(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
生分解性ポリマーを含んでなるマトリックス中に分散したサブ粒子を含んでなる塞栓粒子であって、サブ粒子は低溶解度の治療剤を含んでなり、
（ａ）前記生分解性ポリマーはデンプンを含んでなり、かつデンプンは塞栓粒子を安定化するために架橋されているか、（ｂ）前記サブ粒子は、前記治療剤を含んでなる針状の粒子を含んでなるか、（ｃ）前記サブ粒子は、非晶質のパクリタキセルの粒子を含んでなるか、（ｄ）前記サブ粒子は、無水結晶形パクリタキセルの粒子を含んでなるか、或いは（ｅ）前記サブ粒子はヨード化油中に分散した結晶質のパクリタキセル粒子を含んでなる、塞栓粒子。
【請求項２】
血管に投与されると粒子は１時間〜２日間の期間内に完全に生分解する、請求項１に記載の塞栓粒子。
【請求項３】
前記粒子は幅が２０〜２００ミクロン（２０〜２００μｍ）の範囲にある、請求項１〜２のいずれか１項に記載の塞栓粒子。
【請求項４】
前記サブ粒子は幅が１０ｎｍ〜１０，０００ｎｍの範囲にある、請求項１〜３のいずれか１項に記載の塞栓粒子。
【請求項５】
前記生分解性ポリマーは、ポリ無水物、ポリ（オルトエステル）及び多糖から選択される、請求項１〜４のいずれか１項に記載の塞栓粒子。
【請求項６】
前記生分解性ポリマーはデンプンを含んでなり、かつデンプンは塞栓粒子を安定化するために架橋されている、請求項１〜５のいずれか１項に記載の塞栓粒子。
【請求項７】
前記サブ粒子は、前記治療剤を含んでなる針状の粒子を含んでなる、請求項１〜６のいずれか１項に記載の塞栓粒子。
【請求項８】
前記サブ粒子は、非晶質のパクリタキセルの粒子、無水結晶形パクリタキセルの粒子、又は結晶質のパクリタキセル二水和物の針状の粒子を含んでなる、請求項１〜６のいずれか１項に記載の塞栓粒子。
【請求項９】
前記サブ粒子はヨード化油中に分散した結晶質のパクリタキセル粒子を含んでなる、請求項１〜８のいずれか１項に記載の塞栓粒子。
【請求項１０】
前記サブ粒子はヨード化されたケシ油中に分散した結晶質のパクリタキセル粒子を含んでなる、請求項１〜８のいずれか１項に記載の塞栓粒子。
【請求項１１】
請求項１〜１０のいずれか１項に記載の塞栓粒子を湿潤形態又は乾燥形態で含んでなる、注入可能な医療用組成物。
【請求項１２】
等張化剤をさらに含んでなる、請求項１１に記載の注入可能な医療用組成物。
【請求項１３】
前記注入可能な医療用組成物はガラス製容器又は事前装入式医療用デバイスの中に配置される、請求項１１〜１２のいずれか１項に記載の注入可能な医療用組成物。
【請求項１４】
請求項１１〜１３のいずれか１項に記載の注入可能な医療用組成物であって、塞栓術において患者に注入されるものである、注入可能な医療用組成物。
【請求項１５】
請求項１４に記載の注入可能な医療用組成物であって、塞栓術において抗凝血薬とともに注入されるものである、注入可能な医療用組成物。
【請求項１６】
キットであって、（ａ）請求項１１〜１３のいずれか１項に記載の医療用組成物と、（ｂ）下記すなわち（ｉ）カテーテル、（ｉｉ）ガイドワイヤ及び（ｉｉｉ）液体担体のうちの１以上と、を含んでなるキット。
【請求項１７】
生分解性ポリマーを含んでなるマトリックス中に分散したサブ粒子を含んでなる塞栓粒子を湿潤形態又は乾燥形態で含んでなる注入可能な医療用組成物において、前記サブ粒子は低溶解度の治療剤を含んでなり、前記組成物は塞栓術において抗凝血薬とともに患者に注入されるものである、注入可能な医療用組成物。
【請求項１８】
等張化剤をさらに含んでなる、請求項１７に記載の注入可能な医療用組成物。
【請求項１９】
前記注入可能な医療用組成物はガラス製容器又は事前装入式医療用デバイスの中に配置される、請求項１７または請求項１８に記載の注入可能な医療用組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、治療剤の放出を示す注入用のポリマー性塞栓粒子に関する。
【背景技術】
【０００２】
数多くの臨床状況について、体液又は分泌物の流動を制限することによる血管系、リンパ系又は導管系の調節は有効である。例えば、塞栓術という技法は、例えば、出血の阻止若しくは予防のいずれか、又は構造体若しくは器官への血流の遮断のために、血管を閉塞せしめるべく血液循環中に粒子を導入することを伴う。血管の一時的閉塞は、様々な疾患及び状態の管理にとって望ましい。
【０００３】
塞栓術手技の１例においては、局所麻酔が最初に総頚動脈の上に施される。該動脈はその後経皮的に穿刺され、カテーテルが挿入されて対象エリア内までＸ線透視下にて誘導される。その後、カテーテルを通じて造影剤を注入することにより血管造影が実施される。次いで塞栓剤がカテーテルを通じて配置される。塞栓剤は、例えば、数ある要因の中でも特に、閉塞せしめられる血管の大きさ、所望の閉塞期間、及び治療される疾患又は状態の種類（例えば多血性腫瘍、子宮筋腫など）のうち少なくともいずれかに基づいて選ばれる。追跡調査の血管造影が、動脈閉塞の特異性及び完全性を決定するために実施されてもよい。組織への血液供給の遮断は、組織の収縮及び死のうちの少なくともいずれかをもたらすように意図される。
【０００４】
塞栓療法は現在、肝臓移植又は肝臓切除術の候補とならない患者について末期肝臓がんを治療するために使用されている。目下、利用可能ないくつかの具体的な塞栓療法が存在する。これらの治療法には、ブランド塞栓術、肝動脈化学塞栓術（ＴＡＣＥ）及び薬物溶出ビーズ（ＤＥＢ）療法が挙げられる。
【０００５】
ブランド塞栓術は、腫瘍への血流を停止し、ひいては壊死をもたらすために、腫瘍に栄養供給している動脈に注入される塞栓粒子を利用する。この塞栓粒子は薬物を含有していない。
【０００６】
ＴＡＣＥは、薬物の還流を防止し、かつ塞栓形成をもたらすために、最初の化学療法薬の局所注入と、その直後の塞栓粒子の注入とを伴うものである。ＴＡＣＥは２つの作用様式すなわち塞栓形成（壊死）及び化学療法を提供し、かつブランド塞栓術よりも効果的である。しかしながらＴＡＣＥを用いると、ＴＡＣＥが薬物の単回注入を伴うことから持続的な薬物放出は欠如する。加えて、ＴＡＣＥはその手技において別個の２つのステップを伴うので実施するには煩雑である。
【０００７】
ＤＥＢは薬物を塞栓粒子に組み入れ、ＴＡＣＥのように２つの作用様式を含んでいる。ＴＡＣＥとは異なり、ＤＥＢは持続的な薬物放出の可能性を提示する。しかしながら、現在利用可能なＤＥＢ生産物は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏにおける塞栓粒子からの薬物の急速な放出（すなわち数時間以内）を示す。さらに、現在のＤＥＢ療法は生体安定性の粒子を利用するので、再治療は不可能である。臨床的には、ＤＥＢはＴＡＣＥよりも効率性において多少優れていることが示されている。大多数の症例において単回の治療で腫瘍の発達が遅延するが、いずれの塞栓術も現在のところ治癒をもたらすものではない。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明の１つの態様によれば、塞栓粒子であって、生分解性ポリマーマトリックス中に分散した治療剤含有サブ粒子を含んでなる塞栓粒子が提供される。該塞栓粒子は、対象者の体腔に投与されると生分解性ポリマーマトリックスが分解してサブ粒子の放出をもたらすように構成される。いくつかの実施形態では、サブ粒子も、生分解性ポリマーマトリックスが完全に分解した後にサブ粒子がある期間は注入部位に局在し続けるように構成される。
【０００９】
本発明の他の態様は、そのような粒子を含んでなる注入可能な組成物、及びそのような注入可能な組成物を使用する治療方法に関する。
本発明のさらに他の態様は、そのような粒子を作製する方法に関する。
【００１０】
本発明の上記及び様々なさらなる態様及び実施形態は、以降の詳細な説明及び添付の任意の請求項を検討すれば、当業者には直ちに明白となろう。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１Ａ】本発明の実施形態による、時間に応じた血管内の塞栓粒子の３つの状態を示す概略図。
【図１Ｂ】本発明の実施形態による、時間に応じた血管内の塞栓粒子の３つの状態を示す概略図。
【図１Ｃ】本発明の実施形態による、時間に応じた血管内の塞栓粒子の３つの状態を示す概略図。
【図２Ａ】本発明の実施形態による、時間に応じた血管内の塞栓粒子の２つの状態を示す概略図。
【図２Ｂ】本発明の実施形態による、時間に応じた血管内の塞栓粒子の２つの状態を示す概略図。
【図３】本発明の実施形態による、塞栓粒子の概略図、及び該塞栓粒子のサブ粒子のうちの１つの拡大概略図。
【図４】二水和物結晶を含有するＰＬＧＡ塞栓粒子の顕微鏡写真。
【図５】受理したままの（ａｓ  ｒｅｃｅｉｖｅｄ  ａｓ−ｒｅｃｅｉｖｅｄ）無水結晶形パクリタキセル粉体の顕微鏡写真。
【図６】３７℃の水中で一晩インキュベーションした後の図５の無水結晶形パクリタキセル粉体の顕微鏡写真。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
いくつかの態様では、本開示は、腫瘍内の動脈を塞栓せしめた後に急速分解することが可能な、治療剤放出性の塞栓粒子を提供する。ある有益な実施形態では、粒子は、腫瘍壊死を引き起こすのに十分長い時間存続すると同時に、重大な血管血栓症を回避するのに十分急速に分解することにより、同じ部位におけるその後の塞栓治療の可能性を残す。ある有益な実施形態では、塞栓粒子は分解のかなり後まで持続した治療剤放出を提供する。
【００１３】
様々な実施形態によれば、本開示は、生分解性ポリマーマトリックス中に分散した治療剤含有サブ粒子を含んでなる塞栓粒子を提供する。該塞栓粒子は、対象者の体腔に投与されると生分解性ポリマーマトリックスが分解してサブ粒子の放出をもたらすように構成される。
【００１４】
例えば、塞栓粒子は、対象者の体腔（例えば動脈などのような血管）に投与されると、生分解性ポリマーが血管に塞栓を生じせしめて下流の組織の壊死を引き起こすのに十分に遅い速度で分解し（例えば、血管を少なくとも６０分間閉塞せしめる）、一方で同時に、血栓症の可能性を低減するように投与の４８時間以内に、より好ましくは投与の３６時間以内に血管に血流を復元するのに十分に急速な速度で分解するように、構成されうる。
【００１５】
様々な実施形態において、治療剤は生分解性ポリマーマトリックスの分解後も局所的に放出され続け、例えば、生分解性ポリマーマトリックスが完全に分解した後に長期にわたり（すなわち少なくとも７日間、１か月に至るまで、又はそれ以上）放出され続ける。例えば、塞栓粒子は、治療剤含有サブ粒子であって、少なくともその一部が塞栓部位に局在し続けて生分解性ポリマーマトリックスの完全な分解後も長期にわたり治療剤を放出し続けるように構成されている、治療剤含有サブ粒子を含有することができる。
【００１６】
本明細書中に定義されるように、「完全な分解」とは、元の生分解性ポリマーの重量（すなわち注入時の生分解性ポリマーの重量）の１０重量％未満、好ましくは５重量％未満、さらにより好ましくは２重量％しか塞栓部位に残っていない時点である。
【００１７】
この点では、血管が後日再治療を受けることが可能であるように、塞栓粒子が壊死を引き起こした後に血流を再開せしめることが望ましい。腫瘍への血流の停止は、腫瘍壊死をもたらすために短期間生じれば十分であって、その後遮断状態はもはや必要なく、かつ実際、同じ部位への追加治療の適用の邪魔になる。しかしながら多くの場合、腫瘍に対して局所的な治療剤放出を長く提供し続けることは有益であるものの、これは急速分解する粒子を用いては通常不可能である、というのも治療剤は放出されてその部位から下流に運ばれるからである。ある実施形態では、本開示は、塞栓部位に局在し続けるように構成された治療剤含有サブ粒子を提供することにより、持続的な治療剤送達を伴った迅速分解性の粒子を設計するという難問を克服する。
【００１８】
注入可能な粒子は種々様々な対象者の様々な疾患及び状態を治療するために使用されうる。対象者には、脊椎動物の対象者、特にヒト、並びにペット及び家畜を含む様々な温血動物が挙げられる。本明細書中で使用されるように、「治療」とは、疾患若しくは状態の予防、疾患若しくは状態に関連した症状の低減若しくは除去、又は疾患若しくは状態の実質的若しくは完全な除去を指す。
【００１９】
本開示の注入可能な粒子は様々な形状であってよい。ある実施形態では、該粒子は、数ある規則的又は不規則な球に近い幾何学的形状の中でも特に、例えば（見た目で）完全な球体の形態又は長球（わずかに細長い球体）若しくは偏球（わずかに扁平な球体）のような完全に近い球体の形態を有して、ほぼ球形である。粒子がほぼ球形の実施形態では、粒子の少なくとも半分（５０％以上、例えば粒子試料の５０％から７５％まで、９０％まで、９５％又はそれ以上）が０．８以上（例えば０．８０から０．８５まで、０．９まで、０．９５まで、０．９７又はそれ以上）の球形度を有しうる。粒子の球形度は、例えばベックマン・コールター（Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ）のＲａｐｉｄＶＵＥ（登録商標）イメージアナライザ・バージョン２．０６（米国フロリダ州マイアミのベックマン・コールター）を使用して決定することが可能である。簡潔に述べると、ＲａｐｉｄＶＵＥ（登録商標）は、連続階調（グレースケール）形式のイメージを撮影し、該イメージを、サンプリング及び量子化のプロセスを通じてデジタル形式に変換する。該システムソフトウェアはイメージ中の粒子を同定及び測定する。Ｄａ／Ｄｐ（ここでＤａ＝√（４Ａ／π）；Ｄｐ＝Ｐ／π；Ａ＝画素面積（ｐｉｘｅｌ  ａｒｅａ）；Ｐ＝画素周囲長（ｐｉｘｅｌ  ｐｅｒｉｍｅｔｅｒ））として計算される粒子の球形度はゼロから１までの値であり、１は完全な円を表わしている。粒子は０．８以上（例えば０．８０から０．８５まで、０．９まで、０．９５まで、０．９７又はそれ以上）の球形度を有する場合に「球形」である。
【００２０】
本開示の注入可能な粒子は大きさにおいて顕著に様々であってよく、粒子の典型的な幅（例えば球体の直径、桿状体又は繊維体の直径など）の範囲は例えば１０〜１０００ミクロン（μｍ）（例えば１０から２０ミクロン（μｍ）まで、５０ミクロン（μｍ）まで、１００ミクロン（μｍ）まで、１５０ミクロン（μｍ）まで、２００ミクロン（μｍ）まで、５００ミクロン（μｍ）まで、１０００ミクロン（μｍ）まで）、より典型的には２０〜２００ミクロン（μｍ）である。
【００２１】
本開示の塞栓粒子に使用される治療剤含有サブ粒子は大きさにおいて顕著に様々であってよく、サブ粒子の典型的な幅（例えば球体の直径、桿状体又は繊維体の直径など）は該サブ粒子が所在する塞栓粒子の幅より小さく、より典型的には塞栓粒子の幅の０．５倍未満、０．１倍未満、０．０３倍未満、０．０１倍未満、０．００３倍未満、又は実に０．００１倍未満である。
【００２２】
様々な実施形態において、サブ粒子は、様々な数値の中でも特に、例えば幅が１０ｎｍ〜１０，０００ｎｍ（例えば幅が１０ｎｍから２５ｎｍまで、５０ｎｍまで、１００ｎｍまで、２５０ｎｍまで、５００ｎｍまで、１０００ｎｍまで、２５００ｎｍまで、５，０００ｎｍまで、１０，０００ｎｍまで）の範囲であってよい。
【００２３】
様々な実施形態において、サブ粒子は、１０：１から２５：１まで、５０：１まで、１００：１まで、２５０：１まで、５００：１まで、１０００：１又はそれ以上の範囲のアスペクト比（長さ：幅）を有する針状の粒子である。これらの実施形態のうちいくつかにおいて、そのようなサブ粒子の長さは塞栓粒子の幅のオーダー、例えば、塞栓粒子の幅の０．１倍から０．２５倍まで、０．５倍まで、１．０倍まで、又はそれ以上の範囲であってよい。
【００２４】
本明細書中で使用されるように、「ポリマー」は、一般にモノマーと呼ばれる１又は複数の種類の構成上の分子種を複数コピー含有している分子である。所与のポリマー内のモノマーの数は広く様々であってよく、例えば５から１０個まで、２５個まで、５０個まで、１００個まで、１０００個まで、１０，０００個又はそれ以上の構成単位に及びうる。
【００２５】
本明細書中で使用されるように、ポリマーは、該ポリマーがｉｎ  ｖｉｖｏにおいて結合開裂の機構（例えば酵素による分解、加水分解、酸化など）はどうあれポリマー主鎖に沿って結合開裂を受ける場合は、「生分解性」である。
【００２６】
本開示の塞栓粒子に使用される有益な生分解性ポリマーには、（ａ）ポリ無水物ホモポリマー及びコポリマー、例えば数ある中でも特に、ポリ（アジピン酸無水物）、ポリ（スベリン酸無水物）、ポリ（セバシン酸無水物）、ポリ（ドデカン二酸無水物）、ポリ（マレイン酸無水物）、ポリ［１，３−ビス（ｐ−カルボキシフェノキシ）メタン無水物］、並びにポリ［α，ω−ビス（ｐ−カルボキシフェノキシ）アルカン無水物］であって例えばポリ［１，３−ビス（ｐ−カルボキシフェノキシ）プロパン無水物］、ポリ［１，３−ビス（ｐ−カルボキシフェノキシ）ヘキサン無水物］、及びポリ（セバシン酸−ｃｏ−１，３−ビス（ｐ−カルボキシフェノキシ）プロパン）、（ｂ）ポリ（オルトエステル）ホモポリマー及びコポリマー、例えば数ある中でも特にクラスＩのポリ（オルトエステル）、クラスＩＩのポリ（オルトエステル）、クラスＩＩＩのポリ（オルトエステル）及びクラスＩＶのポリ（オルトエステル）として含むもの、並びに（ｃ）多糖類ホモポリマー及びコポリマー、例えば数ある中でも特にデンプン及びアルギナート、が挙げられる。
【００２７】
本開示の注入可能な粒子は架橋されなくてもよいし、共有結合及び非共有結合のうち少なくともいずれか一方により架橋されてもよい。よって、いくつかの実施形態では、共有結合型架橋剤又はイオン架橋剤のような架橋剤が注入可能な粒子の中に存在していてもよく、一方他の実施形態では、架橋剤は粒子中には存在しない。いくつかの実施形態では、粒子は放射線（例えばガンマ又ははｅ−ビーム放射線）への曝露によって架橋されてもよく、これは粒子の滅菌と同時に為されうる。
【００２８】
本開示の塞栓粒子に使用される有益な治療剤には、抗腫瘍剤が挙げられる。本開示の塞栓粒子に使用される有益な治療剤には、低溶解性治療剤を有している（すなわち、２５℃の水に１ｇ／ｌ未満、及びいくつかの実施形態では１００ｍｇ／ｌ未満の溶解度を有している）ものが挙げられる。特に有益なのは、低溶解性の抗腫瘍剤、例えば数ある中でも特にパクリタキセル、エベロリムス、及びソラフェニブである。典型的な治療剤装荷量は、例えば組成物の乾燥重量の０．１重量％以下から、０．２重量％まで、０．５重量％まで、１重量％まで、２重量％まで、５重量％まで、１０重量％まで、２０重量％又はそれ以上の範囲に及ぶ。
【００２９】
生分解性ポリマーとしてデンプン及び治療剤としてパクリタキセルを使用するいくつかの実施形態についてはここで議論されることになる。注目されるべきは、後続の様々な実施形態について議論する際に多糖類（すなわちデンプン）が使用されているが、その他の生分解性ポリマーも本開示の実行に適しているということである。同様に注目されるべきは、後続の様々な実施形態においてパクリタキセルが使用されているが、その他の治療剤も本開示の実行に適しているということである。
【００３０】
デンプンはアミラーゼを必要とする酵素的プロセスにより生分解することが知られている。デンプン塞栓粒子の完全な分解の時間は、２日間未満、例えば１時間から２時間まで、４時間まで、６時間まで、１２時間まで、１８時間まで、２４時間まで、３６時間まで、４８時間までの範囲であってよい。デンプンのミクロスフェアを調製するプロセスは文献において周知である。例えば、パトリシアＢ．マラファヤ（Ｐａｔｒｉｃｉａ  Ｂ．Ｍａｌａｆａｙａ）ら、ジャーナル・オブ・マテリアルズ・サイエンス：マテリアルズ・イン・メディシン（Ｊ  Ｍａｔｅｒ  Ｓｃｉ：Ｍａｔｅｒ  Ｍｅｄ）、２００６年、第１７巻、ｐ．３７１−３７７を参照されたい。
【００３１】
本開示のある実施形態では、油相中に分散した水相中にデンプンが溶解されている油中水型乳剤が形成される。非晶質のパクリタキセルサブ粒子又は無水結晶形のパクリタキセルサブ粒子も水相中に分散せしめることができる。（以下に議論されるように、非晶質及び無水結晶形のパクリタキセル粒子はいずれも水の存在下で時間をかけて合体して針状の二水和物結晶となることが可能である。非晶質又は無水結晶形のパクリタキセル粒子の水への曝露が妥当な時間（例えば１時間未満）に保たれる限り、非晶質パクリタキセル粒子の著しい結晶化又は無水結晶形パクリタキセル粒子の二水和物結晶形パクリタキセル粒子への変換は回避されうる；さらに結晶化を阻害するために処理温度を下げることも可能である。）油中水型乳剤の形成は、界面活性剤、例えば数ある中でも特に、非イオン性界面活性剤、例えばＴｗｅｅｎ（登録商標）８０、Ｓｐａｎ（登録商標）８０、又はポリビニルアルコール若しくはポリビニルピロリドンのような適切な低分子量ポリマーなど、の添加によって増進されうる。ホモジナイザ又は超音波処理器は分散相を所望の大きさに縮めるために使用可能である。架橋剤、例えば数ある中でも特にトリメタリン酸三ナトリウム（ＴＳＴＰ）、エピクロロヒドリン、グルタルアルデヒド又はホルムアルデヒドなどは、分散した水相中のデンプンを架橋して塞栓粒子を形成するために添加されうる。ＴＳＴＰについては、架橋反応は、架橋剤を活性化するのに適した塩基性溶液（例えばＮａＯＨ溶液）を用いてｐＨを上昇させることにより開始される。反応は適切な酸性溶液（例えばＨＣｌ溶液）の添加によって停止される。形成の方法にかかわらず、一度形成されると、非晶質又は無水結晶形のパクリタキセルサブ粒子のデンプンマトリックス中分散物を含有する塞栓粒子は、その後所望通りに洗浄され、単離され、大きさで分類され、かつ凍結乾燥されうる。
【００３２】
非晶質のパクリタキセルのサブ粒子は、例えば、パクリタキセル用の良溶媒（例えばテトラヒドロフラン、ジメチルホルムアミド、ジクロロメタンなど）である第１の溶媒中のパクリタキセル溶液を最初に提供し、次にこの溶液を、第１の溶媒と混和性であるがパクリタキセルについては貧溶媒である第２の溶媒（例えばヘプタン、ヘキサン、トルエンなど）に滴加し、該溶液からパクリタキセルが析出するという結果を伴うことにより、得ることができる。粒子の分散性を援助するために、Ｓｐａｎ（登録商標）８０のような界面活性剤が粒子に添加されてもよい。
【００３３】
受理したままの（ａｓ  ｒｅｃｅｉｖｅｄ）無水結晶形パクリタキセルのサブ粒子は、受理したままの無水結晶物粉体を、ジルコニウムの粉砕媒体を備えた高周波シェーカにおいて粉砕することにより形成されうる。
【００３４】
ポリマーマトリックス（すなわちＰＬＧＡ）中に分散した非晶質のパクリタキセル微粒子を含有する粒子について、３７Ｃの水中でインキュベーションされると、非晶質のパクリタキセル粒子が数時間内に合体して大きな針状の二水和物結晶になることが観察されている。ＰＬＧＡ粒子中での結晶質パクリタキセル形成の一例は図４に示されている（スケール＝１ミクロン（μｍ））。
【００３５】
３７℃の水中に分散した受理したままの無水結晶形パクリタキセル粉体について、無水結晶形パクリタキセル粒子が数時間内に合体して大きな針状の二水和物結晶になることも観察されている。受理したままの無水結晶形パクリタキセル粉体、及び３７℃の水中で無水結晶形パクリタキセル粉体を一晩インキュベーションした後に形成された二水和物結晶の実例は、図５及び６にそれぞれ示されている。
【００３６】
非晶質又は結晶ダイハイレート（ｃｒｙｓｔａｌｌｉｎｅ  ｄｉｈｙｒａｔｅ）のパクリタキセルサブ粒子がデンプンマトリックス内に分散せしめられる方法にかかわらず、水性のｉｎ  ｖｉｖｏ環境への導入（例えば患者への注入）がなされると、二水和物形成に十分な水が時間とともに利用可能になり、塞栓粒子内の非晶質又は無水結晶形のパクリタキセル微粒子は合体して針状の二水和物結晶となりうる。
【００３７】
さらなる時間がｉｎ  ｖｉｖｏで経過するにつれ、デンプンは分解して血管内には針状の二水和物結晶が残される。二水和物結晶のパクリタキセルは非常に脂肪親和性が強く（水溶解度＜１ｇ／Ｌ）、かつ二水和物結晶の多形は、その緩徐な溶解プロファイルゆえに、約１か月かけて排出することが可能な薬物デポーとしての機能を果たすことができる。
【００３８】
そのような粒子の使用は、図１Ａ〜１Ｃに概略的に示されている。塞栓粒子１１０ｐが図１Ａに示されるように動脈（例えば腫瘍に栄養供給している動脈２００）に注入されたとき、粒子１１０ｐは該塞栓粒子の下流の組織（例えば腫瘍組織）への血流を止め、その結果腫瘍壊死を引き起こす。動脈内で水に曝露されると、粒子中の非晶質又は無水結晶形のパクリタキセルは二水和物結晶に変換し始めて図１Ｂに示されるような結晶質のパクリタキセル針状物を備えた塞栓粒子１００ｃが形成される。図１Ｃに示されるようにデンプン粒子が分解すると、結晶質のパクリタキセル針状物１２０ｓの少なくとも一部が血管系に残留することにより、薬物デポーとしての機能を果たし、かつ腫瘍に持続的な薬物放出を提供する一方で血流は復元される。
【００３９】
別例として、塞栓粒子内の分散した非晶質又は無水結晶形のパクリタキセルは、非晶質又は無水結晶形のパクリタキセルを効率的に二水和物結晶に変換するためにｅｘ  ｖｉｖｏでエタノール中での蒸気アニーリングに供されることもできる。このように、非晶質又は無水結晶形のパクリタキセルの二水和物結晶へのｉｎ  ｖｉｖｏ変換に依存する必要はない。適切な蒸気アニーリングプロセスはカンガス（Ｋａｎｇａｓ）らの米国特許出願公開第２０１１／００１５６６４Ａ１号明細書に記載されている。
【００４０】
本開示の他の実施形態では、油性サブ粒子が生分解性ポリマー（例えばデンプン）マトリックスの全体にわたって分散している塞栓粒子が形成される。油性サブ粒子は、例えば、適切な油、例えば植物性のヨード化油又は動物性のヨード化油のようなヨード化油の中に分散した治療剤ナノ粒子（例えば結晶形パクリタキセルのナノ粒子）を含有しうる。特定の実施形態では、リピオドール（Ｌｉｐｉｏｄｏｌ）（登録商標）（ヨード化ケシ油脂肪酸エチルエステル（ｅｔｈｉｏｄｉｚｅｄ  ｏｉｌ）及びＥｔｈｉｏｄｏｌ（登録商標）としても知られている）が使用されてもよい。リピオドール（登録商標）はヨード化されたケシ油であり、これは造影剤として使用されている。リピオドール（登録商標）は、肝臓腫瘍に対して、（Ｘ線透視検査により観察されるように）数週間の腫瘍内滞留時間を備えた高い親和性を有することも知られており（例えば、スンウク、シン（Ｓｕｎ  Ｗｏｏｋ  Ｓｈｉｎ）、コリアン・ジャーナル・オブ・ラジオロジー（Ｋｏｒｅａｎ  Ｊ  Ｒａｄｉｏｌ）、２００９年９月／１０月、第１０巻、第５号、ｐ．４２５−４３４を参照されたい）、かつＴＡＣＥ手技において造影剤として一般に使用されている。本開示では、治療剤のナノ粒子（例えば結晶形パクリタキセルのナノ粒子）はリピオドール（登録商標）中に分散せしめられ、これがひいてはデンプンマトリックス中に分散せしめられる。治療剤のナノ粒子の典型的な大きさは、例えば、数ある可能性の中でも特に、５から５００ｎｍまで（例えば５ｎｍから、１０ｎｍまで、２５ｎｍまで、５０ｎｍまで、１００ｎｍまで、２５０ｎｍまで、５００ｎｍまで）の範囲に及ぶ。油は治療剤ナノ粒子の腫瘍特異的な担体としての機能を果たす。デンプンが分解するにつれて、デンプンから油ミクロスフェアが放出される。油ミクロスフェアの一部は下流に押し流されて微小血管系（直径＜１０ｕｍの血管）の中に滞留／吸着する一方、油ミクロスフェアの別の一部は塞栓粒子が分解する場所に近接した動脈内に沈積することにより、油から組織中への治療剤の持続放出（例えば数日から数週）を可能にすることができる。
【００４１】
リピオドール（登録商標）中の二水和物結晶形のパクリタキセルナノ粒子は粉砕プロセスにより形成可能である。米国ワシントン州シアトルのインデナ・ユーエスエイ社（Ｉｎｄｅｎａ  ＵＳＡ  Ｉｎｃ．）からの受理したままの無水結晶形パクリタキセル粉体から始め、この無水結晶形パクリタキセルは水で処理されて安定した二水和物結晶の形態に変換される。その後、二水和物結晶形のパクリタキセルと、米国インディアナ州ブルーミントンのゲルベ・エルエルシー（Ｇｕｅｒｂｅｔ  ＬＬＣ）からのリピオドール（登録商標）とが、高速シェーカを使用してジルコニアの粉砕媒体を用いて粉砕される。結果として生じるパクリタキセル含有リピオドールのサブ粒子は、パクリタキセル含有リピオドール（登録商標）を多量の水相（例えば、水に溶解したデンプン）と組み合わせ、該混合物を例えばホモジナイザ又は超音波処理器を使用して乳化し水中油型乳剤を形成することにより、水相中に形成することが可能である。この組成物はその後、多量の適切な油相に添加され、例えばホモジナイザ又は超音波処理器を使用して乳化されて、油中水中油型複乳剤を形成することができる。分散水相中のデンプンは架橋されてもよい（例えば上述のとおり）。形成の方法にかかわらず、一度形成されると、治療剤を含有するヨード化油サブ粒子のデンプンマトリックス中分散物を含有する塞栓粒子は、その後所望通りに洗浄され、単離され、大きさで分類され、かつ凍結乾燥されうる。
【００４２】
そのような塞栓粒子の使用は、図２Ａ〜２Ｂに概略的に示されている。塞栓粒子１１０ｐが動脈２００（例えば腫瘍に栄養供給している動脈）の中に注入されると、粒子は図２Ａに示されるように腫瘍への血流を停止して腫瘍壊死を引き起こす。図２Ｂに示されるように塞栓粒子１１０ｐのデンプンが分解すると血流は復元される。塞栓粒子１１０ｐにおけるデンプンの分解はさらに、結晶形パクリタキセルナノ粒子を含有するリピオドール（登録商標）サブ粒子１２０ｓの放出をももたらし、かつサブ粒子１２０ｓの少なくとも一部はデンプン粒子が分解した位置に近接した動脈壁２００において沈積物１２０ｃを形成して、油から周囲の腫瘍内へのパクリタキセルの持続放出を可能にすることができる。その他のサブ粒子は下流に流れて微小血管系に滞留する場合もあり、微小血管系においてもパクリタキセルが腫瘍組織内へ放出される。
【００４３】
ここで、本開示の別の実施形態による図３を参照すると、タンパク質で安定化された治療剤サブ粒子、より具体的にはアルブミン１２０ａで安定化されたパクリタキセルナノ粒子１２０ｘ、を含有するデンプン粒子１１０ｐが調製される。使用可能なその他のタンパク質は、数ある中でも特に、ゼラチン及び植物性タンパク質、例えばグリアジン、レグミン、分離大豆タンパク及び乳漿タンパク分離物などである。ＦＤＡに認可された薬物アブラキサン（登録商標）は、アルブミンで安定化されたパクリタキセルナノ粒子（平均径〜１３０ｎｍ）の水性分散液である。アブラキサン（登録商標）のＩＶ注入の前臨床及び臨床研究は、腫瘍によるパクリタキセルの取り込みが標準的なクレモホール（登録商標）／パクリタキセルのＩＶ注入の取り込みより顕著に大きいことを示した（例えば、Ａ．スパレボーム（Ａ．Ｓｐａｒｒｅｂｏｏｍ）ら、クリニカル・キャンサー・リサーチ（Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ）、２００５年、第１１巻、ｐ．４１３６−４１４３を参照されたい）。これは一部には腫瘍タンパク質へのアルブミンの良好な結合に因るものと考えられる。アルブミンで安定化されたパクリタキセルをデンプン粒子の中に組み込むことにより、腫瘍に塞栓を形成せしめる（壊死をもたらす）こと、及びアルブミンで安定化されたパクリタキセル粒子の全身注入を用いて可能であるよりもはるかに高いパクリタキセルの局所用量を提供することの両方が可能である。粒子は、水相が、溶解されたデンプンと、アルブミンで安定化されたパクリタキセルの分散した粒子とを含有している、油中水型乳剤を作出することにより形成されてもよい。水相が油相中に分散した乳剤を形成する際、分散した水相中のデンプンが（例えば上述のように）架橋されることにより、塞栓粒子が形成される。形成の方法にかかわらず、一度形成されると、タンパク質で安定化された治療剤粒子（例えばアルブミンで安定化されたパクリタキセル粒子）のデンプンマトリックス中分散物を含んでなる塞栓粒子は、その後所望通りに洗浄され、単離され、大きさで分類され、かつ凍結乾燥されうる。
【００４４】
ある実施形態では、本開示の粒子は、粒子のｉｎ  ｖｉｖｏでの撮影を向上させるのに有用な量で、撮影用造影剤を任意選択で含むことになろう。（上述の塞栓粒子のうちのいくつかはもともとリピオドール（登録商標）の形態で造影剤を含有することになることが知られている。）造影剤の例には、（ａ）磁気共鳴撮像（ＭＲＩ）と併せて使用するための造影剤、例えばＧｄ（ＩＩＩ）、Ｄｙ（ＩＩＩ）、Ｍｎ（ＩＩ）、Ｆｅ（ＩＩＩ）のような比較的大きな磁気モーメントを備えた元素及びこれらを含有する化合物（キレート化合物を含む）、例えばジエチレントリアミン五酢酸でキレートされたガドリニウムイオン、を含有する造影剤など、並びに（ｂ）Ｘ線透視に関連して使用するための造影剤、例えば、数ある中でも特に、金属、金属の塩及び酸化物（特にビスマスの塩及び酸化物）、並びにヨード化化合物、が挙げられる。
【００４５】
本開示の塞栓粒子は湿潤形態又は乾燥形態で保管及び輸送され、好ましくは無菌の乾燥形態で保管及び輸送される。本明細書中に記載されるような生分解性の塞栓粒子及び任意選択の造影剤に加えて、塞栓粒子組成物はさらに任意選択で、例えば数ある中でも特に下記すなわち（ａ）等張化剤、例えば数ある中でも特に、糖質（例えばデキストロース、ラクトース、スクロースなど）、多価アルコール（例えばグリセロール、プロピレングリコール、マンニトール、ソルビトールなど）及び無機塩類（例えば塩化カリウム、塩化ナトリウムなど）、（ｂ）懸濁剤、例えば数ある中でも特に、様々な界面活性剤、湿潤剤、及びポリマー（例えば卵白、ＰＥＯ、ポリビニルアルコール、ブロックコポリマーなど）、並びに（ｃ）ｐＨ調節剤、例えば様々な緩衝剤溶質など、のうち１以上から選択された追加の作用薬を、含有することもできる。
【００４６】
乾燥形態又は湿潤形態の塞栓粒子組成物は、例えばシリンジ、カテーテル、バイアル、アンプル、又はその他の容器に含めて出荷されうる。乾燥形態は、投与に先立って適切な液体担体（例えば注射用無菌水、生理食塩水、リン酸塩緩衝液、撮影用造影剤を含有している溶液など）と混合されるとよい。このように、注入される組成物の濃度は、この手技を担当する医療関係者の所望のとおりに変更されうる。湿潤形態（例えば水懸濁液）も、この手技を担当する医療関係者がそのように所望すれば、投与に先立って適切な液体担体（例えば注射用無菌水、生理食塩水、リン酸塩緩衝液、造影剤を含有している溶液など）と混合されて、懸濁液中の投与される粒子（及びその他の任意選択の作用薬）の濃度が注入に先立って低減されることを可能にすることができる。液体担体の１以上の容器も、乾燥形態又は湿潤形態の粒子と共に、キットの形態で供給及び出荷されうる。キットはさらに、カテーテル（例えばマイクロカテーテル）、ガイドワイヤなどのような、送達を支援するための１以上の機器も備えうる。キットはさらに、下記すなわち（ｉ）保管情報、及び（ｉｉ）対象者に塞栓粒子を投与する方法に関する指示、のうち１以上を備えた印刷物も含みうる。
【００４７】
上記に示されるように、いくつかの実施形態において、本開示による塞栓粒子は、種々ある中でも特に、腎臓癌、骨腫瘍及び肝臓腫瘍のような固形腫瘍を治療するのに使用されうる。塞栓術は、化学療法又は放射線療法への強化として行われてもよい。他の実施形態では、粒子は良性腫瘍を治療するために使用されうる。例えば、平滑筋腫（ｌｅｉｏｍｙｏｍａ）、平滑筋腫（ｌｅｉｏｍｙｏｍａｔａ）又は線維筋腫としても知られている類線維腫は子宮の最も一般的な良性腫瘍である。
【００４８】
本開示はさらに、塞栓術を達成するために本開示の粒子状物質組成物を投与する様々な方法をも包含する。当業者は、数ある要因の中でも特に、治療の種類及び患者の状態に応じて、粒子を投与する最も望ましい方法を決定することができる。投与の方法には、例えば、他の有効な投与経路と同様に経皮的技法も含まれる。例えば、本開示の粒子状物質組成物は、シリンジを通じて、又はカテーテル、例えばガイドワイヤ上を前進せしめることが可能なＴｒａｃｋｅｒ（登録商標）マイクロカテーテル（米国マサチューセッツ州ナティックのボストン・サイエンティフィック（Ｂｏｓｔｏｎ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ））、操縦可能なマイクロカテーテル、若しくはフローダイレクトマイクロカテーテル（ＭＡＧＩＣ（登録商標）、フランス共和国モンモランシーのバルト（Ｂａｌｔ））を通じて送達可能である。いくつかの実施形態では、ヘパリン又はワルファリンのような抗凝血薬が、注入部位での血栓形成の可能性を低減するために手技中及び手技直後に患者に与えられる。
【００４９】
本明細書中では様々な実施形態について具体的に例証及び説明がなされているが、本発明の改変形態及び変更形態は上記の教示による対象範囲にあり、かつ本発明の思想及び意図された範囲から逸脱することなく添付の特許請求の範囲の範囲内にあることが認識されるであろう。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図１Ｃ】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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