(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
（Ａ）過酢酸、（Ｂ）過酸化水素、（Ｃ）酢酸、（Ｄ）カタラーゼ酵素、（Ｅ）キレート剤、（Ｆ）水を含有する除菌剤組成物であって、
（Ａ）過酢酸濃度を１００〜１００００ｐｐｍ、
（Ｄ）カタラーゼ酵素を１〜１０ｐｐｍ、
（Ｅ）キレート剤を１〜１０００ｐｐｍ、
含有し、かつ
（Ａ）過酢酸と（Ｂ）過酸化水素の質量比（Ａ）／（Ｂ）が１以上、
（Ｄ）カタラーゼ酵素と（Ｅ）キレート剤の質量比（Ｄ）／（Ｅ）が、０．００５〜１０、
であることを特徴とする除菌剤組成物。
【請求項２】
（Ｅ）成分のキレート剤が、有機ホスホン酸及び／又は有機ホスホン酸塩であることを特徴とする請求項１に記載の除菌剤組成物。
【請求項３】
（Ｅ）成分のキレート剤が、１−ヒドロキシエチリデン−１，１−ジホスホン酸、２−ホスホノブタン−１，２，４−トリカルボン酸又はこれらの塩より選ばれた化合物であることを特徴とする請求項１または２に記載の除菌剤組成物。
【請求項４】
さらに、（Ｇ）ノニオン界面活性剤及び／又は、（Ｈ）アニオン界面活性剤を１０〜５００００ｐｐｍ含有することを特徴とする請求項１〜３のいずれか一項に記載の除菌剤組成物。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれか一項に記載の除菌剤組成物を、使用温度が２０℃〜７０℃に加温して除菌処理することを特徴とする除菌方法。
【請求項６】
請求項１〜３のいずれか一項に記載の除菌組成物を用いる除菌方法であって、
（Ａ）過酢酸、（Ｂ）過酸化水素、（Ｃ）酢酸、（Ｅ）キレート剤および（Ｆ）水を含む第１剤と、（Ｄ）成分を含有する第２剤とを使用直前に混合して前記除菌組成物を調製し、除菌操作に供することを特徴とする除菌方法。
【請求項７】
（Ａ）過酢酸、（Ｂ）過酸化水素、（Ｃ）酢酸、（Ｅ）キレート剤の少なくとも１つの成分を濃厚に含む濃厚組成物に、（Ｄ）カタラーゼ酵素及び（Ｆ）水を添加、希釈して、
（Ａ）過酢酸濃度を１００〜１００００ｐｐｍ、
（Ｄ）カタラーゼ酵素を１〜１０ｐｐｍ、
（Ｅ）キレート剤を１〜１０００ｐｐｍ、
含有し、かつ
（Ａ）過酢酸と（Ｂ）過酸化水素の質量比（Ａ）／（Ｂ）が１以上、
（Ｄ）カタラーゼ酵素と（Ｅ）キレート剤の質量比（Ｄ）／（Ｅ）が、０．００５〜１０となるように調整することを特徴とする除菌剤組成物の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、過酢酸を含有した除菌剤組成物に関し、更に詳細には、過酢酸に抵抗性を持つ菌を制御することができ、かつ、設備腐食への影響を低減した除菌剤組成物を提供するものである。
【背景技術】
【０００２】
過酢酸は、過酢酸・過酸化水素・酢酸・水の平衡混合溶液として市販されているが、低濃度、短時間の接触で広範囲の微生物に対して高い除菌効果を示し、分解物が酢酸と水であることから安全性も高く、食品工業においては設備・機器・包装容器等の除菌目的で多量に使用されている。
【０００３】
過酢酸は、細菌、真菌、ウイルス等に対して優れた除菌性を示し、更に、人に対する感作性や変異原性が低く、分解生成物が酢酸と過酸化水素という比較的安全な化合物である。このため過酢酸、過酸化水素、酢酸を含む過酢酸系消毒薬は、安全性が高く、各種洗浄剤や除菌剤等に用いられ、更に、これらの洗浄剤や除菌剤の洗浄効果を補強する目的等から、ノニオン界面活性剤等の界面活性剤を配合している場合もある（例えば、特許文献１〜３を参照）。また近年、各種飲料食品関連では、この過酢酸に対して強い抵抗性を示すパエニバチルス属細菌等の抵抗性菌の問題が顕在化しており、その対策として、残留する過酸化水素の濃度を低減したり、過酸化水素濃度の高い過酢酸系殺菌剤を用いる方法（特許文献４）や、過酢酸濃度を上げる方法（特許文献５）などが提案されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特表平８−５０２５１８号公報
【特許文献２】特開２００１−０７２９９６号公報
【特許文献３】特開２００７−０８４５８９号公報
【特許文献４】特開２００９−１１３８５８号公報
【特許文献５】特開２０１２−２１９０５３号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
しかしながら、過酸化水素の濃度を低減することによって、酢酸の濃度が増加し、設備のパッキンに対して膨潤や劣化等の影響を及ぼす問題があり、過酸化水素濃度を高くすると、無菌水による洗浄後の容器への過酸化水素の残留量が高くなってしまい、製品への混入トラブルが起こるリスクがある。さらに、過酢酸濃度を上げる方法はコスト高となるという問題があった。
【０００６】
従って、本発明が解決しようとする課題は、過酢酸に対して強い抵抗性を示すパエニバチルス属細菌等の抵抗性菌に対する除菌性に優れ、ステンレスに対して低腐食性の除菌剤組成物を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
上記課題を解決するために、本発明者等は鋭意検討した結果、過酢酸、過酸化水素、酢酸、キレート剤とともに、カタラーゼ酵素を含む除菌剤組成物が、従来の過酢酸系除菌剤組成物が有していた問題を解決できることを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００８】
即ち本発明は、
（１）（１）（Ａ）過酢酸、（Ｂ）過酸化水素、（Ｃ）酢酸、（Ｄ）カタラーゼ酵素、（Ｅ）キレート剤、（Ｆ）水を含有する除菌剤組成物であって、
（Ａ）過酢酸濃度を１００〜１００００ｐｐｍ、
（Ｄ）カタラーゼ酵素を１〜１０ｐｐｍ、
（Ｅ）キレート剤を１〜１０００ｐｐｍ、
含有し、かつ
（Ａ）過酢酸と（Ｂ）過酸化水素の質量比（Ａ）／（Ｂ）が１以上、
（Ｄ）カタラーゼ酵素と（Ｅ）キレート剤の質量比（Ｄ）／（Ｅ）が、０．００５〜１０であることを特徴とする除菌剤組成物、
（２）（Ｅ）成分のキレート剤が、有機ホスホン酸及び／又は有機ホスホン酸塩であることを特徴とする上記（１）に記載の除菌剤組成物、
（３）（Ｅ）成分のキレート剤が、１−ヒドロキシエチリデン−１，１−ジホスホン酸、２−ホスホノブタン−１，２，４−トリカルボン酸又はこれらの塩より選ばれた化合物であることを特徴とする上記（１）〜（２）の除菌剤組成物、
（４）さらに、（Ｇ）ノニオン界面活性剤及び／又は、（Ｈ）アニオン界面活性剤を１０〜５００００ｐｐｍ含有することを特徴とする上記（１）〜（３）のいずれかの除菌剤組成物、
（５）上記（１）〜（４）のいずれか一項に記載の除菌剤組成物を、使用温度が２０℃〜７０℃に加温して除菌処理することを特徴とする除菌方法、
（６）上記（１）〜（３）のいずれかの除菌組成物を用いる除菌方法であって、
（Ａ）過酢酸、（Ｂ）過酸化水素、（Ｃ）酢酸、（Ｅ）キレート剤および（Ｆ）水を含む第１剤と、（Ｄ）成分を含有する第２剤とを使用直前に混合して前記除菌組成物を調製し、除菌操作に供することを特徴とする除菌方法、
（７）（Ａ）過酢酸、（Ｂ）過酸化水素、（Ｃ）酢酸、（Ｅ）キレート剤の少なくとも１つの成分を濃厚に含む濃厚組成物に、（Ｄ）カタラーゼ酵素及び（Ｆ）水を添加、希釈して、
（Ａ）過酢酸濃度を１００〜１００００ｐｐｍ、
（Ｄ）カタラーゼ酵素を１〜１０ｐｐｍ、
（Ｅ）キレート剤を１〜１０００ｐｐｍ、
含有し、かつ
（Ａ）過酢酸と（Ｂ）過酸化水素の質量比（Ａ）／（Ｂ）が１以上、
（Ｄ）カタラーゼ酵素と（Ｅ）キレート剤の質量比（Ｄ）／（Ｅ）が、０．００５〜１０となるように調整することを特徴とする除菌剤組成物の製造方法、
を要旨とするものである。
【発明の効果】
【０００９】
本発明の除菌剤組成物は、細菌、真菌、ウイルス等に対して優れた除菌性を有するとともに、過酢酸に対して強い抵抗性を示すパエニバチルス属細菌等の抵抗性菌に対しても除菌効果に優れ、ステンレスに対して低腐食性である等の効果を奏する。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
本発明の除菌剤組成物は、（Ａ）過酢酸、（Ｂ）過酸化水素、（Ｃ）酢酸、（Ｄ）カタラーゼ酵素、（Ｅ）キレート剤、（Ｆ）水を含有する除菌剤組成物であって、（Ａ）過酢酸濃度を１００〜１００００ｐｐｍ、（Ｄ）カタラーゼ酵素を０．０１〜２５０ｐｐｍ、（Ｅ）キレート剤を１〜１０００ｐｐｍ含有し、かつ、（Ａ）過酢酸と（Ｂ）過酸化水素の質量比（Ａ）／（Ｂ）が１以上、（Ｄ）カタラーゼ酵素と（Ｅ）キレート剤の質量比（Ｄ）／（Ｅ）が、０．００２〜１０である。本発明の除菌剤組成物は、（Ａ）過酢酸、（Ｂ）過酸化水素、（Ｃ）酢酸、（Ｅ）キレート剤の少なくとも１つの成分を濃厚に含む濃厚組成物に、（Ｄ）カタラーゼ酵素及び（Ｆ）水を添加、希釈して、（Ａ）過酢酸濃度を１００〜１００００ｐｐｍ、（Ｄ）カタラーゼ酵素を０．０１〜２５０ｐｐｍ、（Ｅ）キレート剤を１〜１０００ｐｐｍ含有し、かつ（Ａ）過酢酸と（Ｂ）過酸化水素の質量比（Ａ）／（Ｂ）が１以上、（Ｄ）カタラーゼ酵素と（Ｅ）キレート剤の質量比（Ｄ）／（Ｅ）が、０．００２〜１０となるように調整したものでも良い。
【００１１】
本発明で使用されるカタラーゼ酵素としては、微生物を起源とするものが使用できるが、好ましくはアスペルギルス属またはマイクロコッカス属を起源とするカタラーゼが挙げられ、より好ましくはアスペルギルス・ニガーを起源とするカタラーゼが挙げられる。カタラーゼ酵素の形態は水溶液でも粉末状でもよく、水溶液中または粉末化時の安定性向上の目的で使用される安定化成分としては、メタノール、エタノール、グリセリン、ソルビトール、マルチトール、マンニトール、シクロデキストリン、デキストリン、システイン、アセチルシステイン、グルタチオン、トコフェロール、アスコルビン酸、チオグリコール酸又はその塩類、クエン酸ナトリウムが挙げられる。好ましい安定化成分としてはエタノール、デキストリンが挙げられ、より好ましい安定化成分はデキストリンが挙げられる。塩酸、硝酸、硫酸、スルホン酸類等の強酸由来の塩類は、使用環境において設備の腐食に影響を及ぼすため強酸由来の塩類の少ないことが好ましい。
【００１２】
本発明の除菌剤組成物において、（Ａ）成分の過酢酸濃度は１００〜１００００ｐｐｍであるが、５００〜５０００ｐｐｍであることが好ましく、１０００〜３０００ｐｐｍであることがより好ましい。（Ａ）成分の過酢酸濃度が１００ｐｐｍ未満であると、過酢酸抵抗性菌に対する除菌性が低下する場合があり、１００００ｐｐｍを超えると、設備の腐食に影響をあたえることがあり、またコスト的に好ましくない。
【００１３】
（Ｂ）成分の過酸化水素濃度は２０００ｐｐｍ未満であることが好ましいが、２００ｐｐｍ未満であることがより好ましく、２０ｐｐｍ未満であることがさらに好ましい。過酸化水素の下限は０．１ｐｐｍが好ましく、本発明の除菌剤組成物中における過酸化水素濃度は、０．１〜１０ｐｐｍであることが最も好ましい。２０００ｐｐｍを超えると、過酢酸抵抗性菌に対する除菌性が低下する場合がある。
【００１４】
（Ｃ）成分の酢酸濃度は、１００〜２００００ｐｐｍであることが好ましいが、５００〜１００００ｐｐｍであることがより好ましく、１０００〜６０００ｐｐｍであることがさらに好ましい。（Ｃ）成分の酢酸濃度が１００ｐｐｍ未満であると、無機物の汚れを除去する効果が低下する場合があり、２００００ｐｐｍを超えると酢酸の臭いが激しくなるため取扱いが困難になることや設備のパッキンへの膨潤や劣化を起こす場合があるために好ましくない。
【００１５】
（Ｄ）成分のカタラーゼは、０．０１〜２５０ｐｐｍ配合されるが、０．０５〜２０ｐｐｍ配合することが好ましく、０．１〜１０ｐｐｍ配合することがより好ましく、０．５〜５ｐｐｍ配合することが更に好ましい。（Ｄ）成分の配合量が０．０１ｐｐｍ未満であると、過酸化水素の分解スピードが低下するため、パエニバチルス属細菌への除菌性が低下する場合があり、２５０ｐｐｍを超えると、リユース使用時にカタラーゼの分解物が過酢酸の安定性に影響を与えること、カタラーゼ酵素に起因する凝集物が発生することから好ましくない。
【００１６】
（Ｅ）成分のキレート剤としては、ポリリン酸、有機ホスホン酸、フィチン酸、エチレンジアミン四酢酸、ジエチレントリアミン五酢酸、ロダンカリ、ポリアミノカルボン酸等や、これらの塩が挙げられる。ポリリン酸としては、例えば、ピコリン酸、ジピコリン酸、ピロリン酸、トリポリリン酸、テトラポリリン酸、ヘキサポリリン酸等のポリリン酸等が挙げられ、有機ホスホン酸としては、例えば、１−ヒドロキシエチリデン−１，１−ジホスホン酸、２−ホスホノブタン−１，２，４−トリカルボン酸、アミノトリメチレンホスホン酸や、エチレンジアミンテトラ（メチレンホスホン酸）、ジエチレントリアミンペンタ（メチレンホスホン酸）等のポリエチレンポリアミン系ホスホン酸等が挙げられる。キレート剤としては、有機ホスホン酸やその塩が好ましく、なかでも１−ヒドロキシエチリデン−１，１−ジホスホン酸、２−ホスホノブタン−１，２，４−トリカルボン酸が好ましい。（Ｅ）成分のキレート剤は、１〜１０００ｐｐｍ配合されるが、５〜５００ｐｐｍ配合することが好ましく、１０〜１００ｐｐｍ配合することがより好ましく、１５〜５０ｐｐｍ配合することが更に好ましい。（Ｅ）キレート剤の配合量が１ｐｐｍより少ないと、過酢酸の安定性が低下する場合があり、１０００ｐｐｍを超えて配合した場合、カタラーゼ酵素が失活してしまい好ましくない。
【００１７】
また、（Ｆ）成分の水としては、特に限定はなく、イオン交換水、軟水、純水、水道水などが挙げられ、除菌剤組成物の安定性の観点から、イオン交換水又は純水が好ましい。
【００１８】
本発明除菌剤組成物における（Ａ）成分と（Ｂ）成分の濃度比率は、過酢酸抵抗性菌への除菌性、除菌剤組成物の安定性の観点から（Ａ）／（Ｂ）が１以上であるが、好ましくは（Ａ）／（Ｂ）が２以上であり、さらに好ましくは（Ａ）／（Ｂ）＝２６以上であり、最も好ましくは（Ａ）／（Ｂ）＝１００以上である。（Ａ）／（Ｂ）が１未満であると、過酢酸抵抗性菌への除菌性が低下する場合がある。また（Ｄ）成分と（Ｅ）成分の濃度比率は、過酢酸抵抗性菌への除菌性、凝集物の抑制性の観点から（Ｄ）／（Ｅ）＝０．００２〜１０（質量比）であるが、好ましくは（Ｄ）／（Ｅ）＝０．００５〜５であり、さらに好ましくは（Ｄ）／（Ｅ）＝０．０１〜３である。（Ｄ）／（Ｅ）が０．００２未満であると、過酢酸抵抗性菌への除菌性が低下する場合があり、（Ｄ）／（Ｅ）が１０を超えると、凝集物の抑制性が低下する場合がある。
【００１９】
更に、本発明の除菌剤組成物には、上記（Ａ）成分、（Ｂ）成分、（Ｃ）成分、（Ｄ）成分、（Ｅ）成分、（Ｆ）成分の他に、（Ｇ）成分としてノニオン界面活性剤が配合されていてもよい。（Ｇ）成分のノニオン界面活性剤としては、ポリオキシアルキレンアルキルエーテル、ポリオキシアルキレンジアルキルエーテル、ポリオキシアルキレンアルキルエステル、ポリオキシアルキレンアルキルジエステル、ポリオキシアルキレンアルキルアリールエーテル、グリセリン脂肪酸エステル又はそのエチレンオキサイド付加物、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビット脂肪酸エステル、ポリオキシエチレングリセリン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンヒマシ油、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリオキシエチレンアルキルアミン、高級脂肪酸アルカノールアミド、アルキルグリコシド、アルキルアミンオキサイド、Ｎ−オクチルピロリドン等が挙げられる。これらの中でも、泡立ちが少ない点から、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンアルケニルエーテル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンアルキルエーテル、エチレンオキシドとプロピレンオキシドのランダム或いはブロック付加体等のポリアルキレンオキサイド付加物が好ましく、下記の一般式（Ｉ）で表されるポリオキシアルキレンアルキルエーテル型ノニオン界面活性剤、或いはポリオキシアルキレンアルケニルエーテル型ノニオン界面活性剤がより好ましい。
【００２０】
（化１）
Ｒ−（ＯＡ）ｎ −ＯＨ           （Ｉ）
（式中、Ｒは炭素数８〜１８の脂肪族炭化水素基を表し、ｎは３〜５０の数を表わし、Ａは炭素数２〜４のアルキレン基を表す。）
【００２１】
更に、（Ｈ）成分としてアニオン界面活性剤が配合されていてもよい。（Ｈ）成分のアニオン界面活性剤としては、高級アルコール硫酸エステル塩、硫化オレフィン塩、高級アルキルスルホン酸又はその塩、α−オレフィンスルホン酸又はその塩、硫酸化脂肪酸又はその塩、スルホン化脂肪酸又はその塩、アルキルリン酸エステル塩、α−スルホ脂肪酸メチルエステル塩、ポリオキシアルキレンアルキルエーテル硫酸エステル塩、ポリオキシアルキレンアルキルフェニルエーテル硫酸エステル塩、脂肪酸アルカノールアミド又はそのアルキレンオキサイド付加物の硫酸エステル塩、スルホコハク酸エステル、アルキルベンゼンスルホン酸又はその塩、アルキルナフタレンスルホン酸又はその塩、アルキルベンゾイミダゾールスルホン酸又はその塩、Ｎ−アシル−Ｎ−メチルタウリン又はその塩、アシルオキシエタンスルホン酸又はその塩、アルコキシエタンスルホン酸又はその塩、Ｎ−アシル−Ｎ−カルボキシエチルタウリン又はその塩、及びアルキル又はアルケニルアミノカルボキシメチル硫酸又はその塩、アルキルエーテルカルボン酸塩等を挙げることができる。
【００２２】
本発明の除菌剤組成物は、除菌剤組成物の濃厚組成物をそのまま或いは水で希釈して使用することができる。輸送するときは、除菌剤組成物の濃厚組成物のほうが輸送コストを抑えられるため、輸送時には（Ａ）成分の濃度は１〜１５重量％が好ましく、３〜１４重量％がより好ましく、５〜１３重量％が更に好ましい。（Ｅ）成分の濃度は０．０１〜１．５重量％が好ましく、０．０３〜１．０重量％がより好ましく、０．０５〜０．８重量％が更に好ましい。本発明において、除菌剤組成物の調整や希釈に用いる水としては、特に限定はなく、イオン交換水（イオン交換樹脂によりイオンを除去した水）、軟水、純水（ＲＯ水つまり逆浸透膜を通した水、蒸留水つまり蒸留器で蒸留した水）、水道水などが挙げられ、除菌性の点から純水、特にＲＯ水が好ましい。
【００２３】
本発明の除菌剤組成物は、（Ｂ）過酸化水素、（Ｃ）酢酸、（Ｅ）キレート剤、（Ｆ）水、を混合して平衡状態となるまで放置して（Ａ）過酢酸、（Ｂ）過酸化水素、（Ｃ）酢酸、（Ｅ）キレート剤、（Ｆ）水を含む混合平衡溶液を得、更に必要に応じて、（Ｇ）成分、（Ｈ）成分を配合して調製することができる。本発明の除菌剤組成物は、予め全ての成分が混合された状態で調製してもよいが、使用する直前に調製する方が、高い除菌効果を得る上で好適である。使用に際して調製する方法としては、平衡状態に達した（Ａ）成分、（Ｂ）成分、（Ｃ）成分、（Ｅ）キレート剤、（Ｆ）水及び所望によりその他成分の所定量を、それぞれ個別に水に溶解して調整する方法を用いることができるが、簡便性の点から（Ａ）成分、（Ｂ）成分及び（Ｃ）成分、（Ｅ）成分、（Ｆ）成分及び所望によりその他成分を含有する第１剤と、（Ｄ）成分を含有する第２剤とからなり、第１剤、第２剤を使用直前に混合することによって、除菌操作に供することが好ましい。
【００２４】
本発明の除菌剤組成物は、強力な除菌性を有するため、パエニバチルス属細菌を含む菌類・微生物の汚染・混入が問題となる幅広い分野（食品分野、醸造分野、医療分野、農業分野など）での除菌に有用である。例えば、乳製品・乳加工品、ビール・ワイン・清酒、味噌・醤油などの食品加工工場での容器や製造ラインの除菌、内視鏡等の医療器具の消毒や滅菌、透析ラインの洗浄、野菜及び果物の処理水の病原菌微生物の制御、植物の病気又は損傷及び苗木の腐敗の原因となる種子に取り付いた微生物の制御、食鳥肉の処理場での食鳥肉の表面の病原菌の減少、特に、無菌充填法によるＰＥＴボトル入り清涼飲料の製造での容器包材（ＰＥＴボトル及びキャップ）の除菌、またはそのラインの強化除菌に好適に用いることができる。
【００２５】
本発明の除菌剤組成物による除菌処理を行う際の温度は、２０℃〜７０℃であるが、除菌性を高めるために、４０℃〜６５℃であることがより好ましく、５０℃〜５９℃であることが更に好ましい。除菌剤組成物の温度が２０℃未満であると、過酢酸に対して強い抵抗性を示すパエニバチルス属細菌等の抵抗性菌に対する除菌性が悪くなる場合があり、７０℃を超えると、製造設備の材質であるステンレスの腐食性、カタラーゼ酵素が失活してしまう場合がある。
【００２６】
除菌処理は、除菌液を対象物に噴霧したり、除菌液に対象物を浸漬したりする方法を採用することができるが、噴霧時間や浸漬時間は、微生物の種類や量、有機汚れあるいは無機汚れの種類や量、除菌液の濃度等によって適宜選択することができる。
【実施例】
【００２７】
以下、実施例を挙げて本発明を更に詳細に説明する。
【００２８】
実施例１〜６９、比較例１〜６
表１〜７に示す配合の除菌剤組成物を調製した。各除菌剤組成物中の過酸化水素濃度、過酢酸濃度、酢酸濃度は以下の方法で測定した。また各除菌剤組成物について、除菌性試験、腐食性試験を行った。結果を表１〜８に併せて示す。
実施例１〜１０、実施例２１〜６９、比較例５〜６に関しては、（Ａ）成分、（Ｂ）成分及び（Ｃ）成分、（Ｅ）成分、（Ｆ）成分及び所望によりその他成分を含有する第１剤と、（Ｄ）成分を含有する第２剤を使用直前に混合してから５分後に除菌操作に供したものであり、実施例１１〜２０、比較例１〜４に関しては、第１剤と、第２剤を使用直前に混合してから６０分後に除菌操作に供したものである。また、実施例６４の除菌剤組成物は、（Ａ）過酢酸を１０％、（Ｂ）過酸化水素を２０％、（Ｃ）酢酸を１５％、（Ｅ）１−ヒドロキシエチリデン−１，１−ジホスホン酸を０．２５％、を含有する濃厚組成物を純水で２％に希釈し、その後、（Ｄ）カタラーゼ酵素を１０ｐｐｍ、を除菌剤組成物中に添加し、５分後の状態であり、表９に示す異なる試験温度で除菌性試験を行った。結果を表９に示す。なお、表１〜９において各成分の配合割合は“ｐｐｍ”である。また、表１〜表９中の（Ａ）／（Ｂ）の値は、割りきれない場合は小数点一桁を四捨五入した値で示した。
【００２９】
【表１】
0006371186.tif 000002
【００３０】
【表２】
0006371186.tif 000003
【００３１】
【表３】
0006371186.tif 000004
【００３２】
【表４】
0006371186.tif 000005
【００３３】
【表５】
0006371186.tif 000006
【００３４】
【表６】
0006371186.tif 000007
【００３５】
【表７】
0006371186.tif 000008
【００３６】
【表８】
0006371186.tif 000009
【００３７】
【表９】
0006371186.tif 000010
【００３８】
（１）過酸化水素濃度測定法
【００３９】
高濃度（５０．０ｐｐｍ超）の過酸化水素を測定する場合
１００ｍＬのコニカルビーカーに、調製した除菌剤組成物（原液）をマイクロピペッターで１ｍＬ採取し、１０％硫酸溶液１０ｍＬを加えた後、０．１Ｎ過マンガン酸カリウム標準液により、薄桃色を呈するまで滴定し、滴定に要した過マンガン酸カリウム標準液量：Ａ（ｍＬ）、０．１Ｎ過マンガン酸カリウム標準液のファクター：Ｆ１より、下記（１）式により過酸化水素濃度を求めた。
（数１）
過酸化水素濃度（ｗ／ｖ％）＝Ａ×０．１７×Ｆ１        （１）
【００４０】
低濃度（０．１〜５０．０ｐｐｍ）の過酸化水素を測定する場合
３００ｍＬのコニカルビーカーに、調製した除菌剤組成物（原液）をホールピペットで１００ｍＬ採取し、１０％硫酸溶液１０ｍＬを加えた後、０．０５Ｎ過マンガン酸カリウム標準液により、薄桃色を呈するまで滴定し、滴定に要した過マンガン酸カリウム標準液量：Ｂ（ｍＬ）、０．０５Ｎ過マンガン酸カリウム標準液のファクター：Ｆ２より、下記（２）式により過酸化水素濃度を求めた。
(数２)
過酸化水素濃度（ｗ／ｖ％）＝Ｂ×０．０１×０．０８５×Ｆ２        （２）
【００４１】
（２）過酢酸濃度測定法
【００４２】
組成物中に高濃度（５０．０ｐｐｍ超）の過酸化水素が含有している場合
上記高濃度過酸化水素を測定する方法に基づいて過酸化水素濃度を滴定した後の溶液に、１０％ヨウ化カリウム溶液１ｍＬを添加後、０．０１Ｎチオ硫酸ナトリウム標準液で淡黄色になるまで滴定し、１％デンプン溶液を１ｍＬ加え、暗青色が消えるまで滴定し、滴定に要した０．０１Ｎチオ硫酸ナトリウム標準液量：Ｃ（ｍＬ）を求めた。ブランクとして、精製水１ｍＬを採取し上記と同様の滴定を行い、０．０１Ｎチオ硫酸ナトリウム標準液の滴定量：Ｃ０（ｍＬ）を求めた。試料の滴定に要したチオ硫酸ナトリウム標準液量：Ｃ（ｍＬ）、ブランクの滴定に要したチオ硫酸ナトリウム標準液量：Ｃ０（ｍＬ）、及び、０．０１Ｎチオ硫酸ナトリウム標準液のファクター：Ｆ３より、下記（３）式により過酢酸濃度を求めた。
(数３)
過酢酸濃度（ｗ／ｖ％）＝（Ｃ−Ｃ０）×０．０３８×Ｆ３        （３）
【００４３】
組成物中に低濃度（０．１〜５０．０ｐｐｍ）の過酸化水素が含有している場合
上記低濃度過酸化水素を測定する方法に基づいて過酸化水素濃度を滴定した後の溶液に、１０％ヨウ化カリウム溶液１ｍＬを添加後、１Ｎチオ硫酸ナトリウム標準液で淡黄色になるまで滴定し、１％デンプン溶液を１ｍＬ加え、暗青色が消えるまで滴定し、滴定に要した１Ｎチオ硫酸ナトリウム標準液量：Ｄ（ｍＬ）を求めた。ブランクとして、精製水１００ｍＬを採取し上記と同様の滴定を行い、１Ｎチオ硫酸ナトリウム標準液の滴定量：Ｄ０（ｍＬ）を求めた。試料の滴定に要したチオ硫酸ナトリウム標準液量：Ｄ（ｍＬ）、ブランクの滴定に要したチオ硫酸ナトリウム標準液量：Ｄ０（ｍＬ）、及び、１Ｎチオ硫酸ナトリウム標準液のファクター：Ｆ４より、下記（４）式により過酢酸濃度を求めた。
(数４)
過酢酸濃度（ｗ／ｖ％）＝（Ｄ−Ｄ０）×０．０１×３．８×Ｆ４        （４）
【００４４】
（３）酢酸濃度測定法
２００ｍＬコニカルビーカーに除菌剤組成物：Ｗ（ｇ）を精秤し、純水１００ｍＬを加えた後、自動滴定装置（京都電子製、ＡＴ−６１０−ＰＴ）を用いて、０．５Ｎ水酸化ナトリウム標準液で中和滴定をおこなった。ｐＨ６．８付近（ｔ１）の変曲点（中和点）を与える滴定所要量から酢酸濃度を算出した。ｐＨ６．８付近（ｔ１）の変曲点を与える滴定所要量：Ｔ１（ｍＬ）、０．５Ｎ水酸化ナトリウム標準液のファクター：Ｆ５、及び、除菌剤組成物の質量：Ｗより、下記（５）式により酢酸濃度を求めた。
（数５）
酢酸濃度（ｗ／ｖ％）＝３×Ｔ１×Ｆ５／Ｗ        （５）
【００４５】
※１：除菌性（芽胞菌、過酢酸に抵抗性を持つ芽胞菌）
（ａ）試験用芽胞菌
芽胞菌として、バチルス・サブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）（ＮＢＲＣ３１３４）を用いた。
過酢酸に抵抗性を持つ芽胞菌として、分析・試験受託の総合サービスサイトであるアナライズ・ジェイ・ネットのＧｅｒｍｓｐｅｄｉａより入手した菌株、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ  ｆａｖｉｓｐｏｒｕｓ（注文番号：Ｅ１２３）、飲料工場で採取し、分離同定したパエニバチルス属細菌であるパエニバチルス・チベンシス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｈｉｂｅｎｓｉｓ）を用いた。
（ｂ）芽胞懸濁液の作製
供試菌株をＳＣＤ寒天培地（日水製薬品）に塗抹し、３７℃で培養し、培養後、顕微鏡観察にて芽胞が十分に形成されていることを確認した。平板培地上に滅菌済み純水を１０ｍＬ入れ、コロニーを掻き取り懸濁液を収集した。１００００ｒｐｍで、４℃、１５分間の条件で遠心洗浄を３回実施し、遠心後、滅菌済み純水を適量加え、２．０〜９．０×１０８ＣＦＵ／ｍｌ程度になるように菌数を調製し、ウォーターバスにて８０℃、１５分間の加熱処理をして芽胞懸濁液とした。
（ｃ）滅菌中和液の調整
大豆レシチンを１０ｇ、Ｔｗｅｅｎ８０を３０ｇ、Ｌ−ヒスチジンを１ｇ、チオ硫酸ナトリウムを２０ｇ、１Ｌの蒸留水に加温溶解し、攪拌しながら冷却をおこなった。その後、スクリューキャップ付き試験管に各９ｍＬ分注し、高圧殺菌（１２１℃、２０分間）をおこない、滅菌中和溶液とした
（ｄ）除菌性試験
滅菌済み１００ｍＬ三角フラスコに、供試除菌剤組成物１００ｍＬを入れた。各供試除菌剤組成物を入れた三角フラスコを所定温度に設定したウォーターバス中のマグネチックスターラー上に置き、三角フラスコの攪拌子を回転させながら薬剤の温度を上昇させた。三角フラスコ内の各供試除菌剤組成物が５９℃になったことを確認後、供試菌懸濁液１ｍＬを添加した。１分（薬剤接触時間）ごとに、１ｍＬを滅菌中和溶液入り試験管に採取し、よく攪拌した。混合液をＳＣＤ寒天培地にて混和固化し、３７℃で２日間培養した。培養後、平板にコロニーの形成が見られなくなるまでの時間より、以下の基準で除菌性（芽胞菌、過酢酸に抵抗性を持つ芽胞菌）を評価し、△、○、◎の評価のものを実用性のあるものとして判定した。
評価基準
◎：接触後２分以内にコロニーの形成がみられなくなる。
○：接触後２分超、５分以内にコロニーの形成がみられなくなる。
△：接触後５分超、８分以内にコロニーの形成がみられなくなる。
×：接触後８分を超えてもコロニーの形成がみられる。
【００４６】
※２：ステンレス腐食性試験
除菌剤組成物５０ｍｌを１００ｍｌ容積のキャップつきポリ瓶に入れ、ＳＵＳ３０４製のパネル（縦×横×厚み＝７５ｍｍ×２５ｍｍ×１ｍｍ）を面積の半分まで除菌剤組成物中に浸るように入れ、キャップをする。キャップをしたポリ瓶を５９℃に昇温した後、７日間静置する。７日後パネルを取り出し、流水で洗浄後、１０５℃で２時間乾燥させ、乾燥後の外観を、除菌剤組成物に浸漬する前の状態と比較評価し、腐食性を判定し、△、○の評価のものを実用性のあるものとして判定した。
評価基準
○：浸漬前と変化なし
△：浸漬前とほぼ変化なし
×：腐食した
【００４７】
※３：ゴムパッキン適合性
除菌剤組成物５０ｍＬを１００ｍＬキャップ付きガラス瓶に入れ、このガラス瓶にＥＰＤＭゴムパネル（入間川ゴム株式会社製：縦×横×厚み＝５０ｍｍ×２５ｍｍ×２ｍｍ（体積２５００立方ミリメートル））を全体が浸るように入れ、キャップをする。６５℃に昇温した後、同温度に保持して２４時間静置後、ＥＰＤＭゴムパネルを取り出し、流水で洗浄した。１０５℃で３時間乾燥した後体積を測定し、下記（４）式より膨張率を求めた。
膨張率＝（浸漬後体積‐浸漬前体積）／浸漬前体積        （４）
膨張率より、以下の基準でゴムパッキン適合性を評価し、△、○、◎の評価のものを実用性のあるものとして判定した。
評価基準：
◎：膨張率が０．０３未満。
○：膨張率が０．０３以上、０．０５未満。
△：膨張率が０．０５以上、０．１未満。
×：膨張率が０．１以上。