(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ｉ）の化合物：
【化１】
0006367800.tif 000060
式中、
ＸはＣ又はＳ＝Ｏであり；
ＡはＣＨを表し；
ｎは０、１、２又は３であり；
Ｒ１は、フェニル、５又は６員の飽和又は不飽和の複素環、Ｏ、Ｎ及びＳから独立に選択されるヘテロ原子を含有する、８〜１０員の不飽和又は部分的に飽和の複素環であり；環のいずれかが、シアノ、ハロゲン、ニトロ、ヒドロキシ、Ｃ１〜６アルキル、ハロＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、ハロＣ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルキルカルボニル、Ｃ６〜１０アリール、Ｃ６〜１０アリールオキシ、Ｃ６〜１０アリールカルボニル、Ｎ（Ｒａ）２、ＳＯ２Ｎ（Ｒａ）２、Ｎ（Ｒａ）ＳＯ２Ｒａ、並びにハロゲン、Ｃ１〜６アルキル、ハロＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシから独立に選択される１つ以上の基で場合によって置換されている５又は６員の飽和又は不飽和の複素環から独立に選択される１つ以上の基で場合によって置換されており；
Ｒ２は、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜１０シクロアルキルを表し；
Ｒ３は、水素又はＣ１〜６アルキルを表し；
Ｒ４は、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、スルホニルアミノ、Ｃ１〜６アルキル、ハロＣ１〜６アルキル、ヒドロキシＣ１〜６アルキル、ＳＯ２Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、ハロＣ１〜６アルコキシ、Ｃ３〜１０シクロアルキル、ハロＣ３〜１０シクロアルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル、ニトロ、Ｎ（Ｒａ）２、Ｃ６〜１０アリール、Ｃ６〜１０アリールＣ１〜６アルキル、Ｃ６〜１０アリールＣ１〜６アルコキシ；場合によってＣ１〜４アルキル基で架橋されている、Ｎ、Ｏ及びＳから独立に選択される１、２又は３個のヘテロ原子を含有する、４、５又は６員の飽和又は部分的に飽和の複素環；Ｎ、Ｏ及びＳから独立に選択されるが、そのうちの１個以下はＯ又はＳである、１、２、３又は４個のヘテロ原子を含有する、５員の不飽和の複素環；１、２又は３個の窒素原子を含有する、６員の不飽和の複素環；或いはＮ、Ｏ又はＳから独立に選択されるヘテロ原子を含有する、７〜１３員の飽和、部分的に飽和又は不飽和の複素環であり；環のいずれかが、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１〜６アルキル、ハロＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、及びハロＣ１〜６アルコキシから独立に選択される１つ以上の基で場合によって置換され；
Ｒ５及びＲ６は、独立に水素又はＣ１〜６アルキルであるか、ＣＲ５Ｒ６はカルボニルを表すか、或いはＣＲ５Ｒ６はシクロプロピルを表し；
それぞれＲａは、水素、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ６〜１０アリール、Ｃ１〜６アルキルカルボニル、及びＣ６〜１０アリールカルボニルから独立に選択される；
並びにその医薬的に許容可能な塩、互変異性体、立体異性体。
【請求項２】
一般式（ＩＩ）を有する、請求項１に記載の化合物：
【化２】
0006367800.tif 000061
式中、
Ａ、Ｒ２は請求項１で定義したとおりであり；
ｎは０又は１であり；
Ｒ７は、ハロゲン、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、ハロＣ１〜６アルキル、及びハロＣ１〜６アルコキシから選択され；
Ｒ５及びＲ６は、独立に水素又はＣ１〜６アルキルであるか、ＣＲ５Ｒ６はカルボニルを表すか、或いはＣＲ５Ｒ６はシクロプロピルを表し；
Ｒ４は、Ｃ３〜１０シクロアルキル、ハロＣ３〜１０シクロアルキル、Ｎ（Ｒａ）２；場合によってＣ１〜４アルキル基で架橋されている、Ｎ、Ｏ及びＳから独立に選択される１、２又は３個のヘテロ原子を含有する、４、５又は６員の飽和又は部分的に飽和の複素環；Ｎ、Ｏ及びＳから独立に選択されるが、そのうちの１個以下はＯ又はＳである、１、２、３個のヘテロ原子を含有する、５員の不飽和の複素環；Ｎ、Ｏ及びＳから独立に選択されるヘテロ原子を含有する、７〜１３員の飽和、部分的に飽和又は不飽和の複素環であり；環のいずれかが、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１〜６アルキル、ハロＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、及びハロＣ１〜６アルコキシから独立に選択される１つ以上の基で場合によって置換され；
ＲａはＣ１〜６アルキルである；
並びにその医薬的に許容可能な塩、互変異性体、立体異性体。
【請求項３】
一般式（ＩＩＩ）を有する、請求項１に記載の化合物：
【化３】
0006367800.tif 000062
式中、
Ａ、Ｒ２は請求項１で定義したとおりであり；
ｎは０又は１であり；
Ｒ８はＣ１〜６アルキルであり；
Ｒ５及びＲ６は、独立に水素又はＣ１〜６アルキルであるか、ＣＲ５Ｒ６はカルボニルを表すか、或いはＣＲ５Ｒ６はシクロプロピルを表し；
Ｒ４は、Ｃ３〜１０シクロアルキル、ハロＣ３〜１０シクロアルキル、Ｎ（Ｒａ）２；場合によってＣ１〜４アルキル基で架橋されている、Ｎ、Ｏ及びＳから独立に選択される１、２又は３個のヘテロ原子を含有する、４、５又は６員の飽和又は部分的に飽和の複素環；Ｎ、Ｏ及びＳから独立に選択されるが、そのうちの１個以下はＯ又はＳである、１、２、３個のヘテロ原子を含有する、５員の不飽和の複素環；Ｎ、Ｏ又はＳから独立に選択されるヘテロ原子を含有する、７〜１３員の飽和、部分的に飽和又は不飽和の複素環であり；環のいずれかが、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１〜６アルキル、ハロＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、及びハロＣ１〜６アルコキシから独立に選択される１つ以上の基で場合によって置換される；
並びにその医薬的に許容可能な塩、互変異性体、立体異性体。
【請求項４】
以下のリストから選択される化合物：
−（Ｓ）−２−（５−メトキシ−２−メチル−１Ｈ−インドル−３−イル）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）アセトアミド；
−（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキサノニル）−１−メチルアゼチジン−３−カルボキサミド；
−（Ｓ）−１−メチル−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）ピペリジン−４−カルボキサミド；
−（Ｓ）−２−（５−メトキシ−２−メチル−１Ｈ−インドル−３−イル）−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）アセトアミド；
−（（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２，３−ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキシン−５−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−１−メチルピペリジン−４−カルボキサミド；
−（Ｓ）−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）チアゾール−５−カルボキサミド；
−（Ｓ）−３−（ジメチルアミノ）−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）プロパンアミド；
−１−メチル−Ｎ−（（Ｓ）−７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）ピロリジン−３−カルボキサミド；
−（Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−２−メチル−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）プロパンアミド；
−（Ｓ）−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）シクロプロパン−１，１−ジカルボキサミド；
−（Ｓ）−２−（メチルスルホニル）−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）アセトアミド；
−（（Ｓ）−２−シクロヘキシル−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）アセトアミド；
−（Ｒ）−２−オキソ−Ｎ−（（Ｓ）−７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）チアゾリジン−４−カルボキサミド；
−（Ｓ）−２−クロロ−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）イソニコチンアミド；
−（Ｓ）−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）アセトアミド；
−（Ｓ）−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）キノキサリン−６−カルボキサミド；
−１−メチル−Ｎ−（（Ｓ）−７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）ピペリジン−３−カルボキサミド；
−（Ｓ）−２−（２−メチル−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾル−１−イル）−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）アセトアミド；
−（Ｓ）−６−クロロ−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−２−カルボキサミド；
−（Ｓ）−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）−１Ｈ−インドール−６−カルボキサミド；
−１−メチル−Ｎ−（（Ｓ）−７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）アゼパン−２−カルボキサミド；
−（Ｓ）−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）−４−スルファモイルブタンアミド；
−２−メチル−Ｎ−（（Ｓ）−７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）テトラヒドロフラン−２−カルボキサミド；
−（Ｓ）−３，３−ジフルオロ−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）シクロブタンカルボキサミド；
−３−（１−メチルピペリジン−３−イル）−Ｎ−（（Ｓ）−７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）プロパンアミド；
−（Ｓ）−３−（２−エチル−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾル−１−イル）−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）プロパンアミド；
−（Ｓ）−Ｎ１，Ｎ１−ジメチル−Ｎ２−（７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）オキサルアミド；
−（Ｓ）−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−オキソ−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）アセトアミド；
−（Ｓ）−３−（２−エチル−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾル−１−イル）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）プロパンアミド；
−（Ｓ）−４−メチル−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン−７−カルボキサミド；
−（Ｓ）−２−（イミダゾ［２，１−ｂ］チアゾル−３−イル）−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）アセトアミド；
−（Ｓ）−１−メチル−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）アゼチジン−３−カルボキサミド；
−（Ｓ）−２−（２−アミノチアゾル−４−イル）−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）アセトアミド；
−Ｎ−（（Ｓ）−１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−１−メチルピロリジン−３−カルボキサミド；
−（Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−２−メチルプロパンアミド；
−（Ｓ）−Ｎ１−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−Ｎ２，Ｎ２−ジメチルオキサルアミド；
−（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−オキソアセトアミド；
−（Ｓ）−３−（ジメチルアミノ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）プロパンアミド；
−（Ｓ）−９−（（２−（ジメチルアミノ）エチル）アミノ）−９−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）ノナン−３−オン；
−（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）チアゾール−５−カルボキサミド；
−（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）キヌクリジン−４−カルボキサミド；
−（Ｒ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−１−メチルアゼチジン−３−カルボキサミド；
−（Ｓ）−２−（５−メトキシ−２−メチル−１Ｈ−インドル−３−イル）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−Ｎ−メチルアセトアミド；
−（Ｓ）−１−メチル−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−（２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）ノニル）アゼチジン−３−カルボキサミド；
−（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（４−（１Ｈ−ピラゾル−５−イル）フェニル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−１−メチルアゼチジン−３−カルボキサミド；
−（Ｓ）−１−メチル−Ｎ−（１−（５−（４−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾル−５−イル）フェニル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）アゼチジン−３−カルボキサミド；
−（Ｓ）−１−アセチル−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）アゼチジン−３−カルボキサミド；
−（Ｓ）−１−ベンジル−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）アゼチジン−３−カルボキサミド；
−（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）アゼチジン−３−カルボキサミド；
−（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−Ｎ−（（Ｓ）−１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−１−メチルピロリジン−２−カルボキサミド；
−（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−２−（１Ｈ−１，２，３−トリアゾル−１−イル）アセトアミド；
−（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−Ｎ−（（Ｓ）−１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）ピロリジン−２−カルボキサミド；
−（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（４−（１Ｈ−ピラゾル−１−イル）フェニル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−１−メチルアゼチジン−３−カルボキサミド；
−（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（４−（１Ｈ−ピラゾル−１−イル）フェニル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−１−アセチルアゼチジン−３−カルボキサミド；
−（Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−４，４，４−トリフルオロ−Ｎ−（（Ｓ）−１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）ブタンアミド；
−（Ｒ）−２−（ジメチルアミノ）−４，４，４−トリフルオロ−Ｎ−（（Ｓ）−１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）ブタンアミド；
−（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（４−（６−メトキシピリジン−３−イル）フェニル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−１−メチルアゼチジン−３−カルボキサミド；
−（２Ｓ，４Ｓ）−４−フルオロ−Ｎ−（（Ｓ）−１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−１−メチルピロリジン−２−カルボキサミド；
−（Ｓ）−３−フルオロ−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−１−メチルアゼチジン−３−カルボキサミド；
−（Ｓ）−４−フルオロ−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−１−メチルピペリジン−４−カルボキサミド；
−（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−２−モルホリノ−２−オキソアセトアミド；
−（Ｓ）−１−メチル−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−（キノリン−８−イル）オキサゾル−２−イル）ノニル）アゼチジン−３−カルボキサミド；
Ｎ−（（Ｓ）−１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−５−オキソピロリジン−３−カルボキサミド；
（Ｓ）−２−（１Ｈ−イミダゾル−４−イル）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）アセトアミド；
（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−２−（ピリジン−３−イル）アセトアミド；
（Ｓ）−３−（１Ｈ−イミダゾル−１−イル）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）プロパンアミド；
（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−２−（チアゾル−２−イル）アセトアミド；
（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−２−（４−メチル−１，２，５−オキサジアゾル−３−イル）アセトアミド；
（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−２−（３−メチル−１Ｈ−ピラゾル−１−イル）アセトアミド；
（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−２−（ピリミジン−２−イル）アセトアミド；
（Ｓ）−２−（３，５−ジメチル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）アセトアミド；
（Ｓ）−２−（３，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾル−１−イル）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）アセトアミド；
（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−２−（ピロリジン−１−イルメチル）チアゾール−５−カルボキサミド；
（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−２，４−ジメチルチアゾール−５−カルボキサミド；
（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−１，３−ジメチルアゼチジン−３−カルボキサミド；
Ｎ−（（Ｓ）−１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−１−メチルアゼチジン−２−カルボキサミド；
（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）アセトアミド；
（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキサミド；
（Ｓ）−２−（２Ｈ−インダゾル−２−イル）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）アセトアミド；
（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−２−（ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−２−イル）アセトアミド；
（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−５−メチル−１，３，４−オキサジアゾール−２−カルボキサミド；
（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）ニコチンアミド；
（Ｓ）−１−メチル−Ｎ−（１−（５−（１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）アゼチジン−３−カルボキサミド；
（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−３−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾル−４−イル）プロパンアミド；
（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−３−（ピペリジン−１−イルメチル）イソチアゾール−５−カルボキサミド；
２−（３，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾル−１−イル）−Ｎ−（（Ｓ）−１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）プロパンアミド；
（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−１，３−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキサミド；
（Ｓ）−２−（１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾル−１−イル）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）アセトアミド；
（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−１，２，３−チアジアゾール−４−カルボキサミド；
（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）イソチアゾール−５−カルボキサミド；
（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−４−メチル−１，２，３−チアジアゾール−５−カルボキサミド；
Ｎ−（（Ｓ）−１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−２−（１Ｈ−ピラゾル−１−イル）プロパンアミド；
（Ｓ）−２−（（ジメチルアミノ）メチル）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）チアゾール−４−カルボキサミド；
Ｎ−（（Ｓ）−１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−１−メチルピペリジン−３−カルボキサミド；
（Ｓ）−１−（ジメチルアミノ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）シクロペンタンカルボキサミド；
（Ｓ）−３−（ジメチルアミノ）−Ｎ−（１−（５−（１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）プロパンアミド；
（Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−２−メチル−Ｎ−（１−（５−（１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）プロパンアミド；
（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−２−（１−メチルアゼチジン−３−イル）アセトアミド；
（Ｓ）−１−メチル−Ｎ−（１−（５−（１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）ピペリジン−４−カルボキサミド；
（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）チアゾール−５−カルボキサミド；
（Ｓ）−１−（ジメチルアミノ）−Ｎ−（１−（５−（１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）シクロペンタンカルボキサミド；
並びにその医薬的に許容可能な塩、互変異性体、立体異性体。
【請求項５】
（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−１−メチルアゼチジン−３−カルボキサミド、及びその医薬的に許容可能な塩、互変異性体、立体異性体である、請求項４に記載の化合物。
【請求項６】
請求項１から５のいずれか一項に記載の化合物を有効成分として含有する、医薬。
【請求項７】
ＨＤＡＣの阻害により改善する疾患の治療における使用のための、請求項６に記載の医薬。
【請求項８】
異常ヘモグロビン症及び癌の治療における使用のための、請求項６又は７に記載の医薬。
【請求項９】
前記異常ヘモグロビン症が、β−サラセミア又は鎌状赤血球貧血である、請求項８に記載の医薬。
【請求項１０】
一般式（ＩＶ）の化合物：
【化４】
0006367800.tif 000063
式中、
ＸはＣ又はＳ＝Ｏであり；
ＡはＮを表し；
ｎは０、１、２又は３であり；
Ｒ１は、フェニル、５又は６員の飽和又は不飽和の複素環、Ｏ、Ｎ及びＳから独立に選択されるヘテロ原子を含有する、８〜１０員の不飽和又は部分的に飽和の複素環であり；環のいずれかが、シアノ、ハロゲン、ニトロ、ヒドロキシ、Ｃ１〜６アルキル、ハロＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、ハロＣ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルキルカルボニル、Ｃ６〜１０アリール、Ｃ６〜１０アリールオキシ、Ｃ６〜１０アリールカルボニル、Ｎ（Ｒａ）２、ＳＯ２Ｎ（Ｒａ）２、Ｎ（Ｒａ）ＳＯ２Ｒａ、並びにハロゲン、Ｃ１〜６アルキル、ハロＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシから独立に選択される１つ以上の基で場合によって置換されている５又は６員の飽和又は不飽和の複素環から独立に選択される１つ以上の基で場合によって置換されており；
Ｒ２は、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜１０シクロアルキルを表し；
Ｒ３は、水素又はＣ１〜６アルキルを表し；
Ｒ４は、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、スルホニルアミノ、Ｃ１〜６アルキル、ハロＣ１〜６アルキル、ヒドロキシＣ１〜６アルキル、ＳＯ２Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、ハロＣ１〜６アルコキシ、Ｃ３〜１０シクロアルキル、ハロＣ３〜１０シクロアルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル、ニトロ、Ｎ（Ｒａ）２、Ｃ６〜１０アリール、Ｃ６〜１０アリールＣ１〜６アルキル、Ｃ６〜１０アリールＣ１〜６アルコキシ；場合によってＣ１〜４アルキル基で架橋されている、Ｎ、Ｏ及びＳから独立に選択される１、２又は３個のヘテロ原子を含有する、４、５又は６員の飽和又は部分的に飽和の複素環；Ｎ、Ｏ及びＳから独立に選択されるが、そのうちの１個以下はＯ又はＳである、１、２、３又は４個のヘテロ原子を含有する、５員の不飽和の複素環；１、２又は３個の窒素原子を含有する、６員の不飽和の複素環；或いはＮ、Ｏ又はＳから独立に選択されるヘテロ原子を含有する、７〜１３員の飽和、部分的に飽和又は不飽和の複素環であり；環のいずれかが、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１〜６アルキル、ハロＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、及びハロＣ１〜６アルコキシから独立に選択される１つ以上の基で場合によって置換され；
Ｒ５及びＲ６は、独立に水素又はＣ１〜６アルキルであるか、ＣＲ５Ｒ６はカルボニルを表すか、或いはＣＲ５Ｒ６はシクロプロピルを表し；
それぞれＲａは、水素、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ６〜１０アリール、Ｃ１〜６アルキルカルボニル、及びＣ６〜１０アリールカルボニルから独立に選択される；
並びにその医薬的に許容可能な塩、互変異性体、立体異性体を有効成分として含有する、異常ヘモグロビン症治療剤。
【請求項１１】
以下のリストから選択される、一般式（ＩＶ）の化合物：
−（Ｓ）−Ｎ１−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）−１，３，４−オキサジアゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−Ｎ２，Ｎ２−ジメチルオキサラミド；
−（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）−１，３，４−オキサジアゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−オキソアセトアミド；
−（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）−１，３，４−オキサジアゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−１−メチルピペリジン−４−カルボキサミド；
−（Ｓ）−２−（５−メトキシ−２−メチル−１Ｈ−インドル−３−イル）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）−１，３，４−オキサジアゾル−２−イル）−７−オキソノニル）アセトアミド；
−（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）−１，３，４−オキサジアゾル−２−イル）−７−オキソノニル）チアゾール−５−カルボキサミド；
−（Ｓ）−３−（２−エチル−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾル−１−イル）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）−１，３，４−オキサジアゾル−２−イル）−７−オキソノニル）プロパンアミド；
−（Ｓ）−３−（ジメチルアミノ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）−１，３，４−オキサジアゾル−２−イル）−７−オキソノニル）プロパンアミド；
−（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）−１，３，４−オキサジアゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−１−メチルアゼチジン−３−カルボキサミド；
−（Ｓ）−１−メチル−Ｎ−（１−（５−（１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−１，３，４−オキサジアゾル−２−イル）−７−オキソノニル）アゼチジン−３−カルボキサミド；
並びにその医薬的に許容可能な塩、互変異性体、立体異性体を有効成分として含有する、異常ヘモグロビン症治療剤。
【請求項１２】
前記異常ヘモグロビン症が、β−サラセミア又は鎌状赤血球貧血である、請求項１０又は１１に記載の異常ヘモグロビン症治療剤。
【請求項１３】
単独又はその他の活性化合物との組み合わせで、有効量の請求項１から６のいずれか一項に記載の化合物と、少なくとも１つの医薬的に許容可能な賦形剤とを含む、医薬組成物。
【請求項１４】
さらなる活性成分が、２，２−ジメチルブチレート、ヒドロキシウレア、デシタビン、エリスロポエチン、トリコスタチン、バルプロ酸、又はそれらの組み合わせである、請求項１３に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
単独又は他の活性化合物との組み合わせで、有効量の１つ又は複数の請求項１０又は１１に記載の異常ヘモグロビン症治療剤と、少なくとも１つの医薬的に許容可能な賦形剤とを含む、異常ヘモグロビン症治療用医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）の阻害剤である複素環誘導体に関する。本発明の化合物は、ＨＤＡＣの阻害により改善される疾患、特に異常ヘモグロビン症を含む遺伝性疾患の治療に有用である。異常ヘモグロビン症は、ヘモグロビン分子（Ｈｂ）の通常のグロビンタンパク質の異常な構造又は生産不足を特徴とする遺伝子異常である。主要な異常ヘモグロビン症には、鎌状赤血球病及び様々な形態のサラセミアが含まれる。鎌状赤血球貧血は、ベータ−グロビン鎖の６番目のアミノ酸におけるミスセンス変異に起因する。得られた鎌状Ｈｂ（ＨｂＳ）は、脱酸素時にサイトゾル中で不溶性ポリマーを形成し、続けて赤血球が変形し、血管が閉塞する。サラセミアは、アルファ又はベータ−グロビンの減少又は低下した発現をもたらす多くの遺伝子変異まで遡ることができ、ベータ−サラセミアがより一般的である。
【０００２】
特に、本発明の化合物は、β−サラセミア及び鎌状赤血球貧血を治療するために有用である。
【背景技術】
【０００３】
真核細胞において、核中のＤＮＡの秩序的な充填は、遺伝子転写の調節に重要な役割を果たす。核ＤＮＡは、クロマチンと呼ばれる小型の複合体中で秩序化される。複合体のコアは、ヒストンと呼ばれる高保存塩基性タンパク質の八量体である。ヒストンＨ２Ａ、Ｈ２Ｂ、Ｈ３及びＨ４のうちの２つがそれぞれ会合し、ＤＮＡは、ＤＮＡの負に帯電したリン酸基と相互作用するヒストンの塩基性アミノ酸の周りに巻き付く。ヒストンＨ１の１分子は、約１４６ｂｐのＤＮＡを収容するそれぞれの巻き付けられたコアと会合する。代わりに、コアは、それぞれのコアの間の約２００ｂｐのＤＮＡを有する小さく規則的な構造に充填される。
【０００４】
ヒストンのアミノ末端尾部は、特にリシンのアセチル化によって翻訳後修飾される。ヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）及びヒストンアセチルトランスフェラーゼ（ＨＡＴ）はヒストンのアセチル化のパターンを決定し、これは他の動的逐次翻訳後修飾と一緒に、遺伝子発現の調節に含まれる複合体を形成する非ヒストンタンパク質によって認識され得る「コード」を表す。このこと及び非ヒストン性物質を改質し、多タンパク質複合体に関与するヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）の能力は、遺伝子転写の調節、細胞周期の進行及び分化、ゲノム安定性、並びにストレス反応に寄与する。ＨＤＡＣ阻害剤は、分化の誘発、培養中の広範囲の形質転換細胞における増殖停止及び／又はアポトーシス、並びに血液癌及び固形腫瘍の両方を含む、動物中の腫瘍の原因となる。これらの阻害効果は、遺伝子転写の調節において主要な役割を果たすと思われるヌクレオソームヒストンなどのアセチル化タンパク質の蓄積によって、ある程度引き起こされると考えられている。最近、これらの化合物が、β−サラセミア及び鎌状赤血球貧血などの遺伝性疾患の治療のための新規な治療剤となり得ることが発見された。
【０００５】
ヘモグロビン（Ｈｂ）は、２つのα様及び２つのβ様グロビンポリペプチド鎖の四量体である。ヒトにおいて、α−グロビンのための遺伝子は、ζのための１つの遺伝子及びαのための２つの遺伝子（α１及びα２、それらのタンパク質は同一である）を含有する、染色体１６にクラスター化される。β様グロビンのための遺伝子は、ε、β及びδのための遺伝子、それぞれのための１つの遺伝子、及びγのための２つのわずかに異なる遺伝子を含有する、染色体１１にクラスター化される。さらに、これらのクラスターは、それぞれの遺伝子の発現の調節の原因となる様々なサイトを含有する（Ｓｔｅｉｎｂｅｒｇ，  ＭＨ  ｅｔ  ａｌ、Ｇｅｎｅｔｉｃｓ、Ｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ、ＵＫ、２００１）。
【０００６】
グロビン遺伝子の発現は、個体発生の間に調節される。ヒトにおいて、グロビン生成物は、２つの主な「スイッチ」によって特徴付けられる（Ｔｈｅｉｎ，  ＳＬ  Ｂｒ．  Ｊ．  Ｈａｅｍａｔｏｌ．、２００４、１２４、２６４）。胎児（ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ）Ｈｂの生成物は、最初の２月後、胎児（ｆｅｔａｌ）Ｈｂ（ＨｂＦ）（α２γ２）に変わり、その後再び、出産前及び出産後すぐに、成人ヘモグロビン（ＨｂＡ）（α２β２）に変わる。ＨｂＡ及びＨｂＦの両方がα鎖を含有するため、前のものから後のものへの変化は、β−グロビン遺伝子発現の増加に関連するγ−グロビン遺伝子の発現の減少を表す。胚期の間のＨｂＦの広がりは、胎盤を通した母親の赤血球（ＲＢＣ）においてＨｂＡから酸素を取り除く特性である、その酸素への高い親和性によって説明される。
【０００７】
出産直後の新生児は、８５〜９８％のＨｂＦを有しており、１歳までに＜５％まで徐々に低下する。成人期においてはＨｂＡが主なＨｂであり、わずか＜５％がＨｂＡ２（α２δ２）であり、残り（＜５％）が数個のＲＢＣに濃縮されたＨｂＦである。
【０００８】
β−サラセミア及び鎌状赤血球貧血は、最も一般的なヒトの単一遺伝子疾患のうちの２つである。両方の疾患は、成人の赤血球中に存在する主なヘモグロビン（成人ヘモグロビン、ＨｂＡ）を作る四量体グロビン鎖のうちの２つをコードするβ−グロビン遺伝子の異なる突然変異に起因する。
【０００９】
β−サラセミアにおいて、β−グロビン遺伝子又はその調節領域に影響を与える突然変異は、β−グロビン鎖の不在（β０）又は低下（β＋）した合成を引き起こす。これは、対応する過剰の補足α−グロビンと関連する。この不安定なグロビン生成の結果は、骨髄及び骨髄以外の部位（無効造血）における赤血球前駆体のアポトーシスによる破壊、及び末梢血におけるＲＢＣの短い生存期間である（Ｂａｎｋ，  Ａ．  Ｂｌｏｏｄ、２００６、１０７、４３５；Ｓｔａｍａｔｏｙａｎｎｏｐｏｕｌｏｓ、Ｇ．  Ｅｘｐ．  Ｈｅｍａｔｏｌ．  ２００５、３３、２５９）。
【００１０】
鎌状赤血球貧血は、β−グロビン鎖の６番目のアミノ酸におけるミスセンス変異（グルタミンからバリンへの置換）に起因する。得られる鎌状Ｈｂ（ＨｂＳ）は、脱酸素時にサイトゾル中で不溶性ポリマーを形成し、続けて赤血球が変形し、血管が閉塞する。
【００１１】
β−サラセミア及び鎌状赤血球病の患者は、その赤血球が胎児型のＨｂ（ＨｂＦ）を含有する場合、出産時にはそれらの病気の臨床的合併症を有しない。
【００１２】
出生後の生活におけるＨｂＦの割合は、様々な生理学的及び遺伝的要因によって影響を受ける。疫学的な発見により、β−サラセミアにおけるＨｂＦの増加は、臨床症状を改善することが示された（Ｏｌｉｖｉｅｒｉ，  ＮＦ  Ｓｅｍｉｎ．  Ｈｅｍａｔｏｌ．  １９９６、３３、２４；Ｒｏｃｈｅｔｔｅ，  Ｊ  ｅｔ  ａｌ  Ｂｌｏｏｄ  Ｒｅｖ．  １９９４、８、２１３）。最も説得力のある発見は、成人期において遺伝性高胎児ヘモグロビン症（ＨＰＦＨ）に関連する突然変異を有する個体で見出された（Ｂｈａｒｄｗａｊ，  Ｕ  ｅｔ  ａｌ  Ｍｏｌ．  Ｄｉａｇｎ．  ２００５、９、１５１）。ＨＰＦＨと同型接合型β−サラセミアの共存は、無症状である。ＨｂＦが、β−グロビン鎖の不在を機能的に補償することができると思われる（Ｗｉｔｔ，  Ｏ  Ａｍ．  Ｊ．  Ｈｅｍａｔｏｌ．  ２０００、６４、３１９）。
【００１３】
鎌状赤血球病において、ＨｂＦの存在により、有効濃度のＨｂＳが減少し、これにより細胞内でポリマー化する傾向が減少する。胎児γ−グロビン鎖はまた、ＨｂＳがヘテロハイブリッド形成によりポリマー化する能力を妨げる。
【００１４】
これらの発見は、ＨｂＦの生成を増加する分子の特定及び薬理学的方法への大きな関心を生じさせた。さらに、出生後の赤血球細胞中のγ−グロビンを再活性化させる様々な群の化合物が発見された。
【００１５】
様々な発見が、ヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）の活性の阻害は、γ−グロビン遺伝子の発現の増加に関連することを示唆する（Ｃａｏ，  Ｈ  Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ、２００４、９、２２３）。ＨＤＡＣ阻害剤の中で、トリコスタチンは、ヒト及びマウスの赤白血病細胞中で高いＨｂＦ誘導活性を有することが見出された。Ｗｉｔｔら（Ｂｌｏｏｄ、２００３、１０１、２００１）は、試験したいくつかの特定のＨＤＡＣ阻害剤の中で、アピシジンが最も効果的なＨｂＦ誘導剤であり（Ｋ５６２細胞中のｎＭからμＭ濃度で）、その効果は、ＨＤＡＣの阻害に加えて、ｐ３８マイトジェン活性化タンパク質（ＭＡＰ）キナーゼシグナル伝達を含むことを示した。さらなるＨＤＡＣ阻害剤が、最近、トランスジェニックマウスにおけるヒトγ−グロビン遺伝子発現の効果に特徴付けられた。調べられた短鎖脂肪酸のヒドロキサム酸誘導体の中で、ヒドロキサム酸ブチリル及びヒドロキサム酸プロピオニルが最も効果的であり、ヒトのγ／マウスのα−グロビンのｍＲＮＡ比をそれぞれ３３．９％及び７１％増加させた。これは、網状赤血球のヘマクリット値及びＢＦＵ−Ｅのインビボレベルの増加と関連した（Ｃａｏ，  Ｈ  Ｅｘｐ．  Ｈｅｍａｔｏｌ．  ２００５、３３、１４４３）。
【００１６】
国際公開２００６／０６１６３８号には、本発明の化合物と構造的に関連するヒストンデアセチラーゼの阻害剤が開示されている。このような化合物は、癌、神経変性病、統合失調症、及び脳卒中を含む細胞増殖疾患を治療するために有用である。国際公開２００６／０６１６３８号に開示された化合物は、本発明の範囲内ではない。
【００１７】
国際公開２０１１／０７２０８６号には、２，２−ジメチルブチレート（ＤＭＢ）を単独で又はヒドロキシ尿素、デシタビン、若しくはＨＤＡＣ阻害剤と組み合わせて投与することによる、赤血球障害を有する患者の胎児ヘモグロビンレベルを増加するための方法及び低用量レジメンが開示されている。
【００１８】
国際公開２００９／１４１６５８号は、ヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）の阻害剤として作用し、それゆえ異常ヘモグロビン症、サラセミア、及び鎌状赤血球病を含む、ＨＤＡＣを介在する症状の治療において治療的実用性を有する、デプシペプチドに関する。
【００１９】
国際公開２００３／０８７０５７号は、ＨＤＡＣ阻害活性を有し、したがって癌、嚢胞性線維症、ハンチントン舞踏病、及び鎌状赤血球貧血に関連する疾患状態の治療に潜在的な価値を有する、ベンズアミド誘導体に関する。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００２０】
【特許文献１】国際公開２００６／０６１６３８号
【特許文献２】国際公開２０１１／０７２０８６号
【特許文献３】国際公開２００９／１４１６５８号
【特許文献４】国際公開２００３／０８７０５７号
【非特許文献】
【００２１】
【非特許文献１】Ｓｔｅｉｎｂｅｒｇ，  ＭＨ  ｅｔ  ａｌ、Ｇｅｎｅｔｉｃｓ、Ｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ、ＵＫ、２００１
【非特許文献２】Ｔｈｅｉｎ，  ＳＬ  Ｂｒ．  Ｊ．  Ｈａｅｍａｔｏｌ．、２００４、１２４、２６４
【非特許文献３】Ｂａｎｋ，  Ａ．  Ｂｌｏｏｄ、２００６、１０７、４３５
【非特許文献４】Ｓｔａｍａｔｏｙａｎｎｏｐｏｕｌｏｓ、Ｇ．  Ｅｘｐ．  Ｈｅｍａｔｏｌ．  ２００５、３３、２５９
【非特許文献５】Ｏｌｉｖｉｅｒｉ，  ＮＦ  Ｓｅｍｉｎ．  Ｈｅｍａｔｏｌ．  １９９６、３３、２４
【非特許文献６】Ｒｏｃｈｅｔｔｅ，  Ｊ  ｅｔ  ａｌ  Ｂｌｏｏｄ  Ｒｅｖ．  １９９４、８、２１３
【非特許文献７】Ｂｈａｒｄｗａｊ，  Ｕ  ｅｔ  ａｌ  Ｍｏｌ．  Ｄｉａｇｎ．  ２００５、９、１５１
【非特許文献８】Ｗｉｔｔ，  Ｏ  Ａｍ．  Ｊ．  Ｈｅｍａｔｏｌ．  ２０００、６４、３１９
【非特許文献９】Ｃａｏ，  Ｈ  Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ、２００４、９、２２３
【非特許文献１０】Ｗｉｔｔ  ｅｔ  ａｌ  Ｂｌｏｏｄ、２００３、１０１、２００１
【非特許文献１１】Ｃａｏ，  Ｈ  Ｅｘｐ．  Ｈｅｍａｔｏｌ．  ２００５、３３、１４４３
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２２】
しかし、これらの薬物の多くは低い有効性及び特異性を有し、いくつかは潜在的に毒性又は発癌性である。したがって、患者による耐性に優れる用量でＨｂＦの生成を誘導することができ、それにより公知のＨＤＡＣ阻害剤に対して高い有効性及び低い毒性を有する新規な薬剤への緊急の要求が存在する。
【００２３】
本発明の化合物は、潜在的なＨＤＡＣ阻害活性を有し、赤血球分化及びヒトγ−グロビン遺伝子発現を誘導することができる小分子である。さらに、本発明の化合物は、ヒトにおいて改善された治療域が予測される、前臨床化学種における優れた薬物動態によって特徴付けられる。
【課題を解決するための手段】
【００２４】
本発明の化合物は、γ−グロビンの発現を誘導することができるＨＤＡＣ阻害剤である。特に、本明細書において、対象の血液中における胎児ヘモグロビンの割合を増加させることができる化合物が提供される。
【００２５】
したがって、本発明の対象は、式（Ｉ）の化合物：
【００２６】
【化１】
0006367800.tif 000002
【００２７】
式中、
ＸはＣ又はＳ＝Ｏであり；
ＡはＣＨを表し；
ｎは０、１、２又は３であり；
Ｒ１は、フェニル、５又は６員の飽和又は不飽和の複素環、Ｏ、Ｎ及びＳから独立に選択されるヘテロ原子を含有する、８〜１０員の不飽和又は部分的に飽和の複素環であり；環のいずれかが、シアノ、ハロゲン、ニトロ、ヒドロキシ、Ｃ１〜６アルキル、ハロＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、ハロＣ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルキルカルボニル、Ｃ６〜１０アリール、Ｃ６〜１０アリールオキシ、Ｃ６〜１０アリールカルボニル、Ｎ（Ｒａ）２、ＳＯ２Ｎ（Ｒａ）２、Ｎ（Ｒａ）ＳＯ２Ｒａ、並びにハロゲン、Ｃ１〜６アルキル、ハロＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシから独立に選択される１つ以上の基で場合によって置換されている５又は６員の飽和又は不飽和の複素環から独立に選択される１つ以上の基で場合によって置換されており；
Ｒ２は、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜１０シクロアルキルを表し；
Ｒ３は、水素又はＣ１〜６アルキルを表し；
Ｒ４は、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、スルホニルアミノ、Ｃ１〜６アルキル、ハロＣ１〜６アルキル、ヒドロキシＣ１〜６アルキル、ＳＯ２Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、ハロＣ１〜６アルコキシ、Ｃ３〜１０シクロアルキル、ハロＣ３〜１０シクロアルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル、ニトロ、Ｎ（Ｒａ）２、Ｃ６〜１０アリール、Ｃ６〜１０アリールＣ１〜６アルキル、Ｃ６〜１０アリールＣ１〜６アルコキシ；場合によってＣ１〜４アルキル基で架橋されている、Ｎ、Ｏ及びＳから独立に選択される１、２又は３個のヘテロ原子を含有する、４、５又は６員の飽和又は部分的に飽和の複素環；Ｎ、Ｏ及びＳから独立に選択されるが、そのうちの１個以下はＯ又はＳである、１、２、３又は４個のヘテロ原子を含有する、５員の不飽和の複素環；１、２又は３個の窒素原子を含有する、６員の不飽和の複素環；或いはＮ、Ｏ又はＳから独立に選択されるヘテロ原子を含有する、７〜１３員の飽和、部分的に飽和又は不飽和の複素環であり；環のいずれかが、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１〜６アルキル、ハロＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、及びハロＣ１〜６アルコキシから独立に選択される１つ以上の基で場合によって置換され；
Ｒ５及びＲ６は、独立に水素又はＣ１〜６アルキルであるか、ＣＲ５Ｒ６はカルボニルを表すか、或いはＣＲ５Ｒ６はシクロプロピルを表し；
それぞれＲａは、水素、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ６〜１０アリール、Ｃ１〜６アルキルカルボニル、及びＣ６〜１０アリールカルボニルから独立に選択される；
並びにその医薬的に許容可能な塩、互変異性体、立体異性体である。
【００２８】
好ましい実施形態において、化合物は、一般式（ＩＩ）：
【００２９】
【化２】
0006367800.tif 000003
【００３０】
式中、
Ａ、Ｒ２は上で定義したとおりであり；
ｎは０又は１であり；
Ｒ７は、ハロゲン、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、ハロＣ１〜６アルキル、及びハロＣ１〜６アルコキシから選択され；
Ｒ５及びＲ６は、独立に水素又はＣ１〜６アルキルであるか、ＣＲ５Ｒ６はカルボニルを表すか、或いはＣＲ５Ｒ６はシクロプロピルを表し；
Ｒ４は、Ｃ３〜１０シクロアルキル、ハロＣ３〜１０シクロアルキル、Ｎ（Ｒａ）２；場合によってＣ１〜４アルキル基で架橋されている、Ｎ、Ｏ及びＳから独立に選択される１、２又は３個のヘテロ原子を含有する、４、５又は６員の飽和又は部分的に飽和の複素環；Ｎ、Ｏ及びＳから独立に選択されるが、そのうちの１個以下はＯ又はＳである、１、２、３個のヘテロ原子を含有する、５員の不飽和の複素環；Ｎ、Ｏ及びＳから独立に選択されるヘテロ原子を含有する、７〜１３員の飽和、部分的に飽和又は不飽和の複素環であり；環のいずれかが、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１〜６アルキル、ハロＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、及びハロＣ１〜６アルコキシから独立に選択される１つ以上の基で場合によって置換され；
ＲａはＣ１〜６アルキルである；
並びにその医薬的に許容可能な塩、互変異性体、立体異性体を有する。
【００３１】
さらに好ましい実施形態において、化合物は、一般式（ＩＩＩ）：
【００３２】
【化３】
0006367800.tif 000004
【００３３】
式中、
Ａ、Ｒ２は上で定義したとおりであり；
ｎは０又は１であり；
Ｒ８はＣ１〜６アルキルであり；
Ｒ５及びＲ６は、独立に水素又はＣ１〜６アルキルであるか、ＣＲ５Ｒ６はカルボニルを表すか、或いはＣＲ５Ｒ６はシクロプロピルを表し；
Ｒ４は、Ｃ３〜１０シクロアルキル、ハロＣ３〜１０シクロアルキル、Ｎ（Ｒａ）２；場合によってＣ１〜４アルキル基で架橋されている、Ｎ、Ｏ及びＳから独立に選択される１、２又は３個のヘテロ原子を含有する、４、５又は６員の飽和又は部分的に飽和の複素環；Ｎ、Ｏ及びＳから独立に選択されるが、そのうちの１個以下はＯ又はＳである、１、２、３個のヘテロ原子を含有する、５員の不飽和の複素環；Ｎ、Ｏ又はＳから独立に選択されるヘテロ原子を含有する、７〜１３員の飽和、部分的に飽和又は不飽和の複素環であり；環のいずれかが、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１〜６アルキル、ハロＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、及びハロＣ１〜６アルコキシから独立に選択される１つ以上の基で場合によって置換される；
並びにその医薬的に許容可能な塩、互変異性体、立体異性体を有する。
【００３４】
好ましい化合物は、以下のリスト：
−（Ｓ）−２−（５−メトキシ−２−メチル−１Ｈ−インドル−３−イル）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）アセトアミド；
−（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキサノニル）−１−メチルアゼチジン−３−カルボキサミド；
−（Ｓ）−１−メチル−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）ピペリジン−４−カルボキサミド；
−（Ｓ）−２−（５−メトキシ−２−メチル−１Ｈ−インドル−３−イル）−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）アセトアミド；
−（（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２，３−ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキシン−５−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−１−メチルピペリジン−４−カルボキサミド；
−（Ｓ）−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）チアゾール−５−カルボキサミド；
−（Ｓ）−３−（ジメチルアミノ）−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）プロパンアミド；
−１−メチル−Ｎ−（（Ｓ）−７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）ピロリジン−３−カルボキサミド；
−（Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−２−メチル−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）プロパンアミド；
−（Ｓ）−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）シクロプロパン−１，１−ジカルボキサミド；
−（Ｓ）−２−（メチルスルホニル）−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）アセトアミド；
−（（Ｓ）−２−シクロヘキシル−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）アセトアミド；
−（Ｒ）−２−オキソ−Ｎ−（（Ｓ）−７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）チアゾリジン−４−カルボキサミド；
−（Ｓ）−２−クロロ−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）イソニコチンアミド；
−（Ｓ）−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）アセトアミド；
−（Ｓ）−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）キノキサリン−６−カルボキサミド；
−１−メチル−Ｎ−（（Ｓ）−７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）ピペリジン−３−カルボキサミド；
−（Ｓ）−２−（２−メチル−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾル−１−イル）−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）アセトアミド；
−（Ｓ）−６−クロロ−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−２−カルボキサミド；
−（Ｓ）−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）−１Ｈ−インドール−６−カルボキサミド；
−１−メチル−Ｎ−（（Ｓ）−７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）アゼパン−２−カルボキサミド；
−（Ｓ）−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）−４−スルファモイルブタンアミド；
−２−メチル−Ｎ−（（Ｓ）−７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）テトラヒドロフラン−２−カルボキサミド；
−（Ｓ）−３，３−ジフルオロ−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）シクロブタンカルボキサミド；
−３−（１−メチルピペリジン−３−イル）−Ｎ−（（Ｓ）−７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）プロパンアミド；
−（Ｓ）−３−（２−エチル−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾル−１−イル）−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）プロパンアミド；
−（Ｓ）−Ｎ１，Ｎ１−ジメチル−Ｎ２−（７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）オキサルアミド；
−（Ｓ）−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−オキソ−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）アセトアミド；
−（Ｓ）−３−（２−エチル−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾル−１−イル）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）プロパンアミド；
−（Ｓ）−４−メチル−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン−７−カルボキサミド；
−（Ｓ）−２−（イミダゾ［２，１−ｂ］チアゾル−３−イル）−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）アセトアミド；
−（Ｓ）−１−メチル−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）アゼチジン−３−カルボキサミド；
−（Ｓ）−２−（２−アミノチアゾル−４−イル）−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−フェニルオキサゾル−２−イル）ノニル）アセトアミド；
−Ｎ−（（Ｓ）−１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−１−メチルピロリジン−３−カルボキサミド；
−（Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−２−メチルプロパンアミド；
−（Ｓ）−Ｎ１−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−Ｎ２，Ｎ２−ジメチルオキサルアミド；
−（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−オキソアセトアミド；
−（Ｓ）−３−（ジメチルアミノ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）プロパンアミド；
−（Ｓ）−９−（（２−（ジメチルアミノ）エチル）アミノ）−９−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）ノナン−３−オン；
−（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）チアゾール−５−カルボキサミド；
−（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）キヌクリジン−４−カルボキサミド；
−（Ｒ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−１−メチルアゼチジン−３−カルボキサミド；
−（Ｓ）−２−（５−メトキシ−２−メチル−１Ｈ−インドル−３−イル）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−Ｎ−メチルアセトアミド；
−（Ｓ）−１−メチル−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−（２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）ノニル）アゼチジン−３−カルボキサミド；
−（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（４−（１Ｈ−ピラゾル−５−イル）フェニル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−１−メチルアゼチジン−３−カルボキサミド；
−（Ｓ）−１−メチル−Ｎ−（１−（５−（４−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾル−５−イル）フェニル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）アゼチジン−３−カルボキサミド；
−（Ｓ）−１−アセチル−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）アゼチジン−３−カルボキサミド；
−（Ｓ）−１−ベンジル−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）アゼチジン−３−カルボキサミド；
−（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）アゼチジン−３−カルボキサミド；
−（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−Ｎ−（（Ｓ）−１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−１−メチルピロリジン−２−カルボキサミド；
−（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−２−（１Ｈ−１，２，３−トリアゾル−１−イル）アセトアミド；
−（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−Ｎ−（（Ｓ）−１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）ピロリジン−２−カルボキサミド；
−（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（４−（１Ｈ−ピラゾル−１−イル）フェニル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−１−メチルアゼチジン−３−カルボキサミド；
−（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（４−（１Ｈ−ピラゾル−１−イル）フェニル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−１−アセチルアゼチジン−３−カルボキサミド；
−（Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−４，４，４−トリフルオロ−Ｎ−（（Ｓ）−１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）ブタンアミド；
−（Ｒ）−２−（ジメチルアミノ）−４，４，４−トリフルオロ−Ｎ−（（Ｓ）−１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）ブタンアミド；
−（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（４−（６−メトキシピリジン−３−イル）フェニル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−１−メチルアゼチジン−３−カルボキサミド；
−（２Ｓ，４Ｓ）−４−フルオロ−Ｎ−（（Ｓ）−１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−１−メチルピロリジン−２−カルボキサミド；
−（Ｓ）−３−フルオロ−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−１−メチルアゼチジン−３−カルボキサミド；
−（Ｓ）−４−フルオロ−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−１−メチルピペリジン−４−カルボキサミド；
−（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−２−モルホリノ−２−オキソアセトアミド；
−（Ｓ）−１−メチル−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−（キノリン−８−イル）オキサゾル−２−イル）ノニル）アゼチジン−３−カルボキサミド；
Ｎ−（（Ｓ）−１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−５−オキソピロリジン−３−カルボキサミド；
（Ｓ）−２−（１Ｈ−イミダゾル−４−イル）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）アセトアミド；
（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−２−（ピリジン−３−イル）アセトアミド；
（Ｓ）−３−（１Ｈ−イミダゾル−１−イル）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）プロパンアミド；
（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−２−（チアゾル−２−イル）アセトアミド；
（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−２−（４−メチル−１，２，５−オキサジアゾル−３−イル）アセトアミド；
（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−２−（３−メチル−１Ｈ−ピラゾル−１−イル）アセトアミド；
（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−２−（ピリミジン−２−イル）アセトアミド；
（Ｓ）−２−（３，５−ジメチル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）アセトアミド；
（Ｓ）−２−（３，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾル−１−イル）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）アセトアミド；
（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−２−（ピロリジン−１−イルメチル）チアゾール−５−カルボキサミド；
（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−２，４−ジメチルチアゾール−５−カルボキサミド；
（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−１，３−ジメチルアゼチジン−３−カルボキサミド；
Ｎ−（（Ｓ）−１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−１−メチルアゼチジン−２−カルボキサミド；
（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）アセトアミド；
（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキサミド；
（Ｓ）−２−（２Ｈ−インダゾル−２−イル）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）アセトアミド；
（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−２−（ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−２−イル）アセトアミド；
（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−５−メチル−１，３，４−オキサジアゾール−２−カルボキサミド；
（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）ニコチンアミド；
（Ｓ）−１−メチル−Ｎ−（１−（５−（１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）アゼチジン−３−カルボキサミド；
（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−３−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾル−４−イル）プロパンアミド；
（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−３−（ピペリジン−１−イルメチル）イソチアゾール−５−カルボキサミド；
２−（３，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾル−１−イル）−Ｎ−（（Ｓ）−１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）プロパンアミド；
（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−１，３−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキサミド；
（Ｓ）−２−（１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾル−１−イル）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）アセトアミド；
（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−１，２，３−チアジアゾール−４−カルボキサミド；
（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）イソチアゾール−５−カルボキサミド；
（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−４−メチル−１，２，３−チアジアゾール−５−カルボキサミド；
Ｎ−（（Ｓ）−１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−２−（１Ｈ−ピラゾル−１−イル）プロパンアミド；
（Ｓ）−２−（（ジメチルアミノ）メチル）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）チアゾール−４−カルボキサミド；
Ｎ−（（Ｓ）−１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−１−メチルピペリジン−３−カルボキサミド；
（Ｓ）−１−（ジメチルアミノ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）シクロペンタンカルボキサミド；
（Ｓ）−３−（ジメチルアミノ）−Ｎ−（１−（５−（１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）プロパンアミド；
（Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−２−メチル−Ｎ−（１−（５−（１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）プロパンアミド；
（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−２−（１−メチルアゼチジン−３−イル）アセトアミド；
（Ｓ）−１−メチル−Ｎ−（１−（５−（１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）ピペリジン−４−カルボキサミド；
（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）チアゾール−５−カルボキサミド；
（Ｓ）−１−（ジメチルアミノ）−Ｎ−（１−（５−（１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）シクロペンタンカルボキサミド；
並びにその医薬的に許容可能な塩、互変異性体、立体異性体から選択される。
【００３５】
さらにより好ましくは、化合物は、（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−１−メチルアゼチジン−３−カルボキサミドである。
【００３６】
医学的使用、好ましくはＨＤＡＣの阻害により改善される疾患の治療及び／又は異常ヘモグロビン症及び癌の治療における使用のための上で定義した化合物は、本発明のさらなる対象である。
【００３７】
好ましい実施形態において、異常ヘモグロビン症は、β−サラセミア又は鎌状赤血球貧血である。
【００３８】
異常ヘモグロビン症の治療における使用のための、一般式（ＩＶ）の化合物：
【００３９】
【化４】
0006367800.tif 000005
【００４０】
式中、
ＸはＣ又はＳ＝Ｏであり；
ＡはＮを表し；
ｎは０、１、２又は３であり；
Ｒ１は、フェニル、５又は６員の飽和又は不飽和の複素環、Ｏ、Ｎ及びＳから独立に選択されるヘテロ原子を含有する、８〜１０員の不飽和又は部分的に飽和の複素環であり；環のいずれかが、シアノ、ハロゲン、ニトロ、ヒドロキシ、Ｃ１〜６アルキル、ハロＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、ハロＣ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルキルカルボニル、Ｃ６〜１０アリール、Ｃ６〜１０アリールオキシ、Ｃ６〜１０アリールカルボニル、Ｎ（Ｒａ）２、ＳＯ２Ｎ（Ｒａ）２、Ｎ（Ｒａ）ＳＯ２Ｒａ、並びにハロゲン、Ｃ１〜６アルキル、ハロＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシから独立に選択される１つ以上の基で場合によって置換されている５又は６員の飽和又は不飽和の複素環から独立に選択される１つ以上の基で場合によって置換されており；
Ｒ２は、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜１０シクロアルキルを表し；
Ｒ３は、水素又はＣ１〜６アルキルを表し；
Ｒ４は、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、スルホニルアミノ、Ｃ１〜６アルキル、ハロＣ１〜６アルキル、ヒドロキシＣ１〜６アルキル、ＳＯ２Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、ハロＣ１〜６アルコキシ、Ｃ３〜１０シクロアルキル、ハロＣ３〜１０シクロアルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル、ニトロ、Ｎ（Ｒａ）２、Ｃ６〜１０アリール、Ｃ６〜１０アリールＣ１〜６アルキル、Ｃ６〜１０アリールＣ１〜６アルコキシ；場合によってＣ１〜４アルキル基で架橋されている、Ｎ、Ｏ及びＳから独立に選択される１、２又は３個のヘテロ原子を含有する、４、５又は６員の飽和又は部分的に飽和の複素環；Ｎ、Ｏ及びＳから独立に選択されるが、そのうちの１個以下はＯ又はＳである、１、２、３又は４個のヘテロ原子を含有する、５員の不飽和の複素環；１、２又は３個の窒素原子を含有する、６員の不飽和の複素環；或いはＮ、Ｏ又はＳから独立に選択されるヘテロ原子を含有する、７〜１３員の飽和、部分的に飽和又は不飽和の複素環であり；環のいずれかが、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１〜６アルキル、ハロＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、及びハロＣ１〜６アルコキシから独立に選択される１つ以上の基で場合によって置換され；
Ｒ５及びＲ６は、独立に水素又はＣ１〜６アルキルであるか、ＣＲ５Ｒ６はカルボニルを表すか、或いはＣＲ５Ｒ６はシクロプロピルを表し；
それぞれＲａは、水素、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ６〜１０アリール、Ｃ１〜６アルキルカルボニル、及びＣ６〜１０アリールカルボニルから独立に選択される；
並びにその医薬的に許容可能な塩、互変異性体、立体異性体は、本発明の対象である。
【００４１】
異常ヘモグロビン症の治療における使用のための、一般式（ＩＶ）の好ましい化合物は、以下のリスト：
−（Ｓ）−Ｎ１−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）−１，３，４−オキサジアゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−Ｎ２，Ｎ２−ジメチルオキサラミド；
−（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）−１，３，４−オキサジアゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−オキソアセトアミド；
−（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）−１，３，４−オキサジアゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−１−メチルピペリジン−４−カルボキサミド；
−（Ｓ）−２−（５−メトキシ−２−メチル−１Ｈ−インドル−３−イル）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）−１，３，４−オキサジアゾル−２−イル）−７−オキソノニル）アセトアミド；
−（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）−１，３，４−オキサジアゾル−２−イル）−７−オキソノニル）チアゾール−５−カルボキサミド；
−（Ｓ）−３−（２−エチル−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾル−１−イル）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）−１，３，４−オキサジアゾル−２−イル）−７−オキソノニル）プロパンアミド；
−（Ｓ）−３−（ジメチルアミノ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）−１，３，４−オキサジアゾル−２−イル）−７−オキソノニル）プロパンアミド；
−（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）−１，３，４−オキサジアゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−１−メチルアゼチジン−３−カルボキサミド；
−（Ｓ）−１−メチル−Ｎ−（１−（５−（１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−１，３，４−オキサジアゾル−２−イル）−７−オキソノニル）アゼチジン−３−カルボキサミド；
並びにその医薬的に許容可能な塩、互変異性体、立体異性体から選択される。
【００４２】
好ましくは、式（ＩＶ）の化合物は、β−サラセミア又は鎌状赤血球貧血の治療のためのものである。
【００４３】
単独又は他の活性化合物との組み合わせで、有効量の１つ以上の上で定義した化合物又はその医薬的に許容可能なプロドラッグ並びに少なくとも１つの医薬的に許容可能な賦形剤を含む医薬組成物は、本発明のさらなる対象である。
【００４４】
好ましくは、さらなる活性成分は、２，２−ジメチルブチレート、ヒドロキシウレア、デシタビン、エリスロポエチン、トリコスタチン、バルプロ酸、又はそれらの組み合わせである。
【００４５】
本発明は、その範囲内に、上の式（Ｉ）から（ＩＶ）の化合物のプロドラッグを含む。一般的に、このようなプロドラッグは、インビボで必要とされる式（Ｉ）から（ＩＶ）の化合物にすぐに変換可能である、本発明の化合物の機能性誘導体である。好適なプロドラッグ誘導体の選択及び調製の従来の手順は、例えば「Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ」、Ｈ．  Ｂｕｎｄｇａａｒｄ編、Ｅｌｓｅｖｉｅｒ、１９８５に記載されている。
【００４６】
プロドラッグは、活性薬物を放出するために体内で変換される必要があり、元の薬物分子よりも改善された送達特性を有する、生物学的活性物質（「元の薬物」又は「元の分子」）の薬理学的に不活性な誘導体であってもよい。インビボの変換は、例えば、カルボン酸エステル、リン酸エステル、又は硫酸エステルの化学的又は酵素的加水分解、或いは影響を受けやすい官能基の還元又は酸化などのいくつかの代謝プロセスの結果としてであってもよい。
【００４７】
本発明は、その範囲内に、式（Ｉ）から（ＩＶ）の化合物及びその塩の溶媒和物、例えば水和物を含む。
【００４８】
本発明の化合物は、非対称中心、キラル軸、及びキラル面を有していてもよく（Ｅ．Ｌ．  Ｅｌｉｅｌ  ａｎｄ  Ｓ．Ｈ．  Ｗｉｌｅｎ、Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｃａｒｂｏｎ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、１９９４、ページ  １１１９〜１１９０に記載されているとおり）、ラセミ化合物、ラセミ混合物として、並びに光学異性体を含む全ての可能な異性体及びそれらの混合物を有する個々のジアステレオマーとして生じてもよく、このような立体異性体の全ては本発明に含まれる。さらに、本明細書に開示される化合物は互変異性体として存在してもよく、例え１つのみの互変異性構造が描かれていても、両方の互変異性体の形態が本発明の範囲に包含されることが意図される。
【００４９】
化合物は異なる異性体の形態で存在してもよく、その全てが本発明により包含される。
【００５０】
いずれかの可変基（例えばＲ５及びＲ６など）がいずれかの構成において１回よりも多く存在する場合、それぞれの存在における定義は、他の存在とは独立である。また、置換基及び可変基の組合せは、そのような組合せが安定な化合物をもたらす場合にのみ、許容される。置換基から環系へ引かれた線は、示された結合が置換可能な環原子のいずれに結合してもよいことを表す。環系が多環式である場合、隣接した環のみの好適な炭素原子のいずれかへの結合が意図される。
【００５１】
本発明の化合物の置換基及び置換パターンは、当業者によって選択されて、化学的に安定であり、当分野において知られている技法、並びにすぐに利用可能な出発物質からの以下に記載する方法ですぐに合成することができる化合物を提供することができることが理解される。置換基がそれ自体１つを超える基で置換される場合、これらの複数の基は、安定な構造をもたらす限り、同じ炭素又は異なる炭素上であってもよい。語句「場合によって置換された」は、語句「置換されていない又は１つ以上の基で置換された」と等価であると考えられるべきであり、このような場合において、好ましい実施形態は、０から３つの置換基を有する。より具体的には、０から２つの置換基が存在する。飽和の、部分的に飽和の、又は不飽和の複素環の置換基は、いずれの置換可能な位置で結合することができる。
【００５２】
本明細書において使用される場合、「アルキル」は、特定の数の炭素原子を含む、分枝及び直鎖の両方の飽和の脂肪族炭化水素基を含むことが意図される。例えば、「Ｃ１〜Ｃ６アルキル」は、直鎖又は分枝の配置で、１、２、３、４、５又は６個の炭素を有する基を含むと定義される。例えば、「Ｃ１〜Ｃ６アルキル」には、具体的には、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、ｉ−ブチル、ペンチル、ヘキシルなどが含まれる。用語「シクロアルキル」は、特定の数の炭素原子を有する、単環式、二環式又は多環式の飽和の脂肪族炭化水素基を意味する。例えば、「Ｃ７〜１０シクロアルキル」には、シクロプロピル、メチル−シクロプロピル、２，２−ジメチル−シクロブチル、２−エチル−シクロペンチル、シクロヘキシルなどが含まれる。本発明の一実施形態において、用語「シクロアルキル」には、すぐ上に記載された基が含まれ、単環式の不飽和の脂肪族炭化水素基もさらに含まれる。例えば、この実施形態において定義された「シクロアルキル」には、シクロプロピル、メチル−シクロプロピル、２，２−ジメチル−シクロブチル、２−エチル−シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロペンテニル、シクロブテニル、７，７−ジメチルビシクロ［２．２．１］ヘプチルなどが含まれる。好ましいシクロアルキル基は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、及びシクロヘキシルである。「アルコキシ」は、酸素の橋かけを通して結合した、示された数の炭素原子のアルキル基を表す。したがって、「アルコキシ」は、上記のアルキルの定義を包含する。好適なアルコキシ基の例には、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、ｉ−プロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｓ−ブトキシ、及びｔ−ブトキシが含まれる。好ましいアルコキシ基はメトキシである。
【００５３】
用語「ハロＣ１〜６アルキル」及び「ハロＣ１〜６アルコキシ」は、１つ以上（特に１から３つ）の水素原子がハロゲン原子、特にフッ素原子又は塩素原子によって置換された、Ｃ１〜６アルキル基またはＣ１〜６アルコキシ基を意味する。好ましいものは、フルオロＣ１〜６アルキル基及びフルオロＣ１〜６アルコキシ基、特にフルオロＣ１〜３アルキル基及びフルオロＣ１〜３アルコキシ基、例えばＣＦ３、ＣＨＦ２、ＣＨ２Ｆ、ＣＨ２ＣＨ２Ｆ、ＣＨ２ＣＨＦ２、ＣＨ２ＣＦ３、ＯＣＦ３、ＯＣＨＦ２、ＯＣＨ２Ｆ、ＯＣＨ２ＣＨ２Ｆ、ＯＣＨ２ＣＨＦ２、又はＯＣＨ２ＣＦ３、最も具体的にはＣＦ３、ＯＣＦ３、及びＯＣＨＦ２である。
【００５４】
用語「ヒドロキシＣ１〜６アルキル」は、１つ以上（特に１から３つ）の水素原子がヒドロキシ基によって置換されたＣ１〜６アルキル基を意味する。好ましいものは、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＣＨＯＨ、及びＣＨＯＨＣＨ３である。
【００５５】
本明細書において使用される場合、用語「Ｃ２〜６アルケニル」は、２から６個の炭素原子及び少なくとも１つの炭素と炭素との二重結合を含有する、直鎖又は分枝の非芳香族炭化水素基を表す。好ましくは、１つの炭素と炭素との二重結合が存在し、４つまでの非芳香族炭素−炭素二重結合が存在してもよい。アルケニル基には、エテニル、プロペニル、ブテニル、及び２−メチルブテニルが含まれる。アルケニル基の直鎖又は分枝の部分は、二重結合を含有してもよく、置換されたアルケニル基が示されている場合、置換されていてもよい。好ましいアルケニル基には、エテニル及びプロペニルが含まれる。
【００５６】
用語「Ｃ２〜６アルキニル」は、２から６個の炭素原子及び少なくとも１つの炭素と炭素との三重結合を含有する、直鎖又は分枝の炭化水素基を表す。３つまでの炭素−炭素三重結合が存在してもよい。アルキニル基には、エチニル、プロピニル、ブチニル、３−メチルブチニルなどが含まれる。アルキニル基の直鎖又は分枝の部分は、三重結合を含有してもよく、置換されたアルキニル基が示されている場合、置換されていてもよい。好ましいアルキニル基には、エチニル及びプロピニルが含まれる。
【００５７】
本明細書において使用される場合、「Ｃ６〜１０アリール」は、少なくとも１つの環が芳香族である、６から１０個の原子のあらゆる安定な単環式又は二環式の炭素環を意味することが意図される。このようなアリール基の例には、フェニル、ナフチル、テトラヒドロナフチル、インダニル、及びテトラヒドロベンゾ［７］アヌレンが含まれる。好ましいアリール基は、フェニル又はナフチル、特にフェニルである。
【００５８】
本発明の具体的な複素環の例は、ベンズイミダゾリル、ベンゾフランジオニル、ベンゾフラニル、ベンゾフラザニル、ベンゾピラゾリル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾチエニル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾオキサゾロニル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチアジアゾリル、ベンゾジオキソリル、ベンゾオキサジアゾリル、ベンゾイソオキサゾリル、ベンゾイソチアゾリル、クロメニル、クロマニル、イソクロマニル、カルバゾリル、カルボリニル、シンノリニル、エポキシジル、フラニル、フラザニル、イミダゾリル、インドリニル、インドリル、インドリジニル、イソインドリニル、インダゾリル、イソベンゾフラニル、イソインドリル、イソキノリル、イソチアゾリル、イソオキサゾリル、ナフタピリジニル、オキサジアゾリル、オキサゾリル、オキサゾリニル、イソオキサゾリニル、オキセタニル、プリニル、ピラニル、ピラジニル、ピラゾリル、ピリダジニル、ピリドピリジニル、ピリダジニル、ピリジニル、ピリミジニル、トリアジニル、テトラジニル、ピロリル、キナゾリニル、キノリル、キノキサリニル、キノリジニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロチオピラニル、テトラヒドロイソキノリニル、テトラゾリル、テトラゾロピリジル、チアジアゾリル、チアゾリジニル、チアゾリル、チエニル、トリアゾリル、アゼチジニル、１，４−ジオキサニル、ヘキサヒドロアゼピニル、ピペラジニル、ピペリジル、ピリジン−２−オニル、ピロリジニル、イミダゾリニル、ピラゾリニル、ピロリニル、モルホリニル、チオモルホリニル、ジヒドロベンゾイミダゾリル、ジヒドロベンゾフラニル、ジヒドロベンゾチオフェニル、ジヒドロベンゾオキサゾリル、ジヒドロフラニル、ジヒドロイミダゾリル、ジヒドロインドリル、ジヒドロイソオキサゾリル、ジヒドロイソチアゾリル、ジヒドロオキサジアゾリル、ジヒドロオキサゾリル、ジヒドロピラジニル、ジヒドロピラゾリル、ジヒドロピリジニル、ジヒドロピリミジニル、ジヒドロピロリル、ジヒドロキノリニル、ジヒドロテトラゾリル、ジヒドロチアジアゾリル、ジヒドロチアゾリル、ジヒドロチエニル、ジヒドロトリアゾリル、ジヒドロアゼチジニル、ジヒドロイソクロメニル、ジヒドロイミダゾロニル、ジヒドロトリアゾロニル、ジヒドロベンゾジオキシニル、ジヒドロチアゾロピリミジニル、メチレンジオキシベンゾイル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロチエニル、テトラヒドロキノリニル、チアゾリジノニル、イミダゾロニル、イソインドリノニル、オクタヒドロキノリジニル、オクタヒドロイソインドリル、イミダゾピリジニル、アザビシクロヘプタニル、クロメノニル、トリアゾロピリミジニル、ジヒドロベンゾオキサジニル、チアゾロトリアゾリル、アゾニアビシクロヘプタニル、アゾニアビシクロオクタニル、フタラジニル、ナフチリジニル、キナゾリニル、プテリジニル、及びこれらのＮ−オキシドである。さらに具体的な複素環には、ジヒドロキナゾリニル、ジヒドロフタラジニル、ジヒドロイソインドリル、テトラヒドロナフチリジニル、テトラヒドロベタカルボリニル、及びこれらのＮ−オキシドが含まれる。ヘテロシクリル置換基の結合は、炭素原子を介して又はヘテロ原子を介して存在し得る。
【００５９】
好ましい４員の飽和の複素環は、アゼチジニルである。
【００６０】
好ましい５又は６員の飽和又は部分的に飽和の複素環は、ピロリジニル、ピペリジル、ピペラジニル、モルホリニル、アゾニアビシクロ［２．２．１］ヘプタニル、アゾニアビシクロ［２．２．２］オクタニル、チオモルホリニル、及びチアゾリジニルである。
【００６１】
好ましい５員の不飽和の複素環は、チエニル、チアゾリル、ピラゾリル、イソオキサゾリル、イミダゾリル、チアジアゾリル、オキサゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、フリル、及びオキサジアゾリルである。
【００６２】
好ましい６員の不飽和の複素環は、ピリジニルである。
【００６３】
好ましい８から１０員の飽和、部分的に飽和又は不飽和の複素環は、ベンゾチエニル、イソキノリル、インドリル、ベンゾチアジアゾリル、ベンゾオキサジアゾリル、チアゾロトリアゾリル、ジヒドロベンゾジオキシニル、ジヒドロチアゾロピリミジニル、ジヒドロベンゾオキサジニル、ジヒドロベンゾフラニル、ベンゾチアゾリル、キノリニル、イソキノリニル、ベンズイミダゾリル、ベンゾフラニル、ジヒドロベンゾオキサゾリル、ジヒドロインドリル、ジヒドロキナゾリニル、ジヒドロフタラジニル、インダゾリル、ベンズイソオキサゾリル、ベンゾトリアゾリル、ジヒドロイソインドリル、テトラヒドロナフチリジニル、トリアゾロピリミジニル、及びテトラヒドロキノリニルである。
【００６４】
好ましい１３員の部分的に飽和の複素環は、テトラヒドロベタカルボリニルである。
【００６５】
本明細書において使用される場合、用語「ハロゲン」は、フッ素、塩素、臭素、及びヨウ素を表し、その中でフッ素、塩素、及び臭素が好ましい。
【００６６】
本明細書において使用される場合、用語「互変異性体」は、互変異性化と呼ばれる化学反応によってすぐに相互に変換される、有機化合物の異性体を表す。この反応は、一般的に、水素原子又はプロトンの幾何的な移動をもたらし、これは単結合と隣接二重結合との変化を伴う。互変異性化の例は、例えば、ヒドロキシピリジンとピリドンとの間又はヒドロキシキノリンとキノロンとの間の相互変換である。
【００６７】
本発明に含まれるものとして、式（Ｉ）から（ＩＶ）の化合物の遊離塩基、並びにその医薬的に許容可能な塩及び立体異性体がある。本明細書において例示される特定の化合物のいくつかは、アミン化合物のプロトン化塩である。１つ以上のＮ原子を含有する式（Ｉ）から（ＩＶ）の化合物は、いずれか１つ、いくつか、又は全てのＮ原子上でプロトン化されてもよい。用語「遊離塩基」は、非塩の形態のアミン化合物を表す。包含される医薬的に許容可能な塩は、本明細書において記載される特定の化合物に対して例示される塩だけでなく、式（Ｉ）から（ＩＶ）の化合物の遊離形態の典型的な医薬的に許容可能な塩を全て含む。記載される特定の塩化合物の遊離形態は、当分野において知られている技法を使用して単離されてもよい。例えば、遊離形態は、希釈水性ＮａＯＨ、炭酸カリウム、アンモニア、及び重炭酸ナトリウムなどの好適な希釈塩基性水溶液で塩を処理することによって再生されてもよい。遊離形態は、極性溶媒中の相溶性などの特定の物理的な特性において、それぞれの塩の形態といくらか異なってもよいが、酸及び塩基の塩は、本発明の目的に対してそれぞれの遊離形態と医薬的に等価である。
【００６８】
本発明の化合物の医薬的に許容可能な塩は、塩基性又は酸性の基を含有する本発明の化合物から、従来の化学的方法によって合成することができる。一般的に、塩基性化合物の塩は、イオン交換クロマトグラフィーによって又は遊離塩基を化学量論量若しくは過剰の所望の塩を形成する無機酸若しくは有機酸と、好適な溶媒若しくは溶媒の様々な組合せの中で反応させることによって調製される。
【００６９】
したがって、本発明の化合物の医薬的に許容可能な塩は、塩基性の本発明の化合物を無機酸又は有機酸と反応させることによって形成される、本発明の化合物の従来の非毒性の塩を含む。例えば、従来の非毒性の塩には、塩酸、臭化水素酸、硫酸、スルファミン酸、リン酸、硝酸などの無機酸から誘導されるもの、並びに酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、ステアリン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、パモン酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、フェニル酢酸、グルタミン酸、安息香酸、サリチル酸、スルファニル酸、２−アセトキシ−安息香酸、フマル酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、エタンジスルホン酸、シュウ酸、イセチオン酸、トリフルオロ酢酸などの有機酸から調製される塩が含まれる。好ましくは、本発明の医薬的に許容可能な塩は、１当量の式（Ｉ）から（ＩＶ）の化合物、及び１、２又は３当量の無機酸又は有機酸を含有する。より具体的には、本発明の医薬的に許容可能な塩は、酒石酸塩、トリフルオロ酢酸塩、又は塩化物塩である。
【００７０】
本発明の化合物が酸性である場合、好適な「医薬的に許容可能な塩」は、無機塩基及び有機塩基を含む、医薬的に許容可能な非毒性の塩基から調製される塩を表す。無機塩基から誘導される塩には、アルミニウム塩、アンモニウム塩、カルシウム塩、銅塩、第二鉄塩、第一鉄塩、リチウム塩、マグネシウム塩、三価のマンガン塩、二価のマンガン塩、カリウム塩、ナトリウム塩、亜鉛塩などが含まれる。特に好ましいものは、アンモニウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、カリウム塩、及びナトリウム塩である。医薬的に許容可能な有機の非毒性の塩基から誘導される塩には、第一級、第二級及び第三級アミン、天然に存在する置換されたアミンを含む置換されたアミン、環状アミン及び塩基性イオン交換樹脂、例えばアルギニン、ベタイン、カフェイン、コリン、Ｎ，Ｎ１−ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチルモルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン、イソプロピルアミン、リシン、メチルグルカミン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、ポリアミン樹脂、プロカイン、プリン、テオブロミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミン、トロメタミンなどの塩が含まれる。
【００７１】
上で記載した医薬的に許容可能な塩及びその他の典型的な医薬的に許容可能な塩の調製は、Ｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．、「Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ」  Ｊ．  Ｐｈａｒｍ．  Ｓｃｉ．、１９７７：６６：１〜１９に、より完全に記載されている。
【００７２】
生理学的条件下において、カルボキシル基などの化合物中の脱プロトン化した酸性基はアニオン性であってもよく、この電荷がその後分子内で、第四級窒素原子などのプロトン化又はアルキル化した塩基性基のカチオン電荷とバランスするため、本発明の化合物は、分子内塩又は両性イオンである可能性があることにも注意されたい。
【００７３】
本発明の化合物は、ヒト及び動物の健康への様々な用途における使用を見出した。本発明の化合物は、疾患の中でも癌の治療に有用な、ヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）阻害剤である。ＨＤＡＣは、ヒストンを含むタンパク質上のリシン残基からのアセチル基の除去を触媒し、ＨＤＡＣ阻害剤は、遺伝子発現、細胞分化、細胞周期の進行、増殖停止、及び／又はアポトーシスに影響することを含む、多様な生物学的機能を示す。Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  ２００３、４６：５０９７及びＣｕｒｒ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  ２００３、１０：２３４３を参照。
【００７４】
本明細書において提供される化合物、組成物及び方法は、特に、サラセミア及び鎌状赤血球病を含む、異常ヘモグロビン症の治療に有用であると思われる。
【００７５】
サラセミア及び鎌状赤血球病は赤血球障害として特徴付けることができ、グロビン遺伝子の異常によって引き起こされる。
【００７６】
本発明の化合物は、哺乳類、好ましくはヒトに、単独又は医薬的に許容可能な担体、賦形剤若しくは希釈剤と組み合わせて、標準的な医薬的実務によって、医薬組成物で投与されてもよい。一実施形態において、本発明の化合物は、動物に投与されてもよい。化合物は、経口で、又は静脈内、筋肉内、腹腔内、皮下、直腸、及び局所経路の投与を含む非経口で投与することができる。
【００７７】
本発明はまた、本発明の１つ以上の化合物及び医薬的に許容可能な担体を含む医薬組成物を提供する。活性成分を含有する医薬組成物は、経口で使用するための好適な形態、例えば錠剤、トローチ、ドロップ、水性若しくは油性懸濁液、分散可能な粉体若しくは顆粒、エマルション、硬質若しくは軟質カプセル、又はシロップ若しくはエリキシルであってもよい。経口使用を意図した組成物は、医薬組成物の製造のために当分野において知られているあらゆる方法によって調製されてもよく、このような組成物は、甘味剤、香味剤、着色剤、及び保存剤からなる群から選択される１つ以上の薬剤を含有して、医薬的に洗練され口に合う調製物を提供してもよい。錠剤は、錠剤の製造に好適な非毒性の医薬的に許容可能な賦形剤との混合物で活性成分を含有する。これらの賦形剤は、例えば、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、ラクトース、リン酸カルシウム、又はリン酸ナトリウムなどの不活性希釈剤；造粒剤及び崩壊剤、例えば微結晶セルロース、クロスカルメロースナトリウム、コーンスターチ、又はアルギン酸；結合剤、例えばデンプン、ゼラチン、ポリビニルピロリドン又はアカシア；並びに潤滑剤、例えばステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、又はタルクであってもよい。錠剤はコーティングされていなくてもよく、或いは公知の技法でコーティングされて、薬物の不快な味をマスク又は消化管中の分解及び吸収を遅らせ、これによって長期間維持された作用を提供してもよい。例えば、ヒドロキシプロピルメチルセルロース若しくはヒドロキシプロピルセルロースなどの水溶性の味マスキング物質、又はエチルセルロース、酢酸酪酸セルロースなどの時間遅延物質を用いてもよい。
【００７８】
経口使用のための処方はまた、硬質ゼラチンカプセルとして提供されてもよく、活性成分は、不活性固体希釈剤、例えば炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、若しくはカオリンと混合されるか、或いは軟質ゼラチンカプセルとして提供されてもよく、活性成分は、ポリエチレングリコールなどの水溶性担体、又は油性媒体、例えばピーナッツ油、液状パラフィン、又はオリーブ油と混合されてもよい。
【００７９】
水性懸濁液は、水性懸濁液の製造に好適な賦形剤との混合物で活性物質を含有する。このような賦形剤は、懸濁剤、例えばカルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガカントガム、及びアカシアガムであり；分散剤又は湿潤剤は、天然に存在するリン脂質、例えばレシチン、又はアルキレンオキシドと脂肪酸との縮合生成物、例えばポリオキシエチレンステアレート、又はエチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールとの縮合生成物、例えばヘプタデカエチレンオキシセタノール、又はエチレンオキシドと脂肪酸及びヘキシトールから誘導された部分エステルとの縮合生成物、例えばポリオキシエチレンソルビトールモノオレエート、又はエチレンオキシドと脂肪酸及びヘキシトール無水物から誘導された部分エステルとの縮合生成物、例えばポリエチレンソルビトールモノオレエートであってもよい。水性懸濁液はまた、１つ以上の保存剤、例えばエチル若しくはｎ−プロピルｐ−ヒドロキシベンゾエート、１つ以上の着色剤、１つ以上の香味剤、及び１つ以上の甘味剤、例えばスクロース、サッカリン、又はアスパルテームを含有してもよい。
【００８０】
油性懸濁液は、植物油、例えばラッカセイ油、オリーブ油、ゴマ油、若しくはココナッツ油、又は液状パラフィンなどの鉱油中に活性成分を懸濁させることによって配合されてもよい。油性懸濁液は、増粘剤、例えばビーズワックス、固形パラフィン、又はセチルアルコールを含有してもよい。上で記載したものなどの甘味剤、及び香味剤を加えて、口に合う経口調製物を提供してもよい。これらの組成物は、ブチル化ヒドロキシアニソール又はアルファ−トコフェロールなどの抗酸化剤の添加によって保存されてもよい。
【００８１】
水を加えることによって水性懸濁液を調製するのに好適な、分散可能な粉体又は顆粒は、分散剤又は湿潤剤、懸濁剤、及び１つ以上の保存剤との混合物で活性成分を提供する。好適な分散剤又は湿潤剤及び懸濁剤は、上で既に記載したものによって例示される。さらなる賦形剤、例えば甘味剤、香味剤、及び着色剤が存在してもよい。これらの組成物は、アスコルビン酸などの抗酸化剤の添加によって保存されてもよい。
【００８２】
本発明の医薬組成物はまた、水中油エマルションの形態であってもよい。油相は、植物油、例えばオリーブ油若しくはラッカセイ油、又は鉱油、例えば液状パラフィン、或いはこれらの混合物であってもよい。好適な乳化剤は、天然に存在するリン脂質、例えば大豆レシチン、及び脂肪酸とヘキシトール無水物から誘導されるエステル若しくは部分エステル、例えばソルビタンモノオレエート、及びエチレンオキシドと前記部分エステルとの縮合生成物、例えばポリオキシエチレンソルビタンモノオレエートであってもよい。エマルションはまた、甘味剤、香味剤、保存剤、及び抗酸化剤を含有してもよい。
【００８３】
シロップ及びエリキシルは、甘味剤、例えばグリセロール、プロピレングリコール、ソルビトール、又はスクロースと配合されてもよい。このような配合物はまた、鎮痛剤、保存剤、香味剤及び着色剤、並びに抗酸化剤を含有してもよい。
【００８４】
医薬組成物は、無菌注射水溶液の形態であってもよい。許容可能なビヒクル及び溶媒のうち、水、リンガー溶液、及び等張塩化ナトリウム水溶液を用いてもよい。
【００８５】
無菌注射調製物はまた、活性成分が油相中に溶解された、無菌注射水中油マイクロエマルションであってもよい。例えば、活性成分は、大豆油とレシチンとの混合物中に最初に溶解されてもよい。その後、油性溶液は水とグリセロールとの混合物中に導入され、処理されてマイクロエマルションを形成する。
【００８６】
注射溶液又はマイクロエマルションは、局部ボーラス注射によって患者の血液の流れに導入されてもよい。代わりに、本発明の化合物の一定の血中濃度を維持する方法で、溶液又はマイクロエマルションを投与することが有利であり得る。このような一定の濃度を維持するために、連続的な静脈送達デバイスを利用してもよい。このようなデバイスの例は、Ｄｅｌｔｅｃ  ＣＡＤＤ−ＰＬＵＳＴＭ  ｍｏｄｅｌ  ５４００静脈ポンプである。
【００８７】
医薬組成物は、筋肉内投与又は皮下投与のための、無菌注射水性又は油性懸濁液の形態であってもよい。この懸濁液は、上で記載した好適な分散剤又は湿潤剤及び懸濁剤を使用する、知られている技術によって配合されてもよい。無菌注射調製物はまた、非毒性の非経口的に許容可能な希釈剤又は溶媒中の無菌注射溶液、例えば１，３−ブタンジオール中の溶液であってもよい。さらに、無菌の固定油が、溶媒又は懸濁媒体として従来用いられている。この目的に対して、合成モノ−又はジグリセリドを含む、あらゆる無菌の固定油を用いてもよい。さらに、オレイン酸などの脂肪酸は注射可能な調製物としての用途を見出す。
【００８８】
式（Ｉ）から（ＩＶ）の化合物はまた、薬物の直腸投与のための座薬の形態で投与されてもよい。これらの組成物は、常温で固体であるが、直腸温度で液体であり、それゆえ直腸内で融けて薬物を放出する、好適な非刺激性の賦形剤と薬物とを混合することによって調製することができる。このような物質には、ココアバター、グリセリン化ゼラチン、水素化植物油、様々な分子量のポリエチレングリコールの混合物、及びポリエチレングリコールの脂肪酸エステルが含まれる。
【００８９】
式（Ｉ）から（ＩＶ）の化合物を含有する、局所使用のためのクリーム、軟膏、ゼリー、溶液又は懸濁液などが用いられる（本出願の目的のために、局所適用には、口内洗浄液及びうがい液が含まれる）。
【００９０】
本発明の化合物は、好適な鼻腔内ビヒクル及び送達デバイスの局所使用を介した経鼻形態で、又は当業者によく知られている経皮貼布の形態を使用した経皮経路を介して投与することができる。経皮送達系の形態で投与するために、投与用量は、当然、用量レジメンを通して断続的より連続的である。本発明の化合物はまた、ココアバター、グリセリン化ゼラチン、水素化植物油、様々な分子量のポリエチレングリコールの混合物、及びポリエチレングリコールの脂肪酸エステルなどの座薬に用いられるベースとして送達されてもよい。
【００９１】
本発明による化合物がヒトの対象に投与される場合、１日の用量は、年齢、体重、性別、及び個々の患者の反応、並びに患者の症状の重症度によって一般的に変化する用量で、処方医師によって通常決定される。
【００９２】
１つの例示的な適用において、好適な量の化合物を哺乳類に投与して、β−サラセミア又は鎌状赤血球病の治療を行う。投与は、一般的に、１日あたり約０．１ｍｇ／体重ｋｇから約６０ｍｇ／体重ｋｇ、好ましくは１日あたり０．５ｍｇ／体重ｋｇから約４０ｍｇ／体重ｋｇの間の量で行われる。
【００９３】
本発明の化合物はまた、公知の治療剤と組み合わせての、同時、別々、又は連続投与に有用である。
【００９４】
一実施形態において、本発明の化合物は、低メチル化剤、ヒドロキシウレア、ＨＤＡＣ阻害剤、ＤＮＡ結合薬物、オリゴヌクレオチド、及びペプチド核酸、ラパマイシン、エリスロポエチンを含む、その他の胎児ヘモグロビン誘導剤と組み合わせて使用してもよい。
【００９５】
低メチル化剤の例には、５−アザシチジン及び５−アザ−２’−デオキシシチジンが含まれる。ＨＤＡＣ阻害剤のいくつかの例は、トリコスタチン、スクリプタイド、ブチリル、及びプロピオニルヒドロキサメートである。ＤＮＡ結合薬剤には、ミトラマイシン、アンゲリシン、タリムスチン、及びシスプラチンが含まれる。
【００９６】
本発明の化合物の参照における用語「投与」及びその変形形態（例えば、化合物を「投与する」）は、化合物又は化合物のプロドラッグを、治療を必要とする動物の系に導入することを意味する。本発明の化合物又はそのプロドラッグが、１つ以上のその他の活性剤（例えば、細胞毒性剤など）と組み合わせて提供される場合、「投与」及びその変形形態は、化合物又はそのプロドラッグ及び他の薬剤の同時及び続けての導入を含むものとそれぞれ理解される。
【００９７】
いくつかの実施形態において、パルス状の合計用量は、同じ組成物の連続投与から予測されるよりも通常少ないため、パルス状の投与が連続治療よりも効果的である。それぞれのパルス状の用量を減少することができ、治療期間に投与される薬物の合計量が最小化される。個々のパルスは数時間、例えば約２、４、６、８、１０、１２、１４、若しくは１６時間、又は数日間、例えば２、３、４、５、６、若しくは７日間にわたって、患者に連続的に送達することができる。
【００９８】
本明細書において使用される場合、用語「組成物」は、特定の量で特性の成分を含む生成物、並びに直接的又は間接的に、特定の量での特定の成分の組合せからもたらされる、あらゆる生成物を包含することが意図される。
【００９９】
本明細書において使用される場合、用語「治療的に有効な量」は、研究者、獣医、医師、又はその他の臨床医によって求められる、組織、系、動物、又はヒトの中で生物学的又は薬理反応を生じる活性化合物又は医薬剤の量を意味する。
【０１００】
化学及び実施例の記載において使用される略語は以下のとおりである：
ＤＭＦ：ジメチルホルムアミド；ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド；ＭｅＯＨ：メタノール；ＥｔＯＨ：エタノール；ＥｔＯＡｃ：酢酸エチル；ＤＣＭ：ジクロロメタン；ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸；（ｇ）：気体；ｍｉｎ：分；ｈ：時間；ｅｑ．：当量；Ｍ：モル；ＲＴ：室温；ＲＰ−ＨＰＬＣ：逆相高圧液体クロマトグラフィー；ＤＩＰＥＡ：Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン；ＥＤＣＩ：１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩；ＨＯＢｔ：１−ヒドロキシベンゾトリアゾール；及びＨＡＴＵ：Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾル−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート。
【０１０１】
本発明は、以下の図を参照する、非限定的な実施例によって記載される。
【図面の簡単な説明】
【０１０２】
【図１】β−サラセミア患者からの培養した赤血球前駆体細胞によって生成したヘモグロビンのＨＰＬＣクロマトグラムである。対照（未処理、パネルＡ）、ミトラマイシン処理（５０ｎＭ、パネルＢ）及び化合物２処理（１００ｎＭ、パネルＣ）の細胞を培養し、洗浄し、溶解させた（材料及び方法を参照）。溶解物中のヘモグロビンを、カチオン交換ＨＰＬＣ上で分離した。ピークを対応するヘモグロビンタイプで標識する。ＨｂＦの割合の増加は、処理した細胞からの溶解物中で検出可能である。ＯＤＵは光学密度単位を示す。
【図２】１人のβ−サラセミア患者（Ｆｅ７）からの赤血球前駆体細胞中のグロビン遺伝子の導入である。細胞を３０ｎＭのミトラマイシン（ＭＴＨ）又は１００ｎＭの化合物２で処理し、グロビンのｍＲＮＡの蓄積をリアルタイム定量ＲＴ−ＰＣＲによって分析した（材料及び方法を参照）。γ−グロビンに対するｍＲＮＡの蓄積は、未処理の対照赤血球前駆体（白色のグラフ）に対して増加している。γ−グロビンのｍＲＮＡ／α−グロビンのｍＲＮＡの比を計算した（黒色のグラフ）。
【発明を実施するための形態】
【０１０３】
材料及び方法
化学
ａ）一般的手順
式（Ｉ）及び（ＩＶ）の化合物を、式（ＩＶｂ）の化合物を式（Ｖ）の化合物と反応させることによって調製することができる：
【０１０４】
【化５】
0006367800.tif 000006
【０１０５】
式中、ＡはＣＨ又はＮであり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、ｎは式（Ｉ）及び（ＩＶ）に対して定義したとおりであり、Ｌ１は、塩素又はヒドロキシなどの脱離基である。Ｌ１が塩素などの脱離基である場合、反応は、一般的に、Ｅｔ３Ｎなどの塩基及びＤＭＦ又はＤＣＭなどの溶媒の存在下で、約室温で行われる。Ｌ１がヒドロキシルなどの脱離基である場合、ＥＤＣ．ＨＣｌなどのカップリング剤及びＥｔ３Ｎなどの塩基もまた、加えられてもよい。ＨＯＢＴ及びＤＩＰＥＡなどのさらなる添加剤が存在してもよい。
【０１０６】
式（ＩＶｂ）の化合物のカルボニル位において、ジオキサンなどの保護基が反応の間存在してもよい。化合物は、還流下でＴＨＦなどの溶媒中のＴＢＡＦを加えるか、又は約室温でＤＣＭ及びＴＦＡ又はＴＨＦなどの溶媒中のＨＣｌ（ａｑ）を加えるなどの標準的な方法を使用して、続けて脱保護することができる。
【０１０７】
ＡがＣＨである式（ＩＶｂ）の化合物は、式（ＶＩ）の化合物を、一般的に、約室温で、Ｅｔ３Ｎなどの塩基の存在下、ＤＣＭなどの溶媒中で、ヘキサクロロエタン（Ｃ２Ｃｌ６）及びトリフェニルホスフィン（ＰＰｈ３）などの環化剤と反応させることによって調製することができる：
【０１０８】
【化６】
0006367800.tif 000007
【０１０９】
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３は上で定義したとおりであり、Ｐは、ＢＯＣ又はＣｂｚなどの保護基である。
【０１１０】
ＡがＮである式（ＩＶｂ）の化合物は、式（ＶＩＩ）の化合物を、一般的に、約６５℃で、ＴＨＦなどの溶媒中で、ＰＳ−ＢＥＭＰ及びＴｓＣｌなどの環化剤と反応させることによって調製することができる：
【０１１１】
【化７】
0006367800.tif 000008
【０１１２】
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＰは上で定義したとおりである。
【０１１３】
式（ＶＩ）の化合物は、式（ＶＩＩＩ）の化合物を、式（ＩＸ）の化合物と反応させることによって調製することができる：
【０１１４】
【化８】
0006367800.tif 000009
【０１１５】
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＰは上で定義したとおりである。反応は、一般的に、ＨＯＢｔ及びＥＤＣ．ＨＣｌなどのカップリング剤の存在下、ＤＩＰＥＡなどの塩基及びＤＭＦなどの溶媒中で行われる。
【０１１６】
式（ＩＸ）の化合物は、式（Ｘ）の対応するアジドの水素化によって調製することができる：
【０１１７】
【化９】
0006367800.tif 000010
【０１１８】
式中、Ｒ１は上で定義したとおりである。反応は、一般的に、約室温で、ＨＣｌなどの酸中、炭素上のＰｄなどの触媒の存在下、メタノールなどの溶媒中で行われる。
【０１１９】
式（Ｘ）の化合物は、式（ＸＩ）の化合物を、一般的に、約室温で、アセトンなどの溶媒中で、ＮａＮ３などのアジド源と反応させることによって調製することができる：
【０１２０】
【化１０】
0006367800.tif 000011
【０１２１】
式中、Ｒ１は上で定義したとおりであり、Ｌ２は、ハロゲンなどの脱離基である。
【０１２２】
式（ＶＩＩ）の化合物は、式（ＶＩＩＩ）の化合物を、式（ＸＩＩ）の化合物と反応させることによって調製することができる：
【０１２３】
【化１１】
0006367800.tif 000012
【０１２４】
式中、Ｒ１は上で定義したとおりである。反応は、一般的に、室温で、ＥＤＣ．ＨＣｌ及びＨＯＢｔなどのカップリング剤の存在下、ＤＭＦなどの溶媒中で行われる。
【０１２５】
式（ＸＩＩ）の化合物は、式（ＸＩＩＩ）の化合物を、ヒドラジン一水和物と反応させることによって調製することができる：
【０１２６】
【化１２】
0006367800.tif 000013
【０１２７】
式中、Ｒ１は上で定義したとおりであり、Ｌ４は、メトキシなどの適切な脱離基である。反応は、一般的に、約８０℃で、ｉ−ＰｒＯＨなどの溶媒中で行われる。代わりに、式（ＸＩＩ）の化合物は、Ｌ４がＯＨである式（ＸＩＩＩ）の化合物を、カップリング試薬の存在下で、Ｂｏｃ−ヒドラジンと反応させ、続けてＴＦＡなどの酸でＢＯＣ脱保護することによって調製することができる。
【０１２８】
中間体及び出発物質の合成が記載されていない場合、これらの化合物は、商業的に入手可能であるか、商業的に入手可能な化合物から、標準的な方法によって又は本明細書における実施例の拡張によって製造することができる。式（Ｉ）から（ＩＶ）の化合物は、公知の方法によって又は実施例に記載した方法によって、式（Ｉ）から（ＩＶ）の他の化合物に転換してもよい。
【０１２９】
本明細書に記載するあらゆる合成の進行の間、該当する分子のいずれかにおける反応性の高い又は反応性の基を保護することが必要及び／又は望ましい。これは、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、３ｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ、Ｇｒｅｅｎｅ、Ｔ．  Ｗ．  ａｎｄ  Ｗｕｔｓ，  Ｐ．  Ｇ．  Ｍ．；Ｗｉｌｅｙ  Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ、１９９９及びＫｏｃｉｅｎｓｋｉ，  Ｐ．  Ｊ．  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ、Ｔｈｉｅｍｅ、１９９４に記載されたものなどの従来の保護基によって達成されてもよい。保護基は、当分野において知られている方法を使用して、都合の良い後続の段階で除去されてもよい。例えば、Ｂｏｃ保護基が存在する場合、それはＴＦＡ及びＤＣＭなどの溶媒の添加によって除去されてもよい。化合物はまた、水素雰囲気下でメタノールなどの溶媒中のＰｄ／Ｃなどの触媒で処理するなどの標準的な方法を使用して、水素化されてもよい。
【０１３０】
前に記載したとおり、複素環式基は、式（Ｉ）から（ＩＶ）の化合物の合成の間、ＳＥＭなどの保護基によって保護されてもよく、続けて上で記載したとおりの標準的な条件下で除去することができる。
【０１３１】
複素環上の保護基のさらなる例には、ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリルメチル及びＢＯＭが含まれる。ＢＯＭ基は、標準的な方法、例えば、約室温で、ＢＢｒ３などの試薬及びトルエンなどの溶媒を添加することによって続けて除去されてもよい。
【０１３２】
本発明の化合物は、アミノ誘導体を有するα位で官能化された、好適に構成されたアルキル鎖から、スキーム１に記載されたとおりに調製することができる。これらの誘導体は当業者によって調製することができ、このような複素環を合成するための方法は、他の文章の中で、Ａｌａｎ  Ｋａｔｒｉｔｚｋｙ、Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．（Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、１９８４）及びＣｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｈｅｔｅｒｏｃｙｌｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ＩＬ  （Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、１９９６）に記載されている。遊離アミノ基は酸誘導体とカップリングしてアミドを形成し、カルボン酸（及び酸誘導体）をアミンとカップリングしてカルボキサミドを形成する方法は、当分野においてよく知られている。好適な方法は、例えば、Ｊｅｒｒｙ  Ｍａｒｃｈ、Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、３ｒｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ、１９８５、ｐｐ．  ３７０〜３７６に記載されている。同様に、塩基の存在下での塩化スルホニルとの反応が、対応するスルホンアミドをもたらすことは、Ｊｅｒｒｙ  Ｍａｒｃｈ、Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．  ４ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ、１９９２、ｐｐ．  ４９６〜４９９を参照されたい。同様の方法において、アミンと塩化スルファモイルとの反応は、対応するスルファミドをもたらす。
【０１３３】
【化１３】
0006367800.tif 000014
【０１３４】
１，３，４−オキサジアゾールを調製するための合成経路をスキーム２に示し、ヒドラジドはすぐに第２カルボン酸とカップリングし、その後脱水条件下で環化して、所望の複素環を形成する。好適な条件は、Ｂｒａｉｎ  ｅｔ  ａｌ．  Ｓｙｎｌｅｔｔ  ２００１、３、３８２〜３８４に記載された、塩化トシル及びポリマーで支持したＢＥＭＰの使用を含む。続けて、保護基を窒素原子から除去することができ、必要な阻害剤を前に記載したとおりに合成することができる。
【０１３５】
【化１４】
0006367800.tif 000015
【０１３６】
オキサゾールを調製するための、この場合における代わりの手順をスキーム３に示し、α−アミノケトンがカルボン酸とカップリングし、その後、そこで形成した得られたアミドが脱水条件下で再び環化して、所望の複素環を得ることができる。環化を行うための１つの方法は、Ｎｉｃｏｌａｏｕ  ｅｔ  ａｌ．  Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ  ２００４、１２６、１０１６２〜１０１７３に記載されたとおり、ヘキサクロロエタン及びトリフェニルホスフィンを使用することである。
【０１３７】
【化１５】
0006367800.tif 000016
【０１３８】
ｂ）実施例
以下の実施例は、本発明を例示する。
【０１３９】
実施例１
（Ｓ）−２−（５−メトキシ−２−メチル−１Ｈ−インドル−３−イル）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）アセトアミド（化合物１）
【０１４０】
工程１：ｔｅｒｔ−ブチル（２−（２−メトキシキノリン−３−イル）−２−オキソエチル）カルバメート
−７８℃まで冷却した１０ｍＬのＴＨＦ中のメシルブロミド（１７．２３ｍｍｏｌ）の溶液に、ｔＢｕＬｉ（３４．５ｍｍｏｌ）の１．７ＭのＴＨＦ溶液を滴下で加えた。混合物を−７８℃で１時間撹拌したままにした。その後、混合物を０℃に到達させ、ＴＨＦ（４０ｍＬ）中の２−メトキシキノリン（１２．９ｍｍｏｌ）の溶液を、１０分間にわたって滴下で加えた。得られた混合物を、０℃で１時間エージングし、−７８℃に冷却し、２０ｍＬのＴＨＦ中のｔｅｒｔ−ブチル（２−（メトキシ（メチル）アミノ）−２−オキソエチル）カルバメート（４．３１ｍｍｏｌ）の溶液と一緒に滴下で加えた。混合物を−７８℃で３０分間撹拌し、その後室温で終夜放置した。混合物をＤＣＭで希釈し、ＮａＨＣＯ３飽和水溶液で洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、減圧下で濃縮し、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、石油エーテル／ＥｔＯＡｃ、５％から４０％のＥｔＯＡｃ）で精製した。溜まった画分を真空下で、標題の生成物（１．０１ｇ）に濃縮した。ＭＳ（ＥＳ）  Ｃ１７Ｈ２０Ｎ２Ｏ４  必要：３１６．３５、実測：３１７。
【０１４１】
工程２：２−アミノ−１−（２−メトキシキノリン−３−イル）エタノン
前の工程からの化合物を、ジオキサン（３０ｍＬ）中に溶解し、０℃で、ジオキサン中の１６ｍＬの４Ｎ  ＨＣｌで処理した。混合物を室温で１時間撹拌し、ＮａＨＣＯ３飽和水溶液中に注ぎ、ＤＣＭで抽出した。有機相を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、粗生成物に濃縮して、次の工程で直接使用した。ＭＳ（ＥＳ）  Ｃ１２Ｈ１２Ｎ２Ｏ２  必要：２１６．２４、実測：２１７。
【０１４２】
工程３：（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル（１−（（２−（２−メトキシキノリン−３−イル）−２−オキソエチル）アミノ）−１，８−ジオキソデカン−２−イル）カルバメート
ＤＭＦ（３ｍＬ）中の、（Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−８−オキソデカン酸（０．７６ｍｍｏｌ、１当量）、ＥＤＣ．ＨＣｌ（０．９９ｍｍｏｌ、１．３当量）、ＨＯＢＴ（０．９９ｍｍｏｌ、１．３当量）を、室温で１０分間撹拌した。３ｍＬのＤＭＦ中の２−アミノ−１−（２−メトキシキノリン−３−イル）エタノン（１当量）の溶液及びＤＩＰＥＡ（２当量）を加え、混合物を室温で２時間撹拌した。混合物をＤＣＭで希釈し、ブラインで洗浄した。有機相を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、石油エーテル／ＥｔＯＡｃ、１０％ＥｔＯＡｃから８０％ＥｔＯＡｃ）で精製して、２０％の収率で標題の化合物を単離した。ＭＳ（ＥＳ）  Ｃ２７Ｈ３７Ｎ３Ｏ６  必要：４９９．６０、実測：５００。
【０１４３】
工程４：（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）カルバメート
ＰＰｈ３（１．０８ｍｍｏｌ）及びＣ２Ｃｌ６（１．０８ｍｍｏｌ）を、室温でＤＣＭ（１．５ｍＬ）中に溶解し、Ｅｔ３Ｎを加え（２．１６ｍｍｏｌ）、５分間撹拌した後、続けてＤＣＭ（１．５ｍＬ）中の前の工程からのアミドの溶液（０．５４ｍｍｏｌ）を滴下で加えた。混合物を室温で１時間撹拌し、その後水中に注いだ。有機相を分離し、ブラインで洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧下で濃縮した。生成物を、溶離液として３０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテルを使用するシリカ上のフラッシュクロマトグラフィーで精製して、標題の生成物を得た。ＭＳ（ＥＳ）  Ｃ２７Ｈ３５Ｎ３Ｏ５  必要：４８１．５８、実測：４８２。
【０１４４】
工程５：（Ｓ）−９−アミノ−９−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）ノナン−３−オン
前の工程からの化合物を、ＤＣＭ：ＴＦＡ混合物（１：１、２．２ｍＬ）中に溶解し、０℃で４０分間撹拌し、その後室温で１０分間撹拌した。混合物をトルエン（７ｍＬ）で希釈し、溶媒を蒸発させた。得られた油をＤＣＭで希釈し、ＮａＨＣＯ３飽和水溶液で洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧下で濃縮した。生成物を以下の工程で直接使用した。ＭＳ（ＥＳ）  Ｃ２２Ｈ２７Ｎ３Ｏ３  必要：３８１．４７、実測：３８２。
【０１４５】
工程６：（Ｓ）−２−（５−メトキシ−２−メチル−１Ｈ−インドル−３−イル）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）アセトアミド
ＤＭＦ中の５−メトキシ−２−メチル−１Ｈ−インドル−３−イル）酢酸（１．３当量）、ＨＯＢＴ（１．３当量）、ＥＤＣ．ＨＣｌ（１．３当量）の溶液（３分間予混合）を、前の工程からの（Ｓ）−９−アミノ−９−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）ノナン−３−オン（１当量）に加え、続けてＤＩＰＥＡ（１．３当量）を加えた。混合物を室温で終夜混合した。生成物を、溶離液として水（＋０．１％ＴＦＡ）及びＭｅＣＮ（＋０．１％ＴＦＡ）を使用する（Ｃ１８カラム）、分取ＲＰ−ＨＰＬＣで精製した。ＭＳ（ＥＳ）  Ｃ３４Ｈ３８Ｎ４Ｏ５  必要：５８２．６９、実測：５８３。
【０１４６】
実施例２
（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−１−メチルアゼチジン−３−カルボキサミド（化合物２）
【０１４７】
工程１：（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル  ３−（（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）カルバモイル）アゼチジン−１−カルボキシレート
ＤＭＦ中の１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アゼチジン−３−カルボン酸（１．３当量）、ＨＯＢｔ（１．３当量）、及びＥＤＣ．ＨＣｌ（１．３当量）の溶液（１０分間予混合）を、上で記載したとおりに得られた（Ｓ）−９−アミノ−９−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）ノナン−３−オン（１当量）に加えた。混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物をＤＣＭで希釈し、ＮａＨＣＯ３飽和水溶液、ブラインで洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮した。混合物を、ＥｔＯＡｃ／石油エーテル（５０％のＥｔＯＡｃから８０％のＥｔＯＡｃ）で溶離する、シリカ上のフラッシュクロマトグラフィーで精製した。ＭＳ（ＥＳ）  Ｃ３１Ｈ４０Ｎ４Ｏ６  必要：５６４．６７、実測：５６５。
【０１４８】
工程２：（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）アゼチジン−３−カルボキサミド
前の工程からの化合物（６７ｍｇ）を、０℃で、２．９ｍＬのＤＣＭ及び０．６ｍＬのＴＦＡで処理した。混合物を０℃で３０分間撹拌し、Ｅｔ２Ｏで希釈し、真空下で蒸発させた。残渣をＤＣＭで溶解し、ＮａＨＣＯ３飽和水溶液で洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮した。生成物を直接次の工程で使用した。ＭＳ（ＥＳ）  Ｃ２６Ｈ３２Ｎ４Ｏ４  必要：４６４．５６、実測：４６５。
【０１４９】
工程３：（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−１−メチルアゼチジン−３−カルボキサミド
前の工程からの化合物（０．１３ｍｍｏｌ、１当量）を、ＭｅＯＨ（１．５ｍＬ）中に溶解し、ホルムアルデヒド（３．５当量、３７％水溶液）を加え、混合物を室温で１０分間撹拌した。ＮａＯＡｃ（３．０当量）及びＮａＢＨ３ＣＮ（３．０当量）を加え、混合物を室温で１時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、アセトニトリル中に溶解し、ＲＰ−ＨＰＬＣ（アセトニトリル／Ｈ２Ｏ＋０．０１％ＴＦＡ）で精製した。生成物をＴＦＡ塩として得た。ＭＳ（ＥＳ）  Ｃ２７Ｈ３４Ｎ４Ｏ４  必要：４７８．５８、実測：４７９。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：８．６７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ）、８．５３（１Ｈ，ｓ）、８．０２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ）、７．８２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ）、７．７１（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ）、７．６５（１Ｈ，ｓ）、７．５０（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ）、５．１１〜５．０５（１Ｈ，ｍ）、４．３８〜４．３０（１Ｈ，ｍ）、４．２５〜４．０９（３Ｈ，ｓ＋２Ｈ，ｍ）、３．９９〜３．８９（１Ｈ，ｍ）、３．６（１Ｈ，ｍ，部分的に水と重複）、２．８３（３Ｈ，ｓ）、２．４２〜２．３１（ｍ，４Ｈ）、２．００〜１．８０（ｍ，２Ｈ）、１．４９〜１．４０（２Ｈ，ｍ）、１．２５（４Ｈ，ｂｓ）、０．９７（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）。
【０１５０】
実施例３
（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）−１，３，４−オキサジアゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−１−メチルアゼチジン−３−カルボキサミド（化合物５２）
【０１５１】
工程１：ｔｅｒｔ−ブチル  ２−（２−メトキシキノリン−３−カルボニル）ヒドラジンカルボキシレート
Ｎ２下でＤＣＭ（４５ｍＬ）中の２−メトキシキノリン−３−カルボン酸（０．９２ｇ、４．５５当量）の撹拌された懸濁液に、ＨＯＢＴ（６．８３ｍｍｏｌ、１．５当量）、ＥＤＣ．ＨＣｌ（６．８３ｍｍｏｌ、１．５当量）、トリエチルアミン（５．０ｍｍｏｌ、１．１当量）、及びｔｅｒｔ−ブチルヒドラジンカルボキシレート（５．００ｍｍｏｌ、１．１当量）を加えた。混合物を室温で３時間撹拌し、ＤＣＭで希釈し、ＮａＨＣＯ３飽和水溶液及びＮａＣｌ飽和水溶液で洗浄した。有機相を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、減圧下で濃縮し、生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、石油エーテル／ＥｔＯＡｃ  ９：１から０：１００）で精製し、白色の固体として１．２３ｇの生成物を得た（８５％の収率）。ＭＳ（ＥＳ）  Ｃ１６Ｈ１９Ｎ３Ｏ４  必要：３１７．３４、実測：３１８。
【０１５２】
工程２：２−メトキシキノリン−３−カルボヒドラジド
ｔｅｒｔ−ブチル  ２−（２−メトキシキノリン−３−カルボニル）ヒドラジンカルボキシレート（１．２３ｇ、３．８７ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１０ｍＬ）中に溶解し、０℃に冷却した。トリフルオロ酢酸（１０ｍＬ）を加え、混合物を室温で１時間撹拌した。溶媒を蒸発させ、残渣を水で洗浄した。生成物を次の工程で精製なしで使用した。ＭＳ（ＥＳ）  Ｃ１１Ｈ１１Ｎ３Ｏ２  必要：２１７．２２、実測：２１８。
【０１５３】
工程３：（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル（１−（（２−（２−メトキシキノリン−３−カルボニル）ヒドラジニル）オキシ）−１，８−ジオキソデカン−２−イル）カルバメート
ＤＭＦ（６ｍＬ）中の（Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−８−オキソデカン酸（０．６ｇ、１．９９ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ．ＨＣｌ（１．５当量）、及びＨＯＢＴ（１．５当量）の溶液を、１０分間撹拌した。混合物に、粗ヒドラジド（０．９９ｇ、２．９９ｍｍｏｌ、１当量）及びＤＩＰＥＡ（２．０当量）の溶液を加えた。混合物を室温で２時間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、有機相をＮａＨＣＯ３飽和水溶液及びブラインで洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、減圧下で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、石油エーテル／ＥｔＯＡｃ  ９：１から０：１００）で精製し、４８％の収率で生成物を得た。ＭＳ（ＥＳ）  Ｃ２６Ｈ３６Ｎ４Ｏ７  必要：５１６．５９、実測：５１７。
【０１５４】
工程４：（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）−１，３，４−オキサジアゾル−２−イル）−７−オキソノニル）カルバメート
（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル（１−（（２−（２−メトキシキノリン−３−カルボニル）ヒドラジニル）オキシ）−１，８−ジオキソデカン−２−イル）カルバメート（０．４８ｇ、１当量）、ポリスチレン上に結合した２−ｔｅｒｔ−ブチルイミノ−２−ジエチルアミノ−１，３−ジメチル−ペルヒドロ−１，３，２−ジアザホスホリン（５当量）、及び塩化トシル（１．２当量）の混合物を、無水ＴＨＦ中に懸濁した。懸濁液を６５℃に加熱し、４時間撹拌した。混合物を濾過し、樹脂をＴＨＦで洗浄した。組み合わせた濾液を減圧下で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、石油エーテル／ＥｔＯＡｃ  １：９から０：１００）で精製し、無色の油として生成物を得た（０．３３ｇ、７２％の収率）。ＭＳ（ＥＳ）  Ｃ２６Ｈ３４Ｎ４Ｏ５  必要：４８２．５７、実測：４８３。
【０１５５】
工程５：（Ｓ）−９−アミノ−９−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）−１，３，４−オキサジアゾル−２−イル）ノナン−３−オン
ＤＣＭ（６．１ｍＬ）中の前の工程からのオキサジアゾールの溶液（０．６８ｍｍｏｌ）に、０℃で、０．７ｍＬのＴＦＡを加えた。冷却浴を除去し、混合物を室温で３０分間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をＤＣＭとＮａＨＣＯ３飽和水溶液との間で分配した。有機相を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、減圧下で濃縮した。粗生成物を次の工程で直接使用した。ＭＳ（ＥＳ）  Ｃ２１Ｈ２６Ｎ４Ｏ３  必要：３８２．４６、実測：３８３。
【０１５６】
工程６：（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル  ３−（（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）−１，３，４−オキサジアゾル−２−イル）−７−オキソノニル）カルバモイル）アゼチジン−１−カルボキシレート
前の工程からの粗アミン（０．１５ｍｍｏｌ、１当量）に、ＤＭＦ中の１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アゼチジン−３−カルボン酸（１．３当量）、ＨＯＢｔ（１．３当量）、及びＥＤＣ．ＨＣｌ（１．３当量）の溶液（１０分間予混合）を加えた。混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、ＮａＨＣＯ３飽和水溶液、ブラインで洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮した。生成物をさらなる精製なしに次の工程で使用した。ＭＳ（ＥＳ）  Ｃ３０Ｈ３９Ｎ５Ｏ６  必要：５６５．６６、実測：５６７。
【０１５７】
工程７：（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）−１，３，４−オキサジアゾル−２−イル）−７−オキソノニル）アゼチジン−３−カルボキサミド
ＤＣＭ（１．３５ｍＬ）中の前の工程からの化合物の溶液（０．１５ｍｍｏｌ）に、０℃で、０．１５ｍＬのＴＦＡを加えた。混合物を室温で３時間撹拌し、ＤＣＭで希釈し、ＮａＨＣＯ３飽和水溶液、ブラインで洗浄し、乾燥し、濾過し、濃縮して、黄色の固体として、定量的収率で標題の化合物を得た。ＭＳ（ＥＳ）  Ｃ２５Ｈ３１Ｎ５Ｏ４  必要：４６５．５４、実測：４６６。
【０１５８】
工程８：（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）−１，３，４−オキサジアゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−１−メチルアゼチジン−３−カルボキサミド
前の工程からの化合物（０．１４ｍｍｏｌ、１当量）を、ＭｅＯＨ（１．４ｍＬ）中に溶解させ、ホルムアルデヒド（３．５当量、３７％水溶液）を加え、室温で４分間撹拌した。ＮａＯＡｃ（３．０当量）及びＮａＢＨ３ＣＮ（３．０当量）を加え、混合物を室温で１時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、アセトニトリル中に溶解し、ＲＰ−ＨＰＬＣ（アセトニトリル／Ｈ２Ｏ＋０．０１％ＴＦＡ）で精製した。生成物を５０％の収率でＴＦＡ塩として得た。生成物をＥｔＯＡｃとＮａＨＣＯ３飽和水溶液との間で分配した。有機相を乾燥し、濃縮した。残渣をアセトニトリル／Ｈ２Ｏ  ２／３中に溶解し、等モルの酒石酸で処理した。得られた溶液を凍結乾燥して、酒石酸塩として生成物を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：８．８９（１Ｈ，ｓ）、８．７４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ）、８．０９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ）、７．８４（２Ｈ，ｍ）、７．５７（１Ｈ，ｍ）、５．１８（１Ｈ，ｍ）、４．１０（３Ｈ，ｓ）、３．８０（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．４Ｈｚ）、３．５８（２Ｈ，ｍ）、２．３９（４Ｈ，ｍ）、１．５０〜１．２７（６Ｈ，ｍ）、０．９０（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）。
【０１５９】
実施例４
（Ｓ）−２−（５−メトキシ−２−メチル−１Ｈ−インドル−３−イル）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）−１，３，４−オキサジアゾル−２−イル）−７−オキソノニル）アセトアミド（化合物４８）
【０１６０】
上で記載したとおりに調製した（Ｓ）−９−アミノ−９−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）−１，３，４−オキサジアゾル−２−イル）ノナン−３−オン（０．０５ｍｍｏｌ、１当量）を、ＤＭＦ中の（５−メトキシ−２−メチル−１Ｈ−インドル−３−イル）酢酸（１．３当量）、ＨＯＢＴ（１．３当量）、及びＥＤＣ．ＨＣｌ（１．３当量）の溶液（３分間予混合）、続けてＤＩＰＥＡ（１．３当量）で処理した。混合物を室温で２時間撹拌し、生成物を、溶離液として水（＋０．０１％ＴＦＡ）及びＭｅＣＮ（＋０．０１％ＴＦＡ）を使用する（カラムＣ１８）、分取ＲＰ−ＨＰＬＣで単離した。溜まった生成物の画分を凍結乾燥し、生成物を白色の固体として得た。ＭＳ（ＥＳ）  Ｃ３３Ｈ３７Ｎ５Ｏ５  必要：５８３．６８、実測：５８４。
【０１６１】
実施例５
（Ｓ）−２−（５−メトキシ−２−メチル−１Ｈ−インドル−３−イル）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−Ｎ−メチルアセトアミド（化合物４３）
【０１６２】
工程１：（Ｓ）−９−（ベンジル（メチル）アミノ）−９−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）ノナン−３−オン
上で記載したとおりに調製した（Ｓ）−９−アミノ−９−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）ノナン−３−オン（０．２１ｍｍｏｌ、１当量）を、ジクロロエタン（２．１ｍＬ）中に溶解し、ベンズアルデヒド（０．１７ｍｍｏｌ、０．８当量）で処理した。混合物を室温で１時間撹拌し、その後ＮａＢＨ（ＡｃＯ）３（０．２１ｍｍｏｌ、１当量）で処理した。室温で３０分間撹拌した後、水（３当量）及びＮａＢＨ（ＡｃＯ）３（０．２１ｍｍｏｌ、３当量）中のＨＣＨＯの３７％溶液。１０分後、混合物をＤＣＭで希釈し、水及びブラインで洗浄した。有機相を乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣を、４％から４０％のＥｔＯＡｃの直線勾配でＥｔＯＡｃ／石油エーテルを使用する、フラッシュクロマトグラフィーで精製した。生成物を、５３％の収率で、無色の油として得た。ＭＳ（ＥＳ）  Ｃ３０Ｈ３５Ｎ３Ｏ３  必要：４８５．６２、実測：４８６。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：８．５８（１Ｈ，ｓ）、８．０５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ）、７．８１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ）、７．７１（２Ｈ，ｍ）、７．４９（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ）、７．３４〜７．３０（４Ｈ，ｍ）、７．２７〜７．２２（１Ｈ，ｍ）、４．１７（３Ｈ，ｓ）、３．９５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ）、３．７２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．２Ｈｚ）、３．４９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．２Ｈｚ）、２．４１〜２．３４（２Ｈ，ｍ）、２．１８（３Ｈ，ｓ）、１．９９〜１．９３（２Ｈ，ｍ）、１．５０〜１．４１（４Ｈ，ｍ）、１．２７〜１．２３（４Ｈ，ｍ），０．８９（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ）。
【０１６３】
工程２：（Ｓ）−９−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−９−（メチルアミノ）ノナン−３−オン
前の工程からの生成物をＥｔＯＡｃ（７ｍＬ）中に入れ、Ｐｄ／Ｃ（５ｍｇ）で処理した。混合物をＮ２でパージし、Ｈ２雰囲気下、室温で３日間撹拌した。反応混合物をシリカのパッドを通して濾過し、濾液を真空下で濃縮した。生成物を次の工程で使用した。ＭＳ（ＥＳ）  Ｃ２３Ｈ２９Ｎ３Ｏ３  必要：３９５．４９、実測：３９６。
【０１６４】
工程３：（Ｓ）−２−（５−メトキシ−２−メチル−１Ｈ−インドル−３−イル）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−Ｎ−メチルアセトアミド
ＤＣＭ中の２−メチル−５−メトキシインドリル酢酸（０．１ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に、塩化オキサリル（１．５当量）を室温で加えた。混合物を１時間撹拌し、その後蒸発させ、３０分間高真空に保った。塩化アシルをＤＣＭ中に再び溶解し、ＤＣＭ及びＤＩＰＥＡ（３当量）中の前の工程からの（Ｓ）−９−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−９−（メチルアミノ）ノナン−３−オンの溶液を加えた。室温で３０分間撹拌した後、混合物を、溶離液として水（＋０．０１％ＴＦＡ）及びＭｅＣＮ（＋０．０１％ＴＦＡ）を使用する（カラムＣ１８）、ＲＰ−ＨＰＬＣで精製した。溜まった生成物の画分を凍結乾燥し、生成物を白色の固体として得た。ＭＳ（ＥＳ）  Ｃ３５Ｈ４０Ｎ４Ｏ５  必要：５９６．７２、実測：５９７。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：１０．６９（０．３Ｈ，ｓ）、１０．６２（０．７Ｈ，ｓ）、８．３８（０．７Ｈ，ｓ）、８．２９（０．３Ｈ，ｓ）、７．９９（０．７Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．７Ｈｚ）、７．９６（０．３Ｈ，ｄ，Ｊ＝４Ｈｚ）、７．８０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ）、７．７０（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ）、７．６５〜７．６４（１Ｈ，ｍ）、７．５１〜７．４７（１Ｈ，ｍ）、７．０８（１Ｈ，ｄ，６．６Ｈｚ）、６．９９（１Ｈ，ｓ）、６．５８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，Ｊ＝１．５Ｈｚ）、５．９０〜５．８６（０．７Ｈ，ｍ）、５．３３〜５．３０（０．３Ｈ，ｍ）、４．１４（３Ｈ，ｓ）、３．９０〜３．７１（ｍ，２Ｈ）、３．６７（２．１Ｈ）、３．６６（０．９Ｈ）、２．９０（２．１Ｈ，ｓ）、２．７３（０．９Ｈ，ｓ）、２．４０〜２．２７（７Ｈ，ｍ）、１．８７〜１．７５（４Ｈ，ｍ）、１．３４〜１．７６（４Ｈ，ｍ）、０．９０（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ）。
【０１６５】
実施例６
（Ｓ）−１−メチル−Ｎ−（７−オキソ−１−（５−（２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）ノニル）アゼチジン−３−カルボキサミド（化合物４４）
【０１６６】
ＤＣＭ（１ｍＬ）中の上で記載したとおりに調製した（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（２−メトキシキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）−１−メチルアゼチジン−３−カルボキサミド（０．０５ｍｍｏｌ、１当量）の溶液を、ジオキサン中の０．２ｍＬのＨＣｌ  ４Ｎで処理した。混合物を室温で１時間撹拌し、その後濃縮し、溶離液として水（＋０．０１％ＴＦＡ）及びＭｅＣＮ（＋０．０１％ＴＦＡ）を使用する（カラムＣ１８）、ＲＰ−ＨＰＬＣで精製した。溜まった生成物の画分を凍結乾燥し、生成物を白色の固体として得た。ＭＳ（ＥＳ）  Ｃ２６Ｈ３２Ｎ４Ｏ４  必要：４６４．５８、実測：４６５。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：１２．２１（１Ｈ，ｓ）、９．８３（１Ｈ，ｂｓ）、８．８９〜８．８２（１Ｈ，ｍ）、８．２６（１Ｈ，ｓ）、７．８３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ）、７．７８（１Ｈ，ｓ）、７．５５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）、７．３８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ）、７．２５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ）、５．０９（１Ｈ，ｂｓ）、４．３６（１Ｈ，ｂｓ）、４．２２〜４．２０（１Ｈ，ｍ）、４．１１（１Ｈ，ｂｓ）、３．９８〜３．９２（１Ｈ，ｍ）、３．５７〜３．５５（１Ｈ，ｍ，部分的に水と重複）、２．８２（３Ｈ，ｓ）、２．４２〜２．３７（４Ｈ，ｍ）、１．９６〜１．９２（１Ｈ，ｍ）、１．８３〜１．８０（１Ｈ，ｍ）、１．４８〜１．４４（２Ｈ，ｍ）、１．３５〜１．３３（４Ｈ，ｍ）、０．８９（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）。
【０１６７】
実施例７
（Ｓ）−１−メチル−Ｎ−（１−（５−（１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）アゼチジン−３−カルボキサミド（化合物９２）
【０１６８】
工程１：ｔｅｒｔ−ブチル（２−（１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−２−オキソエチル）カルバメート
乾燥ＴＨＦ中の３−ブロモ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（１当量；Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ、６４（２６）、６０３０〜６０３７；２００８に記載されたとおりに調製）及びｔｅｒｔ−ブチル（２−（メトキシ（メチル）アミノ）−２−オキソエチル）カルバメート（１．２当量）の０．３Ｍ溶液に、塩化イソプロピルマグネシウム（３当量）を、室温で滴下で加えた。混合物を室温で３０分間撹拌し、ジクロロメタンで希釈し、ＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液で洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、減圧下で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、石油エーテル／ＥｔＯＡｃ、７％から６０％ＥｔＯＡｃ）で精製した。溜まった画分を真空下で標題の化合物に濃縮した。ＭＳ（ＥＳ）  Ｃ１７Ｈ２０Ｎ２Ｏ４  必要：３１６．３５、実測：３１７。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：８．５３（１Ｈ，ｓ）、７．９９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）、７．７８（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ）、７．６１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ）、７．３５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）、６．９７（１Ｈ，ｂｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ）、４．４５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ）、３．７０（３Ｈ，ｓ）、１．３９（９Ｈ，ｓ）。
【０１６９】
工程２：３−（２−アミノアセチル）−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン
前の工程からの化合物を、室温で、ジクロロメタンとトリフルオロ酢酸の１：１混合物中に溶解した。混合物を３０分間撹拌し、真空下で蒸発させ、生成物を次の工程で直接使用した。ＭＳ（ＥＳ）  Ｃ１２Ｈ１２Ｎ２Ｏ２  必要：２１６．２４、実測：２１７。
【０１７０】
工程３：（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル（１−（（２−（１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）−２−オキソエチル）アミノ）−１，８−ジオキソデカン−２−イル）カルバメート
ＤＭＦ（０．２Ｍ）中の（Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−８−オキソデカン酸（０．７６ｍｍｏｌ、１当量；Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  ２００８、５１（８）、ｐｐ  ２３５０〜２３５３に記載されたとおりに調製）、ＥＤＣ．ＨＣｌ（１当量）、ＨＯＢＴ（１当量）の溶液を、室温で１０分間撹拌した。続けてＤＭＦ（３当量）中の３−（２−アミノアセチル）−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（１．１当量）を加え、続けてＤＩＰＥＡ（２．２当量）を加え、混合物を室温で２時間撹拌した。混合物をＤＣＭで希釈し、ブラインで洗浄した。有機相を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、石油エーテル／ＥｔＯＡｃ、１０％のＥｔＯＡｃから８０％のＥｔＯＡｃ）で精製して、油として標題の化合物を得た。ＭＳ（ＥＳ）  Ｃ２７Ｈ３７Ｎ３Ｏ６  必要：４９９．６０、実測：５００。
【０１７１】
工程４：（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル（１−（５−（１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）カルバメート
ＰＰｈ３（２当量）及びＣ２Ｃｌ６（２当量）を、室温で、ＤＣＭ（０．２Ｍ溶液）中に溶解し、Ｅｔ３Ｎ（４当量）を加え、１５分撹拌した後、ＤＣＭ中の前の工程からのアミド（１当量）の溶液を滴下で加えた。混合物を室温で終夜撹拌し、その後ＡｃＯＥｔで希釈し、ブラインで洗浄した。有機相を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧下で濃縮した。粗生成物をＳｉＯ２上のフラッシュクロマトグラフィー（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ、１０％のＥｔＯＡｃから１００％のＥｔＯＡｃ）で精製して、標題の生成物を得た。ＭＳ（ＥＳ）  Ｃ２７Ｈ３５Ｎ３Ｏ５  必要：４８１．５８、実測：４８２。
【０１７２】
工程５：（Ｓ）−３−（２−（１−アミノ−７−オキソノニル）オキサゾル−５−イル）−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン
前の工程からの化合物を、ＤＣＭ：ＴＦＡ（１：１）混合物中に溶解し、０℃で１０分間撹拌し、その後室温で１時間撹拌した。混合物をトルエン（７ｍＬ）で希釈し、溶媒を蒸発させた。得られた油をＥｔＯＡｃで希釈し、ＮａＨＣＯ３飽和水溶液で洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた粗生成物を以下の工程で直接使用した。ＭＳ（ＥＳ）  Ｃ２２Ｈ２７Ｎ３Ｏ３  必要：３８１．４７、実測：３８２。
【０１７３】
工程６：（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル  ３−（（１−（５−（１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）カルバモイル）アゼチジン−１−カルボキシレート
ＤＭＦ中の１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アゼチジン−３−カルボン酸（１．３当量）、ＨＯＢｔ（１．３当量）、及びＥＤＣ．ＨＣｌ（１．３当量）の溶液（１０分間予混合）を、上で記載したとおりに得られた（Ｓ）−３−（２−（１−アミノ−７−オキソノニル）オキサゾル−５−イル）−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（１当量）に加えた。混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物をＤＣＭで希釈し、ＮａＨＣＯ３飽和水溶液、ブラインで洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮した。混合物を、ＥｔＯＡｃ／石油エーテル（５０％のＥｔＯＡｃから１００％のＥｔＯＡｃ）で溶離する、シリカ上のフラッシュクロマトグラフィーで精製した。ＭＳ（ＥＳ）  Ｃ３１Ｈ４０Ｎ４Ｏ６  必要：５６４．６７、実測：５６５。
【０１７４】
工程７：（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）アゼチジン−３−カルボキサミド
前の工程からの化合物を、０℃で、ＤＣＭ：ＴＦＡ（７：３）で処理した。混合物を０℃で３０分間撹拌し、Ｅｔ２Ｏで希釈し、真空下で蒸発させた。残渣をＥｔＯＡｃに溶解し、ＮａＨＣＯ３飽和水溶液で洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮した。生成物を次の工程で直接使用した。ＭＳ（ＥＳ）  Ｃ２６Ｈ３２Ｎ４Ｏ４  必要：４６４．５６、実測：４６５。
【０１７５】
工程８：（Ｓ）−１−メチル−Ｎ−（１−（５−（１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）アゼチジン−３−カルボキサミド
前の工程からの化合物（１当量）の０．２Ｍメタノール溶液及びホルムアルデヒド（３．５当量、３７％水溶液）を、室温で１０分間撹拌した。ＮａＯＡｃ（３．０当量）及びＮａＢＨ３ＣＮ（３．０当量）を加え、得られた混合物を室温で１時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、アセトニトリル中に溶解し、ＲＰ−ＨＰＬＣ（アセトニトリル／Ｈ２Ｏ＋０．０１％ＴＦＡ）で精製した。生成物をＴＦＡ塩として単離した。ＭＳ（ＥＳ）  Ｃ２７Ｈ３４Ｎ４Ｏ４  必要：４７８．５８、実測：４７９。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：８．２３（１Ｈ，ｓ）、７．８７（１Ｈ，ｓ）、７．８０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ）、７．６７（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ）、７．５４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ）、７．３４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ）、７．２８（１Ｈ，ｂｓ）、５．１９〜５，１３（１Ｈ，ｍ）、４．４９〜４．３０（２Ｈ，ｍ）、４．１５〜４．１２（２Ｈ，ｍ）、３．７８（３Ｈ，ｓ）、３．６９〜３．６４（１Ｈ，ｍ）、２．８５（３Ｈ，ｓ）、２．４２〜２．４０（４Ｈ，ｍ）、１．５６〜１．５２（２Ｈ，ｍ）、１．３８〜１．３３（６Ｈ，ｍ）、０．９７（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）。
【０１７６】
実施例８
（Ｓ）−Ｎ−（１−（５−（１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−イル）オキサゾル−２−イル）−７−オキソノニル）チアゾール−５−カルボキサミド（化合物１１２）
【０１７７】
実施例７の工程１から５に記載したとおりに調製した（Ｓ）−３−（２−（１−アミノ−７−オキソノニル）オキサゾル−５−イル）−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（１当量）を、ＤＭＦ中のチアゾール−５−カルボン酸（１．３当量）、ＨＯＢＴ（１．３当量）、及びＥＤＣ．ＨＣｌ（１．３当量）の溶液（３分間予混合）で処理し、続けてＤＩＰＥＡ（１．３当量）で処理した。混合物を室温で２時間撹拌し、所望の生成物を、溶離液として水（＋０．０１％ＴＦＡ）及びＭｅＣＮ（＋０．０１％ＴＦＡ）を使用する（Ｃ１８カラム）、分取ＲＰ−ＨＰＬＣで単離した。溜まった生成物の画分を凍結乾燥して、生成物を白色の固体として得た。ＭＳ（ＥＳ）  Ｃ２６Ｈ２８Ｎ４Ｏ４Ｓ  必要：４９２．５９、実測：４９３。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：９．２８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ）、９．２６（１Ｈ，ｓ）、８．６２（１Ｈ，ｓ）、８．２９（１Ｈ，ｓ）、７．９１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ）、７．８４（１Ｈ，ｓ）、７．６８（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）、７．６１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ）、７．３４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ）、５．２７〜５．２２（１Ｈ，ｍ）、３．７５（３Ｈ，ｓ）、２．３９〜２．３６（４Ｈ，ｍ）、２．０９〜２．０６（１Ｈ，ｍ）、２．００〜１．９６（１Ｈ，ｍ）、１．５０〜１．２７（６Ｈ，ｍ）、０．８９（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）。
【０１７８】
以下の化合物（表１）を、実施例１から８に記載した手順によって調製した。
【０１７９】
【表１Ａ】
0006367800.tif 000017
【表１Ｂ】
0006367800.tif 000018
【表１Ｃ】
0006367800.tif 000019
【表１Ｄ】
0006367800.tif 000020
【表１Ｅ】
0006367800.tif 000021
【表１Ｆ】
0006367800.tif 000022
【表１Ｇ】
0006367800.tif 000023
【表１Ｈ】
0006367800.tif 000024
【表１Ｉ】
0006367800.tif 000025
【表１Ｊ】
0006367800.tif 000026
【表１Ｋ】
0006367800.tif 000027
【表１Ｌ】
0006367800.tif 000028
【表１Ｍ】
0006367800.tif 000029
【表１Ｎ】
0006367800.tif 000030
【表１Ｏ】
0006367800.tif 000031
【表１Ｐ】
0006367800.tif 000032
【表１Ｑ】
0006367800.tif 000033
【表１Ｒ】
0006367800.tif 000034
【表１Ｓ】
0006367800.tif 000035
【表１Ｔ】
0006367800.tif 000036
【０１８０】
生物学
ＨＤＡＣ１アッセイ
【０１８１】
アッセイの説明
ＨＤＡＣ１アッセイを使用して、ヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）の活性を定量化する。アッセイを、固定した濃度のＨｅＬａ核抽出物又は精製したＨＤＡＣ１を有する化合物の一連の希釈物を予備培養し、その後アセチル化リシンを含有する、脱アセチル化の際に蛍光を発する基質／現像剤を加えることによって、３８４ウェルマイクロタイタープレートで行う。脱アセチル化反応は室温で６０分間行い、現像剤溶液を加えることによって終了し、その後蛍光（ｅｘ  ３６０ｎｍ、ｅｍ  ４６０ｎｍ）をプレートリーダーを使用して測定する。
【０１８２】
ＨＤＡＣ基質バッファー系
ＨＤＡＣ蛍光活性アッセイの試薬を、ＢｉｏＭｏｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｐｌｙｍｏｕｔｈ  Ｍｅｅｔｉｎｇ、ＰＡ）から購入し、Ｆｌｕｏｒ−ｄｅ−ＬｙｓＴＭ  Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ／Ｄｅｖｅｌｏｐｅｒ  Ｓｙｓｔｅｍを特徴とする。試薬は、５０ｍＭの貯蔵液（ＫＩ−１０４）及び現像剤濃縮物（ＫＩ−１０５）としての独自の蛍光基質を含む。Ｆｌｕｏｒ−ｄｅ−Ｌｙｓ基質のリシン残基の脱アセチル化は、独自の現像剤を加えた後に、蛍光（ｅｘ  ３６０ｎｍ、ｅｍ  ４６０ｎｍ）を測定することによって定量化される。
【０１８３】
作用試薬
ＴＳＡストック：ＴＳＡは、１００％ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中の１０ｍＭの貯蔵溶液として提供される。
アッセイバッファー：２５ｍＭのＴｒｉｓ／ＨＣｌ  ｐＨ８、１３７ｍＭのＮａＣｌ、２．７ｍＭのＫＣｌ、１ｍＭのＭｇＣｌ２、０．１ｍｇ／ｍｌのＢＳＡ
希釈基質溶液：商業的な５０ｍＭのＦｌｕｏｒ−ｄｅ−Ｌｙｓ基質（ＫＩ−１０４）を、それぞれの使用の前に、ＨＤＡＣアッセイバッファーで８０μＭに希釈する。アッセイにおける最終的な濃度は２０μＭである。
希釈現像剤溶液：商業的な２０Ｘ現像剤濃縮物（ＫＩ−１０５）を、ＨＤＡＣアッセイバッファーに１：６６６希釈した。この溶液に対する３μＭ（最終）のＴＳＡは、反応を停止する能力を増加させる。
ＨＤＡＣ１作用溶液：ＨＤＡＣ１酵素を、未使用の一定量の酵素から、それぞれの使用前にアッセイバッファー中に希釈する。アッセイにおける最終濃度は、１〜２ｎＭである。
化合物：試験化合物を、アコースティックディスペンサー（ＡＴＳ−１００、ＥＤＣ  ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ、ＵＳ）によって、ナノリットルの溶液をスポットすることで、１００％ＤＭＳＯ溶液からアッセイプレートに直接移動する。最終的なＤＭＳＯ濃度は０．２５％である。
【０１８４】
実験計画
反応を、以下のとおり、２０μｌ／ウェルの最終的な体積で、３８４−ウェルマイクロプレートで行う：
−５０ｎｌのＤＭＳＯ／化合物溶液を加える
−１５μｌのアッセイバッファー中のＨＤＡＣ１（又は陰性対照においては３５μｌのアッセイバッファー）を加える
−室温で１０分間培養する
−５μｌの８０μＭの基質溶液を加えることによって、反応を開始する
−室温で１時間培養する
−１０μｌの現像剤／３μＭのＴＳＡ溶液を加えることによって、停止する
−室温で１０分間培養する
−Ｅｘ．３６０ｎｍ及びＥｍ．４６０ｎｍにおける蛍光を測定する。
【０１８５】
ＨｅＬａ細胞で発現するフラグ標識ＨＤＡＣ１に対する抽出及び精製手順
ｐＣＤＮＡ３−ＨＤＡＣ１−ＦＬＡＧで一時的にトランスフェクトされたＨｅＬａ細胞を、ＤＭＥＭ中の１０ｃｍの培養皿上で、８０％の重なり（ｃｏｎｆｌｕｅｎｃｅ）まで成長させ、１０％のウシ胎児血清に抗生物質及びグルタミンを補った。細胞を１０ｍＬの冷却ＰＢＳで洗浄し、２ｍｌのＰＢＳに分ける。細胞を、８００ｘｇにおいて４℃で、５分間遠心分離し、３０ｍｌのＰＢＳで洗浄し、１０ｍｌのＰＢＳ中に再懸濁し、計数し、再度遠心分離し、−８０℃で凍結する。
【０１８６】
凍結した細胞のペレットを、ＣＯＭＰＬＥＴＥプロテアーゼ阻害剤を含有する、１ｍｌの低張溶解バッファー（ＬＢ：２０ｍＭのＨｅｐｅｓ  ｐＨ７．９、０．２５ｍＭのＥＤＴＡ、１０％のグリセロール）中に再懸濁し、氷上で１５分間培養し、続けて２−ｍｌ  ＤｏｕｎｃｅＢホモジナイザー（２５ストローク）で均一化する。１５０ｍＭのＫＣｌ及び０．５％のＮＰ−４０をホモジネートに加え、溶液を３０秒間、２回超音波にかけ（出力５／６、負荷サイクル９０）、４℃で１時間培養する。１２０００ｒｐｍ及び４℃で３０分間遠心分離した後、上澄み（溶解性抽出物）を集め、タンパク質の濃度を、ＢＩＯＲＡＤアッセイを使用して測定する。
【０１８７】
Ａｎｔｉ−ＦＬＡＧ  Ｍ２親和性樹脂（Ｓｉｇｍａ）を、ＴＢＳで３回、ＬＢで２回洗浄する。１０μｌのＬＢで洗浄した樹脂／ｍｇのタンパク質（２〜３μｇのＦｌａｇｇｅｄ−ＨＤＡＣ１）を溶解性抽出物（１ｍＬ）に加え、ゆっくりと混合しながら４℃で終夜培養する。その後、樹脂を遠心分離で集め、ＬＢで１回、ＬＢ＋０．１％のＮＰ４０で２回、溶離バッファー（５０ｍＭのＨｅｐｅｓ  ｐＨ７．４、５％のグリセロール、１００ｍＭのＫＣｌ、０．０１％のＴｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００）で２回洗浄する。
【０１８８】
親和性の精製したＨＤＡＣを、１００μｇ／ｍｌの３ＸＦＬＡＧペプチド（ＳＩＧＭＡ）を含有する、１０倍過剰（樹脂に対して）の溶離バッファーを加えることによって、樹脂から溶離する。精製したＨＤＡＣの濃度を、ウエスタンブロット分析によって測定する。
【０１８９】
その他のアッセイは文献で知られており、当業者によってすぐに行うことができる。
【０１９０】
胎児ヘモグロビンの潜在的な誘導剤をスクリーニングするためのインビトロのモデル系
いくつかの化合物を試験するために、文献に存在する以前の発見に基づいて、モデル系を作成した。急性転化における慢性骨髄性白血病を有する患者からの、Ｌｏｚｚｉｏ＆Ｌｏｚｚｉｏ（Ｂｌｏｏｄ、４５（３）、ｐｐ  ３２１〜３３４）によって特徴付けられた、単離されたＫ５６２赤血球様細胞株を、有用なインビトロモデルとして広く用いて、初期の胎児性ヒトグロビン遺伝子の発現を制御する分子メカニズムを調べ、新規な分化誘導化合物をスクリーニングした。緑色のＥＧＦＰ及び遠赤色の蛍光タンパク質の赤色のＦＰをコードする報告者の遺伝子が、ヒトγ−グロビン又はβ−グロビン促進剤の対照下にそれぞれ配置される、安定な細胞株を使用した（詳細はＶａｄｏｌａｓ  ｅｔ  ａｌ，  Ｈｕｍ．  Ｍｏｌ．  Ｇｅｎｅｔ．  ２００４、１３、２、２２３〜２３３参照）。変性したβ−クラスターはまた、ＬＣＲと呼ばれる上流の調節領域を含有する。この細胞株は、以下の媒体：ＤＭＥＭ、１０％の胎児ウシ血清、グルタミン、及び抗生物質（ペニシリン及びストレプトマイシン）中、加湿雰囲気下、３７℃及び５％ＣＯ２で、懸濁液中で成長する。
【０１９１】
アッセイの手順は以下のとおりである：
・単一の濃度の化合物又は連続的に希釈されたサンプルを、空のアッセイプレートにスポッター（ＡＴＳ−１００、ＥＤＣ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ、ＵＳＡ）で移動して、５０μＬの細胞株中で０．２５％のＤＭＳＯの最終濃度を有する。ソースの区画は、１００％のＤＭＳＯ中に溶解された化合物を含有する。
・黒色の、底部が透明な３８４ウェルの組織培養で処理したプレートを、アッセイプレートとして使用する。
・スポットされた化合物を含有するアッセイプレートを、記載したアッセイ培地中の細胞の懸濁液で満たす。最終的な細胞濃度は、ウェルあたり１０００個の細胞である。
・細胞を加湿雰囲気、３７℃−５％のＣＯ２で６０時間培養する。
・細胞の核を、１０μｌ（６μＭ；最終１μＭ）のＨｏｅｃｈｓｔ  ３３３４２（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、ＵＳＡ）を加えることによって染色する。
・明度に関連する細胞を、プレートに基づく血球計算器（ＡＣＵＭＥＮ  ｅｘｐｌｏｒｅｒ、ＴＴＰ  Ｌａｂｔｅｃｈ、ＵＫ）に示す。
・核の数を使用して、細胞の増殖／死亡を評価し、合計のＥＧＦＰ／ＲＦＰ強度を正規化する。
【０１９２】
ヒト細胞株Ｋ５６２におけるＨｂＦ活性アッセイ
本出願の化合物の生物学的活性を、ヒトＫ５６２細胞株におけるγ−グロビン遺伝子の発現を調節する能力を調べることによって評価し、ヒトＫ５６２細胞株は、目的に好適な生物学的反応の修飾因子で処理された場合、γ−グロビンのための遺伝子を発現することによって、赤血球で分化することができる（Ｂｉａｎｃｈｉ  ｅｔ  ａｌ、Ｊ．  Ｈａｅｍａｔｏｌ．、１１３、４、ｐ．９５１〜９６１、２００１）。ヒトＫ５６２細胞株を、１０％の胎児ウシ血清（ＦＢＳ；Ａｎａｌｉｔｉｃａｌ  ｄｅ  Ｍｏｒｉ、Ｍｉｌａｎ、Ｉｔａｌｙ）、１００単位／ｍＬのペニシリン、及び１００μｇ／ｍＬのストレプトマイシンを補った、ＲＰＭＩ  １６４０培地（Ｓｉｇｍａ、Ｓｔ  Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ、ＵＳＡ）で培養した。細胞の成長を、セルカウンター（Ｃｏｕｌｔｅｒ  Ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃｓ、Ｈｉａｌｅａｈ、ＦＬ、ＵＳＡ）を使用して、細胞数／ｍｌによって決定した。実験のために、Ｋ５６２細胞株を３×１０４／ｍＬで開始し、示された濃度の化学誘導剤を加えた。続けて培地を交換せずに３から５日間培養し、赤血球の分化を、０．５Ｍの氷酢酸、１０％のＨ２Ｏ２中に０．２％のベンジジンを含有する溶液中で細胞を染色することによって決定した。ベンジジン陽性は、細胞内のＨｂの存在を示す。
【０１９３】
γ−グロビンをコードする遺伝子の発現を、定量ＲＴ−ＰＣＲによって評価した。上で示した条件で６日間処理した細胞から抽出した物質に、分析を行った。
【０１９４】
ヒト赤血球前駆体におけるγ−グロビンのｍＲＮＡ及びＨｂＦの生成
末梢血から単離したヒト赤血球前駆体における、γ−グロビンに対するｍＲＮＡの生成の刺激を、Ｆｉｂａｃｈによる技法を使用して検出した（Ｆｉｂａｃｈ，  Ｅ．  Ｈｅｍｏｇｌｏｂｉｎ、１９９８、２２、４４５〜４５８；Ｂｌｏｏｄ、１９９３、８１、１６３０〜１６３５）。血液サンプルを同意書後の対象から得て、地方倫理委員会が試験を承認した。この技法は、２つの段階を提供する：最初の段階において、健康な対象又は鎌状赤血球貧血若しくはβ−サラセミアなどの造血病状に苦しむ対象の末梢血から単離した細胞を、膀胱癌細胞株５６３７から得られた、１０％の調節された培地を加えた培養媒体中に播種する。第２の段階は、エリスロポエチンを補った好適な培養培地中で、単離した細胞を培養することからなる。要するに、Ｆｉｃｏｌｌ−Ｈｙｐａｑｕｅ密度勾配遠心分離法及び１０％のＦＢＳ（Ａｎａｌｉｔｉｃａ  ｄｅ  Ｍｏｒｉ）、１μｇ／ｍＬのシクロスポリンＡ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）、並びに５６３７膀胱癌細胞系及び１０ｎｇ／ｍｌの幹細胞因子（ＰｅｐｒｏＴｅｃｈ  ＥＣ  Ｌｔｄ、Ｌｏｎｄｏｎ、Ｅｎｇｌａｎｄ）からの１０％の調節した培地を補った、アルファ−最小必須培地に播種することによって、単核細胞を、通常のドナー及び患者の赤血球サンプルから単離した。このフェーズ１培養における７日間の培養後、非接着細胞を培養し、洗浄し、α−培地、３０％のＦＢＳ、１％の脱イオン化ウシ血清アルブミン（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）、１０−５Ｍのβ−メルカプトエタノール、２ｍＭのＬ−グルタミン、１０−６Ｍのデキサメタゾン、１Ｕ／ｍｌのヒト組み換えエリスロポエチン（Ｔｅｂｕ−ｂｉｏ、Ｍａｇｅｎｔａ、ＭＩ、Ｉｔａｌｙ）及び１０ｎｇ／ｍｌの幹細胞因子からなる新鮮な培地で再培養した。培養のこの部分は、フェーズＩＩとして表される。化合物をフェーズＩＩの４から５日目に加え、細胞を１２日目に培養した。全ての培地を、湿度を追加した空気中５％のＣＯ２雰囲気下で、３７℃で培養した。γ−グロビンに対してコードする遺伝子の発現を、定量ＲＴ−ＰＣＲで評価した。ＨｂＦの生成を、ＨＰＬＣで分析した。
【０１９５】
γ−グロビンのｍＲＮＡの生成を分析するための、定量リアルタイムＲＴ−ＰＣＲ
全ＲＮＡを、ＴＲＩ試薬ＲＮＡ単離試薬（Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ）を使用して、細胞から抽出した。全ての溶液及び研究室設備は、ＲＮＡ分解酵素を含まないことが保障された。製造者の使用説明書に従って、１ｍＬの試薬を５×１０６個の細胞に加えた。室温で３分間の培養後、２０μｇのグリコーゲン及び２００μＬのクロロホルムを加えた。その後、サンプルを遠心分離し、水性相を回収した。この相を１体積のイソプロパノールで希釈し、４℃で遠心分離して、ＲＮＡを沈殿させた。メタノールによる洗浄工程後、抽出されたＲＮＡを乾燥し、その後ＲＮＡ分解酵素を含まない水の中で再懸濁した。精製したＲＮＡを−８０℃で保存した。
【０１９６】
抽出したＲＮＡの質を決定するために、０．８％のアガロースゲル上で電気泳動を行った。回収したＲＮＡの量を、２６０ｎｍの吸収光で定量化した。２６０／２８０ｎｍの吸収比が１．８を超えるか確かめることによって、タンパク質の汚染の質管理を行った。
【０１９７】
抽出されたＲＮＡからのｃＤＮＡ生成を、ＩｍＰｒｏｍ−ＩＩＴＭ逆転写システム（Ｐｒｏｍｅｇａ）により行った。０．５μｇのｄｉ  ＲＮＡを、ランダム六量体を使用して、逆転写した。その後、生成したｃＤＮＡを、使用するまで−８０℃で保存した。
【０１９８】
γ−グロビンに対してコードする遺伝子の発現を、以下のプライマー及びプローブオリゴヌクレオチド（ＦＡＭ＝６−カルボキシフルオレセイン、ＴＡＭＲＡ＝６−カルボキシ−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルローダミン）：
５’−ＴＧＧ  ＣＡＡ  ＧＡＡ  ＧＧＴ  ＧＣＴ  ＧＡＣ  ＴＴＣ−３’（γ−グロビンフォワードプレイマー）；
５’−ＴＣＡ  ＣＴＣ  ＡＧＣ  ＴＧＧ  ＧＣＡ  ＡＡＧ  Ｇ−３’（γ−グロビンリバースプライマー）；
５’−ＦＡＭ−ＴＧＧ  ＧＡＧ  ＡＴＧ  ＣＣＡ  ＴＡＡ  ＡＧＣ  ＡＣＣ  ＴＧＧ−ＴＡＭＲＡ−３’（γ−グロビンプローブ）
を使用して、定量ＲＴ−ＰＣＲで評価した。
【０１９９】
リアルタイムＰＣＲ分析のために、参照遺伝子として、内因性対照ヒトＧＡＰＤＨキット（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を使用した。
【０２００】
ＨｂＦの生成を分析するための高速液体クロマトグラフィー
ヒト赤血球前駆体細胞を培養し、ＰＢＳで１回洗浄し、ペレットを溶解バッファー（ドデシル硫酸ナトリウム０．０１％）で溶解した。氷上で１５分間培養し、微小遠心管で１４０００ｒｐｍで５分間遠心分離した後、上澄みを膜の残骸から分離し、注入した。溶解物中に存在するＨｂタンパク質を、Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ  ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ  Ｓｙｓｔｅｍ  Ｇｏｌｄ  １２６  Ｓｏｌｖｅｎｔ  Ｍｏｄｕｌｅ−１６６  Ｄｅｔｅｃｔｏｒを使用して、カチオン交換ＨＰＬＣで分離した。ヘモグロビンを、Ｓｙｎｃｒｏｐａｋ  ＣＣＭ  １０３／２５（２５０ｍｍ×４．６ｍｍ）カラムを使用して分離し、サンプルを、酢酸ナトリウム−ＢｉｓＴｒｉｓ−ＫＣＮ水性バッファーを使用する溶媒勾配で溶離し、検出を４１５ｎｍで行った。標準対照は、精製したＨｂＡ（ＳＩＧＭＡ、Ｓｔ  Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ、ＵＳＡ）及びＨｂＦ（Ａｌｐｈａ  Ｗａｓｓｅｒｍａｎｎ、Ｍｉｌａｎｏ、Ｉｔａｌｙ）であった。
【０２０１】
プールされたラット、マウス、又はヒト肝臓ミクロソームを使用する試験
アッセイを、０．５ｍｇ／ｍｌのミクロソームタンパク質の存在下、３．３ｍＭのＭｇＣｌ２（ｐＨ  ７．４）を含有する１００ｍＭのリン酸カルシウムバッファー中のＮＡＤＰＨ発生系（１ｍＭのＮＡＤＰ、２．５ｍＭのグルコース６−リン酸、及び２Ｕ／ｍｌのグルコース６−リン酸デヒドロゲナーゼ）で行った。試験した化合物を１０ｍＭのＤＭＳＯ溶液中で保存し、１μＭの最終濃度で培養した（培養中の最終ＤＭＳＯ濃度は０．１％未満）。ミクロソーム及び基質を、３７℃で５分間予備培養し、その後酵素反応を、補因子を加えることによって開始し、３７℃で最大９０分間培養した。培養は、Ｉ．Ｓ．を含有する、等量の冷却アセトニトリルを加えることによって終了した。基質を、ＮＡＤＰＨ発生系を有さず、ｐＲＬＭを含有する同じバッファー系で培養した対照培養もまた、行った。
【０２０２】
ラットのＰＫ試験
オスのＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット（２５０〜３５０ｇ）を、吸収動態試験のために使用した。それぞれのラットにおいて、血液のサンプリングのために、右の頸静脈に内在カニューレを埋め込んだ。手術は、浅麻酔下（Ｋｅｔａｍｉｎｅ−Ｘｉｌａｚｉｎｅ（それぞれ８５ｍｇ／ｋｇ及び２．５ｍｇ／ｋｇのｉ．ｍ．）実験の１日前）で行った。動的試験の間、全ての動物を、プラスチックの代謝ケージ中に個々に住まわせ、実験の間拘束はしなかった。化合物（６ｍｇ／ｍＬ）を、静脈内投与のために２０％のＤＭＳＯ／６０％のＰＥＧ４００／２０％の水中に溶解し、経口投与のために１％のメチルセルロース中に溶解若しくは懸濁した（２ｍｇ／ｍｌ）。終夜絶食した後、ラットは、ｉ．ｖ．（尾静脈を介して）又は経口投与で化合物を受け取った。投与後、血液サンプルを、異なる時点で収集した。遠心分離によって、血液をサンプリングした後に血漿をすぐに分離し、血漿サンプルを、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳによって測定されるまで、凍結（−２０℃）に保った。
【０２０３】
分析手順
血漿サンプルを、アセトニトリルを有するタンパク質沈殿物による、Ｌｉｑｕｉｄ  Ｈａｎｄｌｉｎｇ  Ｒｏｂｏｔ  ＭｕｌｔｉＰｒｏｂｅ  Ｐａｃｋａｒｄを使用して抽出した。その後、サンプルを遠心分離し（４℃で、３０００ｒｐｍ×１５分間）、上澄みを移動し、窒素下で乾燥した。サンプルを、水／アセトニトリルの９０／１０中に戻し、その後ＨＰＬＣカラム中に直接注入した。サンプルの分析を、Ｔｕｒｂｏ  Ｉｏｎ  Ｓｐｒａｙ（ＥＳＩ）／ＡＰＣＩを介して、ＨＴＳ  ＰＡＬ  ＣＴＣオートサンプラー及びＡｇｉｌｅｎ  ＨＰ  １１００  Ｂｉｎａｒｙ  ＰｕｍｐからなるＬＣシステムにつながれた、ＡＰＩ  ３０００又は／及びＡＰＩ  ２０００又は／及びＡＰＩ  ４０００の質量分析計を使用して行った。結果を、１／ｘ×ｘの重みづけでＡｎａｌｙｓｔ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ線形回帰を使用して、計算した。アッセイの精度を、Ｗａｔｓｏｎ  Ｌｉｍｓデータベースによる品質管理に対して計算した。
【０２０４】
薬理動態分析
化合物の血漿クリアランス（ＣＬｐ）を、（Ｗａｔｓｏｎ  ＰＫプログラムを使用して）時間０から無限大まで（ＡＵＣ０〜∞）、血漿濃度−時間の曲線の下の面積で割ることによって、用量として計算した。見かけの半減期を、血漿濃度−時間のデータのｌｏｇの最終フェーズの傾きから推算した。分布体積（Ｖｄｓｓ）を、以下の無隔壁の方法を使用して決定した：
Ｖｄｓｓ＝（用量ＩＶ×ＡＵＭＣ）／（ＡＵＣ０〜∞）２
式中、ＡＵＭＣは、時間０から無限大まで、薬物濃度時間の曲線の第１のモーメントの下の全面積である。バイオアベイラビリティを、用量の差で正規化した、経口及び静脈内投与の後のＡＩＣ０〜∞比として推算した。
【０２０５】
結果
本明細書において記載し、例示した化合物を、上で記載したＨＤＡＣアッセイで試験し、１０μＭ未満のＩＣ５０値を有することが分かった。
【０２０６】
本発明の化合物を、胎児ヘモグロビンの潜在的な誘導剤をスクリーニングするためのモデル系として、Ｋ５６２のＨｂＦ活性アッセイで試験した。結果は、高いナノモルの桁でＥＣ５０を有する、かなりのレポーター蓄積効果を示す。
【０２０７】
結果を以下の表２で報告する。
【０２０８】
【表２Ａ】
0006367800.tif 000037
【表２Ｂ】
0006367800.tif 000038
【表２Ｃ】
0006367800.tif 000039
【表２Ｄ】
0006367800.tif 000040
【表２Ｅ】
0006367800.tif 000041
【表２Ｆ】
0006367800.tif 000042
【表２Ｇ】
0006367800.tif 000043
【表２Ｈ】
0006367800.tif 000044
【表２Ｉ】
0006367800.tif 000045
【表２Ｊ】
0006367800.tif 000046
【表２Ｋ】
0006367800.tif 000047
【表２Ｌ】
0006367800.tif 000048
【表２Ｍ】
0006367800.tif 000049
【表２Ｎ】
0006367800.tif 000050
【表２Ｏ】
0006367800.tif 000051
【表２Ｐ】
0006367800.tif 000052
【表２Ｑ】
0006367800.tif 000053
【表２Ｒ】
0006367800.tif 000054
【表２Ｓ】
0006367800.tif 000055
【０２０９】
Ｋ５６２細胞の赤血球の分化を、本発明の選択した化合物で以下の処理をして調べた。細胞増殖への効果を、増加した濃度の化合物の存在下でのＫ５６２細胞の培養によって、全ての試験した分子に対して最初に決定した。その後、サンプルごとの細胞の数を、３、４、及び５日後に測定した。抗増殖効果について表３で報告するＩＣ５０値を、５日間培養した後の対照未処理Ｋ５６２細胞株で得られた値の５０％の細胞数に減少するために必要な化合物の濃度から計算した。赤血球の分化を、細胞培養の５、６、及び７日後のベンジジン染色によって、及び定量逆転写酵素ポリメラーゼ連鎖反応（ＲＴ−ｑＰＣＲ）によって測定して、γ−グロビンのｍＲＮＡの発現を定量化した。抗増殖効果が異なるため、様々な濃度の試験した化合物を用い；したがって、濃度を選択して、細胞の生存の大きな減少なしに、赤血球の誘導効果を最大化させた。表３において、ベンジジン陽性細胞の％及び培養期間の６日後にＲＴ−ｑＰＣＲでアッセイしたγ−グロビンのｍＲＮＡの増加を報告する。
【０２１０】
【表３】
0006367800.tif 000056
【０２１１】
表４は、公知の誘導剤と比較した、最適化された濃度の化合物２で処理したＫ５６２細胞における赤血球の分化の誘導を報告する。化合物２は、ベンジジン陽性（ヘモグロビン生成）Ｋ５６２細胞の割合の増加を刺激することができる。これは、γ−グロビンｍＲＮＡの発現の増加と関連がある。Ｋ５６２細胞系において、試験したＨＤＡＣ阻害剤は、今まで臨床試験で最も使用されているＨｂＦ誘導剤である酪酸及びヒドロキシウレアに匹敵する誘導効率を示すことに注意されたい。
【０２１２】
【表４】
0006367800.tif 000057
【０２１３】
β−サラセミア及び鎌状赤血球病の治療のための、試験した化合物の潜在的な有用性の検証を、β−サラセミアの患者からの赤血球前駆体細胞を使用して行った。ＢＦＵｅ（Ｂｕｒｓｔ  Ｆｏｒｍｉｎｇ  Ｕｎｉｔｓ）の培養方法は、末梢血のＦｉｃｏｌｌ勾配遠心分離を使用する、有核細胞の単離を含む。その後、有核細胞を、サイトカインを含有する適切な培地で培養し、サイトカインは、ＢＦＵｅ及び続けてＣＦＵｅ（Ｃｏｌｏｎｙ  Ｆｏｒｍｉｎｇ  Ｕｎｉｔｓ）への細胞分裂及び多能性前駆細胞の成熟を促進する。これは、細胞が赤血球に分化させている間の培養のフェーズＩである。フェーズＩ培養条件の５から７日後、細胞を、エリスロポエチン及び幹細胞因子（ＳＣＦ）を含有する新鮮な媒体に移動して、赤血球の成熟を完了させることができる（培養のフェーズＩＩ）。エリスロポエチンは、ＣＦＵｅの、前赤芽球、続けて成熟した赤芽球、最終的には赤血球への分化を引き起こす。試験した物質をフェーズＩＩの５から７日目に培地に加える。細胞が試験した薬剤に曝されている間、ヘモグロビンの生成が始まる。ＨｂＦの生成及びグロビンの連鎖を、ＨＰＬＣを使用して評価する。
【０２１４】
さらに、図１〜２及び表５に示すデータは、化合物２が、β−サラセミアの患者からの赤血球前駆体細胞（ＥｒＰＣ）においてＨｂＦの強力な誘導剤であることを示す。興味深いことに、化合物の活性は、ＥｒＰＣモデル系（Ｆｉｂａｃｈ  ｅｔ  ａｌ．、Ｂｌｏｏｄ  ２００３、１０２、１２７６〜１２８１）における最も有効なＨｂＦ誘導剤のうちの１つである、ミトラマイシン（ＭＴＨ）の最適な濃度によるものよりも高い。これらの実験条件下で達成したＨｂＦ蓄積の量は、過剰なα−グロビン連鎖を抑えるため、臨床的に関連がある。
【０２１５】
【表５】
0006367800.tif 000058
【０２１６】
本発明の化合物を、インビトロ及びインビボの薬理動態試験で評価した。本発明の選択した化合物に対する、ミクロソームの内因性クリアランス及びインビボの用量の結果を、表６で報告する。
【０２１７】
【表６】
0006367800.tif 000059
【０２１８】
一般的に、試験した化合物は、臨床前の種に投与した場合の経口曝露を大きく抑えた。本発明のＨＤＡＣ阻害剤は、新しい種類の赤血球分化誘導剤であると考えることができる。本明細書において、本発明の化合物が、β−サラセミアの患者から単離された赤血球において、胎児ヘモグロビンの生成を誘導することができることを実証した。本実験の証拠により、公知のＨＤＡＣ阻害剤及び治療で現在使用されている化合物と比較した場合、これらの化合物が非常に興味深いものになった。本文脈において、本明細書において報告した化合物の優れた薬理動態特性を考慮して、これらは異常ヘモグロビン症の治療、特にβ−サラセミア及び鎌状赤血球貧血の治療のために、単独又は組み合わせて有用に用いることができる。
【図１】
0006367800.tif 000064
【図２】
0006367800.tif 000065