(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
求核的に活性化したポリオキサゾリン（ＮＵ−ＰＯＸ）と、求電子的に活性化したポリオキサゾリン以外の求電子性架橋剤を反応させることにより得られる共有結合架橋ポリマーを、乾燥物質の重量に対して、少なくとも１％、好ましくは少なくとも２５％含む、生体適合性組織接着性医療製品であって、
前記ＮＵ−ＰＯＸがｍ個の求核基を含み；前記求電子性架橋剤がｎ個の求電子基を含み、ｍ個の求核基がｎ個の求電子基と反応して共有結合を形成することが可能であり；ｍ≧２、ｎ≧２及びｍ＋ｎ≧５であり；求電子性架橋剤がイソシアネートである場合、ＮＵ−ＰＯＸが、少なくとも３０単位のオキサゾリンを含み、
前記組織接着性が、前記ポリマーに含有される未反応求電子基と、組織中に存在する求核基との反応に由来する、生体適合性組織接着性医療製品。
【請求項２】
接着性組織テープ、接着性組織膜、組織シーラント、止血材、縫合糸材料、ポリマーコーティングしたステント又はインプラントである、請求項１に記載の生体適合性組織接着性医療製品。
【請求項３】
医療製品に含有される架橋ポリマーが、非晶質状態である、請求項１又は２に記載の生体適合性組織接着性医療製品。
【請求項４】
ｍ個の求核基の少なくとも１個が、ペンダント求核基である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の生体適合性組織接着性医療製品。
【請求項５】
ＮＵ−ＰＯＸが、１００モノマー当たり３〜５０個のペンダント求核基を含有する、請求項４に記載の生体適合性組織接着性医療製品。
【請求項６】
ｍ個の求核基が、アミン基、チオール基、ホスフィン基及びそれらの組み合わせから選択される、請求項１〜５のいずれか一項に記載の生体適合性組織接着性医療製品。
【請求項７】
求核基がアミン基であり、求電子性架橋剤に含有される求電子基が、カルボン酸エステル、スルホン酸エステル、ホスホン酸エステル、チオエステル、ペンタフルオロフェニルエステル、ｐ−ニトロフェニルエステル、ｐ−ニトロチオフェニルエステル、酸ハロゲン化物基、無水物、ケトン、アルデヒド、イソシアナト、チオイソシアナト、エポキシド、活性化ヒドロキシル基、グリシジルエーテル、カルボキシル、スクシンイミジルエステル、炭酸スクシンイミジル、カルバミン酸スクシンイミジル、スルホスクシンイミジルエステル、炭酸スルホスクシンイミジル、イミドエステル、ジヒドロキシ−フェニル誘導体、及びそれらの組み合わせから選択される、請求項６に記載の生体適合性組織接着性医療製品。
【請求項８】
求核基がチオール基であり、求電子性架橋剤に含有される求電子基が、ハロアセタール、オルトピリジルジスルフィド、マレイミド、ビニルスルホン、ジヒドロキシフェニル誘導体、ビニル、アクリル酸エステル、アクリルアミド、ヨードアセトアミド、スクシンイミジルエステル、炭酸スクシンイミジル、カルバミン酸スクシンイミジル、スルホスクシンイミジルエステル、炭酸スルホスクシンイミジル及びそれらの組み合わせから選択される、請求項６に記載の生体適合性組織接着性医療製品。
【請求項９】
求電子性架橋剤が、ｎ≧２個の求電子基を有する又はそれで置換されている主鎖を含有し、前記主鎖が、寒天、デンプン、プルラン、イヌリン、レバン、絹、フィブロネクチン、ペクチン、セルロースコラーゲン、エラスチン、ゼラチン、アルブミン、フィブリン、フィブリノーゲン、デキストラン、メチルセルロース、ヒアルロン酸、コンドロイチン硫酸、ケラト硫酸、ヘパラン硫酸、デルマタン硫酸、アルギン酸、キトサン、キチン、ヘパリン、ポリビニルアルコール、ポリエチレングリコール及びそれらの組み合わせからなるポリマーの群から選択される、請求項１〜８のいずれか一項に記載の生体適合性組織接着性医療製品。
【請求項１０】
求核的に活性化したポリオキサゾリン（ＮＵ−ＰＯＸ）と、求電子的に活性化したポリオキサゾリン以外の求電子性架橋剤を反応させることにより得られる、生体適合性及び組織接着性の共有結合架橋ポリマーであって、前記ＮＵ−ＰＯＸがｍ個の求核基を含み；前記求電子性架橋剤がｎ個の求電子基を含み、ｍ個の求核基がｎ個の求電子基と反応して共有結合を形成することが可能であり；ｍ≧２、ｎ≧２及びｍ＋ｎ≧５であり；求電子性架橋剤がイソシアネートである場合に、ＮＵ−ＰＯＸが少なくとも３０単位のオキサゾリンを含み；前記組織接着性が、前記ポリマーに含有される未反応求電子基と、組織中に存在する求核基との反応に由来する、生体適合性組織接着性架橋ポリマー。
【請求項１１】
ｍ個の求核基の少なくとも１個がペンダント求核基である、請求項１０に記載の生体適合性組織接着性架橋ポリマー。
【請求項１２】
ＮＵ−ＰＯＸが、１００モノマー当たり３〜５０個のペンダント求核基を含有する、請求項１１に記載の生体適合性組織接着性架橋ポリマー。
【請求項１３】
ｍ個の求核基が、アミン基、チオール基、ホスフィン基及びそれらの組み合わせから選択される、請求項１０〜１２のいずれか一項に記載の生体適合性組織接着性架橋ポリマー。
【請求項１４】
求核基がアミン基であり、求電子性架橋剤に含有される求電子基が、カルボン酸エステル、スルホン酸エステル、ホスホン酸エステル、チオエステル、ペンタフルオロフェニルエステル、ｐ−ニトロフェニルエステル、ｐ−ニトロチオフェニルエステル、酸ハロゲン化物基、無水物、ケトン、アルデヒド、イソシアナト、チオイソシアナト、エポキシド、活性化ヒドロキシル基、グリシジルエーテル、カルボキシル、スクシンイミジルエステル、炭酸スクシンイミジル、カルバミン酸スクシンイミジル、スルホスクシンイミジルエステル、炭酸スルホスクシンイミジル、イミドエステル、ジヒドロキシ−フェニル誘導体、及びそれらの組み合わせから選択される、請求項１３に記載の生体適合性組織接着性架橋ポリマー。
【請求項１５】
求核基がチオール基であり、求電子性架橋剤に含有される求電子基が、ハロアセタール、オルトピリジルジスルフィド、マレイミド、ビニルスルホン、ジヒドロキシフェニル誘導体、ビニル、アクリル酸エステル、アクリルアミド、ヨードアセトアミド、スクシンイミジルエステル、炭酸スクシンイミジル、カルバミン酸スクシンイミジル、スルホスクシンイミジルエステル、炭酸スルホスクシンイミジル及びそれらの組み合わせから選択される、請求項１３に記載の生体適合性組織接着性架橋ポリマー。
【請求項１６】
求電子性架橋剤が、ｎ≧２個の求電子基を有する又はそれで置換されている主鎖を含有し、前記主鎖が、寒天、デンプン、プルラン、イヌリン、レバン、絹、フィブロネクチン、ペクチン、セルロースコラーゲン、エラスチン、ゼラチン、アルブミン、フィブリン、フィブリノーゲン、デキストラン、メチルセルロース、ヒアルロン酸、コンドロイチン硫酸、ケラト硫酸、ヘパラン硫酸、デルマタン硫酸、アルギン酸、キトサン、キチン、ヘパリン、ポリビニルアルコール、ポリエチレングリコール及びそれらの組み合わせからなるポリマーの群から選択される、請求項１０〜１５のいずれか一項に記載の生体適合性組織接着性架橋ポリマー。
【請求項１７】
請求項１０〜１６のいずれか一項に記載の生体適合性組織接着性架橋ポリマーを生成するキットであり、前記キットが、請求項１０〜１６のいずれか一項に記載のＮＵ−ＰＯＸ、及び請求項１０〜１６のいずれか一項に記載の求電子性架橋剤を含み；キットが、ＮＵ−ＰＯＸ及び求電子性架橋剤の個別包装容量を含み、ＮＵ−ＰＯＸ及び架橋剤のそれぞれが、流体又は再構成可能な粉末の形態で存在するキット。
【請求項１８】
ＮＵ−ＰＯＸが、溶媒及び１〜９５ｗｔ．％のＮＵ−ＰＯＸを含む流体の形態で存在する、請求項１７に記載のキット。
【請求項１９】
請求項１０〜１６のいずれか一項に記載の生体適合性組織接着性架橋ポリマーを生成するキットであり、前記キットが、０．０１〜１０００μｍの重量平均径を有する粒子からなる粉末を含み、前記粒子が、請求項１０〜１６のいずれか一項に記載のＮＵ−ＰＯＸを含有する粒子、及び、請求項１０〜１６のいずれか一項に記載の求電子性架橋剤を含有する粒子を含むキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、求核的に活性化したポリオキサゾリン（ＮＵ−ＰＯＸ）と求電子的に活性化した架橋剤を反応させることによって得られる、生体適合性の共有結合架橋ポリマーに関する。
【０００２】
また、ＮＵ−ＰＯＸと求電子的に活性化した架橋剤から、生体適合性架橋ポリマーを生成するキットを提供する。
【０００３】
本発明は、前記架橋ポリマーを、乾燥物質の重量に対して、少なくとも１％含む医療製品をさらに提供する。そのような医療製品の例は、骨インプラント、軟部組織インプラント、接着性インプラント、インプラントのコーティング、縫合糸、接着性組織シーラント及び接着性組織テープを含む医療インプラントである。
【背景技術】
【０００４】
組織接着剤は、創傷の閉鎖、手術手技における縫合糸又はステープルの補完又は代替、角膜への合成アンレー又はインレーの接着、薬剤送達装置を含み、また術後接着を防ぐための抗接着バリアとして、多くの潜在的な医療用途を有する。
【０００５】
従来の組織接着剤は、フィブリンシーラント、シアノアクリレート系シーラント、及び他の合成シーラント、並びに重合可能なマクロマーを含む。このような従来のシーラントには、特定の範囲の接着用途にしか適さないものもある。例えば、シアノアクリレート系接着剤は、局所創傷閉鎖に使用されているが、毒性の分解生成物を放出することで、内服使用が限定される。フィブリン系接着剤は高価であり、冷蔵保存を必要とすることが多く、硬化が遅く、機械的強度が限定され、ウイルス感染の危険性を引き起こす。
【０００６】
ある用途、例えば眼科用途のために、例として、外傷である角膜裂傷、又は手術手技である硝子体切除手技、腹壁ヘルニア、白内障手術、レーシック手術、緑内障手術及び角膜移植により生じる創傷を密閉すること；神経外科用途のために、例として、硬膜を密閉すること；瘻孔又は点を塞いで密閉すること、組織接着剤の分解を遅くすることが必要である。
【０００７】
この１０年間で、接着性を改善した非毒性の（半）合成ヒドロゲル組織接着剤数種類が開発されている。デュラシール（ＤｕｒａＳｅａｌ）（登録商標）のようなこれらのヒドロゲル組織接着剤の大半は、ＰＥＧ化と呼ばれるプロセスに化学的に基づいており、例えば、ＰＥＧ−グルタル酸スクシンイミジルのような反応性ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）前駆体を用いたポリマー修飾治療に使用される。これらの、ＰＥＧ化に基づくヒドロゲル組織接着剤は、典型的には、早く膨張しすぎる、若しくは早く溶解しすぎて消える、又は十分な粘着（互いにつながる機械的強度）を欠き、それにより外科用接着剤としての有効性が低下する。さらに、これらのヒドロゲル組織接着剤を利用することは、デュアルシリンジの噴霧技術を必要とする可能性があり、凍結乾燥した出発原料から、広範な試料を調製することが要求される。結局、そのようなＰＥＧ系材料の性質は、容易に調節できず、ＮＨＳ基の数は鎖末端の数に限定され；鎖末端当たりで、複数のＮＨＳ基を含むと考えられ、基は規則的に分布せずに、ＮＨＳ基の密度は高くなる。
【０００８】
国際公開第２００２／０６２２７６号パンフレットには、星形ＰＥＧ−グルタル酸スクシンイミジル前駆体を含むヒドロゲル組織シーラントについて記載され、これは、スターＰＥＧ−ＮＨＳ、又はスターＰＥＧ−ＮＳ、又はスターＳＧ−ＰＥＧ、又はスターＰＥＧ−ＳＧとしても知られており、トリリシン前駆体と反応することが記載されている。スターＳＧ−ＰＥＧ前駆体は、ｐＨ４のリン酸塩中で再構成できるが、トリリシン前駆体は、ｐＨ８のホウ酸塩緩衝液中で再構成できる。混合する際、トリリシン前駆体のアミン及びスターＳＧ−ＰＥＧ前駆体のＮＨＳ−活性化末端カルボン酸塩基の間に共有アミド結合が形成される。
【０００９】
国際公開第２０１０／０５９２８０号パンフレットには、繊維状ポリマーの第１の成分を含む無水繊維状シートについて記載され、求電子基又は求核基、及び前記シートが水性媒体に曝露されて、生物学的組織に接着性の架橋ヒドロゲルを形成した場合に、前記ポリマーは、第１の成分を架橋させることが可能な第２の成分を含有する。国際特許出願の例には、デキストランアルデヒド及び多分岐ポリエチレングリコールアミンを含む繊維状シートの調製について記載されている。
【００１０】
国際公開第００／３３７６４号パンフレットには、生体適合性架橋ポリマーを調製する方法であって、
ｎ個の架橋官能基を有し、ｎが２以上であり、架橋官能基が求電子性又は求核性である、生体適合性小分子架橋剤を得るステップと、
生体適合性小分子架橋剤を、第１の溶媒に溶解して架橋剤溶液を形成するステップと、
ｍ個の官能性ポリマー官能基を有し、ｍが２以上であり、ｎ及びｍの合計が５以上であり、官能性ポリマー官能基が、架橋官能基が求電子性の場合は求核性であり、架橋官能基が求核性の場合は、官能性ポリマー官能基が求電子性である、生体適合性官能性ポリマーを得るステップと、
生体適合性官能性ポリマーを第２の溶媒に溶解し、官能性ポリマー溶液を形成するステップと、
架橋剤及び官能性ポリマー溶液を組み合わせて、架橋官能基を官能性ポリマー官能基と反応させるステップと
を含む方法が記載されている。
国際公開第００／３３７６４号パンフレットには、ポリオキサゾリンについてどこにも言及されていない。
【００１１】
国際公開第２００５／１０９２４８号パンフレットには、加水分解ポリ（２−アルキル−２−オキサゾリン）の架橋ポリマー組成物及びカラーインクジェットインクに、これらの架橋ポリマー組成物を使用することが記載されている。
【００１２】
国際公開第２００９／０４３０２７号パンフレットには、ポリオキサゾリンの、多分岐の単官能誘導体、並びにそのようなポリオキサリン（ｐｏｌｙｏｘａｌｉｎｅ）の誘導体と薬剤の複合体が記載されている。
【００１３】
求核的に活性化したポリオキサゾリン（ＮＵ−ＰＯＸ）と、求電子的に活性化した架橋剤を反応させることによる架橋ポリマーの調製が、Ｌｕｘｅｎｈｏｆｅｒ（論文：Ｎｏｖｅｌ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｐｏｌｙ（２−ｏｘａｚｏｌｉｎｅ）ｓ  ａｓ  Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  Ｃａｒｒｉｅｒｓ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ、Ｔｅｃｈｎｉｓｃｈｅ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔａｔ  Ｍｕｎｃｈｅｎ（２００７年））により記載されている。２０単位の２−メチル−２−オキサゾリン及び５単位の２−アミノエチル−２−オキサゾリンを含むポリ（２−オキサゾリン）を、ヘキサメチレンジイソシアネートと架橋させた。水に対するイソシアネートの反応性が高いため、ヒドロゲルの調製を水なしで行わなければならなかった。ポリ（２−オキサゾリン）の（その後の膨張に対して）良好且つ水相溶性のある溶媒として、アセトニトリルが選択された。架橋剤が、溶媒に直接加えられ、続いて凍結乾燥させたポリマーに加えられた。１０分後、１．５ｍＬの水を加えると、ヒドロゲルが直ちに膨張した。
【００１４】
Ｃｈｕｊｏら（Ｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  Ｇｅｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｐｏｌｙｏｘａｚｏｌｉｎｅ  ｂｙ  Ｍｅａｎｓ  ｏｆ  Ｄｉｅｌｓ−Ａｌｄｅｒ  Ｒｅａｃｔｉｏｎ、Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ、１９９０年（２３）、２６３６〜２６４１頁）は、フランで修飾したポリ（Ｎ−アセチルエチレンイミン）（ＰＡＥＩ）及びマレイミドで修飾したＰＡＥＩの間における、分子間Ｄｉｅｌｓ−Ａｌｄｅｒ反応を用いたポリオキサゾリンヒドロゲルの調製について記載しており、ジシクロヘキシルカルボジイミドの存在下で、フラン又はマレイミドカルボン酸それぞれの反応により部分的に加水分解したＰＡＥＩから合成した。
【００１５】
インプラント又は組織シーラントの用途を有するポリマーの範囲を広げること、特に、ＰＥＧ系ポリマーにはない性質を有するが、類似した生体適合性ポリマーを得ることに関心がある。
【発明の概要】
【００１６】
本発明者らは、求核的に活性化したポリオキサゾリン（ＮＵ−ＰＯＸ）及び少なくとも２個の求核基を、少なくとも２個の求電子基を含む架橋剤と反応させることにより、優れたインプラント及び／又は密閉特性を有するポリマーが得られることを発見した。なお、前記架橋剤は、求電子的に活性化したポリオキサゾリンではない。
【００１７】
したがって、本発明は、ＮＵ−ＰＯＸと求電子的に活性化したポリオキサゾリン以外の求電子性架橋剤を反応させることにより得られる共有結合架橋ポリマーを含む、生体適合性医療製品であって、前記ＮＵ−ＰＯＸが、ｍ個の求核基を含み；前記求電子性架橋剤がｎ個の求電子基を含み、ｍ個の求核基が、ｎ個の求電子基と反応して共有結合を形成することが可能であり；ｍ≧２、ｎ≧２及びｍ＋ｎ≧５であり、求電子性架橋剤がイソシアネートである場合に、ＮＵ−ＰＯＸが、少なくとも３０単位のオキサゾリンを含む、生体適合性医療製品を提供する。
【００１８】
本発明による生体適合性医療製品の例は、インプラント、組織シーラント、接着性組織テープ、縫合糸材料、ポリマーコーティングしたステント及び止血材を含む。
【００１９】
本発明の架橋ポリマーは、いくつかの有益な性質を提供する：
架橋ポリマーの機械的性質は、アルキル側鎖の段階及び性質並びに／又は末端基の官能基化並びにポリマー鎖の長さを調節することにより、効率的に操作できる。カチオン性２−オキサゾリン重合を適切に使用して、多数の活性化した基をＰＯＸポリマーのアルキル側鎖に組み込むことができる；
架橋ポリマーの接着性は、様々な求電子性架橋剤を使用すること、及び架橋ポリマーの調製に使用される求電子性架橋剤の量を変化させることにより、変化させることができる。
架橋ポリマーの粘着性は、主に、ポリマー内の架橋の数／密度によって決定する。ポリマーにおける架橋の数は、様々な量の活性化した基をＰＯＸの側鎖に組み込むことにより、幅広い範囲内で変化し得る；
架橋ポリマーの膨張指数は、架橋の数及びＰＯＸにおける側鎖の大きさを操作することにより調節できる；
架橋ポリマーで作られたインプラントは、局所薬剤送達に理想的な薬剤であるデポ剤である。薬剤、例えば抗生物質、ＶＥＧＦ及び骨形成因子（ＢＭＰ−２）のような増殖因子の放出は、相互につながる網状組織からの拡散を遅くすることにより持続でき、アルキル側鎖の性質及び網状組織内の架橋密度及び分解性に左右される；
架橋ポリマーの生分解性は、加水分解基、例えばエステル又は炭酸塩をコポリマーに組み込むことにより効率的に調節できる。内部架橋の数によりさらに影響を受ける。したがって、使用目的に対して、ポリマーの生分解性を微調整することができる；
薬剤送達の研究においてエンドキャップしたＰＯＸ−ＮＨＳに基づいて、ＰＯＸは、ＰＥＧに類似して、又はそれよりもさらに目立たずファウリングを起こしにくい挙動を有するとみられる。腎臓のクリアランスのためには、ＰＯＸは、好ましくは、３０，０００以下のＭｗを有するべきである。
【００２０】
本発明の別の態様は、ＮＵ−ＰＯＸと求電子的に活性化したポリオキサゾリン以外の求電子性架橋剤を反応させることにより得られる、生体適合性の共有結合架橋ポリマーであって、前記ＮＵ−ＰＯＸがｍ個の求核基を含み；前記求電子性架橋剤がｎ個の求電子基を含み、ｍ個の求核基が、ｎ個の求電子基と反応して、共有結合を形成することが可能であり；ｍ≧２、ｎ≧２及びｍ＋ｎ≧５であり；求電子性架橋剤がイソシアネートである場合に、ＮＵ−ＰＯＸが、少なくとも３０単位のオキサゾリンを含み；ポリマーに含有される反応及び未反応求電子基の総数は、ポリマーに含有される反応及び未反応求核基の総数を、少なくとも３％、好ましくは少なくとも５％超える、生体適合性の共有結合架橋ポリマーに関する。
【００２１】
本発明のさらに別の態様は、生体適合性架橋ポリマーを生成するキットであって、前記キットが、本明細書で既に記載されているＮＵ−ＰＯＸ及び求電子的に活性化した架橋剤を含む、キットに関する。このキットを、適切に使用して、骨置換材料、抗接着インプラント（膜）、接着インプラント（例えば、動脈穿刺部位を閉塞するための、若しくは塞栓のための、又は尿失禁を処置するための組織シーラント）が得られる。
【００２２】
ＮＵ−ＰＯＸ及び求電子的に活性化した架橋剤が一緒にされる際に、発生する架橋の速度は、非慣性流体、例えば水（様々なｐＨで）、アルコール及び／又はポリオールを含むことにより効率的に調節できる。
【００２３】
本発明の生体適合性医療製品のＮＵ−ＰＯＸ成分は、以下の利点を提供する：
親水性／疎水性が釣り合うため、ＮＵ−ＰＯＸが、エタノール及びジクロロメタンのような有機流体並びに水において可溶性になり得る；
ＮＵ−ＰＯＸが、例えば、ポリエチレングリコールと比較して、ガラス転移温度に対して著しく高い優れた非晶質性を有する；
ＮＵ−ＰＯＸが、膜形成能力を有し、限られた量の可塑剤に対して可塑化しやすい；
求核的に活性化したＰＥＧを上回るＮＵ−ＰＯＸの利点は、特定の用途に向けたポリマーの性質を調整するために、様々な基、また、鎖に沿って官能基化した基を組み込めることである；
求核的に活性化したＰＥＧを上回るＮＵ−ＰＯＸのもう１つの利点は、ＮＵ−ＰＯＸは共重合でき、広い範囲で変化させることができる機械的特性を有する架橋コポリマーを調製できることである；
水又は体液に曝露しない場合、ＮＵ−ＰＯＸにより、インプラントにおいて求電子基を保護する環境が得られる。
【発明の詳細な説明】
【００２４】
したがって、本発明の一態様は、生体適合性医療製品であって、求核的に活性化したポリオキサゾリン（ＮＵ−ＰＯＸ）と、求電子的に活性化したポリオキサゾリン以外の求電子的に活性化した架橋剤を反応させることにより得られる共有結合架橋ポリマーを、乾燥物質の重量に対して、少なくとも１％含み、前記ＮＵ−ＰＯＸがｍ個の求核基を含み；前記求電子的に活性化した架橋剤がｎ個の求電子基を含み、ｍ個の求核基が、ｎ個の求電子基と反応して共有結合を形成することが可能であり、ｍ≧２、ｎ≧２及びｍ＋ｎ≧５であり、求電子性架橋剤がイソシアネートである場合に、ＮＵ−ＰＯＸが、少なくとも３０単位のオキサゾリンを含む、生体適合性医療製品に関する。
【００２５】
本明細書で使用されている「ポリオキサゾリン」という用語は、ポリ（Ｎ−アシルアルキレンイミン）又はポリ（アロイルアルキレンイミン）を指し、さらに、ＰＯＸと呼ばれる。本明細書で使用されている「ポリオキサゾリン」という用語は、ＰＯＸコポリマーも包含する。
【００２６】
本明細書で使用されている「求電子的に活性化した架橋剤」という専門用語は、少なくとも２個の求電子基、とりわけ、カルボン酸エステル、スルホン酸エステル、ホスホン酸エステル、チオエステル、ペンタフルオロフェニルエステル、ｐ−ニトロフェニルエステル、ｐ−ニトロチオフェニルエステル、酸ハロゲン化物基、無水物、ケトン、アルデヒド、イソシアナト、チオイソシアナト、イソシアノ、エポキシド、活性化ヒドロキシル基、オレフィン、グリシジルエーテル、カルボキシル、スクシンイミジルエステル、炭酸スクシンイミジル、カルバミン酸スクシンイミジル、スルホスクシンイミジルエステル、炭酸スルホスクシンイミジル、マレイミド（マレイミジル）、エテンスルホニル、イミドエステル、アセト酢酸、ハロアセタール、オルトピリジルジスルフィド、ジヒドロキシ−フェニル誘導体、ビニル、アクリル酸エステル、アクリルアミド、ヨードアセトアミド及びそれらの組み合わせから選択される、ＥＬ−ＰＯＸに含有される求電子基から選択される求電子基を含有するポリオキサゾリンを指す。
【００２７】
「ペンダント求核基」という専門用語は、ＰＯＸポリマー鎖の末端に位置する求核基に対して、ＰＯＸポリマーの側鎖、例えばアルキル又はアリール側鎖に含まれる求核基を指す。ＰＯＸポリマーの特定の側鎖は、その特定の側鎖内の各求核基がペンダント求核基として数えられる場合、１個を超える求核基を適切に含有できることは理解されるべきである。
【００２８】
本明細書で使用されている「アミン基」という用語は、第一級又は第二級アミン基を指す。
【００２９】
本発明のＮＵ−ＰＯＸ又は架橋ポリマーを、一定数の特定の基又は１００モノマー当たりの結合の存在に基づいて特徴づける場合、ポリマーが少なくとも１００モノマーを含有することを必ずしも意味するわけではないことは理解されるべきである。例えば、８０モノマー及び８個のペンダント基を含むＮＵ−ＰＯＸは、１００モノマー当たり１０個のペンダント基を含有する。同様に、ＮＵ−ＰＯＸが８０モノマー含有し、このポリマーが、例えば１００モノマー当たり少なくともｘ個のペンダント基を含有することが明記される場合、この特定のポリマーが、平均で少なくとも０．８ｘ個のペンダント基を含有するなら、この基準を満たしている。
【００３０】
本発明のＮＵ−ＰＯＸは、ポリオキサゾリンポリマーを求核的に活性化したものであり、繰り返し単位が、以下の式（Ｉ）
（ＣＨＲ１）ｍＮＣＯＲ２
［式中、Ｒ２及び各Ｒ１は、独立して、Ｈ、場合により置換Ｃ１〜２２アルキル、場合により置換シクロアルキル、場合により置換アラルキル、場合により置換アリールから選択され；ｍは、２又は３である］
によって表される。本発明は、式（Ｉ）で表される、２つ以上の異なる繰り返し単位を含むポリオキサゾリンコポリマーを使用することも包含する。
【００３１】
式（Ｉ）のＲ１及びＲ２は、Ｈ及びＣ１〜２２アルキル、より一層好ましくはＨ及びＣ１〜４アルキルから選択されることが好ましい。Ｒ１は、最も好ましくはＨである。式（Ｉ）の整数ｍは、好ましくは２に等しい。
【００３２】
好ましい実施形態において、本発明に従って用いられるポリオキサゾリンは、２−アルキル−２−オキサゾリンのポリマー、より好ましくはホモポリマーであり、前記２−アルキル−２−オキサゾリンが、２−メチル−２−オキサゾリン、２−エチル−２−オキサゾリン、２−プロピル−２−オキサゾリン及びそれらの組み合わせから選択される。より一層好ましくは、２−アルキル−オキサゾリン（２−ａｌｋｙｌ−ｏｘａｚｏｌｉｎｅ）は、２−メチル−２−オキサゾリン、２−エチル−２−オキサゾリン及びそれらの組み合わせから選択される。最も好ましくは、２−アルキル−２−オキサゾリンは、２−メチル−オキサゾリンである。
【００３３】
求電子性架橋剤がイソシアネートである場合に、本発明に従って用いられるＮＵ−ＰＯＸは、少なくとも４０、より一層好ましくは少なくとも５０、及び最も好ましくは少なくとも１００単位（モノマー）のオキサゾリンを好都合に含有する。
【００３４】
特に好ましい実施形態によれば、本発明の架橋ポリマーに用いられる２つの反応物、すなわち、ＮＵ−ＰＯＸ及び／又は求電子性架橋剤の少なくとも１つは、少なくとも２０、より好ましくは少なくとも３０、より一層好ましくは最低５０、及び最も好ましくは少なくとも１００の重合度を有するポリマーである。
【００３５】
高い重合度を有するＮＵ−ＰＯＸを使用することにより、組織シーラント、インプラントなどの用途に理想的に適した弾性のある架橋ポリマーの調製が可能となる。したがって、好ましい実施形態において、ＮＵ−ＰＯＸは、少なくとも２０、より一層好ましくは少なくとも３０、さらにより好ましくは少なくとも５０、及び最も好ましくは少なくとも１００単位（モノマー）のオキサゾリンを含有する。
【００３６】
本発明に従って用いられるＮＵ−ＰＯＸは、ペンダント求核基、末端求核基、又はそれらの組み合わせを含有する。先述のいずれかに従った生体適合性架橋ポリマーの一部であるＮＵ−ＰＯＸにおいて、ｍ個の求核基の少なくとも１個が、ペンダント求核基であることが好ましい。典型的には、前記ＮＵ−ＰＯＸは、架橋ポリマーに、１００モノマー当たり３〜５０個のペンダント求核基、より好ましくは、架橋ポリマーに、１００モノマー当たり５〜２０個のペンダント求電子基を含有する。
【００３７】
本発明の特に好ましい実施形態によれば、架橋ポリマーは、組織接着性を有する。本明細書で使用される「組織接着剤」という専門用語は、架橋ポリマーに関して、架橋ポリマーに含有される未反応求電子基が、組織に自然に存在する求核（例えばアミン又はチオール）基と反応して共有結合を形成することが可能であることを必ず意味する。ポリマーに含有される反応及び未反応求電子基の総数は、ポリマーに含有される反応及び未反応求核基の総数を、少なくとも３％、好ましくは少なくとも５％、より一層好ましくは少なくとも１０％及び最も好ましくは少なくとも２０％超えることが好ましい。
【００３８】
架橋ポリマーの組織接着性は、架橋ポリマーにおける未反応求電子基の数を操作することにより、きわめて効率的に調節できる。一般的にいえば、未反応求電子基の数が大きいほど、接着が強くなる。好ましくは、架橋ポリマーは、ＮＵ−ＰＯＸ１００モノマー当たり、少なくとも２個、より好ましくは少なくとも５個、及び最も好ましくは少なくとも１０個の、ＮＵ−ＰＯＸの求核基と反応しない求電子性架橋剤の求電子基を含むことが好ましい。
【００３９】
ＮＵ−ＰＯＸのｍ個の求核基は、アミン基、チオール基、ホスフィン基及びそれらの組み合わせから選択されることが好ましい。より一層好ましくは、求核基は、アミン基、チオール基及びそれらの組み合わせから選択される。
【００４０】
好ましい実施形態によれば、ＮＵ−ＰＯＸに存在する求核基は、アミン基である。アミン官能基化ＮＵ−ＰＯＸは、適切には、システアミン修飾２−アルケニル−２−オキサゾリン又は２−ｔ−ＢＯＣ−アミノアルキル−２−オキサゾリン、及び２−アルキル−２−オキサゾリンのホモポリマー又はコポリマーに由来する。コポリマーに含まれるシステアミン修飾２−アルケニル−２−オキサゾリンは、好ましくは、２−ブテニル−２−オキサゾリン、及びその組み合わせから選択される。２−アルキル−２−オキサゾリンは、好ましくは、２−エチル−２−オキサゾリン、２−メチル−２−オキサゾリン、２−プロピル−２−オキサゾリン及びそれらの組み合わせから選択される。アミン部分も、ＰＯＸの部分的な加水分解によって導入でき、続いて、ポリマー鎖が生じた第二級アミン基がアルキル化又はアミド化される。
【００４１】
別の好ましい実施形態によれば、ＮＵ−ＰＯＸに存在するｍ個の求核基は、チオール（スルホヒドリル）基である。より一層好ましくは、ＮＵ−ＰＯＸは、チオール末端基を有するポリ（２−アルキル−２−オキサゾリン）であり、チオール末端基は、キサントゲン酸カリウムを有する多官能開始剤を用いて重合をエンドキャップし、続いて、アミノ分解して遊離チオール基を得ることにより導入される。或いは、チオール部分は、モノマーを含有する保護チオールの共重合、又は酸、アミン若しくはアルケニル側鎖の修飾、又は、部分的な加水分解から生じる第二級アミンの主鎖の修飾によりＮＵ−ＰＯＸの側鎖に導入される。２−アルキル−２−オキサゾリンは、好ましくは、２−エチル−２−オキサゾリン、２−メチル−２−オキサゾリン、２−プロピル−２−オキサゾリン及びそれらの組み合わせから選択される。
【００４２】
好ましい実施形態によれば、ＮＵ−ＰＯＸは、１：５０〜１：１の範囲内にあるモル比で、より好ましくは３：１００〜１：２の範囲内にあるモル比で、求核基を含有するオキサゾリン単位、及び求核基を含有しないオキサゾリン単位を含有する。
【００４３】
本発明に従って用いられるＮＵ−ＰＯＸは、典型的には、１，０００〜１００，０００ｇ／ｍｏｌ、より好ましくは５，０００〜５０，０００、及び最も好ましくは１０，０００〜３０，０００ｇ／ｍｏｌの範囲の分子量を有する。
【００４４】
本発明に従って用いられるＮＵ−ＰＯＸは、ホモポリマーでもコポリマーでもよい。最も好ましくは、ＮＵ−ＰＯＸはコポリマーである。
【００４５】
本発明に従って用いられる求電子的に活性化した架橋剤は、≧２個の求電子基を有する又は、それで置換されている主鎖を含有する。主鎖は、好ましくは、ポリマー、二塩基酸、三塩基酸又はより高い酸からなる群から選択される。求電子的に活性化した架橋剤の主鎖は、ポリオキサゾリンではない。
【００４６】
好ましい実施形態において、求電子的に活性化した架橋剤の主鎖は、ポリエステル、ポリオレフィン、ポリスチレン、ポリカーボネート、ポリアミド、ポリアセテート、ポリ（アルキレンオキサレート）、ポリ無水物、ポリイミノカーボネート、ポリオキサエステル、ポリオルトエステル、ポリホスファゼン、ポリホスホエステル、ポリエーテル、ポリエーテルエステル、ポリアクリルアミド、ポリイミド、ポリフェニレン、ポリシラン、ポリシロキサン、ポリベンゾイミダゾール、ポリベンゾチアゾール、ポリスルフィド、ポリエステルアミド、ポリエーテルアミド、ポリアミン、ポリエーテルアミン、ポリアリーレンビニレン、ポリエーテルケトン、ポリウレタン、ポリスルホン、ポリアクリレート、ポリメタクリレート、多糖、グリコサミノグリカン、ポリペプチド、及びそれらの組み合わせからなるポリマーの群から選択される。典型的には、これらのポリマーは、１，０００〜１００，０００の範囲の分子量を有する。
【００４７】
より一層好ましくは、求電子的に活性化した架橋剤の主鎖は、寒天、デンプン、プルラン、イヌリン、レバン、絹、フィブロネクチン、ペクチン、セルロース（例えばカルボキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、酸化セルロース又はメチルセルロース）、コラーゲン、エラスチン、ゼラチン、アルブミン、フィブリン、フィブリノーゲン、デキストラン、メチルセルロース、ヒアルロン酸、コンドロイチン硫酸、ケラト硫酸、ヘパラン硫酸、デルマタン硫酸、アルギン酸、キトサン、キチン、ヘパリン、ポリビニルアルコール、ポリエチレングリコール及びそれらの組み合わせからなるポリマーの群から選択される。求電子的に活性化した架橋剤の主鎖は、適切には、デキストラン（例えばカルボキシメチルデキストラン）、デンプン、寒天、セルロースプルラン（ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ  ｐｕｌｌｕｌａｎ）、イヌリン、レバン、及びヒアルロン酸からなる多糖の群から選択される。特に好都合な実施形態に従って、後者の多糖が、（部分的に）酸化した形態で用いられる。
【００４８】
最も好ましくは、求電子性架橋剤は、デキストラン、コラーゲン、ゼラチン（ゲルフォーム）、アルギン酸及びポリエチレングリコールからなるポリマーの群から選択される。
【００４９】
別の好ましい実施形態において、生体適合性架橋ポリマーに用いられる求電子性架橋剤は、８０〜１０００ｇ／ｍｏｌ、好ましくは１００〜５００ｇ／ｍｏｌの分子量を有する低分子量の求電子性架橋剤である。適切に用いられ得る低分子架橋剤の例は、多価アルデヒド（ｍｕｌｔｉａｌｄｅｈｙｄｅ）、多価マレイミド（ｍｕｌｔｉｍａｌｅｉｍｉｄｅ）、多価活性化エステル及びそれらの組み合わせ（ここでは、「多価」という用語は、少なくとも２価を意味する）を含む。好ましい実施形態によれば、低分子架橋剤は、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）又はスルホ−ＮＨＳで修飾された二塩基酸、三塩基酸及びより高い酸からなる群から選択される酸からなる主鎖を有する。より一層好ましくは、酸系架橋剤は、二塩基酸、三塩基酸及びそれらの組み合わせから選択される。用いられ得る二酸塩基及び三酸塩基の非限定的な例は、ジグリコール酸、シュウ酸、マロン酸、リンゴ酸、酒石酸、マレイン酸、コハク酸、グルタル酸、アジピン酸、ピメリン酸、スベリン酸、アゼライン酸、セバシン酸、フタル酸、テトラヒドロフタル酸、ヘキサヒドロフタル酸、トリメシン酸、メリト酸、イソフタル酸、テレフタル酸、クエン酸、イソクエン酸、アコニット酸、トリカルバリル酸及びトリメシン酸である。最も好ましくは、求電子性架橋剤の主鎖を形成する酸は、三塩基酸、最も好ましくはクエン酸から選択される。
【００５０】
酸系架橋剤は、アミノカルボン酸の群から選択されることが好ましい。用いられ得るアミノカルボン酸の非限定的な例は：Ｆｕｒａ−２、イミノ二酢酸、ニトリロ三酢酸、エチレンジアミン四酢酸、ジエチレントリアミン五酢酸、エチレングリコール四酢酸、（１，２−ビス（ｏ−アミノフェノキシ）エタン−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−四酢酸）、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸及びオリゴペプチドをベースとしたグルタミン酸及び／又はアスパラギン酸である。
【００５１】
特に好ましい実施形態によれば、求電子性架橋剤は、１０００ｇ／ｍｏｌ、より好ましくは２０００〜１００００ｇ／ｍｏｌ、及び最も好ましくは５０００〜５００００ｇ／ｍｏｌを超える分子量を有するポリマーである。ポリマー求電子性架橋剤を使用することにより、過剰な求電子基が架橋点からさらに離れ、それによって、求電子基の運動性及び組織に連結する能力が高まるという利点が得られる。
【００５２】
架橋剤に含有される求電子基は、好ましくは、周囲条件及び／又は生理学的条件で、ＮＵ−ＰＯＸに含有される求核基に対して高度に反応性であることが好ましい。
【００５３】
架橋剤に存在する求電子基は、好ましくは、カルボン酸エステル、スルホン酸エステル、ホスホン酸エステル、チオエステル、ペンタフルオロフェニルエステル、ｐ−ニトロフェニルエステル、ｐ−ニトロチオフェニルエステル、酸ハロゲン化物基、無水物、ケトン、アルデヒド、イソシアナト、チオイソシアナト（イソチオシアナト）、エポキシド、活性化ヒドロキシル基、グリシジルエーテル、カルボキシル、スクシンイミジルエステル、炭酸スクシンイミジル、カルバミン酸スクシンイミジル、スルホスクシンイミジルエステル、炭酸スルホスクシンイミジル、マレイミド、イミドエステル、オルトピリジルジスルフィド、ジヒドロキシ−フェニル誘導体、ビニル、アクリル酸エステル、アクリルアミド、ヨードアセトアミド、ハロアセタール、オルトピリジルジスルフィド、ビニルスルホン、ジヒドロキシフェニル誘導体、ヨードアセトアミド、及びそれらの組み合わせから選択される。
【００５４】
求電子基として使用できるスルホン酸エステルの例は、メシレート、トシレート、ノシレート（ｎｏｓｙｌａｔｅ）、トリフレート及びそれらの組み合わせを含む。活性化ヒドロキシル基の例は、ｐ−ニトロフェニルクロロカーボネート、カルボニルジイミダゾール（例えば１，１−カルボニルジイミダゾール）及び塩化スルホニルから選択される活性化剤を用いて活性化したヒドロキシル基を含む。
【００５５】
用いられるスクシンイミジル誘導体の例は、グルタル酸スクシンイミジル、プロピオン酸スクシンイミジル、スクシンイミジルスクシンアミド、炭酸スクシンイミジル、スベリン酸ジサクシンイミジル、スベリン酸ビス（スルホスクシンイミジル）、ジチオビス（プロピオン酸スクシンイミジル）、ビス（２−スクシンイミドオキシカルボニルオキシ）エチルスルホン及び３，３’−ジチオビス（プロピオン酸スルホスクシンイミジル）を含む。使用できるスルホスクシンイミジル誘導体の例は、スルホスクシンイミジル（４−ヨードアセチル）アミノベンゾエート、スベリン酸ビス（スルホスクシンイミジル）、スルホスクシンイミジル−４−（Ｎ−マレイミドメチル）−シクロヘキサン−１−カルボキシレート、ジチオビス−プロピオン酸スルホスクシンイミジル、ジスルホ−酒石酸スクシンイミジル；ビス［２−（スルホ−スクシンイミジルオキシカルボニルオキシエチルスルホン）］、エチレングリコールビス（スルホスクシンイミクリルスクシネート）（ｅｔｈｙｌｅｎｅ  ｇｌｙｃｏｌ  ｂｉｓ（ｓｕｌｆｏｓｕｃｃｉｎｉｍｉｃｌｙｌｓｕｃｃｉｎａｔｅ））、ジチオビス−（プロピオン酸スクシンイミジル）を含む。ジヒドロキシフェニル誘導体の例は、ジヒドロキシフェニルアラニン、３，４−ジヒドロキシフェニルアラニン（ＤＯＰＡ）、ドーパミン、３，４−ジヒドロキシヒドロ桂皮酸（ｈｙｄｒｏｃｃｉｎａｍｉｃ  ａｃｉｄ）（ＤＯＨＡ）、ノルエピネフリン、エピネフリン及びカテコールを含む。
【００５６】
好ましい一実施形態によれば、ＮＵ−ＰＯＸのｍ≧２個の求核基は、アミン基、好ましくは第一級アミン基であり、求電子的に活性化した架橋剤に含まれるｎ≧２個の求電子基は、カルボン酸エステル、スルホン酸エステル、ホスホン酸エステル、チオエステル、ペンタフルオロフェニルエステル、ｐ−ニトロフェニルエステル、ｐ−ニトロチオフェニルエステル、酸ハロゲン化物基、無水物、ケトン、アルデヒド、イソシアナト、チオイソシアナト、エポキシド、活性化ヒドロキシル基、グリシジルエーテル、カルボキシル、スクシンイミジルエステル、炭酸スクシンイミジル、カルバミン酸スクシンイミジル、スルホスクシンイミジルエステル、炭酸スルホスクシンイミジル、イミドエステル、ジヒドロキシ−フェニル誘導体、及びそれらの組み合わせから選択される。より一層好ましくは、架橋剤に含有される求電子基は、アルデヒド、スクシンイミジルエステル、炭酸スクシンイミジル、カルバミン酸スクシンイミジル、イミドエステル、ジヒドロキシフェニル誘導体及びそれらの組み合わせから選択される。最も好ましくは、求電子基は、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル、アルデヒド、ジヒドロキシフェニル誘導体及びそれらの組み合わせの群から選択される。
【００５７】
別の好ましい実施形態によれば、ＮＵ−ＰＯＸのｍ≧２個の求核基は、チオール基、並びに、ハロアセタール、オルトピリジルジスルフィド、マレイミド、ビニルスルホン、ジヒドロキシフェニル誘導体、ビニル、アクリル酸エステル、アクリルアミド、ヨードアセトアミド、スクシンイミジルエステル、炭酸スクシンイミジル、カルバミン酸スクシンイミジル、スルホスクシンイミジルエステル、炭酸スルホスクシンイミジル及びそれらの組み合わせから選択され、求電子的に活性化した架橋剤に含有されるｎ≧２個の求電子基である。より好ましくは、求電子基は、スクシンイミジルエステル、ハロアセタール、マレイミド、又はジヒドロキシフェニル誘導体及びそれらの組み合わせから選択される。最も好ましくは、ｎ≧２個の求電子基は、マレイミド又はジヒドロキシフェニル誘導体及びそれらの組み合わせから選択される。
【００５８】
特に好ましい実施形態によれば、架橋ポリマーのＮＵ−ＰＯＸ成分に含まれるｍ≧２個の求核基は、周囲及び／又は生理学的条件下で、架橋剤のｎ≧２個の求電子基と反応させて、共有結合を形成することが可能である。
【００５９】
本発明の架橋ポリマーにおける未反応求電子基は、組織に自然に存在する求核基（例えばアミノ基及びチオール基）と反応できるため、ポリマーに組織接着性を与える。したがって、未反応求電子基を含有する架橋ポリマーは、組織において利用され、未反応求電子基は、組織の求核基と反応でき、それにより、ポリマー及び組織の間に強力な接着を発生させる。周囲温度で架橋を形成する能力は、例えば手術中に原位置で架橋を発生させるべき場合に、特に好都合である。典型的には、３５℃及び１ａｔｍで、ＮＵ−ＰＯＸ及び架橋剤の間の架橋反応が、３０分以内に、好ましくは１０分以内、より好ましくは５分以内に、最も好ましくは２分以内に完了する。
【００６０】
（乾燥）架橋ポリマーが、水と接触すると膨張する能力は、全体の疎水性は別として、架橋の程度に大きく左右される。架橋が多いほど、膨張指数は低くなる。ポリマーは、ＮＵ−ＰＯＸの求核基及び架橋剤の求電子基の間の反応により形成される共有結合を、１００モノマー当たり、５０個以下、より好ましくは２０個以下、及び最も好ましくは１０個以下含有することが好ましい。典型的には、この共有結合の数は、１００モノマー当たり少なくとも２個である。
【００６１】
ペンダント求核基を含むＮＵ−ＰＯＸは、適切には、様々な求電子性化学種、例えばアルキルハロゲン化物、スルホン酸エステル、強酸により開始される２−オキサゾリンモノマーのカチオン性重合により調製できる。側鎖に活性化基を含有するＰＯＸ−誘導体は、必要とされる（保護される）基を含有する２−オキサゾリンモノマーから直接的に、又はポリマー前駆体のポリマー類似物の反応により調製できる。ＰＯＸ末端における官能基の合成は、例えば、Ａｎｎａ  Ｍｅｒｏら（Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ａｎｄ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｐｏｌｙ（２−ｅｔｈｙｌ  ２−ｏｘａｚｏｌｉｎｅ）−ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ  ｗｉｔｈ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ａｎｄ  ｄｒｕｇｓ：Ｓｕｉｔａｂｌｅ  ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅｓ  ｔｏ  ＰＥＧ−ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ？、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  １２５（２００８年）８７〜９５頁）により記載されている。
【００６２】
アルキル側鎖にエチル及びアミノ（−ＮＨ２）基を含有するＮＵ−ＰＯＸは、ポリ［２−（エチル／３−ブテニル）］−２−オキサゾリンコポリマーとシステアミンの反応により、保護アミンモノマーと２−エチル−２−オキサゾリンの共重合により、又はＰＯＸの部分加水分解、続いて事後修飾により合成できる。
【００６３】
アルキル側鎖におけるエチル及びチオール（−ＳＨ）基を含有するＮＵ−ＰＯＸは、ポリ［２−（エチル／３−ブテニル）］−２−オキサゾリンコポリマーと過剰なエタンジスルフィドの反応により、２−エチル−２−オキサゾリンと保護チオール基を持つモノマーの共重合により、又はＰＯＸの部分加水分解、続いて事後修飾により、類似した方法で調製できる。
【００６４】
本発明の架橋ポリマーが、ＮＨＳ−活性化架橋剤の架橋によって得られる場合、生分解性の範囲は、基本的に非分解性から易分解性にわたる。生分解性は、ＮＨＳ−エステル及びアミンの反応から生じる第二級アミドより、容易に加水分解されるエステル結合の組み込みによって改善できる。エステル基は、水との反応により、水性環境で直接加水分解されるが、第二級アミドは、主に酵素分解により加水分解され、中性ｐＨで架橋網状組織において、きわめて遅くなるであろう。
【００６５】
カチオン性重合により、コポリマーと所定数の活性化基の合成が可能となる。さらに、カチオン性２−アルキル−２−オキサゾリン重合を使用して多数の活性基を組み込むことができるが、その理由は、これらの活性基は、ＰＯＸの非常に多くのアルキル側鎖と連結するためである。これにより、架橋ポリマーが高い密度の未反応求電子基を有する場合、優れた粘着性、並びに傑出した接着性を有する高度に架橋したポリマーを生成することが可能となる。
【００６６】
さらに、カチオン性重合により、様々な官能基を側鎖及び／又は末端に組み込むことができ、それによりＰＯＸポリマー系の多用途性が向上する。
【００６７】
コポリマー当たりで、所定数の活性化基を含有するコポリマーの合成は以下のように実行できる：既に記載されているように、コポリマーは、ＥＴＯＸ及びＢＵＴＯＸのカチオン性重合により合成されて、ポリ［２−（エチル／３−ブテニル）−２−オキサゾリンコポリマーが得られる。活性化側鎖、例えばシステアミンを用いて官能基化すると、第一級アミン基が導入される。初期ＥＴＯＸ／ＢＵＴＯＸのモル比が９０／１０の場合、ポリ［２−（エチル／３−ブテニル）］−２−オキサゾリンコポリマー当たりの反応基の割合は、１０％になるであろう。初期で９０／１０のＥＴＯＸ／ＢＵＴＯＸ混合物においてＢＵＴＯＸが増加すると、最終的にはアミノ基の割合がより高く、すなわち１０％以上になるであろう。組み込まれるアミノ基の正確な数は、ポリマーの長さを決定する開始剤の、モノマーに対する比により調節できる。例えば、９０／１０のＥＴＯＸ／ＢＵＴＯＸ比及び１００：１のモノマー対開始剤の比を使用すると、アミノ基１０個を含む１００繰り返し単位を有するポリマーが得られる。モノマー対開始剤の比が２００：１に変化する場合、生じたコポリマーは、同一のＥＴＯＸ／ＢＵＴＯＸ比を有するアミノ基２０個を有するであろう。
【００６８】
本発明の架橋ポリマーは、生分解性又は非生分解性になり得る。ポリマーは生分解性であることが好ましい。
【００６９】
本発明の医療製品は、本明細書で既に定義されている架橋ポリマーを、乾燥物質の重量に対して、好ましくは少なくとも２５％、及び最も好ましくは５０〜１００％を含む。そのような医療製品の好ましい例は、インプラント、組織シーラント、接着性組織テープ、接着性組織膜（シート）、縫合糸材料、ポリマーコーティングしたステント及び止血（多孔）材料を含む。
【００７０】
医療製品は、架橋ポリマー以外に医薬として許容できる他の成分を適切に（ｓｕｉｔａｂｌｅ）含有する。例えば、架橋ポリマーの一部ではないポリマーを組み込むことは好都合になり得る。そのようなポリマーの例は、アフィパシック（ａｐｈｉｐａｔｈｉｃ）ポリマー（例えばコラーゲン、ゼラチン及びフィブリン）、中性バイオポリマー（例えばデキストラン及びアガロース）又はイオン性ポリマーを含む。イオン性ポリマーは、カチオン性（例えばキチン又はキトサン）であってもアニオン性であってもよい。適切なアニオン性ポリマーは、例えば、カルボキシ、スルホ、硫酸塩、ホスホノ又はホスファト基若しくはそれらの混合物、又はそれらの塩、例えば生物医学的な許容できる塩を含む合成ポリマー、バイオポリマー又は修飾バイオポリマーである。合成アニオン性ポリマーの例は：直鎖状ポリアクリル酸（ＰＡＡ）、分岐ポリアクリル酸、例えばＧｏｏｒｉｃｈ  Ｃｏｒｐ．のカーボフィル（Ｃａｒｂｏｐｈｉｌ）（登録商標）又はカーボポル（Ｃａｒｂｏｐｏｌ）（登録商標）のようなタイプ、ポリメタクリル酸（ＰＭＡ）、ポリアクリル酸又はポリメタクリル酸コポリマー、例えばアクリル又はメタクリル酸のコポリマー、及びさらにビニルモノマー、例えばアクリルアミド、Ｎ．Ｎ−ジメチルアクリルアミド又はＮ−ビニルピロリドン、マレイン又はフマル酸コポリマー、ポリ（スチレンスルホン酸）（ＰＳＳ）、ポリアミド酸、例えばジアミンのカルボキシ末端ポリマー、及びジ−又はポリカルボン酸、例えばカルボキシ末端スターバースト（Ｓｔａｒｂｕｒｓｔ）（商標）パマム（ＰＡＭＡＭ）デンドリマー（Ａｌｄｒｉｃｈ）、ポリ（２−アクリルアミド−２−メチルプロパンスルホン酸）（ポリ−（ＡＭＰＳ））、又はポリリン酸アルキレン、ポリホスホン酸アルキレン、ポリリン酸炭水化物又はポリホスホン酸炭水化物、例えばテイコ酸である。アニオン性バイオポリマー又は修飾バイオポリマーの例は：ヒアルロン酸（ＨＡ）、修飾ＨＡ（エステル化ＨＡ又はアミン修飾ＨＡ）、グリコサミノグリカン、例えばヘパリン又はコンドロイチン硫酸、フコイダン、ポリアスパラギン酸、ポリグルタミン酸、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルデキストラン、アルギン酸エステル、ペクチン、ゲラン、カルボキシアルキルキチン、カルボキシメチルキトサン、硫酸化多糖である。好ましいアニオン性バイオポリマーは、アルギン酸、ヒアルロン酸である。
【００７１】
架橋ポリマーは、溶液流延法、ホットメルト押出法又は電界紡糸法により形成できる。例えば、国際公開第２００７／０９９３７０号パンフレットに記載されているように、２枚の加熱平板の間で圧縮することによる、架橋ポリマーの形成も実行可能である。ＮＵ−ＰＯＸの求核基と架橋剤の求電子基との間の架橋により粘着性が得られ、過剰な求電子基により架橋ポリマーが組織への結び付きを形成できるようになる。したがって、本発明により、粘着性と接着性を組み合わせた医療製品を調製できるようなる。
【００７２】
ＰＯＸ膜のきわめて重要な性質は、完全に乾燥させて水を除去する際に、ＰＯＸ膜が加水分解から内部を保護することである。したがって、架橋ポリマーにおける過剰な（未反応）求電子基は、保存時に活性を保つであろう。未反応求電子基を含有する医療製品が組織に利用される場合、これらの求電子基及び求核性反応物、とりわけ組織に存在するアミノ又はチオール基の間に、求電子性−求核性反応が発生し、それにより、共有結合を経て架橋した外部網状組織（接着）を形成するであろう。したがって、医療製品は、架橋ポリマーの重量に対して、１０％未満、より一層好ましくは５％未満、及び最も好ましくは１％未満の水を含有する、好都合に脱水された生成物である。
【００７３】
医療製品は、好ましくは、限られた量までの有機溶媒を含有する。生成物は、有機溶媒を、架橋ポリマーの重量に対して、５％未満、より好ましくは０．５％未満含有することが好ましい。
【００７４】
例えば、組織密閉テープ又は膜に関して、ＮＵ−ＰＯＸ及び架橋剤は、溶液流延法又はホットメルト押出法に必要なあらゆる比で混合できる。この手法により、接着性組織テープ又は膜に必要な性質を、きわめて精密に微調整できるようになる。ＮＵ−ＰＯＸにおける求核基の数が少なく、架橋剤により得られる求電子基の数が相対的に高い場合、生じる架橋ポリマーの粘着性は低くなり、組織への接着性は高くなるであろう。当然、高い密度の求核基を有するＮＵ−ＰＯＸと過量の求電子性架橋剤を組み合わせることにより、粘着性及び接着性が高い接着性組織テープ又は膜の生成も実行可能である。
【００７５】
本発明の医療製品の特に好都合な実施形態は、接着性組織テープ又は接着性組織膜である。本発明により、優れた組織接着性を有するテープ又は膜の調製が可能となるが、その理由は、組織に自然に存在する求核基と反応することが可能な未反応求電子基が存在するためである。さらに、本発明の架橋ポリマーは、非晶質性及び調整可能なガラス転移温度により、粘着性、柔軟性及び弾性のあるテープ及び膜、並びに特定の用途に向けた頑丈で硬いテーラーメイド材料の調製が可能となる。
【００７６】
本発明によるテープ又は膜は、非透過性でも透過性でもよい。非透過テープ又は膜は、適切には、組織を密閉して、例えば、感染症又は脱水を防ぐために使用され得る。透過できるテープ又は膜は、手術の又は外傷性創傷による出血を止めるために好都合に用いることができる。本明細書で既に説明されているように、医療製品に含有される架橋ポリマーが非晶質状態である場合にきわめて好都合である。「非晶質」という用語は、固体であり、分子の位置の長距離秩序がない材料を指す。この秩序がないことにより、非晶質固体と結晶性固体が区別される。
【００７７】
本発明により、架橋ポリマーのＮＵ−ＰＯＸ成分として、優れた非晶質性を有する非晶質テープ又は非晶質膜の調製が可能となる。これらの非晶質特性は、架橋ポリマーにおいて、特に、求電子性架橋剤が、本明細書で既に定義されている低分子量架橋剤である場合に保つことができる。
【００７８】
医療製品における架橋ポリマーは、少なくとも０℃、及び最も好ましくは少なくとも２０℃のガラス転移温度を有することがさらに好ましい。典型的には、ポリマーのガラス転移温度は１２０℃を超えない。
【００７９】
本発明の接着性組織テープ又は接着性組織膜には、かなりの量の水を吸収して、粘着性のあるヒドロゲルを形成できるという利点がある。水の吸収は、生成物の著しい膨張を引き起こす恐れがある。しかし、水分と接触させる際に著しく膨張しないような方法で生成物を設計することも可能である。
【００８０】
好都合な実施形態によれば、本明細書で既に記載されている接着性組織テープ又は接着性組織膜は、水分と接触させる際に、著しい膨張を呈さない。典型的には、これらの医療製品は、０％〜１００％以下、好ましくは０％〜３０％以下、及び最も好ましくは０％〜１０％以下の膨張指数を有する。低い膨張指数を有する医療製品は、硬膜欠損の修復及び脊髄の修復の際に、適切に利用することができる。
【００８１】
架橋が多いほど、網状組織は緊密になり、膨張は低下するであろう。これは、ある用途、例えば、医療製品は、ゲル膨張が潜在的に副作用を引き起こし得る緊密な配置で利用されるインプラント、縫合糸材料又は組織シーラントである場合に好都合となる可能性がある。その場合、膨張指数は、好ましくは５０％を超えず、最も好ましくは１０％を超えない。
【００８２】
本発明により、例えば、支持層を必要とすることなく、優れた性質を有する接着性組織テープ又は組織膜の調製が可能となる。したがって、接着性組織テープは、好ましくは単層のテープである。同様に、接着性組織膜は、好ましくは、単層の膜である。
【００８３】
本発明の別の実施形態によれば、医療製品は多孔止血生成物である。そのような多孔止血生成物は、例えば、ＮＵ−ＰＯＸの粘性溶液を泡に変換して、続いて、ＮＵ−ＰＯＸと求電子性架橋剤を架橋させることにより泡構造を固定させて調製できる。次に、溶媒を除去し、多孔止血生成物を得ることができる。当然、発泡剤及び／又は賦形剤を、このプロセスにおいて用いてもよい。そのように得られる止血生成物は、本明細書に既に記載されている未反応求電子基が存在するため、組織接着性を有することは好都合である。
【００８４】
止血生成物は、適切には、担体、好ましくは水溶性担体を含有し得る。適切に用いられ得る担体の例は、単糖；ジ−及びオリゴ糖、例えばラクトース、マンニトール、トレハロース、エリトリトール、キシリトール、ソルビトール、マルチトール、イソマルト、マルトデキストリン、セロビオース、グルコース、フルクトース、マルチュロース、ラクチュロース、マルトース、ゲントビオース、イソマルトース、ラクチトール、パラチニトール、ズルシトール、リビトール、スクロース、ラフィノース、ゲンチアノース、プランテオース、ベルバスコース、スタキオース、メレジトース、イノシトール；並びに多糖、例えばデキストラン、デンプン（アミロース、アミロペクチン）、グリコーゲン、セルロース、キチン、アルギン酸エステル、カロース、クリソラミナリン、キシラン、アラビノキシラン、マンナン、フコイダン並びにガラクトマンナン；及びこれらの炭水化物の組み合わせを含む。用いられる担体は、少なくとも０℃、より好ましくは少なくとも２５℃のガラス転移温度を有することが好ましい。
【００８５】
典型的には、止血生成物は、２５〜７５ｗｔ．％のＮＵ−ＰＯＸ、２５〜７５ｗｔ．％の求電子的に活性化した架橋剤、及び０〜５０ｗｔ．％の担体を含有する。
【００８６】
別の好都合な実施形態によれば、本発明の医療製品は、インプラントである。特に好ましい実施形態によれば、インプラントに含有される架橋ポリマーは、組織再生を支援するマトリックスを備える。マトリックスは、生分解性の三次元的な生体吸収性多孔構成であり、骨材料への付着性、及び細胞へ付着させ続いて組織形成させる適切な機械的性質を有することが好ましい。骨を再構成するためには、構成も好ましくは耐荷重性であり、インプラントにおけるあらゆる流体成分、又は原位置で形成されるインプラントは、できる限り少なく維持されるべきであることを意味する。この点では、架橋剤及びＮＵ−ＰＯＸを押出可能にするために、トリアセチンのような可塑剤又は水をごく限られた量しか必要としないことは好都合である。
【００８７】
好都合な実施形態によれば、本発明のインプラントに含まれるポリマー網状組織は、骨移植材料のような骨伝導賦形剤を含有し、自家骨、自家骨微粒子、同種異系の骨移植材料、ヒトの死体の骨、異種移植片の骨移植材料、動物の骨、増殖因子、又は合成材料、例えばヒドロキシアパタイト、リン酸三カルシウム及び生体活性ガラスを含む。
【００８８】
本発明の医療製品は、適切には、繊維又は繊維状フリース（ｆｉｂｒｏｕｓ  ｆｌｅｅｃｅ）の形態で生成され得る。これは、例えば、電界紡糸法を用いて、又は流体を含有するＮＵ−ＰＯＸを、高濃度の求電子性架橋剤を含有する溶液に注入することにより達成できる。繊維状フリースは、ポリマー求電子性架橋剤、例えばデキストランアルデヒドを用いて、溶液中に架橋ポリマーを生成し、続いて溶媒（例えば水）を蒸発させて除去することにより生成できる。繊維状フリースは、アニオン性ポリマー架橋剤、例えばアルギン酸エステルを活用しても生成できる。繊維状フリースの生成は、例えば、ＮＵ−ＰＯＸ及びアルギン酸プロピレングリコールの溶液を低ｐＨで調製し、続いて、ｐＨを上昇させ、それにより架橋反応を開始することにより行われ得る。
【００８９】
本発明のさらなる態様は、ＮＵ−ＰＯＸと求電子的に活性化したポリオキサゾリン以外の求電子性架橋剤を反応させることにより得られる、生体適合性共有結合架橋ポリマーであって、前記ＮＵ−ＰＯＸがｍ個の求核基を含み；前記求電子性架橋剤がｎ個の求電子基を含み、ｍ個の求核基がｎ個の求電子基と反応して共有結合を形成することが可能であり；ｍ≧２、ｎ≧２及びｍ＋ｎ≧５であり；求電子性架橋剤がイソシアネートである場合に、ＮＵ−ＰＯＸが少なくとも３０単位のオキサゾリンを含み；ポリマーに含有される反応及び未反応求電子基の総数が、ポリマーに含有される反応及び未反応求核基の総数を、少なくとも３％、好ましくは少なくとも５％超える、生体適合性共有結合架橋ポリマーに関する。
【００９０】
共有結合架橋ポリマーは、好ましくは、本明細書で既に定義されている架橋ポリマーである。
【００９１】
本発明の別の態様は、生体適合性架橋ポリマーを生成するキットであって、前記キットが、本明細書で既に定義されているＮＵ−ＰＯＸ及び求電子的に活性化した架橋剤を含み、キットが、個別包装容量のＮＵ−ＰＯＸ及び求電子性架橋剤を含み、ＮＵ−ＰＯＸ及び求電子性架橋剤のそれぞれが、流体又は再構成可能な粉末の形態で存在する、キットに関する。
【００９２】
ＮＵ−ＰＯＸ及び求電子性架橋剤は、流体又は粉末の形態で独立して得ることができる。流体又は再構成可能な粉末の形態でＮＵ−ＰＯＸ及び架橋剤を得ることにより、ＮＵ−ＰＯＸ及び架橋剤に迅速な架橋反応を施すことができる。
【００９３】
ＮＵ−ＰＯＸは、流体の形態で得ることが好ましい。より具体的には、ＮＵ−ＰＯＸは、１〜９５ｗｔ．％、好ましくは１．５〜２０％、最も好ましくは２〜１０％の濃度で第１の溶媒に含有されることが好ましい。求電子性架橋剤も、好ましくは流体の形態で得られる。より一層好ましくは、求電子的に活性化した架橋剤は、１〜９５ｗｔ．％、好ましくは１．５〜３０％、最も好ましくは２〜１０％の濃度で第２の溶媒に含有される。
【００９４】
ＮＵ−ＰＯＸ及び架橋剤の両方が、流体の形態で得られる実施形態において、前記流体は、液体又は粘性流体になり得る。ＮＵ−ＰＯＸ及び架橋剤の両方を低粘度の液体の形態で用いることは、これらの成分の両方が、例えば噴霧により利用されることになる場合に好都合である。ＮＵ−ＰＯＸを、低粘度の液体の形態で得るために、ＮＵ−ＰＯＸは、かなりの希釈を必要とすることがある。希釈液体であるＮＵ−ＰＯＸ溶液が用いられる場合、十分な架橋を達成するために、濃縮した溶液で架橋剤を得ることが望ましい。これは、低分子の架橋剤を、高粘性を生じさせずに高濃度で溶解できる架橋剤として用いることにより達成できる。
【００９５】
ＮＵ−ＰＯＸ及び架橋剤が、低粘度の液体になるこれらの成分を必要としない方法で利用されることになる場合、例えば、それらがデュアルシリンジによって、場合により、静的ミキサーで利用される場合、ＮＵ−ＰＯＸ及び架橋剤の両方を粘性のある（ゲル状の）流体の形態で得ることができる。
【００９６】
別の特に好ましい実施形態によれば、第１の溶媒及び第２の溶媒は、水、ポリオール、アルコール（例えばエタノール又はイソプロパノール）及びそれらの組み合わせから選択される。ＮＵ−ＰＯＸを含有する容量体及び／又は架橋剤を含有する容量体は、ポリオール、水又は両方の混合物を好都合に含有する。さらに、後者の容量体は、適切に緩衝できる。本発明のキットに用いられる溶媒（複数可）及び緩衝系は、最適な、架橋速度を達成するために、適切に選択される。
【００９７】
本発明のキットに適切に用いることができるポリオールは、グリセロール、ジアセチン、トリアセチン、ソルビトール及びそれらの組み合わせを含む。
【００９８】
特に好ましい実施形態によれば、第１の溶媒及び第２の溶媒は、５〜５０ｗｔ．％の水、より好ましくは１０〜３０ｗｔ．％の水、及び最も好ましくは１５〜２０ｗｔ．％の水を含有する。
【００９９】
ＮＵ−ＰＯＸ及び求電子的に活性化した架橋剤の個別包装容量は、適切には、ｐＨ調整剤を含有できる。
【０１００】
ＮＵ−ＰＯＸを含有する個別包装容量は、好ましくは、ＮＵ−ＰＯＸを含有する容量体の微小環境ｐＨから、水又は体液の存在下でよりアルカリ性の状態へと移行させるアルカリ化剤を含有する。
【０１０１】
適切なアルカリ化剤の例は、アンモニア溶液、炭酸アンモニウム、アルカリ金属炭酸塩（例えば炭酸カリウム及び炭酸ナトリウム）を含むアルカリ金属塩、水酸化カリウム、水酸化ナトリウム及びホウ酸ナトリウム（ホウ砂）、第三級アミン、例えばトリエチルアミン、トリエタノールアミン、ジエタノールアミン及びモノエタノールアミンのような他のアミン、並びにリン酸塩を含む。
【０１０２】
アルカリ化剤は、２５℃で８〜１４、特に８．５〜１１、より具体的には９〜１１のｐＫａを有することが好ましい。
【０１０３】
ＮＵ−ＰＯＸを含有する個別包装容量のｐＨは、好ましくは７〜１２、より好ましくは８〜１１、最も好ましくは９〜１０の範囲にわたる。
【０１０４】
ＮＵ−ＰＯＸ及び架橋剤の個別包装容量は、好都合に、両方の容量体を同時に調剤できる調剤手段のうちに含有される。したがって、２つの作用剤を同時に送達でき、架橋ポリマーが原位置で形成されるであろう。２つの反応物を同時に調剤することにより、それらを、架橋を発生させるべき部位に送達し、予混を避けることができ、早過ぎる架橋を効率的に予防する。適切な調剤手段の例は、噴霧調剤器、シリンジ、及びデュアルシリンジを含む。シリンジは、適切には、静的ミキサー及び／又は噴霧ノズルを含み、前記シリンジから同時に排出される際に、２つの反応物が確実に一緒に混合されるようにする。
【０１０５】
好ましい実施形態によれば、少なくとも１つの個別包装容量は、可視化剤を含有して可視性を向上させる。可視化剤（例えば着色料）は、ヒトの眼に感知可能な波長で光を反射する、又は放射する。可視化剤を包含するため、使用者は、反応性混合物を正確に利用することが容易である。適切な着色料の例は、ＦＤ＆Ｃ及びＤ＆Ｃという着色剤、例えばＦＤ＆Ｃ  Ｖｉｏｌｅｔ  Ｎｏ．２、ＦＤ＆Ｃ  Ｂｌｕｅ  Ｎｏ．１、Ｄ＆Ｃ  Ｇｒｅｅｎ  Ｎｏ．６、Ｄ＆Ｃ  Ｇｒｅｅｎ  Ｎｏ．５、Ｄ＆Ｃ  Ｖｉｏｌｅｔ  Ｎｏ．２；並びに天然の着色剤、例えばビートルートレッド、カンタキサンチン、クロロフィル、エオシン、サフラン、カルミン、インドシアニングリーン、又は合成手術用縫合糸で通常見出される有色色素を含む。同様に、色素、例えばフルオレセイン及びメチレンブルーが使用できる。可視化剤は、ヒドロゲルに化学的に結合できるようになることもならないこともある。
代替実施形態において、キットは、ＮＵ−ＰＯＸを含有する、生体適合性の第１の薄膜を含み、求電子的に活性化した架橋剤を含有する、生体適合性の第２の薄膜を含む。２つの膜は、適切には、２つの膜の表面を互いに組み合わせた後で利用される。適切には、膜を穿孔して一定の表面積を増加させることができる。
【０１０６】
ＮＵ−ＰＯＸを含有する、生体適合性薄膜は、好ましくは、本明細書で既に定義されているアルカリ化剤を含む。
【０１０７】
本発明のさらに別の態様は、生体適合性架橋ポリマーを生成するキットに関し、前記キットが、本明細書で既に定義されているＮＵ−ＰＯＸ及び求電子性架橋剤を含み、キットが、０．０１〜１０００μｍの重量平均径を有する粒子からなる粉末を含み、前記粒子が、ＮＵ−ＰＯＸを含有する粒子及び求電子性架橋剤を含有する粒子を含む。
【０１０８】
ＮＵ−ＰＯＸ又は求電子性架橋剤が、粉末形態で得られる場合、粉末は、同一のキットに含有され得る流体において容易に分散できるようなるべきである。
【０１０９】
キットに含まれる粒子は、好ましくは、０．５〜５００μｍ、及び最も好ましくは２〜３００μｍの重量平均径を有し、前記粒子が、ＮＵ−ＰＯＸを含有する粒子及び求電子的に活性化した架橋剤を含有する粒子を含む。ＮＵ−ＰＯＸ及び求電子的に活性化した架橋剤は、同一の粒子に含有されてもよく、又は同一の粉末内の異なる粒子に含有されてもよい。
【０１１０】
前述の粉末は、適切には、周囲条件下で保存できる止血粉末として使用され得る。
【０１１１】
ＮＵ−ＰＯＸ及び／又は求電子性架橋剤以外に、止血粉末に含まれる粒子は、適切には、担体、好ましくは、水溶性担体を含有する。適切に用いられ得る担体の例は、単糖；ジ−及びオリゴ糖、例えばラクトース、マンニトール、トレハロース、エリトリトール、キシリトール、ソルビトール、マルチトール、イソマルト、マルトデキストリン、セロビオース、グルコース、フルクトース、マルチュロース、ラクチュロース、マルトース、ゲントビオース、イソマルトース、ラクチトール、パラチニトール、ズルシトール、リビトール、スクロース、ラフィノース、ゲンチアノース、プランテオース、ベルバスコース、スタキオース、メレジトース、イノシトール；並びに多糖、例えばデキストラン、デンプン（アミロース、アミロペクチン）、グリコーゲン、セルロース、キチン、アルギン酸エステル、カロース、クリソラミナリン、キシラン、アラビノキシラン、マンナン、フコイダン及びガラクトマンナン；並びにこれらの炭水化物の組み合わせを含む。用いられる担体は、少なくとも０℃、より好ましくは少なくとも２５℃のガラス転移温度を有することが好ましい。
【０１１２】
典型的には、止血粉末は、２５〜７５ｗｔ．％のＮＵ−ＰＯＸ、２５〜７５ｗｔ．％の求電子的に活性化した架橋剤、及び０〜５０ｗｔ．％の担体を含有する。
【０１１３】
本発明のキットを用いて生成できる架橋ポリマーは、組織接着性を有していても、有していなくてもよい。組織接着性を有する架橋ポリマーの生成にキットが使用できる場合は、いくつかの用途では有益である。したがって、本発明のキットに含有される架橋剤は、ＮＵ−ＰＯＸに含有される求核基の量と比較して、過量の求電子基を含むことが有利である。したがって、ＮＵ−ＰＯＸ及び求電子的に活性化した架橋剤が反応して、本明細書で既に定義されている架橋ポリマーを形成できる。
【０１１４】
本発明のキットによる、原位置の架橋特性は、トリアセチン、グリセロール、トリエチルアミン及びそれらの組み合わせの群から選択される可塑化剤を有するＮＵ−ＰＯＸを可塑化することにより改善できる。典型的には、可塑化剤は、ＮＵ−ＰＯＸの重量に対して、１〜５０％の濃度、より好ましくは３〜１５％の濃度で用いられる。
【０１１５】
本明細書で既に説明された通り、本発明のキットの特に好ましい実施形態は、組織接着性を有する架橋ポリマーを生成する。この好都合な実施形態は、例えば、ＮＵ−ＰＯＸ及び求電子性架橋剤を単一膜又はテープに可塑化することにより実現できる。組織テープとして利用する前に、後者のテープは、活性化物質を含有する別の水溶性膜、又は、活性化物質を含有する流体若しくは核酸可能な組成物と組み合わせることができる。
【０１１６】
本発明による生体適合性架橋ポリマー、並びにＮＵ−ＰＯＸは、それらに含まれるオキサゾリン１単位に含まれる共有結合した抗微生物剤を、好都合に含有できる。より好ましくは、架橋ポリマー又はＮＵ−ＰＯＸは、アミド又はイミド基を介してオキサゾリン単位に共有結合した抗微生物剤を含有する。抗微生物剤の例は、アミノフェノール、アミノクレゾール、アミノレゾルシノール及びアミノナフトールを含む。抗微生物剤は、適切には、スペーサー基、例えばアルキレン、オキシアルキラン（ｏｘｙａｌｋｙｌａｎｅ）又はシリコーンを経てＰＯＸ−ポリマーに結合され得る。抗微生物剤をＰＯＸ−ポリマーに共有結合することにより、ポリマーの生分解中に、確実に、抗微生物剤を徐々に放出するようにできる。
【０１１７】
生体適合性架橋ポリマーは、適切には、賦形剤、酸化剤、架橋剤、ミクロゲル、追加のポリマー、薬剤及び他の治療剤から選択される１つ又は複数の添加成分をさらに含む。
【０１１８】
本発明による医療製品は、多彩な手術用途に好都合に使用できる。これらの手術用途の例を以下に要約した。
【０１１９】
【表１】
0006372000.tif 000002
【０１２０】
超音波造影剤として作用するポリマーコーティングした気泡は、適切には、本明細書に既に記載されているキット又は医療製品に含まれ得る。ポリマーコーティングした気泡は、血液及び含有されている気体の間の音響インピーダンスの不一致が大きい対比性質に由来する。これらの気泡をコーティングするために使用できるポリマーの例は、ポリラクチド、ポリグリコリド、ポリカプロラクトン、ポリラクチド及びポリグリコリドのコポリマー、ラクチド及びラクトンのコポリマー、多糖、ポリ無水物、ポリスチレン、ポリアルキルシアノアクリレート、ポリアミド、ポリホスファゼン、ポリ（メタクリル酸メチル）、ポリウレタン、メタクリル酸及びアクリル酸のコポリマー、メタクリル酸ヒドロキシエチル及びメタクリル酸メチルのコポリマー、ポリエステル、例えばポリカーボネート、及びタンパク質を含む。好ましいポリマーは、生体適合性ポリマー、及び／又は生分解性のポリマーである。好ましい実施形態において、ポリマーは、ポリ乳酸−ｃｏ−グリコール酸（ＰＬＧＡ）である。
【０１２１】
本発明は、以下の非限定的な例によってさらに例示される。
【実施例】
【０１２２】
実施例１
ａｑｕａｚｏｌ５０（ポリ（２−エチル−２−オキサゾリン（ＰＥｔＯｘ）、Ｍｗ５０，０００）に調節した酸性加水分解を行って、ポリ［２−エチル−２−オキサゾリン／エチレンイミン］コポリマー（ＰＥｔＯｘ−ＰＥＩ）を得ることにより、アルキル側鎖にエチル及びアミン基を含有するＮＵ−ＰＯＸの両親媒性コポリマーを合成した。１２％の初期２−エチル−オキサゾリン単位を加水分解した。
【０１２３】
このポリ［２−エチル−２−オキサゾリン／エチレンイミン］を、２段階の手法で、官能基化した。最初に塩化メチルスクシニルを連結し、メチルエステルとエチレンジアミン（溶媒なしで３０当量）の反応を続けて、アミン−側鎖活性化ポリ［２−（エチル／アミン−エチル−アミド−エチル）−２−オキサゾリン］コポリマーを得た。
【０１２４】
１．３１ｍｇの量の、このＮＨ２−側鎖活性化ポリ［２−（エチル／アミン−エチル−アミド−エチル）−２−オキサゾリン］コポリマーを、エタノール（無水）５０μＬ、水１０μＬ及びトリエチルアミン４μＬの混合物に溶解した。水５０μＬに、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドでエンドキャップした２０，０００ＤａのＰＥＧの粉末（ＤｕｒａＳｅａｌ  Ｄｕｒａｌ  Ｓｅａｌａｎｔ  Ｓｙｓｔｅｍ）８．７６ｍｇを含有する溶液を加えた。組み合わせた流体混合物（約１１５μＬで、１：１．２２のＮＨ２：ＮＨＳ比を有する）を、室温で３０秒以内に架橋網状組織（ゲル）に変化させた。
【０１２５】
実施例２
実施例１に記載されているように、ＮＨ２−側鎖活性化ポリ［（２−エチル／アミン−エチル−アミド−エチル）−２−オキサゾリン］コポリマーを合成した。
【０１２６】
１．２６ｍｇの量の、このＮＨ２−側鎖活性化ポリ［２−（エチル／アミン−エチル−アミド−エチル）−２−オキサゾリン］コポリマーを、エタノール（無水）２８μＬ、水１．４μＬ及びトリエチルアミン０．２μＬの混合物に溶解した。５０μＬに、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドでエンドキャップした２０，０００ＤａのＰＥＧの粉末（ＤｕｒａＳｅａｌ  Ｄｕｒａｌ  Ｓｅａｌａｎｔ  Ｓｙｓｔｅｍ）８．７９ｍｇを含有する溶液を加えた。組み合わせた流体混合物（約８０μＬで、１：１．２７のＮＨ２：ＮＨＳ比を有する）を、切断して間もないウシの腹膜に注いだ。生じたヒドロゲルが組織に接着していることを見出した。
【０１２７】
実施例３
実施例１に記載されているようにＮＨ２−側鎖活性化ポリ［（２−エチル／アミン−エチル−アミド−エチル）−２−オキサゾリン］コポリマーを合成した。
【０１２８】
１４．３８ｍｇの量の、このＮＨ２−側鎖活性化ポリ［２−（エチル／アミン−エチル−アミド−エチル）−２−オキサゾリン］コポリマーを、エタノール（無水）３００μＬ、水３０μＬ及びトリエチルアミン５μＬの混合物に溶解し、エチルエステルＬ−リジンジイソシアネート（ＣＡＳ４５１７２−１５−４）３．６９ｍｇを加えた。組み合わせた流体混合物（約３４０μＬで、１：２のＮＨ２：ＮＣＯ比を有する）を架橋網状組織（ゲル）に２分以内に変化させた。
【０１２９】
実施例４
実施例１に記載されているように、ＮＨ２−側鎖活性化ポリ［（２−エチル／アミン−エチル−アミド−エチル）−２−オキサゾリン］コポリマーを合成した。
【０１３０】
１４．１２ｍｇの量の、このＮＨ２−側鎖活性化ポリ［２−（エチル／アミン−エチル−アミド−エチル）−２−オキサゾリン］コポリマーを、エタノール（無水）２００μＬ、水１０μＬ及びトリエチルアミン１．４μＬの混合物に溶解し、エチルエステルＬ−リジンジイソシアネート（ＣＡＳ４５１７２−１５−４）３．６９ｍｇを加えた。組み合わせた流体混合物（約２２０μＬで、１：２．１１のＮＨ２：ＮＣＯ比を有する）を、架橋網状組織（ゲル）に２０秒以内に変化させた。ゲルを、切断して間もないウシの腹膜に塗布し、組織に接着することを見出した。
【０１３１】
実施例５
実施例１に記載されているように、ＮＨ２−側鎖活性化ポリ［（２−エチル／アミン−エチル−アミド−エチル）−２−オキサゾリン］コポリマーを合成した。
【０１３２】
１４．９２ｍｇの量の、このＮＨ２−側鎖活性化ポリ［２−（エチル／アミン−エチル−アミド−エチル）−２−オキサゾリン］コポリマーを、エタノール（無水）３５０μＬ、水１０μＬ及びトリエチルアミン５μＬの混合物に溶解し、この溶液を、水２０５μＬ中にアルギン酸プロピレングリコール（ＰＧＡ）５．１７ｍｇを含有する溶液に加えた。組み合わせた流体混合物（約５７０μＬで、１：１．３５のＮＨ２：プロピレングリコール比を有する）を、架橋網状組織（ゲル）に１０分以内に変化させた。
【０１３３】
実施例６
実施例１に記載されているように、ＮＨ２−側鎖活性化ポリ［（２−エチル／アミン−エチル−アミド−エチル）−２−オキサゾリン］コポリマーを合成した。
【０１３４】
１４．７２ｍｇの量の、このＮＨ２−側鎖活性化ポリ［２−（エチル／アミン−エチル−アミド−エチル）−２−オキサゾリン］コポリマーを、エタノール（無水）２００μＬ、水１０μＬ及びトリエチルアミン１．４μＬの混合物に溶解し、この溶液を、水２０５μＬ中にアルギン酸プロピレングリコール（ＰＧＡ）５．５９ｍｇを含有する溶液に加えた。組み合わせた流体混合物（約４２０μＬで、１：１．４６のＮＨ２：プロピレングリコール比を有する）を、切断して間もないウシの腹膜に注いだ。生じたヒドロゲルが、組織に接着していることを見出した。
【０１３５】
実施例７
実施例１に記載されているように、ＮＨ２−側鎖活性化ポリ［（２−エチル／アミン−エチル−アミド−エチル）−２−オキサゾリン］コポリマーを合成した。
【０１３６】
０℃に冷却した水９ｍｌ中のＭＷ９，０００〜１１，０００のデキストラン１ｇの溶液に、水９ｍｌ中の過ヨウ素酸ナトリウム１ｇの溶液を一滴ずつ加えた。完全に加え終えた後で、混合物を室温で４時間撹拌した。次に、ＣａＣｌ２３２８ｍｇを加え、３０分間撹拌し、濾過した。生じた濾液を、ヨウ化カリウム３５０ｍｇと組み合わせ、３０分間撹拌した。生じた赤色の溶液を冷アセトン２００ｍｌに一滴ずつ加え、凝集した生成物を分離した。水に白色固体を溶解し、凍結乾燥させ、約５０％のグルコピラノース環がジアルデヒドを酸化的に開裂した、白色のデキストランアルデヒド（ＭＷ９，０００〜１１，０００）を生じさせた。
【０１３７】
７．８７ｍｇの量の、ＮＨ２−側鎖活性化ポリ［２−（エチル／アミン−エチル−アミド−エチル）−２−オキサゾリン］コポリマーを、エタノール（無水）１５０μＬ、水１５μＬ及びトリエチルアミン２．５μＬの混合物に溶解し、この溶液を、水１５０μＬ中にデキストランアルデヒド１２．０７ｍｇを含有する溶液に加えた。組み合わせた流体混合物（約３２０μＬで、１：８．６８のＮＨ２：アルデヒド比を有する）を、架橋網状組織（ゲル）に３０秒以内に変化させた。
【０１３８】
実施例８
実施例１に記載されているように、ＮＨ２−側鎖活性化ポリ［（２−エチル／アミン−エチル−アミド−エチル）−２−オキサゾリン］コポリマーを合成した。
【０１３９】
実施例７に記載されているように、デキストランアルデヒドを合成した。
【０１４０】
７．２８ｍｇの量の、このＮＨ２−側鎖活性化ポリ［２−（エチル／アミン−エチル−アミド−エチル）−２−オキサゾリン］コポリマーを、エタノール（無水）１００μＬ、水５μＬ及びトリエチルアミン０．７μＬの混合物に溶解し、この溶液を、水１５０μＬ中にデキストランアルデヒド１２．７２ｍｇを含有する溶液に加えた。組み合わせた流体混合物（約２６０μＬで１：９．８９のＮＨ２：アルデヒド比を有する）を、切断して間もないウシの腹膜に注いだ。生じたヒドロゲルが組織に接着することを見出した。
【０１４１】
実施例９
文献の手技（Ｍ．Ｔ．Ｚａｒｋａ、Ｏ．Ｎｕｙｋｅｎ、Ｒ．Ｗｅｂｅｒｓｋｉｒｃｈ、Ｃｈｅｍ．Ｅｕｒ．Ｊ．２００３年、９、３２２８〜３２３４頁、Ａ．Ｌｅｖｙ、Ｍ．Ｌｉｔｔ、Ｊ．Ｐｏｌｙｍ．Ｓｃｉ．Ａ  １９６８年、６、１８８３頁の改変手技）に従って、２−（２−メトキシカルボニルエチル）−２−オキサゾリンを調製し、続いてカチオン性開環重合により、対応するメチルエステル官能基化ホモポリマーである、ポリ（２−（２−メトキシカルボニルエチル）−２−オキサゾリン）を得た。
【０１４２】
２−（２−メトキシカルボニルエチル）−２−オキサゾリンモノマーの単独重合により、ポリ（２−（２−メトキシカルボニルエチル）−２−オキサゾリン）ホモポリマーが得られた。
【０１４３】
２−（２−メトキシカルボニルエチル）−２−オキサゾリンモノマーと２−エチル−２−オキサゾリン（２５、５０及び７５％）又は２−メチル−２−オキサゾリン（２５、５０及び７５％）の共重合によりランダムコポリマーが得られた。
【０１４４】
ポリ［２−（２−メトキシカルボニルエチル）−２−オキサゾリン］ホモポリマーを、ポリマー０．８ｇをＮ−Ｂｏｃアミノエタンアミン２．５ｍｌに溶解し、続いて８０℃で２３時間撹拌することによりＮ−Ｂｏｃアミノエタンアミンと反応させた。ＣＤＣｌ３中での１Ｈ  ＮＭＲ分光法により、〜９０％のメチルエステル単位が、Ｂｏｃ−アミノエチルアミド側鎖に変換されることが明らかになった。ジクロロメタン（３０ｍｌ）中のポリマー８５０ｍｇに溶解することにより、このポリマーを塩酸（ＨＣｌ）とさらに反応させ、酢酸エチル（０．１７５ｍｌ、２．９８ｍｍｏｌ）中のＨＣｌ溶液に一滴ずつ加えた。完全に加え終えた後で、溶液を室温で６時間撹拌した。１Ｈ  ＮＭＲ分光法により、１．４ｐｐｍで、Ｂｏｃのシグナルが消えることにより、アミノ−エチルアミド側鎖官能基化ポリマーの塩酸塩が正しく形成されて、＞９０％のアミン−側鎖活性化ポリ［２−（アミン−エチル−アミド−エチル）−２−オキサゾリン］コポリマー（ＮＵ−ＰＯＸ）が得られることが立証された。
【０１４５】
２５％の２−メトキシカルボニルエチル−２−オキサゾリンを含有する２−エチル−２−オキサゾリンコポリマーを、メチルエステル側鎖とエチレンジアミン（溶媒なしで３０当量）を反応させて、２５％ちょうどのアミン−側鎖活性化ポリ［２−（エチル／アミン−エチル−アミド−エチル）−２−オキサゾリン］コポリマー（ＮＵ−ＰＯＸ）を得ることにより官能基化した。
【０１４６】
２５％の２−メトキシカルボニルエチル−２−オキサゾリンを含有する２−メチル−２−オキサゾリンのコポリマーを、メチルエステル側鎖とエチレンジアミン（溶媒なしで３０当量）を反応させて、２５％ちょうどのアミン−側鎖活性化ポリ［２−（メチル／アミン−エチル−アミド−エチル）−２−オキサゾリン］コポリマー（ＮＵ−ＰＯＸ）を得ることにより官能基化した。
【０１４７】
ポリ［２−（２−メトキシカルボニルエチル）−２−オキサゾリン］ホモポリマーを、メチルエステルのＬｉＯＨを用いて、カルボン酸に部分的に加水分解（２５、５０及び７５％）し、続いて、ジイソプロピルカルボジイミド及びトリエチルアミンの存在下で、得られたカルボン酸部分を、ＮＨＳを用いて活性化することによる２段階の手法で官能基化して、ＮＨＳ−側鎖活性化ポリ（ＮＨＳ−エステル−エチル−オキサゾリン／メトキシカルボニルエチルオキサゾリン）コポリマー（ＥＬ−ＰＯＸ）を合成した。ＮＨＳを用いた最終的な官能基化の程度は、２５、５０及び７５％にごく近いことを、ＵＶ可視分光法及び１Ｈ  ＮＭＲ分光法により確認した。
【０１４８】
２５、５０又は７５％のメチルエステル単位を含有する２−エチル−２−オキサゾリンのコポリマー及び２５、５０又は７５％のメチルエステル単位を含有する２−メチル−２−オキサゾリンのコポリマーを、メチルエステルのＬｉＯＨを用いてカルボン酸に定量的に加水分解し、続いて、ジイソプロピルカルボジイミド及びトリエチルアミンの存在下で、得られたカルボン酸部分を、ＮＨＳを用いて活性化することによる２段階の手法で官能基化して、ＮＨＳ−側鎖活性化ポリ［２−（ＮＨＳ−エステル−エチル）−２−オキサゾリン］ポリマー（ＥＬ−ＰＯＸ）を合成した。ＮＨＳを用いた最終的な官能基化は、２５、５０及び７５％ちょうどになることを、ＵＶ可視分光法及び１Ｈ  ＮＭＲ分光法により確認した。
【０１４９】
例Ａ（特許請求の範囲に記載されている本発明に従わない）
Ａｑｕａｚｏｌ−５０（ポリ（２−エチル−２−オキサゾリン、ＰＥｔＯｘ、Ｍｎ５０，０００）＞９５％の酸性加水分解を行って、直鎖状ポリ（エチレンイミン）（ＬＰＥＩ）を得ることにより、アルキル側鎖にＮＨＳ基を含有するＥＬ−ＰＯＸのポリマーを合成した。ＤＭＳＯ中の無水コハク酸と連結させ、続いて活性化することによる２段階の手法で、ジイソプロピルカルボジイミド及びトリエチルアミンの存在下で、得られたカルボン酸部分を、ＮＨＳを用いてＬＰＥＩを官能基化して、ＮＨＳ−側鎖活性化ポリ（ＮＨＳ−エステル−エチル−オキサゾリン）ポリマーを合成した。ＮＨＳを用いた最終的な官能基化は、＞９５％（ＥＬ−ＰＯＸ）になることを、ＵＶ可視分光法及び１Ｈ  ＮＭＲにより確認した。この化合物は水不溶性であった。
【０１５０】
同一の２段階の手法で、ジイソプロピルカルボジイミド及びトリエチルアミンの存在下で、カルボン酸部分に対して２５、５０及び７５％の化学量論量のＮＨＳを用いて、ＬＰＥＩを官能基化して、それぞれ２５、５０及び７５％のＮＨＳ−側鎖活性化ポリ（ＮＨＳ−エステル−エチル−オキサゾリン／カルボキシエチルオキサゾリン）コポリマーを合成した。ＮＨＳを用いた最終的な官能基化の程度は、約２５、５０及び７５％になることを、ＵＶ可視分光法及び１Ｈ  ＮＭＲ分光法により確認した。これらのＥＬ−ＰＯＸ化合物は、水溶性であり、それぞれ１０／９０ｖ／ｖ％の水／メタノール、水／エタノール混合物に可溶性であった。
【０１５１】
実施例９に記載されている１．１６ｍｇの量の、２５％のアミン−側鎖活性化ポリ［（２−エチル／アミン−エチル−アミド−エチル）−２−オキサゾリン］コポリマーを、エタノール：トリエチルアミン（９９：１）混合物１０μＬに溶解し、この溶液を、エタノール７０μＬ中に２５％のＮＨＳ−側鎖活性化ポリ［２−（２−メトキシカルボニルエチル）／（２−エチル−ＮＨＳエステル）−２−オキサゾリン］コポリマー８．８４ｍｇを含有する溶液に加えた。組み合わせた流体混合物（約９０μＬで、５：１の比ＮＨＳ：ＮＨ２を有する）は、架橋網状組織（ゲル）に６０秒以内に変化した。
【０１５２】
この例は、ＮＵ−ＰＯＸが、ＮＨＳ−官能性ポリマーによって適切に架橋され得ることを例示する。
【０１５３】
例Ｂ（特許請求の範囲に記載されている本発明に従わない）
ａｑｕａｚｏｌ５０（ポリ（２−エチル−２−オキサゾリン（ＰＥｔＯｘ）、Ｍｗ５０，０００）の酸性加水分解を調節して、１２％の初期２−エチル−オキサゾリン単位が加水分解されたポリ［２−エチル−２−オキサゾリン／エチレンイミン］コポリマー（ＰＥｔＯｘ−ＰＥＩ）を得ることにより、アミン−側鎖活性化ポリ［２−（エチル／ＮＨＳ−エステル−エチル）］−２−オキサゾリンコポリマー（ＮＵ−ＰＯＸ）を合成した。
【０１５４】
このポリ［２−エチル−２−オキサゾリン／エチレンイミン］を、最初に、トリエチルアミンの存在下で塩化メチルスクシニルに連結させ、続いて、形成されたメチルエステル側鎖とエチレンジアミンを反応させることによる２段階の手法で官能基化して、アミン−側鎖活性化ポリ（２−エチル／アミノ−エチル−アミド−エチル）−２−オキサゾリンコポリマーを得た。
【０１５５】
このＮＵ−ＰＯＸを、アミンと無水マレイン酸を反応させて、マレイミド−側鎖活性化ポリ（２−エチル／マレイミド−エチル−アミド−エチル）−２−オキサゾリンコポリマーを得ることにより、ＥＬ−ＰＯＸに変化させた。
【０１５６】
例Ａに記載されているように、アルキル側鎖に＞９５％のＮＨＳ部分を含有するＰＯＸを合成した。このＥＬ−ＰＯＸを塩酸システアミンと反応させて、ジスルフィド結合により架橋したチオールを含有するポリマーを合成した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＮＵ−ＰＯＸ）により同一であることを確認した。
【０１５７】
ジスルフィド結合を、トリス（２−カルボキシエチル）ホスフィン（ＴＣＥＰ）を用いて減少させた。チオール側鎖活性化ポリマー（５００μＬに１０ｍｇ）の架橋を、トリエチルアミン（ＴＥＡ）１００μＬの存在下で、マレイミド−側鎖活性化ポリ（２−エチル／マレイミド−エチル−アミド−エチル）−２−オキサゾリンコポリマー（１００μＬ中に６ｍｇ）を用いて試験した。
【０１５８】
ＴＥＡ（１００μＬ）の存在下で、ＥＬ−ＰＯＸ６ｍｇ及び本例のＮＵ−ＰＯＸ５ｍｇを使用してＤＭＳＯ／ＭｅＯＨ（２：５ｖ／ｖ）６００μＬにおける架橋を確認した。室温で２０秒以内にゲルが形成された。
【０１５９】
例Ｃ（特許請求の範囲に記載されている本発明に従わない）
アルキル側鎖に２−チアゾリン−２−チオエステルを含有するポリマーを、以下の手技により合成した。
【０１６０】
例Ａに記載されているように、アルキル側鎖に＞９５％のカルボン酸部分を含有するＰＯＸを合成した。ジイソプロピルカルボジイミド及びトリエチルアミンの存在下で、このＰＯＸを、２−チアゾリン−２−チオールを用いて活性化して、２−チアゾリン−２−チオエステル−側鎖活性化ポリ［２−（チアゾリン−チオエステル−エチル）−２−オキサゾリン］ポリマー（ＥＬ−ＰＯＸ）を合成した。１Ｈ  ＮＭＲにより、このＥＬ−ＰＯＸの同一性を確認した。
【０１６１】
実施例１に記載されているように、アルキル側鎖にエチル及びＮＨ２基を含有するＮＵ−ＰＯＸの両親媒性コポリマーを合成した：１２％の初期２−エチル−オキサゾリン単位を加水分解した。
【０１６２】
塩基を加えずに、ＥＬ−ＰＯＸ７，０ｍｇ及び本例のＮＵ−ＰＯＸ１５．８ｍｇを使用して、ＤＭＳＯ／ＭｅＯＨ（１：１ｖ／ｖ）４００μＬの架橋を確認した。室温で３０秒以内にゲルが形成された。
【０１６３】
本例により、ＮＵ−ＰＯＸが、チアゾリン−官能性ポリマーによって適切に架橋され得ることが例示される。
【０１６４】
例Ｄ（特許請求の範囲に記載されている本発明に従わない）
以下の手技により、アルキル側鎖にアルデヒド官能基を含有するポリマーを合成した。
【０１６５】
例Ａに記載されているように、アルキル側鎖に＞９５％のＮ−ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）基を含有するＥＬ−ＰＯＸを合成した。このＥＬ−ＰＯＸを、２−（１，３−ジオキソラン−２−イル）エタンアミンと反応させて、＞９５％の保護アルデヒド官能基を含有するポリマーを合成した。以前に記載された手技（Ｔａｕｂｍａｎｎ，Ｃ．、Ｌｕｘｅｎｈｏｆｅｒ，Ｒ．、Ｃｅｓａｎａ，Ｓ．及びＪｏｒｄａｎ，Ｒ．（２００５年）、Ｆｉｒｓｔ  Ａｌｄｅｈｙｄｅ−Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｉｚｅｄ  Ｐｏｌｙ（２−ｏｘａｚｏｌｉｎｅ）ｓ  ｆｏｒ  Ｃｈｅｍｏｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  Ｌｉｇａｔｉｏｎ．Ｍａｃｒｏｍｏｌ．Ｂｉｏｓｃｉ．、５：６０３〜６１２頁。）を使用して、ポリマーを脱保護し、＞９５％のアルデヒド官能基化ポリマー（ＥＬ−ＰＯＸ）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ及び１３Ｃ−ＮＭＲにより、同一性を確認した。
【０１６６】
本例からのＥＬ−ＰＯＸ７，０ｍｇ及び実施例１のＮＵ−ＰＯＸ１５．８ｍｇを使用して、塩基を加えずに、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（１：１、ｖ／ｖ）４００μＬ中の架橋を確認した。室温で６０秒以内にゲルが形成された。
【０１６７】
この例により、ＮＵ−ＰＯＸがアルデヒド−官能性ポリマーによって適切に架橋され得ることが例示される。
【０１６８】
例Ｅ（特許請求の範囲に記載されている本発明に従わない）
例Ａに記載されているように、５０％のＮＨＳ単位を含有するＮＨＳ−側鎖活性化ポリ［２−（ＮＨＳ−エステル−エチル）−２−オキサゾリン］コポリマー及び２５％のアミン−側鎖活性化ポリ［２−（エチル／アミン−エチル−アミド−エチル）−２−オキサゾリン］コポリマーを調製した。
【０１６９】
５０％のＮＨＳ単位を含有するＮＨＳ−側鎖活性化ポリ［２−（ＮＨＳ−エステル−エチル）−２−オキサゾリン］コポリマーをエタノール（無水）に溶解した。別途、２５％のアミン−側鎖活性化ポリ［２−（エチル／アミン−エチル−アミド−エチル）−２−オキサゾリン］コポリマーをエタノール（無水）に溶解した。両方の溶液に少量のグリセロール（可塑化剤）を加えた。溶液流延法のために溶液を混合し、混合物を、室温で真空によって非晶質テープに乾燥させた。
【０１７０】
以下の手段で、この製剤の破裂圧力を試験した。均一な性質及び厚さのコラーゲンケーシング（ソーセージケーシング、Ｎｉｐｐｉ  Ｃａｓｉｎｇ  Ｃｏ．（＃３２０）、４）を使用した（基材）。基材部分を脱イオン水で洗浄して、グリセリンを除去し、新鮮な脱イオン水に５分間浸す。基材に３ｍｍの円形の切り込みを入れ、次いで、測定可能な圧力下で疑似体液を、円形の切り込みを経て押し出すことができるような方法でビュレットに固定した。
【０１７１】
非晶質テープを固定した基材に貼付してシールを形成する。数分後、シールの破裂点（破裂圧力）まで疑似体液の圧力を上昇させた。密閉テープに対して破裂圧力が十分であることを見出した。この膜のＮＨＳ：アミンの比は５：１であった。
【０１７２】
例Ｆ（特許請求の範囲に記載されている本発明に従わない）
２つの貯蔵器が同時に空である場合に、貯蔵器の内容物を混合するために２つの分離した貯蔵器及び静的ミキシングユニットを含むシリンジは、２種の粘性流体で満たされる。
【０１７３】
実施例１に記載されているように、ＮＨ２−側鎖活性化ポリ［（２−エチル／アミン−エチル−アミド−エチル）−２−オキサゾリン］コポリマー（ＮＵ−ＰＯＸ）を合成し、例Ａに記載されているように、７５％のＮＨＳ−側鎖活性化ポリ（ＮＨＳ−エステル−エチル−オキサゾリン）ポリマー（ＥＬ−ＰＯＸ）を調製した。
【０１７４】
水及び内容物（５０／５０ｗ／ｗ）を含有する容器中で、ＮＵ−ＰＯＸを正確に秤量し、十分に混合した。シリンジの第１の貯蔵器をＮＵ−ＰＯＸゲルで満たし、大きい気泡を入念に排除した。シリンジの第２の貯蔵器を、同一の手段で調製した水性ＥＬ−ＰＯＸ溶液で満たした。アミン−ＮＨＳ比は１：５であった。
【０１７５】
静的ミキサー及びプランジャーの両方をつなぎ、２種のゲルを押し出して、静的混合物から均質で透明な架橋ポリマー相を、初期の設定時間である１分未満で形成する。
【０１７６】
例Ｇ（特許請求の範囲に記載されている本発明に従わない）
例Ｆに記載されているデュアルシリンジの実験を繰り返した。しかし、この実験においてＥＬ−ＰＯＸを８５％のグリセロールに溶解し、最終的なアミン−ＮＨＳ比は１：１であった。
【０１７７】
静的ミキサー及びプランジャーの両方をつなぎ、２種のゲルを押し出して、静的混合物から均質で透明な架橋ポリマー相を、初期の設定時間である１分未満で形成する。
【０１７８】
例Ｈ（特許請求の範囲に記載されている本発明に従わない）
実施例１に記載されているように（ＮＵ−ＰＯＸ）、ＮＨ２−側鎖活性化ポリ［（２−エチル／アミン−エチル−アミド−エチル）−２−オキサゾリン］コポリマーを合成した。例Ａ（ＥＬ−ＰＯＸ）に記載されているように、７５％のＮＨＳ−側鎖活性化ポリ（ＮＨＳ−エステル−エチル−オキサゾリン）ポリマーを合成した。ＤｕｒａＳｅａｌ、Ｄｕｒａｌ  Ｓｅａｌａｎｔ  ＳｙｓｔｅｍからＮ−ヒドロキシスクシンイミドでエンドキャップした、２０，０００ＤａのＰＥＧの粉末［ＰＥＧ−ＮＨＳ］を得、トリリシンをＳｉｇｍａから得た。求電子基／ＥＬ−ＰＯＸ分子の数は、約３７５であり、求電子基／ＰＥＧ−ＮＨＳ分子の数は約４であった。求核基／ＮＵ−ＰＯＸ分子の数は約２９であり、求電子基／トリリシン分子の数は４であった。
【０１７９】
ＮＵ−ＰＯＸ及びＰＥＧ−ＮＨＳは、同一量（ｗ／ｗ）のトレハロースを含有する水に別々に溶解し、液体窒素を利用して急速冷凍させ、終夜凍結乾燥させて、ＮＵ−ＰＯＸｔ及びＰＥＧ−ＮＨＳｔをそれぞれ得た。
【０１８０】
クエン酸塩緩衝液（水で再構成した後でｐＨ５，５）を含む同一量（ｗ／ｗ）のトレハロースを含有する水に、ＥＬ−ＰＯＸを溶解した。液体窒素を利用して急速冷凍させ、終夜ｅｎ凍結乾燥させて、ＥＬ−ＰＯＸｔを得た。１００倍量（ｗ／ｗ）のトレハロースを含有する水にトリリシンを溶解し、液体窒素を利用して急速冷凍させ、終夜ｅｎ凍結乾燥させて、トリリシン−ｔを得た。
【０１８１】
１．０ｍｌのヘパリン化した新鮮な全血を、凍結乾燥した製剤に加え、室温でそれらを組み合わせ、混合して止血性を評価した（チューブ反転試験を使用した）。これらの実験の結果を表１に表す。炭酸塩−炭酸水素塩緩衝液（Ｎａ２ＣＯ３１ｍｇ＋ＮａＨＣＯ３１３ｍｇ）を乾燥塩形態で、血液を加える前に凍結乾燥した製剤に加えた。炭酸塩／炭酸水素塩緩衝液を有する製剤に血液を加えて、最終的にｐＨ９とした。
【０１８２】
【表２】
0006372000.tif 000003
【０１８３】
これらの結果から、製剤Ａ及びＢが、十分な止血性を呈したことは明らかである。ＮＵ−ＰＯＸ及びＥＬ−ＰＯＸの組み合わせを含有する製剤のために最適な結果が得られたので、架橋により改善した止血性が得られたことを示す。さらに、架橋により粘度の高いゲルが得られることが見出された。緩衝液なしで、実験Ｂは約１５分でゲルを生じた。
【０１８４】
実験Ｃは、ゲル化及び／又は止血をまったく生じなかった。