(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の成分（Ａ）、（Ｂ）及び（Ｃ）；
（Ａ）クルイベロミセス属の酵母による糖発酵物を乾燥固形分で０．０１質量％〜０．０５質量％
（Ｂ）多価アルコール
（Ｃ）クエン酸、クエン酸塩、乳酸、乳酸塩からなる群から選択される少なくとも一つ
を含有し、
前記成分（Ｂ）と前記成分（Ｃ）の含有質量比（Ｂ）／（Ｃ）が１００〜３００であり、
２０℃でのｐＨが５．０〜７．０であることを特徴とする、液状化粧料。
【請求項２】
前記成分（Ｂ）が、２０℃での比重が１．０２以下の多価アルコールである、請求項１に記載の液状化粧料。
【請求項３】
前記成分（Ｂ）が１，３−ブチレングリコールもしくは１，２−ペンタンジオールである、請求項１又は２に記載の液状化粧料。
【請求項４】
前記成分（Ｃ）が、クエン酸及びその塩、または、乳酸及びその塩を含有する、請求項１〜３のいずれか一項に記載の液状化粧料。
【請求項５】
更に、成分（Ｄ）として、ヒアルロン酸及びその塩、加水分解ヒアルロン酸及びその塩、アセチルヒアルロン酸ナトリウム、ヒアルロン酸プロピレングリコール、ヒアルロン酸ヒドロキシプロピルトリモニウムから選ばれる１種または２種以上を含有する、請求項１〜４のいずれか一項に記載の液状化粧料。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、クルイベロミセス属の酵母による糖発酵物と多価アルコールと有機酸または無機酸並びにこれらの塩を含有し、２０℃でのｐＨが５．０〜７．０である液状化粧料に関するものであり、更に詳しくは、保湿感、べたつきのなさに優れ、かつ経時安定性にも優れる液状化粧料に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
化粧水やボディローションなどの液状化粧料は、皮膚に保湿、柔軟、収斂などの肌効果を与えることで、皮膚を健康に保つことを目的に使用される。その中でも、保湿は液状化粧料の基本的な機能であり、保湿が十分でないと皮膚バリア機能も低下しやすい。皮膚バリア機能が低下すると、例えば、乾燥肌、シワ、肌荒れ等の肌トラブルになりやすく、また皮膚炎症の改善が遅くなる。
このため、液状化粧料に配合可能で、保湿機能が高い素材が種々検討されている。具体的にはNMF（NATURAL MOISTURIZING FACTOR）である乳酸ナトリウム、アミノ酸類（例えば、グリシン、β−アラニン等）やヒアルロン酸、可溶性コラーゲン等の高分子化合物、また、セラミド等が用いられている。
例えば、特許文献１には、リシル−β−アラニン又はその塩を含有する保湿剤が提案されている。
しかしながら、使用者は様々な保湿成分を求めているため、さらなる保湿成分の研究開発が進められている。
特許文献２には、クルイベロマイセス・サーモトレランス（Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ  ｔｈｅｒｍｏｔｏｌｅｒａｎｓ）による発酵液を含有することを特徴とする化粧料が提案されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】国際公開２００８／１２６６５２号パンフレット
【特許文献２】特開２０１２−１４０３４８公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
上記、従来技術のうちで、特許文献２のクルイベロマイセス・サーモトレランス（Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ  ｔｈｅｒｍｏｔｏｌｅｒａｎｓ）のようなクルイベロミセス属の酵母による発酵物を、保湿効果を付与し高い肌効果を有する素材として、利用することを試みた。
しかしながら、クルイベロミセス属の酵母による発酵物は、時間の経過によって変臭、変色、沈殿が発生するという懸念があった。このため、液状化粧料において、保湿感による高い肌効果を発揮させるために、クルイベロマイセス・サーモトレランスによる発酵物を含有すると経時での変臭、変色、沈殿などの懸念があり、液状化粧料としての品質を損なう場合があった。
そこで本発明において、クルイベロミセス属の酵母による糖発酵物を含有しても、変臭、変色、沈殿などのない、経時安定性に優れ、かつ保湿感及び使用感にも優れた液状化粧料を提供しようとするものである。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
斯かる実情に鑑み、本発明者は上記課題を解決すべく鋭意検討した結果、クルイベロミセス属の酵母による発酵物を含有した液状化粧料において、経時での変臭、変色を抑制する手段として、有機酸または無機酸並びにこれらの塩を含有して、液状化粧料の２０℃でのｐＨを５．０〜７．０の範囲にすることにより、保湿感及び使用感を損なうことなく、経時での変臭、変色が解消されることを見出した。
しかしながら、沈殿に関しては、有機酸または無機酸並びにこれらの塩を含有して、液状化粧料の２０℃でのｐＨを５．０〜７．０の範囲にしても、解決できず、さらに、第３成分を検討した結果、多価アルコールを含有することにより、経時での沈殿が解消され、保湿感及びべたつきのない優れた使用感が得られることを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００６】
すなわち、本発明は、次の成分（Ａ）、（Ｂ）及び（Ｃ）；
（Ａ）クルイベロミセス属の酵母による糖発酵物を乾燥固形分で０．０１質量％〜０．０５質量％
（Ｂ）多価アルコール
（Ｃ）クエン酸、クエン酸塩、乳酸、乳酸塩からなる群から選択される少なくとも一つ
を含有し、
前記成分（Ｂ）と前記成分（Ｃ）の含有質量比（Ｂ）／（Ｃ）が１００〜３００であり、
２０℃でのｐＨが５．０〜７．０である液状化粧料を提供するものである。
【０００８】
前記成分（Ｂ）が、２０℃での比重１．０２以下の多価アルコールである液状化粧料を提供するものである。
【０００９】
前記成分（Ｂ）が１，３−ブチレングリコールもしくは１，２−ペンタンジオールである液状化粧料を提供するものである。
【００１０】
前記成分（Ｃ）が、クエン酸及びその塩、または、乳酸及びその塩を含有する液状化粧料を提供するものである。
【００１１】
前記成分（Ｂ）と前記成分（Ｃ）の含有質量比（Ｂ）／（Ｃ）が、２０〜１０００の範囲である液状化粧料を提供するものである。
【００１２】
更に、成分（Ｄ）として、ヒアルロン酸及びその塩、加水分解ヒアルロン酸及びその塩、アセチルヒアルロン酸ナトリウム、ヒアルロン酸プロピレングリコール、ヒアルロン酸ヒドロキシプロピルトリモニウムから選ばれる１種または２種以上を含有する液状化粧料を提供するものである。
【発明の効果】
【００１３】
本発明によれば、クルイベロミセス属の酵母による糖発酵物を含有し、経時安定性及び保湿感及びべたつきのない使用感に優れた液状化粧料を提供することができる。
【００１４】
本発明に用いられる「成分（Ａ）クルイベロミセス属の酵母による糖発酵物」（以下、「成分（Ａ）糖発酵物」ともいう）について説明する。
【００１５】
本発明に用いる「クルイベロミセス属（Kluyveromyces）の酵母」は、特に限定されず、以下の例示の酵母種を１種又は２種以上選択して使用することができる。
前記「クルイベロミセス属（Kluyveromyces）酵母」として、例えば、クルイベロミセス・サーモトレランス（Kluyveromyces thermotolerans）、クルイベロミセス・アフリカヌス（Kluyveromyces africanus）、クルイベロミセス・フラジリス（Kluyveromyces fragilis）、クルイベロミセス・ラクティス（Kluyveromyces lactis）、クルイベロミセス・ファフィー（Kluyveromyces phaffii）、クルイベロミセス・ウォルティ（Kluyveromyces waltii）、クルイベロミセス・ウィッカーラミ（Kluyveromyces wickerhamii）、クルイベロミセス・ヤロウィ（Kluyveromyces yarrowii）等が挙げられる。
このうち、好ましくは、クルイベロミセス・サーモトレランス（Kluyveromyces thermotolerans）、クルイベロミセス・ラクティス（Kluyveromyces lactis）及びクルイベロミセス・フラジリス（Kluyveromyces fragilis）、であり、より好ましくはクルイベロミセス・サーモトレランス（Kluyveromyces thermotolerans）である。
なお、これらの酵母は、古くからチーズ及びヨーグルト等の乳製品、ワイン、並びに漬物等の発酵食品の製造に使用されている。例えば、クルイベロミセス・サーモトレランスが、ワイン醸造やプラムジャム発酵物から単離される乳酸産生酵母として、その生化学的性質及び生理的性質と共に報告されている（参考文献１：The Yeasts.A Taxonomic Study,4th ed.Elsevier Science BV,Amsterdam.240-241(1998)）。また、クルイベロミセス・サーモトレランス（Kluyveromyces thermotolerans）として、Kluyveromyces thermotolerans MA KT（NITE BP-1420）菌株が挙げられる。
このように本発明に用いるクルイベロミセス属酵母は、人体に対して極めて安全な微生物であり、発酵原料である糖も食することが可能であることから、本発明の成分（Ａ）糖発酵物は安全性が高いと考えられる。
【００１６】
成分（Ａ）糖発酵物の原料に用いる「糖」は、特に限定されず、ショ糖が含まれるものが好ましい。「糖」は、粉体又は液体等のいずれの形態でもよい。
本発明成分（Ａ）として、好ましくはサトウキビ由来の糖であり、より好ましくは、サトウキビ茎の搾り汁から得られるサトウキビ糖である。当該サトウキビ由来の糖として、例えば、和三盆、糖蜜、黒蜜、含蜜糖、粗糖、黒糖等の未精製糖；上白糖、グラニュー糖等の精製糖等が挙げられ、これらを１種又は２種以上選択することができる。このうち、上白糖にまで精製されていない未精製糖が好ましく、当該未精製糖のうち、黒糖が好ましい。黒糖は、サトウキビ茎の絞り汁を加熱し、濃縮して製造されたものであり、糖分の分離精製を行なっていないものが好適である。
本発明「サトウキビ」は、イネ科サトウキビ属の植物（砂糖黍、学名：Saccharum officinarum）であり、カンショ（甘蔗）ともいう。
【００１７】
本発明成分（Ａ）糖発酵物は、クルイベロミセス属酵母を糖含有培地にて培養して得た発酵物であるのが好適である。
本発明糖含有培地中の糖の含有量は、特に限定されないが、好ましくは３〜１５質量％（以下、質量％は、単に「％」と記載する）、より好ましくは４〜８％である。
また、本発明糖含有培地は液体であるのが好ましい。当該糖含有の液体培地として、例えば、上述した糖と水とを混合した糖水溶液等が挙げられる。当該水としては、特に制限されず、例えば、純水、水道水、井戸水、鉱泉水、鉱水、温泉水、湧水、淡水、精製水、イオン交換水、生理食塩水、リン酸緩衝液、リン酸緩衝生理食塩水等が挙げられる。
さらに、前記糖含有培地は、通常酵母に使用される培地成分（例えば、炭素源、窒素源、無機塩類等）を含有させたものが、発酵物の生産性向上の点で、好適である。また、前記糖含有培地は、雑菌繁殖を防止する点で、殺菌処理（例えば加熱や膜処理）したものを使用するのが好適である。
【００１８】
前記クルイベロミセス属酵母の培養方法は、通常酵母に使用される培養方法であれば、特に限定されず、公知の手法に従うことができる（例えば、参考文献１参照）。
例えば、振盪培養、通気培養、静置培養、撹拌培養等が挙げられる。また、バッチ式や連続式の何れでもよい。これらを単独で又は２種以上組み合わせて行うことができる。
前記クルイベロミセス属酵母の培養条件（例えば、好気性、嫌気性、培地中のｐＨ、溶存酸素、培養温度及び培養時間等）は、特に限定されず、目的に応じて適宜選択することができる。
【００１９】
本発明成分（Ａ）糖発酵物は、前培養したクルイベロミセス属酵母を接種した糖含有培地にて好気的培養を行い、調製するのが好適である。このとき、糖含有培地に対して前培養液１％を添加するのが好適である。また、培地ｐＨを５〜７とし、１５〜３５℃で、１〜３日間好気的培養を行うのが好適である。当該好適培養として、好気的条件下にて振盪培養や撹拌培養を行うのが望ましい。なお、好気的条件の場合、空気（酸素２０体積％程度）を除菌フィルターで処理したものを使用すればよい。
また、本開示の調製は、酒類製造のように積極的にエタノール発酵をさせるのではなく、調製終了後の糖発酵物中のエタノール濃度が１％未満であり、好適には０．１％以下となるようにするのが、保湿効果の点で、好適である。
【００２０】
本発明成分（Ａ）糖発酵物は、上記調製後、そのままの状態で、又は乾燥させた状態で、使用することが可能である。また、本開示の調製後、クルイベロミセス属酵母の菌体を遠心分離や膜処理等の常法にて除去してもよい。
また、本発明成分（Ａ）糖発酵物を、目的に応じて、希釈液、濃縮液、乾燥物としてもよく、さらに分離精製した分離物や精製物としてもよい。希釈する際には、生理食塩液を用いてもよく、乾燥する際には、フリーズドライ方式やスプレイドライ方式を用いてもよい。分離精製する際には、不純物除去等を目的として、遠心分離法、沈殿法、クロマト法等の常法を用いてもよく、脱臭、脱色等を目的として、活性炭、吸着剤、イオン交換樹脂等を用いてもよい。
また、異なる酵母種で得られた糖発酵物を２種以上混合して使用してもよい。
【００２１】
本発明成分（Ａ）糖発酵物の含有量は特に限定されるものではないが、優れた肌効果（保湿感）を得るためには、乾燥固形分として、好ましくは、０．０１〜０．０７％であり、より好ましくは、０．０２〜０．０５％である。この範囲であると、経時安定性及び肌効果（保湿感）の点で、好適である。
【００２２】
本発明に用いられる成分（Ｂ）多価アルコールについて説明する。本発明成分（Ｂ）は、以下の成分（Ｂ）多価アルコールの例示から１種又は２種以上選択し、調製することができる。
本発明成分（Ｂ）の多価アルコールは、保湿性を向上させる効果だけでなく、前記成分（Ａ）糖発酵物による経時での沈殿の発生を抑制し、液状化粧料の経時安定性の観点から好適である。
【００２３】
本発明成分（Ｂ）の多価アルコールは、具体的には、メチレングリコール、グルコール（エチレングリコール）、プロピレングリコール、プロパンジオール（１，３−プロパンジオール）、ジエチレングルコール、メチレンプロパンジオール、１，２−ブチレングリコール、１，３−ブチレングリコール、１，４−ブチレングリコール、２，３−ブタンジオール、１，２−ペンタンジオール、１，３−ペンタンジオール、１，４−ペンタンジオール、１，５−ペンタンジオール、２，４−ペンタンジオール、１，２−シクロペンタンジオール、１，３−シクロペンタンジオール、ネオペンチルグリコール、イソペンチルジオール、アミノエチルプロパンジオール、１，２−ヘキサンジオール、１，６−ヘキサンジオール、トリエチレングリコール、ジプロピレングリコール、ブトキシジグリコール、エチルヘキサンジオール、ブチルエチルプロパンジオール、１，１０−デカンジオール、エクオール、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、グリセリン、トリメチロールエタン、トリメチロールブタン、１，２，６−ヘキサントリオール、フィタントリオール、ペンタエリスリトール、ジグリセリン、ポリグリセリン等が挙げられる。
【００２４】
また、本発明成分（Ｂ）の多価アルコールは、特に限定されるものではないが、比重（ｇ／ｍＬ  ａｔ２０℃）が、好ましくは１．０２以下であることが、前記成分（Ａ）糖発酵物による経時での沈殿をより効果的に抑制することができ、また、べたつきのない使用感を得るためにも、好適である。
２０℃での比重が１．０２以下の多価アルコールとしては、具体的には、１，３−ブチレングリコール（比重：１．００４〜１．００７）、１，２−ブチレングリコール（比重：１．００２４）、１，２−ペンタンジオール（比重：０．９６６〜０．９７６）、ヘキシレングリコール（比重：０．９２２〜０．９２５）等が挙げられる。この中でも、好ましくは、１，３−ブチレングリコール、１，２−ペンタンジオールである。
【００２５】
なお、多価アルコールの「２０℃での比重」は、日本厚生労働省：医薬部外品原料規格２００６（薬事日報社出版）に記載の比重測定法第１法にて測定した値である。
【００２６】
成分（Ｂ）の含有量は、特に限定されるものではないが、概ね１〜６０％であることが好ましく、より好ましくは、３〜４０％であり、さらには５〜３０％であるとより好ましい。
【００２７】
本発明に用いられる成分（Ｃ）有機酸または無機酸並びにこれらの塩について説明する。本発明成分（Ｃ）は、以下の成分（Ｃ）有機酸または無機酸並びにこれらの塩の例示から１種又は２種以上選択し、調製することができる。
本発明成分（Ｃ）有機酸または無機酸並びにこれらの塩は、本発明品の２０℃でのｐＨを５．０〜７．０の範囲に調整するために、含有されるものである。２０℃のｐＨを５．０〜７．０の範囲にすることにより、成分（Ａ）糖発酵物を含有した液状化粧料において、経時での、変臭、変色を抑制する効果を付与するものである。さらに優れた効果を得るには、５．５〜６．５がより好ましい。なお、本願においてｐＨ測定は２０℃にて測定したものであり、測定には、ガラス電極式水素イオン濃度計（堀場製作所社製）を用いた。
【００２８】
本発明成分（Ｃ）有機酸または無機酸並びにこれらの塩は、特に限定されず、有機酸としては、クエン酸、乳酸、蟻酸、酢酸、シュウ酸、リンゴ酸、酒石酸、コハク酸、グリコール酸、アスパラギン酸、グルタミン酸、ポリグタミン酸、またはそれらの塩、無機酸としては、リン酸、塩酸、硫酸、ホウ酸、またはそれらの塩などが挙げられる。
これらの中で、さらに、優れた経時における変臭、変色の抑制効果を得るには、有機酸及びその塩をそれぞれ含有することが好ましい。具体的には、クエン酸及びその塩、または、乳酸及びその塩が、より好ましい。
【００２９】
成分（Ｃ）の含有量は、特に限定されるものではないが、概ね０．００５〜１．０％であることが好ましく、より好ましくは、０．０１〜０．８％であり、さらには０．０５〜０．５％であるとより好ましい。
【００３０】
本発明の液状化粧料における前記成分（Ｂ）多価アルコールと前記成分（Ｃ）有機酸または無機酸並びにこれらの塩の含有質量比（Ｂ）／（Ｃ）は、特に限定されるものではないが、概ね、好ましくは（Ｂ）／（Ｃ）が、２０〜１０００、より好ましくは５０〜５００、さらに好ましくは、１００〜３００の範囲である。
【００３１】
本発明は、さらに成分（Ｄ）として、ヒアルロン酸及びその塩、又はヒアルロン酸誘導体を含有することも可能である。本発明成分（Ｄ）ヒアルロン酸及びその塩、又はヒアルロン酸誘導体は、変臭、変色、沈殿などの経時安定性を損なうことなく、保湿感をさらに向上させる。
本発明に用いられる成分（Ｄ）のヒアルロン酸及びその塩、又はヒアルロン酸誘導体について説明する。本発明成分（Ｄ）は、以下の成分（Ｄ）ヒアルロン酸及びその塩、又はヒアルロン酸誘導体の例示から１種又は２種以上選択し、調製することができる。
【００３２】
本発明成分（Ｄ）ヒアルロン酸及びその塩、又はヒアルロン酸誘導体は、特に限定されるものではないが、具体的には、ヒアルロン酸、加水分解ヒアルロン酸やそれらのナトリウムなどの塩、ヒアルロン酸誘導体としては、アセチルヒアルロン酸ナトリウム、ヒアルロン酸プロピレングリコール、またカチオン化ヒアルロン酸としては、ヒアルロン酸ヒドロキシプロピルトリモニウムなどが挙げられる。また、分子量についても、低分子量である加水分解ヒアルロン酸から、高分子量のものまで、いずれも使用することができる。これらの中でも、加水分解ヒアルロン酸や、分子量が、５万〜１４０万のヒアルロン酸が好ましく、ヒアルロン酸誘導体としては、アセチルヒアルロン酸ナトリウムが、好ましい。
【００３３】
本発明成分（Ｄ）ヒアルロン酸及びその塩、又はヒアルロン酸誘導体の含有量は、特に限定されるものではないが、好ましくは、０．０００１〜０．２％、より好ましくは、０．００１〜０．１％である。
【００３４】
なお、本発明の液状化粧料には、本発明の前記成分（Ａ）糖発酵物、前記成分（Ｂ）多価アルコール及び前記成分（Ｃ）有機酸または無機酸並びにこれらの塩、前記成分（Ｄ）ヒアルロン酸及びその塩、又はヒアルロン酸誘導体の他、本技術の効果を損ねない範囲で、必要に応じて任意の成分を組み合わせて使用してもよい。他の成分としては、薬学的に許容される成分であればよく、例えば、防腐剤、細胞賦活剤、抗酸化剤、保湿剤、紫外線防止剤、溶剤（水、アルコール類等）、油剤、界面活性剤、増粘剤、粉体、キレート剤、乳化剤、安定化剤、着色剤、光沢剤、矯味剤、矯臭剤、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、希釈剤、浸透圧調整剤、香料等が挙げられ、これらを目的とする製剤に応じて配合すればよい。
本発明の液状化粧料に油剤を組み合わせて含有する場合、油剤の含有量は、特に限定されるものではないが、本発明品の形態が液状であることと優れた使用感を得るには、概ね５％以下が好ましく、３％以下がより好ましく、さらには、１％以下がより好ましい。
【００３５】
後記実施例に示すように、前記成分（Ａ）糖発酵物、前記成分（Ｂ）多価アルコール及び前記成分（Ｃ）有機酸または無機酸並びにこれらの塩を含有させ、２０℃でのｐＨが５．０〜７．０の液状化粧料を得ることによって、前記成分（Ａ）単独の場合と比較して、経時安定性が飛躍的に向上することが認められた。
また、前記成分（Ａ）、前記成分（Ｂ）及び前記成分（Ｃ）の組み合わせは、保湿性を有するため、保湿によって、皮膚に関する各種症状や状態等の予防、改善及び／又は治療を図るための方法に使用することができる。この各種症状や状態としては、例えば、肌荒れ、シワ形成、皮膚老化、乾皮症、フケ症、等が挙げられる。
また、前記成分（Ａ）糖発酵物、前記成分（Ｂ）多価アルコール及び前記成分（Ｃ）有機酸または無機酸並びにこれらの塩含有する、２０℃でのｐＨが５．０〜７．０の液状化粧料は、保湿性を与えながらも、べたつきが少なく、使用感が良好である。これにより、経時安定性、保湿性、使用感の全てが良好な液状化粧料を提供することができる。
【００３６】
本発明の液状化粧料の液状とは、３０℃で流動性を有する状態であることを意味する。具体的には、３０℃において、ブルックフィールド型回転粘度計を用いて測定された液状化粧料の粘度が、１００００ｍＰａ・ｓ以下、好ましくは、５０００ｍＰａ・ｓ以下、さらに好ましくは、２０００ｍＰａ・ｓ以下であると、優れた使用感を得るために好適である。
【００３７】
また、本発明の液状化粧料の形態は特に限定されず、外観が透明である水性剤型、油剤または香料などを可溶化し、外観が透明〜微濁状である可溶化剤型、あるいは、外観が白色〜白濁である乳化剤型のいずれでもよい。この中でも、白濁液状、微濁液状、透明液状の形態がより好ましい。
【００３８】
本発明の液状化粧料は、化粧水、美容液、多層ローション、日焼け止めローション、アフターシェーブローション等のスキンケア製品、ヘアートニック、ヘアーリキッド、養毛料、整髪料等のヘアケア製品、化粧直しミスト、プレメーキャップ用ローション、不織布含浸のマスク等に用いることができる
【００３９】
本発明の液状化粧料の製造方法は、特に限定されず、常法により調製される。例えば、前記成分（Ａ）、（Ｂ）及び（Ｃ）、さらに必要に応じて上記任意成分を加え、これらを混合することにより調製する方法が挙げられる。これらを組み合わせる際に、前記成分（Ａ）糖発酵物は糖発酵液（好適には水溶液）を用いるのが好ましい。
【実施例】
【００４０】
以下、調整例、実施例、比較例を挙げ、本発明をさらに具体的に説明するが、本発明はこれら実施例等に何ら制約されるものではない。
【００４１】
＜調製例１：クルイベロミセス・サーモトレランス（Kluyveromyces thermotolerans）による黒糖発酵液の調製＞
〔前培養〕
クルイベロミセス・サーモトレランス MA KT（NITE BP-1420)をＹＰＤ培地（ｐＨ６．０）を用いて液体培養を行った。前記液体培養液を１白金耳にとり、ＹＭ培地（固体培地）に植菌し、２日間、２５℃で前培養を行った。なお、ＹＰＤ（Yeast Extract-Peptone-Dextrose）培地及びＹＭ(Yeast Mold)培地は、DifcoTM＆BBLTM Manual,2nd Editionに記載されている内容に従って作成したものである。
Kluyveromyces thermotoleransMA KT（NITE BP-1420）菌株は、原産国：日本／分離源：樹液で採取され、形態観察及び細菌学的性質からLachancea (Kluyveromyces) thermotoleransと分類され、MA KT菌株と命名されたものである。当該菌株は、寄託先：〒２９２−０８１８  千葉県木更津市かずさ鎌足２−５−８、独立行政法人  製品評価技術基盤機構  特許微生物寄託センター（ＮＰＭＤ）に、２０１２年９月１３日に寄託されているものである。
【００４２】
〔黒糖水溶液の調製〕
黒糖２５質量部に純水５００質量部を添加し、５％黒糖水溶液とした。前記５％黒糖水溶液を、通気攪拌型発酵槽とともに殺菌後、適温に調節した。
黒糖として、サトウキビ茎の絞り汁を加熱し、濃縮して製造された市販品を使用した。
【００４３】
〔発酵工程〕
前記クルイベロミセス・サーモトレランス（Kluyveromyces thermotolerans）の前培養により得られたコロニーを生理的食塩水で懸濁して、１．０×１０９ＣＦＵ／ｍＬ〜１．０×１０１０ＣＦＵ／ｍＬとなるよう調製した懸濁液を、前記５％黒糖水溶液に、前記５％黒糖水溶液の全量の１％を添加し、３０℃で２日間、振とう培養（振とう条件：１００ｒｐｍ）を行った。振とう培養後の培養液をオートクレーブ（条件：１２１℃、１５分）で滅菌した後、ろ過により不純物や残渣物などを除去した。その後、精製水とフェノキシエタノールを添加し、固形分濃度０．１％の、クルイベロミセス・サーモトレランス（Kluyveromyces thermotolerans）の黒糖発酵液を調製した。エタノール含量は０．０１％であった。
【００４４】
＜化粧水の製造＞
実施例１〜４、参考例Ａ〜Ｆ、実施例１１、実施例１２、参考例Ｇ、実施例１４〜１８、参考例Ｈ、実施例２０〜２２、比較例１〜８：化粧水
調製例１にて調製した黒糖発酵液を用いて、表１〜表３に示す組成の化粧水を下記製造方法により調整し、「ｐＨ、経時安定性（変臭、変色、沈殿）」、「官能評価（保湿感、べたつきのなさ）」の各項目について、以下に示す評価方法及び評価基準により評価判定し、結果を併せて表１〜表３に示した。
【００４５】
【表１】
0006407742.tif 000002
【００４６】
【表２】
0006407742.tif 000003
【００４７】
【表３】
0006407742.tif 000004
【００４８】
（製造方法）
Ａ．成分１〜１７を混合して、化粧水を得た。
【００４９】
〔評価方法１〕ｐＨ測定方法
各試料のｐＨは、製造直後および各試料を５０℃にて１ヶ月保管した後、試料の温度を２０℃に調整して、ガラス電極式水素イオン濃度計（堀場製作所社製）を用いて測定した。
【００５０】
〔評価方法２〕経時安定性（変臭）
各試料を５０℃にて１ヶ月保管した後に、各試料を室温に戻し、香料専門パネル１ ０ 人により、匂いの官能評価を行い、変臭について、以下の（ イ）変臭のレベルランクで判断し、パネル全員の評点合計からその平均値を算出し、以下の（ ロ） 判定基準により判定した。
（イ）   変臭のレベルランク
［評点］：［評価］
４点：変臭の発生がない。
３点：変臭の発生がほとんどなく、無香料での製品化が可能。
２点：変臭の発生がわずかにあるが、微量の香料でのマスキングが可能。
１点：変臭の発生が著しく、香料でのマスキングが不可能。
（ロ） 判定基準
［判定］：［評点の平均値］
◎：平均点が３．５ 点以上
〇：平均点が２．５点以上
△：平均点が１．５点以上
×：平均点が１．５点未満
【００５１】
〔評価方法３〕経時安定性（変色）
黄変（４００ｎｍ吸光度）：各試料を原液のまま１ｃｍセルに入れ、吸光度計Ｕ−３２１０(日立社製)を用いて波長４００ｎｍの吸光度を測定することにより評価した。コントロールとして蒸留水を使用した。５℃遮光１ヶ月保管品と５０℃１ヶ月保管後の吸光度を比較し、その差を下記（ハ）判定基準に従って判定した。（  ）内は、化粧料評価の専門家によるコメントである。
（ハ） 判定基準
［判定］：［吸光度の差］
◎：０．１未満  （黄変が全く見られない、あるいはわずかに黄変が見られるレベル）
○：０．１以上０．２未満  （黄変が見られるが、化粧料として問題ないレベルである）
△：０．２以上０．３未満  （黄変が見られ、化粧料としての品質上問題となる）
×：０．３以上  （黄変が著しい）
【００５２】
〔評価方法３〕経時安定性（沈殿）
各試料を５０℃にて１ヶ月保管した後、各試料を室温に戻し、化粧料評価の専門家が目視により、沈殿物の有無を観察し、下記（ニ）判定基準に従って判定した。
（ニ） 判定基準
［判定］：［評価］
◎：沈殿が全く見られない、あるいはわずかに沈殿が見られるレベルである
〇：沈殿が見られるが、化粧料として問題ないレベルである
△：沈殿が見られ、化粧料としての品質上問題となるレベルである
×：沈殿の析出が著しい
【００５３】
〔評価方法４〕官能評価（保湿感、べたつきのなさ）
保湿感、べたつきのなさの評価は、各試料を２０名の化粧品評価専門パネルにより使用してもらい、「保湿感」、「べたつきのなさ」について、下記（ホ）評価基準に従って５段階評価してもらった。その後、全パネルの評点の平均点を下記（ヘ）判定基準に従って判定した。
（ホ）評価基準
［評点］：［評価結果］
５点：非常に良好
４点：良好
３点：普通
２点：やや不良
１点：不良
（ヘ）判定基準
［判定］：［評点の平均点］
◎：４．０以上
○：３．０以上４．０未満
△：２．０以上３．０未満
×：２．０未満
【００５４】
表１〜表３から明らかなように、本発明の成分（Ａ）〜（Ｃ）の３成分を含み、２０℃でのｐＨが５．０〜７．０の範囲である実施例１〜４、参考例Ａ〜Ｆ、実施例１１、実施例１２、参考例Ｇ、実施例１４〜１８、参考例Ｈ、実施例２０〜２２の化粧水は、経時安定性が良好で、保湿感とべたつきのなさに優れることが確認された。
これに対し、本発明の成分１を欠いた比較例１は、保湿感が非常に劣るものであった。成分（Ｂ）または（Ｃ）のいずれかの成分を欠いた比較例２及び５の化粧水は、比較例２では、特に沈殿が、比較例５では、経時で大きくｐＨが低下して、変臭、変色、沈殿のいずれの経時安定性の悪いものであった。
また、本発明の成分（Ｂ）に替えて、低級モノアルコールであるエタノールを含有した比較例３は、経時安定性（沈殿）、保湿感の悪いものであり、本発明の成分（Ｂ）に替えて、保湿効果の高いアミノ酸であるグリシンを含有した比較例４は、経時安定性（変色）、べたつきのなさが悪いものであった。本発明の成分（Ｃ）に替えて、キレート剤であるエデト酸二ナトリウムを含有した比較例６は、経時安定性の沈殿の評価が特に悪いものであった。２０℃でのｐＨを５．０〜７．０の範囲外に調整した比較例７及び８は、経時安定性の変臭、変色が特に悪いものであった。
このことから、本発明の成分（Ａ）〜（Ｃ）の３成分を組み合わせ、２０℃でのｐＨが５．０〜７．０の範囲の液状化粧料を得ることが、経時安定性（変臭、変色、沈殿）、保湿感、べたつきのなさのいずれにも優れた効果を有する液状化粧料を得る際に重要である。
しかも、得られた本発明の液状化粧料に成分（Ｄ）を加えることで、変臭、変色、沈殿の経時安定性を損なうことなく、保湿感の向上が認められ、さらに優れた液状化粧料が得られる。これは、化粧水の実施例２と実施例２０の保湿感の評価比較にて確認できる。また、実施例１と実施例３の比較においても、保湿感の判定は、いずれも［◎］で同一だが、評点の平均点においては、実施例１が、４．９、実施例３が、４．５であり、成分（Ｄ）の含有効果を確認することができる。
【００５５】
実施例２３：可溶化型化粧水
（成分）                                                    （％）
１．ＰＯＥ（４０モル）硬化ヒマシ油                        ０．２
２．ＰＯＥ（２０モル）硬化ヒマシ油                        ０．２
３．セスキオレイン酸ソルビタン                            ０．２
４．オレイン酸オレイル                                    ０．２
５．香料                                                    適量
６．エタノール                                            ３．０
７．１，３−ブチレングリコール                          １５．０
８．グリセリン                                            ２．０
９．調製例１の黒糖発酵液（固形分濃度０．１％）          ２５．０
１０．クエン酸                                            ０．０１
１１．クエン酸ナトリウム                                  ０．１
１２．アセチルヒアルロン酸ナトリウム                      ０．０１
１３．パラオキシ安息香酸メチル                            ０．１
１４．精製水                                              残  量
【００５６】
（製造方法）
Ａ．成分１〜６を混合溶解する。
Ｂ．成分７〜１４を混合溶解する。
Ｃ．ＢにＡを加え、可溶化型化粧水を得た。
実施例２３の可溶化型化粧水は、ｐＨ＝６．２で、経時安定性も良好で、保湿感に優れ、べたつきのないものであった。
【００５７】
実施例２４：乳化型化粧水
（成分）                                                    （％）
１．大豆由来水素添加リン脂質                              ０．５
２．エチルへキサン酸セチル                                ０．１
３．スクワラン                                            ０．１
４．イソステアリン酸                                      ０．１
５．セラミド２                                            ０．１
６．キサンタンガム                                        ０．０１
７．グリセリン                                            ３．０
８．ジプロピレングリコール                                ２．０
９．１,２−ペンタンジオール                               １．０
１０．１，３−ブチレングリコール                        ２３．０
１１．精製水                                                残量
１２．乳酸                                                ０．００６
１３．乳酸ナトリウム                                      ０．２１
１４．加水分解ヒアルロン酸                                ０．００５
１５．調製例１の黒糖発酵液（固形分濃度０．１％）        ３０．０
１６．エタノール                                          ３．０
１７．香料                                                  適量
【００５８】
（製造方法）
Ａ．成分１〜５を７５℃に加熱し、均一に混合溶解する。
Ｂ．成分６〜１１を７５℃に加熱し、均一に混合溶解する
Ｃ．ＡにＢを添加し、乳化する。
Ｄ．Ｃを冷却し、成分１２〜１７を添加し、乳化型化粧水を得た。
実施例２４の乳化型化粧水は、ｐＨ＝５．５で、経時安定性も良好で、保湿感に優れ、べたつきのないものであった。
【受託番号】
【００５９】
MA KT（NITE BP-1420）菌株／分類：Lachancea (Kluyveromyces) thermotolerans／寄託先：〒２９２−０８１８  千葉県木更津市かずさ鎌足２−５−８、独立行政法人  製品評価技術基盤機構  特許微生物寄託センター（ＮＰＭＤ）／受託日：２０１２年９月１３日。