(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＭＲＩ造影剤として使用するための滅菌水性組成物であって、
１００〜６００ｍＭのアスコルベートと、
１００〜６００ｍＭのナトリウム、メグルミン又はそれらの組合せと
を含み、
ここで、前記組成物が、メグルミン、グルコース、ガラクトース、フルクトース、ラクトース、マルトース、スクロース及び／又はトレハロースを更に含み、かつ、２００〜１４００ｍＯｓｍ／Ｌのモル浸透圧濃度を有する、組成物。
【請求項２】
メグルミンを、場合によりナトリウムと組み合わせて含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
アスコルビン酸メグルミン及びアスコルビン酸ナトリウムを１０：９０、２０：８０、３０：７０又は４０：６０から９０：１０、８０：２０、７０：３０又は６０：４０までのモル又はミリモル（ｍＭ）比（アスコルビン酸メグルミン：アスコルビン酸ナトリウム）で含む、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
炭酸塩及び／又はリン酸塩を更に含む、請求項１から３のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項５】
グルコース、ガラクトース、フルクトース、ラクトース及び／又はマルトースを含む、請求項１から４のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項６】
スクロース及び／又はトレハロースを含む、請求項１から４のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項７】
２００〜１２００ｍＯｓｍ／Ｌのモル浸透圧濃度を有する、請求項１から６のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項８】
６．５〜７．５のｐＨを有する、請求項１から７のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項９】
安定化剤を更に含む、請求項１から８のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１０】
単位剤形で提供される、請求項１から９のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１１】
前記単位剤形が１０〜１００グラムのアスコルベートを含む、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１２】
アスコルベートと、
メグルミン、又は、ナトリウム及びメグルミンの組合せと、
場合により炭酸塩及び／又はリン酸塩と、
場合によりグルコース、ガラクトース、フルクトース、ラクトース、マルトース、スクロース及び／又はトレハロースと
を含む粉末組成物であって、滅菌液体担体の添加時に、対象の身体又は身体領域、例えば、臓器又は臓器領域の磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）画像の強調に使用するための、組成物。
【請求項１３】
アスコルビン酸メグルミン及びアスコルビン酸ナトリウムを１０：９０、２０：８０、３０：７０又は４０：６０から９０：１０、８０：２０、７０：３０又は６０：４０までのモル又はミリモル（ｍＭ）比（アスコルビン酸メグルミン：アスコルビン酸ナトリウム）で含む、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１４】
対象の身体又は身体領域の磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）画像を強調するための、請求項１から１１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１５】
前記身体領域が、頭部、頸部、胸部、腹部、骨盤、肢（複数可）、筋肉、脂肪又は骨である、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１６】
前記身体領域が、副腎、下垂体、胸腺、黄体、網膜、脳、脾臓、肺、精巣、リンパ節、肝臓、甲状腺、小腸粘膜、白血球、膵臓、腎臓又は唾液腺組織を含む、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１７】
前記身体領域が脳である、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１８】
前記身体領域が心臓である、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１９】
静脈内投与用である、請求項１４から１８のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項２０】
腹腔内投与用である、請求項１４から１８のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項２１】
前記画像がＴ２強調画像を含む、請求項１４から２０のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項２２】
前記画像が代謝画像を含む、請求項１４から２１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項２３】
前記画像が灌流画像を含む、請求項１４から２２のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項２４】
前記ＭＲＩ画像を生成する５、１０、３０、４０、６０、９０若しくは１２０分前、又は１、２、３若しくは４時間前までに非経口投与されるものである、請求項１４から２３のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項２５】
強調された磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）画像を生成するための薬剤若しくはイメージング剤を調製するための、請求項１から２４のいずれか１項に記載の滅菌水性組成物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願
本出願は、２０１５年９月３０日に出願された米国仮特許出願第６２／２３４，９８６号及び２０１６年２月４日に出願された米国仮特許出願第６２／２９１，１３８号に対する利益を主張するものである。これら両方の仮特許出願の開示全体を、引用することにより本明細書の一部をなすものとする。
【０００２】
発明の分野
本発明は、アスコルベートの非経口投与に有用な組成物及びその放射線学的使用に関する。
【背景技術】
【０００３】
磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）は、高空間解像度でヒトの解剖学的構造及び病変の精巧なレンダリングをもたらす。癌、感染、神経及び心血管疾患の画像化などに関する、ＭＲＩの診断感度及び特異度を増大させるために、画像化前及び／又は画像化中に造影材料を静脈内投与して信号を改善することが多い。
【０００４】
最も一般的なＭＲＩ造影材料は、常磁性金属ガドリニウム（Ｇｄ）を含有する分子錯体をベースとするものである。Ｇｄは、自然界では結合した（塩の）形態でのみ見られる重金属である。Ｇｄは、水溶性塩の形態では毒性が高いが、しかし、キレート化されたＧｄは毒性が低下している。米国において、食品医薬品局（ＦＤＡ）によって認可されている９種のＭＲＩ造影剤は全てＧｄをベースとしている。Ｇｄは、Ｔ１強調画像上のＭＲＩ信号を局所的に増大させる強い「常磁性」を有する。しかし、Ｇｄ系造影剤は、皮膚、関節、眼及び内臓の広範囲にわたる線維症を伴う症候群である腎性全身性線維症（ＮＳＦ）と称する稀ではあるが重度の衰弱状態を引き起こす可能性がある。世界保健機関及びＦＤＡは、腎機能不全／腎不全患者におけるこれらのＧｄ剤の使用に対する規制を発行し、ＦＤＡは、Ｇｄを含有する全ての商業的な造影剤に対して「黒枠で囲まれた」警告を義務づけている。結果として、米国における何百人もの患者及び世界的にははるかに多くの患者は、ＭＲＩの造影材料の投与をもはや受けることができず、いくつかの疾患の検出及びキャラクタリゼーションが著しく制限されている。更に、２０１５年に、ＦＤＡは、薬物安全性情報（Ｄｒｕｇ  Ｓａｆｅｔｙ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ）を発行した。これは、正常な腎機能を有する個体でさえＧｄが脳中に残存し得ることがヒト及び動物における最近の研究により実証されたことから、この機関が、Ｇｄ系ＭＲＩ造影剤の反復使用後における脳沈着のリスクを調査していることを示している。
【０００５】
「研究用」として又は「認可外」としてより稀に使用される他の常磁性錯体は通常、静脈内鉄補充療法（例えば、ＦＥＲＡＨＥＭＥ（登録商標）（フェルモキシトール）注射剤）として開発及び市販されている大きい酸化鉄系ナノ粒子をベースとする。しかし、ＭＲＩへのこれらの錯体の使用は、それらの大きい分子サイズによって制限される。これらの薬剤は、分子サイズが大きいために、細網内皮系（すなわち、マクロファージ、肝臓、脾臓）によって最終的に排出されるまで対象の血液プールにとどめられる。
【０００６】
米国特許出願公開第２０１４／０１５４１８５号公報（Ｖａｎ  Ｚｉｊら）は、非経口グルコースを使用してＭＲＩを強調することを論じている。Ｙａｄａｖ  ＮＮ，Ｘｕ  Ｊ，Ｂａｒ−Ｓｈｉｒ  Ａ，Ｑｉｎ  Ｑ，Ｃｈａｎ  ＫＷ，Ｇｒｇａｃ  Ｋ，Ｌｉ  Ｗ，ＭｃＭａｈｏｎ  ＭＴ，ｖａｎ  Ｚｉｊｌ  ＰＣ，  Ｎａｔｕｒａｌ  Ｄ−ｇｌｕｃｏｓｅ  ａｓ  ａ  ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｂｌｅ  ＭＲＩ  ｃｏｎｔｒａｓｔ  ａｇｅｎｔ  ｆｏｒ  ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ  ｃａｎｃｅｒ．  Ｍａｇｎ  Ｒｅｓｏｎ  Ｍｅｄ．  ２０１２  Ｄｅｃ；６８（６）：１７６４−７３；Ｙａｄａｖ  ＮＮ，Ｘｕ  Ｊ，Ｂａｒ−Ｓｈｉｒ  Ａ，Ｑｉｎ  Ｑ，Ｃｈａｎ  ＫＷ，Ｇｒｇａｃ  Ｋ，Ｌｉ  Ｗ，ＭｃＭａｈｏｎ  ＭＴ，ｖａｎ  Ｚｉｊｌ  ＰＣ，  Ｎａｔｕｒａｌ  Ｄ−ｇｌｕｃｏｓｅ  ａｓ  ａ  ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｂｌｅ  ＭＲＩ  ｒｅｌａｘａｔｉｏｎ  ａｇｅｎｔ．  Ｍａｇｎ  Ｒｅｓｏｎ  Ｍｅｄ．  ２０１４  Ｓｅｐｔ；７２（３）：８２３−２８も参照のこと。
【０００７】
ＭＲＩスキャン技術に有用な代替的な／追加の造影剤組成物が依然として必要とされている。
【発明の概要】
【０００８】
放射能又は化学標識を必要とせずにヒト及び非ヒト組織における灌流、代謝及び酸化ストレスの検出及びキャラクタリゼーションのための磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）を行うのに有用な、造影剤としてアスコルベート（ビタミンＣ）を含む組成物が、本明細書中で提供される。
【０００９】
一部の実施形態において、ＭＲＩ造影剤としての使用に好適であり得る滅菌水性組成物であって、１００〜６００ｍＭのアスコルベートと、１００〜６００ｍＭのナトリウム、メグルミン又はそれらの組合せ（例えば、アスコルビン酸メグルミン、アスコルビン酸ナトリウム又はそれらの組合せとして提供される）とを含む組成物が提供される（例えば、アスコルベートは１００〜３００ｍＭである）（例えば、前記組成物は、アスコルビン酸メグルミン及びアスコルビン酸ナトリウムを１０：９０、２０：８０、３０：７０又は４０：６０から９０：１０、８０：２０、７０：３０又は６０：４０までのモル又はミリモル（ｍＭ）比（アスコルビン酸メグルミン：アスコルビン酸ナトリウム）で含む）。
【００１０】
一部の実施形態において、組成物は、２００〜１４００ｍＯｓｍ／Ｌ（例えば、２００〜１２００ｍＯｓｍ／Ｌ）のモル浸透圧濃度を有する。
【００１１】
一部の実施形態において、組成物は、炭酸塩及び／又はリン酸塩を更に含む。
【００１２】
一部の実施形態において、組成物は、還元糖及び／又は非還元糖を更に含む。
【００１３】
一部の実施形態において、組成物は、安定化剤（例えば、キレート剤、例えばエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ））を更に含む。
【００１４】
一部の実施形態において、組成物は、単位剤形で提供される。
【００１５】
更に、アスコルベートと、ナトリウム、メグルミン又はそれらの組合せ（例えば、アスコルビン酸ナトリウム、アスコルビン酸メグルミン又はその組合せ）と、場合により炭酸塩及び／又はリン酸塩と、場合により還元糖又は非還元糖とを含む粉末組成物が提供される。一部の実施形態において、組成物は、単位剤形である。一部の実施形態において、粉末組成物は、滅菌液体担体（例えば、水、通常の生理食塩水、乳酸リンゲル液、又は非経口的薬物送達に好適な他の水性ビヒクル）の添加時に、対象の身体又は身体領域、例えば、臓器又は臓器領域の磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）画像の強調に使用するのに好適である。
【００１６】
非経口投与すると、アスコルベートが取り込まれ且つ／又は通過する組織及び／又は体液において、磁気共鳴（ＭＲ）信号の時間依存的な変化が検出される。これらのＭＲＩ信号の変化は、ルーチン的なスピンエコー法又はグラディエントエコー系のＴ２強調ＭＲＩシーケンスを使用して検出でき、Ｔ２マッピングにより定量化できる。スピン−スピン緩和に対して高感度の他のより一般でない収集技術も、ＭＲ信号の符号化に使用できる。
【００１７】
また、対象の身体又は身体領域、例えば、臓器又は臓器領域のＭＲＩ画像を強調する方法であって、非経口アスコルベート製剤を、ＭＲＩ画像解像度を強調する量で前記対象に非経口投与（例えば、静脈内投与、腹腔内投与、動脈内投与、骨内投与又は髄腔内投与）するステップと、次いで、前記対象のＭＲＩにより前記身体又は身体領域の画像を生成するステップとを含み、アルコルベート又は医薬として許容されるその塩が前記ＭＲＩ画像を強調する、方法が本明細書中で提供される。
【００１８】
一部の実施形態において、ＭＲＩ画像は、非経口アスコルベート製剤の非経口投与中、又は非経口投与後５、１０、３０、４０、６０、９０若しくは１２０分以内、又は非経口投与後１、２、３若しくは４時間以内に生成される。
【００１９】
更に、本明細書中で教示される方法を実施するための、又は本明細書中で教示される方法を実施するための薬剤若しくはイメージング剤を調製するための、本明細書中で教示されるアスコルベート製剤の使用が提供される。
【００２０】
本発明を、本明細書に添付した図面及び明細書の以下の記載においてより詳細に説明する。本明細書中に引用した米国特許文献の開示は、参照することによってその全体を本明細書中に組み込むものとする。
【図面の簡単な説明】
【００２１】
【図１】アスコルベート及びアスコルベートラジカルの不均化を示す図である。Ａ、アスコルベートは二酸であるが、７．４の生理的ｐＨではアスコルベートの９９％が、そのモノアニオン（ＡｓｃＨ−）として存在する。アスコルベートラジカル（Ａｓｃ・−）は、酸化型及び還元型のアスコルベートとの平衡状態で（しかしまた、はるかに低濃度で）存在する。Ｂ、Ａｓｃ・−の不均化は、その転換の主要な経路であり、ＮＭＲタイムススケールで「中間の」プロトン交換速度に分類される速度定数（ｋｏｂｓ）を有する。この速度定数は、リン酸塩などのプロトン交換触媒の存在下で１０倍増加し得る（Ｂｏｒｓ  Ｗ，Ｂｕｅｔｔｎｅｒ  ＧＲ．  （１９９７）  Ｔｈｅ  ｖｉｔａｍｉｎ  Ｃ  ｒａｄｉｃａｌ  ａｎｄ  ｉｔｓ  ｒｅａｃｔｉｏｎｓ  ｉｎ  Ｖｉｔａｍｉｎ  Ｃ  ｉｎ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｄｉｓｅａｓｅ，  ｅｄ．  ｂｙ  Ｌ．  Ｐａｃｋｅｒ  ａｎｄ  Ｊ．  Ｆｕｃｈｓ，  Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，  Ｉｎｃ．，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  Ｃｈａｐｔｅｒ  ４，  ｐｐ７５−９４）。
【図２】糖、糖アルコール及びアスコルベートのＴ２緩和度（ｒ２＝ｍＭ−１秒−１）を示す図である。比較は単糖及び二糖を含む。本明細書中で論じる通り、濃度が高いほどコントラスト効果が減少していることに注目されたい。これは、類似した部分の自己会合及びプロトン交換の減少に伴って起こると考えられる。
【図３】アスコルベートのスピン−スピン緩和（Ｔ２強調）ＭＲＩコントラストに関するインビトロ（「ファントム」）実験を示す図である。Ａ、アスコルベートの漸増濃度を有する５つのファントムにおける定量的Ｔ２マッピングを示している。従来の高速スピンエコー（ＦＳＥ）収集による対照（リン酸緩衝生理食塩水）と比較して統計学的に有意な、わずか１〜５ｍＭの「負のＴ２コントラスト」（信号損失）が認められる。したがって、感度は、高取り込み組織における薬理学的用量のアスコルベート後に予想される組織／細胞濃度の下限である（例えば、（腫瘍及び脳、１０〜３０ｍＭ）。この結果はまた、組織の酸化性基質又は生理学的交換触媒による相乗効果を考慮していない。Ｂ、アスコルベートのＴ２強調に対するＨ２Ｏ２の相乗効果を示している。Ｈ２Ｏ２は、インビボでの非経口アスコルベート後に脳及び腫瘍で１００〜２００マイクロモル濃度まで上昇し、アスコルビン酸によるＴ２コントラスト効果に対して顕著な相乗作用をもたらす。図示される通り、この相乗効果は、ファントムにおいて３０分間にわたって経時的にゆっくり減少するが、インビボにおいては、アスコルベート投与後にＨ２Ｏ２が生成される限り、持続するであろう。Ｃ、中性／生理的ｐＨ（７．０〜７．４）で最大化されるアスコルベートのＴ２効果に対するｐＨの影響を実証している。この結果は、平衡状態でのアスコルベートのラジカル及び酸化型を用いたアスコルベート不均化の速度動態に関する以前の研究と一致している（図１）。Ｄ、アスコルベートが、いくつかのＦＤＡに認可されている薬物及び造影製剤（ｃｏｎｔｒａｓｔ  ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ）中に賦形剤として一般的に使用されているソルビタール（ｓｏｒｂｉｔａｌ）のアミン糖誘導体であるメグルミン（Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン）により塩化された（メグルミンと塩形成した）場合の顕著な相乗効果を示している。
【図４】Ｎａ塩又はメグルミン塩としてのアスコルベートの比較を示すグラフである。生理的濃度のＰＯ４（２ｍＭ）及びＨＣＯ３−（２５ｍＭ）緩衝剤を含む溶液を調製する。
【図５】アスコルビン酸Ｎａ＋生理学的交換触媒を示すグラフである。各溶液は、脱イオン水中で中性（ｐＨ＝７．０）に設定する。生理学的交換触媒の濃度は、インビボの血清及び細胞外空間と同じである：ＰＯ４＝２ｍＭ、ブドウ糖＝５ｍＭであり、ＨＣＯ３−は２５ｍＭである。
【図６】アスコルビン酸Ｎａ／メグルミンとグルコースとの交換相乗作用を示すグラフである。溶液は、交換触媒としても寄与する生理的緩衝液ＰＯ４（２ｍＭ）及びＨＣＯ３−（２５ｍＭ）の設定で比較する。
【図７】Ｎａ  Ａｓｃ／メグルミンと糖アルコール、単糖及び二糖との交換相乗作用を示すグラフである。溶液は全て、２ｍＭ  ＰＯ４及び２５ｍＭ  ＨＣＯ３−の共存下で調製する。
【図８】Ｎａ  Ａｓｃ／メグルミンと糖アルコール、単糖及び二糖との交換相乗作用に関する、対照を用いない倍率変更データを示すグラフである。溶液は全て、２ｍＭ  ＰＯ４及び２５ｍＭ  ＨＣＯ３−を用いて調製する。
【図９】インビボにおける、高用量の非経口アスコルベート（２ｇ／ｋｇ、右ＩＪ  ｉ．ｖ．注射）後のアスコルベートＴ２コントラスト変化を示す図である。Ａ、正常Ｃ５７ブラックマウスの中脳を通る従来の単一スライスアキシャルＦＳＥ  Ｔ２ＷＩ画像を示している。右の２つの画像は、アスコルベートｉ．ｖ．投与中及び投与後におけるコントラスト変化の「初回通過」抽出を示す。脳組織のＴ２信号を、アスコルベート投与の直後及び１０分後に収集し、次にアスコルベート投与前に収集したＴ２脳信号から差し引く。アスコルベートが信号強度の減少をもたらすので、より高信号の投与前スキャンからの減算により、脳組織を通る通過灌流（血流）の正味の陽性「マップ」が得られる。１０分において、灌流効果はほぼ消失し、組織取り込みに関連する早期の信号強度変化が観察され始めている。Ｂ、高用量アスコルベートの組織取り込みによる信号変化を示している。信号強度のカラー−リュートマップは投与前スキャンから減算されず、したがって、正常Ｃ５７マウスでは３０〜６０分に最大となる、予想された経時的Ｔ２信号減少を示している。
【図１０】新皮質拡延性抑制（ＳＤ）の齧歯類モデルにおけるアスコルベートＴ２強調を示す図である。例示した実験において、下の列の画像は、小さい頭蓋切除を、隣接した頭頂葉皮質に局所的に拡散している、高濃度の塩化カリウム（ＫＣｌ）に浸漬されたゲルフォーム（赤い矢印）と共に示している。頭蓋切除部位は、ブレグマの後方１ｍｍであり、頭蓋骨の目印は、下にある脳の後方１／３を表している。上の２つの列は、ブレグマの前方３ｍｍ及び４ｍｍの、すなわち、ＳＤ誘導部位から離れた齧歯類脳のＴ２画像及び信号変化の定量的カラーリュートＴ２マップを示している。前方スライスにおけるＴ２信号変化は、右大脳皮質では左大脳皮質に比較して明瞭なＴ２非対称を示している（この場合も、ＳＤは依然として右半球に限定されている）。これらの顕著な皮質信号変化は、１８Ｆ−ＦＤＧ  ＰＥＴ並びに直接マイクロダイアリシス及びメタボロミック測定でも観察される、ＳＤによって生じる既知の代謝亢進活性と一致している。注目すべきことに、逆の観察（Ｔ２信号の局所的増加）が頭蓋切除部位自体（３列目）の直下で見られ、ＫＣｌ注入部位での限局性水腫（自由水の増加）と一致している。
【図１１Ａ】非経口アスコルベートを用いた灌流及びバイアビリティの心臓イメージングを示す図である。７Ｔにおけるラット心臓イメージングの２つの主要イメージング面、コロナル及びアキシャルを示している。
【図１１Ｂ】非経口アスコルベートを用いた灌流及びバイアビリティの心臓イメージングを示す図である。アスコルベートｉ．ｖ．注射の最初のボーラスによる、左心室全体にわたるＴ２信号強度の一過性減少を示している。
【図１２Ａ】モルモットにおける、アスコルベートの３つの異なる製剤のｉ．ｖ．投与後のＴ２コントラスト変化を示す図である。アスコルベートの緩徐注入の前及び６０分の緩徐注入後における高速スピンエコー（ＦＳＥ）Ｔ２画像は、脳実質の全体にわたって劇的な信号強度差を示している。
【図１２Ｂ】モルモットにおける、アスコルベートの３つの異なる製剤のｉ．ｖ．投与後のＴ２コントラスト変化を示す図である。３つの異なるアスコルベート製剤の投与後のモルモット大脳皮質（Ｃｘ）及び大脳基底核（ＢＧ）の両方に関する標準化された信号強度変化を示している。
【図１２Ｃ】モルモットにおける、アスコルベートの３つの異なる製剤のｉ．ｖ．投与後のＴ２コントラスト変化を示す図である。３つの異なるアスコルベート製剤の投与後のモルモット大脳皮質（Ｃｘ）及び大脳基底核（ＢＧ）の両方に関する定量的緩和度測定値を示している。
【発明を実施するための形態】
【００２２】
次に、本発明の実施形態を示す添付の図面を参照して、本発明を以下により完全に説明する。しかし、本発明は、種々の形態で具体化でき、本明細書中に記載された実施形態に限定されると解釈されるべきではない。むしろ、これらの実施形態は、本開示が十分で完全なものとなり且つ本発明の範囲を当業者に十分に伝えられるように提供する。
【００２３】
本明細書において使用する単数形「ａ」、「ａｎ」及び「ｔｈｅ」は、文脈からそうでないことが明白に示されない限り、複数形も同様に含むものとする。「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」又は「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という用語は、記載された特徴、整数、工程、操作、要素、成分及び／若しくは群又はそれらの組合せの存在を特定するが、１つ又は複数の他の特徴、整数、工程、操作、要素、成分及び／若しくは群又はそれらの組合せの存在又は追加を排除しないことを更に理解されたい。
【００２４】
本明細書中で使用する用語「及び／又は」は、関連列挙項目のありとあらゆる組合せ又は１つ若しくは複数を、並びに選択的に解される場合（「又は」）には組合せがないことを包含する。
【００２５】
特に定義されない限り、本明細書中で使用する全ての用語（技術用語及び科学用語を含む）は、本発明が属する技術分野の当業者によって一般的に理解されているのと同じ意味を有する。一般的に使用される辞書に定義された用語のような用語は、本明細書及び特許請求の範囲の文脈においては、それらの意味と一致する意味を有すると解するべきであり、本明細書中でそのように特に定義しない限り、理想化された又は過度に形式的な意味で解すべきでないことを更に理解されたい。
【００２６】
アスコルベート。アスコルベート（「アスコルビン酸」、「Ｌ−アスコルビン酸」又は「ビタミンＣ」としても知られる）は、天然に存在する有機化合物及び必須栄養素であり、正常に機能していない場合には最も顕著な壊血病の症状をもたらす、いくつかのコラーゲン合成反応を含む少なくとも８つの酵素反応における抗酸化剤及び補因子として重要な性質を有する。ほとんどの哺乳類は、肝臓においてアスコルビン酸を産生する。肝臓において、酵素Ｌ−グルノラクトンオキシダーゼによりグルコースがアスコルビン酸に変換される。しかし、ヒト、高等霊長類、モルモット及びほとんどのコウモリにおいては、突然変異により、Ｌ−グルノラクトンオキシダーゼの発現が低いか存在せず、したがって、アスコルベートは食事又は食餌で摂取しなければならない（Ｌａｃｈａｐｅｌｌｅ，Ｍ．Ｙ．；Ｄｒｏｕｉｎ，Ｇ．  （２０１０）．  ”Ｉｎａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｄａｔｅｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｈｕｍａｎ  ａｎｄ  ｇｕｉｎｅａ  ｐｉｇ  ｖｉｔａｍｉｎ  Ｃ  ｇｅｎｅｓ”．  Ｇｅｎｅｔｉｃａ  １３９  （２）：  １９９−２０７）。全ての動物種において、Ｌ−アスコルビン酸／アスコルベートは最も豊富な細胞内抗酸化剤であり、細胞内濃度は腫瘍、脳細胞及びいくつかの他の組織で１０〜３０ｍＭに達し得る。血漿中レベルの１００倍を超えるビタミンＣを蓄積する組織としては、副腎、下垂体、胸腺、黄体及び網膜が挙げられる。１０〜５０倍の濃度を有する組織としては、脳、脾臓、肺、精巣、リンパ節、肝臓、甲状腺、小腸粘膜、白血球、膵臓、腎臓及び唾液腺が挙げられる（Ｈｅｄｉｇｅｒ  ＭＡ  （Ｍａｙ  ２００２）．  ”Ｎｅｗ  ｖｉｅｗ  ａｔ  Ｃ”．  Ｎａｔ．  Ｍｅｄ．  ８  （５）：  ４４５−６）。
【００２７】
食事又は食餌による過剰のビタミンＣは吸収されず、血液中の過剰のビタミンＣは尿中に速やかに排出される。ビタミンＣは、著しく低い毒性を示し、ラットにおけるＬＤ５０は一般的に体重１ｋｇ当たり約１１．９グラムと認められている。このような用量（体重の１．２％、又は７０ｋｇのヒトに対して０．８４ｋｇ）による死亡のメカニズムは知られていないが、化学的ではなく機械的である可能性がある（”Ｓａｆｅｔｙ  （ＭＳＤＳ）  ｄａｔａ  ｆｏｒ  ａｓｃｏｒｂｉｃ  ａｃｉｄ”．  Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ．  Ｏｃｔｏｂｅｒ  ９，  ２００５．  Ｒｅｔｒｉｅｖｅｄ  Ｆｅｂｒｕａｒｙ  ２１，  ２００７）。偶発的又は意図的な中毒死のデータがないことを考えると、ヒトにおけるＬＤ５０は不確かである。したがって、ラットのＬＤ５０をヒトの毒性の指針として使用する。
【００２８】
生理的ｐＨにおいて、アスコルベートの９９％はモノアニオンとして存在する（図１Ａ）。ビタミンＣの化学的性質、したがって、イメージング特性は、この部分によって支配される。供与体抗酸化剤として、モノアニオンは水素原子（Ｈ．又はＨ＋＋ｅ−）を酸化的ラジカルに供与して、共鳴安定化されたトリカルボニルアスコルベートフリーラジカル（Ａｓｃ．−）を生成する（図１Ｂ）。もとの還元型又は酸化型アスコルベートへのＡｓｃ．−の不均化反応（図１Ｃ）は、インビトロでの主要な排出経路である。このプロセスは、インビボでは、アスコルベートの再循環を助ける酵素によって補われる（Ｍａｙ  ＪＭ，Ｑｕ  ＺＣ，Ｎｅｅｌ  ＤＲ，Ｌｉ  Ｘ  （Ｍａｙ  ２００３）．  ”Ｒｅｃｙｃｌｉｎｇ  ｏｆ  ｖｉｔａｍｉｎ  Ｃ  ｆｒｏｍ  ｉｔｓ  ｏｘｉｄｉｚｅｄ  ｆｏｒｍｓ  ｂｙ  ｈｕｍａｎ  ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  ｃｅｌｌｓ”．  Ｂｉｏｃｈｉｍ．  Ｂｉｏｐｈｙｓ．  Ａｃｔａ  １６４０  （２−３）：  １５３−６１）。アスコルベート又はデヒドロアスコルベートのいずれかへのラジカルの不均化は、電子運搬体又はより普通のカチオンのいずれかとして働く水素の喪失又は獲得によって起こる。また、アスコルビン酸ラジカルの不均化速度定数は１０５〜１０６Ｍ−１ｓ−１であるので、不均化に伴う水素交換も同じ速度で起こる。ＮＭＲタイムスケールにおいて、これらの「中間体」の交換速度は、１Ｈスピン−スピン緩和の変更に最適である。
【００２９】
アスコルベートの非経口製剤。非経口投与のためのアスコルベートは、非経口投与に好適な製剤として、医薬として許容される担体（例えば、滅菌水、エンドドキシンフリー水、又はパイロジェンフリー水；滅菌、エンドトキシンフリー若しくはパイロジェンフリー生理食塩水など）中に入れて提供し得る。本明細書で使用する用語「医薬として許容される」は、化合物又は組成物が、疾患の重症度及び治療の必要性に鑑みて、過度に有害な副作用を伴わずに本明細書中に記載した治療を達成するために対象に投与するのに好適であることを意味する。
【００３０】
製剤は、単位用量又は多回用量の容器、例えば、密封アンプル及びバイアルに入れて提供でき、使用直前に滅菌液体担体、例えば、生理食塩水又は注射用の水の添加のみを必要とする乾燥／粉末／フリーズドライ（凍結乾燥）状態で保存することができる。即時注射剤及び懸濁剤は、滅菌粉末剤、顆粒剤及び錠剤から調製できる。例えば、本発明の一態様において、密封容器中にアスコルベートを単位剤形で含む注射可能で安定な滅菌組成物が提供される。アスコルベートは、好適な医薬として許容される担体を用いて再構成して対象への注射に好適な液体組成物を形成できる凍結乾燥物の形態で提供できる。
【００３１】
好適な製剤の例としては、１０、２０、３０、４０又は５０ｍｇ／ｍＬから８０、９０、１００、１５０又は２００ｍｇ／ｍＬのアスコルベート又はその塩（例えば、ナトリウム塩、メグルミン（Ｎメチル−Ｄ−グルカミン）塩、それらの組合せなど）を含有する、注射用の水に溶解したアスコルビン酸滅菌水溶液が挙げられるが、これらに限定するものではない。一部の実施形態において、製剤は、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０又は１００ｍＭから１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、５００、５５０、６００、６５０、７００、７５０又は８００ｍＭのアスコルベート又はその塩（例えば、ナトリウム塩、メグルミン（Ｎメチル−Ｄ−グルカミン）塩、それらの組合せなど）を含むことができる。例えば、製剤は、１００〜７００ｍＭ、又は２００〜６５０ｍＭ、又は３００〜６００ｍＭ、又は４００〜５５０ｍＭのアスコルベート又はその塩を含むことができる。アスコルベートの濃度は、投与経路（例えば、局所的な身体領域又は区画への直接投与に対して静脈内投与）に応じて、随時調整できる。
【００３２】
一部の実施形態において、ｐＨは、約７（例えば、ｐＨ６．５〜７．５）に調整する（例えば、炭酸水素ナトリウム及び／又は水酸化ナトリウムを用いて）。
【００３３】
非経口投与に好適な製剤は、安定化剤を含んでいてもよい。安定化剤の例としては、キレート剤、例えば、ＥＤＴＡ（例えば、ＥＤＴＡ二ナトリウム）が挙げられる。製剤は、ｐＨ緩衝剤、例えば、炭酸水素塩（ＨＣＯ３−）及び／又はリン酸塩（ＰＯ４）を含んでいてもよい。
【００３４】
一部の実施形態による製剤は、糖、例えば、還元糖又は非還元糖を含んでいてもよい。「還元糖」は、遊離アルデヒド基又は遊離ケトン基を有する開鎖糖であり、全ての単糖並びに一部の二糖、オリゴ糖及び多糖を含む。還元糖の例としては、グルコース、ガラクトース、グリセルアルデヒド、フルクトース、リボース、キシロース、乳糖、マルトースなどが挙げられるが、これらに限定するものではない。「非還元糖」は、遊離アルデヒド基又は遊離ケトン基を含まない糖である。非還元糖の例としては、スクロース、トレハロースなどが挙げられるが、これらに限定するものではない。
【００３５】
本明細書中に教示したアスコルベート製剤に使用できるスピン−スピン交換触媒としては、メグルミン（Ｎメチル−Ｄ−グルカミン）、還元糖（例えば、グルコース、ガラクトース、グリセルアルデヒド、フルクトース、リボース、キシロース、ラクトース、マルトース、それらの組合せなど）及び非還元糖（例えば、スクロース、トレハロース、それらの組合せなど）を挙げることができるが、これらに限定するものではない。
【００３６】
非経口投与に好適な製剤は、範囲で、２００〜１２００又は１４００ｍＯｓｍ／Ｌの範囲のモル浸透圧濃度を有し得る。一部の実施形態において、製剤は、２００、３００、４００、５００又は６００ｍＯｓｍ／Ｌから７００、８００、９００、１０００、１１００、１２００、１３００又は１４００ｍＯｓｍ／Ｌのモル浸透圧濃度を有する。
【００３７】
一部の実施形態において、製剤は、動脈又は静脈への、及び／又は身体領域、例えば、臓器若しくは臓器領域への注射に好適である。一部の実施形態において、製剤は、静脈内注入に好適である。一部の実施形態において、製剤は、動脈内注入に好適である。一部の実施形態において、製剤は、髄腔内注入に好適である。
【００３８】
一部の実施形態において、製剤は、酸素除去する。水性組成物の酸素除去方法、例えば、窒素のような不活性ガス下で製剤を調製する又は窒素のような不活性ガスでパージする方法が知られている。例えば、米国特許出願公開第２０１４／００４８２９０号（Ｂｏｄｅｍａｎｎ）を参照のこと。
【００３９】
一部の実施形態において、製剤は、交換触媒、キレート剤などを含む又は含まない、アスコルビン酸メグルミン、アスコルビン酸ナトリウム又はこれらの塩の組合せの乾燥／粉末／凍結乾燥組成物としてとして提供する。これは、投与直前のケアの時点で滅菌液体担体（例えば、水、通常の生理食塩水、乳酸リンゲル液、又は非経口的薬物送達に好適な他の水性ビヒクル）中で再構成できる。好適な乾燥製剤は、５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５又は１００グラムのアスコルベート又はその塩を含むことができるが、これらに限定するものではない。
【００４０】
一部の実施形態において、製剤は、光感受性の液体組成物に好適な容器、例えば、不透明なプラスチック又はガラス容器（例えば、高密度ポリエチレン容器、黒色ポリ塩化ビニルでコーティングされたプラスチック又はガラス容器など）、アンバーガラスなどに入れて提供する。例えば、米国特許第８，３０９，１９１号（Ｗａｎｇら）、米国特許出願公開第２００４／００４８２０６号（Ｍｉｙａｋｅら）を参照のこと。
【００４１】
一部の実施形態において、製剤は、ＭＲＩイメージングのための非経口投与に好適な単位剤形で提供される。非限定的な例として、静脈内投与に好適な単位剤形は、１）０．２５グラム／分、６０分以下、１５グラム以下；２）０．５グラム／分、６０分以下、３０グラム以下；３）１．０グラム／分、６０分以下、６０グラム以下；又は４）１．５グラム／分、６０分以下、９０グラム以下であることができる。
【００４２】
使用方法。上記の通り、本明細書で教示する非経口アスコルベート組成物は、放射能又は化学標識を必要とせずにヒト及び非ヒト組織における灌流、代謝及び／又は酸化ストレスの検出及びキャラクタリゼーションのための造影剤を提供するために磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）に有用である。
【００４３】
特にスピン−スピン交換触媒（例えば、単純な糖、糖アルコール又はアミノ酸）の存在下での及びそれと合剤にされたアスコルベートは、金属系（例えば、ガドリニウム又は鉄）造影材料の使用もイオン化放射線の使用も必要としない、安全で生分解性のＭＲＩ造影剤である。この技術により、組織灌流の評価並びに１８Ｆ−ＦＤＧＰＥＴに類似した組織のバイアビリティ及び代謝の高分解能分子キャラクタリゼーションが可能になる。後者は、１８Ｆ−ＦＤＧ（即ち、ＧＬＵＴ１及び３トランスポーター）を取り込む同じグルコース輸送メカニズムによる細胞中へのアスコルベートの取り込み（デヒドロアスコルベートを介する）によって可能である（Ｒｕｍｓｅｙ  ＳＣ，Ｋｗｏｎ  Ｏ，Ｘｕ  ＧＷ，Ｂｕｒａｎｔ  ＣＦ，Ｓｉｍｐｓｏｎ  Ｉ，Ｌｅｖｉｎｅ  Ｍ  （Ｊｕｌｙ  １９９７）．  ”Ｇｌｕｃｏｓｅ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ  ｉｓｏｆｏｒｍｓ  ＧＬＵＴ１  ａｎｄ  ＧＬＵＴ３  ｔｒａｎｓｐｏｒｔ  ｄｅｈｙｄｒｏａｓｃｏｒｂｉｃ  ａｃｉｄ”．  Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．  ２７２  （３０）：  １８９８２−９）。
【００４４】
本明細書中で使用する「非経口投与」は、例えば注射又は注入による、静脈内、皮下、筋肉内、腹腔内、動脈内、骨内、髄腔内又は心室内投与を含むが、これらに限定するものではない。非限定的な例として、静脈内（ｉ．ｖ．）アクセスが対象には困難である場合（例えば、低血圧）又はそれ以外の投与経路が好適なＭＲＩ画像をもたらすであろう場合には、腹腔内投与若しくは他の非経口投与を使用できる。
【００４５】
一部の実施形態において、ＭＲＩは、アスコルベート組成物の非経口投与中、又は非経口投与後５、１０、３０、４０、６０、９０若しくは１２０分以内、又は非経口投与後１、２、３若しくは４時間以内に行う。
【００４６】
本発明の恩恵を受ける対象は、一般に、診断、治療、研究又は獣医学のための、ヒト対象と動物対象（例えば、イヌ、ネコ、ウサギ、ウシ、ウマなど）の両方を含む哺乳類対象である。対象は男性でも女性でもよく、新生児、乳児、若年、青年、成人及び老齢対象を含む任意の年齢であることができる。
【００４７】
ＭＲＩは公知であり、市販の装置によって及び当分野で公知の技術によって行うことができる。例えば、Ｓ．Ｂｕｓｈｏｎｇ  ａｎｄ  Ｇ．Ｃｌａｒｋｅ，  Ｍａｇｎｅｔｉｃ  Ｒｅｓｏｎａｎｃｅ  Ｉｍａｇｉｎｇ：  Ｐｈｙｓｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  （Ｍｏｓｂｙ，  ４ｔｈ  Ｅｄ．  ２０１４）を参照のこと。一部の実施形態において、ＭＲＩは、灌流（例えば、血流）イメージングである。一部の実施形態において、ＭＲＩは、代謝イメージングである。代謝イメージングは、代謝亢進又は代謝低下を示す腫瘍又は機能障害組織の同定／キャラクタリゼーションを含むがこれに限定されない、１８Ｆ  ＦＤＧ  ＰＥＴに類似した診断バイオマーカーとして使用することができる。
【００４８】
本明細書中に教示したＭＲＩによって画像化できる「身体又は身体領域」は、対象の身体又は身体の任意の領域、例えば、臓器又は臓器系、軟部組織、骨など又はそれらの任意の部分を含む。身体組織の例としては、頭部、頸部、胸部、腹部、骨盤、肢（複数可）、筋肉、脂肪、他の軟部組織、骨などが挙げられるが、これらに限定するものではない。臓器の例としては、副腎、下垂体、胸腺、黄体、網膜、脳、脾臓、肺、精巣、リンパ節、肝臓、甲状腺、小腸粘膜、白血球、膵臓、腎臓、唾液腺組織、心臓などが挙げられるが、これらに限定するものではない。
【００４９】
本明細書で使用するＭＲＩ画像の「強調（ｅｎｈａｎｃｉｎｇ）」は、ＭＲＩ信号における構造、組織又は体液のコントラストを強調することによってＭＲＩ可視化を容易にすることを含む。
【００５０】
「ＭＲＩ造影剤」は、ＭＲＩスキャン中に体内の構造、組織又は体液のコントラストを強調できる物質である。例として、常磁性造影剤、例えば、Ｇｄ含有造影剤又はマンガンキレート、及び超常磁性造影剤（例えば、鉄白金粒子）が挙げられるが、これに限定するものではない。例えば、米国特許出願公開第２０１４／０３５０１９３号（Ａｘｅｌｓｓｏｎら）、及び米国特許出願公開第２０１４／０２３４２１０号（Ｌｉｎら）も参照のこと。
【００５１】
アスコルベートＭＲＩの潜在的な用途には、現在の医療行為がＰＥＴスキャンを利用することが多いが、代替スキャン技術としてＭＲＩを使用する方法体系の改良が更なる臨床的な利益をもたらす可能性があるいくつかの臨床シナリオが含まれる。これらのシナリオとしては、癌、神経疾患（例えば、認知症、ＴＢＩ及びてんかん）及び心血管イメージングに関する診断研究が挙げられる。Ｔｃ９９ｍ標識薬剤（例えば、Ｔｃ−９９ｍセスタミビ（ｓｅｓｔｉｍｉｂｉ）又は「Ｃａｒｄｉｏｌｉｔｅ」）を用いた心臓研究は、Ｔｃ−９９ｍ供給の予測される縮小を考慮して代替的アプローチを必要とする特に注目すべき潜在的な診断用途を示している。Ｔｃ−９９ｍ関連薬剤を用いる心筋灌流及びバイアビリティイメージングは、欠くことのできない、広く実施されている操作であるが、これらのＴｃ−９９ｍ依存性薬剤に取って代わる商業的に実現可能な解決策は現在までいまだに開発されていない。
【００５２】
ＭＲイメージング及び造影剤の臨床的応用。臨床磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）は、組織中の水及び高分子からのプロトン（１Ｈ）核磁気共鳴（ＮＭＲ）信号を収集することにより、身体の高解像度画像を生成する。「Ｔ１強調（Ｔ１−ｗｅｉｇｈｔｅｄ）」ＭＲ画像の場合、縦緩和速度（スピン格子緩和速度、１／Ｔ１）が増加する領域で信号強度が増加する。「Ｔ２強調（Ｔ２−ｗｅｉｇｈｔｅｄ）」ＭＲＩでは、横緩和速度（スピン−スピン緩和速度、１／Ｔ２）が増加すると信号強度が減少する。Ｔ１強調画像及びＴ２強調画像はいずれも、実質的に全ての臨床ＭＲＩ研究においてルーチン的に収集される。
【００５３】
患部組織を正常組織からより明確に描出し、解剖学的定義を改善し且つ生理学的又は病理学的機能のキャラクタリゼーションを向上させることを目的として、ＭＲＩにおいては静脈造影剤をルーチン的に投与して１／Ｔ１又は１／Ｔ２を更に増加させる。現在認可されているＭＲＩ造影剤はほとんど全て、ランタニド金属Ｇｄのキレートをベースにしているが、ごく一部の血管造影及び灌流研究は、腎機能不全／腎不全患者において認可外の酸化鉄材料（例えば、Ｆｅｒａｈｅｍｅ）を使用して行われている。商業的なＧｄ系材料は、造影材料が蓄積しやすい患部組織において１／Ｔ１を増加させるために最も一般的に使用されている。
【００５４】
ＭＲＩによる組織灌流測定のために、１／Ｔ１又は１／Ｔ２コントラストのいずれかに基づく収集ストラテジーにより、Ｇｄ系薬剤又は酸化鉄ナノ粒子を使用することができるが、１／Ｔ２コントラストアプローチがますます好まれている。灌流イメージングは、腫瘍の攻撃性、治療に対する腫瘍応答並びに心臓、脳及び他の臓器における組織バイアビリティのキャラクタリゼーションのために現在臨床的に使用されている。
【００５５】
理論に拘泥するものではないが、溶媒水プロトンはアスコルベート分子のヒドロキシルプロトンと交換されるので、「Ｔ２強調コントラスト」とも称される常磁性を伴わないアスコルベート信号変化のメカニズムは、水プロトン（１Ｈ）スピン−スピン緩和速度１／Ｔ２（又は逆数として、スピン−スピン緩和時間、Ｔ２）の強調をベースとする。Ｔ２コントラストに対するプロトン交換の効果は、生理的ｐＨにおけるアスコルベートラジカルの不均化反応によって更に増幅される。アスコルベートの酸化及びアスコルベートラジカルの不均化は、酸化基質、例えば、過酸化水素（Ｈ２Ｏ２）及び／又は水素（「プロトン」）交換触媒の共存によって推進される。
【００５６】
アスコルベートの輸送及び排出。アスコルビン酸は、能動輸送と単純拡散の両方によって身体に吸収される。２つの主要な能動輸送経路は、アスコルビン酸ナトリウムコトランスポーター（ＳＶＣＴ）及びヘキソーストランスポーター（ＧＬＵＴ）である。ＳＶＣＴ１及びＳＶＣＴ２は、還元型のアスコルベートを、細胞膜を横切って輸入する（Ｓａｖｉｎｉ  Ｉ，Ｒｏｓｓｉ  Ａ，Ｐｉｅｒｒｏ  Ｃ，Ａｖｉｇｌｉａｎｏ  Ｌ，Ｃａｔａｎｉ  ＭＶ  （Ａｐｒｉｌ  ２００８）．  ”ＳＶＣＴ１  ａｎｄ  ＳＶＣＴ２：  ｋｅｙ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｆｏｒ  ｖｉｔａｍｉｎ  Ｃ  ｕｐｔａｋｅ”．  Ａｍｉｎｏ  Ａｃｉｄｓ  ３４  （３）：  ３４７−５５）のに対し、ＧＬＵＴ１及びＧＬＵＴ３グルコーストランスポーターは、酸化型であるデヒドロアスコルビン酸を移動させる（Ｒｕｍｓｅｙ  ＳＣ，Ｋｗｏｎ  Ｏ，Ｘｕ  ＧＷ，Ｂｕｒａｎｔ  ＣＦ，Ｓｉｍｐｓｏｎ  Ｉ，Ｌｅｖｉｎｅ  Ｍ  （Ｊｕｌｙ  １９９７）．  ”Ｇｌｕｃｏｓｅ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ  ｉｓｏｆｏｒｍｓ  ＧＬＵＴ１  ａｎｄ  ＧＬＵＴ３  ｔｒａｎｓｐｏｒｔ  ｄｅｈｙｄｒｏａｓｃｏｒｂｉｃ  ａｃｉｄ”．  Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．  ２７２  （３０）：  １８９８２−９）。正常な条件下では血漿中のデヒドロアスコルビン酸濃度は低いが、酸化型分子はＧＬＵＴ１及びＧＬＵＴ３を横切って、還元型がＳＶＣＴを横切って吸収されるよりもはるかに高い速度で吸収される。アスコルベート濃度が薬理学的に上昇すると、デヒドロアスコルベート濃度も増加し、それにより、ＧＬＵＴトランスポーターが高コピーで存在する場所、例えば、脳（及び血液脳関門）及び腫瘍細胞中での顕著な吸収が可能となる。一旦輸送されると、デヒドロアスコルビン酸は速やかに還元されてアスコルベートにもどる。
【００５７】
腎再吸収閾値を超える濃度のアスコルベートは尿中に自由に移り、約３０分間の半減期で排泄される。高摂取量（ヒトでは数百ｍｇ／日に相当）では、腎再吸収閾値は、男性で１．５ｍｇ／ｄＬ、女性で１．３ｍｇ／ｄＬである（Ｏｒｅｏｐｏｕｌｏｓ  ＤＧ，Ｌｉｎｄｅｍａｎ  ＲＤ，ＶａｎｄｅｒＪａｇｔ  ＤＪ，Ｔｚａｍａｌｏｕｋａｓ  ＡＨ，Ｂｈａｇａｖａｎ  ＨＮ，Ｇａｒｒｙ  ＰＪ  （Ｏｃｔｏｂｅｒ  １９９３）．  ”Ｒｅｎａｌ  ｅｘｃｒｅｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｓｃｏｒｂｉｃ  ａｃｉｄ：  ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ａｇｅ  ａｎｄ  ｓｅｘ”．  Ｊ  Ａｍ  Ｃｏｌｌ  Ｎｕｔｒ  １２  （５）：  ５３７−４２）。尿中に直接排出されない又は他の身体の代謝によって破壊されるアスコルベートは、Ｌ−アスコルビン酸オキシダーゼによって酸化されて除去される。
【００５８】
アスコルベートは、バンコマイシンに似た薬物動態プロフィールを有すると理解されている。経口アスコルベートの体内分布は厳密に制御され、経口用量が一日所要量の１００倍を超える場合でも血漿濃度が２００μＭを超えることはめったにない。（Ｌｅｖｉｎｅ  Ｍ，Ｃｏｎｒｙ−Ｃａｎｔｉｌｅｎａ  Ｃ，Ｗａｎｇ  Ｙ，Ｗｅｌｃｈ  ＲＷ，Ｗａｓｈｋｏ  ＰＷ，Ｄｈａｒｉｗａｌ  ＫＲ，Ｐａｒｋ  ＪＢ，Ｌａｚａｒｅｖ  Ａ，Ｇｒａｕｍｌｉｃｈ  ＪＦ，Ｋｉｎｇ  Ｊ，Ｃａｎｔｉｌｅｎａ  ＬＲ  （Ａｐｒｉｌ  １９９６）．  ”Ｖｉｔａｍｉｎ  Ｃ  ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ  ｉｎ  ｈｅａｌｔｈｙ  ｖｏｌｕｎｔｅｅｒｓ：  ｅｖｉｄｅｎｃｅ  ｆｏｒ  ａ  ｒｅｃｏｍｍｅｎｄｅｄ  ｄｉｅｔａｒｙ  ａｌｌｏｗａｎｃｅ”．  Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  Ｕ．Ｓ．Ａ．  ９３  （８）：  ３７０４−９）。しかし、静脈内投与されたアスコルベートは、これらの厳密な制御系を迂回するので、１０ｍＭ以上の血漿濃度が達成可能である。１０ｍＭを超える血漿濃度が、最大４時間にわたってヒトにおいて安全に持続され、毒性は著しく低い（Ｈｏｆｆｅｒ  ＬＪ．，Ｌｅｖｉｎｅ  Ｍ．，Ａｓｓｏｕｌｉｎｅ  Ｓ．，Ｍｅｌｎｙｃｈｕｋ  Ｄ．，Ｐａｄａｙａｔｔｙ  ＳＪ．，Ｒｏｓａｄｉｕｋ  Ｋ．，Ｒｏｕｓｓｅａｕ  Ｃ．，Ｒｏｂｉｔａｉｌｌｅ  Ｌ．，  ａｎｄ  Ｍｉｌｌｅｒ  ＷＨ．，  Ｊｒ．，  Ｐｈａｓｅ  Ｉ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｔｒｉａｌ  ｏｆ  ｉ．ｖ．  ａｓｃｏｒｂｉｃ  ａｃｉｄ  ｉｎ  ａｄｖａｎｃｅｄ  ｍａｌｉｇｎａｎｃｙ．  Ａｎｎ  Ｏｎｃｏｌ  １９：  １９６９−１９７４，  ２００８）。
【００５９】
本発明を、以下の非限定的な実施例において更に詳細に説明する。
【００６０】
インビトロの例
スピン−スピン緩和速度、１／Ｔ２のアスコルベートによる強調
以前の研究では、バルク水プロトンと低分子量溶質及び高分子の移動可能なプロトン（例えば、−ＮＨ２、−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＨ）との交換によって生じるＴ２強調に関するＮＭＲ／ＭＲＩコントラスト効果について報告されている。このプロトン交換による１／Ｔ２に関するコントラスト効果は、以下のように記載される：
【数１】
0006415715.tif 000002
【００６１】
バルク水はａに関連し、交換可能なプロトン（例えば、アスコルベートＯＨ基から）はｂに関連する。ｆＣＲは、Ｃａｒｖｅｒ及びＲｉｃｈａｒｄｓから導かれ、Ｈｉｌｌらによって改良された５つのパラメーターを有する閉じた関数である。（Ｃａｒｖｅｒ，  Ｊ．  Ｐ．；  Ｒｉｃｈａｒｄｓ，  Ｒ．  Ｅ．  Ｊ．  Ｇｅｎｅｒａｌ  ２−Ｓｉｔｅ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ  Ｆｏｒ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｅｘｃｈａｎｇｅ  Ｐｒｏｄｕｃｅｄ  Ｄｅｐｅｎｄｅｎｃｅ  Ｏｆ  Ｔ２  Ｕｐｏｎ  Ｃａｒｒ−Ｐｕｒｃｅｌｌ  Ｐｕｌｓｅ  Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ  Ｊ．  Ｍａｇｎ．  Ｒｅｓｏｎ．  １９７２，  ６，  ８９−１０５；  Ｈｉｌｌｓ，  Ｂ．  Ｐ．；  Ｗｒｉｇｈｔ，  Ｋ．  Ｍ．；  Ｂｅｌｔｏｎ，  Ｐ．  Ｓ．  Ｎ．Ｍ．Ｒ．  ｓｔｕｄｉｅｓ  ｏｆ  ｗａｔｅｒ  ｐｒｏｔｏｎ  ｒｅｌａｘａｔｉｏｎ  ｉｎ  Ｓｅｐｈａｄｅｘ  ｂｅａｄ  ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎｓ    Ｍｏｌ．  Ｐｈｙｓ．  １９８９，  ６７，  １３０９−１３２６）。アスコルベートのヒドロキシルプロトンに関しては、Ｐｂは交換可能なプロトンの割合であり、ｋは交換可能なプロトンと水プロトンとの交換速度であり、δωｂはヒドロキシルプロトンとバルク水プロトンとの間の化学シフトであり、Ｔ２ｂは、ヒドロキシルプロトンの局所的スピン−スピン緩和時間である。τは、Ｔ２強調収集シーケンスにおけるパルス間（９０°〜１８０°）間隔である。
【００６２】
Ｔ２コントラストに関してプロトン交換に影響を及ぼす必須であるがしばしば無視されるパラメーターは、交換触媒反応の役割である（Ｌｉｅｐｉｎｓｈ  Ｅ  ａｎｄ  Ｏｔｔｉｎｇ，  Ｇ    Ｐｒｏｔｏｎ  ｅｘｃｈａｎｇｅ  ｒａｔｅｓ  ｆｒｏｍ  ａｍｉｎｏ  ａｃｉｄ  ｓｉｄｅ  ｃｈａｉｎｓ  −  ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｆｏｒ  ｉｍａｇｅ  ｃｏｎｔｒａｓｔ．  Ｍａｇｎ  Ｒｅｓｏｎ  Ｍｅｄ．  １９９６    ３５（１）：  ３０−４２）。ＯＨ基又はＮＨ基と水との間のプロトン交換の速度定数ｋは、
【数２】
0006415715.tif 000003
によって記載できる。Ｋａ、Ｋｂ及びＫｃはそれぞれ、Ｈ＋、ＯＨ−及び他の交換触媒による触媒反応よる交換速度定数を示す。指数ｙは、所与の交換触媒のメカニズムに応じて１又は２である。速度定数Ｋａ及びＫｂは、
【数３】
0006415715.tif 000004
［式中、ＫＤは、プロトン供与体及び受容体の拡散律速遭遇（ｄｉｆｆｕｓｉｏｎ  ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  ｅｎｃｏｕｎｔｅｒ）の速度定数（約１０１０ｍｏｌ−１ｓ−１）であり、ｐＫＤ及びｐＫＡは、プロトン供与体及び受容体のｐＫ値である］
によって算出できる。ｐＫＨ３Ｏ＋及びｐＫＯＨ−＝１５．７であるが、触媒濃度に対するプロトン移動の非線形依存性のために、Ｋｃは予測がより困難である。それにもかかわらず、中性ｐＨでの効率的な交換触媒反応が、ｐＫＤ−ｐＫＡとの間の少なくとも中程度の差及び生理的ｐＨでの触媒活性酸性型又は塩基性型交換触媒の有意な濃度によって達成される。
【００６３】
したがって、Ｈ２Ｏは、主要な種（Ｈ３Ｏ＋及びＯＨ−）のｐＫＡが１５．７であるので、高濃度にもかかわらず、比較的弱いプロトン供与体であり、したがって生理的ｐＨでは、非効率的な交換触媒である。一方、生理的条件において認められている交換触媒には、有機リン酸塩、炭酸塩（例えば、炭酸水素塩、ＨＣＯ３−）並びにカルボキシル及びアミノ基を有する分子がある（Ｌｉｅｐｉｎｓｈ  Ｅ  ａｎｄ  Ｏｔｔｉｎｇ，  Ｇ    Ｐｒｏｔｏｎ  ｅｘｃｈａｎｇｅ  ｒａｔｅｓ  ｆｒｏｍ  ａｍｉｎｏ  ａｃｉｄ  ｓｉｄｅ  ｃｈａｉｎｓ  −  ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｆｏｒ  ｉｍａｇｅ  ｃｏｎｔｒａｓｔ．  Ｍａｇｎ  Ｒｅｓｏｎ  Ｍｅｄ．  １９９６，  ３５（１）：  ３０−４２）。
【００６４】
以下に示すように、アスコルベートはこれまでに認められていないもう１つの強力な触媒であり、好ましいｐＫＡ＝６．７５の１つのヒドロキシル基を４位に有すると共にｐＫＡ＝７．０の平衡不均化反応を有する。したがって、アスコルベートは、「自己触媒」するだけでなく、糖及び他の高分子の塩基性ヒドロキシル基に対して効率的なプロトン交換触媒である可能性がある。
【００６５】
図２は、ｐＨ７の脱イオン水中におけるいくつかの糖、糖アルコール及びアスコルベートの純粋な溶液のＴ２強調の比較を示す。溶質濃度１０及び２０ｍＭにおける、少なくとも６つの異なるエコー時間を含むＲＡＲＥ  ＦＳＥプロトコールを使用した７Ｔでの定量的Ｔ２マッピングからのデータを示す。示される通り、Ｔ２緩和度は、各分子上の利用可能な交換可能ＯＨプロトン数と概ね相関関係があり、二糖は、予測通り、単糖よりも比例的に大きなコントラスト効果を生成する。注目すべきは、溶質濃度に対する非線形依存性であって、濃度が増加するにつれて緩和度の強調が減少し、これは、純粋な溶液中における糖の自己会合に関連する可能性のある現象である。後者は、以下に記載する観察と特に関連し、アスコルベートと糖がより高い総溶質濃度で一緒に組み合わされると、全体的なＴ２効果がむしろ相乗的に強調される。アスコルベートを単糖又は二糖と組み合わせて含む製剤は、ＭＲイメージングのＴ２コントラスト効果を増加させるために、両方の種をより高濃度で送達する手段を提供する。
【００６６】
図３Ａは、中性ｐＨにおける種々の濃度での純粋なアスコルベート溶液のＴ２効果のより詳細な実証を図示している。図３Ｂは、デヒドロアスコルベートへの酸化及びアルコールベートラジカル不均化を推進するわずかμＭ濃度（即ち、生理的濃度）の過酸化水素（Ｈ２Ｏ２）の存在下でアスコルベートが存在する場合に、Ｔ２効果が顕著に強調されることを明らかにしている。Ｈ２Ｏ２はそれ自体が交換触媒と考えられるが、Ｈ２Ｏ２がアスコルベートの１００倍低い濃度で存在する場合にアスコルベート介在性の１／Ｔ２強調に対して劇的な効果が観察されることから、ＯＨアスコルビルプロトンによる直接交換ではなく、Ｈ２Ｏ２に推進されるアスコルベート酸化／不均化によるプロトン交換がＴ２変化に関与する重要な寄与メカニズムであることが示唆される。プロトン交換に対するデヒドロアスコルベートの酸化／不均化の寄与の更なる証拠が図３Ｃに示されており、これは、１／Ｔ２増強効果が、アスコルベート−デヒドロアスコルベート不均化の反応速度も最大である中性ｐＨにおいてずば抜けて顕著であることを示している。
【００６７】
図３Ｄのデータは、アスコルベートと適切なｐＫを有する受容体／供与体分子との間の交換触媒反応が１／Ｔ２強調変化を顕著に促進し得るという第１の示唆を与えている。ここでのデータは、ナトリウム塩として及びメグルミン（アミノ糖）塩としてのアスコルベートの溶液（１０ｍＭ）を比較している。ここで、Ｔ２コントラスト効果（Ｔ２緩和（ｍｓ））は、中性ｐＨの水中においてアスコルビン酸メグルミンを用いた場合にはメグルミン単独又はアスコルベート単独と比較して約４倍大きい。
【００６８】
引き続き、メグルミンとアスコルベートとの印象的な相乗効果が、塩形成カチオンとしてのアスコルベートとの化学的会合に依存するかどうかを検討した（理論的には、２つの部分は水中で完全に会合しているはずである）。図４は、「塩形成機能」がＮａ＋カチオンによって果たされる場合にはプロトン交換に実際に相乗作用がもたらされることを明らかにしており、メグルミンの塩基性ＯＨ基に加えてアミン基をアスコルベートとの交換触媒反応に関与させていると推定される。ここでは、実験群間差を更によく示すために、対照Ｔ２緩和（ｍｓ）値（Ｔ２＝８４０ｍｓ）は示していないことに留意されたい。
【００６９】
図５は、アスコルベートによるコントラスト効果に対する種々の生理学的交換触媒の影響を調べる一連の実験からのＴ２緩和データを要約している。既知の血清及び細胞外濃度のＰＯ４＝２ｍＭ、グルコース＝５ｍＭ及びＨＣＯ３−  ２５ｍＭを使用し、アスコルベートを１０ｍＭとして、これらの部分のそれぞれのＴ２緩和を個別に及び組み合わせて調べた。示される通り、水中におけるアスコルベート単独又はアスコルベートとＰＯ４＋との組合せのＴ２緩和効果は少ないが、生理的濃度のグルコース又はＨＣＯ３−のいずれかが１０ｍＭアスコルベートと共に存在すると劇的に増加し（血漿濃度は非経口投与によって容易且つ安全に達成される）、注目に値する、Ｔ２緩和の５０％の変化がもたらされる。最大の強調は、インビボにおいてはアスコルベートと共に既知濃度のグルコース、ＨＣＯ３−及びＰＯ４が存在する場合に見られる。したがって、アスコルベートをただ単にｉ．ｖ．投与することによって、インビボでのアスコルベートのＴ２強調効果は、ファントム研究において生理学的交換触媒を存在させずにアスコルベート単独だけを調べた後に予想される可能性がある効果よりはるかに大きくなるであろう。
【００７０】
インビボでは通常存在しない他の糖とアスコルベートとの配合がアスコルベートのコントラスト効果を更に触媒し得る可能性も、上記実験から予測される。図６は、例えば、メグルミンを同等の濃度（２０ｍＭ）のアスコルビン酸ナトリウムの溶液に添加し、２ｍＭ  ＰＯ４、２５ｍＭ  ＨＣＯ３−のバックグラウンドに加えた場合の追加の相乗作用を示している。データは、生理的濃度（５ｍＭ）のグルコースの有無による比較、及び生理学的触媒に添加されたメグルミン単独の効果を示している。明らかなように、最大のコントラスト効果は、全ての部分が組み合わされた場合に観察される。したがって、異なる交換触媒を互いに組み合わせることによってより高いコントラスト効果を達成でき、そのため任意の１つの外部から投与される種の濃度を制限する可能性があると推測される。
【００７１】
図７は、この概念を拡張して、アスコルビン酸Ｎａ及びメグルミンが他の単糖及び二糖並びに糖アルコールと配合された場合の潜在的な相乗作用を試験したデータを要約している。示される通り、コントラスト効果は、考えられるどの配合物によっても劇的である。図８には、コントラスト変化の群間差をよりよく示すために対照溶液（２ｍＭ  ＰＯ４及び２５ｍＭ  ＨＣＯ３−）。このように、最強の効果は、アスコルベート及びメグルミンが一般的な二糖であるスクロースと組み合わされた場合に観察され、したがって、全てが安全に非経口投与できる部分のみを使用するＭＲＩの有望な候補配合物（即ち、アスコルベート／メグルミン／スクロース）を示唆している。
【００７２】
［実施例１］
（インビボの例）
正常な脳灌流及び物質代謝
図９。インビボにおける、高用量非経口アスコルベート（２ｇ／ｋｇ、右ＩＪｉ．ｖ．注射）後のアスコルベートＴ２コントラスト変化。Ａ、正常Ｃ５７ブラックマウスの中脳を通る従来の単一スライスアキシャルＦＳＥ  Ｔ２ＷＩ画像を示している。右の２つの画像は、アスコルベートｉ．ｖ．投与中及び投与後におけるコントラスト変化の「初回通過」抽出を示す。脳組織のＴ２信号を、アスコルベート投与の直後及び１０分後に収集し、次にアスコルベート投与前に収集したＴ２脳信号から差し引く。アスコルベートが信号強度の減少をもたらすので、より高信号の投与前スキャンからの減算により、脳組織を通る通過灌流（血流）の正味の陽性「マップ」が得られる。１０分において、灌流効果はほぼ消失し、組織取り込みに関連する早期の信号強度変化が観察され始めている。Ｂ、高用量アスコルベートの組織取り込みによる信号変化を示している。信号強度のカラー−リュートマップは投与前スキャンから減算されず、したがって、正常Ｃ５７マウスでは３０〜６０分に最大となる、予想された経時的Ｔ２信号減少を示している。
【００７３】
［実施例２］
（インビボの例）
新皮質拡延性抑制と関連した限局性脳代謝亢進
図１０。新皮質拡延性抑制の齧歯類モデルにおけるアスコルベートＴ２強調。拡延性抑制（ＳＤ）は、６０年前にＬｏａｏによって最初に記載されたＣＮＳ組織の実験的に再生可能な病態生理学的現象である。皮質の限局的な領域がイオン摂動の臨界閾値に達した後、細胞脱分極の大きい拡散波が始まり灰白質組織に広がる可能性があるが、それが誘導された灰白質域に限局されたままであり、白質経路を通らない。誘導メカニズム（例えば、適用された塩化カリウムの局所的高濃度）が同じ領域に対して連続的である場合、ＳＤのこれらの波は８〜１０分に１回繰り返されて、２〜３時間持続する。ＳＤに伴って脳代謝の顕著な変化が起こる。組織学的に検出可能なニューロン損傷がＳＤ後には存在しないので、これらの物質代謝は、非虚血性の過剰興奮性脳組織、例えば、てんかん発作焦点の代謝フラックスに対応する。
【００７４】
前記実験において、下の列の画像は、小さい頭蓋切除を、隣接した頭頂葉皮質に局所的に拡散している、高濃度のＫＣｌに浸漬されたゲルフォーム（赤い矢印）と共に示している。頭蓋切除部位は、ブレグマの後方１ｍｍであり、頭蓋骨の目印は、下にある脳の後方１／３を表している。上の２つの列は、ブレグマの前方３ｍｍ及び４ｍｍの、すなわち、ＳＤ誘導部位から離れた齧歯類脳のＴ２画像及び信号変化の定量的カラーリュートＴ２マップを示している。前方スライスにおけるＴ２信号変化は、右大脳皮質では左大脳皮質に比較して明瞭なＴ２非対称を示している（この場合も、ＳＤは依然として右半球に限定されている）。これらの顕著な皮質信号変化は、１８Ｆ−ＦＤＧ  ＰＥＴ並びに直接マイクロダイアリシス及びメタボロミック測定でも観察される、ＳＤによって生じる既知の代謝亢進活性と一致している。注目すべきことに、逆の観察（Ｔ２信号の局所的増加）が頭蓋切除部位自体（３列目）の直下で見られ、ＫＣｌ注入部位での限局性水腫（自由水の増加）と一致している。
【００７５】
［実施例３］
（インビボの例）
心臓灌流及び代謝イメージング
図１１。非経口アスコルベートを用いた灌流及びバイアビリティの心臓イメージングを示す図である。Ａ、７Ｔにおけるラット心臓イメージングの２つの主要イメージング面、コロナル及びアキシャルを示している。呼吸同調を伴うレトロスペクティブゲーティングを用いて、７Ｔにおいて画像を集めた。収集シーケンスは中程度にＴ２強調されており、コントラスト効果を強調するために更に最適化することができる。Ｂ、アスコルベートｉ．ｖ．注射の最初のボーラスによる、左心室の全体にわたるＴ２信号強度の一過性減少を示している。初回通過流又は「灌流イメージング」のための最初のボーラスの後、可変フリップ角を使用した定量的Ｔ２マップは、心臓組織の緩徐なＴ２コントラスト変化を示し、アスコルベートの取り込みを反映している。代謝的に活性な生細胞のみが、アスコルベートを取り込むであろう。
【００７６】
［実施例４］
【表１】
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【００７７】
［実施例５］
ＭＲＩイメージングに有用な非経口製剤の調製例
上記製剤ＩＩを、以下の方法で調製する：滅菌水５００ｍＬに、アスコルビン酸５０ｇ（５６８ｍＭ）及びＮ−メチル−Ｄ−グルカミン５５．４ｇ（５６８ｍＭ）を加える。溶液が透明になるまで撹拌する。ｍＯｓｍ／Ｌ  約１１００。ｐＨ  約７．０。長期安定性を促進するために、０．０２５％ＥＤＴＡ二ナトリウムを加え、窒素ブランケット下及び感光条件下において脱酸素化溶液中で調製を行う。
【００７８】
［実施例６］
（インビボの例）
モルモットにおける、アスコルベートの３つの異なる製剤の静脈内投与後のＴ２コントラスト変化
我々は、軽度麻酔したモルモットの全脳におけるＴ２コントラスト変化を７Ｔで調べた。モルモットは、ヒトと同様にアスコルベートを内因的に合成できないので、このモデルのＭＲＩ効果は患者のＭＲＩ変化をより予測できる。アスコルベートは、６０分にわたって総用量２ｇ／ｋｇにコントロールされた注入を用いて大腿静脈又は頸静脈から非経口投与した。ＭＲＩは、９０分間行った。
【００７９】
図１２Ａは、アスコルベートの緩徐注入の前及び６０分の緩徐注入後における高速スピンエコー（ＦＳＥ）Ｔ２画像が脳実質の全体にわたって劇的な信号強度差を示すことを示している。
【００８０】
図１２Ｂ及び図１２Ｃにおいて、標準化された信号強度変化及び定量的緩和度測定値が、３つの異なるアスコルベート製剤：（１）１００％アスコルビン酸ナトリウム；（２）５０％アスコルビン酸ナトリウム及び５０％アスコルビン酸メグルミン；及び（３）１００％アスコルビン酸メグルミンの投与後のモルモット大脳皮質（Ｃｘ）及び大脳基底核（ＢＧ）の両方に関して示されている。図１２Ｂでは、シグナル強度変化は、５０％ＮａＡＡ：５０％ＭｅｇＡＡからなる第２の製剤（２）の投与中及び投与後のいずれの時点でも最大であり、観察された皮質ＦＳＥ  Ｔ２強度の減少は４０％を超えている。図１２ＣのＴ２緩和度計算値も、製剤（２）の場合はベースラインから１０％を超える値を示し、最大値は、製剤（１）又は（３）のいずれよりも統計的に大きい。従来のＦＳＥ  Ｔ２強調画像では、Ｍｅｇ  ＡＡ（３）の場合の信号強度変化は、ほとんど全ての時点でアスコルビン酸ナトリウム（１）の場合に観察されたものよりも大きいことが認められるが、Ｔ２緩和度計算値は、これらの後者２つの製剤間では統計的な差異を示していない。
【００８１】
前述したのは、本発明の例証であって、本発明の限定と解してはならない。本発明は以下の特許請求の範囲によって規定され、特許請求の範囲の均等形態も本発明に包含される。
出願時の特許請求の範囲は以下の通りである。
［請求項１］
ＭＲＩ造影剤としての使用に好適な滅菌水性組成物であって、
１００〜６００ｍＭのアスコルベートと、
１００〜６００ｍＭのナトリウム、メグルミン又はそれらの組合せと
を含み、２００〜１４００ｍＯｓｍ／Ｌのモル浸透圧濃度を有する、組成物。
［請求項２］
メグルミンを、場合によりナトリウムと組み合わせて含む（例えば、アスコルビン酸メグルミン及びアスコルビン酸ナトリウムを１０：９０、２０：８０、３０：７０又は４０：６０から９０：１０、８０：２０、７０：３０又は６０：４０までのモル又はミリモル（ｍＭ）比（アスコルビン酸メグルミン：アスコルビン酸ナトリウム）で含む）、請求項１に記載の組成物。
［請求項３］
炭酸塩及び／又はリン酸塩を更に含む、請求項１又は２に記載の組成物。
［請求項４］
還元糖を更に含む、請求項１から３のいずれか１項に記載の組成物。
［請求項５］
非還元糖を更に含む、請求項１から４のいずれか１項に記載の組成物。
［請求項６］
２００〜１２００ｍＯｓｍ／Ｌのモル浸透圧濃度を有する、請求項１から５のいずれか１項に記載の組成物。
［請求項７］
６．５〜７．５のｐＨを有する、請求項１から６のいずれか１項に記載の組成物。
［請求項８］
安定化剤（例えば、キレート剤、例えばエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ））を更に含む、請求項１から７のいずれか１項に記載の組成物。
［請求項９］
単位剤形で提供される、請求項１から８のいずれか１項に記載の組成物。
［請求項１０］
前記単位剤形が１０〜１００グラムのアスコルベートを含む、請求項９に記載の組成物。
［請求項１１］
アスコルベートと、
ナトリウム、メグルミン又はそれらの組合せと、
場合により炭酸塩及び／又はリン酸塩と、
場合により還元糖又は非還元糖と
を含む粉末組成物であって、滅菌液体担体の添加時に、対象の身体又は身体領域、例えば、臓器又は臓器領域の磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）画像の強調に使用するのに好適な、組成物。
［請求項１２］
メグルミンを、場合によりナトリウムと組み合わせて含む（例えば、アスコルビン酸メグルミン及びアスコルビン酸ナトリウムを１０：９０、２０：８０、３０：７０又は４０：６０から９０：１０、８０：２０、７０：３０又は６０：４０までのモル又はミリモル（ｍＭ）比（アスコルビン酸メグルミン：アスコルビン酸ナトリウム）で含む）、請求項１１に記載の組成物。
［請求項１３］
対象の身体又は身体領域、例えば、臓器又は臓器領域の磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）画像を強調する方法であって、
請求項１から１０のいずれか１項に記載の滅菌水性組成物を、ＭＲＩ画像を強調する量で前記対象に非経口投与するステップと、
次いで、前記対象のＭＲＩにより前記身体又は身体領域の画像を生成するステップと
を含み、それによって前記ＭＲＩ画像が強調される、方法。
［請求項１４］
前記身体領域が、頭部、頸部、胸部、腹部、骨盤、肢（複数可）、筋肉、脂肪又は骨である、請求項１３に記載の方法。
［請求項１５］
前記臓器が、副腎、下垂体、胸腺、黄体、網膜、脳、脾臓、肺、精巣、リンパ節、肝臓、甲状腺、小腸粘膜、白血球、膵臓、腎臓又は唾液腺組織を含む、請求項１３に記載の方法。
［請求項１６］
前記身体領域が脳である、請求項１３に記載の方法。
［請求項１７］
前記身体領域が心臓である、請求項１３に記載の方法。
［請求項１８］
前記投与ステップが、静脈内投与、例えば、静脈内注射によって行われる、請求項１３から１７のいずれか１項に記載の方法。
［請求項１９］
前記投与ステップが、腹腔内投与、例えば、腹腔内注射によって行われる、請求項１３から１８のいずれか１項に記載の方法。
［請求項２０］
前記画像がＴ２強調画像を含む、請求項１３から１９のいずれか１項に記載の方法。
［請求項２１］
前記画像が、代謝画像（例えば、腫瘍代謝画像又は脳代謝画像）を含む、請求項１３から２０のいずれか１項に記載の方法。
［請求項２２］
前記画像が灌流画像（例えば、心血管灌流画像）を含む、先行する請求項のいずれか１項に記載の方法。
［請求項２３］
前記画像生成ステップが、前記滅菌水性組成物の非経口投与中、非経口投与後５、１０、３０、４０、６０、９０若しくは１２０分以内、又は非経口投与後１、２、３若しくは４時間以内に行われる、先行する請求項のいずれか１項に記載の方法。
［請求項２４］
請求項１３から２３のいずれか１項に記載の方法を実施するための、又は請求項１３から２３のいずれか１項に記載の方法を実施するための薬剤若しくはイメージング剤を調製するための、請求項１から１０のいずれか１項に記載の滅菌水性組成物の使用。
【図１】
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【図２】
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【図３−１】
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【図３−２】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１Ａ】
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【図１１Ｂ】
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【図１２Ａ】
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【図１２Ｂ】
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【図１２Ｃ】
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