(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：
【化１】
0006418950.tif 000127
（式中、
ＸがＣＨ又はＮであり、
各Ｒ１Ａが独立して、−ＯＲ１Ｃ、−Ｎ（Ｒ１Ｃ）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１Ｃ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１Ｃ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１Ｃ）２、−Ｎ（Ｒ１Ｃ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ１Ｃ、シアノ、ハロ、又は任意に置換されたＣ１−１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のＲ１Ｂによるものであり、
各Ｒ１Ｂが独立して、−ＯＲ１Ｃ、−Ｎ（Ｒ１Ｃ）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１Ｃ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１Ｃ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１Ｃ）２、−Ｎ（Ｒ１Ｃ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ１Ｃ、シアノ又はハロであり、
各Ｒ１Ｃが独立して、水素、又は任意に置換されたＣ１−１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のシアノ、ハロ又はヒドロキシルによるものであり、
各Ｒ２Ｃが独立して、−ＯＲ２Ｄ、−Ｎ（Ｒ２Ｄ）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２Ｄ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２Ｄ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２Ｄ）２、−Ｎ（Ｒ２Ｄ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ２Ｄ、シアノ、ハロ、又は任意に置換されたＣ１−１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のアミノ、シアノ、ハロ、ヒドロキシル又はＲ２Ｄによるものであり、
各Ｒ２Ｄは独立して、水素、又は任意に置換されたＣ１−１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のアミノ、シアノ、ハロ又はヒドロキシルによるものであり、
ｍは０〜３である）
の化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
【請求項２】
前記化合物が、式：
【化２】
0006418950.tif 000128
の化合物である、請求項１に記載の化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
【請求項３】
前記化合物が、式：
【化３】
0006418950.tif 000129
の化合物である、請求項２に記載の化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
【請求項４】
前記化合物が、式：
【化４】
0006418950.tif 000130
の化合物である、請求項２に記載の化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
【請求項５】
少なくとも１つのＲ１Ａがハロである、請求項１〜４のいずれかに記載の化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
【請求項６】
少なくとも１つのＲ１Ａが−ＯＲ１Ｃである、請求項１〜４のいずれかに記載の化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
【請求項７】
Ｒ１Ｃが、任意に置換されたＣ１−１２ヒドロカルビルである、請求項６に記載の化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
【請求項８】
Ｒ２Ｃが−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２Ｄ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２Ｄ）２、又は−Ｎ（Ｒ２Ｄ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ２Ｄである、請求項１〜４のいずれかに記載の化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
【請求項９】
Ｒ２Ｃが−Ｃ（Ｏ）Ｒ２Ｄである、請求項１〜４のいずれかに記載の化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
【請求項１０】
各Ｒ２Ｄが独立して、水素、又はＣ１−１２ヒドロカルビルである、請求項８又は９に記載の化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
【請求項１１】
少なくとも１つのＲ２Ｄが、任意に置換されたＣ１−１２ヒドロカルビルであり、任意の置換が１つ又は複数のアミノ、シアノ、ハロ、ヒドロキシルによるものである、請求項８又は９に記載の化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
【請求項１２】
Ｒ２Ｄが、少なくとも１つの窒素原子を含む２員〜１２員のヘテロカルビルである、請求項８又は９に記載の化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
【請求項１３】
前記化合物が、２−メトキシエチル４−（３−（２−メトキシピリジン−３−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボキシレート：
【化５】
0006418950.tif 000131
である、請求項３に記載の化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
【請求項１４】
前記化合物が、４−［３−（２−メトキシ−ピリジン−３−イル）−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル］−ピペラジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル：
【化６】
0006418950.tif 000132
である、請求項３に記載の化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
【請求項１５】
請求項１〜１４のいずれかに記載の化合物又はその薬学的に許容可能な塩、及び薬学的に許容可能な賦形剤又は希釈剤を含む医薬組成物。
【請求項１６】
治療有効量の請求項１〜１４のいずれかに記載の化合物又はその薬学的に許容可能な塩を含む、神経因性疼痛を治療又は管理するための医薬組成物。
【請求項１７】
前記神経因性疼痛が、線維筋痛症又は末梢神経障害である、請求項１６に記載の医薬組成物。  
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
１．  発明の分野
本発明は、アダプター関連キナーゼ１（ＡＡＫ１）の阻害剤として有用なピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン系化合物、それを含む組成物、及びそれらを使用する方法に関する。
【０００２】
本願は、２０１２年３月９日付けで出願された米国仮特許出願第６１／６０８，７６５号（その全体が引用することにより本明細書の一部をなす）に対する優先権を主張する。
【背景技術】
【０００３】
２．  発明の背景
アダプター関連キナーゼ１（ＡＡＫ１）は、セリン／スレオニンキナーゼのＡｒｋ１／Ｐｒｋ１ファミリーの一員である。ＡＡＫ１  ｍＲＮＡにはショート及びロングと呼ばれる２種のスプライシング型が存在する。ロング型は脳及び心臓において優勢であり、強く発現する（非特許文献１）。ＡＡＫ１はシナプトソーム調製物に豊富に含まれ、培養細胞においてエンドサイトーシス構造と共局在化する。ＡＡＫ１は、シナプス小胞の再利用及び受容体媒介性のエンドサイトーシスに重要なプロセスであるクラスリン被覆エンドサイトーシスを調節する。ＡＡＫ１が、受容体のカーゴとクラスリン被覆とを連結するヘテロ四量体であるＡＰ２複合体に結び付く。クラスリンとＡＡＫ１との結合がＡＡＫ１キナーゼ活性を刺激する（非特許文献２、非特許文献３）。ＡＡＫ１は、ＡＰ−２のｍｕ−２サブユニットをリン酸化し、それによりｍｕ−２とカーゴ受容体上のチロシンを含むソーティングモチーフとの結合を促す（非特許文献４、非特許文献５）。Ｍｕ２のリン酸化は受容体の取込みに必要ではないが、リン酸化は内在化の効率を高める（非特許文献６）。
【０００４】
ＡＡＫ１はＰＣ１２細胞におけるニューレグリン−１／ＥｒｂＢ４シグナル伝達の阻害剤として特定されている。ＲＮＡ干渉媒介性の遺伝子サイレンシング又はキナーゼ阻害剤Ｋ２５２ａ（ＡＡＫ１キナーゼ活性を阻害する）での処理によるＡＡＫ１発現の喪失がニューレグリン−１誘導性の神経突起伸長の増強をもたらす。これらの処理により、細胞膜又はその付近でのＥｒｂＢ４の発現の増大及びＥｒｂＢ４の集積が起こる（非特許文献７）。ＮＲＧ１及びＥｒｂＢ４は推定統合失調症感受性遺伝子である（非特許文献８）。両遺伝子のＳＮＰが複合的な統合失調症の中間形質に関連している（非特許文献９）。ニューレグリン１及びＥｒｂＢ４  ＫＯマウスモデルは統合失調症関連の形態変化及び行動的表現型を示した（非特許文献１０、非特許文献１１）。加えて、ＡＡＫ１遺伝子のイントロンでの一塩基多型はパーキンソン病の発症年齢に関連していた（非特許文献１２）。これらの結果から、ＡＡＫ１活性の阻害が統合失調症、統合失調症における認知障害、パーキンソン病、双極性障害及びアルツハイマー病の治療に有用であり得ることが示唆される。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Henderson and Conner, Mol. Biol. Cell. 2007, 18, 2698-2706
【非特許文献２】Conner et. al., Traffic 2003, 4, 885-890
【非特許文献３】Jackson et. al., J. Cell. Biol. 2003, 163, 231-236
【非特許文献４】Ricotta et. al., J. Cell Bio. 2002, 156, 791-795
【非特許文献５】Conner and Schmid, J. Cell Bio. 2002, 156, 921-929
【非特許文献６】Motely et. al., Mol. Biol. Cell. 2006, 17, 5298-5308
【非特許文献７】Kuai et. al., Chemistry and Biology 2011, 18, 891-906
【非特許文献８】Buonanno, Brain Res. Bull. 2010, 83, 122-131
【非特許文献９】Greenwood et. al., Am. J. Psychiatry 2011, 168, 930-946
【非特許文献１０】Jaaro-Peled et. al., Schizophrenia Bulletin 2010, 36, 301-313
【非特許文献１１】Wen et. al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2010, 107, 1211-1216
【非特許文献１２】Latourelle et. al., BMC Med. Genet. 2009, 10, 98
【発明の概要】
【０００６】
３．  発明の概要
本発明は、式：
【化１】
0006418950.tif 000002
【０００７】
（式中、Ｒ１はＲ１Ａ又は任意に置換されたＣ１−１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のＲ１Ａによるものであり、各Ｒ１Ａは独立して、−ＯＲ１Ｃ、−Ｎ（Ｒ１Ｃ）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１Ｃ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１Ｃ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１Ｃ）２、−Ｎ（Ｒ１Ｃ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ１Ｃ、シアノ、ハロ、又は任意に置換されたＣ１−１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のＲ１Ｂによるものであり、各Ｒ１Ｂは独立して、−ＯＲ１Ｃ、−Ｎ（Ｒ１Ｃ）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１Ｃ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１Ｃ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１Ｃ）２、−Ｎ（Ｒ１Ｃ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ１Ｃ、シアノ又はハロであり、各Ｒ１Ｃは独立して、水素、又は任意に置換されたＣ１−１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のシアノ、ハロ又はヒドロキシルによるものであり、Ｒ２は−ＮＲ２ＡＲ２Ｂであり、ここでＲ２Ａは水素であり、Ｒ２Ｂは任意に置換されたＣ１−１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ若しくは複数のＲ２Ｃによるものであり、又はＲ２ＡとＲ２Ｂとがともに１つ若しくは複数のＲ２Ｃで任意に置換された４員〜７員の複素環を形成し、各Ｒ２Ｃは独立して、−ＯＲ２Ｄ、−Ｎ（Ｒ２Ｄ）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２Ｄ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２Ｄ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２Ｄ）２、−Ｎ（Ｒ２Ｄ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ２Ｄ、シアノ、ハロ、又は任意に置換されたＣ１−１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のＲ２Ｄによるものであり、各Ｒ２Ｄは独立して、水素、又は任意に置換されたＣ１−１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のシアノ、ハロ、又はヒドロキシルによるものであり、Ｒ３は水素、又は１つ若しくは複数のシアノ、ハロ若しくはヒドロキシルで任意に置換されたＣ１−６アルキルである）の化合物、及びその薬学的に許容可能な塩のＡＡＫ１阻害剤に一部関する。
【０００８】
本発明の１つの実施の形態は、本明細書に開示の化合物（すなわち本発明の化合物）を含む医薬組成物及び剤形を包含する。
【０００９】
本発明の別の実施の形態は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ及びｉｎ  ｖｉｖｏの両方でアダプター関連キナーゼ１（ＡＡＫ１）を阻害する方法であって、ＡＡＫ１を本発明の化合物と接触させることを含む、方法を包含する。
【００１０】
別の実施の形態は、ＡＡＫ１活性によって媒介される疾患及び障害を治療及び管理する方法を包含する。このような疾患及び障害の例としては、アルツハイマー病、双極性障害、疼痛、パーキンソン病及び統合失調症（統合失調症における認知障害を含む）が挙げられると考えられる。
【００１１】
４．  図面の簡単な説明
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】本発明の態様を説明するものであり、ＡＡＫ１ホモ接合型（−／−）ノックアウトマウスとその野生型（＋／＋）同腹子とを用いたホルマリン疼痛モデルから得られた結果を示す図である。ＡＡＫ１ホモ接合型（−／−）ノックアウトマウスは、その野生型（＋／＋）同腹子と比較して急性及び持続性の（tonic）疼痛応答の両方において明らかな低減を示している。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
５．  発明の詳細な説明
本発明は、ＡＡＫ１ノックアウトマウスが疼痛に高い耐性を示すという発見に一部基づくものである。この発見が研究を促し、最終的にＡＡＫ１阻害剤、それを含む組成物及びそれらを使用する方法の発見へと至った。
【００１４】
５．１．  定義
特に明示のない限り、「本発明の化合物」、「本開示の化合物」等の語句は、本明細書中で開示される化合物を指す。
【００１５】
特に明示のない限り、「ヒドロカルビル」という用語は、全炭素主鎖（all-carbon backbone）を有し、炭素原子と水素原子とからなる脂肪族部分又は脂環式部分を意味する。ヒドロカルビル基の例としては、１個〜２０個、１個〜１２個、１個〜６個及び１個〜４個の炭素原子を有するもの（それぞれＣ１−２０ヒドロカルビル、Ｃ１−１２ヒドロカルビル、Ｃ１−６ヒドロカルビル及びＣ１−４ヒドロカルビルと称される）が挙げられる。具体例としては、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ベンジル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキルアルキル、シクロアルケニルアルキル、ナフチル、フェニル及びフェニルエチルが挙げられる。
【００１６】
アルキル部分の例としては、１個〜２０個、１個〜１２個、１個〜６個、１個〜４個及び１個〜３個の炭素原子を有する直鎖部分及び分岐部分（それぞれＣ１−２０アルキル、Ｃ１−１２アルキル、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−４アルキル及びＣ１−３アルキルと称される）が挙げられる。具体例としては、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、イソブチル、ペンチル、ヘキシル、イソへキシル、ヘプチル、４，４−ジメチルペンチル、オクチル、２，２，４−トリメチルペンチル、ノニル、デシル、ウンデシル及びドデシルが挙げられる。
【００１７】
アルケニル部分の例としては、直鎖及び分岐Ｃ２−２０、Ｃ２−１２及びＣ２−６アルケニルが挙げられる。具体例としては、ビニル、アリル、１−ブテニル、２−ブテニル、イソブチレニル、１−ペンテニル、２−ペンテニル、３−メチル−１−ブテニル、２−メチル−２−ブテニル、２，３−ジメチル−２−ブテニル、１−ヘキセニル、２−ヘキセニル、３−ヘキセニル、１−ヘプテニル、２−ヘプテニル、３−ヘプテニル、１−オクテニル、２−オクテニル、３−オクテニル、１−ノネニル、２−ノネニル、３−ノネニル、１−デセニル、２−デセニル及び３−デセニルが挙げられる。
【００１８】
アルキニル部分の例としては、直鎖及び分岐Ｃ２−２０、Ｃ２−１２及びＣ２−６アルキニルが挙げられる。具体例としては、エチニル及び２−プロピニル（プロパルギル）が挙げられる。
【００１９】
アリール部分の例としては、アントラセニル、アズレニル、フルオレニル、インダン、インデニル、ナフチル、フェニル及びフェナントレニルが挙げられる。
【００２０】
シクロアルキル部分の例としては、Ｃ３−１２、Ｃ３−７、Ｃ４−６及びＣ６シクロアルキルが挙げられる。具体例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル及びアダマンチルが挙げられる。
【００２１】
特に明示のない限り、「ハロ」という用語は、フルオロ、クロロ、ブロモ及びヨードを包含する。
【００２２】
特に明示のない限り、「ヘテロカルビル」という用語は、１つ又は複数の炭素原子と１つ又は複数のヘテロ原子とから構成される主鎖を有する部分を指す。具体的なヘテロ原子は窒素、酸素及び硫黄である。ヘテロカルビル部分は、少なくとも１つの炭素原子、ＣＨ基、ＣＨ２基又はＣＨ３基が、１つ又は複数のヘテロ原子と原子価を満たすのに必要な数の水素原子とで置き換えられたヒドロカルビル部分と考えることができる。ヘテロカルビルの例としては、２員〜２０員、２員〜１２員、２員〜８員、２員〜６員及び２員〜４員のヘテロカルビル部分が挙げられ、この数の範囲はこの部分の炭素原子、窒素原子、酸素原子及び／又は硫黄原子の合計を指す。したがって、「２員〜１２員のヘテロカルビル」という用語は、合計で２個〜１２個の炭素原子、窒素原子、酸素原子及び／又は硫黄原子を有するヘテロカルビル部分を指す。具体的なヘテロカルビル部分としては、直鎖及び分岐ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル及びヘテロアルキニル、並びに複素環及びヘテロアリールが挙げられる。
【００２３】
ヘテロアルキル部分の例としては、２員〜８員、２員〜６員及び２員〜４員のヘテロアルキル部分が挙げられる。具体例としては、アルコキシル、アシル（例えば、ホルミル、アセチル、ベンゾイル）、アルキルアミノ（例えば、ジ−（Ｃ１−３−アルキル）アミノ）、アリールアミノ、アリールオキシム、カルバメート、カルバミド、アルキルカルボニル、アリールカルボニル、アミノカルボニル、アルキルアミノカルボニル、アルキルスルファニル、アリールスルファニル、アルキルスルフィニル、アリールスルフィニル、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、アルキルスルホニルアミノ及びアリールスルホニルアミノが挙げられる。
【００２４】
特に明示のない限り、「複素環」という用語は、芳香族、部分芳香族又は非芳香族であり得る環式（単環式又は多環式）のヘテロカルビル部分を指す。複素環はヘテロアリールを含む。例としては、４員〜１０員、４員〜７員、６員及び５員の複素環が挙げられる。具体例としては、ベンゾ［１，３］ジオキソリル、２，３−ジヒドロ−ベンゾ［１，４］ジオキシニル、シンノリニル、フラニル、ヒダントイニル、モルホリニル、オキセタニル、オキシラニル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピロリジノニル、ピロリジニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロピリジニル、テトラヒドロピリミジニル、テトラヒドロチオフェニル、テトラヒドロチオピラニル及びバレロラクタミルが挙げられる。「複素環」という用語は環を指すため、単独ではオキサゾリジノン及びイミダゾリジノン等の部分を包含しない。かかる部分は、置換された複素環、すなわちオキソで置換された複素環とみなされる。
【００２５】
ヘテロアリール部分の例としては、アクリジニル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾイソチアゾリル、ベンゾイソオキサゾリル、ベンゾキナゾリニル、ベンゾチアゾリル、ベンズオキサゾリル、フリル、イミダゾリル、インドリル、イソチアゾリル、イソオキサゾリル、オキサジアゾリル、オキサゾリル、フタラジニル、ピラジニル、ピラゾリル、ピリダジニル、ピリジル、ピリミジニル、ピリミジル、ピロリル、キナゾリニル、キノリニル、テトラゾリル、チアゾリル及びトリアジニルが挙げられる。
【００２６】
特に明示のない限り、「挙げられる（含む）（include）」という用語は、「挙げられる（含む）が、これらに限定されない」と同じ意味を有し、「挙げられる（含む）（includes）」という用語は、「挙げられる（含む）が、これらに限定されない」と同じ意味を有する。同様に、「等の（のような）（such as）」という用語は、「等の（のような）（ただし、これらに限定されない）」という用語と同じ意味を有する。
【００２７】
特に明示のない限り、「管理する（manage）」、「管理すること（managing）」及び「管理（management）」という用語は、特定の疾患若しくは障害に既に罹患した患者において疾患若しくは障害の再発を予防すること、及び／又は疾患若しくは障害に罹患している患者が寛解期にある時間を延長させることを包含する。この用語は、疾患若しくは障害の閾値、発症及び／又は継続期間を調節すること、又は患者の疾患若しくは障害に対する応答の仕方を変えることを包含する。
【００２８】
特に明示のない限り、化合物の「治療有効量」は、疾患若しくは病態の治療若しくは管理において治療的利点をもたらすのに、又は疾患若しくは病態に関連した１つ若しくは複数の症状を遅延させる若しくは最小限に抑えるのに十分な量である。化合物の「治療有効量」は、疾患又は病態の治療又は管理に治療的利点をもたらす、単独の又は他の療法と組み合わせた治療剤の量を意味する。「治療有効量」という用語は、療法を全体的に改善するか、疾患若しくは病態の症状若しくは原因を低減させる若しくは回避するか、又は別の治療剤の治療的な有効性を高める量を包含し得る。
【００２９】
特に明示のない限り、「治療する（treat）」、「治療すること（treating）」及び「治療（treatment）」という用語は、疾患若しくは障害の重症度を低減させるか、又は疾患若しくは障害の進行を遅延若しくは減速させる、患者が特定の疾患又は障害に罹患している間に行う処置を意図する。
【００３０】
特に明示のない限り、一連の名詞の直前にくる１つ又は複数の形容詞は、それぞれの名詞を修飾するものとして解釈される。例えば、「任意に置換されるアルキル、アリール又はヘテロアリール」という語句は、「任意に置換されるアルキル、任意に置換されるアリール、又は任意に置換されるヘテロアリール」と同じ意味を有する。
【００３１】
５．２．  化合物
本発明は、式：
【化２】
0006418950.tif 000003
【００３２】
（式中、Ｒ１はＲ１Ａ又は任意に置換されたＣ１−１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のＲ１Ａによるものであり、各Ｒ１Ａは独立して、−ＯＲ１Ｃ、−Ｎ（Ｒ１Ｃ）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１Ｃ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１Ｃ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１Ｃ）２、−Ｎ（Ｒ１Ｃ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ１Ｃ、シアノ、ハロ、又は任意に置換されたＣ１−１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のＲ１Ｂによるものであり、各Ｒ１Ｂは独立して、−ＯＲ１Ｃ、−Ｎ（Ｒ１Ｃ）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１Ｃ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１Ｃ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１Ｃ）２、−Ｎ（Ｒ１Ｃ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ１Ｃ、シアノ又はハロであり、各Ｒ１Ｃは独立して、水素、又は任意に置換されたＣ１−１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のシアノ、ハロ又はヒドロキシルによるものであり、Ｒ２は−ＮＲ２ＡＲ２Ｂであり、ここでＲ２Ａは水素であり、Ｒ２Ｂは任意に置換されたＣ１−１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ若しくは複数のＲ２Ｃによるものであり、又はＲ２ＡとＲ２Ｂとがともに１つ若しくは複数のＲ２Ｃで任意に置換された４員〜７員の複素環を形成し、各Ｒ２Ｃは独立して、−ＯＲ２Ｄ、−Ｎ（Ｒ２Ｄ）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２Ｄ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２Ｄ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２Ｄ）２、−Ｎ（Ｒ２Ｄ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ２Ｄ、シアノ、ハロ、又は任意に置換されたＣ１−１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のＲ２Ｄによるものであり、各Ｒ２Ｄは独立して、水素、又は任意に置換されたＣ１−１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のシアノ、ハロ、又はヒドロキシルによるものであり、Ｒ３は水素、又は１つ若しくは複数のシアノ、ハロ若しくはヒドロキシルで任意に置換されたＣ１−６アルキルである）の化合物、及びその薬学的に許容可能な塩を包含する。
【００３３】
特定の化合物では、Ｒ１がＲ１Ａである。幾つかの化合物では、Ｒ１が、任意に置換されたＣ１−１２ヒドロカルビルである。幾つかの化合物では、Ｒ１が、任意に置換されたフェニルである。幾つかの化合物では、Ｒ１が、任意に置換された２員〜１２員のヘテロカルビル（例えば、２員〜８員のヘテロカルビル、２員〜６員のヘテロカルビル、２員〜６員のヘテロカルビル）である。幾つかの化合物では、Ｒ１が、任意に置換されたピリジニル、チオフェン又はイミダゾールである。
【００３４】
特定の化合物では、Ｒ１Ａがハロである。幾つかの化合物では、Ｒ１Ａが−ＯＲ１Ｃ、−Ｎ（Ｒ１Ｃ）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１Ｃ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１Ｃ、又は−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１Ｃ）２である。幾つかの化合物では、Ｒ１Ａが−ＯＲ１Ｃである。
【００３５】
特定の化合物では、Ｒ１Ｂが−Ｎ（Ｒ１Ｃ）２、−ＯＲ１Ｃ、ハロである。
【００３６】
特定の化合物では、Ｒ２ＡとＲ２Ｂとがともに、１つ又は複数のＲ２Ｃで任意に置換された４員〜７員の複素環を形成する。
【００３７】
特定の化合物では、Ｒ１Ｃが水素である。幾つかの化合物では、Ｒ１ＣがＣ１−１２ヒドロカルビル（例えば、メチル、エチル、プロピル等のＣ１−６ヒドロカルビル、Ｃ１−４ヒドロカルビル）である。幾つかの化合物では、Ｒ２Ｃが−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２Ｄ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２Ｄ）２、又は−Ｎ（Ｒ２Ｄ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ２Ｄである。
【００３８】
特定の化合物では、Ｒ２Ｄが水素である。
【００３９】
特定の化合物では、Ｒ２ＤがＣ１−１２ヒドロカルビル（例えば、メチル、エチル、プロピル等のＣ１−６ヒドロカルビル、Ｃ１−４ヒドロカルビル）である。
【００４０】
特定の化合物では、Ｒ３が水素である。
【００４１】
本発明の一実施形態は、式：
【化３】
0006418950.tif 000004
【００４２】
（式中、Ａは環状Ｃ１−１２ヒドロカルビル又は４員〜７員の複素環であり、Ｄは４員〜７員の複素環であり、各Ｒ１Ａは独立して、−ＯＲ１Ｃ、−Ｎ（Ｒ１Ｃ）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１Ｃ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１Ｃ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１Ｃ）２、−Ｎ（Ｒ１Ｃ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ１Ｃ、シアノ、ハロ、又は任意に置換されたＣ１−１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のＲ１Ｂによるものであり、各Ｒ１Ｂは独立して、−ＯＲ１Ｃ、−Ｎ（Ｒ１Ｃ）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１Ｃ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１Ｃ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１Ｃ）２、−Ｎ（Ｒ１Ｃ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ１Ｃ、シアノ又はハロであり、各Ｒ１Ｃは独立して、水素、又は任意に置換されたＣ１−１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のシアノ、ハロ又はヒドロキシルによるものであり、各Ｒ２Ｃは独立して、−ＯＲ２Ｄ、−Ｎ（Ｒ２Ｄ）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２Ｄ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２Ｄ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２Ｄ）２、−Ｎ（Ｒ２Ｄ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ２Ｄ、シアノ、ハロ、又は任意に置換されたＣ１−１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のＲ２Ｄによるものであり、各Ｒ２Ｄは独立して、水素、又は任意に置換されたＣ１−１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のシアノ、ハロ、又はヒドロキシルによるものであり、ｎは１〜３であり、ｍは０〜３である）の化合物、及びその薬学的に許容可能な塩を包含する。
【００４３】
特定の化合物では、Ｄはピペリジニルではない。
【００４４】
特定の化合物では、Ｒ２Ｃは−Ｎ（Ｒ２Ｄ）２ではない。
【００４５】
特定の化合物では、Ａはフェニルではない。
【００４６】
特定の化合物では、ｍは１である。
【００４７】
特定の化合物では、ｍは２である。
【００４８】
特定の化合物では、Ｒ２Ｄはエチルではない。
【００４９】
特定の化合物では、Ｄがピペリジニルであり、Ａがフェニルであり、及びＲ２Ｃが−Ｎ（Ｒ２Ｄ）２である場合、Ｒ２Ｄはエチルではない。
【００５０】
特定の化合物では、Ｄがピペラジン又はピロリジンである。
【００５１】
特定の化合物では、ｎが１である。
【００５２】
特定の化合物では、Ａがピリジニル、チオフェン又はイミダゾールである。
【００５３】
本発明の特定の化合物は、式：
【化４】
0006418950.tif 000005
【００５４】
（式中、ＸがＣＨ又はＮである）の化合物である。
【００５５】
本発明の別の実施形態は、式：
【化５】
0006418950.tif 000006
【００５６】
（式中、ＸがＣＨ又はＮであり、各Ｒ１Ａが独立して、−ＯＲ１Ｃ、−Ｎ（Ｒ１Ｃ）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１Ｃ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１Ｃ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１Ｃ）２、−Ｎ（Ｒ１Ｃ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ１Ｃ、シアノ、ハロ、又は任意に置換されたＣ１−１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のＲ１Ｂによるものであり、各Ｒ１Ｂが独立して、−ＯＲ１Ｃ、−Ｎ（Ｒ１Ｃ）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１Ｃ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１Ｃ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１Ｃ）２、−Ｎ（Ｒ１Ｃ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ１Ｃ、シアノ又はハロであり、各Ｒ１Ｃが独立して、水素、又は任意に置換されたＣ１−１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のシアノ、ハロ又はヒドロキシルによるものであり、各Ｒ２Ｃが独立して、−ＯＲ２Ｄ、−Ｎ（Ｒ２Ｄ）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２Ｄ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２Ｄ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２Ｄ）２、−Ｎ（Ｒ２Ｄ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ２Ｄ、シアノ、ハロ、又は任意に置換されたＣ１−１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のＲ２Ｄによるものであり、各Ｒ２Ｄは独立して、水素、又は任意に置換されたＣ１−１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のシアノ、ハロ又はヒドロキシルによるものであり、ｍは０〜３である）の化合物、及びその薬学的に許容可能な塩を包含する。
【００５７】
特定の化合物では、Ｒ２Ｃが、任意に置換されたフェニル又はピリジニルではない。
【００５８】
特定の化合物では、ＸはＮであり、ｍが１又は２である。
【００５９】
特定の化合物は式：
【化６】
0006418950.tif 000007
の化合物である。
【００６０】
特定の化合物は式：
【化７】
0006418950.tif 000008
の化合物である。
【００６１】
特定の化合物は式：
【化８】
0006418950.tif 000009
の化合物である。
【００６２】
他の化合物は式：
【化９】
0006418950.tif 000010
の化合物である。
【００６３】
本発明の別の実施形態は、式：
【化１０】
0006418950.tif 000011
【００６４】
（式中、ＸがＣＨ又はＮであり、各Ｒ１Ａが独立して、−ＯＲ１Ｃ、−Ｎ（Ｒ１Ｃ）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１Ｃ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１Ｃ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１Ｃ）２、−Ｎ（Ｒ１Ｃ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ１Ｃ、シアノ、ハロ、又は任意に置換されたＣ１−１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のＲ１Ｂによるものであり、各Ｒ１Ｂが独立して、−ＯＲ１Ｃ、−Ｎ（Ｒ１Ｃ）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１Ｃ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１Ｃ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１Ｃ）２、−Ｎ（Ｒ１Ｃ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ１Ｃ、シアノ又はハロであり、各Ｒ１Ｃが独立して、水素、又は任意に置換されたＣ１−１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のシアノ、ハロ又はヒドロキシルによるものであり、各Ｒ２Ｃが独立して、−ＯＲ２Ｄ、−Ｎ（Ｒ２Ｄ）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２Ｄ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２Ｄ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２Ｄ）２、−Ｎ（Ｒ２Ｄ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ２Ｄ、シアノ、ハロ、又は任意に置換されたＣ１−１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のＲ２Ｄによるものであり、各Ｒ２Ｄは独立して、水素、又は任意に置換されたＣ１−１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のシアノ、ハロ又はヒドロキシルによるものであり、ｍは０〜３である）の化合物、及びその薬学的に許容可能な塩を包含する。
【００６５】
特定の化合物は式：
【化１１】
0006418950.tif 000012
の化合物である。
【００６６】
特定の化合物は式：
【化１２】
0006418950.tif 000013
の化合物である。
【００６７】
他の化合物は式：
【化１３】
0006418950.tif 000014
の化合物である。
【００６８】
特定の化合物では、Ｒ１Ａがハロである。幾つかの化合物では、Ｒ１Ａは−ＯＲ１Ｃである。
【００６９】
特定の化合物では、Ｒ１Ｃが、任意に置換されたＣ１−１２ヒドロカルビル（例えば、Ｃ１−６ヒドロカルビル、Ｃ１−４ヒドロカルビル）である。
【００７０】
特定の化合物では、Ｒ２Ｃが−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２Ｄ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２Ｄ）２、又は−Ｎ（Ｒ２Ｄ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ２Ｄである。幾つかの化合物では、Ｒ２Ｃが−Ｃ（Ｏ）Ｒ２Ｄである。
【００７１】
特定の化合物では、Ｒ２Ｄは独立して水素又はＣ１−１２ヒドロカルビル（例えば、Ｃ１−６ヒドロカルビル、Ｃ１−４ヒドロカルビル）である。場合によっては、Ｒ２Ｄは任意に置換されたＣ１−１２ヒドロカルビルであり、任意の置換はアミノ、シアノ、ハロ、ヒドロキシルの１つ又は複数によるものである。
【００７２】
本発明の化合物は１つ又は複数の不斉中心を有することができる。特に指示のない限り、本発明はこの化合物のあらゆる立体異性体とそれらの混合物とを包含する。化合物の個々の立体異性体を、キラル中心を含有する市販の出発材料から、又は鏡像異性生成物の混合物を調製した後、ジアステレオマー混合物への変換後の分離若しくは再結晶化、クロマトグラフ法、又はキラルクロマトグラフカラム上での鏡像異性体の直接分離等の分離によって合成的に調製することができる。特定の立体化学の出発化合物は市販されているか、又は当該技術分野で既知の技法によって作製及び分割することができる。
【００７３】
本開示の或る特定の化合物は、分離可能な異なる安定した立体配座型でも存在し得る。非対称の単結合についての束縛回転に起因する、例えば、立体障害又は環の変形（ring strain）による捻れ非対称（Torsional asymmetry）によって、異なる配座異性体の分離が可能となり得る。本開示はこれらの化合物の各立体配座異性体とそれらの混合物とを含む。
【００７４】
本開示は本発明の化合物で生じる原子の全ての同位体を含むことが意図される。同位体には、原子数が同じであるが、質量数が異なる複数の原子が含まれる。一般例であり限定するものではないが、水素の同位体にはデューテリウムとトリチウムとが含まれる。炭素の同位体には１３Ｃと１４Ｃとが含まれる。本発明の同位体的に標識された化合物は一般的に、当業者に既知の従来技法によって、又は他で用いられている非標識試薬の代わりに適切な同位体的に標識された試薬を用いる本明細書に記載のものに類似するプロセスによって、調製することができる。かかる化合物には多様な潜在用途、例えば、生物活性を特定する際の標準及び試薬としての用途があり得る。安定した同位体の場合、かかる化合物には生物学的、薬理学的又は薬物動態的な特性を有利に変更する可能性があり得る。
【００７５】
本開示の化合物は薬学的に許容可能な塩として存在することができる。本明細書で使用される「薬学的に許容可能な塩」という用語は、正しい医学的判断の範囲内において過度の毒性、刺激、アレルギー反応、又は妥当なベネフィット／リスク比に相応する他の問題若しくは合併症を伴わずに、患者の組織に接触させて使用するのに適しており、その使用目的に対して効果的である、水又は油に可溶性又は分散性の本開示の化合物の塩又は両性イオン体を指す。塩は化合物の最終単離及び精製中に、又は好適な窒素原子と好適な酸とを反応させることにより別々に調製することができる。代表的な酸付加塩としては、酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、クエン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、重硫酸塩、酪酸塩、樟脳酸塩（camphorate）、カンファースルホン酸塩；ジグルコン酸塩、二臭化水素酸塩、二塩酸塩、二ヨウ化水素酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、メシチレンスルホン酸塩、メタンスルホン酸塩、ナフチレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、シュウ酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩（pectinate）、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩（propionate）、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、トリクロロ酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、リン酸塩、グルタミン酸塩、重炭酸塩、パラ−トルエンスルホン酸塩、及びウンデカン酸塩が挙げられる。薬学的に許容可能な付加塩を形成するのに用いることができる酸の例としては、塩酸、臭化水素酸、硫酸及びリン酸等の無機酸とシュウ酸、マレイン酸、コハク酸及びクエン酸等の有機酸とが挙げられる。
【００７６】
塩基付加塩は、カルボキシ基を、金属陽イオンの水酸化物、炭酸塩若しくは重炭酸塩等の好適な塩基、又はアンモニア若しくは有機の第一級アミン、第二級アミン若しくは第三級アミンと反応させることにより、化合物の最終単離及び精製中に調製することができる。薬学的に許容可能な塩の陽イオンとしては、リチウム、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム及びアルミニウムと、アンモニウム、テトラメチルアンモニウム、テトラエチルアンモニウム、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、ジエチルアミン、エチルアミン、トリブチルアミン、ピリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリン、Ｎ−メチルピペリジン、Ｎ−メチルモルホリン、ジシクロヘキシルアミン、プロカイン、ジベンジルアミン、Ｎ，Ｎ−ジベンジルフェネチルアミン及びＮ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン等の非毒性の第四級アミンの陽イオンとが挙げられる。塩基付加塩の形成に有用な他の代表的な有機アミンとしては、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペリジン及びピペラジンが挙げられる。
【００７７】
本発明の特定の化合物は、下記の実施例に記載されるＰ８１フィルタープレートアッセイにおいて測定されるように０．１μＭ、０．０１μＭ又は０．００１μＭ未満のＩＣ５０でＡＡＫ１を阻害する。本発明の特定の化合物は、下記の実施例に記載されるＨＥＫ２８１細胞ベースアッセイにおいて測定されるように０．１μＭ、０．０１μＭ又は０．００１μＭ未満のＩＣ５０でＡＡＫ１を阻害する。
【００７８】
５．３．  合成方法
本発明の化合物（すなわち本明細書に開示の化合物）は、下記の方法及び有機化学の当業者に既知の方法を用いて調製することができる。特定の化合物は一般式：
【化１４】
0006418950.tif 000015
【００７９】
（式中、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は本明細書で規定されている）の化合物であり、その塩を含む。これらの化合物は下記に概説される方法によって調製することができる。
【００８０】
上に示した式の化合物は、以下に概説する方法を用いて調製することができる。スキーム１では、式１の化合物の塩素をアミンで置換して２を得る。２の臭素化により３が生じる。代替的には、１を初めに臭素化して４を得た後、アミン置換により３を得ることができる。適切なボロン酸［Ｒ１Ｂ（ＯＨ）２］を用いた３の鈴木カップリングにより式５の化合物が得られる。
【００８１】
【化１５】
0006418950.tif 000016
【００８２】
スキーム２では、置換アセトニトリル６がギ酸エチルと反応して７が生じる。７とヒドラジン水和物との縮合により８が得られる。８と１，３−ジメチルピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオンとの反応により９が生じる。９とアミンとの更なる反応により式５の化合物が得られる。
【００８３】
【化１６】
0006418950.tif 000017
【００８４】
スキーム３では、式１０の化合物は２とＮＩＳとを反応させることによって調製することができる。１０と２，２−ジフルオロ−２−（フルオロスルホニル）酢酸メチルとの反応により式１１の化合物が得られる。
【００８５】
【化１７】
0006418950.tif 000018
【００８６】
５．４．  使用方法
本発明の一実施形態は、アダプター関連キナーゼ１（ＡＡＫ１）をｉｎ  ｖｉｔｒｏ及びｉｎ  ｖｉｖｏの両方で阻害する方法であって、ＡＡＫ１を本発明の化合物と接触させることを含む、方法を包含する。
【００８７】
別の実施形態は、ＡＡＫ１活性によって媒介される疾患及び障害を治療及び管理する方法を包含する。ＡＡＫ１活性によって媒介される疾患及び障害は、ＡＡＫ１活性によって影響を受ける、少なくとも１つの症状、重症度又は徴候を有する疾患及び障害である。かかる疾患及び障害の例としては、アルツハイマー病、双極性障害、疼痛、パーキンソン病及び統合失調症（統合失調症における認知障害を含む）が挙げられると考えられる。特定の方法は、それを必要とする患者（ヒト又は他の哺乳動物）に、治療又は予防に有効な量のＡＡＫ１阻害剤（例えば、本明細書で開示される化合物）を投与することを含む。
【００８８】
本発明の別の実施形態は、疾患又は障害を治療又は管理する方法であって、該方法はそれを必要とする患者に治療又は予防に有効な量のＡＡＫ１阻害剤を投与することを含み、上記疾患又は障害がアルツハイマー病、双極性障害、疼痛、パーキンソン病又は統合失調症（統合失調症における認知障害を含む）である、方法を包含する。特定のタイプの疼痛としては、慢性疼痛、急性疼痛及び神経因性疼痛が挙げられる。特定のタイプの神経因性疼痛としては線維筋痛症及び末梢神経障害（例えば、糖尿病性神経障害）が挙げられる。
【００８９】
疾患又は障害を治療又は管理するのに使用する場合、本発明の化合物を、１つ又は複数の薬学的に許容可能な担体、希釈剤又は賦形剤を含む医薬組成物の一部として投与するのが好ましい。
【００９０】
医薬組成物又は配合物を単位用量当たり所定量の有効成分を含有する単位用量形態で与えることができる。１日に付き体重１キログラム当たり約０．０１ミリグラム〜約２５０ミリグラム（「ｍｇ／ｋｇ」）、好ましくは１日に付き体重１ｋｇ当たり約０．０５ｍｇ〜約１００ｍｇの投与量レベルの本開示の化合物は、疾患の予防及び治療のための単剤療法において典型的なものである。典型的に、本開示の医薬組成物は１日に付き約１回〜約５回、又は代替的には持続注入として投与される。かかる投与は長期療法又は救急療法として使用することができる。単一剤形を作製するのに担体材料と組み合わせることができる有効成分の量は治療する病態、病態の重症度、投与時間、投与経路、用いる化合物の排出率、治療期間、並びに患者の年齢、性別、体重及び状態によって変わる。好ましい単位投与量配合物は、本明細書の上記で述べられているように有効成分の１日量若しくは１日未満量（sub-dose）又はその適切な分量を含有するものである。治療は実質的に適量に満たない少量の化合物から開始してもよい。その後、その環境下で最適な効果が達成されるまで投与量を少しずつ増大させる。概して、化合物は一般的に悪い又は有害な副作用を引き起こすことなく効果的な結果が得られる濃度レベルで投与されるのが最も望ましい。
【００９１】
本発明の化合物は１つ又は複数の追加の治療剤又は予防剤と組み合わせて投与することができる。例えば、疼痛の治療に使用される場合、可能な追加の作用剤としては免疫抑制剤及び抗炎症剤が挙げられる。
【００９２】
本発明の方法及び組成物における使用に適した免疫抑制剤には当該技術分野で既知のものが含まれる。例としては、アミノプテリン、アザチオプリン、シクロスポリンＡ、Ｄ−ペニシラミン、金塩、ヒドロキシクロロキン、レフルノミド、メトトレキサート、ミノサイクリン、ラパマイシン、スルファサラジン、タクロリムス（ＦＫ５０６）及びそれらの薬学的に許容可能な塩が挙げられる。特定の免疫抑制剤はメトトレキサートである。
【００９３】
更なる例としては、アダリムマブ、セルトリズマブペゴール、エタネルセプト及びインフリキシマブ等の抗ＴＮＦ抗体が挙げられる。他には、アナキンラ等のインターロイキン−１遮断剤が挙げられる。他には、リツキシマブ等の抗Ｂ細胞（ＣＤ２０）抗体が挙げられる。他には、アバタセプト等のＴ細胞活性化遮断剤が挙げられる。
【００９４】
更なる例としては、ミコフェノール酸モフェチル（ＣｅｌｌＣｅｐｔ（商標））及びミコフェノール酸（Ｍｙｆｏｒｔｉｃ（商標））等のイノシン一リン酸脱水素酵素阻害剤が挙げられる。
【００９５】
本発明の方法及び組成物における使用に適した抗炎症薬には当該技術分野で既知のものが含まれる。例としてはグルココルチコイド及びＮＳＡＩＤが挙げられる。
【００９６】
グルココルチコイドの例としては、アルドステロン、ベクロメタゾン、ベタメタゾン、コルチゾン、デオキシコルチコステロン、デキサメタゾン、フルドロコルチゾン、ヒドロコルチゾン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾロン、プレドニゾン、トリアムシノロン及びそれらの薬学的に許容可能な塩が挙げられる。
【００９７】
ＮＳＡＩＤの例としては、サリチル酸塩（例えば、アスピリン、アモキシプリン、ベノリレート、サリチル酸コリンマグネシウム、ジフルニサル、ファイスラミン、サリチル酸メチル、サリチル酸マグネシウム、サリチルサリチル酸及びそれらの薬学的に許容可能な塩）、アリールアルカン酸（例えば、ジクロフェナク、アセクロフェナク、アセメタシン、ブロムフェナク、エトドラク、インドメタシン、ナブメトン、スリンダク、トルメチン及びそれらの薬学的に許容可能な塩）、アリールプロピオン酸（例えば、イブプロフェン、カルプロフェン、フェンブフェン、フェノプロフェン、フルルビプロフェン、ケトプロフェン、ケトロラック、ロキソプロフェン、ナプロキセン、オキサプロジン、チアプロフェン酸、スプロフェン及びそれらの薬学的に許容可能な塩）、アリールアントラニル酸（例えば、メクロフェナム酸、メフェナム酸及びそれらの薬学的に許容可能な塩）、ピラゾリジン誘導体（例えば、アザプロパゾン、メタミゾール、オキシフェンブタゾン、フェニルブタゾン、スルフィンピラゾン及びそれらの薬学的に許容可能な塩）、オキシカム（例えば、ロルノキシカム、メロキシカム、ピロキシカム、テノキシカム及びそれらの薬学的に許容可能な塩）、ＣＯＸ−２阻害剤（例えば、セレコキシブ、エトリコキシブ、ルミラコキシブ、パレコキシブ、ロフェコキシブ、バルデコキシブ及びそれらの薬学的に許容可能な塩）及びスルホンアニリド（例えば、ニメスリド及びその薬学的に許容可能な塩）が挙げられる。
【００９８】
疼痛（神経因性疼痛及び炎症性疼痛を含むが、それらに限定されない）の治療に使用される他の作用剤としては、プレガバリン、リドカイン、デュロキセチン、ガバペンチン、カルバマゼピン、カプサイシン及び他のセロトニン／ノルエピネフリン／ドーパミン再取込み阻害剤、並びに鎮静剤（オキシコンチン、モルヒネ及びコデイン等）のような作用剤が挙げられる。
【００９９】
糖尿病、感染症（例えば、帯状疱疹又はＨＩＶ感染症）又はがん等の既知の疾患又は病態によって引き起こされる疼痛の治療において、本発明の化合物を、根本的な疾患又は病態に向けた１つ又は複数の追加の治療剤又は予防剤と併せて投与することができる。例えば、糖尿病性神経障害の治療に使用する場合、本発明の化合物を、１つ又は複数の抗糖尿病剤、抗高血糖剤、抗高脂血症／脂質低下剤、抗肥満剤、抗高血圧剤及び食欲抑制剤と併せて投与することができる。抗糖尿病剤の例としては、ビグアニド（例えば、メトホルミン、フェンホルミン）、グルコシダーゼ阻害剤（例えば、アカルボース、ミグリトール）、インスリン（インスリン分泌促進物質及びインスリン増感剤を含む）、メグリチニド（例えば、レパグリニド）、スルホニル尿素（例えば、グリメピリド、グリブリド、グリクラジド、クロルプロパミド及びグリピジド）、ビグアニド／グリブリド複合薬（例えば、グルコバンス）、チアゾリジンジオン（例えば、トログリタゾン、ロシグリタゾン及びピオグリタゾン）、ＰＰＡＲ−αアゴニスト、ＰＰＡＲ−γアゴニスト、ＰＰＡＲ  α／γデュアルアゴニスト、グリコーゲンホスホリラーゼ阻害剤、脂肪酸結合タンパク質（ａＰ２）の阻害剤、グルカゴン様ペプチド−１（ＧＬＰ−１）、又はＧＬＰ−１受容体の他のアゴニスト、ジペプチジルペプチダーゼＩＶ（ＤＰＰ４）阻害剤及びナトリウム−グルコース共輸送体２（ＳＧＬＴ２）阻害剤（例えば、ダパグリフロジン、カナグリフロジン及びＬＸ−４２１１）が挙げられる。
【０１００】
５．５．  医薬組成物
医薬配合物は、任意の適切な経路による、例えば、経口（口腔又は舌下を含む）、直腸、鼻腔、局所（口腔、舌下又は経皮を含む）、膣内、又は非経口（皮下、皮内（intracutaneous）、筋内、関節内、滑液嚢内、胸骨内、髄腔内、病変内、静脈内又は皮内（intradermal）の注射又は注入を含む）の経路による投与に適合させることができる。かかる配合物は、薬学分野において知られる任意の方法によって、例えば、有効成分を担体（複数の場合もあり）又は賦形剤（複数の場合もあり）と混ぜ合わせることによって調製することができる。経口投与又は注射による投与が好ましい。
【０１０１】
経口投与に適合させた医薬配合物を、カプセル若しくは錠剤、粉末若しくは顆粒、水性液体若しくは非水性液体中の溶液若しくは懸濁液、食用のフォーム（foams）若しくはホイップ、又は水中油型液体エマルション若しくは油中水型エマルション等の不連続単位として与えることができる。
【０１０２】
例えば、錠剤又はカプセルの形態での経口投与については、有効薬物成分をエタノール、グリセロール、水等の経口用の非毒性の薬学的に許容可能な不活性担体と組み合わせることができる。粉末は化合物を好適な微細サイズに粉砕して、食用の炭水化物、例えば、デンプン又はマンニトール等の同様に粉砕した医薬担体と混合することによって調製される。香味剤、防腐剤、分散剤及び着色剤が存在していてもよい。
【０１０３】
カプセルは、上記のように粉末混合物を調製して、形成されたゼラチンシースに充填することによって作製される。コロイドシリカ、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム又は固体のポリエチレングリコール等の滑剤及び滑沢剤を充填操作前に粉末混合物に添加することができる。カプセルが消化される際の薬剤のアベイラビリティを改善するのに、寒天（agar-agar）、炭酸カルシウム又は炭酸ナトリウム等の崩壊剤又は可溶化剤も添加することができる。
【０１０４】
その上、所望又は必要とされる場合、好適な結合剤、滑沢剤、崩壊剤及び着色剤も混合物に組み込むことができる。好適な結合剤としては、デンプン、ゼラチン、グルコース又はβ−ラクトース等の天然糖、トウモロコシ甘味料、アカシア、トラガカント又はアルギン酸ナトリウム等の天然ガム及び合成ガム、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール等が挙げられる。これらの剤形に用いられる滑沢剤としては、オレイン酸ナトリウム、塩化ナトリウム等が挙げられる。崩壊剤としては、デンプン、メチルセルロース、寒天、ベントナイト、キサンタンガム等が挙げられるが、これらに限定されない。錠剤は、例えば、粉末混合物を調製し、造粒又はスラッギング（slugging）を行い、滑沢剤及び崩壊剤を添加して、錠剤へと圧縮することによって配合される。粉末混合物は、好適に粉砕した化合物を、上記のような希釈剤又は基剤と、更に任意でカルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン又はポリビニルピロリドン等の結合剤、パラフィン等の溶解遅延剤、第４級塩等の再吸収促進剤、及び／又はベントナイト、カオリン若しくはリン酸二カルシウム等の吸収剤と混合することによって調製される。粉末混合物は、シロップ剤、デンプン糊、アカディア粘液（acadia mucilage）等の結合剤、又はセルロース材料若しくはポリマー材料の溶液で湿潤させ、篩にかけることによって造粒することができる。造粒の代わりとして、粉末混合物を錠剤機に通し、その結果として不完全に形成されたスラッグ（slugs）が顆粒へと粉砕される。顆粒は、錠剤成形ダイへの貼り付きを抑えるために、ステアリン酸、ステアリン酸塩、タルク又は鉱油の添加によって潤滑化することができる。次いで潤滑化した混合物を錠剤へと圧縮成形する。本開示の化合物を自由流動不活性担体と組み合わせて、造粒工程又はスラッギング工程を通すことなく直接、錠剤へと圧縮成形することもできる。シェラックのシーリングコート（sealing coat）からなる透明な又は不透明な保護コーティング、糖又はポリマー材料のコーティング、及びワックスの研磨コーティングを提供することができる。染料をこれらのコーティングに添加して、異なる単位投与量を識別させることができる。
【０１０５】
溶液、シロップ剤及びエリキシル剤等の経口流体を、所与の分量に所定量の化合物が含まれるように投与量単位形態で調製することができる。シロップ剤は好適に風味付けされた水溶液中に化合物を溶解することによって調製することができるが、エリキシル剤は非毒性ビヒクルの使用によって調製される。エトキシル化イソステアリルアルコール及びポリオキシエチレンソルビトールエーテル等の可溶化剤及び乳化剤、防腐剤、ペパーミントオイル若しくは天然甘味料等の香味用添加物、又はサッカリン若しくは他の人工甘味料等も添加することができる。
【０１０６】
必要に応じて、経口投与用の単位投与量配合物をマイクロカプセル化することができる。配合物は、例えば、粒子状材料をポリマー、ワックス等でコーティングするか又はそれらに包埋することによって放出を延長又は持続させるように調製することもできる。
【０１０７】
式（Ｉ）の化合物及びその薬学的に許容可能な塩を、小型単ラメラ小胞、大型単ラメラ小胞及び多重ラメラ小胞等のリポソーム送達系の形態で投与することもできる。リポソームは、コレステロール、ステアリルアミン又はホスファチジルコリン等の多様なリン脂質から形成することができる。
【０１０８】
式（Ｉ）の化合物及びその薬学的に許容可能な塩を、化合物分子が連結する個々の担体としてのモノクローナル抗体の使用によって送達することもできる。この化合物は標的化可能な薬物担体である可溶性ポリマーと連結することもできる。かかるポリマーには、ポリビニルピロリドン、ピランコポリマー、ポリヒドロキシプロピルメタクリルアミドフェノール、ポリヒドロキシエチルアスパルトアミドフェノール、又はパリトイル（palitoyl）残基で置換されたポリエチレンオキシドポリリジンが含まれ得る。さらに、この化合物は、薬物の制御放出を達成するのに有用な生分解性ポリマー群、例えば、ポリ乳酸、ポリイプシロンカプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリアセタール、ポリジヒドロピラン、ポリシアノアクリレート、及びヒドロゲルの架橋又は両親媒性ブロックコポリマーに連結することができる。
【０１０９】
経皮投与に適合させた医薬配合物を、長期間、レシピエントの表皮への密接な接触を維持することを目的とした個別のパッチとして与えることができる。例えば、有効成分をPharmaceutical Research 1986, 3（6）, 318に概説されるようにイオントフォレーシスによってパッチから送達させることができる。
【０１１０】
局所投与に適合させた医薬配合物を、軟膏、クリーム、懸濁液、ローション、粉末、溶液、ペースト、ジェル、噴霧剤、エアロゾル又はオイルとして配合することができる。
【０１１１】
直腸投与に適合させた医薬配合物を坐剤又は浣腸剤として与えることができる。
【０１１２】
担体が固体の鼻腔投与に適合させた医薬配合物には、嗅ぎタバコ（snuff）を摂取するように、すなわち鼻に近付けた粉末容器からの鼻腔を通した急速吸入によって投与される、粒径が例えば、２０ミクロン〜５００ミクロンの範囲の粗粉末が含まれる。鼻噴霧剤又は点鼻剤として投与される担体が液体の好適な配合物には有効成分の水溶液又は油溶液が含まれる。
【０１１３】
吸入による投与に適合させた医薬配合物には、様々なタイプの加圧式定量噴霧器、ネブライザ又は吸入器を用いて発生させることができる微細粒子の粉塵又は煙霧が含まれる。
【０１１４】
膣内投与に適合させた医薬配合物を、ペッサリー、タンポン、クリーム、ジェル、ペースト、フォーム、又は噴霧配合物として与えることができる。
【０１１５】
非経口投与に適合させた医薬配合物には、抗酸化剤、バッファー、静菌薬及び配合物を目的のレシピエントの血液と等張にする溶質を含有し得る水性及び非水性の滅菌注射溶液、並びに懸濁化剤及び増粘剤を含み得る水性及び非水性の滅菌懸濁液が含まれる。この配合物は単用量又は多用量の容器、例えば、封止されたアンプル及びバイアル内に与えることができ、使用の直前に滅菌液体担体、例えば、注射用水を添加するだけでよいフリーズドライ（凍結乾燥）条件で保存することができる。即席の注射溶液及び懸濁液を滅菌粉末、顆粒及び錠剤から調製することができる。
【０１１６】
この配合物は、上記で特に言及される成分に加えて、対象となる配合物のタイプを考慮して当該技術分野において従来的な他の作用剤を含むことができる、例えば、経口投与に適したものには香味剤が含まれ得ることを理解されたい。
【実施例】
【０１１７】
５．６．  実施例
本発明の或る特定の態様は下記実施例から理解することができる。
【０１１８】
５．６．１．  ＡＡＫ１ノックアウトマウス
ＡＡＫ１遺伝子の破壊に関するホモ接合型（−／−）マウスを遺伝子トラップ法及び相同組換えという２つの方法によって準備した。
【０１１９】
遺伝子トラップ法は、突然変異原としてレポーター又は選択可能なマーカー遺伝子をコードするＤＮＡのフラグメントを使用するランダム挿入突然変異の方法である。遺伝子トラップベクターは、細胞スプライシング機構によって、ベクターでコードされたエクソンが細胞ｍＲＮＡへとスプライシングするようにイントロン又は遺伝子に組み込まれるように設計されている。一般的に遺伝子トラップベクターは、強いスプライスアクセプター配列が先行しプロモーターは先行していない、選択可能なマーカー配列を含有する。このため、かかるベクターが遺伝子に組み込まれると、細胞スプライシング機構によって、エクソンはトラップされた遺伝子から選択可能なマーカー配列の５’末端上へとスプライシングする。典型的に、かかる選択可能なマーカー遺伝子は、遺伝子をコードするベクターがイントロンに組み込まれている場合にのみ発現することができる。次いで得られる遺伝子トラップ事象は選択的培養物を生存させることができる細胞を選択することによって特定される。
【０１２０】
胚性幹細胞（マウス派生株Ａ１２９由来のＬｅｘ−１細胞）は、遺伝子操作されたベクター配列の少なくとも一部を対象の遺伝子に挿入させることを含むプロセスによって突然変異させて、突然変異された胚性幹細胞を胚盤胞に微量注入して、次いでそれを偽妊娠雌性宿主に導入して、確立された方法を用いて出産させた。例えば、"Mouse Mutagenesis", 1998, Zambrowicz et al., eds., Lexicon Press, The Woodlands, TXを参照されたい。その後、得られるキメラ動物を繁殖させ、対象の遺伝子に遺伝子操作による突然変異を含有する対立遺伝子の生殖細胞系伝達が可能な子孫を産生した。
【０１２１】
ＡＡＫ１遺伝子が破壊されたマウスは相同組換えによっても作製された。この場合、マウスＡＡＫ１遺伝子の第２のコーディングエクソン（ＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿１７７７６２を参照されたい）を当該技術分野で既知の方法によって除去した。例えば、米国特許第５，４８７，９９２号、同第５，６２７，０５９号及び同第５，７８９，２１５号を参照されたい。
【０１２２】
ＡＡＫ１遺伝子の破壊に関するホモ接合型（−／−）マウスを、ＡＡＫ１遺伝子の破壊に関するヘテロ接合型（＋／−）マウス及び野生型（＋／＋）同腹子とともに研究した。この分析の間、マウスに対して、哺乳動物の被験体において主な器官系の機能を評価するように設計された一連の統合医療診断法を用いる医学的精密検査を行った。ホモ接合型（−／−）「ノックアウト」マウスをそのヘテロ接合型（＋／−）及び野生型（＋／＋）の同腹子とともに研究した。ＡＡＫ１遺伝子の破壊をサザン分析によって確認した。ＡＡＫ１のマウスホモログの発現をマウスの脳、脊髄、眼、胸腺、脾臓、肺、腎臓、肝臓、骨格筋、骨、胃、小腸及び結腸、心臓、脂肪、喘息肺、ＬＰＳ肝臓、血液、輪状化した心臓、大動脈（aortic tree）、前立腺及び乳腺（５週齢の未交尾（virgin）、成体の未交尾、１２ＤＰＣ、産後３日目（授乳）、離乳後３日目（初期乳腺退縮）、及び離乳後７日目（後期乳腺退縮））においてＲＴ−ＰＣＲによって検出した。
【０１２３】
ＡＡＫ１ホモ接合型（−／−）及びその野生型（＋／＋）同腹子を、急性及び持続性の侵害受容反応を評価するためにホルマリン脚試験を用いて試験した。これらの試験には、Ａｕｔｏｍａｔｉｃ  Ｎｏｃｉｃｅｐｔｉｏｎ  Ａｎａｌｙｚｅｒ（カリフォルニア大学サンディエゴ校のOzaki labから購入）を使用した。試験の３０分前に金属バンドを各マウスの左後肢に巻いた。３０分の馴化期間の後、２０μｌの５％ホルマリンを左後肢の背面に皮下注射する。マウスを個々に４５分間、円筒型のチャンバに収容した。コンピューターによって、電磁場による１分当たりのフリンチ回数（flinches）、第１相（最初の８分である急性期）の総フリンチ回数、及び第２相（２０分〜４０分の間の期間である持続期）の総フリンチ回数を記録した。Yaksh TL, Ozaki G, McCumber D, Rathbun M, Svensson C, Malkmus S, Yaksh MC.  An automated flinch detecting system for use in the formalin nociceptive bioassay. J Appl Physiol., 2001; 90:2386-402を参照されたい。
【０１２４】
図１に示されるように、第１相及び第２相のデータは、ホモ接合型（−／−）雌性マウス（ｎ＝１６）、野生型雌性マウス（ｎ＝１５）、ホモ接合型（−／−）雄性マウス（ｎ＝９）、及び野生型雄性マウス（ｎ＝１８）を用いて入手した。全ての群及び両相において、ＡＡＫ１ホモ接合型（−／−）マウスは、その野生型（＋／＋）同腹子よりも記録された脚フリンチが大幅に少なかった。
【０１２５】
５．６．２．  ［３−（４−アミノメチル−フェニル）−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル］−ブチル−アミンの合成
【化１８】
0006418950.tif 000019
【０１２６】
パートＡ．  ブチル−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル−アミン
【化１９】
0006418950.tif 000020
【０１２７】
Ｎ２ブランケット下のブチルアミン［１０９−７３−９］（６．２ｍＬ、６２．７ｍｍｏｌ）中の５−クロロ−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン［２９２７４−２４−］（９５５．４ｍｇ、６．２ｍｍｏｌ）の溶液を６５℃で１７時間磁気撹拌した後、ブライン（飽和重炭酸ナトリウム水溶液でｐＨを１０に調整した）と酢酸エチルとで分配した。相分離した抽出物を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ヘプタンで希釈して、ブチル−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル−アミンを１．２ｇの黄色の粉末として沈殿させた（ｍｐ．７５℃〜７６℃）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ０．９１（ｔ，Ｊ＝７．３３Ｈｚ，３Ｈ）１．３７（ｄｑ，Ｊ＝１５．００、７．２９Ｈｚ，２Ｈ）１．４７〜１．５９（ｍ，２Ｈ）３．２４〜３．３４（ｍ，２Ｈ）５．９４（ｄ，Ｊ＝１．５２Ｈｚ，１Ｈ）６．２２（ｄ，Ｊ＝７．５８Ｈｚ，１Ｈ）７．３５（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）７．７４（ｄ，Ｊ＝２．２７Ｈｚ，１Ｈ）８．４０（ｄ，Ｊ＝７．５８Ｈｚ，１Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  １３．６９、１９．７１、３０．６５、９１．００、９９．９５、１３４．７０、１４３．４５、１４８．３７、１５５．４３。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  １９１．１［（Ｍ＋Ｈ）］＋、Ｃ１０Ｈ１４Ｎ４についての算出値：１９０．２５。
【０１２８】
パートＢ．  （３−ブロモ−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）−ブチル−アミン
【化２０】
0006418950.tif 000021
【０１２９】
酢酸ナトリウム［１２７−０９−３］（０．７ｇ、８．９ｍｍｏｌ）を、氷酢酸（１００ｍＬ）中のブチル−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル−アミン（１．１ｇ、５．９ｍｍｏｌ）の溶液に添加し、固体が全て溶解するまで常温で撹拌した。臭素［７７２６−９５−６］（０．３ｍＬ、６．４ｍｍｏｌ）を常温の緩衝酢酸反応溶液に５分かけて一滴ずつ添加した。臭素添加の完了後、懸濁液を更に１５分間撹拌した後、５００ｍＬの撹拌水にゆっくりと注いだ。飽和重炭酸ナトリウム水溶液を、上清のｐＨがｐＨ試験紙によっておよそ８と決定されるまで撹拌懸濁液に添加した後、懸濁液を酢酸エチルで抽出した。抽出物を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、６０％（ｖ／ｖ）の酢酸エチル／ヘプタンで溶出）にかけて、１．２ｇのオフホワイト色の固体を得た（ｍｐ．９４℃〜９５℃）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ０．９３（ｔ，Ｊ＝７．３３Ｈｚ，３Ｈ）１．３１〜１．４４（ｍ，２Ｈ）１．５６（ｑｕｉｎ，Ｊ＝７．２０Ｈｚ，２Ｈ）３．３１〜３．３８（ｍ，２Ｈ）６．２８（ｄ，Ｊ＝７．５８Ｈｚ，１Ｈ）７．６１（ｔ，Ｊ＝５．０５Ｈｚ，１Ｈ）７．８５（ｓ，１Ｈ）８．４２（ｄ，Ｊ＝７．５８Ｈｚ，１Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  １３．６７、１９．６４、３０．５３、７６．９９、１００．８７、１３５．１４、１４３．０３、１４５．１３、１５６．０９。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ２６９．０／２７１．０［（Ｍ＋Ｈ）］＋、Ｃ１０Ｈ１３ＢｒＮ４についての算出値：２６９．１５。
【０１３０】
パートＣ．  ［３−（４−アミノメチル−フェニル）−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル］−ブチル−アミン
【化２１】
0006418950.tif 000022
【０１３１】
５０ｍＬ容の丸底フラスコに入った（３−ブロモ−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）−ブチル−アミン（３５０．３ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）、４−アミノメチルフェニルボロン酸塩酸塩［７５７０５−２１−４］（３３７．１ｍｇ、１．８ｍｍｏｌ）、三塩基性リン酸カリウム一水和物［２７１７６−１０−９］（６０１．６ｍｇ、２．６ｍｍｏｌ）及び［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）ジクロロメタン錯体［９５４６４−０５−４］（１１７．２ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）の混合物に、１，２−ジメトキシエタン（２５ｍＬ）中の３０％（ｖ／ｖ）水の溶液及び磁気撹拌子を加えた。反応ポットを還流冷却器に取り付け、常温油浴に入れ、システムを急速撹拌しながら１０回の排気／Ｎ２ブランケットサイクルに供した。急速撹拌したＮ２ブランケット反応物を８５℃の油浴温度に１７時間加熱した後、冷却し、ブラインと酢酸エチルとで分配した。相分離した抽出物を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、蒸発させて褐色の油を得て、これを分取ＲＰ−ＨＰＬＣで精製して、７１．９ｍｇの［３−（４−アミノメチル−フェニル）−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル］−ブチル−アミン一酢酸塩を白色の固体として得た（ｍｐ．１７１℃〜１７２℃）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ０．９７（ｔ，Ｊ＝７．３９Ｈｚ，３Ｈ）１．４３（ｓｘｔ，Ｊ＝７．３６Ｈｚ，２Ｈ）１．６４（ｑｕｉｎ，Ｊ＝７．１７Ｈｚ，２Ｈ）３．４３（ｑ，Ｊ＝６．４７Ｈｚ，２Ｈ）３．７１〜３．８４（ｍ，２Ｈ）６．２９（ｄ，Ｊ＝７．５０Ｈｚ，１Ｈ）７．３４（ｍ，Ｊ＝８．１６Ｈｚ，２Ｈ）７．６２〜７．７１（ｍ，１Ｈ）８．０５（ｍ，Ｊ＝７．９４Ｈｚ，２Ｈ）８．３２（ｓ，１Ｈ）８．４６（ｄ，Ｊ＝７．５０Ｈｚ，１Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  １３．０３、１４．１１、１９．６３、２９．１１、３０．３３、４４．３４、４５．６２、１０３．７５、１２４．０２、１２４．１４、１２６．９５、１２７．８６、１３１．８５、１３５．０７、１３７．５０、１４１．１５、１４１．３６、１４４．４６、１５５．５０、１７２．５２。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ２９６．１［（Ｍ＋Ｈ）］＋、Ｃ１７Ｈ２１Ｎ５についての算出値：２９５．３９。
【０１３２】
５．６．３．  （２−メトキシ−エチル）−｛３−［４−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−フェニル］−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル｝−アミンの合成
【化２２】
0006418950.tif 000023
【０１３３】
パートＡ．  Ｎ−（２−メトキシエチル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−アミン
【化２３】
0006418950.tif 000024
【０１３４】
５−クロロ−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン［２９２７４−２４−６］（５２５．５ｍｇ、３．４ｍｍｏｌ）及び２−メトキシ−エチルアミン（３．０ｍＬ、３４．５ｍｍｏｌ）の撹拌混合物を６５℃に１７時間加熱し、冷却し、ブライン（飽和重炭酸ナトリウム水溶液でｐＨを８に調整した）と酢酸エチルとで分配した。抽出物を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、蒸発させて、７０６．４ｍｇの淡黄色の固体を得た。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  １９３．１［（Ｍ＋Ｈ）］＋、Ｃ９Ｈ１２Ｎ４Ｏの算出値：１９２．２２。
【０１３５】
パートＢ．  （３−ブロモ−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）−（２−メトキシ−エチル）−アミン
【化２４】
0006418950.tif 000025
【０１３６】
酢酸ナトリウム［１２７−０９−３］（４５７．６ｍｇ、５．６ｍｍｏｌ）を、氷酢酸（４０ｍＬ）中のＮ−（２−メトキシエチル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−アミン（７０６．４ｍｇ、３．７ｍｍｏｌ）の溶液に添加し、固体が全て溶解するまで常温で撹拌した。臭素［７７２６−９５−６］（０．２ｍＬ、３．７ｍｍｏｌ）を常温の緩衝酢酸反応溶液に２分かけて添加した後、反応溶液を撹拌水（１Ｌ）にゆっくりと注いだ。上清のｐＨがｐＨ試験紙によっておよそ８と決定されるまでｐＨを固体重炭酸ナトリウムの添加によって上昇させた。沈殿生成物を濾過によって単離し、濾過ケーキを水で洗浄し、乾燥させて８１９．６ｍｇの白色の粉末を得た。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ２７１．０／２７３．０［（Ｍ＋Ｈ）］＋、Ｃ９Ｈ１１ＢｒＮ４Ｏの算出値：２７１．１２。
【０１３７】
パートＣ．  （２−メトキシ−エチル）−｛３−［４−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−フェニル］−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル｝−アミン
【化２５】
0006418950.tif 000026
【０１３８】
５０ｍＬ容の丸底フラスコに入った（３−ブロモ−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）−（２−メトキシ−エチル）−アミン（３０７．７ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）、（４−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェニル）ボロン酸［１７９９４２−５５−３］（２５９．６ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）、三塩基性リン酸カリウム一水和物［２７１７６−１０−９］（５２２．４ｍｇ、２．３ｍｍｏｌ）及び［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロ−パラジウム（ＩＩ）ジクロロメタン錯体［９５４６４−０５−４］（１０６．３ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）の混合物に、１，２−ジメトキシエタン（１２ｍＬ）中の３０％（ｖ／ｖ）水の溶液及び磁気撹拌子を加えた。反応ポットを還流冷却器に取り付け、常温油浴に入れ、システムを急速撹拌しながら１０回の排気／Ｎ２ブランケットサイクルに供した。急速撹拌したＮ２ブランケット反応物を８５℃の油浴温度に４時間加熱した後、冷却し、メタノールで希釈し、重力濾過した。濾液をシリカゲルに予備吸着し（preabsorbed）、フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、１０％（ｖ／ｖ）メタノール／酢酸エチル中の１％ＮＨ４ＯＨで溶出）にかけた。所望のクロマトグラフィー画分を合わせ、蒸発させ、２−プロパノールに再溶解し、撹拌ヘプタン中に重力濾過して、精製生成物を沈殿させた。（２−メトキシ−エチル）−｛３−［４−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−フェニル］−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル｝−アミンを、濾過によって９６．３ｍｇの固形物として単離した（ｍｐ．２６４℃〜２６５℃（ｄｅｃ．））。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ３．６３（ｔ，Ｊ＝４．２９Ｈｚ，５Ｈ）６．４１（ｄ，Ｊ＝７．５８Ｈｚ，１Ｈ）７．８８（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）８．０４（ｍ，Ｊ＝８．５９Ｈｚ，２Ｈ）８．３１（ｍ，Ｊ＝８．３４Ｈｚ，２Ｈ）８．４７（ｓ，１Ｈ）８．５３（ｄ，Ｊ＝７．５８Ｈｚ，１Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ４０．６９、５８．４８、７０．４８、１００．８６、１０３．７５、１１９．８６、１２５．２３、１２７．６１、１３５．９７、１３７．０８、１４２．４２、１４５．６３、１５６．６０、ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ３３７．２［（Ｍ＋Ｈ）］＋、Ｃ１６Ｈ１６Ｎ８Ｏについての算出値：３３６．３６。
【０１３９】
５．６．４．  メチル−［２−（３−チオフェン−２−イル−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イルアミノ）−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの合成
【化２６】
0006418950.tif 000027
【０１４０】
パートＡ．  ３−オキソ−２−チオフェン−２−イル−プロピオニトリル
【化２７】
0006418950.tif 000028
【０１４１】
チオフェン−２−イル−アセトニトリル［２０８９３−３０−５］（６．７ｍＬ、６２．６ｍｍｏｌ）を、エタノール（１００ｍＬ）中の２１ｗｔ％ナトリウムエトキシド（２５．７ｍＬ、６８．９ｍｍｏｌ）のＮ２ブランケットした０℃の撹拌溶液に添加した。５分後、ギ酸エチル［１０９−９４−４］（１２．６ｍＬ、１５６．７ｍｍｏｌ）を添加し、得られた溶液を２０分間撹拌した。次いで、氷浴を取り外し、加熱マントルに置き換えた。反応物を２時間加熱還流し、冷却し、蒸発させて、黄色の固体を得た。粗生成物を水に溶解し、溶液を０℃に冷やし、塩酸水溶液で酸性化して、オフホワイト色の粉末を沈殿させた。生成物を濾過によって単離し、水で洗浄し、乾燥させて、７．４ｇの生成物を得た。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  １５２．０［（Ｍ＋Ｈ）］＋、Ｃ７Ｈ５ＮＯＳの算出値：１５１．１９
【０１４２】
パートＢ．  ４−チオフェン−２−イル−２Ｈ−ピラゾール−３−イルアミン
【化２８】
0006418950.tif 000029
【０１４３】
ヒドラジン水和物［７８０３−５７−８］（４．８ｍＬ、９９．０ｍｍｏｌ）、続いて酢酸［６４−１９−７］（５．６ｍＬ、９７．８ｍｍｏｌ）を、エタノール（１００ｍＬ）中の３−オキソ−２−チオフェン−２−イル−プロピオニトリル（７．４ｇ、４９．０ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。次いで、溶液を２時間加熱還流した。冷却した反応物を蒸発乾固し、得られた固体を水中でトリチュレートした（triturated）。生成物を濾過によって単離し、水で洗浄し、乾燥させて、４−チオフェン−２−イル−２Ｈ−ピラゾール−３−イルアミンを７．１ｇのオフホワイト色の微粉末として得た（ｍｐ．１８３℃〜１８４℃）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ２．５１（ｓ，１Ｈ）７．０１〜７．１０（ｍ，２Ｈ）７．２７（ｄｄ，Ｊ＝５．０５、１．０１Ｈｚ，１Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  １２１．０７、１２１．４７、１２７．５８、１３５．８５。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  １６６．０［（Ｍ＋Ｈ）］＋、Ｃ７Ｈ７Ｎ３Ｓについての算出値：１６５．２２。
【０１４４】
パートＣ．  ３−チオフェン−２−イル−４Ｈ−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−オン
【化２９】
0006418950.tif 000030
【０１４５】
エタノール（３２．７ｍＬ、８７．６ｍｍｏｌ）中のナトリウムエトキシドの２１ｗｔ％溶液を、エタノール（２１７ｍＬ）中の４−チオフェン−２−イル−２Ｈ−ピラゾール−３−イルアミン（４．１ｇ、２５．０ｍｍｏｌ）及び１，３−ジメチルピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン［８７４−１４−６］（３．９ｇ、２７．５ｍｍｏｌ）の常温の撹拌懸濁液にゆっくりと添加した。添加が進むにつれ、固体が溶解して透明な褐色溶液が得られた。溶液を２日間加熱還流し、冷却した後、５％（ｗ／ｖ）塩化アンモニウム水溶液に注いだ。エタノールを蒸発させ、体積が減少した生成物溶液を撹拌しながら氷浴内で冷やし、３−チオフェン−２−イル−４Ｈ−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−オンを３．２ｇの赤褐色の結晶性微粉末として沈殿させた（ｍｐ．２３１℃〜２３２℃）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ６．１３（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）７．１０（ｄｄ，Ｊ＝５．０５、３．５４Ｈｚ，１Ｈ）７．３８〜７．４６（ｍ，２Ｈ）８．０７（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）８．５１〜８．７３（ｍ，１Ｈ）１２．０６（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  １２３．６６、１２７．７１、１３８．７０、１４２．４７。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ２１８．０［（Ｍ＋Ｈ）］＋、Ｃ１０Ｈ７Ｎ３ＯＳについての算出値：２１７．２５。
【０１４６】
パートＤ．  メチル−［２−（３−チオフェン−２−イル−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イルアミノ）−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【化３０】
0006418950.tif 000031
【０１４７】
１，８−ジアザビシクロウンデカ−７−エン（ＤＢＵ）［６６７４−２２−２］（０．４ｍＬ、２．５ｍｍｏｌ）を、アセトニトリル（１６ｍＬ）中の３−チオフェン−２−イル−４Ｈ−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−オン（３５４．３ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）、（２−アミノ−エチル）−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル［１２１４９２−０６−６］（８５２．２ｍｇ、４．９ｍｍｏｌ）及び（ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）トリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＢＯＰ）［５６６０２−３３−６］（９３７．７ｍｇ、２．１ｍｍｏｌ）の常温の撹拌混濁溶液に添加した。ＤＢＵを添加すると濁りが消え、溶液を２日間撹拌した後、ブラインと酢酸エチルとで分配した。抽出物を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、１０％（ｖ／ｖ）メタノール／酢酸エチルで溶出）にかけた。生成物画分の蒸発により油が得られ、これをヘプタンから結晶化し、メチル−［２−（３−チオフェン−２−イル−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イルアミノ）−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルを３３３．６ｍｇの黄色の結晶性微粉末として得た（ｍｐ．１４０℃〜１４１℃）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  （回転異性体が存在する）１．１６〜１．２８（ｍ，５Ｈ）１．３７（ｂｒ．ｓ．，３Ｈ）２．５１（ｓ，１Ｈ）２．８５（ｂｒ．ｓ．，３Ｈ）３．４７（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）３．５５（ｂｒ．ｓ．，３Ｈ）６．２８（ｄ，Ｊ＝６．８２Ｈｚ，１Ｈ）７．０４（ｄｄ，Ｊ＝５．０５、３．５４Ｈｚ，１Ｈ）７．３０（ｄｄ，Ｊ＝５．０５、１．０１Ｈｚ，１Ｈ）７．４１（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）７．８０（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）８．１９（ｓ，１Ｈ）８．４８（ｄ，Ｊ＝７．０７Ｈｚ，１Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ２７．８１、２７．９６、３３．７５、３８．４１、４６．３２、７８．１３、１００．２８、１００．７６、１２０．１６、１２１．７５、１２６．９０、１３５．０１、１３５．２０、１４０．７８、１４３．７４、１５４．９１、１５５．８１。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ３７４．１［（Ｍ＋Ｈ）］＋、Ｃ１８Ｈ２３Ｎ５Ｏ２Ｓについての算出値：３７３．４８。
【０１４８】
５．６．５．  イソプロピル（２−（（３−（３−メトキシピリジン−４−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）アミノ）エチル）（メチル）−カルバメートの合成
【化３１】
0006418950.tif 000032
【０１４９】
パートＡ．  ３−ブロモ−５−クロロ−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン
【化３２】
0006418950.tif 000033
【０１５０】
酢酸ナトリウム［１２７−０９−３］（２４．１ｇ、２９３．９ｍｍｏｌ）を、氷酢酸（３９５ｍＬ）中の５−クロロ−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン［２９２７４−２４−６］（３０．１ｇ、１９５．７ｍｍｏｌ）の溶液に添加し、固体が全て溶解するまで常温で撹拌した。次いで、氷浴を設置し、溶液を０℃に冷やした。臭素［７７２６−９５−６］（１１．０ｍＬ、２１４．７ｍｍｏｌ）を０℃の緩衝酢酸反応溶液に３５分かけて一滴ずつ添加すると、徐々に濃厚な撹拌懸濁液となった。臭素添加の完了後、懸濁液を更に１５分間撹拌した後、氷浴内の撹拌したメタ重亜硫酸ナトリウム［７６８１−５７−４］の（５％（ｗ／ｖ））水溶液（１Ｌ）にゆっくりと注いだ。固体水酸化ナトリウム［１３１０−７３−２］ペレットを、内部温度を４０℃未満に維持する速度で上清のｐＨがｐＨ試験紙によっておよそ８と決定されるまで撹拌懸濁液に添加した。沈殿生成物を濾過によって単離し、濾過ケーキを水で洗浄し、乾燥させて、３９．８ｇの淡黄色の粉末を得た（ｍｐ．１７３℃〜１７４℃）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ７．２２（ｄ，Ｊ＝７．３３Ｈｚ，１Ｈ）８．４４（ｓ，１Ｈ）９．２１（ｄ，Ｊ＝７．０７Ｈｚ，１Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ８２．８４、１０９．９９、１３８．９４、１４３．７６、１４５．６１、１５１．１８。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ２３１．８／２３３．８／２３５．８［（Ｍ＋Ｈ）］＋、Ｃ６Ｈ３ＢｒＣｌＮ３についての算出値：２３２．４７。
【０１５１】
パートＢ．  ｔｅｒｔ−ブチル（２−（（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）アミノ）エチル）（メチル）カルバメート
【化３３】
0006418950.tif 000034
【０１５２】
４６５ｍｇ（２．００ｍｍｏｌ）の３−ブロモ−５−クロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジンに、ｔｅｒｔ−ブチル（２−アミノエチル）（メチル）カルバメート（５２２ｍｇ、３．００ｍｍｏｌ）、４ｍＬのイソプロパノール及びトリエチルアミン（０．５６ｍＬ、４．００ｍｍｏｌ）を添加した。得られる混合物を１４０℃で０．５時間マイクロ波加熱する。これをＥｔＯＡｃで希釈し、水及びブラインで洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濃縮し、２０％→１００％のＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘで溶出するシリカゲルカラムで精製して、６０７ｍｇ（８２％）の所望の生成物を得た。
【０１５３】
パートＣ．  Ｎ１−（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）−Ｎ２−メチルエタン−１，２−ジアミン
【化３４】
0006418950.tif 000035
【０１５４】
ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルを、６００ｍｇ（１．６２ｍｍｏｌ）のｔｅｒｔ−ブチル（２−（（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）アミノ）エチル）（メチル）カルバメートを４ｍＬのＤＣＭに溶解することによって除去した後、４ｍＬのＴＦＡを添加し、室温で０．５時間撹拌し、混合物を濃縮して、所望の生成物のＴＦＡ塩を１００％の収率で得た（６２２ｍｇ）。
【０１５５】
パートＤ．  イソプロピル（２−（（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）アミノ）エチル）（メチル）カルバメート
【化３５】
0006418950.tif 000036
【０１５６】
２０ｍＬのＤＣＭに溶解した１．０当量（３８４ｍｇ、１．０００ｍｍｏｌ）のアミン（ＴＦＡ塩）に、３．０当量（３６８ｍｇ、３．０００ｍｍｏｌ）のクロロギ酸イソプロピル、４．０当量のトリエチルアミン（４０４ｍｇ、４．０００ｍｍｏｌ）を添加した。得られる混合物を室温で０．５時間撹拌した後、ＤＣＭ（３０ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。粗残渣を１％→１０％のＭｅＯＨ／ＤＣＭで溶出するシリカゲル（ＩＳＣＯ）で精製して、所望の生成物を得た（収率８７％）。
【０１５７】
パートＥ．  イソプロピル（２−（（３−（３−メトキシピリジン−４−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）アミノ）エチル）（メチル）−カルバメート
【化３６】
0006418950.tif 000037
【０１５８】
８０ｍｇ（０．２２ｍｍｏｌ）のイソプロピル（２−（（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）アミノ）エチル）（メチル）−カルバメートに、（３−メトキシピリジン−４−イル）ボロン酸二水和物（５６ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）、Ｋ３ＰＯ４（１４３ｍｇ、０．６７ｍｍｏｌ）、ＰｄＣｌ２（ＰＰｈ３）２（１６．８ｍｇ、０．０２２ｍｍｏｌ）、３ｍＬのＤＭＥ及び１ｍＬの水を添加した。この混合物を１４０℃で０．５時間マイクロ波処理した。冷却後、これをＥｔＯＡｃで希釈し、水及びブラインで洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濃縮し、分取るＨＰＬＣで精製して、所望の生成物を７７％の収率で得た（６６．４ｍｇ）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，アセトン）δ  ｐｐｍ  ２．８７（ｂｒ．ｓ．，３Ｈ）２．９９（ｂｒ．ｓ．，３Ｈ）３．５８〜３．７１（ｍ，２Ｈ）３．７３〜３．８２（ｍ，２Ｈ）４．０９（ｓ，３Ｈ）４．８２（ｔｄ，Ｊ＝６．２５、２．９１Ｈｚ，１Ｈ）６．４５（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）８．２１（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）８．３５（ｓ，１Ｈ）８．４３（ｄ，Ｊ＝６．０６Ｈｚ，１Ｈ）８．５８（ｓ，１Ｈ）８．７７（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）；ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ  ３８５．０［（Ｍ＋Ｈ）＋、Ｃ１９Ｈ２４Ｎ６Ｏ３についての算出値３８４．０］。
【０１５９】
５．６．６．  （Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（（（３−（４−（アミノメチル）フェニル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）アミノ）メチル）ピロリジン−１−カルボキシレートの合成
【０１６０】
パートＡ．  （Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（（（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）アミノ）メチル）ピロリジン−１−カルボキシレート
【化３７】
0006418950.tif 000038
【０１６１】
実施例５．６．５に記載のアミン置換条件下での３−ブロモ−５−クロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジンと（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（アミノメチル）ピロリジン−１−カルボキシレートとの反応により、７４％の生成物を得た。
【０１６２】
パートＢ．  （Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（（（３−（４−（アミノメチル）フェニル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）アミノ）メチル）−ピロリジン−１−カルボキシレート
【化３８】
0006418950.tif 000039
【０１６３】
実施例５．６．５に記載のものと同じ条件下での（４−（アミノメチル）フェニル）ボロン酸による（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（（（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）アミノ）メチル）ピロリジン−１−カルボキシレートの鈴木カップリングにより、７３％の表題の化合物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール−ｄ４）δ  ｐｐｍ  １．４４（ｂｒ．ｓ．，９Ｈ）１．９０（ｄｄ，Ｊ＝９．９２、５．５１Ｈｚ，１Ｈ）１．９６〜２．１１（ｍ，３Ｈ）３．３５〜３．４５（ｍ，４Ｈ）４．０７〜４．２１（ｍ，３Ｈ）６．３３（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）７．４６（ｄ，Ｊ＝８．３８Ｈｚ，２Ｈ）８．１９（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ）８．２５〜８．３６（ｍ，２Ｈ）；ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ  ４２３．０［（Ｍ＋Ｈ）＋、Ｃ２３Ｈ３０Ｎ６Ｏ２についての算出値４２２．０］。
【０１６４】
５．６．７  （Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（（（３−（２−メトキシフェニル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）アミノ）メチル）ピロリジン−１−カルボキシレートの合成
【化３９】
0006418950.tif 000040
【０１６５】
実施例５．６．５に記載のものと同じ条件下での（２−メトキシフェニル）ボロン酸による（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（（（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）アミノ）メチル）ピロリジン−１−カルボキシレートの鈴木カップリングにより、６８％の表題の化合物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ）δ  ｐｐｍ  １．５０（ｓ，９Ｈ）１．８５〜２．１２（ｍ，４Ｈ）３．４０（ｄｄ，Ｊ＝７．５８、４．０４Ｈｚ，２Ｈ）３．４６〜３．５９（ｍ，１Ｈ）３．５９〜３．６７（ｍ，１Ｈ）３．９４（ｓ，３Ｈ）４．１９（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）６．０７（ｄ，Ｊ＝７．０７Ｈｚ，１Ｈ）６．９９（ｄ，Ｊ＝７．５８Ｈｚ，１Ｈ）７．０６（ｔｄ，Ｊ＝７．４５、１．０１Ｈｚ，１Ｈ）７．１５〜７．２２（ｍ，１Ｈ）８．１４〜８．２８（ｍ，１Ｈ）８．４５（ｄ，Ｊ＝６．８２Ｈｚ，１Ｈ）８．５１（ｓ，１Ｈ）；ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ  ４２４．０［（Ｍ＋Ｈ）＋、Ｃ２３Ｈ２９Ｎ５Ｏ３についての算出値４２３．０］。
【０１６６】
５．６．８．  （Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（（（３−（トリフルオロメチル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）アミノ）メチル）ピロリジン−１−カルボキシレートの合成
【化４０】
0006418950.tif 000041
【０１６７】
パートＡ．  （Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（（ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イルアミノ）メチル）ピロリジン−１−カルボキシレート
【化４１】
0006418950.tif 000042
【０１６８】
実施例５．６．５に記載のアミン置換条件下で市販の５−クロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジンを（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（アミノメチル）ピロリジン−１−カルボキシレートと反応させて、９６％の生成物を得る。
【０１６９】
パートＢ．  （Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（（（３−ヨードピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）アミノ）メチル）ピロリジン−１−カルボキシレート
【化４２】
0006418950.tif 000043
【０１７０】
（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（（ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イルアミノ）メチル）ピロリジン−１−カルボキシレート（７９０ｍｇ、２．４９０ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのＤＭＦに溶解し、ＮＩＳ（６１７ｍｇ、２．７４０ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を室温で４時間撹拌した後、１０ｍＬの水でクエンチした。次いで、これを５０ｍＬのＥｔＯＡｃで希釈し、有機層を分離し、ブラインで２回洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させた。これを濃縮し、２０％→１００％のＥｔＯＡｃ／ｈｅｘで溶出するシリカゲルで精製して、１．０３ｇ（９３％）のオフホワイト色の固体を得た。
【０１７１】
パートＣ．  （Ｓ）−イソプロピル２−（（（３−（トリフルオロメチル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）アミノ）メチル）ピロリジン−１−カルボキシレート
【化４３】
0006418950.tif 000044
【０１７２】
２ｍＬのＤＭＦに溶解した２２１．５ｍｇ（０．５０ｍｍｏｌ）のヨウ化アリールに、２，２−ジフルオロ−２−（フルオロスルホニル）酢酸メチル（０．７７ｇ、４．００ｍｍｏｌ）、ＣｕＩ（７６２ｍｇ、２．００ｍｍｏｌ）、ＨＭＰＡ（０．４１ｍＬ、３．５０ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を９０℃に予熱した油浴上で０．７５時間撹拌した。反応物を室温に冷却し、ＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液でクエンチした。３０ｍＬのＥｔＯＡｃで抽出し、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させた。これを濃縮し、分取ＨＰＬＣで精製して、８１ｍｇ（４２％）の所望の生成物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール−ｄ４）δ  ｐｐｍ  １．４４（ｓ，９Ｈ）１．８６〜１．９９（ｍ，３Ｈ）１．９９〜２．０７（ｍ，１Ｈ）３．４０（ｂｒ．ｓ．，３Ｈ）３．６１（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）４．１１（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）６．３７（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）７．９８（ｓ，１Ｈ）８．３３（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）；ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ  ３８６．０［（Ｍ＋Ｈ）＋、Ｃ１７Ｈ２２Ｆ３Ｎ５Ｏ２についての算出値３８５．０］。
【０１７３】
５．６．９．  ４−［３−（３−メトキシ−ピリジン−４−イル）−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル］−ピペラジン−１−カルボン酸イソプロピルエステルの合成
【化４４】
0006418950.tif 000045
【０１７４】
パートＡ．  ３−ブロモ−５−ピペラジン−１−イル−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン
【化４５】
0006418950.tif 000046
【０１７５】
３−ブロモ−５−クロロ−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（１５．４ｇ、６６．２ｍｍｏｌ）及びピペラジン［１１０−８５−０］（５６．８ｇ、６５９．５ｍｍｏｌ）を乳鉢でともにすり潰して均質混合物とし、磁気撹拌子の入った２５０ｍＬ容の丸底フラスコに移した。フラスコを還流冷却器に取り付け、Ｎ２ブランケットし、反応ポットを常温の油浴に浸した。純粋な（neat）固体混合物を撹拌しながら、油浴を０．５時間にわたって１２０℃に加熱し、公称温度に計２時間保持した。油浴を取り外し、溶融反応物をおよそ７５℃に冷却した。酢酸エチルを反応生成物が溶解して、それが固体塊となるのを防ぐように慎重に冷却器に添加した。反応溶液を分液漏斗に移し、酢酸エチルで更に希釈し、水で洗浄した。酢酸エチル抽出物を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、蒸発させて、１６．１ｇの透明な黄色の油を得た。油をメタノールから結晶化し、２段階で（in two crops）１５．８ｇの淡黄色の結晶性粉末を得た（ｍｐ．１０８℃〜１０９℃）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ２．５１（ｓ，１Ｈ）３．１６〜３．２４（ｍ，３Ｈ）３．３８（ｓ，１Ｈ）３．９３〜４．００（ｍ，３Ｈ）６．８５（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ）８．０３（ｓ，１Ｈ）８．７８（ｄ，Ｊ＝８．０８Ｈｚ，１Ｈ）９．６１（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ４１．２５、４２．１６、７７．７３、９７．７８、１３６．７７、１４４．０１、１４４．１８、１５５．５３。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ２８２．０／２８４．０［（Ｍ＋Ｈ）］＋、Ｃ１０Ｈ１２ＢｒＮ５についての算出値：２８２．１４。
【０１７６】
パートＢ．  ４−（３−ブロモ−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）−ピペラジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル
【化４６】
0006418950.tif 000047
【０１７７】
酢酸エチル（２８０ｍＬ）中の３−ブロモ−５−ピペラジン−１−イル−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（１５．８ｇ、５６．０ｍｍｏｌ）及びヒューニッヒ塩基［７０８７−６８−５］（２０．０ｍＬ、１１４．８ｍｍｏｌ）の急速撹拌した０℃のＮ２ブランケット溶液に、トルエン（６７．０ｍＬ）中のクロロギ酸イソプロピルの１．０Ｍ溶液を１０分間にわたって徐々に添加した。反応物を撹拌し、一晩常温に温めた後、ブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、シリカゲルにプレロードし（preloaded）、クロマトグラフィー（シリカゲル、１００％酢酸エチルで溶出）にかけ、酢酸エチル／ヘプタンから結晶化して、１３．２ｇの白色の粉末を得た（ｍｐ．７８℃〜７９℃）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  １．２２（ｄ，Ｊ＝６．３２Ｈｚ，６Ｈ）３．４４〜３．５４（ｍ，４Ｈ）３．６７〜３．７９（ｍ，４Ｈ）４．８２（ｓｐｔ，Ｊ＝６．２３Ｈｚ，１Ｈ）６．７７（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ）７．９７（ｓ，１Ｈ）８．６９（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ２１．９４、４２．８０、４３．８７、６８．１７、７７．３２、９７．６６、１３６．４７、１４３．８７、１４４．４０、１５４．２９、１５５．６４。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ３６８．０／３７０．０［（Ｍ＋Ｈ）］＋、Ｃ１４Ｈ１８ＢｒＮ５Ｏ２についての算出値：３６８．２４。
【０１７８】
パートＣ．  ４−［３−（３−メトキシ−ピリジン−４−イル）−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル］−ピペラジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル
【化４７】
0006418950.tif 000048
【０１７９】
５０ｍＬ容の丸底フラスコに入った４−（３−ブロモ−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）−ピペラジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（３８５．０ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）、３−メトキシピリジン−４−ボロン酸水和物［１０７２９５２−５０−１］（２２９．７ｍｇ、１．３４ｍｍｏｌ）、三塩基性リン酸カリウム一水和物［２７１７６−１０−９］（５１６．３ｍｇ、２．２ｍｍｏｌ）及び［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）ジクロロメタン錯体［９５４６４−０５−４］（１０２．４ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）の混合物に、１，２−ジメトキシエタン（２５ｍＬ）中の３０％（ｖ／ｖ）水の溶液及び磁気撹拌子を加えた。反応ポットを還流冷却器に取り付け、常温油浴に入れ、システムを急速撹拌しながら１０回の排気／Ｎ２ブランケットサイクルに供した。急速撹拌したＮ２ブランケット反応物を８５℃の油浴温度に１７時間加熱した後、冷却し、ブライン（３Ｎ水酸化ナトリウム水溶液でｐＨを１０に調整した）と酢酸エチルとで分配した。相分離した抽出物を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、蒸発させて橙色の油を得て、これを分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製した。単離生成物をメタノールに溶解し、濃塩酸に希釈し、蒸発乾固し、メタノールに再溶解し、ジエチルエーテルの添加によって沈殿させた。沈殿物の濾過により、１００．５ｍｇの生成物の一塩酸塩が黄色の粉末として得られた（ｍｐ．２０６℃〜２０７℃（ｄｅｃ．））。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  １．２３（ｄ，Ｊ＝６．３９Ｈｚ，６Ｈ）２．５１（ｓ，２Ｈ）３．５３〜３．５９（ｍ，４Ｈ）３．８５（ｂｒ．ｓ．，３Ｈ）４．１３（ｓ，３Ｈ）４．８４（ｓｐｔ，Ｊ＝６．２５Ｈｚ，１Ｈ）６．９６（ｄ，Ｊ＝７．９４Ｈｚ，１Ｈ）８．４２（ｄ，Ｊ＝６．３９Ｈｚ，１Ｈ）８．４８（ｓ，１Ｈ）８．７６（ｓ，１Ｈ）８．８６（ｄ，Ｊ＝７．９４Ｈｚ，１Ｈ）９．０６（ｄ，Ｊ＝６．１７Ｈｚ，１Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ２１．９７、４２．７９、４４．２３、５７．１７、６８．２５、９７．５６、９８．３９、１２０．０３、１２３．９０、１３７．２７、１３７．０５、１３７．９５、１４６．４８、１４７．００、１５１．８０、１５４．２６、１５６．６６。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ３９７．１［（Ｍ＋Ｈ）］＋、Ｃ２０Ｈ２４Ｎ６Ｏ３についての算出値：３９６．４５。
【０１８０】
５．６．１０．  ４−［３−（２−メトキシ−フェニル）−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル］−ピペラジン−１−カルボン酸イソプロピルエステルの合成
【化４８】
0006418950.tif 000049
【０１８１】
実施例５．６．９の調製と同様に４−（３−ブロモ−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）−ピペラジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（３８５．０ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）及び２−メトキシフェニルボロン酸［５７２０−０６−９］（１９１．８ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）から調製して、７６．４ｍｇの黄色の粉末を遊離塩基として得た（ｍｐ．５７℃〜５９℃）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  １．２２（ｄ，Ｊ＝６．３２Ｈｚ，６Ｈ）３．４８〜３．５４（ｍ，４Ｈ）３．６８〜３．７７（ｍ，４Ｈ）３．８７（ｓ，３Ｈ）４．７７〜４．８５（ｍ，１Ｈ）６．７６（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ）６．９４〜７．０７（ｍ，２Ｈ）７．１０〜７．１８（ｍ，１Ｈ）８．３８（ｄｄ，Ｊ＝７．７１、１．６４Ｈｚ，１Ｈ）８．４３（ｓ，１Ｈ）８．７１（ｄ，Ｊ＝８．０８Ｈｚ，１Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ２１．９５、４４．０７、５５．３２、６８．１４、９６．９３、１０１．１０、１１１．２９、１２０．４８、１２１．６４、１２５．８３、１２７．６７、１３６．２８、１４５．００、１５４．３１、１５５．２５、１５５．５１。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ３９６．１［（Ｍ＋Ｈ）］＋、Ｃ２１Ｈ２５Ｎ５Ｏ３についての算出値：３９５．４７。
【０１８２】
５．６．１１  （Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（（（３−（２−エチルフェニル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）アミノ）メチル）ピロリジン−１−カルボキシレートの合成
【化４９】
0006418950.tif 000050
【０１８３】
実施例５．６．５に記載のものと同じ条件下での（２−エチルフェニル）ボロン酸による（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（（（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）アミノ）メチル）ピロリジン−１−カルボキシレートの鈴木カップリングにより、７７％の表題の化合物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ）δ  ｐｐｍ  １．２０（ｔ，Ｊ＝７．５８Ｈｚ，３Ｈ）１．４９（ｓ，９Ｈ）１．７９〜１．９５（ｍ，３Ｈ）１．９５〜２．０５（ｍ，１Ｈ）２．８２（ｑ，Ｊ＝７．５８Ｈｚ，２Ｈ）３．３４〜３．４４（ｍ，３Ｈ）３．４４〜３．５３（ｍ，１Ｈ）４．１５（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）６．０８（ｄ，Ｊ＝６．８２Ｈｚ，１Ｈ）７．２３〜７．３１（ｍ，３Ｈ）７．３２〜７．３８（ｍ，１Ｈ）７．５１（ｄｄ，Ｊ＝７．２０、１．３９Ｈｚ，１Ｈ）７．９１（ｓ，１Ｈ）８．２０（ｄ，Ｊ＝６．３２Ｈｚ，１Ｈ）；ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ  ４２２．０［（Ｍ＋Ｈ）＋、Ｃ２４Ｈ３１Ｎ５Ｏ２についての算出値４２１．０］。
【０１８４】
５．６．１２．  （Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（（（３−（２−［Ｄ３］メトキシフェニル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）アミノ）メチル）ピロリジン−１−カルボキシレートの合成
【化５０】
0006418950.tif 000051
【０１８５】
パートＡ．  ２−（２−［Ｄ３］メトキシフェニル）−４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン
【化５１】
0006418950.tif 000052
【０１８６】
６ｍＬのＤＭＳＯに溶解した２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェノール（１００ｍｇ、０．４５５ｍｍｏｌ）に、重水素化ヨウ化メチル（１３２ｍｇ、０．９０９ｍｍｏｌ）、続いて６０％ＮａＨ（２２ｍｇ、０．９０９ｍｍｏｌ）を添加した。得られる混合物を室温で一晩撹拌した。２５ｍＬのＥｔＯＡｃで希釈し、水及びブラインで洗浄した。ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濃縮して、１０８ｍｇ（１００％）のエーテル生成物を得た。
【０１８７】
パートＢ．  （Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（（（３−（２−［Ｄ３］メトキシフェニル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）アミノ）メチル）−ピロリジン−１−カルボキシレート
【化５２】
0006418950.tif 000053
【０１８８】
実施例５．６．５に記載の鈴木カップリング条件下での２−（２−［Ｄ３］メトキシフェニル）−４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロランと（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（（（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）アミノ）メチル）ピロリジン−１−カルボキシレートとの反応により、表題の化合物が７０％の収率で得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ）δ  ｐｐｍ  １．５１（ｓ，９Ｈ）１．８３〜２．１１（ｍ，４Ｈ）３．４０（ｄｄ，Ｊ＝７．４５、３．９２Ｈｚ，２Ｈ）３．４７〜３．５９（ｍ，１Ｈ）３．５９〜３．６６（ｍ，１Ｈ）４．２０（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）６．０７（ｄ，Ｊ＝７．０７Ｈｚ，１Ｈ）６．９６〜７．０２（ｍ，１Ｈ）７．０６（ｔｄ，Ｊ＝７．５２、１．１４Ｈｚ，１Ｈ）７．１５〜７．２４（ｍ，１Ｈ）８．１９（ｄ，Ｊ＝６．３２Ｈｚ，１Ｈ）８．４６（ｄ，Ｊ＝６．８２Ｈｚ，１Ｈ）８．５１（ｓ，１Ｈ）；ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ  ４２７．０［（Ｍ＋Ｈ）＋、Ｃ２３Ｈ２６Ｄ３Ｎ５Ｏ３についての算出値４２６．０］。
【０１８９】
５．６．１３．  ４−［３−（２−メトキシ−ピリジン−３−イル）−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル］−ピペラジン−１−カルボン酸イソプロピルエステルの合成
【化５３】
0006418950.tif 000054
【０１９０】
実施例５．６．９の調製と同様に４−（３−ブロモ−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）−ピペラジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（３３８．７ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ）及び２−メトキシ−３−ピリジンボロン酸［１６３１０５−９０−６］（１６９．４ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）から調製して、７６．０ｍｇの黄色の粉末を遊離塩基として得た（ｍｐ．１３１℃〜１３２℃）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  １．２２（ｄ，Ｊ＝６．０６Ｈｚ，６Ｈ）３．４７〜３．５６（ｍ，４Ｈ）３．７１〜３．８０（ｍ，４Ｈ）４．００（ｓ，３Ｈ）４．８２（ｓｐｔ，Ｊ＝６．２３Ｈｚ，１Ｈ）６．８１（ｄ，Ｊ＝８．０８Ｈｚ，１Ｈ）７．０８（ｄｄ，Ｊ＝７．４５、４．９３Ｈｚ，１Ｈ）７．９８（ｄｄ，Ｊ＝４．９３、１．８９Ｈｚ，１Ｈ）８．５１（ｓ，１Ｈ）８．７６（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ）８．８２（ｄｄ，Ｊ＝７．５８、２．０２Ｈｚ，１Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ２１．９５、４２．８５、４４．０６、５３．１０、６８．１６、９７．２１、９８．９０、１１６．４０、１１７．１７、１３４．５５、１３６．４３、１４１．９９、１４４．６５、１４４．７１、１５４．２６、１５５．４６、１５８．８９。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ３９７．１［（Ｍ＋Ｈ）］＋、Ｃ２０Ｈ２４Ｎ６Ｏ３についての算出値：３９６．４５。
【０１９１】
５．６．１４．  ４−［３−（１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−ピリジン−３−イル）−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル］−ピペラジン−１−カルボン酸イソプロピルエステルの合成
【化５４】
0006418950.tif 000055
【０１９２】
実施例５．６．９の調製と同様に４−（３−ブロモ−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）−ピペラジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル及び（１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−ピリジン−３−イル）ボロン酸から調製して、黄色の粉末を遊離塩基として得た（ｍｐ．２０６℃〜２０７℃）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  １．２３（ｄ，Ｊ＝６．３２Ｈｚ，６Ｈ）３．５３（ｓ，７Ｈ）３．７０〜３．８２（ｍ，４Ｈ）４．８３（ｓｐｔ，Ｊ＝６．２３Ｈｚ，１Ｈ）６．３７（ｔ，Ｊ＝６．８２Ｈｚ，１Ｈ）６．７８（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ）７．５５（ｄｄ，Ｊ＝６．５７、１．２６Ｈｚ，１Ｈ）８．６４（ｄｄ，Ｊ＝７．２０、１．１４Ｈｚ，１Ｈ）８．７２（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ）８．９６（ｓ，１Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ２１．９７、３７．３９、４２．８４、４４．１１、６８．１６、９６．９４、１００．５６、１０５．４９、１２２．８０、１３２．４９、１３５．００、１３６．４２、１４４．４０、１４４．５６、１５４．２９、１５５．４６、１６０．２９。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ３９７．１［（Ｍ＋Ｈ）］＋、Ｃ２０Ｈ２４Ｎ６Ｏ３についての算出値：３９６．４５。
【０１９３】
５．６．１５．  ４−［３−（３−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル］−ピペラジン−１−カルボン酸イソプロピルエステルの合成
【化５５】
0006418950.tif 000056
【０１９４】
実施例５．６．９の調製と同様に４−（３−ブロモ−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）−ピペラジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（３８９．９ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）及び３−フルオロ−２−メトキシフェニルボロン酸［７６２２８７−５９−２］（２１６．２ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）から調製して、１５３．８ｍｇの淡黄色の粉末を遊離塩基として得た（ｍｐ．５２℃〜５３℃）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  １．２２（ｄ，Ｊ＝６．３２Ｈｚ，６Ｈ）３．４９〜３．５６（ｍ，４Ｈ）３．７５（ｄｄ，Ｊ＝６．４４、４．１７Ｈｚ，４Ｈ）３．８３（ｄ，Ｊ＝１．０１Ｈｚ，３Ｈ）４．８２（ｓｐｔ，Ｊ＝６．２３Ｈｚ，１Ｈ）６．８１（ｄ，Ｊ＝８．０８Ｈｚ，１Ｈ）７．０６（ｄｄｄ，Ｊ＝１１．３７、８．０８、１．５２Ｈｚ，１Ｈ）７．１６（ｔｄ，Ｊ＝８．０８、５．８１Ｈｚ，１Ｈ）８．２３（ｄｔ，Ｊ＝７．８９、１．３６Ｈｚ，１Ｈ）８．４２（ｓ，１Ｈ）。１９Ｆ  ＮＭＲ（３７７ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  −１３１．４２。１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ２１．９５、４２．８３、４４．０５、６０．３８、６８．１６、９７．２４、９９．９４、９９．９８、１１２．７２、１１２．９０、１２３．２２、１２４．０６、１２７．９８、１３６．３９、１４３．４０、１４３．５１、１４４．２５、１４４．４９、１５４．２８、１５４．６３、１５５．５３、１５７．０４。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ４１４．１［（Ｍ＋Ｈ）］＋、Ｃ２１Ｈ２４ＦＮ５Ｏ３についての算出値：４１３．４６。
【０１９５】
５．６．１６．  イソプロピル４−（３−（２−フルオロピリジン−３−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボキシレートの合成
【化５６】
0006418950.tif 000057
【０１９６】
イソプロピル４−（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボキシレート（４ｇ、１０．８６ｍｍｏｌ）、２−フルオロピリジン−３−ボロン酸水和物（３．４４ｇ、２１．７ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（４．５ｇ、３２．６ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（２４ｍｇ、０．１０８６ｍｍｏｌ）及びｘ−Ｐｈｏｓ（１４６ｍｇ、０．２１７ｍｍｏｌ）を窒素下でジオキサン及び水に取り、８０℃で２時間撹拌した。次いで、反応物を室温に冷却し、酢酸エチルを用いてセライトプラグ（celited plug）に通して濾過した。真空還元し、７５％→１００％のヘキサン：酢酸エチルを用いてｉｓｃｏシリカカラムに通した。生成物とデスブロモとが共溶出し、これを真空還元した。生成物をＩＰＡＣから３回再結晶化し、ヘプタンで洗浄し、乾燥させて、８８９ｍｇの生成物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ８．９５（ｔ，Ｊ＝２．１５Ｈｚ，１Ｈ）、８．７８（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ）、８．２９（ｄ，Ｊ＝４．２９Ｈｚ，１Ｈ）、８．００（ｄ，Ｊ＝４．８０Ｈｚ，１Ｈ）、７．４３（ｄｔ，Ｊ＝２．４０、４．９９Ｈｚ，１Ｈ）、６．８５（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ）、４．７８〜４．８７（ｍ，１Ｈ）、３．７３〜３．８３（ｍ，４Ｈ）、３．４８〜３．５８（ｍ，４Ｈ）、３．３１（ｓ，１Ｈ）、１．２２（ｄ，Ｊ＝６．０６Ｈｚ，６Ｈ）ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ３８５［（Ｍ＋Ｈ）］＋、Ｃ１９Ｈ２１ＦＮ６Ｏ２についての算出値：３８４．４２。
【０１９７】
５．６．１７．  イソプロピル４−（３−（５−フルオロ−２−メトキシピリジン−３−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボキシレートの合成
【化５７】
0006418950.tif 000058
【０１９８】
２００ｍＬ容の丸底フラスコに、４．００ｇ（１０．８７ｍｍｏｌ）のイソプロピル４−（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボキシレート、２．８９ｇ（１１．４１ｍｍｏｌ）の（５−フルオロ−２−メトキシピリジン−３−イル）ボロン酸、０．３８ｇ（０．３３ｍｍｏｌ）のＰｄ（ＰＰｈ３）４及び撹拌棒を添加した。全ての固体を添加した後、６０ｍｌの２％ＴＰＧＳ−７５０−Ｍ溶液を添加し、続いて７．５６ｍＬ（５４．３５ｍｍｏｌ）のトリエチルアミンを添加した。
【０１９９】
反応フラスコを９０℃に予熱した油浴に入れ、激しく撹拌した。全ての懸濁固体が完全に溶解するまで約０．２５時間撹拌する必要があった。幾らかの色変化が観察され、反応の残りの間中維持された最後の色は非常に暗い褐色であった。
【０２００】
１．５時間後、ＬＣＭＳにより反応が完了したことが示された。これを室温に冷却し、１００ｍＬのＥｔＯＡｃで希釈した。有機層を分離し、水層を４０ｍＬ分のＥｔＯＡｃで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。少量のＤＣＭを使用して粗混合物を溶解した後、ＩＳＣＯでの分離のために１２０ｇシリカゲルカラムに直接ロードした。最初の２５分間は４０％ＥｔＯＡｃ／ｈｅｘ→１００％ＥｔＯＡｃの勾配で流した。所望の生成物は溶出せず、幾らかの不純物のみが溶出した。しかしながら、１００％ＥｔＯＡｃで約１０分間流すと、デスブロモ副生成物が所望の生成物とともに溶出し始めた。デスブロモ化合物は所望の生成物を含有する全画分に分布するにもかかわらず、デスブロモ化合物の割合は経時的に大幅に減少するようである。したがって、最も高い割合のデスブロモを含有する初期画分を捨て、残りの画分を濃縮して、２５４ｎｍで純度約８７％（約１３％がデスブロモ化合物）の３．４ｇの生成物を得た［１Ｈ  ＮＭＲに基づくと、デスブロモは２５４ｎｍのＵＶで高く見積もられ、２２０ｎｍのＵＶで低く見積もられる］。ＩＰＡＣ及びヘプタンを用いて物質を２回再結晶化し、３．１６ｇ（収率７０％）の所望の生成物を２５４ｎｍのＵＶで９９％を超える純度で得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ）δ  ｐｐｍ  １．３１（ｄ，Ｊ＝６．３２Ｈｚ，６Ｈ）３．６１〜３．７０（ｍ，４Ｈ）３．７７（ｂｒ．ｓ．，４Ｈ）４．０８（ｓ，３Ｈ）５．００（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．１９Ｈｚ，１Ｈ）６．４１（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ）７．８３（ｄ，Ｊ＝３．０３Ｈｚ，１Ｈ）８．３７（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ）８．６３〜８．７１（ｍ，２Ｈ）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ  ４１５［（Ｍ＋Ｈ）＋、Ｃ２０Ｈ２３ＦＮ６Ｏ３についての算出値４１４］。
【０２０１】
５．６．１８．  イソプロピル４−（３−（２−エトキシピリジン−３−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボキシレートの合成
【化５８】
0006418950.tif 000059
【０２０２】
１Ｌ容の丸底フラスコに、１５．００ｇ（４０．７６ｍｍｏｌ）のイソプロピル４−（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボキシレート、８．８５ｇ（５２．９９ｍｍｏｌ）の（２−エトキシピリジン−３−イル）ボロン酸、１４．０６ｇ（１０１．９０ｍｍｏｌ）のＫ２ＣＯ３、１．４１ｇ（１．２２ｍｍｏｌ）のＰ（ＰＰｈ３）４及び撹拌棒を添加した。全ての固体を添加した後、２００ｍｌのＭｅＣＮを添加し、続いて１００ｍＬの水を添加した。反応フラスコを８５℃に予熱した油浴に入れ、激しく撹拌した。この反応物を還流するようにした。８５℃で約１６時間撹拌した後、室温に冷却し、２００ｍＬのＥｔＯＡｃで希釈した。有機層を分離し、水層を８０ｍＬ分のＥｔＯＡｃで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。少量のＤＣＭを使用して粗混合物を溶解した後、ＩＳＣＯ−ＸＬでの分離のために７５０ｇシリカゲルカラムに直接ロードした。最初の３５分間は５０％ＥｔＯＡｃ／ｈｅｘ→１００％ＥｔＯＡｃの勾配で流した。所望の生成物は溶出せず、幾らかの不純物のみが溶出した。しかしながら、１００％ＥｔＯＡｃで約１０分間流すと、デスブロモ副生成物が所望の生成物とともに溶出し始めた。デスブロモ化合物は所望の生成物を含有する全画分に分布するにもかかわらず、デスブロモ化合物の割合は経時的に減少するようである。したがって、最も高い割合のデスブロモを含有する初期画分を捨て、残りの画分を濃縮して、２５４ｎｍで純度約８６％（約１４％がデスブロモ化合物）の１３．４６ｇの生成物を得た。ＩＰＡＣ及びヘプタンを用いてこの物質を２回再結晶化し、１１．４ｇ（６８％）の所望の生成物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ）δ  ｐｐｍ  １．３０（ｄ，Ｊ＝６．３２Ｈｚ，６Ｈ）１．５３（ｔ，Ｊ＝７．０７Ｈｚ，３Ｈ）３．５９〜３．７０（ｍ，４Ｈ）３．７０〜３．８１（ｍ，４Ｈ）４．５３（ｑ，Ｊ＝７．０７Ｈｚ，２Ｈ）５．００（ｄｔ，Ｊ＝１２．４４、６．２８Ｈｚ，１Ｈ）６．３８（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ）６．９８（ｄｄ，Ｊ＝７．４５、４．９３Ｈｚ，１Ｈ）８．０１（ｄｄ，Ｊ＝４．９３、１．８９Ｈｚ，１Ｈ）８．３７（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ）８．７０（ｓ，１Ｈ）８．７６（ｄｄ，Ｊ＝７．４５、１．８９Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ  ４１１［（Ｍ＋Ｈ）＋、Ｃ２１Ｈ２６Ｎ６Ｏ３についての算出値４１０］。
【０２０３】
５．６．１９．  ２−メトキシエチル４−（３−（２−メトキシピリジン−３−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボキシレートの合成
【化５９】
0006418950.tif 000060
【０２０４】
パートＡ．  ２−メトキシエチル４−（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボキシレート
【化６０】
0006418950.tif 000061
【０２０５】
０℃で１２０ｍＬのＥｔＯＡｃに溶解した１０．００ｇ（３５．４４ｍｍｏｌ）の３−ブロモ−５−（ピペラジン−１−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジンに、５．４０ｇ（３８．９９ｍｍｏｌ）のクロロギ酸２−メトキシエチル、続いて９．８６ｍＬ（７０．８８ｍｍｏｌ）のＴＥＡを添加した。５分後、氷浴を取り外し、反応混合物を室温で撹拌した。５時間後、ＬＣＭＳにより反応が完了したことが示された。これをＥｔＯＡｃで希釈し、ブラインでクエンチし、有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させた。これを濃縮し、０％→９％のＭｅＯＨ／ＤＣＭで溶出する３３０ｇカラムを用いたＩＳＣＯで精製して、１２．６３ｇ（９３％）の所望の生成物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ）δ  ｐｐｍ  ３．４２（ｓ，３Ｈ）３．６２〜３．６９（ｍ，６Ｈ）３．７３〜３．８２（ｍ，４Ｈ）４．２６〜４．３５（ｍ，２Ｈ）６．３６（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ）７．８６（ｓ，１Ｈ）８．２７（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ  ３８４［（Ｍ＋Ｈ）＋、（ダブレット）、Ｃ１４Ｈ１８ＢｒＮ５Ｏ３についての算出値３８３］。
【０２０６】
パートＢ．  ２−メトキシエチル４−（３−（２−メトキシピリジン−３−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボキシレート
【化６１】
0006418950.tif 000062
【０２０７】
１００ｍＬ容の丸底フラスコに、１５．００ｇ（３９．０６ｍｍｏｌ）の２−メトキシエチル４−（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボキシレート、７．１７ｇ（４６．８８ｍｍｏｌ）の（２−メトキシピリジン−３−イル）ボロン酸、３８ｍＬ（２７３．４４ｍｍｏｌ）のＴＥＡ、２００ｍｌのＭｅＣＮ、１００ｍＬの水を添加し、続いて０．２１ｇ（０．２９ｍｍｏｌ）のＰｄ−１３２を添加した。反応フラスコを８５℃に予熱した油浴に入れ、撹拌した。１時間後、反応が完了し、これを室温に冷却した後、２００ｍＬのＥｔＯＡｃで希釈した。有機層を分離し、水層を１５０ｍＬ分のＥｔＯＡｃで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、薄いシリカゲルパッドを通して濾過し、濾液を濃縮して、１４ｇの固体生成物を得た［２５４ｎｍでのｕｖ吸収に基づく、９０％の所望の生成物及び１０％のデスブロモ副生成物］。
【０２０８】
得られる固体を、１４ｇ全てを１００ｍＬのＤＣＥに溶解し、５００ｍｇのＤａｒｃｏを添加することによって活性炭処理に供した。これを加熱し、約１．５時間撹拌し、冷却した後、セライトを通して濾過し、濃縮した。得られる生成物は、シリカゲルクロマトグラフィーに供することなく再結晶化に十分な程清浄であるようであった。これを少量のＩＰＡＣに約７５℃で溶解することによって再結晶化を行った（数ｍＬのＭｅＯＨを使用して、固体の溶解を促進した）。完全に溶解した後、ヘプタンを添加し、沈殿物が形成し始めると、０℃に１時間冷却した。次いで、これを濾過し、乾燥させ、約９７％の純度で１３．１ｇの生成物を得た。この物質を再び再結晶化して、１２．４５ｇ（収率７７％、純度９９％超）の所望の生成物の薄黄色の固体を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ）δ  ｐｐｍ  ３．４２（ｓ，３Ｈ）３．６１〜３．７１（ｍ，６Ｈ）３．７２〜３．８０（ｍ，４Ｈ）４．１０（ｓ，３Ｈ）４．２９〜４．３４（ｍ，２Ｈ）６．３８（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ）７．００（ｄｄ，Ｊ＝７．４５、４．９３Ｈｚ，１Ｈ）８．０４（ｄｄ，Ｊ＝４．９３、１．８９Ｈｚ，１Ｈ）８．３７（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ）８．６４（ｓ，１Ｈ）８．７４（ｄｄ，Ｊ＝７．４５、１．８９Ｈｚ，１Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（１０１ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ）δ  ｐｐｍ  ４３．４９、４４．８７、５３．５１、５９．１５、６４．９６、７１．０７、７６．９２、７７．２４、７７．５６、９６．３７、１００．９９、１１６．９３、１１７．０５、１３５．４２、１３６．１６、１４２．７９、１４５．３７、１４６．２６、１５５．４６、１５５．５２、１６０．０８。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ  ４１３［（Ｍ＋Ｈ）＋、Ｃ２０Ｈ２４Ｎ６Ｏ４についての算出値４１２］。
【０２０９】
５．６．２０．  ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−（２−メトキシピリジン−３−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボキシレートの合成
【化６２】
0006418950.tif 000063
【０２１０】
パートＡ．  ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボキシレート
【化６３】
0006418950.tif 000064
【０２１１】
３−ブロモ−５−クロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（１０ｇ、４３ｍｍｏｌ）をイソプロパノールに取った。ｔ−ブチルピペラジンカルボキシレート（９．６１ｇ、５１．６ｍｍｏｌ）、ジイソプロピルエチルアミン（２２．４ｍＬ、１２９ｍｍｏｌ）を添加し、６５℃で一晩撹拌した。反応物を室温に冷却し、水で希釈し、固体生成物を濾別した。固体を水で洗浄し、乾燥させて、更なる反応のために１５．８４ｇの粗生成物をそのまま得た。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ３８２／３８４［（Ｍ＋Ｈ）］＋、Ｃ１５Ｈ２０ＢｒＮ５Ｏ２の算出値：３８２．２。
【０２１２】
パートＢ．  ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−（２−メトキシピリジン−３−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボキシレート
【化６４】
0006418950.tif 000065
【０２１３】
ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボキシレート（１５．８４ｇ、４１．５ｍｍｏｌ）、２−メトキシピリジン−３−ボロン酸（１２．６８ｇ、８２．９ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（１７．１６ｇ、１２４．５ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（９２ｍｇ、４．１５ｍｍｏｌ）及びｘ−Ｐｈｏｓ（３９４ｍｇ、８．３ｍｍｏｌ）を窒素下で６０ｍＬのジオキサン及び３０ｍＬの水に取り、７５℃で２時間撹拌した。次いで、反応物を室温に冷却し、トルエンで希釈し、ブラインで洗浄した。有機層を硫酸マグネシウム及びセライトプラグを通して濾過した。真空還元し、０％→１００％のヘキサン：酢酸エチルを用いてＩＳＣＯシリカカラムに流した。生成物と幾らかのデスブロモとが共溶出し、これを真空で濃縮した。生成物を３０：７０のＩＰＡＣ：ヘプタンから２回再結晶化し、ヘプタンで洗浄し、乾燥させて、１２ｇの生成物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ８．７８〜８．８５（ｍ，１Ｈ）、８．７４（ｄ，Ｊ＝８．０８Ｈｚ，１Ｈ）、８．５０（ｓ，１Ｈ）、７．９２〜８．０２（ｍ，１Ｈ）、７．０４〜７．１３（ｍ，１Ｈ）、６．８０（ｄ，Ｊ＝８．０８Ｈｚ，１Ｈ）、４．００（ｓ，３Ｈ）、３．７０〜３．７８（ｍ，４Ｈ）、３．４９（ｄ，Ｊ＝５．３１Ｈｚ，４Ｈ）、１．４４（ｓ，９Ｈ）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ４１１［（Ｍ＋Ｈ）］＋、Ｃ２１Ｈ２６Ｎ６Ｏ３についての算出値：４１０．４８。
【０２１４】
５．６．２１．  イソプロピル４−（３−（５−フルオロ−２−メトキシフェニル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボキシレートの合成
【化６５】
0006418950.tif 000066
【０２１５】
パートＡ．  イソプロピル４−（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボキシレート
【化６６】
0006418950.tif 000067
【０２１６】
３−ブロモ−５−（ピペラジン−１−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（２．５ｇ、８．８７ｍｍｏｌ）をＤＣＭに取った。トルエン中の１Ｍクロロギ酸イソプロピル（１３．３ｍＬ、１３．３ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（２．４７ｍＬ、１７．７ｍｍｏｌ）を添加し、室温で３０分間撹拌した。反応物を水で洗浄し、ＤＣＭ層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空還元した。０％→５％のＤＣＭ：ＭｅＯＨを用いてＩｓｃｏシリカカラムに流した。生成物画分を合わせ、真空還元して、更なる反応のために２．８６ｇの粗生成物をそのまま得た。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ３６８／３７０［（Ｍ＋Ｈ）］＋、Ｃ１４Ｈ１８ＢｒＮ５Ｏの算出値：３６８．２４。
【０２１７】
パートＢ．  イソプロピル４−（３−（５−フルオロ−２−メトキシフェニル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボキシレート
【化６７】
0006418950.tif 000068
【０２１８】
イソプロピル４−（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボキシレート（２．８６ｇ、７．８ｍｍｏｌ）、５−フルオロ−２−メトキシフェニルボロン酸（２．６４ｇ、１５．５ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（３．２２ｇ、２３．３ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（３５ｍｇ、０．１５５ｍｍｏｌ）及びｘ−Ｐｈｏｓ（１４６ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）を窒素下で１５ｍＬのジオキサン及び７ｍＬの水に取り、８０℃で２時間撹拌した。次いで、反応物を室温に冷却し、酢酸エチルを用いてセライトプラグを通して濾過した。真空還元し、７５％→１００％のヘキサン：酢酸エチルを用いてｉｓｃｏシリカカラムに流した。生成物とデスブロモとが共溶出し、これを真空還元した。生成物を酢酸エチル：ヘキサンから２回再結晶化し、ヘプタンで洗浄し、乾燥させて、１２ｇの生成物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ８．７３（ｄ，Ｊ＝７．７８Ｈｚ，１Ｈ）、８．５０（ｓ，１Ｈ）、８．２９（ｄｄ，Ｊ＝３．１４、１１．１７Ｈｚ，１Ｈ）、７．０４（ｄｄ，Ｊ＝５．０２、９．０３Ｈｚ，１Ｈ）、６．９５（ｄｄ，Ｊ＝３．２６、７．７８Ｈｚ，１Ｈ）、６．７９（ｄ，Ｊ＝８．０３Ｈｚ，１Ｈ）、４．７７〜４．８５（ｍ，１Ｈ）、３．８７（ｓ，３Ｈ）、３．７０〜３．７８（ｍ，４Ｈ）、３．４８〜３．５６（ｍ，４Ｈ）、１．２１（ｄ，Ｊ＝６．２７Ｈｚ，６Ｈ）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ４１４［（Ｍ＋Ｈ）］＋、Ｃ２１Ｈ２４Ｎ５Ｏ３についての算出値：４１３．４。
【０２１９】
５．６．２２．  イソプロピル４−（３−（２−メトキシ−６−メチルピリジン−３−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボキシレートの合成
【化６８】
0006418950.tif 000069
【０２２０】
１００ｍＬ容の丸底フラスコに、２．００ｇ（５．４３ｍｍｏｌ）のイソプロピル４−（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボキシレート、１．００ｇ（５．９８ｍｍｏｌ）の（２−メトキシ−６−メチルピリジン−３−イル）ボロン酸、０．１９ｇ（０．１６ｍｍｏｌ）のＰｄ（ＰＰｈ３）４及び撹拌棒を加えた。
【０２２１】
全ての固体を添加した後、３０ｍｌの２％ＴＰＧＳ−７５０−Ｍ溶液を添加し、続いて３．８０ｍＬ（２７．１５ｍｍｏｌ）のトリエチルアミンを添加した。反応フラスコを８５℃に予熱した油浴に入れ、激しく撹拌した。全ての懸濁固体が完全に溶解するまで約０．２５時間撹拌する必要があった。８５℃で約２時間撹拌した後、ＬＣＭＳにより反応が完了したことが示された。これを室温に冷却し、４０ｍＬのＥｔＯＡｃで希釈した。有機層を分離し、水層を３０ｍＬ分のＥｔＯＡｃで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。少量のＤＣＭを使用して、粗混合物を溶解した後、ＩＳＣＯでの分離のために８０ｇシリカゲルカラムに直接ロードした。最初の１５分間は５０％ＥｔＯＡｃ／ｈｅｘ→１００％ＥｔＯＡｃの勾配で流し、次いでカラムにＥｔＯＡｃのみを流した。ＥｔＯＡｃのみで約８分間流すと、所望の生成物が溶出し始めた。デスブロモ副生成物が所望の生成物とともに溶出した。デスブロモ化合物は所望の生成物を含有する全画分に分布するにもかかわらず、デスブロモ化合物の割合は経時的に減少するようである。したがって、最も高い割合のデスブロモを含有する最初の数個のチューブを捨て、残りの画分を濃縮して、２５４ｎｍで純度約８４％（約１６％がデスブロモ化合物）の１．７３ｇの生成物を得た［１Ｈ  ｎｍｒに基づくと、デスブロモは２５４ｎｍのＵＶで高く見積もられ、２２０ｎｍのＵＶで低く見積もられる］。
【０２２２】
ＩＰＡＣ及びヘプタンを用いて物質を２回再結晶化し、１．４５ｇ（収率６５％）の所望の生成物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ）δ  ｐｐｍ  １．３０（ｄ，Ｊ＝６．３２Ｈｚ，６Ｈ）２．４９（ｓ，３Ｈ）３．５９〜３．６８（ｍ，４Ｈ）３．７３（ｄｄ，Ｊ＝６．１９、３．６６Ｈｚ，４Ｈ）４．０７（ｓ，３Ｈ）４．９９（ｄｔ，Ｊ＝１２．４４、６．２８Ｈｚ，１Ｈ）６．３６（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ）６．８５（ｄ，Ｊ＝７．５８Ｈｚ，１Ｈ）８．３５（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ）８．５５〜８．６３（ｍ，２Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１０１ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ）δ  ｐｐｍ  ２２．４８、２４．１０、４３．３９、４４．９４、５３．３８、６９．３７、９６．３２、１０１．３４、１１３．４０、１１６．０３、１３５．９４、１３６．１２、１４５．１４、１４６．１５、１５２．１３、１５５．３５、１５５．４５、１５９．４９。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ  ４１１［（Ｍ＋Ｈ）＋、Ｃ２１Ｈ２６Ｎ６Ｏ３についての算出値４１０］。
【０２２３】
５．６．２３．  イソプロピル４−（３−（６−メトキシピリジン−２−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボキシレートの合成
【化６９】
0006418950.tif 000070
【０２２４】
パートＡ．  イソプロピル４−（３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボキシレート
【化７０】
0006418950.tif 000071
【０２２５】
５０ｍＬ容の丸底フラスコ内の１８４ｍｇ（０．５０ｍｍｏｌ）のイソプロピル４−（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボキシレートに、１９１ｍｇ（０．７５ｍｍｏｌ）の４，４，４’，４’，５，５，５’，５’−オクタメチル−２，２’−ビ（１，３，２−ジオキサボロラン）、１４７ｍｇ（１．５０ｍｍｏｌ）のＫＯＡｃ、８ｍＬのＤＭＳＯ、続いて４１ｍｇ（０．０５ｍｍｏｌ）のＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）２・ＤＣＭを添加した。空気をＮ２で置換し、混合物を撹拌しながら８０℃に加熱した。翌朝、ＬＣＭＳにより反応が完了していたことが示される。これを室温に冷却し、ＥｔＯＡｃで希釈し、ブラインで洗浄し、有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させた。これを濃縮し、２５％→１００％のＥｔＯＡｃ／ｈｅｘで溶出する１２ｇカラムを用いたＩＳＣＯで精製して、１０７ｍｇの所望の生成物を得た［純度は約８５％でしかなく、約１５％が対応するボロン酸へと加水分解された］。
【０２２６】
パートＢ．  イソプロピル４−（３−（６−メトキシピリジン−２−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボキシレート
マイクロ波バイアル内の６５ｍｇ（０．１５７ｍｍｏｌ）のイソプロピル４−（３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボキシレートに、２９ｍｇ（０．１５７ｍｍｏｌ）の２−ブロモ−６−メトキシピリジン、４３ｍｇ（０．３１３ｍｍｏｌ）のＫ２ＣＯ３、１８ｍｇ（０．０１６ｍｍｏｌ）のＰｄ（ＰＰｈ３）４、３ｍＬのＤＭＥ、続いて１ｍＬの水を添加した。得られる混合物を１２５℃で０．３３時間マイクロ波処理した。これをＥｔＯＡｃで希釈し、ブラインで洗浄し、有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させた。これを濃縮し、中性分取ＨＰＬＣで精製して、４２ｍｇの所望の生成物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ）δ  ｐｐｍ  １．３０（ｄ，Ｊ＝６．３２Ｈｚ，６Ｈ）３．６０〜３．７４（ｍ，４Ｈ）３．８１（ｂｒ．ｓ．，４Ｈ）４．０４（ｓ，３Ｈ）５．００（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．２５Ｈｚ，１Ｈ）６．３９（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ）６．５５（ｄｄ，Ｊ＝８．０８、０．７６Ｈｚ，１Ｈ）７．６２（ｄｄ，Ｊ＝８．０８、７．５８Ｈｚ，１Ｈ）７．８３〜７．９３（ｍ，１Ｈ）８．３７（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ）８．６６（ｓ，１Ｈ）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ  ３９７［（Ｍ＋Ｈ）＋、Ｃ２０Ｈ２４Ｎ６Ｏ３についての算出値３９６］。
【０２２７】
５．６．２４．  ５−イソプロピル−３−（４−（３−（２−メトキシピリジン−３−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−イル）−１，２，４−オキサジアゾールの合成
【化７１】
0006418950.tif 000072
【０２２８】
パートＡ．  ４−（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボニトリル
【化７２】
0006418950.tif 000073
【０２２９】
３−ブロモ−５−（ピペラジン−１−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（５００ｍｇ、１．７７ｍｍｏｌ）を２０ｍＬのＤＣＭに取り、０℃の氷浴内で撹拌した。６ｍＬの水中の重炭酸ナトリウム（７４４ｍｇ、８．８６ｍｍｏｌ）を添加し、撹拌した。臭化シアン（２２５ｍｇ、２．１２ｍｍｏｌ）を添加し、０℃で３０分間撹拌した後、室温にし、一晩撹拌した。反応物をＤＣＭで希釈し、水で洗浄し、ＤＣＭ層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空還元して、更なる反応のために５００ｍｇの粗生成物をそのまま得た。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ３０７／３０９［（Ｍ＋Ｈ）］＋、Ｃ１１Ｈ１１ＢｒＮ６の算出値：３０７．１５。
【０２３０】
パートＢ．  ３−（４−（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−イル）−５−イソプロピル−１，２，４−オキサジアゾール
【化７３】
0006418950.tif 000074
【０２３１】
９ｍＬのＤＭＦ中の４−（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボニトリル（４５０ｍｇ、１．４６ｍｍｏｌ）及び炭酸ナトリウム（１５５ｍｇ、１．４６ｍｍｏｌ）を室温で１５分間撹拌し、ヒドロキシルアミンＨＣｌ（２０３ｍｇ、２．９ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を８０℃で３０分間撹拌した。次いで、１２ｍＬのトルエンを添加し、ピリジン（４７４μＬ、５．８６ｍｍｏｌ）及びイソ酪酸無水物（９７３μＬ、５．８６ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を８０℃で１．５時間撹拌した。反応物を室温に冷却し、真空還元した後、酢酸エチルに取り、水、ブライン、水で洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空還元した。２５０ｍｇの粗生成物を更なる反応にそのまま使用する。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ３９２／３９４［（Ｍ＋Ｈ）］＋、Ｃ１５Ｈ１８ＢｒＮ７Ｏの算出値：３９２．２６。
【０２３２】
パートＣ．  ５−イソプロピル−３−（４−（３−（２−メトキシピリジン−３−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−イル）−１，２，４−オキサジアゾール
３−（４−（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−イル）−５−イソプロピル−１，２，４−オキサジアゾール（２００ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）、２−メトキシピリジン−３−ボロン酸（１５６ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（２１１ｍｇ、１．５３ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（３ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ）及びｘ−Ｐｈｏｓ（１０ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）を封管内の２ｍＬのジオキサン及び１ｍＬの水に取り、８５℃で２時間加熱した。次いで、反応物を室温に冷却し、アセトニトリル及びＤＣＭを用いてセライトプラグを通して濾過し、真空還元した。島津製作所の中性相分取で精製し、凍結乾燥して、１２ｍｇの生成物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ８．８３（ｄｄ，Ｊ＝１．７７、７．５８Ｈｚ，１Ｈ）、８．７７（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ）、８．５１（ｓ，１Ｈ）、７．９９（ｄｄ，Ｊ＝１．８９、４．９３Ｈｚ，１Ｈ）、７．１０（ｄｄ，Ｊ＝４．８０、７．５８Ｈｚ，１Ｈ）、６．８６（ｄ，Ｊ＝８．０８Ｈｚ，１Ｈ）、４．００（ｓ，３Ｈ）、３．８４〜３．９０（ｍ，４Ｈ）、３．４８〜３．５３（ｍ，４Ｈ）、３．１５（ｔ，Ｊ＝７．０７Ｈｚ，１Ｈ）、１．２９（ｄ，Ｊ＝６．８２Ｈｚ，６Ｈ）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ４２１［（Ｍ＋Ｈ）］＋、Ｃ２１Ｈ２４Ｎ８Ｏ２についての算出値：４２０．４８。
【０２３３】
５．６．２５．  （Ｓ）−２−アミノ−１−（４−（３−（２−メトキシピリジン−３−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−イル）−４−メチルペンタン−１−オンの合成
【化７４】
0006418950.tif 000075
【０２３４】
パートＡ．  （Ｓ）−２−アミノ−１−（４−（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−イル）−４−メチルペンタン−１−オン
【化７５】
0006418950.tif 000076
【０２３５】
３−ブロモ−５−（ピペラジン−１−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（２００ｍｇ、０．７１ｍｍｏｌ）、Ｂｏｃ−Ｌ−Ｌｅｕ（１９６ｍｇ、０．８５ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（２４５ｍｇ、１．０６ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（３９４μＬ、２．８３ｍｍｏｌ）をＤＭＦに取り、室温で一晩撹拌した。反応物をＤＣＭで希釈し、水で洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空還元した。残渣を２０ｍＬの４０％ＴＦＡのＤＣＭ溶液に取り、３５℃で一晩撹拌した。混合物を真空で濃縮し、ＤＣＭ中の１０％ＭｅＯＨを用いてシリカプラグに通した。溶媒を除去し、残渣を乾燥させて、６００ｍｇの粗生成物を更なる反応のためにＴＦＡ塩として得た。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ３９５／３９７［（Ｍ＋Ｈ）］＋、Ｃ１６Ｈ２３ＢｒＮ６Ｏの算出値：３９５．３１。
【０２３６】
パートＢ．  （Ｓ）−２−アミノ−１−（４−（３−（２−メトキシピリジン−３−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−イル）−４−メチルペンタン−１−オン
（Ｓ）−２−アミノ−１−（４−（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−イル）−４−メチルペンタン−１−オン（３００ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）、２−メトキシピリジン−３−ボロン酸（１３５ｍｇ、０．８８ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（３２６ｍｇ、２．３６ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（３ｍｇ、０．０１１ｍｍｏｌ）及びｘ−Ｐｈｏｓ（１１ｍｇ、０．０２２ｍｍｏｌ）を封管内の２ｍＬのジオキサン及び１ｍＬの水に取り、８５℃で２時間加熱した。次いで、反応物を室温に冷却し、アセトニトリル及びＤＣＭを用いてセライトプラグを通して濾過し、真空還元した。島津製作所の中性相分取で精製し、凍結乾燥して、２８．１ｍｇのギ酸塩生成物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ８．８２（ｄｄ，Ｊ＝２．０２、７．５８Ｈｚ，１Ｈ）、８．７７（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ）、８．５１（ｓ，１Ｈ）、８．２７（ｓ，１Ｈ）、７．９９（ｄｄ，Ｊ＝１．７７、４．８０Ｈｚ，１Ｈ）、７．０９（ｄｄ，Ｊ＝４．８０、７．５８Ｈｚ，１Ｈ）、６．８３（ｄ，Ｊ＝８．０８Ｈｚ，１Ｈ）、４．００（ｓ，３Ｈ）、３．６２〜３．９３（ｍ，９Ｈ）、１．７２〜１．８８（ｍ，１Ｈ）、１．２３〜１．４２（ｍ，２Ｈ）、０．９１（ｄｄ，Ｊ＝６．５７、１０．１１Ｈｚ，６Ｈ）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ４２４［（Ｍ＋Ｈ）］＋、Ｃ２２Ｈ２９Ｎ７Ｏ２についての算出値：４２３．５２。
【０２３７】
５．６．２６．  （Ｓ）−２−アミノ−Ｎ−（（Ｓ）−１−（３−（２−メトキシピリジン−３−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピロリジン−３−イル）−Ｎ，４−ジメチルペンタンアミドの合成
【化７６】
0006418950.tif 000077
【０２３８】
パートＡ．  （Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル（１−（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピロリジン−３−イル）カルバメート
【化７７】
0006418950.tif 000078
【０２３９】
３−ブロモ−５−クロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（２．２ｇ、９．５ｍｍｏｌ）、（Ｓ）−３−Ｂｏｃ−アミノピロリジン（２．６ｇ、１４．２ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（５．２７ｍＬ、３７．９ｍｍｏｌ）を封管内のイソプロパノールに取り、１４０℃で３０分間マイクロ波処理した。反応物を真空ストリッピングし、酢酸エチルに取り、水で洗浄した後、酢酸エチルを用いてシリカプラグに通した。溶媒を真空で除去して３．６ｇの粗生成物を得て、これをそのままパートＢに用いた。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ３８２／３８４［（Ｍ＋Ｈ）］＋、Ｃ１５Ｈ１９ＢｒＮ５Ｏ２の算出値：３８２．２。
【０２４０】
パートＢ．  （Ｓ）−１−（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）−Ｎ−メチルピロリジン−３−アミン
【化７８】
0006418950.tif 000079
【０２４１】
（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル（１−（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピロリジン−３−イル）カルバメート（３．６ｇ、９．４ｍｍｏｌ）を１５ｍＬのＤＭＦに取り、氷浴内で０℃に冷却した。ヨードメタン（１．０２６ｍＬ、１６．５ｍｍｏｌ）を添加し、５分間撹拌した。次いで、油中の６０％水素化ナトリウム（７５４ｍｇ、１８．８ｍｍｏｌ）をゆっくりと添加した。反応物を０℃で５分間撹拌した後、氷浴から取り出し、室温で３０分間撹拌した。反応物を氷でクエンチした後、酢酸エチルで２回抽出した。酢酸エチル画分を合わせ、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空還元した。次いで、これを２６ｍＬのＤＣＭに取り、４ｍＬのＴＦＡを添加した。ＬＣ／ＭＳにより完了が示されるまで１時間撹拌した。反応物を１Ｎ  ＮａＯＨで洗浄し、ＤＣＭ層を除去し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空還元して、２．７２ｇの粗生成物を得て、これをそのままパートＣに用いた。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ２９６／２９８［（Ｍ＋Ｈ）］＋、Ｃ１１Ｈ１４ＢｒＮ５の算出値：２９６．１７。
【０２４２】
パートＣ．  （Ｓ）−２−アミノ−Ｎ−（（Ｓ）−１−（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピロリジン−３−イル）−Ｎ，４−ジメチルペンタンアミド
【化７９】
0006418950.tif 000080
【０２４３】
（Ｓ）−１−（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）−Ｎ−メチルピロリジン−３−アミン（２００ｍｇ、０．６８ｍｍｏｌ）、Ｂｏｃ−Ｌ−Ｌｅｕ（１８７ｍｇ、０．８１ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（３８５ｍｇ、１．０１ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（３７５μＬ、２．７ｍｍｏｌ）をＤＭＦに取り、室温で一晩撹拌した。反応物をＤＣＭで希釈し、水で洗浄した後、ＤＣＭ層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空還元した。次いで、これを２６ｍＬのＤＣＭに取り、４ｍＬのＴＦＡを添加した。ＬＣ／ＭＳにより完了が示されるまで１時間撹拌した。反応物を１Ｎ  ＮａＯＨで洗浄し、ＤＣＭ層を除去し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空還元して、２２６ｍｇの粗生成物を得て、これをそのままパートＤに使用した。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ４０９／４１１［（Ｍ＋Ｈ）］＋、Ｃ１７Ｈ２４ＢｒＮ６Ｏの算出値：４０９。
【０２４４】
パートＤ．  （Ｓ）−２−アミノ−Ｎ−（（Ｓ）−１−（３−（２−メトキシピリジン−３−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピロリジン−３−イル）−Ｎ，４−ジメチルペンタンアミド
（Ｓ）−２−アミノ−Ｎ−（（Ｓ）−１−（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピロリジン−３−イル）−Ｎ，４−ジメチルペンタンアミド（２２０ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ）、２−メトキシピリジン−３−ボロン酸（１６４ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（２９１ｍｇ、２．１５ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（２ｍｇ、０．０１１ｍｍｏｌ）及びｘ−ｐｈｏｓ（１０ｍｇ、０．０２２ｍｍｏｌ）を２ｍＬのアセトニトリル及び１ｍＬの水に取り、８５℃の封管内で２時間加熱した。次いで、反応物をアセトニトリル及びＤＣＭを用いてセライトを通して濾過し、真空還元した後、島津製作所の中性相分取で精製し、生成物画分を凍結乾燥して、４１．３ｍｇの（Ｓ）−２−アミノ−Ｎ−（（Ｓ）−１−（３−（２−メトキシピリジン−３−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピロリジン−３−イル）−Ｎ，４−ジメチルペンタンアミドを０．５当量のギ酸塩として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ８．８７〜８．９７（ｍ，１Ｈ）、８．７２（ｓ，１Ｈ）、８．５０（ｓ，１Ｈ）、８．３０（ｓ，１Ｈ）、７．９６（ｄｄ，Ｊ＝２．０２、４．８０Ｈｚ，１Ｈ）、７．００〜７．１１（ｍ，１Ｈ）、６．５１（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ）、４．００（ｓ，３Ｈ）、３．４８〜３．６４（ｍ，１Ｈ）、３．４３（ｂｒ．ｓ．，３Ｈ）、２．９６（ｓ，２Ｈ）、２．８１（ｓ，１Ｈ）、２．１１〜２．２８（ｍ，２Ｈ）、１．７２〜１．８９（ｍ，１Ｈ）、１．１９〜１．３９（ｍ，２Ｈ）、０．９０（ｄｄ，Ｊ＝１．８９、６．６９Ｈｚ，６Ｈ）。（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ４３８［（Ｍ＋Ｈ）］＋、Ｃ２３Ｈ３１Ｎ７Ｏ２についての算出値：４３７．５。
【０２４５】
５．６．２７．  （Ｓ）−２−アミノ−１−（４−（３−（２−メトキシピリジン−３−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−イル）−３−メチルブタン−１−オンの合成
【化８０】
0006418950.tif 000081
【０２４６】
パートＡ．  （Ｓ）−２−アミノ−１−（４−（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−イル）−３−メチルブタン−１−オン
【化８１】
0006418950.tif 000082
【０２４７】
３−ブロモ−５−（ピペラジン−１−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（４００ｍｇ、１．４２ｍｍｏｌ）、Ｂｏｃ−Ｌ−ロイシン（３９２ｍｇ、１．７ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（４９０ｍｇ、２．１３ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（７８８μＬ、５．７ｍｍｏｌ）をＤＭＦに取り、室温で一晩撹拌した。反応物をＤＣＭで希釈し、水で洗浄した後、ＤＣＭ層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空還元した。次いで、これを２６ｍＬのＤＣＭに取り、４ｍＬのＴＦＡを添加した。ＬＣ／ＭＳにより完了が示されるまで１時間撹拌した。反応物を１Ｎ  ＮａＯＨで洗浄し、ＤＣＭ層を除去し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空還元して、更なる反応のために３４９ｍｇの粗生成物をそのまま得た。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ３８１／３８３［（Ｍ＋Ｈ）］＋、Ｃ１５Ｈ２１ＢｒＮ６Ｏの算出値：３８１．２８。
【０２４８】
パートＢ．  （Ｓ）−２−アミノ−１−（４−（３−（２−メトキシピリジン−３−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−イル）−３−メチルブタン−１−オン
（Ｓ）−２−アミノ−１−（４−（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−イル）−３−メチルブタン−１−オン（１１０ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）、（２−メトキシピリジン−３−イル）ボロン酸（８８ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（１２０ｍｇ、０．８７ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（１ｍｇ、０．００５８ｍｍｏｌ）及びｘ−Ｐｈｏｓ（５ｍｇ、０．０１２ｍｍｏｌ）を窒素下で３ｍＬのジオキサン及び１ｍＬの水に取り、８５℃で２時間撹拌した。次いで、反応物を室温に冷却し、アセトニトリル及びＤＣＭを用いてセライトプラグを通して濾過した。真空還元し、島津製作所の中性相分取で精製し、凍結乾燥し、１．５当量のギ酸塩生成物を１８ｍｇ得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ８．８３（ｄｄ，Ｊ＝１．７７、７．５８Ｈｚ，１Ｈ）、８．７８（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ）、８．５２（ｓ，１Ｈ）、８．３５（ｓ，２Ｈ）、７．９９（ｄｄ，Ｊ＝１．８９、４．９３Ｈｚ，１Ｈ）、７．０９（ｄｄ，Ｊ＝４．９３、７．４５Ｈｚ，１Ｈ）、６．８５（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ）、４．０１（ｓ，３Ｈ）、３．８１〜３．８９（ｍ，１Ｈ）、３．７４（ｄ，Ｊ＝５．３１Ｈｚ，３Ｈ）、３．６８（ｄ，Ｊ＝７．５８Ｈｚ，３Ｈ）、１．７６〜１．８９（ｍ，１Ｈ）、０．９４（ｄ，Ｊ＝６．８２Ｈｚ，３Ｈ）、０．８６（ｄ，Ｊ＝６．８２Ｈｚ，３Ｈ）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ４１０［（Ｍ＋Ｈ）］＋、Ｃ２１Ｈ２７Ｎ７Ｏ２についての算出値：４０９．５。
【０２４９】
５．６．２８．  （Ｓ）−２−アミノ−３−メトキシ−１−（４−（３−（２−メトキシピリジン−３−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−イル）プロパン−１−オンの合成
【化８２】
0006418950.tif 000083
【０２５０】
パートＡ．  （Ｓ）−２−アミノ−１−（４−（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−イル）−３−メトキシプロパン−１−オン
【化８３】
0006418950.tif 000084
【０２５１】
３−ブロモ−５−（ピペラジン−１−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（３００ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのＤＭＦに取った。Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｍｅ）−ＯＨ（２８０ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（３６８ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（５９０μＬ、４．２５ｍｍｏｌ）を添加し、室温で一晩撹拌した。反応物をＤＣＭで希釈し、水で洗浄した。ＤＣＭ層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空還元した。次いで、これを３０％ＴＦＡのＤＣＭ溶液に取り、室温で２時間撹拌した。次いで、これを０℃に冷却し、水層が塩基性となるまで濃ＮａＯＨ水溶液をゆっくりと添加した。ＤＣＭ層を抽出し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空還元して、更なる反応のために４０５ｍｇの粗生成物をそのまま得た。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ３８３／３８５［（Ｍ＋Ｈ）］＋、Ｃ１４Ｈ１９ＢｒＮ６Ｏ２の算出値：３８３．２５。
【０２５２】
パートＢ．  （Ｓ）−２−アミノ−３−メトキシ−１−（４−（３−（２−メトキシピリジン−３−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−イル）プロパン−１−オン
３（Ｓ）−２−アミノ−１−（４−（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−イル）−３−メトキシプロパン−１−オン（４００ｍｇ、１．０４ｍｍｏｌ）、２−メトキシピリジン−３−ボロン酸（２４０ｍｇ、１．５６ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（４３５ｍｇ、３．１２ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（５ｍｇ、０．０２１ｍｍｏｌ）及びｘ−Ｐｈｏｓ（１４ｍｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）を封管内の２ｍＬのジオキサン及び１ｍＬの水に取り、８５℃で２時間加熱した。次いで、反応物を室温に冷却し、アセトニトリル及びＤＣＭを用いてセライトプラグを通して濾過し、真空還元した。島津製作所の中性相分取で精製し、凍結乾燥して、３９ｍｇのギ酸塩生成物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ８．８２（ｄｄ，Ｊ＝１．８９、７．４５Ｈｚ，１Ｈ）、８．７６（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ）、８．５１（ｓ，１Ｈ）、８．２９（ｓ，１Ｈ）、７．９９（ｄｄ，Ｊ＝１．８９、４．９３Ｈｚ，１Ｈ）、７．０９（ｄｄ，Ｊ＝４．９３、７．４５Ｈｚ，１Ｈ）、６．８４（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ）、３．９８〜４．０２（ｍ，４Ｈ）、３．６１〜３．８５（ｍ，８Ｈ）、３．３１〜３．４５（ｍ，２Ｈ）ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ４１２［（Ｍ＋Ｈ）］＋、Ｃ２０Ｈ２５Ｎ７Ｏ３についての算出値：４１１．４７。
【０２５３】
５．６．２９．  （Ｓ）−２−アミノ−１−（４−（３−（２−メトキシピリジン−３−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−イル）−３，３−ジメチルブタン−１−オンの合成
【化８４】
0006418950.tif 000085
【０２５４】
パートＡ．  （Ｓ）−２−アミノ−１−（４−（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−イル）−３，３−ジメチルブタン−１−オン
【化８５】
0006418950.tif 000086
【０２５５】
３−ブロモ−５−（ピペラジン−１−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（３００ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）、Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−ｔｅｒｔ−ロイシン（２９５ｍｇ、１．２８ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（３６８ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（５９０μＬ、４．２６ｍｍｏｌ）をＤＭＦに取り、室温で一晩撹拌した。反応物をＤＣＭで希釈し、水で洗浄した後、ＤＣＭ層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空還元した。次いで、これを２６ｍＬのＤＣＭに取り、４ｍＬのＴＦＡを添加した。ＬＣ／ＭＳにより完了が示されるまで１時間撹拌した。反応物を１Ｎ  ＮａＯＨで洗浄し、ＤＣＭ層を除去し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空還元して、更なる反応のために４２０ｍｇの粗生成物をそのまま得た。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ３９５／３９７［（Ｍ＋Ｈ）］＋、Ｃ１６Ｈ２３ＢｒＮ６Ｏの算出値：３９５．３１。
【０２５６】
パートＢ．  （Ｓ）−２−アミノ−１−（４−（３−（２−メトキシピリジン−３−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−イル）−３，３−ジメチルブタン−１−オン
（Ｓ）−２−アミノ−１−（４−（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−イル）−３，３−ジメチルブタン−１−オン（４２０ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）、（２−メトキシピリジン−３−イル）ボロン酸（２４０ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（４３５ｍｇ、３．２ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（５ｍｇ、０．０２１ｍｍｏｌ）及びｘ−Ｐｈｏｓ（１４ｍｇ、０．０４３ｍｍｏｌ）を窒素下で４ｍＬのジオキサン及び１ｍＬの水に取り、８５℃で２時間撹拌した。次いで、反応物を室温に冷却し、アセトニトリル及びＤＣＭを用いてセライトプラグを通して濾過した。真空還元し、島津製作所の中性相分取で精製し、凍結乾燥し、１当量のギ酸塩生成物を１８ｍｇ得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ８．８１（ｄｄ，Ｊ＝１．７７、７．５８Ｈｚ，１Ｈ）、８．７５（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ）、８．５１（ｓ，１Ｈ）、８．２９（ｓ，１Ｈ）、７．９７〜８．０３（ｍ，１Ｈ）、７．０６〜７．０９（ｍ，１Ｈ）、６．８３（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ）、４．００（ｓ，３Ｈ）、３．６９〜３．７８（ｍ，３Ｈ）、３．８０（ｓ，４Ｈ）、３．８４（ｓ，２Ｈ）、０．９４（ｓ，９Ｈ）ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ４２４［（Ｍ＋Ｈ）］＋、Ｃ２２Ｈ２９Ｎ７Ｏ２についての算出値：４２３．５２。
【０２５７】
５．６．３０．  （Ｒ）−テトラヒドロフラン−３−イル４−（３−（２−メトキシピリジン−３−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボキシレートの合成
【化８６】
0006418950.tif 000087
【０２５８】
パートＡ．  ４−（３−ブロモ−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）−ピペラジン−１−カルボン酸４−ニトロ−フェニルエステル
【化８７】
0006418950.tif 000088
【０２５９】
０℃で４０ｍＬのＥｔＯＡｃに溶解した２．００ｇ（７．０９ｍｍｏｌ）の３−ブロモ−５−ピペラジン−１−イル−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジンに、１．７１ｇ（８．５１ｍｍｏｌ）のクロロギ酸４−ニトロフェニル、続いて１．９７ｍＬ（１４．１８ｍｍｏｌ）のＴＥＡを添加した。０℃で５分間撹拌した後、氷浴を取り外し、室温で約２時間撹拌を続けた。これを５０ｍＬの５０％ＥｔＯＡｃ／ｈｅｘで希釈した。所望の生成物を濾別し、乾燥させて、３．１７ｇ（収率１００％）のオフホワイト色の固体を得た。
【０２６０】
パートＢ．  ４−（３−ブロモ−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）−ピペラジン−１−カルボン酸（Ｒ）−（テトラヒドロ−フラン−３−イル）エステル
【化８８】
0006418950.tif 000089
【０２６１】
１０ｍＬのＴＨＦに溶解した１１２ｍｇ（０．２５ｍｍｏｌ）の４−ニトロフェニル４−（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボキシレートに、（Ｒ）−テトラヒドロフラン−３−オール（４４ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）、続いて６０％ＮａＨ（４０ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を添加し、室温で２時間撹拌した。２時間後、これを２０ｍＬのＥｔＯＡｃで希釈し、ブラインでゆっくりとクエンチした。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濃縮し、これを０％→１０％のＭｅＯＨ／ＤＣＭで溶出する１２ｇシリカゲルカラムで精製して、７１ｍｇ（収率７２％）の所望の生成物を得た。
【０２６２】
パートＣ．  （Ｒ）−テトラヒドロフラン−３−イル４−（３−（２−メトキシピリジン−３−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボキシレート
鈴木カップリング反応を、６−［１−（２，２−ジメチル−プロピル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−３−（２−メトキシ−ピリジン−３−イル）−イミダゾ−［１，２−］ピリダジンの合成について記載されるのと同じ条件下で行い、７２％の所望の生成物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ）δ  ｐｐｍ  １．９８〜２．１４（ｍ，１Ｈ）２．２３（ｄｔｄ，Ｊ＝１４．０２、８．１７、８．１７、６．２７Ｈｚ，１Ｈ）３．６６（ｄ，Ｊ＝５．０２Ｈｚ，４Ｈ）３．７１〜３．８２（ｍ，４Ｈ）３．８３〜４．０２（ｍ，４Ｈ）４．１０（ｓ，３Ｈ）５．２７〜５．３９（ｍ，１Ｈ）６．３８（ｄ，Ｊ＝７．７８Ｈｚ，１Ｈ）７．００（ｄｄ，Ｊ＝７．５３、５．０２Ｈｚ，１Ｈ）８．０４（ｄｄ，Ｊ＝４．７７、１．７６Ｈｚ，１Ｈ）８．３７（ｄ，Ｊ＝７．７８Ｈｚ，１Ｈ）８．６３（ｓ，１Ｈ）８．７３（ｄｄ，Ｊ＝７．５３、１．７６Ｈｚ，１Ｈ）。
【０２６３】
５．６．３１．  １−メトキシプロパン−２−イル４−（３−（２−メトキシピリジン−３−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボキシレートの合成
【化８９】
0006418950.tif 000090
【０２６４】
パートＡ．  １−メトキシプロパン−２−イル４−（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボキシレート
【化９０】
0006418950.tif 000091
【０２６５】
これは、１−メトキシプロパン−２−オールを使用し、（Ｒ）−テトラヒドロフラン−３−イル４−（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボキシレートを作製する上記の手順のパートＢに従って作製した。
【０２６６】
パートＢ．  １−メトキシプロパン−２−イル４−（３−（２−メトキシピリジン−３−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボキシレート
鈴木カップリング反応を他の実施例に用いた手順に従って行った。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ）δ  ｐｐｍ  １．２９（ｄ，Ｊ＝６．５７Ｈｚ，３Ｈ）３．４０（ｓ，３Ｈ）３．４２〜３．５６（ｍ，２Ｈ）３．６１〜３．７０（ｍ，４Ｈ）３．７２〜３．８１（ｍ，４Ｈ）４．１０（ｓ，３Ｈ）５．０６（ｔｄ，Ｊ＝６．２５、４．１７Ｈｚ，１Ｈ）６．３７（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ）７．００（ｄｄ，Ｊ＝７．５８、５．０５Ｈｚ，１Ｈ）８．０３（ｄｄ，Ｊ＝４．８０、１．７７Ｈｚ，１Ｈ）８．３６（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ）８．６３（ｓ，１Ｈ）８．７３（ｄｄ，Ｊ＝７．４５、１．８９Ｈｚ，１Ｈ）。
【０２６７】
５．６．３２．  テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル４−（３−（２−メトキシピリジン−３−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボキシレートの合成
【化９１】
0006418950.tif 000092
【０２６８】
パートＡ．  テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル４−（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボキシレート
【化９２】
0006418950.tif 000093
【０２６９】
これは、テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−オールを使用し、（Ｒ）−テトラヒドロフラン−３−イル４−（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボキシレートを作製する上記の手順のパートＢに従って作製した。
【０２７０】
パートＢ．  テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル４−（３−（２−メトキシピリジン−３−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボキシレート
これは、（Ｒ）−テトラヒドロフラン−３−イル４−（３−（２−メトキシピリジン−３−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボキシレートを作製する上記の鈴木カップリング手順に従って合成した。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ）δ  ｐｐｍ  １．６６〜１．８０（ｍ，２Ｈ）１．９５〜２．０２（ｍ，２Ｈ）３．５１〜３．６２（ｍ，２Ｈ）３．６７（ｄ，Ｊ＝４．５５Ｈｚ，４Ｈ）３．７１〜３．８２（ｍ，４Ｈ）３．８８〜４．００（ｍ，２Ｈ）４．０９（ｓ，３Ｈ）４．９４（ｔｔ，Ｊ＝８．４３、３．９５Ｈｚ，１Ｈ）６．３６（ｄ，Ｊ＝７．５８Ｈｚ，１Ｈ）６．９９（ｄｄ，Ｊ＝７．０７、５．３１Ｈｚ，１Ｈ）８．０３（ｄ，Ｊ＝４．８０Ｈｚ，１Ｈ）８．３５（ｄ，Ｊ＝７．５８Ｈｚ，１Ｈ）８．６２（ｓ，１Ｈ）８．７２（ｄ，Ｊ＝７．３３Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ  ４３９［（Ｍ＋Ｈ）＋、Ｃ２２Ｈ２６ＦＮ６Ｏ４についての算出値４３８］。
【０２７１】
５．６．３３．  （Ｒ）−テトラヒドロフラン−３−イル４−（３−（５−フルオロ−２−メトキシピリジン−３−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボキシレートの合成
【化９３】
0006418950.tif 000094
【０２７２】
（Ｒ）−テトラヒドロフラン−３−イル４−（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボキシレート（１００ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）、５−フルオロ−２−メトキシ−３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピリジン（１２７ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（２１１μＬ、１．５ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（１ｍｇ、０．００２５ｍｍｏｌ）及びｘ−Ｐｈｏｓ（５ｍｇ、０．００５ｍｍｏｌ）を窒素下で４ｍＬのジオキサン及び１ｍＬの水に取り、８５℃で２時間撹拌した。次いで、反応物を室温に冷却し、アセトニトリル及びＤＣＭを用いてセライトプラグを通して濾過した。真空還元し、島津製作所の中性相分取で精製し、凍結乾燥して、３０ｍｇの生成物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ８．８０（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ）、８．７２（ｄｄ，Ｊ＝３．０３、１０．３６Ｈｚ，１Ｈ）、８．５６（ｓ，１Ｈ）、７．９４（ｄ，Ｊ＝３．０３Ｈｚ，１Ｈ）、６．８６（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ）、５．１８（ｄ，Ｊ＝１．７７Ｈｚ，１Ｈ）、４．００（ｓ，３Ｈ）、３．７１〜３．８３（ｍ，８Ｈ）、３．３２（ｓ，２Ｈ）、２．０８（ｓ，１Ｈ）、２．１３（ｓ，１Ｈ）、１．８９〜２．００（ｍ，１Ｈ）ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ４４３［（Ｍ＋Ｈ）］＋、Ｃ２１Ｈ２３ＦＮ６Ｏ４についての算出値：４４２．４５。
【０２７３】
５．６．３４．  （Ｓ）−テトラヒドロフラン−３−イル４−（３−（２−メトキシピリジン−３−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボキシレートの合成
【化９４】
0006418950.tif 000095
【０２７４】
パートＡ．  （Ｓ）−テトラヒドロフラン−３−イル４−（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボキシレート
【化９５】
0006418950.tif 000096
【０２７５】
１８ｍＬのＴＨＦに溶解した２２４ｍｇ（０．５０ｍｍｏｌ）の４−ニトロフェニル４−（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボキシレートに、（Ｓ）−テトラヒドロフラン−３−オール（８８ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）、続いて６０％ＮａＨ（８０ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）を添加し、室温で２時間撹拌した。２時間後、これを３０ｍＬのＥｔＯＡｃで希釈し、ブラインでゆっくりとクエンチした。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濃縮し、これを０％→１０％のＭｅＯＨ／ＤＣＭで溶出する４０ｇシリカゲルカラムを用いて精製して、３０１ｍｇ（収率７６％）の所望の生成物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ）δ  ｐｐｍ  ２．０１〜２．１３（ｍ，１Ｈ）２．１７〜２．２９（ｍ，１Ｈ）３．５７〜３．７０（ｍ，４Ｈ）３．７４〜３．８４（ｍ，４Ｈ）３．８６〜４．０１（ｍ，４Ｈ）５．２７〜５．３８（ｍ，１Ｈ）６．３７（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ）７．８７（ｓ，１Ｈ）８．２８（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ）。
【０２７６】
パートＢ．  （Ｓ）−テトラヒドロフラン−３−イル４−（３−（２−メトキシピリジン−３−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボキシレート
鈴木カップリング反応をＬＰ−９４３７９５の合成について記載されるのと同じ条件下で行い、６１％の所望の生成物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ）δ  ｐｐｍ  ２．０２〜２．１４（ｍ，１Ｈ）２．１６〜２．３０（ｍ，１Ｈ）３．６６（ｄ，Ｊ＝４．８０Ｈｚ，４Ｈ）３．７２〜３．８２（ｍ，４Ｈ）３．８４〜４．０１（ｍ，４Ｈ）４．１０（ｓ，３Ｈ）５．３３（ｔｄ，Ｊ＝３．８５、１．８９Ｈｚ，１Ｈ）６．３８（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ）７．０１（ｄｄ，Ｊ＝７．４５、４．９３Ｈｚ，１Ｈ）８．０４（ｄｄ，Ｊ＝５．０５、１．７７Ｈｚ，１Ｈ）８．３８（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ）８．６４（ｓ，１Ｈ）８．７３（ｄｄ，Ｊ＝７．３３、１．７７Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ  ４２５［（Ｍ＋Ｈ）＋、Ｃ２１Ｈ２４Ｎ６Ｏ４についての算出値４２４］。
【０２７７】
５．６．３５．  （Ｓ）−１−メトキシプロパン−２−イル４−（３−（２−メトキシピリジン−３−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボキシレートの合成
【化９６】
0006418950.tif 000097
【０２７８】
パートＡ．  （Ｓ）−１−メトキシプロパン−２−イル４−（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボキシレート
【化９７】
0006418950.tif 000098
【０２７９】
これは、上記の［（Ｓ）−テトラヒドロフラン−３−イル４−（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボキシレート］に使用したのと同じ条件及び規模で行い、７１％の所望の生成物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ）δ  ｐｐｍ  １．２９（ｄ，Ｊ＝６．２７Ｈｚ，３Ｈ）３．３０〜３．４１（ｍ，３Ｈ）３．４１〜３．５４（ｍ，２Ｈ）３．５８〜３．６９（ｍ，４Ｈ）３．７１〜３．８３（ｍ，４Ｈ）４．９８〜５．１２（ｍ，１Ｈ）６．３５（ｄ，Ｊ＝８．０３Ｈｚ，１Ｈ）７．８６（ｓ，１Ｈ）８．２６（ｄ，Ｊ＝７．７８Ｈｚ，１Ｈ）。
【０２８０】
パートＢ．  （Ｓ）−１−メトキシプロパン−２−イル４−（３−（２−メトキシピリジン−３−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン−１−カルボキシレート
鈴木カップリング反応を他の実施例の合成に用いた典型的な条件下で行い、６４％の所望の生成物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ）δ  ｐｐｍ  １．２９（ｄ，Ｊ＝６．３２Ｈｚ，３Ｈ）３．４０（ｓ，３Ｈ）３．４２〜３．５４（ｍ，２Ｈ）３．６１〜３．７０（ｍ，４Ｈ）３．７１〜３．８１（ｍ，４Ｈ）４．０９（ｓ，３Ｈ）５．０６（ｑｕｉｎｄ，Ｊ＝６．３２、６．３２、６．３２、６．３２、４．０４Ｈｚ，１Ｈ）６．３８（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ）７．００（ｄｄ，Ｊ＝７．４５、４．９３Ｈｚ，１Ｈ）８．０３（ｄｄ，Ｊ＝４．９３、１．８９Ｈｚ，１Ｈ）８．３６（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ）８．６３（ｓ，１Ｈ）８．７４（ｄｄ，Ｊ＝７．５８、２．０２Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ  ４２７［（Ｍ＋Ｈ）＋、Ｃ２１Ｈ２６Ｎ６Ｏ４についての算出値４２６］。
【０２８１】
５．６．３６．  ２−メトキシエチル４−（３−（２−メトキシピリジン−３−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン（ｄ８）−１−カルボキシレートの合成
【化９８】
0006418950.tif 000099
【０２８２】
パートＡ．  ３−ブロモ−５−（ピペラジン−１−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（ｄ８）
【化９９】
0006418950.tif 000100
【０２８３】
イソプロパノール（８ｍＬ）中の３−ブロモ−５−クロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（９３０ｍｇ、４ｍｍｏｌ）、ピペラジン−ｄ８  ＨＣｌ（１ｇ、６ｍｍｏｌ）及びＴＥＡ（２．２３ｍＬ、１６ｍｍｏｌ）の混合物を電子レンジで１４０℃で３０分間加熱した。混合物を濃縮して表題の化合物を得て、これを更に精製することなく次の工程に使用した。
【０２８４】
パートＢ．  ２−メトキシエチル４−（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン（ｄ８）−１−カルボキシレート
【化１００】
0006418950.tif 000101
【０２８５】
ＴＨＦ（２０ｍＬ）中の３−ブロモ−５−（ピペラジン−１−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−ｄ８（約２ｍｍｏｌ）及びＤＩＥＡ（１．７４ｍＬ、１０ｍｍｏｌ）の混合物に、クロロギ酸メトキシエチル（２７９μＬ、２．４ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を室温で一晩撹拌した。混合物を濃縮し、残渣をＩＳＣＯ、続いて分取ＨＰＬＣに供して、表題の化合物（３８２ｍｇ）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ）δ  ｐｐｍ  ３．３９（ｓ，３Ｈ）３．５７〜３．７０（ｍ，２Ｈ）４．２４〜４．３１（ｍ，２Ｈ）６．３２（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ）７．８４（ｓ，１Ｈ）８．２４（ｄ，Ｊ＝８．０８Ｈｚ，１Ｈ）。
【０２８６】
パートＣ．  ２−メトキシエチル４−（３−（２−メトキシピリジン−３−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン（ｄ８）−１−カルボキシレート
典型的な鈴木カップリング条件下で２−メトキシエチル４−（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン（ｄ８）−１−カルボキシレート及び適切なボロン酸を使用して、表題の化合物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ）δ  ｐｐｍ  ３．４１（ｓ，３Ｈ）３．５８〜３．７０（ｔ，Ｊ＝３．４０Ｈｚ，２Ｈ）４．０９（ｓ，３Ｈ）４．２７〜４．３２（ｔ，Ｊ＝３．４０Ｈｚ，２Ｈ）６．３５（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ）６．９９（ｄｄ，Ｊ＝７．５８、４．８０Ｈｚ，１Ｈ）８．０２（ｄｄ，Ｊ＝４．８０、１．７７Ｈｚ，１Ｈ）８．３５（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ）８．６２（ｓ，１Ｈ）８．７２（ｄｄ，Ｊ＝７．４５、１．８９Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ  ４２１．２［（Ｍ＋Ｈ）＋、Ｃ２１Ｈ２６Ｎ６Ｏ４についての算出値４２０．５］。
【０２８７】
５．６．３７．  イソプロピル４−（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン（ｄ８）−１−カルボキシレートの合成
パートＡ．
【化１０１】
0006418950.tif 000102
【０２８８】
ＴＨＦ（２０ｍＬ）中の３−ブロモ−５−（ピペラジン−１−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−ｄ８（約２ｍｍｏｌ）及びＤＩＥＡ（１．７４ｍＬ、１０ｍｍｏｌ）の混合物に、クロロギ酸イソプロピル（２Ｍ溶液、１．２ｍＬ、２．４ｍｍｏｌ）を滴加した。得られる混合物を室温で一晩撹拌した。混合物を濃縮し、残渣をＩＳＣＯに供して、表題の化合物（４４９ｍｇ）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ）δ  ｐｐｍ  １．２６（ｄ  Ｊ＝６．３２Ｈｚ，６Ｈ）４．９０〜５．００（ｍ，１Ｈ）６．３１（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ）７．８３（ｓ，１Ｈ）８．２３（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ）。
【０２８９】
パートＢ．  イソプロピル４−（３−（２−メトキシ−６−メチルピリジン−３−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン（ｄ８）−１−カルボキシレート
典型的な鈴木カップリング条件下で２−イソプロピル４−（３−ブロモピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ピペラジン（ｄ８）−１−カルボキシレート及び適切なボロン酸を使用して、表題の化合物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ）δ  ｐｐｍ  １．２９（ｄ，Ｊ＝６．３２Ｈｚ，６Ｈ）２．４８（ｓ，３Ｈ）４．０７（ｓ，３Ｈ）４．９８（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．２５Ｈｚ，１Ｈ）６．３２（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ）６．８４（ｄ，Ｊ＝７．５８Ｈｚ，１Ｈ）８．３３（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ）８．５６〜８．６０（ｍ，２Ｈ）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ  ４１９．２［（Ｍ＋Ｈ）＋、Ｃ２１Ｈ２６Ｎ６Ｏ４についての算出値４１８．５］。
【０２９０】
５．６．３８．  Ｐ８１フィルタープレートアッセイ
化合物を、最大化合物濃度が９６μＭとなるようにＭｕｔｉｐｒｏｂｅ（PerkinElmer）及びＢｉｏｍｅｋ  ＦＸ（Beckman Coulter）を用いてＬａｂｃｙｔｅ  ＬＤＶプレート（Labcyte、カタログ番号ＬＰ−０２００）へと段階希釈させた。次いで化合物を、ＥＣＨＯ  ５５０  Ｌｉｑｕｉｄ  Ｈａｎｄｌｅｒ（Labcyte）を用いてＧｒｅｉｎｅｒ  ３８４ウェル反応プレート（Greiner、番号７８１０７６）に分注した（pinged）（１ウェル当たり７５ｎＬ）。その後、合計１２μｌの反応バッファー（Molecular Devices製のＴｗｅｅｎとＤＴＴとを含有するＩＭＡＰバッファー）を陰性対照用のカラム１及びカラム１３の各ウェルに添加して、１２μｌの２×ＡＡＫ１（０．２ｎＭの完全長ヒトタンパク質、ＮＣＢＩアクセッション番号ＮＰ＿０５５７２６．２）を残りのウェルに添加した。次に酵素を化合物と室温で１０分間プレインキュベートした。反応は、２×Ｍｕ２（０．２μＭ、完全長ヒトタンパク質）、２×低温ＡＴＰ（２μＭ）、及び１．３μＣｉの高温３３Ｐ−ＡＴＰを含有する１２μｌの基質ミックスをＭｉｎｉｔｒａｋ（PerkinElmer）によって添加することで開始した。反応は室温で１時間進行させた。一方で、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ  ３８４ウェルＰ８１フィルタープレート（Millipore、カタログ番号ＭＺＰＨＮ０Ｗ１０）をプレートウォッシャー（plate washer）（Ｚｏｏｍ  ＺＷ、Titertek製）に載せ、５０μｌの１％リン酸で予め湿潤させた。次いでキナーゼ反応は２４μｌの２％リン酸を各ウェルに添加することで停止した後、Ｍｉｎｉｔｒａｋを使用して、４０μｌを各ウェルから予め湿潤させたＭｉｌｌｉｐｏｒｅ  ３８４ウェルＰ８１フィルタープレートに移した。反応混合物をＰ８１プレートにおいて室温で１０分間インキュベートし、その後Ｚｏｏｍフィルターウォッシャー（filter washer）を用いて１００μｌ／ウェルの１％リン酸で５回洗浄した。各フィルタープレートの下部に封をした後、各ウェルに２０μｌのＭｉｃｒｏｓｃｉｎｔ  ４０を添加して、プレートの上部にＦｌａｓｈｐｌａｔｅカバーで封をした後、ＴｏｐＣｏｕｎｔ（PerkinElmer）による読み取りまで１時間置いた。
【０２９１】
５．６．３９．  ＨＥＫ２８１細胞ベースアッセイ
ＨＥＫ２９３Ｆ細胞をＤＭＥＭ（Gibco、カタログ番号１１９６５）、１０％  ＦＢＳ（SAFC Biosciences、カタログ番号１２１０３Ｃ）、１×ＧＰＳ（グルタミン、ペニシリン及びストレプトマイシン）を含む培地中で培養した。細胞がトランスフェクション時に約８０％コンフルエントとなるように、１日目に細胞を１０ｃｍ径の皿の上でプレーティングした。およそ１２００万の細胞がトランスフェクション時の１０ｃｍ径の皿に存在していた。２日目、各皿を４８μｇのＤＮＡ及び１４４μｌのＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ  ２０００（Invitrogen、カタログ番号１１６６８−０１９）でトランスフェクトした。ＤＮＡは、３μｇのＡＡＫ１／ＨＡ／ｐＩＲＥＳ（完全長ヒト、ＮＣＢＩアクセッション番号ＮＰ＿０５５７２６．２）、４５μｇのＦｌａｇ／ＡＰ２ＭＩ／ｐｃＤＮＡ（完全長ヒト）、及び１．５ｍｌのＯＰＴＩ−ＭＥＭを含む混合物（１０ｃｍ径の皿１つ当たり）で構成されていた。Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ  ２０００は、１４４μｌのＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ  ２０００及び１．５ｍｌのＯＰＴＩ−ＭＥＭを含む混合物（１０ｃｍ径の皿１つ当たり）で構成されていた。各混合物を個々の１５ｍｌ容のチューブに移し、室温で５分間インキュベートした後、２つの混合物を組み合わせて、室温で２０分間インキュベートした。次いで成長培地を各１０ｃｍ径のプレートから吸引して、１０ｍｌのＤＭＥＭ＋１０％  ＦＢＳ（ＧＰＳなし）と交換した。最後に、３ｍｌのＤＮＡ／Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅミックスを各１０ｃｍ径の皿に添加し、穏やかに混合した後、プレートを３７℃、５％  ＣＯ２で一晩、インキュベートした。
【０２９２】
３日目、化合物を１０００倍の最終濃度で１００％  ＤＭＳＯで希釈した後、合計５つの試験濃度となるように３倍の段階希釈を行った。１０ｃｍ径の皿１つ当たり４つの化合物を試験した。次いで１μｌの各化合物希釈液をディープウェルの９６ウェルプレートへとピペッティングした後、各化合物が２倍の最終濃度となるように５００μｌのＤＭＥＭ＋０．５％  ＦＢＳを各ウェルに添加した。細胞を１０ｃｍ径の皿において単純なピペッティングによって再懸濁させ（この時点でＨＥＫ２９３細胞がプレートから容易に剥がれ落ちる）、次いで５０ｍｌ容の円錐チューブに移し、１０００ｒｐｍで５分間の遠心分離によってペレット化した。次いで細胞ペレットを１０ｃｍ径の皿１つ当たり２．７５ｍｌのＤＭＥＭ＋０．５％  ＦＢＳで再懸濁させ、１００μｌの細胞懸濁液を９６ウェルＴＣプレートの各ウェルに移した。次いで最後に、ＤＭＥＭ＋０．５％  ＦＢＳで希釈した１００μｌの２×化合物を１倍の最終濃度となるように細胞懸濁液の入ったウェルに添加した。その後プレートを３７℃及び５％  ＣＯ２で３時間インキュベートした後、細胞懸濁液を各ウェルから１２チューブＰＣＲストリップへと移した。ＰＣＲストリップをチップラック内において１０００ｒｐｍで５分間スピンさせ、細胞をペレット化し、培地をピペッティングによって細胞ペレットを破壊することなく取り除いた。
【０２９３】
ウェスタンブロット分析の準備のために、細胞ペレットを４０μｌの１×ＬＤＳ−ＰＡＧＥサンプルバッファー（Invitrogen、カタログ番号ＮＰ０００８）＋２×Ｈａｌｔリン酸及びプロテアーゼ阻害剤カクテル（Thermo Scientific、カタログ番号１８６１２８４）で再懸濁させた後、それぞれを５に設定されたマイクロチップソニケーターセットを用いて８秒〜１０秒超音波処理した。５μｌの１０×ＮｕＰａｇｅ  Ｓａｍｐｌｅ  Ｒｅｄｕｃｉｎｇ  Ａｇｅｎｔ（５０ｍＭ  ＤＴＴを含む）を各サンプルに添加した後、ＰＣＲ機器において７０℃で１０分間熱変性させた。リン−ｍｕ２ブロットについては、１サンプル当たり合計１０μｌを４％〜２０％  Ｔｒｉｓ−Ｇｌｙｃｉｎｅ  Ｃｒｉｔｅｒｉｏｎ  ２６ウェルゲル（Biorad、カタログ番号３４５−００３４）の各レーンに、及びｍｕ２ブロットについては１レーン当たり１０μｌを４％〜１２％  Ｂｉｓ−Ｔｒｉｓ（＋ＭＥＳバッファー）ＮｕＰＡＧＥ  ２６ウェルゲル（Invitrogen、カタログ番号ＷＧ１４０３ＢＸ１０）に充填した。対照については、２ｎｇのリン−ｍｕ２又は２０ｎｇのｍｕ２／Ｆｌａｇタンパク質を各ゲルの最後のウェルに充填した。ＳＤＳ−ＰＡＧＥ後、各ゲル上のサンプルを、ｉＢｌｏｔを用いてＰＶＤＦ膜へと移し、膜はＴＢＳＴ＋５％ミルクで１時間ブロッキングした後、５〜１０分間ＴＢＳＴで３回洗浄した。Ｃｒｉｔｅｒｉｏｎゲルを、ＴＢＳＴ＋５％  ＢＳＡ中のウサギ抗リン−ｍｕ２（１：５０００、New England Peptideにより作製され、Lexiconでアフィニティー精製されたウサギポリクローナル抗体）を用いてプローブした一方で、ＮｕＰＡＧＥゲルは、ＴＢＳＴ＋５％ミルク中のマウス抗Ｆｌａｇ（１：５００、Sigma、カタログ番号Ｆ１８０４）を用いてプローブして、これらの一次抗体はロッカーにおいて４℃で一晩インキュベートした。
【０２９４】
４日目、ウェスタンブロット膜を５〜１０分間ＴＢＳＴで３回洗浄して、ＴＢＳＴ＋５％ミルク中の抗ウサギ−ＨＲＰ（１：２０００、BioRad、カタログ番号１７０−６５１５）又は抗マウス−ＨＲＰ（１：２０００、Biorad、カタログ番号１７０−６５１６）を用いて室温で１時間プローブして、１０分間ＴＢＳＴで３回洗浄して、ＶｅｒｓａｄｏｃにおいてＥＣＬ試薬（GE Healthcare、カタログ番号ＲＰＮ２１３２）を用いて展開させた。最後に、１０分間３０秒毎に撮影するようにカメラを設定して、各ブロットについて飽和シグナルのない最良の画像を保存した（シグナルが飽和すると、バンドが赤色に強調表示される）。各バンドの容量分析を行い、密度値を得た。各サンプルについてのパーセント阻害を、初めに総Ｍｕ２発現レベルに正規化した後、０％対照及び１００％対照と比較することによって算出した。次いでＩＣ５０値を、エクセルのフィッティングソフトウェアを用いて算出した。
【０２９５】
５．６．４０．  ｉｎ  ｖｉｔｒｏデータ
様々な本発明の化合物で得られたｉｎ  ｖｉｔｒｏデータを下記表１に提示する。表１において、「ＭＷ」は分子量を意味し、「Ｐ８１アッセイ」は上記のＰ８１フィルタープレートアッセイを表し、「ＣＢＡ」は上記のＨＥＫ２８１細胞ベースアッセイを表し、「−−」は所与のアッセイの結果が得られなかったことを意味し、「＊」は１．０μＭ以下の値を意味し、「＊＊」は０．１μＭ以下の値を意味し、「＊＊＊」は０．０１μＭ以下の値を意味する。
【０２９６】
【表１】
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【０２９７】
0006418950.tif 000104
【０２９８】
0006418950.tif 000105
【０２９９】
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【０３００】
0006418950.tif 000107
【０３０１】
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【０３０２】
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【０３０３】
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【０３０４】
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【０３０５】
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【０３０６】
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【０３０７】
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【０３０８】
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【０３０９】
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【０３１０】
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【０３１１】
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【０３１２】
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【０３１３】
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【０３１４】
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【０３１５】
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【０３１６】
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【０３１７】
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【０３１８】
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【０３１９】
５．６．４１．  薬理効果
ＡＡＫ１ノックアウトマウスの研究によって、ＡＡＫ１遺伝子の破壊がホルマリン脚試験を用いて測定される疼痛応答に影響を及ぼすことが示された。上記の実施例５．６．１を参照されたい。同じ試験を用いて、ＡＡＫ１阻害剤の投与も疼痛応答に影響を与え得ることが確認された。
【０３２０】
マウスを、Ａｕｔｏｍａｔｉｃ  Ｎｏｃｉｃｅｐｔｉｏｎ  Ａｎａｌｙｚｅｒ（カリフォルニア大学サンディエゴ校のOzaki labから購入）を用いて侵害受容について試験した。試験の３０分前に金属バンドを強力瞬間接着剤で各マウスの左後肢に巻いた。３０分の馴化期間の後、２０μｌの５％ホルマリンを左後肢の背面に皮下注射した。マウスを個々に４５分間、円筒型のチャンバに収容した。新たな５％ホルマリン溶液を、ホルムアルデヒド（Ｆｏｒｍａｌｄｅ−ｆｒｅｓｈ  ２０％、Fisher Scientific、ニュージャージー州フェアローン）を蒸留水で希釈することによって調製した。調査対象の化合物をホルマリン注射の３０分前に投与した。
【０３２１】
コンピューターソフトウェアによって、電磁場による１分当たりのフリンチ回数、第１相（最初の８分である急性期）の総フリンチ回数、及び第２相（２０分〜４０分の間の持続期）の総フリンチ回数を記録した。Yaksh TL, Ozaki G,McCumber D,Rathbun M, Svensson C,Malkmus S,Yaksh MC.  An automated flinch detecting system for use in the formalinnociceptive bioassay.J Appl Physiol.,2001; 90:2386-402を参照されたい。
【０３２２】
様々な本発明の化合物を様々な用量で試験した。ガバペンチン及びプレガバリンを陽性対照として使用した。結果を下記表２に示す。表２において、「＊」は２００ｍｐｋでのガバペンチンの効果の５０パーセント以上の効果を意味し、「＊＊」は２００ｍｐｋでのガバペンチンの効果の１００パーセント以上の効果を意味し、「ｓｃ」は皮下投与を意味し、「ｐｏ」は経口投与を意味する。
【０３２３】
【表２】
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【０３２４】
これらの結果から、ＡＡＫ１阻害剤を使用して、疼痛を治療することができることが明らかとなる。
【０３２５】
上記に挙げられた全ての公報（例えば、特許及び特許出願）はその全体が、引用することにより本明細書の一部をなす。
【図１】
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