(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）を有するペプチド化合物：
Ｒ1−Ｚ−Ｒ2  （Ｉ）
［式中、Ｚは、式（ＩＩ）からなるペプチド部分であり、
Ｔｙｒ−Ａｉｂ−Ｘ３−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ−Ｘ１２−Ｇｌｎ−Ｘ１４−Ｘ１５−Ｘ１６−Ｘ１７−Ｘ１８−Ｘ１９−Ｘ２０−Ｘ２１−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｇｌｕ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｘ２８−Ｘ２９−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｘ４０  （ＩＩ）
Ｘ３は、ＧｌｎおよびＧｌｕから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１２は、ＩｌｅおよびＬｙｓから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１４は、Ｌｙｓを表し、−ＮＨ2側鎖基は、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−ヘキサデカノイルアミノ−ブチリル−、および（Ｓ）−４−カルボキシ−４−オクタデカノイルアミノ−ブチリル−から選択される基の１つによって官能化されており、
Ｘ１５は、ＡｓｐおよびＧｌｕから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１６は、Ｇｌｕを表し、
Ｘ１７は、Ａｒｇ、およびＧｌｎから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１８は、Ａｌａ、およびＡｒｇから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１９は、Ａｌａを表し、
Ｘ２０は、Ｐｉｐ、（Ｓ）ＭｅＬｙｓ、（Ｒ）ＭｅＬｙｓおよび（Ｓ）ＭｅＯｒｎから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２１は、Ｇｌｕを表し、
Ｘ２８は、Ａｓｎ、Ａｌａ、およびＳｅｒから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２９は、Ｇｌｙ、およびＴｈｒから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ４０は、存在せず、
Ｒ1はＮＨ2を表し、
Ｒ2は、ペプチド化合物のＣ末端基を表し、ＯＨおよびＮＨ2から選択される］
またはその塩もしくは溶媒和物であって、該化合物がＧＬＰ−１およびＧＩＰ受容体アゴニストである、前記ペプチド化合物またはその塩もしくは溶媒和物。
【請求項２】
Ｒ2はＮＨ2である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
ペプチド化合物は、ＧＩＰ受容体において天然のＧＩＰに比べて少なくとも０．０４％の相対的活性を有する、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項４】
ペプチド化合物は、ＧＩＰ受容体において天然のＧＩＰに比べて少なくとも０．０８％の相対的活性を有する、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項５】
ペプチド化合物は、ＧＩＰ受容体において天然のＧＩＰに比べて少なくとも０．２％の相対的活性を有する、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項６】
ペプチド化合物は、ＧＬＰ−１受容体においてＧＬＰ−１（７−３６）に比べて少なくとも０．０７％の相対的活性を示す、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項７】
ペプチド化合物は、ＧＬＰ−１受容体においてＧＬＰ−１（７−３６）に比べて少なくとも０．１％の相対的活性を示す、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項８】
ペプチド化合物は、ＧＬＰ−１受容体においてＧＬＰ−１（７−３６）に比べて少なくとも０．１４％の相対的活性を示す、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項９】
ペプチド化合物は、ＧＬＰ−１受容体においてＧＬＰ−１（７−３６）に比べて少なくとも０．３５％の相対的活性を示す、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１０】
ペプチド化合物は、ＧＬＰ−１受容体においてＧＬＰ−１（７−３６）に比べて少なくとも０．４％の相対的活性を示す、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１１】
ペプチド化合物は、グルカゴン受容体において天然のグルカゴンに比べて少なくとも０．１％の相対的活性をさらに示す、請求項３〜１０のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１２】
ペプチド化合物は、グルカゴン受容体において天然のグルカゴンに比べて少なくとも０．２％の相対的活性をさらに示す、請求項３〜１０のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１３】
ペプチド化合物は、グルカゴン受容体において天然のグルカゴンに比べて少なくとも０．３％の相対的活性をさらに示す、請求項３〜１０のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１４】
ペプチド化合物は、グルカゴン受容体において天然のグルカゴンに比べて少なくとも０．４％の相対的活性をさらに示す、請求項３〜１０のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１５】
ペプチド化合物は、グルカゴン受容体において天然のグルカゴンに比べて少なくとも０．５％の相対的活性をさらに示す、請求項３〜１０のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１６】
Ｘ２８はＡｌａを表し、
Ｘ２９はＧｌｙを表す、
請求項１〜１５のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１７】
Ｘ２８はＡｓｎを表し、
Ｘ２９はＴｈｒを表す、
請求項１〜１５のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１８】
Ｘ３は、ＧｌｎおよびＧｌｕから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１２は、ＩｌｅおよびＬｙｓから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１４は、Ｌｙｓを表し、−ＮＨ2側鎖基は−Ｃ（Ｏ）−Ｒ5によって官能化されており、ここで、−Ｃ（Ｏ）−Ｒ5は、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−ヘキサデカノイルアミノ−ブチリル−（γＥ−ｘ５３）、および（Ｓ）−４−カルボキシ−４−オクタデカノイルアミノ−ブチリル−（γＥ−ｘ７０）から選択され、
Ｘ１５は、ＡｓｐおよびＧｌｕから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１６はＧｌｕを表し、
Ｘ１７は、ＡｒｇおよびＧｌｎから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１８は、ＡｌａおよびＡｒｇから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１９はＡｌａを表し、
Ｘ２０は、Ｐｉｐ、（Ｓ）−ＭｅＬｙｓ、（Ｒ）−ＭｅＬｙｓおよび（Ｓ）−ＭｅＯｒｎから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２１はＧｌｕを表し、
Ｘ２８は、Ａｓｎ、Ａｌａ、およびＳｅｒから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２９は、ＧｌｙおよびＴｈｒから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ４０は存在しない、
請求項１〜１７のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１９】
配列番号８〜１６の化合物から選択される、請求項１〜１８のいずれか１項に記載の化合物、またはその塩もしくは溶媒和物。
【請求項２０】
配列番号８〜１３および１５の化合物から選択される、請求項１〜１８のいずれか１項に記載の化合物、またはその塩もしくは溶媒和物。
【請求項２１】
医薬における使用のための、請求項１〜２０のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項２２】
ヒトの医薬における使用のための、請求項１〜２０のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項２３】
少なくとも１つの薬学的に許容される担体と一緒に医薬組成物中に活性薬剤として存在する、請求項２１または２２に記載の使用のための化合物。
【請求項２４】
一連のインスリンおよびインスリン誘導体、ＧＬＰ−１、ＧＬＰ−１類似体およびＧＬＰ−１受容体アゴニスト、ポリマーに結合しているＧＬＰ−１およびＧＬＰ−１類似体、二重ＧＬＰ１／グルカゴンアゴニスト、ＰＹＹ３−３６またはその類似体、膵臓ポリペプチドまたはその類似体、グルカゴン受容体アゴニスト、ＧＩＰ受容体アゴニストまたはアンタゴニスト、グレリンアンタゴニストまたはインバースアゴニスト、キセニンおよびその類似体、ＤＤＰ−ＩＶインヒビター、ＳＧＬＴ２インヒビター、二重ＳＧＬＴ２／ＳＧＬＴ１インヒビター、ビグアナイドチアゾリジンジオン、二重ＰＰＡＲアゴニスト、スルホニル尿素、メグリチニド、アルファ−グルコシダーゼインヒビター、アミリンおよびアミリン類似体、ＧＰＲ１１９アゴニスト、ＧＰＲ４０アゴニスト、ＧＰＲ１２０アゴニスト、ＧＰＲ１４２アゴニスト、全身性または低吸収性のＴＧＲ５アゴニスト、サイクロセット（Ｃｙｃｌｏｓｅｔ）、１１−ベータ−ＨＳＤのインヒビター、グルコキナーゼのアクチベーター、ＤＧＡＴのインヒビター、プロテインチロシンホスファターゼ１のインヒビター、グルコース−６−ホスファターゼのインヒビター、フルクトース−１，６−ビスホスファターゼのインヒビター、グリコーゲンホスホリラーゼのインヒビター、ホスホエノールピルビン酸カルボキシキナーゼのインヒビター、グリコーゲンシンターゼキナーゼのインヒビター、ピルビン酸デヒドロゲナーゼキナーゼのインヒビター、アルファ２−アンタゴニスト、ＣＣＲ−２アンタゴニスト、グルコーストランスポーター−４のモジュレーター、ソマトスタチン受容体３アゴニスト、ＨＭＧ−ＣｏＡ−レダクターゼインヒビター、フィブラート、ニコチン酸およびその誘導体、ニコチン酸受容体１アゴニスト、ＰＰＡＲ−アルファ、ガンマ、またはアルファ／ガンマアゴニストまたはモジュレーター、ＰＰＡＲ−デルタアゴニスト、ＡＣＡＴインヒビター、コレステロール吸収インヒビター、胆汁酸結合物質、ＩＢＡＴインヒビター、ＭＴＰインヒビター、ＰＣＳＫ９のモジュレーター、肝臓選択的甲状腺ホルモン受容体βアゴニストによるＬＤＬ受容体の上方制御物質、ＨＤＬ上昇化合物、脂質代謝モジュレーター、ＰＬＡ２インヒビター、ＡｐｏＡ−Ｉエンハンサー、甲状腺ホルモン受容体アゴニスト、コレステロール合成インヒビター、オメガ−３脂肪酸およびその誘導体、シブトラミン、テソフェンシン、オーリスタットのような肥満を処置するための活性物質、ＣＢ−１受容体アンタゴニスト、ＭＣＨ−１アンタゴニスト、ＭＣ４受容体アゴニストおよび部分アゴニスト、ＮＰＹ５またはＮＰＹ２アンタゴニスト、ＮＰＹ４アゴニスト、ベータ−３−アゴニスト、レプチンまたはレプチンミメティック、５ＨＴ２ｃ受容体のアゴニスト、またはブプロピオン／ナルトレキソン（ＣＯＮＴＲＡＶＥ）、ブプロピオン／ゾニサミド（ＥＭＰＡＴＩＣ）、ブプロピオン／フェンテルミン、もしくはプラムリンチド／メトレレプチンの併用、ＱＮＥＸＡ（フェンテルミン＋トピラメート）、リパーゼインヒビター、血管新生インヒビター、Ｈ３アンタゴニスト、ＡｇＲＰインヒビター、トリプルモノアミン取込みインヒビター（ノルエピネフリンおよびアセチ���コリン）、ＭｅｔＡＰ２インヒビター、カルシウムチャネルブロッカーであるジルチアゼムの経鼻製剤、線維芽細胞成長因子受容体４の生成に対するアンチセンス、プロヒビチン標的化ペプチド−１；アンジオテンシンＩＩ受容体アンタゴニスト、ＡＣＥインヒビター、ＥＣＥインヒビター、利尿薬、ベータ−ブロッカー、カルシウム拮抗薬、中枢作用性昇圧薬、アルファ−２−アドレナリン作動性受容体のアンタゴニスト、中性エンドペプチダーゼのインヒビターのような高血圧、慢性心不全、またはアテローム性動脈硬化に影響を及ぼすための薬物、血小板凝集インヒビターから選択される少なくとも１つのさらなる治療的活性薬剤と一緒になった、請求項２１〜２３のいずれか１項に記載の使用のための化合物。
【請求項２５】
特にＧＬＰ−１アゴニストおよび／またはインスリンもしくはインスリン類似体および／または消化管ペプチドである少なくとも１つのさらなる治療的活性薬剤と一緒になった、請求項２１〜２３のいずれか１項に記載の使用のための化合物。
【請求項２６】
高血糖、２型糖尿病、耐糖能障害、１型糖尿病、肥満、メタボリックシンドローム、および神経変性障害の処置または予防のための、特に２型糖尿病における疾患の進行を遅らせ、または予防するための、メタボリックシンドロームを処置するための、肥満を処置しまたは過体重を予防するための、食物摂取を減少させ、エネルギー支出を増大し、体重を減少させ、耐糖能障害（ＩＧＴ）から２型糖尿病への進行を遅らせるための；２型糖尿病からインスリン要求性糖尿病への進行を遅らせるための；食欲を調節するための；満腹を誘発するための；体重減少が成功した後の体重の再増加を予防するための；過体重もしくは肥満に関連する疾患もしくは状態を処置するための；過食症を処置するための；過食を処置するための；アテローム性動脈硬化症、高血圧、ＩＧＴ、異脂肪血症、冠動脈心疾患、肝脂肪症を処置するための、ベータ−ブロッカー中毒症を処置するための、エックス線、ＣＴスキャン、およびＮＭＲスキャンのような技術を用いた消化管の調査との関連において有用である、消化管の運動の阻害のための、請求項２１〜２５のいずれか１項に記載の使用のための化合物。
【請求項２７】
高血糖、２型糖尿病、肥満、およびメタボリックシンドロームを処置もしくは予防し、または体重を減少させるための、請求項２１〜２６のいずれか１項に記載の使用のための化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、グルカゴン様ペプチド１（ＧＬＰ−１）およびグルコース依存性インスリン分泌刺激ポリペプチド（ＧＩＰ）の受容体、ならびに場合によりグルカゴン受容体（ＧＣＧ）を活性化するエキセンジン−４ペプチド類似体、ならびに例えば糖尿病および肥満を含めたメタボリックシンドロームの障害の処置、ならびに過剰な食物摂取の減少におけるその医学的使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
エキセンジン−４は、アメリカドクトカゲ（Ｈｅｌｏｄｅｒｍａ  ｓｕｓｐｅｃｔｕｍ）の唾液腺によって生成される、アミノ酸３９個のペプチドである（非特許文献１）。エキセンジン−４は、グルカゴン様ペプチド−１（ＧＬＰ−１）受容体のアクチベーターである一方、ＧＩＰ受容体の非常に低い活性化しか示さず、グルカゴン受容体は活性化しない（表１を参照されたい）。
【０００３】
【表１】
0006408998.tif 000002
【０００４】
エキセンジン−４は、ＧＬＰ−１に観察される血糖調節作用の多くを共有する。臨床試験および非臨床試験により、エキセンジン−４には、インスリンの合成および分泌におけるグルコース依存的な増強、グルカゴン分泌のグルコース依存的な抑制、胃排出の減速、食物摂取および体重の減少、ならびにベータ細胞塊およびベータ細胞機能のマーカーの増大を含めた、いくつかの有益な抗糖尿病性の性質があることが示されている（非特許文献２；非特許文献３；非特許文献４）。
【０００５】
これらの作用は、糖尿病患者だけでなく肥満に苦しむ患者にも有益である。肥満を有する患者は、糖尿病、高血圧、高脂血症、心血管疾患、および筋骨格疾患にかかるリスクがより高い。
【０００６】
ＧＬＰ−１およびＧＩＰに比べて、エキセンジン−４は、ジペプチジルペプチダーゼ−４（ＤＰＰ４）による切断に対してより抵抗性であり、ｉｎ  ｖｉｖｏで、より長時間の半減期および作用時間をもたらす（非特許文献５；非特許文献６）。
【０００７】
エキセンジン−４は、ＧＬＰ−１、グルカゴン、またはオキシントモジュリンに比べると、中性エンドペプチダーゼ（ＮＥＰ）による分解に対してはるかにより安定であることも示された（非特許文献７）。
【０００８】
それにもかかわらず、エキセンジン−４は、２８位のアスパラギンの脱アミドおよび異性体化（特許文献１）同様、１４位のメチオニンの酸化（非特許文献８）のため、化学的に不安定である。
【０００９】
エキセンジン−４のアミノ酸配列を配列番号１に示す：
ＨＧＥＧＴＦＴＳＤＬＳＫＱＭＥＥＥＡＶＲＬＦＩＥＷＬＫＮＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ−ＮＨ２
【００１０】
ＧＬＰ−１（７〜３６）−アミドのアミノ酸配列を配列番号２に示す：
ＨＡＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＧＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＲ−ＮＨ２
【００１１】
リラグルチドは、市販されている化学修飾されたＧＬＰ−１類似体であり、他の修飾の中でも、脂肪酸が２０位のリジンに連結し、作用時間の延長をもたらす（非特許文献９；非特許文献１０）。
【００１２】
リラグルチドのアミノ酸配列を配列番号３に示す：
ＨＡＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＧＱＡＡＫ（（Ｓ）−４−カルボキシ−４−ヘキサデカノイルアミノ−ブチリル−）ＥＦＩＡＷＬＶＲＧＲＧ−ＯＨ
【００１３】
ＧＩＰ（グルコース依存性インスリン分泌刺激ポリペプチド）は、食物摂取後に腸のＫ細胞から放出される、アミノ酸４２個のペプチドである。ＧＩＰおよびＧＬＰ−１は、インクレチン効果を説明する２つの腸の腸内分泌細胞由来のホルモンであり、インクレチン効果は経口糖負荷に対するインスリン反応の７０％超を占める（非特許文献１１）。
【００１４】
ＧＩＰのアミノ酸配列を配列番号４に示す：
ＹＡＥＧＴＦＩＳＤＹＳＩＡＭＤＫＩＨＱＱＤＦＶＮＷＬＬＡＱＫＧＫＫＮＤＷＫＨＮＩＴＱ−ＯＨ
【００１５】
グルカゴンは、循環グルコースが低いと血流中に放出される、アミノ酸２９個のペプチドである。グルカゴンのアミノ酸配列を配列番号５に示す：
ＨＳＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴ−ＯＨ
【００１６】
低血糖の間、血中グルコースレベルが正常未満に低下すると、グルカゴンはグリコーゲンを分解し、グルコースを放出するように肝臓にシグナルを送り、血中グルコースレベルの上昇を引き起こして正常レベルに到達させる。低血糖は、糖尿病のため高血糖（血中グルコースレベルの上昇）を有するインスリン処置患者によくある副作用である。このように、グルコース調節におけるグルカゴンの最も優勢的な役割は、インスリンの作用に対抗し、血中グルコースレベルを維持することである。
【００１７】
Ｈｏｌｓｔ（非特許文献１２）およびＭｅｉｅｒ（非特許文献１３）は、ＧＬＰ−１、リラグルチド、およびエキセンジン−４などのＧＬＰ−１受容体アゴニストは、空腹時および食後のグルコース（ＦＰＧおよびＰＰＧ）を低下させることにより、Ｔ２ＤＭを有する患者における糖血症コントロールを改善することを記載している。ＧＬＰ−１受容体に結合し、活性化するペプチドは、特許出願特許文献２、特許文献３、および特許文献４に記載されており、これらの内容は参照によって本明細書に組み入れる。
【００１８】
例えば、１つの調製物においてＧＬＰ−１およびＧＩＰの作用を組み合わせることにより、ＧＬＰ−１およびＧＩＰ受容体を二重に活性化し、市販のＧＬＰ−１アゴニストであるリラグルチドに比べて、Ｔ２ＤＭおよび肥満を有するマウスにおける著しく良好な血中グルコースレベルの低下、インスリン分泌の増大、および体重の減少を有する治療原理がもたらされることが記載されている（例えば、非特許文献１４）。天然のＧＬＰ−１およびＧＩＰは、混注後のヒトにおいて、ＧＬＰ−１単独に比べて、著しく増大したインスリン分泌刺激効果と相加的に相互作用することが証明された（非特許文献１５）。
【００１９】
ＧＬＰ−１受容体、ＧＩＰ受容体、およびグルカゴン受容体に対するアゴニズムを組み合わせるハイブリッドの分子をデザインすることで、市販のＧＬＰ−１アゴニストであるリラグルチドに比べて、著しく良好な血中グルコースレベルの低下、インスリン分泌の増大、および体重減少に対するさらに明白な顕著な効果を実現する治療可能性がもたらされる（例えば、非特許文献１６）。
【００２０】
本発明の化合物は、ＧＬＰ−１およびＧＩＰ受容体、ならびに場合によりグルカゴン受容体でアゴニスト活性を示し、数ある中で、好ましくは以下の修飾：１位のＴｙｒおよび１２位のＩｌｅを有する、エキセンジン−４誘導体である。
【００２１】
驚くべきことに、選択的ＧＬＰ−１Ｒアゴニストであるエキセンジン−４の１位のＴｙｒおよび１２位のＩｌｅによる修飾によって、ＧＬＰ−１およびＧＩＰ受容体の高度な二重活性を有するペプチドがもたらされることが見出された。表２に示す通り、ＧＬＰ−１自体など、他のＧＬＰ−１アゴニストを同じく修飾しても、ＧＩＰ受容体の高活性をもたらすことがないことから、この観察は驚くべきものである。
【００２２】
【表２】
0006408998.tif 000003
【００２３】
ＧＩＰおよびＧＬＰ−１受容体の両方、ならびに場合によりグルカゴン受容体に結合および活性化し、糖血症コントロールを改善し、体重増加を抑制し、食物摂取を減少させるペプチドは、特許出願である、特許文献５、特許文献６、特許文献７、特許文献８、特許文献９、特許文献１０に記載されており、これらの内容は参照によって本明細書に組み入れる。これらの出願は、ＧＬＰ−１受容体、ＧＩＰ受容体、および場合によりグルカゴン受容体の混合のアゴニストを、天然のＧＩＰまたはグルカゴンの配列の類似体としてデザインすることができることを開示している。
【００２４】
本発明の化合物は、１０位にロイシンおよび１３位にグルタミンを含む、エキセンジン−４ペプチドの類似体である。Ｋｒｓｔｅｎａｎｓｋｙら（非特許文献１７）は、その受容体の相互作用およびアデニル酸シクラーゼの活性化に対する、グルカゴン残基１０から１３の重要性を示している。本発明のエキセンジン−４ペプチド類似体では、基礎となる残基のいくつかは、グルカゴンの残基と異なる。特に、Ｔｙｒ１０およびＴｙｒ１３の残基は、１０位のロイシン、および１３位の非芳香族の極性アミノ酸であるグルタミンによって置き換えられている。この置換は、特に２３位のイソロイシンおよび２４位のグルタミン酸と組み合わせて、溶解性および溶液中での凝集の挙動として潜在的に改善されている生物物理学的性質を有するエキセンジン−４誘導体をもたらす。エキセンジン−４類似体の１３位の、芳香族アミノ酸の極性アミノ酸での非保存的置換により、ＧＩＰ受容体および場合によりグルカゴン受容体に対して高活性を有するペプチドがもたらされるのは驚くべきことである。
【００２５】
さらに、本発明の化合物は、脂肪酸がアシル化された残基を１４位に有する、エキセンジン−４誘導体である。１４位のこの脂肪酸の官能化により、薬物動態プロファイルの改善がもたらされる。驚くべきことに、１４位の脂肪酸の官能化により、ＧＩＰＲ活性の著しく高いペプチド、例えば実施例５、表８に示すものももたらされる。
【００２６】
本発明の化合物は、２０位に塩基性側鎖を有する、α，α−ジアルキル化アミノ酸を含む、エキセンジン−４ペプチド類似体である。驚くべきことに、エキセンジン−４の配列を、これらのアミノ酸の１つで修飾すると、非天然のアミノ酸を２０位に組み入れた場合、溶解性（特に低ｐＨ、とりわけｐＨ４．５で）または溶液中での凝集の挙動など、生物物理学的プロファイルの改善された化合物がもたらされる。得られるエキセンジン−４類似体は、それにより、ＧＬＰ−１受容体、ＧＩＰ受容体、および場合によりグルカゴン受容体で高活性を維持する。これら非天然のアミノ酸を組み入れることで、ペプチドの酵素安定性も増大し、改善された薬物動態的性質が潜在的にもたらされる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００２７】
【特許文献１】ＷＯ２００４／０３５６２３
【特許文献２】ＷＯ９８／０８８７１  Ａ１
【特許文献３】ＷＯ２００８／０８１４１８  Ａ１
【特許文献４】ＷＯ２００８／０２３０５０  Ａ１
【特許文献５】ＷＯ２０１１／１１９６５７  Ａ１
【特許文献６】ＷＯ２０１２／１３８９４１  Ａ１
【特許文献７】ＷＯ２０１０／０１１４３９  Ａ２
【特許文献８】ＷＯ２０１０／１４８０８９  Ａ１
【特許文献９】ＷＯ２０１１／０９４３３７  Ａ１
【特許文献１０】ＷＯ２０１２／０８８１１６  Ａ２
【非特許文献】
【００２８】
【非特許文献１】Ｅｎｇ  Ｊ．ら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２６７巻、７４０２〜０５頁、１９９２年
【非特許文献２】Ｇｅｎｔｉｌｅｌｌａ  Ｒら、Ｄｉａｂｅｔｅｓ  Ｏｂｅｓ  Ｍｅｔａｂ．、１１巻、５４４〜５６頁、２００９年
【非特許文献３】Ｎｏｒｒｉｓ  ＳＬら、Ｄｉａｂｅｔ  Ｍｅｄ．、２６巻、８３７〜４６頁、２００９年
【非特許文献４】Ｂｕｎｃｋ  ＭＣら、Ｄｉａｂｅｔｅｓ  Ｃａｒｅ．、３４巻、２０４１〜７頁、２０１１年
【非特許文献５】Ｅｎｇ  Ｊ．、Ｄｉａｂｅｔｅｓ、４５巻（補完２）、１５２Ａ頁（抄録５５４頁）、１９９６年
【非特許文献６】Ｄｅａｃｏｎ  ＣＦ、Ｈｏｒｍ  Ｍｅｔａｂ  Ｒｅｓ、３６巻、７６１〜５頁、２００４年
【非特許文献７】Ｄｒｕｃｅ  ＭＲら、Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ、１５０巻（４）、１７１２〜１７２１頁、２００９年
【非特許文献８】Ｈａｒｇｒｏｖｅ  ＤＭら、Ｒｅｇｕｌ．Ｐｅｐｔ．、１４１巻、１１３〜９頁、２００７年
【非特許文献９】Ｄｒｕｃｋｅｒ  ＤＪら、Ｎａｔｕｒｅ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃ．Ｒｅｖ．、９巻、２６７〜２６８頁、２０１０年
【非特許文献１０】Ｂｕｓｅ，ＪＢら、Ｌａｎｃｅｔ、３７４巻、３９〜４７頁、２００９年
【非特許文献１１】Ｂａｇｇｉｏ  ＬＬ、Ｄｒｕｃｋｅｒ  ＤＪ．、Ｂｉｏｌｏｇｙ  ｏｆ  ｉｎｃｒｅｔｉｎｓ：ＧＬＰ−１  ａｎｄ  ＧＩＰ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ、２００７年；１３２巻、２１３１〜２１５７頁
【非特許文献１２】Ｈｏｌｓｔ，Ｊ．Ｊ．、Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｒｅｖ．、２００７年、８７巻、１４０９頁
【非特許文献１３】Ｍｅｉｅｒ，Ｊ．Ｊ．、Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．、２０１２年、８巻、７２８頁
【非特許文献１４】ＶＡ  Ｇａｕｌｔら、Ｃｌｉｎ  Ｓｃｉ（Ｌｏｎｄ）、１２１巻、１０７〜１１７頁、２０１１年
【非特許文献１５】ＭＡ  Ｎａｕｃｋら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｍｅｔａｂ．、７６巻、９１２〜９１７頁、１９９３年
【非特許文献１６】ＶＡ  Ｇａｕｌｔら、Ｃｌｉｎ  Ｓｃｉ（Ｌｏｎｄ）、１２１巻、１０７〜１１７頁、２０１１年
【非特許文献１７】Ｋｒｓｔｅｎａｎｓｋｙら（Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、２５巻、３８３３〜３８３９頁、１９８６年
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００２９】
本明細書において、ＧＬＰ−１およびＧＩＰ受容体、ならびに場合によりグルカゴン受容体を強力に活性化するエキセンジン−４類似体を提供する。これらのエキセンジン−４類似体は、他の置換の中でも、１４位のメチオニンが、側鎖に−ＮＨ２基を保有するアミノ酸によって置き換えられており、これが親油性の側鎖（例えば、リンカーと場合により組み合わされている脂肪酸）でさらに置換されている。
【００３０】
本発明は、式（Ｉ）を有するペプチド化合物：
Ｒ１−Ｚ−Ｒ２  （Ｉ）
［式中、Ｚは、式（ＩＩ）を有するペプチド部分であり、
Ｔｙｒ−Ａｉｂ−Ｘ３−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ−Ｘ１２−Ｇｌｎ−Ｘ１４−Ｘ１５−Ｘ１６−Ｘ１７−Ｘ１８−Ｘ１９−Ｘ２０−Ｘ２１−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｇｌｕ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｘ２８−Ｘ２９−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｘ４０    
（ＩＩ）
Ｘ３は、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、およびＨｉｓから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１２は、ＩｌｅおよびＬｙｓから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１４は、−ＮＨ２基を有する側鎖を有するアミノ酸残基を表し、ここで、−ＮＨ２側鎖基は−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｒ５、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−Ｒ５、−Ｓ（Ｏ）２−Ｒ５、またはＲ５によって、好ましくは−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５によって官能化されており、ここで、Ｒ５は、炭素原子最大５０個または最大１００個、ならびに場合によりハロゲン、Ｎ、Ｏ、Ｓ、および／またはＰから選択されるヘテロ原子を含む部分であってよく、
Ｘ１５は、ＡｓｐおよびＧｌｕから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１６は、Ｓｅｒ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、およびＧｌｎから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１７は、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｉｌｅ、Ｇｌｕ、Ｇｌｎ、Ｌｅｕ、Ａｉｂ、Ｔｙｒ、およびＡｌａから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１８は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ａｉｂ、Ｌｅｕ、およびＴｙｒから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１９は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｎ、およびＡｉｂから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２０は、Ｇｌｎ、Ａｉｂ、Ｐｈｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、Ｐｉｐ、（Ｓ）ＭｅＬｙｓ、（Ｒ）ＭｅＬｙｓ、（Ｓ）ＭｅＯｒｎ、および（Ｒ）ＭｅＯｒｎから選択
されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２１は、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｅｕ、およびＴｙｒから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２８は、Ａｓｎ、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ａｉｂ、およびＳｅｒから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２９は、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ａｉｂ、Ｄ−Ａｌａ、およびＡｌａから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ４０は、存在せず、または−ＮＨ２基を有する側鎖を有するアミノ酸残基を表し、ここで、−ＮＨ２側鎖基は、−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｒ５、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−Ｒ５、−Ｓ（Ｏ）２−Ｒ５、またはＲ５によって、好ましくは−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５によって場合により官能化されており、ここで、Ｒ５は、炭素原子最大５０個または最大１００個、ならびに場合によりハロゲン、Ｎ、Ｏ、Ｓ、および／またはＰから選択されるヘテロ原子を含む部分であってよく、
Ｒ１はＮＨ２を表し、
Ｒ２は、ＯＨまたはＮＨ２を表す］
またはその塩もしくは溶媒和物を提供する。
【００３１】
本発明の化合物は、細胞内ｃＡＭＰ形成を刺激することができるという観察によって決定される、ＧＬＰ−１およびＧＩＰ受容体アゴニスト、ならびに場合によりグルカゴン受容体アゴニストである。ｉｎ  ｖｉｔｒｏの細胞アッセイにおけるアゴニストの作用強度決定は、「方法」に記載する通り、最大反応の５０％活性化（ＥＣ５０）を引き起こす濃度を決定することにより定量される。
【００３２】
ある実施形態において、本発明はしたがって、式（Ｉ）を有するペプチド化合物：
Ｒ１−Ｚ−Ｒ２  （Ｉ）
［式中、Ｚは、式（ＩＩ）を有するペプチド部分であり、
Ｔｙｒ−Ａｉｂ−Ｘ３−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ−Ｘ１２−Ｇｌｎ−Ｘ１４−Ｘ１５−Ｘ１６−Ｘ１７−Ｘ１８−Ｘ１９−Ｘ２０−Ｘ２１−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｇｌｕ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｘ２８−Ｘ２９−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｘ４０    
（ＩＩ）
Ｘ３は、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、およびＨｉｓから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１２は、ＩｌｅおよびＬｙｓから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１４は、−ＮＨ２基を有する側鎖を有するアミノ酸残基を表し、ここで、−ＮＨ２側鎖基は−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｒ５、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−Ｒ５、−Ｓ（Ｏ）２−Ｒ５、またはＲ５によって、好ましくは−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５によって官能化されており、ここで、Ｒ５は、炭素原子最大５０個または最大１００個、ならびに場合によりハロゲン、Ｎ、Ｏ、Ｓ、および／またはＰから選択されるヘテロ原子を含む部分であり、
Ｘ１５は、ＡｓｐおよびＧｌｕから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１６は、Ｓｅｒ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、およびＧｌｎから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１７は、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｉｌｅ、Ｇｌｕ、Ｇｌｎ、Ｌｅｕ、Ａｉｂ、Ｔｙｒ、およびＡｌａから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１８は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ａｉｂ、Ｌｅｕ、およびＴｙｒから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１９は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｎ、およびＡｉｂから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２０は、Ｇｌｎ、Ａｉｂ、Ｐｈｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、Ｐｉｐ、（Ｓ）ＭｅＬｙｓ、（Ｒ）ＭｅＬｙｓ、（Ｓ）ＭｅＯｒｎ、および（Ｒ）ＭｅＯｒｎから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２１は、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｅｕ、およびＴｙｒから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２８は、Ａｓｎ、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ａｉｂ、およびＳｅｒから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２９は、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ａｉｂ、Ｄ−Ａｌａ、およびＡｌａから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ４０は、存在せず、または−ＮＨ２基を有する側鎖を有するアミノ酸残基を表し、ここで、−ＮＨ２側鎖基は、−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｒ５、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−Ｒ５、−Ｓ（Ｏ）２−Ｒ５、またはＲ５によって、好ましくは−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５によって場合により官能化されており、ここで、Ｒ５は、炭素原子最大５０個または最大１００個、ならびに場合によりハロゲン、Ｎ、Ｏ、Ｓ、および／またはＰから選択されるヘテロ原子を含む部分であってよく、
Ｒ１はＮＨ２を表し、
Ｒ２は、ＯＨまたはＮＨ２を表す］
またはその塩もしくは溶媒和物を提供し、ペプチド化合物は、ＧＩＰ受容体において天然のＧＩＰに比べて少なくとも０．０４％、好ましくは少なくとも０．０８％、より好ましくは少なくとも０．２％の相対的活性を有する。
【００３３】
さらに、特に、親油性残基でさらに置換されている１４位のリジンを有するペプチド化合物は、ＧＬＰ−１受容体においてＧＬＰ−１（７〜３６）に比べて少なくとも０．０７％、好ましくは少なくとも０．１％、より好ましくは少なくとも０．１４％、より好ましくは少なくとも０．３５％、さらにより好ましくは少なくとも０．４％の相対的活性を表す。
【００３４】
さらに、特に、親油性残基でさらに置換されている１４位のリジンを有するペプチド化合物は、ＧＩＰ受容体において天然のＧＩＰ（ＥＣ５０＝０．４ｐＭ）に比べて少なくとも０．０４％（すなわち、ＥＣ５０＜１０００ｐＭ）、より好ましくは０．０８％（すなわち、ＥＣ５０＜５００ｐＭ）、さらにより好ましくは０．２％（すなわち、ＥＣ５０＜２００ｐＭ）の相対的活性を表す。
【００３５】
場合により、いくつかの実施形態において、特に、親油性残基でさらに置換されている１４位のリジンを有するペプチド化合物は、グルカゴン受容体において天然のグルカゴンに比べて少なくとも０．１％、好ましくは少なくとも０．２％、より好ましくは少なくとも０．３％、より好ましくは少なくとも０．４％、さらにより好ましくは少なくとも０．５％の相対的活性を表す。
【００３６】
本明細書で用いる「活性」の語は、好ましくは、化合物がヒトＧＬＰ−１受容体、ヒトＧＩＰ受容体、および場合によりヒトグルカゴン受容体を活性化させる性能を意味する。より好ましくは、本明細書で用いる「活性」の語は、化合物が、細胞内ｃＡＭＰ形成を刺激する性能を意味する。本明細書で用いる「相対活性」の語は、化合物が、別の受容体アゴニストに比べて、または別の受容体に比べて、ある比率で受容体を活性化させる性能を意味すると理解される。アゴニストによる受容体の活性化は（例えば、ｃＡＭＰレベルの測定による）、実施例などに記載する通り、本明細書に記載する通りに決定される。
【００３７】
一実施形態によると、本発明の化合物は、ｈＧＬＰ−１受容体に対して、５００ｐＭ以下、好ましくは２００ｐＭ以下；より好ましくは１５０ｐＭ以下、より好ましくは１００ｐＭ以下、より好ましくは９０ｐＭ以下、より好ましくは８０ｐＭ以下、より好ましくは７０ｐＭ以下、より好ましくは６０ｐＭ以下、より好ましくは５０ｐＭ以下、より好ましくは４０ｐＭ以下、より好ましくは３０ｐＭ以下、より好ましくは２０ｐＭ以下のＥＣ５０を有する。
【００３８】
一実施形態によると、本発明の化合物は、ｈＧＩＰ受容体に対して、５００ｐＭ以下、好ましくは２００ｐＭ以下；より好ましくは１５０ｐＭ以下、より好ましくは１００ｐＭ以下、より好ましくは９０ｐＭ以下、より好ましくは８０ｐＭ以下、より好ましくは７０ｐＭ以下、より好ましくは６０ｐＭ以下、より好ましくは５０ｐＭ以下、より好ましくは４０ｐＭ以下、より好ましくは３０ｐＭ以下、より好ましくは２０ｐＭ以下のＥＣ５０を有する。
【００３９】
別の一実施形態によると、本発明の化合物は、場合により、ｈグルカゴン受容体に対して、５００ｐＭ以下、好ましくは２００ｐＭ以下；より好ましくは１５０ｐＭ以下、より好ましくは１００ｐＭ以下、より好ましくは９０ｐＭ以下、より好ましくは８０ｐＭ以下、より好ましくは７０ｐＭ以下、より好ましくは６０ｐＭ以下、より好ましくは５０ｐＭ以下、より好ましくは４０ｐＭ以下、より好ましくは３０ｐＭ以下、より好ましくは２０ｐＭ以下のＥＣ５０を有する。
【００４０】
別の一実施形態によると、本発明の化合物は、ｈＧＬＰ−１受容体に対して、５００ｐＭ以下、好ましくは２００ｐＭ以下；より好ましくは１５０ｐＭ以下、より好ましくは１００ｐＭ以下、より好ましくは９０ｐＭ以下、より好ましくは８０ｐＭ以下、より好ましくは７０ｐＭ以下、より好ましくは６０ｐＭ以下、より好ましくは５０ｐＭ以下、より好ましくは４０ｐＭ以下、より好ましくは３０ｐＭ以下、より好ましくは２０ｐＭ以下のＥＣ５０、および／またはｈＧＩＰ受容体に対して、５００ｐＭ以下、好ましくは２００ｐＭ以下；より好ましくは１５０ｐＭ以下、より好ましくは１００ｐＭ以下、より好ましくは９０ｐＭ以下、より好ましくは８０ｐＭ以下、より好ましくは７０ｐＭ以下、より好ましくは６０ｐＭ以下、より好ましくは５０ｐＭ以下、より好ましくは４０ｐＭ以下、より好ましくは３０ｐＭ以下、より好ましくは２０ｐＭ以下のＥＣ５０、および／または場合によりｈグルカゴン受容体に対して、５００ｐＭ以下、好ましくは２００ｐＭ以下；より好ましくは１５０ｐＭ以下、より好ましくは１００ｐＭ以下、より好ましくは９０ｐＭ以下、より好ましくは８０ｐＭ以下、より好ましくは７０ｐＭ以下、より好ましくは６０ｐＭ以下、より好ましくは５０ｐＭ以下、より好ましくは４０ｐＭ以下、より好ましくは３０ｐＭ以下、より好ましくは２０ｐＭ以下のＥＣ５０を有する。
【００４１】
なお別の一実施形態において、両方の受容体、すなわち、ｈＧＬＰ−１受容体およびｈＧＩＰ受容体に対するＥＣ５０は、５００ｐＭ以下、より好ましくは２００ｐＭ以下、より好ましくは１５０ｐＭ以下、より好ましくは１００ｐＭ以下、より好ましくは９０ｐＭ以下、より好ましくは８０ｐＭ以下、より好ましくは７０ｐＭ以下、より好ましくは６０ｐＭ以下、より好ましくは５０ｐＭ以下、より好ましくは４０ｐＭ以下、より好ましくは３０ｐＭ以下、より好ましくは２０ｐＭ以下である。
【００４２】
なお別の一実施形態において、３つ全ての受容体、すなわち、ｈＧＬＰ−１受容体、ｈＧＩＰ受容体、およびｈグルカゴン受容体に対するＥＣ５０は、５００ｐＭ以下、より好ましくは２００ｐＭ以下、より好ましくは１５０ｐＭ以下、より好ましくは１００ｐＭ以下、より好ましくは９０ｐＭ以下、より好ましくは８０ｐＭ以下、より好ましくは７０ｐＭ以下、より好ましくは６０ｐＭ以下、より好ましくは５０ｐＭ以下、より好ましくは４０ｐＭ以下、より好ましくは３０ｐＭ以下、より好ましくは２０ｐＭ以下である。
【００４３】
ｈＧＬＰ−１受容体、ｈＧＩＰ受容体、およびｈグルカゴン受容体に対するＥＣ５０は、本明細書における「方法」に記載する通りに決定し、実施例５に記載する結果を生じるように用いることができる。
【００４４】
本発明の化合物は、腸通過を低減し、胃内容物を増大し、および／または患者の食物摂取を減少させる能力を有する。本発明の化合物のこれらの活性は、当業者には知られている動物モデルにおいて評価することができ、本明細書の「方法」においてやはり記載する。このような実験の結果を実施例１０に記載する。本発明の好ましい化合物は、０．０２ｍｇ／ｋｇ体重を単一投与量、好ましくは皮下投与量として投与した場合に、マウス、好ましくはＮＭＲＩ雌マウスの胃内容物を、少なくとも２５％、より好ましくは少なくとも３０％、より好ましくは少なくとも４０％、より好ましくは少なくとも５０％、より好ましくは少なくとも６０％、より好ましくは少なくとも７０％、より好ましくは少なくとも８０％増大し得る。
【００４５】
好ましくは、この結果はそれぞれの化合物を投与した１時間後、およびボーラスを投与した３０分後に測定したものであり、ならびに／または単一投与量として、好ましくは皮下投与量として０．０２ｍｇ／ｋｇ体重を投与した場合に、マウス、好ましくはＮＭＲＩ雌マウスの腸通過を、少なくとも４５％、より好ましくは少なくとも５０％、より好ましくは少なくとも５５％、より好ましくは少なくとも６０％、より好ましくは少なくとも６５％低減し、ならびに／または単一投与量として、好ましくは皮下投与量として０．０１ｍｇ／ｋｇ体重を投与した場合に、マウス、好ましくはＮＭＲＩ雌マウスの食物摂取を２２時間の期間にわたって少なくとも１０％、より好ましくは１５％、より好ましくは２０％減少させる。
【００４６】
本発明の化合物は、患者の血中グルコースレベルを低下させ、および／またはＨｂＡ１ｃレベルを低下させる能力を有する。本発明の化合物のこれらの活性は、当業者には知られており、本明細書の「方法」にも記載する動物モデルにおいて評価することができる。このような実験の結果を実施例８および９に記載する。
【００４７】
本発明の好ましい化合物は、単一投与量として、好ましくは皮下投与量として０．０１ｍｇ／ｋｇ体重を、少なくとも４ｍｍｏｌ／Ｌ；より好ましくは少なくとも６ｍｍｏｌ／Ｌ、より好ましくは少なくとも８ｍｍｏｌ／Ｌ投与した場合に、マウス、好ましくはレプチン受容体欠損糖尿病ｄｂ／ｄｂ雌マウスにおける血中グルコースレベルを２４時間の期間にわたって低下させ得る。単一投与量として、好ましくは皮下投与量として投与した場合、投与量を０．１ｍｇ／ｋｇ体重に増大した場合に、２４時間の期間にわたってマウスに血中グルコースレベルのより明白な低下を観察することができる。本発明の化合物が、少なくとも７ｍｍｏｌ／Ｌ；より好ましくは少なくとも９ｍｍｏｌ／Ｌ、より好ましくは少なくとも１１ｍｍｏｌ／Ｌの低下をもたらすのが好ましい。本発明の化合物は、毎日投与量０．０１ｍｇ／ｋｇからおよそイグニション値（ｉｇｎｉｔｉｏｎ  ｖａｌｕｅ）を投与した場合に、４週間の期間にわたってマウスのＨｂＡ１ｃレベルの上昇を減じるのが好ましい。
【００４８】
本発明の化合物には、患者の体重を減少させる能力もある。本発明の化合物のこれらの活性は、当業者には知られている動物モデルにおいて評価することができ、本明細書において方法および実施例７にも記載する。
【００４９】
驚くべきことに、式（Ｉ）のペプチド化合物、特に親油性の残基でさらに置換されている１４位のリジンを有する化合物（または近縁の類似体）は、非常に強力なＧＬＰ−１およびＧＩＰ受容体の活性化を示し；さらに３位のＧｌｎなどのアミノ酸と組み合わせて、非常に強力なグルカゴン受容体活性化も提供し得ることが見出された。
【００５０】
１４位にアセチル化されたリジンを有するＧＬＰ−１類似体が、天然のＧＬＰ−１に比べて著しく低下した作用強度を示したことが、文献に記載されている（Ｍｕｒａｇｅ  ＥＮら、Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、１６巻（２００８年）、１０１０６〜１０１１２頁）。
【００５１】
さらに、エキセンジン−４のコア構造に存在する、メチオニンの酸化（ｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｉｎ  ｖｉｖｏ）は、式（Ｉ）のペプチド化合物にはもはや可能ではない。
【００５２】
さらに、本発明の化合物は、好ましくは、酸性の、および／または生理学的なｐＨ値、例えば、ｐＨ４．５および／またはｐＨ７．４、２５℃で溶解性が高く、別の一実施形態において、少なくとも０．５ｍｇ／ｍｌ、および特定の一実施形態において、少なくとも１．０ｍｇ／ｍｌである。
【００５３】
さらに、一実施形態によると、本発明の化合物は、溶液中で貯蔵した場合に安定性が高いのが好ましい。安定性を決定するのに好ましいアッセイ条件は、ｐＨ４．５またはｐＨ７．４の溶液中、２５℃、７日間の貯蔵である。ペプチドの残存量は、「方法」および実施例に記載する通り、クロマトグラフィー分析によって決定する。ｐＨ４．５またはｐＨ７．４の溶液中、２５℃、７日後にペプチドの残存量が、少なくとも８０％であるのが好ましく、より好ましくは少なくとも８５％、さらにより好ましくは少なくとも９０％、さらにより好ましくは少なくとも９５％である。
【００５４】
本発明の化合物が、直鎖状配列の３９〜４０個のアミノカルボン酸、特にペプチド結合、すなわちカルボキサミド結合によって連結されているα−アミノカルボン酸である、ペプチド部分Ｚ（式ＩＩ）を含むのが好ましい。
【００５５】
一実施形態において、Ｘ１４位は、官能化されている−ＮＨ２側鎖基を有するアミノ酸残基、例えば、官能化されているＬｙｓ、Ｏｒｎ、Ｄａｂ、またはＤａｐ、より好ましくは官能化されているＬｙｓを表し、Ｘ４０は存在せず、またはＬｙｓを表す。
【００５６】
−ＮＨ２側鎖基を有するアミノ酸残基、例えば、Ｌｙｓ、Ｏｒｎ、Ｄａｂ、またはＤａｐは、−ＮＨ２側鎖基の少なくとも１個のＨ原子が、−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｒ５、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−Ｒ５、−Ｓ（Ｏ）２−Ｒ５、またはＲ５によって、好ましくは−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５によって置き換えられている点で官能化されていてよく、ここで、Ｒ５は、炭素原子最大５０個、または最大１００個、ならびに場合によりハロゲン、Ｎ、Ｏ、Ｓ、および／またはＰから選択されるヘテロ原子を含む部分である。
【００５７】
ある実施形態において、Ｒ５は親油性部分、例えば、非環式の直鎖または分枝鎖飽和炭化水素基を含むことができ、Ｒ５は特に、非環式の直鎖もしくは分枝鎖（Ｃ４〜Ｃ３０）飽和もしくは不飽和の炭化水素基、および／または環状の飽和、不飽和、もしくは芳香族基、特に、炭素原子４から１４個およびＮ、Ｏ、およびＳから選択されるヘテロ原子を０、１、または２個含む単環式、二環式、または三環式の基、例えば、シクロヘキシル、フェニル、ビフェニル、クロマニル、フェナントレニル、またはナフチニルを含み、非環式または環状の基は非置換でも、またはハロゲン、−ＯＨ、および／もしくはＣＯ２Ｈなどによって置換されていてもよい。
【００５８】
より好ましいＲ５基は、親油性部分、例えば、非環式直鎖または分枝鎖（Ｃ１２〜Ｃ２２）の飽和または不飽和炭化水素基を含むことができる。親油性部分は、１つまたはそれ以上の（例えば、２、３、または４個の）アミノ酸リンカー基、例えば、γ−アミノ酪酸（ＧＡＢＡ）、ε−アミノヘキサン酸（ε−Ａｈｘ）、γ−Ｇｌｕ、および／またはβ−Ａｌａを含むリンカーなど、全ての立体異性体のリンカーによって−ＮＨ２側鎖基に付着していてもよい。一実施形態において、親油性部分は、リンカーによって−ＮＨ２側鎖基に付着している。別の一実施形態において、親油性部分は、−ＮＨ２側鎖基に直接付着している。アミノ酸リンカー基の具体的な例には、（β−Ａｌａ）１〜４、（γ−Ｇｌｕ）１〜４、（ε−Ａｈｘ）１〜４、または（ＧＡＢＡ）１〜４がある。好ましいアミノ酸リンカー基は、β−Ａｌａ、γ−Ｇｌｕ、β−Ａｌａ−β−Ａｌａ、およびγ−Ｇｌｕ−γ−Ｇｌｕである。
【００５９】
（Ｓ）−４−カルボキシ−４−ヘキサデカノイルアミノ−ブチリル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−オクタデカノイルアミノ−ブチリル−、４−ヘキサデカノイルアミノ−ブチリル−、４−｛３−［（Ｒ）−２，５，７，８−テトラメチル−２−（（４Ｒ，８Ｒ）−４，８，１２−トリメチル−トリデシル）−クロマン−６−イルオキシカルボニル］−プロピオニルアミノ｝−ブチリル−、４−オクタデカノイルアミノ−ブチリル−、４−（（Ｚ）−オクタデカ−９−エノイルアミノ）−ブチリル−、６−［（４，４−ジフェニル−シクロヘキシルオキシ）−ヒドロキシ−ホスホリルオキシ］−ヘキサノイル−、ヘキサデカノイル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１５−カルボキシ−ペンタデカノイルアミノ）−ブチリル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−｛３−［３−（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−５−カルボキシ−２，３，４，５−テトラヒドロキシ−ペンタノイルアミノ）−プロピオニルアミノ］−プロピオニルアミノ｝−ブチリル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−｛３−［（Ｒ）−２，５，７，８−テトラメチル−２−（（４Ｒ，８Ｒ）−４，８，１２−トリメチル−トリデシル）−クロマン−６−イルオキシカルボニル］−プロピオニルアミノ｝−ブチリル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−（（９Ｚ，１２Ｚ）−オクタデカ−９，１２−ジエノイルアミノ）−ブチリル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−［６−（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−５−カルボキシ−２，３，４，５−テトラヒドロキシ−ペンタノイルアミノ）−ヘキサノイルアミノ］−ブチリル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−５−カルボキシ−２，３，４，５−テトラヒドロキシ−ペンタノイルアミノ）−ブチリル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−テトラデカノイルアミノ−ブチリル−、（Ｓ）−４−（１１−ベンジルオキシカルボニル−ウンデカノイルアミノ）−４−カルボキシ−ブチリル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−［１１−（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２，３，４，５，６−ペンタヒドロキシ−ヘキシルカルバモイル）−ウンデカノイルアミノ］−ブチリル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−（（Ｚ）−オクタデカ−９−エノイルアミノ）−ブチリル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−（４−ドデシルオキシ−ベンゾイルアミノ）−ブチリル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−ヘンイコサノイルアミノ−ブチリル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−ドコサノイルアミノ−ブチリル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−（（Ｚ）−ノナデカ−１０−エノイルアミノ）−ブチリル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−（４−デシルオキシ−ベンゾイルアミノ）−ブチリル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−［（４’−オクチルオキシ−ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−ブチリル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１２−フェニル−ドデカノイルアミノ）−ブチリル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−イコサノイルアミノ−ブチリル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−（（Ｓ）−４−カルボキシ−４−ヘキサデカノイルアミノ−ブチリルアミノ）−ブチリル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−（（Ｓ）−４−カルボキシ−４−オクタデカノイルアミノ−ブチリルアミノ）−ブチリル−、３−（３−オクタデカノイルアミノ−プロピオニルアミノ）−プロピオニル−、３−（３−ヘキサデカノイルアミノ−プロピオニルアミノ）−プロピオニル−、３−ヘキサデカノイルアミノ−プロピオニル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−［（Ｒ）−４−（（３Ｒ，５Ｓ，７Ｒ，８Ｒ，９Ｒ，１０Ｓ，１２Ｓ，１３Ｒ，１４Ｒ，１７Ｒ）−３，７，１２−トリヒドロキシ−８，１０，１３−トリメチル−ヘキサデカヒドロ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１７−イル）−ペンタノイルアミノ］−ブチリル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−［（Ｒ）−４−（（３Ｒ，５Ｒ，８Ｒ，９Ｓ，１０Ｓ，１３Ｒ，１４Ｓ，１７Ｒ）−３−ヒドロキシ−１０，１３−ジメチル−ヘキサデカヒドロ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１７−イル）−ペンタノイルアミノ］−ブチリル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−（（９Ｓ，１０Ｒ）−９，１０，１６−トリヒドロキシ−ヘキサデカノイルアミノ）−ブチリル−、テトラデカノイル−、１１−カルボキシ−ウンデカノイル−、１１−ベンジルオキシカルボニル−ウンデカノイル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−（（Ｓ）−４−カルボキシ−４−テトラデカノイルアミノ−ブチリルアミノ）−ブチリル−、６−［ヒドロキシ−（ナフタレン−２−イルオキシ）−ホスホリルオキシ］−ヘキサノイル−、６−［ヒドロキシ−（５−フェニル−ペンチルオキシ）−ホスホリルオキシ］−ヘキサノイル−、４−（ナフタレン−２−スルホニルアミノ）−４−オキソ−ブチリル−、４−（ビフェニル−４−スルホニルアミノ）−４−オキソ−ブチリル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−｛（Ｓ）−４−カルボキシ−４−［２−（２−｛２−［２−（２−｛２−［（Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシ−ヘプタデカノイルアミノ）−ブチリルアミノ］−エトキシ｝−エトキシ）−アセチルアミノ］−エトキシ｝−エトキシ）−アセチルアミノ］−ブチリルアミノ｝−ブチリル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−［２−（２−｛２−［２−（２−｛２−［（Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシ−ヘプタデカノイルアミノ）−ブチリルアミノ］−エトキシ｝−エトキシ）−アセチルアミノ］−エトキシ｝−エトキシ）−アセチルアミノ］−ブチリル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−２−｛（Ｓ）−４−カルボキシ−２−［２−（２−｛２−［２−（２−｛２−［（Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシ−ヘプタデカノイルアミノ）−ブチリルアミノ］−エトキシ｝−エトキシ）−アセチルアミノ］−エトキシ｝−エトキシ）−アセチルアミノ］−ブチリルアミノ｝−ブチリル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−２−［２−（２−｛２−［２−（２−｛２−［（Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシ−ヘプタデカノイルアミノ）−ブチリルアミノ］−エトキシ｝−エトキシ）−アセチルアミノ］−エトキシ｝−エトキシ）−アセチルアミノ］−ブチリル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−｛（Ｓ）−４−カルボキシ−４−［２−（２−｛２−［（Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシ−ヘプタデカノイルアミノ）−ブチリルアミノ］−エトキシ｝−エトキシ）−アセチルアミノ］−ブチリルアミノ｝−ブチリル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−［２−（２−｛２−［（Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシ−ヘプタデカノイルアミノ）−ブチリルアミノ］−エトキシ｝−エトキシ）−アセチルアミノ］−ブチリル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−２−｛（Ｓ）−４−カルボキシ−２−［２−（２−｛２−［（Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシ−ヘプタデカノイルアミノ）−ブチリルアミノ］−エトキシ｝−エトキシ）−アセチルアミノ］−ブチリルアミノ｝−ブチリル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−２−［２−（２−｛２−［（Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシ−ヘプタデカノイルアミノ）−ブチリルアミノ］−エトキシ｝−エトキシ）−アセチルアミノ］−ブチリル−、２−（２−｛２−［２−（２−｛２−［（Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシ−ヘプタデカノイルアミノ）−ブチリルアミノ］−エトキシ｝−エトキシ）−アセチルアミノ］−エトキシ｝−エトキシ）−アセチル−、２−（２−｛２−［（Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシ−ヘプタデカノイルアミノ）−ブチリルアミノ］−エトキシ｝−エトキシ）−アセチル、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−（（Ｓ）−４−カルボキシ−４−｛（Ｓ）−４−カルボキシ−４−［（Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１９−カルボキシ−ノナデカノイルアミノ）−ブチリルアミノ］−ブチリルアミノ｝−ブチリルアミノ）−ブチリル、２−（２−｛２−［２−（２−｛２−［（Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１６−１Ｈ−テトラゾール−５−イル−ヘキサデカノイルアミノ）−ブチリルアミノ］−エトキシ｝−エトキシ）−アセチルアミノ］−エトキシ｝−エトキシ）−アセチル−、２−（２−｛２−［２−（２−｛２−［（Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１６−カルボキシ−ヘキサデカノイルアミノ）−ブチリルアミノ］−エトキシ｝−エトキシ）−アセチルアミノ］−エトキシ｝−エトキシ）−アセチル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−｛（Ｓ）−４−カルボキシ−４−［（Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシ−ヘプタデカノイルアミノ）−ブチリルアミノ］−ブチリルアミノ｝−ブチリル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−（（Ｓ）−４−カルボキシ−４−｛２−［２−（２−｛２−［２−（２−｛（Ｓ）−４−カルボキシ−４−［１０−（４−カルボキシ−フェノキシ）−デカノイルアミノ］−ブチリルアミノ｝−エトキシ）−エトキシ］−アセチルアミノ｝−エトキシ）−エトキシ］−アセチルアミノ｝−ブチリル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−｛（Ｓ）−４−カルボキシ−４−［２−（２−｛２−［２−（２−｛２−［（Ｓ）−４−カルボキシ−４−（７−カルボキシ−ヘプタノイルアミノ）−ブチリルアミノ］−エトキシ｝−エトキシ）−アセチルアミノ］−エトキシ｝−エトキシ）−アセチルアミノ］−ブチリルアミノ｝−ブチリル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−｛（Ｓ）−４−カルボキシ−４−［２−（２−｛２−［２−（２−｛２−［（Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１１−カルボキシ−ウンデカノイルアミノ）−ブチリルアミノ］−エトキシ｝−エトキシ）−アセチルアミノ］−エトキシ｝−エトキシ）−アセチルアミノ］−ブチリルアミノ｝−ブチリル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−｛（Ｓ）−４−カルボキシ−４−［２−（２−｛２−［２−（２−｛２−［（Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１３−カルボキシ−トリデカノイルアミノ）−ブチリルアミノ］−エトキシ｝−エトキシ）−アセチルアミノ］−エトキシ｝−エトキシ）−アセチルアミノ］−ブチリルアミノ｝−ブチリル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−｛（Ｓ）−４−カルボキシ−４−［２−（２−｛２−［２−（２−｛２−［（Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１５−カルボキシ−ペンタデカノイルアミノ）−ブチリルアミノ］−エトキシ｝−エトキシ）−アセチルアミノ］−エトキシ｝−エトキシ）−アセチルアミノ］−ブチリルアミノ｝−ブチリル−、および（Ｓ）−４−カルボキシ−４−｛（Ｓ）−４−カルボキシ−４−［２−（２−｛２−［２−（２−｛２−［（Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１９−カルボキシ−ノナデカノイルアミノ）−ブチリルアミノ］−エトキシ｝−エトキシ）−アセチルアミノ］−エトキシ｝−エトキシ）−アセチルアミノ］−ブチリルアミノ｝−ブチリル−からなる群から選択される、−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５基の具体的な好ましい例を以下の表３に列挙する。
【００６０】
立体異性体、特に、Ｓ−またはＲ−エナンチオマーいずれかの、これらの基のエナンチオマーがさらに好ましい。表３における「Ｒ」の語は、ペプチドバックボーンでの−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５付着部位、すなわち、特にＬｙｓのε−アミノ基を意味するものとされる。
【００６１】
【表３】
0006408998.tif 000004
【００６２】
【表４】
0006408998.tif 000005
【００６３】
【表５】
0006408998.tif 000006
【００６４】
【表６】
0006408998.tif 000007
【００６５】
【表７】
0006408998.tif 000008
【００６６】
【表８】
0006408998.tif 000009
【００６７】
【表９】
0006408998.tif 000010
【００６８】
【表１０】
0006408998.tif 000011
【００６９】
【表１１】
0006408998.tif 000012
【００７０】
【表１２】
0006408998.tif 000013
【００７１】
【表１３】
0006408998.tif 000014
【００７２】
【表１４】
0006408998.tif 000015
【００７３】
【表１５】
0006408998.tif 000016
【００７４】
【表１６】
0006408998.tif 000017
【００７５】
いくつかの実施形態において、本発明は、上記に規定した式（Ｉ）のペプチド化合物に関し、ここで、Ｘ１４は、Ｌｙｓ、Ｏｒｎ、Ｄａｂ、およびＤａｐから選択されるアミノ酸残基を表し、ここで、−ＮＨ２側鎖基は−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５によって官能化されており、Ｘ４０はＬｙｓ、Ｏｒｎ、Ｄａｂ、およびＤａｐから選択されるアミノ酸残基を表し、−ＮＨ２側鎖基は−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５によって官能化されていてよく、Ｒ５は、非環式の直鎖もしくは分枝鎖（Ｃ４〜Ｃ３０）の飽和または不飽和炭化水素基から選択される親油性部分であり、および／または環状の飽和、不飽和、もしくは芳香族基であり、親油性部分は全ての立体異性体の（β−Ａｌａ）１〜４、（γ−Ｇｌｕ）１〜４、（ε−Ａｈｘ）１〜
４、または（ＧＡＢＡ）１〜４から選択されるリンカーによって−ＮＨ２側鎖基に付着していてもよい。
【００７６】
ある実施形態において、Ｘ１４は、官能化されているＬｙｓ、Ｏｒｎ、Ｄａｂ、またはＤａｐなどの官能化されている−ＮＨ２側鎖基を有するアミノ酸残基を表し、−ＮＨ２側鎖基の少なくとも１個のＨ原子は、上記の表３による置換基からなる群から選択される−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５によって置き換えられている。
【００７７】
いくつかの実施形態において、Ｘ１４は、Ｌｙｓ、Ｏｒｎ、Ｄａｂ、およびＤａｐから選択されるアミノ酸残基を表し、ここで、−ＮＨ２側鎖基は−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５によって官能化されており、Ｘ４０はＬｙｓ、Ｏｒｎ、Ｄａｂ、およびＤａｐから選択されるアミノ酸残基を表し、−ＮＨ２側鎖基は−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５によって官能化されていてよく、−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５は、上記の表３による置換基からなる群から選択される。
【００７８】
本発明のいくつかの実施形態において、式（ＩＩ）におけるＸ１４位および／またはＸ４０位はリジン（Ｌｙｓ）を表す。いくつかの実施形態によると、１４位および場合により４０位のＬｙｓは、上記に記載する−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５基などで官能化されている。他の実施形態において、Ｘ４０は存在せず、Ｘ１４は、−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｒ５、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−Ｒ５、−Ｓ（Ｏ）２−Ｒ５、またはＲ５で、好ましくは−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５によって官能化されているＬｙｓであり、ここで、Ｒ５は、上記に規定した通りである。特に、Ｘ１４は、Ｃ（Ｏ）−Ｒ５で官能化されているＬｙｓであり、ここで、Ｃ（Ｏ）−Ｒ５は、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−ヘキサデカノイルアミノ−ブチリル（γＥ−ｘ５３）、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−オクタデカノイルアミノ−ブチリル（γＥ−ｘ７０）、４−ヘキサデカノイルアミノ−ブチリル（ＧＡＢＡ−ｘ５３）、４−｛３−［（Ｒ）−２，５，７，８−テトラメチル−２−（（４Ｒ，８Ｒ）−４，８，１２−トリメチル−トリデシル）−クロマン−６−イルオキシカルボニル］−プロピオニルアミノ｝−ブチリル−（ＧＡＢＡ−ｘ６０）、４−オクタデカノイルアミノ−ブチリル（ＧＡＢＡ−ｘ７０）、４−（（Ｚ）−オクタデカ−９−エノイルアミノ）−ブチリル（ＧＡＢＡ−ｘ７４）、６−［（４，４−ジフェニル−シクロヘキシルオキシ）−ヒドロキシ−ホスホリルオキシ］−ヘキサノイル（Ｐｈｏｓｐｈｏ１）、ヘキサデカノイル（ｘ５３）、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１５−カルボキシ−ペンタデカノイルアミノ）−ブチリル（ｘ５２）、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−｛３−［３−（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−５−カルボキシ−２，３，４，５−テトラヒドロキシ−ペンタノイルアミノ）−プロピオニルアミノ］−プロピオニルアミノ｝−ブチリル（γＥ−ｘ５９）、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−｛３−［（Ｒ）−２，５，７，８−テトラメチル−２−（（４Ｒ，８Ｒ）−４，８，１２−トリメチル−トリデシル）−クロマン−６−イルオキシカルボニル］−プロピオニルアミノ｝−ブチリル（γＥ−ｘ６０）、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−（（９Ｚ，１２Ｚ）−オクタデカ−９，１２−ジエノイルアミノ）−ブチリル（γＥ−ｘ６１）、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−［６−（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−５−カルボキシ−２，３，４，５−テトラヒドロキシ−ペンタノイルアミノ）−ヘキサノイルアミノ］−ブチリル（γＥ−ｘ６４）、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−５−カルボキシ−２，３，４，５−テトラヒドロキシ−ペンタノイルアミノ）−ブチリル（γＥ−ｘ６５）、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−テトラデカノイルアミノ−ブチリル（γＥ−ｘ６９）、（Ｓ）−４−（１１−ベンジルオキシカルボニル−ウンデカノイルアミノ）−４−カルボキシ−ブチリル（γＥ−ｘ７２）、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−［１１−（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２，３，４，５，６−ペンタヒドロキシ−ヘキシルカルバモイル）−ウンデカノイルアミノ］−ブチリル（γＥ−ｘ７３）、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−（（Ｚ）−オクタデカ−９−エノイルアミノ）−ブチリル（γＥ−ｘ７４）、（Ｓ）−４−カ��ボキシ−４−（４−ドデシルオキシ−ベンゾイルアミノ）−ブチリル（γＥ−ｘ７５）、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−ヘンイコサノイルアミノ−ブチリル（γＥ−ｘ７６）、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−ドコサノイルアミノ−ブチリル（γＥ−ｘ７７）、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−（（Ｚ）−ノナデカ−１０−エノイルアミノ）−ブチリル（γＥ−ｘ７９）、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−（４−デシルオキシ−ベンゾイルアミノ）−ブチリル（γＥ−ｘ８０）、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−［（４’−オクチルオキシ−ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−ブチリル（γＥ−ｘ８１）、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１２−フェニル−ドデカノイルアミノ）−ブチリル（γＥ−ｘ８２）、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−イコサノイルアミノ−ブチリル（γＥ−ｘ９５）、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−（（Ｓ）−４−カルボキシ−４−ヘキサデカノイルアミノ−ブチリルアミノ）−ブチリル（γＥ−γＥ−ｘ５３）、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−（（Ｓ）−４−カルボキシ−４−オクタデカノイルアミノ−ブチリルアミノ）−ブチリル（γＥ−γＥ−ｘ７０）、および３−（３−オクタデカノイルアミノ−プロピオニルアミノ）−プロピオニル（β−Ａｌａ−β−Ａｌａ−ｘ７０）からなる群から選択される。
【００７９】
いくつかの実施形態において、Ｘ１４はＣ（Ｏ）−Ｒ５で官能化されているＬｙｓであり、ここで、Ｃ（Ｏ）−Ｒ５は、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−ヘキサデカノイルアミノ−ブチリル（γＥ−ｘ５３）、および（Ｓ）−４−カルボキシ−４−オクタデカノイルアミノ−ブチリル（γＥ−ｘ７０）からなる群から選択される。
【００８０】
さらなる一実施形態は、
Ｒ１はＮＨ２であり、
Ｒ２はＮＨ２であり、または
Ｒ１およびＲ２はＮＨ２である、一群の化合物に関する。
【００８１】
さらなる一実施形態は、
Ｘ３は、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、およびＨｉｓから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１２は、ＩｌｅおよびＬｙｓから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１４は、−ＮＨ２基を有する側鎖を有するアミノ酸残基を表し、−ＮＨ２側鎖基は−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５によって官能化されており、ここで、Ｒ５は、上記に記載した通りであり、
Ｘ１５は、ＡｓｐおよびＧｌｕから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１６は、Ｓｅｒ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、およびＧｌｎから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１７は、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、Ｉｌｅ、Ｇｌｎ、Ｌｅｕ、Ａｉｂ、Ｔｙｒ、およびＡｌａから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１８は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｉｂ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、およびＴｙｒから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１９は、Ａｌａ、Ｇｌｎ、Ｖａｌ、およびＡｉｂから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２０は、Ｇｌｎ、Ａｉｂ、Ｐｈｅ、Ａｒｇ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、およびＨｉｓから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２１は、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｔｙｒ、およびＬｅｕから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２８は、Ａｓｎ、Ａｌａ、Ａｉｂ、Ａｒｇ、およびＬｙｓから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２９は、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ａｉｂ、Ｄ−Ａｌａ、およびＡｌａから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ４０は存在せず、またはＬｙｓを表す、一群の化合物に関する。
【００８２】
さらなる一実施形態は、
Ｘ３は、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、およびＨｉｓから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１２は、ＩｌｅおよびＬｙｓから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１４は、−ＮＨ２基を有する側鎖を有するアミノ酸残基を表し、−ＮＨ２側鎖基は−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５によって官能化されており、ここで、Ｒ５は、上記に記載した通りであり、
Ｘ１５は、ＡｓｐおよびＧｌｕから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１６は、Ｓｅｒ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、およびＧｌｎから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１７は、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、Ｇｌｎ、Ｌｅｕ、Ａｉｂ、Ｔｙｒ、およびＡｌａから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１８は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｉｂ、Ｌｅｕ、およびＴｙｒから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１９は、Ａｌａ、Ｖａｌ、およびＡｉｂから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２０は、Ｇｌｎ、Ａｉｂ、Ｐｈｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｐｉｐ、（Ｓ）ＭｅＬｙｓ、（Ｒ）ＭｅＬｙｓ、および（Ｓ）ＭｅＯｒｎから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２１は、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、およびＬｅｕから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２８は、Ａｓｎ、Ａｌａ、Ａｉｂ、およびＳｅｒから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２９は、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ａｉｂ、Ｄ−Ａｌａ、およびＡｌａから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ４０は存在せず、またはＬｙｓを表す、一群の化合物に関する。
【００８３】
さらなる一実施形態は、
Ｘ３は、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、およびＨｉｓから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１２はＩｌｅを表し、
Ｘ１４は、−ＮＨ２基を有する側鎖を有するアミノ酸残基を表し、−ＮＨ２側鎖基は−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５によって官能化されており、ここで、Ｒ５は、上記に記載した通りであり、
Ｘ１５は、ＡｓｐおよびＧｌｕから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１６は、Ｓｅｒ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、およびＧｌｎから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１７は、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、Ｇｌｎ、Ｌｅｕ、Ａｉｂ、Ｔｙｒ、およびＡｌａから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１８は、ＡｌａおよびＡｒｇから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１９は、ＡｌａおよびＶａｌから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２０は、Ｇｌｎ、Ａｉｂ、Ｌｙｓ、Ｐｉｐ、（Ｓ）ＭｅＬｙｓ、（Ｒ）ＭｅＬｙｓ、および（Ｓ）ＭｅＯｒｎおよびＨｉｓから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２１は、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、およびＬｅｕから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２８は、ＡｓｎおよびＡｌａから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２９は、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、およびＤ−Ａｌａから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ４０は存在せず、またはＬｙｓを表す、一群の化合物に関する。
【００８４】
さらなる一実施形態は、
Ｘ３は、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、およびＨｉｓから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１２は、ＩｌｅおよびＬｙｓから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１４は、−ＮＨ２基を有する側鎖を有するアミノ酸残基を表し、−ＮＨ２側鎖基は−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５によって官能化されており、ここで、Ｒ５は、上記に記載した通りであり、
Ｘ１５は、ＡｓｐおよびＧｌｕから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１６は、Ｓｅｒ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、およびＧｌｎから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１７は、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、Ｇｌｎ、Ｌｅｕ、Ａｉｂ、Ｔｙｒ、およびＡｌａから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１８は、ＡｌａおよびＡｒｇから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１９は、ＡｌａおよびＶａｌから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２０は、Ｇｌｎ、Ａｉｂ、Ｌｙｓ、およびＨｉｓから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２１は、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、およびＬｅｕから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２８は、ＡｓｎおよびＡｌａから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２９は、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、およびＤ−Ａｌａから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ４０は存在せず、またはＬｙｓを表す、一群の化合物に関する。
【００８５】
さらなる一実施形態は、
Ｘ３は、ＧｌｎおよびＧｌｕから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１２はＩｌｅを表し、
Ｘ１４はＬｙｓを表し、ここで、−ＮＨ２側鎖基は、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−ヘキサデカノイルアミノ−ブチリル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−オクタデカノイルアミノ−ブチリル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−（（Ｓ）−４−カルボキシ−４−オクタデカノイルアミノ−ブチリルアミノ）−ブチリル−、３−（３−オクタデカノイルアミノ−プロピオニルアミノ）−プロピオニル−および４−オクタデカノイルアミノ−ブチリル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−ヘンイコサノイルアミノ−ブチリル−から選択される基の１つによって官能化されており、
Ｘ１５は、ＧｌｕおよびＡｓｐから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１６は、ＳｅｒおよびＬｙｓから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１７はＡｒｇを表し、
Ｘ１８はＡｌａを表し、
Ｘ１９はＡｌａを表し、
Ｘ２０は、ＧｌｎおよびＡｉｂから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２１は、ＡｓｐおよびＧｌｕから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２８は、ＡｓｎおよびＡｌａから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２９は、ＧｌｙおよびＴｈｒから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ４０は存在しない、一群の化合物に関する。
【００８６】
さらなる一実施形態は、
Ｘ３はＧｌｕを表し、
Ｘ１２はＩｌｅを表し、
Ｘ１４はＬｙｓを表し、ここで、−ＮＨ２側鎖基は、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−ヘキサデカノイルアミノ−ブチリル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−オクタデカノイルアミノ−ブチリル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−（（Ｓ）−４−カルボキシ−４−オクタデカノイルアミノ−ブチリルアミノ）−ブチリル−、３−（３−オクタデカノイルアミノ−プロピオニルアミノ）−プロピオニル−および４−オクタデカノイルアミノ−ブチリル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−ヘンイコサノイルアミノ−ブチリル−から選択される基の１つによって官能化されており、
Ｘ１５は、ＧｌｕおよびＡｓｐから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１６は、ＳｅｒおよびＬｙｓから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１７はＡｒｇを表し、
Ｘ１８はＡｌａを表し、
Ｘ１９はＡｌａを表し、
Ｘ２０は、ＧｌｎおよびＡｉｂから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２１は、ＡｓｐおよびＧｌｕから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２８は、ＡｓｎおよびＡｌａから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２９は、ＧｌｙおよびＴｈｒから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ４０は存在しない、一群の化合物に関する。
【００８７】
さらなる一実施形態は、
Ｘ３はＧｌｎを表し、
Ｘ１２はＩｌｅを表し、
Ｘ１４はＬｙｓを表し、ここで、−ＮＨ２側鎖基は、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−ヘキサデカノイルアミノ−ブチリル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−オクタデカノイルアミノ−ブチリル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−（（Ｓ）−４−カルボキシ−４−オクタデカノイルアミノ−ブチリルアミノ）−ブチリル−、３−（３−オクタデカノイルアミノ−プロピオニルアミノ）−プロピオニル−および４−オクタデカノイルアミノ−ブチリル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−ヘンイコサノイルアミノ−ブチリル−から選択される基の１つによって官能化されており、
Ｘ１５は、ＧｌｕおよびＡｓｐから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１６は、ＳｅｒおよびＬｙｓから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１７はＡｒｇを表し、
Ｘ１８はＡｌａを表し、
Ｘ１９はＡｌａを表し、
Ｘ２０は、ＧｌｎおよびＡｉｂから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２１は、ＡｓｐおよびＧｌｕから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２８は、ＡｓｎおよびＡｌａから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２９は、ＧｌｙおよびＴｈｒから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ４０は存在しない、一群の化合物に関する。
【００８８】
さらなる一実施形態は、
Ｘ１４はＬｙｓを表し、ここで、−ＮＨ２側鎖基は、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−ヘキサデカノイルアミノ−ブチリル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−オクタデカノイルアミノ−ブチリル−、４−オクタデカノイルアミノ−ブチリル−、ヘキサデカノイル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−ヘンイコサノイルアミノ−ブチリル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−（（Ｓ）−４−カルボキシ−４−オクタデカノイルアミノ−ブチリルアミノ）−ブチリル−、３−（３−オクタデカノイルアミノ−プロピオニルアミノ）−プロピオニル−から選択される基の１つによって官能化されている、一群の化合物に関する。
【００８９】
さらなる一実施形態は、
Ｘ１４はＬｙｓを表し、ここで、−ＮＨ２側鎖基は、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−オクタデカノイルアミノ−ブチリル−、４−オクタデカノイルアミノ−ブチリル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−ヘンイコサノイルアミノ−ブチリル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−（（Ｓ）−４−カルボキシ−４−オクタデカノイルアミノ−ブチリルアミノ）−ブチリル−、３−（３−オクタデカノイルアミノ−プロピオニルアミノ）−プロピオニル−から選択される基の１つによって官能化されている、一群の化合物に関する。
【００９０】
さらなる一実施形態は、
Ｘ１４はＬｙｓを表し、ここで、−ＮＨ２側鎖基は、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−ヘキサデカノイルアミノ−ブチリル−、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−オクタデカノイルアミノ−ブチリル−から選択される基の１つによって官能化されている、一群の化合物に関する。
【００９１】
さらなる一実施形態は、
Ｘ３は、ＧｌｎおよびＧｌｕから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１２はＩｌｅを表し、
Ｘ１４はＬｙｓを表し、ここで、−ＮＨ２側鎖基は、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−ヘキサデカノイルアミノ−ブチリル−および（Ｓ）−４−カルボキシ−４−オクタデカノイルアミノ−ブチリル−から選択される基の１つによって官能化されており、
Ｘ１５は、ＧｌｕおよびＡｓｐから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１６は、ＳｅｒおよびＬｙｓから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１７はＡｒｇを表し、
Ｘ１８はＡｌａを表し、
Ｘ１９はＡｌａを表し、
Ｘ２０は、ＧｌｎおよびＡｉｂから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２１は、ＡｓｐおよびＧｌｕから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２８は、ＡｓｎおよびＡｌａから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２９は、ＧｌｙおよびＴｈｒから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ４０は存在しない、一群の化合物に関する。
【００９２】
さらなる一実施形態は、
Ｘ３は、Ｇｌｎ、Ｈｉｓ、およびＧｌｕから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１２はＩｌｅを表し、
Ｘ１４はＬｙｓを表し、ここで、−ＮＨ２側鎖基は、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−ヘキサデカノイルアミノ−ブチリル−および（Ｓ）−４−カルボキシ−４−オクタデカノイルアミノ−ブチリル−から選択される基の１つによって官能化されており、
Ｘ１５はＧｌｕを表し、
Ｘ１６は、ＧｌｕおよびＬｙｓから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１７はＧｌｕを表し、
Ｘ１８はＡｌａを表し、
Ｘ１９はＶａｌを表し、
Ｘ２０はＡｒｇを表し、
Ｘ２１はＬｅｕを表し、
Ｘ２８は、Ａｓｎ、Ａｉｂ、およびＡｌａから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２９は、ＧｌｙおよびＴｈｒから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ４０は存在しない、一群の化合物に関する。
【００９３】
さらなる一実施形態は、
Ｘ３はＧｌｕを表し、
Ｘ１２はＩｌｅを表し、
Ｘ１４はＬｙｓを表し、ここで、−ＮＨ２側鎖基は、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−ヘキサデカノイルアミノ−ブチリル−および（Ｓ）−４−カルボキシ−４−オクタデカノイルアミノ−ブチリル−から選択される基の１つによって官能化されており、
Ｘ１５はＧｌｕを表し、
Ｘ１６は、ＧｌｕおよびＬｙｓから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１７はＧｌｕを表し、
Ｘ１８はＡｌａを表し、
Ｘ１９はＶａｌを表し、
Ｘ２０はＡｒｇを表し、
Ｘ２１はＬｅｕを表し、
Ｘ２８は、Ａｓｎ、Ａｉｂ、およびＡｌａから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２９はＧｌｙを表し、
Ｘ４０は存在しない、一群の化合物に関する。
【００９４】
さらなる一実施形態は、
Ｘ３は、Ｇｌｎ、Ｈｉｓ、およびＧｌｕから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１２は、ＩｌｅおよびＬｙｓから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１４はＬｙｓを表し、ここで、−ＮＨ２側鎖基は、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−ヘキサデカノイルアミノ−ブチリル−および（Ｓ）−４−カルボキシ−４−オクタデカノイルアミノ−ブチリル−から選択される基の１つによって官能化されており、
Ｘ１５は、ＧｌｕおよびＡｓｐから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１６はＧｌｕを表し、
Ｘ１７は、ＡｒｇおよびＧｌｎから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１８は、ＡｌａおよびＡｒｇから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１９はＡｌａを表し、
Ｘ２０は、Ｐｉｐ、（Ｓ）ＭｅＬｙｓ、（Ｒ）ＭｅＬｙｓおよび（Ｓ）ＭｅＯｒｎから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２１はＧｌｕを表し、
Ｘ２８は、Ａｓｎ、Ｓｅｒ、およびＡｌａから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２９は、ＧｌｙおよびＴｈｒから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ４０は存在しない、一群の化合物に関する。
【００９５】
さらなる一実施形態は、
Ｘ３は、Ｇｌｎ、Ｈｉｓ、およびＧｌｕから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１２は、ＩｌｅおよびＬｙｓから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１４はＬｙｓを表し、ここで、−ＮＨ２側鎖基は、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−ヘキサデカノイルアミノ−ブチリル−、ヘキサデカノイル−および（Ｓ）−４−カルボキシ−４−オクタデカノイルアミノ−ブチリル−から選択される基の１つによって官能化されており、
Ｘ１５は、ＧｌｕおよびＡｓｐから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１６は、Ｓｅｒ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、およびＧｌｎから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１７は、Ａｒｇ、Ｌｅｕ、Ａｉｂ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、Ａｌａ、およびＬｙｓから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１８は、Ａｌａ、Ａｉｂ、Ｌｅｕ、およびＴｙｒから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１９は、Ａｌａ、Ｖａｌ、およびＡｉｂから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２０はＡｉｂを表し、
Ｘ２１は、Ｇｌｕ、Ｌｅｕ、およびＴｙｒから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２８は、Ａｓｎ、Ａｒｇ、およびＡｌａから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２９は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｄ−Ａｌａ、およびＴｈｒから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ４０は存在せず、またはＬｙｓを表す、一群の化合物に関する。
【００９６】
さらなる一実施形態は、
Ｘ３は、Ｇｌｎ、Ｈｉｓ、およびＧｌｕから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１２は、ＩｌｅおよびＬｙｓから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１４はＬｙｓを表し、ここで、−ＮＨ２側鎖基は、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−ヘキサデカノイルアミノ−ブチリル−および（Ｓ）−４−カルボキシ−４−オクタデカノイルアミノ−ブチリル−から選択される基の１つによって官能化されており、
Ｘ１５は、ＧｌｕおよびＡｓｐから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１６は、Ｓｅｒ、Ｌｙｓ、およびＧｌｕから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１７は、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｉｌｅ、Ｇｌｕ、およびＧｌｎから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１８は、Ａｌａ、Ａｒｇ、およびＬｙｓから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１９は、Ａｌａ、Ｖａｌ、およびＧｌｎから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２０は、Ｇｌｎ、Ｐｈｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、およびＡｒｇから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２１は、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、およびＬｅｕから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２８は、Ａｓｎ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、およびＡｌａから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２９は、Ｇｌｙ、Ａｉｂ、およびＴｈｒから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ４０は存在せず、またはＬｙｓを表す、一群の化合物に関する。
【００９７】
さらなる一実施形態は、
Ｘ１２はＩｌｅを表す、一群の化合物に関する。
【００９８】
さらなる一実施形態は、
Ｘ１９はＡｌａを表す、一群の化合物に関する。
【００９９】
さらなる一実施形態は、
Ｘ１６はＧｌｕを表し、
Ｘ２０は、Ｐｉｐ、（Ｓ）ＭｅＬｙｓ、（Ｒ）ＭｅＬｙｓ、および（Ｓ）ＭｅＯｒｎから選択されるアミノ酸残基を表す、一群の化合物に関する。
【０１００】
さらなる一実施形態は、
Ｘ２８はＡｌａを表し、
Ｘ２９はＧｌｙを表す、一群の化合物に関する。
【０１０１】
さらなる一実施形態は、
Ｘ２８はＡｓｎを表し、
Ｘ２９はＴｈｒを表す、一群の化合物に関する。
【０１０２】
さらなる一実施形態は、
Ｘ３は、ＧｌｎおよびＧｌｕから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１２は、ＩｌｅおよびＬｙｓから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１４はＬｙｓを表し、ここで、−ＮＨ２側鎖基は−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５によって官能化されており、ここで、−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５は、（Ｓ）−４−カルボキシ−４−ヘキサデカノイルアミノ−ブチリル−（γＥ−ｘ５３）および（Ｓ）−４−カルボキシ−４−オクタデカノイルアミノ−ブチリル−（γＥ−ｘ７０）から選択され、
Ｘ１５は、ＡｓｐおよびＧｌｕから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１６はＧｌｕを表し、
Ｘ１７は、ＡｒｇおよびＧｌｎから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１８は、ＡｌａおよびＡｒｇから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ１９はＡｌａを表し、
Ｘ２０は、Ｐｉｐ、（Ｓ）−ＭｅＬｙｓ、（Ｒ）−ＭｅＬｙｓおよび（Ｓ）−ＭｅＯｒｎから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２１はＧｌｕを表し、
Ｘ２８は、Ａｓｎ、ＡｌａおよびＳｅｒから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ２９は、ＧｌｙおよびＴｈｒから選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｘ４０は存在しない、一群の化合物に関する。
【０１０３】
式（Ｉ）のペプチド化合物の具体的な例は、配列番号８〜１６の化合物、ならびにその塩および溶媒和物である。
【０１０４】
式（Ｉ）のペプチド化合物の具体的な例は、配列番号８〜１３および１５の化合物、ならびにその塩および溶媒和物である。
【０１０５】
ある実施形態において、すなわち式（Ｉ）の化合物が、遺伝的にコードされるアミノ酸残基を含む場合、本発明はさらに、前記化合物をコードする核酸（ＤＮＡでも、またはＲＮＡでもよい）、このような核酸を含む発現ベクター、およびこのような核酸または発現ベクターを含む宿主細胞を提供する。
【０１０６】
さらなる一態様において、本発明は、担体との混合物における本発明の化合物を含む組成物を提供する。好ましい実施形態において、組成物は薬学的に許容される組成物であり、担体は薬学的に許容される担体である。本発明の化合物は、薬学的に許容される塩などの塩、または水和物などの溶媒和物の形態におけるものでよい。なおさらなる一態様において、本発明は、医療処置の方法における、特にヒトの医療における使用のための組成物を提供する。
【０１０７】
ある実施形態において、核酸または発現ベクターを、遺伝子治療などにおける治療薬として用いてもよい。
【０１０８】
式（Ｉ）の化合物は、さらなる治療的に有効な薬剤なしでの治療応用に適する。しかし、他の実施形態において、「併用治療」において記載する通り、化合物を、少なくとも１つのさらなる治療的活性薬剤と一緒に用いる。
【０１０９】
式（Ｉ）の化合物は、炭水化物および／または脂質の代謝における障害によって引き起こされ、障害に関連し、および／または障害を伴う疾患または障害の処置または予防に、例えば、高血糖、２型糖尿病、耐糖能障害、１型糖尿病、肥満、メタボリックシンドロームの処置または予防に特に適する。さらに、本発明の化合物は、変性疾患、特に神経変性疾患の処置または予防に特に適する。
【０１１０】
記載する化合物は、とりわけ、体重増加の予防、または体重減少の促進における使用を見出すものである。「予防する」とは、処置の非存在に比べた場合の阻害または低減を意味するものであり、障害の完全な中止をほのめかすことを必ずしも意味するものではない。
【０１１１】
本発明の化合物は、食物摂取における減少および／またはエネルギー支出における増大を引き起こし、体重に対する観察される効果をもたらし得る。
【０１１２】
体重に対するこれらの効果とは無関係に、本発明の化合物は、循環コレステロールレベルに対する有益な効果があり得、脂質レベル、特にＬＤＬ、およびＨＤＬレベルを改善する（例えば、ＨＤＬ／ＬＤＬ比を上げる）ことができる。
【０１１３】
このように、本発明の化合物は、体重過剰によって引き起こされ、または体重過剰を特徴とする任意の状態の直接的または間接的な治療、例えば、肥満、病的肥満、肥満に関連する炎症、肥満に関連する胆嚢疾患、肥満誘発性の睡眠時無呼吸の処置および／または予防に用いることができる。本発明の化合物はまた、メタボリックシンドローム、糖尿病、高血圧、アテローム生成的な異脂肪血症、アテローム性動脈硬化症、動脈硬化症、冠動脈心疾患、または脳卒中の処置および予防に用いてもよい。これらの状態における本発明の化合物の効果は、本発明の化合物の体重に対する効果の結果として、または効果に関連するものでもよく、またはこれらに無関係でもよい。
【０１１４】
好ましい医学的使用は、食物摂取を減少させ、エネルギー支出を増大し、体重を減少させ、耐糖能障害（ＩＧＴ）から２型糖尿病への進行を遅らせるための２型糖尿病における疾患の進行の遅延または予防、メタボリックシンドロームの処置、肥満の処置、または過体重の予防；２型糖尿病からインスリン要求性糖尿病への進行の遅延；食欲の調節；満腹の誘発；体重減少が成功した後の体重の再増加の予防；過体重もしくは肥満に関連する疾患もしくは状態の処置；過食症の処置；過食の処置；アテローム性動脈硬化症、高血圧、２型糖尿病、ＩＧＴ、異脂肪血症、冠動脈心疾患、肝脂肪症の処置、ベータブロッカー中毒症の処置、エックス線、ＣＴスキャン、およびＮＭＲスキャンなどの技術を用いた消化管の調査との関連において有用である、消化管の運動の阻害のための使用を含む。
【０１１５】
さらに好ましい医学的使用は、変性障害、特に神経変性障害、例えば、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、失調症、例えば、脊髄小脳失調症、ケネディ病、筋緊張性ジストロフィー、レビー小体型認知症、多系統委縮症、筋萎縮性側索硬化症、原発性側索硬化症、脊髄性筋萎縮、プリオン関連疾患、例えば、クロイツフェルトヤコブ病、多発性硬化症、毛細血管拡張症、バッテン病、大脳皮質基底核変性症、亜急性脊髄連合変性症、脊髄癆、テイサックス病、中毒性脳症、小児レフスム病、レフスム病、神経有棘赤血球症、ニーマンピック病、ライム病、マシャドジョセフ病、サンドホフ病、シャイドレーガー症候群、ハリネズミふらつき症候群、プロテオパシー（ｐｒｏｔｅｏｐａｔｈｙ）、脳βアミロイド血管症、緑内障における網膜神経節細胞変性、シヌクレイノパシー、タウオパシー、前頭側頭葉変性症（ＦＴＬＤ）、認知症、カダシル症候群、アミロイドーシスを有する遺伝性脳出血、アレキサンダー病、セイピノパシー（ｓｅｉｐｉｎｏｐａｔｈｉｅｓ）、家族性アミロイド神経障害、老人性全身性アミロイドーシス、セルピノパシー、ＡＬ（軽鎖）アミロイドーシス（原発性全身性アミロイドーシス）、ＡＨ（重鎖）アミロイドーシス、ＡＡ（続発性）アミロイドーシス、大動脈中心性アミロイドーシス、ＡｐｏＡＩアミロイドーシス、ＡｐｏＡＩＩアミロイドーシス、ＡｐｏＡＩＶアミロイドーシス、フィンランド型の家族性アミロイドーシス（ＦＡＦ）、リゾチームアミロイドーシス、フィブリノーゲンアミロイドーシス、透析アミロイドーシス、封入体筋炎／ミオパチー、白内障、ロドプシン変異を持つ網膜色素変性症、甲状腺髄様癌、心房性アミロイドーシス、下垂体プロラクチノーマ、遺伝性格子状角膜ジストロフィー、皮膚苔癬アミロイドーシス、マロリー小体、角膜ラクトフェリンアミロイドーシス、肺胞タンパク症、歯原性（ピンドボルグ）腫瘍アミロイド、嚢胞性線維症、鎌状赤血球病、または重症疾患ミオパチー（ＣＩＭ）の処置または予防を含む。
【０１１６】
さらなる医学的使用は、骨形成の増大および骨再吸収の低減が有益であり得る場合の、骨粗鬆症または骨関節炎などの骨関連障害の処置を含む。
【図面の簡単な説明】
【０１１７】
【図１】配列番号１１の化合物３μｇ／ｋｇおよび１０μｇ／ｋｇをｓ．ｃ．投与し、３週間１日１回慢性処置した後の、食餌誘発性肥満（ＤＩＯ）Ｃ５７ＢＬ／６ＮＣｒｌ雌マウスにおける体重に対する効果を示す図である。データは、平均値±ＳＥＭである。
【図２】配列番号１１の化合物３μｇ／ｋｇおよび１０μｇ／ｋｇをｓ．ｃ．投与し、３週間１日１回慢性処置した後の、食餌誘発性肥満（ＤＩＯ）Ｃ５７ＢＬ／６ＮＣｒｌ雌マウスにおける体重に対する効果を示す図である。体重の変化を、ベースラインからの相対的変化として算出した。データは、平均値±ＳＥＭである。
【図３】ベースライン（０ｍｍｏｌ／ｌ、−７日目）からの変化として表した、配列番号１１の３μｇ／ｋｇおよび１０μｇ／ｋｇでｓ．ｃ．処置して４週間の、糖尿病ｄｂｄｂマウスにおける非絶食時グルコースに対する効果を示す図である。データは、平均値＋ＳＥＭである。
【図４】ベースライン（０％、−７日目）からの変化として表した、配列番号１１の３μｇ／ｋｇおよび１０μｇ／ｋｇでｓ．ｃ．処置して４週間の、糖尿病ｄｂｄｂマウスにおけるＨｂＡ１ｃに対する効果を示す図である。データは、平均値＋ＳＥＭである。
【図５】ベースライン（ｔ＝０分、０ｍｍｏｌ／ｌ、グルコース投与直前）からの変化として表した、配列番号１１の３μｇ／ｋｇおよび１０μｇ／ｋｇでｓ．ｃ．処置して４週間の、糖尿病ｄｂｄｂマウスにおける経口グルコース耐性に対する効果を示す図である。データは、平均値＋ＳＥＭである。
【図６】グルコース曲線下面積（グルコース−ＡＵＣ）として表した、配列番号１１の３μｇ／ｋｇおよび１０μｇ／ｋｇでｓ．ｃ．処置して４週間の、糖尿病ｄｂｄｂマウスにおける経口グルコース耐性に対する効果を示す図である。データは、平均値＋ＳＥＭである。
【図７】ベースラインからの変化として表した、配列番号１１、配列番号１２、および配列番号１５の３μｇ／ｋｇのｓ．ｃ．処置の、非絶食糖尿病ｄｂｄｂ雌マウスにおけるグルコース低下に対する効果を示す図である。データは、平均値＋ＳＥＭである。
【図８】配列番号１１の化合物１、１０、および１００μｇ／ｋｇのｓ．ｃ．投与の、ＮＭＲＩ雌マウスにおける胃排出および腸通過に対する効果を示す図である。データは、平均値＋ＳＥＭである。ａ）→胃排出ｂ）→小腸の長さに対する小腸通過
【発明を実施するための形態】
【０１１８】
定義
本発明のアミノ酸配列は、天然に存在するアミノ酸に対する慣例的な１文字コードおよび３文字コード、ならびに他のアミノ酸に対して一般的に認められる３文字コード、例えば、Ａｉｂ（α−アミノイソ酪酸）、Ｏｒｎ（オルニチン）、Ｄａｂ（２，４−ジアミノ酪酸）、Ｄａｐ（２，３−ジアミノプロピオン酸）、Ｎｌｅ（ノルロイシン）、ＧＡＢＡ（γ−アミノ酪酸）、またはＡｈｘ（ε−アミノヘキサン酸）を含む。
【０１１９】
さらに、表４に示すアミノ酸に対して、以下のコードを用いた：
【０１２０】
【表１７】
0006408998.tif 000018
【０１２１】
「天然エキセンジン−４」の語は、配列：ＨＧＥＧＴＦＴＳＤＬＳＫＱＭＥＥＥＡＶＲＬＦＩＥＷＬＫＮＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ−ＮＨ２（配列番号１）を有する天然のエキセンジン−４を意味する。
【０１２２】
本発明は、先に規定したペプチド化合物を提供する。
【０１２３】
本発明のペプチド化合物は、ペプチド、すなわちカルボキサミド結合によって連結されるアミノカルボン酸の直鎖状のバックボーンを含む。別段の指摘がなければ、アミノカルボン酸はα−アミノカルボン酸であるのが好ましく、Ｌ−α−アミノカルボン酸であるのがより好ましい。ペプチド化合物が、３９〜４０アミノカルボン酸のバックボーン配列を含むのが好ましい。
【０１２４】
本発明のペプチド化合物は非修飾の側鎖を有していてもよいが、側鎖の１つに少なくとも１つの修飾を保有する。
【０１２５】
疑いを避けるために、本明細書に提供する定義において、ペプチド部分（ＩＩ）の配列は、天然エキセンジン−４と、変動を許容するために記載するこれらの位置の少なくとも１つが異なることが、一般的に意図される。ペプチド部分（ＩＩ）内のアミノ酸は、慣例的なＮ−末端からＣ−末端方向において０から４０まで連続的に番号付けするものと考えることができる。ペプチド部分（ＩＩ）内の「位置」に対する言及は、したがって、エキセンジン−４において１位のＨｉｓ、２位のＧｌｙ、・・・、１４位のＭｅｔ、・・・および３９位のＳｅｒなど、天然エキセンジン−４および他の分子内の位置に対する言及として解釈すべきである。
【０１２６】
Ｌｙｓ、Ｏｒｎ、Ｄａｂ、またはＤａｐなど、−ＮＨ２基を有する側鎖を有する、１４位および場合により４０位のアミノ酸残基は、アシル基などの官能基にコンジュゲートしている。したがって、本発明におけるペプチドの１つまたはそれ以上の選択されるアミノ酸は、その側鎖に共有結合性の付着を保有し得る。いくつかの場合において、これらの付着は親油性であってよい。これらの親油性側鎖の付着には、ペプチドのｉｎ  ｖｉｖｏのクリアランスを低下させる可能性があり、したがってペプチドのｉｎ  ｖｉｖｏの半減期を増大する。
【０１２７】
親油性の付着は、分枝もしくは非分枝の、脂肪族もしくは不飽和の非環式部分であってよく、ならびに／または脂肪族もしくは不飽和のホモ環もしくはヘテロ環、芳香族縮合もしくは非縮合のホモ環もしくはヘテロ環、エーテル連結、不飽和結合および置換基、例えば、ヒドロキシおよび／もしくはカルボキシ基の１つもしくはいくつかから選択される環状部分であってよい、親油性の部分からなっていてもよい。親油性部分は、アルキル化、還元的アミノ化によって、またはアミノ酸がその側鎖にアミノ基を保有する場合はアミド結合、カーバメート、またはスルホンアミド結合によってペプチドに付着していてもよい。
【０１２８】
アミノ酸側鎖に付着していてよい親油性部分の非限定的な例には、脂肪酸、例えば、パルミチン酸、ミリスチン酸、ステアリン酸、およびオレイン酸などのＣ８〜３０脂肪酸、ならびに／または上記に記載する環状基もしくはその誘導体が含まれる。
【０１２９】
ペプチドのアミノ酸と親油性の付着との間には、１つまたはいくつかのリンカーが存在し得る。これらのリンカーの非限定的な例には、全て立体異性体型（ＳおよびＲエナンチオマー）の、β−アラニン、γ−グルタミン酸、α−グルタミン酸、γ−アミノ酪酸、および／もしくはε−アミノヘキサン酸、またはジペプチド、例えば、β−Ａｌａ−β−Ａｌａ（本明細書においてβＡ−βＡとも省略する）、および／もしくはγ−Ｇｌｕ−γ−Ｇｌｕ（本明細書においてγＥ−γＥとも省略する）がある。
【０１３０】
したがって、側鎖の付着の非限定的な一例は、グルタミン酸のα−アミノ基に共有結合性に連結し、アミド結合を形成するパルミチン酸である。この置換されているグルタミン酸のγ−カルボキシ基は、ペプチド内のリジンの側鎖のアミノ基とアミド結合を形成することができる。
【０１３１】
さらなる一態様において、本発明は、担体との混合における、本明細書に記載する本発明の化合物、またはその塩もしくは溶媒和物を含む組成物を提供する。
【０１３２】
本発明は、薬物として用いるための、特に以下に記載する状態を処置するための、本発明の化合物の使用も提供する。
【０１３３】
本発明は、組成物が薬学的に許容される組成物であり、担体が薬学的に許容される担体である、組成物も提供する。
【０１３４】
ペプチド合成
当業者であれば、本発明に記載するペプチドを調製する、多様な異なる方法を知っている。これらの方法には、それだけには限定されないが、合成手法、および組換え遺伝子発現が含まれる。したがって、これらのペプチドを調製する一方法は、溶液中または固体支持体上で合成し、引き続き単離および精製することである。ペプチドを調製する異なる一方法は、ペプチドをコードするＤＮＡ配列を導入する宿主細胞における遺伝子発現である。あるいは、細胞系を利用しないで、遺伝子発現を実現することができる。上記に記載する方法を何らかの方法で組み合わせてもよい。
【０１３５】
本発明のペプチドを調製するのに好ましい方法は、適切な樹脂上での固相合成である。固相ペプチド合成は、十分に確立された方法論である（例えば、Ｓｔｅｗａｒｔ  ａｎｄ  Ｙｏｕｎｇ、Ｓｏｌｉｄ  Ｐｈａｓｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、Ｐｉｅｒｃｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．、Ｒｏｃｋｆｏｒｄ、Ｉｌｌ．、１９８４年；Ｅ．ＡｔｈｅｒｔｏｎおよびＲ．Ｃ．Ｓｈｅｐｐａｒｄ、Ｓｏｌｉｄ  Ｐｈａｓｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ．Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ、Ｏｘｆｏｒｄ−ＩＲＬ  Ｐｒｅｓｓ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、１９８９年を参照されたい）。固相合成は、Ｎ−末端保護したアミノ酸のカルボキシ末端を、切断可能なリンカーを保有する不活性な固体支持体に付着させることにより開始する。この固体支持体は、カルボキシ基（またはＲｉｎｋ樹脂ではカルボキサミド）の樹脂に対する連結が酸に対して感受性である（Ｆｍｏｃ戦略を用いた場合）、トリチル樹脂、クロロトリチル樹脂、Ｗａｎｇ樹脂、またはＲｉｎｋ樹脂など、最初のアミノ酸のカップリングを可能にする任意のポリマーであってよい。ポリマー支持体は、ペプチド合成の間α−アミノ基を脱保護するのに用いる条件下で安定でなければならない。
【０１３６】
第１のアミノ酸を固体支持体にカップリングさせた後、このアミノ酸のα−アミノ保護基を除去する。残りの保護されているアミノ酸を、次いで、ＢＯＰ、ＨＢＴＵ、ＨＡＴＵ、またはＤＩＣ（Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド）／ＨＯＢｔ（１−ヒドロキシベンゾトリアゾール）などの適切なアミドカップリング試薬を用いて、ペプチド配列によって表される順序で次々にカップリングさせるが、この場合、ＢＯＰ、ＨＢＴＵ、およびＨＡＴＵは三級アミン塩基と用いる。あるいは、遊離したＮ−末端を、カルボン酸などのアミノ酸以外の基で官能化してもよい。
【０１３７】
通常、アミノ酸の反応性側鎖基を、適切なブロッキング基で保護する。これらの保護基は、所望のペプチドを構築した後に除去する。これらは、同じ条件下で樹脂から所望の生成物を切断するのに相伴って除去される。保護基、および保護基を導入するための手順は、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、第３版、Ｇｒｅｅｎｅ，Ｔ．Ｗ．およびＷｕｔｓ，Ｐ．Ｇ．Ｍ．、Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ（Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ：１９９９年）に見出すことができる。
【０１３８】
いくつかの場合において、他の側鎖の保護基が依然としてインタクトである間に、選択的に除去することができる側鎖の保護基があるのが望ましいことがある。この場合、遊離した官能性を選択的に官能化することができる。例えば、リジンを、非常に求核性の塩基（例えば、ＤＭＦ（ジメチルホルムアミド）中４％ヒドラジン）に対して不安定である、ｉｖＤｄｅ（［１−（４，４−ジメチル−２，６−ジオキソシクロヘキサ−１−イリデン）−３−メチルブチル）保護基で保護してもよい（Ｓ．Ｒ．Ｃｈｈａｂｒａら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．、３９巻、（１９９８年）、１６０３頁）。このように、Ｎ−末端のアミノ基および全ての側鎖の官能性を酸に不安定な保護基で保護する場合、ｉｖＤｄｅ基は、ＤＭＦ中４％ヒドラジンを用いて選択的に除去することができ、対応する遊離のアミノ基を、次いで、アシル化などによってさらに修飾することができる。リジンを代替的に、保護されたアミノ酸にカップリングしてもよく、このアミノ酸のアミノ基を、次いで、脱保護し、別の遊離のアミノ基を得ることができ、この遊離のアミノ基をアシル化し、またはさらなるアミノ酸に付着させてもよい。
【０１３９】
最後に、ペプチドを樹脂から切断する。これは、Ｋｉｎｇのカクテルを用いることにより実現することができる（Ｄ．Ｓ．Ｋｉｎｇ、Ｃ．Ｇ．Ｆｉｅｌｄｓ、Ｇ．Ｂ．Ｆｉｅｌｄｓ、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｒｅｓ．、３６巻、１９９０年、２５５〜２６６頁）。原材料を、次いで、必要に応じて、分取ＲＰ−ＨＰＬＣなどのクロマトグラフィーによって精製してもよい。
【０１４０】
作用強度
本明細書で用いる「作用強度」または「ｉｎ  ｖｉｔｒｏの作用強度」の語は、細胞ベースのアッセイで、化合物がＧＬＰ−１、ＧＩＰ、またはグルカゴンに対する受容体を活性化する能力に対する尺度である。数値的に、これは「ＥＣ５０値」と表現され、投与量反応実験において反応（例えば、細胞内ｃＡＭＰの形成）の最大の増大の半分を誘発する化合物の効果的な濃度である。
【０１４１】
治療的使用
本発明の化合物は、ＧＬＰ−１およびＧＩＰに対する受容体、ならびに場合によりグルカゴン受容体に対するアゴニストである（例えば、「二重または三方アゴニスト」）。ＧＩＰ／ＧＬＰ−１共アゴニストまたはＧＩＰ／ＧＬＰ−１／グルカゴントリアゴニストであるこのようなペプチドは、糖尿病および肥満を同時に処置できるようになることにより、メタボリックシンドロームを標的化する臨床上の必要性を是正する治療上の利益を提供し得る。
【０１４２】
メタボリックシンドロームは、一緒に生じた場合に、２型糖尿病、ならびにアテローム硬化性の血管疾患（例えば、心疾患および脳卒中）を発症するリスクを増大する医学的障害の組合せである。メタボリックシンドロームに対する医学的パラメータの定義には、真性糖尿病、耐糖能障害、空腹時グルコースの上昇、インスリン抵抗性、尿中アルブミン分泌、中心性肥満、高血圧、トリグリセリドの上昇、ＬＤＬコレステロールの上昇、およびＨＤＬコレステロールの低下が含まれる。
【０１４３】
肥満は、過剰の体脂肪が、健康および平均余命に対して有害作用があり得る程度に蓄積し、成人および小児における有病率の増大により、現代の世界における予防できる主要な死因の一つとなっている医学的状態である。肥満は、心疾患、２型糖尿病、閉塞性睡眠時無呼吸、あるタイプの癌、および骨関節炎を含めた多様な他の疾患の可能性を増大し、最も一般的に、過剰な食物摂取、エネルギー支出の低下、および遺伝的感受性の組合せによって引き起こされる。
【０１４４】
真性糖尿病はしばしば単に糖尿病と呼ばれ、身体が十分なインスリンを生成しないため、または生成されるインスリンに細胞が反応しないためにヒトが高血糖レベルを有する一群のメタボリック疾患である。最も一般的なタイプの糖尿病は：（１）身体がインスリンを生成することができない、１型糖尿病；（２）経時的なインスリン欠乏の増大と組み合わされて、身体がインスリンを適切に用いることができない、２型糖尿病、および（３）女性が妊娠により糖尿病を発症する、妊娠糖尿病である。全ての形態の糖尿病が長期の合併症のリスクを増大し、合併症は長年の後に発症するのが典型的である。これらの長期の合併症の殆どが血管に対する損傷に基づくものであり、大血管のアテローム性動脈硬化に起因する「大血管性」疾患、および小血管の損傷に起因する「微小血管」疾患の２つのカテゴリーに分けることができる。大血管性疾患状態の例には、虚血性心疾患、心筋梗塞、脳卒中、および末梢血管疾患がある。微小血管疾患の例には、糖尿病性網膜症、糖尿病性腎症、および糖尿病性神経障害がある。
【０１４５】
ＧＬＰ−１およびＧＩＰ、ならびにグルカゴンに対する受容体は、７回膜貫通型ヘテロ三量体Ｇタンパク質連結型受容体のファミリーのメンバーである。これらは構造的に相互に関連しており、著しいレベルの配列同一性を共有するだけでなく、リガンド認識および細胞内シグナル伝達経路の同様の機序も有する。
【０１４６】
同様に、ペプチドであるＧＬＰ−１、ＧＩＰ、およびグルカゴンは、配列同一性／類似性の高い領域を共有する。ＧＬＰ−１およびグルカゴンは、共通の前駆物質であるプレプログルカゴンから生成され、これが差次的に組織特異的な形でプロセシングを受けて、例えば、腸の内分泌細胞でＧＬＰ−１が、膵島のアルファ細胞でグルカゴンが産生される。ＧＩＰはより大型のｐｒｏＧＩＰプロホルモン前駆物質に由来し、小腸にあるＫ細胞から合成され、放出される。
【０１４７】
ペプチドのインクレチンホルモンであるＧＬＰ−１およびＧＩＰは、食物に反応して腸の内分泌細胞によって分泌され、食事刺激性インスリン分泌の最大７０％を占める。ＧＬＰ−１分泌は、耐糖能障害または２型糖尿病を有する対象で低下するが、これらの患者ではＧＬＰ−１に対する反応性は依然として保存されていることが、証拠により示唆される。したがって、ＧＬＰ−１受容体を適切なアゴニストで標的化することにより、糖尿病を含めたメタボリック障害の処置に対する魅力的な手法がもたらされる。ＧＬＰ−１に対する受容体は広く分布しており、主に膵島、脳、心臓、腎臓、および消化管に見出される。膵臓では、ＧＬＰ−１は、ベータ細胞からのインスリン分泌の増大により、厳密にグルコース依存的に作用する。このグルコース依存性により、ＧＬＰ−１受容体の活性化は低血糖を引き起こす可能性がないことが示される。また、ＧＩＰに対する受容体は、膵島、脂肪組織、胃、小腸、心臓、骨、肺、腎臓、精巣、副腎皮質、下垂体、内皮細胞、気管、脾臓、胸腺、甲状腺、および脳を含めた末梢組織において広範に発現される。インクレチンホルモンとしての生物学的機能に一致して、膵臓のβ細胞は、ヒトにおけるＧＩＰに対する最高レベルの受容体を発現する。ＧＩＰ受容体媒介性のシグナリングはＴ２ＤＭを有する患者で損なわれ得るが、ＧＩＰ作用は可逆的であることが示されており、糖尿病状態の改善で回復され得るという臨床上の証拠がいくつか存在する。重大なのは、ＧＩＰおよびＧＬＰ−１両方のインクレチンホルモンによるインスリン分泌の刺激は厳密にグルコース依存的であり、低血糖に対する低リスクに関連する絶対安全な機序を保証していることである。
【０１４８】
ベータ細胞レベルでは、ＧＬＰ−１およびＧＩＰは、グルコース感受性、新生、増殖、プロインスリンの転写、および肥大、ならびに抗アポトーシスを促進することが示されている。ＧＬＰ−１およびＧＩＰ受容体に対して二重のアゴニスト活性を有するペプチドは、相加的または相乗的な抗糖尿病性の利益があると予測され得る。膵臓を超えたＧＬＰ−１の他の関連の効果には、胃排出の遅延、満腹の増大、食物摂取の減少、体重の減少、ならびに神経保護効果および心臓保護効果が含まれる。２型糖尿病を有する患者では、肥満および心血管疾患などの共存症が高率であることを考慮すると、このような膵臓外の効果が特に重要であり得る。膵臓を超えた末梢組織におけるさらなるＧＩＰの作用は、骨形成の増大および骨再吸収の低減、ならびに神経保護効果を含み、これらは骨粗鬆症およびアルツハイマー病などの認知欠損の処置に有益であり得る。
【０１４９】
グルカゴンは、膵臓のアルファ細胞によって生成され、循環グルコースが低い場合に血流中に放出される、アミノ酸２９個のペプチドホルモンである。グルカゴンの重要な生理学的役割は、肝臓におけるグルコース出力を刺激することであり、これはｉｎ  ｖｉｖｏでグルコース恒常性を維持する上でインスリンに対して主要な対抗制御的な機序をもたらすプロセスである。
【０１５０】
しかし、グルカゴン受容体は、腎臓、心臓、脂肪細胞、リンパ芽球、脳、網膜、副腎、および消化管などの肝臓外の組織においても発現され、グルコース恒常性を超えたより広範囲の生理学的役割が示唆される。したがって、最近の研究は、グルカゴンには、食物摂取の減少および体重減少を伴う、エネルギー支出の刺激および熱発生を含めたエネルギー管理に対して、治療的にポジティブな効果があることを報告している。まとめると、グルカゴン受容体の刺激は、肥満およびメタボリックシンドロームの処置において有用であり得る。
【０１５１】
オキシントモジュリンは、Ｃ−末端の延長を包含するアミノ酸８個とグルカゴンからなるペプチドホルモンである。ＧＬＰ−１およびグルカゴン同様、オキシントモジュリンはプレプログルカゴンにおいて前もって形成され、切断され、小腸の内分泌細胞によって組織特異的に分泌される。オキシントモジュリンは、ＧＬＰ−１およびグルカゴンに対する受容体の両方を刺激し、したがって二重アゴニストの原型であることが知られている。
【０１５２】
ＧＬＰ−１およびＧＩＰは抗糖尿病効果で知られており、ＧＬＰ−１およびグルカゴンは共に食物摂取抑制効果で知られており、グルカゴンはさらなるエネルギー支出のメディエータでもあるので、１分子に２つまたは３つのホルモンの活性を組み合わせることで、メタボリックシンドローム、特にその構成成分である糖尿病および肥満を処置するのに強力な薬物療法をもたらすことができると考えられる。
【０１５３】
したがって、本発明の化合物は、グルコース不耐性、インスリン抵抗性、糖尿病前症、空腹時グルコースの上昇、２型糖尿病、高血圧、異脂肪血症、アテローム性動脈硬化症、冠動脈心疾患、末梢動脈疾患、脳卒中、またはこれら個々の疾患の構成成分の任意の組合せの処置に用いることができる。
【０１５４】
さらに、本発明の化合物は、食欲、摂食、およびカロリー摂取のコントロール、エネルギー支出の増大、体重増加の予防、体重減少の促進、体重過剰の減少、および病的肥満を含めた肥満の全体的な処置に用いることができる。
【０１５５】
本発明の化合物で処置し得るさらなる疾患状態および健康状態は、肥満関連の炎症、肥満関連の胆嚢疾患、および肥満誘発性の睡眠時無呼吸である。
【０１５６】
これらの状態は全て肥満に直接的または間接的に関連し得るが、本発明の化合物の効果は、全体的または部分的に体重に対する効果によって、またはこの効果とは独立に媒介され得る。
【０１５７】
さらに、処置しようとする疾患は、アルツハイマー病もしくはパーキンソン病などの神経変性疾患、または上記に記載した他の変性疾患である。
【０１５８】
ＧＬＰ−１、グルカゴン、およびオキシントモジュリンに比べて、エキセンジン−４には、溶液中および生理学的条件下の溶解性および安定性（ＤＰＰ−４またはＮＥＰなどの酵素による分解に対する酵素の安定性を含む）などの、有益な物理化学的性質があり、これによりｉｎ  ｖｉｖｏでより長期間の作用がもたらされる。したがって、エキセンジン−４は、二重または三重の、例えば、ＧＬＰ−１／ＧＩＰ、および場合によりグルカゴンアゴニズムを加えた薬理作用を有するエキセンジン−４類似体を得るための良好な出発骨格として役立ち得る。
【０１５９】
それにもかかわらず、エキセンジン−４も、１４位のメチオニンの酸化、ならびに２８位のアスパラギンの脱アミドおよび異性体化のため、化学的に不安定であることが示されている。したがって、１４位のメチオニンの置換により、ならびにアスパルトイミド形成、特に２８位および２９位のＡｓｐ−ＧｌｙまたはＡｓｎ−Ｇｌｙによって分解されやすいことが知られている配列を避けることにより、安定性をさらに改善することができる。
【０１６０】
医薬組成物
「医薬組成物」の語は、混合した場合に適合性であり、投与することができる成分を含む混合物を指し示すものである。医薬組成物は、１つまたはそれ以上の医薬品を含むことができる。さらに、医薬組成物は、活性の、または不活性の成分と考えられても、考えられなくても、担体、バッファー、酸性化剤、アルカリ化剤、溶媒、補助剤、等張化剤、緩和薬、増量剤、保存剤、物理的および化学的安定化剤、例えば、界面活性剤、抗酸化剤、ならびに他の構成成分を含むことができる。医薬組成物の調製における技術者に対する指南は、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ、（第２０版）Ａ．Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ  Ａ．Ｒ．編集、２０００年、Ｌｉｐｐｅｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ、およびＲ．Ｃ．Ｒｏｗｅら（編集）、Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ、ＰｈＰ、２０１３年５月最新版に見出すことができる。
【０１６１】
本発明のエキセンジン−４ペプチド誘導体、またはその塩は、医薬組成物の一部として、許容される製薬上の担体、希釈剤、または賦形剤と組み合わせて投与される。「薬学的に許容される担体」は、生理学的に許容され（例えば、生理学的に許容されるｐＨ）、一緒に投与される物質の治療上の性質を保持する担体である。標準的な許容される製薬上の担体およびその製剤は当業者には知られており、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ、（第２０版）Ａ．Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ  Ａ．Ｒ．編集、２０００年、Ｌｉｐｐｅｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ、およびＲ．Ｃ．Ｒｏｗｅら（編集）、Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ、ＰｈＰ、２０１３年５月最新版に記載されている。一例の薬学的に許容される担体は、生理学的食塩水溶液である。
【０１６２】
一実施形態において、担体は、バッファー（例えば、シトレート／クエン酸）、酸性化剤（例えば、塩酸）、アルカリ化剤（例えば、水酸化ナトリウム）、保存剤（例えば、フェノール）、共溶媒（例えば、ポリエチレングリコール４００）、等張化剤（例えば、マンニトール）、安定化剤（例えば、界面活性剤、抗酸化剤、アミノ酸）の群から選択される。
【０１６３】
用いる濃度は、生理学的に許容される範囲におけるものである。
【０１６４】
許容される製薬上の担体または希釈剤には、経口、直腸、経鼻、または非経口（皮下、筋肉内、静脈内、皮内、および経皮を含む）の投与に適する製剤において用いられるものが含まれる。本発明の化合物は、非経口投与するのが典型的である。
【０１６５】
「薬学的に許容される塩」の語は、哺乳動物において用いるのに安全および効果的である本発明の化合物の塩を意味する。薬学的に許容される塩は、それだけには限定されないが、酸付加塩および塩基性塩を含むことができる。酸付加塩の例には、塩化物塩、硫酸塩、硫化水素塩、リン酸（水素）塩、酢酸塩、クエン酸塩、トシル酸塩、またはメシル酸塩が含まれる。塩基性塩の例には、無機陽イオンとの塩、例えば、アルカリまたはアルカリ土類金属塩、例えば、ナトリウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩、またはカルシウム塩、および有機陽イオンとの塩、例えば、アミン塩が含まれる。薬学的に許容される塩のさらなる例は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ、（第２０版）Ａ．Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ  Ａ．Ｒ．編集、２０００年、Ｌｉｐｐｅｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ、またはＨａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ，Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｕｓｅ、Ｐ．Ｈ．Ｓｔａｈｌ、Ｃ．Ｇ．Ｗｅｒｍｕｔｈ編集、２００２年、Ｖｅｒｌａｇ  Ｈｅｌｖｅｔｉｃａ  Ｃｈｉｍｉｃａ  Ａｃｔａ、Ｚｕｒｉｃｈ、スイスおよびＷｉｌｅｙ−ＶＣＨ、Ｗｅｉｎｈｅｉｍ、ドイツによる共同出版に記載されている。
【０１６６】
「溶媒和物」の語は、本発明の化合物またはその塩の、有機溶媒分子および／または水などの溶媒分子との複合体を意味する。
【０１６７】
医薬組成物において、エキセンジン−４誘導体は、モノマーまたはオリゴマーの形態であってよい。
【０１６８】
化合物の「治療有効量」の語は、所望の効果を提供するのに、非毒性であるが十分な量の化合物を意味する。所望の生物学的効果を実現するのに必要な式Ｉの化合物の量は、選択する特定の化合物、使用目的、投与様式、および患者の臨床上の状態などの数々の因子に依存する。任意の個々の症例における適切な「有効」量は、当業者によってルーチンの実験を用いて決定され得る。例えば、式Ｉの化合物の「治療有効量」は、約０．０１から５０ｍｇ／投与量、好ましくは０．１から１０ｍｇ／投与量である。
【０１６９】
本発明の医薬組成物は、非経口（例えば、皮下、筋肉内、皮内、または静脈内）、経口、直腸、局所、および経口的（例えば、舌下）の投与に適するものであるが、最も適切な投与様式は、個々の症例の各々において処置しようとする状態の性質および重症度、ならびに各症例において用いられる式Ｉの化合物の性質に依存する。
【０１７０】
適切な医薬組成物は、別々の単位の形態、例えば、バイアルまたはアンプル中の、カプセル剤、錠剤、および散剤であってよく、これらは各々、規定された量の化合物を；粉末もしくは顆粒として；水性もしくは非水性の液体中の溶液もしくは懸濁液として；または水中油型もしくは油中水型エマルジョンとして含んでいる。組成物は、単一または複数の投与量の注射可能な形態において、例えば、ペンの形態において提供することができる。組成物は、すでに言及した通り、活性成分および担体（１つまたはそれ以上のさらなる成分からなっていてよい）を接触させるステップを含む、任意の適切な製薬方法によって調製することができる。
【０１７１】
ある実施形態において、医薬組成物は、適用のための装置と一緒に、例えば、シリンジ、注射用ペン、またはオートインジェクターと一緒に提供することができる。このような装置は、医薬組成物と別々に提供しても、または医薬組成物が予め充填してあってもよい。
【０１７２】
併用治療
本発明の化合物である、ＧＬＰ−１およびＧＩＰ受容体に対する二重アゴニスト、またはＧＬＰ−１、ＧＩＰ、およびグルカゴン受容体に対する三方アゴニストは、他の薬理学的な有効化合物と、例えば、Ｒｏｔｅ  Ｌｉｓｔｅ２０１２および／もしくはＲｏｔｅ  Ｌｉｓｔｅ２０１３に言及されている全ての薬物、例えば、Ｒｏｔｅ  Ｌｉｓｔｅ２０１２、第１２章、および／もしくはＲｏｔｅ  Ｌｉｓｔｅ２０１３、第１２章に言及されている全ての抗糖尿病薬と、Ｒｏｔｅ  Ｌｉｓｔｅ２０１２、第１章、および／もしくはＲｏｔｅ  Ｌｉｓｔｅ２０１３、第１章に言及されている全ての体重減少薬または食欲抑制薬と、Ｒｏｔｅ  Ｌｉｓｔｅ２０１２、第５８章、および／もしくはＲｏｔｅ  Ｌｉｓｔｅ２０１３、第５８章に言及されている全ての脂質低下薬と、Ｒｏｔｅ  Ｌｉｓｔｅ２０１２および／もしくはＲｏｔｅ  Ｌｉｓｔｅ２０１３に言及されている全ての降圧薬および腎臓保護薬（ｎｅｐｈｒｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｓ）と、またはＲｏｔｅ  Ｌｉｓｔｅ２０１２、第３６章、および／もしくはＲｏｔｅ  Ｌｉｓｔｅ２０１３、第３６章に言及されている全ての利尿薬と、広範に組み合わせることができる。
【０１７３】
活性成分の併用を、特に作用における相乗作用的改善に用いることができる。これは、活性成分を患者に別々に投与することにより、または複数の活性成分が１つの医薬調製物に存在する併用生成物の形態において適用することができる。活性成分の別々の投与によって活性成分を投与する場合、これは同時に、または連続的に行うことができる。
【０１７４】
本明細書以降に言及する活性成分の殆どは、ＵＳＰ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ  ｏｆ  ＵＳＡＮ  ａｎｄ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｄｒｕｇ  Ｎａｍｅｓ、ＵＳ薬局方、Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ、２０１１年に開示されている。
【０１７５】
このような併用に適する他の活性物質には、特に、例えば、言及する徴候の１つに関して１つもしくはそれ以上の活性物質の治療効果を増強するもの、および／または１つもしくはそれ以上の活性物質の投与量の減少を可能にするものが含まれる。
【０１７６】
併用に適する治療薬には、例えば、以下のような抗糖尿病薬が含まれる：
インスリンおよびインスリン誘導体、例えば：Ｇｌａｒｇｉｎｅ／Ｌａｎｔｕｓ（登録商標）、インスリングラルギン２７０〜３３０Ｕ／ｍＬ（ＥＰ２３８７９８９Ａ）、インスリングラルギン３００Ｕ／ｍＬ（ＥＰ２３８７９８９Ａ）、Ｇｌｕｌｉｓｉｎ／Ａｐｉｄｒａ（登録商標）、Ｄｅｔｅｍｉｒ／Ｌｅｖｅｍｉｒ（登録商標）、Ｌｉｓｐｒｏ／Ｈｕｍａｌｏｇ（登録商標）／Ｌｉｐｒｏｌｏｇ（登録商標）、Ｄｅｇｌｕｄｅｃ／ＤｅｇｌｕｄｅｃＰｌｕｓ、Ａｓｐａｒｔ、基本のインスリンおよび類似体（例えば、ＬＹ−２６０５５４１、ＬＹ２９６３０１６、ＮＮ１４３６）、ＰＥＧ化インスリンＬｉｓｐｒｏ、Ｈｕｍｕｌｉｎ（登録商標）、Ｌｉｎｊｅｔａ、ＳｕｌｉＸｅｎ（登録商標）、ＮＮ１０４５、インスリンプラスＳｙｍｌｉｎ、ＰＥ０１３９、即効性および短時間作用型のインスリン（例えば、Ｌｉｎｊｅｔａ、ＰＨ２０、ＮＮ１２１８、ＨｉｎｓＢｅｔ）、（ＡＰＣ−００２）ヒドロゲル、経口、吸入可能、経皮、および舌下のインスリン（例えば、Ｅｘｕｂｅｒａ（登録商標）、Ｎａｓｕｌｉｎ（登録商標）、Ａｆｒｅｚｚａ、Ｔｒｅｇｏｐｉｌ、ＴＰＭ  ０２、Ｃａｐｓｕｌｉｎ、Ｏｒａｌ−ｌｙｎ（登録商標）、Ｃｏｂａｌａｍｉｎ（登録商標）経口インスリン、ＯＲＭＤ−０８０１、ＮＮ１９５３、ＮＮ１９５４、ＮＮ１９５６、ＶＩＡｔａｂ、Ｏｓｈａｄｉ経口インスリン）。さらに、二官能性のリンカーによってアルブミンまたは別のタンパク質に結合しているインスリン誘導体もさらに含まれる。
ＧＬＰ−１、ＧＬＰ−１類似体、およびＧＬＰ−１受容体アゴニスト、例えば：リキシセナチド／ＡＶＥ００１０／ＺＰ１０／リキスミア、エキセナチド（Ｅｘｅｎａｔｉｄｅ）／エキセンジン−４／Ｂｙｅｔｔａ／Ｂｙｄｕｒｅｏｎ／ＩＴＣＡ  ６５０／ＡＣ−２９９３、リラグルチド／Ｖｉｃｔｏｚａ、セマグルチド、タスポグルチド、Ｓｙｎｃｒｉａ／アルビグルチド、デュラグルチド、ｒエキセンジン−４、ＣＪＣ−１１３４−ＰＣ、ＰＢ−１０２３、ＴＴＰ−０５４、ラングレナチド（Ｌａｎｇｌｅｎａｔｉｄｅ）／ＨＭ−１１２６０Ｃ、ＣＭ−３、ＧＬＰ−１エリゲン（Ｅｌｉｇｅｎ）、ＯＲＭＤ−０９０１、ＮＮ−９９２４、ＮＮ−９９２６、ＮＮ−９９２７、ノデキセン（Ｎｏｄｅｘｅｎ）、Ｖｉａｄｏｒ−ＧＬＰ−１、ＣＶＸ−０９６、ＺＹＯＧ−１、ＺＹＤ−１、ＧＳＫ−２３７４６９７、ＤＡ−３０９１、ＭＡＲ−７０１、ＭＡＲ７０９、ＺＰ−２９２９、ＺＰ−３０２２、ＴＴ−４０１、ＢＨＭ−０３４、ＭＯＤ−６０３０、ＣＡＭ−２０３６、ＤＡ−１５８６４、ＡＲＩ−２６５１、ＡＲＩ−２２５５、エキセナチド−ＸＴＥＮ、およびグルカゴン−Ｘｔｅｎ。
ＤＰＰ−４インヒビター、例えば：アログリプチン／Ｎｅｓｉｎａ、Ｔｒａｊｅｎｔａ／リナグリプチン／ＢＩ−１３５６／Ｏｎｄｅｒｏ／Ｔｒａｊｅｎｔａ／Ｔｒａｄｊｅｎｔａ／Ｔｒａｙｅｎｔａ／Ｔｒａｄｚｅｎｔａ、サキサグリプチン／Ｏｎｇｌｙｚａ、シタグリプチン／Ｊａｎｕｖｉａ／Ｘｅｌｅｖｉａ／Ｔｅｓａｖｅ／Ｊａｎｕｍｅｔ／Ｖｅｌｍｅｔｉａ、Ｇａｌｖｕｓ／ビルダグリプチン、アナグリプチン、ゲミグリプチン、テネリグリプチン、メログリプチン（Ｍｅｌｏｇｌｉｐｔｉｎ）、トレラグリプチン、ＤＡ−１２２９、オマリグリプチン／ＭＫ−３１０２、ＫＭ−２２３、エボグリプチン（Ｅｖｏｇｌｉｐｔｉｎ）、ＡＲＩ−２２４３、ＰＢＬ−１４２７、ピノキサシン（Ｐｉｎｏｘａｃｉｎ）。
ＳＧＬＴ２インヒビター、例えば：Ｉｎｖｏｋａｎａ／カナグリフロジン、Ｆｏｒｘｉｇａ／ダパグリフロジン、レモグリフロジン（Ｒｅｍｏｇｌｉｆｏｚｉｎ）、セリグロフロジン、エンパグリフロジン、イプラグリフロジン、トホグリフロジン、ルセオグリフロジン、ＬＸ−４２１１、エルグツリフロジン（Ｅｒｔｕｇｌｉｆｏｚｉｎ）／ＰＦ−０４９７１７２９、ＲＯ−４９９８４５２、ＥＧＴ−０００１４４２、ＫＧＡ−３２３５／ＤＳＰ−３２３５、ＬＩＫ０６６、ＳＢＭ−ＴＦＣ−０３９、
ビグアナイド（例えば、メトホルミン、ブホルミン、フェンホルミン）、チアゾリジンジオン（例えば、ピオグリタゾン、リボグリタゾン、ロシグリタゾン、トログリタゾン）、二重ＰＰＡＲアゴニスト（例えば、アレグリタザール、ムラグリタザール、テサグリタザール）、スルホニル尿素（例えば、トルブタミド、グリベンクラミド、グリメピリド／アマリール、グリピジド）、メグリチニド（例えば、ナテグリニド、レパグリニド、ミチグリニド）、アルファグルコシダーゼインヒビター（例えば、アカルボース、ミグリトール、ボグリボース）、アミリンおよびアミリン類似体（例えば、プラムリンチド、シムリン）。
ＧＰＲ１１９アゴニスト（例えば、ＧＳＫ−２６３Ａ、ＰＳＮ−８２１、ＭＢＸ−２９８２、ＡＰＤ−５９７、ＺＹＧ−１９、ＤＳ−８５００）、ＧＰＲ４０アゴニスト（例えば、ファシグリファム（Ｆａｓｉｇｌｉｆａｍ）／ＴＡＫ−８７５、ＴＵＧ−４２４、Ｐ−１７３６、ＪＴＴ−８５１、ＧＷ９５０８）。
【０１７７】
他の適切な併用パートナーには：Ｃｙｃｌｏｓｅｔ、１１−ベータ−ＨＳＤのインヒビター（例えば、ＬＹ２５２３１９９、ＢＭＳ７７０７６７、ＲＧ−４９２９、ＢＭＳ８１６３３６、ＡＺＤ−８３２９、ＨＳＤ−０１６、ＢＩ−１３５５８５）、グルコキナーゼのアクチベーター（例えば、ＴＴＰ−３９９、ＡＭＧ−１５１、ＴＡＫ−３２９、ＧＫＭ−００１）、ＤＧＡＴのインヒビター（例えば、ＬＣＱ−９０８）、プロテインチロシンホスファターゼ１のインヒビター（例えば、トロズスクエミン（Ｔｒｏｄｕｓｑｕｅｍｉｎｅ））、グルコース−６−ホスファターゼのインヒビター、フルクトース−１，６−ビスホスファターゼのインヒビター、グリコーゲンホスホリラーゼのインヒビター、ホスホエノールピルビン酸カルボキシキナーゼのインヒビター、グリコーゲンシンターゼキナーゼのインヒビター、ピルビン酸デヒドロキナーゼ（ｐｙｒｕｖａｔｅ  ｄｅｈｙｄｒｏｋｉｎａｓｅ）のインヒビター、アルファ２−アンタゴニスト、ＣＣＲ−２アンタゴニスト、ＳＧＬＴ−１インヒビター（例えば、ＬＸ−２７６１）がある。
【０１７８】
例えば：ＨＭＧ−ＣｏＡ−レダクターゼインヒビター（例えば、シンバスタチン、アトルバスタチン）、フィブラート（例えば、ベザフィブラート、フェノフィブラート）、ニコチン酸およびその誘導体（例えば、ナイアシン）、ＰＰＡＲ−（アルファ、ガンマ、またはアルファ／ガンマ）アゴニストまたはモジュレーター（例えば、アレグリタザール（Ａｌｅｇｌｉｔａｚａｒ））、ＰＰＡＲ−デルタアゴニスト、ＡＣＡＴインヒビター（例えば、アバシミブ（Ａｖａｓｉｍｉｂｅ））、コレステロール吸収インヒビター（例えば、エゼチミブ）、胆汁酸結合物質（例えば、コレスチラミン）、回腸胆汁酸輸送（ｔｒａｎｓｐｏｒｔ）インヒビター、ＭＴＰインヒビター、またはＰＣＳＫ９のモジュレーターなどの、１つまたはそれ以上の脂質低下薬も併用パートナーとして適切である。
【０１７９】
ＨＤＬ上昇化合物、例えば：ＣＥＴＰインヒビター（例えば、トルセトラピブ、アナセトラピブ（Ａｎａｃｅｔｒａｐｉｄ）、ダルセトラピブ（Ｄａｌｃｅｔｒａｐｉｄ）、エヴァセトラピブ（Ｅｖａｃｅｔｒａｐｉｄ）、ＪＴＴ−３０２、ＤＲＬ−１７８２２、ＴＡ−８９９５）、またはＡＢＣ１レギュレーター。
【０１８０】
他の適切な併用パートナーは、例えば：シブトラミン、テソフェンシン、オルリスタット、カンナビノイド−１受容体のアンタゴニスト、ＭＣＨ−１受容体アンタゴニスト、ＭＣ４受容体アゴニスト、ＮＰＹ５またはＮＰＹ２アンタゴニスト（例えば、ベルネペリット）、ベータ−３−アゴニスト、レプチンまたはレプチンミメティック、５ＨＴ２ｃ受容体のアゴニスト（例えば、ロルカセリン）、またはブプロピオン／ナルトレキソン、ブプロピオン／ゾニサミド、ブプロピオン／フェンテルミン、もしくはプラムリンチド／メトレプチンの併用など、肥満を処置するための１つまたはそれ以上の活性物質である。
【０１８１】
他の適切な併用パートナーは：
さらなる消化管ペプチド、例えば、ペプチドＹＹ３−３６（ＰＹＹ３−３６）またはその類似体、膵臓ポリペプチド（ＰＰ）またはその類似体。
グルカゴン受容体アゴニストまたはアンタゴニスト、ＧＩＰ受容体アゴニストまたはアンタゴニスト、グレリンアンタゴニストまたはインバースアゴニスト、キセニンおよびその類似体。
【０１８２】
さらに、高血圧、慢性心不全、またはアテローム性動脈硬化症に影響を及ぼすための薬物、例えば：アンジオテンシンＩＩ受容体アンタゴニスト（例えば、テルミサルタン、カンデサルタン、バルサルタン、ロサルタン、エプロサルタン、イルベサルタン、オルメサルタン、タソサルタン、アジルサルタン）、ＡＣＥインヒビター、ＥＣＥインヒビター、利尿薬、ベータブロッカー、カルシウム拮抗薬、中枢作用性昇圧薬、アルファ−２−アドレナリン作用性受容体のアンタゴニスト、中性エンドペプチダーゼのインヒビター、血小板凝集インヒビター、およびその他、またはその組合せとの併用が適切である。
【０１８３】
別の一態様において、本発明は、ＧＬＰ−１およびグルカゴンに対する受容体に結合することにより、およびこれらの活性を変調することにより、影響を及ぼすことができる疾患または状態を処置または予防するのに適する薬物を調製するための、併用パートナーとして上記に記載した活性物質の少なくとも１つと組み合わせた、本発明による化合物または生理学的に許容されるその塩の使用に関する。これは、メタボリックシンドローム、特に上記に列挙した疾患または状態の１つ、最も詳しくは糖尿病もしくは肥満またはこれらの合併症の状況における疾患であるのが好ましい。
【０１８４】
本発明による化合物、または生理学的に許容されるその塩の、１つまたはそれ以上の活性物質との併用における使用は、同時に、別々に、または連続的に起こり得る。
【０１８５】
本発明による化合物、または生理学的に許容されるその塩の、別の活性物質との併用における使用は、同時に、または互い違いの時間であるが、特に短期の時間間隔内に起こり得る。これらを同時に投与する場合、２つの活性物質は患者に一緒に投与され；これらを互い違いの時間に用いる場合、２つの活性物質は患者に、１２時間以下、特に６時間以下の期間内に投与される。
【０１８６】
したがって、別の一態様において、本発明は、本発明による化合物、またはそのような化合物の生理学的に許容される塩、および併用パートナーとして上記に記載した少なくとも１つの活性物質を、場合により１つまたはそれ以上の不活性な担体および／または希釈剤と一緒に含む薬物に関する。
【０１８７】
本発明による化合物、または生理学的に許容されるその塩もしくは溶媒和物、およびこれらと併用されるさらなる活性物質は、共に、錠剤もしくはカプセル剤などの１製剤中に一緒に、またはいわゆるキットオブパーツなど、２つの同一の、もしくは異なる製剤中に別々に存在することができる。
【０１８８】
方法
用いる略語は以下の通りである：
ＡＡ  アミノ酸
ｃＡＭＰ  環状アデノシン一リン酸
Ｂｏｃ  ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（ｂｕｔｙｌｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ）
ＢＯＰ  （ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）ｔｒｉｓ（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート
ＢＳＡ  ウシ血清アルブミン
ｔＢｕ  三級ブチル
Ｄｄｅ  １−（４，４−ジメチル−２，６−ジオキソシクロヘキシリデン）−エチル
ｉｖＤｄｅ  １−（４，４−ジメチル−２，６−ジオキソシクロヘキシリデン）３−メチル−ブチル
ＤＩＣ  Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド
ＤＩＰＥＡ  Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＥＭ  ダルベッコ変法イーグル培地
ＤＭＦ  ジメチルホルムアミド
ＥＤＴ  エタンジチオール
ＦＡ  ギ酸
ＦＢＳ  ウシ胎児血清
Ｆｍｏｃ  フルオレニルメチルオキシカルボニル
ＨＡＴＵ  Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート
ＨＢＳＳ  ハンクス平衡塩類溶液
ＨＢＴＵ  ２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチル−ウロニウムヘキサフルオロホスフェート
ＨＥＰＥＳ  ２−［４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−１−イル］エタンスルホン酸
ＨＯＢｔ  １−ヒドロキシベンゾトリアゾール
ＨＯＳｕ  Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド
ＨＰＬＣ  高速液体クロマトグラフィー
ＨＴＲＦ  ホモジニアス時間分解蛍光（Ｈｏｍｏｇｅｎｏｕｓ  Ｔｉｍｅ  Ｒｅｓｏｌｖｅｄ  Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ）
ＩＢＭＸ  ３−イソブチル−１−メチルキサンチン
ＬＣ／ＭＳ  液体クロマトグラフィー／質量分析法
Ｐａｌｍ  パルミトイル
ＰＢＳ  リン酸緩衝食塩水
ＰＥＧ  ポリエチレングリコール（ｐｏｌｙｅｔｈｙｌｅｎｅ  ｇｌｙｃｏｌ）
ＰＫ  薬物動態
ＲＰ−ＨＰＬＣ  逆相高速液体クロマトグラフィー
Ｓｔｅａ  ステアリル
ＴＦＡ  トリフルオロ酢酸
Ｔｒｔ  トリチル
ＵＶ  紫外線
【０１８９】
ペプチド化合物の一般的合成
材料
様々なＲｉｎｋ−アミド樹脂（４−（２’，４’−ジメトキシフェニル−Ｆｍｏｃ−アミノメチル）−フェノキシアセトアミド−ノルロイシルアミノメチル樹脂、Ｍｅｒｃｋ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ；４−［（２，４−ジメトキシフェニル）（Ｆｍｏｃ−アミノ）メチル］フェノキシアセトアミドメチル樹脂、Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を、０．３〜０．４ｍｍｏｌ／ｇの範囲のローディング（ｌｏａｄｉｎｇ）で、ペプチドアミドの合成に用いた。
【０１９０】
Ｆｍｏｃ保護した天然のアミノ酸を、Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ｉｎｃ．、Ｓｅｎｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ、Ｍｅｒｃｋ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ、Ｉｒｉｓ  Ｂｉｏｔｅｃｈ、またはＢａｃｈｅｍから購入した。合成を通して以下の標準のアミノ酸を用いた：Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｍｅｔ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｐｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｖａｌ−ＯＨ。
【０１９１】
さらに、以下の特殊なアミノ酸を上記と同じ供給業者から購入した：Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｌｙｓ（ｉｖＤｄｅ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｌｙｓ（Ｍｍｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｉｂ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌ−Ｈｉｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ（トルエン溶媒和物として入手可能）、およびＢｏｃ−Ｌ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ。
【０１９２】
固相ペプチド合成を、例えば、Ｐｒｅｌｕｄｅペプチドシンセサイザー（Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ｉｎｃ）または同様の自動合成機上で、標準のＦｍｏｃ化学反応およびＨＢＴＵ／ＤＩＰＥＡ活性化を用いて行った。溶媒としてＤＭＦを用いた。脱保護：２０％ピペリジン／ＤＭＦで２×２．５分間。洗浄：７×ＤＭＦ。カップリングＤＭＦ２×中、２：５：１０  ２００ｍＭＡＡ／５００ｍＭ  ＨＢＴＵ／２Ｍ  ＤＩＰＥＡ２０分間。洗浄：５×ＤＭＦ。
【０１９３】
Ｌｙｓ−側鎖を修飾する場合は、Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｌｙｓ（ｉｖＤｄｅ）−ＯＨまたはＦｍｏｃ−Ｌ−Ｌｙｓ（Ｍｍｔ）−ＯＨを、相当する位置で用いた。合成完了後、ｉｖＤｄｅ基を、文献の手順を修飾したものにしたがって（Ｓ．Ｒ．Ｃｈｈａｂｒａら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．、３９巻、（１９９８年）、１６０３頁）、ＤＭＦ中４％ヒドラジン水和物を用いて除去した。ジクロロメタン中１％ＴＦＡで繰返し処理することにより、Ｍｍｔ基を除去した。樹脂を所望の酸のＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステルで処理し、またはＨＢＴＵ／ＤＩＰＥＡもしくはＨＯＢｔ／ＤＩＣなどのカップリング試薬を用いて、以下のアシル化を行った。
【０１９４】
合成したペプチドを全て、８２．５％ＴＦＡ、５％フェノール、５％水、５％チオアニソール、２．５％ＥＤＴからなるＫｉｎｇの切断カクテルで、樹脂から切断した。次いで、粗製ペプチドをジエチルエーテルまたはジイソプロピルエーテル中で沈殿させ、遠心分離し、凍結乾燥した。ペプチドを分析用ＨＰＬＣによって分析し、ＥＳＩ質量分析法によってチェックした。粗製のペプチドを、慣例的な分取用ＨＰＬＣ精製手順によって精製した。
【０１９５】
分析用ＨＰＬＣ／ＵＰＬＣ
方法Ａ：分析用ＵＰＬＣ／ＭＳを、Ｗａｔｅｒｓ  ＵＰＬＣ  ＨＳＳ１．７μｍ  Ｃ１８カラム（２．１×１００ｍｍ）を装着したＷａｔｅｒｓ  ＵＰＬＣシステム上４０℃で、流速０．５ｍＬ／分の勾配溶出で行い、２１５ｎｍおよび２８０ｎｍでモニタリングした。勾配を、１５分かけて１０％Ｂから９０％Ｂ、次いで１分間９０％Ｂ、または１２．５分かけて１５％Ｂから５０％Ｂ、次いで３分かけて５０％Ｂから９０％Ｂに設定した。バッファーＡ＝水中０．１％ギ酸、およびＢ＝アセトニトリル中０．１％ギ酸。
【０１９６】
質量分析計として、ポジティブイオンモードのエレクトロスプレーを装着した、Ｗａｔｅｒｓ  ＬＣＴ  Ｐｒｅｍｉｅｒ飛行時間型機器を用いた。
【０１９７】
方法Ｂ：検出２１０〜２２５ｎｍ、場合により、エレクトロスプレーポジティブイオンモードの質量分析計Ｗａｔｅｒｓ  ＬＣＴ  Ｐｒｅｍｉｅｒに連結
カラム：Ｗａｔｅｒｓ  ＡＣＱＵＩＴＹ  ＵＰＬＣ（登録商標）ＣＳＨ（商標）Ｃ１８  １．７μｍ（１５０×２．１ｍｍ）、５０℃
溶媒：Ｈ２Ｏ＋０．５％ＴＦＡ：ＡＣＮ＋０．３５％ＴＦＡ（流速０．５ｍｌ／分）
勾配：８０：２０（０分）から８０：２０（３分）から２５：７５（２３分）から２：９８（２３．５分）から２：９８（３０．５分）から８０：２０（３１分）から８０：２０（３７分）
【０１９８】
方法Ｃ：検出２１５ｎｍ
カラム：Ａｅｒｉｓ  Ｐｅｐｔｉｄｅ、３．６μｍ、ＸＢ−Ｃ１８（２５０×４．６ｍｍ）、６０℃
溶媒：Ｈ２Ｏ＋０．１％ＴＦＡ：ＡＣＮ＋０．１％ＴＦＡ（流速１．５ｍｌ／分）
勾配：９０：１０（０分）から９０：１０（３分）から１０：９０（４３分）から１０：９０（４８分）から９０：１０（４９分）から９０：１０（５０分）
【０１９９】
方法Ｄ：検出２１４ｎｍ
カラム：Ｗａｔｅｒｓ  Ｘ−Ｂｒｉｄｇｅ  Ｃ１８  ３．５μｍ  ２．１×１５０ｍｍ
溶媒：Ｈ２Ｏ＋０．５％ＴＦＡ：ＡＣＮ（流速０．５５ｍｌ／分）
勾配：９０：１０（０分）から４０：６０（５分）から１：９９（１５分）
【０２００】
方法Ｅ：検出２１０〜２２５ｎｍ、場合により、エレクトロスプレーポジティブイオンモードの、質量分析計Ｗａｔｅｒｓ  ＬＣＴ  Ｐｒｅｍｉｅｒに連結
カラム：Ｗａｔｅｒｓ  ＡＣＱＵＩＴＹ  ＵＰＬＣ（登録商標）ＢＥＨ（商標）Ｃ１８  １．７μｍ（１５０×２．１ｍｍ）、５０℃
溶媒：Ｈ２Ｏ＋１％ＦＡ：ＡＣＮ＋１％ＦＡ（流速０．９ｍｌ／分）
勾配：９５：５（０分）から９５：５（２分）から３５：６５（３分）から６５：３５（２３．５分）から５：９５（２４分）から９５：５（２６分）から９５：５（３０分）
【０２０１】
一般的な分取ＨＰＬＣ精製手順：
粗製ペプチドを、Ａｋｔａ  Ｐｕｒｉｆｉｅｒシステム上、またはＪａｓｃｏ  ｓｅｍｉｐｒｅｐ  ＨＰＬＣシステム上のいずれかで精製した。精製しようとする粗製ペプチドの量に応じて、様々なサイズおよび様々な流速の分取用ＲＰ−Ｃ１８−ＨＰＬＣカラムを用いた。アセトニトリル＋０．０５〜０．１％ＴＦＡ（Ｂ）および水＋０．０５〜０．１％ＴＦＡ（Ａ）を、溶離液として使用した。あるいは、微量（ｍｉｎｏｒ  ａｍｏｕｎｔ）の酢酸を含む、アセトニトリルおよび水からなるバッファー系を用いた。生成物を含む分画を収集し、凍結乾燥させて、典型的にＴＦＡまたは酢酸塩である、精製生成物を得た。
【０２０２】
エキセンジン−４誘導体の溶解性および安定性試験
ペプチドバッチの溶解性および安定性を試験する前に、その含量を決定した。したがって、純度（ＨＰＬＣ−ＵＶ）およびバッチの塩負荷量（イオンクロマトグラフィー）である、２つのパラメータを調査した。
【０２０３】
溶解性試験に対して、標的の濃度は、純粋化合物１．０ｍｇ／ｍＬであった。したがって、固体試料からの溶液を、予め決定した含量に基づいて１．０ｍｇ／ｍＬ化合物の濃度を含む様々なバッファー系で調製した。４０００ｒｐｍで２０分、遠心分離することによって得た、上清から２時間穏やかに振盪した後、ＨＰＬＣ−ＵＶを行った。
【０２０４】
次いで、純水中または可変量のアセトニトリル中２ｍｇ／ｍＬの濃度のペプチドの保存溶液（化合物全てを溶解した光学対照）で得たＵＶピーク面積と比較することによって、溶解性を決定した。この分析は、安定性試験に対する出発点（ｔ０）にもなった。
【０２０５】
安定性試験には、溶解性に対して得た上清のアリコートを、２５℃で７日間貯蔵した。この時間経過の後、試料を４０００ｒｐｍで２０分間遠心分離し、上清をＨＰＬＣ−ＵＶで分析した。残余のペプチドの量を決定するために、ｔ０およびｔ７の標的化合物のピーク面積を比較し、以下の等式
残余ペプチド％＝［（ｔ７のペプチドのピーク面積）×１００］／ｔ０のペプチドのピーク面積
にしたがって「残余ペプチド％」が得られた。
【０２０６】
可溶性の分解生成物の量を、全ての観察された不純物からのピーク面積の合計を、ｔ０に観察されたピーク面積の合計によって減じた比較から算出した（すなわち、新たに形成したペプチド関連の種の量を決定するために）。この値は、等式：
可溶性分解生成物の％＝｛［（ｔ７の不純物のピーク面積の合計）−（ｔ０の不純物のピーク面積の合計）］×１００｝／ｔ０のペプチドのピーク面積
にしたがって、ｔ０のペプチドの初期量とのパーセントの関係で与えられる。
【０２０７】
「残余のペプチドの％」および「可溶性の分解生成物の％」の合計から１００％までの潜在的な差は、等式：
沈殿物の％＝１００−（［残余のペプチド％］＋［可溶性の分解生成物の％］）
にしたがって、ストレス条件時に依然として可溶性でなかったペプチドの量を反映するものである。
【０２０８】
この沈殿物は、遠心分離によって分析から除去された、不溶性の分解生成物、ポリマー、および／または原線維を含む。
【０２０９】
化学的安定性は「残余のペプチドの％」として表される。
【０２１０】
陰イオンクロマトグラフィー
機器：Ｄｉｏｎｅｘ  ＩＣＳ−２０００、プレ／カラム：Ｉｏｎ  Ｐａｃ  ＡＧ−１８
２×５０ｍｍ（Ｄｉｏｎｅｘ）／
ＡＳ１８  ２×２５０ｍｍ（Ｄｉｏｎｅｘ）、溶離液：水酸化ナトリウム水溶液、流速：０．３８ｍＬ／分、勾配：０〜６分：２２ｍＭ  ＫＯＨ、６〜１２分：２２〜２８ｍＭ  ＫＯＨ、１２〜１５分：２８〜５０ｍＭ  ＫＯＨ、１５〜２０分：２２ｍＭ  ＫＯＨ、サプレッサー：ＡＳＲＳ  ３００  ２ｍｍ、検出：伝導率。
【０２１１】
ＨＰＬＣ／ＵＰＬＣ法として、方法ＤまたはＥを用いた。
【０２１２】
ＧＩＰ受容体、ＧＬＰ−１受容体、およびグルカゴン受容体の有効性に対するｉｎ  ｖｉｔｒｏの細胞アッセイ
受容体に対する化合物のアゴニズムを、ヒトＧＩＰ、ＧＬＰ−１、またはグルカゴン受容体を安定して発現するＨＥＫ−２９３細胞株のｃＡＭＰ反応を測定する機能的アッセイによって決定した。
【０２１３】
細胞のｃＡＭＰ含量を、ＨＴＲＦ（ホモジニアス時間分解蛍光）をベースとしたＣｉｓｂｉｏ  Ｃｏｒｐ．（カタログ番号６２ＡＭ４ＰＥＣ）からのキットを用いて決定した。調製のため、細胞をＴ１７５培養フラスコ中に分割し、培地（ＤＭＥＭ／１０％ＦＢＳ）中で一夜増殖させてほぼコンフルエントにした。次いで、培地を除去し、カルシウムおよびマグネシウムを欠くＰＢＳで細胞を洗浄し、引き続きアキュターゼ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  カタログ番号Ａ６９６４）でプロテイナーゼ処理した。剥離した細胞を洗浄し、アッセイバッファー（１×ＨＢＳＳ；２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、０．１％  ＢＳＡ、２ｍＭ  ＩＢＭＸ）中に再懸濁し、細胞密度を決定した。次いで、これらを４０００００細胞／ｍｌに希釈し、２５μｌアリコートを、９６ウエルプレートのウエル中に懸濁した。測定のため、アッセイバッファー中の試験化合物２５μｌをウエルに加え、引き続き室温で３０分間インキュベートした。溶解バッファー（キットの構成成分）中に希釈したＨＴＲＦ試薬を加えた後、プレートを１時間インキュベートし、引き続き６６５／６２０ｎｍで蛍光比を測定した。最大反応の５０％活性化を引き起こした濃度（ＥＣ５０）を決定することによって、アゴニストのｉｎ  ｖｉｔｒｏの作用強度を定量した。
【０２１４】
マウスおよびブタにおけるエキセンジン−４誘導体を定量するための生物学的分析スクリーニング方法
マウスに１ｍｇ／ｋｇを皮下投与（ｓ．ｃ．）した。マウスを屠殺し、適用後０．２５、０．５、１、２、４、８、１６、および２４時間後に血液試料を採取した。タンパク質を沈殿させた後、液体クロマトグラフィー質量分析法（ＬＣ／ＭＳ）により血漿試料を分析した。ＰＫパラメータおよび半減期を、ＷｉｎｏｎＬｉｎバージョン５．２．１（非コンパートメントモデル）を用いて算出した。
【０２１５】
Ｇｏｔｔｉｎｇｅｒ系雌ミニブタに０．１ｍｇ／ｋｇを皮下投与（ｓ．ｃ．）した。適用後０．２５、０．５、１、２、４、８、２４、３２、４８、５６、および７２時間後に血液試料を採取した。タンパク質を沈殿させた後、液体クロマトグラフィー質量分析法（ＬＣ／ＭＳ）により血漿試料を分析した。ＰＫパラメータおよび半減期を、ＷｉｎｏｎＬｉｎバージョン５．２．１（非コンパートメントモデル）を用いて算出した。
【０２１６】
マウスにおける胃排出および腸通過
体重が２０ｇから３０ｇの間のＮＭＲＩ雌マウスを用いた。マウスを、少なくとも１週間、収容条件に順応させた。
【０２１７】
水は常時摂取可能にしたまま、マウスを一夜絶食させた。試験日、マウスの体重を測り、１匹ずつケージに入れ、３０分間、餌５００ｍｇを自由に食べさせ、水は除去した。３０分の摂食時間の終わりに、残りの餌を除去し、体重を測定した。次いで、試験化合物／基準化合物、または対照群ではビヒクルを皮下投与した。６０分後、化合物を関連の血漿曝露に到達させるために、着色した、カロリーのないボーラスを、胃管栄養法により胃の中に注入した。さらに３０分後、動物を屠殺し、胃および小腸を準備した。満たされた胃の重量を測定し、空にし、注意深く清浄にし、乾燥させ、再び重量測定した。満たされた胃の重量から空の胃の重量を差し引いて算出した胃内容物は、胃排出の度合いを指し示すものであった。力を加えずに小腸をまっすぐにし、長さを測定した。次いで、消化管（ｇｕｔ）の胃の始まりから腸内容物のボーラスが最も移動した先端までの距離を測定した。腸通過を、後者の距離と小腸の長さの合計とのパーセントにおける比率として示した。
【０２１８】
Ｅｖｅｒｓｔａｔ６．０で、一元配置のＡＮＯＶＡ、引き続きダネットの事後検定によって統計学的分析を行った。ダネット検定を適用して、ビヒクル対照に対して比較した。ｐ＜０．０５レベルの差を、統計学的に有意とみなした。
【０２１９】
マウスにおける餌摂取の自動化評価
体重が２０ｇから３０ｇの間のＮＭＲＩ雌マウスを用いた。マウスを、少なくとも１週間、収容条件に順応させ、少なくとも１日間、１匹ずつ評価用装置のケージに入れ、そのとき基礎データを同時に記録した。試験日、試験生成物を消灯期（１２時間消灯）近くに皮下投与し、後で餌消費量の評価を直接開始した。評価には、２２時間にわたる継続的なモニタリングが含まれ、データを３０分ごとの平均として処理した。この手順を数日間にわたって繰り返すことが可能であった。評価を２２時間に制限したのは、動物の体重を再測定し、餌および水を再充填し、手順の間に薬物を投与するのを可能にする実際的な理由のためであった。結果を、２２時間にわたって蓄積したデータとして評価し、または３０分の間隔に対して差別化することができた。雌および雄両方のマウスについて、同等のデータを得ることができる。
【０２２０】
Ｅｖｅｒｓｔａｔ６．０で、繰返し測定に対する二元配置のＡＮＯＶＡ、およびダネットの事後検定によって統計学的分析を行った。ｐ＜０．０５レベルの差を、統計学的に有意とみなした。
【０２２１】
食餌誘発性肥満（ＤＩＯ）Ｃ５７ＢＬ／６ＮＣｒｌ雌マウスにおける血中グルコースおよび体重に対する皮下処置後のエキセンジン−４誘導体の急性および亜慢性効果
１８週の高脂肪食餌（方法１）
Ｃ５７ＢＬ／６ＮＣｒｌ雌マウスを、グループで、特定病原体フリーのバリア設備中１２時間の明／暗周期で、水および高脂肪食餌を自由にとらせて収容した。高脂肪食餌１８週後、各群の平均体重が同様になるように、マウスを処置群（ｎ＝８）に層別化した。標準食を適宜とらせた、齢数をマッチさせた群を、標準の対照群として含めた。
【０２２２】
実験前に、マウスにビヒクル溶液を皮下（ｓ．ｃ．）注射し、３日間体重測定してマウスを手順に順応させた。
【０２２３】
１）摂食ＤＩＯマウスにおける血中グルコースに対する急性効果：ビヒクル（リン酸バッファー溶液）またはそれぞれ１０、３０、および１００μｇ／ｋｇの投与量のエキセンジン−４誘導体（リン酸バッファー中に溶解したもの）を最初に投与（ｓ．ｃ．）する直前に最初の血液試料を採取した。投与体積は５ｍＬ／ｋｇであった。実験の間、動物に水および相当する食餌をとらせ、食物消費量を、採血の全ての時間点に測定した。血中グルコースレベルを、ｔ＝０．５時間、ｔ＝１時間、ｔ＝２時間、ｔ＝４時間、ｔ＝６時間、ｔ＝８時間、およびｔ＝２４時間に測定した（方法：ｄ−グルコースヘキソキナーゼ、溶血血液、ＡＵ６４０  Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ）。採血は、麻酔せずに尾の切開によって行った。
【０２２４】
２）体重に対する亜慢性効果：全ての動物を毎日１回、明期（１２時間点灯）の終わりの午後に、ビヒクルまたは上記に言及した投与量のエキセンジン−４誘導体のいずれかで４週間、ｓ．ｃ．処置した。体重を毎日記録した。６日目および２８日目、全脂肪体積を、Ｂｒｕｋｅｒ  ｍｉｎｉｓｐｅｃ（Ｅｔｔｌｉｎｇｅｎ、ドイツ）を用いて核磁気共鳴（ＮＭＲ）によって測定した。
【０２２５】
高脂肪食餌の給餌前１４週（方法２）
Ｃ５７ＢＬ／６ＮＣｒｌ雌マウスを、グループで、特定病原体フリーのバリア設備中１２時間の明／暗周期で、水および高脂肪食餌を自由にとらせて収容した。高脂肪食餌１４週後、各群の平均体重が同様になるように、マウスを処置群（ｎ＝８）に層別化した。標準食および水を適宜とらせた、齢数をマッチさせた群を、標準の対照群として含めた。
【０２２６】
実験前に、マウスにビヒクル溶液を皮下注射（ｓ．ｃ．）し、３日間体重測定してマウスを手順に順応させた。
【０２２７】
体重に対する亜慢性効果：全ての動物を毎日１回、明期（ＬＤ１２：１２）の終わりの午後遅く、ビヒクルまたは上記に言及した投与量のエキセンジン−４誘導体のいずれかで３週間、ｓ．ｃ．処置した。体重を毎日記録した。
【０２２８】
Ｅｖｅｒｓｔａｔ６．０で、二元配置のＡＮＯＶＡの繰返し測定、およびダネットの事後検定（グルコースプロファイル）、ならびに一元配置のＡＮＯＶＡ、引き続きダネットの事後検定（体重、体脂肪）によって統計学的分析を行った。ｐ＜０．０５レベルの、ビヒクル処置したＤＩＯ対照マウスに対する差を、統計学的に有意とみなした。
【０２２９】
皮下処置後のエキセンジン−４誘導体の、レプチン受容体欠損糖尿病ｄｂ／ｄｂ雌マウスにおける血中グルコースおよびＨｂＡ１ｃに対する急性および亜慢性効果（方法３）
９〜１０週齢のＢＫＳ．Ｃｇ−ｍ＋／＋Ｌｅｐｒｄｂ／Ｊ（ｄｂ／ｄｂ）およびＢＫＳ．Ｃｇ−ｍ＋／＋Ｌｅｐｒｄｂ／＋（痩身（ｌｅａｎ）対照）雌マウスを、Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、ドイツから得た。動物を、グループで、特定病原体フリーのバリア設備中１２時間の明／暗周期で、水および齧歯動物標準食を自由にとらせて収容した。順化１週間後、血液試料を、麻酔せずに尾から採取し、血中グルコース（方法：ｄ−グルコースヘキソキナーゼ、溶血血液、ＡＵ６４０  Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ）およびＨｂＡ１ｃレベル（方法：溶血血液、Ｃｏｂａｓ６０００  ｃ５０１、Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ、ドイツ）を測定した。
【０２３０】
ＨｂＡ１ｃはグリコシル化形態のヘモグロビンであり、そのレベルは、赤血球が生存期間の間に曝露されたグルコースの平均レベルを反映する。マウスでは、ＨｂＡ１ｃは、直前の４週間の間の平均血中グルコースレベルに対する関連の生物マーカーである（マウスでは赤血球の寿命はおよそ４７日）。
【０２３１】
ｄｂ／ｄｂマウスを、各群のベースラインの血中グルコースレベルおよびＨｂＡ１ｃレベルが同様であるように、処置群（ｎ＝８）に層別化した。
【０２３２】
１）摂食ｄｂ／ｄｂマウスにおける血中グルコースに対する急性効果：ビヒクル（リン酸バッファー溶液）またはエキセンジン−４誘導体のそれぞれ３、１０、および１００μｇ／ｋｇ（リン酸バッファーに溶解）の投与量を最初に投与（ｓ．ｃ．）する直前に、最初の血液試料を採取した。投与体積は５ｍＬ／ｋｇであった。実験の間、動物に水および飼料を摂取させ、採血の全ての時間点に食物消費量を測定した。血中グルコースレベルを、ｔ＝０．５時間、ｔ＝１時間、ｔ＝２時間、ｔ＝４時間、ｔ＝６時間、ｔ＝８時間、およびｔ＝２４時間に測定した。採血は、麻酔せずに尾の切開によって行った。雌および雄両方のマウスについて、同等のデータを得ることができる。
【０２３３】
２）血中グルコースおよびＨｂＡ１ｃに対する亜慢性効果：全ての動物を、毎日１回、明期の終わりの（１２時間点灯）午後に、ビヒクルまたは上記に言及した投与量のエキセンジン−４誘導体のいずれかで、４週間ｓ．ｃ．処置した。試験の終わりに、血液試料（尾、麻酔なし）を、グルコースおよびＨｂＡ１ｃに対して分析した。雌および雄両方のマウスについて、同等のデータを得ることができる。
【０２３４】
Ｅｖｅｒｓｔａｔ６．０で、二元配置のＡＮＯＶＡの繰返し測定およびダネットの事後検定により、統計学的分析を行った。ｐ＜０．０５レベルのビヒクル処置したｄｂ／ｄｂ対照マウスに対する差を、統計学的に有意とみなした。
【０２３５】
糖尿病ｄｂｄｂ雌マウスにおけるグルコース、ＨｂＡ１ｃ、および経口グルコース耐性に対する４週間の処置の効果（方法４）
非絶食時平均グルコース値が１４．５ｍｍｏｌ／ｌであり体重が３７〜４０ｇの、８週齢の糖尿病ｄｂｄｂ雌マウスを用いた。マウスに個々に印をつけ、少なくとも１週間収容条件に順応させた。
【０２３６】
試験開始７日前、非絶食時グルコースおよびＨｂＡ１ｃに対するベースライン値を測定し、試験開始５日前、マウスをＨｂＡ１ｃ値にしたがって群およびケージに割り当てて（１ケージあたりマウス５匹、１群あたり１０匹）、確実に群間に低値および高値が等しく分布するようにした（層別化）。
【０２３７】
１日１回、暗期（６ｐｍから６ａｍ）の３時間前に皮下投与することにより、マウスを４週間処置した。試験２１日目に尾の先端の切開からＨｂＡ１ｃ用の血液試料を得、経口グルコース耐性を４週目に評価した。経口グルコース耐性試験を、前もって化合物を余計に投与せずに朝に行って、慢性処置および急性未満の化合物投与の効果を主に評価した。経口グルコース投与（２ｇ／ｋｇ、ｔ＝０分）４時間前に、マウスを絶食させた。グルコース投与前、およびそれ以降１５、３０、６０、９０、１２０、および１８０分に血液試料を採取した。最終の採血後に摂食を回復した。結果を、ベースラインからの、グルコースはｍｍｏｌ／ｌにおけるおよびＨｂＡ１ｃは％単位の変化として表す。
【０２３８】
Ｅｖｅｒｓｔａｔバージョン６．０でＳＡＳに基づき、一元配置のＡＮＯＶＡにより、引き続きダネットの事後検定により、ビヒクル対照に対して、統計学的分析を行った。ｐ＜０．０５レベルの差を、統計学的に有意とみなした。
【０２３９】
非絶食糖尿病ｄｂｄｂ雌マウスにおけるグルコース低下
非絶食時の平均グルコース値が２０〜２２ｍｍｏｌ／ｌであり体重が４２ｇ±０．６ｇ（ＳＥＭ）である糖尿病ｄｂｄｂ雌マウスを用いた。マウスに個々に印をつけ、少なくとも１週間収容条件に順応させた。
【０２４０】
試験開始３〜５日前、マウスを非絶食時のグルコース値にしたがって群およびケージに割り当てて（１ケージあたりマウス４匹、１群あたり８匹、対照群１６匹）、確実に群間に低値および高値が等しく分布するようにした（層別化）。試験日、マウスの体重を測り、投与した（ｔ＝０）。化合物を投与する直前に餌を除去したが、水は依然として摂取可能とし、尾の切開で第一の血液試料を採取した（ベースライン）。３０、６０、９０、１２０、２４０、３６０、および４８０分に、尾の切開でさらなる血液試料を採取した。
【０２４１】
Ｅｖｅｒｓｔａｔバージョン６．０でＳＡＳに基づき、繰返し測定の二元配置のＡＮＯＶＡ、引き続きダネットの事後検定により、ビヒクル対照に対して、統計学的分析を行った。ｐ＜０．０５レベルの差を、統計学的に有意とみなした。
【実施例】
【０２４２】
本発明を以下の実施例によってさらに説明する。
【０２４３】
（実施例１）
配列番号８の合成
１００〜２００メッシュ、ローディング０．３４ｍｍｏｌ／ｇの、Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ  Ｒｉｎｋ−Ａｍｉｄｅ樹脂（４−（２’，４’−ジメトキシフェニル−Ｆｍｏｃ−アミノメチル）−フェノキシアセトアミド−ノルロイシルアミノメチル樹脂）上で固相合成を行った。Ｆｍｏｃ合成の戦略をＨＢＴＵ／ＤＩＰＥＡ−活性化とともに適用した。２０位のアミノ酸として、Ｎ−Ｂｏｃ−４−（Ｆｍｏｃ−アミノ）ピペリジン−４−カルボン酸を用いた。１位のＢｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨおよび１４位のＦｍｏｃ−Ｌｙｓ（ｉｖＤｄｅ）−ＯＨを、固相合成のプロトコールにおいて用いた。ｉｖＤｄｅ−基を、文献の手順（Ｓ．Ｒ．Ｃｈｈａｂｒａら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．、３９巻、（１９９８年）、１６０３頁）を改変したものにしたがって、ＤＭＦ中４％ヒドラジン水和物を用いて、樹脂上のペプチドから切断した。その後、Ｐａｌｍ−Ｇｌｕ（γОＳｕ）−ＯｔＢｕを、遊離したアミノ基にカップリングさせた。ペプチドを、Ｋｉｎｇのカクテル（Ｄ．Ｓ．Ｋｉｎｇ、Ｃ．Ｇ．Ｆｉｅｌｄｓ、Ｇ．Ｂ．Ｆｉｅｌｄｓ、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｒｅｓ．、３６巻、１９９０年、２５５〜２６６頁）で樹脂から切断した。粗製生成物を、アセトニトリル／水勾配（両方とも０．０５％ＴＦＡを含むバッファー）を用いてＷａｔｅｒｓカラム（Ｓｕｎｆｉｒｅ、Ｐｒｅｐ  Ｃ１８）上の分取ＨＰＬＣによって精製した。精製したペプチドをＬＣＭＳによって分析した（方法Ｂ）。保持時間１２．６９分のピークのもとに見出された質量シグナルの逆重畳積分により、ペプチドの質量は４６１８．７１であることが明らかになり、これは予想値である４６１９．２１と一致する。
【０２４４】
（実施例２）
配列番号１１の合成
１００〜２００メッシュ、ローディング０．３４ｍｍｏｌ／ｇの、Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ  Ｒｉｎｋ−Ａｍｉｄｅ樹脂（４−（２’，４’−ジメトキシフェニル−Ｆｍｏｃ−アミノメチル）−フェノキシアセトアミド−ノルロイシルアミノメチル樹脂）上で固相合成を行った。Ｆｍｏｃ合成の戦略をＨＢＴＵ／ＤＩＰＥＡ−活性化とともに適用した。１位のＢｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、１４位のＦｍｏｃ−Ｌｙｓ（ｉｖＤｄｅ）−ＯＨ、および２０位のＦｍｏｃ−（Ｓ）−ＭｅＬｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨを、固相合成のプロトコールにおいて用いた。ｉｖＤｄｅ−基を、文献の手順（Ｓ．Ｒ．Ｃｈｈａｂｒａら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．、３９巻、（１９９８年）、１６０３頁）を修飾したものにしたがって、ＤＭＦ中４％ヒドラジン水和物を用いて、樹脂上のペプチドから切断した。その後、Ｐａｌｍ−Ｇｌｕ（γОＳｕ）−ＯｔＢｕを、遊離したアミノ基にカップリングさせた。ペプチドを、Ｋｉｎｇのカクテル（Ｄ．Ｓ．Ｋｉｎｇ、Ｃ．Ｇ．Ｆｉｅｌｄｓ、Ｇ．Ｂ．Ｆｉｅｌｄｓ、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｒｅｓ．、３６巻、１９９０年、２５５〜２６６頁）で樹脂から切断した。粗製生成物を、アセトニトリル／水勾配（両方とも０．０５％ＴＦＡを含むバッファー）を用いてＷａｔｅｒｓカラム（Ｓｕｎｆｉｒｅ、Ｐｒｅｐ  Ｃ１８）上の分取ＨＰＬＣによって精製した。精製したペプチドをＬＣＭＳによって分析した（方法Ｂ）。保持時間１２．８８分のピークのもとに見出された質量シグナルの逆重畳積分により、ペプチドの質量は４６３４．６６であることが明らかになり、これは予想値である４６３５．２５と一致する。
【０２４５】
（実施例３）
配列番号１５の合成
１００〜２００メッシュ、ローディング０．３４ｍｍｏｌ／ｇの、Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ  Ｒｉｎｋ−Ａｍｉｄｅ樹脂（４−（２’，４’−ジメトキシフェニル−Ｆｍｏｃ−アミノメチル）−フェノキシアセトアミド−ノルロイシルアミノメチル樹脂）上で固相合成を行った。Ｆｍｏｃ合成の戦略をＨＢＴＵ／ＤＩＰＥＡ−活性化とともに適用した。１位のＢｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨおよび１４位のＦｍｏｃ−Ｌｙｓ（ｉｖＤｄｅ）−ＯＨおよび２０位のＦｍｏｃ−アルファ−メチル−オルニチン（Ｂｏｃ）−ＯＨを、固相合成のプロトコールにおいて用いた。ｉｖＤｄｅ−基を、文献の手順（Ｓ．Ｒ．Ｃｈｈａｂｒａら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．、３９巻、（１９９８年）、１６０３頁）を改変したものにしたがって、ＤＭＦ中４％ヒドラジン水和物を用いて、樹脂上のペプチドから切断した。その後、Ｓｔｅａ−Ｇｌｕ（γОＳｕ）−ＯｔＢｕを、遊離したアミノ基にカップリングさせた。ペプチドを、Ｋｉｎｇのカクテル（Ｄ．Ｓ．Ｋｉｎｇ、Ｃ．Ｇ．Ｆｉｅｌｄｓ、Ｇ．Ｂ．Ｆｉｅｌｄｓ、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｒｅｓ．、３６巻、１９９０年、２５５〜２６６頁）で樹脂から切断した。粗製生成物を、アセトニトリル／水勾配（両方とも０．１％ＴＦＡを含むバッファー）を用いてＷａｔｅｒｓカラム（Ｓｕｎｆｉｒｅ、Ｐｒｅｐ  Ｃ１８）上の分取ＨＰＬＣによって精製した。精製したペプチドをＬＣＭＳによって分析した（方法Ｂ）。保持時間１２．９０分のピークのもとに見出された質量シグナルの逆重畳積分により、ペプチドの質量は４６０３．６４であることが明らかになり、これは予想値である４６０４．２４と一致する。
【０２４６】
類似の方法で、配列番号８〜１７の以下のペプチドを合成し、特徴付けた（方法Ａ〜Ｅ）、表５を参照されたい。
【０２４７】
【表１８】
0006408998.tif 000019
【０２４８】
（実施例４）
化学的安定性および溶解性
ペプチド化合物の溶解性および化学的安定性を、「方法」に記載した通りに評価した。結果を表６に示す。
【０２４９】
【表１９】
0006408998.tif 000020
【０２５０】
（実施例５）
ＧＬＰ−１、ＧＩＰ、およびグルカゴン受容体に対するｉｎ  ｖｉｔｒｏのデータ
ＧＬＰ−１、ＧＩＰ、およびグルカゴン受容体でのペプチド化合物の作用強度を、ヒトグルカゴン受容体（ｈＧＬＵＣ  Ｒ）、ヒトＧＩＰ（ｈＧＩＰ  Ｒ）、およびヒトＧＬＰ−１受容体（ｈＧＬＰ−１  Ｒ）を発現する細胞を、「方法」に記載した通りに、濃度を増大させながら列挙する化合物に曝露し、形成したｃＡＭＰを測定することによって測定した。
【０２５１】
エキセンジン−４誘導体の、ヒトＧＩＰ（ｈＧＩＰ  Ｒ）、ヒトＧＬＰ−１受容体（ｈＧＬＰ−１  Ｒ）、およびヒトグルカゴン受容体（ｈＧＬＵＣ  Ｒ）での活性との結果を表７に示す。
【０２５２】
【表２０】
0006408998.tif 000021
【０２５３】
比較試験
１４位に官能化されているアミノ酸を含む本発明のエキセンジン−４誘導体の選択を、この１４位に「官能化されていない」アミノ酸を有する、対応する化合物に対して試験した。基準の対の化合物、ならびにＧＬＰ−１およびＧＩＰ受容体の対応するＥＣ５０値（ｐＭで示す）を、表８に示す。示す通り、本発明のエキセンジン−４誘導体は、１４位に「官能化されていない」アミノ酸を有する化合物に比べて優れた活性を示す。
【０２５４】
【表２１】
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【０２５５】
（実施例６）
薬物動態試験
薬物動態プロファイルを、「方法」に記載した通りに決定した。算出したＴ１／２およびＣｍａｘ値を表９に示す。
【０２５６】
【表２２】
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【０２５７】
（実施例７）
皮下処置した後の配列番号１１の、食餌誘発性肥満（ＤＩＯ）Ｃ５７ＢＬ／６ＮＣｒｌ雌マウスの体重に対する亜慢性効果（高脂肪食餌を給餌前１４週、方法２）
肥満Ｃ５７ＢＬ／６ＮＣｒｌ雌マウスを３週間、毎日１回午後遅く、明期（１２時間点灯）の終わり前に、配列番号１１の３μｇ／ｋｇおよび１０μｇ／ｋｇまたはビヒクルで皮下処置した。体重を毎日記録した。
【０２５８】
配列番号１１での処置により体重は減少したが、高脂肪食餌の対照群では体重が増加した（図１、表１０）。ベースライン値からの相対的な体重変化を算出することにより、体重の投与量依存的な減少が明らかになり、３μｇ／ｋｇで７．６％、１０μｇ／ｋｇで１７．４％にそれぞれ到達した（図２）。
【０２５９】
【表２３】
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【０２６０】
（実施例８）
配列番号１１での４週間処置の、糖尿病ｄｂｄｂ雌マウスにおけるグルコース、ＨｂＡ１ｃ、および経口グルコース耐性に対する効果（方法４）
ｄｂｄｂ雌マウスに、配列番号１１の３μｇ／ｋｇおよび１０μｇ／ｋｇまたはリン酸緩衝食塩水（ビヒクル対照）を１日１回、４週間にわたって皮下投与した。配列番号１１は、３μｇ／ｋｇおよび１０μｇ／ｋｇで、ビヒクル対照に比べて非絶食時グルコースを統計的に有意に低下させた（図３）。
【０２６１】
同様に配列番号１１は、３μｇ／ｋｇおよび１０μｇ／ｋｇ投与量で、ビヒクル対照に比べて、ＨｂＡ１ｃの上昇を統計学的に有意に防いだ（図４；ｐ＜０．０５、一元配置のＡＮＯＶＡ、引き続きダネットの事後検定）。
【０２６２】
配列番号１１での処置により、３μｇ／ｋｇおよび１０μｇ／ｋｇで、ビヒクル対照に比べて、経口グルコース耐性の改善がもたらされ（０分、０ｍｍｏｌ／ｌに標準化して表す；図５）、グルコース曲線下ＡＵＣの低下は統計学的有意に到達した（図６；ｐ＜０．０５、一元配置のＡＮＯＶＡ、引き続きダネットの事後検定）。
【０２６３】
（実施例９）
非絶食糖尿病ｄｂｄｂ雌マウスにおけるグルコース低下に対する配列番号１１、配列番号１２、および配列番号１５
ｄｂｄｂ雌マウスに、時間０分に、配列番号１１、配列番号１２、および配列番号１５の３μｇ／ｋｇまたはリン酸緩衝食塩水（ビヒクル対照）を皮下投与した。３つの化合物は全て、グルコース値を速やかに低下させ（ベースライン、２０〜２２ｍｍｏｌ／ｌ）、２４０分に、配列番号１１および配列番号１２はおよそ１１ｍｍｏｌ／ｌの最大効果に、配列番号１５はおよそ１２ｍｍｏｌ／ｌのグルコース低下にそれぞれ到達し、それを４８０分の観察の終わりまで維持した（図７）。
【０２６４】
３つの化合物は全て、ｔ＝６０分から観察の終わりまで、ビヒクル対照に比べて、統計的に有意なグルコースの低下に到達した（ｐ＜０．０５、繰返し測定に対する二元配置のＡＮＯＶＡ、引き続きダネットの事後検定）。
【０２６５】
（実施例２）
ＮＭＲＩ雌マウスにおける胃排出および腸通過に対する配列番号１１の効果
平均体重２５〜３０ｇのＮＭＲＩ雌マウスに、配列番号１１の１、１０、および１００μｇ／ｋｇ、またはリン酸緩衝食塩水（ビヒクル対照）を皮下投与し、３０分後、着色したボーラスを投与した。３０分後、胃内容物および腸通過の評価を行った（図８）。
【０２６６】
雌および雄両方のマウスについて、同等のデータを得ることができた。
【０２６７】
これらの試験において、配列番号１１はそれぞれ、腸通過を４４、６８、および６９％（ｐ＜０．０００１）低減し、残存する胃内容物を１７、９７、および１０６％増大した（ビヒクル対照に対してｐ＜０．０００１、一元配置のＡＮＯＶＡ、引き続きダネットの事後検定）。
【０２６８】
【表２４】
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【配列表】
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