(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ホモシステインの血中濃度が１２ｎｍоｌ／ｍｌ以下であり、且つビタミンＢ１２の血中濃度が４３５−１０００ｐｇ／ｍｌである、認知症でない習慣的飲酒者即ち健常者の飲酒による脳容積の減少を予防するための、葉酸、ビタミンＢ６及びビタミンＢ１２を有効成分として含む健脳食品又は健脳飲料であって、０．４−０．８ｍｇの葉酸、１０−２０ｍｇのビタミンＢ６及び０．２５−０．５ｍｇのビタミンＢ１２を有効成分として含有することを特徴とする、健脳食品又は健脳飲料。
【請求項２】
認知症でない習慣的飲酒者即ち健常者の飲酒による脳容積の減少を予防するための薬剤の製造における、葉酸、ビタミンＢ６及びビタミンＢ１２の使用であって、
該薬剤を摂取する前の該健常者のホモシステインの血中濃度が１２ｎｍоｌ／ｍｌ以下であり、且つビタミンＢ１２の血中濃度が４３５−１０００ｐｇ／ｍｌであり、
該薬剤は、該葉酸を０．４−０．８ｍｇ、該ビタミンＢ６を１０−２０ｍｇ、該ビタミンＢ１２を０．２５−０．５ｍｇ含むことを特徴とする、使用。
【請求項３】
前記健常者が、ＭＴＨＦＲのＳＮＰの遺伝子型としてＣＣ型又はＣＴ型を有することを特徴とする、請求項２記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、健脳食品または健脳飲料およびこれらを投与する方法に係り、より詳しくは葉酸、ビタミンＢ６及びビタミンＢ１２を成分として含む食品または飲料およびこれらを投与する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
厚生労働省研究班の推計（２００８年）によると、飲酒による社会的損失は年間４兆１４８３億円に上る。その内容は、肝臓病・脳卒中・がんなどの疾病や外傷の医療費に１兆２２６億円、病気や死亡による労働損失と生産性の低下などの雇用損失を合わせて３兆９４７億円、および自動車事故・犯罪・社会保障に係る２８３億円である。家庭崩壊や子どもへの影響など金額に換算しにくい問題も含めて、アルコール関連問題によって引き起こされる社会的損失は甚大であり、とりわけ健康に及ぼす影響は大きい。
長期間の恒常的な飲酒は様々な健康障害を引き起こすことが知られている。一般的には口腔癌、咽頭癌、喉頭癌、食道癌、肝癌、大腸癌などの消化器癌がよく知られており、中でもアルコール性肝炎や肝硬変を経て肝癌へと至るような肝臓に関連する疾患については広く認知されている。また、肝機能を定量的にモニタリングする指標についても研究が進められ、広く実用化されている。したがって、こうした飲酒による健康障害の対策・予防については、これまで主に肝臓を中心に行われてきた。
【０００３】
一方で、近年、習慣的な飲酒が脳へのダメージ（脳萎縮）を引き起こすことが注目されている。
２００８年には適量とされているアルコール摂取量（２０ｇ／日）でも脳萎縮が生じる可能性が報告された（“Ａｒｃｈｉｖｅｓ  ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ”  ２００８，  ６５（１０），１３６３−１３６７）。この知見から、飲酒による健康障害の予防・対策を考える上で、肝機能障害の指標として用いられるＧＯＴやＧＰＴの肝細胞酵素の血中濃度などと同様に、新たに脳萎縮が飲酒による脳障害の指標となり得ることが示された。したがって、習慣的な飲酒が脳容積値に与える変化をモニタリングして、脳萎縮を予防・軽減する食品・飲料の開発に利用することが望まれていた。しかしながら、アルコール摂取による脳萎縮のメカニズムは不詳であり、こうした脳萎縮の軽減は困難であった。
【０００４】
本発明の発明者は、脳ドックでのＭＲＩによる脳領域容積計測法を用いて、飲酒量と脳萎縮の関係性について検討した。その結果、飲酒量が多いほど全脳容積比が小さくなる、即ち脳萎縮が進むということが確認された。そこで本発明の発明者は、ＭＲＩで計測される脳容積値を利用して、脳萎縮と血中の様々な代謝物質の濃度との関連を調べることで、アルコール摂取による脳萎縮を引き起こす因子の探索を開始した。
【０００５】
血中には様々な代謝物質が含まれており、その濃度の変動があらゆる疾患・疾病の発生に関与している。その一つであるホモシステインは、必須アミノ酸であるメチオニンの中間代謝物質である。ホモシステインの血中濃度が増加すると、血管内皮細胞内で活性酸素が産生され、動脈硬化を促進することが知られている。また、ホモシステインは一酸化窒素の産生を抑制することによって血小板凝集を促進し、最終的に血栓形成を誘導することも知られている。さらに、こうしたホモシステインの増加に起因する動脈硬化や血栓形成は脳の循環障害を引き起こし、脳梗塞に至ることが報告されている（“Ｓｔｒｏｋｅ”  ２００１；  ３２：  １１１６−１１１９）。
【０００６】
ホモシステイン値を抑制する成分としては、葉酸、ビタミンＢ６及びビタミンＢ１２が知られている。葉酸及びビタミンＢ６は、ホモシステインのメチオニンへの代謝を促進する。また、ビタミンＢ１２はホモシステインのシステインへの分解を促進する。
【０００７】
特許文献１には、ビタミンＢ６、ビタミンＢ１２及び葉酸の１種又は２種以上からなるビタミンＢ群とセサミン類とを含有する組成物が記載されている。
特許文献２には、ヒメツルニチニチソウエキス（別名ビンカマイナーエキス）およびいちょう葉エキスを主成分とし、ドコサヘキサエン酸、レシチンのいずれか一つ以上とビタミンＢ６、ビタミンＢ１２及び葉酸を含有する組成物が記載されている。
【０００８】
上記した特許文献１−２に記載された発明は、葉酸、ビタミンＢ６及びビタミンＢ１２以外にセサミンまたはドコサヘキサエン酸を加えることで血中ホモシステイン値を下げ、アルツハイマー病の症状に対して脳機能を回復させることを試みている。
【０００９】
上記特許文献１−２においては、アルツハイマー病に対する脳機能回復について報告しているのであり、認知症ではない健常者のアルコールの習慣的摂取による脳萎縮への影響については全く検討されていない。
また、非特許文献３−５においても、７０歳以上の高齢者のＭＣＩ（軽度認知障害）による脳萎縮を予防するために葉酸、ビタミンＢ６及びビタミンＢ１２を投与することが記載されているものの、認知症でもＭＣＩでもない習慣的飲酒者即ち健常者を対象とするものではない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１０】
【特許文献１】特開２００９−１７３６４０号公報
【特許文献２】特開２００４−１６８６９９号公報
【非特許文献】
【００１１】
【非特許文献１】“Ａｒｃｈｉｖｅｓ  ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ”  ２００８，  ６５  （１０），  １３６３−１３６７
【非特許文献２】“Ｓｔｒｏｋｅ”  ２００１；  ３２：  １１１６−１１１９
【非特許文献３】“ＰｌｏＳ  ＯＮＥ”  ２０１０年，Ｖｏｌ．５，Ｉｓｓｕｅ  ９，ｅ１２２４４，ｐｐ．１−１０
【非特許文献４】“ＰＮＡＳ”２０１３年，Ｖｏｌ．１１０，Ｎｏ．２３，ｐｐ．９５２３−９５２８
【非特許文献５】“Ｉｎｔ．Ｊ．Ｇｅｒｉａｔｒ．Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ”２０１２年，Ｖｏｌ．２７，ｐｐ．５９２−６００
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
本発明の発明者は、アルコール摂取による脳萎縮を引き起こす因子を鋭意探索するため、習慣的にアルコールを多飲している人を対象にＭＲＩで計測される脳容積値をモニターするとともに、アルコール多飲者の血中における様々な因子を測定分析したところ、ホモシステイン値と脳萎縮との関連性に着目した。そして、ホモシステイン代謝に関与するメチレンテトラヒドロ葉酸還元酵素（以下ＭＴＨＦＲ）の遺伝子多型により、葉酸、ビタミンＢ６及びビタミンＢ１２の投与効果が相違することを見出した。そこで、あたかも腹囲やＢＭＩでダイエット効果を評価してダイエット商品を開発するが如く、脳萎縮を予防・軽減する食品・飲料を開発せんとした。その結果、本発明を投与される前の被験者のホモシステインの血中濃度が１２ｎｍоｌ／ｍｌ以下であり、且つビタミンＢ１２の血中濃度が４３５−１０００ｐｇ／ｍｌであれば（Δ条件）、ホモシステインの増加を抑制する効果を有する葉酸、ビタミンＢ６及びビタミンＢ１２を食品あるいは飲料に含有させることによって、ホモシステインの増加を抑制し、ひいてはアルコール摂取による脳萎縮を予防することができる食品または飲料の開発に成功した。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
請求項１に係る発明は、ホモシステインの血中濃度が１２ｎｍоｌ／ｍｌ以下であり、且つビタミンＢ１２の血中濃度が４３５−１０００ｐｇ／ｍｌである、認知症でない習慣的飲酒者即ち健常者の飲酒による脳容積の減少を予防するための、葉酸、ビタミンＢ６及びビタミンＢ１２を有効成分として含む健脳食品又は健脳飲料であって、０．４−０．８ｍｇの葉酸、１０−２０ｍｇのビタミンＢ６及び０．２５−０．５ｍｇのビタミンＢ１２を有効成分として含有することを特徴とする、健脳食品又は健脳飲料に関する。
【００１４】
請求項２に係る発明は、認知症でない習慣的飲酒者即ち健常者の飲酒による脳容積の減少を予防するための薬剤の製造における、葉酸、ビタミンＢ６及びビタミンＢ１２の使用であって、該薬剤を摂取する前の該健常者のホモシステインの血中濃度が１２ｎｍоｌ／ｍｌ以下であり、且つビタミンＢ１２の血中濃度が４３５−１０００ｐｇ／ｍｌであり、該薬剤は、該葉酸を０．４−０．８ｍｇ、該ビタミンＢ６を１０−２０ｍｇ、該ビタミンＢ１２を０．２５−０．５ｍｇ含むことを特徴とする、使用に関する。
【００１５】
請求項３に係る発明は、前記健常者が、ＭＴＨＦＲのＳＮＰの遺伝子型としてＣＣ型又はＣＴ型を有することを特徴とする、請求項２記載の使用に関する。
【００１６】
なお、本特許請求の範囲において、「健常者」とは認知症を患っていない習慣的飲酒者（毎日飲酒する習慣がある者）を意味する。
【発明の効果】
【００１７】
請求項１に係る発明によれば、０．４−０．８ｍｇの葉酸、１０−２０ｍｇのビタミンＢ６及び０．２５−０．５ｍｇのビタミンＢ１２を有効成分として食品あるいは飲料に含有させることによって、前記食品あるいは飲料を摂取したヒトにおいて血中のホモシステイン値を下げることができる。これによって、ホモシステインの血中濃度が１２ｎｍоｌ／ｍｌ以下であり、且つビタミンＢ１２の血中濃度が４３５−１０００ｐｇ／ｍｌである健常者（認知症を患っていない習慣的飲酒者）が長期間にわたりアルコールを摂取した場合の脳容積の減少を抑制することができるという効果を奏する。
【００１８】
請求項２に係る発明によれば、健常者のホモシステインやビタミンＢ１２の血中濃度を予め調べることで、本発明の葉酸、ビタミンＢ６及びビタミンＢ１２の効能を予測することができ、日常的に飲酒する人の健康をより効率よく促進することが可能である。
【００１９】
請求項３に係る発明によれば、健常者のＭＴＨＦＲのＳＮＰタイプ（ＣＣ型、ＣＴ型あるいはＴＴ型）を予め調べることで、本発明の葉酸、ビタミンＢ６及びビタミンＢ１２の効能を予測することができ、日常的に飲酒する人の健康をより効率よく促進することが可能である。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
【図１】図１は葉酸・ビタミンＢ６・ビタミンＢ１２とホモシステイン代謝の関係を示す図である。
【図２】図２は血中ホモシステイン濃度のＡ群（プラセボ群）対Ｂ群（健脳食品服用群）の比較を示す図である。
【図３Ａ】図３Ａは、血中ホモシステイン濃度の減少ならびに脳萎縮軽減反応による層別化を示す。Ａ群はプラセボ、Ｂ群は健脳食品服用群を示す。グループＩからＩＩＩは、それぞれ、グループＩ：ホモシステイン濃度が減少しないグループ、グループＩＩ：ホモシステイン濃度が減少するが、脳萎縮の軽減がみられないグループ、グループＩＩＩ：血中ホモシステイン濃度が減少し、且つ脳萎縮の軽減がみられるグループを表す。
【図３Ｂ】図３Ｂは、Ａ群（プラセボ群）ならびにＢ群（健脳食品服用群）における、前記グループＩからＩＩＩの度数を示す図である。
【図４Ａ】図４Ａは、ＭＴＨＦＲ遺伝子のＳＮＰがＣＣ型の人に関して、Ａ群（プラセボ群）ならびにＢ群（健脳食品服用群）における前記グループＩからＩＩＩの度数を示す図である。
【図４Ｂ】図４Ｂは、ＭＴＨＦＲ遺伝子のＳＮＰがＣＴ型の人に関して、Ａ群（プラセボ群）ならびにＢ群（健脳食品服用群）における前記グループＩからＩＩＩの度数を示す図である。
【図４Ｃ】図４Ｃは、ＭＴＨＦＲ遺伝子のＳＮＰがＴＴ型の人に関して、Ａ群（プラセボ群）ならびにＢ群（健脳食品服用群）における前記グループＩからＩＩＩの度数を示す図である。
【図５Ａ】図５Ａは、本発明を投与される前の被験者のホモシステインの血中濃度が１２ｎｍоｌ／ｍｌ以下であり、且つビタミンＢ１２の血中濃度が４３５−１０００ｐｇ／ｍｌであるという条件（Δ条件）を満たした場合の、Ａ群（プラセボ群）及びＢ群（健脳食品服用群）における全脳容積比の比較を示す図である。
【図５Ｂ】図５Ｂは、Δ条件を満たさない場合の、Ａ群（プラセボ群）及びＢ群（健脳食品服用群）における全脳容積比の比較を示す図である。
【図６】図６は、被験者（認知症でない習慣的飲酒者即ち健常者）がΔ条件を満たす場合、葉酸、ビタミンＢ６及びビタミンＢ１２をそれぞれ０．８ｍｇ、２０ｍｇ及び０．５ｍｇ含む薬剤を毎日服用し、９か月後に脳容積が増加した部位を示す図である。
【図７】図７は、被験者（認知症でない習慣的飲酒者即ち健常者）がΔ条件を満たした場合の、本発明を摂取した体感調査の結果を示す図である。被験者は葉酸、ビタミンＢ６及びビタミンＢ１２をそれぞれ０．８ｍｇ、２０ｍｇ及び０．５ｍｇ含む薬剤を毎日服用し、９か月後に体感調査を行った。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
本明細書において、「健常者」とは認知症を患っていない習慣的飲酒者（毎日飲酒する習慣がある者）を意味する。
【００２２】
本発明は、体内のホモシステイン濃度の増加に伴う脳萎縮を抑制するために、葉酸、ビタミンＢ６及びビタミンＢ１２を成分として含有する健脳食品あるいは健脳飲料であり、１日あたり１回以上摂食または服用してもよく、前記葉酸、ビタミンＢ６及びビタミンＢ１２の１日あたりの摂取量は、０．４−０．８ｍｇの葉酸、１０−２０ｍｇのビタミンＢ６及び０．２５−０．５ｍｇのビタミンＢ１２であってもよい。
【００２３】
本発明の食品・飲料に使用される葉酸は、プテロイルポリグルタミン酸、プテロイルモノグルタミン酸、またはこれらを組み合わせたものとして含まれていてもよい。
本発明の食品・飲料に使用されるビタミンＢ６は、ピリドキシン、ピリドキサール、ピリドキサミン、これらのリン酸エステル型であるピリドキシン−５’−リン酸（ＰＮＰ）、ピリドキサール−５’−リン酸（ＰＬＰ）、ピリドキサミン−５’−リン酸（ＰＭＰ）、またはこれらを組み合わせたものとして含まれていてもよい。
本発明の食品・飲料に使用されるビタミンＢ１２は、ヒドロキソコバラミン、アデノシルコバラミン、メチルコバラミン、シアノコバラミン、スルフィトコバラミン、またはこれらを組み合わせたものとして含まれていてもよい。
【００２４】
上記の摂食または服用方法によって、０．４−０．８ｍｇの葉酸、１０−２０ｍｇのビタミンＢ６及び０．２５−０．５ｍｇのビタミンＢ１２を食品あるいは飲料に含有させた健脳食品または健脳飲料を摂食または服用した場合に、前記食品あるいは飲料を摂取したヒトにおいて血中のホモシステイン値を下げることができる。これによって、長期間にわたりアルコールを摂取した場合の脳萎縮を抑制することができる（図３Ｂ参照）。これらの配合量は、通常栄養ビタミン剤等に配合されている量に比べて４−１００倍の量である。本発明においては、葉酸、ビタミンＢ６、ビタミンＢ１２を多量に配合することにより、発明の効果を奏すると発明者らは知得している。
【００２５】
前記の通り、本発明の健脳食品または健脳飲料を摂食あるいは服用する場合に、一日あたりの葉酸の摂取量が０．８ｍｇ、ビタミンＢ６の摂取量が２０ｍｇ及びビタミンＢ１２の摂取量が０．５ｍｇであってもよい。ＭＴＨＦＲのＣＴ型では、葉酸、ビタミンＢ６及びビタミンＢ１２を成分として含有する健脳食品あるいは健脳飲料がホモシステイン濃度の増加に伴う脳萎縮を抑制する効果はあるが、ＣＣ型では弱く、ＴＴ型では抑制する効果がない（図４Ａ−Ｃ参照）。
【００２６】
飲料に配合する場合には、長期保存により成分が分解される恐れがあるため、上記の１．８倍量の配合が望まれるが、１．８倍量は栄養表示基準の耐容上限量に照らして葉酸の配合量が上限値を超えてしまう。ゆえに実際の配合量は、これらの条件を勘案して定めれば良い。ＭＴＨＦＲのＣＴ型では、葉酸、ビタミンＢ６及びビタミンＢ１２を成分として含有する健脳食品あるいは健脳飲料がホモシステイン濃度の増加に伴う脳萎縮を抑制する効果はあるが、ＣＣ型では弱く、ＴＴ型では抑制する効果がない（図４Ａ−Ｃ参照）。
【００２７】
＜葉酸・ビタミンＢ６・ビタミンＢ１２によるホモシステイン濃度の制御＞
タンパク質が消化吸収されアミノ酸レベルにまで分解されると、必須アミノ酸であるメチオニンが生じる。メチオニンは肝臓において代謝されるが、この際中間生成物としてホモシステインが生成される（図１参照）。
ホモシステインの分解には、葉酸・ビタミンＢ６・ビタミンＢ１２が必須である。葉酸は、その代謝産物である５−メチルテトラヒドロ葉酸からテトラヒドロ葉酸への代謝を介して、ホモシステインのメチオニンへの代謝を促進する。この経路では、テトラヒドロ葉酸はジメチル化され、５，１０−メチルテトラヒドロ葉酸が生成される。５，１０−メチルテトラヒドロ葉酸はさらにＭＴＨＦＲにより還元され、５−メチルテトラヒドロ葉酸が生成される。
ビタミンＢ１２はホモシステインのメチオニンへの代謝を促進する。また、ビタミンＢ６はホモシステインをシステインへと分解する働きをする。
【００２８】
＜アルコールの習慣的摂取は葉酸・ビタミンＢ６・ビタミンＢ１２を介してホモシステイン値を上昇させて、脳容積の減少、すなわち脳萎縮を引き起こし得る＞
慢性的にアルコールを多量摂取すると、胃腸の粘膜細胞が変性することで、葉酸、ビタミンＢ６及びビタミンＢ１２の吸収障害が起きる。また、アルコール摂取に起因するアセトアルデヒドによって、葉酸、ビタミンＢ６及びビタミンＢ１２の分解が促進される。その結果、血中のホモシステイン濃度が上昇する。
ホモシステインの血中濃度が増加すると、血管内皮細胞内で活性酸素が産生され、動脈硬化を促進することが知られている。また、ホモシステインは一酸化窒素の産生を抑制することによって血小板凝集を促進し、最終的に血栓形成を誘導することも知られている。さらに、こうした動脈硬化や血栓形成は脳の循環障害を引き起こし、脳梗塞に至ることが報告されている。したがって、アルコールの習慣的摂取に起因するホモシステイン濃度の上昇は、脳循環低下を引き起こし、脳萎縮に至ると考えられる。
【００２９】
上記の通り、アルコールの習慣的摂取によってホモシステイン値の上昇が引き起こされ、それに起因して脳萎縮が引き起こされる。そしてホモシステインを分解し、ホモシステイン値を下げるためには、葉酸、ビタミンＢ６及びビタミンＢ１２の多量投与が有効であるとこの発明者らは見出した。０．４−０．８ｍｇの葉酸、１０−２０ｍｇのビタミンＢ６及び０．２５−０．５ｍｇのビタミンＢ１２を食品あるいは飲料に含有させることによって、前記食品あるいは飲料を摂取したヒトにおいて血中のホモシステイン値を下げることができる（図２参照）。これによって、長期間にわたりアルコールを摂取した場合の脳萎縮を抑制することができ、脳容積の減少を予防することができる。
【実施例】
【００３０】
以下、この発明にかかる好適な実施例を説明するが、この発明は明細書、図面の内容に限定されない。
【００３１】
（実施例１．健脳食品の摂取による脳萎縮への影響の評価）
認知症を患っておらず、アルコールを日常的に摂取する被験者（健常者）に本発明の健脳食品を与え、アルコール摂取に起因する脳萎縮の予防効果について評価した。
【００３２】
＜実験方法＞
９６人（男性４８名、女性４８名）の健常なボランティアを対象に、ランダム化二重盲検試験によって健脳食品摂取による効果を調べた。実験の対象者は、年齢３０−６０歳（平均４８．４歳）の健常者（ほぼ毎日飲酒する者）であり、非喫煙者で、サプリメントを服用しておらず、肝機能を含む健康状態は良好であった。
【００３３】
被験者を二群に分け、Ａ群はプラセボを、Ｂ群は葉酸、ビタミンＢ６及びビタミンＢ１２をそれぞれ０．８ｍｇ、２０ｍｇ及び０．５ｍｇ含む薬剤を毎日服用した。被験者に対して０か月、３か月、９か月目で次の項目の検査を行った。
・脳ドッグでのＭＲＩ検査による脳領域容積の計測
・ビタミンＢ群などの血中濃度の測定
・遺伝子多型（ＳＮＰ：ＭＴＨＦＲ）の検査
遺伝子検査については０か月でのみ行われた。
【００３４】
＜結果＞
まず、血中のホモシステイン濃度をＡＢ群間で比較した。その結果、図２に示す通り、３ヶ月の薬剤服用後の血中のホモシステイン濃度の変化率は、Ａ群に対してＢ群で有意に低下していた（Ａ群０．０３１０±０．１８４６７，  ｎ＝４７；  Ｂ群−０．２３５５±０．１６９２５，  ｎ＝４９）。
次に、この血中ホモシステイン濃度の減少による脳萎縮への影響の評価を行った。そのために被験者を次の３グループに分け、血中ホモシステイン濃度の減少と脳萎縮軽減反応における層別化を行った（図３Ａ参照）。
グループＩ：ホモシステイン濃度が減少しないグループ
グループＩＩ：ホモシステイン濃度が減少するが、脳萎縮の軽減がみられないグループ
グループＩＩＩ：血中ホモシステイン濃度が減少し、且つ脳萎縮の軽減がみられるグループ
さらに、Ａ群（プラセボ群）ならびにＢ群（健脳食品服用群）における、前記グループＩ、ＩＩ、ＩＩＩの３グループの人数を比較し、順位和検定したところ、ＡＢ群間で有意差が認められた（図３Ｂ）。即ち、Ｂ群ではＡ群に比べてグループＩＩＩ（ホモシステイン濃度が減少し且つ脳萎縮の軽減がみられるグループ）の割合が有意に増加していた（Ｍａｎｎ−Ｗｈｉｔｎｅｙ  Ｕ検定：  ｐ＜０．００１）
【００３５】
＜考察＞
上記の結果から、葉酸、ビタミンＢ６及びビタミンＢ１２をそれぞれ０．８ｍｇ、２０ｍｇ及び０．５ｍｇ毎日摂取することにより、血中ホモシステイン濃度が減少した。さらに、このホモシステイン濃度の低下に関連して、脳萎縮の軽減がみられた。
【００３６】
（実施例２．健脳食品の摂取による脳萎縮への影響の評価、ＭＴＨＦＲによる影響）
上記実施例１で得られたデータについて、ホモシステイン代謝の律速段階酵素であるＭＴＨＦＲのＳＮＰの遺伝子型（ＣＣ型：ワイルド型、ＣＴ型：ヘテロ型、ＴＴ型：ホモ型）を利用して再検討した（図４Ａ−Ｃ参照）。まず、被験者をＭＴＨＦＲのＳＮＰにおける３つの各遺伝子型により、３群（ＣＣ型、ＣＴ型、ＴＴ型）に分類した。次に、各被験者群について、実施例１と同様の解析（グループＩ，ＩＩ，ＩＩＩの度数分布におけるＡＢ群間比較）を行った。その結果、ＣＴ型（ヘテロ型）では、グループＩからグループＩＩＩへの度数分布の偏りがＡＢ群間で有意であった（Ｍａｎｎ−Ｗｈｉｔｎｅｙ  Ｕ検定：  ｐ＜０．００１）（図４Ｂ参照）。一方、ＣＣ型（ワイルド型）では、度数分布の偏りにＣＴ型（ヘテロ型）と同様の傾向が見られるものの、度数分布の偏りがＡＢ群間で有意でなかった（Ｍａｎｎ−Ｗｈｉｔｎｅｙ  Ｕ検定：  ｐ＝０．０９）（図４Ａ参照）。すなわち、ＭＴＨＦＲのＣＴ型（ヘテロ型）は、ＣＣ型（ワイルド型）と比較して健脳食品の摂取による脳萎縮の軽減に効果を有している。ＴＴ型（ホモ型）ではＭＴＨＦＲの活性が低いため、健脳食品の摂取による有意な脳萎縮軽減効果は認めなかった（Ｍａｎｎ−Ｗｈｉｔｎｅｙ  Ｕ検定：  ｐ＝０．４７８）（図４Ｃ参照）。
【００３７】
（実施例３．健脳食品を与えて飲酒による脳萎縮が軽減するグループの同定（Δ条件））
上記実施例１及び２で使用したＭＲＩによる脳容積計測は、あらかじめサイズが決まっている標準脳に被験者脳を写像して、脳容積の確率分布を得た後、逆写像をして被験者脳の各脳領域容積を求めるというＶＢＭ（ｖｏｘｅｌ  ｂａｓｅｄ  ｍｏｒｐｈｏｍｅｔｒｙ）法を常用しているが、健常者の脳容積の年間変化量は１乃至２ｍｌ程度のごく少量であるため、更に正確な測定法が求められる。
よって、本実施例では新たに標準脳を介さず、被験者脳の２時点間の脳容積を直接比較するＴＢＭ（ｔｅｎｓｏｒ  ｂａｓｅｄ  ｍｏｒｐｈｏｍｅｔｒｙ）法を用いて解析した。つまり、アルコール摂取に起因する脳萎縮の予防効果について、本発明を９か月間摂取し続ける前と後で全脳容積を比較することで解析した。
具体的には以下の実験方法で解析を行った。
【００３８】
＜実験方法＞
９６人（男性４６名、女性５０名）の健常なボランティアを対象に、ランダム化二重盲検試験によって健脳食品摂取による効果を調べた。実験の対象者は、年齢３０−６０歳（平均４８．４歳）の健常者（ほぼ毎日飲酒する者）であり、非喫煙者で、サプリメントを服用しておらず、肝機能を含む健康状態は良好であった。
【００３９】
被験者を二群に分け、Ａ群はプラセボを、Ｂ群は葉酸、ビタミンＢ６及びビタミンＢ１２をそれぞれ０．８ｍｇ、２０ｍｇ及び０．５ｍｇ含む薬剤を毎日服用し続けた９か月後のＡ群及びＢ群間で脳萎縮が軽減するグループの条件を探索した。
【００４０】
そうすると、健脳食品投与前のホモシステイン血中濃度が１２ｎｍｏｌ／ｍｌ以下かつビタミンＢ１２が４３５−１０００ｐｇ／ｍｌの範囲内に限定される条件（Δ条件）を満たすグループ（３８名：男１３名、女２５名）において、Ａ群とＢ群の全脳容積比の平均値で、Ｂ群がＡ群に比べて有意に増加していたことがわかった（図５Ａ：Ａ群０．９９８０１±０．００３１０  ｎ＝２４、Ｂ群１．０００４１±０．００２４７６  ｎ＝１４；ｔ検定  Ｐ＝０．０１８）。
逆に、Δ条件を満たさないグループ（５８名：男３３名、女２５名）では、有意差はなかった（図５Ｂ：Ａ群０．９９８２３±０．０００４９  ｎ＝２３、Ｂ群０．９９７１１±０．０００５７  ｎ＝３５；ｔ検定  Ｐ＝０．１７２）。
このことから、Ａ群及びＢ群間で脳萎縮が軽減するグループの条件とは、健脳食品投与前のホモシステイン血中濃度が１２ｎｍｏｌ／ｍｌ以下かつビタミンＢ１２が４３５−１０００ｐｇ／ｍｌの範囲内であるという条件（Δ条件）であることがわかった。
【００４１】
（実施例４：Δ条件及びＭＴＨＦＲによる影響）
実施例３で得られたデータ（Δ条件についてのデータ）について、ＭＴＨＦＲのＳＮＰの遺伝子型（ＣＣ型：ワイルド型、ＣＴ型：ヘテロ型、ＴＴ型：ホモ型）との関係を再検討した。Δ条件を満たす３８名中のＣＣ型は５名、ＣＴ型は３２名、ＴＴ型は１名であり、Δ条件を満たす健常者のほとんどがＣＣ型、あるいはＣＴ型であると言える。
【００４２】
（実施例５：本発明の投与により容積が増加した脳部位について）
Δ条件を満たす被験者を二群に分け、Ａ群はプラセボを、Ｂ群は葉酸、ビタミンＢ６及びビタミンＢ１２をそれぞれ０．８ｍｇ、２０ｍｇ及び０．５ｍｇ含む薬剤を毎日服用し、９か月目でＴＢＭ法による脳領域容積の計測を行った。
その結果、Ｂ群の方がＡ群よりも有意に容積が増加した脳部位は以下の部位であった（図６参照）。
１：左前部帯状回
２：左島皮質前部
３：右中弁蓋部
４：右嗅内野
５：右下後頭回
６：左中心前回中部
７：左上前回中部
８：右下前回弁蓋部
９：右海馬傍回
１０：右頭頂弁蓋部
１１：右後眼窩回
１２：右中心前回
１３：左側頭平面
１４：右上前頭回
１５：左補足運動野
１６：右下前頭回三角部
１７：左横側頭回
このことから、本発明は上記の脳部位の容積を増加させるのに効果的であると考えられる。
【００４３】
（実施例６：健脳食品摂取による体感の調査）
被験者を二群に分け、Ａ群はプラセボを、Ｂ群は葉酸、ビタミンＢ６及びビタミンＢ１２をそれぞれ０．８ｍｇ、２０ｍｇ及び０．５ｍｇ含む薬剤を毎日服用し続けた９ヶ月後に体感調査を行った。
調査した設問は以下の１１問である。
１．薬剤服用前後で体調の変化があった。
２．アルコールを飲んだ後の酔いが少なくなった。
３．体のだるさが無くなったあるいは軽くなった。
４．運動した後、疲れにくくなった。
５．寝つきが良くなった。
６．熟睡できるようになった。
７．食欲が出てきた。
８．便通が良くなった。
９．肌のつやが良くなった。
１０．化粧ののりが良くなった。
１１．気分が落ち込むことが少なくなった。
上記の設問に対して、全く感じなければ１、ほとんど感じなければ２、少し感じれば３、感じれば４、非常に感じれば５と被験者が評価した。その評価結果を度数分布化し、度数分布から平均値、標準偏差及び平均値の標準誤差を算出した。また、ｔ検定を用いてＰ値を算出することで、各設問のＡ群とＢ群間で有意な差があるか否かを確認した。その結果を図７に示す。
【００４４】
体感調査の結果、Δ条件を満たさないグループではＡ群とＢ群を比較したところ、すべての設問において有意差がないことがわかった（図示せず）。
これに対し、Δ条件を満たすグループでは、設問３、７、８、１０、１１でＰ＜０．０５でＡ群とＢ群の間に有意な差があり、設問１及び４においてもＰ＜０．１０で有意差があることがわかった（図７参照）。
この結果から、Δ条件を満たし、且つ本発明の健脳食品を摂取した被験者が体感調査において有意に陽性反応を示すことがわかった。逆に、上記の体感調査に対して有意に陽性反応を示す被験者がΔ条件を満たす可能性が有意に高いと考えられる。
【００４５】
本発明にかかる健脳食品の例としては、サプリメント、食餌療法用食品、食用油脂、クリーム、チーズ、粉乳、肉製品、加工水産物、加工野菜及び加工果実、油揚げ、凍り豆腐、こんにゃく、豆腐、納豆、加工卵、カレー・シチュー又はスープのもと、お茶漬けのり、ふりかけ、なめ物、食用たんぱく、菓子パン、サンドイッチ、中華まんじゅう、ハンバーガー、ピザ、ホットドッグ、ミートパイ、調味料、香辛料、アイスクリームのもと、シャーベットのもと、穀物の加工品、ぎょうざ、しゅうまい、すし、たこ焼き、ラビオリ、イーストパウダー、こうじ、酵母、ベーキングパウダー、即席菓子のもと、パスタソース、酒かす、食用グルテン、食用粉類が挙げられる。配合量としては、０．４−０．８ｍｇの葉酸、１０−２０ｍｇのビタミンＢ６及び０．２５−０．５ｍｇのビタミンＢ１２となるように配合することで、上記の脳萎縮の予防効果を得ることができる。配合量は好ましくは、０．８ｍｇの葉酸、２０ｍｇのビタミンＢ６及び０．５ｍｇのビタミンＢ１２がよい。
本発明にかかる健脳飲料の例としては、食餌療法用飲料、牛乳、乳酸飲料、乳酸菌飲料、発酵乳、粉乳、やぎ乳、羊乳、練乳、豆乳、茶、コーヒー、ココア、ビール、清涼飲料、果実飲料、飲料用野菜ジュース、乳清飲料、日本酒、洋酒、果実酒、酎ハイ、中国酒、薬味酒が挙げられる。配合量としては、０．４−０．８ｍｇの葉酸、１０−２０ｍｇのビタミンＢ６及び０．２５−０．５ｍｇのビタミンＢ１２となるように配合することで、上記の脳萎縮の予防効果を得ることができる。配合量は好ましくは、０．８ｍｇの葉酸、２０ｍｇのビタミンＢ６及び０．５ｍｇのビタミンＢ１２がよい。尚、飲料に配合する場合には、長期保存により成分が分解される恐れがあるため、上記の１．８倍量の配合が望まれるが、１．８倍量は栄養表示基準の耐容上限量に照らして葉酸の配合量が上限値を超えてしまう。ゆえに実際の配合量は、これらの条件を勘案して定めれば良い。
【００４６】
上記食品の摂取方法としては、１日１回で上記の０．４−０．８ｍｇの葉酸、１０−２０ｍｇのビタミンＢ６及び０．２５−０．５ｍｇのビタミンＢ１２を、好ましくは０．８ｍｇの葉酸、２０ｍｇのビタミンＢ６及び０．５ｍｇのビタミンＢ１２を摂取してもよく、または上記の量を１日２回以上に分けて摂取してもよい。
上記飲料の摂取方法としては、１日１回で上記の０．４−０．８ｍｇの葉酸、１０−２０ｍｇのビタミンＢ６及び０．２５−０．５ｍｇのビタミンＢ１２を、好ましくは０．８ｍｇの葉酸、２０ｍｇのビタミンＢ６及び０．５ｍｇのビタミンＢ１２を摂取してもよく、または上記の量を１日２回以上に分けて摂取してもよい。
【産業上の利用可能性】
【００４７】
本発明にかかる健脳食品ならびに健脳飲料は、ホモシステイン値の上昇を抑制し、脳萎縮の予防に効果があるため、健脳食品ならびに健脳飲料の摂取・服用により、日常的に飲酒する人の健康の促進につながる。また、ＭＴＨＦＲのＳＮＰによって健脳食品や健脳飲料による脳萎縮軽減効果は異なるため、前もってＳＮＰタイプを調べたり、ホモシステインやビタミンＢ１２の血中濃度を調べたりして、前記食品ならびに飲料の効能を予測する事ができ、習慣的に飲酒する人の健康をより効率よく促進することが可能である。前もってＳＮＰタイプや血中濃度を調べることができなくとも、前記食品ならびに飲料を摂取した際の体感調査で、効能を予測できる。
【符号の説明】
【００４８】
１    左前部帯状回
２    左島皮質前部
３    右中弁蓋部
４    右嗅内野
５    右下後頭回
６    左中心前回中部
７    左上前回中部
８    右下前回弁蓋部
９    右海馬傍回
１０  右頭頂弁蓋部
１１  右後眼窩回
１２  右中心前回
１３  左側頭平面
１４  右上前頭回
１５  左補足運動野
１６  右下前頭回三角部
１７  左横側頭回
【図１】
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【図２】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図４Ｃ】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図６】
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【図７】
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