(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ポリ乳酸（ＰＬＡ）の生分解性熱可塑性ポリマー、ＤＭＳＯおよび一般式（１）のアロマターゼ阻害化合物： 
【化１】
0006317348.tif 000017
（式中；
Ｒ1がＨである場合、Ｒ2は
【化２】
0006317348.tif 000018
であり、Ｒ3はＨであり
Ｒ1が
【化３】
0006317348.tif 000019
である場合、Ｒ2はＨであり、Ｒ3はＣＮである）
を含む、インサイチュ（in situ）で筋肉内インプラントを形成するための組成物であって、
前記アロマターゼ阻害化合物がＤＭＳＯおよびＰＬＡを含む溶液中に懸濁状態にありかつ前記総組成物の１５〜５０重量％を占め、前記組成物が水性液状物または体液と接触した後、固形化して固形またはゲル状のインサイチュ（in situ）インプラントを形成する点において特徴付けられる前記組成物。
【請求項２】
請求項１に記載の前記インサイチュ（in situ）で筋肉内インプラントを形成するための組成物であって、前記アロマターゼ阻害化合物がＤＭＳＯおよびＰＬＡを含む溶液中で懸濁状態にありかつ前記総組成物の２０〜３０重量％を占めることを特徴とする、前記組成物。
【請求項３】
請求項１または２のいずれかに記載のインサイチュ（in situ）で筋肉内インプラントを形成するための組成物であって、前記アロマターゼ阻害化合物がＤＭＳＯおよびＰＬＡを含む溶液で懸濁状態にありかつ前記総組成物の２５重量％を占める前記組成物。
【請求項４】
請求項１に記載の前記インサイチュ（in situ）で筋肉内インプラントを形成するための組成物であって、一般式（１）の前記アロマターゼ阻害化合物が前記製剤において以下の粒子径分布を有することを特徴とする前記組成物：
・前記粒子の＜１０％が２０ミクロン未満であり、
・前記粒子の＜１０％が３５０ミクロンを超え、
・ｄ０．５が７０〜２００ミクロンである。
【請求項５】
請求項１に記載の前記インサイチュ（in situ）で筋肉内インプラントを形成するための組成物であって、前記アロマターゼ阻害化合物がレトロゾールおよびアナストロゾールの一方または双方であることを特徴とする前記組成物。
【請求項６】
請求項１に記載の前記インサイチュ（in situ）で筋肉内インプラントを形成するための組成物であって、前記ＤＭＳＯおよびＰＬＡを含む溶液が４０〜４３重量％のＰＬＡ（乳酸１００％）および５７〜６０重量％のＤＭＳＯであることを特徴とする前記組成物。
【請求項７】
請求項１に記載の前記インサイチュ（in situ）で筋肉内インプラントを形成するための組成物であって、前記ＰＬＡの末端基がエステルであることを特徴とする組成物。
【請求項８】
請求項１〜７のいずれかに記載の前記インサイチュ（in situ）で筋肉内インプラントを形成するための組成物であって、前記製剤が最大値３５ｋＧｙで照射されることを特徴とする前記組成物。
【請求項９】
請求項１に記載の前記インサイチュ（in situ）で筋肉内インプラントを形成するための組成物であって、ＤＭＳＯと、一般式（１）の前記アロマターゼ阻害化合物との比が０．５〜３．７の範囲内にあることを特徴とする前記組成物。
【請求項１０】
請求項１に記載の前記インサイチュ（in situ）で筋肉内インプラントを形成するための組成物であって、ＤＭＳＯと、一般式（１）の前記アロマターゼ阻害化合物との比が１．７〜１．８であることを特徴とする前記組成物。
【請求項１１】
請求項１に記載の前記インサイチュ（in situ）で筋肉内インプラントを形成するための組成物であって、前記ＤＭＳＯおよびＰＬＡを含む溶液の粘度が０．８〜１．８Ｐａ．ｓであることを特徴とする前記組成物。
【請求項１２】
請求項１に記載の前記インサイチュ（in situ）で筋肉内インプラントを形成するための組成物であって、前記組成物の最大体積が筋肉内注射用レトロゾールを５００ｍｇ含めて２ｍＬであることを特徴とする前記組成物。
【請求項１３】
請求項１に記載の前記インサイチュ（in situ）で筋肉内インプラントを形成するための組成物であって、一般式（１）の前記化合物のバーストのＡＵＣが注射後の最初の３０日間において前記総ＡＵＣの１０％未満であることを特徴とする前記組成物。
【請求項１４】
乳癌治療のための薬剤である請求項１から１３の何れか一項に記載の前記組成物。
【請求項１５】
請求項１から１３のいずれかに記載の前記組成物をインサイチュ（in situ）で調製するためのキットであって、一般式（１）の前記アロマターゼ阻害化合物および固体形態の前記ポリマーが第１の容器内にありかつ前記ＤＭＳＯが別の第２の容器内にあることを特徴とする前記キット。
【請求項１６】
請求項１５に記載のインプラントをインサイチュ（in situ）で調製するためのキットであって、前記ポリマーが凍結乾燥されることを特徴とする前記キット。
【請求項１７】
請求項１から１３のいずれかに記載の前記組成物をインサイチュ（in situ）で調製するためのキットであって、一般式（１）の前記アロマターゼ阻害化合物が固体形態で第１に容器内にありかつ前記ＤＭＳＯおよび前記ポリマーが溶液形態で第２容器内にあることを特徴とする前記キット。
【請求項１８】
請求項１から１３のいずれかに記載の前記組成物をインサイチュ（in situ）で調製するためのキットであって、一般式（１）の前記アロマターゼ阻害化合物、前記ポリマーおよび前記ＤＭＳＯが懸濁液の形態で単一の容器内にあることを特徴とする前記キット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本特許出願は、癌治療において有用な組成物に関する。
【０００２】
具体的には、本発明は、ポリ乳酸（ＰＬＡ）の生分解性熱可塑性ポリマー、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）およびアロマターゼ阻害化合物を含む筋肉内インプラントの形成に適した組成物、組成物のｉｎ  ｓｉｔｕ調製に適したキット、および乳癌治療のための薬剤としてのその使用に関する。
【背景技術】
【０００３】
疑い無く、癌治療の発展は必要なものであり、新規な分子的実体だけでなく、患者の生活の質を向上させるための医薬品も必要である。延長放出製剤の開発により総投与用量を減少することが可能となり、各用量の持続時間および投与回数が増加し、これにより患者の感情状態に好ましい影響を与えるので、この点において、延長放出製剤の開発は進展を意味する。
【０００４】
レトロゾールおよびアナストロゾールは、錠剤の連日投与以外の代替治療が無いホルモン受容体陽性進行乳癌を有する閉経後の女性の補助治療において第一候補の有効成分あるため、本発明においてそれらがこの種の延長放出型製剤のための候補医薬製剤として選択されている。
【０００５】
レトロゾール（４、４’−（１，２，４−トリアゾラム−１−イルメチル）ベンゾニトリル）およびアナストロゾール（２、２’−［５−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾラム−１−イルメチル）−１，３−フェニレン］ビス（２−メチルプロパンニトリル））は、非ステロイド系アロマターゼ阻害薬と呼ばれる薬剤分類に属し、その作用機構は身体中のエストロゲン量を低減させることからなる。この効果は、成長にエストロゲンを必要とする乳房中の多様な種類の癌産生細胞の成長を減速または停止させることができる。
【０００６】
現在、薬剤の放出を長期間制御できるレトロゾール製剤は市場に存在しない。医薬製剤としてのレトロゾールは、現時点では、連日経口投与用の錠剤の形態でしか入手できない。本願に記載するレトロゾール製剤は、血液中の薬剤の治療レベルを得ることを開始時および３か月間連続して可能とし、連日投与計画の必要性を回避し、これにより患者の生活の質を向上させる。
【０００７】
乳癌の治療においては、一般的な癌治療と同様に、患者の心理状態が極めて重要となる；そのため、レトロゾールおよび／またはアナストロゾールの３か月型製剤の開発は、相当な生活の質の向上を意味し、連日投与によって引き起こされるであろう影響が低減する。この場合、疾病のモニタリング時において行われる内科的検査は、通常は最初の数年間において３および６ヶ月毎に行われるため、製剤の投与が医師による診療と同時期となる可能性がある。
【０００８】
同様の推論により、Ｚｏｌａｄｅｘ（登録商標）といった前立腺がんの治療のための３か月間皮下投与用ゴセレリン事前形成インプラント製剤、および避妊薬として用いられるエトノゲストレルの事前形成インプラントインプラノン（登録商標）が市場に登場している。しかし、これらの事前形成インプラントは以下の一連の欠点を示す：
・押し出しによりインプラントを調製するためには、高温が必要となるため、有効成分の劣化および潜在的に有毒な不純物の発生の原因となり得る。
・有効成分の投与量が低い場合、製品の均質性が低くなる。
・インプラントを移植するかまたは大径の針を用いて注射する場合、外科手術が必要になる。
【０００９】
以下に示すように、いくつかの文献においてレトロゾールおよび／またはアナストロゾールのインプラント組成物についての公表を確認することも可能である。
【００１０】
例えば、国際出願第２００８／０４１２４５号は水性媒体中に懸濁されたプリフォーム微小粒子から、ｉｎ  ｓｉｔｕゼリー化製剤に至る多様な投与形態において、アナストロゾールを含むアロマターゼ阻害薬といった多様な有効成分を含むインプラント組成物を記載する。発生し得る有効成分と投与形態の全ての組み合わせを本願が十分に裏付けることができるかは疑わしいものの、実施例は常にプリフォーム微小粒子に言及し、すなわち直接「ｉｎ  ｓｉｔｕ」インプラントを形成する系は全く言及しない。最後に、実施例のいずれも６０日を超える期間を示していないことも指摘すべきである。
【００１１】
国際出願第２０１０／０６５３５８（Ａ１）号は、テストステロンの連続的投与とそのエストラジオールへの変換の防止を目的とした、テストステロンおよびアロマターゼ阻害薬を含む薬剤の投与のための組成物を記載する。当該記載は投与形態がインプラントであり得る可能性を考慮するものの、唯一の投与形態の例はペレットのみである。
【００１２】
また、国際出願第２０１２／０７４８８３（Ａ１）号は、医薬製剤の投与のための生分解性組成物についての記載がある。これらの組成物はインプラントを液状または半固形状態で維持するために、安息香酸ベンジルまたはベンジルアルコールといった非水溶性溶媒の使用を必要とする。これらの溶媒は突発的放出を提供することがすでに判明しているので、本発明の延長放出組成物には不適切である。
【００１３】
最後に、米国特許出願第２００８／０２０６３０３Ａ１号明細書は、多様な溶媒を伴い得るＰＬＡまたはＰＬＧＡポリマーを含むアナストロゾールの延長放出製剤についての記載がある；しかし、本発明の実施形態においては、用いられる溶媒は、大量のバーストの後ほぼゼロ放出をもたらす溶媒であるベンジルアルコールおよびｎ−メチル−２−ピロリドン（ＮＭＰ）である。実際、当該明細書における発明者にとって許容可能なバーストは１日あたり２５〜３０％と極めて高い値であり、このことから、その実施例のいずれも６０日以上持続せず；特にヒトに類似する動物であるイヌにおいて放出は３５日を超えて持続しなかった。最後に、当該明細書においては、レトロゾール粒子径も製剤挙動におけるこの要素の重要性についても言及がない。
【００１４】
したがって、ホルモン受容体陽性閉経後女性における乳癌の第一選択的補助治療のための、レトロゾールおよび／またはアナストロゾールの３ヶ月型製剤を得ることが望ましい。この理由により、本発明のｉｎ  ｓｉｔｕ形成インプラントの技術は、現行のプリフォームインプラントに基づく製剤によって示される欠陥のうち大部分を克服する。この技術は、患者のための実際的かつ有効な代替的治療を提供し、少なくとも６０日間持続する治療プロファイルを達成する。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
以下の図は、本発明の目的の解釈を支援するために提供されるが、いかなる限定も暗示しない。
【図１】実施例１に記載される製剤をニュージーランドホワイトウサギに筋肉内投与した後に得られたレトロゾールの血漿レベル（ｎｇ／ｍＬ）を示す。表示された値は各群の３匹の動物において得られる平均血漿レベルに対応する。
【図２】実施例２に記載される製剤をニュージーランドホワイトウサギに筋肉内投与した後に得られたレトロゾールの血漿レベル（ｎｇ／ｍＬ）を示す。表示された値は各群の３匹の動物において得られる平均血漿レベルに対応する。
【図３】実施例３中に記載される製剤をニュージーランドホワイトウサギに筋肉内投与した後に得られたレトロゾールの血漿レベル（ｎｇ／ｍＬ）を示す。表示された値は各群の３匹の動物において得られる平均血漿レベルに対応する。
【発明の概要】
【００１６】
本発明の目的である組成物について、用語初期「バースト」は、製剤を生存動物に筋肉内投与した後最初の７２時間にわたって得られた血漿レベル曲線下面積（別名「ＡＵＣ」）と、一定量のレトロゾールまたはアナストロゾールの注射後に得られた総曲線下面積の比として理解される。
【００１７】
本発明の目的に適した有効成分の延長間放出を得るために、バースト曲線下面積は、総ＡＵＣと比較して１０％未満、かつ理想的には５％未満でなくてはならない。同様に、アロマターゼ阻害薬の少なくとも６０日間にわたる延長放出プロファイルにおいて平衡を得ることは、血漿レベルの曲線下面積の５０％以下が注射後の最初の３０日間において得られることが必要となる。すなわち、本発明の目的のため、有効成分の好ましい延長放出は、バースト曲線下面積が総ＡＵＣの１０％未満であり、かつ、総ＡＵＣの５０％以下が注射後の最初の３０日間にわたって得られるような放出である。
【００１８】
本発明の目的のため、以下の用語が識別されずに用いられる：
「ＰＬＡ」；「ポリ乳酸の生分解性熱可塑性ポリマー」；「ポリ乳酸」および「ポリ乳酸」。
「ＤＭＳＯ」および「ジメチルスルホキシド」。
【００１９】
したがって、本発明の第１の態様は、ポリ乳酸（ＰＬＡ）の生分解性熱可塑性ポリマー、ＤＭＳＯおよび一般式（１）のアロマターゼ阻害化合物：
【化１】
0006317348.tif 000002
式中；
Ｒ1がＨである場合、Ｒ2は
【化２】
0006317348.tif 000003
であり、Ｒ3はＨであり、
Ｒ1が
【化３】
0006317348.tif 000004
である場合、Ｒ2はＨであり、Ｒ3はＣＮである、
を含む筋肉内インプラントの形成に適した組成物であって、アロマターゼ阻害化合物がＤＭＳＯおよびＰＬＡを含む溶液中の懸濁物としてあり、かつ総組成物の１５〜５０重量％の間を示し、組成物が水性液状物または体液と接触した時に固形化して固形またはゲル状インプラントを形成することができ、少なくとも１００ｎｍｏｌ／ｍＬでインビボ投与した後に６０日以上治療値を示すことによって特徴付けられる組成物である。
【００２０】
好ましくは、アロマターゼ阻害化合物は、ＤＭＳＯおよびＰＬＡを含む溶液中の懸濁物の形態にあり、総組成物の２０〜３０重量％を示す。
【００２１】
より好ましくは、アロマターゼ阻害化合物は、ＤＭＳＯおよびＰＬＡを含む溶液中の懸濁物の形態にあり、総組成物の２５重量％を示す。
【００２２】
他の態様によれば、一般式（１）のアロマターゼ阻害化合物は、以下の粒子径分布を有する：
・粒子の＜１０％が２０ミクロン未満であり、
・粒子の＜１０％が３５０ミクロンを超え、
・ｄ０．５が７０〜２００ミクロンである。
【００２３】
好ましい実施形態において、アロマターゼ阻害化合物は、単独または組み合わされたレトロゾールまたはアナストロゾールである。
【００２４】
他の好ましい実施形態において、ＤＭＳＯおよびＰＬＡによって形成される溶液は、４０〜４３重量％のＰＬＡ（乳酸１００％）＋５７〜６０重量％のＤＭＳＯを有する。
【００２５】
さらなる好ましい実施形態において、ＰＬＡの末端基はカルボン酸ではなくエステルである。
【００２６】
さらなる他の好ましい実施形態において、有効成分は例えばγまたはβ線による滅菌に付す。放射線照射による有効成分の滅菌を実施した後、インプラント組成物を最大値３５ｋＧｙまで含めることもある。有効成分の滅菌は、最終的な製剤の照射によって行うこともできる。
【００２７】
さらなる好ましい実施形態において、ＤＭＳＯのレトロゾールに対する比は０．５〜３．７の範囲内であり、かつ好ましくは１．７〜１．８の範囲内である。
【００２８】
さらなる好ましい実施形態において、ＤＭＳＯおよびＰＬＡを含む溶液の粘度は、０．８〜１．８Ｐａ．ｓの間であり、好ましくは０．８〜１．５Ｐａ．ｓの間であり、より好ましくは０．８〜１．３Ｐａ．ｓの間および１．００〜１．２０Ｐａ．ｓの間である。
【００２９】
他のさらなる実施形態において、最大量は２ｍＬであり、５００ｍｇのレトロゾールの筋肉内注射投与が可能になる。
【００３０】
本発明の第２の態様は、上記の組成物の乳癌治療のための薬剤としての使用である。
【００３１】
他の態様によれば、筋肉内インプラントを形成することに適した組成物は、一般式（１）の化合物のバーストＡＵＣが総ＡＵＣの１０％未満でありかつ注射後最初の３０日間にわたって総ＡＵＣの５０％以下である点において特徴付けられる。
【００３２】
最終製剤は、例えば筋肉内注射にすぐ使用することできる注射器に含められて製剤化することができる。同一の製剤が、例えば、一方がオスシリンジであり一方がメスシリンジであるか、またはポリマーのＤＭＳＯ溶液が一方のシリンジ内にありかつアロマターゼ阻害剤が第２のシリンジ内で固形形態にあるコネクタで連結された２つのオスシリンジである２つのシリンジのキットの一部を形成し得る。
【００３３】
同様に、最終組成物は、例えば、固体状態のポリマーおよびアロマターゼ阻害薬の入った１つのシリンジおよび第２のシリンジ内の溶媒を維持することにより、得ることができる。
【００３４】
これらの場合における溶解は、オスシリンジとメスシリンジの直接的連結を介するか、または２本の雄注射器がある場合はコネクタにより、かつ製剤の組み合わせ、さらにはこのようにしてポリマー溶液と有効成分の懸濁液をもたらすプランジャーの双方向への押し引きである。
【００３５】
たとえば溶媒またはポリマー溶液を有効成分と別に維持すること、またはたとえばポリマー溶液がバイアルに注入されて懸濁液製剤をもたらすようプリロードシリンジ中にポリマー溶液をおよびバイアル中にアロマターゼ阻害剤を維持するなどといった、最終的な組み合わせが所望の製剤をもたらす他の製剤設計の任意の変法が、本発明の目的に対する可能な代替法として考慮されるような、本発明の組成物をもたらすこの系の任意の代替系が可能である。
【００３６】
従って、他の態様によれば、本発明は、一般式（１）のアロマターゼ阻害剤化合物およびポリマーが第１の容器内で固形状にありかつＤＭＳＯが別の第２の容器内にある、本発明の組成物のｉｎ  ｓｉｔｕ調製に適したキットについて言及する。
【００３７】
従って、他の態様によれば、本発明は、ポリマーが凍結乾燥される本発明の組成物のｉｎ  ｓｉｔｕ調製に適したキットについて言及する。
【００３８】
従って、他の態様によれば、本発明は、一般式（１）のアロマターゼ阻害化合物が第１の容器内で固形状にありかつＤＭＳＯが第２の容器内で液状にある、本発明のｉｎ  ｓｉｔｕ調製に適したキットについて言及する。
【００３９】
従って、他の態様によれば、本発明は、一般式（１）のアロマターゼ阻害化合物、ポリマーおよびＤＭＳＯが単一の容器内で懸濁液の状態にある、本発明の組成物のｉｎ  ｓｉｔｕ調製に適したキットについて言及する。
【発明を実施するための形態】
【００４０】
本発明の全般的な展開において、本発明による延長放出のためのインプラント組成物の結果に影響し得る多様なパラメータの挙動について検討した。以下にパラメータを示す。
【００４１】
（１．ポリマー溶液のレオロジー特性および固有粘度）
ポリマー溶液および完成製剤の両者である流体の挙動を流量計によって評価した。マトリクスをレトロゾールの賦形剤として考慮する場合、これらは全てニュートン挙動を有する。本願においては、製剤の初期放出制御能力に関し、注射用製剤の挙動について、粘度を間接的なパラメータおよびポリマー濃度の追加的パラメータとして用いる。
【００４２】
実験研究に基づき、ポリマー溶液は最小粘度０．８Ｐａ．ｓを有するべきと決定されたが、これは好ましくは約１Ｐａ．ｓであるが１．８Ｐａ．ｓ以下とすべきである。この粘度範囲内において得られた２５℃におけるポリマーのＤＭＳＯ溶液は、有効成分の可溶化とポリマーマトリックス中におけるその保持との好ましい均衡が得られ、これによりレトロゾールまたはアナストロゾールの臨床的妥当な血漿濃度が得られ、有効成分の拡散相におけるインプラントの耐用年数を損ないうる過量の有効成分の放出が回避される。有効成分が添加されると粘度が上昇するが、３〜４Ｐａ．ｓの範囲を超えてはならない。
【００４３】
以下の表は、２５℃で種々のＤＭＳＯ中濃度にあるインビトロおよびインビボ挙動おける最適なポリマーのみかけの粘度、および最終的な好ましい製剤の粘度を示す。
【００４４】
（原材料として線量１０ｋＧｙでベータ線照射したＰＬＡポリマーＲｅｓｏｍｅｒ（登録商標）Ｒ２０３Ｓの粘度、）
【表１】
0006317348.tif 000005
【００４５】
（好ましい製剤の粘度）
【表２】
0006317348.tif 000006
【００４６】
（２．有効成分の粒子径）
溶液または懸濁液中の有効成分の存在は、一旦製剤が筋肉内注射されると有効成分の放出プロセスに重大な影響を与える。したがって、ポリマーおよびＤＭＳＯを含む溶液中にレトロゾールを溶解した場合、製剤の筋肉内注射により、ポリマー担体の硬化プロセスにおいて水混合溶媒を伴うレトロゾールの拡散に起因して、初めの数日間において過量の放出が発生し、その後有効成分のｉｎ  ｖｉｖｏ放出が最小であり、かつポリマーが加水分解による分解を被る時にレトロゾールの最終放出が発生する潜伏期間がもたらされる。本願は、どのようにしてレトロゾールを懸濁液中に含む製剤のみが有効成分の初期放出を制御し、かつ製剤が臨床的に有効性でないこれらの潜伏期間を回避することができるかを記載する。したがって、有効成分の粒子径は、製剤が一旦投与された場合の製剤からの放出プロセスに直接影響するので、製剤の最終的挙動に重大な影響をもたらすからである。この基本的要素の重要性は、アロマターゼ阻害薬を含む延長放出製剤の調製を記載する文書にはこれまで記述されていなかった。
【００４７】
したがって、適切でありかつできるだけ十分に規定された間隔を決定または狭めるために、相異なるサイズ分画の使用を評価した。多様な結晶サイズの分布を持つことは、特定の全体として狭いサイズよりも優れ、より有用であり、放出の調節をある程度時差的に行うことが可能になる。このように、最小サイズはインプラント（５０ミクロン未満）の形成時溶媒に極めて容易に拡散するため有用ではない。平均値が１００〜３００ミクロンに近い中間サイズの粒子は、マトリックスによって保持され、溶解により長い時間が必要となり、かつ固化時にはインプラント中に捕捉されたままであるので、より有用であることができる。これを超えたサイズはポリマーの高度な分解を必要とし、インプラントのライフサイクルにおける新たな潜伏期およびポリマーの加水分解時の過量放出をもたらし、このサイズ範囲の高い割合での使用は特に安全でなくなる。
【００４８】
好ましい実施形態において、最小サイズのみならず中間サイズ〜小サイズ（５０〜１００ミクロン）の排除は製剤の向上をもたらすと判定されている一方、溶解した製剤の最終年度が低下し、その一方で顕著なバースト効果が相当防止される最終粘度。
【００４９】
（３．ＰＬＡおよびＤＭＳＯを含む溶液中の有効成分の懸濁レベル）
本組成物の特性は、一般式（１）のアロマターゼ阻害化合物が、総組成物の残りの７５重量％を構成するＤＭＳＯおよびＰＬＡを含む溶液中に懸濁され、好ましくは総組成物の２５重量％に近い量で存在する点である。
【００５０】
後で実施例１に見られるように、例えば製剤が溶液状である場合、インビボ反応が不十分であるので、これは無作為の事実ではなく、本質的なものである。
【実施例】
【００５１】
以下の実施例は本発明の例示であり、限定的なものとみなされるべきではない。
【００５２】
実施例１
（製剤における有効成分の物理的形態の影響の検討：懸濁液と溶液の比較）
注射液中のレトロゾールの物理的形態の影響（有効成分の溶液と懸濁液の比較）を検討した。
【００５３】
（製剤１：溶液状レトロゾール製剤）
【表３】
0006317348.tif 000007
【００５４】
（製剤２：懸濁液状レトロゾール製剤）
【表４】
0006317348.tif 000008
【００５５】
製剤２中のレトロゾールの粒子径をレーザー光線回折技術（Ｍａｌｖｅｒｎ  Ｍａｓｔｅｒｓｉｚｅｒ２０００、オブスキュレーションが９．４１％になるまで水中で懸濁）により特性解析したところ、以下の分布（％量）を有していた：ｄ（０．１）＝３８．２１μｍ、ｄ（０．５）＝１４１．３５μｍおよびｄ（０．９）＝３１２．１３μｍ。
【００５６】
いずれの場合も、オスシリンジとメスシリンジの連結およびポリマーの完全溶解が達成されるまでのプランジャーの双方向への連続的動きにより、製剤の溶解を実施した。
【００５７】
（ニュージーランドホワイトウサギにおけるインビボ放出の検討）
実験用動物モデル、ウサギおよび／またはイヌにおいて筋肉内投与後の血漿中のレトロゾールおよびアナストロゾールの薬物動態プロファイルの判定により、本願についてのインビボ放出の検討を実施した。
【００５８】
イヌおよびウサギ血漿中のレトロゾールの定量化のための、有機溶媒としての酢酸エチレンによる液-液抽出および分析のための再懸濁を用いた、均一濃度の逆相での質量−質量検出系を伴う蛍光検出器を伴う高速液体クロマトグラフィＨＰＬＣ−ＦＬＤに基づく技術。カルベジロールを内部標準として用い、処理時間を８．５分間とし、レトロゾール保持時間７．８分間、および適用波長２４０ｎｍ（λ励起）および３１５ｎｍ（λ蛍光）とした。有効濃度間隔は、５（ＬＬＯＱ）〜５００ｎｇ／ｍＬであり、すなわち，当該分析技術の定量下限値または最小定量可能分析物濃度を５ｎｇ／ｍＬとし、かつ最大有効濃度を５００ｎｇ／ｍＬとした。得られた構成曲線は０．９９よりも高い相関係数を特徴とした。精度および日内再現確度および日間再現確度は、ＬＬＯＱについては２０％未満、他のＱＣ、すなわち分析の実施において品質管理として用いられる他の既知の濃度サンプルについては１５％未満であった。この生物分析法は３日間の間有効であり、結果は、ＦＤＡガイド：「生物分析法バリデーション」に記載される許容基準を満たした。
【００５９】
イヌおよびウサギ血漿中のレトロゾールのサンプルは、室温において６時間まで安定していることが実証された。処理されたサンプルは、分析の精度および角度にいかなる変化も認めることなく、サンプラーにおいて４℃で２４時間保存することができた。実施した凍結／解凍サイクルはイヌおよびウサギ血漿中のレトロゾールの安定性に影響しなかった。−８０℃で保存されたサンプルの長期安定性は、１３２日間に渡る安定性が実証された。
【００６０】
本例において、製剤１および２を、体重約３ｋｇのニュージーランドホワイトウサギの殿筋に筋肉内投与した。各群につき３匹の動物を用い、製剤１については５．４ｍｇ／ｋｇおよび製剤２については１０．８ｍｇ／ｋｇ対応する量の製剤を注射した。注射後、注射後２３１日目までの事前に確立されたサンプリング時期にウサギから血漿サンプルを採取した。得られた結果を図１に示す。図１は、製剤１と比較して２倍の用量の製剤２をニュージーランドホワイトウサギに投与したところ、同様の初期血漿レベルがもたらされたことを示す。製剤１において用いられた用量が製剤２において用いられた用量の半分であることを考えると、製剤中の有効成分の物理的形態を制御すること明確な重要性を見て取ることができた。レトロゾールは製剤１において溶液状態あり、製剤２におけるレトロゾールの場合よりも広い範囲まで溶媒と共に拡散する。また製剤１の場合、血漿レベルが急速に低下し、保持されるポリマーの加水分解に起因して有効成分の放出が開始する注射後１５４日目まで回復を開始しなかったことも見て取れる。製剤２は、ウサギ血漿において連続的な有意に高いレベルのレトロゾールを４ヶ月以上維持することができた。
【００６１】
実施例２
（ポリマーの末端基の影響の検討）
以下に述べる製剤の使用により、ポリマーの末端カルボキシル基またはエステル基（Ｎキャップ）の影響の評価を評価した。
【００６２】
（製剤１：カルボン酸基を末端とする乳酸ポリマー製剤）
【表５】
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【００６３】
（製剤２：エステル基を末端とする乳酸ポリマーを用いた製剤）
【表６】
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【００６４】
製剤１および２中のレトロゾール粒子径をレーザー光線回折技術（Ｍａｌｖｅｒｎ  Ｍａｓｔｅｒｓｉｚｅｒ２０００、オブスキュレーションが９．４１％になるまで水中で懸濁）により特性解析したところ、以下の分布（％量）を有した：ｄ（０．１）＝３８．２１μｍ、ｄ（０．５）＝１４１．３５μｍおよびｄ（０．９）＝３１２．１３μｍ。
【００６５】
いずれの場合も、オスシリンジとメスシリンジの連結およびポリマーの完全溶解が達成されるまでのプランジャーの双方向への連続的動きにより、製剤の溶解を実施した。
【００６６】
平行して、オスシリンジのコンポーネントを含む溶液の粘度を、回転式粘度計（Ｈａａｋｅ）の使用により、記載の量に比例して等価な量（溶液重量に対して４１．５重量％のポリマー）で２５℃において評価した。得られた粘度結果の値を以下の表に示す。
【００６７】
【表７】
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【００６８】
（ニュージーランドホワイトウサギにおけるインビボ放出の検討）
本実施例では、製剤１および２を体重が約３ｋｇであるニュージーランドホワイトウサギの殿筋に筋肉内投与した。各群につき３匹の動物を用い、両製剤について１０．８ｍｇ／ｋｇに対応する量の製剤を注射した。注射後、注射後の１７５日目までの事前に確立されたサンプリング時期に血漿サンプルをウサギから採取した。得られた結果を図２に示す。
【００６９】
図２は、製剤１の投与が注射後に非常に高い初期レトロゾール血漿レベルをもたらしたことを示す。しかし、１１９日目にレベルが検出不可能となるまで、レベルは徐々に低下した。一方製剤２の場合、明らかにより長期間にわたって顕著に高いレベルがもたらされた。おそらくは、エステル末端を有するポリマーと比較した、カルボン酸末端を有するポリマーの高い親水性およびその高い湿潤性が、試験の初期にわたる有効成分のより高い放出の背後にある。しかし、製剤２は、レトロゾール放出を製剤１よりもより高い程度まで調節することができ、時間と共により持続的なレベルをもたらした。各製剤中のレトロゾール血漿レベルの総曲線下面積に対する曲線下面積％を以下に示す。
【００７０】
【表８】
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【００７１】
実施例３
（ビーグル犬におけるポリマーの末端基の影響の検討）
以下に述べる製剤の使用により、ポリマーの末端カルボキシル基またはエステル基（Ｎキャップ）の影響の評価を評価した。
【００７２】
（製剤１：カルボン酸基を末端とする乳酸ポリマー製剤）
【表９】
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【００７３】
（製剤２：エステル基を末端とする乳酸ポリマー製剤）
【表１０】
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【００７４】
製剤１および２中のレトロゾール粒子径をレーザー光線回折技術（Ｍａｌｖｅｒｎ  Ｍａｓｔｅｒｓｉｚｅｒ２０００、オブスキュレーションが９．４１％になるまで水中で懸濁）により特性解析したところ、以下の分布（％量）を有していた：ｄ（０．１）＝３８．２１μｍ、ｄ（０．５）＝１４１．３５μｍおよびｄ（０．９）＝３１２．１３μｍ。
【００７５】
いずれの場合も、オスシリンジとメスシリンジの連結およびポリマーの完全溶解が達成されるまでのプランジャーの双方向への連続的動きにより、製剤の溶解を実施した。
【００７６】
完全に溶解された製剤２の２５℃におけるみかけの粘度により、２．８６５Ｐａ．ｓの値が得られた。
【００７７】
平行して、オスシリンジのコンポーネントを含む溶液の粘度を、回転式粘度計（Ｈａａｋｅ）の使用により、記載の量に比例して等価な量（溶液重量に対して４１．５重量％のポリマー）で２５℃において評価した。得られた粘度結果値を以下の表に示す。
【００７８】
【表１１】
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【００７９】
（ビーグル犬におけるインビボ放出の検討）
本実施例では、製剤１および２を体重が約１０ｋｇであるビーグル犬の殿筋に筋肉内投与した。各群につき３匹の動物を用い、両製剤について８６．５ｍｇ／ｋｇに対応する量の製剤を注射した。注射後、注射後の４７２日目までの事前に確立されたサンプリング時期にイヌから血漿サンプルを採取した。得られた結果を図３に示す。
【００８０】
図３は、先の実施例において２つのポリマー間に認められた差がイヌにおいて顕著に高かったことを示す。ビーグル犬のより低い体温はニュージーランドホワイトウサギに比べて２．４℃程低い）、おそらくはより低温におけるポリマーのより低速な加水分解と、これもおそらく低体温によるマトリックスを通過する有効成分の拡散低下の間の効果の組み合わせによって、拡散プロセスを低速化させる。この拡散および分解速度の低下の状況において、レトロゾールの動態プロファイルにおけるポリマー親水性のより高い影響が観察された。初めの１４〜２１日間にわたるレトロゾール血漿レベルの連続的に増加の所見より、得られたデータの母集団薬物動態分析（Ｎｏｎｍｅｎ）によって実証されている腸肝循環現象が実証された。このレトロゾールの腸肝循環は、ヒトにおいても観測可能である可能性が高い。総曲線下面積に対する各製剤中のレトロゾール血漿レベルの曲線下面積％を以下の表に示す。
【００８１】
【表１２】
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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