(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の構造：
【化３１】
0006265998.tif 000046
［式中、
Ｒ２は低級アルキルであり、
ａは、１以上４以下の範囲の整数であり、
Ｙは、Ｏであり、
Ｒ３は、低級アルキルであり、
Ｒ４は、水素であり、
Ｒ５は、アミノまたは低級アルキルアミノであり、
Ｒ６は、ハロであり、
Ｘは、単結合であり、かつ
ＰＯＬＹは、ポリ（アルキレンオキシド）である］
で示される式Ｉ−Ｃａの化合物およびその薬学的に許容される塩。
【請求項２】
ＰＯＬＹの重量平均分子量が４００ダルトン未満である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
以下の構造：
【化３７】
0006265998.tif 000047
［式中、
ｎは、１以上３０以下の範囲の整数である］
によって示される、請求項１および２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項４】
前記ポリ（アルキレンオキシド）がポリ（エチレンオキシド）である、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
ＰＯＬＹが、１〜３０個の範囲の複数の繰り返しモノマーを有する、請求項１および２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６】
ＰＯＬＹが、１〜１０個の範囲の複数の繰り返しモノマーを有する、請求項５に記載の化合物。
【請求項７】
前記ポリ（アルキレンオキシド）がアルコキシまたはヒドロキシルエンドキャッピング部分を含む、請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
（ｉ）請求項１に記載の化合物と、（ｉｉ）任意選択で、薬学的に許容される賦形剤とを含む組成物。
【請求項９】
請求項１に記載の化合物を含む組成物であって、該組成物が、ある剤形で存在する、組成物。
【請求項１０】
請求項１に記載の化合物を含み、対象に投与されることを特徴とする、組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本願は、米国特許法第１１９条（ｅ）に基づき、２０１２年９月１７日に出願された米国仮特許出願第６１／７０２，０８８号明細書に対する優先権の利益を主張するものであり、この仮特許出願の開示は参照により本明細書に援用される。
【０００２】
本発明は、（特に）化学修飾のないベンズアミド系化合物と比べて特定の利点を有する化学修飾されたベンズアミド系化合物を含む。本明細書に記載される化学修飾されたベンズアミド系化合物は、（特に）創薬、薬物療法、生理学、有機化学および高分子化学の分野に関連し、および／またはそのような分野における１つまたは複数の用途を有する。
【背景技術】
【０００３】
ベンズアミド系コアをベースとする化学的化合物は、哺乳動物において著しく幅広い薬理作用を呈する。
【化１】
0006265998.tif 000002
【０００４】
たとえば、Ｎ−（２−ジエチルアミノエチル）−２−メトキシ−４−アミノ−５−クロロベンズアミド（メトクロプラミド）は、胃不全麻痺に罹患している患者の治療において用いられている。加えて、Ｎ−（２−ジエチルアミノエチル（ｄｉｅｔｈｙｌｅａｍｉｎｏｅｔｈｙｌ））−４−アミノベンズアミドは、クラスＩＡ抗不整脈薬による薬物療法が必要な患者の治療において用いられている。このように、ベンズアミド系構造を有するこれらのおよび他の薬剤は、固有の、かつ多くの場合に有益な薬理学的特性を有する。
【０００５】
しかしながら、これらの薬剤の有望さは、未だ完全には実現されていない。たとえば、メトクロプラミドの長期または高用量の使用は、遅発性ジスキネジーのリスクを高める。
【０００６】
従って、ベンズアミド系化合物は固有の薬理学的特性を有するものの、この薬物を安全かつ有効に利用できる能力は限られていた。
【０００７】
従って、メトクロプラミドなどのベンズアミド系化合物による薬物療法は、このクラスの薬物の薬理をある程度保持しながらも異なる化学構造を有し、従って異なる薬物動態学的および／または薬力学的プロファイルをもたらす新規化合物が提供されたならば、向上し得る。結果として、新規ベンズアミド系化合物の開発が必要とされているが、未だ対処されていない。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明は、当該技術分野における上記および他の必要性に対処しようとするものである。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明の１つ以上の実施形態では、化合物が提供され、この化合物は、安定したまたは分解可能な連結によって水溶性非ペプチドオリゴマーに共有結合したベンズアミド系化合物の残基を含む。
【００１０】
ベンズアミド系化合物の「残基」は、１つ以上の水溶性非ペプチドオリゴマーを（直接的に、あるいは間接的に）結合する働きをする１つ以上の結合の存在によって改変された、治療的に活性なベンズアミド系化合物の構造を有する化合物である。
【００１１】
本発明の例示的化合物は、以下の構造：
【化２】
0006265998.tif 000003
を有する化合物
［式中、
Ｒ２は、低級アルキル（たとえばエチル）であり、
（ａ）は、１以上４以下の範囲の整数（たとえば２）であり、
Ｙは、Ｏ（酸素）またはＳのいずれかであり、
Ｒ３は、低級アルキル（たとえばメチル）であり、
Ｒ４は、水素、ハロ（たとえばクロロ、ブロモおよびヨード）、低級アルコキシ、アミノ、および低級アルキルアミノ（たとえば水素）からなる群から選択され、
Ｒ５は、水素、ハロ（たとえばクロロ、ブロモおよびヨード）、低級アルコキシ、アミノ、および低級アルキルアミノ（たとえばアミノ）からなる群から選択され、
Ｒ６は、水素、ハロ（たとえばクロロ、ブロモおよびヨード）、低級アルコキシ、アミノ、および低級アルキルアミノ（たとえばクロロ）からなる群から選択され、
Ｘは、スペーサー部分であり、かつ
ＰＯＬＹは、水溶性非ペプチドオリゴマーである］
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【００１２】
本発明のさらなる例示的化合物は、以下の構造：
【化３】
0006265998.tif 000004
を有する化合物
［式中、
Ｒ１は、低級アルキル（たとえばエチル）であり、
Ｒ２は、低級アルキル（たとえばエチル）であり、
（ａ）は、１以上４以下の範囲の整数（たとえば２）であり、
Ｒ４は、水素、ハロ（たとえばクロロ、ブロモおよびヨード）、低級アルコキシ、アミノ、および低級アルキルアミノ（たとえば水素）からなる群から選択され、
Ｒ５は、水素、ハロ（たとえばクロロ、ブロモおよびヨード）、低級アルコキシ、アミノ、および低級アルキルアミノ（たとえばアミノ）からなる群から選択され、
Ｒ６は、水素、ハロ（たとえばクロロ、ブロモおよびヨード）、低級アルコキシ、アミノ、および低級アルキルアミノ（たとえばクロロ）からなる群から選択され、
Ｘは、スペーサー部分であり、かつ
ＰＯＬＹは、水溶性非ペプチドオリゴマーである］
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【００１３】
本発明のさらなる例示的化合物は、以下の構造：
【化４】
0006265998.tif 000005
を有する化合物
［式中、
Ｒ１は、低級アルキル（たとえばエチル）であり、
Ｒ２は、低級アルキル（たとえばエチル）であり、
（ａ）は、１以上４以下の範囲の整数（たとえば２）であり、
Ｙは、Ｏ（酸素）またはＳのいずれかであり、
Ｒ３は、低級アルキル（たとえばメチル）であり、
Ｒ５は、水素、ハロ（たとえばクロロ、ブロモおよびヨード）、低級アルコキシ、アミノ、および低級アルキルアミノ（たとえばアミノ）からなる群から選択され、
Ｒ６は、水素、ハロ（たとえばクロロ、ブロモおよびヨード）、低級アルコキシ、アミノ、および低級アルキルアミノ（たとえばクロロ）からなる群から選択され、
Ｘは、スペーサー部分であり、かつ
ＰＯＬＹは、水溶性非ペプチドオリゴマーである］
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【００１４】
本発明のさらに別の例示的化合物は、以下の構造：
【化５】
0006265998.tif 000006
を有する化合物
［式中、
Ｒ１は、低級アルキル（たとえばエチル）であり、
Ｒ２は、低級アルキル（たとえばエチル）であり、
（ａ）は、１以上４以下の範囲の整数（たとえば２）であり、
Ｙは、Ｏ（酸素）またはＳのいずれかであり、
Ｒ３は、低級アルキル（たとえばメチル）であり、
Ｒ４は、水素、ハロ（たとえばクロロ、ブロモおよびヨード）、低級アルコキシ、アミノ、および低級アルキルアミノ（たとえば水素）からなる群から選択され、
Ｒ６は、水素、ハロ（たとえばクロロ、ブロモおよびヨード）、低級アルコキシ、アミノ、および低級アルキルアミノ（たとえばクロロ）からなる群から選択され、
Ｘは、スペーサー部分であり、かつ
ＰＯＬＹは、水溶性非ペプチドオリゴマーである］
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【００１５】
本発明のさらに別の例示的化合物は、以下の構造：
【化６】
0006265998.tif 000007
を有する化合物
［式中、
Ｒ１は、低級アルキル（たとえばエチル）であり、
Ｒ２は、低級アルキル（たとえばエチル）であり、
（ａ）は、１以上４以下の範囲の整数（たとえば２）であり、
Ｙは、Ｏ（酸素）またはＳのいずれかであり、
Ｒ３は、低級アルキル（たとえばメチル）であり、
Ｒ４は、水素、ハロ（たとえばクロロ、ブロモおよびヨード）、低級アルコキシ、アミノ、および低級アルキルアミノ（たとえば水素）からなる群から選択され、
Ｒ５は、水素、ハロ（たとえばクロロ、ブロモおよびヨード）、低級アルコキシ、アミノ、および低級アルキルアミノ（たとえばアミン）からなる群から選択され、
Ｘは、スペーサー部分であり、かつ
ＰＯＬＹは、水溶性非ペプチドオリゴマーである］
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【００１６】
ベンズアミド系化合物に関して、本明細書で使用されるときベンズアミド系化合物は、式Ｉ：
【化７】
0006265998.tif 000008
［式中、
Ｒ１は、低級アルキル（たとえばエチル）であり、
Ｒ２は、低級アルキル（たとえばエチル）であり、
（ａ）は、１以上４以下の範囲の整数（たとえば２）であり、
Ｙは、Ｏ（酸素）またはＳのいずれかであり、
Ｒ３は、低級アルキル（たとえばメチル）であり、
Ｒ４は、水素、ハロ（たとえばクロロ、ブロモおよびヨード）、低級アルコキシ、アミノ、および低級アルキルアミノ（たとえば水素）からなる群から選択され、
Ｒ５は、水素、ハロ（たとえばクロロ、ブロモおよびヨード）、低級アルコキシ、アミノ、および低級アルキルアミノ（たとえばアミン）からなる群から選択され、かつ
Ｒ６は、水素、ハロ（たとえばクロロ、ブロモおよびヨード）、低級アルコキシ、アミノ、および低級アルキルアミノ（たとえばクロロ）からなる群から選択される］
およびその薬学的に許容される塩に包含される構造を有する。
【００１７】
本発明で使用される例示的ベンズアミド系化合物部分は、メトクロプラミドおよびプロカインアミドからなる群から選択される。
【００１８】
本発明の１つ以上の実施形態では、組成物が提供され、この組成物は、安定したまたは分解可能な連結によって水溶性非ペプチドオリゴマーに共有結合したベンズアミド系化合物の残基を含む化合物と、任意選択で、薬学的に許容される賦形剤とを含む。
【００１９】
本発明の１つ以上の実施形態では、剤形が提供され、この剤形は、安定したまたは分解可能な連結によって水溶性非ペプチドオリゴマーに共有結合したベンズアミド系化合物の残基を含む化合物を含み、ここで化合物はある剤形で存在する。
【００２０】
本発明の１つ以上の実施形態では、方法が提供され、この方法は、水溶性非ペプチドオリゴマーをベンズアミド系化合物に共有結合するステップを含む。
【００２１】
本発明の１つ以上の実施形態では、方法が提供され、この方法は、化合物を、それを必要とする哺乳動物に投与するステップを含み、この化合物は、安定したまたは分解可能な連結によって水溶性非ペプチドオリゴマーに共有結合したベンズアミド系化合物の残基を含む。
【００２２】
本コンジュゲート、組成物、方法などのさらなる実施形態が、以下の説明、例、および特許請求の範囲から明らかとなるであろう。前述のおよび以下の説明から理解され得るとおり、本明細書に記載されるあらゆる特徴、およびかかる特徴の２つ以上のあらゆる組み合わせが、かかる組み合わせに含まれる特徴が互いに矛盾しない限り、本開示の範囲内に含まれる。加えて、任意の特徴または特徴の組み合わせが、本発明の任意の実施形態から特別に除外されてもよい。本発明のさらなる態様および利点が、以下の説明および特許請求の範囲に示される。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
（項目１）
安定したまたは分解可能な連結によって水溶性非ペプチドオリゴマーに共有結合したベンズアミド系化合物の残基を含む化合物。
（項目２）
前記連結が安定した連結である、項目１に記載の化合物。
（項目３）
前記連結が分解可能な連結である、項目１に記載の化合物。
（項目４）
前記連結が、アミン、尿素、カルバメートおよびエーテルからなる群から選択される、項目１に記載の化合物。
（項目５）
前記水溶性非ペプチドオリゴマーの重量平均分子量が４００ダルトン未満である、項目１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
（項目６）
以下の構造：
【化３１】
0006265998.tif 000009
を有する項目１に記載の化合物
［式中、
Ｒ２は低級アルキルであり、
（ａ）は、１以上４以下の範囲の整数であり、
Ｙは、ＯまたはＳのいずれかであり、
Ｒ３は、低級アルキルであり、
Ｒ４は、水素、ハロ、低級アルコキシ、アミノ、および低級アルキルアミノからなる群から選択され、
Ｒ５は、水素、ハロ、低級アルコキシ、アミノ、および低級アルキルアミノからなる群から選択され、
Ｒ６は、水素、ハロ、低級アルコキシ、アミノ、および低級アルキルアミノからなる群から選択され、
Ｘは、スペーサー部分であり、かつ
ＰＯＬＹは、水溶性非ペプチドオリゴマーである］
およびその薬学的に許容される塩。
（項目７）
以下の構造：
【化３２】
0006265998.tif 000010
を有する項目１に記載の化合物
［式中、
Ｒ１は、低級アルキルであり、
Ｒ２は、低級アルキルであり、
（ａ）は、１以上４以下の範囲の整数であり、
Ｒ４は、水素、ハロ、低級アルコキシ、アミノ、および低級アルキルアミノからなる群から選択され、
Ｒ５は、水素、ハロ、低級アルコキシ、アミノ、および低級アルキルアミノからなる群から選択され、
Ｒ６は、水素、ハロ、低級アルコキシ、アミノ、および低級アルキルアミノからなる群から選択され、
Ｘは、スペーサー部分であり、かつ
ＰＯＬＹは、水溶性非ペプチドオリゴマーである］
およびその薬学的に許容される塩。
（項目８）
以下の構造：
【化３３】
0006265998.tif 000011
を有する項目１に記載の化合物
［式中、
Ｒ１は、低級アルキルであり、
Ｒ２は、低級アルキルであり、
（ａ）は、１以上４以下の範囲の整数であり、
Ｙは、ＯまたはＳのいずれかであり、
Ｒ３は、低級アルキルであり、
Ｒ５は、水素、ハロ、低級アルコキシ、アミノ、および低級アルキルアミノからなる群から選択され、
Ｒ６は、水素、ハロ、低級アルコキシ、アミノ、および低級アルキルアミノからなる群から選択され、
Ｘは、スペーサー部分であり、かつ
ＰＯＬＹは、水溶性非ペプチドオリゴマーである］
およびその薬学的に許容される塩。
（項目９）
以下の構造：
【化３４】
0006265998.tif 000012
を有する項目１に記載の化合物
［式中、
Ｒ１は、低級アルキルであり、
Ｒ２は、低級アルキルであり、
（ａ）は、１以上４以下の範囲の整数であり、
Ｙは、ＯまたはＳのいずれかであり、
Ｒ３は、低級アルキルであり、
Ｒ４は、水素、ハロ、低級アルコキシ、アミノ、および低級アルキルアミノからなる群から選択され、
Ｒ６は、水素、ハロ、低級アルコキシ、アミノ、および低級アルキルアミノからなる群から選択され、
Ｘは、スペーサー部分であり、かつ
ＰＯＬＹは、水溶性非ペプチドオリゴマーである］
およびその薬学的に許容される塩。
（項目１０）
以下の構造：
【化３５】
0006265998.tif 000013
を有する項目１に記載の化合物
［式中、
Ｒ１は、低級アルキルであり、
Ｒ２は、低級アルキルであり、
（ａ）は、１以上４以下の範囲の整数であり、
Ｙは、ＯまたはＳのいずれかであり、
Ｒ３は、低級アルキルであり、
Ｒ４は、水素、ハロ、低級アルコキシ、アミノ、および低級アルキルアミノからなる群から選択され、
Ｒ５は、水素、ハロ、低級アルコキシ、アミノ、および低級アルキルアミノからなる群から選択され、
Ｘは、スペーサー部分であり、かつ
ＰＯＬＹは、水溶性非ペプチドオリゴマーである］
およびその薬学的に許容される塩。
（項目１１）
前記ベンズアミド系化合物の前記残基が、以下の構造：
【化３６】
0006265998.tif 000014
を有するベンズアミド系化合物
［式中、
Ｒ１は、低級アルキルであり、
Ｒ２は、低級アルキルであり、
（ａ）は、１以上４以下の範囲の整数であり、
Ｙは、ＯまたはＳのいずれかであり、
Ｒ３は、低級アルキルであり、
Ｒ４は、水素、ハロ、低級アルコキシ、アミノ、および低級アルキルアミノからなる群から選択され、
Ｒ５は、水素、ハロ、低級アルコキシ、アミノ、および低級アルキルアミノからなる群から選択され、かつ
Ｒ６は、水素、ハロ、低級アルコキシ、アミノ、および低級アルキルアミノからなる群から選択される］
およびその薬学的に許容される塩の残基である、項目１〜５のいずれか一項に記載の化合物。
（項目１２）
前記ベンズアミド系化合物の前記残基がメトクロプラミドの残基である、項目１〜５のいずれか一項に記載の化合物。
（項目１３）
前記ベンズアミド系化合物の前記残基がプロカインアミドの残基である、項目１〜５のいずれか一項に記載の化合物。
（項目１４）
前記ベンズアミド系化合物の前記残基がメトクロプラミドの残基である、項目１〜５のいずれか一項に記載の化合物。
（項目１５）
前記水溶性非ペプチドオリゴマーがポリ（アルキレンオキシド）である、項目１〜５のいずれか一項に記載の化合物。
（項目１６）
前記ポリ（アルキレンオキシド）がポリ（エチレンオキシド）である、項目１５に記載の化合物。
（項目１７）
前記水溶性非ペプチドオリゴマーが、１〜３０個の範囲の複数の繰り返しモノマーを有する、項目１〜５のいずれか一項に記載の化合物。
（項目１８）
前記水溶性非ペプチドオリゴマーが、複数の繰り返しモノマーを有し、１〜１０個の範囲の複数の繰り返しモノマーを有する、項目１７に記載の化合物。
（項目１９）
前記ポリ（アルキレンオキシド）がアルコキシまたはヒドロキシルエンドキャッピング部分を含む、項目１５に記載の化合物。
（項目２０）
単一の水溶性非ペプチドオリゴマーに結合したベンズアミド系化合物の単一の残基を有する、項目１に記載の化合物。
（項目２１）
単一の水溶性非ペプチドオリゴマーに共有結合したベンズアミド系化合物の２つの残基を有する、項目１に記載の化合物。
（項目２２）
（ｉ）水溶性非ペプチドオリゴマーに共有結合したベンズアミド系化合物の残基と、（ｉｉ）任意選択で、薬学的に許容される賦形剤とを含む化合物を含む組成物。
（項目２３）
水溶性非ペプチドオリゴマーに共有結合したベンズアミド系化合物の残基を含む化合物であって、ある剤形で存在する化合物を含む物質の化合物。
（項目２４）
水溶性非ペプチドオリゴマーをベンズアミド系化合物の残基に共有結合するステップを含む方法。
（項目２５）
水溶性非ペプチドオリゴマーに連結を介して共有結合したベンズアミド系化合物の残基を含む化合物を対象に投与するステップを含む方法。
【図面の簡単な説明】
【００２３】
【図１】メトクロプラミドの代謝経路の概略図である。
【図２】実施例１６で考察するとおりのｍＰＥＧ１−Ｎ−メトクロプラミドの代謝経路の概略図である。
【図３】実施例１６で考察するとおりのｍＰＥＧ４−Ｎ−メトクロプラミドの代謝経路の概略図である。
【図４】実施例１６で考察するとおりのｍＰＥＧ８−Ｎ−メトクロプラミドの代謝経路の概略図である。
【図５Ａ】実施例１８に記載する方法で実施したときの、ヒト組換えＣＹＰ２Ｄ６酵素における被験物質の代謝安定性試験の結果のプロットである。
【図５Ｂ】最長３０分間にわたる３７℃の１００ｍＭリン酸カリウム緩衝液、ｐＨ７．４中における被験物質の化学安定性試験の結果のプロットである。
【図６】実施例１２に記載する方法で実施したときの、一連の濃度の被験物質によるＣＹＰ２Ｄ６の阻害の程度を表す一連のプロットである。
【図７】実施例１８に記載する方法で実施したときの、一連の濃度の被験物質によるＣＹＰ２Ｄ６の阻害の程度を表すプロットである。
【発明を実施するための形態】
【００２４】
本明細書で使用する場合、単数形の「ａ」「ａｎ」「ｔｈｅ」は、文脈からそうでないことが明らかな場合を除き、該当する対象の複数形も含む。
【００２５】
本発明について説明および権利請求するにあたり、下記の定義に基づいて以下の専門用語を使用する。
【００２６】
「水溶性非ペプチドオリゴマー」は、室温で水に対して少なくとも３５％（重量）可溶、好ましくは７０％（重量）超、およびより好ましくは９５％（重量）超可溶なオリゴマーを指す。一般に、「水溶性」のオリゴマーの未濾過調製水溶液は、濾過後の同じ溶液で伝達される光の量の少なくとも７５％、より好ましくは少なくとも９５％を伝達する。しかしながら、最も好ましいのは、水溶性オリゴマーは水に対して少なくとも９５％（重量）可溶であるか、または水に対して完全に可溶である。「非ペプチド」に関しては、オリゴマーはアミノ酸残基数が３５％（重量比）未満のときに非ペプチドである。
【００２７】
「モノマー」「モノマーサブユニット」「モノマー単位」という用語は、本明細書では同義に用いられ、ポリマーまたはオリゴマーの基本構造単位のうちの１つを示す。ホモオリゴマーの場合、単一の繰り返し構造単位でオリゴマーが形成される。コオリゴマーの場合、２つ以上の構造単位が一定のパターンあるいはランダムに繰り返され、オリゴマーが形成される。本発明に関連して用いられる好ましいオリゴマーは、ホモオリゴマーである。水溶性非ペプチドオリゴマーは、直列に結合されてモノマー鎖を形成する１つ以上のモノマーを含む。オリゴマーは、単一のモノマータイプ（すなわちホモオリゴマー）からでも２つまたは３つのモノマータイプ（すなわちコオリゴマー）からでも形成可能である。
【００２８】
「オリゴマー」は、約１から約３０個のモノマーを有する分子である。本発明で用いる具体的なオリゴマーは、詳細については後述する、直鎖、分岐鎖またはフォーク状などの多岐にわたる幾何学的形状を有するものを含む。
【００２９】
「ＰＥＧ」または「ポリエチレングリコール」とは、本明細書で使用する場合、水溶性ポリ（エチレンオキシド）を包含することを意図している。特に明記しないかぎり、「ＰＥＧオリゴマー」またはオリゴエチレングリコールは、実質的にすべての（好ましくはすべての）モノマーサブユニットがエチレンオキシドサブユニットであるものであるが、オリゴマーがたとえばコンジュゲーション用に明確なエンドキャッピング部分または官能基を含むものであってもよい。本発明で用いるＰＥＧオリゴマーは、たとえば合成変換時に末端酸素が置き換わるか否かに応じて、「−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ−」または「−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ−１ＣＨ２ＣＨ２−」という２つの構造のうちの１つを含む。前述のとおり、ＰＥＧオリゴマーの変数（ｎ）は約１〜３０、特定の実施形態では約２〜約３０の範囲をとり、末端基およびＰＥＧ全体の構造は様々であり得る。ＰＥＧが官能基Ａを、たとえば小分子薬物との連結用にさらに含む場合、その官能基がＰＥＧオリゴマーに共有結合すると、（ｉ）酸素−酸素結合（−Ｏ−Ｏ−、過酸化物連結）、または（ｉｉ）窒素−酸素結合（Ｎ−Ｏ、Ｏ−Ｎ）の形成は生じない。
【００３０】
用語「エンドキャップされた」または「末端がキャップされた」は、本明細書では、エンドキャッピング部分を有するポリマーの末端または端点を指して同義的に使用される。必須ではないが、典型的には、エンドキャッピング部分はヒドロキシ基またはＣ１〜２０アルコキシ基を含む。従って、エンドキャッピング部分の例には、アルコキシ（たとえば、メトキシ、エトキシおよびベンジルオキシ）、ならびにアリール、ヘテロアリール、シクロ、ヘテロシクロなどが含まれる。加えて、前述の各々の飽和、不飽和、置換および非置換形態が想定される。さらに、エンドキャッピング基はまたシランであってもよい。エンドキャッピング基はまた、有利には、検出可能標識も含み得る。ポリマーが、検出可能標識を含むエンドキャッピング基を有する場合、ポリマーおよび／またはポリマーがカップリングする目的の部分（たとえば活性薬剤）の量または位置を、好適な検出器を使用して決定することができる。かかる標識としては、限定なしに、蛍光剤、化学発光剤、酵素標識で用いられる部分、発色剤（たとえば色素）、金属イオン、放射性部分などが挙げられる。好適な検出器としては、光度計、フィルム、分光計などが挙げられる。加えて、エンドキャッピング基は標的部分を含み得る。
【００３１】
オリゴマーの幾何学的形状または全体としての構造に関する「分岐」とは、分岐点から延在する２つ以上のポリマー「アーム」を有するオリゴマーを示す。
【００３２】
オリゴマーの幾何学的形状または全体としての構造に関する「フォーク状」とは、分岐点から延在する２つ以上の官能基（一般に１つ以上の原子を介して）を有するオリゴマーを示す。
【００３３】
「分岐点」とは、オリゴマーが直鎖構造から１つ以上の別のアームに分岐またはフォーク状に分かれる１つ以上の原子を含む二分岐点を示す。
【００３４】
「反応性」または「活性化された」という表現は、従来の有機合成条件下で容易にまたは実用的な速度で反応する官能基を示す。これは、反応しないか、反応に強力な触媒または非実用的な反応条件を必要とする基（すなわち「非反応性」または「不活性」基）とは対照的である。
【００３５】
反応混合物内の分子上に存在する官能基に関して「容易に反応しない」とは、その基が反応混合物中で所望の反応を生むのに効果的な条件下でほぼ原形を保つことを示す。
【００３６】
「保護基」は、特定の反応条件下で分子内の特定の化学的反応性官能基の反応を防止または阻止する部分である。保護基は、保護対象となる化学的反応性基のタイプ、ならびに使用される反応条件、分子内における別の反応基または保護基の存在次第で異なることがある。保護対象となることが可能な官能基には、一例として、カルボン酸基、アミノ基、ヒドロキシル基、チオール基、カルボニル基などがあげられる。代表的な保護基としては、カルボン酸に対する場合はエステル（ｐ−メトキシベンジルエステルなど）、アミド、ヒドラジド；アミノ基に対する場合はカルバメート（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルなど）やアミド；ヒドロキシル基に対する場合はエーテルやエステル；チオール基に対する場合はチオエーテルやチオエステル；カルボニル基に対する場合はアセタールやケタールなどがあげられる。このような保護基は当業者間で周知であり、たとえば、Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｔｈｉｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｗｉｌｅｙ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９９ならびにそこに引用されている参考文献に記載されている。
【００３７】
「保護された形態」の官能基とは、保護基を有する官能基を示す。本明細書で使用する場合、「官能基」という用語またはその同義語は、その保護された形態を包含する。
【００３８】
「生理学的に切断可能な」結合または「加水分解可能な」結合または「分解可能な」結合は、生理学的条件下で水と反応する（すなわち加水分解される）比較的弱い結合である。水中における結合の加水分解しやすさは、二つの中心原子を接続する連結の一般的なタイプだけではなく、これらの中心原子に結合する置換基にも左右されることがある。加水分解的に不安定または弱い適切な連結としては、カルボン酸エステル、リン酸エステル、無水物、アセタール、ケタール、アシルオキシアルキルエーテル、イミン、オルトエステル、ペプチド、オリゴヌクレオチド、チオエステル、および炭酸塩があげられるが、これに限定されるものではない。
【００３９】
「酵素的に分解可能な連結」は、１つ以上の酵素によって分解され得る連結を意味する。
【００４０】
「安定した」連結または結合とは、水中で実質的に安定している、すなわち生理学的条件下で長期間にわたって適当な程度まで加水分解されない化学結合を示す。加水分解的に安定した連結の例として、炭素−炭素結合（脂肪族鎖におけるものなど）、エーテル、アミド、ウレタン、アミンなどがあげられるが、これに限定されるものではない。通常、安定した連結は、生理学的条件下で１日あたりの加水分解率が約１〜２％未満のものである。代表的な化学結合の加水分解率は、たいていの標準的な化学テキストに掲載されている。
【００４１】
「実質的に」または「本質的に」とは、ほぼ総量または全て、たとえばある所与の分量の９５％以上、より好ましくは９７％以上、またより好ましくは９８％以上、さらにより好ましくは９９％以上、なおもまたより好ましくは９９．９％以上を意味し、９９．９９％以上が最も好ましい。
【００４２】
「単分散」とは、組成物中の実質的にすべてのオリゴマーが、クロマトグラフィまたは質量分析で測定した場合に分子量が明確な単一値であり、なおかつモノマー数も明確なオリゴマー組成物を示す。単分散オリゴマー組成物は、ある意味では純粋すなわち、モノマー数が大きく分布するのではなく実質的に単一かつ限定的（整数として）である。単分散オリゴマー組成物は、ＭＷ／Ｍｎ値が１．０００５以下、一層好ましくはＭＷ／Ｍｎ値が１．００００である。ひいては、単分散コンジュゲートを含む組成物とは、すなわち、組成物中の全てのコンジュゲートの実質的に全てのオリゴマーが、大きい分布でなく、単一の確定可能な（整数としての）数のモノマーを有することを意味し、オリゴマーが治療的部分に結合していないならば、１．０００５のＭＷ／Ｍｎ値、より好ましくは１．００００のＭＷ／Ｍｎ値を有し得る。しかしながら、単分散コンジュゲートを含む組成物は、溶媒、試薬、賦形剤などの１つ以上の非コンジュゲート物質を含んでもよい。
【００４３】
オリゴマー組成物に関する「二峰性」は、組成物中の実質的にすべてのオリゴマーについて、モノマー数が大きく分布するのではなく限定的で異なる２種類の数（整数として）のうちの１つであり、分子量の分布を分率と分子量でプロットした場合に、２つの識別可能な別のピークとして現れるオリゴマー組成物を示す。好ましくは、本明細書に記載される二峰性オリゴマー組成物について、各ピークはその平均に関して略対称であり、ただし２つのピークのサイズは異なり得る。理想的には、二峰性分布における各ピークの多分散度指数Ｍｗ／Ｍｎは、１．０１以下、より好ましくは１．００１以下、およびさらにより好ましくは１．０００５以下であり、および最も好ましくは１．００００のＭＷ／Ｍｎ値である。ひいては、二峰性コンジュゲートを含む組成物とは、すなわち、組成物中の全てのコンジュゲートの実質的に全てのオリゴマーが、大きい分布でなく、２つの確定可能な異なる（整数としての）数のモノマーのうちの一方を有することを意味し、オリゴマーが治療的部分に結合していないならば、１．０１以下、より好ましくは１．００１以下およびさらにより好ましくは１．０００５以下のＭＷ／Ｍｎ値、および最も好ましくは１．００００のＭＷ／Ｍｎ値を有し得る。しかしながら、二峰性コンジュゲートを含む組成物は、溶媒、試薬、賦形剤などの１つ以上の非コンジュゲート物質を含んでもよい。
【００４４】
「ベンズアミド系化合物」は、本明細書では、約１０００ダルトン未満の分子量を有し、かつある程度の薬理学的活性（たとえば胃運動性）を有する有機、無機、または有機金属化合物を指して広義に使用される。当業者に公知のアッセイを使用して、所与のベンズアミド系化合物（ならびに本明細書に提供されるオリゴマー含有化合物）が薬理学的活性（たとえば胃運動性）を有するかどうかを決定することができる。
【００４５】
「生体膜」は、少なくともいくつかの外来物質あるいは、そうでなければ望ましくない材料に対する関門として機能する、細胞または組織で構成される膜である。本明細書で使用する場合、「生体膜」は、たとえば、血液脳関門（ＢＢＢ）、血液脳脊髄液関門、血液胎盤関門、血液乳関門、血液精巣関門、ならびに膣粘膜や尿道粘膜、肛門粘膜、頬粘膜、舌下粘膜、および直腸粘膜を含む粘膜関門をはじめとする生理学的保護関門に関連した膜を含む。文脈からそうでないことが明らかな場合を除き、「生体膜」という用語は、中部消化管（胃および小腸など）に関連した膜を含まない。
【００４６】
「生体膜通過率」は、化合物が血液脳関門（「ＢＢＢ」）などの生体膜を通過する機能の尺度となる。生体膜での分子の輸送を評価するには、多岐にわたる方法を用いることができる。所与の生体関門（たとえば、血液脳関門、血液脊髄液関門、血液胎盤関門、血液乳汁関門、腸管関門など）に関連する生体膜通過率を評価する方法は知られており、本明細書および／または関連文献に記載があり、および／または当業者が判断し得る。
【００４７】
「代謝低下」は、水溶性オリゴマーと結合していない小分子薬物（すなわち、小分子薬物それ自体）または参照標準物質の代謝速度と比較したときの、水溶性オリゴマー−小分子薬物コンジュゲートの、代謝の測定可能な低下、および／または代謝の速度の測定された低下を示す。特に「初回通過代謝速度の低下」の場合、小分子薬物（または参照標準物質）および対応するコンジュゲートが経口投与されることを除き、同じ「代謝速度低下」が求められる。経口投与薬物は胃腸管から門脈循環中に吸収され、肝臓を通過した後に体循環に達し得る。肝臓は薬物代謝または生体内変化の一次的な部位であるため、薬物は体循環に達する前に相当量が代謝され得る。初回通過代謝の程度、ひいてはその任意の低下は、数多くの異なる手法で計測することができる。たとえば、所定の時間間隔で動物血液試料を採取し、血漿または血清の代謝物レベルを液体クロマトグラフィー／質量分析法により分析してもよい。初回通過代謝および他の代謝過程に関連する「代謝速度低下」を計測する他の技法が公知であり、本明細書および／または関連文献に記載され、および／または当業者により決定され得る。好ましくは、本発明の化合物は、以下の値の少なくとも１つを満足する（水溶性非ペプチドオリゴマーを含まない化合物と比べた）代謝速度の低下を提供し得る：少なくとも約３０％；少なくとも約４０％；少なくとも約５０％；少なくとも約６０％；少なくとも約７０％；少なくとも約８０％；および少なくとも約９０％。「生物が経口利用可能な」化合物（小分子薬物またはそのコンジュゲートなど）は、好ましくは経口投与時に２５％超、好ましくは７０％超のバイオアベイラビリティを備えるものであり、ここで化合物のバイオアベイラビリティとは、投与された薬物のうち、代謝されていない形態で体循環に到達する割合である。
【００４８】
「アルキル」は、約１〜２０原子長さの範囲の炭化水素鎖を指す。かかる炭化水素鎖は、必須ではないが、好ましくは飽和であり、分枝鎖または直鎖であってよい。例示的なアルキル基には、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、２−メチルブチル、２−エチルプロピル、３−メチルペンチルなどが含まれる。本明細書で使用されるとき、「アルキル」には、３個以上の炭素原子が参照される場合のシクロアルキルが含まれる。「アルケニル」基は、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を含む２〜２０個の炭素原子のアルキルである。
【００４９】
用語「置換アルキル」または「置換Ｃｑ〜ｒアルキル」（式中、ｑおよびｒは、そのアルキル基に含まれる炭素原子の範囲を特定する整数である）は、１、２または３個のハロ（たとえば、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、トリフルオロメチル、ヒドロキシ、Ｃ１〜７アルキル（たとえば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ブチル、ｔ−ブチルなど）、Ｃ１〜７アルコキシ、Ｃ１〜７アシルオキシ、Ｃ３〜７複素環式、アミノ、フェノキシ、ニトロ、カルボキシ、アシル、シアノによって置換されている上記のアルキル基を指す。置換アルキル基は、同じまたは異なる置換基で１、２または３回置換され得る。
【００５０】
「低級アルキル」は、メチル、エチル、プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｉ−ブチル、ｔ−ブチルによって例示されるとおり、１〜６個の炭素原子を含むアルキル基を指し、直鎖または分枝鎖であってよい。「低級アルケニル」は、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を有する２〜６個の炭素原子の低級アルキル基を指す。
【００５１】
「非干渉置換基」は、分子に存在するとき、典型的には分子内に含まれる他の官能基との反応性を有しない基である。
【００５２】
「アルコキシ」は−Ｏ−Ｒ基を指し、式中、Ｒはアルキルまたは置換アルキルであり、好ましくはＣ１〜Ｃ２０アルキル（たとえば、メトキシ、エトキシ、プロピルオキシ等）、好ましくはＣ１〜Ｃ７である。「低級アルコキシ」は−Ｏ−Ｒであり、式中、ＲはＣ１〜Ｃ７アルキルである。
【００５３】
「薬学的に許容される賦形剤」または「薬学的に許容されるキャリア」とは、患者に対して毒物学的作用を有意に引き起こすことのない、本発明の組成物に含まれていてもよい成分を示す。
【００５４】
「アリール」という用語は、最大１４個の炭素原子を有する芳香族基を意味する。アリール基としては、フェニル、ナフチル、ビフェニル、フェナントレニル、ナフタレニルなどがあげられる。「置換フェニル」および「置換アリール」はそれぞれ、ハロ（たとえば、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、アルキル（Ｃ１〜６アルキルなど）、アルコキシ（Ｃ１〜６アルコキシなど）、ベンジルオキシ、カルボキシ、アリールなどから選択される１つ、２つ、３つ、４つまたは５つ（置換基１〜２個、１〜３個または１〜４個など）で置換されたフェニル基およびアリール基を示す。
【００５５】
「薬理学的有効量」、「生理学的有効量」、および「治療有効量」は、本明細書では、血流または標的組織において所望のレベルの化合物（またはその所望の代謝産物）を提供するために必要な、組成物中に存在する本発明の化合物の量を意味して同義的に使用される。正確な量は、数多くの要因、たとえば、詳細な活性薬剤、組成物の構成成分および物理的特性、意図する患者集団、患者の考慮事項に依存し得るとともに、当業者は、本明細書に提供される情報および関連文献で利用可能な情報に基づきそれを容易に判断し得る。
【００５６】
「二官能性」オリゴマーは、そこに含まれる（一般に末端にて）２つの官能基を有するオリゴマーである。官能基同士が同じである場合、オリゴマーはホモ二官能性であると言われる。官能基同士が異なる場合、オリゴマーはヘテロ二官能性（ｈｅｔｅｒｏｄｉｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ）であると言われる。
【００５７】
本明細書に記載の塩基性反応剤または酸性反応剤は、中性で帯電されたその対応の任意の塩形態を含む。
【００５８】
「患者」という用語は、本明細書に記載されているような本発明の化合物を投与することで予防可能または治療可能な症状があるか症状になりやすい生命体を示し、動物と人間（他の動物）の両方を含む。
【００５９】
「任意選択の」または「任意選択で」とは、その後ろで説明される状況が起こるかもしれないが必ずしもそうとはかぎらないことを意味するため、説明にはその状況が起こる場合と起こらない場合が含まれる。
【００６０】
上記に指摘したとおり、本発明は、（特に）安定したまたは分解可能な連結によって水溶性非ペプチドオリゴマーに共有結合したベンズアミド系化合物の残基を含む化合物に関する。
【００６１】
「ベンズアミド系化合物」の残基は、１つ以上の水溶性非ペプチドオリゴマーを（直接的に、あるいは間接的に）結合する働きをする１つ以上の結合の存在によって改変されたベンズアミド系化合物の構造を有する化合物である。例示的ベンズアミド系化合物部分は、式Ｉ：
【化８】
0006265998.tif 000015
［式中、
Ｒ１は、低級アルキル（たとえばエチル）であり、
Ｒ２は、低級アルキル（たとえばエチル）であり、
（ａ）は、１以上４以下の範囲の整数（たとえば２）であり、
Ｙは、Ｏ（酸素）またはＳのいずれかであり、
Ｒ３は、低級アルキル（たとえばメチル）であり、
Ｒ４は、水素、ハロ（たとえばクロロ、ブロモおよびヨード）、低級アルコキシ、アミノ、および低級アルキルアミノ（たとえば水素）からなる群から選択され、
Ｒ５は、水素、ハロ（たとえばクロロ、ブロモおよびヨード）、低級アルコキシ、アミノ、および低級アルキルアミノ（たとえばアミン）からなる群から選択され、かつ
Ｒ６は、水素、ハロ（たとえばクロロ、ブロモおよびヨード）、低級アルコキシ、アミノ、および低級アルキルアミノ（たとえばクロロ）からなる群から選択される］
およびその薬学的に許容される塩に包含される構造を有する。
【００６２】
本発明の１つ以上の実施形態では、化合物が提供され、この化合物は、安定したまたは分解可能な連結によって水溶性非ペプチドオリゴマーに共有結合したベンズアミド系化合物の残基を含み、ここでベンズアミド系化合物（水溶性非ペプチドオリゴマーが存在しない形態）は、メトクロプラミドおよびプロカインアミドからなる群から選択されるベンズアミド系化合物に対応する。
【００６３】
場合によっては、本発明の化合物の合成における出発物質または中間体として有用なベンズアミド系化合物は、商業的供給元から入手することができる。加えて、ベンズアミド系化合物は、化学合成によって入手することができる。ベンズアミド系化合物を調製する合成手法は、文献、およびたとえば米国特許第４，２５０，１１０号明細書に記載されている。これらの（および他の）ベンズアミド系化合物の各々は、本明細書に記載される技術および手法に従い水溶性非ペプチドオリゴマーに（直接、あるいは１つ以上の原子を介してのいずれかで）共有結合させることができる。
【００６４】
本発明の例示的化合物は、以下の構造：
【化９】
0006265998.tif 000016
を有する化合物
［式中、
Ｒ２は、低級アルキル（たとえばエチル）であり、
（ａ）は、１以上４以下の範囲の整数（たとえば２）であり、
Ｙは、Ｏ（酸素）またはＳのいずれかであり、
Ｒ３は、低級アルキル（たとえばメチル）であり、
Ｒ４は、水素、ハロ（たとえばクロロ、ブロモおよびヨード）、低級アルコキシ、アミノ、および低級アルキルアミノ（たとえば水素）からなる群から選択され、
Ｒ５は、水素、ハロ（たとえばクロロ、ブロモおよびヨード）、低級アルコキシ、アミノ、および低級アルキルアミノ（たとえばアミノ）からなる群から選択され、
Ｒ６は、水素、ハロ（たとえばクロロ、ブロモおよびヨード）、低級アルコキシ、アミノ、および低級アルキルアミノ（たとえばクロロ）からなる群から選択され、
Ｘは、スペーサー部分であり、かつ
ＰＯＬＹは、水溶性非ペプチドオリゴマーである］
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【００６５】
本発明のさらなる例示的化合物は、以下の構造：
【化１０】
0006265998.tif 000017
を有する化合物
［式中、
Ｒ１は、低級アルキル（たとえばエチル）であり、
Ｒ２は、低級アルキル（たとえばエチル）であり、
（ａ）は、１以上４以下の範囲の整数（たとえば２）であり、
Ｒ４は、水素、ハロ（たとえばクロロ、ブロモおよびヨード）、低級アルコキシ、アミノ、および低級アルキルアミノ（たとえば水素）からなる群から選択され、
Ｒ５は、水素、ハロ（たとえばクロロ、ブロモおよびヨード）、低級アルコキシ、アミノ、および低級アルキルアミノ（たとえばアミノ）からなる群から選択され、
Ｒ６は、水素、ハロ（たとえばクロロ、ブロモおよびヨード）、低級アルコキシ、アミノ、および低級アルキルアミノ（たとえばクロロ）からなる群から選択され、
Ｘは、スペーサー部分であり、かつ
ＰＯＬＹは、水溶性非ペプチドオリゴマーである］
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【００６６】
本発明のさらなる例示的化合物は、以下の構造：
【化１１】
0006265998.tif 000018
を有する化合物
［式中、
Ｒ１は、低級アルキル（たとえばエチル）であり、
Ｒ２は、低級アルキル（たとえばエチル）であり、
（ａ）は、１以上４以下の範囲の整数（たとえば２）であり、
Ｙは、Ｏ（酸素）またはＳのいずれかであり、
Ｒ３は、低級アルキル（たとえばメチル）であり、
Ｒ５は、水素、ハロ（たとえばクロロ、ブロモおよびヨード）、低級アルコキシ、アミノ、および低級アルキルアミノ（たとえばアミノ）からなる群から選択され、
Ｒ６は、水素、ハロ（たとえばクロロ、ブロモおよびヨード）、低級アルコキシ、アミノ、および低級アルキルアミノ（たとえばクロロ）からなる群から選択され、
Ｘは、スペーサー部分であり、かつ
ＰＯＬＹは、水溶性非ペプチドオリゴマーである］
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【００６７】
本発明のさらに別の例示的化合物は、以下の構造：
【化１２】
0006265998.tif 000019
を有する化合物
［式中、
Ｒ１は、低級アルキル（たとえばエチル）であり、
Ｒ２は、低級アルキル（たとえばエチル）であり、
（ａ）は、１以上４以下の範囲の整数（たとえば２）であり、
Ｙは、Ｏ（酸素）またはＳのいずれかであり、
Ｒ３は、低級アルキル（たとえばメチル）であり、
Ｒ４は、水素、ハロ（たとえばクロロ、ブロモおよびヨード）、低級アルコキシ、アミノ、および低級アルキルアミノ（たとえば水素）からなる群から選択され、
Ｒ６は、水素、ハロ（たとえばクロロ、ブロモおよびヨード）、低級アルコキシ、アミノ、および低級アルキルアミノ（たとえばクロロ）からなる群から選択され、
Ｘは、スペーサー部分であり、かつ
ＰＯＬＹは、水溶性非ペプチドオリゴマーである］
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【００６８】
本発明のさらに別の例示的化合物は、以下の構造：
【化１３】
0006265998.tif 000020
を有する化合物
［式中、
Ｒ１は、低級アルキル（たとえばエチル）であり、
Ｒ２は、低級アルキル（たとえばエチル）であり、
（ａ）は、１以上４以下の範囲の整数（たとえば２）であり、
Ｙは、Ｏ（酸素）またはＳのいずれかであり、
Ｒ３は、低級アルキル（たとえばメチル）であり、
Ｒ４は、水素、ハロ（たとえばクロロ、ブロモおよびヨード）、低級アルコキシ、アミノ、および低級アルキルアミノ（たとえば水素）からなる群から選択され、
Ｒ５は、水素、ハロ（たとえばクロロ、ブロモおよびヨード）、低級アルコキシ、アミノ、および低級アルキルアミノ（たとえばアミン）からなる群から選択され、
Ｘは、スペーサー部分であり、かつ
ＰＯＬＹは、水溶性非ペプチドオリゴマーである］
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【００６９】
本発明の例示的化合物には、たとえば、
【化１４】
0006265998.tif 000021
（式中、Ｘはスペーサー部分であり、かつＰＯＬＹは水溶性非ペプチドオリゴマーである）；
【化１５】
0006265998.tif 000022
（式中、ｎは１以上３０以下の整数である）；
【化１６】
0006265998.tif 000023
（式中、ｎは１以上３０以下の整数である）；
【化１７】
0006265998.tif 000024
（式中、ｎは１以上３０以下の整数である）；
【化１８】
0006265998.tif 000025
（式中、ｎは１以上３０以下の整数である）；
【化１９】
0006265998.tif 000026
（式中、Ｘはスペーサー部分であり、かつＰＯＬＹは水溶性非ペプチドオリゴマーである）；
【化２０】
0006265998.tif 000027
（式中、ｎは１以上３０以下の整数である）；
【化２１】
0006265998.tif 000028
（式中、Ｘはスペーサー部分であり、かつＰＯＬＹは水溶性非ペプチドオリゴマーである）；
【化２２】
0006265998.tif 000029
（式中、Ｘはスペーサー部分であり、かつＰＯＬＹは水溶性非ペプチドオリゴマーである）；
【化２３】
0006265998.tif 000030
（式中、ｎは１以上３０以下の整数である）；
【化２４】
0006265998.tif 000031
（式中、ｎは１以上３０以下の整数である）；
【化２５】
0006265998.tif 000032
（式中、ｎは１以上３０以下の整数である）；
【化２６】
0006265998.tif 000033
（式中、ｎは１以上３０以下の整数である）；
【化２７】
0006265998.tif 000034
（式中、Ｘはスペーサー部分であり、かつＰＯＬＹは水溶性非ペプチドオリゴマーである）；
からなる群から選択される化合物が含まれる。
【００７０】
個別的なオリゴマー（たとえば、比較的不純な組成物とは対照的に、単分散または二峰性のオリゴマー組成物のもの）を使用してオリゴマー含有化合物を形成することが好ましい。たとえば、本発明の化合物は、非経口、経口、経皮、口腔、経肺、または経鼻などの数多くの好適な投与経路のいずれかで投与するとき、血液脳関門を越える透過の低下を示す。経口送達が意図される場合、本発明の化合物は血液脳関門の通過の遅延を示し、通過が最小限に抑えられ、または事実上そこを通過しない一方、胃腸（ＧＩ）壁はなお通過して体循環に入り込むのが好ましい。さらに、本発明の化合物は、オリゴマーを一切含まない化合物の生物活性およびバイオアベイラビリティと比較して、一定の生物活性ならびにバイオアベイラビリティを維持する。
【００７１】
血液脳関門（「ＢＢＢ」）に関連して、この関門は、血液から脳への薬物の輸送を制限する。この関門は、緊密な接合部によって接合された固有の内皮細胞の連続層からなる。ＢＢＢの全表面積の９５％超を含む脳の毛細血管は、ほとんどの溶質および薬物が中枢神経系に入り込む際の主要な経路に相当する。
【００７２】
血液脳関門通過能の程度が容易には分からない化合物について、かかる能力は、本明細書に記載されるインサイチュラット脳灌流（「ＲＢＰ」）モデルなどの好適な動物モデルを使用して決定することができる。簡潔に言えば、ＲＢＰ技法は、頸動脈へのカニューレ挿入と、続く制御条件下での化合物溶液による灌流、その後の血管空間に残った化合物を除去する洗浄段階を含む（かかる分析は、たとえば、Ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｅｘｔｏｎ，ＰＡなどの医薬品開発業務受託機関により行われ得る）。ＲＢＰモデルの一例では、カニューレを左頸動脈に入れ、側枝を結紮する。分析物を含有する生理学的緩衝液（必須ではないが、典型的には５マイクロモル濃度レベル）を、シングルパス灌流実験で約１０ｍＬ／分の流量で灌流させる。３０秒後、灌流を停止し、化合物を含有しない緩衝液で脳血管の内容物をさらに３０秒間洗い流す。次に脳組織を摘出し、液体クロマトグラフィーによりタンデム質量分析検出法（ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ）を用いて化合物濃度を分析する。或いは、化合物の分子極性表面積（「ＰＳＡ」）（分子中の極性原子（通常は酸素、窒素および結合水素）の表面寄与合計として定義される）の計算値に基づき血液脳関門透過性を推定してもよい。ＰＳＡは、血液脳関門輸送などの化合物の輸送特性と相関があることが示されている。化合物のＰＳＡを決定する方法は、たとえば、Ｅｒｔｌ  ｅｔ  ａｌ．（２０００）Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４３，３７１４−３７１７；およびＫｅｌｄｅｒ，Ｊ．，ｅｔ  ａｌ．（１９９９），Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．１６，１５１４−１５１９に見ることができる。
【００７３】
血液脳関門に関連して、本発明の水溶性非ペプチドオリゴマー含有化合物は、水溶性非ペプチドオリゴマーと結合していない小分子薬物の通過率と比較したとき低下した（または実質的に消失した）血液脳関門通過率を示す。本明細書に記載される化合物の例示的な血液脳関門通過率の低下としては、水溶性非ペプチド（ｎｏｎ−ｐｅｐｔｉｃ）オリゴマーを含まない対応する化合物の血液脳関門通過率と比較したときの少なくとも約５％；少なくとも約１０％；少なくとも約２５％；少なくとも約３０％；少なくとも約４０％；少なくとも約５０％；少なくとも約６０％；少なくとも約７０％；少なくとも約８０％；または少なくとも約９０％の低下が挙げられる。本発明のコンジュゲートに好ましい血液脳関門通過率の低下は、少なくとも約２０％である。
【００７４】
所与の化合物（化合物が水溶性非ペプチドオリゴマーを含むか否かに関わらず）がベンズアミド系化合物として働くことができるかどうかを決定するためのアッセイは公知であり、および／または当業者が調製してもよく、以下にさらに記載される。
【００７５】
これらの（および他の）ベンズアミド系化合物部分の各々は、水溶性非ペプチドオリゴマーに（直接、あるいは１つ以上の原子を介して）共有結合することができる。
【００７６】
ベンズアミド系化合物（たとえば、水溶性非ペプチドオリゴマーとのコンジュゲート前の）の例示的な分子量には、約９５０ダルトン未満；約９００ダルトン未満；約８５０ダルトン未満；約８００ダルトン未満；約７５０ダルトン未満；約７００ダルトン未満；約６５０ダルトン未満；約６００ダルトン未満；約５５０ダルトン未満；約５００ダルトン未満；約４５０ダルトン未満；約４００ダルトン未満；約３５０ダルトン未満；および約３００ダルトン未満の分子量が含まれる。
【００７７】
本発明で使用されるベンズアミド系化合物は、キラルである場合、ラセミ混合物、または光学活性型、たとえば、単一の光学活性鏡像異性体、または任意の組み合わせまたは比率の鏡像異性体（たとえば、スケールミック（ｓｃａｌｅｍｉｃ）およびラセミ混合物）から得られてもよい。加えて、ベンズアミド系化合物は１つ以上の幾何異性体を有し得る。幾何異性体に関連して、組成物は単一の幾何異性体または２つ以上の幾何異性体の混合物を含み得る。本発明で使用されるベンズアミド系化合物はその通例の活性型であることができ、またはある程度の修飾を有してもよい。たとえば、ベンズアミド系化合物は、オリゴマーの共有結合前またはその後に、それに結合したターゲッティング剤、タグ、またはトランスポーターを有してもよい。あるいは、ベンズアミド系化合物は、リン脂質（たとえば、ジステアロイルホスファチジルエタノールアミンすなわち「ＤＳＰＥ」、ジパルミトイルホスファチジルエタノールアミンすなわち「ＤＰＰＥ」など）または小分子の脂肪酸など、それに結合した親油性部分を有してもよい。しかしながら、場合によっては、ベンズアミド系化合物が親油性部分との結合を含まないことが好ましい。
【００７８】
水溶性非ペプチドオリゴマーにカップリングするベンズアミド系化合物は、オリゴマーとの共有結合に適した遊離ヒドロキシル基、カルボキシル基、チオ基、アミノ基など（すなわち「ハンドル」）を有する。加えて、ベンズアミド系化合物は反応基の導入により修飾されてもよく、この導入は、好ましくは、オリゴマーと薬物との間に安定した共有結合を形成するのに適した官能基となるようにその既存の官能基の１つを変換することによる。
【００７９】
各オリゴマーは、エチレンオキシドまたはプロピレンオキシドなどのアルキレンオキシド；ビニルアルコール、１−プロペノールまたは２−プロペノールなどのオレフィンアルコール；ビニルピロリドン；ヒドロキシアルキルメタクリルアミドまたはヒドロキシアルキルメタクリレート（この場合、アルキルは好ましくはメチルである）；乳酸またはグリコール酸などのα−ヒドロキシ酸；ホスファゼン、オキサゾリン、アミノ酸、単糖などの炭化水素、マンニトールなどのアルジトール；Ｎ−アクリロイルモルホリンからなる群から選択される最大３種類のタイプのモノマーで構成される。好ましいモノマータイプとしては、アルキレンオキシド、オレフィンアルコール、ヒドロキシアルキルメタクリルアミドまたはメタクリレート、Ｎ−アクリロイルモルホリン、α−ヒドロキシ酸があげられる。好ましくは、各オリゴマーが独立して、この群から選択される２つのモノマータイプのコオリゴマーであるか、一層好ましくは、この群から選択される１つのモノマータイプのホモオリゴマーである。
【００８０】
コオリゴマーにおける２つのモノマータイプは、エチレンオキシドおよびプロピレンオキシドといった２つのアルキレンオキシドなどの同一のモノマータイプであってもよい。好ましくは、オリゴマーは、エチレンオキシドのホモオリゴマーである。通常は、必ずしもそうである必要はないが、小分子を共有結合的に結合していないオリゴマーの末端をキャップして、これを非反応性にする。あるいは、末端が反応性基を含むものであってもよい。末端が反応性基である場合、反応性基は、最終的なオリゴマーの形成条件下または小分子薬剤に対するオリゴマーの共有結合時に非反応性であるように選択されるか、必要に応じて保護される。一般的なひとつの末端官能基に、特にオリゴエチレンオキシドについてのヒドロキシルまたは−ＯＨがある。
【００８１】
水溶性非ペプチドオリゴマー（本明細書にて提供するさまざまな構造における「ＰＯＬＹ」など）は、多数の異なる幾何学的形状のうち、どのような形状をとるものであってもよい。たとえば、水溶性非ペプチドオリゴマーは、直鎖状、分枝状、またはフォーク状であってもよい。最も一般には、水溶性非ペプチドオリゴマーは直鎖または分岐鎖であり、たとえば、１つの分岐点を有する。本明細書の説明の多くはオリゴマーの例としてポリ（エチレンオキシド）に焦点を当てているが、本明細書にて提示する説明と構造は、上述した任意の水溶性非ペプチドオリゴマーを包含するよう容易に拡大適用可能である。
【００８２】
リンカー部分を除いた水溶性非ペプチドオリゴマーの分子量は、概して比較的低い。水溶性ポリマーの分子量の例示的な値としては、約１５００ダルトン未満；約１４５０ダルトン未満；約１４００ダルトン未満；約１３５０ダルトン未満；約１３００ダルトン未満；約１２５０ダルトン未満；約１２００ダルトン未満；約１１５０ダルトン未満；約１１００ダルトン未満；約１０５０ダルトン未満；約１０００ダルトン未満；約９５０ダルトン未満；約９００ダルトン未満；約８５０ダルトン未満；約８００ダルトン未満；約７５０ダルトン未満；約７００ダルトン未満；約６５０ダルトン未満；約６００ダルトン未満；約５５０ダルトン未満；約５００ダルトン未満；約４５０ダルトン未満；約４００ダルトン未満；約３５０ダルトン未満；約３００ダルトン未満；約２５０ダルトン未満；約２００ダルトン未満；および約１００ダルトン未満があげられる。
【００８３】
水溶性非ペプチドオリゴマー（リンカーを除く）の分子量の例示としての範囲は、約１００から約１４００ダルトン、約１００から約１２００ダルトン、約１００から約８００ダルトン、約１００から約５００ダルトン、約１００から約４００ダルトン、約２００から約５００ダルトン、約２００から約４００ダルトン、約７５から１０００ダルトン、約７５から約７５０ダルトンがあげられる。
【００８４】
好ましくは、水溶性非ペプチドオリゴマーのモノマー数は、以下の範囲すなわち、約１〜約３０（これらの値も含む）、約１〜約２５、約１〜約２０、約１〜約１５、約１〜約１２、約１〜約１０のうちの１つ以上に入る。特定の場合には、オリゴマー（および対応するコンジュゲート）で直列になっているモノマー数は、１、２、３、４、５、６、７または８のうちの１つである。別の実施形態では、オリゴマー（および対応するコンジュゲート）が、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９または２０のモノマーを含む。さらに他の実施形態では、オリゴマー（および対応するコンジュゲート）が、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９または３０のモノマーを直列に含む。従って、たとえば、水溶性非ペプチドポリマーがＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎ−を含む場合、「ｎ」は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９または３０であってもよい、かつ以下の範囲：約１〜約２５；約１〜約２０；約１〜約１５；約１〜約１２；約１〜約１０の１つ以上に含まれ得る整数である。
【００８５】
水溶性非ペプチドオリゴマーが１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０個のモノマーを有する場合、これらの値は、それぞれ約７５、１１９、１６３、２０７、２５１、２９５、３３９、３８３、４２７、および４７１ダルトンの分子量を有するメトキシエンドキャップ型オリゴ（エチレンオキシド）に対応する。オリゴマーが１１、１２、１３、１４、または１５個のモノマーを有する場合、これらの値は、それぞれ約５１５、５５９、６０３、６４７、および６９１ダルトンに対応する分子量を有するメトキシエンドキャップ型オリゴ（エチレンオキシド）に対応する。
【００８６】
水溶性非ペプチドオリゴマーをベンズアミド系化合物に結合させる場合（１個以上のモノマーを段階的に付加してオリゴマーをベンズアミド系化合物に事実上「成長」させる場合とは対照的に）、活性形態の水溶性非ペプチドオリゴマーを含む組成物は単分散であると好ましい。しかしながら、二峰性組成物を用いる場合、この組成物は上記の任意の２つの数のモノマーを中心とした二峰性分布を持つことになる。たとえば、二峰性オリゴマーは、モノマーサブユニットについての以下の例示としての組み合わせのうちのいずれを有するものであってもよい。１−２、１−３、１−４、１−５、１−６、１−７、１−８、１−９、１−１０など；２−３、２−４、２−５、２−６、２−７、２−８、２−９、２−１０など；３−４、３−５、３−６、３−７、３−８、３−９、３−１０など；４−５、４−６、４−７、４−８、４−９、４−１０など；５−６、５−７、５−８、５−９、５−１０など；６−７、６−８、６−９、６−１０など；７−８、７−９、７−１０など；８−９、８−１０など。
【００８７】
場合によっては、水溶性非ペプチドオリゴマーの活性化された形態を含む組成物が、上述したような一定範囲のモノマー単位を有する三峰性または四峰性のものである。オリゴマーの十分に定義された（すなわち、二峰性、三峰性、四峰性など）混合物を含むオリゴマー組成物を、オリゴマーの所望のプロファイルを得るように精製された単分散オリゴマーを混合して（モノマー数だけが異なる２種類のオリゴマーの混合物は二峰性であり、モノマー数だけが異なる３種類のオリゴマーの混合物は三峰性であり、モノマー数だけが異なる４種類のオリゴマーの混合物は四峰性である）調製することが可能であり、あるいは、所望かつ定義された分子量の範囲にあるオリゴマーの混合物を得るように「中心カット（ｃｅｎｔｅｒ  ｃｕｔ）」を回収する多分散オリゴマーのカラムクロマトグラフィで得ることが可能である。
【００８８】
単分子または単分散の組成物から水溶性非ペプチドオリゴマーを得るのが好ましい。すなわち、組成物中のオリゴマーは、分子量の分布ではなく同一の離散分子量値を有するのが好ましい。単分散オリゴマーの中には、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈから入手可能なものなど商業ソースから購入可能なものもあるし、あるいは、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈなどの市販の開始材料から直接調製することも可能である。水溶性非ペプチドオリゴマーは、Ｃｈｅｎ  Ｙ．，Ｂａｋｅｒ，Ｇ．Ｌ．，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，６８７０〜６８７３（１９９９）、国際公開第０２／０９８９４９号パンフレット、米国特許出願公開第２００５／０１３６０３１号明細書に記載されているようにして調製可能である。
【００８９】
スペーサー部分（水溶性非ペプチドポリマーによるベンズアミド系化合物への結合に介する連結）は、単結合、単一の原子、たとえば酸素原子または硫黄原子、２個の原子、または多数の原子であってもよい。スペーサー部分は、必須ではないが、典型的には本質的に直鎖状である。スペーサー部分「Ｘ」は、好ましくは加水分解に安定であり、また好ましくは酵素にも安定である。好ましくは、スペーサー部分「Ｘ」は、約１２原子未満、好ましくは約１０原子未満、さらにより好ましくは約８原子未満およびさらにより好ましくは約５原子未満の鎖長を有し得るものであり、ここで長さは、単鎖中の原子の数を意味する（置換基は数えない）。たとえば、このＲオリゴマー−ＮＨ−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＨ−Ｒ’薬物のような尿素連結は、３原子鎖長を有する（−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−）と見なされる。選択された実施形態では、連結はさらなるスペーサー基を含まない。
【００９０】
場合によっては、スペーサー部分（たとえば、本明細書に提供される様々な構造における「Ｘ」）は、エーテル、アミド、ウレタン、アミン、チオエーテル、尿素、または炭素−炭素結合を含む。以下で考察するもの、および例に示すものなどの官能基は、典型的には連結を形成するために使用される。スペーサー部分はまた、それほど好ましいわけではないが、以下に詳述するとおり他の原子も含み得る（またはそれに隣接するか、もしくはそれが隣りに並び得る）。
【００９１】
より具体的には、選択された実施形態において、スペーサー部分（たとえば、本明細書に提供される様々な構造における「Ｘ」）は、以下のいずれかであり得る：「−」（すなわち、ベンズアミド系化合物と水溶性非ペプチドオリゴマーとの間の、安定したまたは分解可能であってよい共有結合）、−Ｏ−、−ＮＨ−、−Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＣＨ２−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−ＣＨ２−、−ＯＣ（Ｏ）−ＣＨ２−、Ｃ（Ｏ）−ＮＨ、ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ、Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ、−Ｃ（Ｓ）−、−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、二価シクロアルキル基、−Ｎ（Ｒ６）−（Ｒ６はＨであるか、またはアルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリールおよび置換アリールからなる群から選択される有機ラジカルである）。さらなるスペーサー部分としては、１個以上５個以下の炭素原子を含むアシルアミノ、アシル、アリールオキシ、アルキレン架橋、約２個以上４個以下の炭素原子を有するアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、ピペリジノ、ピロリジノ、Ｎ−（低級アルキル）−２−ピペリジル、モルホリノ、１−ピペリジニル、４−（低級アルキル）−１−ピペリジニル、４−（ヒドロキシル−低級アルキル）−１−ピペリジニル、４−（メトキシ−低級アルキル）−１−ピペリジニル、およびグアニジンを含む部分が挙げられる。場合によっては、オリゴマーとの結合を促進するため薬物化合物の一部分または官能基が修飾され、または完全に取り除かれてもよい。場合によっては、Ｘはアミド、すなわち−ＣＯＮＲ−および−ＲＮＣＯ−でないことが好ましい。
【００９２】
しかしながら、本発明の目的で、原子の群はこれがオリゴマーセグメントにすぐ隣接している場合は連結とはみなされず、この原子の群は、オリゴマー鎖を単に伸ばしただけの群であるという点でオリゴマーのモノマーと同一である。
【００９３】
水溶性非ペプチドオリゴマーと小分子との間のスペーサー部分は一般に、オリゴマー（またはオリゴマーをベンズアミド系化合物に「成長させる」ことが望ましい場合は新生オリゴマー）の末端にある官能基とベンズアミド系化合物内の対応する官能基との反応によって形成される。以下、例示的な反応を簡単に説明する。たとえば、オリゴマーのアミノ基を小分子のカルボン酸または活性化されたカルボン酸誘導体と反応させるかその逆によって、アミド結合を生成することができる。あるいは、オリゴマーのアミンと薬剤の活性化された炭酸塩（炭酸スクシンイミジルまたは炭酸ベンゾトリアゾリルなど）との反応またはその逆では、カルバミン酸塩の結合が形成される。オリゴマーのアミンと薬剤のイソシアネート（Ｒ−Ｎ＝Ｃ＝Ｏ）との反応またはその逆では、尿素結合（Ｒ−ＮＨ−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＨ−Ｒ’）が形成される。さらに、オリゴマーのアルコール（アルコキシド）基とハロゲン化アルキルまたは薬剤内のハロゲン化物との反応またはその逆では、エーテル結合（ｌｉｎｋａｇｅ）が形成される。さらに別のカップリング法においては、アルデヒド官能基（ｆｕｎｃｔｉｏｎ）を持つ小分子を還元的アミノ化によってオリゴマーのアミノ基とカップリングし、オリゴマーと小分子の間に第二級アミンの連結を形成する。
【００９４】
特に好ましい水溶性非ペプチドオリゴマーは、アルデヒド官能基を有するオリゴマーである。この点について、オリゴマーは以下の構造を有することになる。ＣＨ３Ｏ−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｎ−（ＣＨ２）ｐ−Ｃ（Ｏ）Ｈ［この場合、（ｎ）は１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０のうちの１つであり、（ｐ）は１、２、３、４、５、６、７のうちの１つである］を有する。好ましい（ｎ）の値としては３、５、７があげられ、好ましい（ｐ）の値としては２、３、４があげられる。
【００９５】
一般に、官能基を持たない水溶性非ペプチドオリゴマーの末端が、非反応性になるようにキャップされてもよい。オリゴマーがコンジュゲートの形成用以外で末端にさらに官能基を含む場合、その基はスペーサー部分（たとえば「Ｘ」）の形成条件下で非反応性であるように選択されるか、スペーサー部分（たとえば「Ｘ」）の形成時には保護される。
【００９６】
上述したように、水溶性非ペプチドオリゴマーは、コンジュゲーションの前に少なくとも１つの官能基を含む。官能基は、小分子に含まれるまたは小分子に導入される反応性基に応じて、小分子との共有結合のための求電子基または求核基を含む。オリゴマーまたは小分子のいずれかに存在し得る求核基の例としては、ヒドロキシル、アミン、ヒドラジン（−ＮＨＮＨ２）、ヒドラジド（−Ｃ（Ｏ）ＮＨＮＨ２）、チオールがあげられる。好ましい求核剤には、アミン、ヒドラジン、ヒドラジド、チオールがあり、特にアミンがある。オリゴマーに対して共有結合される小分子薬剤のほとんどは、遊離のヒドロキシル、アミノ、チオ、アルデヒド、ケトンまたはカルボキシル基を有する。
【００９７】
オリゴマーまたは小分子のいずれかに存在し得る求電子官能基の例としては、カルボン酸、カルボン酸エステル、特にイミドエステル、オルトエステル、カーボネート、イソシアネート、イソチオシアネート、アルデヒド、ケトン、チオン、アルケニル、アクリレート、メタクリレート、アクリルアミド、スルホン、マレイミド、ジスルフィド、ヨード、エポキシ、スルホネート、チオスルホネート、シラン、アルコキシシラン、およびハロシランがあげられる。これらの群のさらに具体的な例として、スクシンイミジルエステルまたは炭酸塩、イミダゾイルエステルまたは炭酸塩、ベンゾトリアゾールエステルまたは炭酸塩、ビニルスルホン、クロロエチルスルホン、ビニルピリジン、ピリジルジスルフィド、ヨードアセトアミド、グリオキサール、ジオン、メシレート、トシレート、およびトレシレート（２，２，２−トリフルオロエタンスルホネート）があげられる。
【００９８】
また、チオン、チオン水和物、チオケタールなどのこれらの群のうちのいくつかの硫黄類似体、２−チアゾリジンチオンなど、ならびに上記の部分のいずれかの水和物または保護化誘導体（アルデヒド水和物、ヘミアセタール、アセタール、ケトン水和物、ヘミケタール、ケタール、チオケタール、チオアセタールなど）も含まれる。
【００９９】
カルボン酸の「活性化された誘導体」とは、誘導体化していないカルボン酸よりも通常はかなり容易に求核剤と反応するカルボン酸誘導体を示す。活性化されたカルボン酸は、たとえば、酸ハロゲン化物（酸クロリドなど）、無水物、炭酸塩、エステルを含む。このようなエステルとしては、一般形−（ＣＯ）Ｏ−Ｎ［（ＣＯ）−］２のイミドエステル；たとえば、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジル（ＮＨＳ）エステルまたはＮ−ヒドロキシフタルイミジルエステルがあげられる。同様に好ましいものとしては、イミダゾリルエステルおよびベンゾトリアゾールエステルがあげられる。特に好ましいものとしては、共有の米国特許第５，６７２，６６２号明細書に記載されるとおり、プロピオン酸またはブタン酸エステルがあげられる。これらは−（ＣＨ２）２〜３Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−Ｑの形の群を含み、ここでＱは好ましくは、Ｎ−スクシンイミド、Ｎ−スルホスクシンイミド、Ｎ−フタルイミド、Ｎ−グルタルイミド、Ｎ−テトラヒドロフタルイミド、Ｎ−ノルボルネン−２，３−ジカルボキシイミド、ベンゾトリアゾール、７−アザベンゾトリアゾール、およびイミダゾールから選択される。
【０１００】
他の好ましい求電子基としては、炭酸スクシンイミジル、マレイミド、炭酸ベンゾトリアゾール、グリシジルエーテル、炭酸イミダゾイル、炭酸ｐ−ニトロフェニル、アクリレート、トレシレート、アルデヒド、およびオルトピリジルジスルフィドがあげられる。
【０１０１】
これら求電子基を、ヒドロキシ、チオまたはアミノ基などの求核剤と反応させ、さまざまな結合タイプを形成する。本発明で好ましいのは、加水分解的に安定した連結の形成を好む反応である。たとえば、オルトエステル、スクシンイミジルエステル、イミダゾリルエステル、ベンゾトリアゾールエステルを含むカルボン酸やその活性化された誘導体は、上記のタイプの求核剤と反応して、それぞれエステル、チオエステル、アミドを形成し、このうちアミドが加水分解的に最も安定である。炭酸スクシンイミジル、炭酸イミダゾリル、炭酸ベンゾトリアゾールをはじめとする炭酸塩は、アミノ基と反応してカルバミン酸塩を形成する。イソシアネート（Ｒ−Ｎ＝Ｃ＝Ｏ）はヒドロキシル基またはアミノ基と反応して、それぞれ、カルバミン酸塩（ＲＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ’）または尿素（ＲＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨＲ’）連結を形成する。アルデヒド、ケトン、グリオキサール、ジオン、これらの水和物またはアルコールアダクト（すなわち、アルデヒド水和物、ヘミアセタール、アセタール、ケトン水和物、ヘミケタール、ケタール）を、好ましくはアミンと反応させた後、必要があれば得られるイミンを還元して、アミン連結を得る（還元アミン化）。
【０１０２】
求電子官能基のなかには、チオールなどの求核基が結合する求電子二重結合を含むか追加可能であって、たとえば、チオエーテル結合を形成する。これらの基として、マレイミド、ビニルスルホン、ビニルピリジン、アクリレート、メタクリレート、アクリルアミドがあげられる。他の基は、求核基で置き換え可能な脱離基を含み、これには、クロロエチルスルホン、ピリジルジスルフィド（切断可能なＳ−Ｓ結合を含む）、ヨードアセトアミド、メシレート、トシレート、チオスルホネート、トレシレートが含まれる。エポキシドは、求核剤によって開環することで反応し、たとえばエーテルまたはアミン結合を形成する。オリゴマーと小分子の上述したものなどの相補的反応性基を伴う反応は、本発明のコンジュゲートの調製に利用される。
【０１０３】
場合によっては、コンジュゲーションに適した官能基がベンズアミド系化合物にないこともある。この場合、コンジュゲーションに適した官能基を持つように、「もとの」ベンズアミド系化合物を修飾（または「官能化」）することが可能である。たとえば、ベンズアミド系化合物にアミド基はあるがアミン基が望ましい場合、Ｈｏｆｍａｎｎ転位、Ｃｕｒｔｉｕｓ転位（アミドがアジドに変換されたら）またはＬｏｓｓｅｎ転位（アミドがヒドロオキサミドに変換された後、トリレン−２−塩化スルホニル／塩基で処理したら）によって、このアミド基を修飾してアミン基にすることが可能である。
【０１０４】
カルボキシル基を持つベンズアミド系化合物のコンジュゲートを調製可能であるが、この場合、カルボキシル基を持つベンズアミド系化合物をアミノ末端オリゴマーエチレングリコールとカップリングして、ベンズアミド系化合物をオリゴマーに共有結合的に連結しているアミド基を有するコンジュゲートを提供する。これは、たとえば無水有機溶媒中にてカルボキシル基を持つベンズアミド系化合物とアミノ末端オリゴマーエチレングリコールとをカップリング試薬（ジシクロヘキシルカルボジイミドすなわち「ＤＣＣ」など）の存在下で組み合わせて実現可能である。
【０１０５】
さらに、ヒドロキシル基を持つベンズアミド系化合物のコンジュゲートを調製可能であるが、この場合、ヒドロキシル基を持つベンズアミド系化合物をオリゴマーエチレングリコールハロゲン化物とカップリングし、エーテル（−Ｏ−）コンジュゲートを得る。これは、たとえば水素化ナトリウムを用いてヒドロキシル基を脱プロトン化した後、ハロゲン化物末端オリゴマーエチレングリコールと反応させて実現可能である。
【０１０６】
さらに、ヒドロキシル基を持つベンズアミド系化合物のコンジュゲートを調製することが可能であり、この場合、ヒドロキシル基を持つベンズアミド系化合物を、ハロホルメート基［たとえば、ＣＨ３（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎＯＣ（Ｏ）−ハロ、式中ハロは、クロロ、ブロモ、ヨードである］を持つオリゴマーエチレングリコールにカップリングし、炭酸塩［−Ｏ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−］連結小分子コンジュゲートを得る。これは、たとえば、ベンズアミド系化合物と、ハロホルメート基を持つオリゴマーエチレングリコールとを求核触媒（４−ジメチルアミノピリジンすなわち「ＤＭＡＰ」など）の存在下で組み合わせ、対応する炭酸塩連結コンジュゲートを得ることにより実施可能である。
【０１０７】
別の例では、まずケトン基を還元して対応するヒドロキシル基を形成することで、ケトン基を持つベンズアミド系化合物のコンジュゲートを調製することが可能である。その後、ヒドロキシル基を持ったベンズアミド系化合物を本明細書に記載のようにしてカップリング可能である。
【０１０８】
さらに別の例では、アミン基を担持するベンズアミド系化合物のコンジュゲートを調製することが可能である。一つの手法では、アミン基担持ベンズアミド系化合物とアルデヒド担持オリゴマーとを好適な緩衝液に溶解し、その後、好適な還元剤（たとえばＮａＣＮＢＨ３）を添加する。その結果、還元後に、アミン基含有ベンズアミド系化合物のアミン基とアルデヒド担持オリゴマーのカルボニル炭素との間にアミン連結が形成される。
【０１０９】
アミン基を担持するベンズアミド系化合物のコンジュゲートを調製する別の手法では、カップリング試薬（たとえばＤＣＣ）の存在下でカルボン酸担持オリゴマーとアミン基担持ベンズアミド系化合物とが組み合わされる。その結果、アミン基含有ベンズアミド系化合物のアミン基とカルボン酸担持オリゴマーのカルボニルとの間にアミド連結が形成される。
【０１１０】
本明細書に開示される全範囲の化合物が記載のとおり挙動すると考えられるが、最適なサイズのオリゴマーを以下のとおり同定することができる。
【０１１１】
初めに、単分散または二峰性の水溶性オリゴマーから得られるオリゴマーをベンズアミド系化合物とコンジュゲートする。好ましくは、この薬物は、生物が経口利用可能なものであり、そのままでは無視できない血液脳関門通過率を示す。次に、適切なモデルを用いてコンジュゲートの血液脳関門通過能力を決定し、非修飾親薬物と比較する。結果が好ましい場合、すなわち、たとえば通過率が大幅に低下した場合、コンジュゲートの生物活性をさらに評価する。好ましくは、本発明に係る化合物は親薬物と比べて高度の生物活性、すなわち、親薬物の生物活性の約３０％超、さらにより好ましくは、親薬物の生物活性の約５０％超を維持する。
【０１１２】
上記のステップが、モノマータイプは同じであるがサブユニットの数が異なるオリゴマーを使用して１回以上繰り返され、結果が比較される。
【０１１３】
非コンジュゲート小分子薬物と比較して血液脳関門通過能力が低下したコンジュゲートのそれぞれについて、次にその経口バイオアベイラビリティを評価する。これらの結果に基づき、すなわち、小分子内における所与の位置または箇所での所与の小分子に対する種々のサイズのオリゴマーのコンジュゲートの比較に基づき、生体膜通過の低下と、経口バイオアベイラビリティと、生物活性との間のバランスが最適なコンジュゲートを提供するのに最も効果的なオリゴマーのサイズを決定することが可能である。小さいオリゴマーサイズによってかかるスクリーニングが実行可能となり、得られるコンジュゲートの特性を効果的に調整することが可能となる。オリゴマーサイズを小刻みに漸増変化させ、実験計画手法を利用することにより、生体膜通過率の低下と、生物活性と、経口バイオアベイラビリティとのバランスが好ましいコンジュゲートを効果的に同定することができる。ある場合には、本明細書に記載されるオリゴマーの結合が、薬物の経口バイオアベイラビリティを実際に増加させるのに有効である。
【０１１４】
例えば、当業者であれば常法による実験を用いて、まず分子量と官能基の異なる一連のオリゴマーを調製した後、コンジュゲートを患者に投与して定期的に血液および／または尿のサンプルを採取して必要なクリアランスのプロファイルを得ることで、経口生物学的利用率を改善するのに最適な分子サイズと連結を判断することができる。試験したコンジュゲートごとに一連のクリアランスのプロファイルが得られてしまえば、好適なコンジュゲートを特定することが可能である。
【０１１５】
動物モデル（齧歯類と犬）を使用して、経口薬剤輸送について研究することも可能である。また、ｉｎ  ｖｉｖｏ以外の方法として、齧歯類の反転腸管の組織切片やＣａｃｏ−２細胞の単層膜組織培養モデルがあげられる。これらのモデルは、薬剤の経口薬剤生物学的利用率を予測する上で有用である。
【０１１６】
ベンズアミド系化合物または本発明の化合物（たとえば、ベンズアミド系化合物と水溶性非ペプチドオリゴマーとのコンジュゲート）がベンズアミド系化合物治療薬としての活性を有するかどうかを決定するため、かかる化合物を試験することが可能である。たとえば、関連する受容体、トランスポーター、または他の目的の特異的分子標的に関するインビトロ機能アッセイを用いて目的の化合物の活性を試験することができる。たとえば、プソイドエフェドリン型の活性に関して、かかる活性は、培養下のノルエピネフリントランスポーター（ＮＥＴ）発現細胞からのノルエピネフリンの放出を計測して試験することができる。
【０１１７】
本発明の化合物は、それ自体として投与されても、または薬学的に許容される塩の形態で投与されてもよく、本明細書における本発明の化合物に対するいかなる言及も、薬学的に許容される塩を含むことが意図される。本明細書に記載されるとおりの化合物の塩は、使用される場合、薬理学的にも、また薬学的にも許容可能でなければならず、しかし薬学的に許容可能でない塩が遊離活性化合物またはその薬学的に許容される塩の調製に好都合に用いられてもよく、本発明の範囲から除外されるものではない。かかる薬理学的かつ薬学的に許容される塩は、文献に詳説される標準方法を用いて化合物を有機酸または無機酸と反応させることにより調製し得る。有用な塩の例としては、限定はされないが、以下の酸から調製されるものが挙げられる：塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、マレイン酸、酢酸、サリチル酸（ｓａｌｉｃｙｃｌｉｃ）、ｐ−トルエンスルホン酸、酒石酸、クエン酸、メタンスルホン酸、ギ酸、マロン酸、コハク酸、ナフタレン−２−スルホン酸およびベンゼンスルホン酸など。また、薬学的に許容される塩は、アルカリ金属塩またはアルカリ土類塩、たとえば、カルボン酸基のナトリウム塩、カリウム塩、またはカルシウム塩として調製されてもよい。
【０１１８】
また、本発明は、薬学的賦形剤との組み合わせで本明細書に記載の化合物を含む医薬品も含む。通常は、化合物自体が固体状（沈殿物など）であり、これを固体または液体状のいずれかの好適な薬学的賦形剤と組み合わせることが可能である。
【０１１９】
例示としての賦形剤には、限定することなく、炭水化物、無機塩、抗微生物剤、酸化防止剤、界面活性剤、緩衝液、酸、塩基、およびこれらの組み合わせからなる群から選択されるものを含む。
【０１２０】
糖、アルジトール、アルドン酸、エステル化糖などの誘導体化糖および／または糖ポリマーなどの炭化水素が賦形剤として含まれていてもよい。具体的な炭化水素賦形剤としては、たとえば、フルクトース、マルトース、ガラクトース、グルコース、Ｄ−マンノース、ソルボースなどの単糖類、ラクトース、スクロース、トレハロース、セロビオースなどの二糖類、ラフィノース、メレジトース、マルトデキストリン、デキストラン、スターチなどの多糖、マンニトール、マルチトール、ラクチトール、キシリトール、ソルビトール、ミオイノシトールなどのアルジトールがあげられる。
【０１２１】
賦形剤には、クエン酸、塩化ナトリウム、塩化カリウム、硫酸ナトリウム、硝酸カリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸水素ナトリウム、およびこれらの組み合わせなどの無機塩または緩衝液を含むことも可能である。
【０１２２】
調製物は、微生物の成長を防止または遅らせるための抗微生物剤を含むものであってもよい。本発明に適した抗微生物剤の非限定的な例として、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、ベンジルアルコール、塩化セチルピリジニウム、クロロブタノール、フェノール、フェニルエチルアルコール、硝酸フェニル水銀、チメロサール、およびこれらの組み合わせがあげられる。
【０１２３】
調製物には酸化防止剤も含有させることが可能である。酸化防止剤は、酸化を防止して調製物中のコンジュゲートまたは他の成分の劣化を防ぐために用いられる。本発明で用いられる好適な酸化防止剤としては、たとえば、パルミチン酸アスコルビル、ブチル化ヒドロキシアニソール、ブチル化ヒドロキシトルエン、次亜リン酸、モノチオグリセロール、没食子酸プロピル、重硫酸ナトリウム、スルホン酸ナトリウムホルムアルデヒド、メタ重亜硫酸ナトリウム、これらの組み合わせがあげられる。
【０１２４】
界面活性剤を賦形剤として含有してもよい。例示としての界面活性剤には、「Ｔｗｅｅｎ  ２０」および「Ｔｗｅｅｎ  ８０」などのポリソルベート、Ｆ６８およびＦ８８などのプロロニック（いずれもＢＡＳＦ、Ｍｏｕｎｔ  Ｏｌｉｖｅ，ＮＪから入手可能）；ソルビタンエステル；レシチンといったリン脂質および他のホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、脂肪酸および脂肪酸エステルなどの脂質；コレステロールなどのステロイド；ＥＤＴＡ、亜鉛、他のこのような好適なカチオンなどのキレート化剤がある。
【０１２５】
薬学的に許容される酸または塩基も賦形剤として調製物中に含有させることができるものである。使用可能な酸の非限定的な例として、塩酸、酢酸、リン酸、クエン酸、リンゴ酸、乳酸、ギ酸、トリクロロ酢酸、硝酸、過塩素酸、リン酸、硫酸、フマル酸、およびこれらの組み合わせからなる群から選択される酸があげられる。好適な塩基の例として、限定することなく、水酸化ナトリウム、酢酸ナトリウム、水酸化アンモニウム、水酸化カリウム、酢酸アンモニウム、酢酸カリウム、リン酸ナトリウム、リン酸カリウム、クエン酸ナトリウム、ギ酸ナトリウム、硫酸ナトリウム、硫酸カリウム、フマル酸カリウム、およびこれらの組み合わせからなる群から選択される塩基があげられる。
【０１２６】
組成物中の本発明の化合物の量は多数の要因次第で変わるが、組成物を単位用量の容器で保存する場合は、治療有効用量であると最適であろう。治療有効用量は、化合物の量を増やしながら繰り返し投与して、どの量で臨床的に望ましい端点が得られるかを判断することで、実験的に定められるものである。
【０１２７】
組成物中の個々の賦形剤の量は、賦形剤の活性と、組成物の特定の必要性に応じて変わる。個々の賦形剤の最適量は、常法による実験すなわち、さまざまな量の賦形剤（低量から高量まで）を含有する組成物を調製し、安定性および他のパラメータを試験した上で、有意な副作用を伴わずに最適な効果が得られる範囲を求めることで決定される。
【０１２８】
しかしながら、一般に、賦形剤は組成物中に、約１重量％〜約９９重量％、好ましくは約５重量％〜９８重量％、より好ましくは約１５〜９５重量％の量の賦形剤で存在し、濃度は３０重量％未満が最も好ましい。
【０１２９】
上述した薬学的賦形剤ならびに他の賦形剤、薬学的組成物に関する一般的な教示内容は、“Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ＆  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ”，１９ｔｈ  ｅｄ．，Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｌｉａｍｓ，（１９９５）、“Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ’ｓ  Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ”，５２ｎｄ  ｅｄ．，Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｅｃｏｎｏｍｉｃｓ，Ｍｏｎｔｖａｌｅ，ＮＪ（１９９８）、Ｋｉｂｂｅ，Ａ．Ｈ．，Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ，３ｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ．Ｃ．，２０００に記載されている。
【０１３０】
薬学的組成物は、さまざまな形態をとり得るものであり、この点に関して本発明は何ら限定されるものではない。例示としての調製物は、最も好ましくは、錠剤、カプレット、カプセル、ジェルキャップ、トローチ、分散液、懸濁液、溶液、エリキシル剤、シロップ、薬用キャンディなどの経口投与に適した形態、経皮パッチ、スプレー、坐剤および粉末である。
【０１３１】
経口投与により活性のあるコンジュゲートには経口剤形が好ましく、錠剤、カプレット、カプセル、ジェルキャップ、懸濁液、溶液、エリキシル剤、シロップが含まれ、任意にカプセル化された複数の顆粒、ビーズ、粉末またはペレットも含まれうる。このような剤形は、医薬製剤の分野の人々には周知であり、関連のテキストに説明されている従来の方法で調製される。
【０１３２】
錠剤およびカプレットは、たとえば、標準的な錠剤処理方法と装置を用いて製造可能である。本明細書に記載のコンジュゲートを含む錠剤やカプレットの調製には、直接打錠や顆粒成型の技術が好ましい。コンジュゲートだけでなく、錠剤やカプレットは通常、薬学的に許容される不活性キャリア材料、たとえば、バインダー、潤滑剤、崩壊剤、フィラー、安定剤、界面活性剤、着色剤、流動化剤などを含む。バインダーは、錠剤に結合性をもたせ、錠剤が損なわれないようにするものである。好適なバインダー材料としては、スターチ（コーンスターチおよびα化したスターチを含む）、ゼラチン、糖（スクロース、グルコース、デキストロース、ラクトースを含む）、ポリエチレングリコール、ワックス、ならびにアカシアアルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、セルロースポリマー（ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース、微結晶セルロース、エチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロースなどを含む）、Ｖｅｅｇｕｍなどの天然ガムおよび合成ガムがあげられるが、これに限定されるものではない。潤滑剤は、粉末の流れをよくして、圧力を緩和した際の粒子キャッピング（すなわち粒子の破損）を防いで錠剤を製造しやすくするのに用いられる。有用な潤滑剤としては、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸があげられる。崩壊剤は、錠剤を崩壊しやすくするために用いられるものであり、通常は、スターチ、クレー、セルロース、アルギン、ガムまたは架橋ポリマーである。フィラーとしては、たとえば、二酸化ケイ素、二酸化チタン、アルミナ、タルク、カオリン、粉末セルロース、および微結晶性セルロースなどの材料、ならびにマンニトール、尿素、スクロース、ラクトース、デキストロース、塩化ナトリウム、およびソルビトールなどの可溶性材料があげられる。安定剤は、従来技術において周知のように、酸化反応など薬剤の分解反応を阻害あるいは遅延させるのに用いられる。
【０１３３】
カプセルもまた好ましい経口剤形であり、その場合、コンジュゲートを含有する組成物は、液体またはゲル（たとえば、ゲルキャップの場合）または固体（顆粒、ビーズ、粉末またはペレットなどの粒子状物質を含む）の形態でカプセル化され得る。好適なカプセルとしては、ハードカプセルおよびソフトカプセルがあげられ、通常はゼラチン、スターチまたはセルロース材料で作られる。２ピースのハードゼラチンカプセルについては、ゼラチンバンドなどで封止するのが好ましい。
【０１３４】
実質的に乾燥状態（粉末あるいはケークの形をとり得る凍結乾燥物または沈殿物として）の非経口製剤、ならびに液体である注射用に調製された製剤も含まれ、これは乾燥状態の非経口製剤を再構成する段階を必要とする。注射前に固体組成物を再構成するための好適な希釈剤の例として、注射用静菌水、５％デキストロース水溶液、リン酸緩衝生理食塩水、リンガー液、生理食塩水、滅菌水、脱イオン水、およびこれらの組み合わせがあげられる。
【０１３５】
場合により、非経口投与を想定した組成物は、非水溶液、懸濁液またはエマルション（通常は滅菌されている）の形をとり得る。非水性溶媒または溶媒剤の例として、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブ油やトウモロコシ油などの植物油、ゼラチン、およびオレイン酸エチルなどの注入可能な有機エステルがあげられる。
【０１３６】
本明細書に記載の非経口製剤はまた、保存剤、湿潤剤、乳化剤、分散助剤などのアジュバントを含むものであってもよい。製剤は、滅菌剤を加え、細菌を捕捉するフィルタを用いた濾過、放射線照射または加熱によって滅菌される。
【０１３７】
また、本発明の化合物は、従来の経皮パッチまたは他の経皮輸送系を用いて皮膚から投与可能であり、ここで、当該コンジュゲートは、皮膚に貼り付けられたときに薬剤送達装置として作用する積層構造内に含まれている。そのような構造において、化合物は、上側の裏打ち層の下にある層すなわち「リザーバ」に含まれる。積層構造は、単一のリザーバを含むものであってもよいし、複数のリザーバを含むものであってもよい。
【０１３８】
本発明の化合物を直腸投与用の坐剤として処方することも可能である。坐剤に関しては、カカオバター（カカオ脂）、ポリエチレングリコール、グリセリンゼラチン、脂肪酸、およびこれらの組み合わせなどの（室温では固体のままであるが、体温で軟化、溶融または溶解する賦形剤など）坐剤の基剤材料と化合物を混合する。坐剤は、たとえば、以下の段階を実施（必ずしもここにあげた順序でなくてもよい）して調製可能である。坐剤の基剤材料を溶融させて溶融物を形成し、化合物を（坐剤の基剤材料の溶融前または溶融後のいずれかで）取り入れ、溶融物を型に注ぎ、溶融物を冷却して（溶融物の入った型を室温環境に置くなど）坐剤を形成し、型から坐剤を取り出す。
【０１３９】
本発明の一部の実施形態では、本発明の化合物を含む組成物は好適な送達ビヒクルにさらに組み込まれ得る。かかる送達ビヒクルは、化合物の制御放出および／または連続放出を提供し得るとともに、標的部分としてもまた働き得る。送達ビヒクルの非限定的な例としては、補助剤、合成補助剤、マイクロカプセル、マイクロパーティクル、リポソーム、および酵母細胞壁粒子が挙げられる。酵母細胞壁は様々に処理されてタンパク質構成成分、グルカン、またはマンナン層が選択的に取り除かれてもよく、全グルカン粒子（ＷＧＰ）、酵母β−グルカンマンナン粒子（ＹＧＭＰ）、酵母グルカン粒子（ＹＧＰ）、ロドトルラ属（Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ）酵母細胞粒子（ＹＣＰ）と称される。Ｓ．セレビシエ（Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）およびロドトルラ属（Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ）の種などの酵母細胞が好ましい；しかしながら、任意選択の酵母細胞を使用し得る。これらの酵母細胞は、流体力学的容積の点で異なる特性を呈し、また、それがその内容物を放出し得る標的器官も異なる。これらの粒子を製造し、および特徴付ける方法は、米国特許第５，７４１，４９５号明細書、同第４，８１０，６４６号明細書、同第４，９９２，５４０号明細書、同第５，０２８，７０３号明細書および同第５，６０７，６７７号明細書、および米国特許出願公開第２００５／０２８１７８１号明細書および同第２００８／００４４４３８号明細書に記載されている。
【０１４０】
また、本発明は、本発明の化合物による治療に応答する症状のある患者に、本明細書に記載したような化合物を投与する方法を提供するものである。この方法は、通常は経口的に、治療有効量の化合物（好ましくは医薬品の一部として提供される）を投与することを含む。経肺、経鼻、頬側、直腸、舌下、経皮、非経口投与などの他の投与モードについても企図される。本明細書で使用する場合、「非経口」という用語は、皮下、静脈内、動脈内、腹腔内、心臓内、くも膜下腔内、および筋肉内注射、ならびに点滴注射を含む。
【０１４１】
非経口投与を用いる場合は、上述したものよりも若干大きな、分子量が約５００から３０Ｋダルトンの範囲にある（分子量が約５００、１０００、２０００、２５００、３０００、５０００、７５００、１００００、１５０００、２００００、２５０００、３００００またはそれをさらに上回るなど）オリゴマーを使う必要があるかもしれない。
【０１４２】
この投与方法を用いて、本発明の特定の化合物の投与により治療や予防が可能な症状であれば、どのような症状でも治療できる。特定の化合物でどの症状を有効に治療できるかは、当業者であれば自明であろう。例示的症状には胃不全麻痺が含まれる。実際の投与用量は、被検体の年齢や体重、全身状態、ならびに治療する症状の重篤度、医療行為従事者の判断、投与されるコンジュゲートによって決まる。治療有効量は当業者間で周知であるおよび／または関連の参考テキストおよび文献に説明されている。通常は、治療有効量は、約０．００１ｍｇから１０００ｍｇの範囲、好ましくは０．０１ｍｇ／日から７５０ｍｇ／日の用量、一層好ましくは０．１０ｍｇ／日から５００ｍｇ／日の用量である。
【０１４３】
本発明の特定の化合物（繰り返すが、好ましくは医薬品の一部として提供される）の単位薬用量も、臨床医の判断や患者側の需要などに応じて、多岐にわたる投与スケジュールで投与可能である。具体的な投与スケジュールは、当業者であれば分かるか、常法で実験的に決定可能である。例示としての投与スケジュールとしては、限定することなく、１日５回、１日４回、１日３回、１日２回、１日１回、週３回、週２回、週１回、月２回、月１回、およびこれらのいずれかの組み合わせがあげられる。臨床端点に達したら、組成物の投与を中断する。
【０１４４】
本明細書で引用される全ての論文、書籍、特許、特許公報および他の刊行物は、全体として参照により援用される。本明細書の教示と参照によって援用される技術分野の教示との間に矛盾が生じた場合、本明細書の教示および定義の意味が（特に本明細書に添付される特許請求の範囲で使用される用語に関して）優先するものとする。たとえば、本願と参照によって援用される刊行物とが同じ用語を別様に定義する場合、その定義が示される文書の教示の範囲内においてその用語の定義が維持されるものとする。
【実施例】
【０１４５】
以上、特定の好ましい実施形態および特定の実施形態に関して本発明を説明してきたが、上記の説明ならびに以下の実施例は、例示を意図したものであり、本発明の範囲を限定するものではないことを理解されたい。本発明の範囲内の他の態様、利点、改変は、本発明が属する分野の当業者には自明であろう。
【０１４６】
添付の実施例で取り上げる非ＰＥＧ化学試薬はすべて、特に明記しないかぎり、業務入手可能なものである。ＰＥＧマーの調製については、たとえば、米国特許出願公開第２００５／０１３６０３１号明細書に記載されている。
【０１４７】
１Ｈ  ＮＭＲ（核磁気共鳴）データはＮＭＲ分光計によって生成された。
【０１４８】
実施例１
「ｍＰＥＧｎ−Ｎ−メトクロプラミド」の合成−手法Ａ
「ｍＰＥＧｎ−Ｎ−メトクロプラミド」と称される化合物を、第１の手法を用いて調製した。この第１の手法を以下に概略的に示す。
【化２８】
0006265998.tif 000035
【０１４９】
トリチル−Ｎ−エチルエチレンジアミン（化合物２）の合成
塩化トリチル（約３．４５ｇ、約１２．５ｍｍｏｌ）をＮ−エチルエチレンジアミン（ｅｔｈｙｌｅｔｈｌｅｎｅｄｉａｍｉｎｅ）（約１．１ｇ、約１２．５ｍｍｏｌ）ＤＣＭ（塩化メチレン）溶液に撹拌しながらゆっくりと添加した。反応混合物を室温で一晩（約２３時間）撹拌した後、ＨＰＬＣにより反応の完了が示された。Ｂｉｏｔａｇｅシリカゲルクロマトグラフィーの実施後（ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ）、化合物２が白色固体として得られ（約３．５ｇ、約８５％単離収率）、生成物をプロトンＮＭＲによって確認した。
【０１５０】
ｍＰＥＧ６−Ｎ−トリチル−Ｎ−エチルエチレンジアミン（化合物３、ｎ＝６）の合成
ｍＰＥＧ６−ＯＭｓ（約０．６６ｇ、約１．７６ｍｍｏｌ、ここでＭｓはメシレートである）、ＤＩＰＥＡ（約０．６６ｇ、約４．８１ｍｍｏｌ）および化合物２（約０．５３ｇ、約１．６０ｍｍｏｌ）のアセトニトリル溶液を、マイクロ波下１００℃で約８時間加熱した。ＨＰＬＣにより反応の完了が示された。Ｂｉｏｔａｇｅシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ）の実施後、化合物３（ｎ＝６）が無色の液体として得られ（約０．５１ｇ、約５２％単離収率）、生成物をＬＣ−ＭＳによって確認した（計算値：６０８．０；実測値：６０８．０）。
【０１５１】
ｍＰＥＧ６−Ｎ−エチルエチレンジアミン（化合物４、ｎ＝６）の合成
ＴＦＡ（約１ｍＬ）をｍＰＥＧ６−Ｎ−トリチル−Ｎ−エチルエチレンジアミン（約０．５１ｇ、約０．８３ｍｍｏｌ）のＤＣＭ溶液に添加し、その溶液を室温で一晩（約１７時間）撹拌した。ＨＰＬＣにより脱保護の完了が示された。ＤＣＭ溶媒を除去した後、生成物混合物を０．１Ｎ  ＨＣｌに溶解し、生成物溶液をＥｔＯＡｃで２回洗浄した。溶液のｐＨをＮａ２ＣＯ３で約９に調整し、生成物をＤＣＭで２回抽出した。ワークアップ後、無色の液体が得られ（約０．２６ｇ、約８５％単離収率）、プロトンＮＭＲにより、それが純粋なｍＰＥＧ６−Ｎ−エチルエチレンジアミンであることが確認された。
【０１５２】
ｍＰＥＧ６−Ｎ−メトクロプラミド（化合物５、ｎ＝６）の合成
４−アミノ−５−クロロ−２−メトキシ安息香酸（約７０ｍｇ、約０．３５ｍｍｏｌ）およびメチルモルホリン（約１２７ｍｇ、約０．３５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液に、ＣＤＭＴ（約６１ｍｇ、約０．３５ｍｍｏｌ）を添加し、溶液を室温で約３０分間撹拌した。その後、ｍＰＥＧ６−Ｎ−エチルエチレンジアミン（約１２７ｍｇ、約０．３５ｍｍｏｌ）を添加した。約１８時間後、ＨＰＬＣにより反応の完了が示された。反応混合物にＤＣＭを添加し、そのＤＣＭ溶液を０．１Ｎ  ＮａＯＨ／ＮａＣｌ溶液で３回洗浄した。全ての溶媒を除去した後、Ｂｉｏｔａｇｅにおいて生成物混合物をシリカゲルカラムに加え、ＥｔＯＡｃ／メタノールで溶出した。無色の液体が得られた（約７０ｍｇ、約０．１３ｍｍｏｌ、約３７％単離収率）。ＨＰＬＣプロトンＮＭＲの両方により、それが所望のｍＰＥＧ６−Ｎ−メトクロプラミド（化合物５、ｎ＝６）であることが確認され、これはまた、ＬＣ−ＭＳによっても確認された（計算値：５４９．３；実測値：５４９．３）。
【０１５３】
「手法Ａ」を使用して、ｍＰＥＧ６−ＯＭｓを（たとえばそれぞれｍＰＥＧ１〜５および６〜１５−ＯＭｓで）置き換えることにより、ｍＰＥＧｎ−Ｎ−メトクロプラミド化合物（式中、ｎは６以外の数字（たとえば、１〜５および６〜１５）に等しい）を調製することができる。
【０１５４】
実施例２
「ｍＰＥＧ１−Ｎ−メトクロプラミド」の合成−手法Ｂ
ｍＰＥＧｎ−Ｎ−メトクロプラミドと称される化合物を、第２の手法を用いて調製した。この第２の手法を以下に概略的に示す。
【化２９】
0006265998.tif 000036
【０１５５】
エチルエチレンジアミン−４−アミノ−５−クロロ−２−メトキシ安息香酸アミド（化合物６）の合成
４−アミノ−５−クロロ（ｃｈｏｒｏ）−２−メトキシ安息香酸（約１．８ｇ、約８．９ｍｍｏｌ）およびメチルモルホリン（約２．７ｇ、約２６．８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液に、ＣＤＭＴ（約１．６ｇ、約８．９ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で約１時間撹拌した。その後、Ｎ−エチルエチレンジアミン（ｅｔｈｙｌｅｔｈｌｅｎｅｄｉａｍｉｎｅ）（約１．６ｇ、約１７．９ｍｍｏｌ）を続いて添加した。反応混合物を室温で一晩（約１９時間）撹拌し、ＨＰＬＣにより反応の完了が示された。反応混合物にＤＣＭを添加し、そのＤＣＭ溶液を０．１Ｎ  ＮａＯＨ／ＮａＣｌ水溶液で３回洗浄した。全ての溶媒を除去した後、Ｂｉｏｔａｇｅにおいて生成物混合物をシリカゲルカラムに加え、ＤＣＭ／メタノールで溶出した。白色固体が得られた（約１．５ｇ、約５．５ｍｍｏｌ、約６２％単離収率）。ＬＣ−ＭＳ：計算値：２７１．１；実測値：２７１．１。プロトンＮＭＲによってもまた、それが所望のエチルエチレンジアミン（ｅｔｈｙｌｅｔｈｌｅｎｅｄｉａｍｉｎｅ）−４−アミノ−５−クロロ−２−メトキシ安息香酸アミド（化合物６）であることが確認された。
【０１５６】
ｍＰＥＧ１−Ｎ−メトクロプラミド（化合物５、ｎ＝１）の合成
２−ブロモエチルメチルエーテル（約０．７７ｇ、約５．５ｍｍｏｌ）、化合物６（約０．５０ｇ、約１．８ｍｍｏｌ）および過剰のＫ２ＣＯ３のＴＨＦ溶液を、マイクロ波下１００℃で約３時間加熱した。ＨＰＬＣにより、生成物が約５０％収率で形成されたことが示された。溶媒の除去後、残渣を０．１Ｎ  ＨＣｌ溶液に溶解した。生成物溶液をＤＣＭで３回洗浄し、その後Ｋ２ＣＯ３を添加してｐＨを約９に調整し、ＤＣＭで３回抽出した。溶媒を蒸発させた後、残渣をＢｉｏｔａｇｅでＤＣＭ／ＴＥＡ／メタノール溶媒を使用してクロマトグラフィーにかけた。純粋なｍＰＥＧ１−Ｎ−メトクロプラミドが半固体として得られた（約１２２ｍｇ、約０．３７ｍｍｏｌ、約２０％単離収率）。生成物はＨＰＬＣおよびプロトンＮＭＲの両方によって確認された。
【０１５７】
実施例３
ｍＰＥＧ２−Ｎ−メトクロプラミドの合成
実施例２に記載される第２の手法に略対応する手法を用いて、「ｍＰＥＧ２−Ｎ−メトクロプラミド」（化合物５、ｎ＝２）を調製した。
【０１５８】
１−ブロモ−２−（２−メトキシエトキシ）エタン（約０．６７ｇ、約３．７ｍｍｏｌ）、化合物（化合物６）（約０．５０ｇ、約１．８ｍｍｏｌ）および過剰のＫ２ＣＯ３のＴＨＦ溶液を、マイクロ波下１００℃で約４時間加熱した。ＨＰＬＣにより、生成物が約８６％収率で形成されたことが示された。溶媒の除去後、残渣を０．２Ｎ  ＨＣｌ溶液に溶解した。生成物溶液をＤＣＭで３回洗浄し、その後Ｋ２ＣＯ３を添加してｐＨを約９に調整し、ＤＣＭで３回抽出した。溶媒を蒸発させた後、残渣をＢｉｏｔａｇｅでＤＣＭ／ＴＥＡ／メタノール溶媒を使用してクロマトグラフィーにかけた。純粋なｍＰＥＧ２−Ｎ−メトクロプラミドが半固体として得られた（約３７０ｍｇ、約０．９９ｍｍｏｌ、約５４％単離収率）。生成物はＨＰＬＣおよびプロトンＮＭＲの両方によって確認された。
【０１５９】
実施例４
ｍＰＥＧ３−Ｎ−メトクロプラミドの合成
実施例２に記載される第２の手法に略対応する手法を用いて、「ｍＰＥＧ３−Ｎ−メトクロプラミド」（化合物５、ｎ＝３）を調製した。
【０１６０】
ｍＰＥＧ３−ＯＭｓ（約０．５１ｇ、約２．１ｍｍｏｌ）、化合物６（約０．３８ｇ、約１．４ｍｍｏｌ）および過剰のＫ２ＣＯ３のアセトニトリル溶液を、マイクロ波下１００℃で約１０時間加熱した。ＨＰＬＣにより、生成物が約６０％収率で形成されたことが示された。溶媒の除去後、残渣を０．２Ｎ  ＨＣｌ溶液に溶解した。生成物溶液をＤＣＭで３回洗浄し、その後Ｋ２ＣＯ３を添加してｐＨを約９に調整し、ＤＣＭで３回抽出した。溶媒を蒸発させた後、残渣をＢｉｏｔａｇｅでＤＣＭ／ＴＥＡ／メタノール溶媒を使用してクロマトグラフィーにかけた。純粋なｍＰＥＧ３−Ｎ−メトクロプラミドが粘着性の液体として得られた（約２６０ｍｇ、約０．６２ｍｍｏｌ、約４５％単離収率）。生成物はＨＰＬＣおよびプロトンＮＭＲの両方によって確認された。
【０１６１】
実施例５
ｍＰＥＧ４−Ｎ−メトクロプラミドの合成
実施例２に記載される第２の手法に略対応する手法を用いて、「ｍＰＥＧ４−Ｎ−メトクロプラミド」（化合物５、ｎ＝４）を調製した。
【０１６２】
ｍＰＥＧ４−Ｂｒ（約１．０ｇ、約３．７ｍｍｏｌ）、化合物６）（約０．５０ｇ、約１．８ｍｍｏｌ）および過剰のＫ２ＣＯ３のＴＨＦ溶液を、マイクロ波下１００℃で約４時間加熱した。ＨＰＬＣにより、生成物が約７０％収率で形成されたことが示された。溶媒の除去後、残渣を０．２Ｎ  ＨＣｌ溶液に溶解した。生成物溶液をＤＣＭで３回洗浄し、その後Ｋ２ＣＯ３を添加してｐＨを約９に調整し、ＤＣＭで３回抽出した。溶媒を蒸発させた後、残渣をＢｉｏｔａｇｅでＤＣＭ／ＴＥＡ／メタノール溶媒によるクロマトグラフィーにかけた。純粋なｍＰＥＧ４−Ｎ−メトクロプラミドが液体として得られた（約２７７ｍｇ、約０．６０ｍｍｏｌ、約３３％単離収率）。生成物はＨＰＬＣおよびプロトンＮＭＲの両方によって確認された。
【０１６３】
実施例６
ｍＰＥＧ５−Ｎ−メトクロプラミドの合成
実施例２に記載される第２の手法に略対応する手法を用いて、「ｍＰＥＧ５−Ｎ−メトクロプラミド」（化合物５、ｎ＝５）を調製した。
【０１６４】
ｍＰＥＧ５−ＯＭｓ（約０．２２ｇ、約０．６６ｍｍｏｌ）、化合物（６）（約０．９０ｇ、約０．３３ｍｍｏｌ）および過剰のＫ２ＣＯ３のアセトニトリル溶液を、マイクロ波下１６０℃で約１．５時間加熱した。ＨＰＬＣにより、生成物が約６０％収率で形成されたことが示された。溶媒の除去後、残渣を０．１Ｎ  ＨＣｌ溶液に溶解した。生成物溶液をＤＣＭで３回洗浄し、その後Ｋ２ＣＯ３を添加してｐＨを約９に調整し、ＤＣＭで３回抽出した。溶媒を蒸発させた後、残渣をＢｉｏｔａｇｅでＤＣＭ／ＴＥＡ／メタノール溶媒によるクロマトグラフィーにかけた。純粋なｍＰＥＧ５−Ｎ−メトクロプラミドが粘着性の液体として得られた（約７３ｍｇ、約０．１４ｍｍｏｌ、約４４％単離収率）。生成物はＨＰＬＣおよびプロトンＮＭＲの両方によって確認された。
【０１６５】
実施例７
ｍＰＥＧ６−Ｎ−メトクロプラミドの合成
実施例２に記載される第２の手法に略対応する手法を用いて、「ｍＰＥＧ６−Ｎ−メトクロプラミド」（化合物５、ｎ＝６）を調製した。
【０１６６】
ｍＰＥＧ６−Ｂｒ（約０．６６ｇ、約１．８ｍｍｏｌ）、化合物６（約０．２５ｇ、約０．９２ｍｍｏｌ）および過剰のＫ２ＣＯ３のＴＨＦ溶液を、マイクロ波下１００℃で約４時間加熱した。ＨＰＬＣにより、生成物が約７０％収率で形成されたことが示された。溶媒の除去後、残渣を０．２Ｎ  ＨＣｌ溶液に溶解した。生成物溶液をＤＣＭで３回洗浄し、その後Ｋ２ＣＯ３を添加してｐＨを約９に調整し、ＤＣＭで３回抽出した。溶媒を蒸発させた後、残渣をＢｉｏｔａｇｅでＤＣＭ／ＴＥＡ／メタノール溶媒を使用してクロマトグラフィーにかけた。純粋なｍＰＥＧ６−Ｎ−メトクロプラミドが淡黄色の液体として得られた（約２４９ｍｇ、約０．４５ｍｍｏｌ、約４９％単離収率）。生成物はＨＰＬＣおよびプロトンＮＭＲの両方によって確認された。
【０１６７】
実施例８
ｍＰＥＧ７−Ｎ−メトクロプラミドの合成
実施例２に記載される第２の手法に略対応する手法を用いて、「ｍＰＥＧ７−Ｎ−メトクロプラミド」（化合物５、ｎ＝７）を調製した。
【０１６８】
ｍＰＥＧ７−Ｂｒ（約１．４ｇ、約３．４ｍｍｏｌ）、化合物６（約０．４６ｇ、約１．７ｍｍｏｌ）および過剰のＫ２ＣＯ３のＴＨＦ溶液を、マイクロ波下１００℃で約４時間加熱した。ＨＰＬＣにより反応の完了が示された。ＴＨＦ溶媒の除去後、残渣を０．２Ｎ  ＨＣｌ溶液に溶解した。生成物溶液をＤＣＭで３回洗浄し、その後Ｋ２ＣＯ３を添加してｐＨを約９に調整し、ＤＣＭで３回抽出した。溶媒を蒸発させた後、残渣をＢｉｏｔａｇｅでＤＣＭ／ＴＥＡ／メタノール溶媒によるクロマトグラフィーにかけた。純粋なｍＰＥＧ７−Ｎ−メトクロプラミドが粘着性の液体として得られた（約２６０ｍｇ、約０．４４ｍｍｏｌ、約２６％単離収率）。生成物はＨＰＬＣおよびプロトンＮＭＲの両方によって確認された。
【０１６９】
実施例９
ｍＰＥＧ８−Ｎ−メトクロプラミドの合成
実施例２に記載される第２の手法に略対応する手法を用いて、「ｍＰＥＧ８−Ｎ−メトクロプラミド」（化合物５、ｎ＝８）を調製した。
【０１７０】
ｍＰＥＧ８−Ｂｒ（約１．６ｇ、約３．５ｍｍｏｌ）、化合物６（約０．４８ｇ、約１．８ｍｍｏｌ）および過剰のＫ２ＣＯ３のＴＨＦ溶液を、マイクロ波下１００℃で約３時間加熱した。ＨＰＬＣにより、生成物が約７０％収率で形成されたことが示された。ＴＨＦ溶媒の除去後、残渣を０．２Ｎ  ＨＣｌ溶液に溶解した。生成物溶液をＤＣＭで３回洗浄し、その後Ｋ２ＣＯ３を添加してｐＨを約９に調整し、ＤＣＭで３回抽出した。溶媒を蒸発させた後、残渣をＢｉｏｔａｇｅでＤＣＭ／ＴＥＡ／メタノール溶媒によるクロマトグラフィーにかけた。純粋なｍＰＥＧ８−Ｎ−メトクロプラミドが半固体として得られた（約３５０ｍｇ、約０．５５ｍｍｏｌ、約３１％単離収率）。生成物はＨＰＬＣおよびプロトンＮＭＲの両方によって確認された。
【０１７１】
実施例１０
ｍＰＥＧ９−Ｎ−メトクロプラミドの合成
実施例２に記載される第２の手法に略対応する手法を用いて、「ｍＰＥＧ９−Ｎ−メトクロプラミド」（化合物５、ｎ＝９）を調製した。
【０１７２】
ｍＰＥＧ９−Ｂｒ（約１．４ｇ、約２．９ｍｍｏｌ）、化合物６（約０．４０ｇ、約１．５ｍｍｏｌ）および過剰のＫ２ＣＯ３のＴＨＦ溶液を、マイクロ波下１００℃で約５時間加熱した。ＨＰＬＣにより反応の完了が示された。ＴＨＦ溶媒の除去後、残渣を０．２Ｎ  ＨＣｌ溶液に溶解した。生成物溶液をＤＣＭで３回洗浄し、その後Ｋ２ＣＯ３を添加してｐＨを約９に調整し、ＤＣＭで３回抽出した。溶媒を蒸発させた後、残渣をＢｉｏｔａｇｅでＤＣＭ／ＴＥＡ／メタノール溶媒によるクロマトグラフィーにかけた。純粋なｍＰＥＧ９−Ｎ−メトクロプラミドが半固体として得られた（約１３２ｍｇ、約０．１９ｍｍｏｌ、約１３％単離収率）。生成物はＨＰＬＣおよびプロトンＮＭＲの両方によって確認された。
【０１７３】
実施例１１
競合結合アッセイ（ドパミン２Ｌ受容体）
［３Ｈ］メチルスピペロンとの競合結合を実施して、ドパミン２Ｌ（「Ｄ２Ｌ」）受容体に対するメトクロプラミドおよびコンジュゲートの結合親和性を決定した。メトクロプラミドおよびコンジュゲートの段階希釈物を１００％ＤＭＳＯ中に調製した。Ｄ２Ｌ受容体を安定的に発現するＨｅｋ−２９３細胞の膜標本を、終濃度が３ｕｇ／ウェルとなるようにアッセイ緩衝液（５０ｍＭ  トリス−ＨＣｌ、１０ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１２０ｍＭ  ＮａＣｌ）中に希釈した。［３Ｈ］メチルスピペロンを、終濃度が０．４ｎＭとなるようにアッセイ緩衝液中に希釈した。このアッセイを開始するため、１ｕＬの化合物を９６ウェルＶ底プレートに添加し、続いて５０ｕＬの希釈した膜標本を添加し、次に最後に希釈した［３Ｈ］メチルスピペロンを添加した。アッセイ混合物を室温で６０分間、振盪しながらインキュベートした。インキュベーション後、Ｆｉｌｔｅｒｍａｔｅ  Ｈａｒｖｅｓｔｅｒ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）を使用する５％ＰＥＩに浸漬したＧＦ／Ｂフィルタプレート上の結合した［３Ｈ］メチルスピペロンを、次に氷冷洗浄緩衝液（５０ｍＭ  トリス−ＨＣｌ、ｐＨ７．５）で４回洗浄した。フィルタプレートを２分間風乾し、次に５０ｕＬのＭｉｃｒｏＳｃｉｎｔ−２０を各ウェルに添加した。Ｔｏｐ  Ｃｏｕｎｔプレートリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）を使用して放射能カウントを定量化した。ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍの一部位結合競合非線形回帰曲線フィッティングを使用してデータを解析した。
【０１７４】
メトクロプラミド、およびｍＰＥＧ１〜９−Ｎ−メトクロプラミド（それぞれ実施例２〜１０に従い調製した）のＩＣ５０値を、一部位結合競合アッセイにおいて、ドパミン２Ｌ受容体を安定的に発現するＨＥＫ２９３細胞から調製した膜上の［３Ｈ］−メチルスピペロンによって決定した。決定されたＩＣ５０値は、メトクロプラミドが８．４２Ｅ−０８Ｍ、ｍＰＥＧ１−Ｎ−メトクロプラミドが２．３３Ｅ−０７Ｍ、ｍＰＥＧ２−Ｎ−メトクロプラミドが１．３６Ｅ−０６Ｍ、ｍＰＥＧ３−Ｎ−メトクロプラミドが３．４５Ｅ−０６Ｍ、ｍＰＥＧ４−Ｎ−メトクロプラミドが３．２６Ｅ−０６Ｍ、ｍＰＥＧ５−Ｎ−メトクロプラミドが８．２９Ｅ−０６Ｍ、ｍＰＥＧ６−Ｎ−メトクロプラミドが７．７５Ｅ−０６Ｍ、ｍＰＥＧ７−Ｎ−メトクロプラミドが１．１６Ｅ−０５Ｍ、ｍＰＥＧ８−Ｎ−メトクロプラミドが６．７９Ｅ−０６Ｍ、およびｍＰＥＧ９−Ｎ−メトクロプラミドが１．１１Ｅ−０５Ｍであった。親化合物と比べた変化倍数は、それぞれ２．８、１６．１、４１、３８．７、９８．５、９２．１、１３７．３、８０．７、および１３１．９であった。これらの結果は表１にも提供される。品質管理を行わなかった予備ランでは、決定されたＩＣ５０値は、メトクロプラミドが９．３２Ｅ−０７Ｍ（予想ＩＣ５０＝５４０ｎＭ）、ｍＰＥＧ３−Ｎ−メトクロプラミドが４．６５Ｅ−０６Ｍ、ｍＰＥＧ５−Ｎ−メトクロプラミドが１．５１Ｅ−０５Ｍ、およびｍＰＥＧ３−Ｎ−メトクロプラミドが１．３１Ｅ−０５Ｍであった。全てのランで、ハロペリドールを、このアッセイにおけるＩＣ５０値が６．１７Ｅ−０９の陽性対照として実行した（予想ＩＣ５０＝８．４、ｐＫｉ＝８．３）。
【０１７５】
【表１】
0006265998.tif 000037
【０１７６】
実施例１２
競合結合アッセイ（セロトニン４Ｂ受容体）
［３Ｈ］ＧＲ１１３８０８（セロトニン４受容体、すなわち５ＨＴ４受容体に高親和性を有する選択的アンタゴニスト、Ｇａｌｅ  ｅｔ  ａｌ．（１９９４）Ｂｒ  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  １１１（１）：３３２−８）との競合結合を実施して、５ＨＴ４Ｂ受容体に対するメトクロプラミドおよびコンジュゲートの結合親和性を決定した。メトクロプラミドおよびコンジュゲートの段階希釈物を１００％ＤＭＳＯ中に調製した。５ＨＴ４受容体を安定的に発現するＨｅｋ−２９３細胞の膜標本を、終濃度が２．５ｕｇ／ウェルとなるようにアッセイ緩衝液（５０ｍＭ  トリス−ＨＣｌ、５ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１ｍＭ  ＥＤＴＡ）中に希釈した。［３Ｈ］ＧＲ１１３８０８を、終濃度が２ｎＭとなるようにアッセイ緩衝液中に希釈した。このアッセイを開始するため、１ｕＬの化合物を９６ウェルＶ底プレートに添加し、続いて５０ｕＬの希釈した膜標本を添加し、次に最後に希釈した［３Ｈ］ＧＲ１１３８０８を添加した。アッセイ混合物を室温で６０分間、振盪しながらインキュベートした。インキュベーション後、Ｆｉｌｔｅｒｍａｔｅ  Ｈａｒｖｅｓｔｅｒ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）を使用する５％ＰＥＩに浸漬したＧＦ／Ｂフィルタプレート上の結合した［３Ｈ］ＧＲ１１３８０８を、次に氷冷洗浄緩衝液（５０ｍＭ  トリス−ＨＣｌ、ｐＨ７．５）で４回洗浄した。フィルタプレートを２分間風乾し、次に５０ｕＬのＭｉｃｒｏＳｃｉｎｔ−２０を各ウェルに添加した。Ｔｏｐ  Ｃｏｕｎｔプレートリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）を使用して放射能カウントを定量化した。ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍの一部位結合競合非線形回帰曲線フィッティングを使用してデータを解析した。
【０１７７】
メトクロプラミド、およびコンジュゲートｍＰＥＧ１〜９−Ｎ−メトクロプラミド（それぞれ実施例２〜１０に従い調製した）のＩＣ５０値を、［３Ｈ］−ＧＲ１１３８０８との一部位結合競合アッセイにおいて、５ＨＴ４Ｂ受容体（セロトニン４Ｂ受容体）を安定的に発現するＨＥＫ２９３細胞から調製した膜上で決定した。決定されたＩＣ５０値は、メトクロプラミドが１．５２Ｅ−０５Ｍ、ｍＰＥＧ１−Ｎ−メトクロプラミドが１．９７Ｅ−０５Ｍ、ｍＰＥＧ２−Ｎ−メトクロプラミドが２．９７Ｅ−０５Ｍ、ｍＰＥＧ３−Ｎ−メトクロプラミドが３．１８Ｅ−０５Ｍ、ｍＰＥＧ４−Ｎ−メトクロプラミドが３．０７Ｅ−０５Ｍ、ｍＰＥＧ５−Ｎ−メトクロプラミドが５．８１Ｅ−０５Ｍ、ｍＰＥＧ６−Ｎ−メトクロプラミドが５．７８Ｅ−０５Ｍ、ｍＰＥＧ７−Ｎ−メトクロプラミドが１．３３Ｅ−０４Ｍ、ｍＰＥＧ８−Ｎ−メトクロプラミドが１．８１Ｅ−０４Ｍ、およびｍＰＥＧ９−Ｎ−メトクロプラミドが２．０２Ｅ−０４Ｍであった。親化合物と比べた変化倍数は、それぞれ１．３、２．０、２．１、２．０、３．８、３．８、８．８、１１．９、および１３．３である。トロピセトロンを、アッセイにおけるＩＣ５０値が９．１０Ｅ−０９（ｐＫｉ＝８．５〜８．８）の陽性対照として実行した。１０ｕＭトロピセトロンで非特異的結合を決定した。上限であった最も高い濃度（５．０Ｅ−３Ｍ）であっても、コンジュゲートは１００％阻害に達しなかった。これらの結果は表２にも提供する。
【０１７８】
【表２】
0006265998.tif 000038
【０１７９】
実施例１３
競合結合アッセイ（セロトニン３Ａ受容体）
［３Ｈ］ＧＲ  ６５６３０との競合結合を実施して、５ＨＴ３受容体に対するメトクロプラミドおよびコンジュゲートの結合親和性を決定した。メトクロプラミドおよびコンジュゲートの段階希釈物を１００％ＤＭＳＯ中に調製した。５ＨＴ３受容体を安定的に発現するＨｅｋ−２９３細胞の膜標本を、終濃度が２．５ｕｇ／ウェルとなるようにアッセイ緩衝液（５０ｍＭ  トリス−ＨＣｌ、５ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１ｍＭ  ＥＤＴＡ）中に希釈した。［３Ｈ］ＧＲ  ６５６３０を、終濃度が２ｎＭとなるようにアッセイ緩衝液中に希釈した。このアッセイを開始するため、１ｕＬの化合物を９６ウェルＶ底プレートに添加し、続いて５０ｕＬの希釈した膜標本を添加し、次に最後に希釈した［３Ｈ］ＧＲ  ６５６３０を添加した。アッセイ混合物を室温で６０分間、振盪しながらインキュベートした。インキュベーション後、Ｆｉｌｔｅｒｍａｔｅ  Ｈａｒｖｅｓｔｅｒ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）を使用する５％ＰＥＩに浸漬したＧＦ／Ｂフィルタプレート上の結合した［３Ｈ］ＧＲ  ６５６３０を、次に氷冷洗浄緩衝液（５０ｍＭ  トリス−ＨＣｌ、ｐＨ７．５）で４回洗浄した。フィルタプレートを２分間風乾し、次に５０ｕＬのＭｉｃｒｏＳｃｉｎｔ−２０を各ウェルに添加した。Ｔｏｐ  Ｃｏｕｎｔプレートリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）を使用して放射能カウントを定量化した。ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍの一部位結合競合非線形回帰曲線フィッティングを使用してデータを解析した。
【０１８０】
メトクロプラミド、およびコンジュゲートｍＰＥＧ３、５および６−Ｎ−メトクロプラミドのＩＣ５０値（それぞれ実施例４、６および７に従い調製した）を、［３Ｈ］−ＧＲ６５６３０との一部位結合競合アッセイにおいて、５ＨＴ３Ａ受容体（セロトニン３Ａ受容体）を安定的に発現するＨＥＫ２９３細胞から調製した膜上で決定した。決定されたＩＣ５０値は、メトクロプラミドが６．８６Ｅ−０６Ｍ（ｐＫｉ＝５．９〜６．４）、ｍＰＥＧ３−Ｎ−メトクロプラミドが１．６０Ｅ−０４Ｍ、ｍＰＥＧ５−Ｎ−メトクロプラミドが１．０７Ｅ−０３Ｍ、およびｍＰＥＧ６−Ｎ−メトクロプラミドが８．８５Ｅ−０４Ｍであった。親化合物と比べた変化倍数は、それぞれ２３、１５６、および１２９であった。トロピセトロンを、アッセイにおけるＩＣ５０値が９．１０Ｅ−０９（ｐＫｉ＝８．５〜８．８）の陽性対照として実行した。１０ｕＭトロピセトロンで非特異的結合を決定した。上限であった最も高い濃度（５．０Ｅ−３Ｍ）であっても、コンジュゲートは１００％阻害に達しなかった。これらの結果は表３にも提供する。
【０１８１】
【表３】
0006265998.tif 000039
【０１８２】
実施例１４
アレスチン機能アッセイ（ドパミン）
ドパミン２Ｓ受容体を発現するＣＨＯ−Ｋ１細胞におけるβ−アレスチンと活性ドパミン２Ｓ（「Ｄ２Ｓ」）受容体との相互作用を、ドパミン２Ｓ（「Ｄ２Ｓ」）受容体に対するメトクロプラミドおよびコンジュゲートの機能活性の尺度として決定した。ＤｉｓｃｏｖｅＲｘからのＰａｔｈＨｕｎｔｅｒ  ｅＸｐｒｅｓｓｉｎｇ  β−アレスチンヒトＧＰＣＲキット（製品番号９５−００８４Ｅ２）をこの目的のために使用し、アンタゴニスト用量反応手順に従った。細胞を製造者の指示どおり解凍し、５％ＣＯ２ウォータージャケット付きインキュベーターにおいて３７℃で一晩成長させた（ウェル当たり約３０，０００細胞）。メトクロプラミドおよびコンジュゲート（アンタゴニスト）のストック溶液を１００％ＤＭＳＯ中に調製し、その後１１点３倍段階希釈物を、ＰＢＳ中２２％ＤＭＳＯに調製した。各希釈の濃度は、最終スクリーニング濃度の２２倍であった。ウェル毎に各アンタゴニスト希釈物（５μｌ）を添加し、３７℃、５％ＣＯ２ウォータージャケット付きインキュベーターにおいて３７℃で３０分間インキュベートした。それぞれのウェルにＥＣ８０（４００ｎＭ）のドパミン作動薬（５μｌ）を添加し、５％ＣＯ２ウォータージャケット付きインキュベーターにおいて３７℃で９０分間インキュベートした。最後に、各ウェルにつき５５μｌのＤｉｓｃｏｖｅＲｘ検出試薬を添加し、室温で６０分間インキュベートし、Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  Ｖｉｃｔｏｒ  Ｘ４  ＨＴＲＦリーダーを使用してルミネセンスを計測した。ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ、シグモイド用量反応（傾き可変）曲線フィッティングを使用してデータ解析を行った。
【０１８３】
メトクロプラミド、およびｍＰＥＧ１〜９−Ｎ−メトクロプラミド（それぞれ実施例２〜１０に従い調製した）のＩＣ５０値を、ドパミン２Ｓ受容体を発現するＣＨＯ−Ｋ１細胞においてβ−アレスチン相互作用アッセイで決定した。決定されたＩＣ５０値は、メトクロプラミドが８．２１Ｅ−０８Ｍ、ｍＰＥＧ１−Ｎ−メトクロプラミドが３．４５Ｅ−０７Ｍ、ｍＰＥＧ２−Ｎ−メトクロプラミドが７．８６Ｅ−０７Ｍ、ｍＰＥＧ３−Ｎ−メトクロプラミドが２．０５Ｅ−０６Ｍ、ｍＰＥＧ４−Ｎ−メトクロプラミドが３．０４Ｅ−０６Ｍ、ｍＰＥＧ５−Ｎ−メトクロプラミドが３．６２Ｅ−０６Ｍ、ｍＰＥＧ６−Ｎ−メトクロプラミドが４．２７Ｅ−０６Ｍ、ｍＰＥＧ７−Ｎ−メトクロプラミドが８．１８Ｅ−０５Ｍ、ｍＰＥＧ８−Ｎ−メトクロプラミドが５．５３Ｅ−０６Ｍ、およびｍＰＥＧ９−Ｎ−メトクロプラミドが７．２２Ｅ−０６Ｍであった。親化合物と比べた変化倍数は、それぞれ４．１９、９．５７、２５、３７．０３、４４．１、５２．０５、９９．５７、６７．４および８７．６である。これらの結果は表４にも提供する。
【０１８４】
【表４】
0006265998.tif 000040
【０１８５】
実施例１５
ｃＡＭＰ蓄積アッセイ（セロトニン４受容体）
セロトニン４受容体（５ＨＴ４）に対するメトクロプラミドおよびコンジュゲートの機能活性の尺度として、５ＨＴ４受容体を安定的に発現するＣＨＯ−Ｋ１細胞においてｃＡＭＰの蓄積を決定した。メトクロプラミドおよびコンジュゲートの段階希釈物を１００％ＤＭＳＯ中に調製した。５ＨＴ４を安定的に発現するＣＨＯ−Ｋ１細胞は、分裂が停止した単回使用のアリコートとしてＭｕｌｔｉｓｐａｎから購入した。細胞を解凍し、３７℃、５％ＣＯ２ウォータージャケット付きインキュベーターで一晩成長させた。Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ細胞解離緩衝液を使用して細胞を回収し、次に１２００ｒｐｍで５分間遠心した。上清を吸引し、細胞を１×１０６細胞／ｍＬの密度となるようにアッセイ緩衝液（ＰＢＳ／０．５ｍＭ  ＩＢＭＸ）中に再懸濁した。白色のハーフエリア９６ウェルプレートに細胞（２５μｌ）を添加した。試験化合物の１３点段階希釈を、アッセイ緩衝液（０．５ｍＭ  ＩＢＭＸのＰＢＳ）で行った。各アッセイについてメトクロプラミドを陽性対照として使用した。各試験濃度について化合物（２５μｌ）をデュプリケートで細胞に添加した。細胞を３７℃、５％ＣＯ２ウォータージャケット付きインキュベーターで１時間インキュベートした。ＣｉｓＢｉｏ  ＨＴＲＦ  ｃＡＭＰアッセイ試薬を使用してｃＡＭＰを定量化した。基質を添加して２時間後、Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  Ｖｉｃｔｏｒ  Ｘ４  ＨＴＲＦリーダーを使用して６６５／６１５ｎｍのシグナルを計測した。ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ、シグモイド用量反応（傾き可変）曲線フィッティングを使用してデータ解析を行った。
【０１８６】
メトクロプラミド、およびコンジュゲートｍＰＥＧ１および４−Ｎ−メトクロプラミド（それぞれ実施例２および５に従い調製した）のＩＣ５０値を、５ＨＴ４を安定的に発現するＣＨＯ−Ｋ１細胞においてｃＡＭＰ蓄積アッセイで決定した。決定されたＩＣ５０値は、メトクロプラミドが１．０２Ｅ−０６Ｍ、ｍＰＥＧ１−Ｎ−メトクロプラミドが１．５９Ｅ−０６Ｍ、およびｍＰＥＧ４−Ｎ−メトクロプラミドが６．４４Ｅ−０７Ｍであった。親化合物と比べた変化倍数は、それぞれ１．５および０．６２であった。これらの結果は表５にも提供する。
【０１８７】
【表５】
0006265998.tif 000041
【０１８８】
実施例１６
ＭｅｔＩＤ決定
凍結保存したヒトおよびスプラーグドーリーラット肝細胞を３７℃の水浴中で解凍した。メトクロプラミド、ｍＰＥＧ１−Ｎ−メトクロプラミド（実施例２から）、ｍＰＥＧ４−Ｎ−メトクロプラミド（実施例５から）、ｍＰＥＧ８−Ｎ−メトクロプラミド（実施例９から）、およびテストステロン（陽性対照）を、３７℃および５％ＣＯ２に設定したインキュベーターにおいて０、１、および４時間まで肝細胞と共にインキュベートした。インキュベーション混合物は、１００μＬの最終インキュベーション容量のウィリアム培地Ｅ中１０μＭのメトクロプラミド、ｍＰＥＧ１−Ｎ−メトクロプラミド、ｍＰＥＧ４−Ｎ−メトクロプラミド、ｍＰＥＧ８−Ｎ−メトクロプラミド、または２００μＭテストステロンおよび１００万細胞／ｍＬ肝細胞からなった。試料は、インキュベーション中の各時間点について別個のプレートから取った。試料採取時点毎にプレートをインキュベーターから取り出し、１００μＬ冷アセトニトリルを添加することによりクエンチし、４，０００ｒｐｍ、４℃で３０分間遠心するまで氷浴中に置いた。上清（ｓｕｐｅｒｎａｔａｎｔｄ）を、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析を実行するまで−７０℃以下で保存した。使用した液体クロマトグラフィーシステムは、Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００オートサンプラー、バイナリポンプ、ＤＡＤおよびカラム封入装置を使用した。Ｔｈｅｒｍｏ  ＤＥＣＡ  ＸＰ  ＭＡＸイオントラップ質量分析器を使用してタンデム質量分析法を実施した。イオン源はエレクトロスプレー（＋）であり、使用したＬＣカラムは、Ｖａｒｉａｎ、Ｐｏｌａｒｉｓ  ５  Ｃ１８−Ａ（２５０×２．１ｍｍ、５ミクロン）カラムであった。
【０１８９】
ラットおよびヒト肝細胞でメトクロプラミドおよびコンジュゲートの代謝経路を決定した。Ｎ−脱アルキル化がラットにおけるメトクロプラミドの主要な代謝経路であり、ヒト肝細胞における代謝は最小限であった。図１はメトクロプラミドの代謝経路を示す。Ｎ−脱アルキル化がラットにおけるｍＰＥＧ１−Ｎ−メトクロプラミドおよびｍＰＥＧ４−Ｎ−メトクロプラミドの主要な代謝経路であり、ヒト肝細胞における代謝は低かった。ラット肝細胞では、メトクロプラミド（ｍｅｔｏｃｌｏｐｒｏｍｉｄｅ）の構造修飾後、広範な代謝が観察された。図２および図３は、それぞれ（ｒｅｐｅｃｔｉｖｅｌｙ）ｍＰＥＧ１−Ｎ−メトクロプラミドおよびｍＰＥＧ４−Ｎ−メトクロプラミドの代謝経路を示す。ＰＥＧ鎖の修飾は、ラットにおけるｍＰＥＧ８−Ｎ−メトクロプラミド（ｎｅｔｏｃｌｏｐｒａｍｉｄｅ）の主要な代謝経路であり、ヒト肝細胞における代謝は僅かしかなかった。メトクロプラミド（ｍｅｔｏｃｌｏｐｒｏｍｉｄｅ）と比較してＮ−脱アルキル化は少なかった。図４はｍＰＥＧ８−Ｎ−メトクロプラミドの代謝経路を示す。表６は代謝産物の割合を示す。この図では、各コンジュゲートの種々の代謝産物が「Ｍ」で示され、図中で所与のコンジュゲートに付与される記号に対応する。たとえば、表６におけるｍＰＥＧ１−Ｎ−メトクロプラミドの代謝産物Ｍ１は、図２におけるＭ１に対応し、表６におけるｍＰＥＧ４−Ｎ−メトクロプラミドの代謝産物Ｍ２は、図３におけるＭ２に対応し、および表６におけるｍＰＥＧ８−Ｎ−メトクロプラミドの代謝産物Ｍ３は、図４におけるＭ３に対応する。
【０１９０】
【表６】
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【０１９１】
実施例１７
ラットＰＫ
体重２１０〜２６０グラム（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｈｏｌｌｉｓｔｅｒ，ＣＡ））の雄性スプラーグドーリーラット（ラトゥス・ノルベギクス（Ｒａｔｔｕｓ  ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ））において、ラット薬物動態（「ＰＫ」）特性決定を実施した。ラットには標準的な食餌を与え、水は常時自由に摂取できるようにした。メトクロプラミドおよびコンジュゲートの投与前、ラットを一晩絶食させ、投与４時間後に元の食餌に戻した。動物には強制経口投与（２．５ｍｇ／Ｋｇ）するか、または頸静脈カニューレにより静脈内投与（０．５ｍｇ／ｋｇ）した。それぞれの時間点で血液試料（約０．１５ｍＬ）を頸動脈カニューレから採取し、Ｋ２ＥＤＴＡをコートしたチューブ（クエンチ媒体−酢酸、ＰＭＳＦおよびジクロルボスが入っている）に直ちに移し、氷上に置いた。採取後３０分以内に試料を１０，０００ＲＰＭで５分間遠心し、得られた血漿を分離した。血漿を微量遠心管に移し、直ちにドライアイス上に置いた。血漿試料は、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳによるバイオアナリシスのためドライアイス上に載せて発送されるまで、約−７０℃で保存した。尿試料は、代謝ケージを使用して、試験計画に特定される間隔で、氷上にあるクエン酸（０〜４時間および４〜８時間の間は４ｍｇ、および８〜２４時間の間は１６ｍｇ）が入ったチューブに採取した。各間隔における採尿の完了後、各ケージを２ｍＬの脱イオン水（１回１ｍＬ）でリンスした。このリンス液を、尿として個別のラベル付き容器（２ｍｇのクエン酸が入っている）に捕集した。このリンス後、エタノール（１回１ｍｌ）によるさらなる２ｍｌリンスを実施した。このリンス液も、尿として個別のラベル付き容器に捕集した。試料は、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳによるバイオアナリシスを実施するまで−７０℃で凍結保存した。
【０１９２】
Ｐｈｏｅｎｉｘ（登録商標）ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ（登録商標）（バージョン６．３；Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ  Ｃｏｒｐ．，Ｍｏｕｎｔａｉｎ  Ｖｉｅｗ，ＣＡ）を使用して、ノンコンパートメント解析により薬物動態パラメータを決定した。この解析には、公称用量および試料採取時間を使用した。ＢＬＱとして報告される濃度は、前用量でない限り欠測値として扱った；次にそれらをゼロに設定した。最高血漿濃度（Ｃｍａｘ）および最高血漿検体濃度が観察された時点（Ｔｍａｘ）をＰｈｏｅｎｉｘ（登録商標）ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ（登録商標）によって入力データセットから直接生成した。対数線形回帰を使用して終末対数線形相のデータを解析し、終末相速度定数（ｋ）および対応する半減期（ｔ１／２＝０．６９３／ｋ）を推定した。時間＝０から最後に血漿濃度を計測可能であった時点までの血漿濃度−時間曲線下面積（ＡＵＣｌａｓｔ）を、Ｔｍａｘまでは線形台形補間法を用いて計算し、Ｔｍａｘ以降は対数台形補間法を用いて計算した。時間０から無限大までの血漿濃度−時間曲線下面積（ＡＵＣｉｎｆ）は、ＡＵＣｌａｓｔと最後に観察された濃度をｋで除した商との和として計算した。総血漿クリアランス（ＣＬ）は、用量／ＡＵＣｉｎｆとして計算した。定常状態における見かけの分布容積（Ｖｓｓ）は、ＭＲＴｉｎｆ×ＣＬ（式中、ＭＲＴは平均滞留時間である）として計算した。経口投与後の絶対的バイオアベイラビリティは、以下の式：
【数１】
0006265998.tif 000043
を用いて計算した。以下の表７および表８は、それぞれ静脈内投与時および経口投与時のメトクロプラミドおよびコンジュゲートのＰＫパラメータ（ｐａｒａｍｔｅｒ）を提供する。
【０１９３】
【表７】
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【０１９４】
【表８】
0006265998.tif 000045
【０１９５】
実施例１８
代謝アッセイ
メトクロプラミドおよびｍＰＥＧ３、５および６−Ｎ−メトクロプラミド（それぞれ実施例４、６および７に従い調製した）の代謝安定性をヒト組換えＣＹＰ２Ｄ６酵素で評価した。最終的なインキュベーション混合物は、ｐＨ７．４の１００ｍＭリン酸カリウム緩衝液中、１μＭ  メトクロプラミドまたはｍＰＥＧ３、５および６−Ｎ−メトクロプラミド、１ｍＭ  塩化マグネシウム、２ｍＭ  β−ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸ナトリウム塩、２０ｍＭ  Ｄ−グルコース６−リン酸二ナトリウム塩水和物、０．２単位／ｍＬのグルコース６−リン酸デヒドロゲナーゼ、および１００ｐｍｏｌ／ｍＬの解凍したヒト組換えＣＹＰ２Ｄ６タンパク質（Ｘｅｎｏｔｅｃｈ，ＬＬＣ）からなった。試料のアリコート（７０ｒｐｍ振盪機、３７℃水浴でのインキュベーション後ｔ＝０、１０、２０、および３０分）を、等容積のアセトニトリルでクエンチし、上清中のメトクロプラミドおよびｍＰＥＧ３、５および６−Ｎ−メトクロプラミドをＬＣ−ＭＳ／ＭＳを用いて定量化した。結果は図５Ａに提供する。
【０１９６】
結論：ｍＰＥＧ３、５および６−Ｎ−メトクロプラミドがヒト組換えＣＹＰ２Ｄ６酵素によって代謝された程度は、メトクロプラミドより低かった。メトクロプラミドおよびｍＰＥＧ３、５および６−Ｎ−メトクロプラミドの各々は、３７℃の１００ｍＭリン酸カリウム緩衝液、ｐＨ７．４において最長３０分まで化学的に安定であった。結果は図５Ｂに提供する。
【０１９７】
ＣＹＰ２Ｄ６の時間依存阻害を評価するため、プールされたヒト肝臓ミクロソーム（Ｘｅｎｏｔｅｃｈ，ＬＬＣ）を、１００ｍＭリン酸カリウム緩衝液、ｐＨ７．４中のメトクロプラミドおよびｍＰＥＧ３、５および６−Ｎ−メトクロプラミド（０．１、０．３、１、３、１０、および３０μＭ）（それぞれ実施例４、６および７に従い調製した）または溶媒対照および１ｍＭ  ＮＡＤＰＨと共に、７０ｒｐｍ振盪機において３７℃水浴中で１２００秒間プレインキュベートした。プレインキュベーション混合物を、１ｍＭ  ＮＡＤＰＨ含有１００ｍＭリン酸カリウム緩衝液、５μＭブフラロール、ｐＨ７．４で１０倍希釈し、ブフラロールのＣＹＰ２Ｄ６特異的代謝産物である１−ヒドロキシブフラロールの出現を、７０ｒｐｍ振盪機、３７℃水浴で２０分間インキュベートし、続いて等容積のアセトニトリルでタンパク質沈殿を行った後、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳを用いて観察した。１−ヒドロキシブフラロール出現速度を溶媒対照の速度と比較することにより、所与のプレインキュベーション時点における各濃度のメトクロプラミドおよびｍＰＥＧ３、５および６−Ｎ−メトクロプラミドによるＣＹＰ２Ｄ６の阻害程度を評価した。
【０１９８】
結論：文献では、メトクロプラミドがＣＹＰ２Ｄ６の時間依存性阻害薬であることが報告され、メトクロプラミドの代謝産物がＣＹＰ２Ｄ６を阻害することが示唆される。しかしながら、この実験のデータの示唆するところでは、メトクロプラミドも、またｍＰＥＧ３、５および６−Ｎ−メトクロプラミドのいずれも、時間依存性阻害薬ではないことが見出された。アッセイの妥当性は、ＣＹＰ２Ｄ６の時間依存性阻害薬であるパロキセチンを並行して試験することにより確認された。結果は図６ａ〜図６Ｆに提供する。
【０１９９】
ＣＹＰ２Ｄ６の直接阻害を評価するため、メトクロプラミド、ｍＰＥＧ３、５および６−Ｎ−メトクロプラミド（０．０５、０．１５、０．５、２、５、１５、５０μＭ）（それぞれ実施例４、６および７に従い調製した）または溶媒対照を、ｐＨ７．４の１００ｍＭリン酸カリウム緩衝液中０．１ｍｇ／ｍＬのプールされたヒト肝臓ミクロソーム、５μＭブフラロール、および１ｍＭ塩化マグネシウム、２ｍＭ  β−ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸ナトリウム塩、２０ｍＭ  Ｄ−グルコース６−リン酸二ナトリウム塩水和物、０．２単位／ｍＬのグルコース６−リン酸デヒドロゲナーゼと共に、７０ｒｐｍ振盪機、３７℃水浴で２０分間インキュベートした。インキュベーション時間の終了時に試料を等容積のアセトニトリルでクエンチし、上清中の１−ヒドロキシブフラロールを、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳを用いて定量化した。ブフラロールのＣＹＰ２Ｄ６プローブ代謝産物である１−ヒドロキシブフラロールの出現速度を溶媒対照の速度と比較することにより、各濃度のメトクロプラミド、ｍＰＥＧ３、５および６−Ｎ−メトクロプラミドによるＣＹＰ２Ｄ６の直接阻害の程度を評価した。結果は図７に示す。
【０２００】
結論：ＰＥＧ−メトクロプラミドコンジュゲートは、メトクロプラミドと比較したときＣＹＰ２Ｄ６介在ブフラロール代謝の直接阻害の低下を示した。
【図１】
0006265998.tif 000048
【図２】
0006265998.tif 000049
【図３】
0006265998.tif 000050
【図４】
0006265998.tif 000051
【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
0006265998.tif 000053
【図６】
0006265998.tif 000054
【図７】
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