(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
構造が式（I）で示される化合物、またはその薬学的に許容される塩、立体異性体、あるいは溶媒和物。
【化１】
0006267806.tif 000099
（式中において、Aは、
【化２】
0006267806.tif 000100
から選ばれる任意の一つである。
ここで、Z2はCR5またはNで、R5は水素である。
R4は水素、C1-10アルキル基またはC3-10シクロアルキル基である。  R42、R43はそれぞれ独立に水素またはC1-10アルキル基である。
R41は水素、フッ素、または塩素である。
R0は水素である。
Z1はCR6で、ここで、R6は水素、フッ素、塩素、トリフルオロメチル基、またはメトキシ基である。
R1は、
【化３】
0006267806.tif 000101
からなる群から選ばれる任意の一つである。
R2およびR3は水素である。
R12はメトキシ基である。）
【請求項２】
Aが、
【化４】
0006267806.tif 000102
（ただし、R4、R42、R43の定義は、請求項1における記載と同様である。）
から選ばれる任意の一つである、請求項1に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩、立体異性体、あるいは溶媒和物。
【請求項３】
前記式（I）化合物が、
【化５】
0006267806.tif 000103
【化６】
0006267806.tif 000104
【化７】
0006267806.tif 000105
からなる群から選ばれる化合物である、請求項1に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩、立体異性体、あるいは溶媒和物。
【請求項４】
請求項1〜３のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩、立体異性体、あるいは溶媒和物と、薬学的に許容される担体とを含むことを特徴とする、医薬組成物。
【請求項５】
EGFRチロシンキナーゼを調節する医薬またはEGFR関連疾患を治療する医薬の製造における、請求項1〜３のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩、立体異性体、あるいは溶媒和物の使用。
【請求項６】
前記のEGFR関連疾患が、癌、糖尿病、免疫系疾患、神経変性疾患または心血管疾患、EGFR調節剤で治療する期間中に獲得性薬剤耐性を有する疾患である、請求項５に記載の使用。
【請求項７】
前記獲得性薬剤耐性の疾患が、EGFRのエクソン20のコードのT790突然変異によるものであるか、あるいはEGFRのエクソン20のコードのT790突然変異によるものを含む、請求項６に記載の使用。
【請求項８】
請求項1〜３のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩、立体異性体、あるいは溶媒和物と、ゲフィチニブ、エルロチニブ、イコチニブ、ラパチニブ、XL647、NVP-AEE-788、ARRY-334543、EKB-569、BIBW2992、HKI272、BMS-690514、CI-1033、バンデタニブ、PF00299804、WZ4002、セツキシマブ、トラスツズマブ、パニツムマブ、マツズマブ、ニモツズマブ、ザルツムマブ、ペルツズマブ、MDX-214、CDX-110、IMC-11F8、Zemab、Her2ワクチンPX 1041、HSP90阻害剤、CNF2024、タネスピマイシン、アルベスピマイシン、IPI-504、SNX-5422、NVP-AUY922、またはこれらの組み合わせからなる群から選ばれる一種または複数種のほかの薬物とを含む、薬用組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、医薬の技術分野に関し、特に、2,4-二置換ベンゼン-1,5-ジアミン誘導体およびそのEGFRチロシンキナーゼ阻害剤としての使用、ならびにそれから製造される医薬組成物および薬用組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
肺癌は、全世界で最も発症率の高い癌で、中国で肺癌の発症率はすべての癌において1位で、中国で発症率と死亡率が最も高い癌で、中国の肺癌患者のうち、30％の患者がEGFR突然変異を持ち、中でも、L858Rとエクソン19欠失変異は90％以上を占め、このような患者はEGFR阻害剤に対してより敏感である。現在市販されている第一世代のEGFR阻害剤、たとえば、エルロチニブ、ゲフィチニブは、このような患者に効果が良好で、そのうちの60％以上の患者の腫瘍を縮小させ、患者の無増悪生存期間を顕著に延長させることができる。しかし、ほとんどの患者は、6〜12か月で薬剤耐性になり、第一世代のEGFR阻害剤が効かなくなり、このような患者はいま使用できる薬がない状態にある。臨床で第一世代のEGFR阻害剤に対して薬剤耐性になった患者のうち、50％がEGFR T790M突然変異が検出されることが見出された。T790M変異細胞系H1975において、第一世代のEGFR阻害剤のゲフィチニブとエルロチニブは、いずれも3 μMで、基本的に活性がない。
【０００３】
現在開発して市販された第二世代の不可逆的pan-EGFR阻害剤（アファチニブ、Afatinib （BIBW2992））は、EGFR変異の肺癌患者に対する効果が第一世代のEGFR阻害剤よりも顕著に優れている。しかし、第二世代の阻害剤は、同時に強い野生型EGFR阻害活性も有し、野生型EGFRに対する阻害活性は薬剤耐性T790M変異のよりも顕著に高く、患者の皮疹などの毒性・副作用がひどく、かつ薬剤耐性の患者に対する治療効果が比較的に劣り、一部だけの第一世代のEGFR阻害剤に対する薬剤耐性の患者しかこのような薬物に反応しない。
薬剤耐性T790M変異に対する阻害活性を向上させると同時に、野生型EGFRに対する阻害活性を低下させるために、より活性が高く、選択性が良く、毒性が低い第三世代のEGFR変異体の選択性阻害剤の開発は、重要な意義がある。
【発明の概要】
【０００４】
本発明の目的は、2,4-二置換ベンゼン-1,5-ジアミン誘導体、またはその薬学的に許容される塩、立体異性体、溶媒和物あるいはそのプロドラッグ、ならびに上記誘導体を含む医薬組成物を提供することである。
本発明の二つ目の目的は、EGFRチロシンキナーゼの活性を調節する医薬またはEGFR関連疾患を治療する医薬の製造における上記誘導体または組成物の使用を提供することである。
【０００５】
本発明の第一では、構造が式（I）で示される化合物、またはその薬学的に許容される塩、立体異性体、溶媒和物あるいはそのプロドラッグを提供する。
【化１】
0006267806.tif 000002
（式（I）において、Aは、
【化２】
0006267806.tif 000003
からなる群から選ばれる任意の一つである。
【０００６】
ここで、Z2はCR5またはNである。R5は水素、ハロゲン、トリフルオロメチル基またはC1-10アルコキシ基である。Z21はNまたはCHである。R4、R42、R43はそれぞれ独立に水素またはC1-10アルキル基、C3-10シクロアルキル基、C3-10ヘテロシクロアルキル基（たとえばピペリジル基）、またはハロゲン置換のC1-10アルキル基である。R41は水素、ハロゲン、トリフルオロメチル基、C1-10アルキル基またはC1-10アルコキシ基である。好ましくは、R4、R42、R43はそれぞれ独立に水素、メチル基またはエチル基で、R41は水素、塩素、フッ素、トリフルオロメチル基、メチル基またはメトキシ基である。R1'、R2'およびR5'はそれぞれ独立に水素、C1-10アルキル基である。好ましくは、R1'、R2'およびR5'はそれぞれ独立に水素、メチル基またはエチル基である。R3'、R4'はそれぞれ独立に水素、C1-10アルキル基であるか、あるいはR3'とR4'が連結して橋かけ環構造を形成する。好ましくは、R3'、R4'はそれぞれ独立に水素、メチル基またはエチル基であるか、あるいはR3'とR4'が連結して-CH2-になる。YはO、CH2、NRa'である。ここで、Ra'は水素、メチル基、t-ブトキシカルボニル基、アセチル基、メタンスルホニル基である。nは0または1である。
R0は水素、ハロゲン、C1-10アルキル基、-NRaRbまたは-CO-NRaRbで、ここで、Ra、Rbはそれぞれ独立にC1-10アルキル基である。
Z1はCR6またはNで、ここで、R6は水素、ハロゲン、トリフルオロメチル基、メトキシ基または-CO2C1-10アルキル基である。
【０００７】
R1は水素であるか、あるいは
【化３】
0006267806.tif 000004
からなる群から選ばれる任意の一つである。
【０００８】
R2およびR3はそれぞれ独立に水素または-CH2NR7R8である。ここで、（1） R7、R8はそれぞれ独立に水素またはメチル基であるか、あるいは（2） R7、R8が連結する窒素原子とともに5〜6員の窒素含有飽和複素環を形成する。
R12は水素、ハロゲン、C1-10アルキル基またはC1-10アルコキシ基で、好ましくはメトキシ基である。）
【０００９】
もう一つの好適な例において、式（I）において、Aは、
【化４】
0006267806.tif 000005
からなる群から選ばれる。
（ここで、n、R4、R41、R42、R43、R1'、R2'、R3'、R4'、R5'、Ra'は式（I）で定義される通りである。）
【００１０】
もう一つの好適な例において、式（I）において、R4は水素、メチル基、エチル基、イソプロピル基、シクロプロピル基、ジフルオロメチル基またはピペリジル基で、R41は水素、塩素、フッ素、トリフルオロメチル基、メチル基またはメトキシ基で、R42は水素、メチル基またはエチル基で、R43は水素、メチル基またはエチル基である。
もう一つの好適な例において、式（I）において、R2およびR3はそれぞれ独立に水素で、かつR12はメトキシ基である。
【００１１】
もう一つの好適な例において、式（I）において、Z1はCR6またはNで、ここで、R6は水素、フッ素、塩素、トリフルオロメチル基、メトキシ基または-CO2C1-10アルキル基である。
もう一つの好適な例において、式（I）において、Z1はCR6で、ここで、R6は水素、フッ素、塩素、トリフルオロメチル基、メトキシ基または-CO2CH3である。
もう一つの好適な例において、式（I）において、R0は水素である。
【００１２】
もう一つの好適な例において、式（I）において、Aは、
【化５】
0006267806.tif 000006
からなる群から選ばれる任意の一つで、ここで、
【化６】
0006267806.tif 000007
【００１３】
もう一つの好適な例において、式（I）において、R2およびR3はそれぞれ独立に水素である。
もう一つの好適な例において、式（I）において、R2およびR3はそれぞれ独立に水素または-CH2NR7R8で、かつR7、R8はそれぞれ独立に水素またはメチル基である。
もう一つの好適な例において、式（I）において、R2およびR3はそれぞれ独立に水素または-CH2NR7R8で、かつR7、R8が連結する窒素原子とともに5〜6員の窒素含有飽和複素環を形成する。
【００１４】
もう一つの好適な例において、式（I）において、R2およびR3はそれぞれ独立に水素または-CH2NR7R8で、かつR7、R8が隣接する窒素原子とともに5〜6員の窒素含有飽和複素環を形成し、前記5〜6員の窒素含有飽和複素環の構造は式（III）で表される通りである。
【化７】
0006267806.tif 000008
（式中において、XはO、S、NR9またはCR10R11である。ここで、R9、R10、R11はそれぞれ独立に水素、C1-10アルコキシ基または-CO-C1-10アルキル基である。）
【００１５】
もう一つの好適な例において、式（I）で表される化合物は式（IV-1）で表される構造の化合物である。
【化８】
0006267806.tif 000009
（式中において、A、R0、R1、R2、R3およびR6は式（I）で定義される通りである。）
【００１６】
もう一つの好適な例において、式（I）で表される化合物は式（IV-2）で表される構造の化合物である。
【化９】
0006267806.tif 000010
（式中において、A、R0、R1、R2およびR3は式（I）で定義される通りである。）
【００１７】
もう一つの好適な例において、式（I）で表される化合物は式（V-1）で表される構造の化合物である。
【化１０】
0006267806.tif 000011
（式中において、R1、R2、R3、R4、R41およびR6は式（I）で定義される通りである。）
【００１８】
もう一つの好適な例において、式（I）で表される化合物は式（V-2）で表される構造の化合物である。
【化１１】
0006267806.tif 000012
（式中において、R1、R2、R3、R4およびR41は式（I）で定義される通りである。）
【００１９】
もう一つの好適な例において、式（I）で表される化合物は式（VI-1）で表される構造の化合物である。
【化１２】
0006267806.tif 000013
（式中において、R1、R2、R3、R4、R41およびR6は式（I）で定義される通りである。）
【００２０】
もう一つの好適な例において、式（I）で表される化合物は式（VI-2）で表される構造の化合物である。
【化１３】
0006267806.tif 000014
（式中において、R1、R2、R3、R4およびR41は式（I）で定義される通りである。）
【００２１】
もう一つの好適な例において、式（I）で表される化合物は式（VII-1）で表される構造の化合物である。
【化１４】
0006267806.tif 000015
（式中において、R1、R2、R3およびR6は式（I）で定義される通りである。）
【００２２】
もう一つの好適な例において、式（I）で表される化合物は式（VII-2）で表される構造の化合物である。
【化１５】
0006267806.tif 000016
（式中において、R1、R2およびR3は式（I）で定義される通りである。）
【００２３】
もう一つの好適な例において、式（I）で表される化合物は式（VIII-1）で表される構造の化合物である。
【化１６】
0006267806.tif 000017
（式中において、R1'、R2'、R3'、R4'、R5'、R1、R2、R3、R6およびYは式（I）で定義される通りである。）
【００２４】
もう一つの好適な例において、式（I）で表される化合物は式（VIII-2）で表される構造の化合物である。
【化１７】
0006267806.tif 000018
（式中において、R1'、R2'、R3'、R4'、R5'、R1、R2、R3およびYは式（I）で定義される通りである。）
【００２５】
もう一つの好適な例において、式（I）で表される化合物は式（IX-1）で表される構造の化合物である。
【化１８】
0006267806.tif 000019
（式中において、R1'、R2'、R4'、R5'、R1、R2、R3およびR6は式（I）で定義される通りである。）
【００２６】
もう一つの好適な例において、式（I）で表される化合物は式（IX-2）で表される構造の化合物である。
【化１９】
0006267806.tif 000020
（式中において、R1'、R2'、R4'、R5'、R1、R2およびR3は式（I）で定義される通りである。）
【００２７】
もう一つの好適な例において、式（I）で表される化合物は式（X-1）で表される構造の化合物である。
【化２０】
0006267806.tif 000021
（式中において、R1'、R5'、R1、R2、R3およびR6は式（I）で定義される通りである。）
【００２８】
もう一つの好適な例において、式（I）で表される化合物は式（X-2）で表される構造の化合物である。
【化２１】
0006267806.tif 000022
（式中において、R1'、R5'、R1、R2およびR3は式（I）で定義される通りである。）
【００２９】
もう一つの好適な例において、式（I）で表される化合物は式（XI-1）で表される構造の化合物である。
【化２２】
0006267806.tif 000023
（式中において、R1、R2、R3、R4、R42、R43およびR6は式（I）で定義される通りである。）
【００３０】
もう一つの好適な例において、式（I）で表される化合物は式（XI-2）で表される構造の化合物である。
【化２３】
0006267806.tif 000024
（式中において、R1、R2、R3、R4、R42およびR43は式（I）で定義される通りである。）
【００３１】
もう一つの好適な例において、式（I）で表される化合物は式（XII-1）で表される構造の化合物である。
【化２４】
0006267806.tif 000025
（式中において、R1、R2、R3、R4、R41およびR6は式（I）で定義される通りである。）
【００３２】
もう一つの好適な例において、式（I）で表される化合物は式（XII-2）で表される構造の化合物である。
【化２５】
0006267806.tif 000026
（式中において、R1、R2、R3、R4およびR41は式（I）で定義される通りである。）
【００３３】
もう一つの好適な例において、式（XI-1）の化合物において、R6は水素、フッ素、塩素、トリフルオロメチル基である。
もう一つの好適な例において、式（XI-1）または式（XI-2）の化合物において、R2およびR3はそれぞれ独立に水素である。
もう一つの好適な例において、式（XI-1）または式（XI-2）の化合物において、R1は
【化２６】
0006267806.tif 000027
から選ばれる。
【００３４】
もう一つの好適な例において、式（XI-1）または式（XI-2）の化合物において、R4、R42、R43はそれぞれ独立に水素、C1-10アルキル基、ハロゲン置換のC1-10アルキル基またはピペリジル基である。
もう一つの好適な例において、式（XI-1）または式（XI-2）の化合物において、R4、R42、R43はそれぞれ独立に水素、メチル基、エチル基、ジフルオロメチル基またはピペリジル基である。
もう一つの好適な例において、式（XI-1）または式（XI-2）の化合物において、R4は水素、メチル基、ジフルオロメチル基またはピペリジル基で、R42、R43はそれぞれ独立に水素またはメチル基である。
【００３５】
もう一つの好適な例において、式（V-1）、式（V-2）、式（VI-1）、式（VI-2）、式（XII-1）または式（XII-2）の化合物において、R4は水素、C1-10アルキル基、C3-10シクロアルキル基またはハロゲン置換のC1-10アルキル基である。
もう一つの好適な例において、式（V-1）、式（V-2）、式（VI-1）、式（VI-2）、式（XII-1）または式（XII-2）の化合物において、R4は水素、メチル基、エチル基、イソプロピル基、シクロプロピル基またはジフルオロメチル基である。
【００３６】
もう一つの好適な例において、式（V-1）、式（V-2）、式（VI-1）、式（VI-2）、式（XII-1）または式（XII-2）の化合物において、R41は水素、塩素、フッ素、トリフルオロメチル基、メチル基またはメトキシ基である。
もう一つの好適な例において、式（V-1）、式（V-2）、式（VI-1）、式（VI-2）、式（XII-1）または式（XII-2）の化合物において、R2およびR3はそれぞれ独立に水素である。
もう一つの好適な例において、式（V-1）、式（VI-1）または式（XII-1）の化合物において、R6は水素、フッ素、塩素、トリフルオロメチル基、メトキシ基または-CO2CH3である。
【００３７】
もう一つの好適な例において、式（V-1）、式（V-2）、式（VI-1）、式（VI-2）、式（XII-1）または式（XII-2）の化合物において、R1は、
【化２７】
0006267806.tif 000028
から選ばれる。
【００３８】
もう一つの好適な例において、前記の化合物は、
【化２８】
0006267806.tif 000029
【００３９】
【化２９】
0006267806.tif 000030
【００４０】
【化３０】
0006267806.tif 000031
【００４１】
【化３１】
0006267806.tif 000032
からなる群から選ばれる。
【００４２】
本発明の第二では、本発明の第一に係る化合物、またはその薬学的に許容される塩、立体異性体、溶媒和物あるいはそのプロドラッグを含み、かつさらに薬学的に許容される担体を含む医薬組成物を提供する。
もう一つの好適な例において、前記医薬組成物は、治療有効量の本発明の第一に係る化合物、たとえば上記式（I）化合物、式（IV-1）化合物、式（IV-2）化合物、式（V-1）化合物、式（V-2）化合物、式（VI-1）化合物、式（VI-2）化合物、式（VII-1）化合物、式（VII-2）化合物、式（VIII-1）化合物、式（VIII-2）化合物、式（IX-1）化合物、式（IX-2）化合物、式（X-1）化合物、式（X-2）化合物、式（XI-1）化合物、または式（XI-2）化合物、または上記例示化合物、またはその薬学的に許容される塩、立体異性体、溶媒和物あるいはそのプロドラッグと、薬学的に許容される担体とを含む。
【００４３】
通常、本発明の化合物またはその薬学的に許容される塩は、一つまたは複数の薬用担体と適切な剤形にして施用してもよい。これらの剤形は、経口投与、直腸投与、局部投与、口内投与およびほかの非胃腸管施用（たとえば、皮下、筋肉、静脈など）に適する。たとえば、経口投与に適する剤形は、カプセル、錠剤、顆粒剤およびシロップなどを含む。これらの製剤に含まれる本発明の化合物は、固体粉末または顆粒、水性または非水性液体における溶液または懸濁液、油中水または水中油の乳剤などでもよい。上記剤形は、活性化合物と一つまたは複数の担体または補助剤とから通常の薬剤学的方法によって製造することができる。上記の担体は、活性化合物またはほかの補助剤と併用できるものでなければならない。固体製剤について、通常の無毒性担体は、マンニトール、乳糖、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、セルロース、ブドウ糖、ショ糖などを含むが、これらに限定されない。液体製剤に使用される担体は、水、生理食塩水、ブドウ糖水溶液、エチレングリコールやポリエチレングリコールなどを含む。活性化合物は、上記担体と溶液または懸濁液を形成してもよい。
本発明の組成物は、医学実践規範に合う様態で調製、定量および投与される。投与する化合物の「有効量」は、治療する具体的な疾患、治療する個体、疾患の原因、薬物の標的および投与様態などの要素によって決まる。
【００４４】
本発明の第三では、EGFRチロシンキナーゼの活性を調節する医薬またはEGFR関連疾患を治療する医薬の製造における本発明の第一に係る化合物、またはその薬学的に許容される塩、立体異性体、溶媒和物あるいはそのプロドラッグの使用を提供する。
好ましくは、前記EGFR関連疾患は、癌、糖尿病、免疫系疾患、神経変性疾患または心血管疾患である。
好ましくは、前記癌は、非小細胞肺癌、頭頚部癌、乳癌、腎臓癌、膵臓腺癌、子宮頚癌、食道癌、膵臓腺癌、前立腺癌、膀胱癌、結腸直腸癌、卵巣癌、胃癌、膠細胞腫などを含む脳悪性腫瘍、またはこれらの任意の組み合わせである。
【００４５】
好ましくは、前記非小細胞肺癌は、EGFR突然変異によるもので、敏感型突然変異（たとえばL858R突然変異またはエクソン19欠失）および薬剤耐性突然変異（たとえばEGFR T790M突然変異）を含む。
好ましくは、前記の化合物、またはその薬学的に許容される塩、立体異性体、溶媒和物あるいはそのプロドラッグは、EGFR異常発現の疾患またはEGFR調節剤で治療する期間中に獲得性薬剤耐性を有する疾患を治療する医薬の製造における使用にも有用である。
好ましくは、前記獲得性薬剤耐性は、EGFRのエクソン20のコードのT790突然変異、たとえばT790Mによるものであるか、あるいはEGFRのエクソン20のコードのT790突然変異、たとえばT790Mによるものを含む。
【００４６】
本発明において、EGFR調節剤とは、EGFRを標的とする小分子チロシンキナーゼ阻害剤、たとえばゲフィチニブ、エルロチニブ、イコチニブ、ラパチニブまたはアファチニブである。
本発明の第四では、治療有効量の本発明の第一に係る化合物、またはその薬学的に許容される塩、立体異性体、溶媒和物あるいはそのプロドラッグと、ゲフィチニブ、エルロチニブ、イコチニブ、ラパチニブ、XL647、NVP-AEE-788、ARRY-334543、EKB-569、BIBW2992、HKI272、BMS-690514、CI-1033、バンデタニブ、PF00299804、WZ4002、セツキシマブ、トラスツズマブ、パニツムマブ、マツズマブ、ニモツズマブ、ザルツムマブ、ペルツズマブ、MDX-214、CDX-110、IMC-11F8、Zemab、Her2ワクチンPX 1041、HSP90阻害剤、CNF2024、タネスピマイシン、アルベスピマイシン、IPI-504、SNX-5422 、NVP-AUY922、またはこれらの組み合わせからなる群から選ばれる一種または複数種のほかの薬物とを含む医薬組成物を提供する。本発明の化合物、またはその薬学的に許容される塩、立体異性体、溶媒和物あるいはそのプロドラッグ以外、上記薬用組成物におけるほかの薬物はいずれも当業者に熟知されている抗腫瘍薬である。
【００４７】
ここで用いられるように、「治療有効量」とは、ヒトおよび/または動物に機能や活性があり、かつヒトおよび/または動物にとって受けられる量である。
本発明の医薬組成物あるいは前記医薬組成物に含まれる本発明の化合物、またはその薬学的に許容される塩、立体異性体、溶媒和物あるいはそのプロドラッグの治療有効量は0.1mg〜5g/kg（体重）であることが好ましい。
【００４８】
本発明の薬用組成物は、EGFR関連疾患、たとえば癌、糖尿病、免疫系疾患、神経変性疾患または心血管疾患、あるいはEGFR調節剤で治療する期間中に獲得性薬剤耐性を有する疾患の治療に有用である。
前記獲得性薬剤耐性の疾患は、EGFRのエクソン20のコードのT790突然変異によるものであるか、あるいはEGFRのエクソン20のコードのT790突然変異によるものを含む。
もう一つの好適な例において、前記のEGFRのエクソン20のコードのT790は、T790Mである。
【００４９】
本発明に係る化合物は、一部の疾患でほかの薬物と併用することによって、所期の治療効果を実現することができる。一つの併用の例は、末期NSCLCの治療への使用である。たとえば、治療有効量の本発明の式Iで表される化合物を、mTOR阻害剤（たとえばラパマイシン）と、あるいはMet阻害剤（Met抗体MetMAbおよびMet小分子阻害剤PF02341066を含む）と、あるいはIGF1R阻害剤（たとえばOSI-906）と、あるいは熱ショックタンパク質阻害剤と併用する。
もちろん、本発明の範囲内において、本発明の上記の各技術特徴および下記（例えば実施例）の具体的に記述された各技術特徴は互いに組合せ、新しい、または好適な技術的解決手段を構成できることが理解される。
【００５０】
具体的な実施形態
発明者は、長時間で深い研究を経て、1種類のEGFR突然変異選択性阻害剤を意外に見出し、体外の実験において、ナノモルの濃度でEGFR T790M/L858R二重突然変異酵素および細胞株H1975の増殖を抑制することができると同時に、EGFR敏感性突然変異株HCC827（エクソン19欠失）にも高い抑制強度を有するが、野生型EGFR酵素および細胞株A431に対する抑制は比較的に弱いことが示された。そのため、このような構造は、EGFR敏感型突然変異の癌の治療だけでなく、現在EGFR-TKI治療で続発性の薬剤耐性が生じる症例にも適する。同時に、その突然変異の選択性は野生型EGFRに対する抑制による毒性・副作用を大幅に減らし、また、このような化合物は比較的に低い細胞毒性を有するため、非特異的な毒性・副作用を大幅に低下させ、第二世代のEGFR-TKIの理想的な代替物である。
【００５１】
用語の定義
ここで用いられるように、「C1-10アルキル基」とは、炭素原子を1〜10個有する直鎖または分岐鎖の飽和脂肪族炭化水素基である。例えばメチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、sec-ブチル基、t-ブチル基、ペンチル基、ヘキシル基、ヘプチル基、オクチル基、ノニル基、デシル基などが挙げられる。
ここで用いられるように、「C1-10アルコキシ基」とは、C1-10アルキル基-O-を指す。例えばメトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基、イソプロポキシ基、ブトキシ基、イソブトキシ基、sec-ブトキシ基、tert-ブトキシ基などが挙げられる。
ここで用いられるように、「ハロゲン」とは、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素を指す。
【００５２】
ここで用いられるように、「C3-10シクロアルキル基」とは、炭素原子を3〜10個有する飽和または部分飽和の単環または複数環の環状炭化水素置換基、好ましくは炭素原子を3〜8個有するもの（C3-8シクロアルキル基）、最も好ましくは炭素原子を3〜6個有するもの（C3-6シクロアルキル基）である。単環のシクロアルキル基の非制限的な実施例は、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロペンテニル基、シクロヘキシル基、シクロヘキセニル基、シクロヘキサジエニル、シクロヘプチル基、シクロヘプタトリエニル、シクロオクチル基などを含むが、シクロプロピル基、シクロペンチル基、シクロヘキセニル基が好ましい。多環のシクロアルキル基は、スピロ環、縮合環および架橋環のシクロアルキル基を含む。
【００５３】
ここで用いられるように、「C3-10ヘテロシクロアルキル基」とは、飽和または部分飽和の単環または複数環の環状炭化水素置換基で、環原子を3〜10個有し、そのうちの1個または複数の環原子が窒素、酸素またはS(O)t（ここで、tは整数の0〜2である）から選ばれるヘテロ原子であるが、-O-O-、-O-S-または-S-S-の環部分を含まず、残りの環原子が炭素である。好ましくは環原子を3〜8個有し、そのうちの1〜3個がヘテロ原子で、より好ましくはヘテロシクロアルキル基は環原子を3〜6個有し、さらに好ましくはヘテロシクロアルキル基は環原子を5〜6個有する。単環の複素環基の非制限的な実施例は、ピロリジル基、ピペリジル基、ピペラジル基、モルホリル基、チオモルホリル基、ホモピペラジル基、ピラニル基、テトラヒドロフリルなどを含む。多環の複素環基は、スピロ環、縮合環および架橋環の複素環基を含む。
【００５４】
ここで用いられるように、「ハロゲン置換のC1-10アルキル基」とは、アルキル基が1、2、3、4または5個のハロゲンで置換されたもので、ここで、アルキル基の定義は前記の通りである。好ましくはハロゲン置換のC1-10アルキル基、より好ましくはハロゲン置換のC1-6アルキル基、最もハロゲン置換のC1-3アルキル基である。モノクロロエチル基、ジクロロメチル基、1,2-ジクロロエチル基、モノブロモエチル基、モノフルオロエチル基、モノフルオロメチル基、ジフルオロメチル基、トリフルオロメチル基などを含むが、これらに限定されない。
【００５５】
活性成分
用語の「本発明の活性物質」または「本発明の活性化合物」とは、本発明の式（I）化合物、またはその薬学的に許容される塩、またはその溶媒和物、またはその立体異性体、あるいはそのプロドラッグで、顕著な薬剤耐性EGFR T790M突然変異（特にEGFR T790M/L858R二重突然変異）の抑制活性を有する。
【００５６】
ここで用いられるように、前記「薬学的に許容される塩」は、薬学的に許容される酸付加塩および薬学的に許容される塩基付加塩を含む。「薬学的に許容される酸付加塩」とは、遊離塩基の生物的有効性を残したまま、ほかの副作用がなく、無機酸または有機酸と形成された塩である。無機酸塩は、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、リン酸塩などを含むが、これらに限定されない。有機酸塩は、ギ酸塩、酢酸塩、プロピオン酸塩、グリコール酸塩、グルコン酸塩、乳酸塩、シュウ酸、マレイン酸、コハク酸塩、フマル酸、酒石酸塩、クエン酸塩、グルタミン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、メタンスルホン酸塩、p-トルエンスルホン酸塩やサリチル酸塩などを含むが、これらに限定されない。これらの塩は、本分野で既知の方法で製造することができる。「薬学的に許容される塩基付加塩」とは、無機塩基の塩、たとえばナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩やマグネシウム塩などを含むが、これらに限定されない。有機塩基の塩、たとえばアンモニウム塩、トリエチルアミン塩、リシン塩、アルギニン塩などを含むが、これらに限定されない。これらの塩は、本分野で既知の方法で製造することができる。
【００５７】
ここで用いられるように、式（I）化合物は1種または複数種の結晶形が存在しうるが、本発明の活性化合物は、様々な結晶形およびその混合物を含む。
本発明における「溶媒和物」とは本発明の化合物と溶媒が形成した錯体である。これらは、溶媒で反応させること、または溶媒から沈殿・析出させることまたは結晶させることによってできる。たとえば、一つの水と形成した錯体は「水和物」と呼ばれる。式（I）化合物の「溶媒和物」は本発明の範囲内に含まれる。
【００５８】
本発明の式（I）で表される化合物は、一つまたは複数のキラル中心を含み、異なる光学的活性の形態で存在してもよい。化合物が一つのキラル中心を含む場合、化合物はエナンチオマーを含む。本発明は、この2種類の異性体および異性体の混合物、たとえばラセミ混合物を含む。エナンチオマーは、本分野で既知の方法、たとえば結晶やキラルクロマトグラフィーなどの方法によって分割することができる。化合物が複数のキラル中心を含む場合、ジアステレオマーが存在しうる。本発明は、分割された光学的に単一の特定の異性体およびジアステレオマーの混合物を含む。ジアステレオマーは、本分野で既知の方法、たとえば結晶やクロマトグラフィーなどによって分割することができる。
【００５９】
本発明は、上記化合物のプロドラッグを含む。プロドラッグは、既知のアミノ保護基およびカルボキシ保護基が生理的条件において加水分解されてまたは酵素反応によって母体化合物を放出することを含む。具体的なプロドラッグの製造方法は、(Saulnier，M.G.；Frennesson，D.B.；Deshpande，M.S.；Hansel，S.B and Vysa，D.M.Bioorg.Med.Chem Lett.1994，4，1985-1990；およびGreenwald，R.B.；Choe，Y.H.；Conover，C.D.；Shum，K.；Wu，D.；Royzen，M.J.Med.Chem.2000，43，475.)を参照する。
【００６０】
製造方法
本発明は、式（I）化合物の製造方法を提供するが、本発明における化合物は、複数の合成操作を組み合わせて容易に製造することができ、これらの操作は当業者に熟知のものである。これらの化合物の例示的な製造方法は、後述のような流れを含むが、これらに限定されない。
好ましくは、本発明の式（I）化合物は、以下のスキームおよび実施例に記載の例示的な方法ならびに当業者に使用される関連する公開文献の操作によって完成することができる。
具体的な操作過程において、必要によって方法における工程を拡張または合併することができる。
【００６１】
【化３２】
0006267806.tif 000033
【００６２】
工程1：ピリミジンの4位の塩素をホウ酸エステルまたはホウ酸、あるいは適切なアミンと反応させ、所定の温度において、適切な触媒および適切な溶媒で行う必要がある。鈴木法を使用し、使用されるパラジウム触媒はPdCl2(dppf)でもよいが、これに限定されず、使用される塩基は炭酸ナトリウムでもよいが、これに限定されない。
工程2：ピリミジンの2位の塩素をアミンで置換させ、所定の温度において、適切な触媒および適切な溶媒で行う必要がある。酸触媒を使用し、触媒はTFAまたはp-トルエンスルホン酸でもよいが、これらに限定されない。Buchwald-Hartwigアミン化法を使用し、使用されるパラジウム触媒はPd2(dba)3でもよいが、これに限定されず、使用される配位子はキサントホス（4,5-ビス(ジフェニルホスフィノ)-9,9-ジメチルキサンテン）でもよいが、これに限定されず、使用される塩基は炭酸セシウムでもよいが、これに限定されない。
【００６３】
工程3：フェニル基の4位のフッ素をアミンで置換させ、所定の温度において、適切な塩基および適切な溶媒で行う必要がある。使用される塩基は炭酸カリウムでもよいが、これに限定されない。
工程4：当該ニトロ化合物の相応のアミノ化合物への転化は、酸性条件において、金属（鉄粉、亜鉛粉でもよいが、これらに限定されない）または塩化第一スズで還元させこと、あるいはパラジウム炭素による触媒で水素化還元させることによって行うことができる。
工程5：当該アミノ化合物は、塩基性条件において相応の塩化アシルとアミドに縮合させてもよく、あるいは縮合剤の存在下で相応のカルボン酸とアミドに縮合させてもよい。
以上の各工程における反応は、いずれも当業者に既知の通常の反応である。
【００６４】
本発明で公開された式（I）化合物ならびに化合物の製造方法、医薬組成および治療方法は、当業者が本明細書の内容を参考に、適切にプロセスのパラメーターを変更して実現することができるものである。特別に指摘したいのは、すべての類似の置き換えおよび変更は当業者が容易に思いつくもので、いずれも本発明に含まれると見なすことである。本発明の製品、方法および使用はすでに好適な実施例で記述され、当業者は容易に本発明の内容、趣旨および範囲以内でここに記載の方法および使用を修正し、あるいは適切に変更や組み合わせをし、本発明の技術を実現・使用することができる。
【００６５】
既存技術と比べ、本発明の主な利点は以下の通りである。
（1）  本発明の化合物は、EGFR T790M突然変異型（特にEGFR T790M/L858R二重突然変異型）の酵素および細胞に対して高い抑制活性を有し、かつEGFR野生型（EGFR WT）の酵素および細胞に対して低い抑制活性を有するため、高い選択的抑制性を有する。
（2）  本発明の化合物は、EGFR二重突然変異型の酵素および細胞に対して高い選択的抑制性を示すと同時に、低い非特異的な細胞毒性を有する。
（3）  ほかの既知のEGFR突然変異阻害剤と比べ、本発明の化合物は、有利な物理的性質（たとえば、高い水溶性）、有利な毒性の特徴（たとえば低いhERG遮断傾向）、有利な代謝の特徴（たとえば、優れた薬物動態学の特徴、たとえば生物的利用能）を示す。
【００６６】
以下、当業者がより良く本発明の技術方案を理解できるように、具体的な実施例を合わせて本発明をさらに詳しく説明する。
試薬と機械
本発明において、化合物の構造および純度は、核磁気共鳴（1HNMR）および/またはLC/MSによって確認した。1HNMR：Bruker AVANCE-400核磁気共鳴装置で、内部標準はテトラメチルシラン（TMS）である。LC-MS：Agilent 1200 HPLC System/6140 MSのLC/MS装置（アジレントから購入）で、カラムはWatersX-Bridge, 150×4.6mm, 3.5μmである。高速液体クロマトグラフ（pre-HPLC）：Waters PHW007で、カラムはXBridge C18, 4.6×150mm, 3.5μmである。
ISCO Combiflash-Rf75またはRf200型のフラッシュクロマトシステム、Agela 4 g、12g、20g、40g、80g、120gの使い捨て型シリカゲルカラムを使用した。
【００６７】
薄層クロマトグラフィーのシリカゲル板は煙台黄海HSGF254または青島GF254のシリカゲル板を使用し、薄層クロマトグラフィー法（TLC）による反応の検出に使用されたシリカゲル板に用いられた規格は0.15mm - 0.2mmで、薄層クロマトグラフィー法による製品の分離・精製に使用されたシリカゲル板に用いられた規格は0.4mm - 0.5mmである。シリカゲルは、通常、煙台黄海シリカゲル200 - 300目のシリカゲルを担体とした。塩基性酸化アルミニウムは、通常、国薬のクロマトグラフィー用FCP200 - 300目の塩基性酸化アルミニウムを担体とした。
【００６８】
本発明の既知の出発原料は、本分野で既知の方法で合成されたものを使用してもよく、あるいはABCR GmbH&Co.KG、Acros Organics、Aldrich Chemical Company、韶遠化学科技（Accela ChemBio Inc）および達瑞化学品などの会社から購入したもよい。
実施例において、特に説明しない限り、反応はいずれも窒素またはアルゴンの雰囲気で行われる。実施例において、特に説明しない限り、溶液とは水溶液である。
【００６９】
ここで用いられるように、DMFはジメチルホルムアミドを、DMSOはジメチルスルホキシドを、THFはテトラヒドロフランを、DIEAはN,N-ジイソプロピルエチルアミンを、EAは酢酸エチルを、PEは石油エーテルを表す。BINAPは(2R,3S)-2,2'-ビス(ジフェニルホスフィノ)-1,1'-ビナフチルを、NBSはN-ブロモスクシンイミドを、NCSはN-クロロスクシンイミドを、Pd2(dba)3はトリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウムを、Pd(dppf)Cl2は[1,1'-ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン]パラジウムジクロリドを表す。
ここで用いられるように、室温とは約25℃である。
【００７０】
化合物1aの製造：
【化３３】
0006267806.tif 000034
工程a： 化合物1a1（10.6 g, 58 mmol）を500 mLの反応瓶に置き、THF/水（100 mL / 60 mL）混合溶液を入れて溶解させた。室温において、撹拌しながら順に塩化アンモニウム（15.5 g, 292 mmol）および還元鉄粉（26 g, 467 mmol）を入れた後、反応系を65℃に加熱して3h撹拌を続けた。TLCで反応の進展を検出し、反応が終了したら、余分の鉄粉をろ過で除去し、ケーキをEAで3回洗浄した。ろ液をEA/水系で3回抽出し、有機層を分離し、水、飽和食塩水で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥した後、減圧で濃縮させて化合物1a2（8.0 g）を得、直接次の工程の反応に使用した。収率：93％、純度：90％、MS m/z(ESI)：142.0 [M+H]+。
【００７１】
工程b： 化合物1a2（8.0 g, 43 mmol）を500 mL反応瓶に置き、等速で撹拌しながら濃硫酸（100 mL）を入れて基質を溶解させた。-20℃において、撹拌しながらゆっくり濃硝酸（6.15 mL, 48 mmol）を滴下し、かつ保温しながら5min撹拌した。TLCで反応の進展を検出し、反応が終了したら、氷水に注いだ。-20℃の氷浴を保ちながら、反応系にゆっくり水酸化ナトリウム/水溶液（150 mL / 300 mL）を入れ、pH値を8-9に調節した。その後、反応液をEA/水系で3回抽出し、有機層を分離し、水、飽和食塩水で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥した後、減圧で濃縮させて化合物1a（8.7g）を得、直接次の工程の反応に使用した。収率：80％、純度：100％、MS m/z(ESI)：187.0 [M+H]+、1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.34 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.04 (d, J = 13.4 Hz, 1H), 5.25 (brs, 2H), 3.90 (s, 3H)。
【００７２】
中間体2aの製造
【化３４】
0006267806.tif 000035
【００７３】
工程1：化合物1a（11.16g，60mmol）を150mLの塩化メチレンに溶解させ、二炭酸ジ-t-ブチル（15.60g，72mmol）、トリエチルアミン（12.24g，120mmol）および4-ジメチルアミノピリジン（0.74g，6mmol）を入れて室温で撹拌しながら18 h反応させた。TLCで反応の進展を検出し、反応が終了したら、減圧で反応液を濃縮させ、カラムクロマトグラフィー[PE:EA=80:20]で分離・精製して目的産物の化合物2a2（12.56 g、73％）を得た。MS m/z(ESI): 285 [M-H]＋。
工程2：化合物2a2（11.46g，40mmol）を60mLのN,N-ジメチルアセトアミドに溶解させ、N,N,N'-トリメチルエチレンジアミン（4.90 g，48 mmol）、N,N-ジイソプロピルエチルアミン（7.74 g，60mmol）を入れ、90℃に加熱して撹拌しながら6 h反応させた。TLCで反応の進展を検出し、反応が終了したら、反応液を室温に冷却し、氷水に注ぎ、酢酸エチルで抽出し、飽和食塩水で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥し、減圧で濃縮させて目的産物の化合物2a3（12.51 g、85％）を得た。そのまま次の工程に使用した。MS m/z(ESI): 369 [M+H]+。
【００７４】
工程3：化合物2a3（12 g，32.6 mmol）を200mLのメタノールに溶解させ、1.0gの10％ Pd/Cを入れた。水素ガスで空気を置換した後、室温で水素風船で水素を入れ、撹拌しながら1 h反応させた。TLCで反応の進展を検出し、反応が終了したら、砂芯漏斗で吸引ろ過し、少量のメタノールでケーキを洗浄し、ろ液を濃縮させて目的産物の化合物2a4（10.70 g、97％）を得た。そのまま次の工程に使用した。MS m/z(ESI): 339 [M+H]+。
工程4：化合物2a4（10.1g，30mmol）およびトリエチルアミン（6.12g，60mmol）を200mLの塩化メチレンに溶解させ、0℃に冷却し、アクリロイルクロリド（3.24g，36mmol）を入れ、窒素ガスの保護下で、室温で3 h撹拌した。TLCで反応の進展を検出し、反応が終了したら、飽和炭酸水素ナトリウム、飽和食塩水で順に洗浄し、無水Na2SO4で乾燥し、吸引ろ過し、減圧で濃縮させて目的産物の化合物2a5（9.64 g、82％）を得た。そのまま次の工程に使用した。MS m/z(ESI):393 [M+H]+。
【００７５】
工程5：化合物2a5（9.41g，24 mmol）を100mLの塩化メチレンに溶解させ、0℃に冷却し、20 mLのトリフルオロ酢酸を入れ、窒素ガスの保護下で、室温で18 h撹拌した。TLCで反応の進展を検出し、反応が終了したら、減圧で反応液を濃縮させた。残留物を300 mLの塩化メチレンで溶解させ、飽和炭酸水素ナトリウム、飽和食塩水で順に洗浄し、無水Na2SO4で乾燥し、吸引ろ過し、減圧で濃縮させて粗製品を得た。カラムクロマトグラフィー[DCM:MeOH=10:1]によって精製して目的産物の化合物2a（3.26 g、46.5％）を得た。MS m/z(ESI): 293 [M+H]+。
【００７６】
中間体3aの製造
【化３５】
0006267806.tif 000036
中間体4aの製造
【化３６】
0006267806.tif 000037
【００７７】
実施例1： N-(5-(5-クロロ-4-(1-メチル-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-5-イル)ピリミジン-2-イルアミノ)-2-((2-(ジメチルアミノ)エチル)メチルアミノ)-4-メトキシフェニル)プロピオンアミド（化合物Z-1）
【化３７】
0006267806.tif 000038
【００７８】
工程1：5-ブロモ-1-メチル-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン（化合物1-2）
0℃において、化合物5-ブロモ-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン（5 g，25.4 mmol，市販品）のDMF溶液を水素化ナトリウム（4.32 g，30.5 mmol）の40mLDMFに入れ、0℃で0.5 h激しく撹拌した後、ヨードメタン（1.22 g，30.5 mmol）を入れ、室温で3 h激しく撹拌した。TLCで反応の進展を検出し、反応が終了したら、反応系を氷水に注いだ。固体が完全に析出した後、ろ過し、固体を塩化メチレンとメタノール（10:1）で溶解させ、水で3回洗浄し、乾燥し、有機層を分離し、減圧で濃縮させて化合物1-2（5.4 g、99％）を得、産物をそのまま次の工程に使用した。MS m/z(ESI): 211.0 [M+H]+。
【００７９】
工程2：1-メチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン（化合物1-3）
ビス(ピナコラト)ジボロン（11.26 g，43.6 mmol）、PdCl2(dppf)（814 mg，1.11 mmol）および酢酸カリウム（6.53 g，32.7 mmol）を化合物1-2（4.6 g, 21.8 mmol）の50mL1,4-ジオキサン溶液に入れた。90℃で、N2雰囲気において8 h激しく撹拌した。反応終了後、ろ過し、ろ液を濃縮させ、粗製品の化合物1-3（13.9 g）を得、産物をそのまま次の工程に使用した。MS m/z(ESI): 259.1 [M+H]+。
【００８０】
工程3：5-(2,5-ジクロロピリミジン-4-イル)-1-メチル-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン(化合物1-4)
2,4,5-トリクロロピリミジン（4.93 g，26.2 mmol）、PdCl2(dppf)（1.66 g，2.26 mmol，市販品）および23mLの2.0 mol/Lの炭酸ナトリウム溶液を化合物1-3（13.9 g, 21.8 mmol）の50mLアセトニトリル溶液に入れた。85℃で、N2雰囲気において4 h激しく撹拌した。反応終了後、水を入れて希釈し、EA/水系で抽出し、水で3回洗浄し、乾燥し、有機層を減圧で濃縮させて粗製品を得た。Combi-flashカラムクロマトグラフィー[PE: EA = 100: 0 - 20: 80]によって精製して化合物1-4（2.16 g，36％）を得た。MS m/z(ESI):279.0[M+H]+。
【００８１】
工程4：5-クロロ-N-(4-フルオロ-2-メトキシ-5-ニトロフェニル)-4-(1-メチル-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-5-イル)ピリミジン-2-アミン（化合物1-5）
化合物4-フルオロ-2-メトキシ-5-ニトロアニリン（1.13 g，6.09 mmol）、Pd2(dba)3（558 mg，0.61 mmol）、キサントホス（05 mg，1.22 mmol）および炭酸セシウム（3.97 g，12.2 mmol）を化合物1-4（1.70 g, 6.09 mmol）の20mL1,4-ジオキサン溶液に入れた。120℃で、N2雰囲気において5 h激しく撹拌した。反応終了後、ろ過し、ろ液を濃縮させて粗製品を得、Combi-flashカラムクロマトグラフィー[PE: EA = 100: 0 - 0: 100]によって精製して化合物1-5（420 mg，16％）を得た。MS m/z(ESI):429.0[M+H]+。
【００８２】
工程5：N1-(5-クロロ-4-(1-メチル-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-5-イル)ピリミジン-2-イル)-N4-(2-(ジメチルアミノ)エチル)-2-メトキシ-N4-メチル-5-ニトロフェニル-1,4-ジアミン（化合物1-6）
N,N,N'-トリメチルエチレンジアミン（72 mg，0.70 mmol）および炭酸カリウム（193 mg，1.40 mmol）を化合物1-5（200 mg, 0.47 mmol）の4mLのDMFに入れ、100℃で2 h激しく撹拌した。TLCで反応の進展を検出し、反応が終了したら、10 mLの水を入れ、EA/水系で3回抽出し、有機層を分離し、減圧で濃縮させて化合物1-6（240 mg，90％）を得た。MS m/z(ESI):511.3[M+H]+。
【００８３】
工程6：N4-(5-クロロ-4-(1-メチル-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-5-イル)ピリミジン-2-イル)-N1-(2-(ジメチルアミノ)エチル)-5-メトキシ-N1-メチルフェニル-1,2,4-トリアミン（化合物1-7）
Pd/C（20 mg）を化合物 1-6（100 mg, 0.20 mmol）の20mLメタノール溶液に入れた。室温で、H2雰囲気において4 h激しく撹拌した。反応終了後、ろ過し、ろ液を濃縮させ、化合物1-7（80 mg、83％）を得、産物をそのまま次の工程に使用した。MS m/z(ESI):481.2 [M+H]+。
【００８４】
工程7：N-(5-(5-クロロ-4-(1-メチル-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-5-イル)ピリミジン-2-イルアミノ)-2-((2-(ジメチルアミノ)エチル)メチルアミノ)-4-メトキシフェニル)プロピオンアミド（化合物Z-1）
0℃において、アクリロイルクロリド（17 mg，0.17 mmol）およびトリエチルアミン（28 mg，0.25 mmol）を化合物1-7（80 mg, 0.17 mmol）の2mLの塩化メチレンに入れ、0℃で2 h激しく撹拌した。反応終了後、水を入れて希釈し、塩化メチレン/水系で3回抽出し、有機層を減圧で濃縮させて粗製品を得た。液相分離・精製を経て化合物Z-1（2.39 mg、6％）を得た。MS m/z(ESI):534.9 [M+H]+；1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.11 (s, 1H), 8.87 - 8.75 (m, 2H), 8.57 (d, J = 17.2 Hz, 3H), 7.62 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 7.00 (s, 1H), 6.57 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 6.44 - 6.35 (m, 1H), 6.29 (d, J = 16.7 Hz, 1H), 5.77 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.82 (s, 3H), 2.85 (s, 2H), 2.70 (s, 3H), 2.29 (d, J = 5.7 Hz, 2H), 2.19 (s, 6H)。
【００８５】
実施例2：N-(5-(5-クロロ-4-(1-メチル-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-5-イル)ピリミジン-2-イルアミノ)-2-(4-(ジメチルアミノ)ピペリジン-1-イル)-4-メトキシフェニル)アクロイルアミド（化合物Z-2）
【化３８】
0006267806.tif 000039
【００８６】
工程1：5-クロロ-N-(4-(4-(ジメチルアミノ)ピペリジン-1-イル)-2-メトキシ-5-ニトロフェニル)-4-(1-メチル-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-5-イル)ピリミジン-2-アミン（化合物2-6）
化合物1-5（260 mg, 0.607 mmol）および炭酸カリウム（251 mg, 1.822mmol）を25 mL反応瓶に置き、DMF（10 mL）を入れて基質を部分的に溶解させた。その後、N,N-ジメチルアミノピペリジン（85.4 mg, 0.667 mmol）を入れて反応系を70℃に維持する条件で3 h加熱した。TLCで反応の進展を検出し、反応が終了したら、反応液をEA/水系で3回抽出し、有機層を分離し、水、飽和食塩水で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥した後、減圧で濃縮させて粗製品2-6を220 mgを得、収率が68％であった。MS M/Z(ESI)537.2[M+H]+。
【００８７】
工程2：N1-(5-クロロ-4-(1-メチル-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-5-イル)ピリミジン-2-イル)-N-4-(4-(ジメチルアミノ)ピペリジン-1-イル)-6-メトキシフェニル-1,3-ジアミン（化合物2-7）
反応基質2-6（110 mg, 0.205 mmol）を25 mL反応瓶に置き、エタノール（6 mL）を入れた。室温の条件において、撹拌している反応瓶に塩化第一スズ（138 mg, 0.615mmol）を入れて反応系を60℃に維持する条件で2 h加熱した。TLCで反応の進展を検出し、反応が終了したら、反応液を濃縮させて回転乾燥し、EA/水系で3回抽出し、有機層を分離し、水、飽和食塩水で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥した後、ろ液を減圧で濃縮して粗製品2-7（80 mg，76.9％）を得、そのまま次の反応に使用した。
【００８８】
工程3：N-(5-(5-クロロ-4-(1-メチル-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-5-イル)ピリミジン-2-イルアミノ)-2-(4-(ジメチルアミノ)ピペリジン-1-イル)-4-メトキシフェニル)アクロイルアミド（化合物Z-2）
0℃において、アクリロイルクロリド（17.0 mg，0.188mmol）およびDIEA（60.8 mg，0.471 mmol）を化合物2-7（80 mg, 0.157 mmol）の3mLのTHFに入れ、0℃で2 h激しく撹拌した。反応終了後、水を入れて希釈し、塩化メチレン/水系で3回抽出し、有機層を減圧で濃縮させて粗製品を得た。液相分離・精製を経て化合物Z-2（9.0 mg、10％）を得た。MS m/z(ESI):560.8 [M+H]+；1HNMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.98 (s, 1H), 8.75-8.74(d, J = 4.0 Hz, 1H)，8.48-8.53(m, 4H), 7.62-7.61 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 6.84 (s, 1H), 6.71-6.57(m, 2H), 6.29-6.25 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 5.77-5.74 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.82(s, 3H), 3.05-3.02 (d, J = 12.0 Hz, 2H), 2.69-2.63 (m, 2H), 2.30-2.19(m, 7H), 1.91-1.83(m, 2H), 1.70-1.68(m, 2H)。
【００８９】
実施例3：N-(5-(5-クロロ-4-(1-メチル-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-5-イル)ピリミジン-2-イルアミノ)-4-メトキシ-2-(4-メチルピペラジン-1-イル)フェニル)アクロイルアミド（化合物Z-3）
【化３９】
0006267806.tif 000040
【００９０】
工程1：5-クロロ-N-(2-メトキシ-4-(4-メチルピペラジン-1-イル)-5-ニトロフェニル)-4-(1-メチル-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-5-イル)ピリミジン-2-アミン（化合物3-6）
N-メチルピペラジン（126 mg，1.26 mmol）および炭酸カリウム（261 mg，1.89 mmol）を化合物1-5（200 mg, 0.47 mmol）の4mLのDMFに入れ、100℃で2 h激しく撹拌した。TLCで反応の進展を検出し、反応が終了したら、10 mLの水を入れ、EA/水系で3回抽出し、有機層を分離し、減圧で濃縮させて化合物3-6（200 mg，84％）を得た。MS m/z(ESI):509.2[M+H]+。
【００９１】
工程2：N1-(5-クロロ-4-(1-メチル-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-5-イル)ピリミジン-2-イル)-6-メトキシ-4-(4-メチルピペラジン-1-イル)フェニル-1,3-ジアミン（化合物3-7）
化合物3-6（200 mg, 0.39 mmol）を原料とし、実施例1における工程6を参照して合成し、化合物3-7（140 mg、75％）を得、産物をそのまま次の工程に使用した。MS m/z(ESI):479.1 [M+H]+。
【００９２】
工程3：N-(5-(5-クロロ-4-(1-メチル-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-5-イル)ピリミジン-2-イルアミノ)-4-メトキシ-2-(4-メチルピペラジン-1-イル)フェニル)アクロイルアミド（化合物Z-3）
化合物3-7（140 mg, 0.29 mmol）を原料とし、実施例1における工程7を参照して合成し、化合物Z-3（1.60 mg、1％）を得た。MS m/z(ESI):533.2 [M+H]+；1HNMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.98 (s, 1H), 8.76 (s, 1H), 8.51 (d, J = 32.1 Hz, 3H), 7.63 (s, 1H), 6.86 (s, 1H), 6.63 (d, J = 28.9 Hz, 2H), 6.27 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 5.76 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 5.33 (s, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.84 (s, 3H), 2.86 (s, 4H), 2.55 (s, 2H), 2.26 (s, 3H), 1.99 (s, 2H)。
【００９３】
実施例4：N-(2-(4-(ジメチルアミノ)ピペリジン-1-イル)-4-メトキシ-5-(4-(1-メチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-5-イル)ピリミジン-2-イルアミノ)フェニル)アクロイルアミド（化合物Z-4）
【化４０】
0006267806.tif 000041
【００９４】
工程1：5-ブロモ-1-メチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン（化合物4-2）
水素化ナトリウム（720 mg, 30 mmol）を100 mL反応瓶に置き、反応瓶に無水THF（40 mL）を入れた。0℃の条件で5 min撹拌し、反応基質の5-ブロモ-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン（4.0 g, 20 mmol，市販品）THF(20 mL)に溶解させ、恒圧滴下漏斗でゆっくり反応瓶に滴下し、30 min撹拌し、反応系にヨードメタン（1.6 mL, 26 mmol）を滴下した。滴下終了後、ゆっくり室温に昇温して反応させ、一晩撹拌した。TLCで反応の進展を検出し、反応が終了したら、反応系に氷水を10 mL入れて反応をクエンチングし、減圧で濃縮させてTHFを蒸発で除去し、残留物を塩化メチレン（60 mL)および水(20 mL×3)で抽出し、有機層をNa2SO4で乾燥し、減圧で濃縮させて4.1 gの褐色の固体を得、Combi-flashカラムクロマトグラフィー[PE: EA = 10: 90 - 40: 60]によって分離・精製して目的の化合物4-2（3.1 g、73％）を得た。MS m/z(ESI): 211.9 [M+H]+
【００９５】
工程2：1-メチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン（化合物4-3）
化合物4-2（3.1 g, 14.6 mmol）およびビス(ピナコラト)ジボロン（11.1g, 43.8 mmol）を250 mL反応瓶に置き、DMF（150 mL）および酢酸カリウム（4.3 g, 43.8 mmol）を入れた。反応系をアルゴンガスで空気を3回置換した後、Pd(dppf)Cl2（0.55 g, 0.73 mmol）を入れ、さらに窒素ガスで空気を3回置換した。反応系を90℃に加熱し、かつ8h撹拌を続けた。LC-MSで反応の進展を検出し、反応が終了したら、吸引ろ過し、ケーキをEA(30 mL×3)で洗浄し、ろ液を減圧で濃縮させてDMFを蒸発で除去し、化合物4-3（13.5 g）を得、褐色の固体で、そのまま次の反応に使用した。MS m/z(ESI): 260.2 [M+H]+
【００９６】
工程3：5-(2-クロロピリミジン-4-イル)-1-メチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン(化合物4-4)
反応基質4-3（3.8 g, 14.6 mmol)および2,4-ジクロロピリミジン（2.6 g, 17.5 mmol）を250 mL反応瓶に置き、アセトニトリル（130 mL）および炭酸ナトリウム溶液（22 mL、2M）を入れた。反応系をアルゴンガスで空気を3回置換した後、Pd(dppf)Cl2（0.55 g, 0.73 mmol）を入れ、さらに窒素ガスで空気を3回置換した。反応系を85℃に加熱し、かつ3h撹拌を続けた。LC-MSで反応の進展を検出し、反応が終了したら、室温に冷却し、大量の固体が析出し、吸引ろ過し、ケーキをEA(10 mL×3)で洗浄し、重量が一定になるまで加熱乾燥し、2.2 gの黄色の固体を得、ろ液をEAおよび水で抽出し、乾燥して濃縮させた後、Combi-flashカラムクロマトグラフィー[PE: EA = 10: 90 - 70: 30]によって分離・精製して0.6 gの黄色の固体を得、固体を合併して目的の化合物4-4（2.8 g、78％）を得た。MS m/z(ESI): 246.1 [M+H]+
【００９７】
工程4：N-(4-フルオロ-2-メトキシ-5-ニトロフェニル)-4-(1-メチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-5-イル)ピリミジン-2-アミン（化合物4-5）
反応基質4-4（420 mg, 1.7 mmol）および4-フルオロ-2-メトキシ-5-ニトロアニリン（316 mg, 1.7 mmol）を100 mLの密封反応瓶に置き、イソブタノール（40 mL）を入れて基質を部分的に溶解させた。その後、p-トルエンスルホン酸（807 mg, 4.25 mmol）を入れ、かつ反応系を130℃に維持する条件で密封して16 h加熱した。反応が終了したら、室温に冷却し、溶液に大量の固体が析出した。ブフナー漏斗でろ過してケーキを得、エタノールで還流させて撹拌した後、目的の化合物4-5（524 mg，78％）を得、そのまま次の反応に使用した。純度：47 ％。MS m/z(ESI): 396.2 [M+H]+
【００９８】
工程5：N-(4-(4-(ジメチルアミノ)ピペリジン-1-イル)-2-メトキシ-5-ニトロフェニル)-4-(1-メチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-5-イル)ピリミジン-2-アミン（化合物4-6）
反応基質4-5（146 mg, 0.25 mmol）および炭酸カリウム（104 mg, 0.75 mmol）を25 mL反応瓶に置き、DMF（10 mL）を入れて基質を完全に溶解させた。その後、4-ジメチルアミノピペリジン（42 mg, 0.325mmol）を入れて反応系を100℃に維持する条件で2 h加熱して反応させた。TLCで反応の進展を検出し、反応が終了したら、反応液をEA/水系で3回抽出し、有機層を分離し、水、飽和食塩水で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥した後、減圧で濃縮させて目的の化合物4-6を（120 mg、98 ％）を得た。MS m/z(ESI): 504.2 [M+H]+。
【００９９】
工程6：4-(4-(ジメチルアミノ)ピペリジン-1-イル)-6-メトキシ-N1-(4-(1-メチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-5-イル)ピリミジン-2-イル)ベンゼン-1,3-ジアミン（化合物4-7）
化合物4-6（120 mg, 0.24 mmol）を原料とし、実施例1における工程6を参照して合成し、化合物4-7（113 mg）を得、そのまま次の反応に使用した。MS m/z(ESI):474.3 [M+H]+。
【０１００】
工程7：N-(2-(4-(ジメチルアミノ)ピペリジン-1-イル)-4-メトキシ-5-(4-(1-メチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-5-イル)ピリミジン-2-イルアミノ)フェニル)アクロイルアミド（化合物Z-4）
化合物4-7（113 mg, 0.24 mmol）を原料とし、実施例1における工程7を参照して合成し、得られた粗製品をPrep-TLCカラムクロマトグラフィー[DCM: MeOH:NH4OH = 9:1:0.1]によって精製した後、目的の化合物Z-4（6 mg、5％）を得た。 MS m/z(ESI):528.3 [M+H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.33 (s, 1H), 9.22 (s, 1H), 9.04 (s, 1H), 8.80 (s,1H), 8.51-8.50 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 8.13 (s, 1H), 7.53-7.51 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 6.86(s,1H), 6.74-6.67(m, 1H), 6.32-6.28 (d, J = 17.0 Hz, 2H), 5.79-5.67 (d, J = 13.4 Hz, 1H), 4.24(s, 3H), 3.86 (s, 3H), 3.33 (s, 1H), 3.05-3.03 (d, J = 10.7 Hz, 2H), 2.70-2.64(t, J = 11.7 Hz, 3H), 2.22(s, 6H), 1.85-1.82(d, J = 11.3 Hz, 2H), 1.70-1.67(d, J = 12.1 Hz, 2H)。
【０１０１】
実施例5：N-(4-メトキシ-5-(4-(1-メチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-5-イル)ピリミジン-2-イルアミノ)-2-(4-メチルピペラジン-1-イル)フェニル)アクロイルアミド（化合物Z-5）
【化４１】
0006267806.tif 000042
【０１０２】
工程1：N-(2-メトキシ-4-(4-メチルピペラジン-1-イル)-5-ニトロフェニル)-4-(1-メチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-5-イル)ピリミジン-2-アミン（化合物5-6）
化合物4-5（146 mg, 0.25 mmol）および炭酸カリウム（104 mg, 0.75 mmol）を25 mL反応瓶に置き、DMF（10 mL）を入れて基質を完全に溶解させた。その後、N-メチルピペラジン（32 mg, 0.325 mmol）を入れて反応系を100℃に維持する条件で2 h加熱して反応させた。TLCで反応の進展を検出し、反応が終了したら、反応液をEA/水系で3回抽出し、有機層を分離し、水、飽和食塩水で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥した後、減圧で濃縮させて目的の化合物5-6を得、そのまま次の反応に使用した。純度：88 ％。MS m/z(ESI): 476.2 [M+H]+
【０１０３】
工程2：6-メトキシ-N1-(4-(1-メチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-5-イル)ピリミジン-2-イル)-4-(4-メチルピペラジン-1-イル)フェニル-1,3-ジアミン（化合物5-7）
化合物5-6（119 mg, 0.25 mmol）を原料とし、実施例1における工程6を参照して合成し、化合物5-7を得、そのまま次の反応に使用した。純度：59 ％。MS m/z(ESI):446.2 [M+H]+。
【０１０４】
工程3：N-(4-メトキシ-5-(4-(1-メチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-5-イル)ピリミジン-2-イルアミノ)-2-(4-メチルピペラジン-1-イル)フェニル)アクロイルアミド（化合物Z-5）
化合物5-7（111 mg, 0.25 mmol）を原料とし、実施例1における工程7を参照して合成し、得られた粗製品をPrep-TLCカラムクロマトグラフィー[DCM: MeOH:NH4OH = 9:1:0.1]によって精製した後、目的の化合物Z-5（8 mg、6 ％）を得た。純度：96.5 ％。MS m/z(ESI):500.2 [M+H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.33 (s, 1H), 9.21 (s, 1H), 9.03 (s, 1H), 8.79 (s,1H), 8.51-8.50 (d, J = 5.2 Hz, 2H), 8.12 (s, 1H), 7.52-7.51 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 6.88(s,1H), 6.68-6.61(m, 1H), 6.31-6.27 (d, J = 16.9 Hz, 2H), 5.78-5.76 (d, J = 9.9 Hz, 1H), 4.24(s, 3H), 3.87 (s, 3H), 2.86 (s, 4H), 2.53-2.49 (d, J = 13.6 Hz, 4H), 2.25(s, 3H)。
【０１０５】
実施例6：N-(2-((2-(ジメチルアミノ)エチル)(メチル)アミノ)-4-メトキシ-5-(4-(1-メチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-5-イル)ピリミジン-2-イルアミノ)フェニル)アクロイルアミド（化合物Z-6）
【化４２】
0006267806.tif 000043
【０１０６】
工程1：N1-(2-(ジメチルアミノ)エチル)-5-メトキシ-N1-メチル-N4-(4-(1-メチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-5-イル)ピリミジン-2-イル)-2-ニトロフェニル-1,4-ジアミン（化合物6-6）
化合物4-5（146 mg, 0.25 mmol）および炭酸カリウム（104 mg, 0.75 mmol）を25 mL反応瓶に置き、DMF（10 mL）を入れて基質を完全に溶解させた。その後、N,N,N-トリメチルエチレンジアミン（34 mg, 0.325 mmol）を入れて反応系を100℃に維持する条件で2 h加熱して反応させた。TLCで反応の進展を検出し、反応が終了したら、反応液をEA/水系で3回抽出し、有機層を分離し、水、飽和食塩水で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥した後、減圧で濃縮させて目的産物の化合物6-6を得、そのまま次の反応に使用した。純度：94 ％。MS m/z(ESI): 478.2 [M+H]+
【０１０７】
工程2：N1-(2-(ジメチルアミノ)エチル)-5-メトキシ-N1-メチル-N4-(4-(1-メチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-5-イル)ピリミジン-2-イル)ベンゼン-1,2,4-トリアミン（化合物6-7）
化合物6-6（119 mg, 0.25 mmol）を原料とし、実施例1における工程6を参照して合成し、化合物6-7を得、そのまま次の反応に使用した。純度：83 ％。MS m/z(ESI):448.2 [M+H]+。
【０１０８】
工程3：N-(2-((2-(ジメチルアミノ)エチル)(メチル)アミノ)-4-メトキシ-5-(4-(1-メチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-5-イル)ピリミジン-2-イルアミノ)フェニル)アクロイルアミド（化合物Z-6）
化合物6-7（111 mg, 0.25 mmol）を原料とし、実施例1における工程7を参照して合成し、得られた粗製品をPrep-HPLCによって分離・精製した後、目的製品の化合物Z-6（1 mg、1 ％）を得た。純度：96.5 ％。MS m/z(ESI):502.2 [M+H]+ ; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.13 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 9.27 (s, 1H), 9.12 (s,1H), 8.52-8.51 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 8.50 (s, 2H), 8.20 (s, 1H), 8.14(s,1H), 7.54-7.53(d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.03 (s, 1H), 6.50-6.44 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 6.34-6.29(d, J = 17.3 Hz, 1H), 5.80-5.78 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 4.24 (s, 3H), 3.87 (s, 3H), 2.92-2.90(d, J = 5.4 Hz, 2H), 2.69(s, 3H), 2.39-2.36(t, J = 5.4 Hz, 2H), 2.25(s, 6H)。
【０１０９】
実施例7：N-(5-((5-クロロ-4-モルホリルピリミジン-2-イル)アミノ)-2-(4-(ジメチルアミノ)ピペリジン-1-イル)-4-メトキシフェニル)アクロイルアミド（化合物Z-7）ギ酸塩
【化４３】
0006267806.tif 000044
【０１１０】
工程1：4-(2,5-ジクロロピリミジン-4-イル)モルホリン(化合物7-2)
25℃において、化合物2,4,5-トリクロロピリミジン（5 g，27.0 mmol）を25mLのTHFに入れ、トリエチルアミン（5.5 g，54.0 mmol）を入れ、モルホリン（2.37g，27.0mmol）を反応液に滴下し、室温で1h撹拌した。TLCで反応の進展を検出し、反応が終了したら、水およびEAを入れ、有機層を分離し、有機層を飽和食塩水で洗浄し、乾燥し、減圧で濃縮させて化合物7-2（5.2 g）を得、産物をそのまま次の工程に使用した。MS m/z(ESI): 234.0 [M+H]+
【０１１１】
工程2：5-クロロ-N-(4-フルオロ-2-メトキシ-5-ニトロフェニル)-4-モルホリルピリミジン-2-アミン（化合物7-3）
化合物7-2（1.0 g，4.2 mmol）、4-フルオロ-2-メトキシ-5-ニトロアニリン（0.83 g，4.4 mmol）およびp-トルエンスルホン酸（2.57 g, 15.0 mmol）を10mLの1,4-ジオキサン溶液に入れた。110℃で、N2雰囲気において8 h撹拌した。反応終了後、ろ過し、EAでケーキを洗浄し、ケーキを50℃で加熱乾燥し、粗製品の化合物7-3（1.16 g）を得、産物をそのまま次の工程に使用した。MS m/z(ESI): 284.1 [M+H]+
【０１１２】
工程3：5-クロロ-N-(4-(4-(ジメチルアミノ)ピペリジン-1-イル)-2-メトキシ-5-ニトロフェニル)-4-モルホリルピリミジン-2-アミン（化合物7-4）
化合物7-3（0.1 g，0.26 mmol）、4-ジメチルアミノピペリジン（0.033 g，0.26 mmol）および炭酸カリウム（0.072g，0.52mmol）をDMF溶液に入れた。100℃で、N2雰囲気において2 h撹拌した。反応終了後、水を入れて希釈し、EA/水系で抽出し、水で3回洗浄し、乾燥し、有機層を減圧で濃縮させて粗製品の化合物7-4（0.21 g）を得、産物をそのまま次の工程に使用した。MS m/z(ESI): 492.2 [M+H]+。
【０１１３】
工程4：N-(5-クロロ-4-モルホリルピリミジン-2-イル)-4-(4-(ジメチルアミノ)ピペリジン-1-イル)-6-メトキシベンゼン-1,3-ジアミン（化合物7-5）
化合物7-4（0.2 g，0.41 mmol）、鉄粉（0.51 g，8.1 mmol）および塩化アンモニウム（0.11 g，2.0 mmol）を16mLのTHFと水の混合溶液に入れた。65℃で、N2雰囲気において3 h激しく撹拌した。反応終了後、ろ過し、ろ液をEAで抽出し、水で洗浄し、乾燥し、減圧で濃縮させて化合物7-5（0.19 g）を得、産物をそのまま次の工程に使用した。MS m/z(ESI): 462.2 [M+H]+
工程5：N-(5-((5-クロロ-4-モルホリルピリミジン-2-イル)アミノ)-2-(4-(ジメチルアミノ)ピペリジン-1-イル)-4-メトキシフェニル)アクロイルアミド（化合物Z-7）ギ酸塩
0℃において、アクリロイルクロリド（40 mg，0.43 mmol）およびトリエチルアミン（50 mg，0.49 mmol）を化合物7-5（190 mg, 0.41 mmol）の5mLの塩化メチレンに入れ、0℃で2 h激しく撹拌した。反応終了後、水を入れて希釈し、塩化メチレン/水系で3回抽出し、有機層を減圧で濃縮させて粗製品を得た。液相分離・精製を経て化合物Z-7のギ酸塩（4.27 mg、5つの工程の収率3.1％）を得た。MS m/z(ESI):562.2 [M+H]+；1HNMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.98 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.83 (s, 1H), 6.80 (s, 1H), 6.65 (dd, J = 17.0, 10.1 Hz, 1H), 6.21 (d, J = 17.0 Hz, 1H), 5.72 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.65 (d, J = 7.6 Hz, 8H), 3.02 (d, J = 11.0 Hz, 2H), 2.64 (t, J = 11.0 Hz, 2H), 2.27 (overlap, 7H), 1.84 (d, J = 10.7 Hz, 2H), 1.68 (d, J = 9.6 Hz, 2H)。
【０１１４】
実施例8：N-(5-((5-クロロ-4-モルホリルピリミジン-2-イル)アミノ)-4-メトキシ-2-(4-メチルピペラジン-1-イル)フェニル)アクロイルアミド（化合物Z-8）
【化４４】
0006267806.tif 000045
【０１１５】
工程1：5-クロロ-N-(2-メトキシ-4-(4-メチルピペラジン-1-イル)-5-ニトロフェニル)-4-モルホリルピリミジン-2-アミン（化合物8-4）
化合物7-3（0.5 g，1.3 mmol）、N-メチルピペラジン（0.13 g，1.3 mmol）および炭酸カリウム（0.36 g，2.6 mmol）をDMF溶液に入れた。100℃で、N2雰囲気において2 h撹拌した。反応終了後、水を入れて希釈し、EA/水系で抽出し、水で3回洗浄し、乾燥し、有機層を減圧で濃縮させて粗製品の化合物8-4（0.6 g）を得、産物をそのまま次の工程に使用した。MS m/z(ESI): 464.1 [M+H]+。
【０１１６】
工程2：N-(5-クロロ-4-モルホリルピリミジン-2-イル)-6-メトキシ-4-(4-メチルピペラジン-1-イル)ベンゼン-1,3-ジアミン（化合物8-5）
化合物8-4（0.6 g, 1.3 mmol）を原料とし、実施例7における工程4を参照して合成し、化合物8-5（0.56 g）を得、産物をそのまま次の工程に使用した。MS m/z(ESI): 434.2 [M+H]+
【０１１７】
工程3：N-(5-((5-クロロ-4-モルホリルピリミジン-2-イル)アミノ)-4-メトキシ-2-(4-メチルピペラジン-1-イル)フェニル)アクロイルアミド（化合物Z-8）
化合物8-5（0.56 g, 1.3 mmol）を原料とし、実施例1における工程7を参照して合成し、得られた粗製品を液相分離・精製した後、化合物Z-8（44.51 mg、3つの工程の収率7.0 ％）を得た。MS m/z(ESI):488.2 [M+H]+；1HNMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.26 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.43 (s, 1H), 6.69 (s, 1H), 6.29 (d, J = 16.8 Hz, 1H), 6.18 (dd, J = 16.8, 10.0 Hz, 1H), 5.66 (dd, J = 10.0, 1.3 Hz, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.76 (s, 8H), 2.82 (d, J = 4.2 Hz, 4H), 2.55 (d, J = 13.4 Hz, 4H), 2.32 (s, 3H)。
【０１１８】
実施例9：N-(5-((5-クロロ-4-モルホリルピリミジン-2-イル)アミノ)-2-((2-(ジメチルアミノ)メチルアミノ)-4-メトキシフェニル)アクロイルアミド（化合物Z-9）
【化４５】
0006267806.tif 000046
【０１１９】
工程1：N-(5-クロロ-4-モルホリルピリミジン-2-イル)-N-(2-(ジメチルアミノ)エチル)-2-メトキシ-N-メチル-5-ニトロベンゼン-1,4-ジアミン（化合物9-4）
化合物7-3（0.5 g，1.3 mmol）、N,N,N'-トリメチルエチレンジアミン（0.26 g，2.6 mmol）および炭酸カリウム（0.36 g，2.6 mmol）をDMF溶液に入れた。100℃で、N2雰囲気において2 h撹拌した。反応終了後、水を入れて希釈し、EA/水系で抽出し、水で3回洗浄し、乾燥し、有機層を減圧で濃縮させて粗製品の化合物9-4（0.6 g）を得、産物をそのまま次の工程に使用した。MS m/z(ESI):466.1[M+H]+。
【０１２０】
工程2：N-(5-クロロ-4-モルホリルピリミジン-2-イル)-N-(2-(ジメチルアミノ)エチル)-5-メトキシ-N-メチルベンゼン-1,2,4-トリアミン（化合物9-5）
化合物9-4（0.6 g, 1.3 mmol）を原料とし、実施例7における工程4を参照して合成し、化合物9-5（0.56 g）を得、産物をそのまま次の工程に使用した。MS m/z(ESI):436.2[M+H]+。
【０１２１】
工程3：N-(5-((5-クロロ-4-モルホリルピリミジン-2-イル)アミノ)-2-((2-(ジメチルアミノ)メチルアミノ)-4-メトキシフェニル)アクロイルアミド（化合物Z-9）
化合物9-5（0.50 g, 1.2 mmol）を原料とし、実施例1における工程7を参照して合成し、得られた粗製品を液相分離・精製した後、化合物Z-9（77.19 mg、3つの工程の収率12.1％）を得た。MS m/z(ESI):490.2 [M+H]+；1HNMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.00 (s, 1H), 9.29 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 6.69 (s, 1H), 6.31 (dd, J = 16.9, 1.8 Hz, 1H), 6.21 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 5.59 (dd, J = 10.0, 1.8 Hz, 1H), 3.78 (d, J = 7.3 Hz, 9H), 2.79 (s, 2H), 2.62 (s, 3H), 2.18 (s, 6H), 1.53 (s, 4H)。
【０１２２】
実施例10：N-(2-(3-(ジメチルアミノ)アゼチジン-1-イル)-4-メトキシ-5-((4-(キノリン-3-イル)ピリミジン-2-イルアミノ)フェニル)アクロイルアミド（化合物Z-10）
【化４６】
0006267806.tif 000047
【０１２３】
工程1：3-(2-ジクロロピリミジン-4-イル)キノリン(化合物10-2)
化合物2,4-ジクロロピリミジン（5.0 g, 34 mmol、市販品)およびキノリン-3-ホウ酸（5.8 g, 34 mmol、市販品）をアセトニトリル（120 mL）および炭酸ナトリウム溶液（50 mL、2M）に入れた。反応系を窒素ガスで空気を3回置換した後、Pd(dppf)Cl2（494 mg, 0.68 mmol）を入れ、さらに窒素ガスで空気を3回置換した。反応系を80℃に加熱し、かつ6h撹拌を続けた。TLCで反応の進展を検出し、反応が終了したら、水を入れて希釈し、灰色の固体が析出し、ブフナー漏斗でろ過し、ケーキを水で洗浄した後、重量が一定になるまで加熱乾燥し、化合物10-2（4.6 g、57 ％）を得、そのまま次の反応に使用した。MS m/z(ESI): 242.7 [M+H]+
【０１２４】
工程2：N-(4-フルオロ-2-メトキシ-5-ニトロフェニル)-4-(キノリン-3-イル)ピリミジン-2-アミン（化合物10-3）
4-フルオロ-2-メトキシ-5-ニトロアニリン（2.2 g, 12 mmol）および化合物10-2（2.9 g, 12 mmol）をp-トルエンスルホン酸（p-TSA）（2.1 g, 12 mmol）の40 ml n-ブタノール溶液に入れ、130℃の条件で密封して6 h加熱した。反応が終了したら、室温に冷却し、溶液に大量の固体が析出した。ブフナー漏斗でろ過してケーキを得、エタノールで還流させて撹拌した後、化合物10-3（4.3 g，64％）を得、そのまま次の反応に使用した。MS m/z(ESI): 392.0 [M+H]+
【０１２５】
工程3：t-ブチル3-(ジメチルアミノ)アゼチジン-1-カルボン酸 t-ブチル（化合物10-5）
化合物3-オキシアゼチジン-1-カルボン酸 t-ブチル（2.0 g, 11.7 mmol、市販品）およびジメチルアミン塩酸塩（1.3 g, 17 mmol）を100 mlの乙酸（1 ml）のメタノール溶液に入れ、パラジウム炭素（1.4 g）をいれ、水素ガスで3回置換した後、水素ガスの雰囲気において5 h撹拌し、 反応終了後、ろ過で残りのパラジウム炭素を除去し、ろ液を減圧で濃縮させて化合物10-5（2.2 g, 80％）を得、そのまま次の反応に使用した。MS m/z(ESI): 200.1 [M+H]+
【０１２６】
工程4：3-(ジメチルアミノ)アゼチジン（化合物10-6）塩酸塩
塩酸の1,4-ジオキサン溶液（10 ml）を15 mlの化合物10-5（2.2 g，11 mmol）に入れ、常温で3 h撹拌した。反応終了後、減圧で濃縮して粗製品10-6（1.3 g，90％）を得、そのまま次の反応に使用した。MS m/z(ESI): 100.1 [M+H]+
【０１２７】
工程5：N-(4-(3-(ジメチルアミノ)アゼチジン-1-イル)-2-メトキシ-5-ニトロフェニル)-4-(キノリン-3-イル)ピリミジン-2-アミン（化合物10-7）
化合物10-6（160 mg. 1.16 mmol）および炭酸カリウム（350 mg, 2.3 mmol）を化合物10-3（300 mg, 0.58 mmol）の4 ml DMF溶液に入れ、100度で2 h撹拌し、TLCで反応の進展を検出し、反応が終了したら、10 mLの水を入れ、EA/水系で3回抽出し、有機層を分離し、減圧で濃縮させて化合物10-7（130 mg，50％）を得、そのまま次の工程に使用した。MS m/z(ESI): 472.2 [M+H]+
【０１２８】
工程6：4-(3-(ジメチルアミノ)アゼチジン-1-イル)-6-メトキシ-N 1-(4-(キノリン-3-イル)ピリミジン-2-イル)ベンゼン-1,3-ジアミン（化合物10-8）
化合物10-7（130 mg, 0.27 mmol）を原料とし、実施例7における工程4を参照して合成し、化合物10-8（80 mg、70％）を得、産物をそのまま次の工程に使用した。MS m/z(ESI):441.2 [M+H]+。
【０１２９】
工程7：N-(2-(3-(ジメチルアミノ)アゼチジン-1-イル)-4-メトキシ-5-((4-(キノリン-3-イル)ピリミジン-2-イルアミノ)フェニル)アクロイルアミド（化合物Z-10）
化合物10-8（80 mg, 0.17 mmol）を原料とし、実施例1における工程7を参照して合成し、得られた粗製品を液相分離・精製した後、化合物Z-10（30.69 mg、30％）を得た。MS m/z(ESI):496.2 [M+H]+, 1HNMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.40 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 9.32 (s, 1H), 9.16 (s, 1H), 8.45 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.06 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.68 (dd, J = 18.2, 10.0 Hz, 2H), 7.54 - 7.43 (m, 2H), 7.22 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 6.49 - 6.37 (m, 2H), 6.33 (d, J = 10.1 Hz, 1H), 5.73 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 3.92 - 3.78 (m, 5H), 3.58 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 3.07 (d, J = 6.3 Hz, 1H), 2.13 (d, J = 17.8 Hz, 6H)。
【０１３０】
実施例11：(R)-N-(2-(3-(ジメチルアミノ)ピロリジン-1-イル)-4-メトキシ-5-((4-(キノリン-3-イル)ピリミジン-2-イルアミノ)フェニル)アクロイルアミド（化合物Z-11）
【化４７】
0006267806.tif 000048
【０１３１】
工程1：(R)-N-(4-(3-(ジメチルアミノ)ピロリジン-1-イル)-2-メトキシ-5-ニトロフェニル)-4-(キノリン-3-イル)ピリミジン-2-アミン（化合物11-7）
(R)-N,N-ジメチルピロリジン-3-アミン（80 mg，0.70 mmol、市販品）および炭酸カリウム（193 mg，1.40 mmol）を化合物10-3（200 mg, 0.47 mmol）の4mLのDMFに入れ、100℃で2 h激しく撹拌した。TLCで反応の進展を検出し、反応が終了したら、10 mLの水を入れ、EA/水系で11回抽出し、有機層を分離し、減圧で濃縮させて化合物11-7（180 mg，79％）を得た。MS m/z(ESI):486.2[M+H]+。
【０１３２】
工程2：(R)-4-(3-(ジメチルアミノ)ピロリジン-1-イル)-6-メトキシ-N1-(4-(キノリン-3-イル)ピリミジン-2-イル)ベンゼン-1,3-ジアミン（化合物11-8）
化合物11-7（180 mg, 0.37 mmol）を原料とし、実施例1における工程6を参照して合成し、化合物11-8（150mg，89％）を得、産物をそのまま次の工程に使用した。MS m/z(ESI):456.2 [M+H]+。
【０１３３】
工程3：(R)-N-(2-(3-(ジメチルアミノ)ピロリジン-1-イル)-4-メトキシ-5-((4-(キノリン-3-イル)ピリミジン-2-イルアミノ)フェニル)アクロイルアミド（化合物Z-11）
化合物11-8（150 mg, 0.3 mmol）を原料とし、実施例1における工程7を参照して合成し、得られた粗製品を液相分離・精製した後、化合物Z-11（23.58 mg、9.87％）を得た。MS m/z(ESI):509.9 [M+H]+；1HNMR (400 MHz, DMSO-d6):δ 9.67(1s, 1H)，9.40(1s, 1H), 8.59(d, J= 4Hz, 1H), 8.39(s, 1H), 8.31(s, 1H), 8.07(d, J= 8Hz, 1H), 7.70(m, 2H), 7.50(m, 1H), 7.27(m, 1H), 6.74(s, 1H), 6.35(m, 2H), 5.73(d, J= 8Hz, 1H), 3.83(s, 3H), 3.05(m, 4H), 1.16(m, 1H), 2.24(s, 6H), 2.05(m, 2H)。
【０１３４】
実施例12：N-(4-メトキシ-2-(1-メチル-1,2,3,6-テトラヒドロピリジン-4-イル)-5-((4-(キノリン-3-イル)ピリミジン-2-イル)アミノ)フェニル)アクロイルアミド（化合物Z-12）
【化４８】
0006267806.tif 000049
【０１３５】
工程1：3-(2-クロロピリミジン-4-イル)キノリン(化合物10-2、実施例10の工程1を参照)
【０１３６】
工程2：4-ブロモ-2-メトキシ-1-ニトロベンゼン（化合物12-4）
室温の条件において、化合物12-3（10.0 g, 46 mmol，市販品）を150mLの無水メタノールに溶解させ、ナトリウムメトキシド（4.37 g，81mmol）を入れ、還流するまで加熱して8 h激しく撹拌した。TLCで反応の進展を検出し、反応が終了したら、水を入れて希釈し、EA/水系で抽出し、水で3回洗浄し、乾燥し、有機層を減圧で濃縮させて粗製品の化合物12-4（9.5 g）を得、産物をそのまま次の工程に使用した。MS m/z(ESI): 231.0 [M+H]+
【０１３７】
工程3：4-ブロモ-2-メトキシアニリン（化合物12-5）
室温の条件において、還元鉄粉（4.48 g，80 mmol）および塩化アンモニウム（2.65 g，50 mmol）を化合物12-4（2.3 g，10.0 mmol）の60mLのTHF/水（THFと水の体積比2：1）の混合溶液に入れた。65℃で、4 h激しく撹拌した。反応終了後、ろ過し、ろ液に水を入れて希釈し、EA/水系で抽出し、水で3回洗浄し、乾燥し、有機層を減圧で濃縮させて粗製品の化合物12-5（2.0 g）を得、産物をそのまま次の工程に使用した。MS m/z(ESI): 201.9 [M+H]+
【０１３８】
工程4：4-ブロモ-2-メトキシ-5-ニトロアニリン（化合物12-6）
-20℃の条件において、硝酸カリウム（217 mg，2.25 mmol）を化合物 12-5（400 mg, 2.0 mmol）の3.5mL濃硫酸溶液に入れた。-20℃で、5 min激しく撹拌した。反応終了後、水を入れて希釈し、EA/水系で抽出し、水で3回洗浄し、乾燥し、有機層を減圧で濃縮させて粗製品の化合物12-6（300 mg）を得、産物をそのまま次の工程に使用した。MS m/z(ESI):246.9[M+H]+。
【０１３９】
工程5：4-(4-アミノ-5-メトキシ-2-ニトロフェニル)-5,6-ジヒドロピリジン-1(2H)-カルボン酸t-ブチル（化合物12-7）
化合物12-6（100 mg, 0.40 mmol）、Pd(PPh3)4（24 mg，0.02 mmol）および0.5mLの2.0 mol/Lの炭酸ナトリウム溶液を化合物4-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)-5,6-ジヒドロピリジン-1(2H)-カルボン酸t-ブチル（125 mg, 0.40 mmol）の5mL1,4-ジオキサン溶液に入れた。100℃で、N2雰囲気において4 h激しく撹拌した。反応終了後、ろ過し、ろ液を濃縮させて粗製品を得、Combi-flashカラムクロマトグラフィー[PE: EA = 100: 0 - 0: 100]によって精製して化合物12-7（420 mg，35％）を得た。   MS m/z(ESI): 350.1 [M+H]+
【０１４０】
工程6：4-(5-メトキシ-2-ニトロ-4-((4-(キノリン-3-イル)ピリミジン-2-イル)アミノ)フェニル)-5,6-ジヒドロピリジン-1(2H)-カルボン酸t-ブチル（化合物12-8）
化合物12-7（500 mg，1.43 mmol）、Pd2(dba)3（131 mg，0.143 mmol）、キサントホス（165 mg，0.286 mmol）および炭酸セシウム（925 mg，2.86 mmol）を化合物10-2（345 mg, 1.43 mmol）の30mL1,4-ジオキサン溶液に入れた。100℃で、N2雰囲気において5 h激しく撹拌した。反応終了後、ろ過し、ろ液を濃縮させて粗製品を得、Combi-flashカラムクロマトグラフィー[DCM:MeOH = 100: 0 - 0: 100]によって精製して化合物12-8（600 mg，76％）を得た。MS m/z(ESI): 545.0 [M+H]+
【０１４１】
工程7：N-(2-メトキシ-5-ニトロ-4-(1,2,3,6-テトラヒドロピリジン-4-イル)フェニル)-4-(キノリン-3-イル)ピリミジン-2-アミン（化合物12-9）
室温において、化合物12-8（150 mg, 0.27 mmol）の塩化メチレン（10 ml）に1 mlのトリフルオロ酢酸を滴下し、滴下終了後室温で3 h撹拌した。反応液を飽和炭酸水素ナトリウム溶液で中和し、有機相を分離し、水相を塩化メチレンで抽出し（2×10 ml）、有機相を合併し、飽和食塩水（10 ml）で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥、ろ過し、減圧で濃縮させて化合物12-9（115 mg, 93％）を得、産物をそのまま次の反応に使用した。MS m/z(ESI):455.2[M+H]+。
【０１４２】
工程8：N-(2-メトキシ-4-(1-メチル-1,2,3,6-テトラヒドロピリジン-4-イル)-5-ニトロフェニル)-4-(キノリン-3-イル)ピリミジン-2-アミン（化合物12-10）
室温において、化合物12-9（115 mg, 0.25 mmol）のメタノール（5ml）溶液にパラホルムアルデヒド（45 mg, 0.5 mmol）およびトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（106 mg, 0.5 mmol）を入れ、室温で撹拌を3 h続けた後、20 mLの塩化メチレンを入れ、有機相を順に水（10ml）、飽和食塩水（10 ml）で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥、ろ過し、減圧で濃縮させて化合物12-10（95 mg, 81％）を得、産物をそのまま次の反応に使用した。MS m/z(ESI):469.2[M+H]+。
【０１４３】
工程9：6-メトキシ-4-(1-メチル-1,2,3,6-テトラヒドロピリジン-4-イル)-N1-(4-(キノリン-3-イル)ピリミジン-2-イル)ベンゼン-1,3-ジアミン（化合物12-11）
化合物12-10（95 mg, 0.2 mmol）を原料とし、実施例7における工程4を参照して合成し、化合物12-11（74 mg、84％）を得、産物をそのまま次の反応に使用した。MS m/z(ESI):439.2[M+H]+。
【０１４４】
工程10：N-(4-メトキシ-2-(1-メチル-1,2,3,6-テトラヒドロピリジン-4-イル)-5-((4-(キノリン-3-イル)ピリミジン-2-イル)アミノ)フェニル)アクロイルアミド（化合物Z-12）
化合物12-11（74 mg, 0.17 mmol）を原料とし、実施例1における工程7を参照して合成し、得られた粗製品を液相分離した後、化合物Z-12（14 mg、17％）を得た。MS m/z(ESI):493.2[M+H]+。
【０１４５】
実施例13：N-(2-((2-(ジメチルアミノ)エチル)(メチル)アミノ)-4-メトキシ-5-(5-メトキシ-4-(キノリン-3-イル)ピリミジン-2-イルアミノ)フェニル)アクロイルアミド（Z-13）
【化４９】
0006267806.tif 000050
【０１４６】
工程1：3-(2-クロロ-5-メトキシピリミジン-4-イル)キノリン(化合物13-2)
キノリン-3-ホウ酸（2.93 g，16.9 mmol）、PdCl2(dppf)（250 mg，0.34 mmol）および50mLの2.0 mol/Lの炭酸ナトリウム溶液を化合物13-1（3 g, 16.9 mmol、市販品）の80mLアセトニトリル溶液に入れた。95℃で、N2雰囲気において8 h激しく撹拌した。反応終了後、固体が完全に析出するまで、大量の冷水に入れた。ろ過し、水で十分に洗浄し、乾燥して化合物13-2（4 g、100％）を得た。MS m/z(ESI):272.7[M+H]+。
【０１４７】
工程2：N-(4-フルオロ-2-メトキシ-5-ニトロフェニル)-5-メトキシ-4-(キノリン-3-イル)ピリミジン-2-アミン（化合物13-3）
化合物4-ニトロ-2-メトキシ-5-ニトロアニリン（343 mg，1.85 mmol）、Pd2(dba)3（169 mg，0.18 mmol）、キサントホス（214 mg，0.37 mmol）および炭酸セシウム（1.2 g，3.69 mmol）を化合物13-2（500 mg, 1.85 mmol）の9mL1,4-ジオキサン溶液に入れた。120℃で、N2雰囲気において5 h激しく撹拌した。反応終了後、ろ過し、ろ液を濃縮させて粗製品を得、Combi-flashカラムクロマトグラフィー[PE: EA = 100: 0 - 0: 100]によって精製して化合物13-3（180 mg，65％）を得た。MS m/z(ESI):422.1[M+H]+。
【０１４８】
工程3：N1-(2-(ジメチルアミノ)エチル)-5-メトキシ-N4-(5-メトキシ-4-(キノリン-3-イル)ピリミジン-2-イル)-N-メチル-2-ニトロベンゼン-1,4-ジアミン（化合物13-4）
N,N,N'-トリメチルエチレンジアミン（65 mg，0.64 mmol）および炭酸カリウム（193 mg，1.29 mmol）を化合物13-3（180 mg, 0.43 mmol）の3mLのDMFに入れ、100℃で2 h激しく撹拌した。TLCで反応の進展を検出し、反応が終了したら、10 mLの水を入れ、EA/水系で13回抽出し、有機層を分離し、減圧で濃縮させて化合物13-4（200 mg，91％）を得た。MS m/z(ESI):504.3[M+H]+。
【０１４９】
工程4：N1-(2-(ジメチルアミノ)エチル)-5-メトキシ-N4-(5-メトキシ-4-(キノリン-3-イル)ピリミジン-2-イル)-N1-メチルベンゼン-1,２,4-トリアミン（化合物13-5）
化合物13-4（200 mg, 0.40 mmol）を原料とし、実施例1における工程6を参照して合成し、化合物13-5（100 mg、92％）を得、産物をそのまま次の工程に使用した。MS m/z(ESI):474.1 [M+H]+。
【０１５０】
工程5：N-(2-((2-(ジメチルアミノ)エチル)(メチル)アミノ)-4-メトキシ-5-(5-メトキシ-4-(キノリン-3-イル)ピリミジン-2-イルアミノ)フェニル)アクロイルアミド（化合物Z-13）
化合物13-5（100 mg, 0.21 mmol）を原料とし、実施例1における工程7を参照して合成し、得られた粗製品を液相分離した後、化合物Z-13（4.55 mg、4％）を得た。MS m/z(ESI):527.8 [M+H]+；1HNMR (400 MHz, DMSO-d6) δ9.57 (s, 1H), 9.21 (d, J = 16.7 Hz, 2H), 8.57 (s, 1H), 8.28 - 8.19 (m, 2H), 8.07 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.85 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 7.65 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 7.02 (s, 1H), 6.61 - 6.47 (m, 1H), 6.32 (d, J = 17.1 Hz, 1H), 5.80 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.88 (s, 3H), 2.94 (s, 2H), 2.68 (s, 3H), 2.45 (s, 2H), 2.30 (s, 6H)。
【０１５１】
実施例14：N-(2-((2-(ジメチルアミノ)エチル)(メチル)アミノ)-4-メトキシ-5-(4-(キノリン-3-イル)-1,3,5-トリアジン-2-イルアミノ)フェニル)アクロイルアミド（Z-14）
【化５０】
0006267806.tif 000051
【０１５２】
工程1： 4-クロロ-N-(4-フルオロ-2-メトキシ-5-ニトロフェニル)-1,3,5-トリアジン-2-アミン（化合物14-2）
化合物1a（200 mg, 1.1 mmol、市販品）を250 mL反応瓶に置き、THF（10 mL）を入れて基質を溶解させた。80℃において、撹拌中の反応瓶に4-フルオロ-2-メトキシ-5-ニトロアニリン（200 mg, 1.1 mmol）のTHF（30 mL）溶液を入れ、温度を維持しながら50 minで滴下した。滴下終了後、10 min反応を続けた。TLCで反応の進展を検出し、反応が終了したら、減圧で濃縮させて粗製品を得た。Combi-Flashカラムクロマトグラフィーによって精製して目的製品の化合物14-2 (110 mg, 34％)を得た。MS m/z(ESI):300.0 [M+H]+。
【０１５３】
工程2： N-(4-フルオロ-2-メトキシ-5-ニトロフェニル)-4-(キノリン-3-イル)-1,3,5-トリアジン-2-アミン（化合物14-3）
反応基質の化合物14-2（1.2 g, 4 mmol）、3-キノリンホウ酸（5.8 g, 34 mmol）、炭酸カリウム（1.11 g, 8 mmol）を250 mL反応瓶に置き、エチレングリコールジメチルエーテル（20 mL）および水（5 mL）を入れた。反応系を窒素ガスで空気を3回置換した後、Pd(dppf)Cl2（300 mg, 0.4 mmol）を入れ、さらに窒素ガスで空気を3回置換した。反応系を100℃に加熱し、かつ4h撹拌を続けた。TLCで反応の進展を検出し、反応が終了したら、減圧で濃縮させて粗製品を得た。Combi-Flashカラムクロマトグラフィーによって精製して目的製品の化合物14-3 (700 mg, 45％)を得た。MS m/z(ESI):393.1 [M+H]+。
【０１５４】
工程3： N1-(2-(ジメチルアミノ)エチル)-5-メトキシ-N1-メチル-2-ニトロ-N4-(4-(キノリン-3-イル)-1,3,5-トリアジン-2-イル)ベンゼン-1,4-ジアミン（化合物14-4）
反応基質の化合物14-3（400 mg, 1 mmol）、N,N,N'-トリメチルエチレンジアミン（156 mg, 1.5 mmol）および炭酸セシウム（670 mg, 2 mmol）を50 mL反応瓶に置き、ジメチルアミノホルムアミド（6 mL）を入れた。反応系を窒素ガスで空気を3回置換した後、80℃に加熱し、かつ4h撹拌を続けた。TLCで反応の進展を検出し、反応が終了したら、水を入れて反応液を希釈し、ろ過して粗製品を得、Combi-Flashカラムクロマトグラフィーによって精製して目的製品の化合物14-4(200 mg, 42％)を得た。MS m/z(ESI):475.2 [M+H]+。
【０１５５】
工程4： N1-(2-(ジメチルアミノ)エチル)-5-メトキシ-N-メチル-N4-(4-(キノリン-3-イル)-1,3,5-トリアジン-2-イル)ベンゼン-1,2,4-トリアミン（化合物14-5）
化合物14-4（190 mg, 0.4 mmol）を原料とし、実施例1における工程6を参照して合成し、化合物14-5（180 mg）を得、そのまま次の反応に使用した。MS m/z(ESI):445.2 [M+H]+。
【０１５６】
工程5： N-(2-((2-(ジメチルアミノ)エチル)(メチル)アミノ)-4-メトキシ-5-(4-(キノリン-3-イル)-1,3,5-トリアジン-2-イルアミノ)フェニル)アクロイルアミド（化合物Z-14）
化合物14-5（180 mg, 0.41 mmol）を原料とし、実施例1における工程7を参照して合成し、得られた粗製品をPrep-TLCによって精製した後、目的製品の化合物Z-14（2.01 mg、1％）を得た。純度：94.99％。MS m/z(ESI):499.3 [M+H]+。
【０１５７】
実施例15：N-(2-((4-(ジメチルアミノ)ピペリジン-1-イル)-4-メトキシ-5-(4-(キノリン-3-イル)-1,3,5-トリアジン-2-イルアミノ)フェニル)アクロイルアミド（Z-15）
【化５１】
0006267806.tif 000052
【０１５８】
工程1： N-(4-(4-(ジメチルアミノ)ピペリジン-1-イル)-2-メトキシ-5-ニトロフェニル)-4-(キノリン-3-イル)-1,3,5-トリアジン-2-アミン（化合物15-4）
化合物14-3（100 mg, 0.25 mmol）、4-ジメチルアミノピペリジン（66 mg, 0.51 mmol）および炭酸カリウム（140 mg, 1.02 mmol）を20 mL反応瓶に置き、ジメチルアミノホルムアミド（4 mL）を入れた。反応系を窒素ガスで空気を3回置換した後、100℃に加熱し、かつ4h撹拌を続けた。TLCで反応の進展を検出し、反応が終了したら、反応液をEA/水系で3回抽出し、有機層を分離し、水、飽和食塩水で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥した後、減圧で濃縮させて粗製品2-6を220 mgを得た。Combi-Flashカラムクロマトグラフィーによって精製して目的製品の化合物15-4 (110 mg, 43％)を得た。MS m/z(ESI):501.2 [M+H]+。
【０１５９】
工程2： 4-(4-(ジメチルアミノ)ピペリジン-1-イル)-6-メトキシ-N1-(4-(キノリン-3-イル)-1,3,5-トリアジン-2-イル)ベンゼン-1,3-ジアミン（化合物15-5）
化合物15-4（100 mg, 0.2 mmol）を原料とし、実施例1における工程6を参照して合成し、化合物15-5（90 mg）を得、そのまま次の反応に使用した。MS m/z(ESI):471.3 [M+H]+。
【０１６０】
工程3： N-(2-(4-(ジメチルアミノ)ピペリジン-1-イル)-4-メトキシ-5-(4-(キノリン-3-イル)-1,3,5-トリアジン-2-イルアミノ)フェニル)アクロイルアミド（化合物Z-15）
化合物15-5（90 mg, 0.2 mmol）を原料とし、実施例1における工程7を参照して合成し、得られた粗製品をPrep-HPLCカラムクロマトグラフィーによって精製した後、目的製品の化合物Z-15（2.09 mg、2％、FA塩）を得た。純度：100.0％。MS m/z(ESI):525.3 [M+H]+。
【０１６１】
実施例16：N-(2-((2-(ジメチルアミノ)エチル)(メチル)アミノ)-4-メトキシ-5-((4-(1-メチル-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-5-イル)ピリミジン-2-イル)アミノ)フェニル)アクロイルアミド（化合物Z-16）
【化５２】
0006267806.tif 000053
【０１６２】
工程1：5-(2-クロロピリミジン-4-イル)-1-メチル-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン(化合物16-2)
化合物16-1（2.0 g, 13.5 mmol）、PdCl2(dppf)（1.04 g，1.35 mmol）および13.5mLの2.0 mol/Lの炭酸ナトリウム溶液を化合物1-メチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン（8.6 g, 13.5 mmol）の50mLアセトニトリル溶液に入れた。80℃で、N2雰囲気において4 h激しく撹拌した。反応終了後、水を入れて希釈し、EA/水系で抽出し、水で3回洗浄し、乾燥し、有機層を減圧で濃縮させて粗製品を得た。Combi-flashカラムクロマトグラフィー[PE: EA = 100: 0 - 20: 80]によって精製して化合物16-2（2.1 g，36％）を得た。MS m/z(ESI):245.0[M+H]+。
【０１６３】
工程2：N-(4-フルオロ-2-メトキシ-5-ニトロフェニル)-4-(1-メチル-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-5-イル)ピリミジン-2-アミン（化合物16-3）
4-フルオロ-2-メトキシ-5-ニトロアニリン（1.6 g, 8.6 mmol）および化合物16-2（2.1 g, 8.6 mmol）をp-トルエンスルホン酸（3.7 g, 21.5 mmol）の20 ml イソブタノール溶液に入れ、130℃の条件で密封して6 h加熱した。反応が終了したら、室温に冷却し、溶液に大量の固体が析出した。ブフナー漏斗でろ過してケーキを得、エタノールで還流させて撹拌した後、化合物16-3（1.2 g，44％）を得、そのまま次の反応に使用した。MS m/z(ESI):429.0[M+H]+。
【０１６４】
工程3：N1-(2-(ジメチルアミノ)エチル)-5-メトキシ-N1-メチル-N4-(4-(1-メチル-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-5-イル)ピリミジン-2-イル)-2-ニトロフェニル-1,4-ジアミン（化合物16-4）
化合物16-3（370 mg, 0.62 mmol）を原料とし、実施例1における工程5を参照して合成し、化合物16-4（300 mg、90％）を得た。MS m/z(ESI):477.2[M+H]+。
【０１６５】
工程4：N1-(2-(ジメチルアミノ)エチル)-5-メトキシ-N1-メチル-N4-(4-(1-メチル-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-5-イル)ピリミジン-2-イル)ベンゼン-1,2,4-トリアミン（化合物16-5）
化合物16-4（300 mg, 0.6 mmol）を原料とし、実施例7における工程4を参照して合成し、化合物16-5（200 mg）を得、産物をそのまま次の工程に使用した。MS m/z(ESI): 447.2 [M+H]+
【０１６６】
工程5：N-(2-((2-(ジメチルアミノ)エチル)(メチル)アミノ)-4-メトキシ-5-((4-(1-メチル-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-5-イル)ピリミジン-2-イル)アミノ)フェニル)アクロイルアミド（化合物Z-16）
化合物16-5（200 mg, 0.44 mmol）を原料とし、実施例1における工程7を参照して合成し、得られた粗製品を液相分離した後、化合物Z-16（23 mg、10%）を得た。MS m/z(ESI):501.3 [M+H]+；1HNMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.04 (s, 1H), 9.78 (s, 1H), 9.20 (s, 1H), 8.90 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.41 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.15 (dd, J = 6.9, 4.4 Hz, 2H), 6.73 (s, 1H), 6.59 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 6.49 - 6.42 (m, 1H), 6.30 (d, J = 10.1 Hz, 1H), 5.65 (d, J = 10.1 Hz, 1H), 3.84 (d, J = 13.7 Hz, 6H), 2.86 - 2.77 (m, 2H), 2.64 (s, 3H), 2.22 (d, J = 5.8 Hz, 2H), 2.19 (s, 6H)。
【０１６７】
実施例17：N-(2-(4-(ジメチルアミノ)ピペリジン-1-イル)-4-メトキシ-5-(4-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)ピリミジン-2-イルアミノ)フェニル)アクロイルアミド（化合物Z-17）
【化５３】
0006267806.tif 000054
【０１６８】
工程1：2-クロロ-4-(1-メチル-1H-ピラゾール-4イル)ピリミジン(化合物17-2)
化合物16-1（745 mg, 5 mmol)およびメチル-4-ピラゾールピナコールボロナート（1.092 g, 5.25 mmol、市販品）を100 mL反応瓶に置き、アセトニトリル（30 mL）および炭酸ナトリウム溶液（5 mL、2M）を入れた。反応系を窒素ガスで空気を3回置換した後、Pd(dppf)Cl2（109.7 mg, 0.15 mmol）を入れ、さらに窒素ガスで空気を3回置換した。反応系を110℃に加熱し、かつ6h撹拌を続けた。TLCで反応の進展を検出し、反応が終了したら、水を入れて希釈し、反応液をEA/水系で3回抽出し、有機層を分離し、水、飽和食塩水で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥した後、減圧で濃縮させて粗製品1.1 gを得た。Combi-flashカラムクロマトグラフィー[EA: PE = 1: 5 - 1: 2]によって精製して目的製品の化合物17-2（600 mg，93％）を得た。MS m/z(ESI):195.1 [M+H]+。
【０１６９】
工程2：N-(4-フルオロ-2-メトキシ-5-ニトロフェニル)-4-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)ピリミジン-2-アミン（化合物17-3）
化合物17-2（500 mg, 2.577 mmol）および4-フルオロ-2-メトキシ-5-ニトロアニリン（479 g, 2.577 mmol）を50 mLの密封反応瓶に置き、n-ブタノール（12 mL）を入れて基質を部分的に溶解させた。その後、p-トルエンスルホン酸（1.108 g, 6.44 mmol）を入れ、かつ反応系を130℃に維持する条件で密封して5 h加熱した。反応が終了したら、室温に冷却し、溶液に大量の固体が析出した。ブフナー漏斗でろ過してケーキを得、エタノールで還流させて撹拌した後、目的産物の化合物17-3（600 mg，67.8％）を得、そのまま次の反応に使用した。
【０１７０】
工程3：N-(4-(4-(ジメチルアミノ)ピペリジン-1-イル)-2-メトキシ-5-ニトロフェニル)-4-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)ピリミジン-2-アミン（化合物17-4）
化合物17-3（70 mg, 0.203mmol）および炭酸カリウム（84 mg, 0.609mmol）を25 mL反応瓶に置き、DMF（5 mL）を入れて基質を部分的に溶解させた。その後、N,N-ジメチルアミノピペリジン（31.2 mg, 0.244 mmol）を入れて反応系を70℃に維持する条件で2 h加熱した。TLCで反応の進展を検出し、反応が終了したら、反応液をEA/水系で3回抽出し、有機層を分離し、水、飽和食塩水で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥した後、減圧で濃縮させて化合物17-4を（70 mg、76％）を得た。MS m/z(ESI):453.2 [M+H]+。
【０１７１】
工程4：4-(4-(ジメチルアミノ)ピペリジン-1-イル)-6-メトキシ-N1-(4-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)ピリミジン-2-イル)ベンゼン-1,3-ジアミン（化合物17-5）
化合物17-4（70 mg, 0.155 mmol）を原料とし、実施例1における工程6を参照して合成し、粗製品の化合物17-5（60 mg、92％）を得、そのまま次の反応に使用した。
【０１７２】
工程5：N-(2-(4-(ジメチルアミノ)ピペリジン-1-イル)-4-メトキシ-5-(4-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)ピリミジン-2-イルアミノ)フェニル)アクロイルアミド（化合物Z-17）
化合物17-5（50 mg, 0.118 mmol）を原料とし、実施例1における工程7を参照して合成し、得られた粗製品を製造板[DCM: MeOH = 10:1]によって精製した後、目的製品の化合物Z-17（30 mg、44％）を得た。MS m/z(ESI):477.2 [M+H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.14(s, 1H), 9.05 (s, 1H), 8.81 (s, 1H), 8.36-8.35(d, J =4.0 Hz, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.10-7.09(d, J =4.0 Hz, 1H), 6.86 (s, 1H), 6.76-6.69 (m, 1H), 6.33-6.29 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 5.80-5.77 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.88 (s, 3H), 3.03-3.00(m, 2H), 2.69-2.64(m, 2H), 2.27-2.15(m, 7H), 1.85-1.82(m, 2H), 1.73-1.68(m, 2H)。
【０１７３】
実施例18：N-(2-(2-(ジメチルアミノ)エチル)(メチル)アミノ)-4-メトキシ-5-(4-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)ピリミジン-2-イルアミノ)フェニル)アクロイルアミド（Z-18）
【化５４】
0006267806.tif 000055
【０１７４】
工程1：N1-(2-(ジメチルアミノ)エチル)-5-メトキシ-N1-メチル-N4-(4-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)ピリミジン-2-イル)-2-ニトロベンゼン-1,4-ジアミン（化合物18-4）
化合物17-3（130 mg, 0.378 mmol、製造方法は実施例17の工程2を参照）および炭酸カリウム（156 mg, 1.133 mmol）を50 mL反応瓶に置き、DMF（5 mL）を入れて基質を部分的に溶解させた。その後、N,N,N-トリメチルエチレンジアミン（57.8 mg, 0.567 mmol）を入れて反応系を70℃に維持する条件で3 h加熱して反応させた。TLCで反応の進展を検出し、反応が終了したら、反応液をEA/水系で3回抽出し、有機層を分離し、水、飽和食塩水で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥した後、減圧で濃縮させて粗製品の化合物18-4を（110 mg、68％）を得た。MS m/z(ESI):427.2[M+H]+。
【０１７５】
工程2：N1-(2-(ジメチルアミノ)エチル)-5-メトキシ-N1-メチル-N4-(4-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)ピリミジン-2-イル)ベンゼン-1,2,4-トリアミン（化合物18-5）
化合物18-4（110 mg, 0.258 mmol）を原料とし、実施例1における工程6を参照して合成し、粗製品の化合物18-5（110 mg、100％）を得、そのまま次の反応に使用した。
【０１７６】
工程3：N-(2-((2-(ジメチルアミノ)エチル)(メチル)アミノ)-4-メトキシ-5-(4-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)ピリミジン-2-イルアミノ)フェニル)アクロイルアミド（化合物Z-18）
化合物18-5（110 mg, 0.278 mmol）を原料とし、実施例1における工程7を参照して合成し、得られた粗製品を製造板によって精製し、DCM: MeOHの体積比は10:1で、精製後、目的製品の化合物Z-18（10.0 mg、8.2％）を得た。MS m/z(ESI):451.1 [M+H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.18 (s, 1H), 9.42 (s, 1H), 8.90 (s, 1H), 8.38-8.37 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.79 (s, 1H),7.12-7.11 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 7.03 (s, 1H), 6.46-6.32 (m, 2H), 5.82-5.76 (m, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.86 (s, 3H), 2.97-2.93 (m, 2H), 2.68 (s, 3H), 2.08-2.47 (m, 8H)。
【０１７７】
実施例19：N-(5-((5-クロロ-4-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)ピリミジン-2-イル)アミノ)-2-((2-(ジメチルアミノ)エチル)(メチル)アミノ)-4-メトキシフェニル)アクロイルアミド（Z-19）
【化５５】
0006267806.tif 000056
【０１７８】
工程1：2,5-ジクロロ-4-(1-メチル-1H-ピラゾール-4イル)ピリミジン(化合物19-2)
2,4,5-トリクロロピリミジン（1.32 g, 7.21mmol）およびメチル-4-ピラゾールピナコールボロナート（1.5 g, 7.21 mmol）を原料とし、実施例17における工程1を参照して合成し、得られた粗製品をCombi-Flashカラムクロマトグラフィー(EA: PE = 1:5)によって精製した後、化合物19-2（1.4 g、84.8％）を得た。MS m/z(ESI):229.3[M+H]+。
【０１７９】
工程2：5-クロロ-N-(4-フルオロ-2-メトキシ-5-ニトロフェニル)-4-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)ピリミジン-2-アミン（化合物19-3）
化合物19-2（1.1 g，4.8 mmol）、Pd2(dba)3（439 mg，0.48 mmol）、キサントホス（277 mg，0.48 mmol）および炭酸セシウム（4.68 g，14.4 mmol）を4-フルオロ-2-メトキシ-5-ニトロアニリン（892 mg, 4.8 mmol）の30mL1,4-ジオキサン溶液に入れた。100℃で、N2雰囲気において5 h激しく撹拌した。反応終了後、ろ過し、ろ液を濃縮させて粗製品を得、Combi-flashカラムクロマトグラフィー[PE: EA = 100: 0 - 0: 100]によって精製して化合物19-3（600 mg，33.1％）を得た。MS m/z(ESI):379.3[M+H]+。
【０１８０】
工程3：N1-(5-クロロ-4-(1-メチル-1H-ピロゾール-4-イル)ピリミジン-2-イル)-N4-(2-(ジメチルアミノ)エチル)-2-メトキシ-N4-メチル-5-ニトロベンゼン-1,4-ジアミン（化合物19-4）
化合物19-3（600 mg, 1.587mmol）を原料とし、実施例1における工程5を参照して合成し、粗製品の化合物19-4（400 mg、57.7%）を得、そのまま次の工程に使用した。MS m/z(ESI):461.1[M+H]+。
【０１８１】
工程4：N4-(5-クロロ-4-(1-メチル-1H-ピロゾール-4-イル)ピリミジン-2-イル)-N1-(2-(ジメチルアミノ)エチル)-5-メトキシ-N-メチルベンゼン-1,2,4-トリアミン（化合物19-5）
化合物19-4（200 mg, 0.435 mmol）を原料とし、実施例2における工程2を参照して合成し、粗製品の化合物19-5（200 mg）を得、そのまま次の反応に使用した。MS m/z(ESI):431.3[M+H]+。
【０１８２】
工程5：N-(5-((5-クロロ-4-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)ピリミジン-2-イル)アミノ)-2-((2-(ジメチルアミノ)エチル)(メチル)アミノ)-4-メトキシフェニル)アクロイルアミド（化合物Z-19）
化合物19-5（200 mg, 0.465 mmol）を原料とし、実施例1における工程7を参照して合成し、得られた粗製品をPrep-HPLCカラムクロマトグラフィーによって精製した後、目的製品の化合物Z-19（23 mg、10％）を得た。 MS m/z(ESI):485.2 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6)  δ 10.21 (s, 1H), 9.11 (s, 1H), 8.99 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 8.37(s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.04 (s, 1H), 6.29-6.47(m, 2H), 5.79-5.81 (m, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.87 (s, 3H), 2.89 (m, 2H), 2.70 (s, 3H), 2.15-2.39(m, 8H)。
【０１８３】
実施例20：N-(2-((2-(ジメチルアミノ)エチル)(メチル)アミノ)-5-((5-フルオロ-4-(1-メチル-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-5-イル)ピリミジン-2-イル)アミノ)-4-メトキシフェニル)アクロイルアミド（Z-20）
【化５６】
0006267806.tif 000057
【０１８４】
工程1：5-(2-クロロ-5-フルオロピリミジン-4-イル)-1-メチル-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン(化合物20-2)
2,4-ジクロロ-5-フルオロピリミジン（2.0 g, 7.8 mmol）、PdCl2(dppf)2（0.57 g，0.78 mmol）および炭酸ナトリウム（1.64 g, 15.6mmol）を化合物1-メチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン（2.0 g, 7.8 mmol、市販品）の20mLアセトニトリルと4mL水の混合溶液に入れた。80℃で、窒素ガスの雰囲気において2 h激しく撹拌した。反応終了後、ろ過し、ろ液を濃縮させて粗製品を得、Combi-flashカラムクロマトグラフィー[PE: EA = 100: 0 - 60: 40]によって精製して化合物20-2（1.12 g，55％）を得た。MS m/z(ESI):263.1[M+H]+。
【０１８５】
工程2：5-フルオロ-N-(4-フルオロ-2-メトキシ-5-ニトロフェニル)-4-(1-メチル-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-5-イル)ピリミジン-2-アミン（化合物20-3）
化合物20-2（1.5 g, 5.46 mmol）を原料とし、実施例19における工程2を参照して合成し、違うのは、120℃でN2雰囲気において21 h激しく撹拌し、得られた粗製品をCombi-flashカラムクロマトグラフィー（PE: EA = 50 : 50）によって精製した後、化合物20-3（0.8 g、45％）を得た。MS m/z(ESI):413.1[M+H]+。
【０１８６】
工程3：N1-(2-(ジメチルアミノ)エチル)-N4-(5-フルオロ-4-(1-メチル-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-5-イル)ピリミジン-2-イル)-5-メトキシ-N-メチル-2-ニトロベンゼン-1,4-ジアミン（化合物20-4）
化合物20-3（300 mg, 1.18 mmol）を原料とし、実施例1における工程5を参照して合成し、化合物20-4（330 mg、92％）を得、産物をそのまま次の反応に使用した。MS m/z(ESI):495.2[M+H]+。
【０１８７】
工程4：N1-(2-(ジメチルアミノ)エチル)-N4-(5-フルオロ-4-(1-メチル-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-5-イル)ピリミジン-2-イル)-5-メトキシ-N 1-メチルベンゼン-1,2,4-トリアミン（化合物20-5）
化合物20-4（330 mg, 0.67 mmol）を原料とし、実施例1における工程6を参照して合成し、化合物20-5（317 mg、100％）を得、産物をそのまま次の工程に使用した。MS m/z(ESI):465.2[M+H]+。
工程5：N-(2-((2-(ジメチルアミノ)エチル)(メチル)アミノ)-5-((5-フルオロ-4-(1-メチル-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-5-イル)ピリミジン-2-イル)アミノ)-4-メトキシフェニル)アクロイルアミド（化合物Z-20）
化合物20-5（317 mg, 0.68 mmol）を原料とし、実施例1における工程7を参照して合成し、得られた粗製品を製造板クロマトグラフィー[DCM: MeOH:NH4OH = 90:10:1]によって分離・精製した後、化合物Z-20（11.9 mg、3.4％）を得た。MS m/z(ESI):519.2[M+H]+；1HNMR (400MHz , CDCl3) = 9.92 (br. s., 1 H), 9.64 (s, 1 H), 9.07 (d, J = 9.2 Hz, 2 H), 8.31 (d, J = 2.8 Hz, 1 H), 7.66 (s, 1 H), 7.14 (d, J = 1.6 Hz, 1 H), 6.70 (s, 1 H), 6.59 (d, J = 1.6 Hz, 1 H), 6.42 (br. s., 2 H), 5.66-5.63 (m, 1 H), 3.86 (s, 3 H), 3.81 (s, 3 H), 2.87 (br. s., 2 H), 2.63 (s, 3 H), 2.25 (br. s., 8 H)。
【０１８８】
実施例21：N-(2-((2-(ジメチルアミノ)エチル)(メチル)アミノ)-4-メトキシ-5-((5-メトキシ-4-(1-メチル-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-5-イル)ピリミジン-2-イル)アミノ)フェニル)アクロイルアミド（Z-21）
【化５７】
0006267806.tif 000058
【０１８９】
工程1：5-(2-クロロ-5-メトキシピリミジン-4-イル)-1-メチル-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン(化合物21-2)
2,4-ジクロロ-5-メトキシピリミジン（1.25 g, 7.0 mmol）、PdCl2(dppf)2（0.5 g，0.7 mmol）および炭酸ナトリウム（1.5 g, 14.0 mmol）を化合物1-メチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン（1.8 g, 7.0 mmol、市販品）の20mLアセトニトリルと4mL水の混合溶液に入れた。80℃で、N2雰囲気において2 h激しく撹拌した。反応終了後、ろ過し、ろ液を濃縮させて粗製品を得、Combi-flashカラムクロマトグラフィー[PE: EA = 100: 0 - 60: 40]によって精製して化合物21-2（1.54 g，80％）を得た。MS m/z(ESI):275.1[M+H]+。
【０１９０】
工程2：N-(4-フルオロ-2-メトキシ-5-ニトロフェニル)-5-メトキシ-4-(1-メチル-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-5-イル)ピリミジン-2-アミン（化合物21-3）
化合物21-2（1.5 g, 5.46 mmol）を原料とし、実施例19における工程2を参照して合成し、違うのは、120℃でN2雰囲気において21 h激しく撹拌し、得られた粗製品をCombi-flashカラムクロマトグラフィー（PE: EA = 50 : 50）によって精製した後、化合物21-3（1.2 g、52％）を得た。MS m/z(ESI):425.2[M+H]+。
【０１９１】
工程3：N1-(2-(ジメチルアミノ)エチル)-5-メトキシ-N4-(5-メトキシ-4-(1-メチル-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-5-イル)ピリミジン-2-イル)-N1-メチル-2-ニトロベンゼン-1,4-ジアミン（化合物21-4）
化合物21-3（500 mg, 1.18 mmol）を原料とし、実施例1における工程5を参照して合成し、化合物21-4（620 mg、100％）を得、産物をそのまま次の反応に使用した。MS m/z(ESI):507.3[M+H]+。
【０１９２】
工程4：N1-(2-(ジメチルアミノ)エチル)-5-メトキシ-N4-(5-メトキシ-4-(1-メチル-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-5-イル)ピリミジン-2-イル)-N1-メチルベンゼン-1,2,4-トリアミン（化合物21-5）
化合物21-4（500 mg, 0.99 mmol）を原料とし、実施例1における工程6を参照して合成し、化合物21-5（332 mg、70.3％）を得、産物をそのまま次の工程に使用した。MS m/z(ESI):477.2[M+H]+。
【０１９３】
工程5：N-(2-((2-(ジメチルアミノ)エチル)(メチル)アミノ)-4-メトキシ-5-((5-メトキシ-4-(1-メチル-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-5-イル)ピリミジン-2-イル)アミノ)フェニル)アクロイルアミド（化合物Z-21）
化合物21-5（332 mg, 0.7 mmol）を原料とし、実施例1における工程7を参照して合成し、得られた粗製品を製造板クロマトグラフィー[DCM: MeOH:NH4OH = 90:10:1]によって分離・精製した後、化合物Z-21（59 mg、15.6％）を得た。MS m/z(ESI):531.2[M+H]+；1HNMR (400MHz , CDCl3)：9.83 (br. s., 1 H), 9.63 (s, 1 H), 9.13 (d, J = 1.6 Hz, 1 H), 8.93 (s, 1 H), 8.23 (s, 1 H), 7.52 (s, 1 H), 7.11 (d, J = 3.6 Hz, 1 H), 6.67 (s, 1 H), 6.53 (d, J = 3.2 Hz, 1 H), 6.48-6.34 (m, 2 H), 5.63 (d, J = 11.6 Hz, 1 H), 3.84 (s, 3 H), 3.81 (s, 3 H), 3.80 (s, 3 H), 2.87 (br. s., 2 H), 2.61 (s, 3 H), 2.37 (br. s., 2 H), 2.28 (br. s., 6 H)。
【０１９４】
実施例22：N-(2-((2-(ジメチルアミノ)エチル)(メチル)アミノ)-4-メトキシ-5-((4-(1-メチル-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-5-イル)-5-(トリフルオロメチル)ピリミジン-2-イル)アミノ)フェニル)アクロイルアミド（Z-22）
【化５８】
0006267806.tif 000059
【０１９５】
工程1：5-(2-クロロ-5-(トリフルオロメチル)ピリミジン-4-イル)-1-メチル-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン(化合物22-2)
2,4-ジクロロ-5-(トリフルオロメチル)ピリミジン（1.0 g, 6.5 mmol）、PdCl2(dppf)（0.5 g，0.65 mmol）および6.5mLの2.0 mol/Lの炭酸ナトリウム溶液を化合物1-メチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン（4.3 g, 6.5 mmol）の25mLアセトニトリル溶液に入れた。80℃で、N2雰囲気において4 h激しく撹拌した。反応終了後、水を入れて希釈し、EA/水系で抽出し、水で3回洗浄し、乾燥し、有機層を減圧で濃縮させて粗製品を得た。Combi-flashカラムクロマトグラフィー[PE: EA = 100: 0 - 20: 80]によって精製して化合物22-2（0.6 g，36％）を得た。MS m/z(ESI):313.0[M+H]+。
【０１９６】
工程2：N-(4-フルオロ-2-メトキシ-5-ニトロフェニル)-4-(1-メチル-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-5-イル)-5-(トリフルオロメチル)ピリミジン-2-アミン（化合物22-3）
4-フルオロ-2-メトキシ-5-ニトロアニリン（760 mg, 4.1 mmol）および化合物22-2（1.0 g, 4.1 mmol）をp-トルエンスルホン酸（p-TSA）（1.7 g, 10.5 mmol）の20 ml イソブタノール溶液に入れ、130℃の条件で密封して6 h加熱した。反応が終了したら、室温に冷却し、溶液に大量の固体が析出した。ブフナー漏斗でろ過してケーキを得、エタノールで還流させて撹拌した後、化合物22-3（740 mg，44％）を得、そのまま次の反応に使用した。MS m/z(ESI):463.1[M+H]+。
【０１９７】
工程3：N1-(2-(ジメチルアミノ)エチル)-5-メトキシ-N1-メチル-N4-(4-(1-メチル-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-5-イル)-5-(トリフルオロ)ピリミジン-2-イル)-2-ニトロベンゼン-1,4-ジアミン（化合物22-4）
化合物22-3（370 mg, 0.62 mmol）を原料とし、実施例1における工程5を参照して合成し、化合物22-4（300 mg、90％）を得た。MS m/z(ESI):544.2[M+H]+。
【０１９８】
工程4：N1-(2-(ジメチルアミノ)エチル)-5-メトキシ-N1-メチル-N4-(4-(1-メチル-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-5-イル)-5-(トリフルオロ)ピリミジン-2-イル)ベンゼン-1,2,4-トリアミン（化合物22-5）
化合物22-4（300 mg, 0.6 mmol）を原料とし、実施例7における工程4を参照して合成し、化合物22-5（200 mg）を得、産物をそのまま次の工程に使用した。MS m/z(ESI): 514.2 [M+H]+
【０１９９】
工程5：N-(2-((2-(ジメチルアミノ)エチル)(メチル)アミノ)-4-メトキシ-5-((4-(1-メチル-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-5-イル)-5-(トリフルオロメチル)ピリミジン-2-イル)アミノ)フェニル)アクロイルアミド（化合物Z-22）
化合物22-5（200 mg, 0.44 mmol）を原料とし、実施例1における工程7を参照して合成し、得られた粗製品を液相分離した後、化合物Z-22（44.9 mg、20％）を得た。MS m/z(ESI):568.8 [M+H]+；1HNMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.03 (s, 1H), 9.60 (s, 1H), 8.76 (s, 1H), 8.56 (s, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.16 (s, 2H), 6.72 (s, 1H), 6.52 (s, 1H), 6.42 (d, J = 16.8 Hz, 1H), 6.24 (dd, J = 17.0, 10.1 Hz, 1H), 5.64 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 3.83 (d, J = 24.8 Hz, 6H), 2.79 (s, 2H), 2.63 (s, 3H), 2.20 (d, J = 12.4 Hz, 8H)。
【０２００】
実施例23：N-(5-((5-クロロ-4-(1-オキサ-4-アザシクロヘプタン-4-イル)ピリミジン-2-イル)アミノ)-2-((2-(ジメチルアミノ)エチル)(メチル)アミノ)-4-メトキシフェニル)アクロイルアミド（Z-23）
【化５９】
0006267806.tif 000060
【０２０１】
工程1：4-(2,5-ジクロロピリミジン-4-イル)-1-オキサ-4-アザシクロヘプタン(化合物23-2)
0℃において、化合物2,4,5-トリクロロピリミジン（0.3 g，1.65 mmol）を10mLのTHFに入れ、トリエチルアミン（0.49 g，4.9 mmol）を入れ、ホモモルホリン（0.22 g，1.65 mmol，市販品）を反応液に滴下し、室温で1h撹拌した。TLCで反応の進展を検出し、反応が終了したら、水およびEAを入れ、有機層を分離し、有機層を飽和食塩水で洗浄し、乾燥し、減圧で濃縮させて化合物23-2（0.5 g）を得、産物をそのまま次の工程に使用した。MS m/z(ESI):248.0 [M+H]+。
【０２０２】
工程2：5-クロロ-N-(4-フルオロ-2-メトキシ-5-ニトロフェニル)-4-(1-オキサ-4-アザシクロヘプタン-4-イル)ピリミジン-2-アミン（化合物23-3）
化合物23-2（0.5 g，2.0 mmol）、4-フルオロ-2-メトキシ-5-ニトロアニリン（0.37 g，2.0 mmol）およびp-トルエンスルホン酸（0.87 g, 5.0 mmol）を10mLの1,4-ジオキサン溶液に入れた。110℃で、N2の保護下で8 h撹拌した。反応終了後、ろ過し、EAでケーキを洗浄し、ケーキを50℃で加熱乾燥し、粗製品の化合物23-3（0.45 g）を得、産物をそのまま次の工程に使用した。MS m/z(ESI):398.1 [M+H]+。
【０２０３】
工程3：N1-(5-クロロ-4-(1-オキサ-4-アザシクロヘプタン-4-イル)ピリミジン-2-イル)-N4-(2-(ジメチルアミノ)エチル)-2-メトキシ-N4-メチル-5-ニトロベンゼン1,4-ジアミン（化合物23-4）
化合物23-3（0.45 g, 1.1 mmol）を原料とし、実施例1における工程5を参照して合成し、粗製品の化合物23-4（0.4 g）を得、産物をそのまま次の工程に使用した。MS m/z(ESI):480.2[M+H]+。
【０２０４】
工程4：N4-(5-クロロ-4-(1-オキサ-4-アザシクロヘプタン-5-イル)ピリミジン-2-イル)-N1-(2-(ジメチルアミノ)エチル)-5-メトキシ-N-メチルベンゼン-1,2,4-トリアミン（化合物23-5）
化合物23-4（0.4 g, 0.83 mmol）を原料とし、実施例7における工程4を参照して合成し、化合物23-5（0.25 g）を得、産物をそのまま次の工程に使用した。MS m/z(ESI):450.2[M+H]+。
【０２０５】
工程5：N-(5-((5-クロロ-4-(1-オキサ-4-アザシクロヘプタン-4-イル)ピリミジン-2-イル)アミノ)-2-((2-(ジメチルアミノ)エチル)(メチル)アミノ)-4-メトキシフェニル)アクロイルアミド（化合物Z-23）
化合物23-5（0.25 g, 0.55 mmol）を原料とし、実施例1における工程7を参照して合成し、得られた粗製品を液相分離した後、化合物Z-23（69.8 mg、8.4％）を得た。MS m/z(ESI):504.2 [M+H]+；1HNMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.99 (s, 1H), 9.18 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.68 (s, 1H), 6.30 (dd, J = 17.0, 1.9 Hz, 1H), 6.20 (d, J = 9.9 Hz, 1H), 5.58 (dd, J = 10.0, 1.9 Hz, 1H), 4.03-3.98 (m, 2H), 3.96 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 3.83-3.79 (m, 2H), 3.78 (s, 3H), 3.72-3.66 (m, 2H), 2.84-2.75 (m, 2H), 2.61 (s, 3H), 2.19 (s, 2H), 2.17 (s, 6H), 1.98 (dd, J = 11.9, 5.9 Hz, 2H)。
【０２０６】
実施例24：N-(5-((4-((1S,4S)-2-オキサ-5α-アザビシクロ［2.2.1］ヘプタン-5-イル)-5-クロロピリジン-2-イル)アミノ)-2-((2-(ジメチルアミノ)エチル)(メチル)アミノ)-4-メトキシフェニル)アクロイルアミド（Z-24）
【化６０】
0006267806.tif 000061
【０２０７】
工程1：(1S,4S)-5-(2,5-ジクロロピリミジン-4-イル)-2-オキサ-5-アザビシクロ［2.2.1］ヘプタン(化合物24-2)
0℃において、化合物2,4,5-トリクロロピリミジン（0.3 g，1.65 mmol）を10mLのTHFに入れ、トリエチルアミン（0.5 g，4.9 mmol）を入れ、架橋モルホリン（0.22 g，1.65 mmol，市販品）を反応液に滴下し、室温で1h撹拌した。TLCで反応の進展を検出し、反応が終了したら、水およびEAを入れ、有機層を分離し、有機層を飽和食塩水で洗浄し、乾燥し、減圧で濃縮させて化合物24-2（0.36 g）を得、産物をそのまま次の工程に使用した。MS m/z(ESI): 246.0 [M+H]+。
【０２０８】
工程2：4-((1S,4S)-2-オキサ-5-アザビシクロ［2.2.1］ヘプタン-5-イル)-5-クロロ-N-(4-フルオロ-2-メトキシ-5-ニトロフェニル)ピリミジン-2-アミン（化合物24-3）
化合物24-2（0.36 g, 1.4 mmol）を原料とし、実施例23における工程2を参照して合成し、粗製品の化合物24-3（0.32 g）を得、産物をそのまま次の工程に使用した。MS m/z(ESI): 396.1 [M+H]+。
【０２０９】
工程3：N1-(4-((1S,4S)-2-オキサ-5-アザビシクロ［2.2.1］ヘプタン-5-イル)-5-クロロピリミジン-2-イル)-N4-(-2-(ジメチルアミノ)エチル)-2-メトキシ-N4-メチル-5-ニトロベンゼン-1,4-ジアミン（化合物24-4）
化合物24-3（0.32 g, 0.81 mmol）を原料とし、実施例1における工程5を参照して合成し、粗製品の化合物24-4（0.31 g）を得、産物をそのまま次の工程に使用した。MS m/z(ESI):478.1[M+H]+。
【０２１０】
工程4：N4-(4-((1S,4S)-2-オキサ-5-アザビシクロ［2.2.1］ヘプタン-5-イル)-5-クロロピリミジン-2-イル)-N1-(2-(ジメチルアミノ)エチル)-5-メトキシ-N1-メチルベンゼン-1,2,4-トリアミン（化合物24-5）
化合物24-4（0.31 g, 0.65 mmol）を原料とし、実施例7における工程4を参照して合成し、化合物24-5（0.22 g）を得、産物をそのまま次の工程に使用した。MS m/z(ESI):448.2[M+H]+。
【０２１１】
工程5：N-(5-((4-((1S,4S)-2-オキサ-5α-アザビシクロ［2.2.1］ヘプタン-5-イル)-5-クロロピリジン-2-イル)アミノ)-2-((2-(ジメチルアミノ)エチル)(メチル)アミノ)-4-メトキシフェニル)アクロイルアミド（化合物Z-24）
化合物24-5（0.2 g, 0.44 mmol）を原料とし、実施例1における工程7を参照して合成し、得られた粗製品を液相分離した後、化合物Z-24（60.1 mg、7.3％）を得た。MS m/z(ESI):502.2 [M+H]+；1HNMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.09 (s, 1H), 8.85 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 6.96 (s, 1H), 6.37 (dd, J = 16.9, 10.0 Hz, 1H), 6.22 (dd, J = 16.9, 2.1 Hz, 1H), 5.73 (dd, J = 10.0, 2.1 Hz, 1H), 5.32 (s, 1H), 4.61 (s, 1H), 3.88 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.81 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 3.73 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 3.59 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 2.85 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 2.68 (s, 3H), 2.25 (t, J = 5.9 Hz, 2H), 2.18 (s, 6H), 1.90 (d, J = 9.9 Hz, 1H), 1.78 (d, J = 9.7 Hz, 1H)。
【０２１２】
実施例25-78、87、88：
【化６１】
0006267806.tif 000062
実施例25-78、87および88における目的の化合物は式（IV-1）で表され、ここで、置換基R0、R2およびR3はいずれも水素で、残りの置換基A、R1、R6は下記表の通りである。
共通の工程：化合物Z-25〜Z-56、Z-87、Z-88は異なる置換のホウ酸エステルまたはホウ酸、5位置換の2,4-ジクロロピリミジンを原料とし、実施例1と類似の方法を参照して製造した。
化合物Z-57〜Z-78は異なるアミン、5位置換の2,4-ジクロロピリミジンを原料とし、実施例7と類似の方法を参照して製造した。
【０２１３】
【化６２−１】
0006267806.tif 000063
【０２１４】
【化６２−２】
0006267806.tif 000064
【０２１５】
【化６２−３】
0006267806.tif 000065
【０２１６】
【化６３−１】
0006267806.tif 000066
【０２１７】
【化６３−２】
0006267806.tif 000067
【０２１８】
実施例79-86
【化６４】
0006267806.tif 000068
実施例79-86における目的の化合物は式（IV-2）で表され、ここで、置換基R0、R2およびR3はいずれも水素で、残りの置換基A、R1は下記表の通りである。
共通の工程：化合物Z-79〜Z-82は異なるアミン、2,4-ジクロロ-1,3,5-トリアジンを原料とし、実施例23と類似の方法を参照して製造した。
化合物Z-83〜Z-86は異なる置換のホウ酸またはホウ酸エステル、および2,4-ジクロロ-1,3,5-トリアジンを原料とし、実施例14と類似の方法を参照して製造した。
【０２１９】
【化６５】
0006267806.tif 000069
【０２２０】
実施例89：N-(5-(5-クロロ-4-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)ピリミジン-2-イルアミノ)-2-(4-(ジメチルアミノ)ピペリジン-1-イル)-4-メトキシフェニル)アクロイルアミド（Z-89）の製造
【化６６】
0006267806.tif 000070
【０２２１】
工程1：窒素ガスの雰囲気において、1-メチル-4-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)-1H-ピラゾール（1.1g，5.25 mmol）、化合物19-1（745mg，4mmol）、Pd(dppf)Cl2 （109.7mg，0.15 mmol）および炭酸ナトリウム溶液（5 mL，2M）の混合物のアセトニトリル（30 mL）溶液を85℃で6 h撹拌した。反応終了後、水を入れてクエンチングし、反応混合物にEA（150 mL）を入れて層分離した後、水相をEA（50 mL×2）で2回抽出し、合併した有機相をNa2SO4で乾燥して濃縮させ、得られた粗製品をCombi-flashカラムクロマトグラフィー[PE: EA = 5: 1 - 2:1]によって分離・精製して0.6 gの目的産物89-2を得た。MS m/z(ESI)：229[M+H]+。工程2：化合物3a（159mg，0.5mmol）、化合物89-2（114mg，0.5mmol）、Pd2(dba)3（45.75 mg，0.05mmol）およびキサントホス（28.4 mg，0.05 mmol）の1,4-ジオキサン（4ml）溶液に炭酸セシウム（487.5mg，0.5 mmol）を入れ、反応化合物を100℃で3 h撹拌した後、反応混合物にEA（50ml×2）および水（10ml）を入れ、有機相を水（10ml×3）で洗浄した後、Na2SO4で乾燥し、濃縮させて粗製品を得、得られた粗製品から製造液相分離・精製によって表題の化合物Z-89（19mg，4％)を得た。MS m/z(ESI):511.2[M+H]+； 1HNMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.50 (s, 1H), 9.19 (s, 1H), 8.63 (s, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 6.69 (s, 1H), 6.28 (ddd, J = 26.8, 16.9, 5.7 Hz, 2H), 5.69 (dd, J = 9.9, 1.6 Hz, 1H), 4.00 (s, 3H), 3.81 (s, 3H), 2.96 (d, J = 12.1 Hz, 2H), 2.66 (t, J = 10.9 Hz, 2H), 2.15 (dd, J = 9.3, 5.5 Hz, 1H), 2.04 - 1.91 (m, 2H), 1.62 (s, 2H)。
【０２２２】
実施例90：N-(2-(4-(ジメチルアミノ)ピペリジン-1-イル)-5-(5-フルオロ-4-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)ピリミジン-2-イルアミノ)-4-メトキシフェニル)アクロイルアミド（Z-90）の製造
【化６７】
0006267806.tif 000071
製造方法は実施例89と同様で、違うのは実施例89の工程1における化合物19-1を化合物90-1に換え、表題の化合物Z-90を得た（42 mg、収率9％）。MS m/z(ESI):495.0 [M+H]+；1HNMR(400MHz，DMSO-d6) δ 9.05(1s, 1H), 9.01(1s, 1H),8.80(s, 1H), 8.48(d,J=4Hz, 1H), 8.18(s, 1H), 7.89(s, 1H), 6.87(s, 1H), 6.73(m, 1H), 6.32(m, 1H), 5.78(t, 1H), 3.97(s, 3H), 3.88(s, 3H), 3.01(d, J=12Hz, 2H), 2.66(t, 2H), 2.19(s, 6H), 2.16(m, 1H), 1.84(m, 2H), 1.71(m, 2H)。
【０２２３】
実施例91：N-(5-(5-クロロ-4-(1,3,5-トリメチル-1H-ピラゾール-4-イル)ピリミジン-2-イルアミノ)-2-((2-(ジメチルアミノ)エチル)(メチル)アミノ)-4-メトキシフェニル)アクロイルアミド（Z-91）の製造
【化６８】
0006267806.tif 000072
製造方法は実施例89と同様で、違うのは実施例89の工程1における化合物89-1を化合物91-1に、工程2における化合物3aを化合物2aに換え、表題の化合物Z-91を得た（22 mg、収率11％）。黄色の固体であった。MS m/z(ESI):513.2 [M+H]+； 1HNMR (400 MHz, CDCl3) δ9.32 (br. s., 1H), 8.43 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 6.66 (s, 1H), 6.35 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 5.62 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.70 (s, 3H), 2.92 (br. s., 2H), 2.63 (s, 3H), 2.34 (br. s., 6H), 2.21 (s, 3H), 2.19 (s, 3H), 1.60 (br. s., 2H)。
【０２２４】
実施例92：N-(5-(5-クロロ-4-(1,3,5-トリメチル-1H-ピラゾール-4-イル)ピリミジン-2-イルアミノ)-2-(4-(ジメチルアミノ)ピペリジン-1-イル)-4-メトキシフェニル)アクロイルアミド（Z-92）の製造
【化６９】
0006267806.tif 000073
【０２２５】
実施例93：N-(2-((2-(ジメチルアミノ)エチル)(メチル)アミノ)-5-(5-フルオロ-4-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)ピリミジン-2-イルアミノ)-4-メトキシフェニル)アクロイルアミド（Z-93）の製造
【化７０】
0006267806.tif 000074
【０２２６】
実施例94：N-(5-(5-クロロ-4-(1,3-ジメチル-1H-ピラゾール-4-イル)ピリミジン-2-イルアミノ)-2-((2-(ジメチルアミノ)エチル)(メチル)アミノ)-4-メトキシフェニル)アクロイルアミド（Z-94）の製造
【化７１】
0006267806.tif 000075
【０２２７】
製造方法は実施例91と同様で、違うのは実施例91の工程1における化合物91-1を化合物94-1に換え、表題の化合物Z-94を得た（13 mg、2.6％）。MS m/z(ESI):499.2[M+H]+； 1HNMR(400MHz，DMSO-d6) δ 10.13 (s, 1H), 8.46 (d, J = 3.1 Hz, 3H), 8.40 (s, 1H), 7.00 (s, 1H), 6.41 (dd, J = 16.7, 10.0 Hz, 1H), 6.22 (dd, J = 16.9, 2.0 Hz, 1H), 5.75 (dd, J = 10.1, 1.9 Hz, 1H), 3.81 (d, J = 17.7 Hz, 6H), 2.90 (s, 2H), 2.72 (s, 3H), 2.33 (s, 2H), 2.21 (d, J = 24.6 Hz, 9H)。
【０２２８】
実施例95：N-(5-(5-クロロ-4-(1,3-ジメチル-1H-ピラゾール-4-イル)ピリミジン-2-イルアミノ)-2-(4-(ジメチルアミノ)ピペリジン-1-イル)-4-メトキシフェニル)アクロイルアミド（Z-96）の製造
【化７２】
0006267806.tif 000076
【０２２９】
実施例96：N-(5-(5-クロロ-4-(1-(ピペリジン-1-イル)-1H-ピラゾール-4-イル)ピリミジン-2-イルアミノ)-2-(4-(ジメチルアミノ)ピペリジン-1-イル)-4-メトキシフェニル)アクロイルアミド（Z-96）の製造
【化７３】
0006267806.tif 000077
【０２３０】
工程1：0℃において、4-ヒドロキシピペリジン-1-カルボン酸t-ブチル（2.0g，10mmol）の塩化メチレン（20ml）溶液にトリエチルアミン（2.0g，20mmol）を入れ、さらにメタンスルホニルクロリド（1.73g，15mmol）の塩化メチレン（5ml）溶液を滴下した。反応混合物を1h撹拌した後、反応混合物を氷水に注ぎ、塩化メチレンで抽出し、有機相を食塩水で洗浄した後、無水Na2SO4で乾燥し、濃縮させ、2.5gの粗製品96-2を得、精製せずにそのまま次の工程に進んだ。MS m/z(ESI):223 [M-56]+。
【０２３１】
工程2：4-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2--ジオキサボロラン-2-イル)-1H-ピラゾール（97mg，0.5mmolのDMF溶液に化合物96-2（134mg，0.5mmol）および炭酸セシウム（245mg，0.75mmol）を入れ、反応混合物を90℃で12-16 h撹拌し、反応液を室温に冷却し、水を入れて希釈した。EAで抽出し、合併した有機相を食塩水で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥し、濃縮させて粗製品を得、Combi-flashカラムクロマトグラフィー[PE: EA = 100: 0 - 50:50]によって分離・精製して目的産物96-3を得た（2g、収率44％）。MS m/z(ESI):378.2[M＋1]+
【０２３２】
工程3：化合物19-1（549mg，3.0mmol）および化合物96-3（754mg，2.0mmol）を原料とし、実施例89における工程1を参照して製造し、目的物96-4を得た（580mg、収率73％）。MS m/z(ESI)：398 [M+H]+。
【０２３３】
工程4：化合物96-4（298mg，0.75mmol）、化合物2a（159mg，0.5mmol）、炭酸セシウム（326mg，1.0 mmol）およびキサントホス（58 mg，0.1 mmol）の1,4-ジオキサン（2ml）溶液にPd2(dba)3（46mg，0.05mmol）を入れ、反応液に対して窒素ガス置換を3回行い、160℃でマイクロ波で0.5 h反応させた後、反応液をろ過して濃縮させ、粗製品を得た。粗製品をCombi-flashカラムクロマトグラフィー[PE: EA = 100: 0 - 0: 100]によって分離・精製して表題の化合物96-5（250 mg）を得た。黄色の固体であった。MS m/z(ESI)：680.3[M+H]+。
【０２３４】
工程5：室温において、化合物96-5（240mg，0.35mmol）の塩化メチレン（10ml）溶液に塩酸/1,4-ジオキサンの混合液を入れ、反応混合物を室温で2 h撹拌し、Na2CO3を入れてPHを9とし、塩化メチレンを入れた。有機相を塩酸洗浄し、濃縮させて粗製品を得た。得られた粗製品から液相分離・精製を経て20 mgの表題の化合物Z-96を得、黄色の固体であった。MS m/z(ESI):580[M+H]+。
【０２３５】
実施例97：N-(5-(5-クロロ-4-(1,5-ジメチル-1H-ピラゾール-4-イル)ピリミジン-2-イルアミノ)-2-(4-(ジメチルアミノ)ピペリジン-1-イル)-4-メトキシフェニル)アクロイルアミド（Z-97）の製造
【化７４】
0006267806.tif 000078
【０２３６】
製造方法は実施例89と同様で、違うのは実施例89の工程1における化合物89-1を化合物97-1に換え、表題の化合物Z-97を得た（56.5mg、収率26％）。黄色の固体であった。MS m/z(ESI):525.2[M+H]+；1HNMR(400MHz，DMSO-d6) δ 8.99 (s, 1 H), 8.44 (s, 1 H) , 8.39 (s, 1 H), 8.20 (s, 1.5 H), 7.99 (s, 1 H), 6.81 (s, 1 H), 6.66 (dd, J=16.8, 10.0 Hz, 1 H), 6.22 (dd, J=16.8 Hz, 2.0 Hz, 1 H), 5.73 (d, J=10.4 Hz, 1 H), 3.79 (s, 3 H), 3.76 (s, 3 H), 3.07 (d, J=11.0 Hz, 2 H), 2.68 (t, J=11.0 Hz, 2 H), 2.46 (br. s., 1 H), 2.37(s, 6 H) , 2.34 (s, 3 H), 1.89 (d, J=10.5 Hz, 2 H), 1.75 (t, J=11.0 Hz, 2 H)。
【０２３７】
実施例98：N-(5-(5-クロロ-4-(1-ジメチル-1H-ピロール-3-イル)ピリミジン-2-イルアミノ)-2-(4-(ジメチルアミノ)ピペリジン-1-イル)-4-メトキシフェニル)アクロイルアミド（Z-98）の製造
【化７５】
0006267806.tif 000079
【０２３８】
工程1：化合物19-1（400 mg, 2.2 mmol）および1-メチル-3-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)-1H-ピロール（250mg，2.0mmol）を原料とし、実施例89における工程1を参照して合成し、得られた粗製品をCombi-Flashカラムクロマトグラフィー(PE: EA = 3:1)によって分離・精製して目的産物98-2を得た（80mg、収率17.6％）。MS m/z(ESI):228[M+H]+。
【０２３９】
工程2：化合物98-2（100mg，0.44mmol）の1,4-ジオキサン（6ml）溶液に化合物3a（140mg，0.4mmol）、Pd2(dba)3（41 mg，0.044mmol）、BINAP（55mg，0.088mmol）および炭酸セシウム（286mg，0.88 mmol）を入れた。反応液を130℃でマイクロ波で30分間反応させた。反応液をろ過して濃縮させて粗製品を得、得られた粗製品から液相分離・精製を経て94.47mgの表題の化合物Z-98を得、黄色の粉末であった。MS m/z(ESI):510.3 [M+H]+；1HNMR(400MHz，DMSO-d6) δ 9.06 (s, 1H), 8.80 (s, 1H), 8.34 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.92 (s, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.84 (dd, J = 5.6, 3.2 Hz, 2H), 6.71 (dd, J = 16.9, 10.2 Hz, 1H), 6.29 (dd, J = 17.0, 1.6 Hz, 1H), 5.77 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.74 (s, 3H), 3.05 (d, J = 11.4 Hz, 2H), 2.68 (t, J = 11.0 Hz, 2H), 2.42 (t, J = 11.1 Hz, 1H), 2.34 (s, 6H), 1.89 (d, J = 10.6 Hz, 2H), 1.79 - 1.67 (m, 2H)。
【０２４０】
実施例99：N-(5-(5-クロロ-4-(1-メチル-1H-ピロール-3-イル)ピリミジン-2-イルアミノ)-2-((2-(ジメチルアミノ)エチル)(メチル)アミノ)-4-メトキシフェニル)アクロイルアミド（Z-99）の製造
【化７６】
0006267806.tif 000080
【０２４１】
実施例100：N-(5-(5-クロロ-4-(1-ジメチル-1H-ピラゾール-4-イル)ピリミジン-2-イルアミノ)-4-メトキシ-2-(4-メチルピペラジン-1-イル)フェニル)アクロイルアミド（Z-100）の製造
【化７７】
0006267806.tif 000081
化合物4a（100mg，0.34mmol）および化合物89-2（80mg，0.34 mmol）を原料とし、実施例89の工程2的方法を参照して合成し、表題の化合物Z-100を得た（200mg，収率70％）。；MS m/z(ESI):483[M+H]+； 1HNMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.51 (s, 1H), 9.10 (s, 1H), 8.41 (s, 2H), 8.26 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 6.73 (s, 1H), 6.43 - 6.32 (m, 1H), 6.26 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 5.82 - 5.65 (m, 1H), 3.99 (s, 3H), 3.83 (s, 3H), 3.03 (s, 8H), 2.62 (s, 4H)。
【０２４２】
実施例101：N-(5-(5-クロロ-4-(1-(ジフルオロメチル)-1H-ピラゾール-4-イル)ピリミジン-2-イルアミノ)-2-(4-(ジメチルアミノ)ピペリジン-1-イル)-4-メトキシフェニル)アクロイルアミド（Z-101）の製造
【化７８】
0006267806.tif 000082
【０２４３】
工程1：アセトニトリル（100ml）に化合物4-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)-1H-ピラゾール101-1（4.0g，0.21mol）、クロロジフルオロ酢酸ナトリウム（3.77g 0.25mol）、15-クラウン-5（103.8g，0.65mol）を入れ、窒素ガスの保護下で還流するまで加熱し、24 h撹拌し、室温に冷却し、反応液を水（50 mL）に注いでクエンチングし、EA（100 ml × 3）で抽出し、飽和食塩水（20 ml）で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、ろ過し、ろ液を回転乾燥して白色固体の化合物101-2を得た(4.1g、収率80％)。MS m/z(ESI): 245.1 [M+H]+。
【０２４４】
工程2：テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（0.264g，2.58x10-4mol）の入った反応瓶に化合物101-2（2.1g，8.9x10-3mol）を溶解させたジメトキシエタン（20ml）溶液、化合物19-1（1.4g，8.0x10-3mol）を溶解させたジメトキシエタン（20ml）溶液および炭酸ナトリウム（1.8g，1.72x10-2mol）を溶解させた水溶液（11ml）を入れ、窒素ガスの保護下で、100 oCに加熱し、一晩撹拌し、室温に下げ、水（50ml）で反応液をクエンチングし、EA（3×100ml）で抽出し、飽和食塩水（30ml）で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過して濃縮させて油状物を得、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル、300-400目）によって石油エーテル：EA=30：1で溶離させて白色固体の化合物101-3を得た(870mg、収率30％)。MS m/z(ESI): 265.0 [M+H]+，純度 = 96.08 ％ (UV214)；1HNMR (400 MHz，DMSO) δ:9.21(s，1H)，8.95 (s，1H)，8.56 (s，1H)，7.94(t，J=58Hz,1H)。
【０２４５】
工程3：化合物101-3および化合物3aを原料とし、実施例89における工程2を参照して合成し、得られた粗製品から製造液相分離・精製を経て黄色固体の表題の化合物Z-101を得た。MS m/z(ESI):547[M+H]+；1HNMR(400MHz，DMSO-d6) δ 9.28 (s, 1H), 9.06 (s, 1H), 8.76 (s, 1H), 8.65 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.28 (d, J = 3.6 Hz, 2H), 7.92 (t, J = 58.6 Hz, 1H), 6.87 (s, 1H), 6.70 (dd, J = 17.0, 10.2 Hz, 1H), 6.29 (dd, J = 16.9, 1.7 Hz, 1H), 5.87 - 5.65 (m, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.04 (d, J = 11.6 Hz, 2H), 2.68 (t, J = 10.9 Hz, 2H), 2.26 (s, 7H), 1.85 (d, J = 10.5 Hz, 2H), 1.71 (d, J = 8.9 Hz, 2H)。
【０２４６】
実施例102：N-(5-(5-クロロ-4-(1H-ピラゾール-4-イル)ピリミジン-2-イルアミノ)-2-(4-(ジメチルアミノ)ピペリジン-1-イル)-4-メトキシフェニル)アクロイルアミド（Z-102）の製造
【化７９】
0006267806.tif 000083
【０２４７】
工程1：撹拌しながら、化合物101-1（5.0g，25.8mmol）および2,3-ジヒドロピラン（4.33g，51.5mmol）の塩化メチレン（100ml）溶液にDTSA（463mg，2.6mmol）を入れ、反応混合物を40℃で2 h撹拌した。反応終了後、反応液を水で洗浄し、EA抽出後、減圧で濃縮させて粗製品102-2を得た(7.0g，60％)。精製せずにそのまま次の工程に使用した。MS m/z(ESI):279 [M+H]+。
【０２４８】
工程2：化合物19-1（4.5 g，25 mmol）および化合物102-2（7.0 mg，25 mmol）を原料とし、実施例89における工程1を参照して製造し、得られた粗製品をCombi-flashカラムクロマトグラフィーによって分離・精製して目的物102-3を得た（850mg、収率10％）。MS m/z(ESI)：299[M+H]+。
【０２４９】
工程3：化合物102-3（300 mg，1 mmol）および化合物3a（320 mg，1 mmol）を原料とし、実施例89における工程2を参照して製造し、粗製品102-4を得た（60mg、収率70％）。精製せずにそのまま次の工程に使用した。MS m/z(ESI)：581 [M+H]+。
【０２５０】
工程4：撹拌しながら、化合物102-4 （700mg，1mmol）の塩化メチレン（5ml）溶液に塩酸/1,4-ジオキサン溶液（2ml）を入れ、反応液を室温で4 h撹拌し、粗製品を得、得られた粗製品から製造液相分離・精製を経て黄色固体の表題の化合物Z-102を得た（80mg、収率60％）。MS m/z(ESI):497 [M+H]+； 1HNMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.55 (s, 1H), 8.92 (s, 2H), 8.70 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 6.76 (s, 1H), 6.32 (dt, J = 17.0, 12.9 Hz, 2H), 5.76 (d, J = 9.9 Hz, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.04 (d, J = 11.9 Hz, 2H), 2.73 (t, J = 11.0 Hz, 2H), 2.36 (s, 6H), 2.24 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 2.05 (d, J = 11.5 Hz, 2H), 1.70 (s, 2H)。
【０２５１】
実施例103-127
実施例103-127における目的の化合物は式（IV-1）で表され、ここで、置換基R0、R2およびR3はいずれも水素で、残りの置換基A、R1、R6は下記表の通りである。共通の工程：化合物Z-103〜Z-127は異なる置換のホウ酸エステルまたはホウ酸、5位置換の2,4-ジクロロピリミジンを原料とし、実施例1と類似の方法を参照して製造した。
【０２５２】
【化８０−１】
0006267806.tif 000084
【０２５３】
【化８０−２】
0006267806.tif 000085
【０２５４】
【化８１−１】
0006267806.tif 000086
【０２５５】
【化８１−２】
0006267806.tif 000087
【０２５６】
比較例
比較化合物2および3はそれぞれ相応のホウ酸エステルおよび5位置換または無置換の2,4-ジクロロピリミジンを原料とし、実施例1と類似の方法を参照して製造した。
【化８２】
0006267806.tif 000088
【０２５７】
試験例1：野生型EGFRおよび突然変異型EGFRキナーゼに対する活性抑制試験
以下のz-lyte試験方法で使用された試薬はいずれもInvitrogenから購入することができる。
z-lyte方法によって被験物の二重突然変異型EGFRキナーゼ（EGFR T790M/L858Rキナーゼ）（Invitrogen，PV4879）、野生型EGFRキナーゼ（EGFR WT）（Invitrogen，PV3872）活性に対する抑制作用を測定した。
10 μL T790M/L858Rキナーゼ反応系における各成分の使用濃度は、25μM ATP, 0.08(または0.1) ng/μL EGFR T790M/L858Rキナーゼ、2 μM Tyr04 基質（Invitrogen，PV3193，以下同様)であった。本発明の上記実施例で製造された化合物（すなわち被験物）を入れた後のDMSOの濃度は2 ％であった。
10 μL EGFR WTキナーゼ反応系における各成分の使用濃度は、10μM ATP, 0.8 ng/μL EGFR WTキナーゼ、2 μM Tyr04 基質であった。被験物を入れた後のDMSOの濃度は2 ％であった。
【０２５８】
試験方法：
室温で10 mMの被験化合物ストーク液を溶解させて4％ DMSOの水勾配で最終濃度10 -0.005 μMに希釈した。各ウェルに2.5 μLの被験物溶液および5 μL の反応緩衝液で希釈されたEGFR T790M/L858Rキナーゼ(またはEGFR WTキナーゼ)とTyr04基質の混合物を入れ、さらに2.5 μLのATPを入れて反応開始させた。C1ウェルはATPの代わりに反応緩衝液を入れ、C2ウェルは何らの薬物も入れず、C3ウェルは説明書の記載に従ってリン酸化された基質を入れた。
室温でシェーカーで60 min反応させた後、5 μL Development Reagent B（Invitrogen）を入れ、室温でシェーカーで60 min反応させた。VictorX5蛍光マイクロプレートリーダー（PerkinElmer）でプレートを読み取り、励起波長が405 nmで、発光波長が450 nmおよび520 nmの光吸収を測定した。（たとえば、C3520nmはC3ウェルの520 nmにおける読み値を表す）。
【０２５９】
抑制率の計算方法は以下の通りである。
1、ER=Coumarin Emission (450nm)/Fluorescein Emission (520nm)
2、リン酸化率= (1-((ER×C3520nm-C3450nm)/((C1450nm-C3450nm)＋ER×(C3520nm-C1520nm)))) ×100％
3、抑制率 (IR)=(1-(被験化合物のリン酸化率)/(C2のリン酸化率)) ×100％
XLFIT 5.0ソフト(英国IDBS社)でフィッティングして半数阻害濃度IC50。を算出した。酵素に対する抑制活性および選択的抑制活性の結果は表1〜表3を参照する。
【０２６０】
【表１】
0006267806.tif 000089
【０２６１】
【表２】
0006267806.tif 000090
【０２６２】
【表３】
0006267806.tif 000091
【０２６３】
表1、表2および表3から、本発明の例示化合物は、EGFR突然変異型酵素（T790M/L858RおよびL858R）に強い抑制活性を示すが、EGFR野生型酵素（T790M WT）に対する抑制活性が弱く、陽性対照物BIBW2992（Afatinib）と比べると、本発明の化合物はEGFR突然変異型酵素に顕著な選択的抑制活性を有することがわかる。そして、本発明の例示化合物のEGFR突然変異型酵素に対する選択的抑制活性は比較化合物（具体的な構造は以下の通りで、WO2013014448A1を参照する）を超え、選択性は最高値で比較化合物1よりも18倍向上した。
【化８３】
0006267806.tif 000092
試験例2：MTT(3-(4,5-ジメチルチアゾール-2-イル)-2,5-ジフェニルテトラゾリウムブロミド)方法による細胞抑制活性の検出
MTT試験方法の工程は当業者に熟知の方法で行われ、方法で使用された試薬はいずれも市販品として入手可能である。
【０２６４】
2.1  試験方法：
まず、培地を捨てて0.25 ％のトリプシン/EDTA（Gibco, 25200-056）を入れた。 1回洗浄した後、さらに1.5 mLのトリプシン/EDTAを入れて細胞が分離するまで付着細胞を消化した後、3.5 mLの培地を入れて消化を終了させた。 消化した細胞の懸濁液を15 mL遠心管に移し、1300 rpmで3min遠心した後、上清を捨て、かつ新鮮な培地で細胞を懸濁させた。その後、細胞をカウントし、かつ細胞を希釈し、濃度をA431およびH1975細胞は2.78万/mL、NIH3T3は3.33万/mLとした。細胞を96ウェルプレート(BD 3072)に接種し、各ウェル90 μLずつ、一晩培養した。
A431細胞の培地は10％FBS (Gibco，10099-141) DMEM (Hyclone SH30243.01B)で、
NIH3T3細胞の培地は10％FBS (Gibco，10099-141) DMEM (Hyclone SH30243.01B)で、
H1975細胞の培地は10％FBS(Gibco，10099-141) RPMI-1640 (Hyclone SH30809.01B)であった。
【０２６５】
20 μLの10mM被験化合物を取り、2000、666.67、222.22、74.07、24.69、8.23、2.74、0.91 μMの濃度勾配で10×薬品を希釈し、さらに無血清培地(最終濃度は10、3.333、1.111、0.370、0.123、0.041、0.014、0.005 μM)を入れ、そして10 μL/ウェルの薬品を細胞培養プレートに入れ、ここで、DMSOの最終濃度は0.5％であった。
薬品を入れた後、細胞をインキュベーターに入れ、72h培養した後、各ウェルに10 μLの5 mg/mlのMTT (Sigma,M5655) 溶液を入れ、さらに96ウェルプレートを37℃、5％CO2のインキュベーターで4hインキュベートした。
その後、2000 rpm、5minの条件でプレートを遠心させ、上清を捨てた後、各ウェルに150 μLのDMSOを入れ、かつシェーカーでプレートを振とうさせてクリスタルバイオレットを全部溶解させた(約10-20min)。最後に、マイクロプレートリーダーで492 nmにおける光吸収を測定し、XLFIT 5.0ソフト(英国IDBS社)でIC50。を算出した。例示化合物の細胞に対する抑制活性および選択的抑制活性は表4〜表7を参照する。
【０２６６】
【表４】
0006267806.tif 000093
【０２６７】
【表５】
0006267806.tif 000094
【０２６８】
【表６】
0006267806.tif 000095
【０２６９】
【表７】
0006267806.tif 000096
【０２７０】
表4および表6から、本発明の例示化合物は、EGFR突然変異型細胞（H1975細胞）に強い抑制活性を示すが、EGFR野生型酵素（A431細胞）に弱い抑制活性を示し、陽性対照物BIBW2992と比べると、本発明の化合物はEGFR突然変異型細胞の生長に顕著な選択的抑制活性を有することがわかる。そして、ほとんどの例示化合物のEGFR突然変異型細胞の生長に対する選択的抑制活性はいずれも比較化合物1、2および3を超える。選択性は最高値で比較化合物1よりも4倍近くに向上した。また、研究では、Aをピリジン環またはキノリン環に換えた場合、H1975細胞に対する活性および細胞生長に対する選択的抑制活性は顕著に低下する。
表5および表7から、本発明の例示化合物は、NIH3T3細胞に高いIC50値を有するため、低い毒性を示すことがわかる。
【０２７１】
試験例3：EGFR T790M阻害剤の細胞活性のELISA法測定
以下の方法における試薬、溶液の調製方法および細胞処理と分解液の調製手順、ELISA検出手順はいずれもR&D DYC3570、R&D DYC1095EおよびR&D DYC1095BEの説明書に従って行われた。
【０２７２】
一、試薬と溶液
細胞分解緩衝液：1% NP-40，20 mM Tris (pH 8.0)，137 mM NaCl，10% glycerol，1 mM NaVO3，2 mM EDTA。
細胞分解液：細胞分解緩衝液 + 10 μg/mL アプロチニン(Aprotinin) (Sigma)、10 μg/mLロイペプチン(Leupeptin) (Sigma)で、使用直前に調製する。
1 x PBS緩衝液：NaCl: 0.137 M，KCl: 0.0027 M，Na2PO4-12H2O: 0.01M，KH2PO4 : 0.0015M，pH7.4。
洗浄緩衝液：0.05％ Tween-20を含有するPBS緩衝液。
検出抗体希釈液：20 mM Tris，137 mM NaCl，0.05% Tween-20，0.1% BSA，pH 7.2-7.4。
ブロッキング液：1％BSAを含有するPBS緩衝液。
ELISAキット：R&D DYC3570，R&D DYC1095EおよびR&D DYC1095BE。
【０２７３】
二、H1975細胞
2.1  H1975細胞処理と分解液の調製
(1) H1975細胞を1×104/ウェルの密度で96ウェルプレートに接種し、各ウェルに90 μLの10％FBS、1640培地で、37℃、5％ CO2で一晩培養した。
(2) 被験化合物をMTT実験における薬物希釈方法で希釈し、10μLの希釈された化合物または希釈されたDMSOを細胞培養プレートの相応のウェルに入れ、DMSOの最終濃度は0.5％で、37℃、5％ CO2で1時間培養した。DMSOだけで処理した細胞培養系を細胞コントロールとした。
(3) 培地を吸い捨てた後、100μLの細胞分解液を入れ、プレートを密封して-80℃の冷蔵庫に一晩置いた。細胞分解緩衝液をブランクコントロールとした。
【０２７４】
2.2  ELISA検出手順
R&D DYC1095EまたはR&D DYC1095BEについている説明書に従って操作した。
(1) R&D捕獲抗体((DYC1095BEまたはDYC1095E))をPBSで1:180希釈し、希釈された抗体を100μL/ウェルでELISA反応プレート(Corning costar 42592)に入れ、25℃のシェーカーで一晩コーティングさせた。
(2) 360μLの洗浄緩衝液で3回洗浄した。
(3) 300μLのブロッキング液を入れ、25℃のシェーカーで2時間インキュベートした。
(4) 360μLの洗浄緩衝液で3回洗浄した。
(5) 40μLの細胞分解緩衝液と60μLの細胞分解液を入れ、25℃のシェーカーで2時間インキュベートした。
(6) 360μLの洗浄緩衝液で3回洗浄した。
(7) 検出抗体を検出抗体希釈液でキットの説明書に書いた比率で希釈し、各ウェルに100μLずつ入れ、25℃のシェーカーで光を避けて1時間インキュベートした。
(8) 360μLの洗浄緩衝液で3回洗浄した。
(9) TMB基質(R&D DY999)におけるA試薬とB試薬を1:1で混合し、各ウェルに100μLずつ入れ、25℃のシェーカーで光を避けて20分間インキュベートした。
(10) 2N H2SO4を各ウェルに50μLずつ入れた。
(11) マイクロプレートリーダーでプレートを読み取り(Thermo Multiskan K3)、それぞれ細胞コントロール、ブランクコントロールおよび薬物処理の場合のOD 450値およびOD570値を測定し、かつ同様のウェルのOD 450値から相応のOD570値を引いてそれぞれOD細胞、ODブランクおよびOD薬物処理を得た。
【０２７５】
2.3  データ分析
抑制率(％)=100％×(OD細胞-OD薬物処理)/(OD細胞-ODブランク)
2.4 算出した抑制率からXLFIT 5.0ソフトでIC50値を計算し、表8に示す。
【０２７６】
三、A431細胞
3.1 A431細胞の処理と試験手順
(1) A431細胞を1×104/ウェルの密度で96ウェルプレートに接種し、各ウェルに90 μLの10％FBSを含有するDMEM培地で、37℃、5％ CO2で一晩培養した。
(2) A431細胞培地を90 μLの無血清DMEM培地に換え、続いて一晩培養した。
(3) 被験化合物をMTT実験における薬物希釈方法で希釈し、10μLの希釈された化合物または希釈されたDMSOを細胞培養プレートの相応のウェルに入れ、DMSOの最終濃度は0.5％で、37℃、5％ CO2で1時間培養した。その後、細胞コントロールウェル以外の各ウェルに10 μLの2μg/LのEGFを入れ、細胞ウェルに10 μLの無血清DMEMを入れて45分間培養した。EGFまたは薬物を入れない細胞を細胞コントロールとし、薬物を入れないがEGFだけ入れて処理した細胞をEGFコントロールとした。
(4) 培地を吸い捨てた後、100μLの細胞分解液を入れ、プレートを密封して-80℃の冷蔵庫に一晩置いた。
【０２７７】
3.2  ELISA検出手順
R&D DYC3570Eの説明書を参照して操作した。
(1) R&D捕獲抗体(DYC3570E)をPBSで1:180希釈し、希釈された抗体を100μL/ウェルでELISA反応プレート(Corning costar 42592)に入れ、25℃のシェーカーで一晩コーティングさせた。
(2) 360μLの洗浄緩衝液で3回洗浄した。
(3) 200μLのブロッキング液を入れ、25℃のシェーカーで2時間インキュベートした。
(4) 360μLの洗浄緩衝液で3回洗浄した。
(5) 40μLの細胞分解緩衝液と60μLの細胞分解液を入れ、25℃のシェーカーで2時間インキュベートした。
(6) 360μLの洗浄緩衝液で3回洗浄した。
(7) 検出抗体を検出抗体希釈液でキットの説明書に書いた比率で希釈し、各ウェルに100μLずつ入れ、25℃のシェーカーで光を避けて1時間インキュベートした。
(8) 360μLの洗浄緩衝液で3回洗浄した。
(9) TMB基質(R&D DY999)におけるA試薬とB試薬を1:1で混合し、各ウェルに100μLずつ入れ、25℃のシェーカーで光を避けて20分間インキュベートした。
(10) 2N H2SO4を各ウェルに50μLずつ入れた。
(11) マイクロプレートリーダーでプレートを読み取り(Thermo Multiskan K3)、それぞれ細胞コントロール、ブランクコントロールおよび薬物処理の場合のOD 450値およびOD570値を測定し、かつ同様のウェルのOD 450値から相応のOD570値を引いてそれぞれODEGF、OD薬物、OD細胞を得た。
【０２７８】
3.3  データ分析
抑制率(％)=100％×(ODEGF-OD薬物)/(ODEGF-OD細胞)
3.4 算出した抑制率からXLFIT 5.0ソフトでIC50値を計算し、表8に示す。
【０２７９】
【表８】
0006267806.tif 000097
【０２８０】
表8から、陽性対照物BIBW2992と比べると、本発明の化合物は細胞レベルの標的に顕著な選択的抑制活性を有することがわかる。そして、比較化合物1、2および3と比べ、細胞レベルの標的に対する選択的抑制活性は最高値で90倍に向上した。また、研究では、Aをピリジン環またはキノリン環に換えた場合、H1975細胞に対する活性および細胞レベルの標的に対する選択的抑制活性は顕著に低下し、ひいては選択的抑制活性がなくなる。
体外の酵素、細胞生長の抑制実験では、本発明の化合物は、EGFR突然変異型酵素、細胞に強い抑制活性を示すが、EGFR野生型酵素、細胞に弱い抑制活性を示すため、EGFR突然変異株の細胞に対して優れた選択性を有することが示された。細胞毒性実験では、NIH-3T3細胞に非常に弱い抑制作用を有するため、低い細胞毒性を示す。そのため、このような化合物はT790M突然変異のEGFRに対して優れた選択的抑制活性および低い細胞毒性を有する。
【０２８１】
試験例4：ラットまたはマウスにおける体内試験
LC/MS/MS法によってラットまたはマウスにそれぞれ胃内投与と静脉注射で実施例の化合物を投与した後の異なる時点の血漿における薬物濃度を測定し、本発明の化合物のラットまたはマウスの体内の薬物動態学的挙動を研究し、その薬物動態学的特徴を評価した。
【０２８２】
プロトコール：
試験動物：健康の成年オスSDラット(体重200-300g、6匹、禁食)またはオスCD1マウス(体重20-30g、18匹、摂食自由)で、SLAC社によって提供された。
投与様態と投与量：SDラットは、足背静脈投与(1 mg/kg，5 mL/kg，5％ DMAC(ジメチルアセトアミド), 5％ Solutol HS 15(ステアリン酸ポリエチレングリコール15)および90％食塩水および胃内投与(20 mg/kg，10 mL/kg，0.5％ CMC-Na水溶液)で、CD1マウスは、尾静脈投与(1 mg/kg, 5 mL/kg，5％ DMAC, 5％ Solutol HS 15および90％ Saline)および胃内投与(5 mg/kg, 10 mL/kg，0.5％ CMC-Na水溶液)であった。
【０２８３】
血液サンプルの採取：まず、投与前に選ばれた実験要求に合った動物に対し、体重を測って標識した。血液サンプルを採取する前に、ラットまたはマウスを固定し、投与したラットはそれぞれ予定の採血時点で(静脈投与：それぞれ投与前、投与後の0.083、0.25、0.5、1、2、4、8、24hで採血し、計9つの時点で、胃内投与：それぞれ投与前、投与後の0.083、0.25、0.5、1、2、4、8、24hで採血し、計9つの時点で)、尾静脈から、または心臓から(終末採血)約150 μL採血した。投与したマウスはそれぞれ予定の採血時点で(尾静脈投与は0.083、0.25、0.5、1、2、4、8、24hで採血し、計8つの時点で、胃内投与は0.25、0.5、1、2、4、8、24hで採血し、計7つの時点で)、眼窩から、または心臓から(終末採血)約150 μL採血した。血液を事前にK2EDTAを入れておいた1.5 mL試験管に移した。採取された血液サンプルを湿った氷の上に置き、5 min遠心し(2000 g, 4℃)、血漿と取り出し、全過程を採血後15 min以内で完成した。すべてのサンプルは、サンプルの分析まで-70oCの冷蔵庫に保存する必要がある。
【０２８４】
LC/MS/MS法によって薬物濃度を測定し、本発明の一部の実施例の化合物の同様の投与量および投与様態におけるラットおよびマウスの体内の薬物動態学的性質のパラメーターを表9に示す。
【０２８５】
【表９】
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表9から、本発明の例示化合物は薬物動態学的に吸収が良く、顕著な薬物動態学上の吸収効果を有し、しかも優れた生物的利用能を示すことがわかる。
【０２８６】
各文献がそれぞれ単独に引用されるように、本発明に係るすべての文献は本出願で参考として引用する。また、本発明の上記の内容を読み終わった後、この分野の技術者が本発明を各種の変動や修正をすることができるが、それらの等価の様態のものは本発明の請求の範囲に含まれることが理解されるはずである。