(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
[1S-(1α,2α,3α,4α)]-2-[[3-[4-[(ペンチルアミノ)カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプタ-2-イル]メチル]-ベンゼンプロパン酸(イフェトロバン)又は薬学的に許容されるその塩を含む、治療の必要な哺乳動物において心臓線維症を治療するための医薬組成物。
【請求項２】
哺乳動物が、ヒト患者であり、
イフェトロバン又は薬学的に許容されるその塩が、哺乳動物における線維症組織の形成の速度を減少させるために有効な量で投与される、請求項1に記載の医薬組成物。
【請求項３】
イフェトロバン又は薬学的に許容されるその塩が、約1ng/mlから約10,000ng/mlのイフェトロバンの血漿中濃度を提供するために有効な量で投与される、請求項1に記載の医薬組成物。
【請求項４】
イフェトロバン又は薬学的に許容されるその塩の治療上有効な量が、1日当たり約10mgから約1000mgである、請求項1に記載の医薬組成物。
【請求項５】
イフェトロバン又は薬学的に許容されるその塩が、経口、鼻腔内、直腸、膣、舌下、頬側、非経口、又は経皮で投与される、請求項4に記載の医薬組成物。
【請求項６】
イフェトロバン又は薬学的に許容されるその塩が、以下：
(i)ヒト患者における心筋線維症の進行を遅延させる、及び／又は
(ii)ヒト患者における運動能力を改善する、及び／又は
(iii)ヒト患者におけるRV線維症を減少させる、及び／又は
(iv)ヒト患者における心筋細胞肥大を減少させる、及び／又は
(v)ヒト患者におけるE/A比を増大させる
ために有効な量で投与される、請求項4に記載の医薬組成物。
【請求項７】
イフェトロバン又は薬学的に許容されるその塩が、右室駆出率(RVEF)、左室駆出率(LVEF)、肺動態、右室収縮期圧(RVSP)、左室収縮期機能(LVSF)、右室拡張期機能(RVDF)及び左室拡張期機能(LVDF)からなる群から選択される機能を改善する又は維持するために有効な量で投与される、請求項4に記載の医薬組成物。
【請求項８】
イフェトロバン又は薬学的に許容されるその塩が、ヒト患者における心筋細胞直径を増大させるために有効な量で投与される、請求項7に記載の医薬組成物。
【請求項９】
イフェトロバン又は薬学的に許容されるその塩が、右心を、不適応型線維症、炎症及び細胞肥大でなく、むしろ適応に向けることにより、圧負荷に対して心保護的であるために有効な量で投与される、請求項8に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
イフェトロバン又は薬学的に許容されるその塩が、ヒト患者における左心不全を軽減するために有効な量で投与される、請求項9に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
必要とする哺乳動物における右室駆出率(RVEF)、左室駆出率(LVEF)、肺動態、右室収縮期圧(RVSP)、左室収縮期機能(LVSF)、右室拡張期機能(RVDF)及び左室拡張期機能(LVDF)からなる群から選択される機能を改善又は維持するための、イフェトロバン又は薬学的に許容されるその塩を含む医薬組成物。
【請求項１２】
イフェトロバン塩が、イフェトロバンナトリウムである、請求項11に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
治療上有効な量が、1日当たり約10mgから約1000mgである、請求項12に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
経口固体剤形である、請求項13に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は、哺乳動物、例えばヒトにおける線維症の治療及び/又は予防でのトロンボキサンA2受容体拮抗薬(例えば、イフェトロバン(Ifetroban))の使用、及びトロンボキサンA2受容体拮抗薬(例えば、イフェトロバン)を、これらの疾患を治療及び/又は予防するために有効な量で含む同等物のための医薬組成物に関する。特定の実施形態では、線維症は、心臓線維症である。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
線維症は、修復プロセス又は反応プロセスにおける臓器又は組織での過剰の線維結合組織の形成である。これは、反応性状態、良性状態又は病理学的状態である可能性があり、基礎をなす臓器又は組織の構造及び機能を破壊する可能性がある結合組織を沈着させるように生理学的に作用する。線維症は、線維組織の過剰沈着の病理学的状態、並びに治癒中の結合組織沈着のプロセスを記載するために使用されうる。線維組織の形成は正常であり、線維組織は、体内の臓器又は組織の正常な構成要素である一方で、線維症状態により引き起こされる瘢痕は、基礎をなす臓器又は組織の構造を破壊する可能性がある。
【０００３】
例えば、線維症瘢痕組織は、高血圧により損傷を受けた心筋に置き換わる際、心臓は、弾性が低下し、したがって、その働きをする能力が低下する。同様に、肺線維症は、肺を硬化させ、肺機能に損傷を与える。線維症成長は、元の損傷が治癒した後でさえ、増殖でき、健全な周囲組織を浸潤しうる。ほとんどの症例で、線維症は、反応性のあるプロセスであり、数個の異なる因子が、組織線維症に通じる経路を明らかに調節しうる。そのような因子としては、早期炎症反応、線維芽細胞集団における局所増加、線維芽細胞の合成機能の調節、及びコラーゲンの生合成及び分解の調節変化が挙げられる。他の因子としては、近くの組織の炎症、又は増加した循環介在物質と共に発生された炎症状態が挙げられる。
【０００４】
線維症としては、組織損傷を伴う線維症物質(例えば、細胞外マトリックス)の異常な及び/又は過剰な蓄積により特徴づけられる病態が挙げられる。線維増殖性疾患は、心臓疾患、脳疾患、及び末梢血管疾患などの血管疾患、並びに肺系、腎系、眼、心臓系、肝系、消化器系及び皮膚に影響する多様な慢性疾患での臓器不全に関連した罹患及び死亡の原因である。
【０００５】
現在まで、線維症疾患、特に心臓線維症を治療又は予防するために有効である市販で利用可能な治療はない。ほとんどの線維症関連障害の従来の治療は、プレドニゾンなどの副腎皮質ステロイド及び/又は体の免疫系を抑制する他の薬物を頻繁に伴う。現在の治療投与計画の目標は、炎症及び続く瘢痕を減少させることである。現在利用可能な治療に対する反応は、変化しやすく、これらの治療に関連した毒性及び副作用は、重大でありうる。実際に、少数の患者のみが、副腎皮質ステロイド単独に応答し、免疫抑制薬物は、しばしば、副腎皮質ステロイドと組み合わせて使用される。
【０００６】
右室(RV)不全は、肺動脈高血圧(PAH)における死亡の主要原因であり、他の形態の肺高血圧における顕著な罹患率及び死亡率の源である。両方がトロンボキサン/プロスタノイド(prostainoid)(TP)受容体の作動薬である、トロンボキサン及びF2イソプロスタン(isprostane)の産生が、肺動脈高血圧などの負荷ストレスを増加させる病理学的状態で増大される。プロスタサイクリン/トロンボキサン平衡は、おそらく冠動脈の支持を通して、ストレス下での心保護作用に関連してきた。アスピリン治療は、トロンボキサン産生及びプロスタグランジン産生の両方を減少させる可能性がある一方で、アスピリン治療は、有益なプロスタサイクリン産生を抑制し、イソプロスタン形成になんら効果を示さない。
【０００７】
RV機能を保護するときに指示される、承認された治療法はない。F-シリーズ及びE-シリーズのイソプロスタンは、心不全及びPAHで増加され、疾患の重症度に関連し、トロンボキサン/プロスタノイド(TP)受容体を通して示しうる、血管収縮から線維症までの効果を伴う。RV機能の減少は、肺動脈圧を下げる治療にもかかわらず進行しうる。慢性圧負荷に対するRV反応は、適応型及び不適応型の両方を取ることができ、それは、しばしば、臨床成績を決定する。タンパク質合成が増大されている適応型心室肥大は、機能を維持する一方で、線維症及び心筋細胞肥大は、不整脈及び収縮不全を引き起こす可能性があり、不適合型拡張は、RV不全に関連する。したがって、慢性負荷ストレスに直面して適合型肥大を促進する治療戦略は、心機能を保護でき、成績を改善できる。
【０００８】
慢性的圧負荷で起こる細胞肥大及び心筋線維症の発生は、酸化ストレス及び脂質過酸化の増大とも関連する。15-F2tイソプロスタン(8-イソPGF2α又は8-イソF)は、酸化ストレスについての一般的なバイオマーカーであり、そのレベルは、心室拡張で増大し、心不全の重症度と関連する。バイオマーカーであることに加えて、8-イソF及び他のイソプロスタンが、心筋症で直接的役割を果たしうることが示唆される。F-シリーズ及びE-シリーズのイソプロスタンは、トロンボキサン/プロスタノイド(TP)受容体を通してシグナル伝達することが知られており、効果は、血管収縮から線維症までの範囲に及ぶ。環状エンドペルオキシド(PGH2)及びトロンボキサンA2(TxA2)のシクロオキシゲナーゼ(COX)産物は、TP受容体のリガンドでもあり、TP受容体活性化は、慢性高血圧のモデルでの心肥大に寄与し、Gh-過剰発現マウスでの心機能を低下させる。TP受容体は、血小板及び血管でのみならず、受容体密度がPAH患者で増大される右室でも見られる。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
発明の要旨
哺乳動物、例えば、ヒトにおける線維症及び/又は硬化症を予防及び/又は治療する新たな方法を提供することが、本発明の目的である。
【００１０】
哺乳動物、例えば、ヒトにおける心臓線維症を予防及び/又は治療及び/又は軽減する組成物及び方法を提供することが、本発明の目的である。
【００１１】
哺乳動物、例えば、ヒトにおける心臓線維症の効果を減らすための組成物及び方法を提供することが、本発明のさらに別の目的である。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
治療上有効な量のトロンボキサンA2受容体拮抗薬(例えば、イフェトロバン)を用いた哺乳動物の治療が、心臓線維症及び関連後遺症を予防できるか、又は軽減できることが、ここで予想外に発見されている。特定の実施形態では、治療上有効な量のトロンボキサンA2受容体拮抗薬(例えば、イフェトロバン)の投与は、炎症及び線維症から機能性生理学的肥大に向かう圧負荷の状況で、心筋症及び心不全を予防できるか、又は軽減できる。
【００１３】
上の目的により、本発明は、治療上有効な量のトロンボキサンA2受容体拮抗薬(例えば、イフェトロバン又は薬学的に許容されるその塩(例えば、イフェトロバンナトリウム))を必要とする患者に投与することにより、線維症を予防する、逆転させる、改善する又は治療する方法を提供する。
【００１４】
上の目的により、本発明は、治療上有効な量のトロンボキサンA2受容体拮抗薬(例えば、イフェトロバン)を、必要とする患者に投与することにより、心臓線維症を予防する、逆転させる、改善する又は治療する方法を提供する。
【００１５】
特定の実施形態では、本発明は、約0.1ng/mlから約100,000 ng/mlのトロンボキサンA2受容体拮抗薬(及び/又はその活性代謝産物)の所望の血漿中濃度を提供するために、治療上有効な量のトロンボキサンA2受容体拮抗薬を必要とする患者に投与することを含む、患者における線維症疾患又は状態、特に心臓線維症を治療及び/又は改善する方法を対象とする。特定の実施形態では、トロンボキサンA2受容体拮抗薬の所望の血漿中濃度を供給するために治療上有効な量のトロンボキサンA2受容体拮抗薬は、約0.1ng/mlから約10,000ng/mlである。いくつかの実施形態では、前述の血漿中濃度は、定常状態での血漿中濃度である。いくつかの実施形態では、前述の血漿中濃度は、最大の血漿中濃度(Cmax)である。特定の好ましい実施形態では、トロンボキサンA2受容体拮抗薬は、イフェトロバン又は薬学的に許容されるその塩、例えばイフェトロバンナトリウムである。
【００１６】
本発明は、本明細書に記載されるとおりのトロンボキサンA2受容体拮抗薬の投与を介して、肺動脈高血圧を経験しているヒト患者に心保護作用を提供する方法も対象とする。
【００１７】
本発明は、さらに、本明細書に記載されるとおりのトロンボキサンA2受容体拮抗薬の投与を介して、ヒト患者における負荷ストレスに対する右心適応を改善する方法に向けられる。
【００１８】
特定の実施形態では、トロンボキサンA2受容体拮抗薬は、治療上有効な量の[1S-(1α,2α,3α,4α)]-2-[[3-[4-[(ペンチルアミノ)カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプタ-2-イル]メチル]-ベンゼンプロパン酸(イフェトロバン)、及び薬学的に許容されるその塩を含む。
【００１９】
本発明は、さらに、治療上有効な量の[1S-(1α,2α,3α,4α)]-2-[[3-[4-[(ペンチルアミノ)カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプタ-2-イル]メチル]-ベンゼンプロパン酸(イフェトロバン)又は薬学的に許容されるその塩を哺乳動物に投与することを含む、それらの治療の必要な哺乳動物における心臓線維症を治療する方法をさらに対象とする。特定の実施形態では、トロンボキサンA2受容体拮抗薬は、治療上有効な量の[1S-(1α,2α,3α,4α)]-2-[[3-[4-[(ペンチルアミノ)カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプタ-2-イル]メチル]-ベンゼンプロパン酸一ナトリウム塩(イフェトロバンナトリウム)を含む。特定の好ましい実施形態では、治療上有効な量のイフェトロバンは、哺乳動物における線維症組織の形成の速度を減少させる。特定の好ましい実施形態では、哺乳動物は、ヒト患者である。特定の好ましい実施形態では、治療上有効な量のイフェトロバンは、ヒト患者における心筋線維症の進行を遅延させ、及び/又はヒト患者における運動能力を改善し、及び/又はヒト患者におけるRV線維症を減少させ、及び/又はヒト患者における心筋細胞肥大を減少させ、及び/又はヒト患者におけるE/A比を増大させ、及び/又はヒト患者における心筋細胞直径を増大させ、及び/又は右室駆出率(RVEF: right ventricular ejection fraction)、左室駆出率(LVEF)、肺動態(pulmonary dynamics)、右室収縮期圧(RVSP: right ventricular systolic pressure)、左室収縮期機能(LVSF)、右室拡張期機能(RVDF: right ventricular diastolic function)及び左室拡張期機能(LVDF)からなる群から選択される機能を改善又は維持する。
【００２０】
特定の好ましい実施形態では、治療上有効な量のイフェトロバンは、右心を、不適応型線維症、炎症及び細胞肥大でなく、むしろ適応に向けることにより、圧負荷に対して心保護的である。
【００２１】
特定の好ましい実施形態では、治療上有効な量のイフェトロバンは、ヒト患者における左心不全を軽減する。
【００２２】
上に記載される方法及び本明細書に記載される他の方法のいずれかで、イフェトロバンは、好ましくは、約1ng/mlから約100,000ng/mlのイフェトロバン(及び/又はイフェトロバンの活性代謝産物)、又はイフェトロバン自体については約1ng/mlから約10,000ng/mlの血漿中濃度を供給するために有効な量で投与され、いくつかの実施形態では、約1ng/mlから約1,000ng/mlである。いくつかの実施形態では、前述の血漿中濃度は、定常状態での血漿中濃度である。いくつかの実施形態では、前述の血漿中濃度は、最大限の血漿中濃度(Cmax)である。哺乳動物はヒト患者である特定の好ましい実施形態では、治療上有効な量は、1日当たり約100mgから約2000mg、又は1日当たり約10mg又は約100mgから約1000mgであり、特定の実施形態で、さらに好ましいのは、1日当たり約100から約500mgである。1日量は、分割用量で、又は1回ボーラス用量若しくは単位用量で、又は同時に投与される複数の投与量で投与されうる。この点については、イフェトロバンは、経口で、鼻腔内に、直腸に、膣に、舌下に、頬側に、非経口で又は経皮に投与されうる。
【００２３】
本発明は、さらに、トロンボキサンA2受容体拮抗薬(例えば、イフェトロバン又は薬学的に許容されるその塩)を含む医薬組成物であって、トロンボキサンA2受容体拮抗薬が、必要とする哺乳動物における右室駆出率(RVEF)、左室駆出率(LVEF)、肺動態、右室収縮期圧(RVSP)、左室収縮期機能(LVSF)、右室拡張期機能(RVDF)及び左室拡張期機能(LVDF)からなる群から選択される機能を改善又は維持するために有効な量である、医薬組成物を対象とする。特定の好ましい実施形態では、イフェトロバン塩は、イフェトロバンナトリウムである。
【００２４】
特定の好ましい実施形態では、上に記載される医薬組成物において、治療上有効な量は、1日当たり約10mgから約1000mgイフェトロバン(又は薬学的に許容されるその塩)である。特定の好ましい実施形態では、治療上有効な量は、1日当たり約100から約500mgである。
【００２５】
本発明は、治療上有効な量のトロンボキサンA2受容体拮抗薬を、必要とする対象(複数可)又は患者(複数可)に投与することを含む、その治療、特に心臓線維症の治療を必要とする対象又は患者における線維症を治療するための方法及び組成物にも関する。特に、本発明は、線維症又は硬化症の速度を減少させるために有効な量で、必要とする患者に治療上有効な量のトロンボキサンA2受容体拮抗薬を含む組成物を投与することを含む、そのような治療の必要な対象(複数可)又は患者(複数可)における線維症又は硬化症を生じる障害を治療又は予防する方法に関する。さらに提供されるのは、トロンボキサンA2受容体拮抗薬を含む組成物を、そのような治療の不在下で起こる線維症組織又は硬化症組織の形成を減少させるために有効な量で、投与することを含む、そのような治療の必要な対象又は患者における線維症又は硬化症を予防する方法である。
【００２６】
特定の実施形態では、線維症は、心臓線維症、腎臓線維症、肝臓線維症、肺線維症及び全身性硬化症からなる群から選択される線維増殖性疾患に関連している。
【発明を実施するための形態】
【００２７】
発明の詳細な説明
上に規定される目的により、治療上有効な量のトロンボキサンA2受容体拮抗薬を、必要とする対象又は患者に投与することで、線維症(線維症疾患又は状態、特に、心臓線維症)を予防及び/又は治療することができると考えられる。
【００２８】
右室が負荷ストレスに適応できないことは、肺動脈高血圧における直接的死因である。トロンボキサン産生は、肺動脈高血圧などの負荷ストレスを増大させる病理学的状態で増加し、プロスタサイクリン/トロンボキサン平衡は、おそらく冠動脈の支持を通してストレス下の心保護作用と関連してきた。アスピリン治療は、トロンボキサン及びプロスタグランジン両方の産生を減少させことができるが、有益なプロスタサイクリン産生も抑制し、より的を絞った手法が必要となり得る。
【００２９】
線維症は、典型的には炎症又は損傷の結果として、体内の多くの組織で起こる可能性があり、例としては:肺線維症(肺);特発性肺線維症(ここで、原因は未知である);嚢胞性線維症;肝線維症又は肝硬変(肝臓);心内膜心筋線維症(心臓)、陳旧性心筋梗塞(心臓)、心房線維症(心臓)を含めた心臓線維症;及びそれに限定されないが、縦隔線維症(縦隔の軟部組織)、骨髄線維症(骨髄)、後腹膜線維症(後腹膜の軟部組織)、進行性塊状線維症(肺)を含めた他の線維症状態;炭鉱労働者の塵肺症、腎性全身性線維症(皮膚)、クローン病(腸)、ケロイド(皮膚)、強皮症/全身性硬化症(皮膚、肺)、関節線維症(膝、肩、他の関節)及びある種の形態の癒着性関節包炎(肩)の合併症が挙げられる。過去に使用されてきた種々の型の肺線維症についての他の名称としては、慢性間質性肺炎、ハマン-リッチ症候群、通常型間質性肺炎(UIP)及びび漫性線維性肺胞炎が挙げられる。
【００３０】
肺線維症の症状としては、息切れ、咳、及び運動耐容能減少が挙げられる。経時の症状の重症度及び症状の悪化は、変化する可能性があり、少なくとも部分的に、線維症の原因に依存する。
【００３１】
肝硬変は、長期損傷により引き起こされる肝臓での広範な瘢痕(線維症)である。この損傷は、炎症により引き起こされ、それは、慢性ウイルス感染又は慢性アルコール依存などのいくつかの損傷に対する正常な反応である。肝臓は、対象が、彼らの体に切り傷を維持する場合に、治癒プロセスの間に発生する瘢痕組織に類似の様式で、それらの損傷領域を瘢痕組織に置換することにより、損傷領域を修復する。肝臓での線維症は、取り囲む健全な肝臓組織と異なる。不運にも、瘢痕組織は、正常な肝細胞として機能できないので、多すぎる瘢痕組織が、基本的な肝臓機能を妨げる。肝硬変は、多くの原因を有するが、最も一般的なのは、アルコール依存及び慢性肝炎である。肝硬変の他の原因のいくつかは、肝臓及び胆のうでの胆管閉塞、自己免疫性肝炎、及びウィルソン病又はヘモクロマトーシスなどの遺伝性疾患である。
【００３２】
肝線維症は、肝臓への継続的且つ繰り返しの侵襲により引き起こされる慢性肝疾患(CLD)に応答して開始される瘢痕プロセスである。CLDの後期段階は、基礎をなす疾患(例えば、肝硬変、非アルコール性脂肪性肝炎(NASH)、原発性硬化性胆管炎(PSC))に関係なく、肝臓構築物の広範なリモデリング及び慢性臓器不全により特徴づけられる。
【００３３】
特発性肺線維症(IPF)は、主要形態の肺線維症である。IPFは、酸素摂取を阻害する肺の進行性瘢痕により特徴づけられる衰弱性及び生命を危うくする肺疾患である。
【００３４】
全身性硬化症は、過剰線維症が、皮膚、血管、心臓、肺及び腎臓を含めた複数の臓器系で起こる変性障害である。数種の形態の線維症疾患は、肺線維症、うっ血性心不全及び腎線維症を含めた強皮症患者に死を引き起こす;その各々は、全身性硬化症患者の約半分で起こる。
【００３５】
線維症は、臓器移植拒絶の主要な原因でもある。
【００３６】
句「治療上有効な量」は、任意の治療に利用可能な合理的な利益/リスク比でいくつかの所望の局所効果又は全身性効果を生じる物質の量を指す。このような物質の有効な量は、治療されるべき対象及び疾患状態、対象の重量及び年齢、疾患状態の重症度、投与の手段などにより変化し、それは、当業者により容易に決定されうる。
【００３７】
本明細書で使用される場合、用語「トロンボキサンA2受容体拮抗薬」は、標準バイオアッセイで又はインビボで又は治療上有効な用量で使用される場合に少なくとも30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%若しくは100%まで、又は少なくとも約30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%若しくは100%トロンボキサン受容体の発現又は活性を阻害する化合物を指す。特定の実施形態では、トロンボキサンA2受容体拮抗薬は、トロンボキサンA2の受容体に対する結合を阻害する。トロンボキサンA2受容体拮抗薬としては、競合的拮抗薬(すなわち、受容体についての作動薬と競合する拮抗薬)及び非競合的拮抗薬が挙げられる。トロンボキサンA2受容体拮抗薬としては、受容体に対する抗体が挙げられる。抗体は、モノクローナルでありうる。それらは、ヒト又はヒト化抗体でありうる。トロンボキサンA2受容体拮抗薬は、トロンボキサンシンターゼ阻害剤、並びにトロンボキサンA2受容体拮抗薬活性及びトロンボキサンシンターゼ阻害剤活性の両方を有する化合物も挙げられる。
トロンボキサンA2受容体拮抗薬
【００３８】
トロンボキサンA2受容体拮抗薬の発見及び開発は、およそ30年間、多くの製薬会社の目標であった(Dogne J-Mら、Exp. Opin. Ther. Patents 11: 1663〜1675ページ(2001)を参照されたい)。随伴性のトロンボキサンA2シンターゼ阻害活性を伴うか、又は伴わないいずれかの、これらの会社により同定された特定の個々の化合物としては、イフェトロバン(BMS)、リドグレル(Janssen)、テルボグレル(BI)、UK-147535(Pfizer)、GR32191(Glaxo)及びS-18886(Servier)が挙げられる。前臨床薬理学で、このクラスの化合物が、トロンボキサン経路の阻害により得られる有効な抗血栓活性を有することが確立された。これらの化合物は、トロンボキサンA2、及び血管床内のトロンボキサンA2受容体で作用する他のプロスタノイドにより誘発される血管収縮も予防し、したがって、肝腎症候群及び/又は肝性脳症を予防及び/又は治療するために使用するために有益となり得る。
【００３９】
本発明で使用されるための適切なトロンボキサンA2受容体拮抗薬としては、例えば、それに限定されないが、イフェトロバン(BMS;[1S-(1α,2α,3α,4α)]-2-[[3-[4-[(ペンチルアミノ)カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプタ-2イル]メチル]ベンゼンプロパン酸)などの小型分子、並びに米国特許出願公開第2009/0012115号に記載される他のものを挙げることができ、その開示の全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【００４０】
本明細書で使用するために適した追加のトロンボキサンA2受容体拮抗薬は、米国特許第4,839,384号(Ogletree)、第5,066,480号(Ogletreeら)、第5,100,889号(Misraら)、第5,312,818号(Rubinら)、第5,399,725号(Possら)、及び第6,509,348号(Ogletree)にも記載されており、それらの開示の全体が参照によりここに組み込まれる。これらは、それに限定されないが、以下を含めた米国特許第5,100,889号に開示されるとおりのインターフェニレン(interphenylene)7-オキサビシクロ-ヘプチル置換複素環式アミドプロスタグランジン類似体が挙げられうる:
【００４１】
[1S-(1α,2α,3α,4α)]-2-[[3-[4-[[(4-シクロヘキシルブチル)アミノ]カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]-ヘプタ-2-イル]メチル]ベンゼンプロパン酸(SQ33,961)又はそのエステル若しくは塩;
【００４２】
[1S-(1α,2α,3α,4α)]-2-[[3-[4-[[[(4-クロロフェニル)-ブチル]アミノ]カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプタ-2-イル]メチル]ベンゼンプロパン酸又はそのエステル若しくは塩;
【００４３】
[1S-(1α,2α,3α,4α)]-3-[[3-[4-[[(4-シクロヘキシルブチル)-アミノ]カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ]2.2.1]ヘプタ-2-イル]ベンゼン酢酸又はそのエステル若しくは塩;
【００４４】
[1S-(1α,2α,3α,4α)]-[2-[[3-[4-[[(4-シクロヘキシル-ブチル)アミノ]カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプタ-2-イル]メチル]フェノキシ]酢酸又はそのエステル若しくは塩;
【００４５】
[1S-(1α,2α,3α,4α]-2-[[3-[4-[[(7,7-ジメチルオクチル)-アミノ]カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプタ-2-イル]-メチル]ベンゼンプロパン酸又はそのエステル若しくは塩。
【００４６】
1992年、3月31日に刊行された米国特許番号第5,100,889号に開示される、[1S-[1α,2α(Z),3α,4α)]-6-[3-[4-[[(4-シクロヘキシルブチル)アミノ]-カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプタ-2-イル]-4-ヘキセン酸又はそのエステル若しくは塩を含めた7-オキサビシクロヘプチル置換複素環式アミドプロスタグランジン類似体;
【００４７】
[1S-[1α,2α(Z),3α,4α)]]-6-[3-[4-[[(4-シクロヘキシル-ブチル)アミノ]カルボニル]-2-チアゾリル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプタ-2-イル]-4-ヘキセン酸又はそのエステル若しくは塩;
【００４８】
[1S-[1α,2α(Z),3α,4α)]]-6-[3-[4-[[(4-シクロヘキシル-ブチル)メチルアミノ]カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ-[2.2.1]ヘプタ-2-イル]-4-ヘキセン酸又はそのエステル若しくは塩;
【００４９】
[1S-[1α,2α(Z),3α,4α)]]-6-[3-[4-[(1-ピロリジニル)-カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプタ-2-イル]-4-ヘキセン酸又はそのエステル若しくは塩;
【００５０】
[1S-[1α,2α(Z),3α,4α)]]-6-[3-[4-[(シクロヘキシルアミノ)-カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプタ-2-イル-4-ヘキセン酸又はそのエステル若しくは塩;
【００５１】
[1S-[1α,2α(Z),3α,4α)]]-6-[3-[4-[[(2-シクロヘキシル-エチル)アミノ]カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプタ-2-イル]-4-ヘキセン酸又はそのエステル若しくは塩;
【００５２】
[1S-[1α,2α(Z),3α,4α)]]-6-[3-[4-[[[2-(4-クロロフェニル)エチル]アミノ]カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ-[2.2.1]ヘプタ-2-イル]-4-ヘキセン酸又はそのエステル若しくは塩;
【００５３】
[1S-[1α,2α(Z),3α,4α)]-6-[3-[4-[[(4-クロロフェニル)-アミノ]カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプタ-2-イル]-4-ヘキセン酸又はそのエステル若しくは塩;
【００５４】
[1S-[1α,2α(Z),3α,4α)]]-6-[3-[4-[[[4-(4-クロロフェニル)ブチル]アミノ]カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ-[2.2.1]ヘプタ-2-イル]-4-ヘキセン酸又はそのエステル若しくは塩;
【００５５】
[1S-[11α,2α(Z),3α,4α)]]-6-[3-[4α-[[-(6-シクロヘキシル-ヘキシル)アミノ]カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプタ-2-イル]-4-ヘキセン酸又はそのエステル若しくは塩;
【００５６】
[1S-[1α,2α(Z),3α,4α)]]-6-[3-[4-[[(6-シクロヘキシル-ヘキシル)アミノ]カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプタ-2-イル]-4-ヘキセン酸又はそのエステル若しくは塩;
【００５７】
[1S-[1α,2α(Z),3α,4α]]-6-[3-[4-[(プロピルアミノ)-カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプタ-2-イル]-4-ヘキセン酸又はそのエステル若しくは塩;
【００５８】
[1S-[1α,2α(Z),3α,4α)]]-6-[3-[4-[[(4-ブチルフェニル)-アミノ]カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプタ-2-イル]-4-ヘキセン酸又はそのエステル若しくは塩;
【００５９】
[1S-[1α,2α(Z),3α,4α)]]-6-[3-[4-[(2,3-ジヒドロ-1H-インドール-1-イル)カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ(2.2.1]ヘプタ-2-イル]-4-ヘキセン酸又はそのエステル若しくは塩;
【００６０】
[1S-[1α,2α(Z),3α,4α)]]-6-[3-[4-[[(4-シクロヘキシル-ブチル)アミノ]カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプタ-2-イル]-N-(フェニルスルホニル)-4-ヘキセンアミド;
【００６１】
[1S-[11α,2α(Z),3α,4α)]]-6-[3-[4-[[(4-シクロヘキシル-ブチル)アミノ]カルボニル]-2-オキサゾリル]-N-(メチルスルホニル)-7-オキサビシクロ[2-.2.1]ヘプタ-2-イル]-4-ヘキセンアミド;
【００６２】
[1S-[1α,2α(Z),3α,4α)]]-7-[3-[4-[[(4-シクロヘキシル-ブチル)アミノ]カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプタ-2-イル]-5-ヘプテン酸又はそのエステル若しくは塩;
【００６３】
[1S-[1α,2α(Z),3α,4α)]]-6-[3-[4-[[(4-シクロヘキシル-ブチル)アミノ]カルボニル]-1H-イミダゾール-2-イル]-7-オキサビシクロ-[2.2.1]ヘプタ-2-イル]-4-ヘキセン酸又はそのエステル若しくは塩;
【００６４】
[1S-[1α,2α,3α,4α)]-6-[3-[4-[[(7,7-ジメチルオクチル)-アミノ]カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプタ-2-イル]-4-ヘキセン酸又はそのエステル若しくは塩;
【００６５】
[1S-[1α,2α(E),3α,4α)]]-6-[3-[4-[[(4-シクロヘキシル-ブチル)アミノ]カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプタ-2-イル]-4-ヘキセン酸;
【００６６】
[1S-[1α,2α,3α,4α)]-3-[4-[[(4-(シクロヘキシルブチル)-アミノ]カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-ヘキサン酸又はそのエステル若しくは塩、
【００６７】
[1S-[1α,2α(Z),3α,4α)]]-6-[3-[4-[[(4-シクロヘキシル-ブチル)アミノ]カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ-[2.2.1]ヘプタ-2-イル]-4-ヘキセン酸又はそのエステル若しくは塩;
【００６８】
開示の全体が参照により本明細書に組み込まれる、Snitmanらに対する米国特許第4,537,981号に開示される[1S-(1α,2α(Z),3α(1E,3S*,4R*),4α)]]-7-[3-(3-ヒドロキシ-4-フェニル-1-ペンテニル)-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプタ-2-イル]-5-ヘプテン酸(SQ29,548)などの7-オキサビシクロヘプタン及び7-オキサビシクロヘプテン化合物;開示の全体が参照により本明細書に組み込まれる、Nakaneらに対する米国特許第4,416,896号に開示される[1S-[1α,2α(Z),3α,4α)]]-7-[3-[[2-(フェニルアミノ)カルボニル]-ヒドラジノ]メチル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプタ-2-イル]-5-ヘプテン酸などの7-オキサビシクロヘプタン置換アミノプロスタグランジン類似体;開示の全体が参照により本明細書に組み込まれる、Nakaneらに対する米国特許第4,663,336号に開示される[1S-[1α,2α(Z),3α,4α)]]-7-[3-[[[[(1-オキソヘプチル)アミノ]-アセチル]アミノ]メチル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプタ-2-イル]-5-ヘプテン酸及び対応するテトラゾール、並びに[1S-[1α,2α(Z),3α,4α)]]-7-[3-[[[[(4-シクロヘキシル-1-オキソブチル)-アミノ]アセチル]アミノ]メチル]-7-オキサビシクロ]2.2.1]ヘプタ-2-イル]-5-ヘプテン酸などの7-オキサビシクロヘプタン置換ジアミドプロスタグランジン類似体;
【００６９】
開示の全体が参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第4,977,174号に開示されるとおりの[1S-[1α,2α(Z),3α,4α)]]-6-[3-[[4-(4-シクロヘキシル-1-ヒドロキシブチル)-1H-イミダゾール-1-イル]メチル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプタ-2-イル]-4-ヘキセン酸又はそのメチルエステルなどの7-オキサビシクロヘプタンイミダゾールプロスタグランジン類似体;
【００７０】
[1S-[1α,2α(Z),3α,4α)]]-6-[3-[[4-(3-シクロヘキシル-プロピル)-1H-イミダゾール-1-イル]メチル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプタ-2-イル]-4-ヘキセン酸又はそのメチルエステル;
【００７１】
[1S-[1α,2α(X(Z),3α,4α)]]-6-[3-[[4-(4-シクロヘキシル-1-オキソブチル)-1H-イミダゾール-1-イル]メチル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプタ-2-イル]-4-ヘキセン酸又はそのメチルエステル;
【００７２】
[1S-[1α,2α(Z),3α,4α]]-6-[3-(1H-イミダゾール-1-イルメチル)-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプタ-2-イル]-4-ヘキセン酸若しくはそのメチルエステル;又は
【００７３】
[1S-[1α,2α(Z),3α,4α)]]-6-[3-[[4-[[(4-シクロヘキシル-ブチル)アミノ]カルボニル]-1H-イミダゾール-1-イル]メチル-7-オキサビシクロ-[2.2.1]-ヘプタ-2-イル]-4-ヘキセン酸若しくはそのメチルエステル;
【００７４】
開示の全体が参照により本明細書に組み込まれる、Witteらに対する米国特許第4,258,058号に開示される4-[2-(ベンゼンスルファミド)エチル]フェノキシ酢酸(BM13,177-Boehringer Mannheim)を含めた、フェノキシアルキルカルボン酸;開示の全体が参照により本明細書に組み込まれる、Witteらに対する米国特許第4,443,477号に開示される4-[2-(4-クロロベンゼンスルホンアミド)エチル]-フェニル酢酸(BM13,505、Boehringer Mannheim)を含めたスルホンアミドフェニルカルボン酸;開示の全体が参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第4,752,616号に開示される4-(3-((4-クロロフェニル)スルホニル)プロピル)ベンゼン酢酸を含めたアリールチオアルキルフェニルカルボン酸。
【００７５】
本明細書で使用するために適しているトロンボキサンA2受容体拮抗薬の他の例としては、それに限定されないが、バピプロスト(これは、好ましい例である)、R68,070-Janssen Research Laboratoriesとも呼ばれる(E)-5-[[[(ピリジニル)]3-(トリフルオロメチル)フェニル]メチレン]アミノ]-オキシ]ペンタン酸、3-[1-(4-クロロフェニルメチル)-5-フルオロ-3-メチルインドール-2-イル]-2,-2-ジメチルプロパン酸[(L-655240 Merck-Frosst)Eur.J.Pharmacol.135(2):193、Mar.17、87]、5(Z)-7-([2,4,5-cis]-4-(2-ヒドロキシフェニル)-2-トリフルオロメチル-1,3-ジオキサン-5-イル)ヘプテン酸(ICI185282、Brit. J. Pharmacol. 90(Proc. Suppl):228 P-Abs, March 87)、5(Z)-7-[2,2-ジメチル-4-フェニル-1,3-ジオキサン-cis-5-イル]ヘプテン酸(ICI159995、Brit.J.Pharmacol. 86(Proc.Suppl):808P-Abs.、December 85)、N,N'-ビス[7-(3-クロロベンゼンアミノ-スルホニル)-1,2,3,4-テトラヒドロ-イソキノリル]ジスルホニルイミド(SKF 88046, Pharmacologist 25(3):116 Abs.、117 Abs、August 83)、(1α(Z)-2β,5α]-(+)-7-[5-[[(1,1'-ビフェニル)-4-イル]-メトキシ]-2-(4-モルホリニル)-3-オキソシクロペンチル]-4-ヘプテン酸(AH 23848 -Glaxo、Circulation 72(6):1208、December 85、レバロルファンアリルブロミド(CM32,191 Sanofi, Life Sci.31(20-21):2261, Nov. 15, 82)、(Z,2-エンド-3-オキソ)-7-(3-アセチル-2-ビシクロ[2.2.1]ヘプチル-5-ヘプタ-3Z-エン酸、4-フェニル-チオセミカルバゾン(EP092-Univ. Edinburgh、Brit. J. Pharmacol.84(3):595、March 85);GR32,191(バピプロスト)-[1R-[1α(Z),2β,3β,5α]]-(+)-7-[5-([1,1'-ビフェニル]-4-イルメトキシ)-3-ヒドロキシ-2-(1-ピペリジニル)シクロペンチル]-4-ヘプテン酸;ICI192,605-4(Z)-6-[(2,4,5-cis)2-(2-クロロフェニル)-4-(2-ヒドロキシフェニル)-1,3-ジオキサン-5-イル]ヘキセン酸;BAYu3405(ラマトロバン)-3-[[(4-フルオロフェニル)-スルホニル]アミノ]-1,2,3,4-テトラヒドロ-9H-カルバゾール-9-プロパン酸;又はONO3708-7-[2α,4α-(ジメチルメタノ)-6β-(2-シクロペンチル-2β-ヒドロキシアセトアミド)-1α-シクロヘキシル]-5(Z)-ヘプテン酸;(.+-.)(5Z)-7-[3-エンド-((フェニルスルホニル)アミノ]-ビシクロ[2.2.1]ヘプタ-2-exo-イル]-ヘプテン酸(S-1452、Shionogiドミトロバン、Anboxan(登録商標));(-)6,8-ジフルオロ-9-p-メチルスルホニルベンジル-1,2,3,4-テトラヒドロカルバゾール-1-イル-酢酸(L670596、Merck)及び(3-[l-(4-クロロベンジル)-5-フルオロ-3-メチル-インドール-2-イル]-2,2-ジメチルプロパン酸(L655240、Merck)が挙げられる。
【００７６】
本発明の好ましいトロンボキサンA2受容体拮抗薬は、イフェトロバン又は任意の薬学的に許容されるその塩である。
【００７７】
特定の好ましい実施形態では、好ましいトロンボキサンA2受容体拮抗薬は、イフェトロバンナトリウム([1S-(1α,2α,3α,4α)]-2-[[3-[4-[(ペンチルアミノ)カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプタ-2-イル]メチル]-ベンゼンプロパン酸一ナトリウム塩として化学的に知られている)である。
治療の方法
【００７８】
本発明の特定の実施形態では、治療上有効な量のトロンボキサンA2受容体拮抗薬を必要とする患者に投与することにより、患者又は患者集団の1つ以上の臓器又は組織における線維症を予防及び/又は治療及び/又は改善する方法が提供される。
【００７９】
治療上有効な量のトロンボキサンA2受容体拮抗薬の投与は、それに限定されないが、経口、鼻腔内、直腸、膣、舌下、頬側、非経口又は経皮を含めた治療上有用な任意の投与経路を介して達成されうる。特定の好ましい実施形態では、トロンボキサンA2受容体拮抗薬は、非経口で投与される。特定のさらなる実施形態では、トロンボキサンA2受容体拮抗薬は、関節内注射により投与される。特定のさらなる実施形態では、トロンボキサンA2受容体拮抗薬は、罹患した解剖学的部位に直接投与される。別の実施形態では、トロンボキサンA2受容体拮抗薬は、肝動脈を通して投与される。
【００８０】
上に記載される方法及び本明細書に記載される他の方法のいずれかで、トロンボキサンA2受容体拮抗薬(例えば、イフェトロバン)は、好ましくは、約1ng/mlから約100,000ng/mlの、若しくは約0.1ng/mlの;又はイフェトロバン自体については1ng/mlから約10,000ng/mlの、さらにいくつかの実施形態では、約1ng/mlから約1,000ng/ml以上(例えば、いくつかの実施形態では、約10,000ng/mlまで、さらなる実施形態では、約100,000ng/mlまで)のトロンボキサンA2受容体拮抗薬(及び/又はそれらの活性代謝産物)の血漿中濃度を供給するために有効な量で投与される。いくつかの実施形態では、前述の血漿中濃度は、定常状態での血漿中濃度である。いくつかの実施形態では、前述の血漿中濃度は、最大限の血漿中濃度(Cmax)である。哺乳動物はヒト患者である特定の好ましい実施形態では、治療上有効な量は、1日当たり約100mgから約2000mg、又は1日当たり約10mg若しくは約100mgから約1000mgであり、特定の実施形態では、1日当たり約100から約500mgであるのがさらに好ましい。1日量は、分割用量で、又は1回ポーラス用量若しくは単位用量、又は同時に投与される複数の投与量で投与されうる。この点については、イフェトロバンは、経口で、鼻腔内に、直腸に、膣に、舌下に、頬側に、非経口で又は経皮に投与されうる。
【００８１】
投与される用量は、患者の年齢、体重及び状態、並びに投与の経路、剤形及び投与計画並びに所望の結果により調整されるべきである。
【００８２】
線維症の治療又は予防のためのトロンボキサンA2受容体拮抗薬の所望の血漿中濃度を得るために、トロンボキサンA2受容体拮抗薬の1日量は、好ましくは、約0.1mgから約5000mgの範囲にある。特定の好ましい実施形態では、線維症の治療又は予防のためのトロンボキサンA2受容体拮抗薬の1日量は、1日当たり約1mgから約2000mg、約10mgから約1000mg、約100mgから約1000mg、約50mgから約500mg、約100mgから約500mg、約200mgから約500mg、約300mgから約500mg、又は約400mgから約500mgの範囲にありうる。
【００８３】
特定の好ましい実施形態では、イフェトロバンナトリウム約10mgから約250mg(イフェトロバン遊離酸量)の1日量は、線維症の治療又は予防のためのイフェトロバン遊離酸の治療上有効な血漿中レベルを生じる。
【００８４】
トロンボキサンA2受容体拮抗薬がイフェトロバンである場合、A2/プロスタグランジンエンドペルオキシド受容体(TPr)活性化の阻害効果を提供するための所望の血漿中濃度、したがって脳微小血管活性化の減少は、約10ng/mL(イフェトロバン遊離酸)より大きいべきである。トロンボキサンA2受容体拮抗薬、例えばイフェトロバンのいくつかの阻害効果は、約1ng/mLより大きな濃度で見ることができる可能性がある。
【００８５】
投与される用量は、患者の年齢、体重及び状態、並びに投与の経路、剤形及び投与計画並びに所望の結果により注意深く調整されるべきである。
【００８６】
トロンボキサンA2受容体拮抗薬が、イフェトロバン又は薬学的に許容されるその塩である特定の好ましい実施形態では、イフェトロバンナトリウム約10mgから約500mg、好ましくは約10mgから約300mg(イフェトロバン遊離酸量)の1日量は、イフェトロバン遊離酸の有効な血漿中レベルを生じると見込まれる。
医薬組成物
【００８７】
本発明のトロンボキサンA2受容体拮抗薬は、任意の薬学的に有効な経路により投与しうる。例えば、トロンボキサンA2受容体拮抗薬は、経口、鼻腔内、直腸、膣、舌下、頬側、非経口又は経皮で投与できるように製剤化してもよく、したがって、それに合うように製剤化しうる。
【００８８】
特定の実施形態では、トロンボキサンA2受容体拮抗薬は、薬学的に許容される経口剤形で製剤化しうる。経口剤形としては、限定されないが、経口固体剤形及び経口液体剤形が挙げられうる。
【００８９】
経口固体剤形としては、限定されないが、錠剤、カプセル剤、カプレット、粉剤、ペレット、多粒子(multiparticulate)、ビーズ、球及びそれらの任意の組合せを挙げうる。これらの経口固体剤形は、即時放出、放出制御、持続放出(徐放)又は調節放出製剤として製剤化されうる。
【００９０】
本発明の経口固体剤形は、充填剤、希釈剤、潤滑剤、界面活性剤、流動促進剤、結合剤、分散剤、懸濁剤、崩壊剤、粘度上昇剤(viscosity-increasing agent)、膜形成剤、造粒助剤、香味剤、甘味剤、コーティング剤、可溶化剤などの薬学的に許容される賦形剤及びそれらの組合せも含みうる。
【００９１】
所望の放出プロファイルにより、本発明の経口固体剤形は、適切な量の放出制御剤、徐放剤、調節放出剤を含有しうる。
【００９２】
経口液体剤形としては、それに限定されないが、溶液、エマルション、懸濁液及びシロップ剤が挙げられる。これらの経口液体剤形は、液体剤形の調製のために当業者に公知の任意の薬学的に許容される賦形剤で製剤化しうる。例えば、水、グリセリン、単シロップ剤、アルコール及びそれらの組合せである。
【００９３】
本発明の特定の実施形態では、トロンボキサンA2受容体拮抗薬は、非経口用途に適切な剤形に製剤化されうる。例えば、剤形は、凍結乾燥粉剤、溶液、懸濁剤(例えば、デポー懸濁剤(depot suspension))でありうる。
【００９４】
他の実施形態では、トロンボキサンA2受容体拮抗薬は、それに限定されないが、パッチ、ゲル、ペースト、クリーム、エマルション、リニメント、バーム、ローション及び軟膏などの局所剤形に製剤化されうる。
【実施例】
【００９５】
好ましい実施形態の詳細な説明
以下の実施例は、限定的であること意図せず、本発明の特定の実施形態を表す。
【００９６】
[実施例1]
この実施例では、イフェトロバンナトリウムカプセル剤を、表1に列挙される以下の成分で調製される。
【００９７】
【表１】
0006273072.tif 000002
【００９８】
イフェトロバンのナトリウム塩、酸化マグネシウム、マンニトール、結晶セルロース及びクロスポビドンを、適切な混合機を使用して、約2から約10分間一緒に混合する。得られる混合物を、12番から40番のメッシュサイズのスクリーンを介して通過させる。その後、ステアリン酸マグネシウム及びコロイド状シリカを添加し、混合は、約1から約3分間継続する。
【００９９】
その後、得られる均質な混合物を、各々50mgのイフェトロバンナトリウム塩を含有するカプセル剤に充填する。
【０１００】
[実施例II]
この実施例では、各々400mgのイフェトロバンナトリウムを含有する1000錠の錠剤が、表2で列挙される以下の成分から作製される:
【０１０１】
【表２】
0006273072.tif 000003
【０１０２】
[実施例III]
この実施例では、イフェトロバンナトリウムの注射液が、表3a及び3bで列挙される以下の成分で静脈内用に調製される:
【０１０３】
【表３】
0006273072.tif 000004
【０１０４】
【表４】
0006273072.tif 000005
【０１０５】
イフェトロバンのナトリウム塩、緩衝剤及び塩化ナトリウムを、注射用水3リットルに溶解させ、その後、体積は5リットルになる。その溶液を、滅菌ろ紙を通してろ過し、予備滅菌バイアルに無菌的に充填し、その後予備滅菌ゴム栓で閉じる。各バイアルは、5mlの溶液当たり50mgの濃度の有効成分を含有する。
【０１０６】
[実施例IV]
トロンボキサン受容体拮抗作用により改善される、負荷ストレスに対する右室適応
右室が負荷ストレスに適応できないことは、肺動脈高血圧における直接的死因である。プロスタグランジン/トロンボキサン平衡は、おそらく冠動脈の支持を通してストレス下の心保護作用と関連してきた。
方法:
【０１０７】
FVB/Nマウス、又はGFPマクロファージ特異的系統追跡マーカー(LysM-Cre)を有するマウスに、負荷ストレスを直接増大させる肺結紮(又は対照には偽手術)を施し、翌日から、溶媒（vehicle）、又は飲料水中でのトロンボキサン受容体拮抗薬のイフェトロバンナトリウム(25mg/kg/日)のいずれかを与えた。2週後、非浸潤性血行動態を、経胸壁心エコー法により得て、犠牲にする前に、浸潤性血行動態を、右心の圧容積カテーテル法(pressure-volume catheterization)により得た。心臓を、線維症及びマクロファージ浸潤について評価した。右室から得られるRNAを単離し、4つの群(結紮又は偽)で行ったAffymetrix Mouse Gene 2.0アレイを用いて、変化遺伝子の発現を偏りなく発見するために使用した。LysM-Creマウスの心臓を、全体にフラッシュ凍結し、断面薄片を作り、線維症及びマクロファージ浸潤について顕微鏡により評価した。群の間の差を、ANOVA及びt-検定により評価した。スピアマン相関により相関性を評価した。
結果:
【０１０８】
イフェトロバンを受けている結紮マウスは、負荷ストレス下で保存された右心機能の血行動態マーカーが、線維症での減少及び炎症細胞の動員での減少に関連したことを示した。発現アレイに基づいて、これらの効果についての分子基盤は、PDGF-D及びFBXO32などの線維化促進経路(pro-fibrotic pathway)の減少、並びにTHBS4及びTGF-βの阻害剤、アスポリン及びLTBP2を含めた抗線維症経路の誘発にあった。心臓筋形成に関連した発達プログラムの血管新生及び再活性化における潜在的増大を含めた、機能性肥大に関した経路の誘発の証拠もあった。これらの変化の全ては、結紮されたマウスに特異的であり、イフェトロバンナトリウムを受けた偽手術群では見られなかった。負荷ストレスが、トロンボキサン産生を誘発することが先に見られたので、これは、薬物により遮断される経路が、偽手術で有効でなかったからでありそうである。
結論:
【０１０９】
右室負荷ストレスのげっ歯類モデルは、適合型反応の生理学的及び分子マーカーが、トロンボキサン受容体拮抗薬イフェトロバンナトリウムにより改善されることを実証する。
【０１１０】
[実施例V]
この研究の目的は、イフェトロバンが、早期段階の疾患を有するヒトにおける肺高血圧を治療するために有用であるかどうかを決定するために、トロンボキサン-プロスタノイド受容体のイフェトロバン-介在性遮断が、肺高血圧のマウスモデルでの心臓/肺機能及び遺伝子発現に効果を及ぼす可能性があるかどうかを決定することである。
【０１１１】
実験的方法:この肺動脈結紮(PAB)動物モデルで、本発明者らは、正常な食餌で野生型又はRosa26-rtTA2マウスを使用した。4〜6カ月齢でマウスに麻酔をかけ、PAB(20匹のマウス)又は偽手術(10匹のマウス)のいずれかを施した。その手段に続いて、マウスに、30mg/kg/日でイフェトロバン水又は正常な飲料水のいずれかを与え、14日間の治療後に、本発明者らは、心血管の表現型検査(cardiovascular phenotyping)を行った後、最終的な犠牲、組織検査及び遺伝子発現アレイを行った。
【０１１２】
心拍出量を評価する心エコー図を、カテーテル挿入及び犠牲にする前の日に得た。本発明者らは、標準的な心血管表現型検査を、尾静脈腱板による全身圧測定及び頸静脈内心臓カテーテル挿入、並びにピーク圧力を求める右室収縮期圧(RVSP)、拡張期圧、拡張期時定数(diastolic time constant)、動脈弾性、駆出率及び1回拍出量の測定で継続した。
【０１１３】
犠牲にすることに続いて、右室肥大を、心臓重量の百分率として各動物で評価した。右心のランダム画分を、組織検査のためにホルマリンで固定し、線維症の指数について試験した;他の心臓を、遺伝子発現解析のために、RNAマイクロアレイを介して、急速凍結した。右心及び肺を、タンパク質発現の解析及び遺伝子発現アレイのために採取した。左肺を固定し、染色した。血小板沈着を、肺小細胞動脈血管で試験した。残りの臓器を収集し、潜在的遺伝子発現解析のために液体窒素で凍結した。
【０１１４】
得られた結果は、以下のとおりであった。肺動脈の結紮は成功であった(すなわち、右室収縮期圧(RVSP)が増した)が、イフェトロバンは効果を示さなかった。総心拍出量は、結紮に続いて基本的に変化せず、それにより右心補償を示した。三尖弁E対A波の比(独立t検定によりp<0.05)は、イフェトロバンが結紮マウスでの三尖弁E対A波の比を有意に増大させることを実証した。このデータは、イフェトロバンが、線維化ストレス要因の中央で心臓のサイズを増大し、それは、有利でありうることを示唆する。その結果は、イフェトロバンでの治療が、結紮右室での線維症を減少させることも実証している。マウスにおける右室の断面(20倍で取ったトリクローム染色RV)は、イフェトロバンが、偽手術及び結紮右室の両方について、右室での線維症を減少させることを示した。溶媒治療マウスは、線維化コラーゲン沈着のレベルを増大させたが、イフェトロバン治療マウスには、線維症がほとんどなかった。
【０１１５】
肺結紮及びイフェトロバン治療により変化した遺伝子は、3つの一般カテゴリー:炎症、線維症及び筋化に適する。一般に、3つ全てが、結紮により増大されるが、イフェトロバンを用いた治療は、線維化促進及び炎症遺伝子の発現を減少させ、筋化促進性遺伝子の発現を増大させる。
【０１１６】
この研究の一部として、RNAを抽出し、発現解析を、Mouse Genone 2.0 Affymetrix発現アレイを使用して行った(図4C)。アレイ設計は、2×2×2:偽/結紮×溶媒/イフェトロバン×M/Fであった。総計で、8アレイであった;各アレイは、3匹のマウスから得られるRVのプールであった。RVSP>30を有するマウスのみを、結紮群のために使用した。結紮それ自体は、溶媒の結紮と偽とを(ABS(平均の差)-標準偏差の合計)>0.4で比較して199の遺伝子を変化させ、49のそれらの遺伝子の発現は、イフェトロバンにより増強され(差>0.4)、29のそれらの遺伝子の発現は、イフェトロバンにより軽減された(差>0.4)。増大がイフェトロバンにより遮断される遺伝子の内、以下の事実に基づいて、約半分が、炎症細胞動員を減少させることを示すことが仮定される：(i)イフェトロバンが、線維化促進シグナル伝達分子であるPDGFの発現を減少させること(Pontenら、「Platelet-dervied growth factor D induces cardiac fibrosis and proliferation of vascular smooth muscle cells in heart-specific transgenic mice」、Circ. Res. 2005 Nov 11:97 (10):1036〜45ページ)、(ii)線維症/抗線維症に関して、イフェトロバンは、線維化促進シグナル伝達分子であるFBX032の発現を減少させること(Usuiら、「Endogenous muscle atrophy F-box mediates pressure overload-induced cardiac hypertrophy through regulation of nuclear factor-kappaB」、Circ. Res., 2011 Jul 8 09(2):161〜71ページ)、(iii)線維症/抗線維症に関して、イフェトロバンは、コラーゲン及び細胞-細胞癒着に関連した特定の遺伝子、特にトロンボスポジン-4(Thbs4)の発現を増強すること。その増大がイフェトロバンにより増強される遺伝子の内、約半分が、コラーゲン及び細胞-細胞癒着に関連する：(iv)イフェトロバンは、TGF-β、アスポリン及びLtbp2の阻害に関与する遺伝子の発現も増強したこと、(v)イフェトロバンが、他の遺伝子、すなわちNmrk2、Meox1、Nkd2及びPkhd1の発現を増強すること、(vi)筋化に関して、イフェトロバンはNMRK2の発現を増強し、それは、筋肉分化の進行を制御する上で重要な役割を果たしうること(Liら、「A novel muscle-specific beta 1 integrin binding protein (MIBP) that modulates myogenic differentiation」、J. Cell Biol. 1999 Dec 27:147(7); 391〜8ページ、(vii)筋化に関して、イフェトロバンはMeox1の発現を増強すること(Mankooら、「The concerted action of Meox homeobox genes is required upstream of genetic pathways essential for the formation, patterning and differentiation of somites」、Development, 2003 Oct: 130(19):4655〜64ページ;イフェトロバンはNKD2の発現を増強する、Huら、「Myristoylated Naked2 antagonizes Wnt-beta-catenin activity by degrading Dishevlled-1 at the plasma membrane」、J. Bio. Chem. 2010 April 30:285(18)、13561〜8ページ、図12を参照されたい;イフェトロバンはPkhd1の発現を増強すること(Gillessen-Kaesbachら、「New autosomal recessive lethal disorder with polycystic kidnesy type Potter I, characteristic face, microephaly, brachymelia, and congenital heart defects」、AM J Med Genet., 1993 Feb 15;45(4):511〜8ページ。
【０１１７】
したがって、RVストレスにおけるイフェトロバンの保護作用は、炎症細胞の動員での減少;PDGF-D及びFBXO32などの線維化促進経路(pro-fibrotic pathway)の誘発減少;THBS4及びTGF-βの阻害剤、アスポリン及びLTBP2を含めた抗線維化経路の誘発;潜在的な血管新生を含めた機能性肥大に関連した経路の誘発を含みうる。
【０１１８】
[実施例VI]
野生型マウスに肺動脈結紮を施した後、イフェトロバン(飲料水を介して30mg/kg/日)対対照(普通の飲料水)を用いた治療を2週間又は6週間行った。肺動脈結紮は、肺高血圧及び右心不全を模倣する。右心の組織検査により、対照マウスの心筋細胞サイズの顕著な増大が明らかとなり、イフェトロバン治療は、この効果を防止することができ、偽手術を受けた動物に類似の心筋細胞サイズを示した。
【０１１９】
6週間の治療/肺動脈結紮後の心エコーは、対照マウスの左室不全を有意にした一方で、イフェトロバン治療マウスは、偽手術を受けた動物に類似の心機能値を有していた。
【０１２０】
右室収縮期圧(RVSP)は、肺動脈結紮を受けた動物の全てで上昇することが最初に示された(予想通り)。6週でのエコーデータ(拡張終期容積、収縮終期容積、左室1回拍出量、駆出率及び短縮率を含めた)は、左室が、溶媒治療PABマウスでは不全である一方で、イフェトロバン治療PABマウスが、これらの効果から保護され、偽手術動物に類似のエコー値を有することを有意にした。6週まで肺動脈結紮を延長することにより、2週モデルでは見られなかった左室不全があったという事実は、驚くべきことであると考えられ、この左室不全に対して保護するイフェトロバンの能力をさらにいっそう目立たせる。イフェトロバンは、右室での心筋細胞直径における増大に対しても保護し、6週で右室線維症を減少させた。
【０１２１】
これらの結果は、イフェトロバンが、複数の機構/経路を介してこの6週モデルで拡張型心筋症からの保護を提供することを示唆する。
【０１２２】
[実施例VII]
心臓ストレスの状態でのTP受容体活性化の優性に有害な結果、及び心筋症と関連したイソプロスタンの産生を考慮して、本発明者らは、右室圧負荷の肺動脈結紮(PAB)モデルでのTP受容体拮抗作用の効果を試験した。この実施例で、肺動脈結紮(PAB)による圧負荷のためRV機能不全を有するマウスに溶媒又はイフェトロバンを与えた。PABに続く2週、イフェトロバン治療マウスを、圧負荷に対して保護した。遺伝子発現アレイ、定量的組織検査及び形態計測、系統追跡及び細胞培養系を、イフェトロバン保護の機構を決定するために使用した。イフェトロバンは、線維化領域の近正常化(near normalization)を引き起こし、RV質量を増大させると同時に細胞肥大を予防し、抗線維化トロンボスポジン-4の発現を増大し、線維化促進TGF-β経路の誘発を遮断した。低用量アスピリンは、これらの結果を再現できなかった。PAB後6週までのTP受容体拮抗薬を用いた延長治療は、さらなる機能性適応に至り、延長圧負荷で見られた心不全の徴候を減少させた。
【０１２３】
自家繁殖により得られた雄及び雌両用の同齢のC57Bl/6又はFVB/NJマウスを、肺動脈結紮について使用した。自家繁殖LysM-Cre×mTomato/GFPレポーターマウスB6.129P2-Lyz2tm1(cre)Ifo/J (Tim Blackwellからの寄贈)×Gt(ROSA)26Sortm4(ACTB-tdTomato,-EGFP)Luo (JAXストック番号007676)により、LysM-GFPマウスを得た。手術に続く日に、マウスに、血行動態評価の前に2週又は6週間、25 mg/kg/日のイフェトロバン(Cumberland Pharmaceuticals Inc.、Nashville, TN)飲料水又は正常な飲料水(溶媒)のいずれかを与えた。マウスを秤量し、水を週に1回交換した。
【０１２４】
結果:イフェトロバンを受けているPABマウスで増大した心室効率
マウスは、肺動脈結索(PAB)又は偽手術を受け、飲料水中の溶媒又はイフェトロバン(TPα/TPβの競合的拮抗薬)で2週間治療した。右室収縮期圧(RVSP)は、PABマウスで上昇し、好結果の機械的血管収縮を示した。結紮後2週で、心拍出量における有意な変化はなかった。RV質量は、溶媒及びイフェトロバン治療PAB群で同様に増大した。しかし、心エコーにより、E/A波比は、TP拮抗薬を与えたマウスで増大し、充填効率が増大されたことを示唆する。ウエスタンブロットにより、RVにおけるTP受容体発現を解析し、PAB治療又は薬物治療に続く2週後一定なままであった。
【０１２５】
PABは、RVSPで、約22mmHgからおよそ40mmHg(**、二元配置ANOVAによりp<0.01)での増大を示した。心拍出量は、2週後、PABマウスで減少されなかった。右室重量と左室+中隔の重量の比は、PABマウスで増加する(**、二元配置ANOVAによりp<0.01);この増加は、イフェトロバンにより遮断されない。収縮性の基準である三尖弁E/A波比は、イフェトロバン(*、ANOVAによりp<.05)により改善されるが、それは、PABマウスでのみである。TP受容体タンパク質は、全RVで発現され、発現は、PABで変化しない。
【０１２６】
TP受容体拮抗作用で減少した心臓線維症
30mmHgのRVSPが、PAHを定義するために使用され、この閾値にある又はより上のマウスから得られる試料のみが、PAB群の分析のために使用された。PABマウスは、2週までに顕著なRV線維症を発生し、それは、イフェトロバン治療でほとんど完全に消滅された。アスピリン(10mg/kg/日)の経口用量は、このモデルでの線維症を予防できず、トロンボキサンA2が線維症を介在するリガンドでないことを示唆した。PABの2週間後、未治療マウスのRVにおける線維症は、マッソンのトリクロームにより染色された凍結RVの組織切片で<5%から約20%まで(青色染色)増加した。この効果は、アスピリンでなく、イフェトロバンにより遮断される。
【０１２７】
イフェトロバン-治療PABマウスでのRV遺伝子発現における変化
それを通して、イフェトロバンが線維症を減少させ、RV収縮性を保護した機構を決定するために、本発明者らは、薬物治療を伴うか又は伴わない偽又はPAB手術を有するマウスから得られる貯蔵RVの組での遺伝子発現アレイを行った。主成分分析法により、結紮の強力な効果が見られ、結紮を受けたマウスでのみイフェトロバンの効果が見られた。主成分分析法は、結紮を有する群の強い分離を示し、結紮を有するマウスでのみイフェトロバンの強力な効果を示す。イフェトロバンは、偽手術のみを受けたマウスで遺伝子発現は有意に変化させなかった。PABマウスでは、イフェトロバン治療は、いくつかの遺伝子の転写を増強した一方で、他の遺伝子での結紮の効果は、TP受容体拮抗作用で遮断された。特に、癒着、コラーゲン組織化、細胞外構造及び発生過程に関連した遺伝子発現に変化があった。
【０１２８】
PABマウスにおける心臓単核球
発現アレイにより、イフェトロバンを与えられたPABマウスは、成熟マクロファージのためのマーカーであるCd14、並びにTlr8及び他の炎症促進性遺伝子のRV発現を減少させた。TP受容体は、単核球でも発現され、これらの受容体の遮断は、免疫特異的効果を有しうる。TP受容体阻害で見られる線維症での減少が、マクロファージ浸潤減少又はRVでの増殖のためであったかどうかを決定するために、リゾチームMプロモーター下でeGFPを発現するLysM-CreマウスでのPABを行ったが、ここで単核球系統を常に有した全ての細胞は、それらが後に分化した場合でさえ、GFPで標識される。単核球の大半は、左心又は中隔に配置された一方で、PABは、溶媒治療及びアスピリン治療マウスでのRV単核球の数を増加しているように見えた。野生型マウスから取られたRVのフローサイトメトリーは、試験されたいずれのマクロファージ集団での結紮でも有意な変化はなく、偽手術対照と比較して、イフェトロバン治療PABマウスではなく、溶媒治療でのCD14/CD45及びF480/CD45標識細胞増大及びCD86標識CD45+細胞減少に対する有意でない傾向を示すことを有意にした。LysM-Creマウスに対するこのミスマッチは、細胞が、心臓に宿るそれらの循環分化マーカーを失うことを示唆する。遺伝子発現アレイは、圧負荷においてのみ、イフェトロバンが炎症細胞動員に関連した遺伝子の発現を減少させることを示した。トランスジェニックLysM-Cre x flox-mTomato-flox eGFPマウスを、RVでの単核球誘導の細胞を標識するために使用した。蛍光グリーンを発現する単核球系統から誘導される細胞(それらが、後に分化した場合でさえ)を除いて、これらのマウスは、蛍光レッドを発現する。PABは、溶媒及びASAマウスでグリーン細胞の数を有意に増加するが、イフェトロバン治療マウスでは増加しない(示される2〜3のトランスジェニック心臓から得られる代表的画像)。循環マーカーについての全RVのフロー選別では、イフェトロバンにより遮断されたPA-結紮マウスでの増大に対して有意でない傾向が見出された。
【０１２９】
イフェトロバン-治療PABマウスにおける細胞肥大減少
筋分化に関連した遺伝子の発現は、結紮対照と比較してTP受容体拮抗薬を受けているPABマウスで増強された。RV重量は、溶媒治療及びイフェトロバン治療PABマウスで同様に増大したが、PABに正常に関連した心筋細胞直径での増大は、イフェトロバン治療で遮断された。アスピリン治療マウスは、溶媒治療マウスと同様の心筋細胞直径を有した。心筋細胞サイズは、PABを有するマウスで増大する。この効果は、アスピリンではなく、イフェトロバンにより遮断される。ウエスタンブロットは、RVでα-MHC及びβ-MHC発現を示した。α-MHCは、可変であるが、変化しない一方で、β-MHCは、TP受容体拮抗薬を与えられたPABマウスで強力に誘発される。PABマウスのイフェトロバン治療は、α-MHC発現に変化なしにβ-ミオシン重鎖(β-MHC)タンパク質の誘発を引き起こした。圧負荷の大動脈結紮モデルで、この誘発は、β-MHC-発現細胞で減少される個々の肥大に関連する。TP受容体拮抗作用後のβ-MHCの誘発は、溶媒治療及びイフェトロバン-治療PABマウスの平均年齢は、それぞれ、688.3±19.8及び689.8±18.5日であったので、動物年齢が増大したことによらなかった。遺伝子発現アレイは、適合型リモデリングに関連したイフェトロバン誘発遺伝子を示すが、圧負荷においてのみであった。
【０１３０】
TGF-βシグナル伝達減少及びTSP-4増強
既知線維化及び抗線維化シグナル伝達経路でのイフェトロバン治療の効果を試験した。TP受容体拮抗薬を受けているマウスは、溶媒治療マウスより少ないPABに関連したホスホ-SMAD2/3を有し、線維症に関連した遺伝子の発現を減少させ、抗線維化遺伝子の発現を増大した。外来のTGF-βを与えられたイフェトロバン-治療の培養心筋細胞は、溶媒治療細胞と比較してPAI-1発現又はプロモーター活性で変化を示さず、それの受容体からのTGF-βシグナル伝達の直接遮断を示さず、TGF-βのインビボブロックが、リガンド結合の上流で起こることを示唆した。線維化促進TGF-βに対立して、圧負荷は、抗線維化トロンボスポジン-4(Thbs4;TSP-4)mRNAの誘発に関連する。イフェトロバン治療は、PAB RVのみでThbs4発現を強力に増強する(図6B)、それは、イフェトロバン-治療された結紮マウスでのTSP-4タンパク質増大と解釈される。TSP-4の局在化が、溶媒治療RVでの線維化パッチに限定されるように見えた一方で、イフェトロバンを受けているPABマウスは、TSP-4の心筋細胞発現増大を示した。イフェトロバンは、インビボでのTGF-βシグナル伝達分子Smad2/3のリン酸化を遮断する(各バンドは、異なるマウスの心臓から得られる)。RVから得られる遺伝子発現アレイは、圧負荷においてのみ、イフェトロバンが前線維化遺伝子を減少させ、抗線維化遺伝子を誘発することを示した。培養された心筋細胞で、イフェトロバンは、基準のTGF-β標的PAI1のタンパク質発現を遮断せず、イフェトロバンは、PAI1プロモーターにより誘導されるルシフェラーゼ活性の誘発も遮断しない。PABは、RVでのTSP-4発現を誘発し、それは、イフェトロバン治療で強力に増強される。
【０１３１】
心不全の予防
先の実験で、RV質量での増大があったが、PABに続いて心拍出量又はE/A波比を除いた他の機能性パラメーターでのなんらの変化もなかった。TP受容体拮抗作用と共に見られる線維症における減少が、心機能の保存増大に至るかどうかを決定するために、PAB-誘発圧負荷に続く期間が、6週に延長され、イフェトロバンを用いた投与が、同様に6週まで継続された。6週後、対照治療PABマウスは、収縮及び拡張容積増大により実証されるとおり、左室拡張を発達させ、それは、代償性1回拍出量増大により付随された。これは、心不全の徴候である駆出率減少及び短縮率減少に関連した。これらの全ては、類似のRVSP以外に、イフェトロバンを受けたPABマウスで予防された。マウスは、偽手術又はPABを受け、心エコー及び圧力ループ(pressure-loop)カテーテル挿入が6週後に行われた。左室の拡張終期及び収縮終期容積を、球状及び円筒状モデルの両方を使用して計算された平均値を使用して測定した。心エコーからも得られるのは、左室1回拍出量及び駆出率、並びに短縮率パーセントであった。
【０１３２】
高用量対低用量イフェトロバンの比較
この実施例の別のアームで、低用量(3mg/kg/日)イフェトロバンが、肺動脈結紮に続く2週間、飲料水を介してマウスに投与された。右室の組織検査は、この低用量治療が、右室の線維症を予防しないことを有意にした。線維化コラーゲン沈着に加えて、核は浸潤細胞又は増殖細胞から得られる細胞外間隙に存在した。本明細書で先に表される結果は、同じモデルにおける高用量イフェトロバン(ifetrobn)(25mg/kg/日)の抗線維化効果を有意にした。右室組織のトロンボスポジン-4(TSP-4)ウエスタンブロットの密度測定分析は、肺動脈結紮に続いて2週間、飲料水を介して与えられた高用量イフェトロバン(25mg/kg/日)が、抗線維化TSP-4の発現を増大した一方で、低用量イフェトロバン3mg/kg/日は増大しなかったことを実証している。
【０１３３】
考察
TP受容体拮抗作用の効果は、PAH随伴RV肥大のモデルである肺動脈の機械的収縮を有するマウスで研究された。有効な量のTP受容体拮抗薬イフェトロバンを用いた治療は、PABマウスでのRV線維症及び心筋細胞肥大を減少させ、心臓効率の1つの指標であるE/A比を増大した(E/A比は、早期(E)対後期(A)心室充填速度の比である。健全な心臓では、E速度は、A速度より大きい。特定の病態で、加齢のある場合、左室壁は、堅くなる可能性があり、それが充填したときに背圧を増大させ、早期(E)充填速度を遅くし、それによりE/A比を低下させる)。これは、抗線維化及び筋化遺伝子の増強するRV発現、並びに炎症と関連した遺伝子の発現減少、及びRVホスホ-SMAD2/3での減少に関連した。少数の差異が、イフェトロバンを受けている、偽手術を受けたマウスで見られ、イフェトロバン-介在性遺伝子発現変化が、PA結紮に特異的であることを示した。圧負荷が6週まで延長された場合、TP受容体拮抗薬を与えられたマウスは、溶媒治療PABマウスで見られた心不全の徴候から保護された:左室容積での総増加並びに駆出率及び短縮率における減少。これは、心室相互依存、中隔内反又は神経ホルモン活性化による可能性がある。
【０１３４】
TP受容体拮抗作用で見られる当初の心保護作用は、マウスの低用量アスピリン治療で繰り返されず、PABと関連した線維症が、血小板発生トロンボキサンにより介在されていないことを示唆した。心不全患者での高用量アスピリンが、死亡又は入院を減少させないため、また抗炎症効果又はサリチル酸介在NF-κB効果を混乱させることを避けるために、この低用量が選択された。TxA2の局所又はマクロファージ産生のいずれかが、このモデルで観察される心臓線維症の原因である可能性が残っている。しかし、8-イソ-PGF2αなどのイソプロスタンは、TP受容体を通してシグナル伝達することも知られており、増大されたコラーゲン産生及び線維形成効果を引き起こしうる。実際に、スーパーオキシドジスムターゼの増強又は遊離ラジカルスカベンジャーの導入を通して、酸化ストレス及びイソプロスタン発生を減少させることは、圧負荷での抗線維化心保護作用を有する可能性がある。TP受容体を通した特異的イソプロスタンシグナルか、又は構造的に類似の「TP様受容体」は、ある種のイソプロスタン作用を介在するかについてのいくつかの論争がある。組織特異的受容体複合体は、形成可能であるか、又はイフェトロバンの効果で役割を果たしうる類似の結合を有するいまだ未同定のTP様受容体があることが可能である。代わりに、イソプロスタン及びトロンボキサンに加えて、イフェトロバンの効果は、プロスタグランジンH2又は20-HETEなどのTP受容体についての別の内在性リガンドにより介在されうる。
【０１３５】
問題をさらに複雑にすることには、α及びβイソ型のTP受容体、類似のリガンド結合及びGq/G11カップリングを有するが、局在化の異なるスプライス異性体がある。両方の受容体が、イフェトロバンにより有効に遮断される。これらのイソ型のどれが、どの組織上で、圧負荷に対する反応で心臓線維症を介在するかは現在知られていない。免疫ブロッティング及びmRNA(データは示されず)の両方により、本発明者らは、全RVでの頑強なTP受容体発現を検出し、線維芽細胞又は内皮受容体の可能な寄与は、無視できないが、それは、心筋細胞でのそれの発現を示唆する。しかし、本発明者らの方法は、TPα及びTPβ発現の間で区別することができなかった。
【０１３６】
この研究で、本発明者らは、PABマウスでのRVマクロファージ数及び細胞マーカー発現に対するTP受容体阻害の効果も調べた。FACS解析により、本発明者らは、溶媒と比較したイフェトロバン治療でのみならず、PAB及び偽手術マウスの間でもなんら顕著な変化を見出さなかった。しかし、単核球系統のGFP-発現細胞を有するマウスから取られた心臓では、心筋細胞線維で十分に組み込まれた多くの単核球であるように見られ、本発明者らは、各RVから個々の単核球を完全には分離しなかった可能性がある。FACSにより、好中球を含む総CD45-発現細胞の百分率は、変化しなかったが、トランスジェニック心臓で可視化されるLysM-発現細胞は、実際には好中球であった可能性もある。
【０１３７】
PAB後2週間で、イフェトロバン治療は、PABマウスにおけるE/A波比を増大し、収縮効率の可能な増大を示した。これは、先の研究に類似し、TP受容体拮抗作用が、内毒素ショックに続くRV効率を保存することを実証する(Lambermont B, Kolh P, Ghuysen A, Segers P, Dogne JM, Tchana-Sato V, Morimont P, Benoit P, Gerard P, Masereel B及びD'Orio V. Effect of a novel thromboxane A2 inhibitor on right ventricular-arterial coupling in endotoxic shock. Shock. 2004;21:45〜51ページ)。イフェトロバン治療でのこの効率増大は、心臓線維症での減少、又はPA結紮に関連した心筋細胞肥大での減少、又はおそらくこれら2つの機構の組合せによるかどうかは知られていない。本発明者らがイフェトロバンで見出した細胞肥大減少は、マウスにおけるTP受容体活性化の既知肥大効果と一致しているが、トロンボキサン作動薬は、インビボで単離された心筋細胞の肥大を引き起こさなかったので、一致しているインビボ効果でありそうであり、心筋細胞における直接TP受容体阻害のためでない。
【０１３８】
α-MHC発現での変化なしに、TP拮抗薬-治療PABマウスでの個々の細胞肥大及びβ-MHCの併用RV発現増大の予防は、Lopezらによる先の研究(Lopez JE, Myagmar B, Swigart PM, Montgomery MD, Haynam S, Bigos M, Rodrigo MC及びSimpson PC.β-Myosin heavy chain is induced by pressure overload in a minor subpopulation of smaller mouse cardiac myocytes. Circ Res. 2011;109:629〜38ページ)に対応する。圧負荷に続く個々の心筋細胞をサイズ選別することにより、彼らは、β-MHC発現は非肥大性心筋細胞でのみ起こることを見出した;全細胞は、類似のα-MHC発現を有した。個々の細胞は、直径では増大しなかったが、イフェトロバンを与えられたPABマウスは、フルトン指数増大により立証されるとおりの溶媒治療マウスとRV重量で類似の増大を示した。結紮と組み合わせてイフェトロバンにより活性化される遺伝子の中で、細胞成長及びリプログラミングに関連した多くの遺伝子であり、TP受容体阻害は、線維化反応をも減少させながら、圧負荷に対する反応で筋化及び機能性肥大を誘発する理論が立てられる。TGFβにおける減少の背後のイフェトロバン-開始事象はまだ知られていないが、TGFβ活性減少は、おそらく部分的に線維化反応減少の原因である。
【０１３９】
PA結紮により増大され、イフェトロバン治療でさらに上方調節されるTSP-4は、TGFβ活性化を調節することは知られていないが、それ自体は、線維症及び肥大を減少させることができ、圧負荷における収縮性及び心臓適合を増加させる。TSP-4は、ERストレス反応転写因子である転写因子6α(Atf6α)を活性化することを介して、保護的小胞体(ER)ストレスシグナル伝達を誘発することにより作用すると考えられる。溶媒治療マウスでの厳密な線維化領域に対抗して、イフェトロバン-治療マウスでの心筋細胞へのTSP-4の局在化は、本発明者らのモデルで、細胞内シグナル伝達を支持する一方で、PA結紮又はTP受容体拮抗作用(データは示されず)のいずれかの後、Atf6αmRNAレベルにおける差はなかった。2週時点はmRNAでのあらゆる増加を失ったこと、又はRVストレス反応はTSP-4に対するAtf6α反応が描写されるLVモデルと異なることは全て可能である。
【０１４０】
要約すると、これらの研究は、不適応型線維症、炎症及び細胞肥大でなく、むしろ適合に右心を向けることにより、イフェトロバンが圧負荷に対して心保護的であることを実証している。右心の保護は、結局、これらのマウスにおける左心不全の予防に繋がる。
【０１４１】
前述の明細書で、本発明は、特定の例示的実施形態及びそれらの実施例に関連して記載された。しかし、それは、以下の特許請求の範囲で規定されるとおりの本発明の広範な概念及び範囲から逸脱することなく種々の改変及び変更がなされうる証拠である。本明細書は、制限的意味でなく、むしろ例示手段で考えられるべきである。
本発明は以下の発明を包含する。
（１）  治療上有効な量のトロンボキサンA2受容体拮抗薬又は薬学的に許容されるその塩を、哺乳動物に投与することを含む、治療の必要な哺乳動物において心臓線維症を治療する方法。
（２）  哺乳動物が、ヒト患者である、（1）に記載の方法。
（３）  トロンボキサンA2受容体拮抗薬が、哺乳動物に対する[1S-(1α,2α,3α,4α)]-2-[[3-[4-[(ペンチルアミノ)カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプタ-2-イル]メチル]-ベンゼンプロパン酸(イフェトロバン)又は薬学的に許容されるその塩である、（1）に記載の方法。
（４）  治療上有効な量のイフェトロバンが、哺乳動物における線維症組織の形成の速度を減少させる、（3）に記載の方法。
（５）  イフェトロバンが、約1ng/mlから約10,000ng/mlのイフェトロバンの血漿中濃度を提供するために有効な量で投与される、（3）に記載の方法。
（６）  トロンボキサンA2受容体拮抗薬が、約1ng/mlから約100,000ng/mlの血漿中濃度を提供するために有効な量で投与される、（3）に記載の方法。
（７）  治療上有効な量が、1日当たり約10mgから約1000mgである、（3）に記載の方法。
（８）  イフェトロバンが、経口、鼻腔内、直腸、膣、舌下、頬側、非経口、又は経皮で投与される、（7）に記載の方法。
（９）  治療上有効な量のイフェトロバンが、ヒト患者における心筋線維症の進行を遅延させる、（7）に記載の方法。
（１０）  治療上有効な量のイフェトロバンが、ヒト患者における運動能力を改善する、（7）に記載の方法。
（１１）  治療上有効な量のイフェトロバンが、ヒト患者におけるRV線維症を減少させる、（7）に記載の方法。
（１２）  治療上有効な量のイフェトロバンが、ヒト患者における心筋細胞肥大を減少させる、（7）に記載の方法。
（１３）  治療上有効な量のイフェトロバンが、ヒト患者におけるE/A比を増大させる、（7）に記載の方法。
（１４）  治療上有効な量のイフェトロバンが、右室駆出率(RVEF)、左室駆出率(LVEF)、肺動態、右室収縮期圧(RVSP)、左室収縮期機能(LVSF)、右室拡張期機能(RVDF)及び左室拡張期機能(LVDF)からなる群から選択される機能を改善する又は維持する、（7）に記載の方法。
（１５）  治療上有効な量のイフェトロバンが、ヒト患者における心筋細胞直径を増大させる、（14）に記載の方法。
（１６）  治療上有効な量のイフェトロバンが、右心を、不適応型線維症、炎症及び細胞肥大でなく、むしろ適応に向けることにより、圧負荷に対して心保護的である、（15）に記載の方法。
（１７）  治療上有効な量のイフェトロバンが、ヒト患者における左心不全を軽減する、（16）に記載の方法。
（１８）  トロンボキサンA2受容体拮抗薬又は薬学的に許容されるその塩を含む医薬組成物であって、トロンボキサンA2受容体拮抗薬が、必要とする哺乳動物における右室駆出率(RVEF)、左室駆出率(LVEF)、肺動態、右室収縮期圧(RVSP)、左室収縮期機能(LVSF)、右室拡張期機能(RVDF)及び左室拡張期機能(LVDF)からなる群から選択される機能を改善又は維持するために有効な量である、医薬組成物。
（１９）  トロンボキサンA2受容体拮抗薬が、イフェトロバン又は薬学的に許容されるその塩である、（18）に記載の医薬組成物。
（２０）  イフェトロバン塩が、イフェトロバンナトリウムである、（19）に記載の医薬組成物。
（２１）  治療上有効な量が、1日当たり約10mgから約1000mgである、（20）に記載の医薬組成物。
（２２）  経口固体剤形である、（21）に記載の医薬組成物。