(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記化学式Ｉの抗体−リンカー−薬物結合体またはその薬剤学的に許容される塩：
【化１】
0006262768.tif 000234
（式中、
Ａｂは抗体であり、
Ｌはリンカーであり、
Ｄは薬物であり、
ｎは１〜５である）であって、
リンカー−薬物が抗体のリシン残基に直接結合され、
薬物は、下記化学式ＩＩＩ−１、ＩＩＩ−２、ＩＩＩ−３またはＩＩＩ−４のドラスタチン１０誘導体である細胞毒性薬物である、塩：
【化２】
0006262768.tif 000235
（式中、Ｒ１はヒドロキシ、Ｃ１−Ｃ４のアルコキシ基、またはオキソ（＝Ｏ）であり、
Ｒ２は水素、またはＣ１−Ｃ４のアルキル基であり、
Ｒ３は水素、ヒドロキシ、Ｃ１−Ｃ４のアルコキシ基、アミノ、オキソ（＝Ｏ）、またはヒドロキシイミノ（＝Ｎ−ＯＨ）であり、
Ｒ４はアリール基である。）
【化３】
0006262768.tif 000236
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４はそれぞれ独立して、水素、またはＣ１−Ｃ４のアルキル基であり、
Ａｒはアリール基であり、
Ｚは窒素または酸素であり、
Ｒ５は、Ｚが窒素の時、水素、またはＣ１−Ｃ４のアルキル基であり、Ｚが酸素の時、存在せず、
Ｒ６はヒドロキシ、Ｃ１−Ｃ４のアルコキシ基、またはオキソ（＝Ｏ）である。）
【化４】
0006262768.tif 000237
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４はそれぞれ独立して、水素、またはＣ１−Ｃ４のアルキル基であり、
Ｒ５は水素、ヒドロキシ、Ｃ１−Ｃ４のアルコキシ基、アミノ、オキソ（＝Ｏ）、またはヒドロキシイミノ（＝Ｎ−ＯＨ）であり、
Ａｒはアリール基であり、
Ｙは窒素または酸素であり、
Ｒ６は、Ｙが窒素の時、水素、またはＣ１−Ｃ４のアルキル基であり、Ｙが酸素の時、存在しない。）
【化５】
0006262768.tif 000238
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４はそれぞれ独立して、水素、またはＣ１−Ｃ４のアルキル基であり、
Ｒ５は水素、ヒドロキシ、Ｃ１−Ｃ４のアルコキシ基、アミノ、オキソ（＝Ｏ）、またはヒドロキシイミノ（＝Ｎ−ＯＨ）であり、
Ａｒはアリール基であり、
Ｙは窒素または酸素であり、
Ｒ６は、Ｙが窒素の時、水素、またはＣ１−Ｃ４のアルキル基であり、Ｙが酸素の時、存在しない。）。
【請求項２】
下記化学式Ｉ−１の、請求項１に記載の抗体−リンカー−薬物結合体またはその薬剤学的に許容される塩：
【化６】
0006262768.tif 000239
（式中、
Ａｂは抗体であり、
ＸはＣ１−Ｃ８のアルキル基、またはＣ３−Ｃ６のシクロアルキル基であり、
Ｒ１はヒドロキシ、Ｃ１−Ｃ４のアルコキシ基、またはオキソ（＝Ｏ）であり、
Ｒ２は水素、またはＣ１−Ｃ４のアルキル基であり、
Ｒ３は水素、ヒドロキシ、Ｃ１−Ｃ４のアルコキシ基、アミノ、オキソ（＝Ｏ）、またはヒドロキシイミノ（＝Ｎ−ＯＨ）であり、
Ｒ４はアリール基であり、
ｎは１〜５である）。
【請求項３】
Ａｂが癌細胞抗原に免疫特異的に結合する抗体であり、
ＸはＣ１−Ｃ８のアルキル基、またはＣ３−Ｃ６のシクロアルキル基であり、
Ｒ１はヒドロキシ、またはＣ１−Ｃ４のアルコキシ基であり、
Ｒ２は水素、またはＣ１−Ｃ４のアルキル基であり、
Ｒ３は水素、オキソ（＝Ｏ）、またはヒドロキシイミノ（＝Ｎ−ＯＨ）であり、
Ｒ４はＣ１−Ｃ４のアルキル基、Ｃ１−Ｃ４のアルコキシ基、およびハロゲンからなる群より選択された１つ以上の置換基で置換もしくは非置換のフェニルであることを特徴とする、請求項２に記載の抗体−リンカー−薬物結合体またはその薬剤学的に許容される塩。
【請求項４】
Ａｂがトラスツズマブ（ｔｒａｓｔｕｚｕｍａｂ）であり、
Ｘはメチル、ｎ−プロピル、ｎ−ペンチル、ｎ−オクチル、またはシクロプロピルであり、
Ｒ１はヒドロキシ、またはメトキシであり、
Ｒ２は水素またはメチルであり、
Ｒ３は水素、オキソ（＝Ｏ）、またはヒドロキシイミノ（＝Ｎ−ＯＨ）であり、
Ｒ４はメチル、メトキシ、およびハロゲンからなる群より選択された１つ以上の置換基で置換もしくは非置換のフェニルであることを特徴とする、請求項２に記載の抗体−リンカー−薬物結合体またはその薬剤学的に許容される塩。
【請求項５】
下記化合物から選択されることを特徴とする、請求項２に記載の抗体−リンカー−薬物結合体またはその薬剤学的に許容される塩：
【化７】
0006262768.tif 000240
（式中、ｎは１〜５である）。
【請求項６】
抗体が９８％以上の正常抗体構造比率を有することを特徴とする、請求項２〜５のいずれか１項に記載の抗体−リンカー−薬物結合体またはその薬剤学的に許容される塩。
【請求項７】
下記化学式Ｉ−２の、請求項１に記載の抗体−リンカー−薬物結合体またはその薬剤学的に許容される塩：
【化８】
0006262768.tif 000241
（式中、
Ａｂは抗体であり、
ＸはＣ１−Ｃ８のアルキル基、またはＣ３−Ｃ６のシクロアルキル基であり、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４はそれぞれ独立して、水素、またはＣ１−Ｃ４のアルキル基であり、
Ａｒはアリール基であり、
Ｚは窒素または酸素であり、
Ｒ５は、Ｚが窒素の時、水素、またはＣ１−Ｃ４のアルキル基であり、Ｚが酸素の時、存在せず、
Ｒ６はヒドロキシ、Ｃ１−Ｃ４のアルコキシ基、またはオキソ（＝Ｏ）であり、
ｎは１〜５である）。
【請求項８】
Ａｂが癌細胞抗原に免疫特異的に結合する抗体であり、
ＸはＣ１−Ｃ８のアルキル基、またはＣ３−Ｃ６のシクロアルキル基であり、
Ｒ１、Ｒ２およびＲ４はそれぞれ独立して、水素、またはＣ１−Ｃ４のアルキル基であり、
Ｒ３はＣ１−Ｃ４のアルキル基であり、
ＡｒはＣ１−Ｃ４のアルキル基、Ｃ１−Ｃ４のアルコキシ基、およびハロゲンからなる群より選択された１つ以上の置換基で置換もしくは非置換のフェニルであり、
Ｚは窒素であり、
Ｒ５は水素、またはＣ１−Ｃ４のアルキル基であり、
Ｒ６はヒドロキシ、またはＣ１−Ｃ４のアルコキシ基であることを特徴とする、請求項７に記載の抗体−リンカー−薬物結合体またはその薬剤学的に許容される塩。
【請求項９】
Ａｂがトラスツズマブ（ｔｒａｓｔｕｚｕｍａｂ）であり、
Ｘはメチル、ｎ−プロピル、ｎ−ペンチル、ｎ−オクチル、またはシクロプロピルであり、
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３はメチルであり、
Ｒ４は水素またはメチルであり、
Ａｒはメチル、メトキシ、およびハロゲンからなる群より選択された１つ以上の置換基で置換もしくは非置換のフェニルであり、
Ｚは窒素であり、
Ｒ５は水素またはメチルであり、
Ｒ６はヒドロキシ、またはメトキシであることを特徴とする、請求項７に記載の抗体−リンカー−薬物結合体またはその薬剤学的に許容される塩。
【請求項１０】
下記化合物から選択されることを特徴とする、請求項７に記載の抗体−リンカー−薬物結合体またはその薬剤学的に許容される塩：
【化９−１】
0006262768.tif 000242
【化９−２】
0006262768.tif 000243
（式中、ｎは１〜５である）。
【請求項１１】
抗体が９２％以上の正常抗体構造比率を有することを特徴とする、請求項７〜１０のいずれか１項に記載の抗体−リンカー−薬物結合体またはその薬剤学的に許容される塩。
【請求項１２】
下記化学式Ｉ−３の、請求項１に記載の抗体−リンカー−薬物結合体またはその薬剤学的に許容される塩：
【化１０】
0006262768.tif 000244
（式中、
Ａｂは抗体であり、
ＸはＣ１−Ｃ８のアルキル基、またはＣ３−Ｃ６のシクロアルキル基であり、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４はそれぞれ独立して、水素、またはＣ１−Ｃ４のアルキル基であり、
Ｒ５は水素、ヒドロキシ、Ｃ１−Ｃ４のアルコキシ基、アミノ、オキソ（＝Ｏ）、またはヒドロキシイミノ（＝Ｎ−ＯＨ）であり、
Ａｒはアリール基であり、
Ｙは窒素または酸素であり、
Ｒ６は、Ｙが窒素の時、水素、またはＣ１−Ｃ４のアルキル基であり、Ｙが酸素の時、存在せず、
ｎは１〜５である）。
【請求項１３】
Ａｂが癌細胞抗原に免疫特異的に結合する抗体であり、
ＸはＣ１−Ｃ８のアルキル基、またはＣ３−Ｃ６のシクロアルキル基であり、
Ｒ１、Ｒ２およびＲ４はそれぞれ独立して、水素、またはＣ１−Ｃ４のアルキル基であり、
Ｒ３はＣ１−Ｃ４のアルキル基であり、
Ｒ５は水素、アミノ、オキソ（＝Ｏ）、またはヒドロキシイミノ（＝Ｎ−ＯＨ）であり、
ＡｒはＣ１−Ｃ４のアルキル基、Ｃ１−Ｃ４のアルコキシ基、およびハロゲンからなる群より選択された１つ以上の置換基で置換もしくは非置換のフェニルまたはナフチルであり、
Ｙは窒素または酸素であり、
Ｒ６は、Ｙが窒素の時、水素、またはＣ１−Ｃ４のアルキル基であり、Ｙが酸素の時、存在しないことを特徴とする、請求項１２に記載の抗体−リンカー−薬物結合体またはその薬剤学的に許容される塩。
【請求項１４】
Ａｂがトラスツズマブ（ｔｒａｓｔｕｚｕｍａｂ）であり、
Ｘはメチル、ｎ−プロピル、ｎ−ペンチル、ｎ−オクチル、またはシクロプロピルであり、
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３はメチルであり、
Ｒ４は水素またはメチルであり、
Ｒ５は水素、オキソ（＝Ｏ）、またはヒドロキシイミノ（＝Ｎ−ＯＨ）であり、
Ａｒはメチル、メトキシ、およびハロゲンからなる群より選択された１つ以上の置換基で置換もしくは非置換のフェニルまたはナフチルであり、
Ｙは窒素または酸素であり、
Ｒ６は、Ｙが窒素の時、水素またはメチルであり、Ｙが酸素の時、存在しないことを特徴とする、請求項１２に記載の抗体−リンカー−薬物結合体またはその薬剤学的に許容される塩。
【請求項１５】
下記化合物から選択されることを特徴とする、請求項１２に記載の抗体−リンカー−薬物結合体またはその薬剤学的に許容される塩：
【化１１−１】
0006262768.tif 000245
【化１１−２】
0006262768.tif 000246
（式中、ｎは１〜５である）。
【請求項１６】
抗体が９０％以上の正常抗体構造比率を有することを特徴とする、請求項１２〜１５のいずれか１項に記載の抗体−リンカー−薬物結合体またはその薬剤学的に許容される塩。
【請求項１７】
下記化学式Ｉ−４の、請求項１に記載の抗体−リンカー−薬物結合体またはその薬剤学的に許容される塩：
【化１２】
0006262768.tif 000247
（式中、
Ａｂは抗体であり、
ＸはＣ１−Ｃ８のアルキル基、またはＣ３−Ｃ６のシクロアルキル基であり、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ７およびＲ８はそれぞれ独立して、水素、またはＣ１−Ｃ４のアルキル基であり、
Ｒ５は水素、ヒドロキシ、Ｃ１−Ｃ４のアルコキシ基、アミノ、オキソ（＝Ｏ）、またはヒドロキシイミノ（＝Ｎ−ＯＨ）であり、
Ａｒはアリール基であり、
Ｙは窒素または酸素であり、
Ｒ６は、Ｙが窒素の時、水素、またはＣ１−Ｃ４のアルキル基であり、Ｙが酸素の時、存在せず、
ｎは１〜５である）。
【請求項１８】
Ａｂが癌細胞抗原に免疫特異的に結合する抗体であり、
ＸはＣ１−Ｃ８のアルキル基、またはＣ３−Ｃ６のシクロアルキル基であり、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ７およびＲ８はそれぞれ独立して、水素、またはＣ１−Ｃ４のアルキル基であり、
Ｒ３はＣ１−Ｃ４のアルキル基であり、
Ｒ５は水素、アミノ、オキソ（＝Ｏ）、またはヒドロキシイミノ（＝Ｎ−ＯＨ）であり、
ＡｒはＣ１−Ｃ４のアルキル基、Ｃ１−Ｃ４のアルコキシ基、およびハロゲンからなる群より選択された１つ以上の置換基で置換もしくは非置換のフェニルまたはナフチルであり、
Ｙは窒素または酸素であり、
Ｒ６は、Ｙが窒素の時、水素、またはＣ１−Ｃ４のアルキル基であり、Ｙが酸素の時、存在しないことを特徴とする、請求項１７に記載の抗体−リンカー−薬物結合体またはその薬剤学的に許容される塩。
【請求項１９】
Ａｂがトラスツズマブ（ｔｒａｓｔｕｚｕｍａｂ）であり、
Ｘはメチル、ｎ−プロピル、ｎ−ペンチル、ｎ−オクチル、またはシクロプロピルであり、
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３はメチルであり、
Ｒ４、Ｒ７およびＲ８はそれぞれ独立して、水素またはメチルであり、
Ｒ５は水素、オキソ（＝Ｏ）、またはヒドロキシイミノ（＝Ｎ−ＯＨ）であり、
Ａｒはメチル、メトキシ、およびハロゲンからなる群より選択された１つ以上の置換基で置換もしくは非置換のフェニルまたはナフチルであり、
Ｙは窒素または酸素であり、
Ｒ６は、Ｙが窒素の時、水素またはメチルであり、Ｙが酸素の時、存在しないことを特徴とする、請求項１７に記載の抗体−リンカー−薬物結合体またはその薬剤学的に許容される塩。
【請求項２０】
下記化合物から選択されることを特徴とする、請求項１７に記載の抗体−リンカー−薬物結合体またはその薬剤学的に許容される塩：
【化１３−１】
0006262768.tif 000248
【化１３−２】
0006262768.tif 000249
（式中、ｎは１〜５である）。
【請求項２１】
抗体が９７％以上の正常抗体構造比率を有することを特徴とする、請求項１７〜２０のいずれか１項に記載の抗体−リンカー−薬物結合体またはその薬剤学的に許容される塩。
【請求項２２】
（ｉ）下記化学式ＩＩ−１の化合物と下記化学式ＩＩＩ−１のドラスタチン１０誘導体を縮合反応させて、下記化学式ＩＶ−１の化合物を得るステップと、
（ｉｉ）下記化学式ＩＶ−１の化合物に下記化学式Ｖの化合物を付加反応させて、下記化学式ＶＩ−１の化合物を得るステップと、
（ｉｉｉ）下記化学式ＶＩ−１の化合物とＮ−ヒドロキシスクシンイミドを縮合反応させて、下記化学式ＶＩＩ−１の化合物を得るステップと、
（ｉｖ）下記化学式ＶＩＩ−１の化合物と抗体を反応させるステップとを含む、下記化学式Ｉ−１の抗体−リンカー−薬物結合体の製造方法：
【化１４】
0006262768.tif 000250
（式中、
Ａｂは抗体であり、
ＸはＣ１−Ｃ８のアルキル基、またはＣ３−Ｃ６のシクロアルキル基であり、
Ｒ１はヒドロキシ、Ｃ１−Ｃ４のアルコキシ基、またはオキソ（＝Ｏ）であり、
Ｒ２は水素、またはＣ１−Ｃ４のアルキル基であり、
Ｒ３は水素、ヒドロキシ、Ｃ１−Ｃ４のアルコキシ基、アミノ、オキソ（＝Ｏ）、またはヒドロキシイミノ（＝Ｎ−ＯＨ）であり、
Ｒ４はアリール基であり、
ｎは１〜５である）。
【請求項２３】
（ｉ）下記化学式ＩＩ−１の化合物と下記化学式ＩＩＩ−２のドラスタチン１０誘導体を縮合反応させて、下記化学式ＩＶ−２の化合物を得るステップと、
（ｉｉ）下記化学式ＩＶ−２の化合物に下記化学式Ｖの化合物を付加反応させて、下記化学式ＶＩ−２の化合物を得るステップと、
（ｉｉｉ）下記化学式ＶＩ−２の化合物とＮ−ヒドロキシスクシンイミドを縮合反応させて、下記化学式ＶＩＩ−２の化合物を得るステップと、
（ｉｖ）下記化学式ＶＩＩ−２の化合物と抗体を反応させるステップとを含む、下記化学式Ｉ−２の抗体−リンカー−薬物結合体の製造方法：
【化１５】
0006262768.tif 000251
（式中、
Ａｂは抗体であり、
ＸはＣ１−Ｃ８のアルキル基、またはＣ３−Ｃ６のシクロアルキル基であり、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４はそれぞれ独立して、水素、またはＣ１−Ｃ４のアルキル基であり、
Ａｒはアリール基であり、
Ｚは窒素または酸素であり、
Ｒ５は、Ｚが窒素の時、水素、またはＣ１−Ｃ４のアルキル基であり、Ｚが酸素の時、存在せず、
Ｒ６はヒドロキシ、Ｃ１−Ｃ４のアルコキシ基、またはオキソ（＝Ｏ）であり、
ｎは１〜５である）。
【請求項２４】
（ｉ）下記化学式ＩＩ−１の化合物と下記化学式ＩＩＩ−３のドラスタチン１０誘導体を縮合反応させて、下記化学式ＩＶ−３の化合物を得るステップと、
（ｉｉ）下記化学式ＩＶ−３の化合物に下記化学式Ｖの化合物を付加反応させて、下記化学式ＶＩ−３の化合物を得るステップと、
（ｉｉｉ）下記化学式ＶＩ−３の化合物とＮ−ヒドロキシスクシンイミドを縮合反応させて、下記化学式ＶＩＩ−３の化合物を得るステップと、
（ｉｖ）下記化学式ＶＩＩ−３の化合物と抗体を反応させるステップとを含む、下記化学式Ｉ−３の抗体−リンカー−薬物結合体の製造方法：
【化１６−１】
0006262768.tif 000252
【化１６−２】
0006262768.tif 000253
（式中、
Ａｂは抗体であり、
ＸはＣ１−Ｃ８のアルキル基、またはＣ３−Ｃ６のシクロアルキル基であり、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４はそれぞれ独立して、水素、またはＣ１−Ｃ４のアルキル基であり、
Ｒ５は水素、ヒドロキシ、Ｃ１−Ｃ４のアルコキシ基、アミノ、オキソ（＝Ｏ）、またはヒドロキシイミノ（＝Ｎ−ＯＨ）であり、
Ａｒはアリール基であり、
Ｙは窒素または酸素であり、
Ｒ６は、Ｙが窒素の時、水素、またはＣ１−Ｃ４のアルキル基であり、Ｙが酸素の時、存在せず、
ｎは１〜５である）。
【請求項２５】
（ｉ）下記化学式ＩＩ−２の化合物と下記化学式ＩＩＩ−４のドラスタチン１０誘導体を縮合反応させて、下記化学式ＩＶ−４の化合物を得るステップと、
（ｉｉ）下記化学式ＩＶ−４の化合物に下記化学式Ｖの化合物を付加反応させて、下記化学式ＶＩ−４の化合物を得るステップと、
（ｉｉｉ）下記化学式ＶＩ−４の化合物とＮ−ヒドロキシスクシンイミドを縮合反応させて、下記化学式ＶＩＩ−４の化合物を得るステップと、
（ｉｖ）下記化学式ＶＩＩ−４の化合物と抗体を反応させるステップとを含む、下記化学式Ｉ−４の抗体−リンカー−薬物結合体の製造方法：
【化１７−１】
0006262768.tif 000254
【化１７−２】
0006262768.tif 000255
（式中、
Ａｂは抗体であり、
ＸはＣ１−Ｃ８のアルキル基、またはＣ３−Ｃ６のシクロアルキル基であり、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ７およびＲ８はそれぞれ独立して、水素、またはＣ１−Ｃ４のアルキル基であり、
Ｒ５は水素、ヒドロキシ、Ｃ１−Ｃ４のアルコキシ基、アミノ、オキソ（＝Ｏ）、またはヒドロキシイミノ（＝Ｎ−ＯＨ）であり、
Ａｒはアリール基であり、
Ｙは窒素または酸素であり、
Ｒ６は、Ｙが窒素の時、水素、またはＣ１−Ｃ４のアルキル基であり、Ｙが酸素の時、存在せず、
ｎは１〜５である）。
【請求項２６】
ステップ（ｉ）の縮合反応が、
ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）、ヒドロキシアザベンゾトリアゾール（ＨＯＡｔ）、およびヒドロキシスクシンイミド（ＨＯＳｕ）からなる群より選択された縮合剤と、ピリジンおよびジイソプロピルエチルアミンからなる群より選択された有機塩基の存在下で行われることを特徴とする、請求項２２〜２５のいずれか１項に記載の製造方法。
【請求項２７】
ステップ（ｉｉｉ）の縮合反応が、
ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）および（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（ＥＤＣ）からなる群より選択された縮合剤の存在下で行われることを特徴とする、請求項２２〜２５のいずれか１項に記載の製造方法。
【請求項２８】
ステップ（ｉｖ）の反応溶媒が、ｐＨ６．０〜８．０のホスフェートバッファーであることを特徴とする、請求項２２〜２５のいずれか１項に記載の製造方法。
【請求項２９】
ステップ（ｉｖ）の反応溶媒が、ｐＨ６．０〜８．０のホスフェートバッファーと有機溶媒の混合溶媒であることを特徴とする、請求項２２〜２５のいずれか１項に記載の製造方法。
【請求項３０】
混合溶媒中の有機溶媒の比率は５０％以下であることを特徴とする、請求項２９に記載の製造方法。
【請求項３１】
請求項１〜５、７〜１０、１２〜１５、１７〜２０のいずれか１項に記載の抗体−リンカー−薬物結合体またはその薬剤学的に許容される塩を、薬剤学的に許容可能な担体とともに含む抗癌剤組成物。
【請求項３２】
抗癌剤が乳癌の治療に適用されることを特徴とする、請求項３１に記載の抗癌剤組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、優れた抗癌活性を有する抗体−リンカー−薬物結合体、その製造方法およびそれを有効成分として含む抗癌剤組成物に関するものである。より具体的には、本発明は、抗体のリシン残基に直接結合可能な酵素分解型ペプチドリンカーを介して抗体と細胞毒性薬物が接合された抗体−リンカー−薬物結合体、その製造方法およびそれを有効成分として含む抗癌剤組成物に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
抗体は特異的抗原に結合する免疫学的蛋白質であって、多数のモノクロナール抗体が現在抗癌剤として開発中であったり、癌の治療に用いられている。しかし、ほぼすべての抗体は、癌細胞の増殖を抑制して癌の進行を阻止してはいるものの、癌の治療には極めて制限的である［非特許文献１］。このような限界を克服するための代案として、抗体に薬物を接合した抗体−薬物結合体（ａｎｔｉｂｏｄｙ−ｄｒｕｇ  ｃｏｎｊｕｇａｔｅ：ＡＤＣ）が新たな形態の抗体治療剤として開発されている［非特許文献２］。ＡＤＣは、細胞毒性薬物または毒素を、これらを標的腫瘍細胞の内部に選択的に伝達可能な（ｉｎｔｅｒｎａｌｉｚａｔｉｏｎ）モノクロナール抗体（ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  ａｎｔｉｂｏｄｙ：ｍＡｂ）に結合（ｃｏｎｊｕｇａｔｉｏｎ）させたものを意味する。患者に投与されると、ＡＤＣはその抗体部分を介して標的細胞に結合して細胞内に伝達され、これによって、細胞毒性薬物または毒素はＡＤＣから分離され、それ自体の効能を示すようになる［非特許文献３］。
【０００３】
ＡＤＣの製造のために抗体と細胞毒性薬物を効果的に接合するためには、適当な形態のリンカー（ｌｉｎｋｅｒ）を用いる方法が普遍的である。この時、使用されるリンカーの代表例としては、ヒドラゾン、ジスルフィド、ペプチドリンカーなどがある。ＡＤＣが効果的に作用するためには、基本的に、ＡＤＣの３つの構成要素であるｍＡｂ、リンカー、および細胞毒性薬物がすべて一定水準以上の機能を発揮しなければならない［非特許文献４］。
【０００４】
特許文献１には、特定のリソソーム内に存在する蛋白質分解酵素のカテプシン（ｃａｔｈｅｐｓｉｎ）によって分解される酵素分解型（ｅｎｚｙｍｅ  ｃｌｅａｖａｂｌｅ）ペプチドリンカーを用いてドキソルビシン、タキソールなどの細胞毒性薬物を抗体に結合させたＡＤＣが開示されている。また、特許文献２には、同じ酵素分解型ペプチドリンカーを用いてＭｅＶａｌ−Ｖａｌ−Ｄｉｌ−Ｄａｐ−Ｎｏｒｅｐｈｅｄｒｉｎｅ（ＭＭＡＥ）およびＭｅＶａｌ−Ｖａｌ−Ｄｉｌ−Ｄａｐ−Ｐｈｅ（ＭＭＡＦ）のような細胞毒性薬物を抗体に結合させたＡＤＣが報告されている。
【０００５】
従来の酵素分解型ペプチドリンカーを用いたＡＤＣの製造方法によれば、リンカーを抗体に接合する方法で抗体とジチオスレイトール（ｄｉｔｈｉｏｔｈｒｅｉｔｏｌ：ＤＴＴ）のような還元剤を反応させて、抗体に存在するジスルフィド結合から抗体内チオール基を生成した後、生成されたチオール基とリンカーを接合する技術を利用する。しかし、還元剤を用いて抗体の分子内ジスルフィド結合を切る方式は、必然的に抗体構造自体の変形が伴い、これによって抗体の抗原に対する親和力に悪い影響を与えることがある。また、還元反応時、抗体の部分的な分解を伴い、最終ＡＤＣの精製を困難にする要因とされたりする。同時に、反応中に抗体が容易に集合体を形成（ａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎ）して、最終ＡＤＣの収率が低くなる問題もある。
【０００６】
また、抗体の分子内ジスルフィド結合を還元させてチオール基を生成する代わりに、２−イミノチオラン（Ｔｒａｕｔ’ｓ  ｒｅａｇｅｎｔ）のようなチオール基生成試薬と抗体のリシン残基のアミノ基を反応させてチオール基を生成してもよいことが知られているが、この場合には、抗体に結合されたチオール基生成試薬の個数が０から数個まで多様な分布を示し、生成されたチオール基とリンカーを接合させる時、同じ抗体内にリンカーの結合されたチオール基とリンカーの結合されていないチオール基が混在する結果が生じる。したがって、製造されたＡＤＣは、リンカーが結合されていない不必要なチオール基の存在、チオール基生成試薬に起因する残基などによって、ＡＤＣの性能、特に生体内で薬物動力学が良くない問題を抱えている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】米国特許第６，２１４，３４５号明細書
【特許文献２】米国特許第７，９６４，５６６号明細書
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】Ｓｈａｒｋｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌ．Ｒｅｖ．，２００８，１４０７−１４２０
【非特許文献２】Ｃｈａｒｉ，Ａｃｃ．Ｃｈｅｍ．Ｒｅｓ．，４１（２００８），９８−１０７
【非特許文献３】Ｈａｍｂｌｅｔｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，１０：７０６３−７０７０，Ｏｃｔｏｂｅｒ  １５，１９９９
【非特許文献４】Ｃｈａｒｉ，Ａｃｃ．Ｃｈｅｍ．Ｒｅｓ．，４１（２００８），９８−１０７
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明者らは、上記の目的としない抗体の構造的変形なしに、細胞毒性薬物が抗体に接合されたＡＤＣを開発すべく鋭意研究検討した結果、抗体のリシン残基に直接結合可能な酵素分解型ペプチドリンカーを用いることで、従来のペプチドリンカーの問題を克服できることを見出して、本発明を完成するに至った。
【００１０】
したがって、本発明の一の目的は、抗体のリシン残基に直接結合可能な酵素分解型ペプチドリンカーを介して抗体と細胞毒性薬物が接合された抗体−リンカー−薬物結合体を提供することである。
【００１１】
本発明の他の目的は、前記抗体−リンカー−薬物結合体を高収率で製造する方法を提供することである。
【００１２】
本発明のさらに他の目的は、前記抗体−リンカー−薬物結合体を含む抗癌剤組成物を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本発明は、下記化学式Ｉ、Ｉ−１、Ｉ−２、Ｉ−３またはＩ−４の抗体−リンカー−薬物結合体またはその薬剤学的に許容される塩に関するものである。
【００１４】
【化１】
0006262768.tif 000002
【００１５】
式中、
Ａｂは抗体であり、
Ｌはリンカーであり、
Ｄは薬物であり、
ｎは１〜５である。
【００１６】
【化２】
0006262768.tif 000003
【００１７】
式中、
Ａｂは抗体であり、
ＸはＣ１−Ｃ８のアルキル基、またはＣ３−Ｃ６のシクロアルキル基であり、
Ｒ１は水素、ヒドロキシ、Ｃ１−Ｃ４のアルコキシ基、またはオキソ（＝Ｏ）であり、
Ｒ２は水素、またはＣ１−Ｃ４のアルキル基であり、
Ｒ３は水素、ヒドロキシ、Ｃ１−Ｃ４のアルコキシ基、アミノ、オキソ（＝Ｏ）、またはヒドロキシイミノ（＝Ｎ−ＯＨ）であり、
Ｒ４はアリール基であり、
ｎは１〜５である。
【００１８】
【化３】
0006262768.tif 000004
【００１９】
式中、
Ａｂは抗体であり、
ＸはＣ１−Ｃ８のアルキル基、またはＣ３−Ｃ６のシクロアルキル基であり、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４はそれぞれ独立して、水素、またはＣ１−Ｃ４のアルキル基であり、
Ａｒはアリール基であり、
Ｚは窒素または酸素であり、
Ｒ５は、Ｚが窒素の時、水素、またはＣ１−Ｃ４のアルキル基であり、Ｚが酸素の時、存在せず、
Ｒ６は水素、ヒドロキシ、Ｃ１−Ｃ４のアルコキシ基、またはオキソ（＝Ｏ）であり、
ｎは１〜５である。
【００２０】
【化４】
0006262768.tif 000005
【００２１】
式中、
Ａｂは抗体であり、
ＸはＣ１−Ｃ８のアルキル基、またはＣ３−Ｃ６のシクロアルキル基であり、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４はそれぞれ独立して、水素、またはＣ１−Ｃ４のアルキル基であり、
Ｒ５は水素、ヒドロキシ、Ｃ１−Ｃ４のアルコキシ基、アミノ、オキソ（＝Ｏ）、またはヒドロキシイミノ（＝Ｎ−ＯＨ）であり、
Ａｒはアリール基であり、
Ｙは窒素または酸素であり、
Ｒ６は、Ｙが窒素の時、水素、またはＣ１−Ｃ４のアルキル基であり、Ｙが酸素の時、存在せず、
ｎは１〜５である。
【００２２】
【化５】
0006262768.tif 000006
【００２３】
式中、
Ａｂは抗体であり、
ＸはＣ１−Ｃ８のアルキル基、またはＣ３−Ｃ６のシクロアルキル基であり、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ７およびＲ８はそれぞれ独立して、水素、またはＣ１−Ｃ４のアルキル基であり、
Ｒ５は水素、ヒドロキシ、Ｃ１−Ｃ４のアルコキシ基、アミノ、オキソ（＝Ｏ）、またはヒドロキシイミノ（＝Ｎ−ＯＨ）であり、
Ａｒはアリール基であり、
Ｙは窒素または酸素であり、
Ｒ６は、Ｙが窒素の時、水素、またはＣ１−Ｃ４のアルキル基であり、Ｙが酸素の時、存在せず、
ｎは１〜５である。
【００２４】
本明細書において、Ｃ１−Ｃ８のアルキル基は、炭素数１〜８個からなる直鎖状もしくは分枝状炭化水素を意味し、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｎ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−オクチルなどが含まれるが、これらに限定されるものではない。
【００２５】
本明細書において、Ｃ３−Ｃ６のシクロアルキル基は、炭素数３〜６個からなる環状炭化水素を意味し、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルなどが含まれるが、これらに限定されるものではない。
【００２６】
本明細書において、Ｃ１−Ｃ４のアルコキシ基は、炭素数１〜４個からなる直鎖状もしくは分枝状アルコキシ基を意味し、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロパンオキシなどが含まれるが、これらに限定されるものではない。
【００２７】
本明細書において、Ｃ１−Ｃ４のアルキル基は、炭素数１〜４個からなる直鎖状もしくは分枝状炭化水素を意味し、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｉ−ブチル、ｔ−ブチルなどが含まれるが、これらに限定されるものではない。
【００２８】
本明細書において、アリール基は、芳香族基とヘテロ芳香族基およびそれらの部分的に還元された誘導体をすべて含む。前記芳香族基は、５〜１５角形からなる単純または融合環状であり、ヘテロ芳香族基は、酸素、硫黄または窒素を１つ以上含む芳香族基を意味する。代表的なアリール基の例としては、フェニル、ナフチル、ピリジニル（ｐｙｒｉｄｉｎｙｌ）、フラニル（ｆｕｒａｎｙｌ）、チオフェニル（ｔｈｉｏｐｈｅｎｙｌ）、インドリル（ｉｎｄｏｌｙｌ）、キノリニル（ｑｕｉｎｏｌｉｎｙｌ）、イミダゾリニル（ｉｍｉｄａｚｏｌｉｎｙｌ）、オキサゾリル（ｏｘａｚｏｌｙｌ）、チアゾリル（ｔｈｉａｚｏｌｙｌ）、テトラヒドロナフチルなどがあるが、これらに限定されるものではない。
【００２９】
前記Ｃ１−Ｃ８のアルキル基、Ｃ３−Ｃ６のシクロアルキル基、Ｃ１−Ｃ４のアルコキシ基、Ｃ１−Ｃ４のアルキル基、およびアリール基は、１つまたはそれ以上の水素が、Ｃ１−Ｃ４のアルキル基、Ｃ２−Ｃ４のアルケニル基、Ｃ２−Ｃ４のアルキニル基、Ｃ３−Ｃ１０のシクロアルキル基、Ｃ１−Ｃ４のハロアルキル基、Ｃ１−Ｃ４のアルコキシ基、Ｃ１−Ｃ４のチオアルコキシ基、アリール基、アシル基、ヒドロキシ、チオ（ｔｈｉｏ）、ハロゲン、アミノ、アルコキシカルボニル、カルボキシ、カルバモイル、シアノ、ニトロなどで置換されてもよい。
【００３０】
本明細書において、抗体はできるだけ広い意味で使用され、具体的には、無損傷（ｉｎｔａｃｔ）モノクロナール抗体、ポリクロナール抗体、２種以上の無損傷抗体から形成された多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）、および目的の生物学的活性を示す抗体断片を含む。抗体は、特異的な抗原を認識して結合可能な免疫系によって生成される蛋白質である。その構造的な面で、抗体は、通常４個のアミノ酸鎖（２個の重鎖および２個の軽鎖）からなるＹ−形状の蛋白質を有する。それぞれの抗体は、主に可変領域および不変領域の２つの領域を有する。Ｙの腕の末端部分に位置した可変領域は、標的抗原に結合して相互作用する。前記可変領域は、特定抗原上の特異的結合部位を認識して結合する相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む。Ｙの尾部分に位置した不変領域は、免疫系によって認識されて相互作用する。標的抗原は、一般的に多数の抗体上のＣＤＲによって認識される、エピトープともいう多数の結合部位を有している。相異なるエピトープに特異的に結合するそれぞれの抗体は、相異なる構造を有する。そのため、１つの抗原は、１つ以上の相応する抗体を有することができる。
【００３１】
本発明の一実施形態として、抗体は、癌細胞抗原に免疫特異的に結合する抗体であってよい。癌細胞抗原に免疫特異的な抗体は、商業的に入手するか、組換え発現技術のように当業界で公知の方法によって製造されてもよい。癌細胞抗原に免疫特異的な抗体をコーディングするヌクレオチド配列は、例えば、ジーンバンクデータベースまたは文献から得るか、通常のクローニングおよびシーケンシングによって得ることができる。癌の治療に使用可能な抗体の例は、転移性乳癌の治療のためのヒト化された抗−ＨＥＲ２抗体のハーセプチン（ジェネンテック社のトラスツズマブ）、非ホジキンリンパ腫の治療のためのキメラ抗−ＣＤ２０抗体のリツキサン（ジェネンテック社のリツキシマブ）、頭部および首の癌のような上皮成長因子陽性癌の治療のためのキメラ抗−ＥＧＦＲ抗体のアービタックス（イムクローンシステムズ社のセツキシマブ）、および肉腫の治療のためのヒト化された抗−インテグリンαｖβ３抗体のビタキシン（メドイミューン社）を含むが、これらに制限されない。
【００３２】
本発明の抗体−リンカー−薬物結合体において、リンカー−薬物は、抗体のリシン残基に直接結合される。したがって、抗体の分子内ジスルフィド結合の還元、チオール基生成試薬による残基の残留などの抗体蛋白質構造の不必要な変形が発生せず、抗体の異常な破片や凝集の発生が最小化され、９０％以上、好ましくは９２％以上、より好ましくは９７％以上、さらに好ましくは９８％以上の正常抗体構造比率を有する。
【００３３】
本発明の抗体−リンカー−薬物結合体は、好ましくは、
ｉ）上記化学式Ｉ−１中、
Ａｂが癌細胞抗原に免疫特異的に結合する抗体であり、
ＸはＣ１−Ｃ８のアルキル基、またはＣ３−Ｃ６のシクロアルキル基であり、
Ｒ１は水素、ヒドロキシ、またはＣ１−Ｃ４のアルコキシ基であり、
Ｒ２は水素、またはＣ１−Ｃ４のアルキル基であり、
Ｒ３は水素、オキソ（＝Ｏ）、またはヒドロキシイミノ（＝Ｎ−ＯＨ）であり、
Ｒ４はＣ１−Ｃ４のアルキル基、Ｃ１−Ｃ４のアルコキシ基、およびハロゲンからなる群より選択された１つ以上の置換基で置換もしくは非置換のフェニルである抗体−リンカー−薬物結合体であるか、
ｉｉ）上記化学式Ｉ−２中、
Ａｂが癌細胞抗原に免疫特異的に結合する抗体であり、
ＸはＣ１−Ｃ８のアルキル基、またはＣ３−Ｃ６のシクロアルキル基であり、
Ｒ１、Ｒ２およびＲ４はそれぞれ独立して、水素、またはＣ１−Ｃ４のアルキル基であり、
Ｒ３はＣ１−Ｃ４のアルキル基であり、
ＡｒはＣ１−Ｃ４のアルキル基、Ｃ１−Ｃ４のアルコキシ基、およびハロゲンからなる群より選択された１つ以上の置換基で置換もしくは非置換のフェニルであり、
Ｚは窒素であり、
Ｒ５は水素、またはＣ１−Ｃ４のアルキル基であり、
Ｒ６は水素、ヒドロキシ、またはＣ１−Ｃ４のアルコキシ基である抗体−リンカー−薬物結合体であるか、
ｉｉｉ）上記化学式Ｉ−３中、
Ａｂが癌細胞抗原に免疫特異的に結合する抗体であり、
ＸはＣ１−Ｃ８のアルキル基、またはＣ３−Ｃ６のシクロアルキル基であり、
Ｒ１、Ｒ２およびＲ４はそれぞれ独立して、水素、またはＣ１−Ｃ４のアルキル基であり、
Ｒ３はＣ１−Ｃ４のアルキル基であり、
Ｒ５は水素、アミノ、オキソ（＝Ｏ）、またはヒドロキシイミノ（＝Ｎ−ＯＨ）であり、
ＡｒはＣ１−Ｃ４のアルキル基、Ｃ１−Ｃ４のアルコキシ基、およびハロゲンからなる群より選択された１つ以上の置換基で置換もしくは非置換のフェニルまたはナフチルであり、
Ｙは窒素または酸素であり、
Ｒ６は、Ｙが窒素の時、水素、またはＣ１−Ｃ４のアルキル基であり、Ｙが酸素の時、存在しない抗体−リンカー−薬物結合体であるか、
ｉｖ）上記化学式Ｉ−４中、
Ａｂが癌細胞抗原に免疫特異的に結合する抗体であり、
ＸはＣ１−Ｃ８のアルキル基、またはＣ３−Ｃ６のシクロアルキル基であり、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ７およびＲ８はそれぞれ独立して、水素、またはＣ１−Ｃ４のアルキル基であり、
Ｒ３はＣ１−Ｃ４のアルキル基であり、
Ｒ５は水素、アミノ、オキソ（＝Ｏ）、またはヒドロキシイミノ（＝Ｎ−ＯＨ）であり、
ＡｒはＣ１−Ｃ４のアルキル基、Ｃ１−Ｃ４のアルコキシ基、およびハロゲンからなる群より選択された１つ以上の置換基で置換もしくは非置換のフェニルまたはナフチルであり、
Ｙは窒素または酸素であり、
Ｒ６は、Ｙが窒素の時、水素、またはＣ１−Ｃ４のアルキル基であり、Ｙが酸素の時、存在しない抗体−リンカー−薬物結合体である。
【００３４】
より好ましくは、本発明の抗体−リンカー−薬物結合体は、
ｉ）上記化学式Ｉ−１中、
Ａｂがトラスツズマブ（ｔｒａｓｔｕｚｕｍａｂ）であり、
Ｘはメチル、ｎ−プロピル、ｎ−ペンチル、ｎ−オクチル、またはシクロプロピルであり、
Ｒ１は水素、ヒドロキシ、またはメトキシであり、
Ｒ２は水素またはメチルであり、
Ｒ３は水素、オキソ（＝Ｏ）、またはヒドロキシイミノ（＝Ｎ−ＯＨ）であり、
Ｒ４はメチル、メトキシ、およびハロゲンからなる群より選択された１つ以上の置換基で置換もしくは非置換のフェニルである抗体−リンカー−薬物結合体であるか、
ｉｉ）上記化学式Ｉ−２中、
Ａｂがトラスツズマブ（ｔｒａｓｔｕｚｕｍａｂ）であり、
Ｘはメチル、ｎ−プロピル、ｎ−ペンチル、ｎ−オクチル、またはシクロプロピルであり、
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３はメチルであり、
Ｒ４は水素またはメチルであり、
Ａｒはメチル、メトキシ、およびハロゲンからなる群より選択された１つ以上の置換基で置換もしくは非置換のフェニルであり、
Ｚは窒素であり、
Ｒ５は水素またはメチルであり、
Ｒ６は水素、ヒドロキシ、またはメトキシである抗体−リンカー−薬物結合体であるか、
ｉｉｉ）上記化学式Ｉ−３中、
Ａｂがトラスツズマブ（ｔｒａｓｔｕｚｕｍａｂ）であり、
Ｘはメチル、ｎ−プロピル、ｎ−ペンチル、ｎ−オクチル、またはシクロプロピルであり、
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３はメチルであり、
Ｒ４は水素またはメチルであり、
Ｒ５は水素、オキソ（＝Ｏ）、またはヒドロキシイミノ（＝Ｎ−ＯＨ）であり、
Ａｒはメチル、メトキシ、およびハロゲンからなる群より選択された１つ以上の置換基で置換もしくは非置換のフェニルまたはナフチルであり、
Ｙは窒素または酸素であり、
Ｒ６は、Ｙが窒素の時、水素またはメチルであり、Ｙが酸素の時、存在しない抗体−リンカー−薬物結合体であるか、
ｉｖ）上記化学式Ｉ−４中、
Ａｂがトラスツズマブ（ｔｒａｓｔｕｚｕｍａｂ）であり、
Ｘはメチル、ｎ−プロピル、ｎ−ペンチル、ｎ−オクチル、またはシクロプロピルであり、
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３はメチルであり、
Ｒ４、Ｒ７およびＲ８はそれぞれ独立して、水素またはメチルであり、
Ｒ５は水素、オキソ（＝Ｏ）、またはヒドロキシイミノ（＝Ｎ−ＯＨ）であり、
Ａｒはメチル、メトキシ、およびハロゲンからなる群より選択された１つ以上の置換基で置換もしくは非置換のフェニルまたはナフチルであり、
Ｙは窒素または酸素であり、
Ｒ６は、Ｙが窒素の時、水素またはメチルであり、Ｙが酸素の時、存在しない抗体−リンカー−薬物結合体である。
【００３５】
本明細書において、薬剤学的に許容される塩は、無毒性無機酸塩および有機酸塩をすべて含み、例えば、塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩、酢酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、クエン酸塩などを含むが、これらに限定されるものではない。
【００３６】
本発明の抗体−リンカー−薬物結合体のうちの代表的な物質は下記のグループから選択されてもよい。
【００３７】
【化６−１】
0006262768.tif 000007
【００３８】
【化６−２】
0006262768.tif 000008
【００３９】
【化６−３】
0006262768.tif 000009
【００４０】
【化６−４】
0006262768.tif 000010
【００４１】
【化６−５】
0006262768.tif 000011
【００４２】
【化６−６】
0006262768.tif 000012
【００４３】
【化６−７】
0006262768.tif 000013
【００４４】
【化６−８】
0006262768.tif 000014
【００４５】
【化６−９】
0006262768.tif 000015
【００４６】
上記化学式Ｉ−５〜Ｉ−４１中、ｎは１〜５である。
【００４７】
一方、本発明は、上記化学式Ｉ−１、Ｉ−２、Ｉ−３またはＩ−４の抗体−リンカー−薬物結合体の製造方法に関するものであって、本発明の製造方法は、
（ｉ）下記化学式ＩＩ−１の化合物と下記化学式ＩＩＩ−１、ＩＩＩ−２またはＩＩＩ−３のドラスタチン１０誘導体を縮合反応させて、それぞれ下記化学式ＩＶ−１、ＩＶ−２、ＩＶ−３の化合物を得るか、下記化学式ＩＩ−２の化合物と下記化学式ＩＩＩ−４のドラスタチン１０誘導体を縮合反応させて、下記化学式ＩＶ−４の化合物を得るステップと、
（ｉｉ）下記化学式ＩＶ−１、ＩＶ−２、ＩＶ−３またはＩＶ−４の化合物に下記化学式Ｖの化合物を付加反応させて、それぞれ下記化学式ＶＩ−１、ＶＩ−２、ＶＩ−３またはＶＩ−４の化合物を得るステップと、
（ｉｉｉ）下記化学式ＶＩ−１、ＶＩ−２、ＶＩ−３またはＶＩ−４の化合物とＮ−ヒドロキシスクシンイミドを縮合反応させて、それぞれ下記化学式ＶＩＩ−１、ＶＩＩ−２、ＶＩＩ−３またはＶＩＩ−４の化合物を得るステップと、
（ｉｖ）下記化学式ＶＩＩ−１、ＶＩＩ−２、ＶＩＩ−３またはＶＩＩ−４の化合物と抗体を反応させるステップとを含む。
【００４８】
【化７】
0006262768.tif 000016
【００４９】
【化８】
0006262768.tif 000017
【００５０】
式中、Ｒ７とＲ８は上記化学式Ｉ−４で定義した通りである。
【００５１】
【化９】
0006262768.tif 000018
【００５２】
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は上記化学式Ｉ−１で定義した通りである。
【００５３】
【化１０】
0006262768.tif 000019
【００５４】
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、ＡｒおよびＺは上記化学式Ｉ−２で定義した通りである。
【００５５】
【化１１】
0006262768.tif 000020
【００５６】
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、ＡｒおよびＹは上記化学式Ｉ−３で定義した通りである。
【００５７】
【化１２】
0006262768.tif 000021
【００５８】
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、ＡｒおよびＹは上記化学式Ｉ−４で定義した通りである。
【００５９】
【化１３】
0006262768.tif 000022
【００６０】
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は上記化学式Ｉ−１で定義した通りである。
【００６１】
【化１４】
0006262768.tif 000023
【００６２】
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、ＡｒおよびＺは上記化学式Ｉ−２で定義した通りである。
【００６３】
【化１５】
0006262768.tif 000024
【００６４】
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、ＡｒおよびＹは上記化学式Ｉ−３で定義した通りである。
【００６５】
【化１６】
0006262768.tif 000025
【００６６】
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、ＡｒおよびＹは上記化学式Ｉ−４で定義した通りである。
【００６７】
【化１７】
0006262768.tif 000026
【００６８】
式中、Ｘは上記化学式Ｉ−１、Ｉ−２、Ｉ−３またはＩ−４で定義した通りである。
【００６９】
【化１８】
0006262768.tif 000027
【００７０】
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＸは上記化学式Ｉ−１で定義した通りである。
【００７１】
【化１９】
0006262768.tif 000028
【００７２】
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ａｒ、ＸおよびＺは上記化学式Ｉ−２で定義した通りである。
【００７３】
【化２０】
0006262768.tif 000029
【００７４】
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ａｒ、ＸおよびＹは上記化学式Ｉ−３で定義した通りである。
【００７５】
【化２１】
0006262768.tif 000030
【００７６】
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ａｒ、ＸおよびＹは上記化学式Ｉ−４で定義した通りである。
【００７７】
【化２２】
0006262768.tif 000031
【００７８】
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＸは上記化学式Ｉ−１で定義した通りである。
【００７９】
【化２３】
0006262768.tif 000032
【００８０】
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ａｒ、ＸおよびＺは上記化学式Ｉ−２で定義した通りである。
【００８１】
【化２４】
0006262768.tif 000033
【００８２】
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ａｒ、ＸおよびＹは上記化学式Ｉ−３で定義した通りである。
【００８３】
【化２５】
0006262768.tif 000034
【００８４】
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ａｒ、ＸおよびＹは上記化学式Ｉ−４で定義した通りである。
【００８５】
以下、本発明に係る上記化学式Ｉ−１〜Ｉ−４の抗体−リンカー−薬物結合体の製造方法を、それぞれ下記反応式Ｉ−１〜Ｉ−４を参照して詳細に説明する。下記反応式Ｉ−１〜Ｉ−４に記載の方法は、代表的に使用された方法を例示したものに過ぎず、単位操作の順序、反応試薬、反応条件などは、場合によっていくらでも変更可能である。
【００８６】
【化２６】
0006262768.tif 000035
【００８７】
【化２７】
0006262768.tif 000036
【００８８】
【化２８】
0006262768.tif 000037
【００８９】
【化２９】
0006262768.tif 000038
【００９０】
前記ステップ（ｉ）では、化学式ＩＩ−１の化合物と化学式ＩＩＩ−１、ＩＩＩ−２またはＩＩＩ−３のドラスタチン１０誘導体を縮合反応させて、それぞれ化学式ＩＶ−１、ＩＶ−２またはＩＶ−３の化合物を得るか、化学式ＩＩ−２の化合物と化学式ＩＩＩ−４のドラスタチン１０誘導体を縮合反応させて、それぞれ化学式ＩＶ−４の化合物を得る。
【００９１】
前記縮合反応は、縮合剤の存在下で行われてもよく、縮合剤としては、ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）、ヒドロキシアザベンゾトリアゾール（ＨＯＡｔ）、ヒドロキシスクシンイミド（ＨＯＳｕ）などを使用することができるが、これらに限定されるものではない。
【００９２】
縮合反応時、必要であれば、ピリジン、ジイソプロピルエチルアミンのような有機塩基を、縮合剤とともに使用することができる。
【００９３】
反応溶媒としては、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、Ｎ−メチル−２−ピロリドン（ＮＭＰ）などを使用することができ、反応温度は２０〜２５℃が好ましい。
【００９４】
前記ステップ（ｉｉ）では、化学式ＩＶ−１、ＩＶ−２、ＩＶ−３またはＩＶ−４の化合物に化学式Ｖの化合物を付加反応させて、化学式ＶＩ−１、ＶＩ−２、ＶＩ−３またはＶＩ−４の化合物を得る。
【００９５】
反応溶媒としては、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、アセトニトリル（ＭｅＣＮ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）などを使用することができ、反応温度は２０〜２５℃が好ましい。
【００９６】
前記ステップ（ｉｉｉ）では、化学式ＶＩ−１、ＶＩ−２、ＶＩ−３またはＶＩ−４の化合物とＮ−ヒドロキシスクシンイミドを縮合反応させて、化学式ＶＩ−１、ＶＩ−２、ＶＩ−３またはＶＩ−４の化合物のカルボン酸基を活性化する。
【００９７】
前記縮合反応は、縮合剤の存在下で行われてもよく、縮合剤としては、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（ＥＤＣ）などを使用することができるが、これらに限定されるものではない。
【００９８】
反応溶媒としては、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）、ジクロロメタン（ＤＣＭ）などを使用することができ、反応温度は２０〜２５℃が好ましい。
【００９９】
前記ステップ（ｉｖ）では、化学式ＶＩＩ−１、ＶＩＩ−２、ＶＩＩ−３またはＶＩＩ−４の化合物と抗体を反応させて、最終生成物である化学式Ｉ−１、Ｉ−２、Ｉ−３またはＩ−４の抗体−リンカー−薬物結合体を得る。
【０１００】
反応溶媒としては、ｐＨ６．０〜８．０のホスフェートバッファーを使用することができ、細胞毒性薬物の種類に応じて、化学式ＶＩＩ−１、ＶＩＩ−２、ＶＩＩ−３またはＶＩＩ−４の化合物であるリンカー−細胞毒性薬物のホスフェートバッファーでの溶解度が異なるため、必要に応じて、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）、アセトニトリル（ＭｅＣＮ）、１，４−ジオキサンなどの有機溶媒を混合して使用することができる。この時、混合溶媒中の有機溶媒の比率は５０％以下であることが好ましい。
【０１０１】
上記化学式ＶＩＩ−１、ＶＩＩ−２、ＶＩＩ−３またはＶＩＩ−４の化合物は、抗体を基準として３〜２５当量使用することが好ましい。この時、製造された抗体−リンカー−薬物結合体において１分子の抗体に結合された薬物の数である薬物−抗体比（ｄｒｕｇ−ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｒａｔｉｏ：ＤＡＲ）は約１〜５になる。
【０１０２】
上記化学式ＩＩ−１またはＩＩ−２の化合物は、酵素分解型（ｅｎｚｙｍｅ  ｃｌｅａｖａｂｌｅ）ペプチドリンカーとして公知の物質で、米国特許第６，２１４，３４５号に記載の方法によって容易に製造することができる。
【０１０３】
また、上記化学式ＩＩＩ−１、ＩＩＩ−２、ＩＩＩ−３またはＩＩＩ−４のドラスタチン１０誘導体は、細胞毒性薬物であって、本出願人によって２０１２年９月２０日付で出願されて係属中の大韓民国特許出願第１０−２０１２−０１０４７１０号または米国特許第５，５９９，９０２号に記載の方法によって製造することができる。そこで、前記特許文献をすべて本明細書に参照として組み込む。
【０１０４】
例えば、上記化学式ＩＩＩ−１、ＩＩＩ−２、ＩＩＩ−３またはＩＩＩ−４のドラスタチン１０誘導体は、それぞれ下記反応式ＩＩ−１〜ＩＩ−４に示した方法によって製造できる。
【０１０５】
【化３０】
0006262768.tif 000039
【０１０６】
【化３１】
0006262768.tif 000040
【０１０７】
【化３２】
0006262768.tif 000041
【０１０８】
【化３３】
0006262768.tif 000042
【０１０９】
本発明の抗体−リンカー−薬物結合体は、優れた抗腫瘍活性を示す（試験例４および試験例６参照）。
【０１１０】
したがって、本発明は、上記化学式Ｉ−１〜Ｉ−４の抗体−リンカー−薬物結合体またはその薬剤学的に許容される塩を、薬剤学的に許容可能な担体とともに含む抗癌剤組成物、特に乳癌治療用組成物に関するものである。
【０１１１】
本発明に係る抗癌剤組成物は、経口的に（例えば、服用または吸入）または非経口的に（例えば、注射、沈着、移植、座薬）投与可能であり、注射は、例えば、静脈注射、皮下注射、筋肉内注射または腹腔内注射であってよい。本発明に係る抗癌剤は、投与経路によって、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、ファインサブティレ（ｆｉｎｅ  ｓｕｂｔｉｌａｅ）、粉剤、舌下錠剤、座薬、軟膏、注射剤、乳濁液剤、懸濁液剤、シロップ剤、噴霧剤などに剤形化されてもよい。前記様々な形態の本発明に係る抗癌剤組成物は、各剤形に通常使用される薬剤学的に許容される担体（ｃａｒｒｉｅｒ）を用いて公知技術によって製造できる。薬剤学的に許容される担体の例は、賦形剤、結合剤、崩壊剤（ｄｉｓｉｎｔｅｇｒａｔｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）、潤滑剤、防腐剤、抗酸化剤、等張剤（ｉｓｏｔｏｎｉｃ  ａｇｅｎｔ）、緩衝剤、被膜剤、甘味剤、溶解剤、基剤（ｂａｓｅ）、分散剤、湿潤剤、懸濁化剤、安定剤、着色剤などを含む。
【０１１２】
本発明に係る抗癌剤組成物は、薬剤の形態に応じて異なるが、本発明の化合物またはその薬剤学的に許容される塩を約０．０１〜９５重量％含む。
【０１１３】
本発明の抗癌剤組成物の具体的な投与量は、治療される人を含む哺乳動物の種類、体重、性別、疾患の程度、医師の判断などに応じて異なっていてもよい。好ましくは、経口投与の場合には、１日に、体重１ｋｇあたり活性成分０．０１〜５０ｍｇが投与され、非経口投与の場合には、１日に、体重１ｋｇあたり活性成分０．０１〜１０ｍｇが投与される。前記１日の総投与量は、疾患の程度、医師の判断などに応じて１回にまたは数回に分けて投与されてもよい。
【発明の効果】
【０１１４】
本発明に係る抗体−リンカー−薬物結合体は、リンカー−薬物が抗体のリシン残基に直接結合され、抗体蛋白質構造の不必要な変形が発生せず、生体内安定性を確保しながら、細胞毒性薬物の効果的かつ選択的な伝達を可能にすることで、１回の投与で癌、特に乳癌を効果的に治療することができる。同時に、本発明の製造方法によれば、抗体−リンカー−薬物結合体を高収率で製造することができる。
【図面の簡単な説明】
【０１１５】
【図１】ＢＴ−４７４細胞に対する、本発明に係る抗体−リンカー−薬物結合体（Ｉ−６）と（Ｉ−８）の試験管内の細胞生長阻害能を示すグラフである。
【図２】ＢＴ−４７４細胞に対する、本発明に係る抗体−リンカー−薬物結合体（Ｉ−１０）の試験管内の細胞生長阻害能を示すグラフである。
【図３】ＢＴ−４７４細胞に対する、本発明に係る抗体−リンカー−薬物結合体（Ｉ−１１）の試験管内の細胞生長阻害能を示すグラフである。
【図４】ＢＴ−４７４細胞に対する、本発明に係る抗体−リンカー−薬物結合体（Ｉ−１６）の試験管内の細胞生長阻害能を示すグラフである。
【図５】ＢＴ−４７４細胞に対する、本発明に係る抗体−リンカー−薬物結合体（Ｉ−１８）の試験管内の細胞生長阻害能を示すグラフである。
【図６】ＢＴ−４７４細胞に対する、本発明に係る抗体−リンカー−薬物結合体（Ｉ−１９）と（Ｉ−２１）の試験管内の細胞生長阻害能を示すグラフである。
【図７】ＢＴ−４７４細胞に対する、本発明に係る抗体−リンカー−薬物結合体（Ｉ−２０）と（Ｉ−２２）の試験管内の細胞生長阻害能を示すグラフである。
【図８】ＢＴ−４７４細胞に対する、本発明に係る抗体−リンカー−薬物結合体（Ｉ−２３）の試験管内の細胞生長阻害能を示すグラフである。
【図９】ＢＴ−４７４細胞に対する、本発明に係る抗体−リンカー−薬物結合体（Ｉ−２４）の試験管内の細胞生長阻害能を示すグラフである。
【図１０】ＢＴ−４７４細胞に対する、本発明に係る抗体−リンカー−薬物結合体（Ｉ−２５）の試験管内の細胞生長阻害能を示すグラフである。
【図１１】ＢＴ−４７４細胞に対する、本発明に係る抗体−リンカー−薬物結合体（Ｉ−２６）の試験管内の細胞生長阻害能を示すグラフである。
【図１２】ＢＴ−４７４細胞に対する、本発明に係る抗体−リンカー−薬物結合体（Ｉ−３２）の試験管内の細胞生長阻害能を示すグラフである。
【図１３】ＢＴ−４７４細胞に対する、本発明に係る抗体−リンカー−薬物結合体（Ｉ−３３）の試験管内の細胞生長阻害能を示すグラフである。
【図１４】ＢＴ−４７４細胞に対する、本発明に係る抗体−リンカー−薬物結合体（Ｉ−３４）の試験管内の細胞生長阻害能を示すグラフである。
【図１５】ＢＴ−４７４細胞に対する、本発明に係る抗体−リンカー−薬物結合体（Ｉ−３５）と（Ｉ−３６）の試験管内の細胞生長阻害能を示すグラフである。
【図１６】ＢＴ−４７４細胞に対する、本発明に係る抗体−リンカー−薬物結合体（Ｉ−３７）と（Ｉ−３８）の試験管内の細胞生長阻害能を示すグラフである。
【図１７】ＢＴ−４７４細胞に対する、本発明に係る抗体−リンカー−薬物結合体（Ｉ−３９）と（Ｉ−４０）の試験管内の細胞生長阻害能を示すグラフである。
【図１８】癌誘発動物モデルに、本発明に係る抗体−リンカー−薬物結合体（Ｉ−６）、（Ｉ−１０）および（Ｉ−１１）をそれぞれ投与した後、時間に応じた腫瘍体積の変化を示すグラフである。
【図１９】癌誘発動物モデルに、本発明に係る抗体−リンカー−薬物結合体（Ｉ−６）、（Ｉ−１０）および（Ｉ−１１）をそれぞれ投与し、５６日経過後の腫瘍の重量を示すグラフである。
【図２０】癌誘発動物モデルに、本発明に係る抗体−リンカー−薬物結合体（Ｉ−１６）を投与した後、時間に応じた腫瘍体積の変化を示すグラフである。
【図２１】癌誘発動物モデルに、本発明に係る抗体−リンカー−薬物結合体（Ｉ−１６）をそれぞれ投与し、２８日経過後の腫瘍の重量を示すグラフである。
【図２２】癌誘発動物モデルに、本発明に係る抗体−リンカー−薬物結合体（Ｉ−２３）を投与した後、時間に応じた腫瘍体積の変化を示すグラフである。
【図２３】癌誘発動物モデルに、本発明に係る抗体−リンカー−薬物結合体（Ｉ−２３）を投与し、２８日経過後の腫瘍の重量を示すグラフである。
【図２４】癌誘発動物モデルに、本発明に係る抗体−リンカー−薬物結合体（Ｉ−２５）を投与した後、時間に応じた腫瘍体積の変化を示すグラフである。
【図２５】癌誘発動物モデルに、本発明に係る抗体−リンカー−薬物結合体（Ｉ−２５）を投与し、２８日経過後の腫瘍の重量を示すグラフである。
【図２６】癌誘発動物モデルに、本発明に係る抗体−リンカー−薬物結合体（Ｉ−２６）を投与した後、時間に応じた腫瘍体積の変化を示すグラフである。
【図２７】癌誘発動物モデルに、本発明に係る抗体−リンカー−薬物結合体（Ｉ−２６）を投与し、２８日経過後の腫瘍の重量を示すグラフである。
【図２８】癌誘発動物モデルに、本発明に係る抗体−リンカー−薬物結合体（Ｉ−３４）を投与した後、時間に応じた腫瘍体積の変化を示すグラフである。
【図２９】癌誘発動物モデルに、本発明に係る抗体−リンカー−薬物結合体（Ｉ−３４）を投与し、２８日経過後の腫瘍の重量を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【０１１６】
以下、実施例によって本発明をより具体的に説明する。これらの実施例は単に本発明を説明するためのものであり、本発明の範囲がこれらの実施例に限らないことは当業者にとって自明である。
【０１１７】
製造例１：化学式ＩＩ−１、ＩＩ−２の化合物の製造
【０１１８】
製造例１−１：化合物（ＩＩ−１）の製造
【０１１９】
【化３４】
0006262768.tif 000043
【０１２０】
６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（（４−（ヒドロキシメチル）フェニル）アミノ）−１−オキソ−５−ウレイドペンタン−２−イル）アミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）ヘキサンアミド（５．０ｇ、８．７ｍｍｏｌ、Ｄｕｂｏｗｃｈｉｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．，２００２，１３（４），ｐｐ８５５−８６９）を、アルゴン気流下、無水ジメチルホルムアミド６０ｍＬに溶かした後、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（３．０ｍＬ、１７．４ｍｍｏｌ）を加え、０℃に冷却した。反応混合物にビス（４−ニトロフェニル）カーボネート（７．９４ｇ、２６．１ｍｍｏｌ）を一度に加え、常温で１５時間撹拌した。反応完了後、高真空下で減圧濃縮して、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、表題化合物（３．６５ｇ、５７％）を米色固体として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．８３（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ），０．８６（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ），１．０９（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），１．１９（ｍ，２Ｈ），１．３４−１．７６（ｍ，７Ｈ），１．９６（ｍ，１Ｈ），２．１５（ｍ，２Ｈ），２．９９（ｍ，２Ｈ），３．３７（ｍ，２Ｈ），４．１９（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），４．３９（ｍ，１Ｈ），５．２４（ｓ，２Ｈ），５．４１（ｓ，２Ｈ），５．９７（ｂｒｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ），７．００（ｓ，２Ｈ），７．４１（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．５７（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），７．６５（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．８０（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），８．０９（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），８．３１（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），１０．０５（ｂｒｓ，１Ｈ）
【０１２１】
製造例１−２：化合物（ＩＩ−３）の製造
【０１２２】
【化３５】
0006262768.tif 000044
【０１２３】
６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（（４−（ヒドロキシメチル）フェニル）アミノ）−１−オキソ−５−ウレイドペンタン−２−イル）アミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）ヘキサンアミド（５．０ｇ、８．７ｍｍｏｌ、Ｄｕｂｏｗｃｈｉｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．，２００２，１３（４），ｐｐ８５５−８６９）を、アルゴン気流下、無水ジメチルホルムアミド６０ｍＬに溶かした後、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（３．０ｍＬ、１７．４ｍｍｏｌ）を加え、０℃に冷却した。反応混合物にビス（４−ニトロフェニル）カーボネート（７．９４ｇ、２６．１ｍｍｏｌ）を一度に加え、常温で１５時間撹拌した。反応完了後、高真空下で減圧濃縮して、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド）−３−メチルブタンアミド）−５−ウレイドペンタンアミド）ベンジル（４−ニトロフェニル）カーボネート（３．６５ｇ、５７％）を米色固体として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．８３（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ），０．８６（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ），１．０９（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），１．１９（ｍ，２Ｈ），１．３４−１．７６（ｍ，７Ｈ），１．９６（ｍ，１Ｈ），２．１５（ｍ，２Ｈ），２．９９（ｍ，２Ｈ），３．３７（ｍ，２Ｈ），４．１９（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），４．３９（ｍ，１Ｈ），５．２４（ｓ，２Ｈ），５．４１（ｓ，２Ｈ），５．９７（ｂｒｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ），７．００（ｓ，２Ｈ），７．４１（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．５７（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），７．６５（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．８０（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），８．０９（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），８．３１（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），１０．０５（ｂｒｓ，１Ｈ）
【０１２４】
４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド）−３−メチルブタンアミド）−５−ウレイドペンタンアミド）ベンジル（４−ニトロフェニル）カーボネート（３．６５ｇ、４．９５ｍｍｏｌ）を、アルゴン気流下、無水ジメチルホルムアミド９０ｍＬに溶解した後、ｔ−ブチル（２−アミノエチル）（メチル）カルバメート（０．８６ｇ、４．９５ｍｍｏｌ）を加え、２０−２５℃で２時間撹拌した。反応完了後、高真空下で反応溶液を完全濃縮して、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、化合物（ＩＩ−３）のアミノ基が保護化された化合物（３．８ｇ、９９％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：７７３．５［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１２５】
化合物（ＩＩ−３）のアミノ基が保護化された化合物（１４６ｍｇ、０．１８６ｍｍｏｌ）をジクロロメタン５ｍＬに溶かし、トリフルオロ酢酸２ｍＬを滴加した後、２０−２５℃で２時間撹拌した。反応が終了すると、反応溶媒を減圧濃縮して除去し、トルエン５ｍＬを２回添加してトリフルオロ酢酸を完全に除去して、表題化合物のＴＦＡ塩濃縮液を得た。
【０１２６】
製造例１−３：化合物（ＩＩ−４）の製造
【０１２７】
【化３６】
0006262768.tif 000045
【０１２８】
４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド）−３−メチルブタンアミド）−５−ウレイドペンタンアミド）ベンジル（４−ニトロフェニル）カーボネート（６．８ｇ、９．２２ｍｍｏｌ）を、アルゴン気流下、無水ジメチルホルムアミド１５０ｍＬに溶解した後、ｔ−ブチルメチル（２−（メチルアミノ）エチル）カルバメート（１．８２ｇ、９．６８ｍｍｏｌ）を加え、２０−２５℃で１９時間撹拌した。反応完了後、高真空下で反応溶液を完全濃縮して、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、化合物（ＩＩ−４）のアミノ基が保護化された化合物（５．１４ｇ、７１％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．７８−０．８（ｄ，３Ｈ），０．８−０．８３（ｄ，３Ｈ），１．０９−１．９９（ｍ，１０Ｈ），１．３３（ｓ，９Ｈ），１．９２（ｍ，１Ｈ），２．０７−２．１９（ｍ，２Ｈ），２．６６−２．７３（ｄ，３Ｈ），２．８−２．８１（ｍ，３Ｈ），２．９−３．０（ｍ，２Ｈ），３．３７（ｍ，２Ｈ），４．１５（ｔ，１Ｈ），４．３４（ｍ，１Ｈ），４．９４（ｓ，２Ｈ），５．３８（ｓ，２Ｈ），５．９４（ｂｒｔ，１Ｈ），６．９６（ｓ，２Ｈ），７．２３（ｄ，２Ｈ），７．５５（ｄ，２Ｈ），７．７７（ｄ，１Ｈ），８．０４（ｄ，１Ｈ），９．９５（ｂｒｓ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：７８７．５［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１２９】
化合物（ＩＩ−４）のアミノ基が保護化された化合物を用いて、製造例１−２と同様の方法で表題化合物のＴＦＡ塩濃縮液を得た。
【０１３０】
製造例１−４：化合物（ＩＩ−５）の製造
【０１３１】
【化３７】
0006262768.tif 000046
【０１３２】
４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド）−３−メチルブタンアミド）−５−ウレイドペンタンアミド）ベンジル（４−ニトロフェニル）カーボネート（６．８ｇ、９．２２ｍｍｏｌ）を、アルゴン気流下、無水ジメチルホルムアミド８０ｍＬに溶解した後、ｔ−ブチル（２−アミノエチル）カルバメート（１．６３ｇ、１０．１４ｍｍｏｌ）を加え、２０−２５℃で１５時間撹拌した。反応完了後、高真空下で反応溶液を完全濃縮して、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、化合物（ＩＩ−５）のアミノ基が保護化された化合物（４．１３ｇ、５９％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．７８−０．８（ｄ，３Ｈ），０．８−０．８３（ｄ，３Ｈ），１．０９−１．９９（ｍ，１０Ｈ），１．３３（ｓ，９Ｈ），１．９２（ｍ，１Ｈ），２．０７−２．１９（ｍ，２Ｈ），２．９−３．０（ｍ，２Ｈ），３．３７（ｍ，２Ｈ），４．１５（ｔ，１Ｈ），４．３４（ｍ，１Ｈ），４．９４（ｓ，２Ｈ），５．３８（ｓ，２Ｈ），５．９４（ｂｒｔ，１Ｈ），６．７６（ｍ，１Ｈ），６．９６（ｓ，２Ｈ），７．１５（ｍ，１Ｈ），７．２３（ｄ，２Ｈ），７．５５（ｄ，２Ｈ），７．７７（ｄ，１Ｈ），８．０４（ｄ，１Ｈ），９．９５（ｂｒｓ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：７５９．５［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１３３】
化合物（ＩＩ−５）のアミノ基が保護化された化合物を用いて、製造例１−２と同様の方法で表題化合物のＴＦＡ塩濃縮液を得た。
【０１３４】
製造例１−５：化合物（ＩＩ−６）の製造
【０１３５】
【化３８】
0006262768.tif 000047
【０１３６】
４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド）−３−メチルブタンアミド）−５−ウレイドペンタンアミド）ベンジル（４−ニトロフェニル）カーボネート（０．７４ｇ、１ｍｍｏｌ）を、アルゴン気流下、無水ジメチルホルムアミド３０ｍＬに溶解した後、ｔ−ブチル（２−（メチルアミノ）エチル）カルバメート（０．２５ｇ、１．４ｍｍｏｌ）を加え、２０−２５℃で１５時間撹拌した。反応完了後、高真空下で反応溶液を完全濃縮して、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、化合物（ＩＩ−６）のアミノ基が保護化された化合物（０．３６ｇ、４８％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．７９（ｄ，３Ｈ），０．８２（ｄ，３Ｈ），１．１３−１．７（ｍ，１０Ｈ），１．３２−１．３９（ｄ，９Ｈ），１．８９−１．９３（ｍ，１Ｈ），２．０７−２．１７（ｍ，２Ｈ），２．７９−２．８２（ｄ，２Ｈ），２．８９−３．０２（ｍ，５Ｈ），３．１４（ｄ，１Ｈ），３．２（ｍ，１Ｈ），４．１５（ｔ，１Ｈ），４．３４（ｍ，１Ｈ），４．９−４．９４（ｄ，２Ｈ），５．３７（ｓ，２Ｈ），５．９４１（ｂｒｔ，１Ｈ），６．８１−６．８５（ｍ，１Ｈ），７．２４（ｄ，２Ｈ），７．５４（ｄ，２Ｈ），７．７６（ｄ，１Ｈ），８．０４（ｄ，１Ｈ），９．９５（ｂｒｓ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：７７３．５［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１３７】
化合物（ＩＩ−６）のアミノ基が保護化された化合物を用いて、製造例１−２と同様の方法で表題化合物のＴＦＡ塩濃縮液を得た。
【０１３８】
製造例２：化学式ＩＩＩ−１、ＩＩＩ−２、ＩＩＩ−３またはＩＩＩ−４の化合物の製造
【０１３９】
製造例２−１：化合物（ＩＩＩ−５）の製造
【０１４０】
【化３９】
0006262768.tif 000048
【０１４１】
（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−（ｔ−ブトキシカルボニル）ピロリジン−２−イル）−３−メトキシ−２−メチルプロパン酸（０．６３ｇ、２．２ｍｍｏｌ）を、アルゴン気流下、無水ジメチルホルムアミド１０ｍＬに溶かした後、２−（２，６−ジフルオロフェニル）エタンアミン（０．３８ｇ、２．４ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を０℃に冷却した後、ベンゾトリアゾール−１−イル−オキシ−トリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（０．９７ｇ、２．２ｍｍｏｌ）とジイソプロピルエチルアミン（１．０ｍＬ、６．６ｍｍｏｌ）を順次に加え、常温で１５時間撹拌した。反応完了後、高真空下で減圧濃縮して、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、（Ｒ）−ｔ−ブチル２−（（１Ｒ，２Ｒ）−３−（（２，６−ジフルオロフェネチル）アミノ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル）ピロリジン−１−カルボキシレート（０．６０ｇ、６４％）を得た。
【０１４２】
前記化合物（０．６ｇ、１．４ｍｍｏｌ）をジクロロメタン１０ｍＬに溶かし、トリフルオロ酢酸１ｍＬを加えた後、常温で３時間撹拌し、反応が終了すると、反応溶媒を減圧濃縮した後、ジクロロメタン１０ｍＬを２回添加して繰り返し濃縮して残留トリフルオロ酢酸を完全に除去して、（２Ｒ，３Ｒ）−Ｎ−（２，６−ジフルオロフェネチル）−３−メトキシ−２−メチル−３−（（Ｒ）−ピロリジン−２−イル）プロパンアミドのトリフルオロ酢酸塩を得た。
【０１４３】
前記濃縮液（ＴＦＡ塩）と（５Ｓ，８Ｓ，１１Ｓ，１２Ｒ）−１１−（（Ｓ）−ｓｅｃ−ブチル）−５，８−ジイソプロピル−１２−メトキシ−４，１０−ジメチル−３，６，９−トリオキソ−１−メチル−２−オキサ−４，７，１０−トリアザテトラデカン−１４−酸（０．７７ｇ、１．４ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド１０ｍＬに溶解し、０℃でジエチルシアノホスホネート（ＤＥＰＣ）（０．２３ｍＬ、１．５４ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（１．１７ｍＬ、８．４ｍｍｏｌ）を順次に加え、常温で１５時間撹拌した。反応完了後、溶媒を除去し、得られた残渣をエチルアセテート５０ｍＬに溶解させて、蒸留水３０ｍＬで洗った後、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、化合物（ＩＩＩ−５）のＮ−末端アミノ基が保護化された化合物（０．９６ｇ、８０％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ０．７５−１．０６（ｍ，１７Ｈ），１．１８−１．３８（ｍ，５Ｈ），１．７１−２．１５（ｍ，７Ｈ），２．２１−２．５２（ｍ，４Ｈ），２．８７−２．９１（ｍ，４Ｈ），２．９９（ｓ，３Ｈ），３．１０（ｓ，３Ｈ），３．３８（ｓ，３Ｈ），３．４３−３．５１（ｍ，３Ｈ），３．８２（ｍ，１Ｈ），４．０９−４．１５（ｍ，４Ｈ），４．６９（ｍ，１Ｈ），５．１２−５．２３（ｍ，２Ｈ），６．５０−６．６０（ｍ，２Ｈ），６．８２−６．８７（ｍ，２Ｈ），７．１３−７．１７（ｍ，１Ｈ），７．３０−７．３４（ｍ，５Ｈ）
【０１４４】
化合物（ＩＩＩ−５）のＮ−末端アミノ基が保護化された化合物（０．９６ｇ、１．１ｍｍｏｌ）をｔ−ブチルアルコール１８ｍＬと水２ｍＬに溶かし、１０％パラジウムカーボン（０．１ｇ）を加えた後、水素大気下で３時間撹拌した。反応が終了すると、反応混合物をセライトで濾過し、メタノールで数回洗浄した後、減圧下で溶媒を除去して、表題化合物（０．７９ｇ、９９％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ０．７８−０．９８（ｍ，１６Ｈ），１．０６（ｍ，１Ｈ），１．１６−１．２７（ｍ，４Ｈ），１．３８（ｍ，１Ｈ），１．６５−１．７６（ｍ，６Ｈ），１．８９−２．０２（ｍ，４Ｈ），２．３１−２．３８（ｍ，５Ｈ），２．７１−２．７５（ｍ，１Ｈ），２．８８−２．８９（ｍ，２Ｈ），３．００（ｓ，３Ｈ），３．２９（ｓ，３Ｈ），３．４１−３．４８（ｍ，３Ｈ），３．７９−３．８２（ｍ，１Ｈ），４．０８−４．１５（ｍ，２Ｈ），４．７２−４．８６（ｍ，２Ｈ），６．５６（ｍ，１Ｈ），６．７９−６．８５（ｍ，２Ｈ），７．１０−７．１５（ｍ，１Ｈ），７．１６−７．２２（ｍ，１Ｈ），７．５５（ｄ，１Ｈ）
【０１４５】
製造例２−２：化合物（ＩＩＩ−６）の製造
【０１４６】
【化４０】
0006262768.tif 000049
【０１４７】
２−（２，６−ジフルオロフェニル）エタンアミンの代わりに、２−アミノアセトフェノンを用いて、製造例２−１と同様の方法で化合物（ＩＩＩ−６）のＮ−末端アミノ基が保護化された化合物２．３６ｇ（８１％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ０．７１−１．０４（ｍ，１７Ｈ），１．３１−１．３２（ｍ，４Ｈ），１．７７−１．８１（ｍ，２Ｈ），１．９２−２．０４（ｍ，４Ｈ），２．１７−２．６１（ｍ，４Ｈ），２．８９−２．９５（ｍ，３Ｈ），２．９９（ｓ，３Ｈ），３．３０（ｓ，３Ｈ），３．４６（ｍ，３Ｈ），３．４３−３．５２（ｍ，１Ｈ），３．９９−４．０１（ｍ，１Ｈ），４．０９−４．１５（ｍ，１Ｈ），４．２４（ｍ，１Ｈ），４．６９−４．７６（ｍ，６Ｈ），５．０９−５．２３（ｍ，２Ｈ），６．４６−６．４９（ｍ，１Ｈ），７．１２（ｍ，１Ｈ），７．２６−７．３４（ｍ，５Ｈ），７．５０（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ），７．６２（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），７．９７（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ）
【０１４８】
化合物（ＩＩＩ−６）のＮ−末端アミノ基が保護化された化合物を用いて、製造例２−１と同様の方法で表題化合物１．８９ｇ（９６％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ０．８１−０．８５（ｍ，３Ｈ），０．９２−１．１４（ｍ，１３Ｈ），１．２５−１．４３（ｍ，５Ｈ），１．４６−１．８９（ｍ，６Ｈ），１．９２−２．２２（ｍ，５Ｈ），２．３３（ｓ，３Ｈ），２．４５−２．５４（ｍ，２Ｈ），２．７４（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１Ｈ），３．０２（ｓ，３Ｈ），３．３２（ｓ，３Ｈ），３．４３（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，３Ｈ），３．５２−３．８４（ｍ，２Ｈ），３．９２−４．０６（ｍ，２Ｈ），４．７５−４．８０（ｍ，２Ｈ），４．９４−５．２３（ｍ，１Ｈ），６．７６−６．９４（ｍ，１Ｈ），７．３４−７．４３（ｍ，４Ｈ），７．６０（ｍ，１Ｈ）
【０１４９】
製造例２−３：化合物（ＩＩＩ−７）の製造
【０１５０】
【化４１】
0006262768.tif 000050
【０１５１】
（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−（ｔ−ブトキシカルボニル）ピロリジン−２−イル）−３−メトキシ−２−メチルプロパン酸の代わりに、（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（２Ｓ，４Ｒ）−１−（ｔ−ブトキシカルボニル）−４−メトキシピロリジン−２−イル）−３−メトキシ−２−メチルプロパン酸を用い、２−（２，６−ジフルオロフェニル）エタンアミンの代わりに、２−アミノ−１−（２−フルオロ−４−メトキシフェニル）エタノンを用いて、製造例２−１と同様の方法で表題化合物０．１８ｇ（８９％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ０．８０−０．８４（ｍ，３Ｈ），０．８８−１．０３（ｍ，１７Ｈ），１．３２（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ），１．３５−１．３９（ｍ，２Ｈ），１．９８−２．１０（ｍ，４Ｈ），２．３５（ｓ，３Ｈ），２．３６−２．５１（ｍ，３Ｈ），２．７４（ｍ，１Ｈ），３．０２（ｍ，３Ｈ），３．２９（ｓ，３Ｈ），３．３４（ｓ，３Ｈ），３．４５（ｓ，３Ｈ），３．４６−３．５６（ｍ，１Ｈ），３．８７（ｓ，３Ｈ），３．９９（ｄｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２．８Ｈｚ，１Ｈ），４．１０−４．１５（ｍ，１Ｈ），４．２５−４．２８（ｍ，１Ｈ），４．５８−４．６４（ｍ，２Ｈ），４．７３−４．７８（ｍ，１Ｈ），６．６７（ｍ，１Ｈ），６．７８（ｑｄ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，２．８Ｈｚ，１Ｈ），７．９５（ｍ，１Ｈ）
【０１５２】
製造例２−４：化合物（ＩＩＩ−８）の製造
【０１５３】
【化４２】
0006262768.tif 000051
【０１５４】
（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−（ｔ−ブトキシカルボニル）ピロリジン−２−イル）−３−メトキシ−２−メチルプロパン酸の代わりに、（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（２Ｓ，４Ｒ）−１−（ｔ−ブトキシカルボニル）−４−メトキシピロリジン−２−イル）−３−メトキシ−２−メチルプロパン酸を用い、２−（２，６−ジフルオロフェニル）エタンアミンの代わりに、（Ｓ）−２−アミノ−１−（４−フルオロフェニル）プロパン−１−オンを用いて、製造例２−１と同様の方法で表題化合物０．４５ｇ（１００％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ０．７１−１．０３（ｍ，２０Ｈ），１．２２（ｄ，３Ｈ），１．３３−１．３７（ｍ，４Ｈ），１．４０−１．４４（ｍ，３Ｈ），１．６０−１．８１（ｍ，４Ｈ），１．９８（ｍ，２Ｈ），２．２６（ｍ，２Ｈ），２．９０（ｓ，３Ｈ），３．２１（ｓ，３Ｈ），３．３２（ｓ，３Ｈ），３．４３（ｓ，３Ｈ），４．０６−４．１５（ｍ，２Ｈ），４．２２−４．２７（ｍ，２Ｈ），４．６４−４．６９（ｍ，２Ｈ），５．０９−５．１３（ｍ，２Ｈ），５．２３−５．３０（ｍ，２Ｈ），５．５０（ｍ，１Ｈ），７．１８（ｔ，２Ｈ），８．０１−８．０５（ｍ，２Ｈ）
【０１５５】
製造例２−５：化合物（ＩＩＩ−９）の製造
【０１５６】
【化４３】
0006262768.tif 000052
【０１５７】
２−（２，６−ジフルオロフェニル）エタンアミンの代わりに、（Ｒ，Ｅ）−２−アミノ−１−（３−メトキシフェニル）プロパン−１−オンオキシムを用いて、製造例２−１と同様の方法で表題化合物０．１７ｇ（９４％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ０．７９−０．９８（ｍ，２０Ｈ），１．０１（ｍ，４Ｈ），１．１９−１．２７（ｍ，４Ｈ），１．７９−１．８３（ｍ，２Ｈ），２．２１−２．４３（ｍ，４Ｈ），２．７７（ｍ，２Ｈ），３．００（ｍ，２Ｈ），３．２９（ｓ，６Ｈ），３．４２（ｓ，３Ｈ），３．９９−４．１４（ｍ，３Ｈ），４．１５−４．３７（ｍ，３Ｈ），４．７０（ｍ，１Ｈ），５．２１−５．２３（ｍ，２Ｈ），５．３６（ｍ，１Ｈ），７．０３（ｍ，１Ｈ），７．１５（ｍ，２Ｈ），７．４９（ｍ，１Ｈ）
【０１５８】
製造例２−６：化合物（ＩＩＩ−１０）の製造
【０１５９】
【化４４】
0006262768.tif 000053
【０１６０】
（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−（ｔ−ブトキシカルボニル）ピロリジン−２−イル）−３−メトキシ−２−メチルプロパン酸の代わりに、（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（２Ｓ，４Ｓ）−１−（ｔ−ブトキシカルボニル）−４−（（ｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）ピロリジン−２−イル）−３−メトキシ−２−メチルプロパン酸を用いて、製造例２−１と同様の方法で化合物（ＩＩＩ−１０）のＮ−末端アミノ基とヒドロキシ基が保護化された未精製化合物１．０ｇ（１００％）を得た。
【０１６１】
前記化合物（１．０ｇ、１．０２ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド１０ｍＬに溶かし、１．０Ｍテトラブチルアンモニウムフルオライド（３．１ｍＬ、３．１ｍｍｏｌ）を添加した後、５時間撹拌した。反応完了後、溶媒を除去し、得られた残渣をエチルアセテート５０ｍＬに溶解させて飽和炭酸水素ナトリウム溶液および塩水で洗った後、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、化合物（ＩＩＩ−１０）のＮ−末端アミノ基が保護化された化合物（０．７５ｇ、８４％）を得た。
ＥＳ−ＭＳ  ｍ／ｚ：８７４［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１６２】
化合物（ＩＩＩ−１０）のＮ−末端アミノ基が保護化された化合物を用いて、製造例２−１と同様の方法で表題化合物０．６４ｇ（１００％）を得た。
ＥＳ−ＭＳ  ｍ／ｚ：７４０［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１６３】
製造例２−７：化合物（ＩＩＩ−１１）の製造
【０１６４】
【化４５】
0006262768.tif 000054
【０１６５】
（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（２Ｓ，４Ｒ）−１−（ｔ−ブトキシカルボニル）−４−メトキシピロリジン−２−イル）−３−メトキシ−２−メチルプロパン酸（０．７０ｇ、２．２ｍｍｏｌ）を、アルゴン気流下、無水ジメチルホルムアミド１０ｍＬに溶かした後、（２Ｒ）−１−アジド−１−（４−フルオロフェニル）プロパン−２−アミン塩酸塩（０．４７ｇ、２．４ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を０℃に冷却した後、ベンゾトリアゾール−１−イル−オキシ−トリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（０．９７ｇ、２．２ｍｍｏｌ）とジイソプロピルエチルアミン（１．０ｍＬ、６．６ｍｍｏｌ）を順次に加え、常温で１５時間撹拌した。反応完了後、高真空下で減圧濃縮して、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、（２Ｓ，４Ｒ）−ｔ−ブチル２−（（１Ｒ，２Ｒ）−３−（（（２Ｒ）−１−アジド−１−（４−フルオロフェニル）プロパン−２−イル）アミノ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル）−４−メトキシピロリジン−１−カルボキシレート（０．６１ｇ、５６％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：４９４．２［Ｍ＋］＋，５１６．３［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０１６６】
前記化合物（０．６１ｇ、１．２３ｍｍｏｌ）をジクロロメタン１０ｍＬに溶かし、トリフルオロ酢酸７ｍＬを滴加した後、２０−２５℃で３時間撹拌した。反応が終了すると、反応溶媒を減圧濃縮して除去し、トルエン５ｍＬを２回添加してトリフルオロ酢酸を完全に除去した後、反応を進行させた。
【０１６７】
反応濃縮液（ＴＦＡ塩）と（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−３−メチルブタンアミド）−Ｎ，３−ジメチルブタンアミド）−３−メトキシ−５−メチルヘプタン酸（０．５３ｇ、１．２３ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド５ｍＬに溶解し、０℃でジエチルシアノホスホネート（ＤＥＰＣ）（０．２０ｍＬ、１．３５ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（１．５６ｍＬ、１１．０９ｍｍｏｌ）を加え、常温で１６時間撹拌した。反応が終了すると、反応溶媒を除去し、エチルアセテート２０ｍＬに溶解させた後、１Ｍポタシウムヒドロゲンサルファイト、水、飽和炭酸水素ナトリウム溶液、および塩水で抽出した後、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧濃縮した。濃縮残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、化合物（ＩＩＩ−１１）のアミノ基が保護化された化合物（０．２５ｇ、２５％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：７７９．６［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１６８】
化合物（ＩＩＩ−１１）のアミノ基が保護化された化合物（０．２５ｇ、０．３１ｍｍｏｌ）をメチルアルコール１０ｍＬに溶かし、１０％パラジウムカーボン（１５ｍｇ）を加えた後、水素大気下で１６時間撹拌した。反応が終了すると、反応混合物をセライトで濾過し、メタノールで数回洗浄した後、減圧下で溶媒を除去して、白色固体の表題化合物（９７ｍｇ、４１％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：７５３［Ｍ＋］＋，７７５［Ｍ＋Ｎａ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ０．７２（ｔ，３Ｈ），０．７７−１．０２（ｍ，１７Ｈ），１．０１（ｄ，３Ｈ），１．１５（ｄ，３Ｈ），１．３２（ｍ，１Ｈ），１．７８（ｂｒｄ２Ｈ），１．８５−２．１２（ｍ，４Ｈ），２．１８（Ｓ，６Ｈ），２．３２−２．５０（ｍ，４Ｈ），３．３０（ｓ，３Ｈ），３．３８（ｓ，６Ｈ），３．４８（ｍ，１Ｈ），４．００−４．１５（ｍ，４Ｈ），４．３２（ｍ，２Ｈ），４．８５（ｍ，２Ｈ），６．６０（ｓ，１Ｈ），６．８８（ｓ，１Ｈ），６．９９−７．０６（ｍ，２Ｈ），７．２２−７．３２（ｍ，２Ｈ）
【０１６９】
製造例２−８：化合物（ＩＩＩ−１２）の製造
【０１７０】
【化４６】
0006262768.tif 000055
【０１７１】
（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（２Ｓ，４Ｒ）−１−（ｔ−ブトキシカルボニル）−４−メトキシピロリジン−２−イル）−３−メトキシ−２−メチルプロパン酸の代わりに、（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（２Ｓ）−１−（ｔ−ブトキシカルボニル）ピロリジン−２−イル）−３−メトキシ−２−メチルプロパン酸（９２ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）を用い、（２Ｒ）−１−アジド−１−（４−フルオロフェニル）プロパン−２−アミン塩酸塩の代わりに、（２Ｒ）−１−アジド−１−フェニルプロパン−２−アミン塩酸塩（６８ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）を用いて、製造例２−７と同様の方法で表題化合物（４４ｍｇ、５０％）を得た。
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ  ｍ／ｚ：７３１．６［Ｍ＋Ｈ］＋，７５３．５［Ｍ＋Ｎａ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ０．８１（ｔ，３Ｈ），０．８８−１．０７（ｍ，１７Ｈ），１．１８（ｄ，３Ｈ），１．２１（ｄ，３Ｈ），１．４７（ｍ，１Ｈ），１．７４（ｂｒｄ，２Ｈ），１．８７−２．１７（ｍ，３Ｈ），２．２４（Ｓ，６Ｈ），２．２５−２．４７（ｍ，４Ｈ），３．０４（ｓ，３Ｈ），３．２８−３．３４（ｍ，１Ｈ），３．３１（ｓ，３Ｈ），３．３８（ｓ，３Ｈ），３．４５（ｍ，１Ｈ），３．７９（ｄ，１Ｈ），３．８２（ｍ，１Ｈ），４．０５−４．１２（ｍ，４Ｈ），４．２４（ｍ，２Ｈ），４．７５（ｍ，２Ｈ），６．７３（ｓ，１Ｈ），６．９５（ｄ，１Ｈ），７．２４−７．３５（ｍ，５Ｈ）
【０１７２】
製造例２−９：化合物（ＩＩＩ−１３）の製造
【０１７３】
【化４７】
0006262768.tif 000056
【０１７４】
（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（２Ｓ，４Ｒ）−１−（ｔ−ブトキシカルボニル）−４−メトキシピロリジン−２−イル）−３−メトキシ−２−メチルプロパン酸の代わりに、（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（２Ｓ）−１−（ｔ−ブトキシカルボニル）ピロリジン−２−イル）−３−メトキシ−２−メチルプロパン酸（０．８０ｇ、２．８ｍｍｏｌ）を用い、（２Ｒ）−１−アジド−１−（４−フルオロフェニル）プロパン−２−アミン塩酸塩（０．６４ｇ、２．８ｍｍｏｌ）を用いて、製造例２−７と同様の方法で表題化合物（０．５ｇ、７９％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：７４９．４７［Ｍ＋Ｈ］＋，７７１．４４［Ｍ＋Ｎａ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ０．８２（ｔ，３Ｈ），０．９１−１．１（ｍ，１７Ｈ），１．１６（ｄ，３Ｈ），１．２０（ｄ，３Ｈ），１．３５（ｍ，１Ｈ），１．７８（ｂｒｄ，２Ｈ），１．８７−２．１０（ｍ，４Ｈ），２．２４（Ｓ，６Ｈ），２．２８−２．４８（ｍ，４Ｈ），３．０３（ｓ，３Ｈ），３．２８−３．３４（ｍ，１Ｈ），３．３１（ｓ，３Ｈ），３．３８（ｓ，３Ｈ），３．４８（ｍ，１Ｈ），３．８２（ｄ，１Ｈ），４．０３−４．１０（ｍ，４Ｈ），４．２２（ｍ，２Ｈ），４．７７（ｍ，２Ｈ），６．５６（ｄ，１Ｈ），６．８６（ｓ，１Ｈ），６．９９−７．０７（ｍ，２Ｈ），７．２３−７．３５（ｍ，２Ｈ）
【０１７５】
製造例２−１０：化合物（ＩＩＩ−１４）の製造
【０１７６】
【化４８】
0006262768.tif 000057
【０１７７】
（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（２Ｓ，４Ｒ）−１−（ｔ−ブトキシカルボニル）−４−メトキシピロリジン−２−イル）−３−メトキシ−２−メチルプロパン酸の代わりに、（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（２Ｓ，４Ｒ）−１−（ｔ−ブトキシカルボニル）−４−ヒドロキシピロリジン−２−イル）−３−メトキシ−２−メチルプロパン酸（３４０ｍｇ、１．１２ｍｍｏｌ）を用い、（２Ｒ）−１−アジド−１−（４−フルオロフェニル）プロパン−２−アミン塩酸塩（２５８ｍｇ、１．１２ｍｍｏｌ）を用いて、製造例２−７と同様の方法で表題化合物（３５０ｍｇ、７１％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：７６５．４６［Ｍ＋］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ０．８０（ｔ，３Ｈ），０．９０−１．０９（ｍ，１７Ｈ），１．１１（ｄ，３Ｈ），１．２５（ｄ，３Ｈ），１．３２（ｍ，１Ｈ），１．７８（ｂｒｄ，２Ｈ），２．０４−２．０９（ｍ，３Ｈ），２．２３（Ｓ，６Ｈ），２．３５−２．５０（ｍ，４Ｈ），３．０３（ｓ，３Ｈ），３．３２（ｓ，３Ｈ），３．３８（ｍ，１Ｈ），３．４７（ｓ，３Ｈ），３．５４−３．５６（ｍ，２Ｈ），３．９０（ｍ，１Ｈ），４．０−４．３２（ｍ，６Ｈ），４．７５（ｍ，２Ｈ），６．５３（ｓ，１Ｈ），６．７６（ｄ，１Ｈ），６．９９−７．０４（ｍ，２Ｈ），７．３２−７．３５（ｍ，２Ｈ）
【０１７８】
製造例２−１１：化合物（ＩＩＩ−１５）の製造
【０１７９】
【化４９】
0006262768.tif 000058
【０１８０】
（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（２Ｓ，４Ｒ）−１−（ｔ−ブトキシカルボニル）−４−メトキシピロリジン−２−イル）−３−メトキシ−２−メチルプロパン酸の代わりに、（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（２Ｓ）−１−（ｔ−ブトキシカルボニル）ピロリジン−２−イル）−３−メトキシ−２−メチルプロパン酸（０．１７ｇ、０．５８ｍｍｏｌ）を用い、（２Ｒ）−１−アジド−１−（４−フルオロフェニル）プロパン−２−アミン塩酸塩の代わりに、（２Ｒ）−１−フタルイミド−１−（４−メトキシフェニル）プロパン−２−アミン塩酸塩（０．２ｇ、０．５８ｍｍｏｌ）を用いて、製造例２−７と同様の方法で化合物（ＩＩＩ−１５）のアミノ基が保護化された化合物（０．３４ｇ、９４％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：８９１．６２［Ｍ］＋
【０１８１】
化合物（ＩＩＩ−１５）のアミノ基が保護化された化合物（０．３４ｇ、０．３８ｍｍｏｌ）をエタノール１０ｍＬに溶解させ、ヒドラジン水和物１ｍＬを加えた後、１６時間常温で撹拌した。反応が終了すると、減圧下で溶媒を除去して濃縮した。濃縮残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、白色固体の表題化合物（０．１１ｇ、３８％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：７６１．５６［Ｍ＋］＋，７８３．６０［Ｍ＋Ｎａ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ０．８０（ｍ，３Ｈ），０．８８−１．０７（ｍ，１８Ｈ），１．１９（ｄ，３Ｈ），１．１５（ｍ，１Ｈ），１．２２（ｍ，１Ｈ），１．２５（ｄ，３Ｈ），１．７０−１．９０（ｍ，４Ｈ），２．０７（Ｓ，６Ｈ），２．２６（ｓ，３Ｈ），２．２８−２．４８（ｍ，４Ｈ），３．０６（ｓ，３Ｈ），３．３２（ｓ，３Ｈ），３．３８（ｍ，１Ｈ），３．４３（ｓ，３Ｈ），３．５０（ｍ，１Ｈ），３．７６（ｍ，１Ｈ），３．８０（ｓ，３Ｈ），３．７８（ｄ，１Ｈ），３．９０−４．２５（ｍ，４Ｈ），４．５４（ｍ，２Ｈ），６．８９（ｄ，２Ｈ），７．３５（ｄ，２Ｈ）
【０１８２】
製造例２−１２：化合物（ＩＩＩ−１６）の製造
【０１８３】
【化５０】
0006262768.tif 000059
【０１８４】
（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（２Ｓ，４Ｒ）−１−（ｔ−ブトキシカルボニル）−４−メトキシピロリジン−２−イル）−３−メトキシ−２−メチルプロパン酸の代わりに、（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（２Ｓ，４Ｒ）−１−（ｔ−ブトキシカルボニル）−４−ヒドロキシピロリジン−２−イル）−３−メトキシ−２−メチルプロパン酸（０．３６ｇ、１．１７ｍｍｏｌ）を用い、（２Ｒ）−１−アジド−１−（４−フルオロフェニル）プロパン−２−アミン塩酸塩の代わりに、（２Ｒ）−１−フタルイミド−１−（４−メトキシフェニル）プロパン−２−アミン塩酸塩（０．４１ｇ、１．１７ｍｍｏｌ）を用いて、製造例２−７と同様の方法で化合物（ＩＩＩ−１６）のアミノ基が保護化された化合物（０．５９ｇ、７４％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：９０７．５４［Ｍ］＋
【０１８５】
化合物（ＩＩＩ−１６）のアミノ基が保護化された化合物（０．５９ｇ、０．６５ｍｍｏｌ）を用いて、製造例２−１１と同様の方法で白色固体の表題化合物（０．１９ｇ、３８％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：７７７．４２［Ｍ＋］＋，７９９．３９［Ｍ＋Ｎａ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ０．７９−０．８５９（ｍ，３Ｈ），０．８６−１．０６（ｍ，１７Ｈ），１．１３（ｄ，３Ｈ），１．２４−１．４０（ｍ，６Ｈ），１．６２−１．８４（ｍ，２Ｈ），１．９７−２．４１（ｍ，３Ｈ），２．２０−２．３２（ｍ，７Ｈ），２．３６−２．５４（ｍ，４Ｈ），３．０６（ｓ，３Ｈ），３．３１（ｓ，３Ｈ），３．４６（ｔ，１Ｈ）３．５０（ｓ，３Ｈ），３．５６（ｂｒｓ，１Ｈ），３．６２（ｍ，１Ｈ），３．６７（ｍ，１Ｈ），３．７２−３．７７（ｍ，１Ｈ），３．８０（ｓ，３Ｈ），３．９７−４．２８（ｍ，４Ｈ），４．３０（ｍ，１Ｈ），４．６８（ｍ，１Ｈ），４．７２−４．８３（ｍ，１Ｈ），６．８９（ｄ，２Ｈ），７．３３（ｄ，２Ｈ）
【０１８６】
製造例２−１３：化合物（ＩＩＩ−１７）の製造
【０１８７】
【化５１】
0006262768.tif 000060
【０１８８】
（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（２Ｓ，４Ｒ）−１−（ｔ−ブトキシカルボニル）−４−メトキシピロリジン−２−イル）−３−メトキシ−２−メチルプロパン酸の代わりに、（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（２Ｓ，４Ｒ）−１−（ｔ−ブトキシカルボニル）−４−ヒドロキシピロリジン−２−イル）−３−メトキシ−２−メチルプロパン酸（１．４３ｇ、４．７ｍｍｏｌ）を用い、（２Ｒ）−１−アジド−１−（４−フルオロフェニル）プロパン−２−アミン塩酸塩の代わりに、２−フタルイミド−２−（ｐ−トリル）エチルアミン塩酸塩（１．６５ｇ、５．２ｍｍｏｌ）を用いて、製造例２−７と同様の方法で化合物（ＩＩＩ−１７）のアミノ基が保護化された化合物（２．３５ｇ、７８％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：８７８［Ｍ＋１］＋
【０１８９】
化合物（ＩＩＩ−７）のアミノ基が保護化された化合物（２．０８ｇ、２．３７ｍｍｏｌ）を用いて、製造例２−１１と同様の方法で白色固体の表題化合物（１．７ｇ、９４％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：７４８［Ｍ＋１］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ０．７９−０．８４（ｍ，３Ｈ），０．９１−１．０３（ｍ，１９Ｈ），１．２４−１．２９（ｍ，４Ｈ），１．２９−１．４０（ｍ，１Ｈ），１．９０−２．１４（ｍ，４Ｈ），２．２５（ｓ，６Ｈ），２．３２（ｓ，３Ｈ），２．３８−２．４８（ｍ，３Ｈ），３．０３（ｓ，３Ｈ），３．１４（ｂｒｄ，１Ｈ），３．２４−３．３０（ｍ，１Ｈ），３．３２（ｓ，３Ｈ），３．３８−３．４３（ｍ，１Ｈ），３．４８（ｓ，３Ｈ），３．５４−３．６２（ｍ，３Ｈ），４．０４−４．１８（ｍ，３Ｈ），４．２４−４．３４（ｍ，２Ｈ），４．７７−４．９０（ｍ，２Ｈ），６．３７（ｍ，１Ｈ），７．１４−７．２８（ｍ，４Ｈ）
【０１９０】
製造例２−１４：化合物（ＩＩＩ−１８）の製造
【０１９１】
【化５２】
0006262768.tif 000061
【０１９２】
（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（２Ｓ，４Ｓ）−１−（ｔ−ブトキシカルボニル）−４−（（ｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）ピロリジン−２−イル）−３−メトキシ−２−メチルプロパン酸（０．９２ｇ、２．２ｍｍｏｌ）を、アルゴン気流下、無水ジメチルホルムアミド１０ｍＬに溶かした後、２−（２，６−ジフルオロフェニル）エタンアミン（０．３８ｇ、２．４ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を０℃に冷却した後、ベンゾトリアゾール−１−イル−オキシ−トリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（０．９７ｇ、２．２ｍｍｏｌ）とジイソプロピルエチルアミン（１．０ｍＬ、６．６ｍｍｏｌ）を順次に加え、常温で１５時間撹拌した。反応完了後、高真空下で減圧濃縮して、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、（２Ｓ，４Ｓ）−ｔ−ブチル４−（（ｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−２−（（１Ｒ，２Ｒ）−３−（（２，６−ジフルオロフェネチル）アミノ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル）ピロリジン−１−カルボキシレート（０．８７ｇ、７０．９％）を得た。
【０１９３】
前記化合物（０．８７ｇ、１．５６ｍｍｏｌ）をジクロロメタン１０ｍＬに溶かし、トリフルオロ酢酸７ｍＬを滴加した後、２０−２５℃で３時間撹拌した。反応が終了すると、反応溶媒を減圧濃縮して除去し、トルエン５ｍＬを２回添加してトリフルオロ酢酸を完全に除去した後、反応を進行させた。
【０１９４】
反応濃縮液（ＴＦＡ塩）と（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−３−メチルブタンアミド）−Ｎ，３−ジメチルブタンアミド）−３−メトキシ−５−メチルヘプタン酸（０．６７ｇ、１．５６ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド５ｍＬに溶解し、０℃でジエチルシアノホスホネート（ＤＥＰＣ）（０．２６ｍＬ、１．５６ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（１．０９ｍＬ、７．８２ｍｍｏｌ）を加え、常温で１６時間撹拌した。反応が終了すると、反応溶媒を除去し、エチルアセテート２０ｍＬに溶解させた後、１Ｍポタシウムヒドロゲンサルファイト、水、飽和炭酸水素ナトリウム溶液、および塩水で抽出した後、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧濃縮した。濃縮残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（エチルアセテート：ヘキサン＝２：１→エチルアセテート）で精製して、化合物（ＩＩＩ−１８）のヒドロキシ基が保護化された化合物（１．１４ｇ、８４％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ０．０４（ｓ，６Ｈ），０．８１−１．０６（ｍ，１９Ｈ），１．１９（ｍ，３Ｈ），１．４６（ｍ，２Ｈ），１．６５（ｍ，２Ｈ），１．９７−２．１７（ｍ，３Ｈ），２．４４−２．４６（ｍ，３Ｈ），２．７１−２．８０（ｍ，３Ｈ），２．８１−２．８９（ｍ，１Ｈ），２．９１−２．９４（ｍ，２Ｈ），２．７１−２．８０（ｍ，３Ｈ），３．０４（ｓ，３Ｈ），３．２６−３．３３（ｍ，２Ｈ），３．３７（ｓ，３Ｈ），３．７４（ｍ，２Ｈ），４．２８−４．３１（ｍ，２Ｈ），４．７５−４．８２（ｍ，２Ｈ），６．１８（ｍ，１Ｈ），６．８４−６．８９（ｍ，２Ｈ），７．１５−７．１９（ｍ，１Ｈ），７．５８（ｄ，１Ｈ）
【０１９５】
化合物（ＩＩＩ−１８）のヒドロキシ基が保護化された化合物（１．１４ｇ、１．３１ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン９５ｍＬに溶かし、１．０Ｍテトラブチルアンモニウムフルオライド（４．９ｍＬ、４．０９ｍｍｏｌ）を添加した後、５時間撹拌した。飽和したアンモニウムクロライド水溶液で反応を終了させ、エチルアセテート４５０ｍＬと水３００ｍＬで抽出した後、減圧濃縮した。濃縮残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール＝９：１）で精製して、表題化合物（０．４５ｇ、４５％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ０．７９−１．０５（ｍ，１９Ｈ），１．２６（ｍ，３Ｈ），１．４５（ｍ，２Ｈ），１．６６（ｍ，２Ｈ），１．９７−２．１７（ｍ，３Ｈ），２．４４−２．４６（ｍ，３Ｈ），２．７１−２．８０（ｍ，３Ｈ），２．８１−２．８９（ｍ，１Ｈ），２．９１−２．９４（ｍ，２Ｈ），２．７１−２．８０（ｍ，３Ｈ），３．０４（ｓ，３Ｈ），３．２６−３．３３（ｍ，２Ｈ），３．３７（ｓ，３Ｈ），３．７４（ｍ，２Ｈ），４．２８−４．３１（ｍ，２Ｈ），４．７５−４．８２（ｍ，２Ｈ），６．１８（ｍ，１Ｈ），６．８４−６．８９（ｍ，２Ｈ），７．１５−７．１９（ｍ，１Ｈ），７．５８（ｄ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：７５４［Ｍ＋］＋
【０１９６】
製造例２−１５：化合物（ＩＩＩ−１９）の製造
【０１９７】
【化５３】
0006262768.tif 000062
【０１９８】
２−（２，６−ジフルオロフェニル）エタンアミンの代わりに、（Ｓ）−２−アミノ−１−（４−フルオロフェニル）プロパン−１−オンを用いて、（２Ｓ，４Ｓ）−ｔ−ブチル４−（（ｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−２−（（１Ｒ，２Ｒ）−３−（（（Ｓ）−１−（４−フルオロフェニル）−１−オキソプロパン−２−イル）アミノ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル）ピロリジン−１−カルボキシレート（０．４４ｇ、０．７８ｍｍｏｌ）を得て、これを用いて、製造例２−１４と同様の方法で表題化合物０．３４ｇ（５８％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：７６４［Ｍ＋］＋
【０１９９】
製造例２−１６：化合物（ＩＩＩ−２０）の製造
【０２００】
【化５４】
0006262768.tif 000063
【０２０１】
（２Ｓ，４Ｓ）−ｔ−ブチル４−（（ｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−２−（（１Ｒ，２Ｒ）−３−（（２，６−ジフルオロフェネチル）アミノ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル）ピロリジン−１−カルボキシレートの代わりに、（２Ｓ，４Ｓ）−ｔ−ブチル４−アジド−２−（（１Ｒ，２Ｒ）−３−（（２，６−ジフルオロフェネチル）アミノ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル）ピロリジン−１−カルボキシレート（０．３３ｇ、０．７１ｍｍｏｌ）を用いて、製造例２−１４と同様の方法で化合物（ＩＩＩ−２０）のアミノ基が保護化された化合物（０．４２ｇ、７６％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ０．７９−１．０７（ｍ，１５Ｈ），１．２０（ｄ，２Ｈ），１．９９−２．１１（ｍ，４Ｈ），２．１８−２．２８（ｍ，５Ｈ），２．３３−２．４５（ｍ，４Ｈ），２．９０−３．２７（ｍ，６Ｈ），３．３２−３．４２（ｍ，６Ｈ），３．４７−３．５４（ｍ，２Ｈ），３．７５−３．７８（ｍ，１Ｈ），３．８５−３．９８（ｍ，２Ｈ），４．１９−４．２１（ｍ，１Ｈ），４．３９−４．４４（ｍ，１Ｈ），４．４６−４．８０（ｍ，１Ｈ），４．８７−４．９０（ｍ，１Ｈ），６．１７（ｍ，１Ｈ），６．８４−６．９５（ｍ，２Ｈ），７．１４−７．２６（ｍ，１Ｈ）
【０２０２】
化合物（ＩＩＩ−２０）のアミノ基が保護化された化合物（０．２４ｇ、０．３１ｍｍｏｌ）をメチルアルコール１０ｍＬに溶かし、１０％パラジウムカーボン（１５ｍｇ）を加えた後、水素大気下で１４時間撹拌した。反応が終了すると、反応混合物をセライトで濾過し、メタノールで数回洗浄した後、減圧下で溶媒を除去して、白色固体の表題化合物（０．２３ｇ、９９％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ０．７９−１．０３（ｍ，１４Ｈ），１．２１−１．２２（ｍ，５Ｈ），２．０６−２．４５（ｍ，６Ｈ），２．８９−３．０２（ｍ，４Ｈ），３．３０−３．４４（ｍ，５Ｈ），３．４７−３．５２（ｍ，２Ｈ），３．６７−３．６９（ｍ，１Ｈ），３．７１−４．３９（ｍ，３Ｈ），４．７８−４．８０（ｍ，１Ｈ），６．１７（ｍ，１Ｈ），６．８４−６．９５（ｍ，２Ｈ），７．１４−７．２６（ｍ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：７５３［Ｍ＋］＋，７７５［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０２０３】
製造例２−１７：化合物（ＩＩＩ−２１）の製造
【０２０４】
【化５５】
0006262768.tif 000064
【０２０５】
（２Ｓ，４Ｓ）−ｔ−ブチル４−（（ｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−２−（（１Ｒ，２Ｒ）−３−（（２，６−ジフルオロフェネチル）アミノ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル）ピロリジン−１−カルボキシレートの代わりに、（２Ｓ，４Ｓ）−ｔ−ブチル４−（ベンジル（メチル）アミノ）−２−（（１Ｒ，２Ｒ）−３−（（２，６−ジフルオロフェネチル）アミノ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル）ピロリジン−１−カルボキシレート（０．１３ｇ、０．２４ｍｍｏｌ）を用いて、製造例２−１４と同様の方法で化合物（ＩＩＩ−２１）のアミノ基が保護化された化合物（０．１３ｇ、６４％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：８５７．５［Ｍ＋］＋
【０２０６】
化合物（ＩＩＩ−２１）のアミノ基が保護化された化合物（０．１３ｇ、０．１５ｍｍｏｌ）をメチルアルコール１０ｍＬに溶かし、２０％水酸化パラジウム（６６ｍｇ）を加えた後、水素圧力（５５ｐｓｉ）下で１２時間撹拌した。反応が終了すると、反応混合物をセライトで濾過し、メタノールで数回洗浄した後、減圧下で溶媒を除去して、白色固体の表題化合物（１１５ｍｇ、１００％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：７６７．６［Ｍ＋］＋，７８９．４［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０２０７】
製造例２−１８：化合物（ＩＩＩ−２２）の製造
【０２０８】
【化５６】
0006262768.tif 000065
【０２０９】
（２Ｓ，４Ｓ）−ｔ−ブチル２−（（１Ｒ，２Ｒ）−３−（（２−（３−フルオロ−４−メトキシフェニル）−２−オキソエチル）アミノ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル）−４−ヒドロキシピロリジン−１−カルボキシレート（１．２８ｇ、２．７３ｍｍｏｌ）をジクロロメタン３０ｍＬに溶かし、トリフルオロ酢酸１０ｍＬを滴加した後、２０−２５℃で３時間撹拌した。反応が終了すると、反応溶媒を減圧濃縮して除去し、トルエン５ｍｌを２回添加してトリフルオロ酢酸を完全に除去した後、反応を進行させた。
【０２１０】
（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−ｔ−ブチル４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−３−メチルブタンアミド）−Ｎ，３−ジメチルブタンアミド）−３−メトキシ−５−メチルヘプタノエート（１．３３ｇ、２．７３ｍｍｏｌ）をジクロロメタン３０ｍＬに溶かし、トリフルオロ酢酸１０ｍＬを滴加した後、２０−２５℃で３時間撹拌した。反応が終了すると、反応溶媒を減圧濃縮して除去し、トルエン５ｍＬを２回添加してトリフルオロ酢酸を完全に除去した後、反応を進行させた。
【０２１１】
２つの反応濃縮液（ＴＦＡ塩）をジクロロメタン６０ｍＬに溶解し、０℃でジエチルシアノホスホネート（ＤＥＰＣ）（０．５２ｍＬ、３．２８ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（３．８ｍＬ、２７．３２ｍｍｏｌ）を加え、常温で１６時間撹拌した。反応が終了すると、反応溶媒を除去し、エチルアセテート５０ｍＬに溶解させた後、１Ｍポタシウムヒドロゲンサルファイト、水、飽和炭酸水素ナトリウム溶液、および塩水で抽出した後、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧濃縮した。濃縮残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（エチルアセテート：ヘキサン＝２：１→エチルアセテート）で精製して、表題化合物（１．３ｇ、６０％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ０．７８  ０．８８（ｍ，３Ｈ），０．９１−１．０７（ｍ，１７Ｈ），１．３１−１．３７（ｍ，５Ｈ），１．９９−２．１１（ｍ，３Ｈ），２．２８（ｓ，６Ｈ），２．４３−２．６２（ｍ，６Ｈ），３．０６（ｓ，３Ｈ），３．１１−３．１６（ｍ，２Ｈ），３．３４（ｓ，３Ｈ），３．５６（ｓ，３Ｈ），３．５７−３．６５（ｍ，２Ｈ），３．９７（ｓ，３Ｈ），４．０８−４．０９（ｂｒｓ，１Ｈ），４．１８−４．２（ｄ，１Ｈ），４．３（ｂｒｓ，１Ｈ），４．３９−４．４２（ｄ，２Ｈ），４．７−４．７２（ｔ，２Ｈ），４．７６−４．８（ｍ，２Ｈ），４．８５−４．９１（ｂｒｓ，１Ｈ），７．０３−７．１（ｍ，１Ｈ），７．６９−７．７８（ｍ，２Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：７８０．８［Ｍ＋Ｈ］＋，８０２．８［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０２１２】
製造例２−１９：化合物（ＩＩＩ−２３）の製造
【０２１３】
【化５７】
0006262768.tif 000066
【０２１４】
（２Ｓ，４Ｓ）−ｔ−ブチル２−（（１Ｒ，２Ｒ）−３−（（２−（３−フルオロ−４−メトキシフェニル）−２−オキソエチル）アミノ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル）−４−ヒドロキシピロリジン−１−カルボキシレートの代わりに、（２Ｓ，４Ｓ）−ｔ−ブチル２−（（１Ｒ，２Ｒ）−３−（（２−（２，４−ジメチルフェニル）−２−オキソエチル）アミノ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル）−４−ヒドロキシピロリジン−１−カルボキシレートを用いて、製造例２−１８と同様の方法で表題化合物（３．２ｇ、８９％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ０．７９−０．８５（ｍ，３Ｈ），０．９１−１．１３（ｍ，１４Ｈ），１．１５−１．１９（ｍ，３Ｈ），１．３５−１．３８（ｍ，５Ｈ），２．００−２．１０（ｍ，３Ｈ），２．１８−２．２４（ｍ，３Ｈ），２．３７（ｓ，３Ｈ），２．３９−２．４８（ｍ，１Ｈ），２．５３（ｓ，３Ｈ），２．５５−２．６２（ｍ，１Ｈ），２．８７（ｓ，６Ｈ），２．８９（ｓ，１Ｈ），３．０２（ｓ，３Ｈ），３．０７−３．１７（ｍ，２Ｈ），３．３２（ｓ，３Ｈ），３．５２（ｓ，３Ｈ），３．５１−３．６１（ｍ，２Ｈ），４．１１−４．１２（ｂｒｓ，１Ｈ），４．１６−４．１８（ｄ，１Ｈ），４．３０（ｍ，１Ｈ），４．３７−４．４（ｄ，１Ｈ），４．６４−４．６６（ｔ，２Ｈ），４．６９−４．７４（ｍ，２Ｈ），６．９０（ｔ，１Ｈ），７．０９−７．１１（ｍ，２Ｈ），７．６６−７．６８（ｄ，２Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：７６０．６［Ｍ＋Ｈ］＋，７８２．６［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０２１５】
製造例２−２０：化合物（ＩＩＩ−２４）の製造
【０２１６】
【化５８】
0006262768.tif 000067
【０２１７】
（２Ｓ，４Ｓ）−ｔ−ブチル２−（（１Ｒ，２Ｒ）−３−（（２−（３−フルオロ−４−メトキシフェニル）−２−オキソエチル）アミノ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル）−４−ヒドロキシピロリジン−１−カルボキシレートの代わりに、（２Ｓ，４Ｓ）−ｔ−ブチル４−ヒドロキシ−２−（（１Ｒ，２Ｒ）−１−メトキシ−３−（（２−（６−メトキシナフタレン−２−イル）−２−オキソエチル）アミノ）−２−メチル−３−オキソプロピル）ピロリジン−１−カルボキシレートを用いて、製造例２−１８と同様の方法で表題化合物（０．１７ｇ、６７．５％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ０．７５−０．８２（ｍ，３Ｈ），０．８５−１．０７（ｍ，１７Ｈ），１．２６−１．４０（ｍ，５Ｈ），１．９８−２．１０（ｍ，６Ｈ），２．３９−２．４８（ｍ，３Ｈ），２．５８−２．６４（ｍ，１Ｈ），３．０１（ｓ，３Ｈ），３．３４（ｓ，３Ｈ），３．５２−３．７３（ｍ，２Ｈ），３．５７（ｓ，３Ｈ），４．１２（ｂｒｓ，１Ｈ），４．１９−４．２１（ｄ，１Ｈ），４．２５−４．３１（ｂｒｓ，１Ｈ），４．４１−４．４４（ｄ，１Ｈ），４．７５−４．８３（ｍ，２Ｈ），４．８７−４．９４（ｍ，３Ｈ），６．９１−６．９４（ｔ，２Ｈ），７．１７（ｓ，１Ｈ），７．２２−７．２４（ｄ，１Ｈ），７．７８−７．９２（ｍ，２Ｈ），７．９６−７．９８（ｄ，１Ｈ），８．４２（ｓ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：８１２．７［Ｍ＋Ｈ］＋，８３４．７［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０２１８】
製造例２−２１：化合物（ＩＩＩ−２５）の製造
【０２１９】
【化５９】
0006262768.tif 000068
【０２２０】
（２Ｓ，４Ｓ）−ｔ−ブチル２−（（１Ｒ，２Ｒ）−３−（（２−（３−フルオロ−４−メトキシフェニル）−２−オキソエチル）アミノ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル）−４−ヒドロキシピロリジン−１−カルボキシレートの代わりに、（２Ｓ，４Ｓ）−ｔ−ブチル−４−アジド−２（（１Ｒ，２Ｒ）−３−（（２−（３，４−ジメトキシフェニル）−２−オキソエチル）アミノ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル）ピロリジン−１−カルボキシレート（０．３９ｇ、０．７７ｍｍｏｌ）を用いて、製造例２−１８と同様の方法で化合物（ＩＩＩ−２５）のアミノ基が保護化された化合物（０．５６ｇ、８９％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：８１７．５［Ｍ＋Ｈ］＋，８３９．５［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０２２１】
化合物（ＩＩＩ−２５）のアミノ基が保護化された化合物を用いて、製造例２−１６と同様の方法で表題化合物（０．３８ｇ、６９％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ０．７９−０．８２（ｔ，３Ｈ），０．８８−１．０２（ｍ，１７Ｈ），１．２３−１．２８（ｍ，１Ｈ），１．３１−１．３４（ｍ，３Ｈ），１．９６−２．１２（ｍ，２Ｈ），２．２５−２．２８（ｍ，６Ｈ），２．３６−２．５２（ｍ，２Ｈ），２．５６−２．６５（ｍ，１Ｈ），２．９８−３．０３（ｍ，３Ｈ），３．２５−３．３３（ｍ，５Ｈ），３．４７−３．４９（ｍ，１Ｈ），３．５１−３．５７（ｍ，３Ｈ），３．７２−３．７３（ｍ，１Ｈ），３．８３−３．９６（ｄ，６Ｈ），４．０９−４．１６（ｍ，２Ｈ），４．１８−４．２４（ｍ，２Ｈ），４．２５−４．３６（ｍ，１Ｈ），４．６８−４．６９（ｍ，１Ｈ），４．７４−４．８８ｍ，２Ｈ），４．８２−４．８８（ｍ，１Ｈ），６．９１−６．９３（ｄ，１Ｈ），７．５０（ｓ，１Ｈ），７．６０−７．６３（ｄ，１Ｈ）
【０２２２】
製造例２−２２：化合物（ＩＩＩ−２６）の製造
【０２２３】
【化６０】
0006262768.tif 000069
【０２２４】
（２Ｓ，４Ｓ）−ｔ−ブチル２−（（１Ｒ，２Ｒ）−３−（（２−（３−フルオロ−４−メトキシフェニル）−２−オキソエチル）アミノ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル）−４−ヒドロキシピロリジン−１−カルボキシレートの代わりに、（２Ｓ，４Ｓ）−ｔ−ブチル−４−アジド−２−（（１Ｒ，２Ｒ）−１−メトキシ−２−メチル−３−（（２−（ナフタレン−２−イル）−２−オキソエチル）アミノ−３−オキソプロピル）ピロリジン−１−カルボキシレート（０．４０ｇ、０．８１ｍｍｏｌ）を用いて、製造例２−１８と同様の方法で化合物（ＩＩＩ−２６）のアミノ基が保護化された化合物（０．６０ｇ、９２％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：８０７．５［Ｍ＋Ｈ］＋，８２９．５［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０２２５】
化合物（ＩＩＩ−２６）のアミノ基が保護化された化合物を用いて、製造例２−１６と同様の方法で表題化合物（０．２８ｇ、４８％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ０．７８−０．８２（ｔ，３Ｈ），０．８７−１．０１（ｍ，１７Ｈ），１．２２−１．２８（ｍ，１Ｈ），１．３３−１．３４（ｍ，３Ｈ），１．８０−２．１２（ｍ，２Ｈ），２．２４−２．２８（ｍ，６Ｈ），２．３８−２．５０（ｍ，２Ｈ），２．５８−２．６８（ｍ，１Ｈ），２．９５−３．０５（ｍ，３Ｈ），３．０６−３．１３（ｍ，１Ｈ），３．２０−３．２３（ｍ，１Ｈ），３．２８−３．４０（ｍ，３Ｈ），３．４３−３．４５（ｍ，１Ｈ），３．４８−３．５９（ｍ，３Ｈ），３．６０−３．６７（ｍ，１Ｈ），３．７２−３．７５（ｍ，１Ｈ），４．０４−４．１７（ｍ，２Ｈ），２．２０−２．３０（ｍ，１Ｈ），４．３２−４．３６（ｍ，１Ｈ），４．７３−４．８１（ｍ，２Ｈ），４．８５−４．８６（ｍ，１Ｈ），４．９６−５．０２（ｍ，１Ｈ），７．５７−７．６５（ｍ，２Ｈ），７．８８−８．０１（ｍ，４Ｈ），８．５１（ｓ，１Ｈ）
【０２２６】
製造例２−２３：化合物（ＩＩＩ−２７）の製造
【０２２７】
【化６１】
0006262768.tif 000070
【０２２８】
（２Ｓ，４Ｓ）−ｔ−ブチル２−（（１Ｒ，２Ｒ）−３−（（２−（３−フルオロ−４−メトキシフェニル）−２−オキソエチル）アミノ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル）−４−ヒドロキシピロリジン−１−カルボキシレートの代わりに、（２Ｓ，４Ｓ）−ｔ−ブチル−４−アジド−２−（（１Ｒ，２Ｒ）−１−メトキシ−３−（（２−（３−メトキシフェニル）−２−オキソエチル）アミノ）−２−メチル−３−オキソプロピル）ピロリジン−１−カルボキシレート（０．３０ｇ、０．６３ｍｍｏｌ）を用いて、製造例２−１８と同様の方法で化合物（ＩＩＩ−２７）のアミノ基が保護化された化合物（０．５０ｇ、１００％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：７８７．４［Ｍ＋Ｈ］＋，８０９．５［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０２２９】
化合物（ＩＩＩ−２７）のアミノ基が保護化された化合物を用いて、製造例２−１６と同様の方法で表題化合物（０．２３ｇ、４８％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ０．７８−０．８２（ｔ，３Ｈ），０．８８−１．０２（ｍ，１７Ｈ），１．２５−１．２９（ｍ，３Ｈ），２．０７−２．０９（ｍ，２Ｈ），２．１８−２．３１（ｍ，６Ｈ），２．３３−２．４０（ｍ，２Ｈ），２．５２−２．６４（ｍ，１Ｈ），２．９２−３．０８（ｍ，３Ｈ），３．２０−３．２５（ｍ，１Ｈ），３．２８−３．３３（ｍ，３Ｈ），３．３８−３．４０（ｍ，１Ｈ），３．４８−３．７６（ｍ，１Ｈ），３．７８−３．８８（ｍ，３Ｈ），４．０６−４．１６（ｍ，２Ｈ），４．１９−４．２８（ｍ，１Ｈ），４．２９−４．３９（ｍ，１Ｈ），４．７０−４．７１（ｍ，１Ｈ），４．７４−４．８１（ｍ，２Ｈ），４．８８−４．９５（ｍ，１Ｈ），６．９６−６．９９（ｄ，１Ｈ），７．３８−７．４２（ｔ，１Ｈ），７．４７（ｓ，１Ｈ），７．５３−７．５５（ｄ，１Ｈ）
【０２３０】
製造例２−２４：化合物（ＩＩＩ−２８）の製造
【０２３１】
【化６２】
0006262768.tif 000071
【０２３２】
（２Ｓ，４Ｓ）−ｔ−ブチル４−（（ｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−２−（（１Ｒ，２Ｒ）−３−（（（Ｓ）−１−（４−フルオロフェニル）−１−オキソプロパン−２−イル）アミノ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル）ピロリジン−１−カルボキシレート（０．８７ｇ、１．５６ｍｍｏｌ）をジクロロメタン１０ｍＬに溶かし、トリフルオロ酢酸７ｍＬを滴加した後、２０−２５℃で３時間撹拌した。反応が終了すると、反応溶媒を減圧濃縮して除去し、トルエン５ｍｌを２回添加してトリフルオロ酢酸を完全に除去した後、反応を進行させた。
【０２３３】
反応濃縮液（ＴＦＡ塩）と（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−３−メチルブタンアミド）−Ｎ，３−ジメチルブタンアミド）−３−メトキシ−５−メチルヘプタン酸（０．６７ｇ、１．５６ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド５ｍＬに溶解し、０℃でジエチルシアノホスホネート（ＤＥＰＣ）（０．２６ｍＬ、１．５６ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（１．０９ｍＬ、７．８２ｍｍｏｌ）を加え、常温で１６時間撹拌した。反応が終了すると、反応溶媒を除去し、エチルアセテート２０ｍＬに溶解させた後、１Ｍポタシウムヒドロゲンサルファイト、水、飽和炭酸水素ナトリウム溶液、および塩水で抽出した後、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧濃縮した。濃縮残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（エチルアセテート：ヘキサン＝２：１→エチルアセテート）で精製して、ヒドロキシ基が保護化された化合物（１．１４ｇ、８４％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ０．０４（ｓ，６Ｈ），０．８１−１．０６（ｍ，１９Ｈ），１．１９（ｍ，３Ｈ），１．４６（ｍ，２Ｈ），１．６５（ｍ，２Ｈ），１．９７−２．１７（ｍ，３Ｈ），２．４４−２．４６（ｍ，３Ｈ），２．７１−２．８０（ｍ，３Ｈ），２．８１−２．８９（ｍ，１Ｈ），２．９１−２．９４（ｍ，２Ｈ），２．７１−２．８０（ｍ，３Ｈ）３．０４（ｓ，３Ｈ），３．２６−３．３３（ｍ，２Ｈ），３．３７（ｓ，３Ｈ），３．７４（ｍ，２Ｈ），４．２８−４．３１（ｍ，２Ｈ），４．７５−４．８２（ｍ，２Ｈ），６．１８（ｍ，１Ｈ），６．８４−６．８９（ｍ，２Ｈ），７．１５−７．１９（ｍ，１Ｈ），７．５８（ｄ，１Ｈ）
【０２３４】
ヒドロキシ基が保護化された化合物（１．１４ｇ、１．３１ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン９５ｍｌに溶かし、１．０Ｍテトラブチルアンモニウムフルオライド（４．９ｍＬ、４．０９ｍｍｏｌ）を添加した後、５時間撹拌した。飽和したアンモニウムクロライド水溶液で反応を終了させ、エチルアセテート４５０ｍＬと水３００ｍＬで抽出した後、減圧濃縮した。濃縮残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール＝９：１）で精製して、（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−３−メチルブタンアミド）−Ｎ−（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−（（２Ｓ，４Ｓ）−２−（（１Ｒ，２Ｒ）−３−（（（Ｓ）−１−（４−フルオロフェニル）−１−オキソプロパン−２−イル）アミノ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル）−４−ヒドロキシピロリジン−１−イル）−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル）−Ｎ，３−ジメチルブタンアミド（０．４５ｇ、４５％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ０．７９−１．０５（ｍ，１９Ｈ），１．２６（ｍ，３Ｈ），１．４５（ｍ，２Ｈ），１．６６（ｍ，２Ｈ），１．９７−２．１７（ｍ，３Ｈ），２．４４−２．４６（ｍ，３Ｈ），２．７１−２．８０（ｍ，３Ｈ），２．８１−２．８９（ｍ，１Ｈ），２．９１−２．９４（ｍ，２Ｈ），２．７１−２．８０（ｍ，３Ｈ），３．０４（ｓ，３Ｈ），３．２６−３．３３（ｍ，２Ｈ），３．３７（ｓ，３Ｈ），３．７４（ｍ，２Ｈ），４．２８−４．３１（ｍ，２Ｈ），４．７５−４．８２（ｍ，２Ｈ），６．１８（ｍ，１Ｈ），６．８４−６．８９（ｍ，２Ｈ），７．１５−７．１９（ｍ，１Ｈ），７．５８（ｄ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：７５４［Ｍ＋Ｈ］＋
【０２３５】
前記化合物（０．４５ｇ、０．５９ｍｍｏｌ）をジクロロメタン２０ｍｌに溶解し、−５０〜−６０℃に冷却した後、ピリジン（０．２９ｍｌ、３．５４ｍｍｏｌ）を加えた。生成された反応溶液にｐ−ニトロフェニルクロロホルメート（０．７１ｇ、３．５４ｍｍｏｌ）をジクロロメタン１０ｍｌに溶解して２０分間徐々に滴加した後、−５０〜−６０℃で３時間撹拌した。反応が終了すると、反応溶液にジクロロメタン２０ｍｌをさらに加え、０．５Ｍポタシウムヒドロゲンサルファイト溶液で抽出した後、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧濃縮した。濃縮残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、表題化合物（０．４ｇ、７４％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：９２９．６［Ｍ＋Ｈ］＋
【０２３６】
製造例２−２５：化合物（ＩＩＩ−２９）の製造
【０２３７】
【化６３】
0006262768.tif 000072
【０２３８】
（２Ｓ，４Ｓ）−ｔ−ブチル２−（（１Ｒ，２Ｒ）−３−（（２−（３−フルオロ−４−メトキシフェニル）−２−オキソエチル）アミノ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル）−４−ヒドロキシピロリジン−１−カルボキシレート（１．２８ｇ、２．７３ｍｍｏｌ）をジクロロメタン３０ｍＬに溶かし、トリフルオロ酢酸１０ｍＬを滴加した後、２０−２５℃で３時間撹拌した。反応が終了すると、反応溶媒を減圧濃縮して除去し、トルエン１０ｍｌを２回添加してトリフルオロ酢酸を完全に除去した後、反応を進行させた。
【０２３９】
（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−ｔ−ブチル４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−３−メチルブタンアミド）−Ｎ，３−ジメチルブタンアミド）−３−メトキシ−５−メチルヘプタノエート（１．３３ｇ、２．７３ｍｍｏｌ）をジクロロメタン３０ｍＬに溶かし、トリフルオロ酢酸１０ｍＬを滴加した後、２０−２５℃で３時間撹拌した。反応が終了すると、反応溶媒を減圧濃縮して除去し、トルエン１０ｍＬを２回添加してトリフルオロ酢酸を完全に除去した後、反応を進行させた。
【０２４０】
２つの反応濃縮液（ＴＦＡ塩）をジクロロメタン６０ｍＬに溶解し、０℃でジエチルシアノホスホネート（ＤＥＰＣ）（０．５２ｍＬ、３．２８ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（３．８ｍＬ、２７．３２ｍｍｏｌ）を加え、常温で１６時間撹拌した。反応が終了すると、反応溶媒を除去し、エチルアセテート５０ｍＬに溶解させた後、１Ｍポタシウムヒドロゲンサルファイト、水、飽和炭酸水素ナトリウム溶液、および塩水で抽出した後、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧濃縮した。濃縮残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（エチルアセテート：ヘキサン＝２：１→エチルアセテート）で精製して、（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−３−メチルブタンアミド）−Ｎ−（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−（（２Ｓ，４Ｓ）−２−（（１Ｒ，２Ｒ）−３−（（２−（３−フルオロ−４−メトキシフェニル）−２−オキソエチル）アミノ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル）−４−ヒドロキシピロリジン−１−イル）−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル）−Ｎ，３−ジメチルブタンアミド（１．３ｇ、６０％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ０．７８−０．８８（ｍ，３Ｈ），０．９１−１．０７（ｍ，１７Ｈ），１．３１−１．３７（ｍ，５Ｈ），１．９９−２．１１（ｍ，３Ｈ），２．２８（ｓ，６Ｈ），２．４３−２．６２（ｍ，６Ｈ），３．０６（ｓ，３Ｈ），３．１１−３．１６（ｍ，２Ｈ），３．３４（ｓ，３Ｈ），３．５６（ｓ，３Ｈ），３．５７−３．６５（ｍ，２Ｈ），３．９７（ｓ，３Ｈ），４．０８−４．０９（ｂｒｓ，１Ｈ），４．１８−４．２（ｄ，１Ｈ），４．３（ｂｒｓ，１Ｈ），４．３９−４．４２（ｄ，２Ｈ），４．７−４．７２（ｔ，２Ｈ），４．７６−４．８（ｍ，２Ｈ），４．８５−４．９１（ｂｒｓ，１Ｈ），７．０３−７．１（ｍ，１Ｈ），７．６９−７．７８（ｍ，２Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：７８０．８［Ｍ＋Ｈ］＋，８０２．８［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０２４１】
前記化合物（１．２７ｇ、１．６３ｍｍｏｌ）をジクロロメタン２０ｍｌに溶解し、−５０〜−６０℃に冷却した後、ピリジン（１．３ｍｌ、１６．２８ｍｍｏｌ）を加えた。生成された反応溶液にｐ−ニトロフェニルクロロホルメート（１６．２８ｇ、３．３ｍｍｏｌ）をジクロロメタン１０ｍｌに溶解して２０分間徐々に滴加した後、−５０〜−６０℃で３時間撹拌した。反応が終了すると、反応溶液にジクロロメタン２０ｍｌをさらに加え、０．５Ｍポタシウムヒドロゲンサルファイト溶液で抽出した後、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧濃縮した。濃縮残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、表題化合物（０．８ｇ、５４％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：９４５．７［Ｍ＋Ｈ］＋，９６７．７［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０２４２】
製造例２−２６：化合物（ＩＩＩ−３０）の製造
【０２４３】
【化６４】
0006262768.tif 000073
【０２４４】
（２Ｓ，４Ｓ）−ｔ−ブチル２−（（１Ｒ，２Ｒ）−３−（（２−（３−フルオロ−４−メトキシフェニル）−２−オキソエチル）アミノ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル）−４−ヒドロキシピロリジン−１−カルボキシレートの代わりに、（２Ｓ，４Ｓ）−ｔ−ブチル２−（（１Ｒ，２Ｒ）−３−（（２−（２，４−ジメチルフェニル）−２−オキソエチル）アミノ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル）−４−ヒドロキシピロリジン−１−カルボキシレートを用いて、製造例２−２５と同様の方法で（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−３−メチルブタンアミド）−Ｎ−（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−（（２Ｓ，４Ｓ）−２−（（１Ｒ，２Ｒ）−３−（（２−（２，４−ジメチルフェニル）−２−オキソエチル）アミノ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル）−４−ヒドロキシピロリジン−１−イル）−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル）−Ｎ，３−ジメチルブタンアミド（３．２ｇ、８９％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ０．７９  ０．８５（ｍ，３Ｈ），０．９１−１．１３（ｍ，１４Ｈ），１．１５−１．１９（ｍ，３Ｈ），１．３５−１．３８（ｍ，５Ｈ），２．００−２．１０（ｍ，３Ｈ），２．１８−２．２４（ｍ，３Ｈ），２．３７（ｓ，３Ｈ），２．３９−２．４８（ｍ，１Ｈ），２．５３（ｓ，３Ｈ），２．５５−２．６２（ｍ，１Ｈ），２．８７（ｓ，６Ｈ），２．８９（ｓ，１Ｈ），３．０２（ｓ，３Ｈ），３．０７−３．１７（ｍ，２Ｈ），３．３２（ｓ，３Ｈ），３．５２（ｓ，３Ｈ），３．５１−３．６１（ｍ，２Ｈ），４．１１−４．１２（ｂｒｓ，１Ｈ），４．１６−４．１８（ｄ，１Ｈ），４．３０（ｍ，１Ｈ），４．３７−４．４（ｄ，１Ｈ），４．６４−４．６６（ｔ，２Ｈ），４．６９−４．７４（ｍ，２Ｈ），６．９０（ｔ，１Ｈ），７．０９−７．１１（ｍ，２Ｈ），７．６６−７．６８（ｄ，２Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：７６０．６［Ｍ＋Ｈ］＋，７８２．６［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０２４５】
前記化合物を用いて、製造例２−２５と同様の方法で表題化合物（１．６ｇ、４３％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：９２５．６［Ｍ＋Ｈ］＋，９４７．６［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０２４６】
製造例２−２７：化合物（ＩＩＩ−３１）の製造
【０２４７】
【化６５】
0006262768.tif 000074
【０２４８】
（２Ｓ，４Ｓ）−ｔ−ブチル２−（（１Ｒ，２Ｒ）−３−（（２−（３−フルオロ−４−メトキシフェニル）−２−オキソエチル）アミノ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル）−４−ヒドロキシピロリジン−１−カルボキシレートの代わりに、（２Ｓ，４Ｓ）−ｔ−ブチル４−ヒドロキシ−２−（（１Ｒ，２Ｒ）−１−メトキシ−３−（（２−（６−メトキシナフタレン−２−イル）−２−オキソエチル）アミノ）−２−メチル−３−オキソプロピル）ピロリジン−１−カルボキシレートを用いて、製造例２−２５と同様の方法で（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−３−メチルブタンアミド）−Ｎ−（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−（（２Ｓ，４Ｓ）−４−ヒドロキシ−２−（（１Ｒ，２Ｒ）−１−メトキシ−３−（（２−（６−メトキシナフタレン−２−イル）−２−オキソエチル）アミノ）−２−メチル−３−オキソプロピル）ピロリジン−１−イル）−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル）−Ｎ，３−ジメチルブタンアミド（０．１７ｇ、６７．５％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ０．７５−０．８２（ｍ，３Ｈ），０．８５−１．０７（ｍ，１７Ｈ），１．２６−１．４０（ｍ，５Ｈ），１．９８−２．１０（ｍ，６Ｈ），２．３９−２．４８（ｍ，３Ｈ），２．５８−２．６４（ｍ，１Ｈ），３．０１（ｓ，３Ｈ），３．３４（ｓ，３Ｈ），３．５２−３．７３（ｍ，２Ｈ），３．５７（ｓ，３Ｈ），４．１２（ｂｒｓ，１Ｈ），４．１９−４．２１（ｄ，１Ｈ），４．２５−４．３１（ｂｒｓ，１Ｈ），４．４１−４．４４（ｄ，１Ｈ），４．７５−４．８３（ｍ，２Ｈ），４．８７−４．９４（ｍ，３Ｈ），６．９１−６．９４（ｔ，２Ｈ），７．１７（ｓ，１Ｈ），７．２２−７．２４（ｄ，１Ｈ），７．７８−７．９２（ｍ，２Ｈ），７．９６−７．９８（ｄ，１Ｈ），８．４２（ｓ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：８１２．７［Ｍ＋Ｈ］＋，８３４．７［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０２４９】
前記化合物を用いて、製造例２−２５と同様の方法で表題化合物（０．１５ｇ、８７％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：９７７．９［Ｍ＋Ｈ］＋，９９９．９［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０２５０】
製造例２−２８：化合物（ＩＩＩ−３２）の製造
【０２５１】
【化６６】
0006262768.tif 000075
【０２５２】
（２Ｓ，４Ｓ）−ｔ−ブチル２−（（１Ｒ，２Ｒ）−３−（（２−（３−フルオロ−４−メトキシフェニル）−２−オキソエチル）アミノ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル）−４−ヒドロキシピロリジン−１−カルボキシレートの代わりに、（２Ｓ，４Ｓ）−ｔ−ブチル４−（（ｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−２−（（１Ｒ，２Ｒ）−３−（（２，６−ジフルオロフェネチル）アミノ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル）ピロリジン−１−カルボキシレート（０．８７ｇ、７０．９％）を用いて、製造例２−２４と同様の方法で（２Ｓ）−Ｎ−（（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（２Ｓ，４Ｓ）−２−（（１Ｒ，２Ｒ）−３−（（２，６−ジフルオロフェネチル）アミノ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル）−４−ヒドロキシピロリジン−１−イル）−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル）−２−（（Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−３−メチルブタンアミド）−Ｎ，３−ジメチルブタンアミド（０．４５ｇ、４５％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ０．７９−１．０５（ｍ，１９Ｈ），１．２６（ｍ，３Ｈ），１．４５（ｍ，２Ｈ），１．６６（ｍ，２Ｈ），１．９７−２．１７（ｍ，３Ｈ），２．４４−２．４６（ｍ，３Ｈ），２．７１−２．８０（ｍ，３Ｈ），２．８１−２．８９（ｍ，１Ｈ），２．９１−２．９４（ｍ，２Ｈ），２．７１−２．８０（ｍ，３Ｈ），３．０４（ｓ，３Ｈ），３．２６−３．３３（ｍ，２Ｈ），３．３７（ｓ，３Ｈ），３．７４（ｍ，２Ｈ），４．２８−４．３１（ｍ，２Ｈ），４．７５−４．８２（ｍ，２Ｈ），６．１８（ｍ，１Ｈ），６．８４−６．８９（ｍ，２Ｈ），７．１５−７．１９（ｍ，１Ｈ），７．５８（ｄ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：７５４［Ｍ＋］＋
【０２５３】
前記化合物を用いて、製造例２−２４と同様の方法で表題化合物（０．４６ｇ、８３％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：９２０．１［Ｍ＋Ｈ］＋
【０２５４】
製造例３：化学式ＩＶ−１、ＩＶ−２、ＩＶ−３またはＩＶ−４の化合物の製造
【０２５５】
製造例３−１：化合物（ＩＶ−５）の製造
【０２５６】
【化６７】
0006262768.tif 000076
【０２５７】
製造例２−１で得られた化合物（ＩＩＩ−５）（０．３６ｇ、０．５０ｍｍｏｌ）を、アルゴン気流下、無水ジメチルホルムアミド１４ｍＬに溶かした後、製造例１−１で得られた化合物（ＩＩ−１）（０．３７ｇ、０．５０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を０℃に冷却した後、ＨＯＢｔ（８１ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）と無水ピリジン３．５ｍＬを順次に加え、常温で１５時間撹拌した。反応完了後、高真空下で減圧濃縮して、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、表題化合物（０．４９ｇ、７４％）を微白色固体として得た。
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ  ｍ／ｚ：１３４５．６［Ｍ＋Ｎａ］＋，１３６１．６［Ｍ＋Ｋ］＋
【０２５８】
製造例３−２：化合物（ＩＶ−６）の製造
【０２５９】
【化６８】
0006262768.tif 000077
【０２６０】
製造例２−１で得られた化合物（ＩＩＩ−５）の代わりに、製造例２−２で得られた化合物（ＩＩＩ−６）（０．３５ｇ、０．５０ｍｍｏｌ）を用いて、製造例３−１と同様の方法で表題化合物（０．４２ｇ、７２％）を得た。
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ  ｍ／ｚ：１３２２．８［Ｍ＋Ｎａ］＋，１３３９．０［Ｍ＋Ｋ］＋
【０２６１】
製造例３−３：化合物（ＩＶ−７）の製造
【０２６２】
【化６９】
0006262768.tif 000078
【０２６３】
製造例２−１で得られた化合物（ＩＩＩ−５）の代わりに、製造例２−３で得られた化合物（ＩＩＩ−７）（７９ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）を用いて、製造例３−１と同様の方法で表題化合物（９７ｍｇ、７８％）を得た。
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ  ｍ／ｚ：１４００．３［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０２６４】
製造例３−４：化合物（ＩＶ−８）の製造
【０２６５】
【化７０】
0006262768.tif 000079
【０２６６】
製造例２−１で得られた化合物（ＩＩＩ−５）の代わりに、製造例２−４で得られた化合物（ＩＩＩ−８）（１０４ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）を用いて、製造例３−１と同様の方法で表題化合物（８６ｍｇ、４８％）を得た。
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ  ｍ／ｚ：１３８６．９［Ｍ＋Ｎａ］＋，１４０２．９［Ｍ＋Ｋ］＋
【０２６７】
製造例３−５：化合物（ＩＶ−９）の製造
【０２６８】
【化７１】
0006262768.tif 000080
【０２６９】
製造例２−１で得られた化合物（ＩＩＩ−５）の代わりに、製造例２−５で得られた化合物（ＩＩＩ−９）（６５ｍｇ、０．０８５ｍｍｏｌ）を用いて、製造例３−１と同様の方法で表題化合物（４３ｍｇ、４１％）を得た。
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ  ｍ／ｚ：１３８１．６［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０２７０】
製造例３−６：化合物（ＩＶ−１０）の製造
【０２７１】
【化７２】
0006262768.tif 000081
【０２７２】
製造例２−１で得られた化合物（ＩＩＩ−５）の代わりに、製造例２−６で得られた化合物（ＩＩＩ−１０）（８２ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を用いて、製造例３−１と同様の方法で表題化合物（８９ｍｇ、６６％）を得た。
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ  ｍ／ｚ：１３６０．０［Ｍ＋Ｎａ］＋，１３７７．２［Ｍ＋Ｋ］＋
【０２７３】
製造例３−７：化合物（ＩＶ−１１）の製造
【０２７４】
【化７３】
0006262768.tif 000082
【０２７５】
製造例２−７で得られた化合物（ＩＩＩ−１１）（８９ｍｇ、０．１１６ｍｍｏｌ）を、アルゴン気流下、無水ジメチルホルムアミド８ｍＬに溶かした後、製造例１−１で得られた化合物（ＩＩ−１）（７８ｍｇ、０．１０６ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を０℃に冷却した後、ＨＯＢｔ（１７ｍｇ、０．１２８ｍｍｏｌ）と無水ピリジン２．０ｍＬを順次に加え、常温で１７時間撹拌した。反応完了後、高真空下で減圧濃縮して、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、表題化合物（１０６ｍｇ、７３％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１３７７．８［Ｍ＋］＋，１４００．８［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０２７６】
製造例３−８：化合物（ＩＶ−１２）の製造
【０２７７】
【化７４】
0006262768.tif 000083
【０２７８】
製造例２−７で得られた化合物（ＩＩＩ−１１）の代わりに、製造例２−８で得られた化合物（ＩＩＩ−１２）（１７ｍｇ、０．０２３ｍｍｏｌ）を用いて、製造例３−７と同様の方法で表題化合物（２６ｍｇ、９３％）を得た。
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ  ｍ／ｚ：１３５１．３［Ｍ＋Ｎａ］＋，１３６７．７［Ｍ＋Ｋ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ０．８１−０．９１（ｍ，６Ｈ），０．９１−１．０３（ｍ，２１Ｈ），１．６３（ｄ，２Ｈ），１．２２（ｄ，１Ｈ），１．２８（ｍ，２Ｈ），１．３２（ｍ，１Ｈ），１．５０−１．６３（ｍ，６Ｈ），１．６８（ｍ，２Ｈ），１．８２−１．９０（ｍ，２Ｈ），１．９５（ｓ，３Ｈ），１．９８（ｍ，４Ｈ），２．２３−２．２８（ｍ，３Ｈ），２．３４（ｂｒｄ，１Ｈ），２．４０（ｓ，６Ｈ），２．５８−２．７０（ｍ，１Ｈ），２．８０−２．８５（ｍ，１Ｈ），２．９１−２．９８（ｍ，１Ｈ），３．１２（ｓ，３Ｈ），３．１５−３．２７（ｍ，２Ｈ），３．２６−３．３３（ｍ，８Ｈ，ＯＣＨ３），３．３４（ｄ，２Ｈ），３．４２−３．４８（ｍ，５Ｈ，ＯＣＨ３），３．５２（ｍ，１Ｈ），３．７−３．９６（ｍ，２Ｈ），３．９６−４．０８（ｍ，２Ｈ），４．１５（ｄ，１Ｈ），４．１８（ｍ，１Ｈ），４．４４−４．５４（ｍ，２Ｈ），４．６６（ｄ，１Ｈ），４．５４−５．１０（ｍ，５Ｈ），６．７６（ｍ，１Ｈ），７．０２−７．１２（ｍ，２Ｈ），７．２３−７．２８（ｍ，２Ｈ），７．３０−７．３８（ｍ，２Ｈ），７．５１−７．５８（ｍ，２Ｈ）
【０２７９】
製造例３−９：化合物（ＩＶ−１３）の製造
【０２８０】
【化７５】
0006262768.tif 000084
【０２８１】
製造例２−７で得られた化合物（ＩＩＩ−１１）の代わりに、製造例２−９で得られた化合物（ＩＩＩ−１３）（４７８ｍｇ、０．６３８ｍｍｏｌ）を用いて、製造例３−７と同様の方法で表題化合物（３４７ｍｇ、４０％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１３４７［Ｍ＋］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ０．７６−０．９０（ｍ，６Ｈ），０．９０−１．１２（ｍ，１８Ｈ），１．１６（ｍ，４Ｈ），１．１９（ｍ，３Ｈ），１．２８（ｍ，３Ｈ），１．２８（ｍ，３Ｈ），１．４０（ｍ，２Ｈ），１．５０−１．６６（ｍ，９Ｈ），１．６６−１．８０（ｍ，２Ｈ），１．９３（ｓ，３Ｈ），２．０−２．１４（ｍ，４Ｈ），２．２６（ｍ，３Ｈ），２．３８（ｄ，６Ｈ），２．４４（ｍ，１Ｈ），２．５０−２．６５（ｍ，１Ｈ），２．７７（ｍ，２Ｈ），３．１０−３．２４（ｍ，６Ｈ），３．２５−３．３６（ｍ，７Ｈ，ＯＣＨ３），３．４５（ｔ，３Ｈ），３．５８（ｍ，１Ｈ），３．６６（ｍ，１Ｈ），３．８２（ｍ，１Ｈ），４．０６（ｍ，１Ｈ），４．１４（ｍ，２Ｈ），４．２６（ｍ，１Ｈ），４．３６（ｍ，１Ｈ），４．４８（ｍ，２Ｈ），４．６３（ｍ，１Ｈ），４．６９（ｍ，３Ｈ），６．７８（ｓ，２Ｈ），６．９７（ｍ，１Ｈ），７．０８（ｍ，１Ｈ），７．２５（ｍ，２Ｈ），７．３４（ｍ，２Ｈ），７．５４（ｍ，２Ｈ）
【０２８２】
製造例３−１０：化合物（ＩＶ−１４）の製造
【０２８３】
【化７６】
0006262768.tif 000085
【０２８４】
製造例２−７で得られた化合物（ＩＩＩ−１１）の代わりに、製造例２−１０で得られた化合物（ＩＩＩ−１４）（０．３９ｇ、０．５１ｍｍｏｌ）を用いて、製造例３−７と同様の方法で表題化合物（４５３ｍｇ、６５％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１３６４［Ｍ＋１］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ０．８１−０．９１（ｍ，６Ｈ），０．９１−１．０３（ｍ，２１Ｈ），１．１３（ｄ，２Ｈ），１．２２（ｄ，１Ｈ），１．２８（ｍ，２Ｈ），１．３２（ｍ，１Ｈ），１．５０−１．６３（ｍ，６Ｈ），１．６８（ｍ，２Ｈ），１．８２−１．９０（ｍ，２Ｈ），１．９５（ｓ，３Ｈ），１．９８（ｍ，４Ｈ），２．２３−２．２８（ｍ，３Ｈ），２．３４（ｂｒｄ，１Ｈ），２．４０（ｓ，６Ｈ），２．５８−２．７０（ｍ，１Ｈ），２．８０−２．８５（ｍ，１Ｈ），２．９１−２．９８（ｍ，１Ｈ），３．１２（ｓ，３Ｈ），３．１５−３．２７（ｍ，２Ｈ），３．２７−３．３３（ｍ，８Ｈ，ＯＣＨ３），３．３４（ｄ，２Ｈ），３．４２−３．４８（ｍ，５Ｈ，ＯＣＨ３），３．５２（ｍ，１Ｈ），３．７−３．９６（ｍ，２Ｈ），３．９６−４．０８（ｍ，２Ｈ），４．１５（ｄ，１Ｈ），４．１８（ｍ，１Ｈ），４．４４−４．５４（ｍ，２Ｈ），４．６６（ｄ，１Ｈ），４．７４−５．１０（ｍ，５Ｈ），６．７６（ｍ，１Ｈ），７．０２−７．１２（ｍ，２Ｈ），７．２３−７．２８（ｍ，２Ｈ），７．３０−７．３８（ｍ，２Ｈ），７．５１−７．５８（ｍ，２Ｈ）
【０２８５】
製造例３−１１：化合物（ＩＶ−１５）の製造
【０２８６】
【化７７】
0006262768.tif 000086
【０２８７】
製造例２−７で得られた化合物（ＩＩＩ−１１）の代わりに、製造例２−１１で得られた化合物（ＩＩＩ−１５）（１１０ｍｇ、０．１４４ｍｍｏｌ）を用いて、製造例３−７と同様の方法で表題化合物（８２ｍｇ、４２％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１３６０［Ｍ＋１］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ０．８１−０．９１（ｍ，６Ｈ），０．９２−１．０５（ｍ，１９Ｈ），１．３−１．２（ｍ，３Ｈ），１．２２（ｄ，１Ｈ），１．２８（ｍ，２Ｈ），１．３２（ｍ，１Ｈ），１．５０−１．６３（ｍ，６Ｈ），１．６８（ｍ，２Ｈ），１．８２−１．９０（ｍ，２Ｈ），１．９５（ｓ，３Ｈ），１．９８（ｍ，３Ｈ），２．２３−２．２８（ｍ，３Ｈ），２．３７（ｄ，６Ｈ），２．６１（ｍ，１Ｈ），２．７８（ｍ，１Ｈ），３．１２（ｓ，３Ｈ），３．１６−３．２４（ｍ，２Ｈ），３．２６−３．３２（ｍ，１５Ｈ，ＯＣＨ３），３．３２−３．２８（ｍ，５Ｈ，ＯＣＨ３），３．４２−３．５０（ｍ，１Ｈ），３．７４（ｄ，３Ｈ），３．８６（ｍ，１Ｈ），３．９６−４．０８（ｍ，２Ｈ），４．１４（ｄ，１Ｈ），４．１８−４．１０（ｍ，１Ｈ），４．４２−４．５２（ｍ，２Ｈ），４．６４−５．１０（ｍ，５Ｈ），６．７６（ｄ，２Ｈ），６．８７（ｍ，２Ｈ），７．２４（ｍ，４Ｈ），７．５５（ｍ，２Ｈ）
【０２８８】
製造例３−１２：化合物（ＩＶ−１６）の製造
【０２８９】
【化７８】
0006262768.tif 000087
【０２９０】
製造例２−７で得られた化合物（ＩＩＩ−１１）の代わりに、製造例２−１２で得られた化合物（ＩＩＩ−１６）（１７９ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）を用いて、製造例３−７と同様の方法で表題化合物（２６８ｍｇ、８５％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１３７５［Ｍ＋１］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．７１−０．８０（ｍ，５Ｈ），０．８０−０．９８（ｍ，１８Ｈ），０．９８−１．１０（ｍ，４Ｈ），１．１８（ｍ，２Ｈ），１．５０（ｍ，６Ｈ），１．５５−１．７５（ｍ，４Ｈ），１．８１−２．００（ｍ，８Ｈ），２．０５−２．３０（ｍ，５Ｈ），２．２６（ｄ，６Ｈ），２．４０−２．６１（ｍ，１Ｈ），２．６５−２．８０（ｍ，２Ｈ），２．９０−３．０８（ｍ，６Ｈ），３．１５（ｄ，３Ｈ），３．３０（ｄ，３Ｈ），３．４２（ｓ，２Ｈ），３．６７（ｓ，３Ｈ），３．７０（ｓ，３Ｈ），３．１５−３．４３（ｍ，３Ｈ），３．８５−４．０５（ｍ，４Ｈ），４．１８（ｂｒｔ，２Ｈ），４．３８（ｍ，２Ｈ），４．５２（ｔ，１Ｈ），４．５６−４．８０（ｍ，３Ｈ），４．８８（ｄ，１Ｈ），５．０１（ｍ，２Ｈ），５．１０（ｄ，１Ｈ），６．００（ｍ，１Ｈ），６．８４−８．２０（ｍ，１０Ｈ），１０．０（ｄ，１Ｈ）
【０２９１】
製造例３−１３：化合物（ＩＶ−１７）の製造
【０２９２】
【化７９】
0006262768.tif 000088
【０２９３】
製造例２−７で得られた化合物（ＩＩＩ−１１）の代わりに、製造例２−１３で得られた化合物（ＩＩＩ−１７）（３２７ｍｇ、０．４３１ｍｍｏｌ）を用いて、製造例３−７と同様の方法で表題化合物（４４０ｍｇ、７５％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１３４６［Ｍ＋１］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ０．８１−１．０２（ｍ，２３Ｈ），１．１３−１．２０（ｍ，３Ｈ），１．２５−１．３２（ｍ，２Ｈ），１．４０（ｍ，１Ｈ），１．５０−１．６３（ｍ，６Ｈ），１．７２−１．７８（ｍ，２Ｈ），１．８２−１．９８（ｍ，３Ｈ），１．９６（ｓ，３Ｈ），２．００−２．０９（ｍ，４Ｈ），２．１５−２．３０（ｍ，５Ｈ），２．３４−２．４２（ｄ，６Ｈ），２．４０−２．６０（ｍ，３Ｈ），２．７５（ｍ，１Ｈ），２．９８（ｍ，１Ｈ），３．０５（ｍ，３Ｈ），３．１６−３．２４（ｍ，２Ｈ），３．２６−３．３５（ｍ，８Ｈ，ＯＣＨ３），３．３８−３．４８（ｍ，６Ｈ，ＯＣＨ３），３．５２−３．６０（ｍ，１Ｈ），３．６５−３．８０（ｍ，１Ｈ），３．９０−４．１６（ｍ，５Ｈ），４．４８（ｍ，１Ｈ），４．６３−５．１０（ｍ，８Ｈ），６．７６（ｓ，２Ｈ），７．０９−７．２８（ｍ，６Ｈ），７．５３（ｍ，２Ｈ）
【０２９４】
製造例３−１４：化合物（ＩＶ−１８）の製造
【０２９５】
【化８０】
0006262768.tif 000089
【０２９６】
製造例２−１４で得られた化合物（ＩＩＩ−１８）（０．３６ｇ、０．４８ｍｍｏｌ）を、アルゴン気流下、無水ジメチルホルムアミド１０ｍＬに溶かした後、製造例１−１で得られた化合物（ＩＩ−１）（０．３２ｇ、０．４３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を０℃に冷却した後、ＨＯＢｔ（７０ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）と無水ピリジン２．５ｍＬを順次に加え、常温で１５時間撹拌した。反応完了後、高真空下で減圧濃縮して、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、表題化合物（０．２９ｇ、５１％）を微白色固体として得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１３５３［Ｍ＋］＋，１３７５［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０２９７】
製造例３−１５：化合物（ＩＶ−１９）の製造
【０２９８】
【化８１】
0006262768.tif 000090
【０２９９】
製造例２−１４で得られた化合物（ＩＩＩ−１８）の代わりに、製造例２−１５で得られた化合物（ＩＩＩ−１９）（０．３４ｇ、０．４５ｍｍｏｌ）を用いて、製造例３−１４と同様の方法で表題化合物（０．２８ｇ、４５％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１３６２．８［Ｍ＋］＋，１３８４．８［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０３００】
製造例３−１６：化合物（ＩＶ−２０）の製造
【０３０１】
【化８２】
0006262768.tif 000091
【０３０２】
製造例２−１４で得られた化合物（ＩＩＩ−１８）の代わりに、製造例２−１６で得られた化合物（ＩＩＩ−２０）（９１ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）を用いて、製造例３−１４と同様の方法で表題化合物（１２２ｍｇ、８２％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１３５２［Ｍ＋］＋
【０３０３】
製造例３−１７：化合物（ＩＶ−２１）の製造
【０３０４】
【化８３】
0006262768.tif 000092
【０３０５】
製造例２−１４で得られた化合物（ＩＩＩ−１８）の代わりに、製造例２−１７で得られた化合物（ＩＩＩ−２１）（１１０ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）を用いて、製造例３−１４と同様の方法で表題化合物（１５３ｍｇ、８６％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．７０−０．７７（ｍ，５Ｈ），０．８１−０．９７（ｍ，１７Ｈ），１．０２−１．０７（ｍ，３Ｈ），１．１６−１．２９（ｍ，８Ｈ），１．３４−１．４０（ｍ，１Ｈ），１．４８−１．５１（ｍ，６Ｈ），１．５４−１．６３（ｍ，１Ｈ），１．６３−１．７９（ｍ，２Ｈ），１．９１−１．９７（ｍ，５Ｈ），２．０３−２．３０（ｍ，７Ｈ），２．３５−２．４４（ｍ，１Ｈ），２．５９−２．６１（ｍ，１Ｈ），２．６１−２．６９（ｍ，１Ｈ），２．７０−２．８４（ｍ，４Ｈ），３．０７−３．１２（ｍ，１Ｈ），３．１２−３．２４（ｍ，３Ｈ），３．２６−３．４０（ｍ，３Ｈ），３．４０−３．４８（ｍ，１Ｈ），３．６２−４．０３（ｍ，４Ｈ），４．０３−４．２５（ｍ，３Ｈ），４．２５−４．６８（ｍ，４Ｈ），４．８８−５．０９（ｓ，２Ｈ），５．３５−５．４７（ｓ，２Ｈ），５．８５−６．０３（ｔ，１Ｈ），６．８５−７．１０（ｓ，２Ｈ），７．１４−７．４０（ｍ，２Ｈ），７．５６−７．６６（ｍ，１Ｈ），７．７４−７．８３（ｄ，１Ｈ），７．９０−８．２２（ｍ，３Ｈ），１０．００（ｂｒｓ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１３６６［Ｍ＋］＋
【０３０６】
製造例３−１８：化合物（ＩＶ−２２）の製造
【０３０７】
【化８４】
0006262768.tif 000093
【０３０８】
製造例２−１８で得られた化合物（ＩＩＩ−２２）（１．２７ｇ、１．６３ｍｍｏｌ）をジクロロメタン２０ｍｌに溶解し、−５０〜−６０℃に冷却した後、ピリジン（１．３ｍｌ、１６．２８ｍｍｏｌ）を加えた。生成された反応溶液にｐ−ニトロフェニルクロロホルメート（１６．２８ｇ、３．３ｍｍｏｌ）をジクロロメタン１０ｍｌに溶解して２０分間徐々に滴加した後、−５０〜−６０℃で３時間撹拌した。反応が終了すると、反応溶液にジクロロメタン２０ｍｌをさらに加え、０．５Ｍポタシウムヒドロゲンサルファイト溶液で抽出した後、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧濃縮した。濃縮残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、（３Ｓ，５Ｓ）−１−（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−３−メチルブタンアミド）−Ｎ，３−ジメチルブタンアミド）−３−メトキシ−５−メチルヘプタノイル）−５−（（１Ｒ，２Ｒ）−３−（（２−（３−フルオロ−４−メトキシフェニル）−２−オキソエチル）アミノ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル）ピロリジン−３−イル（４−ニトロフェニル）カーボネート（０．８ｇ、５４％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：９４５．７［Ｍ＋Ｈ］＋，９６７．７［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０３０９】
前記化合物（０．３ｇ、０．３２ｍｍｏｌ）とｔ−ブチル（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（（４−（ヒドロキシメチル）フェニル）アミノ）−１−オキソ−５−ウレイドペンタン−２−イル）アミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）カルバメート（０．３ｇ、０．６４ｍｍｏｌ）を、アルゴン気流下、無水ジメチルホルムアミド１０ｍＬに溶解した後、４−メチルアミノピリジン（０．０３９ｇ、０．３２ｍｍｏｌ）を加え、２０−２５℃で１９時間撹拌した。反応完了後、高真空下で反応溶液を完全濃縮して、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、アミノ基が保護化された化合物（０．１ｇ、２５％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１２８５．５［Ｍ＋Ｈ］＋
【０３１０】
アミノ基が保護された化合物（０．１８ｇ、０．１４ｍｍｏｌ）をジクロロメタン８ｍＬに溶かし、トリフルオロ酢酸２ｍＬを滴加した後、２０−２５℃で３時間撹拌した。反応が終了すると、反応溶媒を減圧濃縮して除去し、トルエン５ｍｌを２回添加してトリフルオロ酢酸を完全に除去した後、反応を進行させた。
【０３１１】
反応濃縮液（ＴＦＡ塩）と２，５−ジオキソピロリジン−１−イル６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１−ピロール−１−イル）ヘキサノエートをジメチルホルムアミド１０ｍＬに溶解し、トリエチルアミン（０．１ｍＬ、０．７ｍｍｏｌ）を加え、常温で１８時間撹拌した。反応完了後、高真空下で反応溶液を完全濃縮して、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、表題化合物（０．１４ｇ、７１％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．７０−０．７８（ｍ，６Ｈ），０．８１−０．９２（ｍ，１３Ｈ），１．１６−１．２４（２３Ｈ），１．４６−１．５１（ｍ，４Ｈ），１．８４−１．９７（ｍ，３Ｈ），３．０６−３．１７（ｍ，１２Ｈ），３．３０−３．３８（ｍ，１５Ｈ），３．８４−３．９３（ｍ，３Ｈ），４．０８−４．８５（ｍ，８Ｈ），４．８６−５．０４（ｍ，１Ｈ），５．１０（ｓ，２Ｈ），５．４０（ｓ，２Ｈ），６．０３（ｔ，１Ｈ），７．００（ｓ，１Ｈ），７．１５−７．３５（ｍ，２Ｈ），７．５３−７．５５（ｄ，１Ｈ），７．７７−７．９８（ｍ，２Ｈ），８．１０−８．１２（ｄ，１Ｈ），８．１９−８．４８（ｍ，１Ｈ），９．４４−９．４９（ｂｒｓ，１Ｈ），１０．０３（ｓ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１３７８．７［Ｍ＋Ｈ］＋
【０３１２】
製造例３−１９：化合物（ＩＶ−２３）の製造
【０３１３】
【化８５】
0006262768.tif 000094
【０３１４】
製造例２−１８で得られた化合物（ＩＩＩ−２２）の代わりに、製造例２−１９で得られた化合物（ＩＩＩ−２３）（０．８ｇ、０．８６５ｍｍｏｌ）を用いて、製造例３−１８と同様の方法で表題化合物（０．２２ｇ、６９％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．７３−０．７５（ｍ，４Ｈ），０．８１−０．９２（ｍ，１１Ｈ），１．１６−１．１９（２３Ｈ），１．４６−１．５０（ｍ，４Ｈ），１．５４−１．７３（ｍ，２Ｈ），１．９０−１．９７（ｍ，２Ｈ），２．０８−２．２５（ｍ，４Ｈ），２．２８−２．３８（ｍ，４Ｈ），２．９４−２．９９（ｍ，４Ｈ），３．０７−３．１７（ｍ，１１Ｈ），３．３３−３．３８（ｍ，１２Ｈ），３．９５−４．０５（ｍ，１Ｈ），４．１２−４．２７（ｍ，３Ｈ），４．５１−４．６７（ｍ，１Ｈ），４．８７−４．９５（ｍ，１Ｈ），５．１１（ｓ，２Ｈ），５．４３（ｓ，２Ｈ），６．００（ｔ，１Ｈ），７．００（ｓ，１Ｈ），７．０７−７．１５（ｍ，１Ｈ），７．２２−７．２４（ｄ，１Ｈ），７．３２−７．３５（ｍ，Ｈ），７．５３−７．５６（ｄ，１Ｈ），７．６１−７．６２（ｄ，１Ｈ），７．８１−７．８４（ｄ，１Ｈ），８．０７−８．１３（ｍ，１Ｈ），８．２８−８．５０（ｍ，１Ｈ），９．２６（ｂｒｓ，１Ｈ），９．９１（ｓ，１Ｈ），１０．０６（ｓ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１３８０．４［Ｍ＋Ｈ］＋
【０３１５】
製造例３−２０：化合物（ＩＶ−２４）の製造
【０３１６】
【化８６】
0006262768.tif 000095
【０３１７】
製造例２−１８で得られた化合物（ＩＩＩ−２２）の代わりに、製造例２−２０で得られた化合物（ＩＩＩ−２４）（０．４４ｇ、０．４５ｍｍｏｌ）を用いて、製造例３−１８と同様の方法で表題化合物（０．１６ｇ、６４％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．４８−０．５０（ｄ，１Ｈ），０．５８−０．５９（ｄ，１Ｈ），０．６８−０．７７（ｍ，４Ｈ），０．８１−０．９２（ｍ，１４Ｈ），１．１６−１．２３（２０Ｈ），１．４６−１．５１（ｍ，４Ｈ），１．８１−１．８８（ｍ，３Ｈ），３．０６−３．１３（ｍ，１２Ｈ），３．３５−３．３８（ｍ，１５Ｈ），３．８４−３．９２（ｍ，４Ｈ），４．０８−５．００（ｍ，８Ｈ），５．１３（ｓ，２Ｈ），５．４４（ｓ，２Ｈ），６．０１−６．０３（ｔ，１Ｈ），７．００（ｓ，１Ｈ），７．２２−７．２８（ｍ，１Ｈ），７．３３−７．３６（ｍ，２Ｈ），７．３９−７．４２（ｄ，１Ｈ），７．６０−７．６５（ｄ，２Ｈ），７．８２−７．８４（ｄ，１Ｈ），７．８９−７．９３（ｍ，２Ｈ），８．００−８．０３（ｄ，１Ｈ），８．１１−８．１３（ｄ，１Ｈ），８．２７−８．５３（ｍ，１Ｈ），８．６４（ｓ，１Ｈ），９．３８（ｂｒｓ，１Ｈ），１０．０６（ｓ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１４１０．５［Ｍ＋Ｈ］＋
【０３１８】
製造例３−２１：化合物（ＩＶ−２５）の製造
【０３１９】
【化８７】
0006262768.tif 000096
【０３２０】
製造例２−１８で得られた化合物（ＩＩＩ−２２）の代わりに、製造例２−２１で得られた化合物（ＩＩＩ−２５）（０．３７ｇ、０．４７ｍｍｏｌ）を用いて、製造例３−１４と同様の方法で表題化合物（０．４７ｇ、７２％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．５７−０．７８（ｍ，８Ｈ），０．７８−０．９８（ｍ，１５Ｈ），１．０４−１．２８（ｍ，６Ｈ），１．２８−１．３９（ｍ，１Ｈ），１．３９−１．５４（ｍ，５Ｈ），１．５４−１．６３（ｍ，１Ｈ），１．６３−１．８４（ｍ，３Ｈ），１．８４−２．０３（ｍ，３Ｈ），２．０３−２．２５（ｍ，７Ｈ），２．２５−２．４０（ｍ，２Ｈ），２．５３−２．６９（ｍ，３Ｈ），２．６９−２．８３（ｍ，１Ｈ），２．８５−３．０６（ｍ，５Ｈ），３．０９−３．２１（ｍ，３Ｈ），３．２６−３．４２（ｍ，３Ｈ），３．４４−３．５２（ｍ，１Ｈ），３．７４−３．８８（ｍ，６Ｈ），３．８８−４．０５（ｍ，３Ｈ），４．０７−４．１６（ｍ，１Ｈ），４．１６−４．２３（ｍ，１Ｈ），４．２３−４．３４（ｍ，１Ｈ），４．３４−４．４８（ｍ，２Ｈ），４．４８−４．５７（ｍ，１Ｈ），４．５８−４．７３（ｍ，２Ｈ），４．９７（ｓ，２Ｈ），５．４２（ｓ，２Ｈ），５．９３−６．０４（ｔ，１Ｈ），６．９８−７．０４（ｓ，１Ｈ），７．０４−７．１２（ｄ，１Ｈ），７．２５−７．３６（ｍ，１Ｈ），７．４２−７．４８（ｓ，１Ｈ），７．４８−７．５７（ｍ，１Ｈ），７．５７−７．６４（ｄ，１Ｈ），７．６４−７．７２（ｍ，１Ｈ），７．７７−７．８６（ｍ，１Ｈ），８．０１−８．１６（ｍ，１Ｈ），１０．０１（ｂｒｓ，１Ｈ），１０．５６（ｂｒｓ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１３８９．６［Ｍ＋］＋，１４１２．６［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０３２１】
製造例３−２２：化合物（ＩＶ−２６）の製造
【０３２２】
【化８８】
0006262768.tif 000097
【０３２３】
製造例２−１８で得られた化合物（ＩＩＩ−２２）の代わりに、製造例２−２２で得られた化合物（ＩＩＩ−２６）（０．２８ｇ、０．３６ｍｍｏｌ）を用いて、製造例３−１４と同様の方法で表題化合物（０．２４ｇ、４８％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．６６−０．７８（ｍ，５Ｈ），０．７８−１．０６（ｍ，１９Ｈ），１．０７−１．２９（ｍ，６Ｈ），１．２９−１．３８（ｍ，１Ｈ），１．３８−１．５３（ｍ，５Ｈ），１．５３−１．６３（ｍ，１Ｈ），１．６３−１．８５（ｍ，２Ｈ），１．８５−２．０２（ｍ，３Ｈ），２．０２−２．１４（ｍ，３Ｈ），２．１４−２．２７（ｍ，６Ｈ），２．２７−２．４１（ｍ，２Ｈ），２．５６−２．６０（ｍ，３Ｈ），２．６１−２．８３（ｍ，１Ｈ），２．８６−３．０８（ｍ，５Ｈ），２．０８−３．２０（ｍ，３Ｈ），３．２０−３．２７（ｍ，１Ｈ），３．２７−３．４０（ｍ，３Ｈ），３．４５−３．６３（ｍ，１Ｈ），３．６４−３．８８（ｍ，１Ｈ），３．８８−４．０６（ｍ，２Ｈ），４．０６−４．２６（ｍ，２Ｈ），４．２８−４．４６（ｍ，１Ｈ），４．４６−４．７４（ｍ，２Ｈ），４．７４−４．９１（ｍ，１Ｈ），４．９７（ｓ，２Ｈ），５．４３（ｓ，２Ｈ），５．８８−６．１０（ｔ，１Ｈ），７．０１（ｓ，１Ｈ），７．１２−７．３８（ｍ，２Ｈ），７．３８−７．７２（ｍ，４Ｈ），７．７２−７．９２（ｍ，２Ｈ），７．９２−８．２２（ｍ，３Ｈ），８．２５−８．６３（ｍ，２Ｈ），８．７３（ｓ，１Ｈ），１０．０６（ｂｒｓ，１Ｈ），１０．５９（ｂｒｓ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１３７９．６［Ｍ＋］＋，１４０２．５［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０３２４】
製造例３−２３：化合物（ＩＶ−２７）の製造
【０３２５】
【化８９】
0006262768.tif 000098
【０３２６】
製造例２−１８で得られた化合物（ＩＩＩ−２２）の代わりに、製造例２−２３で得られた化合物（ＩＩＩ−２７）（０．２４ｇ、０．３２ｍｍｏｌ）を用いて、製造例３−１４と同様の方法で表題化合物（０．２８ｇ、６４％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．５９−０．７８（ｍ，６Ｈ），０．７８−０．９７（ｍ，１５Ｈ），０．９７−１．０６（ｍ，２Ｈ），１．０６−１．２８（ｍ，６Ｈ），１．２８−１．３９（ｍ，１Ｈ），１．３９−１．５４（ｍ，５Ｈ），１．５４−１．６４（ｍ，１Ｈ），１．６４−１．８４（ｍ，３Ｈ），１．８４−２．０２（ｍ，３Ｈ），２．０５−２．２９（ｍ，８Ｈ），２．３０−２．４２（ｍ，２Ｈ），２．５５−２．６０（ｍ，３Ｈ），２．６０−２．８３（ｍ，１Ｈ），２．８６−３．０６（ｍ，５Ｈ），３．０６−３．２１（ｍ，６Ｈ），３．２１−３．３２（ｍ，３Ｈ），３．３６−３．４４（ｍ，１Ｈ），３．４４−３．５２（ｍ，１Ｈ），３．６５−３．７４（ｍ，１Ｈ），３．７４−３．８７（ｍ，２Ｈ），３．８９−４．０５（ｍ，２Ｈ），４．１５−４．２５（ｍ，１Ｈ），４．３１−４．７３（ｍ，４Ｈ），４．９６（ｓ，２Ｈ），５．４３（ｓ，２Ｈ），５．９２−６．０６（ｔ，１Ｈ），６．７１−６．８３（ｍ，１Ｈ），６．８３−６．９４（ｍ，１Ｈ），６．９７−７．０４（ｍ，１Ｈ），７．１６−７．３５（ｍ，２Ｈ），７．３８−７．６７（ｍ，３Ｈ），７．７５−７．８８（ｄ，１Ｈ），８．００−８．１７（ｍ，２Ｈ），１０．０１（ｂｒｓ，１Ｈ），１０．５５（ｂｒｓ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１３６１．６［Ｍ＋］＋，１３８４．５［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０３２７】
製造例３−２４：化合物（ＩＶ−２８）の製造
【０３２８】
【化９０】
0006262768.tif 000099
【０３２９】
製造例１−２で得られた化合物（ＩＩ−３）のＴＦＡ塩（０．８８ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）に無水ジメチルホルムアミド５ｍＬとジイソプロピルエチルアミン（０．１８ｍＬ、１．０３ｍｍｏｌ）を添加して得られた溶液を、製造例２−２４で得られた化合物（ＩＩＩ−２８）（７５ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）を、アルゴン気流下、無水ジメチルホルムアミド５ｍＬに溶かした溶液に滴加した後、２０−２５℃で１７時間撹拌した。反応完了後、高真空下で減圧濃縮して、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、表題化合物（１３５ｍｇ、１００％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１４６２．９［Ｍ＋Ｈ］＋，１４８５．９［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０３３０】
製造例３−２５：化合物（ＩＶ−２９）の製造
【０３３１】
【化９１】
0006262768.tif 000100
【０３３２】
製造例１−２で得られた化合物（ＩＩ−３）のＴＦＡ塩の代わりに、製造例１−３で得られた化合物（ＩＩ−４）のＴＦＡ塩（０．１７ｇ、０．２１２ｍｍｏｌ）を用い、製造例２−２４で得られた化合物（ＩＩＩ−２８）の代わりに、製造例２−２５で得られた化合物（ＩＩＩ−２９）（０．２ｇ、０．２１２ｍｍｏｌ）を用いて、製造例３−２４と同様の方法で表題化合物（０．１４ｇ、４４％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．６９−０．７８（ｍ，６Ｈ），０．８１−０．９０（ｍ，１４Ｈ），１．１１−１．６４（ｍ，３Ｈ），１．１８−１．２６（ｍ，１０Ｈ），１．３８−１．５１（ｍ，６Ｈ），１．５８−１．６２（ｍ，１Ｈ），１．６３−１．８３（ｍ，３Ｈ），１．９１−１．９９（ｍ，３Ｈ），２．１１−２．２６（ｍ，７Ｈ），２．３５−２．４２（ｍ，２Ｈ），２．８７（ｓ，６Ｈ），２．９２−３．０５（ｍ，３Ｈ），３．１３−３．１８（ｍ，４Ｈ），３．３２−３．３８（ｍ，１７Ｈ），３．６２（ｂｒｓ，１Ｈ），３．９２−３．９９（ｍ，４Ｈ），４．０７−４．０９（ｍ，１Ｈ），４．１５−４．８４（ｍ，９Ｈ），４．９８（ｓ，２Ｈ），５．４（ｓ，２Ｈ），５．９６−５．９９（ｔ，１Ｈ），６．９９（ｓ，１Ｈ），７．２２−７．３（ｍ，２Ｈ），７．５３−７．６５（ｍ，２Ｈ），７．７７−７．８０（ｍ，２Ｈ），７．８４−７．８９（ｔ，１Ｈ），８．０５−８．０７（ｄ，１Ｈ），８．３７−８．４３（ｍ，１Ｈ），９．９７（ｓ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１４９２．８［Ｍ＋Ｈ］＋，１５１４．７［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０３３３】
製造例３−２６：化合物（ＩＶ−３０）の製造
【０３３４】
【化９２】
0006262768.tif 000101
【０３３５】
製造例１−２で得られた化合物（ＩＩ−３）のＴＦＡ塩の代わりに、製造例１−４で得られた化合物（ＩＩ−５）のＴＦＡ塩（０．１６ｇ、０．２１２ｍｍｏｌ）を用い、製造例２−２４で得られた化合物ＩＩＩ−２８の代わりに、製造例２−２５で得られた化合物（ＩＩＩ−２９）（０．２ｇ、０．２１２ｍｍｏｌ）を用いて、製造例３−２４と同様の方法で表題化合物（０．１３ｇ、４０％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．６９−０．７６（ｍ，６Ｈ），０．８１−０．９２（ｍ，１４Ｈ），１．１０−１．２０（ｍ，４Ｈ），１．２５−１．２６（ｍ，８Ｈ），１．４４−１．５１（ｍ，５Ｈ），１．５５−１．６５（ｍ，１Ｈ），１．６６−１．８５（３Ｈ），１．８６−２．０５（ｍ，３Ｈ），２．０６−２．２７（ｍ，６Ｈ），２．２８−２．４６ｍ，２Ｈ），２．８４（ｓ，１Ｈ），２．８７−２．９６（ｍ，１Ｈ），２．９９−３．０４（ｍ，５Ｈ），３．１４−３．１８（ｍ，４Ｈ），３．３２−３．４７（ｍ，１１Ｈ），３．６２（ｂｒｓ，１Ｈ），３．９２−３．９３（ｄ，３Ｈ），４．００−４．９１（ｍ，８Ｈ），４．９４（ｓ，２Ｈ），５．４１（ｓ，２Ｈ），５．９７−６．００（ｔ，１Ｈ），７．００（ｓ，１Ｈ），７．２４−７．３２（ｍ，３Ｈ），７．５８−７．６０（ｄ，２Ｈ），７．７７−７．８０（ｍ，２Ｈ），７．８５−７．８９（ｔ，１Ｈ），８．０５−８．０７（ｄ，１Ｈ），８．１９（ｔ，１Ｈ），８．４４（ｂｒｓ，１Ｈ），９．９７（ｓ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１４６４．８［Ｍ＋Ｈ］＋，１４８７．９［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０３３６】
製造例３−２７：化合物（ＩＶ−３１）の製造
【０３３７】
【化９３】
0006262768.tif 000102
【０３３８】
製造例１−２で得られた化合物（ＩＩ−３）のＴＦＡ塩の代わりに、製造例１−３で得られた化合物（ＩＩ−４）のＴＦＡ塩（０．２６ｇ、０．３２４ｍｍｏｌ）を用い、製造例２−２４で得られた化合物（ＩＩＩ−２８）の代わりに、製造例２−２６で得られた化合物（ＩＩＩ−３０）（０．２ｇ、０．２１６ｍｍｏｌ）を用いて、製造例３−２４と同様の方法で表題化合物（０．２ｇ、６４％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．７１−０．７５（ｍ，６Ｈ），０．８０−０．９１（ｍ，１５Ｈ），１．１８−１．１９（ｍ，３Ｈ），１．２２−１．２７（ｍ，９Ｈ），１．４３−１．４９（ｍ，６Ｈ），１．９０−１．９８（ｍ，３Ｈ），２．０９−２．２３（ｍ，３Ｈ），２．２５−２．４０（ｍ，７Ｈ），２．８３−２．８６（ｍ，４Ｈ），２．９６−３．０１（ｍ，４Ｈ），３．１５−３．１９（ｍ，３Ｈ），３．２６（ｓ，３Ｈ），３．３５−３．３８（ｍ，１６Ｈ），３．８５−３．９６（ｍ，３Ｈ），４．１１−４．８８（ｍ，８Ｈ），４．９７（ｓ，２Ｈ），５．４２（ｓ，２Ｈ），５．９７−５．９９（ｔ，１Ｈ），６．９９−７．０１（ｍ，１Ｈ），７．０６−７．１６（ｍ，２Ｈ），７．２８（ｂｒｓ，２Ｈ），７．６０−７．６９（ｍ，２Ｈ），７．８１−７．８３（ｄ，１Ｈ），８．０９−８．１２（ｄ，１Ｈ），８．２９（ｂｒｓ，１Ｈ），１０．０９（ｓ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１４７２．９［Ｍ＋Ｈ］＋，１４９４．９［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０３３９】
製造例３−２８：化合物（ＩＶ−３２）の製造
【０３４０】
【化９４】
0006262768.tif 000103
【０３４１】
製造例１−２で得られた化合物（ＩＩ−３）のＴＦＡ塩の代わりに、製造例１−４で得られた化合物（ＩＩ−５）のＴＦＡ塩（０．２４ｇ、０．３２４ｍｍｏｌ）を用い、製造例２−２４で得られた化合物（ＩＩＩ−２８）の代わりに、製造例２−２６で得られた化合物（ＩＩＩ−３０）（０．２ｇ、０．２１６ｍｍｏｌ）を用いて、製造例３−２４と同様の方法で表題化合物（０．２ｇ、６７％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．７１−０．７５（ｍ，７Ｈ），０．８１−０．９２（ｍ，１６Ｈ），１．０３−１．０４（ｍ，２Ｈ），１．１１−１．１２（ｍ，１Ｈ），１．１８−１．２７（ｍ，７Ｈ），１．４６−１．４９（ｍ，５Ｈ），１．９０−１．９８（ｍ，３Ｈ），２．０９−２．２３（ｍ，６Ｈ），２．２８−２．３８（ｍ，７Ｈ），２．９６−３．０３（ｍ，９Ｈ），３．１５−３．１７（ｍ，４Ｈ），３．２８（ｓ，３Ｈ），３．３５−３．３８（ｍ，１４Ｈ），３．６２−３．６５（ｍ，２Ｈ），３．８５−４．００（ｍ，３Ｈ），４．１７−４．８８（ｍ，８Ｈ），４．９４（ｓ，２Ｈ），５．４３（ｓ，２Ｈ），５．８８−６．００（ｔ，１Ｈ），７．００（ｓ，１Ｈ），７．０６−７．１６（ｍ，２Ｈ），７．２７−７．２９（ｍ，３Ｈ），７．５８−７．６９（ｍ，２Ｈ），７．８２−７．８４（ｄ，１Ｈ），８．０９−８．１２（ｄ，１Ｈ），８．２９（ｂｒｓ，１Ｈ），１０．００（ｓ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１４４４．９［Ｍ＋Ｈ］＋，１４６６．９［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０３４２】
製造例３−２９：化合物（ＩＶ−３３）の製造
【０３４３】
【化９５】
0006262768.tif 000104
【０３４４】
製造例１−２で得られた化合物（ＩＩ−３）のＴＦＡ塩の代わりに、製造例１−４で得られたＩＩ−５化合物のＴＦＡ塩（０．２３ｇ、０．３０７ｍｍｏｌ）を用い、製造例２−２４で得られた化合物（ＩＩＩ−２８）の代わりに、製造例２−２７で得られた化合物（ＩＩＩ−３１）（０．２ｇ、０．２０５ｍｍｏｌ）を用いて、製造例３−２４と同様の方法で表題化合物（０．１６ｇ、５１％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．７１−０．７５（ｍ，７Ｈ），０．８１−０．９２（ｍ，１６Ｈ），１．０３−１．０４（ｍ，２Ｈ），１．１１−１．１２（ｍ，１Ｈ），１．１８−１．２７（ｍ，７Ｈ），１．４６−１．４９（ｍ，５Ｈ），１．９０−１．９８（ｍ，３Ｈ），２．０９−２．２３（ｍ，６Ｈ），２．２８−２．３８（ｍ，７Ｈ），２．９６−３．０３（ｍ，９Ｈ），３．１５−３．１７（ｍ，４Ｈ），３．２８（ｓ，３Ｈ），３．３５−３．３８（ｍ，１４Ｈ），３．６２−３．６５（ｍ，２Ｈ），３．８５−４．００（ｍ，３Ｈ），４．１７−４．８８（ｍ，８Ｈ），４．９４（ｓ，２Ｈ），５．４３（ｓ，２Ｈ），５．８８−６．００（ｔ，１Ｈ），７．００（ｓ，１Ｈ），７．０６−７．１６（ｍ，２Ｈ），７．２７−７．２９（ｍ，３Ｈ），７．５８−７．６９（ｍ，２Ｈ），７．８２−７．８４（ｄ，１Ｈ），８．０９−８．１２（ｄ，１Ｈ），８．２９（ｂｒｓ，１Ｈ），１０．００（ｓ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１４９７．６［Ｍ＋Ｈ］＋，１５１９．６［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０３４５】
製造例３−３０：化合物（ＩＶ−３４）の製造
【０３４６】
【化９６】
0006262768.tif 000105
【０３４７】
製造例１−２で得られたＩＩ−３化合物のＴＦＡ塩（１ｇ、１．２９４ｍｍｏｌ）を用い、製造例２−２４で得られた化合物（ＩＩＩ−２８）の代わりに、製造例２−２８で得られた化合物（ＩＩＩ−３２）（１．２ｇ、１．２９４ｍｍｏｌ）を用いて、製造例３−２４と同様の方法で表題化合物（１．３ｇ、７２％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．４８−０．４９（ｍ，１Ｈ），０．５８−０．５９（ｍ，２Ｈ），０．６４−０．６５（ｍ，２Ｈ），０．７０−０．７６（ｍ，５Ｈ），０．８１−０．９２（ｍ，１６Ｈ），１．１１−１．１３（ｍ，２Ｈ），１．１６−１．２０（ｍ，３Ｈ），１．２２−１．２８（ｍ，９Ｈ），１．４４−１．４９（ｍ，５Ｈ），１．９０−１．９８（ｍ，３Ｈ），２．０９−２．２３（ｍ，７Ｈ），２．９６−３．０４（ｍ，９Ｈ），３．１３−３．１８（ｍ，４Ｈ），３．３３−３．３８（ｍ，１４Ｈ），３．６０−３．６４（ｍ，１Ｈ），３．９０−３．９４（ｍ，４Ｈ），３．９９−４．８８（ｍ，８Ｈ），４．９４（ｓ，２Ｈ），５．４２（ｓ，２Ｈ），５．８６−５．９９（ｔ，１Ｈ），７．２２−７．２９（ｍ，４Ｈ），７．３８−７．４２（ｍ，１Ｈ），７．５８−７．６０（ｄ，２Ｈ），７．８０−７．８２（ｄ，１Ｈ），７．８９−７．９６（ｍ，２Ｈ），８．００−８．１０（ｍ，２Ｈ），８．２９（ｂｒｓ，１Ｈ），８．７０（ｓ，１Ｈ），１０．００（ｓ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１４５２．８［Ｍ＋Ｈ］＋，１４７４．７［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０３４８】
製造例３−３１：化合物（ＩＶ−３５）の製造
【０３４９】
【化９７】
0006262768.tif 000106
【０３５０】
製造例１−２で得られた化合物（ＩＩ−３）のＴＦＡ塩の代わりに、製造例１−５で得られたＩＩ−６化合物のＴＦＡ塩（０．１８ｇ、０．２３３ｍｍｏｌ）と製造例２−２５で得られた化合物（ＩＩＩ−２９）（０．２ｇ、０．２１２ｍｍｏｌ）を用いて、製造例３−２４と同様の方法で表題化合物（０．１６ｇ、５１％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．６８−０．７６（ｍ，６Ｈ），０．８１−０．９０（ｍ，１４Ｈ），１．０８−１．２０（ｍ，４Ｈ），１．２３−１．２７（ｍ，９Ｈ），１．４４−１．４９（ｍ，６Ｈ），１．５８−１．６２（ｍ，１Ｈ），１．６３−１．８３（ｍ，３Ｈ），１．９１−１．９９（ｍ，３Ｈ），２．１３−２．２０（ｍ，６Ｈ），２．３５−２．４２（ｍ，２Ｈ），２．８５−２．８７（ｍ，４Ｈ），２．９９−３．０１（ｍ，４Ｈ），３．１４−３．１７（ｍ，４Ｈ），３．２８−３．３８（ｍ，１９Ｈ），３．６２（ｂｒｓ，１Ｈ），３．９２−３．９４（ｍ，３Ｈ），４．０７−４．０９（ｍ，１Ｈ），４．１５−４．８４（ｍ，８Ｈ），４．９８（ｓ，２Ｈ），５．４３（ｓ，２Ｈ），５．９８−６．００（ｔ，１Ｈ），７．０１（ｓ，１Ｈ），７．２２−７．３６（ｍ，３Ｈ），７．５４−７．６４（ｍ，２Ｈ），７．７７−７．９７（ｍ，２Ｈ），８．０８−８．１１（ｄ，１Ｈ），８．２２−８．４５（ｍ，２Ｈ），１０．０１（ｓ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１４７８．５［Ｍ＋Ｈ］＋，１５００．５［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０３５１】
製造例４：化学式ＶＩ−１、ＶＩ−２、ＶＩ−３またはＶＩ−４の化合物の製造
【０３５２】
製造例４−１：化合物（ＶＩ−５）の製造
【０３５３】
【化９８】
0006262768.tif 000107
【０３５４】
製造例３−１で得られた化合物（ＩＶ−５）（２７４ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）にアセトニトリル５．０ｍＬを加えて溶解させ、４−メルカプト酪酸（Ｖ−１）（１２６ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ）とＤＭＳＯ０．５ｍＬを加えて、室温で４時間撹拌した。反応混合物を減圧濃縮して、表題化合物（２９０ｍｇ、９８％）を得た。
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ  ｍ／ｚ：１４６５．３［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０３５５】
製造例４−２：化合物（ＶＩ−６）の製造
【０３５６】
【化９９】
0006262768.tif 000108
【０３５７】
製造例３−１で得られた化合物（ＩＶ−５）（７０ｍｇ、０．０５３ｍｍｏｌ）にアセトニトリル２．５ｍＬを加えて溶解させ、２−（１−（メルカプトメチル）シクロプロパン）酢酸（Ｖ−２）（４４ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）とＤＭＦ０．７ｍＬを加えて、室温で４時間撹拌した。反応混合物を減圧濃縮して、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、表題化合物（６０ｍｇ、７７％）を固体として得た。
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ  ｍ／ｚ：１４９２．０［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０３５８】
製造例４−３：化合物（ＶＩ−７）の製造
【０３５９】
【化１００】
0006262768.tif 000109
【０３６０】
２−（１−（メルカプトメチル）シクロプロパン）酢酸（Ｖ−２）の代わりに、６−メルカプトヘキサン酸（Ｖ−３）を用いて、製造例４−２と同様の方法で表題化合物（５４ｍｇ、６９％）を固体として得た。
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ  ｍ／ｚ：１４９３．２［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０３６１】
製造例４−４：化合物（ＶＩ−８）の製造
【０３６２】
【化１０１】
0006262768.tif 000110
【０３６３】
２−（１−（メルカプトメチル）シクロプロパン）酢酸（Ｖ−２）の代わりに、８−メルカプトオクタン酸（Ｖ−４）を用いて、製造例４−２と同様の方法で表題化合物（６６ｍｇ、８４％）を固体として得た。
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ  ｍ／ｚ：１５２２．０［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０３６４】
製造例４−５：化合物（ＶＩ−９）の製造
【０３６５】
【化１０２】
0006262768.tif 000111
【０３６６】
２−（１−（メルカプトメチル）シクロプロパン）酢酸（Ｖ−２）の代わりに、１１−メルカプトウンデカン酸（Ｖ−５）を用いて、製造例４−２と同様の方法で表題化合物（７１ｍｇ、８６％）を固体として得た。
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ  ｍ／ｚ：１５６３．３［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０３６７】
製造例４−６：化合物（ＶＩ−１０）の製造
【０３６８】
【化１０３】
0006262768.tif 000112
【０３６９】
製造例３−１で得られた化合物（ＩＶ−５）の代わりに、製造例３−２で得られた化合物（ＩＶ−６）（７０ｍｇ、０．０５４ｍｍｏｌ）を用いて、製造例４−２と同様の方法で表題化合物（５３ｍｇ、６８％）を固体として得た。
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ  ｍ／ｚ：１４６９．５［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０３７０】
製造例４−７：化合物（ＶＩ−１１）の製造
【０３７１】
【化１０４】
0006262768.tif 000113
【０３７２】
製造例３−１で得られた化合物（ＩＶ−５）の代わりに、製造例３−２で得られた化合物（ＩＶ−６）（７０ｍｇ、０．０５４ｍｍｏｌ）を用い、２−（１−（メルカプトメチル）シクロプロパン）酢酸（Ｖ−２）の代わりに、６−メルカプトヘキサン酸（Ｖ−３）を用いて、製造例４−２と同様の方法で表題化合物（４６ｍｇ、５９％）を固体として得た。
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ  ｍ／ｚ：１４７１．６［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０３７３】
製造例４−８：化合物（ＶＩ−１２）の製造
【０３７４】
【化１０５】
0006262768.tif 000114
【０３７５】
製造例３−１で得られた化合物（ＩＶ−５）の代わりに、製造例３−３で得られた化合物（ＩＶ−７）（８８ｍｇ、０．０６４ｍｍｏｌ）を用いて、製造例４−２と同様の方法で表題化合物（４８ｍｇ、４９％）を固体として得た。
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ  ｍ／ｚ：１５４８．１［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０３７６】
製造例４−９：化合物（ＶＩ−１３）の製造
【０３７７】
【化１０６】
0006262768.tif 000115
【０３７８】
製造例３−１で得られた化合物（ＩＶ−５）の代わりに、製造例３−４で得られた化合物（ＩＶ−８）（７１ｍｇ、０．０５２ｍｍｏｌ）を用いて、製造例４−２と同様の方法で表題化合物（４６ｍｇ、５９％）を固体として得た。
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ  ｍ／ｚ：１５２９．４［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０３７９】
製造例４−１０：化合物（ＶＩ−１４）の製造
【０３８０】
【化１０７】
0006262768.tif 000116
【０３８１】
製造例３−１で得られた化合物（ＩＶ−５）の代わりに、製造例３−５で得られた化合物（ＩＶ−９）（３５ｍｇ、０．０２６ｍｍｏｌ）を用いて、製造例４−２と同様の方法で表題化合物（２９ｍｇ、７４％）を固体として得た。
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ  ｍ／ｚ：１５２８．２［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０３８２】
製造例４−１１：化合物（ＶＩ−１５）の製造
【０３８３】
【化１０８】
0006262768.tif 000117
【０３８４】
製造例３−１で得られた化合物（ＩＶ−５）の代わりに、製造例３−６で得られた化合物（ＩＶ−１０）（７８ｍｇ、０．０５８ｍｍｏｌ）を用いて、製造例４−２と同様の方法で表題化合物（７７ｍｇ、９０％）を固体として得た。
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ  ｍ／ｚ：１５０８．１［Ｍ＋Ｎａ］＋，１５２４．８［Ｍ＋Ｋ］＋
【０３８５】
製造例４−１２：化合物（ＶＩ−１６）の製造
【０３８６】
【化１０９】
0006262768.tif 000118
【０３８７】
製造例３−７で得られた化合物（ＩＶ−１１）（５８ｍｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）にメチルアルコール５ｍＬを入れて、無水ジメチルホルムアミド１．５ｍＬを加えて溶解させ、２−（１−（メルカプトメチル）シクロプロパン）酢酸（１９ｍｇ、０．１２６ｍｍｏｌ）を加えて、室温で４時間撹拌した。反応混合物を減圧濃縮して、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、表題化合物（６０ｍｇ、９３％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１５２３．８［Ｍ＋］＋，１５４５．８［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０３８８】
製造例４−１３：化合物（ＶＩ−１７）の製造
【０３８９】
【化１１０】
0006262768.tif 000119
【０３９０】
製造例３−７で得られた化合物（ＩＶ−１１）の代わりに、製造例３−８で得られた化合物（ＩＶ−１２）（４１ｍｇ、０．０３１ｍｍｏｌ）を用いて、製造例４−１２と同様の方法で表題化合物（３９ｍｇ、８５％）を固体として得た。
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ  ｍ／ｚ：１４９６．８［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０３９１】
製造例４−１４：化合物（ＶＩ−１８）の製造
【０３９２】
【化１１１】
0006262768.tif 000120
【０３９３】
製造例３−７で得られた化合物（ＩＶ−１１）の代わりに、製造例３−９で得られた化合物（ＩＶ−１３）（３４７ｍｇ、０．２５７ｍｍｏｌ）を用い、２−（１−（メルカプトメチル）シクロプロパン）酢酸の代わりに、１１−メルカプトウンデカン酸（１１２ｍｇ、０．５１４ｍｍｏｌ）を用いて、製造例４−１２と同様の方法で表題化合物（２６６ｍｇ、６６％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１５６７［Ｍ＋１］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ０．７６−０．９０（ｍ，１０Ｈ），０．９０−１．１４（ｍ，２０Ｈ），１．１７（ｍ，３Ｈ），１．２６（ｍ，４Ｈ），１．２９（ｂｒｓ，２０Ｈ），１．３７（ｍ，４Ｈ），１．５０−１．６４（ｍ，１４Ｈ），１．６８−１．７８（ｍ，３Ｈ），１．８８（ｍ，２Ｈ），１．９４（ｓ，３Ｈ），２．２１−２．２６（ｍ，６Ｈ），２．９９−２．４８（ｍ，１０Ｈ，Ｎ−ＣＨ３＊２），２．７０（ｍ，１Ｈ），２．８４（ｍ，１Ｈ），３．０７−３．１９（ｍ，６Ｈ），３．２６−３．４５（ｍ，６Ｈ），３．４５（ｍ，４Ｈ），３．８２（ｍ，１Ｈ），４．１５（ｍ，１Ｈ），４．４７（ｍ，２Ｈ），４．６４（ｍ，１Ｈ），４．８１（ｍ，１Ｈ），４．９８（ｍ，３Ｈ），６．９６（ｔ，１Ｈ），７．０８（ｔ，１Ｈ），７．２５（ｄ，２Ｈ），７．２８−７．４０（ｍ，２Ｈ），７．５３（ｄ，２Ｈ）
【０３９４】
製造例４−１５：化合物（ＶＩ−１９）の製造
【０３９５】
【化１１２】
0006262768.tif 000121
【０３９６】
製造例３−７で得られた化合物（ＩＶ−１１）の代わりに、製造例３−１０で得られた化合物（ＩＶ−１４）（４５３ｍｇ、０．３３２ｍｍｏｌ）を用いて、製造例４−１２と同様の方法で表題化合物（６０ｍｇ、９３％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１５１０［Ｍ＋１］＋，
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ０．４６−０．６８（ｍ，５Ｈ），０．８２−１．１０（ｍ，２７Ｈ），１．１７（ｄ，２Ｈ），１．２２（ｄ，１Ｈ），１．３０（ｍ，２Ｈ），１．４０（ｍ，１Ｈ），１．５０−１．６３（ｍ，６Ｈ），１．６８−１．８０（ｍ，２Ｈ），１．８２−１．９０（ｍ，２Ｈ），１．９４（ｓ，３Ｈ），２．００−２．１５（ｍ，４Ｈ），２．２０−２．３５（ｍ，５Ｈ），２．４２（ｓ，６Ｈ），２．３８−２．５０（ｍ，２Ｈ），２．８１−２．８９（ｍ，１Ｈ），２．９１−２．９８（ｍ，２Ｈ），３．０８−３．４０（ｍ，６Ｈ），３．２６−３．３３（ｍ，１０Ｈ，ＯＣＨ３），３．４３（ｄ，２Ｈ），３．４５−３．４８（ｍ，５Ｈ，ＯＣＨ３），３．５２−３．６４（ｍ，１Ｈ），３．７４−３．８６（ｍ，１Ｈ），３．９０６−４．１０（ｍ，３Ｈ），４．１５（ｄ，１Ｈ），４．２４（ｍ，１Ｈ），４．４４−４．５４（ｍ，２Ｈ），４．６６（ｄ，１Ｈ），４．７４−５．１０（ｍ，５Ｈ），７．０９−７．１２（ｍ，２Ｈ），７．２３−７．２７（ｍ，２Ｈ），７．３３−７．３７（ｍ，２Ｈ），７．５２−７．５９（ｍ，２Ｈ）
【０３９７】
製造例４−１６：化合物（ＶＩ−２０）の製造
【０３９８】
【化１１３】
0006262768.tif 000122
【０３９９】
製造例３−７で得られた化合物（ＩＶ−１１）の代わりに、製造例３−１１で得られた化合物（ＩＶ−１５）（８２ｍｇ、０．０６３ｍｍｏｌ）を用いて、製造例４−１２と同様の方法で表題化合物（３８ｍｇ、４２％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１５０６［Ｍ＋１］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ０．４２−０．６７（ｍ，４Ｈ），０．８１−１．０８（ｍ，２７Ｈ），１．１３−１．２０（ｍ，４Ｈ），１．２９（ｍ，２Ｈ），１．４０（ｍ，１Ｈ），１．５０−１．６８（ｍ，６Ｈ），１．７５（ｍ，２Ｈ），１．８２−１．９０（ｍ，２Ｈ），１．９４（ｓ，３Ｈ），２．０１−２．１８（ｍ，４Ｈ），２．２３−２．３２（ｍ，３Ｈ），２．４２（ｓ，６Ｈ），２．３５−２．５０（ｍ，１Ｈ），２．６１（ｍ，１Ｈ），２．７９−３．００（ｍ，３Ｈ），３．１０−３．２０（ｍ，５Ｈ），３．２８−３．４０（ｍ，１９Ｈ，２＊ＯＣＨ３），３．４３−３．４８（ｍ，３Ｈ），３．６０（ｍ，１Ｈ），３．７４（ｄ，３Ｈ），３．８５−４．００（ｍ，３Ｈ），４．１４（ｄ，１Ｈ），４．２１−４．３０（ｍ，１Ｈ），４．４８（ｍ，２Ｈ），４．６４−５．１０（ｍ，５Ｈ），６．８６−７．６０（ｍ，８Ｈ）
【０４００】
製造例４−１７：化合物（ＶＩ−２１）の製造
【０４０１】
【化１１４】
0006262768.tif 000123
【０４０２】
製造例３−７で得られた化合物（ＩＶ−１１）の代わりに、製造例３−１２で得られた化合物（ＩＶ−１６）（２６８ｍｇ、０．１９５ｍｍｏｌ）を用いて、製造例４−１２と同様の方法で表題化合物（１３２ｍｇ、４６％）を固体として得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１５２１［Ｍ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．４８−０．５０（ｍ，６Ｈ），０．７１−１．０８（ｍ，２７Ｈ），１．１６−１．２２（ｍ，４Ｈ），１．４２−１．５４（ｍ，９Ｈ），１．６０（ｍ，１Ｈ），１．７０（ｍ，１Ｈ），１．９４（ｓ，３Ｈ），２．１０−２．３２（ｍ，８Ｈ），２．３２−２．４６（ｍ，６Ｈ），２．５０（ｓ，６Ｈ），２．７８−３．１０（ｍ，８Ｈ），３．１６（ｍ，２Ｈ），３．２１（ｍ，１Ｈ），３．２８−３．４０（ｍ，６Ｈ），３．６２（ｓ，１Ｈ），３．７０（ｓ，２Ｈ），３．８６−４．００（ｍ，５Ｈ），４．１９（ｔ，２Ｈ），４．３８（ｍ，２Ｈ），４．５２（ｔ，１Ｈ），４．６０（ｍ，１Ｈ），４．７６（ｍ，１Ｈ），４．８８（ｍ，１Ｈ），５．００（ｍ，２Ｈ），５．０８（ｍ，１Ｈ），５．４２（ｂｒｓ，２Ｈ），５．９８（ｍ，１Ｈ），６．８１（ｄ，１Ｈ），７．１７（ｄ，１Ｈ），７．２８（ｄｄ、１Ｈ），７．５０−７．７０（ｍ，３Ｈ），７．８２（ｄ，１Ｈ），８．１０（ｄ，１Ｈ），１０．０（ｄ，１Ｈ）
【０４０３】
製造例４−１８：化合物（ＶＩ−２２）の製造
【０４０４】
【化１１５】
0006262768.tif 000124
【０４０５】
製造例３−７で得られた化合物（ＩＶ−１１）の代わりに、製造例３−１３で得られた化合物（ＩＶ−１７）（４４０ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）を用いて、製造例４−１２と同様の方法で表題化合物（２９６ｍｇ、６０％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１４９２［Ｍ＋１］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ０．４７−０．６２（ｍ，５Ｈ），０．８１−１．０２（ｍ，２６Ｈ），１．１３−１．２０（ｍ，３Ｈ），１．２５−１．３２（ｍ，２Ｈ），１．４０（ｍ，１Ｈ），１．５０−１．６８（ｍ，６Ｈ），１．７２−１．７８（ｍ，２Ｈ），１．８２−１．９８（ｍ，３Ｈ），１．９６（ｓ，３Ｈ），２．００−２．０９（ｍ，４Ｈ），２．２５−２．３５（ｍ，５Ｈ），２．３８−２．４８（ｍ，６Ｈ），２．８５０−２．９０（ｍ，３Ｈ），３．０５−３．２０（ｍ，６Ｈ），３．２６−３．３５（ｍ，９Ｈ，ＯＣＨ３），３．４０−３．４８（ｍ，６Ｈ，ＯＣＨ３），３．５０−３．６０（ｍ，２Ｈ），３．６５−３．８０（ｍ，３Ｈ），３．９０−４．１８（ｍ，５Ｈ），４．４８（ｍ，１Ｈ），４．６４（ｍ，１Ｈ），４．７０−５．１０（ｍ，８Ｈ），７．０９−７．５８（ｍ，８Ｈ）
【０４０６】
製造例４−１９：化合物（ＶＩ−２３）の製造
【０４０７】
【化１１６】
0006262768.tif 000125
【０４０８】
製造例３−１４で得られた化合物（ＩＶ−１８）（３７ｍｇ、０．０２７ｍｍｏｌ）にメチルアルコール５ｍＬを入れて、無水ジメチルホルムアミド１．５ｍＬを加えて溶解させ、２−（１−（メルカプトメチル）シクロプロパン）酢酸（１２ｍｇ、０．０８３ｍｍｏｌ）を加えて、室温で４時間撹拌した。反応混合物を減圧濃縮して、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、表題化合物（３３ｍｇ、８１％）を固体として得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１４９９［Ｍ＋］＋，１４５１［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０４０９】
製造例４−２０：化合物（ＶＩ−２４）の製造
【０４１０】
【化１１７】
0006262768.tif 000126
【０４１１】
製造例３−１４で得られた化合物（ＩＶ−１８）の代わりに、製造例３−１５で得られた化合物（ＩＶ−１９）（６９ｍｇ、０．０５１ｍｍｏｌ）を用いて、製造例４−１９と同様の方法で表題化合物（５５ｍｇ、７２％）を固体として得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１５０８．９［Ｍ＋］＋
【０４１２】
製造例４−２１：化合物（ＶＩ−２５）の製造
【０４１３】
【化１１８】
0006262768.tif 000127
【０４１４】
製造例３−１４で得られた化合物（ＩＶ−１８）の代わりに、製造例３−１６で得られた化合物（ＩＶ−２０）（９４ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ）を用いて、製造例４−１９と同様の方法で表題化合物（９９ｍｇ、９４％）を固体として得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１４９８［Ｍ＋］＋
【０４１５】
製造例４−２２：化合物（ＶＩ−２６）の製造
【０４１６】
【化１１９】
0006262768.tif 000128
【０４１７】
製造例３−１４で得られた化合物（ＩＶ−１８）の代わりに、製造例３−１７で得られた化合物（ＩＶ−２１）（１４４ｍｇ、０．１０５ｍｍｏｌ）を用いて、製造例４−１９と同様の方法で表題化合物（１１６ｍｇ、７３％）を固体として得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１５１２［Ｍ＋］＋
【０４１８】
製造例４−２３：化合物（ＶＩ−２７）の製造
【０４１９】
【化１２０】
0006262768.tif 000129
【０４２０】
製造例３−１４で得られた化合物（ＩＶ−１８）の代わりに、製造例３−１８で得られた化合物（ＩＶ−２２）（０．１４ｇ、０．０９９ｍｍｏｌ）を用いて、製造例４−１９と同様の方法で表題化合物（０．１１ｇ、７５％）を固体として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．５０−０．５２（ｍ，４Ｈ），０．６５−０．７６（ｍ，６Ｈ），０．８２−０．９２（ｍ，１３Ｈ），１．０８−１．２４（１８Ｈ），１．４３−１．４９（ｍ，６Ｈ），１．５４−１．８２（ｍ，３Ｈ），１．８４−１．９８（ｍ，３Ｈ），２．１０−２．１９（ｍ，６Ｈ），２．７９−３．０４（ｍ，１２Ｈ），３．１５−３．２４（ｍ，３Ｈ），３．３０−３．４４（ｍ，１５Ｈ），３．８７−３．８９（ｍ，３Ｈ），３．９７−４．００（ｍ，１Ｈ），４．０８−４．８６（ｍ，８Ｈ），４．８６−５．０４（ｍ，１Ｈ），５．１０（ｓ，２Ｈ），５．４６（ｓ，２Ｈ），６．０３（ｔ，１Ｈ），７．２２−７．３６（ｍ，２Ｈ），７．６２−７．６５（ｄ，１Ｈ），７．７７−７．８０（ｄ，１Ｈ），７．８７−７．８９（ｍ，２Ｈ），８．１７−８．２３（ｍ，１Ｈ），８．４８（ｂｒｓ，１Ｈ），１０．１１（ｓ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１５２４．４［Ｍ＋］＋
【０４２１】
製造例４−２４：化合物（ＶＩ−２８）の製造
【０４２２】
【化１２１】
0006262768.tif 000130
【０４２３】
製造例３−１４で得られた化合物（ＩＶ−１８）の代わりに、製造例３−１９で得られた化合物（ＩＶ−２３）（０．２ｇ、０．１５ｍｍｏｌ）を用いて、製造例４−１９と同様の方法で表題化合物（０．０６ｇ、２７％）を固体として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．４３−０．５２（ｍ，６Ｈ），０．６９−０．７６（ｍ，７Ｈ），０．８２−０．９２（ｍ，１５Ｈ），１．０２−１．０６（ｍ，７Ｈ），１．１１−１．１３（ｍ，２Ｈ），１．１８−１．２３（ｍ，４Ｈ），１．４３−１．４７（ｍ，６Ｈ），１．５４−１．６５（ｍ，１Ｈ），１．６６−１．８４（ｍ，２Ｈ），１．８９−１．９８（ｍ，３Ｈ），２．０９−２．２０（ｍ，６Ｈ），２．９１−３．０３（ｍ，１０Ｈ），３．１５−３．２２（ｍ，５Ｈ），３．３３−３．４６（ｍ，１５Ｈ），３．８７−４．０２（ｍ，３Ｈ），４．１５−４．９５（ｍ，８Ｈ），５．０８（ｓ，２Ｈ），５．４４（ｓ，２Ｈ），６．０３（ｔ，１Ｈ），７．０７−７．１６（ｍ，２Ｈ），７．３３−７．３５（ｍ，２Ｈ），７．６２−７．７０（ｄ，２Ｈ），７．８５−７．９１（ｍ，１Ｈ），７．９８−８．０７（ｍ，１Ｈ），８．２０（ｂｒｓ，１Ｈ），８．２８−８．４９（ｍ，１Ｈ），１０．１０（ｓ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１５０４．４［Ｍ＋］＋
【０４２４】
製造例４−２５：化合物（ＶＩ−２９）の製造
【０４２５】
【化１２２】
0006262768.tif 000131
【０４２６】
製造例３−１４で得られた化合物（ＩＶ−１８）の代わりに、製造例３−２０で得られた化合物（ＩＶ−２４）（０．１ｇ、０．１ｍｍｏｌ）を用いて、製造例４−１９と同様の方法で表題化合物（０．０８ｇ、５３％）を固体として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．４３−０．４７（ｍ，５Ｈ），０．４８−０．５０（ｄ，１Ｈ），０．５８−０．５９（ｄ，１Ｈ）０．６９−０．７６（ｍ，３Ｈ），０．８２−０．９２（ｍ，１６Ｈ），１．０５−１．０９（ｍ，６Ｈ），１．１１−１．１３（ｍ，２Ｈ），１．１６−１．２３（ｍ，４Ｈ），１．４３−１．４７（ｍ，６Ｈ），１．５４−１．６５（ｍ，１Ｈ），１．６６−１．８４（ｍ，２Ｈ），１．８９−１．９８（ｍ，３Ｈ），２．１０−２．２０（ｍ，８Ｈ），２．３１−２．４３（ｍ，２Ｈ），２．５８−２．６８（ｍ，１Ｈ），２．７０−２．８２（ｍ，３Ｈ），２．８７−２．８８（ｍ，２Ｈ），２．９５−３．００（ｍ，４Ｈ），３．１３−３．２２（ｍ，４Ｈ），３．３１−３．４６（ｍ，１６Ｈ），３．９０−３．９２（ｍ，３Ｈ），３．９７−４．００（ｍ，１Ｈ），４．０６−５．００（ｍ，８Ｈ），５．１０（ｓ，２Ｈ），５．４７（ｓ，２Ｈ），６．１０（ｔ，１Ｈ），７．２２−７．２８（ｍ，１Ｈ），７．３３−７．４３（ｍ，２Ｈ），７．５５−７．５８（ｄ，１Ｈ），７．８８−７．９９（ｍ，２Ｈ），８．０１−８．０３（ｄ，１Ｈ），８．２２−８．５４（ｍ，２Ｈ），８．６４（ｓ，１Ｈ），１０．１５（ｓ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１５５６．４［Ｍ＋］＋
【０４２７】
製造例４−２６：化合物（ＶＩ−３０）の製造
【０４２８】
【化１２３】
0006262768.tif 000132
【０４２９】
製造例３−１４で得られた化合物（ＩＶ−１８）の代わりに、製造例３−２１で得られた化合物（ＩＶ−２５）（０．４６ｇ、０．３３ｍｍｏｌ）を用いて、製造例４−１９と同様の方法で表題化合物（０．４９ｇ、９６％）を固体として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．３０−０．５８（ｍ，６Ｈ），０．５９−０．７８（ｍ，８Ｈ），０．７８−１．００（ｍ，１６Ｈ），１．０５−１．３２（ｍ，６Ｈ），１．３２−１．５４（ｍ，６Ｈ），１．５４−１．６４（ｍ，１Ｈ），１．６４−１．８４（ｍ，３Ｈ），１．８４−２．０５（ｍ，３Ｈ），２．０６−２．２７（ｍ，１０Ｈ），２．２７−２．４３（ｍ，４Ｈ），２．５５−２．７１（ｍ，１Ｈ），２．７１−２．８５（ｍ，２Ｈ），２．８５−３．０７（ｍ，７Ｈ），３．０９−３．１８（ｍ，３Ｈ），３．１８−３．３０（ｍ，３Ｈ），３．７４−３．８８（ｍ，６Ｈ），３．８８−４．０５（ｍ，４Ｈ），４．０６−４．２２（ｍ，２Ｈ），４．２２−４．４３（ｍ，２Ｈ），４．４３−４．５３（ｍ，１Ｈ），４．５９−４．７５（ｍ，２Ｈ），４．９６（ｓ，２Ｈ），５．４３（ｓ，２Ｈ），５．７８（ｓ，１Ｈ），５．９６−６．１０（ｄ，１Ｈ），７．０１−７．１３（ｄ，１Ｈ），７．２１−７．３７（ｍ，２Ｈ），７．４１−７．４８（ｓ，１Ｈ），７．４９−７．５７（ｍ，１Ｈ），７．５７−７．７５（ｍ，３Ｈ），８．００−８．１１（ｍ，１Ｈ），１０．００−１０．２０（ｂｒｓ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１５３５．５［Ｍ＋］＋
【０４３０】
製造例４−２７：化合物（ＶＩ−３１）の製造
【０４３１】
【化１２４】
0006262768.tif 000133
【０４３２】
製造例３−１４で得られた化合物（ＩＶ−１８）の代わりに、製造例３−２２で得られた化合物（ＩＶ−２６）（０．２４ｇ、０．１７ｍｍｏｌ）を用いて、製造例４−１９と同様の方法で表題化合物（０．１９ｇ、７３％）を固体として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．３７−０．５８（ｍ，９Ｈ），０．６０−０．７８（ｍ，６Ｈ），０．７８−０．９７（ｍ，１６Ｈ），１．０６−１．３７（ｍ，７Ｈ），１．３７−１．５３（ｍ，６Ｈ），１．５４−１．８５（ｍ，５Ｈ），１．８６−２．０３（ｍ，３Ｈ），２．０５−２．２６（ｍ，１０Ｈ），２．２６−２．４３（ｍ，３Ｈ），２．５８−２．６７（ｍ，１Ｈ），２．６８−２．８４（ｍ，２Ｈ），２．８５−３．０９（ｍ，８Ｈ），３．１０−３．２４（ｍ，６Ｈ），３．２４−３．３３（ｍ，３Ｈ），３．６２−３．７８（ｍ，１Ｈ），３．７８−４．０５（ｍ，３Ｈ），４．０５−４．２４（ｍ，２Ｈ），４．２７−４．４０（ｍ，１Ｈ），４．４６−４．６１（ｍ，１Ｈ），４．６１−４．７２（ｍ，１Ｈ），４．７２−４．８９（ｍ，１Ｈ），５．０１（ｓ，２Ｈ），５．４４（ｓ，２Ｈ），５．９６−６．１４（ｔ，１Ｈ），７．２１−７．３７（ｍ，２Ｈ），７．４５−７．５６（ｍ，１Ｈ），７．５６−７．７４（ｍ，４Ｈ），７．９３−８．０８（ｍ，３Ｈ），８．０８−８．１９（ｍ，１Ｈ），８．２８−８．３９（ｍ，１Ｈ），８．４９−８．６１（ｍ，１Ｈ），８．７３（ｓ，１Ｈ），１０．１４（ｂｒｓ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１５３５．５［Ｍ＋］＋
【０４３３】
製造例４−２８：化合物（ＶＩ−３２）の製造
【０４３４】
【化１２５】
0006262768.tif 000134
【０４３５】
製造例３−１４で得られた化合物（ＩＶ−１８）の代わりに、製造例３−２３で得られた化合物（ＩＶ−２７）（０．２１ｇ、０．１５ｍｍｏｌ）を用いて、製造例４−１９と同様の方法で表題化合物（０．２１ｇ、９１％）を固体として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．３４−０．５６（ｍ，５Ｈ），０．６４−０．７８（ｍ，６Ｈ），０．７８−０．９６（ｍ，１５Ｈ），０．９６−１．０７（ｍ，２Ｈ），１．０７−１．２７（ｍ，５Ｈ），１．２９−１．３９（ｍ，１Ｈ），１．３９−１．５４（ｍ，５Ｈ），１．５４−１．６５（ｍ，１Ｈ），１．６５−１．８４（ｍ，３Ｈ），１．８４−２．０３（ｍ，３Ｈ），２．０５−２．３１（ｍ，１０Ｈ），２．３１−２．４４（ｍ，２Ｈ），２．４４−２．４８（ｍ，１Ｈ），２．５８−２．６１（ｍ，２Ｈ），２．７５−２．８５（ｍ，１Ｈ），２．８６−３．０８（ｍ，７Ｈ），３．０９−３．１５（ｍ，１Ｈ），３．２４−３．５５（ｍ，１４Ｈ），３．６４−３．７６（ｍ，２Ｈ），３．７７−３．８６（ｍ，２Ｈ），３．８７−４．０４（ｍ，３Ｈ），４．０４−４．１４（ｍ，２Ｈ），４．１４−４．２５（ｍ，２Ｈ），４．３３−４．４０（ｍ，１Ｈ），４．４０−４．６１（ｍ，２Ｈ），４．６１−４．７６（ｍ，１Ｈ），４．９７（ｓ，２Ｈ），５．４４（ｓ，２Ｈ），５．９８−６．１１（ｔ，１Ｈ），６．８２−６．９４（ｍ，１Ｈ），７．１６−７．２５（ｍ，１Ｈ），７．２５−７．３７（ｍ，２Ｈ），７．４０−７．４９（ｍ，１Ｈ），７．４９−７．６８（ｍ，３Ｈ），７．８１−７．９９（ｍ，１Ｈ），７．９９−８．１２（ｍ，１Ｈ），８．２４−８．４５（ｍ，１Ｈ），１０．１２（ｂｒｓ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１５３５．５［Ｍ＋］＋
【０４３６】
製造例４−２９：化合物（ＶＩ−３３）の製造
【０４３７】
【化１２６】
0006262768.tif 000135
【０４３８】
製造例３−１４で得られた化合物（ＩＶ−１８）の代わりに、製造例３−１７で得られた化合物（ＩＶ−２１）（０．２８ｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を用い、２−（１−（メルカプトメチル）シクロプロパン）酢酸の代わりに、６−メルカプトヘキサン酸（０．０７ｇ、０．４１ｍｍｏｌ）を用いて、製造例４−１９と同様の方法で表題化合物（０．２６ｇ、８１％）を固体として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．６４−０．７９（ｍ，５Ｈ），０．７９−０．９８（ｍ，１７Ｈ），０．９８−１．１４（ｍ，４Ｈ），１．１４−１．２８（ｍ，５Ｈ），１．２８−１．４１（ｍ，６Ｈ），１．４１−１．６５（ｍ，１４Ｈ），１．６５−１．７９（ｍ，２Ｈ），１．８３−２．０５（ｍ，７Ｈ），２．０５−２．３２（ｍ，１３Ｈ），２．３２−２．５６（ｍ，１Ｈ），２．５７−２．８８（ｍ，１０Ｈ），２．８９−３．０６（ｍ，６Ｈ），３．０６−３．２４（ｍ，３Ｈ），３．６９−３．８６（ｍ，３Ｈ），３．８６−４．０９（ｍ，３Ｈ），４．０９−４．２８（ｍ，１Ｈ），４．２９−４．４８（ｍ，２Ｈ），４．４８−４．７８（ｍ，２Ｈ），５．０４（ｓ，２Ｈ），５．４２（ｓ，２Ｈ），６．０３（ｂｒｓ，１Ｈ），７．０１（ｂｒｓ，２Ｈ），７．１４−７．４５（ｍ，２Ｈ），７．４５−７．７０（ｍ，１Ｈ），７．８３−８．０６（ｍ，２Ｈ），１０．０８（ｂｒｓ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１５１４．４［Ｍ＋Ｈ］＋，１５３６．４［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０４３９】
製造例４−３０：化合物（ＶＩ−３４）の製造
【０４４０】
【化１２７】
0006262768.tif 000136
【０４４１】
製造例３−２４で得られた化合物（ＩＶ−２８）（１３７ｍｇ、０．０９３ｍｍｏｌ）にメチルアルコール１０ｍＬを入れて、無水ジメチルホルムアミド３ｍＬを加えて溶解させ、２−（１−（メルカプトメチル）シクロプロパン）酢酸（４１ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）を加えて、室温で１５時間撹拌した。反応混合物を減圧濃縮して、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、表題化合物（２５ｍｇ、１７％）を固体として得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１６０９．３［Ｍ＋Ｈ］＋
【０４４２】
製造例４−３１：化合物（ＶＩ−３５）の製造
【０４４３】
【化１２８】
0006262768.tif 000137
【０４４４】
製造例３−２４で得られた化合物（ＩＶ−２８）の代わりに、製造例３−２５で得られた化合物（ＩＶ−２９）（０．１９ｇ、０．１２８ｍｍｏｌ）を用いて、製造例４−３０と同様の方法で表題化合物（０．０８５ｇ、４１％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．４２−０．５５（ｍ，６Ｈ），０．６６−０．７５（ｍ，８Ｈ），０．８１−０．８７（ｍ，１４Ｈ），１．１０−１．２３（ｍ，６Ｈ），１．３７−１．４９（ｍ，６Ｈ），１．５４−１．７９（ｍ，３Ｈ），１．９１−１．９８（ｍ，７Ｈ），２．２７（ｓ，１Ｈ），２．３０−２．３７（ｍ，１Ｈ），２．３８−２．４２（ｍ，１Ｈ），２．４４−２．４５（ｍ，１Ｈ），２．５６−２．６４（ｍ，２Ｈ），２．７５−２．８６（ｍ，６Ｈ），２．９３−２．９９（ｍ，４Ｈ），３．１２−３．２４（ｍ，４Ｈ），３．３１−３．３５（ｍ，１７Ｈ），３．９１−４．０６（ｍ，６Ｈ），４．１４−４．８６（ｍ，８Ｈ），４．９８（ｓ，２Ｈ），５．４３（ｓ，２Ｈ），５．９７−５．９８（ｔ，１Ｈ），７．２９−７．３０（ｍ，２Ｈ），７．５８−７．６０（ｄ，２Ｈ），７．７７−７．９０（ｍ，２Ｈ），７．９３−８．１０（ｍ，２Ｈ），８．１１−８．１３（ｄ，２Ｈ），８．４６（ｂｒｓ，１Ｈ），１０．０１（ｓ，１Ｈ），１２．１２（ｂｒｓ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１６３９．０［Ｍ＋Ｈ］＋，１６６１．０［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０４４５】
製造例４−３２：化合物（ＶＩ−３６）の製造
【０４４６】
【化１２９】
0006262768.tif 000138
【０４４７】
製造例３−２４で得られた化合物（ＩＶ−２８）の代わりに、製造例３−２６で得られた化合物（ＩＶ−３０）（０．１８ｇ、０．１１９ｍｍｏｌ）を用いて、製造例４−３０と同様の方法で表題化合物（０．１２ｇ、６１％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．４４−０．５２（ｍ，５Ｈ），０．６６−０．７５（ｍ，７Ｈ），０．８２−０．９２（ｍ，１２Ｈ），１．０９−１．２３（ｍ，６Ｈ），１．４３−１．４７（ｍ，５Ｈ），１．５４−１．８３（ｍ，３Ｈ），１．９４−１．９７（ｍ，４Ｈ），２．１０−２．２２（ｍ，７Ｈ），２．２５−２．２６（ｄ，１Ｈ），２．３８−２．４６（ｍ，４Ｈ），２．５６−２．６７（ｍ，２Ｈ），２．７８−２．８１（ｍ，２Ｈ），２．８６−２．９１（ｍ，２Ｈ），２．９６−３．０４（ｍ，５Ｈ），３．１０−３．２４（ｍ，４Ｈ），３．３２−３．３５（ｍ，１７Ｈ），３．９１−３．９３（ｍ，３Ｈ），３．９７−４．００（ｍ，２Ｈ），４．１３−４．６５（ｍ，８Ｈ），４．８０−４．８６（ｍ，２Ｈ），４．９４（ｓ，２Ｈ），５．４４（ｓ，２Ｈ），６．００（ｔ，１Ｈ），７．２２−７．３２（ｍ，４Ｈ），７．５４−７．５６（ｄ，２Ｈ），７．７８−７．８１（ｄ，１Ｈ），７．８５−８．００（ｍ，２Ｈ），８．０９−８．２３（ｍ，２Ｈ），８．４７（ｂｒｓ，１Ｈ），１０．０４（ｓ，１Ｈ），１２．１２（ｂｒｓ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１６１０．８［Ｍ＋Ｈ］＋，１６３２．８［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０４４８】
製造例４−３３：化合物（ＶＩ−３７）の製造
【０４４９】
【化１３０】
0006262768.tif 000139
【０４５０】
製造例３−２４で得られた化合物（ＩＶ−２８）の代わりに、製造例３−２７で得られた化合物（ＩＶ−３１）（０．２ｇ、０．１３８ｍｍｏｌ）を用いて、製造例４−３０と同様の方法で表題化合物（０．１７ｇ、７７％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．００−０．５７（ｍ，６Ｈ），０．６９−０．７６（ｍ，８Ｈ），０．８２−０．８７（ｍ，１４Ｈ），０．９５−１．０８（ｍ，２Ｈ），１．０９−１．１８（ｍ，２Ｈ），１．２０−１．２４（ｍ，２Ｈ），１．４３−１．４９（ｍ，６Ｈ），１．５４−１．６４（ｍ，１Ｈ），１．８１−２．０５（ｍ，４Ｈ），２．２０−２．２３（ｍ，６Ｈ），２．２７−２．３８（ｍ，９Ｈ），２．５６−２．６９（ｍ，１Ｈ），２．７０−２．８１（ｍ，２Ｈ），２．８２−２．８６（ｍ，７Ｈ），２．９６−３．００（ｍ，５Ｈ），３．１５−３．２０（ｍ，５Ｈ），３．２７（ｓ，３Ｈ），３．３２−３．３４（ｍ，１５Ｈ），３．８９−４．００（ｍ，３Ｈ），４．１４−４．２５（ｍ，２Ｈ），４．２６−４．８２（ｍ，８Ｈ），４．９８（ｓ，２Ｈ），５．４３（ｓ，２Ｈ），６．００−６．０３（ｔ，１Ｈ），７．０６−７．１６（ｍ，２Ｈ），７．２８−７．３０（ｍ，２Ｈ），７．５９−７．６９（ｍ，３Ｈ），７．８４−７．８６（ｄ，１Ｈ），７．９７−８．０５（ｍ，１Ｈ），８．１４−８．１５（ｍ，１Ｈ），８．２３−８．２８（ｍ，１Ｈ），８．４９（ｂｒｓ，１Ｈ），１０．０２（ｓ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１６１９．６［Ｍ＋Ｈ］＋，１６４１．６［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０４５１】
製造例４−３４：化合物（ＶＩ−３８）の製造
【０４５２】
【化１３１】
0006262768.tif 000140
【０４５３】
製造例３−２４で得られた化合物（ＩＶ−２８）の代わりに、製造例３−２８で得られた化合物（ＩＶ−３２）（０．２ｇ、０．１３７ｍｍｏｌ）を用いて、製造例４−３０と同様の方法で表題化合物（０．１７ｇ、７６％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．５０−０．５２（ｍ，４Ｈ），０．６９−０．７６（ｍ，８Ｈ），０．８２−０．９２（ｍ，１４Ｈ），１．０３−１．０５（ｍ，２Ｈ），１．１１−１．１２（ｍ，１Ｈ），１．１８−１．２４（ｍ，３Ｈ），１．４２−１．４９（ｍ，６Ｈ），１．５２−１．６４（ｍ，１Ｈ），１．６６−１．８３（ｍ，３Ｈ），１．８６−２．０２（ｍ，４Ｈ），２．１０−２．２０（ｍ，６Ｈ），２．２８−２．３８（ｍ，８Ｈ），２．４５−２．４９（ｍ，１Ｈ），２．５６−２．６８（ｍ，１Ｈ），２．７８−２．８６（ｍ，３Ｈ），２．９５−３．１０（ｍ，８Ｈ），３．１５−３．１７（ｍ，４Ｈ），３．２８（ｓ，３Ｈ），３．３４−３．３５（ｍ，１０Ｈ），３．９５−４．００（ｍ，３Ｈ），４．０２−４．８８（ｍ，８Ｈ），４．９４（ｓ，２Ｈ），５．４３（ｓ，２Ｈ），６．０３（ｔ，１Ｈ），７．０６−７．１５（ｍ，２Ｈ），７．２２−７．２９（ｍ，４Ｈ），７．５４−７．６９（ｍ，３Ｈ），７．８９（ｂｒｓ，１Ｈ），７．８７−７．９９（ｄ，１Ｈ），８．０３−８．０５（ｄ，１Ｈ），８．１９（ｂｒｓ，１Ｈ），８．３０（ｍ，１Ｈ），８．５０（ｍ，１Ｈ），１０．０４（ｓ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１５９１．７［Ｍ＋Ｈ］＋，１６１３．７［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０４５４】
製造例４−３５：化合物（ＶＩ−３９）の製造
【０４５５】
【化１３２】
0006262768.tif 000141
【０４５６】
製造例３−２４で得られた化合物（ＩＶ−２８）の代わりに、製造例３−２９で得られた化合物（ＩＶ−３３）（０．１５ｇ、０．０９９ｍｍｏｌ）を用いて、製造例４−３０と同様の方法で表題化合物（０．１１ｇ、７０％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．４１−０．５４（ｍ，６Ｈ），０．５８−０．６５（ｍ，２Ｈ），０．６８−０．７６（ｍ，３Ｈ），０．８２−０．９５（ｍ，１４Ｈ），１．０９−１．２３（ｍ，８Ｈ），１．３２−１．４９（ｍ，５Ｈ），１．５９−１．６１（ｍ，１Ｈ），１．６８−１．７１（ｍ，３Ｈ），１．８７−２．０４（ｍ，３Ｈ），２．０９−２．２３（ｍ，１０Ｈ），２．３２−２．３９（ｍ，３Ｈ），２．６２−２．６８（ｍ，｀Ｈ），２．７４−３．２５（ｍ，１５Ｈ），３．３３−３．５０（ｍ，１４Ｈ），３．９０−３．９７（ｍ，３Ｈ），３．９９−４．１４（ｍ，２Ｈ），４．１６−４．８９（ｍ，８Ｈ），４．９０（ｓ，２Ｈ），５．４５（ｓ，２Ｈ），６．１０（ｔ，１Ｈ），７．２２−７．２８（ｍ，３Ｈ），７．３８−７．４１（ｄ，２Ｈ），７．５５−７．８５（ｄ，２Ｈ），７．８６−８．０１（ｍ，２Ｈ），８．０３−８．０５（ｍ，１Ｈ），８．１９−８．２０（ｂｒｓ，１Ｈ），８．２９（ｂｒｓ，１Ｈ），８．５９（ｂｒｓ，１Ｈ），８．８４（ｓ，１Ｈ），１０．０８（ｓ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１６４２．８［Ｍ＋Ｈ］＋，１６６４．８［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０４５７】
製造例４−３６：化合物（ＶＩ−４０）の製造
【０４５８】
【化１３３】
0006262768.tif 000142
【０４５９】
製造例３−２４で得られた化合物（ＩＶ−２８）の代わりに、製造例３−３０で得られた化合物（ＩＶ−３４）（１．３ｇ、０．８９５ｍｍｏｌ）を用いて、製造例４−３０と同様の方法で表題化合物（１．１ｇ、７４％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．４０−０．５０（ｍ，７Ｈ），０．７０−０．７７（ｍ，８Ｈ），０．８２−０．８９（ｍ，１８Ｈ），１．０２−０．０７（ｍ，３Ｈ），１．１８−１．２９（ｍ，３Ｈ），１．４４−１．４７（ｍ，６Ｈ），１．５４−１．７６（ｍ，４Ｈ），１．８９−１．９４（ｍ，５Ｈ），２．１０−２．２３（ｍ，１２Ｈ），２．３２−２．４４（ｍ，３Ｈ），２．６１−２．６４（ｍ，２Ｈ），２．７４−３．００（ｍ，１０Ｈ），３．１３−３．１７（ｍ，３Ｈ），３．２０−３．３３（ｍ，１０Ｈ），３．９０−４．００（ｍ，４Ｈ），４．１６−４．８４（ｍ，８Ｈ），４．９５（ｓ，２Ｈ），５．４１（ｓ，２Ｈ），６．０１−６．０２（ｔ，１Ｈ），７．０１−７．０５（ｍ，２Ｈ），７．２８−７．２９（ｍ，４Ｈ），７．５９−７．６０（ｄ，２Ｈ），７．８４−７．９９（ｍ，２Ｈ），８．１３−８．１６（ｍ，１Ｈ），８．２３（ｂｒｓ，１Ｈ），１０．０４（ｓ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１５９８．９［Ｍ＋Ｈ］＋，１６２１．９［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０４６０】
製造例４−３７：化合物（ＶＩ−４１）の製造
【０４６１】
【化１３４】
0006262768.tif 000143
【０４６２】
製造例３−２４で得られた化合物（ＩＶ−２８）の代わりに、製造例３−３１で得られた化合物（ＩＶ−３５）（０．１４ｇ、０．０９５ｍｍｏｌ）を用いて、製造例４−３０と同様の方法で表題化合物（０．０７２ｇ、４７％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．４３−０．５０（ｍ，６Ｈ），０．６６−０．７６（ｍ，８Ｈ），０．８２−０．９２（ｍ，１６Ｈ），１．０９−１．２３（ｍ，６Ｈ），１．４４−１．４８（ｍ，６Ｈ），１．６５−１．８１（ｍ，３Ｈ），１．８４−１．９７（ｍ，４Ｈ），２．０１−２．３０（ｍ，１０Ｈ），２．３４−２．３８（ｍ，３Ｈ），２．５６−２．６４（ｍ，２Ｈ），２．８０−２．８８（ｍ，５Ｈ），２．９１−３．０４（ｍ，５Ｈ），３．１４−３．１７（ｍ，６Ｈ），３．２７−３．３９（ｍ，１７Ｈ），３．９２−３．９８（ｍ，３Ｈ），４．１５−４．８６（ｍ，８Ｈ），４．９８（ｓ，２Ｈ），５．４２（ｓ，２Ｈ），６．０２−６．０３（ｔ，１Ｈ），７．２１−７．３６（ｍ，４Ｈ），７．５５−７．６３（ｄ，２Ｈ），７．７７−８．０１（ｍ，４Ｈ），８．０３−８．０５（ｄ，１Ｈ），８．１３（ｂｒｓ，１Ｈ），８．４５（ｂｒｓ，１Ｈ），１０．０１（ｓ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１６２４．９［Ｍ＋Ｈ］＋，１６４６．９［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０４６３】
製造例５：化学式ＶＩＩ−１、ＶＩＩ−２、ＶＩＩ−３またはＶＩＩ−４の化合物の製造
【０４６４】
製造例５−１：化合物（ＶＩＩ−５）の製造
【０４６５】
【化１３５】
0006262768.tif 000144
【０４６６】
製造例４−１で得られた化合物（ＶＩ−５）（２９０ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）を、アルゴン気流下、無水ジメチルホルムアミド１０ｍＬに溶かした後、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（３５ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を０℃に冷却した後、ＥＤＣ・ＨＣｌ（５８ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）を加え、常温で１５時間撹拌した。反応完了後、高真空下で減圧濃縮して、得られた残渣をエチルアセテート５０ｍＬに溶解させて、１Ｍ  ＨＣｌ５ｍＬを加え、蒸留水３０ｍＬ、飽和食塩水３０ｍＬで順次に洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮して有機溶媒を除去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、表題化合物（２２６ｍｇ、７３％）を得た。
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ  ｍ／ｚ：１５６２．９［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０４６７】
製造例５−２：化合物（ＶＩＩ−６）の製造
【０４６８】
【化１３６】
0006262768.tif 000145
【０４６９】
製造例４−１で得られた化合物（ＶＩ−５）の代わりに、製造例４−２で得られた化合物（ＶＩ−６）（６０ｍｇ、０．０４１ｍｍｏｌ）を用いて、製造例５−１と同様の方法で表題化合物（５３ｍｇ、８３％）を微白色固体として得た。
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ  ｍ／ｚ：１５８６．７［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０４７０】
製造例５−３：化合物（ＶＩＩ−７）の製造
【０４７１】
【化１３７】
0006262768.tif 000146
【０４７２】
製造例４−１で得られた化合物（ＶＩ−５）の代わりに、製造例４−３で得られた化合物（ＶＩ−７）（５４ｍｇ、０．０３７ｍｍｏｌ）を用いて、製造例５−１と同様の方法で表題化合物（５７ｍｇ、９８％）を微白色固体として得た。
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ  ｍ／ｚ：１６０７．４［Ｍ＋Ｋ］＋
【０４７３】
製造例５−４：化合物（ＶＩＩ−８）の製造
【０４７４】
【化１３８】
0006262768.tif 000147
【０４７５】
製造例４−１で得られた化合物（ＶＩ−５）の代わりに、製造例４−４で得られた化合物（ＶＩ−８）（６６ｍｇ、０．０４４ｍｍｏｌ）を用いて、製造例５−１と同様の方法で表題化合物（５９ｍｇ、８４％）を微白色固体として得た。
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ  ｍ／ｚ：１６１７．０［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０４７６】
製造例５−５：化合物（ＶＩＩ−９）の製造
【０４７７】
【化１３９】
0006262768.tif 000148
【０４７８】
製造例４−１で得られた化合物（ＶＩ−５）の代わりに、製造例４−５で得られた化合物（ＶＩ−９）（７１ｍｇ、０．０４６ｍｍｏｌ）を用いて、製造例５−１と同様の方法で表題化合物（６６ｍｇ、８８％）を微白色固体として得た。
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ  ｍ／ｚ：１６６０．９［Ｍ＋Ｎａ］＋，１６７７．１［Ｍ＋Ｋ］＋
【０４７９】
製造例５−６：化合物（ＶＩＩ−１０）の製造
【０４８０】
【化１４０】
0006262768.tif 000149
【０４８１】
製造例４−１で得られた化合物（ＶＩ−５）の代わりに、製造例４−６で得られた化合物（ＶＩ−１０）（５３ｍｇ、０．０３７ｍｍｏｌ）を用いて、製造例５−１と同様の方法で表題化合物（３８ｍｇ、６７％）を微白色固体として得た。
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ  ｍ／ｚ：１５６５．５［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０４８２】
製造例５−７：化合物（ＶＩＩ−１１）の製造
【０４８３】
【化１４１】
0006262768.tif 000150
【０４８４】
製造例４−１で得られた化合物（ＶＩ−５）の代わりに、製造例４−７で得られた化合物（ＶＩ−１１）（４６ｍｇ、０．０３２ｍｍｏｌ）を用いて、製造例５−１と同様の方法で表題化合物（３０ｍｇ、６１％）を微白色固体として得た。
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ  ｍ／ｚ：１５６８．９［Ｍ＋Ｎａ］＋，１５８５．０［Ｍ＋Ｋ］＋
【０４８５】
製造例５−８：化合物（ＶＩＩ−１２）の製造
【０４８６】
【化１４２】
0006262768.tif 000151
【０４８７】
製造例４−１で得られた化合物（ＶＩ−５）の代わりに、製造例４−８で得られた化合物（ＶＩ−１２）（３８ｍｇ、０．０２５ｍｍｏｌ）を用いて、製造例５−１と同様の方法で表題化合物（３１ｍｇ、７８％）を微白色固体として得た。
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ  ｍ／ｚ：１６４３．７［Ｍ＋Ｎａ］＋，１６６０．２［Ｍ＋Ｋ］＋
【０４８８】
製造例５−９：化合物（ＶＩＩ−１３）の製造
【０４８９】
【化１４３】
0006262768.tif 000152
【０４９０】
製造例４−１で得られた化合物（ＶＩ−５）の代わりに、製造例４−９で得られた化合物（ＶＩ−１３）（３４ｍｇ、０．０２３ｍｍｏｌ）を用いて、製造例５−１と同様の方法で表題化合物（２７ｍｇ、７５％）を微白色固体として得た。
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ  ｍ／ｚ：１６２７．７［Ｍ＋Ｎａ］＋，１６４４．８［Ｍ＋Ｋ］＋
【０４９１】
製造例５−１０：化合物（ＶＩＩ−１４）の製造
【０４９２】
【化１４４】
0006262768.tif 000153
【０４９３】
製造例４−１で得られた化合物（ＶＩ−５）の代わりに、製造例４−１０で得られた化合物（ＶＩ−１４）（２９ｍｇ、０．０１９ｍｍｏｌ）を用いて、製造例５−１と同様の方法で表題化合物（８ｍｇ、２７％）を微白色固体として得た。
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ  ｍ／ｚ：１６２５．４［Ｍ＋Ｎａ］＋，１６４２．０［Ｍ＋Ｋ］＋
【０４９４】
製造例５−１１：化合物（ＶＩＩ−１５）の製造
【０４９５】
【化１４５】
0006262768.tif 000154
【０４９６】
製造例４−１で得られた化合物（ＶＩ−５）の代わりに、製造例４−１１で得られた化合物（ＶＩ−１５）（７７ｍｇ、０．０５２ｍｍｏｌ）を用いて、製造例５−１と同様の方法で表題化合物（３４ｍｇ、４１％）を微白色固体として得た。
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ  ｍ／ｚ：１６０３．８［Ｍ＋Ｎａ］＋，１６２１．２［Ｍ＋Ｋ］＋
【０４９７】
製造例５−１２：化合物（ＶＩＩ−１６）の製造
【０４９８】
【化１４６】
0006262768.tif 000155
【０４９９】
製造例４−１２で得られた化合物（ＶＩ−１６）（６０ｍｇ、０．０３９ｍｍｏｌ）を、アルゴン気流下、無水ジメチルホルムアミド３ｍＬに溶かした後、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（１８．１ｍｇ、０．１５７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を０℃に冷却した後、ＥＤＣ・ＨＣｌ（３０．２ｍｇ、０．１５７ｍｍｏｌ）を加え、常温で１５時間撹拌した。反応完了後、高真空下で減圧濃縮して、得られた残渣をエチルアセテート５０ｍＬに溶解させて、１Ｍ  ＨＣｌ５ｍＬを加え、蒸留水３０ｍＬ、飽和食塩水３０ｍＬで順次に洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥後減圧濃縮して有機溶媒を除去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、表題化合物（３７ｍｇ、５７％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１６２０．８［Ｍ＋］＋，１６４３．７［Ｍ＋Ｎａ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ０．４８（ｍ，２Ｈ），０．６４（ｍ，２Ｈ），０．７１（ｍ，６Ｈ），０．７８−０．８８（ｍ，１７Ｈ），０．９２−０．９７（ｍ，４Ｈ），１．０２−１．０３（ｄ，２Ｈ），１．１６（ｍ，３Ｈ），１．４０−１．４５（ｍ，５Ｈ），１．５０−１．７８（ｍ，４Ｈ），１．８２−２．０１（ｍ，５Ｈ），２．１６（Ｓ，６Ｈ），２．０６−２．２８（ｍ，３Ｈ），２．３９（ｍ，１Ｈ），２．４７（Ｓ，３Ｈ），２．４４−２．５０（ｍ，１Ｈ），２．６０（ｍ，１Ｈ），２．７０（ｍ，１Ｈ），２．７７（Ｓ，３Ｈ），２．８２−２．９４（ｍ，４Ｈ），２．９６−３．００（ｍ，３Ｈ），３．１０−３．１７（ｍ，７Ｈ），３．１８−３．５２（ｍ，１３Ｈ），３．５４−３．７０（ｍ，２Ｈ），３．７６（ｍ，１Ｈ），３．８４−３．９９（ｍ，３Ｈ），４．００−４．１６（ｍ，２Ｈ），４．３３（ｍ，１Ｈ），４．４９（ｔ，１Ｈ），４．５４−４．６８（ｍ，２Ｈ），４．９２（ｍ，２Ｈ），５．３８（ｓ，２Ｈ），５．９５（ｍ，１Ｈ），７．００−７．０６（ｍ，２Ｈ），７．２２−７．２７（ｍ，３Ｈ），７．５０−７．５５（ｍ，２Ｈ），７．７０−７．７８（ｍ，１Ｈ），７．９８−８．０６（ｍ，１Ｈ），９．９５（Ｓ，１Ｈ）
【０５００】
製造例５−１３：化合物（ＶＩＩ−１７）の製造
【０５０１】
【化１４７】
0006262768.tif 000156
【０５０２】
製造例４−１２で得られた化合物（ＶＩ−１６）の代わりに、製造例４−１３で得られた化合物（ＶＩ−１７）（３９ｍｇ、０．０２６ｍｍｏｌ）を用いて、製造例５−１２と同様の方法で表題化合物（３２ｍｇ、７８％）を得た。
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ  ｍ／ｚ：１５９５．８［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０５０３】
製造例５−１４：化合物（ＶＩＩ−１８）の製造
【０５０４】
【化１４８】
0006262768.tif 000157
【０５０５】
製造例４−１２で得られた化合物（ＶＩ−１６）の代わりに、製造例４−１４で得られた化合物（ＶＩ−１８）（２６６ｍｇ、０．１７０ｍｍｏｌ）を用いて、製造例５−１２と同様の方法で表題化合物（３７ｍｇ、５７％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１５９０［Ｍ＋］＋
【０５０６】
製造例５−１５：化合物（ＶＩＩ−１９）の製造
【０５０７】
【化１４９】
0006262768.tif 000158
【０５０８】
製造例４−１２で得られた化合物（ＶＩ−１６）の代わりに、製造例４−１５で得られた化合物（ＶＩ−１９）（２４７ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）を用いて、製造例５−１２と同様の方法で表題化合物（１９７ｍｇ、７７％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１６０７［Ｍ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．５４（ｍ，１Ｈ），０．６５（ｍ，３Ｈ），０．７０−０．７８（ｍ，５Ｈ），０．８０−１．００（ｍ，１８Ｈ），１．００−１．０８（ｍ，６Ｈ），１．２０（ｍ，３Ｈ），１．４７（ｍ，５Ｈ），１．６０（ｍ，２Ｈ），１．９４（ｍ，５Ｈ），２．０８−２．２０（ｍ，３Ｈ），２．２５（ｄ，６Ｈ），２．４０（ｍ，１Ｈ），２．６０（ｓ，６Ｈ），２．７３−３．０２（ｍ，１３Ｈ），２．８４−３．４２（ｍ，１７Ｈ，２＊ＯＣＨ３），３．６０（ｍ，１Ｈ），３．７０（ｍ，１Ｈ），３．８０−４．０６（ｍ，３Ｈ），４．２０（ｔ，２Ｈ），４．３８（ｍ，２Ｈ），４．５３（ｔ，１Ｈ），４．６６（ｍ，２Ｈ），４．７８（ｍ，１Ｈ），４．８８−５．１０（ｍ，３Ｈ），５．４２（ｓ，２Ｈ），６．００（ｍ，１Ｈ），７．０７（ｍ，１Ｈ），７．２７−７．３７（ｍ，３Ｈ），７．５０−７．５８（ｍ，２Ｈ），７．６５−７．８５（ｍ，１Ｈ），８．１０（ｍ，１Ｈ），９．９５（ｓ，１Ｈ）
【０５０９】
製造例５−１６：化合物（ＶＩＩ−２０）の製造
【０５１０】
【化１５０】
0006262768.tif 000159
【０５１１】
製造例４−１２で得られた化合物（ＶＩ−１６）の代わりに、製造例４−１６で得られた化合物（ＶＩ−２０）（３８ｍｇ、０．０２５ｍｍｏｌ）を用いて、製造例５−１２と同様の方法で表題化合物（２５ｍｇ、６２％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１６０３［Ｍ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．４８（ｍ，１Ｈ），０．６２（ｍ，２Ｈ），０．６５−０．７８（ｍ，６Ｈ），０．７１−１．０２（ｍ，２５Ｈ），１．１６（ｍ，２Ｈ），１．３０−１．５２（ｍ，５Ｈ），１．５３−１．８２（ｍ，５Ｈ），１．８３−２．１２（ｍ，５Ｈ），２．１４（ｄ，６Ｈ），２．５４（ｓ，３Ｈ），２．５８−３．０２（ｍ，１４Ｈ），３．１０−３．１６（ｍ，６Ｈ），３．１８−３．２０（ｍ，７Ｈ），３．２８−３．７０（ｍ，１１Ｈ），３．７２−３．８６（ｍ，１Ｈ），３．９０−４．０４（ｍ，１Ｈ），４．０３−４．２９（ｍ，２Ｈ），４．３２（ｍ，１Ｈ），４．４２−４．７８（ｍ，３Ｈ），４．８２−４．９８（ｍ，２Ｈ），５．０６（ｍ，１Ｈ），５．３９（ｓ，２Ｈ），５．９６（ｍ，１Ｈ），６．７８（ｍ，１Ｈ），７．０３−７．２６（ｍ，４Ｈ），７．５８（ｍ，２Ｈ），７．７９（ｄ，１Ｈ），８．００（ｄ，１Ｈ），８．０７（ｄ，１Ｈ），９．９５（Ｓ，１Ｈ）
【０５１２】
製造例５−１７：化合物（ＶＩＩ−２１）の製造
【０５１３】
【化１５１】
0006262768.tif 000160
【０５１４】
製造例４−１２で得られた化合物（ＶＩ−１６）の代わりに、製造例４−１７で得られた化合物（ＶＩ−２１）（１３２ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ）を用いて、製造例５−１２と同様の方法で表題化合物（１３６ｍｇ、９３％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１６１９［Ｍ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．５４（ｍ，１Ｈ），０．６３−０．６８（ｍ，３Ｈ），０．７０−０．８０（ｍ，５Ｈ），０．８１−０．９０（ｍ，１７Ｈ），１．００−１．１．０８（ｍ，８Ｈ），１．２２（ｍ，３Ｈ），１．４０−１．５４（ｍ，６Ｈ），１．５６−１．７４（ｍ，３Ｈ），１．８０−２．００（ｍ，３Ｈ），２．２６−２．３０（ｍ，７Ｈ），２．５１（ｍ，６Ｈ），２．５６（ｓ，１Ｈ），２．６４−３．０４（ｍ，１４Ｈ），３．１３−３．３０（ｍ，６Ｈ），３．３６（ｍ，６Ｈ），３．６２（ｓ，１Ｈ），３．６９（ｓ，２Ｈ），３．８７−４．０４（ｍ，４Ｈ），４．１９（ｔ，２Ｈ０，４．３７（ｍ，２Ｈ），４．５２（ｔ，１Ｈ），４．６２（ｍ，１Ｈ），４．６８（ｍ，１Ｈ），４．７６（ｍ，１Ｈ），４．８９（ｍ，１Ｈ），４．９７９ｍ，２Ｈ），５．０８（ｄ，１Ｈ），５．４２（ｓ，２Ｈ），５．９８（ｍ，１Ｈ），６．８１（ｄ，１Ｈ），７．１７（ｄ，１Ｈ），７．３０（ｍ，１Ｈ），７．６０（ｍ，３Ｈ），７．８２（ｄ，１Ｈ），８．１０（ｍ，１Ｈ），１０．００（ｄ，１Ｈ），
【０５１５】
製造例５−１８：化合物（ＶＩＩ−２２）の製造
【０５１６】
【化１５２】
0006262768.tif 000161
【０５１７】
製造例４−１２で得られた化合物（ＶＩ−１６）の代わりに、製造例４−１８で得られた化合物（ＶＩ−２２）（２９６ｍｇ、０．１９８ｍｍｏｌ）を用いて、製造例５−１２と同様の方法で表題化合物（１３２ｍｇ、８３％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１５８９［Ｍ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．４８（ｍ，１Ｈ），０．６０（ｍ，２Ｈ），０．７１（ｍ，５Ｈ），０．７１−０．８８（ｍ，１７Ｈ），０．９８（ｄ，３Ｈ），０．９３−１．０８（ｍ，３Ｈ），１．１６（ｍ，３Ｈ），１．３７−１．４５（ｍ，５Ｈ），１．５０−１．８６（ｍ，４Ｈ），１．９１（ｍ，３Ｈ），２．０−２．４２（ｍ，１１Ｈ），２．６８（ｍ，１Ｈ），２．７７（Ｓ，３Ｈ），２．８２−３．０２（ｍ，５Ｈ），３．１０−３．１９（ｍ，６Ｈ），３．２１−３．３０（ｍ，７Ｈ），３．３６−３．５０（ｍ，１６Ｈ），３．５４−３．７２（ｍ，３Ｈ），３．８０−４．００（ｍ，４Ｈ），４．１５（ｔ，１Ｈ），４．３３（ｍ，１Ｈ），４．４９−４．７１（ｍ，３Ｈ），４．８６（ｍ，２Ｈ），５．０４（ｍ，１Ｈ），５．３９（ｓ，２Ｈ），５．９６（ｍ，１Ｈ），７．０３−７．２１（ｍ，５Ｈ），７．５５（ｍ，２Ｈ），７．７９（ｄ，１Ｈ），８．０６（ｄ，１Ｈ）９．９５（Ｓ，１Ｈ）
【０５１８】
製造例５−１９：化合物（ＶＩＩ−２３）の製造
【０５１９】
【化１５３】
0006262768.tif 000162
【０５２０】
製造例４−１９で得られた化合物（ＶＩ−２３）（３３．４ｍｇ、０．０２２ｍｍｏｌ）を、アルゴン気流下、無水ジメチルホルムアミド３ｍＬに溶かした後、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（７．７ｍｇ、０．０６６ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を０℃に冷却した後、ＥＤＣ・ＨＣｌ（１２．８ｍｇ、０．０６６ｍｍｏｌ）を加え、常温で１５時間撹拌した。反応完了後、高真空下で減圧濃縮して、得られた残渣をエチルアセテート５０ｍＬに溶解させ、１Ｍ  ＨＣｌ５ｍＬを加えて、蒸留水３０ｍＬ、飽和食塩水３０ｍＬで順次に洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮して有機溶媒を除去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、表題化合物（３２ｍｇ、９１％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１５９６［Ｍ＋］＋，１６１９［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０５２１】
製造例５−２０：化合物（ＶＩＩ−２４）の製造
【０５２２】
【化１５４】
0006262768.tif 000163
【０５２３】
製造例４−１９で得られた化合物（ＶＩ−２３）の代わりに、製造例４−２０で得られた化合物（ＶＩ−２４）（５５ｍｇ、０．０３７ｍｍｏｌ）を用いて、製造例５−１９と同様の方法で表題化合物（４９ｍｇ、８４％）を微白色固体として得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１６０６［Ｍ＋］＋
【０５２４】
製造例５−２１：化合物（ＶＩＩ−２５）の製造
【０５２５】
【化１５５】
0006262768.tif 000164
【０５２６】
製造例４−１９で得られた化合物（ＶＩ−２３）の代わりに、製造例４−２１で得られた化合物（ＶＩ−２５）（６５ｍｇ、０．０４３ｍｍｏｌ）を用いて、製造例５−１９と同様の方法で表題化合物（５６ｍｇ、８２％）を微白色固体として得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１５９２［Ｍ＋］＋
【０５２７】
製造例５−２２：化合物（ＶＩＩ−２６）の製造
【０５２８】
【化１５６】
0006262768.tif 000165
【０５２９】
製造例４−１９で得られた化合物（ＶＩ−２３）の代わりに、製造例４−２２で得られた化合物（ＶＩ−２６）（１１４ｍｇ、０．０７５ｍｍｏｌ）を用いて、製造例５−１９と同様の方法で表題化合物（９４ｍｇ、７８％）を微白色固体として得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１６０９［Ｍ＋］＋
【０５３０】
製造例５−２３：化合物（ＶＩＩ−２７）の製造
【０５３１】
【化１５７】
0006262768.tif 000166
【０５３２】
製造例４−１９で得られた化合物（ＶＩ−２３）の代わりに、製造例４−２３で得られた化合物（ＶＩ−２７）（９１ｍｇ、０．０５９７ｍｍｏｌ）を用いて、製造例５−１９と同様の方法で表題化合物（２５ｍｇ、２５％）を微白色固体として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．５１−０．５３（ｍ，１Ｈ），０．６２−０．７１（ｍ，７Ｈ），０．７８−０．８７（ｍ，１２Ｈ），１．０５−１．１７（ｍ，４Ｈ），１．３８−１．４３（ｍ，４Ｈ），１．８４−１．９８（ｍ，３Ｈ），２．１０−２．１４（ｍ，５Ｈ），２．７９−３．０４（ｍ，１０Ｈ），３．０９−３．１３（ｍ，３Ｈ），３．２５−３．３６（ｍ，１０Ｈ），３．３８−３．４９（ｍ，１９Ｈ），３．８７−３．８９（ｍ，４Ｈ），３．９８−４．００（ｍ，２Ｈ），４．１２−４．９９（ｍ，８Ｈ），５．０５（ｓ，２Ｈ），５．３９（ｓ，２Ｈ），６．００−６．０３（ｔ，１Ｈ），７．２３−７．３１（ｍ，３Ｈ），７．５６−７．５８（ｄ，２Ｈ），７．７２−７．８０（ｍ，３Ｈ），８．０６−８．０８（ｄ，２Ｈ），８．１６−８．４１（ｍ，１Ｈ），１０．０１（ｓ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１６２１．５［Ｍ＋］＋
【０５３３】
製造例５−２４：化合物（ＶＩＩ−２８）の製造
【０５３４】
【化１５８】
0006262768.tif 000167
【０５３５】
製造例４−１９で得られた化合物（ＶＩ−２３）の代わりに、製造例４−２４で得られた化合物（ＶＩ−２８）（６０ｍｇ、０．０３９９ｍｍｏｌ）を用いて、製造例５−１９と同様の方法で表題化合物（１４ｍｇ、２３％）を微白色固体として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．５１−０．５３（ｍ，１Ｈ），０．６２−０．７１（ｍ，７Ｈ），０．７８−０．８７（ｍ，１２Ｈ），１．０５−１．１７（ｍ，４Ｈ），１．３８−１．４３（ｍ，４Ｈ），１．８４−１．９８（ｍ，３Ｈ），２．１４−２．１５（ｍ，７Ｈ），２．２４−２．３３（ｍ，６Ｈ），２．７９−３．０４（ｍ，１０Ｈ），３．０９−３．１３（ｍ，３Ｈ），３．２５−３．３６（ｍ，１０Ｈ），３．３８−３．４９（ｍ，１９Ｈ），３．８７−３．８９（ｍ，４Ｈ），３．９８−４．００（ｍ，２Ｈ），４．１２−４．９９（ｍ，８Ｈ），５．０５（ｓ，２Ｈ），５．３９（ｓ，２Ｈ），５．９７（ｔ，１Ｈ），７．０２−７．１１（ｍ，２Ｈ），７．２８−７．２９（ｍ，１Ｈ），７．５７−７．６５（ｄ，２Ｈ），７．８８−７．９８（ｍ，１Ｈ），８．０７−８．０８（ｍ，１Ｈ），８．２２−８．４４（ｍ，１Ｈ），１０．００（ｓ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１６０１．７［Ｍ＋］＋
【０５３６】
製造例５−２５：化合物（ＶＩＩ−２９）の製造
【０５３７】
【化１５９】
0006262768.tif 000168
【０５３８】
製造例４−１９で得られた化合物（ＶＩ−２３）の代わりに、製造例４−２５で得られた化合物（ＶＩ−２９）（８３ｍｇ、０．０５３ｍｍｏｌ）を用いて、製造例５−１９と同様の方法で表題化合物（２３ｍｇ、２５％）を微白色固体として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．５１−０．５３（ｍ，２Ｈ），０．６２−０．７１（ｍ，５Ｈ），０．７８−０．８７（ｍ，９Ｈ），１．０５−１．１７（ｍ，４Ｈ），１．３８−１．４３（ｍ，４Ｈ），１．８４−１．９８（ｍ，３Ｈ），２．１４−２．１５（ｍ，４Ｈ），２．７９−３．０４（ｍ，１０Ｈ），３．０９−３．１３（ｍ，３Ｈ），３．２５−３．３６（ｍ，１０Ｈ），３．３８−３．４９（ｍ，１９Ｈ），３．８７−３．８９（ｍ，４Ｈ），３．９８−４．００（ｍ，２Ｈ），４．１２−４．９９（ｍ，８Ｈ），５．０５（ｓ，２Ｈ），５．３９（ｓ，２Ｈ），５．９７（ｔ，１Ｈ），７．１８−７．２４（ｍ，１Ｈ），７．２９−７．３７（ｍ，２Ｈ），７．５７−７．５８（ｍ，１Ｈ），７．７８−８．０７（ｍ，５Ｈ），８．２２−８．４６（ｍ，１Ｈ），８．５８（ｓ，１Ｈ），１０．０２（ｓ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１６５３．４［Ｍ＋］＋
【０５３９】
製造例５−２６：化合物（ＶＩＩ−３０）の製造
【０５４０】
【化１６０】
0006262768.tif 000169
【０５４１】
製造例４−１９で得られた化合物（ＶＩ−２３）の代わりに、製造例４−２６で得られた化合物（ＶＩ−３０）（０．４８ｇ、０．３１ｍｍｏｌ）を用いて、製造例５−１９と同様の方法で表題化合物（０．４４ｇ、８６％）を微白色固体として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．４４−０．５４（ｍ，１Ｈ），０．５５−０．７５（ｍ，１０Ｈ），０．７５−０．９６（ｍ，１７Ｈ），０．９６−１．０４（ｍ，１Ｈ），１．０４−１．２５（ｍ，６Ｈ），１．２７  １．５１（ｍ，６Ｈ），１．５１  １．８２（ｍ，３Ｈ），１．８２  ２．０２（ｍ，３Ｈ），２．０２−２．２１（ｍ，６Ｈ），２．２１−２．３６（ｍ，３Ｈ），２．５２−２．６４（ｍ，１Ｈ），２．６５−２．７５（ｍ，４Ｈ），２．７５−２．８０（ｍ，５Ｈ），２．８０−２．８４（ｍ，２Ｈ），２．８４−２．９３（ｍ，４Ｈ），２．９３−３．０６（ｍ，４Ｈ），３．０６−３．２２（ｍ，４Ｈ），３．２５−３．２８（ｍ，３Ｈ），３．３８−３．４６（ｍ，２Ｈ），３．４８−３．６４（ｍ，１Ｈ），３．７１−３．８６（ｍ，７Ｈ），３．８６−４．０４（ｍ，４Ｈ），４．０４−４．２１（ｍ，２Ｈ），４．２１−４．３１（ｍ，１Ｈ），４．３１−４．４４（ｍ，２Ｈ），４．４４−４．５６（ｍ，１Ｈ），４．５６−４．７１（ｍ，２Ｈ），４．７１−４．８７（ｍ，１Ｈ），４．９３（ｓ，２Ｈ），５．３８（ｓ，２Ｈ），５．８７−６．０１（ｔ，１Ｈ），６．９５−７．０９（ｄ，１Ｈ），７．１８−７．３３（ｍ，２Ｈ），７．３７−７．５４（ｍ，１Ｈ），７．５４−７．６８（ｍ，３Ｈ），７．７１−７．８５（ｄ，１Ｈ），８．０２−８．１２（ｄ，１Ｈ），９．９６（ｂｒｓ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１６３３［Ｍ＋］＋
【０５４２】
製造例５−２７：化合物（ＶＩＩ−３１）の製造
【０５４３】
【化１６１】
0006262768.tif 000170
【０５４４】
製造例４−１９で得られた化合物（ＶＩ−２３）の代わりに、製造例４−２７で得られた化合物（ＶＩ−３１）（０．１８ｇ、０．１２ｍｍｏｌ）を用いて、製造例５−１９と同様の方法で表題化合物（０．１３ｇ、６８％）を微白色固体として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．３８−０．５９（ｍ，８Ｈ），０．６０−０．７９（ｍ，８Ｈ），０．７９−０．９８（ｍ，１６Ｈ），１．０５−１．３６（ｍ，７Ｈ），１．３６−１．５２（ｍ，６Ｈ），１．５４−１．８６（ｍ，５Ｈ），１．８６−２．０２（ｍ，３Ｈ），２．０４−２．２８（ｍ，１０Ｈ），２．２８−２．４４（ｍ，３Ｈ），２．５９−２．６８（ｍ，１Ｈ），２．６９−２．８６（ｍ，６Ｈ），２．８６−３．０９（ｍ，８Ｈ），３．１０−３．２５（ｍ，６Ｈ），３．２５−３．４３（ｍ，３Ｈ），３．７１−３．８６（ｍ，１Ｈ），３．８８−４．０７（ｍ，２Ｈ），４．０７−４．２６（ｍ，２Ｈ），４．３１−４．４３（ｍ，１Ｈ），４．４８−４．７４（ｍ，２Ｈ），４．７４−４．９０（ｍ，１Ｈ），４．９７（ｓ，２Ｈ），５．４１（ｍ，２Ｈ），５．８６−６．１３（ｔ，１Ｈ），７．１６−７．４３（ｍ，２Ｈ），７．４３−７．５５（ｍ，１Ｈ），７．５６−７．７５（ｍ，２Ｈ），７．７５−７．９２（ｍ，１Ｈ），７．９２−８．２１（ｍ，４Ｈ），８．２１−８．４４（ｍ，１Ｈ），８．４４−８．６６（ｍ，１Ｈ），８．７２（ｓ，１Ｈ），９．３８−９．８２（ｂｒｓ，１Ｈ），１０．０１（ｂｒｓ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１６２２［Ｍ＋］＋
【０５４５】
製造例５−２８：化合物（ＶＩＩ−３２）の製造
【０５４６】
【化１６２】
0006262768.tif 000171
【０５４７】
製造例４−１９で得られた化合物（ＶＩ−２３）の代わりに、製造例４−２８で得られた化合物（ＶＩ−３２）（０．２１ｇ、０．１４ｍｍｏｌ）を用いて、製造例５−１９と同様の方法で表題化合物（０．１９ｇ、８８％）を微白色固体として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．４３−０．５９（ｍ，２Ｈ），０．５９−０．７８（ｍ，８Ｈ），０．７９−１．００（ｍ，１６Ｈ），１．００−１．０８（ｍ，３Ｈ），１．０８−１．２９（ｍ，５Ｈ），１．２９−１．６４（ｍ，９Ｈ），１．６４−１．７３（ｍ，３Ｈ），１．７４−２．０４（ｍ，４Ｈ），２．０４−２．４４（ｍ，１０Ｈ），２．５６−２．６４（ｍ，２Ｈ），２．６５−２．９２（ｍ，１２Ｈ），２．９２−３．０８（ｍ，６Ｈ），３．０８−３．２３（ｍ，５Ｈ），３．２３−３．３２（ｍ，３Ｈ），３．４２−３．５４（ｍ，１Ｈ），３．５５−３．６４（ｍ，１Ｈ），３．６８−３．８８（ｍ，３Ｈ），３．８８−４．０６（ｍ，２Ｈ），４．０６−４．２６（ｍ，２Ｈ），４．２６−４．４６（ｍ，２Ｈ），４．４６−４．７１（ｍ，２Ｈ），４．７４−４．８８（ｍ，１Ｈ），４．９６（ｓ，２Ｈ），５．４１（ｓ，２Ｈ），５．９０−６．０８（ｔ，１Ｈ），６．７４−７．０４（ｍ，１Ｈ），７．１０−７．３８（ｍ，３Ｈ），７．３８−７．６８（ｍ，４Ｈ），７．７２−７．８８（ｄ，１Ｈ），８．０１−８．１８（ｄ，１Ｈ），８．１８−８．３５（ｍ，１Ｈ），１０．００（ｂｒｓ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１６０２［Ｍ＋］＋
【０５４８】
製造例５−２９：化合物（ＶＩＩ−３３）の製造
【０５４９】
【化１６３】
0006262768.tif 000172
【０５５０】
製造例４−１９で得られた化合物（ＶＩ−２３）の代わりに、製造例４−２９で得られた化合物（ＶＩ−３３）（０．２６ｇ、０．１７ｍｍｏｌ）を用いて、製造例５−１９と同様の方法で表題化合物（０．１４ｇ、５２％）を微白色固体として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．５３−０．９４（ｍ，２８Ｈ），０．９５−１．２８（ｍ，９Ｈ），１．２８−１．７４（ｍ，１８Ｈ），１．７６−２．２５（ｍ，１３Ｈ），２．２７−２．４３（ｍ，１Ｈ），２．５４−２．８４（ｍ，１６Ｈ），２．８４−３．０３（ｍ，５Ｈ），３．０３−３．２１（ｍ，７Ｈ），３．６０−３．８２（ｍ，２Ｈ），３．８２−４．００（ｍ，３Ｈ），４．０５−４．２４（ｍ，１Ｈ），４．２９−４．４５（ｍ，１Ｈ），４．４５−４．７８（ｍ，２Ｈ），５．０１（ｓ，２Ｈ），５．３９（ｓ，２Ｈ），５．９０−６．０９（ｔ，１Ｈ），６．９７（ｂｒｓ，２Ｈ），７．０９−７．４３（ｍ，２Ｈ），７．４３−７．７０（ｍ，２Ｈ），７．７０−７．８７（ｍ，１Ｈ），８．００−７．３３（ｍ，２Ｈ），１０．０１（ｂｒｓ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１６１０［Ｍ＋］＋
【０５５１】
製造例５−３０：化合物（ＶＩＩ−３４）の製造
【０５５２】
【化１６４】
0006262768.tif 000173
【０５５３】
製造例４−３０で得られた化合物（ＶＩ−３４）（２５ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌ）を、アルゴン気流下、無水ジメチルホルムアミド３ｍＬに溶かした後、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（７．２ｍｇ、０．０６２ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を０℃に冷却した後、ＥＤＣ・ＨＣｌ（１１．９ｍｇ、０．０６２ｍｍｏｌ）を加え、常温で１５時間撹拌した。反応完了後、高真空下で減圧濃縮して、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、表題化合物（２０ｍｇ、７６％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１７０６．９［Ｍ＋Ｈ］＋，１７２８．９［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０５５４】
製造例５−３１：化合物（ＶＩＩ−３５）の製造
【０５５５】
【化１６５】
0006262768.tif 000174
【０５５６】
製造例４−３０で得られた化合物（ＶＩ−３４）の代わりに、製造例４−３１で得られた化合物（ＶＩ−３５）（０．０７４ｇ、０．０４５２ｍｍｏｌ）を用いて、製造例５−３０と同様の方法で表題化合物（０．０４９ｇ、６２．４％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．５１−０．５３（ｍ，１Ｈ），０．６３−０．７６（ｍ，１２Ｈ），０．８１−０．８６（ｍ，１８Ｈ），１．０２−１．０４（ｄ，４Ｈ），１．１１−１．１４（ｍ，４Ｈ），１．１８−１．２２（ｍ，２Ｈ），１．４２−１．４９（ｍ，６Ｈ），１．９４−１．９７（ｍ，３Ｈ），２．１８−２．１９（ｍ，６Ｈ），２．７３  ２．８９（ｍ，１３Ｈ），２．９３−２．９９（ｍ，５Ｈ），３．１４−３．２１（ｍ，５Ｈ），３．３１−３．３９（ｍ，１７Ｈ），３．９１−４．０３（ｍ，５Ｈ），４．１４−４．８５（ｍ，８Ｈ），４．９８（ｓ，２Ｈ），５．４２（ｓ，２Ｈ），５．９６−５．９８（ｔ，１Ｈ），７．２７−７．３０（ｍ，３Ｈ），７．５８−７．５９（ｄ，２Ｈ），７．７７−７．８７（ｍ，２Ｈ），７．９４−８．０３（ｍ，２Ｈ），８．０８−８．１１（ｄ，１Ｈ），８．４６（ｂｒｓ，１Ｈ），１０．０１（ｓ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１７３５．４［Ｍ＋Ｈ］＋，１７５８．４［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０５５７】
製造例５−３２：化合物（ＶＩＩ−３６）の製造
【０５５８】
【化１６６】
0006262768.tif 000175
【０５５９】
製造例４−３０で得られた化合物（ＶＩ−３４）の代わりに、製造例４−３２で得られた化合物（ＶＩ−３６）（０．１１ｇ、０．０６６４ｍｍｏｌ）を用いて、製造例５−３０と同様の方法で表題化合物（０．０７９ｇ、６９．６％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．５１−０．５３（ｍ，１Ｈ），０．６３−０．７６（ｍ，７Ｈ），０．８２−０．９２（ｍ，１２Ｈ），１．０２−１．０４（ｄ，１Ｈ），１．０９−１．２４（ｍ，７Ｈ），１．４２−１．４９（ｍ，８Ｈ），１．９１−１．９９（ｍ，４Ｈ），２．１１−２．１９（ｍ，８Ｈ），２．８１−２．８３（ｍ，１０Ｈ），２．９９−３．１４（ｍ，６Ｈ），３．１７−．２１（ｍ，５Ｈ），３．３２−３．３５（ｍ，２０Ｈ），３．９２−３．９３（ｍ，４Ｈ），３．９７−４．０４（ｍ，２Ｈ），４．１３−４．８５（ｍ，８Ｈ），４．９４（ｓ，２Ｈ），５．４３（ｓ，２Ｈ），６．００−６．０３（ｔ，１Ｈ），７．２７−７．３２（ｍ，５Ｈ），７．５８−７．６１（ｄ，２Ｈ），７．７７−７．９６（ｍ，３Ｈ），８．１０−８．１２（ｍ，１Ｈ），８．４７（ｂｒｓ，１Ｈ），１０．０２（ｓ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１７０８．４［Ｍ＋Ｈ］＋，１７３０．４［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０５６０】
製造例５−３３：化合物（ＶＩＩ−３７）の製造
【０５６１】
【化１６７】
0006262768.tif 000176
【０５６２】
製造例４−３０で得られた化合物（ＶＩ−３４）の代わりに、製造例４−３３で得られた化合物（ＶＩ−３７）（０．１６ｇ、０．０９６ｍｍｏｌ）を用いて、製造例５−３０と同様の方法で表題化合物（０．１２ｇ、７１％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．５１−０．５３（ｍ，１Ｈ），０．７０−０．７５（ｍ，８Ｈ），０．８２−０．８７（ｍ，１４Ｈ），１．０３−１．０５（ｍ，４Ｈ），１．０８−１．１４（ｍ，１Ｈ），１．１８−１．２３（ｍ，４Ｈ），１．４４−１．４９（ｍ，７Ｈ），２．０８−２．２０（ｍ，１０Ｈ），２．２８−２．３７（ｍ，８Ｈ），２．７７−２．８９（ｍ，１３Ｈ），２．９３−３．００（ｍ，６Ｈ），３．１４−３．２０（ｍ，５Ｈ），３．２８（ｓ，３Ｈ），３．３２−３．３４（ｍ，１８Ｈ），３．８８−４．０４（ｍ，４Ｈ），４．０８−４．８７（ｍ，８Ｈ），４．９７（ｓ，２Ｈ），５．４２（ｓ，２Ｈ），５．９９−６．００（ｔ，１Ｈ），７．０５−７．１５（ｍ，２Ｈ），７．２８−７．３０（ｍ，２Ｈ），７．５９−７．６９（ｍ，２Ｈ），７．８０−７．８３（ｄ，１Ｈ），７．９７−８．０５（ｍ，１Ｈ），８．１０−８．１１（ｍ，１Ｈ），８．２３−８．２８（ｍ，１Ｈ），８．４９（ｂｒｓ，１Ｈ），１０．０２（ｓ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１７１６．５［Ｍ＋Ｈ］＋，１７４０．５［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０５６３】
製造例５−３４：化合物（ＶＩＩ−３８）の製造
【０５６４】
【化１６８】
0006262768.tif 000177
【０５６５】
製造例４−３０で得られた化合物（ＶＩ−３４）の代わりに、製造例４−３４で得られた化合物（ＶＩ−３８）（０．１５ｇ、０．０９３ｍｍｏｌ）を用いて、製造例５−３０と同様の方法で表題化合物（０．１ｇ、６７％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．５１−０．５３（ｍ，１Ｈ），０．６３−０．６６（ｍ，３Ｈ），０．６９−０．７６（ｍ，８Ｈ），０．８２−０．９２（ｍ，１４Ｈ），１．０３−１．０５（ｍ，２Ｈ），１．１１−１．１２（ｍ，１Ｈ），１．１８−１．２４（ｍ，３Ｈ），１．４４−１．４９（ｍ，７Ｈ），２．１３−２．２０（ｍ，９Ｈ），２．２８−２．３７（ｍ，７Ｈ），２．７３−２．８９（ｍ，７Ｈ），２．９３−３．０３（ｍ，９Ｈ），３．１５−３．１９（ｍ，５Ｈ），３．２８（ｓ，３Ｈ），３．３１−３．３５（ｍ，１５Ｈ），３．８５−３．８７（ｍ，１Ｈ），３．９５−４．０４（ｍ，３Ｈ），４．１６−４．８８（ｍ，８Ｈ），４．９４（ｓ，２Ｈ），５．４２（ｓ，２Ｈ），５．９９−６．０２（ｔ，１Ｈ），７．０６−７．１５（ｍ，２Ｈ），７．２７−７．２９（ｍ，４Ｈ），７．５８−７．６３（ｍ，３Ｈ），７．８１−７．８３（ｄ，１Ｈ），７．８７−８．０４（ｍ，１Ｈ），８．１０−８．１１（ｄ，１Ｈ），８．３０−８．５０（ｍ，１Ｈ），１０．０２（ｓ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１６８７．６［Ｍ＋Ｈ］＋，１７０９．５［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０５６６】
製造例５−３５：化合物（ＶＩＩ−３９）の製造
【０５６７】
【化１６９】
0006262768.tif 000178
【０５６８】
製造例４−３０で得られた化合物（ＶＩ−３４）の代わりに、製造例４−３５で得られた化合物（ＶＩ−３９）（０．１２ｇ、０．０７３ｍｍｏｌ）を用いて、製造例５−３０と同様の方法で表題化合物（０．０５８ｇ、４６％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．４８−０．５３（ｍ，１Ｈ），０．５８−０．５９（ｍ，１Ｈ），０．６４−０．７６（ｍ，８Ｈ），０．８２−０．９２（ｍ，１５Ｈ），１．０３−１．０４（ｄ，２Ｈ），１．１１−１．２２（ｍ，６Ｈ），１．４２−１．４９（ｍ，６Ｈ），１．８６−１．９７（ｍ，３Ｈ），２．１１−２．２０（ｍ，９Ｈ），２．７３−２．９５（ｍ，１０Ｈ），２．９８−３．１３（ｍ，６Ｈ），３．１４−３．２１（ｍ，５Ｈ），３．３３−３．３７（ｍ，２Ｈ），３．９０−３．９２（ｍ，４Ｈ），３．９８−４．０４（ｍ，２Ｈ），４．１４−４．８０（ｍ，８Ｈ），４．９４（ｓ，２Ｈ），５．４２（ｓ，２Ｈ），６．００−６．０１（ｔ，１Ｈ），７．２２−７．２９（ｍ，４Ｈ），７．３８−７．４２（ｄ，１Ｈ），７．５９−７．６１（ｄ，２Ｈ），７．８１−７．８３（ｄ，１Ｈ），７．８９−７．９６（ｍ，２Ｈ），８．００−８．０３（ｄ，１Ｈ），８．０９−８．１２（ｄ，１Ｈ），８．２８−８．５１（ｍ，１Ｈ），８．６４（ｓ，１Ｈ），１０．０２（ｓ，１Ｈ），
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１７４０．４［Ｍ＋Ｈ］＋，１７６２．３［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０５６９】
製造例５−３６：化合物（ＶＩＩ−４０）の製造
【０５７０】
【化１７０】
0006262768.tif 000179
【０５７１】
製造例４−３０で得られた化合物（ＶＩ−３４）の代わりに、製造例４−３６で得られた化合物（ＶＩ−４０）（０．１ｇ、０．０６３ｍｍｏｌ）を用いて、製造例５−３０と同様の方法で表題化合物（０．０７２ｇ、６８％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．５１−０．５３（ｍ，１Ｈ），０．６２−０．６９（ｍ，２Ｈ），０．７０−０．７７（ｍ，７Ｈ），０．８２−０．８９（ｍ，１８Ｈ），１．０２−０．０７（ｍ，３Ｈ），１．１８−１．２９（ｍ，３Ｈ），１．４４−１．４７（ｍ，６Ｈ），２．１９−２．２１（ｍ，１０Ｈ），２．６１−２．６４（ｍ，２Ｈ），２．７４−３．００（ｍ，１０Ｈ），３．１７−３．１８（ｍ，７Ｈ），３．２５−３．３３（ｍ，２５Ｈ），３．９０−４．０１（ｍ，５Ｈ），４．１６−４．８４（ｍ，８Ｈ），４．９５（ｓ，２Ｈ），５．４０（ｓ，２Ｈ），６．０１−６．０２（ｔ，１Ｈ），７．０１−７．０５（ｍ，２Ｈ），７．２６−７．２９（ｍ，４Ｈ），７．５８−７．６０（ｄ，２Ｈ），７．７９−７．８２（ｍ，１Ｈ），７．９４−７．９９（ｍ，２Ｈ），８．０８−８．１０（ｍ，１Ｈ），１０．００（ｓ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１６９７．２［Ｍ＋Ｈ］＋，１７１９．１［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０５７２】
製造例５−３７：化合物（ＶＩＩ−４１）の製造
【０５７３】
【化１７１】
0006262768.tif 000180
【０５７４】
製造例４−３０で得られた化合物（ＶＩ−３４）の代わりに、製造例４−３７で得られた化合物（ＶＩ−４１）（０．０６２ｇ、０．０３８ｍｍｏｌ）を用いて、製造例５−３０と同様の方法で表題化合物（０．０３７ｇ、５６％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．５１−０．５３（ｍ，１Ｈ），０．６３−０．７７（ｍ，１３Ｈ），０．８１−０．９１（ｍ，１７Ｈ），１．０３−１．０４（ｄ，２Ｈ），１．０９−１．２２（ｍ，６Ｈ），１．４２−１．４９（ｍ，６Ｈ），１．９５−１．９７（ｍ，３Ｈ），２．１１−２．１９（ｍ，７Ｈ），２．７７−２．８９（ｍ，１３Ｈ），３．１３−３．１７（ｍ，７Ｈ），３．３２−３．３６（ｍ，１８Ｈ），３．９２−３．９３（ｍ，４Ｈ），４．００−４．０４（ｍ，２Ｈ），４．１４−４．８５（ｍ，８Ｈ），４．９９（ｓ，２Ｈ），５．４２（ｓ，２Ｈ），５．８８−６．００（ｔ，１Ｈ），７．２８−７．４１（ｍ，４Ｈ），７．５８−７．６５（ｄ，２Ｈ），７．７７−８．０６（ｍ，４Ｈ），８．１０−８．１１（ｄ，１Ｈ），８．２１−８．４５（ｍ，１Ｈ），１０．００（ｓ，１Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１７２２．５［Ｍ＋Ｈ］＋，１７４４．３［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０５７５】
実施例：化学式Ｉ−１、Ｉ−２、Ｉ−３またはＩ−４の抗体−リンカー−薬物結合体の製造
【０５７６】
実施例１：結合体（Ｉ−５）の製造
【０５７７】
【化１７２】
0006262768.tif 000181
【０５７８】
ｐＨ７．５のＰＢＳ（１０ｍＭ  ｐｈｏｓｐｈａｔｅ、１３７ｍＭ  ＮａＣｌ、２．７ｍＭ  ＫＣｌを含む）で交換処理されたトラスツズマブ（ハーセプチン）溶液５ｍＬ（４．０ｇ／ｍＬ、２７μＭ）に、追加的にｐＨ７．５のＰＢＳ２．５ｍｌとｐＨ８．５の０．０５Ｍソジウムボレートバッファー７．５ｍＬを加え、２０％ＤＭＳＯ３．７５ｍＬに溶解した製造例５−１で得られた化合物（ＶＩＩ−５）（２ｍｇ、０．００１ｍｍｏｌ、１０当量）を加えた後、２５℃で４時間撹拌した。反応が終了すると、反応混合物を０．４５μｍの濾過器で濾過し、濾液を遠心濾過器（ｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｌ  ｆｉｌｔｅｒ、Ａｍｉｃｏｎ  Ｕｌｔｒａ−１５  ３０Ｋ）に入れて、有機溶媒と未反応物質が除去されるまで、ｐＨ７．５のＰＢＳをさらに加えて２−３回繰り返し濃縮した。濃縮液を、ｐＨ７．５のＰＢＳ中に平衡化させたＳｅｐｈａｄｅｘ  Ｇ−２５樹脂充填カラム（３０ｘ３００ｍｍ）を用いてＭＰＬＣ（２８０ｎｍ、ＵＶ  ｒａｎｇｅ０．０８、ｆｌｏｗ  ｒａｔｅ１０ｍＬ／ｍｉｎ）で分離精製して、表題化合物１３．５ｍｇ（１．２８ｍｇ／ｍＬ、総体積１０．５ｍＬ、６８％）を得た。この時、得られた化合物の濃度は、ＵＶ分光計で３つの波長（２８０ｎｍ、３２０ｎｍ、３５０ｎｍ）それぞれにおける吸光度を測定して決定した。
【０５７９】
実施例２：結合体（Ｉ−６）の製造
【０５８０】
【化１７３】
0006262768.tif 000182
【０５８１】
製造例５−１で得られた化合物（ＶＩＩ−５）の代わりに、製造例５−２で得られた化合物（ＶＩＩ−６）（４．２ｍｇ、０．００３ｍｍｏｌ、１５当量）を用いて、実施例１と同様の方法で表題化合物１２．１ｍｇ（１．１ｍｇ／ｍＬ、総体積１１ｍＬ、４５％）を得た。
【０５８２】
実施例３：結合体（Ｉ−７）の製造
【０５８３】
【化１７４】
0006262768.tif 000183
【０５８４】
製造例５−１で得られた化合物（ＶＩＩ−５）の代わりに、製造例５−３で得られた化合物（ＶＩＩ−７）（３．１２ｍｇ、０．００２ｍｍｏｌ、１５当量）を用いて、実施例１と同様の方法で表題化合物１３．７ｍｇ（１．７１ｍｇ／ｍＬ、総体積８ｍＬ、６８％）を得た。
【０５８５】
実施例４：結合体（Ｉ−８）の製造
【０５８６】
製造例５−１で得られた化合物（ＶＩＩ−５）の代わりに、製造例５−４で得られた化合物（ＶＩＩ−８）（３．２０ｍｇ、０．００２ｍｍｏｌ、１５当量）を用いて、実施例１と同様の方法で表題化合物１３．９ｍｇ（１．５４ｍｇ／ｍＬ、総体積９ｍＬ、６８％）を得た。
【０５８７】
実施例５：結合体（Ｉ−９）の製造
【０５８８】
製造例５−１で得られた化合物（ＶＩＩ−５）の代わりに、製造例５−５で得られた化合物（ＶＩＩ−９）（３．２７ｍｇ、０．００２ｍｍｏｌ、１５当量）を用いて、実施例１と同様の方法で表題化合物１５．３ｍｇ（１．５３ｍｇ／ｍＬ、総体積１０ｍＬ、７７％）を得た。
【０５８９】
実施例６：結合体（Ｉ−１０）の製造
【０５９０】
【化１７５】
0006262768.tif 000184
【０５９１】
製造例５−１で得られた化合物（ＶＩＩ−５）の代わりに、製造例５−６で得られた化合物（ＶＩＩ−１０）（４．１７ｍｇ、０．００３ｍｍｏｌ、１５当量）を用いて、実施例１と同様の方法で表題化合物１４．２ｍｇ（１．２９ｍｇ／ｍＬ、総体積１１ｍＬ、５３％）を得た。
【０５９２】
実施例７：結合体（Ｉ−１１）の製造
【０５９３】
【化１７６】
0006262768.tif 000185
【０５９４】
製造例５−１で得られた化合物（ＶＩＩ−５）の代わりに、製造例５−７で得られた化合物（ＶＩＩ−１１）（３．０８ｍｇ、０．００２ｍｍｏｌ、１５当量）を用いて、実施例１と同様の方法で表題化合物９．５ｍｇ（１．１９ｍｇ／ｍＬ、総体積８ｍＬ、４８％）を得た。
【０５９５】
実施例８：結合体（Ｉ−１２）の製造
【０５９６】
【化１７７】
0006262768.tif 000186
【０５９７】
製造例５−１で得られた化合物（ＶＩＩ−５）の代わりに、製造例５−８で得られた化合物（ＶＩＩ−１２）（５．４ｍｇ、０．００３ｍｍｏｌ、１０当量）を用いて、実施例１と同様の方法で表題化合物５０ｍｇ（２．５ｍｇ／ｍＬ、総体積２０ｍＬ、１００％）を得た。
【０５９８】
実施例９：結合体（Ｉ−１３）の製造
【０５９９】
【化１７８】
0006262768.tif 000187
【０６００】
製造例５−１で得られた化合物（ＶＩＩ−５）の代わりに、製造例５−９で得られた化合物（ＶＩＩ−１３）（５．７ｍｇ、０．００４ｍｍｏｌ、２０当量）を用いて、実施例１と同様の方法で表題化合物１５．２ｍｇ（１．０１ｍｇ／ｍＬ、総体積１５ｍＬ、５６％）を得た。
【０６０１】
実施例１０：結合体（Ｉ−１４）の製造
【０６０２】
【化１７９】
0006262768.tif 000188
【０６０３】
製造例５−１で得られた化合物（ＶＩＩ−５）の代わりに、製造例５−１０で得られた化合物（ＶＩＩ−１４）（４．３ｍｇ、０．００３ｍｍｏｌ、１５当量）を用いて、実施例１と同様の方法で表題化合物１９．４ｍｇ（１．５５ｍｇ／ｍＬ、総体積１２．５ｍＬ、７２％）を得た。
【０６０４】
実施例１１：結合体（Ｉ−１５）の製造
【０６０５】
【化１８０】
0006262768.tif 000189
【０６０６】
製造例５−１で得られた化合物（ＶＩＩ−５）の代わりに、製造例５−１１で得られた化合物（ＶＩＩ−１５）（２．３ｍｇ、０．００１５ｍｍｏｌ、１０当量）を用いて、実施例１と同様の方法で表題化合物２０．１ｍｇ（１．６ｍｇ／ｍＬ、総体積１２．５ｍＬ、９２％）を得た。
【０６０７】
実施例１２：結合体（Ｉ−１６）の製造
【０６０８】
【化１８１】
0006262768.tif 000190
【０６０９】
ｐＨ７．５のＰＢＳ（１０ｍＭ  ｐｈｏｓｐｈａｔｅ、１３７ｍＭ  ＮａＣｌ、２．７ｍＭ  ＫＣｌを含む）で交換処理されたトラスツズマブ溶液５ｍＬ（５．４ｇ／ｍＬ、３６μＭ）に、追加的にｐＨ７．５のＰＢＳ２．５ｍｌとｐＨ８．５の０．０５Ｍソジウムボレートバッファー７．５ｍＬを加え、２０％ＤＭＳＯ３．７５ｍＬに溶解した製造例５−１２で得られた化合物（ＶＩＩ−１６）（４．４ｍｇ、０．００３ｍｍｏｌ、１５当量）を加えた後、２５℃で４時間撹拌した。反応が終了すると、反応混合物を０．４５μｍの濾過器で濾過し、濾液を遠心濾過器（ｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｌ  ｆｉｌｔｅｒ、Ａｍｉｃｏｎ  Ｕｌｔｒａ−１５  ３０Ｋ）に入れて、有機溶媒と未反応物質が除去されるまで、ｐＨ７．５のＰＢＳをさらに加えて２−３回繰り返し濃縮した。濃縮液を、ｐＨ７．５のＰＢＳ中に平衡化させたＳｅｐｈａｄｅｘ  Ｇ−２５樹脂充填カラム（３０ｘ３００ｍｍ）を用いてＭＰＬＣ（２８０ｎｍ、ＵＶ  ｒａｎｇｅ０．０８、ｆｌｏｗ  ｒａｔｅ１０ｍＬ／ｍｉｎ）で分離精製して、表題化合物２２．５ｍｇ（１．７３ｍｇ／ｍＬ、総体積１３ｍＬ、８３％）を得た。この時、得られた化合物の濃度は、ＵＶ分光計で３つの波長（２８０ｎｍ、３２０ｎｍ、３５０ｎｍ）それぞれにおける吸光度を測定して決定した。
【０６１０】
実施例１３：結合体（Ｉ−１７）の製造
【０６１１】
【化１８２】
0006262768.tif 000191
【０６１２】
製造例５−１２で得られた化合物（ＶＩＩ−１６）の代わりに、製造例５−１３で得られた化合物（ＶＩＩ−１７）（５．６ｍｇ、０．００４ｍｍｏｌ、２０当量）を用いて、実施例１２と同様の方法で表題化合物２５．６ｍｇ（２．０５ｍｇ／ｍＬ、総体積１２．５ｍＬ、９５％）を得た。
【０６１３】
実施例１４：結合体（Ｉ−１８）の製造
【０６１４】
【化１８３】
0006262768.tif 000192
【０６１５】
製造例５−１２で得られた化合物（ＶＩＩ−１６）の代わりに、製造例５−１４で得られた化合物（ＶＩＩ−１８）（４．０ｍｇ、０．００２４ｍｍｏｌ、１５当量）を用いて、実施例１２と同様の方法で表題化合物２３．８ｍｇ（１．９８ｍｇ／ｍＬ、総体積１２ｍＬ、９９％）を得た。
【０６１６】
実施例１５：結合体（Ｉ−１９）の製造
【０６１７】
【化１８４】
0006262768.tif 000193
【０６１８】
製造例５−１２で得られた化合物（ＶＩＩ−１６）の代わりに、製造例５−１５で得られた化合物（ＶＩＩ−１９）（４．０ｍｇ、０．００２５ｍｍｏｌ、１５当量）を用いて、実施例１２と同様の方法で表題化合物２０．４ｍｇ（１．８６ｍｇ／ｍＬ、総体積１１ｍＬ、８２％）を得た。
【０６１９】
実施例１６：結合体（Ｉ−２０）の製造
【０６２０】
【化１８５】
0006262768.tif 000194
【０６２１】
製造例５−１２で得られた化合物（ＶＩＩ−１６）の代わりに、製造例５−１６で得られた化合物（ＶＩＩ−２０）（３．８ｍｇ、０．００２４ｍｍｏｌ、１５当量）を用いて、実施例１２と同様の方法で表題化合物１８．９ｍｇ（１．７２ｍｇ／ｍＬ、総体積１１ｍＬ、７９％）を得た。
【０６２２】
実施例１７：結合体（Ｉ−２１）の製造
【０６２３】
【化１８６】
0006262768.tif 000195
【０６２４】
製造例５−１２で得られた化合物（ＶＩＩ−１６）の代わりに、製造例５−１７で得られた化合物（ＶＩＩ−２１）（４．０ｍｇ、０．００２５ｍｍｏｌ、１５当量）を用いて、実施例１２と同様の方法で表題化合物１９．８ｍｇ（１．８ｍｇ／ｍＬ、総体積１１ｍＬ、８０％）を得た。
【０６２５】
実施例１８：結合体（Ｉ−２２）の製造
【０６２６】
【化１８７】
0006262768.tif 000196
【０６２７】
製造例５−１２で得られた化合物（ＶＩＩ−１６）の代わりに、製造例５−１８で得られた化合物（ＶＩＩ−２２）（３．８ｍｇ、０．００２４ｍｍｏｌ、１５当量）を用いて、実施例１２と同様の方法で表題化合物１３．０ｍｇ（１．１８ｍｇ／ｍＬ、総体積１１ｍＬ、５４％）を得た。
【０６２８】
実施例１９：結合体（Ｉ−２３）の製造
【０６２９】
【化１８８】
0006262768.tif 000197
【０６３０】
ｐＨ７．５のＰＢＳ（１０ｍＭ  ｐｈｏｓｐｈａｔｅ、１３７ｍＭ  ＮａＣｌ、２．７ｍＭ  ＫＣｌを含む）で交換処理されたトラスツズマブ（ハーセプチン）溶液５ｍＬ（５．４ｇ／ｍＬ、３６μＭ）に、追加的にｐＨ７．５のＰＢＳ２．５ｍｌとｐＨ８．５の０．０５Ｍソジウムボレートバッファー７．５ｍＬを加え、２０％ＤＭＳＯ３．７５ｍＬに溶解した製造例５−１９で得られた化合物（ＶＩＩ−２３）（５．７ｍｇ、０．００３６ｍｍｏｌ、２０当量）を加えた後、２５℃で４時間撹拌した。反応が終了すると、反応混合物を０．４５μｍの濾過器で濾過し、濾液を遠心濾過器（ｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｌ  ｆｉｌｔｅｒ、Ａｍｉｃｏｎ  Ｕｌｔｒａ−１５  ３０Ｋ）に入れて、有機溶媒と未反応物質が除去されるまで、ｐＨ７．５のＰＢＳをさらに加えて２−３回繰り返し濃縮した。濃縮液を、ｐＨ７．５のＰＢＳ中に平衡化させたＳｅｐｈａｄｅｘ  Ｇ−２５樹脂充填カラム（３０ｘ３００ｍｍ）を用いてＭＰＬＣ（２８０ｎｍ、ＵＶ  ｒａｎｇｅ０．０８、ｆｌｏｗ  ｒａｔｅ１０ｍＬ／ｍｉｎ）で分離精製して、表題化合物１６．９ｍｇ（１．２１ｍｇ／ｍＬ、総体積１５ｍＬ、６７％）を得た。この時、得られた化合物の濃度は、ＵＶ分光計で３つの波長（２８０ｎｍ、３２０ｎｍ、３５０ｎｍ）それぞれにおける吸光度を測定して決定した。
【０６３１】
実施例２０：結合体（Ｉ−２４）の製造
【０６３２】
【化１８９】
0006262768.tif 000198
【０６３３】
製造例５−１９で得られた化合物（ＶＩＩ−２３）の代わりに、製造例５−２０で得られた化合物（ＶＩＩ−２４）（４．３ｍｇ、０．００２７ｍｍｏｌ、１５当量）を用いて、実施例１９と同様の方法で表題化合物１９．２ｍｇ（１．５４ｍｇ／ｍＬ、総体積１１．５ｍＬ、７１％）を得た。
【０６３４】
実施例２１：結合体（Ｉ−２５）の製造
【０６３５】
【化１９０】
0006262768.tif 000199
【０６３６】
製造例５−１９で得られた化合物（ＶＩＩ−２３）の代わりに、製造例５−２１で得られた化合物（ＶＩＩ−２５）（５．７４ｍｇ、０．００３６ｍｍｏｌ、２０当量）を用いて、実施例１９と同様の方法で表題化合物１４．７ｍｇ（１．２３ｍｇ／ｍＬ、総体積１２ｍＬ、５４％）を得た。
【０６３７】
実施例２２：結合体（Ｉ−２６）の製造
【０６３８】
【化１９１】
0006262768.tif 000200
【０６３９】
製造例５−１９で得られた化合物（ＶＩＩ−２３）の代わりに、製造例５−２２で得られた化合物（ＶＩＩ−２６）（４．３８ｍｇ、０．００２７ｍｍｏｌ、１５当量）を用いて、実施例１９と同様の方法で表題化合物２３．７ｍｇ（１．５８ｍｇ／ｍＬ、総体積１４ｍＬ、８８％）を得た。
【０６４０】
実施例２３：結合体（Ｉ−２７）の製造
【０６４１】
【化１９２】
0006262768.tif 000201
【０６４２】
製造例５−１９で得られた化合物（ＶＩＩ−２３）の代わりに、製造例５−２３で得られた化合物（ＶＩＩ−２７）（４．０ｍｇ、０．００２５ｍｍｏｌ、１５当量）を用いて、実施例１９と同様の方法で表題化合物２１．１ｍｇ（１．１５ｍｇ／ｍＬ、総体積１４ｍＬ、８５％）を得た。
【０６４３】
実施例２４：結合体（Ｉ−２８）の製造
【０６４４】
【化１９３】
0006262768.tif 000202
【０６４５】
製造例５−１９で得られた化合物（ＶＩＩ−２３）の代わりに、製造例５−２４で得られた化合物（ＶＩＩ−２８）（３．９ｍｇ、０．００２５ｍｍｏｌ、１５当量）を用いて、実施例１９と同様の方法で表題化合物１７．３ｍｇ（１．５８ｍｇ／ｍＬ、総体積１３ｍＬ、７０％）を得た。
【０６４６】
実施例２５：結合体（Ｉ−２９）の製造
【０６４７】
【化１９４】
0006262768.tif 000203
【０６４８】
製造例５−１９で得られた化合物（ＶＩＩ−２３）の代わりに、製造例５−２５で得られた化合物（ＶＩＩ−２９）（４．１ｍｇ、０．００２５ｍｍｏｌ、１５当量）を用いて、実施例１９と同様の方法で表題化合物９．２ｍｇ（０．９２ｍｇ／ｍＬ、総体積１０ｍＬ、２４．８％）を得た。
【０６４９】
実施例２６：結合体（Ｉ−３０）の製造
【０６５０】
【化１９５】
0006262768.tif 000204
【０６５１】
製造例５−１９で得られた化合物（ＶＩＩ−２３）の代わりに、製造例５−２６で得られた化合物（ＶＩＩ−３０）（４．０ｍｇ、０．００２５ｍｍｏｌ、１５当量）を用いて、実施例１９と同様の方法で表題化合物１６．７ｍｇ（１．１９ｍｇ／ｍＬ、総体積１４ｍＬ、６７％）を得た。
【０６５２】
実施例２７：結合体（Ｉ−３１）の製造
【０６５３】
【化１９６】
0006262768.tif 000205
【０６５４】
製造例５−１９で得られた化合物（ＶＩＩ−２３）の代わりに、製造例５−２７で得られた化合物（ＶＩＩ−３１）（４．０ｍｇ、０．００２５ｍｍｏｌ、１５当量）を用いて、実施例１９と同様の方法で表題化合物２１ｍｇ（１．６１ｍｇ／ｍＬ、総体積１３ｍＬ、８５％）を得た。
【０６５５】
実施例２８：結合体（Ｉ−３２）の製造
【０６５６】
【化１９７】
0006262768.tif 000206
【０６５７】
製造例５−１９で得られた化合物（ＶＩＩ−２３）の代わりに、製造例５−２８で得られた化合物（ＶＩＩ−３２）（４．０ｍｇ、０．００２５ｍｍｏｌ、１５当量）を用いて、実施例１９と同様の方法で表題化合物１２．３ｍｇ（０．８８ｍｇ／ｍＬ、総体積１４ｍＬ、５０％）を得た。
【０６５８】
実施例２９：結合体（Ｉ−３３）の製造
【０６５９】
【化１９８】
0006262768.tif 000207
【０６６０】
製造例５−１９で得られた化合物（ＶＩＩ−２３）の代わりに、製造例５−２９で得られた化合物（ＶＩＩ−３３）（４．０ｍｇ、０．００２５ｍｍｏｌ、１５当量）を用いて、実施例１９と同様の方法で表題化合物１５．３ｍｇ（１．１８ｍｇ／ｍＬ、総体積１３ｍＬ、６２％）を得た。
【０６６１】
実施例３０：結合体（Ｉ−３４）の製造
【０６６２】
【化１９９】
0006262768.tif 000208
【０６６３】
ｐＨ７．５のＰＢＳ（１０ｍＭ  ｐｈｏｓｐｈａｔｅ、１３７ｍＭ  ＮａＣｌ、２．７ｍＭ  ＫＣｌを含む）で交換処理されたトラスツズマブ（ハーセプチン）溶液５ｍＬ（５．４ｇ／ｍＬ、３６μＭ）に、追加的にｐＨ７．５のＰＢＳ２．５ｍｌとｐＨ８．５の０．０５Ｍソジウムボレートバッファー７．５ｍＬを加え、２０％ＤＭＳＯ３．７５ｍＬに溶解した製造例５−３０で得られた化合物（ＶＩＩ−３４）（５．７ｍｇ、０．００３６ｍｍｏｌ、２０当量）を加えた後、２５℃で１８時間撹拌した。反応が終了すると、反応混合物を０．４５μｍの濾過器で濾過し、濾液を遠心濾過器（ｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｌ  ｆｉｌｔｅｒ、Ａｍｉｃｏｎ  Ｕｌｔｒａ−１５  ３０Ｋ）に入れて、有機溶媒と未反応物質が除去されるまで、ｐＨ７．５のＰＢＳをさらに加えて２−３回繰り返し濃縮した。濃縮液を、ｐＨ７．５のＰＢＳ中に平衡化させたＳｅｐｈａｄｅｘ  Ｇ−２５樹脂充填カラム（３０ｘ３００ｍｍ）を用いてＭＰＬＣ（２８０ｎｍ、ＵＶ  ｒａｎｇｅ０．０８、ｆｌｏｗ  ｒａｔｅ１０ｍＬ／ｍｉｎ）で分離精製して、表題化合物２６．４ｍｇ（２．２０ｍｇ／ｍＬ、総体積１２ｍＬ、９８％）を得た。この時、得られた化合物の濃度は、ＵＶ分光計で３つの波長（２８０ｎｍ、３２０ｎｍ、３５０ｎｍ）それぞれにおける吸光度を測定して決定した。
【０６６４】
実施例３１：結合体（Ｉ−３５）の製造
【０６６５】
【化２００】
0006262768.tif 000209
【０６６６】
製造例５−３０で得られた化合物（ＶＩＩ−３４）の代わりに、製造例５−３１で得られた化合物（ＶＩＩ−３５）（４．２ｍｇ、０．００２４ｍｍｏｌ、１５当量）を用いて、実施例３０と同様の方法で表題化合物１４．５ｍｇ（１．２１ｍｇ／ｍＬ、総体積１２ｍＬ、６１％）を得た。
【０６６７】
実施例３２：結合体（Ｉ−３６）の製造
【０６６８】
【化２０１】
0006262768.tif 000210
【０６６９】
製造例５−３０で得られた化合物（ＶＩＩ−３４）の代わりに、製造例５−３２で得られた化合物（ＶＩＩ−３６）（４．１ｍｇ、０．００２４ｍｍｏｌ、１５当量）を用いて、実施例３０と同様の方法で表題化合物１７．９ｍｇ（１．６３ｍｇ／ｍＬ、総体積１１ｍＬ、７５％）を得た。
【０６７０】
実施例３３：結合体（Ｉ−３７）の製造
【０６７１】
【化２０２】
0006262768.tif 000211
【０６７２】
製造例５−３０で得られた化合物（ＶＩＩ−３４）の代わりに、製造例５−３３で得られた化合物（ＶＩＩ−３７）（４．１ｍｇ、０．００２４ｍｍｏｌ、１５当量）を用いて、実施例３０と同様の方法で表題化合物１１．８ｍｇ（１．４８ｍｇ／ｍＬ、総体積８ｍＬ、５０％）を得た。
【０６７３】
実施例３４：結合体（Ｉ−３８）の製造
【０６７４】
【化２０３】
0006262768.tif 000212
【０６７５】
製造例５−３０で得られた化合物（ＶＩＩ−３４）の代わりに、製造例５−３４で得られた化合物（ＶＩＩ−３８）（４．０ｍｇ、０．００２４ｍｍｏｌ、１５当量）を用いて、実施例３０と同様の方法で表題化合物１５．８ｍｇ（１．２１ｍｇ／ｍＬ、総体積１３ｍＬ、６６％）を得た。
【０６７６】
実施例３５：結合体（Ｉ−３９）の製造
【０６７７】
【化２０４】
0006262768.tif 000213
【０６７８】
製造例５−３０で得られた化合物（ＶＩＩ−３４）の代わりに、製造例５−３５で得られた化合物（ＶＩＩ−３９）（４．２ｍｇ、０．００２４ｍｍｏｌ、１５当量）を用いて、実施例３０と同様の方法で表題化合物１８．３ｍｇ（１．５２ｍｇ／ｍＬ、総体積１２ｍＬ、７７％）を得た。
【０６７９】
実施例３６：結合体（Ｉ−４０）の製造
【０６８０】
【化２０５】
0006262768.tif 000214
【０６８１】
製造例５−３０で得られた化合物（ＶＩＩ−３４）の代わりに、製造例５−３６で得られた化合物（ＶＩＩ−４０）（４．６ｍｇ、０．００２７ｍｍｏｌ、１５当量）を用いて、実施例３０と同様の方法で表題化合物１２．７ｍｇ（１．１５ｍｇ／ｍＬ、総体積１１ｍＬ、４７％）を得た。
【０６８２】
実施例３７：結合体（Ｉ−４１）の製造
【０６８３】
【化２０６】
0006262768.tif 000215
【０６８４】
製造例５−３０で得られた化合物（ＶＩＩ−３４）の代わりに、製造例５−３７で得られた化合物（ＶＩＩ−４１）（４．１ｍｇ、０．００２４ｍｍｏｌ、１５当量）を用いて、実施例３０と同様の方法で表題化合物１６．１ｍｇ（１．２４ｍｇ／ｍＬ、総体積１３ｍＬ、６７％）を得た。
【０６８５】
試験例１：蛋白質の質量分析法を利用したＤＡＲ決定
【０６８６】
実施例で製造された抗体−リンカー−薬物結合体それぞれに、ＰＮＧａｓｅ  Ｆエンザイムを３７℃で１５±３時間処理して、Ｎ−結合型糖を除去した。糖の除去された抗体−リンカー−薬物結合体を、Ａｇｉｌｅｎｔ１２００ＨＰＬＣとＡｇｉｌｅｎｔ６５３０Ｑ−ＴＯＦ質量分析器（ｍａｓｓ  ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒ）で構成されたＬＣ−ＥＳＩ−ＭＳを用いて分析した。Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｚｏｒｂａｘカラム（３００ＳＢ−Ｃ１８、２．１ｍｍｘ７５ｍｍ、５μｍ）と０．１％ギ酸水溶液／０．１％ギ酸アセトニトリル溶液の勾配溶離（ｇｒａｄｉｅｎｔ  ｅｌｕｔｉｏｎ）を利用して抗体−リンカー−薬物結合体を分離し、ｍ／ｚ（ｍａｓｓ  ｔｏ  ｃｈａｒｇｅ）データを１秒あたり１スペクトルのスキャン速度で９００〜４０００ｍ／ｚの範囲で取得した後、デコンボリューション（ｄｅｃｏｎｖｏｌｕｔｉｏｎ）して、分子量とインテグレーション（ｉｎｔｅｇｒａｔｉｏｎ）された各ピーク（Ｄ０，Ｄ１，Ｄ２．．Ｄｎ）の存在比（ａｂｕｎｄａｎｃｅ）情報を用いてＤＡＲを計算した。
【０６８７】
各ピークの相手存在比（ｒｅｌａｔｉｖｅ  ａｂｕｎｄａｎｃｅ）は、下記式を用いて計算した。各ピークの存在比をすべてのピークの存在比の和で割って、各ピークの％相対存在比を計算した。
【０６８８】
【化２０７】
0006262768.tif 000216
【０６８９】
抗体−リンカー−薬物結合体のＤＡＲは、％相対存在比と下記式を用いて計算し、その結果を下記表１〜表４に示した。
【０６９０】
【化２０８】
0006262768.tif 000217
【０６９１】
【表１】
0006262768.tif 000218
【０６９２】
【表２】
0006262768.tif 000219
【０６９３】
【表３−１】
0006262768.tif 000220
【０６９４】
【表３−２】
0006262768.tif 000221
【０６９５】
【表４−１】
0006262768.tif 000222
【０６９６】
【表４−２】
0006262768.tif 000223
【０６９７】
試験例２：ＳＥＣ−ＨＰＬＣ分析
【０６９８】
サイズ排除クロマトグラフィー法（Ｓｉｚｅ  Ｅｘｃｌｕｓｉｏｎ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ、ＳＥＣ−ＨＰＬＣ）を用いて、抗体と薬物を結合する過程で抗体の異常な破片（ｆｒａｇｍｅｎｔ）や凝集（ａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎ）の発生の有無を評価した。このような異常な蛋白質構造は、本来抗体の有する抗原特異的な結合能、生体内薬物動力学に影響を与えるため、製造された抗体−リンカー−薬物結合体の優秀性を間接的に確認することができる。
【０６９９】
実施例で製造された抗体−リンカー−薬物結合体それぞれに対して、ＳＥＣ−ＨＰＬＣを用いて正常抗体構造比率を分析して、その結果を下記表５〜表８に示した。
【０７００】
【表５】
0006262768.tif 000224
【０７０１】
実施例２、６および７で製造された抗体−リンカー−薬物結合体は、薬物を接合する前の抗体（９９．１６％）と比較して、９８．２１〜９８．５５％の範囲の正常抗体構造比率を示した。
【０７０２】
【表６】
0006262768.tif 000225
【０７０３】
実施例１２〜１８で製造された抗体−リンカー−薬物結合体は、薬物を接合する前の抗体（９９．４８％）と比較して、９２．４３〜９９．２５％の範囲の正常抗体構造比率を示した。
【０７０４】
【表７】
0006262768.tif 000226
【０７０５】
実施例１９〜２９で製造された抗体−リンカー−薬物結合体は、薬物を接合する前の抗体（９９．４８％）と比較して、９０．６８〜９９．１３％の範囲の正常抗体構造比率を示した。
【０７０６】
【表８】
0006262768.tif 000227
【０７０７】
実施例３０〜３７で製造された抗体−リンカー−薬物結合体は、薬物を接合する前の抗体（９９．４８％）と比較して、９７．００〜９８．９３％の範囲の正常抗体構造比率を示した。
【０７０８】
試験例３：ＩＥＦ分析
【０７０９】
等電位点焦点化（ｉｓｏｅｌｅｃｔｒｉｃ  ｆｏｃｕｓｉｎｇ：ＩＥＦ）分析を利用して、実施例２、４、６および７で製造された抗体−リンカー−薬物結合体（Ｉ−６）、（Ｉ−８）、（Ｉ−１０）および（Ｉ−１１）それぞれの等電点（ｐＩ）値を分析して、その結果を下記表９に示した。
【０７１０】
【表９】
0006262768.tif 000228
【０７１１】
前記表９から明らかなように、ＤＡＲの結果と同様に、より多くの薬物が結合された結合体（Ｉ−１０）と（Ｉ−１１）でより低いｐＩバンド（ｂａｎｄ）が確認され、これから結合された薬物の数が増加したことが分かる。
【０７１２】
試験例４：試験管内の細胞毒性試験
【０７１３】
抗体−リンカー−薬物結合体の抗癌効能（ｐｏｔｅｎｃｙ）は、ＨＥＲ−２過発現乳癌細胞株（ＢＴ−４７４）を用いて、細胞生長阻害能（ａｎｔｉ−ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ  ａｃｔｉｖｉｔｙ）を試験管内実験法で評価した。対照群としては、抗体−リンカー−薬物結合体の製造に用いられたトラスツズマブが使用された。トラスツズマブは、乳癌細胞で特異的に発現するＨＥＲ−２抗原に対するモノクロナール抗体である。
【０７１４】
９６ウェルのマイクロプレートにおいて、ウェルあたり１Ｘ１０４個のＢＴ−４７４細胞株を用意し、対照群のトラスツズマブと、各実施例で製造された抗体−リンカー−薬物結合体をそれぞれ濃度別に処理した後、５日培養後に生きている細胞数を発色試薬（ＣＣＫ−８）で処理した後、吸光度を測定して間接確認した。濃度−効能の間の関係式は、４次曲線関数で求め、ＥＣ５０（ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ  ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ５０％、半数影響濃度）を比較して、相対的な効能を評価した。その結果を図１〜図１７および表１０〜表１３に示した。
【０７１５】
表１０から明らかなように、対照群のトラスツズマブと比較して、実施例２、６および７で製造された抗体−リンカー−薬物結合体は、１３．２〜１７．８倍の低いＥＣ５０値を示し、これはより少ない量を使用しても同等の効能を示し、副作用が低減される効果を期待することができることを表す。
【０７１６】
また、図１〜図３から明らかなように、実施例２、４、６および７で製造された抗体−リンカー−薬物結合体は、対照群のトラスツズマブと比較して４次曲線関数でより低い吸光度まで到達するが、これは細胞生長阻害能が対照群のトラスツズマブよりも優れていることを意味する。すなわち、抗体が本来有する腫瘍細胞阻害効能に接合された細胞毒性薬物の機序によって追加的に腫瘍細胞が減少したことを表す。
【０７１７】
【表１０】
0006262768.tif 000229
【０７１８】
表１１から明らかなように、対照群のトラスツズマブと比較して、実施例１〜７で製造された抗体−リンカー−薬物結合体は、７．７倍〜３４．２倍の低いＥＣ５０値を示し、これはより少ない量を使用しても同等の効能を示し、副作用が低減される効果を期待することができることを表す。
【０７１９】
また、図４〜図７から明らかなように、実施例１〜７で製造された抗体−リンカー−薬物結合体は、対照群のトラスツズマブと比較して４次曲線関数でより低い吸光度まで到達するが、これは細胞生長阻害能が対照群のトラスツズマブよりも優れていることを意味する。すなわち、抗体が本来有する腫瘍細胞阻害効能に接合された細胞毒性薬物の機序によって追加的に腫瘍細胞が減少したことを表す。
【０７２０】
【表１１】
0006262768.tif 000230
【０７２１】
表１２から明らかなように、対照群のトラスツズマブと比較して、実施例１９〜２９で製造された抗体−リンカー−薬物結合体は、０．５倍〜３３．６倍の低いＥＣ５０値を示した。抗体−リンカー−薬物結合体（Ｉ−２３）、（Ｉ−２５）、（Ｉ−２６）および（Ｉ−３３）の場合、対照群と比較して、２０倍以上の低いＥＣ５０値を示し、これは２０倍以上より少ない量を使用しても同等の効能を示し、副作用が低減される効果を期待することができることを表す。
【０７２２】
また、図８〜図１３から明らかなように、実施例１９〜２９で製造された抗体−リンカー−薬物結合体は、対照群のトラスツズマブと比較して４次曲線関数でより低い吸光度まで到達するが、これは細胞生長阻害能が対照群のトラスツズマブよりも優れていることを意味する。すなわち、抗体が本来有する腫瘍細胞阻害効能に接合された細胞毒性薬物の機序によって追加的に腫瘍細胞が減少したことを表す。
【０７２３】
【表１２】
0006262768.tif 000231
【０７２４】
表１３から明らかなように、対照群のトラスツズマブと比較して、実施例３０〜３６で製造された抗体−リンカー−薬物結合体は、８．９倍〜２２．６倍の低いＥＣ５０値を示し、これはより少ない量を使用しても同等の効能を示し、副作用が低減される効果を期待することができることを表す。
【０７２５】
また、図１４〜図１７から明らかなように、実施例３０〜３６で製造された抗体−リンカー−薬物結合体は、対照群のトラスツズマブと比較して４次曲線関数でより低い吸光度まで到達するが、これは細胞生長阻害能が対照群のトラスツズマブよりも優れていることを意味する。すなわち、抗体が本来有する腫瘍細胞阻害効能に接合された細胞毒性薬物の機序によって追加的に腫瘍細胞が減少したことを表す。
【０７２６】
【表１３】
0006262768.tif 000232
【０７２７】
試験例５：薬物動態試験
【０７２８】
実施例２および４で製造された抗体−リンカー−薬物結合体（Ｉ−６）および（Ｉ−８）と対照群のトラスツズマブをそれぞれ、Ｂａｌｂ／ｃ  Ｓｌｃ−ｎｕマウスに２０ｍｇ／ｋｇの容量で静脈内に１回投与した後、１ヶ月間、血液内薬物動態（ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ：ＰＫ）試験を行った。
【０７２９】
抗体−リンカー−薬物結合体（Ｉ−８）および（Ｉ−６）の半減期はそれぞれ８．３日と７．９日で、対照群のトラスツズマブの半減期８．６日と比較して統計的に有意な差を示しておらず、これは接合過程中に抗体自体のＰＫに影響を及ぼす部位（ＦｃＲｎ）には細胞毒性薬物が接合されていないことを表す。
【０７３０】
【表１４】
0006262768.tif 000233
【０７３１】
試験例６：動物モデル効能試験
【０７３２】
動物モデル効能試験は、ＨＥＲ−２過発現乳癌細胞株（ＢＴ−４７４）を異種移植（ｘｅｎｏｇｒａｆｔ）したヌードマウスに、実施例２、６および７で製造された抗体−リンカー−薬物結合体（Ｉ−６）、（Ｉ−１０）および（Ｉ−１１）をそれぞれ３種の容量（１．２５、５、２０ｍｇ／ｋｇ）で単回静脈投与した後、５６日間の腫瘍の体積と最終重量を比較評価して行った。陰性対照群には生理食塩水（ＰＢＳ）を、陽性対照群にはトラスツズマブ（ハーセプチン（Ｒ））を２０ｍｇ／ｋｇ投与した。その結果を図１８および図１９に示した。
【０７３３】
図１８および図１９から、トラスツズマブ（ハーセプチン（Ｒ））を投与した陽性対照群は、陰性対照群と比較して有意に腫瘍が減少し、抗体−リンカー−薬物結合体（Ｉ−６）、（Ｉ−１０）および（Ｉ−１１）が投与された群は、陽性対照群よりも顕著に腫瘍が減少し、２８日後には移植された腫瘍が完全に消失して再発しないことを確認することができた。
【０７３４】
また、ＨＥＲ−２過発現乳癌細胞株（ＢＴ−４７４）を異種移植（ｘｅｎｏｇｒａｆｔ）したヌードマウスに、実施例１２で製造された抗体−リンカー−薬物結合体（Ｉ−１６）を３種の容量（０．０５、０．５、５ｍｇ／ｋｇ）で単回静脈投与した後、２８日間の腫瘍の体積と最終重量を比較評価して行った。陰性対照群には生理食塩水（ＰＢＳ）を、陽性対照群にはトラスツズマブ（ハーセプチン（Ｒ））を５ｍｇ／ｋｇ投与した。その結果を図２０および図２１に示した。
【０７３５】
図２０および図２１から、トラスツズマブ（ハーセプチン（Ｒ））を投与した陽性対照群は、陰性対照群と比較して有意に腫瘍が減少し、抗体−リンカー−薬物結合体（Ｉ−１６）が投与された群は、陽性対照群より顕著に腫瘍が減少したことを確認することができた。
【０７３６】
また、ＨＥＲ−２過発現乳癌細胞株（ＢＴ−４７４）を異種移植（ｘｅｎｏｇｒａｆｔ）したヌードマウスに、実施例１９、２１および２２で製造された抗体−リンカー−薬物結合体（Ｉ−２３）、（Ｉ−２５）および（Ｉ−２６）をそれぞれ３種の容量（０．０５、０．５、５ｍｇ／ｋｇ）で単回静脈投与した後、２８日間の腫瘍の体積と最終重量を比較評価して行った。陰性対照群には生理食塩水（ＰＢＳ）を、陽性対照群にはトラスツズマブ（ハーセプチン（Ｒ））を５ｍｇ／ｋｇ投与した。その結果を図２２〜図２７に示した。
【０７３７】
図２２〜図２７から、トラスツズマブ（ハーセプチン（Ｒ））を投与した陽性対照群は、陰性対照群と比較して有意に腫瘍が減少し、抗体−リンカー−薬物結合体（Ｉ−２３）、（Ｉ−２５）および（Ｉ−２６）が投与された群は、陽性対照群よりも顕著に腫瘍が減少したことを確認することができた。
【０７３８】
また、ＨＥＲ−２過発現乳癌細胞株（ＢＴ−４７４）を異種移植（ｘｅｎｏｇｒａｆｔ）したヌードマウスに、実施例３０で製造された抗体−リンカー−薬物結合体（Ｉ−３４）を３種の容量（０．０５、０．５、５ｍｇ／ｋｇ）で単回静脈投与した後、２８日間の腫瘍の体積と最終重量を比較評価して行った。陰性対照群には生理食塩水（ＰＢＳ）を、陽性対照群にはトラスツズマブ（ハーセプチン（Ｒ））を５ｍｇ／ｋｇ投与した。その結果を図２８および図２９に示した。
【０７３９】
図２８および図２９から、トラスツズマブ（ハーセプチン（Ｒ））を投与した陽性対照群は、陰性対照群と比較して有意に腫瘍が減少し、抗体−リンカー−薬物結合体（Ｉ−３４）が投与された群は、陽性対照群よりも顕著に腫瘍が減少したことを確認することができた。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８】
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【図２９】
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