使用して、活性薬剤量を実質的に上積みすることができる。さらに、活性薬剤がより速く放出されるために、ＷＨＰ期間をより短い状態で維持できる。
【００９６】
好ましい製造方法
本発明のさらなる態様では、大略上述された組成物を製造する方法が提供され、この方法は、
ａ）容器中で油と界面活性剤を混合し、均一油混合物を形成するステップと、
ｂ）活性薬剤を油混合物中に分散させるステップと、
ｃ）続けて、油混合物にコロイド状シリカを添加するステップと、
を含む。
【００９７】
任意選択で、ステップａ）で、少なくとも１種の防腐剤が、油および界面活性剤と混合される。例えば、メチルパラベンおよびプロピルパラベンを防腐剤として使用できる。
【００９８】
好ましくは、ステップａ）で形成された油混合物は、加熱滅菌される。例えば、本発明者らは、１４０℃で３時間のインキュベーションを利用し、引き続いて混合物を冷却する。
【００９９】
好ましくは、ステップｂ）およびステップｃ）は、高せん断分散設備を利用する。
【０１００】
好ましくは、ステップｃ）のコロイド状シリカも、油混合物への添加の前に加熱滅菌される。
【０１０１】
好ましくは、ステップｃ）の後に形成された油混合物は、均一に混合される。
【０１０２】
本発明者らは、組成物の好ましい低粘度が製造プロセスにも役立つことを明らかにした。他の組成物と異なり、増粘剤（例えば、ヒドロキシステアリン）中で混合するのに必要な余分の加熱ステップがない。
【０１０３】
また、組成物を製造後で、投与の前にシリンジに充填が必要な場合に、より低い粘度が有用であり得る。
【０１０４】
また、微粉化活性薬剤の好ましい使用は、組成物の急速な沈殿を防ぐのに役立つ。さらに、本発明者らは、おそらく、粒径分布がより均一であると思われることから、非微粉化の活性薬剤よりも微粉化活性薬剤の放出の制御の方がより容易であると考えている。また、組成物内からの他の成分との何らかの相互作用が、より小さい微粉化粒子の大きな表面積により強化される可能性もある。
【０１０５】
コロイド状シリカの追加の背景
コロイド状二酸化ケイ素などのヒュームドコロイド状シリカは、通常、粘度調節剤として、また特に、液体製剤の増粘剤として使用される。どのようにコロイド状シリカが使用されてきたかの一部の例を以下に示す。当技術分野で通常理解されている内容に沿って、コロイド状シリカは、組成物からの活性薬剤の放出を変えるのに役立つことが明らかにされたが、増粘剤として作用するという意味においてのみ役立つ。前に考察したように、通常、組成物が粘稠になるほど、活性薬剤の放出プロファイルが遅くなり、逆もまた同じである。これは、本発明の概念とは全く異なる。
【０１０６】
ニュージーランド国特許出願公開第５２３１２８号は、獣医学水薬製品を開示しており、この水薬製品は、溶媒中に熔解され、その後、Ａｅｒｏｓｉｌ  Ｒ９７２ヒュームドシリカなどの吸着媒体に吸着され、次に、その媒体を、熔解または懸濁された別の活性薬剤を含有する別の液体中に分散した形態の活性薬剤を含有する
【０１０７】
国際公開第０３０７０１５５号は、経口投与用配合物を開示しており、配合物は、界面活性剤とコロイド状二酸化ケイ素を含有する油状マトリックス中に懸濁された活性薬剤を含有する。組成物は、懸濁剤としての黄ろう、レシチンを含有する水素化植物油を加えた粘性溶液中で形成される。二酸化ケイ素は、分散助剤として使用され、プソイドエフェドリンＨＣｌはゼラチンカプセルとして使用される。
【０１０８】
国際公開第０１６０４０９号は、活性薬剤、ヒュームドシリカ、粘度調節剤、吸着剤、着色剤、およびキャリアを含有するペースト配合物を開示している。粘度調節剤には、ＰＥＧ２００−６００、モノエチルアミン、グリセロール、およびプロピレングリコールが含まれる。
【０１０９】
国際公開第９８２４４３６号は、コロイド状二酸化ケイ素およびトリアセチンを含有するゲル配合物を開示している。
【０１１０】
特許第３１５３６２３号（要約の英訳による）は、経口投与用半固体医薬品組成物を開示している。組成物には、薬剤、生理学的に許容可能な液体、食用油、コロイド状二酸化ケイ素、アルミニウムステアリン酸塩または高分子量ポリエチレングリコールが含まれる。
【０１１１】
米国特許第４，９８０，１７５号は、中鎖トリグリセリド中に懸濁した制酸剤成分（水酸化アルミニウム、など）およびコロイド状二酸化ケイ素を含有する経口投与用液体組成物を開示している。油の味覚を低減させるために、乳化剤（モノオレイン酸ヘキサグリセリン）が添加されている。
【０１１２】
米国特許第４，７８１，９２０号は、ミネラル油、ポリソルベート２０界面活性剤、ヒュームドシリカおよびテトラミソール樹脂酸塩を含有する駆虫薬ペーストを開示している。
【０１１３】
これらの文献は、成分の組み合わせ（および、特に界面活性剤とコロイド状シリカの組み合わせ）が相互作用し、活性薬剤の制御放出機序を与える可能性があることを開示していない。さらに、界面活性剤とコロイド状シリカの両方を含有するものは、本発明の範囲（１０００ｍＰａｓ未満の粘度の組成物）には入らないと思われる粘性液体組成物またはペーストとして記載されている。このような組成物で使用されるコロイド状シリカは、通常、制御放出を直接付与する粘度調節剤（増粘剤）として使用される。
【０１１４】
他の例では、ヒュームドコロイド状シリカは、フリーフロー剤として錠剤または粉剤に使用される。Ａｅｒｏｓｉｌは、ウェブサイトでコロイド状シリカの固化防止剤や安定剤などの他の典型的な用途に関し考察している（ｗｗｗ．ａｅｒｏｓｉｌ．ｃｏｍ）。
【０１１５】
ヒュームドコロイド状シリカは、粒子（集合および／または凝集のレベルに応じ一次、二次、三次粒子と呼ばれる）として存在する。
【０１１６】
機械的な応力を受けると、シリカ三次構造は、一次または二次凝集体に破壊され、系はより流動的になり、粘度が低下する。静止状態に戻るとすぐに、凝集シリカ粒子の三次構造が再構築され、粘度は、元の値に戻る。
【０１１７】
技術情報１２７９、Ａｅｒｏｓｉｌ、Ｄｅｇｕｓｓａで述べられているように、疎水性のＡｅｒｏｓｉｌ（登録商標）（「Ｒ」）グレードは、製造中に処理されて疎水性の表面が与えられている。このプロセス中に、シラノール基が反応を受ける。興味があるのは、疎水性のＡｅｒｏｓｉｌ（登録商標）型は、親水性の型より低い増粘効率を示す場合が多いことである。
【０１１８】
従って、液体剤形に対しては、粘度制御用に親水性のヒュームドシリカが推奨され、従って、特に貯蔵の間の固い沈殿物（すなわち、固化）の形成を防ぐ安定化用として、活性薬剤の放出の遅い、疎水性のヒュームドシリカが推奨される（ｗｗｗ．ａｅｒｏｓｉｌ．ｃｏｍ）。
【０１１９】
配合物化学で採用される一般的原理は、配合物中の増粘剤濃度の増加であり、粘度が大きいほど得られる配合物からの活性薬剤放出が遅くなるということである。
【０１２０】
この理由で、本組成物の成分を変えることにより、粘度に過度に影響することなく、活性薬剤の放出プロファイルに実質的に影響を与えることを発見したのは意外であった。このことは、本明細書中に提供される実施例で明確に例示されている。
【０１２１】
図１０に示すように、好ましい組成物からのクロキサシリン放出は、治療の４８時間超の後（例１７）に、ＭＩＣ９０＝０．５ｍｇ／Ｌ超の乳汁中濃度（ニュージーランドのクロキサシリンに対して：数値は、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ、１９９８  Ｊ  Ｄａｉｒｙ  Ｓｃｉ  ８１：５７０−５７８から引用）で長時間にわたり精密に制御できる。これは、ＮｉｔｒｏＣｌｏｘ（商標）ＬＡ（図１３）やＯｒｂｅｎｉｎ（商標）ＬＡ（図１５）などの現状市販の製品では、比較して、はるかに高い粘度であっても、４８時間の治療計画では達成できない。
【０１２２】
コロイド状シリカは、Ｐｆｉｚｅｒにより製造されているＯｒｂｅｎｉｎ（商標）ＬＡ配合物に採用されているが、増粘剤および／または固化防止剤などの従来の使用法のためのみである。活性薬剤の徐放を実現するのに使用されるヒドロキシステアリン増粘剤をコロイド状シリカに追加し、配合物の粘度を高められる。本発明とは異なり、Ｏｒｂｅｎｉｎ（商標）ＬＡ配合物には界面活性剤は含まれていない。
【０１２３】
Ｏｒｂｅｎｉｎ（商標）ＬＡ組成物に使用される増粘剤の結果として、それは、本発明により得られるよりも極めて高粘度である（実施例中で概要が示されるように）。前に考察したように、これは、注入性の問題を生ずる場合がある。従って、本発明者らは、活性薬剤放出を効果的に制御できる一方で、より低い粘度を実現できる本発明は、Ｏｒｂｅｎｉｎ（商標）ＬＡに対し大きな利点を有すると考えている。
【０１２４】
また、国際公開第８７／０３８７６号は、乾乳期中の乳房炎用の治療／予防配合物を開示している。国際公開第８７／０３８７６号は、粘性配合物を提供するために、追加の増粘剤の添加と併用したコロイド状シリカの使用について考察している。この場合も、この高粘度配合物の成果は、より長い治療期間（授乳期ではなく乾乳期中の）にわたり活性薬剤の制御放出を提供することである。これは、本発明におけるコロイド状シリカの使用とは異なる。
【０１２５】
また、国際公開第０３／０６３８７７号は、乾乳期中の乳房炎治療用にコロイド状シリカの使用を開示している。ここでも、目的は、抗生物質の徐放のためにコロイド状シリカを増粘剤として使用して高粘度配合物を提供することである。
【０１２６】
米国特許第４，４０１，６７４号は、ペニシリンおよび分子ふるいを含有する乳房内配合物を開示している。コロイド状シリカは、分子ふるいとは異なる。分子ふるいは、典型的な例では、直径数ミクロン（μｍ）でコロイド状シリカ粒子よりかなり大きい。コロイド状シリカと異なり、分子ふるいは、増粘性がなく、従って、通常、増粘剤としては使用されない。
【０１２７】
米国特許第４，４０１，６７４号の第１カラム第５４〜５８行には、配合物が授乳期の乳牛に使用される場合、乳化剤（または、代わりにヤシ油）を組成物に加え、「組成物と乳房中の水性分泌物の混合を促進する」ことができることについて考察している。これは、本発明の概念と全く異なり、本発明では、界面活性剤は、化学的にシリカ構造と相互作用し、放出速度に変化を付与すると思われる。例えば、活性薬剤の放出速度は、界面活性剤濃度の増加と共に遅くなる。界面活性剤、シリカおよび／または活性薬剤の型／量に応じて、組成物からの活性薬剤の放出速度を変えることができ、重要なのは、過度に粘度に影響を与えずに放出速度を変えることができることである。
【０１２８】
また、米国特許第４，４０１，６７４号は、乳化剤が活性薬剤の放出速度を変える可能性があるということを開示も教示もしていない。それは、単に組成物の混合を促進するために添加される。
【０１２９】
さらなる本発明の態様は、例としてのみ提示され、下記の付随する図に言及しながら行う以降の説明から明らかになるであろう。
【実施例】
【０１３０】
本発明の実施のための最良の形態
【表１】
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【表２】
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【表３】
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【表４】
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【表５】
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【表６】
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【表７】
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【表８】
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【表９】
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【表１０】
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【表１１】
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【表１２】
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【表１３】
0006271443.tif 000014
【表１４】
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【表１５】
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【表１６】
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【表１７】
0006271443.tif 000018
【０１３１】
実施例１〜１７（および、下記実施例１８でも使用）で使用されるクロキサシリンナトリウムは、微粉化形態であることに留意されたい。
【０１３２】
パート２：活性薬剤の制御放出速度の例示
図１は、現状市販されている参照製品に比べて、比較的低粘度の本発明の好ましい組成物を示す。本発明者らは、溶解溶媒中の回収率（図２〜６に示す）は、インビボでの放出速度を示すと考えている。
【０１３３】
図２は、本発明の主要利点の１つを明確に示している。Ｏｒｂｅｎｉｎ（商標）ＬＡに比べて、図２の２種の試験組成物は非常に低粘度（９０〜１５０ｍＰａｓ対１０８０ｍＰａｓ）である。増粘剤（ヒドロキシステアリン）を使用することにより、Ｏｒｂｅｎｉｎ（商標）ＬＡは、比較的遅いクロキサシリン放出（約５％）を維持できる。本組成物に比較したこのＯｒｂｅｎｉｎ（商標）ＬＡの粘度は、図１から明確に読み取れる。
【０１３４】
図２に示す２種の試験組成物は、遅い回収プロファイルを与える増粘剤を含まない。その代わり、界面活性剤（スパン８０対ＰＥＧ１２−オレアート）の注意深い選択を行って、粘度の大きな上昇もなく、クロキサシリンの回収プロファイルを大きく変化させることができる。ＰＥＧ１２−オレアートを含有する試験組成物は、Ｏｒｂｅｎｉｎ（商標）ＬＡとほぼ同じ（これより遅いとは言わないまでも）回収プロファイルであるが、粘度が比較的低いままであるのは有利である（１８０ｍＰａｓ）。
【０１３５】
図３は、活性薬剤の回収率は、界面活性剤の型の選択のみならず、それの濃度にも影響を受ける可能性があることを示す。これは、０．０５％から１％へのスパン８０（ＨＬＢ＝４．３）の濃度の増加（実施例８〜１１）により実証されている。粘度のわずかな上昇のみが認められるが、活性薬剤の回収の不釣り合いな減少が生ずる。
【０１３６】
同様に、対応する回収プロファイルの変化と共に、ＰＥＧ１２−オレアート（ＨＬＢ＝１３．７）（実施例６と７）の濃度の変化が示されている。従って、これは、界面活性剤の異なる型および濃度を使用して、インビボでの組成物の放出プロファイルを制御できることを示している。
【０１３７】
図４は、コロイド状シリカの濃度もまた、活性薬剤の回収率に影響を与えることを示す。コロイド状シリカ（この場合、ＡｅｒｏｓｉｌＲ９７２）の濃度が１．７５％から３％ｗ／ｗに増加するに伴い、回収率が低下したことが認められた。
【０１３８】
ここでも、シリカ濃度が１．７５から３％に増加するに伴い、回収プロファイルが劇的に低下したが、粘度は、わずか９０ｍＰａｓから１２７ｍＰａｓに増加しただけであった。
【０１３９】
図５は、コロイド状シリカの型もまた、活性薬剤の回収率に影響を与えることを示す。この場合、親水性コロイド状シリカ（Ａｅｒｏｓｉｌ２００）に比べて、疎水性のコロイド状シリカ（ＡｅｒｏｓｉｌＲ９７２）が回収率を大きく低下させることが示されている。このことは、親水性シリカを使用した同じ組成物に比べて、疎水性のシリカは、組成物により低い粘度を与えるにも関わらず起こる。これは、当技術分野での共通の理解に反する結果である。
【０１４０】
図６は、使用される油の型もまた、活性薬剤の回収率に影響を与え得ることを示す。
【０１４１】
図７は、治療の２時間後の異なる組織中のクロキサシリンの分布を示す。この場合、組織は、搾乳直後に残っている乳房と定義され、これには、細胞外液、血管、および場合によっては、一部の搾乳されずに残っている乳汁が含まれる。
【０１４２】
図８と図９は、他の全ての条件を実質的に同じとした場合、異なる活性薬剤がどのように活性薬剤それ自体の放出プロファイルに影響を与え得るかを示す。図８では、実施例組成物１中のクロキサシリンがセファピリンで置換された場合（実施例組成物２に示すように）、放出プロファイルは実質的に遅くなる。図９では、クロキサシリンとタイロシンとの間でも差異が認められた。これは実に意外な結果で、活性薬剤の放出が組成物の基剤中の一部または全ての賦形剤と形成されると想定される構造的ネットワークとの相互作用により影響を受ける可能性があることを示唆している。
【０１４３】
図１０〜１４は、組成物のＷＨＰが組成物の特性によりどのように影響を受け得るかを示す。
【０１４４】
図１０は、コロイド状シリカの量の１．７５％から３．００％ｗ／ｗへの増加がＷＨＰをどのように大きく変化させ得るかを示す。
【０１４５】
図１１は、治療回数がＷＨＰに影響を与えないことを示す。動物が６回×２４時間または３回×２４時間計画で治療されたに関わらず、ＷＨＰは、ほぼ等しい。
【０１４６】
図１２は、ＡＣＶＭ（農薬・動物医薬品）ガイドラインに従って計算された実施例１の組成物のＷＨＰを示す。
【０１４７】
図１３は、ＮｉｔｒｏＣｌｏｘ（商標）ＬＡに対して実施例１の組成物の有効性を示す。特に興味があるのは、実施例１の組成物を投与した場合、ＮｉｔｒｏＣｌｏｘ（商標）ＬＡよりも各治療後、活性薬剤の量がより高いことであり、治療の２４時間後、実施例１のより高いバイオアベイラビリティを示唆している。ＮｉｔｒｏＣｌｏｘ（商標）ＬＡと同様に、実施例１の組成物は、治療の２４時間後、ＭＩＣ９０（実線）未満に減少しないが、０時間目の最後の治療後、より急速に乳汁から除去される。
【０１４８】
図１４は、図１３で示された結果を反映している。実施例１の組成物は、ＮｉｔｒｏＣｌｏｘ（商標）ＬＡの１０８時間に比較して、ただの７２時間のＷＨＰであると計算される。
【０１４９】
図１５は、異なる治療計画（それぞれ、６回×２４時間対３回×４８時間）に従ってはいるが、実施例１の組成物をＯｒｂｅｎｉｎ（商標）ＬＡに対し比較している。実施例１の組成物を使用した治療計画は、Ｏｒｂｅｎｉｎ（商標）ＬＡを使用した治療計画より、ずっと長く、乳汁中の一定レベルの活性薬剤を与えるが、最後の治療後は、活性薬剤がはるかに速く乳汁から放出されることが認められる。図から明らかなように、Ｏｒｂｅｎｉｎ（商標）ＬＡによる最終治療は、９６時間目であり、一方、実施例１の組成物による最終治療は、１２０時間目であり、より長い治療期間を与える。図１６は、Ｏｒｂｅｎｉｎの３回×４８時間および５回×２４時間治療計画でのＷＨＰに比べて、実施例１の組成物の６回×２４時間治療計画での計算ＷＨＰは、それぞれ１２時間および２４時間短いことを示す。
【０１５０】
パート３：製造方法：
ａ）ミグリオール８１２、メチルパラベン、プロピルパラベンおよびスパン８０をよく混合し、均質の油混合物を形成する。
ｂ）混合物を１４０℃で３時間滅菌し、その後、室温に冷却する。
ｃ）別の容器中に必要量のＡｅｒｏｓｉｌＲ９７２Ｐｈａｒｍａを装填する。
ｄ）１４０℃で３時間滅菌し、その後、室温に冷却する。
ｅ）クロキサシリンナトリウムを滅菌油混合物中に分散し、均質化する。
ｆ）滅菌ＡｅｒｏｓｉｌＲ９７２Ｐｈａｒｍａを滅菌油懸濁液中に分散させる。
ｇ）混合物を均質化する。
【０１５１】
パート３：動物実験
２０１１年１１月に開始した試験の一部として、詳細を下記に示す実施例１８配合物のウシ乳房炎の治療での有効性を検討した。
【表１８】
0006271443.tif 000019
【０１５２】
試験に使用した動物は、臨床型乳房炎と診断された乳牛であった。０日目に、細菌学的分析用に乳汁試料を採取し、実施例１８組成物を３回乳房内にそれぞれ２４時間間隔で注入して動物を治療した。各治療での用量は、ナトリウム塩としてクロキサシリン２００ｍｇとした。
【０１５３】
２８日目および３５日目に、さらに細菌学的分析用乳汁試料を採取し、治癒率を測定した。細菌学的治癒の成功には、動物の乳房炎の臨床的治癒、および０日目試料で特定された病原体が２８日目および３５日目の試料中に存在しないことが必要である。
【０１５４】
臨床型乳房炎で、登録時に特定されたグラム陽性細菌感染の約１００頭の登録ウシから実施例１８組成物で治療した場合、２０１２年１１月１日時点で入手可能な中間結果は、６９．６％の細菌学的治癒率であった。
【０１５５】
比較研究は、ＭＤ  Ｗｒａｉｇｈｔ、Ｎｅｗ  Ｚｅａｌａｎｄ  Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ５１（１）、２６−３２、２００３「商用酪農場での授乳期ウシの臨床型乳房炎用乳房内治療薬としてのセフロキシムおよびクロキサシリンの比較に基づく有効性試験（Ａ  ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ  ｅｆｆｉｃａｃｙ  ｔｒｉａｌ  ｂｅｔｗｅｅｎ  ｃｅｆｕｒｏｘｉｍｅ  ａｎｄ  ｃｌｏｘａｃｉｌｌｉｎ  ａｓ  ｉｎｔｒａｍａｍｍａｒｙ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ  ｆｏｒ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｍａｓｔｉｔｉｓ  ｉｎ  ｌａｃｔａｔｉｎｇ  ｃｏｗｓ  ｏｎ  ｃｏｍｍｅｒｃｉａｌ  ｄａｉｒｙ  ｆａｒｍｓ）」、で報告されている。この研究では、４８時間毎の３回治療により長時間作用型配合物中の２００ｍｇのクロキサシリンが乳房内投与され、６４．３％の細菌学的治癒率が得られた。
【０１５６】
実施例１８組成物に関する中間研究結果は、同じ活性薬剤を使用したより強力な長時間作用型治療薬に比較した場合でも、本発明の組成物の高い有効性を実証している。これは、本発明の組成物を使用して有利なより短い出荷制限期間を得ることが、治療の有効性を減らしたり、または損なったりしないことを示している。
【０１５７】
パート４：配合物の安定性
実施例１８の組成物の３つのバッチに関し安定性試験を行った。これらのバッチを、５ｍＬのポリエチレンシリンジに充填し、２５℃／６０％ＲＨ、３０℃／６５％ＲＨおよび４０℃／７５％ＲＨの指定貯蔵温度と湿度条件で貯蔵した。ＡＣＶＭにより推奨される規則的間隔でバッチの物理的および化学的特性を記録した。安定性データに基づくと、２５℃の貯蔵温度で、少なくとも１８ヶ月間の保存可能期間が期待される。
【０１５８】
本発明の態様を例としてのみ記載してきたが、添付の請求項に規定される範囲を逸脱することなく、それにこれに対して変更および追加を行うことができることは理解されよう。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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