(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
固体経口投与剤であって、
ＢＣＳクラスＩＩＩとして分類され分子構造中にペプチド結合を含まない少なくとも１つの抗菌化合物または抗ウイルス化合物と機能賦形剤との混合物と、
耐酸保護剤としての腸溶性コーティングと、
前記混合物と腸溶性コーティングとの間に位置し、前記混合物に含まれるクエン酸を耐酸保護剤から分離する水溶性バリアーと、を含んでなり、
前記機能賦形剤は、ラウロイルカルニチンと、コーティングされているクエン酸粒子とからなり、
前記クエン酸粒子は、クエン酸と前記混合物の他の成分との酸相互作用を減じる水溶性コートでコーティングされ、前記固体経口投与剤に０．１Ｍの重炭酸ナトリウム水溶液１０ｍＬが加えられると、水溶液のｐＨが５．５より高くならないように低減し、
前記固体経口投与剤が経口で投与されるとき、前記少なくとも１つの抗菌化合物または抗ウイルス化合物の等用量を含有するが前記機能賦形剤を含まない固体投与剤の投与により提供される全身的な生物学的利用能と比較して、前記固体経口投与剤は全身的な生物学的利用能の相乗的な増加を提供することを特徴とする固体経口投与剤。
【請求項２】
前記少なくとも１つの活性医薬化合物或いは前記少なくとも１つの抗菌化合物または抗ウイルス化合物が、チゲサイクリン（ｔｉｇｅｃｙｃｌｉｎｅ）、ザナミビル（ｚａｎａｍｉｖｉｒ）、カナマイシン（ｋａｎａｍｙｃｉｎ）、及びトブラマイシン（ｔｏｂｒａｍｙｃｉｎ）からなる群から選ばれることを特徴とする請求項１に記載の固体経口投与剤。
【請求項３】
固体経口投与剤であって、
治療上有効量のトブラマイシンと、ラウロイルカルニチンと、コーティングされているクエン酸粒子とを含んでなる混合物と、
耐酸保護剤としての腸溶性コーティングと、
前記混合物と腸溶性コーティングとの間に位置し、前記混合物に含まれるクエン酸を耐酸保護剤から分離する水溶性バリアーと、を含んでなり、
前記クエン酸粒子は、クエン酸と前記混合物の他の成分との酸相互作用を減じる水溶性コートでコーティングされ、前記固体経口投与剤に０．１Ｍの重炭酸ナトリウム水溶液１０ｍＬが加えられると、水溶液のｐＨが５．５より高くならないように低減し、
前記固体経口投与剤が経口投与されたときに、前記トブラマイシンの等用量を含有するが前記ラウロイルカルニチン及び前記クエン酸粒子を含まない固体投与剤の投与により提供される全身的な生物学的利用能の平均値と比較して、前記固体経口投与剤は、前記トブラマイシンの全身的な生物学的利用能の平均値の増加を提供することを特徴とする固体経口投与剤。
【請求項４】
前記耐酸保護剤は、セルロースアセテートフタレート、ヒドロキシプロピル・メチルエチルセルロースサクシネート、ヒドロキシプロピル・メチルセルロース・フタレート、カルボキシメチルエチルセルロース、及びメタクリル酸−メチルメタクリレートコポリマーから選ばれることを特徴とする請求項１乃至３のいずれかに記載の固体経口投与剤。
【請求項５】
前記水溶性バリアーは、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、及び医薬ゼラチンから選ばれることを特徴とする請求項１乃至４のいずれかに記載の固体経口投与剤。
【請求項６】
前記水溶性コートの材料は、グルコース、マルトデキストリン、及びクエン酸ナトリウムから選ばれることを特徴とする請求項１乃至５のいずれかに記載の固体経口投与剤。
【請求項７】
前記水溶性コートの材料は、クエン酸ナトリウムであることを特徴とする請求項１乃至６のいずれかに記載の固体経口投与剤。
【発明の詳細な説明】
【関連出願の相互参照】
【０００１】
本出願は、米国仮出願Ｎｏ．６１／７７２，９２７（２０１３年３月５日）、及び米国仮出願Ｎｏ．６１／９２５，４４３（２０１４年１月９日）を基礎として優先権を主張する。これら出願の内容は、参照として全体をここに組み入れる。
【背景技術】
【０００２】
バイオ医薬品分類システム（Ｂｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ  Ｓｙｓｔｅｍ）“ＢＣＳ”ガイダンスは、経口配合開発を標準化するために米国食品医薬品局（“ＦＤＡ”）によって２０００年に公表され、現在、水溶性と腸透過性に基づいて医薬物質を分類するに使用される科学的フレームワークの基礎となっている。
ＢＣＳによれば、医薬物質は、溶解性と腸透過性に基づいて４つのクラスに分類される。クラスＩは、高溶解性で高透過性、クラスＩＩは、低溶解性で高透過性；クラスＩＩＩは、高溶解性で低透過性、およびクラスＩＶは、低溶解性で低透過性、である。
溶解性が低いことは、分解速度と膜透過を遅くすることで、医薬品候補物質の経口吸収と生物学的利用能（ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ）に大きな障害となる。生体膜を通る透過性は、薬剤の吸収と分配でのキーファクターである。透過性が良くないことは、胃腸粘膜での吸収が悪くなり、身体全体への行きわたりを悪くする。
【０００３】
経口生物学的利用能“Ｆ”が低いことは、臨床前及び臨床での開発において失敗化合物となる主要因の１つである。経口Ｆが低い化合物は、血漿中での発現が低く、固体間の変動が大きく、治療に使用するに限界となる。そこで、当業界では、経口生物学的利用能を改善する医薬組成物の要求がある。本発明は、この要求に応えるものである。
【発明の概要】
【０００４】
本発明は、経口デリバリーに適した医薬組成物を提供するもので、ＢＣＳクラスＩＩ、ＢＣＳクラスＩＩＩあるいはＢＣＳクラスＩＶとして分類される少なくとも１つの化合物、少なくとも１つの吸収促進剤、少なくとも１つのｐＨ低減化合物（ｐＨ  ｌｏｗｅｒｉｎｇ  ｃｏｍｐｏｕｎｄ）、そして少なくとも１つのキレート剤を含んでいる。
【０００５】
本発明は、さらに、治療上有効量のＢＣＳクラスＩＩ、ＢＣＳクラスＩＩＩあるいはＢＣＳクラスＩＶとして分類される少なくとも１つの化合物の経口生物学的利用能を高める方法を提供するもので、ＢＣＳクラスＩＩ、ＢＣＳクラスＩＩＩあるいはＢＣＳクラスＩＶとして分類される少なくとも１つの化合物、少なくとも１つの吸収促進剤、少なくとも１つのｐＨ低減化合物、そして少なくとも１つのキレート剤を含む医薬組成物を経口投与することからなっている。
【０００６】
本発明は、さらに、必要とする対象（ｓｕｂｊｅｃｔ）の細菌またはウイルス感染症の処置（ｔｒｅａｔｉｎｇ）方法を提供するもので、ＢＣＳクラスＩＩ、ＢＣＳクラスＩＩＩあるいはＢＣＳクラスＩＶとして分類される少なくとも１つの化合物、少なくとも１つの吸収促進剤、少なくとも１つのｐＨ低減化合物、そして少なくとも１つのキレート剤を含む医薬組成物を経口投与することからなっている。細菌感染症は、グラム陽性菌によるものでも、あるいはグラム陰性菌によるものであってもよい。
【０００７】
本発明は、さらに、必要とする対象（被験対象）での複雑性皮膚・皮膚組織感染症（ｃＳＳＳＩ）の処置（治療）方法を提供するもので、ＢＣＳクラスＩＩ、ＢＣＳクラスＩＩＩあるいはＢＣＳクラスＩＶとして分類される少なくとも１つの化合物、少なくとも１つの吸収促進剤、少なくとも１つのｐＨ低減化合物、そして少なくとも１つのキレート剤を含む医薬組成物を経口投与することからなっている。
【０００８】
ＢＣＳクラスＩＩ、ＢＣＳクラスＩＩＩあるいはＢＣＳクラスＩＶとして分類される少なくとも１つの化合物は、低分子量の有機化合物である。ＢＣＳクラスＩＩ、ＢＣＳクラスＩＩＩあるいはＢＣＳクラスＩＶとして分類される少なくとも１つの化合物は、抗菌化合物あるいは抗ウイルス化合物である。ＢＣＳクラスＩＩ、ＢＣＳクラスＩＩＩあるいはＢＣＳクラスＩＶとして分類される少なくとも１つの化合物は、チゲサイクリン（ｔｉｇｅｃｙｃｌｉｎｅ）、ザナミビル（ｚａｎａｍｉｖｉｒ）、カナマイシン（ｋａｎａｍｙｃｉｎ）、トブラマイシン（ｔｏｂｒａｍｙｃｉｎ）あるいはフェノフィブラート（ｆｅｎｏｆｉｂｒａｔｅ）であることができる。
【０００９】
医薬組成物は、固体投与（ｓｏｌｉｄ  ｄｏｓａｇｅ）の医薬組成物であることができ、また、多層固体投与の医薬組成物であることができる。
【００１０】
ｐＨ低減化合物は、ｐＫａが４．２以下であることができ、また３．０以下であることができる。好ましくは、ｐＨ低減化合物は、クエン酸ナトリウムである。
【００１１】
キレート剤は、カルボン酸系キレート剤あるいはアミノ酸系キレート剤である。カルボン酸系キレート剤は、アセチルサリチル酸、酢酸、アスコルビン酸、クエン酸、フマル酸、グルクロン酸、グルタル酸、グリセリン酸、グリコール酸、グリオキサル酸、イソクエン酸、イソバレリン酸、乳酸、マレイン酸、オキサロ酢酸、オキサロコハク酸、プロピオン酸、ピルビン酸、コハク酸、酒石酸あるいは吉草酸である。好ましくは、カルボン酸系キレート剤は、クエン酸である。
【００１２】
少なくとも１の吸収促進剤は、アシルカルニチンを含むことができる。好ましくは、アシルカルニチンは、ラウロイルカルニチンである。少なくとも１の吸収促進剤は、表面活性剤を含むことができる。表面活性剤は、酸溶解性の胆汁酸である。
【００１３】
医薬組成物は、さらにカチオン表面活性剤を含むことができる。
【００１４】
医薬組成物は、さらに耐酸保護剤（ａｃｉｄ  ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  ｖｅｈｉｃｌｅ）を含むことができる。好ましくは、耐酸保護剤は、粘稠な保護シロップである。
【００１５】
キレート剤および耐酸保護剤を含む多層固体投与の医薬組成物は、さらにキレート剤と耐酸保護剤の間に層をなす水溶性バリアーを含むことができる。
【００１６】
本発明は、ＢＣＳクラスＩＩ、ＢＣＳクラスＩＩＩあるいはＢＣＳクラスＩＶとして分類される少なくとも１つの抗菌化合物あるいは抗ウイルス化合物、ラウロイルカルニチン、クエン酸、及びクエン酸ナトリウムを含み、ｐＨ３．５で緩衝された経口デリバリーに適した医薬組成物を提供する。
【００１７】
本開示は、詳細な説明と関連して記載してきたが、前述の記載は、説明のためのもので、本開示の範囲を限定するものではなく、本開示の範囲は、添付の特許請求の範囲によって定義されるものである。他の実施形態、利点および変更は、以下の請求の範囲内に入るものである。
【００１８】
この開示は、特に、好ましい実施形態を参照として示し、記載してきたが、添付の特許請求の範囲に挙げた開示の範囲を逸脱することなく、形態と詳細に様々な変更ができることは、当業界の者であれば理解できることである。
【００１９】
ここに引用された特許および科学的文献は、当業界の者が入手できる知識を確立する。ここに引用されたアメリカ特許、及び公開または未公開アメリカ特許出願の全てを、参考として挙げる。ここに引用された外国特許および特許出願の全てを、参考として挙げている。ここに引用された受入番号によって示されたジェンバンク（ＧｅｎＢａｎｋ）と米国生物工学情報センター（ＮＣＢＩ）提出物を、参考として挙げている。ここに引用された他の公開参考書、種類、原稿及び科学文献を、参考として挙げている。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
【図１】チゲサイクリン０．６４ｍｇ／ｋｇをスプラーグドーリーラット（Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ  Ｒａｔｓ）に単回ＩＶボーラス注射投与した後の、個々の及び平均（±ＳＤ）の血漿中チゲサイクリン濃度を示すグラフである。
【図２】チゲサイクリン１２ｍｇ／ｋｇをスプラーグドーリーラットに単回ＩＶボーラス注射投与した後の、個々の及び平均（±ＳＤ）の血漿中チゲサイクリン濃度を示すグラフである。
【図３】チゲサイクリン０．６４ｍｇ／ｋｇまたは１２ｍｇ／ｋｇをスプラーグドーリーラットに単回ＩＶボーラス注射投与した後の、投与量調節した平均血漿中チゲサイクリン濃度を示すグラフである。
【００２１】
【図４】ＰＢＳ中に配合（処方）して（ｆｏｒｍｕｌａｔｅｄ）、チゲサイクリン４．８ｍｇ／ｋｇをスプラーグドーリーラットに単回十二指腸内（ＩＤ）注射投与した後の、個々の及び平均（±ＳＤ）の血漿中チゲサイクリン濃度を示すグラフである。
【図５】ＰＢＳ中に配合して、チゲサイクリン９．０ｍｇ／ｋｇをスプラーグドーリーラットに単回ＩＤ注射投与した後の、個々の及び平均（±ＳＤ）の血漿中チゲサイクリン濃度を示すグラフである。
【図６】ＰＢＳ中に配合してスプラーグドーリーラットに単回ＩＤ注射投与した後の、投与量調節した平均血漿中チゲサイクリン濃度を示すグラフである。
【００２２】
【図７】クエン酸（ＣＡ）１００ｍＭ（ｐＨ：３．５）、ラウロイル−Ｌ−カルニチン（ＬＬＣ）２６ｍＭで配合して、チゲサイクリン４．８ｍｇ／ｋｇをスプラーグドーリーラットに単回ＩＤ注射投与した後の、個々の及び平均（±ＳＤ）の血漿中チゲサイクリン濃度を示すグラフである。
【図８】ＣＡを１００ｍＭ（ｐＨ：３．５）、ＬＬＣを２６ｍＭで配合したチゲサイクリン９．０ｍｇ／ｋｇをスプラーグドーリーラットに単回ＩＤ注射投与した後の、個々の及び平均（±ＳＤ）の血漿中チゲサイクリン濃度を示すグラフである。
【図９】ＣＡを１００ｍＭ（ｐＨ３．５）、ＬＬＣを２６ｍＭで配合して、スプラーグドーリーラットに単回ＩＤ注射投与した後の、投与量調節した平均血漿中チゲサイクリン濃度を示すグラフである。
【図１０】ＣＡを４００ｍＭ（ｐＨ：３．５）、ＬＬＣを２６ｍＭで配合して、チゲサイクリン４．８ｍｇ／ｋｇをスプラーグドーリーラットに単回ＩＤ注射投与した後の、個々の及び平均（±ＳＤ）の血漿中チゲサイクリン濃度を示すグラフである（チゲサイクリンの親ピークのみ使用）。
【図１１】ＣＡを４００ｍＭ（ｐＨ：３．５）、ＬＬＣを２６ｍＭで配合して、チゲサイクリン９．０ｍｇ／ｋｇをスプラーグドーリーラットに単回ＩＤ注射投与した後の、個々の及び平均（±ＳＤ）の血漿中チゲサイクリン濃度を示すグラフである（チゲサイクリンの親ピークのみ使用）。
【図１２】ＣＡを４００ｍＭ（ｐＨ：３．５）、ＬＬＣを２６ｍＭで配合して、スプラーグドーリーラットに単回ＩＤ注射投与した後の、投与量調節した平均血漿中チゲサイクリン濃度を示すグラフである（チゲサイクリンの親ピークのみ使用）。
【図１３】ＣＡを４００ｍＭ（ｐＨ：３．５）、ＬＬＣを２６ｍＭで配合して、チゲサイクリン４．８ｍｇ／ｋｇをスプラーグドーリーラットに単回ＩＤ注射投与した後の、個々の及び平均（±ＳＤ）の血漿中チゲサイクリン濃度を示すグラフである（チゲサイクリン関連ピークを含む）。
【図１４】ＣＡを４００ｍＭ（ｐＨ：３．５）、ＬＬＣを２６ｍＭで配合して、チゲサイクリン９．０ｍｇ／ｋｇをスプラーグドーリーラットに単回ＩＤ注射投与した後の、個々の及び平均（±ＳＤ）の血漿中チゲサイクリン濃度を示すグラフである（チゲサイクリン関連ピークを含む）。
【図１５】ＣＡを４００ｍＭ（ｐＨ：３．５）、ＬＬＣを２６ｍＭで配合してスプラーグドーリーラットに単回ＩＤ注射投与した後の、投与量調節した平均の血漿中チゲサイクリン濃度を示すグラフである（チゲサイクリン関連ピークを含む）。
【図１６】研究ＲＡ８５１およびＲＡ８５３の実現可能性１次研究からの種々の配合で、スプラーグドーリーラットに単回ＩＤ注射投与した後の、投与量調節した平均の血漿中チゲサイクリン濃度を示すグラフである。
【図１７】研究ＲＡ８６１−スプラーグドーリーラットに単回ＩＤ注射投与した後の、平均（±ＳＤ）血漿中チゲサイクリン濃度を示すグラフである。
【図１８】研究ＲＡ８６９−スプラーグドーリーラットの投与量調節した平均（±ＳＤ）血漿中チゲサイクリン濃度を示すグラフである。
【図１９】研究ＲＡ８６７−ＣＡを４００ｍＭ、ＬＬＣを２６ｍＭで、ｐＨ：３．５とｐＨ：６．０に配合してスプラーグドーリーラットに単回ＩＤ投与した後の、平均（±ＳＤ）血漿中チゲサイクリン濃度を示すグラフである。
【図２０】スプラーグドーリーラットに単回ＩＤ投与した後の、始点に対する％として定義される平均血漿中チゲサイクリンのクリアランスを示すグラフである。
【図２１】ＩＶ配合（ＩＶ  Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ）の個々のＰＫプロフィールを示すグラフである。
【図２２】配合Ａの個々のＰＫプロフィールを示すグラフである。
【図２３】配合ＰＢＳの個々のＰＫプロフィールを示すグラフである。
【図２４】配合Ｂの個々のＰＫプロフィールを示すグラフである。
【図２５】配合Ｃの個々のＰＫプロフィールを示すグラフである。
【図２６】配合Ｄの個々のＰＫプロフィールを示すグラフである。
【図２７】指定濃度でのザナビビール配合の個々のＰＫプロフィールを示すグラフである。
【図２８】カナマイシンのＩＶボーラス注射投与後の、平均濃度（±ＳＥＭ）プロフィール対時間を示すグラフである。
【図２９】トブラマイシンのＩＶボーラス注射投与後の平均濃度（±ＳＥＭ）プロフィール対時間を示すグラフである。
【図３０】コーティングしていないカプセルのプロソルブ（ＰＲＯＳＯＬＶ）（配合ＪＳＶ−００３−０３８）で犬に単回経口投与した後の、個々の血漿中カナマイシンの吸収プロフィールを示すグラフである。
【図３１】ＣＡとＬＬＣで配合したコーティングしていないカプセル（配合ＪＳＶ−００３−０３９）で犬に単回経口投与した後の、個々の血漿中カナマイシンの吸収プロフィールを示すグラフである。
【図３２】ＣＡを５００ｍｇ含むカプセル（配合ＪＳＶ−００３−００５）で犬に単回経口投与した後の、個々の血漿プロフィールを示すグラフである。
【図３３】ＣＡを２５０ｍｇ含むカプセル（配合ＪＳＶ−００３−０５２）で犬に単回経口投与した後の、個々の血漿プロフィールを示すグラフである。
【図３４】ＣＡを１００ｍｇ含むカプセル（配合ＪＳＶ−００３−０５３）で犬に単回経口投与した後の、個々の血漿プロフィールを示すグラフである。
【図３５】ＣＡを５０ｍｇ含むカプセル（配合ＪＳＶ−００３−０５４）で犬に単回経口投与した後の、個々の血漿プロフィールを示すグラフである。
【図３６】ＣＡを５００ｍｇ配合したディーアールキャップカプセル（配合ＪＳＶ−００３−０１０）で犬に単回経口投与した後の、個々の血漿プロフィールを示すグラフである。
【図３７】ＣＡを２５０ｍｇ配合したディーアールキャップカプセル（配合ＪＳＶ−００３−０４１）で犬に単回経口投与した後の、個々の血漿プロフィールを示すグラフである。
【図３８】プロソルブに溶解して（配合ＪＳＶ−００３−０５０）ビーグル犬に単回経口投与した後の、個々の血漿プロフィールを示すグラフである。
【図３９】ＣＡおよびＬＬＣ（配合ＪＳＶ−００３−０５１）をビーグル犬に単回経口投与した後の、個々の血漿プロフィールを示すグラフである。
【図４０】カナマイシンを、ＣＡ５００ｍｇとＬＬＣ１００ｍｇと配合したディーアールキャップスと腸溶性ヴイキャッププラスで犬に投与した後の、平均吸収プロフィールを示すグラフである。
【図４１】カナマイシンを、ＣＡと配合したコーティングしていないヴイキャッププラスカプセルで犬に投与した後の、平均吸収プロフィールを示すグラフである。
【図４２】カナマイシンを、ＬＬＣを１００ｍｇとＣＡを種々の濃度で配合して犬に投与した後の、平均吸収プロフィールを示すグラフである。
【図４３】トブラマイシンを、配合しない、あるいはＣＡとＬＬＣで配合してカプセルで犬に投与した後の、平均吸収プロフィールを示すグラフである。
【図４４】チゲサイクリン１ｍｇ（０．０８ｍｇ／ｋｇ）を単回ＩＶボーラス注射投与した後の、個々の及び平均（±ＳＤ）の血漿中チゲサイクリン濃度を示すグラフである（ＳＣ４２７）。
【図４５】チゲサイクリン５ｍｇ（０．４２ｍｇ／ｋｇ）を単回ＩＶボーラス注射投与した後の、個々の及び平均（±ＳＤ）の血漿中チゲサイクリン濃度を示すグラフである（ＳＣ４３１）。
【図４６】ビーグル犬に単回ＩＶボーラス注射投与（ＳＣ４２７とＳＣ４３１）した後の、投与量調節した平均血漿中チゲサイクリン濃度を示すグラフである。
【図４７】チゲサイクリン１５ｍｇ（１．２５ｍｇ／ｋｇ）を、配合しない、またはＣＡを５００ｍｇとＬＬＣを１００ｍｇで配合した腸溶性コーティングされたカプセル（ＳＣ４２４）でビーグル犬に単回ＰＯ投与した後の、個々の血漿中チゲサイクリン濃度を示すグラフである。
【図４８】チゲサイクリン１５ｍｇ（１．２５ｍｇ／ｋｇ）を、配合しないで、またはＣＡを５００ｍｇとＬＬＣを１００ｍｇで配合した腸溶性コーティングされたカプセル（ＳＣ４２４）でビーグル犬に単回ＰＯ投与した後の、平均（±ＳＤ）血漿中チゲサイクリン濃度を示すグラフである。
【図４９】チゲサイクリン３０ｍｇ（２．５ｍｇ／ｋｇ）を、ＣＡを５００ｍｇとＬＬＣを１００ｍｇで配合した腸溶性コーティングされたカプセル（ＳＣ４３０）でビーグル犬に単回ＰＯ投与した後の、個々の血漿中チゲサイクリン濃度を示すグラフである。
【図５０】チゲサイクリン３０ｍｇ（２，５ｍｇ／ｋｇ）を、ＣＡを５００ｍｇとＬＬＣを１００ｍｇで配合した腸溶性コーティングされたカプセル（ＳＣ４３０）でビーグル犬に単回ＰＯ投与した後の、平均（±ＳＤ）血漿中チゲサイクリン濃度を示すグラフである。
【図５１】チゲサイクリン４５ｍｇ（３．７５ｍｇ／ｋｇ）を、ＣＡを５００ｍｇとＬＬＣを１００ｍｇで配合した腸溶性コーティングされたカプセル（ＳＣ４３０）でビーグル犬に単回ＰＯ投与した後の、個々の血漿中チゲサイクリン濃度を示すグラフである。
【図５２】チゲサイクリン４５ｍｇ（３．７５ｍｇ／ｋｇ）を、ＣＡを５００ｍｇとＬＬＣを１００ｍｇで配合した腸溶性コーティングされたカプセル（ＳＣ４３０）でビーグル犬に単回ＰＯ投与した後の、平均（±ＳＤ）血漿中チゲサイクリン濃度を示すグラフである。
【図５３】チゲサイクリンを、ＣＡを５００ｍｇとＬＬＣを１００ｍｇで配合した腸溶性コーティングされたカプセル（ＳＣ４２４とＳＣ４３０）でビーグル犬に単回ＰＯ投与した後の、平均血漿中チゲサイクリン濃度を示すグラフである。（ＳＣ４２４が４時間までサンプリング、一方、ＳＣ４３０が２４時間までサンプリングであるので、比較のために時間の目盛を調節したことに注意）
【図５４】チゲサイクリンを、ＣＡを５００ｍｇとＬＬＣを１００ｍｇで配合した腸溶性コーティングされたカプセル（ＳＣ４２４とＳＣ４３０）でビーグル犬に単回ＰＯ投与した後の、投与量調節した平均血漿中チゲサイクリン濃度を示すグラフである。ＳＣ４２４が４時間までサンプリング、一方、ＳＣ４３０が２４時間までサンプリングであるので、比較のために時間の目盛を調節してあることに注意。
【図５５】ＣＡを５００ｍｇとＬＬＣを１００ｍｇで配合した腸溶性コーティングされたカプセル（ＳＣ４２４とＳＣ４３０）でビーグル犬に単回ＰＯ投与した後の、Ｃｍａｘと投与量の直線関係を示すグラフである。（ＳＣ４２４が４時間までサンプリング、一方、ＳＣ４３０が２４時間までサンプリングであるので、比較のために時間目盛を調節してあることに注意）
【図５６】ＣＡを５００ｍｇとＬＬＣを１００ｍｇで配合した腸溶性コーティングされたカプセル（ＳＣ４２４とＳＣ４３０）でビーグル犬に単回ＰＯ投与した後の、ＡＵＣ（Ｏ−４ＨＲ）と投与量の直線関係を示すグラフである。ＳＣ４２４が４時間までサンプリング、一方、ＳＣ４３０が２４時間までサンプリングであるので、比較のために時間の目盛を調節してあることに注意。
【図５７】ＬＬＣの濃度増加に伴うフェノフィブラートの溶解性を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００２３】
本発明は、経口デリバリーに適した医薬組成物を提供するもので、ＢＣＳクラスＩＩ、ＢＣＳクラスＩＩＩあるいはＢＣＳクラスＩＶとして分類される少なくとも１つの化合物、少なくとも１つの吸収促進剤、少なくとも１つのｐＨ低減化合物、そして少なくとも１つのキレート剤を含んでいる。
【００２４】
ＢＣＳクラスＩＩ、ＢＣＳクラスＩＩＩあるいはＢＣＳクラスＩＶとして分類される少なくとも１つの化合物は、低分子量の有機化合物である。ＢＣＳクラスＩＩ、ＢＣＳクラスＩＩＩあるいはＢＣＳクラスＩＶとして分類される少なくとも１つの化合物は、抗細菌性物あるいは抗ウイルス化合物である。ＢＣＳクラスＩＩ、ＢＣＳクラスＩＩＩあるいはＢＣＳクラスＩＶとして分類される少なくとも１つの化合物は、チゲサイクリン（ｔｉｇｅｃｙｃｌｉｎｅ）、ザナミビル（ｚａｎａｍｉｖｉｒ）、カナマイシン（ｋａｎａｍｙｃｉｎ）、トブラマイシン（ｔｏｂｒａｍｙｃｉｎ）あるいはフェノフィブラート（ｆｅｎｏｆｉｂｒａｔｅ）であることができる。
【００２５】
医薬組成物は、固体投与の医薬組成物（例えば錠剤、カプセル）で、多層固体投与医薬組成物であることができる。
【００２６】
ｐＨ低減化合物は、ｐＫａが４．２以下であることができ、また３．０以下であることができる。好ましくは、ｐＨ低減化合物は、クエン酸ナトリウムである。
【００２７】
キレート剤は、カルボン酸系キレート剤あるいはアミノ酸系キレート剤である。カルボン酸系キレート剤は、アセチルサリチル酸、酢酸、アスコルビン酸、クエン酸、フマル酸、グルクロン酸、グルタル酸、グリセリン酸、グリコール酸、グリオキサル酸、イソクエン酸、イソバレリン酸、乳酸、マレイン酸、オキサロ酢酸、オキサロコハク酸、プロピオン酸、ピルビン酸、コハク酸、酒石酸あるいは吉草酸である。好ましくは、カルボン酸系キレート剤は、クエン酸である。
【００２８】
少なくとも１つの吸収促進剤は、アシルカルニチンを含むことができる。好ましくは、アシルカルニチンは、ラウロイルカルニチンである。少なくとも１つの吸収促進剤は、表面活性剤を含むことができる。表面活性剤は、酸溶解性の胆汁酸であることができる。
【００２９】
医薬組成物は、さらにカチオン表面活性剤を含むことができる。
【００３０】
医薬組成物は、さらに耐酸保護剤を含むことができる。好ましくは、耐酸保護剤が、粘稠な保護シロップである。
【００３１】
キレート剤および耐酸保護剤を含む多層固体投与医薬組成物は、さらにキレート剤と耐酸保護剤の間に水溶性バリアーが層になっていることができる。
【００３２】
本発明は、ＢＣＳクラスＩＩ、ＢＣＳクラスＩＩＩあるいはＢＣＳクラスＩＶとして分類される少なくとも１つの抗菌化合物あるいは抗ウイルス化合物、ラウロイルカルニチン、クエン酸、及びクエン酸ナトリウムを含み、ｐＨ３．５で緩衝された経口デリバリーに適した医薬組成物を提供する。
【００３３】
本発明は、医薬組成物を提供するもので、治療上有効量のＢＣＳクラスＩＩ、ＢＣＳクラスＩＩＩあるいはＢＣＳクラスＩＶとして分類される少なくとも１つの化合物、少なくとも１つのキレート剤、少なくとも１つの吸収促進剤を含んでいる。本組成物は、さらに少なくとも１つのｐＨ低減化合物を含むことができる。
本組成物は、さらに、医薬組成物が患者の胃を通って輸送するに有効な耐酸保護剤を含むことができる。本組成物は、さらに、キレート剤を耐酸保護剤から分離させる水溶性バリアー層を含むことができる。
ある実施形態では、キレート剤がカルボン酸であり、ある実施形態では、カルボン酸がクエン酸である。ある実施形態では、クエン酸が、医薬組成物中に、本組成物を０．０１Ｍの重炭酸ナトリウム水溶液１０ｍＬに加えたとき、この溶液のｐＨを５．５以下に迄下げるに充分な量で存在している。ある実施形態では、クエン酸が、医薬組成物中に、本組成物を０．０５Ｍの重炭酸ナトリウム水溶液１０ｍＬに加えたとき、この溶液のｐＨを５．５以下に迄下げるに充分な量で存在している。ある実施形態では、クエン酸が、医薬組成物中に、本組成物を０．１Ｍの重炭酸ナトリウム水溶液１０ｍＬに加えたとき、この溶液のｐＨを５．５以下に下げるに充分な量で存在している。ある実施形態では、吸収促進剤は、ラウロイルカルニチンである。
【００３４】
〔医薬組成物〕
本発明は、ＢＣＳクラスＩＩ、ＢＣＳクラスＩＩＩあるいはＢＣＳクラスＩＶとして分類される少なくとも１つの化合物を含み、経口のデリバリーに適した医薬組成物を提供する。
【００３５】
ジー．アミドン（Ｇ．Ａｍｉｄｏｎ）によって最初に開発されていたバイオ医薬品分類システム（ＢＣＳ）は、経口投与の医薬物質を、溶解性と腸細胞膜の透過性に基づいて４つのクラスに分類している。ＢＣＳによれば、医薬物質は、クラスＩ−高透過性で高溶解性；クラスＩＩ−高透過性で低溶解性；クラスＩＩＩは、低透過性で高溶解性；およびクラスＩＶ−低透過性で低溶解性；である。
【００３６】
ここに使用されたように、ＢＣＳクラスＩＩ、ＢＣＳクラスＩＩＩあるいはＢＣＳクラスＩＶとして分類される少なくとも１つの化合物は、溶解性が高く、最高投与量でｐＨが１〜７．５の範囲にある水２５０ｍｌ未満に溶解すると考えられる。ここに使用される化合物は、透過性が大きく、ヒト体内における吸収範囲が、静脈内への参考投与量とのマスバランスあるいは比較に基づいて、投与された量の９０％以上と考えられる。
ここに使用されたように、ＵＳＰ装置ＩまたはＩＩを使用して、９００ｍｌより少ないバッファー溶液中に、標識した薬剤物質の８５％以上が３０分以内に溶解するとき、化合物は速く溶解すると考えられる。
【００３７】
ここに使用されるように、化合物または薬剤（これらの用語は、互に交換できる）は、分子構造中にペプチド結合をもっていない。本発明の化合物は、小さい分子であると理解される。ここに使用される用語の小さな分子は、低分子量の有機化合物、無機化合物、あるいは有機金属化合物である。
この小さな分子は、分子量が２０００ダルトン以下であることができる。小さな分子は、分子量が５００ダルトン以下の化合物であることができる。小さな分子は、分子量が約５０〜５００であることができる。
【００３８】
本発明の化合物は、バクテリアの機能あるいは成長プロセスを対象とした化合物、例えば抗菌化合物であることができる。この化合物は、中央に４員環骨格をもつ抗菌化合物であることができる。抗菌化合物は、テトラサイクリンまたはグリシルサイクリン系抗菌化合物であることができる。好ましい実施形態では、抗菌化合物がチゲサイクリンである。この化合物は、バクテリアのリボソームサブユニットへの結合能がある。本発明の化合物は、ウィルスあるいはウイルス粒子、例えば、抗ウイルス剤または化合物、を対象とする化合物であることができる。
【００３９】
ここでの化合物は、ＢＣＳクラスＩＩ薬剤、クラスＩＩＩ薬剤あるいはＢＣＳクラスＩＶ薬剤として分類することができる。制限するものではないがＢＣＳクラスＩＩ薬剤の例として、グリベンクラミド（ｇｌｉｂｅｎｃｌａｍｉｄｅ）、バイカルタミド（ｂｉｃａｌｕｔａｍｉｄｅ）、エゼチミベ（ｅｚｅｔｉｍｉｂｅ）、フェノフィブラート（ｆｅｎｏｆｉｂｒａｔｅ）、グリピジド（ｇｌｉｐｉｚｉｄｅ）、アトバクオン（ａｔｏｖａｑｕｏｎｅ）、カルバマゼピン（ｃａｒｂａｍａｚｅｐｉｎｅ）、ダナゾール（ｄａｎａｚｏｌ）、グリセオフルビン（ｇｒｉｓｅｏｆｕｌｖｉｎ）、ケトコナゾール（ｋｅｔｏｃｏｎａｚｏｌｅ）、トグリタゾン（ｔｏｇｌｉｔａｚｏｎｅ）、イブプロフェン（ｉｂｕｐｒｏｆｅｎ）、ニフェディピン（ｎｉｆｅｄｉｐｉｎｅ）、ニトロフラントイン（ｎｉｔｒｏｆｕｒａｎｔｏｉｎ）、フェニトイン（ｐｈｅｎｙｔｏｉｎ）、スルファメトキサゾール（ｓｕｌｆａｍｅｔｈｏｘａｚｏｌｅ）、トリメトプリム（ｔｒｉｍｅｔｈｏｐｒｉｍ）、バルプロイック・アシド（ｖａｌｐｒｏｉｃ  ａｃｉｄ）、プラジクァンテル（ｐｒａｚｉｑｕａｎｔｅｌ）、レチノール・パルミテート（ｒｅｔｉｎｏｌ  ｐａｌｍｉｔａｔｅ）、及びスルファサラジン（ｓｕｌｆａｓａｌａｚｉｎｅ）がある。
制限するものではないがＢＣＳクラスＩＩＩ薬剤の例として、シメチジン（ｃｉｍｅｔｉｄｉｎｅ）、アシクロビール（ａｃｙｃｌｏｖｉｒ）、アテノロール（ａｔｅｎｏｌｏｌ）、ラニチジン（ｒａｎｉｔｉｄｉｎｅ）、アバカビール（ａｂａｃａｖｉｒ）、カプトプリル（ｃａｐｔｏｐｒｉｌ）、クロラムフェニコール（ｃｈｌｏｒａｍｐｈｅｎｉｃｏｌ）、コデイン（ｃｏｄｅｉｎｅ）、コルチシン（ｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅ）、ダプソン（ｄａｐｓｏｎｅ）、エルゴタミン（ｅｒｇｏｔａｍｉｎｅ）、カナマイシン（ｋａｎａｍｙｃｉｎ）、トブラマイシン（ｔｏｂｒａｍｙｃｉｎ）、チゲサイクリン（ｔｉｇｅｃｙｃｌｉｎｅ）、ザナミビル（ｚａｎａｍｉｖｉｒ）、ヒドララジン（ｈｙｄｒａｌａｚｉｎｅ）、ヒドロクロロチアジド（ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｏｔｈｉａｚｉｄｅ）、レボチロキシン（ｌｅｖｏｔｈｙｒｏｘｉｎｅ）、メチルドーパ（ｍｅｔｈｙｌｄｏｐａ）、パラセタモール（ｐａｒａｃｅｔａｍｏｌ）、プロピルチオウラシル（ｐｒｏｐｙｌｔｈｉｏｕｒａｃｉｌ）、ピロドスティグミン（ｐｙｒｏｄｏｓｔｉｇｍｉｎｅ）、ナトリウム・クロキサシリン（ｓｏｄｉｕｍ  ｃｌｏｘａｃｉｌｌｉｎ）、チアミン（ｔｈｉａｍｉｎｅ）、ベンズイダゾール（ｂｅｎｚｉｄａｚｏｌｅ）、ジダノシン（ｄｉｄａｎｏｓｉｎｅ）、エタンブトール（ｅｔｈａｍｂｕｔｏｌ）、エトスキミド（ｅｔｈｏｓｕｘｉｍｉｄｅ）、葉酸（ｆｏｌｉｃ  ａｃｉｄ）、ニコチンアミド（ｎｉｃｏｔｉｎａｍｉｄｅ）、ニフルチモックス（ｎｉｆｕｒｔｉｍｏｘ）、およびサルブタモール・サルフェート（ｓａｌｂｕｔａｍｏｌ  ｓｕｌｆａｔｅ）がある。
制限するものではないがＢＣＳクラスＩＶ薬剤の例として、ヒドロクロロチアジド（ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｏｔｈｉａｚｉｄｅ）、フロセミド（ｆｕｒｏｓｅｍｉｄｅ）、シクロスポリン・Ａ（ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎ  Ａ）、イトラコナゾール（ｉｔｒａｃｏｎａｚｏｌｅ）、インディナビール（ｉｎｄｉｎａｖｉｒ）、ネルフマビール（ｎｅｌｆｍａｖｉｒ）、リトナビール（ｒｉｔｏｎａｖｉｒ）、サキナビール（ｓａｑｕｉｎａｖｉｒ）、ニトロフラントイン（ｎｉｔｒｏｆｕｒａｎｔｏｉｎ）、アルベンダゾール（ａｌｂｅｎｄａｚｏｌｅ）、アセタゾールアミド（ａｃｅｔａｚｏｌａｍｉｄｅ）、アジスロマイシン（ａｚｉｔｈｒｏｍｙｃｉｎ）がある。
【００４０】
本発明の好ましい実施形態では、化合物がチゲサイクリン（Ｔｉｇｅｃｙｃｌｉｎｅ）である。チゲサイクリンは、グリシルサイクリンベース４員環系抗菌化合物において最初に承認されたものである。チゲサイクリンは、種々のグラム陽性とグラム陰性のバクテリア病原体に対して活性である。それらの多くは、既存の抗菌化合物に対し耐性があり、制限するものではないが、例として、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭｅｔｈｉｃｉＵｉｎ−Ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ：ＭＲＳＡ）、ステノトロホモナス・マルトフィリア（Ｓｔｅｎｏｔｒｏｐｈｏｍｏｎａｓ  ｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ）、ヘモフィルス・インフルエンザ（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）、及び淋菌（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ）（ＭＩＣ値は、２ｍｃｇ／ｍＬと報告された）、ならびにアシネトバクター・バウマンニ（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ  ｂａｕｍａｎｎｉｉ）の多薬剤耐性株がある。
チゲサイクリンは、皮膚及び軟部組織感染症の治療、及び腹腔内感染症の治療に認可され、本質的に固有の低透過性により、以前には、病院でのＩＶ注射の再構成用の凍結乾燥粉末として利用されていた。チゲサイクリンの水への溶解性は、凡そ３００ｍｇ／ｍＬであり、透過性が経口投与にとっての鍵となる。公知の配合（処方）では、最大経口生物学的利用能は５％未満である。その高い水溶性と低膜透過性とが釣り合って、チゲサイクリンは、大きく代謝しない。薬剤は、大部分は変化しないで薬剤として、胆汁ルートを通って排出される。
ある実施形態では、本発明の医薬組成物は、チゲサイクリンの改良経口投与配合である。ある実施形態では、本発明の医薬組成物は、患者の感染がコントロールされて臨床サインが安定した後に用いる、チゲサイクリンの改良経口投与配合である。
ある実施形態では、本発明のチゲサイクリンの経口投与配合は、肝臓の悪化がない、あるいは最小にして患者の回帰感染をコントロールするに使用される。
【００４１】
本発明の好ましい実施形態では、化合物が、ザナミビル（ｚａｎａｍｉｖｉｒ）である。ある実施形態では、本開示の医薬組成物は、ｐＨ低下剤（例えば、緩衝されたクエン酸）および／または透過向上剤（例えば、ラウロイル−Ｌ−カルニチン）と一緒に、あるいはエマルション（例えば、カプムル（Ｃａｐｍｕｌ）中のエマルション）に配合されたザナミビルである。
【００４２】
本発明のＢＣＳクラスＩＩ、ＢＣＳクラスＩＩＩあるいはＢＣＳクラスＩＶとして分類される少なくとも１つの化合物を含む経口デリバリーに適した医薬組成物は、さらに少なくとも１つのキレート剤を含むことができる。キレート剤はカルボン酸系キレート剤あるいはアミノ酸系キレート剤であることができる。
【００４３】
本開示のキレート剤として使用することができる適切なカルボン酸は、制限するものではないが、アセチルサリチル酸、酢酸、アスコルビン酸、クエン酸、フマル酸、グルクロン酸、グルタル酸、グリセリン酸、グリコール酸、グリオキサル酸、イソクエン酸、イソバレリン酸、乳酸、マレイン酸、オキサロ酢酸、オキサロコハク酸、プロピオン酸、ピルビン酸、コハク酸、酒石酸、吉草酸、及び同種のものである。
【００４４】
本開示のキレート剤として使用することができる適切な有機アミノ酸は、制限するものではないが、グルタミン酸、アスパラギン酸、ヒスチジンおよび同種のものである。
【００４５】
キレート剤は、高親和性キレート剤であることができる。高親和性キレート剤は、カチオン金属類とキレートすることができ、これにより、塩に起因する析出を阻止できる。好ましい実施形態では、キレート剤は、クエン酸である。クエン酸は、３つの異なるｐＫａ、略ｐＨ＝３．０９、４．７５、および６．３９で区別される３つのイオン化グループを示す。この特性は、クエン酸を、溶液中でカチオンの多座バインダーあるいは結合剤として作用する。総じて、クエン酸は、優れたキレート剤、特にカルシウムのような小さな金属イオンのキレート剤である。しかしながら、この配合（ｃｕｒｒｅｎｔ  ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ）の活性ｐＨ範囲（ｐＨが５．５より低い）では、イオン化グループがそれぞれのｐＫａをもつ故に、イオン化グループの１または２（ｐＨにより）の大部分がプロトン化し、カチオン塩類と結合するに利用できないと考えるであろう。そこで、問題のｐＨ（ｐＨが５．５より低い）では、クエン酸は、このｐＨ領域で、塩基領域でと同じように有効なキレート剤であることは期待されない。
【００４６】
適したキレート剤は、さらにＥＤＴＡ、ＥＧＴＡ、リン酸塩、及びビスリン酸塩であることができる。
【００４７】
ＢＣＳクラスＩＩ、ＢＣＳクラスＩＩＩあるいはＢＣＳクラスＩＶとして分類される少なくとも１つの化合物を含む本発明の経口デリバリーに適した医薬組成物は、さらにコーティングされた酸粒子を含むことができる。
【００４８】
ある実施形態では、配合の他の成分との所望しない酸相互作用を小さくするために、カルボン酸を、少なくとも一部分に、外側を腸溶性コーティングしたような保護コーティングされた酸性粒子として加えることができる。コーティングされた酸粒子が用いられるとき、粒子は酸性でない、好ましくは少なくとも１グラムの水への溶解性、好ましくは１００ｍＬの水に室温で少なくとも１０グラムの溶解性をもつ薬学的に許容できる保護層でコーティングされる。
コーティングは、医薬組成物の他の成分との酸相互作用を減らすことを目的としているので、それ自体が酸性でなく、それ自身の酸性度が、コーティングの目的である所望しない酸相互作用を妨げる原因とならないことが重要である。さらに、水への溶解性が良いことは、迅速に分解して、医薬の酸、薬剤及び吸収促進剤をより同時に放出できるようにする上で重要である。
【００４９】
適切なコーティング材料は、制限するものではないが、砂糖（例えば、グルコース）、オリゴ糖（マルトデキストリン）、および酸性塩（例えば、クエン酸ナトリウム）がある。酸性塩が用いられるとき、それは、コーティングされる酸の塩（例えばクエン酸ナトリウムでコーティングしたクエン酸粒子）であるのが好ましいが、必ずではない。好ましいコーティングされた酸粒子は、制限するものではないが、ユングブンズラウエル（Ｊｕｎｇｂｕｎｚｌａｕｅｒ）から商標名“シトロコート（ＣＩＴＲＯＣＯＡＴ）”で入手可能なマルトデキストリンでコーティングされたクエン酸粒子である。
酸として用いられるときのクエン酸あるいは他の有機酸は、例えば、グルコース、マルトデキストリン、あるいはクエン酸ナトリウムを含むコーティング溶液を、流動床ドライヤー中で有機酸粒子上にスプレーしてコーティングできる。ここに論じたコーティングは、ここで論じた他の酸粒子上で使用できる。
【００５０】
酸をコーティングした粒子の平均サイズは、約３０メッシュから約１４０メッシュであることができる。
【００５１】
ＢＣＳクラスＩＩ、ＢＣＳクラスＩＩＩあるいはＢＣＳクラスＩＶとして分類される少なくとも１つの化合物を含む本発明の経口デリバリーに適した医薬組成物は、さらに少なくとも１つのｐＨ低減化合物を含むことができる。
【００５２】
ｐＨ低減化合物の量は、使用されるｐＨ低減化合物のタイプ、及び与えられたｐＨ低減化合物によって提供されるプロトン当量に基づいて決められる。
【００５３】
ｐＨ低減化合物は、胃腸経路で有毒でなく、水素イオンを与える（ブレンステッド−ロウリィ酸）、あるいは局所環境から高水素イオン量を発生させる（アレニウスまたはルイス酸として作用）ことができ、かつ薬学的に許容できる化合物である。さらに、そのような化合物の任意の組合せおよび／またはそのような化合物とそれぞれの共役塩基の組合せて、目標ｐＨを維持することもできる。
ある実施形態では、組成物の中で使用される少なくとも１つのｐＨ低減化合物は、ｐＫａが４．２以下、好ましくは３．０以下である。ある実施形態では、少なくとも１つのｐＨ低減化合物は、室温で１００ｍＬの水に少なくとも３０グラムの溶解性を持っている。
【００５４】
制限するものではないが、アレニウスまたはルイス酸である化合物の例は、塩化アルミニウムと塩化亜鉛のようなハロゲン化金属塩類である。薬学的に許容できる従来からの酸は、制限するものではないが、アミノ酸（例えば、アミノ酸塩酸塩）あるいはその誘導体の酸性塩がある。
これらの例は、アセチルグルタミン酸、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、ベタイン、カルニチン、カルノシン、シトルリン、クレアチン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、ヒドロキシリシン、ヒドロキシプロリン、ハイポタウリン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチルヒスチジン、ノルロイシン、オルニチン、フェニルアラニン、プロリン、サルコシン、セリン、タウリン、トレオニン、トリプトファン、チロシンおよびバリンの塩類である。
【００５５】
通常業界で“酸”と呼ばれないかもしれないが、本発明に従って有用なｐＨ低減化合物は、ホスフェートエステル（例えば、フラクトース−１，６−ジホスフェート、グルコース−１，６−ジホスフェート、ホスフォグリセリン酸、ジホスフォグリセリン酸）のような少なくとも１つのフリーなホスフォヒドロキシグループをもつ有機ホスフェートである。カルボポール（ＣＡＲＢＯＰＯＬＴＭ：ＢＦグッドリッチ（ＢＦ  Ｇｏｏｄｒｉｃｈ）の商標名）、及びポリカルボフィル（ｐｏｌｙｃａｒｂｏｐｈｉｌ）のようなポリマーも、ｐＨを低下させるために使用できる。
【００５６】
ＢＣＳクラスＩＩ、ＢＣＳクラスＩＩＩあるいはＢＣＳクラスＩＶとして分類される少なくとも１つの化合物を含む本発明の経口デリバリーに適した医薬組成物は、さらに少なくとも１つの吸収促進剤を含むことができる。
【００５７】
吸収促進剤は、医薬組成物（腸溶性コーティングを除く）の全重量に対し、重量で０．１〜２０．０％となる量で存在することができる。
適切な吸収促進剤は、表面活性剤であることができ、これは、溶解性向上剤と体内取込み促進剤の両方で作用する。
一般的に言って、“溶解性向上剤”は、本開示の成分が、最初に放出される水性環境と、腸壁を粘液状の層でライニングした脂肪性の環境の一方、または両方に溶解する能力を改善するものである。
“輸送（取込み）促進剤”（しばしば、溶解性向上剤として使用されるのと同じ表面活性剤である）は、薬剤が腸壁を通過するのを容易にするものである。［０１１１］
【００５８】
１以上の吸収促進剤が、１つの機能（例えば溶解性）のみ行うかもしれないし、あるいは、１以上の吸収促進剤が、別の機能（例えば取込み）のみを行うかもしれない。さらに、溶解性を改善するもの、取込みを改善するもの、及び／又はそれらの両方を行うもののいくつかの化合物を混合することも可能である。
理論に拘束されることなく、取込み促進剤は、（１）腸細胞外部膜の疏水性領域における不規則性を増して、細胞膜を通っての輸送を増やすことができる、あるいは（２）膜蛋白質を浸出し、細胞膜を通っての輸送を増やすことができる、あるいは（３）細胞間の孔径を拡げて、細胞膜を通っての輸送を増やす、により作用しているかもしれないと信じられている。
【００５９】
表面活性剤は、溶解性向上剤と取込み促進剤の両方に有用である。例えば、表面活性剤は、（１）全活性成分を、最初に放出された水性環境に速やかに溶解させ、（２）本開示の成分、特に薬剤の親油性を高めて、腸粘膜の通過を助け、（３）薬がブラシ状の境界膜の上皮バリアーを通って薬剤能力を高め、そして（４）ここに記載したような経細胞または傍細胞の輸送を増加させる、に有用である。
【００６０】
表面活性剤を吸収促進剤として用いたとき、表面活性剤は、流動性のある紛体となって、製造工程での混合とカプセルへの装填を容易にすることができる。
化合物の生体利用性を高めようとするとき、吸収促進剤として使用される表面活性剤は、（ｉ）コレステロール誘導体（例えば、胆汁酸）であるアニオン表面活性剤、（ｉｉ）カチオン表面活性剤（例えば、アシルカルニチン、リン脂質など）、（ｉｉｉ）非イオン表面活性剤、及び（ｉｖ）アニオン表面活性剤（特に、直鎖炭化水素域があるもの）と負電荷中和剤の混合物、のグループから選ぶことができる。
負電荷中和剤には、制限するものではないが、アシルカルニチン、セチルピリジニウムクロライドなどがある。吸収促進剤は、酸性ｐＨ、特に３．０〜５．０の範囲で可溶性となる。
【００６１】
ある実施形態では、カチオン表面活性剤をアニオン表面活性剤と一緒にした組合せが、本発明の医薬組成物にあってよい。ある実施形態では、カチオン表面活性剤とアニオン表面活性剤の両方が、コレステロール誘導体であることができ、また、両方が、酸性ｐＨで可溶性となる。
【００６２】
ある実施形態では、酸可溶性の胆汁酸とカチオン表面活性剤の組合せは、本発明の医薬組成物にあることができる。ある実施形態では、この組合せは、アシルカルニチンとスクロースエステルであることができる。特定の吸収促進剤が単独で用いられるとき、それは、カチオン表面活性剤であるのがよい。
アシルカルニチン（例えば、ラウロイルカルニチン）、リン脂質および胆汁酸は、特に優れた吸収促進剤であり、特にアシルカルニチンが優れている。コレステロール誘導体であるアニオン表面活性剤も、いくつかの実施形態で使用される。薬剤の血液中への吸収を阻害する薬剤の相互作用をなくすのが、このような良否を言うことの意図である。
【００６３】
副作用が起きる可能性を小さくするために、好ましい表面活性剤は、本開示の吸収促進剤として用いられたとき、生分解性あるいは再吸収性（例えば、胆汁酸、リン脂質、および／またはアシルカルニチンのような生物学的に再利用可能な化合物）、好ましくは生分解性であることができる。アシルカルニチンは、傍細胞輸送を高めるに特に有用であると考えられる。
【００６４】
制限するものではないが、吸収促進剤の例として、（ａ）サリチル酸ナトリウム、３−メトキシサリチル酸ナトリウム、５−メトキシサリチル酸ナトリウム、およびホモバニリン酸ナトリウムなどのサリチル酸塩、（ｂ）タウロコール酸、タウロデオキシコール酸、デオキシコール酸、コール酸、グリコール酸、リトコーレート、ケノデオキシコール酸、ウルソデオキシコール酸、ウルソコール酸、デヒドロコール酸、フシジン酸などの胆汁酸、（ｃ）ポリオキシエチレンエーテル（例えば、ブリジ（Ｂｒｉｊ）３６Ｔ、ブリジ５２、ブリジ５６、ブリジ７６、ブリジ９６、テキサフォール（Ｔｅｘａｐｈｏｒ）Ａ６、テキサフォールＡ１４、テキサフォール  Ａ６０など）、ｐ−ｔ−オクチルフェノール・ポリオキシエチレン（トリトン（Ｔｒｉｔｏｎ）Ｘ−４５、トリトンＸ−１００、トリトンＸ−ｌ１４、トリトンＸ−３０５など）、ノニルフェノキシ・ポリオキシエチレン（例えば、イゲパール（Ｉｇｅｐａｌ）ＣＯシリーズ）、ポリオキシエチレン・ソルビタンエステル（例えば、トゥイーン−（Ｔｗｅｅｎ）２０、トゥイーン−８０など）、ｄ−アルファ・トコフェニル・ポリエチレングリコール１０００コハク酸塩（ビタミンＥ  ＴＰＧＳ）などの非イオン物質表面活性剤、（ｄ）ジオクチルナトリウム・スルホコハク酸などのアニオン表面活性剤、（ｅ）リゾレシチン、リソホスファティジルエタノールアミンなどのリソリン脂質、（ｆ）アシルカルニチン、アシルコリン、およびラウロイルカルニチン、ミリストイルカルニチン、パルミトイルカルニチン、ラウロイルコリン、ミリストイルコリン、パーニトイルコリン、ヘキサデシルリシン、Ｎ−アシルフェニルアラニン、Ｎ−アシルグリセリンなどのアシルアミノ酸、（ｇ）ジヘプタノイルホスファティジルコリン、ジオクチルホスファティジルコリンなどの水溶性リン脂質、（ｈ）中鎖脂肪酸（カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸など）を含むモノ−、ジ−及びトリ−グリセライドの混合である中鎖グリセリド、（ｉ）エチレン−ジアミンテトラ酢酸、（ｊ）セチルピリジニウムクロライド、ベンザルコニウムクロライド、ベンゼトニウム・クロライドなどのカチオン表面活性剤、（ｋ）ラブラソール（Ｌａｂｒａｓｏｌ）、ラブラファック（Ｌａｂｒａｆａｃ）などのポリエチレングリコール脂肪酸誘導体、（１）ラウロイルマルトサイド、ラウロイルスクロース、ミリストイルスクロース、パルミトイスクロースなどのアルキルサッカライド；がある。ある実施形態では、吸収促進剤が、ラウロイルカルニチンである。
【００６５】
ＢＣＳクラスＩＩ、ＢＣＳクラスＩＩＩあるいはＢＣＳクラスＩＶとして分類される少なくとも１つの化合物を含む本発明の経口デリバリーに適した医薬組成物は、さらに耐酸保護剤を含むことができる。
【００６６】
多くの耐酸保護剤（腸溶性コーティング）が、当業界で知られており、本開示に有用である。その例として、セルロースアッセテートフタレート、ヒドロキシプロピル・メチルセルロースサクシネート、ヒドロキシプロピル・メチルセルロース・フタレート、カルボキシメチルエチルセルロース、メタクリル酸−メチルメタクリレートコポリマーがある。
ある実施形態では、この化合物、溶解性及び／または取込み促進剤のような吸収促進剤、及びカルボン酸が、高粘稠保護シロップに含有されて、本開示の成分を保護されて胃を通過できるようにしている。
【００６７】
適切な腸溶性コーティングは、例えば、本開示のその他成分をカプセル内に入れた後にカプセルに適用する。他の実施形態では、腸溶性コーティングは、錠剤の外側にコーティングする、あるいは活性成分粒子の外表面にコーティングしてから加圧成型して錠剤にする、あるいは、好ましくはそれ自体腸溶性コーティングしたカプセルにして活性成分粒子を充填する。
【００６８】
本開示の全ての成分は、キャリアーまたは賦形剤から放出され、できるだけ同時に腸内環境に溶解されなければならない。賦形剤またはキャリアーは、小腸で活性成分を放出するのが好ましい。小腸では、取込み促進剤が経細胞または傍細胞の輸送を増加させ、その取込み促進剤が後の大腸で放出されるより、好ましくない副作用を少なくする。しかしながら、本開示は、小腸と同様に大腸においても有効であると考えられることを強調する。以上議論したものに加え、多数の賦形剤あるいはキャリアーが当業界で知られている。腸溶性コーティングは、（特に、本開示の成分を、同時に放出されるように最適化して）少ない量に保つことが望ましい。
好ましくは、腸溶性コーティングは、その他医薬組成物の重量に対して３０％以下に加える。ここで、“その他”とは、腸溶性コーティングを除く医薬組成物である。より好ましくは、コーティングしていない成分重量に対して、２０％未満、特に１２％から２０％である。
腸溶性コーティングは、好ましくは本開示の医薬組成物が、０．１ＮのＨＣ１中で少なくとも２時間崩壊を抑え、そして、医薬組成物の全成分が、毎分１００回転している分解浴中でｐＨが６．３に高めてから３０分以内に放出するに充分でなければならない。
ある実施形態で、本開示の水溶性バリアー層が用いられて、腸溶性コーティングを少なく、水溶性バリアー層の量を少なくしている。
【００６９】
ＢＣＳクラスＩＩ、ＢＣＳクラスＩＩＩあるいはＢＣＳクラスＩＶとして分類される少なくとも１つの化合物を含む本発明の経口デリバリーに適した医薬組成物は、固体投与形態である。医薬組成物は、さらに多層固体投与形態である。
【００７０】
ある実施形態では、医薬組成物がさらに多層固体投与形態であり、医薬組成物がクエン酸耐酸保護剤を含む実施形態では、キレート剤を耐酸保護剤から分ける水溶性バリアーが存在することができる。以下の例のいくつかは、従来からの医薬カプセルが、このバリアーを作る目的で使用されている。多くの水溶性バリアーが当業界で知られており、制限するものではないが、ヒドロキシプロピルメチルセルロースや、従来からの医薬ゼラチンがある。
【００７１】
ある実施形態では、ペプチド（アルブミン、カゼイン、大豆蛋白、その他動物あるいは植物蛋白など）を加えて、特定の吸着（例えば、ペプチドが腸の粘膜バリアーに結合する）を減らすことができる。ペプチドが加えられるとき、ペプチドは、全医薬組成物（保護剤以外）の重量に対して、好ましくは１．０〜１０．０％である。好ましくは、ペプチドは、生理学的に活性でなく、最も好ましくは、大豆ペプチドなど食物ペプチドである。
【００７２】
本開示の全ての医薬組成物は、さらにそれらの通常の医薬希釈剤、滑材、フィラー、潤滑剤、酸化防止剤、ゼラチンカプセル、保存剤、着色剤、その他同種のものを含むことがでる。
【００７３】
適切なフィラーは、ＪＲＳファーマ（ＪＲＳ  Ｐｈａｒｍａ）から市販されているポロソルブ（ＰＲＯＳＯＬＶＴＭのようなセルロースフィラーがる。その他のフィラーは、当業界で知られており、使用できる。
【００７４】
分解速度を速める機能のある崩壊剤を使用することもできる。制限するものではないが、適した崩壊剤の例は、インターナショナル・スペシャリティ・プロダクツ（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｓｐｅｃｉａｌｔｙ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ）、ＪＲＳファーム（ＪＲＳ  Ｐｈａｒｍａ）およびＦＭＣバイオポリマー（ＦＭＣ  Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒ）からそれぞれ入手可能なポリプラスドン（ＰＯＬＹＰＬＡＳＤＯＮＥ）、エクスプロタブ（ＥＸＰＬＯＴＡＢ）、ＡＣ−ＤＩ−ソル（ＡＣ−ＤＩ−ＳＯＬ）がある。好ましくは、崩壊剤は、水溶性バリアー層および耐酸保護剤を除く全錠剤重量（錠剤が使用された場合）に対して１〜１５％である。
【００７５】
紛体流動性を高める機能をする滑材を使用してもよい。制限するものではないが、適切な滑材の例として、タルク、ケイ酸カルシウム、ケイ酸マグネシウム、二酸化ケイ素がある。好ましくは、滑材は、水溶性バリアー層と耐酸保護剤を除く医薬組成物に対して、０．１〜２．０重量％パーセントである。
【００７６】
紛体が装置に付着するのを防ぐ機能をする潤滑剤を使用してもよい。制限するものではないが、適切な潤滑剤の例として、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、水素化植物油タイプ１がある。好ましくは、潤滑剤は、水溶性バリアー層と耐酸保護剤を除く医薬組成物に対し、０．５〜５．０重量％である。
【００７７】
限定するものではないが、適切な酸化防止剤の例として、ピルビン酸ナトリウム、ピルビン酸ナトリウム誘導体、アスコルビン酸、アスコルビン酸パルミテート、ブチル化ヒドロキシアニソール、ブチル化ヒドロキシトルエン、重硫酸ナトリウム、およびメタ重亜硫酸ナトリウムがある。好ましくは、酸化防止剤は、錠剤当たり０．５〜５ｍｇである。
【００７８】
医薬組成物は、さらに、ペプチド（アルブミン、カゼイン、大豆蛋白、他の動物または植物蛋白など）を加えて特定しない吸着（例えば、ペプチドを腸粘膜バリアーに結合させる）を減らし、これにより薬剤の必要濃度を下げることができる。ペプチドは、加えるときには、好ましくは全医薬組成物（水溶性のバリアー層と耐酸保護剤を除く）に対して１．０〜１０．０重量％である。好ましくは、ペプチドは生理学的に活性でなく、最も好ましくは大豆ペプチドなどの食物ペプチドである。
【００７９】
医薬組成物は、固体投与形態である。適切な固体投与形態の１つは、錠剤である。医薬組成物が錠剤であるとき、ドライ加圧用に医薬バインダーを加えることができる。
制限するものではないが、適切なバインダーの例として、コリドン（ＫＯＬＬＩＤＯＮ）  ＶＡ６４、コリドンＶＡ６４ファイン、コリドン３０、アビセル（ＡＶＩＣＥＬ）ＰＨ−１０１、ファーマコート（ＰＨＡＲＭＡＣＯＡＴ）６０６、およびマルデックス（ＭＡＬＤＥＸ）がある。最初の３つは、バスフ（ＢＡＳＦ）から商業的に入手可能であり、後の３つは、それぞれＦＭＣバイオポリマー（ＦＭＣ  Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒ）、信越（Ｓｈｉｎ−Ｅｔｓｕ）、及びアミラム（Ａｍｙｌｕｍ）から入手可能である。
【００８０】
同時放出性を改善するために、医薬組成物（任意に加える腸溶性コーティングあるいはバリアー層以外の）の成分を完全に混ぜ合わせることで、バインダー内での前述した成分の実質的な均一分散となる。
この目的のために、コーティングした酸粒子（使用された時）は、単一成分と考えられる。酸（あるいは、使用された時には、コーティングした酸粒子）と薬剤を均一に分散することが、特に望ましい。
【００８１】
錠剤の形にしたとき、脆さ試験での最大重量ロスが１％以下であるのが好ましい。ここに使用されるように、脆さ試験は、“錠剤脆さ”１２１６章、ＵＳＰ２８ページ２７４５に記載された技術を参照している。
【００８２】
ある実施形態では、クエン酸と吸収促進剤の重量比は、３：１〜２０：１であり、好ましくは４：１〜１２：１，最も好ましくは５：１〜１０：１である。クエン酸と吸収促進剤の与えられた医薬組成物中の全重量は、前述の好ましい比率内にあることである。
【００８３】
ある実施形態では、化合物、ｐＨ低減化合物、および吸収促進剤（単一化合物、あるいはそれぞれのカテゴリーにある複数の化合物でも）が、医薬組成物中で均一に分散している。医薬組成物は、医薬バインダーを含む粒子を含むことができ、薬剤、クエン酸、および吸収促進剤がこのバインダー内に均一に分散されている。好ましい粒子は、酸をコアにして、その周囲を有機酸層、促進剤層、および薬剤層で囲み、薬剤層が外側で有機酸層に囲まれている。
粒子は、ポリビニルピロリドンあるいはヒドロキシプロピルメチルセルロースのような医薬バインダーが、クエン酸、吸収促進剤、および本開示の薬剤と一緒になってなる水性混合物から、あるいはドライ造粒プロセスで製造できる。
他の実施形態では、マトリックス、あるいは他の錠剤あるいはカプセルベースのシステムがあり、薬剤を、外部で造粒したクエン酸相と一緒にして、溶解性向上剤及び他の加工薬剤の有りまたはなしで造粒している。
【００８４】
水溶解性がないまたは低い化合物のための溶解性向上も、当業界では公知の追加の処理技術で使用できる。制限するものではないが、そのような技術として、スプレードライ、凍結乾燥、あるいはホットメルト押出しがあり、適切な薬学的に許容できるポリマーを用いて非晶質に分散させる。ここで、薬学的に許容できるポリマーは、ＰＶＰ、ＨＰＭＣ、ＨＰＭＣＰ、ＨＰＭＣＡＳ、ＰＥＧ、ＰＶＰ／ＶＡ、ＭＭＥ、ＣＡＰ、ポラキサマー（ｐｏｌａｘａｍｅｒ）、ゲルサイア（ｇｅｌｕｃｉｒｅ）、トゥイーン（Ｔｗｅｅｎ）、オイドラギット（Ｅｕｄｒａｇｉｔ）、ＣＭＥＣ、ゼラチンなどである。
他の多くの追加の薬剤は、当業界の者には明白であろう。透過向上剤（ｐｅｒｍｅａｔｉｏｎ  ｅｎｈａｎｃｅｒ）は、加工時における分散を助ける表面活性剤として使用することができ、一方、インビボでの透過向上効果を維持する。次いで、その他活性及び加工薬剤と一緒にしてドライブレンドし、カプセルに充填する。あるいは造粒ありまたはなしで錠剤に加圧成型する。
【００８５】
ある実施形態では、本発明の医薬組成物は、化合物５０ｍｇ、粒状クエン酸〔例えば、アーチャー・ダニエルズ・ミッドランド社（Ａｒｃｈｅｒ  Ｄａｎｉｅｌｓ  Ｍｉｄｌａｎｄ  Ｃｏｒｐ．）から入手可能〕５００ｍｇ、およびラウロイルカルニチン（ＳＩＧＭＡ）５０ｍｇを充填したサイズ００ゼラチンあるいはＨＰＭＣカプセルである。
【００８６】
全ての成分を、好ましくは最終的にゼラチンまたはＨＰＭＣカプセルに装入する、あるいは紛体を任意の順序でブレンダーに入れる。次いで、ブレンダーを、紛体が完全に混ざり合う迄、約５分間稼働させる。混合された紛体を、カプセルの大きい口に装入する。カプセルの他方の口を合わせて閉じる。５００個以上のカプセルが、コーティング装置〔例えば、ベクター・ＬＤＣＳ・２０／３０・ラボラトリー・ディベロップメント・コーティング・システム（Ｖｅｃｔｏｒ  ＬＤＣＳ  ２０／３０  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  Ｃｏａｔｉｎｇ  Ｓｙｓｔｅｍ）（ベクター社（Ｖｅｃｔｏｒ  ＬＤＣＳ  ２０／３０  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  Ｃｏａｔｉｎｇ  Ｓｙｓｔｅｍ）、マリオン、アイオワ州から入手可能）〕に投入される。
【００８７】
腸溶性コーティング溶液は、以下のようにして作成する。メタクリル酸−エチルアクリレート共重合体（１：１））を腸溶性コーティングしたオイドラギット（ＥＵＤＲＡＧＩＴ）Ｌ３０  Ｄ−５５−１：１〔エボニック（Ｅｖｏｎｉｋ）から入手可能〕を５００ｇ計量し、希釈水４１１ｇ、トリエチルシトレート１５ｇ、およびタルク３８ｇを加える。この量は、約５００個のサイズ００カプセルをコーティングするに充分である。
【００８８】
カプセルは、当業界で既知のプロセスを使用してコーティングしたフィルムである。
【００８９】
本開示によって提供される増強された生物学的利用能の故に、本開示の医薬製造では、高価な薬剤濃度を比較的低くできる。
【００９０】
ある実施形態では、本開示の医薬組成物は、以下のようにして製造される錠剤である。
（１）薬剤及び微結晶セルロース（プロソルブＨＤ９０のようなプロソルブ）を高剪断力あるいはコミル（ＣＯＭＩＬ）幾何学的混合をする。
（２）ステップ１の混合成分を、クエン酸ＤＣ  Ｆ２０、ラウロイル−Ｌ−カルニチン、クロスポビドン（Ｃｒｏｓｐｏｖｉｄｏｎｅ）、コリドン（ＫＯＬＬＩＤＯＮ）−ＶＡ６４ｍおよびピルビン酸ナトリウムと共にＶ型ブレンダーに入れる。ブレンダーで混合する。
（３）ステップ２が終わった後、Ｖ型ブレンダーに、ステアリン酸マグネシウムを加え、Ｖ型ブレンダー中で短時間混合する。
（４）混合物を加圧して錠剤にする。
（５）任意に、錠剤を、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）またはＰＶＡサブコートなどの水溶性バリアーで６％の重量増加となる迄コーティングする。
（６）任意に、錠剤を、腸溶性コート〔オイドラギット（ＥＵＤＲＡＧＩＴ）−Ｌ３０Ｄ−５５〕で７％の重量増加になる迄コーティングする。
【００９１】
〔処置（Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）方法〕
本発明は、さらに、治療上有効量のＢＣＳクラスＩＩ、ＢＣＳクラスＩＩＩあるいはＢＣＳクラスＩＶとして分類される少なくとも１つの化合物の生物学的利用能を高める方法を提供するものであり、ＢＣＳクラスＩＩ、ＢＣＳクラスＩＩＩあるいはＢＣＳクラスＩＶとして分類される少なくとも１つの化合物、少なくとも１の吸収促進剤、少なくとも１つのｐＨ低減化合物、また少なくとも１つのキレート剤を含む医薬組成物を、経口投与することからなっている。
【００９２】
本発明は、さらに必要とする患者の細菌感染症またはウイルス感染症の処置方法を提供するものであり、ＢＣＳクラスＩＩ、ＢＣＳクラスＩＩＩあるいはＢＣＳクラスＩＶとして分類される少なくとも１つの化合物、少なくとも１の吸収促進剤、少なくとも１つのｐＨ低減化合物、また少なくとも１つのキレート剤を含む医薬組成物を含む医薬組成物を、経口投与することからなっている。細菌感染症は、グラム陽性菌またはグラム陰性菌によるものである。
【００９３】
本発明は、さらに、必要とする患者の複雑皮膚および皮膚構造伝染病（ｃＳＳＳＩ）の処置方法を提供するものであり、ＢＣＳクラスＩＩ、ＢＣＳクラスＩＩＩあるいはＢＣＳクラスＩＶとして分類される少なくとも１つの化合物、少なくとも１の吸収促進剤、少なくとも１つのｐＨ低減化合物、また少なくとも１つのキレート剤を含む医薬組成物を、経口投与することからなっている。
【００９４】
ここに使用された用語“（被験）対象（ｓｕｂｊｅｃｔ）”、“患者（ｐａｔｉｅｎｔ）”は、本発明の組成物と方法で処置を受ける哺乳類を含む生体である。“対象”は、哺乳類を含んでいる。哺乳類は、例えば、いかなる哺乳類でもよいが、例えば、ヒト、霊長類、鳥、マウス、ラット、家禽、犬、猫、牛、馬、ヤギ、ラクダ、羊、ブタである。好ましくは、哺乳類はヒトである。用語“対象”と“患者”は、交換可能に使用される。
【００９５】
用語“治療上有効量”は、確認された疾病または状態を処置（治療）する、改善する、または抑制する、あるいは治療または抑制効果が検出できることを意味する。効果は、当業界で既知の任意の分析方法で検出することができる。患者にとっての正確な有効量は、患者の体重、大きさ、および健康、すなわち健康の性状と程度、投与に選んだ治療または治療の組合せに依って変わる。
【００９６】
ここに挙げた実施形態によると、経口投与されたクラスＩＩ、ＩＩＩまたはＩＶ薬剤の生物学的利用能を高める方法が開示され、この方法は、薬剤、キレート剤および吸収促進剤が、患者の口と胃を通った後に、治療上有効量の薬剤が、少なくとも１つのキレート剤と少なくとも１つの吸収促進剤と共に、患者の腸に選択的に放出されることからなっている。
【００９７】
ここに説明した実施形態によると、治療上有効量のチゲサイクリン、キレート化性状を生むに充分量のクエン酸、及びラウロイルカルニチンからなる経口医薬組成物を開示している。
ある実施形態では、この組成物が、さらに少なくとも１つのｐＨ低下剤を含んでいる。ある実施形態では、この組成物が、さらに医薬組成物が患者の胃を通って輸送するために有効な耐酸保護剤を含んでいる。ある実施形態では、この組成物が、さらにクエン酸を耐酸保護剤から隔離する水溶性バリアーを含んでいる。
ある実施形態では、クエン酸が、組成物を０．０１Ｍ重炭酸ナトリウム水溶液１０ｍＬに加えたときに水溶液のｐＨを５．５以下に下げるに充分な量で医薬組成物中に存在している。ある実施形態では、クエン酸が、組成物を０．０５Ｍ重炭酸ナトリウム水溶液１０ｍＬに加えたときに水溶液のｐＨを５．５以下に下げるに充分な量で医薬組成物中に存在している。ある実施形態では、クエン酸が、組成物を０．１Ｍ重炭酸ナトリウム水溶液１０ｍＬに加えたときに水溶液のｐＨを５．５以下に下げるに充分な量で医薬組成物中に存在している。
【００９８】
ここに挙げたある実施形態によれば、経口投与されたチゲサイクリンの生物学的利用能を高める方法が開示され、この方法は、チゲサイクリン、クエン酸およびラウロイルカルニチンが、患者の口と胃を通った後に、治療上有効量のチゲサイクリンが、充分な量のクエン酸およびラウロイルカルニチンと共に患者の腸に選択的に放出されることからなっている。
【００９９】
本開示に従って、吸収促進剤とキレート剤を一緒に使用することは、吸収促進剤単独、あるいはキレート剤単独に比べて、生物学的利用能に驚くべき相乗効果を与える。
理論に拘束されることなく、本開示の経口医薬組成物は、生物学的利用能に対して、一連の異なる互いに関係のない自然の障害を克服していると考えられる。
医薬組成物の種々の賦形剤は、それぞれに適切なメカニズムによって異なる障壁を克服し、クラスＩＩ、ＩＩＩあるいはＩＶ薬の生物学的利用能に対して相乗効果を示すように作用している。
クラスＩＩ、ＩＩＩあるいはＩＶ薬剤は、単独で、あるいはカチオン金属塩の存在下で摂取すると、消化管でキレートを生成して生物学的利用能を下げる。理論に拘束されることなく、本開示の組成物でキレート剤として充分量のクエン酸を用いたとき、クエン酸は高親和性キレート剤として作用できると信じられている。ここに使用される用語“高親和性キレート剤”は、問題のそれぞれの金属塩に対して低平衡解離定数ＩＱのキレート剤を意味する。例えば、クエン酸は、カチオン金属塩とキレートし、それ故に、クラスＩＩ、ＩＩＩあるいはＩＶ薬剤の身体吸収能を邪魔して利用できないと信じられている。
理論に拘束されることなく、本開示に従って、本開示の医薬組成物で投与されたクラスＩＩ、ＩＩＩあるいはＩＶ薬剤は、キレート剤と共に胃を通って輸送される（つまり、この投与形態は、そのまま幽門を通り過ぎる）。
【０１００】
ある実施形態によれば、グラム陽性菌あるいはグラム陰性菌の病原体をもつ患者の処置方法を開示するものであり、この処置方法は、治療上有効量のチゲサイクリン、少なくとも１つのキレート剤、及び少なくとも１の吸収促進剤を、固体投与形態で経口投与することからなっている。
ある実施形態では、複雑性皮膚・皮膚組織感染症（ｃＳＳＳＩ）をもつ患者の処置方法であり、治療上有効量のチゲサイクリン、少なくとも１つのキレート剤、及び少なくとも１つの吸収促進剤を含む固体投与形態を、経口投与することからなっている。
ある実施形態では、複雑腹腔感染症（ｃＩＡＩ）をもつ患者の処置方法であり、治療上有効量のチゲサイクリン、少なくとも１つのキレート剤、及び少なくとも１つの吸収促進剤を含む固体投与形態を経口投与することからなっている。ある実施形態では、キレート剤が、充分量のクエン酸である。
【０１０１】
本開示に従えば、クラスＩＩ、ＩＩＩあるいはＩＶ薬剤で治療する必要がある患者は、この組成物（適切な投与で）を、好ましくは、制限するものではないが、医薬品産業で通常サイズの錠剤またはカプセル形式で与えられる。その医薬組成物の投与量及び頻度は、以下に詳細に議論する。利益を得ることができる患者は、症状に対して薬剤量を増加して対応している患者である。例えば、本開示による抗菌化合物は、細菌感染症、原虫感染症、及び免疫修飾をもつ患者を治療するに使用することができる。さらに、本開示に従う抗菌化合物は、歯の抗菌性予防薬のような外科的創傷での感染、および好中球減少症の感染を防ぐのに使用できる。例えば、本開示によるビタミンは、ビタミン欠乏症のある患者を治療するに使用できる。良く知られたヒトビタミン欠乏症には、チアミン（脚気）、ナイアシン（ペラグラ）、ビタミンＣ（壊血病）、及びビタミンＤ（くる病）がある。
【０１０２】
定義によって、単独で摂取されたクラスＩＩ、ＩＩＩあるいはＩＶ薬剤は、胃腸領域での析出、膜浸透が出来ない物理化学的性状（物理化学的性状による分子固有の機能、あるいは輸送メカニズム、膜デポジション、蛋白−薬剤相互作用、代謝などによる）、あるいはこれの組合せにより生物学的利用能を低くしている。
多くのＢＣＳクラスＩＩ、ＩＩＩあるいはＩＶ薬剤に関して、析出または不溶解は、問題の分子に固有の特性であり、すなわち、無機または有機塩類の存在下でのイオン相互作用あるいは疏水性相互作用により生じることがある。ある実施形態では、カルボン酸が、本開示の高親和性キレート剤として機能する。
理論に拘束されることなく、本開示に従って、本開示の医薬組成物によって投与されたクラスＩＩ、ＩＩＩあるいはＩＶ薬剤は、胃腸皮膜組織を通って輸送されるように見える。酸は、カチオン金属とキレートし、これにより、塩によって引き起こされる析出を阻止し、一方、傍細胞吸収の促進剤として機能すると信じられている。
【０１０３】
ある実施形態では、酸は、多機能であり、カルシウムキレート剤、ｐＨ低下剤、生物学的利用能向上剤、浸透向上剤、および膜湿潤／電荷排斥剤として機能する。
酸は、カルシウムをキレートすることにより、堅固な結合を開裂させて浸透向上剤として機能をすることができる。さらに、ｐＨ低下剤として細胞内の酸性化により傍細胞浸透を高めることができ、その結果、ＰＫＣの医学作用によってアクトミオシン収縮となる。
遊離金属を捕捉することによって、錯体形成による薬剤の溶解性阻止または析出、あるいはカドヘリン相互作用による強固な結合力の維持がなくなる。例えば、異なるタイプの抗菌化合物は、カルシウムと相互作用すると示された。さらに、クエン酸は、ｐＨ低下剤として機能し、細胞内酸性化により傍細胞吸収を促進してアクトミオシンの収縮と傍細胞の流動を引き起すことができる。
【０１０４】
さらに、理論に拘束されることなく、カルボン酸は、膜電荷分散を改善する能力により、膜に結合した輸送蛋白質の作用を抑え、吸収する流れを増やすことができる。
【０１０５】
本開示がクラスＩＩ、ＩＩＩあるいはＩＶ薬剤の生物学的利用能を高める目的が達せられると考えられるメカニズムは、医薬組成物の活性賦形剤を出来る限り同時に放出させることにある。
吸収促進剤は、溶解性向上剤及び／または輸送促進剤（以下により詳細に記述する）ともなることができ、薬剤を胃腸領域から血液にまで輸送するのを助けている。多くの界面活性剤が、溶解促進剤と輸送（取込み）促進剤の両方で機能できる。
再び、理論に拘束されることなく、溶解性を高めることは、（１）本開示の活性賦形剤を腸の水性領域により同時に放出し、（２）薬剤が腸壁に沿った粘膜により良く溶解し、かつ通り抜ける、ことであると信じられる。薬剤が腸壁に達すると、取込み促進剤が、経細胞または傍細胞の輸送により、腸のブラシ状膜を通って血液に輸送する。
以下に、より詳細に議論するように、多くの好ましい化合物が両方の機能を提供できる。これらの実例では、これらの機能を両方とも利用する好ましい実施形態が、医薬組成物にたった１つの追加の化合物を加えることで実現できる。他の実施形態では、別個の吸収促進剤が、２つの機能を別々に実現させることができる。
【０１０６】
ある実施形態では、単一固体投与形態が、それぞれの投与で使用される。近同時放出は、単一錠剤、ピルあるいはカプセルのように、本発明の全成分を投与するには最もよい。然しながら、本発明は、例えば、酸と促進剤の必要量を２つ以上のカプセルに分割し、合わせて全成分が必要量となるように一緒に投与することも含んでいる。
【実施例】
【０１０７】
〔実施例１：ラットへのチゲサイクリン投与〕
［材料］
〔動物と試験物品〕
ナイーブな雌スプラーグドーリーラット（タコニックファーム（Ｔａｃｏｎｉｃ  Ｆａｒｍｓ）、ジャーマンタウン、ニューヨーク州）を、３つグループに分け、１２：１２時間の明−暗サイクルにした環境制御室で、食物と水を自由に得られるようにして飼育した。
動物の体重は、テスト時で凡そ２５０ｇであった。ラットは、投与前の一夜絶食させた（水は利用可）。試験物品、チゲサイクリンの情報を表１に挙げる。チゲサイクリンストックは、それぞれの研究の日に、新たに水に入れ、示した配合に希釈して準備した。
【０１０８】
【表１】
0006375314.tif 000002
【０１０９】
［方法］
〔投与量と投与ルート〕
静脈内（ＩＶ：Ｉｎｔｒａｖｅｎｏｕｓ）投与は、投与量１．６ｍＬ／ｋｇで、左頚動脈内にボーラス投与した。十二指腸内投与は、投与量１．２ｍＬ／ｋｇで十二指腸内にボーラス投与した。実現可能性１次研究の薬剤投与と配合の詳細を、表２にまとめる。
【０１１０】
【表２】
0006375314.tif 000003
【０１１１】
追加の研究は、それぞれの活性賦形剤（ＲＡ８６１とＲＡ８６９）の１つに配合されたチゲサイクリンの％ＦとＰＫプロフィールを、実現可能性１次研究からの最大％Ｆ配合（研究ＲＡ８５１とＲＡ８５３から、ＣＡ：４００ｍＭ、ＬＬＣ：２６ｍＭ、ｐＨ：３．５）と比較して行なった。追加の研究は、ＣＡとＬＬＣが一定濃度（ＲＡ８６７）で配合されｐＨの影響を調査した。
【０１１２】
【表３】
0006375314.tif 000004
【０１１３】
〔麻酔とカテーテル実施〕
雌ラットを、新鮮な木材チップ層理を敷いたポリカーボネート（あるいは等価な物）の靴箱かごに、２０〜２２℃での１２時間オン／オフの明暗サイクル下で、それぞれ３つのグループで飼育した。ラットは、外科的処置に先立ち、一夜絶食させ、０．９％食塩水中フレッシュなケタミン（６７ｍｇ／ｍＬ）／キシラジン（４２ｍｇ／ｍＬ）を０．３ｍＬ筋肉注射して麻酔をかけた。ラットが動かなくなってから、ケタミン／キシラジンを０．１ｍＬ腹腔内（ＩＰ）に注射した。麻酔の状態は、必要に応じてケタミン／キシラジンのＩＰ注射によって維持した。動物重量は、麻酔誘発後に測定した。
【０１１４】
メイヨー鋏で気管を露出させ、右頸動脈に血液サンプリング用の留置カテーテルを挿入し、動脈の底部をクランプ留めし、縫合糸で上部を縛って通路を止めた。その間の領域を、小さな鋭い鋏で切り、そこにイントラメディック（Ｉｎｔｒａｍｅｄｉｃ）ポリエチレンチューブを挿入した、チューブを付けた動脈は、漏れを防ぐために縫合してシールした。２３−ゲージイントラメディック・ラウエル・スタブ・アダプター（Ｉｎｔｒａｍｅｄｉｃ  Ｌｕｅｒ  Ｓｔｕｂ  Ａｄａｐｔｅｒ）をカニューレに挿入し、３方向バルブに接続した。３方向バルブは、０．９％の通常食塩水を充填した３ｃｃ注射器と、血液サンプリング用の５Ｕ／ｍＬヘパリン酸ナトリウムを充填した１ｃｃ注射器に接続した。
【０１１５】
〔ＩＶ研究〕
ＩＶフェーズでは、チゲサイクリンを、３匹の麻酔をかけたナイーブ雌ラットのグループに対し、脳の方向に流れが抑えられている左頚動脈に、脳から遠ざけてボーラス投与した。血漿中チゲサイクリン濃度分析を行うための血液サンプル（〜０．５ｍＬ）を、投与前に右頚動脈に外科的に設けたカニューレから、研究に依り投与後１２０分あるいは２４０分までの所定時間に採取した。血液サンプルを、１８０ｍＭＥＤＴＡを２０μＬ含むチューブに採取した。チューブは、氷の上に置いて、その後、４℃で５分間凡そ３０００ｒｐｍで遠心分離した。血漿は、サンプルの遠心分離直後に集め、分析を待つ間−２０℃に貯蔵した。
【０１１６】
〔十二指腸内研究（Ｉｎｔｒａｄｕｏｄｅｎａｌ  Ｓｔｕｄｉｅｓ）〕
十二指腸内投与には、腸溶性コーティングしたカプセルあるいは錠剤配合の経口デリバリーを模して使用した。研究のＩＤフェーズでは、ナイーブ雌ラットを用い、チゲサイクリンを、２７−ゲージ針を付けた１ｍＬ注射器を通して十二指腸内に投与した。
メイヨー鋏を使って十二指腸を露出し、胃と十二指腸の接合部から空腸の方向に５ｃｍを測定して投与サイトを決めた。測定したサイトは、注射サイトの真下の小さな１片の縫合糸を挿入して識別できるようにした。配合薬剤を投与した後、腹腔を外科クリップで閉じた。薬剤投与に先立ち、血漿中チゲサイクリン濃度分析に使う血液サンプル（〜０．５ｍＬ）を、研究に依り１２０分か２４０分迄の所定時間ポイントで、右頚動脈に外科的に取付けたカニューレから採取した。
【０１１７】
血液サンプルは、１８０ｍＭ  ＥＤＴＡを２０μＬ含むチューブに集めた。チューブは、氷の上に置いて、その後、４℃で５分間凡そ３０００ｒｐｍで遠心分離した。血漿は、サンプルを遠心分離してその直後に集め、分析を待つ間−２０℃に貯蔵した。
【０１１８】
〔チゲサイクリンの分析方法〕
ラット血漿中チゲサイクリンは、３５０ｎｍでＵＶ検知するＨＰＬＣ分析を用いて定量した。ミノサイクリン（Ｍｉｎｏｃｙｃｌｉｎｅ）（国際的なＶＷＲ）を内部標準として使用した。血漿サンプルのサンプル加工／清掃を、酸性にしたアセトニトリルを用いる蛋白質析出により、オフラインで行った。
【０１１９】
ＨＰＬＣシステムは、デュアル島津ＬＣ−ｌＯＡＤｖｐイソポンプ、島津ＣＴＯ−ｌＯＡＳｖｐカラム温度コントローラー、および島津ＳＰＤ−１０Ａｖｐ可変波長検出器を装備した島津ＳＩＬ−ＨＴｃ  ＨＰＬＣシステムからなっている。
クロマトグラフィー分離は、リー（Ｌｉ）らに基いているが、かなりの相違がある。（Ｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，２００４，Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｉｇｅｃｙｃｌｉｎｅ，ａ  ｎｏｖｅｌ  ｇｌｙｃｙｌｃｙｃｌｉｎｅ，ｂｙ  ｌｉｑｕｉｄ  ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ．Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ  Ｂ．８１１：２２５−２２９参照）。
ＨＰＬＣ分離は、逆相カラム（フェノメネックス・ルナＣＩ８（２）、５μｍ、１５０×４．６ｍｍ、部品番号：００Ｆ−４２５２−Ｅ０（２））で、最初に無勾配相、次いでチゲサイクリンの勾配溶出を行った。
移動相Ａは、リン酸塩バッファーｐＨ：２．５が２３ｍＭと１−オクタンスルホン酸６ｍＭでなり、移動相Ｂは、アセトニトリルだけからからなる。タイムプログラムは、２５％移動相Ｂで無勾配相を６分間、次いで１０分かけて移動相Ｂを３５％まで上げた（１６分）。システムは、２５％移動相Ｂにしてさらに２分間平衡にし、１つのサンプルについて合計ランタイムを１８分とした。移動相の流量は、１．２ｍＬ／分であった。検出は、ＳＰＤ−１０Ａｖｐ可変波長検出器を３５０ｎｍに固定し、感度０．００１ａｕｆｓで行った。
【０１２０】
未知サンプルと校正基準（プールしたラット血漿中チゲサイクリン）を、内部標準でスパイクしたアセトニトリルで蛋白質析出により処理した。その後、サンプルを、冷凍下、１３ｋｐｍで３０分間遠心分離した。上澄み液を取出し、ターボバップ（ｔｕｒｂｏｖａｐ）中で乾燥させて液体を除いた。次いで、サンプルを、５５μＬの０．１Ｍリン酸塩バッファー、ｐＨ：３．８で再構成した。サンプルは、シーケンスの間、自動注入器中１０℃に維持した。注入量は、５０μＬとした。ラット血漿サンプル中の未知濃度は、分析物のピーク面積比、内部標準対名目上の濃度比率をプールしたラット血漿中にスパイクした校正基準からの回帰直線に内挿して定量した。回帰重量は、計算に使用しなかた。この方法は、０．０５μｇ／ｍＬ（ＬＯＱと定義する）まで線形であることが示された。校正曲線は、０．０５μｇ／ｍＬから５．０μｇ／ｍＬの範囲をカバーした。
【０１２１】
初期の研究サンプルの分析で観察された分析上の問題点から、後のサンプルの分析方法を僅か変えた。移動相Ａは、２３ｍＭのリン酸塩バッファー、ｐＨ：２．５に１−オクタンスルホン酸４ｍＭを加えたものに、移動相Ｂは、９０％アセトニトリル−１０％水に１−オクタンスルホン酸２ｍＭを加えたものに変えた。
タイムプログラムは、２５％移動相Ｂで無勾配相を６分間、次いで８分かけて移動相Ｂを３５％まで上げ（１４分）、次いで、さらに２５％移動相Ｂにして４分間で再平衡して、合計ランタイムが１８分とした。
全タイムプログラム、検知波長、流量、注射量、カラム、およびカラム温度は全て変えなかった。さらに、サンプルのクリーンアップのため、蛋白質析出薬を、０．５％（ｖ／ｖ）ＴＦＡで酸性にした。生じた析出物は、１３ｋｒｐｍで５分間、遠心分離し、析出物を乾燥し、移動相Ａ６０μＬに再構成した。
再構成したペレットは、さらに５ｋｒｐｍで遠心分離して不溶解物のペレットにし、上澄み液は注入した。これらの変更は、下の表４に順次示しており、より確実な分析方法となり、チゲサイクリンとミノサイクリンのより良い分離、より良いシグナル対ノイズ比、そして初期の実験でみられた析出問題をなくしている。
然しながら、この方法を古いＨＰＬＣシステム（島津ＳＣＴ−ｌＯＡｖｐシステムコントローラーとＳＩＬ−１０Ａ自動注射器を装備した）に用いる時、タイムプログラムは、さらに変更し、システムデザイン変更のために勾配を３８％移動相Ｂ迄にしたことに注意しなければならない。他の全てのパラメーターは変更することなしに残した。
【０１２２】
【表４】
0006375314.tif 000005
【０１２３】
〔薬物動態データの取扱い〕
ラットそれぞれのチゲサイクリンＰＫパラメーターは、マイクロソフト・エクセルのＰＫ機能を用いた非区画分析で計算した。
［結果］実現可能性１次研究（ＲＡ８５１、ＲＡ８５３）
【０１２４】
〔ＩＶ投与後の血漿中チゲサイクリン〕
目標投与量０．６４ｍｇ／ｋｇでの血漿中チゲサイクリンの平均Ｃｍａｘが１．７９μｇ／ｍＬであり、平均時間（Ｔｍａｘ）が５分（０．０８時間；表５）で観察された。チゲサイクリンは、単回投与で半減期が凡そ２０時間であるとの報告に基づいて、予想通り４時間測定可能であった。平均ＡＵＣ（ｏ−ｔ）は、５８．２０μｇ＊ｍｉｎ／ｍＬであった。
【０１２５】
目標投与量を１２ｍｇ／ｋｇ（ＲＡ８５３）に増加した時、平均Ｃｍａｘが５０．７μｇ／ｍＬに増加し、これは、Ｔｍａｘ５分で観察された（表５）。２つの研究（ＲＡ８５１とＲＡ８５３）では、チゲサイクリンに明瞭な二相性ディスポジションあり、初期には非常に速く、凡そ３０分で平衡状態になる（図１、図２、図３）。研究ＲＡ８５３での平均ＡＵＣ（０−ｔ）は、７９１μｇ＊ｍｉｎ／ｍＬであった。
【０１２６】
【表５】
0006375314.tif 000006
【０１２７】
〔ＩＤ投与後の血漿中チゲサイクリン〕
チゲサイクリンは、ＰＢＳ中で、あるいはＣＡを１００ｍＭ、ｐＨを３．５で、あるいはＣＡを４００ｍＭ、ｐＨを３．５、ＬＬＣを６ｍＭで配合して、ＩＤにより投与した。目標投与量が４．８ｍｇ／ｋｇあるいは９．０ｍｇ／ｋｇで、ＰＢＳで配合して投与されたチゲサイクリンは、吸収がほとんどなしあるいはなかった（表６）。ＲＡ８５１（４．８ｍｇ／ｋｇ）では、平均Ｔｍａｘが９０分で平均Ｃｍａｘが０．１０μｇ／ｍＬであり、より多い投与量では、平均Ｔｍａｘが３０分で平均Ｃｍａｘが０．２２μｇ／ｍＬとなった。この最後の結果は、かなり大きな吸収である１０分でＣｍａｘが１．１１μｇ／ｍＬを示した１匹の動物を含んでいない。
早いＴｍａｘと結び付いた高い吸収は、ＰＢＳで配合されたチゲサイクリンを投与した他の５匹の動物に特徴的でなく、不注意なＩＤ注射サイトの漏れによる投与エラーであることを示している（ＩＰ投与になっている）。
４．８ｍｇ／ｋｇで投与されたとき、ＡＵＣ（ｏ−ｔ）に基づいた平均％Ｆは、０．６４ｍｇ／ｋｇＩＶプロファイルと比較して、１．６％であった。９．０ｍｇ／ｋｇで投与されたときには、平均％Ｆは２．８％であった。
【０１２８】
ＬＬＣが２６ｍＭおよびクエン酸塩が１００ｍＭ、ｐＨ：３．５では、血漿中チゲサイクリン濃度は、著しく増加した（×７〜９）。ＰＫデータを表７にまとめる。
４．８ｍｇ／ｋｇ（ＲＡ８５１）で投与したとき、チゲサイクリンは、Ｔｍａｘ２０分で平均Ｃｍａｘが０．７１μｇ／ｍＬであった。平均ＡＵＣ（ｏ−ｔ）は、４９．４μｇ＊ｍｉｎ／ｍＬであり、計算された平均％Ｆが１０．９％となる（０．６４ｍｇ／ｋｇＩＶと比較して、ＣＶが５２．１％）。
ＣＡが１００ｍＭ、ＬＬＣが２６ｍＭの存在下で投与量を９．０ｍｇ／ｋｇに増加すると、血漿中チゲサイクリン濃度が、平均Ｔｍａｘ１７分で、平均Ｃｍａｘが２．０６μｇ／ｍＬとなり、著しく増えた。平均ＡＵＣ（ｏ−ｔ）が７６．９μｇ＊ｍｉｎ／ｍＬであり、平均％Ｆが１１．４％になる（ＣＶ、５９．３％）。要するに、ＣＡを１００ｍＭ、ｐＨ：３．５、ＬＬＣが２６ｍＭで配合されると、平均％Ｆは４〜７倍増加した。
【０１２９】
ＬＬＣが２６ｍＭの存在下で、クエン酸塩濃度を４００ｍＭ、ｐＨ：３．５に上げると、血漿中チゲサイクリン濃度にさらに増加した。クロマトグラムは、チゲサイクリンの親ピークより長い保持時間で、チゲサイクリンに関連する第２ピークがみられた。ＰＫデータを、表８および表９にまとめる。
４．８ｍｇ／ｋｇで投与すると、平均Ｔｍａｘが１７分で平均Ｃｍａｘが０．７９μｇ／ｍＬ（第２ピークを含めると、１．１１μｇ／ｍＬ）に増加した。平均ＡＵＣ（ｏ−ｔ）は、８５．６μｇ＊ｍｍ／ｍＬ（ピーク２を含めると、１１７．６３μｇ＊ｍｉｎ／ｍＬ）で、平均％Ｆが２０．３％（ピーク２を含めて、ＣＶが９６．６％、％Ｆが２７．９％）になった。
【０１３０】
ＣＡが１００ｍＭの実験と同様にして、投与量を９．０ｍｇ／ｋｇに増すと、血漿中のチゲサイクリンが著しく増加した。チゲサイクリン関連ピークの出現は、この実験では際立っていなかったが、低い投与量の実験に比べてそれ程高くなかった。
ＣＡを４００ｍＭ、ｐＨ：３．５、ＬＬＣを２６ｍＭとして９．０ｍｇ／ｋｇで投与すると、平均Ｔｍａｘが１０分で、平均Ｃｍａｘが２．４９μｇ／ｍＬ（ピーク２を含めると、２．８８μｇ／ｍＬ）であった。平均ＡＵＣ（ｏ−ｔ）は、１３８μｇ＊ｍｉｎ／ｍＬ（ピーク２を含めると、１５３μｇ＊ｍｉｎ／ｍＬ）であり、平均％Ｆは、２１．８％（ピーク２を含めると、ＣＶが４０．８％；％Ｆが２４．１３％）となった。
図３は、配合が異なる研究ＲＡ８５１とＲＡ８５３からの平均投与量調節データを集めて比較している。
【０１３１】
【表６】
0006375314.tif 000007
【０１３２】
【表７】
0006375314.tif 000008
【０１３３】
【表８】
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【０１３４】
【表９】
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【０１３５】
〔機構的な実現可能性調査（Ｍｅｃｈａｎｉｓｔｉｃ  Ｆｅａｓｉｂｉｌｉｔｙ  Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔｓ）（ＲＡ８６１、ＲＡ８６７、ＲＡ８６９）〕
実現可能性１次研究（ｐｒｉｍａｒｙ  ｆｅａｓｉｂｉｌｉｔｙ  ｓｔｕｄｉｅｓ）からのポジティブデータは、活性賦形剤それぞれ（ＣＡとＬＬＣ）の個々の寄与に及ぶ調査を必要としていた。
そこで、追加の研究は、それぞれの活性賦形剤（ＲＡ８６１とＲＡ８６９）の１つに配合され、投与されたチゲサイクリンの％Ｆ及びＰＫプロファイルを、実現可能性１次研究からの最高％Ｆ配合（研究ＲＡ８５１とＲＡ８５３からＣＡが４００ｍＭ、ｐＨ：３．５、およびＬＬＣが２６ｍＭ）との比較で行った。追加の研究は、ＣＡおよびＬＬＣ濃度（ＲＡ８６７）を一定にした配合で、ｐＨの影響を調査した。
【０１３６】
ＲＡ８６１は、３つのＩＤ投与系でデザインし、コントロールとしてＣＡを４００ｍＭ、ｐＨ：３．５、ＬＬＣを２６ｍＭとし、２つ目はＣＡを４００ｍＭ、ｐＨ：３．５のみとし、３つ目はＬＬＣを２６ｍＭのみとした。
結果は、実現可能性１次研究と比較して極めて低い発現（ｅｘｐｏｓｕｒｅ）で、分析手法から生じたと考えられる問題があることが示された。これらの問題は、本質的にＲＡ８６１の繰り返しであったが、ＣＡのみの系をＩＶコンパレーターで交換した研究ＲＡ８６９を必要とした。
要するに、両方の研究は、チゲサイクリンに可能な賦形剤としてＣＡを使用していることを示している。研究ＲＡ８６９からのＰＫデータが、ＣＡを４００ｍＭ、ｐＨ：３．５およびＬＬＣを２６ｍＭで投与したときには、凡そ％Ｆが２２％を示したが、ＬＬＣが２６ｍＭのみの投与では、平均％Ｆが９％になった。
【０１３７】
研究ＲＡ８６７は、異なるｐＨで配合して投与したときの、チゲサイクリン％ＦおよびＰＫを比較した。この研究は、６匹のラットそれぞれに、ＣＡを４００ｍＭ、ｐＨ：３．５、およびＬＬＣを２６ｍＭにして、ｐＨ：３．５あるいはｐＨ：６．０でＩＤ投与する２つの配合系で行った。
データは、ｐＨ：３．５で配合して投与されたラットが、より高いＣｍａｘ、早いＴｍａｘ、および高いＡＵＣ（０−ｔ）であることを示している。これらのデータは、この小さな分子を可能にする賦形剤として、ＣＡが機能しているとするのが支配的なメカニズムであるので、カルシウム封鎖より、ｐＨを考えに入れることを示唆している。
【０１３８】
【表１０】
0006375314.tif 000011
【０１３９】
〔実現可能性１次研究（ＲＡ８５１、ＲＡ８５３）〕
これらの研究は、クエン酸塩バッファー（ｐＨ：３．５）とＬＬＣの組合せを用いて、ＢＣＳクラスＩＩＩ抗菌化合物であるチゲサイクリンの経口％Ｆを改善する可能性を示した。
十二指腸内投与は、大型哺乳類での腸溶性コーティングした投与形態の投与を模して用いた。これらの実現可能性１次研究も、以下に議論されたメカニズム的研究も、腸溶性コーティングされた投与形態が、小さい分子に必要かどうか研究するようにデザインされたものではない。浸透のメカニズムを考えた理論的展望から、潜在的に食物および希釈効果を限定するので、変化の視点から腸溶性コーティングが好ましい。
【０１４０】
チゲサイクリンの静脈内投与は、予想される二相性で、１次血漿濃度曲線となる。研究ＲＡ８５１（図７および図１０）のチゲサイクリンＩＤ投与のディスポジションフェーズに、変化する比較的低いチゲサイクリン血漿濃度が観察されたので、高投与量で研究を繰り返した（ＲＡ８５３）。
理論的な観点から、ＢＣＳクラスＩＩＩ化合物を投与したときに起きる低発現を克服する１つの方法は、吸収に利用できる局部的な濃度（つまり投与量）を上げることである。受動的な吸収メカニズムと相応して、全体濃度は投与量に直接依存しているが、投与量調節したＰＫカーブは、事実上重ね合わせ出来る（図３、９、１２および１５）。
【０１４１】
この小さい分子での治療では、一般にＣＡを酸性にして代謝酵素を阻止する必要がないので、我々は、ＣＡがＢＣＳ化合物の賦形剤として有益だろうと仮定した。
確かに、チゲサイクリンの絶対％Ｆは、ＣＡ濃度に依存していて、ＣＡが、浸透向上剤と溶解化賦形剤（この特定の場合のみに）の両方に潜在的用途をもっていることを示している。四環状の類似化合物が、カルシウムイオンの存在下で胆汁酸塩と作用して複合物を作ることが知られている。クエン酸は、カルシウムとキレートを作ることによって、あるいは周囲を酸性によってこれらの相互作用を阻止することができ、これにより、胆汁酸塩との相互作用を壊し、吸収を活性にする。
チゲサイクリンの絶対％Ｆは、ＣＡを１００ｍＭ、ｐＨ：３．５、及びＬＬＣを２６ｍＭに配合したとき、凡そ１１％であり、ＣＡを４００ｍＭ、ｐＨ；３．５、及びＬＬＣを２６ｍＭに配合したときに比べて凡そ２２％まで増加した（表１１および図１６）。
【０１４２】
【表１１】
0006375314.tif 000012
【０１４３】
表１１に示したＣＡを４００ｍＭ、ｐＨ：３．５、及びＬＬＣを２６ｍＭに配合したチゲサイクリンのデータは、チゲサイクリン単独であることを強調すべきである。分析では、研究ＲＡ８５１とＲＡ８５３の両方の研究について、この配合からの血漿サンプルのクロマトグラムが、チゲサイクリンピークより長い保持時間にかなり大きなピークを示したことに注目される。
この未知のピーク（チゲサイクリン関連ピークとした）は、それぞれの動物の時間ゼロの血漿サンプルでは観察されなかったが、その後のタイムポイント全てで観察され、そのレベルは、チゲサイクリンにレベルに対応／従っていた。このピークは、サンプルの入手時とその後の分析時の間に貯蔵時間があるので、潜在的なチゲサイクリン分解生成物、恐らくクエン酸塩付加物である可能性があると仮定される。然しながら、ピークは、同定していない。
さらに分解したという理論を立証することは、このピークが、以下に議論する貯蔵時間が最小だったメカニズム的研究（特にＲＡ８６７あるいはＲＡ８６９）では観察されなかったことである。然しながら、このピークが同定されていないので、全体的なまとめには含んでいない。このピークを含めると、絶対％Ｆは、ＲＡ８５１では２８％、ＲＡ８５３では２４％になる（表９）。
【０１４４】
興味あることに、ＩＶをＩＤ、ＰＫプロファイルと比較すると、曲線のディスポジションフェーズは、際立って異なっている（図２０）。
ディスポジションが遅い（開始時間に対してのパーセントが高い）と、生物学的利用能は、サンプル収集の限られた時間により過小評価されると推測される。
さらなる研究は、なぜチゲサイクリンのＩＤ投与のディスポジションが、ＩＶより遅いのかを決めることが必要であろう。高容積のチゲサイクリン分布が報告されているので、組織デポジションが優先していると示唆できる。しかし、これは明らかに推測である。
この発見が犬モデルで模して実施できるかどうか、肝臓と胆汁の組織の差、及びラットと犬での機能を特に考慮して、確かめることは興味あることである。
【０１４５】
〔機構的実現可能性調査（ＲＡ８６１、ＲＡ８６７、ＲＡ８６９）〕
実現可能性１次研究からのポジティブデータで、活性賦形剤（ＣＡとＬＬＣ）それぞれの寄与を研究する必要が出てきた。
そこで、追加の研究は、個々の活性賦形剤（ＲＡ８６１とＲＡ８６９）それぞれの１つに配合されたチゲサイクリンの％ＦとＰＫプロファイルを、実現可能性１次研究での最高％Ｆ配合（ＲＡ８５１とＲＡ８５３から、ＣＡが４００ｍＭ、ｐＨ：３．５、及びＬＬＣが２６ｍＭ）と比較した。追加研究は、ＣＡとＬＬＣの濃度を一定にして、配合ｐＨの影響を研究した（ＲＡ８６７）。
【０１４６】
研究は、ＣＡおよびＬＬＣ（ＲＡ８６１とＲＡ８６９）の相対的な個々の寄与を評価し、チゲサイクリンの経口配合用の賦形剤としてＣＡの有効性を示すことをデザインした。潜在的な分析方法の問題は別にして、研究ＲＡ８６９からの結果は、ＣＡを４００ｍＭ、ｐＨ：３．５、そしてＬＬＣを２６ｍＭで配合したとき、比較的高い絶対％Ｆ（２２％）であり、ＬＬＣを２６ｍＭにしただけ（ＣＡはない、表１０）で投与したとき、チゲサイクリン絶対％Ｆが９％を示した。これらの研究は、ＣＡとＬＬＣ一緒にした使用を良しとするのみならず、組合せで観察された相乗効果への研究の扉を開くものである。
【０１４７】
この目的のために、研究ＲＡ８６７は、ＣＡの影響が、実際にクエン酸塩の物理化学的性質によるのか、あるいはｐＨが低いことによるのかを決めることであった。
この研究は、同じ組成物（クエン酸塩が４００ｍＭ、ＬＬＣが２６ｍＭ）で、ｐＨが３．５またはｐＨが６．０の配合で、チゲサイクリン％ＦおよびＰＫを比較した。データは、ｐＨを３．５の配合で投与されたラットが、より高いＣｍａｘ、より早いＴｍａｘ、そしてより高いＡＵＣ（ｏ−ｔ）を示していた。これらのデータでは、支配的なメカニズムが、この小さな分子を可能にする賦形剤としてのＣＡが機能しているので、カルシウムの隔離よりむしろ、ｐＨが重要であることを示唆している。
追加の研究は、潜在的な混乱をなくすもので、この化合物用の酸性ｐＨの有効性を解明するためのものである。例えば、別の研究で、既知の浸透性を高めるメカニズムであるが、浸透性に及ぼす酸性化の影響を示した。
この例では、酸性化が、チゲサイクリン−胆汁酸塩複合体を開裂させるという利点を生んでいる。高ｐＨのクエン酸塩が、よいカルシウムキレート剤（ｐＫａが３．１、４．７および６．４と報告されている）であり、同時に、チゲサイクリン−胆汁酸塩の相互作用を断ち切り、浸透を高めているが、カルシウムキレート化が、胆汁酸塩の相互作用分断にどれ程有効かは明確でない。要するに、観察された％Ｆの差は、単に不溶化させる機能による差であろう。
実施例１に示した研究は、ＢＣＳクラスＩＩＩの小さな分子の経口デリバリーを目的にした本発明の医薬組成物における薬剤の実施形態を挙げたものである。
ＰＢＳで配合され、ＩＤ投与でデリバリーされたチゲサイクリンの絶対％Ｆは、低投与量（ＲＡ８５１）で１．６％、高投与量（ＲＡ８５３）で２．８％未満であった。チゲサイクリンを、ＣＡが１００ｍＭ、ｐＨ：３．５およびＬＬＣが２６ｍＭで配合されたときには、絶対％Ｆが凡そ１１％まで増加した。
ＣＡ含有量を４００ｍＭ、ｐＨ：３．５に増やし、ＬＬＣを２６ｍＭで一緒に配合すると、絶対％Ｆは、凡そ２２％まで増加した。実施例１に記載した追加のメカニズム研究では、２つの機能賦形剤の相乗効果と、チゲサイクリンの経口％Ｆを可能にする配合ｐＨの重要性を示した。
【０１４８】
〔実施例２：ラットのザナミビル投与〕
［材料］
〔動物〕
ナイーブな雌スプラーグドーリーラット（タコニックファーム、ジャーマンタウン、ＮＹ）を、２つグループに分け、食物と水は自由に得られるようした。動物は試験の時におよそ２５０ｇであった。ラットは、薬剤投与の前一夜絶食させた（水は利用可能）。
【０１４９】
〔試験物品および参照物質〕
試験物品、ザナミビルの情報を、表１２に挙げる。
【０１５０】
【表１２】
0006375314.tif 000013
【０１５１】
〔賦形剤〕
ザナミビルのストック溶液は、使用直前に、ザナミビルを２Ｎ−ＨＣｌに４０ｍｇ／ｍＬ濃度で溶解して調製した。このストック溶液を分割して、所定の配合に希釈した。
【０１５２】
［方法］
〔配合調製および投与〕
ラット（ｎ＝３）に、ザナミビル投与量０．１６ｍｇを容量４００μＬにして、頚動脈に留置カテーテルを通してＩＶ投与した。血液サンプルは、投与前、及び試験物品の投与後５、１０、２０、３０および６０分で頚動脈から採取した。
【０１５３】
ラット（配合毎にｎ＝３）は、幽門結合部から５ｃｍから離れた部位に、各配合（１．２ｍｇのザナミビル）の３００μＬをボーラスでＩＤ投与した。血液サンプルは、投与前、及び試験物品の投与後１０、２０、３０、６０，１２０、および１８０分迄で頚動脈から採取した。
【０１５４】
血液サンプルはすべて、１８０ｍＭ  ＥＤＴＡを２０μＬで処理し、次いで、３０００ｒｐｍで５分間遠心分離した。採取した血漿は、−２０℃に凍結させて貯蔵し、分析のためにドライアイス上アブソープション・システム（Ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）に移した。
【０１５５】
【表１３】
0006375314.tif 000014
【０１５６】
〔血漿中ザナミビル濃度の分析方法〕
血漿サンプルを、血漿中ザナミビル濃度を決定するために、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳを用いるアブソープション・システムズ（Ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）により分析した。
【０１５７】
〔生物学的利用能の計算〕
血漿中ザナミビル濃度対時間曲線のＡＵＣは、マイクロソフトエクセルの台形積分を使用して計算した。絶対生物学的利用能は、以下の式によって計算した。
【０１５８】
【数１】
0006375314.tif 000015
ここで、ＤＩＤは、ＩＤ投与量（ｍｇ）を、個々のラット体重（ｋｇ）で割った値である。ＤＩＶは、ＩＶ投与量（ｍｇ）を、ＩＶ系のラットの平均体重（ｋｇ）で割った値である。
【０１５９】
［結果］
研究に用いた６つの配合での血漿中ザナミビル濃度それぞれを、下に挙げる。平均ＰＫプロファイルを、図２７に示す。また、各配合のＰＫデータを、表１４にまとめる。
【０１６０】
【表１４】
0006375314.tif 000016
【０１６１】
ザナミビルのストック溶液は、全賦形剤が酸性であるＡＰＩに溶解するように、２ＮＨＣｌ中に調製した。これは、すべての配合でザナミビルの吸収を高めていた。
然しながら、相対的に最良の生物学的利用能をもつ賦形剤は、ＣＡが４００ｍＭとＬＬＣが１．０％を含む配合“Ｃ”であった。
【０１６２】
【表１５】
0006375314.tif 000017
【０１６３】
【表１６】
0006375314.tif 000018
【０１６４】
【表１７】
0006375314.tif 000019
【０１６５】
【表１８】
0006375314.tif 000020
【０１６６】
【表１９】
0006375314.tif 000021
【０１６７】
【表２０】
0006375314.tif 000022
【０１６８】
【表２１】
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【０１６９】
５つのＩＤ配合のそれぞれは、投与量を１．２ｍｇ（４．８ｍｇ／ｋｇ）にしてでラットの十二指腸に直接ボーラス投与し、一方、ＩＶ配合は、投与量が０．１６ｍｇ（０．６４ｍｇ／ｋｇ）で頚動脈に留置カテーテルによって投与した。血液サンプルは、投与前と、投与後の所定タイムポイントで、頚動脈から採取し、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳにより血漿中のザナミビル濃度を測定をした。
【０１７０】
【表２２】
0006375314.tif 000024
【０１７１】
ザナミビルのストック溶液は、ＡＰＩが溶解するように２Ｎ−ＨＣｌ中で調製したので、すべての賦形剤が酸性になった。これは、全ての配合のザナミビルが、吸収を高めることとなった。しかしながら、相対的に最良の生物学的利用能をもつ賦形剤は、ＣＡが４００ｍＭとＬＬＣが１．０％を含む配合“Ｃ”であった。
【０１７２】
〔実施例３：犬へのアミノグリコサイド投与〕
［材料］
〔動物〕
研究には、体重凡そ１０〜１５ｋｇの成長したビーグル犬を用いた。この動物は、シンクレア・リサーチ・センター（Ｓｉｎｃｌａｉｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｅｎｔｅｒ）（コロンビア、ミズーリ州）で、一匹づつ、あるいはペアーにして大きすぎる位の小屋に飼育した。１次動物囲いは、ＵＳＤＡ動物福祉法（９ＣＦＲ、パート１、２および３）に特定され、実験動物の飼育と使用上のガイド（ナショナル・アカデミー・プレス、ワシントンＤ．Ｃ．、１９９６年）に記載に基いた。１２時間の明／１２時間の暗の光周期を維持した。室温を２０±５℃に維持するように設定した。相対湿度は、モニターしたが、コントロールはしなかった。動物室および囲い内の掃除は、設備（シンクレア）ＳＯＰによって行われた。
【０１７３】
犬用餌として認定されたテクラッド（ＴＥＫＬＡＤ（Ｒ））を、動物の大きさと年齢に適切な量（〜４００グラム）で、毎日一回与えた。水道水は、自動給水装置あるいは水ボウルから自由に得られるようにした。
【０１７４】
動物は、薬剤の投与前一夜、および全血液採取期間にわたって絶食させた。
【０１７５】
【表２３】
0006375314.tif 000025
【０１７６】
〔媒介剤（Ｖｅｈｉｃｌｅ）〕
ＩＶ研究に対して、カナマイシンとトブラマイシンを、ＰＢＳ中に濃厚溶液で準備し、シンクレア・リサーチ・センターに冷凍移送し、そこで投与前に、ＰＢＳに希釈し、殺菌されたフィルターを通した。経口研究では、カナマイシンとトブラマイシンを他の賦形剤（ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ）と混ぜ合わせ、カプセルに移した。
【０１７７】
［方法］
〔投与量およびルート〕
カナマイシンのＩＶ投与は、投与量が０．１ｍｇ／ｍＬで、３匹のビーグル犬へボーラス投与した。トブラマイシンのＩＶ投与は、投与量が０．１ｍｇ／ｍＬで、３匹のビーグル犬へボーラス投与した。配合組成物と投与の詳細を、表２４にまとめる。
【０１７８】
【表２４】
0006375314.tif 000026
【０１７９】
カプセルの経口投与は、それぞれ犬の口の奥にカプセルを押し込んだ。カナマイシンは、キャップスーゲル（Ｃａｐｓｕｇｅｌ）からのディーアールキャップス（ＤＲＣＡＰＳＴＭ）、ヴィキャップ・プラス（ＶＣＡＰ  ＰＬＵＳＴＭ）のいずれかのカプセルで投与した。ディーアールキャップスは、耐酸性で、コーティングを必要としていない。ヴィキャップ・プラスは、植物ＨＰＭＣカプセルである。カナマイシンカプセルの配合組成物及び投与の詳細を表２５にまとめる。
【０１８０】
【表２５】
0006375314.tif 000027
【０１８１】
トブラマイシンは、腸溶性コーティングを施したヴィキャップ・プラスカプセルでデリバリーした。その配合組成物及び投与の詳細を、表２６にまとめる。
【０１８２】
【表２６】
0006375314.tif 000028
【０１８３】
〔研究デザイン及び血漿サンプルの採取〕
経口及びＩＶ研究には、体重凡そ９〜１５ｋｇの成長したビーグル犬を用いた。犬は、それぞれの研究前の一夜絶食させたが、水は自由に得られるようにした。研究当日に、投与前血液サンプル３ｍＬをそれぞれの動物から採取した。続いて、それぞれのグループの動物に、所定配合で混合されたカナマイシンあるいはトブラマイシンを特定配合して１つのカプセルに入れた。
【０１８４】
薬剤投与の後、投与後２４０分（４時間）迄の異なるタイムポイントで、血液サンプル３ｍＬを腕静脈から採取した。血液サンプルを、新しいヘパリン処理されたモノベットサンプリングシリンジに入れた。サンプルは、氷の上に置いてから、２８℃、２７５０ｒｐｍで凡そ１０分間遠心分離した。チューブのそれぞれに、犬のＩＤ＃およびタイムポイントを記録したラベルを貼り、移動を待つ間、−２０℃に貯蔵した。
【０１８５】
〔カナマイシンとトブラマイシンの分析方法〕
血漿中のカナマイシンとトブラマイシン濃度は、ＵＣバイオデバイス（ＵＣ  Ｂｉｏｄｅｖｉｃｅｓ）（フリーモント、カリフォルニア）からの競合エライザ法・キット（ＥＬＩＳＡ  ｋｉｔ）を用い、“カナマイシン検知のためのエライザ法（ＥＬＩＳＡ）”に従って測定した。血液中カナマイシン濃度は、キット・カナマイシン標準を標準曲線に使用して決定した。
血液中トブラマイシン濃度は、シグマ−アルドリッチ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）製のトブラマイシンを希釈し、標準曲線で決定した。カナマイシンの標準曲線は、０．２ｎｇ／ｍＬから３．０ｎｇ／ｍＬ、トブラマイシンのための標準曲線は、０．１ｎｇ／ｍＬから５．０ｎｇ／ｍＬの範囲とした。血漿サンプルは、キット分析バッファーで適切に希釈した。
【０１８６】
カナマイシンとトブラマイシンのエライザ法計算；
血漿中カナマイシンとトブラマイシン濃度は、ソフトマックス・プロ・ソフトウェア・バージョン５．０．１（ＳＯＦＴＭＡＸ  Ｐｒｏ  ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｖｅｒｓｉｏｎ  ５．０．１）（モレキュラ・デバイセス（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ））に取付けの５−パラメーターカーブを用いて計算した。
【０１８７】
〔薬物動態データの取り扱い〕
動物それぞれのカナマイシンとトブラマイシンの濃度−時間データは，マイクロソフト・エクセルのＰＫ機能を使用して、非区画方法によって分析した。
最大血漿中濃度（Ｃｍａｘ）の値およびその時間（Ｔｍａｘ）は、血漿中の濃度対時間プロファイルから直接に得た。血漿中の濃度−時間曲線（ＡＵＣｉａｓｔ）より下の領域は、血漿中の濃度の時間ゼロから最後に観察された時間迄の線形台形規則（ｌｉｎｅａｒ  ｔｒａｐｅｚｏｉｄａｌ  ｒｕｌｅ）によって推定した。
【０１８８】
［結果］
各サンプリング時間での血漿中のカナマイシンおよびトブラマイシンの濃度、及び対応するＰＫパラメーターを、表２７から表３８に示す。ＩＶ投与後のカナマイシンとトブラマイシンの平均濃度−時間プロファイルを、それぞれ図２８および図２９に示す。
【０１８９】
〔ＩＶ投与後の血漿中のカナマイシンとトブラマイシン〕
ＩＶ投与（ＳＣ４３４）後の血漿中カナマイシのンＣｍａｘは５０ｎｇ／ｍＬであり、平均時間（Ｔｍａｘ）５分で観測された（表２７）。ＩＶ投与（ＳＣ４３４）後のカナマイシのンの平均濃度プロファイルを図２８に示す。
【０１９０】
【表２７】
0006375314.tif 000029
【０１９１】
〔ＩＶ投与後の血漿中トブラマイシン〕
ＩＶ投与（ＳＣ４３５）後の血漿中トブラマイシンのＣｍａｘは３１ｎｇ／ｍＬであり、平均時間（Ｔｍａｘ）５分で観測された（表２８）。ＩＶ投与後のトブラマイシンの平均濃度プロファイルを、図２９に示す。
【０１９２】
【表２８】
0006375314.tif 000030
【０１９３】
〔経口投与後の血漿中のカナマイシン〕
配合なしでプロソルブ（ＰＲＯＳＯＬＶ）のみを含む（配合ＪＳＶ−００３−０３８）コーティングされていないヴィキャップ・プラスカプセル（ＳＣ４３２）で経口投与されたカナマイシンの結果を、表２９に示す。犬はすべて、平均生物学的利用能が２．８％の低いレベルを示した。個々の犬のプロファイルを図３０に示す。
【０１９４】
【表２９】
0006375314.tif 000031
【０１９５】
ＣＡおよびＬＬＣをコーティングされてないカプセルに加えると、平均生物学的利用能が１２．４％（ＳＣ４３２）と極めて高くなった。個々の犬の結果を、表３０に示す。個々の犬のプロファイルを、図３１に示す。
【０１９６】
【表３０】
0006375314.tif 000032
【０１９７】
ＬＬＣを１００ｍｇ含んだ腸溶性コーティングを施したヴィキャップ・プラスカプセルを、ＣＡ濃度を変えて調製し、カナマイシンの生物学的利用能に及ぼすＣＡ濃度の影響をテストした。
配合ＪＳＶ−００３−００５（ＳＣ４２６）は、ＣＡを５００ｍｇ含んでおり、平均生物学的利用能が１４．２となった。個々の犬の血漿結果を表３１に、個々の犬吸収プロファイルを図３２に示す。
【０１９８】
【表３１】
0006375314.tif 000033
【０１９９】
ＣＡを２５０ｍｇ含む配合ＪＳＶ−００３−０５２（ＳＣ４３８）は、平均生物学的利用能が１．４％になった。個々の犬の血漿結果を表３２に、また、個々の犬の吸収プロファイルを、図３３に示す。
【０２００】
【表３２】
0006375314.tif 000034
【０２０１】
ＣＡを１００ｍｇ含む配合ＪＳＶ−００３−０５３（ＳＣ４３８）は、平均生物学的利用能が１２．４％になった。個々の犬の血漿結果を表３３に、また、個々の吸収プロファイルを、図３４に示す。
【０２０２】
【表３３】
0006375314.tif 000035
【０２０３】
ＣＡを５０ｍｇ含む配合ＪＳＶ−００３−０５４（ＳＣ４３８）は、投与された３匹の犬のうちの１匹だけの犬が、平均の生物学的利用能２．６％のカナマイシンを検知できる血液濃度を示した。個々の犬の血漿結果を表３４に、また個々の血漿吸収プロファイルを、図３５に示す。
【０２０４】
【表３４】
0006375314.tif 000036
【０２０５】
腸溶性コーティングを施したヴィキャップ・プラスの代わりにディーアールキャップスを用いて、カナマイシンの生物学的利用能を評価した。ディーアールキャップスを用いたＳＣ４２６とＳＣ４３３それぞれの２つの研究を行った。
第１の研究は、ＣＡを５００ｍｇおよびＬＬＣを１００ｍｇ含むディーアールキャップス（配合、ＪＳＶ−００３−０１０）で、その平均生物学的利用能は９．２％であった。個々の血漿中カナマイシン濃度を表３５に、個々の血漿吸収プロファイルを図３６に示す。
【０２０６】
【表３５】
0006375314.tif 000037
【０２０７】
第２の研究は、ＣＡを２５０ｍｇとＬＬＣを１００ｍｇ含んでいるディーアールキャップス（配合ＪＳＶ−００３−０４１）で、平均生物学的利用能は１０．６％であった。また、個々の血漿中のカナマイシン濃度を表３６に、個々の血漿吸収プロファイルを図３７に示す。
【０２０８】
【表３６】
0006375314.tif 000038
【０２０９】
〔経口投与後の血漿中トブラマイシン〕
プロソルブのみを含み、配合されていないヴィキャップ・プラスカプセル（配合ＪＳＶ−００３−０５０）でのトブラマイシン経口投与の結果を、表３７に示す。平均生物学的利用能は０．２％で、８匹の犬のうちの３匹だけの犬が、血液中トブラマイシンの検出可能レベルであった。個々の血漿プロファイルを図３８に示す。
【０２１０】
【表３７】
0006375314.tif 000039
【０２１１】
ＣＡとＬＬＣを追加することで、８匹の犬の平均生物学的利用能は１５％まで増加した。配合ＪＳＶ−００３−０５１を与えた全ての犬は、血液中のトブラマイシンの検出レベルを示した。ＰＫ結果を表３８に、個々の血漿プロファイルを図３９に示す。
【０２１２】
【表３８】
0006375314.tif 000040
【０２１３】
〔カナマイシンの経口投与吸収プロファイル〕
ディーアールキャップス中のカナマイシン（ＪＳＶ−００３−０１０）及びヴィキャップ・プラス中のカナマイシン（ＪＳＶ−００３−００５）が投与された犬の平均吸収プロファイルの比較を図４０に示す。
両方のカプセルは、同じキー賦形剤（ｋｅｙ  ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ）（ＣＡを５００ｍｇとＬＬＣを１００ｍｇ）を含んでいて、違いは、カプセルが異なっているだけであった。それぞれのカプセルでのデータは、平均Ｔｍａｘで調節した。誤差バーは、平均の標準誤差（ＳＥＭ）を表わしている。
【０２１４】
配合されていない（ＣＡを０ｍｇ、ＬＬＣを０ｍｇ）ヴィキャップ・プラス（ＪＳＶ−００３−０３８）、及び配合された（ＣＡを５００ｍｇ、ＬＬＣを１００ｍｇ）ヴィキャップ・プラス（ＪＳＶ−００３−０３９）でカナマイシンを投与された犬の平均吸収プロファイルの比較を、図４１に示す。
両方のカプセルはコーティングしていなかった。それぞれのカプセルのデータは、平均Ｔｍａｘで調節した。誤差バーをＳＥＭで表わしている。
【０２１５】
ＬＬＣを１００ｍｇとＣＡを種々の濃度（ＣＡを５００ｍｇ，ＪＳＶ−００３−００５；ＣＡを２５０ｍｇ，ＪＳＶ−００３−０５２；ＣＡを１００ｍｇ，ＪＳＶ−００３−０５３；ＣＡを５０ｍｇ，ＪＳＶ−００３−０５４）にしてヴィキャップ・プラスでカナマイシンが投与された犬の平均吸収プロファイルの比較を、図４２に示す。それぞれのカプセルのデータは、平均Ｔｍａｘで調節した。誤差バーは、ＳＥＭを表わしている。
【０２１６】
〔トブラマイシンの経口吸収プロファイル〕
配合なしのヴィキャップ・プラスカプセル（０ｍｇのＣＡおよび０ｍｇのＬＬＣ、ＪＳＶ−００３−０５０）と、配合されたヴィキャップ・プラスカプセル（ＣＡが５００ｍｇとＬＬＣが１００ｍｇ、ＪＳＶ−００３−０５１）でトブラマイシンが投与された犬の平均吸収プロファイルの比較を、図４３に示す。それぞれのカプセルのデータは、平均Ｔｍａｘで調節した。誤差バーは、ＳＥＭを表わしている。
【０２１７】
［考察］
本開示の医薬組成物を使用することで、カナマイシンの生物学的利用能を１４％及びトブラマイシンの生物学的利用能を１５％とすることができた。キーとなる賦形剤は、ＣＡとＬＬＣである。実施例３において、医薬組成物中に少なくともＣＡを１００ｍｇの濃度で用いている。
本発明の例では、医薬組成物においてヴィキャップ・プラスカプセルが、ディーアールキャップスカプセルより好ましい。実施例３に概説した研究は、ＢＣＳクラスＩＩＩアミノグリコサイド系抗生物質の例となる。カナマイシンとトブラマイシンの例は、制限することを意図しておらず、本開示の医薬組成物がＢＣＳクラスＩＩＩ分子の経口による生物学的利用能を改善することができるという例として使用している。
【０２１８】
実現可能性研究（ｆｅａｓｉｂｉｌｉｔｙ  ｓｔｕｄｙ）は、ＢＣＳクラスＩＩＩのアミノグリコサイド系バクテリア抗菌化合物であるカナマイシンおよびトブラマイシンについて、経口生物学的利用能と薬物動態（ＰＫ）の評価を行った。この研究デザインは、ビーグル犬への静脈内（ＩＶ）投与フェーズと経口投与フェーズからなっている。
【０２１９】
クエン酸（ＣＡ）を５００ｍｇとラウロイル−Ｌ−カルニチン（ＬＬＣ）を１００ｍｇ含む腸溶性コーティングヴィキャップ・プラスカプセルで、カナマイシン（配合ＪＳＶ−００３−００５）を４匹の犬に経口投与し、血液サンプルを４時間迄採取して、経時的に血漿中カナマイシン濃度を測定した。犬は、平均Ｃｍａｘが４２８ｎｇ／ｍＬ、平均絶対生物学的利用能が１４％であった。
同じ賦形剤を含む腸溶性コーティングヴィキャップ・プラスカプセルで、トブラマイシン（配合ＪＳＶ−００３−０５１）を８匹の犬に経口投与し、血液サンプルを４時間迄採取して、経時的に血漿中トブラマイシン濃度を測定した。犬は、平均Ｃｍａｘが３１４ｎｇ／ｍＬ、平均絶対生物学的利用能が１５％であった。
【０２２０】
【表３９】
0006375314.tif 000041
【０２２１】
カナマイシンを、ＣＡの量を変えて配合して、コーティングした及びコーティングしていないカプセルでの薬物動態研究を、犬で研究した。
ＣＡとＬＬＣなしで配合したコーティングしてないカプセルからのカナマイシンの経口生物学的利用能は２．８％であり、ＣＡを５００ｍｇとＬＬＣを１００ｍｇと共に配合したコーティングしてないカプセルからのカナマイシンの生物学的利用能は１２．４％であった。同じ配合で腸溶性コーティングしたカプセルで経口デリバリーしたカナマイシンの生物学的利用能は、大きな変化がなかった。更に、ＣＡ濃度を１００ｍｇに減らすと、生物学的利用能には本質的な違いはなかった。ＣＡの量を５０ｍｇまで減らすと、カナマイシンの生物学的利用能は２．６％に減った。
【０２２２】
【表４０】
0006375314.tif 000042
【０２２３】
カナマイシンを１００ｍｇ、ＬＬＣを１００ｍｇ、及びＣＡを２通りの濃度にしてディーアールキャップスを用いて研究した。これらの犬は、高い生物学的利用能レベルを示さなかった。これらの２つの研究の結果を以下に示す。
【０２２４】
【表４１】
0006375314.tif 000043
【０２２５】
配合されていない（ＣＡを０ｍｇとＬＬＣを０ｍｇ）及び配合された（ＣＡ５００ｍｇとＬＬＣを１００ｍｇ）ヴィキャップ・プラスカプセルでのトブラマイシンを比較した研究を、以下にまとめる。トブラマイシンの経口生物学的利用能は１５％であり、分子量と構造が似ていることから予想した通りに、カナマイシンの場合と近似していた。
【０２２６】
【表４２】
0006375314.tif 000044
【０２２７】
〔実施例４：犬でのチゲサイクリン〕
［材料］
〔動物と試験物品〕
研究には、体重凡そ９〜１５ｋｇの成長したビーグル犬を用いた。動物は、シンクレア・リサーチ・センター、コロンビアで、一匹づつ、あるいはペアーにして大きすぎる位の小屋に飼育した。１次動物囲いは、ＵＳＤＡ動物福祉法（９ＣＦＲ、パート１、２および３）に特定され、実験動物の飼育と使用上のガイド（ナショナル・アカデミー・プレス、ワシントンＤ．Ｃ．、１９９６年）の記載に基いた。１２時間の明／１２時間の暗の光周期を維持した。室温は、２０±５℃に維持するように設定した。相対湿度は、モニターしたが、コントロールはしなかった。動物室および囲い内の掃除は、設備（シンクレア）ＳＯＰによって行われた。
【０２２８】
犬用餌として認定されたテクラッドを、動物の大きさと年齢に適切な量（〜４００グラム）で、毎日一回与えた。水道水は、自動給水装置あるいは水ボウルから自由に得られるようにした。動物は、薬の投与前一夜、および全血液採取期間にわたって絶食させた。試験物品情報を表４３に挙げた。
【０２２９】
【表４３】
0006375314.tif 000045
【０２３０】
［方法］
〔投与量および投与ルート〕
投与量は、正味チゲサイクリン濃度で表わす。チゲサイクリンの静脈内投与量を１．０ｍｇ／ｍＬとしてボーラス注射（ｂｏｌｕｓ  ｉｎｊｅｃｔｉｏｎｓ）投与した。
腸溶性コーティングを施したカプセルの経口投与は、犬の口の奥に押し込み、水を５ｍＬで呑み込ませた。１次実現可能性研究に用いた投与と配合組成物の詳細を表４４にまとめる。
【０２３１】
【表４４】
0006375314.tif 000046
【０２３２】
〔研究デザインとサンプル採取〕
ＩＶ研究には、成長した体重９〜１５ｋｇの雌ビーグル犬を用いた。犬は、研究の始める前一夜絶食させ、水は自由に得られるようにした。研究の当日、投与前にそれぞれ動物から血液サンプルを３ｍＬ採取した。続いて、動物それぞれのグループに、プロトコールに基づいて、ＩＶ投与あるいはカプセルによりＰＯ投与した。
【０２３３】
薬剤投与の後に、研究の継続時間により、投与後１１４０分（２４時間）迄の種々のタイムポイントで腕静脈から血液サンプル３ｍＬを採取した。血液サンプルは新しくヘパリン処理されたモノベットサンプリングシリンジ（ｍｏｎｏｖｅｔｔｅ  ｓａｍｐｌｉｎｇ  ｓｙｒｉｎｇｅｓ）に採取した。サンプルは、氷上に置いてから、２８℃、凡そ２７５０ｒｐｍで１０分間遠心分離した。チューブそれぞれには、犬のＩＤ＃とタイムポイントを表示し、移動迄の間−２０℃に貯蔵した。
【０２３４】
〔チゲサイクリンの分析的方法〕
犬の血漿中チゲサイクリン定量は、３５０ｎｍでＵＶ検知するＨＰＬＣ分析を用いて行った。ミノサイクリン（ＶＷＲ  ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ）を内部標準として使用した。血漿サンプルのサンプル処理／清掃を、０．５％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）で酸性にしたアセトニトリルを用いる蛋白質析出により、オフラインで行った。
【０２３５】
ＨＰＬＣシステムは、デュアル島津ＬＣ−ｌＯＡＤｖｐイソポンプ、島津ＣＴＯ−ｌＯＡＳｖｐカラム温度コントローラー、および島津ＳＰＤ−１０Ａｖｐ可変波長検出器を装備した島津ＳＩＬ−ＨＴｃ・ＨＰＬＣシステムからなっている。クロマトグラフィー分離は、リー（Ｌｉ）らに基いているが、かなりの相違がある。（Ｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，２００４，Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｉｇｅｃｙｃｌｉｎｅ，ａ  ｎｏｖｅｌ  ｇｌｙｃｙｌｃｙｃｌｉｎｅ，ｂｙ  ｌｉｑｕｉｄ  ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ．Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ  Ｂ．８１１：２２５−２２９参照）。
ＨＰＬＣ分離は、逆相カラム（フェノメネックス・ルナＣＩ８（２）、５μｍ、１５０×４．６ｍｍ、部品番号：００Ｆ−４２５２−Ｅ０（２））で、最初に無勾配相、次いでチゲサイクリンの勾配溶出を行った。
移動相Ａは、１−オクタンスルホン酸４ｍＭを加えたリン酸塩バッファー（ｐＨ：２．５）２３ｍＭであり、移動相Ｂは、アセトニトリルが９０％と水１０％に１−オクタンスルホン酸を２ｍＭ加えている。
タイムプログラムは、２５％移動相Ｂで無勾配相を６分間、次いで８分かけて移動相Ｂを３５％まで上げ（１４分）、さらに追加の４分間２５％移動相Ｂで平衡にし、１つのサンプルについて合計ランタイムを１８分とした。移動相の流量は、１．２ｍＬ／分であった。検出は、ＳＰＤ−１０Ａｖｐ可変波長検出器を３５０ｎｍに固定し、感度０．００１ａｕｆｓで行った。
【０２３６】
未知サンプルと校正基準（プールしたラット血漿中チゲサイクリン）を、内部標準でスパイクした酸性化（０．５％ＴＦＡ  ｖ／ｖ）アセトニトリルで蛋白質析出により処理した。次いで、サンプルを、冷却下、１３ｋ  ｒｐｍで５分間遠心分離した。上澄み液を取り、液体をターボバップ中窒素雰囲気下で乾燥除去した。乾燥抽出物を、移動相Ａの６０μＬに再構成し、その懸濁液を５ｋ  ｒｐｍで５分間遠心分離して不溶解物のペレットにした。生じた上澄み液を、ＬＣに注入した。
【０２３７】
犬の血漿サンプル中の濃度は、分析物のピーク面積比、内部標準対名目上の濃度比率をプールした犬の血漿中にスパイクした校正基準からの回帰直線に内挿して決めた。回帰重量は、計算に使用しなかた。この方法は、０．０５μｇ／ｍＬ（ＬＯＱと定義する）まで線形であることが示された。校正曲線は、０．０５μｇ／ｍＬから５．０μｇ／ｍＬの範囲をカバーした。
【０２３８】
しかしながら、この方法を古いＨＰＬＣシステム（島津ＳＣＴ−ｌＯＡｖｐシステムコントローラーとＳＩＬ−１０Ａ自動注射器を装備した）に用いる時、タイムプログラムは、さらに変更し、システムデザイン変更のために勾配を３８％移動相Ｂ迄にしたことに注意しなければならない。他のパラメーターは全て変更せずに残した。
【０２３９】
【表４５】
0006375314.tif 000047
【０２４０】
〔薬物動態データの取り扱い〕
個々の犬のチゲサイクリンＰＫパラメーターは、マイクロソフト・エクセルのＰＫ機能を用いた非区画分析で計算した。最大血漿中濃度（Ｃｍａｘ）の値、その発生時間（Ｔｍａｘ）の値は、血漿中の濃度対時間プロファイルから直接得た。血漿中濃度−時間曲線（ＡＵＣｉａｓｔ）より下の領域は、血漿中の濃度の時間ゼロから最後に観察された時間迄の線形台形ルール、すなわち、曲線下の全領域部分を加算して推定した。
血漿中の濃度時間カーブ（ＡＵＣｌａｓｔ）の下の領域は、時間０から最後に観察された血漿の時間までカーブの下の領域をすべて加算することにより、線形台形のルールで評価した。
【０２４１】
［結果］
〔ＩＶ投与後の血漿中チゲサイクリン（ＳＣ４２７、ＳＣ４３１）〕
血漿中チゲサイクリンの目標投与量が０．０８ｍｇ／ｋｇでは、平均時間（Ｔｍａｘ）５分（０．０８ｈｒｓ）で平均Ｃｍａｘが７９．１ｎｇ／ｍＬが観察された。チゲサイクリンは、ヒトでの単回投与半減期が凡そ２０時間であるとの報告に基づいて、４時間測定できる。平均ＡＵＣ（０−ｔ）は、７２．４ｎｇ＊ｈｒ／ｍＬであった。
【０２４２】
目標投与量を０．４２ｍｇ／ｋｇに上げると、平均Ｃｍａｘが３３５ナノグラム／ｍＬに大きくなり、これはＴｍａｘが５分で観察された。両方の研究では、チゲサイクリンの明瞭な二相性ディスポジション（ｂｉｐｈａｓｉｃ  ｄｉｓｐｏｓｉｔｉｏｎ）であり、初期には非常に速く、凡そ３０分で平衡状態になる。平均のＡＵＣ（０−ｔ）は４１１ｎｇ＊ｈｒ／ｍＬであった。
【０２４３】
【表４６】
0006375314.tif 000048
【０２４４】
【表４７】
0006375314.tif 000049
【０２４５】
【表４８】
0006375314.tif 000050
【０２４６】
〔ＰＯ投与後の血漿中チゲサイクリン〕
チゲサイクリンを、コーティングしたＣＡ（シトロコート（Ｃｉｔｒｏｃｏａｔ）ＤＣ  Ｆ２０、ユングズラウエル）が５００ｍｇ、ＬＬＣが１００ｍｇ、及びフィラーとしてケイ酸化した微結晶セルロース（プロソルブ）で配合して腸溶性コーティングを施したカプセル、あるいは配合さずにフィラーだけのカプセルを経口投与させた。カプセルは、標準の臨床前プロトコールを使用して、１０％の重量増となる迄腸溶性コーティングした。
２つの研究を行なった。研究ＳＣ４２４は、チゲサイクリンを、配合され、あるいは配合されずに、目標を１５ｍｇにして８匹の犬それぞれに投与した。研究ＳＣ４３０は、チゲサイクリンを、処理され（ｎ＝５）、あるいは配合されてない（ｎ＝３）で３０ｍｇ投与した系、及びさらに追加で、配合されて（ｎ＝５）４５ｍｇを投与した系であり、投与量の段階的拡大を研究した。
【０２４７】
薬物動態のデータは、研究ＳＣ４２４またはＳＣ４３０から、配合されていない系の１５ｍｇあるいは３０ｍｇには発現がなかったが、２つの研究それぞれで配合された系の全てでかなり発現されていた。チゲサイクリンが１５ｍｇで配合されての投与は、平均Ｃｍａｘが７５．５ｎｇ／ｍＬ、平均ＡＵＣ（ｏ−ｔ）が１３３ｎｇ＊ｈｒ／ｍＬ、平均絶対％Ｆが１２．２％を示した。個々の犬の薬物動態は、％Ｆが凡そ２〜３０の範囲となった。
チゲサイクリンが高投与量では、２４時間にわたっての血漿サンプリングから、ＣｍａｘとＡＵＣ（ｏ−ｔ）の両方が、投与量と共に増えることが示された。チゲサイクリンが４５ｍｇの投与は、平均Ｃｍａｘが１７７ｎｇ／ｍＬ、平均ＡＵＣ（０−ｔ）が５７４ｎｇ＊ｈｒ／ｍＬ、および平均絶対％Ｆが１５．５％となった。平均Ｔｍａｘは、研究した全ての配合で再現性があった。
【０２４８】
【表４９】
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【０２４９】
【表５０】
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【０２５０】
【表５１】
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【０２５１】
【表５２】
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【０２５２】
【表５３】
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【０２５３】
【表５４】
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【０２５４】
［考察］
これらの研究は、ビーグル犬に、ＢＣＳクラスＩＩＩ抗生物質であるチゲサイクリンを、ＣＡとＬＬＣと組合わせて経口したときの生物学的利用能を改善する可能性を示した。これらの配合は、腸溶性コーティングしたカプセルでデリバリーされ、潜在的な将来の臨床開発をサポートする価値ある概念を臨床前の証拠を提供するものであった。ラットにＩＤ投与モデルを使用した実施例１は、賦形剤の吸収促進には、ＣＡとＬＬＣの組合せが相乗効果を示した。実施例１で概説した研究は、さらにチゲサイクリンの経口％Ｆを可能にするに配合ｐＨの重要性を示した。
一方、メカニズムの見地から価値がある実施例１は、チゲサイクリンを直接に吸収表面にデリバリーするのに、液体賦形剤を用い、特に、生物学的利用能を可能にする主要なファクターである固体投与形態の固体から液体への転移（崩壊と分解）の潜在的な問題点を除き、配合を可能にする固有の変化をコントロールすることを目指した。
【０２５５】
チゲサイクリンの静脈内投与は、期待された二相性で、１次血漿中濃度カーブとなった。ＢＣＳクラスＩＩＩ化合物を投与したときの低発現を克服する１つの方法は、局部的に有効吸収濃度（つまり投与量）を上げて、ＩＶ  ＰＫプロファイルを、２つの濃度で決定することである。全体的な発現は、投与量に直接依存しているが（図４４および図４５）、投与量調節したＰＫカーブは、事実上同じであった（図４６）。
【０２５６】
ラット研究（実施例１）は、ＣＡ濃度を高くすると、チゲサイクリンの発現をより高くすることができることを示した。それらの研究では、ＣＡを４００ｍＭ、ｐＨ：３．５を、ＬＬＣを２６ｍＭにして組み合わせると、生物学的利用能が凡そ２１％になった。ＣＡは、潜在的に、チゲサイクリンを析出させる四環化合物と胆汁酸塩との相互作用を分裂させる作用があると仮定した。この目的のために、これらの配合は、コーティングしたＣＡ５００ｍｇを目標にして調製した。ＣＡは、典型的に、臨床的に及び臨床前の両方で研究した濃度範囲の上限にある。
さらに、これらの研究では、ラット研究が直ちに低い正味の発現を示唆したというデータから、低いＣＡ濃度の影響を調査しなかった。しかしながら、これらの研究は、絶対発現（ａｂｓｏｌｕｔｅ  ｅｘｐｏｓｕｒｅ）に対して投与量の段階的拡大の影響を調査した。
【０２５７】
ＣＡを５００ｍｇとＬＬＣを１００ｍｇでチゲサイクリンを１５ｍｇ（目標１．２５ｍｇ／ｋｇ）の経口投与は、平均Ｃｍａｘが７５．５ｎｇ／ｍＬ、平均ＡＵＣ（０−ｔ）が１３３ｎｇ＊ｈｒ／ｍＬ、および平均絶対％Ｆが１２．２％になった。
チゲサイクリンを４５ｍｇとした投与は、平均Ｃｍａｘが１７７ｎｇ／ｍＬ、平均ＡＵＣ（ｏ−ｔ）が５７４ｎｇ＊ｈｒ／ｍＬ、および平均絶対生物学的利用能が１５．５％になった。平均Ｔｍａｘは、凡そ１００分で、研究した全ての配合で再現性があった。
興味あることに、この発現は、ＣｍａｘとＡＵＣの両方に関して線形であり、ＣｍａｘとＡＵＣ（Ｏ−４ＨＲ）の両方に関して比例する投与量以下であった（表５５）。この観察は、投与量が３０ｍｇで（１５ｍｇの投与量に基いて）予想されたパーセント差が、投与量が４５ｍｇのものより低かったので、吸収ウィンドウ（デザインによる）が限られたことの機能にあると考えられる。
別の仮説は、胆汁酸塩またはトランスポーターの相互作用のような他の要因が、吸収の流れを抑える役割をしているということである。つまり、チゲサイクリンは、投与量が増すと過剰となって、ＣＡがトランスポーター効果を抑える、あるいは胆汁酸塩複合体の析出を抑えるに充分存在しない、ということである。しかしながら、分子自体の生体薬剤の性状が、広範囲な組織内分布により観察できる飽和効果になっている、とするのがもっともらしい。
【０２５８】
チゲサイクリンは、確かに高い組織内分配を示す。代謝の不足と結び付けて、低投与量での比例関係は、吸収不充分と、投与量に関して非線形クリアランスの両方を示唆している。要するに、観察された投与量関係は、飽和結果であり、つまり、最もありそうなのは、クリアランスが、投与量の増加に対して、チゲサイクリンの高組織内分布と釣り合った組織デポジションにより減少していくことであり、高投与量での吸収がだめになることがあり得る。観測される差異は、投与量調節した平均血漿プロファイルから得られないということからこの仮説が支持される（図５４）。
この仮説をテストする比較的単純な方法は、ＩＶ注射に続いて、チゲサイクリンの単回経口投与を行って、投与量の比例関係を研究することである。そのような研究は、経口投与されたチゲサイクリンの潜在的な製品プロファイルとなるとみられるから、さらなる潜在的な臨床調査に役立つであろう。
【０２５９】
【表５５】
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【０２６０】
これらの研究は、臨床前モデルの犬にＢＣＳクラスＩＩＩの小さな分子であるチゲサイクリンの経口デリバリー技術を使用する実現可能性を示している。チゲサイクリン発現は、微結晶セルロースフィラーに配合されたチゲサイクリン１５ｍｇあるいは３０ｍｇのカプセルで投与された犬に観察された。
チゲサイクリンを１５ｍｇ含み、ＣＡを５００ｍｇとＬＬＣを１００ｍｇで配合された腸溶性コーティングカプセルの投与は、平均絶対％Ｆが１２．２％になった。投与量を直線的に上げると、ＣｍａｘとＡＵＣ（ｏ−ｔ）の両方が増加した。しかし、発現は、投与量に比例していなかった。クエン酸を５００ｍｇとＬＬＣを１００ｍｇで配合されたチゲサイクリン４５ｍｇの平均生物学的利用能は、平均絶対％Ｆが１５．５％になった。
【０２６１】
これらの研究の目的は、ビーグル犬にチゲサイクリンを経口投与しての経口生物学的利用能（％＞Ｆ）および薬物動態（ＰＫ）プロファイルを調べることであった。２つの研究は、配合されてチゲサイクリンを含む腸溶性コーティングカプセル、あるいは配合されてないでチゲサイクリンを含む腸溶性コーティングカプセルで、静脈内（ＩＶ）フェーズと経口フェーズそれぞれで行なった。これらの研究は、投与量とサンプリング時間において異なっていた。
【０２６２】
研究１（ＳＣ４２４とＳＣ４２７）では、チゲサイクリンをビーグル犬（ｎ＝３）にＩＶボーラス投与で１ｍｇ、及び腸溶性コーティングを施したカプセル系で１５ｍｇを投与した。カプセルフェーズは、クエン酸（ＣＡ）と３，０−ラウロイル−Ｌ−カルニチン（ＬＬＣ）での配合、あるいは配合されない（それぞれに犬ｎ＝８）の２つの配合で行った。種々の血液サンプルを、投与から４時間まで採取して、時間に対しての血漿中のチゲサイクリン濃度を決定した。
【０２６３】
研究２（ＳＣ４３０とＳＣ４３１）は、研究１からのフィードバックに基づいて、高投与量のＩＶ系（動物当たり５ｍｇ、ｎ＝３）と、３０ｍｇおよび４５ｍｇで配合（それぞれｎ＝５）した腸溶性コーティングカプセル、３０ｍｇで配合（ｎ＝３）した腸溶性コーティングカプセルでデザインした。
研究は、単回経口投与のＰＫプロファイルを特徴づけるための２４時間の静脈サンプリングがあった。両方の研究で、配合された系は、ＣＡを５００ｍｇとＬＬＣを１００ｍｇ含み、配合されてない系は、微結晶セルロースフィラーに分散された薬剤を含んだものである。これらのパラメーターは、研究１と研究２で変更していない。
【０２６４】
薬物動態のデータは、ＩＶ投与のチゲサイクリンが二相クリアランス（ｂｉｐｈａｓｉｃ  ｃｌｅａｒａｎｃｅ）を示し、研究１と研究２との間で投与量の増加（１ｍｇ対５ｍｇ）で、ＣｍａｘとＡＵＣ（ｏ−ｔ）の両方でほぼ比例的に増加していることを示している。
平均Ｃｍａｘは、それぞれ７９ｎｇ／ｍＬと３３５ｎｇ／ｍＬ、平均ＡＵＣ（ｏ−ｔ）は、それぞれ７２．４ｎｇ＊ｈｒ／ｍＬと４１１ｎｇ＊ｈｒ／ｍＬであった。
【０２６５】
【表５６】
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【０２６６】
微結晶セルロース（配合されない）と一緒に配合され、腸溶性コーティングカプセルに充填されたたチゲサイクリン１５ｍｇ（研究１）あるいは３０ｍｇ（研究２）を経口投与すると、観測できるような血漿での発現にはならなかったが、ＣＡを５００ｍｇとＬＬＣを１００ｍｇで配合されたチゲサイクリンは、両方の研究で全ての投与量でかなりの発現をみた。活性賦形剤と共に１５ｍｇで配合されたチゲサイクリンが８匹の犬に経口投与して、投与後４時間にわたり血漿をサンプリングした、この結果は、平均Ｃｍａｘが７５．５ｎｇ／ｍＬ、平均ＡＵＣ（０−ｔ）が１３３ｎｇ＊ｈｒ／ｍＬ、および平均絶対％Ｆが１２．２％を示した。
高投与量でのチゲサイクリン投与と、２４時間にわたる血漿サンプリングで、投与量と共にＣｍａｘとＡＵＣ（０−ｔ）の両方に増加があるが、発現は、潜在的にデザインによる限界のある吸収ウィンドウにより、投与量の比例より少なかった。
チゲサイクリンを４５ｍｇで投与すると、平均Ｃｍａｘが１７７ｎｇ／ｍＬ、平均ＡＵＣ（ｏ−ｔ）が５７４ｎｇ＊ｈｒ／ｍＬ、そして平均絶対％Ｆが１５．５％となった。このとき、平均Ｔｍａｘは、研究した投与量の全てで再現性があった。
【０２６７】
【表５７】
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【０２６８】
〔実施例５：フェノフィブラートの溶解性〕
［方法］
ＢＣＳクラスＩＩ化合物であるフェノフィブラートは、水に不溶性である。エタノールには１ｍｇ／ｍＬ、ＤＭＦには３０ｍｇ／ｍＬ、ＤＭＳＯには１５ｍｇ／ｍＬ、そして１：３ＤＭＦ：ＰＢＳでｐＨ：７．２には２５０ｍｃｇ／ｍＬの溶解性がある。
【０２６９】
フェノフィブラートの水中溶解性を、ＬＬＣ濃度を０．０％未満ｗ／ｖから１０．０％ｗ／ｖに上げながら評価した。過剰のフェノフィブラートを、個々のＰＰヴァイアルに入れて重量測定した。フェノフィブラートを含む溶液を、２５℃、１２５ｒｐｍで４日間撹拌した。溶解したフェノフィブラートは、ＨＰＬＣによって、純アセトニトリル中で調製した標準曲線に対してモニターした。
【０２７０】
［結果及び考察］
図５７に示したデータは、ＬＬＣ濃度が高くなるに従い、フェノフィブラートの水中溶解性が上がることを示している。フェノフィブラートの溶解性が上がることは、他のクラスＩＩ分子の水中の溶解性を高めることに対するＬＬＣの有用性を示している。ＬＬＣは、溶解性向上剤として本開示の組成物において利用できる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８】
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【図２９】
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【図３０】
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【図３１】
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【図３２】
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【図３３】
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【図３４】
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【図３５】
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【図３６】
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【図３７】
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【図３８】
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【図３９】
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【図４０】
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【図４１】
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【図４２】
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【図４３】
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【図４４】
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【図４５】
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【図４６】
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【図４７】
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【図４８】
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【図４９】
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【図５０】
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【図５１】
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【図５２】
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【図５３】
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【図５４】
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【図５５】
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【図５６】
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【図５７】
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