(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ピペットのピペット本体に取り付けられるように配置される第１端部と、
少なくとも一部において、前記ピペットによって吸引されるように意図される試料に挿入されるように配置される縁部によって画定される開口部を有する第２端部と、
を有するピペットチップであって、
前記開口部を有する前記第２端部は、前記第２端部が、前記試料を含有する容器を覆う蓋を切り開くことができるように、鋭利な輪郭を有し、前記鋭利な輪郭は、
前記開口部を有する前記第２端部は、前記ピペットチップの中心軸に対して垂直に画定される平面に対して、第１角度で傾斜し、前記第１角度は、０度より大きく、
前記縁部は、前記開口部から出発する第２角度で余分に傾斜する表面を有し、
前記ピペットチップは、熱可塑性物質から作られる、
ピペットチップ。
【請求項２】
前記第１角度は、５度から９０度の間である、請求項１に記載のピペットチップ。
【請求項３】
前記第１角度は、３０度から５０度の間である、請求項２に記載のピペットチップ。
【請求項４】
前記第１角度は、３０度から４５度の間である、請求項２に記載のピペットチップ。
【請求項５】
前記第２角度が前記第２端部の最も延在する部分において最大となるように、前記第２角度は、縁部表面における位置に応じて異なる、請求項１に記載のピペットチップ。
【請求項６】
前記縁部が前記開口部の一部だけに対して前記第２角度で傾斜する、請求項１に記載のピペットチップ。
【請求項７】
熱可塑性物質から作られた前記ピペットチップは、ポリカーボネート、ポリフェニレンオキシド、熱可塑性ポリウレタン、熱可塑性ポリスルホン、熱可塑性ポリエーテルイミド、熱可塑性ポリエーテルスルホン、熱可塑性ポリフェニルスルホン及びポリプロピレンのうちの１つである、請求項１に記載のピペットチップ。
【請求項８】
前記ピペットチップは、炭素繊維及びガラス繊維のうちの少なくとも一方で補強される、請求項７に記載のピペットチップ。
【請求項９】
前記縁部の一部は、鋭利な輪郭を有さない、請求項１に記載のピペットチップ。
【請求項１０】
前記縁部の前記一部は、その内部及び外部のうちの少なくとも一方において、丸みを帯びる、請求項９に記載のピペットチップ。
【請求項１１】
前記縁部は全長を有し、前記縁部の前記一部は、前記全長の最大１０％に沿って延在する、請求項９に記載のピペットチップ。
【請求項１２】
前記縁部の前記一部は、前記全長の最大５％に沿って延在する、請求項１１に記載のピペットチップ。
【請求項１３】
前記縁部の前記一部は、前記全長の最大３％に沿って延在する、請求項１１に記載のピペットチップ。
【請求項１４】
液体の感知を可能にするように、添加物として、導電性材料を含む、請求項１に記載のピペットチップ。
【請求項１５】
液体の感知を可能にするように、添加物として、炭素材料を含む、請求項１に記載のピペットチップ。
【請求項１６】
請求項１に記載のピペットチップ、
を備える、ピペット。
【請求項１７】
請求項１６に記載のピペット、
を含む、ロボットピペッター。
【請求項１８】
蓋で覆われ、かつ、試料を含有する少なくとも１つの容器と同様に、請求項１６に記載の、ピペットチップを有するピペット、
を含み、
前記試料は、少なくとも一部において、前記ピペットを用いて前記容器から吸引される、
一式。
【請求項１９】
容器から少なくとも一部において試料を吸引する方法であって、
ａ）請求項１６に記載の、ピペットチップを有するピペットを提供する工程と、
ｂ）蓋で覆われ、かつ、試料を含有する容器を提供する工程と、
ｃ）前記ピペットを用いて前記蓋を切り開く工程と、
ｄ）少なくとも一部において、前記ピペットによって前記試料を吸引する工程と、
を含む、方法。
【請求項２０】
容器から少なくとも一部において試料を吸引する方法であって、
ａ）請求項１７に記載のロボットピペットを提供する工程と、
ｂ）蓋で覆われ、かつ、試料を含有する容器を提供する工程と、
ｃ）前記ロボットピペットを用いて前記蓋を切り開く工程と、
ｄ）少なくとも一部において、前記ロボットピペットによって前記試料を吸引する工程と、
を含む、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ピペットチップ、そのようなチップを備えるピペット、そのようなピペットチップと、試料を含有する少なくとも１つの容器とを含む一式及びそのようなピペットを使用する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
正確な液体ハンドリングは、通常、ピペットを使用して行われる。ピペットは、分子生物学、分析化学及び医療検査において、一般的に使用される。ピペットは、ガラスピペット単体から、より複雑な調整が可能な、あるいは、電子的なピペットに至る、様々なレベルの正確さと共に、種々の目的に応じた様々な設計を有する。多くのピペットの種類は、液体収容チャンバの上方に部分的な真空を作り出し、この真空を選択的に解放して液体を吸引したり、分注したりすることによって機能する。
【０００３】
１から１０００マイクロリットルの間を分注するピペットが、マイクロピペットと呼ばれる一方で、マクロピペットは、より多くの量を分注する。エアディスプレイスメントピペットとポジティブディスプレイスメントピペットの２種類のマイクロピペットが、一般的に使用されている。特に、ピストン駆動式エアディスプレイスメントピペットは、使い捨てのチップから調整可能な量の液体を分注するマイクロピペットである。
【０００４】
図１は、ピペット本体３、ピペットチップ５、ピストン７を有する公知のピペット１の外観を示す。ピペット本体３は、プランジャー（図示しない）を内部に含み、プランジャーは、ピストン７が圧縮され、そして、解放されるとき、液体をピペットチップ５の中に吸い上げる吸引力を提供する。プランジャーの最大変位は、ピペット本体３におけるダイヤル９により設定され、吐出量（ｄｅｌｉｖｅｒｌｙ  ｖｏｌｕｍｅ）の変更を可能にする。
【０００５】
ホールピペット又はメスピペット（ｖｏｌｕｍｅｔｒｉｃ  ｏｒ  ｇｒａｄｕａｔｅｄ  ｐｉｐｅｔｔｅｓ）などのより大きな容量のチューブ状ピペットは、ピペット分注器を一時的に取り付けることによって使用される。ピペットシリンジは、一般に、０．５ｍＬから２５ｍＬの範囲の量を取り扱う。マイクロピペットは、使い捨てのチップを使用して試料の汚染を防ぐ。
【０００６】
使い捨てのピペットチップ５と共に作用するピペットは、通常、マイクロピペットである。チップは、主にポリプロピレンから作られ、これは、化学反応における不活性、化学物質に対する耐性、そして可撓性を有するためである。この可撓性は、ピペットチップ５とピペット本体３との間に気密封止を提供するために必要である。ピペットチップ５に、より硬質な材料を使用するとき、より軟質で可撓性を有するインサート（図示しない）がピペットチップ５のピペット側でピペットチップ５に使用されて、ピペットチップ５とピペット本体３との間に気密封止を提供することができる。ピペット本体３とピペットチップ５との間のいかなる空間も密封するように、適切な軟質材料の１つ以上のシール用Ｏリングを有するピペットを使用することも可能である。
【０００７】
開口したエッペンドルフチューブ又はマイクロタイタープレートなどの開放容器から液体を吸引する際、可撓性は問題とならない。非常に限られたゲル（ｖｅｒｙ  ｎａｒｒｏｗ  ｇｅｌ）（例えば、シーケンシングゲル）を投入するとき、可撓性が問題となる可能性がある。これは、非常に薄いゲルを収容するガラスプレート間に嵌合することができるように、吸引／分注端部（ｄｒａｗｉｎｇ／ｄｉｓｐｅｎｓｉｎｇ  ｅｎｄ）においてチップが超薄型である必要があるからである。例えば、ポリプロピレンなどの可撓性材料から作られたチップは、その形状を維持するのに十分な硬さを有さない。この場合、ポリカーボネートが使用され得る（ドラマンド−シグマ（Ｄｒｕｍｍｏｎｄ−Ｓｉｇｍａ））。
【０００８】
分子生物学において、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ：Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ  Ｃｈａｉｎ  Ｒｅａｃｔｉｏｎ）などの核酸増幅技術が、ＲＮＡやＤＮＡの短いポリヌクレオチド配列（最大１０００ポリヌクレオチド、しかし、時折より長く、最大１００００ヌクレオチド又はそれ以上）の増幅のために使用される。ＰＣＲプロセスは、１９８９年にキャリー・マリス（Ｋａｒｙ  Ｍｕｌｌｉｓ）によって初めて行われた。そのようなプロセスの他の例として、核酸配列ベース増幅（ＮＡＳＢＡ：Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ−Ｂａｓｅｄ  Ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ）がある。
【０００９】
適切なプラスチックホイルから作製された密封容器でＰＣＲを行うとき（ＰＣＴ／ＮＬ２０１１／０５０３５４、未公開）、容器から試料を回収するのが煩雑かもしれない。容器と共に雌型ホイルを有して、保持ブロック（ｈｏｌｄｉｎｇ  ｂｌｏｃｋ）を提供することにより、更なる処理のために、容器はブロックに固定され得る。接着フィルム（プレートシーラー）により密封されたマイクロタイタープレートが、雌型ブロックを用いずに保持器として使用され得る。いくつかの手段が、容器を開けるために使用され得る。ナイフ（例えば、メス）、あるいは、適切な材料から作られる他の鋭利な物体で、容器が開けられ、容器内の液体試料が、ピペットによる吸引のために利用可能になる。相互汚染は危険である。代わりに、試料は、鋭利な針を保持するシリンジによって吸引され得る。通常、シリンジ及び針の両方は、次に続く試料の汚染を防ぐために、１つの試料を吸引した後に破棄されなければならず、これが費用のかかる手順となっている。密封されたマイクロタイタープレートは、接着プラスチックホイル（プレートシーラー）を除去することにより開けられ得る。
【発明の概要】
【００１０】
少なくともＰＣＲの分野において、簡便で、かつ、費用効率の良い方法で、プラスチックホイルから作られるか、あるいは、プラスチックホイルにより覆われる容器から試料（一部）を吸引するために、適切な器具が必要である。他の実施例では、シールにより覆われた、血液や感染因子を含有するチューブがあるが、これは穿刺される可能性がある。
【００１１】
本発明の目的は、そのような器具を提供することである。
【００１２】
その趣旨で、本発明は、請求項１で請求されるようなピペットを提供する。この器具の実施形態は、他の請求項で請求される。
【００１３】
更に、請求項は、そのようなチップを備えるピペット、そのようなピペットチップと、試料を含有する少なくとも１つの容器とを含む一式、そして、そのようなピペットを使用する方法に関する。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
本発明は、範囲を限定せず、発明の実施形態を示すことのみを意図する図面を参照して、詳細に説明される。本発明の範囲は、添付の請求項で定められ、かつ、技術的な等価物により定められる。
【図１】先行技術から公知のピペットを示す図である。
【図２ａ】ピペットのチップの実施形態の断面図である。
【図２ｂ】代替的な実施形態の断面図である。
【図３ａ】図２ａに従ったピペットの側面図である。
【図３ｂ】図２ｂに従ったピペットの側面図である。
【図３ｃ】ピペットチップの端部における縁部の拡大図である。
【図４ａ】ピペットの代替的なチップの断面図である。
【図４ｂ】ピペットの代替的なチップの断面図である。
【図４ｃ】ピペットの代替的なチップの断面図である。
【図５ａ】例えば、ＤＮＡ材料といった液体試料を含有する密封袋を作製するための方法の一連の工程を示し、その密封袋から、例えば、ＤＮＡ材料といった液体試料が、本発明に従ったピペットを用いて吸引され得る。
【図５ｂ】例えば、ＤＮＡ材料といった液体試料を含有する密封袋を作製するための方法の一連の工程を示し、その密封袋から、例えば、ＤＮＡ材料といった液体試料が、本発明に従ったピペットを用いて吸引され得る。
【図５ｃ】例えば、ＤＮＡ材料といった液体試料を含有する密封袋を作製するための方法の一連の工程を示し、その密封袋から、例えば、ＤＮＡ材料といった液体試料が、本発明に従ったピペットを用いて吸引され得る。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
図２ａは、ピペットチップ５ａの断面図である。ピペットチップ５ａは、試料に挿入され、かつ、ピペット１の中に試料（一部）を吸引するように使用される開口部１５を有する。本発明に従って、開口部１５は、平面１９に対して傾斜する。平面１９は、ピペットチップ５ａの中心軸１７に対して垂直に位置する。図２ａにおいて、傾斜は角度α１で示される。
【００１６】
開口部１５は、ピペットチップ５ａから最も遠くに延在する部分１０ａと、ピペットチップ５ａから最も近くに延在する部分１０ｂとを有する縁部１０（図３ａ）によって画定される。図２ａの実施形態において、縁部１０全体は、平面１９に対して、開口部１５と同様の角度α１で傾斜する。
【００１７】
そのようにすることで、縁部１０によって画定されるようなピペットチップ５ａの端部が非常に鋭くなるので、ピペット１によって吸引される試料を含有する容器を覆う（薄い）プラスチックホイルを切り開くことができる。
【００１８】
図２ｂに示される一実施形態において、縁部１０の一部１０ｃは、ピペットチップ５ａの内側又は外側のいずれかに対して鋭利な遷移（ｓｈａｒｐ  ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ）を示さない。その趣旨で、一部１０ｃは、例えば平坦でよく、かつ、平面１９に平行な平面に位置することができる。代替的に、あるいは、追加的に、一部１０ｃは、ピペットチップ５ａの内側及び外側のうちの少なくとも一方に対する遷移において、丸みを帯びる。この特徴の効果は、プラスチックホイルのようなシートをピペットチップ５ａで切り開くとき、一部１０ｃに対応する位置で切断が防止される。これは、ピペットチップ５ａがシートに完全な穴を開けることを防ぐ。つまり、シートの切り取られた部分は、シートの残りの部分に取り付けられたままである。また、切り取られた部分が、ピペットチップ５ａ内で詰まったり、試料の中に落下したりすることが防がれる。
【００１９】
一部１０ｃの有利な位置は、ピペットチップ５ａから最も近くに延在する縁部１０の部分であり、つまり、図２ａ、図３ａにおける部分１０ｂと対応する部分である。しかし、ピペットチップ５ａから最も遠くに延在する部分が常に有利ではないが、代わりに、他の位置を選択することが可能である。後者の部分が鋭利であるときが最良であり、これは、その部分が最初に切断されるべきシートに接触するからである。
【００２０】
縁部１０は全長を有し、縁部１０の一部１０ｃは、全長の最大１０％、より好ましくは最大５％、最も好ましくは最大３％に沿って延在することが好ましい。
【００２１】
図３ｂは、図２ｂのピペットチップ５ａの３Ｄ立体視である。図３ｃは、図２ｂ、図３ｂのピペットチップ５ａの縁部１０の拡大図であり、図３ｂの円ＩＩＩｃに対応する。
【００２２】
一般に、角度α１は０度以上で、好ましくは５度から９０度の間で、より好ましくは３０度から５０度の間で、最も好ましくは３０度から４５度の間である。α１＝０の場合、次いで、縁部１０自体は、ピペットチップ５ａの鋭利な端部を備えるように傾斜すべきである（図４ａから図４ｃ）。ピペットチップ５ａが、容器の（平坦な）底部まで液体を完全に吸引するように使用される場合、α１＝０のピペットチップ５ａが有利に使用され得る。
【００２３】
これは、（マイクロ）ピペット本体３に取り付けられるべきピペットチップ５ａが、十分な剛性と強度を有する材料から作られるとき、特に当てはまる。そのような材料には、例えば、ステンレス鋼又は熱可塑性物質（ｔｈｅｒｍｏｐｌａｓｔ）があるが、これらに限らず、例えば、ポリカーボネート、ポリフェニレンオキシド、熱可塑性ポリウレタン、熱可塑性ポリスルホン、熱可塑性ポリエーテルイミド、熱可塑性ポリエーテルスルホン又は熱可塑性ポリフェニルスルホンなどがあるが、これらに限らない。他のポリマーも使用され得る。そのような材料は、炭素繊維及びガラス繊維のうちの少なくとも一方で補強され得る。他の代替物として、ポリプロピレンがあり、炭素繊維及びガラス繊維のうちの少なくとも一方で補強されるだろう。プラスチックホイルに対して押圧されるとき、固く鋭利なピペットチップ５ａが、容器のプラスチックホイルを切り開く。その後、ピペット１は試料を吸引し、かつ、必要に応じて試料を分注するように使用され得る。その後、他のピペットチップに対して行われるように、ピペットチップ５ａは破棄され得る。
【００２４】
図４ａから図４ｃは、ピペットチップ５ａの開口部１５の他の実施例を示す。概括的に言うと、これらの図は、縁部１０自体が開口部１５に対して角度βで傾斜するように、切断される縁部１０によって画定された開口部１５の実施例を示す。
【００２５】
図４ａは、開口部１５が平面１９に対して傾斜せず（α＝０）、縁部１０全体に沿って角度β＝β１であるように、縁部１０が周囲に対称的（ｃｉｒｃｕｍｆｅｒｅｎｔｉａｌ  ｓｙｍｍｅｔｒｉｃ）である実施形態を示す。なお、図４ａは、ピペットチップ５ａが外部表面よりも更に延在する内部表面を有する状態を示す。しかしながら、角度β＝β１は、外部表面が内部表面よりも更に延在するような値を有することができる。
【００２６】
当業者にとって明らかなように、図４ａに図示するようなピペットチップ５ａを使用するとき、ホイルを穿孔する効果を有することができる。これが所望の状態ではない場合、図４ｂ及び図４ｃ（及び図２ａ）に図示するような、他の開口部１５を使用することができる。
【００２７】
図４ｂ及び図４ｃは、共通して、縁部１０が開口部１５に対して、縁部１０において位置ごとで異なる角度βで傾斜する。好ましくは、ホイルを簡単に切り開くことができるように、最も遠くに延在する部分１０ａが、最も高い傾斜度と共に提供される。そのため、最も近くに延在する部分１０ｂにおける角度β２は、最も遠くに延在する部分１０ａにおける角度β１より小さくてよい。角度β２＝０（図４ｃ）であるか、あるいは、角度β１及びβ２が反対符号（ｏｐｐｏｓｉｔｅ  ｓｉｇｎｓ）を有することは可能である。β１及びβ２は、好ましくは５度から９０度の間の範囲で、より好ましくは３０度から５０度の間で、最も好ましくは３０から４５度の間の範囲である。
【００２８】
一実施形態において、縁部１０は、角度が０度以上の開口部に対して、第２角度β１；β２；β３で傾斜する表面を有し、縁部が開口部の一部だけに対して第２角度β１；β２；β３で傾斜するという特性を有する。
【００２９】
図２ｂのピペットチップ５ａのように、液体ハンドリング側のピペットチップ５ａの開口部１５を含む円形又は楕円形の一部を尖っていない状態（ｂｌｕｎｔ）のままにするために、図４ａから図４ｃのピペットチップ５ａも部分的に鋭くすることができる。これは、図２ｂのピペットチップ５ａと同様に、鋭利でない部分と共に実施され得る。これは、ホイルを切り開くとき、ピペットチップ５ａの全体形状ではなく、一部分だけがホイルから切り取られるので、ホイルの残りの部分に接続するフラップ（ｆｌａｐ）を作り出すという効果を有する。全体形状を切断すると、切り取られたホイルがピペットチップ５ａに入ったり、ピペットチップ５ａの入口を塞いだりするか、あるいは、そうでなれば、正確な液体の分注を妨げてしまう、という状態が生じてしまう。
【００３０】
当業者にとって明らかなように、ピペットチップ５ａは、ロボットピペッターを具備して使用され得る。
【００３１】
自動ロボットピペッターは、液体感知ピペットチップと共に作用することができる。本明細書で説明されるようなピペットチップは、例えば、ピペットチップが導電性を持つようにさせることで、液体感知機能を有するように作ることができる。これは、当業者にとって公知の方法で行われ、例えば、チップを生産するために使用される熱可塑性物質を介して、添加物として炭素粒子を混合させることによって行われ得る。スチールチップは、既に導電性を有している。そのような導電性チップは、次いで、コントローラが他の機能を制御する、ロボットピペット内のコントローラに電気的に接続され得る。代替的に、感知機能は、導電性を有するピペットチップに接続される、別の（専用の）コントローラによって実行され、かつ、そのコントローラと通信するように配置され得る。ロボットピペッターは、導電性を利用してチップに接触する液体の存在を感知する。
【００３２】
本ピペットは、ＰＣＲ法で有利に使用され得る。従来型サーモサイクラーＰＣＲは、マイクロタイタープレート（例えば、１２ウェルが８行、合計９６ウェルを有する）で行われ、これは、上部で自己接着ホイルにより密封され得る（プレートシーラー）。密封されたプレートは、サーモサイクラーに挿入され、その後、プレートシーラーはマイクロピペット又はロボットピペット用の試料を供給するために除去される必要がある。本明細書で説明されるピペットチップ５ａを使用することによって、ピペット操作前のプレートシーラーの除去は省略することができる。ピペットチップ５ａが適切な材料（例えば、ポリカーボネート）から作られ、かつ、開口部１５において十分鋭利に作製されれば、ピペットチップ５ａは、プレートシーラーを切り開くことができる。
【００３３】
有利な実施形態において、本発明に従ったピペット１は、未公開特許出願第ＰＣＴ／ＮＬ２０１１／０５０３５４号に示されるような容器を覆うホイルを切り開くように使用され得る。この出願では、ＰＣＲ器具と、試料が封入され、かつ、吸引され得る方法とについて議論されている。ピペットチップを使用することによって、ホイルにおける開口部は、ピペットそのもので作られ得る。
【００３４】
未公開特許出願第ＰＣＴ／ＮＬ２０１１／０５０３５４号で議論されるような容器について、図５ａから図５ｃを参照して説明する。
【００３５】
容器は、ＰＣＲ反応混合物を満たして生産される。そのようなＰＣＲ反応混合物は、水、ＤＮＡ鋳型、ＤＮＡポリメラーゼ、ヌクレオチド、プライマー、バッファ、ＭｇＣｌ２及びＰＣＲエンハンサー、そして、ＰＣＲ反応に役立つことができる他の物質を含むことができる。
【００３６】
容器の形状が材料の剛性に依存しないので、容器は、非常に薄い材料で作製され得る。その形状も、必ずしも固定されない。容器を作製する材料の強度及び他の特性に応じて、容器は、０．０１ｍｍ以下の薄さの壁を有することができる。これらの薄壁は、急激な温度ランプに役立つ。そのような高い温度ランプを得るために、容器の容積は、５μｌから１００μｌの範囲であることが有利であり、好ましくは１０μｌから５０μｌの範囲、最も好ましくは１０μｌから２０μｌの範囲でよい。
【００３７】
容器は、適切な温度耐性プラスチックで構成され、たとえ混合物が加えられた後であっても、ＰＣＲ反応と干渉せず、かつ、全ての側部において密閉され得る。従って、水分は密封箇所に存在し得る。
【００３８】
そのような容器の実施例は袋であり、これは、図５ａから図５ｃを参照して説明されるような方法で生産され得る。図５ａは、袋の形態の容器を生産するための器具１０１を図示する。
【００３９】
図５ａは、第１プレート１０３及び第２プレート１０５を有する器具１０１を示し、第１プレート１０３及び第２プレート１０５の両方が、断面図で示される。第１プレート１０３は、１つ以上の拡張部１０７（ｉ）を有する。これらの拡張部は、図示されるような中空でよい。しかしながら、拡張部は中実でもよい。拡張部は、第１プレート１０３の上面に平行な第１の視点（ｆｉｒｓｔ  ｖｉｅｗ）において、円形の断面を有することができる。拡張部は、第１の視点に垂直な第２の視点（ｓｅｃｏｎｄ  ｖｉｅｗ）において、楕円形状の断面を有することができる。しかしながら、実施形態はこれらの形状に制限されない。例えば、第１プレート１０３の表面に平行な断面は、矩形か、あるいは、任意の他の適切な断面形状を有することができる。
【００４０】
第２プレート１０５は、１つ以上の開口部１０９（ｉ）を有し、開口部１０９（ｉ）は、各々が第１プレートの対応する拡張部１０７（ｉ）を収容することができるように配置され、かつ、形作られる。好ましくは、拡張部１０７（ｉ）の外形形状は、開口部１０９（ｉ）の内形形状に実質的に対応する。
【００４１】
１つ以上の袋１１７（ｉ）を形成するために、プラスチックホイル１１１が、第１プレート１０３と第２プレート１０５との間に配置される。第１プレート１０３及び第２プレート１０５の両方は、所定の温度に加熱され得る。これら温度は、等しくてよく、かつ、第１プレート１０３及び第２プレート１０５が、プラスチックホイル１１１と接触するとき、プラスチックホイル１１１を軟化させるように選択される。矢印Ａ（１）で示されるように、第１プレート１０３及び第２プレート１０５は、各拡張部１０７（ｉ）が、対応する開口部１０９（ｉ）に収容されるように、互いに向かって動かされる。軟化したプラスチックホイルは、袋１１７（ｉ）を形成するように拡張部１０７（ｉ）によって開口部１０９（ｉ）に押し込まれる（図５ｂ）。拡張部１０７（ｉ）及び開口部９（ｉ）があるだけ多くの袋１１７（ｉ）が形成される。これらの袋１１７（ｉ）は、開口部１０９（ｉ）の内部に押し込まれない、プラスチックホイル１１１の部分によって互いに接続される。
【００４２】
第１プレート１０３及び第２プレート１０５のうちの一方は、定位置に残ることができ、矢印Ａ（１）で示されるような移動を生じさせるために、他方のみを動かす必要があることが分かる。第１プレート１０３及び第２プレート１０５は、アルミ、スチール、あるいは、十分高い融解点を有し、かつ、十分高い熱伝達率を有する任意の他の材料により作製され得る。プラスチックホイルがプロピレンの場合、それらの使用温度は、３２３Ｋから５７３Ｋの間の範囲で、より好ましくは３２３Ｋから４７３Ｋの間の範囲で、最も好ましくは３７３Ｋから４４３Ｋの間の範囲でよい。プラスチックはポリプロピレンでよい。しかしながら、例えば、ポリエチレン、ポリエテン、ＰＭＭＡ（ポリメチルメタクリレート）、ＰＯＭ（ポリオキシメチレン）などの任意の他の適切な材料を代わりに使用することができる。
【００４３】
第１プレート１０３及び第２プレート１０５は、互いに除去され、袋１１７（ｉ）を有するプラスチックホイル１１１は、器具１０１から除去される。次いで、袋１１７（ｉ）を有するプラスチックホイル１１１は、袋１１７（ｉ）が第３プレート１１３における対応する開口部１１５（ｉ）に挿入されるように配置される。第３プレート１１３は加熱されず（そのため、第３プレート１１３は、常温であるか、あるいは、試料により求められれば、第３プレート１１３は冷却され得る）、かつ、ガラス、適切な金属又は適切なポリマーにより作製され得る。
【００４４】
いったん開口部１１５（ｉ）に挿入されると、図５ｂにおいて矢印Ａ（２）で示されるように、袋は所定のＰＣＲ反応混合物で満たされる。
【００４５】
更なるプラスチックホイル１１９が、プラスチックホイル１１１の上部に設けられる。矢印Ａ（３）で示されるように、この更なるプラスチックホイル１１９は、プラスチックホイル１１１上に置かれる。図５ｃを参照すると、位置１２３において、更なるプラスチックホイルがプラスチックホイル１１１へ封着される。位置１２３は、袋１１７（ｉ）間に位置し、かつ、更なるプラスチックホイル１１９がプラスチックホイル１１１に接触する位置である。封着のために、例えば、糊付け、加熱、超音波適用などの任意の適切な手段及び方法が用いられ得る。超音波では、２１０００Ｈｚから１０００００Ｈｚの範囲の周波数を使用することが好ましく、より好ましくは３５０００Ｈｚから４５０００Ｈｚの間の範囲で、最も好ましくは３８０００Ｈｚから４２０００Ｈｚの範囲である。これらの周波数を使用することにより、容器内に存在する水分が加熱されることも防ぐ。
【００４６】
拡張部１０７（ｉ）及び開口部１０９（ｉ）は、マトリクス配列で配置され得る。次いで、袋１１７（ｉ）もマトリクス配列で配置される。任意の数（例えば、９６）の袋が、別の行において並列に配置され得るか、あるいは、接続され得る。袋は、直列に接合されてマトリクス状の袋を形成することもできる。代替的に、ポリプロピレンホイルのシートは、行（ｒｏｗ）及び列（ｃｏｌｕｍｎ）（例えば、１行８列又は１２列か、あるいは、1２行８列）の袋１１７（ｉ）を含むように生産される。袋１１７（ｉ）は、円形又は矩形でよく、あるいは、任意の他の適切な断面形状を有することができる。数は、例として役立つものとされる。
【００４７】
本発明に従ったピペットチップ５ａを有するピペットが使用され得る方法は、以下の動作を含む。
ａ）本発明に従ったピペットチップを有するピペットを提供する；
ｂ）蓋で覆われ、かつ、試料を含有する容器を提供する；
ｃ）ピペットを用いて蓋を切り開く；
ｄ）少なくとも一部において、ピペットによって試料を吸引する。
【００４８】
当業者にとって明白なように、ＰＣＲ法におけるピペットチップ５ａの用途は、単に例として言及される。ピペットチップ５ａは、事前に容器を開けることなく、任意の密封された、あるいは、密閉された容器から、液体試料を回収するように使用され得る。
【００４９】
本発明は、添付の請求項及びその技術的な等価物のみによって限定されるということが理解される。本明細書及び請求項において、動詞「含む（ｔｏ  ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」及びその活用形は、具体的に言及されないアイテムが除外されず、その語に続くアイテムが包含されることを意味するべく、非制限的な意味で使用される。加えて、文脈が、１つ又は１つのみの要素が存在することを明確に要求しない限り、不定冠詞「ａ」又は「ａｎ」による要素への言及は、２つ以上の要素が存在することの可能性を除外するものではない。それ故、不定冠詞「ａ」又は「ａｎ」は、通常、「少なくとも１つ（ａｔ  ｌｅａｓｔ  ｏｎｅ）」を意味する。
【図１】
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【図２ａ】
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【図２ｂ】
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【図３ａ】
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【図３ｂ】
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【図３ｃ】
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【図４ａ】
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【図４ｂ】
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【図４ｃ】
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【図５ａ】
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【図５ｂ】
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【図５ｃ】
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