(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
血中の上昇したグルコース量によって特徴づけられた疾患の治療における使用のための、
以下からなる群より選択された、プロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の脂質付加された類似体：
ＳＲＴＨＲＨＳＭＥＩＫ（ｐａｌｍ）ＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（配列番号１２）；
ＴＰＤＩＮＰＫ（ｐａｌｍ）ＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（配列番号１３）；
【化１】
0006342016.tif 000027
Ｘ１−ＳＲＡＨＱＨＳＭＥＴＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＴＧＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（配列番号１６）；
Ｘ１−ＳＲＴＨＲＨＳＭＥＩＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（配列番号１７）；
（Ｎ−ｍｙｒ）−ＴＰＤＩＮＰＡＷＹＴＧＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（配列番号２０）；および
（Ｎ−ｍｙｒ）−ＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（配列番号２１）；
式中、Ｘ１は、ミリスチン酸またはパルミチン酸であり、Ｘ２は、γ−グルタミン酸であり、ｐａｌｍは、パルミチン酸であり、かつ、ｍｙｒは、ミリスチン酸である。
【請求項２】
以下からなる群より選択された、プロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の脂質付加された類似体：
ＳＲＴＨＲＨＳＭＥＩＫ（ｐａｌｍ）ＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（配列番号１２）；
ＴＰＤＩＮＰＫ（ｐａｌｍ）ＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（配列番号１３）；
【化２】
0006342016.tif 000028
式中、
ｐａｌｍは、パルミチン酸であり、Ｘ２は、γ−グルタミン酸である。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
〔相互参照〕
本出願は、米国仮出願No.61/927,944（２０１４年１月１５日出願）に基づく優先権を享受するものであり、その全文が参照によって本出願に引用される。
【０００２】
〔配列表〕
本出願は、ＡＳＣＩＩのフォーマットでＥＦＳ−Ｗｅｂを通して提出された、配列表を含んでおり、そのすべてが、参照によって本出願に引用される。前記ＡＳＣＩＩのコピーを、２０１５年１月１３日に作成し、45071_703_60l_SeqListing.txtと名前を付け、そのサイズは、５７，１８１バイトである。
【０００３】
〔分野〕
本明細書に記載された実施形態は、全体として、医学の分野、代謝の制御、プロラクチン放出ペプチドに関し、特に、上昇した血中グルコース量および関連した病状を治療するための、脂質付加されたプロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の使用に関する。
【０００４】
〔参照による引用〕
本明細書中において言及される、すべての刊行物、特許、および特許出願は、各々個別の刊行物、特許、または特許出願が、本明細書中、参照によって引用されるために、明確かつ独立に示されており、その全文が示されている場合と同程度に、参照によって引用される。
【０００５】
〔背景〕
合衆国の１０から１５パーセントの成人は、耐糖能障害または空腹時グルコース異常のいずれかを有している（Rao S. S. et al., American FamilyPhysician 69 (8), 1961参照）。耐糖能障害は、インスリン抵抗性および心血管疾患の上昇したリスクに関連した、高血糖症の糖尿病になる前の状態であり、二型糖尿病の前兆であり得る（Barr E. L. et al., Circulation 116 (2): 151-7, 2007参照）。
【０００６】
二型糖尿病は、近年、世界で１億７０００万人の命を冒しており、２０３０年までにその数は、２倍になると予想されている、複雑な多遺伝子病である[Wild S.et al., Diabetes Care 27:1047-1053, 2004参照]。これは、インスリン抵抗性、グルコース刺激インスリン放出障害（例えば、膵臓のβ−細胞の機能障害）、および慢性高血糖症として現れ得る、グルカゴンの不適切な分泌によって特徴づけられる。
【０００７】
〔概要〕
本明細書では、特定の実施形態において、以下の化学式を有している、プロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の脂質付加された類似体が開示される：
Ｊ−ｒＲＰｓＧＲｔ−ＮＨ２（化学式１；配列番号１）、式中、
ｒは、イソロイシン、アラニン、またはフェニルグリシンであり；
ｓは、バリンまたはフェニルグリシンであり；
ｔは、フェニルアラニン、トリプトファン、ピログルタミン酸、またはＣＨ２−ＡｒもしくはＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２−Ａｒを含んでいる側鎖を有しているアミノ酸であり、式中、Ａｒは、任意に、ハロゲン基、メチル基またはニトロ基で置換された、フェニルまたはナフチルであり；かつ
Ｊは、１か所において、Ｘによって脂質付加された、１３アミノ酸または２４アミノ酸の鎖を表し、式中、Ｘ＝Ｘ１またはＸ２Ｘ１であり；
式中、Ｘ１は、Ｃ８−Ｃ１８の脂肪酸であり、当該脂肪酸は、遊離アミノ基、ＳＨ基またはＯＨ基のうち少なくとも１つを有しているアミノ酸と、直接またはＸ２を介して、結合しており；
かつ、式中、Ｘ２は、ポリオキシエチレン部分、アリールアルキル部分、並びに、１つまたは複数の炭素原子が、Ｎ、Ｓ、およびＯからなる群より選択されたヘテロ原子によって置換され得る、飽和または不飽和の、直鎖または分鎖のＣ３−Ｃ８の炭化水素鎖からなる群のうちから選択された、親水性リンカーであり、前記炭化水素鎖は、少なくとも１つのアミノ基またはカルボン酸基を有しており、そのうち１つは、置換されて以下のような形を取り得る
ＣＯＮＨ２；
ＮＨ−ポリオキシエチレン；
ＣＯＯＭ１；式中、Ｍ１はアルカリ金属であり；
ＣＮ；
ＣＯＯＲ１、ＣＯＲ１またはＣＯＮＨＲ１；式中、Ｒ１は、低級アルキル、アリールアルキル、ポリオキシエチレン、メチルポリオキシエチレン、またはアミノエチルポリオキシエチレンであり；
（ＣＨＯＨ）ｎＲ２；式中、Ｒ２は、ＨまたはＣＯＯＨであり、かつｎは、２から１０の整数であり；または
（ＣＨ）ｎＮ＋（Ｒ´３）；式中、各々Ｒ´は独立に、ＨまたはＣ１−Ｃ４アルキルであり、血中の上昇したグルコース量によって特徴づけられた、疾患の治療における使用のためである。
【０００８】
本明細書では、特定の実施形態において、以下の化学式を有している、プロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の脂質付加された類似体が開示される：
Ｊ−ｒＲＰｓＧＲｔ−ＮＨ２（Ｉ）、式中、
ｒは、イソロイシン、アラニン、またはフェニルグリシンであり；
ｓは、バリンまたはフェニルグリシンであり；
ｔは、フェニルアラニン、トリプトファン、ピログルタミン酸、またはＣＨ２−ＡｒもしくはＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２−Ａｒを含んでいる側鎖を有しているアミノ酸であり、式中、Ａｒは、任意に、ハロゲン基、メチル基またはニトロ基で置換された、フェニルまたはナフチルであり；かつ
Ｊは、１か所において、Ｘによって脂質付加された、１３アミノ酸または２４アミノ酸の鎖を表し、式中、Ｘ＝Ｘ１またはＸ２Ｘ１であり；
式中、Ｘ１は、Ｃ１２−Ｃ１６の脂肪酸であり、当該脂肪酸は、遊離アミノ基、ＳＨ基またはＯＨ基のうち少なくとも１つを有しているアミノ酸と、直接またはＸ２を介して、結合しており；
かつ、式中、Ｘ２は、ポリオキシエチレン部分、アリールアルキル部分、並びに、１つまたは複数の炭素原子が、Ｎ、Ｓ、およびＯからなる群より選択されたヘテロ原子によって置換され得る、飽和または不飽和の、直鎖または分鎖のＣ３−Ｃ８の炭化水素鎖からなる群のうちから選択された、親水性リンカーであり、前記炭化水素鎖は、少なくとも１つのアミノ基またはカルボン酸基を有しており、そのうち１つは、置換されて以下のような形を取り得る
ＣＯＮＨ２；
ＮＨ−ポリオキシエチレン；
ＣＯＯＭ１；式中、Ｍ１はアルカリ金属であり；
ＣＮ；
ＣＯＯＲ１、ＣＯＲ１またはＣＯＮＨＲ１；式中、Ｒ１は、低級アルキル、アリールアルキル、ポリオキシエチレン、メチルポリオキシエチレン、またはアミノエチルポリオキシエチレンであり；
（ＣＨＯＨ）ｎＲ２；式中、Ｒ２は、ＨまたはＣＯＯＨであり、かつｎは、２から１０の整数であり；または
（ＣＨ）ｎＮ＋（Ｒ´３）；式中、各々Ｒ´は独立に、ＨまたはＣ１−Ｃ４アルキルであり、血中の上昇したグルコース量によって特徴づけられた疾患の治療における使用のためである。
【０００９】
いくつかの実施形態において、血中の上昇したグルコース量によって特徴づけられた疾患の治療における使用のためである、プロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の脂質付加された類似体は、以下の化学式を有している：
（Ｘ）ｋＲｍＨｎＨＳｑＥｕＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲｐｒＲＰｓＧＲｔ−ＮＨ２（化学式２；配列番号２）、式中、
ｋは、セリン、スレオニン、またはジアミノプロピオン酸であり；
ｍは、スレオニン、アラニン、またはメチルアラニンであり；
ｎは、グルタミンまたはアルギニンであり；
ｑは、メチオニンまたはノルロイシンであり；
ｕは、スレオニンまたはイソロイシンであり；
ｏは、グリシンまたはセリンであり；
ｐは、グリシン、アラニン、プロリン、またはＮ−メチルグリシンであり；
ｒは、イソロイシン、アラニン、またはフェニルグリシンであり；
ｓは、バリンまたはフェニルグリシンであり；かつ
ｔは、フェニルアラニン、トリプトファン、ピログルタミン酸、またはＣＨ２−ＡｒもしくはＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２−Ａｒを含んでいる側鎖を有しているアミノ酸であり、式中、Ａｒは、任意に、ハロゲン基、メチル基またはニトロ基で置換された、フェニルまたはナフチルを表し；式中、Ｘ＝Ｘ１またはＸ２Ｘ１であり、式中、Ｘ１は、Ｃ８−Ｃ１８の脂肪酸である。
【００１０】
いくつかの実施形態において、血中の上昇したグルコース量によって特徴づけられた疾患の治療における使用のためである、プロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の脂質付加された類似体は、以下の化学式を有している：
（Ｘ）ｋＲｍＨｎＨＳｑＥｕＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲｐｒＲＰｓＧＲｔ−ＮＨ２（化学式２；配列番号２）、式中、
ｋは、セリン、スレオニン、またはジアミノプロピオン酸であり；
ｍは、スレオニン、アラニン、またはメチルアラニンであり；
ｎは、グルタミンまたはアルギニンであり；
ｑは、メチオニンまたはノルロイシンであり；
ｕは、スレオニンまたはイソロイシンであり；
ｏは、グリシンまたはセリンであり；
ｐは、グリシン、アラニン、プロリン、またはＮ−メチルグリシンであり；
ｒは、イソロイシン、アラニン、またはフェニルグリシンであり；
ｓは、バリンまたはフェニルグリシンであり；かつ
ｔは、フェニルアラニン、トリプトファン、ピログルタミン酸、またはＣＨ２−ＡｒもしくはＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２−Ａｒを含んでいる側鎖を有しているアミノ酸であり、式中、Ａｒは、任意に、ハロゲン基、メチル基またはニトロ基で置換された、フェニルまたはナフチルを表し；式中、Ｘ＝Ｘ１またはＸ２Ｘ１であり、式中、Ｘ１は、Ｃ１２−Ｃ１６の脂肪酸である。
【００１１】
いくつかの実施形態において、血中の上昇したグルコース量によって特徴づけられた疾患の治療における使用のためである、プロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の脂質付加された類似体は、化学式（Ｘ）ｋＲｍＨｎＨＳｑＥｕＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲｐｒＲＰｓＧＲｔ−ＮＨ２（化学式２；配列番号２）を有し、式中、Ｘ＝Ｘ１またはＸ２Ｘ１であり、式中、Ｘ１は、Ｃ８−Ｃ１８の脂肪酸またはＣ１２−Ｃ１６の脂肪酸であり、式中、ｋＲｍＨｎＨＳｑＥｕＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲｐ（配列番号３５）は、１アミノ酸〜１１アミノ酸を除去することによって短縮されている。
【００１２】
いくつかの実施形態において、血中の上昇したグルコース量によって特徴づけられた疾患の処置における使用のためである、プロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の脂質付加された類似体は、化学式（Ｘ）ｋＲｍＨｎＨＳｑＥｕＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲｐｒＲＰｓＧＲｔ−ＮＨ２（化学式２；配列番号２）を有し、式中、Ｘ＝Ｘ１またはＸ２Ｘ１であり、式中、Ｘ１は、Ｃ８−Ｃ１８の脂肪酸またはＣ１２−Ｃ１６の脂肪酸であり、式中、ｋＲｍＨｎＨＳｑＥｕＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲｐ（配列番号３５）は、Ｎ末端またはＣ末端から、１アミノ酸〜１１アミノ酸を除去することによって短縮されている。
【００１３】
いくつかの実施形態において、血中の上昇したグルコース量によって特徴づけられた疾患の治療における使用のためである、プロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の脂質付加された類似体は、化学式（Ｘ）ｋＲｍＨｎＨＳｑＥｕＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲｐｒＲＰｓＧＲｔ−ＮＨ２（化学式２；配列番号２）を有し、式中、Ｘ＝Ｘ１またはＸ２Ｘ１であり、式中、Ｘ１は、Ｃ８−Ｃ１８の脂肪酸またはＣ１２−Ｃ１６の脂肪酸であり、式中、ｋＲｍＨｎＨＳｑＥｕＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲｐ（配列番号３５）は、Ｎ末端から、１アミノ酸〜１１アミノ酸を除去することによって短縮されている。
【００１４】
いくつかの実施形態において、血中の上昇したグルコース量によって特徴づけられた疾患の治療における使用のためである、プロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の脂質付加された類似体は、化学式（Ｘ）ｋＲｍＨｎＨＳｑＥｕＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲｐｒＲＰｓＧＲｔ−ＮＨ２（化学式２；配列番号２）を有し、式中、Ｘ＝Ｘ１またはＸ２Ｘ１であり、式中、Ｘ１は、Ｃ８−Ｃ１８の脂肪酸またはＣ１２−Ｃ１６の脂肪酸であり、式中、ｋＲｍＨｎＨＳｑＥｕＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲｐ（配列番号３５）は、Ｃ末端から、１アミノ酸〜１１アミノ酸を除去することによって短縮されている。
【００１５】
いくつかの実施形態において、血中の上昇したグルコース量によって特徴づけられた疾患の治療における使用のためである、プロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の脂質付加された類似体は、以下の化学式を有している：
（Ｘ）ｋＲｍＨｎＨＳｑＥｕＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲｐｒＲＰｓＧＲｔ−ＮＨ２（化学式２；配列番号２）；または
（Ｘ）ＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲｐｒＲＰｓＧＲｔ−ＮＨ２（化学式３；配列番号３）；
式中、
ｋは、セリン、スレオニン、またはジアミノプロピオン酸であり；
ｍは、スレオニン、アラニン、またはメチルアラニンであり；
ｎは、グルタミンまたはアルギニンであり；
ｑは、メチオニンまたはノルロイシンであり；
ｕは、スレオニンまたはイソロイシンであり；
ｏは、グリシンまたはセリンであり；
ｐは、グリシン、アラニン、プロリン、またはＮ−メチルグリシンであり；
ｒは、イソロイシン、アラニン、またはフェニルグリシンであり；
ｓは、バリンまたはフェニルグリシンであり；かつ
ｔは、フェニルアラニン、トリプトファン、ピログルタミン酸、またはＣＨ２−ＡｒもしくはＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２−Ａｒを含んでいる側鎖を有しているアミノ酸であり、式中、Ａｒは、任意に、ハロゲン基、メチル基またはニトロ基で置換された、フェニルまたはナフチルである。
【００１６】
いくつかの実施形態において、血中の上昇したグルコース量によって特徴づけられた疾患の治療における使用のためである、プロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の脂質付加された類似体は、Ｋｉ１０−６ｍｏｌ．ｌ−１を超えないラットの下垂体細胞において発現したＧＰＲ１０レセプターに対する結合親和力を有している。
【００１７】
いくつかの実施形態において、血中の上昇したグルコース量によって特徴づけられた疾患の治療における使用のためである、プロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の脂質付加された類似体は、以下の化学式を有している：
（Ｘ）ＳＲｍＨｎＨＳｑＥｕＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲｐｒＲＰｓＧＲｔ−ＮＨ２（化学式４；配列番号４）、式中、
ｍは、スレオニン、アラニン、またはメチルアラニンであり；
ｎは、グルタミンまたはアルギニンであり；
ｑは、メチオニンまたはノルロイシンであり；
ｕは、スレオニンまたはイソロイシンであり；
ｏは、グリシンまたはセリンであり；
ｐは、グリシン、アラニン、プロリン、またはＮ−メチルグリシンであり；
ｒは、イソロイシン、アラニン、またはフェニルグリシンであり；
ｓは、バリンまたはフェニルグリシンであり；かつ
ｔは、フェニルアラニン、トリプトファン、ピログルタミン酸、またはＣＨ２−ＡｒもしくはＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２−Ａｒを含んでいる側鎖を有しているアミノ酸であり、式中、Ａｒは、任意に、ハロゲン基、メチル基またはニトロ基で置換された、フェニルまたはナフチルを表し；式中、Ｘ＝Ｘ１またはＸ１Ｘ２であり、式中、Ｘ１は、アミド結合によって直接、またはＸ２を介して、化学式４のアミノ酸と結合した、Ｃ８−Ｃ１８の脂肪酸である。
【００１８】
いくつかの実施形態において、血中の上昇したグルコース量によって特徴づけられた疾患の治療における使用のためである、プロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の脂質付加された類似体は、以下の化学式を有している：
Ｊ−ｒＲＰｓＧＲｔ−ＮＨ２（化学式１；配列番号１）、式中、ｔは、ヒスチジン、ベンジルヒスチジン、ナフチルアラニン、トリプトファン、ピログルタミン酸、ベンジルシステイン、ベンジル−Ｏ−グルタメート、ノルロイシン、ジクロロフェニルアラニン、テトラクロロフェニルアラニン、ペンタフルオロフェニルアラニン、メチル−Ｏ−フェニルアラニン、メチル−ＮＨ−フェニルアラニン、およびニトロフェニルアラニンからなる群より選択される。
【００１９】
いくつかの実施形態において、血中の上昇したグルコース量によって特徴づけられた疾患の治療における使用のためである、プロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の脂質付加された類似体は、以下の化学式を有している：
（Ｘ）ＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲＧｒＲＰｓＧＲＦ−ＮＨ２（化学式５；配列番号５）；
（Ｘ）ＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲＧｒＲＰｓＧＲ  １−Ｎａｌ−ＮＨ２（化学式６；配列番号６）；または
（Ｘ）ＲｍＨｎＨＳＮｌｅＥＴＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲＧｒＲＰｓＧＲ  １−Ｎａｌ−ＮＨ２（化学式７；配列番号７）；
式中、
１−ｎａｌは、ナフチルアラニンであり；
ｍは、スレオニン、アラニン、またはメチルアラニンであり；
ｎは、グルタミンまたはアルギニンであり；
ｑは、メチオニンまたはノルロイシンであり；
ｕは、スレオニンまたはイソロイシンであり；
ｏは、グリシンまたはセリンであり；
ｐは、グリシン、アラニン、プロリン、またはＮ−メチルグリシンであり；
ｒは、イソロイシン、アラニン、またはフェニルグリシンであり；
ｓは、バリンまたはフェニルグリシンであり；かつ
ｔは、フェニルアラニン、トリプトファン、ピログルタミン酸、またはＣＨ２−ＡｒもしくはＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２−Ａｒを含んでいる側鎖を有しているアミノ酸であり、式中、Ａｒは、任意に、ハロゲン基、メチル基またはニトロ基で置換された、フェニルまたはナフチルを表す。
【００２０】
いくつかの実施形態において、血中の上昇したグルコース量によって特徴づけられた疾患の治療における使用のためである、プロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の脂質付加された類似体は、以下の化学式を有している：
（Ｘ）ＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲＧｒＲＰｓＧＲＦ−ＮＨ２（化学式５；配列番号５）；
（Ｘ）ＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲＧｒＲＰｓＧＲ  １−Ｎａｌ−ＮＨ２（化学式６；配列番号６）；または
（Ｘ）ＲｍＨｎＨＳＮｌｅＥＴＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲＧｒＲＰｓＧＲ  １−Ｎａｌ−ＮＨ２（化学式７；配列番号７）；式中、ｒは、イソロイシンであり、ｓは、バリンである。
【００２１】
いくつかの実施形態において、血中の上昇したグルコース量によって特徴づけられた疾患の治療における使用のためである、プロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の脂質付加された類似体は、以下の化学式を有している：
（Ｘ）ＳＲＴＨＲＨＳＭＥＩＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式８；配列番号８）；または
（Ｘ）ＳＲＡＨＱＨＳＭＥＴＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＴＧＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式９；配列番号９）。
【００２２】
いくつかの実施形態において、血中の上昇したグルコース量によって特徴づけられた疾患の治療における使用のためである、プロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の脂質付加された類似体は、以下の化学式を有している：
（Ｘ）ＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式１０；配列番号１０）；または
（Ｘ）ＳＲＴＨＲＨＳＭＥＩＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式８；配列番号８）；
式中、Ｘ＝Ｘ１またはＸ２Ｘ１であり、式中、Ｘ１は、アミド結合によって直接、またはＸ２を介して、化学式１０または化学式８のアミノ酸と結合した、Ｃ１２〜Ｃ１６の脂肪酸であり、式中、Ｘ２は、β−アラニン、γ−アミノ酪酸、ポリオキシエチレン、またはγ−グルタミン酸である。
【００２３】
いくつかの実施形態において、血中の上昇したグルコース量によって特徴づけられた疾患の治療における使用のためである、プロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の脂質付加された類似体は、以下の化学式を有している：
（Ｘ）ＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式１０；配列番号１０）；または
（Ｘ）ＳＲＴＨＲＨＳＭＥＩＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式８；配列番号８）；
式中、Ｘ＝Ｘ１またはＸ２Ｘ１であり、式中、Ｘ１は、ミリスチン酸またはパルミチン酸であり、式中、Ｘ２は、γ−グルタミン酸またはポリオキシエチレンである。
【００２４】
いくつかの実施形態において、血中の上昇したグルコース量によって特徴づけられた疾患の治療における使用のためである、プロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の脂質付加された類似体は、以下の化学式を有している：
（Ｘ）ＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式１０；配列番号１０）；または
（Ｘ）ＳＲＴＨＲＨＳＭＥＩＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式８；配列番号８）；
式中、Ｘ＝Ｘ１またはＸ２Ｘ１であり、式中、Ｘ１は、ミリスチン酸またはパルミチン酸であり、式中、Ｘ２は、γ−グルタミン酸またはポリオキシエチレンであり、式中、Ｘ１は、アミド結合によって直接、またはＸ２を介して、化学式１０または化学式８のアミノ酸と結合している。
【００２５】
いくつかの実施形態において、血中の上昇したグルコース量によって特徴づけられた疾患の治療における使用のためである、プロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の脂質付加された類似体は、以下の化学式を有している：
（Ｘ）ＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式１０；配列番号１０）；または
（Ｘ）ＳＲＴＨＲＨＳＭＥＩＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式８；配列番号８）；
式中、Ｘ＝Ｘ１またはＸ２Ｘ１であり、式中、Ｘ１は、ミリスチン酸またはパルミチン酸であり、式中、Ｘ２は、γ−グルタミン酸またはポリオキシエチレンであり、式中、Ｘ１は、アミド結合によって直接、またはＸ２を介して、化学式８の１番、１１番もしくは１８番のアミノ酸、または化学式１０の１番、５番もしくは７番のアミノ酸と結合している。
【００２６】
いくつかの実施形態において、血中の上昇したグルコース量によって特徴づけられた疾患の治療における使用のためである、プロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の脂質付加された類似体は、以下の化学式を有している：
（Ｘ）ＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式１０；配列番号１０）；または
（Ｘ）ＳＲＴＨＲＨＳＭＥＩＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式８；配列番号８）；
式中、Ｘ＝Ｘ１またはＸ２Ｘ１であり、Ｘ１は、ミリスチン酸またはパルミチン酸であり、Ｘ２は、γ−グルタミン酸またはポリオキシエチレンであり、Ｘ１は、化学式８の１番もしくは１１番のアミノ酸、または化学式１０の１番もしくは７番のアミノ酸と結合している。
【００２７】
いくつかの実施形態において、上昇したグルコース量によって特徴づけられた疾患の治療における使用のためである、プロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の脂質付加された類似体は、以下からなる群より選択される：
ＳＲＴＨＲＨＳＭＥＩＫ（ｐａｌｍ）ＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（配列番号１２）；
ＴＰＤＩＮＰＫ（ｐａｌｍ）ＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（配列番号１３）；
【００２８】
【化１】
0006342016.tif 000002
【００２９】
式中、ｐａｌｍは、パルミチン酸であり、Ｘ２は、γ−グルタミン酸またはポリオキシエチレンである。
【００３０】
いくつかの実施形態において、上昇したグルコース量によって特徴づけられた疾患の治療における使用のためである、プロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の脂質付加された類似体は、以下からなる群より選択される：
Ｘ１−ＳＲＡＨＱＨＳＭＥＴＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＴＧＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（配列番号１６）；
Ｘ１−ＳＲＴＨＲＨＳＭＥＩＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（配列番号１７）；
（Ｎ−ｐａｌｍ）−ＳＲＴＨＲＨＳＭＥＩＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨＭｅ（配列番号１８）；
（Ｎ−ｐａｌｍ）−ＳＲＴＨＲＨＳＭＥＩＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＯＭｅ（配列番号１９）；
（Ｎ−ｍｙｒ）−ＴＰＤＩＮＰＡＷＹＴＧＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（配列番号２０）；
（Ｎ−ｍｙｒ）−ＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（配列番号２１）；
（Ｎ−ｏｃｔ）−ＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（配列番号２２）；
（Ｎ−ｄｅｃ）−ＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（配列番号２３）；
（Ｎ−ｄｏｄｅｃ）−ＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（配列番号２４）；
Ｘ１’−ＳＲＡＨＱＨＳ  Ｎｌｅ  ＥＴＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＴＧＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（配列番号２５）；
Ｘ１−ＳＲＡＨＱＨＳ  Ｎｌｅ  ＥＴＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＴＧＲＧＩＲＰＶＧＲ  １−Ｎａｌ−ＮＨ２（配列番号２６）
Ｘ１−ＳＲＡＨＱＨＳ  Ｎｌｅ  ＥＴＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＴＧＲＧＩＲＰＶＧＲ  ＰｈｅＣｌ２−ＮＨ２（配列番号２７）；
Ｘ１−ＳＲＡＨＱＨＳ  Ｎｌｅ  ＥＴＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＴＧＲＧＩＲＰＶＧＲ  ＰｈｅＮＯ２−ＮＨ２（配列番号２８）；
Ｘ１−ＳＲＡＨＱＨＳ  Ｎｌｅ  ＥＴＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＴＧＲＧＩＲＰＶＧＲ  ＰｈｅＦ５−ＮＨ２（配列番号２９）；
Ｘ１−ＳＲＡＨＱＨＳ  Ｎｌｅ  ＥＴＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＴＧＲＧＩＲＰＶＧＲＹ−ＮＨ２（配列番号３０）；
Ｘ１−ＳＲＡＨＲＨＳ  Ｎｌｅ  ＥＩＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＹ−ＮＨ２（配列番号３１）；
（Ｎ−ｍｙｒ）−Ｎｌｅ−ＥＴＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＴＧＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（配列番号３２）；
（Ｎ−ｍｙｒ）−ＱＨＳＭＥＴＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＴＧＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（配列番号３３）；および
（Ｎ−ｍｙｒ）−ＱＨＳＭＥＴＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（配列番号３４）；
式中、Ｘ＝Ｘ１またはＸ１’であり、式中、Ｘ１’は、パルミチン酸、ミリスチン酸またはステアリン酸であり；かつ
式中、Ｘ１は、パルミチン酸またはミリスチン酸である。
【００３１】
いくつかの実施形態において、疾患は、インスリン抵抗性、グルコース刺激インスリン放出障害（例えば、膵臓のβ−細胞の機能障害）、および／またはグルカゴンの不適切な分泌によって特徴づけられる。いくつかの実施形態において、疾患は、高血糖症または糖尿病である。いくつかの実施形態において、高血糖症は、慢性高血糖症である。いくつかの実施形態において、糖尿病は二型糖尿病である。いくつかの実施形態において、二型糖尿病は、二次疾患に関連している。二次疾患は、例えば、肥満、心血管疾患、高血圧または脂質異常血症でありうる。
【００３２】
本明細書では、特定の実施形態において、以下の化学式を有している、プロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の脂質付加された類似体が開示される：
Ｊ−ｒＲＰｓＧＲｔ−ＮＨ２（化学式１；配列番号１）、式中、
ｒは、イソロイシン、アラニン、またはフェニルグリシンであり；
ｓは、バリンまたはフェニルグリシンであり；かつ
ｔは、フェニルアラニン、トリプトファン、ピログルタミン酸、またはＣＨ２−ＡｒもしくはＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２−Ａｒを含んでいる側鎖を有しているアミノ酸であり、式中、Ａｒは、任意に、ハロゲン基、メチル基またはニトロ基で置換された、フェニルまたはナフチルを表し；
Ｊは、１か所において、Ｘによって脂質付加された、１３アミノ酸または２４アミノ酸の鎖を表し、式中、Ｘ＝Ｘ１またはＸ２Ｘ１であり；式中、Ｘ１は、少なくとも１つの、遊離アミノ基、ＳＨ基またはＯＨ基を有しているアミノ酸と、直接またはＸ２を介して結合している、Ｃ８−Ｃ１８の脂肪酸であり；また、式中、Ｘ２は、ポリオキシエチレン部分、アリールアルキル部分、並びに、１つまたは複数の炭素原子が、Ｎ、Ｓ、およびＯからなる群より選択されたヘテロ原子によって任意に置換された、飽和もしくは不飽和の、直鎖もしくは分鎖のＣ３−Ｃ８の炭化水素鎖からなる群より選択された、親水性リンカーであり；前記炭化水素鎖は、少なくとも１つのアミノ基またはカルボン酸基を有しており、そのうち１つは、置換されて以下のような形を取り得る
ＣＯＮＨ２；
ＮＨ−ポリオキシエチレン；
ＣＯＯＭ１；式中、Ｍ１はアルカリ金属であり；
ＣＮ；
ＣＯＯＲ１、ＣＯＲ１またはＣＯＮＨＲ１；式中、Ｒ１は、低級アルキル、アリールアルキル、ポリオキシエチレン、メチルポリオキシエチレン、またはアミノエチルポリオキシエチレンであり；
（ＣＨＯＨ）ｎＲ２；式中、Ｒ２は、ＨまたはＣＯＯＨであり、ｎは、２〜１０の整数であり；または
（ＣＨ）ｎＮ＋（Ｒ３）；式中、各々Ｒ´は独立に、ＨまたはＣ１−Ｃ４アルキルであり、ただし、Ｘが化学式１のＮ末端アミノ酸に結合する場合は、Ｘは、Ｘ２Ｘ１である。
【００３３】
本明細書では、特定の実施形態において、以下の化学式を有しているプロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の脂質付加された類似体が開示される：
Ｊ−ｒＲＰｓＧＲｔ−ＮＨ２（化学式１；配列番号１）、式中、
ｒは、イソロイシン、アラニン、またはフェニルグリシンであり；
ｓは、バリンまたはフェニルグリシンであり；かつ
ｔは、フェニルアラニン、トリプトファン、ピログルタミン酸、またはＣＨ２−ＡｒもしくはＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２−Ａｒを含んでいる側鎖を有しているアミノ酸であり、式中、Ａｒは、任意に、ハロゲン基、メチル基またはニトロ基で置換された、フェニルまたはナフチルを表し；
Ｊは、１か所において、Ｘによって脂質付加された、１３アミノ酸または２４アミノ酸の鎖を表し、式中、Ｘ＝Ｘ１またはＸ２Ｘ１であり；式中、Ｘ１は、少なくとも１つの、遊離アミノ基、ＳＨ基またはＯＨ基を有しているアミノ酸と、直接またはＸ２を介して結合している、Ｃ１２−Ｃ１６の脂肪酸であり；また、式中、Ｘ２は、ポリオキシエチレン部分、アリールアルキル部分、並びに、１つまたは複数の炭素原子が、Ｎ、Ｓ、およびＯからなる群より選択されたヘテロ原子によって任意に置換された、飽和もしくは不飽和の、直鎖もしくは分鎖のＣ３−Ｃ８の炭化水素鎖からなる群より選択された、親水性リンカーであり；前記炭化水素鎖は、少なくとも１つのアミノ基またはカルボン酸基を有しており、そのうち１つは、置換されて以下のような形を取り得る
ＣＯＮＨ２；
ＮＨ−ポリオキシエチレン；
ＣＯＯＭ１；式中、Ｍ１はアルカリ金属であり；
ＣＮ；
ＣＯＯＲ１、ＣＯＲ１またはＣＯＮＨＲ１；式中、Ｒ１は、低級アルキル、アリールアルキル、ポリオキシエチレン、メチルポリオキシエチレン、またはアミノエチルポリオキシエチレンであり；
（ＣＨＯＨ）ｎＲ２；式中、Ｒ２は、ＨまたはＣＯＯＨであり、ｎは、２〜１０の整数であり；または
（ＣＨ）ｎＮ＋（Ｒ３）；式中、各々Ｒ´は独立に、ＨまたはＣ１−Ｃ４アルキルであり、ただし、Ｘが化学式１のＮ末端アミノ酸に結合する場合は、Ｘは、Ｘ２Ｘ１である。
【００３４】
いくつかの実施形態において、プロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の脂質付加された類似体は、以下の化学式を有している：
（Ｘ）ｋＲｍＨｎＨＳｑＥｕＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲｐｒＲＰｓＧＲｔ−ＮＨ２（化学式２；配列番号２）、式中、
ｋは、セリン、スレオニン、またはジアミノプロピオン酸であり；
ｍは、スレオニン、アラニン、またはメチルアラニンであり；
ｎは、グルタミンまたはアルギニンであり；
ｑは、メチオニンまたはノルロイシンであり；
ｕは、スレオニンまたはイソロイシンであり；
ｏは、グリシンまたはセリンであり；
ｐは、グリシン、アラニン、プロリン、またはＮ−メチルグリシンであり；
ｒは、イソロイシン、アラニン、またはフェニルグリシンであり；
ｓは、バリンまたはフェニルグリシンであり；
ｔは、フェニルアラニン、トリプトファン、ピログルタミン酸、またはＣＨ２−ＡｒもしくはＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２−Ａｒを含んでいる側鎖を有しているアミノ酸であり、式中、Ａｒは、任意に、ハロゲン基、メチル基またはニトロ基で置換された、フェニルまたはナフチルを表す。
【００３５】
いくつかの実施形態において、プロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の脂質付加された類似体は、化学式（Ｘ）ｋＲｍＨｎＨＳｑＥｕＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲｐｒＲＰｓＧＲｔ−ＮＨ２（化学式２；配列番号２）を有しており、式中、ｋＲｍＨｎＨＳｑＥｕＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲｐ（配列番号３５）は、１アミノ酸〜１１アミノ酸を除去することによって短縮されている。
【００３６】
いくつかの実施形態において、プロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の脂質付加された類似体は、化学式（Ｘ）ｋＲｍＨｎＨＳｑＥｕＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲｐｒＲＰｓＧＲｔ−ＮＨ２（化学式２；配列番号２）を有しており、式中、Ｘ＝Ｘ１またはＸ２Ｘ１であり、式中、Ｘ１は、Ｃ８−Ｃ１８の脂肪酸またはＣ１２−Ｃ１６の脂肪酸であり、式中、ｋＲｍＨｎＨＳｑＥｕＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲｐ（配列番号３５）は、そのＮ末端またはＣ末端から、１アミノ酸〜１１アミノ酸を除去することによって短縮されている。
【００３７】
いくつかの実施形態において、プロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の脂質付加された類似体は、化学式（Ｘ）ｋＲｍＨｎＨＳｑＥｕＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲｐｒＲＰｓＧＲｔ−ＮＨ２（化学式２；配列番号２）を有しており、式中、Ｘ＝Ｘ１またはＸ２Ｘ１であり、式中、Ｘ１は、Ｃ８−Ｃ１８の脂肪酸またはＣ１２−Ｃ１６の脂肪酸であり、式中、ｋＲｍＨｎＨＳｑＥｕＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲｐ（配列番号３５）は、そのＮ末端から、１アミノ酸〜１１アミノ酸を除去することによって短縮されている。
【００３８】
いくつかの実施形態において、プロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の脂質付加された類似体は、化学式（Ｘ）ｋＲｍＨｎＨＳｑＥｕＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲｐｒＲＰｓＧＲｔ−ＮＨ２（化学式２；配列番号２）を有しており、式中、Ｘ＝Ｘ１またはＸ２Ｘ１であり、式中、Ｘ１は、Ｃ８−Ｃ１８の脂肪酸またはＣ１２−Ｃ１６の脂肪酸であり、式中、ｋＲｍＨｎＨＳｑＥｕＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲｐ（配列番号３５）は、そのＣ末端から、１アミノ酸〜１１アミノ酸を除去することによって短縮されている。
【００３９】
いくつかの実施形態において、プロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の脂質付加された類似体は、以下の化学式を有している：
（Ｘ）ｋＲｍＨｎＨＳｑＥｕＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲｐｒＲＰｓＧＲｔ−ＮＨ２（化学式２；配列番号２）、または
（Ｘ）ＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲｐｒＲＰｓＧＲｔ−ＮＨ２（化学式３；配列番号３）；式中
ｋは、セリン、スレオニン、またはジアミノプロピオン酸であり；
ｍは、スレオニン、アラニン、またはメチルアラニンであり；
ｎは、グルタミンまたはアルギニンであり；
ｑは、メチオニンまたはノルロイシンであり；
ｕは、スレオニンまたはイソロイシンであり；
ｏは、グリシンまたはセリンであり；
ｐは、グリシン、アラニン、プロリン、またはＮ−メチルグリシンであり；
ｒは、イソロイシン、アラニン、またはフェニルグリシンであり；
ｓは、バリンまたはフェニルグリシンであり；
ｔは、フェニルアラニン、トリプトファン、ピログルタミン酸、またはＣＨ２−ＡｒもしくはＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２−Ａｒを含んでいる側鎖を有しているアミノ酸であり、式中、Ａｒは、任意に、ハロゲン基、メチル基またはニトロ基で置換された、フェニルまたはナフチルを表す。
【００４０】
いくつかの実施形態において、プロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の脂質付加されたＰｒＲＰの類似体は、Ｋｉ１０−６ｍｏｌ．ｌ−１を超えない、ラットの下垂体細胞において発現したＧＰＲ１０レセプターに対する結合親和力を有している。
【００４１】
いくつかの実施形態において、脂質付加されたＰｒＲＰの類似体は、以下の化学式を有している：
（Ｘ）ＳＲｍＨｎＨＳｑＥｕＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲｐｒＲＰｓＧＲｔ−ＮＨ２（化学式４；配列番号４）、
式中、
ｍは、スレオニン、アラニン、またはメチルアラニンから選択され；
ｎは、グルタミンまたはアルギニンであり；
ｑは、メチオニンまたはノルロイシンであり；
ｕは、スレオニンまたはイソロイシンであり；
ｏは、グリシンまたはセリンであり；
ｐは、グリシン、アラニン、プロリン、またはＮ−メチルグリシンであり；
ｒは、イソロイシン、アラニン、またはフェニルグリシンであり；
ｓは、バリンまたはフェニルグリシンであり；
ｔは、フェニルアラニン、トリプトファン、ピログルタミン酸、またはＣＨ２−ＡｒもしくはＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２−Ａｒを含んでいる側鎖を有しているアミノ酸であり、式中、Ａｒは、任意に、ハロゲン基、メチル基またはニトロ基で置換された、フェニルまたはナフチルを表し、および式中、Ｘ１は、Ｃ１０−Ｃ１８の脂肪酸である。
【００４２】
いくつかの実施形態において、プロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）のペプチドの脂質付加された類似体は、化学式Ｊ−ｒＲＰｓＧＲｔ−ＮＨ２（化学式１；配列番号１）を有しており、式中、ｔは、ヒスチジン、ベンジルヒスチジン、ナフチルアラニン、トリプトファン、ピログルタミン酸、ベンジルシステイン、ベンジル−Ｏ−グルタミン、ノルロイシン、ジクロロフェニルアラニン、テトラクロロフェニルアラニン、ペンタフルオロフェニルアラニン、メチル−Ｏ−フェニルアラニン、メチル−ＮＨ−フェニルアラニン、およびニトロフェニルアラニンからなる群より選択される。
【００４３】
いくつかの実施形態において、プロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の脂質付加された類似体は、以下の化学式を有している：
（Ｘ）ＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲＧｒＲＰｓＧＲＦ−ＮＨ２（化学式５；配列番号５）；
（Ｘ）ＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲＧｒＲＰｓＧＲ  １−Ｎａｌ−ＮＨ２（化学式６；配列番号６）；または
（Ｘ）ＲｍＨｎＨＳＮｌｅＥＴＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲＧｒＲＰｓＧＲ  １−Ｎａｌ−ＮＨ２（化学式７；配列番号７）；
式中、
１−ｎａｌは、ナフチルアラニンであり；
ｍは、スレオニン、アラニン、またはメチルアラニンであり；
ｎは、グルタミンまたはアルギニンであり；
ｏは、グリシンまたはセリンであり；
ｒは、イソロイシン、アラニン、またはフェニルグリシンであり；
ｓは、バリンまたはフェニルグリシンである。
【００４４】
いくつかの実施形態において、脂質付加されたＰｒＲＰのペプチドは、以下の化学式を有している：
（Ｘ）ＳＲＴＨＲＨＳＭＥＩＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式８；配列番号８）；または
（Ｘ）ＳＲＡＨＱＨＳＭＥＴＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＴＧＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式９；配列番号９）。
【００４５】
いくつかの実施形態において、脂質付加されたＰｒＲＰのペプチドは、以下の化学式を有している：
（Ｘ）ＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式１０；配列番号１０）、または
（Ｘ）ＳＲＴＨＲＨＳＭＥＩＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式８；配列番号８）であり；
式中、Ｘ＝Ｘ１またはＸ２Ｘ１であり、式中、Ｘ１は、ミリスチン酸またはパルミチン酸であり、当該Ｘ１は、アミド結合によって直接、またはＸ２を介して、化学式８の１番〜２２番のアミノ酸、または化学式８の１番〜１２番のアミノ酸のいずれか１つと結合しており、式中、Ｘ２は、ポリオキシエチレン、β−アラニン、γ−アミノ酪酸、またはγ−グルタミン酸であり、ただし、Ｘは、化学式１０または化学式８のＮ末端アミノ酸と結合する場合、Ｘは、Ｘ２Ｘ１であり、式中、Ｘ１に結合する前記アミノ酸は、リジンによって置換される。
【００４６】
いくつかの実施形態において、脂質付加されたＰｒＲＰのペプチドは、以下の化学式を有している：
（Ｘ）ＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式１０；配列番号１０）、または
（Ｘ）ＳＲＴＨＲＨＳＭＥＩＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式８；配列番号８）であり；
式中、Ｘ＝Ｘ１またはＸ２Ｘ１であり、式中、Ｘ１は、ミリスチン酸またはパルミチン酸であり、当該Ｘ１は、アミド結合によって直接、またはＸ２を介して、化学式８の１番、１１番もしくは１８番のアミノ酸、または化学式１０の１番、５番もしくは７番のアミノ酸のいずれか１つと結合しており、式中、Ｘ２は、γ−グルタミン酸またはポリオキシエチレンであり、ただし、Ｘは、化学式１０または化学式８のＮ末端アミノ酸と結合する場合、Ｘは、Ｘ２Ｘ１である。
【００４７】
いくつかの実施形態において、脂質付加されたＰｒＲＰのペプチドは、以下の化学式を有している：
（Ｘ）ＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式１０；配列番号１０）、または
（Ｘ）ＳＲＴＨＲＨＳＭＥＩＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式８；配列番号８）であり；
式中、Ｘ＝Ｘ１またはＸ２Ｘ１であり、式中、Ｘ１は、ミリスチン酸またはパルミチン酸であり、当該Ｘ１は、アミド結合によって直接、またはＸ２を介して、化学式８の１番もしくは１１番のアミノ酸、または化学式１０の１番もしくは７番のアミノ酸のいずれか１つと結合しており、式中、Ｘ２は、γ−グルタミン酸またはポリオキシエチレンであり、ただし、Ｘは、化学式１０または化学式８のＮ末端アミノ酸と結合する場合、Ｘは、Ｘ２Ｘ１である。
【００４８】
いくつかの実施形態において、脂質付加されたＰｒＲＰのペプチドは、以下からなる群より選択される：
ＳＲＴＨＲＨＳＭＥＩＫ（ｐａｌｍ）ＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（配列番号１２）；
ＴＰＤＩＮＰＫ（ｐａｌｍ）ＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（配列番号１３）；
【００４９】
【化２】
0006342016.tif 000003
【００５０】
式中、ｐａｌｍは、パルミチン酸であり、Ｘ２は、γ−グルタミン酸またはポリオキシエチレンである。
【００５１】
追加の実施形態は、薬剤（または、薬学的組成物、例えば、活性成分として、一般式：Ｊ−ｒＲＰｓＧＲｔ−ＮＨ２（化学式１；配列番号１）を有している、プロラクチン放出ペプチドの脂質付加された類似体を含んでいる、薬学的組成物）、およびその薬学的に許容可能なキャリアに関する。更なる実施形態は、その薬剤または薬学的組成物を投与することによって、上昇した血中の糖分によって特徴づけられた病状を、治療するため、または予防するための方法に関する。
【００５２】
〔図面の簡単な説明〕
以下は、図面の簡単な説明であり、当該説明は、本明細書中に開示された、例示の実施形態を説明するという目的のために提示され、本明細書中に記載された、プロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の脂質付加された類似体の選択された実験的な土台を提示し、同様のことを制限するという目的のためではない。
【００５３】
図１Ａおよび図１Ｂは、やせたマウスにおける、ｐａｌｍ−ＰｒＲＰ３１（類似体４３）および対照の生理食塩水の急性投与後の、腹腔内のグルコース負荷試験（ＩＰＧＴＴ）の結果を示す。ＩＰＧＴＴを、一晩絶食させたオスのＣ５７ＢＬ／６マウスにおいて実施した。血中グルコース量を、開始時およびｐａｌｍ−ＰｒＲＰ３１（類似体４３）（５ｍｇ／ｋｇ  ＳＣ）または生理食塩水の皮下（ＳＣ−皮膚の下）投与後、３０分，６０分，９０分および１２０分において、測定した（ｎ＝７）。図１Ａは、時間とともにグルコース量を示し、図１Ｂは、３０分間の曲線下面積（ＡＵＣ）を示す。
【００５４】
図２Ａおよび図２Ｂは、肥満かつ糖尿病のグルタミン酸ナトリウム（ＭＳＧ）マウスに対して、ｐａｌｍ−ＰｒＲＰ３１（類似体４３）を１０日投与した後の、腹腔内の（ＩＰＧＴＴ）結果を示す。マウスは、１０日間の摂食実験を受けた。ＭＳＧマウスに、５ｍｇ／ｋｇの用量の、生理食塩水またはｐａｌｍ−ＰｒＲＰ３１（類似体４３）のいずれかを、１０日間１日に２度、ＳＣ注射し、これらのＮＭＲＩの対照は、生理食塩水を１０日間１日に２度、ＳＣ注射した（ｎ＝１０）。処理の１０日後、マウスを一晩絶食させ、ＩＰＧＴＴを実施した。初めの血中グルコースの測定後、２ｇ／ｋｇのグルコース溶液を腹腔内に投与した（ＩＰ）。その後、血中グルコースを、１５分，３０分，６０分，１２０分および１８０分において、測定した。図２Ａは、結果のグルコース量を時間とともに示し、図２Ｂは、１８０分間の曲線下面積（ＡＵＣ）を示す。
【００５５】
図３は、糖尿病のｄｂ／ｄｂマウスに対して、ｐａｌｍ−ＰｒＲＰ３１（類似体４３）または、対照として、生理食塩水を、１４日間反復投与した後のグルコース量の比較を示す。オスのｄｂ／ｄｂマウスに、５ｍｇ／ｋｇの用量の、生理食塩水またはｐａｌｍ−ＰｒＲＰ３１（類似体４３）のいずれかを、１４日間１日に２度、ＳＣ注射した。その後、マウスを一晩絶食させ、ＩＰＧＴＴを実施した。初めの血中グルコースの測定後、２ｇ／ｋｇのグルコース溶液をＩＰ投与し、グルコースを、７時間の間、１時間ごとに追跡した。実験の終了時（４２０分）におけるグルコース量を示す。
【００５６】
図４は、ラットにおけるｐａｌｍ−ＰｒＲＰ３１（類似体４３）の急性投与後のグルコース量のプロットを示す。ＩＰＧＴＴを、一晩絶食させたオスのウィスターラットにおいて実施した。血中グルコース量を、開始時、およびｐａｌｍ−ＰｒＲＰ３１（類似体４３）（５ｍｇ／ｋｇ  ＳＣ）または生理食塩水のＳＣ投与後に、時間とともに測定した。
【００５７】
図５Ａおよび図５Ｂは、糖尿病のＺＤＦラットに対して、類似体４３および類似体５２を２１日間投与した後の、経口グルコース負荷試験（ＯＧＴＴ）の結果を示す。ラットは、２１日間の摂食実験を受けた。ＺＤＦラットは、１ｍｇ／ｋｇおよび５ｍｇ／ｋｇの用量の、リン酸緩衝生理食塩水ｐＨ６（対照）、または化合物４３もしくは化合物５２を、２１日間１日に２度、ＩＰ注射した（ｎ＝８）。処理の２１日後、ラットを一晩絶食させ、ＯＧＴＴを実施した。初めの血中グルコースの測定後、２ｇ／ｋｇのグルコース溶液を経口補給によって投与した。その後、血中グルコースを、１５分，３０分，６０分，９０分，１２０分および１８０分において、測定した。図５Ａは、グルコース量における変化（デルタグルコース）の結果を時間とともに示し、図５Ｂは、１８０分間の曲線下面積（ＡＵＣ）を示す。
【００５８】
〔詳細な説明〕
化合物（例えば、プロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の脂質付加された類似体、およびその薬学的組成物）および、上昇したグルコース量によって特徴づけられた１つまたは複数の疾患のような、代謝の状態を有しているか、または代謝の状態になりやすいと診断された被験体を治療するための、このような組成物の使用を、本明細書中で開示する。本明細書中に開示された研究は、脂質付加された形態の、ＰｒＲＰ２０の類似体およびＰｒＲＰ３１の類似体が、グルコースを低下する効果および食欲不振の特性を示したことを明らかにしている。さらに、本明細書中に開示された研究は、末梢的に（例えば、皮下に）投与された際、これらの脂質付加された類似体が有効であることを明らかにする。
【００５９】
本明細書中に記載されるように、ＰｒＲＰの脂質付加された類似体の食欲不振の特性は、ラットの下垂体の細胞系統ＲＣ−４Ｂ／Ｃおよびチャイニーズハムスターの卵巣（ＣＨＯ）の細胞系統を用いて、明らかにされた。この特性は、さらに、本明細書中に記載された、げっ歯類の研究において、明らかにされ、脂質付加された類似体は、用量依存的な様式において、絶食したマウスにおいて、摂食を低下させることが示された。さらに、いくつかの部分群（例えば、やせたマウス、肥満かつ糖尿病のグルタミン酸ナトリウムマウス、糖尿病のｄｂ／ｄｂマウス、およびやせたラット）における、本明細書中に記載された研究は、脂質付加されたＰｒＲＰの類似体の投与によって、低下したグルコース量を示した。これらの結果は、脂質付加されたＰｒＲＰの類似体は、新規の治療的候補物としての使用のために適用できることを示す。さらに、視床下部または脳幹を介した、これらの末梢投与は、血液脳関門を越える輸送のための好都合な代替策を提示する。本明細書中で開示されたように、特定の実施形態において、脂質付加されたＰｒＲＰの類似体は、特に、上昇した血中グルコース量およびそれに関連した他の病状を治療するために適用できる。
【００６０】
（特定の用語法）
別の方法で定義されない場合は、本明細書中で使用される、すべての技術的用語および科学的用語は、クレームに記載された対象が属している分野の当業者によって、一般的に理解されるのと同じ意味を有している。本明細書中の用語に対して多数の定義がある場合は、その項目内の定義を優先する。参照が、ＵＲＬまたは他のこのような識別子もしくはアドレスによって、特定される場合、このような識別子は、変わり得るし、インターネット上の特定の情報は、移り変わり得るが、同等の情報は、インターネットを検索することによって見つけられ得る、と理解される。それに対する参照は、このような情報の有効性および公的な普及の証拠となる。
【００６１】
前述の概略の説明、および以下に続く詳細な説明は、例または解説に過ぎず、如何なるクレームに記載された対象も制限されない、と理解され得る。本出願中、単数形の使用は、他に特定して言及されない場合は、複数形を含んでいる。注意すべきは、明細書および添付の請求項中で用いられるように、単数形の形式「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、文脈上、他に明確に指示されない場合は、複数の対象を含んでいる。本出願中、「または」の使用は、他に言及されない場合は、「および／または」を意味する。さらに、用語「含んでいる(including)」の使用は、「含む(include)」、「含む(includes)」、「含まれた(included)」などの、他の形式と同様に、制限されない。
【００６２】
本明細書中で使用される、項目の見出しは、体系的な目的のためのみであって、記載された対象を制限するために、解釈されるのではない。特許、特許出願、記事、書籍、マニュアル、および学術論文を含み、これに制限されない、本出願中に引用される、すべての書類または書類の一部は、如何なる目的のためにも、その全文が、特別に参照によって引用される。
【００６３】
用語「ペプチド」は、本明細書中で使用される場合、ペプチド（アミド）結合によって結合した、少なくとも５つの構成アミノ酸からなる、化合物に関する。このアミノ酸は、遺伝暗号によってコードされた、天然に生じているアミノ酸、遺伝暗号によってコードされない、天然に生じている天然のアミノ酸、および／または合成のアミノ酸であり得る。
【００６４】
ペプチドに関する用語「類似体」は、改質したペプチドに関し、改質したペプチド中、１つまたは複数のアミノ酸残基が、他のアミノ酸残基によって置換されているか、および／または改質したペプチド中、１つまたは複数のアミノ酸残基が、このペプチドから削除されているか、および／または改質したペプチド中、１つまたは複数のアミノ酸残基が、このペプチドに付加されている。この類似体は、脂質付加され得る。
【００６５】
用語「疾患の治療」は、本明細書中で使用される場合、病気、症状または疾患を生じている患者の、管理およびケアに関する。治療の目的は、病気、症状または疾患を治すことである。治療は、公知の適用可能な方法によって、病気を解消するため、または制御するための有効な化合物の投与を含んでいる。また、病状または疾患の治療は、病気、症状または疾患に関連した、兆候または合併症を緩和することを含み得る。
【００６６】
用語「脂肪酸」は、本明細書中で使用される場合、長い脂肪族の尾部（鎖）を有している、カルボン酸に関する。例えば、１３〜２１の炭素長、または、１３を超える炭素長もしくは１５を超える炭素長の尾部を有しているカルボン酸である。
【００６７】
用語「低級アルキル」は、本明細書中で使用される場合、Ｃ１−Ｃ６の直鎖のアルキル鎖またはＣ３−Ｃ６の分鎖のアルキル鎖を意味する。
【００６８】
用語「アリールアルキル」は、本明細書中で使用される場合、６〜１２の炭素原子を含み、少なくとも１つの芳香環を含む、炭化水素基を意味し、当該炭化水素基は、非置換であり得るし、または−ＯＨ，−ＳＨ，ハロゲン，Ｃ１−Ｃ６のアルキル，−ＮＨ２，−ＣＮ，−ＮＯ２、および、式中Ｒ´´は、ＨまたはＣ１−Ｃ６のアルキルである、−ＣＯＯＲ´´からなる群より選択された、１〜５の置換基によって置換され得る。
【００６９】
用語「ポリオキシエチレン」は、一般式ＨＯ−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｎ−Ｈを有している、エチレンオキシドの、オリゴマーまたはポリマーを意味する。
【００７０】
用語「塩」は、本明細書中で使用される場合、塩基性塩、酸性塩または中性塩であり得る。有用な塩は、各々、活性分子の、陰性基または陽性基と反応する、陽イオンまたは陰イオンを添加されて、形成され得る。これらの基は、ペプチド鎖、および／または脂質付加された類似体の側鎖に、位置し得る。
【００７１】
本明細書中で使用される、脂質付加された類似体の「エステル」は、アルコールまたはフェノールとの、遊離カルボン酸基の反応によって、形成され得るし、当該反応は、アルコキシ基またはアリールオキシ基によって、少なくとも１つの炭化水素基の置換を引き起こす。
【００７２】
本明細書中で使用される、脂質付加された類似体の「アミド」は、アミンもしくは置換されたアミンと、活性型の遊離カルボン酸基との反応、または活性型のカルボン酸と、遊離アミノ基もしくは置換されたアミノ基との反応によって、形成され得る。
【００７３】
本明細書中で使用される用語「結合親和力」は、多くのリガンドと、これらの各々の結合部位との相互作用を特徴づける。典型的には、高い親和力のリガンドの結合は、リガンドとそのレセプターとの間の、より大きな分子間力によって起こり、逆に、低い親和力のリガンドの結合は、リガンドとそのレセプターとの間の、より小さな分子間力を必要とする。一般則として、高い親和力の結合は、低い親和力の結合を有している場合よりも、リガンドの、そのレセプターの結合部位における、より長い滞留時間を必要とする。レセプターに対する、リガンドの高い親和力の結合は、結合のエネルギーの一部が、レセプターにおける立体配座の変化を引き起こすために用いられ得る場合に、しばしば、生理的に重要であり、関連したイオンチャネルまたは酵素の振る舞いを変化させる結果となる。
【００７４】
本明細書中で使用される用語「アゴニスト」は、レセプターに結合し、生理的な反応を引き起こし得るリガンドに関する。任意のタイプのレセプターに結合しているアゴニストは、どれだけの生理的な反応が引き起こされ得るかという観点、および生理的な反応を生み出すために必要とされる、アゴニストの濃度という観点において、特徴づけられ得る。高い親和力のリガンドの結合は、比較的低い濃度のリガンドが、リガンドの結合部位を最大限に占有し、生理的な反応を引き起こすために十分であることを意味する。Ｋｉ値がより低いと、分子と受容抗原との化学反応がより起こりやすい。低い親和力の結合（高いＫｉ値）は、比較的高い濃度のリガンドが、結合部位が最大限に占有され、リガンドに対する最大の生理的な反応が達成される前に必要とされることを意味する。Ｋｉは、任意の想定されるアゴニストに対して、例えば、競合結合測定によって、定量され得る。例えば、類似体の結合親和力、または他には、天然のアゴニストの改質された種類の結合親和力は、天然のアゴニストとの競合結合によって、測定され得る。
【００７５】
本開示中に使用される省略形は、分散分析（ＡＮＯＶＡ）；ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）；ウシ膵臓トリプシンインヒビター（ＢＰＴＩ）；上皮成長因子（ＥＧＦ）；４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）；リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）；ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）；トリス緩衝生理食塩水（ＴＢＳ）；ジアミノプロピオン酸（Ｄｐｒ）；１−ナフチルアラニン（１−Ｎａｌ）；ノルロイシン（Ｎｌｅ）；ミリストイル（ｍｙｒ）；パルミトイル（ｐａｌｍ）；オクタノイル（ｏｃｔ）；ドデカノイル（ｄｏｄｅｃ）；およびトリデカノイル（ｔｒｉｄｅｃ），γ−アミノ酪酸（ＧＡＢＡ），ガンマ−グルタミン酸（γＥ），ポリオキシエチレン（ＰＯＥ）、特に１，１３−ジアミノ−４，７，１０−トリオキサトリデカン−スクシンアミノ酸を含んでいる。
【００７６】
（プロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ））
プロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）とは、エネルギー代謝の制御に作用する神経ペプチドである（Hinuma, S., et al. "A prolactin-releasing peptide in the brain," Nature 393:272-276, 1998）。ＰｒＲＰには２種類の特に重要な型がある。一つは３１のアミノ酸から構成され（ＰｒＲＰ３１）、第二のものは２０のアミノ酸から構成される（ＰｒＲＰ２０）（Hinuma et al., 1998）。
【００７７】
体内において、ＰｒＲＰの幾つかの生物学的機能が特徴づけられてきた。一つの機能は、プロラクチン放出を刺激することであると見做されていた（Hinuma et al., 1998）。その後、他の研究において、この効果はオスのラットにおいては存在しないことが判明した。それ故、前記研究によると、これがＰｒＲＰの主要な機能ではないことが示唆された（Jarry, H., et al., "Prolactin-releasing peptides  do not  stimulate prolactin  release  in vivo," Neuroendocrinology,  71:262-267,  2000）。代謝平衡を維持するために重要である、視床下部の視床下部室傍核および視床下部背内側核（ＰＶＮおよびＤＭＮ）におけるＰｒＲＰの発見によって、ＰｒＲＰは摂食に作用する因子として考えられた（Lawrence, C., at al., "Alternative role for prolactin- releasing peptide in the regulation of food intake," Nat. Neurosci, 3:645-646, 2000）。
【００７８】
ＰｒＲＰ遺伝子が欠失されたノックアウトマウスについてのさらなる研究によると、極度の空腹または食欲の増進に関連する状況での精神発揚における、ＰｒＲＰの役割が示唆された。個々の食事の頻度は作用されなかった一方で、各食事における摂食の量が増加した。体温および酸素消費量が対照動物と比較された際、これらのマウスにおいてエネルギー消費の低下は観測されなかった（Takayanagi et al.; Mochiduki, A., et al., "Stress response of prolactin releasing peptide knockout mice as to glucocorticoid secretion," J Neuroendocrinol, 22:576-584, 2010）。
【００７９】
同様に、ＰｒＲＰのレセプターであるＧＰＲ１０のための遺伝子を欠失しているマウスは、食欲が大きく肥満に至る。この効果は、メスのマウスにおいてより顕著であった（Gu, W., et al., "The prolactin releasing peptide receptor (GPR10) regulates body weight homeostasis in mice," J Mol Neurosci, 22:93-103, 2004; Bjursell et al., 2007）。これに加えて、ＧＰＲ１０ノックアウト（ＫＯ）マウスにおける増加した摂食は、コレシストキニン（ＣＣＫ）の投与後に減少しなかった。この発見は、ＧＰＲ１０−ＰｒＲＰシステムはＣＣＫ（摂食時の満腹感を誘発する末梢性ペプチド）のシグナル伝達において重要な役割を有している可能性がある、との仮説を支持する（Bechtold D, et al., "Prolactin-releasing peptide mediates cholecystokinin induced satiety in mice," Endocrinology, 147:4723-4729, 2006）。
【００８０】
構造上、ＰｒＲＰの３０番におけるアミノ酸残基（アルギニン）の変異により、レセプターに対する結合活性および生物活性は失われる。さらに、前記ＧＰＲ１０レセプターに対するＰｒＲＰの結合のために、３１番は、フェニルアラニンまたはアミノ酸の側鎖のＣＨ２基のうち少なくとも１つに対して芳香族部分が結合した他のアミノ酸であることが要求される（Boyle, R., et al., "Structure activity studies on prolactin releasing peptide (PrRP). Analogues of PrRP (19 31) peptide," J Pept Sci, 11:161-165, 2005）。
【００８１】
ＰｒＲＰ類似体による結合実験のために、２０番のチロシンを１２５Ｉで放射線標識したＰｒＲＰが利用された（Satoh, F., et al., "Characterization and distribution of prolactin releasing peptide (PrRP) binding sites in the rat-evidence for a novel binding site subtype in cardiac and skeletal muscle," Br. J. Pharmacol., 129:1787-1793, 2000）。チロシンの一ヨウ化は、ＰｒＲＰの前記レセプターに対する結合に影響を与えないことが確認された（Maixnerova, J., et al. 2011）。生物活性をＰｒＲＰ３１と比較するために、天然のＰｒＲＰ２０にアミノ酸の修飾が導入された（Langmead, C., et al., "Characterization  of the binding  of[125I] human prolactin releasing peptide (PrRP) to GPR10, a novel G protein coupled receptor," Br. J. Pharmacol.,  131:683-688, 2000; Maixnerova et al., 2011 ;Maletinska, L., et al., "Biological properties of prolactin releasing peptide analogues with a modified aromatic ring of a C terminal phenylalanine amide," Peptides, 32:1887-1892, 2011）。Ｃ末端のフェニルアラニンが、コードされないアミノ酸（フェニルアラニン誘導体ＰｈｅＣｌ２、ＰｈｅＦ５およびＰｈｅＮＯ２））、嵩張ったナフチルアラニン（１−Ｎａｌおよび２−Ｎａｌ）を伴うコードされないアミノ酸、またはチロシンによって置換された。全ての類似体は、生物活性に必要となる保存されたＣ末端のアミドを有した（Hinuma  et  al.1998; Roland,  B.,  et  al.,  "Anatomical  distribution  of  prolactin  releasing  peptide  and  its  receptor suggests  additional  functions  in  the  central  nervous  system  and  periphery,"  Endocrinology, 140:5736-5745, 1999）。さらに、前記全ての類似体は、ペプチド鎖のＮ末端がアセチル化されて、特にインビボでの実験のための安定性を増加させた。生物活性は、前記Ｃ末端のヘプタペプチドより前の位置におけるアミノ酸の置換に依存しなかった。
【００８２】
前記ＰｒＲＰ類似体［Ｔｙｒ３１］ＰｒＲＰ２０、［１−Ｎａｌ３１］ＰｒＲＰ２０、［ＰｈｅＦ５３１］ＰｒＲＰ２０、［ＰｈｅＣｌ２３１］ＰｒＲＰ２０および［ＰｈｅＮＯ２３１］ＰｒＲＰ２０は、前記ＧＰＲ１０レセプターを発現しており、１細胞あたり数万個オーダーの結合サイトを産出している下垂体細胞系統ＲＣ−４Ｂ／Ｃに対して結合する（Maixnerova et al., 2011）。これらの類似体は、ＰｒＲＰ３１およびＰｒＲＰ２０のものに匹敵する程度のＫｄの値を示す（Maletinska et al., 2011）。これに加えて、前記ＲＣ−４Ｂ／Ｃ細胞を上述した類似体と共にインキュベートすると、分裂促進因子活性化ホスホリラーゼ／細胞外調節キナーゼ（ＭＡＰＫ／ＥＲＫ１／２）およびｃＡＭＰ応答配列結合タンパク質（ＣＲＥＢ）という酵素のリン酸化が促進される。ＥＣ５０の値において、前記類似体はまた、ＰｒＲＰ２０に匹敵する程度に培地中への前記プロラクチン放出を刺激する（Hinuma et al., 1998）。これらＰｒＲＰの類似体を、脳室内（ＩＣＶ−脳の脳室系の内部に）への用量を１０ｎｍｏｌとする投与によって、絶食させたマウスにおける摂食が統計的に有意に減少した（Maletinska et al., 2011）。
【００８３】
（ＰｒＲＰ２０およびＰｒＲＰ３１の脂質付加された類似体）
組成物（例えば、プロラクチン放出ペプチドの脂質付加された類似体およびその薬学的組成物）および、血中の上昇したグルコース量によって特徴づけられる１つ以上の疾患である、または当該疾患が疑われると診断された被験体を、前記組成物を用いて治療する方法が、本明細書中に開示される。
【００８４】
インビトロおよびインビボでのこれらの化合物の薬理的効果、並びに、二型糖尿病および関連する状態（肥満および摂食障害など）などの状態を治療することに対するその適用が、本明細書中に説明されている。プロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の種々の脂質付加された類似体の末梢投与が血中のグルコース量を低下させることの実証、並びにこのことが耐糖能障害（ＩＧＴ）およびグルコース不耐性状態を治療するために有用であり得ることもまた、本明細書中で説明される。
【００８５】
特定の実施形態において、好適なヘプタペプチド配列ＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（配列番号３６）をＣ末端に含んでいる、ＰｒＲＰ２０またはＰｒＲＰ３１の脂質付加された類似体（それぞれ長さは２０または３１アミノ酸）が、本明細書中に開示される。いくつかの実施形態においては、前記ペプチド鎖における任意の前記アミノ酸の、好ましくは前記配列ＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（配列番号３６）およびＮ末端のアミノ酸以外のアミノ酸の遊離官能基に、Ｃ８〜Ｃ１８の脂肪酸がアミド結合により直接結合している、またはヒドロカルビルスペーサーもしくはポリオキシエチレンスペーサーを介して結合している、のいずれかである。いくつかの実施形態では、前記Ｃ末端のヘプタペプチド配列において、イソロイシンがフェニルグリシンまたはアラニンによって置換されている場合があり、バリンがフェニルグリシンによって置換されている場合がある。いくつかの実施形態において、前記末端のフェニルアラニンは、トリプトファン、ピログルタミン酸またはＣＨ２−ＡｒもしくはＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２−Ａｒを含んでいる側鎖を伴うアミノ酸（Ａｒは、任意にハロゲン基、メチル基もしくはニトロ基によって置換されている、フェニルまたはナフチルを表す）によって置換されている。
【００８６】
いくつかの実施形態において、脂質付加されたＰｒＲＰは、ＧＰＲ１０レセプターに対して本来のものに近い結合親和力を示した。いくつかの実施形態において、哺乳動物に対して投与された際に、脂質付加されたＰｒＲＰは血中グルコースを低下させた。
【００８７】
代表的な合成されたＰｒＲＰおよび脂質付加されたＰｒＲＰ類似体の一覧が、表１において説明されている。
【００８８】
【表１】
0006342016.tif 000004
【００８９】
0006342016.tif 000005
【００９０】
0006342016.tif 000006
【００９１】
0006342016.tif 000007
【００９２】
いくつかの実施形態において、前記ＰｒＲＰの脂質付加された類似体は、配列番号４１〜９９のうちの１つである。
【００９３】
特定の実施形態においては、ＰｒＲＰの脂質付加された類似体（前記ＰｒＲＰの脂質付加された類似体は、配列番号４１〜９９のうちの１つである）を投与することによって、増加した血中のグルコース量によって特徴づけられる１つ以上の疾患である、または当該疾患が疑われると診断された被験体を治療するための方法が、本明細書中に開示される。
【００９４】
特定の実施形態において、前記脂質（典型的にはＣ８〜Ｃ１８の脂肪酸）とアミノ酸（典型的にはＰｒＲＰ２０、ＰｒＲＰ３１または類似体）との間の、親水性のリンカー（Ｘ２）が、本明細書に開示される。いくつかの実施形態において、前記リンカーは、ポリオキシエチレン部分、アリールアルキル部分、または単結合の（任意に２価の）直鎖状もしくは分鎖状Ｃ３〜Ｃ８炭化水素鎖から選択される。ポリオキシエチレンは、２つ以上のエトキシサブユニットを含み得、末端を任意にアミノ基またはアセチル基にされ得る。例えば、エトキシはアミド結合を介して結合されていてよい。
【００９５】
いくつかの実施形態において、前記リンカーＸ２が炭化水素鎖を含む場合、前記炭化水素鎖の炭素原子は、Ｎ、ＳおよびＯからなる群より選択されるヘテロ原子によって置換されていてもよい。これらはまた、−Ｐ（＝Ｏ）（ＲＸ）−または−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲＸ）−基（ＲＸはＣ１〜Ｃ３アルキルから選択される）によっても置換され、ホスフィンオキシドまたはホスホネート部分を形成し得る。当該鎖は、少なくとも１つ（より好ましくは少なくとも２つ）の、好ましくは２つのアミノ基またはカルボン酸基を有しており、そのうち少なくとも１つは置換されて、ＣＯＮＨ２；ＮＨ−ポリオキシエチレン；ＣＯＯＭ１（Ｍ１はアルカリ金属、好ましくはＮａまたはＫ）；ＣＮ；ＣＯＯＲ１、ＣＯＲ１もしくはＣＯＮＨＲ１（Ｒ１は、低級アルキル、アリールアルキル、ポリオキシエチレン、メチルポリオキシエチレン、アミノエチルポリオキシエチレンからなる群より選択される）、（ＣＨＯＨ）ｎＲ２（Ｒ２はＨまたはＣＯＯＨであり、ｎは２〜１０の整数である）、または（ＣＨ）ｎＮ＋（Ｒ´）３（それぞれのＲ´は、独立にＨまたはＣ１〜Ｃ４アルキルであり得る）基を形成し得る。
【００９６】
いくつかの実施形態において、前記リンカーＸ２は、アミノ酸の遊離ＮＨ２基、ＣＯＯＨ基、ＯＨ基またはＳＨ基を使用して前記ペプチド鎖のアミノ酸に結合している、または、前記ペプチド鎖（ＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（配列番号３６）の配列を除く）のＣ末端にある任意のアミノ酸を置換しているリジンに結合している。
【００９７】
いくつかの実施形態において、Ｘ１（通常は脂肪酸）が前記ペプチド鎖のアミノ酸に結合していると説明されている場合、他に（例えばＪの定義においてなど）限定されない限り、Ｘ１は当該鎖における任意の前記アミノ酸に結合していてよい。より具体的には、（Ｘ）がアミノ酸配列の一端に示されている場合、（Ｘ）は前記配列において直接隣接しているアミノ酸に結合していなければならない、と想定されるべきではない。
【００９８】
いくつかの実施形態において、本明細書中に説明されているＰｒＲＰ２０またはＰｒＲＰ３１の前記脂質付加された類似体（例えば化学式１、２、３および４の、前記脂質付加された類似体）は、ヒスチジン、ベンジルヒスチジン、ナフチルアラニン、トリプトファン、ピログルタミン酸、ベンジルシステイン、ベンジル−Ｏ−グルタメート、ノルロイシン、ジクロロフェニルアラニン、テトラクロロフェニルアラニン、ペンタフルオロフェニルアラニン、メチル−Ｏ−フェニルアラニン、メチル−ＮＨ−フェニルアラニンおよびニトロフェニルアラニンから選択されるＣ末端のアミノ酸を有している。
【００９９】
いくつかの実施形態においては、前記ＰｒＲＰの上述した当該Ｃ末端のヘプタペプチドの前の位置における前記アミノ酸が、前記脂質付加された類似体の説明された生物活性にとって不可欠ではない場合があるペプチドである。これらのアミノ酸の一部または全部を、異なるアミノ酸に置換することは可能であり、予期されている。生じたプロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の脂質付加された類似体が、Ｋｉにして１０−６ｍｏｌ・Ｌ−１以下もしくは未満の（または、好ましくは１０−７もしくは１０−８ｍｏｌ・Ｌ−１以下もしくは未満の）オーダーの前記ＰｒＲＰレセプターに対する好適な結合親和力を有し、ＰｒＲＰに対するアゴニスト活性（好ましくは、ＲＣ−４Ｂ／Ｃ細胞におけるＭＡＰＫ／ＥＰＫ１／２シグナリングによって定義される）を示し、哺乳類（ラット、マウスおよびヒトなど）において血中グルコースを低下させ、かつ／または、ＰｒＲＰに等しいかそれ以上の食欲抑制活性（好ましくは、絶食させたマウスにおいて中枢投与または末梢投与した後の摂食によって試験される）を示しさえすれば、これらの置換は特に予期されている。
【０１００】
特定の実施形態において、ＰｒＲＰ２０またはＰｒＲＰ３１の種々の類似体は、８〜１８炭素の、好ましくは１０〜１８炭素原子の、より好ましくは１２〜１６炭素原子の脂肪酸を含む群より選択される脂肪酸を含んでいる。
【０１０１】
いくつかの実施形態において、前記脂肪酸は８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７または１８の炭素原子を有している。
【０１０２】
いくつかの実施形態において、ＰｒＲＰ２０および／またはＰｒＲＰ３１の脂質付加された類似体は、化学式２（配列番号２）の２〜２４番において、または化学式３（配列番号３）の２〜１３番において、（単数または複数の）アミノ酸置換を有している。いくつかの実施形態において、類似体は、充分な結合活性および／またはグルコース抑制活性を維持している。好ましくは、前記類似体は、前記生じたＰｒＲＰの脂質付加された類似体のＧＰＲ１０に対する前記Ｋｉの値を、１０−６ｍｏｌ・Ｌ−１を超えて上昇させない（増加したＫｉの値は、より弱い結合親和力に対応する）置換を含んでいる。前記Ｋｉは、１ウェルあたり３０万〜４５万細胞の最適密度まで、底面がポリエチレンイミンで被覆された２４ウェルプレート上で増殖させたラット下垂体細胞系統ＲＣ−４Ｂ／Ｃにおいて、測定される。以下の物質を、引き続いて加えた：ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）  ２０ｍｍｏｌ・Ｌ−１、ＮａＣｌ  １１８ｍｍｏｌ・Ｌ−１、ＫＣｌ  ４．７ｍｍｏｌ・Ｌ−１、ＭｇＣｌ２  ５ｍｍｏｌ・Ｌ−１、グルコース５．５ｍｍｏｌ・Ｌ−１、ウシ血清アルブミン  １ｍｇ／ｍＬ、ウシ膵臓トリプシンインヒビター  ０．１ｍｇ／ｍＬを含んでいる結合バッファー；最終濃度が１０−１１〜１０−４ｍｍｏｌ・Ｌ−１の間である標識されていないＰｒＲＰの類似体、および最終濃度が１０−１０ｍｍｏｌ・Ｌ−１である１２５Ｉ−ＰｒＲＰ３１。前記プレートを、室温で６０分インキュベートし、その後、前記細胞をＮａＯＨの０．１ｍｏｌ／Ｌ溶液中で可溶化し、前記細胞と結合している放射活性をγ−カウンターで計数した。
【０１０３】
いくつかの実施形態は、本明細書中に説明されている前記脂質付加された類似体（例えば、脂肪酸が直接１番ではないアミノ酸に結合させられている、またはリンカーによって結合させられている、前記ＰｒＲＰ２０またはＰｒＲＰ３１の脂質付加された類似体）の、末梢投与（例えば、皮下投与）の後に、血中の上昇したグルコース量を低下させ、関連する病状（糖尿病および摂食障害など）を改善する薬剤としての使用に関する。
【０１０４】
いくつかの実施形態において、本明細書中に説明されている任意の前記脂質付加された類似体（脂肪酸が直接１番ではないアミノ酸に結合させられている、またはリンカーによって結合させられている、ＰｒＲＰ２０またはＰｒＲＰ３１の脂質付加された類似体を含む）は、血中の上昇したグルコース量の治療および／またはインスリン抵抗性の治療のための薬剤として利用される。
【０１０５】
いくつかの実施形態においては、本明細書中に説明されている任意の組成物の、薬学的に許容可能な塩、アミドまたはエステルが利用される。
【０１０６】
いくつかの実施形態において、前記薬学的組成物は、本明細書中に説明されている前記脂質付加された類似体（脂肪酸が直接１番ではないアミノ酸に結合させられている、またはリンカーによって結合させられている、ＰｒＲＰ２０またはＰｒＲＰ３１の脂質付加された類似体を含む）の少なくとも１つ以上を、活性成分として含んでいる。
【０１０７】
いくつかの実施形態において、前記薬学的組成物は、血糖の状態を治療する方法として患者に対して投与される。いくつかの実施形態において、前記薬学的組成物は、血中の上昇したグルコース量によって特徴づけられる疾患であると診断された、または当該疾患を有していると疑われる被験体の、予防用または治療用である。
【０１０８】
特定の実施形態において、一般式
Ｊ−ｒＲＰｓＧＲｔ−ＮＨ２（化学式１；配列番号１）を有しているＰｒＲＰ２０またはＰｒＲＰ３１の脂質付加された類似体が、本明細書中に開示される：式中、
ｒは、イソロイシン、アラニンまたはフェニルグリシンであり；
ｓは、バリンまたはフェニルグリシンであり；かつ
ｔは、フェニルアラニン、トリプトファン、ピログルタミン酸、またはＣＨ２−ＡｒもしくはＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２−Ａｒを含んでいる側鎖を有している他のアミノ酸（式中、Ａｒは、任意にハロゲン基、メチル基またはニトロ基によって置換されたフェニルまたはナフチルを表す）であり、
Ｊは、Ｘ＝Ｘ１またはＸ２Ｘ１によって任意の１箇所に脂質付加された１３アミノ酸または２４アミノ酸の鎖を表す。Ｘ１はＣ８〜Ｃ１８の脂肪酸である。当該脂肪酸は、遊離アミノ基またはＳＨ基もしくはＯＨ基の少なくとも１つを有しているアミノ酸に直接、またはＸ２を介して結合している。当該Ｘ２は、ポリオキシエチレン部分、アリールアルキル部分または、飽和もしくは不飽和の、直鎖もしくは分鎖のＣ３〜Ｃ８の炭化水素鎖（このうち、１つ以上の炭素原子は、Ｎ、Ｓ、Ｏからなる群より選択されるヘテロ原子によって置換され得る）からなる群より選択される親水性リンカーである。前記炭化水素鎖は、少なくとも一つ（好ましくは２つ）のアミノ基またはカルボン酸基を有しており、このうち１つは置換されて、ＣＯＮＨ２；ＮＨ−ポリオキシエチレン；ＣＯＯＭ１（式中、Ｍ１はアルカリ金属、好ましくはＮａまたはＫ）；ＣＮ；ＣＯＯＲ１、ＣＯＲ１もしくはＣＯＮＨＲ１（式中、Ｒ１は、低級アルキル、アリールアルキル、ポリオキシエチレン、メチルポリオキシエチレン、アミノエチルポリオキシエチレンを含む群より選択される）、（ＣＨＯＨ）ｎＲ２（式中、Ｒ２は、ＨまたはＣＯＯＨであり、ｎは、２〜１０の整数である）または（ＣＨ）ｎＮ＋Ｒ３等の基を形成し得る。いくつかの実施形態において、Ｒ３は、ＨまたはＣ１〜Ｃ４のアルキルであり得る。好ましくは、ただしＸが前記ペプチド鎖の１番のアミノ酸に結合している場合、ＸはＸ２Ｘ１である。
【０１０９】
いくつかの実施形態において、前記ＰｒＲＰ３１の脂質付加された類似体は、一般式
（Ｘ）ｋＲｍＨｎＨＳｑＥｕＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲｐｒＲＰｓＧＲｔ−ＮＨ２（化学式２；配列番号２）
を有する：式中、
ｋは、セリン、スレオニンまたはジアミノプロピオン酸であり；
ｍは、スレオニン、アラニンまたはメチルアラニンであり；
ｎは、グルタミンまたはアルギニンであり；
ｑは、メチオニンまたはノルロイシンであり；
ｕは、スレオニンまたはイソロイシンであり；
ｏは、グリシンまたはセリンであり；
ｐは、グリシン、アラニン、プロリンまたはＮ−メチルグリシンであり；
ｒは、イソロイシン、アラニンまたはフェニルグリシンであり；
ｓは、バリンまたはフェニルグリシンであり；
ｔは、フェニルアラニン、トリプトファン、ピログルタミン酸、またはＣＨ２−ＡｒもしくはＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２−Ａｒ（式中、Ａｒは、任意にハロゲン基、メチル基またはニトロ基によって置換されたフェニルまたはナフチルを表す）を含んでいる側鎖を有しているアミノ酸である。Ｘは先に説明されている通りである（ただし、Ｘが前記ペプチド鎖の１番のアミノ酸に結合している場合、ＸはＸ２Ｘ１である）。上式中、アミノ酸の鎖ｋＲｍＨｎＨＳｑＥｕＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲｐ（配列番号３５）は、１〜１１アミノ酸を除去することによって、任意に短縮される。
【０１１０】
いくつかの実施形態において、前記ＰｒＲＰ３１の脂質付加された類似体は、一般式
（Ｘ）ｋＲｍＨｎＨＳｑＥｕＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲｐｒＲＰｓＧＲｔ−ＮＨ２（化学式２；配列番号２）
を有する：式中、
ｋ、ｍ、ｎ、ｑ、ｕ、ｏ、ｐ、ｒ、ｓ、ｔおよびＸは先に説明されている通りであり（ただし、Ｘが前記ペプチド鎖の１番のアミノ酸に結合している場合、ＸはＸ１Ｘ２である）；
上式中、前記アミノ酸の鎖ｋＲｍＨｎＨＳｑＥｕＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲｐ（配列番号３５）は、Ｎ末端から１〜１１アミノ酸を除去することによって、任意に短縮される。
【０１１１】
他の実施形態において、前記ＰｒＲＰ２０またはＰｒＲＰ３１の脂質付加された類似体は、化学式
（Ｘ）ｋＲｍＨｎＨＳｑＥｕＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲｐｒＲＰｓＧＲｔ−ＮＨ２（化学式２；配列番号２）、または
（Ｘ）ＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲｐｒＲＰｓＧＲｔ−ＮＨ２（化学式３；配列番号３）
のペプチドから選択され、式中、
ｋ、ｍ、ｎ、ｑ、ｕ、ｏ、ｐ、ｒ、ｓ、ｔおよびＸは、先に説明されている通りである（ただし、Ｘが前記ペプチド鎖の１番のアミノ酸に結合している場合、ＸはＸ２Ｘ１である）。
【０１１２】
いくつかの実施形態において、前記ＰｒＲＰ３１の脂質付加された類似体は、化学式
（Ｘ）ＳＲｍＨｎＨＳｑＥｕＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲｐｒＲＰｓＧＲｔ−ＮＨ２（化学式４；配列番号４）
を有する：式中、
ｍ、ｎ、ｑ、ｕ、ｏ、ｐ、ｒ、ｓ、ｔは、先に説明されている通りであり；
Ｘ＝Ｘ１またはＸ２Ｘ１であり；左式中、
Ｘ１は、任意の１箇所において、上述されているペプチド鎖の本来のアミノ酸または置換されたアミノ酸に、直接アミド結合によって、または代わりにＸ２（先に説明されている通りである）を介してのいずれかによって、結合しているＣ８〜Ｃ１８の脂肪酸であり、好ましくはＣ１０〜Ｃ１０の脂肪酸である（ただし、Ｘが前記ペプチド鎖の１番のアミノ酸に結合している場合、ＸはＸ２Ｘ１である）。
【０１１３】
いくつかの実施形態において、前記ＰｒＲＰ２０またはＰｒＲＰ３１の脂質付加された類似体は、
（Ｘ）ＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲＧｒＲＰｓＧＲＦ−ＮＨ２（化学式５；配列番号５）；
（Ｘ）ＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲＧｒＲＰｓＧＲ １−Ｎａｌ−ＮＨ２（化学式６；配列番号６）；および
（Ｘ）ＲｍＨｎＨＳ Ｎｌｅ ＥＴＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲＧｒＲＰｓＧＲ １−Ｎａｌ−ＮＨ２（化学式７；配列番号７）
からなる群より選択される：
式中、１−ｎａｌは、ナフチルアラニンである。ｍ、ｎ、ｏ、ｒ、ｓおよびＸは、先に説明されている通りである（ただし、Ｘが前記ペプチド鎖の１番のアミノ酸に結合している場合、ＸはＸ２Ｘ１である）。
【０１１４】
いくつかの実施形態において、前記ＰｒＲＰ３１の脂質付加された類似体は、
（Ｘ）ＳＲＴＨＲＨＳＭＥＩＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式８；配列番号８）；または
（Ｘ）ＳＲＡＨＱＨＳＭＥＴＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＴＧＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式９；配列番号９）
である：
式中、Ｘは先に説明されている通りである（ただし、Ｘが前記ペプチド鎖の１番のアミノ酸に結合している場合、ＸはＸ２Ｘ１である）。
【０１１５】
いくつかの実施形態において、前記ＰｒＲＰ２０の脂質付加された類似体は、化学式
（Ｘ）ＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式１１；配列番号１１）
に従う：
式中、ｍは、スレオニンまたはアラニンである。ｏは、グリシンまたはセリンである。Ｘは、先に説明した通りである（ただし、Ｘが前記ペプチド鎖の１番のアミノ酸に結合している場合、ＸはＸ２Ｘ１である）。
【０１１６】
本明細書中に説明されている、さらなる実施形態は、化学式
（Ｘ）ＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式１０；配列番号１０）；または
（Ｘ）ＳＲＴＨＲＨＳＭＥＩＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式８；配列番号８）
に係るＰｒＲＰ２０またはＰｒＲＰ３１の脂質付加された類似体に関する：
式中、Ｘ＝Ｘ１またはＸ１Ｘ２である。Ｘ１は、任意の１箇所において、上述されているペプチド鎖の本来のアミノ酸または置換されたアミノ酸に、直接アミド結合によってまたはＸ２（ポリオキシエチレン、β−アラニン、γ−アミノ酪酸およびγ−グルタミン酸からなる群より選択される）を介して結合しているＣ１２〜Ｃ１６の脂肪酸である（ただし、Ｘが前記ペプチド鎖の１番のアミノ酸に結合している場合、ＸはＸ２Ｘ１である）。
【０１１７】
いくつかの実施形態において、前記ＰｒＲＰ２０またはＰｒＲＰ３１の脂質付加された類似体は、化学式
（Ｘ）ＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式１０；配列番号１０）；または
（Ｘ）ＳＲＴＨＲＨＳＭＥＩＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式８；配列番号８）
に従う：
式中、Ｘ＝Ｘ１またはＸ２Ｘ１である。Ｘ１は、任意の１箇所において、上述されているペプチド鎖の本来のアミノ酸または置換されたアミノ酸に、直接アミド結合によってまたはＸ２（ポリオキシエチレン、β−アラニン、γ−アミノ酪酸およびγ−グルタミン酸からなる群より選択される）を介して結合しているミリスチン酸またはパルミチン酸である（ただし、Ｘが前記ペプチド鎖の１番のアミノ酸に結合している場合、ＸはＸ２Ｘ１である）。
【０１１８】
いくつかの実施形態において、前記ＰｒＲＰ２０またはＰｒＲＰ３１の脂質付加された類似体は、化学式
（Ｘ）ＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式１０；配列番号１０）；または
（Ｘ）ＳＲＴＨＲＨＳＭＥＩＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式８；配列番号８）
に従う：
式中、Ｘ＝Ｘ１またはＸ２Ｘ１である。Ｘ１は、任意の１箇所において、上述されているペプチド鎖の本来のアミノ酸または置換されたアミノ酸に、直接アミド結合によってまたはＸ２（γ−グルタミン酸またはポリオキシエチレンである）を介して結合しているミリスチン酸またはパルミチン酸である（ただし、Ｘが前記ペプチド鎖の１番のアミノ酸に結合している場合、ＸはＸ２Ｘ１である）。
【０１１９】
いくつかの実施形態において、前記ＰｒＲＰ２０またはＰｒＲＰ３１の脂質付加された類似体は、化学式
（Ｘ）ＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式１０；配列番号１０）；または
（Ｘ）ＳＲＴＨＲＨＳＭＥＩＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式８；配列番号８）
に従う：
式中、Ｘ＝Ｘ１またはＸ２Ｘ１である。Ｘ１は、化学式８のアミノ酸１〜２２のうち任意のアミノ酸を置換しているリジンに、または化学式１０のアミノ酸１〜１２のうち任意のアミノ酸を置換しているリジンに、直接アミド結合によってまたはＸ２（ポリオキシエチレン、β−アラニン、γ−アミノ酪酸およびγ−グルタミン酸からなる群より選択される）を介してのいずれかによって結合している、ミリスチン酸またはパルミチン酸である（ただし、Ｘが前記ペプチド鎖の１番のアミノ酸に結合している場合、ＸはＸ２Ｘ１である）。
【０１２０】
いくつかの実施形態において、前記ＰｒＲＰ２０またはＰｒＲＰ３１の脂質付加された類似体は、化学式
（Ｘ）ＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式１０；配列番号１０）；または
（Ｘ）ＳＲＴＨＲＨＳＭＥＩＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式８；配列番号８）
に従う：
式中、Ｘ＝Ｘ１またはＸ２Ｘ１である。Ｘ１は、本来のもしくは置換された化学式８のアミノ酸１〜２２に、または本来のもしくは置換された化学式１０のアミノ酸１〜１２に、直接アミド結合によってまたはＸ２（γ−グルタミン酸またはポリオキシエチレンである）を介して結合しているミリスチン酸またはパルミチン酸である（ただし、Ｘが前記ペプチド鎖の１番のアミノ酸に結合している場合、ＸはＸ２Ｘ１である）。
【０１２１】
いくつかの実施形態において、前記ＰｒＲＰ２０またはＰｒＲＰ３１の脂質付加された類似体は、化学式
（Ｘ）ＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式１０；配列番号１０）；または
（Ｘ）ＳＲＴＨＲＨＳＭＥＩＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式８；配列番号８）
に従う：
式中、Ｘ＝Ｘ１またはＸ２Ｘ１である。Ｘ１は、本来のもしくは置換された化学式８の１番、１１番もしくは１８番のアミノ酸に、または本来のもしくは置換された化学式１０の１番、５番もしくは７番のアミノ酸に、直接アミド結合によってまたはＸ２（γ−グルタミン酸またはポリオキシエチレンである）を介して結合しているミリスチン酸またはパルミチン酸である（好ましくは、Ｘが前記ペプチド鎖の１番のアミノ酸に結合している場合、ＸはＸ２Ｘ１である）。
【０１２２】
いくつかの実施形態において、前記ＰｒＲＰ２０またはＰｒＲＰ３１の脂質付加された類似体は、化学式
（Ｘ）ＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式１０；配列番号１０）；または
（Ｘ）ＳＲＴＨＲＨＳＭＥＩＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式８；配列番号８）
に従う：
式中、Ｘ＝Ｘ１またはＸ２Ｘ１である。Ｘ１は、本来のもしくは置換された化学式８の１番もしくは１１番のアミノ酸に、または本来のもしくは置換された化学式１０の１番もしくは７番のアミノ酸に、直接アミド結合によってまたはＸ２（γ−グルタミン酸またはポリオキシエチレンである）を介して結合しているミリスチン酸またはパルミチン酸である（好ましくは、Ｘが前記ペプチド鎖の１番のアミノ酸に結合している場合、ＸはＸ２Ｘ１である）。
【０１２３】
代替となる実施形態において、前記ＰｒＲＰ２０またはＰｒＲＰ３１の脂質付加された類似体は、化学式
（Ｘ）ＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式１０；配列番号１０）；または
（Ｘ）ＳＲＴＨＲＨＳＭＥＩＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式８；配列番号８）
に従う：
式中、Ｘ＝Ｘ１またはＸ２Ｘ１である。Ｘ１は、化学式８のアミノ酸１もしくは１１を置換しているリジンに、または化学式１０のアミノ酸１もしくは７を置換しているリジンに、直接アミド結合によってまたはＸ２（γ−グルタミン酸またはポリオキシエチレンである）を介して結合しているミリスチン酸またはパルミチン酸である。
【０１２４】
いくつかの実施形態において、前記ＰｒＲＰ２０またはＰｒＲＰ３１の脂質付加された類似体は、化学式
ＳＲＴＨＲＨＳＭＥＩＫ（ｐａｌｍ）ＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（配列番号１２）
ＴＰＤＩＮＰＫ（ｐａｌｍ）ＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（配列番号１３）
【０１２５】
【化３】
0006342016.tif 000008
【０１２６】
に従う：
式中、ｐａｌｍはパルミチン酸であり、Ｘ２はγ−グルタミン酸である。
【０１２７】
代替となる実施形態において、前記ＰｒＲＰ２０またはＰｒＲＰ３１の脂質付加された類似体は、化学式
【０１２８】
【化４】
0006342016.tif 000009
【０１２９】
に従う：
式中、ｐａｌｍはパルミチン酸であり、Ｘ２はポリオキシエチレンである。
【０１３０】
（治療の方法）
本明細書中に説明されている前記脂質付加された類似体の特徴は、理論または特定の生化学的メカニズムによって拘束されることなく、血中の上昇したグルコース量によって特徴づけられる疾患を治療するために特に有用である。本明細書中に説明されているペプチドの脂質付加（脂質付加されたＰｒＲＰ類似体）は、末梢投与後の治療用ペプチドの血液脳関門を越えた送達を促進する。本明細書中に説明されているように、ＰｒＲＰの脂質付加により、末梢投与後の中枢効果の誘導が可能となる。
【０１３１】
哺乳類は、血中の上昇したグルコース量を患っている、または血中の上昇したグルコース量を患う可能性が高いと、標準的な医療技術を使用することにより識別され得る。例えば、ヒトの家族歴および／または食習慣の分析は、当該ヒトが血中の上昇したグルコース量を患う可能性が高いか否かを、それゆえインスリン抵抗性および二型糖尿病を患うことの上昇したリスクをもまた、判断するために使用され得る。血中グルコースおよび関連している血中因子の直接測定は、参考になる。血中の上昇したグルコース量を患っている、または血中の上昇したグルコース量を患っていると疑われていると識別された哺乳類は、本明細書中に開示されている、１種類以上の前記脂質付加された類似体を投与することによって治療され得る。
【０１３２】
特定の実施形態において、血中の上昇したグルコース量によって引き起こされる、または血中の上昇したグルコース量によって特徴づけられる疾患を、治療または予防するための具体的かつ一般的な組成物を使用する方法が、本明細書中に開示されている。いくつかの実施形態において、前記方法は、哺乳類における疾患を治療または予防するために使用される。いくつかの実施形態において、前記哺乳類はヒトである。
【０１３３】
いくつかの実施形態において、前記方法は、典型的には薬学的組成物の一部として、１種類以上の前記脂質付加された類似体を必要とする被験体に対して投与することを含んでいる。このような組成物は、典型的には、治療効果のある量の１種類以上の脂質付加された類似体を、適切な賦形剤と共に含んでいる。
【０１３４】
いくつかの実施形態は、血中の上昇したグルコース量によって特徴づけられる１つ以上の疾患である、または当該疾患が疑われると診断された被験体を治療する方法に関する。前記方法は、前記被験体に対して、一般式
Ｊ−ｒＲＰｓＧＲｔ−ＮＨ２（化学式１；配列番号１）
を有するプロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の脂質付加された類似体を投与する工程を含んでいる：式中、
ｒは、イソロイシン、アラニンまたはフェニルグリシンであり；
ｓは、バリンまたはフェニルグリシンであり；かつ
ｔは、フェニルアラニン、トリプトファン、ピログルタミン酸、またはＣＨ２−ＡｒもしくはＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２−Ａｒ（式中、Ａｒは、任意にハロゲン基、メチル基またはニトロ基で置換された、フェニルまたはナフチルを表す）を含んでいる側鎖を有しているアミノ酸であり；かつ
Ｊは、Ｘ＝Ｘ１またはＸ２Ｘ１のいずれかによって任意の１箇所を脂質付加された、１３アミノ酸または２４アミノ酸の鎖を表す。Ｘ１は、遊離アミノ基またはＳＨ基もしくはＯＨ基のうち少なくとも１つを有しているアミノ酸に対し、直接、またはその代わりにＸ２を介して結合しているＣ８〜Ｃ１８の脂肪酸である。Ｘ２は、ポリオキシエチレン部分、アリールアルキル部分または、飽和もしくは不飽和の、直鎖もしくは分鎖のＣ３〜Ｃ８の炭化水素鎖（このうち、いくつかの炭素原子は、Ｎ、Ｓ、Ｏからなる群より選択されるヘテロ原子によって置換され得る）からなる群より選択される、親水性リンカーである。前記炭化水素鎖は、少なくとも一つ（好ましくは２つ）のアミノ基またはカルボン酸基を有しており、このうち１つは置換されて、ＣＯＮＨ２；ＮＨ−ポリオキシエチレン；ＣＯＯＭ１（式中、Ｍ１はアルカリ金属、好ましくはＮａまたはＫ）；ＣＮ；ＣＯＯＲ１、ＣＯＲ１もしくはＣＯＮＨＲ１（式中、Ｒ１は、低級アルキル、アリールアルキル、ポリオキシエチレン、メチルポリオキシエチレン、アミノエチルポリオキシエチレンを含む群より選択される）、（ＣＨＯＨ）ｎＲ２（式中、Ｒ２は、ＨまたはＣＯＯＨであり、ｎは、２〜１０の整数である）または（ＣＨ）ｎＮ＋Ｒ３（式中、Ｒ３は、同一または異なるＨまたはＣ１〜Ｃ４のアルキルであり得る）等の基を形成している。いくつかの実施形態において、前記疾患は、インスリン抵抗性、グルコース刺激インスリン放出障害（例えば、膵臓β細胞の機能不全）およびグルカゴンの不適切な分泌によって特徴づけられる。いくつかの実施形態において、前記疾患は、高血糖または糖尿病である。いくつかの実施形態において、前記高血糖は、慢性高血糖である。いくつかの実施形態において、前記糖尿病は二型糖尿病である。いくつかの実施形態において、前記二型糖尿病は、二次疾患（肥満、心血管疾患、高血圧または脂質異常血症など）に関連している。
【０１３５】
さらなる実施形態は、血中の上昇したグルコース量によって特徴づけられる疾患であると診断された、または当該疾患が疑われる被験体を、予防または治療する方法に関する。当該方法は、治療する被験体に対して、一般式
（Ｘ）ｋＲｍＨｎＨＳｑＥｕＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲｐｒＲＰｓＧＲｔ−ＮＨ２（化学式２；配列番号２）
を有する、少なくとも１種類のプロラクチン放出ペプチドの脂質付加された類似体を投与する工程を含んでいる：式中、
ｋは、セリン、スレオニンまたはジアミノプロピオン酸であり；
ｍは、スレオニン、アラニンまたはメチルアラニンであり；
ｎは、グルタミンまたはアルギニンであり；
ｑは、メチオニンまたはノルロイシンであり；
ｕは、スレオニンまたはイソロイシンであり；
ｏは、グリシンまたはセリンであり；
ｐは、グリシン、アラニン、プロリンまたはＮ−メチルグリシンであり；
ｒは、イソロイシン、アラニンまたはフェニルグリシンであり；
ｓは、バリンまたはフェニルグリシンであり；
ｔは、フェニルアラニン、トリプトファン、ピログルタミン酸、またはＣＨ２−ＡｒもしくはＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２−Ａｒ（式中、Ａｒは、任意にハロゲン基、メチル基またはニトロ基によって置換されたフェニルまたはナフチルを表す）を含んでいる側鎖を有しているアミノ酸である。Ｘは先に説明されている通りである。アミノ酸の鎖ｋＲｍＨｎＨＳｑＥｕＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲｐ（配列番号３５）は、上記鎖の当該箇所から１〜１１アミノ酸を除去することによって、任意に短縮される。いくつかの実施形態において、アミノ酸は前記鎖の他の箇所からは除去されず、最大限の結合親和力を維持する。
【０１３６】
またさらなる実施形態は、血中の上昇したグルコース量によって特徴づけられる疾患であると診断された、または当該疾患が疑われる被験体を、予防または治療する方法を含んでいる。当該方法は、治療する被験体に対して、一般式
（Ｘ）ｋＲｍＨｎＨＳｑＥｕＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲｐｒＲＰｓＧＲｔ−ＮＨ２（化学式２；配列番号２）
を有する、前記プロラクチン放出ペプチドの脂質付加された類似体を投与する工程を含んでいる：式中、
ｋ、ｍ、ｎ、ｑ、ｕ、ｏ、ｐ、ｒ、ｓ、ｔおよびＸは、先にされている通りであり；
前記アミノ酸の鎖ｋＲｍＨｎＨＳｑＥｕＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲｐ（配列番号３５）は、Ｎ末端から１〜１０アミノ酸を除去することによって、任意に短縮される。
【０１３７】
本明細書中に開示されている、さらなる実施形態は、血中の上昇したグルコース量によって特徴づけられる疾患であると診断された、または当該疾患が疑われる被験体を、予防または治療する方法を含んでいる。当該方法は、治療する被験体に対して、化学式
（Ｘ）ｋＲｍＨｎＨＳｑＥｕＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲｐｒＲＰｓＧＲｔ−ＮＨ２（化学式２；配列番号２）、および
（Ｘ）ＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲｐｒＲＰｓＧＲｔ−ＮＨ２（化学式３；配列番号３）
のペプチドからなる群より選択される、前記プロラクチン放出ペプチドの脂質付加された類似体を投与する工程を含んでいる：式中、
ｋ、ｍ、ｎ、ｑ、ｕ、ｏ、ｐ、ｒ、ｓ、ｔおよびＸは、先に説明されている通りである。
【０１３８】
いくつかの実施形態において、前記方法は、化学式２の１〜２４番において、および／または化学式３の１〜１３番においてアミノ酸の置換を有している、プロラクチン放出ペプチドの脂質付加された類似体を投与することを含んでいる。当該置換は、前記生じた、プロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の脂質付加された類似体の、ＧＰＲ１０レセプターに対する前記結合親和力の値を、Ｋｉ１０−６ｍｏｌ・Ｌ−１を超えて上昇させない。前記結合親和力は、１ウェルあたり３０万〜４５万細胞の最適密度まで、底面がポリエチレンイミンで被覆された２４ウェルプレート上で増殖させた、ラット下垂体細胞系統ＲＣ−４Ｂ／ＣまたはＧＰＲ１０レセプターをトランスフェクションしたＣＨＯ細胞において、評価された。以下の物質を、引き続いて加えた：ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）  ２０ｍｍｏｌ・Ｌ−１、ＮａＣｌ  １１８ｍｍｏｌ・Ｌ−１、ＫＣｌ  ４．７ｍｍｏｌ・Ｌ−１、ＭｇＣｌ２  ５ｍｍｏｌ・Ｌ−１、グルコース５．５ｍｍｏｌ・Ｌ−１、ウシ血清アルブミン  １ｍｇ／ｍＬ、ウシ膵臓トリプシンインヒビター  ０．１ｍｇ／ｍＬを含んでいる結合バッファー；最終濃度が１０−１１〜１０−４ｍｍｏｌ・Ｌ−１の間である標識されていないＰｒＲＰの類似体、および最終濃度が１０−１０ｍｍｏｌ・Ｌ−１である１２５Ｉ−ＰｒＲＰ３１。前記プレートを、室温で６０分インキュベートし、その後、前記細胞をＮａＯＨの０．１ｍｏｌ／Ｌ溶液中で可溶化し、前記細胞と結合している放射活性をγ−カウンターで計数した。
【０１３９】
さらなる実施形態は、治療する被験体に対して、化学式
（Ｘ）ＳＲｍＨｎＨＳｑＥｕＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲｐｒＲＰｓＧＲｔ−ＮＨ２（化学式４；配列番号４）
の前記プロラクチン放出ペプチドの脂質付加された類似体を投与することを含んでいる方法に関する：式中、
ｍ、ｎ、ｑ、ｕ、ｏ、ｐ、ｒ、ｓ、ｔは、先に説明されている通りである。
【０１４０】
Ｘ＝Ｘ１またはＸ２Ｘ１である。Ｘ１は、任意の１箇所において、上述されているペプチド鎖の本来のアミノ酸または置換されたアミノ酸に、直接アミド結合によってまたはＸ２（先に説明された通りである）を介して結合しているＣ８〜Ｃ１８の脂肪酸であり、好ましくはＣ１０〜Ｃ１６の脂肪酸である。いくつかの実施形態において、本明細書中に説明されている前記プロラクチン放出ペプチドの脂質付加された類似体は、ヒスチジン、ベンジルヒスチジン、ナフチルアラニン、トリプトファン、ピログルタミン酸、ベンジルシステイン、ベンジル−Ｏ−グルタメート、ノルロイシン、ジクロロフェニルアラニン、テトラクロロフェニルアラニン、ペンタフルオロフェニルアラニン、メチル−Ｏ−フェニルアラニン、メチル−ＮＨ−フェニルアラニンまたはニトロフェニルアラニンから選択される末端アミノ酸を有している。いくつかの実施形態において、前記方法は、８〜１８炭素の、好ましくは１０〜１８炭素原子の、より好ましくは１２〜１６炭素原子の脂肪酸からなる群より選択される脂肪酸を有している、本明細書中に説明されている前記プロラクチン放出ペプチドの脂質付加された類似体を、治療する被験体に投与する工程によって特徴づけられる。
【０１４１】
いくつかの実施形態において、前記脂肪酸は８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７または１８の炭素原子を有している。
【０１４２】
さらなる実施形態は、
（Ｘ）ＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲＧｒＲＰｓＧＲＦ−ＮＨ２（化学式５；配列番号５）；
（Ｘ）ＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲＧｒＲＰｓＧＲ １−Ｎａｌ−ＮＨ２（化学式６；配列番号６）；および
（Ｘ）ＲｍＨｎＨＳＮｌｅＥＴＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲＧｒＲＰｓＧＲ １−Ｎａｌ−ＮＨ２（化学式７；配列番号７）
からなる群より選択されるプロラクチン放出ペプチドの脂質付加された類似体を使用する：
式中、ｍ、ｎ、ｏ、ｒ、ｓおよびＸは、先に説明されている通りであり、１−Ｎａｌはナフチルアラニンである。
【０１４３】
いくつかの実施形態において、本明細書に説明されている前記方法は、
（Ｘ）ＳＲＴＨＲＨＳＭＥＩＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式８；配列番号８）；および
（Ｘ）ＳＲＡＨＱＨＳＭＥＴＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＴＧＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式９；配列番号９）
から選択されるプロラクチン放出ペプチドの脂質付加された類似体を利用する：
式中、Ｘは先に説明されている通りである。
【０１４４】
いくつかの実施形態において、本明細書中に説明されている前記方法は、化学式
（Ｘ）ＴＰＤＩＮＰＡＷＹｍｏＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式１１；配列番号１１）
に係るプロラクチン放出ペプチドの脂質付加された類似体を使用する：
式中、ｍは、スレオニンまたはアラニンである。ｏは、グリシンまたはセリンである。Ｘは、先に説明されている通りである。
【０１４５】
他の実施形態において、本明細書中に説明されている前記方法は、化学式
（Ｘ）ＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式１０；配列番号１０）；または
（Ｘ）ＳＲＴＨＲＨＳＭＥＩＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式８；配列番号８）
に係るプロラクチン放出ペプチドの脂質付加された類似体を使用する：
式中、Ｘ＝Ｘ１またはＸ１Ｘ２である。Ｘ１は、任意の１箇所において、上述されているペプチド鎖の本来のアミノ酸または置換されたアミノ酸に、直接アミド結合によってまたはＸ２（β−アラニン、γ−アミノ酪酸およびγ−グルタミン酸からなる群より選択される）を介して結合しているＣ１２〜Ｃ１６の脂肪酸である。
【０１４６】
いくつかの実施形態において、本明細書中に説明されている前記方法は、化学式
（Ｘ）ＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式１０；配列番号１０）；または
（Ｘ）ＳＲＴＨＲＨＳＭＥＩＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式８；配列番号８）
に係るプロラクチン放出ペプチドの脂質付加された類似体を利用する：
式中、Ｘ＝Ｘ１またはＸ１Ｘ２である。Ｘ１は、化学式１０または化学式８の本来のアミノ酸または置換されたアミノ酸に、直接アミド結合によってまたはＸ２（ポリオキシエチレン、β−アラニン、γ−アミノ酪酸およびγ−グルタミン酸からなる群より選択される）を介して結合しているミリスチン酸またはパルミチン酸である。
【０１４７】
いくつかの実施形態において、本明細書中に説明されている前記方法は、化学式に係るプロラクチン放出ペプチドの脂質付加された類似体を利用する。
【０１４８】
他の実施形態において、使用される、プロラクチン放出ペプチドの脂質付加された類似体は、化学式
（Ｘ）ＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式１０；配列番号１０）；または
（Ｘ）ＳＲＴＨＲＨＳＭＥＩＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式８；配列番号８）
に従う：
式中、Ｘ＝Ｘ１またはＸ１Ｘ２である。Ｘ１は、化学式１０または化学式８の本来のアミノ酸または置換されたアミノ酸に、直接アミド結合によってまたはＸ２（γ−グルタミン酸である）を介して結合しているミリスチン酸またはパルミチン酸である。
【０１４９】
いくつかの実施形態において、本明細書中に説明されている方法において利用されるプロラクチン放出ペプチドの脂質付加された類似体は、化学式
（Ｘ）ＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式１０；配列番号１０）；または
（Ｘ）ＳＲＴＨＲＨＳＭＥＩＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式８；配列番号８）
に従う：
式中、Ｘ＝Ｘ１またはＸ２Ｘ１である。Ｘ１は、化学式８の１番、１１番もしくは１８番の本来のアミノ酸または置換されたアミノ酸に、または化学式１０の１番、５番もしくは７番の本来のアミノ酸または置換されたアミノ酸に、直接アミド結合によって、またはＸ２（γ−グルタミン酸である）を介してのいずれかによって、結合しているミリスチン酸またはパルミチン酸である。
【０１５０】
いくつかの実施形態において、本明細書中に説明されている前記方法は、化学式
（Ｘ）ＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式１０；配列番号１０）；または
（Ｘ）ＳＲＴＨＲＨＳＭＥＩＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（化学式８；配列番号８）
に係るプロラクチン放出ペプチドの脂質付加された類似体を使用する：
式中、Ｘ＝Ｘ１またはＸ２Ｘ１である。Ｘ１は、化学式８の１番もしくは１１番の本来の置換されたアミノ酸(original replaced amino acid)に、または化学式１０の１番もしくは７番の本来の置換されたアミノ酸に、直接アミド結合によってまたはＸ２（γ−グルタミン酸である）を介して、結合しているミリスチン酸またはパルミチン酸である。
【０１５１】
本明細書中に説明されている、いくつかの実施形態は、血中の上昇したグルコース量によって特徴づけられる疾患であると診断された、または当該疾患を有していることが疑われる被験体を、予防または治療する方法に関する。当該方法は、治療する被験体に、化学式
ＳＲＴＨＲＨＳＭＥＩＫ（ｐａｌｍ）ＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（配列番号１２）
ＴＰＤＩＮＰＫ（ｐａｌｍ）ＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（配列番号１３）
【０１５２】
【化５】
0006342016.tif 000010
【０１５３】
に係る前記プロラクチン放出ペプチドの脂質付加された類似体を投与する工程を含んでいる：
式中、ｐａｌｍは、パルミチン酸であり、Ｘ２は、γ−グルタミン酸またはポリオキシエチレンである。
【０１５４】
いくつかの実施形態において、Ｘ２は、Ｋに対して連結されている。
【０１５５】
疾患を予防または治療する方法に関するさらなる実施形態は、血中の上昇したグルコース量によって特徴づけられている。当該実施形態は、被験体に、
Ｘ１−ＳＲＡＨＱＨＳＭＥＴＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＴＧＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（配列番号１６）；
Ｘ１−ＳＲＴＨＲＨＳＭＥＩＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（配列番号１７）；
（Ｎ−ｐａｌｍ）−ＳＲＴＨＲＨＳＭＥＩＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨＭｅ（配列番号１８）；
（Ｎ−ｐａｌｍ）−ＳＲＴＨＲＨＳＭＥＩＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＯＭｅ（配列番号１９）；
（Ｎ−ｍｙｒ）−ＴＰＤＩＮＰＡＷＹＴＧＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（配列番号２０）；
（Ｎ−ｍｙｒ）−ＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（配列番号２１）；
（Ｎ−ｏｃｔ）−ＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（配列番号２２）；
（Ｎ−ｄｅｃ）−ＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（配列番号２３）；
（Ｎ−ｄｏｄｅｃ）−ＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（配列番号２４）；
Ｘ１´−ＳＲＡＨＱＨＳ Ｎｌｅ ＥＴＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＴＧＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（配列番号２５）；
Ｘ１−ＳＲＡＨＱＨＳ Ｎｌｅ ＥＴＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＴＧＲＧＩＲＰＶＧＲ １−Ｎａｌ−ＮＨ２（配列番号２６）；
Ｘ１−ＳＲＡＨＱＨＳ Ｎｌｅ ＥＴＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＴＧＲＧＩＲＰＶＧＲ ＰｈｅＣｌ２−ＮＨ２（配列番号２７）；
Ｘ１−ＳＲＡＨＱＨＳ Ｎｌｅ ＥＴＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＴＧＲＧＩＲＰＶＧＲ ＰｈｅＮＯ２−ＮＨ２（配列番号２８）；
Ｘ１−ＳＲＡＨＱＨＳ Ｎｌｅ ＥＴＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＴＧＲＧＩＲＰＶＧＲ ＰｈｅＦ５−ＮＨ２（配列番号２９）；
Ｘ１−ＳＲＡＨＱＨＳ Ｎｌｅ ＥＴＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＴＧＲＧＩＲＰＶＧＲＹ−ＮＨ２（配列番号３０）；
Ｘ１−ＳＲＡＨＲＨＳ Ｎｌｅ ＥＩＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＹ−ＮＨ２（配列番号３１）；
（Ｎ−ｍｙｒ）−Ｎｌｅ−ＥＴＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＴＧＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（配列番号３２）；
（Ｎ−ｍｙｒ）−ＱＨＳＭＥＴＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＴＧＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（配列番号３３）；および
（Ｎ−ｍｙｒ）−ＱＨＳＭＥＴＲＴＰＤＩＮＰＡＷＹＡＳＲＧＩＲＰＶＧＲＦ−ＮＨ２（配列番号３４）
からなる群より選択される、少なくとも１種類のプロラクチン放出ペプチドの脂質付加された類似体を投与する工程を含んでいる：
式中、Ｘ１´は、パルミチン酸、ミリスチン酸またはステアリン酸であり；かつ
Ｘ１は、パルミチン酸またはミリスチン酸である。
【０１５６】
（薬学的組成物、投与経路および用量）
特定の実施形態において、本明細書中に説明されている通りの脂質付加された類似体の少なくとも１種類を含んでいる薬学的組成物、およびこれらの薬学的組成物を使用する治療の方法が、本明細書中に説明されている。
【０１５７】
薬学的組成物は、典型的には、薬学的に使用される製剤への治療用組成物の加工を容易にする、１種類以上の生理学上許容可能なキャリア（賦形剤および助剤を含む）を使用して調合される。適切な調合は、選択された投与経路、保存条件および他の当該技術分野の要素に依存する。薬学的組成物の概要は、例えば、Remington: The Science and Practice of Pharmacy, Nineteenth Ed (Eahston, Pa.: Mack  Publishing Company, 1995)；Hoover, John E., Remington´s Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., Easton, Pennsylvania  1975；Liberman, H.A. and Lachman, L., Eds.,  Pharmaceutical Dosage Forms, Marcel Decker, New York, N.Y., 1980；および、Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, Seventh Ed. (Lippincott Williams & Wilkins, 1999)において見られる。薬学的に許容可能な賦形剤および剤型は、当該技術分野に知られている通りに調製され得る。
【０１５８】
本明細書中に説明されている脂質付加された類似体の１種類以上、および薬学的に許容される（単数または複数の）希釈剤、（単数または複数の）賦形剤、または（単数または複数の）キャリアのうち１つ以上を含んでいる薬学的組成物が、本明細書中に説明されている。さらに、併用療法に際して、前記脂質付加された類似体は、これが他の活性成分と混合されている薬学的組成物として任意に投与される。いくつかの実施形態において、前記薬学的組成物は、選択された脂質付加された類似体の薬学的に許容可能な塩、アミドまたはエステルを使用することを包含している。いくつかの実施形態において、前記薬学的組成物は、他の医学的物質もしくは薬学的物質、キャリア、アジュバント（保存剤、安定剤、湿潤剤または乳化剤など）、溶液促進剤(solution promoters)、浸透圧を調節するための塩、および／または緩衝液を含んでいる。さらに、前記薬学的組成物はまた、他の治療上有益な物質を含み得る。
【０１５９】
本明細書で使用される場合、薬学的組成物とは、脂質付加された類似体と１種類以上の化学的成分（キャリア、安定剤、希釈剤、分散剤、懸濁化剤、増粘剤および／または賦形剤など）との混合物をいう。前記薬学的組成物は、生物に対する前記脂質付加された類似体の投与を容易にする。本明細書中に提供されている治療または使用の前記方法を実践するにあたっては、脂質付加された類似体は、薬学的組成物の状態で、治療されるべき状態、疾病または疾患を有している哺乳類に対して投与される。好ましくは、前記哺乳類はヒトである。用量および投与計画は、前記状態の重症度および段階、個体の年齢および相対的な健康、使用された前記治療用組成物の効能および他の要素に依存して異なる。前記脂質付加された類似体は、単独で、または混合物の成分として１種類以上の治療用物質と組み合わせて、任意に使用される。
【０１６０】
いくつかの実施形態において、本明細書中に説明されている前記薬学的組成物は、例えば、水性分散液、自己乳化分散液、固溶体製剤、リポソーム分散液、エアロゾル製剤、固形剤、散剤、速放性製剤、徐放性製剤、速崩壊(fast melt)製剤、錠剤、カプセル剤、丸剤、遅延放出製剤、持続放出製剤、パルス放出型製剤、マルチパーティキュレート(multiparticulate)製剤並びに混合された速報性製剤および徐放性製剤として調合され得る。本明細書中に説明されている薬学的製剤は、非経口的投与経路（例えば、静脈内投与経路、皮下投与経路、筋肉内投与経路、髄腔内投与経路）、脳血管内投与経路、鼻腔内投与経路、口腔内投与経路、局所投与経路、直腸内投与経路、経口投与経路または経皮投与経路を含んでいるが限定されない１つ以上の投与経路によって、個体に任意に投与される。いくつかの実施形態において、脂質付加された類似体は、皮下注射または静脈内経路によって投与される。
【０１６１】
いくつかの実施形態において、個体には、治療上効果のある量の１種類以上の脂質付加された類似体、および適切な賦形剤が投与される。いくつかの実施形態において、前記脂質付加された類似体は、血中の上昇したグルコース量を低下させることに関する医学的治療のために投与される。いくつかの実施例において、前記脂質付加された類似体は、全ての型の糖尿病および関連する疾病（摂食障害および／または糖尿病合併症など）の予防および／または治療のために投与される。
【０１６２】
いくつかの実施形態において、前記脂質付加された類似体は、糖尿病性疾病の進行（例えば、耐糖能障害の進行）を遅延させるまたは予防するために投与される。
【０１６３】
いくつかの実施形態において、脂質付加された類似体は、１つ以上のさらなる薬学的活性物質（抗糖尿病薬、抗肥満薬、抗高血圧薬、食欲調節薬、並びに、血中の上昇したグルコース量、糖尿病または肥満の結果生じる合併症、またはそれらに関連付けられている合併症の治療および／または予防のための他の公知の薬剤など）と組み合わされる。
【０１６４】
いくつかの実施形態において、脂質付加された類似体は、血中のグルコース量および／または脂質ホメオスタシスに影響する、外科手術または他の手術（胃絞扼術または胃バイパス術など）と組み合わされる。
【０１６５】
〔実施例〕
以下の具体的で限定されない実施例は、単なる説明として、かつ本発明の範囲の開示を制限しないと解釈されるべきである。さらなる詳述を俟つことなく、当業者は、本明細書中の記載に基づいて本開示を最大限に利用し得ると考えられる。実験からの具体例の結果は、図１〜５および以下の表２〜４に提示されている。
【０１６６】
本明細書中では以下の略語が使用されている：分散分析（ＡＮＯＶＡ）；ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）；ウシ膵臓トリプシンインヒビター（ＢＰＴＩ）；上皮成長因子（ＥＧＦ）；４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）；リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）；ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）；トリス緩衝生理食塩水（ＴＢＳ）；ジアミノプロピオン酸（Ｄｐｒ）；１−ナフチルアラニン（１−Ｎａｌ）；ノルロイシン（Ｎｌｅ）；ミリストイル（ｍｙｒ）；パルミトイル（ｐａｌｍ）；オクタノイル（ｏｃｔ）；ドデカノイル（ｄｏｄｅｃ）；およびトリデカノイル（ｔｒｉｄｅｃ）；γ−アミノ酪酸（ＧＡＢＡ）、ガンマ−グルタミン酸（γＥ），ポリオキシエチレン（ＰＯＥ）（特に１，１３−ジアミノ−４，７，１０−トリオキサトリデカン−スクシンアミド酸）。
【０１６７】
［実施例１：脂質付加されたＰｒＲＰペプチドおよび脂質付加されたＰｒＲＰ類似体の合成］
本開示において説明されているペプチド（例えば、表１において説明されているペプチド）は、ＡＢＩ  ４３３Ａ合成機（Applied Biosystems, Foster City, CA, USA）においてＦｍｏｃ法を利用し、Ｍａｉｘｎｅｒｏｖａらに係る固相合成法（Maixnerova, J., et al., "Structure activity relationship of CART (cocaine- and amphetamine-regulated transcript) peptide fragments," Peptides, 28: 1945-1953, 2007）を使用して合成した。前記ペプチドの適切な脂肪酸との脂質付加は、Maletinska, L., et al., "Characterization  of new stable ghrelin analogs with prolonged orexigenic potency," J Pharmacol Exp Ther, 340:781-786, 2012に説明されているように、樹脂からペプチドを切断する前に行った。
【０１６８】
競合結合実験において使用された、標識されたＰｒＲＰ３１ペプチドは、Ｉｏｄｏ−Ｇｅｎ（Pierce, Rockford, IL, USA）を使用して、公開されている手法（Maixnerova et al., 2011）によって、Ｎａ１２５Ｉでヨウ化させた。一ヨウ化されたペプチドは、分注して−２０℃で保存し、１箇月以内に結合アッセイに使用した。
【０１６９】
［実施例２：競合結合実験］
競合結合実験は、ＭｏｔｕｌｓｋｙおよびＮｅｕｂｉｇに従って行った（Motulsky, A., et al., "Analyzing radioligand binding data," Curr Protoc Neurosci, Chapter 7, Unit 7.5, 2002）。結合実験は、以下のラット下垂体細胞およびチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞で実施した。
【０１７０】
前記ラット下垂体細胞系統ＲＣ−４Ｂ／Ｃ（ATCC, Manassas, USA）は、底面がポリエチレンイミンで被覆されている２４ウェルプレート上で増殖させた。前記細胞は、１ウェルあたり３０〜４５万細胞の最適密度まで増殖させた。以下の物質が、前記実験のために使用された：結合バッファー（ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）  ２０ｍｍｏｌ・Ｌ−１、ＮａＣｌ  １１８ｍｍｏｌ・Ｌ−１、ＫＣｌ  ４．７ｍｍｏｌ・Ｌ−１、ＭｇＣｌ２  ５ｍｍｏｌ・Ｌ−１、グルコース  ５．５ｍｍｏｌ・Ｌ−１、ＢＳＡ  １ｍｇ／ｍＬ、ＢＰＴＩ  ０．１ｍｇ／ｍＬ）、最終濃度が１０−１１〜１０−４ｍｍｏｌ・Ｌ−１の間である標識されていないＰｒＲＰの類似体（すなわち試験される類似体）、および最終濃度が１０−１０ｍｍｏｌ・Ｌ−１であるラット１２５Ｉ−ＰｒＲＰ３１（放射性ヨウ素１２５で標識されている）（Maixnerova et al., 2011）。
【０１７１】
ヒトＰｒＲＰのレセプターであるＧＰＲ１０をトランスフェクションさせたＣＨＯ細胞（Perkin Elmer, USA）は、ポリエチレンイミンで被覆されている２４ウェルプレート上で増殖させた。前記細胞は、１ウェルあたり４〜８万細胞の最適密度まで増殖させた。以下の物質が、前記実験のために使用された：結合バッファー（Ｔｒｉｓ（ｐＨ７．４）  ２５ｍｍｏｌ・Ｌ−１、ＮａＣｌ  １１８ｍｍｏｌ・Ｌ−１、ＭｇＣｌ２  １０ｍｍｏｌ・Ｌ−１、ＣａＣｌ２  １ｍｍｏｌ・Ｌ−１、グルコース  ５．５ｍｍｏｌ・Ｌ−１、ＢＳＡ  ０．５ｍｇ／ｍＬ）、最終濃度が１０−１１〜１０−４ｍｍｏｌ・Ｌ−１の間である標識されていないＰｒＲＰの類似体（すなわち試験される類似体）、および最終濃度が５×１０−１１ｍｍｏｌ・Ｌ−１である放射線標識されたヒト１２５Ｉ−ＰｒＲＰ３１。
【０１７２】
プレートは室温で６０分間インキュベートした。インキュベーションの後、前記細胞をＮａＯＨの０．１ｍｏｌ／Ｌ溶液中で可溶化し、前記細胞と結合している放射活性をγ−カウンターを使用して計数した。前記実験は二重に行われ、少なくとも３回繰り返された。
【０１７３】
前記プロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の脂質付加された類似体を含む、ほぼ全ての試験されたラットＰｒＲＰ類似体およびヒトＰｒＲＰ類似体（構造に関しては、表１参照）は、高い結合親和力でＲＣ−４Ｂ／Ｃ細胞におけるラットレセプターに結合し（表２）、ＣＨＯ細胞におけるヒトＧＰＲ１０レセプターにも高い結合親和力で結合した（表２）。一般的に、脂肪酸鎖の長さが増加するにつれて、Ｋｉの値は減少した。これは、前記脂質付加されたＰｒＲＰ類似体との前記親和力が、より強かったことを示している。脂質付加された類似体の結合親和力は、本来のプロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の脂質付加されていない類似体と比較して、最大で１桁勝っていた（表２参照）。
【０１７４】
結果は、ラットＲＣ−４Ｂ／Ｃ細胞レセプターおよびヒトＧＰＲ１０レセプターの両方において、前記試験されたペプチドの脂質付加によりレセプターとの結合が増加すること、および前記ペプチドの脂質付加によりＫｉの値は低くなること、または上昇した結合親和力という結果を招いたことを示している。前記上昇した結合親和力は、前記脂質付加された類似体上にある、前記脂肪酸の鎖の長さの増加と相関している。脂肪酸の付加により、レセプターとの結合が保存されるのみならず（前記レセプターとの結合は、Ｃ末端のＲＦアミドに依存しているが、Ｎ末端への脂質付加の結果による）、実際には前記結合親和力が最大で１桁近く上昇する。
【０１７５】
ヒトの脂質付加されたＰｒＲＰ類似体（表１の類似体番号２、３９、４０、４１、４３参照）は、ラット１２５Ｉ−ＰｒＲＰおよびヒト１２５Ｉ−ＰｒＲＰの両方の、前記ＲＣ−４Ｂ／Ｃ細胞における前記ラットＰｒＲＰレセプターとの前記結合、およびヒトＧＰＲ１０レセプターとの前記結合を、ｎｍｏｌ／Ｌ−１の範囲のよく似た程度に置き換えた（表２参照）。脂質付加された短縮されているＰｒＲＰ３１類似体（２１〜３０アミノ酸）は、両方のＰｒＲＰの本来の形状に類似した結合親和力を示した。対照的に、スクランブルペプチド（類似体番号１９、２０、２５、２６）は、非常に低い結合親和力（高いＫｉ）を示し、かつ、マウスにおける摂食に関して何ら効果がないことを示した（表２）。
【０１７６】
前記競合結合実験を評価するために、Ｇｒａｐｈ  Ｐａｄ  Ｐｒｉｓｍ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ（San Diego, CA, USA）を使用した。ワンサイト(onesite)結合モデルを使用して、非線形回帰を実行した。Ｋｄの値に４．２１ｎｍｏｌ・Ｌ−１、放射性リガンドの濃度に０．１ｎｍｏｌ・Ｌ−１を用い（Maixnerova et al., 2011）、Ｃｈｅｎｇ−Ｐｒｕｓｓｏｆ式を使用して、前記Ｋｉの値を計算した（Cheng, Y., et al., "Relationship between the inhibition constant (Ki) and the concentration of inhibitor which causes 50 percent inhibition (IC50) of an enzymatic reaction," Biochem Pharmacol , 22:33099- 3108, 1973）。
【０１７７】
［実施例３：細胞シグナリング］
前記種々の脂質付加されたＰｒＲＰ２０類似体が、前記ＭＡＰＫ／ＥＲＫ１／２シグナル経路を開始するか否かを決定するために、実験がまた行われた。ＭＡＰＫ／ＥＲＫ１／２シグナリングを開始することが知られているＰｒＲＰ３１が、比較のために使用された。
【０１７８】
ＲＣ−４Ｂ／Ｃ細胞を、６ウェルプレート中で、１ウェルあたり７００〜９００細胞の最適密度まで増殖させた。サンプル回収の１７時間前に、前記増殖培地を、上皮成長因子（ＥＧＦ）を欠いている無血清培地によって置き換えた。試験される前記脂質付加されたＰｒＲＰ２０の類似体を、それぞれのウェルに最終濃度が１０−６ｍｏｌ・Ｌ−１となるように加えた。３７℃、５分間のインキュベーションの後、前記プレートを氷の上に載置し、それぞれのウェルをｐＨ７．４のＰＢＳ（ＮａＣｌ  １３７ｍｍｏｌ・Ｌ−１、ＫＣｌ  ２．７ｍｍｏｌ・Ｌ−１、Ｎａ２ＨＰＯ４．２Ｈ２Ｏ  ８ｍｍｏｌ・Ｌｌ−１およびＫＨ２ＰＯ４  １．７６ｍｍｏｌ・Ｌ−１）で３回すすぎ、４℃まで冷却した。次に、前記細胞をサンプルバッファー（Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ６．８）  ６２．５ｍｍｏｌ・Ｌｌ−１、グリセロール  １０％、ＳＤＳ  ２％、ブロモフェノールブルー  ０．０１％、メルカプトエタノール  ５％、ＮａＦ  ５０ｍｍｏｌ・Ｌｌ−１およびＮａ３ＶＯ４  １ｍｍｏｌ・Ｌｌ−１）中で可溶化し、マイクロチューブ中に集め、−２０℃で冷凍した。少なくとも３回の独立した実験において、サンプルを回収した。
【０１７９】
前記脂質付加されたＰｒＲＰ２０の類似体が、前記ＭＡＰＫ／ＥＲＫ１／２シグナリング経路を開始するか否かを決定するために、ウェスタンブロット分析を使用した。機器ＭｉｎｉＰｒｏｔｅａｎ３（BioRad, Herkules, CA, USA）上の、５％／１２％のＳＤＳ存在下ポリアクリルアミドゲル（ＳＤＳ−ＰＡＧＥ）上で電気泳動を行った。ゲル上に投入されたサンプルを、まず超音波によって分解し、次に１００℃で２分間加熱し、５００×ｇ、室温で５分間遠心分離した。ＭＡＰＫ／ＥＲＫ１／２シグナリングを開始することが示されているＰｒＲＰ３１（Maixnerova et al., 2011）を、ポジティブコントロールとして使用した。１００Ｖの一定電圧で１０分間、または１５０Ｖで６０分間、電気泳動を行った。
【０１８０】
前記サンプルにおけるリン酸化されたタンパク質の存在を示すため、前記タンパク質を、前記ＳＤＳ−ＰＡＧＥゲルからＩｍｍｏｂｉｌｏｎ（商標）−Ｐ  ＰＶＤＦ（ポリフッ化ビニリデン）メンブレン（Sigma-Aldrich, USA）へ転写した。前記転写は、ｐＨ８．３のブロッティングバッファー（Ｔｒｉｓ  ２５ｍｍｏｌ・Ｌ−１、グリシン  １９２ｍｍｏｌ・Ｌ−１およびメタノール  ２０％）中において、４℃、３０Ｖの一定電圧で２０時間行った。
【０１８１】
前記ＰＶＤＦメンブレンへのタンパク質の前記転写の後、前記メンブレンをＴＢＳウォッシングバッファー（Ｔｒｉｓ  ２０ｍｍｏｌ・Ｌ−１、ＮａＣｌ  １４０ｍｍｏｌ・Ｌ−１およびＴｗｅｅｎ−２０  ０．１％）中において５分間洗浄し、次にブロッキングバッファー（脱脂粉乳５％を加えたＴＢＳならびに、Ｎａ３ＶＯ４  ５ｍｍｏｌ・Ｌ−１およびＮａＦ  ５０ｍｍｏｌ・Ｌ−１）中において室温で１時間インキュベートした。さらに、前記メンブレンを、前記ＴＢＳウォッシングバッファーを使用して５分間、３回洗浄した。次に、前記メンブレンを、ブロッキングバッファー中で１：１０００に希釈された抗ホスホ−ｐ−４４／４２ＭＡＰＫ（Ｔｈｒ２０２／Ｔｙｒ２０４）一次抗体（Cell Signaling Technology, Beverly, USA）と共にインキュベートした。前記ＴＢＳウォッシングバッファーで５分間、３回の洗浄の後、前記メンブレンを、ブロッキングバッファー中で１：１２，０００に希釈された、ペルオキシダーゼで標識されたウサギ二次抗体（Sigma, St. Louis, USA）と共に１時間インキュベートした。
【０１８２】
次に、前記メンブレンをＴＢＳウォッシングバッファー中において５分間、３回洗浄し、引き続いてＦｅｍｔｏ溶液（Pierce SuperSignal, Thermo Fisher Scientific, Rockford, IL, USA）を塗布した。誘起された化学発光を、ＣＣＤカメラ（LAS 3000, Fuji Photo Film GmBH, Dusseldorf, Germany）によって検出した。
【０１８３】
リン酸化のレベルを評価するため、プログラムＱｕａｎｔｉｔｉｙ  Ｏｎｅ（BioRad, Hercules, CA, USA）を用いたデンシメトリー分析が使用された。前記デンシメトリー分析の統計的有意性を決定するため、一元配置のＮＯＶＡおよび引き続くダネットのｐｏｓｔ  ｈｏｃ検定を使用した。Ｐ値＜０．０５の場合、データを統計的有意であるとした。
【０１８４】
ＧＰＲ１０レセプターに対する結合親和力が高い（相対的に低いＫｉの値によって示される）全てのペプチドを、アゴニストであるとした。阻害定数Ｋｉの値は、Ｋｄの値に４．２１ｎｍｏｌ．Ｌｌ−１±Ｓ．Ｅ．Ｍ．（当該Ｓ．Ｅ．Ｍ．は、飽和結合実験において求められた）、放射性リガンドの濃度に０．１ｎｍｏｌ・Ｌ−１を用いるＣｈｅｎｇ−Ｐｒｕｓｓｏｆ式を使用して、ＩＣ５０から計算した。
【０１８５】
［実施例４：インビボ試験］
ラットおよびマウスの食欲、血中グルコース量およびその他の代謝パラメータへの、ＰｒＲＰ２０、ＰｒＲＰ３１、並びにそれらの脂質付加された類似体のインビボにおける効果を示すために、摂食試験およびグルコース負荷試験（ＧＴＴ）を行った。その結果を、図１〜５、表２の「マウスにおける摂食」の欄および表３〜４に要約する。
【０１８６】
ＮＭＲＩマウス、Ｃ５７ＢＬ／６マウスおよびウィスターラット（AnLab, Prague, Czech Republic）を、２３℃の温度、並びに１２ｈの明期および暗期の１日のサイクル（６：００から明期）にて飼育した。それらには、水を適宜与えるとともに、タンパク質、脂肪および炭水化物をそれぞれ２５％、９％および６６％含む標準的な食事を与えた。この餌のエネルギー含量は、３．４ｋｃａｌ／ｇ（St-1, Mlyn Kocanda, Czech Republic）であった。ｄｂ／ｄｂマウスおよびその対照（Ｃ５７ＢＬ／６バックグラウンド）をＴａｃｏｎｉｃ（Denmark）から入手し、上記と同様の条件下で飼育し、Ａｌｔｒｏｍｉｎ（Taconic, Denmark）を与えた。ＺＤＦ−Ｌｅｐｒｆａ／Ｃｒｌ、オスの糖尿病ｆａ／ｆａラットをＣｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ（France）から入手し、上記と同様の条件下で飼育し、Ｐｕｒｉｎａ  ５００８  ｄｉｅｔ（IPS Product Supplies Limited, UK）を与えた。全ての実験は、動物実験のための倫理指針およびチェコ共和国Ｎｒ．２４６／１９９２の法律に従った。
【０１８７】
ａ）摂食実験
Ｃ５７ＢＬ／６マウスまたはウィスターラットを用いた実験において、個々のケージ内で一晩絶食させた動物を用いて摂食を測定した。食物は、プロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の脂質付加された類似体の注射の１７時間前に回収した。水への自由なアクセスは維持した。生理食塩水、ＰｒＲＰ、または脂質付加された類似体のいずれかの投与を、１〜１０ｍｇ／ｋｇの用量（０．２ｍｌの体積／マウスおよび０．１ｍｌ／ラットの体重１００ｇに相当する）にてＳＣ注射によって行った。プロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の脂質付加された類似体の投与の１５分後、予め重さを量った食物をマウスに与えた。当該食物は、その後、５〜１０時間、３０分毎に重さを量った。各用量の投与は、少なくとも２回行われ、マウスの各グループは、少なくとも６匹のマウスからなった。その結果を、表２に示すように、生理食塩水を注射した対照群と比較した摂食の％にて評価した。脂質付加されていないＰｒＲＰを与えられた対照に比べて、スクランブルされていない（non-scrambled）プロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の脂質付加された類似体を投与された大部分のマウスでは、摂食が減少し、多くのケースで劇的に減少した。賦形剤を与えた対照に比べて、ペプチド４３、４８、５２、５３、５４、５５または５７を与えたラットにおいて、摂食が有意に減少した。
【０１８８】
ｂ）やせたマウスにおける類似体４３の投与の、血中グルコースに対する効果
一晩絶食させた１２週齢のオスのＣ５７ＢＬ／６マウス（AnLab, Praha, Czech Republic）に対して、腹腔内グルコース負荷試験（ＩＰＧＴＴ）を行った。初めの血中グルコース量（尾の静脈から採取）を測定し、その後、類似体４３（５ｍｇ／ｋｇ  ＳＣ）または生理食塩水をマウスに投与した（ｎ＝７）。１５分後、２ｇ／ｋｇのグルコース溶液をＩＰにて投与した。その後、グルコース注射から１５分、３０分、６０分、１２０分の時点で、グルコメーター（Glucocard, Arkray, Kyoto, Japan）を用いて血中グルコースを測定した。
【０１８９】
図１Ａおよび１Ｂは、やせたマウスにおける、ｐａｌｍ−ＰｒＲＰ３１（類似体４３）および対照の生理食塩水の急性投与後のＩＰＧＴＴ試験の結果を示す。ＩＰＧＴＴを、一晩絶食させたオスのＣ５７ＢＬ／６マウスにおいて実施した。血中グルコース量を、開始時およびｐａｌｍ−ＰｒＲＰ３１（５ｍｇ／ｋｇ  ＳＣ）または生理食塩水の皮下（ＳＣ−皮膚の下）投与後、３０分、６０分、９０分および１２０分において、測定した（ｎ＝７）。図１Ａは、時間とともに血中グルコース量を示し、一方、図１Ｂは、３０分間の曲線下面積（ＡＵＣ）を示す。グラフ中のエラーバーに関して、＊Ｐ＜０．０５であり、＊＊Ｐ＜０．０１である。生理食塩水の代わりに類似体４３を与えられたマウスにおいては、ＩＰＧＴＴによるグルコース量が、特に実験の初期において低かった。曲線下総面積はまた、類似体４３マウスにおいて明らかに低かった。
【０１９０】
ｃ）肥満かつ糖尿病のグルタミン酸ナトリウム（ＭＳＧ）マウスに対する類似体４３の１０日間反復投与の、血中グルコースに対する効果
肥満マウスを、ＭＳＧを用いて作製した。Ｌ−グルタミン酸ナトリウム水和物（Sigma, St. Louis, USA）を、肥満を誘導するために生後２〜８日から毎日、４ｍｇ／ｇ体重の用量にて、新生仔雄マウスへ皮下（ＳＣ）投与した。実験に用いた、ＭＳＧ処理したマウスは２４週齢であった。年齢が関連したマウスを対照として用いた。肥満マウスと対照マウスとを別々のケージに入れて、食物および水に自由にアクセスできるようにした。次の週に、マウスは１０日間の摂食実験を受けた。ＭＳＧマウスに、５ｍｇ／ｋｇの用量の、生理食塩水または類似体４３を、１０日間１日に２度、ＳＣ注射し、これらのＮＭＲＩの対照には、生理食塩水を１０日間１日に２度、注射した（ｎ＝１０）。Ｓｔ−１食の消費およびマウスの体重を同時に追った。１０日間の処理の後、マウスを一晩絶食させて、ＩＰＧＴＴを行った。初めの血中グルコースの測定後、２ｇ／ｋｇのグルコース溶液をＩＰ投与した。その後、血中グルコースを、上述のように、注射後、１５分、３０分、６０分、１２０分および１８０分において、測定した。
【０１９１】
図２Ａおよび２Ｂは、肥満ＭＳＧマウスおよび対照ＮＭＲＩマウスへ、ｐａｌｍ−ＰｒＲＰ３１（類似体４３）を１０日間投与した後のＩＰＧＴＴの結果を表す。図２Ａは、結果のグルコース量を時間とともに示し、図２Ｂは、１８０分間の曲線下面積（ＡＵＣ）を比較している。ＩＰＧＴＴ血中グルコース量は、特に初めの血中グルコースのピークが達成された後の試行の後半において、生理食塩水を投与したマウスよりも、類似体４３を与えたマウスのほうが低かった。曲線下面積はまた、類似体４３を受けたマウスにおいて実質的に低かった。
【０１９２】
ｄ）糖尿病ｄｂ／ｄｂマウスに対する類似体４３の１４日間反復投与の、血中グルコースに対する効果
オスのｄｂ／ｄｂマウスおよびそのそれぞれの対照を、到着後、順応させ、ケージあたり２〜３匹のマウスを飼育し、１１〜１２週齢にて実験に用いた。マウスは、食物および水に自由にアクセスし、１４日間の実験を受けた。ｄｂ／ｄｂマウスには、５ｍｇ／ｋｇの用量の類似体４３または対照の生理食塩水のいずれかを、１４日間１日に２度、ＳＣ注射した（ｎ＝１０）。マウスの体重を同時に追った。１４日間の処置の後、マウスを一晩絶食させて、ＩＰＧＴＴを行った。初めの血中グルコースの測定後、２ｇ／ｋｇのグルコース溶液をＩＰ投与し、グルコース量を７時間、毎時測定した。
【０１９３】
図３は、糖尿病ｄｂ／ｄｂマウスへ、ｐａｌｍ−ＰｒＲＰ３１（類似体４３）または生理食塩水を１４日間反復投与した後のＩＰＧＴＴグルコース量を比較している。グルコース量は、実験の終了時（４２０分）に示されており、類似体４３が投与された糖尿病マウスにおいて有意に低い。
【０１９４】
ｅ）やせたラットに対する類似体４３の急性投与の、血中グルコースに対する効果
一晩絶食させた１４週齢のオスのウィスターラット（AnLab, Praha, Czech Republic）に対してＩＰＧＴＴを行った。初めの血中グルコース量（尾の静脈から採取）を測定し、その後、類似体４３（５ｍｇ／ｋｇ  ＩＰ）または生理食塩水のいずれかをマウス（ｎ＝７）に投与した。１５分後、２ｇ／ｋｇのグルコース溶液をＩＰにて投与した。その後、グルコース注射から１５分、３０分、６０分および１２０分において、血中グルコースを測定した。
【０１９５】
図４は、ラットにおけるｐａｌｍ−ＰｒＲＰ３１の急性投与後のグルコース量を表す。ＩＰＧＴＴは、一晩絶食させたオスのウィスターラットに対して行われた。ｐａｌｍ−ＰｒＲＰ３１（類似体４３）または生理食塩水のＳＣ投与の初め、および投与後、時間とともに、血糖値を測定した。示されているように、生理食塩水ラットは、平均して血糖の大きなスパイクを経験しており、類似体４３を与えたラットは、経験していない。
【０１９６】
ｆ）糖尿病ＺＤＦラットに対する類似体４３および５２の２１日間反復投与の、摂食、血中グルコースおよび代謝パラメータに対する効果
ｐＨ６のリン酸緩衝生理食塩水中に溶解した賦形剤または類似体４３および５２（１ｍｇ／ｋｇおよび５ｍｇ／ｋｇ  ＩＰ）を用いて、２１日間、毎日２回、ＺＤＦラットを処置し、２２日目に犠牲にした。摂食を、２２日目まで測定した。レプチン、インスリン、コレステロールおよびＨｂＡｌｃの量を２１日目に測定した。グルコース負荷試験（ＯＧＴＴ）もまた、２１日目に行った。
【０１９７】
表３は、０日目、７日目、１４日目および２１日目における、累積の摂食を示す。自由に餌を取ることができるＺＤＦ糖尿病ラットにおける摂食は、毎日２回、５ｍｇ／ｋｇの用量の類似体４３および５２を用いた長期のＩＰ処置後に、賦形剤を用いて処置した対照に比べて有意に低下した。
【０１９８】
表４は、２１日目、実験の終了時での代謝パラメータを表す。血中コレステロール量は、毎日２回、１ｍｇ／ｋｇおよび５ｍｇ／ｋｇの用量の類似体４３を用いた反復処置後に、対照に比べて有意に低下した。
【０１９９】
図５は、ｐａｌｍ−ＰｒＲＰ３１（類似体４３）を２１日間投与した後のＯＧＴＴの結果を示す。図５Ａは、グルコース量の結果を時間とともに示し、図５Ｂは、１８０分間の曲線下面積（ＡＵＣ）を比較している。上記結果は、毎日２回、５ｍｇ／ｋｇの用量にて類似体４３を反復投与すると、ＯＧＴＴ血糖値の有意な低下が引き起こされたことを示している。ラットは、２１日間の摂食実験を受けた。ｐＨ６のリン酸緩衝生理食塩水（対照）、または化合物４３もしくは５２を、２１日間、毎日２回、１ｍｇ／ｋｇおよび５ｍｇ／ｋｇの用量にてＺＤＦラットにＩＰ注射した（ｎ＝８）。２１日間の処置後、ラットに一晩絶食させ、ＯＧＴＴを行った。初めの血中グルコースを測定した後、２ｇ／ｋｇのグルコース溶液を経口補給によって投与した。その後、血中グルコースを、１０分、３０分、６０分、９０分、１２０分および１８０分において測定した。図５Ａは、グルコース量の変化（デルタグルコース）の結果を時間とともに示し、図５Ｂは、１８０分間の曲線下面積（ＡＵＣ）を示している。統計学的な有意性はアスタリスク（＊）によって示され、＊Ｐ＜０．０５である。
【０２００】
［統計学的解析］
データは、方法および表に示した動物の数に対して平均値±ＳＥＭ（標準誤差）として示す。生データは、Ｇｒａｐｈ−Ｐａｄソフトウェア（San Diego, CA, USA）を用いて、一元配置のＡＮＯＶＡの後、ダネットのｐｏｓｔ  ｈｏｃ検定によって解析した。Ｐ＜０．０５であれば統計学的に有意であると考えた。曲線下面積（ＡＵＣ）をまた、Ｇｒａｐｈ−Ｐａｄソフトウェアを用いて計算した。
【０２０１】
【表２】
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【０２０２】
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【０２０３】
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【０２０４】
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【０２０５】
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【０２０６】
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【０２０７】
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【０２０８】
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【０２０９】
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【０２１０】
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【０２１１】
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【０２１２】
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【０２１３】
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【０２１４】
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【０２１５】
【表３】
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【０２１６】
【表４】
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【０２１７】
本明細書に記載のプロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の脂質付加された類似体の原理の適用を示すために、本明細書に記載の特定の実施形態が詳細に示され、記載されているが、プロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の脂質付加された類似体は、そのような原理から離れなければ、他に具現化され得ることが理解されるであろう。本明細書に記載のプロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の脂質付加された類似体から離れなければ、数々の変化、変更および置換が、当業者によって理解されるであろう。本発明を実施する場合、本明細書に記載のプロラクチン放出ペプチド（ＰｒＲＰ）の脂質付加された類似体の特定の実施形態に対して様々な代わりのものが採用され得ることが理解されるべきである。請求項は発明の範囲を定義し、これにより、この請求項の範囲内の方法および構造、並びにそれらの同等物はカバーされていることが意図されている。
【図面の簡単な説明】
【０２１８】
【図１Ａ】図１Ａは、やせたマウスにおける、ｐａｌｍ−ＰｒＲＰ３１（類似体４３）および対照の生理食塩水の急性投与後の、腹腔内のグルコース負荷試験（ＩＰＧＴＴ）の結果を示す。ＩＰＧＴＴを、一晩絶食させたオスのＣ５７ＢＬ／６マウスにおいて実施した。血中グルコース量を、開始時およびｐａｌｍ−ＰｒＲＰ３１（類似体４３）（５ｍｇ／ｋｇ  ＳＣ）または生理食塩水の皮下（ＳＣ−皮膚の下）投与後、３０分，６０分，９０分および１２０分において、測定した（ｎ＝７）。図１Ａは、時間とともにグルコース量を示す。
【図１Ｂ】図１Ｂは、やせたマウスにおける、ｐａｌｍ−ＰｒＲＰ３１（類似体４３）および対照の生理食塩水の急性投与後の、腹腔内のグルコース負荷試験（ＩＰＧＴＴ）の結果を示す。ＩＰＧＴＴを、一晩絶食させたオスのＣ５７ＢＬ／６マウスにおいて実施した。血中グルコース量を、開始時およびｐａｌｍ−ＰｒＲＰ３１（類似体４３）（５ｍｇ／ｋｇ  ＳＣ）または生理食塩水の皮下（ＳＣ−皮膚の下）投与後、３０分，６０分，９０分および１２０分において、測定した（ｎ＝７）。図１Ｂは、３０分間の曲線下面積（ＡＵＣ）を示す。
【図２Ａ】図２Ａは、肥満かつ糖尿病のグルタミン酸ナトリウム（ＭＳＧ）マウスに対する、ｐａｌｍ−ＰｒＲＰ３１（類似体４３）の投与の１０日後の、腹腔内の（ＩＰＧＴＴ）結果を示す。マウスは、１０日間の摂食実験を受けた。ＭＳＧマウスに、５ｍｇ／ｋｇの用量の、生理食塩水またはｐａｌｍ−ＰｒＲＰ３１（類似体４３）のいずれかを、１０日間１日に２度、ＳＣ注射し、これらのＮＭＲＩの対照は、生理食塩水を１０日間１日に２度、ＳＣ注射した（ｎ＝１０）。処理の１０日後、マウスを一晩絶食させ、ＩＰＧＴＴを実施した。初めの血中グルコースの測定後、２ｇ／ｋｇのグルコース溶液を腹腔内に投与した（ＩＰ）。その後、血中グルコースを、１５分，３０分，６０分，１２０分および１８０分において、測定した。図２Ａは、結果のグルコース量を時間とともに示す。
【図２Ｂ】図２Ｂは、肥満かつ糖尿病のグルタミン酸ナトリウム（ＭＳＧ）マウスに対する、ｐａｌｍ−ＰｒＲＰ３１（類似体４３）の投与の１０日後の、腹腔内の（ＩＰＧＴＴ）結果を示す。マウスは、１０日間の摂食実験を受けた。ＭＳＧマウスに、５ｍｇ／ｋｇの用量の、生理食塩水またはｐａｌｍ−ＰｒＲＰ３１（類似体４３）のいずれかを、１０日間１日に２度、ＳＣ注射し、これらのＮＭＲＩの対照は、生理食塩水を１０日間１日に２度、ＳＣ注射した（ｎ＝１０）。処理の１０日後、マウスを一晩絶食させ、ＩＰＧＴＴを実施した。初めの血中グルコースの測定後、２ｇ／ｋｇのグルコース溶液を腹腔内に投与した（ＩＰ）。その後、血中グルコースを、１５分，３０分，６０分，１２０分および１８０分において、測定した。図２Ｂは、１８０分間の曲線下面積（ＡＵＣ）を示す。
【図３】図３は、糖尿病のｄｂ／ｄｂマウスに対する、ｐａｌｍ−ＰｒＲＰ３１（類似体４３）または、対照として、生理食塩水の、反復投与の１４日後のグルコース量の比較を示す。オスのｄｂ／ｄｂマウスに、５ｍｇ／ｋｇの用量の、生理食塩水またはｐａｌｍ−ＰｒＲＰ３１（類似体４３）のいずれかを、１４日間１日に２度、ＳＣ注射した。その後、マウスを一晩絶食させ、ＩＰＧＴＴを実施した。初めの血中グルコースの測定後、２ｇ／ｋｇのグルコース溶解液をＩＰ投与し、グルコースを、７時間の間、１時間ごとに追跡した。実験の終了時（４２０分）におけるグルコース量を示す。
【図４】図４は、ラットにおけるｐａｌｍ−ＰｒＲＰ３１（類似体４３）の急性投与後のグルコース量のプロットを示す。ＩＰＧＴＴを、一晩絶食させたオスのウィスターラットにおいて実施した。血中グルコース量を、開始時、およびｐａｌｍ−ＰｒＲＰ３１（類似体４３）（５ｍｇ／ｋｇ  ＳＣ）または生理食塩水のＳＣ投与後に、時間とともに測定した。
【図５Ａ】図５Ａは、糖尿病のＺＤＦラットに対する、類似体４３および類似体５２の投与の２１日後の、経口グルコース負荷試験（ＯＧＴＴ）の結果を示す。ラットは、２１日間の摂食実験を受けた。ＺＤＦラットは、１ｍｇ／ｋｇおよび５ｍｇ／ｋｇの用量の、リン酸緩衝生理食塩水ｐＨ６（対照）、または化合物４３もしくは化合物５２を、２１日間１日に２度、ＩＰ注射した（ｎ＝８）。処理の２１日後、ラットを一晩絶食させ、ＯＧＴＴを実施した。初めの血中グルコースの測定後、２ｇ／ｋｇのグルコース溶液を経口補給によって投与した。その後、血中グルコースを、１５分，３０分，６０分，９０分，１２０分および１８０分において、測定した。図５Ａは、グルコース量における結果の変化（デルタグルコース）を時間とともに示す。
【図５Ｂ】図５Ｂは、糖尿病のＺＤＦラットに対する、類似体４３および類似体５２の投与の２１日後の、経口グルコース負荷試験（ＯＧＴＴ）の結果を示す。ラットは、２１日間の摂食実験を受けた。ＺＤＦラットは、１ｍｇ／ｋｇおよび５ｍｇ／ｋｇの用量の、リン酸緩衝生理食塩水ｐＨ６（対照）、または化合物４３もしくは化合物５２を、２１日間１日に２度、ＩＰ注射した（ｎ＝８）。処理の２１日後、ラットを一晩絶食させ、ＯＧＴＴを実施した。初めの血中グルコースの測定後、２ｇ／ｋｇのグルコース溶液を経口補給によって投与した。その後、血中グルコースを、１５分，３０分，６０分，９０分，１２０分および１８０分において、測定した。図５Ｂは、１８０分間の曲線下面積（ＡＵＣ）を示す。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図３】
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【図４】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【配列表】
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