(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記の式Ｉの化合物であるナフタル尿素誘導体、医薬的に許容され得るその塩、又はその水和物：
【化１】
0006291066.tif 000027
ただし、式Ｉにおいて、
Ｒは、ハロゲン；ヒドロキシル；スルフヒドリル；シアノ；アミノまたはアルキル置換アミノ；ニトリル（ｎｉｔｒｙｌ）；非置換であるか、あるいは、ハロゲン、ヒドロキシル、スルフヒドリル、シアノ、アミノ、アルキル置換アミノおよびニトリル（ｎｉｔｒｙｌ）の１つまたは複数によって置換されるＣ１〜Ｃ６アルキル；非置換であるか、あるいは、ハロゲン、ヒドロキシル、スルフヒドリル、シアノ、アミノ、アルキル置換アミノおよびニトリル（ｎｉｔｒｙｌ）の１つまたは複数によって置換されるＣ１〜Ｃ６アルコキシ；ＣＯＲ５；ＣＯＮＨＲ６；ＣＯＯＲ７；ＮＨＣＯＲ８；ＯＣＯＲ９からなる群から選択され、ただし、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０およびＲ１１は独立して、非置換のＣ１〜Ｃ６アルキルまたはハロゲン置換のＣ１〜Ｃ６アルキルから選択される；
ｍは、０〜５の間における整数である；
ｎは、１〜５の間における整数である；
Ｙは、ハロゲン；ヒドロキシル；アミノまたはアルキル置換アミノ；非置換であるか、あるいは、ハロゲン、ヒドロキシル、スルフヒドリル、シアノ、アミノおよびアルキル置換アミノの１つまたは複数によって置換されるＣ１〜Ｃ３アルコキシ；Ｎおよび／またはＯを含有する５員または６員の複素環；およびＣＲ１０Ｒ１１ＮＨ２からなる群から選択される。
【請求項２】
式Ｉにおいて、Ｒが、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、ヒドロキシル、スルフヒドリル、シアノ、アミノ、メチルアミノ、エチルアミノ、ニトリル（ｎｉｔｒｙｌ）、メチル、エチル、イソプロピル、トリフルオロメチル、メトキシ、トリフルオロメトキシ、エトキシ、ヒドロキシメチル、メルカプトメチル、Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ３、Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ２ＣＨ３、Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＣＨ３、Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ３、ＮＨＣ（＝Ｏ）ＯＣＨ３、ＮＨＣ（＝Ｏ）ＯＣＨ２ＣＨ３、ＮＨＣＨ３、Ｎ（ＣＨ３）２およびＮＨＣＨ２ＣＨ３からなる群から選択されることを特徴とする、請求項１に記載のナフタル尿素誘導体。
【請求項３】
ｍが１または２であることを特徴とする、請求項１または２に記載のナフタル尿素誘導体。
【請求項４】
ｎが２または３であることを特徴とする、請求項１に記載のナフタル尿素誘導体。
【請求項５】
Ｙが、下記の基：
【化２】
0006291066.tif 000028
（式中、Ｒ１０およびＲ１１は独立して、メチル、ハロゲン置換メチル、ハロゲン置換エチル、プロピルまたはハロゲン置換プロピルからなる群から選択される）
からなる群から選択されることを特徴とする、請求項１または４に記載のナフタル尿素誘導体。
【請求項６】
下記の化合物、医薬的に許容され得る塩、および水和物からなる群から選択されるナフタル尿素誘導体：
【化３】
0006291066.tif 000029
【請求項７】
チロシンキナーゼ媒介の疾患または症状を処置する薬物を調製することにおける、請求項１〜６のいずれか一項に記載されるナフタル尿素誘導体の使用。
【請求項８】
チロシンキナーゼ媒介の疾患または症状を処置するための薬剤であって、その有効成分が、請求項１〜６のいずれか一項に記載されるナフタル尿素誘導体を少なくとも含有する薬剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はバイオメディカル分野に属し、具体的には新規な種類のナフチル尿素誘導体およびその医療適用に属する。
【背景技術】
【０００２】
加齢性黄斑変性（ＡＭＤ）が５０歳超の高齢者における失明の第１位の原因である。糖尿病性網膜症（ＤＲ）が若年者および中年者における失明の最も一般的な原因である。臨床モデルまたは動物モデルにより、ＶＥＧＦ／ＫＤＲまたはＰＤＧＦ／ＰＤＧＦＲ−βが患部組織において異常に高いことが明らかにされた。脈絡膜または網膜の病理学的血管新生の重篤度が患部組織におけるＶＥＧＦ／ＫＤＲ発現のレベルとの有意な正の相関を示した。抗ＶＥＧＦ抗体またはチロシンキナーゼ阻害剤は血管新生の形成を効果的に阻害することができる。ＫＤＲおよびＰＤＧＦＲ受容体チロシンキナーゼのリン酸化を薬物開発のための標的として阻害することが、眼の血管新生を処置するための最新の方策となっている。ＶＥＧＦＲ受容体が血管内皮細胞および腫瘍細胞において主に発現される。血管内皮増殖因子受容体−２（ＫＤＲ）が血管新生の形成における重要な役割を果たしている。ＶＥＧＦＲ受容体は内皮細胞および腫瘍細胞において主に発現した。新規なナフチル尿素誘導体血管内皮増殖因子受容体−２（ＫＤＲ）が新血管の形成における重要な役割を果たしている。ＰＤＧＦＲ受容体は血管壁細胞において主に発現する。ＰＤＧＦＲ−β受容体が、血管壁の完全性を維持することにおける大きな役割を果たしている。ＶＥＧＦ増殖因子またはＰＤＧＦ増殖因子は様々な生物学的作用をその受容体キナーゼのリン酸化によって生じさせる。Ｌｕｃｅｎｔｉｓは臨床要求を満たすことができない。ウェット型ＡＭＤ患者の６０％が依然としてＬｕｃｅｎｔｉｓ療法に応答することができず、潜在的に重篤な眼の合併症を引き起こす１回／月の眼内注入を必要としている。抗ＶＥＧＦ単独療法の効力は限られている。Ｌｕｃｅｎｔｉｓの価格は非常に高価であり、患者は毎年１２回の注射を必要とし、２８０００米国ドル（約１８００００中国元）の年間支払いを負担している。したがって、信頼性が高く、投与が容易であり、かつ、より安価な薬物を開発することが、世界中の主要な製薬企業の目的の１つとなっている。それはまた、満たされることが切望される医療適用空白の１つでもある。
【０００３】
臨床研究者および科学研究者は、異常なＫＤＲ発現および細胞内シグナル伝達が重要な役割を病理学的な脈絡膜血管新生または網膜血管新生の形成において果たすことを完全に証明した。ＫＤＲがその特異的なリガンドのＶＥＧＦと結合した後、受容体チロシンキナーゼが自己リン酸化され、一連の細胞内シグナル伝達を誘導し、その結果、血管内皮細胞の増殖および遊走ならびに血管形成が引き起こされる。したがって、ＫＤＲ受容体チロシンキナーゼのリン酸化を阻害することにより、ＫＤＲによって誘導される異常な細胞内シグナル伝達を効果的に阻害することができ、また、病理学的な脈絡膜血管新生または網膜血管新生を軽減させることができ、かつ、それにより、血管新生によって誘導される脈絡膜出血または網膜出血、瘢痕化および線維症によって引き起こされる重度の視覚喪失が防止される。例えば、米国ＦＤＡによって承認された薬物であるＬｕｃｅｎｔｉｓまたはＭａｃｕｇｅｎ（これらはともにＶＥＧＦ抗体である）が、加齢性黄斑変性を処置するために使用される。そのうえ、臨床データでは、ＬｕｃｅｎｔｉｓまたはＭａｃｕｇｅｎの眼内注入は、加齢性黄斑変性の患者の視力がさらに衰えることを、ＶＥＧＦ／ＫＤＲ発現により誘発される異常な細胞内シグナル伝達を阻害することによって効果的に阻止し得ることが明らかにされている。加えて、ＰＤＧＦＲはまた、血管新生の形成に関与し、ＰＤＧＦＲ受容体チロシンキナーゼのリン酸化を阻害しており、このことは、病理学的な新血管の変性変化および萎縮を生じさせる、病理学的な脈絡膜血管新生または網膜血管新生の周皮細胞の自己アポトーシスを引き起こすことができ、その結果、視覚が効果的に改善されるようになる。したがって、ＶＥＧＦ／ＫＤＲおよび／またはＰＤＧＦ／ＰＤＧＦＲの異常な発現およびシグナル伝達を抑制することを目標とする様々な薬物設計が、加齢性黄斑変性および糖尿病性網膜症を処置する新しい方策となっている。
【０００４】
加えて、多くの腫瘍の発生、発達および転移と、腫瘍血管新生の形成とが、チロシンキナーゼの異常な発現と密接に関連づけられている。具体的には、いくつかのチロシンキナーゼ受容体が固形腫瘍細胞において異常に発現しており、この場合、血管内皮細胞増殖因子受容体（ＶＥＧＦＲ）が多くの腫瘍細胞および腫瘍血管内皮細胞の両方において高発現し、血小板由来増殖因子受容体（ＰＤＧＦＲ）が腫瘍間質線維芽細胞において異常に発現する。チロシンキナーゼのリガンドおよび受容体によって形成されるオートクリンループが直接、腫瘍細胞の発生および発達に関与しており、例えば、血管内皮細胞増殖因子受容体（ＶＥＧＦＲ）がメラノーマに存在し、血小板由来増殖因子受容体（ＰＤＧＦＲ）が神経膠腫に存在し、幹細胞増殖因子受容体（ＫＩＴ）が小細胞肺癌に存在する。加えて、類似するループが、メラノーマ、髄膜腫、神経内分泌腫瘍、卵巣癌、前立腺癌、肺癌および膵臓癌において存在する。これらのループが腫瘍の発生および発達と密接に連係している。幹細胞増殖因子（Ｋｉｔ）は幹細胞増殖因子受容体（ＳＣＦＲ、ｃ−ＫＩＴ）のリガンドである。ＫＩＴ／ＳＣＦＲは、身体の造血機能ならびにマスト細胞およびカハール間質細胞の発達との非常に密接な関係を有する。研究では、ＫＩＴ／ＳＣＦＲの３０を超える機能獲得変異型が存在することが見出された（これらは、多くの腫瘍の発生および発達を直接に誘導するものである）。さらに、ＫＩＴ／ＳＣＦＲのオートクリンループが小細胞肺癌患者の７０％に存在しており、癌が増殖因子とは無関係に発達することを助けている。加えて、固形腫瘍の発生、発達および転移は、腫瘍が成長するための不可欠な養分および酸素を提供する腫瘍血管新生の形成に依存している。腫瘍の血管形成は、癌細胞の侵入、遊走および増殖のための重要なプロセスである。血管内皮細胞増殖因子受容体（ＶＥＧＦＲ）ファミリーおよび血小板由来増殖因子受容体（ＰＤＧＦＲ）ファミリーが、腫瘍の発生および発達ならびに腫瘍血管形成の形成と直接に関連づけられている。血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）は、最も強力な、血管浸透性の内皮細胞特異的なマイトジェンとして知られているものであり、重要な役割を内皮細胞の増殖、遊走および血管形成において果たしている。ＶＥＧＦの発現レベルは腫瘍組織の血管新生化度との明白な正の相関を示す。ＶＥＧＦは、異なるシグナル伝達経路を有する内皮細胞における高親和性受容体のＶＥＧＦＲ−１およびＫＤＲに対して主に作用し、その結果、チロシンキナーゼがリン酸化されて、その生物学的作用を果たすようになる。ＫＤＲが、重要な役割を腫瘍の成長、転移および血管形成において果たしている。血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）およびその受容体（ＰＤＧＦＲ）が多数の腫瘍の病理発生に関わり、重要な役割を血管形成において果たしている。血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）は、その細胞生物学的作用を、その受容体（ＰＤＧＦＲ）を介して示す。ＰＤＧＦＲは、血管壁周皮細胞および血管平滑筋細胞の増殖および遊走を調節することによって、血管壁の完全性を維持し、腫瘍血管新生の形成を促進させる。そのうえ、腫瘍の成長が、腫瘍内の微小環境を変化させることによって促進させられる。
【０００５】
チロシンキナーゼの異常な発現が、腫瘍の発生、発達、転移および血管新生と密接に関連づけられるために、チロシンキナーゼを標的とする薬物研究および薬物開発が、世界中における抗腫瘍薬物の研究の中心となっている。とりわけ、腫瘍血管形成の形成を阻害して、また、腫瘍の栄養供給および遊走経路を遮断して、腫瘍の成長および転移を阻止するために血管新生を標的とすることが、癌を処置するための新しい方策である。ＫＤＲ受容体またはＰＤＧＦＲ受容体の異常な発現が重要な役割を腫瘍血管新生の形成において果たしており、したがって、ＫＤＲ受容体またはＰＤＧＦＲ受容体が抗腫瘍薬物療法の最も理想的な標的となっている。さらには、ＫＤＲおよびＰＤＧＦＲ受容体チロシンキナーゼを主に阻害する２つの抗腫瘍薬物、すなわち、ソラフェニブ（Ｓｏｒａｆｅｎｉｂ）およびスニチニブ（Ｓｕｎｉｔｉｎｉｂ）（ＳＵ１１２４８）（これらは、米国食品医薬品局（ＦＤＡ）によって承認されたものである）は、臨床実施における大きい治癒効果およびより少ない副作用を伴うそれらの抗腫瘍治療効果を完全に証明している。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、チロシンキナーゼ阻害剤として使用することができ、かつ、ＶＥＧＦＲ２受容体チロシンキナーゼおよびＰＤＧＦＲ−β受容体チロシンキナーゼのリン酸化をナノモル濃度レベルで著しく阻害することができるナフチル尿素誘導体を提供することが意図される。
【０００７】
本発明はまた、チロシンキナーゼ媒介の疾患または症状を処置する薬剤を調製することにおける上記ナフチル尿素誘導体の適用を提供する。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
上記課題を解決するために、本発明は一方では、下記の式Ｉの化合物であるナフタル尿素誘導体、および、医薬的に許容され得る塩、水和物、プロドラッグ、または、どのようなタイプの代謝であってもそれらの代謝で産生される代謝産物を提供する：
【化１】
0006291066.tif 000002
ただし、式Ｉにおいて、
Ｒは、ハロゲン；ヒドロキシル；スルフヒドリル；シアノ；アミノまたはアルキル置換アミノ；ニトリル（ｎｉｔｒｙｌ）；非置換であるか、あるいは、ハロゲン、ヒドロキシル、スルフヒドリル、シアノ、アミノ、アルキル置換アミノおよびニトリル（ｎｉｔｒｙｌ）の１つまたは複数によって置換されるＣ１〜Ｃ６アルキル；非置換であるか、あるいは、ハロゲン、ヒドロキシル、スルフヒドリル、シアノ、アミノ、アルキル置換アミノおよびニトリル（ｎｉｔｒｙｌ）の１つまたは複数によって置換されるＣ１〜Ｃ６アルコキシ；ＣＯＲ５；ＣＯＮＨＲ６；ＣＯＯＲ７；ＮＨＣＯＲ８；ＯＣＯＲ９からなる群から選択される；
Ｍは、０〜５の間における整数である；
Ｎは、１〜５の間における整数である；
Ｙは、ハロゲン；ヒドロキシル；アミノまたはアルキル置換アミノ；非置換であるか、あるいは、ハロゲン、ヒドロキシル、スルフヒドリル、シアノ、アミノおよびアルキル置換アミノの１つまたは複数によって置換されるＣ１〜Ｃ３アルコキシ；Ｎおよび／またはＯを含有する５員または６員の複素環；ＣＨＲ１０Ｒ１１ＮＨ２からなる群から選択される。Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０およびＲ１１は独立して、非置換のＣ１〜Ｃ６アルキルまたはハロゲン置換のＣ１〜Ｃ６アルキルから選択される。
【０００９】
本発明のさらなる実施によれば、式Ｉにおいて、Ｒは好ましくは、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、ヒドロキシル、スルフヒドリル、シアノ、アミノ、メチルアミノ、エチルアミノ、ニトリル（ｎｉｔｒｙｌ）、メチル、エチル、イソプロピル、トリフルオロメチル、メトキシ、トリフルオロメトキシ、エトキシ、ヒドロキシメチル、メルカプトメチル、Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ３、Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ２ＣＨ３、Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＣＨ３、Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ３、ＮＨＣ（＝Ｏ）ＯＣＨ３、ＮＨＣ（＝Ｏ）ＯＣＨ２ＣＨ３、ＮＨＣＨ３、Ｎ（ＣＨ３）２およびＮＨＣＨ２ＣＨ３からなる群から選択される。
【００１０】
本発明の１つの実施形態によれば、式Ｉにおいて、特に、ｍは、０、１、２、３、４または５であることが可能である。好ましくは、ｍは１または２である。式Ｉにおいて、特に、ｎは、１、２、３、４または５であることが可能である。好ましくは、ｎは２または３である。
【００１１】
好ましくは、Ｙは、下記の基からなる群から選択される；
【化２】
0006291066.tif 000003
式中、Ｒ１０およびＲ１１は独立して、メチル、ハロゲン置換メチル、ハロゲン置換エチル、プロピルまたはハロゲン置換プロピルからなる群から選択される。
【００１２】
具体的かつ好ましい局面によれば、ＹはＣＨ（ＣＨ３）２ＮＨ２である。
【００１３】
式Ｉの典型的な化合物を下記のように列挙することができる：
【化３】
0006291066.tif 000004
【００１４】
本発明の別の局面により、別のナフタル尿素誘導体、すなわち、下記の式ＩＩの化合物、および、医薬的に許容され得る塩、水和物、プロドラッグ、または、どのようなタイプの代謝であってもそれらの代謝で産生される代謝産物が提供される：
【化４】
0006291066.tif 000005
ただし、式ＩＩにおいて、
Ｒは、ハロゲン；ヒドロキシル；スルフヒドリル；シアノ；アミノまたはアルキル置換アミノ；ニトリル（ｎｉｔｒｙｌ）；非置換であるか、あるいは、ハロゲン、ヒドロキシル、スルフヒドリル、シアノ、アミノ、アルキル置換アミノおよびニトリル（ｎｉｔｒｙｌ）の１つまたは複数によって置換されるＣ１〜Ｃ６アルキル；非置換であるか、あるいは、ハロゲン、ヒドロキシル、スルフヒドリル、シアノ、アミノ、アルキル置換アミノおよびニトリル（ｎｉｔｒｙｌ）の１つまたは複数によって置換されるＣ１〜Ｃ６アルコキシ；ＣＯＲ５；ＣＯＮＨＲ６；ＣＯＯＲ７；ＮＨＣＯＲ８；ＯＣＯＲ９からなる群から選択され、ただし、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９は独立して、非置換のＣ１〜Ｃ６アルキルまたはハロゲン置換のＣ１〜Ｃ６アルキルから選択される；
ｍは、０〜５の間における整数である；
【００１５】
本発明の具体的な実施形態によれば、式ＩＩにおいて、ｍは、０、１、２、３、４または５であることが可能である。好ましくは、ｍは１または２であり、かつ、Ｒが、Ｃ１〜Ｃ６アルキルおよびハロゲンから選択される。より好ましくは、ｍが１であるときには、Ｒが、Ｃ１〜Ｃ６アルキルから選択され、ｍが２であるときには、Ｒが、Ｃ１〜Ｃ６アルキルおよびハロゲンから選択される。
【００１６】
式ＩＩの典型的な化合物が下記のように列挙される：
【化５】
0006291066.tif 000006
【００１７】
本発明の１つの実施形態によれば、化合物には、単一の化合物のみが含まれるだけではなく、化合物の構造が式の要件を満たす様々な化合物の混合物、同様にまた、同じ化合物の種々の異性体（例えば、ラセミ体、エナンチオマーおよびジアステレオマーなど）もまた含まれる。医薬的に許容され得る塩には、塩酸塩、臭化水素酸塩、リン酸塩、硫酸塩、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、マレイン酸塩、メタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、メチルベシラート、コハク酸塩、フマル酸塩、酒石酸塩、没食子酸塩およびクエン酸塩などが含まれるが、これらに限定されない。「式Ｉまたは式ＩＩの化合物のプロドラッグ」は、適切な方法を使用することによって投与されたときには志願者における代謝反応または化学反応によって式Ｉまたは式ＩＩの少なくとも１つの化合物あるいはその塩に転換され得る物質を示す。
【００１８】
本発明はまた、チロシンキナーゼ媒介の疾患または症状を処置する薬物を調製することにおける上記ナフタル尿素誘導体の使用を提供する。
【００１９】
チロシンキナーゼ媒介の疾患または症状には、病理学的血管新生が伴う悪性腫瘍および眼疾患が含まれる。
【００２０】
本発明のさらに別の局面により、チロシンキナーゼによって媒介される疾患を処置するための薬剤であって、その有効成分が本発明の上述のナフタル尿素誘導体を少なくとも含有する薬剤が提供される。
【００２１】
本発明の具体的な実施形態によれば、チロシンキナーゼによって媒介される疾患または症状には、病理学的血管新生が伴う悪性腫瘍および眼疾患が含まれる。悪性腫瘍には、腎臓癌、肝臓癌、結腸癌、消化管間質腫瘍、肺癌、乳癌、膵臓癌、神経グリア腫瘍、リンパ癌、線維肉腫、卵巣癌、白血病および前立腺癌などが含まれるが、これらに限定されない。眼疾患には、加齢性黄斑変性、糖尿病性網膜症および血管新生緑内障、ならびに、他の眼疾患が含まれる。
【００２２】
本発明による化合物は、有機合成の技術分野における従来の合成方法を使用することによって得ることができる。
【００２３】
上述の技術スキームを使用するため、本発明は、先行技術を上回る下記の利点を有する：
【００２４】
本発明は、チロシンキナーゼ阻害活性を有する新規なチロシンキナーゼ阻害剤であって、そのナフチル構造が分子の中心部分の脂肪向性を増大させ、したがって、分子と受容体との間の結合相互作用が増大するチロシンキナーゼ阻害剤を提供する。本化合物によって保持される水素結合相互作用をもたらすことができるナフタル尿素構造との間における水素結合により、分子と受容体との間の結合相互作用がさらに増大させられる。チロシンキナーゼの強い阻害活性のために、本化合物は、様々な悪性腫瘍および眼疾患を処置するために、例えば、加齢性黄斑変性疾患、糖尿病性網膜症および血管新生緑内障などを処置するために使用することができる。加えて、本発明のナフタル尿素誘導体、具体的には式Ｉを有するナフタル尿素誘導体は、水における大きい溶解性を有する。
【発明を実施するための形態】
【００２５】
下記において、本発明を、具体的な実施形態と一緒に詳しく説明するが、しかしながら、本発明はそのような実施形態に限定されない。
【００２６】
式Ｉおよび式ＩＩのナフタル尿素誘導体の調製
化合物（ＩＩＩ）、化合物（ＩＶ）、化合物（Ｖ）、化合物（ＶＩ）、化合物（ＶＩＩ）および化合物（ＶＩＩＩ）を例として、様々なナフタル尿素誘導体の調製を記載する。
【００２７】
上記標的化合物の逆合成分析によって、化合物（ＩＩＩ）、化合物（ＩＶ）および化合物（Ｖ）は、それぞれ合成される４つのセグメント、すなわち、セグメントＡ、セグメントＢ、セグメントＣおよびセグメントＤに分割することができた。
【化６】
0006291066.tif 000007
【００２８】
実施例１：セグメントＡの合成
【化７】
0006291066.tif 000008
【００２９】
１．１  化合物Ａ２の合成
窒素保護下において、１５０ｍＬの無水ＴＨＦおよび４９．１ｇのジイソプロピルアミンを２Ｌの三つ口フラスコに加え、溶液を−５℃に冷却した。１９４ｍＬの２．５Ｍ  ｎ−ＢｕＬｉ溶液を滴下して加え、その間、温度を０℃以下に保った。滴下終了後、系をその温度で保ち、１時間反応させ、その後、溶液を−７０℃に冷却した。５００ｍＬのＴＨＦに溶解される１００ｇの３，５−ジブロモピリジンを、温度を−７０℃以下で保ちながら滴下して加え、滴下終了後、系をその温度で保ち、２時間撹拌した。２５０ｍＬのＴＨＦに溶解される６１．６ｇのＤＭＦを、温度を−７０℃以下で保ちながら、得られた系に滴下して加え、２時間撹拌した。反応が、ＴＬＣにより調べると完了していた。反応液を２．５Ｌの飽和重炭酸ナトリウム溶液に加え、酢酸エチルによって抽出した（８００ｍＬ、３回）。有機相を一緒にし、飽和塩水によって洗浄し、無水硫酸ナトリウムによって乾燥し、濃縮し、石油エーテルを用いて再結晶して、黄色の固体（すなわち、化合物Ａ２）を得た（５０ｇ、４５％の収率）。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＤＯ−ｄ６）（ｐｐｍ）８．９１（ｓ，２Ｈ），１０．０９（ｓ，１Ｈ）．
【００３０】
１．２  化合物Ａ３の合成
６２ｇの化合物Ａ２、１７．１ｇのヒドロキシルアミン塩酸塩、１５．６ｇの炭酸ナトリウム、４００ｍＬのメタノールおよび２００ｍＬの水を１Ｌの三つ口フラスコにそれぞれ加え、室温で２時間反応させた。反応が、ＴＬＣにより調べると実質的に完了していた。反応液をろ過し、ろ過後のケークを一つ口フラスコに加え、添加後、１Ｌの酢酸エチルにおいて溶解して清澄化するために撹拌し、その後、層を形成させて、下側の水層を除いた。有機層を無水硫酸ナトリウムによって乾燥し、ろ過し、濃縮乾固した。２００ｍＬの石油エーテルを加え、得られた系を十分に撹拌し、ろ過し、乾燥して、白色の固体（すなわち、化合物Ａ３）を得た（５５ｇ、８４％の収率）。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＤＯ−ｄ６）（ｐｐｍ）８．１６（ｓ，１Ｈ），８．８１（ｓ，２Ｈ），１２．２１（ｓ，１Ｈ）．
【００３１】
１．３  化合物Ａ４の合成
５５ｇの化合物Ａ３を１Ｌの三つ口フラスコに加え、５５０ｍＬのＤＭＦに溶解した。溶液を氷水浴に置き、３５ｇのトリホスゲンを少量ずつ加え、その後、３０分間反応させた。反応は、ＴＬＣにより調べると実質的に完了しており、１Ｌの水を加えて、反応を停止させた。系をジクロロメタンにより抽出した（５００ｍＬ、３回）。有機相を一緒にし、飽和塩水によって２回洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４によって乾燥し、濃縮し、石油エーテルとともにすりつぶし、ろ過して、肌色の固体（すなわち、化合物Ａ４）を得た（４６ｇ、９０％の収率）。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）（ｐｐｍ）８．８４（ｓ，２Ｈ）．
【００３２】
１．４  セグメントＡの合成
４５ｇの化合物Ａ４、５１．１ｇの８５％ヒドラジン水和物および１２５ｍＬのｎ−ブタノールを５００ｍＬの一つ口フラスコに加え、加熱し、２４時間還流した。反応が、ＴＬＣにより調べると実質的に完了していた。反応液をほぼ乾燥するまで濃縮し、ろ過した。フィルターケークを２００ｍＬの水とともにすりつぶし、ろ過した。フィルターケークを１００ｍＬのメタノールとともにすりつぶし、ろ過し、乾燥して、オフホワイトの固体（すなわち、セグメントＡ）を得た（２６ｇ、７１％の収率）。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＤＯ−ｄ６）（ｐｐｍ）５．３５（ｓ，２Ｈ），８．１０（ｓ，１Ｈ），８．７２（ｓ，１Ｈ），１２．４３（ｓ，１Ｈ）．
【００３３】
実施例２：セグメントＢの合成
【化８】
0006291066.tif 000009
【００３４】
２．１  化合物Ｂ１の合成
氷水浴の条件のもと、３６．３ｇのアクリル酸メチルを３００ｍＬのジクロロメタンに溶解し、その後、５００ｍＬの三つ口フラスコに加えた。溶液を０〜５℃の温度で保ち、３０ｇのピロリジンをこの溶液に加え、その後、得られた溶液を室温に加熱した。２時間後、反応は、ＴＬＣにより調べると完了していた。系を真空濃縮して、塩化メチレンを除いて、６４ｇの無色の油状物質（すなわち、化合物Ｂ１）を得た（９６％の収率）。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）（ｐｐｍ）１．６０−１．７０（ｍ，４Ｈ），２．４１−２．４８（ｍ，６Ｈ），２．６２−２．６５（ｍ，２Ｈ），３．５９（ｓ，３Ｈ）．
【００３５】
２．２  化合物Ｂ２の合成
氷塩浴の条件のもと、３００ｍＬのテトラヒドロフランを５００ｍＬの三つ口フラスコに加え、その後、８ｇのＬｉＡｌＨ４を、０℃を超えない温度を保ちながら少量ずつ加えた。３０ｍＬのＴＨＦに溶解される３０ｇの化合物Ｂ１の溶液を滴下して加えると、ガスが激しく放出された。系を自然に室温に温めた。２時間後、反応は、ＴＬＣにより調べると完了していた。１２％の水を含有する１００ｍＬのＴＨＦ溶液を加えると、ガスが激しく放出された。その後、３０ｍＬの１５％ＮａＯＨ溶液を加えると、ガスが少し放出された。系を４０ｍＬの水とともに加え、その後、７０ｍＬのジクロロメタンにより３回抽出した。有機相を一緒にし、塩水により洗浄し、無水硫酸ナトリウムにより乾燥し、濃縮乾固して、１６ｇの黄色の固体（すなわち、化合物Ｂ２）を得た（６５％の収率）。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）（ｐｐｍ）１．７０−１．７９（ｍ，６Ｈ），２．５６−２．５９（ｍ，４Ｈ），２．７２−２．７５（ｍ，２Ｈ），３．８１（ｔ，Ｊ＝５．６，２Ｈ）．
【００３６】
２．３  化合物Ｂ４の合成
１Ｌの三つ口フラスコにおいて、３９．４ｇのジイソプロピルアミンを１００ｍＬのＴＨＦに溶解し、−５℃に冷却した。窒素保護下において、１４８．６ｍＬの２．５Ｍ  ｎ−ブチルリチウム溶液を系に加え、溶液を０℃で１時間撹拌し、その後、−７０℃に冷却した。４５０ｍＬのＴＨＦに溶解される６９．２ｇの２−フルオロ−４−ブロモアニソールの溶液を加え、その後、２時間撹拌した。１５０ｍＬのＴＨＦに溶解される４９．３ｇのＤＭＦの溶液を滴下して加え、２時間撹拌した。反応が、ＴＬＣにより調べると完了していた。４Ｌの重炭酸ナトリウム溶液を加え、溶液を１Ｌの酢酸エチルによって２回抽出した。有機相を一緒にし、飽和食塩水により洗浄し、無水硫酸ナトリウムによって乾燥し、濃縮して、大部分の酢酸エチルを除いた。３００ｍＬの石油エーテルを、撹拌を行いながら加え、系を３０分間撹拌し、ろ過して、白色の綿状物を得た。この綿状物を乾燥して、５３ｇの化合物Ｂ４を得た（６７．４％の収率）。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）（ｐｐｍ）３．８９（ｓ，３Ｈ），７．４０−７．４４（ｍ，１Ｈ），７．５６−７．５８（ｍ，１Ｈ），１０．１８（ｓ，１Ｈ）．
【００３７】
２．４  化合物Ｂ５の合成
機械的撹拌のもと、５２．７ｇの化合物Ｂ４、１５．８ｇのＮａ２ＣＯ３、１０００ｍＬのメタノールおよび５００ｍＬの水を２Ｌの一つ口フラスコにそれぞれ加えた。一様に撹拌した後、１７．３ｇのヒドロキシルアミン塩酸塩をゆっくり加えた。２時間にわたる撹拌および反応を行った後、反応は、ＴＬＣにより調べると完了していた。１．２Ｌの水を加え、溶液を１．５Ｌの酢酸エチルにより２回抽出した。飽和食塩水により洗浄し、無水硫酸ナトリウムによって乾燥し、濃縮して、大部分の溶媒を除き、石油エーテルとともにすりつぶして、白色の固体、すなわち、５４ｇの化合物Ｂ５を得た（１００％の収率）。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）（ｐｐｍ）３．８６（ｓ，３Ｈ），７．１８（ｔ，Ｊ＝８．８，１Ｈ），７．４７−７．５０（ｍ，１Ｈ），８．１３（ｓ，１Ｈ），１１．８６（ｓ，１Ｈ）．
【００３８】
２．５  化合物Ｂ６の合成
４４．５ｇの化合物Ｂ５および２５０ｍＬのＤＭＦを５００ｍＬの三つ口フラスコに加えた。氷水浴の条件のもと、かつ、温度を３５℃未満に保ちながら、３１．９ｇのトリホスゲンをゆっくり加えた。反応は激しく、ガス放出性であった。３０分間にわたる撹拌および反応を行った後、反応は、ＨＰＬＣにより調べると完了していた。反応溶液を１Ｌの水に加え、ろ過し、固相を４５０ｍＬの塩化メチレンに溶解し、濃縮して、大部分の溶媒を除き、石油エーテルとともにすりつぶして、３９ｇの白色の固体粉末（すなわち、化合物Ｂ６）を得た（９５％の収率）。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）（ｐｐｍ）３．９４（ｓ，３Ｈ），７．１０（ｔ，Ｊ＝８．８，１Ｈ），７．４０−７．４３（ｍ，１Ｈ）．
【００３９】
２．６  化合物Ｂ７の合成
温度を−１０℃で保ちながら、かつ、窒素保護下において、３３．６ｇの化合物Ｂ６および２４０ｍＬのジクロロメタンを１Ｌの三つ口フラスコに加えた。２４０ｍＬのジクロロメタンに溶解される５４．８ｇのＢＢｒ３の溶液を滴下して加えた。添加終了後、溶液を自然に室温に温め、２４時間反応させ、１ＮのＢＢｒ３を加えた。系を２４時間にわたって撹拌し、反応させた。反応が、ＴＬＣにより調べると完了していた。氷水浴の条件のもと、３Ｎ塩酸を加えた。多量のガスが放出され、熱が激しく放出された。系を８００ｍＬのジクロロメタンにより２回抽出し、飽和食塩水により洗浄し、濃縮して、大部分の溶媒を除き、ＰＥ（石油エーテル）とともにすりつぶして、２９ｇの明緑色の固体粉末（すなわち、化合物Ｂ７）を得た（９２％の収率）。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＤＯ−ｄ６）（ｐｐｍ）７．２３−７．２７（ｍ，１Ｈ），７．４９−７．５１（ｍ，１Ｈ），１１．０６（ｓ，１Ｈ）．
【００４０】
２．７  化合物Ｂ８の合成
２８．５ｇの化合物Ｂ７、１６ｇの化合物Ｂ２、５１．９ｇのトリフェニルホスフィンおよび５００ｍＬのＴＨＦを窒素保護下において１Ｌの三つ口フラスコにそれぞれ加え、０℃に冷却した。温度を０℃未満に保ちながら、３４．５ｇのＤＥＡＤを３０分以内に滴下して加えた。添加完了後、系を自然に室温に温め、２．５時間反応させた。反応が、ＴＬＣにより調べると実質的に完了していた。溶液を乾固するまで濃縮して、溶媒を除き、２００ｍＬのエーテルとともに加え、一晩凍結した。得られた系をろ過し、母液を濃縮し、カラムクロマトグラフィーによって精製して、３３ｇの黄色の油状物質（すなわち、化合物Ｂ８）を得た（７７％の収率）。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＤＯ−ｄ６）（ｐｐｍ）１．６６−１．７０（ｍ，２Ｈ），１．８９−１．９５（ｍ，２Ｈ），２．４８−２．５８（ｍ，８Ｈ），４．１７（ｔ，Ｊ＝６．０，２Ｈ），７．５１−７．５６（ｍ，１Ｈ），７．６３−７．６５（ｍ，１Ｈ）．
【００４１】
２．８  セグメントＢの合成
９０ｇの化合物Ｂ８、８１．２ｇの８５％ヒドラジン水和物および２３０ｍＬのｎ−ブタノールを５００ｍＬの一つ口フラスコに加えた。溶液を１００℃に加熱し、一晩還流した。反応が、ＴＬＣにより調べると実質的に完了していた。ｎ−ブタノールを濃縮乾固し、１Ｌの水を加えた。得られた系をＤＣＭ（ジクロロメタン）により抽出した（５００ｍＬ、６回）。有機相を一緒にし、飽和食塩水により洗浄し、濃縮乾固し、ＰＥとともにすりつぶして、４０ｇの黄色の固体を得た。１２０ｍＬのメタノールを加えた。系を５０℃に加熱し、１時間撹拌し、その後、室温に冷却し、ろ過し、乾燥して、３８ｇの白色の固体（すなわち、セグメントＢ）を得た（４１％の収率、９９％を超える純度）。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＤＯ−ｄ６）（ｐｐｍ）１．７４（ｍ，４Ｈ），１．９８（ｍ，２Ｈ），２．６１−２．７５（ｍ，６Ｈ），４．１３（ｍ，２Ｈ），５．０８（ｓ，２Ｈ），６．６２（ｄ，２Ｈ），６．９４（ｄ，２Ｈ），１２．０６（ｓ，１Ｈ）．
【００４２】
実施例３：セグメントＣの合成
【化９】
0006291066.tif 000010
【００４３】
３．１  化合物Ｃ２の合成
４．９ｇのトリホスゲンおよび２５ｍＬのメチルベンゼンを５００ｍＬの一つ口フラスコにそれぞれ加え、室温で溶解して清澄化するために撹拌した。５ｍＬのメチルベンゼンに溶解される３．７５ｇの２−フルオロ−５−メチルアニリンの溶液を滴下して加え、滴下期間中に、多量の固体が生じた。添加完了後、系を室温で３０分間撹拌し、その後、加熱還流し、３時間反応させた（還流期間中、反応溶液は透明であった）。得られた溶液を冷却し、乾固するまで真空濃縮して、３．８ｇの無色の油状物質（すなわち、化合物Ｃ２）を得た。この油状物質を、さらに処理することなく、次工程においてそのまま使用した。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）（ｐｐｍ）７．０６−７．１２（ｍ，２Ｈ），７．２２−７．２７（ｍ，１Ｈ）．
【００４４】
３．２  化合物Ｃ４の合成
５０ｇの１−ナフチルアミン、２５０ｍＬのジオキサンおよび２５０ｍＬのピリジンを１Ｌの三つ口フラスコにそれぞれ加え、一様に撹拌し、−５℃〜０℃に冷却した。１３２ｇのヨウ素を少量ずつ加え、充填期間中は、温度を、０℃未満であるように制御した。充填終了後、系を０℃〜５℃で４時間〜５時間にわたって撹拌し、反応させた。原料が、ＴＬＣにより調べると完全に反応していた。３００ｍＬの５％チオ硫酸ナトリウム水溶液を加えて、反応を停止させた。系をジクロロメタンによって抽出した（２５０ｍＬ、３回）。混合有機相を一緒にし、水により洗浄し（２５０ｍＬ、１回）、飽和食塩水によって洗浄し（２５０ｍＬ、１回）、無水硫酸ナトリウムによって乾燥し、乾固するまで真空濃縮して、暗紫色の油状物質を得た。この油状物質を、ジクロロメタンおよび石油エーテルを用いて再結晶させて、明紫色の固体（すなわち、化合物Ｃ４）を得た（４０ｇ）。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）（ｐｐｍ）６．０１（ｓ，２Ｈ），６．５２（ｄ，１Ｈ），７．５３−７．５７（ｍ，２Ｈ），７．７４（ｄ，１Ｈ），７．８３（ｄ，１Ｈ），８．０７（ｄ，１Ｈ）．
【００４５】
３．３  化合物Ｃ５の合成
７．１２ｇの化合物Ｃ４および５０ｍＬのジクロロメタンを１００ｍＬの一つ口フラスコに加え、溶解して清澄化した。４．０ｇの化合物Ｃ２を室温で滴下して加え、得られた溶液を室温で一晩撹拌して、多量の固体を生じさせた。系を、ポンプを使用してろ過し、ろ過後のケークを、石油エーテルを用いて浸漬洗浄し、ポンプを使用して乾固して、１２．５ｇの灰白色の固体（すなわち、化合物Ｃ５）を得た。
【００４６】
３．４  セグメントＣの合成
１２．５ｇの化合物Ｃ５、９．１ｇの化合物Ｃ６、０．０７５ｇのテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム、１２．３ｇの炭酸カリウムおよび１００ｍＬのＤＭＳＯを２５０ｍＬの一つ口フラスコにそれぞれ加えた。窒素保護下において、得られた溶液を８０℃〜８５℃に加熱し、３時間〜４時間反応させた。反応が、ＴＬＣにより調べると完了していた。系を冷却し、１５０ｍＬの水を加えて、反応を停止させた。溶液を酢酸エチルにより抽出した（１５０ｍＬ、３回）。有機層を飽和食塩水により洗浄し（１５０ｍＬ、２回）、無水硫酸ナトリウムによって乾燥し、活性炭により脱色し、濃縮して約２００ｍＬの酢酸エチルを残し、冷凍状態で結晶化させ、ろ過し、石油エーテルおよび酢酸エチルを用いて再結晶して、６．８ｇの灰色の固体粉末（すなわち、セグメントＣ）を得た。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）（ｐｐｍ）１．３８（ｓ，１２Ｈ），２．３０（ｓ，３Ｈ），６．８３（ｔ，Ｊ＝５．６，１Ｈ），７．１２−７．１６（ｍ，１Ｈ），７．６１（ｍ，１Ｈ），７．９７（ｄ，１Ｈ），８．１０（ｄ，１Ｈ），８．２０−８．２４（ｍ，２Ｈ），８．７４（ｄ，１Ｈ），９．１３（ｓ，１Ｈ），９．３２（ｓ，１Ｈ）．
【００４７】
実施例４．セグメントＤの合成
【化１０】
0006291066.tif 000011
【００４８】
４．１  化合物Ｄ２の合成
３２．６ｇのトリホスゲンおよび２００ｍＬのメチルベンゼンを５００ｍＬの一つ口フラスコにそれぞれ加え、室温で溶解して清澄化するために撹拌した。１０ｍＬのメチルベンゼンに溶解される２１．４３ｇのｍ−メチルアニリンの溶液を滴下して加えると、滴下期間中に、多量の固体が生じた。添加完了後、系を室温で３０分間撹拌し、その後、加熱還流し、３時間反応させた（還流期間中、反応溶液は透明であった）。得られた溶液を冷却し、乾固するまで真空濃縮して、４１ｇの褐色の油状物質を得た。この油状物質を、オイルポンプによる高真空のもとで減圧蒸留して、１６ｇの無色かつ透明な油状物質（すなわち、化合物Ｄ２）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）（ｐｐｍ）７．０２−７．０７（ｍ，２Ｈ），７．２４−７．２８（ｍ，１Ｈ）．
【００４９】
４．２  化合物Ｄ５の合成
３ｇの化合物Ｃ４および１５ｍＬのジクロロメタンを５０ｍＬの一つ口フラスコに加え、溶解して清澄化するために撹拌した。１．５ｇの化合物Ｄ２を室温で滴下して加え、得られた溶液を室温で一晩撹拌し、反応させて、多量の固体を生じさせた。系を、ポンプを使用してろ過し、ろ過後のケークを、石油エーテルを用いて浸漬洗浄し、ポンプを使用して乾固して、４ｇの灰白色の固体（すなわち、化合物Ｄ５）を得た。
【００５０】
４．３  セグメントＤの合成
１０．４ｇの化合物Ｄ５、７．９ｇの化合物Ｃ６、０．０６ｇのテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム、１０．７ｇの炭酸カリウムおよび７０ｍＬのＤＭＳＯを１００ｍＬの一つ口フラスコにそれぞれ加えた。窒素保護下において、得られた溶液を８０℃〜８５℃に加熱し、４時間〜５時間反応させた。反応が、ＴＬＣにより調べると完了していた。系を冷却し、２００ｍＬの水を加えて、反応を停止させた。溶液を酢酸エチルにより抽出した（２００ｍＬ、３回）。有機層を飽和食塩水により洗浄し（２００ｍＬ、１回）、無水硫酸ナトリウムによって乾燥し、活性炭により脱色し、濃縮して約２００ｍＬの酢酸エチルを残し、冷凍状態で結晶化させ、ろ過し、石油エーテルおよび酢酸エチルを用いて再結晶して、５．５ｇの紫色の固体粉末（すなわち、セグメントＤ）を得た（５３％の収率）。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）（ｐｐｍ）１．３７（ｓ，１２Ｈ），２．３１（ｓ，３Ｈ），６．８２（ｍ，１Ｈ），７．１９−７．６２（ｍ，５Ｈ），７．９６−７．９９（ｍ，１Ｈ），８．１８−８．２２（ｍ，１Ｈ），８．７６−８．７７（ｍ，１Ｈ），８．９５（ｓ，１Ｈ），９．１１（ｓ，１Ｈ）．
【００５１】
実施例５：化合物（ＩＩＩ）の合成
【化１１】
0006291066.tif 000012
【００５２】
化合物Ｃ（８．４ｇ、２０ｍｍｏｌ）、化合物Ａ（５．１ｇ、２４ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（８．２８ｇ、６０ｍｍｏｌ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０．４ｇ）、エチレングリコールジメチルエーテル（２４０ｍＬ）および水（６０ｍＬ）を５００ｍＬの一つ口フラスコにそれぞれ加え、窒素置換を３回実行した。系を８５℃〜９０℃に加熱し、１６時間にわたって撹拌し、反応させた。反応が、ＴＬＣにより調べると完了していた。系を冷却し、５００ｍＬの水を加えて、反応を停止させた。溶液を酢酸エチルにより抽出した（５００ｍＬ、３回）。有機層を飽和食塩水により洗浄し（３００ｍＬ、２回）、無水硫酸ナトリウムによって乾燥し、活性炭により脱色し、濃縮して、６．５ｇの褐色の油状物質を得た。この油状物質をカラムクロマトグラフィーによって精製して、３ｇの明黄色の固体生成物（すなわち、化合物（ＩＩＩ））を得た（３５％の収率、９８％を超えるＨＰＬＣ純度）。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）（ｐｐｍ）２．３０（ｓ，３Ｈ），４．０９（ｓ，２Ｈ），６．８４（ｔ，Ｊ＝９．６，１Ｈ），７．１５（ｔ，Ｊ＝８．０，１Ｈ），７．５１（ｔ，Ｊ＝８．４，１Ｈ），７．６６−７．７０（ｍ，１Ｈ），７．９７（ｓ，１Ｈ），８．１１（ｔ，Ｊ＝６．４，１Ｈ），８．２５（ｄ，１Ｈ），８．３１（ｄ，１Ｈ），８．８７（ｓ，１Ｈ），９．１１（ｓ，１Ｈ），９．３４（ｓ，１Ｈ），１２．３２（ｗ，１Ｈ）．
【００５３】
１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）（ｐｐｍ）２１．３，１１４．９，１１５．１，１１６．５，１１６．８，１２１．４，１２２．３，１２３．１，１２６．１，１２６．４，１２７．２，１２７．６，１２８．０，１２８．３，１２８．５，１３２．７，１３４．０，１３５．３，１３７．５，１３８．３，１４８．７，１４９．６，１５２．０，１５３．１．
【００５４】
検出によると、化合物（ＩＩＩ）において、Ｃ含有量が６７．３８％であり、Ｈ含有量が４．６２％であり、分子式がＣ２４Ｈ１９ＦＮ６Ｏであった（計算によると、Ｃ含有量が６７．６０％であり、Ｈ含有量が４．４９％である）。
【００５５】
ＬＣＭＳ：４０９．２（Ｍ＋Ｈ）。
【００５６】
実施例６：化合物（ＩＶ）の合成
【化１２】
0006291066.tif 000013
【００５７】
化合物Ｄ（８．０５ｇ、２０ｍｍｏｌ）、化合物Ａ（５．１ｇ、２４ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（８．２８ｇ、６０ｍｍｏｌ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０．４ｇ）、エチレングリコールジメチルエーテル（２４０ｍＬ）および水（６０ｍＬ）を５００ｍＬの一つ口フラスコにそれぞれ加え、窒素置換を３回実行した。系を８５℃〜９０℃に加熱し、１６時間にわたって撹拌し、反応させた。反応が、ＴＬＣにより調べると完了していた。系を冷却し、５００ｍＬの水を加えて、反応を停止させた。溶液を酢酸エチルにより抽出した（５００ｍＬ、３回）。有機層を飽和食塩水により洗浄し（３００ｍＬ、２回）、無水硫酸ナトリウムによって乾燥し、活性炭により脱色し、濃縮して、７．４ｇの褐色の油状物質を得た。この油状物質をカラムクロマトグラフィーによって精製して、３．４３ｇの明黄色の固体生成物（すなわち、化合物（ＩＶ））を得た（４２％の収率、９８％を超えるＨＰＬＣ純度）。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）（ｐｐｍ）２．３１（ｓ，３Ｈ），４．０９（ｓ，２Ｈ），６．８２（ｄ，１Ｈ），７．２０（ｔ，Ｊ＝８．０，１Ｈ），７．３３−７．６６（ｍ，６Ｈ），７．９７（ｓ，１Ｈ），８．２２（ｄ，１Ｈ），８．３７（ｄ，１Ｈ），８．８６（ｓ，１Ｈ），９．１７（ｓ，１Ｈ），９．４３（ｓ，１Ｈ），１２．３３（ｗ，１Ｈ）．
【００５８】
１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）（ｐｐｍ）２１．７，１１５．６，１１６．２，１１６．５，１１８．９，１２２．９，１２３．１，１２６．０，１２６．２，１２６．３，１２７．１，１２７．８，１２８．２，１２８．３，１２９．１，１３２．７，１３３．９，１３６．０，１３７．４，１３８．３，１４０．６，１４８．７  １５３．７．
【００５９】
検出によると、化合物（ＩＶ）において、Ｃ含有量が７０．３２％であり、Ｈ含有量が５．０２％であり、分子式がＣ２４Ｈ２０Ｎ６Ｏであった（計算によると、Ｃ含有量が７０．５７％であり、Ｈ含有量が４．９４％である）。
【００６０】
ＬＣＭＳ：４０９．２（Ｍ＋Ｈ）。
【００６１】
実施例７：化合物（Ｖ）の合成
【化１３】
0006291066.tif 000014
【００６２】
化合物Ｃ（８．４ｇ、２０ｍｍｏｌ）、化合物Ｂ（８．１４ｇ、２４ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（８．２８ｇ、６０ｍｍｏｌ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０．４ｇ）、エチレングリコールジメチルエーテル（２４０ｍＬ）および水（６０ｍＬ）を５００ｍＬの一つ口フラスコにそれぞれ加え、窒素置換を３回実行した。系を８５℃〜９０℃に加熱し、１６時間にわたって撹拌し、反応させた。反応が、ＴＬＣにより調べると完了していた。系を冷却し、５００ｍＬの水を加えて、反応を停止させた。溶液を酢酸エチルにより抽出した（５００ｍＬ、３回）。有機層を飽和食塩水により洗浄し（３００ｍＬ、２回）、無水硫酸ナトリウムによって乾燥し、活性炭により脱色し、濃縮して、６．２ｇの褐色の油状物質を得た。この油状物質をカラムクロマトグラフィーによって精製して、３．５３ｇのオフホワイトの固体生成物（すなわち、化合物（Ｖ））を得た（３２％の収率、９８％を超えるＨＰＬＣ純度）。
【００６３】
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）（ｐｐｍ）１．８５−１．８８（ｍ，４Ｈ），２．１２−２．３０（ｍ，４Ｈ），３．０８−４．２７（ｍ，１０Ｈ），６．７３−６．８５（ｍ，３Ｈ），７．１５（ｍ，１Ｈ），７．３９−７．６４（ｍ，４Ｈ），８．０９−８．３０（ｍ，４Ｈ），９．１１（ｓ，１Ｈ），９．３１（ｓ，１Ｈ），１１．９７（ｗ，１Ｈ）．
【００６４】
１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）（ｐｐｍ）２１．３，２３．４，２６．９，２８．４，３０．９，５２．１，５３．８，６０．４，１１４．９，１１５．１，１１６．０，１１７．１，１１８．５，１２１．４，１２２．２，１２３．１，１２５．８，１２６．２，１２６．７，１２６．９，１２７．６，１３２．１，１３３．０，１３３．８，１３４．０，１３４．５，１４３．９，１４９．１，１４９．６，１５２．０，１５３．２．
【００６５】
検出によると、化合物（Ｖ）において、Ｃ含有量が６９．３８％であり、Ｈ含有量が６．２０％であり、分子式がＣ３２Ｈ３３ＦＮ６Ｏ２であった（計算によると、Ｃ含有量が６９．５５％であり、Ｈ含有量が６．０２％である）。
【００６６】
ＬＣＭＳ：５５３．２（Ｍ＋Ｈ）。
【００６７】
実施例８：化合物（ＶＩ）の合成
【化１４】
0006291066.tif 000015
【００６８】
化合物Ｄ（８．０５ｇ、２０ｍｍｏｌ）、化合物Ｂ（８．１４ｇ、２４ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（８．２８ｇ、６０ｍｍｏｌ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０．４ｇ）、エチレングリコールジメチルエーテル（２４０ｍＬ）および水（６０ｍＬ）を５００ｍＬの一つ口フラスコにそれぞれ加え、窒素置換を３回実行した。系を８５℃〜９０℃に加熱し、１６時間にわたって撹拌し、反応させた。反応が、ＴＬＣにより調べると完了していた。系を冷却し、５００ｍＬの水を加えて、反応を停止させた。溶液を酢酸エチルにより抽出した（５００ｍＬ、３回）。有機層を飽和食塩水により洗浄し（３００ｍＬ、２回）、無水硫酸ナトリウムによって乾燥し、活性炭により脱色し、濃縮して、７．４ｇの褐色の油状物質を得た。この油状物質をカラムクロマトグラフィーによって精製して、４．０６ｇのオフホワイトの固体生成物（すなわち、化合物（ＶＩ））を得た（３８％の収率、９８％を超えるＨＰＬＣ純度）。
【００６９】
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）（ｐｐｍ）１．９８−２．２４（ｍ，４Ｈ），２．２４−２．３１（ｍ，４Ｈ），３．４４（ｗ，２Ｈ），３．５５−３．５７（ｍ，４Ｈ），４．２６（ｍ，２Ｈ），４．２８（ｍ，２Ｈ），６．７４（ｄ，１Ｈ），６．８１（ｄ，１Ｈ），６．８７（ｄ，１Ｈ），７．１９（ｔ，Ｊ＝８．０，１Ｈ），７．３４−７．６２（ｍ，６Ｈ），８．１５（ｄ，１Ｈ），８．４０（ｄ，１Ｈ），９．２３（ｓ，１Ｈ），９．６０（ｓ，１Ｈ），１０．４７（ｗ，１Ｈ），１１．９３（ｓ，１Ｈ）．
【００７０】
１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）（ｐｐｍ）２１．７，２３．２，２６．０，５１．９，５３．９，６５．４，１１４．３，１１５．８，１１７．１，１１９．１，１２１．０，１２２．５，１２３．１，１２６．０，１２６．２，１２６．３，１２６．７，１２６．８，１２７．７，１２９．２，１３１．８，１３３．０，１３３．８，１３４．８，１３８．５，１４０．３，１４３．７，１４９．２，１５３．５．
【００７１】
検出によると、化合物（ＶＩ）において、Ｃ含有量が７１．７５％であり、Ｈ含有量が６．５５％であり、分子式がＣ３２Ｈ３４Ｎ６Ｏ２であった（計算によると、Ｃ含有量が７１．８９％であり、Ｈ含有量が６．４１％である）。
【００７２】
ＬＣＭＳ：５３５．３（Ｍ＋Ｈ）。
【００７３】
実施例９：化合物（ＶＩＩ）の合成
工程１：中間体Ｅ２の合成
【化１５】
0006291066.tif 000016
【００７４】
窒素保護下および室温（１０℃〜１５℃）において、化合物Ｂ７、トリフェニルホスフィンおよびＴＨＦ（５５ｍＬ）を２００ｍＬの三つ口フラスコにそれぞれ加え、撹拌した。ＤＢＡＤ（アゾジカルボン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル）を窒素保護下において加えると、熱が放出された。得られた溶液を室温で１５分間攪拌した。２０ｍＬのＴＨＦに溶解される化合物Ｅ１（市販品を購入）の溶液を滴下して加え、添加が７時間続いた。その後、系を室温（１０℃〜１５℃）で１５時間攪拌した。得られた溶液を乾固するまで４０℃で真空濃縮し、その後、カラムクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥＡ＝６／１）によって精製して、１２．８ｇの油状物質を得た。この油状物質は中間体Ｅ２であることがＮＭＲにより示された。
【００７５】
工程２：中間体Ｅ３の合成
【化１６】
0006291066.tif 000017
【００７６】
工程１に従って調製される化合物Ｅ２（１２ｇ）を５０ｍＬのｎ−ブタノールおよび６．２５ｇの８０％ヒドラジン水和物とともに加えた。溶液を１００℃に加熱し、１５時間撹拌し、真空濃縮して、ｎ−ブタノールを除いた。５０ｍＬのジクロロメタンを加えた。得られた系を食塩水により洗浄し、無水硫酸ナトリウムによって乾燥した。硫酸ナトリウムをろ過によって除き、５ｍＬのトリフルオロ酢酸を加えた。溶液を室温で２０分間攪拌すると、ガスが放出された。系を乾固するまで真空濃縮した。炭酸ナトリウム水溶液を残渣に加えて、ｐＨを９に調節した。溶液をＴＢＭＥによって３回抽出した。有機相を一緒にし、食塩水により洗浄し、硫酸ナトリウムによって乾燥し、ろ過し、濃縮して、１４ｇの黄色の油状物質を得た。この油状物質をカラムクロマトグラフィーによって精製し（最初に、極性が小さい不純物（例えば、トリフェニルホスフィンなど）を、ＰＥ／ＥＡ＝６／１により溶出させ、その後、溶離剤の極性を徐々に増大させ、最後に標的生成物を、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝５／１で溶出させる）、濃縮乾固し、ＰＥ／ＥＡ＝１０／１の１０ｍＬの混合溶媒とともにすりつぶして、４．５ｇのオフホワイトの固体を得た（９５％を超えるＨＰＬＣ純度）。この固体は標的中間体Ｅ３であることがＮＭＲにより示された。
【００７７】
工程３：中間体Ｅ５の合成
【化１７】
0006291066.tif 000018
【００７８】
工程２に従って調製される化合物Ｅ３、化合物ＣおよびＰｄ触媒を５０ｍＬの三つ口フラスコにそれぞれ加え、窒素置換を３回実行した。ＴＨＦおよび炭酸カリウム水溶液を注射器により加えた。溶液を油浴において８０℃に加熱し、１５時間撹拌した。水を加えて、反応を停止させた。溶液を酢酸エチルにより３回抽出した。有機相を一緒にし、食塩水により洗浄し、硫酸ナトリウムによって乾燥し、珪藻土でろ過し、濃縮乾固し、カラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝２０／１〜１０／１）によって精製し、色および純度に依存してカラムクロマトグラフィーによって再び精製して、生成物をある点で得た（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝２０／１〜１０／１、Ｒｆ＝０．２）。これを濃縮乾固し、０．６５ｇの物質（すなわち、中間体Ｅ５）を得た。この物質を次工程においてそのまま使用した。
【００７９】
Ｐｄ触媒の構造：
【化１８】
0006291066.tif 000019
【００８０】
工程４：化合物（ＶＩＩ）の合成
【化１９】
0006291066.tif 000020
【００８１】
工程３に従って調製される０．６７ｇの化合物Ｅ５を２０ｍＬのジクロロメタンとともに加えた。８ｍＬのトリフルオロ酢酸を室温で加え、得られた溶液を室温で１５時間撹拌した。ＴＬＣは、反応が完了していることを示した。溶液を乾固するまで真空濃縮し、炭酸カリウム水溶液を残渣に加えて、ｐＨを１０超であるように調節した。溶液を、ジクロロメタン／メタノール＝２／１により抽出し、硫酸ナトリウムによって乾燥し、ろ過して硫酸ナトリウムを除き、濃縮乾固し、カラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝２０／１〜２／１）によって精製して、生成物をある点で集めた（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝５／１、Ｒｆ＝０．２）。この生成物を濃縮して、０．４ｇの明黄色の固体を得た。この固体はＴＬＣ試験において単一の点を有し、しかしながら、そのＨＰＬＣ純度はほんの８７％にすぎず、したがって、これは、極性が大きい不純物を有した。２００ｍｇの生成物サンプルを調製用クロマトグラフィーによって精製して、１０５ｍｇの生成物を得た。この生成物は、ＨＰＬＣ純度が９９．０％であり、標的生成物の化合物（ＶＩＩ）であることがＮＭＲにより確認された。
【００８２】
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）（ｐｐｍ）１．１５（ｓ，６Ｈ），１．９２（ｔ，Ｊ＝７．２，２Ｈ），２．３０（ｓ，３Ｈ），３．７８（ｓ，２Ｈ），４．３２（ｔ，Ｊ＝７．２，２Ｈ），６．６６（ｄ，１Ｈ），６．７３（ｄ，１Ｈ），６．８２（ｄ，１Ｈ），６．８９（ｄ，１Ｈ），６．９５（ｄ，１Ｈ），７．１３−７．１８（ｍ，１Ｈ），７．４１−７．６６（ｍ，４Ｈ），８．１０（ｄ，１Ｈ），８．１６（ｄ，１Ｈ），８．２７（ｄ，１Ｈ），９．０８（ｓ，１Ｈ），９．２８（ｓ，１Ｈ），１１．８７（ｗ，１Ｈ）．
【００８３】
１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）（ｐｐｍ）２１．３，３１．０，４２．９，４９．１，６５．９，１０３．８，１０６．５，１０７．７，１１３．１，１１４．９，１１７．２，１２１．１，１２１．９，１２３．１，１２５．４，１２６．３，１２６．７，１２７．７，１３２．３，１３３．０，１３３．９，１３４．０，１３４．４，１３４．９，１４４．３，１４９．０，１４９．６，１５２．０，１５３．２．
【００８４】
検出によると、化合物（ＶＩＩ）において、Ｃ含有量が６８．５３％であり、Ｈ含有量が５．９８％であり、Ｎ含有量が１５．８５％であり、分子式がＣ３０Ｈ３１ＦＮ６Ｏ２であった（計算によると、Ｃ含有量が６８．４２％であり、Ｈ含有量が５．９３％であり、Ｈ含有量が１５．９６％である）。
【００８５】
ＬＣＭＳ：５２７．３（Ｍ＋Ｈ）。
【００８６】
実施例１０：化合物（ＶＩＩＩ）の合成
工程１：中間体Ｅ４の合成
【化２０】
0006291066.tif 000021
【００８７】
化合物Ｅ３、化合物ＤおよびＰｄ触媒（実施例９の場合と同じ）を５０ｍＬの三つ口フラスコにそれぞれ加え、窒素置換を３回実行した。ＴＨＦおよび炭酸カリウム水溶液を注射器により加えた。溶液を油浴において８０℃に加熱し、１５時間撹拌した。水を加えて、反応を停止させた。溶液を酢酸エチルにより３回抽出した。有機相を一緒にし、食塩水により洗浄し、硫酸ナトリウムによって乾燥し、珪藻土でろ過し、濃縮乾固し、カラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝２０／１〜１０／１）によって精製し、色および純度に依存してカラムクロマトグラフィーによって再び精製して、生成物をある点で得た（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝２０／１〜１０／１、Ｒｆ＝０．２）。これを濃縮乾固し、ＰＥ／ＥＡ＝２／１とともにすりつぶして、０．８７ｇのオフホワイトの固体（すなわち、中間体Ｅ４）を得た。
【００８８】
工程２：化合物（ＶＩＩＩ）の合成
【化２１】
0006291066.tif 000022
【００８９】
工程１に従って調製される化合物Ｅ４（０．７７ｇ）を１０ｍＬのジクロロメタンとともに加えたところ、多量の固体が未溶解であった。５ｍＬのトリフルオロ酢酸を室温で加え、溶液を溶解して清澄化した。系を室温で１５時間撹拌した。ＴＬＣは、反応が完了していることを示した。溶液を乾固するまで真空濃縮し、炭酸カリウム水溶液を残渣に加えて、ｐＨを１０超であるように調節した。溶液を、ジクロロメタン／メタノール＝２／１により抽出し、硫酸ナトリウムによって乾燥し、ろ過して硫酸ナトリウムを除き、濃縮乾固し、カラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝２０／１〜２／１）によって精製して、生成物をある点で集めた（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝５／１、Ｒｆ＝０．２）。この生成物を濃縮して、０．６ｇの灰色の固体を得た。この固体は標的生成物の化合物（ＶＩＩＩ）であることがＮＭＲにより確認された。この固体を再びカラムクロマトグラフィーによって精製して、４５０ｍｇのオフホワイトの標的生成物を得た（９７．２％のＨＰＬＣ純度）。
【００９０】
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）（ｐｐｍ）１．４０（ｓ，６Ｈ），２．１７（ｔ，Ｊ＝６．４，２Ｈ），２．３１（ｓ，３Ｈ），３．８１（ｓ，２Ｈ），４．３５（ｔ，Ｊ＝６．４，２Ｈ），６．７５（ｄ，１Ｈ），６．８１（ｄ，１Ｈ），６．９０（ｄ，１Ｈ），７．１８（ｄ，１Ｈ），７．２１（ｄ，１Ｈ），７．３３−７．６３（ｍ，５Ｈ），７．９４（ｗ，２Ｈ），８．１２（ｄ，１Ｈ），８．３０（ｄ，１Ｈ），９．１２（ｓ，１Ｈ），９．３８（ｓ，１Ｈ），１１．８４（ｗ，１Ｈ）．
【００９１】
１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）（ｐｐｍ）２１．７，２６．１，３９．１，５３．２，６４．１，１０６．４，１１４．３，１１５．９，１１７．５，１１９．１，１２１．１，１２２．５，１２３．０，１２５．９，１２６．２，１２６．７，１２６．８，１２７．７，１２９．２，１３１．９，１３３．０，１３３．７，１３４．８，１３８．４，１４０．４，１４９．１，１５３．７，１５９．１．
【００９２】
検出によると、化合物（ＶＩＩＩ）において、Ｃ含有量が７０．９５％であり、Ｈ含有量が６．５５％であり、Ｎ含有量が１６．３５％であり、分子式がＣ３０Ｈ３２Ｎ６Ｏ２であった（計算によると、Ｃ含有量が７０．８４％であり、Ｈ含有量が６．３４％であり、Ｈ含有量が１６．５３％である）。
【００９３】
ＬＣＭＳ：５０９．３（Ｍ＋Ｈ）。
【００９４】
ＶＥＧＦＲ２受容体チロシンキナーゼおよびＰＤＧＦＲ−β受容体チロシンキナーゼの活性に対する本発明によるナフタル尿素誘導体の阻害のインビトロ試験
１．実験方法
酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）
主要装置
可変波長型マイクロプレートリーダー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ  ＳＰＥＣＴＲＡＭＡＸ１９０）。
【００９５】
主要試薬
試験サンプル：実施形態１の一連の例示化合物（ＩＩ〜ＶＩ）（これらは使用前に溶媒ＤＭＳＯにより所望の濃度に希釈された）；
コントロール群：ソラフェニブ（Ｓｕｌ１２４８）；
チロシンキナーゼ  ＶＥＧＦＲ２（ＫＤＲ）、ｃ−Ｋｉｔ、これらは、昆虫バキュロウイルス発現系を利用することによって発現され、Ｎｉ−ＮＴＡカラムによってアフィニティー精製されたもので、実験要件を検出によって満たした；
チロシンキナーゼ  ＰＤＧＦＲ−β（ＭＩＬＬＩＰＯＲＥ）；
キナーゼ反応基質  ポリ（Ｇｌｕ，Ｔｙｒ、４：１）（ＳＩＧＭＡ）；
抗ホスホチロシンモノクローナル抗体  ＰＹ９９（ＳＡＮＴＡ  ＣＲＵＺ）；
西洋ワサビペルオキシダーゼ標識されたヤギ抗ウサギＩｇＧ（ＣＡＬＡＢＩＯＣＨＥＭ）；
ＡＴＰ、ＤＴＴ、ＯＰＤ（ＡＭＲＥＳＣＯ）；
酵素標識プレート（ＣＯＲＮＩＮＧ）；
ソラフェニブ（ＬＣ  ＬＡＢＯＲＡＴＯＲＩＥＳ）；
中国で製造される他の試薬。
【００９６】
実験手順
（１）キナーゼ反応基質のポリ（Ｇｌｕ，Ｔｙｒ、４：１）をカリウムイオン非含有ＰＢＳにより２０μｇ／ｍｌに希釈し、酵素標識プレートをこの基質によって被覆し、３７℃で１２時間〜１６時間反応させ、その後、ウエル穴内の液体を除いた。
（２）酵素標識プレートをＴ−ＰＢＳにより３回洗浄した（毎回、１０分）。
（３）酵素標識プレートを乾燥機において３７℃で乾燥させた。
（４）試験サンプルを、被覆された酵素標識プレートのウエル穴に加えた：
試験サンプルは最初、ＤＭＳＯを用いた１０−２Ｍストック溶液とするために調合され、その後、要求された濃度に反応緩衝液により使用前に希釈され、実験用ウエル穴に加えて、１００μＬの反応系における対応する最終濃度を達成した。同時に、陽性コントロール用ウエル穴を作製し、化合物（ソラフェニブ）を加えた。ストック溶液の残りは、小分けした後、−２０℃で保存した。
（５）ＡＴＰおよび試験されたチロシンキナーゼの添加：
反応緩衝液により希釈されるＡＴＰ溶液（ＡＴＰ最終濃度が５μＭである）を加え、その後、反応緩衝液により希釈される試験されたチロシンキナーゼを加えた。反応系の総体積が１００μＬであった。同時に、陰性コントロール用ウエル穴および酵素非含有コントロール用ウエル穴を作製した。
（６）反応系を湿潤ボックスに置き、光が禁止される条件のもとで１時間、振とう台において３７℃で反応させた。反応後、プレートをＴ−ＰＢＳにより３回洗浄した。
（７）抗体ＰＹ９９（１００μＬ／ウエル穴）を加え、振とう台において３７℃で３０分間反応させた。プレートをＴ−ＰＢＳにより３回洗浄した。
（８）西洋ワサビペルオキシダーゼ標識ヒツジ抗マウスＩｇＧ（１００μＬ／ウエル穴）を加え、振とう台において３７℃で３０分間反応させた。プレートをＴ−ＰＢＳにより３回洗浄した。
（９）ＯＰＤ発色溶液（１００μＬ／ウエル穴）を加え、光が禁止される条件のもと、１分間〜１０分間、室温で反応させた。
（１０）２ＭのＨ２ＳＯ４（５０μＬ）を加えて、反応を停止させ、Ａ４９０の値を可変波長型マイクロプレート（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ  ＳＰＥＣＴＲＡＭＡＸ１９０）によって測定した。
（１１）サンプルの阻害率を下記の式によって得た：
【数１】
0006291066.tif 000023
【００９７】
２．実験結果
ＤＫＲ受容体チロシンキナーゼおよびＰＤＧＦＲ−β受容体チロシンキナーゼの活性に対する典型的な例示化合物（ＩＩＩ）〜例示化合物（ＶＩＩＩ）の阻害結果が下記の表１および表２にそれぞれ示される。
【表１】
0006291066.tif 000024
【表２】
0006291066.tif 000025
【００９８】
上記の薬理学的実験が中国科学院上海薬物研究所によって実行された。ＩＣ５０＋ＳＤ値および阻害率はそれぞれ、異なるときに行われた３回〜４回の実験の平均値であり、ただし、この場合、それぞれの試験サンプルがそれぞれの実験において少なくとも２回について試験された。
【００９９】
上記の実験結果により、下記のことが確認された：
１．本発明のナフタル尿素誘導体はＶＥＧＦＲ２受容体チロシンキナーゼおよびＰＤＧＦＲ−β受容体チロシンキナーゼのリン酸化を分子レベルで著しく阻害することができ、チロシンキナーゼの新しい阻害剤である可能性がある。
【０１００】
２．列挙された化合物において、ＶＥＧＦＲ２チロシンキナーゼの活性に対する最も大きい活性を有した化合物（ＩＶ）の阻害ＩＣ５０が４．３ｎＭであり、これは、陽性コントロールであるソラフェニブの阻害ＩＣ５０（ＩＣ５０＝１１．１ｎＭ）の２．６倍であった。ＰＤＧＦＲ−βチロシンキナーゼの活性に対する化合物（ＩＶ）の阻害ＩＣ５０が６．７ｎＭであり、これは、陽性コントロール群であるソラフェニブの阻害ＩＣ５０（ＩＣ５０＝１８．４ｎＭ）の２．７倍であった。コントロール薬物のソラフェニブは、現在の市場における同じ種類の薬剤において最も強い作用を有する。このことは、より大きい生物学的活性を有する化合物がこの一連の化合物において見出され得ることを示していた。
【０１０１】
３．ＰＤＧＦＲ−βチロシンキナーゼの活性に対する化合物（Ｖ）の阻害ＩＣ５０が１６．３ｎＭであり、これは、陽性コントロール群であるソラフェニブの阻害ＩＣ５０（ＩＣ５０＝１８．４ｎＭ）よりもわずかに大きかった。この化合物は、強いアルカリ性を有する窒素原子を側鎖に有する。水溶性試験（２２℃、２４時間にわたる超音波混合、ｐＨ５．５、２回の実験の平均）において、化合物（Ｖ）の溶解性が、アルカリ性側鎖を有しない化合物（ＩＩＩ）および化合物（ＩＶ）の溶解性よりも明白に良好であった。化合物（Ｖ）の水溶性が化合物（ＩＩＩ）よりも非常に良好であり、そして、より強いアルカリ性の側鎖を有する誘導体が、水溶性がより良好であるという利点を有したことを示す表３において示されるように化合物（ＩＶ）の水溶性の６．９倍であった。
【表３】
0006291066.tif 000026
【０１０２】
上記実験により、下記のことが示された：本発明の上記種類のナフタル尿素化合物は、特定のタンパク質、すなわち、受容体チロシンキナーゼを選択的に標的とすることができ、新しい種類の多標的チロシンキナーゼ阻害剤であり、チロシンキナーゼによって媒介される疾患または症状を処置する薬剤において使用することができる。これらの化合物は、ＶＥＧＦＲ２受容体およびＰＤＧＦＲ受容体に作用することによって腫瘍細胞の成長、増殖および転移を阻害し、また、受容体チロシンキナーゼのリン酸化を、異常な細胞におけるシグナル伝達を遮断するために選択的かつ効果的に阻害するという効果を達成することができる。一方で、これらの化合物は、腫瘍血管新生の形成を阻止し、これにより、腫瘍成長において要求される血液および栄養分の供給を阻止することによって腫瘍細胞の死を引き起こすことができる。そのうえ、ＶＥＧＦＲ２受容体およびＰＤＧＦＲ受容体の発現が、増殖性の血管内皮細胞および血管壁細胞に主に限定されており、したがって、細胞毒性薬剤に関して、血管内皮増殖因子受容体および血小板由来増殖因子受容体を、腫瘍を処置するために標的とすることは、様々な利点（例えば、高い選択性、高い特異性および低い毒性など）を有することができる。加えて、本発明のナフタル尿素化合物（化合物（ＩＩ））は、病理学的血管新生が伴う加齢性黄斑変性または糖尿病性網膜症を処置するための医薬において使用することができ、また、病理学的血管新生により誘導される脈絡膜または網膜の出血および瘢痕化によって引き起こされる視覚喪失を、病理学的血管新生の内皮細胞膜における、また、病変部におけるＶＥＧＦＲ２受容体チロシンキナーゼのリン酸化、および、血管壁の周皮細胞膜におけるＰＤＧＦＲ−β受容体チロシンキナーゼのリン酸化を阻害することによって防止することができる。
【０１０３】
本発明によれば、チロシンキナーゼによって媒介される疾患には、病理学的血管新生が伴う悪性腫瘍および眼疾患が含まれる。悪性腫瘍には、腎臓癌、肝臓癌、結腸癌、消化管間質腫瘍、肺癌、乳癌、膵臓癌、神経グリア腫瘍、リンパ癌、線維肉腫、卵巣癌、白血病および前立腺癌などが含まれるが、これらに限定されない。眼疾患には、加齢性黄斑変性および糖尿病性網膜症などが含まれる。
【０１０４】
上記で記載される実施形態は、本発明の技術的概念および特徴を例示するためにだけであり、かつ、当業者が本発明を理解し、それにより、本発明を実行することを可能にするために意図されたもので、かつ、本発明の保護範囲を限定するものと結論づけてはならない。本発明の精神に従う同等な変形または改変はどれも、本発明の保護範囲によって包含されるべきである。