(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
それを必要とする被験体における、前記被験体にとってインスリンの投与が有益であろう病態又は疾患を治療するための、少なくとも第１のインスリン様化合物及び第２のインスリン様化合物を含む組合せであって；
前記組合せが、前記被験体に対する１日の最大の食事での前記組合せの投与後における、前記被験体におけるＨｂＡ１ｃのレベルによって決定される、前記被験体における有益な血糖制御を達成する量で投与され；
前記組合せによる前記有益な血糖制御が、前記被験体に対するＩＧｌａｒの投与後における、前記被験体におけるＨｂＡ１ｃのレベルによって決定される、前記被験体における同等の用量のＩＧｌａｒによって達成される血糖制御よりも優れており、及び／又は、前記組合せによる前記有益な血糖制御が、１日の最大の食事での前記組合せの投与後に、前記被験体におけるＨｂＡ１ｃのレベルを、７以下まで減少させることを含み；
前記第１のインスリン様化合物が、前記第２のインスリン様化合物よりも長時間作用型であり；
前記組合せが、前記被験体に対する１日の最大の食事で投与され、
前記第１のインスリン様化合物が、ＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンであり、前記第２のインスリン様化合物が、ＡｓｐＢ２８ヒトインスリンである、
組合せ。
【請求項２】
「最大の食事で」が、前記食事中に、並びに、前記食事の最初の食物摂取の最大で３０分前に、及び、前記食事の最後の食物摂取の最大で３０分後に、を含む又はそれらからなる、請求項１に記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【請求項３】
前記組合せが、同等の用量のＩＧｌａｒと比較して、前記被験体に、より少ない全低血糖を引き起こすことが可能である、請求項１又は２に記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【請求項４】
前記組合せが、前記被験体に１日１回投与される、請求項１〜３のいずれか１項に記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【請求項５】
前記被験体が、真性糖尿病、又は高血糖を特徴とする他の病態、前糖尿病、耐糖能障害、メタボリック症候群、肥満症、悪液質、インビボのβ−細胞消失／死、食欲過多及び炎症からなる群から選択される疾患又は病態に罹患している、請求項１〜４のいずれか１項に記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【請求項６】
前記被験体が、ＩＩ型糖尿病に罹患している、請求項１〜５のいずれか１項に記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【請求項７】
前記第１のインスリン様化合物が、前記第２のインスリン様化合物よりも多い量で、前記組合せ中に存在する、請求項１〜６のいずれか１項に記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【請求項８】
前記組合せによる前記有益な血糖制御が、前記被験体に対するＩＧｌａｒの投与後における、前記被験体におけるＨｂＡ１ｃのレベルによって決定される、前記被験体における同等の用量のＩＧｌａｒによって達成される血糖制御よりも優れており；前記組合せによる前記有益な血糖制御が、１日の最大の食事での前記組合せの投与後に、前記被験体におけるＨｂＡ１ｃのレベルを、７以下まで減少させることを含む、請求項１〜７のいずれか１項に記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【請求項９】
前記組合せによる前記有益な血糖制御が、２６週間の期間にわたる１日の最大の食事での前記組合せの投与後に、前記被験体におけるＨｂＡ１ｃのレベルを、７以下まで減少させることを含む、請求項１〜８のいずれか１項に記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、医薬組成物及び新規な投与スキームに関する。
【０００２】
本発明は、真性糖尿病及び高血糖等の病態の、特にインスリン依存性真性糖尿病の治療において有用である。
【背景技術】
【０００３】
真性糖尿病（Diabetes mellitus）は、適切な代謝制御（主に血糖制御を含むが、他の代謝パラメータも、インスリン治療の利益を享受する）を確立するために、インスリン治療を必要とすることが多い。インスリン治療の確立された実務は、入手可能な治療指針に記載されるように、任意で他の治療様式と組み合わせて、インスリン製品を１日当たり１回又は複数回投与することである。静脈内及び皮下のインスリン注入も、臨床実務において使用される。
【０００４】
広く使用されるインスリン治療の選択肢の１つは、患者のインスリンの必要性を全体的に又は部分的にカバーするために、基礎インスリンとも称される、長時間作用型インスリン製品を投与することである。長時間作用型インスリンは、１日当たり１回又は複数回、毎日同じ時間に投与され、１型糖尿病及び２型糖尿病の両方に対して、並びに他の形態のインスリン要求性疾患状態（いずれかの原因の高血糖）に対して使用される。
【０００５】
現在のところ、１型糖尿病及び２型糖尿病の両方の糖尿病の治療は、いわゆる集中インスリン治療にますます依存するようになっている。この計画によれば、患者は、食事に関連するインスリン要求をカバーするための急速作用型インスリンのボーラス注射によって補われる、基礎インスリン要求をカバーするために、毎日同じ時間に与えられる、１日１回又は２回の長時間作用型インスリンの注射を含む、１日複数回のインスリン注射を用いて治療される。
【０００６】
糖尿病及び高血糖の管理における現在の実務は、例えば以下に示される：
IDF Clinical Guidelines Task Force. Guideline for Management of PostMeal Glucose. Brussels: International Diabetes Federation, 2007, http://www.idf.org/webdata/docs/Guideline_PMG_final.pdf
S. E. Inzucchi, R. M. Bergenstal, J. B. Buse, M. Diamant, E. Ferrannini, M. Nauck, A. L. Peters, A. Tsapas, R. Wender, and D. R. Matthews. Management of Hyperglycemia in Type 2 Diabetes: A Patient-Centered Approach: Position Statement of the American Diabetes Association (ADA) and the European Association for the Study of Diabetes (EASD). Diabetes care, 2012。
【０００７】
基礎インスリン類似体並びにそれらの特徴及び現在の臨床使用に関する概説は、例えば、以下に見出すことができる：
T. Heise and T. R. Pieber. Towards peakless, reproducible and long-acting insulins. An assessment of the basal analogues based on isoglycaemic clamp studies. Diabetes Obes Metab 9 (5):648-659, 2007, and
A. H. Barnett. A review of basal insulins. Diabet Med 20 (11):873-885, 2003。
【０００８】
ヒトインスリンは、３つの第一級アミノ基を有する：Ａ鎖のＮ末端基及びＢ鎖のＮ末端基、並びにＬｙｓＢ２９のε−アミノ基。これらの基の１つ又は複数において置換される複数のインスリン誘導体が、従来技術において知られる。
【０００９】
加えて、長時間作用型インスリン組成物が、当該技術分野において知られる。長時間作用型インスリン組成物の１つの主要な種類は、インスリン結晶又は非晶質インスリンの注射可能な水性懸濁物を含む。これらの組成物において、典型的に利用されるインスリン化合物は、プロタミンインスリン、亜鉛インスリン又はプロタミン亜鉛インスリンである。
【００１０】
ＷＯ２００５／０１２３４７（Novo Nordisk A/S）は、ＷＯ９５／０７９３１に開示されるアシル化インスリンと比較して、さらなる負電荷を含むアシル化インスリン誘導体を開示する。これらのアシル化インスリンの薬学的配合物は、ヘキサマーインスリン１つ当たり２、３又は４つの亜鉛原子として与えられる。
【００１１】
ＷＯ２０１０／０４９４８８は、有効投与量のインスリン誘導体をそれを必要とする患者に投与することを含む、インスリンの投与が有益であろう病態又は疾患の治療のためのインスリン誘導体であって、前記インスリン誘導体が、長期的な作用プロファイルを示し、前記投与量が、２４時間よりも長い間隔で投与される、インスリン誘導体を開示する。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１２】
【特許文献１】ＷＯ２００５／０１２３４７
【特許文献２】ＷＯ９５／０７９３１
【特許文献３】ＷＯ２０１０／０４９４８８
【非特許文献】
【００１３】
【非特許文献１】IDF Clinical Guidelines Task Force. Guideline for Management of PostMeal Glucose. Brussels: International Diabetes Federation, 2007, http://www.idf.org/webdata/docs/Guideline_PMG_final.pdf
【非特許文献２】S. E. Inzucchi, R. M. Bergenstal, J. B. Buse, M. Diamant, E. Ferrannini, M. Nauck, A. L. Peters, A. Tsapas, R. Wender, and D. R. Matthews. Management of Hyperglycemia in Type 2 Diabetes: A Patient-Centered Approach: Position Statement of the American Diabetes Association (ADA) and the European Association for the Study of Diabetes (EASD). Diabetes care, 2012
【非特許文献３】T. Heise and T. R. Pieber. Towards peakless, reproducible and long-acting insulins. An assessment of the basal analogues based on isoglycaemic clamp studies. Diabetes Obes Metab 9 (5):648-659, 2007
【非特許文献４】A. H. Barnett. A review of basal insulins. Diabet Med 20 (11):873-885, 2003
【発明の概要】
【００１４】
本発明の説明
本発明は、１日における特定の事象で様々に作用するインスリン様化合物を含む薬学的組合せの投与によって、インスリンの投与が有益であろう病態又は疾患、例えば糖尿病又は高血糖を治療することが可能であるという驚くべき知見に基づく。これに関して、前記組合せは、前記被験体に対する１日の最大の食事で投与される。
【００１５】
本発明によれば、前記組合せは、少なくとも第１のインスリン様化合物及び第２のインスリン様化合物を含む。
【００１６】
「インスリン様化合物」という用語は、天然に存在するインスリン、インスリン類似体、インスリン誘導体及びインスリン模倣物（mimetics）を含む。インスリン様化合物は、「インスリン化合物」等と称されることがある。
【００１７】
本発明によれば、前記第１のインスリン様化合物は、前記第２のインスリン様化合物よりも長時間作用型である。これに関して、前記第１のインスリン様化合物は、前記第２のインスリン様化合物よりも長いインスリン作用を有する。
【００１８】
本発明によれば、前記組合せは、前記被験体における有益な血糖制御を達成する量で投与される。
【００１９】
本発明によれば、前記被験体における有益な血糖制御が、少なくとも、前記被験体に対する１日の最大の食事での前記組合せの投与後における、前記被験体におけるＨｂＡ１ｃ（グリコシル化ヘモグロビン）のレベルによって決定される。
【００２０】
「前記被験体に対する１日の最大の食事での前記組合せの投与（administration of said combination at the largest meal of the day for said subject）」という用語は、前記組合せが、２日以上の期間にわたって、１日の最大の食事中に（during）又は１日の最大の食事の前後に（around）、典型的には、１日の最大の食事の少し前、例えば約３０分前から、又は１日の最大の食事の少し後、例えば約３０分後までに、投与されることを意味する。本明細書で使用される場合、１日の最大の食事「で（at）」、「とともに（with）」又は「に関して（in relation to）」は、その食事「中に」それ自体、並びに、前記食事の少し前及び少し後に、例えば、前記食事の最初の食物摂取の最大で約３０分前に、及び最後の食物摂取の最大で約３０分後に、を等しく含む。
【００２１】
換言すればまた例示すれば、前記組合せは、少なくとも約１週間、又は少なくとも約２週間、又は少なくとも約３週間、又は少なくとも約４週間、又は少なくとも約５週間、又は少なくとも約６週間、又は少なくとも約７週間、又は少なくとも約８週間、又は少なくとも約９週間、又は少なくとも約１０週間、又は少なくとも約１５週間、又は少なくとも約２０週間、又は少なくとも約２５週間の期間、又はさらにより長い期間にわたって、毎日（又は、少なくとも実質的に毎日）、１日の最大の食事中に又は１日の最大の食事の前後に（典型的には、１日の最大の食事の少し前、例えば約３０分前から、又は１日の最大の食事の少し後、例えば約３０分後までに）、投与される。
【００２２】
一態様では、１日の最大の食事は、前記患者によって決定される。一態様では、前記患者は、どの食事が１日の最大の食事であるかを決定することを指示される。１日の最大の食事は、各患者に対して、必ずしも同じ食事ではない、すなわち、必ずしも１日の同じ時間での食事ではない。それは、患者毎に、例えば、患者の生活様式、文化、時間的制約、例えば仕事等による時間的制約に応じて、変化し得る。或る患者に対しては、１日の最大の食事は、必ずしも毎日同じ食事ではない、すなわち、必ずしも毎日１日の同じ時間での食事ではない。それは、日毎に変化し得る。
【００２３】
本発明によれば、ＨｂＡ１ｃレベルは、重要な標的である。現在までに、インスリンの投与が有益であろうそれを必要とする被験体における病態又は疾患、例えば１型糖尿病、２型糖尿病に罹患している患者、及び他の形態のインスリン要求性疾患状態（いずれかの原因の高血糖）を有する患者におけるＨｂＡ１ｃのレベルの改善を達成することは困難であることが証明されている。
【００２４】
本発明の組合せの使用によって、インスリンの投与が有益であろうそれを必要とする被験体における病態又は疾患、例えば １型糖尿病、２型糖尿病に罹患している患者、及び他の形態のインスリン要求性疾患状態（いずれかの原因の高血糖）を有する患者におけるＨｂＡ１ｃのレベルの改善を達成することが可能である。これは、重要な知見であり、このような病態又は疾患の治療における多大なる治療的価値を有する。
【００２５】
したがって、本発明による少なくとも第１のインスリン様化合物及び第２のインスリン様化合物を含む組合せを、それを必要とする被験体における、前記被験体にとってインスリンの投与が有益であろう病態又は疾患を治療するために、使用することができる。したがって、本発明の使用又は方法に対する主要な標的である疾患及び病態は、真性糖尿病（１型又は２型）又は高血糖を特徴とする他の病態であり、また包括的に、インスリンの代謝効果が臨床上重要性を有する代謝性疾患及び病態、例えば前糖尿病、耐糖能障害、メタボリック症候群、肥満症、悪液質、インビボのβ−細胞消失／死、食欲過多及び炎症にも関心が持たれる。全てのこれらの種類の病態は、疾患／病態を有する被験体における安定な代謝状態から利益を受けることが知られる又は考えられている。
【００２６】
したがって、インスリン又はインスリン化合物の投与が含まれるいずれかの治療計画を、本発明を実施することによって、修正することができる。
【００２７】
一態様では、前記組合せによる有益な血糖制御は、前記被験体に対するＩＧｌａｒの投与後における、前記被験体におけるＨｂＡ１ｃのレベルによって決定されるような、前記被験体における同等の用量のＩＧｌａｒによって達成される、いずれかの血糖制御よりも優れている。
【００２８】
「前記組合せが、前記被験体に対するＩＧｌａｒの投与後における、前記被験体におけるＨｂＡ１ｃのレベルによって決定されるような、前記被験体における同等の用量のＩＧｌａｒによって達成される、いずれかの血糖制御よりも優れている」という用語は、前記組合せが、前記組合せ又はＩＧｌａｒのいずれかの投与後における、前記被験体におけるＨｂＡ１ｃのレベルによって決定されるような、より良好な血糖制御を達成する上で、ＩＧｌａｒの表示に従う投与計画下における、同等の用量のＩＧｌａｒよりも優れていることを意味する。
【００２９】
ＩＧｌａｒ（インスリングラルギン）は、商品名Ｌａｎｔｕｓ（登録商標）で、Sanofi Aventis社によって市販される基礎インスリンである。Ｌａｎｔｕｓの容器内の説明書によれば、ＩＧｌａｒは、１日１回、毎日同じ時間に、与えられるべきである。
【００３０】
一態様では、前記組合せによる有益な血糖制御は、１日の最大の食事での前記組合せの投与後に、前記被験体におけるＨｂＡ１ｃのレベルを、約７以下まで減少させることを含む。前記被験体におけるＨｂＡ１ｃのレベルの約７への減少は、約２６週間又はさらに短い期間で、達成することができる。
【００３１】
一態様では、前記組合せによる有益な血糖制御は、前記被験体に対するＩＧｌａｒの投与後における、前記被験体におけるＨｂＡ１ｃのレベルによって決定されるような、前記被験体における同等の用量のＩＧｌａｒによって達成される、いずれかの血糖制御よりも優れていること、及び、１日の最大の食事での前記組合せの投与後に、前記被験体におけるＨｂＡ１ｃのレベルを、約７以下まで減少させることを含むことの両方と定義される。
【００３２】
ＨｂＡ１ｃのレベルに対して有益な効果を有することに加えて、本発明の組合せは、血中グルコースのレベルに対する有益な効果も有し得る。
【００３３】
本発明の組合せは、前記被験体に対する１日の最大の食事で投与される。これは、本発明の組合せが、前記被験体に対する１日の最大の食事とともに、又は前記被験体に対する１日の最大の食事と同じ時間の前後に、典型的には、前記被験体に対する１日の最大の食事の少し前、例えば約３０分前から、又は前記被験体に対する１日の最大の食事の少し後、例えば約３０分後までに、投与されることを意味する。
【００３４】
本発明の組合せが、被験体に柔軟性を提供しながら、有益な血糖制御を達成することが有利である。多数の利点が、このような柔軟な治療計画から直接得られる。
【００３５】
例えば、柔軟な投与が可能であることによって、患者にとっての利便性が、改善される。例えば、患者は、固定された時点での投与に左右されるのではなく、その投与を、自身の生活様式に適合させることができ、このことは、目的の注射時間より早くもしくは遅く或る用量が投与される服薬不遵守（incompliance）もしくは注意散漫（distraction）の場合に；前記患者が、例えば、旅行中である、幼児もしくは十代の若者である、スポーツを行っている、もしくは交代勤務労働者である場合に；または、いずれかの他の理由で不規則な生活様式を有する場合に、もしくは日常の業務における不規則性が生じるもしくはこれを避けることができない者に対して、有利であり得る。柔軟な投与が有利である別の例は、前記患者が老人ホームで生活している場合、またはそうでなくとも前記患者がインスリン化合物の支援投与に依存している場合である。改善された利便性は、患者の服薬遵守性を改善し、最終的に前記患者の長期的な予後を改善する可能性がある。
【００３６】
患者は、毎日同じ時間に注射しなければならない基礎インスリン、例えばＩＧｌａｒの使用と比較して、さらなる柔軟性を有する。
【００３７】
したがって、我々は、驚くべきことに、有益な血糖制御（本明細書において規定されるような）を、本発明の組合せを、最大の食事中に又は最大の食事の時間の前後に、典型的には、最大の食事の時間の少し前、例えば約３０分前から、又は最大の食事の時間の少し後、例えば約３０分後までに、投与することによって、達成することができることを見出した。
【００３８】
本明細書において提示される我々の実験的研究において、ＩＤｅｇＡｓｐが、２型糖尿病を有する患者に、１日の最大の食事で、投与された。本明細書において提示される結果は、無作為化対照第３相試験から得られた。実施例の節において、食事時間及び基礎インスリンカバレッジの両方をもたらすＩＤｅｇＡｓｐの組合せ（超長時間作用型インスリンデグルデク（degludec）（７０％）及びインスリンアスパルト（aspart）（３０％）の可溶性の組合せ）に関するデータが提供される。この２６週間非盲検標的指向治療（treat-to-target）試験は、２型糖尿病を有するインスリンナイーブ被験体におけるＩＤｅｇＡｓｐの有効性及び安全性を調査した。これらの研究において、参加者（平均：６０．５歳；Ａ１Ｃ  ８．４％；ＦＰＧ  １６２ｍｇ／ｄＬ；ＢＭＩ  ２５．１ｋｇ／ｍ２；糖尿病の期間  １１．７年）が、両方とも最大で±２つのＯＡＤ（ＳＵ、ＤＰＰ−４阻害剤及びグリニドを除く）の、ＩＤｅｇＡｓｐ（ｎ＝１４７）又はインスリングラルギン（ＩＧｌａｒ；ｎ＝１４９）の１日１回（ＯＤ）注射へと無作為化された。ＩＤｅｇＡｓｐは、各参加者の自由裁量で（及び試験全体を通じて維持されて）、１日の最大の食事の前に、与えられた；ＩＧｌａｒは、表示に従って投与された。両方のインスリンが、ＦＰＧ＜９０ｍｇ／ｄＬへと滴定された（titrated）。２６週間後、平均ＨｂＡ１Ｃは、ＩＤｅｇＡｓｐを用いた場合７．０％であり、ＩＧｌａｒを用いた場合７．３％であった。ＩＧｌａｒに対するＩＤｅｇＡｓｐの優位性が、実証された（推定治療差（estimated treatment difference）（ＥＴＤ）ＩＤｅｇＡｓｐ−ＩＧｌａｒ：−０．２８％ポイント［−０．４６；−０．１０］、ｐ＜０．００１）。平均ＦＰＧは、ＩＤｅｇＡｓｐ及びＩＧｌａｒで類似していた（１０３対１００ｍｇ／ｄＬ；ＥＴＤ  ＩＤｅｇＡｓｐ−ＩＧｌａｒ：２．７ｍｇ／ｄＬ［−５．２；１０．８］、ｐ＝ＮＳ）。確認低血糖（Confirmed hypoglycemia）（ＰＧ＜５６ｍｇ／ｄＬ）が、両群における被験体の４４％において報告された。また、ＩＤｅｇＡｓｐは、ＩＧｌａｒに対して、数値としてより低い割合の全確認低血糖（２７％）及び夜間確認低血糖（２５％）と関連した（推定割合比（estimated rate ratio）ＩＤｅｇＡｓｐ／ＩＧｌａｒ：それぞれ、０．７３［０．５０；１．０８］、ｐ＝ＮＳ、及び０．７５［０．３４；１．６４］、ｐ＝ＮＳ）。ベースラインからの体重の増大（両群０．７ｋｇ）と同様、平均１日インスリン用量は、試験終了時において、群間で類似していた（ＩＤｅｇＡｓｐ：０．４１Ｕ／ｋｇ；ＩＧｌａｒ：０．４１Ｕ／ｋｇ）。有害事象の全体割合は、群間で類似しており、治療特異的なパターン又はクラスター形成を伴わなかった。結論として、結果は、１日の最大の食事とともに１日１回投与されるＩＤｅｇＡｓｐが、ＩＧｌａｒに対して、類似のＦＰＧとともに優れた長期間の血糖制御をもたらし、全低血糖及び夜間低血糖の割合が数値としてより低かったことを示す。したがって、要約すると、ＩＤｅｇＡｓｐの１日１回投与は、２型糖尿病を有する被験体において、ＩＧｌａｒよりも優れている。
【００３９】
したがって、本明細書において提示される我々の実験的研究において、我々は、ＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン及びＩＡｓｐの組合せが、最大の食事とともに与えられる場合、ＨｂＡ１ｃの有益なレベルをもたらし、このレベルは、ＩＧｌａｒの投与によって達成されるレベル（データは示していない）よりも優れていたことを見出した。
【００４０】
我々の結果は、Strojek et al (2009) Current Medical Research & Opinion vol 25 pages 2887 to 2894の知見を考慮すると、驚くべきものである。ここで、著者らは、経口薬剤では十分に制御されない、２型糖尿病を有する患者において、二相型インスリンアスパルト３０対ＩＧｌａｒを用いる、１日１回の開始（initiation）を研究した。治療の終了時に、著者らは、平均ＨｂＡ１ｃレベルが、ＢＩＡｓｐ３０及びインスリングラルギンに関して、それぞれ、７．１％及び７．３％であることを見出した。著者らは、夜間低血糖エピソード（００：００〜０６．００ａ．ｍ．）を経験する相対リスク（ＲＲ）が、ＢＩＡｓｐ３０を用いた場合、インスリングラルギンを用いた場合よりも有意に高い（１．１対０．５エピソード／年、ＲＲ１／４  ２．４１、９５％ＣＩ［１．３４；４．３４］、ｐ１／４  ０．００３）ことも見出した。著者らは、各群における３つの主要な低血糖エピソードについても報告した。
【００４１】
我々は、我々のバックグラウンド研究において、ＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン及びＩＡｓｐの組合せが、最大の食事ではない食事、例えば朝食とともに与えられた場合、ＩＧｌａｒの投与によって達成されるレベル（データは示していない）と同等のＨｂＡ１ｃのレベルをもたらすことを見出したため、我々の知見は驚くべきものである。
【００４２】
糖尿病
「糖尿病（diabetes）」又は「真性糖尿病（diabetes mellitus）」という用語は、１型糖尿病、２型糖尿病、妊娠性糖尿病（妊娠中）、及び高血糖を引き起こす他の状態を含む。この用語は、膵臓が十分な量のインスリンを産生しない、又は、身体の細胞がインスリンに適切に応答することができないため、細胞がグルコースを吸収することができない、代謝障害に対して、使用される。結果として、グルコースの血液中濃度が増大する。
【００４３】
インスリン依存性真性糖尿病（ＩＤＤＭ）及び若年発症糖尿病とも称される１型糖尿病は、Ｂ細胞の破壊によって引き起こされ、通常、絶対的なインスリン欠乏を引き起こす。
【００４４】
非インスリン依存性真性糖尿病（ＮＩＤＤＭ）及び成人発症糖尿病としても知られる２型糖尿病は、支配的（predominant）インスリン抵抗性、及びしたがって相対的なインスリン欠乏及び／又はインスリン抵抗性を伴う支配的インスリン分泌欠損と関連する。
【００４５】
他の適応症
一実施形態では、本発明による組合せは、高血糖、例えばストレス誘発性高血糖、２型糖尿病、耐糖能障害、１型糖尿病、熱傷、手術創、治療において同化効果が必要とされる他の疾患又は傷害、心筋梗塞、脳卒中、冠動脈心疾患、他の循環器系障害の治療又は予防、危篤状態の糖尿病患者及び非糖尿病患者並びに多発性ニューロパチーの治療のための薬物の調製のために使用される。
【００４６】
別の実施形態では、本発明による組合せは、２型糖尿病における疾患の進行を遅延させる又は予防するための薬物として使用される。
【００４７】
本発明の一実施形態では、本発明による組合せは、高血糖、例えばストレス誘発性高血糖、２型糖尿病、耐糖能障害、１型糖尿病、及び熱傷、手術創、及び治療において同化効果が必要とされる他の疾患又は傷害、心筋梗塞、脳卒中、冠動脈心疾患、及び他の循環器系障害の治療又は予防のための薬物としての使用のためのものである。
【００４８】
さらなる実施形態では、本発明は、高血糖、例えばストレス誘発性高血糖、２型糖尿病、耐糖能障害、１型糖尿病、及び熱傷、手術創、及び治療において同化効果が必要とされる他の疾患又は傷害、心筋梗塞、冠動脈心疾患、及び他の循環器系障害、脳卒中の治療又は予防のための方法であって、このような治療のための有効量の本発明による組合せを、このような治療を必要とする患者に投与することを含む、方法に関する。
【００４９】
具体的な組合せ治療
本発明による組合せによる治療は、例えば、抗糖尿病剤、抗肥満症剤、食欲調節剤、降圧剤、糖尿病から生じる又はこれと関連する合併症の治療及び／又は予防のための作用剤、並びに肥満症から生じる又はこれと関連する合併症及び障害の治療及び／又は予防のための作用剤から選択される、第２の又はさらなる薬理学的活性物質と組み合わせることもできる。
【００５０】
本発明による組合せの成分は、同時に又は順番に投与することができる。要素は、両方の化合物を含有する単一の投与形態で、又は、本発明による組合せの或る製剤を第１の単位投与形態として、及び、本発明による組合せの或る製剤を第２の単位投与形態として含むキット・オブ・パーツの形態で、供給することができる。本明細書全体を通じて第１又は第２又は第３等の単位用量に言及する場合はいつでも、これは、好ましい投与順序を表しておらず、便宜上の目的で言及するにすぎない。
【００５１】
本発明による組合せの製剤の「同時（simultaneous）」の投与は、単一の投与形態での化合物の投与、又は、１５分以下、好ましくは１０分、より好ましくは５分、より好ましくは２分のタイムセパレーションでの第１の作用剤の投与及びその後の第２の作用剤の投与を意味する。いずれの要素を最初に投与してもよい。
【００５２】
「順番（sequential）」の投与は、１５分を超えるタイムセパレーションでの第１の作用剤の投与及びその後の第２の作用剤の投与を意味する。２つの単位投与形態のいずれを最初に投与してもよい。好ましくは、両方の物が、同じ静脈内経路を介して注射される。
【００５３】
好ましくは、本発明による組合せは、同じ配合物中に、すなわち同じ組成物中に、第１のインスリン様化合物及び第２のインスリン様化合物を含む。
【００５４】
インスリン
「ヒトインスリン」という用語は、本明細書で使用される場合、その構造及び特性が周知である、ヒトインスリンホルモンを意味する。ヒトインスリンは、Ａ鎖及びＢ鎖と称される２つのポリペプチド鎖を有する。Ａ鎖は、２１アミノ酸のペプチドであり、Ｂ鎖は、３０アミノ酸のペプチドであり、この２鎖が、以下のジスルフィド架橋によって接続される：Ａ鎖の７位におけるシステインとＢ鎖の７位におけるシステインとの間の第１の架橋、及びＡ鎖の２０位におけるシステインとＢ鎖の１９位におけるシステインとの間の第２の架橋。第３の架橋は、Ａ鎖の６位及び１１位におけるシステインの間に存在する。
【００５５】
ヒトの身体において、前記ホルモンは、その配置中に２４アミノ酸のプレペプチド及びそれに引き続く８６アミノ酸を含有するプロインスリンからなる、一本鎖前駆体プロインスリン（プレプロインスリン）：プレペプチド−Ｂ−Ａｒｇ  Ａｒｇ−Ｃ−Ｌｙｓ  Ａｒｇ−Ａ（式中、Ｃは、３１アミノ酸の接続ペプチドである）として合成される。Ａｒｇ−Ａｒｇ及びＬｙｓ−Ａｒｇは、Ａ鎖及びＢ鎖からの接続ペプチドの切断のための切断部位である。
【００５６】
本発明による「インスリン」は、本明細書において、ヒトインスリン、又は別の種由来のインスリン、例えばブタインスリン若しくはウシインスリンと理解すべきである。
【００５７】
「インスリンペプチド」という用語は、本明細書で使用される場合、ヒトインスリン、又はインスリン活性を有するその類似体若しくは誘導体のいずれかであるペプチドを意味する。
【００５８】
「親インスリン」という用語は、本明細書で使用される場合、それに対していずれかの変更（modifications）が適用される前のインスリンを意味することを意図する。
【００５９】
インスリン類似体
「インスリン類似体」という用語は、本明細書で使用される場合、変更されたヒトインスリンであって、インスリンの１つ若しくは複数のアミノ酸残基が、他のアミノ酸残基によって置換されている、並びに／又は、１つ若しくは複数のアミノ酸残基が、インスリンから欠失している、並びに／又は、１つ若しくは複数のアミノ酸残基が、インスリンに付加されている及び／若しくは挿入されている、変更されたヒトインスリンを意味する。
【００６０】
一実施形態では、インスリン類似体は、ヒトインスリンに対して、１０未満のアミノ酸変更（置換、欠失、付加（挿入を含む）、及びそれらの任意の組合せ）、代替的には、ヒトインスリンに対して、９未満、８、７、６、５、４、３、２又は１の変更を含む。
【００６１】
インスリン分子中の変更は、未変更の（native）アミノ酸残基を置換するアミノ酸残基に関して、鎖（Ａ又はＢ）、位置及び１文字コード又は３文字コードを示して、表示される。
【００６２】
「ｄｅｓＢ３０」又は「Ｂ（１−２９）」は、Ｂ３０アミノ酸を欠く天然インスリンＢ鎖又はその類似体を意味し、「Ａ（１−２１）」は、天然インスリンＡ鎖を意味する。したがって、例えば、Ａ２１Ｇｌｙ，Ｂ２８Ａｓｐ，ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンは、Ａ鎖の２１位におけるアミノ酸がグリシンで置換され、Ｂ鎖の２８位におけるアミノ酸がアスパラギン酸で置換され、Ｂ鎖の３０位におけるアミノ酸が欠失する、ヒトインスリンの類似体である。
【００６３】
本明細書において、「Ａ１」、「Ａ２」及び「Ａ３」 等のような用語は、それぞれ、インスリンのＡ鎖における（Ｎ末端から数えて）１位、２位及び３位等におけるアミノ酸を示す。同様に、Ｂ１、Ｂ２及び等のような用語は、それぞれ、インスリンのＢ鎖における（Ｎ末端から数えて）１位、２位及び３位等におけるアミノ酸を示す。アミノ酸について１文字コードを使用すると、Ａ２１Ａ、Ａ２１Ｇ及びＡ２１Ｑのような用語は、Ａ２１位におけるアミノ酸が、それぞれ、Ａ、Ｇ及びＱであることを指定する。アミノ酸について３文字コードを使用すると、対応する表現は、それぞれ、Ａ２１Ａｌａ、Ａ２１Ｇｌｙ及びＡ２１Ｇｌｎである。
【００６４】
本明細書において、「Ａ（０）」又は「Ｂ（０）」という用語は、それぞれ、Ａ１又はＢ１に対してＮ末端側にあるアミノ酸の位置を示す。Ａ（−１）又はＢ（−１）という用語は、それぞれ、Ａ（０）又はＢ（０）に対してＮ末端側にある最初のアミノ酸の位置を示す。したがって、Ａ（−２）及びＢ（−２）は、それぞれ、Ａ（−１）及びＢ（−１）に対してＮ末端側にあるアミノ酸の位置を示し、Ａ（−３）及びＢ（−３）は、それぞれ、Ａ（−２）及びＢ（−２）に対してＮ末端側にあるアミノ酸の位置を示す、等となる。Ａ２２又はＢ３１という用語は、それぞれ、Ａ２１又はＢ３０に対してＣ末端側にあるアミノ酸の位置を示す。Ａ２３又はＢ３２という用語は、それぞれ、Ａ２２又はＢ３１に対してＣ末端側にある最初のアミノ酸の位置を示す。したがって、Ａ２４及びＢ３３は、それぞれ、Ａ２３及びＢ３２に対してＣ末端側にあるアミノ酸の位置を示す 、等となる。
【００６５】
本明細書において、「アミノ酸残基」という用語は、形式的に、カルボキシ基からヒドロキシ基が除去されたアミノ酸、及び／又は、形式的に、アミノ基から水素原子が除去されたアミノ酸である。
【００６６】
インスリン類似体の例は、Ｂ鎖の２８位におけるＰｒｏが、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ若しくはＡｌａで置換され、及び／又は、Ｂ２９位のＬｙｓが、Ｐｒｏ、Ｇｌｕ若しくはＡｓｐで置換される、というようなものである。さらに、Ｂ３位のＡｓｎが、Ｔｈｒ、Ｌｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ又はＡｓｐで置換されてもよい。Ａ２１位のアミノ酸残基が、Ｇｌｙで置換されてもよい。また、１つ又は複数のアミノ酸、例えばＬｙｓ等が、Ａ鎖及び／又はＢ鎖のＣ末端に付加されてもよい。Ｂ１位のアミノ酸が、Ｇｌｕで置換されてもよい。Ｂ１６位のアミノ酸が、Ｇｌｕ又はＨｉｓで置換されてもよい。インスリン類似体のさらなる例は、欠失類似体、例えば、ヒトインスリンのＢ３０アミノ酸が欠失している類似体（ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン）、ヒトインスリンのＢ１アミノ酸が欠失しているインスリン類似体（ｄｅｓ（Ｂ１）ヒトインスリン）、ｄｅｓ（Ｂ２８−Ｂ３０）ヒトインスリン及びｄｅｓ（Ｂ２７）ヒトインスリンである。Ａ鎖及び／又はＢ鎖がＮ末端の伸長を有するインスリン類似体、並びにＡ鎖及び／又はＢ鎖が、Ｃ末端の伸長を有する、例えばＢ鎖のＣ末端に付加された２つのアルギニン残基を有するインスリン類似体もまた、インスリン類似体の例である。さらなる例は、言及される突然変異の組合せを含むインスリン類似体である。Ａ１４位におけるアミノ酸がＡｓｎ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ａｒｇ、Ａｓｐ、Ｇｌｙ又はＨｉｓであり、Ｂ２５位におけるアミノ酸がＨｉｓであり、任意で１つ又は複数のさらなる突然変異をさらに含むインスリン類似体は、インスリン類似体のさらなる例である。Ａ２１位のアミノ酸残基がＧｌｙであり、２つのアルギニン残基によってＣ末端においてさらに伸長されているヒトインスリンのインスリン類似体もまた、インスリン類似体の例である。
【００６７】
インスリン類似体のさらなる例は、ＤｅｓＢ３０ヒトインスリン；ＡｓｐＢ２８ヒトインスリン；ＡｓｐＢ２８，ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；ＬｙｓＢ３，ＧｌｕＢ２９ヒトインスリン；ＬｙｓＢ２８，ＰｒｏＢ２９ヒトインスリン；ＧｌｙＡ２１，ＡｒｇＢ３１，ＡｒｇＢ３２ヒトインスリン；ＧｌｕＡ１４，ＨｉｓＢ２５ヒトインスリン；ＨｉｓＡ１４，ＨｉｓＢ２５ヒトインスリン；ＧｌｕＡ１４，ＨｉｓＢ２５，ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；ＨｉｓＡ１４、ＨｉｓＢ２５，ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；ＧｌｕＡ１４，ＨｉｓＢ２５，ｄｅｓＢ２７，ｄｅｓＢ２８，ｄｅｓＢ２９，ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；ＧｌｕＡ１４，ＨｉｓＢ２５，ＧｌｕＢ２７，ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；ＧｌｕＡ１４，ＨｉｓＢ１６，ＨｉｓＢ２５，ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；ＨｉｓＡ１４，ＨｉｓＢ１６，ＨｉｓＢ２５，ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；ＨｉｓＡ８，ＧｌｕＡ１４，ＨｉｓＢ２５，ＧｌｕＢ２７，ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；ＨｉｓＡ８，ＧｌｕＡ１４，ＧｌｕＢ１，ＧｌｕＢ１６，ＨｉｓＢ２５，ＧｌｕＢ２７，ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；及びＨｉｓＡ８，ＧｌｕＡ１４，ＧｌｕＢ１６，ＨｉｓＢ２５，ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンを含む。
【００６８】
したがって、本発明における使用のためのインスリン類似体は、天然に存在するインスリン中に存在する少なくとも１つのアミノ酸残基を欠失させる及び／若しくは交換すること、並びに／又は少なくとも１つのアミノ酸残基を付加することによって、天然に存在するインスリンの構造、例えばヒトインスリンの構造から、形式的には、誘導することができる分子構造を有するポリペプチドを含み得る。付加及び／又は交換されるアミノ酸残基は、コード可能な（codable）アミノ酸残基、又は他の天然に存在する残基、又は純粋に合成のアミノ酸残基のいずれかであり得る。
【００６９】
例えば、インスリン類似体は、Ｂ鎖の２８位が、天然のＰｒｏ残基からＡｓｐ、Ｌｙｓ又はＩｌｅのうちの１つへと変更され得るようなものであり得る。別の実施形態では、Ｂ２９位のＬｙｓが、Ｐｒｏへと変更される。一実施形態では、Ｂ３０がＬｙｓであってもよく、引き続き、Ｂ２９が、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｒｇ及びＬｙｓを除く、いずれかのコード可能なアミノ酸であってもよい。
【００７０】
例えば、Ａ２１位のＡｓｎが、Ａｌａ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ又はＶａｌへと、特にＧｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ又はＴｈｒへと、好ましくはＧｌｙへと、変更され得る。
【００７１】
例えば、Ｂ３位のＡｓｎは、Ｌｙｓ又はＡｓｐへと変更され得る。
【００７２】
インスリン類似体のさらなる例は、ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン類似体；ＰｈｅＢ１が欠失しているインスリン類似体；Ａ鎖及び／又はＢ鎖がＮ末端の伸長部を有するインスリン類似体、並びにＡ鎖及び／又はＢ鎖がＣ末端の伸長部を有するインスリン類似体である。したがって、１又は２個のＡｒｇが、Ｂ１位に付加されてもよい。
【００７３】
「コード可能なアミノ酸」又は「コード可能なアミノ酸残基」という表現は、ヌクレオチドのトリプレット（「コドン」）によってコードすることができる、アミノ酸又はアミノ酸残基を示すために使用される。
【００７４】
インスリン類似体のさらなる例は、側鎖にカルボン酸基を有するアミノ酸残基を有するものを含む。「側鎖にカルボン酸基を有するアミノ酸残基」という表現は、Ａｓｐ、Ｇｌｕ及びｈＧｌｕ等のアミノ酸残基を指定する。アミノ酸は、Ｌ−立体配置又はＤ−立体配置のいずれのものであってもよい。何も特定されない場合、アミノ酸残基がＬ立体配置のものであることが理解される。
【００７５】
インスリン類似体のさらなる例は、中性側鎖を有するアミノ酸残基を有するアミノ酸残基を有するものを含む。「中性側鎖を有するアミノ酸残基」という表現は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ｔｙｒ、Ａｓｎ及びＧｌｎ等のアミノ酸残基を指定する。
【００７６】
インスリン誘導体
「インスリン誘導体」という用語は、本明細書で使用される場合、化学的に変更された親インスリン又はその類似体であって、前記変更は、アミド、炭水化物、アルキル基、アシル基、エステル、ＰＥＧ化等の結合の形態である、化学的に変更された親インスリン又はその類似体を意味する。本発明によるヒトインスリンの誘導体の例は、ＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン、ＮεＢ２９−ω−カルボキシ−ペンタデカノイル−γ−Ｌ−グルタミルアミドｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、ＮεＢ２９−ω−カルボキシ−ペンタデカノイル−γ−アミノ−ブタノイルｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、ＮεＢ２９−（Ｎα−（Ｓａｒ−ＯＣ（ＣＨ２）１３ＣＯ）−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、ＮεＢ２９−ヘキサデカンジオイル−γ−アミノ−ブタノイルｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、ＮεＢ２９−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｌ−Ｇｌｕ−アミドｄｅｓＢ３０インスリンである。
【００７７】
ポリペプチドへのポリマー分子（複数の場合も有り）共有結合を達成するために、活性化形態の、すなわち反応性官能基を有する、ポリマー分子のヒドロキシル末端基が、提供される。好適な活性化ポリマー分子は、例えばShearwater Corp., Huntsville, Ala., USAから、又はPolyMASC Pharmaceuticals plc, UKから、商業的に入手可能である。代替的には、ポリマー分子は、例えばＷＯ９０／１３５４０に開示されるような、当該技術分野において知られる従来の方法によって、活性化することができる。本発明における使用のための、活性化された直鎖又は分枝鎖のポリマー分子の具体例は、Shearwater Corp.の1997及び2000のカタログ（参照によって本明細書に組み込まれる、Functionalized Biocompatible Polymers for Research and pharmaceuticals, Polyethylene Glycol and Derivatives）に記載されている。活性化ＰＥＧポリマーの具体例は、以下の直鎖のＰＥＧ：ＮＨＳ−ＰＥＧ（例えば、ＳＰＡ−ＰＥＧ、ＳＳＰＡ−ＰＥＧ、ＳＢＡ−ＰＥＧ、ＳＳ−ＰＥＧ、ＳＳＡ−ＰＥＧ、ＳＣ−ＰＥＧ、ＳＧ−ＰＥＧ及びＳＣＭ−ＰＥＧ）、及びＮＯＲ−ＰＥＧ）、ＢＴＣ−ＰＥＧ、ＥＰＯＸ−ＰＥＧ、ＮＣＯ−ＰＥＧ、ＮＰＣ−ＰＥＧ、ＣＤＩ−ＰＥＧ、ＡＬＤ−ＰＥＧ、ＴＲＥＳ−ＰＥＧ、ＶＳ−ＰＥＧ、ＩＯＤＯ−ＰＥＧ、及びＭＡＬ−ＰＥＧ、並びに分枝鎖のＰＥＧ、例えばＰＥＧ２−ＮＨＳ、及びに米国特許第５，９３２，４６２号及び米国特許第５，６４３，５７５号開示されるものを含む。
【００７８】
ポリペプチド及び活性化ポリマー分子の結合は、例えば以下の参考文献（ポリマー分子の活性化のための好適な方法も記載する）：R. F. Taylor, (1991), "Protein immobilisation. Fundamental and applications", Marcel Dekker, N.Y.；S. S. Wong, (1992), "Chemistry of Protein Conjugation and Crosslinking", CRC Press, Boca Raton；G. T. Hermanson et al., (1993), "Immobilized Affinity Ligand Techniques", Academic Press, N.Y.に記載されるような、いずれかの従来の方法の使用によって、実施される。当業者は、使用される活性化方法及び／又は結合化学が、ポリペプチド結合基（複数の場合も有り）（この例は、さらに上で示される）及びポリマーの官能基（例えば、アミン、ヒドロキシル、カルボキシル、アルデヒド、スルフィドリル、スクシンイミジル、マレイミド、ビニスルホン又はハロアセテートである）に依存することを理解している。
【００７９】
したがって、本発明のインスリン誘導体は、例えば、インスリン骨格の１つ若しくは複数の位置に側鎖を導入することによって、又はインスリン中のアミノ酸残基の基を酸化若しくは還元することによって、又は遊離のカルボン酸基をエステル基へと変換することによって、又は遊離のアミノ基若しくはヒドロキシ基をアシル化することによって、化学的に変更されている、天然に存在するインスリン又はインスリン類似体を含み得る。
【００８０】
薬学的タンパク質配合物
本発明の組合せを含有する注射可能な組成物は、所望の最終製品を得るために、必要に応じて、成分を溶解及び混合することを伴う、製薬産業の従来の技法を使用して、調製することができる。したがって、或る手順によれば、本発明の組合せを、調製される組成物の最終体積よりも幾分少ない水の量で、溶解する。等張剤、保存剤及び緩衝剤を、必要に応じて添加し、溶液のｐＨ値を、必要に応じて、酸、例えば塩酸、又は塩基、例えば水酸化ナトリウム水溶液を必要に応じて使用して、調整する。最終的に、溶液の体積を、水を用いて調整して、成分の所望の濃度を得る。
【００８１】
より正確には、本発明のインスリン製剤、例えば溶液又は懸濁物は、例えば約２４０〜約２４００ｎｍｏｌｅ／ｍｌの範囲の濃度で、僅かに酸性条件の水性媒体において、本発明の組合せを溶解することによって、調製することができる。水性媒体は、例えば塩化ナトリウム又はグリセロールを用いて、等張とされる。さらに、水性媒体は、緩衝剤、例えば酢酸緩衝剤又はクエン酸緩衝剤、保存剤、例えばｍ−クレゾール又はフェノール及び亜鉛イオンを含有していてもよく、例えば、亜鉛は、インスリン誘導体６分子当たり亜鉛原子４個を超える濃度で、例えば、インスリン誘導体６分子当たり亜鉛原子４．５個、インスリン誘導体６分子当たり亜鉛原子５個、インスリン誘導体６分子当たり亜鉛原子６個、又はインスリン誘導体６分子当たり亜鉛原子１２個までの濃度で存在していてもよい。溶液のｐＨ値は、沈殿の可能性を回避するために、本発明の化合物の等電点に近づけすぎることなく、中性に向けて調整される。最終的なインスリン製剤のｐＨ値は、本発明どの化合物を使用するか、亜鉛イオンの濃度、及び本発明の化合物の濃度に依存する。インスリン製剤は、例えば無菌ろ過によって、無菌とされる。
【００８２】
第１のインスリン様化合物
本発明の組合せは、第２のインスリン様化合物よりも長時間作用型である第１のインスリン様化合物を含む。
【００８３】
一実施形態では、第１の及び／又は第２のインスリン様化合物は、生理学的条件において、少なくとも部分的に、天然に存在するインスリンのインスリン受容体結合及び／又は活性化（効力）、好ましくは、天然に存在するインスリンのインスリン受容体結合及び／又は活性化（効力）の少なくとも０．０１％、例えば、天然に存在するインスリンのインスリン受容体結合及び／又は活性化（効力）の少なくとも０．１％、少なくとも、１％、少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも５０％、少なくとも６５％、少なくとも７５％、少なくとも８５％、少なくとも９５％、少なくとも１００％、少なくとも１１０％、少なくとも１２０％、少なくとも１３０％、少なくとも１４０％又は少なくとも１５０％を示す。
【００８４】
インスリン受容体結合は、当該技術分野において知られる任意の好適な手段によって、決定することができる。しかしながら、好ましくは、インスリン受容体結合は、上記の例において提供される方法（アッセイ（Ｉ）−インスリン受容体結合）を使用して決定される。
【００８５】
インスリン受容体活性化（効力）は、当該技術分野において知られる任意の好適な手段によって、決定することができる。しかしながら、好ましくは、インスリン受容体結合は、上記の例において提供される方法（アッセイ（ＩＩ）−効力）を使用して決定される。
【００８６】
一実施形態では、第１の及び／又は第２のインスリン化合物は、少なくとも１８時間、例えば少なくとも２４時間の半減期を有し、前記半減期は、本明細書における臨床例１に記載されるように、決定することができる。一実施形態では、第１の及び／又は第２のインスリン化合物は、少なくとも１２時間、例えば少なくとも１２時間及び２４時間未満の半減期を有し、前記半減期は、本明細書における臨床例１に記載されるように、決定することができる。
【００８７】
これに関して、幾つかの実施形態に関して、第１のインスリン様化合物が、少なくとも長時間作用型インスリンである。
【００８８】
一実施形態では、「長時間作用型インスリン」という用語は、インスリン様化合物が、最大で２４時間、インスリン作用又は長期的な作用プロファイルを有する（例えば、一定且つ安定なレベルで血糖レベルを維持する）ことを意味する。
【００８９】
一実施形態では、長時間持続型インスリンは、皮下注射された場合、生理学的条件において、少なくとも１０時間、例えば、少なくとも１２．５時間、少なくとも１５時間、少なくとも１７．５時間、少なくとも２０時間、少なくとも２２．５時間、少なくとも２５時間、少なくとも２７．５時間、少なくとも３０時間、少なくとも３２．５、少なくとも３５時間、少なくとも３７．５時間、又は少なくとも４０時間の半減期を示す。好ましくは、長時間持続型インスリンは、皮下注射された場合、生理学的条件において、２４ｈｒ以下、例えば、２２ｈｒ以下、２０ｈｒ以下、１８ｈｒ以下、１６ｈｒ以下、又は１４ｈｒ以下の半減期も示す。
【００９０】
インスリンの半減期は、当該技術分野において知られる任意の好適な手段（例えば、Gough SC, Harris S, Woo V, Davies M, 2013, ‘Insulin degludec: overview of a novel ultra long-acting basal insulin’ Diabetes Obes Metab., 15(4):301-9；及び／又はHeise T, Nosek L, Bottcher SG, Hastrup H, Haahr H, 2012, ‘Ultra-long-acting insulin degludec has a flat and stable glucose-lowering effect in type 2 diabetes’ Diabetes Obes Metab., 14(10):944-50を参照されたい。これらの開示は、参照によって本明細書に組み込まれる）によって決定することができる。インスリンの半減期は、本明細書における臨床例１に記載されるように決定することもできる。好ましくは、インスリンの半減期は、本明細書においてアッセイ（ＩＩＩ）に提供される方法を使用して決定される。
【００９１】
これに関して、幾つかの実施形態に関して、第１のインスリン様化合物は、超長時間作用型インスリンである。
【００９２】
一実施形態では、「超長時間作用型インスリン」という用語は、インスリン様化合物が、２４時間にわたって、インスリン作用又は長期的な作用プロファイル（例えば、一定且つ安定なレベルで血糖レベルを維持する）を有することを意味する。
【００９３】
一実施形態では、超長時間持続型インスリンは、皮下注射された場合、生理学的条件において、１８ｈｒよりも大きい、例えば、２０ｈｒよりも大きい、２２ｈｒよりも大きい、又は２４ｈｒよりも大きいの半減期を示す。
【００９４】
幾つかの実施形態に関して、第１のインスリン様化合物は、長期的な作用プロファイルを有する。
【００９５】
一実施形態では、「長期的な作用プロファイル」は、少なくとも２０時間の、グルコース制御の喪失までの平均時間と定義され、前記グルコース制御の喪失までの平均時間は、本明細書における臨床例１に記載されるように、決定することができる。
【００９６】
一実施形態では、本発明において使用されるインスリン様化合物は、１）ほとんどの被験体における、十分に長期的な作用プロファイル及び／又は半減期、並びに任意で、２）短い投与間隔で使用したときに、インスリン作用の過度の増大を引き起こさないために、相対的に平坦且つ安定な形状の活性プロファイルを有する。臨床使用における作用の期間の指標は、例えば臨床例１において使用される正常血糖グルコースクランプ手順（L. Heinemann and J. H. Anderson-Jr. Measurement of insulin absorption and insulin action. Diabetes Technol Ther 6 (5):698-718, 2004）の使用による、実験条件下で、得ることができる。臨床使用における活性プロファイルの平坦性の指標は、臨床例１又は臨床例２に記載されるような実験条件下で、得ることができる。臨床使用における活性プロファイルの安定性の指標は、臨床例１又は臨床例２に記載されるような実験条件下で、得ることができる。
【００９７】
一実施形態では、第１のインスリン様化合物は、相対的に高いピーク活性プロファイルを有しない。このピークは、薬剤の投与以後において、グルコース注入を時間に対してプロットしたときの、曲線における最大値と定義される。臨床使用における活性プロファイルのピークの指標は、臨床例１又は臨床例２に記載されるような実験条件下で、得ることができる。
【００９８】
好ましくは、第１の及び／又は第２のインスリン様インスリンは、被験体において、２４時間の期間にわたって、≦±１８、例えば、≦±１７、≦±１６、≦±１５、≦±１４、≦±１３、≦±１２、≦±１１、≦±１０、≦±９、≦±８、≦±７、≦±６、≦±５、≦±４、≦±３、≦±２、≦±１、≦±０．５、≦±０．１の、平均インスリン濃度からの最大偏差（ＡＵＣＦ％）を導く。
【００９９】
平均インスリン濃度からの最大偏差（ＡＵＣＦ％）は、当該技術分野において知られる任意の好適な手段（例えば、Heise et al., Poster EASD 2011を参照されたい）によって決定することができる。
【０１００】
一実施形態では、第１の及び／又は第２のインスリン様インスリンは、好ましくは、投与間隔全体にわたって、安定且つ均等に分布したグルコース低下効果をもたらす。例えば、全ての４つの６時間測定間隔に対するＧＩＲプロファイル下における下位領域に対するＡＵＣの比を推定することによって定量化される、２４ｈの投与間隔（タウ）にわたってのグルコース注入速度（ＧＩＲ）（ＧＩＲ  ＡＵＣの割合：ＡＵＣＧＩＲ，０−６ｈ，ＳＳ／ＡＵＣＧＩＲ，τ，ＳＳ；ＡＵＣＧＩＲ，６−１２ｈ，ＳＳ／ＡＵＣＧＩＲ，τ，ＳＳ；ＡＵＣＧＩＲ，１２−１８ｈ，ＳＳ／ＡＵＣＧＩＲ，τ，ＳＳ；ＡＵＣＧＩＲ，１８−２４ｈ，ＳＳ／ＡＵＣＧＩＲ，τ，ＳＳ）は、２５：２５：２５：２５％分布に近いべきである（好ましくは、±８％、例えば、±４％、±３％、±２％、± １％、±０．５％、又は、±０．１％）。
【０１０１】
加えて、投与間隔にわたってのＧＩＲの変動は、好ましくは可能な限り小さい。ＧＩＲの変動は、ＡＵＣFＧＩＲ,τ（これは、どの程度個体のＧＩＲプロファイルが、２４ｈにわたって、どの程度、彼の／彼女の平均ＧＩＲから逸脱しているかを推定する）によって評価することができる。好ましくは、ＡＵＣFＧＩＲ,τは、≦５８（例えば、≦５７、≦５６、≦５５、≦５４、≦５３、≦５２、≦５１、又は≦５０）である。ＧＩＲの変動（ＡＵＣFＧＩＲ,τ）は、当該技術分野において知られる任意の好適な方法によって、評価することができる。しかしながら、一実施形態では、ＧＩＲ（ＡＵＣFＧＩＲ,τ）は、Heise et al., 2012, Diabetes, Obesity and Metabolism,  14(9):859-64に記載される方法によって、評価される。
【０１０２】
好ましい一実施形態では、第１のインスリン様化合物は、ＷＯ２００５／０１２３４７に開示される化合物のいずれかの１つ又は複数である。幾つかの例では、これらの化合物は、「’３４７誘導体」と称される。
【０１０３】
本発明は、第１のインスリン様化合物が、’３４７誘導体である、すなわち、天然に存在するインスリンの誘導体又はインスリン類似体が、親インスリンのＢ鎖のＮ末端アミノ酸残基のα−アミノ基と、又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε−アミノ基と結合した側鎖を有し、前記側鎖が、一般式（Ｉ）：
−Ｗ−Ｘ−Ｙ−Ｚ
［式中、
Ｗは、
●  側鎖にカルボン酸基を有するα−アミノ酸残基であって、前記残基が、そのカルボン酸基のうちの１つを用いて、親インスリンのＢ鎖のＮ末端アミノ酸残基のα−アミノ基とともに、又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε−アミノ基とともに、アミド基を形成する、α−アミノ酸残基；
●  アミド結合を介してともに連結される２、３又は４個のα−アミノ酸残基から構成される鎖であって、前記鎖が、アミド結合を介して、親インスリンのＢ鎖のＮ末端アミノ酸残基のα−アミノ基と、又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε−アミノ基と連結され、Ｗのアミノ酸残基が、中性側鎖を有するアミノ酸残基及び側鎖にカルボン酸基を有するアミノ酸残基の群から選択され、その結果、Ｗが、側鎖にカルボン酸基を有するアミノ酸残基を少なくとも１つ有する、鎖；又は
●  Ｘから、親インスリンのＢ鎖のＮ末端アミノ酸残基のα−アミノ基までの、又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε−アミノ基までの共有結合
であり；
Ｘは、
●  −ＣＯ−；
●  −ＣＯＣＨ（ＣＯＯＨ）ＣＯ−；
●  −ＣＯＮ（ＣＨ２ＣＯＯＨ）ＣＨ２ＣＯ−；
●  −ＣＯＮ（ＣＨ２ＣＯＯＨ）ＣＨ２ＣＯＮ（ＣＨ２ＣＯＯＨ）ＣＨ２ＣＯ−；
●  −ＣＯＮ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨ）ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ−；
●  −ＣＯＮ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨ）ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨ）ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ−；
●  −ＣＯＮＨＣＨ（ＣＯＯＨ）（ＣＨ２）４ＮＨＣＯ−；
●  −ＣＯＮ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨ）ＣＨ２ＣＯ−；又は
●  −ＣＯＮ（ＣＨ２ＣＯＯＨ）ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ−
（ただし、
ａ）Ｗがアミノ酸残基又はアミノ酸残基の鎖である場合、Ｘは、下線が付されたカルボニル炭素からの結合を介して、Ｗにおけるアミノ基と、アミド結合を形成する、又は
ｂ）Ｗが共有結合である場合、Ｘは、下線が付されたカルボニル炭素からの結合を介して、親インスリンのＢ鎖におけるＮ末端のα−アミノ基と、又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε−アミノ基と、アミド結合を形成する）
であり；
Ｙは、
●  −（ＣＨ２）ｍ−  （式中、ｍは、６〜３２の範囲の整数である）；
●  １、２又は３個の−ＣＨ＝ＣＨ−基、及び１０〜３２の範囲の、鎖における炭素原子の総数を与えるのに十分な数の−ＣＨ２−基を含む２価の炭化水素鎖；
●  式−（ＣＨ２）ｖＣ６Ｈ４（ＣＨ２）Ｗ−の２価の炭化水素鎖（式中、ｖ及びｗは整数であり、又はｖ及びｗのうちの１つは０であり、その結果、ｖ及びｗの合計が６〜３０の範囲である）
であり；
Ｚは、
●  −ＣＯＯＨ；
●  −ＣＯ−Ａｓｐ；
●  −ＣＯ−Ｇｌｕ；
●  −ＣＯ−Ｇｌｙ；
●  −ＣＯ−Ｓａｒ；
●  −ＣＨ（ＣＯＯＨ）２；
●  −Ｎ（ＣＨ２ＣＯＯＨ）２；
●  −ＳＯ３Ｈ；又は
●  −ＰＯ３Ｈ；
及びその任意のＺｎ２＋錯体
である（ただし、Ｗが共有結合であり、Ｘが−ＣＯ−である場合、Ｚは−ＣＯＯＨとは異なる）］
を有する、実施形態を含む。
【０１０４】
一実施形態では、側鎖−Ｗ−Ｘ−Ｙ−Ｚは、親インスリンのＢ鎖のＮ末端アミノ酸残基のα−アミノ基と結合している。
【０１０５】
本発明の別の実施形態では、側鎖−Ｗ−Ｘ−Ｙ−Ｚは、親インスリンのＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε−アミノ基と結合している。
【０１０６】
この実施形態のより具体的な一態様では、側鎖−Ｗ−Ｘ−Ｙ−Ｚは、Ｂ鎖の２８位に存在するＬｙｓ残基のε−アミノ基と結合している。
【０１０７】
この実施形態のさらにより具体的な態様では、側鎖−Ｗ−Ｘ−Ｙ−Ｚは、Ｂ鎖の２９位に存在するＬｙｓ残基のε−アミノ基と結合している。
【０１０８】
この実施形態のさらにより具体的な態様では、側鎖−Ｗ−Ｘ−Ｙ−Ｚは、Ｂ鎖の３０位に存在するＬｙｓ残基のε−アミノ基と結合している。
【０１０９】
側鎖−Ｗ−Ｘ−Ｙ−Ｚの下位構造Ｗは、共有結合であり得る。代替的には、Ｗは、側鎖にカルボン酸基を有し、合計で４〜１０個の炭素原子を含む、α−アミノ酸の残基であり得る。具体的には、Ｗは、遺伝コードによってコードされ得るα−アミノ酸の残基であり得る。したがって、Ｗは、例えば、α−Ａｓｐ、β−Ａｓｐ、α−Ｇｌｕ及びγ−Ｇｌｕからなる群から選択することができる。Ｗのさらなる選択肢は、例えば、α−ｈＧｌｕ及びδ−ｈＧｌｕである。
【０１１０】
さらなる実施形態では、Ｗは、２つのα−アミノ酸残基から構成される鎖であり、前記２つのα−アミノ酸残基の一方は、４〜１０個の炭素原子及び側鎖のカルボン酸基を有し、他方は、２〜１１個の炭素原子を有するが遊離のカルボン酸基を有しない。遊離のカルボン酸基を有しないα−アミノ酸残基は、中性のコード可能なα−アミノ酸残基であり得る。この実施形態によるＷの例は、α−Ａｓｐ−Ｇｌｙ；Ｇｌｙ−α−Ａｓｐ；β−Ａｓｐ−Ｇｌｙ；Ｇｌｙ−β−Ａｓｐ；α−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ；Ｇｌｙ−α−Ｇｌｕ；γ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ；Ｇｌｙ−γ−Ｇｌｕ；α−ｈＧｌｕ−Ｇｌｙ；Ｇｌｙ−α−ｈＧｌｕ；δ−ｈＧｌｕ−Ｇｌｙ；及びＧｌｙ−δ−ｈＧｌｕである。
【０１１１】
さらなる実施形態では、Ｗは、２つのα−アミノ酸残基から構成される鎖であり、前記２つのα−アミノ酸残基は、独立して４〜１０個の炭素原子を有し、両方が側鎖にカルボン酸基を有する。これらのα−アミノ酸残基のうちの１つ、又はこれらの両方が、コード可能なα−アミノ酸残基であり得る。この実施形態によるＷの例は、以下である：α−Ａｓｐ−α−Ａｓｐ；α−Ａｓｐ−α−Ｇｌｕ；α−Ａｓｐ−α−ｈＧｌｕ；α−Ａｓｐ−β−Ａｓｐ；α−Ａｓｐ−γ−Ｇｌｕ；α−Ａｓｐ−δ−ｈＧｌｕ；β−Ａｓｐ−α−Ａｓｐ；β−Ａｓｐ−α−Ｇｌｕ；β−Ａｓｐ−α−ｈＧｌｕ；β−Ａｓｐ−β−Ａｓｐ；β−Ａｓｐ−γ−Ｇｌｕ；β−Ａｓｐ−δ−ｈＧｌｕ；α−Ｇｌｕ−α−Ａｓｐ；α−Ｇｌｕ−α−Ｇｌｕ；α−Ｇｌｕ−α−ｈＧｌｕ；α−Ｇｌｕ−β−Ａｓｐ；α−Ｇｌｕ−γ−Ｇｌｕ；α−Ｇｌｕ−δ−ｈＧｌｕ；γ−Ｇｌｕ−α−Ａｓｐ；γ−Ｇｌｕ−α−Ｇｌｕ；γ−Ｇｌｕ−α−ｈＧｌｕ；γ−Ｇｌｕ−β−Ａｓｐ；γ−Ｇｌｕ−γ−Ｇｌｕ；γ−Ｇｌｕ−δ−ｈＧｌｕ；α−ｈＧｌｕ−α−Ａｓｐ；α−ｈＧｌｕ−α−Ｇｌｕ；α−ｈＧｌｕ−α−ｈＧｌｕ；α−ｈＧｌｕ−β−Ａｓｐ；α−ｈＧｌｕ−γ−Ｇｌｕ；α−ｈＧｌｕ−δ−ｈＧｌｕ；δ−ｈＧｌｕ−α−Ａｓｐ；δ−ｈＧｌｕ−α−Ｇｌｕ；δ−ｈＧｌｕ−α−ｈＧｌｕ；δ−ｈＧｌｕ−β−Ａｓｐ；δ−ｈＧｌｕ−γ−Ｇｌｕ；及びδ−ｈＧｌｕ−δ−ｈＧｌｕ。
【０１１２】
さらなる実施形態では、Ｗは、独立して４〜１０個の炭素原子を有する３つのα−アミノ酸残基から構成される鎖であり、前記鎖のアミノ酸残基は、中性側鎖を有する残基及び側鎖カルボン酸基を有する残基の群から選択され、その結果、前記鎖は、側鎖にカルボン酸基を有する残基を少なくとも１つ有する。一実施形態では、アミノ酸残基は、コード可能な残基である。
【０１１３】
さらなる実施形態では、Ｗは、独立して４〜１０個の炭素原子を有する４つのα−アミノ酸残基から構成される鎖であり、前記鎖のアミノ酸残基は、中性側鎖を有する残基及び側鎖にカルボン酸基を有する残基の群から選択され、その結果、前記鎖は、側鎖にカルボン酸基を有する残基を少なくとも１つ有する。一実施形態では、アミノ酸残基は、コード可能な残基である。
【０１１４】
一実施形態では、Ｗは、尿素誘導体を介して、Ｂ鎖におけるＬｙｓ残基のε−アミノ基と接続され得る。
【０１１５】
側鎖−Ｗ−Ｘ−Ｙ−Ｚの下位構造Ｘは、下線が付されたカルボニル炭素からの結合を介して、Ｗにおけるアミノ基と、又は、Ｗが共有結合である場合、親インスリンのＢ鎖におけるＮ末端のα−アミノ基と、若しくはＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε−アミノ基と、アミド結合を形成する、式−ＣＯ−の基であり得る。
【０１１６】
さらなる実施形態では、側鎖の下位構造Ｘは、下線が付されたカルボニル炭素からの結合を介して、Ｗにおけるアミノ基と、又は、Ｗが共有結合である場合、親インスリンのＢ鎖におけるＮ末端のα−アミノ基と、若しくはＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε−アミノ基と、アミド結合を形成する、式−ＣＯＣＨ（ＣＯＯＨ）ＣＯ−の基であり得る。
【０１１７】
さらなる実施形態では、側鎖の下位構造Ｘは、下線が付されたカルボニル炭素からの結合を介して、Ｗにおけるアミノ基と、又は、Ｗが共有結合である場合、親インスリンのＢ鎖におけるＮ末端のα−アミノ基と、若しくはＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε−アミノ基と、アミド結合を形成する、式−ＣＯＮ（ＣＨ２ＣＯＯＨ）ＣＨ２ＣＯ−の基であり得る。
【０１１８】
さらなる実施形態では、側鎖の下位構造Ｘは、下線が付されたカルボニル炭素からの結合を介して、Ｗにおけるアミノ基と、又は、Ｗが共有結合である場合、親インスリンのＢ鎖におけるＮ末端のα−アミノ基と、若しくはＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε−アミノ基と、アミド結合を形成する、式−ＣＯＮ（ＣＨ２ ＣＨ２ＣＯＯＨ）ＣＨ２ＣＯ−の基であり得る。
【０１１９】
さらなる実施形態では、側鎖の下位構造Ｘは、下線が付されたカルボニル炭素からの結合を介して、Ｗにおけるアミノ基と、又は、Ｗが共有結合である場合、親インスリンのＢ鎖におけるＮ末端のα−アミノ基と、若しくはＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε−アミノ基と、アミド結合を形成する、式−ＣＯＮ（ＣＨ２ＣＯＯＨ）ＣＨ２ ＣＨ２ＣＯ−の基であり得る。
【０１２０】
さらなる実施形態では、側鎖の下位構造Ｘは、下線が付されたカルボニル炭素からの結合を介して、Ｗにおけるアミノ基と、又は、Ｗが共有結合である場合、親インスリンのＢ鎖におけるＮ末端のα−アミノ基と、若しくはＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε−アミノ基と、アミド結合を形成する、式−ＣＯＮ（ＣＨ２ＣＯＯＨ）ＣＨ２ＣＯＮ（ＣＨ２ＣＯＯＨ）ＣＨ２ＣＯ−の基であり得る。
【０１２１】
さらなる実施形態では、側鎖の下位構造Ｘは、下線が付されたカルボニル炭素からの結合を介して、Ｗにおけるアミノ基と、又は、Ｗが共有結合である場合、親インスリンのＢ鎖におけるＮ末端のα−アミノ基と、若しくはＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε−アミノ基と、アミド結合を形成する、式−ＣＯＮ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨ）ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ−の基であり得る。
【０１２２】
さらなる実施形態では、側鎖の下位構造Ｘは、下線が付されたカルボニル炭素からの結合を介して、Ｗにおけるアミノ基と、又は、Ｗが共有結合である場合、親インスリンのＢ鎖におけるＮ末端のα−アミノ基と、若しくはＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε−アミノ基と、アミド結合を形成する、式−ＣＯＮ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨ）ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨ）ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ−の基であり得る。
【０１２３】
側鎖−Ｗ−Ｘ−Ｙ−Ｚの下位構造Ｙは、式−（ＣＨ２）ｍ−の基の場合があり、式中、ｍは、６〜３２、８〜２０、１２〜２０又は１２〜１６の範囲の整数である。
【０１２４】
別の実施形態では、Ｙは、１、２又は３個の−ＣＨ＝ＣＨ−基、及び６〜３２、１０〜３２、１２〜２０又は１２〜１６の範囲の、鎖における炭素原子の総数を与えるのに十分な数の−ＣＨ２−基を含む２価の炭化水素鎖である。
【０１２５】
別の実施形態では、Ｙは、式−（ＣＨ２）ｖＣ６Ｈ４（ＣＨ２）Ｗ−の２価の炭化水素鎖であり、式中、ｖ及びｗは整数であり、又はｖ及びｗのうちの１つは０であり、その結果、ｖ及びｗの合計が、６〜３０、１０〜２０又は１２〜１６の範囲である。
【０１２６】
一実施形態では、側鎖−Ｗ−Ｘ−Ｙ−Ｚの下位構造Ｚは−ＣＯＯＨであり、ただし、Ｗが共有結合であり、Ｘが−ＣＯ−である場合、Ｚは−ＣＯＯＨとは異なる。一実施形態では、Ｚは−ＣＯＯＨである。別の実施形態では、Ｚは−ＣＯ−Ａｓｐである。別の実施形態では、Ｚは−ＣＯ−Ｇｌｕである。別の実施形態では、Ｚは−ＣＯ−Ｇｌｙである。別の実施形態では、Ｚは−ＣＯ−Ｓａｒである。別の実施形態では、Ｚは−ＣＨ（ＣＯＯＨ）２である。別の実施形態では、Ｚは−Ｎ（ＣＨ２ＣＯＯＨ）２である。別の実施形態では、Ｚは−ＳＯ３Ｈである。別の実施形態では、Ｚは−ＰＯ３Ｈである。
【０１２７】
さらなる実施形態では、Ｗは、α−Ａｓｐ、β−Ａｓｐ、α−Ｇｌｕ及びγ−Ｇｌｕからなる群から選択され；Ｘは、−ＣＯ−又は−ＣＯＣＨ（ＣＯＯＨ）ＣＯであり；Ｙは、−（ＣＨ２）ｍ−であり、ｍは、１２〜１８の範囲の整数であり；Ｚは、−ＣＯＯＨ又は−ＣＨ（ＣＯＯＨ）２である。
【０１２８】
’３４７誘導体のインスリン部分（本願の文脈においては親インスリンとも称される）は、天然に存在するインスリン、例えばヒトインスリン又はブタインスリンであり得る。代替的には、親インスリンは、インスリン類似体であり得る。
【０１２９】
親インスリン類似体の一群において、Ａ２１位のアミノ酸残基はＡｓｎである。
【０１３０】
親インスリン類似体の別の群において、Ａ２１位のアミノ酸残基はＧｌｙである。類似体のこの群からの具体例は、以下である：ＧｌｙＡ２１ヒトインスリン、ＧｌｙＡ２１ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；及びＧｌｙＡ２１ＡｒｇＢ３１ＡｒｇＢ３２ヒトインスリン。
【０１３１】
親インスリン類似体の別の群において、Ｂ１位のアミノ酸残基が欠失している。親インスリン類似体のこの群からの具体例は、ｄｅｓ（Ｂ１）ヒトインスリンである。
【０１３２】
親インスリン類似体の別の群において、Ｂ３０位のアミノ酸残基が欠失している。親インスリン類似体のこの群からの具体例は、ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンである。
【０１３３】
親インスリン類似体の別の群において、Ｂ２８位のアミノ酸残基はＡｓｐである。親インスリン類似体のこの群からの具体例は、ＡｓｐＢ２８ヒトインスリン）であるか、又は、他の形では、ＡｓｐＢ２８）と記載される。
【０１３４】
親インスリン類似体の別の群において、Ｂ２８位のアミノ酸残基はＬｙｓであり、Ｂ２９位のアミノ酸残基はＰｒｏである。親インスリン類似体のこの群からの具体例は、ＬｙｓＢ２８ＰｒｏＢ２９ヒトインスリンである。
【０１３５】
親インスリン類似体の別の群において、Ｂ３０位のアミノ酸残基はＬｙｓであり、Ｂ２９位のアミノ酸残基は、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｒｇ及びＬｙｓを除く、任意のコード可能なアミノ酸である。一例は、Ｂ２９位のアミノ酸残基がＴｈｒであり、Ｂ３０位のアミノ酸残基がＬｙｓである、インスリン類似体である。親インスリン類似体のこの群からの具体例は、ＴｈｒＢ２９ＬｙｓＢ３０ヒトインスリンである。
【０１３６】
親インスリン類似体の別の群において、Ｂ３位のアミノ酸残基はＬｙｓであり、Ｂ２９位のアミノ酸残基はＧｌｕである。親インスリン類似体のこの群からの具体例は、ＬｙｓＢ３ＧｌｕＢ２９ヒトインスリンである。
【０１３７】
一実施形態では、親インスリンは、以下からなる群から選択される：ヒトインスリン；ｄｅｓ（Ｂ１）ヒトインスリン；ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；ＧｌｙＡ２１ヒトインスリン；ＧｌｙＡ２１ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；ＡｓｐＢ２８ヒトインスリン；ブタインスリン；ＬｙｓＢ２８ＰｒｏＢ２９ヒトインスリン；ＧｌｙＡ２１ＡｒｇＢ３１ＡｒｇＢ３２ヒトインスリン；及びＬｙｓＢ３ＧｌｕＢ２９ヒトインスリン。
【０１３８】
一実施形態では、本発明における第１のインスリン様化合物は、ほとんどの被験体における、十分な長期的な作用プロファイル、及び任意で、相対的に平坦且つ安定な形状の活性プロファイルを有する。
【０１３９】
一実施形態では、第１のインスリン様化合物は、前記インスリンの投与後における、少なくとも２０時間、例えば、２０〜５０時間、２０〜４５時間、２４〜４５時間、２６〜４５時間、３０〜５０時間、３５〜５０時間、少なくとも２６時間、２６時間超、２６時間超且つ最大で５０時間、２６時間超且つ最大で５０時間、少なくとも２８時間、２８〜５０時間、少なくとも３０時間、３０〜４５時間、少なくとも３５時間、３５〜４５時間、少なくとも３８時間、少なくとも約４０時間  最大で約４５時間の、又は約４０時間の、グルコース制御の喪失までの平均時間と定義される、ほとんどの被験体における、十分な長期的な作用プロファイルを有し、前記長期的な作用プロファイルは、本明細書における臨床例１に記載されるように、決定することができる。
【０１４０】
一実施形態では、第１のインスリン様化合物は、少なくとも１２時間、少なくとも１４時間、少なくとも１６時間、少なくとも１８時間、少なくとも２０時間、少なくとも２２時間、少なくとも２４時間、１２〜５０時間、１４〜５０時間、１６〜５０時間、１８〜５０時間、２０〜５０時間、２２〜５０時間、２４〜５０時間、１２〜４０時間、１４〜４０時間、１６〜４０時間、１８〜４０時間、少なくとも２０時間、少なくとも２４時間且つ最大で５０時間、１８〜３６時間、２０〜３６時間、２２〜３６時間、２４〜３６時間、２５〜３６時間、２６〜３６時間の、平均終末半減期と定義される、ほとんどの被験体における、十分な長期的な作用プロファイルを有し、前記平均終末半減期は、本明細書における臨床例１に記載されるように、決定することができる。
【０１４１】
別の実施形態では、本発明における第１のインスリン様化合物は、長期的な作用プロファイル、及び相対的に平坦且つ安定な形状の活性プロファイルを有する。
【０１４２】
本発明における第１のインスリン様化合物として有用な’３４７誘導体の例は、以下の化合物である：
ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１４ＣＯ）−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；Ｏ４５４
ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１５ＣＯ）−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；Ｏ４６７
ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１６ＣＯ）−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；Ｏ４５６
ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１７ＣＯ）−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；未だ番号無し
ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１８ＣＯ）−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；Ｏ４５８
ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１６ＣＯ）−γ−Ｇｌｕ−Ｎ−（γ−Ｇｌｕ））ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；Ｏ４５９
ＮεＢ２９−（Ｎα−（Ａｓｐ−ＯＣ（ＣＨ２）１６ＣＯ）−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；Ｏ４６０
ＮεＢ２９−（Ｎα−（Ｇｌｕ−ＯＣ（ＣＨ２）１４ＣＯ）−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；Ｏ４６１
ＮεＢ２９−（Ｎα−（Ｇｌｕ−ＯＣ（ＣＨ２）１４ＣＯ−）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；Ｏ４６２
ＮεＢ２９−（Ｎα−（Ａｓｐ−ＯＣ（ＣＨ２）１６ＣＯ−）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；Ｏ４６３
ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１６ＣＯ）−α−Ｇｌｕ−Ｎ−（β−Ａｓｐ））ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；Ｏ４６６
ＮεＢ２９−（Ｎα−（Ｇｌｙ−ＯＣ（ＣＨ２）１３ＣＯ）−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；Ｏ４６８
ＮεＢ２９−（Ｎα−（Ｓａｒ−ＯＣ（ＣＨ２）１３ＣＯ）−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；
ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１３ＣＯ）−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；
（ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１３ＣＯ）−β−Ａｓｐ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；Ｏ４５４
ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１３ＣＯ）−α−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；Ｏ４５４
ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１６ＣＯ）−γ−Ｄ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；Ｏ４５４
ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１４ＣＯ）−β−Ｄ−Ａｓｐ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；Ｏ４５４
ＮεＢ２９−（Ｎ−ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１６ＣＯ−β−Ｄ−Ａｓｐ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；
ＮεＢ２９−（Ｎ−ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１４ＣＯ−ＩＤＡ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；
ＮεＢ２９−［Ｎ−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１６ＣＯ）−Ｎ−（カルボキシエチル）−Ｇｌｙ］ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；
ＮεＢ２９−［Ｎ−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１４ＣＯ）−Ｎ−（カルボキシエチル）−Ｇｌｙ］ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；及び
ＮεＢ２９−［Ｎ−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１４ＣＯ）−Ｎ−（カルボキシメチル）−β−Ａｌａ］ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン。
【０１４３】
一実施形態では、第１のインスリン様化合物は、ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１４ＣＯ）−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンである。
【０１４４】
一実施形態では、第１のインスリン様化合物は、ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１５ＣＯ）−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンである。
【０１４５】
一実施形態では、第１のインスリン様化合物は、ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１６ＣＯ）−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンである。
【０１４６】
一実施形態では、第１のインスリン様化合物は、ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１７ＣＯ）−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンである。
【０１４７】
一実施形態では、第１のインスリン様化合物は、ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１８ＣＯ）−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンである。
【０１４８】
一実施形態では、第１のインスリン様化合物は、ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１６ＣＯ）−γ−Ｇｌｕ−Ｎ−（γ−Ｇｌｕ））ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンである。
【０１４９】
一実施形態では、第１のインスリン様化合物は、ＮεＢ２９−（Ｎα−（Ａｓｐ−ＯＣ（ＣＨ２）１６ＣＯ）−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンである。
【０１５０】
一実施形態では、第１のインスリン様化合物は、ＮεＢ２９−（Ｎα−（Ｇｌｕ−ＯＣ（ＣＨ２）１４ＣＯ）−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンである。
【０１５１】
一実施形態では、第１のインスリン様化合物は、ＮεＢ２９−（Ｎα−（Ｇｌｕ−ＯＣ（ＣＨ２）１４ＣＯ−）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンである。
【０１５２】
一実施形態では、第１のインスリン様化合物は、ＮεＢ２９−（Ｎα−（Ａｓｐ−ＯＣ（ＣＨ２）１６ＣＯ−）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンである。
【０１５３】
一実施形態では、第１のインスリン様化合物は、ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１６ＣＯ）−α−Ｇｌｕ−Ｎ−（β−Ａｓｐ））ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンである。
【０１５４】
一実施形態では、第１のインスリン様化合物は、ＮεＢ２９−（Ｎα−（Ｇｌｙ−ＯＣ（ＣＨ２）１３ＣＯ）−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンである。
【０１５５】
一実施形態では、第１のインスリン様化合物は、ＮεＢ２９−（Ｎα−（Ｓａｒ−ＯＣ（ＣＨ２）１３ＣＯ）−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンである。
【０１５６】
一実施形態では、第１のインスリン様化合物は、ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１３ＣＯ）−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンである。
【０１５７】
一実施形態では、第１のインスリン様化合物は、（ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１３ＣＯ）−β−Ａｓｐ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンである。
【０１５８】
一実施形態では、第１のインスリン様化合物は、ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１３ＣＯ）−α−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンである。
【０１５９】
一実施形態では、第１のインスリン様化合物は、ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１６ＣＯ）−γ−Ｄ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンである。
【０１６０】
一実施形態では、第１のインスリン様化合物は、ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１４ＣＯ）−β−Ｄ−Ａｓｐ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンである。
【０１６１】
一実施形態では、第１のインスリン様化合物は、ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１４ＣＯ）−β−Ｄ−Ａｓｐ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンである。
【０１６２】
一実施形態では、第１のインスリン様化合物は、ＮεＢ２９−（Ｎ−ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１６ＣＯ−β−Ｄ−Ａｓｐ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンである。
【０１６３】
一実施形態では、第１のインスリン様化合物は、ＮεＢ２９−（Ｎ−ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１４ＣＯ−ＩＤＡ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンである。
【０１６４】
一実施形態では、第１のインスリン様化合物は、ＮεＢ２９−［Ｎ−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１６ＣＯ）−Ｎ−（カルボキシエチル）−Ｇｌｙ］ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンである。
【０１６５】
一実施形態では、第１のインスリン様化合物は、ＮεＢ２９−［Ｎ−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１４ＣＯ）−Ｎ−（カルボキシエチル）−Ｇｌｙ］ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンである。
【０１６６】
一実施形態では、第１のインスリン様化合物は、ＮεＢ２９−［Ｎ−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１４ＣＯ）−Ｎ−（カルボキシメチル）−β−Ａｌａ］ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンである。
【０１６７】
Ｏ４６９
【０１６８】
’３４７誘導体の亜鉛錯体が提供される場合、’３４７誘導体６分子当たり４個を超えるＺｎ２＋イオン、５個のＺｎ２＋イオン、６個のＺｎ２＋イオン、又は最大で１２個のＺｎ２＋イオンが、存在する。一実施形態では、インスリン誘導体は、亜鉛錯体の形態であり、６分子の’３４７誘導体が、２個の亜鉛イオン、３個の亜鉛イオン、４個の亜鉛イオン、５個の亜鉛イオン、６個の亜鉛イオン、７個の亜鉛イオン、８個の亜鉛イオン、９個の亜鉛イオン、又は１０個の亜鉛イオンに結合する。インスリン誘導体の亜鉛錯体の溶液が、このような種の混合物を含有する。
【０１６９】
’３４７誘導体についての調製、処方、薬理、及び関連する他の特徴に関する詳細は、参照によって本明細書に組み込まれるＷＯ２００５／０１２３４７に示される。
【０１７０】
第１のインスリン様化合物は、参照によって本明細書に組み込まれるＷＯ２００７／１２８８１７に開示される化合物のいずれか１つであり得る。
【０１７１】
幾つかの実施形態に関して、第１のインスリン様化合物は、基礎インスリン化合物である。
【０１７２】
本発明の組合せは、１つ又は複数のさらなる第１のインスリン様化合物（複数の場合も有り）も含み得る。
【０１７３】
１つ又は複数のさらなる第１のインスリン様化合物（複数の場合も有り）は、上で提示される第１のインスリン様化合物のいずれかの１つ又は複数であり得る。
【０１７４】
第２のインスリン様化合物
本発明の組合せは、第２のインスリン様化合物よりも即効型である第２のインスリン様化合物を含む。
【０１７５】
これに関して、幾つかの実施形態に関して、第２のインスリン様化合物は、急速作用型インスリンである。
【０１７６】
「急速作用型インスリン」という用語は、インスリン様化合物が、非常に短い時間で効果を生じるインスリン作用を有する、すなわち、作用の開始が３０分以内であり、最大の効果が１〜３時間以内であることを意味する。
【０１７７】
好ましい実施形態では、急速作用型インスリンは、参照によって本明細書に組み込まれるＷＯ２００７／０７４１３３に記載される急速作用型インスリン類似体から選択される。
【０１７８】
好ましい実施形態では、急速作用型インスリンは、以下からなる群から選択される：ＡｓｐＢ２８ヒトインスリン；ＬｙｓＢ２８ＰｒｏＢ２９ヒトインスリン、及びＬｙｓＢ３ＧｌｕＢ２９ヒトインスリン。
【０１７９】
好ましい実施形態では、急速作用型インスリンはＩＡｓｐである。ＩＡｓｐは、天然に存在するＢ２８位のアミノ酸が、Ａｓｐで置き換えられているヒトインスリンである（ＡｓｐＢ２８ヒトインスリン）。ＩＡｓｐは、ＮｏｖｏＲａｐｉｄ（登録商標）（Ｎovo Nordisk A／S）の商品名で販売される。
【０１８０】
幾つかの実施形態に関して、第２のインスリン様化合物は、ボーラスインスリン化合物である。
【０１８１】
本発明の組合せは、１つ又は複数のさらなる第２のインスリン様化合物（複数の場合も有り）も含み得る。
【０１８２】
１つ又は複数のさらなる第１のインスリン様化合物（複数の場合も有り）は、上で提示される第２のインスリン様化合物のいずれかの１つ又は複数であり得る。
【０１８３】
疎水性
幾つかの実施形態に関して、第１のインスリン様化合物は、ヒトインスリンの疎水性と本質的に類似する全体的な疎水性を有する。
【０１８４】
幾つかの実施形態に関して、第１のインスリン様化合物は、約０．０２〜約１０、約０．１〜約５；約０．５〜約５；又は約０．５〜約２の範囲である、疎水性指標ｋ’ｒｅｌを有する。
【０１８５】
可溶性
幾つかの実施形態に関して、第１のインスリン様化合物は、生理学的ｐＨ値で可溶性である。
【０１８６】
幾つかの実施形態に関して、第２のインスリン様化合物は、生理学的ｐＨ値で可溶性である。
【０１８７】
本発明によるインスリン様化合物が「生理学的ｐＨ値で可溶性」であると述べられる場合、それは、インスリン誘導体を、生理学的ｐＨ値で完全に溶解される注射可能なインスリン組成物を調製するために使用することができることを意味する。このような好ましい可溶性は、単独のインスリン様化合物の固有の特性によるものか、又は、インスリン誘導体とビヒクルに含有される１つ又は複数の成分との間の好ましい相互作用の結果であり得る。
【０１８８】
したがって、一実施形態では、本発明は、生理学的ｐＨ値で可溶性である第１のインスリン様化合物、及び／又は生理学的ｐＨ値で可溶性である第２のインスリン様化合物を含む医薬組成物に関する。
【０１８９】
したがって、一実施形態では、本発明は、生理学的ｐＨ値で可溶性である第１のインスリン様化合物、及び生理学的ｐＨ値で可溶性である第２のインスリン様化合物を含む医薬組成物に関する。
【０１９０】
別の実施形態では、本発明は、約６．５〜約８．５の間隔のｐＨ値で可溶性である第１のインスリン様化合物、及び／又は約６．５〜約８．５の間隔のｐＨ値で可溶性である第２のインスリン様化合物を含む医薬組成物に関する。
【０１９１】
幾つかの好ましい実施形態
本発明の幾つかの実施形態に関して、本発明の組合せは、他の１つ又は複数の他の薬学的活性剤（複数の場合も有り）と併せて使用される。
【０１９２】
本発明の幾つかの実施形態に関して、本発明の組合せは、１つ又は複数の他の抗糖尿病薬（複数の場合も有り）、例えば１つ又は複数の経口投与される抗糖尿病薬と併せて使用される。
【０１９３】
本発明の幾つかの実施形態に関して、本発明の組合せは、少なくとも２０歳である被験体を治療するために、使用される。
【０１９４】
本発明の幾つかの実施形態に関して、本発明の組合せは、ボディ・マス・インデックスが３５ｋｇ／ｍ２以下である被験体を治療するために、使用される。
【０１９５】
本発明の幾つかの実施形態に関して、本発明の組合せは、ボディ・マス・インデックスが約２５ｋｇ／ｍ２である被験体を治療するために、使用される。
【０１９６】
本発明の幾つかの実施形態に関して、本発明の組合せは、治療前のベースラインＨｂＡ１ｃレベルが７よりも大きい、例えば約８又は９である被験体を治療するために、使用される。
【０１９７】
本発明の幾つかの実施形態に関して、本発明の組合せは、少なくとも１年、例えば少なくとも５年、例えば少なくとも１０年の期間、糖尿病に罹患している被験体を治療するために、使用される。
【０１９８】
本発明の幾つかの実施形態に関して、本発明の組合せは、２６週間の治療の後に、被験体に対して、７以下のベースラインＨｂＡ１ｃレベルを達成することが可能である。
【０１９９】
本発明の幾つかの実施形態に関して、本発明の組合せは、ＩＧｌａｒの同等の投与量を使用した場合よりも大きく低下したＰＧ（血漿グルコース）インクリメント（increment）を達成することが可能である。
【０２００】
本発明の幾つかの実施形態に関して、本発明の組合せは、約５０％よりも大きく低下したＰＧ（血漿グルコース）インクリメントを達成することが可能である。
【０２０１】
本発明の幾つかの実施形態に関して、本発明の組合せは、１つの１日の食事のさらなる食事のカバレッジとともに、長時間作用型の基礎カバレッジを達成することが可能である。
【０２０２】
本発明の幾つかの実施形態に関して、本発明の組合せは、ＦＰＦ（空腹時血漿グルコース）制御を損なうことなく、同等の用量のＩＧｌａｒと比較して、食後のグルコース逸脱（excursions）の優れた制御を達成することが可能である。
【０２０３】
本発明の幾つかの実施形態に関して、本発明の組合せは、血糖制御の改善を達成することが可能であり、ディナー（dinner）時の、食事の血漿グルコースインクリメントを低下させる。
【０２０４】
本発明の幾つかの実施形態に関して、本発明の組合せは、より大きな割合の被験体を、確認低血糖を伴うことなく、＜７％というＨｂＡ１ｃ標的へと到達させる上で、同等の用量で、ＩＧｌａｒよりも優れている。
【０２０５】
本発明の幾つかの実施形態に関して、本発明の組合せによって、第１のインスリン様化合物及び第２のインスリン様化合物が、ともに、送達される。
【０２０６】
本発明の幾つかの実施形態に関して、本発明の組合せによって、第１のインスリン様化合物及び第２のインスリン様化合物は、同じ配合物において、ともに、送達される。
【０２０７】
本発明の幾つかの実施形態に関して、本発明の組合せによって、第１のインスリン様化合物及び／又は第２のインスリン様化合物は、注射によって、送達される。
【０２０８】
本発明の幾つかの実施形態に関して、本発明の組合せによって、第１のインスリン様化合物及び第２のインスリン様化合物は、注射によって、送達される。
【０２０９】
本発明の幾つかの実施形態に関して、本発明の組合せによって、第１のインスリン様化合物及び第２のインスリン様化合物は、注射によって、ともに、送達される。
【０２１０】
本発明の幾つかの実施形態に関して、本発明の組合せによって、第１のインスリン様化合物及び第２のインスリン様化合物は、注射によって、ともに、及び同じ配合物において、送達される。
【０２１１】
本発明の幾つかの実施形態に関して、本発明の組合せによって、第１のインスリン様化合物及び／又は第２のインスリン様化合物は、インスリンペンデバイスの使用による注射によって、送達される。
【０２１２】
本発明の幾つかの実施形態に関して、本発明の組合せによって、第１のインスリン様化合物及び第２のインスリン様化合物は、インスリンペンデバイスの使用による注射によって、送達される。
【０２１３】
本発明の幾つかの実施形態に関して、本発明の組合せによって、第１のインスリン様化合物及び第２のインスリン様化合物は、インスリンペンデバイスの使用によって、注射によって、ともに、送達される。
【０２１４】
本発明の幾つかの実施形態に関して、本発明の組合せによって、第１のインスリン様化合物及び第２のインスリン様化合物は、インスリンペンデバイスの使用によって、注射によって、ともに、及び同じ配合物において、送達される。
【０２１５】
本発明の幾つかの実施形態に関して、本発明の組合せによって、第１のインスリン様化合物及び／又は第２のインスリン様化合物は、ＦｌｅｘＰｅｎ（登録商標）（複数の場合も有り）又はＦｌｅｘＴｏｕｃｈ（登録商標）（複数の場合も有り）の使用による注射によって、送達される。
【０２１６】
本発明の幾つかの実施形態に関して、本発明の組合せによって、第１のインスリン様化合物及び第２のインスリン様化合物は、ＦｌｅｘＰｅｎ（登録商標）（複数の場合も有り）又はＦｌｅｘＴｏｕｃｈ（登録商標）（複数の場合も有り）の使用による注射によって、送達される。
【０２１７】
本発明の幾つかの実施形態に関して、本発明の組合せによって、第１のインスリン様化合物及び第２のインスリン様化合物は、ＦｌｅｘＰｅｎ（登録商標）（複数の場合も有り）又はＦｌｅｘＴｏｕｃｈ（登録商標）（複数の場合も有り）の使用によって、注射によって、ともに、送達される。
【０２１８】
本発明の幾つかの実施形態に関して、本発明の組合せによって、第１のインスリン様化合物及び第２のインスリン様化合物は、ＦｌｅｘＰｅｎ（登録商標）又はＦｌｅｘＴｏｕｃｈ（登録商標）の使用によって、注射によって、ともに、及び同じ配合物において、送達される。
【０２１９】
ＦｌｅｘＰｅｎ（登録商標）及び／又はＦｌｅｘＴｏｕｃｈ（登録商標）は、Novo Nordisk A/Sの商標である。
【０２２０】
好ましい実施形態では、ＷＯ２００５／０１２３４７（参照によって本明細書に組み込まれる）に開示されるインスリン誘導体は、ＷＯ２００７／０７４１３３（参照によって本明細書に組み込まれる）に記載されるような急速作用型インスリン類似体とともに、配合され得る。
【０２２１】
好ましい実施形態では、第１のインスリン様化合物は、ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１４ＣＯ）−γ−Ｌ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンであり、第２のインスリン様化合物は、ＡｓｐＢ２８ヒトインスリンであり、薬学的に許容可能な担体及び添加剤とともに存在する。
【０２２２】
本明細書における幾つかの例では、ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１４ＣＯ）−γ−Ｌ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンは、デグルデク、インスリンデグルデク、ＩＤｅｇ、又はＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンと称される。
【０２２３】
本明細書における幾つかの例では、ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１４ＣＯ）−γ−Ｌ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン及び第２のインスリン様化合物がＡｓｐＢ２８ヒトインスリンであり、ＩＤｅｇＡｓｐ又はデグルデクプラス（DegludecPlus）と称される。
【０２２４】
他の組合せ
一実施形態では、本発明の組合せは、患者の治療において、又は患者の特定の病態の治療のために、例えば糖尿病の治療において、そのままで（on its own）使用される。
【０２２５】
一実施形態では、本発明の組合せは、本発明による１つ若しくは複数の他の組合せ又はその成分と併せて使用される。
【０２２６】
一実施形態では、本発明の組合せは、１つ又は複数の他の薬学的活性剤と併せて使用される。
【０２２７】
一実施形態では、本発明の組合せは、１つ又は複数の抗糖尿病薬と併せて使用される。
【０２２８】
一実施形態では、本発明の組合せは、１つ又は複数の経口投与される抗糖尿病薬と併せて使用される。
【０２２９】
一実施形態では、本発明の組合せは、１つ又は複数の抗糖尿病薬、例えばスルホニル尿素、ビグアナイド、アルファ−グルコシダーゼ阻害剤、チアゾリジンジオン、ＤＰＰ４阻害剤、グリニド、メトホルミン及びＧＬＰ−１アゴニストのうちの１つ又は複数と併せて使用される。
【０２３０】
配合物
本発明による第１のインスリン様化合物及び本発明による第２のインスリン様化合物は、必要に応じて、約９０／１０％からの比で；約８５／１５％、約８０／２０％、約７０／３０％、約６０／４０％、約５０／５０％、約４０／６０％、約３０／６０％又は約１０／９０％の比で、混合することができる。
【０２３１】
別の実施形態では、本発明による第１のインスリン様化合物及び本発明による第２のインスリン様化合物は、必要に応じて、４０％以上の第１のインスリン様化合物から６０％以下の第２のインスリン様化合物まで、５０％超の第１のインスリン様化合物から５０％未満の第２のインスリン様化合物まで、又は、約７０％以上の第１のインスリン様化合物から約３０％以下の第２のインスリン様化合物までの比で、混合することができる。
【０２３２】
別の実施形態では、本発明は、約１２０ｎｍｏｌ／ｍｌ〜約２４００ｎｍｏｌ／ｍｌ、約４００ｎｍｏｌ／ｍｌ〜約２４００ｎｍｏｌ／ｍｌ、約４００ｎｍｏｌ／ｍｌ〜約１２００ｎｍｏｌ／ｍｌ、約６００ｎｍｏｌ／ｍｌ〜約２４００ｎｍｏｌ／ｍｌ、又は約６００ｎｍｏｌ／ｍｌ〜約１２００ｎｍｏｌ／ｍｌの本発明の第１のインスリン様化合物及び／又は第２のインスリン様化合物を含有する溶液である医薬組成物に関する。
【０２３３】
本発明の組合せにおいて、インスリン様化合物の各々が、約０．０１〜約５Ｕ／ｋｇ、典型的には約０．０３〜約３Ｕ／ｋｇの量でであり得る。
【０２３４】
本発明の一実施形態では、医薬組成物の濃度は、１００Ｕ／ｍｌである。
【０２３５】
本発明の一実施形態では、医薬組成物の濃度は、２００Ｕ／ｍｌである。
【０２３６】
一実施形態では、天然に存在するインスリン、インスリン類似体又は誘導体は、薬学的に許容可能な担体及び／又はビヒクル及び／又は希釈剤及び／又は賦形剤とともに配合される。
【０２３７】
天然に存在するインスリン、インスリン類似体、又は天然に存在するインスリン若しくはインスリン類似体の誘導体を含有する医薬組成物は、本明細書において「インスリン組成物」と称される。本発明を実施するために、インスリン組成物を、このような治療を必要とする患者に、非経口的に投与することができる。非経口投与は、シリンジ、任意でペン様シリンジを用いて、注射、例えば皮下注射、筋肉内注射又は静脈内注射によって、行うことができる。一実施形態では、投与は、皮下注射による。一実施形態では、投与は、筋肉内注射による。一実施形態では、投与は、静脈内注射による。代替的には、非経口投与を、注入ポンプを用いて、行うことができる。さらなる選択肢は、インスリン組成物を、経鼻的に又は経肺的に（pulmonally）、好ましくは、目的のために具体的に設計される、組成物、粉末又は液体において、投与することである。
【０２３８】
注射可能なインスリン組成物は、所望の最終製品を得るために、必要に応じて、成分を溶解及び混合することを伴う、製薬産業の従来の技法を使用して、調製することができる。したがって、或る手順によれば、天然インスリン、類似体又は誘導体は、調製される組成物の最終体積よりも幾分少ない水の量で、溶解される。等張剤、保存剤及び緩衝剤を、必要に応じて添加し、溶液のｐＨ値を、必要に応じて、酸、例えば塩酸、又は塩基、例えば水酸化ナトリウム水溶液を必要に応じて使用して、調整する。最終的に、溶液の体積を、水を用いて調整して、成分の所望の濃度を得る。
【０２３９】
緩衝剤は、典型的には、酢酸ナトリウム、炭酸ナトリウム、シトレート、グリシルグリシン、ヒスチジン、グリシン、リジン、アルギニン、リン酸二水素ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、リン酸ナトリウム、及びトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン、ビシン、トリシン、リンゴ酸、スクシネート、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、アスパラギン酸、又はそれらの混合物からなる群から選択される。これらの具体的な緩衝剤の各々が、本発明の実施形態において有用な代替手段を構成する。
【０２４０】
本発明のさらなる実施形態では、配合物は、フェノール、ｏ−クレゾール、ｍ−クレゾール、ｐ−クレゾール、メチルｐ−ヒドロキシベンゾエート、プロピルｐ−ヒドロキシベンゾエート、２−フェノキシエタノール、ブチルｐ−ヒドロキシベンゾエート、２−フェニルエタノール、ベンジルアルコール、クロロブタノール、及びチオメロサール（thiomerosal）、ブロノポール、安息香酸、イミドウレア（imidurea）、クロロヘキシジン、デヒドロ酢酸ナトリウム、クロロクレゾール、エチルｐ−ヒドロキシベンゾエート、塩化ベンゼトニウム、クロルフェネシン（３ｐ−クロルフェノキシプロパン−１，２−ジオール）、又はそれらの混合物からなる群から選択することができる、薬学的に許容可能な保存剤をさらに含む。本発明のさらなる実施形態では、保存剤は、０．１ｍｇ／ｍｌ〜２０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。本発明のさらなる実施形態では、保存剤は、０．１ｍｇ／ｍｌ〜５ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。本発明のさらなる実施形態では、保存剤は、５ｍｇ／ｍｌ〜１０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。本発明のさらなる実施形態では、保存剤は、１０ｍｇ／ｍｌ〜２０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。これらの具体的な保存剤の各々が、本発明の代替的な実施形態を構成する。医薬組成物における保存剤の使用は、当業者に周知である。便宜のため、Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 19th edition, 1995が参照される。
【０２４１】
本発明のさらなる実施形態では、配合物は、塩（例えば、塩化ナトリウム）、糖若しくは糖アルコール、アミノ酸（例えば、Ｌ−グリシン、Ｌ−ヒスチジン、アルギニン、リジン、イソロイシン、アスパラギン酸、トリプトファン、トレオニン）、アルジトール（例えば、グリセロール（グリセリン）、１，２−プロパンジオール（プロピレングリコール）、１，３−プロパンジオール、１，３−ブタンジオール）、ポリエチレングリコール（例えば、ＰＥＧ４００）、又はそれらの混合物からなる群から選択することができる、等張剤をさらに含む。例えばフルクトース、グルコース、マンノース、ソルボース、キシロース、マルトース、ラクトース、スクロース、トレハロース、デキストラン、プルラン、デキストリン、シクロデキストリン、可溶性デンプン、ヒドロキシエチルデンプン及びカルボキシメチルセルロース−Ｎａを含む、任意の糖、例えば単糖、二糖若しくは多糖、又は水溶性グルカンを、使用することができる。一実施形態では、糖添加剤はスクロースである。糖アルコールは、少なくとも１つの−ＯＨ基を有するＣ４〜Ｃ８の炭化水素と定義され、例えば、マンニトール、ソルビトール、イノシトール、ガラクチトール、ズルシトール、キシリトール及びアラビトールを含む。一実施形態では、糖アルコール添加剤は、マンニトールである。上で言及される糖又は糖アルコールは、個別に又は組み合わせて、使用され得る。糖又は糖アルコールが、液体製剤中に可溶性であり、本発明の方法を使用して達成される安定化効果に悪影響を及ぼさない限りにおいて、使用される量には、固定的な限界は存在しない。一実施形態では、糖又は糖アルコール濃度は、約１ｍｇ／ｍｌ〜約１５０ｍｇ／ｍｌである。本発明のさらなる実施形態では、等張剤は、１ｍｇ／ｍｌ〜５０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。本発明のさらなる実施形態では、等張剤は、１ｍｇ／ｍｌ〜７ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。本発明のさらなる実施形態では、等張剤は、８ｍｇ／ｍｌ〜２４ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。本発明のさらなる実施形態では、等張剤は、２５ｍｇ／ｍｌ〜５０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。これらの具体的な等張剤の各々が、本発明の代替的な実施形態を構成する。医薬組成物における等張剤の使用は、当業者に周知である。便宜のため、Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 19th edition, 1995が参照される。
【０２４２】
典型的な等張剤は、塩化ナトリウム、マンニトール、ジメチルスルホン及びグリセロールであり、典型的な保存剤は、フェノール、ｍ−クレゾール、メチルｐ−ヒドロキシベンゾエート及びベンジルアルコールである。
【０２４３】
好適な緩衝剤の例は、酢酸ナトリウム、グリシルグリシン、ＨＥＰＥＳ（４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタンスルホン酸）、トリス（２−アミノ−２−ヒドロキシメチル−１，３−プロパンジオール）及びリン酸ナトリウムである。
【０２４４】
経鼻投与のための組成物は、例えば、欧州特許第２７２０９７号（Novo Nordisk A/Sに対する）に記載されるように、調製することができる。
【０２４５】
含有するインスリン組成物を、インスリンに感応性を有する状態の治療において、使用することができる。したがって、それらを、例えば、重傷を負った者及び大手術を受けた者において見られることがあるような、１型糖尿病、２型糖尿病及び高血糖の治療において、使用することができる。任意の患者に対する最適な用量レベルは、利用される特定のインスリン、類似体又は誘導体の有効性、患者の年齢、体重、身体活動及び食事を含む、様々な因子に、他の薬剤との考え得る組合せに、並びに、治療対象の状態の重症度に、依存する。投与計画が、当業者によって、既知のインスリン組成物と同様に、しかしながら投与間隔に関する本教示を考慮に入れて、個々の患者の各々について、決定されることが推奨される。
【０２４６】
便宜的に、インスリン組成物を、他の種類のインスリン、例えば、作用がより迅速に開始するインスリン類似体と組み合わせて、使用することができる。このようなインスリン類似体の例は、例えば、公開番号第ＥＰ２１４８２６号（Novo Nordisk A/S）、ＥＰ３７５４３７号（Novo Nordisk A/S）及びＥＰ３８３４７２号（Eli Lilly & Co.）を有する欧州特許出願に記載される。
【０２４７】
一実施形態では、本発明の組成物は、ＷＯ２００７／０７４１３３又はＷＯ２００８／１５２１０６に規定されるようなものである。
【０２４８】
薬物としての使用
一実施形態では、本発明は、真性糖尿病、又は高血糖を特徴とする他の病態、前糖尿病、耐糖能障害、メタボリック症候群、肥満症、悪液質、インビボのβ−細胞消失／死、食欲過多、及び炎症からなる群から選択される疾患又は病態において使用される。一実施形態では、真性糖尿病は、１型又は２型糖尿病である。一実施形態では、真性糖尿病は、２型糖尿病であり、経口抗糖尿病薬治療に失敗している。
【０２４９】
一実施形態では、本発明は、真性糖尿病、又は高血糖を特徴とする他の病態、前糖尿病、耐糖能障害、メタボリック症候群、肥満症、悪液質、インビボのβ−細胞消失／死、食欲過多、及び炎症の治療のための医薬組成物の調製における、本明細書において規定されるような本発明の組合せに関し、ここで、前記治療は、本明細書において規定されるようなものである。
【０２５０】
一実施形態では、本発明は、本明細書において規定されるような方法の説明を含む、使用の説明書に関する。
【図面の簡単な説明】
【０２５１】
【図１】図１はグラフを示す。
【図２】図２はグラフを示す。
【発明を実施するための形態】
【０２５２】
本発明の実施形態
本発明は、以下の段落において、さらに要約される。
【０２５３】
１ａ．  それを必要とする被験体における、前記被験体にとってインスリンの投与が有益であろう病態又は疾患を治療するための、少なくとも第１のインスリン様化合物及び第２のインスリン様化合物を含む組合せであって；前記組合せが、前記被験体に対する１日の最大の食事での前記組合せの投与後における、前記被験体におけるＨｂＡ１ｃのレベルによって決定されるような、前記被験体における有益な血糖制御を達成する量で投与され；前記組合せによる前記有益な血糖制御が、前記被験体に対するＩＧｌａｒの投与後における、前記被験体におけるＨｂＡ１ｃのレベルによって決定されるような、前記被験体における同等の用量のＩＧｌａｒによって達成される、いずれかの血糖制御よりも優れており、及び／又は、前記組合せによる前記有益な血糖制御が、１日の最大の食事での前記組合せの投与後に、前記被験体におけるＨｂＡ１ｃのレベルを、約７以下まで減少させることを含み；前記第１のインスリン様化合物が、前記第２のインスリン様化合物よりも長時間作用型であり；前記組合せが、前記被験体に対する１日の最大の食事で投与される、組合せ。
【０２５４】
１ｂ．  それを必要とする被験体における、前記被験体にとってインスリンの投与が有益であろう病態又は疾患を治療するための、少なくとも第１のインスリン様化合物及び第２のインスリン様化合物を含む組合せであって；前記組合せが、前記被験体に対する１日の最大の食事での前記組合せの投与後における、前記被験体におけるＨｂＡ１ｃのレベルによって決定されるような、前記被験体における有益な血糖制御を達成する量で投与され；前記組合せによる前記有益な血糖制御が、前記被験体に対するＩＧｌａｒの投与後における、前記被験体におけるＨｂＡ１ｃのレベルによって決定されるような、前記被験体における同等の用量のＩＧｌａｒによって達成される、いずれかの血糖制御よりも優れており、及び／又は、前記組合せによる前記有益な血糖制御が、１日の最大の食事での前記組合せの投与後に、前記被験体におけるＨｂＡ１ｃのレベルを、約７以下まで減少させることを含み；前記第１のインスリン様化合物が、前記第２のインスリン様化合物よりも長時間作用型であり；前記組合せが、前記被験体に対する１日の最大の食事で投与され；
前記第１のインスリン様化合物が、少なくとも長時間作用型インスリン、好ましくは超長時間作用型インスリンであり；
前記第１のインスリン様化合物が、天然に存在するインスリンの誘導体であり、又はインスリン類似体であり；
前記第１のインスリン様化合物が、親インスリンのＢ鎖のＮ末端アミノ酸残基のα−アミノ基と、又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε−アミノ基と結合した側鎖を有し、前記側鎖が、一般式（Ｉ）： 
−Ｗ−Ｘ−Ｙ−Ｚ
［式中、
Ｗは、
●  側鎖にカルボン酸基を有するα−アミノ酸残基であって、前記残基が、そのカルボン酸基のうちの１つを用いて、親インスリンのＢ鎖のＮ末端アミノ酸残基のα−アミノ基とともに、又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε−アミノ基とともに、アミド基を形成する、α−アミノ酸残基；
●  アミド結合を介してともに連結される２、３又は４個のα−アミノ酸残基から構成される鎖であって、前記鎖が、アミド結合を介して、親インスリンのＢ鎖のＮ末端アミノ酸残基のα−アミノ基と、又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε−アミノ基と連結され、Ｗのアミノ酸残基が、中性側鎖を有するアミノ酸残基及び側鎖にカルボン酸基を有するアミノ酸残基の群から選択され、その結果、Ｗが、側鎖にカルボン酸基を有するアミノ酸残基を少なくとも１つ有する、鎖；又は
●  Ｘから、親インスリンのＢ鎖のＮ末端アミノ酸残基のα−アミノ基までの、又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε−アミノ基までの共有結合
であり；
Ｘは、
●  −ＣＯ−；
●  −ＣＯＣＨ（ＣＯＯＨ）ＣＯ−；
●  −ＣＯＮ（ＣＨ２ＣＯＯＨ）ＣＨ２ＣＯ−；
●  −ＣＯＮ（ＣＨ２ＣＯＯＨ）ＣＨ２ＣＯＮ（ＣＨ２ＣＯＯＨ）ＣＨ２ＣＯ−；
●  −ＣＯＮ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨ）ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ−；
●  −ＣＯＮ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨ）ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨ）ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ−；
●  −ＣＯＮＨＣＨ（ＣＯＯＨ）（ＣＨ２）４ＮＨＣＯ−；
●  −ＣＯＮ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨ）ＣＨ２ＣＯ−；又は
●  −ＣＯＮ（ＣＨ２ＣＯＯＨ）ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ−
（ただし、
ａ）Ｗがアミノ酸残基又はアミノ酸残基の鎖である場合、Ｘは、下線が付されたカルボニル炭素からの結合を介して、Ｗにおけるアミノ基と、アミド結合を形成する、又は
ｂ）Ｗが共有結合である場合、Ｘは、下線が付されたカルボニル炭素からの結合を介して、親インスリンのＢ鎖におけるＮ末端のα−アミノ基と、又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε−アミノ基と、アミド結合を形成する）
であり；
Ｙは、
●  −（ＣＨ２）ｍ−  （式中、ｍは、６〜３２の範囲の整数である）；
●  １、２又は３個の−ＣＨ＝ＣＨ−基、及び１０〜３２の範囲の、鎖における炭素原子の総数を与えるのに十分な数の−ＣＨ２−基を含む２価の炭化水素鎖；
●  式−（ＣＨ２）ｖＣ６Ｈ４（ＣＨ２）Ｗ−の２価の炭化水素鎖（式中、ｖ及びｗは整数であり、又はｖ及びｗのうちの１つは０であり、その結果、ｖ及びｗの合計が６〜３０の範囲である）
であり；
Ｚは、
●  −ＣＯＯＨ；
●  −ＣＯ−Ａｓｐ；
●  −ＣＯ−Ｇｌｕ；
●  −ＣＯ−Ｇｌｙ；
●  −ＣＯ−Ｓａｒ；
●  −ＣＨ（ＣＯＯＨ）２；
●  −Ｎ（ＣＨ２ＣＯＯＨ）２；
●  −ＳＯ３Ｈ；又は
●  −ＰＯ３Ｈ；
及びその任意のＺｎ２＋錯体
である（ただし、Ｗが共有結合であり、Ｘが−ＣＯ−である場合、Ｚは−ＣＯＯＨとは異なる）］
を有する、組合せ。
【０２５５】
２ａ．  １日の最大の食事が、前記患者によって決定される、前述の段落のいずれか１つに記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【０２５６】
２ｂ．  １日の最大の食事が、前記患者に対して、必ずしもディナーではない、前述の段落のいずれか１つに記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【０２５７】
２ｃ．  「最大の食事で」が、「前記食事中に、並びに前記食事の最初の食物摂取の最大で約３０分前及び最後の食物摂取の最大で約３０分後に」を含む又はそれらからなる、前述の段落のいずれか１つに記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【０２５８】
３ａ．  前記組合せによる前記有益な血糖制御が、前記被験体に対するＩＧｌａｒの投与後における、前記被験体におけるＨｂＡ１ｃのレベルによって決定されるような、前記被験体における同等の用量のＩＧｌａｒによって達成される、いずれかの血糖制御よりも優れており；前記組合せによる前記有益な血糖制御が、１日の最大の食事での前記組合せの投与後に、前記被験体におけるＨｂＡ１ｃのレベルを、約７以下まで減少させることを含む、前述の段落のいずれか１つに記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【０２５９】
３ｂ．  前記組合せが、前記被験体において、長期間の血糖制御を達成する、段落１ａ又は１ｂに記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【０２６０】
４．  組合せが、同等の用量のＩＧｌａｒと比較して、前記被験体に、より少ない夜間低血糖を引き起こすことが可能である、前述の段落のいずれか１つに記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【０２６１】
５．  組合せが、同等の用量のＩＧｌａｒと比較して、前記被験体に、より少ない全低血糖（overall hypoglycaemia）を引き起こすことが可能である、前述の段落のいずれか１つに記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【０２６２】
６．  前記組合せが、前記被験体に１日１回投与される、前述の段落のいずれか１つに記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【０２６３】
７．  前記被験体が、真性糖尿病、例えば１型糖尿病若しくは２型糖尿病、又は高血糖を特徴とする他の病態、前糖尿病、耐糖能障害、メタボリック症候群、肥満症、悪液質、インビボのβ−細胞消失／死、食欲過多、及び炎症からなる群から選択される疾患又は病態に罹患している、前述の段落のいずれか１つに記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【０２６４】
８．  前記被験体が、ＩＩ型糖尿病に罹患している、前述の段落のいずれか１つに記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【０２６５】
９．  前記第１のインスリン様化合物が、前記第２のインスリン様化合物よりも大きい量で、前記組合せ中に存在する、前述の段落のいずれか１つに記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【０２６６】
１０ａ．  前記第１のインスリン様化合物が、前記組合せにおいて、第２のインスリン様化合物のモル量に基づいて、約５５％超、又は約６０％超、又は約６５％超、又は約７０％超、又は約７５％超、又は約８０％超のモル量で、前記組合せ中に存在する、前述の段落のいずれか１つに記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【０２６７】
１０ｂ．  前記第１のインスリン様化合物が、前記組合せにおいて、第２のインスリン様化合物のモル量に基づいて、約７０％以上のモル量で、前記組合せ中に存在する、前述の段落のいずれか１つに記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【０２６８】
１１ａ．  前記第１のインスリン様化合物が、前記組合せにおいて、第２のインスリン様化合物のモル量に基づいて、約７０％のモル量で、前記組合せ中に存在する、前述の段落のいずれか１つに記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【０２６９】
１１ｂ．  前記第１のインスリン様化合物が、前記組合せにおいて、第２のインスリン様化合物のモル量に基づいて、約８５％のモル量で、前記組合せ中に存在する、前述の段落のいずれか１つに記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【０２７０】
１２ａ．  前記第２のインスリン様化合物が、前記組合せにおいて、第１のインスリン様化合物のモル量に基づいて、約５５％未満、又は約４０％未満、又は約３５％未満、又は約３０％未満、又は約２５％未満、又は約２０％未満のモル量で、前記組合せ中に存在する、前述の段落のいずれか１つに記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【０２７１】
１２ｂ．  前記第２のインスリン様化合物が、前記組合せにおいて、第１のインスリン様化合物のモル量に基づいて、約３０％以下のモル量で、前記組合せ中に存在する、前述の段落のいずれか１つに記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【０２７２】
１２ｃ．  前記第２のインスリン様化合物が、前記組合せにおいて、第１のインスリン様化合物のモル量に基づいて、約１５％のモル量で、前記組合せ中に存在する、前述の段落のいずれか１つに記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【０２７３】
１３．  前記第２のインスリン様化合物が、前記組合せにおいて、第１のインスリン様化合物のモル量に基づいて、約３０％のモル量で、前記組合せ中に存在する、前述の段落のいずれか１つに記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【０２７４】
１４ａ．  前記組合せが、薬学的に許容可能な担体及び／又はビヒクル及び／又は希釈剤及び／又は賦形剤を含む、前述の段落のいずれか１つに記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【０２７５】
１４ｂ．  前記第１のインスリン様化合物が、少なくとも長時間作用型インスリンである、前述の段落のいずれか１つに記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【０２７６】
１４ｃ．  前記第１のインスリン様化合物が、超長時間作用型インスリンである、前述の段落のいずれか１つに記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【０２７７】
１４ｄ．  前記第１のインスリン様化合物が、天然に存在するインスリンの誘導体である、又はインスリン類似体である、前述の段落のいずれか１つに記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【０２７８】
１５．  前記第１のインスリン様化合物が、ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１４ＣＯ）−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１５ＣＯ）−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１６ＣＯ）−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１７ＣＯ）−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１８ＣＯ）−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１６ＣＯ）−γ−Ｇｌｕ−Ｎ−（γ−Ｇｌｕ））ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；ＮεＢ２９−（Ｎα−（Ａｓｐ−ＯＣ（ＣＨ２）１６ＣＯ）−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；ＮεＢ２９−（Ｎα−（Ｇｌｕ−ＯＣ（ＣＨ２）１４ＣＯ）−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；ＮεＢ２９−（Ｎα−（Ｇｌｕ−ＯＣ（ＣＨ２）１４ＣＯ−）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；ＮεＢ２９−（Ｎα−（Ａｓｐ−ＯＣ（ＣＨ２）１６ＣＯ−）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１６ＣＯ）−α−Ｇｌｕ−Ｎ−（β−Ａｓｐ））ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；ＮεＢ２９−（Ｎα−（Ｇｌｙ−ＯＣ（ＣＨ２）１３ＣＯ）−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；ＮεＢ２９−（Ｎα−（Ｓａｒ−ＯＣ（ＣＨ２）１３ＣＯ）−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１３ＣＯ）−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；（ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１３ＣＯ）−β−Ａｓｐ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１３ＣＯ）−α−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１６ＣＯ）−γ−Ｄ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１４ＣＯ）−β−Ｄ−Ａｓｐ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１４ＣＯ）−β−Ｄ−Ａｓｐ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；ＮεＢ２９−（Ｎ−ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１６ＣＯ−β−Ｄ−Ａｓｐ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；ＮεＢ２９−（Ｎ−ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１４ＣＯ−ＩＤＡ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；ＮεＢ２９−［Ｎ−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１６ＣＯ）−Ｎ−（カルボキシエチル）−Ｇｌｙ］ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；ＮεＢ２９−［Ｎ−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１４ＣＯ）−Ｎ−（カルボキシエチル）−Ｇｌｙ］ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン；及びＮεＢ２９−［Ｎ−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１４ＣＯ）−Ｎ−（カルボキシメチル）−β−Ａｌａ］ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンからなる群から選択される、前述の段落のいずれか１つに記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【０２７９】
１６．  前記第１のインスリン様化合物が、ＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンである、前述の段落のいずれか１つに記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【０２８０】
１７．  前記第２のインスリン様化合物が、急速作用型インスリンである、前述の段落のいずれか１つに記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【０２８１】
１８．  前記第２のインスリン様化合物が、天然に存在するインスリンの誘導体である、又はインスリン類似体である、前述の段落のいずれか１つに記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【０２８２】
１９．  前記第２のインスリン様化合物が、アミノ酸残基のうちの少なくとも１つが置換されているインスリンを含む、前述の段落のいずれか１つに記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【０２８３】
２０．  前記第２のインスリン様化合物が、ＡｓｐＢ２８ヒトインスリン；ＬｙｓＢ２８ＰｒｏＢ２９ヒトインスリン及びＬｙｓＢ３ＧｌｕＢ２９ヒトインスリンからなる群から選択される、前述の段落のいずれか１つに記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【０２８４】
２１．  前記第２のインスリン様化合物が、ＡｓｐＢ２８ヒトインスリンである、前述の段落のいずれか１つに記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【０２８５】
２２．  それを必要とする被験体における、前記被験体にとってインスリンの投与が有益であろう病態又は疾患を治療するための、少なくとも第１のインスリン様化合物及び第２のインスリン様化合物を含む組合せであって；前記組合せが、前記被験体に対する１日の最大の食事での前記組合せの投与後における、前記被験体におけるＨｂＡ１ｃのレベルによって決定されるような、前記被験体における有益な血糖制御を達成する量で投与され；前記組合せによる前記有益な血糖制御が、前記被験体に対するＩＧｌａｒの投与後における、前記被験体におけるＨｂＡ１ｃのレベルによって決定されるような、前記被験体における同等の用量のＩＧｌａｒによって達成される、いずれかの血糖制御よりも優れており、及び／又は、前記組合せによる前記有益な血糖制御が、１日の最大の食事での前記組合せの投与後に、前記被験体におけるＨｂＡ１ｃのレベルを、約７以下まで減少させることを含み；前記第１のインスリン様化合物が、前記第２のインスリン様化合物よりも長時間作用型であり；前記組合せが、前記被験体に対する１日の最大の食事で投与され；
前記第１のインスリン様化合物が、少なくとも長時間作用型インスリン、好ましくは超長時間作用型インスリンであり；
前記第１のインスリン様化合物が、天然に存在するインスリンの誘導体であり、又はインスリン類似体であり；
前記第１のインスリン様化合物が、親インスリンのＢ鎖のＮ末端アミノ酸残基のα−アミノ基と、又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε−アミノ基と結合した側鎖を有し、前記側鎖が、一般式（Ｉ）：
−Ｗ−Ｘ−Ｙ−Ｚ
［式中、
Ｗは、
●  側鎖にカルボン酸基を有するα−アミノ酸残基であって、前記残基が、そのカルボン酸基のうちの１つを用いて、親インスリンのＢ鎖のＮ末端アミノ酸残基のα−アミノ基とともに、又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε−アミノ基とともに、アミド基を形成する、α−アミノ酸残基；
●  アミド結合を介してともに連結される２、３又は４個のα−アミノ酸残基から構成される鎖であって、前記鎖が、アミド結合を介して、親インスリンのＢ鎖のＮ末端アミノ酸残基のα−アミノ基と、又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε−アミノ基と連結され、Ｗのアミノ酸残基が、中性側鎖を有するアミノ酸残基及び側鎖にカルボン酸基を有するアミノ酸残基の群から選択され、その結果、Ｗが、側鎖にカルボン酸基を有するアミノ酸残基を少なくとも１つ有する、鎖；又は
●  Ｘから、親インスリンのＢ鎖のＮ末端アミノ酸残基のα−アミノ基までの、又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε−アミノ基までの共有結合
であり；
Ｘは、
●  −ＣＯ−；
●  −ＣＯＣＨ（ＣＯＯＨ）ＣＯ−；
●  −ＣＯＮ（ＣＨ２ＣＯＯＨ）ＣＨ２ＣＯ−；
●  −ＣＯＮ（ＣＨ２ＣＯＯＨ）ＣＨ２ＣＯＮ（ＣＨ２ＣＯＯＨ）ＣＨ２ＣＯ−；
●  −ＣＯＮ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨ）ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ−；
●  −ＣＯＮ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨ）ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨ）ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ−；
●  −ＣＯＮＨＣＨ（ＣＯＯＨ）（ＣＨ２）４ＮＨＣＯ−；
●  −ＣＯＮ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨ）ＣＨ２ＣＯ−；又は
●  −ＣＯＮ（ＣＨ２ＣＯＯＨ）ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ−
（ただし、
ａ）Ｗがアミノ酸残基又はアミノ酸残基の鎖である場合、Ｘは、下線が付されたカルボニル炭素からの結合を介して、Ｗにおけるアミノ基と、アミド結合を形成する、又は
ｂ）Ｗが共有結合である場合、Ｘは、下線が付されたカルボニル炭素からの結合を介して、親インスリンのＢ鎖におけるＮ末端のα−アミノ基と、又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε−アミノ基と、アミド結合を形成する）
であり；
Ｙは、
●  −（ＣＨ２）ｍ−  （式中、ｍは、６〜３２の範囲の整数である）；
●  １、２又は３個の−ＣＨ＝ＣＨ−基、及び１０〜３２の範囲の、鎖における炭素原子の総数を与えるのに十分な数の−ＣＨ２−基を含む２価の炭化水素鎖；
●  式−（ＣＨ２）ｖＣ６Ｈ４（ＣＨ２）Ｗ−の２価の炭化水素鎖（式中、ｖ及びｗは整数であり、又はｖ及びｗのうちの１つは０であり、その結果、ｖ及びｗの合計が６〜３０の範囲である）
であり；
Ｚは、
●  −ＣＯＯＨ；
●  −ＣＯ−Ａｓｐ；
●  −ＣＯ−Ｇｌｕ；
●  −ＣＯ−Ｇｌｙ；
●  −ＣＯ−Ｓａｒ；
●  −ＣＨ（ＣＯＯＨ）２；
●  −Ｎ（ＣＨ２ＣＯＯＨ）２；
●  −ＳＯ３Ｈ；又は
●  −ＰＯ３Ｈ；
及びその任意のＺｎ２＋錯体
である（ただし、Ｗが共有結合であり、Ｘが−ＣＯ−である場合、Ｚは−ＣＯＯＨとは異なる）］を有し；
前記第２のインスリン様化合物が、ＡｓｐＢ２８ヒトインスリン；ＬｙｓＢ２８ＰｒｏＢ２９ヒトインスリン及びＬｙｓＢ３ＧｌｕＢ２９ヒトインスリンからなる群から選択される、組合せ。
【０２８６】
２３．  前記組合せによる前記有益な血糖制御が、前記被験体に対するＩＧｌａｒの投与後における、前記被験体におけるＨｂＡ１ｃのレベルによって決定されるような、前記被験体における同等の用量のＩＧｌａｒによって達成される、いずれかの血糖制御よりも優れており；前記組合せによる前記有益な血糖制御が、１日の最大の食事での前記組合せの投与後に、前記被験体におけるＨｂＡ１ｃのレベルを、約７以下まで減少させることを含む、段落２２に記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【０２８７】
２４．  それを必要とする被験体における、前記被験体にとってインスリンの投与が有益であろう病態又は疾患を治療するための、少なくとも第１のインスリン様化合物及び第２のインスリン様化合物を含む組合せであって；前記組合せが、前記被験体に対する１日の最大の食事での前記組合せの投与後における、前記被験体におけるＨｂＡ１ｃのレベルによって決定されるような、前記被験体における有益な血糖制御を達成する量で投与され；前記組合せによる前記有益な血糖制御が、前記被験体に対するＩＧｌａｒの投与後における、前記被験体におけるＨｂＡ１ｃのレベルによって決定されるような、前記被験体における同等の用量のＩＧｌａｒによって達成される、いずれかの血糖制御よりも優れており、及び／又は、前記組合せによる前記有益な血糖制御が、１日の最大の食事での前記組合せの投与後に、前記被験体におけるＨｂＡ１ｃのレベルを、約７以下まで減少させることを含み；前記第１のインスリン様化合物が、前記第２のインスリン様化合物よりも長時間作用型であり；前記組合せが、前記被験体に対する１日の最大の食事で投与され；
前記第１のインスリン様化合物が、ＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンであり；
前記第２のインスリン様化合物が、ＡｓｐＢ２８ヒトインスリンである、組合せ。
【０２８８】
２５．  前記組合せによる前記有益な血糖制御が、前記被験体に対するＩＧｌａｒの投与後における、前記被験体におけるＨｂＡ１ｃのレベルによって決定されるような、前記被験体における同等の用量のＩＧｌａｒによって達成される、いずれかの血糖制御よりも優れており；前記組合せによる前記有益な血糖制御が、１日の最大の食事での前記組合せの投与後に、前記被験体におけるＨｂＡ１ｃのレベルを、約７以下まで減少させることを含む、段落２４に記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【０２８９】
２６ａ．  それを必要とする被験体における、前記被験体にとってインスリンの投与が有益であろう病態又は疾患を治療するための、少なくとも第１のインスリン様化合物及び第２のインスリン様化合物を含む組合せであって；前記組合せが、前記被験体に対する１日の最大の食事での前記組合せの投与後における、前記被験体におけるＨｂＡ１ｃのレベルによって決定されるような、前記被験体における有益な血糖制御を達成する量で投与され；前記組合せによる前記有益な血糖制御が、前記被験体に対するＩＧｌａｒの投与後における、前記被験体におけるＨｂＡ１ｃのレベルによって決定されるような、前記被験体における同等の用量のＩＧｌａｒによって達成される、いずれかの血糖制御よりも優れており、及び／又は、前記組合せによる前記有益な血糖制御が、１日の最大の食事での前記組合せの投与後に、前記被験体におけるＨｂＡ１ｃのレベルを、約７以下まで減少させることを含み；前記第１のインスリン様化合物が、前記第２のインスリン様化合物よりも長時間作用型であり；前記組合せが、前記被験体に対する１日の最大の食事で投与され；
前記第１のインスリン様化合物が、ＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンであり；
前記第２のインスリン様化合物が、ＡｓｐＢ２８ヒトインスリンであり；
前記第１のインスリン様化合物が、約７０％の量で、前記組合せ中に存在し；
前記第２のインスリン様化合物が、約３０％の量で、前記組合せ中に存在する、組合せ。
【０２９０】
２６ｂ．  それを必要とする被験体における、前記被験体にとってインスリンの投与が有益であろう病態又は疾患を治療するための、少なくとも第１のインスリン様化合物及び第２のインスリン様化合物を含む組合せであって；前記組合せが、前記被験体に対する１日の最大の食事での前記組合せの投与後における、前記被験体におけるＨｂＡ１ｃのレベルによって決定されるような、前記被験体における有益な血糖制御を達成する量で投与され；前記組合せによる前記有益な血糖制御が、前記被験体に対するＩＧｌａｒの投与後における、前記被験体におけるＨｂＡ１ｃのレベルによって決定されるような、前記被験体における同等の用量のＩＧｌａｒによって達成される、いずれかの血糖制御よりも優れており、及び／又は、前記組合せによる前記有益な血糖制御が、１日の最大の食事での前記組合せの投与後に、前記被験体におけるＨｂＡ１ｃのレベルを、約７以下まで減少させることを含み；前記第１のインスリン様化合物が、前記第２のインスリン様化合物よりも長時間作用型であり；前記組合せが、前記被験体に対する１日の最大の食事で投与され；
前記第１のインスリン様化合物が、ＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンであり；
前記第２のインスリン様化合物が、ＡｓｐＢ２８ヒトインスリンであり；
前記第１のインスリン様化合物が、約  の量で、前記組合せ中に存在し；
前記第１のインスリン様化合物が、約７０％以上の量で、前記組合せ中に存在し；
前記第２のインスリン様化合物が、約３０％以下の量で、前記組合せ中に存在する、組合せ。
【０２９１】
２７．  前記組合せによる前記有益な血糖制御が、前記被験体に対するＩＧｌａｒの投与後における、前記被験体におけるＨｂＡ１ｃのレベルによって決定されるような、前記被験体における同等の用量のＩＧｌａｒによって達成される、いずれかの血糖制御よりも優れており；前記組合せによる前記有益な血糖制御が、１日の最大の食事での前記組合せの投与後に、前記被験体におけるＨｂＡ１ｃのレベルを、約７以下まで減少させることを含む、段落２６ａ又は２６ｂに記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【０２９２】
２８．  それを必要とする被験体における、前記被験体にとってインスリンの投与が有益であろう病態又は疾患を治療するための、少なくとも第１のインスリン様化合物及び第２のインスリン様化合物を含む組合せであって；前記組合せが、前記被験体に対する１日の最大の食事での前記組合せの投与後に、前記被験体におけるＨｂＡ１ｃのレベルを、約７以下まで減少させることによって、前記被験体における血糖制御を達成する量で投与され；前記第１のインスリン様化合物が、前記第２のインスリン様化合物よりも長時間作用型である、組合せ。
【０２９３】
２９．  それを必要とする被験体における、前記被験体にとってインスリンの投与が有益であろう病態又は疾患を治療するための、少なくとも第１のインスリン様化合物及び第２のインスリン様化合物を含む組合せであって；前記組合せが、前記被験体に対する１日の最大の食事での前記組合せの投与後に、前記被験体におけるＨｂＡ１ｃのレベルに影響を及ぼすことによって、前記被験体における同等の用量のＩＧｌａｒと比較して、優れた血糖制御を達成する量で投与され；前記第１のインスリン様化合物が、前記第２のインスリン様化合物よりも長時間作用型であり；前記組合せが、前記被験体に対する１日の最大の食事で投与される、組合せ。
【０２９４】
３０．  それを必要とする被験体における、前記被験体にとってインスリンの投与が有益であろう病態又は疾患を治療するための、少なくとも第１のインスリン様化合物及び第２のインスリン様化合物を含む組合せであって；前記組合せが、前記被験体に対する１日の最大の食事での前記組合せの投与後に、前記被験体におけるＨｂＡ１ｃのレベルを、約７以下まで減少させることによって、前記被験体における血糖制御を達成する量で投与され；前記第１のインスリン様化合物が、前記第２のインスリン様化合物よりも長時間作用型であり；前記組合せが、前記被験体に対する１日の最大の食事で投与される、組合せ。
【０２９５】
３１．  １日の最大の食事が、前記患者によって決定される、段落２４〜３０のいずれか１つに記載の組合せ。
【０２９６】
３２．  １日の最大の食事が、前記患者によって決定され、必ずしも夕食（evening meal）ではない、段落２４〜３０のいずれか１つに記載の組合せ。
【０２９７】
３３．  前記第１のインスリン様化合物が、最大で２４時間、インスリン作用を有する、前述の段落のいずれか１つに記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【０２９８】
３４．  前記第１のインスリン様化合物が、２４時間を超える時間、インスリン作用を有する、前述の段落のいずれか１つに記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【０２９９】
３５．  前記第１のインスリン様化合物が、少なくとも１２時間、例えば少なくとも１２時間且つ２４時間未満の、又は少なくとも１８時間、例えば少なくとも２４時間の半減期を有し、前記半減期は、臨床例１に記載されるように、決定することができる、前述の段落のいずれか１つに記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【０３００】
３６．  前記第１のインスリン様化合物が、少なくとも２０時間の、グルコース制御の喪失までの平均時間によって規定される、長期的な作用プロファイルを有し、前記グルコース制御の喪失までの平均時間は、臨床例１に記載されるように、決定することができる、前述の段落のいずれか１つに記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【０３０１】
３７．  前記第１のインスリン様化合物が、前記インスリンの投与後における、少なくとも２０時間、例えば、２０〜５０時間、２０〜４５時間、２４〜４５時間、２６〜４５時間、３０〜５０時間、３５〜５０時間、少なくとも２６時間、２６時間超、２６時間超且つ最大で５０時間、２６時間超且つ最大で５０時間、少なくとも２８時間、２８〜５０時間、少なくとも３０時間、３０〜４５時間、少なくとも３５時間、３５〜４５時間、少なくとも３８時間、少なくとも約４０時間  最大で約４５時間の、又は約４０時間の、グルコース制御の喪失までの平均時間によって規定される、十分な長期的な作用プロファイルを有し、前記長期的な作用プロファイルは、本明細書における臨床例１に記載されるように、決定することができる、前述の段落のいずれか１つに記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【０３０２】
３８．  前記第１のインスリン様化合物が、少なくとも１２時間、少なくとも１４時間、少なくとも１６時間、少なくとも１８時間、少なくとも２０時間、少なくとも２２時間、少なくとも２４時間、１２〜５０時間、１４〜５０時間、１６〜５０時間、１８〜５０時間、２０〜５０時間、２２〜５０時間、２４〜５０時間、１２〜４０時間、１４〜４０時間、１６〜４０時間、１８〜４０時間、少なくとも２０時間、少なくとも２４時間且つ最大で５０時間、１８〜３６時間、２０〜３６時間、２２〜３６時間、２４〜３６時間、２５〜３６時間、２６〜３６時間の平均終末半減期によって規定される、長期的な作用プロファイルを有し、前記平均終末半減期は、本明細書における臨床例１に記載されるように、決定することができる、前述の段落のいずれか１つに記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【０３０３】
３９．  前記第１のインスリン様化合物及び第２のインスリン様化合物が、同じ配合物中に存在する、前述の段落のいずれか１つに記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【０３０４】
４０．  前記組合せによる前記有益な血糖制御が、約２６週間の期間にわたる１日の最大の食事での前記組合せの投与後に、前記被験体におけるＨｂＡ１ｃのレベルを、約７以下まで減少させることを含む、前述の段落のいずれか１つに記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【０３０５】
５０．  前記組合せによる前記有益な血糖制御が、約２６週間未満の期間にわたる１日の最大の食事での前記組合せの投与後に、前記被験体におけるＨｂＡ１ｃのレベルを、約７以下まで減少させることを含む、前述の段落のいずれか１つに記載の血糖制御を達成するための組合せ。
【０３０６】
５１．  有益な血糖制御を達成するために、前述の段落のいずれか１つに規定されるような組合せを、前記被験体に投与することを含む、それを必要とする被験体を治療する方法。
【０３０７】
５２．  被験体において有益な血糖制御を達成するための薬物の調製における、前述の段落のいずれか１つに規定されるような組合せの使用。
【０３０８】
５３．  前記被験体が、ＩＩ型糖尿病に罹患している、段落５１に記載の方法又は段落５２に記載の使用。
【０３０９】
５４．  前記組合せが、約０．４Ｕ／ｋｇの量で投与される、前述の段落のいずれか１つに記載の血糖制御を達成するための組合せ又は方法又は使用。
【０３１０】
略語
以下の略語が、明細書及び実施例において使用されている：
Ａａｄ：アルファ−アミノ−アジピン酸（ホモグルタミン酸）
Ｂｚｌ：Ｂｎ：ベンジル
ＤＩＥＡ：Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＩＤＡ：イミノ二酢酸
Ｓａｒ：サルコシン（Ｎ−メチル−グリシン）
ｔＢｕ：ｔｅｒｔ−ブチル
ＴＳＴＵ：Ｏ−（Ｎ−スクシンイミジル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウム  テトラフルオロボレート
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
ＥｔＯＡｃ：エチル  アセテート
ＤＩＰＥＡ：ジイソプロピルエチルアミン
ＨＯＡｔ：１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール
ＴＥＡ：トリエチルアミン
Ｓｕ：スクシンイミジル＝２，５−ジオキソ−ピロリジン−１−イル
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸
ＤＣＭ：ジクロロメタン
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド
ＴＬＣ：薄層クロマトグラフィ
ＲＴ：室温
ｈＧｌｕ：ホモグルタミン酸
α−Ａｓｐ：Ｌ型の−ＨＮＣＨ（ＣＯ−）ＣＨ２ＣＯＯＨ
β−Ａｓｐ：Ｌ型の−ＨＮＣＨ（ＣＯＯＨ）ＣＨ２ＣＯ−
α−Ｇｌｕ：Ｌ型の−ＨＮＣＨ（ＣＯ−）ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨ
γ−Ｇｌｕ：Ｌ型の−ＨＮＣＨ（ＣＯＯＨ）ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ−
α−ｈＧｌｕ：Ｌ型の−ＨＮＣＨ（ＣＯ−）ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨ
δ−ｈＧｌｕ：Ｌ型の−ＨＮＣＨ（ＣＯＯＨ）ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ−
β−Ａｌａ：−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＯＯＨ
Ｓａｒ：サルコシン（Ｎ−メチルグリシン）
デグルデク：ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１４ＣＯ）−γ−Ｌ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン
ＡｓｐＢ２８：Ｂ２８位にＡｓｐを有するヒトインスリン類似体
ＩＤｅｇＡｓｐ：ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１４ＣＯ）−γ−Ｌ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン及びＡｓｐＢ２８の組合せ
デグルデクプラス：ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１４ＣＯ）−γ−Ｌ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン及びＡｓｐＢ２８の組合せ
ＯＡＤ：経口抗糖尿病薬
【０３１１】
本発明は、以下の実施例によって、さらに例示されるが、この実施例は、保護の範囲を限定するものと解釈されるべきでない。
【０３１２】
実施例
導入
いずれかのインスリン製品の臨床効果を調査するために、本発明の使用の様式を表す条件下で、臨床試験を実施することが必要である。承認及び登録を得る目的で糖尿病の治療のための化合物を調査する臨床試験は、地方当局によって提供される指針（欧州の指針が例として役立つ：Note for Guidance on Clinical Investigations of Medicinal Products in the Treatment of diabetes Mellitus, EMEA, London, 2002）に従うことが必要である。
【０３１３】
長い作用期間を有するインスリン様製品の一例は、ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１４ＣＯ）−γ−Ｌ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン（ＷＯ２００５／０１２３４７における実施例１）に対応するＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンである。この化合物は、ＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンと称されることがある。
【０３１４】
本発明の実施例（臨床例４及び５）において、ＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン及びＩＡｓｐの組合せを、異なる食事時間での投与による臨床効果に関して、調査した。
【０３１５】
我々は、驚くべきことに、有益な血糖制御（本明細書において規定されるような）を、最大の食事の時間と同じ時間に、又は最大の食事の時間の前後に、典型的には、最大の食事の時間の少し前、例えば約３０分前から、又は最大の食事の時間の少し後、例えば約３０分後までに、本発明の組合せを投与することによって、達成することができることを見出した。
【０３１６】
調製例１〜３７は、ＥＰ２２７５４３９から導かれ、これらが本発明に関する背景情報を提供するため、情報目的のために提示される。
【０３１７】
臨床例１〜４は、ＰＣＴ／ＥＰ２０１１／０６８８７０から導かれ、これらが本発明に関する背景情報を提供するため、情報目的のために提示される。
【０３１８】
薬理学的研究の実施例において、我々は、アッセイ（Ｉ）、（ＩＩ）及び（ＩＩＩ）を提示する。これらのアッセイは、インスリン様化合物に関する特性を決定するのに有用である。結果は、本発明の組合せにおける第１のインスリン様化合物としての使用に好適である幾つかのインスリン様化合物について提示される。
【０３１９】
疎水性研究の実施例において、我々は、本発明の組合せにおける第１のインスリン様化合物としての使用に好適である幾つかのインスリン様化合物に関する疎水性データを提示する。
【０３２０】
調製例
調製例１
ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１４ＣＯ）−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンの合成
────────────────────────────────────
この化合物の調製方法は、参照によって本明細書に組み込まれる特許出願ＷＯ２００５／０１２３４７の実施例１に記載される。
【０３２１】
調製例２
ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１６ＣＯ）−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンの合成
この化合物の調製方法は、参照によって本明細書に組み込まれる特許出願ＷＯ２００５／０１２３４７の実施例２に記載される。
【０３２２】
調製例３
ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１６ＣＯ）−γ−Ｇｌｕ−Ｎ−（γ−Ｇｌｕ））ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンの合成
この化合物の調製方法は、参照によって本明細書に組み込まれる特許出願ＷＯ２００５／０１２３４７の実施例３に記載される。
【０３２３】
調製例４
ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１４ＣＯ）−γ−Ｌ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンの合成
この化合物の調製方法は、参照によって本明細書に組み込まれる特許出願ＷＯ２００５／０１２３４７の実施例４に記載される。
【０３２４】
調製例５
ＮεＢ２９−（Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１６ＣＯ）−γ−Ｌ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンの合成
────────────────────────────────────
この化合物の調製方法は、参照によって本明細書に組み込まれる特許出願ＷＯ２００５／０１２３４７の実施例５に記載される。
【０３２５】
調製例６
ＮεＢ２９−（Ｎ−（Ｌ−Ａｓｐ−ＯＣ（ＣＨ２）１６ＣＯ）−γ−Ｌ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンの合成
この化合物の調製方法は、参照によって本明細書に組み込まれる特許出願ＷＯ２００５／０１２３４７の実施例６に記載される。
【０３２６】
────────────────────────────────────
調製例７
ＮεＢ２９−（Ｎ−（Ｌ−Ｇｌｕ−ＯＣ（ＣＨ２）１４ＣＯ−γ−Ｌ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンＯ４５６の合成
この化合物の調製方法は、参照によって本明細書に組み込まれる特許出願ＷＯ２００５／０１２３４７の実施例７に記載される。
【０３２７】
調製例８
ＮεＢ２９−（Ｎ−（Ｌ−Ｇｌｕ−ＯＣ（ＣＨ２）１４ＣＯ−）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンの合成
この化合物の調製方法は、参照によって本明細書に組み込まれる特許出願ＷＯ２００５／０１２３４７の実施例８に記載される。
【０３２８】
調製例９
────────────────────────────────────
ＮεＢ２９−（Ｎ−ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１６ＣＯ−α−Ｌ−Ｇｌｕ）−Ｎ−（β−Ｌ−Ａｓｐ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンの合成
この化合物の調製方法は、参照によって本明細書に組み込まれる特許出願ＷＯ２００５／０１２３４７の実施例９に記載される。
────────────────────────────────────
【０３２９】
調製例１０
ＮεＢ２９−（Ｎ−ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１５ＣＯ−γ−Ｌ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンの合成
この化合物の調製方法は、参照によって本明細書に組み込まれる特許出願ＷＯ２００５／０１２３４７の実施例１０に記載される。
【０３３０】
────────────────────────────────────
調製例１１
ＮεＢ２９−（Ｎ−（Ｇｌｙ−ＯＣ（ＣＨ２）１３ＣＯ−γ−Ｌ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンの合成
この化合物の調製方法は、参照によって本明細書に組み込まれる特許出願ＷＯ２００５／０１２３４７の実施例１１に記載される。
────────────────────────────────────
【０３３１】
調製例１２
ＮεＢ２９−（Ｎ−（Ｌ−Ｓａｒ−ＯＣ（ＣＨ２）１３ＣＯ−γ−Ｌ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンの合成
この化合物の調製方法は、参照によって本明細書に組み込まれる特許出願ＷＯ２００５／０１２３４７の実施例１２に記載される。
────────────────────────────────────
【０３３２】
調製例１３
ＮεＢ２９−（Ｎ−ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１６ＣＯ−α−Ｌ−Ａｓｐ）−Ｎ−（β−Ｌ−Ａｓｐ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンの合成
この化合物の調製方法は、参照によって本明細書に組み込まれる特許出願ＷＯ２００５／０１２３４７の実施例１３に記載される。
────────────────────────────────────
【０３３３】
調製例１４
ＮεＢ２９−（Ｎ−（Ｇｌｙ−ＯＣ（ＣＨ２）１４ＣＯ−γ−Ｌ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンの合成
この化合物の調製方法は、参照によって本明細書に組み込まれる特許出願ＷＯ２００５／０１２３４７の実施例１４に記載される。
【０３３４】
調製例１５
ＮεＢ２９−（Ｎ−ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１４ＣＯ−β−Ｌ−Ａｓｐ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンの合成
この化合物の調製方法は、参照によって本明細書に組み込まれる特許出願ＷＯ２００５／０１２３４７の実施例１５に記載される。
────────────────────────────────────
【０３３５】
調製例１６
ＮεＢ２９−（Ｎ−ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１６ＣＯ−β−Ｌ−Ａｓｐ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンの合成
この化合物の調製方法は、参照によって本明細書に組み込まれる特許出願ＷＯ２００５／０１２３４７の実施例１６に記載される。
────────────────────────────────────
【０３３６】
調製例１７
ＮεＢ２９−（Ｎ−（Ｇｌｙ−ＯＣ（ＣＨ２）１６ＣＯ−γ−Ｌ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンの合成
この化合物の調製方法は、参照によって本明細書に組み込まれる特許出願ＷＯ２００５／０１２３４７の実施例１７に記載される。
────────────────────────────────────
【０３３７】
調製例１８
ＮεＢ２９−（Ｎ−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１４ＣＯ−ε−Ｌ−ＬｙｓＣＯ−）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンの合成
この化合物の調製方法は、参照によって本明細書に組み込まれる特許出願ＷＯ２００５／０１２３４７の実施例１８に記載される。
────────────────────────────────────
【０３３８】
調製例１９
ＮεＢ２９−（Ｎ−ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１６ＣＯ−α−Ｌ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンの合成
この化合物の調製方法は、参照によって本明細書に組み込まれる特許出願ＷＯ２００５／０１２３４７の実施例１９に記載される。
【０３３９】
────────────────────────────────────
調製例２０
ＮεＢ２９−（Ｎ−ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１６ＣＯ−α−Ｌ−Ａｓｐ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンの合成
この化合物の調製方法は、参照によって本明細書に組み込まれる特許出願ＷＯ２００５／０１２３４７の実施例２０に記載される。
────────────────────────────────────
【０３４０】
調製例２１
ＮεＢ２９−（Ｎ−ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１５ＣＯ−β−Ｌ−Ａｓｐ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンの合成
この化合物の調製方法は、参照によって本明細書に組み込まれる特許出願ＷＯ２００５／０１２３４７の実施例２１に記載される。
────────────────────────────────────
【０３４１】
調製例２２
ＮεＢ２９−（Ｎ−ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１６ＣＯ−γ−Ｄ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンの合成
この化合物の調製方法は、参照によって本明細書に組み込まれる特許出願ＷＯ２００５／０１２３４７の実施例２２に記載される。
【０３４２】
調製例２３
ＮεＢ２９−（Ｎ−ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１６ＣＯ−δ−Ｌ−Ａａｄ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンの合成
この化合物の調製方法は、参照によって本明細書に組み込まれる特許出願ＷＯ２００５／０１２３４７の実施例２３に記載される。
────────────────────────────────────
【０３４３】
調製例２４
ＮεＢ２９−（Ｎ−ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１３ＣＯ−β−Ｌ−Ａｓｐ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンの合成
この化合物の調製方法は、参照によって本明細書に組み込まれる特許出願ＷＯ２００５／０１２３４７の実施例２４に記載される。
────────────────────────────────────
【０３４４】
調製例２５
ＮεＢ２９−（Ｎ−ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１３ＣＯ−β−Ｌ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンの合成
この化合物の調製方法は、参照によって本明細書に組み込まれる特許出願ＷＯ２００５／０１２３４７の実施例２５に記載される。
────────────────────────────────────
【０３４５】
調製例２６
ＮεＢ２９−（Ｎ−ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１４ＣＯ−β−Ｄ−Ａｓｐ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンの合成
この化合物の調製方法は、参照によって本明細書に組み込まれる特許出願ＷＯ２００５／０１２３４７の実施例２６に記載される。
────────────────────────────────────
【０３４６】
調製例２７
ＮεＢ２９−（Ｎ−ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１６ＣＯ−β−Ｄ−Ａｓｐ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンの合成
この化合物の調製方法は、参照によって本明細書に組み込まれる特許出願ＷＯ２００５／０１２３４７の実施例２７に記載される。
────────────────────────────────────
【０３４７】
調製例２８
ＮεＢ２９−（Ｎ−ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１４ＣＯ−ＩＤＡ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンの合成
この化合物の調製方法は、参照によって本明細書に組み込まれる特許出願ＷＯ２００５／０１２３４７の実施例２８に記載される。
【０３４８】
────────────────────────────────────
調製例２９
ＮεＢ２９−［Ｎ−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１６ＣＯ）−Ｎ−（カルボキシメチル）−β−Ａｌａ］ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンの合成
この化合物の調製方法は、参照によって本明細書に組み込まれる特許出願ＷＯ２００５／０１２３４７の実施例２９に記載される。
────────────────────────────────────
【０３４９】
調製例３０
ＮεＢ２９−［Ｎ−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１６ＣＯ）−Ｎ−（２−カルボキシエチル）−Ｇｌｙ］ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンの合成
この化合物の調製方法は、参照によって本明細書に組み込まれる特許出願ＷＯ２００５／０１２３４７の実施例３０に記載される。
────────────────────────────────────
【０３５０】
調製例３１
ＮεＢ２９−［Ｎ−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１４ＣＯ）−Ｎ−（カルボキシエチル）−Ｇｌｙ］ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンの合成
この化合物の調製方法は、参照によって本明細書に組み込まれる特許出願ＷＯ２００５／０１２３４７の実施例３１に記載される。
────────────────────────────────────
【０３５１】
調製例３２
ＮεＢ２９−［Ｎ−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１４ＣＯ）−Ｎ−（カルボキシメチル）−β−Ａｌａ］ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンの合成
この化合物の調製方法は、参照によって本明細書に組み込まれる特許出願ＷＯ２００５／０１２３４７の実施例３２に記載される。
────────────────────────────────────
【０３５２】
調製例３３
ＮεＢ２９−［Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１１）ＮＨＣＯ（ＣＨ２）３ＣＯ）−γ−Ｌ−Ｇｌｕ］ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンの合成
この化合物の調製方法は、参照によって本明細書に組み込まれる特許出願ＷＯ２００５／０１２３４７の実施例３３に記載される。
────────────────────────────────────
【０３５３】
調製例３４
ＮεＢ２９−［Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１１）ＮＨＣＯ（ＣＨ２）２ＣＯ）−γ−Ｌ−Ｇｌｕ］ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンの合成
この化合物の調製方法は、参照によって本明細書に組み込まれる特許出願ＷＯ２００５／０１２３４７の実施例３４に記載される。
────────────────────────────────────
【０３５４】
調製例３５
ＮεＢ２９−［Ｎα−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１６ＣＯ）］−Ｇｌｙ−γ−Ｌ−Ｇｌｕ  ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンの合成
この化合物の調製方法は、参照によって本明細書に組み込まれる特許出願ＷＯ２００５／０１２３４７の実施例３５に記載される。
────────────────────────────────────
【０３５５】
調製例３６
ＮεＢ２９−［Ｎ−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１４ＣＯ）−Ｎ−（２−カルボキシエチル）−β−Ａｌａ］  ｄｅｓ  Ｂ３０ヒトインスリンの合成
この化合物の調製方法は、参照によって本明細書に組み込まれる特許出願ＷＯ２００５／０１２３４７の実施例３６に記載される。
────────────────────────────────────
【０３５６】
調製例３７
ＮεＢ２９−［Ｎ−（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１６ＣＯ）−Ｎ−（２−カルボキシエチル）−β−Ａｌａ］  ｄｅｓ  Ｂ３０ヒトインスリンの合成
この化合物の調製方法は、参照によって本明細書に組み込まれる特許出願ＷＯ２００５／０１２３４７の実施例３７に記載される。
────────────────────────────────────
【０３５７】
薬理学的研究
アッセイ（Ｉ）
本発明のインスリン誘導体のインスリン受容体結合
ヒトインスリン受容体に対する本発明における使用のためのインスリン様化合物の親和性を、ＳＰＡアッセイ（シンチレーション近接アッセイ）マイクロタイタープレート抗体捕捉アッセイによって決定した。ＳＰＡ−ＰＶＴ抗体結合ビーズ、抗マウス試薬（Amersham Biosciences, カタログ番号ＰＲＮＱ００１７）を、２５ｍｌの結合緩衝剤（１００ｍＭ  ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．８）；１００ｍＭ  塩化ナトリウム、１０ｍＭ  ＭｇＳＯ４、０．０２５％  Ｔｗｅｅｎ−２０）と混合した。単回のPackardのＯｐｔｉｐｌａｔｅ（Packard番号６００５１９０）のための試薬混合物は、２．４μｌの１：５０００希釈された精製組換えヒトインスリン受容体−エクソン１１、試薬混合物１００μｌ当たり５０００ｃｐｍに相当するＡ１４  Ｔｙｒ［１２５Ｉ］ヒトインスリンの一定量のストック溶液、１２μｌのＦ１２抗体の１：１０００希釈物、３ｍｌのＳＰＡビーズ、及び結合緩衝剤から構成され、合計１２ｍｌである。その後、合計１００μｌを添加した。希釈系列を、適切な試料から作成する。その後、希釈系列に、１００μｌの試薬混合物を添加し、試料を、穏やかに振とうしながら１６時間インキュベーションした。その後、相を、１分間の遠心分離によって分離し、プレートを、Ｔｏｐｃｏｕｎｔｅｒにおいて計測した。結合データを、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ  ２．０１（GraphPad Software, San Diego, CA）における非線形回帰アルゴリズムを使用して、フィッティングした。
【０３５８】
モノクローナルｍＩＲ抗体の調製
特異的抗体（Ｆ１２）を、モノクローナル技法によって作製した：ＲＢＦマウスを、ＦＣＡにおける５０μｇの精製ｍＩＲを皮下注射し、その後、ＦＩＡにおける２０μｇのｍＩＲを２回注射することによって免疫化した。ハイレスポンダーマウスを、２５μｇのｍＩＲを用いて、静脈内に追加免疫し（boosted）、脾臓を、３日後に回収した。脾臓細胞を、ミエローマキツネ細胞株（Kohler, G & Milstein C. (1976), European J. Immunology, 6:511-19；Taggart RT et al (1983), Science 219:1228-30）と融合させた。上清を、ｍＩＲ特異的ＥＬＩＳＡにおいて、抗体産生についてスクリーニングした。陽性ウェルを、クローニングし、ウェスタンブロッティングにおいて試験した。
【０３５９】
【表１】
0006262206.tif 000002
【０３６０】
アッセイ（ＩＩ）
ヒトインスリンと比較した、本発明のインスリン誘導体の効力
実験日に体重２３８〜３８３ｇのスプラーグドーリー雄ラットを、クランプ実験に使用した。ラットは、制御された周囲条件下で、自由に飼料を摂食することができ、クランプ実験の前に、終夜（３ｐｍから）絶食させた。
【０３６１】
実験プロトコル
ラットを、手術手順の少なくとも１週間前に、動物施設において順化させた。クランプ実験のおよそ１週間前に、Ｔｙｇｏｎカテーテルを、ハロタン麻酔下で、頚静脈（注入用）及び頚動脈（血液サンプリング用）中に挿入し、頚部の後ろに露出させ固定した。ラットに、手術後に、ストレプトシリン（動物用（vet.））（Boehringer Ingelheim；０．１５ｍｌ／ラット、筋肉内）を与え、当該ラットを、回復期間の間、動物飼育施設（２５℃）に配置した。鎮痛を得るために、麻酔時にアノルフィン（Anorphin）（０．０６ｍｇ／ラット、皮下）を投与し、麻酔からの完全な回復（２〜３ｈ）後に及び再び２日間にわたり１日１回、リマジル（Rimadyl）（１．５ｍｇ／ｋｇ、皮下）を投与した。
【０３６２】
利用したクランプ技法を、（１）から適合させた。実験日の７ａｍに、終夜絶食させた（前日の３ｐｍから）ラットを、秤量し、サンプリング用シリンジ及び注入システム（Ｈａｒｖａｒｄ  ２２  Ｂａｓｉｃ  ｐｕｍｐｓ, Harvard、及び、Ｐｅｒｆｅｃｔｕｍ  Ｈｙｐｏｄｅｒｍｉｃ  ｇｌａｓｓ  ｓｙｒｉｎｇｅ, Aldrich）に接続し、その後、実験の開始前にラットが約４５分間休息する個々のクランプケージ中に配置した。ラットは、全実験の間、通常の寝床において自由に移動することができ、自由に飲用水を飲用することができた。１０分間隔で血漿グルコースレベルが測定される３０分の基礎期間後、試験対象のインスリン誘導体及びヒトインスリン（ラット１匹当たり１用量レベル、１用量レベル当たりｎ＝６〜７）を、一定速度で３００分間、注入した（静脈内）。血漿グルコースレベルを、期間中通じて１０分間隔で測定し、２０％グルコース水溶液の注入を、それに応じて、正常血糖を維持するために調整した。再懸濁した赤血球の試料を、各ラットからプールし、頚動脈カテーテルを介して、約１／２  ｍｌの体積で、戻した。
【０３６３】
各実験の日に、試験対象の個々のインスリン誘導体の溶液及びヒトインスリン溶液の試料を、クランプ実験前に及びその終了時に、採取し、ペプチドの濃度を、ＨＰＬＣによって確認した。ラットインスリン及びＣ−ペプチドの、並びに試験対象のインスリン誘導体及びヒトインスリンの血漿濃度を、研究の前に及びその終了時に、関連する時点で、測定した。ラットを、実験の終了時に、過剰量のペントバルビタールを使用して、殺した。
【０３６４】
試験化合物及び用量：試験対象の、本発明における使用のためのインスリン様化合物を、５ｍＭホスフェート（ｐＨ７．７）中に９７μＭのインスリン誘導体を含有するストック溶液から、希釈した。使用可能な状態の溶液中の最終濃度は、以下であった：０．４５μＭのインスリン誘導体、５ｍＭのホスフェート、１００ｍＭの塩化ナトリウム、０．００７％のポリソルベート２０。ｐＨは７．７であり、静脈内注入速度は、１５及び２０ｐｍｏｌ・ｍｉｎ−１・ｋｇ−１であった。
【０３６５】
参照化合物として使用したヒトインスリンのストック溶液を、類似の媒体中に配合し、６、１５又は３０ｐｍｏｌ・ｍｉｎ−１・ｋｇ−１で静脈内注入した。
【０３６６】
両方のストック溶液を、−２０℃で保存し、使用前に４℃で終夜融解した。溶液を、注入シリンジへと移行する１５分前に、複数回、穏やかにひっくり返した。
【０３６７】
【表２】
0006262206.tif 000003
【０３６８】
アッセイ（ＩＩＩ）
ブタにおける、本発明のインスリン誘導体のＴ５０％の決定
Ｔ５０％は、外部（external）γカウンターを用いて測定されるような、試験対象の本発明における使用のためのインスリン様化合物のＡ１４  Ｔｙｒ［１２５Ｉ］標識誘導体の注射した量の５０％が、注射部位から消失する時間である。
【０３６９】
実験動物管理の原則に従って、薬物動態研究及び薬力学研究のために、特定病原体を含まないＬＹＹＤ、非糖尿病雌ブタ、デンマークのランドレース、ヨークシャー及びデュロックの交雑種を使用した（Holmenlund, Haarloev, Denmark）。ブタは、意識があり（conscious）、４〜５月齢であり、体重７０〜９５ｋｇであった。動物は、実験前にＩ８ｈ、終夜絶食させた。
【０３７０】
ＴｙｒＡ１４が１２５Ｉで標識された本発明における使用のためのインスリン様化合物の構築された製剤を、過去に記載された（Ribel, U., Jorgensen, K, Brange, J, and Henriksen, U. The pig as a model for subcutaneous insulin absorption in man. Serrano-Rios, M and Lefebvre, P. J.  891-896. 1985. Amsterdam；New York; Oxford, Elsevier Science Publishers. 1985 (Conference Proceeding)）ように、ブタに皮下注射した。
【０３７１】
実験の開始時に、６０ｎｍｏｌの用量の本発明における使用のためのインスリン様化合物（試験化合物）、及び６０ｎｍｏｌの用量のインスリンデテミル（両方が、Ｔｙｒ  Ａ１４において１２５Ｉ標識されている）を、各ブタの頚部における２つの別々の部位に、注射した。
【０３７２】
皮下注射の部位からの放射性標識の消失を、伝統的な外部γ計測法（Ribel, U. Subcutaneous absorption of insulin analogues. Berger, M. and Gries, F. A. 70-77 (1993). Stuttgart；New York, Georg Thime Verlag (Conference Proceeding)）の修正方法を使用して、監視した。この修正方法を用いると、コードレスのポータブル機器（Scancys Laboratorieteknik, Vaerlose, ＤＫ−３５００, Denmark）を使用して、数日間、皮下のデポ部（depot）からの放射能の消失を連続的に測定することが可能であった。測定を、１分間隔で行い、計測値を、バックグラウンドの活性に関して補正した。
【０３７３】
表３において、カラム「試験／デテミル」は、同じ実験において、試験した化合物の各々について見出されたＴ５０％（「試験」）、及びインスリンデテミルについて見出されたＴ５０％（「デテミル」）を示す。
【０３７４】
【表３】
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【０３７５】
疎水性研究
本発明のインスリン様化合物に関する疎水性データ
ヒトインスリンと比較したインスリン様化合物の疎水性（疎水性指標）ｋ’ｒｅｌを、溶離液として（Ａ）１０％アセトニトリルを含有する０．１Ｍ  リン酸ナトリウム緩衝剤（ｐＨ７．３）、及び（Ｂ）水中の５０％アセトニトリルの混合物を使用する、４０℃での定組成溶出によって、ＬｉＣｈｒｏｓｏｒｂ  ＲＰ１８（５μｍ、２５０×４ｍｍ）ＨＰＬＣカラムで測定した。２１４ｎｍでの溶出物のＵＶ吸収を追跡することによって、溶出を監視した。排出時間（Void time）ｔ０を、０．１ｍＭ  硝酸ナトリウムを注射することによって、見出した。ヒトインスリンに対する保持時間ｔｈｕｍａｎを、Ａ溶液及びＢ溶液の間の比を変化させることによって、少なくとも２ｔ０へと調整した。ｋ’ｒｅｌ＝（ｔｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ−ｔ０）／（ｔｈｕｍａｎ−ｔ０）。本発明による多数のインスリン誘導体について見出されたｋ’ｒｅｌが、表４に示される。
【０３７６】
【表４】
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【０３７７】
臨床研究  −  臨床例１〜４
臨床例１
定常状態クランプ  −  ＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン活性プロファイル及び作用期間の調査
方法論
１型糖尿病を有する被験体において、ＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン及びインスリングラルギン（ＩＧｌａｒ）の活性プロファイルを比較するために、無作為化二重盲検単一施設２期間クロスオーバー試験として、調査を行った。
【０３７８】
被験体を、ＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン及びＩＧｌａｒの皮下（s.c.）、複数用量、１日１回投与の種々の系列に対して無作為化した。用量は、ＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン０．５７Ｕ／ｋｇ又は０．８５Ｕ／ｋｇ、及びＩＧｌａｒ０．４Ｕ／ｋｇ又は０．６Ｕ／ｋｇのいずれかであった。被験体を、各投与期間について、８日間治療した。２つの投与期間の間に、１０〜２０日間続くウォッシュアウト期間が存在した。
【０３７９】
各投与期間の最後の日に、被験体は、１００ｍｇ／ｄＬ（５．５ｍｍｏｌ／Ｌ）のレベルで安定な血中グルコース濃度を維持するために、試験薬剤の投与の前に８〜４時間、グルコース及びヒト可溶性インスリン（Ａｃｔｒａｐｉｄ（登録商標））の制御された静脈内注入を受けた。すなわち、標的血中グルコースレベルを１００ｍｇ／ｄＬ（５．５ｍｍｏｌ／Ｌ）とする正常血糖クランプを開始した。正常血糖クランプは、投与後４２時間でで終了したが、血中グルコースレベルが２００ｍｇ／ｄＬ（１１．１ｍｍｏｌ／Ｌ）を上回る濃度まで増大した場合には、最後の３０分間グルコース注入を行わず、より早く終了した。
【０３８０】
血清ＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン／血漿ＩＧｌａｒ及び血中グルコースの測定のための血液試料は、投与前に、及び投与後１４６時間まで、採取した。
【０３８１】
標準的な安全性評価を行った。
【０３８２】
被験体の数
２１名の被験体が、試験を完了した。
【０３８３】
診断、及び試験対象者に含めるための主要な基準
グリコシル化ヘモグロビン（ＨｂＡ１ｃ）が１０％以下であり、インスリン（１．２Ｕ／ｋｇ／日以下）による通常の治療を受けた、年齢１８〜６９歳（両端を含む（inclusive））の男性又は女性の１型糖尿病を有する（１２ヶ月以上）被験体。被験体は、１２ヶ月以上インスリンで治療されており、１８〜２８ｋｇ／ｍ２（両端を含む）のボディ・マス・インデックス（ＢＭＩ）及び０．３ｎｍｏｌ／Ｌ未満の空腹時Ｃ−ペプチドを有する。
【０３８４】
試験製品、用量、及び投与様式
ＮｏｖｏＦｉｎｅ（登録商標）３０Ｇ、８ｍｍニードルを使用する３ｍｌ  ＦｌｅｘＰｅｎ（登録商標）（１００ＤＵ／ｍｌ）カートリッジで送達される、０．５７Ｕ／ｋｇ又は０．８５Ｕ／ｋｇという複数用量のＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン、６００ｎｍｏｌ／ｍｌ、ＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン。
【０３８５】
治療の期間
複数用量のＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン及びＩＧｌａｒを、１０〜２０日の間隔で、８日間（任意で＋１〜５日間）続く２つの異なる投与期間を使用して、投与した。
【０３８６】
基準となる治療法、用量、及び投与様式
３．０ｍｌ  ３ｍｌ  Ｏｐｔｉｓｅｔ（登録商標）カートリッジ送達され、ＰｅｎＦｉｎｅ（登録商標）３１Ｇ、８ｍｍを使用して大腿部の皮下に注射される、複数用量（０．４Ｕ／ｋｇ又は０．６Ｕ／ｋｇ）のＩＧｌａｒ（Ｌａｎｔｕｓ（登録商標））、１００ＩＵ／ｍＬ、６００ｎｍｏｌ／ｍＬ。
【０３８７】
評価の基準  −  有効性
薬力学：
−  第８日及び最終投与日の、４２時間の正常血糖クランプ時における、グルコース注入速度（ＧＩＲ）
−  血中グルコース濃度。
薬物動態：
−  ＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン又はＩＧｌａｒの単回投与後１４４時間の、血清ＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン／血漿  ＩＧｌａｒ濃度。
【０３８８】
一次エンドポイント：
−  ＡＵＣＧＩＲ（０〜２４ｈ）、すなわち、０から２４時間までのＧＩＲ曲線の曲線下面積（ＡＵＣ）。
【０３８９】
主要な二次エンドポイント：
−  正常血糖クランプ期間中の血中グルコースレベル
−  薬物動態（ｔｍａｘ、終末半減期）。
【０３９０】
試験集団の個体群統計（Demography）
男性３５名及び女性７名の１型糖尿病を有する被験体の平均年齢はそれぞれ４０歳であり、平均重量は７５ｋｇであり、平均ＨｂＡ１ｃは７．８％であり、平均糖尿病期間は２１年であった。
【０３９１】
主要な結果
−  ２４時間の時点で顕著なレベルのＧＩＲが依然として存在したため、ＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンについてのＡＵＣＧＩＲ（０〜２４ｈ）は、全体的なインスリン作用を捉えるものではなかった。２４時間でのＧＩＲレベルは、低用量又は高用量の投与の後のＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンについて、それぞれ、およそ２．０及び３．０ｍｇ／ｋｇ／分であった。インスリングラルギンについての対応する値は、およそ０．８及び１．８ｍｇ／ｋｇ／分であった。
−  平均ＧＩＲｍａｘは、最高用量の投与の後で、ＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンについてのもの（それぞれ、４．６８及び４．０２ｍｇ／ｋｇ／分）よりも、ＩＧｌａｒについてのもの（５．６及び４．２ｍｇ／ｋｇ／分）の方が高かったが、より低い用量の投与の後では、ＧＩＲｍａｘは、等しかった（３．０７ｍｇ／ｋｇ／分）。
−  ＧＩＲｍａｘまでの平均ＧＩＲ時間は、ＩＧｌａｒについてのもの（低用量及び高用量について、それぞれ、５．０及び４．１時間）よりも、ＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンについてのもの（低用量及び高用量について、それぞれ、１３．２及び６．１時間）の方が長かった。
−  平均ピーク対トラフ範囲（Mean peak to trough ranges）は、インスリングラルギンの投与後についてのものよりも、ＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンについてのものの方が小さかった。値は、低用量及び高用量の投与の後に、それぞれ、１．０及び０．７ｍｇ／ｋｇ／分であった。インスリングラルギンについて、対応する値は、１．６及び１．１ｍｇ／ｋｇ／分であった。
−  グルコース制御の喪失までの平均時間は、両方の用量レベルで、グラルギンについてのものよりも、ＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンについてのものの方が長かった。これは、低用量のＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンの投与の後、およそ４０時間後に起こり、グルコース制御の顕著な喪失（１０ｍｇ／ｄｌを超える血中グルコースの増大と定義される）は、高用量のＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンの投与の後、４２時間の時点で観察されなかった。インスリングラルギン投与の後、グルコース制御の喪失は、低用量及び高用量を投与する場合、それぞれ、およそ２４時間及び２６時間後に起こった。
−  最大濃度（Ｃｍａｘ）までの平均時間は、ＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンについてのものよりも、インスリングラルギンについてのものの方が短かった。それぞれ中用量及び高用量の投与の後で、インスリングラルギンについては、値は、７．２及び６．４時間であったが、ＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンについての値は、９．２及び１０．１時間であった。
−  平均終末半減期は、ＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンについては２５．２時間（９５％ＣＩ  ２３〜２８時間）、及び、ＩＧｌａｒについては１３．９時間（９５％ＣＩ  １３〜１５）であった。
【０３９２】
主要な安全性の結果
概して、複数用量のＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン及びＩＧｌａｒの投与が、それぞれ、１型糖尿病を有する被験体において、耐容性良好であった。
【０３９３】
主要な結論
ＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンは、ＧＩＲプロファイルの特徴によって実証されるように、ＩＧｌａｒと比較して、より平坦及びより長期的な（protracted）作用プロファイル並びにより長い作用期間を有するようであった。データは、ＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンが、同等の（comparable）用量でのより低いＧＩＲｍａｘ、両方の用量レベルでのより長いＧＩＲｍａｘまでの時間、及びより小さなピーク対トラフ範囲を有することを示す。本状況下におけるＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンの作用期間は、およそ４０時間以上であった。データは、ＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンが、血中グルコースをより長い期間制御する能力を有することを示す。活性データ（薬力学）に基づく結論は、薬物動態データ（より長いＣｍａｘまでの時間、及びより長い終末半減期）によって支持される。
【０３９４】
臨床例２
様々な間隔を用いて１日１回投与される、ＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンの臨床効果の調査 
主要な方法論的構成及び結果
本試験は、様々な注射間隔（柔軟な注射）を用いて、１日１回、２型糖尿病を有する被験体を治療するための、ＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン（６００ｎｍｏｌ／ｍＬ）の実用可能性（feasibility）、有効性、安全性及び耐容性を評価するために、設計された。この治療は、インスリン治療若しくは経口抗糖尿病薬（ＯＡＤ）治療又はインスリン治療及びＯＡＤ治療の組合せに失敗している２型糖尿病を有する被験体における、メトホルミン及び／又はスルホニル尿素及び／又はピオグリタゾンを伴う又は伴わない、インスリンの投与からなるものであった。ＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンによる様々な注射間隔（すなわち柔軟な注射）の実用可能性を、表５に示されるように、参加した被験体に、月曜日、水曜日及び金曜日の朝（起床と朝食との間）に注射させ、火曜日、木曜日、土曜日及び日曜日の晩（夕食と就寝時間との間）に注射させることによって、調査した。
【０３９５】
【表５】
0006262206.tif 000006
【０３９６】
主目的
インスリン治療若しくは経口抗糖尿病薬（ＯＡＤ）治療又はインスリン治療及びＯＡＤ治療の組合せに失敗している２型糖尿病を有する被験体において、全てメトホルミン及び／又はスルホニル尿素及び／又はピオグリタゾンと組み合わせて、様々な注射間隔（柔軟な注射）を用いて１日１回与えられるＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン、夕食とともに１日１回与えられるＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン、又は（認可表示に従って）各日同じ時間に１日１回与えられるインスリングラルギンによる２６週間の治療の後の、ＨｂＡ１ｃに関するグルコース制御を評価すること。
【０３９７】
材料及び方法
経口抗糖尿病剤：メトホルミン、スルホニル尿素、ピオグリタゾンの１つ若しくは複数を用いて、又は任意の基礎インスリン治療、若しくは特定のＯＡＤ及び任意の基礎インスリン治療の組合せを用いて過去に治療された、２型糖尿病を有する被験体において、試験を行った。無作為化において、被験体は、そのＯＡＤ治療（在る場合には）を継続しつつ、様々な注射間隔を用いて１日１回与えられる基礎インスリンＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン、又は夕食とともに１日１回与えられるＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン、又は（表示に従って）各日同じ時間に１日１回与えられるインスリングラルギンを追加、開始、又はそれに変更した。
【０３９８】
合計６８７名の、年齢５６歳、平均糖尿病期間１０．６年、平均ＢＭＩ２９．６ｋｇ／ｍ２、平均ＦＰＧ８．９ｍｍｏｌ／Ｌ、及び平均ＨｂＡ１ｃ８．４％の、２型糖尿病を有する被験体を、２６週間の治療期間、単独で、又はメトホルミン及び／若しくはＳＵ及び／若しくはピオグリタゾンと組み合わせて、様々な注射間隔を用いて１日１回与えられるＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン（２２９名の被験体）、又は夕食とともに１日１回与えられるＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン（２２８名の被験体）、又は１日１回与えられるインスリングラルギン（２３０名の被験体）の投与を受けるように、無作為化した（１：１：１）。
【０３９９】
無作為化前のＯＡＤ及びインスリン治療の具体的な組合せは、表１２に見ることができる。
【０４００】
研究インスリン製品に対する無作為化前に使用されるインスリンの種類を、表６に示す。
【０４０１】
表７に、実験前に及び実験中に使用されるＯＡＤ（複数の場合も有り）を示す。
【０４０２】
【表６】
0006262206.tif 000007
【０４０３】
【表７】
0006262206.tif 000008
【０４０４】
有効性の結果
ＨｂＡ１ｃ
試験の終了時のＨｂＡ１ｃ、及びベースラインから試験の終了時までＨｂＡ１ｃの変化を、表８に示す。
【０４０５】
様々な注射間隔を用いて与えられるＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンを、他の治療群と比較した場合の、治療対比（treatment contrast）の信頼区間は、非劣性限界（non-inferiority limit）０．４の範囲内であったが、これは、ＦＤＡによって許容される非劣性限界の範囲内である（Guidance for Industry Diabetes Mellitus: Developing Drugs and Therapeutic Biologics for Treatment and Prevention, draft Guidance, U.S. Department of Health and Human Services Food and Drug Administration Center for Drug Evaluation and Research (CDER) February 2008）。したがって、様々な注射間隔を用いて与えられるＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンの投与を受ける群は、ベースラインから治療の終了時までのＨｂＡ１ｃの平均の変化に関して、他の２つの治療群と同様であった（表８及び表９）。
【０４０６】
【表８】
0006262206.tif 000009
【０４０７】
【表９】
0006262206.tif 000010
【０４０８】
低血糖
試験中に、重度の低血糖事象が、６つだけ報告された。表１０を参照されたい。
【０４０９】
【表１０】
0006262206.tif 000011
【０４１０】
インスリンの用量
【０４１１】
【表１１】
0006262206.tif 000012
【０４１２】
結論
長い作用期間、及びピークがなく安定な活性プロファイルを有するＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンを使用して、２型糖尿病を有する被験体が、単独で又はＯＡＤ治療と組み合わせて、様々な注射間隔を用いて施される１日１回の投与によって、十分に調節されることが、驚くべきことに見出された。
【０４１３】
ＯＡＤ及び／又はインスリンによる治療に失敗している、２型糖尿病を有する被験体において、メトホルミン及び／又はスルホニル尿素及び／又はピオグリタゾンと組み合わせて又は組み合わせずに、柔軟に（様々な注射間隔を用いて）与えられるＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンによる２６週間の治療が、夕食とともに与えられるＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンについて観察されるものに対して、並びに、（認可表示に従って）各日同じ時間に１日１回与えられるインスリングラルギンについて観察される血糖制御及び低血糖のエピソードの発生率に対して、同等の（非劣性の）血糖制御及び同等の低血糖のエピソードの発生率をもたらした。
【０４１４】
臨床例３
様々な間隔を用いて１日１回投与される、ＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンの臨床効果の調査
主要な方法論的構成及び結果
本試験は、様々な注射間隔（柔軟な注射）を用いて、１日１回、１型糖尿病を有する被験体を治療するための、ＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン（６００ｎｍｏｌ／ｍＬ）の実用可能性、有効性、安全性及び耐容性を評価するために、設計された。この治療は、ボーラスインスリン（ＡｓｐＢ２８ヒトインスリン）の別々の注射と組み合わせた、基礎インスリン（ＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン又はインスリングラルギン）の投与からなるものであった。ＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンによる様々な注射間隔（すなわち柔軟な注射）の実用可能性を、表１２に示されるように、参加した被験体に、月曜日、水曜日及び金曜日の朝（起床と朝食との間）に注射させ、火曜日、木曜日、土曜日及び日曜日の晩（夕食と就寝時間との間）に注射させることによって、調査した。
【０４１５】
【表１２】
0006262206.tif 000013
【０４１６】
主目的
１型糖尿病を有する被験体において、全てＡｓｐＢ２８ヒトインスリンと組み合わせて、様々な注射間隔（柔軟な注射）を用いて１日１回与えられるＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン、夕食とともに１日１回与えられるＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン、又は（認可表示に従って）各日同じ時間に１日１回与えられるインスリングラルギンによる２６週間の治療の後の、ＨｂＡ１ｃに関するグルコース制御を評価すること。
【０４１７】
材料及び方法
少なくとも１２ヶ月間インスリンによって過去に治療された、１型糖尿病を有する被験体において、試験を行った。無作為化において、被験体は、全てＡｓｐＢ２８ヒトインスリンと組み合わせて、様々な注射間隔を用いて１日１回与えられる基礎インスリンＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン、又は夕食とともに１日１回与えられるＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン、又は（表示に従って）各日同じ時間に１日１回与えられるインスリングラルギンに切り替えた。
【０４１８】
合計４９０名の、年齢５６歳、平均糖尿病期間１０．６年、平均ＢＭＩ２９．６ｋｇ／ｍ２、平均ＦＰＧ８．９ｍｍｏｌ／Ｌ、及び平均ＨｂＡ１ｃ８．４％の、１型糖尿病を有する被験体を、２６週間の治療期間、様々な注射間隔を用いて１日１回与えられるＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン（１６４名の被験体）、又は夕食とともに１日１回与えられるＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン（１６５名の被験体）、又は表示に従って１日１回与えられるインスリングラルギン（１６１名の被験体）の投与を受けるように、無作為化した（１：１：１）。
【０４１９】
無作為化前の具体的なインスリン治療は、表６に見ることができる。研究インスリン製品に対する無作為化前に使用されるインスリンの種類を、表７に示す。
【０４２０】
有効性の結果
ＨｂＡ１ｃ
試験の終了時のＨｂＡ１ｃ、及びベースラインから試験の終了時までのＨｂＡ１ｃの変化を、表１３に示す。様々な注射間隔を用いて与えられるＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンを、他の治療群と比較した場合の、治療対比の信頼区間は、０．４の非劣性限界の範囲内であった（表１４）。
【０４２１】
【表１３】
0006262206.tif 000014
【０４２２】
【表１４】
0006262206.tif 000015
【０４２３】
低血糖
表１５は、試験中に報告された低血糖事象を示す。
【０４２４】
【表１５】
0006262206.tif 000016
【０４２５】
インスリンの用量
【０４２６】
【表１６】
0006262206.tif 000017
【０４２７】
結論
長い作用期間、及びピークがなく安定な活性プロファイルを有するＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンを使用して、ボーラスインスリンと組み合わせて、様々な注射間隔を用いて施される１日１回の投与によって、１型糖尿病を有する被験体が、十分に調節されることが、驚くべきことに見出された。
【０４２８】
１型糖尿病を有する被験体において、ＡｓｐＢ２８ヒトインスリンと組み合わせて、柔軟に（様々な注射間隔を用いて）与えられるＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンによる２６週間の治療が、夕食とともに与えられるＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンについて観察されるものに対して、並びに、（認可表示に従って）各日同じ時間に１日１回与えられるインスリングラルギンについて観察される血糖制御及び低血糖のエピソードの発生率に対して、非劣性の血糖制御及び同等の低血糖のエピソードの発生率をもたらした。
【０４２９】
臨床例４
治療期間中日ごとに食事間で任意に変化させて、食事に関して投与される、ＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン及びＡｓｐＢ２８ヒトインスリンの同時配合された（co-formulated）組合せ製品の臨床効果の調査
主要な方法論的構成及び結果
本試験は、種々の食事に対してＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン及びＡｓｐＢ２８ヒトインスリンの組合せ製品について注射時間を日ごとに任意に変化させて、食事に関して与えられる、１日１回、１型糖尿病を有する被験体を治療するための、ＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン及びＡｓｐＢ２８ヒトインスリン（６００ｎｍｏｌ／ｍＬ）の組合せ製品の実用可能性、有効性、安全性及び耐容性を評価するために、設計された。この治療は、１型糖尿病を有する被験体における、１回の食事におけるＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン及びＡｓｐＢ２８ヒトインスリンの組合せ製品、並びにインスリンを必要とする残りの食事に関して与えられるＡｓｐ２８ヒトインスリンの投与からなるものであった。
【０４３０】
主目的
１型糖尿病を有する被験体において、インスリンを必要とする残りの食事に対しては両方の治療群をＡｓｐ２８ヒトインスリンと組み合わせて、選択された食事に関するＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン及びＡｓｐＢ２８ヒトインスリンの組合せ製品（日ごとに食事を任意に変化させて）、又は１日１回与えられるインスリンデテミル（最適に制御されない場合、１日２回へと任意に最適化させて）による２６週間の治療の後の、ＨｂＡ１ｃに関するグルコース制御を評価すること。
【０４３１】
材料及び方法
本試験に入る少なくとも１年前にＨｂＡ１ｃが７％と１０％との間にあると診断された、１型糖尿病を有する被験体において、試験を行った。無作為化において、被験体は、２つの基礎インスリン製品のいずれかに割り当てられた：
１．  任意の食事に対して１日１回（日ごとに注射時間を変化させて）与えられるＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン及びＡｓｐＢ２８ヒトインスリンの組合せ、又は
２．  （表示に従って）各日同じ時間に１日１回（又は、１日２回）与えられるインスリンデテミル。
両方の治療群が、残りの食事において、食事時のインスリンとして、ＡｓｐＢ２８ヒトインスリンの投与を受けた。
【０４３２】
合計５４８名の、年齢４１歳、平均糖尿病期間１７年、平均ＢＭＩ２６．４ｋｇ／ｍ２、平均ＦＰＧ１０．５ｍｍｏｌ／Ｌ、及び平均ＨｂＡ１ｃ８．３％の、１型糖尿病を有する被験体を、２６週間の治療期間、ＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン及びＡｓｐＢ２８ヒトインスリンの組合せに偏るように、無作為化した（２：１）。
【０４３３】
有効性の結果
ＨｂＡ１ｃ
ＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン及びＡｓｐＢ２８ヒトインスリンを、他の治療群と比較した場合の、治療対比の信頼区間は、０．４の非劣性限界の範囲内であった。したがって、２つの群は、ベースラインから治療の終了時までのＨｂＡ１ｃの平均値の変化に関して、同様であった（統計解析：表１７）。
【０４３４】
【表１７】
0006262206.tif 000018
【０４３５】
低血糖
低血糖のエピソードを、米国糖尿病協会の定義に従って、試験時に記録した。表１８を参照されたい。
【０４３６】
【表１８】
0006262206.tif 000019
【０４３７】
インスリンの用量
【０４３８】
【表１９】
0006262206.tif 000020
【０４３９】
結論
組合せ製品の基礎成分である、長い作用期間、及びピークがなく安定な活性プロファイルを有するＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンが、組合せ製品の注射が施される食事を変化させたことの結果として、注射間隔を変化させた場合であっても、１日１回の投与によって、被験体を十分に調節することを可能とすることが、驚くべきことに見出された。
【０４４０】
１型糖尿病を有する被験体において、（日ごとに種々の食事に対して注射時間を任意に変化させて）選択された食事に関して１日１回与えられるＡｓｐＢ２８ヒトインスリンと組み合わせたＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンによる２６週間のインスリン治療が、表示に従って１日２回与えられるインスリンデテミルのものに対して、同等の（非劣性の）血糖制御をもたらした。両方の治療が、残りの食事についてＡｓｐＢ２８ヒトインスリンと組み合わせられた。ＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンの組合せは、インスリンデテミルについて観察されるものと比較して、より低いインスリン使用、及び低血糖のエピソードのより低い発生率をもたらした。
【０４４１】
臨床研究  −  臨床例５
最大の食事で投与されるＩＤｅｇＡｓｐ（ＬｙｓＢ２９（Ｎε−ヘキサデカンジオイル−γ−Ｇｌｕ）ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン及びＡｓｐＢ２８ヒトインスリン）の臨床効果の調査
導入
この詳細な臨床研究において、ＩＤｅｇＡｓｐ（インスリンデグルデク／インスリンアスパルト）が、１日の最大の食事で、２型糖尿病を有する患者に、投与される。本明細書において提示される結果は、無作為化対照第３相試験から得られる。本明細書における議論は、実際の測定に基づく。しかしながら、幾つかの箇所においては、我々は、推定された割合（例えば、好適な統計モデルから得られるもの）について議論する。
【０４４２】
アナリシス・セットの定義
以下のアナリシス・セットが、IＣＨ−Ｅ９ガイダンスに従って定義される：
−  フル・アナリシス・セット（ＦＡＳ）：これは、全ての無作為化される被験体を含むものであった。例外的な場合として、ＦＡＳ由来の被験体が除外される場合があった。そのような場合には、当該除外は、説明され、文書化されるものとした。ＦＡＳの統計的評価は、治療意図（intention-to-treat）の原則に従う必要があり、被験体は、「無作為化される通りに」評価に寄与するものとした。
−  パー・プロトコル（ＰＰ）アナリシス・セット：これは、一次エンドポイントに影響を及ぼした可能性があるいかなる重要なプロトコル違反をも伴わない被験体を含むものであった。さらに、被験体は、１２週間を超えて、調査製品又はその比較品（comparator）に曝露されていなければならず、一次エンドポイントを得るために必要な有効な（valid）評価を有するものとした。ＰＰセットにおける被験体は、「処理される通りに」評価に寄与するものとした。
−  安全性・アナリシス・セット：これは、調査製品又はその比較品の少なくとも１つの投与を受けた全ての被験体を含むものであった。安全性セットにおける被験体は、「処理される通りに」評価に寄与するものとした。
【０４４３】
経過観察が行われず、無作為化後の調査製品又はその比較品の曝露情報が入手可能でない無作為化された被験体は、曝露されていないものとして取り扱われるものとした。全てのＯＡＤが、非調査製品とみなされた。
【０４４４】
統計解析のためにデータを公表する前に、全データのブラインドでのレビューが、結果に影響を及ぼした潜在的な可能性があるプロトコル偏差を特定するために、行われるものとした。このレビューは、被験体がどの試験製品に割り当てられたかを明らかにすることなく、行われるものとした。試験製品のブラインディングは、統計解析のためにデータが公表されるまで、アナリシス・セットの定義に関与する全員について維持されるものとした。さらに、極値及び外れ値（outliers）は、偽無作為化（fake randomisation）を使用して、ＩＣＨ−Ｅ９３０によるプログラミング及びデータレビュー時に、統計学者によって、特定されるものとした。
【０４４５】
１２週間未満試験製品に曝露され、無作為化後にＨｂＡ１ｃの有効な評価を有しない被験体は、試験における選択基準に違反した被験体であるとして、ＰＰ分析から除外された。統計解析からいずれかの被験体又は観察結果を除外する決定は、研究群のブラインド化されたメンバーの連帯責任であった。除外される被験体又は観察結果及びそれらの除外の理由は、データベース公表の前に、文書化され、全関係者（parties）によって署名されるものとした。文書化されたものは、残りの試験に係る文書化されたものとともに、保存されるものとした。
【０４４６】
統計解析
一次エンドポイント
一次エンドポイントは、２６週間の治療の後の、ＨｂＡ１ｃのベースラインからの変化（％）であった。
【０４４７】
統計解析
２６週間の治療の後の、ＨｂＡ１ｃのベースラインからの変化を、固定因子として治療、スクリーニング時の抗糖尿病療法及び性別を、並びに共変数（covariates）として年齢及びベースラインＨｂＡ１ｃを用いる分散分析（ＡＮＯＶＡ）法を使用して、分析した。スクリーニング時の抗糖尿病療法は、以下の２つのレベルを有する因子であった：１．  ＳＵ及び／又はグリニド、並びに２．  他。
【０４４８】
モデルは、同時に全データ（全ての治療群）にフィッティングさせられるものとした。また、このモデルから、関連する治療差が、推定されるものとした。
【０４４９】
両側９５％ＣＩの上限が０．４％以下である場合、非劣性が確認されたとみなされ、又は、Ｈ０：Ｄ＞０．４％  対  ＨＡ：Ｄ≦０．４％の片側検定に関するｐ値が２．５％以下である場合、同等とした（ここで、Ｄは平均治療差（調査製品  −  比較品）である）。
【０４５０】
非劣性が確認された場合、比較品に対する調査製品の優位性が、調査されるものとした。ＦＡＳを使用して算出される両側９５％ＣＩの上限が０％未満である場合、優位性が確認されたとみなされた。ここではＰＰ分析は、支持的なものとみなされた。
【０４５１】
感度分析
以下の感度分析が、ＦＡＳのみを使用して、行われるものとした。
【０４５２】
スケジューリングされた測定時間での無作為化後における入手可能な全ての観察されたＨｂＡ１ｃの測定値も、非構造化残存共分散行列（unstructured residual covariance matrix）（可能であれば）を使用する線形混合モデルにおいて、分析されるものとした。このアプローチは、Rubin（1976 Biometrika vol 63(3) pp 581-592）によって規定される分類に従ってデータが無作為に失われていくという仮定に基づく。結果が、失われたデータを取り扱うためのＬＯＣＦ法の結果と比較された。無作為アプローチでの喪失とＬＯＣＦアプローチでの喪失との間の治療差に関する任意の顕著な差異が、ＣＴＲにおいてコメントされるものとした。
【０４５３】
ベースラインからのＨｂＡ１ｃの変化も、固定因子として治療のみを、及び共変数としてベースラインＨｂＡ１ｃを用いるモデルを使用して、分析し、固定因子及び共変数の包含／除外に対する結果の感度を評価した。
【０４５４】
確認用（Confirmatory）二次エンドポイント
一次エンドポイントについて非劣性が確認された場合、多数の確認用二次エンドポイントが、比較品に対する調査製品の優位性を確認するために、試験されるものとした。
【０４５５】
確認用二次エンドポイントが、優位性についての試験の方向性とともに、以下に示される。エンドポイントの順序が、試験順序を規定した。
１．  ２６週間の治療の後の、ディナー時の（ＳＭＰＧによって測定されるような、ディナーの開始の９０分後の）、食事のＰＧインクリメント
−  治療差（調査製品  −  比較品）についての９５％ＣＩが、完全に０未満である場合、優位性が確認されたとみなされた。
２．  低血糖のエピソードを有しないレスポンダー（少なくとも１２週間曝露された被験体のみを含み、試験終了時にＨｂＡ１ｃ＜７．０％、及び、最後の１２週間の治療の間、重度又は軽度（minor）のエピソードを有しない）
−  オッズ比（調査製品／比較品）についての９５％ＣＩが、完全に１を上回る場合、優位性が確認されたとみなされた。
３．  治療によって発生した夜間（００：０１〜０５：５９ａ．ｍ．）の重度又は軽度の低血糖のエピソードの数
−  相対リスク（調査製品／比較品）についての９５％ＣＩが、完全に１未満である場合、優位性が確認されたとみなされた。
４．  ２６週間の治療の後の、体重のベースラインからの変化
−  治療差（調査製品  −  比較品）についての９５％ＣＩが、完全に０未満である場合、優位性が確認されたとみなされた。
【０４５６】
ディナー時の、食事の血漿グルコースインクリメント
１日のディナー（インスリンが注射される）時の、食事のＰＧインクリメントを、ディナーの前及びディナーの９０分後に入手可能なＰＧ値の間の差異として、９点ＳＭＰＧプロファイルから導いた。
【０４５７】
２６週間の治療の後のエンドポイントを、固定因子として治療、スクリーニング時の抗糖尿病療法及び性別を、並びに共変数として年齢及びベースラインでのＰＧインクリメントを用いるＡＮＯＶＡ法を使用して、分析した。
【０４５８】
低血糖のエピソードを有しないレスポンダー
低血糖のエピソードを有しないレスポンダーは、被験体が、最後の１２週間の治療の間、治療によって発生した重度又は軽度の低血糖のエピソードを伴うことなく、試験終了時にＡＤＡのＨｂＡ１ｃ標的（ＨｂＡ１ｃ＜７％）を満たしたかどうかに基づいて規定される二分エンドポイント（レスポンダー／非レスポンダー）である。重度の低血糖のエピソードは、ＡＤＡの分類に従って規定され、軽度の低血糖のエピソード（ＰＧ＜３．１ｍｍｏｌ／Ｌ）は、さらなる群である。低血糖のエピソードは、エピソードの開始が、無作為化された治療への曝露の初日以後で且つ無作為化された治療の最後の日の７日後までである場合、治療によって発生したと定義される。エンドポイントは、少なくとも１２週間調査製品又はその比較品に曝露された被験体のみに対して規定された。
【０４５９】
レスポンダー分析は、固定因子として治療、スクリーニング時の抗糖尿病療法及び性別を、並びに共変数として年齢及びベースラインＨｂＡ１ｃを使用するロジスティック回帰モデルに基づくものであった。
【０４６０】
夜間の治療によって発生した重度又は軽度の低血糖のエピソードの数
この計測エンドポイントは、治療によって発生した夜間の重度及び軽度の低血糖のエピソードの合計と定義される。００：０１及び０５：５９ａ．ｍ．の間（両端を含む）の開始時間を有するいずれかのエピソードを、「夜間の」とみなすものとした。
【０４６１】
夜間の低血糖のエピソードの数を、対数リンク関数（log-link function）及びオフセットとして（as offset）低血糖のエピソードが治療によって発生したとみなされる期間の対数を用いる、負の二項回帰モデルを使用して、分析した。このモデルは、固定因子として治療、スクリーニング時の抗糖尿病療法及び性別を、並びに共変数として年齢を含むものであった。
【０４６２】
体重のベースラインからの変化
２６週間の治療の後の、体重のベースラインからの変化を、固定因子として治療、スクリーニング時の抗糖尿病療法及び性別を、並びに共変数として年齢及びベースライン体重を用いるＡＮＯＶＡ法を使用して、分析した。
【０４６３】
支持的（Supportive）二次エンドポイント
ＨｂＡ１ｃレスポンダーエンドポイント
二分エンドポイント（レスポンダー／非レスポンダー）を、被験体が、特定の標的、例えば少なくともＡＤＡのＨｂＡ１ｃ標的（ＨｂＡ１ｃ＜７％）を満たしたかどうかに基づいて規定した。標的の別の例は、国際糖尿病連合のＨｂＡ１ｃ標的（ＨｂＡ１ｃ≦６．５％）である。
【０４６４】
さらなる二分エンドポイントを、試験の終了時におけるこれらの治療標的が、重度のエピソードのみを、並びに重度及び軽度のエピソードをともに考慮して、最後の１２週間の治療において、低血糖のエピソードを伴うことなく達成されたかどうかに基づいて規定した。エンドポイントは、少なくとも１２週間曝露された被験体のみに対して規定した。
【０４６５】
レスポンダーエンドポイントを、固定因子として治療、スクリーニング時の抗糖尿病療法及び性別を、並びに共変数として年齢及びベースラインＨｂＡ１ｃを使用するロジスティック回帰モデルに基づいて、別々に分析した。
【０４６６】
空腹時血漿グルコース
ＦＰＧのベースラインからの変化を、固定因子として治療、スクリーニング時の抗糖尿病療法及び性別を、並びに共変数として年齢及びベースラインＦＰＧを用いるＡＮＯＶＡ法を使用して、分析した。
【０４６７】
自己測定血漿グルコース
自己測定血漿グルコースを、インスリンの用量の調整に対して使用される９点ＳＭＰＧプロファイル及び１点ＳＭＰＧプロファイルに関して、測定した。
【０４６８】
９点プロファイル（ＳＭＰＧ）
９点プロファイル（ＳＭＰＧ）は、朝食、昼食及び主要な夕食の前及びそれらの開始の９０分後における測定、就寝時間の前、４ａ．ｍ．、及び翌日の朝食の前における測定を含むものであった。
【０４６９】
９点（ＳＭＰＧ）プロファイル由来のエンドポイントは、以下であった：
●  ９点プロファイル（ＳＭＰＧ）
●  ９点プロファイル（ＳＭＰＧ）の平均値
●  ９点プロファイル（ＳＭＰＧ）の変動
●  食事のＰＧインクリメント
●  夜間のＳＭＰＧ測定の間の変化。
【０４７０】
９点プロファイル（ＳＭＰＧ）の平均値は、測定時間によって除算されたプロファイル下面積と定義され、台形法を使用して、算出される。９点プロファイル（ＳＭＰＧ）の変動は、
【数１】
0006262206.tif 000021
（式中、Ｔ、ＰＧ（ｔ）及び
【数２】
0006262206.tif 000022
は、それぞれ、プロファイルの長さ、時間ｔでのＰＧ値、及びプロファイルの平均値を表す）と定義される。
【０４７１】
各食事に対する食事のＰＧインクリメントを、食事の９０分後及び食事の前に入手可能なＰＧ値の間の差異として、９点プロファイル（ＳＭＰＧ）から導いた。全ての食事にわたっての、食事のＰＧインクリメントの平均値を、全ての入手可能な食事インクリメントの平均値として導いた。
【０４７２】
夜間のＰＧの間の変化を、就寝時間の前、４ａ．ｍ．及び翌日の朝食の前に入手可能なＰＧ値の間の差異：（４ａ．ｍ．のＰＧ値  −  就寝時間の前のＰＧ値）、（朝食の前のＰＧ値  −  就寝時間の前のＰＧ値）及び（朝食の前のＰＧ値  −  ４ａ．ｍ．のＰＧ値）を考慮することによって評価した。
【０４７３】
混合効果モデルを、９点プロファイル（ＳＭＰＧ）データにフィッティングさせた。このモデルは、固定因子として治療、時間、治療及び時間の間の相互作用、スクリーニング時の抗糖尿病療法及び性別を、共変数として年齢を、並びに無作為効果として被験体を含むものであった。このモデルから、治療による平均プロファイル及び関連する治療差を推定及び調査した。
【０４７４】
９点プロファイル（ＳＭＰＧ）の平均値及び変動、食事のＰＧインクリメント、並びに夜間のＰＧエンドポイントを、固定因子として治療、スクリーニング時の抗糖尿病療法及び性別を、並びに共変数として年齢及び関連するベースライン値を用いるＡＮＯＶＡ法を使用して、別々に分析した。９点プロファイル（ＳＭＰＧ）の変動を、分析の前に、対数的に変換した。
【０４７５】
安全性エンドポイント
以下の安全性エンドポイントが、評価されるものとした：
●  ＡＥ
●  実験評価
●  臨床評価。
【０４７６】
低血糖のエピソード
低血糖のエピソードは、試験全体を通じて、被験体によって、彼らの試験日記に記録されるものとした。収集された情報は、エピソードを治療する前のＰＧ、及び被験体が自分自身を治療することができるかどうかを含むものとした。最後の食事及び用量に関する情報も、収集されるものとした。この情報を使用して、ＡＤＡの定義に従ってエピソードを分類した（重度、症状が確認される、無症状、症状が推定される、及び相対的）。
【０４７７】
低血糖のエピソードは、エピソードの開始が、無作為化された治療への曝露の初日以後で且つ無作為化された治療の最後の日の７日後までである場合、治療によって発生したと定義されるものとした。
【０４７８】
治療によって発生した低血糖のエピソードの要約を、以下を示すことによって、作成した：
●  少なくとも１つのエピソードを伴う被験体の数
●  少なくとも１つのエピソードを伴う被験体の割合
●  エピソードの数、及び１００ＰＹＥ当たりのエピソードの割合
●  重症度による別々の要約：
−  全てのエピソード
−  ＡＤＡの定義及びさらなる小分類の両方を使用する、夜間のエピソード。
【０４７９】
夜間の期間は、００：０１及び０５：５９ａ．ｍ．（両端を含む）の間の期間とみなされた。この期間中に開始時間を有する低血糖のエピソードを、「夜間の」とみなすものとした。
【０４８０】
低血糖のエピソードの数を、対数リンク関数及びオフセットとして低血糖のエピソードが治療によって発生したとみなされる期間の対数を用いる、負の二項回帰モデルを使用して、分析した。このモデルは、固定因子として治療、スクリーニング時の抗糖尿病療法及び性別を、並びに共変数として年齢を含むものとした。データが許容する範囲内で、別々の分析が、全てのエピソード及び夜間のエピソードを別々に考慮して、重度のエピソード及び重度又は軽度のエピソードについて、行われるものとした。
【０４８１】
さらなる試験情報
以下の表形式の情報は、実施された特定の試験についてのさらなる情報を示す。
【０４８２】
【表２０】
0006262206.tif 000023
【０４８３】
【表２１】
0006262206.tif 000024
【０４８４】
【表２２】
0006262206.tif 000025
【０４８５】
【表２３】
0006262206.tif 000026
【０４８６】
【表２４】
0006262206.tif 000027
【０４８７】
試験の実施
【０４８８】
【表２５】
0006262206.tif 000028
【０４８９】
アナリシス・セットにおける被験体の数
【０４９０】
【表２６】
0006262206.tif 000029
【０４９１】
【表２７】
0006262206.tif 000030
【０４９２】
臨床例５に関する結果
実施例５に関する結果が、添付の図面に示される。結果は、本明細書においてさらに議論される。
【０４９３】
ＨｂＡ１ｃ  −  一次エンドポイント
この試験の主目的は、２６週間の治療の後のＨｂＡ１ｃのベースラインからの変化に関する、血糖（glycaemia）の制御におけるＩＤｅｇＡｓｐの有効性を確認することであった。ＩＤｅｇＡｓｐは、ＩＧｌａｒと比較して、研究集団において、より大きな程度で、血糖制御を改善した。平均ＨｂＡ１ｃは、両方の治療群において、試験全体を通じて、減少した。図１及び２に示される結果、特に図１に示される結果を参照されたい。
【０４９４】
２６週間の治療の後に、平均ＨｂＡ１ｃの観察結果は、ＩＤｅｇＡｓｐを用いた場合７．０％であり、ＩＧｌａｒを用いた場合７．３％であった。ベースラインから試験の終了時までの平均の変化の観察結果は、ＩＤｅｇＡｓｐ群及びＩＧｌａｒ群において、それぞれ、−１．３５％ポイント及び−１．２２％ポイントであった。
【０４９５】
ＩＤｅｇＡｓｐは、血糖制御を有効に改善し（ＩＧｌａｒに対して非劣性）、その後の試験によって、ＨｂＡ１ｃを低下させることにおける、ＩＧｌａｒに対する優位性が確認された。推定治療差についての９５％ＣＩの上限が＜０であったため、非劣性及び優位性の両方が、確認された。
【０４９６】
２６週間の治療の後に、ＨｂＡ１ｃの推定平均低減は、ＩＤｅｇＡｓｐを用いた場合−１．６１％ポイントであり、ＩＧｌａｒを用いた場合−１．３３％ポイントであり、推定平均差異（ＩＤｅｇＡｓｐ−ＩＧｌａｒ）は、−０．２８％ポイント［−０．４６；−０．１０］９５％ＣＩであった。表２８を参照されたい。
【０４９７】
【表２８】
0006262206.tif 000031
【０４９８】
一次有効性分析は、ＦＡＳ及びＰＰアナリシス・セットの両方に基づくものであり、ここでＰＰ分析は、支持的な証拠とみなされた。ＰＰアナリシス・セットを使用する分析の結果は、一次分析から得られる結果を支持した。表２９を参照されたい。
【０４９９】
一次分析の結果は、１つが共変数としてベースラインでのＨｂＡ１ｃのみを含む単純なモデルに基づき、１つが、繰り返し測定モデルに基づく、２つのさらなる感度分析によっても支持された。
【０５００】
【表２９】
0006262206.tif 000032
【０５０１】
ＨｂＡ１ｃについてのレスポンダー
試験の終了時に、ＨｂＡ１ｃ＜７．０％というＡＤＡの標的を達成する被験体の割合の観察結果は、ＩＤｅｇＡｓｐを用いた場合５８．５％であり、ＩＧｌａｒを用いた場合４０．３％であった（表３０を参照されたい）。＜７．０％というＨｂＡ１ｃ標的を達成するレスポンダーの割合の観察結果は、数値として、全ての時点（第１２週、第１６週及び第２６週）で、ＩＧｌａｒ群と比較して、ＩＤｅｇＡｓｐ群において、より高かった。
【０５０２】
ＨｂＡ１ｃ≦６．５％というより厳しいＩＤＦの標的を達成する被験体の割合の観察結果は、ＩＤｅｇＡｓｐで治療された被験体の３３．３％、及びＩＧｌａｒで治療された被験体の１９．５％であった。表３０を参照されたい。
【０５０３】
【表３０】
0006262206.tif 000033
【０５０４】
ＨｂＡ１ｃ＜７％という標的を達成することの推定オッズは、ＩＧｌａｒを用いた場合よりも、ＩＤｅｇＡｓｐを用いた場合、およそ２倍高かった（推定治療オッズ比（ＩＤｅｇＡｓｐ／ＩＧｌａｒ）は、２．１０［１．２６；３．５２］９５％ＣＩであった）。表３１を参照されたい。オッズ比（ＩＤｅｇＡｓｐ／ＩＧｌａｒ）についての９５％ＣＩは１を含まなかったため、この差異は、統計的に有意であった。表３１を参照されたい。
【０５０５】
【表３１】
0006262206.tif 000034
【０５０６】
これと一致して、推定オッズ比（ＩＤｅｇＡｓｐ／ＩＧｌａｒオッズ比：２．２０［１．２０；４．０２］９５％ＣＩ）についての９５％ＣＩの下限が＞１であったため、試験の終了時における、ＨｂＡ１ｃ≦６．５％という標的を達成することの推定オッズも、ＩＧｌａｒを用いた場合よりも、ＩＤｅｇＡｓｐを用いた場合、およそ２倍高かった。表３１を参照されたい。
【０５０７】
低血糖を伴うことなくＨｂＡ１ｃ標的を達成する被験体
全体として、ＩＧｌａｒで治療された被験体（２５．０％）よりも数値として高い割合の、ＩＤｅｇＡｓｐで治療された被験体（４３．３％）が、最後の１２週間の治療の間、確認低血糖のエピソードを伴うことなく、ＨｂＡ１ｃ標的＜７％を達成した。表３２を参照されたい。
【０５０８】
【表３２】
0006262206.tif 000035
【０５０９】
確認低血糖のエピソードを伴うことなく、試験の終了時においてＨｂＡ１ｃ＜７％を達成する被験体の割合を、確認用二次エンドポイントと特定した。
【０５１０】
推定オッズ比（ＩＤｅｇＡｓｐ／ＩＧｌａｒ）についての９５％ＣＩの下限が＞１であったため、統計解析によって、確認低血糖のエピソードを伴うことなく、ＨｂＡ１ｃ＜７％を達成する被験体の割合がより高いという点で、ＩＤｅｇＡｓｐが、ＩＧｌａｒよりも優れていることが確認された。この標的を達成することの推定オッズは、ＩＧｌａｒと比較して、ＩＤｅｇＡｓｐを用いた場合、およそ２倍高かった（オッズ比２．２１［１．２５；３．９２］９５％ＣＩ）。表３３を参照されたい。
【０５１１】
【表３３】
0006262206.tif 000036
【０５１２】
確認低血糖のエピソードを伴うことなく、より厳しい標的ＨｂＡ１ｃ≦６．５％を達成することの推定オッズ（ＩＤｅｇＡｓｐ／ＩＧｌａｒ）は、１．７８［０．９０；３．５１］９５％ＣＩであった。推定オッズ比（ＩＤｅｇＡｓｐ／ＩＧｌａｒ）についての９５％ＣＩが、１を含んでいたため、統計的有意差は、治療群の間で観察されなかった。
【０５１３】
予め計画される統計解析によると、重度の低血糖を伴うことなく、標的ＨｂＡ１ｃ＜７％又はＨｂＡ１ｃ≦６．５％を達成する被験体の割合が行われた。この試験について報告される重度の低血糖のエピソードは存在しなかった。
【０５１４】
第２６週におけるＨｂＡ１ｃについての以下の一次統計解析によって、本発明の組合せの優位性が確認される。
【０５１５】
【表３４】
0006262206.tif 000037
【０５１６】
表３４は、表２８から抽出されたデータを含有する。
【０５１７】
臨床例５の要約
この実施例においては、ＩＤｅｇＡｓｐが、経口薬剤では十分に制御されない、２型糖尿病を有する患者に、投与される。本明細書において提示される結果は、無作為化対照第３相試験から得られる。
【０５１８】
背景及び目的
インスリンデグルデク（ＩＤｅｇ）は、皮下注射されると超長時間にわたり且つ一貫性のある（consistent）グルコース低下効果をもたらす、可溶性マルチヘキサマーを形成する、新たな基礎インスリンである。インスリンデグルデク／インスリンアスパルト（ＩＤｅｇＡｓｐ）は、食事時間及び基礎インスリンカバレッジの両方をもたらす、ＩＤｅｇ（７０％）及びインスリンアスパルト（３０％）の可溶性同時配合物である。我々は、第３相２６週間非盲検標的指向治療試験において、経口抗糖尿病薬（ＯＡＤ）では十分に制御されない２型糖尿病を有するインスリンナイーブな成人における、ＩＤｅｇＡｓｐの有効性及び安全性を調査した。
【０５１９】
材料及び方法
参加者（平均：６０．５歳；ＨｂＡ１ｃ  ８．４％；空腹時血漿グルコース［ＦＰＧ］９．０ｍｍｏｌ／Ｌ；ＢＭＩ  ２５．１ｋｇ／ｍ２；糖尿病期間  １１．７年）が、両方とも最大で２つのＯＡＤ（スルホニル尿素、ジペプチジルペプチダーゼ−４阻害剤、及びグリニドを除く）を伴う／伴わない、ＩＤｅｇＡｓｐ（ｎ＝１４７）又はインスリングラルギン（ＩＧｌａｒ；ｎ＝１４９）の１日１回注射へと無作為化された。
【０５２０】
ＩＤｅｇＡｓｐは、各参加者の自由裁量で（及び試験全体を通じて維持されて）、１日の最大の食事の前に、注射された。ＩＧｌａｒは、表示に従って、各日同じ時間に注射された。両方のインスリンが、ＦＰＧ＜５ｍｍｏｌ／Ｌへと滴定された。
【０５２１】
結果
２６週間後に、平均ＨｂＡ１ｃは、ＩＤｅｇＡｓｐを用いた場合７．０％であり、ＩＧｌａｒを用いた場合７．３％であった。
【０５２２】
ベースラインから試験の終了時までのＨｂＡ１ｃの変化の分析が、ＩＤｅｇＡｓｐが、ＩＧｌａｒよりも優れていることを実証した（推定治療差（ＥＴＤ）ＩＤｅｇＡｓｐ−ＩＧｌａｒ：−０．２８％ポイント［−０．４６；−０．１０］９５％ＣＩ、ｐ＜０．００１）
。試験終了時に、ＩＧｌａｒを用いた場合（４０．３％）に対して、ＩＤｅｇＡｓｐを用いた場合（５８．５％）、より大きい割合の被験体が、ＨｂＡ１ｃ＜７．０％を達成した。平均ＦＰＧは、ＩＤｅｇＡｓｐ及びＩＧｌａｒで類似していた（５．７対５．６ｍｍｏｌ／Ｌ；ＥＴＤ  ＩＤｅｇＡｓｐ−ＩＧｌａｒ：０．１５ｍｍｏｌ／Ｌ［−０．２９；０．６０］、ｐ＝ＮＳ）。
【０５２３】
重度の低血糖は、報告されなかった。
【０５２４】
確認低血糖（ＰＧ＜３．１ｍｍｏｌ／Ｌ）が、両群において、４４％の被験体について報告された。ＩＤｅｇＡｓｐは、ＩＧｌａｒよりも、数値としてより低い（２７％）割合の確認低血糖と関連した（推定割合比（ＥＲＲ）ＩＤｅｇＡｓｐ／ＩＧｌａｒ：０．７３ ［０．５０；１．０８］、ｐ＝ＮＳ）。
【０５２５】
ＩＧｌａｒを用いた場合と比較して、ＩＤｅｇＡｓｐを用いた場合、有意に大きい割合の被験体が、試験終了時に、（最後の１２週間の治療において確認低血糖を伴うことなく）ＨｂＡ１ｃ＜７．０％を達成した（４３％対２５％；オッズ比２．２１［１．２５；３．９２］、ｐ＝０．００３）。
【０５２６】
夜間確認低血糖（００：０１〜０５：５９ｈの間に開始する確認低血糖）の割合は、ＩＧｌａｒを用いた場合よりも、ＩＤｅｇＡｓｐを用いた場合、数値として、より低かった（２５％）（ＲＲ：０．７５［０．３４；１．６４］、ｐ＝ＮＳ）。
【０５２７】
ベースラインからの体重の増大（両群で０．７ｋｇ）と同様、平均インスリンの１日用量は、試験の終了時において、群間で類似していた（ＩＤｅｇＡｓｐ：２８Ｕ；ＩＧｌａｒ：２９Ｕ）。有害事象の全体割合は、群間で類似しており、治療特異的なパターン又はクラスター形成を伴わなかった。
【０５２８】
結論
１日の最大の食事とともに１日１回投与されるＩＤｅｇＡｓｐが、ＩＧｌａｒよりも、優れた長期間の血糖制御をもたらし、類似のＦＰＧをもたらし、数値としてより低い割合の全低血糖及び夜間低血糖をもたらした。
【０５２９】
したがって、優れた血糖制御が、経口薬剤では十分に制御されない２型糖尿病を有する被験体において、ＩＧｌａｒに対して、ＩＤｅｇＡｓｐの１日１回投与を用いた場合、達成された。
【０５３０】
議論及び全体的な結論
背景情報
ヒトインスリン製剤と比較して、内因性インスリン分泌をより厳密に（closely）模倣し、現在、糖尿病管理の確立された部分であるインスリン類似体が、開発された。ＩＤｅｇＡｓｐは、基礎インスリン成分（ＩＤｅｇ）及びボーラスインスリン成分（ＩＡｓｐ）の両方を含む、最初の可溶性の使用準備済（ready-to-use）インスリンである。ＩＤｅｇＡｓｐが、１つの食事のさらなる食事のカバレッジとともに超長時間作用型の基礎カバレッジをもたらすため、今回の試験では、ＯＡＤ単独では十分に制御されない２型真性糖尿病を有するインスリンナイーブ被験体が、インスリン治療の開始のためのＩＤｅｇＡｓｐの使用を調査するために、選ばれた。
【０５３１】
試験は、２型真性糖尿病を有する被験体においてＯＡＤ単独によってはグルコースレベルがもはや制御されない場合における、単剤療法として又は最大で２つのＯＡＤと組み合わせて、ＩＤｅｇＡｓｐ  ＯＤを用いる治療の有効性及び安全性を確認するために、実施された。主目的は、２６週間の治療の後における、ＨｂＡ１ｃのベースラインからの変化に関する血糖の制御における、ＩＤｅｇＡｓｐ  ＯＤ±ＯＡＤの有効性を確認することであった。ベースラインの特徴は、２つの治療群において類似しており、およそ９３％の被験体が、試験を完了した。
【０５３２】
任意の非盲検試験における場合と同様に、根本的な報告バイアスのリスクが存在し得る。概して、調査者は、ＩＤｅｇＡｓｐのような新たな医薬によって被験体を治療する場合には、より注意深くなりがちであるし、被験体も、新たな治療に対して、より躊躇する可能性がある。このことは、ＡＥ及び低血糖の報告に影響した可能性がある。
【０５３３】
血糖制御
ＩＤｅｇＡｓｐは、２６週間の治療の後に、０．２８％ポイントという臨床的に意義のある差異を伴ってＨｂＡ１ｃを低下させる点で、ＩＧｌａｒよりも優れていた。２６週間の治療の後に、平均ＨｂＡ１ｃの観察結果は、ＩＧｌａｒ群における７．３％と比較して、ＩＤｅｇＡｓｐにおける７．０％まで低減された。ＨｂＡ１ｃの推定低減は、ＩＤｅｇＡｓｐを用いた場合−１．６１％ポイントであり、ＩＧｌａｒを用いた場合−１．３３％ポイントであった。確認低血糖を伴って又は伴うことなくＨｂＡ１ｃ＜７％というＡＤＡの標的を達成することの推定オッズは、ＩＧｌａｒを用いた場合と比較して、ＩＤｅｇＡｓｐを用いた場合、およそ２倍高く、主要な食事でのさらなる食事のカバレッジを伴う超長時間作用型の基礎インスリンの組合せによる治療が、安全性を損なうことなく、優れたグルコース制御をもたらすという事実を強調した。加えて、ＨｂＡ１ｃ＜６．５％というＩＤＦの標的を達成することの推定オッズも、ＩＧｌａｒを用いた場合と比較して、ＩＤｅｇＡｓｐを用いた場合、およそ２倍高かった。
【０５３４】
ＦＰＧの低減は、２６週間の治療の後に、両方の治療群において、類似していたが、ＩＤｅｇＡｓｐの投与を受ける被験体においては、夜間確認低血糖及び全確認低血糖のエピソードの両方のより低いリスクを伴って、達成された。
【０５３５】
ＩＤｅｇＡｓｐ及びＩＧｌａｒの治療の両方が、ＳＭＰＧプロファイルの全体的な低減をもたらし、ＩＤｅｇＡｓｐによる治療は、ＩＧｌａｒと比較して、主要な夕食での及び全ての食事にわたる、より低い食事のインクリメントをもたらした。主要な夕食の後に観察されるＩＤｅｇＡｓｐの優れたグルコース低下効果は、ＩＤｅｇＡｓｐの食事のカバレッジの利益を反映する。主要な夕食の後に、ＩＧｌａｒ群と比較して、ＩＤｅｇＡｓｐ群においては、より多くの低血糖事象は、存在しなかった。これは、彼らが何時最大の食事を有するかに応じて、投与の時間を、患者に選ばせることの利点を支持する。ＦＰＧ制御を損なうことなく、ＩＧｌａｒと比較して、食後のグルコース逸脱の制御においてＩＤｅｇＡｓｐが優れていることは、ＩＤｅｇＡｓｐのインスリンデグルデク対インスリンアスパルト比が、この群の被験体に対して適切であることを示唆する。
【０５３６】
インスリンの用量及び滴定
１０Ｕ  ＯＤでのＩＤｅｇＡｓｐの開始は、安全であるようであり、最初の４週間のインスリン投与の間、低血糖のエピソードが殆ど報告されなかった。
【０５３７】
平均インスリンの１日用量は、試験全体を通じて、ＩＤｅｇＡｓｐ及びＩＧｌａｒ群において、同じパターンに従った。２６週間の治療の後に、平均インスリンの用量は、ＩＤｅｇＡｓｐ及びＩＧｌａｒ群において、それぞれ、２８Ｕ（０．４１Ｕ／ｋｇ）及び２９Ｕ（０．４１Ｕ／ｋｇ）であった。
【０５３８】
両方の治療群における全ての被験体が、注射時間に関係なく、朝食前の（prebreakfast）ＳＭＰＧに基づいて、滴定された。処方された用量と実際の用量との間の平均差異、及び滴定アルゴリズム用量と処方された用量の間の平均差異が、それぞれ、試験全体を通じて、０Ｕに近かった（平均差異［処方された用量  −  滴定アルゴリズム用量］は、−２Ｕと−１Ｕとの間であった）ため、被験体の服薬遵守及び滴定アルゴリズムへの密なアドヒアランスが、両方の治療群において、示された。
【０５３９】
ＩＤｅｇＡｓｐの食事の成分は、より低い夕食後及び就寝時間のグルコース値をもたらしたため、夜間の基礎インスリンカバレッジの必要性を低減した。したがって、ＩＤｅｇＡｓｐの基礎成分（７０％のインスリンデグルデク）は、ＩＧｌａｒを用いた場合と同じ平均ＦＰＧ値を達成するのに十分である。
【０５４０】
低血糖
確認低血糖のエピソードの割合の観察結果は、ＩＧｌａｒを用いた場合と比較して、ＩＤｅｇＡｓｐを用いた場合、数値として、より低かった。
【０５４１】
真性糖尿病を有する被験体にとって最大の関心事の１つは、睡眠中に発生する低血糖のエピソードのリスクである。３３、３４  ＩＤｅｇＡｓｐによる治療は、２６週間の治療の後に、優れたグルコース低下効果を維持しながら、ＩＧｌａｒによる治療と比較して、数値としてより低い割合の、夜間の確認低血糖のエピソードをもたらした。ＩＤｅｇＡｓｐの基礎成分の、より安定且つ平坦な作用プロファイルは、被験体が、安全性を損なうことなく、血糖標的に到達することを可能とする。重度の又は夜間の重度の低血糖のエピソードは、この試験中、いずれの治療群においても、報告されなかった。
【０５４２】
試験中の任意の時点で観察される低血糖のエピソードのクラスター形成は存在しなかった。
【０５４３】
安全性及び耐容性
全体的に、ＩＤｅｇＡｓｐによる治療は、この研究において、耐容性良好であり、ＩＤｅｇＡｓｐのＡＥプロファイルは、予期せぬ安全性シグナルは特定されず、完全なＩＤｅｇＡｓｐ開発プログラムにおいて観察される安全性プロファイルに従っていた。ＩＤｅｇＡｓｐは、安全且つ耐容性良好且つ効果的な治療である。
【０５４４】
全体的な結論
この確認用の無作為化対照２６週間試験の結果は、２型真性糖尿病を有するインスリンナイーブ被験体において、両方とも±経口抗糖尿病薬で１日１回投与される、ＩＧｌａｒに対するＩＤｅｇＡｓｐの有効性及び安全性を実証する。ＩＤｅｇＡｓｐは、ＨｂＡ１ｃによって測定されるような血糖制御を有効に改善し、そのデータは、ＨｂＡ１ｃを低下させること及びディナー時の食事の血漿グルコースインクリメントを低下させることに関する、ＩＧｌａｒに対する優位性を確認する。ＩＤｅｇＡｓｐは、確認低血糖を伴うことなく、より大きな割合の被験体をＨｂＡ１ｃ標的＜７％へと到達させることにおいて、ＩＧｌａｒよりも優れている。ＩＤｅｇＡｓｐ及びＩＧｌａｒは、ＦＰＧの同様の低減をもたらす。ＩＤｅｇＡｓｐは、ＩＧｌａｒよりも、数値として低い割合の、確認低血糖及び夜間確認低血糖と関連する。体重は、両方の治療群において、僅かに増大する。この試験においては、ＩＤｅｇＡｓｐを用いた場合、安全性の問題は特定されない。
【０５４５】
本明細書において引用される出版物、特許出願及び特許を含む全ての参考文献は、各参考文献が、参照によって組み込まれることが個別に且つ具体的に示されており、その全体が本明細書に示されているかのように、その全体として且つ同程度、（法によって許容される最大の程度）、参照によって本明細書に組み込まれる。
【０５４６】
全ての見出し及び小見出しは、本明細書において、便宜のみのために使用されており、本発明を限定するものとは決して解釈されるべきではない。
【０５４７】
本明細書において提示される任意の及び全ての実施例又は例示用の用語（例えば、「例えば（such as）」）の使用は、本発明の理解をより容易にすることを意図しているにすぎないものであり、他の主張がなされぬ限り、本発明の範囲に対する限定をもたらすものではない。明細書中の用語が、特許請求されていない任意の要素を、本発明の実施に必須であるとして示すものと解釈されるべきではない。
【０５４８】
本明細書における特許文書の引用及び組込みは、便宜のみのためになされているにすぎず、そのような特許文書の有効性、特許性及び／又は法的強制力のいかなる観点をも反映するものではない。
【０５４９】
本発明は、適用法によって許容されるように、ここに添付される特許請求の範囲に記載される主題事項の全ての変更形態及び均等形態を含む。
【図１】
0006262206.tif 000038
【図２】
0006262206.tif 000039