(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
マンゴスチン（Ｇａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａ  Ｌ．）果皮６０〜８０部と、
タイム（Ｔｈｙｍｕｓ  ｍｏｎｇｏｌｉｃｕｓ  Ｒ．）１０〜２０部と、
枳殻（ｆｒｕｃｔｕｓ  ａｕｒａｎｔｉｉ）１０〜２０部と、
からなるニキビ除去のための医薬組成物。
【請求項２】
マンゴスチン果皮６０〜８０重量部、タイム１０〜２０重量部、および、枳殻１０〜２０重量部、を混合する工程と、エタノールで抽出する工程と、その抽出溶液を精製する工程と、を有するニキビ除去のための医薬組成物の製造方法。
【請求項３】
前記エタノール抽出は、１〜２．５時間の加熱還流抽出に、８〜１２倍（重量比）の量の７６〜９５％のエタノール水溶液を用いて実施される請求項２に記載のニキビ除去のための医薬組成物の製造方法。
【請求項４】
ａ．前記抽出溶液をろ過後に濃縮し、濃縮抽出物をエタノール水溶液に溶解し、一晩冷蔵保管する工程と、
ｂ．濾過を行い、濾液はマクロ孔質吸着樹脂によって吸着され、溶出溶液によって溶出される工程と、
を有する請求項２または３に記載のニキビ除去のための医薬組成物の製造方法。
【請求項５】
前記工程ａにおいて、前記濃縮は、好ましくは、比重が１．０５〜１．１になるまで行われる請求項４に記載のニキビ除去のための医薬組成物の製造方法。
【請求項６】
前記工程ａにおいて、前記エタノール水溶液中のエタノールの体積比は７０〜８０％である請求項４または５に記載のニキビ除去のための医薬組成物の製造方法。
【請求項７】
前記工程ａにおける一晩の冷蔵保管は、０〜４℃で１２〜１８時間、静置することによって行われる請求項４〜６のいずれか１項に記載のニキビ除去のための医薬組成物の製造方法。
【請求項８】
前記工程ｂの前記溶出は、水、２０〜４０％エタノール水溶液、６０〜８０％エタノール水溶液、によって順次行われ、６０〜８０％エタノール水溶液による溶出液が回収される請求項４〜７のいずれか１項に記載のニキビ除去のための医薬組成物の製造方法。
【請求項９】
請求項２〜８のいずれか１項に記載のニキビ除去漢方薬組成物の製造方法によって製造されたニキビ除去のための医薬組成物。
【請求項１０】
請求項１または９に記載のニキビ除去のための医薬組成物と、許容可能な賦形剤と、から調製されるニキビ除去のための調剤薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、ここにその内容全体を参考文献とする２０１５年８月２８日に中華人民共和国知識産権局に出願された「ニキビ除去のための医薬組成物とその製造方法」と題する中国特許出願第２０１５１０５４０７８５．６号に基づく優先権を主張するものである。
【０００２】
本発明は、のための医薬、特に、ニキビ除去のための医薬組成物とその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
ニキビ（小塊、尋常性ざ瘡、ピンプル、としても知られる）は、ヒトの皮膚皮脂腺または毛包の炎症を引き起こす可能性がある一般的な皮膚疾患である。脊柱型丘疹が局所病変箇所に形成され、そこから白色または乳白色の砕精米状の汁が絞り出される。ニキビの発達は主として、過剰な皮脂分泌、毛包皮脂腺の詰まり、バクテリア感染、炎症反応、などの要因と関連している。ヒトは、思春期を迎えると、アンドロゲン、特に、テストステロン、のレベルが急速に増大し、皮脂腺の発達と皮脂の大量分泌とが促進される。また、毛包皮脂腺の角化異常によって、毛包皮脂腺の詰まり、皮脂小胞障害、および、角質プラグ（すなわち、マイクロアクネ）の形成、が生じる。種々の微生物、特に、アクネ菌が、毛包内で増殖する。アクネ菌が生成するリパーゼが皮脂を自由脂肪酸へ分解し、炎症細胞およびメディエータ（伝達物質）の走化性を促進し、最終的に炎症を誘発し悪化させる。
【０００４】
ニキビは男女ともの若い人々によく起こる。それは、女性よりも男性に、より一般的にみられるが、女性における発症年齢は男性における発症年齢よりも早い。ニキビは、その大半が、顔、額、頬、および、鼻唇溝、で生じ、続いて、胸、背中、および、肩、で生じる。通常、ニキビによって引き起こされる皮膚のダメージには自覚症状が無い。炎症反応が重度な場合は痛みが伴う場合がある。ニキビは、アクネ、丘疹、膿疱、および、結節性嚢胞、に分類される。青少年の８０〜９０％がニキビに苦しんでいる。ニキビは、思春期が過ぎると、自然に減少または治癒することが多いが、患者の一部においては三十歳台まで残る場合がある。ニキビは自己治癒する傾向があるが、ニキビ自身と、ニキビによって引き起こされる傷と、は、適時に治療しなれば患者の生活の質に重大な影響を与え、患者の心的圧迫および経済的負担を引き起こす。これらの問題には注意を払わなければならない。
【０００５】
ニキビの治療法には、以下を含む６つの一般的な方法がある。
【０００６】
（１）局所的に用いる外用薬：トレチノイン（トレチノインクリーム、アダパレンゲル、タザロテンゲル）、過酸化ベンゾイル、抗生物質（クリンダマイシン、エリスロマイシン、クロラムフェニコール、など）、アゼライン酸、硫黄ローション、など。
【０００７】
（２）抗生物質の経口投与：第１の選択肢はテトラサイクリン系抗生物質（ミノサイクリン、ドキシサイクリン、など）であり、第２の選択肢はマクロライド系抗生物質（エリスロマイシン）である。レボフロキサシンなどの全身感染治療に使用される抗生物質は避けるべきである。抗生物質治療の期間は、通常６〜１２週間である。
【０００８】
（３）イソトレチノインの経口投与：重度のニキビのためには、経口イソトレチノインが、標準的かつ現時点で最も効果的な治療法である。６０ｍｇ／ｋｇの最小蓄積投与量に到達することを終点として治療が進められる。
【０００９】
（４）抗アンドロゲン治療：たとえば、経口避妊薬化合物酢酸シプロテロン錠（商品名：ダイアン３５）が、中程度および重程度のニキビの女性患者向けに適している。高アンドロゲン血症（多毛症、脂漏症、など）、多嚢胞性卵巣症候群、後期発症型ニキビ、および、ニキビが月経周期の前に酷くなる女性、のためには、経口避妊薬も考慮に入れうる。
【００１０】
（５）グルココルチコイドの経口投与：主として劇症性ざ瘡および集簇性ざ瘡向けに使用される。この処置は、短期間、小投与量、他の処置との組み合わせ、の原理に従う。
【００１１】
（６）その他：薬剤を受け入れない患者向け、または、薬剤治療を受け入れることを嫌がる患者向け、には、光力学療法（ＰＤＴ）、フルーツ酸療法、レーザ療法、などの物理的療法も考慮に入れうる。
【００１２】
ニキビ治療は、症状の段階に応じて行われるべきである。
第１段階：通常は局所治療が採用される。トレチノイン外用薬の使用が好ましい。
第２段階：トレチノイン外用薬と、過酸化ベンゾイルまたは抗生物質の外用薬と、を組み合わせて使用される。必要な場合は、抗生物質の経口投与が組み合わせられる。
第３段階：通常は、組み合わせ治療が必要である。抗生物質の経口投与と、過酸化ベンゾイル外用薬および／またはトレチノイン外用薬の使用と、の組み合わせが第１の選択肢である。症状のある女性のためには、抗アンドロゲン治療も考慮に入れうる。
第４段階：イソトレチノインの経口投与が最も効果的な治療法であり、これを第１選択治療として使用することができる。炎症性丘疹および多くの膿疱を有する患者には、抗生物質と過酸化ベンゾイル外用薬との組み合わせを全身的に投与することも可能である。皮膚のダメージが明らかに改善した後は、イソトレチノインの経口投与を継続する。
【００１３】
しかし、現在、西洋医学がニキビ治療のための薬剤市場の主要部分を占めている。西洋医学はニキビ除去の作用を奏することができるが、それらには比較的明白な副作用がある。したがって、それらは長期的使用には適しておらず、その投与量は過大であってはならない。頻繁に繰り返しニキビを発症する思春期から成人の段階の人々にとって、天然で、肌に優しく、副作用が少なく、長期使用に適した、ニキビ除去製品が必要とされている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
上記に鑑みて、本発明の課題は、ニキビ除去のための医薬組成物とその製造方法を提供することにある。ここに記載される医薬組成物はニキビ治療に対する劇的な作用と、高い治癒率と、を有し、天然で、肌に優しく、長期使用に適している。
【課題を解決するための手段】
【００１５】
前記課題を達成するために、本発明において以下の技術的解決手段が適用される。
【００１６】
ニキビ除去のための医薬組成物が提供され、これは以下の原料（重量部）からなる。
マンゴスチン（Ｇａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａ  Ｌ．）果皮  ６０〜８０部
タイム（Ｔｈｙｍｕｓ  ｍｏｎｇｏｌｉｃｕｓ  Ｒ．）  １０〜２０部
枳殻（ｆｒｕｃｔｕｓ  ａｕｒａｎｔｉｉ）  １０〜２０部
【００１７】
本発明の前記漢方薬組成物は、マンゴスチン果皮、タイム、および、枳殻、から成る。前記漢方薬組成物中のこれらの薬剤は互いに影響を与え、抗菌作用と抗炎症作用とにおいて相乗効果を奏する。
【００１８】
マンゴスチンの学名はＧａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａ  Ｌ．である。マンゴスチンは平性、酸味に属する生薬であり、脾臓を正常化し、唾液分泌を促進し、下痢を止める効果を有する。マンゴスチン果皮は涼性、苦味に属する生薬であり、抗炎症作用と鎮痛作用とを有する。
【００１９】
タイムは、タチジャコウソウとも呼ばれ、学名はＴｈｙｍｕｓ  ｍｏｎｇｏｌｉｃｕｓ  Ｒ．である。タイム、または、タイム属シソ科に属するＭｏｎｇｏｌｌｉａｎ  Ｔｈｙｍｅ  Ｈｅｒｂ（学名Ｔｈｙｍｕｓ  ｐｒｚｅｗａｌｓｋｉｉ）を含む。全草が薬剤として使用される。前記原料を準備するために、タイムは、その枝葉が豊かな夏期に収穫される。前記全草を洗浄し、その根（これは再生産のために利用できる）を除去した後、それを小片にカットし、そのまま使用するか、もしくは、それを乾燥した後に使用することができる。タイムは微温性、辛味に属する生薬であり、外因性の病気を緩和するべく風邪を払いのける作用、気の循環を促進して痛みを和らげる作用、咳止め作用、および、血圧降下作用、を有する。それは主として、風邪、咳、頭痛、歯痛、消化不良、急性胃腸炎、および、高血圧、の治療に使用される。
【００２０】
枳殻は、学名Ｃｉｔｒｕｓ  ａｕｒａｎｔｉｕｍ  Ｌおよびその変種の未熟果実を乾燥したものである。枳殻は、その果皮がまだ緑色である７月に収穫され、その真ん中で半分に切られ、空気中または低温下で乾燥される。枳殻は、苦味、辛味、酸味、に属し、かつ、温性に属する、生薬であり、気を整える作用、中心をほぐす作用、停滞を活性化する作用、および、腫れを緩和する作用、を有する。それは主として、胸および四肢の気の停滞、腫れおよび痛み、飽満感、痰の過剰分泌、胃腸炎、直腸脱、子宮脱、などの治療に使用される。
【００２１】
本発明に記載のマンゴスチン果皮、タイム、および、枳殻、は当業者にとって周知であり、それらは、薬局から購入することによって商業的に入手可能であるか、もしくは、国が定める基準または産業上の基準を満たす限りにおいて、従来技術に開示されている方法によって栽培および収集することが可能である。
【００２２】
本発明において、前記ニキビ除去のための医薬組成物の製造方法もまた提供される。これは、マンゴスチン果皮６０〜８０重量部、タイム１０〜２０重量部、および、枳殻１０〜２０重量部、を混合する工程と、エタノールで抽出する工程と、その抽出溶液を精製する工程と、を有する。
【００２３】
本発明のいくつかの実施形態によれば、本発明の製造方法において、前記エタノール抽出は、１〜２．５時間の加熱還流抽出に、８〜１２倍（重量比）の量の７６〜９５％のエタノール水溶液を用いて実施される。
【００２４】
本発明のいくつかの実施形態によれば、本発明の製造方法に記載の前記精製の方法は、以下の工程を有する、
【００２５】
ａ．抽出溶液をろ過後に濃縮する。濃縮抽出物をエタノール水溶液に溶解し、一晩冷蔵保管する。
【００２６】
ｂ．濾過を行う。濾液はマクロ孔質吸着樹脂によって吸着され、溶出溶液によって溶出される。
【００２７】
本発明のいくつかの実施形態によれば、前記工程ａにおいて、前記濃縮は、好ましくは、比重が１．０５〜１．１になるまで行われる。
【００２８】
さらに、本発明のいくつかの実施形態によれば、前記エタノール水溶液中のエタノールの体積比は７０〜８０％である。
【００２９】
本発明のいくつかの実施形態によれば、前記工程ａにおいて使用される前記エタノール水溶液の量は、前記濃縮溶液の量の重量に対して４〜６倍である。
【００３０】
本発明のいくつかの実施形態によれば、前記工程ａにおいて前記濃縮溶液を前記エタノール水溶液に溶解する温度は５０〜８０℃であり、その溶解時間は０．５〜２時間である。
【００３１】
本発明のいくつかの実施形態によれば、前記工程ａにおける一晩の冷蔵保管は、０〜４℃で１２〜１８時間、静置することによって行われる。
【００３２】
本発明のいくつかの実施形態によれば、本発明の製造方法において、前記工程ｂの前記溶出は、水、２０〜４０％エタノール水溶液、６０〜８０％エタノール水溶液、によって順次行われ、６０〜８０％エタノール水溶液による溶出液が回収される。
【００３３】
ここで、使用される水の量は１〜２ＢＶであり、使用される２０〜４０％エタノール水溶液の量は１〜２ＢＶであり、使用される６０〜８０％エタノール水溶液の量は２〜４ＢＶである。
【００３４】
本発明のいくつかの実施形態によれば、工程ｂにおける前記溶出は、水、４０％エタノール水溶液、８０％エタノール水溶液、によって順次行われ、８０％エタノール水溶液による溶出液が回収される。
【００３５】
本発明のいくつかの実施形態によれば、本発明の前記製造方法において、前記工程ｂにおける６０〜８０％エタノール水溶液による溶出液は、濃縮され、乾燥される。いくつかの実施形態において、前記溶出液は比重が１．０５〜１．１になるまで濃縮され、その後、噴霧乾燥が行われる。
【００３６】
本発明のいくつかの実施形態によれば、前記工程ｂにおいて、ろ過後の前記溶液を濃縮する工程が含まれる。好ましくは、この濃縮工程は比重が１．０５〜１．１になるまで行われる。
【００３７】
当業者に理解されるように、本発明の前記製造方法は公知のいかなる方法によっても実施することが可能である。いくつかの具体的実施例において、本発明の前記製造方法に記載の前記濃縮は、好ましくは、減圧濃縮である。その具体的条件は、温度６０〜８０℃、真空度≧０．０８ＭＰａ、である。
【００３８】
本発明において、製造された漢方薬組成物もまた提供される。
【００３９】
本発明において、前記漢方薬組成物を含有する調剤薬もまた提供される。ここに記載される調剤薬は、医薬品または化粧品とすることができる。前記医薬品は、リニメント、軟膏、クリーム、ペースト、フィルム、コーティング、ゲル、エアロゾル、スプレー、パッチ、などの、当該分野において周知の外用調剤薬とすることができる。前記化粧品は、フェイシャルクリーム、エマルジョン、エッセンス、フェイシャルマスク、アイクリーム、基礎溶液、などの周知のタイプとすることができる。
【００４０】
患者の異なるニーズに応じて、当業者は、本発明の前記漢方薬組成物を、必要に応じて種々の一般的な賦形剤を添加することにより、さまざまな投与形態にすることができる。ここに記載の一般的調剤薬は、一般的な形成方法および処理によって製造することができる。
【００４１】
好ましくは、本発明における前記漢方薬組成物は、軟膏およびクリームである。それらは、使用が簡単で、患部に届きやすく、治療効果が優れる、という利点を有する。
【００４２】
前記薬用組成物およびその調剤薬の、投与量および処方計画は、患者の、年齢、体重、性別、健康状態、栄養状態、前記化合物の活性強度、疾患の持続期間、代謝率、疾患の重度、医師の判断、などを含む多くの要素に依存する。当業者は、上述した要素に応じて前記薬用組成物の投与量と処方計画とを容易に決めることができる。
【発明の効果】
【００４３】
本発明は、ニキビ除去のための医薬組成物とその製造方法を提供する。本発明の前記医薬組成物は、マンゴスチン果皮、タイム、および、枳殻、を原料として製造される。マウス皮膚炎モデルを用いた抗炎症作用テスト、および、アクネ菌静菌テスト、において、本発明の前記医薬組成物がアクネ菌の抑制と抗炎症作用において優れた効果を有することが示された。これらの三種類の薬用原料は抗炎症作用において相乗効果を奏する。それらは、迅速に作用し、非常に優れた効果を有する。
【００４４】
本発明の前記漢方薬組成物は、天然材料から成り、顔料、保存剤、および、その他の副機能的添加物を含まない。前記漢方薬組成物は、安全でマイルドであり、刺激や副作用が無く、長期にわたって使用可能であり、ニキビに長期に苦しめられている青少年および大人に対して広く適している。
【００４５】
本発明の前記漢方薬組成物の製造方法は、抽出工程と溶解工程とにおいてエタノール水溶液しか使用せず、有毒な有機溶剤を必要としない。また、前記製造方法の各工程において使用される溶剤は、リサイクルおよび再利用が可能であり、これによってコストを削減し、環境を保護する。
【００４６】
本発明の前記漢方薬組成物の前記製造方法に使用される器具は漢方薬製造における一般的な器具であり、還流抽出、ろ過、減圧濃縮、樹脂吸着と溶出、および、噴霧乾燥、のための器具を含む。前記処理工程は取扱いが簡便で、生産物と活性成分の収率が高く、したがって、この方法は工業生産に適している。
【発明を実施するための形態】
【実施例】
【００４７】
以下、本発明の実施形態における技術的解決手段について、実施例とともに明確かつ完全に記載する。ここに記載される実施例は、本発明の実施形態の全部ではなく、その一部にすぎないことは勿論である。本発明の実施形態に基づき、当業者によって創意無く得られるその他すべての実施形態も、本発明の範囲に含まれる。
【００４８】
本発明の更なる理解のために、以下の実施例とともに詳細説明を提供する。
【００４９】
（実施例１）本発明のニキビ除去のための医薬組成物
１．マンゴスチン果皮、タイム、および、枳殻、をそれぞれ粉砕し、６０メッシュの篩を通過させ、マンゴスチン果皮８０ｇ、タイム２０ｇ、および、枳殻２０ｇ、の比率で混合した。
２．前記原料の重量の１２倍の量の９５％エタノール水溶液を使用して、還流抽出を２．５時間行った。
３．上記抽出溶液を１００メッシュフィルタ布に通して濾過して残滓を除去し、減圧下（温度６０〜８０℃、真空度≧０．０８ＭＰａ、以下同様）で濃縮して、比重１．０８の濃縮溶液７２ｇを得た。
４．リサイクルしたエタノール水溶液を８０％の濃度に調節し、前記濃縮溶液に、エタノール水溶液：濃縮溶液＝６：１の体積比で添加し、攪拌し、８０℃で２時間溶解させ、４℃で１８時間一晩冷蔵した。
５．前記冷蔵溶液をろ過し、ろ過物を減圧下で濃縮し、比重１．０８の生成物４０ｇを得た。
６．前記濃縮溶液をポリアミド樹脂に吸着し、水、４０％エタノール水溶液、８０％エタノール水溶液、で順次溶出させた。ここで、使用した水の量は１ＢＶ、使用した４０％エタノール水溶液の量は１ＢＶ、使用した８０％エタノール水溶液の量は４ＢＶ、である。
７．８０％エタノール水溶液による溶出液を回収し、比重１．０６になるまで減圧下で濃縮し、その後、噴霧乾燥によって５．０４ｇのニキビ除去のための医薬組成物を得た。
【００５０】
（実施例２）本発明のニキビ除去のための医薬組成物
１．マンゴスチン果皮、タイム、および、枳殻、をそれぞれ粉砕し、６０メッシュの篩を通過させ、マンゴスチン果皮６０ｇ、タイム１０ｇ、および、枳殻１０ｇ、の比率で混合した。
２．前記原料の重量の８倍の量の６０％エタノール水溶液を使用して、還流抽出を１時間行った。
３．上記抽出溶液を１００メッシュフィルタ布に通して濾過して残滓を除去し、減圧下（温度６０〜８０℃、真空度≧０．０８ＭＰａ、以下同様）で濃縮して、比重１．０８の濃縮溶液１０６ｇを得た。
４．リサイクルしたエタノール水溶液を６０％の濃度に調節し、前記濃縮溶液に、エタノール水溶液：濃縮溶液＝４：１の体積比で添加し、攪拌し、５０℃で０．５時間溶解させ、０℃で１２時間一晩冷蔵した。
５．前記冷蔵溶液をろ過し、ろ過物を減圧下で濃縮し、比重１．０８の生成物７６ｇを得た。
６．前記濃縮溶液をポリアミド樹脂に吸着し、水、４０％エタノール水溶液、８０％エタノール水溶液、で順次溶出させた。ここで、使用した水の量は２ＢＶ、使用した４０％エタノール水溶液の量は２ＢＶ、使用した８０％エタノール水溶液の量は２ＢＶ、である。
７．８０％エタノール水溶液による溶出液を回収し、比重１．０６になるまで減圧下で濃縮し、その後、噴霧乾燥によって３．２ｇのニキビ除去のための医薬組成物を得た。
【００５１】
（実施例３）本発明のニキビ除去のための医薬組成物
１．マンゴスチン果皮、タイム、および、枳殻、をそれぞれ粉砕し、６０メッシュの篩を通過させ、マンゴスチン果皮８０ｇ、タイム１０ｇ、および、枳殻１０ｇ、の比率で混合した。
２．前記原料の重量の１０倍の量の７５％エタノール水溶液を使用して、還流抽出を２時間行った。
３．上記抽出溶液を１００メッシュフィルタ布に通して濾過して残滓を除去し、減圧下（温度６０〜８０℃、真空度≧０．０８ＭＰａ、以下同様）で濃縮して、比重１．０６の濃縮溶液１０６ｇを得た。
４．リサイクルしたエタノール水溶液を７０％の濃度に調節し、前記濃縮溶液に、エタノール水溶液：濃縮溶液＝５：１の体積比で添加し、攪拌し、６０℃で１．５時間溶解させ、２℃で１５時間一晩冷蔵した。
５．前記冷蔵溶液をろ過し、ろ過物を減圧下で濃縮し、比重１．０８の生成物７６ｇを得た。
６．前記濃縮溶液をポリアミド樹脂に吸着し、水、４０％エタノール水溶液、８０％エタノール水溶液、で順次溶出させた。ここで、使用した水の量は１ＢＶ、使用した４０％エタノール水溶液の量は２ＢＶ、使用した８０％エタノール水溶液の量は３ＢＶ、である。
７．８０％エタノール水溶液による溶出液を回収し、比重１．０６になるまで減圧下で濃縮し、その後、噴霧乾燥によって４．４ｇのニキビ除去のための医薬組成物を得た。
【００５２】
（比較例１）
１．マンゴスチン果皮１００ｇを粉砕し、６０メッシュの篩を通過させた。
２．前記原料の重量の１０倍の量の７５％エタノール水溶液を使用して、還流抽出を２時間行った。
３．上記抽出溶液を１００メッシュフィルタ布に通して濾過して残滓を除去し、減圧下（温度６０〜８０℃、真空度≧０．０８ＭＰａ、以下同様）で濃縮して、比重１．０６の濃縮溶液６２ｇを得た。
４．リサイクルしたエタノール水溶液を７０％の濃度に調節し、前記濃縮溶液に、エタノール水溶液：濃縮溶液＝５：１の体積比で添加し、攪拌し、６０℃で１．５時間溶解させ、２℃で１５時間一晩冷蔵した。
５．前記冷蔵溶液をろ過し、ろ過物を減圧下で濃縮し、比重１．０８の生成物５４ｇを得た。
６．前記濃縮溶液をポリアミド樹脂に吸着し、水、４０％エタノール水溶液、８０％エタノール水溶液、で順次溶出させた。ここで、使用した水の量は１ＢＶ、使用した４０％エタノール水溶液の量は２ＢＶ、使用した８０％エタノール水溶液の量は３ＢＶ、である。
７．８０％エタノール水溶液による溶出液を回収し、比重１．０８になるまで減圧下で濃縮し、その後、噴霧乾燥によって４．０ｇの漢方薬組成物を得た。
【００５３】
（比較例２）
１．タイム１００ｇを粉砕し、６０メッシュの篩を通過させた。
２．前記原料の重量の１０倍の量の７５％エタノール水溶液を使用して、還流抽出を２時間行った。
３．上記抽出溶液を１００メッシュフィルタ布に通して濾過して残滓を除去し、減圧下（温度６０〜８０℃、真空度≧０．０８ＭＰａ、以下同様）で濃縮して、比重１．０６の濃縮溶液５２ｇを得た。
４．リサイクルしたエタノール水溶液を７０％の濃度に調節し、前記濃縮溶液に、エタノール水溶液：濃縮溶液＝５：１の体積比で添加し、攪拌し、６０℃で１．５時間溶解させ、２℃で１５時間一晩冷蔵した。
５．前記冷蔵溶液をろ過し、ろ過物を減圧下で濃縮し、比重１．０８の生成物３８ｇを得た。
６．前記濃縮溶液をポリアミド樹脂に吸着し、水、４０％エタノール水溶液、８０％エタノール水溶液、で順次溶出させた。ここで、使用した水の量は１ＢＶ、使用した４０％エタノール水溶液の量は２ＢＶ、使用した８０％エタノール水溶液の量は３ＢＶ、である。
７．８０％エタノール水溶液による溶出液を回収し、比重１．０６になるまで減圧下で濃縮し、その後、噴霧乾燥によって１．２ｇの漢方薬組成物を得た。
【００５４】
（比較例３）
１．枳殻１００ｇを粉砕し、６０メッシュの篩を通過させた。
２．前記原料の重量の１０倍の量の７５％エタノール水溶液を使用して、還流抽出を２時間行った。
３．上記抽出溶液を１００メッシュフィルタ布に通して濾過して残滓を除去し、減圧下（温度６０〜８０℃、真空度≧０．０８ＭＰａ、以下同様）で濃縮して、比重１．０６の濃縮溶液７０ｇを得た。
４．リサイクルしたエタノール水溶液を７０％の濃度に調節し、前記濃縮溶液に、エタノール水溶液：濃縮溶液＝５：１の体積比で添加し、攪拌し、６０℃で１．５時間溶解させ、２℃で１５時間一晩冷蔵した。
５．前記冷蔵溶液をろ過し、ろ過物を減圧下で濃縮し、比重１．０８の生成物５８ｇを得た。
６．前記濃縮溶液をポリアミド樹脂に吸着し、水、４０％エタノール水溶液、８０％エタノール水溶液、で順次溶出させた。ここで、使用した水の量は１ＢＶ、使用した４０％エタノール水溶液の量は２ＢＶ、使用した８０％エタノール水溶液の量は３ＢＶ、である。
７．８０％エタノール水溶液による溶出液を回収し、比重１．０５になるまで減圧下で濃縮し、その後、噴霧乾燥によって１．８ｇの漢方薬組成物を得た。
【００５５】
（実験例１）静菌作用
１．原料
１．１  テスト菌株：アクネ菌（ＡＴＣＣ６９１９）
１．２  漢方薬組成物例：Ｄ１、Ｄ２、Ｄ３、Ｄ４、Ｄ５、および、Ｄ６、を、使用のために４℃で保存した。ここで、Ｄ１〜Ｄ６は、それぞれ、実施例１、２、および、３、比較例１、２、および、３、に、それぞれ対応する。
１．３  培養培地：アクネ菌培養培地（ｐＨ  ６．６〜７．０に調節された）。固体培養培地に寒天１５ｇ／Ｌを添加した。
【００５６】
２．方法
２．１  菌懸濁液の調製と接種
凍結沈殿菌懸濁液０．１ｍｌをアクネ菌培養培地５ｍｌに添加し、嫌気条件下３７℃で２日間培養し、実験用の菌懸濁液を得た。
２．２  サンプル溶液の調製
サンプルＤ１、Ｄ２、Ｄ３、Ｄ４、Ｄ５、および、Ｄ６、を、生理的食塩水中で０．１％のテスト濃度に希釈し、その後、勾配希釈した。第１のテストでは、濃度勾配は、それぞれ、１００％（元のサンプル溶液）、５０％、２５％、１２．５％、６．２５％、３．１２５％、１．５６％、０．７８％、とした。第２のテストでは、濃度勾配は、それぞれ、１０％、８％、６％、４％、および、２％、とした。
２．３  菌懸濁液の調製
前記菌懸濁液を、アクネ菌培養培地中で最終濃度１０６ＣＦＵ／ｍｌまで希釈した。
２．４  培養と結果判定
菌懸濁液１００μＬとサンプル溶液１００μＬとをウェルに添加した。バクテリアを添加しない陰性対照と、テスト溶液を添加しない正常成長対照と、を、同時にセットした。各サンプルについて三重に試験を行い、その平均を結果とした。３７℃で４８時間の嫌気インキュベーション後、結果を観察した。濁度の存在を裸眼で観察し、直接読み取った。結果判定の前提条件は以下のとおりであった。すなわち、正常成長対照においてバクテリアが良好に成長し、陰性対照においてバクテリアが存在しないことである。他のウェルにおけるバクテリアの成長は、薬剤の濃度勾配に従って抑制された。
【００５７】
第１のテストの結果を表１に示す。
【表１】
0006400851.tif 000002
注：「＋」は菌の成長が見られたことを意味し、「−」は菌の成長が見られなかったことを意味する。
【００５８】
第２のテストの結果を表２に示す。
【表２】
0006400851.tif 000003
注：「＋」は菌の成長が見られたことを意味し、「−」は菌の成長が見られなかったことを意味する。
【００５９】
２．５  結果
表１の結果から、濃度０．１％の三つの実施例からの溶液はすべて、１２．５％またはそれ以上の濃度に希釈された時に、アクネ菌に対する良好な成長抑制作用を有することがわかった。しかし、比較例においては、希釈濃度が、Ｄ４の場合には２５％以上、Ｄ５およびＤ６の場合には５０％以上、である時に望ましい作用を達成することができる。表２の結果から、検証後、静菌作用が、Ｄ１およびＤ３では８％の濃度で、Ｄ２では１０％の濃度で、達成可能であることがわかった。
【００６０】
上記結果から、本発明の漢方薬組成物は約０．０１％の最小添加量によって、アクネ菌に対する抑制作用を基本的に達成することが可能であることがわかる。また、本発明の漢方薬組成物は、薬剤原料のみを使用する場合よりもより強力な静菌作用を有する。
【００６１】
（実験例２）マウス皮膚炎モデルに対する抗炎症効能テスト
１．実験材料と方法
１．１  実験動物：Ｂａｌｂ／ｃマウス（メス、８週齢、体重２０〜２５ｇ）をＳｈａｎｇｈａｉ  Ｓｌａｃ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃｏ．  Ｌｔｄ．  （ライセンスＮｏ．ＳＣＸＫ（Ｈｕ）２００７−９００５）から購入した。
１．２  主実験試薬：２，４−ジニトロクロロベンゼン（ＤＮＣＢ，分析的純粋）をＳｈａｎｇｈａｉ  Ｓｈｕｎｑｉａｎｇ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｃｏ．，  Ｌｔｄから購入し、アセトン（分析的純粋）をＳｉｎｏｐｈａｒｍ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｃｏ．，  Ｌｔｄ．より購入した。
【００６２】
２．ＤＮＣＢによって誘発された慢性湿疹性皮膚炎マウスモデルと薬剤療法
実験の第１日目（ｄ０）に、すべてのマウスの約２ｃｍ×２ｃｍの背中の領域を剃毛した。ＤＮＣＢの７％アセトン溶液１００μＬをピペットで採り、マウスの背中の剃毛領域に塗付して過敏症を誘発させた。第５日目から、０．１％ＤＮＣＢ溶液２０μＬを、三日毎、全部で５回、前記マウスの右耳の内側に塗付して慢性湿疹性皮膚炎を喚起し誘発させた。Ｄ１〜Ｄ６の抗皮膚炎作用を評価するために、第１回目の喚起の後、種々の濃度のＤ１〜Ｄ６の希釈溶液または溶媒を、一日２回、前記マウスの右耳と背中の感作領域とに塗付した。前記皮膚炎モデルグループおよび薬剤治療グループのマウスの、背中の感作領域の皮膚病変を、毎回の喚起の４８時間後に観察した。最後の喚起の後、すべてのマウスを屠殺した。左右の耳介片（直径約８ｍｍ）をパンチャーによって除去し、それらの質量を分析天秤上で測定した。耳の腫れ度を反映する二つの耳介片間の質量差を計算した。
【００６３】
３．実験結果
３．１  Ｄ１〜Ｄ６の抗皮膚炎効果の一次評価結果
マウスをランダムに５つのグループに分けた。各グループはそれぞれ、各成分の評価実験に使用される４匹のマウスを含む。これらの５つのグループは、それぞれ、正常対照グループ、溶剤対照グループ、５％、１０％、および、１５％、Ｄ１〜Ｄ６希釈溶液治療グループ、とした。前記正常対照グループにおいては、背中と右耳の剃毛領域とにアセトンのみを塗付した。前記溶剤対照グループにおいては、背中および右耳の剃毛領域にＤＮＣＢアセトン溶液を塗付して皮膚炎を誘発させた。第１回目の喚起の後、テスト成分溶液（Ｄ１〜Ｄ６の０．１％水溶液）を塗付した。前記５％、１０％、および、１５％、の、Ｄ１〜Ｄ６希釈溶液治療グループにおいては、皮膚炎を誘発するために、背中と右耳の剃毛領域にＤＮＣＢのアセトン溶液を塗付し、その後、第１回目喚起の後、テスト成分の塗付を行った。ここで、その濃度は、それぞれ、５％、１０％、１５％、とした。すべての実験グループのマウスの、背中の感作領域の皮膚病変を、毎回の喚起の４８時間後に観察し、写真を撮影した。Ｄ５とＤ６は、濃度５〜１５％のいずれの溶液の投与においても基本的に皮膚炎緩和の薬用効果を示さなかったのに対して、Ｄ１〜Ｄ４は、濃度１５％の溶液の投与において皮膚炎軽減の薬用効果を示した。その結果を表３に示す。
【００６４】
マウス耳腫れモデルに対するＤ１〜Ｄ６希釈溶液のデータを表３に示す。
【表３】
0006400851.tif 000004
【００６５】
表３から、Ｄ１〜Ｄ４の０．１％溶液はすべて様々な濃度において炎症軽減作用を有するが、その作用は、５％濃度では顕著ではなく、１０％では僅かに改善され、１５％では際立っていることが判る。縦の比較において、Ｄ１、Ｄ２、および、Ｄ３、は、全体として類似の作用を有し、Ｄ４よりも僅かに良好である。Ｄ５とＤ６は背中の炎症について際立った軽減効果を示さなかったため、比較を行わなかった。
【００６６】
前記静菌テストの結果から、Ｄ３の最小濃度は８％もの低さでありうるのに対して、Ｄ４の最小濃度は１２．５％以上であることが判る。マウス炎症モデルの耳腫れデータから、Ｄ３およびＤ４溶液は、濃度５％で炎症軽減に対して類似の作用を有するのに対して、濃度１０％および１５％では、Ｄ３のデータは、Ｄ４のそれよりも遥かに小さく、その差は２０％以上であり、同じ濃度においてはＤ３がＤ４よりも遥かに良好な抗炎症作用を有することがわかる。これらの結果より、マンゴスチン果皮、タイム、および、枳殻、が静菌および炎症軽減に対して相乗作用を有することが示された。
【００６７】
（実験例３）臨床実験
実施例１のニキビ除去のための医薬組成物を、汎用基礎クリームに０．１％の濃度で添加し、被験者の病変に塗付した。０．５〜１時間後に、赤みと腫れが軽減された。４〜６時間後に腫れや刺すような痛みなどは無く、２４時間以内にすべての傷はかさぶたとなった。長期間の塗付によって、長期にわたってニキビを患っていた被験者について、彼らの顔の上のニキビの密度が大幅に減少するとともに、ニキビ発症時の炎症が正常集団よりも軽減される効果を確認した。実施例２および３のニキビ除去のための医薬組成物は、臨床において実施例１と類似の作用を有する。