(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
血球を含む測定試料を流すフローセルと、
前記フローセルを流れる前記測定試料に、４００ｎｍ以上４３５ｎｍ以下の波長の光を照射する第１光源と、
前記フローセルを流れる前記測定試料に、６１０ｎｍ以上７５０ｎｍ以下の波長の光を照射する第２光源と、
前記フローセルを流れる血球に前記第１光源からの光を照射することにより得られる第１散乱光を受光する第１受光部と、
前記フローセルを流れる血球に前記第２光源からの光を照射することにより得られる第２散乱光を受光する第２受光部と、
前記第１受光部から出力される信号に基づく第１散乱光情報と、前記第２受光部から出力される信号に基づく第２散乱光情報と、に基づいて、赤血球数、白血球数、およびヘモグロビンに関する値を取得する処理部と、を備える、血液分析装置。
【請求項２】
前記測定試料を調製する試料調製部をさらに備え、
前記試料調製部は、血液検体中の赤血球を溶血せずに前記測定試料を調製する、請求項１に記載の血液分析装置。
【請求項３】
前記処理部は、前記第１散乱光情報および前記第２散乱光情報に基づいて、血小板数を取得する、請求項１または２に記載の血液分析装置。
【請求項４】
前記処理部は、前記第１受光部から出力される信号に基づく第１散乱光情報と、前記第２受光部から出力される信号に基づく第２散乱光情報と、に基づいて、赤血球容積に関する値を取得する、請求項１ないし３の何れか一項に記載の血液分析装置。
【請求項５】
前記処理部は、前記第１散乱光情報および前記第２散乱光情報の組み合わせと、赤血球容積およびヘモグロビン濃度の組み合わせと、の関係を規定する変換情報を用いて、前記第１散乱光情報および前記第２散乱光情報から、ヘモグロビン濃度に関する値および前記赤血球容積に関する値を取得する、請求項４に記載の血液分析装置。
【請求項６】
前記処理部は、前記ヘモグロビン濃度に関する値および前記赤血球数に基づいて、平均赤血球血色素濃度を取得する、請求項５に記載の血液分析装置。
【請求項７】
前記処理部は、前記赤血球容積に関する値および前記赤血球数に基づいて、平均赤血球容積を取得する、請求項４ないし６の何れか一項に記載の血液分析装置。
【請求項８】
前記処理部は、前記平均赤血球容積および前記赤血球数に基づいて、ヘマトクリット値を取得する、請求項７に記載の血液分析装置。
【請求項９】
前記処理部は、前記平均赤血球色素濃度および前記ヘマトクリット値に基づいて、ヘモグロビン量を取得する、請求項８に記載の血液分析装置。
【請求項１０】
前記処理部は、前記第１散乱光情報および前記第２散乱光情報に基づいて、白血球をさらに複数のサブグループに分類して計数する、請求項１ないし９の何れか一項に記載の血液分析装置。
【請求項１１】
前記測定試料の第１の部分を用いて赤血球数を取得し、前記測定試料の前記第１の部分よりも多い量の第２の部分を用いて白血球数を取得する、請求項１ないし１０の何れか一項に記載の血液分析装置。
【請求項１２】
第１の時間において前記フローセルを流れる前記測定試料を前記第１の部分として前記赤血球数を取得し、前記第１の時間より長い第２の時間において前記フローセルを流れる前記測定試料を前記第２の部分として前記白血球数を取得する、請求項１１に記載の血液分析装置。
【請求項１３】
前記第２の部分に対する処理において、前記第１散乱光情報が所定の閾値以下の血球を解析対象から除外する、請求項１１または１２に記載の血液分析装置。
【請求項１４】
前記処理部により取得された値を出力する出力部をさらに備える、請求項１ないし１３の何れか一項に記載の血液分析装置。
【請求項１５】
前記出力部は、前記ヘモグロビンに関する値とともに、前記第１散乱光情報および前記第２散乱光情報を座標軸とするスキャッタグラムを表示する、請求項１４に記載の血液分析装置。
【請求項１６】
前記出力部は、前記ヘモグロビンに関する値とともに、前記赤血球容積に関する値および前記ヘモグロビン濃度に関する値を座標軸とするスキャッタグラムを表示する、請求項１４または１５に記載の血液分析装置。
【請求項１７】
血球を含む測定試料に、４００ｎｍ以上４３５ｎｍ以下の波長の第１の光と、６１０ｎｍ以上７５０ｎｍ以下の波長の第２の光と、をそれぞれ照射し、
前記血球に前記第１の光が照射されることにより得られる第１散乱光と、前記血球に前記第２の光が照射されることにより得られる第２散乱光と、をそれぞれ受光し、
前記第１散乱光に基づく第１散乱光情報と、前記第２散乱光に基づく第２散乱光情報と、に基づいて、赤血球数、白血球数、およびヘモグロビンに関する値を取得する、血液分析方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、血液分析装置および血液分析方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
血液検体を分析する血液分析装置では、一般的に、赤血球、白血球、血小板等の血球の測定が行われる。これらの血球の測定を行うため、たとえば特許文献１に記載の血液分析装置では、赤血球数および血小板数を測定するためのＲＢＣ／ＰＬＴ検出部、血液中の血色素量を測定するためのＨＧＢ検出部、白血球数を測定するための光学検出部等、測定項目に応じて複数の検出部が設けられている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特開２００６−２９２７３８号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
ここで、血液分析装置は、測定可能な測定項目は維持しつつ、たとえば検査施設における設置面積を抑制するために、装置の大きさを抑制することが望まれている。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明の第１の態様に係る血液分析装置は、血球を含む測定試料を流すフローセルと、フローセルを流れる測定試料に、４００ｎｍ以上４３５ｎｍ以下の波長の光を照射する第１光源と、フローセルを流れる測定試料に、６１０ｎｍ以上７５０ｎｍ以下の波長の光を照射する第２光源と、フローセルを流れる血球に第１光源からの光を照射することにより得られる第１散乱光を受光する第１受光部と、フローセルを流れる血球に第２光源からの光を照射することにより得られる第２散乱光を受光する第２受光部と、第１受光部から出力される信号に基づく第１散乱光情報と、第２受光部から出力される信号に基づく第２散乱光情報と、に基づいて、赤血球数、白血球数、およびヘモグロビンに関する値を取得する処理部と、を備える。
【０００６】
本発明の第２の態様に係る血液分析方法は、血球を含む測定試料に、４００ｎｍ以上４３５ｎｍ以下の波長の第１の光と、６１０ｎｍ以上７５０ｎｍ以下の波長の第２の光と、をそれぞれ照射し、血球に第１の光が照射されることにより得られる第１散乱光と、血球に第２の光が照射されることにより得られる第２散乱光と、をそれぞれ受光し、第１散乱光に基づく第１散乱光情報と、第２散乱光に基づく第２散乱光情報と、に基づいて、赤血球数、白血球数、およびヘモグロビンに関する値を取得する。
【発明の効果】
【０００７】
本発明によれば、小型の血液分析装置を提供することが可能となる。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
【図１】図１は、実施形態１に係る血液分析装置の構成を示すブロック図である。
【図２】図２（ａ）、（ｂ）は、それぞれ、実施形態１に係る光学検出部をＹ軸負方向とＸ軸正方向に見た場合の模式図である。
【図３】図３（ａ）〜（ｄ）は、それぞれ、実施形態１に係るフローセル、ビームストッパ、ピンホールおよび光検出器の構成を示す模式図である。
【図４】図４（ａ）は、濃度が低い測定試料を測定したときの検出タイミングを示す図であり、図４（ｂ）は、通常濃度の測定試料を測定したときの検出タイミングを示す図である。
【図５】図５（ａ）は、赤血球に含まれるヘモグロビンの吸収特性を示す図であり、図５（ｂ）は、粒子分析のシミュレーション結果を示す図である。
【図６】図６（ａ）は、実施形態１に係る赤血球と、白血球と、血小板とを分類するためのスキャッタグラムであり、図６（ｂ）は、実施形態１に係るマップ情報を組み込んだ場合のスキャッタグラムであり、図６（ｃ）は、実施形態１に係る赤血球容積とヘモグロビン濃度を２軸とするスキャッタグラムである。
【図７】図７は、実施形態１に係る血液分析装置による処理を示すフローチャートである。
【図８】図８は、実施形態１に係る出力部に表示される画面を示す図である。
【図９】図９（ａ）〜（ｄ）は、実施形態１による結果と比較手法による結果との相関性を示す図である。
【図１０】図１０（ａ）は、実施形態２に係る白血球を分類するためのスキャッタグラムであり、図１０（ｂ）は、実施形態２の変更例に係る白血球を分類するためのスキャッタグラムであり、図１０（ｃ）は、実施形態２に係る好酸球を分類するためのスキャッタグラムである。
【図１１】図１１は、実施形態２に係る血液分析装置による処理を示すフローチャートである。
【図１２】図１２は、実施形態２に係る出力部に表示される画面を示す図である。
【図１３】図１３は、実施形態２の変更例に係る血小板を分類するためのスキャッタグラムである。
【図１４】図１４（ａ）〜（ｃ）は、実施形態２による結果と比較手法による結果との相関性を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
以下に示す実施形態１、２は、血液検体に含まれる赤血球、白血球、血小板等を検出し、各血球を計数することにより、血液に関する検査および分析を行うための装置に本発明を適用したものである。
【００１０】
＜実施形態１＞
図１に示すように、血液分析装置１０は、測定部１０ａと情報処理部１０ｂを備える。測定部１０ａは、測定制御部１１と、検体吸引部１２と、試料調製部１３と、光学検出部１４と、信号処理回路１５と、を備える。測定制御部１１は、記憶部１１ａを備える。情報処理部１０ｂは、処理部２１と、出力部２２と、入力部２３と、を備える。処理部２１は、記憶部２１ａを備える。
【００１１】
測定制御部１１は、測定部１０ａの各部が出力する信号を受信し、測定部１０ａの各部を制御する。測定制御部１１は、情報処理部１０ｂと通信を行う。検体吸引部１２は、検体容器に収容された血液検体を吸引管により吸引する。試料調製部１３には、試薬１３ａを収容する容器が接続されている。試薬１３ａは希釈液である。試薬１３ａは、測定試料をフローセル１１０に流すためのシース液としても用いられる。試料調製部１３は、試薬１３ａと、検体吸引部１２により吸引された血液検体とを混和して、測定試料を調製する。血液検体中の赤血球の形状は、試薬１３ａにより球状になる。測定試料の調製は、溶血剤と染色剤を用いずに行われる。測定試料は、血液検体中の血球を含んでいる。
【００１２】
光学検出部１４は、フローセル１１０と、第１光源１２１と、第２光源１２２と、光検出器１３１〜１３３と、を備える。第１光源１２１は、フローセル１１０を流れる測定試料に、第１波長を有する第１の光２１０を照射する。第２光源１２２は、フローセル１１０を流れる測定試料に、第１波長とは異なる第２波長を有する第２の光２２０を照射する。
【００１３】
光検出器１３１は、第１受光部１３１ａと第２受光部１３１ｂを備える。第１受光部１３１ａは、フローセル１１０を流れる血球に、第１の光２１０を照射することにより得られる第１散乱光を受光する。実施形態１では、第１散乱光は、第１前方散乱光２１１である。第２受光部１３１ｂは、フローセル１１０を流れる血球に、第２の光２２０を照射することにより得られる第２散乱光を受光する。実施形態１では、第２散乱光は、第２前方散乱光２２１である。光検出器１３２は、受光部１３２ａを備える。受光部１３２ａは、フローセル１１０を流れる血球に、第２の光２２０を照射することにより得られる第２側方散乱光２２２を受光する。光検出器１３３は、フローセル１１０を流れる血球に、第１の光２１０を照射することにより得られる第１蛍光２１３を受光する。
【００１４】
第１散乱光は、後述する第１側方散乱光２１２であっても良い。すなわち、第１受光部１３１ａは、第１散乱光として第１側方散乱光２１２を受光するよう配置されても良い。第２散乱光は、第２側方散乱光２２２であっても良い。すなわち、第２受光部１３１ｂは、第２散乱光として第２側方散乱光２２２を受光するよう配置されても良い。
【００１５】
第１受光部１３１ａは、第１前方散乱光２１１に基づく信号を出力する。第２受光部１３１ｂは、第２前方散乱光２２１に基づく信号を出力する。光検出器１３１は、第１受光部１３１ａと第２受光部１３１ｂから出力される信号を、信号処理回路１５に出力する。受光部１３２ａは、第２側方散乱光２２２に基づく信号を出力する。光検出器１３２は、受光部１３２ａから出力される信号を、信号処理回路１５に出力する。光検出器１３３は、第１蛍光２１３に基づく信号を、信号処理回路１５に出力する。光学検出部１４については、追って図２（ａ）、（ｂ）と図３（ａ）〜（ｄ）を参照して説明する。
【００１６】
信号処理回路１５は、光検出器１３１〜１３３が出力する信号に基づいて、血球に対応する波形を抽出し、波形のピーク値、幅、面積等を算出する。信号処理回路１５は、第１散乱光情報として、第１前方散乱光２１１に基づく信号から得られた波形のピーク値を算出する。信号処理回路１５は、第２散乱光情報として、第２前方散乱光２２１に基づく信号から得られた波形のピーク値を算出する。信号処理回路１５は、第３散乱光情報として、第２側方散乱光２２２に基づく信号から得られた波形のピーク値を算出する。信号処理回路１５は、蛍光情報として、第１蛍光２１３に基づく信号から得られた波形のピーク値を算出する。
【００１７】
第１散乱光を第１側方散乱光２１２とする場合、第１散乱光情報は、第１側方散乱光２１２に基づく信号から得られた波形のピーク値となる。第２散乱光を第２側方散乱光２２２とする場合、第２散乱光情報は、第２側方散乱光２２２に基づく信号から得られた波形のピーク値となる。
【００１８】
信号処理回路１５は、第１散乱光情報と、第２散乱光情報と、第３散乱光情報と、蛍光情報とを、測定制御部１１に出力する。測定制御部１１は、信号処理回路１５から出力された情報を記憶部１１ａに記憶する。血液検体の測定が終わると、測定制御部１１は、血球ごとに得られた第１散乱光情報と、第２散乱光情報と、第３散乱光情報と、蛍光情報とを、測定データとして情報処理部１０ｂに送信する。
【００１９】
処理部２１は、情報処理部１０ｂの各部が出力する信号を受信し、情報処理部１０ｂの各部を制御する。記憶部２１ａは、処理部２１により実行されるプログラムと、各種データとを記憶している。また、記憶部２１ａは、処理部２１の作業領域としても利用される。処理部２１は、第１散乱光情報と第２散乱光情報に基づいて、赤血球数、白血球数、およびヘモグロビンに関する値を取得する。処理部２１は、その他、血球の分類と計数を行い、各種の値を取得する。処理部２１が行う処理については、追って図７を参照して説明する。
【００２０】
出力部２２は、文字情報と図形情報を表示するためのディスプレイである。入力部２３は、オペレータによる入力を受け付けるためのキーボードとマウスである。
【００２１】
図２（ａ）、（ｂ）に示すように、光学検出部１４は、フローセル１１０と、第１光源１２１と、第２光源１２２と、光検出器１３１〜１３３と、コリメータレンズ１４１、１４２と、ダイクロイックミラー１４３と、シリンドリカルレンズ１４４と、集光レンズ１４５、１４６と、ビームストッパ１４７と、ピンホール１４８と、コリメータレンズ１４９と、ダイクロイックミラー１５０と、集光レンズ１５１と、分光フィルタ１５２と、集光レンズ１５３と、を備える。図２（ａ）、（ｂ）には、便宜上、互いに直交するＸＹＺ座標軸が示されている。
【００２２】
図３（ａ）に示すように、フローセル１１０は、シース液供給口１１１と、試料ノズル１１２と、細孔部１１３と、廃液口１１４と、を備える。シース液供給口１１１は、シース液をフローセル１１０内に供給する。試料ノズル１１２は、フローセル１１０内において測定試料をＹ軸正方向に噴射する。測定試料は、シース液に包まれた状態で、細孔部１１３に形成されている流路１１５を通って廃液口１１４へと進む。流路１１５は、Ｙ軸方向に延びている。測定試料に含まれる血球は、一列に整列した状態で流路１１５を通る。
【００２３】
図２（ａ）、（ｂ）に戻り、第１光源１２１は、第１の光２１０をＸ軸負方向に出射する。第１の光２１０は、レーザ光である。第１の光２１０の波長は、４００ｎｍ以上４３５ｎｍ以下に設定される。実施形態１では、第１の光２１０の波長は約４０５ｎｍである。第１光源１２１は、図示しない発光部の半導体層の積層方向がＺ軸方向に一致するよう配置される。したがって、第１の光２１０の広がり角は、Ｚ軸方向において最大となり、Ｙ軸方向において最小となる。第１光源１２１の出射光軸は、コリメータレンズ１４２の光軸２０１に交差する。光軸２０１は、Ｚ軸に平行である。
【００２４】
第２光源１２２は、第２の光２２０をＺ軸正方向に出射する。第２の光２２０は、レーザ光である。第２の光２２０の波長は、６１０ｎｍ以上７５０ｎｍ以下に設定される。実施形態１では、第２の光２２０の波長は約６４０ｎｍである。第２光源１２２は、図示しない発光部の半導体層の積層方向がＸ軸方向に一致するよう配置される。したがって、第２の光２２０の広がり角は、Ｘ軸方向において最大となり、Ｙ軸方向において最小となる。第２光源１２２の出射光軸は、光軸２０１に一致している。
【００２５】
コリメータレンズ１４１は、第１の光２１０を平行光に変換する。コリメータレンズ１４２は、第２の光２２０を平行光に変換する。ダイクロイックミラー１４３は、第１の光２１０を反射し、第２の光２２０を透過する。ダイクロイックミラー１４３は、ダイクロイックミラー１４３によって反射された第１の光２１０の進行方向が、図２（ｂ）に示すように、Ｚ軸方向からややＹ軸正方向に傾くように配置されている。
【００２６】
シリンドリカルレンズ１４４は、第１の光２１０と第２の光２２０をＸ軸方向にのみ収束させる。集光レンズ１４５は、第１の光２１０と第２の光２２０をＹ軸方向に収束させて、フローセル１１０の流路１１５の位置に合焦させる。また、集光レンズ１４５は、第１の光２１０と第２の光２２０をＸ軸方向に収束させて流路１１５のＺ軸負側の位置に合焦させる。これにより、流路１１５には、図３（ａ）に示すように、Ｘ軸方向に細長いビーム形状で、第１の光２１０と第２の光２２０が照射される。
【００２７】
図２（ｂ）に示すように、ダイクロイックミラー１４３によって反射された第１の光２１０は、Ｚ軸方向からＹ軸方向にやや傾いた方向に進むため、流路１１５における第１の光２１０の照射位置２０２は、第２の光２２０の照射位置２０３よりもＹ軸正方向にずれている。第２の光２２０の照射位置２０３は、光軸２０１上にある。
【００２８】
照射位置２０２の血球に対して第１の光２１０が照射されると、第１の光２１０が照射された血球から、第１前方散乱光２１１と、第１側方散乱光２１２と、第１蛍光２１３が生じる。第１前方散乱光２１１の波長と第１側方散乱光２１２の波長は、第１の光２１０の波長と略同じである。照射位置２０３の粒子に対して第２の光２２０が照射されると、第２の光２２０が照射された血球から、第２前方散乱光２２１と、第２側方散乱光２２２と、第２蛍光２２３が生じる。第２前方散乱光２２１の波長と第２側方散乱光２２２の波長は、第２の光２２０の波長と略同じである。
【００２９】
測定試料の調製において染色剤が用いられていないため、第１蛍光２１３と第２蛍光２２３は、自家蛍光に相当するものである。後述する実施形態２では、好酸球から生じる自家蛍光である第１蛍光２１３に基づいて、好酸球の分類を行う。
【００３０】
集光レンズ１４６は、第１前方散乱光２１１と第２前方散乱光２２１に対して色収差を補正する機能を備える。集光レンズ１４６は、第１前方散乱光２１１と第２前方散乱光２２１をピンホール１４８の位置に集光させる。また、集光レンズ１４６は、第１の光２１０と第２の光２２０の一部であって血球に照射されずにフローセル１１０を透過した光を、ビームストッパ１４７の位置に集光させる。図２（ｂ）に示すように、集光レンズ１４６の光軸は、Ｚ軸と平行であり、且つ、光軸２０１からＹ軸正方向にずれている。これにより、第１前方散乱光２１１の中心を通る光線は、集光レンズ１４６を透過した後、Ｚ軸正方向からややＹ軸負方向に傾く方向に進む。第２前方散乱光２２１の中心を通る光線は、集光レンズ１４６を透過した後、Ｚ軸正方向からややＹ軸正方向に傾く方向に進む。
【００３１】
図３（ｂ）に示すように、ビームストッパ１４７は、開口１４７ａ、１４７ｂと遮光部１４７ｃと、を備える。開口１４７ａ、１４７ｂの形状は、半円形状である。遮光部１４７ｃは、開口１４７ａと開口１４７ｂの間に形成されている。ビームストッパ１４７は、光を透過しない薄板状の部材によって構成されている。ビームストッパ１４７は、第１の光２１０および第２の光２２０のＸ軸方向の焦点位置に配置される。これにより、第１の光２１０と第２の光２２０は、遮光部１４７ｃ上でＹ軸方向に長いビーム形状となり、遮光部１４７ｃによって遮光される。第１前方散乱光２１１と第２前方散乱光２２１の大部分は、開口１４７ａ、１４７ｂを介してビームストッパ１４７を通過する。
【００３２】
図３（ｃ）に示すように、ピンホール１４８は、Ｙ軸方向に並ぶ２つの孔１４８ａ、１４８ｂを備える。第１前方散乱光２１１は、孔１４８ａの位置に集光され、第２前方散乱光２２１は、孔１４８ｂの位置に集光される。第１前方散乱光２１１と第２前方散乱光２２１は、それぞれ、孔１４８ａ、１４８ｂを通り抜ける。
【００３３】
図３（ｄ）に示すように、光検出器１３１は、フォトダイオードである。第１受光部１３１ａと第２受光部１３１ｂは、同一平面上に配置されている。光検出器１３１は、第１受光部１３１ａに照射された第１前方散乱光２１１に基づく信号と、第２受光部１３１ｂに照射された第２前方散乱光２２１に基づく信号とを出力する。
【００３４】
図２（ａ）に戻り、コリメータレンズ１４９は、第１側方散乱光２１２と、第２側方散乱光２２２と、第１蛍光２１３と、第２蛍光２２３とを、平行光に変換する。コリメータレンズ１４９の光軸は、フローセル１１０の流路１１５を通るＸ軸に平行な直線と一致する。ダイクロイックミラー１５０は、第２側方散乱光２２２をＺ軸正方向に反射し、第１側方散乱光２１２と、第１蛍光２１３と、第２蛍光２２３とを透過する。
【００３５】
集光レンズ１５１は、ダイクロイックミラー１５０により反射された第２側方散乱光２２２を集光する。光検出器１３２は、フォトダイオードである。光検出器１３２は、受光部１３２ａに照射された第２側方散乱光２２２に基づく信号を出力する。分光フィルタ１５２は、第１側方散乱光２１２と第２蛍光２２３を吸収し、第１蛍光２１３を透過する。集光レンズ１５３は、分光フィルタ１５２を透過した第１蛍光２１３を集光する。光検出器１３３は、アバランシェフォトダイオードである。光検出器１３３は、第１蛍光２１３に基づく信号を出力する。
【００３６】
次に、第１散乱光情報と第２散乱光情報とを対応付ける方法について説明する。
【００３７】
図２（ｂ）を参照して説明したように、第１の光２１０の照射位置２０２と、第２の光２２０の照射位置２０３とは、互いにＹ軸方向にずれている。流路１１５内の血球は、照射位置２０３から照射位置２０２へと流れる。したがって、照射位置２０３において血球に第２の光２２０が照射されてから、照射位置２０２において同じ血球に第１の光２１０が照射されるまでには、所定のタイムラグがある。このため、第１の光２１０により生じた第１前方散乱光２１１に基づく第１散乱光情報と、第２の光２２０により生じた第２前方散乱光２２１に基づく第２散乱光情報とを解析に用いる場合には、同一の血球から生じた第１散乱光情報と第２散乱光情報とを互いに対応付ける必要がある。
【００３８】
図４（ａ）に示すように、濃度が低い測定試料を測定したとき、第２前方散乱光２２１の検出タイミングと第１前方散乱光２１１の検出タイミングは離散的になる。この場合、通常、１つの血球に基づく第２前方散乱光２２１の検出タイミングと第１前方散乱光２１１の検出タイミングとの間の期間に、次の血球に基づく第２前方散乱光２２１の検出タイミングが入ることはない。したがって、第２前方散乱光２２１の検出タイミングの次に到来する第１前方散乱光２１１の検出タイミングを、同一血球に対する検出タイミングとして対応づけることができる。
【００３９】
図４（ａ）の例では、検出タイミングＴ２１〜Ｔ２３が、それぞれ、検出タイミングＴ１１〜Ｔ１３に対応づけられる。同一血球に基づく検出タイミングの時間差は、何れの血球の場合も略同じである。したがって、たとえば、互いに対応付けられた２つの検出タイミングの時間差Δｔ１、Δｔ２、Δｔ３を取得し、これら時間差を平均することにより時間差Δｔを算出する。こうすると、時間差Δｔを、各血球に対する第２前方散乱光２２１と第１前方散乱光２１１との検出タイミングの時間差として用いることができる。
【００４０】
図４（ｂ）に示すように、通常濃度の測定試料を測定したとき、第２前方散乱光２２１の検出タイミングと第１前方散乱光２１１の検出タイミングとが混在し合うことになる。この場合、同一の血球に基づく第２前方散乱光２２１の検出タイミングと第１前方散乱光２１１の検出タイミングとを対応付けることは難しい。しかしながら、フローセル１１０を流れる測定試料の速度は、濃度が高い場合と濃度が低い場合とで略同じである。よって、濃度が低い場合に取得された時間差Δｔを、濃度が高い場合の同一血球に基づく第２前方散乱光２２１の検出タイミングと第１前方散乱光２１１の検出タイミングとの時間差として用いることができる。図４（ｂ）の例では、時間差Δｔを用いることにより、検出タイミングＴ２ｎ、Ｔ２ｍが、それぞれ、検出タイミングＴ１ｎ、Ｔ１ｍに対応づけられる。
【００４１】
実施形態１では、測定を行う前に、濃度が低い試料をフローセル１１０に流して、予め時間差Δｔを取得しておき、実際の測定時に、同一の血球に基づく第２散乱光情報と第１散乱光情報とを、順次、時間差Δｔを用いて対応づける。同様に、実際の測定時に、同一の血球に基づく第２散乱光情報と蛍光情報とを、順次、時間差Δｔを用いて対応づける。このように、予め取得した時間差Δｔを用いることにより、同一の血球に基づく全ての情報を対応づけることができる。
【００４２】
次に、赤血球から生じる第１前方散乱光２１１と、赤血球以外の血球から生じる第１前方散乱光２１１との違いについて説明する。赤血球以外の血球は、白血球と血小板を含む。
【００４３】
光が照射されることにより粒子から生じる散乱光は、Ｍｉｅ散乱理論によれば、その粒子の粒径と屈折率とにより定まる。屈折率は、実数部と虚数部からなる複素数により表すことができる。すなわち、複素屈折率をｍ、屈折率をｎｒ、吸収をｎｉとすると、複素屈折率ｍは、以下の式により算出できる。
【００４４】
ｍ＝ｎｒ＋ｉｎｉ
【００４５】
上記式によれば、複素屈折率ｍは吸収ｎｉに応じて変化するため、光に対する粒子の吸収度合いが異なれば、屈折率も異なることになる。よって、異なる種類の粒子が互いに異なる吸収度合いを有する場合、これら粒子に対して光を照射すると、生じる散乱光も互いに異なったものとなる。
【００４６】
赤血球に含まれるヘモグロビンは、図５（ａ）に示すような吸収特性を有する。図５（ａ）において、横軸はヘモグロビンに照射される光の波長を示し、縦軸は吸収係数を示している。図５（ａ）には、酸素化ヘモグロビンと脱酸素化ヘモグロビンの吸収係数がそれぞれ示されている。赤血球中のヘモグロビンは、酸素化ヘモグロビンと、脱酸素化ヘモグロビンとが混在した状態にあり、一般的には、静脈血のヘモグロビン酸素飽和度は約７５％、すなわち、酸素化ヘモグロビンと脱酸素化ヘモグロビンの存在比率が３対１となっている。このため、血液検体に含まれる赤血球では、酸素化ヘモグロビンの性質が支配的となる。
【００４７】
波長が４００ｎｍ以上４３５ｎｍ以下の範囲では、酸素化ヘモグロビンの吸収係数は、他の波長帯に比べて数段大きくなっている。一方、波長が６１０ｎｍ以上７５０ｎｍ以下の範囲では、酸素化ヘモグロビンの吸収係数は、他の波長帯に比べて数段小さくなっている。すなわち、第１の光２１０に対する赤血球の吸収度合いと、第２の光２２０に対する赤血球の吸収度合いとの差は、大きいものとなる。他方、赤血球以外の血球はヘモグロビンを含んでいないため、第１の光２１０に対する赤血球以外の血球の吸収度合いと、第２の光２２０に対する赤血球以外の血球の吸収度合いとの差は、小さいものとなる。
【００４８】
以上のことから、赤血球と、赤血球以外の血球とでは、第１の光２１０に対する吸収度合いと、第２の光２２０に対する吸収度合いとの差が顕著に異なる。したがって、赤血球と、赤血球以外の血球とでは、第１の光２１０が照射される場合に生じる第１前方散乱光２１１の強度と、第２の光２２０が照射される場合に生じる第２前方散乱光２２１の強度との差も異なるものとなる。具体的には、赤血球では、第１散乱光情報は、第２散乱光情報よりも小さくなり易い。赤血球以外の血球では、第１散乱光情報と第２散乱光情報は、同程度になり易い。
【００４９】
次に、粒子分析のシミュレーションについて説明する。
【００５０】
本シミュレーションを以下の条件で行った。前方散乱光を受光する光学系のＮＡを０．２２とした。前方散乱光を受光する光学系として、集光レンズ１４６と、ビームストッパ１４７と、ピンホール１４８と、光検出器１３１とを備える光学系を用いた。ビームストッパ１４７における遮光部１４７ｃのＸ軸方向の幅を０．３ｍｍとした。フローセル１１０とビームストッパ１４７との間を６ｍｍとした。フローセル１１０に照射する第１の光２１０および第２の光２２０のＹ軸方向における幅を１０μｍとした。本シミュレーションでは、赤血球と同様の性質を有する８１個の球状粒子と、血小板と同様の性質を有する４個の球状粒子とを設定した。これら粒子に対して所定波長のレーザ光を照射することにより生じる前方散乱光の強度を、シミュレーションにより算出した。
【００５１】
本シミュレーションでは、赤血球と血小板に相当する粒子に、波長４０５ｎｍの第１の光２１０と、波長６４０ｎｍの第２の光２２０とを照射した。これにより得られた各粒子に対応する第１散乱光情報と第２散乱光情報とを、図５（ｂ）に示すスキャッタグラム３００上にプロットした。スキャッタグラム３００の横軸と縦軸は、それぞれ、第１散乱光情報と第２散乱光情報である。
【００５２】
続いて、赤血球に相当する粒子に基づいて、スキャッタグラム３００に、マップ３１０を設定した。マップ３１０の２軸は、赤血球容積とヘモグロビン濃度である。マップ３１０は、赤血球容積の値がＶ３０〜Ｖ１５０であり、ヘモグロビン濃度の値がＨＣ２２〜ＨＣ４６である８１個の粒子に基づいて作成されている。マップ３１０の格子の交点は、各粒子がプロットされた位置である。マップ３１０は、赤血球が分布する範囲に相当する。健常者の赤血球では、概ね、赤血球容積がＶ６０〜Ｖ１２０であり、ヘモグロビン濃度がＨＣ３１〜ＨＣ３７である。続いて、血小板に相当する粒子に基づいて、スキャッタグラム３００に、分布線３２０を設定した。分布線３２０は、体積の値がＶ０．５〜Ｖ３３である４個の粒子に基づいて作成されている。
【００５３】
本シミュレーションの結果から、被検者から採取される赤血球も、マップ３１０内に分布すると考えられ、被検者から採取される血小板も、分布線３２０上に分布すると考えられる。
【００５４】
本シミュレーションの結果において、赤血球の分布を示すマップ３１０は、血小板の分布を示す分布線３２０よりも、左上に位置しており、マップ３１０と分布線３２０とが重なり合わない。これは、上述したように、赤血球に含まれるヘモグロビンにより第１の光２１０が吸収され、第１散乱光情報が第２散乱光情報に比べて小さくなっているためと考えられる。被検者から採取される血小板の体積が大きいと、この血小板は、分布線３２０の延長線３２１に位置付けられる。しかしながら、延長線３２１もマップ３１０と重なり合わないため、延長線３２１上の血小板はマップ３１０と重ならない。したがって、本シミュレーションの結果に基づけば、血小板の体積が大きい場合でも、赤血球と血小板を精度良く弁別できる。
【００５５】
血小板と白血球は、概ね同様の屈折率を有していると考えられ、ヘモグロビンを有しないという点でも同様の性質を有している。このため、白血球も、概ね分布線３２０と延長線３２１上に分布すると考えられる。白血球は血小板に比べて大きいため、白血球は血小板よりも、第１散乱光情報と第２散乱光情報が大きい領域に位置付けられる。したがって、本シミュレーションの結果に基づけば、白血球はマップ３１０と重なりにくいため、赤血球と白血球を精度良く弁別できる。
【００５６】
よって、実施形態１のように第１の光２１０と第２の光２２０を用いると、赤血球と、白血球と、血小板とを精度良く分類できることが分かる。
【００５７】
実施形態１では、図６（ａ）に示すように、スキャッタグラム４００に設定した領域４１０、４２０、４３０を用いて、赤血球と、白血球と、血小板とを分類する。スキャッタグラム４００には、各血球から得られた第１散乱光情報と第２散乱光情報とに基づいて、各血球がプロットされている。スキャッタグラム４００の横軸と縦軸は、それぞれ、第１散乱光情報と第２散乱光情報である。領域４１０、４２０、４３０は、それぞれ、赤血球と、白血球と、血小板とが分布する領域である。スキャッタグラム４００において第２散乱光情報が閾値Ｖ１以下の部分は、ノイズを含む信号のため除去されている。
【００５８】
図６（ａ）に示すように、赤血球は分布曲線４０１に沿うように分布し、白血球と血小板は分布曲線４０２に沿うように分布する。分布曲線４０２は、図５（ｂ）の分布線３２０と延長線３２１に対応する。このように、実測値において、分布曲線４０１、４０２は、互いに異なる角度で延びており交わらないため、領域４１０、４２０、４３０は、互いに重なりにくい。
【００５９】
ここで、図５（ｂ）に示すマップ３１０は、赤血球と同様の性質を有し、赤血球容積の値がＶ３０〜Ｖ１５０であり、ヘモグロビン濃度の値がＨＣ２２〜ＨＣ４６である８１個の粒子に基づいて作成された。したがって、図６（ｂ）に示すように、スキャッタグラム４００の赤血球に対応する領域４１０に、赤血球容積とヘモグロビン濃度とを示すマップ情報を組み込むことにより、領域４１０内の各血球について、赤血球容積とヘモグロビン濃度とを取得できる。なお、図６（ｂ）は、便宜上、図６（ａ）のスキャッタグラム４００において第１散乱光情報が小さい部分を示している。
【００６０】
具体的には、図６（ｂ）に示すように、実際の測定で得られたスキャッタグラム４００に、マップ情報を含む領域４１０を適用する。そして、領域４１０を、領域４１０に含まれる血球と共に展開して、図６（ｃ）に示すスキャッタグラム５００を作成し、スキャッタグラム５００上のプロット位置に基づいて、血球ごとに赤血球容積とヘモグロビン濃度を取得する。スキャッタグラム５００において、横軸はヘモグロビン濃度を示し、縦軸は赤血球容積を示す。
【００６１】
より具体的には、処理部２１の記憶部２１ａは、変換情報を記憶している。変換情報は、変換テーブルと変換プログラムから構成される。変換テーブルは、図６（ｂ）に示す領域４１０内の８１個の交点が、図６（ｃ）に示すスキャッタグラム５００のどの位置にプロットされるかを示すテーブルである。変換プログラムは、図６（ｂ）に示す領域４１０の交点の間に位置する粒子を、交点との距離に基づいてスキャッタグラム５００上の位置に変換するためのプログラムである。すなわち、変換情報は、第１散乱光情報および第２散乱光情報の組み合わせと、赤血球容積およびヘモグロビン濃度の組み合わせと、の関係を規定する情報である。処理部２１は、変換情報を用いて、第１散乱光情報および第２散乱光情報から、赤血球容積とヘモグロビン濃度を取得する。
【００６２】
変換情報は変換テーブルのみから構成されても良い。この場合の変換テーブルは、図６（ｂ）に示す領域４１０の格子間がさらに所定数だけ分割されている場合に、さらに多くの交点が、スキャッタグラム５００のどの位置にプロットされるかを示すテーブルである。この場合、分割する数を増やすことにより、変換情報の容量が大きくなるものの、変換精度を高くできる。
【００６３】
次に、血液分析装置１０による処理について図７を参照して説明する。図７中、ステップＳ１１〜Ｓ１７は、測定制御部１１の制御のもとで行われ、ステップＳ２１〜Ｓ２４は、処理部２１の制御のもとで行われる。
【００６４】
血液分析装置１０が起動されると、図４（ａ）、（ｂ）を参照して説明したように、予め時間差Δｔが取得される。取得された時間差Δｔは、測定部１０ａの記憶部１１ａに記憶される。
【００６５】
図７に示すように、ステップＳ１１において、血液検体と試薬１３ａとが混和され、測定試料が調製される。この場合の測定試料の調製は、溶血剤と染色剤が混和されることなく行われる。
【００６６】
ステップＳ１２において、測定試料がフローセル１１０に流される。ステップＳ１３において、第１の光２１０と第２の光２２０が、フローセル１１０を流れる測定試料に照射される。フローセル１１０を流れる血球に第１の光２１０が照射されることにより得られる第１前方散乱光２１１と第１蛍光２１３とが、第１受光部１３１ａと光検出器１３３により受光される。フローセル１１０を流れる血球に第２の光２２０が照射されることにより得られる第２前方散乱光２２１と第２側方散乱光２２２とが、第２受光部１３１ｂと受光部１３２ａにより受光される。
【００６７】
ステップＳ１４において、測定制御部１１は、第２散乱光情報が図６（ａ）に示す閾値Ｖ１より大きいか否かを判定する。閾値Ｖ１は微小な値に設定されており、ノイズを含む信号を除くために用いられる。ステップＳ１４においてＹＥＳと判定すると、ステップＳ１５において、測定制御部１１は、時間差Δｔに基づいて、同一の血球から生じた第１散乱光情報と、第２散乱光情報と、第３散乱光情報と、蛍光情報とを互いに対応付けて、記憶部１１ａに記憶する。他方、ステップＳ１４においてＮＯと判定すると、測定制御部１１は、この場合の血球の情報を記憶せず、処理をステップＳ１６に進める。
【００６８】
ステップＳ１６において、測定制御部１１は、ステップＳ１４が最初に開始されてから所定時間が経過したか否かを判定する。測定制御部１１は、所定時間が経過するまで、血球ごとにステップＳ１４、Ｓ１５の処理を繰り返し行う。ステップＳ１６においてＹＥＳと判定すると、ステップＳ１７において、測定制御部１１は、記憶部１１ａに記憶した測定データを、情報処理部１０ｂに送信する。
【００６９】
ステップＳ２１において、処理部２１は、測定部１０ａから測定データを受信したか否かを判定する。ステップＳ２１においてＹＥＳと判定すると、ステップＳ２２において、処理部２１は、図６（ａ）に示すスキャッタグラム４００に基づいて、領域４１０、４２０、４３０の血球数を計数し、それぞれ、赤血球数と、白血球数と、血小板数とを取得する。
【００７０】
ステップＳ２２では、説明の便宜上、スキャッタグラム４００上に領域４１０、４２０、４３０を設定し、領域４１０、４２０、４３０の血球数を計数している。しかしながら、スキャッタグラム４００と領域４１０、４２０、４３０を必ずしも作成する必要はなく、領域４１０、４２０、４３０の血球数をデータ処理により取得しても良い。
【００７１】
後述する処理においても同様である。すなわち、ステップＳ２３においても、スキャッタグラム５００を必ずしも作成する必要はなく、各値をデータ処理により取得しても良い。ステップＳ２０１においても、スキャッタグラム４００と領域４１０、４３０を必ずしも作成する必要はなく、領域４１０、４３０の血球数をデータ処理により取得しても良い。ステップＳ２０２においても、スキャッタグラム７００と領域７１０、７１１、７１２、７１３を必ずしも作成する必要はなく、領域７１０、７１１、７１２、７１３の血球数をデータ処理により取得しても良い。ステップＳ２０３においても、スキャッタグラム７３０と領域７３１を必ずしも作成する必要はなく、領域７３１の血球数をデータ処理により取得しても良い。
【００７２】
続いて、ステップＳ２３において、処理部２１は、変換情報を用いて、スキャッタグラム４００の領域４１０を、図６（ｃ）に示すスキャッタグラム５００に変換する。これにより、処理部２１は、領域４１０内の赤血球ごとに、赤血球容積とヘモグロビン濃度を取得する。
【００７３】
さらに、ステップＳ２３において、処理部２１は、以下の各値を取得する。ステップＳ２２で取得した赤血球数をＲＢＣとして、処理部２１は、平均赤血球容積すなわちＭＣＶと、平均赤血球血色素濃度すなわちＭＣＨＣとを求める。ＭＣＶは、スキャッタグラム５００における全粒子の赤血球容積の和を、ＲＢＣで割ることにより算出される。ＭＣＨＣは、スキャッタグラム５００における全粒子のヘモグロビン濃度の和を、ＲＢＣで割ることにより算出される。処理部２１は、平均赤血球血色素量すなわちＭＣＨを、ＭＣＶ×ＭＣＨＣにより算出する。処理部２１は、ヘマトクリット値すなわちＨＣＴを、ＭＣＶ×ＲＢＣにより算出する。処理部２１は、ヘモグロビン量すなわちＨＧＢを、ＨＣＴ×ＭＣＨＣにより算出する。ＨＧＢは、ＭＣＨ×ＲＢＣによっても算出できる。
【００７４】
このように、処理部２１は、ヘモグロビンに関する値、すなわち、ＭＣＨＣと、ＭＣＨと、ＨＧＢとを取得し、赤血球容積に関する値、すなわち、ＭＣＶと、ＭＣＨと、ＨＣＴとを取得する。
【００７５】
ステップＳ２４において、処理部２１は、図８に示す画面６００を、出力部２２に表示する。画面６００は、リスト６０１〜６０３と、図６（ａ）、（ｂ）に示すスキャッタグラム４００と、図６（ｃ）に示すスキャッタグラム５００と、を含む。リスト６０１〜６０３は、ステップＳ２２、Ｓ２３で取得した値を含む。オペレータは、画面６００を参照することにより、測定結果を視覚的に把握できる。画面６００には、図８に示すような２軸からなるスキャッタグラムだけでなく、他のパラメータの軸がさらに追加された３軸からなるスキャッタグラムを含んでも良い。
【００７６】
実施形態１によれば、処理部２１は、赤血球ごとに赤血球容積とヘモグロビン濃度を算出してスキャッタグラム５００を作成し出力部２２に表示している。後述する比較手法では赤血球を溶血してヘモグロビンを測定していたが、実施形態１では赤血球ごとに個別の信号を基に解析を行うことができるため、より高精度な分析が可能となる。また、赤血球容積とヘモグロビン濃度を示すスキャッタグラム５００から、各赤血球がどのように分布しているかも把握できる。この赤血球の分布情報からオペレータは測定した検体に対して種々の判断を行うことも可能となる。
【００７７】
実施形態１によれば、溶血と染色を行うことなく測定試料を調製し、血球を測定するための光学検出部１４を用いて、赤血球と、白血球と、血小板とを分類し、ヘモグロビンに関する値を取得できる。これにより、溶血剤と染色剤が不要であるため、測定に要するコストを低減でき、環境負荷を抑えることができる。血液分析装置１０が備える試薬としては、希釈液である試薬１３ａのみであるため、さらに、測定に要するコストを低減でき、環境負荷を抑えることができる。
【００７８】
実施形態１によれば、別途、ヘモグロビンを測定するための検出部を備える必要がなく、赤血球と血小板を測定するための検出部を備える必要がないため、血液分析装置１０を小型化できる。白血球の分類を行うための検出部と、ヘモグロビンを測定するための検出部とを別々に用意することなく、白血球の分類とヘモグロビンの測定とで光学検出部１４を共用するため、血液分析装置１０を小型化できる。
【００７９】
次に、実際に取得されたＭＣＶ、ＭＣＨＣ、ＭＣＨ、ＨＧＢの精度を検証する。
【００８０】
この検証では、異なる被検者から採取された１５６の血液検体に基づいて、実施形態１により得られた結果と、溶血剤と染色剤等の試薬を用いて各測定項目のための測定試料を調製し、それぞれＲＢＣ／ＰＬＴ検出部、ＨＧＢ検出部、および白血球数を測定するための光学検出部を用いて測定を行う比較手法により得られた結果とを比較する。比較手法では、シスメックス株式会社製の多項目自動血球分析装置ＸＮ−１０００を用いて測定を行った。
【００８１】
図９（ａ）〜（ｄ）の縦軸は、それぞれ、実施形態１により得られた値を示す。図９（ａ）〜（ｄ）の横軸は、それぞれ、比較手法により得られた値を示す。図９（ａ）〜（ｄ）のグラフには、実施形態１による値と、比較手法による値とをパラメータとして、それぞれ、１５６の血液検体に対応する点がプロットされている。図９（ａ）〜（ｄ）のグラフには、１５６の血液検体に対応する点の近似直線が示されている。図９（ａ）〜（ｄ）には、横軸をｘとし縦軸をｙとした場合の近似直線の式、および、実施形態１による結果と比較手法による結果との相関係数Ｒの値が示されている。近似直線の傾きと相関係数の値は、何れも１に近づくほど、実施形態１による結果と比較手法による結果との相関性が高くなる。
【００８２】
図９（ａ）、（ｃ）、（ｄ）に示すように、ＭＣＶと、ＭＣＨと、ＨＧＢでは、実施形態１による結果と比較手法による結果との相関性は、比較的高い。一方、図９（ｂ）に示すように、ＭＣＨＣでは、実施形態１の結果と比較手法の結果との相関性は、やや低い。しかしながら、実施形態１の場合、ＭＣＶ×ＭＣＨＣにより算出されるＭＣＨは、ＭＣＶ、ＭＣＨＣよりも相関性が高く、ＭＣＨ×ＲＢＣにより算出されるＨＧＢは、ＭＣＨよりも相関性が高い。さらに、ＭＣＨＣよりもＨＧＢの方が、臨床的な重要度が高い。よって、実施形態１による結果は、溶血剤と染色剤等の試薬を用いて測定試料を調製する比較手法による結果に置き換えて使用可能なレベルの精度を有すると言える。
【００８３】
＜実施形態２＞
実施形態２では、実施形態１と同様に溶血と染色を行うことなく測定試料を調製した後、測定試料をフローセル１１０に流し、赤血球と血小板の情報を取得する処理と、白血球の情報を取得する処理とを順に行う。実施形態２では、血液分析装置１０の構成は、実施形態１と同様であり、血液分析装置１０による処理が、後述するように実施形態１と比べて一部変更される。
【００８４】
実施形態２の場合、赤血球と血小板の分類については、実施形態１と同様、図６（ａ）のスキャッタグラム４００において領域４１０、４３０を設定することにより行う。一方、白血球の分類については、第１散乱光情報が閾値Ｖ２より大きい血球のみを取得し、図１０（ａ）に示すスキャッタグラム７００を作成する。スキャッタグラム７００の横軸と縦軸は、スキャッタグラム４００と同じである。スキャッタグラム７００に設定した領域７１０を用いて白血球を分類する。さらに、領域７１０内に設定した領域７１１、７１２、７１３を用いて、それぞれ、リンパ球と、単球と、顆粒球とを分類する。
【００８５】
リンパ球と、単球と、顆粒球の分類は、領域７１０内の血球に基づいて、図１０（ｂ）に示すスキャッタグラム７２０を作成して行っても良い。スキャッタグラム７２０の横軸と縦軸は、それぞれ、第３散乱光情報と第１散乱光情報である。スキャッタグラム７２０に設定された領域７２１、７２２、７２３は、それぞれ、リンパ球と、単球と、顆粒球とが分布する領域である。
【００８６】
さらに、スキャッタグラム７００において、領域７１０内の血球に基づいて、図１０（ｃ）に示すスキャッタグラム７３０を作成する。スキャッタグラム７３０の横軸と縦軸は、それぞれ、蛍光情報と第１散乱光情報である。スキャッタグラム７３０に設定した領域７３１を用いて好酸球を分類する。好酸球は、第１の光２１０が照射されると自家蛍光を発するため、図１０（ｃ）に示すように、スキャッタグラム７３０上において他の白血球よりも蛍光情報が大きい領域に分布する。スキャッタグラム７３０の縦軸は、第２散乱光情報でも良い。
【００８７】
図１１に示すように、実施形態２の測定部１０ａによる処理は、図７に示す実施形態１の測定部１０ａによる処理と比較して、ステップＳ１６に代えてステップＳ１０１が追加され、ステップＳ１０１とステップＳ１７の間に、ステップＳ１０２〜Ｓ１０４が追加されている。実施形態２の情報処理部１０ｂによる処理は、実施形態１の情報処理部１０ｂによる処理と比較して、ステップＳ２２に代えてステップＳ２０１が追加されており、ステップＳ２３とステップＳ２４の間に、ステップＳ２０２、Ｓ２０３が追加されている。以下、実施形態１と異なるステップを説明する。
【００８８】
ステップＳ１０１において、測定制御部１１は、ステップＳ１４が最初に開始されてから第１の時間が経過したか否かを判定する。測定制御部１１は、第１の時間が経過するまでステップＳ１４、Ｓ１５を繰り返し行う。これにより、第１の時間においてフローセル１１０を流れる測定試料を第１の部分とすると、第１の部分に基づく血球に関する情報が取得される。第１の部分に基づく血球に関する情報は、赤血球と血小板の分類で用いられる。測定制御部１１は、測定試料をフローセル１１０に流す処理と、測定試料に第１の光２１０と第２の光２２０とを照射し各光の光を受光する処理とを、継続する。
【００８９】
ステップＳ１０２において、測定制御部１１は、第１散乱光情報が図１０（ａ）に示す閾値Ｖ２より大きいか否かを判定する。ステップＳ１０２においてＹＥＳと判定すると、ステップＳ１０３において、測定制御部１１は、同一の血球から生じた第１散乱光情報と、第２散乱光情報と、第３散乱光情報と、蛍光情報とを互いに対応付けて、記憶部１１ａに記憶する。これにより、第１散乱光情報が閾値Ｖ２以下の血球が、解析対象から除外される。
【００９０】
ステップＳ１０４において、測定制御部１１は、ステップＳ１０２が最初に開始されてから第２の時間が経過したか否かを判定する。第２の時間は、第１の時間よりも長い。測定制御部１１は、第２の時間が経過するまでステップＳ１０２、Ｓ１０３を繰り返し行う。これにより、第２の時間においてフローセル１１０を流れる測定試料を第２の部分とすると、第２の部分に基づく血球に関する情報が取得される。第２の部分に基づく血球に関する情報は、白血球の分類で用いられる。
【００９１】
測定試料中の白血球は赤血球に比べて数段少ない。しかしながら、第２の時間は第１の時間よりも長く、フローセル１１０を流れる測定試料の速度は一定であることから、第２の部分の量は、第１の部分の量よりも多い。したがって、ステップＳ１０２〜Ｓ１０４において、白血球に関する情報を十分に取得できるため、白血球の分類と計数の精度を高めることができる。図１０（ａ）のスキャッタグラム７００に示すように、赤血球に関する大部分の情報が記憶部１１ａに記憶されないため、記憶部１１ａの記憶容量を効率良く利用できる。
【００９２】
試料調製部１３において濃度の異なる２つの測定試料を用意し、低濃度の測定試料を用いて赤血球に関する情報と血小板に関する情報を取得し、高濃度の測定試料を用いて白血球に関する情報を取得しても良い。この場合も、白血球に関する情報を十分に取得できる。
【００９３】
ステップＳ２０１において、処理部２１は、図６（ａ）に示すスキャッタグラム４００に基づいて、領域４１０、４３０の血球数を計数し、それぞれ、赤血球数と血小板数とを取得する。この場合のスキャッタグラム４００は、測定試料の第１の部分から得られた情報に基づくものである。
【００９４】
ステップＳ２０２において、処理部２１は、図１０（ａ）に示すスキャッタグラム７００に基づいて、領域７１０、７１１、７１２、７１３内の血球数を計数し、それぞれ、白血球数と、リンパ球数と、単球数と、顆粒球数とを取得する。スキャッタグラム７００は、測定試料の第２の部分から得られた情報に基づくものである。ステップＳ２０３において、処理部２１は、図１０（ｃ）に示すスキャッタグラム７３０に基づいて、領域７３１内の血球数を計数し、好酸球数を取得する。
【００９５】
このように、処理部２１は、第１散乱光情報と第２散乱光情報に基づいて、領域７１０を設定することにより白血球を分類して計数する。処理部２１は、第１散乱光情報と第２散乱光情報に基づいて、領域７１１〜７１３を設定することにより白血球をさらに３つのサブグループに分類して計数する。処理部２１は、第１散乱光情報と、第２散乱光情報と、蛍光情報に基づいて、領域７３１を設定することにより好酸球を分類して計数する。
【００９６】
ステップＳ２４において、処理部２１は、図１２に示す画面６１０を、出力部２２に表示する。画面６１０は、リスト６１１〜６１３と、図６（ａ）、（ｂ）に示すスキャッタグラム４００と、図６（ｃ）に示すスキャッタグラム５００と、図１０（ａ）に示すスキャッタグラム７００と、図１０（ｃ）に示すスキャッタグラム７３０と、を含む。リスト６１１、６１３は、ステップＳ２０１、Ｓ２３で取得した値を含む。リスト６１２は、ステップＳ２０２、Ｓ２０３で取得した値を含む。
【００９７】
測定試料の第２の部分を用いて、白血球と血小板に関する情報を取得しても良い。この場合、ステップＳ１０２において、測定制御部１１は、第２散乱光情報が閾値Ｖ１より大きい場合に、各光に基づく情報を記憶する。処理部２１は、測定試料の第１の部分から得られた情報に基づいて、赤血球について分類と計数を行い、測定試料の第２の部分から得られた情報に基づいて、白血球と血小板について分類と計数を行う。第１の部分よりも多い量の第２の部分を用いて、白血球と血小板に関する情報を取得するため、赤血球よりも数の少ない白血球と血小板について、分類と計数の精度を高めることができる。
【００９８】
測定試料の第１の部分と第２の部分を測定した後、さらに第３の時間だけ測定試料の第３の部分を測定しても良い。この場合、第３の時間は、第１の時間よりも長く、第３の部分の量は、第１の部分の量よりも多い。測定制御部１１は、第２散乱光情報が閾値Ｖ１より大きく且つ閾値Ｖ３より小さいときに、各光に基づく情報を記憶部１１ａに記憶する。処理部２１は、図１３に示すスキャッタグラム８００に基づいて、領域８１０内の血球数を計数し、血小板数を取得する。スキャッタグラム８００の横軸と縦軸は、スキャッタグラム４００と同じである。スキャッタグラム８００は、第３の部分から得られた情報に基づくものである。
【００９９】
次に、実際に取得されたリンパ球数と、単球数と、顆粒球数の精度を検証する。
【０１００】
この検証では、異なる被検者から採取された８つの血液検体に基づいて、実施形態２に基づく処理によって得られた結果と、溶血剤と染色剤等の試薬を用いて測定試料を調製する比較手法によって得られた結果とを比較する。
【０１０１】
図１４（ａ）〜（ｃ）の縦軸は、それぞれ、実施形態２により得られた血球の全体の血球に占める比率を示す。図１４（ａ）〜（ｃ）の横軸は、それぞれ、比較手法により得られた血球の全体の血球に占める比率を示す。図１４（ａ）〜（ｃ）のグラフには、実施形態２による値と、比較手法による値とをパラメータとして、それぞれ、８つの血液検体に対応する点がプロットされている。図１４（ａ）〜（ｃ）のグラフには、８つの血液検体に対応する点の近似直線が示されている。図１４（ａ）〜（ｃ）には、横軸をｘとし縦軸をｙとした場合の近似直線の式、および、実施形態２による結果と比較手法による結果との相関係数Ｒ２の値が示されている。近似直線の傾きと相関係数の値は、何れも１に近づくほど、実施形態２による結果と比較手法による結果との相関性が高くなる。
【０１０２】
図１４（ａ）、（ｃ）に示すように、リンパ球と顆粒球では、実施形態２による結果と比較手法による結果との相関性は、比較的高い。したがって、実施形態２によれば、リンパ球と顆粒球の結果は、溶血剤と染色剤等の試薬を用いて測定試料を調製する比較手法と、同程度の精度を有することが分かる。一方、図１４（ｂ）に示すように、単球では、実施形態２による結果と比較手法による結果との相関性は、やや低い。しかしながら、実施形態２において、血液検体の希釈度と、第２の時間とを調整すれば、実施形態２による単球の結果と比較手法による単球の結果との相関性が高められる可能性がある。
【符号の説明】
【０１０３】
１０  …  血液分析装置
１３  …  試料調製部
２１  …  処理部
２２  …  出力部
１１０  …  フローセル
１２１  …  第１光源
１２２  …  第２光源
１３１ａ  …  第１受光部
１３１ｂ  …  第２受光部
２１０  …  第１の光
２１１  …  第１前方散乱光
２２０  …  第２の光
２２１  …  第２前方散乱光
４００、５００、７００  …  スキャッタグラム
【図１】
0006352750.tif 000002
【図２】
0006352750.tif 000003
【図３】
0006352750.tif 000004
【図４】
0006352750.tif 000005
【図５】
0006352750.tif 000006
【図６】
0006352750.tif 000007
【図７】
0006352750.tif 000008
【図８】
0006352750.tif 000009
【図９】
0006352750.tif 000010
【図１０】
0006352750.tif 000011
【図１１】
0006352750.tif 000012
【図１２】
0006352750.tif 000013
【図１３】
0006352750.tif 000014
【図１４】
0006352750.tif 000015