(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象の過剰増殖疾患の治療のための組成物であって、
該組成物が、以下の式の化合物、
【化６７】
0006407955.tif 000092
またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグの有効量を含み、
式中、
Ｒ１が、水素、ハロゲン、置換もしくは非置換のアミノ、または置換もしくは非置換のＣ１−６アルキルであり、
Ｒ２が、ハロゲン、ニトロ、トリフルオロメチル、置換もしくは非置換のアルコキシル、置換もしくは非置換のアミノ、または置換もしくは非置換のＣ１−６アルキルであり、
Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、及びＲ９が、各々独立して、水素、ハロゲン、置換もしくは非置換のアルコキシ、トリフルオロメチル、または置換もしくは非置換のＣ１−６アルキルから選択される、
組成物。
【請求項２】
Ｒ２が、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ハロゲン、またはトリフルオロメチルであり、
Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、及びＲ９が、各々独立して、水素およびメトキシから選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記化合物が、以下：
【化６８】
0006407955.tif 000093
からなる群から選択される、請求項１または２に記載の組成物。
【請求項４】
前記過剰増殖疾患が癌である、請求項１〜３のいずれかに記載の組成物。
【請求項５】
前記過剰増殖疾患が、多発性嚢胞腎疾患である、請求項１〜３のいずれかに記載の組成物。
【請求項６】
前記過剰増殖疾患が、線維症である、請求項１〜３のいずれかに記載の組成物。
【請求項７】
前記線維症が、特発性肺線維症である、請求項６に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
優先権出願の相互参照
本出願は、２０１３年３月１５日に出願された米国仮特許出願第６１／７８８，３９８号に対する優先権を主張するものであり、当該出願は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【０００２】
様々な種類の疾患は、細胞の過剰増殖を含む。例えば、癌は、公知の過剰増殖疾患である。癌は、細胞の集団が非制御の成長を示す巨大な不均一性のクラスの疾患であり、隣接する組織に入り込み破壊する侵襲をもたらす。細胞は、しばしば、転移し、腫瘍細胞がリンパ系を介してまたは血流を通って体内の他の場所に広がる。癌は、環境因子または遺伝子因子（または両方の組み合わせ）によって引き起こされ得る。癌を引き起こす共通の環境因子としては、喫煙、不十分な食生活及び肥満、感染症、放射線、運動不足、環境汚染物質が挙げられる。これらの環境因子は、細胞の遺伝子材料中の異常を引き起こすまたは増大させ得る。細胞繁殖は、発癌遺伝子及び癌抑制遺伝子を含む、いくつかのクラスの遺伝子によって通常密接に調節される極めて複雑なプロセスである。これらの制御遺伝子の異常／変異が、癌の発生につながり得る。完全に遺伝性の癌は、約５〜１０パーセントとわずかな割合である。２００７年には、癌は、世界中の全人類の約１３％（７９０万人）の死因となった。より多くの人々が長生きをし、多数の生活様式が発展途上国において変化するにつれて、割合が増加する。
【０００３】
過剰増殖疾患の他の形態としてもまた、多発性嚢胞腎疾患（ＰＫＤ）及び関連する嚢胞腎疾患等が存在するが、これらに限定されない。多発性嚢胞腎疾患（ＰＫＤまたはＰＣＫＤ）は、腎臓の嚢胞性遺伝子障害である。２種類のＰＫＤが存在するが、常染色体優性多発性嚢胞腎（ＡＤＰＫＤ）及びあまり一般的ではない常染色体劣性多発性嚢胞腎（ＡＲＰＫＤ）である。両方の形態は、腎臓上皮細胞の過剰増殖を引き起こすが、どちらの形態も癌ではない。これは、ヒト及びいくつかの他の動物で起こる。ＰＫＤは、典型的には両方の腎臓における複数の嚢胞（したがって、「多嚢胞性」）の存在によって特徴付けられるが、症例の１７％は、初期に、１つの腎臓において観察可能な疾患と共に存在し、ほとんどの症例は成人期に両側性疾患に進行する。嚢胞は、多数でありかつ流体で満たされており、腎臓の大規模な拡張をもたらす。疾患はまた、肝臓、膵臓、及びいくつかの珍しい症例では、心臓及び脳の脈管構造を損傷し得る。ＰＫＤは、最も一般的な重篤な遺伝子疾患及び透析及び移植の先行遺伝子原因であり、世界中で推定１２５０万人に影響を及ぼしている。ＰＫＤを有する人々の半分には、疾患の家族歴はない。しかしながら、疾患の優性形態において、これは、出現の可変回数及び重症度のいくつかの変動を有する複数のファミリーメンバーに影響を及ぼす。
【０００４】
他の過剰増殖疾患としては、異なる組織の線維症が挙げられる。線維症は、器官または組織の過剰繊維結合組織の形成である。線維症は、それが広範になり高悪性度になった場合、組織または器官及び／または機能の損失の変性につながり得る。線維症は、これらに限定されないが、肺線維症、特発性肺線維症、硬変、心内膜心筋線維症、血管狭窄または脊柱管狭窄、縦隔線維症、骨髄線維症、後腹膜線維症、進行性塊状線維症、腎性全身性線維症、クローン病、ケロイドまたは陳旧性心筋梗塞、強皮症／全身性硬化症、関節線維症（ａｒｔｈｒｏｆｉｂｒｏｓｉｓ）、及び癒着性関節包炎を含む哺乳類の多数の疾患状態の一因となる。
【０００５】
このような過剰増殖疾患は、数十年間知られているが、効果的な治療法は、わからないままである。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
クマリン誘導体化合物、ならびに癌、多発性嚢胞腎疾患、及び異なる組織の線維症（例えば、特発性肺線維症）等の過剰増殖疾患の治療のための方法が提供される。本方法は、本明細書に説明される化合物を対象に投与することを含む。
【０００７】
ＣＦＴＲコレクターのクラスは、以下の式の化合物、
【化１】
0006407955.tif 000002
によって表されるもの、及びその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグである。化合物のこのクラスでは、Ｒ１は、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、置換もしくは非置換のアルコキシル、置換もしくは非置換のアミノ、置換もしくは非置換のＣ１−６アルキル、または置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキルであり、Ｒ２は、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アジド、チオシアナト、トリフルオロメチル、置換もしくは非置換のアルコキシル、置換もしくは非置換のアミノ、置換もしくは非置換のカルボニル、または置換もしくは非置換のＣ１−６アルキルであり、Ｒ３は、水素または置換もしくは非置換のＣ１−６アルキルであり、Ｒ４は、置換もしくは非置換のＣ１−６アルキル、置換もしくは非置換のアリール、または置換もしくは非置換のヘテロアリールであり、Ｘは、ＳまたはＯであり、Ｙは、ＯまたはＮＣＨ３である。随意に、化合物は、
【化２】
0006407955.tif 000003
からなる群から選択され、式中、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、及びＲ９は、各々独立して、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、置換もしくは非置換のアルコキシ、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、置換もしくは非置換のカルボニル、置換もしくは非置換のアミノ、置換もしくは非置換のＣ１−６アルキル、置換もしくは非置換のＣ２−６アルケニル、置換もしくは非置換のアリール、置換もしくは非置換のスルホンアミド、置換もしくは非置換のスルホニル、または置換もしくは非置換のチオから選択される。随意に、Ｒ１及びＲ２、Ｒ５及びＲ６、Ｒ６及びＲ７、Ｒ７及びＲ８、またはＲ８及びＲ９は、組み合わさって、置換もしくは非置換のアリール、置換もしくは非置換のシクロアルケニル、置換もしくは非置換のヘテロアリール、または置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキルを形成する。
【０００８】
ＣＦＴＲコレクターのクラスは、以下の式の化合物、
【化３】
0006407955.tif 000004
によって表されるもの、及びその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグである。化合物のこのクラスでは、Ｌは、ヘテロアリールであり、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、及びＲ９は、各々独立して、水素及びメトキシから選択される。
【０００９】
ＣＦＴＲコレクターのクラスは、以下の式の化合物、
【化４】
0006407955.tif 000005
によって表されるもの、及びその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグである。化合物のこのクラスでは、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、及びＸ４は、各々独立して、ＣＨ及びＮから選択され、Ｙは、ＯまたはＮＲであり、式中、Ｒは、水素またはメチルであり、Ｒ２は、水素、Ｃ１−６アルキル、ハロゲン、またはトリフルオロアルキルであり、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、及びＲ９は、各々独立して、水素及びメトキシから選択される。
【００１０】
ＣＦＴＲコレクターのクラスは、以下の式の化合物、
【化５】
0006407955.tif 000006
によって表されるもの、及びその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグである。化合物のこのクラスでは、Ｘ１は、ＯまたはＮＣＨ３であり、Ｘ２は、ＣＨまたはＮであり、Ｙは、Ｏ、ＮＨ、またはＮＣＨ３であり、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、及びＲ９は、各々独立して、水素及びメトキシから選択される。
【００１１】
ＣＦＴＲコレクターのクラスは、以下の式の化合物、
【化６】
0006407955.tif 000007
によって表されるもの、及びその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグである。化合物のこのクラスでは、Ｒ１及びＲ２は、各々独立して、水素、置換もしくは非置換のアミノ、及び置換もしくは非置換のカルボニルから選択される。
【００１２】
ＣＦＴＲコレクターのクラスは、以下の式の化合物、
【化７】
0006407955.tif 000008
によって表されるもの、及びその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグである。化合物のこのクラスでは、Ｘは、ＣＨ２、ＮＨ、またはＯである。
【００１３】
対象の過剰増殖疾患の治療のための方法がまた、本明細書に説明される。対象の過剰増殖疾患の治療のための本方法は、本明細書に説明されるような化合物の有効量を対象に投与することを含む。随意に、過剰増殖疾患は、癌である。随意に、過剰増殖疾患は、多発性嚢胞腎疾患である。随意に、過剰増殖疾患は、線維症（例えば、特発性肺線維症）である。
【００１４】
本明細書に提供されるものはまた、細胞内の２つ以上の熱ショックタンパク質シャペロン間の相互作用を阻害するための方法である。細胞内の２つ以上の熱ショックタンパク質シャペロン間の相互作用を阻害する本方法は、本明細書に説明されるように細胞を化合物と接触させることを含む。随意に、２つ以上の熱ショックタンパク質シャペロンは、Ｈｓｐ−９０、Ｈｓｐ−７０、Ｈｓｃ−７０、及びＨｓｐ−４０からなる群から選択される。随意に、本方法は、インビトロで実施される。随意に、本方法は、インビボで実施される。
【００１５】
１つ以上の実施形態の詳細は、以下の図面及び記述において説明される。他の特徴、目的、及び利点は、記述及び図面から、ならびに特許請求の範囲から明らかとなるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】化合物をプロファイリングするための成長曲線アッセイのための一般的手法（右のグラフ）、一次ヒトＡＤＰＫＤ過剰増殖培養の写真（左上の写真）、及び転移性ＡＲＣａＰ−Ｍ細胞株の写真（左下の写真）を示す概略図を含む。
【図２】嚢胞性ＡＤＰＫＤ細胞内、前立腺癌ライン内、及び腎臓癌ライン内の化合物ＤＢＭ  ２２８の生存率を示す図である。
【図３】コンフルエントな嚢胞性ＡＤＰＫＤ細胞内、増殖性嚢胞性ＡＤＰＫＤ細胞内、コンフルエントな正常な腎細胞、及び増殖性正常な腎細胞内の化合物ＤＢＭ  １０１の生存率を示す図である。
【図４】化合物ＤＢＭ  ２２７、化合物ＤＢＭ  ２２８、化合物ＤＢＭ  ３０８、化合物ＤＢＭ  ３１８、化合物ＤＢＭ  ７０１、化合物ＤＢＭ  ７０７、化合物ＤＢＭ  ７１７、及び化合物ＤＢＭ  ３２８を使って治療される骨髄腫細胞の成長阻害を示す図である。
【図５Ａ】化合物ＤＢＭ  １０１（００１−２）、化合物ＤＢＭ  ２２８（Ｎ８２８）、化合物ＤＢＭ  ３０８（３−８Ｃｌ）、及び化合物ＤＢＭ  ３２８（３−８ＣＯＯＨ）を使って治療されるクローン化多嚢胞性腎臓組織細胞の成長阻害を示す図である。
【図５Ｂ】化合物ＤＢＭ  １０１（００１−２）、化合物ＤＢＭ  ２２８（Ｎ８２８）、化合物ＤＢＭ  ３０８（３−８Ｃｌ）、及び化合物ＤＢＭ  ３２８（３−８ＣＯＯＨ）を使って治療されるクローン化非嚢胞性腎臓組織細胞の成長阻害を示す図である。
【図６】化合物ＤＢＭ  ２２８、化合物ＤＢＭ  ３０８、化合物ＤＢＭ  ３１８、化合物ＤＢＭ  ７０１、化合物ＤＢＭ  ７０７、化合物ＤＢＭ  ７１５、及び化合物ＤＢＭ  ３２８を使って治療される一次ヒト特発性肺線維症筋線維芽細胞の成長阻害を示す図である。
【図７】化合物ＤＢＭ  ７０１を使って治療される一次ヒト特発性肺線維症筋線維芽細胞及び一次ヒト慢性障害肺疾患（ＣＯＰＤ）線維芽細胞の成長阻害を示す図である。
【図８】化合物ＤＢＭ  ７０１を使って治療される一次ヒト特発性肺線維症筋線維芽細胞の成長阻害を示す図である。
【図９】パクリタキセル、ビンクリスチン、及び化合物ＤＢＭ  ２２８を使った治療の後の多剤耐性ＮＣＩ／ＡＤＲ−ＲＥＳ卵巣癌腫細胞株の阻害を示すグラフである。
【図１０】化合物ＤＢＭ  ３０８（３０ｎＭ、３００ｎＭ、及び３μＭ）、テモゾロミド（ＴＭＺ）（５００μＭ）、及びＤＭＳＯの様々な用量を用いた治療の後の一次ヒト多形性膠芽腫細胞の神経球を示すグラフである。
【図１１Ａ】増加する濃度の化合物ＤＢＭ  ２２８（左上のパネル：対照、右上のパネル：４０ｎＭの化合物ＤＢＭ  ２２８、左下のパネル：１００ｎＭの化合物ＤＢＭ  ２２８、右下のパネル：４００ｎＭの化合物ＤＢＭ  ２２８）を使って試験したＵ２５１ＭＧ神経膠芽腫細胞を示すグラフを含む。
【図１１Ｂ】化合物ＤＢＭ  ２２８、化合物ＤＢＭ  ３１８、及び化合物ＤＢＭ  ３２８を使って治療されるＵ２５１ＭＧ細胞のカスパーゼ３／７活性化におけるパーセント変化を示すグラフである。
【図１１Ｃ】パクリタキセル、ビンクリスチン、対照（化合物ＤＢＭ  ３２８）、化合物ＤＢＭ  ２２７、化合物ＤＢＭ  ２２８、化合物ＤＢＭ  ３０８、化合物ＤＢＭ  ３１８、化合物ＤＢＭ  ７０１、化合物ＤＢＭ  ７０７、及び化合物ＤＢＭ  ７１５を使った治療の後の生化学的チューブリン重合の阻害を示すグラフである。
【図１２】化合物ＤＢＭ  ２２８、化合物ＤＢＭ  ３２８、化合物ＤＢＭ  ３０８、またはＤＭＳＯビヒクル対照（左上のパネル）を使って治療した後のヒト過剰増殖ＧＢＭ癌細胞のための細胞内シグナリング分子リン光体アレイの結果、ｐ３８α、ＪＮＫパン、及びｃ−Ｊｕｎリン酸化（左下のパネル）のための化合物ＤＢＭ  ２２８（００２−Ｎ８−２８）、化合物ＤＢＭ  ３０８（００３−８Ｃｌ）、及び化合物ＤＢＭ  ３２８（００３−８ＣＯＯＨ）のためのパーセントリン酸化対ビヒクル対照の図、用量反応効果がｃ−Ｊｕｎリン酸化の増強のための化合物ＤＢＭ  ２２８（００２−Ｎ８−２８）に提供される（右上のパネル）、及びｃ−Ｊｕｎリン酸化の化合物ＤＢＭ  ２２８（００２−Ｎ８−２８）の増強のための効果の時間依存の図である。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
本明細書に説明されるクマリン誘導体化合物及び方法は、過剰増殖疾患の治療において有用である。本明細書に使用されるとき、過剰増殖疾患は、対象の健康に悪影響を及ぼす脱調節または非調節であるが加速型細胞成長（正常組織の細胞の正常状態に対して）を含む任意の障害または状態である。このような脱調節または非調節であり加速型の細胞成長は、その対象に死をもたらす場合がある。本明細書に説明される化合物及び方法は、これらに限定されないが、癌、多発性嚢胞腎疾患、及び線維症（例えば、特発性肺線維症）を含む過剰増殖障害を治療するために有用である。
【００１８】
Ｉ．化合物
本明細書に説明されるクマリン誘導体のクラスは、式Ｉ：
【化８】
0006407955.tif 000009
によって表されるもの、及びその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグである。
【００１９】
式Ｉでは、Ｒ１は、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、置換もしくは非置換のアルコキシル、置換もしくは非置換のアミノ、置換もしくは非置換のＣ１−６アルキル、または置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキルである。
【００２０】
また、式Ｉでは、Ｒ２は、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アジド、チオシアナト、トリフルオロメチル、置換もしくは非置換のアルコキシル、置換もしくは非置換のアミノ、置換もしくは非置換のカルボニル、または置換もしくは非置換のＣ１−６アルキルである。
【００２１】
加えて、式Ｉでは、Ｒ３は、水素または置換もしくは非置換のＣ１−６アルキルである。
【００２２】
更には、式Ｉでは、Ｒ４は、置換もしくは非置換のＣ１−６アルキル、置換もしくは非置換のアリール、または置換もしくは非置換のヘテロアリールである。
【００２３】
また、式Ｉでは、Ｘは、ＳまたはＯである。
【００２４】
加えて、式Ｉでは、Ｙは、Ｏ、ＮＨ、またはＮＣＨ３である。
【００２５】
本明細書で使用されるとき、アルキル及びアルケニルという用語は、直鎖及び分岐鎖一価置換基を含む。例としては、メチル、エチル、及びイソブチル等が挙げられる。本明細書に説明される化合物及び方法において有用なこれらの基の範囲は、Ｃ１−Ｃ８アルキル及びＣ３−Ｃ８アルケニルを含む。
【００２６】
ヘテロアルキル及びヘテロアルケニルは、アルキル及びアルケニルと同様に定義されるが、骨格内にＯ、Ｓ、またはＮヘテロ原子、またはこれらの組み合わせを含むことができる。本明細書に説明される化合物及び方法において有用なこれらの基の範囲は、Ｃ１−Ｃ８ヘテロアルキル及びＣ３−Ｃ８ヘテロアルケニルを含む。
【００２７】
シクロアルキルという用語は、単一の環式環または複数の縮合環を有する環式アルキル基を含む。例としては、シクロヘキシル、シクロペンチルエチル、及びアダマンタニルが挙げられる。本明細書に説明される化合物及び方法において有用なこれらの基の範囲は、Ｃ３−Ｃ９シクロアルキルを含む。
【００２８】
ヘテロシクロアルキルという用語は、シクロアルキルと同様に定義されるが、環式骨格内にＯ、Ｓ、またはＮヘテロ原子、またはこれらの組み合わせを含むことができる。本明細書に説明される化合物及び方法において有用なこれらの基の範囲は、Ｃ４−Ｃ９ヘテロシクロアルキルを含む。
【００２９】
アリール基は、例えば、フェニル及び置換フェニルを含む。ヘテロアリール基は、単独でかまたは５または６員環の組み合わせのいずれかで、Ｏ、Ｎ、またはＳヘテロ原子を含有する。１個のヘテロ原子を有するヘテロアリール基の例としては、有効炭素原子のうちのいずれか上で置換または有効炭素原子のうちのいずれかによって結合する、ピリジル、チエニル、及びフリルが挙げられる。２個以上のヘテロ原子を有するヘテロアリール基の例としては、有効炭素原子のうちのいずれか上で置換または有効炭素原子のうちのいずれかによって結合する、ピリミジニル、オキサゾリル、及びチアゾリルが挙げられる。アリール基及びヘテロアリール基は、更なる縮合環を含むことができる。このような基の例としては、有効炭素原子のうちのいずれか上で置換または有効炭素原子のうちのいずれかによって結合する、インダニル、ナフチル、ベンゾチエニル、キノリニル、及びこれらの異性体が挙げられる。
【００３０】
上述の全ての基は、非置換であり得るか、または同じかまたは異なり得る次のもののうちの１つ以上で置換され得る。適切な置換基の例としては、次のもの、アルコキシ（例えば、メトキシ）、アルキル、アリール、カルボキシレート、カルボキシレートエステル、シアノ、ハロゲン（例えば、クロロ、ブロモ、フルオロ、ヨード）、ヘテロアリール、ニトロ、アミノ、アルキルスルホニル、スルホンアミド、逆スルホンアミド、及びチオが挙げられるが、これらに限定されない。
【００３１】
いくつかの実施例では、式Ｉは、構造Ｉ−Ａによって表される。
【化９】
0006407955.tif 000010
【００３２】
構造Ｉ−Ａでは、Ｒ１及びＲ２は、式Ｉのために上に定義される通りである。
【００３３】
また、構造Ｉ−Ａでは、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、及びＲ９は、各々独立して、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、置換もしくは非置換のアルコキシ、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、置換もしくは非置換のカルボニル、置換もしくは非置換のアミノ、置換もしくは非置換のＣ１−６アルキル、置換もしくは非置換のＣ２−６アルケニル、置換もしくは非置換のアリール、置換もしくは非置換のスルホンアミド、置換もしくは非置換のスルホニル、または置換もしくは非置換のチオから選択される。カルボニルは、カルボン酸または酸誘導体であり得る。本明細書に使用されるとき、酸誘導体は、例えば、エステルまたはアミド等のカルボン酸の機能的誘導体を指す。
【００３４】
いくつかの実施例では、式Ｉは、構造Ｉ−Ｂによって表される。
【化１０】
0006407955.tif 000011
【００３５】
構造Ｉ−Ｂでは、Ｒ１及びＲ２は、式Ｉのために上に定義される通りである。
【００３６】
また、構造Ｉ−Ｂでは、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、及びＲ９は、構造Ｉ−Ａのために上に定義される通りである。
【００３７】
いくつかの実施例では、式Ｉは、構造Ｉ−Ｃによって表される。
【化１１】
0006407955.tif 000012
【００３８】
構造Ｉ−Ｃでは、Ｒ１及びＲ２は、式Ｉのために上に定義される通りである。
【００３９】
また、構造Ｉ−Ｃでは、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、及びＲ９は、構造Ｉ−Ａのために上に定義される通りである。
【００４０】
いくつかの実施例では、式Ｉ構造Ｉ−Ｄによって表される。
【化１２】
0006407955.tif 000013
【００４１】
構造Ｉ−Ｄでは、Ｒ１及びＲ２は、式Ｉのために上に定義される通りである。
【００４２】
また、構造Ｉ−Ｄでは、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、及びＲ９は、構造Ｉ−Ａのために上に定義される通りである。
【００４３】
随意に、例えば、Ｒ１及びＲ２、Ｒ５及びＲ６、Ｒ６及びＲ７、Ｒ７及びＲ８、またはＲ８及びＲ９等の構造Ｉ−Ａ、Ｉ−Ｂ、Ｉ−Ｃ、及びＩ−Ｄの隣接するＲ基は、組み合わさって、置換もしくは非置換のアリール、置換もしくは非置換のシクロアルケニル、置換もしくは非置換のヘテロアリール、または置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキルを形成する。
【００４４】
式Ｉの例としては、次の化合物が挙げられる。
【化１３−１】
0006407955.tif 000014
【化１３−２】
0006407955.tif 000015
【化１３−３】
0006407955.tif 000016
【化１３−４】
0006407955.tif 000017
【化１３−５】
0006407955.tif 000018
【化１３−６】
0006407955.tif 000019
【化１３−７】
0006407955.tif 000020
【化１３−８】
0006407955.tif 000021
【化１３−８Ａ】
0006407955.tif 000022
【化１３−９】
0006407955.tif 000023
【化１３−１０】
0006407955.tif 000024
【化１３−１１】
0006407955.tif 000025
【化１３−１２】
0006407955.tif 000026
【化１３−１３】
0006407955.tif 000027
【００４５】
化合物Ｐ１〜Ｐ１０７では、Ｒは、ハロゲン（例えば、クロロ）であり得る。いくつかの実施形態では、化合物は、化合物ＤＢＭ  ３２８ではない。
【００４６】
本明細書に説明されるクマリン誘導体のクラスは、式ＩＩ：
【化１４】
0006407955.tif 000028
によって表されるもの、及びその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグである。
【００４７】
式ＩＩでは、Ｌは、ヘテロアリールである。
【００４８】
また、式ＩＩでは、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、及びＲ９は、各々独立して、水素及びメトキシから選択される。
【００４９】
いくつかの実施例では、式ＩＩは、構造ＩＩ−Ａによって表される。
【化１５】
0006407955.tif 000029
【００５０】
構造ＩＩ−Ａでは、Ｘは、ＮＨまたはＯである。
【００５１】
また、構造ＩＩ−Ａでは、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、及びＲ９は、式ＩＩのために上に定義される通りである。
【００５２】
いくつかの実施例では、式ＩＩは、構造ＩＩ−Ｂによって表される。
【化１６】
0006407955.tif 000030
【００５３】
構造ＩＩ−Ｂでは、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、及びＲ９は、式ＩＩのために上に定義される通りである。
【００５４】
いくつかの実施例では、式ＩＩは、構造ＩＩ−Ｃによって表される。
【化１７】
0006407955.tif 000031
【００５５】
構造ＩＩ−Ｃでは、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、及びＲ９は、式ＩＩのために上に定義される通りである。
【００５６】
式ＩＩの例としては、次の化合物が挙げられる。
【化１８−１】
0006407955.tif 000032
【化１８−２】
0006407955.tif 000033
【００５７】
本明細書に説明されるクマリン誘導体のクラスは、式ＩＩＩ：
【化１９】
0006407955.tif 000034
によって表されるもの、及びその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグである。
【００５８】
式ＩＩＩでは、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、及びＸ４は、各々独立して、ＣＨ及びＮから選択される。
【００５９】
また、式ＩＩＩでは、Ｙは、ＯまたはＮＲであり、式中、Ｒは、水素またはメチルである。
【００６０】
加えて、式ＩＩＩでは、Ｒ２は、水素、Ｃ１−６アルキル、ハロゲン、またはトリフルオロアルキルである。随意に、Ｒ２は、Ｃｌまたはメチルである。
【００６１】
更には、式ＩＩＩでは、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、及びＲ９は、各々独立して、水素及びメトキシから選択される。
【００６２】
いくつかの実施例では、式ＩＩＩは、構造ＩＩＩ−Ａによって表される。
【化２０】
0006407955.tif 000035
【００６３】
構造ＩＩＩ−Ａでは、Ｒ２、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、及びＲ９は、式ＩＩＩのために上に定義される通りである。
【００６４】
いくつかの実施例では、式ＩＩＩは、構造ＩＩＩ−Ｂによって表される。
【化２１】
0006407955.tif 000036
【００６５】
構造ＩＩＩ−Ｂでは、Ｒ２、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、及びＲ９は、式ＩＩＩのために上に定義される通りである。
【００６６】
いくつかの実施例では、式ＩＩＩは、構造ＩＩＩ−Ｃによって表される。
【化２２】
0006407955.tif 000037
【００６７】
構造ＩＩＩ−Ｃでは、Ｒ２、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、及びＲ９は、式ＩＩＩのために上に定義される通りである。
【００６８】
いくつかの実施例では、式ＩＩＩは、構造ＩＩＩ−Ｄによって表される。
【化２３】
0006407955.tif 000038
【００６９】
構造ＩＩＩ−Ｄでは、Ｒは、水素またはメチルである。
【００７０】
また、構造ＩＩＩ−Ｄでは、Ｒ２、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、及びＲ９は、式ＩＩＩのために上に定義される通りである。
【００７１】
式ＩＩＩの例としては、次の化合物が挙げられる。
【化２４】
0006407955.tif 000039
【００７２】
本明細書に説明されるクマリン誘導体のクラスは、式ＩＶ：
【化２５】
0006407955.tif 000040
によって表されるもの、及びその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグである。
【００７３】
式ＩＶでは、Ｘ１は、ＯまたはＮＣＨ３である。
【００７４】
また、式ＩＶでは、Ｘ２は、ＣＨまたはＮである。
【００７５】
加えて、式ＩＶでは、Ｙは、Ｏ、ＮＨ、またはＮＣＨ３である。
【００７６】
更には、式ＩＶでは、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、及びＲ９は、各々独立して、水素及びメトキシから選択される。
【００７７】
式ＩＶの例としては、次の化合物が挙げられる。
【化２６】
0006407955.tif 000041
【００７８】
本明細書に説明されるクマリン誘導体のクラスは、式Ｖ：
【化２７】
0006407955.tif 000042
によって表されるもの、及びその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグである。
【００７９】
式Ｖでは、Ｒ１及びＲ２は、各々独立して、水素、置換もしくは非置換のアミノ、及び置換もしくは非置換のカルボニルから選択される。
【００８０】
式Ｖの例としては、次の化合物が挙げられる。
【化２８】
0006407955.tif 000043
【００８１】
本明細書に説明されるクマリン誘導体のクラスは、式ＶＩ：
【化２９】
0006407955.tif 000044
によって表されるもの、及びその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグである。
【００８２】
式ＶＩでは、Ｘは、ＣＨ２、ＮＨ、またはＯである。
【００８３】
式ＶＩの例としては、次の化合物が挙げられる。
【化３０】
0006407955.tif 000045
【００８４】
ＩＩ．化合物の作製方法
本明細書に説明される化合物は、様々な方法で調製され得る。化合物は、種々の合成方法を用いて合成され得る。これらの方法のうちの少なくともいくつかは、有機合成化学の分野で周知のものである。本明細書に説明される化合物は、容易に入手可能な出発材料から調製され得る。最適反応条件は、使用される特定の反応物または溶媒によって異なり得るが、このような条件は、ルーチン最適化手順によって当業者が決定できる。
【００８５】
式Ｉ−ＶＩの変分は、各化合物について説明されるように、種々の構成物の加算、減算、または移動を含む。同様に、１つ以上のキラル中心が分子内に存在する場合、全ての考えられるキラル変異形が含まれる。加えて、化合物合成は、種々の化学基の保護及び脱保護を含むことができる。保護及び脱保護の使用、及び適切な保護基の選択は、当業者によって決定され得る。保護基の化学は、例えば、Ｇｒｅｅｎｅ，ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，２ｄ．Ｅｄ．，Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，１９９１に見出すことができ、当該文献は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【００８６】
本明細書に説明される化合物を生成するための反応は、有機合成の当業者によって選択され得る溶媒中で行われ得る。溶媒は、反応が行われる条件、すなわち、温度及び圧力下で、出発材料（反応物）、中間体、または生成物と実質的に非反応性であり得る。反応は、１つの溶媒または２つ以上の溶媒の混合物中で行われ得る。生成物または中間体形成は、当該分野では周知の任意の好適な方法に従って、監視され得る。例えば、生成物形成は、核磁気共鳴分光法（例えば、１Ｈまたは１３Ｃ）赤外分光法、分光光度法（例えば、ＵＶ可視）、または質量分析法等の分光手段、または高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）または薄層クロマトグラフィー等のクロマトグラフィーによって監視され得る。
【００８７】
ＩＩＩ．医薬製剤
本明細書に説明される化合物またはその誘導体は、薬学的組成物中に提供され得る。薬学的組成物は、局所治療または全身治療が所望されるかどうか、及び治療される領域に依存して、数多くの方法で投与される。薬学的組成物は、局所、経口、非経口、静脈内、関節腔内、腹腔内、筋肉内、皮下、皮内、体腔内（例えば、直腸、膀胱内、膀胱器官の管腔等）、経皮、肝内、頭蓋内、吸入投与／吸引、または気管支鏡検査を介する設置を含む投与のいくつかの経路のうちの任意のものを介して投与される。皮内投与は、リンパ輸送機能不全の部位に対して求心性である部位での投与を含む。随意に、薬学的組成物は、経口吸引、経鼻吸引、鼻腔内粘膜投与、または坐剤によって投与される。薬学的組成物はまた、例えば、炎症関節等の例えば炎症の部位で注射または注入され得る。吸引による薬学的組成物の投与は、例えばエアロゾルの形態で、スプレーまたは小滴機構による送達を介して鼻または口を通ることができる。
【００８８】
意図する投与の様式に応じて、薬学的組成物は、例えば、錠剤、坐剤、丸剤、カプセル剤、粉末、液体、または懸濁剤、好ましくは、正確な量の１回の投与に好適な単位剤形等の固体、半流動性、または液体剤形の形態であり得る。組成物は、薬学的に許容される担体と組み合わされる本明細書に説明される化合物またはこれらの誘導体の治療有効量を含み、加えて、他の薬用薬剤、薬学的薬剤、担体、または希釈剤を含んでもよい。薬学的に許容されるとは、生物学的に望ましくないか、または他の理由で望ましくないことがない材料を意味し、許容されない生物学的効果を引き起こすか、またはそれが含まれる薬学的組成物の他の成分と有害な方法で相互作用することなく、選択された化合物と一緒に個人に投与できることである。
【００８９】
本明細書に使用されるとき、担体という用語は、任意の賦形剤、希釈剤、充填剤、塩、緩衝剤、安定剤、可溶化剤、リピド、安定剤、または医薬製剤を使用する当該分野で周知である他の材料を包括する。組成物中で使用する担体の選択は、組成物の意図する投与の経路に依存するであろう。これらの材料を含有する薬学的に許容される担体及び製剤は、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，２１ｓｔ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，ｅｄ．Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ｉｎ  Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ  Ｐａ．，２００５に説明される。生理学的に許容される担体の例としては、リン酸緩衝剤、クエン酸緩衝剤、及び他の有機酸を含む緩衝剤等の緩衝剤；アスコルビン酸を含む酸化防止剤；低分子量（約１０残渣未満）のポリペプチド；血清アルブミン、ゼラチン、またはイムノグロブリン等のタンパク質；ポリビニルピロリドン等の親水性ポリマー；グリシン、グルタミン、アスパラギン、アルギニン、またはリジン等のアミノ酸；単糖類、二糖類、及びグルコース、マンノース、またはデキストリンを含む他の炭水化物；ＥＤＴＡ等のキレート剤；マンニトールまたはソルビトール等の糖アルコール；ナトリウム等の塩形成対イオン；及び／またはＴＷＥＥＮ（登録商標）（ＩＣＩ，Ｉｎｃ．；Ｂｒｉｄｇｅｗａｔｅｒ，Ｎｅｗ  Ｊｅｒｓｅｙ）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、及びＰＬＵＲＯＮＩＣＳ（商標）（ＢＡＳＦ；Ｆｌｏｒｈａｍ  Ｐａｒｋ，ＮＪ）等の非イオン性界面活性剤が挙げられる。
【００９０】
非経口注射に好適な本明細書に説明される化合物、またはその誘導体を含有する組成物は、生理学的に許容される滅菌水溶性または非水溶性溶液、分散液、懸濁剤またはエマルション、及び滅菌注射剤または分散液中に再構築される滅菌粉末を含んでもよい。好適な水性または非水性の担体、希釈剤、溶媒、またはビヒクルの例として、水、エタノール、ポリオール（プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、グリセロール等）、それらの好適な混合物、植物油（オリーブ油等）、およびオレイン酸エチル等の注射用有機エステルが挙げられる。例えば、レシチン等のコーティング剤の使用によって、分散液の場合には必要とされる粒径の維持によって、および界面活性剤の使用によって、適切な流動性を維持することができる。
【００９１】
これらの組成物は、保存剤、湿潤剤、乳化剤、及び予製剤等のアジュバントも含有できる。微生物の作用の予防は、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸等の種々の抗菌剤及び抗真菌剤によって促進することができる。例えば、糖、塩化ナトリウム等の等張剤がまた、含まれてもよい。注射可能な薬学的形態の持続的吸収は、吸収を遅らせる薬剤、例えば、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンの使用によってもたらすことができる。
【００９２】
本明細書に説明される化合物またはその誘導体の経口投与のための固体剤形としては、カプセル剤、錠剤、丸剤、粉末、及び顆粒剤が挙げられる。このような固体剤形では、本明細書に説明される化合物またはその誘導体は、クエン酸ナトリウムまたはリン酸二カルシウム、または（ａ）例えば、デンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール、及びケイ酸等の充填剤もしくは増量剤、（ｂ）例えば、カルボキシメチルセルロース、アリグネート（ａｌｉｇｎａｔｅｓ）、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、スクロース、及びアカシア等の結合剤、（ｃ）例えば、グリセロール等の湿潤剤、（ｄ）例えば、寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモもしくはタピオカデンプン、アルギン酸、特定の複雑珪酸塩、及び炭酸ナトリウム等の崩壊剤、（ｅ）例えば、パラフィン等の溶液遅延剤、（ｆ）例えば、四級アンモニウム化合物等の吸収促進剤、（ｇ）例えば、セチルアルコール及びモノステアリン酸グリセロール等の湿潤剤、（ｈ）例えば、カオリン及びベントナイト等の吸着剤、及び（ｉ）例えば、タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム等の滑沢剤、またはそれらの混合物等である少なくとも１つの不活性の通例賦形剤（もしくは担体）と混合される。カプセル剤、錠剤、および丸剤の場合、剤形はまた、緩衝剤を含んでもよい。
【００９３】
同様の種類の固体組成物は、ラクトースまたは乳糖等の賦形剤ならびに高分子量ポリエチレングリコール等を用いて軟充填及び硬充填のゼラチンカプセル剤の充填剤として用いてもよい。
【００９４】
錠剤、糖剤、カプセル剤、丸剤、及び顆粒剤等の固体剤形は、腸溶コーティング及び当該分野で周知の他のもの等のコーティング及びシェルで調製することができる。それらは、不透明化剤を含有してもよく、腸管の特定の部分において、活性化合物（単数または複数）を遅延様式で放出するような組成物であってもよい。使用することができる包埋組成物の例は、ポリマー物質及びワックスである。活性化合物はまた、適切な場合、上述の賦形剤のうちの１つ以上と共にマイクロカプセル化された形態であってもよい。
【００９５】
本明細書に説明される化合物またはその誘導体の経口投与のための液体剤形としては、薬学的に許容されるエマルション、溶液、懸濁剤、シロップ、及びエリキシル剤が挙げられる。活性化合物に加えて、液体剤形は、水、または、例えば、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、エチルカーボネート、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド、油、特に、綿実油、落花生油、コーン胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油、ゴマ油、グリセロール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレングリコール、及びソルビタンの脂肪酸エステル、またはこれらの物質の混合物等の、他の溶媒、可溶化剤、及び乳化剤等の当該分野で一般に使用される不活性希釈剤を含有することができる。
【００９６】
このような不活性希釈剤以外に、組成物はまた、湿潤剤、乳化剤、懸濁化剤、甘味剤、香味剤、または芳香剤等の更なる薬剤も含むことができる。
【００９７】
活性化合物に加えて、懸濁剤は、例えば、エトキシル化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトール及びソルビタンエステル、微結晶性セルロース、メタ水酸化アルミニウム（ａｌｕｍｉｎｕｍ  ｍｅｔａｈｙｄｒｏｘｉｄｅ）、ベントナイト、寒天及びトラガント、またはこれらの物質の混合物等の更なる薬剤を含有することができる。
【００９８】
直腸投与のための本明細書に説明される化合物またはその誘導体の組成物は、随意に、化合物を好適な非刺激性賦形剤、またはココアバター、ポリエチレングリコール、もしくは坐剤ワックス等の担体と共に混合することによって調製され得、常温では固体であるが体温では液体であり、よって、直腸または膣腔で融解し、活性成分を放出する坐剤である。
【００９９】
本明細書に説明される化合物またはその誘導体の局部投与のための剤形としては、軟膏剤、粉末、スプレー、及び吸引剤が挙げられる。本明細書に説明される化合物またはその誘導体は、生理学的に許容される担体及び必要とされ得るように任意の保存剤、緩衝剤、または噴霧剤と共に滅菌条件下で混合される。眼部用製剤、軟膏剤、粉末、及び溶液もまた、組成物の範囲内に属するとして企図される。
【０１００】
組成物は、本明細書に説明される化合物のうちの１つ以上及び薬学的に許容される担体を含むことができる。本明細書に使用されるとき、薬学的に許容される塩という用語は、健全な医療判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、及びアレルギー反応等無しに対象の皮膚と接触させて使用するのに好適であり、合理的な利益／リスク比につり合い、本明細書に説明される化合物のそれらの意図する使用、ならびに可能な場合、双性イオン形態に関して有効である、本明細書に説明される化合物またはその誘導体のそれらの塩を指す。塩という用語は、本明細書に説明される化合物の比較的無毒の無機及び有機酸付加塩を指す。これらの塩は、化合物の単離及び精製中に生体内原位置で、または、精製した化合物をその遊離塩基形態で好適な有機または無機酸と別個に反応させること、及びこのようにして形成された塩を単離することによって、調製され得る。代表的な塩は、臭化水素酸塩、塩酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、硝酸塩、酢酸塩、シュウ酸塩、吉草酸塩、オレイン酸塩、パルミチン酸塩、ステアリン酸塩、ラウリン酸エステル、ホウ酸塩、安息香酸塩、乳酸塩、リン酸塩、トシル酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、ナフチル酸メシル酸塩、グルコヘプトン酸塩、ラクトビオン酸塩、メタンスルホン酸塩、及びラウリルスルホン酸塩等が挙げられる。これらのものは、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム等のアルカリ及びアルカリ性土類金属ベースのカチオン、ならびに限定されないが、アンモニウム、テトラメチルアンモニウム、テトラエチルアンモニウム、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、エチルアミン等を含む、非毒性アンモニウム、４級アンモニウム、及びアミンカチオンを含むことができる。（Ｓ．Ｍ．Ｂａｒｇｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．（１９７７）６６，１を参照されたく、少なくともその文献中に教示される組成物に関して、当該文献は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。）
【０１０１】
本明細書に説明される化合物及び組成物または本明細書に説明されるようなその薬学的に許容される塩の投与は、障害の治療に有効な期間にわたって、本明細書に説明される化合物及び組成物または薬学的に許容される塩の治療有効量を用いて行われ得る。本明細書に説明される化合物及び組成物または本明細書に説明されるようなその薬学的に許容される塩の有効量は、当業者によって決定でき、１日当たり１〜４回等の単回用量でまたは個々の分割量の形態で投与され得る、１日当たり哺乳類の約０．５〜約２００ｍｇ／ｋｇ体重の活性化合物の例示的な用量を含む。あるいは、用量は、１日当たり約０．５〜約１５０ｍｇ／ｋｇ体重の活性化合物、１日当たり約０．５〜１００ｍｇ／ｋｇ体重の活性化合物、１日当たり約０．５〜約７５ｍｇ／ｋｇ体重の活性化合物、１日当たり約０．５〜約５０ｍｇ／ｋｇ体重の活性化合物、１日当たり約０．５〜約２５ｍｇ／ｋｇ体重の活性化合物、１日当たり約１〜約２０ｍｇ／ｋｇ体重の活性化合物、１日当たり約１〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重の活性化合物、１日当たり約２０ｍｇ／ｋｇ体重の活性化合物、１日当たり約１０ｍｇ／ｋｇ体重の活性化合物、または１日当たり約５ｍｇ／ｋｇ体重の活性化合物であってもよい。当業者は、特定の用量レベル及び任意の特定の対象のための投与量の頻度が変化し得、用いられる特定の化合物の活量、その化合物の代謝安定性及び作用の長さ、対象の種、年齢、体重、健康状態、性別、及び食生活、投与の様式及び時期、排泄作用の割合、合剤、及び特定の状態の重症度を含む様々な要因に依存するであろうことを理解するであろう。
【０１０２】
ＩＶ．使用方法
本明細書に説明される本方法は、対象の過剰増殖疾患を治療する方法を含む。これらの方法は、本明細書に説明されるような化合物、またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグの有効量を対象に投与するステップを含む。「有効量」という表現は、方法における化合物の量を説明するために使用された場合、所望の薬理学的な効果または他の効果、例えば、腫瘍成長速度の現象をもたらす量を達成する化合物の量を指す。更なるステップが、本明細書に説明される本方法内に含まれ得る。例えば、本方法は、過剰増殖疾患を持つ対象を選択し、本明細書に説明されるような化合物のうちの１つ以上を対象に投与するステップを更に含み得る。本明細書に説明される化合物及び組成物またはその薬学的に許容される塩は、これらに限定されないが小児及び老年集団を含むヒト、及び例えば、獣医学適用等の動物における過剰増殖疾患を治療するために有用である。随意に、過剰増殖疾患は、癌である。随意に、過剰増殖疾患は、多発性嚢胞腎疾患である。随意に、過剰増殖疾患は、特発性肺線維症である。
【０１０３】
上述のように、本明細書に説明される化合物は、癌、多発性嚢胞腎疾患、及び線維症を含む、過剰増殖疾患の治療において有用である。本明細書に説明される化合物は、正常細胞の種類においてまたは非増殖性細胞において細胞増殖を著しく阻害しない。
【０１０４】
随意に、癌は、膀胱癌、脳癌、乳癌、結腸直腸癌、子宮頸癌、消化管癌、尿生殖器癌、頭頸部癌、肺癌、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、腎癌、皮膚癌、または精巣癌である。
【０１０５】
随意に、多発性嚢胞腎疾患は、常染色体優性多発性嚢胞腎（ＡＤＰＫＤ）または常染色体劣性多発性嚢胞腎（ＡＲＰＫＤ）である。対象の多発性嚢胞腎疾患を治療する本方法は、多発性嚢胞腎疾患の症状を治療または予防することを更に含み得る。症状は、ＡＤＰＫＤまたはＡＲＰＫＤに関連し得る。例えば、症状としては、脳動脈瘤、肝臓、膵臓、及び精巣の嚢胞、尿路感染症、高血圧、及び結腸の憩室が挙げられる。
【０１０６】
随意に、線維症は、肺線維症、特発性肺線維症、硬変、心内膜心筋線維症、縦隔線維症、骨髄線維症、後腹膜線維症、進行性塊状線維症、腎性全身性線維症、クローン病、ケロイド、陳旧性心筋梗塞、強皮症／全身性硬化症、関節線維症、及び乳房、前立腺、血液、脳、腎臓、肝臓、または皮膚の癒着性関節包炎である。更なる実施形態では、線維症は、特発性肺線維症である。
【０１０７】
本明細書に説明される本方法では、治療される対象は、１つ以上の更なる薬剤を使って更に治療され得る。１つ以上の更なる薬剤及び本明細書に説明される化合物またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグは、単一の組成物中（例えば、混合物として）に、または同時投与を含む任意の順でならびに最大数日間あける時間的に離れた順で別個の組成物中に、一緒に投与されてもよい。本方法はまた、１つ以上の更なる薬剤及び／または本明細書に説明される化合物またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグの２回以上の投与を含むことができる。１つ以上の更なる薬剤及び本明細書に説明される化合物またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグの投与は、同じかまたは異なる経路によって、かつ同時または順次であり得る。
【０１０８】
治療薬としては、化学治療薬が挙げられるが、これに限定されない。化学治療薬は、異常に成長する細胞の成長を阻害または抑止する際に効果的な化合物または組成物である。したがって、このような薬剤は、癌ならびに異常な細胞成長によって標識される他の疾患を薬学的に治療するために使用され得る。化学療法化合物の例示的な例としては、ベキサロテン、ゲフィチニブ、エルロチニブ、ゲムシタビン、パクリタキセル、ドセタキセル、トポテカン、イリノテカン、テモゾロミド、カルムスチン、ビノレルビン、カペシタビン、ロイコボリン、オキサリプラチン、ベバシズマブ、セツキシマブ、パニツムマブ、ボルテゾミブ、オブリメルセン、ヘキサメチルメラミン、イホスファミド、ＣＰＴ−１１、デフルノミド（ｄｅｆｌｕｎｏｍｉｄｅ）、シクロヘキシミド、ジカルバジン（ｄｉｃａｒｂａｚｉｎｅ）、アスパラギナーゼ、ミトタント（ｍｉｔｏｔａｎｔ）、ビンブラスチン硫酸塩、カルボプラチン、コルヒチン、エトポシド、メルファラン、６−メルカプトプリン、テニポシド、ビンブラスチン、抗生物質誘導体（例えば、ドキソルビシン、リポソームドキソルビシン、及びジエチルスチルベストロール等のアントラサイクリン、ドキソルビシン、ブレオマイシン、ダウノルビシン、及びダクチノマイシン）；抗エストロゲン剤（例えば、タモキシフェン）；代謝拮抗薬（例えば、フルオロウラシル（ＦＵ）、５−ＦＵ、メトトレキサート、フロクスウリジン、インターフェロンアルファ−２Ｂ、グルタミン酸、プリカマイシン、メルカプトプリン、及び６−チオグアニン）；細胞毒性薬物（例えば、カルムスチン、ＢＣＮＵ、ロムスチン、ＣＣＮＵ、シトシンアラビノシド、シクロホスファミド、エストラムスチン、ヒドロキシ尿素、プロカルバジン、マイトマイシン、ブスルファン、シスプラチン、ビンクリスチン、及びビンクリスチン硫酸塩）；ホルモン（例えば、メドロキシプロゲステロン、エストラムスチンリン酸エステルナトリウム、エチニルエストラジオール、エストラジオール、メゲストロール酢酸エステル、メチルテストステロン、ジエチルスチルベストロール二リン酸塩、クロロトリアニセン、及びテストラクトン）；ナイトロジェンマスタード誘導体（例えば、メファレン（ｍｅｐｈａｌｅｎ）、クロラムブシル、メクロレタミン（ナイトロジェンマスタード）、チオテパ）；及びステロイド（例えば、リン酸ベタメタゾンナトリウム（ｂｅｔｈａｍｅｔｈａｓｏｎｅ  ｓｏｄｉｕｍ  ｐｈｏｓｐｈａｔｅ））が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１０９】
治療薬としてはまた、疼痛薬物（例えば、ＮＳＡＩＤ、トラマドール、クロニジン、麻薬、及びオピオイド）、血圧を下げる薬剤（例えば、降圧薬または利尿薬）、及び抗生物質が挙げられ得るが、これらに限定されない。治療薬は、プレドニゾン、アザチオプリン、及びＮ−アセチルシステインを更に含むことができる。
【０１１０】
前述の治療薬のうちの任意のものが、本明細書に説明される組成物との任意の組み合わせで使用され得る。組み合わせは、併用して（例えば、混合物として）、別個にであるが同時に（例えば、同じ対象内に別個の静脈内ラインを介して）、または連続して（例えば、化合物または薬剤のうちの１つが第１に所与され、その後に第２のものが続く）のいずれかで、投与される。したがって、組み合わせという用語は、２つ以上の薬剤の併用投与、同時投与、または連続投与を指すように使用される。
【０１１１】
本明細書に説明されるような本方法及び化合物は、予防的治療及び薬学的治療の両方にとって有用である。予防的使用については、本明細書に説明されるような化合物及びその薬学的に許容される塩の治療有効量は、発症前（例えば、過剰増殖疾患の明らかな徴候の前）、早期発症中（例えば、過剰増殖疾患の初期徴候及び症状に応じて）、または過剰増殖疾患の発生の後に、対象に投与される。予防的投与は、過剰増殖疾患の症状の顕在化の前に数日〜数年にわたって、起こり得る。薬学的治療は、過剰増殖疾患が診断された後に、本明細書に説明されるような化合物及び組成物もしくはその薬学的に許容される塩の治療有効量を対象に投与することを含む。
【０１１２】
本明細書に説明される方法及び化合物は、細胞内の２つ以上の熱ショックタンパク質シャペロン間の相互作用を阻害する際にも有用である。細胞内の２つ以上の熱ショックタンパク質シャペロン間の相互作用を阻害する本方法は、本明細書に説明されるように細胞を化合物と接触させることを含む。随意に、２つ以上の熱ショックタンパク質シャペロンは、Ｈｓｐ−９０、Ｈｓｐ−７０、Ｈｓｃ−７０、及びＨｓｐ−４０からなる群から選択される。随意に、本方法は、インビトロで実施される。随意に、本方法は、インビボで実施される。
【０１１３】
随意に、本明細書に説明される本方法及び化合物は、ビメンチンのリン酸化に関与するキナーゼを調節するために使用され得る。例えば、本明細書に説明される本方法及び化合物は、Ｃｄｋ５を含む調節されたサイクリン依存性キナーゼ（ｃｄｋ）に対して使用され得る。随意に、本明細書に説明される本方法及び化合物を用いるビメンチンのリン酸化に関与するキナーゼの調節は、ビメンチン線維分解をもたらし得る。随意に、ビメンチン線維分解は、癌細胞の増加したアポトーシスをもたらし得る。
【０１１４】
予防的治療及び薬学的治療のための本明細書の本方法は、随意に、過剰増殖疾患を持つ、または過剰増殖疾患の発生の危険がある対象を選択することを含む。当業者は、例えば、疾患または状態の個人歴または家族歴、及び治験（例えば、画像診断、生検、遺伝子試験）等を含む例えば様々な予後方法及び診断方法を用いてこのような決定を行うことができる。
Ｖ．キット
【０１１５】
対象の過剰増殖疾患を治療または予防するためのキットがまた、本明細書に提供される。キットは、本明細書に説明される化合物または組成物のうちの任意のものを含み得る。例えば、キットは、式Ｉ、式ＩＩ、式ＩＩＩ、式ＩＶ、式Ｖ、式ＶＩ、またはこれらの組み合わせの化合物を含み得る。キットは、化学治療薬、疼痛薬物、血圧を下げる薬剤（例えば、降圧薬または利尿薬）、抗生物質、プレドニゾン、アザチオプリン、及びＮ−アセチルシステイン等の１つ以上の更なる薬剤を更に含むことができる。キットは、本明細書に説明される化合物または組成物のうちの任意のものの経口製剤を含み得る。キットは、本明細書に説明される化合物または組成物のうちの任意のものの静脈内製剤を含み得る。キットは、本キットを使用するための説明書（例えば、対象を治療するための説明書）、コンテナ、化合物または組成物を投与するための手段（例えば、シリンジ）、及び／または担体を更に含むことができる。
【０１１６】
ＶＩ．スクリーニングの方法
過剰増殖疾患を治療するための化合物のスクリーニングの方法が、提供される。このような方法は、細胞を候補化合物と接触させてスクリーニングをするステップと、過剰増殖性細胞の増殖において候補化合物の効果を決定するステップと、を含む。本方法は、インビトロまたはインビボで実施され得る。本方法は、少なくとも部分的に、過剰増殖細胞によって引き起こされた疾患または状態を治療することが可能な化合物をスクリーニングするために有効かつ信頼できる手段を提供する。
【０１１７】
随意に、本方法は、過剰増殖細胞を候補薬剤と接触させること、これらに限定されないが、細胞数、細胞生存率、細胞周期進行、アポトーシス性プロセス内で関与するエン（ｅｎ）酵素のアポトーシス性頻度または活性等の細胞成長を示す測定値を獲得すること、及び特性の測定値が特性のベースライン値よりも著しく少ない場合に推定剤として候補剤を特定すること、を含むことができる。
【０１１８】
一実施形態では、このようなスクリーニングアッセイは、例えば、細胞成長を示す測定値を阻害する量を適切なモデル系（これらに限定されないが本明細書に説明されるそれらの系等）で決定すること、及び候補化合物が存在しないことと比較して、その存在下で前述のレベルまたは活性の差を検出すること、によって実施され得る。
【０１１９】
種々のスクリーニングアッセイは、症状、疾患状態、及び本明細書に説明される状態における試験化合物の効果を測定することを伴うインビボアッセイと組み合され得る。
【０１２０】
スクリーニングアッセイにおいて使用するために好適な試験化合物は、従来の化合物ライブラリー等の任意の好適な供給源から獲得することができる。本試験化合物はまた、生物学的ライブラリー、空間的に対処可能な平行固相または溶液相ライブラリー、逆重畳を必要とする合成ライブラリー方法、「１つのビーズ１つの化合物」ライブラリー方法、及びアフィニティクロマトグラフィー選択を用いる合成ライブラリー方法を含む当該分野では知られているコンビナトリアルライブラリー方法の多数の手法のうちの任意のものを用いて獲得することができる。本生物学的ライブラリー手法は、ペプチドライブラリーを含むが、他の４つの手法は、ペプチド、非ペプチドオリゴマー、または化合物の小分子ライブラリーを含む。したがって、実質的に、いくつもの化学抽出物または化合物が、本明細書に説明される本方法を用いてスクリーニングできる。このような抽出物または化合物の例としては、植物ベース、真菌ベース、原核ベース、または動物ベース抽出物、発酵ブロス、及び合成化合物、ならびに既存の化合物の修正が挙げられるが、これらに限定されない。数多くの方法がまた、これらに限定されないが糖類系、リピドベース、ペプチドベース、ポリペプチドベース、及び核酸ベース化合物を含むいくつもの化学化合物のランダムまたは直接合成（例えば、半合成または全合成）を生成するために利用可能である。細菌性、真菌性、植物性、及び動物性抽出物の形態の天然化合物の合成化合物ライブラリー（単数及び複数）は、市販されている。加えて、天然及び合成的に生成されたライブラリーは、所望の場合、当該分野で周知の方法に従って、例えば、標準抽出及び分画方法によって生成される。更に、所望の場合、任意のライブラリーまたは化合物が、標準の化学的、物理的、または生化学的方法を用いて容易に修正される。
【０１２１】
分子ライブラリーの合成のための方法の例は、当該分野に見出すことができる。化合物のライブラリーは、溶液中、またはビーズ、細菌、胞子、プラスミド、またはファージに存在し得る。
【０１２２】
本開示のスクリーニングアッセイは、高処理量形式の影響を特に受けやすく、よって、例えば、小有機分子のコンビナトリアルライブラリー、ペプチド、及び核酸分子等のスクリーンへの手段を提供する。
【０１２３】
本明細書で使用されるとき、治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）、治療する（ｔｒｅａｔ）、または治療すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）という用語は、疾患または状態の１つ以上の症状を低減させる方法を指す。したがって、開示される方法では、治療は、その疾患または状態の１つ以上の症状の重症度における１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％の低減を指し得る。例えば、疾患を治療するための方法は、対照と比較して、対象のその疾患の１つ以上の症状または徴候（例えば、腫瘍の大きさまたは腫瘍成長の速度）において１０％の低減が存在する場合、治療であるとみなされる。本明細書に使用されるとき、対照は、未治療の状態（例えば、本明細書に説明される化合物及び組成物を使って治療されていない腫瘍細胞）を指す。したがって、この低減は、天然レベルまたは対照レベルと比較して、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、または１０％〜１００％の間の任意の低減率であり得る。治療が、必ずしも疾患、状態、またはその疾患もしくは状態の症状の治癒もしくは完全消失を指す必要はないことを理解されたい。
【０１２４】
本明細書に使用されるとき、疾患もしくは障害を予防する（ｐｒｅｖｅｎｔ）、予防すること（ｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇ）、及びその予防（ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ）という用語は、対象が疾患もしくは障害の１つ以上の症状を示し始める前、またはそれとほぼ同時に起こる、例えば、組成物または治療薬の投与等の動作を指し、疾患もしくは障害の１つ以上の症状の発症または重症度を阻害または遅らせる。
【０１２５】
本明細書に使用されるとき、減少、低減、または阻害に関する参照は、対照レベルと比較して、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、またはそれ以上の変化を含む。このような用語は、完全な排除を含み得るが、必ずしもそれを含むとは限らない。
【０１２６】
本明細書に使用されるとき、対象は、哺乳類及び非哺乳類の両方を意味する。哺乳類は、例えば、ヒト、例えば、類人猿及びサル等の非ヒト霊長類、ウシ、ウマ、ヒツジ、ラット、マウス、ブタ、及びヤギを含む。非哺乳類は、例えば、魚類及び鳥類を含む。
【０１２７】
本出願全体を通して、種々の出版物が参照される。これらの出版物のその全体における開示は、参照により本出願に組み込まれる。
【０１２８】
以下の実施例は、本明細書に説明される本方法及び組成物の特定の態様を更に示すこと意図するものであり、特許請求の範囲を限定することを意図しない。
【実施例】
【０１２９】
実施例１：合成
ＤＢＭ−３０８の合成スキームを、スキーム１に示す。
【化３１】
0006407955.tif 000046
【０１３０】
ＤＢＭ−Ｅ−１の合成スキームを、スキーム２に示す。
【化３２】
0006407955.tif 000047
【０１３１】
ＤＢＭ−Ｅ−２の合成スキームを、スキーム３に示す。
【化３３】
0006407955.tif 000048
【０１３２】
ＤＢＭ−Ｅ−３を、以下に列挙する手順に従って調製し、合成スキームをスキーム４に示した。
【化３４】
0006407955.tif 000049
【０１３３】
３−（２−ブロモアセチル）−８−クロロ−２Ｈ−クロメン−２−オン（１５０ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ）及び１−ブロモ−２−エトキシベンゼン（１０８ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ）を、Ｃｓ２ＣＯ３（５２８ｍｇ、１．６２ｍｍｏｌ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（４０ｍｇ、０．０５４ｍｍｏｌ．）、キサントホス（６０ｍｇ、０．１０８ｍｍｏｌ）、及びジオキサン（２ｍＬ）の存在下で１６０℃にて１５分間マイクロウェーブ内で反応させた。次いで、得られた生成物を、分取ＨＰＬＣで精製して、黄色固体として８−クロロ−３−（２−（２−エトキシフェニルアミノ）チアゾールｌ−４−イル）−２Ｈ−クロメン−２−オン（２０ｍｇ、１０％）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：３９９．１［Ｍ＋１］＋；１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１．４０（ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，３Ｈ）、４．１４（ｑ，Ｊ＝７Ｈｚ，２Ｈ）、６．９９〜７．０５（ｍ，３Ｈ）、７．３９（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ）、７．７６〜７．７９（ｍ，２Ｈ）、７．９３（ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，１Ｈ）、８．４８〜８．４９（ｍ，１Ｈ）、８．６５（ｓ，１Ｈ）、９．５４（ｓ，１Ｈ）。
【０１３４】
ＤＢＭ−Ｅ−４を、以下に列挙する手順に従って調製し、合成スキームをスキーム５に示した。
【化３５】
0006407955.tif 000050
【０１３５】
ステップ１：Ｎ，Ｎ−ジメチル−２−（２−ニトロフェノキシ）エタンアミン：
乾燥ＴＨＦ（２００ｍＬ）中の２−ニトロフェノール（１３．９ｇ、１０ｍｍｏｌ）、２−（ジメチルアミノ）エタノール（１０．７ｇ、１２ｍｍｏｌ）、及びＰＰｈ３（２９ｇ、１１ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃でＤＩＡＤ（２２ｇ、１１ｍｍｏｌ）を滴下添加した。次いで、混合物を室温で１７時間攪拌した。溶媒を除去した。残渣を１Ｎ  ＨＣｌ水溶液中に溶解し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。水層を飽和ＮａＨＣＯ３で中和し、ＥｔＯＡｃ（２ｘ）で抽出した。有機層を回収し、ブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮して黄色油としてＮ，Ｎ−ジメチル−２−（２−ニトロフェノキシ）エタンアミン（２．１ｇ、１０％）を提供した。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：２１１．０［Ｍ＋１］＋。
【０１３６】
ステップ２：２−（２−（ジメチルアミノ）エトキシ）アニリン：
ＥｔＯＨ（１０ｍＬ）中のＮ，Ｎ−ジメチル−２−（２−ニトロフェノキシ）エタンアミン（１．０ｇ、４．７６ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｐｄ／Ｃ（８００ｍｇ、１０％）を添加した。混合物をＨ２下で５０℃で２時間攪拌した。反応混合物を室温に冷却し、次いで濾過した。濾液を濃縮して、黄色油として２−（２−（ジメチルアミノ）エトキシ）アニリン（７３０ｍｇ、８５％）を提供した。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：１８１．０［Ｍ＋１］＋。
【０１３７】
ステップ３：Ｎ−（２−（２−（ジメチルアミノ）エトキシ）フェニルカルバモチオイル）ベンズアミド：
２−（２−（ジメチルアミノ）エトキシ）アニリン（５５０ｍｇ、３ｍｍｏｌ）及びベンゾイルイソチオシアナート（７２７ｍｇ、３．６ｍｍｏｌ）を反応させた。次いで、得られる混合物を濾過によって精製して白色固体としてＮ−（２−（２−（ジメチルアミノ）エトキシ）フェニルカルバモチオイル）ベンズアミド（３６０ｍｇ、３５％）を提供した。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：３４４．０［Ｍ＋１］＋。
【０１３８】
ステップ４：１−（２−（２−（ジメチルアミノ）エトキシ）フェニル）チオ尿素：
Ｎ−（２−（２−（ジメチルアミノ）エトキシ）フェニルカルバモチオイル）ベンズアミド（３４３ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（１ｍＬ、３０％）中のＮａＯＭｅの溶液と反応させ、得られる混合物を濾過によって精製して白色固体として１−（２−（２−（ジメチルアミノ）エトキシ）−フェニル）チオ尿素（１６０ｍｇ、６７％）を提供した。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩＥＩ＋，ｍ／ｚ）：２４０．０［Ｍ＋１］＋。
【０１３９】
ステップ５：８−クロロ−３−（２−（２−（２−（ジメチルアミノ）エトキシ）フェニルアミノ）チアゾールｌ−４−イル）−２Ｈ−クロメン−２−オン：
３−（２−ブロモアセチル）−８−クロロ−２Ｈ−クロメン−２−オン（約２７９ｍｇ、５０％、０．５３ｍｍｏｌ）及び１−（２−（２−（ジメチルアミノ）エトキシ）フェニル）チオ尿素（１０６ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）を、８０℃にてエタノール中で反応させた。次いで、生成物を濾過によって精製して黄色固体として８−クロロ−３−（２−（２−（２−（ジメチルアミノ）エトキシ）フェニルアミノ）チアゾールｌ−４−イル）−２Ｈ−クロメン−２−オン（６０ｍｇ、３１％）を提供した。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩＥＩ＋，ｍ／ｚ）：４４２．０［Ｍ＋１］＋；１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＦ３ＣＯＯＤ）：δ３．６４（ｓ，６Ｈ），４．２７（ｓ，２Ｈ），５．０２（ｓ，２Ｈ），７．６５（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．７５（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．９４−７．９９（ｍ，２Ｈ），８．１２（ｓ，１Ｈ），８．１４（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），８．２０（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），８．３３（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），９．０３（ｓ，１Ｈ）
【０１４０】
ＤＢＭ−Ｅ−５を、以下に列挙する手順に従って調製し、合成スキームをスキーム６に示した。
【化３６】
0006407955.tif 000051
【０１４１】
ステップ１：Ｎ−（３，５−ジメチルフェニルカルバモチオイル）ベンズアミド：
３，５−ジメチルアニリン（２．４２ｇ、２０ｍｍｏｌ）及びアセトニトリル中のベンゾイルイソチオシアナート（４．２４ｇ、２６ｍｍｏｌ）を０℃〜室温の温度にて１７時間以上反応させた。次いで、得られる混合物を濾過によって精製して白色固体としてＮ−（３，５−ジメチルフェニルカルバモチオイル）ベンズアミド（３．５ｇ、６１％）を提供した。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩＥＩ＋，ｍ／ｚ）：２８５．１［Ｍ＋１］＋。
【０１４２】
ステップ２：１−（３，５−ジメチルフェニル）チオ尿素：
Ｎ−（３，５−ジメチルフェニルカルバモチオイル）ベンズアミド（３．５ｇ、１２．３ｍｍｏｌ）及びＭｅＯＨ（４ｍＬ、３０％）中のＮａＯＭｅの溶液を室温にて２時間混合した。次いで、得られる混合物を濾過によって精製して白色固体として１−（３，５−ジメチルフェニル）チオ尿素（１．１ｇ、５１％）を提供した。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：１８１．０［Ｍ＋１］＋。
【０１４３】
ステップ３：８−クロロ−３−（２−（３，５−ジメチルフェニルアミノ）チアゾールｌ−４−イル）−２Ｈ−クロメン−２−オン：
３−（２−ブロモアセチル）−８−クロロ−２Ｈ−クロメン−２−オン（約１ｇ、５０％、１．６７ｍｍｏｌ）及び１−（３，５−ジメチルフェニル）チオ尿素（６００ｍｇ、３．３３ｍｍｏｌ）を、８０℃にてエタノール中で反応させた。次いで、生成物を濾過によって精製して黄色固体として８−クロロ−３−（２−（３，５−ジメチルフェニルアミノ）チアゾールｌ−４−イル）−２Ｈ−クロメン−２−オン（５００ｍｇ、７８％）を提供した。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩＥＩ＋，ｍ／ｚ）：３８３．０［Ｍ＋１］＋。
【０１４４】
ステップ４：８−クロロ−３−（２−（（３，５−ジメチルフェニル）（メチル）アミノ）チアゾールｌ−４−イル）−２Ｈ−クロメン−２−オン：
乾燥ＤＭＦ（１０ｍＬ）中の８−クロロ−３−（２−（３，５−ジメチルフェニルアミノ）チアゾールｌ−４−イル）−２Ｈ−クロメン−２−オン（１５０ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）溶液に、０℃でＮａＨ（３１ｍｇ、６０％、０．７８ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、混合物を０℃で１５分間撹拌した。ＭｅＩ（５６ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）を添加して、混合物を室温で２時間攪拌した。反応液を、飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液を使って反応を停止させ、ＥｔＯＡｃ（８０ｍＬ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（２ｘ）及びブライン（２ｘ）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮して黄色固体として８−クロロ−３−（２−（（３，５−ジメチルフェニル）（メチル）アミノ）チアゾールｌ−４−イル）−２Ｈ−クロメン−２−オン（６０ｍｇ、３９％）を提供した。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩＥＩ＋，ｍ／ｚ）：３９７．０［Ｍ＋１］＋；１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ２．３１（ｓ，６Ｈ），３．５６（ｓ，３Ｈ），６．９８（ｓ，１Ｈ），７．１３（ｓ，２Ｈ），７．３９（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．６３（ｓ，１Ｈ），７．７７（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．８９（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），８．６９（ｓ，１Ｈ）。
【０１４５】
ＤＢＭ−Ｅ−６を、以下に列挙する手順に従って調製し、合成スキームをスキーム７に示した。
【化３７】
0006407955.tif 000052
【０１４６】
ステップ１：３−（２−アミノオキサゾール−４−イル）−８−クロロ−２Ｈ−クロメン−２−オン：
オーブン乾燥マイクロウェーブバイアルに、３−（２−ブロモアセチル）−８−クロロ−２Ｈ−クロメン−２−オン（６００ｍｇ、５０％、１ｍｍｏｌ）、尿素（９０ｍｇ、１．５ｅｑ）、及び乾燥ＮＭＰ（２ｍＬ）を添加した。バイアルにキャップをし、窒素でパージした。反応混合物を、マイクロ波照射下で３０分間１５０℃に加熱した。次いで、混合物を冷却させ、分取ＨＰＬＣで精製して、淡黄色固体として３−（２−アミノオキサゾール−４−イル）−８−クロロ−２Ｈ−クロメン−２−オン（１５０ｍｇ、５７％）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩＥＩ＋，ｍ／ｚ）：２６３．０［Ｍ＋１］＋
【０１４７】
ステップ２：８−クロロ−３−（２−（３，５−ジメチルフェニルアミノ）ｏｘａｚｏｌ−４−イル）−２Ｈ−クロメン−２−オン：
オーブン乾燥マイクロウェーブバイアルに、３−（２−アミノオキサゾール−４−イル）−８−クロロ−２Ｈ−クロメン−２−オン（１００ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）、１−ブロモ−３，５−ジメチルベンゼン（７０２ｍｇ、３．８ｍｍｏｌ）、Ｃｓ２ＣＯ３（２４９ｍｇ、０．７６ｍｍｏｌ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（３５ｍｇ、０．０３８ｍｍｏｌ）、キサントホス（４４ｍｇ、０．０７６ｍｍｏｌ）、及び乾燥ジオキサン（３ｍＬ）を添加した。バイアルにキャップをし、窒素でパージした。反応混合物を、マイクロ波照射下で１時間１００℃に加熱した。混合物を冷却させ、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（２ｘ）及びブライン（２ｘ）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮した。残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＰＥ＝０〜１０％）によって精製して粗生成物を得た。粗生成物を、分取ＨＰＬＣで精製して、黄色固体として８−クロロ−３−（２−（３，５−ジメチルフェニルアミノ）−オキサゾール−４−イル）−２Ｈ−クロメン−２−オン（１７ｍｇ、１２％）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩＥＩ＋，ｍ／ｚ）：３６７．１［Ｍ＋１］＋；１ＨＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ２．３０（ｓ，６Ｈ），６．６４（ｓ，１Ｈ），７．３４（ｓ，１Ｈ），７．４１（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），７．７７〜７．７９（ｍ，１Ｈ），７．９５（ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，１Ｈ），８．２０（ｓ，１Ｈ），８．５０（ｓ，１Ｈ），１０．１８（ｓ，１Ｈ）。
【０１４８】
ＤＢＭ−Ｅ−７を、以下に列挙する手順に従って調製し、合成スキームをスキーム８に示した。
【化３８】
0006407955.tif 000053
【０１４９】
ステップ１：３−クロロ−２−（メチルアミノ）ベンゾニトリル：
乾燥ＤＭＦ（６０ｍＬ）中の２−アミノ−３−クロロベンゾニトリル（５．０ｇ、３２．９ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃でＮａＨ（１．９７ｇ、６０％、４９．３ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、混合物を、０℃で１５分間撹拌した。ＭｅＩ（４．６７ｇ、３２．９ｍｍｏｌ）を添加して、混合物を室温で２時間攪拌した。反応液を、飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液を使って反応を停止させ、ＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（２ｘ）及びブライン（２ｘ）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮した。残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＰＥ＝０〜５％）によって精製して白色固体として３−クロロ−２−（メチルアミノ）ベンゾニトリル（４．８ｇ、８８％）を提供した。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩＥＩ＋，ｍ／ｚ）：１６７．０［Ｍ＋１］＋。
【０１５０】
ステップ２：３−クロロ−２−（メチルアミノ）ベンズアルデヒド：
乾燥ＤＣＭ（５０ｍＬ）中の３−クロロ−２−（メチルアミノ）ベンゾニトリル（４ｇ、２４ｍｍｏｌ）の溶液に、マイナス７８℃でＤＩＢＡＬ−Ｈ（１Ｍ、３６ｍＬ、３６ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、混合物を室温で１７時間攪拌した。反応混合物を、飽和クエン酸溶液を使って反応を停止させ、ＤＣＭ（１５０ｍＬ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（２ｘ）及びブライン（２ｘ）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮した。残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＰＥ＝０〜３％）によって精製して黄色油として３−クロロ−２−（メチルアミノ）ベンズアルデヒド（１．４ｇ、３４％）を提供した。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩＥＩ＋，ｍ／ｚ）：１７０．０［Ｍ＋１］＋。
【０１５１】
ステップ３：３−アセチル−８−クロロ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン：
キシレン（３０ｍＬ）中の３−クロロ−２−（メチルアミノ）ベンズアルデヒド（８００ｍｇ、４．７ｍｍｏｌ）の溶液を、１２０℃で２，２，６−トリメチル−４Ｈ−１，３−ダイオキシン−４−オン（６．７ｇ、４７ｍｍｏｌ）を使って処置した。反応混合物を、２時間１２０℃に加熱し、次いで室温に冷却した。溶媒を除去し、残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＰＥ＝０〜３％）によって精製して黄色固体として３−アセチル−８−クロロ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（５００ｍｇ、４５％）を提供した。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩＥＩ＋，ｍ／ｚ）：２３６．０［Ｍ＋１］＋；１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ２．６１（ｓ，３Ｈ），３．８６（ｓ，３Ｈ），７．３１（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．７９〜７．８１（ｍ，１Ｈ），７．９２〜７．９４（ｍ，１Ｈ），８．４１（ｓ，１Ｈ）。
【０１５２】
ステップ４：３−（２−ブロモアセチル）−８−クロロ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン：
ＣＨＣｌ３（２０ｍＬ）中の３−アセチル−８−クロロ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（４３２ｍｇ、１．８４ｍｍｏｌ）の溶液に、室温でＣｕＢｒ２（４０４ｍｇ、１．８４ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を、７０℃で１７時間攪拌した。溶媒を蒸発させ、粗生成物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈し、水（２ｘ）、ブライン（２ｘ）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮して３−（２−ブロモアセチル）−８−クロロ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（約５００ｍｇ、５０％）を提供し、それを直接次のステップで使用した。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：３１３．９［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１５３】
ステップ５：８−クロロ−３−（２−（３，５−ジメチルフェニルアミノ）チアゾールｌ−４−イル）−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン：
３−（２−ブロモアセチル）−８−クロロ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（約２００ｍｇ、５０％、０．３２ｍｍｏｌ）及び１−（３，５−ジメチルフェニル）チオ尿素（１１５ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ）を、８０℃にてエタノール中で反応させた。次いで、生成物を濾過によって精製して黄色固体として８−クロロ−３−（２−（３，５−ジメチルフェニルアミノ）チアゾールｌ−４−イル）−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（５０ｍｇ、５０％）を提供した。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩＥＩ＋，ｍ／ｚ）：３９６．０［Ｍ＋１］＋；１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ２．３１（ｓ，６Ｈ），３．９４（ｓ，３Ｈ），６．６４（ｓ，１Ｈ），７．２９〜７．３５（ｍ，３Ｈ），７．６９〜７．７１（ｍ，１Ｈ），７．８１（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１Ｈ），７．９９（ｓ，１Ｈ），８．５８（ｓ，１Ｈ），１０．１６（ｓ，１Ｈ）。
【０１５４】
ＤＢＭ−Ｅ−８を、以下に列挙する手順に従って調製し、合成スキームをスキーム９に示した。
【化３９】
0006407955.tif 000054
【０１５５】
ステップ１：８−クロロ−２Ｈ−クロメン−２−オン：
３−クロロ−２−ヒドロキシベンズアルデヒド（１ｇ、６．４ｍｍｏｌ）及びＡｃ２Ｏ（４５ｍＬ）中のＣＨ３ＣＯＯＨ（１．３ｇ、１２．８ｍｍｏｌ）の混合物を、６時間１７５℃に加熱した。次いで、混合物を室温に冷却した。形成された沈殿物を回収して褐色固体として８−クロロ−２Ｈ−クロメン−２−オン（１．０２ｇ、８８％）を提供した。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩＥＩ＋，ｍ／ｚ）：１８１．０［Ｍ＋１］＋。
【０１５６】
ステップ２：３−ブロモ−８−クロロ−２Ｈ−クロメン−２−オン：８−クロロ−２Ｈ−クロメン−２−オン（１ｇ、５．５６ｍｍｏｌ）及びＣＨ３ＣＯＯＨ（３０ｍＬ）中のＣＨ３ＣＯＯＫ（１．０９ｇ、１１．１ｍｍｏｌ）の混合物中に、Ｂｒ２（４．４ｇ、２７．８ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を、５０℃で４時間攪拌した。反応混合物を室温に冷却し、水（１００ｍＬ）中に注ぎ、濾過して褐色固体を得た。粗生成物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＰＥ＝０〜５％）によって精製して黄色固体として３−ブロモ−８−クロロ−２Ｈ−クロメン−２−オン（６４０ｍｇ、４５％）を提供した。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩＥＩ＋，ｍ／ｚ）：２６０．９［Ｍ＋１］＋。
【０１５７】
ステップ３：８−クロロ−３−（チアゾールｌ−２−イル）−２Ｈ−クロメン−２−オン：
３−ブロモ−８−クロロ−２Ｈ−クロメン−２−オン（６２０ｍｇ、２．４ｍｍｏｌ）、２−（トリブチルスタンニル）チアゾール（１．８ｇ、４．８ｍｍｏｌ）、及び乾燥ジオキサン（２０ｍＬ）中のＰｄ（ＰＰｈ３）４（２７６ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）の混合物を、６時間１００℃に加熱した。次いで、反応混合物を室温に冷却し、濃縮した。残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＰＥ＝０〜３０％）によって精製して黄色固体として８−クロロ−３−（チアゾールｌ−２−イル）−２Ｈ−クロメン−２−オン（５００ｍｇ、７９％）を提供した。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩＥＩ＋，ｍ／ｚ）：２６４．０［Ｍ＋１］＋。
【０１５８】
ステップ４：３−（５−ブロモチアゾールｌ−２−イル）−８−クロロ−２Ｈ−クロメン−２−オン：
８−クロロ−３−（チアゾールｌ−２−イル）−２Ｈ−クロメン−２−オン（４００ｍｇ、１．５２ｍｍｏｌ）及びＣＨ３ＣＯＯＨ（１５ｍｌ）中のＣＨ３ＣＯＯＫ（４４７ｍｇ、４．５６ｍｍｏｌ）の混合物中に、Ｂｒ２（４７９ｍｇ、３．０４ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、次いで、混合物を室温で２時間攪拌した。反応混合物を水（１００ｍＬ）中に注ぎ、濾過して褐色固体を得た。粗生成物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＰＥ＝０〜２０％）によって精製して黄色固体として３−（５−ブロモチアゾールｌ−２−イル）−８−クロロ−２Ｈ−クロメン−２−オン（２５０ｍｇ、４８％）を提供した。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩＥＩ＋，ｍ／ｚ）：３４２．０［Ｍ＋１］＋。
【０１５９】
ステップ５：８−クロロ−３−（５−（３，５−ジメチルフェニルアミノ）チアゾールｌ−２−イル）−２Ｈ−クロメン−２−オン：
３−（５−ブロモチアゾールｌ−２−イル）−８−クロロ−２Ｈ−クロメン−２−オン（１００ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）及び３，５−ジメチルアニリン（１８２ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）を、Ｃｓ２ＣＯ３（２９３ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（２１ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ．）、キサントホス（５２ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ）、及びジオキサン（２ｍＬ）の存在下で１５０℃にて２５分間マイクロウェーブ内で反応させた。混合物を、分取ＨＰＬＣによって精製して黄色固体として８−クロロ−３−（５−（３，５−ジメチルフェニルアミノ）チアゾールｌ−２−イル）−２Ｈ−クロメン−２−オン（２５ｍｇ、２２％）を提供した。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩＥＩ＋，ｍ／ｚ）：３８３．１［Ｍ＋１］＋；１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ２．２５（ｓ，６Ｈ），６．５６（ｓ，１Ｈ），６．７４（ｓ，２Ｈ），７．４３（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．６３（ｓ，１Ｈ），７．７９〜７．８１（ｍ，１Ｈ），７．９３〜７．９４（ｍ，１Ｈ），８．８１（ｓ，１Ｈ），９．１５（ｓ，１Ｈ）。
【０１６０】
ＤＢＭ−Ｅ−１０を、以下に列挙する手順に従って調製し、合成スキームをスキーム１０に示した。
【化４０】
0006407955.tif 000055
【０１６１】
ステップ１：Ｎ−（３，５−ジメチルフェニル）チアゾールｌ−２−アミン：
２−ブロモチアゾール（３．２６ｇ、２０ｍｍｏｌ）、３，５−ジメチルアニリン（３．６ｇ、３０ｍｍｏｌ）、及びｐ−トルエンスルホン酸（１．７ｇ、１０ｍｍｏｌ）を、ｉ−プロパノール（５０ｍＬ）中に溶解した。混合物を、８０℃で１７時間攪拌した。反応混合物を、ＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（２ｘ）及びブライン（２ｘ）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮した。残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＰＥ＝０〜２０％）によって精製して白色固体としてＮ−（３，５−ジメチルフェニル）チアゾールｌ−２−アミン（１．１ｇ、２７％）を提供した。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩＥＩ＋，ｍ／ｚ）：２０５．０［Ｍ＋１］＋。
【０１６２】
ステップ２：ｔｅｒｔ−ブチル３，５−ジメチルフェニル（チアゾールｌ−２−イル）カルバメート：
Ｎ−（３，５−ジメチルフェニル）チアゾールｌ−２−アミン（１．０２ｇ、５ｍｍｏｌ）、（Ｂｏｃ）２Ｏ（５．４５ｇ、２５ｍｍｏｌ）、及びｔ−ＢｕＯＨ（２０ｍＬ）中のＤＭＡＰ（１．５２ｇ、１２．５ｍｍｏｌ）の混合物を、３６時間８０℃に加熱した。溶媒を除去し、残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＰＥ＝０〜５％）によって精製して白色固体としてｔｅｒｔ−ブチル３，５−ジメチルフェニル（チアゾールｌ−２−イル）カルバメート（３６０ｍｇ、２４％）を提供した。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩＥＩ＋，ｍ／ｚ）：３０５．０［Ｍ＋１］＋。
【０１６３】
ステップ３：ｔｅｒｔ−ブチル５−ブロモチアゾールｌ−２−イル（３，５−ジメチルフェニル）カルバメート：
ＴＨＦ（１５ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル３，５−ジメチルフェニル（チアゾールｌ−２−イル）カルバメート（３９０ｍｇ、１．２８ｍｍｏｌ）の混合物に、室温でＮＢＳ（２５２ｍｇ、１．４１ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、混合物を室温で１時間攪拌した。溶媒を除去し、残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＰＥ＝０〜５％）によって精製して黄色固体としてｔｅｒｔ−ブチル５−ブロモチアゾールｌ−２−イル（３，５−ジメチルフェニル）カルバメート（４４５ｍｇ、９０％）を提供した。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩＥＩ＋，ｍ／ｚ）：３８５．０［Ｍ＋１］＋。
【０１６４】
ステップ４：ｔｅｒｔ−ブチル３，５−ジメチルフェニル（５−（トリメチルスタンニル）チアゾールｌ−２−イル）カルバメート：
ｔｅｒｔ−ブチル５−ブロモチアゾールｌ−２−イル（３，５−ジメチルフェニル）カルバメート（４４５ｍｇ、１．１７ｍｍｏｌ）、１，１，１，２，２，２−ヘキサメチルジスタンナン（５７９ｍｇ、１．７６ｍｍｏｌ）、及びジオキサン（１５ｍＬ）中のＰｄ（ＰＰｈ３）２Ｃｌ２（８３ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）の混合物を、１００℃で１時間撹拌した。次いで、混合物を室温に冷却し、飽和ＫＦ溶液を使って反応を停止させた。混合物を室温で１時間攪拌し、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（２ｘ）及びブライン（２ｘ）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮した。粗生成物ｔｅｒｔ−ブチル３，５−ジメチルフェニル（５−（トリメチルスタンニル）チアゾールｌ−２−イル）カルバメート（約５００ｍｇ）を、次のステップで直接使用した。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩＥＩ＋，ｍ／ｚ）：４６９．０［Ｍ＋１］＋。
【０１６５】
ステップ５：ｔｅｒｔ−ブチル−５−（８−クロロ−２−オキソ−２Ｈ−クロメン−３−イル）チアゾールｌ−２−イル（３，５−ジメチルフェニル）カルバメート：
ｔｅｒｔ−ブチル３，５−ジメチルフェニル（５−（トリメチルスタンニル）チアゾールｌ−２−イル）
カルバメート（約５００ｍｇ）、３−ブロモ−８−クロロ−２Ｈ−クロメン−２−オン（３００ｍｇ、１．１６ｍｍｏｌ）、及びジオキサン（１５ｍＬ）中のＰｄ（ＰＰｈ３）２Ｃｌ２（８３ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）の混合物を、１００℃で１時間撹拌した。次いで、混合物を室温に冷却し、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（２ｘ）及びブライン（２ｘ）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮した。残渣を、分取ＨＰＬＣによって精製して黄色固体としてｔｅｒｔ−ブチル５−（８−クロロ−２−オキソ−２Ｈ−クロメン−３−イル）チアゾールｌ−２−イル（３，５−ジメチルフェニル）カルバメート（２つのステップのための３０ｍｇ、１０％）を提供した。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩＥＩ＋，ｍ／ｚ）：４８３．０［Ｍ＋１］＋。
【０１６６】
ステップ５：８−クロロ−３−（２−（３，５−ジメチルフェニルアミノ）チアゾールｌ−５−イル）−２Ｈ−クロメン−２−オン：
ジオキサン（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル−５−（８−クロロ−２−オキソ−２Ｈ−クロメン−３−イル）チアゾールｌ−２−イル（３，５−ジメチルフェニル）カルバメート（２５ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）の溶液に、ジオキサン（４Ｍ、６０ｍＬ）中のＨＣｌの溶液を添加した。混合物を、２５℃で１７時間攪拌した。次いで、溶媒を除去した。固体を、Ｅｔ２Ｏで洗浄して黄色固体として８−クロロ−３−（２−（３，５−ジメチルフェニルアミノ）チアゾールｌ−５−イル）−２Ｈ−クロメン−２−オン（１７ｍｇ、７１％）を提供した。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩＥＩ＋，ｍ／ｚ）：３８３．１［Ｍ＋１］＋；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＦ３ＣＯＯＤ）：δ２．９１（ｓ，６Ｈ），７．５８（ｓ，２Ｈ），７．７１（ｓ，１Ｈ），７．９６（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），８．１６（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），８．３０（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），８．６１（ｓ，１Ｈ），８．８２（ｓ，１Ｈ）。
【０１６７】
ＤＢＭ−Ｅ−１１の合成スキームを、スキーム１１に示す。
【化４１】
0006407955.tif 000056
【０１６８】
ＤＢＭ−Ｅ−１２の合成スキームを、スキーム１２に示す。
【化４２】
0006407955.tif 000057
【０１６９】
ＤＢＭ−Ｅ−１３を、以下に列挙する手順に従って調製し、合成スキームをスキーム１３に示した。
【化４３】
0006407955.tif 000058
【０１７０】
ステップ１：１−ニトロ−２−プロポキシベンゼン：
２−ニトロフェノール（３ｇ、２１．６ｍｍｏｌ）、１−ブロモプロパン（３．９ｇ、３２．４ｍｍｏｌ）、及びＤＭＦ（５０ｍＬ）中のＫ２ＣＯ３（８．９ｇ、６４．８ｍｍｏｌ）の混合物を、７０℃で２時間撹拌した。反応混合物を室温に冷却し、ＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（２ｘ）及びブライン（２ｘ）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮した。残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＰＥ＝０〜３％）によって精製して黄色油として１−ニトロ−２−プロポキシベンゼン（３．３６ｇ、８６％）を提供した。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩＥＩ＋，ｍ／ｚ）：１８２．０［Ｍ＋１］＋。
【０１７１】
ステップ２：２−プロポキシアニリン：
１−ニトロ−２−プロポキシベンゼン（１．５ｇ、８．３ｍｏｌ）、Ｆｅ（２．３２ｇ、４１．５ｍｍｏｌ）、ＥｔＯＨ（２０ｍＬ）中のＮＨ４Ｃｌ（２．１９ｇ、４１．５ｍｍｏｌ）、及びＨ２Ｏ（２ｍＬ）の混合物を、９０℃で２時間撹拌した。反応混合物を、濾過した。濾液を濃縮し、残渣を、ＤＣＭ（１００ｍＬ）で希釈し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮させて黄色油として２−プロポキシアニリン（１．１６ｇ、９３％）を提供した。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩＥＩ＋，ｍ／ｚ）：１５２．０［Ｍ＋１］＋。
【０１７２】
ステップ３：Ｎ−（２−プロポキシフェニルカルバモチオイル）ベンズアミド：
２−プロポキシアニリン（１．１６ｇ、７．６８ｍｍｏｌ）及びベンゾイルイソチオシアナート（１．６３ｇ、１０．０ｍｍｏｌ）を、アセトニトリル中で０℃〜室温の温度にて３時間以上反応させた。混合物を、濾過によって精製して白色固体としてＮ−（２−プロポキシフェニルカルバモチオイル）ベンズアミド（１．３６ｇ、５６％）を提供した。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩＥＩ＋，ｍ／ｚ）：３１５．０［Ｍ＋１］＋。
【０１７３】
ステップ４：１−（２−プロポキシフェニル）チオ尿素：
Ｎ−（２−プロポキシフェニルカルバモチオイル）ベンズアミド（１．３６ｇ、４．３ｍｍｏｌ）を、ＭｅＯＨ（４ｍＬ、３０％）中のＮａＯＭｅの溶液と反応させた。次いで、得られる混合物を濾過によって精製して白色固体として１−（２−プロポキシフェニル）チオ尿素（６５０ｍｇ、７１％）を提供した。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：２１１．０［Ｍ＋１］＋。
【０１７４】
ステップ５：８−クロロ−３−（２−（２−プロポキシフェニルアミノ）チアゾールｌ−４−イル）−２Ｈ−クロメン−２−オン：
３−（２−ブロモアセチル）−８−クロロ−２Ｈ−クロメン−２−オン（約３００ｍｇ、５０％、０．５ｍｍｏｌ）及び１−（２−プロポキシフェニル）チオ尿素（１５８ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）を、８０℃にてエタノール中で反応させた。次いで、生成物を濾過によって精製して黄色固体として８−クロロ−３−（２−（２−プロポキシフェニルアミノ）チアゾールｌ−４−イル）−２Ｈ−クロメン−２−オン（１１５ｍｇ、５６％）を提供した。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：４１３．０［Ｍ＋１］＋；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ０．９９（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ），１．７８〜１．８４（ｍ，２Ｈ），４．０３（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ），７．０１〜７．０５（ｍ，３Ｈ），７．３９（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．７６〜７．７９（ｍ，２Ｈ），７．９３（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），８．４１〜８．４４（ｍ，１Ｈ），８．６４（ｓ，１Ｈ），９．４９（ｓ，１Ｈ）。
【０１７５】
ＤＢＭ−Ｅ−１４の合成スキームを、スキーム１４に示す。
【化４４】
0006407955.tif 000059
【０１７６】
ＤＢＭ−Ｅ−１５の合成スキームを、スキーム１５に示す。
【化４５】
0006407955.tif 000060
【０１７７】
ＤＢＭ−Ｅ−１６を、以下に列挙する手順に従って調製し、合成スキームをスキーム１６に示した。
【化４６】
0006407955.tif 000061
【０１７８】
ステップ１：Ｎ−（２−メトキシ−５−メチルフェニルカルバモチオイル）ベンズアミド：
２−メトキシ−５−メチルアニリン（５００ｍｇ、３．６５ｍｍｏｌ）及びベンゾイルイソチオシアナート（７７３ｍｇ、４．７４ｍｍｏｌを、アセトニトリル中で０℃〜室温の温度にて２時間以上反応させた。次いで、混合物を、濾過によって精製して白色固体としてＮ−（２−メトキシ−５−メチルフェニルカルバモチオイル）ベンズアミド（６００ｍｇ、５５％）を提供した。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩＥＩ＋，ｍ／ｚ）：３０１．１［Ｍ＋１］＋。
【０１７９】
ステップ２：１−（２−メトキシ−５−メチルフェニル）チオ尿素：
Ｎ−（２−メトキシ−５−メチルフェニルカルバモチオイル）−ベンズアミド（６００ｍｇ、２ｍｍｏｌ）を、ＭｅＯＨ（０．７ｍＬ、３０％）中のＮａＯＭｅの溶液と反応させた。次いで、得られる混合物を濾過によって精製して白色固体として１−（２−メトキシ−５−メチルフェニル）チオ尿素（３００ｍｇ、７６％）を提供した。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩＥＩ＋，ｍ／ｚ）：１９７．０［Ｍ＋１］＋。
【０１８０】
ステップ３：８−クロロ−３−（２−（２−メトキシ−５−メチルフェニルアミノ）チアゾールｌ−４−イル）−２Ｈ−クロメン−２−オン：
３−（２−ブロモアセチル）−８−クロロ−２Ｈ−クロメン−２−オン（約３００ｍｇ、５０％、０．５ｍｍｏｌ）及び１−（２−メトキシ−５−メチルフェニル）チオ尿素（１９７ｍｇ、１ｍｍｏｌ）を、８０℃にてエタノール中で反応させた。次いで、生成物を濾過によって精製して黄色固体として８−クロロ−３−（２−（２−メトキシ−５−メチルフェニルアミノ）チアゾールｌ−４−イル）−２Ｈ−クロメン−２−オン（６０ｍｇ、３０％）を提供した。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩＥＩ＋，ｍ／ｚ）：３９９．０［Ｍ＋１］＋；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ２．３６（ｓ，３Ｈ），３．８４（ｓ，３Ｈ），６．８２（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），６．９３（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．３９（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．７５〜７．７７（ｍ，２Ｈ），７．８３（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），８．２９（ｓ，１Ｈ），８．５８（ｓ，１Ｈ），９．６２（ｓ，１Ｈ）。
【０１８１】
ＤＢＭ−Ｅ−１７の合成スキームを、スキーム１７に示す。
【化４７】
0006407955.tif 000062
【０１８２】
ＤＢＭ−Ｅ−１８の合成スキームを、スキーム１８に示す。
【化４８】
0006407955.tif 000063
【０１８３】
ＤＢＭ−Ｅ−２０を、以下に列挙する手順に従って調製し、合成スキームをスキーム１９に示した。
【化４９】
0006407955.tif 000064
【０１８４】
ステップ１：３−（２−アミノチアゾールｌ−４−イル）−８−クロロ−２Ｈ−クロメン−２−オン：
３−（２−ブロモアセチル）−８−クロロ−２Ｈ−クロメン−２−オン（約１．４ｇ、５０％、２．３３ｍｍｏｌ）及びＥｔＯＨ（２５ｍＬ）中のチオ尿素（３５５ｍｇ、４．６７ｍｍｏｌ）の混合物を、８０℃で２時間撹拌した。形成された沈殿物を回収して黄色固体として３−（２−アミノチアゾールｌ−４−イル）−８−クロロ−２Ｈ−クロメン−２−オン（６３０ｍｇ、９６％）を提供した。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩＥＩ＋，ｍ／ｚ）：２７９．０［Ｍ＋１］＋。
【０１８５】
ステップ２：８−クロロ−３−（２−（３−メトキシピリジン（ｍｅｔｈｏｘｙｐｙｒｉｄｉｎ）−４−イルアミノ）チアゾールｌ−４−イル）−２Ｈ−クロメン−２−オン：
３−（２−アミノチアゾールｌ−４−イル）−８−クロロ−２Ｈ−クロメン−２−オン（１００ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）及び４−ブロモ−３−メトキシピリジン（ｍｅｔｈｏｘｙｐｙｒｉｄｉｎｅ）塩酸塩（８０ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）を、Ｃｓ２ＣＯ３（３５１ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（２５ｍｇ、０．０３６ｍｍｏｌ）、キサントホス（４１ｍｇ、０．０７２ｍｍｏｌ）、及び乾燥ジオキサン（２ｍＬ）の存在下で１５０℃にて１．５時間マイクロウェーブ内で反応させた。次いで、混合物を、分取ＨＰＬＣによって精製して黄色固体として８−クロロ−３−（２−（３−メトキシピリジン−４−イルアミノ）チアゾールｌ−４−イル）−２Ｈ−クロメン−２−オン（４５ｍｇ、３３％）を提供した。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩＥＩ＋，ｍ／ｚ）：３８６．１［Ｍ＋１］＋；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ３．９８（ｓ，３Ｈ），７．４２（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．７７〜７．７９（ｍ，１Ｈ），７．９２（ｓ，１Ｈ），８．００（ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，１Ｈ），８．２１〜８．２６（ｍ，２Ｈ），８．６８〜８．７４（ｍ，２Ｈ），１０．２７（ｓ，１Ｈ）。
【０１８６】
ＤＢＭ−Ｅ−２２の合成スキームを、スキーム２０に示す。
【化５０】
0006407955.tif 000065
【０１８７】
ＤＢＭ−Ｅ−２３の合成スキームを、スキーム２１に示す。
【化５１】
0006407955.tif 000066
【０１８８】
ＤＢＭ−Ｅ−９の合成スキームを、スキーム２２に示す。
【化５２】
0006407955.tif 000067
【０１８９】
実施例２：アッセイ設計
本明細書に説明される化合物は、過剰増殖細胞型において細胞増殖を阻害するために有効である。これらの化合物の効果を研究するために、アッセイを開発して、コンフルエント細胞に対して増殖性細胞における化合物の効果を分化した。アッセイ設計は、播種の２４時間後に増殖性密度を生成し、本明細書に説明される化合物の抗増殖性効果を計測する３日の活性細胞成長／倍加ウインドウを提供する。増殖性細胞の実験については、９６ウェルのフルエリアウェルプレートの１ウェル当たり１，０００〜２，０００のヒト過剰増殖細胞の播種密度を示し、増殖を開始する前に細胞を付着させる２４時間の播種期間の後に３日（７２時間）の活性細胞成長／倍加期間にわたって細胞数の倍加において直線性を提供した。この３日の成長ウインドウでは、細胞数は、７２時間にわたって１日毎に倍加して増加する（図１を参照）。
【０１９０】
各アッセイ設計では、化合物を、細胞播種後の２４時間の時点で添加した。化合物の効果を、ビヒクル対照に対して及び正の対照としてＶｅｌＣａｄｅ（再発多発性骨髄腫及びマントル細胞リンパ腫を治療するために米国で承認されているプロテアソーム阻害剤）に対して、増殖性細胞に関して３日成長ウインドウにわたって、及び同じ期間すでにほぼコンフルエントな細胞の培養において、評価した。
正常な細胞を、選択の場合に必要な播種密度のいくつかの調整を伴って、同じ様式で処理した。このアッセイ設計は、下記に提示されるデータ系列を保持する。
【０１９１】
本アッセイの終了時の細胞数を、ＣＥＬＬＴＩＴＥＲ−ＧＬＯ  Ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ  Ｃｅｌｌ  Ｖｉａｂｉｌｉｔｙ  Ａｓｓａｙ（Ｐｒｏｍｅｇａ；Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）を用いて決定した。ＣＥＬＬＴＩＴＥＲ−ＧＬＯ  Ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ  Ｃｅｌｌ  Ｖｉａｂｉｌｉｔｙ  Ａｓｓａｙは、代謝的に活性な細胞の指針である、存在するＡＴＰの定量化に基づいて培養の生存細胞の数を決定する同種の方法である。ＩＣ５０値を計算した。細胞数（１ウェル当たりの細胞の数）を、ＤＭＳＯ対応対照の％に変換した。各測定を、３連で実施した。試験された典型的な用量の範囲は、２５０ピコモル〜５０マイクロモルであった。
【０１９２】
実施例３：
本明細書に説明される化合物は、過剰増殖癌細胞の成長抑止を引き起こす際にナノモル（ｎＭ）選択性を示すが、中間のマイクロモル（μＭ）濃度まで「正常な」非癌性ヒト細胞の成長及び生存率に対して効果がない。２つの早期の類似体である化合物ＤＢＭ  ２２７及び化合物ＤＢＭ  ２２８を、ＮＣＩ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  Ｐｒｏｇｒａｍによって外部から評価し、検証したが、それらは、ＮＣＩ−６０細胞パネルにおいて２５０ｎＭの平均ＧＩ５０を有するｎＭ効力を示した（２２の細胞株がＧＩ５０値≦１００ｎＭを有した）。例えば、化合物ＤＢＭ−２２８をＮＣＩ  ６０ヒト癌細胞株パネルにおいてプロファイリングした（表１を参照）。ＧＩ５０は、５０％の成長阻害を意味し、薬物インキュベーション中、対照細胞における（ＣＥＬＬＴＩＴＥＲ−ＧＬＯ（登録商標）（Ｐｒｏｍｅｇａ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）によって測定される）正味細胞質ゾルＡＴＰ増加の５０％減少をもたらす薬物濃度を表わす。ＴＧＩは、完全な成長阻害または「細胞分裂停止」をもたらす薬物濃度を意味する。ＬＣ５０は、治療に続く細胞の正味損失（「細胞毒性」）を示す、最初の時点のものと比較した、薬物治療の終了時に測定された細胞質ゾルＡＴＰの５０％減少をもたらす薬物の濃度である。
【表１−１】
0006407955.tif 000068
【表１−２】
0006407955.tif 000069
【表１−３】
0006407955.tif 000070
【表１−４】
0006407955.tif 000071
【０１９３】
実施例４：ヒト過剰増殖細胞プラットフォームにおける化合物ＤＢＭ  ２２８の効果
本明細書に説明されるような化合物を、一次ヒトＡＤＰＫＤ嚢胞性上皮細胞株ならびに前立腺（ＡＲＣａＰ−Ｍ）及び腎臓（ＣＡＫＩ−１）からの２つの一般的な癌細胞株において試験した。図２を参照されたい。ナノモル範囲は、細胞が成長抑止されるが死滅細胞分裂停止ＣＲＣを生成する。この増量された１２ポイントＣＲＣの１マイクロモル用量で及び約１マイクロモル用量で、細胞分裂停止プラトーが存在する。より高い中間のマイクロモル濃度では、細胞毒性効果が存在する。
【０１９４】
実施例５：増殖性細胞対コンフルエントヒト嚢胞性ＡＤＰＫＤ及びインビトロの非嚢胞性腎上皮細胞における化合物ＤＢＭ  １０１の効果
本明細書に説明されるような化合物を、コンフルエント嚢胞性ＡＤＰＫＤ細胞、増殖性嚢胞性ＡＤＰＫＤ細胞、コンフルエント正常な腎細胞、及び増殖性の正常な腎細胞において試験した。表３を参照されたい。
【０１９５】
表３に示されるように、本明細書に説明される化合物の細胞分裂停止効果は、強力なナノモル用量の過剰増殖「疾患」細胞に対して選択的である。際立って対照的に、コンフルエント疾患細胞及び増殖性及びコンフルエントな正常な細胞に、部分的にのみ影響を及ぼし、かつ中間のマイクロモル用量であった。
【０１９６】
実施例６：化合物の効力及び効率
本明細書に説明される化合物は、著しい効力及び有効性（１ｕＭ  ＧＩ５０）を示す。化合物を特定するための典型的なスクリーニング実験については、細胞を、各細胞株に関して所定のプレーティング密度で９６または３８４ウェルのマイクロタイタープレート内に播種して、培養密度に達するずっと前に増殖期中に薬物曝露が起こることを確実にした。播種の後、細胞を、実験薬物の添加前に２４時間インキュベートした。２４時間後、試験プレートをアッセイして（ＣｅｌｌＴｉｔｅｒＧｌｏ−細胞質ゾルＡＴＰの測定）、薬物添加の時点で各細胞株に関して細胞集団のベースライン測定値を決定した。次いで、実験薬物を添加し、細胞を、４８時間の薬物曝露ウインドウのために培養した。４８時間後、細胞をアッセイし、各実験薬剤のために次の３つの用量反応パラメータについて計算した：（１）５０％の成長阻害（ＧＩ５０）は、薬物インキュベーション中、対照細胞における（ＣｅｌｌＴｉｔｅｒＧｌｏによって測定される）正味細胞質ゾルＡＴＰ増加の５０％減少をもたらす薬物濃度である、（２）完全な成長阻害（ＴＧＩ）または「細胞分裂停止」をもたらす薬物濃度、（３）ＬＣ５０、または治療に続く細胞の正味損失（「細胞毒性」）を示す、最初の時点のものと比較した、薬物治療の終了時に測定された細胞質ゾルＡＴＰの５０％減少をもたらす薬物の濃度。活性のレベルに到達した場合、これら３つのパラメータのうちの各々に関して値を計算したが、効果に到達しなかったかまたは超えなかった場合、そのパラメータの値は、試験した最大または最小濃度よりも大きいかまたはそれ未満として表現される。結果を、図４及び表２に示す。
【表２】
0006407955.tif 000072
【０１９７】
図４に示されるように、化合物ｓ  ＤＢＭ  ３０８、ＤＢＭ  ３１８、ＤＢＭ  ７０１、ＤＢＭ  ７０７、及びＤＢＭ  ７１５は、著しい有効性及び効力を示す。更には、これらの化合物を設計して、成功した薬物開発を妨害し得る問題のある官能基を除去した。一次正常ヒト細胞（すなわち、呼吸及び腎上皮細胞、皮膚ケラチノサイト、肝臓肝細胞、及び脳星状膠細胞）をこれらの抗増殖性化合物を使って並行して治療した場合に、効果における劇的な差を観察した。細胞分裂停止効果を、そのクラスで最高の類似体のうちの任意のものを使ってｎＭ範囲で観察せず、細胞分裂停止効果は、低μＭまで現れず、細胞毒性は、中〜高μＭ範囲まで起こらなかった。最も強力な類似体がＮＣＩ−６０パネルにわたって約２５０ｎＭの平均ＧＩ５０を有することを考慮すると、効果における少なくとも１つの２−ログ分離、または「正常な」ヒト細胞に対して、これらの過剰増殖癌細胞における選択性が存在する。
【０１９８】
実施例７：化合物の濃度応答効果
化合物ＤＢＭ  ２２８、化合物ＤＢＭ  ３０８、化合物ＤＢＭ  １０１、及び化合物ＤＢＭ  ３２８の濃度応答効果を、非嚢胞性腎臓組織に対して、嚢胞性腎臓組織からの「クローン」として由来する一次培養において決定した。ＣＲＣグラフ、ＩＣ５０値、及び効果がない最低用量に対するパーセント最大阻害を、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍソフトウェアを使って計算した。化合物ＤＢＭ  ３０８は、この７２時間の治療において及び細胞分裂停止効果に関して強力かつ有効な類似体として現れた。過剰増殖ＰＫＤ細胞（表５Ａ及び表３）とＷＴ細胞（表５Ｂ及び表４）との間の効果において標識された分離がまた存在した。
【表３】
0006407955.tif 000073
【表４】
0006407955.tif 000074
【０１９９】
実施例８：インビトロの一次ヒト特発性肺線維症筋線維芽細胞の成長における化合物の効果
化合物ＤＢＭ  ２２８、ＤＢＭ  ３０８、ＤＢＭ  ３１８、ＤＢＭ  ７０１、ＤＢＭ  ７０７、ＤＢＭ  ７１５、及びＤＢＭ  ３２８の抗増殖性効果を、ヒト特発性肺線維症筋線維芽細胞において決定した。化合物ＤＢＭ  ３２８は、負の対照として機能し、ＣＲＣ全体で効果がなかった。結果を、表６に示す。
【０２００】
実施例９：インビトロの一次ヒト特発性肺線維症筋線維芽細胞対一次ヒトＣＯＰＤ線維芽細胞の成長における化合物ＤＢＭ  ７０１の効果
一次ヒト特発性肺線維症（ＩＰＦ）筋線維芽細胞の成長における化合物ＤＢＭ  ７０１の効果の分離を決定し、一次ヒトＣＯＰＤ線維芽細胞のそれと比較した。結果を、図７及び表５に示す。ＩＰＦ過剰増殖筋線維芽細胞とＣＯＰＤ肺から隔離された線維芽細胞との間の効果において少ない分離が存在したが、著しい分離を観察した。
【表５】
0006407955.tif 000075
一次ヒト特発性肺線維症（ＩＰＦ）筋線維芽細胞の成長において化合物ＤＢＭ  ７０１を使って、「倍加」ＣＲＣを観察した。成長阻害及び細胞分裂停止を、最大１マイクロモルのナノモル範囲において観察し、細胞毒性は、化合物ＤＢＭ  ７０１に関してマイクロモル範囲で出現を開始した（図８）。
【０２０１】
実施例１０：多剤耐性癌に対するインビトロ抗増殖性有効性
具体的には有糸分裂阻害薬との及び一般的には従来の化学療法における重大な制限は、それらの、適応性／内在性多剤耐性の細胞機構に対する感受率（すなわち、ｐ−糖タンパク質、ＭＲＰ１等のＭＤＲ排出ポンプ）である。しかしながら、化合物ＤＢＭ  ２２７及び化合物ＤＢＭ  ２２８を含む本明細書に説明される化合物は、ＮＣＩ−ＡＤＲ／ＲＥＳ細胞株（それぞれ、１００ｎＭ及び４４．５ｎＭ）において優れた効力を示した。この細胞株は、ＭＤＲ１及びＰ−糖タンパク質の高いレベルを表現し、癌多剤耐性のインビトロの細胞モデルの化合物をプロファイリングするための良好なモデルを表わす。ＮＣＩ−６０パネル内に見出された薬物応答性の細胞では、パクリタキセル及びビンクリスチン等の薬剤は、しばしば１〜１０ｎＭの範囲であるＧＩ５０値を持つ強力な細胞毒性を示す。しかしながら、多剤耐性ＮＣＩ−ＡＤＲ／ＲＥＳ細胞株では、これらの一般的な薬物の効力が有意に右方移動であるが、化合物ＤＢＭ  ２２８は、強力なまま残った（図９）。化合物はまた、アドリアマイシン、メルファラン、及びシスプラチンを含むいくつかの臨床的に関連する薬物に対して耐性を示すとして知られているＯＶＣＡＲ−３及びＳＫ−ＯＶ−３細胞株（それぞれ、５０ｎＭ及び３３０ｎＭ  ＧＩ５０）において著しい効力を示した。したがって、本明細書に説明される化合物は、多剤耐性癌を治療する際に効果的であり得る。
【０２０２】
実施例１１：一次ヒト多形性膠芽腫（ＧＢＭ）細胞における細胞毒性効果に対する用量依存成長抑止
本明細書に説明される化合物は、細胞毒性のみ及び高マイクロモル用量であったテモゾロミド（ＴＭＺ）等の知られている第一選択抗癌薬物よりも更により強力である。図１０に示されるように、化合物ＤＢＭ  ３０８は、３Ｄ神経球においてインビトロで成長した一次ヒト多形性膠芽腫（ＧＢＭ）細胞の細胞毒性効果に対する用量依存成長抑止を示す。化合物ＤＢＭ  ３０８は、ナノモル用量の細胞分裂停止効果及びＴＭＺ（しかしながら３マイクロモル対５００マイクロモルのもの）に対する当量の細胞毒性効果を有する。データを平均±平均値の標準誤差として表記し、データは、試料の複写物を使って少なくとも２つの独立した実験を表わす。
【０２０３】
実施例１２：細胞周期抑止
細胞周期分析を、Ｕ２５１−ＭＧ細胞において実施し、細胞周期内のどの地点で本明細書に説明される化合物が作用していたかを決定した。Ｕ２５１ＭＧ神経膠芽腫細胞を、増加する濃度の化合物ＤＢＭ  ２２８を使って２４時間治療した。ヨウ化プロピジウムベースの細胞周期分析は、Ｇ２／Ｍ抑止を明らかにした（図１１Ａ及び表６を参照されたい）。
【表６−１】
0006407955.tif 000076
【表６−２】
0006407955.tif 000077
表６は、細胞周期の異なる相において特定される細胞の割合を示す。細胞の増加した割合を、Ｇ２／Ｍ相ブロックを示す、Ｇ２／Ｍ相で観察した。しかしながら、より高いｎＭ用量で、Ｇ０／Ｇ１以前の細胞のより高い％を考慮すると、細胞は、アポトーシス及びプログラムされた細胞死滅に向かって進行するように現れる。
【０２０４】
化合物ＤＢＭ  ２２８、化合物ＤＢＭ  ３１８、及び化合物ＤＢＭ  ３２８を使う治療の２４時間後に、Ｕ２５１ＭＧ細胞中のカスパーゼ３／７活性化を決定した。Ｕ２５１ＭＧ細胞中のカスパーゼ３／７活性化の検出は、アポトーシスの活性化を示す。結果を、図１１Ｂに示す。化合物ｓ  ＤＢＭ  ２２７、ＤＢＭ  ２２８、ＤＢＭ  ３０８、ＤＢＭ  ３１８、ＤＢＭ  ７０１、ＤＢＭ  ７０７、ＤＢＭ  ７１５、パクリタキセル、ビンクリスチン、及び負の対照化合物であるＤＢＭ  ３２８に関して、チューブリン重合を決定した。生化学的チューブリン重合を、化合物ＤＢＭ  ２２７、ＤＢＭ  ２２８、ＤＢＭ  ３０８、ＤＢＭ  ３１８、ＤＢＭ  ７０１、ＤＢＭ  ７０７、及びＤＢＭ  ７１５によって適度に阻害した。パクリタキセルは、重合強化剤対照として機能し、ビンクリスチンは、重合阻害剤対照として機能した。負の対照であるＤＢＭ  ３２８はまた、微小管重合を阻害した。
【０２０５】
実施例１３：薬物治療対ビヒクル治療ヒト過剰増殖ＧＢＭ癌細胞における細胞内シグナリング分子リン酸アレイ
細胞内シグナリング分子リン酸アレイを、化合物治療ヒト過剰増殖ＧＢＭ癌細胞及びビヒクル治療ヒト過剰増殖ＧＢＭ癌細胞において実施した。試験した化合物は、化合物ＤＢＭ  ２２８（００２−Ｎ８−２８）、化合物ＤＢＭ  ３２８（００３−８ＣＯＯＨ）、及び化合物ＤＢＭ  ３０８（００３−８Ｃｌ）を含んだ。ＤＭＳＯは、ビヒクル対照として機能した。結果を、図１２に示す。数は、主要キナーゼ及び他のシグナリングタンパク質に対応する典型的なドットブロットにおける点の組を反映する。化合物ＤＢＭ  ３２８（００３−８ＣＯＯＨ）は、ＤＭＳＯビヒクル対照を補完するこのアレイ実験のための負の対照である。用量反応効果を、ｃ−Ｊｕｎリン酸化の増強のための化合物ＤＢＭ  ２２８（００２−Ｎ８−２８）（図１２の右上のパネルを参照）ならびに２４時間を必要とする効果の時間依存（図１２の右下のパネルを参照）に関して提供する。
【０２０６】
実施例１４：ヒト過剰増殖疾患におけるビメンチンリン酸化及び分解
ビメンチンは、間葉細胞及び腫瘍細胞を含む様々な培養細胞において広く発現する中間体線維のクラスである。それらは、細胞骨格の裏打ちネットワークの部分を構成し、それらの役割としては、細胞形状の維持、分裂、遊走、分泌、分子分布のシグナリング、創傷治癒、及び平滑筋力の発達が挙げられる。線維状ビメンチンネットワークの細胞内組織化は、一連のタンパク質キナーゼ及び脱リン酸化酵素によるリン酸化現象によって調節される。
【０２０７】
具体的には、ビメンチンリン酸化は、インビトロでのビメンチン線維の分解を介する空間的再構成を調節する際に役割を有する。ビメンチン線維の分解はまた、カスパーゼ依存アポトーシス性現象を示す単一の「活性化された」サブ単位の増加をもたらす。ビメンチンは、ビメンチンの過剰リン酸化が観察される有糸分裂に存在する最も一般的な中間体線維を表わす。例えば、特定のセリン残渣のビメンチンのリン酸化は、細胞質分裂中に分裂溝で起こることを示した。
【０２０８】
特定のキナーゼ及び脱リン酸化酵素を、ビメンチン調節と関連付ける。例えば、Ｐ２１活性化キナーゼ及びサイクリン依存性キナーゼ（ｃｄｋ）は、Ｓ５６でビメンチンを調節する。加えて、Ｃｄｋ５は、ビメンチンが好中球によるＧＴＰ誘発性分泌に関与するＳｅｒ−５６で、ビメンチンリン酸化を媒介する。
【０２０９】
通例の高感受性及び包括的プロテオミクス研究を実施して、ビメンチンにおける化合物ＤＢＭ  ３０８の効果を分析した。ビヒクル及び化合物ＤＢＭ  ３２８（不活性類似体）対照を、並行して実施した。プロテオミクスデータは、主要セリン残渣５６でリン酸化されたビメンチンの２４．２２の折り畳み式調節を示した。ＤＭＳＯビヒクル対照は、１．０であり、不活性類似体化合物ＤＢＭ  ３０８対照は、１．４であった（Ｐ＝０．０００６−データ中のもっとも著しい変化−プロテオミクスアレイ内のタンパク質の９９％が影響されなかった）。
プロテオミクスデータは、Ｃｄｋ５等のいくつかのキナーゼが、対照に対して化合物ＤＢＭ  ３０８  治療の細胞において差次的に調節されたことを明らかにした。
【０２１０】
添付の特許請求の範囲の化合物及び方法は、本明細書に説明される特定の化合物及び方法による範囲に限定されるものではなく、特許請求の範囲のうちの少数の態様の例示として意図され、機能的に均等である任意の化合物及び方法は、本開示の範囲内である。本明細書に示されかつ説明されるものに加えて、化合物及び方法の種々の修正は、添付の特許請求の範囲内に属することを意図する。更には、特定の代表的な化合物、方法、及びこれらの化合物及び方法の態様のみが具体的に説明されるが、他の化合物及び方法が、添付の特許請求の範囲内に属することを意図する。したがって、ステップ、要素、成分、または構成物の組み合わせが、明示的に記述され得るが、ステップ、要素、成分、及び構成物の全ての他の組み合わせが、明示的に記されなくとも含まれる。
例えば、本発明は以下の項目を提供する。
（項目１）
対象の過剰増殖疾患の治療のための方法であって、
以下の式の化合物、
【化５３】
0006407955.tif 000078
またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグの有効量を対象に投与することを含み、式中、
Ｒ１が、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、置換もしくは非置換のアルコキシル、置換もしくは非置換のアミノ、置換もしくは非置換のＣ１−６アルキル、または置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキルであり、
Ｒ２が、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アジド、チオシアナト、トリフルオロメチル、置換もしくは非置換のアルコキシル、置換もしくは非置換のアミノ、置換もしくは非置換のカルボニル、または置換もしくは非置換のＣ１−６アルキルであり、
Ｒ３が、水素または置換もしくは非置換のＣ１−６アルキルであり、
Ｒ４が、置換もしくは非置換のＣ１−６アルキル、置換もしくは非置換のアリール、または置換もしくは非置換のヘテロアリールであり、
Ｘが、ＳまたはＯであり、
Ｙが、Ｏ、ＮＨ、またはＮＣＨ３である、方法。
（項目２）
前記化合物が、
【化５４】
0006407955.tif 000079
からなる群から選択され、式中、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、及びＲ９が、各々独立して、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、置換もしくは非置換のアルコキシ、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、置換もしくは非置換のカルボニル、置換もしくは非置換のアミノ、置換もしくは非置換のＣ１−６アルキル、置換もしくは非置換のＣ２−６アルケニル、置換もしくは非置換のアリール、置換もしくは非置換のスルホンアミド、置換もしくは非置換のスルホニル、または置換もしくは非置換のチオから選択され、
随意に、Ｒ１及びＲ２、Ｒ５及びＲ６、Ｒ６及びＲ７、Ｒ７及びＲ８、またはＲ８及びＲ９が、組み合わさって、置換もしくは非置換のアリール、置換もしくは非置換のシクロアルケニル、置換もしくは非置換のヘテロアリール、または置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキルを形成する、項目１に記載の方法。
（項目３）
対象の過剰増殖疾患の治療のための方法であって、
以下の式の化合物、
【化５５】
0006407955.tif 000080
またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグの有効量を対象に投与することを含み、式中、
Ｌが、ヘテロアリールであり、
Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、及びＲ９が、各々独立して、水素及びメトキシから選択される、方法。
（項目４）
対象の過剰増殖疾患の治療のための方法であって、
以下の式の化合物、
【化５６】
0006407955.tif 000081
またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグの有効量を対象に投与することを含み、式中、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、及びＸ４が、各々独立して、ＣＨ及びＮから選択され、
Ｙが、ＯまたはＮＲであり、式中、Ｒが、水素またはメチルであり、
Ｒ２が、水素、Ｃ１−６アルキル、ハロゲン、またはトリフルオロアルキルであり、
Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、及びＲ９が、各々独立して、水素及びメトキシから選択される、方法。
（項目５）
対象の過剰増殖疾患の治療のための方法であって、
以下の式の化合物、
【化５７】
0006407955.tif 000082
またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグの有効量を対象に投与することを含み、式中、
Ｘ１が、ＯまたはＮＣＨ３であり、
Ｘ２が、ＣＨまたはＮであり、
Ｙが、Ｏ、ＮＨ、またはＮＣＨ３であり、
Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、及びＲ９が、各々独立して、水素及びメトキシから選択される、方法。
（項目６）
対象の過剰増殖疾患の治療のための方法であって、
以下の式の化合物、
【化５８】
0006407955.tif 000083
またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグの有効量を対象に投与することを含み、式中、
Ｒ１及びＲ２が、各々独立して、水素、置換もしくは非置換のアミノ、及び置換もしくは非置換のカルボニルから選択される、方法。
（項目７）
対象の過剰増殖疾患の治療のための方法であって、
以下の式の化合物、
【化５９】
0006407955.tif 000084
またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグの有効量を対象に投与することを含み、式中、
Ｘが、ＣＨ２、ＮＨ、またはＯである、方法。
（項目８）
前記過剰増殖疾患が癌である、項目１〜７のいずれかに記載の方法。
（項目９）
前記過剰増殖疾患が、多発性嚢胞腎疾患である、項目１〜７のいずれかに記載の方法。
（項目１０）
前記過剰増殖疾患が、線維症である、項目１〜７のいずれかに記載の方法。
（項目１１）
前記線維症が、特発性肺線維症である、項目１０に記載の方法。
（項目１２）
細胞内の２つ以上の熱ショックタンパク質シャペロン間の相互作用を阻害する方法であって、
細胞を、以下の式の化合物、
【化６０】
0006407955.tif 000085
またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグの有効量と接触させることを含み、式中、
Ｒ１が、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、置換もしくは非置換のアルコキシル、置換もしくは非置換のアミノ、置換もしくは非置換のＣ１−６アルキル、または置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキルであり、
Ｒ２が、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アジド、チオシアナト、トリフルオロメチル、置換もしくは非置換のアルコキシル、置換もしくは非置換のアミノ、置換もしくは非置換のカルボニル、または置換もしくは非置換のＣ１−６アルキルであり、
Ｒ３が、水素または置換もしくは非置換のＣ１−６アルキルであり、
Ｒ４が、置換もしくは非置換のＣ１−６アルキル、置換もしくは非置換のアリール、または置換もしくは非置換のヘテロアリールであり、
Ｘが、ＳまたはＯであり、
Ｙが、Ｏ、ＮＨ、またはＮＣＨ３である、方法。
（項目１３）
前記化合物が、
【化６１】
0006407955.tif 000086
からなる群から選択され、式中、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、及びＲ９が、各々独立して、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、置換もしくは非置換のアルコキシ、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、置換もしくは非置換のカルボニル、置換もしくは非置換のアミノ、置換もしくは非置換のＣ１−６アルキル、置換もしくは非置換のＣ２−６アルケニル、置換もしくは非置換のアリール、置換もしくは非置換のスルホンアミド、置換もしくは非置換のスルホニル、または置換もしくは非置換のチオから選択され、
随意に、Ｒ１及びＲ２、Ｒ５及びＲ６、Ｒ６及びＲ７、Ｒ７及びＲ８、またはＲ８及びＲ９が、組み合わさって、置換もしくは非置換のアリール、置換もしくは非置換のシクロアルケニル、置換もしくは非置換のヘテロアリール、または置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキルを形成する、項目１2に記載の方法。
（項目１４）
細胞内の２つ以上の熱ショックタンパク質シャペロン間の相互作用を阻害する方法であって、
細胞を、以下の式の化合物、
【化６２】
0006407955.tif 000087
またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグの有効量と接触させることを含み、式中、
Ｌが、ヘテロアリールであり、
Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、及びＲ９が、各々独立して、水素及びメトキシから選択される、方法。
（項目１５）
細胞内の２つ以上の熱ショックタンパク質シャペロン間の相互作用を阻害する方法であって、
細胞を、以下の式の化合物、
【化６３】
0006407955.tif 000088
またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグの有効量と接触させることを含み、式中、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、及びＸ４が、各々独立して、ＣＨ及びＮから選択され、
Ｙが、ＯまたはＮＲであり、式中、Ｒが、水素またはメチルであり、
Ｒ２が、水素、Ｃ１−６アルキル、ハロゲン、またはトリフルオロアルキルであり、
Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、及びＲ９が、各々独立して、水素及びメトキシから選択される、方法。
（項目１６）
細胞内の２つ以上の熱ショックタンパク質シャペロン間の相互作用を阻害する方法であって、
細胞を、以下の式の化合物、
【化６４】
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またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグの有効量と接触させることを含み、式中、
Ｘ１が、ＯまたはＮＣＨ３であり、
Ｘ２が、ＣＨまたはＮであり、
Ｙが、Ｏ、ＮＨ、またはＮＣＨ３であり、
Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、及びＲ９が、各々独立して、水素及びメトキシから選択される、方法。
（項目１７）
細胞内の２つ以上の熱ショックタンパク質シャペロン間の相互作用を阻害する方法であって、
細胞を、以下の式の化合物、
【化６５】
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またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグの有効量と接触させることを含み、式中、
Ｒ１及びＲ２が、各々独立して、水素、置換もしくは非置換のアミノ、及び置換もしくは非置換のカルボニルから選択される、方法。
（項目１８）
細胞内の２つ以上の熱ショックタンパク質シャペロン間の相互作用を阻害する方法であって、
細胞を、以下の式の化合物、
【化６６】
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またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグの有効量と接触させることを含み、式中、
Ｘが、ＣＨ２、ＮＨ、またはＯである、方法。
（項目１９）
前記２つ以上の熱ショックタンパク質シャペロンが、Ｈｓｐ−９０、Ｈｓｐ−７０、Ｈｓｃ−７０、及びＨｓｐ−４０からなる群から選択される、項目１２〜１８のいずれかに記載の方法。
（項目２０）
前記方法が、インビトロで実施される、項目１２〜１９のいずれかに記載の方法。
（項目２１）
前記方法が、インビボで実施される、項目１２〜１９のいずれかに記載の方法。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１Ａ】
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【図１１Ｂ】
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【図１１Ｃ】
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【図１２】
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