(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の(3aR,5s,6aS)-N-(3-メトキシル-1,2,4-チアジアゾール-5-イル)-5-(メチル(7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4-イル)アミノ)ヘキサヒドロシクロペンタ[c]ピロール-2(1H)-カルボキサミド硫酸水素塩、
【化１】
0006323885.tif 000009
。
【請求項２】
式（IV）の化合物の硫酸に対する化学量論比が１：１である、請求項１に記載の式（Ｉ）の(3aR,5s,6aS)-N-(3-メトキシル-1,2,4-チアジアゾール-5-イル)-5-(メチル(7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4-イル)アミノ)ヘキサヒドロシクロペンタ[c]ピロール-2(1H)-カルボキサミド硫酸水素塩、
【化２】
0006323885.tif 000010
。
【請求項３】
式（IV）の化合物と硫酸の塩形成反応の工程を含む、請求項１に記載の式（Ｉ）の(3aR,5s,6aS)-N-(3-メトキシル-1,2,4-チアジアゾール-5-イル)-5-(メチル(7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4-イル)アミノ)ヘキサヒドロシクロペンタ[c]ピロール-2(1H)-カルボキサミド硫酸水素塩の製造方法、
【化３】
0006323885.tif 000011
。
【請求項４】
塩形成反応が溶媒中で行われ、そして溶媒が３個かそれより少ない炭素原子を有するハロアルカンとアルコールの混合溶媒である、請求項３に記載の製造方法。
【請求項５】
混合溶媒がジクロロメタンとメタノールの混合溶媒である、請求項４に記載の製造方法。
【請求項６】
塩形成反応の反応温度が１０‐３０℃である、請求項４に記載の製造方法。
【請求項７】
塩形成反応の反応時間が０．５−４時間である、請求項６に記載の製造方法。
【請求項８】
請求項１に記載の式（I）の(3aR,5s,6aS)-N-(3-メトキシル-1,2,4-チアジアゾール-5-イル)-5-(メチル(7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4-イル)アミノ)ヘキサヒドロシクロペンタ[c]ピロール-2(1H)-カルボキサミド硫酸水素塩および薬学的に許容される担体を含有する医薬組成物。
【請求項９】
リウマチおよび関節リウマチの治療のための薬剤の製造における請求項１に記載の式（I）の(3aR,5s,6aS)-N-(3-メトキシル-1,2,4-チアジアゾール-5-イル)-5-(メチル(7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4-イル)アミノ)ヘキサヒドロシクロペンタ[c]ピロール-2(1H)-カルボキサミド硫酸水素塩または請求項８に記載の医薬組成物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はヤヌスキナーゼ（ＪＡＫ）阻害剤の硫酸水素塩およびその製造方法に関する。より具体的には、本発明は(3aR,5s,6aS)-N-(3-メトキシル-1,2,4-チアジアゾール-5-イル)-5-(メチル(7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4-イル)アミノ)ヘキサヒドロシクロペンタ[c]ピロール-2(1H)-カルボキサミド硫酸水素塩およびその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
関節炎は世界で最も一般的な慢性疾患であり、関節炎を起こす多くの理由があって、関節の損傷もそれによって異なる。現在、関節リウマチ治療の主要な薬剤としては、America Abbott Laboratoriesのアダリブマブ（ヒュミラ）、PfizerとAmgenにより共同開発されたエタネルセプト（エンブレル）およびJanssen pharmaceutical社のインフリキシマブ（レミケード）が挙げられる。これらの薬剤は、現在、医薬品市場で最も売れている薬剤であるが、これらの最も売れている薬剤は注射用薬剤のみである点には注目する価値がある。一般に経口投与されているＭＴＸ（メトトレキセート）は、著しい効果を有しているが、その毒性は非常に高い。
【０００３】
複数のサイトカインのシグナル経路の障害が関節リウマチ（RA）の病態生理学的過程で重要な役割を果たしていることが研究で示されている。一連のコントロールされないサイトカインによって媒介される炎症カスケードが、長期間活性状態にあるＴ細胞、Ｂ細胞、単核球、マクロファージおよび破骨細胞などのRA関連の複数の細胞をもたらし、それにより持続的な炎症や関節構造の損傷を引き起こす。ヤヌスキナーゼ（ＪＡＫ）シグナル経路はRA関連細胞の炎症誘発活性を制御し、該ＪＡＫは炎症性サイトカインネットワークのシグナル伝達におけるハブタンパクであって、RA関節の滑膜組織ではＪＡＫの量が著しく増加している。現在、Pfizerにより開発されたトファシチニブ（CP-690550）がＪＡＫ１阻害剤である。第II相臨床試験の結果は、Pfizerのトファシチニブの効果はメトトレキセートより著しく良いことを示した。この臨床試験で、研究者達は患者をランダムに割り振って、患者の１つのグループには単一薬物として５ｍｇ/１０ｍｇのトファシチニブを投与し、患者の他のグループには５ｍｇ/１０ｍｇのメトトレキセートを投与した。結果は、ヒトの体内の構造損傷の抑制においてトファシチニブの効力が６か月の期間でメトトレキセートより僅かに良く、関節リウマチ患者の種々の症候群を効果的に改善できることを示した。
【０００４】
我々はＪＡＫキナーゼ阻害剤開発のアイディアから進め、国際的な類似薬の開発方針をたどる。トファシチニブの構造に基づいて、我々はin vitroとin vivo活性および高い吸収性を持つ一連の薬物を開発し、式（IV）の化合物がＪＡＫキナーゼ阻害剤として首尾よく得られた。式（IV）の化合物に関して、その情報は、参照することによりその全体が本明細書に取り込まれる、出願人と他の人との共同出願である特許文献１（ＰＣＴ特許出願番号PCT/CN2012/086922）に完全に記載された。
【化１】
0006323885.tif 000002
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】PCT/CN2012/086922
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
式（IV）の化合物の低い溶解性を考慮して、我々はその溶解性とバイオアベイラビリティを改良するためにその塩の形成について検討し、検討した酸としてはクエン酸、塩酸および硫酸であった。溶解性のデータおよび得られた塩の動物試験の薬物動態結果に基づいて、我々は驚くべきことに、式（I）の化合物がリウマチおよび関節リウマチの治療において重要な研究意義を有する、ＪＡＫキナーゼ阻害剤として好ましい化合物になることが期待できることを見い出した。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明はより良い水溶性と改良された薬物動態活性を有するＪＡＫキナーゼ阻害剤塩を提供する。より具体的には、本発明は式（I）の(3aR,5s,6aS)-N-(3-メトキシル-1,2,4-チアジアゾール-5-イル)-5-(メチル(7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4-イル)アミノ)ヘキサヒドロシクロペンタ[c]ピロール-2(1H)-カルボキサミド硫酸水素塩およびその製造方法を提供する。
【化２】
0006323885.tif 000003
【０００８】
(3aR,5s,6aS)-N-(3-メトキシル-1,2,4-チアジアゾール-5-イル)-5-(メチル(7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4-イル)アミノ)ヘキサヒドロシクロペンタ[c]ピロール-2(1H)-カルボキサミドの硫酸に対する化学量論比は１：１である。
【０００９】
他の態様において、本発明は、式（IV）の化合物と硫酸の塩形成反応の工程を含む、(3aR,5s,6aS)-N-(3-メトキシル-1,2,4-チアジアゾール-5-イル)-5-(メチル(7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4-イル)アミノ)ヘキサヒドロシクロペンタ[c]ピロール-2(1H)-カルボキサミド硫酸水素塩の製造方法を提供する。
【化３】
0006323885.tif 000004
上記反応は溶媒中で行うことができ、該反応溶媒は３個かそれより少ない炭素原子を持つハロアルカンとアルコールの混合溶媒、好ましくはジクロロメタンとメタノールの混合溶媒である。
上記反応の温度は好ましくは１０‐３０℃、そして反応時間は好ましくは０．５−４時間である。
【００１０】
他の態様において、本発明は、式（I）の(3aR,5s,6aS)-N-(3-メトキシル-1,2,4-チアジアゾール-5-イル)-5-(メチル(7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4-イル)アミノ)ヘキサヒドロシクロペンタ[c]ピロール-2(1H)-カルボキサミド硫酸水素塩および薬学的に許容される担体を含有する医薬組成物を提供する。
【００１１】
他の態様において、本発明は、リウマチおよび関節リウマチの治療のための薬剤の製造における式（I）の(3aR,5s,6aS)-N-(3-メトキシル-1,2,4-チアジアゾール-5-イル)-5-(メチル(7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4-イル)アミノ)ヘキサヒドロシクロペンタ[c]ピロール-2(1H)-カルボキサミド硫酸水素塩またはそれを含有する医薬組成物の使用に関する。
【００１２】
本発明の方法に従って製造された式（I）の硫酸水素塩は、残留溶媒は含まないか少量の残留溶媒のみ含んでいて、中国薬局方で規定された関連医薬製品の残留溶媒の要求基準に適合しており、それ故、本発明による式（I）の硫酸水素塩は医薬活性成分として十分に使用することができる。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
好ましい実施態様
以下の実施例は本発明を詳細に説明し、本発明の技術的解決を記載するものである。以下の実施例は本発明の精神および範囲を限定するものと解釈してはならない。
【実施例１】
【００１４】
式（IV）の化合物の製造（特許文献１に記載）
式（IV）の化合物は以下のルートに従って製造できる：
【化４】
0006323885.tif 000005
ここで、化合物ｄの製造は次の様にして行われた：
【化５】
0006323885.tif 000006
【００１５】
具体的には、式（IV）の化合物の製造は、以下の２つのパート（部分）を含む：
パートI：化合物ｄの製造
工程１
(3aR,5r,6aS)-tert-ブチル 5-((メチルスルホニル)オキシ)ヘキサヒドロシクロペンタ[c]ピロール-2(1H)-カルボキシレート
(3aR,5r,6aS)-tert-ブチル 5-ヒドロキシヘキサヒドロシクロペンタ[c]ピロール-2(1H)-カルボキシレート１ｄ（９ｇ，４０ｍｍｏｌ）をジクロロメタン１５０ｍＬに溶解し、次いで塩化メチルスルホニル（４．７０ｍＬ，６０ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１１．２０ｍＬ，８０ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。室温で２時間反応後、飽和炭酸水素ナトリウム溶液２００ｍＬを反応混合液に加えた。水相と有機相を分離した。有機相は飽和食塩水（２００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥して、ろ過した。ろ液を減圧下に濃縮して、標題生成物(3aR,5r,6aS)-tert-ブチル 5-((メチルスルホニル)オキシ)ヘキサヒドロシクロペンタ[c]ピロール-2(1H)-カルボキシレート２ｄ（１２．００ｇ、収率９８．４％）を黄色液体として得た。
【００１６】
工程２
(3aR,5s,6aS)-tert-ブチル 5-(メチルアミノ)ヘキサヒドロシクロペンタ[c]ピロール-2(1H)-カルボキシレート
(3aR,5r,6aS)-tert-ブチル 5-((メチルスルホニル)オキシ)ヘキサヒドロシクロペンタ[c]ピロール-2(1H)-カルボキシレート２ｄ（６０ｍｇ，０．２ｍｍｏｌ）をメタノール１０ｍＬに溶解し、メチルアミン５ｍＬを添加した。４０℃で１６時間反応した後、反応混合液を減圧下に濃縮して標題の粗生成物(3aR,5s,6aS)-tert-ブチル 5-(メチルアミノ)ヘキサヒドロシクロペンタ[c]ピロール-2(1H)-カルボキシレート３ｄ（６０ｍｇ、褐色オイル）を得たが、さらなる精製をすることなく次の工程に直接使用した。
MS m/z (ESI): 241.5 [M+1].
【００１７】
工程３
(3aR,5s,6aS)-tert-ブチル 5-(メチル(7H-ピロール[2,3-d]ピリミジン-4-イル)アミノ)ヘキサヒドロシクロペンタ[c]ピロール-2(1H)-カルボキシレート
(3aR,5s,6aS)-tert-ブチル 5-(メチルアミノ)ヘキサヒドロシクロペンタ[c]ピロール-2(1H)-カルボキシレート３ｄ（２００ｍｇ，０．８ｍｍｏｌ）および4-クロロ-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン４ｄ（１２７ｍｇ，０．８ｍｍｏｌ）をｎ−ブタノール５ｍＬに溶解し、次いでトリエチルアミン（１６８ｍｇ，１．６ｍｍｏｌ）を添加した。１００℃で４８時間反応後、反応混合液を減圧下に濃縮し、次いで水１０ｍＬおよび酢酸エチル１０ｍＬを添加した。水相と有機相を分離した。有機相を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥して、ろ過した。ろ液は減圧下に濃縮し、得られた残渣をＨＰＬＣで精製して、標題生成物(3aR,5s,6aS)-tert-ブチル 5-(メチル(7H-ピロール[2,3-d]ピリミジン-4-イル)アミノ)ヘキサヒドロシクロペンタ[c]ピロール-2(1H)-カルボキシレート５ｄ（５ｍｇ、収率５．０％）を白色固体として得た。
MS m/z (ESI): 358.5[M+1]
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 10.07 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 6.55 (s, 1H), 5.58-5.54 (m, 1H), 3.65-3.62 (m, 2H), 3.27-3.23 (m, 5H), 2.86-2.81 (m, 2H), 2.06-2.02 (m, 2H), 1.93-1.91 (m, 2H), 1.49 (s, 6H).
【００１８】
工程４
N-メチル-N-((3aR,5s,6aS)-オクタヒドロシクロペンタ[c]ピロール-5-イル)-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4-アミン 塩酸塩
(3aR,5s,6aS)-tert-ブチル 5-(メチル(7H-ピロール[2,3-d]ピリミジン-4-イル)アミノ)ヘキサヒドロシクロペンタ[c]ピロール-2(1H)-カルボキシレート５ｄ（１．５ｇ，４．２ｍｍｏｌ）を１Ｍ塩化水素のメタノール溶液２０ｍＬに溶解した。１６時間反応後、反応混合液を減圧下に濃縮し、標題の粗生成物N-メチル-N-((3aR,5s,6aS)-オクタヒドロシクロペンタ[c]ピロール-5-イル)-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4-アミン 塩酸塩ｄ（１．５ｇ、褐色固体）を得た。
MS m/z (ESI): 258.1 [M+1].
【００１９】
パートII：式（IV）の化合物の製造
工程１
フェニル (3-メトキシ-1,2,4-チアジアゾール-5-イル)カルバメート
3-メトキシ-1,2,4-チアジアゾール-5-アミンａ（５００ｍｇ，３．８２ｍｍｏｌ）およびクロロギ酸フェニルｂ（６００ｍｇ，３．８２ｍｍｏｌ）をジクロロメタン２０ｍＬに溶解し、次いでトリエチルアミン（０．８ｍＬ，５．７３ｍｍｏｌ）を添加した。１６時間反応後、水３０ｍＬを反応混合液に加えて溶液を希釈した。水相と有機相を分離し、水相はジクロロメタン（２０ｍＬ×２）で抽出し、有機相を合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ液は減圧下に濃縮し、得られた残渣を溶出系Ａを用いてシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、標題生成物フェニル (3-メトキシ-1,2,4-チアジアゾール-5-イル)カルバメートｃ（２００ｍｇ、収率２０．８％）を白色固体として得た。
MS m/z (ESI): 252.0 [M+1].
【００２０】
工程２
(3aR,5s,6aS)-N-(3-メトキシ-1,2,4-チアジアゾール-5-イル)-5-(メチル(7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4-イル)アミノ)ヘキサヒドロシクロペンタ[c]ピロール-2(1H)-カルボキサミド
N-メチル-N-((3aR,5s,6aS)-オクタヒドロシクロペンタ[c]ピロール-5-イル)-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4-アミン 塩酸塩ｄ（１２０ｍｇ，０．４７ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン１５ｍＬに溶解し、次いでフェニル (3-メトキシ-1,2,4-チアジアゾール-5-イル)カルバメートｃ（１１７ｍｇ，０．４７ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（０．１３ｍＬ，０．９４ｍｍｏｌ）を添加した。６０℃で５時間反応後、反応混合液は水３０ｍＬと混合して、ジクロロメタン（５０ｍＬ×３）で抽出した。有機相を合わせて、飽和食塩水（５０ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して、ろ過した。ろ液は減圧下に濃縮し、得られた残渣を溶出系Ａを用いてシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、標題生成物(3aR,5s,6aS)-N-(3-メトキシ-1,2,4-チアジアゾール-5-イル)-5-(メチル(7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4-イル)アミノ)ヘキサヒドロシクロペンタ[c]ピロール-2(1H)-カルボキサミド（IV）（５０mg、収率２５．９％）を白色固体として得た。
MS m/z (ESI): 412.9 [M-1].
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.60 (m, 2H), 8.08 (s, 1H), 7.06-7.05 (m, 1H), 6.53-6.51 (m, 1H), 5.48-5.44 (m, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.69-3.65 (m, 2H), 3.37-3.32 (m, 2H), 3.16 (s, 3H), 2.90-2.88 (m, 2H), 2.02-1.99 (m, 2H), 1.80-1.77 (m, 2H).
【実施例２】
【００２１】
(3aR,5s,6aS)-N-(3-メトキシル-1,2,4-チアジアゾール-5-イル)-5-(メチル(7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4-イル)アミノ)ヘキサヒドロシクロペンタ[c]ピロール-2(1H)-カルボキサミド硫酸水素塩（式（I）の化合物）の製造
(3aR,5s,6aS)-N-(3-メトキシ-1,2,4-チアジアゾール-5-イル)-5-(メチル(7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4-イル)アミノ)ヘキサヒドロシクロペンタ[c]ピロール-2(1H)-カルボキサミド（IV）（１４０ｇ，０．３４ｍｏｌ）、無水メタノール（３５０ｇ）およびジクロロメタン（２．０ｋｇ）を１０Ｌの反応フラスコに撹拌下に加えた。硫酸（３４．８ｇ，０．３６ｍｏｌ）を室温でゆっくりと加え、反応溶液を透明にした。３０分間撹拌した後、不溶物質をろ過で取り除いて、ろ液を減圧下に濃縮し、乾燥して、標題生成物１３５ｇ−１６８ｇ、収率：８０−９０％を得た。
MS m/z (ESI): 415.1651 [M+1].
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.75 (s, 1H), 11.04 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 7.41-7.42 (t, 1H), 6.89 (s, 1H), 5.15-5.19 (m, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.68-3.70 (m, 2H), 3.38-3.40 (m, 2H), 3.29 (s, 3H), 2.95 (s, 2H), 2.09-2.16 (m, 2H) , 1.92-1.97 (m, 2H)
【実施例３】
【００２２】
(3aR,5s,6aS)-N-(3-メトキシル-1,2,4-チアジアゾール-5-イル)-5-(メチル(7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4-イル)アミノ)ヘキサヒドロシクロペンタ[c]ピロール-2(1H)-カルボキサミド（式（IV）の化合物）およびその対応するクエン酸塩、塩酸塩、硫酸塩、硫酸水素塩の水および０．１Ｎ ＨＣｌにおける溶解性比較試験を行った。結果は、硫酸水素塩の溶解性が大きく増加し、また他の塩より非常に良いことを示した。詳細な結果は表１に示した。
【００２３】
式（IV）の化合物およびその塩の溶解性比較試験
【表１】
0006323885.tif 000007
【実施例４】
【００２４】
式（IV）の化合物およびその塩の異なる形態の薬物動態挙動をアカゲザルで研究して、化合物の異なる形態の性質を詳細に評価した。４匹のアカゲザルを試験動物として用い、雄と雌半々とした。アカゲザルに５０ｍｇ/ｋｇの単一用量で投与し；マルチクロスオーバー法を採用して試験動物に異なる薬物を投与し、各サイクルの回復期を３日とし；血液サンプル（０．５ｍＬ）を投与前（０ｈ）および投与後０．２５ｈ、０．５ｈ、１ｈ、２ｈ、４ｈ、６ｈ、８ｈおよび２４ｈに大腿静脈から採取し、ヘパリン処理したチューブに入れて、十分に振とうし、３５００ｒｐｍで１０分間遠心分離して血漿を分離した。血漿サンプルは低温で保存し、LC-MS/MSを用いて血漿と肝臓における薬物濃度を測定し、そして薬物動態パラメータはWinNonlin 5.3ソフトウェアにより解析した。実験結果を以下に示す。
【００２５】
式（IV）の化合物、そのクエン酸塩および硫酸水素塩の薬物動態パラメータ
【表２】
0006323885.tif 000008
【００２６】
結論：上記サルの薬物動態の結果は、式（IV）の化合物の生体内での暴露は41111 ng/ml*hであるが、大きな個体差があり；クエン酸塩の生体内での暴露は塩基のものに類似しており；硫酸水素塩の生体内での暴露は塩基のものに比べて５０％増加していて、個体差は小さく、硫酸水素塩が高い生体内暴露と小さな個体差を有することが見られ、それ故医療目的に適していることを示していた。