(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
オララツマブ、ならびに薬理学的に許容される担体、希釈剤、および賦形剤のうち１種または複数種を含む軟部肉腫の治療のための医薬組成物であって、
前記医薬組成物は、ドキソルビシンおよびデクスラゾキサンと組み合わせて用いるための医薬組成物であり、
前記デクスラゾキサンは、前記オララツマブが投与された後、前記ドキソルビシンが投与される前に患者に投与されるものである、医薬組成物。
【請求項２】
前記オララツマブが約１５ｍｇ／ｋｇの投与量で投与される、請求項１記載の医薬組成物。
【請求項３】
前記ドキソルビシンが約６０ｍｇ／ｍ２または約７５ｍｇ／ｍ２の投与量で投与される、請求項１記載の医薬組成物。
【請求項４】
前記ドキソルビシンが約７５ｍｇ／ｍ２の投与量で投与される、請求項３記載の医薬組成物。
【請求項５】
前記オララツマブが約１５ｍｇ／ｋｇの投与量で投与され、前記ドキソルビシンが約７５ｍｇ／ｍ２の投与量で投与され、前記デクスラゾキサンが約７５０ｍｇ／ｍ２の投与量で投与される、請求項１記載の医薬組成物。
【請求項６】
前記軟部肉腫が平滑筋肉腫である、請求項５記載の医薬組成物。
【請求項７】
オララツマブを含む軟部肉腫の治療のための医薬であって、
前記治療がオララツマブを軟部肉腫を有している患者に投与する工程；
前記オララツマブを投与する工程の後に、前記患者にデクスラゾキサンを投与する工程；および
前記デクスラゾキサンを投与する工程の後に、ドキソルビシンを前記患者に投与する工程；
を含む、医薬。
【請求項８】
オララツマブを含む軟部肉腫の治療のための医薬であって、
前記治療がオララツマブを軟部肉腫を有している患者に投与する工程；および
ドキソルビシンを前記患者に投与する工程を含み、
前記患者へのドキソルビシンの４回目の投与後、前記患者にデクスラゾキサンを投与し、前記デクスラゾキサンはオララツマブを前記患者に投与した後、ドキソルビシンを前記患者に投与する前に投与される、
医薬。
【請求項９】
前記オララツマブが約１５ｍｇ／ｋｇの投与量で投与される、請求項７または８に記載の医薬。
【請求項１０】
前記ドキソルビシンが約６０ｍｇ／ｍ２または約７５ｍｇ／ｍ２の投与量で投与される、請求項７または８に記載の医薬。
【請求項１１】
前記ドキソルビシンが約７５ｍｇ／ｍ２の投与量で投与される、請求項１０記載の医薬。
【請求項１２】
前記オララツマブが約１５ｍｇ／ｋｇの投与量で投与され、前記ドキソルビシンが約７５ｍｇ／ｍ２の投与量で投与され、前記デクスラゾキサンが約７５０ｍｇ／ｍ２の投与量で投与される、請求項７または８に記載の医薬。
【請求項１３】
前記軟部肉腫が平滑筋肉腫である、請求項７または８に記載の医薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本願は２０１４年７月３日に出願された米国仮出願第６２／０２０４２７号に基づく利益を主張する。
【０００２】
本発明は免疫学および癌治療の分野を対象とする。より具体的には、本発明は、オララツマブおよびドキソルビシンの組み合わせ、ならびに、該組み合わせの、軟部肉腫の治療に対する、または軟部肉腫の治療のための医薬としての、使用の方法を対象とするものである。
【０００３】
軟部肉腫（ＳＴＳ）は脂肪、筋肉、神経、線維組織、血管、または深部皮膚組織等の軟部または結合組織に発生する。これらは全て間葉由来である。ＳＴＳは効果的な治療法が比較的少ない不均一な疾患であり、米国では年間で約１１，４００例の発症と、約４４００例の死亡が報告されている（A Snapshot of Sarcoma, National Cancer Institute, US Dept. of Health and Human Services, National Institutes of Health, posted online 12/02/13 at http://www.cancer.gov/researchandfunding/snapshots/sarcoma）。ＳＴＳには各種亜型が存在し、これら亜型の一部は極めて低い有病率である。肉腫が由来する組織に違いはあっても、これらの腫瘍は多くの類似性を有する傾向がある。治療法を特定し、それを行う目的のために、これら腫瘍は一般的にＳＴＳと分類されることが多い。そのため、本明細書の目的において、これら亜型をＳＴＳと総称する。
【０００４】
本発明はＳＴＳの治療において未だ満たされていない需要に応えることを目的とする。この点において、ＳＴＳの治療におけるオララツマブとドキソルビシンの組み合わせは、統計的に有意な予期せぬ延命効果をもたらす。現在、進行したＳＴＳの患者が利用できる治療方法は限られている。こういった状況で行われる化学療法は基本的に姑息的な目的のものであり、ドキソルビシンがこれら患者の多くに対して標準的な治療で用いられる。それと関連した奏効率（associated response rate）は１０％〜３０％である。
【０００５】
ドキソルビシンはアントラサイクリン（anthracyline）ファミリー化合物の細胞毒性抗生物質である。その細胞毒性効果は、ＤＮＡヌクレオチドのインターカレーションによってトポイソメラーゼＩＩによるＤＮＡ修復が不活性化され、フリーラジカルが発生して、脂質過酸化と細胞膜の損傷が起こることに由来すると信じられている。ドキソルビシンに対する細胞曝露の研究では、アポトーシスと関連した形態的な変化が観察されている。
【０００６】
ＳＴＳに対して最近行われた、および現在進行中の試験においては、ドキソルビシンの使用・不使用を含めた併用化学療法レジメン等の各種療法が調べられた。しかし、一部の試験において奏効率の改善が示されたものの、生存率にはほとんど改善が見られなかった。Benjamin RS, et al., Med Pediatr Oncol. 1975;1(1):63-76（ドキソルビシン単独療法に関する議論)；Bramwell V, et. al., Cochrane Database of Systematic Reviews 2001, Issue 4. Art. No.: CD003293. DOI: 10.1002/l4651858.CD003293. Cochrane Database of Systematic & Reviews, Issue 4, 2009 (Status in this issue: Unchanged)（ドキソルビシンの単独療法と併用を比較した議論）；Mouridsen HT, et al., Eur. J. of Cancer and Clin. Onc. 23(10):1477 1483 (1987)（ドキソルビシンの単独療法とエピルビシンの単独療法を比較した議論)；Lorigan P, et al., J Clin Oncol. 2007;25(21):3144-3150（ドキソルビシンとイホスファミドを比較した議論）；Leyvraz S, et al., Br J Cancer. 2006;95(10):1342-1347（ドキソルビシンとイフォスファミドを比較した議論）；Judson I, et al., Lancet Online. March 5, 2014; http://dx.doi.org/10.1016/S1470-2045(14)70063-4（ドキソルビシンとイフォスファミドを比較した議論)；Edmonson JH, et al., J Clin Oncol. 1993;11:1269 1275（ドキソルビシンをドキソルビシン／イフォスファミドおよびドキソルビシン／マイトマイシン／シスプラチンと比較した議論）；および Schoenfeld DA, et al., Cancer. 1982;50:2757 2762（ドキソルビシンをビンクリスチン＋アクチノマイシン−Ｄ＋シクロホスファミドの組み合わせと比較した議論）を参照のこと。チロシンキナーゼ阻害剤（ＴＫＩｓ）を用いた最近の第２相試験でも限定的な成功が示された。Kasper B, et al. Ann Oncol 2014. Published online: February 6, 2014 at http://annonc.oxfordjournals.org/content/early/2014/02/05/annonc.mdt586.abstract（パゾパニブに関する議論）；Maki RG, et al., J Clin Oncol. 2009;27(19):3133 3140（ソラフェニブに関する議論）；Chugh R, et al., J Clin Oncol. 2009;27(19):3148 3153（イマチニブに関する議論）；および George S, et al., J Clin Oncol. 2009;27(19):3154-3160（スニチニブに関する議論）を参照のこと。手短に述べると、進行したＳＴＳのための延命効果のある新たな治療法に対して、未だ満たされていない高度な臨床的需要が存在する。本発明は、この需要に応える新たな治療法を提供することを目的とする。
【０００７】
ＳＴＳの治療のための、オララツマブおよびドキソルビシンという新たな組み合わせが本明細書に示す。オララツマブＩＭＣ−３Ｇ３（米国特許第８，１２８，９２９号および第８，５７４，５７８号）は、ヒト血小板由来増殖因子受容体アルファ（ＰＤＧＦＲαまたはＰＤＧＦＲアルファ）を特異的に標的とする組換えヒトモノクローナル抗体である。前記特許には、ＩＭＣ−３Ｇ３等のＰＤＧＦＲα抗体を使用した、軟部肉腫等の各種新生物疾患の治療が開示されている。その中には併用療法についての言及がある。
【０００８】
薬剤の開発は予測困難を伴う。各種疾患状態において全ての薬剤が一様に活性を持つわけではない。新規分子が前臨床段階および／または臨床段階で失敗に終わるのは珍しいことではなく、その原因はほとんど不明であることが多い。オララツマブのこれまでの臨床試験では、進行した非小細胞肺癌に対するものを含め、一部において成功が得られなかった。Gerber D. et. al. J Clin Oncol 32:5s, 2014 (suppl; abstr 8050)（「進行非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）未治療患者における、ヒト血小板由来増殖因子受容体α（ＰＤＧＦＲα）モノクローナル抗体（オララツマブ、ＩＭＣ−３Ｇ３）とパクリタキセル／カルボプラチン、またはパクリタキセル／カルボプラチン単独を用いた、無作為化第２相研究」に関する議論 http://meetinglibrary.asco.org/content/134011-144）。
【０００９】
本発明は、第１ｂ相および無作為化第２相試験の組み合わせにおいて研究された（http://www.clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT01185964?term=IMC-3G3&rank=3）（以後「研究」と称する）。そこに記載される通り、該研究には、研究への登録の際に層別化された、多数のＳＴＳ亜型の患者が含められた。該患者集団は、該研究において示された亜型に関して、一般的なＳＴＳ患者集団の代表となるように決定された。
【００１０】
前記研究の中間結果では、予期せぬ利益が示された。オララツマブとドキソルビシンの併用によってこのような有意な利益、特に患者の無増悪生存（ＰＦＳ）および全生存（ＯＳ）をもとに測定された利益、が患者にもたらされたことは予想外であり、また驚くべき事である。
【００１１】
最初にまず、前記研究の中間分析からの臨床データが驚くべきものである理由は、該データがＰＦＳにおいて１２週の改善を示し、また、恐らくより重要なことには、ＯＳにおいて４０週の改善を示していることである。オララツマブとドキソルビシンの組み合わせをドキソルビシン単独（標準的な治療）と比較した際に、ＰＦＳについてはハザード比（ＨＲ）０．５９７（９０％信頼区間＝０．４１５，０．８５８）であり、ＨＲは０．４６（９０％信頼区間＝０．２８８，０．７３５）である。前記研究はＯＳに対する統計的検出力は高くないが、現在の標準的な治療と比べ、より低いＨＲとより大きな中央生存期間の改善が見られるという点において有意な改善があることは、極めて予想外のことである。
【００１２】
次に、前記研究の設計のみに基づくと、これらの改善は予想外のことであった。なぜなら、該研究は２ヶ月（１種の活性薬剤による治療を受けたＳＴＳの各種患者の公開済臨床データからの、臨床的評価に基づく見積もり）から３ヶ月のＰＦＳの改善を検出できるように設計されたものだからである。すなわち、研究設計上、４週の改善は成功とみなされる。オララツマブとドキソルビシンの組み合わせでは、ＰＦＳの１２週の改善が見られた。この組み合わせは前記研究が成功とみなされる研究要件の３倍の値を示した。このことは、標準的な治療に基づいて、あるいは本研究が設計され、開始された時点での先行技術に基づいて予測される研究成果を上回る、予期せぬ利益が存在することを示している。現在利用可能な、最近研究が行われた上記の各種治療法に対してＰＦＳおよびＯＳの比較を行うと、前記結果は注目に値するものであり、明瞭な予期せぬ利益が存在することを証明している。
【００１３】
本発明の第一の局面においては、軟部肉腫を有する患者を治療する方法が提供され、該方法は該方法を必要とする前記患者にオララツマブおよびドキソルビシンを投与することを含む。本発明の好ましい一局面においては、オララツマブは約１５ｍｇ／ｋｇの投与量で投与される。本発明の他の一局面において、ドキソルビシンは約６０ｍｇ／ｍ２または約７５ｍｇ／ｍ２の投与量で投与される。本発明の好ましい一局面においては、ドキソルビシンは約７５ｍｇ／ｍ２の投与量で投与される。本発明のさらなる他の好ましい一局面においては、オララツマブはドキソルビシンが投与されるよりも前に投与される。本発明の好ましい一局面においては、前記軟部肉腫は平滑筋肉腫である。
【００１４】
本発明の他の局面においては、キットがオララツマブおよびドキソルビシンを含み、ここで該オララツマブおよび該ドキソルビシンは同時に、別々に、または順次投与されるものである。
【００１５】
本発明のさらなる他の局面は、オララツマブ、ならびに薬理学的に許容される担体、希釈剤、および賦形剤のうち１種または複数種、を含む医薬組成物と、ドキソルビシン、ならびに薬理学的に許容される担体、希釈剤、および賦形剤のうち１種または複数種、を含む医薬組成物と、を含んだキットであって、ここで前記オララツマブおよび前記ドキソルビシンは同時に、別々に、または順次投与されるものである。
【００１６】
本発明の他の局面は、オララツマブ、ならびに薬理学的に許容される担体、希釈剤、および賦形剤のうち１種または複数種、を含む医薬組成物の、薬理学的に許容される担体、希釈剤、および賦形剤のうち１種または複数種を含むドキソルビシンの医薬組成物との組み合わせであって、ここで前記オララツマブおよび前記ドキソルビシンは、軟部肉腫の治療における使用のために同時に、別々に、または順次投与されるものである。
【００１７】
本発明のさらなる他の一局面は、軟部肉腫の治療のための医薬の製造におけるオララツマブの使用であって、ここで前記医薬はドキソルビシンとともに同時に、別々に、または順次投与されるものである。
【００１８】
本発明はまた、軟部肉腫の治療において同時に、別々に、または順次使用するのための、オララツマブとドキソルビシンの組み合わせに関する。
【００１９】
オララツマブをドキソルビシンと組み合わせて同時に、別々に、または順次に軟部肉腫の治療に使用することは本発明の他の一局面である。
【００２０】
上記開示の医薬組成物、上記開示の使用、上記開示の組み合わせ、および／または上記開示の使用のためのオララツマブ、と関連した本発明の好ましい一局面においては、前記オララツマブは約１５ｍｇ／ｋｇの投与量で投与される。
【００２１】
上記開示の医薬組成物、上記開示の使用、上記開示の組み合わせ、および／または上記開示の使用のためのオララツマブ、と関連した本発明の他の一局面においては、前記ドキソルビシンは約６０ｍｇ／ｍ２または約７５ｍｇ／ｍ２の投与量で投与される。
【００２２】
上記開示の医薬組成物、上記開示の使用、上記開示の組み合わせ、および／または上記開示の使用のためのオララツマブ、と関連した本発明の好ましい一局面においては、前記ドキソルビシンは約７５ｍｇ／ｍ２の投与量で投与される。
【００２３】
上記開示の医薬組成物、上記開示の使用、上記開示の組み合わせ、および／または上記開示の使用のためのオララツマブ、と関連した本発明のさらなる他の好ましい一局面においては、前記オララツマブは前記ドキソルビシンが投与されるよりも前に投与される。
【００２４】
上記開示の医薬組成物、上記開示の使用、上記開示の組み合わせ、および／または上記開示の使用のためのオララツマブ、と関連した本発明のさらなる他の好ましい一局面においては、前記軟部肉腫は平滑筋肉腫である。
【００２５】
本発明はまた、次に列挙する、本明細書において別の場所でさらに記載される、限定されない態様を意図する。
【００２６】
上記開示の各種局面に関して、軟部腫瘍は、平滑筋肉腫、胞状軟部肉腫、軟骨芽細胞骨肉腫、軟骨肉腫、明細胞肉腫、子宮内膜間質肉腫、上皮性肉腫（epithelial sarcoma）、類上皮、骨外性粘液性軟骨肉腫、線維粘液肉腫、線維肉腫、再発性皮膚線維肉腫における線維肉腫性変化、血管周囲細胞腫、高悪性度の未分化肉腫、脂肪肉腫、悪性線維性組織球腫、悪性グロムス腫瘍、悪性末梢神経鞘腫瘍、悪性単発性線維性腫瘍、悪性紡錘細胞肉腫、ラブドイド形質を有する悪性紡錘細胞腫瘍、粘液線維肉腫、粘液性軟骨肉腫、粘液性脂肪肉腫、粘液性肉腫、神経線維肉腫、骨肉腫、多形性肉腫（左大腿部の高悪性度の紡錘性および多型性肉腫、低分化円形細胞肉腫、肉腫、平滑筋腫瘍、単発性線維性腫瘍、紡錘細胞肉腫、未分化、を含む）、横紋筋肉腫、滑膜肉腫、未分化肉腫、および未分化子宮肉腫を含むが、これらに限定されない疾患である。前記軟部肉腫は平滑筋肉腫および他の軟部肉腫からなる群より選択されてもよい。前記軟部肉腫は進行期のものであってよい。
【００２７】
本発明の好ましい一態様においては、治療において別々に、同時に、または順次使用するためのオララツマブおよびドキソルビシンを含む組み合わせまたは医薬組成物が提供され、ここで、前記組み合わせまたは医薬組成物は非経口的に投与される。
【００２８】
本発明の好ましい一態様においては、治療において別々に、同時に、または順次使用するためのオララツマブとドキソルビシンの組み合わせが提供され、ここで、前記オララツマブは２１日周期で第１日目および第８日目に投与され、オララツマブの各投与量は約１０ｍｇ／ｋｇから約１８ｍｇ／ｋｇの範囲内である。好ましくは、前記投与量は約１３．５ｍｇ／ｋｇから約１６．５ｍｇ／ｋｇの範囲内であり、最も好ましくは約１５ｍｇ／ｋｇである。好ましくは、患者は疾患の進行のエビデンスが確認されるまで２１日サイクルで治療されるべきである。
【００２９】
本発明の他の好ましい一態様においては、治療において別々に、同時に、または順次使用するためのオララツマブとドキソルビシンの組み合わせが提供され、ここで、前記ドキソルビシンは２１日周期で第１日目および第８日目に投与され、ドキソルビシンの各投与量は約６０ｍｇ／ｍ２から約７５ｍｇ／ｍ２の範囲内である。好ましくは、前記投与量は約６０ｍｇ／ｍ２であり、最も好ましくは約７５ｍｇ／ｍ２である。
【００３０】
本発明のさらなる好ましい一態様においては、治療において順次使用するためのオララツマブおよびドキソルビシンを含む組み合わせが提供され、ここで、前記ドキソルビシンはオララツマブが投与された後で投与される。
【００３１】
本発明の他の一態様においては、治療において順次使用するためのオララツマブおよびドキソルビシンを含む組み合わせが提供され、ここで、前記ドキソルビシンはオララツマブが投与された１時間後に投与される。
【００３２】
本発明はまた、間隔をあけて繰り返しオララツマブを投与することを提供する。好ましくは、オララツマブが間隔をあけて繰り返し投与される際、前記ドキソルビシンはオララツマブが投与された後に投与される。他の一態様においては、オララツマブが間隔をあけて繰り返し投与される際、前記ドキソルビシンはオララツマブが投与された１時間後に投与される。
【００３３】
本発明はまた、軟部肉腫の治療においてドキソルビシンと組み合わせて別々に、同時に、別々に、または順次使用するためのオララツマブを提供し、ここで、前記オララツマブは約１５ｍｇ／ｋｇの投与量で投与される。
【００３４】
本発明はまた、軟部肉腫の治療においてドキソルビシンと組み合わせて同時に、別々に、または順次使用するためのオララツマブを提供し、ここで、前記オララツマブは約１５ｍｇ／ｋｇの投与量で投与され、前記オララツマブはドキソルビシンが投与される前に投与される。
【００３５】
本発明はまた、軟部肉腫の治療においてドキソルビシンと組み合わせて同時に、別々に、または順次使用するためのオララツマブを提供し、ここで、前記オララツマブは約１５ｍｇ／ｋｇの投与量で投与され、前記ドキソルビシンは約６０ｍｇ／ｍ２または約７５ｍｇ／ｍ２の投与量で投与される。
【００３６】
本発明はまた、軟部肉腫の治療においてドキソルビシンと組み合わせて同時に、別々に、または順次使用するためのオララツマブを提供し、ここで、前記オララツマブは約１５ｍｇ／ｋｇの投与量で投与され、前記ドキソルビシンは約６０ｍｇ／ｍ２または約７５ｍｇ／ｍ２の投与量で投与され、前記オララツマブは前記ドキソルビシンが投与される前に投与される。
【００３７】
本発明はまた、軟部肉腫の治療においてドキソルビシンと組み合わせて同時に、別々に、または順次使用するためのオララツマブを提供し、ここで、前記ドキソルビシンは約７５ｍｇ／ｍ２の投与量で投与され、前記オララツマブは前記ドキソルビシンが投与される前に投与される。
【００３８】
好ましくは、本発明はまた、軟部肉腫の治療においてドキソルビシンと組み合わせて同時に、別々に、または順次使用するためのオララツマブを提供し、ここで、前記オララツマブは約１５ｍｇ／ｋｇの投与量で投与され、前記ドキソルビシンは約７５ｍｇ／ｍ２の投与量で投与される。
【００３９】
本発明はまた、軟部肉腫の治療においてドキソルビシンと組み合わせて同時に、別々に、または順次使用するためのオララツマブを提供し、ここで、前記オララツマブは約１５ｍｇ／ｋｇの投与量で投与され、前記ドキソルビシンは約７５ｍｇ／ｍ２の投与量で投与され、前記オララツマブは前記ドキソルビシンが投与される前に投与される。
【００４０】
本発明はまた、軟部肉腫の治療においてドキソルビシンと組み合わせて同時に、別々に、または順次使用するためのオララツマブを提供し、ここで、前記オララツマブおよび前記ドキソルビシンは２１日周期で投与され、前記オララツマブは約１５ｍｇ／ｋｇの投与量で投与され、前記ドキソルビシンは約７５ｍｇ／ｍ２の投与量で投与され、前記オララツマブは前記ドキソルビシンが投与される前に投与される。
【００４１】
本発明はまた、軟部肉腫の治療においてドキソルビシンと組み合わせて同時に、別々に、または順次使用するためのオララツマブを提供し、ここで、前記オララツマブは約１５ｍｇ／ｋｇの投与量で投与され、前記軟部肉腫は平滑筋肉腫である。
【００４２】
本発明はまた、軟部肉腫の治療においてドキソルビシンと組み合わせて同時に、別々に、または順次使用するためのオララツマブを提供し、ここで、前記オララツマブは約１５ｍｇ／ｋｇの投与量で投与され、前記オララツマブは前記ドキソルビシンが投与される前に投与され、前記軟部肉腫は平滑筋肉腫である。
【００４３】
本発明はまた、軟部肉腫の治療においてドキソルビシンと組み合わせて同時に、別々に、または順次使用するためのオララツマブを提供し、ここで、前記オララツマブは約１５ｍｇ／ｋｇの投与量で投与され、前記ドキソルビシンは約６０ｍｇ／ｍ２または約７５ｍｇ／ｍ２の投与量で投与され、前記軟部肉腫は平滑筋肉腫である。
【００４４】
本発明はまた、軟部肉腫の治療においてドキソルビシンと組み合わせて同時に、別々に、または順次使用するためのオララツマブを提供し、ここで、前記オララツマブは約１５ｍｇ／ｋｇの投与量で投与され、前記ドキソルビシンは約６０ｍｇ／ｍ２または約７５ｍｇ／ｍ２の投与量で投与され、前記オララツマブは前記ドキソルビシンが投与される前に投与され、前記軟部肉腫は平滑筋肉腫である。
【００４５】
本発明はまた、軟部肉腫の治療においてドキソルビシンと組み合わせて同時に、別々に、または順次使用するためのオララツマブを提供し、ここで、前記ドキソルビシンは約７５ｍｇ／ｍ２の投与量で投与され、前記オララツマブは前記ドキソルビシンが投与される前に投与され、前記軟部肉腫は平滑筋肉腫である。
【００４６】
好ましくは、本発明はまた、軟部肉腫の治療においてドキソルビシンと組み合わせて同時に、別々に、または順次使用するためのオララツマブを提供し、ここで、前記オララツマブは約１５ｍｇ／ｋｇの投与量で投与され、前記ドキソルビシンは約７５ｍｇ／ｍ２の投与量で投与され、前記軟部肉腫は平滑筋肉腫である。
【００４７】
本発明はまた、軟部肉腫の治療においてドキソルビシンと組み合わせて同時に、別々に、または順次使用するためのオララツマブを提供し、ここで、前記オララツマブは約１５ｍｇ／ｋｇの投与量で投与され、前記ドキソルビシンは約７５ｍｇ／ｍ２の投与量で投与され、前記オララツマブは前記ドキソルビシンが投与される前に投与され、前記軟部肉腫は平滑筋肉腫である。
【００４８】
本発明はまた、軟部肉腫の治療においてドキソルビシンと組み合わせて同時に、別々に、または順次使用するためのオララツマブを提供し、ここで、前記オララツマブおよび前記ドキソルビシンは２１日周期で投与され、前記オララツマブは約１５ｍｇ／ｋｇの投与量で投与され、前記ドキソルビシンは約７５ｍｇ／ｍ２の投与量で投与され、前記オララツマブは前記ドキソルビシンが投与される前に投与され、前記軟部肉腫は平滑筋肉腫である。
【００４９】
上記発明はまた、約９８．９週の中央ＯＳ（９０％信頼区間［ＣＩ］：８９．６，ＮＥ［ＮＥは限界に到達しないことを表す］）（９５％ＣＩ：７０．９，ＮＥ）、または少なくとも７０．９週の中央ＯＳを提供するオララツマブとドキソルビシンの組み合わせを提供する。本発明はまた、約２９．９週の中央ＰＦＳ（９０％ＣＩ：２３．７，３６．０）（９５％ＣＩ：２２．３，３６．７）、または少なくとも２２．３週の中央ＰＦＳを提供するオララツマブとドキソルビシンの組み合わせを提供する。本発明はまた、ドキソルビシン単独（標準的な治療）と比べ、ＯＳにおいて約４０週の改善を提供するオララツマブとドキソルビシンの組み合わせを提供する。本発明はまた、ドキソルビシン単独（標準的な治療）と比べ、ＰＦＳにおいて約１２週の改善を提供するオララツマブとドキソルビシンの組み合わせを提供する。本発明はまた、前述の予期せぬ利益の組み合わせを提供する。
【００５０】
本発明はまた、ここに開示される各種局面のオララツマブを提供する。オララツマブはヒトＰＤＧＦＲαに対して特異的な抗体であり、表１に開示される配列を有する：（１）６個のＣＤＲアミノ酸配列（ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２、ＣＤＲＨ３、ＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２、ＣＤＲＬ３）；（２）重鎖可変領域（ＶＨ）および軽鎖可変領域（ＶＬ）；（３）重鎖および軽鎖；または（４）２個の重鎖および２個の軽鎖。
【００５１】
ここで用いられる「軟部肉腫」または「ＳＴＳ」という語は、脂肪、筋肉、神経、線維組織、血管、または深部皮膚組織等の軟部または結合組織に発生する悪性腫瘍を表す。これらは全て間葉由来である。ＳＴＳには５０を超える組織学的亜型が同定されている。本研究には、平滑筋肉腫および「その他の肉腫」が亜型として含められた。非平滑筋肉腫の軟部肉腫亜型は人口に対する有病率が低いため、本研究において総称的に「その他の肉腫」として表した。これは以下に議論される統計学上の目的のためである。ここで言及される「軟部肉腫」または「ＳＴＳ」の定義は次の通りである：胞状軟部肉腫、軟骨芽細胞骨肉腫、軟骨肉腫、明細胞肉腫、子宮内膜間質肉腫、上皮性肉腫（epithelial sarcoma）、類上皮、骨外性粘液性軟骨肉腫、線維粘液肉腫、線維肉腫、再発性皮膚線維肉腫における線維肉腫性変化、血管周囲細胞腫、高悪性度の未分化肉腫、平滑筋肉腫、脂肪肉腫、悪性線維性組織球腫、悪性グロムス腫瘍、悪性末梢神経鞘腫瘍、悪性単発性線維性腫瘍、悪性紡錘細胞肉腫、ラブドイド形質を有する悪性紡錘細胞腫瘍、粘液線維肉腫、粘液性軟骨肉腫、粘液性脂肪肉腫、粘液性肉腫、神経線維肉腫、骨肉腫、多形性肉腫（左大腿部の高悪性度の紡錘性および多型性肉腫、低分化円形細胞肉腫、肉腫、平滑筋腫瘍、単発性線維性腫瘍、紡錘細胞肉腫、未分化、を含む）、横紋筋肉腫、滑膜肉腫、未分化肉腫、および未分化子宮肉腫。病態の性質および腫瘍の起源により、患者は上記に例示された亜型のうち１つまたは複数と診断される可能性がある。しかし、診断は上記亜型に限定されない。
【００５２】
本研究で例示される亜型を含むＳＴＳの治療の選択肢は、依然として限られたものである。長きにわたる取り組みにもかかわらず、延命効果はわずかにしか改善されていない。ドキソルビシンとの組み合わせにおいても、臨床的利益はわずかしか示されていない。ＳＴＳの患者に延命効果をもたらす新たな治療選択肢に対する、未だ満たされていない高度な臨床的需要が存在しており、本発明ではそれを提供する。
【００５３】
ここで用いられる「進行」ＳＴＳという語は限定されないが、例えば次の基準のいずれを表してもよい。（１）切除不能であること、（２）転移性であること、（３）組織学的または細胞学的に病状進行が確認されること、または（４）手術または放射線による治療が不可能であること。
【００５４】
「血小板由来増殖因子受容体アルファ」、「血小板由来増殖因子受容体α」、「ＰＤＧＦＲアルファ」、「ＰＤＧＦＲα」、「ＰＤＧＦアルファ受容体」、および「ＰＤＧＦα受容体」という語は、特に断りがない限り、本明細書において互換的に使用され、ヒト血小板由来増殖因子を結合するヒトＩＩＩ型受容体チロシンキナーゼ、または機能的に活性なその変異型を意味することが意図される。ＰＤＧＦＲαの具体例として、例えばＧｅｎＢａｎｋ（登録商標）アクセッション番号ＮＭ＿００６２０６．４に提供されるヌクレオチド配列によってコードされるヒトポリペプチド、またはＧｅｎＢａｎｋ（登録商標）アクセッション番号ＮＰ＿００６１９７．１に提供されるポリペプチド配列によってコードされるヒトタンパク質が挙げられる。
【００５５】
ＰＤＧＦＲαは血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）−ＡＡ、−ＡＢ、−ＢＢ、および−ＣＣによって活性化される受容体チロシンキナーゼである。これらの増殖因子は同時に２個の受容体に結合するジスルフィド連結ポリペプチド鎖からなる二量体分子で、受容体の二量体化、自己リン酸化、および下流の細胞内シグナル伝達を誘導する。ＰＤＧＦＲαは多くの間葉構造に発現する。従って、ＰＤＧＦＲαは発生の初期およびその後のステージにおいて重要な役割を果たす。
【００５６】
ここで用いられる「オララツマブ」という語―ＩＭＣ−３Ｇ３、ＣＡＳ登録番号１０２４６０３−９３−７としても知られる―は、それぞれ配列番号９に示すアミノ酸配列を有する２個の重鎖と、それぞれ配列番号１０に示すアミノ酸配列を有する２個の軽鎖と、を有する抗ＰＤＧＦＲα抗体のことをいう。米国特許第８，１２８，９２９号および第８，５７４，５７８号。
【００５７】
オララツマブは、ヒトＰＤＧＦＲαを特異的に標的とする、ＩｇＧ１アイソタイプの組換えヒトモノクローナル抗体である。該抗体はＰＤＧＦＲαに対して高い親和結合を有し、血小板由来増殖因子−ＡＡ（ＰＤＧＦ−ＡＡ）、−ＢＢ、および−ＣＣリガンドが該受容体に結合するのをブロックする。その結果、オララツマブは、リガンド誘導性受容体自己リン酸化、および下流シグナル伝達分子であるプロテインキナーゼＢ（Ａｋｔ）およびマイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＡＰＫ）のリン酸化を阻害する。オララツマブはヒトの各種腫瘍細胞株の増殖および成長を阻害する。
【００５８】
ここで用いられる「抗体」という語には、４個のポリペプチド鎖、ジスルフィド結合により互いに結合する２個の重（Ｈ）鎖および２個の軽（Ｌ）鎖、を有する免疫グロブリン分子が含まれる。個々の鎖は、同様なサイズ（１１０〜１２５アミノ酸）と構造を有するが異なった機能を持つドメインに折りたたまれ得る。抗体をここでは「Ａｂ」と略記する場合がある。
【００５９】
軽鎖は１個の可変領域（ＶＬ）および／または１個の定常領域（ここではCLと略す）を有し得る。ヒト抗体（免疫グロブリン）の軽鎖はカッパ（Ｋ）軽鎖またはラムダ（λ）軽鎖のいずれかである。ここで用いられるＶＬという表記は、カッパ型軽鎖（ＶＫ）由来の可変領域およびラムダ型軽鎖（Ｖλ）由来の可変領域の両者を含むことを意図する。重鎖もまた、１個の可変領域（ＶＨ）および／または、抗体のクラスまたはアイソタイプによっては、３個または４個の定常領域（ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、およびＣＨ４）（ここではＣＨと総称する）を有し得る。ヒトにおいては、アイソタイプはＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、およびＩｇＭであり、ＩｇＡおよびＩｇＧはさらにサブクラスまたはサブタイプ（ＩｇＡ１〜２およびＩｇＧ１〜４）に分かれる。本発明には上述のいずれのクラスまたはサブクラスの抗体も含まれる。ヒトＩｇＧ１は本発明の抗体にとって好ましいアイソタイプである。
【００６０】
超可変または相補性決定領域（以後、「ＣＤＲ」）と呼ばれる３つの領域がＶＬおよびＶＨのそれぞれに見られ、それらはフレームワーク（以後、「ＦＲ」）と呼ばれる、より可変性の低い領域によって支えられている。特定のＣＤＲ領域またはドメインに対するアミノ酸の割り当ては、例えば次のような、しかし限定されない各種規則に従って行うことができる：Kabat (Kabat, et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242 (1991))、Chothia (Chothia, et al., J Mol Biol. 1987; 196: 901-917. Chothia, et al., Nature. 1989; 342: 877-883)、および／または Oxford Molecular’s AbM antibody modelling software (http://www.bioinf.org.uk/abs/)。ＶＨおよびＶＬはそれぞれ３個のＣＤＲと４個のＦＲとからなり、アミノ末端からカルボキシ末端に向かって次の順番で並んでいる：ＦＲ１−ＣＤＲ１−ＦＲ２−ＣＤＲ２−ＦＲ３−ＣＤＲ３−ＦＲ４。ＶＬおよびＶＨドメインからなる抗体の部分はＦｖ（Fragment variable）と表記され、抗原結合部位を構成する。
【００６１】
「単離された」という語は、細胞環境で見られる他の高分子種が含まれない、または実質的に含まれない、抗体、タンパク質、ペプチド、または核酸のことをいう。ここで用いられる「実質的に含まれないした」という語は、対象タンパク質ペプチド、または核酸が、存在する高分子種のうち８０％超（モル換算）、好ましくは９０％超、より好ましくは９５％超を占めることを意味する。「単離された」抗体の例としては、アフィニティー精製された抗体、ハイブリドーマまたは他の細胞株でｉｎ  ｖｉｔｒｏで作成された抗体、およびトランスジェニックマウスから得られたヒト抗体が挙げられる。
【００６２】
ここで用いられる「モノクローナル」という語は、実質的に均一な抗体の集団から得られた抗体のことをいう。例えば、該集団を構成する個々の抗体は、天然に発生し得る突然変異、または存在し得る小規模な翻訳後変異を除けば、実質的に同一である。モノクローナル抗体は高度に特異的であり、単一の抗原部位（決定基またはエピトープとしても知られる）を標的とする。また、典型的には異なる決定基を標的とする複数の抗体を含む従来の（ポリクローナル）抗体製剤とは対照的に、モノクローナル抗体はそれぞれ抗原上の単一の決定基を標的とする。「モノクローナル」という修飾語は、実質的に均一な抗体の集団から得られた抗体の特徴を示すものであって、何らかの特定の方法により抗体を生成する必要性があるものとして解釈されるべきではない。モノクローナル抗体をここでは「ｍＡｂ」と略記する場合がある。
【００６３】
ここで用いられる「ヒト抗体」という語には、ヒト生殖系列免疫グロブリン配列に相当する可変および定常領域を有する抗体が含まれる（上記 Kabat et al. に記載の通り）。本発明のヒト抗体は、ヒト生殖系列免疫グロブリン配列によってコードされないアミノ酸残基（例えばｉｎ  ｖｉｔｒｏでランダムまたは部位特異的突然変異によって、またはｉｎ  ｖｉｖｏで体細胞突然変異によって、導入された突然変異）を、例えばＣＤＲ内に含んでもよい。前記ヒト抗体は、あるアミノ酸残基、例えばヒト生殖系列免疫グロブリン配列によってコードされない活性増強アミノ酸残基、によって置換された少なくとも１個の部位を有し得る。しかし、ここで用いられる「ヒト抗体」という語は、マウス等の他の種の哺乳類の生殖系列に由来するＣＤＲ配列がヒトフレームワーク配列上に移植された抗体を含むことは意図されない。ここで用いられる「ヒト抗体」を生成する方法は、ヒトにおいて産生された抗体を含むことは意図されない。
【００６４】
「組換えヒト抗体」という語は、組換え手段によって調製された、発現された、創出された、または単離されたヒト抗体を包含する。例として宿主細胞に導入された組換え発現ベクターを用いて発現された抗体、組換えコンビナトリアルヒト抗体ライブラリーから単離された抗体、ヒト免疫グロブリン遺伝子のトランスジェニック動物から単離された抗体、および、ヒト免疫グロブリン遺伝子配列を他のＤＮＡ配列と継ぎ合わせることを伴う任意のその他の手段によって調製された、発現された、創出された、または単離された抗体、等が挙げられる。このような組換えヒト抗体はヒト生殖系列免疫グロブリン配列に由来する可変および定常領域を有する。
【００６５】
従って、本発明の抗体は限定されないが、例として、単離された抗体、ヒト抗体、ヒト化抗体、組換えヒト抗体、モノクローナル抗体、その消化断片、特定部位、およびバリアントが挙げられ、これらには抗体模倣物、または抗体の構造および／または機能を模した抗体の部分を有するもの、またはその特定の断片または一部も含まれ、それぞれ少なくとも１個のＣＤＲを有する。
【００６６】
抗体またはその断片の特異性は親和性に基づいて決定することが出来る。親和性は抗原の抗体からの解離に対する平衡定数（ＫＤ）によって表され、抗原決定基と抗原結合部位の間の結合強度の尺度となる。親和性は、例えば、表面プラズモン共鳴によって測定することが出来る。
【００６７】
本発明の抗体は細胞外ドメインセグメント（以下、単に「ドメイン」または「ＥＣＤ］と呼ぶ）に位置するＰＤＧＦＲαのエピトープに結合する。ここで用いられる「エピトープ」という語は、本発明の抗体によって認識される抗原上の、個々の三次元的部位のことを表す。
【００６８】
本明細書に具体的に記載される抗体に加え、「実質的に相同な」修飾された他の抗体も、当業者に周知の各種組換えＤＮＡ技術を利用して容易に設計・製造することが出来る。例えば、フレームワーク領域は、数アミノ酸の置換、末端および内部における付加および欠失等の一次構造レベルで天然配列と相違し得る。さらには、各種の異なるヒトフレームワーク領域を単独で、または組み合わせで、本発明のヒト化免疫グロブリンのための基礎として用いてもよい。一般に、遺伝子の修飾は、部位特異的突然変異等の各種の周知の技術によって容易に成し遂げることが出来る。
【００６９】
本発明は、本明細書に開示されるように、ＶＨ領域のいずれかもしくはその一部、またはＶＨ  ＣＤＲのいずれか、またはその任意のバリアント、を含む抗ＰＤＧＦＲα抗体重鎖をコードする核酸配列を包含する。本発明はまた、本明細書に開示されるように、ＶＬ領域のいずれかもしくはその一部、またはＶＬ  ＣＤＲのいずれか、またはその任意のバリアント、を含む抗ＰＤＧＦＲα抗体軽鎖をコードする核酸配列を包含する。本発明はまた、オララツマブの核酸配列である配列番号１１および１２を、それぞれ重鎖および軽鎖のものとして包含する。本発明の抗体は、オララツマブと同一のＣＤＲ領域、ならびに／またはオララツマブと同一の軽鎖可変領域および／もしくは重鎖可変領域を有する抗体を包含する。
【００７０】
本発明の抗体は、当該分野で公知の方法により製造してよい。これらの方法の例として、Kohler and Milstein, Nature 256: 495-497 (1975)；およびLaboratory Techniques in Biochemistry and Molecular Biology, Volume 13 (Burdon et al. eds., Elsevier Science Publishers, Amsterdam) in Monoclonal Antibody Technology, The Production and Characterization of Rodent and Human Hybridomas (Campbell ed., 1984) に記載のトランスジェニック動物、ファージディスプレイ、および 免疫学的方法の使用、ならびに Huse et al., Science 246: 1275-1281 (1989) に記載の組換えＤＮＡ法が挙げられる。
【００７１】
単一ドメイン抗体の結合の一次決定基であるアミノ酸残基はＫａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａ、ＡｂＭ、またはその組み合わせで定義されるＣＤＲの範囲内であり得るが、他の残基、例えばＶＨ−ＶＬヘテロダイマーのＶＨ−ＶＬ界面内に通常埋もれているであろう残基等も同様に含まれていてよい。
【００７２】
ベクターによる形質転換および本発明の抗体の発現にとって好ましい宿主細胞は哺乳類細胞であり、例としてＮＳ０細胞、２９３、ＳＰ２０、ＣＨＯ細胞、および、リンパ球由来の他の細胞株、例えばリンパ腫、骨髄腫、またはハイブリドーマ細胞が挙げられる。イースト等の他の真核生物宿主を代わりに使用することもできる。
【００７３】
本発明の抗体は、当該分野で公知の任意の方法で単離または精製してよい。例として、硫酸アンモニウムまたは硫酸ナトリウムによる沈殿後の食塩水に対する透析、イオン交換クロマトグラフィー、アフィニティーまたはイムノアフィニティークロマトグラフィー、およびゲル濾過またはゾーン電気泳動等が挙げられる。本発明の抗体の精製の好ましい方法の一つは、プロテインＡアフィニティークロマトグラフィーである。
【００７４】
ここで用いられる「約」とは±５％を意味する。
【００７５】
ここで用いられる「デクスラゾキサン」またはデクスラゾキサン塩酸塩は、心保護薬である。これは一般的には、ダウノルビシンまたはドキソルビシン等のアントラサイクリンの心毒性副作用から心臓を保護するために使用される。
【００７６】
ここで用いられる「治療すること」、「治療する」、または「治療」という語は、既存の症状、障害、病状、または疾患の進行もしくは重症度を抑制し、遅らせ、緩和し、減少させ、または逆転させること、あるいは病状の臨床症状を緩和することを表す。有益な、または所望の臨床結果は限定されないが、例として、症状の緩和、疾患または障害の程度の減少、疾患または障害の安定化（すなわち、該疾患または障害が悪化しないこと）、疾患または障害の進行の遅延または減速、疾患または障害の改善または一時的軽減、および疾患または障害の（部分的または全体的）寛解が挙げられ、それらが検出可能であるか検出不可能であるかを問わない。治療とは、治療を受けなかった場合に期待される生存と比較して生存が延長されることも意味し得る。治療を必要とする対象には、前記疾患に既に罹患している対象が含まれる。一態様において、本発明は医薬として使用し得る。
【００７７】
ここで用いられる「癌」および「癌性」という語は、無秩序な細胞増殖によって典型的に特徴付けられる、哺乳類における生理学的状態を表すもの、または記述するものである。良性および悪性の癌はこの定義に包含される。
【００７８】
本発明のヒト抗体はヒトに対する投与において特に有用であるが、他の哺乳類に対しても同様に投与することが出来る。従って、ここで用いられる「患者」という語は、哺乳類、好ましくはヒトのことをいう。ここで用いられる哺乳類という語は、ヒト、実験動物、ペット、および家畜等を包含することが意図されるが、これらに限定されない。
【００７９】
治療的有効量は、治療的に有益な効果が、前記抗体または抗体部分の任意の毒性または有害な効果を上回る量でもある。
【００８０】
本発明の方法においては、治療的有効量の本発明の抗体が、それを必要とする哺乳類または患者に対して投与される。さらには、本発明の医薬組成物が、治療的有効量の本発明の抗ＰＤＧＦＲα抗体または治療的有効量のドキソルビシンを含んでいてよい。
【００８１】
ここで用いられる「治療的有効量」、「有効量」、または「有効用量」という語は、必要な投薬および期間において所望の治療結果を達成するのに効果的な量のことをいう。有効量は、一当業者としての主診断医によって、公知の技術を用いて、また、類似の状況で得られた結果を観察することにより、容易に決定することができる。患者に対する有効量を決定することにおいては、多数の因子が主診断医により考慮される。それら因子の例としては、以下に限定されるものではないが、患者の種；患者のサイズ、年齢、および全身の健康；関連する特定の疾患または障害；標的部位；該疾患または障害の程度、併発、または深刻度；個々の患者の反応；特定の投与化合物；投与形態；投与する製剤のバイオアベイラビリティ上の特徴；選択された用法；併用薬の使用；投与する他の薬剤；および他の関連性のある状況等が挙げられる。治療的有効量は、治療的に有益な効果が、前記抗体または抗体部分の任意の毒性または有害な効果を上回る量でもある。
【００８２】
一般に、用法を調整することにより最適な所望の反応（例えば治療反応）が提供されてよい。治療用量を当業者に公知の常法により漸増させ、安全性と有効性を最適化してもよい。投与計画は、典型的には、単回ボーラス投与または持続投与から一日当たり複数回投与（例えば４〜６時間おき）までの範囲であるか、あるいは治療にあたる医師および患者の状態によって示される。本発明の抗体の治療的有効量の限定されない範囲の例として、０．１〜５０ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは３〜３５ｍｇ／ｋｇ、さらに好ましくは５〜２０ｍｇ／ｋｇが挙げられる。前記抗体の投与量および頻度は患者の治療にあたる医師によって決定される。例えば、１ｍｇ／ｋｇ未満〜１００ｍｇ／ｋｇ超の投与量を、毎日、週当たり３回、週１回、２週間に１回、またはそれよりも低頻度で、投与することが挙げられる。ただし、本発明は何らかの特定の投与量に限定されるものではない。
【００８３】
オララツマブは、本発明の組み合わせにおいて、広範な投与量範囲にわたり一般的に有効である。例えば、通常の投与は２１日周期で１日目および８日目に行われ、各投与量は約１０ｍｇ／ｋｇ〜約１８ｍｇ／ｋｇの範囲、好ましくは約１３．５ｍｇ／ｋｇ〜約１６．５ｍｇ／ｋｇの範囲内であり、最も好ましくは約１５ｍｇ／ｋｇである。好ましくは、患者は疾患の進行のエビデンスが確認されるまで２１日サイクルで治療されるべきである。
【００８４】
ドキソルビシンは、本発明の組み合わせにおいて、広範な投与量範囲にわたり一般的に有効であるが、ＳＴＳにおけるドキソルビシンの標準的投与量は６０ｍｇ／ｍ２または７５ｍｇ／ｍ２である。従って、例えば、２１日周期ごとの投与量は通常約６０ｍｇ／ｍ２または７５ｍｇ／ｍ２、好ましくは約７５ｍｇ／ｍ２である。ドキソルビシンを２１日周期で８回を超えて使用することは一般的に推奨されない。累積投与量が６００ｍｇ／ｍ２以上では心不全の確率が許容範囲を超えるためである。
【００８５】
一部の例では、オララツマブおよびドキソルビシンに関して、前述の範囲の下限を下回る投与量水準でも十分に適切な場合がある。一方、他の例では、より少ない、またはさらに多い投与量が用いられ、許容範囲の副作用を伴う場合がある。従って、上記の投与量範囲は、何ら本発明の範囲を限定することを意図するものではない。オララツマブとドキソルビシンの組み合わせが投与される場合、これらは上記と同様の範囲で投与される。
【００８６】
ここで用いられる、前記薬剤を用いた治療に対する患者の「有効な反応」もしくは患者の「反応性」、または「治療効果」という語は、投与によって患者に付与された臨床的または治療的利益のことをいう。ここで用いられる、本発明の治療の「予期せぬ治療効果」とは、患者において有意な毒性または有害効果を引き起こすことなく、著しい抗癌効果を生成し、それによって該患者が全体として該治療から利益を得られるようにする能力のことをいう。本発明の治療の有効性、すなわち治療効果は、癌治療の評価において一般に用いられる各種エンドポイントによって測定することが出来、限定されないが、例として次のうちの任意の１つまたは複数が挙げられる：生存の延長（ＯＳおよびＰＦＳを含む）；客観的反応（ＣＲまたはＰＲを含む）；腫瘍退縮；腫瘍重量またはサイズの減少；疾患進行までの時間の延長；生存期間の増加；より長期のＰＦＳ；改善されたＯＳ率；反応期間の増加；ならびに、クオリティオブライフの改善、および／または癌の徴候もしくは症状の改善；等。本発明は固有の抗癌剤の組み合わせを使用することに関するものであるため、本発明のいずれの任意の併用療法に対してもその有効性、すなわち治療効果を、任意に新規アプローチを用いて決定してよい。例として、血管新生に対する血漿中または尿中マーカーの測定、および放射線画像撮影による反応の測定が挙げられる。
【００８７】
ここで用いられる「疾患進行」または「進行性疾患」（ＰＤ）という語は、本明細書において互換的に使用され、標的病変の直径の合計が、研究中の最小和（ベースライン和が研究中で最小である場合はそれを含む）に対して少なくとも２０％増加することをいう。上記の２０％の相対的増加に加え、前記の合計は少なくとも５ｍｍの絶対的増加も示す必要がある。１つまたは複数の新たな病変が現れた場合も進行とみなされる。
【００８８】
ここで用いられる「部分的反応」（ＰＲ）とは、標的病変の直径の合計が、ベースライン和の直径に対して少なくとも３０％減少することを意味する。
【００８９】
ここで用いられる「完全反応」（ＣＲ）という語は、全ての標的病変の消失のことをいう。任意の病的リンパ節（標的であるかどうかに関わりなく）が短軸で１０ｍｍ未満にまで縮小する必要がある。
【００９０】
ここで用いられる「安定疾患」（ＳＤ）という語は、研究中の最小和直径に対して、腫瘍径がＰＲと認められるほど十分には縮小しないか、またはＰＤと認められるほど十分に増加しないことをいう。
【００９１】
ここで用いられる「客観的反応」（ＯＲ）という語は、ＣＲまたはＰＲを含む測定可能な反応のことをいう。
【００９２】
ここで用いられる「全生存」（ＯＳ）という語は、患者が診断または治療の時点から所定の期間、例えば１年間または５年間等、生存し続けることをいう。本発明の好ましい一局面において、全生存は、研究における無作為化の日から、任意の理由による死亡日までの時間として本研究のために定義される。患者が追跡期間の最後まで生存している場合、または患者が追跡不能となった場合、ＯＳは該患者が生存していたことが知られる最後の日付で打ち切りとなる。
【００９３】
ここで用いられる「無増悪生存」（ＰＦＳ）という語は、癌の進行または悪化を伴うことなく患者が生存し続けることをいう。本発明の好ましい一局面において、ＰＦＳは、研究における無作為化の日から、RECIST（Version 1.1）で定義される客観的な進行が最初にX線撮影で記録されるまで、または任意の理由による死までの時間と定義される。事前に進行が報告されずに死亡した患者は、その患者の死亡日に進行が起こったとみなす。進行の無い患者、または追跡不能となった患者は、その患者の最後のＸ線撮影による腫瘍評価の日付で打ち切りとする。
【００９４】
ここで用いられる「生存の延長」または「延長された生存」という語は本明細書において互換的に使用され、ｉ）未治療患者、ｉｉ）特定の併用療法において抗腫瘍剤を全ては使用せずに治療を受けた患者、またはｉｉｉ）対照治療プロトコル、と比較して、治療を受けた患者においてＯＳまたはＰＦＳが増加することをいう。生存の観察は、治療の開始後、または最初の癌の診断後、少なくとも約１ヶ月、少なくとも約２ヶ月、少なくとも約４ヶ月、少なくとも約６ヶ月、少なくとも約９ヶ月、または少なくとも約１年、または少なくとも約２年、または少なくとも約３年、または少なくとも約４年、または少なくとも約５年、または少なくとも約１０年等行われる。
【００９５】
抗ＰＤＧＦＲα抗体を、抗血管新生剤、化学療法剤、および抗腫瘍薬等の、しかし限定されない、１種または複数種の他の抗癌治療との組み合わせで投与することが出来る。任意の適した抗がん剤を使用することができ、その例として化学療法剤、放射線、抗体、またはこれらの組み合わせが挙げられる。抗がん剤は限定されないが、例として抗腫瘍薬、抗体、アジュバント、およびプロドラッグが挙げられる。本発明の抗ＰＤＧＦＲα抗体は、腫瘍増殖、または血管新生、または細胞外基質タンパク質／因子、または上皮／間葉転移、に関与する他の細胞表面受容体を阻害および／または調節する抗体および／または小分子とともに投与することが出来る。前記抗体は、１種または複数種の適したアジュバント、例えばサイトカイン、またはケモカイン、腫瘍関連抗原、およびペプチド等の限定されない他の免疫刺激剤等と組み合わせて投与することも出来る。
【００９６】
本発明においては、本発明の抗ＰＤＧＦＲα抗体を投与するために任意の適した方法または経路を用いることが出来、さらに任意に抗腫瘍薬および／または他の受容体のアンタゴニストを同時投与する事が出来る。本発明の併用療法において、前記抗ＰＤＧＦＲα抗体は他の薬剤を用いた治療を開始する前に、治療中に、治療と実質的に同時に、または治療後に、投与することが出来る。投与経路の例としては、経口、静脈内、腹腔内、皮下、または筋肉内等の投与が挙げられる。静脈内投与が好ましい経路である。ただし、本発明は何らかの特定の投与の方法または経路に限定されるものではないことが強調されるべきである。
【００９７】
本発明の抗ＰＤＧＦＲα抗体を治療の目的で哺乳類において使用する際、該抗体は好ましくは医薬組成物として製剤される。このような医薬組成物、およびそれを調製する過程は当該分野に置いて周知である。例えば、Remington: The Science and Practice of Pharmacy (Gennaro A., et al., eds., 19th ed., Mack Publishing Co., 1995) を参照のこと。
【００９８】
オララツマブおよびドキソルビシンは、好ましくは、前記化合物を体内で利用可能にする任意の経路で投与される医薬組成物として製剤される。投与の経路は様々であり得るが、前記薬剤の物性ならびに患者および介護者の利便性によって限定され得る。好ましくは、オララツマブとドキソルビシンの組成物は、静脈内（ｉ．ｖ．）投与等の非経口投与用のものである。このような医薬組成物、およびそれを調製する過程は当該分野に置いて周知である。（例えば上記文献を参照のこと）。投与の経路は様々であり得るが、前記薬剤の物性ならびに患者および介護者の利便性によって限定され得る。
【００９９】
オララツマブおよびドキソルビシンは同時に、別々に、または順次投与されてよい。ここで用いられる「組み合わせて」という語は、オララツマブおよびドキソルビシンを同時に、任意の順番で順次に、またはその任意の組み合わせで、投与することをいう。この２種の化合物は別々の医薬組成物として投与されてよい。オララツマブは、ドキソルビシンの投与よりも前に、投与と同時に、もしくは投与後に、またはそのいくつかの組み合わせで、投与され得る。好ましい一局面においては、ドキソルビシンはオララツマブが投与された後に投与される。他の一局面においては、ドキソルビシンはオララツマブが投与された１時間後に投与される。オララツマブが間隔をあけて繰り返し投与される場合（例えば標準的な治療過程の途中において）、ドキソルビシンは、オララツマブの各投与の前に、各投与と同時に、もしくは各投与後に、またはそのいくつかの組み合わせで、投与するか、あるいは、オララツマブを用いた治療と関連した異なる間隔で、またはオララツマブを用いた治療過程の前に、治療過程の任意のタイミングで、もしくは治療過程後に、単回投与または一連の投与で、投与することが出来る。オララツマブが間隔をあけて繰り返し投与される好ましい一局面において、ドキソルビシンはオララツマブが投与された後に投与される。オララツマブが間隔をあけて繰り返し投与される他の一局面において、ドキソルビシンはオララツマブが投与された１時間後に投与される。
【０１００】
ここで用いられる「キット」という語は、少なくとも２つの別々の容器を含むパッケージのことをいい、ここで第一の容器はオララツマブを含み、第二の容器はドキソルビシンを含む。「キット」は、これら第一および第二の容器の内容物の全部または一部を癌患者、好ましくはＳＴＳ患者に投与するための説明書も含んでいてよい。これらキットは、任意に、他の抗腫瘍薬を含む第三の容器も含んでいてよい。
【０１０１】
次の実施例では、本組み合わせの予期せぬ利益について説明する。
【０１０２】
実施例および試験
次の実施例および試験は本発明をさらに説明するものであり、決して本発明の範囲を限定する意味で解釈されるべきではない。ベクターおよびプラスミドの構築、このようなベクターおよびプラスミドへのポリペプチドをコードする遺伝子の挿入、宿主細胞へのプラスミドの導入、ならびにその遺伝子および遺伝子産物の発現および決定において用いられる方法、等の従来の方法の詳細な記載は、Sambrook, J. et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2nd ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press (1989) およびColigan, J. et al. Current Protocols in Immunology, Wiley & Sons, Incorporated (2007) 等の数多くの出版物から得ることが出来る。
【０１０３】
ヒト抗ＰＤＧＦＲα抗体の操作、発現、および精製
各抗体（米国特許第８，１２８，９２９号および第８，５７４，５７８号）において、ＰＣＲクローニング等の適した方法により、適した重鎖ヌクレオチド配列、例えばオララツマブに対して配列番号１１、を適した発現プラスミドに導入し、適した軽鎖ヌクレオチド配列、例えばオララツマブに対して配列番号１２、を適した発現プラスミドに導入する。安定な細胞株を確立するため、ＮＳＯまたはＣＨＯ細胞等の適した宿主細胞株に、直鎖化した重鎖および軽鎖プラスミドをトランスフェクトし、透析ウシ胎児血清およびグルタミン合成酵素サプリメントを含むグルタミン不含ダルベッコ改変イーグル培地等の適した培地中で培養を行う。酵素結合免疫吸着法（ＥＬＩＳＡ）によって抗体を発現するクローンをスクリーニングし、最も生産力の高いクローンをスピナーフラスコで培養する。プロテインＡアフィニティークロマトグラフィー等の適した方法で抗体を精製する。
【０１０４】
表１に、本発明の抗体のアミノ酸配列および対応する配列番号を提供する。全てのＣＤＲ配列をＫａｂａｔ法を用いて決定する。以下に開示するアミノ酸配列をコードするポリ核酸配列も、本発明の範囲に包含される。
【表１】
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【０１０５】
軟部肉腫治療においてオララツマブを使用した場合と使用しない場合とに関する、無作為化第２相試験によるドキソルビシンの有効性の評価（「研究」）
研究設計：
本研究は非盲検の、多施設の第２相試験であり、手術または放射線による治療が不可能な進行ＳＴＳの患者が、オララツマブとドキソルビシンの組み合わせ、またはドキソルビシン単独で治療を受けるものである。
全ての適格規準に適合する登録患者を、無作為にＡ群またはＢ群という２つの治療群に１：１で振り分ける。Ａ群の患者はオララツマブとドキソルビシンの組み合わせを投与され（以後、「併用群」）、Ｂ群の患者はドキソルビシンのみを投与される（以後、「ドキソルビシン群」）。本研究の無作為化はあらかじめ定義された４つのリスク因子を用いた動的割付けアルゴリズムによって行う：ＰＤＧＦＲα発現（陽性か、または陰性か）、これまでの治療ラインの数（０か、または１以上か）、腫瘍の組織型（すなわち、平滑筋肉腫か、滑膜肉腫か、または他の腫瘍型か）、およびＥＣＯＧパフォーマンスステータス（０〜１か、または２か）。この動的割り付け手順は治療群間のアンバランスを最小限にするために使用される。腫瘍型およびＰＤＧＦＲα発現を患者において決定するにあたっては、生検または以前に保管された腫瘍組織試料、いずれかからの腫瘍試料があれば十分である。生研は無作為化の２１日前以降に行う必要がある。保管された組織試料もこの時間枠内で利用可能である必要がある。
【０１０６】
併用群：併用群に無作為に割り振られた６４名の患者には、１５ｍｇ／ｋｇのオララツマブが各２１日治療周期の第１日目および第８日目に投与され、それと併せて７５ｍｇ／ｍ２のドキソルビシンが各周期の第１日目に投与される。（注意：一回目のドキソルビシン輸液に先立って前投薬が必要な場合、オララツマブ輸液前ではなく、オララツマブ輸液完了後に行う。この前投薬はオララツマブ輸液の完了後１時間以内に投与してもよい。）各ドキソルビシン輸液の（予定の、ではなく）実際の投与によって各２１日治療周期の第１日目が定義される。ここで記載した併用療法は、研究者の裁量で８周期まで継続される。第５周期から第８周期までの間、ドキソルビシンで治療される患者は、各２１日周期の第１日目のドキソルビシンに先立って、各周期の第１日目に７５０ｍｇ／ｍ２のデクスラゾキサンも（研究者の裁量で）投与されてよい。ドキソルビシンの投与量が本研究の任意の時点で減らされる場合、デクスラゾキサンの投与量もそれに従って減らされるべきであり、投与量比１０：１が維持される。例えば、ドキソルビシンが６０ｍｇ／ｍ２に減らされる場合、デクスラゾキサンも６００ｍｇ／ｍ２に減らされる。ドキソルビシンはオララツマブ輸液の完了後１時間以内に投与してもよい。ＰＤまたは他の中止基準に該当しない場合、８周期の治療を完了した併用群の患者は、続けてオララツマブ単独療法を、各２１日周期の第１日目および第８日目の投与により受ける。また、ドキソルビシンを（例えば毒性により）第８周期の終わりよりも前に中断し、かつ中止基準に該当しない場合、患者はオララツマブ単独療法を続けて受けてもよい。最初の８周期の治療中にオララツマブを中断した患者は、中止基準に該当しない場合はドキソルビシンを継続してよい（最長で８周期まで）。
【０１０７】
ドキソルビシン群：ドキソルビシン群に無作為に割り振られた６５名の患者には、７５ｍｇ／ｍ２のドキソルビシンが各周期の第１日目に投与され、研究者の裁量で８周期まで継続される。各ドキソルビシン輸液の（予定の、ではなく）実際の投与によって各２１日治療周期の第１日目が定義される。第５周期から第８周期までの間、各２１日周期の第１日目のドキソルビシンに先立って、各周期の第１日目に７５０ｍｇ／ｍ２のデクスラゾキサンも（研究者の裁量で）投与されてよい。ドキソルビシンの投与量が本研究の任意の時点で減らされる場合、デクスラゾキサンの投与量もそれに従って減らされるべきであり、投与量比１０：１が維持される。例えば、ドキソルビシンが６０ｍｇ／ｍ２に減らされる場合、デクスラゾキサンも６００ｍｇ／ｍ２に減らされる。最初の８周期の間にＰＤが発生したドキソルビシン群の患者は、オララツマブ単独療法を、オララツマブ単独療法を継続する併用群の患者と同一の投与計画および同様の期間で受けるようにクロスオーバーしてもよい。また、治療と関連した毒性で研究治療を中断した、またはドキソルビシン治療を完了してＳＤもしくはそれよりも良好な状態の、ドキソルビシン群の患者については、ＰＤが記録されてオララツマブ単独療法を受けるまでの間、研究計画と評価をそのまま続けてもよい。ドキソルビシン群患者がオララツマブ単独療法を受ける場合、ＰＤがプロトコル基準に該当する必要がある。
【０１０８】
患者は６週間毎に腫瘍反応について評価される。治療はＰＤ、許容範囲を超える毒性、ノンコンプライアンスもしくは患者の同意の撤回、または研究者による決断が発生するまで継続される。約１３０名の患者（各治療群６５名ずつ）が本研究の第２相に登録された。
【０１０９】
有効性データの分析
先に定義された研究基準の通り、本研究は、ＯＳに対する最終的な分析が行われる（最後の患者が研究薬剤の最初の投与により治療を受けた後の２４ヶ月［２年］間までの生存データを含む）時点で完了とみなされる。この時点以後、研究治療で利益を得た患者は任意に研究完了後の研究治療を受け続けてもよい。この治療延長は個別の基準で決定される。
【０１１０】
試験の所定の終了は、最後の患者が研究薬剤の最初の投与により治療を受けた２年後、および最後の患者が研究治療を中断して３０日間の安全経過観察来院を終えた時、またはオララツマブ関連の有害事象（ＡＥ）が全て解消されるまで、安定化するまで、ベースラインに戻るまで、もしくは不可逆的とみなされるまで追跡された時、いずれか最も最近のものと定義される。
【０１１１】
第２相のデータに対して、有効性データを調べる中間分析が、少なくとも８０回のＰＦＳイベントが観察された後に計画される。この中間分析では主にＰＦＳに関する有効性が評価される。ＯＳおよびＯＲ等の他の選択された副次変数も評価に加えてよい。
【０１１２】
第２相患者の有効性データの分析
ドキソルビシン群でＰＤ後にオララツマブ単独療法にクロスオーバーした患者では、クロスオーバー後の期間についてＯＳ以外の全ての有効性エンドポイントを別々にまとめる。
【０１１３】
主要有効性エンドポイント
ＰＦＳは無作為化の時点から客観的な進行が最初にX線撮影で記録されるまで、または任意の理由による死までの時間と定義される。事前に進行が報告されずに死亡した患者は、その患者の死亡日に進行が起こったとみなす。進行の無い患者、または追跡不能となった患者は、その患者の最後のＸ線撮影による腫瘍評価の日付で打ち切りとする。ベースラインまたはベースライン後のＸ線評価が利用できない場合、その患者については無作為化の日付で打ち切りとする。Ｘ線撮影来院を２回以上続けて行わなかった後に死またはＰＤが発生した場合、その行わなかった来院の前の最後のＸ線撮影来院の日付で打ち切りが発生する。ＰＤ発生の前に新規抗癌治療を利用した場合、新規治療の開始前の最後のＸ線撮影の日付で打ち切りとなる。
【０１１４】
感度解析として、報告された進行と死の実際の日付を用いてＰＦＳが定義される。これは来院の機会を逃した場合、早期中断、または新規治療開始による情報のある打ち切り（informative censoring）の回避に関わりなく行われる。さらに、症状の悪化も他の感度解析のための進行イベントとして加えられてよい。
【０１１５】
Ｋａｐｌａｎ−Ｍｅｉｅｒ法を用いて、９０％信頼区間（以後、「ＣＩ」）とともに中央ＰＦＳ期間が推定される。３ヶ月ＰＦＳも推定される。治療群間の比較が、ログランク検定を用いて行われる。ハザード比（ＨＲ）はコックス比例ハザード回帰モデルにより推定される。各層の患者数が十分である場合のみ、層別解析が行われてよい。そうでない場合、層別因子をコックスモデルの共変量として扱い、ＨＲおよび９０％信頼限界を推定してよい。
【０１１６】
補助的有効性エンドポイント
補助的有効性エンドポイントとしては、ＯＳ、客観的反応率（「ＯＲＲ」）、ならびに腫瘍ＰＤＧＦＲα発現とＰＦＳおよびＯＲＲ等の臨床結果との間の関連性などが挙げられる。該補助的エンドポイントの分析は層別因子に対して調整されてよい。
【０１１７】
ＯＳは、無作為化の日から任意の理由による死亡日までの時間として定義される。患者が追跡期間の最後に生存している場合、または追跡不能な場合、ＯＳはその患者が生存していたことが明らかな最後の日付で打ち切りとする。ＯＳの評価はＫａｐｌａｎ−Ｍｅｉｅｒ法を用いて行い、９０％ＣＩの提供により中央ＯＳが推定される。ＯＳに対するＨＲおよび９０％信頼限界は、層別因子を共変量として扱ったコックス回帰モデルから推定される。感度解析として、ドキソルビシン群の患者はクロスオーバーの日付で打ち切りとする。これはＯＳエンドポイントがクロスオーバーにより交絡するためである。
【０１１８】
ＯＲＲは、RECIST（Version 1.1）に基づく、治療開始からＰＤ／再発までの間に最良のＰＲまたはＣＲ（ＰＲ＋ＣＲ）の全体反応（overall response）を達成した患者の割合に等しい。各治療群のＯＲＲはフィッシャーの正確確率検定を用いて比較される。正確信頼限界（exact confidence bounds）（９０％ＣＩ）が決定される。
オララツマブ療法にクロスオーバーしたドキソルビシン群の患者については、最良の全体反応はオララツマブ療法の開始前と開始後に対して別々に評価される。
【０１１９】
反応者のみに対して、ＣＲ／ＰＲ（どちらか最初に記録されたもの）の測定基準が最初に満たされてからＰＤの基準が満たされた最初の日付、または死までの反応期間が測定される。反応の期間の推定はＫａｐｌａｎ−Ｍｅｉｅｒ法を用いて行い、９０％ＣＩの提供により反応の期間の中央値が推定される。再発の無い患者は、その患者の最後の客観的腫瘍評価の日付で打ち切りとする。
【０１２０】
第２相  中間分析結果
ＰＦＳ：併用群およびドキソルビシン群の中間分析（表２）では、２９．９週（９０％ＣＩ＝２３．７，３６．０）（９５％ＣＩ＝２２．３，３６．７）および１７．９週（９０％ＣＩ＝１２．７，２３．３）（９５％ＣＩ＝１２．１，２３．４）の中央ＰＦＳがそれぞれ示された。この中間分析の層別ＨＲは０．５９７（９０％ＣＩ＝０．４１５，０．８５８）であり、層別ログランクｐ値はｐ＝０．０１８４であった。
【０１２１】
さらに、併用群およびドキソルビシン群のＰＦＳについて、腫瘍の組織型に基づく中間分析を行った。患者を平滑筋肉腫および他の肉腫の２群に分けた。他の肉腫の例として、以下が挙げられる：胞状軟部肉腫、軟骨芽細胞骨肉腫、軟骨肉腫、明細胞肉腫、子宮内膜間質肉腫、上皮性肉腫、類上皮、骨外性粘液性軟骨肉腫、線維粘液肉腫、線維肉腫、再発性皮膚線維肉腫における線維肉腫性変化、血管周囲細胞腫、高悪性度の未分化肉腫、脂肪肉腫、悪性線維性組織球腫、悪性グロムス腫瘍、悪性末梢神経鞘腫瘍、悪性単発性線維性腫瘍、悪性紡錘細胞肉腫、ラブドイド形質を有する悪性紡錘細胞腫瘍、粘液線維肉腫、粘液性軟骨肉腫、粘液性脂肪肉腫、粘液性肉腫、神経線維肉腫、多形性肉腫（左大腿部の高悪性度の紡錘性および多型性肉腫、低分化円形細胞肉腫、肉腫、平滑筋腫瘍、紡錘細胞肉腫、未分化、を含む）、滑膜肉腫、未分化肉腫、および未分化子宮肉腫。
【０１２２】
平滑筋肉腫亜型の患者では、併用およびドキソルビシン群で、中央ＰＦＳがそれぞれ２８．３週（９０％ＣＩ＝１５．０，４２．７）および１５．７週（９０％ＣＩ＝７．１，３１．７）であった。平滑筋肉腫に対する併用群ｖｓドキソルビシン群のこの中間分析におけるＨＲは０．６７１（９０％ＣＩ＝０．３７７，１．１９４）であった。「他の肉腫」亜型の患者では、併用およびドキソルビシン群で、中央ＰＦＳがそれぞれ３０．３週（９０％ＣＩ＝２２．３，３６．７）および１９．０週（９０％ＣＩ＝１０．３，２３．４）であった。「他の肉腫」に対する併用群ｖｓドキソルビシン群の中間分析における層別ＨＲは、それぞれ０．６０８（９０％ＣＩ＝０．３９５，０．９３７）であった。
【０１２３】
ＯＳ：併用群およびドキソルビシン群の中間分析（表３）では、９８．９週（９０％ＣＩ＝８９．６，ＮＥ）（９５％ＣＩ＝７０．９，ＮＥ）および５８．７週（９０％ＣＩ＝４２．６，７８．１）（９５％ＣＩ＝４０．１，９４．３）の中央ＯＳがそれぞれ示された。この中間分析の層別ＨＲは０．４６０（９０％ＣＩ＝０．２８８，０．７３５）であり、層別ログランクｐ値はｐ＝０．００５２であった。併用群に対する１２ヶ月ＯＳ率および１８ヶ月ＯＳ率はそれぞれ、８０．３％（９０％ＣＩ＝７０．２，８７．３）および６４．２％（９０％ＣＩ＝５０．９，７４．８）であった。ドキソルビシン群に対する、対応する１２ヶ月および１８ヶ月ＯＳ率はそれぞれ、５５．１％（９０％ＣＩ＝４３．７，６５．１）および４０．０％（９０％ＣＩ＝２７．５，５２．１）であった。
【０１２４】
さらに、併用群およびドキソルビシン群のＯＳについて、腫瘍の組織型に基づく中間分析を行った。患者を平滑筋肉腫および上記リストのような「他の肉腫」の２群に分けた。平滑筋肉腫亜型の患者は、併用およびドキソルビシン群で、それぞれ１００．３週（９０％ＣＩ＝８９．６，ＮＥ）および４５．３週（９０％ＣＩ＝４０．１，５８．７）のＯＳを示した。平滑筋肉腫に対する併用群ｖｓドキソルビシン群のこの中間分析におけるＨＲは、０．２５８（９０％ＣＩ＝０．１１６，０．５７０）であった。「他の肉腫」亜型の患者は、併用およびドキソルビシン群で、それぞれ９８．９週（９０％ＣＩ＝６１．４，ＮＥ）および７８．１週（９０％ＣＩ＝３５．７，ＮＥ）のＯＳを示した。「他の肉腫」に対する併用群ｖｓドキソルビシン群のこの中間分析におけるＨＲは、それぞれ０．７１６（９０％ＣＩ＝０．３９９，１．２８５）であった。
【０１２５】
ＯＲＲ／疾患管理率：併用群およびドキソルビシン群における反応率の中間分析（表４）においては、患者のそれぞれ７１．９％（９０％ＣＩ＝６１．２，８１．０）および５３．８％（９０％ＣＩ＝４２．９，６４．５）の疾患管理率（ＣＲ＋ＰＲ＋ＳＤ）が示された。併用群およびドキソルビシン群に観察されたＯＲＲ（ＣＲ＋ＰＲ）はそれぞれ、１８．８％（９０％ＣＩ＝１１．２，２８．６）（ｐ＝０．２２３６）および１０．８％（９０％ＣＩ＝５．２，１９．３）であった。
【表２】
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【表３】
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【表４】
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【０１２６】
上記亜型の範囲にわたる本研究からの臨床データの中間分析により、２９．９週の中央ＰＦＳが示された。これはオララツマブがドキソルビシンと併用された場合、ドキソルビシン単独と比べ、ＰＦＳが１２週改善されることに相当する（表２を参照）。この１２週のＰＦＳの改善は、ドキソルビシン群に対し併用群で４週のＰＦＳの改善で成功とみなされるように設計された本研究の設計上、特に予想外のことである。
【０１２７】
また、上記亜型の範囲にわたる本研究からの臨床データの中間分析により、９８．９週の中央ＯＳが示された。これはオララツマブがドキソルビシンと併用された場合、ドキソルビシン単独と比べ、ＯＳが４０週改善されることに相当する（表３）。ＯＳの４０週の改善は高度に予想外のことである。
【０１２８】
さらには、統計学的な観点において、第２相試験は研究のサンプルサイズが限られていることなどから、典型的にはＯＳではなくＰＦＳを示すために設計される。第２相試験は典型的には、ＯＳ上の利益の統計的に有意なエビデンスを示すようには設計されてはおらず、本研究で示された水準のものを示すようには全く設計されていない。比較的小さな集団は、顕著な相違が観察されない限り、統計的有意性を示さない。上記データが第２層研究でＯＳの明瞭な統計的改善を示したことは、予期せぬことである。本研究の前記亜型範囲にわたる臨床データの中間分析は、同様な傾向のＯＳ上の利益を示している。
【０１２９】
本研究のＰＦＳおよびＯＳを、現在利用可能な、最近研究された治療と比較すると、（１）低いハザード比、および（２）中央生存期間のより大きな改善、という点に関して現在の標準治療よりも有意に改善されており、予期せぬ利益が明確に示されている。
【０１３０】
最後に、本中間分析によると、オララツマブをドキソルビシンと組み合わせた際の毒性プロファイルは全体として許容範囲であり、有害事象に関して、他のＳＴＳ治療と比べてより許容的である。
【０１３１】
第２相  最終分析結果
主要分析からの最終結果により、中間分析で見られた傾向が実質的に確認された。
【０１３２】
マウス異種移植モデルにおける、ＳＫＬＭＳ−１平滑筋肉腫、ＫＨＯＳ／ＮＰ骨肉腫、およびＡ２０４横紋筋肉腫に対する、オララツマブをドキソルビシンと併用した場合、またはしない場合の抗腫瘍効果
ＳＫＬＭＳ−１平滑筋肉腫異種移植モデル
６〜７週齢のメスｎｕ／ｎｕ無胸腺マウスの各個体に、５０％ Matrigel（BD Biosciences #356235）内の５×１０６個のＳＫＬＭＳ−１（ATCC #HBT-88）細胞を注入する。腫瘍の体積が約３００ｍｍ３になった時点で、マウスを４つの治療群（ｎ＝１２）に腫瘍体積によって無作為に振り分ける。第１群対照マウスにはＵＳＰ生理食塩水（Aldwin Scientific #2F7124）を１０μＬ／グラムで投与し、第２群マウスにはオララツマブを６０ｍｇ／ｋｇ（負荷投与量２１４ｍｇ／ｋｇ）で投与し、第３群マウスにはドキソルビシン（Sigma #D-1515）を３ｍｇ／ｋｇで投与し、第４群マウスにはオララツマブとドキソルビシンの組み合わせを、単独療法濃度６０ｍｇ／ｋｇのオララツマブおよび３ｍｇ／ｋｇのドキソルビシンで投与する。上記組み合わせの投与は、治療日においてドキソルビシンの１〜２時間前にオララツマブが投与されるように行う。全ての処置は、火曜日および金曜日、週２回の腹腔内注射による投与で行う。
【０１３３】
オララツマブおよびドキソルビシンはＵＳＰ生理食塩水中で調製する。研究期間中、腫瘍体積を週２回、三次元キャリパー（three dimensional caliper）によって測定し、体積（ｍｍ３）＝Ｌ（長径）×Ｗ２（短径）×（ｐｉ／６）で算出する。反復測定ＡＮＯＶＡを用い、腫瘍増殖および体重における相違を治療群間で推定する。腫瘍体積の相対変化（％Ｔ／Ｃ）を、第２１日目の腫瘍体積測定値を用いて算出する。ベースライン腫瘍体積は、投与の初日に、または初日の直前に、記録された体積である。
【０１３４】
結果：オララツマブおよびドキソルビシンの併用療法の結果、単独療法群それぞれと比較して統計的に有意な抗腫瘍有効性の改善が見られた。第２１日目の腫瘍体積で観察された％Ｔ／Ｃは併用群で４６％（ｐ＜０．０００１）であり、それに比べて、それぞれの単独療法群では、ともに６４％の％Ｔ／Ｃであった。生理食塩水対照群と比べると、これらの値は、併用群、オララツマブ単独療法群、およびドキソルビシン単独療法群において、それぞれ、ｐ＜０．０００１、ｐ＝０．００１５、およびｐ＝０．００１で統計的に有意であることが決定された。
【０１３５】
ＳＫＬＭＳ−１平滑筋肉腫異種移植モデルにおける前臨床データは、オララツマブとドキソルビシンの組み合わせのＳＴＳにおける有効性を、オララツマブまたはドキソルビシンいずれかの単独療法としての使用との比較において、腫瘍体積の減少という点でさらに支持している。
【０１３６】
ＫＨＯＳ／ＮＰ骨肉腫異種移植モデル
６〜７週齢のメスｎｕ／ｎｕ無胸腺マウスの各個体に、５０％ Matrigel（BD Biosciences #356235）内の１×１０６個のＫＨＯＳ／ＮＰ（ATCC #CRL-1544）細胞を注入する。腫瘍の体積が約４５０ｍｍ３になった時点で、マウスを４つの治療群（ｎ＝１２）に腫瘍体積によって無作為に振り分ける。第１群対照マウスにはＵＳＰ生理食塩水（Aldwin Scientific #2F7124）を１０μＬ／グラムで投与し、第２群マウスにはオララツマブを６０ｍｇ／ｋｇ（負荷投与量２１４ｍｇ／ｋｇ）で投与し、第３群マウスにはドキソルビシン（Sigma #D-1515）を３ｍｇ／ｋｇで投与し、第４群マウスにはオララツマブとドキソルビシンの組み合わせを、単独療法濃度６０ｍｇ／ｋｇのオララツマブおよび３ｍｇ／ｋｇのドキソルビシンで投与する。上記組み合わせは、治療日においてオララツマブの３時間前にドキソルビシンが投与されるように行う。全ての処置は、月曜日および木曜日、週２回の腹腔内注射による投与で行う。
【０１３７】
オララツマブおよびドキソルビシンはＵＳＰ生理食塩水中で調製する。研究期間中、腫瘍体積を週２回、三次元キャリパーによって測定し、体積（ｍｍ３）＝Ｌ（長径）×Ｗ２（短径）×（ｐｉ／６）で算出する。反復測定ＡＮＯＶＡを用い、腫瘍増殖および体重における相違を治療群間で推定する。腫瘍体積の相対変化（％Ｔ／Ｃ）を、第３２日目の腫瘍体積測定値を用いて算出する。ベースライン腫瘍体積は、投与の初日に、または初日の直前に、記録された体積である。
【０１３８】
結果：オララツマブおよびドキソルビシンの併用療法の結果、単独療法処理群それぞれと比較して統計的に有意な抗腫瘍有効性の改善が見られた。第３２日目の腫瘍体積で併用群に観察された％Ｔ／Ｃは５５％であり、それに比べて、オララツマブおよびドキソルビシンの単独療法群では、それぞれ７９％の％Ｔ／Ｃおよび７２％の％Ｔ／Ｃであった。生理食塩水対照群と比べると、これらの値は、併用群、オララツマブ単独療法群、およびドキソルビシン単独療法群において、それぞれ、ｐ＜０．０００１、ｐ＝０．０１、およびｐ＝０．００２で統計的に有意であることが決定された。
【０１３９】
ＫＨＯＳ／ＮＰ骨肉腫異種移植モデルにおける前臨床データは、オララツマブとドキソルビシンの組み合わせの肉腫における有効性を、オララツマブまたはドキソルビシンいずれかの単独療法としての使用との比較において、腫瘍体積の減少という点でさらに支持している。
【０１４０】
Ａ２０４ラブドイド異種移植モデル
Ａ２０４モデルは元々ＲＭＳとして分類されていたが、その後、ラブドイドと決定されることが多くなった。Hinson, Ashley R. P. et al. Frontiers in Oncology 3 (2013): 183. PMC. Web. 8 May 2015。ラブドイド腫瘍は起源が未知であり、稀である。現在、悪性ラブドイド腫瘍は腎臓起源であると信じられているが、厳密にどの細胞起源かは未知のままである。
【０１４１】
7〜8週齢のメスｎｕ／ｎｕ無胸腺マウスの各個体に、１００％ Matrigel（BD Biosciences #356235）内の５×１０６個のＡ２０４（ATCC #CRL-7900）細胞を注入する。腫瘍の体積が約３４０ｍｍ３になった時点で、マウスを2つの治療群（ｎ＝１２）に腫瘍体積によって無作為に振り分ける。第１群対照マウスにはＨｕＩｇＧ（Equitech-Bio #SLH66-0001）を４０ｍｇ／ｋｇで投与し、第２群マウスにはオララツマブを４０ｍｇ／ｋｇで投与する。全ての処置は、月曜日、水曜日、および金曜日、週３回の腹腔内注射による投与で行う。
【０１４２】
オララツマブはＵＳＰ生理食塩水（Aldwin Scientific #2F7124）中に４ｍｇ／ｍＬで希釈する。研究期間中、腫瘍体積を週２回、三次元キャリパーによって測定し、体積（ｍｍ３）＝Ｌ（長径）×Ｗ２（短径）×（ｐｉ／６）で算出する。反復測定ＡＮＯＶＡを用い、腫瘍増殖および体重における相違を治療群間で推定する。腫瘍体積の相対変化（％Ｔ／Ｃ）を、第30日目の腫瘍体積測定値を用いて算出する。ベースライン腫瘍体積は、投与の初日に、または初日の直前に、記録された体積である。
【０１４３】
結果：オララツマブ治療は３７％の％Ｔ／Ｃとなり、ＨｕＩｇＧ対照群と比較して抗腫瘍有効性において統計的に有意な改善（ｐ＜０．０００１）を示した。
【０１４４】
Ａ２０４ラブドイド腫瘍異種移植モデルにおける前臨床データは、オララツマブのラブドイド腫瘍における有効性を、生理食塩水との比較において、腫瘍体積の減少という点で支持している。
本発明は、以下の態様を含む。
［１］
軟部肉腫を有する患者を治療する方法であって、該方法を必要とする患者にオララツマブおよびドキソルビシンを投与することを含む方法。
［２］
前記オララツマブが約１５ｍｇ／ｋｇの投与量で投与される、［１］記載の方法。
［３］
前記ドキソルビシンが約６０ｍｇ／ｍ２または約７５ｍｇ／ｍ２の投与量で投与される、［１］記載の方法。
［４］
前記ドキソルビシンが約７５ｍｇ／ｍ２の投与量で投与される、［３］記載の方法。
［５］
前記ドキソルビシンが投与されるよりも前に前記オララツマブが投与される、［１］記載の方法。
［６］
前記軟部肉腫が平滑筋肉腫である、［１］記載の方法。
［７］
オララツマブおよびドキソルビシンを含むキットであって、ここで前記オララツマブおよび前記ドキソルビシンは同時に、別々に、または順次投与されるものである、キット。
［８］
オララツマブ、ならびに薬理学的に許容される担体、希釈剤、および賦形剤のうち１種または複数種、を含む医薬組成物と、ドキソルビシン、ならびに薬理学的に許容される担体、希釈剤、および賦形剤のうち１種または複数種、を含む医薬組成物と、を含んだキットであって、ここで前記オララツマブおよび前記ドキソルビシンは同時に、別々に、または順次投与されるものである、キット。
［９］
オララツマブ、ならびに薬理学的に許容される担体、希釈剤、および賦形剤のうち１種または複数種、を含む医薬組成物の、薬理学的に許容される担体、希釈剤、および賦形剤のうち１種または複数種を含むドキソルビシンの医薬組成物との組み合わせであって、ここで前記オララツマブおよび前記ドキソルビシンは、軟部肉腫の治療における使用のために同時に、別々に、または順次投与されるものである、医薬組成物。
［１０］
軟部肉腫の治療のための医薬の製造におけるオララツマブの使用であって、ここで前記医薬はドキソルビシンと同時に、別々に、または順次投与されるものである、オララツマブの使用。
［１１］
軟部肉腫の治療において同時に、別々に、または順次使用するのための、オララツマブとドキソルビシンの組み合わせ。
［１２］
軟部肉腫の治療における、ドキソルビシンと組み合わせて同時に、別々に、または順次使用するための、オララツマブ。
［１３］
前記オララツマブが約１５ｍｇ／ｋｇの投与量で投与される、［９］記載の医薬組成物、［１０］記載の使用、［１１］記載の使用のための組み合わせ、または［１２］記載の使用のためのオララツマブ。
［１４］
前記ドキソルビシンがが約６０ｍｇ／ｍ２または約７５ｍｇ／ｍ２の投与量で投与される、［９］記載の医薬組成物、［１０］記載の使用、［１１］記載の使用のための組み合わせ、または［１２］記載の使用のためのオララツマブ。
［１５］
前記ドキソルビシンが約７５ｍｇ／ｍ２の投与量で投与される、［９］記載の医薬組成物、［１０］記載の使用、［１１］記載の使用のための組み合わせ、または［１２］記載の使用のためのオララツマブ。
［１６］
前記ドキソルビシンが投与されるよりも前に前記オララツマブが投与される、［９］記載の医薬組成物、［［１０］記載の使用、［１１］記載の使用のための組み合わせ、または［１２］記載の使用のためのオララツマブ。
［１７］
前記軟部肉腫が平滑筋肉腫である、［９］記載の医薬組成物、［［１０］記載の使用、［１１］記載の使用のための組み合わせ、または［１２］記載の使用のためのオララツマブ。
【０１４５】
追加配列
配列番号１１
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配列番号１２
ａｔｇｇｇａｔｇｇｔｃａｔｇｔａｔｃａｔｃｃｔｔｔｔｔｃｔａｇｔａｇｃａａｃｔｇｃａａｃｔｇｇａｇｔａｃａｔｔｃａｇａａａｔｔｇｔｇｔｔｇａｃａｃａｇｔｃｔｃｃａｇｃｃａｃｃｃｔｇｔｃｔｔｔｇｔｃｔｃｃａｇｇｇｇａａａｇａｇｃｃａｃｃｃｔｃｔｃｃｔｇｃａｇｇｇｃｃａｇｔｃａｇａｇｔｇｔｔａｇｃａｇｃｔａｃｔｔａｇｃｃｔｇｇｔａｃｃａａｃａｇａａａｃｃｔｇｇｃｃａｇｇｃｔｃｃｃａｇｇｃｔｃｃｔｃａｔｃｔａｔｇａｔｇｃａｔｃｃａａｃａｇｇｇｃｃａｃｔｇｇｃａｔｃｃｃａｇｃｃａｇｇｔｔｃａｇｔｇｇｃａｇｔｇｇｇｔｃｔｇｇｇａｃａｇａｃｔｔｃａｃｔｃｔｃａｃｃａｔｃａｇｃａｇｃｃｔａｇａｇｃｃｔｇａａｇａｔｔｔｔｇｃａｇｔｔｔａｔｔａｃｔｇｔｃａｇｃａｇｃｇｔａｇｃａａｃｔｇｇｃｃｔｃｃｇｇｃｇｔｔｃｇｇｃｃａａｇｇｇａｃｃａａｇｇｔｇｇａａａｔｃａａａｃｇｔａｃｇｇｔｇｇｃｔｇｃａｃｃａｔｃｔｇｔｃｔｔｃａｔｃｔｔｃｃｃｇｃｃａｔｃｔｇａｔｇａｇｃａｇｔｔｇａａａｔｃｔｇｇａａｃｔｇｃｃｔｃｔｇｔｔｇｔｇｔｇｃｃｔｇｃｔｇａａｔａａｃｔｔｃｔａｔｃｃｃａｇａｇａｇｇｃｃａａａｇｔａｃａｇｔｇｇａａｇｇｔｇｇａｔａａｃｇｃｃｃｔｃｃａａｔｃｇｇｇｔａａｃｔｃｃｃａｇｇａｇａｇｔｇｔｃａｃａｇａｇｃａｇｇａｃａｇｃａａｇｇａｃａｇｃａｃｃｔａｃａｇｃｃｔｃａｇｃａｇｃａｃｃｃｔｇａｃｇｃｔｇａｇｃａａａｇｃａｇａｃｔａｃｇａｇａａａｃａｃａａａｇｔｃｔａｃｇｃｃｔｇｃｇａａｇｔｃａｃｃｃａｔｃａｇｇｇｃｃｔｇａｇｃｔｃｇｃｃｃｇｔｃａｃａａａｇａｇｃｔｔｃａａｃａｇｇｇｇａｇａｇｔｇｔｔａｇ
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