(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
化合物であって、
【化１】
0006321844.tif 000028
及びそれらの薬学的に許容される塩からなる群から選択される化合物。
【請求項２】
請求項１に記載の化合物と、薬学的に許容される担体、溶媒、アジュバント、又は希釈剤とを含む医薬組成物。
【請求項３】
対象におけるニューロンカルシウムホメオスタシス不全を正常化するための医薬の製造における化合物の使用であって、前記化合物は請求項１に記載の化合物を含む、使用。
【請求項４】
前記対象がヒト対象である、請求項３に記載の使用。
【請求項５】
対象における神経学的障害又は神経変性障害を治療するための医薬の製造における化合物の使用であって、前記化合物は請求項１に記載の化合物を含む、使用。
【請求項６】
前記神経学的障害又は神経変性障害が、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、前頭側頭認知症、ピック病、慢性外傷性脳障害、外傷性脳損傷、脳卒中、小脳性運動失調、多発性硬化症、ダウン症候群、又は加齢関連ＣＮＳ障害である、請求項５に記載の使用。
【請求項７】
前記神経学的障害又は神経変性障害がアルツハイマー病である、請求項６に記載の使用。
【請求項８】
対象におけるニューロンカルシウムホメオスタシス不全を正常化するための医薬の製造における化合物の使用であって、前記化合物が、
【化２−１】
0006321844.tif 000029
【化２−２】
0006321844.tif 000030
及びそれらの薬学的に許容される塩からなる群から選択される、使用。
【請求項９】
対象におけるニューロンカルシウムホメオスタシス不全を正常化するための医薬の製造における化合物の使用であって、前記化合物が、
【化３】
0006321844.tif 000031
又はその薬学的に許容される塩である、使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、リアノジン受容体チャネルを安定化させる化合物に関する。
【背景技術】
【０００２】
アルツハイマー病（ＡＤ）、パーキンソン病、ハンチントン病、前頭側頭認知症、並びに外傷性脳損傷（ＴＢＩ）及び関連認識障害、及びＣＴＥ（慢性外傷性脳障害）等の脳外傷を含む神経変性疾患を治療するための有効な薬物治療は、依然として実現が困難である。
【０００３】
現在まで、ＡＤ及び他の神経変性疾患を治療するための複数の第ＩＩＩ相臨床治験が、失敗に終わっている。それは、必ずしも治験が目的に合わなかったわけではなく、目的が、所望の治療転帰、即ち認知能力の保持から乖離している可能性があるからである。ＡＤ療法の大多数の臨床治験は、アミロイド前駆タンパク質（ＡＰＰ）プロセシングに着目しており、アミロイドレベルは、臨床治験の多くで低下したが、記憶能力にプラスの効果はなかった。更に、毒性問題及び認知機能悪化等の合併症が現れている（非特許文献１〜３）。これらの化合物が成功しなかったと考え得る理由は、細胞及びシナプス病理が生じた後では、化合物の投与が遅すぎたということであり、その段階でアミロイドを除去しても、シナプス損傷は改善されないであろう。
【０００４】
ＡＤ及び他の神経変性疾患を治療するための代替手法は、異常な病因性カルシウムシグナル伝達カスケードを標的とすることである。カルシウムシグナル伝達の安定化は、神経変性疾患の多くの主要な特徴及び危険因子に結び付けられている病原性機序を標的とする。この戦略は、アミロイド凝集等の単一の診断エンドポイントを標的とするのではなく、アミロイド病理、タウ過剰リン酸化、アポトーシス、シナプス病態生理、及び記憶欠損に関連する病因性促進因子、つまり長期的なカルシウムホメオスタシス不全を正常化することを目的とする。
【０００５】
ニューロンのカルシウムシグナル伝達は、遺伝子転写、細胞死、シナプス完全性（ｓｙｎａｐｔｉｃ  ｉｎｔｅｇｒｉｔｙ）、シナプス可塑性、及び記憶符号化（ｍｅｍｏｒｙ  ｅｎｃｏｄｉｎｇ）を含む多数の重要な機能に必須である。例えば、多数のＡＤモデル、並びに家族性及び孤発性ＡＤ患者に由来する細胞では、リアノジン受容体（ＲｙＲ）チャネルからの小胞体（ＥＲ）カルシウム放出の初期増加が生じる。特筆すべきは、ＲｙＲアイソフォーム２（ＲｙＲ２）発現が、ＡＤ患者及びマウスモデルでも同様に変更されることである。ニューロンカルシウムホメオスタシス不全は、ＡＤを規定する主要な危険因子、組織病理学的特徴、シナプス欠損、及び認知障害全てに関連しており、したがって、ＥＲカルシウムを安定化することは、一連のＡＤ関連病理に幅広く影響を及ぼす可能性がある。幾つかの最近の研究は、ＡＤマウスに由来するニューロンを、臨床的に利用可能なＲｙＲ安定剤であるダントロレンで処置することにより、アミロイド沈着が低減され、記憶能力が改善し、細胞内のカルシウム変化が元に戻り、ＲｙＲ発現が正常化されることを示している（非特許文献３、４）。同様の治療効果は、外傷性脳損傷（ＴＢＩ）のモデルでも明らかである。軽度のＴＢＩにさらされた後のＴｇＣＲＮＤ８マウスをダントロレンで長期的に処置すると、病的タウリン酸化の量は、著しく低下する（図５）。しかしながら、ダントロレンは、病原性である場合があり、ダントロレンでの長期経口処置（１０か月＋）は、アミロイド病理を増加させることが見出された（非特許文献５）。
【０００６】
したがって、当技術分野では、リアノジン受容体チャネルを安定化させることが可能な新規化合物の必要性が存在する。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Ｇｏｌｄｅら、２００９年、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ３２４巻：６０３〜６０４頁
【非特許文献２】Ｋｅｒｃｈｎｅｒ＆Ｂｏｘｅｒ、２０１０年、Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｏｎ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｔｈｅｒａｐｙ  １０巻：１１２１〜１１３０頁
【非特許文献３】Ｃｈａｋｒｏｂｏｒｔｙ及びＳｔｕｔｚｍａｎｎ、２０１３年１２月６日、Ｅｕｒ  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，ｐｉｉ：Ｓ００１４−２９９９（１３）００８８３−２．ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｅｊｐｈａｒ．２０１３．１１．０１２［Ｅｐｕｂ  ａｈｅａｄ  ｏｆ  ｐｒｉｎｔ］
【非特許文献４】Ｏｕｌｅｓら、２０１２年、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ  ３２巻：１１８２０〜１１８３４頁
【非特許文献５】Ｚｈａｎｇら、２０１０年、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ  ３０巻：８５６６〜８５８０頁
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本開示は、従来技術に対して、ある利点及び進歩を提供するものである。特に、本開示は、ＲｙＲを標的とする新規の低分子化合物を含む組成物及び方法を提供する。本明細書で開示されたＲｙＲチャネル安定剤での処置は、異常なＥＲカルシウムシグナル伝達を正常化し、ＲｙＲチャネル安定剤がアミロイド病理を低減するアルツハイマー病等の神経変性疾患の治療に向けてシナプス機能を保存する。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
したがって、本開示が提供する１つの態様は、式Ｉの化合物又はその薬学的に許容される塩を提供する。
【００１０】
【化１】
0006321844.tif 000002
【００１１】
式中、Ａｒは、アリール又はへテロアリールであり、それらの各々は、１、２、３、４、又は５個のＲ６基で置換されていてもよく、
Ｗは、Ｓ又はＯであり、
Ｙは、置換された（アリール）Ｃ１〜６アルキル−、又は
【００１２】
【化２】
0006321844.tif 000003
【００１３】
であり、式中、
Ｚは、Ｃ１〜６アルキル、ベンジル、アリール、へテロアリール、又はＮＲ４Ｒ５であり、ここで、アルキル、ベンジル、アリール、又はへテロアリールは、１、２、３、４、又は５つの独立して選択されるＲ７基で置換されていてもよく、
Ｒ３は、水素であるか、又はＲ３はＺと共に、１つ又は複数のＲ７基で置換されていてもよい複素環を形成してもよく、
Ｒ１及びＲ２は、水素、ハロ、ＣＮ、ニトロ、ヒドロキシ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６ハロアルコキシ、アミノ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ−Ｃ１〜４−アルキルアミノ、カルボキシ、カルバミル、Ｃ１〜６アルキルカルバミル、ジ（Ｃ１〜４アルキル）カルバミル、Ｃ１〜６アルキルカルボニル、Ｃ１〜６アルコキシカルボニル、Ｃ１〜６アルキルカルボニルオキシ、Ｃ１〜６アルキルスルホニル、Ｃ１〜６アルキルカルボニルアミノ、Ｃ１〜６アルキルスルホニルアミノ、アミノスルホニル、Ｃ１〜６アルキルアミノスルホニル、ジ−Ｃ１〜４アルキルアミノスルホニル、アミノスルホニルアミノ、Ｃ１〜６アルキルアミノスルホニルアミノ、及びジ−Ｃ１〜４アルキルアミノスルホニルアミノから各々独立して選択され、各々は、好適な位置において、ハロ、ＣＮ、ヒドロキシ、Ｃ１〜３アルキル、Ｃ１〜３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜３アルキルアミノ、及びジ−Ｃ１〜３−アルキルアミノから独立して選択される１、２、又は３つの基で置換されていてもよく、
Ｒ４及びＲ５は、水素、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ハロアルキル、アミノ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ−Ｃ１〜４−アルキルアミノ、カルボキシ、カルバミル、Ｃ１〜６アルキルカルバミル、ジ（Ｃ１〜４アルキル）カルバミル、Ｃ１〜６アルキルカルボニル、Ｃ１〜６アルコキシカルボニル、Ｃ１〜６アルキルカルボニルオキシ、Ｃ１〜６アルキルスルホニル、Ｃ１〜６アルキルカルボニルアミノ、Ｃ１〜６アルキルスルホニルアミノ、アミノスルホニル、Ｃ１〜６アルキルアミノスルホニル、ジ−Ｃ１〜４アルキルアミノスルホニル、アミノスルホニルアミノ、Ｃ１〜６アルキルアミノスルホニルアミノ、ジ−Ｃ１〜４アルキルアミノスルホニルアミノ、及び（アリール）−ヘテロアリール−ＣＨ＝Ｎ−から各々独立して選択されるか、又はＲ４及びＲ５は、それらに結合している窒素と共に複素環を形成し、各部分（ｍｏｉｅｔｙ）は、好適な位置において、ハロ、ＣＮ、ヒドロキシ、Ｃ１〜３アルキル、Ｃ１〜３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜３アルキルアミノ、及びジ−Ｃ１〜３−アルキルアミノから独立して選択される１、２、又は３つの基で置換されていてもよく、
Ｒ６及びＲ７は、ハロ、ＣＮ、ニトロ、ヒドロキシ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６ハロアルコキシ、アミノ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ−Ｃ１〜４−アルキルアミノ、カルボキシ、カルバミル、Ｃ１〜６アルキルカルバミル、ジ（Ｃ１〜４アルキル）カルバミル、Ｃ１〜６アルキルカルボニル、Ｃ１〜６アルコキシカルボニル、Ｃ１〜６アルキルカルボニルオキシ、Ｃ１〜６アルキルスルホニル、Ｃ１〜６アルキルカルボニルアミノ、Ｃ１〜６アルキルスルホニルアミノ、アミノスルホニル、Ｃ１〜６アルキルアミノスルホニル、ジ−Ｃ１〜４アルキルアミノスルホニル、アミノスルホニルアミノ、Ｃ１〜６アルキルアミノスルホニルアミノ、ジ−Ｃ１〜４アルキルアミノスルホニルアミノ、及びオキソから各々独立して選択され、各々は、好適な位置において、ハロ、ＣＮ、ヒドロキシ、Ｃ１〜３アルキル、Ｃ１〜３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜３アルキルアミノ、及びジ−Ｃ１〜３−アルキルアミノから独立して選択される１、２、又は３つの基で置換されていてもよく、
但し、上記化合物は、１−｛（［５−（４−ニトロフェニル）−２−フリル］メチリデンアミノ｝イミダゾリジン−２，４−ジオン又は１−｛［５−（４−ブロモフェニル）−２−フリル］メチリデンアミノ｝イミダゾリジン−２，４−ジオンではない。
【００１４】
幾つかの実施形態では、Ａｒは、１、２、３、４、又は５つのＲ６基で置換されていてもよいアリールである。
幾つかの実施形態では、本開示は、式Ｉの化合物を提供し、上記化合物は、式ＩＩで表される。
【００１５】
【化３】
0006321844.tif 000004
【００１６】
式中、Ｒａ１、Ｒａ２、及びＲａ３は、水素、ハロ、ＣＮ、ニトロ、ヒドロキシ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６ハロアルコキシ、アミノ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ−Ｃ１〜４−アルキルアミノ、カルボキシ、カルバミル、Ｃ１〜６アルキルカルバミル、及びジ（Ｃ１〜４アルキル）カルバミルから独立して選択される。
【００１７】
幾つかの実施形態では、ＷはＯである。幾つかの実施形態では、Ｒ１及びＲ２は、両方とも水素である。幾つかの実施形態では、本開示は、式Ｉ又はＩＩの化合物を提供し、式中、Ｙは、
【００１８】
【化４】
0006321844.tif 000005
【００１９】
であり、
式中、Ｚは、Ｃ１〜６アルキル、ベンジル、アリール、へテロアリール、又はＮＲ４Ｒ５であり、ここで、アルキル、ベンジル、アリール、又はへテロアリールは、１、２、３、４、又は５つの独立して選択されるＲ７基で置換されていてもよく、Ｒ３は水素である。
【００２０】
幾つかの実施形態では、Ｚは、メチル又はエチルである。幾つかの実施形態では、Ｚはベンジルである。幾つかの実施形態では、Ｚはピリジニルである。幾つかの実施形態では、ＺはＮＲ４Ｒ５である。幾つかの実施形態では、Ｒ４及びＲ５は、水素である。幾つかの実施形態では、Ｒ４及びＲ５は窒素と共に、Ｃ１〜３アルキル、Ｃ１〜３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜３アルキルアミノ、及びジ−Ｃ１〜３−アルキルアミノで置換されていてもよいピペラジニル環を形成する。
【００２１】
幾つかの実施形態では、本開示は、式Ｉ又はＩＩの化合物を提供し、式中、Ｚは、Ｃ１〜６アルキル、ベンジル、アリール、へテロアリール、又はＮＲ４Ｒ５であり、ここで、アルキル、ベンジル、アリール、又はへテロアリールは、１、２、３、４、又は５つの独立して選択されるＲ７基で置換されていてもよく、Ｒ３はＺと共に、１つ又は複数のＲ７基で置換されていてもよい複素環を形成してもよい。
【００２２】
幾つかの実施形態では、本開示は、式Ｉの化合物又はその薬学的に許容される塩を提供し、上記化合物は、以下のものからなる群から選択される：
【００２３】
【化５−１】
0006321844.tif 000006
【００２４】
【化５−２】
0006321844.tif 000007
【００２５】
また、本開示は、式Ｉ又はＩＩの化合物を製造するのに有用な合成中間体を提供する。また、本開示は、本開示の化合物を調製する方法、及びそのような方法で使用される中間体を提供する。
【００２６】
本開示の別の態様は、薬学的に許容される担体、溶媒、アジュバント、又は希釈剤、及び１つ又は複数の式Ｉ又はＩＩの化合物を含む医薬組成物を提供する。
別の態様では、本開示は、有効量の１つ又は複数の式Ｉ又はＩＩの化合物を対象に投与することを含む、対象のニューロンカルシウムホメオスタシス不全を正常化する方法を提供する。幾つかの実施形態では、対象は、ヒト対象である。
【００２７】
別の態様では、本開示は、有効量の１つ又は複数の式Ｉ又はＩＩの化合物を対象に投与することを含む、対象の神経学的障害又は神経変性障害を治療する方法を提供する。
別の態様では、本開示は、１つ又は複数の式Ｉ又はＩＩの化合物を含む、神経学的障害又は神経変性障害を治療するための組成物を提供する。
【００２８】
別の態様では、本開示は、神経学的障害又は神経変性障害を治療する組成物を調製するための、１つ又は複数の式Ｉ又はＩＩの化合物の使用を提供する。
幾つかの実施形態では、神経学的障害又は神経変性障害は、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、前頭側頭認知症、ピック病、慢性外傷性脳障害、外傷性脳損傷、脳卒中、小脳性運動失調、多発性硬化症、ダウン症候群、又は加齢関連ＣＮＳ障害である。幾つかの実施形態では、神経学的障害又は神経変性障害は、アルツハイマー病である。幾つかの実施形態では、対象は、ヒト対象である。
【００２９】
本発明のこれらの及び他の特徴及び利点は、添付の特許請求の範囲と共に、以下の本発明の詳細な説明からより完全に理解されるであろう。なお、特許請求の範囲は、本明細書中の説明に示されている特徴及び利点の特定の考察によってではなく、特許請求の範囲に記載されているものにより規定される。
【００３０】
本発明の実施形態の以下の詳細な説明は、以下の図面と共に読むと最もよく理解することができる。
【図面の簡単な説明】
【００３１】
【図１】ＮｏｎＴｇ海馬ＣＡ１ニューロンに由来する、細胞体（１Ａ）又は樹状突起（１Ｂ）内のＲｙＲ誘発Ｃａ２＋応答の代表的な画像である。１Ｃ及び１Ｄは、ＡＤニューロンであること以外は、上記と同じある。これらの結果は、３×Ｔｇ−ＡＤニューロンでのＲｙＲ誘発Ｃａ２＋放出が増加したことを示す。１Ｅは、ＮｏｎＴｇ薄灰色及びＡＤ濃灰色ニューロンの１区画当たりで平均したＲｙＲ誘発Ｃａ２＋応答を示す棒グラフである。ＡＤ値は、全ての区画でＮｏｎＴｇよりも著しく大きい；ｐ＜０．０５。
【図２Ａ】ダントロレン（Ｄａｎｔ）で処置した４週間後、ＡＤマウスモデルのＡＤ病理が反転したことを示す図である。生理食塩水（Ｓａｌ）処置ＡＰＰ／ＰＳ１マウスでは、細胞体でのＥＲカルシウム応答が著しく増加し、４週間のダントロレン処置は、このカルシウム応答を正常化するが、ＮｏｎＴｇ対照には影響を及ぼさない。＊＝ｐ＜０．０５。
【図２Ｂ】ダントロレン（Ｄａｎｔ）で処置した４週間後、ＡＤマウスモデルのＡＤ病理が反転したことを示す図である。生理食塩水（Ｓａｌ）処置ＡＰＰ／ＰＳ１マウスでは、樹状突起でのＥＲカルシウム応答が著しく増加し、４週間のダントロレン処置は、このカルシウム応答を正常化するが、ＮｏｎＴｇ対照には影響を及ぼさない。＊＝ｐ＜０．０５。
【図２Ｃ】ダントロレンで処置した４週間後、ＡＤマウスモデルのＡＤ病理が反転したことを示す図である。代表的なグレイスケールの２光子画像が示されている。
【図２Ｄ】ダントロレンで処置した４週間後、ＡＤマウスモデルのＡＤ病理が反転したことを示す図である。示されているように、４Ｇ８免疫染色により示されたベータアミロイドレベルは、ダントロレン処置マウスの海馬及び皮質では４５％低減されている。
【図２Ｅ】ダントロレンで処置した４週間後、ＡＤマウスモデルのＡＤ病理が反転したことを示す図である。共焦点顕微鏡を用いて、シナプス前及びシナプス後マーカー（それぞれ、シナプトフィジン及びＰＳＤ−９５免疫染色）の共局在化によって測定されるシナプス完全性が、ダントロレン処置ＡＤマウスでは回復することを示す。＊＝ｐ＜０．０５。
【図３】４週間のダントロレン処置後に、ＡＤトランスジェニックマウスのＲｙＲ２発現レベルが正常化したこと示す図である。棒グラフは、０．９％生理食塩水又は１０ｍｇ／ｋｇのダントロレンで処置したＮｏｎＴｇマウス及びＡＤ−Ｔｇマウスの海馬（３×Ｔｇ−ＡＤは表示；ＡＰＰ／ＰＳ１は非表示）に由来するＲｙＲ２アイソフォーム（３Ａ）及びＲｙＲ３アイソフォーム（３Ｂ）の相対的ｍＲＮＡ発現レベルを示す。ダントロレンで処置したＡＤ−Ｔｇマウスは、生理食塩水処置ＡＤ−Ｔｇマウスと比較して、正常化されたＲｙＲ２の発現レベルを示す。＊＝ｐ＜０．０５。
【図４】長期ダントロレン（Ｒｙａｎｏｄｅｘ；１０ｍｇ／ｋｇ  ＩＰ；４週間）処置後に、ＴＧ−ＣＲＮＤ８  ＡＤマウスの海馬のリン酸化タウレベルが低減したことを示す図である。ＣＰ１３でリン酸化タウを免疫染色すると、生理食塩水処置マウス（４か月齢）（４Ａ）の歯状回では広範囲な染色が見られるが、ダントロレン処置マウス（４Ｂ）では見られない。ダントロレンでＲｙＲカルシウムシグナル伝達を安定化すると、リン酸化タウ染色は著しく低減される。４Ｃは、歯状回におけるＣＰ１３蛍光染色を有する面積の平均％を示すヒストグラムである。＊ｐ＜０．０５。ｎ＝９切片／３動物／群。
【図５】長期ダントロレン（Ｒｙａｎｏｄｅｘ；１０ｍｇ／ｋｇ  ＩＰ；４週間）処置後、Ｃ５７マウスにおける単一外傷性脳損傷（制御された皮質衝撃）に起因する病的リン酸化タウレベルが低減したことを示す図である。ＣＰ１３でリン酸化タウを免疫染色すると、生理食塩水処置マウス（５Ａ）の歯状回では広範囲の染色が見られるが、ダントロレン処置マウス（５Ｂ）では見られない。ダントロレンでＲｙＲカルシウムシグナル伝達を安定化すると、ＣＰ１３リン酸化タウ染色は著しく低減される。５Ｃは、歯状回におけるＣＰ１３蛍光染色を有する面積の平均％を示すヒストグラムである。＊ｐ＜０．０５。ｎ＝６〜９切片／３動物／群。
【図６】ＲｙＲ安定化分子ＲＤ０５及びＲＤ１４の構造を示す図である。これらは、ダントロレンと比較して、Ｃａ２＋放出に対して同等の又は優れた効果を示し、溶解度及びＣＮＳ浸透性の著しい向上を示す。
【図７】７Ａおよび７Ｂは、ＲｙＲアゴニストであるカフェイン（１０ｍＭ）で強力に刺激した際の、培養Ｎ２Ａ細胞の最大カルシウム応答を示すヒストグラムである。７Ａでは、平均最大ＲｙＲ誘発カルシウム応答は、明灰色のバーで示されており、その右側のより暗い灰色のバーは、ＲｙＲチャネル安定剤ダントロレン（Ｒｙａｎｏｄｅｘ、１０ｍＭ）と共に３０分間事前にインキュベートした細胞では、同じアゴニストに対してカルシウム応答が低下したことを示す。この場合、誘発されたＲｙＲカルシウム応答は、６０％を超えて低減される。その次の（模様付き）バーは、本明細書で開示された種々のＲｙＲチャネル安定剤（１０μＭ）と共にインキュベートした細胞を示しており、それらの大多数は、ダントロレンと比較して、同程度ないし増強されたカルシウム安定化特性を示す（点線は、望ましい効果範囲を表す）。７Ｂは、更なる化合物のセットを用いて実施した同じ一連の実験を示す。Ｎ＝１化合物当たり３〜６枚のプレート；＊ｐ＜０．０５、一元配置ＡＮＯＶＡ。
【図８Ａ】３×Ｔｇ−ＡＤマウスモデルにおける、ニューロンカルシウムシグナル伝達及び電気生理学的膜特性に対する新規ＲｙＲ安定化化合物の効果を示す図である。対照（ｃｔｒｌ）条件下で、又はダントロレン若しくは本明細書で開示されたＲｙＲチャネル安定化化合物の１つと共にインキュベーションした後で（１０μＭ、１時間）、海馬脳切片をＲｙＲアゴニストであるカフェインと接触させた。その後、ＣＡ１錐体ニューロンのＲｙＲ誘発カルシウム応答を、２光子顕微鏡及びホールセルパッチクランプ測定で測定した。対照条件下で増強されたＡＤニューロンのＲｙＲ誘発カルシウム応答は、ダントロレン、ＣＫ０１３、及びＣＫ０１７では生理学的レベル内へと著しく低減された。点線は、おおよそ望ましいレベルのＲｙＲ誘発カルシウム応答を示す。＊ｐ＜０．０５。ｎ＝４〜７ニューロン／群。
【図８Ｂ】３×Ｔｇ−ＡＤマウスモデルにおける、ニューロンカルシウムシグナル伝達及び電気生理学的膜特性に対する新規ＲｙＲ安定化化合物の効果を示す図である。対照（ｃｔｒｌ）条件下で、又はダントロレン若しくは本明細書で開示されたＲｙＲチャネル安定化化合物の１つと共にインキュベーションした後で（１０μＭ、１時間）、海馬脳切片をＲｙＲアゴニストであるカフェインと接触させた。その後、ＣＡ１錐体ニューロンの電圧開口型カルシウム応答を、２光子顕微鏡及びホールセルパッチクランプ測定で測定した。種々の化合物と共にインキュベーションした際の電圧開口型カルシウム応答に有意差はなかった。＊ｐ＜０．０５。ｎ＝４〜７ニューロン／群。
【図８Ｃ】３×Ｔｇ−ＡＤマウスモデルにおける、ニューロンカルシウムシグナル伝達及び電気生理学的膜特性に対する新規ＲｙＲ安定化化合物の効果を示す図である。対照（ｃｔｒｌ）条件下で、又はダントロレン若しくは本明細書で開示されたＲｙＲチャネル安定化化合物の１つでインキュベーションした後で（１０μＭ、１時間）、海馬脳切片をＲｙＲアゴニストであるカフェインと接触させた。また、静止膜電位（ＲＭＰ）を、これらの条件下で測定した。種々の化合物と共にインキュベーションした際のＲＭＰに有意差はなかった。＊ｐ＜０．０５。ｎ＝４〜７ニューロン／群。
【図８Ｄ】３×Ｔｇ−ＡＤマウスモデルにおける、ニューロンカルシウムシグナル伝達及び電気生理学的膜特性に対する新規ＲｙＲ安定化化合物の効果を示す図である。対照（ｃｔｒｌ）条件下で、又はダントロレン若しくは本明細書で開示されたＲｙＲチャネル安定化化合物の１つでインキュベーションした後で（１０μＭ、１時間）、海馬脳切片をＲｙＲアゴニストであるカフェインと接触させた。また、膜入力抵抗（Ｒｉ）を、これらの条件下で測定した。種々の化合物と共にインキュベーションした際のＲｉに有意差はなかった。＊ｐ＜０．０５。ｎ＝４〜７ニューロン／群。
【図９】ＲｙＲチャネル安定化剤ＣＫ０１３及びＣＫ０１７で長期処置（１０ｍｇ／ｋｇ、ｉｐ；４週間）した後、成体３×Ｔｇ−ＡＤマウスに由来する急性海馬脳切片でのＲｙＲ誘発カルシウム応答が正常化されることを示す。ＣＡ１海馬ニューロンでのＲｙＲ誘発カルシウム応答のピークは、１０ｍＭカフェインの浴適用により誘発された。生理食塩水処置３×Ｔｇ−ＡＤマウスは、ＮｏｎＴｇ生理食塩水処置マウス、並びにＣＫ０１３及びＣＫ０１７処置３×Ｔｇ−ＡＤマウスと比べて、有意に大きいカルシウム応答を生じた。ＣＫ０１３及びＣＫ０１７薬物処置３×Ｔｇ−ＡＤマウスのカルシウム応答は、対照ＮｏｎＴｇ生理食塩水処置マウスと異なるものではなかった。＊＝一元配置ＡＮＯＶＡ：Ｆ（３，３８）＝６０．６；ｐ＜０．００１。
【発明を実施するための形態】
【００３２】
当業者であれば、図中の要素は、簡潔性及び明瞭性のために例示されており、必ずしも正しい縮尺で示されている訳ではないことを認識するであろう。例えば、図中の要素の幾つかの寸法は、本発明の実施形態の理解向上を支援するために、他の要素と比べて誇張されている場合がある。
【００３３】
本明細書に引用されている刊行物、特許、及び特許出願は全て、あらゆる目的のために、参照により本明細書に明示的に組み込まれる。
本発明を詳細に記載する前に、多数の用語を定義することとする。本明細書で使用される場合、「１つの」、「その」、及び「前記」は、状況が明白にそうではないと示さない限り、複数の指示対象を含む。例えば、「（１つの）タンパク質」への言及は、１つ又は複数のタンパク質を意味する。
【００３４】
なお、本明細書では、用語「好ましくは」、「一般的に」、及び「典型的に」は、請求されている発明の範囲を制限するために使用されているのではなく、また、ある特徴が、請求されている発明の構造又は機能にとって、決定的に重要であること、不可欠であること、又は重要であることをさえ示唆するためにも使用されているのではない。むしろ、これらの用語は、本発明の特定の実施形態に使用することができるか又は使用することができない代替的又は追加の特徴を強調することが意図されているに過ぎない。
【００３５】
本発明を説明及び規定する目的では、用語「実質的に」は、本明細書では、任意の量的比較、値、測定値、又は他の表現に帰することができる固有の不確実性を表すために使用されることに留意されたい。用語「実質的に」は、本明細書では、量的表現が、当該主題の基本機能に変化をもたらさずに、記載された基準から変動することができる程度を表すためにも使用される。
【００３６】
商標が使用される場合、その商標の製品製剤、その商標の製品のジェネリック医薬品及び活性医薬成分を独立して含むことが意図される。
本明細書で使用される用語には、示された置換基とその親部分との間の結合の結合次数を示すための単一ダッシュ「−」又は２重ダッシュ「＝」が先行又は後続する場合があり、単一ダッシュは単結合を示し、２重ダッシュは二重結合を示す。
【００３７】
【化６】
0006321844.tif 000008
【００３８】
は、単結合又は二重結合を意味する。単一ダッシュ又は二重ダッシュがない場合、置換基とその親部分との間には単結合が形成されていると理解される。更に、置換基は、ダッシュが別様に指示しない限り、「左から右に」読むことが意図されている。例えば、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシカルボニルオキシ及び−ＯＣ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキルは、同じ官能基を示し、同様に、アリールアルキル及び−アルキルアリールは、同じ官能基を示す。
【００３９】
化学構造が図示又は記述される場合、明示的に別様に指定されていない限り、炭素は全て、４原子価を満たす水素置換を有すると仮定される。例えば、下記の模式図の左側の構造には、右側の構造に図示されているように、９つの水素が暗示的に存在する。場合によっては、構造中の特定の原子は、置換として１つ又は複数の水素を有するもの（明示的に水素と規定されている）ものとして、文字式で例えば−ＣＨ２ＣＨ２−のように記載される。前述の記述法は説明を簡潔かつ平易にするために化学分野で一般的であり、そうしなければ構造を複雑にしてしまうことが、当業者には理解される。
【００４０】
【化７】
0006321844.tif 000009
【００４１】
用語「アルコキシ」は、本明細書で使用される場合、酸素原子を介して親分子部分に結合されている、本明細書の定義によるアルキル基を意味する。アルコキシの代表的な例には、限定されるものではないが、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、２−プロポキシ、ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、ペンチルオキシ、及びヘキシルオキシが含まれる。
【００４２】
用語「アルキル」は、本明細書で使用される場合、別様の指示がない限り、１〜２０個の炭素原子を含む直鎖又は分岐鎖炭化水素を意味する。アルキルの代表的な例には、限定されるものではないが、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソ−プロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ｎ−ヘキシル、３−メチルヘキシル、２，２−ジメチルペンチル、２，３−ジメチルペンチル、ｎ−ヘプチル、ｎ−オクチル、ｎ−ノニル、及びｎ−デシルが含まれる。用語「アルキレン」は、二価のアルキル基を指し、アルキルは、本明細書で定義されている通りである。
【００４３】
用語「アリール」は、本明細書で使用される場合、フェニル（つまり、単環式アリール）、又は少なくとも１つのフェニル環を含む二環式環系、又は芳香族二環式環系に炭素原子のみを含む芳香族二環式環、又は少なくとも１つのフェニル環を含む多環式環系を意味する。二環式アリールは、単環式シクロアルキル、単環式シクロアルケニル、又は単環式ヘテロシクリルに融合したアズレニル、ナフチル、又はフェニルであってもよい。二環式アリールは、二環系のフェニル部分内に含まれる任意の炭素原子、又はナプチル環若しくはアズレニル環の任意の炭素原子を介して親分子部分に結合されている。
【００４４】
用語「シアノ」及び「ニトリル」は、本明細書で使用される場合、−ＣＮ基を意味する。
用語「ハロ」又は「ハロゲン」は、本明細書で使用される場合、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、又は−Ｆを意味する。
【００４５】
用語「ハロアルキル」及び「ハロアルコキシ」は、場合に応じて１つ又は複数のハロゲン原子で置換されているアルキル又はアルコキシ基を指す。
用語「へテロアリール」は、本明細書で使用される場合、単環式へテロアリール系か、又は少なくとも１つのヘテロ芳香族環を含む二環式環系を意味する。単環式へテロアリールは、５員環又は６員環であってもよい。５員環は、２つの二重結合、及び１、２、３、又は４つの窒素原子、及び任意選択で１つの酸素原子又は硫黄原子から構成される。６員環は、３つの二重結合、及び１、２、３、又は４つの窒素原子から構成される。５員又は６員へテロアリールは、へテロアリール内に含まれている任意の炭素原子又は任意の窒素原子を介して親分子部分に結合されている。二環式へテロアリールは、フェニル、単環式シクロアルキル、単環式シクロアルケニル、単環式ヘテロシクリル、又は単環式へテロアリールに融合した単環式へテロアリールから構成される。二環式へテロアリールは、いずれの環式部分を介して結合されていてもよい（例えば、へテロアリール又はフェニルのいずれを介してでもよい）。へテロアリールの代表的な例には、限定されるものではないが、以下のものが含まれる：フリル、イミダゾリル、イソオキサゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、オキサゾリル、ピリジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、ピラゾリル、ピロリル、テトラゾリル、チアジアゾリル、チアゾリル、チエニル、トリアゾリル、トリアジニル、ベンズイミダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾチエニル、ベンゾオキサジアゾリル、ベンゾオキサチアジアゾリル、ベンゾチアゾリル、シンノリニル、５，６−ジヒドロキノリン−２−イル、５，６−ジヒドロイソキノリン−１−イル、フロピリジニル、インダゾリル、インドリル、イソキノリニル、ナフチリジニル、キノリニル、又はプリニル。
【００４６】
用語「ヘテロシクリル」は、本明細書で使用される場合、単環式ヘテロ環又は二環式ヘテロ環を意味する。単環式ヘテロ環は、Ｏ、Ｎ、及びＳからなる群から独立して選択される少なくとも１つのヘテロ原子を含む３員、４員、５員、６員、又は７員環であって、これらの環は飽和又は不飽和であるが、芳香族ではない。３員環又は４員環は、Ｏ、Ｎ、及びＳからなる群から選択される１つのヘテロ原子を含む。５員環は、０又は１つの二重結合、並びにＯ、Ｎ、及びＳからなる群から選択される１、２、又は３つのヘテロ原子を含んでいてもよい。６員環又は７員環は、０、１、又は２つの二重結合、並びにＯ、Ｎ、及びＳからなる群から選択される１、２、又は３つのヘテロ原子を含む。二環式ヘテロ環は、フェニル、単環式シクロアルキル、単環式シクロアルケニル、単環式ヘテロ環、又は単環式へテロアリールのいずれかに融合した単環式ヘテロ環である。二環式ヘテロ環は、いずれの環式部分を介して結合されていてもよい（例えば、ヘテロ環又はフェニルのいずれを介してでもよい）。ヘテロ環の代表的な例には、限定されるものではないが、以下のものが含まれる：アジリジニル、ジアゼパニル、１，３−ジオキサニル、１，３−ジオキソラニル、１，３−ジチオラニル、１，３−ジチアニル、イミダゾリニル、イミダゾリジニル、イソチアゾリニル、イソチアゾリジニル、イソオキサゾリニル、イソオキサゾリジニル、モルホリニル、オキサジアゾリニル、オキサジアゾリジニル、オキサゾリニル、オキサゾリジニル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピラニル、ピラゾリニル、ピラゾリジニル、ピロリニル、ピロリジニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロチエニル、チアジアゾリニル、チアジアゾリジニル、チアゾリニル、チアゾリジニル、チオモルホリニル、１，１−ジオキシドチオモルホリニル（チオモルホリンスルホン）、チオピラニル、トリチアニル、２，３−ジヒドロベンゾフラン−２−イル、及びインドリニル。
【００４７】
語句「１つ又は複数の」置換基は、本明細書で使用される場合、上記の安定性及び化学的実現可能性の条件を満たす限り、１から、利用可能な結合部位の数に基づいて可能である置換基の最大数に等しい幾つかの置換基を指す。別様の指定がない限り、置換されていてもよい基は、基の各置換可能な位置で置換基を有してもよく、置換基は同じであっても異なっていてもよい。用語「独立して選択される」は、本明細書で使用される場合、単一化合物において所与の変数が複数ある場合、同じ値が選択されてもよく、異なる値が選択されてもよいことを意味する。
【００４８】
「任意の」又は「任意選択で」は、その次に記載されている事象又は状況が生じても生じなくてもよいことを意味し、その記載は、前述の事象又は状況が生じた場合及び生じない場合を含むことを意味する。当業者であれば、１つ又は複数の任意の置換基を含むと記載されている任意の分子に関して、立体的に現実的な及び／又は合成的に実現可能な化合物のみが含まれることが意図されていると理解するであろう。「置換されていてもよい」は、別様に指定されていない限り、その用語に係る全ての修飾語句を指す。
【００４９】
用語「置換されている」は、本明細書で使用される場合、指定部分の水素ラジカルが、特定の置換基のラジカルで置換されているが、その置換は、安定的な又は化学的に実現可能な化合物をもたらすことを意味する。用語「置換可能な」は、指定の原子に関して使用される場合、その原子に結合されているものが水素ラジカルであり、それを、好適な置換基のラジカルで置換することができることを意味する。
【００５０】
本明細書には、ニューロンカルシウムホメオスタシス不全を正常化すること、ＲｙＲチャネルを安定化すること、及び／又は異常ニューロン小胞体（ＥＲ）カルシウムシグナル伝達等の異常ニューロンカルシウムシグナル伝達を正常化することが可能な化合物が開示されている。幾つかの実施形態では、本開示は、アルツハイマー病等のニューロン障害又は神経変性障害を治療するための、これらの化合物を含む方法及び組成物を提供する。
【００５１】
用語「正常化する」は、本明細書で使用される場合、異常な又は通常ではない生物学的量を、健康なニューロンに典型的なレベル等の正常な又は典型的なレベルに戻すことを指す。或いは、「正常化する」は、調節不全又はホメオスタシス不全の状態を、健康な、典型的な、又は通常の機能性ニューロン等の、調節された状態又はホメオスタシス状態に戻すことを指す。
【００５２】
本明細書で使用される場合、用語「カルシウムホメオスタシス不全」は、例えば、ＲｙＲチャネル等のカルシウムチャネルの透過性が変化することにより、細胞、例えばニューロンの細胞内カルシウムが調節不全になることを指す。
【００５３】
カルシウムイオン（Ｃａ２＋）は、シナプス活性及び脱分極状態を、ニューロンの生化学系に伝達するのを支援する主な化学伝達物質である。したがって、Ｃａ２＋レベルを調節すること、つまり「カルシウムホメオスタシス」を維持することは、ニューロンの重要なプロセスであり、それは、広範で複雑なＣａ２＋シグナル伝達経路に依存する。用語「カルシウムシグナル伝達」は、本明細書で使用される場合、ニューロン内に生じるＣａ２＋シグナル伝達の全てを指す。
【００５４】
本明細書で使用される場合、用語「安定化する」は、ＲｙＲチャネル等のイオンチャネルに関して使用される場合、チャネルを通るイオンの流れ又はイオン流量を調節すること、例えば、異常に高いイオン流量を低下させること、又は異常に低いイオン流量を増加させることを指す。本明細書で開示された方法及び組成物の幾つかの実施形態では、ＲｙＲチャネル安定化化合物でＲｙＲチャネルを安定化することにより、チャネルを通るＣａ２＋流量が減少し、ニューロンのカルシウムホメオスタシス不全又は調節不全が正常化され、カルシウムホメオスタシスが回復する。
【００５５】
本明細書に開示される組成物及び方法に特に関連するのは、リアノジン受容体により媒介されるＥＲ−Ｃａ２＋放出増加である。リアノジン受容体（ＲｙＲ）は、筋肉及びニューロンのような種々の形態の興奮性動物組織の小胞体（ＥＲ）に局在する細胞内カルシウムチャネルの一種である。ＲｙＲは、Ｃａ２＋誘導性Ｃａ２＋放出（Ｃａ２＋−ｉｎｄｕｃｅｄ  Ｃａ２＋  ｒｅｌｅａｓｅ：ＣＩＣＲ）と呼ばれる再生プロセスにおいて、Ｃａ２＋自体により活性化される。
【００５６】
アルツハイマー病（ＡＤ）モデルでは、ＣＩＣＲを誘導する閾値が著しく低下し、シナプス刺激又はＮ−メチル−Ｄ−アスパルテート受容体（ＮＭＤＡＲ）活性化が引き金となる通常は無害のＣａ２＋進入が、この場合は異常なＣＩＣＲ応答の引き金となり得る。放出されるＲｙＲ−Ｃａ２＋の量が異常に高いだけではなく、それが生じる細胞区画も異常であり、かなり過剰なＲｙＲ誘発Ｃａ２＋放出が、遠位樹状突起及び棘頭部等のシナプス区画に生じるが、通常、ＮｏｎＴｇニューロンのこれらの領域では、ＲｙＲ−Ｃａ２＋放出のレベルは低いことが観察される（図１を参照）。シナプスカルシウムホメオスタシス不全は、シナプス伝達及び可塑性符号化を妨害し、樹状突起棘喪失を引き起こす場合がある。
【００５７】
ニューロンカルシウムホメオスタシス不全はＡＤの中心的要素である可能性が高く、これは初期病因を引き起こし、孤発性ＡＤのアミロイド病理を保持する。更に、ＡＤモデルで観察されるシナプスカルシウムシグナルの調節不全は、シナプス機能不全及び構造的損傷と密接に関連している。ＲｙＲは、アミロイド沈着の加速に直接的に関与し（Ｑｕｅｒｆｕｒｔｈら、１９９７年、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ６９巻：１５８０〜１５９１頁）、ヒト脳研究では、ＲｙＲの上昇が、ＭＣＩ及びＡＤ患者で観察され、それは、認知力低下及びシナプス病理に関連する（Ｋｅｌｌｉｈｅｒら、１９９９年、Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ  ９２巻：４９９〜５１３頁；Ｇａｌｅｏｔｔｉら、２００８年、Ｌｅａｒｎｉｎｇ＆Ｍｅｍｏｒｙ  １５巻：３１５〜３２３頁）。また、ＲｙＲ２アイソフォーム発現の増加が、ヒトＭＣＩ患者及び幾つかのＡＤマウスモデルで観察されており（Ｃｈａｋｒｏｂｏｒｔｙら、２００９年、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２９巻（３０号）：９４５８〜７０頁；Ｇｏｕｓｓａｋｏｖら、２０１０年、Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  ３０巻：１２１２８〜１２１３７頁；Ｂｒｕｎｏら、２０１２年、Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ａｇｉｎｇ  ３３巻：１００１．ｅ１００１〜１００１．ｅ１０６．；Ａｎｔｏｎｅｌｌら、２０１３年、Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ａｇｉｎｇ  ３４巻：１７７２〜１７７８頁）、他の研究では、病気の後期でのＲｙＲ３上方制御が、Ａβ１−４２凝集と一致することが見出されている（Ｓｕｐｎｅｔら、２００６年、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ２８１巻：３８４４０〜３８４４７頁）。
【００５８】
幾つかの実施形態では、本明細書に開示される方法及び組成物は、従来の薬理学的アンタゴニストのような非選択的阻害活性ではなく、ＲｙＲチャネルをアロステリック的に調節する化合物を含む。このようにして、本開示の化合物は、異常なＣａ２＋シグナルを正常化し、機能的Ｃａ２＋シグナルの完全性を保ちつつ、カルシウムホメオスタシス不全により引き起こされる病因を停止又は予防する。
【００５９】
リアノジン受容体には、多数のアイソフォームが存在する。リアノジン受容体アイソフォーム１（ＲｙＲ１）は、主に骨格筋で発現される。リアノジン受容体アイソフォーム２（ＲｙＲ２）は、主に心筋（心臓筋肉）で発現されるが、下記で考察するように海馬でも高度に発現される。リアノジン受容体アイソフォーム３（ＲｙＲ３）は、より広範に発現されるが、特に脳で発現される。
【００６０】
本明細書に開示される方法及び組成物が特に標的とする対象物は、ＲｙＲ２アイソフォームであり、これは、海馬で高度に発現され、記憶符号化に関与し、ＡＤマウスモデル及びヒトＭＣＩ患者では初期に上方制御される。しかしながら、ＲｙＲ２は、主要な心臓アイソフォームであり、このチャネルの全身性「阻害」は、望ましくない非特異的影響を生じさせる可能性がある。したがって、幾つかの実施形態では、本開示は、他のアイソフォームと比較して、ＲｙＲ２アイソフォームに対する親和性がより高い化合物を供給する。
【００６１】
幾つかの実施形態では、本開示のＲｙＲ２安定化化合物は、アミロイド沈着、過剰リン酸化タウを低減し、ＭＣＩからＡＤへの転換を低減すると共に、初期段階及び中期段階のＡＤ患者の認知力低下速度を低減させる。これらの効果は、ＡＤ発症中等で見られる長期カルシウム調節異常の条件下で損なわれるシナプス構造及びシナプス可塑性の保存によるものと考えられる。
【００６２】
本開示の化合物は、ＲｙＲチャネルリン酸化及び酸化部位をアロステリック調節することによりＲｙＲチャネル放出特性を安定化するように設計されており、チャネル活性を阻害又は低減する古典的アンタゴニストとして機能しないため、心臓機能には顕著な副作用を及ぼさない可能性が高い（心筋細胞はＲｙＲ２を発現する）。むしろ、本明細書に開示された化合物は、ＲｙＲチャネルから放出されるカルシウムを無差別にブロックせず、正常な生理機能が維持される。
【００６３】
幾つかの実施形態では、本開示のＲｙＲ安定化化合物を含む医薬組成物は、経口で利用可能であり、毎日摂取される。幾つかの実施形態では、本明細書に開示される化合物及び組成物は、皮下投与され、幾つかの実施形態では、１日おきに投与される。幾つかの実施形態では、化合物の効果は、数週間〜数か月持続する。カルシウムホメオスタシス不全が既に存在する病状の下流にある場合等の他の実施形態では、化合物の効果が持続する期間は、より短期間である。しかし、ＲｙＲカルシウム調節異常がフィードフォワード経路の主要な促進要因である場合等の他の実施形態では、本明細書に開示される組成物及び化合物は、長期的な治療効果を示す。
【００６４】
当業者であれば理解するであろうが、本明細書に開示される化合物はいずれも、例えば、本組成物及び方法の所望の最終性質に応じて、誘導体又はプロドラッグとして提供することができる。例えば、ＲｙＲチャネル安定剤は、使用条件下で代謝又は他の方式で変換されてＲｙＲチャネル安定剤を産出する、好適なプロドラッグ基で修飾されていてもよい。本開示の組成物及び方法に使用されるＲｙＲチャネル安定剤の誘導体は、当業者にとって日常的な試み及び実験作業を使用する技術範囲内にある。
【００６５】
用語「医薬製剤」は、活性成分の生物活性が有効であることを可能にするような形態であり、製剤を投与しようとする対象にとって許容できないほど毒性である更なる成分を含有していない調合物を指す。
【００６６】
幾つかの実施形態では、本明細書に開示される組成物及び方法の活性成分は、薬学的に許容される塩として製剤化される。本明細書で使用される場合、用語「薬学的に許容される塩」は、酸付加塩及び塩基付加塩を含む。
【００６７】
「薬学的に許容される酸付加塩」は、遊離塩基の生物学的有効性を保持し、生物学的に又は別様に望ましくないものではなく、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、及びリン酸等の無機酸、並びに酢酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、シュウ酸、マレイン酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、ケイ皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、及びサリチル酸等の有機酸と共に形成される塩を指す。
【００６８】
「薬学的に許容される塩基付加塩」には、ナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩、アンモニウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、鉄塩、亜鉛塩、銅塩、マンガン塩、及びアルミニウム塩等の無機塩基に由来するものが含まれる。例示的な塩は、アンモニウム塩、カリウム塩、ナトリウム塩、カルシウム塩、及びマグネシウム塩である。薬学的に許容される有機無毒性塩基に由来する塩には、限定されるものではないが、イソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、エタノールアミン、２−ジメチルアミノエタノール、２−ジエチルアミノエタノール、ジシクロヘキシルアミン、リジン、アルギニン、ヒスチジン、カフェイン、プロカイン、ヒドラバミン、コリン、ベタイン、エチレンジアミン、グルコサミン、メチルグルカミン、テオブロミン、プリン、ピペラジン、ピペリジン、Ｎ−エチルピペリジン、及びポリアミン樹脂等の、一級、二級、及び三級アミン、天然置換アミンを含む置換アミン、環式アミン、並びに塩基性イオン交換樹脂の塩が含まれる。例示的な有機塩基は、イソプロピルアミン、ジエチルアミン、エタノールアミン、トリメチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、コリン、及びカフェインである。（例えば、Ｓ．Ｍ．Ｂｅｒｇｅら、「Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ」、Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．、１９７７年；６６巻：１〜１９頁を参照。この文献は、参照により本明細書に組み込まれる。）
１つの態様では、本開示は、式Ｉの化合物又はその薬学的に許容される塩を提供する。
【００６９】
【化８】
0006321844.tif 000010
【００７０】
式中、Ａｒは、アリール又はへテロアリールであり、それらの各々は、１、２、３、４、又は５個のＲ６基で置換されていてもよく、
Ｗは、Ｓ又はＯであり、
Ｙは、置換された（アリール）Ｃ１〜６アルキル−、又は
【００７１】
【化９】
0006321844.tif 000011
【００７２】
であり、
Ｚは、Ｃ１〜６アルキル、ベンジル、アリール、へテロアリール、又はＮＲ４Ｒ５であり、ここで、アルキル、ベンジル、アリール、又はへテロアリールは、１、２、３、４、又は５個の独立して選択されるＲ７基で置換されていてもよく、
Ｒ３は水素であるか、又はＲ３はＺと共に、１つ又は複数のＲ７基で置換されていてもよい複素環を形成してもよく、
Ｒ１及びＲ２は、水素、ハロ、ＣＮ、ニトロ、ヒドロキシ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６ハロアルコキシ、アミノ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ−Ｃ１〜４−アルキルアミノ、カルボキシ、カルバミル、Ｃ１〜６アルキルカルバミル、ジ（Ｃ１〜４アルキル）カルバミル、Ｃ１〜６アルキルカルボニル、Ｃ１〜６アルコキシカルボニル、Ｃ１〜６アルキルカルボニルオキシ、Ｃ１〜６アルキルスルホニル、Ｃ１〜６アルキルカルボニルアミノ、Ｃ１〜６アルキルスルホニルアミノ、アミノスルホニル、Ｃ１〜６アルキルアミノスルホニル、ジ−Ｃ１〜４アルキルアミノスルホニル、アミノスルホニルアミノ、Ｃ１〜６アルキルアミノスルホニルアミノ、及びジ−Ｃ１〜４アルキルアミノスルホニルアミノから各々独立して選択され、各々は、好適な位置において、ハロ、ＣＮ、ヒドロキシ、Ｃ１〜３アルキル、Ｃ１〜３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜３アルキルアミノ、及びジ−Ｃ１〜３−アルキルアミノから独立して選択される１、２、又は３つの基で置換されていてもよく、
Ｒ４及びＲ５は、水素、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ハロアルキル、アミノ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ−Ｃ１〜４−アルキルアミノ、カルボキシ、カルバミル、Ｃ１〜６アルキルカルバミル、ジ（Ｃ１〜４アルキル）カルバミル、Ｃ１〜６アルキルカルボニル、Ｃ１〜６アルコキシカルボニル、Ｃ１〜６アルキルカルボニルオキシ、Ｃ１〜６アルキルスルホニル、Ｃ１〜６アルキルカルボニルアミノ、Ｃ１〜６アルキルスルホニルアミノ、アミノスルホニル、Ｃ１〜６アルキルアミノスルホニル、ジ−Ｃ１〜４アルキルアミノスルホニル、アミノスルホニルアミノ、Ｃ１〜６アルキルアミノスルホニルアミノ、ジ−Ｃ１〜４アルキルアミノスルホニルアミノ、及び（アリール）−ヘテロアリール−ＣＨ＝Ｎ−から各々独立して選択されるか、又はＲ４及びＲ５は、それらに結合している窒素と共に複素環を形成し、各部分（ｍｏｉｅｔｙ）は、好適な位置において、ハロ、ＣＮ、ヒドロキシ、Ｃ１〜３アルキル、Ｃ１〜３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜３アルキルアミノ、及びジ−Ｃ１〜３−アルキルアミノから独立して選択される１、２、又は３つの基で置換されていてもよく、
Ｒ６及びＲ７は、ハロ、ＣＮ、ニトロ、ヒドロキシ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６ハロアルコキシ、アミノ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ−Ｃ１〜４−アルキルアミノ、カルボキシ、カルバミル、Ｃ１〜６アルキルカルバミル、ジ（Ｃ１〜４アルキル）カルバミル、Ｃ１〜６アルキルカルボニル、Ｃ１〜６アルコキシカルボニル、Ｃ１〜６アルキルカルボニルオキシ、Ｃ１〜６アルキルスルホニル、Ｃ１〜６アルキルカルボニルアミノ、Ｃ１〜６アルキルスルホニルアミノ、アミノスルホニル、Ｃ１〜６アルキルアミノスルホニル、ジ−Ｃ１〜４アルキルアミノスルホニル、アミノスルホニルアミノ、Ｃ１〜６アルキルアミノスルホニルアミノ、ジ−Ｃ１〜４アルキルアミノスルホニルアミノ、及びオキソから各々独立して選択され、各々は、好適な位置において、ハロ、ＣＮ、ヒドロキシ、Ｃ１〜３アルキル、Ｃ１〜３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜３アルキルアミノ、及びジ−Ｃ１〜３−アルキルアミノから独立して選択される１、２、又は３つの基で置換されていてもよく、
但し、上記化合物は、１−｛（［５−（４−ニトロフェニル）−２−フリル］メチリデンアミノ｝イミダゾリジン−２，４−ジオン又は１−｛［５−（４−ブロモフェニル）−２−フリル］メチリデンアミノ｝イミダゾリジン−２，４−ジオンではない。
【００７３】
また、本開示は、式ＩＩの化合物を製造するのに有用な合成中間体を提供する。また、本開示は、本開示の化合物、及びそのような方法で使用される中間体を調製する方法を提供する。
【００７４】
本開示の別の態様は、薬学的に許容される担体、溶媒、アジュバント、又は希釈剤、及び１つ又は複数の式Ｉの化合物を含む医薬組成物を提供する。
また、本開示は、Ａｒが、１、２、３、４、又は５つのＲ６基で置換されていてもよいアリールである式Ｉの化合物を提供する。
【００７５】
式Ｉに基づく特定の実施形態には、Ａｒが、１、２、又は３つのＲ６基で置換されいてもよいフェニルであるものが含まれる。他の実施形態は、Ｒ６が、ハロ、ＣＮ、ニトロ、ヒドロキシ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６ハロアルコキシ、アミノ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ−Ｃ１〜４−アルキルアミノ、カルボキシ、カルバミル、Ｃ１〜６アルキルカルバミル、及びジ（Ｃ１〜４アルキル）カルバミルから独立して選択される化合物を提供する。例えば、Ａｒは、フェニル、４−クロロフェニル、３−ニトロフェニル、２−メトキシフェニル、及び２，３−ジメチル−４−ニトロフェニルであってもよい。
【００７６】
他の特定の実施形態は、Ａｒが、１、２、３、４、又は５つのＲ６基で置換されていてもよいヘテロアリールである化合物を提供する。
式Ｉに基づく特定の実施形態には、化合物が式ＩＩであるものが含まれ、
【００７７】
【化１０】
0006321844.tif 000012
【００７８】
式中、Ｒａ１、Ｒａ２、及びＲａ３は、水素、ハロ、ＣＮ、ニトロ、ヒドロキシ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６ハロアルコキシ、アミノ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ−Ｃ１〜４−アルキルアミノ、カルボキシ、カルバミル、Ｃ１〜６アルキルカルバミル、及びジ（Ｃ１〜４アルキル）カルバミルから独立して選択され、Ｒ１、Ｒ２、Ｗ、及びＹは、本明細書に定義された通りである。他の実施形態は、Ｒａ１、Ｒａ２、及びＲａ３が、水素、ハロ、ニトロ、ヒドロキシ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、及びＣ１〜６ハロアルコキシから独立して選択される式ＩＩの化合物を提供する。更に別の実施形態では、Ｒａ１、Ｒａ２、及びＲａ３は、水素、ハロ、ニトロ、及びＣ１〜６アルコキシから独立して選択される。
【００７９】
式Ｉ又はＩＩ及び任意の上述した実施形態に基づく特定の実施形態には、ＷがＯであるものが含まれる。
式Ｉ又はＩＩ及び任意の上述した実施形態に基づく他の特定の実施形態には、ＷがＳであるものが含まれる。
【００８０】
式Ｉ又はＩＩ及び任意の上述した実施形態に基づく実施形態には、Ｒ１及びＲ２が、水素、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６ハロアルコキシ、アミノ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、及びジ−Ｃ１〜４−アルキルアミノから各々独立して選択されるものが含まれる。他の実施形態は、Ｒ１及びＲ２が両方とも水素である式Ｉ又はＩＩの化合物を提供する。１つの実施形態では、Ｒ１及びＲ２の一方は水素であり、他方はＣ１〜６アルキルである。
【００８１】
式Ｉ又はＩＩ及び任意の上述した実施形態に基づく特定の実施形態には、Ｙが（アリール）Ｃ１〜６アルキル−であるものが含まれる。１つの実施形態は、Ｙがベンジルである化合物を提供する。別の実施形態では、Ｙは、１−フェニル−エチル−である。
【００８２】
式Ｉ又はＩＩ及び任意の上述した実施形態に基づく特定の実施形態には、Ｙが、
【００８３】
【化１１】
0006321844.tif 000013
【００８４】
であり、
Ｚが、Ｃ１〜６アルキル、ベンジル、アリール、へテロアリール、又はＮＲ４Ｒ５であり、ここで、アルキル、ベンジル、アリール、又はへテロアリールが、１、２、３、４、又は５つの独立して選択されるＲ７基で置換されていてもよく、
Ｒ３が水素であるものが含まれる。
【００８５】
この実施形態は、Ｚが、Ｃ１〜６アルキル、ベンジル、アリール、又はへテロアリールであり、各々が、１、２、３、４、又は５つの独立して選択されるＲ７基で置換されていてもよい化合物を提供する。例えば、１つの実施形態では、Ｚは、メチル又はエチル等のＣ１〜６アルキルであってもよい。別の例示的な実施形態では、Ｚはベンジルである。他の実施形態は、Ｚがアリール又はへテロアリールであり、各々が、１、２、３、４、又は５つの独立して選択されるＲ７基で置換されていてもよい化合物を提供する。１つの例示的な実施形態では、Ｚは、１、２、又は３つのＲ７基で置換されていてもよいアリールである。別の例示的な実施形態では、Ｚは、１、２、又は３つのＲ７基で置換されていてもよいフェニルである。他の実施形態は、Ｚが、１つ又は２つのＲ７基で置換されていてもよいヘテロアリールである化合物を提供する。１つの例示的な実施形態では、Ｚはピリジニルである。
【００８６】
また、この実施形態は、ＺがＮＲ４Ｒ５である化合物を提供する。
１つの実施形態では、Ｒ４及びＲ５は、水素、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ハロアルキル、アミノ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ−Ｃ１〜４−アルキルアミノ、カルボキシ、カルバミル、Ｃ１〜６アルキルカルバミル、ジ（Ｃ１〜４アルキル）カルバミル、Ｃ１〜６アルキルカルボニル、Ｃ１〜６アルコキシカルボニル、Ｃ１〜６アルキルカルボニルオキシ、Ｃ１〜６アルキルスルホニル、Ｃ１〜６アルキルカルボニルアミノ、Ｃ１〜６アルキルスルホニルアミノ、アミノスルホニル、Ｃ１〜６アルキルアミノスルホニル、ジ−Ｃ１〜４アルキルアミノスルホニル、アミノスルホニルアミノ、Ｃ１〜６アルキルアミノスルホニルアミノ、ジ−Ｃ１〜４アルキルアミノスルホニルアミノ、及び（アリール）−ヘテロアリール−ＣＨ＝Ｎ−から各々独立して選択され、各々は、好適な位置において、ハロ、ＣＮ、ヒドロキシ、Ｃ１〜３アルキル、Ｃ１〜３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜３アルキルアミノ、及びジ−Ｃ１〜３−アルキルアミノから独立して選択される１、２、又は３つの基で置換されていてもよい。ある実施形態は、Ｒ４及びＲ５が水素である化合物を提供する。他の実施形態は、Ｒ４が水素であり、Ｒ５がＣ１〜６アルキルである化合物を提供する。
【００８７】
別の実施形態では、Ｒ４及びＲ５は、それらに結合している窒素と共に、好適な位置において、ハロ、ＣＮ、ヒドロキシ、Ｃ１〜３アルキル、Ｃ１〜３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜３アルキルアミノ、及びジ−Ｃ１〜３−アルキルアミノから独立して選択される１、２、又は３つの基で置換されていてもよい複素環を形成していてもよい。他の実施形態は、Ｒ４及びＲ５が、窒素と共に、Ｃ１〜３アルキル、Ｃ１〜３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜３アルキルアミノ、及びジ−Ｃ１〜３−アルキルアミノで置換されていてもよいピペラジニル環を形成する化合物を提供する。
【００８８】
式Ｉ又はＩＩ及び任意の上述した実施形態に基づく特定の実施形態には、Ｙが、
【００８９】
【化１２】
0006321844.tif 000014
【００９０】
であり、
Ｚが、Ｃ１〜６アルキル、ベンジル、アリール、へテロアリール、又はＮＲ４Ｒ５であり、ここで、アルキル、ベンジル、アリール、又はへテロアリールが、１、２、３、４、又は５つの独立して選択されるＲ７基で置換されていてもよく、
Ｒ３が、Ｚと共に、１つ又は複数のＲ７基で置換されていてもよい複素環を形成していてもよいものが含まれる。
【００９１】
この実施形態は、Ｒ３がＺと共にイミダゾリジン−２，５−ジオニルを形成していてもよい化合物を形成する。
幾つかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、表１及び２に示されている化合物、又はそれらの薬学的に許容される塩から選択される。
【００９２】
別の態様では、本発明は、１つ又は複数の式（Ｉ）の化合物、及び薬学的に許容される担体、賦形剤、又は希釈剤を含む医薬組成物を提供する。本発明の化合物又はそれらの薬学的に許容される塩の純粋な形態又は適切な医薬組成物での投与は、許容される投与方法又は同様の用途に有用な作用剤のいずれによってでも実施することができる。したがって、投与は、例えば、錠剤、坐剤、丸剤、軟質弾性及び硬質ゼラチンカプセル、粉末、溶液、懸濁液、又はエアゾル等の、固形物、半固形物、凍結乾燥粉末、又は液体剤形の形態での、好ましくは、正確な用量を簡単に投与するのに好適な単位剤形での、例えば、経口、経鼻、非経口（静脈内、筋肉内、又は皮下）、局所的、経皮的、膣内、膀胱内、嚢内、直腸的、又は経尿道、眼腫瘍内、脳室内、髄腔内、肺内及び洗浄法（ｉｒｒｉｇａｔｉｏｎ  ｍｅｔｈｏｄ）によるものであってもよい。
【００９３】
組成物は、従来の医薬担体又は賦形剤及び本発明の化合物を活性作用剤として含み、加えて、他の薬剤、医薬品、担体、アジュバント等を含んでもよい。本発明の組成物は、癌又は他の疾患の治療を受けている患者に一般的に投与される抗癌剤又は他の作用剤と組み合わせて使用してもよい。アジュバントには、保存剤、湿潤剤、懸濁剤、甘味料、香味料、芳香剤、乳化剤、及び調剤助剤が含まれる。微生物作用の防止は、種々の抗細菌剤及び抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、及びソルビン酸等により確保することができる。また、等張剤、例えば、糖及び塩化ナトリウム等を含むことが望ましい場合がある。注射用剤形の持続的吸収は、吸収を遅延する作用剤、例えば、モノステアリン酸アルミニウム及びゼラチンの使用によりもたらすことができる。
【００９４】
また、必要に応じて、本発明の医薬組成物は、例えば、クエン酸、ソルビタンモノラウラート、トリエタノールアミンオレアート、ブチル化ヒドロキシトルエン等の、湿潤剤又は乳化剤、ｐＨ緩衝剤、及び酸化防止剤等の、少量の補助物質を含んでいてもよい。剤形は、徐放性放出又は持続性放出として設計することができる。
【００９５】
非経口注入に好適な組成物は、生理学的に許容される無菌の水溶液又は非水溶液、分散液、懸濁液又はエマルジョン、及び無菌の注射用溶液又は分散液に再構成するための無菌粉末を含んでいてもよい。好適な水性及び非水性担体、希釈剤、溶媒、又は基剤の例には、水、エタノール、ポリオール（プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、及びグリセロール等）、デキストロース、マンニトール、ポリビニルピロリドン、ゼラチン、ヒドロキシセルロース、アカシア樹脂、それらの好適な混合物、植物油（オリーブ油等）、及びオレイン酸エチル等の注射可能な有機エステルが含まれる。適切な流動性は、例えば、レシチン等のコーティングを使用することにより、分散剤の場合は必要とされる粒径を維持することにより、及び界面活性剤を使用することにより、維持することができる。液体製剤は、緩衝化等張性溶液であってもよい。
【００９６】
経口投与用の固形剤形には、カプセル、錠剤、丸剤、散剤、及び果粒剤が含まれる。そのような固形剤形では、活性化合物は、以下のものと混合される：クエン酸ナトリウム又はリン酸二カルシウム等の少なくとも１つの不活性常用賦形剤（又は担体）、又は（ａ）充填剤又は増量剤、例えば、デンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール、及びケイ酸、（ｂ）結合剤、例えば、セルロース誘導体、デンプン、アリグナート（ａｌｉｇｎａｔｅ）、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、スクロース、及びアカシアゴム、（ｃ）湿潤剤、例えばグリセロール、（ｄ）崩壊剤、例えば、寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモ又はタピオカデンプン、アルギン酸、クロスカルメロースナトリウム、複合ケイ酸塩、及び炭酸ナトリウム、（ｅ）溶解遅延剤、例えばパラフィン、（ｆ）吸収促進剤、例えば四級アンモニウム化合物、（ｇ）湿潤剤、例えば、セチルアルコール、及びグリセロールモノステアラート、及びステアリン酸マグネシウム等、（ｈ）吸着剤、例えば、カオリン及びベントナイト、並びに（ｉ）潤滑剤、例えば、タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固形ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム、又はそれらの混合物。また、カプセル、錠剤、及び丸剤の場合、剤形は、緩衝剤を更に含んでいてもよい。
【００９７】
上述のような固形剤形は、腸溶コーティング及び他の当技術分野で周知のコーティング等のコーティング及びシェルを用いて調製することができる。それらは、鎮静剤を含有していてもよく、また、腸管のある部分で１つ又は複数の活性化合物を遅延様式で放出する組成物であってもよい。使用することができる埋込み組成物の例は、ポリマー物質及びワックスである。また、活性化合物は、適切な場合、前述の賦形剤の１つ又は複数を用いたマイクロカプセル化形態であってもよい。
【００９８】
経口投与用の液体剤形には、薬学的に許容されるエマルジョン剤、溶剤、懸濁剤、シロップ剤、及びエリキシル剤が含まれる。そのような剤形は、例えば、本発明の化合物又は薬学的に許容されるそれらの塩、並びに例えば、水、生理食塩水、デキストロース水溶液、グリセロール、及びエタノール等の担体中の任意の医薬アジュバント；可溶化剤及び乳化剤、例えば、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド：油類、特に、綿実油、落花生油、トウモロコシ胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油、及びゴマ油、グリセロール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレングリコール、及びソルビタンの脂肪酸エステル；又はこれらの物質の混合物等を溶解、分散し、それにより溶液又は懸濁液を形成すること等により調製される。
【００９９】
懸濁液は、活性化合物に加えて、懸濁化剤、例えば、エトキシル化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトール及びソルビタンエステル、微結晶性セルロース、メタ水酸化アルミニウム、ベントナイト、寒天、及びトラガカント、又はこれらの物質の混合物等を含有していてもよい。
【０１００】
直腸内投与用組成物は、例えば、本発明の化合物を、例えば、カカオ脂、ポリエチレングリコール、又は坐剤用ワックス等の好適な非刺激性賦形剤又は担体と混合することにより調製することができる坐剤であり、それらは、常温では固体だが、体温では液体であり、したがって好適な体腔にあると融解し、活性成分をそこに放出する。
【０１０１】
本発明の化合物の局所投与用剤形には、軟膏剤、散剤、噴霧剤、及び吸入剤が含まれる。活性成分は、必要な場合、生理学的に許容される担体及び任意の保存剤、緩衝剤、又は噴射剤と、無菌条件下で混合される。オフタルミン酸製剤、眼軟膏剤、散剤、及び溶液剤も、本発明の範囲内にあると考えられる。
【０１０２】
一般的に、意図した投与方法に応じて、薬学的に許容される組成物は、約０．０１％〜約９９．９９重量％の本発明の１つ又は複数の化合物又はその薬学的に許容される塩、及び９９．９９％〜０．０１重量％の好適な医薬賦形剤を含有するであろう。１つの例では、組成物は、約０．５％〜約７５重量％が本発明の化合物及びその薬学的に許容される塩となり、残りが好適な医薬賦形剤となる。
【０１０３】
そのような剤形を調製する実際の方法は、当業者に公知であるか又は明白であろう。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、第１８版（Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ、イーストン、ペンシルベニア州、１９９０年）を参照されたい。投与される組成物は、いかなる場合でも、本発明の教示に従って疾患状態を治療するために、治療上有効量の本発明の化合物又はその薬学的に許容される塩を含有するであろう。
【０１０４】
別の態様では、本開示は、１つ又は複数の式Ｉの化合物を対象に投与することを含む、対象のニューロンカルシウムホメオスタシス不全を正常化する方法を提供する。幾つかの実施形態では、対象は、ヒト対象である。
【０１０５】
別の態様では、本開示は、１つ又は複数の式Ｉの化合物を対象に投与することを含む、対象の神経学的障害又は神経変性障害を治療する方法を提供する。幾つかの実施形態では、神経学的障害又は神経変性障害は、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、前頭側頭認知症、ピック病、慢性外傷性脳障害、外傷性脳損傷、脳卒中、小脳性運動失調、多発性硬化症、ダウン症候群、又は加齢関連ＣＮＳ障害である。幾つかの実施形態では、神経学的障害又は神経変性障害は、アルツハイマー病である。幾つかの実施形態では、対象は、ヒト対象である。
【０１０６】
本発明の化合物又はそれらの薬学的に許容される塩は、「有効量」又は「治療上有効量」で投与される。それらは、使用される特定の化合物の活性、化合物の代謝安定性及び作用期間、年齢、体重、全体的な健康、性別、食事、投与の方法及び時間、排出速度、併用薬物、特定の疾患状態の重症度、及び治療を受けている宿主を含む様々な要因に大きく依存するであろう。本発明の化合物は、１日当たり約７０〜約１４００ｍｇの範囲の用量レベルで患者に投与することができる。約７０キログラムの体重を有する正常ヒト成人の場合、１日当たり体重１キログラム当たり約１〜約２０ｍｇの範囲の用量が一例である。しかしながら、使用される特定の用量は様々であってもよい。例えば、用量は、患者の必要性、治療されている症状の重症度、及び使用されている化合物の薬理学的活性を含む幾つかの因子に依存する場合がある。特定の患者の至適用量の決定は、当業者に周知である。
【０１０７】
実施例
以下の実施例は、本発明の特定の実施形態及びそれらの種々の用途を例示するものである。それらは、説明のために示されているに過ぎず、本発明を限定するものと理解されるべきではない。
【０１０８】
本開示の化合物の調製は、以下の例により更に説明されるが、それらは、本開示の範囲又は趣旨を、本開示に記載の特定の手順及び化合物に限定するものと解釈されるべきではない。全ての場合で、別様の指示がない限り、カラムクロマトグラフィーは、シリカゲル固相を使用して実施される。
【０１０９】
当業者であれば、以下の例に示されているように、本開示により包含される化合物を生成するためには、出発物質及び反応条件は様々であってよく、反応の順序は変更してもよく、追加ステップを使用してもよいことを認識するであろう。本開示の化合物を合成するのに有用な一般的に知られている化学合成スキーム及び条件を提供する一般的な文献は、多数入手可能である（例えば、Ｓｍｉｔｈ及びＭａｒｃｈ、Ｍａｒｃｈ’ｓ  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ：Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ，ａｎｄ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ、第５版、Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ、２００１年；又はＶｏｇｅｌ，Ａ  Ｔｅｘｔｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ  Ｑｕａｌｉｔａｔｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ａｎａｌｙｓｉｓ，第４版、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ：Ｌｏｎｇｍａｎ、１９７８年を参照）。
【０１１０】
出発物質は、商業的に業者から取得することができるか、又は当業者に公知の確立した文献方法により調製することができる。反応は、使用される試薬及び物質に適切であり、達成しようとする変換に好適な溶媒中で実施される。有機合成の当業者であれば、分子に存在する官能基は、提案されている変換と適合性であるべきであることを理解するであろう。それには、本開示の所望の化合物を得るために、合成ステップの順序を変更するか、又は別のものではなく１つの特定のプロセススキームを選択するという判断が求められる場合がある。
【０１１１】
場合によっては、上記の変換の幾つかを達成するために、ある反応性官能基の保護が必要になり得る。一般的に、そのような保護基の必要性、並びにそのような基を結合及び除去するのに必要な条件は、有機合成の当業者には明白であろう。熟練した専門家に対する多数の選択肢が記載されている権威のある文献は、以下のものである：Ｊ．Ｆ．Ｗ．ＭｃＯｍｉｅ、「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ」、Ｐｌｅｎｕｍ  Ｐｒｅｓｓ、Ｌｏｎｄｏｎ  ａｎｄ  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ  １９７３年；Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ及びＰ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ、「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」、第３版、Ｗｉｌｅｙ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ  １９９９年；「Ｔｈｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ」；３巻（編者：Ｅ．Ｇｒｏｓｓ及びＪ．Ｍｅｉｅｎｈｏｆｅｒ）、Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ、Ｌｏｎｄｏｎ  ａｎｄ  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ  １９８１年；「Ｍｅｔｈｏｄｅｎ  ｄｅｒ  ｏｒｇａｎｉｓｃｈｅｎ  Ｃｈｅｍｉｅ」、Ｈｏｕｂｅｎ−Ｗｅｙｌ、第４版、１５／ｌ巻、Ｇｅｏｒｇ
Ｔｈｉｅｍｅ  Ｖｅｒｌａｇ、Ｓｔｕｔｔｇａｒｔ  １９７４年；Ｈ．−Ｄ．Ｊａｋｕｂｋｅ及びＨ．Ｊｅｓｃｈｅｉｔ、「Ａｍｉｎｏｓａｕｒｅｎ，Ｐｅｐｔｉｄｅ，Ｐｒｏｔｅｉｎｅ」、Ｖｅｒｌａｇ  Ｃｈｅｍｉｅ、Ｗｅｉｎｈｅｉｍ、Ｄｅｅｒｆｉｅｌｄ  Ｂｅａｃｈ及びＢａｓｅｌ  １９８２年；及び／又はＪｏｃｈｅｎ  Ｌｅｈｍａｎｎ、「Ｃｈｅｍｉｅ  ｄｅｒ  Ｋｏｈｌｅｎｈｙｄｒａｔｅ：Ｍｏｎｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ  ａｎｄ  Ｄｅｒｉｖａｔｅ」、Ｇｅｏｒｇ  Ｔｈｉｅｍｅ  Ｖｅｒｌａｇ，Ｓｔｕｔｔｇａｒｔ  １９７４年。保護基は、当技術分野で公知の方法を使用して、都合のよいその後の工程で除去することができる。
【０１１２】
実施例１：材料及び方法。
脳切片Ｃａ２＋シグナル伝達及び電気生理学。３×Ｔｇ−ＡＤマウス、ＴｇＣＲＮＤ８マウス、ＰＳ１／ＡＰＰマウス、及び非トランスジェニック（ＮｏｎＴｇ）Ｊ２９／Ｃ５７ＢＬ６対照マウスは、組織内で繁殖されたものであった。３〜５か月齢の成体雄マウス及び雌マウスを使用した。動物は、Ｒｏｓａｌｉｎｄ  Ｆｒａｎｋｌｉｎ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ａｎｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅの動物実験委員会により承認されたプロトコールに従って飼育及び使用した。海馬脳切片（３００μｍ）を、以前の文献に従って調製した（Ｂｒｉｇｇｓら、Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．Ａｇｉｎｇ、２０１３年、３４巻：１６３２〜１６４３年）。マウスをハロタンで麻酔にかけ、断頭し、脳を取り出して、氷冷スクロース切断溶液（２００ｍＭスクロース、１．５ｍＭ  ＫＣｌ、０．５ｍＭ  ＣａＣｌ２、４．０ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１．０ｍＭ  ＫＨ２ＰＯ４、２５ｍＭ  ＮａＨＣＯ３、１０ｍＭ  Ｎａ−アスコルビン酸塩、及び２０ｍＭデキストロース、９５％Ｏ２／５％ＣＯ２で平衡化）に入れた。チャンバーを氷冷スクロース切断溶液で満したＣａｍｄｅｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ社製ビブラトームにより水平海馬切片を調製し、その後、標準人工脳脊髄液（ａＣＳＦ；１３０ｍＭ  ＮａＣｌ、２．５ｍＭ  ＫＣｌ、２．０ｍＭ  ＣａＣｌ２、１．２ｍＭ  ＭｇＳＯ４、１．２５ｍＭ  ＮａＨ２ＰＯ４、２５ｍＭ  ＮａＨＣＯ３、及び１０ｍＭ  デキストロース［３０５〜３１０ｍＯｓｍ］、９５％  Ｏ２／５％  ＣＯ２で平衡化、ｐＨ７．３〜７．４）に移し、使用前に少なくとも１時間３２℃で維持した。ホールセルパッチクランプ測定を、連続灌流したａＣＳＦ（１．５〜２．０ｍＬ／分）中、室温（２３℃）にて実施した。パッチピペット（５〜７ＭΩ）を、細胞内溶液（１３５ｍＭ  Ｋ−グルコナート、２．０ｍＭ  ＭｇＣｌ２、４．０ｍＭ  Ｎａ２−ＡＴＰ、０．４ｍＭ  Ｎａ−ＧＴＰ、１０ｍＭ  Ｎａ−ホスホクレアチン、１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、ＫＯＨでｐＨ７．３に調整）及び蛍光Ｃａ２＋センサとしての５０μＭビス−ｆｕｒａ−２ヘキサカリウム（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社）で満たした。海馬ＣＡ１錐体ニューロンを、赤外線微分干渉コントラスト（ＩＲ−ＤＩＣ）光学法により視覚的に、及びそれらの受動的膜特性及びスパイク頻度順応により電気生理学的に、識別した。膜電位は、Ｄｉｇｉｄａｔａ１３２２  Ａ−Ｄコンバータ及びＭｕｌｔｉｃｌａｍｐ７００Ｂ増幅器を用いて１０ｋＨｚで得た電流固定モードで取得し、ｐＣｌａｍｐ１０．２（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ社製）を使用して記録及び分析した。Ｍｉｎｉａｎａｌｙｓｉｓ６．０．７（Ｓｙｎａｐｔｏｓｏｆｔ社、フォートリー、ニュージャージー州）を使用して、０．２ｍＶの最小振幅及び３ｍＶ＊ｍｓｅｃの最小面積を有する自発的興奮性シナプス後電位（ｓＥＰＳＰ）事象を検出及び測定した。更なる実験詳細は、Ｃｈａｋｒｏｂｏｒｔｙら、２０１２年、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．３２巻（２４号）：８３４１〜５３頁を参照されたい。
【０１１３】
個々のｆｕｒａ−２充填錐体ニューロンのＣａ２＋シグナル伝達を、浴ａＣＳＦを絶えず灌流させ、カフェイン（１０ｍＭ、１分間）を浴灌流（ｂａｔｈ  ｐｅｒｆｕｓｉｏｎ）により適用した以外は上記のように、２光子画像化により測定した。電圧開口型Ｃａ２＋チャネル（ＶＧＣＣ）応答を、８〜１０回の連続スパイクを誘発するように調整した電流レベルでパッチピペットから流した電流による脱分極により誘発させた。ＶＧＣＣ  Ｃａ２＋応答を、カフェインＲｙＲ  Ｃａ２＋測定の３〜４分前に測定し、各切片は、カフェイン曝露後に廃棄した。分析しようとする試験阻害化合物を、１時間のプレインキュベーション中に導入し、カフェイン適用前、適用中、及び適用後、ａＣＳＦ灌流中で維持した。
【０１１４】
外傷性脳損傷の導入。マウスにイソフルランで深く麻酔をかけ、感覚運動皮質に小さな開頭術を施し（３×３ｍｍ）、その後、軽度のＴＢＩをもたらす設定でＢｅｎｃｈｍａｒｋ  Ｉｍｐａｃｔｏｒ  Ｓｔｅｒｅｏｔａｘｉｃ  ＴＢＩデバイスを使用して単回のＣＣＩ（制御された皮質衝撃）を与えた。皮質挫傷傷害は、以前に開発された改良手順を使用して実施する（Ｓｕｔｔｏｎら、１９９３年、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｔｒａｕｍａ  １０巻（２号）：１３５〜４９頁）。傷害は、平坦で円形のインパクター先端（直径２ｍｍ）で与える。インパクターを垂直から１８．０度傾けることにより、平坦インパクター先端を傷害部位の脳表面に対して垂直にすることができる。適所に配置したら、インパクター先端は、定位マウス脳地図に基づき、露出した脳の皮質表面から０．６ｍｍ下の深さに３．０ｍ／ｓで入り込む。傷害は片側に与えられ、皮質傷害の範囲は、ＣＣＩ後の細胞構築分布の変化により規定される。この手順の後、連続縫合又は断続パターンを使用して、頭皮を単一繊維ナイロン縫合糸で縫合し、リドカインで処置する。ＴＢＩ導入の１日、７日、又は３０日後のいずれかで、マウスを経心腔的灌流に処し、脳を４％パラホルムアルデヒドで固定する。その後、リン酸化タウ種及びアミロイド種を測定するための標準的プロトコールを使用する免疫染色を、生理食塩水処置マウス及び薬物処置マウスで実施する。
【０１１５】
経心腔的灌流。マウスにウレタンで深く麻酔をかけ、胸腔を開き、心臓の左心室にカニューレを挿入し、右心房に小さな穴を開ける。氷冷生理食塩水（３ｍＬ）及びその後４％パラホルムアルデヒド（５ｍＬ）又は４％パラホルムアルデヒド／１％グルタルアルデヒドを、循環系で灌流させる。この後、マウスを鋭いはさみで断頭し、脳を染色又は顕微鏡検査用に調製した。
【０１１６】
細胞培養及び色素負荷。Ｎ２ａ細胞（ＡＴＣＣ＃ＣＣＬ−１３１）を、５０：５０ダルベッコ変法イーグル培地：Ｏｐｔｉ変法イーグル培地（Ｇｉｂｃｏ  １１９９５−０６５：Ｇｉｂｃｏ  ３１９８５−０７０）、５％ウシ胎仔血清（Ｇｉｂｃｏ  ２６１４０−０７９）、１％ＡＢＡＭ（Ｇｉｂｃｏ  １５２４０）で培養し、３７℃、１０％ＣＯ２でインキュベートした。０．０５％トリプシン−ＥＤＴＡ（Ｇｉｂｃｏ  ２５３００−０６２）を使用して、細胞を５分間室温で継代し、非機械的にプレートから剥離させた。酵素活性を、ＤＭＥＭ中１０％ＦＢＳで停止させ、細胞を、ポリ−Ｌコーティング円形ガラススリップカバー（Ｃｈｅｍｇｌａｓｓ  ＣＬＳ−１７６０−０１２）に３０％培養密度で播種し、その後３７℃、１０％ＣＯ２にて、５０：５０ＤＭＥＭ：ＯｐｔｉＭＥＭ中２．５％ＦＢＳで一晩増殖させた。蛍光性カルシウム指示薬であるｆｕｒａ−２ＡＭ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社  Ｆ１２０１）を、ＤＭＳＯで１ｍＭに希釈した。Ｎ２ａ細胞を、５μＭ  ｆｕｒａ−２ＡＭ（新しい培地で希釈した）で３０分間培養し、その後１×ＰＢＳで洗浄し、新しい培地を添加し（５０：５０）、最低で１５分間脱エステル化させた。１０μＭのダントロレン又は試験化合物を添加し、３０分間インキュベートした。インキュベーション及び洗浄は全て、３７℃、１０％ＣＯ２で行った。
【０１１７】
Ｃａ２＋画像化及び化合物適用。ｆｕｒａ２−ＡＭで満たしたＮ２ａ細胞を有するガラスカバースリップを、２光子レーザ画像化システムに接続されている直立型オリンパスＢＸ５１顕微鏡の試料台の浸漬チャンバーに設置した。対照培地、ダントロレン、又は試験化合物の１つ（１０μＭ）のいずれかで（３０分間）インキュベートしたＮ２ａ細胞に対し、ＲｙＲ媒介性カルシウム応答を誘発するために、重力駆動灌流系によりカフェイン（５ｍＭ）を浴適用した。個々の細胞のＣａ２＋画像化は、特別仕様のビデオ速度の２光子画像化システムを使用して達成した。レーザ励起は、Ｔｉ：サファイアレーザ（Ｍａｉ  Ｔａｉ広帯域型、Ｓｐｅｃｔｒａ−Ｐｈｙｓｉｃｓ社）から、７８０ｎｍ（８０ＭＨｚ）の１００ｆｓパルスにより提供した。レーザ光線を、Ｘ軸は、高速の（７．９ｋＨｚ）双方向走査を可能にする共振検流計（Ｇｅｎｅｒａｌ  Ｓｃａｎｎｉｎｇ  Ｌｕｍｏｎｉｃｓ社）により、Ｙ軸は、従来の線形検流計により走査して、３０フレーム／ｓの全フレーム走査速度を提供した。オリンパス４０×水浸漬対物レンズ（開口数０．８）を用いて、レーザ光線の焦点を細胞に合わせた。放射された蛍光を、広範囲光電子増倍管（Ｅｌｅｃｔｒｏｎ  Ｔｕｂｅｓ社）により検出して、ビデオ信号を導出し、それをＶｉｄｅｏ  Ｓａｖａｎｔ５．０ソフトウェア（ＩＯ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ社）により捕捉及び分析した。バックグラウンドを補正した画像の詳しい分析は、ＭｅｔａＭｏｒｐｈソフトウェアを用いて実施した。明確性を考慮して、結果は、［Ｃａ２＋］の増加が比率の増加に対応するように、逆比で表した。変化率％は、［（Ｆ０／ΔＦ）−１］＊１００として算出し、式中Ｆ０は、ベースラインでの平均静止蛍光であり、ΔＦは、Ｃａ２＋放出を反映する蛍光の減少である。処置群の間の差は、二元配置ＡＮＯＶＡ及びＳｃｈｅｆｆｅ事後解析を使用して、有意性を評価した（ｐ＜０．０５）。核領域を除き、観察野にある細胞全ての体細胞Ｃａ２＋応答を分析した（ｎ＝８〜２０）。化合物は全て三重反復で試験した。
【０１１８】
実施例２：ダントロレンによるＲｙＲ安定化
実施例１で示した手順を使用して、ＲｙＲ安定化化合物（ダントロレン）が、ＡＤ発症及び外傷性脳損傷に関連するニューロン特性に影響を及ぼすことが可能か否かを調査した。
【０１１９】
２つのＡＤモデル（３×Ｔｇ−ＡＤ及びＰＳ１／ＡＰＰ）では、ダントロレン（１−｛［５−（４−ニトロフェニル）−２−フリル］メチリデンアミノ｝イミダゾリジン−２，４−ジオン；このダントロレンのナノ結晶性製剤は、ＲＹＡＮＯＤＥＸ（商標）という商品名である）による中長期（４週間）処置（５〜１０ｍｇ／ｋｇ、ヒト集団での臨床用量と一致する）は、樹状突起棘での過剰なＥＲ−Ｃａ２＋放出をＮｏｎＴｇレベルに戻し（図１）、シナプス伝達特性及びシナプス完全性を回復させ（図２）、可溶性及び不溶性のＡβ沈着を著しく低減し（図２Ｅ）、ＲｙＲ２発現を正常化した（図３）。これらの知見は、ＡＤ発病及びアミロイドベータ凝集には、ＲｙＲ−Ｃａ２＋調節異常が中心的な役割を果たすという主張を裏づけるだけでなく、疾患の後期段階でさえ治療効果を得ることができることを示すものであり、Ｃａ２＋ホメオスタシス不全、アミロイド病理、及びシナプス機能不全にはフィードフォワード疾患機序が関与することを裏づけている。
【０１２０】
また、ダントロレンによるＲｙＲ機能安定化は、アミロイド病理に加えて、ＡＤのＴｇＣＲＮＤ８マウスモデルではリン酸化タウを低減させるという証拠が存在する（図４）。同様に、ＴＢＩのマウスモデルでは、ダントロレン処置は、海馬歯状回でのリン酸化タウ染色の量を著しく低減する（図５）。
【０１２１】
なお、ダントロレンによる長期経口処置（１０か月＋）は、アミロイド病理を増加させることが見出されており（Ｚｈａｎｇら、２０１０年、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ  ３０巻：８５６６〜８５８０頁）、ダントロレンほど病原性ではないＲｙＲ２標的化合物の必要性が示唆されている。
【０１２２】
実施例３：ＲｙＲ２安定化化合物のヒット−リード最適化。
最初はダントロレン
【０１２３】
【化１３】
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【０１２４】
と類似するスキャフォールドに基づいていたが、強いｉｎ  ｖｉｔｒｏ活性を維持し、かつ薬物特性の向上を示す新しい全く異なる薬物様類似体を開発した（図６を参照）。基礎構造特徴をダントロレン様スキャフォールドに組み込んで、薬物特性の向上を付与したため、ＡＤ及び他の神経変性疾患の全身性活性剤候補の開発が可能になった。
【０１２５】
多様なＲｙＲ安定剤の合成は、確立されているスズキ反応化学、その後のヒドラゾン形成で達成した。２０個の多様なハロゲン化アリール及び５つのヒドラジンを使用して、１００個の新しい候補を生成した。簡潔に述べると、５−ホルミル−２−フリルボロン酸を、炭酸セシウム等の塩基の存在下で触媒性テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）を使用し、スズキ反応条件下にてハロゲン化アリール（Ｒ１）で処理した。その後、得られたジアリール種を、１％酢酸／ジメチルホルムアミド中でヒドラジン誘導体（Ｒ２）を使用するヒドラゾン形成に供した。２０個のハロゲン化アリールＲ１誘導体は、多様な置換ベンゼン及びヘテロ芳香族ハロゲン化アリールを含んでいた。５つのＲ２ヒドラジンは、多様な薬物代謝薬物動態学（ＤＭＰＫ）プロファイルをもたらすヒダントイン、尿素、及びアミド官能基、並びに様々なアリール基を含んでいた。
【０１２６】
【化１４】
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【０１２７】
化合物を精製し、その後ＨＰＬＣ−ＭＳで試験した。＞９５％の純度であった。化合物は、ｐＨ７．４で１５ｍｇ／ｍＬから＞２００ｍｇ／ｍＬの範囲の水溶解度を示した。ダントロレンよりも水溶解度を向上させるために可溶化部分（ｓｏｌｕｂｉｌｉｚｉｎｇ  ｍｏｉｅｔｉｅｓ）を組み込むことに重点をおいた。
【０１２８】
実施例４：第一世代化合物の構造と活性との関係。
化合物をスクリーニングして、それらを、更に試験するか又は更なる調査から除外するかを判断した。スクリーニングカスケードは、薬化学アッセイ、細胞培養アッセイでの迅速スループットスクリーニング試験、非トランスジェニック（ＮｏｎＴｇ）対照マウス及びＡＤマウスからの急性脳切片調製、及び長期処置ＡＤマウスでの効力を含んでいた。こうした試験のための方法は、実施例１に述べられている。リード化合物は、ＲｙＲ２アイソフォームを主に発現するＮ２Ａ細胞で有効であった。
【０１２９】
スクリーニング後に選択した化合物は、表１に特定されており、この表は化合物の構造と活性との関係に関する情報も提示する。
【０１３０】
【表１】
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【０１３１】
幾つかの類似体は、１０μＭでの試験において、Ｎ２Ａ細胞のＲｙＲ誘発Ｃａ２＋を効果的に阻止する（表１）。ダントロレンは、カフェインが示すベースラインから３．０９倍のＣａ２＋増加を１．９６に低減し、ＡＤマウスモデルでの効力も示す。したがって、同様か又はより良好な低減を示す類似体を活性とみなすと結論を下すことは合理的である。具体的には、ＲＤ０９、ＲＤ１１、及びＲＤ０５は、ダントロレンよりも大幅にカルシウム放出を阻止し、ＲＤ９５及びＲＤ１４は、カフェイン刺激Ｃａ２＋放出に対するダントロレンの効果と同等である。
【０１３２】
ダントロレン及び最も活性な化合物であるＲＤ０９及びＲＤ１１は、左側のフェニル環にニトロ置換基を有するため、この官能基は活性にとって重要であると考えられる。しかしながら、ニトロ基は溶解度及びバイオアベイラビリティの低下と関連している。注目すべきことに、意外にも、ＲＤ０５はニトロ基を持たないにもかかわらず、活性を全て保持している。また、意外にも、ＲＤ０５の脳レベルはダントロレンのレベルの＞５０倍である。これらの官能基置換は、更なる代謝安定性及び溶解度を付与し、ダントロレンと比較して、全体的なバイオアベイラビリティを向上させる。
【０１３３】
ダントロレンのヒダントイン官能基の置換も調査した。幾つかの化合物では、この官能基はアセチル及び尿素機構と置換されており、その結果生じた化合物は活性を保持した（例えば、化合物ＲＤ０９、ＲＤ９５、及びＲＤ１４）。また、化合物ＲＤ１１のように、芳香族機構をダントロレンのヒダントイン基の代わりに導入した。これにより、イオン性ピリジル部分が種々の塩に変換され得るため、全体的なＤＭＰＫの向上が強化される。
【０１３４】
表１に示されている化合物の合成法は、以下の通りである。
ＲＤ０５。５−フェニル−２−フルアルデヒド（１．０ｍｍｏｌ）を、ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）に溶解する。この溶液を、ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）中の、３−アミノイミダゾリジン−２，４−ジオン（１．０ｍｍｏｌ）及び１．０Ｍ塩酸溶液（２６０μＬ）の溶液に滴加する。添加の完了後、混合物を、ｒｔで２５時間撹拌する。この混合物を水で希釈し、２倍の体積のジクロロメタンで抽出する。有機層を収集し、溶媒を回転蒸発により除去する。残渣を、水−アセトニトリル勾配を使用して分取逆相ＨＰＬＣで精製し、所望の産物を得る。ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ２７０［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１３５】
ＲＤ０９。５−（３−ニトロフェニル）−２−フルアルデヒド（１．０ｍｍｏｌ）を、ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）に溶解する。この溶液を、ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）中の、酢酸ヒドラジド（１．０ｍｍｏｌ）及び１．０Ｍ塩酸溶液（２６０μＬ）の溶液に滴加する。添加の完了後、混合物を、ｒｔで２５時間撹拌する。この混合物を水で希釈し、２倍の体積のジクロロメタンで抽出する。有機層を収集し、溶媒を回転蒸発により除去する。残渣を、水−アセトニトリル勾配を使用して分取逆相ＨＰＬＣで精製し、所望の産物を得る。ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ２７４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１３６】
ＲＤ１０。５−（２−クロロ−４−ニトロフェニル）−２−フルアルデヒド（１．０ｍｍｏｌ）を、ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）に溶解する。この溶液を、ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）中の、４−Ｎ−メチル−Ｎ−１−ピペラジンカルボヒドラジド（１．０ｍｍｏｌ）及び１．０Ｍ塩酸溶液（２６０μＬ）の溶液に滴加する。添加の完了後、混合物を、ｒｔで２５時間撹拌する。この混合物を水で希釈し、２倍の体積のジクロロメタンで抽出する。有機層を収集し、溶媒を回転蒸発により除去する。残渣を、水−アセトニトリル勾配を使用して分取逆相ＨＰＬＣで精製し、所望の産物を得る。ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ３５０［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１３７】
ＲＤ１１。５−（３−ニトロフェニル）−２−フルアルデヒド（１．０ｍｍｏｌ）を、ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）に溶解する。この溶液を、ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）中の、２−ピリジンカルボヒドラジド（１．０ｍｍｏｌ）及び１．０Ｍ塩酸溶液（２６０μＬ）の溶液に滴加する。添加の完了後、混合物を、ｒｔで２５時間撹拌する。この混合物を水で希釈し、２倍の体積のジクロロメタンで抽出する。有機層を収集し、溶媒を回転蒸発により除去する。残渣を、水−アセトニトリル勾配を使用して分取逆相ＨＰＬＣで精製し、所望の産物を得る。ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ３３７［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１３８】
ＲＤ１４。５−｛４−ニトロ−２，３−ジメチルフェニル｝−２−フルアルデヒド（１．０ｍｍｏｌ）を、ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）に溶解する。この溶液を、ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）中の、セミカルバジド（１．０ｍｍｏｌ）及び１．０Ｍ塩酸溶液（２６０μＬ）の溶液に滴加する。添加の完了後、混合物を、ｒｔで２５時間撹拌する。この混合物を水で希釈し、２倍の体積のジクロロメタンで抽出する。有機層を収集し、溶媒を回転蒸発により除去する。残渣を、水−アセトニトリル勾配を使用して分取逆相ＨＰＬＣで精製し、所望の産物を得る。ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ３０３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１３９】
ＲＤ５４。５−（２−クロロ−４−ニトロフェニル）−２−フルアルデヒド（１．０ｍｍｏｌ）を、ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）に溶解する。この溶液を、ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）中の、Ｎ−フェニルヒドラジンカルボキサミド（１．０ｍｍｏｌ）及び１．０Ｍ塩酸溶液（２６０μＬ）の溶液に滴加する。添加の完了後、混合物を、ｒｔで２５時間撹拌する。この混合物を水で希釈し、２倍の体積のジクロロメタンで抽出する。有機層を収集し、溶媒を回転蒸発により除去する。残渣を、水−アセトニトリル勾配を使用して分取逆相ＨＰＬＣで精製し、所望の産物を得る。ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ３８６［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１４０】
ＲＤ７７。５−（４−ブロモフェニル）−２−フルアルデヒド（１．０ｍｍｏｌ）を、ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）に溶解する。この溶液を、ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）中の、４−ニトロベンズヒドラジド（１．０ｍｍｏｌ）及び１．０Ｍ塩酸溶液（２６０μＬ）の溶液に滴加する。添加の完了後、混合物を、ｒｔで２５時間撹拌する。この混合物を水で希釈し、２倍の体積のジクロロメタンで抽出する。有機層を収集し、溶媒を回転蒸発により除去する。残渣を、水−アセトニトリル勾配を使用して分取逆相ＨＰＬＣで精製し、所望の産物を得る。ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ４１５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１４１】
ＲＤ８３。５−（４−ニトロフェニル）−２−フルアルデヒド（１．０ｍｍｏｌ）を、ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）に溶解する。この溶液を、ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）中の、２，４−ジクロロベンズヒドラジド（１．０ｍｍｏｌ）及び１．０Ｍ塩酸溶液（２６０μＬ）の溶液に滴加する。添加の完了後、混合物を、ｒｔで２５時間撹拌する。この混合物を水で希釈し、２倍の体積のジクロロメタンで抽出する。有機層を収集し、溶媒を回転蒸発により除去する。残渣を、水−アセトニトリル勾配を使用して分取逆相ＨＰＬＣで精製し、所望の産物を得る。ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ４０５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１４２】
ＲＤ９１。５−（２，３−ジクロロフェニル）−２−フルアルデヒド（１．０ｍｍｏｌ）を、ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）に溶解する。この溶液を、ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）中の、２−ピリジンカルボヒドラジド（１．０ｍｍｏｌ）及び１．０Ｍ塩酸溶液（２６０μＬ）の溶液に滴加する。添加の完了後、混合物を、ｒｔで２５時間撹拌する。この混合物を水で希釈し、２倍の体積のジクロロメタンで抽出する。有機層を収集し、溶媒を回転蒸発により除去する。残渣を、水−アセトニトリル勾配を使用して分取逆相ＨＰＬＣで精製し、所望の産物を得る。ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ３６１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１４３】
ＲＤ９５。５−（２−メトキシフェニル）−２−フルアルデヒド（１．０ｍｍｏｌ）を、ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）に溶解する。この溶液を、ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）中の、セミカルバジド（１．０ｍｍｏｌ）及び１．０Ｍ塩酸溶液（２６０μＬ）の溶液に滴加する。添加の完了後、混合物を、ｒｔで２５時間撹拌する。この混合物を水で希釈し、２倍の体積のジクロロメタンで抽出する。有機層を収集し、溶媒を回転蒸発により除去する。残渣を、水−アセトニトリル勾配を使用して分取逆相ＨＰＬＣで精製し、所望の産物を得る。ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ２６０［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１４４】
実施例５：第二世代化合物の合成。
強力かつ選択的な、ｉｎ  ｖｉｖｏで全身的に利用可能な化合物を提供するために、薬化学的最適化を行った。ＲｙＲ安定剤のｉｎ  ｖｉｖｏプロファイル、特に薬物動態（ＰＫ）パラメータの最適化に注力した取り組み、及びｉｎ  ｖｉｖｏで全身投与した場合の脳曝露を増加させる取り組みは、比較的少数である。したがって、第二世代の合成の取り組みは、理想的な特性の集団を有するＲｙＲ安定剤の開発に集中して行った。
【０１４５】
合成化学戦略は、有意なｉｎ  ｖｉｔｒｏカルシウム放出阻止、適切なｉｎ  ｖｉｖｏ脳血漿中濃度、及び本発明者らのＡＤマウスモデルでの効力可能性を示した化合物ＲＤ０５により例示される、確立された一連のリード化合物のファーマコフォアに基づいていた。
【０１４６】
Ｃａ２＋放出を正常化するために必要である重要な基礎構造特徴を特定し、反復戦略を使用して、＞１００個の類似体を合成し、ファーマコフォアの各領域を系統的に調査して、所望の物理的及び生物学的特性の集合を有する至適化候補を提供した。最適化ステップから選択された候補は、実施例３に記載の化合物の第一世代合成に由来するリード候補と共に、表２に示されている。
【０１４７】
【表２−１】
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【０１４８】
【表２−２】
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【０１４９】
表２に示されている（かつ表１には示されていない）化合物の合成法は、以下の通りである。
ＣＫ００８。５−（４−クロロフェニル）−２−フルアルデヒド（１．０ｍｍｏｌ）を、ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）に溶解する。この溶液を、ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）中の、酢酸ヒドラジド（１．０ｍｍｏｌ）及び１．０Ｍ塩酸溶液（２６０μＬ）の溶液に滴加する。添加の完了後、混合物を、ｒｔで２５時間撹拌する。この混合物を水で希釈し、２倍の体積のジクロロメタンで抽出する。有機層を収集し、溶媒を回転蒸発により除去する。残渣を、水−アセトニトリル勾配を使用して分取逆相ＨＰＬＣで精製し、所望の産物を得る。ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ２６３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１５０】
ＣＫ００１０。５−（４−クロロフェニル）−２−フルアルデヒド（１．０ｍｍｏｌ）を、ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）に溶解する。この溶液を、ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）中の、プロパノヒドラジド（１．０ｍｍｏｌ）及び１．０Ｍ塩酸溶液（２６０μＬ）の溶液に滴加する。添加の完了後、混合物を、ｒｔで２５時間撹拌する。この混合物を水で希釈し、２倍の体積のジクロロメタンで抽出する。有機層を収集し、溶媒を回転蒸発により除去する。残渣を、水−アセトニトリル勾配を使用して分取逆相ＨＰＬＣで精製し、所望の産物を得る。ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ２７７［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１５１】
ＣＫ０１２。５−フェニル−２−フルアルデヒド（１．０ｍｍｏｌ）を、ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）に溶解する。この溶液を、ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）中の、カルボヒドラジド（１．０ｍｍｏｌ）及び１．０Ｍ塩酸溶液（２６０μＬ）の溶液に滴加する。添加の完了後、混合物を、ｒｔで２５時間撹拌する。この混合物を水で希釈し、２倍の体積のジクロロメタンで抽出する。有機層を収集し、溶媒を回転蒸発により除去する。残渣を、水−アセトニトリル勾配を使用して分取逆相ＨＰＬＣで精製し、所望の産物を得る。ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ２４５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１５２】
ＣＫ０１３。５−フェニル−２−フルアルデヒド（１．０ｍｍｏｌ）を、ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）に溶解する。この溶液を、ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）中の、フェニル酢酸ヒドラジド（１．０ｍｍｏｌ）及び１．０Ｍ塩酸溶液（２６０μＬ）の溶液に滴加する。添加の完了後、混合物を、ｒｔで２５時間撹拌する。この混合物を水で希釈し、２倍の体積のジクロロメタンで抽出する。有機層を収集し、溶媒を回転蒸発により除去する。残渣を、水−アセトニトリル勾配を使用して分取逆相ＨＰＬＣで精製し、所望の産物を得る。ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ３０５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１５３】
ＣＫ０１７。５−（４−クロロフェニル）−２−フルアルデヒド（１．０ｍｍｏｌ）を、ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）に溶解する。この溶液を、ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）中の、カルボヒドラジド（０．５ｍｍｏｌ）及び１．０Ｍ塩酸溶液（２６０μＬ）の溶液に滴加する。添加の完了後、混合物を、ｒｔで２５時間撹拌する。この混合物を水で希釈し、２倍の体積のジクロロメタンで抽出する。有機層を収集し、溶媒を回転蒸発により除去する。残渣を、水−アセトニトリル勾配を使用して分取逆相ＨＰＬＣで精製し、所望の産物を得る。ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ４６８［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１５４】
ＤＬ０４１。５−（３−ニトロフェニル）−２−フルアルデヒド（１．０ｍｍｏｌ）を、ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）に溶解する。この溶液を、ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）中の、フェニル酢酸ヒドラジド（１．０ｍｍｏｌ）及び１．０Ｍ塩酸溶液（２６０μＬ）の溶液に滴加する。添加の完了後、混合物を、ｒｔで２５時間撹拌する。この混合物を水で希釈し、２倍の体積のジクロロメタンで抽出する。有機層を収集し、溶媒を回転蒸発により除去する。残渣を、水−アセトニトリル勾配を使用して分取逆相ＨＰＬＣで精製し、所望の産物を得る。ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ３５０［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１５５】
ＳＭ００８。５−フェニル−２−フルアルデヒド（１．０ｍｍｏｌ）を、ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）に溶解する。この溶液を、ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）中の、１−フェニルエチルアミン（１．０ｍｍｏｌ）及び１．０Ｍ塩酸溶液（２６０μＬ）の溶液に滴加する。添加の完了後、混合物を、ｒｔで２５時間撹拌する。この混合物を水で希釈し、２倍の体積のジクロロメタンで抽出する。有機層を収集し、溶媒を回転蒸発により除去する。残渣を、水−アセトニトリル勾配を使用して分取逆相ＨＰＬＣで精製し、所望の産物を得る。ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ２７５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１５６】
実施例６：細胞培養系及びＡＤマウスのニューロンにおける迅速スクリーニングアッセイ。
実施例５に示されているＲｙＲ２安定化化合物を、９６ウェルプレートで増殖させたＲｙＲ２発現Ｎ２Ａ細胞系を使用して試験し、実施例１に開示されているように、高速自動画像化システムで試験した。ダントロレンで同様に示されているように、強力なアゴニスト刺激に応答したＲｙＲ誘発カルシウムを低減する能力について、化合物をスクリーニングした（図７）。
【０１５７】
また、実施例１に開示されているように、非トランスジェニック（ＮｏｎＴｇ）マウス及びＡＤ（ＰＳ１／ＡＰＰ）マウスに由来する海馬脳切片調製物で化合物を試験し、生理学的刺激によりＡＤマウスに誘発された異常なＲｙＲ調節カルシウムシグナルを正常化するそれらの能力を決定した。図８Ａに示されているように、ＣＫ０１３及びＣＫ０１７による処置は、ダントロレンと同様に、異常なＲｙＲ誘発カルシウムシグナルを正常化した。試験した化合物による処置は全て、対照ＮｏｎＴｇマウスに与える影響は最小限であり、電圧開口型Ｃａ２＋チャネル内向き流束、受動的膜特性、又はスパイク特性等の、ＡＤマウスで変更されない他の基本的Ｃａ２＋シグナル伝達事象にも影響を及ぼさなかった（図８Ｂ〜８Ｄ）。
【０１５８】
実施例７：ｉｎ  ｖｉｖｏ研究。
ＮｏｎＴｇマウス及びＡＤマウスのｉｎ  ｖｉｖｏ中長期処置パラダイムで化合物を試験して、ＡＤで影響を受けない別個のカルシウム経路に影響を及ぼさずに、ＡＤマウスの異常なＲｙＲカルシウム応答が正常化されるか否かを決定した。
【０１５９】
ＣＡ１錐体ニューロンのＣａ２＋シグナル伝達特性及び電気生理学的特性を、実施例１で開示されているプロトコールに従って海馬脳切片で研究した。簡潔に述べると、３×Ｔｇ−ＡＤマウスを、生理食塩水（０．９％）、ＣＫ０１３、又はＣＫ０１７のいずれかで４週間（１０ｍｇ／ｋｇ；ｉｐ）処置し、その後、ＣＡ１錐体ニューロンのホールセルパッチクランプ測定及び２光子カルシウム画像化のために、急性海馬脳切片調製物を作製した。目的は、本発明者らの化合物が、ＡＤマウスの正常なＲｙＲ媒介カルシウムシグナル伝達を回復させ、正常な膜生理機能を維持することができるか否かを決定することであった。図９に示されている結果は、ＣＫ０１３処置及びＣＫ０１７処置３×Ｔｇ−ＡＤマウスでは両方とも、ＲｙＲ誘発カルシウム応答は、ＮｏｎＴｇ対照応答と異なるものではなく、生理食塩水処置３×Ｔｇ−ＡＤマウスでの異常なＲｙＲカルシウム応答と比較して、有意に低減されている。
【０１６０】
また、静止膜電位及び膜入力抵抗等の受動的膜特性は、これらの化合物により影響を受けなかった。表３に示されるように、静止膜電位（ＲＭＰ）及び膜入力抵抗（Ｒｉ）には、群間に統計的有意差はなかった（ｐ＞０．０５）。加えて、心臓重量：体重比は、処置群間に統計的有意差はなく（表４；ｐ＞０．０５）、絶対的な体重又は心臓重量にも群間で差はなかった（データ非表示；ｐ＜０．０５）。
【０１６１】
【表３】
0006321844.tif 000020
【０１６２】
【表４】
0006321844.tif 000021
【０１６３】
以下、上記の実施形態から把握できる技術的思想を付記する。
［付記１］
構造：
【０１６４】
【化１５】
0006321844.tif 000022
【０１６５】
を有する化合物又はその薬学的に許容される塩であって、式中、
Ａｒはアリール又はへテロアリールであり、それらの各々は、１、２、３、４、又は５つのＲ６基で置換されていてもよく、
ＷはＳ又はＯであり、
Ｙは、置換された（アリール）Ｃ１〜６アルキル−、又は
【０１６６】
【化１６】
0006321844.tif 000023
【０１６７】
であり、式中、
Ｚが、Ｃ１〜６アルキル、ベンジル、アリール、へテロアリール、又はＮＲ４Ｒ５であり、ここで、アルキル、ベンジル、アリール、又はへテロアリールは、１、２、３、４、又は５つの独立して選択されるＲ７基で置換されていてもよく、
Ｒ３は水素であるか、又はＲ３はＺと共に、１つ又は複数のＲ７基で置換されていてもよい複素環を形成してもよく、
Ｒ１及びＲ２は、水素、ハロ、ＣＮ、ニトロ、ヒドロキシ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６ハロアルコキシ、アミノ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ−Ｃ１〜４−アルキルアミノ、カルボキシ、カルバミル、Ｃ１〜６アルキルカルバミル、ジ（Ｃ１〜４アルキル）カルバミル、Ｃ１〜６アルキルカルボニル、Ｃ１〜６アルコキシカルボニル、Ｃ１〜６アルキルカルボニルオキシ、Ｃ１〜６アルキルスルホニル、Ｃ１〜６アルキルカルボニルアミノ、Ｃ１〜６アルキルスルホニルアミノ、アミノスルホニル、Ｃ１〜６アルキルアミノスルホニル、ジ−Ｃ１〜４アルキルアミノスルホニル、アミノスルホニルアミノ、Ｃ１〜６アルキルアミノスルホニルアミノ、及びジ−Ｃ１〜４アルキルアミノスルホニルアミノから各々独立して選択され、各々は、好適な位置において、ハロ、ＣＮ、ヒドロキシ、Ｃ１〜３アルキル、Ｃ１〜３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜３アルキルアミノ、及びジ−Ｃ１〜３−アルキルアミノから独立して選択される１、２、又は３つの基で置換されていてもよく、
Ｒ４及びＲ５は、水素、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ハロアルキル、アミノ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ−Ｃ１〜４−アルキルアミノ、カルボキシ、カルバミル、Ｃ１〜６アルキルカルバミル、ジ（Ｃ１〜４アルキル）カルバミル、Ｃ１〜６アルキルカルボニル、Ｃ１〜６アルコキシカルボニル、Ｃ１〜６アルキルカルボニルオキシ、Ｃ１〜６アルキルスルホニル、Ｃ１〜６アルキルカルボニルアミノ、Ｃ１〜６アルキルスルホニルアミノ、アミノスルホニル、Ｃ１〜６アルキルアミノスルホニル、ジ−Ｃ１〜４アルキルアミノスルホニル、アミノスルホニルアミノ、Ｃ１〜６アルキルアミノスルホニルアミノ、ジ−Ｃ１〜４アルキルアミノスルホニルアミノ、及び（アリール）−ヘテロアリール−ＣＨ＝Ｎ−から各々独立して選択されるか、又はＲ４及びＲ５は、それらに結合している窒素と共に複素環を形成し、各部分は、好適な位置において、ハロ、ＣＮ、ヒドロキシ、Ｃ１〜３アルキル、Ｃ１〜３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜３アルキルアミノ、及びジ−Ｃ１〜３−アルキルアミノから独立して選択される１、２、又は３つの基で置換されていてもよく、
Ｒ６及びＲ７は、ハロ、ＣＮ、ニトロ、ヒドロキシ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６ハロアルコキシ、アミノ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ−Ｃ１〜４−アルキルアミノ、カルボキシ、カルバミル、Ｃ１〜６アルキルカルバミル、ジ（Ｃ１〜４アルキル）カルバミル、Ｃ１〜６アルキルカルボニル、Ｃ１〜６アルコキシカルボニル、Ｃ１〜６アルキルカルボニルオキシ、Ｃ１〜６アルキルスルホニル、Ｃ１〜６アルキルカルボニルアミノ、Ｃ１〜６アルキルスルホニルアミノ、アミノスルホニル、Ｃ１〜６アルキルアミノスルホニル、ジ−Ｃ１〜４アルキルアミノスルホニル、アミノスルホニルアミノ、Ｃ１〜６アルキルアミノスルホニルアミノ、ジ−Ｃ１〜４アルキルアミノスルホニルアミノ、及びオキソから各々独立して選択され、各々は、好適な位置において、ハロ、ＣＮ、ヒドロキシ、Ｃ１〜３アルキル、Ｃ１〜３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜３アルキルアミノ、及びジ−Ｃ１〜３−アルキルアミノから独立して選択される１、２、又は３つの基で置換されていてもよく、
但し、前記化合物は１−｛（［５−（４−ニトロフェニル）−２−フリル］メチリデンアミノ｝イミダゾリジン−２，４−ジオン又は１−｛［５−（４−ブロモフェニル）−２−フリル］メチリデンアミノ｝イミダゾリジン−２，４−ジオンではない、化合物。
［付記２］
Ａｒが、１、２、３、４、又は５つのＲ６基で置換されていてもよいアリールである、付記１に記載の化合物。
［付記３］
構造：
【０１６８】
【化１７】
0006321844.tif 000024
【０１６９】
を有し、式中、Ｒａ１、Ｒａ２、及びＲａ３が、水素、ハロ、ＣＮ、ニトロ、ヒドロキシ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６ハロアルコキシ、アミノ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ−Ｃ１〜４−アルキルアミノ、カルボキシ、カルバミル、Ｃ１〜６アルキルカルバミル、及びジ（Ｃ１〜４アルキル）カルバミルから独立して選択される、付記１又は２に記載の化合物。
［付記４］
ＷがＯである、付記１〜３のいずれか一項に記載の化合物。
［付記５］
Ｒ１及びＲ２が両方とも水素である、付記１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
［付記６］
Ｙが、
【０１７０】
【化１８】
0006321844.tif 000025
【０１７１】
であり、式中、
Ｚが、Ｃ１〜６アルキル、ベンジル、アリール、へテロアリール、又はＮＲ４Ｒ５であり、ここで、アルキル、ベンジル、アリール、又はへテロアリールが、１、２、３、４、又は５つの独立して選択されるＲ７基で置換されていてもよく、かつ
Ｒ３が水素である、付記１〜５のいずれか一項に記載の化合物。
［付記７］
Ｚがメチル又はエチルである、付記６に記載の化合物。
［付記８］
Ｚがベンジルである、付記６に記載の化合物。
［付記９］
Ｚがピリジニルである、付記６に記載の化合物。
［付記１０］
ＺがＮＲ４Ｒ５である、付記６に記載の化合物。
［付記１１］
Ｒ４及びＲ５が水素である、付記１０に記載の化合物。
［付記１２］
Ｒ４及びＲ５が、窒素と共に、Ｃ１〜３アルキル、Ｃ１〜３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜３アルキルアミノ、及びジ−Ｃ１〜３−アルキルアミノで置換されていてもよいピペラジニル環を形成している、付記１０に記載の化合物。
［付記１３］
Ｚが、Ｃ１〜６アルキル、ベンジル、アリール、へテロアリール、又はＮＲ４Ｒ５であり、ここで、アルキル、ベンジル、アリール、又はへテロアリールが、１、２、３、４、又は５つの独立して選択されるＲ７基で置換されていてもよく、
Ｒ３が、Ｚと共に、１つ又は複数のＲ７基で置換されていてもよい複素環を形成していてもよい、付記１に記載の化合物。
［付記１４］
【０１７２】
【化１９−１】
0006321844.tif 000026
【０１７３】
【化１９−２】
0006321844.tif 000027
【０１７４】
及びそれらの薬学的に許容される塩からなる群から選択される、付記１に記載の化合物。
［付記１５］
付記１〜１４のいずれか一項に記載の化合物と、薬学的に許容される担体、溶媒、アジュバント、又は希釈剤とを含む医薬組成物。
［付記１６］
対象におけるニューロンカルシウムホメオスタシス不全を正常化する方法であって、有効量の付記１〜１４のいずれか一項に記載の化合物を前記対象に投与することを含む方法。
［付記１７］
前記対象がヒト対象である、付記１６に記載の方法。
［付記１８］
対象における神経学的障害又は神経変性障害を治療する方法であって、有効量の付記１〜１４のいずれか一項に記載の化合物を前記対象に投与することを含む方法。
［付記１９］
前記神経学的障害又は神経変性障害が、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、前頭側頭認知症、ピック病、慢性外傷性脳障害、外傷性脳損傷、脳卒中、小脳性運動失調、多発性硬化症、ダウン症候群、又は加齢関連ＣＮＳ障害である、付記１８に記載の方法。
［付記２０］
前記神経学的障害又は神経変性障害がアルツハイマー病である、付記１９に記載の方法。
【０１７５】
本発明を、詳細に、その特定の実施形態を参照して説明したが、添付の特許請求の範囲に規定されている本発明の範囲から逸脱せずに、改変及び変異が可能であることは明白であろう。より詳しくは、本発明の幾つかの態様が、特に有利なものとして本明細書で特定されているが、本発明は、本発明のこれらの特定の態様に限定される訳ではないことが企図される。
【図１】
0006321844.tif 000032
【図２Ａ】
0006321844.tif 000033
【図２Ｂ】
0006321844.tif 000034
【図２Ｃ】
0006321844.tif 000035
【図２Ｄ】
0006321844.tif 000036
【図２Ｅ】
0006321844.tif 000037
【図３】
0006321844.tif 000038
【図４】
0006321844.tif 000039
【図５】
0006321844.tif 000040
【図６】
0006321844.tif 000041
【図７】
0006321844.tif 000042
【図８Ａ】
0006321844.tif 000043
【図８Ｂ】
0006321844.tif 000044
【図８Ｃ】
0006321844.tif 000045
【図８Ｄ】
0006321844.tif 000046
【図９】
0006321844.tif 000047