(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
0006375231.tif 000033
で示される化合物またはその製薬的に許容し得る塩
［式中、
Ｙは、式：Ｙ’−ＮＨ−または（Ｙ’）２−Ｎ−
（ここでＹ’は、同一または異なり、
直鎖または分岐鎖のＣ４−Ｃ２０アルキル基であるか、または
式：
【化１】
0006375231.tif 000034
で示される１以上の基が介在しており、１以上のオキシカルボニル−（Ｃ１−Ｃ３０）アルキルで置換されているＣ４−Ｃ10アルキル基
である）
で示される基であり；
Ｌは、Ｙに連結する末端側にカルボニル官能基を有する、以下：
Ｎ，ＳまたはＯから選択される１以上のヘテロ原子が介在していてもよい、３〜１０個の炭素原子を有する脂肪族の炭素環、
直鎖または分岐鎖のC1-C6アルキル基、
C2-C6アルケニルまたはアルキニル基
から選択される２価のリンカーであり；
ＲＩ−ＲＩＶはそれぞれ、以下：
Ｈ、
−ＣＯＯＲ1および
−（C1-C6）アルキルカルボキシ基
（ここでＲ1は水素または直鎖もしくは分岐鎖のＣ1−Ｃ10アルキル基である）。
から選択される]。
【請求項２】
Ｙが式：Ｙ’−ＮＨ−を有し、Ｙ’が、１またはそれ以上の次式：【化２】
0006375231.tif 000035が介在しており、１以上のオキシカルボニル−（Ｃ１−Ｃ３０）アルキルで置換されている５個の炭素原子を有する直鎖状のアルキル基である、式（Ｉ）で示される請求項１記載の化合物。
【請求項３】
Ｙが以下：
【化３】
0006375231.tif 000036
［式中、＃は、請求項１で定義したリンカーＬとの結合点を示す］
から選択される、式（Ｉ）で示される請求項１または２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｙが式（Ｙ’）２−Ｎ−で示される基であり、ここでＹ’が同一の直鎖または分岐鎖のＣ４−Ｃ２０アルキル基である、式（Ｉ）で示される請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
Ｙ’が、直鎖のＣ４Ｈ９、Ｃ６Ｈ１３、Ｃ８Ｈ１７、Ｃ１０Ｈ２１またはＣ１２Ｈ２５から選択される、式（Ｉ）で示される請求項４に記載の化合物。
【請求項６】
Ｙが以下：
【化４】
0006375231.tif 000037
［式中、＃は、請求項１で定義したリンカーＬとの結合点を示す］
から選択される、式（Ｉ）で示される請求項４または５に記載の化合物。
【請求項７】
以下からなる群から選択される、式（Ｉ）で示される請求項１〜６のいずれかに記載の化合物：
【化５】
0006375231.tif 000038
【化６】
0006375231.tif 000039
［式中、ＲＩ−ＲＩＶは請求項１で定義したとおりである］。
【請求項８】
以下から選択される、式（Ｉ）で示される請求項１〜７のいずれかに記載の化合物。
【化７】
0006375231.tif 000040
【化８】
0006375231.tif 000041
【請求項９】
常磁性金属イオンと、式（Ｉ）で示される請求項１〜８のいずれかに記載の化合物との錯体。
【請求項１０】
前記金属イオンがＧｄ３＋またはＤｙ３＋である、請求項９に記載の錯体。
【請求項１１】
以下から選択される、請求項９または１０に記載の錯体。
【化９】
0006375231.tif 000042
【化１０】
0006375231.tif 000043
【請求項１２】
ＭＲＩ造影剤として用いるための、請求項９〜１１のいずれかに記載の錯体。
【請求項１３】
１以上の製薬的に許容し得る担体、希釈剤または賦形剤と組み合わせて、請求項９〜１１のいずれかに記載の錯体またはその製薬的に許容し得る塩を含有する、製薬的に許容し得る組成物。
【請求項１４】
診断用組成物の製造のための、請求項９〜１１のいずれかに記載の錯体の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、常磁性金属イオンキレート化ユニットとしてジアゼピン誘導体を有する両親媒性化合物の新規なクラス、およびＭＲＩ造影剤としてのその使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
金属イオンが常磁性金属イオンであることで、造影剤、特にＭＲＩ（磁気共鳴イメージング）造影剤、として使用するための、金属イオンとの錯体の形態の様々なキレート化剤が当分野において知られている（例えば、EP0292689を参照）。このような錯体は緩和度を示す特定の数値(Ｒ1)で特徴づけられる。緩和度は、近接の水プロトンの核磁気緩和速度を増加させる能力を予測するための有用な常磁性錯体の固有の特性である。事実、緩和度が高いほど、化合物の造影特性が高いことが観察されている。特に、画質と患者のクリアランスの両方の点において利点を有しつつ、短時間で生理学的情報を取得するため、高い緩和度の値が得られると便利である（一般的な文献として、“The Chemistry of Contrast Agents in Medical Magnetic Resonance Imaging” Merbach et al, Eds. John Wiley and sons, Chichester, 2011 and Caravan P. et al, Chem. Rev. 1999, 99, 2293-2352を参照）。
【０００３】
ＷＯ００／３０６８８は、テトラアザ環またはトリアザ直鎖状骨格を有することを特徴とする、MRI造影剤として、特に血液プール造影に有用な、両親媒性ポリアミノ-ポリキレート剤及びその常磁性金属錯体のクラスを開示している。
【０００４】
ＷＯ０３／００８３９０は、多様な官能基を有し、Fe2+、GD3+又はMn2+イオンなどの常磁性金属イオンと錯体を形成することが可能な、直鎖または環状の一連の多座のアザリガンドについて言及している。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
ＭＲＩ剤として使用するための常磁性金属イオンの錯体形成において、従来技術のキレート誘導体が可能性を秘めているにもかかわらず、常磁性錯体を形成することができ、また、活性および安定性が良好な持続を示す、新しいクラスのキレート剤が依然として求められている。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
予想外にも、我々は磁気共鳴イメージング（MRI）技術において使用するための高い緩和度と、さらに高い安定性をも示す、対応する常磁性錯体の調製に有用な、新しいクラスのジアゼピン誘導体をここに見出した。
【０００７】
本発明は、式(I)で示される新しいクラスの誘導体またはその製薬的に許容し得る塩に関する：
【化１】
0006375231.tif 000002
［式中、
Ｙは、式：Ｙ’−ＮＨ−または（Ｙ’）２−Ｎ−
（ここでＹ’は、同一または異なり、以下：
直鎖または分岐鎖の飽和または不飽和Ｃ１−Ｃ２０アルキル基；
−Ｐ−および−Ｏ−（ＨＯ−Ｐ＝Ｏ）−Ｏ−から選択される１以上の原子または基が介在しており、場合により以下：
ヒドロキシ  −ＯＨ、
カルボキシ  −ＣＯＯＲ1、
オキシカルボニル−（Ｃ１−Ｃ３０）アルキルおよび
オキシカルボニル−（Ｃ２−Ｃ３０）アルケニル基
（ここで、Ｒ1は以下から選択される：水素Ｈおよび直鎖または分岐鎖のＣ1−Ｃ10アルキル基）
から選択される１以上の基で置換されていてもよいＣ1−Ｃ10アルキル基
からなる群から選択される）
で示される基であり；
Ｌは、以下：
Ｃ３−Ｃ１０の脂肪族の環またはヘテロ環、
直鎖または分岐鎖のC1-C6アルキル基、
C2-C6アルケニルまたはアルキニル基
から選択される２価のリンカーであって、以下：
カルボニル  −Ｃ＝Ｏ、チオカルボニル  −Ｃ＝Ｓ、アミノ  −ＮＲ1−、カルボキシ  −ＣＯＯ−、オキシ−カルボニル  −ＯＣＯ−、アミド  −ＮＲ1ＣＯ−または−ＣＯＮＲ1−、酸素  −Ｏ−および硫黄  −Ｓ−（ここでＲ1は前記と同意義である）
から選択される基または原子で置換されていてもそれらの基または原子が介在していてもよく；
ＲＩ−ＩＶはそれぞれ、以下：
水素Ｈ、
カルボキシ  −ＣＯＯＲ1および
−（C1-C6）アルキルカルボキシ基
（ここでＲ1は前記と同意義である）。
から選択される]。
【０００８】
更なる態様では、本発明は、式（Ｉ）：
【化２】
0006375231.tif 000003
で示される化合物またはその製薬的に許容し得る塩の製造方法であって、以下のステップ:
ａ）式：
【化３】
0006375231.tif 000004
[式中、RI-IVは上で定義したとおりであり、Ｌは末端にカルボキシル基を含んでなるリンカーである]
で示される化合物の調製；
ｂ）該リンカーの該末端のカルボキシル基の活性化；
ｃ）ステップｂ）の生成物と本明細書において定義するＹ基との間のアミド化反応；
ｄ）保護基を開裂させて式（Ｉ）で示される誘導体を得ること；および場合により、
ｅ）常磁性金属イオンでキレート化して式（Ｉ）で示される誘導体を常磁性錯体の形態で得ること、
を含んでなる方法を提供する。
【０００９】
更なる態様によれば、本発明は、MRI解析のための造影剤として有用な、常磁性金属イオンとの錯体の形態での式（Ｉ）で示される誘導体に関する。
【００１０】
本発明の更なる態様は、常磁性金属イオンとの錯体の形態の、式（Ｉ）で示されるキレート誘導体またはその製薬的塩と、１以上の製薬的に許容し得る担体または賦形剤を組み合わせて含有してなる、製薬的に許容し得る組成物である。
【００１１】
この組成物は、腫瘍中の毛細血管の血液循環を画像化するための、特にMRI造影剤として、例えば血液プール造影剤として、または血管造影用の造影剤として有用である。
【００１２】
本発明の組成物は、診断的に有効量の本発明の組成物を画像化の対象に投与することを含んでなる、体内の部位を画像化する方法に用いられる。
【００１３】
したがって、別の態様では、本発明は、イメージングシステム、好ましくはMRIシステム、を操作する方法であって、以下のステップ：
ａ）本発明の組成物で前処置し該イメージングシステムに配置した対象に対して、該組成物の活性基質と相互作用するよう選択した周波数の照射を行うこと；
ｂ）該相互作用からのシグナルを記録すること
を含んでなる方法に関する。
【００１４】
別の実施形態では、本発明は、有効用量の本発明の組成物をヒト又は動物の身体へ投与し、身体を診断装置で検査し、検査データをまとめることを含んでなる、診断方法に関する。好ましい実施形態において、診断方法は、MRI法である。
【００１５】
用語の定義
特に断らない限り、用語、直鎖または分岐鎖のＣ１−Ｃ６アルキル基は、１〜６個の炭素原子を含んでなる直鎖または分岐鎖を意味し、例えば：メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシルなどが挙げられる。
【００１６】
同様に、用語、直鎖または分岐鎖のＣ１−Ｃ１０およびＣ１−Ｃ２０アルキル基は、１〜１０または１〜２０個の炭素原子を含んでなる直鎖または分岐鎖を意味し、用語、Ｃ１−Ｃ３０アルキル基は、１〜３０個の炭素原子を含んでなる直鎖または分岐鎖を意味する。
【００１７】
用語、場合により置換されていてもよいＣ３−Ｃ１０の脂肪族の環またはヘテロ環基は、３〜１０個の炭素原子を有する、場合によりＮ，ＳまたはＯ等のヘテロ原子が介在していてもよい炭素環を意味する。そのような脂肪族の環状基は単独(即ち、他の環に組み込まれていない）でも、１以上の環と縮合して多環状部分を構成してもよい。特に記載しない限り、フリーの充足していない原子価を有するヘテロ原子は、原子価を満たすために水素原子を有すると仮定されることに留意されたい。Ｃ３−Ｃ１０の脂肪族の環状基の非限定的な例としては：  シクロプロパン、シクロブタン、シクロペンタン、シクロヘキサンなどが挙げられる。Ｃ３−Ｃ１０の脂肪族のヘテロ複素環基の非限定的な例としては：ピロリジン、ピペリジン、ジオキサンなどが挙げられる。
【００１８】
用語、 場合により置換されていてもよいＣ６−Ｃ１０の芳香族の環またはヘテロ環基は、６〜１０個の炭素原子を有し、場合により、Ｎ、ＯまたはＳ等の１以上のヘテロ原子が介在していてもよい芳香族の炭素環を意味する。このような芳香族の環状基は、単独（即ち、他の環に組み込まれていない）でも、１以上の環と縮合して多環状部分を構成してもよい。Ｃ６−Ｃ１０の芳香族の環状基の非限定的な例としては：ベンゼン、トルエン、キシレン、ナフタレン等が挙げられる。。Ｃ６−Ｃ１０のの芳香族のヘテロ環基の非限定的な例としては、ピリジン、ピペラジン、チオフェン、イミダゾール、ピラゾール、ピロール、フラン、インドールなどが挙げられる。
【００１９】
用語、オキシカルボニル−（Ｃ１−Ｃ３０）アルキルは、式−Ｏ（ＣＯ）−（Ｃ１−Ｃ３０）アルキル（（Ｃ１−Ｃ３０）アルキルは前記と同意義である）を意味する。
【００２０】
用語-（C1-C6）のアルキルカルボキシ基は、二価の（C1-C6）アルキル基が、式-COOR1で示されるカルボキシル基（R1が上で定義されたとおりである）に結合している基を意味する。
【００２１】
本明細書において用いられる用語“製薬的に許容し得る”は、担体、希釈剤 賦形剤および／または塩が製剤の他の成分と適合することを意味する。
【００２２】
用語“錯体”または“常磁性錯体”の意味には、それぞれ、キレート部分またはリガンドと、金属または常磁性金属イオンとの付加体が含まれる。キレート部分は、中心金属イオンに結合した少なくとも1つのドナー原子を含む。
【００２３】
特に明記しない限り、くさび又は破線としてではなく、実線で示された化学結合を有する式は、それぞれの可能な異性体（例えば、各エナンチオマー及びジアステレオマー、ならびにラセミ混合物などの異性体の混合物）を企図している。本明細書中に1つ以上の不斉中心を含み、したがって、潜在的にジアステレオマーおよび光学異性体を生じることが記載されている化合物。
【００２４】
特に記載がない限り、本発明は、全てのこのような可能なジアステレオマー、ならびにそれらのラセミ混合物、それらの実質的に純粋な分割されたエナンチオマー、すべての可能な幾何異性体、およびその医薬的に許容される塩を含む。
【発明を実施するための形態】
【００２５】
第１の態様では、本発明は、式（Ｉ）で示される新しいクラスの誘導体またはその製薬的に許容し得る塩に関する：
【化４】
0006375231.tif 000005
［式中、Ｙは、式：Ｙ’−ＮＨ−または（Ｙ’）２−Ｎ−で示される基である（ここでＹ’は、好ましくは、同一の直鎖または分岐鎖のＣ１−Ｃ２０アルキル基；−Ｐ−または−Ｏ−（ＨＯ−Ｐ＝Ｏ）−Ｏ−が介在しており、場合により、ヒドロキシ  −ＯＨ、カルボキシ  −ＣＯＯＲ1、オキシカルボニル−（Ｃ１−Ｃ３０）アルキルまたはオキシカルボニル−（Ｃ２−Ｃ３０）アルケニル基で置換されていてもよいＣ1−Ｃ10アルキル基である）]。
【００２６】
式（Ｉ）によれば、本発明の誘導体は、以下に記載するように、好ましくはＹ基の窒素原子と選択されたリンカーＬの少なくとも一方の末端に存在する末端のカルボニル（−Ｃ＝Ｏ）またはチオカルボニル（−Ｃ＝Ｓ）官能基により形成したアミド官能基を介して、リンカー部分Ｌに連結した２個までの残基Ｙ’を含んでなる。
【００２７】
好ましい態様では、Ｙ基は次式：（Ｙ’）２−Ｎ−
［式中、
好ましいＹ’基は同一であり、以下：Ｃ１−Ｃ２０アルキル鎖、好ましくはＣ２−Ｃ１５アルキル鎖、さらにより好ましくは：Ｃ４Ｈ９、Ｃ６Ｈ１３、Ｃ８Ｈ１７、Ｃ１０Ｈ２１およびＣ１２Ｈ２５からなる群から選択される］
を有する。
【００２８】
したがって、好ましい Ｙ基は、式:
【化５】
0006375231.tif 000006
[式中、 #は、リンカーＬとの結合点（Ｌは下記に定義するとおり）を示す]
を有する。
【００２９】
同等に好ましいのは、Ｙが式：Ｙ’−ＮＨ−を有し、Ｙ’が、１またはそれ以上の式：
【化６】
0006375231.tif 000007
で示される基が介在している、場合により置換されていてもよいＣ１−Ｃ１０アルキル基、より好ましくはＣ２−Ｃ６アルキル基である、本発明の式（Ｉ）で示される誘導体である。
【００３０】
さらにより好ましくは、Ｙは式：Ｙ’−ＮＨ−を有し、Ｙ’が、１またはそれ以上の次式：
【化７】
0006375231.tif 000008
が介在している、４〜６個の炭素原子を有する直鎖状のアルキル基である。
【００３１】
また、好ましくは、Ｙは式：Ｙ’−ＮＨ−（ここでＹ’は、１またはそれ以上の次式：
【化８】
0006375231.tif 000009
が介在しており、さらに、少なくとも少なくとも１つ、好ましくは２または３の、９〜２０個、さらにより好ましくは８〜１８個の炭素原子を有するカルボキシアルキル基で置換された、Ｃ２−Ｃ６アルキル基である）
を有するリン脂質である。また、Ｙはまた、置換されたまたは部分的に置換されたグリセロールのモノホスフェートエステルであって、前記グリセロールの少なくとも一つの官能基が飽和もしくは不飽和の脂肪族脂肪酸によってエステル化されており、リン酸の他の二つの官能基が、フリーかまたはアルカリ金属またはアルカリ土類金属との塩の形態である、モノホスフェートエステルであってよい。
【００３２】
より好ましい態様では、Ｙは以下から選択される：
【化９】
0006375231.tif 000010
[式中、#はリンカーＬ（Ｌは本明細書で定義するとおり）との結合点を示す]。
【００３３】
さらなる実施形態によれば、本発明の式（Ｉ）で示される誘導体の新しいクラスにおいて、リンカーLは、ジアゼピン部分をY基に連結して、適切に選択し得る適切な距離をもたらす二価の基である。
【００３４】
好ましい実施形態では、リンカーＬは、本発明の式（Ｉ）で示される誘導体のＹ残基の末端の窒素原子との結合点として、好ましくは一方の末端側にチオカルボニル基（−Ｃ＝Ｓ）またはより好ましくはカルボニル基（−Ｃ＝Ｏ）を有する、場合により置換された、直鎖または分枝鎖Ｃ1−Ｃ6アルキル又はＣ2−Ｃ6アルケニルもしくはアルキニル基、またはＣ3−Ｃ8環状基である。
【００３５】
さらに好ましい態様では、リンカーＬは、Ｙ基に連結する末端側にカルボニル官能基を有する、以下から選択されるカルボニル−アルキル誘導体である：場合により置換されていてもよいＣ1−Ｃ6直線アルキル基誘導体およびシクロアルキルＣ６−Ｃ８残基。好ましいリンカーＬの例としては：メチルカルボニル、エチルカルボニル、プロピルカルボニル、ブチルカルボニル、ペンチルカルボニルおよび直鎖または環状のヘキシルカルボニルが挙げられる。さらにより好ましくは、リンカーＬは、以下から選択される：
次式のブチルカルボニル：
【化１０】
0006375231.tif 000011
および次式のシクロヘキシルカルボニル:
【化１１】
0006375231.tif 000012
［式中、＃は、本発明の式（Ｉ）で示される誘導体のジアゼピンコアとの結合点を示す］。
【００３６】
上に示したように、リンカーＬは、Ｙ基の一方の端と、ジアゼピンコアのもう一方の端と結合している。上に示したように、式Ｙ’−ＮＨ−または（Ｙ’）2Ｎ−で示されるＹ基は、末端の窒素原子を示し、好ましくは、リンカーＬは、アミド官能基の一部として、二級−ＮＨ−窒素原子を介して、同等に好ましくは、三級−Ｎ−窒素原子を介して、Ｙに結合している。
【００３７】
この点において、好ましいＬ−Ｙ−系は以下から選択される：
【化１２】
0006375231.tif 000013
［式中、
Ｙ’は、上記好ましい態様のいずれかに記載したとおりであり、＃は本発明の式（Ｉ）で示される誘導体のジアゼピンコアとの結合点を示す］。
【００３８】
さらにより好ましい態様では、本発明は、式（Ｉ）で示される新しいクラスの誘導体およびその製薬的に許容し得る塩に関し、以下からなる群から選択される：
【化１３】
0006375231.tif 000014
【化１４】
0006375231.tif 000015
［式中、ＲＩ−ＩＶは本明細書で定義するとおりである］。
【００３９】
本発明の式（Ｉ）で示され、上記好ましい態様のいずれかに記載した誘導体のクラスにおいて、基ＲＩ、ＲＩＩ、ＲＩＩＩおよびＲＩＶは好ましくは、例えば式：
−Ｒ２−ＣＯＯＲ1      または    −Ｒ２−ＣＯＯ−  Ｍ＋
［式中、Ｒ２は結合またはＣ1−Ｃ6アルキル残基であり、Ｒ1は前記と同意義、好ましくは水素であり、Ｍ＋は対イオン、例えば金属イオンである］
で示される、カルボン酸誘導体またはその塩である。
【００４０】
さらなる態様では、Ｒ２基は、メチレン、エチレン、プロピレンおよびブチレンから選択される２価の基であり、メチレンがより好ましい。さらに好ましい態様では、基ＲＩ−ＩＶは、同一の、上で定義した式−ＣＨ2−ＣＯＯＨのカルボキシメチル基または−Ｒ２−ＣＯＯ−Ｍ＋であり、本発明の好ましい式（Ｉ）で示される化合物は、以下の一般式（Ｉ’）：
【化１５】
0006375231.tif 000016
［式中、ＹおよびＬは前記と同意義である］
を有する化合物またはその塩であり、また、好ましい態様のいずれかに記載したものである。本発明の好ましい 式（Ｉ）で示される化合物は、以下：
【化１６】
0006375231.tif 000017
【化１７】
0006375231.tif 000018
またはその製薬的に許容し得る塩から選択される。
【００４１】
上記のすべての式は、光学的に純粋な形態、ならびにそのラセミ混合物の成分としての化合物を指す。
【００４２】
別の態様において、本発明は、常磁性金属イオン（好ましくは以下：Ｇｄ（ＩＩＩ）、Ｍｎ（ＩＩ）、Ｃｒ（ＩＩＩ）、Ｃｕ（ＩＩ）、Ｆｅ（ＩＩＩ）、Ｐｒ（ＩＩＩ）、Ｎｄ（ＩＩＩ）、Ｓｍ（ＩＩＩ）、Ｔｂ（ＩＩＩ）、Ｙｂ（ＩＩＩ）、Ｄｙ（ＩＩＩ）、Ｈｏ（ＩＩＩ）およびＥｒ（ＩＩＩ）から選択され、Ｇｄ（ＩＩＩ）およびＤｙ（ＩＩＩ）が特に好ましい）との錯体の形態の、本明細書に広く記載した、式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬的塩に関する。注目すべきは、このような両親媒性の常磁性錯体は、常磁性金属錯体の調製に関する分野において用いられている他の公知の手順、例えば、式（Ｉ）で示される前駆体誘導体と選択した金属（使用される金属イオンの供給源に依存して、例えば酸化物、塩化物または酢酸塩の形態で）との反応、と同様の手順によって、適切な溶媒、典型的には水（一般的な参考文献としてＷＯ００／３０６８８を参照）あるいは有機溶媒／水混合物中で調製することができる。
【００４３】
さらに、式（Ｉ）で示される化合物は、上記で説明した両親媒性錯体の形態の場合でも、有機酸または無機酸の、生理学的に許容される塩基との塩または生理学的に許容されるイオンの形態が一般的である。この点において、好ましい塩基は以下から選択される：第一級アミン、第二級アミン、第三級アミン、塩基性アミノ酸およびそれらのナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウムの無機水酸化物またはこれらの混合物。有機酸の好ましいアニオンは、以下のとおり：酢酸塩、コハク酸塩、クエン酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、シュウ酸塩であるが、無機酸の好ましいアニオンは、以下から選択される：
ハロゲン化水素、硫酸塩、リン酸塩、ホスホン酸塩など。適切な塩は、また、以下：リジン、アルギニン、オルニチン、アスパラギン酸またはグルタミン酸などから選択される、アミノ酸のカチオンまたはアニオンと形成し得る。
【００４４】
本発明の、両親媒性の常磁性錯体又はその塩の形態の、好ましい 式（Ｉ）で示される化合物は以下から選択される：
【化１８】
0006375231.tif 000019
【化１９】
0006375231.tif 000020
【００４５】
本発明の常磁性錯体又はその製薬的に許容し得る塩は、MRI造影剤として使用するのに適している。したがって、適切な医薬製剤における診断剤としてのそれらの使用は、本発明の範囲内に含まれる。
【００４６】
本発明の常磁性金属錯体は、特に市販の既知の造影剤と比較して、診断実験に用いた場合に、有利に、顕著に高い緩和度を示す。実験の部において表1に示すように、MRIにおける造影剤として使用されるいくつかの他のよく知られた化合物（例えばテトラアザシクロドデカン四酢酸ガドリニウム（GD-DOTA）など）と比較した場合、本発明の化合物の緩和度は予想外に高い。注目すべきは、本発明の両親媒性錯体は、水溶液およびヒト血漿に溶解し、従来のガドリニウム錯体よりも細胞により容易に取り込まれ、親水性が高い。
【００４７】
したがって、さらなる態様において、本発明は、MRI造影剤の製造のための、常磁性金属錯体又はその製薬的に許容し得る塩の形態の式（I）で示される両親媒性化合物の使用に関する。さらに、そのような常磁性錯体又はその製薬的に許容し得る塩は、特に、腫瘍内の毛細血液の循環のイメージングのための、血液プール造影剤として、血管造影用の造影剤として、並びに一般的に炎症を起こした組織のイメージング用として、有用なMRI造影剤または製剤の製造において都合良く用いることができる。
【００４８】
さらなる態様によれば、本発明は、1つ以上の生理学的に許容される賦形剤、希釈剤または溶媒と混合した、常磁性金属錯体の形態の、式（I）で示される誘導体またはその製薬的に許容し得る塩を含んでなる、製薬的に許容し得る組成物に関する。実際、親油性および水性の希釈剤および/または溶媒はいずれも、それらの両親媒性の性質のために、本発明の化合物にも同等に適している。医薬組成物は、任意の好都合な経路による投与（例えば、経口、非経口、局所（眼および鼻を含む）投与）に適するように調製することができる。組成物は、また、吸入（inhalation）または通気（insufflation）（口または鼻のいずれかを通して）による投与用に製剤化することができる。但し、このような組成物は、好ましくは、特にMRイメージング技術のためのイメージング技術における造影剤として使用するのに適した、注射可能な組成物であり、非経口使用のために、生理学的に許容されるpHで水性溶液または分散液中で都合良く製剤化することができる。
【００４９】
さらなる実施形態によれば、本発明の化合物は、例えば両親媒性界面活性化合物および/またはステルス化合物（PEG等）から選択される生理学的に許容される添加剤とともに、ミセルまたはリポソームなどの高分子凝集体の調製に特に適している。
【００５０】
この実施形態によれば、製剤は、１またはそれ以上の界面活性剤及び/又は両親媒性化合物と混合して、常磁性錯体又はその塩の形態の、1以上の式(I)で示される誘導体を含有し得る。
【００５１】
ミセルは、通常は、式（Ｉ）の基Ｙの親油特性に依存して、公知の技術（例えばＷＯ９７／０００８７に記載されているように）により得ることができる。典型的には、このようなミセルは、（そのままかまたは緩衝化した）水または生理食塩水などの任意の生理学的に許容される水性液体担体中で調製することができ、例えば、選択した成分によっては、穏やかに攪拌することにより、または均質化（homogenisation）、ミクロ流動化または音波処理等により分散物を得ることができる。
【００５２】
本発明の超分子集合体は、回収して、さらには、公知の方法、例えば凍結乾燥等により処理した後、乾燥形態の固形物として保存することができる。乾燥形態（多孔質の塊または自由に流動する粉末）は、長期保存には特に便利である。製剤はその後、生理的に許容される液体担体中に凍結乾燥物を分散させることによって使用前に再構成し、最初の製剤に対応した懸濁物を得、MRI造影剤として直接使用することができる。
【００５３】
この態様のさらなる態様では、本発明は、上述の凍結乾燥された成分、およびそれとは別に、液体担体を含むパーツのキットに関する。特に、凍結乾燥された成分は、乾燥した、不活性雰囲気下で保存することができ、一方、液体担体は、さらに、等張添加剤およびアミノ酸等のような他の生理学的に許容される成分を含有することができる。
【００５４】
さらなる態様によれば、本発明は、式（I）で示される化合物の製造方法であって、最初に、選択されたリンカーＬとジアゼピン部分との付加体を形成し、次いで、該リンカーの末端側のカルボキシル基を活性化し、次いで、選択したＹ基でアミド化することを含んでなる、製造方法を包含する。
【００５５】
保護基が存在する場合は、標準的な技術によって最終的に脱離し、誘導体は、好ましく、適宜、選択された常磁性金属で錯体を形成する。
【００５６】
リンカーＬ及び本発明の方法の出発物質としてジアゼピン部分との付加体は、選択されたリンカー部分の前駆体である適切なニトロ誘導体と、本誘導体のジアゼピンコアの前駆体であるＮ,Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミンとの反応、次いで、ニトロ基の還元および官能化、典型的には塩基性条件下での水素化及びそれに続くN-アルキル化、によって得られる。本実験の部で明らかにサポートされ示されるように、リンカーとジアゼピン部分との該付加物は、選択されたY部分を変化させることにより、式（Ｉ）で示される一連の誘導体の製造のためのビルディングブロックとして有利に調製し使用することができる。
【００５７】
したがって、本発明の一態様は、式（I）：
【化２０】
0006375231.tif 000021
で示される化合物またはその製薬的に許容し得る塩の製造方法であって、以下のステップ:
ａ）式：
【化２１】
0006375231.tif 000022
[式中、RI-IVは上で定義したとおりであり、Ｌは末端にカルボキシル基を含んでなるリンカーである]
で示される化合物の調製；
ｂ）該リンカーの該末端のカルボキシル基の活性化；
ｃ）ステップｂ）の生成物と上で定義したＹ基との間のアミド化反応；
ｄ）保護基を開裂させて式（Ｉ）で示される誘導体を得ること；および場合により、
ｅ）常磁性金属イオンでキレート化して式（Ｉ）で示される誘導体を常磁性錯体の形態で得ること、
を含んでなる方法である。
【００５８】
記載した例によれば、本発明の製造方法は、一般に、以下のスキーム１に示すように、誘導体１２ａの調製方法（化合物５は出発付加体である）によって示すことができる。
【化２２】
0006375231.tif 000023
【００５９】
具体的には、リンカーとジアゼピン部分との付加体５は、Ｎ,Ｎ’−ジベンジエチレンジアミン ジアセテートと６−ニトロヘキサン酸メチルエステル１のアルコール性溶液とをパラホルムアルデヒドの存在下で反応後、２のニトロ基の還元および脱ベンジル化、３のアミン窒素原子の官能化、および４の末端のカルボキシル基の選択的開裂によって調製される（下記スキーム２参照）。
【化２３】
0006375231.tif 000024
【００６０】
５として一般的に表されるジアゼピン付加体は、本方法の工程bに従って末端カルボキシル官能基の活性化に供される。この方向では、ステップb）は、例えば、カルボキシル官能基の活性化について有機化学の分野で一般的に知られている手順に従って実施することができ、典型的には、適当な有機溶媒（例えばCHCl3, CH2Cl2 等から選択される非極性有機溶剤など）中、カルボジイミド（例えばジシクロヘキシルカルボジイミド（DCC）または1-エチル-（3-ジメチルアミノプロピル）-カルボジイミド（EDC））の存在下、少なくとも１：１または好ましくは、出発原材料に対してわずかに過剰量（例えば１：１．５までのモル比）のモル比にて、カルボキシル活性化剤（例えばＮ−ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）など）と反応させることによって実行することができる。好ましくは、ステップｂ）は、出発原材料に対して１：１〜１：１．１のモル比にてＮ−ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）およびＥＤＣの存在下、およびＣＨ２Ｃｌ２の存在下実行される。このようにして得られた誘導体は、次いで、ステップc）に従って、通常、ジイソプロピルエチルアミン（DIPEA）の存在下、このように活性化されたリンカーＬのカルボキシル末端基と選択されたY残基（例えばジブチルアミン）の窒素原子との間のアミド化反応に付される。好ましくは、アミド化反応は、ステップbの後に得られた活性化された化合物をＣＨＣｌ3中に溶解し、例えば、ジブチルアミン及びＤＩＰＥＡを、活性化された出発物質に対して１：１〜１：１．７のモル比にて、この順序で添加することによって実行される。次いで、この溶液を選択された温度にて適当な時間（典型的には室温（例えば、１５〜３０℃）にて、一般的に２０〜２４時間）攪拌する。このように形成されたアミド生成物は、都合良く後処理することができる（例えば、水で洗浄することにより、および一般的に減圧下でまたは蒸留操作により分離した有機相を蒸発させることにより）。精製後（例えばクロマトグラフィー）、式（I）の生成物が、保護された形態（例えば、好ましくはtert-ブチルエステル誘導体として）として、高い収率（約80％）と高純度（約95％〜99％HPLC）で得られる。
【００６１】
ステップｄにしたがって、カルボキシ保護された形態で得られた式（Ｉ）で示される誘導体を、例えばステップａで実際に用いた保護基の種類に依存して、当分野で知られている条件下で容易に脱保護することができる。例えば、可能な保護基の選択に関する一般的な参考文献として“Greene’s protective groups in organic synthesis” Wiley 14th Ed.を参照。
【００６２】
好ましい実施形態では、カルボキシル官能基は、ｔｅｒｔ−ブチルエステルとして保護され、脱保護は、典型的には、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）とＣＨ2Ｃｌ2のような非極性有機溶媒の存在下、酸性条件下で行われる。
【００６３】
脱保護後、得られた式（Ｉ）の化合物は、対応する金属錯体誘導体を得るために、金属イオンを含有する化合物と反応させることができる。このような変換は、典型的には、水や有機溶媒（例えば、ＣＨＣｌ3またはメタノールまたはその混合物）などの溶媒の存在下で行う、選択した金属の無機又は有機塩または酸化物との反応により行われる。好ましい対イオンはクロリドまたはアセテートであり、好ましい塩は：ＧｄＣｌ３、ＤｙＣｌ３、Ｇｄ（ＯＡｃ）３またはＤｙ（ＯＡｃ）３であり、好ましい酸化物は：Ｇｄ２Ｏ３またはＤｙ２Ｏ３である。
【００６４】
既に記載したように、常磁性錯体の形態の本発明の式（Ｉ）で示される誘導体は、実験の部の表Ｉおよび表ＩＩにおいて示されるように、とりわけ高い緩和度（一般的にｒ1Pとして示される）と、長く持続する活性および安定性を有する。緩和度（ｒ1P）は、ビシナルプロトンの核磁気緩和速度を増大させる能力を特徴付ける常磁性錯体の固有の特性である。高い緩和速度、即ち高い緩和度は、画像のコントラストをより高め、診断情報を短時間で得ることが可能である。一方、長く持続する活性と安定性は、造影剤の適切な時間枠での可視化によりイメージング方法中の解析領域のより良好で明確な識別が可能であると同時に、身体からの適切な排泄時間をもたらすことで試料内の造影剤の不必要な残留を回避することが可能である。
【００６５】
よって、本発明の誘導体は、ＭＲＩ技術において使用される診断用組成物の調製における使用に特に適している。したがって、別の態様によれば、本発明は、本発明の組成物の診断的有効量を、画像化される対象に投与することを含む身体領域の画像化のための方法を提供する。好ましくは、この方法は、常磁性金属イオンとの錯体の形態の式（Ｉ）の化合物を含む本発明の組成物の診断的有効量を、画像化する対象に投与することを含んでなるＭＲＩ法であって、該金属イオンが好ましくはＧｄ３＋とＤｙ３＋から選択される方法である。
【００６６】
このように、本発明は、イメージングシステムを得るための方法であって、以下のステップ：
ａ）本発明の組成物で前処置し該イメージングシステムに配置した対象に対して、該組成物の活性基質と相互作用するよう選択した周波数の照射を行うこと；
ｂ）該相互作用からのシグナルを記録すること
を含んでなる方法に関する。
【００６７】
さらにより好ましくは、本発明は、以下のステップ：
ａ）常磁性錯体の形態の式（Ｉ）の化合物を含有する本発明の組成物で前処置した対象に対して、活性基質の非ゼロ核スピン原子核の核スピン遷移を励起するように選択された周波数の照射を行うこと；および
ｂ）該励起した原子核からのＭＲシグナルを記録すること
を含んでなるＭＲＩ法に関する。
【００６８】
上記で十分に記載したように、本発明は、利用可能な（例えばＭＲＩ解析における造影剤として）、常磁性錯体の製造に有用な、ストレート且つ便利な製造方法によって入手可能な、新しいクラスの式（Ｉ）で示されるジアゼピン及びその製薬的な塩を有利に提供する。さらに、本発明の常磁性錯体の緩和度（ｒ1P）の値は、驚くほど高く、したがって、それらは、MRI造影剤として従来の錯体に代わる有効かつ便利な代替手段となる。有利には、本発明の錯体は、医薬組成物として投与することができ、高い緩和速度と安定性を示し、低用量での投与が可能である。
【００６９】
以下の実施例は、本発明の代表例に過ぎず、本発明の範囲を限定することを意図したものではない。
【実施例】
【００７０】
実験の部
実施例１：化合物９（ａ−ｃ）の調製
一般的合成スキーム３:
【化２４】
0006375231.tif 000025
【００７１】
実施例１．１  化合物５の調製
以下のスキーム２に示すとおり、ＵＳ２００６０１８８３０に記載された手順に従って、化合物５を５工程で調製した。
【化２５】
0006375231.tif 000026
【００７２】
市販で入手可能な２−ニトロシクロヘキサノンを、Amberlyst A21の存在下、ＭｅＯＨ中で還流して６−ニトロヘキサン酸メチルエステル１を得た。１を、Ｎ,Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン ジアセテートおよびパラホルムアルデヒドと反応させてジアゼピン２を得、これを最初に水素化して３とした後、ブチルｔ−ブチル ブロモアセテートでアルキル化してペンタエステル４を得た。LiOH（THF/H2O中）による４の選択的加水分解により５を得た。全体の収率：13 %.。
【００７３】
実施例１．１ａ：化合物６の調製
6-[ビス[2-[(1,1-ジメチル)エトキシ]-2-オキソエチル]アミノ]-6-[(2,5-ジオキソ-1-ピロリジニル)オキシ]-5-オキソペンタン−1-イル］-テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-二酢酸 ビス[(1,1-ジメチル)エチル]エステル
化合物５(14.6 g；0.022 ｍｏｌ）をＣＨ2Ｃｌ2(350 ｍＬ）に溶解した後、NHS(3.75 g；0.033 ｍｏｌ）を加え、混合物を氷浴で０℃に冷却した。ＥＤＣ(6.25 g；0.033 ｍｏｌ）のＣＨ2Ｃｌ2(150 ｍＬ）溶液を滴加した後、反応溶液を２４時間室温にて攪拌した。混合物をＨ2Ｏ(3 x 150ｍL）で洗浄した。有機相を乾燥(Ｎa2ＳＯ4)し、濾過し、溶媒を留去して6を黄色の油として得た(15.42 g；0.020 ｍｏｌ）。
収率：92%.
解析データ：Mr: 768.94(C38H64N4O12)
1H-および13C-NMRおよびＭＳは構造と一致している。
【００７４】
実施例１．２：化合物７（ａ−ｃ）の調製  一般的手順
化合物６(1当量）をCHCl3(濃度 1% w/v)に溶解した。適当なホスホエタノールアミン(1当量）(1,2−ジデカノイル-sn-グリセロ-3-ホスホエタノールアミン、DLPEまたはDPPE)およびジイソプロピルエチルアミン(DIPEA)(1.7当量）をこの順番で加えた。この溶液を室温にて３〜２４時間攪拌した。混合物を、H2O(1 x 50 ｍＬ）、酸性のH2O(HClでpH４〜５とした；1 x 50 ｍＬ）およびH2O(1 x 50ｍL）で順次洗浄した。有機相を乾燥(Ｎa2ＳＯ4)し、濾過し、溶媒を留去した。得られた粗製物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して化合物７(a-c)を白色の固体として得た。
【００７５】
実施例１．２ａ：化合物７ａの調製：
6-[ビス[2-[(1,1-ジメチル)エトキシ]-2-オキソエチル]アミノ]-6-[(13R)-10-ヒドロキシ−10-オキシド-5,16-ジオキソ-13-(1-オキソデシル)オキシ]-9,11,15-トリオキサ-6-アザ−10-ホスファペンタコス-1-イル］-テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-二酢酸 ビス[(1,1-ジメチル)エチル]エステル
出発物質：化合物６(797 mg；1.04 ｍｍｏｌ）；1,2−ジデカノイル-sn-グリセロ-3-ホスホエタノールアミン(543 mg；1.04 ｍｍｏｌ）
化合物７a(937 mg；0.796 ｍｍｏｌ）  収率：77%.
解析データ： 
HPLC-ELSD: ELSD 100%(area %)；UV 89.1%(area %) 
Mr: 1177.50(C59H109N4O17P)
1H-および13C-NMRおよびＭＳは構造と一致している。
【００７６】
実施例１．２ｂ：化合物７ｂの調製
6-[ビス[2-[(1,1ジメチル)エトキシ]-2-オキソエチル]アミノ]-6-[(13R)-10-ヒドロキシ−10-オキシド-5,16-ジオキソ-13-(1-オキソドデシル)オキシ]-9,11,15-トリオキサ-6-アザ−10-ホスファエプタコス-1-イル］-テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-二酢酸 ビス[(1,1-ジメチル)エチル]エステル
出発物質：化合物６(700 mg；0.91 ｍｍｏｌ）；1,2−ジラウロイル-sn-グリセロ-3-ホスホエタノールアミン DLPE(500 mg；0.86 ｍｍｏｌ）
化合物７b(927 mg；0.751 ｍｍｏｌ）  収率：87%.
解析データ： 
HPLC-ELSD: ELSD 100%(area %)；UV 80.0%(area %) 
Mr: 1233.61(C63H117N4O17P)
1H-および13C-NMRおよびＭＳは構造と一致している。
【００７７】
実施例1.2c: 化合物７cの調製
6-[ビス[2-[(1,1ジメチル)エトキシ]-2-オキソエチル]アミノ]-6-[(13R)-10-ヒドロキシ−10-オキシド-5,16-ジオキソ-13-(1-オキソエサデシル)オキシ]-9,11,15-トリオキサ-6-アザ−10-ホスファノナコス-1-イル］-テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-二酢酸 ビス[(1,1-ジメチル)エチル]エステル
出発物質：化合物６(1.92 g；2.50 ｍｍｏｌ）；1,2−ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-ホスホエタノールアミン DPPE(1.73 g；2.50 ｍｍｏｌ）.
化合物７c(2.79 g；2.07 ｍｍｏｌ）  収率：83%.
解析データ： 
HPLC-ELSD: ELSD 100%(area %)；UV 89.0%(area %) 
Mr: 1345.82(C71H133N4O17P)
1H-および13C-NMRおよびＭＳは構造と一致している。
【００７８】
実施例1.3 ブチルｔ−ブチルエステルの開裂  一般的手順
化合物７(a-c)(1当量）をＣＨ2Ｃｌ2(濃度２−4% w/v)に溶解し、この溶液を攪拌して０℃に冷却した後、ＴＦＡ(6当量）を滴加した。反応混合物を室温にて１時間攪拌した。この橙色の溶液を溶媒留去し、残留物を新たなＴＦＡ(30当量）に溶解し加えた。この溶液を室温にて８０時間攪拌し、反応をMSおよびHPLC-ELSDでモニターした。混合物を溶媒留去し、残留物をジイソプロピルエーテルで処理して白色の固体を得、これを遠心およびジイソプロピルエーテル(2 x 30ｍL）で洗浄した。この固体をH2Oに懸濁し、5% aq NaHCO3の添加によりpH６〜7で溶解し、1M HClを加えpH 2で沈殿させた。この固体を濾過し、減圧乾燥(P2O5)して、下記データのとおりリガンド８(a-c)を得た。
【００７９】
実施例1.3a: 化合物8aの調製
6-[ビス[2-[(カルボキシ)メチル]アミノ]-6-[(13R)-10-ヒドロキシ−10-オキシド-5,16-ジオキソ-13-(1-オキソデシル)オキシ]-9,11,15-トリオキサ-6-アザ−10-ホスファペンタコス-1-イル］-テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-二酢酸
出発物質：化合物７a(885 mg；0.752 ｍｍｏｌ）.
化合物８ａ(669 mg；0.702 ｍｍｏｌ）；収率：93%
解析データ：
HPLC-ELSD: ELSD 92.3%(area %) 
Mr: 953.07(C43H77N4O17P)
錯滴定力価(1.001 mM GdCl3): 95.7%
1H-および13C-NMRおよびＭＳは構造と一致している。
【００８０】
実施例1.3b: 化合物８bの調製
6-[ビス[2-[(カルボキシ)メチル]アミノ]-6-[(13R)-10-ヒドロキシ−10-オキシド-5,16-ジオキソ-13-(1-オキソドデシル)オキシ]-9,11,15-トリオキサ-6-アザ−10-ホスファエプタコス-1-イル］-テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-二酢酸
出発物質：化合物７b(875 mg；0.709 ｍｍｏｌ）.
化合物８b(750 mg；0.642 ｍｍｏｌ）；収率：91% 
解析データ：
HPLC-ELSD: ELSD 75.5%(area %) 
Mr: 1009.18(C47H85N4O17P)
1H-および13C-NMRおよびＭＳは構造と一致している。
【００８１】
実施例1.3c: 化合物８cの調製
6-[ビス[2-[(カルボキシ)メチル]アミノ]-6-[(13R)-10-ヒドロキシ−10-オキシド-5,16-ジオキソ-13-(1-オキソエサデシル)オキシ]-9,11,15-トリオキサ-6-アザ−10-ホスファノナコス-1-イル］-テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-二酢酸
出発物質：化合物７c(2.79 g；2.07 ｍｍｏｌ）
化合物８c(1.77 g；1.58 ｍｍｏｌ）；収率：76%
解析データ： 
HPLC-ELSD: ELSD 95.3%(area %) 
Mr: 1121.39(C55H101N4O17P)
錯滴定力価(1.001 mM GdCl3): 95.7%
1H-および13C-NMRおよびＭＳは構造と一致している。
【００８２】
実施例1.4：水性媒体中での錯体化  一般的手順
リガンド８(a-c)(1当量）をH2O(濃度 5%；starting pH１−2)に懸濁し、5% aq NaHCO3を添加してpH 6.5-7にて溶解させた。滴定溶液 GdCl3(1当量）を一度に加えた。この溶液を室温にて攪拌し、5% aq NaHCO3を添加してpHをモニターした。錯体化をＨＰＬＣ-ELSDおよびキシレノールオレンジアッセイによりモニターした。粗製の錯体を凍結乾燥により単離し、サイズ排除クロマトグラフィーにより塩から精製して９(a-c)を得た。
【００８３】
実施例1.4a: 化合物９ａの調製
[[6-[ビス[2-[(カルボキシ)メチル]アミノ]-6-[(13R)-10-ヒドロキシ−10-オキシド-5,16-ジオキソ-13-(1-オキソデシル)オキシ]-9,11,15-トリオキサ-6-アザ−10-ホスファペンタコス-1-イル］-テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-ジアセテート(4-)]ガドリネート（1-)]ナトリウム
出発物質：化合物８a(400 mg；0.438 ｍｍｏｌ）
化合物９a(257 mg；0.228 ｍｍｏｌ）；収率：52%
解析データ：
HPLC-ELSD: ELSD 98.9%(area %) 
Mr: 1129.28(C43H73GdN4NaO17P)
ＭＳは構造と一致している。
【００８４】
実施例1.4b:化合物９bの調製
[6-[ビス[2-[(カルボキシ)メチル]アミノ]-6-[(13R)-10-ヒドロキシ−10-オキシド-5,16-ジオキソ-13-(1-オキソドデシル)オキシ]-9,11,15-トリオキサ-6-アザ−10-ホスファエプタコス-1-イル］-テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-ジアセテート(4-)]ガドリネート（1-)]ナトリウム
出発物質：化合物８b(690 mg；0.590 ｍｍｏｌ）
化合物９b(614 mg；0.518 ｍｍｏｌ）；収率：88%
解析データ：
HPLC-ELSD: ELSD 95.6%(area %) 
Mr: 1185.39(C47H81GdN4NaO17P)
ＭＳは構造と一致している。
【００８５】
実施例1.4c: 化合物９cの調製
[6-[ビス[2-[(カルボキシ)メチル]アミノ]-6-[(13R)-10-ヒドロキシ−10-オキシド-5,16-ジオキソ-13-(1-オキソエサデシル)オキシ]-9,11,15-トリオキサ-6-アザ−10-ホスファノナコス-1-イル］-テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-ジアセテート(4-)]ガドリネート（1-)]ナトリウム
出発物質：化合物８c(500 mg；0.435 ｍｍｏｌ）
化合物９c(517 mg；0.398 ｍｍｏｌ）；収率： 92%
解析データ：
HPLC-ELSD: ELSD 99.2％(area %) [8]
Mr: 1297.60(C55H97GdN4NaO17P)
ＭＳは構造と一致している。
【００８６】
実施例1.5：有機媒体中での錯体化  化合物９bの調製
[6-[ビス[2-[(カルボキシ)メチル]アミノ]-6-[(13R)-10-ヒドロキシ−10-オキシド-5,16-ジオキソ-13-(1-オキソドデシル)オキシ]-9,11,15-トリオキサ-6-アザ−10-ホスファエプタコス-1-イル］-テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-ジアセテート(4-)]ガドリネート（1-)]ナトリウム ９b
リガンド８bを有機媒体中で別に錯体化した。リガンド８b(0.506 g；0.475 ｍｍｏｌ）をCHCl3(70 ｍＬ）に溶解し、10:1 v/v MeOH/H2O(29.1 mL；0.309 ｍｍｏｌ）中のＧｄ(ＯＡc)3 0.011 M溶液を一度に加えた。次いで、ピリジンを用いてpHを７に調整した。錯体化をＨＰＬＣ-ELSDおよびキシレノールオレンジアッセイによりモニターし、最後にこの溶液を減圧下でエバポレートした。残留物を1:1 v/v MeOH/トルエン(3 x 30 ｍＬ）およびCHCl3(3 x 30 ｍＬ）に順次溶解し、各々溶解後にエバポレートした後、油状の残留物をH2Oに懸濁して凍結乾燥した。白色の固体ををＨ2Ｏに懸濁し、pHを７に調整し凍結乾燥した；後半の処理を２回繰り返して化合物９bを白色の固体として得た(0.750 g)。定量的収率。
解析データ： HPLC-ELSD: ELSD 82.6%(area %) 
Mr: 1185.39(C47H81GdN4NaO17P).
ＭＳは構造と一致している。
【００８７】
実施例2: 化合物 12(a-e)の調製
スキーム４に従って化合物 12(a-e)を調製する。
【化２６】
0006375231.tif 000027
【００８８】
実施例2.1: 化合物 10(a-e)の調製  一般的手順
実施例1.1aに従い調製した化合物６(1当量）をCHCl3(濃度１−3% w/v)に溶解した後、適当なアルキルジアルキルアミン(1当量）およびDIPEA(1.7当量）を順次加えた。この反応溶液を室温にて２４時間攪拌した後、H2O(1 x 50 ｍＬ）、酸性のH2O(HClでpH４〜５とした；1 x 70 ｍＬ）およびH2O(1 x 50ｍL）で順次洗浄した。有機相を乾燥(Ｎa2ＳＯ4)し、濾過し、溶媒を留去した。得られた粗製物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して化合物 10(a-e)を油として得た（結果は下記に示すとおり）。
【００８９】
実施例2.1a: 化合物 10aの調製
6-[ビス[2-[(1,1-ジメチル)エトキシ]-2-オキソエチル]アミノ]-6-[5-(ジブチルアミノ)-5-オキソペンタン−1-イル］-テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-二酢酸 ビス[(1,1-ジメチルエチル)]エステル  
出発物質：化合物６(1.50 g；1.95 ｍｍｏｌ）；ジブチルアミン(0.332 mL；1.95 ｍｍｏｌ）
化合物 10a(1.51 g；1.93 ｍｍｏｌ）  収率：98 %
解析データ：
HPLC-ELSD: ELSD 95.8％(area %)；UV 92.0％(area %) 
Mr: 783.10(C42H78N4O9)
1H-および13C-NMRおよびＭＳは構造と一致している。
【００９０】
実施例2.1b: 化合物 10bの調製
6-[ビス[2-[(1,1-ジメチル)エトキシ]-2-オキソエチル]アミノ]-6-[5-(ジヘキシルアミノ)-5-オキソペンタン−1-イル］-テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-二酢酸-ビス[(1,1-ジメチルエチル)]エステル
出発物質：化合物６(2.50 g；3.25 ｍｍｏｌ）；ジヘキシルアミン(0.758 mL；3.25 ｍｍｏｌ）
化合物 10b(1.70 g；2.03 ｍｍｏｌ）  収率： 62 %.
解析データ：
HPLC-ELSD: ELSD 99.0％(area %)；UV 99.5％(area %) 
Mr: 839.21(C46H86N4O9).
1H-および13C-NMRおよびＭＳは構造と一致している。
【００９１】
実施例2.1c: 化合物 10cの調製
6-[ビス[2-[(1,1-ジメチル)エトキシ]-2-オキソエチル]アミノ]-6-[5-(ジオクチルアミノ)-5-オキソペンタン−1-イル］-テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-二酢酸-ビス[(1,1-ジメチルエチル)]エステル
出発物質：化合物６(2.50 g；3.25 ｍｍｏｌ）；ジオクチルアミン(0.981 mL；3.25 ｍｍｏｌ）
化合物 10c(2.16 g；2.41 ｍｍｏｌ）  収率： 74 %.
解析データ： 
HPLC-ELSD: ELSD 98.7％(area %)；UV 99.3％(area %) 
Mr: 895.31(C50H94N4O9) 
1H-および13C-NMRおよびＭＳは構造と一致している。
【００９２】
実施例2.1d: 化合物 10dの調製
6-[ビス[2-[(1,1-ジメチル)エトキシ]-2-オキソエチル]アミノ]-6-[5-(ジデシルアミノ)-5-オキソペンタン−1-イル］-テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-二酢酸 ビス[(1,1-ジメチルエチル)]エステル
出発物質：化合物６(1.92 g；2.50 ｍｍｏｌ）；ジデシルアミン(0.743 g；2.50 ｍｍｏｌ）
化合物 10d(2.26 g；2.38 ｍｍｏｌ）  収率： 95 %.
解析データ： 
HPLC-ELSD: ELSD 95.3％(area %)；UV 87.7％(area %) 
Mr: 951.42(C54H102N4O9)
1H-および13C-NMRおよびＭＳは構造と一致している。
【００９３】
実施例2.1e: 化合物 10eの調製
6-[ビス[2-[(1,1-ジメチル)エトキシ]-2-オキソエチル]アミノ]-6-[5-(ジドデシルアミノ)-5-オキソペンタン−1-イル］-テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-二酢酸-ビス[(1,1-ジメチルエチル)]エステル
出発物質：化合物６(3.13 g；4.07 ｍｍｏｌ）；ジドデシルアミン(1.44 g；4.07 ｍｍｏｌ）
化合物 10e(4.30 g；4.27 ｍｍｏｌ）  収率： 105％(溶媒残留).
解析データ： 
HPLC-ELSD: ELSD 89.7％(area %)；UV 93.0％(area %) 
Mr: 1007.53(C58H110N4O9)
1H-および13C-NMRおよびＭＳは構造と一致している。
【００９４】
実施例2.2.: 化合物 11(a-e)の調製  一般的手順 
化合物 10(a-e)(1当量）をＣＨ2Ｃｌ2(20-50 ｍＬ）に溶解し、得られたこの溶液を攪拌して０℃に冷却した後、ＴＦＡ(6当量）を滴加した。反応混合物を室温にて１時間攪拌した。この橙色の溶液を溶媒留去し、残留物を新たにＴＦＡ(50当量）に溶解した。この溶液を８０時間攪拌した；反応をMSおよびHPLC-ELSDでモニターした。混合物を溶媒留去し、残留物をジイソプロピルエーテル(70 ｍＬ）で処理して白色の沈殿を得、これを濾過または遠心し、ジイソプロピルエーテル(2 x 20 ｍＬ）で洗浄し、減圧乾燥(P2O5；ＮａＯＨ pellets)した。この手順を用いてリガンド11a、11bおよび11cを固体として得た。11dおよび11eについては逆に、エーテル処理の後、粗製のエーテルをＨ2Ｏに懸濁し、2N ＮａＯＨを添加してpH６−7にて溶解し、1M HClを加えてpH 2にて沈殿させた。この固体を濾過し、減圧乾燥(P2O5)してリガンド11dおよび11eを白色の固体として得た。
【００９５】
実施例2.2a: 化合物 11aの調製
6-[ビス[(カルボキシ)メチル]アミノ]-6-[5-(ジブチルアミノ)-5-オキソペンタン−1-イル］-テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-二酢酸
出発物質：化合物 10a(1.40 g；1.79 ｍｍｏｌ）
化合物 11a:(0.868 g；1.55 ｍｍｏｌ）；収率： 86％
解析データ： 
HPLC-ELSD: ELSD 93.0％(area %)
Mr: 558.67(C26H46N4O9)
1H-および13C-NMRおよびＭＳは構造と一致している。
【００９６】
実施例2.2b: 化合物 11bの調製
6-[ビス[(カルボキシ)メチル]アミノ]-6-[5-(ジヘキシルアミノ)-5-オキソペンタン−1-イル］-テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-二酢酸
出発物質：化合物 10b(1.70 g；2.03 ｍｍｏｌ）
化合物 11b:(1.28 g；2.08 ｍｍｏｌ）；定量的収率。
解析データ： 
HPLC-ELSD: ELSD 57.7％(area %) 
Mr: 614.78(C30H54N4O9)
1H-および13C-NMRおよびＭＳは構造と一致している。
【００９７】
実施例2.2c: 化合物 11cの調製
6-[ビス[(カルボキシ)メチル]アミノ]-6-[5-(ジオクチルアミノ)-5-オキソペンタン−1-イル］-テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-二酢酸
出発物質：化合物 10c(2.16 g；2.41 ｍｍｏｌ）
化合物 11c(1.31 g；1.95 ｍｍｏｌ）；収率： 81％
解析データ： 
HPLC-ELSD: ELSD 78.6％(area %) 
Mr: 670.45(C34H62N4O9)
錯滴定力価(0.963 mM GdCl3): 95 %
1H-および13C-NMRおよびＭＳは構造と一致している。
【００９８】
実施例2.2d: 化合物 11dの調製
6-[ビス[(カルボキシ)メチル]アミノ]-6-[5-(ジデシルアミノ)-5-オキソペンタン−1-イル］-テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-二酢酸
出発物質：化合物 10d(2.20 g；2.31 ｍｍｏｌ）
化合物 11d(1.08 g；1.48 ｍｍｏｌ）；収率： 64 %
解析データ：
HPLC-ELSD: ELSD 95.7％(area %) 
Mr: 726.99(C38H70N4O9)
錯滴定力価(1.001 mM GdCl3): 94 %
1H-および13C-NMRおよびＭＳは構造と一致している。
【００９９】
実施例2.2e: 化合物 11eの調製
6-[ビス[(カルボキシ)メチル]アミノ]-6-[5-(ジドデシルアミノ)-5-オキソペンタン−1-イル］-テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-二酢酸
出発物質：化合物 10e(4.30 g；4.27 ｍｍｏｌ）；
化合物 11e(2.83 g；3.61 ｍｍｏｌ）；収率： 85 %
解析データ：
HPLC-ELSD: ELSD 82.4％(area %). 
Mr: 783.10(C42H78N4O9).
1H-および13C-NMRおよびＭＳは構造と一致している。
【０１００】
実施例2.3: 化合物 12(a-e)の調製  一般的手順
リガンド11(a-e)(1当量）をH2O(濃度 5% w/v；starting pH１−2)に懸濁し、2N ＮａＯＨを加えてpH 6.5-7にて溶解した。滴定溶液 GdCl3(1当量）を一度に加えた。混合物を室温にて攪拌し、0.1N ＮａＯＨを添加してpHをモニターした。錯体化をＨＰＬＣ-ELSDおよびキシレノールオレンジアッセイによりモニターした。混合物をエバポレートして溶媒の体積を減らした。錯体12aおよび12bをサイズ排除クロマトグラフィーにより塩から精製し、一方錯体12c、12dおよび12eは析出および濾過により単離した。
【０１０１】
実施例2.3a: 化合物 12aの調製
[[6-[ビス[(カルボキシ)メチル]アミノ]-6-[5-(ジブチルアミノ)-5-オキソペンタン−1-イル］-テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-ジアセテート(4-)］ガドリネート（1-)］ナトリウム塩
出発物質：化合物 11a(0.800 g；1.16 ｍｍｏｌ）；
化合物 12a:(0.715 g；0.97 ｍｍｏｌ）；収率： 84 %
解析データ： 
HPLC-ELSD: ELSD 93.9％(area %) 
Mr: 735.89(C26H42GdNaN4O9)
KF: 10.01 %
ＭＳは構造と一致している。
【０１０２】
実施例2.3b: 化合物 12bの調製
[[6-[ビス[(カルボキシ)メチル]アミノ]-6-[5-(ジヘキシルアミノ)-5-オキソペンタン−1-イル］-テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-ジアセテート(4-)］ガドリネート（1-)］ナトリウム
出発物質：化合物 11b(1.28 g；1.49 ｍｍｏｌ）；
化合物 12b(0.550 g；0.70 ｍｍｏｌ）；収率： 47％
解析データ： 
HPLC-ELSD: ELSD 98.0％(area %)
Mr: 790.99(C30H50GdN4NaO9)
KF: 12.63 %
ＭＳは構造と一致している。
【０１０３】
実施例2.3c: 化合物 12cの調製
[[6-[ビス[(カルボキシ)メチル]アミノ]-6-[5-(ジオクチルアミノ)-5-オキソペンタン−1-イル］-テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-ジアセテート(4-)］ガドリネート（1-)］ナトリウム
出発物質：化合物 11c(1.14 g；1.27 ｍｍｏｌ）；
化合物 12c(1.03 g；1.22 ｍｍｏｌ）；収率： 96 %
解析データ： 
HPLC-ELSD: ELSD 100.0％(area %)
Mr: 847.10(C34H58GdN4NaO9)
KF: 5.07 %
ＭＳは構造と一致している。
【０１０４】
実施例2.3d: 化合物 12dの調製:
[[6-[ビス[(カルボキシ)メチル]アミノ]-6-[5-(ジデシルアミノ)-5-オキソペンタン−1-イル］-テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-ジアセテート(4-)］ガドリネート（1-)］ナトリウム
出発物質：化合物 11d(1.1 g；1.48 ｍｍｏｌ）；
化合物 12d(1.12 g；1.24 ｍｍｏｌ）；収率：90 %
解析データ： 
HPLC-ELSD: ELSD 94.6％(area %) 
Mr: 903.20(C38H66GdN4NaO9)
ＭＳは構造と一致している。
【０１０５】
実施例2.3e: 化合物 12eの調製
[[6-[ビス[(カルボキシ)メチル]アミノ]-6-[5-(ジドデシルアミノ)-5-オキソペンタン−1-イル］-テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-ジアセテート(4-)］ガドリネート（1-)]ナトリウム
出発物質：化合物 11e(1.10 g；1.37 ｍｍｏｌ）；
化合物 12e(1.02 g；1.06 ｍｍｏｌ）；収率： 78 %
解析データ：
HPLC-ELSD: ELSD 94.3％(area %)
Mr: 959.31(C42H74GdN4NaO9).
ＭＳは構造と一致している。
【０１０６】
実施例3: 化合物 21の調製
6-[ビス[2-(1,1-ジメチルエトキシ)-2-オキソエチル]アミノ]-6-[(1R,4R)-4-カルボキシシクロヘキサン-1-イル］テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-二酢酸 ビス（1,1-ジメチルエチル)エステル
スキーム５に従い化合物 21を調製する：
【化２７】
0006375231.tif 000028
【０１０７】
実施例3a: 化合物 14の調製
(1R,4R)-4-(ヒドロキシメチル)シクロヘキサンカルボン酸メチルエステル
濃硫酸(15 ｍＬ）をトランス−4-ヒドロキシメチルシクロヘキサンカルボン酸13(15 g；94.8 ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ(300 ｍＬ）溶液に加えた後、反応混合物を攪拌し、４時間還流した。この溶液を減圧下で濃縮し、aq. NH4OHを加えて塩基性にした；白色の固体を濾過により除き、母液をＥｔＯＡｃで抽出した（3 x 70ｍL）。合わせた有機層を飽和 aq. NaClで洗浄し、乾燥（Ｎa2ＳＯ4)し、減圧下で溶媒を留去して14を黄色の液体として得た(17.26 g)、これを精製することなく以下の反応に用いた。
定量的収率。
解析データ： 
Mr: 172.22(C9H16O3)
1H-および13C-NMRおよびＭＳは構造と一致している。
【０１０８】
実施例3b: 化合物 15の調製
(1R,4R)-4-(メチルスルホニルオキシ)メチル]シクロヘキサンカルボン酸メチルエステル
０℃で攪拌した化合物 14(17.26 g)のＴＨＦ(450 ｍＬ）溶液にトリエチルアミン(39.4 mL；284.5 ｍｍｏｌ）、次いでエタンメタンスルホニル クロリド(14.9 mL；151.7 ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を０℃でさらに１０分間攪拌した後、反応混合物を室温にて２時間攪拌した。反応混合物をセライト(0,01-0,04 mm)ベッドで濾過した後、新しいTHFで洗浄した；得られた溶液を減圧下でエバポレートして15を黄色の油として得(30.95 g)、これをさらに精製することなく以下の反応に用いた。
定量的収率。
解析データ： 
Mr: 250.30(C10H18O5S)
1H-および13C-NMRおよびＭＳは構造と一致している。
【０１０９】
実施例3c: 化合物 16の調製
(1R,4R)-4-(ヨードメチル)シクロヘキサンカルボン酸メチルエステル
アセトン(450 ｍＬ）中の化合物 15(30.95 g)およびヨウ化ナトリウム(42.64 g；284.5 ｍｍｏｌ）の溶液を室温にて２時間攪拌した後、3.5時間還流した。６０時間後、室温にてさらにNaI(5 g；17.7 ｍｍｏｌ）を加え、この溶液をさらに7時間還流した。反応をTLCによりモニターした。溶媒を減圧下でエバポレートし、黄色の残留物をジエチルエーテルで処理した；不溶性の塩を濾過により除き、新たにジエチルエーテルで洗浄した。この濾液を溶媒留去し、暗黄色の粗製物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して16を黄色の液体として得た(22.43 g；79.5 ｍｍｏｌ）。
収率： 84％
解析データ： 
Mr: 282.12(C9H15IO2)
1H-および13C-NMRおよびＭＳは構造と一致している。
【０１１０】
実施例3d: 化合物 17の調製
(1R,4R)-4-(ニトロメチル)シクロヘキサンカルボン酸メチルエステル
化合物 16(21.92 g；77.7 ｍｍｏｌ）を、 ＤＭＳＯ(1 L)中の亜硝酸ナトリウム(10.72 g；155.4 ｍｍｏｌ）とフロログルシノール(10.78 g；85.4 ｍｍｏｌ）の溶液に加え、この溶液を窒素雰囲気下、室温にて４８時間攪拌した。反応混合物をH2O(3 L)で希釈し、Ｅt2Ｏで抽出した。有機層を乾燥(Ｎa2ＳＯ4)し、溶媒を留去して粗製物を得、これをフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。化合物 17(10.35 g；51.4 ｍｍｏｌ）を淡黄色の液体として得た。収率： 66 %
解析データ： 
HPLC: 97.9％(HPLC Area %) 
Mr: 201.22(C9H15NO4) 
1H-および13C-NMRおよびＭＳは構造と一致している。
【０１１１】
実施例3e: 化合物 18の調製
6-[(1R,4R)-4-(メトキシカルボニル)シクロヘキサン-1-イル］-6-ニトロ-1,4-ビス（フェニルメチル)-テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン
EtOH(400 ｍＬ）中のＮ,Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン ジアセテート(18.29 g；50.7 ｍｍｏｌ）の懸濁液を透明な溶液が得られるまで６０℃で攪拌した；パラホルムアルデヒド (4.57 g；152.2 ｍｍｏｌ）を加え、この懸濁液を 80℃にて1.5時間加熱して暗橙色の透明な溶液を得た。EtOH中の化合物 17(10.21 g；50.7 ｍｍｏｌ）の溶液を滴加し、最後にこの溶液を８０℃にて６時間攪拌した；反応をＨＰＬＣによりモニターした。室温にて１５時間後、得られた沈殿を濾過し、EtOHで洗浄し、減圧乾燥して18を白色の固体として得た(17.88 g；38.4 ｍｍｏｌ）。
収率： 76%
解析データ： 
HPLC: 99.6％(HPLC Area %) 
Mr: 465.59(C27H35N3O4)
1H-および13C-NMRおよびＭＳは構造と一致している。
【０１１２】
実施例3f: 化合物 19の調製
6-アミノ-6-[(1R,4R)-4-(メトキシカルボニル)シクロヘキサン-1-イル］- テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン
ＴＨＦ(200 ｍＬ）中の化合物18(17.88 g；38.4 ｍｍｏｌ）の懸濁液を、透明な溶液が得られるまで４０℃にて攪拌した後、この溶液をＭｅＯＨ(150ｍL）で希釈した。ＭｅＯＨ(50 ｍＬ）中の5% Ｐｄ／Ｃ(10.66 g)の懸濁液を加え、混合物を、常圧で４０℃にて１１時間水素化した。触媒を濾過により除き、この溶液をエバポレートして19を緑がかった油(9.57 g；37.4 ｍｍｏｌ）として得た。この生成物は精製することなく以下で用いた。
収率： 98 %
解析データ：
Mr: 255.36(C13H25N3O2)
1H-および13C-NMRおよびＭＳは構造と一致している。
【０１１３】
実施例3g: 化合物 20の調製
6-[ビス[2-(1,1-ジメチルエトキシ)-2-オキソエチル]アミノ]-6-[(1R,4R)-4-(メトキシカルボニル)-シクロヘキサン-1-イル］テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-二酢酸 ビス（1,1-ジメチルエチル)エステル
化合物 19(9.52 g；37.3 ｍｍｏｌ）をＣＨ3ＣＮ(400 ｍＬ）に溶解した後、新たに磨砕したＫ2ＣＯ3(23.19 g；167.8 ｍｍｏｌ）およびＮa2ＳＯ4(15.88 g；111.8 ｍｍｏｌ）を加えた。ブチルｔ−ブチル ブロモアセテート(24.6 mL；167.8 ｍｍｏｌ）を加え、この橙色の混合物を８０℃にて１６時間攪拌した。塩を濾過により除き、濾液をエバポレートして、残留物をＥｔＯＡｃ(200 ｍＬ）に溶解し、この溶液をH2O(3 x 70 ｍＬ）および飽和 aq. ＮａＣｌ(70ｍL）で洗浄した。有機相を乾燥(Ｎa2ＳＯ4)し、濾過し、溶媒を留去した。粗製物(27.36 g)をフラッシュクロマトグラフィーで精製して20を淡黄色の油として得た(5.34 g；7.5 ｍｍｏｌ）。
収率： 20 %
解析データ： 
Mr: 711.93(C37H65N3O10)
1H-および13C-NMRおよびＭＳは構造と一致している。
【０１１４】
実施例3h: 化合物 21の調製:
6-[ビス[2-(1,1-ジメチルエトキシ)-2-オキソエチル]アミノ]-6-[(1R,4R)-4-カルボキシ-シクロヘキサン-1-イル］テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-二酢酸 ビス（1,1-ジメチルエチル)エステル
2N ＮａＯＨ(7.12 mL；14.2 ｍｍｏｌ）を、 i-PrOH(100 ｍＬ）中の化合物 20の溶液に加え、室温にて攪拌した後、H2O(5.5 ｍＬ）を均一な混合物が得られるまで加えた。反応が完結していなかったので、この溶液を室温にて５．５時間攪拌し、この溶液を-20℃で１５時間保存した。温度を室温に戻し、反応混合物をさらに３時間攪拌した。pＨを2N HCl(7.12 ｍＬ）で７に修正し、この溶液を減圧下室温にてエバポレートした。残留物をH2O(80 ｍＬ）に懸濁し、2N HCl(7.12 ｍＬ）で酸性化しＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を乾燥(Ｎa2ＳＯ4)し、溶媒を留去して21を白色の固体として得た(4.5 g；6.45 ｍｍｏｌ）  収率： 90 %
解析データ：
Mr: 697.91(C36H63N3O10).
1H-および13C-NMRおよびＭＳは構造と一致している。
【０１１５】
実施例4: の調製化合物 25(a-c)
スキーム６に従い化合物 25(a-c)を調製する:
【化２８】
0006375231.tif 000029
【０１１６】
実施例4.1: 化合物 22の調製
6-[ビス[2-(1,1-ジメチルエトキシ)-2-オキソエチル]アミノ]-6-[(1R,4R)-4-[[(2,5-ジオキソピロリジン-1−イル）オキシ]カルボニル]シクロヘキサン-1-イル］テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-二酢酸 ビス（1,1-ジメチルエチル)エステル
NHS(0.27g；2.3 ｍｍｏｌ）を、ＣＨ2Ｃｌ2(50 ｍＬ）中の21(1.09g；1.6 ｍｍｏｌ）の溶液に加え、０℃で攪拌した後、ＣＨ2Ｃｌ2(50 ｍＬ）中のＥＤＣ(0.45g；2.3 ｍｍｏｌ）の溶液を滴加した。反応混合物を室温にて４９時間攪拌した；反応をTLCによりモニターした。最後に溶液をH2O(3 x 40 ｍＬ）で洗浄し、有機層を乾燥(Ｎa2ＳＯ4)し、溶媒を留去して22を固体として得(1.35 g)、これをさらに精製することなく次の工程で用いた。定量的収率。
【０１１７】
実施例4.2: 化合物 23(a-c)の調製  一般的手順
対応するアミン(1-1.3当量）を、CHCl3(濃度 2%)中の化合物 22(1当量）の溶液に加え、次いでDIPEA(1.7当量）を添加した。混合物を室温にて64〜72時間攪拌した。この反応溶液が中性になったら、さらにDIPEA(1.7当量）を加えて、反応混合物を室温にてさらに２〜21時間攪拌した。次いで、反応混合物をH2O(35 ｍＬ）、希塩酸（洗液のpＨが酸性になるまで(3 x 40 ｍＬ））およびH2O(35ｍL）で順次洗浄した。有機相を乾燥(Ｎa2ＳＯ4)し、溶媒を留去して粘稠な黄色味がかった粗製物を得、これをフラッシュクロマトグラフィーにより精製して23(a-c)を黄色の油として得た（データは以下に示す）:
【０１１８】
実施例4.2a: 化合物 23aの調製
6-[ビス[2-(1,1-ジメチルエトキシ)-2-オキソエチル]アミノ]-6-[(1R,4R)-4-[(ジデシルアミノ)-カルボニル]シクロヘキサン-1-イル］テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-二酢酸 ビス（1,1-ジメチルエチル)エステル 
出発物質：化合物 22(1.18 g；1.48 ｍｍｏｌ）；ジデシルアミン(0.44 g；1.48 ｍｍｏｌ）
化合物 23a(075 g；0.77 ｍｍｏｌ）  収率： 52%
Mr: 977.46(C56H104N4O9)
1H-および13C-NMRおよびＭＳは構造と一致している。
【０１１９】
実施例4.2b: 化合物 23bの調製
6-[ビス[2-(1,1-ジメチルエトキシ)-2-オキソエチル]アミノ]-6-[(1R,4R)-4-[(ジオクチルアミノ)-カルボニル]シクロヘキサン-1-イル］テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-二酢酸 ビス（1,1-ジメチルエチル)エステル
出発物質：化合物 22(0.74 g；0.93 ｍｍｏｌ）；ジオクチルアミン(0.74 g；0.93 ｍｍｏｌ）
化合物 23b(0.30 g；0.33 ｍｍｏｌ）  収率： 35%
Mr: 921.35(C52H96N4O9)
1H-および13C-NMRおよびＭＳは構造と一致している。
【０１２０】
実施例4.2c: 化合物 23cの調製
6-[ビス[2-[(1,1ジメチル)エトキシ]-2-オキソエチル]アミノ]-6-(1R,4R)-4-[[[(7R)-4-ヒドロキシ−4-オキシド-10−オキソ−7-[(1-オキソデシル)オキシ]-3,5,9-トリオキサ-4-ホスファノナデカン−1-イル］アミノ]-カルボニル]シクロヘキサン-1-イル］テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-二酢酸 ビス[(1,1-ジメチル)エチル]エステル
出発物質：化合物 22(1.35 g；1.56 ｍｍｏｌ）；1,2−ジデカノイル-sn-グリセロ-3-ホスホエタノールアミン(0.81 g；1.56 ｍｍｏｌ）
化合物 23c(0.84 g；0.70 ｍｍｏｌ）  収率： 45%
Mr: 1203.54(C61H111N4O17P)
1H-および13C-NMRおよびＭＳは構造と一致している。
【０１２１】
実施例4.3: 化合物 24(a-c)の調製  一般的手順
ＴＦＡ(6当量）を、ＣＨ2Ｃｌ2(50 ｍＬ）中の化合物 23(a-c)(1当量）の溶液に滴加し、０℃で攪拌した。反応混合物を室温にて１時間攪拌した後、エバポレートした残留物を新たにＴＦＡ(350当量）に溶解した；次いで、この溶液を室温にて２４〜２８時間攪拌した。反応をESI-MSによりモニターした。ＴＦＡを留去し、残留物をiPr2O(40-60 ｍＬ）で処理して白色の固体を得、これを遠心により単離し、乾燥（減圧、ＮａＯＨペレットの存在下、３０℃にて)して24(a-c)を得た（データは以下のとおり）。
【０１２２】
実施例4.3a: 化合物 24aの調製
6-[ビス（カルボキシメチル)アミノ]-6-[(1R,4R)-4-[(ジデシルアミノ)-カルボニル]シクロヘキサン-1-イル］テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H) 二酢酸
出発物質：化合物 23a(0.75 g；0.77 ｍｍｏｌ）
化合物 24a(0.41 g；0.54 ｍｍｏｌ）；収率： 70%
解析データ： 
HPLC-ELSD: 94.1%(HPLC Area %) 
Mr: 753.03(C40H72N4O9)
錯滴定力価:(0,001 M GdCl3): 81.7%
1H-および13C-NMRおよびＭＳは構造と一致している。
【０１２３】
実施例4.3b: 化合物 24bの調製
6-[ビス（カルボキシメチル)アミノ]-6-[(1R,4R)-4-[(ジオクチルアミノ)-カルボニル]シクロヘキサン-1-イル］テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-二酢酸
出発物質：化合物 23b(0.30 g；0.33 ｍｍｏｌ）
化合物 24b(0.21 g；0.30 ｍｍｏｌ）；収率： 90%
解析データ：
HPLC-ELSD: 98%(HPLC Area %) 
Mr: 696.92(C36H64N4O9)
錯滴定力価:(0,001 M GdCl3): 77%
1H-および13C-NMRおよびＭＳは構造と一致している。
【０１２４】
実施例4.3c: 化合物 24cの調製
6-[-[ビス（カルボキシメチル)アミノ]-6-[(1R,4R)-4-[[[(7R)-4-ヒドロキシ−4-オキシド-10−オキソ−7-[(1-オキソデシル)オキシ]-3,5,9-トリオキサ-4-ホスファノナデカン−1-イル］アミノ]-カルボニル]-シクロヘキサン-1-イル］テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-二酢酸
出発物質：化合物 23c(0.84 g；0.70 ｍｍｏｌ）
化合物 24c(0.67 g；0.69 ｍｍｏｌ）；収率： 98%
解析データ： 
HPLC-ELSD: 96.2％(HPLC Area %) [13]
Mr: 979.11(C45H79N4O17P)
錯滴定力価:(0,001 M GdCl3): 96.9%
1H-および13C-NMRおよびＭＳは構造と一致している。
【０１２５】
実施例4.4: 化合物 25(a-c)の調製  一般的手順:
実施例2.3に記載した手順に従い、標題の化合物を調製した。
【０１２６】
実施例4.4a: 化合物 25aの調製
[[6-[ビス（カルボキシメチル)アミノ]-6-[(1R,4R)-4-[(ジデシルアミノ)-カルボニル]-シクロヘキサン-1-イル］テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H) ジアセテート(4-)]ガドリネート（1-)]ナトリウム
出発物質：化合物 24a(0.32 g；0.43 ｍｍｏｌ）
化合物 25a(0.33 g；0.35 ｍｍｏｌ）；収率： 83 %
解析データ：
HPLC-ELSD: 95.2％(% HPLC Area) [13]
Mr: 929.24(C40H68GdN4 NaO9)
TGA: 5.7%
ＭＳは構造と一致している。
【０１２７】
実施例4.4b: 化合物 25bの調製
[6-[ビス（カルボキシメチル)アミノ]-6-[(1R,4R)-4-[(ジオクチルアミノ)-カルボニル]-シクロヘキサン-1-イル］テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H) ジアセテート(4-)]ガドリネート（1-)]ナトリウム
出発物質：化合物 24b(0.18 g；0.26 ｍｍｏｌ）
化合物 25b(46 mg；0.05 ｍｍｏｌ）；収率：19%
解析データ：
Mr: 873.13(C36H60GdN4 NaO9)
ＭＳは構造と一致している。
【０１２８】
実施例4.4c: 化合物 25cの調製: 
[6-[-[ビス（カルボキシメチル)アミノ]-6-[(1R,4R)-4-[[[(7R)-4-ヒドロキシ−4-オキシド-10−オキソ−7-[(1-オキソデシル)オキシ]-3,5,9-トリオキサ-4-ホスファ-ノナデカン−1-イル］アミノ]-カルボニル]-シクロヘキサン-1-イル］テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-ジアセテート(5)]ガドリネート（2-)]二ナトリウム
出発物質：化合物 24c(0.35 g；0.36 ｍｍｏｌ）
化合物 25c(0.31 g；0.27 ｍｍｏｌ）；収率： 77 %
解析データ：
Mr: 1155.32(C45H75GdN4 NaO17P)
TGA: 9%
KF: 11.6%.
ＭＳは構造と一致している。
【０１２９】
Table I:種々ジアゼピン錯体、およびGd-DOTA、Gd-HP-DO3A、Gd-BT-DO3AおよびGd-BOPTAについての、ｒ1p(mM-1s-1)(異なる媒体中0.47T、25℃にて測定）
【表１】
0006375231.tif 000030
化合物はすべて、mq20 Minispec 装置(Bruker Biospin、Germany)にて、20MHz、25℃での縦緩和時間(T1)を、水、生理学的濃度のヒト血清アルブミンおよびヒト血漿中で測定した。緩和度 r1p(ミリモル濃度）は、以下の数式を用いて測定されたT1値から求めた。
【数１】
0006375231.tif 000031
Ri1obＳは、選択された造影剤の観察された緩和時間、T1obＳは溶液の観察された縦緩和時間であり、指数iおよびjは、それぞれ、造影剤と媒体に関する。上に示した r1p 値は、本発明の化合物が、水、HSAおよびさらには血漿において測定されたように、高い緩和度を有していることを明確に示している。特に、Gd-DOTA、Gd-BOPTAおよびGd-BT-DO3Aなどの、ＭＲＩ解析に広く用いられている公知の造影剤と比較して、本発明の誘導体は顕著に増大した緩和度を示しており、特にＭＲＩ造影剤として適している。
【０１３０】
Table II：ｒ1p(mM-1 s-1)測定（異なる媒体中0.47T、25℃にて）した種々のジアゼピン錯体の３７℃での安定性
【表２】
0006375231.tif 000032
Table II は、本発明の両親媒性錯体の緩和度 ｒ1p が、時間が経過しても実質的に安定を維持していることを示しており、実験中、好ましい持続時間がもたらされている。このことは、本願の両親媒性錯体を投与しMRI実験において検出でき、適切な時間にわたって画像の明確且つ綿密な解析が可能であることを意味している。