(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
非ヒト動物において感染症を治療又は予防するための獣医用組成物であって、適切な獣医用担体及び少なくとも１つの抗菌性ポリアミドを含み、ポリアミドが、次の病原体: スタフィロコッカス種、ストレプトコッカス種、マイコプラズマ・ボビス、及びエシェリキア・コリの少なくとも１つによって引き起こされる感染症又は病態を治療又は予防するのに組成物が効果的であるような殺菌的に有効な量で存在し、
ポリアミドが、[4,4-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-4,4'-ジピペリジン]、[4,4-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-ジアミノプロパン]、[2,2'-ビピロリジンビスプロパン酸-ペンタジアミン]、[4,4-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-N(2-アミノエチル)-ジアミノエタン]、[4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-N(3-アミノプロピル)1,3-プロパンジアミン]、[4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-3,3'-ジアミノ-N-メチル-ジプロピルアミン、[4,4'-ジピペリジンビスプロパン酸-2,2'-ジアミノジエチルアミン]、[4,4'-ジピペリジンビスプロパン酸-2,2'-ジアミノN-メチルジエチルアミン]、[4,4'-ジピペリジンビスプロパン酸-3,3'-ジアミノ-ジプロピルアミン]、[4,4'-ジピペリジンビスプロパン酸-3,3'-ジアミノ-N-メチル-ジプロピルアミン]、[4,4'-トリメチレンジピペリジン-1,3-ジアミノプロパン-N,N'-ジ-3-プロピオン酸]、[4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-N,N'-ジメチル-1,3-ジアミノプロパン]、及び[4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-N-グリシドールジエチレントリアミン]、及びこれらの組み合わせより選ばれる少なくとも１つの反復単位を有し、又は、
ポリアミドが、
【化１】
0006359630.tif 000047
及びこれらの組み合わせより選ばれる、前記獣医用組成物。
【請求項２】
ポリアミドが、下記の構造:
【化２】
0006359630.tif 000048
を有し、質量平均分子量(WAMW)が、サイズ排除クロマトグラフィによる測定に基づいて、約1.0kDaから約15.0kDaまでである、請求項１に記載の獣医用組成物。
【請求項３】
ポリアミドが、約2.0kDaから約10kDaまでのWAMWを有する、請求項２に記載の獣医用組成物。
【請求項４】
ポリアミドが、約2.5kDaから約7.76kDaまでのWAMWを有するか又は約7.76kDaのWAMWを有する、請求項２に記載の獣医用組成物。
【請求項５】
１分房の治療のための組成物の１回の用量が、約20から約3000mgまでのポリアミドを含有する、請求項１又は２に記載の獣医用組成物。
【請求項６】
用量が、約100から約2000mgまで; 約200から約1500mgまで; 約250から約1000mgまで; 約300から約500mgまで; 又は約300mgのポリアミドを含有する、請求項５に記載の獣医用組成物。
【請求項７】
用量が、約300から約500mgまでのポリアミドを含有する、請求項６に記載の獣医用組成物。
【請求項８】
獣医学的に許容され得る担体が、増粘剤又はレオロジー改質剤(TRM)を含む、請求項１又は２に記載の獣医用組成物。
【請求項９】
TRMが、任意の許容され得るセルロース誘導体、メチルセルロース(MC)、エチルセルロース(EC)、EC N50、ヒドロキシメチルセルロース(HMC)、ヒドロキシプロピルセルロース(HPC)、ヒドロキシプロピルメチルセルロース(HPMC)、ヒドロキシエチルセルロース(HEC)、ポリエチレングリコール(PEG)、ポロキサマー、ブロックコポリマー、架橋アクリル酸ベースのポリマー、カルボマー、アルカリ膨潤性エマルジョン(ASE)ポリマー、多糖類、改質多糖類、化工デンプン、部分糊化デンプン、前糊化デンプン、ステアリン酸アルミニウム、12-ヒドロキシステアリン、みつろう、乳化ろう、水添ピーナッツ油、ヒマシ油、硬化ヒマシ油、固形/軟パラフィン、脂肪酸の金属塩、粘膜付着剤、アルキルトリアンモニウムメトスルフェート、セテラリルオクタノエート、ポリビニルアルコール、キトサン、キトサン誘導体、トリメチル化キトサン、キサンタンガム、グアガム、ヒアルロン酸、熱ゲル化剤、剪断減粘性付与剤、剪断ゲル化剤、ポリカルボフィル、ポリエチレンオキシド、シリカ、ヒュームドシリカ、任意のヒュームド金属酸化物、非毒性重金属塩、硬化油、硬化ヒマシ油及びこれらの組み合わせより選ばれる、請求項８に記載の獣医用組成物。
【請求項１０】
TRMが、メチルセルロース(MC)、エチルセルロース(EC)、EC N50、ヒドロキシメチルセルロース(HMC)、ヒドロキシプロピルセルロース(HPC)、ヒドロキシプロピルメチルセルロース(HPMC)、ヒドロキシエチルセルロース(HEC)、及びこれらの組み合わせより選ばれるセルロース誘導体である、請求項９に記載の獣医用組成物。
【請求項１１】
組成物が、約200cPから約8,000cPまで又は約4,000cPから約6,000cPまでの(20℃で測定した)粘度を有し、粘度がスピンドル粘度計を用いて測定される、請求項１０に記載の獣医用組成物。
【請求項１２】
TRMが、約86kDaのWAMW、約28〜約30%のメトキシル含有量及びHPMCの約7〜約12%のヒドロキシプロポキシル含有量を有するHPMCであり、HPMCがCAS番号9004-65-3を有する、請求項１１に記載の獣医用組成物。
【請求項１３】
温度が約20℃から約33℃に、又はほぼ泌乳動物の乳房の温度に上昇した場合に、粘度が低下する、請求項１２に記載の獣医用組成物。
【請求項１４】
粘度が、(20℃で)約4,000〜5,000Cp; (25℃で)約3,000〜約4,000; 及び(33℃で)約2,000〜約3,000である、請求項１２に記載の獣医用組成物。
【請求項１５】
粘度が、(20℃で)約1300〜約1500; (25℃で)約900〜約1,200; 及び(33℃で)約600〜約800である、請求項１２に記載の獣医用組成物。
【請求項１６】
TRMが、組成物の約1〜約5質量/容積%の量で存在する、請求項１１又は１２に記載の獣医用組成物。
【請求項１７】
TRMが、温度が約20℃から約33℃に、又はほぼ泌乳動物の乳房の温度に上昇した場合に、組成物の粘度を増加させるものである、請求項９に記載の獣医用組成物。
【請求項１８】
TRMが、ポロキサマーである、請求項１７に記載の獣医用組成物。
【請求項１９】
組成物が、ペーストである、請求項１又は２に記載の獣医用組成物。
【請求項２０】
抗菌性ポリアミド、ゲル基剤、及び非毒性重金属塩を含む、請求項１９に記載の獣医用組成物。
【請求項２１】
ゲル基剤が流動パラフィンを含み、重金属塩が次硝酸ビスマスを含む、請求項２０に記載の獣医用組成物。
【請求項２２】
アルファトコフェロール、アスコルビン酸、アスコルビルパルミテート、フマル酸、リンゴ酸、アスコルビン酸ナトリウム、メタ重硫酸ナトリウム、没食子酸n-プロピル、BHA、BHT及びモノチオグリセロールより選ばれる抗酸化剤を含む、請求項１９に記載の獣医用組成物。
【請求項２３】
パラベン、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、安息香酸、ベンジルアルコール、ブロノポール、セトリミド、クロルヘキシジン、クロロブタノール、クロロクレゾール、クレゾール、イミド尿素、フェノール、フェノキシエタノール、フェニルエチルアルコール、酢酸フェニル水銀、ホウ酸フェニル水銀、硝酸フェニル水銀、ソルビン酸カリウム、安息香酸ナトリウム、プロピオン酸ナトリウム、ソルビン酸、及びチメロサールより選ばれる防腐剤を含む、請求項１９に記載の獣医用組成物。
【請求項２４】
非ヒト動物において感染症又は病態を治療又は予防する方法であって、動物に請求項１、２、９、１０、又は１２のいずれか１項に記載の獣医用組成物を投与する工程を含む、前記方法。
【請求項２５】
感染が、エシュリキア・コリ、クレブシエラ種、エンテロバクター種、サルモネラ種、シトロバクター種、セラチア種、シゲラ種、エドワードシエラ種、ハフニア種、モルガネラ種、プロビデンシア種、エルシニア種、スタフィロコッカス・アウレウス、スタフィロコッカス種、シュードモナス種、 ストレプトコッカス・アガラクティエ、ストレプトコッカス・ディスガラクティエ、ストレプトコッカス種、エンテロコッカス、コリネバクテリウム種、アルカノバクテリウム種、アクチノマイセス種、マイコバクテリウム種、プロトセカ種、マイコプラズマ種、エルウィニア種、ラクトバシラス種、及びこれらの組み合わせより選ばれる病原体による、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
病態が、乳腺炎である、請求項２４に記載の方法。
【請求項２７】
非ヒト動物が、泌乳動物である、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
非ヒト動物が、その非泌乳乾乳期間にある、請求項２６に記載の方法。
【請求項２９】
投与が、少なくとも３日間毎日繰り返される、請求項２４に記載の方法。
【請求項３０】
投与が、８日間毎日繰り返される、請求項２４に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
参照による引用
本出願は、2013年3月15日に出願の米国特許仮出願番号第61/790,231号に対する優先権を主張し、この開示内容は本願明細書に全体として援用されている。これによって、本願明細書に引用又は参照されたすべての文献(「本願明細書に引用された文献」)、及びその中で引用された文献に引用又は参照されたすべての文献は、本願明細書に記載されているか又は本願明細書に援用されている任意の文献に記載されている任意の製品のための任意の製造業者の指示書、説明書、製品仕様書、及びプロダクトシートと共に、本願明細書に援用されており、且つ本発明の実施において使用され得る。
【０００２】
発明の分野
本発明は、一般的には、安全且つ効果的な獣医用組成物の製造における水溶性の抗菌性アミン官能性ポリアミドの使用に関する。本発明は、更に、乳牛を含む動物において乳腺炎を予防及び治療するためにこれらの組成物を用いることに関する。本開示の組成物は、感受性粘膜、創傷、又は術後/術中の処置を介して動物に侵入した、病原体による感染症を予防及び治療するためにも用い得ることが想定される。
【背景技術】
【０００３】
発明の背景
乳腺炎は、乳牛の最も一般的な疾患である。商用乳牛において、牛乳品質低下によるコストは、極めて重要であり得る。このコストは生産低下及び処理流れから汚染した牛乳を留めておく必要性に起因し得る。乳腺炎はある種の外傷による乳腺組織の炎症反応であり、最も一般的なものは細菌感染である。炎症反応は、血液中のタンパク質並びに乳腺組織及び牛乳中の白血球の増加からなる。体細胞数、SCCは、約200,000 SC/mL牛乳(感染していない)から300,000SC/mL牛乳(炎症を起こした/感染した)を超えるまで増加する。この反応の目的は、刺激原を破壊し、損傷した組織を修復し、且つ乳腺を正常機能に戻すことである。炎症は、(a)乳腺の腫脹(持続している炎症によって組織損傷が生じ且つ乳腺内で分泌組織が非生産的結合組織に置き換わる)、(b)牛乳の凝固(これらの凝塊は凝固した白血球、分泌細胞及びタンパクである)、及び(c)少ない乳量を特徴とする。更に、牛乳汚染は、ヒト消費者を結核、咽喉炎、Q熱、ブルセラ症、レプトスピラ症等を含む疾患に感染させる。
細菌が乳頭管を通過し、槽として知られる乳頭の部分に入った後、乳腺炎が始まる。乳腺炎を引き起こす重要な病原体としては、スタフィロコッカス種(Staphylococcus spp.)(S.アウレウス(aureus)を含む)、ストレプトコッカス種(Streptococcus spp.)(S.アガラクティエ(agalactiae)及びS.ディスガラクティエ(dysgalactiae)及びS.ウベリス(uberis)を含む)及びエシェリキア・コリ(E.coli)が挙げられるが、これらに限定されない。これが生じ得る2つの主要な期間: 泌乳期又は非泌乳(乾乳)期がある。泌乳期の間に、通常、乳頭の浸潤が搾乳中に生じる。搾乳後、乳首管は1〜2時間膨張したままであるが、損傷した乳頭管は永続的に部分的に開いたままであり得る。このことにより、環境からの生物体又は損傷した皮膚上に見られる生物体にとって乳頭管に入ることが容易である。槽や管の内側を覆っている組織への細菌の密着は、搾乳中に流し出すことを妨げ、感染させるのを援助する。細菌は、最終的には、腺組織に入り、そこで肺胞細胞に影響を及ぼす。細菌によって生成される毒素は乳汁分泌上皮細胞の死又はそれに対する損傷を引き起こし、これらの細胞は血管浸透性を増加させる物質を血流に生成させる。このことによって、白血球が血液から肺胞へ移動することができ、そこで細菌を吸い込むことによって機能する。
【０００４】
泌乳期の終わりに、その期間の搾乳が停止すると、乳頭管は天然ケラチン乳頭プラグの形成によって閉じられる。このことは、典型的には2〜3週間かけて起こる。しかしながらこの乳頭プラグの形成前の乳頭管は開いて細菌感染に非常に感受性がある。乳頭プラグの形成が悪い場合には、感染の機会が継続している状況もあり得る。実際に、ほとんどの乳牛がこのプラグを形成するのに1週間と9週間の間を必要とし、乳牛の5%までは決して形成しない。典型的には50%の乳頭が乾乳10日後も「開いている」場合がある(例えば、Williamson JH, Woolford MW, Day AM. The prophylactic effect of a dry cow antibiotic against Streptococcus uberis. New Zealand Veterinary Journal (1995) 43, 228-234を参照のこと)。
乾乳期の間に乳腺炎の新たな症例を予防するために、多くの農場主は、乳牛を乳腺内抗生物質の予防的治療で治療する。このことは、抗生物質と注入されるペースト又はゲルの形で投与される。注射器が用いられ、乳頭の下端の開口部を経て直接乳頭管に物質を挿入する。乳腺炎の予防は、乾乳期にわたって乳頭管に入り得る任意の細菌を全滅させるために乳頭管内に保持される充分な抗生物質に依存している。しかしながら最近、乳牛において従来の抗生物質(例えば、ベータ-ラクタム、マクロライド等)の使用に関する関心が増加してきた。このことは、2つの理由: (a)牛乳中の抗生物質残留物の可能性(牛乳製造加工業者が培養ベースの酪農製品を生産する際に問題を生じることがあり得る)及び(b)動物からヒトまでの菌株を横切る抗生物質に対する細菌の耐性が生じる可能性に起因する。それ故、乳牛乳腺炎の高コストの問題に対処するために、これらの欠点をもたない新規な抗菌物質、及びそれを送達するための方法及び組成物を開発することが非常に望ましい。このような改善された抗菌物質は、感受性膜(例えば、口、鼻、肺等)、創傷、及び切開術後によって入るものを含む、病原体のホストに対して動物を等しくよく防御することが可能である。
当該技術の水準に関する追加の背景として、Merial Limitedの米国特許出願公開第2010/0143510 A1号明細書; サスカチュワン大学の米国特許第6740322 B2号明細書; Bayer Animal Healthの国際公開第2014/001353 A1号パンフレットを参照のこと。
【発明の概要】
【０００５】
発明の概要
一態様において、本発明は、式I〜Vに示された一般構造を有する水溶性の抗菌性アミン官能性ポリアミドを含む安全且つ効果的な獣医用組成物(veterinary composition)を提供する。いくつかの特定の合成法も提供されるが、抗菌性ポリアミドの種類が開示されていることから、当業者は通常の技術を用いて他の多くのポリアミド化学種を製造することが可能である。
他の態様において、本発明は、組成物を用いて、それを必要としている動物において細菌感染症を治療及び予防する方法を提供する。具体的な実施態様において、局所的に作用する抗菌性組成物は、乳牛における乳腺炎の治療及び予防にきわめてよく適している。
実施態様において、ポリアミドは、式(I)の化合物である:
【０００６】
【化１】
0006359630.tif 000002
【０００７】
[式中:
i) mは、0、1、2、又は3であり;
ii) nは、0、1、2、又は3であり;
iii) oは、0、1、2、又は3であり;
iv) pは、0又は1であり;
v) rは、0又は1であり;
vi) qは、1から400までの整数であり;
vii) Qxは、NH、(C1-C10)アルキル、(C2-C9)ヘテロアルキル、(C3-C10)シクロアルキル、(C2-C9)ヘテロシクロアルキル、(C6-C14)アリール、(C2-C9)ヘテロアリールであり;
viii) Qyは、NH-Rw、NH-CH2-Rw、(C1-C10)アルキル、又は(C6-C14)アリールであり
(ここで、Rwは存在しないか又は(C1-C10)アルキル、(C2-C9)ヘテロアルキル、(C6-C14)アリール、又は(C2-C9)ヘテロアリールである);
ix) Rx及びRyは、各々独立して、医薬的に許容され得る末端基である]。
他の実施態様において、ポリアミドは、式(II)の構造を有する:
【０００８】
【化２】
0006359630.tif 000003
【０００９】
[式中:
i) mは、0、1、2、又は3であり;
ii) nは、0、1、2、又は3であり;
iii) oは、0、1、2、又は3であり;
iv) pは、0又は1であり;
v) rは、0又は1であり;
vi) qは、1から400までの整数であり;
vii) Qxは、NH、(C1-C10)アルキル、(C2-C9)ヘテロアルキル、(C3-C10)シクロアルキル、(C2-C9)ヘテロシクロアルキル、(C6-C14)アリール、(C2-C9)ヘテロアリールであり;
viii) Qyは、NH-Rw、NH-CH2-Rw、(C1-C10)アルキル、又は(C6-C14)アリールであり
(ここで、Rwは存在しないか又は(C1-C10)アルキル、(C2-C9)ヘテロアルキル、(C6-C14)アリール又は(C2-C9)ヘテロアリールである);
ix) Rx及びRyは、各々独立して、医薬的に許容され得る末端基であり; 
x) X-は、各々独立して、ハロ又は任意の医薬的に許容され得るアニオンであり; 
xi) Y1及びY2は、各々独立して、H又は(C1-C10)アルキル、(C2-C9)ヘテロアルキル、(C3-C10)シクロアルキル、(C2-C9)ヘテロシクロアルキル、(C6-C14)アリール、(C2-C9)ヘテロアリール、(C1-C10)アルキルアミン、-S-O-(C1-C10)アルキル、-O(O)C-(C1-C10)アルキル、-(C1-C10)アルキル-COOH、(C3-C10)シクロアルキル-COOH、-(O)CH3、-OH、アミド、式(D)で表されるジヒドロキシ基
【００１０】
【化３】
0006359630.tif 000004
【００１１】
(ここで、dは0から25までの整数である)
又は式(E)で表されるポリエチレングリコール基
【００１２】
【化４】
0006359630.tif 000005
【００１３】
(ここで、eは1から25までの整数である)
からなる群より選ばれる1つ以上の置換基で置換されていてもよい(C1-C10)アルキルである]。
他の実施態様において、ポリアミドは、式(III)の構造を有する:
【００１４】
【化５】
0006359630.tif 000006
【００１５】
[式中:
i) mは、0、1、2、又は3であり;
ii) nは、0、1、2、又は3であり;
iii) oは、0、1、2、又は3であり;
iv) pは、0又は1であり;
v) rは、0又は1であり;
vi) qは、1から400までの整数であり;
vii) Qxは、NH、(C1-C10)アルキル、(C2-C9)ヘテロアルキル、(C3-C10)シクロアルキル、(C2-C9)ヘテロシクロアルキル、(C6-C14)アリール、(C2-C9)ヘテロアリールであり;
viii) Qyは、NH-Rw、NH-CH2-Rw、(C1-C10)アルキル、又は(C6-C14)アリールであり
(ここで、Rwは存在しないか又は(C1-C10)アルキル、(C2-C9)ヘテロアルキル、(C6-C14)アリール又は(C2-C9)ヘテロアリールである);
i) Rx及びRyは、各々独立して、医薬的に許容され得る末端基であり;
xi) X-は、ハロ又は任意の医薬的に許容され得るアニオンであり;
x) Y1は、H又は(C1-C10)アルキル、(C2-C9)ヘテロアルキル、(C3-C10)シクロアルキル、(C2-C9)ヘテロシクロアルキル、(C6-C14)アリール、(C2-C9)ヘテロアリール、(C1-C10)アルキルアミン、-S-O-(C1-C10)アルキル、-O(O)C-(C1-C10)アルキル、-(C1-C10)アルキル-COOH、(C3-C10)シクロアルキル-COOH、-(O)CH3、-OH、アミド、式(D)で表されるジヒドロキシ基
【００１６】
【化６】
0006359630.tif 000007
【００１７】
(ここで、dは0から25までの整数である)
又は式(E)で表されるポリエチレングリコール基
【００１８】
【化７】
0006359630.tif 000008
【００１９】
(ここで、eは1から400までの整数である)
からなる群より選ばれる1つ以上の置換基で置換されていてもよい(C1-C10)アルキルである]。
他の実施態様において、ポリアミドは、式(IV)の構造を有する:
【００２０】
【化８】
0006359630.tif 000009
【００２１】
[式中:
i) uは、0、1、2、又は3であり;
ii) vは、0、1、2、又は3であり;
iii) qは、1から400までの整数であり;
iv)  Qxは、NH、(C1-C10)アルキル、(C2-C9)ヘテロアルキル、(C3-C10)シクロアルキル、(C2-C9)ヘテロシクロアルキル、(C6-C14)アリール、(C2-C9)ヘテロアリールであり;
v) Qyは、NH-Rw、NH-CH2-Rw、(C1-C10)アルキル又は(C6-C14)アリールであり
(ここで、Rwは存在しないか又は(C1-C10)アルキル、(C2-C9)ヘテロアルキル、(C6-C14)アリール、又は(C2-C9)ヘテロアリールである);
vi) Rx及びRyは、各々独立して、医薬的に許容され得る末端基である]。
他の実施態様において、ポリアミドは、式(V)の構造を有する:
【００２２】
【化９】
0006359630.tif 000010
【００２３】
[式中:
i) uは、0、1、2、又は3であり;
ii) vは、0、1、2、又は3であり;
iii) qは、1から400までの整数であり;
iv) Qxは、NH、(C1-C10)アルキル、(C2-C9)ヘテロアルキル、(C3-C10)シクロアルキル、(C2-C9)ヘテロシクロアルキル、(C6-C14)アリール、(C2-C9)ヘテロアリールであり;
v) Qyは、NH-Rw、NH-CH2-Rw、(C1-C10)アルキル、又は(C6-C14)アリールであり
(ここで、Rwは存在しないか又は(C1-C10)アルキル、(C2-C9)ヘテロアルキル、(C6-C14)アリール、又は(C2-C9)ヘテロアリールである);
vi) Rx及びRyは、各々独立して、医薬的に許容され得る末端基であり;
vii)  X-は、ハロ又は任意の医薬的に許容され得るアニオンであり;
viii)  Y1及びY2は、独立して、H又は(C1-C10)アルキル、(C2-C9)ヘテロアルキル、(C3-C10)シクロアルキル、(C2-C9)ヘテロシクロアルキル、(C6-C14)アリール、(C2-C9)ヘテロアリール、(C1-C10)アルキルアミン、-S-O-(C1-C10)アルキル、-O(O)C-(C1-C10)アルキル、-(C1-C10)アルキル-COOH、(C3-C10)シクロアルキル-COOH、-(O)CH3、-OH、アミド、式(D)で表されるジヒドロキシ基
【００２４】
【化１０】
0006359630.tif 000011
【００２５】
(ここで、dは0から25までの整数である)
又は式(E)で表されるポリエチレングリコール基
【００２６】
【化１１】
0006359630.tif 000012
【００２７】
(ここで、eは1から400までの整数である)
からなる群より選ばれる1つ以上の置換基で置換されていてもよい(C1-C10)アルキルである]。
本発明の目的は、既に知られている生成物、生成物の製造プロセス、又は生成物を用いる方法を本発明の範囲内に包含しないので、出願人は権利を留保し、これによって既に知られている生成物、プロセス、又は方法の放棄を示すものである。更に、本発明は、任意の生成物、生成物の製造プロセス、又は生成物を用いる方法を本発明の範囲内に包含することを意図せず、USPTO(35 U.S.C.§112、第1項)又はEPO(EPCの第83条)の書面による明細及び実施可能要件を満たしていないので、出願人は権利を留保し、これによって既に記載された生成物、生成物の製造プロセス、又は生成物を用いる方法の放棄を示すことが留意される。
これらの及び他の実施態様は、下記の詳細な説明に開示されているか又はその詳細な説明から明らかであり且つその詳細な説明によって包含されている。
【発明を実施するための形態】
【００２８】
発明の詳細な説明
本発明の一態様において、水溶性の抗菌性アミン官能性ポリアミドを含み、且つ乳腺炎の治療及び予防のために有効である、獣医用組成物が提供される。抗菌性ポリアミドは、式Ｉ、II、III、IV、又はVによって表される任意のポリアミドであり得る。具体的な実施態様において、ポリアミドは、表1に示される25のポリマー(A〜Y)の1つより選ばれる。ここで表される特に効果的な抗菌性ポリアミド化学種に加えて、当業者は、個別計画の実験法の応用に伴って開示された種類の追加の活性化合物を同定し得る。
下記の実施例に示されるように、ポリアミドB及びCは、0.25μg/mL程度の低いレベルで、広範囲の乳腺炎を引き起こす病原体に対して特に効果的である。ポリアミドU及びWは、マイコプラズマ・ボビス(Mycoplasma bovis)(畜牛において難治性呼吸器感染症、中耳炎、関節炎、乳腺炎、及び他の疾患の宿主を引き起こす)に対して特に効果的であり、ポリアミドB〜D及びGは、モラクセラ・ボビス(Moraxella bovis)(ウシ角結膜炎又は「流行性結膜炎」を引き起こす)に対して効果的である。
重要なことに、表1における「MW」の数値は、水系GPCである、サイズ排除クロマトグラフィ(SEC)によって定量された「質量平均分子量」を示す。そのようなものとして、本明細書に用いられる、例えば、「ポリマーB」は、約7.76kDaの質量平均MWを有するポリマーBを含有する組成物を包含することを意図する。更に、特に明記しない限り、「MW」は「質量平均分子量」を意味することを意図する。
表1に示されるように、ポリマーB、C及びDは、各々、(本明細書にポリ(4,4-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-ジアミノプロパンとして定義された)同じ反復構造を有するが、異なる質量平均分子量を有する。更に、MICデータは、ポリマーB、C、及びDが病原体のパネルに対して同等に効果的な傾向があることを示している。従って、出願人は広範囲のポリ(4,4-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-ジアミノプロパン)のMWグレードが活性な抗菌物質であることを示した(すなわち少なくとも約2.5g/molから少なくとも約10.6g/mlまでのMWグレード)。
【００２９】
本明細書に用いられるポリマーは、下記の反復単位: A [4,4-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-4,4'-ジピペリジン]; B〜D [4,4-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-ジアミノプロパン]; E [2,2'-ビピロリジンビスプロパン酸-ペンタジアミン]; G [4,4-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-ジアミノプロパン]; H [4,4-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-N(2-アミノエチル)-ジアミノエタン]; I [4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-N(3-アミノプロピル)1,3-プロパンジアミン]; J [4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-3,3'-ジアミノ-N-メチル-ジプロピルアミン; K [4,4' -ジピペリジンビスプロパン酸-2,2'-ジアミノジエチルアミン]; L [4,4'-ジピペリジンビスプロパン酸-2,2'-ジアミノN-メチルジエチルアミン]; M [4,4'-ジピペリジンビスプロパン酸-3,3'-ジアミノ-ジプロピルアミン]; N [4,4'-ジピペリジンビスプロパン酸-3,3'-ジアミノ-N-メチル-ジプロピルアミン]; O [4,4'-トリメチレンジピペリジン-1,3-ジアミノプロパン-N,N'-ジ-3-プロピオン酸]; P [4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸--N,N'-ジメチル-1,3-ジアミノプロパン]; R [4,4-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-4,4'-ジピペリジン]; S [4,4-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-ジアミノプロパン]; 及びT [4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-N-グリシドールジエチレントリアミン]を含有する。
従って、本発明は、新規な且つ自明でない抗菌性ポリアミド組成物、及び非ヒト動物において乳腺炎を治療及び予防するのに組成物を用いる方法を提供する。方法は、一般的には、乳腺炎を引き起こしている病原体(1つ以上)を、完全に又は実質的に、除去又は治癒するために有効な量の獣医用組成物を感染した動物に投与することを含む。下記で詳述されるように、ポリアミド化合物は、また、幅広い範囲の他の重要なヒト及び動物の病原体に対して非常に活性である。更に、ポリアミドは、マウスやネズミにおいてもよく許容されることを示した。例えば、4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-コ-1,3-ジアミノプロパンの最大耐量は、約5mg/kg(IP)及び40mg/kg(IV)であった。
【００３０】
表1. 25の抗菌性アミン官能性ポリアミド.「MW」= 質量平均分子量
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【００３１】
0006359630.tif 000014
【００３２】
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【００３３】
本発明の獣医用組成物は、濃厚にした(又は粘度調整した)液剤、ゲル剤、軟膏剤、懸濁液剤、ペースト剤、又は他の任意の適切な剤形の形であり得る。例えば、製剤はゲルでもよく、これは安全で乳牛の乳頭に投与するのに容易である。このようなゲルの粘度は、獣医学的に又は医薬的に安全且つ有効な任意のレオロジー/粘度調整剤によって調節され得る。実施態様において、獣医用ゲルは、剪断力が加えられる(例えば練り歯磨きのチューブを絞るとペーストを出すことができる)ときにその粘度が低下するという点でチキソトロピーであり得る。従って、実施態様において、組成物は、剪断流動性であり得る。
他の実施態様において、本発明の組成物は、1つ以上の追加の活性剤を含めてもよい。例えば、組成物が泌乳終了後(すなわち乾乳期の始めに)乳牛に投与される場合には、角栓の形成を刺激する薬剤を含め得ることが望ましい。乳牛の乳頭括約筋が含まれる場合には、幾分高い粘度の組成物を用いて、乳腺の保持を改善し得る。抗菌性ポリマーは、また、現在知られている、又はこれまでに開発された、他の乾乳期ペースト組成物又はゲル組成物に添加され得る。組成物の粘度は、例えば、Brookfield LV-Eデジタル粘度計を用いて測定され得る; 異なる測定速度が用いられてもよい。
組成物は、理想的には、良好な貯蔵安定性を確実にするために滅菌されなければならない。実施態様において、滅菌の間に生じ得る粘性損失に適応させるために、滅菌前組成物の粘度は滅菌後組成物より高い。他の実施態様において、滅菌仲介の粘度増加に適応させるために、滅菌前組成物の粘度は低い。
【００３４】
実施態様において、組成物粘度は、温度、pH、又はこれらの双方が含まれる乳腺内の状態に応答して反応性であるか又は「調整可能」である。具体的な実施態様において、組成物粘度は、乳腺内部で乳汁に典型的なpHにさらされると増大する。他の実施態様において、組成物は熱可逆性の水性組成物であり、投与前には非常に流動性であるが、動物の乳腺温度の作用によって急速にゲル化する。このような位置依存性又は環境依存性の粘度は、イオン強度、温度-又はpH-調整可能なポリマーの種類を組成物中に含めることによって達成され得る。pH反応性のミクロゲルレオロジー調節剤の包括的でない例としては、粉末CARBOPOL(登録商標)ポリマー及びカルボン酸部分を含有するアルカリ膨潤性エマルジョン(ASE)ポリマーを含有する。これらの材料の鍵となる特徴は、pHが酸基のpKaより高いときに個々の架橋ポリマー粒子の直径が大きく増加する。他のレオロジー調節剤も、種々の界面活性剤によって活性化されるアルキルアクリレートとヒドロキシアルキルエステルの両親媒性架橋コポリマーを含み得る。
従って、必要とされるレオロジー及び粘度の特性を達成するために、組成物は、更に、獣医学的に許容され得る増粘剤又はレオロジー調節剤(TRM)を含んでもよい。TRMとしては、非独占的に、セルロース誘導体、メチルセルロース(MC)、エチルセルロース(EC)、EC N50、ヒドロキシメチルセルロース(HMC)、ヒドロキシプロピルセルロース(HPC)、ヒドロキシプロピルメチルセルロース(HPMC)、ヒドロキシエチルセルロース(HEC)、ポリエチレングリコール(PEG)、ポロキサマー、ブロックコポリマー、アクリル酸ベースの架橋ポリマー、カルボマー、CARBOPOL(登録商標)ポリマー、アルカリ膨潤性エマルジョン(ASE)ポリマー、多糖類、改質多糖類、化工デンプン、部分糊化デンプン、前糊化デンプン、ステアリン酸アルミニウム、12-ヒドロキシステアリン、THIXCIN(登録商標)、みつろう、乳化ろう、水添ピーナッツ油、ヒマシ油、水添ヒマシ油、固形/軟パラフィン、脂肪酸の金属塩、粘膜接着剤、アルキルトリアンモニウムメトスルフェート、セテアリルオクタノエート(ceteraryl octanoate)、ポリビニルアルコール、グリセロール、キトサン、キトサン誘導体、トリメチル化キトサン、キサンタンガム(xanthum gum)、グアガム、ヒアルロン酸、サーモゲル化剤、剪断減粘剤、剪断ゲル化剤、ポリカルボフィル、ポリエチレンオキシド、シリカ、ヒュームドシリカ、任意のヒュームド金属酸化物、非毒性重金属塩、硬化油、水添ヒマシ油及びこれらの組み合わせが挙げられる。
【００３５】
セルロースベースのTRM(HPMC、HEC、HPC等)に対して、ゲル化又は増粘効果は、少なくとも 1)H結合を形成するのに利用可能なヒドロキシ基の数; 及び2)ポリマーのMWによって決定される。典型的には、非常に高いMWグレードセルロースベースのTRMは、その低MWグレード相対物(溶液中同じ質量/容積パーセントを示す)と関連して、著しく高い粘度溶液を形成する。当業者は、これらの特徴に気づいており、どのように任意の合理的な温度で組成物粘度をゲルに「調整」させるかを理解している。従って、実施態様において、組成物は、そのように、泌乳動物の乳腺の温度でゲルに「調整」する。
他の態様において、組成物中にセルロースベースのTRMが存在すると、組成物が約20℃の温度から約33℃へ移るときに粘度のわずかな低下を伴う(同じ程度の大きさで)。このような実施態様において、組成物は、乳腺において非常によく保持されているが、同時に、その乳腺液混和性が高められるために(その粘度が低下するために)、APIは、比較的急速に放出され得る。組成物の粘度の日常的に行われる熱-、圧力/剪断-、及び/又はpH-調整のすべての方法が望ましい粘度プロファイルを達成するために使われ得ると本発明者は想定する。
組成物は、また、それが「ペースト」とみなされる点まで増粘され得る。 ペーストコンシステンシーは、充分量のシリカ、又は他の適切な増粘材料を添加することによって達成され得る。粘膜接着剤及びペースト形成剤は、特に、「乾乳牛」適用に対して、より長い乳腺-保持時間を促進させ得る。具体的な実施態様において、粘膜接着剤は、アクリル酸ベースの架橋ポリマー、ポリカルボフィル、キトサン(又はその誘導体、例えばトリメチル化キトサン)、ポリエチレンオキシド、又はこれらの組み合わせであってもよい。
【００３６】
実施態様において、ペースト組成物は、次硝酸ビスマスが含まれる、少なくとも1つの非毒性重金属塩を含んでいてもよい。獣医学的に適切なペーストは、また、ゲルベース(流動パラフィンを含む)、ステアリン酸アルミニウム及び二酸化ケイ素を含んでいてもよい。ヒュームドシリカ、例えばAEROSIL(登録商標)は、特に有効なTRM及びチキソトロープ剤である。しかしながら、任意の獣医学的に許容され得るヒュームド金属酸化物が本発明の実施において用いられてもよい。
獣医用組成物は、更に、アルファトコフェロール、アスコルビン酸、アスコルビルパルミテート、フマル酸、リンゴ酸、アスコルビン酸ナトリウム、メタ重硫酸ナトリウム、没食子酸n-プロピル、BHA、BHT及びモノチオグリセロールより選ばれる抗酸化剤を含んでもよい。組成物は、また、パラベン、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、安息香酸、ベンジルアルコール、ブロノポール、セトリミド、クロルヘキシジン、クロロブタノール、クロロクレゾール、クレゾール、イミド尿素、フェノール、フェノキシエタノール、フェニルエチルアルコール、酢酸フェニル水銀、ホウ酸フェニル水銀、硝酸フェニル水銀、ソルビン酸カリウム、安息香酸ナトリウム、プロピオン酸ナトリウム、ソルビン酸、及びチメロサールより選ばれる、1つ以上の防腐剤を含んでいてもよい。
具体的な実施態様において、レオロジー調節剤は、12-ヒドロキシステアリン(THIXCIN(登録商標))、ステアリン酸アルミニウム、セルロース誘導体(例えばヒドロキシプロピルセルロース(HPC); ヒドロキシプロピルメチルセルロース(HPMC); ヒドロキシエチルセルロース(HEC); エチルセルロース(EC N50)、みつろう、水添ピーナッツ油、ヒマシ油、固形/軟パラフィン、脂肪酸の金属塩、及びこれらの組み合わせより選ばれ得る。本明細書に用いられる「質量」は、全組成物の質量パーセントを意味する。
【００３７】
表2. HECを含む代表的な組成物
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【００３８】
具体的な実施態様において、獣医用組成物は、約200cPから約8,000cPまでの粘度を有する、ヒドロキシプロピルメチルセルロース(HPMC)を含む。具体的な実施態様において、粘度は、約4,000cP〜約6,000cPの間、又は5,600cPである。レオロジー調節の当業者は、種々の組成物粘度がポリマーの分子量(MW)又はその濃度のいずれか(又は両方)を変えることによって達成され得ることをよく知っている。特に有効なHPCは、CAS番号9004-65-3を有するものであるが、他の任意の獣医学的に許容され得る変性セルロース又は化工デンプンが本発明の実施に用いられてもよい。すべてMW範囲グレードの変性セルロース(又はその組み合わせ)を用いて、必要とされる製剤粘度及びAPI放出プロファイルを供給し得る。例えば、イオンゲル化剤を用いて、API放出を変化させることができ、広範囲に架橋した変性セルロースを用いて、乳腺保持を伸ばすことができる。
【００３９】
表3. HPMC溶液の温度及び粘度に対する剪断速度効果. MWは約86kDaである; CAS番号は9004-65-3である
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【００４０】
ヒドロキシプロピルセルロース(HPC/KLUCEL)の濃厚水溶液を水溶液の粘度調整剤として評価した。表4に示すように、溶液の粘度はポリマーの濃度及びグレード(すなわちMW)によって調整され得る。
【００４１】
表4. 25又は33℃で測定したKLUCEL(登録商標)水溶液の粘度(cP)
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【００４２】
他の実施態様において、獣医用組成物は、更に、ポリエチレンオキシド、ポリプロピレンオキシドb-ポリエチレンオキシドaの三元コポリマー[PEOa-PPOb-PEOa]であるポロキサマーを含む。このポリマーの種類の種々のポリマー、例えば、POLOXAMER 188やPOLOXAMER 407は、生理的温度範囲内で逆熱感受性を示す。従って、これらのポリマーは、低温で水溶液に可溶であるが、より高温でゲルである。POLOXAMER 407は、約12,500の平均分子量及び約30%のポリオキシプロピレン画分を有する生体適合性ポリオキシプロピレン-ポリオキシエチレンブロックコポリマーである。このような可逆的ゲル化系は、流体状態で材料を処理することが望ましい場合は有効であるが、ゲル化された又はより粘稠な状態での性能が好ましい。
他の態様において、獣医用組成物は、獣医学的に許容され得る鉱油又は天然由来の脂肪酸のエステル、又はその混合物を含み、これは抗菌性ポリアミドをもつのに適しており、且つ乳腺内注入に充分に許容され得る。
鉱油は、流動パラフィン、軽質流動パラフィン又は石油、例えば、米国薬局方(USP)又は英国薬局方(BP)のものとして医薬において既知の液体炭化水素の混合物である。特に良好な結果は、流動パラフィンで達成された。流動パラフィン(鉱油)は、石油からの液体飽和炭化水素の混合物である。
天然由来である脂肪酸のエステルは、脂肪酸に続いてこれらの酸と所定のアルコールのエステル化によって便利に調製される。望ましい組成物を有する分別された植物油は市販されている。例えば、MIGLYOL(登録商標)812(トリ(カプリン酸/カプリル酸)グリセリル)及びMIGLYOL(登録商標)840(プロピレングリコールジカプリレート/カプレート)。
【００４３】
一実施態様において、獣医用組成物は、ミクロクリスタンワックス、オレオイルポリオキシルグリセリド、及び綿実油を含む。更に他の実施態様において、組成物は、水添ピーナッツ油、モノステアリン酸アルミニウム、及びピーナッツ油を含む。エマルジョンが(例えば油性成分を組み込むために)望まれる場合、オレオイルポリオキシル-6グリセリドが含まれる界面活性剤が組成物に添加されてもよい。従って、実施態様において、組成物はエマルジョンであってもよく、API抗菌性ポリマーが水相に溶解されている。
更に、製剤は、他の非API成分、例えばpH変性剤、抗酸化剤、防腐剤、及び着色剤を含有し得る。これらの化合物は、製剤技術において周知である。抗酸化剤、例えばアルファトコフェロール、アスコルビン酸、アスコルビルパルミテート、フマル酸、リンゴ酸、アスコルビン酸ナトリウム、メタ重硫酸ナトリウム、没食子酸n-プロピル、BHA(ブチル化ヒドロキシアニソール)、BHT(ブチル化ヒドロキシトルエン)モノチオグリセロール等が本製剤に添加されてもよい。抗酸化剤は、一般的には、製剤の全質量に基づき、約0.01%から約2.0%の量で製剤に添加され、約0.05%から約1.0%が特に好ましい。防腐剤、例えばパラベン(メチルパラベン及び/プロピルパラベン)は、適切には約0.01%から約2.0%までの範囲にある量で製剤に用いられ、約0.05%〜約1.0%が特に好ましい。他の防腐剤としては、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、安息香酸、ベンジルアルコール、ブロノポール、ブチルパラベン、セトリミド、クロルヘキシジン、クロロブタノール、クロロクレゾール、クレゾール、エチルパラベン、イミド尿素、メチルパラベン、フェノール、フェノキシエタノール、フェニルエチルアルコール、酢酸フェニル水銀、ホウ酸フェニル水銀、硝酸フェニル水銀、ソルビン酸カリウム、安息香酸ナトリウム、プロピオン酸ナトリウム、ソルビン酸、チメロサール等が挙げられる。これらの化合物の範囲には、最終組成物の約0.01%から約5%(質量/質量)までが含まれる。着色剤は、また、製剤の完全な適用及び乳腺中の維持の可視化、又は感染した分房のマーキングを容易にするために添加されてもよい。好ましい範囲には、約0.5%から約25%(質量/質量)までが含まれる。
【００４４】
他の実施態様において、ポリアミド組成物は、イヌを含むコンパニオンアニマルにおける耳炎に対して効果的である。ポリマーB〜Dのいずれか1つを含む獣医用組成物は、イヌの耳に通常見られるスタフィロコッカス種に対して良好な効力を示す。ポリマーは、水溶性であり、接着特性又はその場ゲル化特性を有する賦形剤(例えば熱調整可能なポリマー)中に容易に配合され得る。従って、本発明の具体的な実施態様は、イヌ又はネコの耳炎を治療するために、耳道との接触時にゲル化し得る軟膏剤(又は他の適切な付着性ポリアミド組成物)を提供する。
実施態様において、組成物は、伝染性結膜炎及び外用を必要とする他の適応症のために、スプレー又はアドヒシブストリップとして配合され得る。スプレーは、粘膜接着剤、粘度調整剤、高速蒸発溶媒成分、又はこれらの組み合わせを含み得る。スプレーは、溶媒が蒸発した後にゲル化するように配合され得る。実施態様において、アドヒシブストリップ(例えばリザーバー又はマトリックス)は標的領域(例えば伝染性結膜炎における眼)の近くに及び/又はそれより上に適用されて、APIを制御された及び/又は長期の方法で放出させることができる。
【００４５】
「置換された」は、アルキル基、複素環基又はアリール基における炭素を1つ以上の非炭素置換基で置換することを意味する。非炭素置換基は、窒素、酸素及び硫黄より選ばれる。
「置換されていない」は、水素と炭素だけから構成される基を意味する。
用語「ポリマー」は、反復単位から構成される分子を意味する。用語「反復単位」又は「モノマー」は、ポリマー中に複数回繰り返しているか又は現れるポリマー中の基を意味する。反復単位又は「コモノマー」が相互に化学的に及び構造的に異なる場合には、ポリマーはコポリマーであり得る。
用語「医薬的に許容され得るアニオン」は、医薬使用に適しているアニオンを意味する。医薬的に許容され得るアニオンとしては、ハロゲン化物、炭酸、重炭酸、硫酸、重硫酸、水酸化物、硝酸、過硫酸、亜硫酸、酢酸、アスコルビン酸、安息香酸、クエン酸、二水素クエン酸、水素クエン酸、シュウ酸、コハク酸、酒石酸、タウロコール酸、グリココール酸、及びコール酸が挙げられるが、これらに限定されない。
用語「医薬的に許容され得る末端基」は、医薬使用に適している末端基を意味する。医薬的に許容され得る末端基の例としては、H、(C1-C10)アルキル、(C2-C9)ヘテロアルキル、(C3-C10)シクロアルキル、(C2-C9)ヘテロシクロアルキル、(C6-C14)アリール、(C2-C9)ヘテロアリール、(C1-C10)アルキルアミン、-O(O)C-(C1-C10)アルキル、(C1-C10)アルキル-COOH、(C3-C10)シクロアルキル-COOH、-(O)CH3、-OH、アミド、グアニジノ基、グアニジウムクロリド基、グアニジノベンゼン基、ジヒドロキシ基、及びポリエチレングリコール基が挙げられるが、これらに限定されない。
【００４６】
開示されたアミン官能性ポリアミドの用語「有効な量」は、治療されている具体的な状態に治療効果及び/又は予防効果を達成するのに充分な量、例えば乳腺炎に伴う症状の予防又は減少をもたらす量である。投与される開示されたアミン官能性ポリアミドの正確な量は、治療されている乳腺炎又は感染の種類と重症度及び動物の特性、例えば健康状態、年齢、体重、薬剤に対する耐性に左右される。
従って、本発明は、具体的な実施態様において、獣医用ポリアミド組成物、及び非ヒト泌乳哺乳動物において乳腺炎を予防又は治療するためのこれらの組成物の使用に関する。獣医用組成物は、泌乳期又は乾乳期の間の乳腺内(IMM)投与によく適している。抗菌性ポリアミドが実質的に「牛乳血液障壁」を横切ることができないことから(その電荷及び比較的大きな分子量のため)、組成物は特にIMM適用によく適している。例えば、「ポリマーB」ポリアミドの平均分子量は、周知の全身的に作用する抗生物質であるセフチオフルより10倍大きい。血液牛乳障壁を横切って移動する薬剤は、典型的には、受動拡散によってそうさせる。約6.4〜約6.8の牛乳pHの抗菌性ポリマーの末端基は荷電されたままでなければならないので、体循環からこれを除外する。
方法の一実施態様において、有効な量のポリアミド組成物を感染した動物にIMM投与して、乳腺炎を引き起こしている感染を除去又は治癒するのに充分である非全身的/局所的ポリアミド曝露レベルを動物において得る。具体的な実施態様において、局所的(例えば乳頭管)曝露レベルは、細菌感染症を完全に除去又は治癒するのに充分である。より具体的な実施態様において、最小の牛乳中止時間だけが必要とされるようにポリアミドは充分に非全身的のままである。より具体的な実施態様において、牛乳は、約24時間未満の中止しか必要としない。理想的には、局所的に作用するポリアミド組成物で乳首管を治療した後に必要とされるのは約ゼロの牛乳中止時間である。
【００４７】
本発明の他の態様によれば、乳腺炎を治療する方法であって、アミン官能性ポリアミドポリマーを含む有効な量の獣医用組成物を、乳腺炎を有する非ヒト哺乳動物に投与することを含む、前記が提供される。
本発明の更に他の態様によれば、乳腺炎を予防する方法であって、抗菌性アミン官能性ポリアミドポリマーを含む有効な量の獣医用組成物を非ヒト哺乳動物に投与することを含む、前記方法が提供される。
本発明の他の態様によれば、非ヒト哺乳動物について乳腺炎の治療又は予防のための抗菌性アミン官能性ポリアミドを含む獣医用組成物の使用が提供される。
本発明の更に他の態様によれば、非ヒト哺乳動物において乳腺炎を治療又は予防する乳腺内獣医用組成物の製造のためのアミン官能性ポリアミドの使用が提供される。
製造のための使用の具体的な実施態様によれば、組成物、好ましくは獣医用組成物は抗菌性アミン官能性ポリアミドを含む。
本明細書に用いられる「完全に治癒する」は、所定の治療法が感染している病原体(1つ以上)の実質的な減少をもたらすこと、及び病原体(1つ以上)による臨床徴候が再発しないことを意味する。例えば、(乳腺炎を引き起こした)細菌が「完全に治癒された」ウシは、300,000未満SC/mL牛乳より低くなるまで回復する。SCCが病原体に対して動物自体の免疫応答を表しているので、組成物が感染を治癒した後、しばらくの期間にわたってSCCが「ピーク乳腺炎レベル」のままであると予想される。従って、治療後のSCC濃度が本明細書に詳述される場合、ウシが感染前、ベースラインSCC牛乳濃度に戻るのに充分な期間が経過したと仮定される。ベースラインSCCは、品種の中で、及び単一品種の動物の中で異なってもよいが、当業者は、所定の治療後SCCが感染したウシと感染していないウシとで一致しているかを評価することが可能である。
具体的な実施態様において、完全に治癒したウシは、250,000SC/mLより少ない。更に具体的な実施態様において、適切な量の回復時間後(治療後)、完全に治癒したウシは、約200,000SC/mL牛乳以下である。いずれにしても、ウシ治療後は、その感染していないコホート(例えばほぼ同じ品種でほぼ同じ年齢の同時に収容された乳牛)とほぼ同じSC/mLを有する。
【００４８】
医薬組成物
本発明によれば、この治療に用いられる獣医用組成物は、水溶性の抗菌性ポリアミドポリマーを含む。特に効果的なポリアミドとしては、ポリマーB、C、D、U及びTが挙げられる。
獣医用組成物は、局所的に作用する乳腺内生成物であることを意図する。好ましい乳腺内抗菌性ポリアミドは、体循環に入らず、又は無視できるくらい少ない程度まで入るだけである。一実施態様において、獣医用組成物は、非ヒト泌乳哺乳動物の乳腺炎を治療又は予防するために乳頭孔を介して投与される乳腺内生成物である。
本明細書に用いられる用語「獣医学的に有効な量」は、組成物が投与される動物において乳腺炎を予防するか又は治療するのに充分な用量を意味する。用量は、有効成分(1つ以上)、治療されている動物、症状の状態、及び症状の重症度に左右される。これらの要因の決定は、当業者のレベルの充分範囲内である。本発明は、好ましくは、乳腺内の軟膏、懸濁液、溶液又はゲルとして調製される。
【００４９】
方法
本発明の獣医用組成物は、動物における乳腺炎の予防又は治療に用いられ得る。乳腺炎は、E.コリ(E.coli)、クレブシエラ種(Klebsiella spp.)、エンテロバクター種(Enterobacter spp.)、サルモネラ種(Salmonella spp.)、シトロバクター種(Citrobacter spp.)、セラチア種(Serratia spp.)、シゲラ種(Shigella spp.)、エドワードシエラ種(Edwardsiella spp.)、ハフニア種(Hafnia spp.)、モルガネラ種(Morganella spp.)、プロビデンシア種(Providencia spp.)、エルシニア種(Yersinia spp.)、スタフィロコッカス・アウレウス(Staphylococcus aureus)、スタフィロコッカス種(Staphylococcus spp.)、シュードモナス種(Pseudomonas spp.)、ストレプトコッカス・アガラクティエ(Streptococcus agalactiae)、ストレプトコッカス・ディスガラクティエ(Streptococcus dysgalactiae)、ストレプトコッカス種(Streptococcus spp.)、エンテロコッカス(Enterococci)、コリネバクテリウム種(Corynebacterium spp.)、アルカノバクテリウム種(Arcanobacterium spp.)、アクチノマイセス種(Actinomyces spp.)、マイコバクテリウム種(Mycobacterium spp.)、プロトセカ種(Prototheca spp.)、マイコプラズマ種(Mycoplasma spp.)、エルウィニア種(Erwinia spp.)、ラクトバシラス種(Lactobacillus spp.)等が含まれるいくつかの病原体と関連付けられ得る。
【００５０】
組成物は、また、他の動物において、他の病原体によって引き起こされる感染症の予防又は治療に用いられてもよい。
獣医用組成物は、泌乳頻度及び/又は動物の乳腺の状態によって決定される適用経路と投薬計画を有する種々の適用に用いられ得る。
獣医用組成物は、乳腺炎の治療又は予防を必要とするすべての非ヒト泌乳哺乳動物、例えばウシ、ラクダ、バッファロー、ヤギ又はヒツジに適用され得るが、ヒト消費のための乳汁産生に用いられる反芻動物、例えばウシ、バッファロー、ヒツジ、及びヤギにおいて特に重要である。
乳腺炎の治療は、乳腺炎を起こした動物を治癒又は改善している、すなわち少なくとも1つの乳腺炎症状を減少している。乳腺炎は、乳腺の炎症をいう。牛乳中の物理的、化学的及び通常は細菌学的変化及び腺組織における病理学的変化によってそれが確認される。腺の変化によって、しばしば、多くの対症状態、例えば、牛乳の変色、凝塊の存在及び多数の白血球の存在が生じる。臨床的には、乳腺炎は、しばしば乳房の変形が生じる乳腺の腫脹、熱、疼痛及び硬化として見られる。炎症性乳房は、目にみえるか又は乳房の触診によって決定され得る。無症状感染の診断が主として牛乳(フレーク、凝固又は乳漿)の白血球含有量に基づく間接試験によって決まる多くの場合、少なくとも1つの細菌が、乳房からの少なくとも100mLの牛乳中に検出され、通常300,000細胞/mLより多い体細胞数(SCC)及び/又は牛乳の導電率が正常より高い。乳腺炎の予防は、感染の発生を予防することを意味する。予防には、また、乳腺炎の徴候を示していないが乳腺炎の少なくとも1つの徴候をもつ他の乳牛が共存している乳牛を治療して、1頭の乳牛からもう1頭に乳腺炎の感染又は潜在的感染を最小化するか又は予防することも含まれる。
【００５１】
動物の乳腺炎を治療する際の獣医用組成物の有効性は、治療した乳腺(すなわち、1つの乳頭からの牛乳がいずれの細菌も含んでいない)のパーセントとして定量化される。一実施態様において、獣医用組成物は、動物の乳腺の少なくとも50%を治療する。他の実施態様において、獣医用組成物は、動物の乳腺の約50%から約100%までを治療する。更に他の実施態様において、獣医用組成物は、動物の乳腺の約75%から約100%までを治療する。
獣医用組成物は、乳腺の内部空洞及びその関連する管系へ乳首口を通して乳腺内に(IMM)投与され得る。獣医用組成物は、軟膏、懸濁液、溶液又はゲルの形であり得る。
1分房(udder quarter)の治療のためのポリアミドの用量は、約20から約3000mgまでのポリアミド; 約100から約2000mgまで; 約200から約1500mgまで; 約250から約1000mgまで; 約300から約500mgまで; 又は約300mgを含有し得る。
治療する又は予防する用量は、1から8日間まで繰り返し投与されてもよい。一実施態様において、用量は、2〜8日間にわたって1日1又は2回投与される。他の実施態様において、用量は、4〜6日間にわたって1日1又は2回投与される。投薬とタイミングの正確な組み合わせが広い範囲の変動を受けるとともに疾患を治療又は予防するのに効果的な多数の組み合わせを本開示を考慮して当業者が容易に設定し得ると思われる。
【００５２】
上記を考慮して、本発明のいくつかの目的が達成され且つ他の有利な結果に到達することがわかる。種々の変更が本発明の範囲を逸脱することなく上記の製剤、生成物、及びプロセスで行われ得るので、前記説明に含有され且つ次の表に示されるすべての事項が、例示として解釈され、限定的に解釈されないことが意図されている。
本発明の要素又はその好ましい実施態様を導入する場合、冠詞「a」、「an」、「the(その)」及び「said(前記の)」は1つ以上の要素があることを意味するものである。用語「含む(comprising)」、「含む(including)」及び「有する(having)」は、含んでいることを意図し、挙げられた要素以外の追加の要素があってもよいことを意味するものである。更に、用語「本質的に〜からなる」は、挙げられた要素以外の追加の元素があってもよいことを意味するものであるが、「有効成分」とみなされるものではないことを意味するものである(例えば非活性賦形剤)。最後に、用語「からなる」は、挙げられた要素だけが含まれることを意味するものである。
特に明記しない限り、技術的用語は従来の使用法に従って用いられる。分子生物の一般用語の定義は、Benjamin Lewin, Genes V. published by Oxford University Press, 1994 (ISBN 0-19-854287-9); Kendrew et al.(eds.), The Encyclopedia of Molecular Biology, published by Blackwell Science Ltd., 1994 (ISBN 0-632-02182-9); Robert A.Meyers (ed.), Molecular Biology and Biotechnology: a Comprehensive Desk Reference, published by VCH Publishers, Inc., 1995 (ISBN 1-56081-569-8)に見られ得る。
下記の実施例は、単に、本発明を更に例示し説明することを意図する。それ故、実施例は、本発明の範囲又は実施され得る方法を制限するものと考えてはならない。
【実施例】
【００５３】
実施例1. ブイヨン中の最小発育阻止濃度(MIC)
25の抗菌性ポリマー(及びエリスロマイシン)の抗菌効果をMIC分析を用いて評価した。実験ごとに、2倍希釈濃度の各抗菌性ポリマーを2×最終濃度範囲(0.12〜16μg/mL)で調製し、100μLのAPIヌル製剤を負の対照ウェルに分配した。全体として、抗菌性ポリマー含有組成物は、病原体に対して、エリスロマイシン(ERY)と比較して充分に匹敵するか又は良好であった。
【００５４】
表5A. MIC試験のための細菌、培養液及びインキュベーション条件の説明
0006359630.tif 000019
MHB = ミュラーヒントンブイヨン、LHB = 3%溶解ウマ血液を有するミュラーヒントンブイヨン、VFM = 獣医用ファスティデアス(Fastidious)培地、HBAN = AlamarBlue(登録商標)及びβ-NADを有する改変ヘイフリックブイヨン
【００５５】
表5B. 追加の細菌の詳細
0006359630.tif 000020
【００５６】
表6-1. 選択された細菌に対する26の化合物のMIC(μg/mL)
0006359630.tif 000021
【００５７】
表6-2. アクチノバチルス・プルロニューモニエに対するMIC
0006359630.tif 000022
【００５８】
表6-3.
ボルデテラ・ブロンキセプティカに対するMIC
0006359630.tif 000023
【００５９】
表6-4. エンテロバクター種に対するMIC
0006359630.tif 000024
【００６０】
表6-5. エシュリキア・コリに対するMIC
0006359630.tif 000025
【００６１】
表6-6. クレブシエラ種に対するMIC
0006359630.tif 000026
【００６２】
表6-7. ヒストフィルス・ソムニに対するMIC
0006359630.tif 000027
【００６３】
表6-8. マイコプラズマ・ボビスに対するMIC
0006359630.tif 000028
【００６４】
表6-9. マンヘミア・ヘモリチカに対するMIC
0006359630.tif 000029
【００６５】
表6-10. モラクセラ・ボビスに対するMIC
0006359630.tif 000030
【００６６】
表6-11. プロテウス・ミラビリスに対するMIC
0006359630.tif 000031
【００６７】
表6-12. パスツレラ・ムルトシダに対するMIC
0006359630.tif 000032
【００６８】
表6-13. シュードモナス・エルギノーザに対するMIC
0006359630.tif 000033
【００６９】
表6-14. MRSAを含むスタフィロコッカス・アウレウスに対するMIC
0006359630.tif 000034
0006359630.tif 000035
【００７０】
表6-15. ストレプトコッカス・アガラクティエに対するMIC
0006359630.tif 000036
【００７１】
表6-16. スタフィロコッカス・シュードインターメディウス(+MRSP)に対するMIC
0006359630.tif 000037
【００７２】
表6-17. セラチア・マルセッセンスに対するMIC
0006359630.tif 000038
【００７３】
表6-18. ストレプトコッカス・カニスに対するMIC
0006359630.tif 000039
【００７４】
表6-19. コアグラーゼ陰性スタフィロコッカス種に対するMIC
0006359630.tif 000040
【００７５】
表6-20. ストレプトコッカス・ウベリスに対するMIC
0006359630.tif 000041
【００７６】
表6-21. ストレプトコッカス・ディスガラクティエに対するMIC
0006359630.tif 000042
【００７７】
実施例2. UHT乳中の最小発育阻止濃度(MIC)
ブイヨンの代わりにUHT乳を用いた以外は、実施例1に記載されているように実験を行った。「MIC」は、植菌される濃度と比較して(種菌と比較してlログ未満の増加)、細菌濃度において有意な増加を可能にしなかった最低抗菌濃度として定義される。「MBC」は、植菌される濃度と比較して、少なくとも3ログの低下が見られた最低濃度として定義される。牛乳中のMICがブイヨン中のMICに等しいか大きいと思われたので、0.12〜32μg/mL間の濃度を試験した。典型株として確認された分離株を3つの化合物(B、T、U)に対して感受性試験した。全体として、組成物は、牛乳において活性且つ安定であった。特に、優良API(ポリマーB)の2つの濃度は、フィルター滅菌された後にその抗菌活性を保持した。
【００７８】
表7. MIC試験のための細菌、培養液及びインキュベーション条件の説明
0006359630.tif 000043
【００７９】
実施例3. 種々の製剤の投与及び保持の容易さの評価
乳腺内注入のための賦形剤の種々の製剤の受容性及び保持を評価するために3頭の健康な、泌乳期成体ホルシュタイン乳牛、生後約32〜54ヵ月を実験した(食塩水に対して)。0日に、3頭の泌乳期乳牛の各々からの3つの乳腺分房を、3治療: グループ1(LFQ) = 8mLの食塩水; グループ2(RFQ) = 8mLのA0202-93A; グループ3(LRQ) = 8mLのA0202-93Bの1つに割り当てた。A0202-93Aは、8mL当たり約300mgのポリマーAを含有する2質量/質量% HPMC水溶液であり; A0202-93Bは、8mL当たり約300mgのポリマーBを含有する1.5質量/質量% HPMC溶液である。治療は、使い捨て注射器を用いてすべての治療グループに対して動物1頭当たり各分房に乳腺内に(IMM)1回投与した。毎日の健康観察は、0日目から始めた。
投与及び注入保持の容易さは、治療投与時に求めた。注入保持及び治療に対する有害反応を治療の約30分後に求めた。表8は、動物データ、治療の投与の容易さ及び注入保持スコアを示す表である。表9は、注入保持及び有害反応、治療の30分後を示す表である。
すべての治療グループがすべての動物に対して投与の容易さのスコア1(許容できる; 投与が容易)を得た。治療投与時及び治療の約30分後にすべての治療グループ及びすべての動物に対する注入保持スコアは、1であった(保持された)。治療の30分後に治療投与による有害反応は観察されなかった。
【００８０】
表8. 動物データ、治療の投与の容易さ及び注入保持
0006359630.tif 000044
1 LF = 左前部分房(qtr)、RF = 右前部qtr、LR = 左後部qtr、RR = 右後部qtr
2 グループ1 = 8mL/qtr食塩水; グループ2 = 8mL/qtr A0202-93A; グループ3 = 8mL/qtr A0202-93B
3 1 = 許容できる(投与が容易); 2 = 許容できない(投与が困難)
4 1 = 保持した;2 = 最小限の薬剤損失; 3 = 中程度の薬剤損失; 4 = 薬剤は保持されなかった
【００８１】
表9. 治療30分後の注入保持及び有害反応
0006359630.tif 000045
【００８２】
実施例4. 泌乳期乳牛における抗菌性組成物の臨床効果
各々が急性乳腺炎に少なくとも1分房が罹患している5頭の泌乳期乳牛をこの実験に提供し参加させた。0〜2日目に、8mLの製剤(「B」ポリマー)を1つの乳腺分房に投与した。製剤は、1.75% HPMC水溶液中3.75質量/容積%のポリマーBを含有した。製剤について、有効性、安全性、投与の容易さ及び保持を評価した。
PM搾乳後に乳腺内注入液を投与し、投与直後の投与の容易さだけでなく保持を評価した。治療の30分後(+ 15分)、保持及び治療に対する任意の有害反応を評価した。乳腺及び牛乳(搾乳前)の評価を含めて、実験の間、動物の臨床評価を1日1回(AM)行った。乳牛の乳腺の4つの分房を0日目(前処理)に及び3、5、及び7日目に培養した(AM搾乳時に)。従って、乳牛を実験の間、1日2回搾乳した。
治療投与前に、各動物に対して乳腺分房を個々に評価した。急性乳腺炎を有することが決定された乳腺分房だけを投与に用いた(1頭の乳牛につき1分房)。8mLの製剤(300mgのAPIを含有する)を、IMMを介して投与した。分房ごとの綿棒を0日目(注入前)及び3、5及び7日目に培養した。同様に、牛乳の試料をエスクリンで補足された血液寒天(5%ヒツジ血液)及びマイコプラズマ寒天双方で培養した。寒天平板を約37℃でインキュベートした(マイコプラズマ培養物のためにCO2を添加した)。血液寒天を24時間と48時間に調べ、マイコプラズマ寒天を植菌後4及び10日後に調べた。表10に示されるように動物を評価した。
【００８３】
表10. 動物の評価のための評価法
0006359630.tif 000046
【００８４】
部分的な牛乳スコア結果を得た(腫脹、疼痛及び牛乳)。1頭の乳牛が(腫脹3; 疼痛1; 牛乳1)からすべて「0」に改善した。治療した乳牛の約半分が改善を示したので、より高いレベルのAPI及び/又は追加の治療日間が乳腺炎を引き起こしている感染症を完全に除くのに有効であり得る。充分に許容される高度に可溶性の抗菌ポリアミドは、このようなより高いAPIレベル及びより長い治療用法に適している。
【００８５】
実施例5. アミン官能性ポリアミドの合成
実施例5-1: 4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパノイックアセテートの合成
20mLのメタノール溶液中の5.0gの4,4'-トリメチレンジピペリジン(20mL)に4.6gのメチルアクリレートを滴下した。得られた反応混合物を室温で16時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残留物を100%のヘキサンから100%の酢酸エチルまでを含む勾配溶媒系を用いたカラムクロマトグラフィによって精製した。減圧下で溶媒を除去して、7gの望ましい生成物を白色固体として得た。
【００８６】
実施例5-2: 4,4'-ジピペリジンビスプロパノイックアセテートの合成
80mLのメタノールに溶解した10.0gの4,4'-ジピペリジンHClに12.6gの炭酸カリウムを添加した。この反応混合物を室温で3時間撹拌し、その時に8.03gのメチルアクリレートを徐々に添加した。次に得られた反応溶液を室温で18時間撹拌した。この反応混合物を濾過し、濾液を減圧下で蒸発乾固した。残留物を300mLの酢酸エチルで処理した。得られた懸濁液を室温で2時間撹拌した後、濾過した。濾液を減圧下で蒸発乾固した。得られた塊を真空中室温で乾燥して、11.34gの望ましい生成物をオフホワイトの固形物として得た。
【００８７】
実施例5-3: ピペラジンビスプロパノイックアセテートの合成
40mLのメタノールに溶解した10gのピペラジン6水和物に9.97gのメチルアクリレートを1滴ずつ添加した。この反応混合物を室温で18時間撹拌した。この時間の終わりに、反応混合物を減圧下で蒸発乾固した。残留物をヘキサン/塩化メチレン(1:1 容積/容積)から再結晶した。濾過し、減圧下室温で乾燥した後、12.2gの望ましい生成物を白色固体として得た。
【００８８】
実施例5-4: 1,1'-ジアクリル-4,4'-トリメチレンジピペリジンの合成
50mLのジクロロメタンに溶解した3.8gのアクリロイルクロリドに20mLのジクロロメタンに溶解した4.0gの4,4-トリメチレンジピペリジンの溶液を0℃で1滴ずつ添加した。この溶液に4.23gのトリエチルアミンを注射器で徐々に添加した。得られた反応混合物を18時間撹拌し、室温に加温した。この反応混合物を濾過し、濾液を集めた。減圧下で溶媒を除去した後、残留物を100mLの酢酸エチルで処理した。この溶液を1M HCl(1×100mL)、NaHCO3飽和液(2×100mL)で、最後に食塩水(2×100mL)で抽出した。有機層を集め、Na2SO4で乾燥した。濾過後、濾液を減圧下で蒸発乾固した。残留物を100%ヘキサンから100%酢酸エチルまでの勾配溶媒系を用いたカラムクロマトグラフィによって精製した。溶媒を除去して、3gの望ましい生成物を粘稠な油状物として得た。
【００８９】
実施例5-5: 2,2'-ビピロリジンビスプロパノイックアセテートの合成
20mLのメタノール中の5gの2,2'-ビピロリジンの溶液に6.9gのメチルアクリレート(6.9g、80mmol)を1滴ずつ添加した。得られた反応混合物を室温で16時間撹拌した。この反応混合物を蒸発乾固して、10gの望ましい生成物を粘稠な油状物として得た。
【００９０】
実施例5-6: ポリ(4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-コ-1,3-ジアミノプロパン)の合成
1gの4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパノイックアセテート(実施例5-1)及び0.387gの1,3-ジアミノプロパンからなる反応混合物を窒素雰囲気下に100℃で18時間加熱した。得られた生成物を5mLのジクロロメタンに溶解し、50mLの酢酸エチルに注入した。溶媒を濾別した後に、残留物を20mLの脱イオン(DI)水に溶解した。この溶液をHClの添加によってpH2にした。得られた溶液を分子量区分1000Daの透析膜を用いてDI水に対して24時間透析した。透析バッグ中に残っている溶液を凍結乾燥によって乾燥して、90mgの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【００９１】
実施例5-7: ポリ(4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-コ-ジアミノエタン)の合成
0.5gの4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパノイックアセテート(実施例5-1)及び0.157gのジアミノエタンを含有する反応混合物を窒素雰囲気下に100℃で18時間撹拌した。得られた生成物を5mLのジクロロメタンに溶解し、50mLの酢酸エチルに注入した。沈殿を濾過によって分離し、20mLのDI水に溶解した。この溶液をpH2に調整した後、分子量区分1000Daの透析膜を用いてDI水に対して透析した。透析膜に残っている溶液を凍結乾固して、50mgの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【００９２】
実施例5-8: ポリ(4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-コ-1,4-ジアミノブタン)の合成
0.5gの4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパノイックアセテート及び0.23gの1,4-ジアミノブタンを含有する反応混合物を窒素雰囲気下に100℃で18時間撹拌した。得られた生成物を5mLのCH2Cl2に溶解し、次に50mLの酢酸エチルに沈殿した。沈殿を濾過によって分離し、20mLのDI水に溶解した。この溶液をpH2に調整した後、分子量区分1000Daの透析膜を用いてDI水に対して透析した。透析膜に残っている溶液を凍結乾固して、60mgの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【００９３】
実施例5-9: ポリ(4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-コ-1,2-ビス(2-アミノエトキシ)エタンの合成
0.5gの4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパノイックアセテート及び0.26gの1,2-ビス(2-アミノエトキシ)エタンを含有する反応混合物を窒素雰囲気下に100℃で18時間撹拌した。得られた生成物を5mLのジクロロメタンに溶解し、50mLの酢酸エチルに注入した。沈殿を濾過によって分離し、20mLのDI水に溶解した。この溶液をpH2に調整した後、分子量区分1000Daの透析膜を用いてDI水に対して透析した。透析膜に残っている溶液を凍結乾固して、60mgの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【００９４】
実施例5-10: ポリ(4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-コ-1,4-ビス(アミノメチル)ベンゼンの合成
0.5gの4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパノイックアセテート及び0.7gの1,4-ビス(アミノメチル)ベンゼン(0.7g、5.1mmol)を含有する反応混合物を窒素雰囲気下に100℃で18時間撹拌した。得られた生成物を5mLのジクロロメタンに溶解し、50mLの酢酸エチルに注入した。沈殿を濾過によって分離し、20mLのDI水に溶解した。この溶液をpH2に調整した後、分子量区分1000Daの透析膜を用いてDI水に対して透析した。透析膜に残っている溶液を凍結乾固して、40mgの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【００９５】
実施例5-11: ポリ(4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-コ-2,2'ジアミノジエチルアミンの合成
0.5gの4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパノイックアセテート及び0.35gの2,2'ジアミノジエチルアミンを含有する反応混合物を窒素雰囲気下に100℃で18時間撹拌した。得られた生成物を5mLのジクロロメタンに溶解し、50mLの酢酸エチルに注入した。沈殿を濾過によって分離し、20mLのDI水に溶解した。この溶液をpH2に調整した後、分子量区分1000Daの透析膜を用いてDI水に対して透析した。透析膜に残っている溶液を凍結乾固して、63mgの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【００９６】
実施例5-12: ポリ(4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-コ-N-メチル-2,2'ジアミノジエチルアミンの合成
1gの4, 4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパノイックアセテート及び0.61gのN-メチル-2,2'ジアミノジエチルアミン(0.61g、5.2mmol)を含有する反応混合物を窒素雰囲気下に100℃で18時間撹拌した。得られた生成物を5mLのジクロロメタンに溶解し、50mLの酢酸エチルに注入した。沈殿を濾過によって分離し、20mLのDI水に溶解した。この溶液をpH2に調整した後、分子量区分1000Daの透析膜を用いてDI水に対して透析した。透析膜中残っている溶液を凍結乾燥して、130mgの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【００９７】
実施例5-13: ポリ(4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-コ-N-(3-アミノプロピル)-1,3-プロパンジアミンの合成
1gの4, 4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパノイックアセテート及び0.68gのN-(3-アミノプロピル)-1,3-プロパンジアミン(0.68g、5.2mmol)を含有する反応混合物を窒素雰囲気下に100℃で18時間撹拌した。得られた生成物を5mLのジクロロメタンに溶解し、50mLの酢酸エチルに注入した。沈殿を濾過によって分離し、20mLのDI水に溶解した。この溶液をpH2に調整した後、分子量1000Da区分の透析膜を用いてDI水に対して透析した。透析膜に残っている溶液を凍結乾固して、180mgの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【００９８】
実施例5-14: ポリ(4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-コ-3,3'-ジアミノ-N-メチルジプロピルアミンの合成
1gの4, 4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパノイックアセテート及び0.76gの3,3'-ジアミノ-N-メチルジプロピルアミンを含有する反応混合物を窒素雰囲気下に100℃で18時間撹拌した。得られた生成物を5mLのジクロロメタンに溶解し、50mLの酢酸エチルに注入した。沈殿を濾過によって分離し、20mLのDI水に溶解した。この溶液をpH2に調整した後、分子量1000Da区分の透析膜を用いてDI水に対して透析した。透析膜に残っている溶液を凍結乾固して、110mgの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【００９９】
実施例5-15: ポリ(4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-コ-1,3-ジアミノ-2-プロパノールの合成
1gの4, 4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパノイックアセテート及び0.47gの1,3-ジアミノ-2-プロパノール(0.47g、5.2mmol)を含有する反応混合物を窒素雰囲気下に100℃で18時間撹拌した。得られた生成物を5mLのジクロロメタンに溶解し、50mLの酢酸エチルに注入した。沈殿を濾過によって分離し20mLのDI水に溶解した。この溶液をpH2に調整した後、分子量区分1000Daの透析膜を用いてDI水に対して透析した。透析膜に残っている溶液を凍結乾固して、60mgの望ましい生成物を淡黄色固形物として得た。
【０１００】
実施例5-16: ポリ(4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-コ-4-(4-アミノ-ブトキシル)-ブチルアミンの合成
4-(4-アミノ-ブトキシル)-ブチルアミンHCl塩(1g)を20mLのメタノールに溶解した。この溶液に0.72gの水酸化ナトリウム水溶液(50質量/質量%)を添加した。この反応混合物を室温で1時間撹拌した。固形分を濾別した後、濾液を蒸発乾固した。残留物を20mLのエタノールで処理した。この反応混合物を濾過し、濾液を蒸発乾固して、0.55gのオフホワイトの固形物を得た。この固形物を0.75gの4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパノイックアセテートと合わせ、得られた反応混合物を窒素雰囲気下に100℃で18時間撹拌した。得られた生成物を5mLのジクロロメタンに溶解し、50mLの酢酸エチルに注入した。沈殿を濾過によって分離し、20mLのDI水に溶解した。この溶液をpH2に調整した後、分子量区分1000Daの透析膜を用いてDI水に対して透析した。透析膜に残っている溶液を凍結乾固して、90mgの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【０１０１】
実施例5-17: ポリ(4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-コ-3,5-ジアミノ-1,2,4-トリアゾールの合成
1gの4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパノイックアセテート及び0.31gの3,5-ジアミノ-1,2,4-トリアゾールを含有する反応混合物を1mLのDMSOで処理した。得られた反応混合物を窒素雰囲気下に100℃で18時間撹拌した。得られた生成物を5mLのジクロロメタンに溶解し、50mLの酢酸エチルに注入した。沈殿を濾過によって分離し、20mLのDI水に溶解した。この溶液をpH2に調整した後に、分子量区分1000Daの透析膜を用いてDI水に対して透析した。透析膜に残っている溶液を凍結乾固して、10mgの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【０１０２】
実施例5-18: ポリ(ピペラジンビスプロパン酸-コ-ジアミノエタン)の合成
1gのピペラジンビスプロパノイックアセテート(実施例5-3)及び0.47gのジアミノエタンを含有する反応混合物を窒素雰囲気下に100℃で18時間撹拌した。得られた生成物を5mLのジクロロメタンに溶解し、50mLの酢酸エチルに注入した。沈殿を濾過によって分離し、20mLのDI水に溶解した。この溶液をpH2に調整した後、分子量区分1000Daの透析膜を用いてDI水に対して透析した。透析膜に残っている溶液を凍結乾固して、10mgの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【０１０３】
実施例5-19: ポリ(ピペラジンビスプロパン酸-コ-1,3-ジアミノプロパン)の合成
1gのピペラジンビスプロパノイックアセテート(実施例5-3)及び0.5gの1,3-ジアミノプロパンを含有する反応混合物を窒素雰囲気下に100℃で18時間撹拌した。得られた生成物を5mLのジクロロメタンに溶解し、50mLの酢酸エチルに注入した。沈殿を濾過によって分離し、20mLのDI水に溶解した。この溶液をpH2に調整した後、分子量区分1000Daの透析膜を用いてDI水に対して透析した。透析膜に残っている溶液を凍結乾固して、30mgの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【０１０４】
実施例5-20: ポリ(ピペラジンビスプロパン酸-コ-1,4-ジアミノブタン)の合成
1gのピペラジンビスプロパノイックアセテート(実施例5-3)及び0.6gの1,4-ジアミノブタンを含有する反応混合物を窒素雰囲気下に100℃で18時間撹拌した。得られた生成物を5mLのジクロロメタンに溶解し、50mLの酢酸エチルに注入した。沈殿を濾過によって分離し、20mLのDI水に溶解した。この溶液をpH2に調整した後、分子量区分1000Daの透析膜を用いてDI水に対して透析した。透析膜に残っている溶液を凍結乾固して、60mgの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【０１０５】
実施例5-21: ポリ(ピペラジンビスプロパン酸-コ-1,2-ビス(2-アミノエトキシ)エタンの合成
1gのピペラジンビスプロパノイックアセテート(実施例5-3)及び1.15gの1,2-ビス(2-アミノエトキシ)エタンを含有する反応混合物を窒素雰囲気下に100℃で18時間撹拌した。得られた生成物を5mLのジクロロメタンに溶解し、50mLの酢酸エチルに注入した。沈殿を濾過によって分離し、20mLのDI水に溶解した。この溶液をpH2に調整した後、分子量区分1000Daの透析膜を用いてDI水に対して透析した。透析膜に残っている溶液を凍結乾固して、30mgの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【０１０６】
実施例5-22: ポリ(ピペラジンビスプロパン酸-コ-2,2'ジアミノジエチルアミンの合成
1gのピペラジンビスプロパノイックアセテート(実施例5-3)及び0.8gの2,2'-ジアミノジエチルアミンを含有する反応混合物を窒素雰囲気下に100℃で18時間撹拌した。得られた生成物を5mLのジクロロメタンに溶解し、50mLの酢酸エチルに注入した。沈殿を濾過によって分離し、20mLのDI水に溶解した。この溶液をpH2に調整した後、分子量区分1000Daの透析膜を用いてDI水に対して透析した。透析膜に残っている溶液を凍結乾固して、60mgの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【０１０７】
実施例5-23: ポリ(ピペラジンビスプロパン酸-コ-N-メチル-2,2'ジアミノジエチルアミンの合成
1gのピペラジンビスプロパノイックアセテート(実施例5-3)及び0.9gのN-メチル-2,2'-ジアミノジエチルアミンを含有する反応混合物を窒素雰囲気下に100℃で18時間撹拌した。得られた生成物を5mLのジクロロメタンに溶解し、50mLの酢酸エチルに注入した。沈殿を濾過によって分離し、20mLのDI水に溶解した。この溶液をpH2に調整した後、分子量区分1000Daの透析膜を用いてDI水に対して透析した。透析膜に残っている溶液を凍結乾固して、50mgの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【０１０８】
実施例5-24: ポリ(ピペラジンビスプロパン酸-コ-N-(3-アミノプロピル)-1,3-プロパンジアミンの合成
1gのピペラジンビスプロパノイックアセテート(実施例5-3)及び1.02gのN-(3-アミノプロピル)-1,3-プロパンジアミンを含有する反応混合物を窒素雰囲気下に100℃で18時間撹拌した。得られた生成物を5mLのジクロロメタンに溶解し、50mLの酢酸エチルに注入した。沈殿を濾過によって分離し、20mLのDI水に溶解した。この溶液をpH2に調整した後、分子量区分1000Daの透析膜を用いてDI水に対して透析した。透析膜に残っている溶液を凍結乾固して、90mgの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【０１０９】
実施例5-25: ポリ(ピペラジンビスプロパン酸-コ-3,3'-ジアミノ-N-メチルジプロピルアミンの合成
1gのピペラジンビスプロパノイックアセテート(実施例5-3)及び1.12gの3,3'-ジアミノ-N-メチルジプロピルアミンを含有する反応混合物を窒素雰囲気下に100℃で18時間撹拌した。得られた生成物を5mLのジクロロメタンに溶解し、50mLの酢酸エチルに注入した。沈殿を濾過によって分離し、20mLのDI水に溶解した。この溶液をpH2に調整した後、分子量区分1000Daの透析膜を用いてDI水に対して透析した。透析膜に残っている溶液を凍結乾固して、120mgの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【０１１０】
実施例5-26: ポリ(4,4'-ジピペリジンビスプロパン酸-コ-ジアミノエタンの合成
1gの4,4'-ジピペリジンビスプロパノイックアセテート(実施例5-2)及び0.31gのジアミノエタンを含有する反応混合物を窒素雰囲気下に100℃で18時間撹拌した。得られた生成物を5mLのジクロロメタンに溶解し、50mLの酢酸エチルに注入した。沈殿を濾過によって分離し、20mLのDI水に溶解した。この溶液をpH2に調整した後、分子量区分1000Daの透析膜を用いてDI水に対して透析した。透析膜に残っている溶液を凍結乾固して、90mgの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【０１１１】
実施例5-27: ポリ(4,4'-ジピペリジンビスプロパン酸-コ-1,3-ジアミノプロパンの合成
1gの4,4'-ジピペリジンビスプロパノイックアセテート(実施例5-2)及び0.38gの1,3-ジアミノプロパンを含有する反応混合物を窒素雰囲気下に100℃で18時間撹拌した。得られた生成物を5mLのジクロロメタンに溶解し、50mLの酢酸エチルに注入した。沈殿を濾過によって分離し、20mLのDI水に溶解した。この溶液をpH2に調整した後、分子量区分1000Daの透析膜を用いてDI水に対して透析した。透析膜に残っている溶液を凍結乾固して、60mgの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【０１１２】
実施例5-28: ポリ(4,4'-ジピペリジンビスプロパン酸-コ-1,4-ジアミノブタンの合成
1gの4,4'-ジピペリジンビスプロパノイックアセテート(実施例5-2)及び0.45gの1,4-ジアミノブタンを含有する反応混合物を窒素雰囲気下に100℃で18時間撹拌した。得られた生成物を5mLのジクロロメタンに溶解し、50mLの酢酸エチルに注入した。沈殿を濾過によって分離し、20mLのDI水に溶解した。この溶液をpH2に調整した後、分子量区分1000Daの透析膜を用いてDI水に対して透析した。透析膜に残っている溶液を凍結乾固して、90mgの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【０１１３】
実施例5-29: ポリ(4,4'-ジピペリジンビスプロパン酸-コ-1,2-ビス(2-アミノエトキシ)エタンの合成
1gの4,4'-ジピペリジンビスプロパノイックアセテート(実施例5-2)及び0.76gの1,2-ビス(2-アミノエトキシ)エタンを含有する反応混合物を窒素雰囲気下に100℃で18時間撹拌した。得られた生成物を5mLのジクロロメタンに溶解し、50mLの酢酸エチルに注入した。沈殿を濾過によって分離し、20mLのDI水に溶解した。この溶液をpH2に調整した後、分子量区分1000Daの透析膜を用いてDI水に対して透析した。透析膜に残っている溶液を凍結乾固して、100mgの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【０１１４】
実施例5-30: ポリ(4,4'-ジピペリジンビスプロパン酸-コ-2,2'ジアミノジエチルアミンの合成
1gの4,4'-ジピペリジンビスプロパノイックアセテート及び0.45gの2,2'ジアミノジエチルアミンを含有する反応混合物を窒素雰囲気下に100℃で18時間撹拌した。得られた生成物を5mLのジクロロメタンに溶解し、50mLの酢酸エチルに注入した。沈殿を濾過によって分離し、20mLのDI水に溶解した。この溶液をpH2に調整した後、分子量区分1000Daの透析膜を用いてDI水に対して透析した。透析膜に残っている溶液を凍結乾固して、310mgの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【０１１５】
実施例5-31: ポリ(4,4'-ジピペリジンビスプロパン酸-コ-N-メチル-2,2'ジアミノジエチルアミンの合成
1gの4,4'-ジピペリジンビスプロパノイックアセテート及び0.52gのN-メチル-2,2'ジアミノジエチルアミンを含有する反応混合物を窒素雰囲気下に100℃で18時間撹拌した。得られた生成物を5mLのジクロロメタンに溶解し、50mLの酢酸エチルに注入した。沈殿を濾過によって分離し、20mLのDI水に溶解した。この溶液をpH2に調整した後、分子量区分1000Daの透析膜を用いてDI水に対して透析した。透析膜に残っている溶液を凍結乾固して、480mgの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【０１１６】
実施例5-32: ポリ(4,4'-ジピペリジンビスプロパン酸-コ-N-(3-アミノプロピル)-1,3-プロパンジアミンの合成
1gの4,4'-ジピペリジンビスプロパノイックアセテート及び0.58gのN-(3-アミノプロピル)-1,3-プロパンジアミンを含有する反応混合物を窒素雰囲気下に100℃で18時間撹拌した。得られた生成物を5mLのジクロロメタンに溶解し、50mLの酢酸エチルに注入した。沈殿を濾過によって分離し、20mLのDI水に溶解した。この溶液をpH2に調整した後、分子量区分1000Daの透析膜を用いてDI水に対して透析した。透析膜に残っている溶液を凍結乾固して、540mgの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【０１１７】
実施例5-33: ポリ(4,4'-ジピペリジンビスプロパン酸-コ-3,3'-ジアミノ-N-メチルジプロピルアミンの合成
1gの4,4'-ジピペリジンビスプロパノイックアセテート及び0.64gの3,3'-ジアミノ-N-メチルジプロピルアミンを含有する反応混合物を窒素雰囲気下に100℃で18時間撹拌した。得られた生成物を5mLのジクロロメタンに溶解し、50mLの酢酸エチルに注入した。沈殿を濾過によって分離し、20mLのDI水に溶解した。この溶液をpH2に調整した後、分子量区分1000Daの透析膜を用いてDI水に対して透析した。透析膜に残っている溶液を凍結乾固して、420mgの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【０１１８】
実施例5-34: ポリ(1,1'-ジアクリル-4,4'-トリメチレンジピペリジン-コ-1,3-ジアミノプロパンの合成
1gの1,1'-ジアクリル-4,4'-トリメチレンジピペリジン、0.35gの1,3-ジアミノプロパン及び1mLのメタノールを含有する反応混合物を室温で18時間撹拌した。得られた生成物を5mLのジクロロメタンに溶解し、50mLの酢酸エチルに注入した。沈殿を濾過によって分離し、20mLのDI水に溶解した。この溶液をpH2に調整した後、分子量区分1000Daの透析膜を用いて脱イオン水に対して透析した。透析膜に残っている溶液を凍結乾固して、640mgの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【０１１９】
実施例5-35: ポリ(1,1'-ジアクリル-4,4'-トリメチレンジピペリジン-コ-N,N'-ジメチル-1,3-プロパンジアミンの合成
1gの1,1'-ジアクリル-4,4'-トリメチレンジピペリジン、0.36gのN,N'-ジメチル-1,3-プロパンジアミン及び1mLのメタノールを含有する反応混合物を60℃で24時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残留物を20mLのDI水に溶解した。HClを添加することによってこの溶液をpH2に調整した。ポリマー溶液を分子量区分1000Daの透析膜を用いてDI水に対して透析した。透析膜に残っている溶液を凍結乾固して、180mgの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【０１２０】
実施例5-36: ポリ(1,1'-ジアクリル-4,4'-トリメチレンジピペリジン-コ-4,4'-トリメチレンジピペリジンの合成
1gの1,1'-ジアクリル-4,4'-トリメチレンジピペリジン、0.99gの4,4'-トリメチレンジピペリジン、1mLのメタノールを含有する反応混合物を60℃で12時間撹拌した。得られた生成物を5mLのジクロロメタンに溶解し、50mLの酢酸エチルに注入した。沈殿を濾過によって分離し、20mLのDI水に溶解した。この溶液をpH2に調整した後、分子量区分1000Daの透析膜を用いてDI水に対して透析した。透析膜に残っている溶液を凍結乾固して、220mgの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【０１２１】
実施例5-37: ポリ(1,1'-ジアクリル-4,4'-トリメチレンジピペリジン-コ-ピペラジンの合成
1gの1,1'-ジアクリル-4,4'-トリメチレンジピペリジン、0.91gのピペラジン6水和物及び1mLのメタノールを含有する反応混合物を60℃で12時間撹拌した。得られた生成物を5mLのジクロロメタンに溶解し、50mLの酢酸エチルに注入した。沈殿を濾過によって分離し、20mLのDI水に溶解した。この溶液をpH2に調整した後、分子量区分1000Daの透析膜を用いてDI水に対して透析した。透析膜に残っている溶液を凍結乾固して、80mgの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【０１２２】
実施例5-38: ポリ(1,1'-ジアクリル-4,4'-トリメチレンジピペリジン-コ-4,4'-ビピペリジンの合成
1.14gの4,4'-ジピペリジンHCl及び5mLのメタノールを含有する溶液を1.14gの炭酸カリウムで処理した。この反応混合物を室温で2時間撹拌した。この反応混合物を濾過し、濾液を3mLのメタノールに溶解した1gの1,1'-ジアクリル-4,4'-トリメチレンジピペリジンと合わせた。得られた反応混合物を60℃で15時間撹拌した。得られた生成物を50mLの酢酸エチルに注入した。沈殿を濾過によって分離し、20mLのDI水に溶解した。この溶液をpH2に調整した後、分子量区分1000Daの透析膜を用いてDI水に対して透析した。透析膜に残っている溶液を凍結乾固して、140mgの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【０１２３】
実施例5-39: ポリ(1,1'ジアクリル-4,4'-トリメチレンジピペリジン-コ-ヒスタミン)の合成
1gの1,1'-ジアクリル-4,4'-トリメチレンジピペリジン、0.5gのヒスタミン及び1mLのメタノールを含有する反応混合物を160℃で8時間撹拌した。得られた生成物を50mLの酢酸エチルに注入した。沈殿を濾過によって分離し、20mLのDI水に溶解した。この溶液をpH2に調整した後、分子量区分1000Daの透析膜を用いてDI水に対して透析した。透析膜に残っている溶液を凍結乾固して、120mgの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【０１２４】
実施例5-40: ポリ(1,1'ジアクリル-4,4'-トリメチレンジピペリジン-コ-3-(ジメチルアミノ)-1-プロピルアミン)の合成
1gの1,1'-ジアクリル-4,4'-トリメチレンジピペリジン、0.53gの3-(ジメチルアミノ)-1-プロピルアミン及び1mLのメタノールを含有する反応混合物を50℃で10時間撹拌した。得られた生成物を50mLの酢酸エチルに注入した。沈殿を濾過によって分離し、20mLのDI水に溶解した。この溶液をpH2に調整した後、分子量区分1000Daの透析膜を用いてDI水に対して透析した。透析膜に残っている溶液を凍結乾固して、1gの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【０１２５】
実施例5-41: ポリ(1,1'ジアクリル-4,4'-トリメチレンジピペリジン-コ-プロピルアミンの合成
0.64gの1,1'-ジアクリル-4,4'-トリメチレンジピペリジン、0.35gのプロピルアミン、及び1mLのメタノールを含有する反応混合物を60℃で20時間撹拌した。得られた生成物を50mLの酢酸エチルに注入した。沈殿を濾過によって分離し、20mLのDI水に溶解した。この溶液をpH2に調整した後、分子量区分1000Daの透析膜を用いてDI水に対して透析した。透析膜に残っている溶液を凍結乾固して、740mgの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【０１２６】
実施例5-42: ポリ(1,1'ジアクリル 4,4'-トリメチレンジピペリジン-コ-1-アミノブチル-3-カルバモイルピリジニウムの合成
0.5gの1,1'-ジアクリル-4,4'-トリメチレンジピペリジン、0.35gの1-アミノブチル-3-カルバモイルピリジニウム及び3mLのメタノールを含有する反応混合物を50℃で20時間撹拌した。得られた生成物を50mLの酢酸エチルに注入した。沈殿を濾過によって分離し、20mLのDI水に溶解した。この溶液をpH2に調整した後、分子量区分1000Daの透析膜を用いてDI水に対して透析した。透析膜に残っている溶液を凍結乾固して、20mgの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【０１２７】
実施例5-43: ポリ(1,1'ジアクリル-4,4'-トリメチレンジピペリジン-コ-1-アミノブチル-3-カルバモイルピリジニウム)-コ-4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-2-ヒドロキシ-1,3-ジアミノプロパン)の合成
1.0gの1,1'-ジアクリル-4,4'-トリメチレンジピペリジン、0.36gの1-アミノブチル-3-カルバモイルピリジニウム、0.27gのモノN-boc-1,3-ジアミノプロパン、及び3mLのメタノールを含有する反応混合物を50℃で20時間撹拌した。この反応混合物を50mLの酢酸エチルに注入した。沈殿を濾過によって分離した。残留物を酢酸エチル(3×50mL)で洗浄し、減圧下で乾燥した。
上記の生成物を5mLのメタノールに溶解し、0.5gの4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸及び0.25mLの濃HClと混合した。得られた反応混合物を50℃で6時間撹拌した。得られた生成物を50mLの酢酸エチルに注入した。沈殿を濾過によって分離し、20mLのDI水に溶解した。この溶液をpH2に調整した後、分子量区分1000Daの透析膜を用いてDI水に対して透析した。透析膜に残っている溶液を凍結乾固して、210mgの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【０１２８】
実施例5-44: ポリ(2,2'-ビピロリジンビスプロパン酸-コ-ジアミノエタン)の合成
1.0gの2,2'-ビピロリジンビスプロパノイックアセテート及び0.38gのジアミノエタンを含有する反応混合物を窒素雰囲気下に100℃で20時間撹拌した。得られた生成物を3mLのメタノールに溶解し、50mLの酢酸エチルに注入した。沈殿を濾過によって分離し、20mLのDI水に溶解した。この溶液をpH2に調整した後、分子量区分1000Daの透析膜を用いてDI水に対して透析した。透析膜に残っている溶液を凍結乾固して、10mgの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【０１２９】
実施例5-45: ポリ(2,2'-ビピロリジンビスプロパン酸-コ-1,3-ジアミノプロパン)の合成
1.0gの2,2'-ビピロリジンビスプロパノイックアセテート及び0.47gの1,3-ジアミノプロパンを含有する反応混合物を窒素雰囲気下に100℃で20時間撹拌した。得られた生成物を3mLのメタノールに溶解し、50mLの酢酸エチルに注入した。沈殿を濾過によって分離し、20mLのDI水に溶解した。この溶液をpH2に調整した後、分子量区分1000Daの透析膜を用いてDI水に対して透析した。透析膜に残っている溶液を凍結乾固して、540mgの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【０１３０】
実施例5-46: ポリ(2,2'-ビピロリジンビスプロパン酸-コ-1,3-ジアミノブタン)の合成
1.0gの2,2'-ビピロリジンビスプロパノイックアセテート及び0.56gの1,4-ジアミノブタンを含有する反応混合物を窒素雰囲気下に100℃で20時間撹拌した。得られた生成物を3mLのメタノールに溶解し、50mLの酢酸エチルに注入した。沈殿を濾過によって分離し、20mLのDI水に溶解した。この溶液をpH2に調整した後、分子量区分1000Daの透析膜を用いてDI水に対して透析した。透析膜に残っている溶液を凍結乾固して、380mgの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【０１３１】
実施例5-47: ポリ(2,2'-ビピロリジンビスプロパン酸-コ-1,5-ジアミノペンタン)の合成
1.0gの2,2'-ビピロリジンビスプロパノイックアセテート及び0.65gの1,5-ジアミノペンタンを含有する反応混合物を窒素雰囲気下に100℃で20時間撹拌した。得られた生成物を3mLのメタノールに溶解し、50mLの酢酸エチルに注入した。沈殿を濾過によって分離し、20mLのDI水に溶解した。この溶液をpH2に調整した後、分子量区分1000Daの透析膜を用いてDI水に対して透析した。透析膜に残っている溶液を凍結乾固して、10mgの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【０１３２】
実施例5-48: ポリ(2,2'-ビピロリジンビスプロパン酸-コ-1,6-ジアミノヘキサン)の合成
1.0gの2,2'-ビピロリジンビスプロパノイックアセテート及び0.74gの1,6-ジアミノヘキサンを含有する反応混合物を窒素雰囲気下に100℃で20時間撹拌した。得られた生成物を3mLのメタノールに溶解し、50mLの酢酸エチルに注入した。沈殿を濾過によって分離し、20mLのDI水に溶解した。この溶液をpH2に調整した後、分子量区分1000Daの透析膜を用いてDI水に対して透析した。透析膜に残っている溶液を凍結乾固して、10mgの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【０１３３】
実施例5-49: ポリ(4,4-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-コ-4-(1,2-ジオール)-1,4,7-トリアザヘプタン)の合成
実施例5-49(a): 4-(1,2-ジオール)-1,4,7-トリアザヘプタンの合成
5mLのエタノール中に1gの1,7-ビス-Boc-1,4,7-トリアザヘプタン及び0.3gのグリシドールを添加し、この反応混合物を15時間還流した。得られた生成物を100%ヘキサン〜100%の範囲にある勾配溶媒系を用いたカラムクロマトグラフィによって精製して、0.4gの1,7-ビス-boc-4-(1,2-ジオール)-1,4,7-トリアザヘプタンを得た。2mLのメタノールに溶解した0.4gの1,7-ビス-boc-4-(1,2-ジオール)-1,4,7-トリアザヘプタンに0.3mLの濃HClを添加した。この反応混合物を50℃で24時間撹拌した。減圧下で溶媒を除去した後、残留物を10mLのメタノール:水(1:1 容積/容積)に溶解した。この溶液に5.0gのAmberlyst OH 26樹脂を添加した。室温で3時間撹拌した後、樹脂を濾別した。溶媒を減圧下で溶媒を蒸発させた。得られた油状物を凍結乾固して、0.15gの望ましい生成物を粘稠な液体として得た。
実施例5-49(b): ポリ(4,4-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-コ-4-(1,2-ジオール)-1,4,7-トリアザヘプタン)の合成
0.288gの4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパノイックアセテート及び0.15gの4-(1,2-ジオール)-1,4,7-トリアザヘプタン(実施例5-49(a))を含有する反応混合物を100℃で18時間撹拌した。得られた生成物を3mLのメタノールに溶解し、50mLの酢酸エチルに注入した。沈殿を濾過によって分離し、20mLのDI水に溶解した。この溶液をpH2に調整した後、分子量区分1000Daの透析膜を用いてDI水に対して透析した。透析膜に残っている溶液を凍結乾固して、160mgの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【０１３４】
実施例5-50: ポリ(4,4-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-コ-4-(1,2-ジオール)-1,4,7-トリアザヘプタン-コ-1,3-ジアミノプロパン)の合成
0.25gの4,4'-トリメチレンジピペリジンビプロパノイックアセテート、0.09gの4-(1,2-ジオール)-1,4,7-トリアザヘプタン(実施例5-49(a))及び0.05gの1,3-ジアミノプロパンを含有する反応混合物を100℃で18時間撹拌した。得られた生成物を3mLのメタノールに溶解し、50mLの酢酸エチルに注入した。沈殿を濾過によって分離し、20mLの脱イオン水に溶解した。この溶液をpH2に調整した後、分子量区分1000Daの透析膜を用いて脱イオン水に対して透析した。透析膜に残っている溶液を凍結乾固して、150mgの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【０１３５】
実施例5-51: ポリ(4,4-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-コ-5-(1,2-ジオール)-1,5,9-トリアザノナン)の合成
実施例5-51(a): 5-(1,2-ジオール)-1,5,9-トリアザノナンの合成
1.5gの1,9-Bi-BOC-1,5,9-トリアザノナン、0.34gのグリシドール、及び10mLのエタノールを含有する反応混合物を15時間還流した。溶媒を除去した後、残留物を100%ヘキサンから100%酢酸エチルまでの勾配溶媒系を用いたカラムクロマトグラフィによって精製して、0.7gの1,9-ビス-boc-5-(1,2-ジオール)-1,5,9-トリアザノナンを得た。2mLのメタノールに溶解した0.7gの1,9-ビス-boc-5-(1,2-ジオール)-1,5,9-トリアザノナンに0.25mLの濃HClを添加し、この反応混合物を50℃で24時間撹拌した。減圧下で溶媒を除去した後、残留物を10mLのメタノール/水(1:1)混合物に溶解し、5gのAmberlyst OH 26樹脂を添加した。室温で3時間撹拌した後、樹脂を濾別した。減圧下で溶媒を除去し、残留物を凍結乾固して、0.28gの望ましい生成物を淡黄色の油状物として得た。
【０１３６】
実施例5-51(b): ポリ(4,4-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-コ-5-(1,2-ジオール)-1,5,9-トリアザノナン)の合成
0.23gの4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパノイックアセテート及び0.15gの5-(1,2-ジオール)-1,5,9-トリアザノナンを含有する反応混合物を100℃で18時間撹拌した。得られた反応混合物を5mLのメタノールに溶解し、50mLの酢酸エチルに注入した。溶媒を濾別した後、残留物を20mLのDI水に溶解した。希HClを添加することによってこの溶液をpH2に調整し、この溶液を分子量区分1000DaのMicrosepメンブランフィルターを用いて遠心分離に供した。1000Daより大きい分子量を有する画分を集め、凍結乾固して、100mgの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【０１３７】
実施例5-52: ポリ(4,4-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-コ-5-(1,2-ジオール)-1,5,9-トリアザノナン-コ-1,3-ジアミノプロパン)の合成。
0.125gの4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパノイックアセテート(実施例5-1)、0.05gの5-(1,2-ジオール)-1,5,9-トリアザノナン(実施例5-51(a))、及び0.3gの1,3-ジアミノプロパンを含有する反応混合物を100℃で18時間撹拌した。得られた反応混合物を5mLのメタノールに溶解し、50mLの酢酸エチルに注入した。溶媒を濾別した後、残留物を20mLのDI水に溶解した。希HClを添加することによってこの溶液をpH2に調整し、この溶液を分子量区分1000DaのMicrosepメンブランフィルターを用いて遠心分離に供した。1000Daより大きい分子量を有する画分を集め、凍結乾固して、90mgの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【０１３８】
実施例5-53: グリシドール変性ポリ(4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-コ-1,3-ジアミノプロパン)の合成
2mLのエタノールに溶解した0.26gのポリ(4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-コ-1,3-ジアミノプロパン)(実施例5-6)に16.5mgのグリシドールを添加した。マイクロ波反応器を用いてこの反応混合物を140℃で30分間処理した。得られた反応混合物を50mLの酢酸エチルに注入した。濾過後、残留物を酢酸エチル(3×50mL)で洗浄した。引き続き、10mLのDI水に溶解し、分子量区分1000DaのMicrosepメンブランフィルターを用いて遠心分離に供した。1000Daより大きい分子量を有する画分を集め、凍結乾燥して、126mgの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【０１３９】
実施例5-54: グアニジン末端ポリ(4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-コ-1,3-ジアミノプロパン)の合成
2mLのメタノールに溶解した0.3gのポリ(4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-コ-1,3-ジアミノプロパン)(実施例5-6)に0.1gの1H-ピラゾール-1-カルボキサミジン及び0.11gのN,N'-ジイソプロピルエチルアミンを添加した。この反応混合物を60℃で8時間撹拌した。得られた反応混合物を50mLの酢酸エチルに注入した。濾過後、残留物を酢酸エチル(3×50mL)で洗浄した。得られた固形物を2mLのDI水に溶解し、PD-10セファデックスカラムを通過させた。望ましい画分を集め、凍結乾固して、0.19gのポリマーを淡黄色の固形物として得た。
【０１４０】
実施例5-55: ポリエチレングリコール(PEG-4)末端ポリ(4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-コ-1,3-ジアミノプロパン)の合成
5mLのメタノールに溶解した0.128gのポリ(4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-コ-1,3-ジアミノプロパン)(実施例5-6)の溶液に0.2mLのトリエチルアミン、続いて0.075gのm-dPEG4-NHSエステルを添加した。この反応溶液を室温で22時間撹拌した。得られた反応混合物を50mLの酢酸エチルに注入した。濾過後、残留物を酢酸エチル(5×50mL)で洗浄した。引き続き残留物を2mLのDI水に溶解し、得られた溶液を希HClを用いてpH2に調整し、分子量区分1000DaのMicrosepメンブランフィルターを用いて遠心分離に供した。1000Daより大きい分子量を有する画分を集め、凍結乾固して、50mgの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【０１４１】
実施例5-56: ポリエチレングリコール(PEG-12)末端ポリ(4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-コ-1,3-ジアミノプロパン)の合成
5mLのメタノールに溶解した0.1gのポリ(4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-コ-1,3-ジアミノプロパン)(実施例5-6)を0.2mLのトリエチルアミン、続いて0.12gのm-dPEG12-NHSエステルを添加した。この反応溶液を室温で22時間撹拌した。得られた反応混合物を50mLの酢酸エチルに注入した。濾過後、残留物を酢酸エチル(5×50mL)で洗浄した。引き続き残留物を2mLのDI水に溶解し、得られた溶液を希HClを用いてpH2に調整し、分子量区分1000DaのMicrosepメンブランフィルターを用いて遠心分離に供した。1000Daより大きい分子量を有する画分を集め、凍結乾固して、60mgの望ましい生成物を淡黄色の固形物として得た。
【０１４２】
実施例5-57: ポリ( 4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-コ-1,3-ジアミノプロパン)の単分散ポリマー(7量体)の合成
実施例5-57(a): 4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-1,3-ジアミノプロパン3量体の合成
3gの4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパノイックアセテート(実施例5-2)及び4.1gのモノN-boc-1,3-ジアミノプロパンを含有する反応混合物を100℃で18時間撹拌した。得られた反応混合物をアミン変性シリカカラム及び100%ヘキサンから酢酸エチル/ヘキサン(50/50)までの範囲にある勾配溶媒系を用いたカラムクロマトグラフィによって精製した。適切な画分を集め、減圧下に溶媒を除去して、2.6gの4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-ビス-BOC-1,3-ジアミノプロパンを得た。
5mLのメタノールに溶解した0.55gの4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-ビス-boc-1,3-ジアミノプロパンに、0.5mLの濃HClを添加し、この反応混合物を50℃で10時間撹拌した。減圧下で溶媒を除去した後、残留物を10mLのメタノール/水(1:1)に溶解し、5gのAmberlyst OH 26樹脂で処理した。室温で3時間撹拌した後、樹脂を濾別した。濾液を蒸発乾固し、残留物を凍結乾燥して、0.5gの生成物を白色固体として得た。
【０１４３】
実施例5-57(b): 1-BOC-4,4'-トリメチレン-1'-プロピオン酸の合成
2gの1-BOC-4,4'-トリメチレン-1'プロパノイックメチルエステルに0.9gの50質量%水酸化ナトリウム水溶液を添加し、この反応混合物を60℃で15時間撹拌した。反応物のpHが7.5に達するまでこの反応混合物に濃HClを添加した。この反応混合物を蒸発乾固し、残留物を完全に凍結乾固した。この乾燥残留物に10mLのジクロロメタンを添加し、得られた混合物を室温で30分間撹拌した。不溶性粒子を濾別した後、濾液を蒸発乾固して、0.7gの白色固形生成物を得た。
【０１４４】
実施例5-57(c): ビス-boc-4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-1,3-ジアミノプロパン5量体の合成
2mLのジクロロメタン/DMF(1:1容積/容積)に溶解した90mgの1-boc-4,4'-トリメチレン-1'-プロパン酸(実施例5-57(b))に38mgの1,1-カルボニルジイミダゾールを添加した。室温で1時間の撹拌した後、この反応混合物に0.05gの4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-1,3-ジアミノプロパン3量体(実施例5-57(a))を添加した。得られた反応混合物を室温で20時間撹拌した。減圧下で溶媒を除去した後、残留物を100%酢酸エチルから酢酸エチル/メタノール(95/5)までの範囲にある勾配溶媒系を用いたアミン変性シリカカラムを用いたカラムクロマトグラフィによって精製して、80mgの生成物を無色油状物として得た。この油状物を2mLのメタノールに溶解し、続いて0.5mLの濃HClを添加した。この反応混合物を50℃で10時間撹拌した。溶媒を蒸発させ、減圧下で除去し、残留物を凍結乾燥して、60mgの望ましい生成物を黄色の粘稠な油状物として得た。
【０１４５】
実施例5-57(d): ポリ(4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-コ-1,3-ジアミノプロパン)7量体の合成
1mLのメタノールに溶解した35mgの4,4'-トリメチレンジピペリジンビスプロパン酸-1,3-ジアミノプロパン5量体(実施例5-57(c))に0.08mLのトリエチルアミン及び24mgのboc-(3-アクリルアミド)プロピルアミンを添加した。この反応混合物を室温で一晩撹拌した。この反応混合物を10mLの酢酸エチルに注入した。残留物を濾過によって分離し、酢酸エチル(3×10mL)で洗浄した。残留物を減圧下に室温で乾燥して、40mgの白色固体を得た。この固体残留物に2mLのメタノール及び0.5mLの濃HClを添加した。得られた反応混合物を50℃で10時間撹拌した。減圧下で溶媒を除去した後、残留物を分取用HPLCによって精製して、10mgの望ましい生成物を淡黄色の粘稠な油状物として得た。
このように本発明の好ましい実施態様を詳細に記載してきたが、上記実施例によって明らかにされた本発明がその多くの明白な変更が本発明の精神又は範囲から逸脱することなく可能であるので上記説明に示された具体的な詳細に限定されないことは理解されるべきである。