(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
固体または水性濃縮物である、２５ｍＮ／ｍ〜５０ｍＮ／ｍの表面張力を有し、哺乳類種の絶食状態の胃液及び絶食状態の上部小腸液を模擬するための、絶食状態生体関連媒体を調製するために適切な 、均質な組成物であって、
前記均質な組成物は以下の界面活性剤：
（i）少なくとも１つの胆汁塩；
（ii）以下から選択された少なくとも１つのリン脂質；
・６０重量％〜９９重量％のホスファチジルコリン（ＰＣ）を含むリン脂質組成物；
・５０重量％〜９０重量％のモノアシルＰＣを含む、部分的に酵素分解されたジアシルリン脂質を含むリン脂質組成物；
・ＰＣと、部分的に酵素分解された、モノアシルＰＣのレベルが５重量％〜８０ 重量％であるジアシルリン脂質との混合物を含むリン脂質組成物；
（iii）少なくとも１つの脂肪酸又は前記脂肪酸の１価塩；および
（iv）コレステロール を含む、均質な組成物。 
【請求項２】
前記少なくとも１つのリン脂質（ii）は以下：
・５０％〜９０％重量のモノアシルＰＣを含む部分的に酵素分解されたジアシルリン脂質を含むリン脂質組成物 ；
・ＰＣと、部分的に酵素分解された、モノアシルＰＣのレベルが５重量％〜８０重量％であるジアシルリン脂質との混合物を含むリン脂質組成物；
から選択される、請求項１に記載の均質な組成物。 
【請求項３】
前記界面活性剤の４０モル％〜９５モル％は、前記少なくとも１つの胆汁塩（i）からなること、並びに
前記界面活性剤の残りのモル％（即ち６０モル％〜５モル％）は、前記少なくとも１つのリン脂質（ii）、前記少なくとも１つの脂肪酸又は前記脂肪酸の１価塩（iii）および コレステロール（iv）からなること
を特徴とする、請求項１または２に記載の均質な組成物。 
【請求項４】
前記界面活性剤が２つの胆汁塩を含むことを特徴とする、請求項１または２に記載の均質な組成物。 
【請求項５】
前記少なくとも１つの胆汁塩はコール酸ナトリウム、タウロコール酸ナトリウム 、グリココール酸ナトリウム、デオキシコール酸ナトリウム、タウロデオキシコール酸ナ トリウム、グリコデオキシコール酸ナトリウム、ウルソデオキシコール酸ナトリウム、ケ ノデオキシコール酸ナトリウム、タウロケノデオキシコール酸ナトリウム、グリコケノデ オキシコール酸ナトリウム、コリルサルコシン酸ナトリウム、Ｎ−メチルタウロコール酸 ナトリウム及びこれらの遊離酸からなる群から選択されることを特徴とする、請求項１〜４のいずれか１項に記載の均質な組成物。 
【請求項６】
前記少なくとも１つの脂肪酸は、１４〜２２個の炭素原子を有する脂肪酸であることを特徴とする、請求項１〜５のいずれか１項に記載の均質な組成物。
【請求項７】
前記界面活性剤は０．００１モル％〜１０モル％のコレステロールを含むことを特徴とする、請求項１〜６のいずれか１項に記載の均質な組成物。
【請求項８】
−平均粒径１０μｍ〜１０００μｍ、充填密度０．３ｇ／ｃｍ3〜０．７ｇ／ｃｍ3 、含水率５重量％未満の粉末；
−平均粒径が２００μｍ〜２０００μｍの顆粒若しくはペレット；
−錠剤；および
−カプセル；
から選択される固体形態であることを特徴とする、請求項１〜７のいずれか１項に記載の均質な組成物。 
【請求項９】
水性媒体中に分散した１０重量％〜６０重量％の界面活性剤を含む水性濃縮物の形態 であることを特徴とする、請求項１〜７のいずれか１項に記載の均質な組成物。
【請求項１０】
哺乳類種の絶食状態胃液及び絶食状態上部小腸液を模擬するために適切な、水性生体関連媒体であって、前記水性生体関連媒体は２５ｍＮ／ｍ〜５０ｍＮ／ｍの表面張力を有し、そして請求項１〜７のいずれか１項において定義された界面活性剤(i)〜(iv)を含むことを特徴とする、水性生体関連媒体。
【請求項１１】
前記表面張力は、３５ｍＮ／ｍ〜４５ｍＮ／ｍであることを特徴とする、請求項１０に記載の水性生体関連媒体。 
【請求項１２】
緩衝剤、浸透圧関連成分、安定剤、抗酸化剤、ｐＨ調整剤、殺菌剤および酵素から選択 される成分を更に含む、請求項１０または１１に記載の水性生体関連媒体。
【請求項１３】
請求項１〜９のいずれか１項に記載の均一な組成物を、所定の量だけ水又は水性媒体に添加することによって、請求項１０〜１２のいずれか１項に記載の水性生体関連媒体を調製する方法。 
【請求項１４】
２５ｍＮ／ｍ〜５０ｍＮ／ｍの表面張力を有し、哺乳類種の絶食状態の胃液及び絶食状態の上部小腸液を模擬するための、絶食状態生体関連媒体を調製するために適切な 、均質な組成物を調製する方法であって、
前記均質な組成物は以下の界面活性剤：
（i）少なくとも１つの胆汁塩；
（ii）以下から選択された少なくとも１つのリン脂質；
・６０重量％〜９９重量％のホスファチジルコリン（ＰＣ）を含むリン脂質組成物；
・５０重量％〜９０重量％のモノアシルＰＣを含む、部分的に酵素分解されたジアシルリン脂質を含むリン脂質組成物；
・ＰＣと、部分的に酵素分解された、モノアシルＰＣのレベルが５重量％〜８０ 重量％であるジアシルリン脂質との混合物を含むリン脂質組成物；
（iii）少なくとも１つの脂肪酸又は前記脂肪酸の１価塩；および
（iv）コレステロール を含み、
ここで、前記均質な組成物は、固体形態であり、前記方法は、
溶媒、水又はこれらの混合物に界面活性剤を溶解させること、及び
前記溶媒、水又はこれらの混合物を除去し、それによって含水率が５重量％未満の固体 組成物をもたらすことを含む、方法。 
【請求項１５】
２５ｍＮ／ｍ〜５０ｍＮ／ｍの表面張力を有し、哺乳類種の絶食状態の胃液及び絶食状態の上部小腸液を模擬するための、絶食状態生体関連媒体を調製するために適切な 、均質な組成物を調製する方法であって、
前記均質な組成物は以下の界面活性剤：
（i）少なくとも１つの胆汁塩；
（ii）以下から選択された少なくとも１つのリン脂質；
・６０重量％〜９９重量％のホスファチジルコリン（ＰＣ）を含むリン脂質組成物；
・５０重量％〜９０重量％のモノアシルＰＣを含む、部分的に酵素分解されたジアシルリン脂質を含むリン脂質組成物；
・ＰＣと、部分的に酵素分解された、モノアシルＰＣのレベルが５重量％〜８０ 重量％であるジアシルリン脂質との混合物を含むリン脂質組成物；
（iii）少なくとも１つの脂肪酸又は前記脂肪酸の１価塩；および
（iv）コレステロール を含み、
ここで、前記均質な組成物は、１０重量％〜６０重量％の界面活性剤が、水を除去するための乾燥ステップなしで１５℃〜６０℃の温度において水性媒体中に均一に溶解又は分散する、水性濃縮物である、方法。
【請求項１６】
溶解性試験、溶出試験、生物学的同等性評価、薬剤放出評価、ＩＶＩＶＣ、インシリコ モデリング及びシミュレーション、薬剤の過飽和、薬剤の沈殿、薬剤の安定性、亢進され た処方の性能の評価または薬剤浸透性研究のための、請求項１０〜１２のいずれか１項に記載の水性生体関連媒体の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、生体関連組成物（ｂｉｏｒｅｌｅｖａｎｔ  ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ）及び当該組成物から生体関連媒体（ｂｉｏｒｅｌｅｖａｎｔ  ｍｅｄｉａ）を再構成する方法に関する。本発明は特に、新規の組成物、並びに選択された生体関連成分並びに胃及び腸内の絶食状態の体液を模擬する物理化学的パラメータによって定義された再現可能かつ安定した絶食状態の体液を模擬した生体関連媒体を調製するための方法を開示する。絶食状態の生体関連媒体は、経口投与に関する水難溶性化合物及びその剤形の溶解性及び溶出評価に適している。
【背景技術】
【０００２】
胃腸上部の生理機能及び溶出部位の重要性
消化管からの薬剤吸収が発生し得る段階の前に、薬剤は溶解状態とならなければならない。即時放出性の剤形にとって、放出及び溶出の最初の機会は胃の中である。ヒトの胃は、消化管に入る食物及び薬剤を処理する器官として機能する。絶食状態において、典型的にはヒトの胃内のｐＨは低い。低いｐＨでイオン化する塩基性薬剤は、このような条件下で容易に溶出でき、これによって薬剤は小腸に入るとすぐに吸収できるようになる。小腸で溶解しない塩基性薬剤の場合は、薬剤が小腸に入る前に胃で溶出することにより、薬剤を小腸から吸収できるようにするのを助ける。小腸において、難溶性の弱酸性薬剤の溶出は、より高いｐｈ（約５〜８）によって支援され、更に混合ミセルを含むコロイド状凝集体に難溶性薬剤を可溶化できる主に胆汁塩及びリン脂質である天然界面活性剤により強化される。
【０００３】
難溶性の化合物は、生物薬剤学分類システム（Ｂｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ  Ｓｙｓｔｅｍ：ＢＣＳ）においてクラス２及びクラス４化合物に分類される。これらの薬剤に関して、胃及び小腸における溶解性及び溶出は、経口投与後のバイオアベイラビリティにとって極めて重要である場合が多い。従って経口吸収が不十分な溶解性／溶出によって制限される薬剤の経口吸収の程度を評価するために、このような領域を模擬する媒体においてＢＣＢクラス２及び４の薬剤の溶解性及び溶出を試験することが望ましい。
【０００４】
医薬品業界において、絶食時模擬腸液（Ｆａｓｔｅｄ  Ｓｔａｔｅ  Ｓｉｍｕｌａｔｅｄ  Ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  Ｆｌｕｉｄ：ＦａＳＳＩＦ）等の生体関連媒体において溶解性を試験することは、新規の薬剤候補の前臨床評価の手順の一部として一般的である（非特許文献１）。
【０００５】
生体関連媒体とは何か
生体関連媒体は、インビトロで消化（ＧＩ）管内の条件を再現することを目的としている。典型的には、生体関連媒体はインビトロでの溶解性及び溶出の研究のために使用されるが、ＧＩ条件下での分解の研究又は薬剤の浸透特性の決定にも応用できる。生体関連媒体は典型的には、ＧＩ管内で自然に生じ、模擬すべき局所的領域の典型的なｐＨ値に調整された界面活性剤の溶液を含む。典型的には生体関連媒体は、絶食状態又は摂食状態における胃液及び腸液を反映するよう設計される。
【０００６】
新しい化合物の主成分及び公知の製剤のジェネリック版を、小腸に対応する生体関連媒体においてだけでなく、胃に対応する生体関連媒体においても試験することが推奨されている。
【０００７】
食物の有無にかかわらず投与できる製剤を開発することが好ましい。難溶性の薬剤の場合、不十分なバイオアベイラビリティは絶食状態での製剤の投与と関連していることが最も多いため、胃及び小腸の絶食状態に生物学的に関連した（ｂｉｏｒｅｌｅｖａｎｔ）条件下で、新しい薬剤候補及び処方を評価することが特に重要である。
【０００８】
未だ対処されていないニーズ
難溶性薬剤の溶解性及び溶出のインビトロ評価及びインビボでの放出の予測のための生体関連媒体を用いた様々な研究が報告されている（非特許文献２、非特許文献３等を参照）。しかしながらこれらの研究は、摂食状態の媒体又は絶食状態の媒体（一般に胆汁塩、リン脂質からなり、摂食状態の媒体においては食物の消化からの脂肪溶出産物に相当する脂肪酸及びモノグリセリドからなる）において行ったものである場合が多い。使用した成分は分析的に類似しておらず、従って物理化学的性質に関して、複数の研究に亘って組成を質的に比較できない。生体関連媒体を作製するための現在使用されている成分（例えば主要な性能パラメータ、表面張力に対して最適化されたもの）は、まだ選択されていない。更に、選択した媒体における最も近いインビトロ‐インビボ相関を提供するために、安定した特性を有し、薬剤及び処方の溶出及び溶解性の評価並びに比較のための試験現場となる異なる研究所において再現可能性を保証して実装できる媒体に関して、未だ対処されていないニーズが存在する。本媒体は、効率的な様式で容易かつ再現可能に調製できるという点で有利である。これというのは、これによって結果の信頼性がより高くなり、インビボ薬剤性能を良好に予測できるようになるからである。
【０００９】
別の制限は、今日に至るまで、ヒトの消化管を模擬するための生体関連媒体しか特定されていないことである。薬剤開発の前臨床段階における動物実験のための処方も開発しなければならないため、イヌ、サル、ミニブタ等の動物種における処方から、薬剤候補のインビボ放出及び溶出を予測できる生体関連媒体を利用できるようになることが特に望ましい。
【００１０】
定義
本明細書における「生体関連媒体」は、安定した生体関連媒体をインサイチュで再構成するための、選択した主要な界面活性剤及び任意に補助界面活性剤の特定の比率の混合物の「即席（ｉｎｓｔａｎｔ）」バージョン、即ち前駆体である。例示的な組成物は、例えば粉末、顆粒、ペレット、錠剤である均質な固体組成物であってもよい。例示的な組成物はまた、例えば５重量％〜６０重量％の界面活性剤混合物を含む水性濃縮液である均質な液体組成物であってもよい。均質な組成物とは特に、分子的に分散した成分を有する組成物である。
【００１１】
胃内の絶食状態条件下の生理液を模擬するための生体関連胃媒体は、一般に絶食状態模擬胃液（Ｆａｓｔｅｄ  Ｓｔａｔｅ  Ｓｉｍｕｌａｔｅｄ  Ｇａｓｔｒｉｃ  Ｆｌｕｉｄｓ（即ちＦａＳＳＧＦ））と記載される。小腸内の絶食状態条件下の生理液を模擬する生体関連腸媒体は、一般に絶食状態模擬腸液（Ｆａｓｔｅｄ  Ｓｔａｔｅ  Ｓｉｍｕｌａｔｅｄ  Ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  Ｆｌｕｉｄ（即ちＦａＳＳＩＦ））と記載される。
【００１２】
胃内の絶食状態条件下の生理液を模擬するための胆汁塩及びリン脂質（ジアシルリン脂質からなる）をモル比４：１で含む生体関連胃媒体は、具体的にオリジナルの絶食状態模擬胃液（ｏｒｉｇｉｎａｌ  Ｆａｓｔｅｄ  Ｓｔａｔｅ  Ｓｉｍｕｌａｔｅｄ  Ｇａｓｔｒｉｃ  Ｆｌｕｉｄ（即ちＦａＳＳＧＦ−Ｏｒｉｇｉｎａｌ））と記載される。
【００１３】
小腸内の絶食状態条件下の生理液を模擬するための胆汁塩及びリン脂質（ジアシルリン脂質からなる）をモル比４：１で含む生体関連腸媒体は、具体的にオリジナルの絶食状態模擬腸液（ｏｒｉｇｉｎａｌ  Ｆａｓｔｅｄ  Ｓｔａｔｅ  Ｓｉｍｕｌａｔｅｄ  Ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  Ｆｌｕｉｄ（即ちＦａＳＳＩＦ−Ｏｒｉｇｉｎａｌ））と記載される。
【００１４】
胃内の絶食状態条件下の生理液を模擬するための胆汁塩及びリン脂質（ジアシルリン脂質からなる）をモル比１５：１で含む生体関連胃媒体は、具体的に第２バージョンの絶食状態模擬胃液（ｓｅｃｏｎｄ  ｖｅｒｓｉｏｎ  ｏｆ  Ｆａｓｔｅｄ  Ｓｔａｔｅ  Ｓｉｍｕｌａｔｅｄ  Ｇａｓｔｒｉｃ  Ｆｌｕｉｄ（即ちＦａＳＳＧＦ−Ｖ２））と記載される。
【００１５】
小腸内の絶食状態条件下の生理液を模擬するための胆汁塩及びリン脂質（ジアシルリン脂質からなる）をモル比１５：１で含む生体関連腸媒体は、具体的に第２バージョンの絶食状態模擬腸液（ｓｅｃｏｎｄ  ｖｅｒｓｉｏｎ  ｏｆ  Ｆａｓｔｅｄ  Ｓｔａｔｅ  Ｓｉｍｕｌａｔｅｄ  Ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  Ｆｌｕｉｄ（即ちＦａＳＳＩＦ−Ｖ２））と記載される。
【００１６】
胃内の絶食状態条件下の生理液を模擬するための少なくとも１つの胆汁塩、少なくとも１つのジアシル又はモノアシルリン脂質並びに少なくとも１つの脂肪酸及び／又はモノアシルリン脂質、特にモノアシルＰＣを含む生体関連胃媒体は、具体的に第３バージョンの絶食状態模擬胃液（ｔｈｉｒｄ  ｖｅｒｓｉｏｎ  ｏｆ  Ｆａｓｔｅｄ  Ｓｔａｔｅ  Ｓｉｍｕｌａｔｅｄ  Ｇａｓｔｒｉｃ  Ｆｌｕｉｄ（即ちＦａＳＳＧＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎ））と記載される。
【００１７】
小腸内の絶食状態条件下の生理液を模擬するための少なくとも１つの胆汁塩、少なくとも１つのジアシル又はモノアシルリン脂質並びに少なくとも１つの脂肪酸及び／又はモノアシルリン脂質、特にモノアシルＰＣを含む生体関連腸媒体は、具体的に第３バージョンの絶食状態模擬腸液（ｔｈｉｒｄ  ｖｅｒｓｉｏｎ  ｏｆ  Ｆａｓｔｅｄ  Ｓｔａｔｅ  Ｓｉｍｕｌａｔｅｄ  Ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  Ｆｌｕｉｄ（即ちＦａＳＳＩＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎ））と記載される。
【００１８】
イヌに適合した生体関連胃媒体及び生体関連腸媒体は、具体的にＦａＳＳＧＦ−ｃａｎｉｎｅ及びＦａＳＳＩＦ−ｃａｎｉｎｅとそれぞれ記載される。
【００１９】
本明細書における「生体関連媒体」は、胃及び小腸内の絶食状態条件を模擬する水性媒体を意味する。
【００２０】
本明細書における用語の単数及び複数は、互いに置換可能である。
【００２１】
従来技術
生体関連腸媒体の開発における従来技術は一般に、難溶性化合物に対する溶解性及び溶出評価を包含し、それらの剤形は、例えば本明細書においてインビトロ‐インビボ相関及びインビボでの薬剤放出の予測のためのＦａＳＳＩＦ−Ｏｒｉｇｉｎａｌ、ＦｅＳＳＩＦ−Ｏｒｉｇｉｎａｌとして既知であるオリジナルバージョンを用いる（非特許文献１）。
【００２２】
ＩＶＩＳＩＶ（インビトロ‐インシリコ‐インビボ）モデリング及び模擬は、生体関連媒体から得られるインビトロでの溶解性及び溶出のデータに依存して、近年発達した（非特許文献４）。生理液のより精密な模擬のために、及び薬剤放出のより良好な予測を提供するために、主要な成分である胆汁塩及びリン脂質の異なる比率を採用するＦａＳＳＩＦ−Ｖ２、ＦｅＳＳＩＦ−Ｖ２が提案されてきた。
【００２３】
従来技術では、難溶性化合物の溶解性及び溶出特性に影響を及ぼし得るヒトの腸吸引液における界面活性剤のモル濃度及びモル比、ｐＨ、重量オスモル濃度、粘度、表面張力等の物理化学的要因を調査している（非特許文献３）。しかしながら、食物の効果及び界面活性剤のレベル以外のいずれの特定の要因も、インビトロでの溶解性及び溶出試験のための生体関連媒体の性質に有意に影響しないと考えられていた。従来技術の研究全体におけるＦａＳＳＩＦ−Ｏｒｉｇｉｎａｌ、ＦａＳＳＩＦ−Ｖ２媒体等は、難溶性薬剤の溶解性の改善及びより良好なインビトロ‐インビトロ相関を主要な目的として、様々な組み合わせ及び様々な質の胆汁塩、リン脂質、及び場合によっては脂肪酸を用いて調製されていた。薬剤のタイプに応じて、ＦａＳＳＩＦ−Ｏｒｉｇｉｎａｌ又はＦａＳＳＩＦ−Ｖ２は腸液により良好に適合し、これは薬剤によって媒体組成物が溶解性評価に適したものとなることを示唆している。
【００２４】
非特許文献６におけるレポートは、遊離脂肪酸‐モノグリセリドのレベル及びナノ構造組成物における比並びに摂食状態の腸液（ｆｅｄ  ｓｔａｔｅ  ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  ｆｌｕｉｄｓ（ＦｅＳＳＩＦ））を模擬する媒体の可溶化能力の影響を検討している。典型的な摂食状態及び絶食状態の媒体は、胆汁含有量が約６０％の粗胆汁抽出物を使用して調製され、表面張力（ＳＴ）、動的光散乱、極低温透過型電子顕微鏡を利用して、媒体中のナノ構造のタイプを比較した。媒体のＳＴは、主に界面活性剤の総濃度に応じて、胆汁塩の濃度又は脂肪酸とモノグリセリドとの比とは独立して、２８ｍＮ／ｍ〜４１ｍＮ／ｍの間で変動した。更に、ナノ構造のタイプはＦｅＳＳＩＦ中の脂肪酸及びモノグリセリドによるものであり、これはイオン化していない難溶性薬剤を可溶化するのに関与することがわかった。これに比べて、粗胆汁塩を含み、脂肪酸又はモノグリセリドを含まない従来技術のＦａＳＳＩＦｈのＳＴは、約４０ｍＮ／ｍであることがわかった。
【００２５】
Ｌｕｎｅｒ  Ｐ  Ｅらは非特許文献７において、胆汁塩及びリン脂質溶液のぬれ挙動に対する脂質の影響を根本的に評価した。生理学的条件下の摂食状態及び絶食状態の腸液に対応する脂肪酸及びモノグリセリドが溶液に追加された。固体ポリメチルメタクリレート（ＰＭＭＡ）モデル基質の表面の性質に起因する溶液のぬれ挙動が、表面張力、接触角と付着張力との相関関係を導き出すために検討された。報告によると、胆汁塩溶液中に存在する脂質のタイプ及び濃度の両方に依存するミセル系がぬれ挙動に影響した。模擬媒体中のリン脂質は、９０〜９６％の純ホスファチジルコリン（ＰＣ）及び＞９９％の純リゾレシチンからなる（酵素はモノアシルＰＣを含むジアシルリン脂質を部分的に分解しなかった）。胆汁成分は、ナトリウム塩としての＞９７％の純タウロデオキシコール酸及び＞９９％のタウロコール酸からなる。脂肪酸は、ドデカン（Ｃ１２）酸、ヘプタン（Ｃ７）酸、デカン（Ｃ１０）酸からなる最大１２及びそれ以下の炭素鎖長からなる。表面張力値は、純胆汁塩、純ＰＣ、純リゾレシチン並びに１２及びそれ以下の炭素鎖長を有する脂肪酸を含む脂質溶液から得られた。摂食状態の媒体における低い表面張力は、モノグリセリドによるものである。しかしながら研究は分析的に定義された胆汁塩の特定の組み合わせを含んでおらず；酵素は最大９０重量％のモノアシルＰＣ（即ちリゾＰＣ）を含むジアシルリン脂質を消化し；脂肪酸は少なくとも１４の炭素鎖長を有するもの（モノグリセリドを有さない）を絶食状態の媒体において有していた。一般的な見解は、界面活性剤は表面張力に影響するものの、溶出媒体の表面張力及び可溶化能力を調整するにあたって、インビボ条件を模倣するために使用するべき１つ若しくは複数の界面活性剤の種類又は濃度に関しては一致した意見がない、というものである。
【００２６】
Ｓｕｎｅｓｅｎ  Ｖ  Ｈらは非特許文献８において、摂食状態及び絶食状態の両方の腸液を模擬するための粗成分から調製した典型的な生体関連溶出媒体を使用するフロースルー溶出法を用いた薬剤のインビトロ‐インビボ相関（ＩＶＩＶＣ）の検討に重点を置いた研究を開示した。その目的は、難溶性薬剤であるダナゾールのＦａＳＳＩＦ中での溶出に影響を及ぼすことができる媒体の流体力学を評価することであった。結論は、ＦｅＳＳＩＦにおいて、薬剤としてのＩＶＩＶＣは、モノグリセリド及び脂肪酸を共に媒体中に含むことによってしか得られないというものであった。絶食状態において、最も関連の深い相関は、脂肪酸を有さず、かつ約５３％の胆汁塩を含有する粗胆汁抽出物からの６．３ｍＭの胆汁塩、及び粗レシチンからの４３％のＰＣを含有する１．２５ｍＭリン酸塩からの１．２５ｍＭｎのリン脂質を含有する媒体において達成された。概して、粗成分から調製したＦｅＳＳＩＦ及びＦａＳＳＩＦ媒体の表面張力は、ＦｅＳＳＩＦ中のモノグリセリド含有量及び／又はＦａＳＳＩＦ生成用の原料中の不純物を考慮に入れて、２５ｍＮ／ｍ〜３６ｍＮ／ｍの範囲であった。安定した表面張力を標的としたＦａＳＳＩＦ媒体を調製するための、特定の範囲の表面張力は提案されていない。
【００２７】
Ｋａｌａｎｔｚｉ  Ｌらは非特許文献９において、イヌ科の腸内容物及び例えばＦａＳＳＩＦ−Ｏｒｉｇｉｎａｌ等の模擬媒体の、絶食時及び接触時のヒトの腸吸引液における２つの塩基性薬剤の溶出の予測における相対的な有用性を評価した。模擬絶食状態媒体ＦａＳＳＩＦの表面張力値は４９．８ｍＮ／ｍと報告されており；イヌ科の腸液は試料を採取する間隔に応じて２８．３ｍＮ／ｍ〜３６．５ｍＮ／ｍの範囲であり；一方で絶食時のヒトの腸液の表面張力は３３．６ｍＮ／ｍである。示した例におけるＦａＳＳＩＦは、粗胆汁抽出物並びに９７重量％のジアシルＰＣ及び３重量％のリゾＰＣからなるリン脂質を使用して調製した。
【００２８】
特許文献１は、固体溶出組成物並びにＦａＳＳＩＦ及びＦｅＳＳＩＦの両方を含むヒト生体関連媒体を調製する方法を開示している。固体組成物は、モル比１：１〜２０：１の胆汁塩及びリン脂質からなる、胆汁塩とリン脂質との複合体を意味する。このリン脂質は幅広い種類のリン脂質から選択でき、レシチン、酵素加水分解レシチン、ジアシルリン脂質、モノアシルリン脂質であってもよい。
【００２９】
特許文献２は、胆汁塩並びにリン脂質を１：１及び１０：１の比で含み、また任意にモノグリセリド及び脂肪酸等のトリグリセリド消化の分解生成物を、胆汁塩に対して１：１０〜６：１の比で含む、摂食状態模擬腸液（ＦｅＳＳＩＦ）のみを調製するための生体関連媒体の即席形態を記載している。
【００３０】
従来技術は、市販認可が得られる以前又は以後のリスクを排除する生物学的同等性研究を支援することによって薬剤製品の薬学的開発を効率化するために、ヒトの医薬のための様々な処方を評価するために使用する媒体、及び臨床試験において使用される最適な処方の選択のために使用される媒体から得られる医薬製品の前臨床評価において典型的に使用される複数の動物用の別個の生体関連媒体を教示できていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００３１】
【特許文献１】国際公開第２００７／０５４３４２号
【特許文献２】国際公開第２００８／０４０７９９号
【非特許文献】
【００３２】
【非特許文献１】Ｄｒｅｓｓｍａｎ  ｅｔ．  ａｌ．，  Ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ  ｔｅｓｔｉｎｇ  ａｓ  ａ  ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ  ｔｏｏｌ  ｆｏｒ  ｏｒａｌ  ｄｒｕｇ  ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ：  ｉｍｍｅｄｉａｔｅ  ｒｅｌｅａｓｅ  ｄｏｓａｇｅ  ｆｏｒｍｓ．  Ｐｈａｒｍ．  Ｒｅｓ．  １５：１１−２２  （１９９８）
【非特許文献２】Ｓｈｏｎｏ  ｅｔ  ａｌ．  Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ  ａｎｄ  Ｂｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ  ７３  （２００９）  １０７−１１４
【非特許文献３】Ｋｌｅｂｅｒｇ  ｒｅｖｉｅｗ  （Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ  ａｎｄ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ２０１０；  ６２：  １６５６−１６６８）
【非特許文献４】Ｓｈｏｎｏ  ｅｔ．  ａｌ．，  Ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｆｏｏｄ  ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｎ  ｔｈｅ  ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃｅｌｅｃｏｘｉｂ  ｂａｓｅｄ  ｏｎ  ｂｉｏｒｅｌｅｖａｎｔ  ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ  ｔｅｓｔｉｎｇ  ｃｏｕｐｌｅｄ  ｗｉｔｈ  ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌｌｙ  ｂａｓｅｄ  ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃ  ｍｏｄｅｌｌｉｎｇ．  Ｅｕｒｏｐ．  Ｊｏｕｒｎａｌ  Ｐｈａｒｍ．  ａｎｄ  Ｂｉｏｐｈａｒｍ．  ７３  １０７−１１４  （２００９）
【非特許文献５】Ｊａｎｔｒａｔｉｄ  ｅｔ．  ａｌ．，  Ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ  Ｍｅｄｉａ  Ｓｉｍｕｌａｔｉｎｇ  Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｐｒｏｘｉｍａｌ  Ｈｕｍａｎ  Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  Ｔｒａｃｔ：  Ａｎ  Ｕｐｄａｔｅ．  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，  Ｖｏｌ．  ２５，  Ｎｏ．  ７，  （２００８）
【非特許文献６】Ｋｌｅｂｅｒｇ  Ｋ  ｅｔ  ａｌ，  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，  ｖｏｌ．９９，  ｎｏ．８．  １７th  Ｍａｙ  ２０１０，  ｐａｇｅｓ  ３５２２−３５３２
【非特許文献７】Ｌｕｎｅｒ  Ｐ  Ｅ  ｅｔ  ａｌ，  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，  ｖｏｌ．９０，  ｎｏ．３，  １  Ｊａｎｕａｒｙ  ２００１  （２００１−０１−０１）  ｐａｇｅｓ  ３４８−３５９
【非特許文献８】Ｓｕｎｅｓｅｎ  Ｖ  Ｈ  ｅｔ  ａｌ，  Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，  ｖｏｌ．  ２４，  ｎｏ．  ４，  １st  Ｍａｒｃｈ  ２００５，  （ｐａｇｅｓ  ３０５−３１３）
【非特許文献９】Ｋａｌａｎｔｚｉ  Ｌ  ｅｔ  ａｌ，  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，  ｖｏｌ．２３，  ｎｏ．６，  ２５th  Ｍａｙ  ２００６，  ｐａｇｅｓ  １３７３−１３８１
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００３３】
本発明の目的は、例えば絶食状態の消化管領域において分析的に定義され発見される生体関連成分の選択を含む、新規の組成物を提供することである。別の目的は、ヒト及び動物種において絶食状態条件を模擬する目的で、生体関連媒体を最適化することである。本発明の更なる目的は、哺乳類の胃及び上部腸管において絶食状態条件をより良好に模擬する目的で、再現可能な生体関連媒体を調製するために、分析的に定義された生体関連成分を選択する方法を提供することである。更なる目的は、水難溶性化合物及びその剤形のインビトロ溶解性、浸透性、過飽和、沈殿、放出及び溶出を試験するために使用できる、生体関連媒体を提供することである。
【００３４】
更に、生体関連媒体におけるインビトロ試験条件を改善することを目的とする。特に、複数の源からの界面活性剤に関連する変動を低減又は回避すること、薬剤処方を最適化するために必要な研究の数を最小化すること、インビボ生物学的同等性研究に大きく依存するリスクを低減することを目標とする。
【課題を解決するための手段】
【００３５】
上述の目的は、その成分だけでなくその一定の生理化学的特性、特に例えば一定の表面張力を特徴とする再現可能な媒体を得るための、分析的に定義された成分に基づくインビボ研究のために、生体関連媒体を構成することによって達成される。
【００３６】
本発明は、絶食状態生体関連媒体を調製するための、固体又は水性濃縮物であってよい新規の組成物について説明する。この絶食状態媒体はまず、胆汁塩と、胃及び小腸において絶食状態条件を模擬する界面活性剤との選択された組み合わせを含む。好ましい絶食状態生体関連媒体は、溶出及び溶解性試験に関して適切な範囲内の表面張力を標的とし、これにより、模擬絶食状態媒体において薬剤の溶解性及び溶出を生成及び比較する際に均一な基準を提供する。最適化されていない媒体と比較して、本発明において開示するような均一かつ標準化された、例えば最適化された生体関連媒体を使用して、新規の薬剤候補及びジェネリック処方の溶解性及び溶出を評価することにより、薬剤を吸収可能なものとすることに関する生物学的同等性試験において、薬剤化合物及び薬剤処方の不適切な溶解性及び溶出のより良好な識別を補助することができる。試験プログラム全体にわたって再現可能な物理的及び化学的特性を有する最適化された媒体における新規の薬剤候補の可能な処方の評価は、経口投与用の最適な処方を識別するために非常に効率的な、信頼性の高い方法である。従って本発明は特に、絶食状態生体関連媒体を調製するための固体又は水性濃縮物に関する。
【００３７】
生体関連媒体は有利には、生理化学的特性、特にインビトロ研究のための表面張力に関する標的範囲を特徴としてよい。
【００３８】
溶解性試験のために薬剤を絶食状態媒体に適合させると、上述の従来技術は続行できず、薬剤の溶解性評価に関してより再現可能で信頼性の高い媒体を作製するための特定の組み合わせ及び特定の成分を特定できない。分析的に特定された（１つ又は複数の）成分を利用して、絶食状態の胃液及び腸液を安定して再現可能に模擬する（１つ又は複数の）成分を定義するための方法は開示されていない。表面張力パラメータに関して組成物を最適化するための設備を提供する方法に関して、従来技術には説明されていない。驚くべきことに、本発明による最適化は、絶食状態生体関連媒体の再現性をより良好に制御できることが分かった。表面張力パラメータを標的とし、凝集状態、例えば模擬媒体中で混合されたミセルの構成に影響し得る成分は、溶解性及び溶出試験のための従来技術の絶食状態生体関連媒体においては重要な役割を有するものとして考慮されていなかった（Ｆｏｔａｋｉ  ａｎｄ  Ｖｅｒｔｚｏｎｉ，  Ｔｈｅ  Ｏｐｅｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｊｏｕｒｎａｌ，  ２０１０，  ４，  ２−１３）。
【００３９】
特に、絶食状態条件を模擬する再構成された生体関連媒体の表面張力の制御を標的とすることによって、難溶性化合物の溶解特性を事前に決定して最適化できることが分かった。驚くべきことに、表面張力を２５ｍＮ／ｍ〜５０ｍＮ／ｍの範囲に制御することによって、溶解値は最適化され、安定して有利なレベルとなることが分かった。更に、絶食状態条件を模擬する再構成された生体関連媒体の表面張力の制御は、この媒体の前駆体組成を事前に定義することによって事前に定義できることが分かった。結果として得られる表面張力値は、前駆体組成に大きく依存することが分かった。生体関連媒体の成分及びパラメータが多いため、表面張力を効果的に操作して実際に所望の範囲を標的とするために使用できる主要な成分及びパラメータを発見することが、更なる課題となった。いずれの従来技術も、このような表面張力の操作について開示していない。更にいずれの従来技術も、表面張力の操作方法を識別していない。
【００４０】
分かっている限りでは、選択された成分及び安定した表面張力を標的とする一意の組み合わせで構成されたヒト及びイヌ（その他の哺乳類種も含む）用の生体関連媒体を考慮した明示的な開示は従来技術には存在しない。とりわけ、先行技術文献はそれぞれ別個にも、又はそれらを組み合わせても、本発明の固体又は濃縮水性組成物を目標としてはいない。更に、胆汁塩並びにヒト及び他の哺乳類種の胃及び小腸の絶食状態条件を模擬する界面活性剤の組み合わせの的確な選択によって定義される、特に生理化学的特性を特徴とする最適化された（ただし表面張力が本発明による範囲内に限定されていない）生体関連媒体の便益は、従来技術には開示されていない。
【００４１】
分析的に特定された界面活性剤の特定の組み合わせを選択することによって定義される生体関連組成物を開示する。本発明による組成物は、絶食状態生体関連媒体を再構成するために特に有用な固体又は水性濃縮物であってよい。再構成された生体関連媒体は、分析的に定義された成分からなり、組成及び生理化学的特性に関してより安定して再現可能である。絶食状態媒体は有利には、分析的に定義された界面活性剤の総量（ｍｍｏｌ）、表面張力（ｍＮ／ｍ）、各界面活性剤の量及びモル比、ｐＨ、重量オスモル濃度（Ｏｓｍｏｌ／ｋｇ）緩衝能力並びにイオン強度を選択することにより、限度内に制限される。最も好ましくは、薬剤溶解性及び溶出試験のために、及び同一の薬剤の処方間での生物学的同等性の比較のために、媒体は少なくとも、絶食状態の胃及び小腸内の体液、特に絶食状態のヒト及びイヌ科動物の体液を模擬するための成分の選択によって定義された範囲内の媒体の組成及び表面張力の観点から最適化される。
【００４２】
本発明による生体関連媒体（特にＦａＳＳＧＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎ及びＦａＳＳＩＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎ）は、本質的に胆汁塩及びジアシルリン脂質成分からなるＦａＳＳＧＦ−Ｏｒｉｇｉｎａｌ、ＦａＳＳＧＦ−Ｖ２及びＦａＳＳＩＦ−Ｏｒｉｇｉｎａｌ、ＦａＳＳＩＦ−Ｖ２として一般に知られている、絶食状態条件を模擬する従来技術の媒体とは区別される。特に本発明による生体関連媒体は、脂肪酸及び／又は部分的に酵素分解されたジアシルリン脂質の形態で提供されるモノアシルＰＣを含む界面活性剤の組み合わせ、並びに２５ｍＮ／ｍ〜５０ｍＮ／ｍ、好ましくは３５ｍＮ／ｍ〜４５ｍＮ／ｍ、より好ましくは２８ｍＮ／ｍ〜４５ｍＮ／ｍ、最も好ましくは３０ｍＮ／ｍ〜４２ｍＮ／ｍの範囲の表面張力という生理化学的特性によって区別される。
【００４３】
従来技術のＦａＳＳＧＦ−Ｏｒｉｇｉｎａｌ、ＦａＳＳＩＦ−Ｏｒｉｇｉｎａｌ、ＦａＳＳＩＦ−Ｖ２は、開示された組成及びｋｅｙ界面活性剤成分が、脂肪酸及び／又は部分的に酵素分解されたジアシルリン脂質の形態で提供されるモノアシルＰＣを含まず、品質及び効果的な組成がある程度可変であるという点で、最適化されていない生体関連媒体であることが分かった。また、従来技術の絶食状態媒体の表面張力パラメータは、例えば２５ｍＮ／ｍ〜５０ｍＮ／ｍ、特に２８ｍＮ／ｍ〜４５ｍＮ／ｍ又は３０ｍＮ／ｍ〜４２ｍＮ／ｍの範囲外まで大幅に変化し得ることが分かった。最も驚くべきことに、上述のような組成の制御及び上述のような表面張力パラメータの調整は、薬剤の溶解性及び溶出試験条件を改善させることが分かった。
【００４４】
絶食状態生体関連媒体における表面張力の制御及び操作は、本発明において教示されるように、（１つ若しくは複数の）脂肪酸及び／又はモノアシルリン脂質、特にモノアシルＰＣを５０％〜９０％の範囲で含む部分的に酵素分解されたジアシルリン脂質の適切な量を選択することで達成される。
【００４５】
本発明による生体関連媒体は、その組成と、例えばｐＨ、緩衝性能、重量オスモル濃度並びに特に胃及び小腸の絶食状態条件を模擬した胆汁塩及び界面活性剤の選択によって定義される範囲内の表面張力といった生理化学的特性とに関して最適化及び標準化される。生理化学的特性の標的値は、絶食状態生体関連媒体（例えばＦａＳＳＧＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎ等のヒトＦａＳＳＧＦ、及びＦａＳＳＩＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎ等のヒトＦａＳＳＩＦ）中の界面活性剤の組み合わせに対して特異的であり、媒体を調製する度に安定して再現されるものである。
【００４６】
例示的実施形態
第１の例示的実施形態では、以下の態様及び下位態様を開示する。
【００４７】
第１の態様では、以下：
（ａ）少なくとも４０モル％〜９５モル％の１つの胆汁塩；並びに
（ｂ）残りのモル％を占める、少なくとも２つの界面活性剤、即ち：
−ジアシルリン脂質、及びそれ自体の１価塩を含む脂肪酸；又は
−モノアシルリン脂質、及びそれ自体の１価塩を含む脂肪酸；又は
−ジアシルリン脂質、モノアシルリン脂質、及びそれ自体の１価塩を含む脂肪酸；又は
−ジアシルリン脂質及びモノアシルリン脂質
を含む、哺乳類の消化管内で発生する複数の界面活性剤からなり、更に２５ｍＮ／ｍ〜５０ｍＮ／ｍの表面張力を特徴とする、哺乳類種の絶食状態の胃液及び絶食状態の上部小腸液を模擬した、標準化された水性生体関連媒体である。
【００４８】
第２の態様では、表面張力が３５ｍＮ／ｍ〜４５ｍＮ／ｍ、好ましくは２８ｍＮ／ｍ〜４５ｍＮ／ｍ、より好ましくは３０ｍＮ／ｍ〜４２ｍＮ／ｍである、態様１による生体関連媒体である。
【００４９】
第３の態様では、上記２つの界面活性剤の混合物中のモル比が１：２０〜２０：１である、態様１又は態様２による生体関連媒体である。
【００５０】
第４の態様では、コレステロール又はそのエステル、モノグリセリド、ジグリセリド、トリグリセリド、脂肪酸以外のリン脂質の分解産物、及びこれらの混合物からなる群から選択される、哺乳類の消化管内で自然発生する補助界面活性剤を０．００１モル％〜１０モル％更に含む、態様１〜３のいずれか１つによる標準化された生体関連媒体である。
【００５１】
第５の態様では、胆汁塩と、少なくとも２つの界面活性剤の上記組み合わせ及び場合によっては補助界面活性剤からなる界面活性剤の合計とのモル比が、２：３〜１９：１、好ましくは１：１〜１５：１、より好ましくは２：１〜６：１、最も好ましくは３：１〜５：１である、態様１〜４のいずれか１つによる生体関連媒体である。
【００５２】
第６の態様では、それ自体の１価塩を含む上記脂肪酸に対する、上記少なくとも１つのモノアシルリン脂質及びジアシルリン脂質の混合物中のモル比が１：２０〜２０：１である態様１〜５のいずれか１つによる生体関連媒体である。
【００５３】
第７の態様では、それ自体の１価塩を含む上記脂肪酸に対するジアシルリン脂質の混合物中のモル比が１：２０〜２０：１である、態様１〜６のいずれか１つによる生体関連媒体である。
【００５４】
第８の態様では、水、緩衝剤、浸透圧関連成分、安定剤、抗酸化剤、ｐＨ調整剤、殺菌剤、例えばペプシン、膵酵素である酵素から選択される成分を更に含む、態様１〜７のいずれか１つによる生体関連媒体である。
【００５５】
第９の態様では、２５ｍＮ／ｍ〜５０ｍＮ／ｍの表面張力を特徴とし、以下の界面活性剤：
（ａ）少なくとも４０モル％〜９５モル％の１つの胆汁塩；並びに
（ｂ）残りのモル％を占める、少なくとも２つの界面活性剤、即ち：
−ジアシルリン脂質、及びそれ自体の１価塩を含む脂肪酸；又は
−モノアシルリン脂質、及びそれ自体の１価塩を含む脂肪酸；又は
−ジアシルリン脂質、モノアシルリン脂質、及びそれ自体の１価塩を含む脂肪酸；又は
−ジアシルリン脂質及びモノアシルリン脂質
を含む、絶食状態生体関連媒体を調製するための均質な生体関連組成物である。
【００５６】
第１０の態様では、平均粒径１０μｍ〜１０００μｍ、充填密度０．３ｇ／ｃｍ3〜０．７ｇ／ｃｍ3、含水率５重量％未満の粉末形態；又は顆粒、ペレット、錠剤若しくはカプセルの形態であり、顆粒若しくはペレットの場合の平均粒径が２００μｍ〜２０００μｍである、態様９による均質な組成物である。
【００５７】
第１１の態様では、水性媒体中に分散した１０重量％〜６０重量％；好ましくは２０重量％〜６０重量％の界面活性剤を含み、並びに好ましくは抗酸化剤及び殺菌剤を更に含む液体組成物の形態である、態様９又は１０による均質な組成物である。
【００５８】
第１２の態様では、揮発性溶媒、水又はこれらの混合物に界面活性剤を溶解させること、及び溶媒を除去し、含水率が５重量％未満の固体組成物を得ることを含む態様９〜１１のいずれか１つによる均質な固体生体関連組成物を調製するための方法である。
【００５９】
第１３の態様では、１０重量％〜６０重量％の界面活性剤が、緩衝剤、浸透圧関連成分、安定剤、抗酸化剤、ｐＨ調整剤、殺菌剤から選択される成分を更に含む１５℃〜６０℃の水性媒体中に溶解又は分散され、水を除去するための乾燥ステップが存在しない、態様９〜１１のいずれか１つによる均質な固体生体関連組成物を調製するための方法である。
【００６０】
第１４の態様では、２〜２０ｍｍｏｌ、好ましくは２〜６ｍｍｏｌの態様９〜１３のいずれか１つの生体関連組成物を含むＦａＳＳＩＦ  ｈｕｍａｎ媒体、及び２〜２０ｍｍｏｌ、好ましくは１０〜１５ｍｍｏｌの態様９〜１３のいずれか１つの生体関連組成物を含むＦａＳＳＩＦ−ｃａｎｉｎｅ媒体を調製するための方法を開示し、本方法は、水性媒体を均質な固体に添加する又は液体組成物を水性媒体で希釈するためのステップを含み、水性媒体は緩衝剤及び浸透圧調節剤を含む。
【００６１】
第１５の態様では、０．０１ｍｍｏｌ〜５ｍｍｏｌ、好ましくは０．０１ｍｍｏｌ〜１ｍｍｏｌの態様９〜１３のいずれか１つの生体関連組成物を含むＦａＳＳＧＦ  ｈｕｍａｎ媒体、及び０．１ｍｍｏｌ〜５ｍｍｏｌ、好ましくは０．１ｍｍｏｌ〜２ｍｍｏｌの態様９〜１３のいずれか１つの生体関連組成物を含むＦａＳＳＧＦ−ｃａｎｉｎｅ媒体を調製するための方法を開示し、本方法は、水性媒体を均質な固体に添加する又は液体組成物を水性媒体で希釈するためのステップを含み、水性媒体は緩衝剤及び浸透圧調節剤を含む。
【００６２】
第１６の態様では、複数の界面活性剤及び任意に補助界面活性剤を独立して計量して、水、緩衝剤、浸透圧関連成分、安定剤、抗酸化剤、ｐＨ調整剤、殺菌剤、例えばペプシン、膵酵素である酵素から選択される成分を含む水性媒体に、別個に、共に又は順次溶解させることを含む、態様１〜８のいずれか１つによる生体関連媒体を調製するための方法である。
【００６３】
第２の例示的実施形態では、以下の態様及び下位態様を開示する。
【００６４】
第１の態様では、哺乳類種の絶食状態の胃液及び絶食状態の上部小腸液を模擬するための、２５ｍＮ／ｍ〜５０ｍＮ／ｍの表面張力を有する絶食状態生体関連媒体を調製するための、均質な生体関連組成物を開示し、この生体関連組成物は以下の界面活性剤：
少なくとも１つの胆汁塩、好ましくは以下の２つの胆汁塩、即ち：
（i）以下を含むリン脂質の群：
・６０重量％〜９９重量％のホスファチジルコリン（ＰＣ）；
・好ましくはＰＣとの逆混合によって得られる５０重量％〜９０重量％のモノアシルＰＣを含む、部分的に酵素分解されたジアシルリン脂質；
・ＰＣと、部分的に酵素分解されたジアシルリン脂質との混合物（ここでモノアシルＰＣのレベルは５重量％〜８０重量％である）
から選択された、少なくとも１つのリン脂質；及び
（ii）少なくとも１つの脂肪酸又はこの脂肪酸の１価塩
を含む。
【００６５】
第２の態様では、上記界面活性剤の４０モル％〜９５モル％が少なくとも１つの胆汁塩（i）からなること、並びに上記界面活性剤の残りのモル％（即ち６０モル％〜５モル％）が少なくとも１つのリン脂質（ii）及び少なくとも１つの脂肪酸又はこの脂肪酸の１価塩（iii）からなることを特徴とする、態様１による均質な組成物である。
【００６６】
第３の態様では、界面活性剤の上記残りのモル％が更にコレステロールを含むことを特徴とする、態様２による均質な組成物である。
【００６７】
第４の態様では、上記少なくとも１つの胆汁塩又は好ましくは２つの胆汁塩が、コール酸ナトリウム、タウロコール酸ナトリウム、グリココール酸ナトリウム、デオキシコール酸ナトリウム、タウロデオキシコール酸ナトリウム、グリコデオキシコール酸ナトリウム、ウルソデオキシコール酸ナトリウム、ケノデオキシコール酸ナトリウム、タウロケノデオキシコール酸ナトリウム、グリコケノデオキシコール酸ナトリウム、コリルサルコシン酸ナトリウム、Ｎ−メチルタウロコール酸ナトリウム及びこれらの遊離酸からなる群から選択されることを特徴とする、態様１〜３のいずれか１つによる均質な組成物である。
【００６８】
第５の態様では、上記少なくとも１つの脂肪酸が、１４〜２２個の炭素原子を有する脂肪酸のうちの少なくとも１つであることを特徴とする、態様１〜４のいずれか１つによる均質な組成物である。
【００６９】
第６の態様では、モノグリセリドを有さない態様１〜５のいずれか１つによる均質な組成物である。
【００７０】
第７の態様では、例えば：
−平均粒径１０μｍ〜１０００μｍ、充填密度０．３ｇ／ｃｍ3〜０．７ｇ／ｃｍ3、含水率５重量％未満の粉末；
−粒径が２００μｍ〜２０００μｍの顆粒若しくはペレット；
−錠剤；又は
−カプセル
等の固体形態の、態様１〜６のいずれか１つによる均質な組成物である。
【００７１】
第８の態様では、水性媒体中に分散した１０重量％〜６０重量％、好ましくは２０重量％〜６０重量％、好ましくは２０重量％〜５０重量％、より好ましくは３０重量％〜４０重量％の界面活性剤を含み、並びに好ましくは抗酸化剤及び殺菌剤を更に含む、例えば水性濃縮物等の液体組成物の形態である、態様１〜６のいずれか１つによる均質な組成物である。
【００７２】
第９の態様では：
（iii）少なくとも１つの胆汁塩、好ましくは２つの胆汁塩；
（iv）以下を含むリン脂質の群：
・６０重量％〜９９重量％のホスファチジルコリン（ＰＣ）；
・好ましくはＰＣとの逆混合によって得られる５０重量％〜９０重量％のモノアシルＰＣを含む、部分的に酵素分解されたジアシルリン脂質；
・ＰＣと、部分的に酵素分解されたジアシルリン脂質との混合物（ここでモノアシルＰＣのレベルは５重量％〜８０重量％である）
から選択された、少なくとも１つのリン脂質；及び
（v）少なくとも１つの脂肪酸又はこの脂肪酸の１価塩
を含み、表面張力が２５ｍＮ／ｍ〜５０ｍＮ／ｍである、哺乳類の消化管内で発生する界面活性剤からなる、哺乳類種の絶食状態胃液及び絶食状態上部小腸液を模擬するための、水性生体関連媒体である。
【００７３】
この水性生体関連媒体は有利には、第１の態様による上述の均質な生体関連組成物から調製される。
【００７４】
第１０の態様では、表面張力が３５ｍＮ／ｍ〜４５ｍＮ／ｍ、好ましくは２８ｍＮ／ｍ〜４５ｍＮ／ｍ、より好ましくは３０ｍＮ／ｍ〜４２ｍＮ／ｍである、態様９による水性生体関連媒体である。
【００７５】
第１１の態様では、上記界面活性剤の４０モル％〜９５モル％が少なくとも１つの胆汁塩（i）からなること、並びに上記界面活性剤の残りのモル％（即ち６０モル％〜５モル％）が少なくとも１つのリン脂質（ii）及び少なくとも１つの脂肪酸又はこの脂肪酸の１価塩（iii）からなることを特徴とする、態様９又は１０による水性生体関連媒体である。
【００７６】
第１２の態様では、界面活性剤の上記残りのモル％が更にコレステロールを含むことを特徴とする、態様９〜１１のいずれか１つによる水性生体関連媒体である。
【００７７】
第１３の態様では、上記少なくとも１つの胆汁塩又は好ましくは２つの胆汁塩が、コール酸ナトリウム、タウロコール酸ナトリウム、グリココール酸ナトリウム、デオキシコール酸ナトリウム、タウロデオキシコール酸ナトリウム、グリコデオキシコール酸ナトリウム、ウルソデオキシコール酸ナトリウム、ケノデオキシコール酸ナトリウム、タウロケノデオキシコール酸ナトリウム、グリコケノデオキシコール酸ナトリウム、コリルサルコシン酸ナトリウム、Ｎ−メチルタウロコール酸ナトリウム及びこれらの遊離酸からなる群から選択されることを特徴とする、態様９〜１２のいずれか１つによる水性生体関連媒体である。
【００７８】
第１４の態様では、上記少なくとも１つの脂肪酸が、１４〜２２個の炭素原子を有する脂肪酸のうちの少なくとも１つであることを特徴とする、態様９〜１３のいずれか１つによる水性生体関連媒体である。
【００７９】
第１５の態様では、モノグリセリドを有さない態様９〜１４のいずれか１つによる水性生体関連媒体である。
【００８０】
第１６の態様では、ヒトＦａＳＳＧＦを模擬するための界面活性剤の総量が０．０１ｍｍｏｌ〜５ｍｍｏｌ、好ましくは０．０１ｍｍｏｌ〜１ｍｍｏｌである態様９〜１５のいずれか１つによる水性関連媒体である。
【００８１】
第１７の態様では、ヒトＦａＳＳＩＦを模擬するための界面活性剤の総量が２ｍｍｏｌ〜２０ｍｍｏｌ、好ましくは２ｍｍｏｌ〜６ｍｍｏｌである態様９〜１５のいずれか１つによる水性関連媒体である。
【００８２】
第１８の態様では、イヌ科動物ＦａＳＳＧＦを模擬するための界面活性剤の総量が０．１ｍｍｏｌ〜５ｍｍｏｌ、好ましくは０．１ｍｍｏｌ〜２ｍｍｏｌ、より好ましくは０．０１ｍｍｏｌ〜５ｍｍｏｌである態様９〜１５のいずれか１つによる水性関連媒体である。
【００８３】
第１９の態様では、イヌ科動物ＦａＳＳＩＦを模擬するための界面活性剤の総量が２ｍｍｏｌ〜２０ｍｍｏｌ、好ましくは５ｍｍｏｌ〜２０ｍｍｏｌ、より好ましくは１０．０ｍｍｏｌ〜１５．０ｍｍｏｌである態様９〜１５のいずれか１つによる水性関連媒体である。
【００８４】
第２０の態様では、少なくとも１つの胆汁塩を少なくとも６０モル％、より好ましくは少なくとも７０モル％含む、態様１６〜１９のいずれか１つによる生体関連媒体である。
【００８５】
第２１の態様では、それ自体の１価塩を含む上記脂肪酸に対する、上記少なくとも１つのモノアシルＰＣ及びジアシルＰＣの合計モルのモル比が１：２０〜２０：１である態様９〜２０のいずれか１つによる水性生体関連媒体である。
【００８６】
第２２の態様では、モノアシルＰＣに対するジアシルＰＣのモル比が１：２０〜２０：１である態様９〜２１のいずれか１つによる水性生体関連媒体である。
【００８７】
第２３の態様では、それ自体の１価塩を含む上記脂肪酸に対するジアシルＰＣのモル比が１：２０〜２０：１である態様９〜２２のいずれか１つによる水性生体関連媒体である。
【００８８】
第２４の態様では、水、緩衝剤、浸透圧関連成分、安定剤、抗酸化剤、ｐＨ調整剤、殺菌剤、例えばペプシン、膵酵素である酵素から選択される成分を更に含む、態様９〜２３のいずれか１つによる水性生体関連媒体である。
【００８９】
第２５の態様では、態様１〜８のいずれか１つによる生体関連組成物を、所定の量だけ水又は水性媒体に添加することによって、生体関連媒体を再構成する方法である。
【００９０】
第２６の態様では、溶媒、水又はこれらの混合物に界面活性剤を溶解させること、及び溶媒を除去し、含水率が５重量％未満の固体組成物を得ることを含む、態様７による固体生体関連組成物を調製するための方法である。
【００９１】
第２７の態様では、１０重量％〜６０重量％の界面活性剤が、緩衝剤、浸透圧関連成分、安定剤、抗酸化剤、ｐＨ調整剤、殺菌剤から選択される成分を更に含む１５℃〜６０℃の水性媒体中に溶解又は分散され、水を除去するための乾燥ステップが存在しない、態様８による水性濃縮物を調製するための方法である。
【００９２】
第２８の態様では、水性媒体を上記固体に添加する又は上記液体生体関連組成物を水性媒体で希釈するステップを含み、水性媒体は緩衝剤及び浸透圧調節剤を含む、態様９〜２４のいずれか１つによる絶食状態媒体を模擬する水性生体関連媒体を調製するための方法である。
【００９３】
第２９の態様では、複数の界面活性剤及び任意に補助界面活性剤を独立して計量して、水、緩衝剤、浸透圧関連成分、安定剤、抗酸化剤、ｐＨ調整剤、殺菌剤、例えばペプシン、膵酵素である酵素から選択される成分を含む水性媒体に、別個に、共に又は順次溶解させることを含む、態様９〜２４のいずれか１つによる水性生体関連媒体を調製するための方法である。
【００９４】
第３０の態様では、溶解性試験、溶出試験、生物学的同等性評価、薬剤放出評価、ＩＶＩＶＣ、インシリコモデリング及び模擬、薬剤の過飽和、薬剤の沈殿、薬剤の安定性、亢進された処方の性能並びに薬剤浸透性研究のために、分析的に定義された界面活性剤を特定の比率で含む、態様９〜２４のいずれか１つによる水性絶食状態生体関連媒体の使用である。
【発明を実施するための形態】
【００９５】
固体組成物及び水性濃縮物
本発明は、固体又は液体であってよい新規の生体関連組成物について説明する。
【００９６】
特に固体組成物及び液体組成物、例えば水性濃縮物を、再現可能な絶食状態生体関連媒体を再構成するために使用する。
【００９７】
例えば本組成物は、以下から選択される哺乳類の消化管で発生する分析的に定義された以下の界面活性剤の選択を含むか、又は上記選択からなる：
（i）コール酸ナトリウム、タウロコール酸ナトリウム、グリココール酸ナトリウム、デオキシコール酸ナトリウム、タウロデオキシコール酸ナトリウム、グリコデオキシコール酸ナトリウム、ウルソデオキシコール酸ナトリウム、ケノデオキシコール酸ナトリウム、タウロケノデオキシコール酸ナトリウム、グリコケノデオキシコール酸ナトリウム、コリルサルコシン酸ナトリウム、Ｎ−メチルタウロコール酸ナトリウム及びこれらの遊離酸からなる群から選択される、上記少なくとも１つの、好ましくは２つの胆汁塩；
（ii）以下を含む実質的に純粋なリン脂質の群：
・６０重量％〜９９重量％のホスファチジルコリン（ＰＣ）；
・好ましくはＰＣとの逆混合によって得られる５０重量％〜９０重量％のモノアシルＰＣを含む、部分的に酵素分解されたジアシルリン脂質；
・ＰＣ（i）と、部分的に酵素分解されたジアシルリン脂質（ii）との混合物（ここでモノアシルＰＣのレベルは５重量％〜８０重量％である）
から選択された、少なくとも１つのリン脂質；並びに
（iii）少なくとも１つの脂肪酸又はこの脂肪酸の１価塩、好ましくは１４〜２２個の炭素原子を有する少なくとも１つの脂肪酸又は１４〜２２個の炭素原子を有する少なくとも１つの脂肪酸の１価塩。
【００９８】
特に絶食状態生体関連媒体を作製するための上記固体及び水性濃縮物中の界面活性剤の総量に対する百分率としての、各界面活性剤のモル濃度は：
（ａ）少なくとも１つの胆汁塩：４０〜９５モル％、（少なくとも４０モル％かつ４０モル％〜５０モル％）、（少なくとも５０モル％かつ５０モル％〜６０モル％）、（少なくとも６０モル％かつ６０モル％〜７０モル％）、好ましくは（少なくとも７０モル％かつ７０モル％〜８０モル％）、より好ましくは（少なくとも８０モル％かつ８０モル％〜９０モル％）、最も好ましくは（少なくとも９０モル％かつ９０モル％〜９５モル％）；
（ｂ）少なくとも１つのリン脂質：０．１モル％〜４０モル％（好ましくは０．５モル％〜３０モル％、１モル％〜２０モル％、より好ましくは２モル％〜２０モル％、より好ましくは１モル％〜１５モル％）
ここでリン脂質は：
（i）６０重量％〜９９重量％のＰＣを含む実質的に純粋なジアシルリン脂質；又は
（ii）ＰＣとの逆混合によって得られる５０重量％〜９０重量％のモノアシルＰＣを含む、部分的に酵素分解されたジアシルリン脂質；又は
（iii）ＰＣ（i）と、部分的に酵素分解されたジアシルリン脂質（ii）との混合物（ここでモノアシルＰＣのレベルは５重量％〜８０重量％である）
を含む；
（ｃ）少なくとも１つの（好ましくは１４〜２２個の炭素原子を有する）脂肪酸又は上記脂肪酸の１価塩：０．１モル％〜４０モル％（好ましくは０．５モル％〜３０モル％、１モル％〜２０モル％、より好ましくは２モル％〜２０モル％、より好ましくは１モル％〜１５モル％）；及び任意に
（ｄ）コレステロール：０モル％〜１０モル％（好ましくは０．００１モル％〜１０モル％、好ましくは０．０１モル％〜７．５モル％、より好ましくは０．０１モル％〜５モル％、より好ましくは０．０１モル％〜１モル％）
である。
【００９９】
生体関連固体組成物、水性濃縮物及び結果として得られる絶食状態生体関連媒体中の、（ａ）、（ｂ）、（ｃ）の選択された生体関連界面活性剤間のモル比の範囲は、以下の通りである：
・リン脂質及び１４〜２２個の炭素原子を有する脂肪酸又は上記脂肪酸の１価塩に対する、胆汁塩のモル比は、１：２〜２０：１である；
・リン脂質に対する胆汁塩のモル比は、１：１〜２０：１、好ましくは４：１〜１５：１、より好ましくは８：１〜１５：１である；
・１４〜２２個の炭素原子を有する脂肪酸又は上記脂肪酸の１価塩に対する、ＰＣのモル比は、１：２０〜２０：１、好ましくは約１：５〜５：１、より好ましくは１：２〜２：１である；
・１４〜２２個の炭素原子を有する脂肪酸又は上記脂肪酸の１価塩に対する、モノアシルＰＣのモル比は、１：２０〜２０：１、好ましくは約１：５〜５：１、より好ましくは１：２〜２：１である；
・１４〜２２個の炭素原子を有する脂肪酸又は上記脂肪酸の１価塩に対する、リン脂質（ＰＣ及びモノアシルＰＣ）のモル比は、１：２０〜２０：１、好ましくは約１：５〜５：１、より好ましくは１：２〜２：１である；
・モノアシルＰＣに対するＰＣのモル比は、１：２０〜２０：１、好ましくは約１：２０〜１：１、より好ましくは１：２０〜１：２である。
【０１００】
ヒト生体関連媒体（ＦａＳＳＧＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎ及びＦａＳＳＩＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎ）
最適化された生体関連媒体は例えば、哺乳類の消化管内で発生する表面張力を標的とする以下の界面活性剤の選択を含むか、又は上記選択からなる：
（i）コール酸ナトリウム、タウロコール酸ナトリウム、グリココール酸ナトリウム、デオキシコール酸ナトリウム、タウロデオキシコール酸ナトリウム、グリコデオキシコール酸ナトリウム、ウルソデオキシコール酸ナトリウム、ケノデオキシコール酸ナトリウム、タウロケノデオキシコール酸ナトリウム、グリコケノデオキシコール酸ナトリウム、コリルサルコシン酸ナトリウム、Ｎ−メチルタウロコール酸ナトリウム及びこれらの遊離酸からなる群から選択される、上記少なくとも１つの、好ましくは２つの胆汁塩；
（ii）６０重量％〜９９重量％のホスファチジルコリン（ＰＣ）を含む実質的に純粋なジアシルリン脂質；逆混合プロセスによって得られる５０重量％〜９０重量％のモノアシルＰＣを含む、部分的に酵素分解されたジアシルリン脂質；５重量％〜８０重量％のモノアシルＰＣを含むこれらの混合物から選択された少なくとも１つのリン脂質；
（iii）少なくとも１つの脂肪酸又はこの脂肪酸の１価塩、好ましくは１４〜２２個の炭素原子を有する少なくとも１つの脂肪酸又は１４〜２２個の炭素原子を有する少なくとも１つの脂肪酸の１価塩。
【０１０１】
ヒト及び哺乳類種における絶食状態条件を模擬する表面張力を標的とする最適化された生体関連媒体は、以下を含む：
（ａ）少なくとも１つの胆汁塩：４０〜９５モル％、（少なくとも４０モル％かつ４０モル％〜５０モル％）、（少なくとも５０モル％かつ５０モル％〜６０モル％）、（少なくとも６０モル％かつ６０モル％〜７０モル％）、好ましくは（少なくとも７０モル％かつ７０モル％〜８０モル％）、より好ましくは（少なくとも８０モル％かつ８０モル％〜９０モル％）、最も好ましくは（少なくとも９０モル％かつ９０モル％〜５５モル％）；
（ｂ）少なくとも１つのリン脂質：０．１モル％〜４０モル％（好ましくは０．５モル％〜３０モル％、１モル％〜２０モル％、より好ましくは２モル％〜２０モル％、より好ましくは１モル％〜１５モル％）
ここでリン脂質は：
（i）６０重量％〜９９重量％のＰＣを含む実質的に純粋なジアシルリン脂質；又は
（ii）ＰＣとの逆混合によって得られる５０重量％〜９０重量％のモノアシルＰＣを含む、部分的に酵素分解されたジアシルリン脂質；又は
（iii）ＰＣ（i）と、部分的に酵素分解されたジアシルリン脂質（ii）との混合物（ここでモノアシルＰＣのレベルは５重量％〜８０重量％である）
を含む；
（ｃ）少なくとも１つの（好ましくは１４〜２２個の炭素原子を有する）脂肪酸又は上記脂肪酸の１価塩：０．１モル％〜４０モル％（好ましくは０．５モル％〜３０モル％、１モル％〜２０モル％、より好ましくは２モル％〜２０モル％、より好ましくは１モル％〜１５モル％）；及び任意に
（ｄ）コレステロール：０モル％〜１０モル％（好ましくは０．００１モル％〜１０モル％、好ましくは０．０１モル％〜７．５モル％、より好ましくは０．０１モル％〜５モル％、より好ましくは０．０１モル％〜１モル％）。
【０１０２】
ヒト及びイヌ科動物ＦａＳＳＧＦ及びＦａＳＳＩＦ（例えばＦａＳＳＧＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎ及びＦａＳＳＩＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎ並びにＦａＳＳＧＦ−Ｖ３-ｃａｎｉｎｅ及びＦａＳＳＩＦ−Ｖ３-ｃａｎｉｎｅ）に関する、本発明による標的の表面張力は、安定して２５ｍＮ／ｍ〜５０ｍＮ／ｍ、好ましくは３０ｍＮ／ｍ〜４５ｍＮ／ｍ又は３０ｍＮ／ｍ〜４２ｍＮ／ｍの範囲である。
【０１０３】
媒体の組成及びこれに付随する表面張力値は、標的表面張力パラメータを考慮して（２５〜５０ｍＮ／ｍの範囲内で）、所定の哺乳類の胃、及び上部小腸の標的位置における体液に可能な限り適合するよう最適化される。
【０１０４】
従来技術は、生体関連媒体を最適化することによって（成分中の未知の不純物による）バッチ間変動を回避するための表面張力を考慮すること、又は絶食状態媒体中の２５ｍＮ／ｍ〜５０ｍＮ／ｍの表面張力を安定して標的とするための好ましい成分及び量をはっきりと示すことをしていない。対照的に、従来技術は本発明から離れた教示を含み、生体関連媒体中で使用できる様々なグレードの界面活性剤を示唆する。更に、再現可能な媒体を提供すること及びバッチ間変動を回避することが本発明の対象であるとすると、絶食状態条件を模擬する生体関連媒体を最適化する際にヒト及びイヌ科動物の胃液及び腸液の表面張力を模擬する成分を選択及び定義するのが合理的と考えられる。
【０１０５】
従来技術は、２５ｍＮ／ｍ〜５０ｍＮ／ｍ、好ましくは２８ｍＮ／ｍ〜４５ｍＮ／ｍ、より好ましくは３０ｍＮ／ｍ〜４５ｍＮ／ｍ、より好ましくは３０ｍＮ／ｍ〜４２ｍＮ／ｍの範囲の表面張力を標的とする分析的に定義された成分の一意の組み合わせを特徴とする、ヒトＦａＳＳＧＦ及びヒトＦａＳＳＩＦ、イヌ科動物ＦａＳＳＧＦ及びイヌ科動物ＦａＳＳＩＦを提供するための均質な固体又は濃縮水性組成物を開示していない。
【０１０６】
水性媒体中の混合ミセルを形成する胆汁塩及びジアシルリン脂質のみの２成分混合物からなる生体関連媒体は、安定したある範囲内にある表面張力を有する溶液又は分散液を提供できない。本発明の絶食状態生体関連媒体（例えばＦａＳＳＧＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎ及びＦａＳＳＩＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎ）は、ｍｍｏｌで表される選択された界面活性剤の組み合わせが２５ｍＮ／ｍ〜５０ｍＮ／ｍの表面張力を標的とするよう定義される。摂食状態の腸の条件を模擬する従来技術の生体関連媒体（例えばＦｅＳＳＩＦ）における表面張力は、ここで請求する範囲内の表面張力を有することができることが分かる。しかしながら、従来技術の摂食状態媒体は、本質的に分析的に定義された胆汁塩、リン脂質、脂肪酸を含みかつ安定して２５ｍＮ／ｍ〜５０ｍＮ／ｍの表面張力を標的とする本発明のヒトＦａＳＳＧＦ及びＦａＳＳＩＦ等の絶食状態生体関連媒体（例えばＦａＳＳＧＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎ及びＦａＳＳＩＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎ）中に組み込まれていない脂肪分解産物である脂肪酸及びモノグリセリドを含み、これは従来技術の絶食状態媒体においては開示されていない。
【０１０７】
従来技術のＦａＳＳＩＦ−Ｏｒｉｇｉｎａｌ及びＦａＳＳＩＦ−Ｖ２は、ジアシルリン脂質と組み合わされた胆汁塩を含み、例えば、ここに開示する５０重量％〜９０重量％のモノアシルリン脂質若しくはモノアシルＰＣ及び／又は脂肪酸を含む部分的に酵素分解されたジアシルリン脂質の形態の界面活性剤、特にモノアシルＰＣ、即ちリソＰＣの選択を教示していない。更に、従来技術のＦａＳＳＩＦ−Ｏｒｉｇｉｎａｌに関して示す比較例における表面張力は、約５２ｍＮ／ｍであり（比較例１０参照）、ＦａＳＳＩＦ−Ｖ２に関しては約５４ｍＮ／ｍであり（比較例９参照）、これらは本発明のヒトＦａＳＳＧＦ及びＦａＳＳＩＦ（ＦａＳＳＧＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎ及びＦａＳＳＩＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎ）に関する範囲、特に２５ｍＮ／ｍ〜５０ｍＮ／ｍの表面張力範囲、又は３０ｍＮ／ｍ〜４５ｍＮ／ｍ若しくは３０ｍＮ／ｍ〜４２ｍＮ／ｍの好ましい範囲外である。
【０１０８】
本発明によると、生体関連媒体（例えばＦａＳＳＧＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎ及びＦａＳＳＩＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎ等）は、例えば独立して計量した複数の界面活性剤及び任意に補助界面活性剤を初めから水性媒体中に溶解又は分散させることによって；あるいは、所定の量の固体前駆体組成物、例えば粉末を水性媒体中に溶解若しくは分散させることによって、又は液体前駆体組成物、例えば水性濃縮物を水性媒体で希釈することによって調製される。水性媒体は、緩衝剤、浸透圧関連成分、安定剤、抗酸化剤、ｐＨ調整剤、殺菌剤、酵素から選択されるがこれらに限定されない成分を含む。
【０１０９】
（ここで言及するような）初めから生体関連媒体を調製する方法は、（ａ）水及び緩衝剤、並びに任意に他の水溶性成分を混合するステップ、並びに（ｂ）独立して計量した胆汁塩、リン脂質及び脂肪酸等の界面活性剤及び補助界面活性剤を、ステップ（ａ）から得られた水性媒体に別個に、順に又は同時に添加するステップを含む。
【０１１０】
例えば粉末である固体組成物又は例えば水性濃縮物である液体組成物から生体関連媒体を調製する方法は、非常にコストパフォーマンスが良く、使用のための最終形態に調製した後で限定された安定性しか有さない媒体を保存する必要がないという利点を有する。このような媒体は、バッチ間変動及び計量の不正確さを伴うことなく、所望の水性媒体中で必要に応じてインサイチュで即座に新しく作製できる。対照的に、独立して計量された成分を用いて毎回初めから媒体を作製する方法は、最もコストパフォーマンス及び時間的効率が良いものではない。更に、均質な固体又は液体組成物から緩衝剤及び浸透圧関連成分を分離することにより、媒体を選択して、消化管の様々な位置において望ましいｐＨ及び浸透圧に適合させるための高い柔軟性が得られる。生体関連媒体の生体関連組成物（「即席」タイプ）は、界面活性剤、及び任意に補助界面活性剤で構成され、これらは、動物種及び模擬対象の消化管の部位に対して適切な緩衝剤及び浸透圧剤とこれらを組み合わせる可能性、並びに上記部位における生理学的条件の変動を考慮するためのものである。例示として、胃内のｐＨが通常の低い値であるヒトと比較して、胃酸ブロッカー（例えばプロトンポンプ阻害剤）を用いて治療中のヒトにおいて薬剤製品がどのように作用するかを知ることが望ましい場合がある。このような場合、生体関連媒体の再構成の開始点として同一の生体関連組成物を使用するものの、希釈剤又は水性媒体は２つの状況に対して異なる。同様に、いくつかの前臨床研究では、イヌに例えば静脈注射によってペンタガストリンを投与して胃酸産生を刺激するが、他の研究ではこれは行われず、イヌは比較的高い胃内ｐＨを有することになる。インビボでの結果を予測するために、適切なｐＨ、緩衝強度及び重量オスモル濃度を有する緩衝剤を使用して、生体関連組成物を再構成できるか、又は標準化された生体関連媒体を初めから作製できる。
【０１１１】
ミセル並びに胆汁塩及びジアシルリン脂質を含む混合ミセルのみが、混合物内の界面活性剤のモル濃度及びモル比の選択に応じて２５ｍＮ／ｍ未満又は５０ｍＮ／ｍ超となり得る可変表面張力を有することができる。水のみの表面張力は、室温で測定すると７２．８ｍＮ／ｍである。緩衝剤は水の表面張力に有意に影響しない。上部消化管液の表面張力がある帯域内にあることが観察されると、これは、絶食状態の生理学的流体の表面張力を安定して模擬するために、胆汁塩及びジアシルリン脂質のみ以外の生体関連界面活性剤並びに特にそれらのモル濃度を考慮する必要があることを示唆する。本発明は、絶食状態条件を模擬し再現可能性を提供する生体関連媒体を最適化する目的で、成分の分析的に定義された選択を含む生体関連組成物、及び絶食状態条件を模擬し、かつ安定して２５ｍＮ／ｍ〜５０ｍＮ／ｍの表面張力を標的とする生体関連媒体（特にＦａＳＳＧＦ及びＦａＳＳＩＦ、例えばＦａＳＳＧＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎ及びＦａＳＳＩＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎ）を調製するための方法を説明する。本発明のヒト及びイヌ科動物に対して設計されたＦａＳＳＧＦ及びＦａＳＳＩＦは、従来技術の絶食状態生体関連媒体では予期も発見もされなかったそれぞれ分析的に定義された胆汁塩、リン脂質、脂肪酸のうちの少なくとも１つの一意の組み合わせを含む。
【０１１２】
本説明によって拘束されるものではないが、表面張力は、例えばミセル、混合ミセル、ベシクルの形態のバルク液体媒体中でコロイド凝集体を発生させる混合物中の界面活性剤の相互作用から発生し得る。更に、界面活性剤混合物は、コロイド凝集体に含まれないが臨界ミセル濃度（ＣＭＣ）未満のモノマーとして存在するいくつかの表面活性種を発生させ得る。これは、粗胆汁塩及びリン脂質を使用する場合に特に関係し、それは不純物が存在するためである。表面張力は空気／液体境界面又は液体／固体境界面において発生し、これもまた（存在する場合は）不純物の存在に応じて、界面活性剤混合物の全体的な凝集状態を呈し得る。よって表面張力は界面活性剤混合物によって定義でき、ＦａＳＳＧＦ及びＦａＳＳＩＦ（例えばＦａＳＳＧＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎ及びＦａＳＳＩＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎ）を最適化すること並びにその再現可能性を検査することを標的とするにあたって有用な生理化学的パラメータとなり得る。更に、表面張力を低下させると、絶食状態生体関連媒体と、難溶性薬剤粒子又は薬剤製品の表面との間の接触（「ぬれ」）が増大し、これによって溶出が促進されるため、表面張力は望ましい特性である。従来技術はこの特徴を、絶食状態生体関連媒体を設計すること、並びに絶食状態条件の模擬及び媒体の再現可能性のために表面張力を安定して２５ｍＮ／ｍ〜５０ｍＮ／ｍに最適化することに関して考慮していなかった。
【０１１３】
イヌ科動物及び他の種における絶食状態を模擬する生体関連媒体
経口投与剤形の前臨床研究はイヌにおいて一般的に実施される。前臨床研究が実施される他の動物種としては、これらに限定するものではないが、マウス、ラット、ウサギ、モルモット、サル、ブタが挙げられる。インビトロ−インビボ相関及び予測のためのイヌ科動物モデルにおける初期薬剤開発研究で現在使用されている生体関連媒体、例えばＦａＳＳＧＦ−Ｏｒｉｇｉｎａｌ、ＦａＳＳＩＦ−Ｏｒｉｇｉｎａｌ、ＦａＳＳＩＦ−Ｖ２は、実際にはヒトにおける研究のために設計されていた。ヒト及びイヌ科動物種の胃液及び腸液の組成には、例えばｐＨ、絶食状態の胆汁塩及びリン脂質の組成に関して差異がある。従って、医薬品有効成分（ａｃｔｉｖｅ  ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ：ＡＰＩ）及び処方性能のインビトロ試験のために、別個のイヌ科動物の生体関連媒体を提供することは理にかなっている。本発明は特に、インビトロ溶解性、溶出及び浸透性評価、並びに所定の哺乳類におけるインビボデータとの相関を具体的な目的とした界面活性剤の組成及び２５ｍＮ／ｍ〜５０ｍＮ／ｍの範囲内の表面張力によって定義される異なる哺乳類種に亘って絶食状態の胃及び腸液を模擬するヒト及びイヌ科動物ＦａＳＳＧＦ及びＦａＳＳＩＦ（例えばＦａＳＳＧＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎ及びＦａＳＳＩＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎ並びにＦａＳＳＧＦ−ｃａｎｉｎｅ及びＦａＳＳＩＦ−ｃａｎｉｎｅ）について説明するものであることを理解されたい。
【０１１４】
まず、イヌ科動物の絶食状態の胃内条件（ここではＦａＳＳＧＦ−ｃａｎｉｎｅと呼ぶ）及びイヌ科動物の絶食状態を模擬した腸液（ここではＦａＳＳＩＦ−ｃａｎｉｎｅと呼ぶ）を模擬する分析的に定義された成分と生理化学的パラメータ、特に表面張力との一意の組み合わせを特徴とするイヌ科動物生体関連媒体を開示する。イヌ科動物生体関連媒体において得られる溶出及び溶解性データは、ヒト生体関連媒体を使用する場合と比較して、イヌ科動物インビボ薬物動態（ＰＫ）データに対するより良好な相関をもたらす。
【０１１５】
イヌ科動物生体関連媒体のインビトロ試験を実施すること、及びイヌ科動物におけるＩＶＩＶ相関を確立することにより、イヌ科動物媒体におけるインビトロ放出データとヒト媒体を使用したインビトロデータとを比較するための獣医学用製品としての承認が容易になる。またこれにより、様々な種において多数のインビトロ試験を行う必要なく、最適な前臨床試験種を合理的に選択できるようになる。
【０１１６】
従来技術によると、従来技術のＦａＳＳＩＦ−Ｏｒｉｇｉｎａｌ中の難溶性塩基性ケトコナゾール（Ｓｏｅｄｅｒｌｉｎｄ）の溶解性は２６μｇ／ｍｌである。イヌの小腸吸引液（Ｋａｌａｎｔｚｉ）において、溶解性は３０〜１６０μｇ／ｍｌである。これと比較して、イヌ科動物ＦａＳＳＩＦ（例えばＦａＳＳＩＦ−ｃａｎｉｎｅ）の溶解性は８４．２μｇ／ｍｌであり、従って実際のイヌにおける吸引液にみられる範囲内である。
【０１１７】
従来技術のＦａＳＳＩＦ−Ｏｒｉｇｉｎａｌ中の難溶性塩基性ジピリダモール（Ｓｏｅｄｅｒｌｉｎｄ）の溶解性は１９μｇ／ｍｌである。イヌ科動物の小腸吸引（Ｋａｌａｎｔｚｉ）において、溶解性は２５〜９５μｇ／ｍｌである。これと比較して、イヌ科動物ＦａＳＳＩＦ（例えばＦａＳＳＩＦ−ｃａｎｉｎｅ）の溶解性は７５．０μｇ／ｍｌであり、実際のイヌにおける吸引にみられる範囲内である。
【０１１８】
界面活性剤混合物は、最大１０モル％、例えば０．００１モル％〜１０モル％のコレステロールを含んでいてもよい。生理学的流体を模擬するためにヒトＦａＳＳＧＦ又はヒトＦａＳＳＩＦにコレステロールを含めることにより、親油性薬剤及び処方の溶解性又は溶出を試験するためのより精密な模擬を提供できる。絶食状態の生理学的流体を模擬するための生体関連媒体がコレステロールを含むか否かは任意であり、評価対象の薬剤によって決まる。ヒトＦａＳＳＧＦ（例えばＦａＳＳＧＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎ）及びヒトＦａＳＳＩＦ（例えばＦａＳＳＩＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎ）並びにイヌ科動物ＦａＳＳＧＦ（例えばＦａＳＳＧＦ−ｃａｎｉｎｅ）及びイヌ科動物ＦａＳＳＩＦ（例えばＦａＳＳＩＦ−ｃａｎｉｎｅ）媒体は、表面張力が２５ｍＮ／ｍ〜５０ｍＮ／ｍである限りは、０モル％〜１０モル％、又は例えば０．００１モル％〜１０モル％の量の、例えばコレステロール及びそのエステルである補助界面活性剤を含んでもよい。
【０１１９】
ヒトＦａＳＳＧＦ、ヒトＦａＳＳＩＦ、イヌ科動物ＦａＳＳＧＦ、イヌ科動物ＦａＳＳＩＦ（即ちＦａＳＳＧＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎ及びＦａＳＳＩＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎ、ＦａＳＳＧＦ−ｃａｎｉｎｅ及びＦａＳＳＩＦ−ｃａｎｉｎｅ）を調製するための方法
絶食状態生体関連媒体は、例えば粉末である固体生体関連組成物から、この粉末を水、緩衝剤、ｐＨ調整剤、浸透圧関連成分、安定剤、抗酸化剤、殺菌剤、例えばペプシン、膵酵素である酵素から選択される成分を含む水性媒体に添加することによって得られる。
【０１２０】
絶食状態生体関連媒体は、水、緩衝剤、ｐＨ調整剤、浸透圧関連成分、安定剤、抗酸化剤、殺菌剤、例えばペプシン、膵酵素である酵素から選択される成分を含む水性媒体で、例えば水性濃縮物である液体生体関連組成物を希釈することによって得られる。
【０１２１】
ＦａＳＳＧＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎは、０．０１ｍｍｏｌ〜５ｍｍｏｌ、好ましくは０．０１ｍｍｏｌ〜１ｍｍｏｌの界面活性剤及び任意に補助界面活性剤を含む。
【０１２２】
ＦａＳＳＩＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎは、２ｍｍｏｌ〜２０ｍｍｏｌ、好ましくは２ｍｍｏｌ〜６ｍｍｏｌ、より好ましくは３ｍｍｏｌ〜５ｍｍｏｌの界面活性剤及び任意に補助界面活性剤を含む。
【０１２３】
ＦａＳＳＧＦ−ｃａｎｉｎｅは、０．０１ｍｍｏｌ〜５ｍｍｏｌ、好ましくは０．０１ｍｍｏｌ〜１ｍｍｏｌの界面活性剤及び任意に補助界面活性剤を含み；又はＦａＳＳＩＦ−ｃａｎｉｎｅは、２ｍｍｏｌ〜２０ｍｍｏｌ（好ましくは１０ｍｍｏｌ〜１５ｍｍｏｌ、より好ましくは１２ｍｍｏｌ〜１４ｍｍｏｌ）の界面活性剤及び任意に補助界面活性剤を含む。
【０１２４】
ＦａＳＳＩＦ−ｃａｎｉｎｅは、５ｍｍｏｌ〜２０ｍｍｏｌ、好ましくは１０ｍｍｏｌ〜１５ｍｍｏｌの界面活性剤及び任意に補助界面活性剤を含む。
【０１２５】
ＦａＳＳＩＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎ及びＦａＳＳＩＦ−ｃａｎｉｎｅに比べて、ＦａＳＳＧＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎ及びＦａＳＳＧＦ−ｃａｎｉｎｅを調製するための界面活性剤濃度が低いことは、腸内容物の逆流により、胃において界面活性剤の量が少ないことを反映している。
【０１２６】
ＦａＳＳＩＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎ又はＦａＳＳＩＦ−ｃａｎｉｎｅは任意に、０．００１モル％〜１０モル％の補助界面活性剤、例えばコレステロールを含んでいてもよい。
【０１２７】
ヒトＦａＳＳＧＦ及びヒトＦａＳＳＩＦ（即ちＦａＳＳＧＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎ及びＦａＳＳＩＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎ）のｐＨ
ＦａＳＳＧＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎのｐＨはｐＨ１〜３、例えば約ｐＨ１．６である。
【０１２８】
ＦａＳＳＩＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎのｐＨはｐＨ５〜８、例えば約ｐＨ６．８である。
【０１２９】
イヌ科動物ＦａＳＳＧＦ及びイヌ科動物ＦａＳＳＩＦ（即ちＦａＳＳＧＦ−ｃａｎｉｎｅ及びＦａＳＳＩＦ−ｃａｎｉｎｅ）のｐＨ
更に別個の実施形態では、ｐＨ１〜３、例えばｐＨ１．５のＦａＳＳＧＦ−ｃａｎｉｎｅ及びｐＨ５〜８、例えばｐＨ６．５のＦａＳＳＧＦ−ｃａｎｉｎｅにより、ペンタガストリンを用いて又は用いずに処理されるイヌのインビトロ生理学的胃液を模擬する。
【０１３０】
例えば酸中和物、胃内での酸の産生を抑制するＨ２拮抗剤及び阻害剤の効果を模擬するために、ＦａＳＳＧＦ−ｃａｎｉｎｅを、ｐＨ１．５の胃液中での難溶性薬剤、特に酸性薬剤の溶解性及び溶出若しくは溶解性塩類形態の沈殿を試験するためには、例えばｐＨ１．５とし、又はｐＨ６．５の胃液中での難溶性薬剤、特に酸性薬剤の溶解性及び溶出若しくは溶解性塩類形態の沈殿を試験するためには、例えばｐＨ６．５とする。
【０１３１】
ＦａＳＳＩＦ−ｃａｎｉｎｅのｐＨはｐＨ６〜９、例えばｐＨ７．５である。
【０１３２】
任意に、０．１ｍｇ／ｍＬ〜１ｍｇ／ｍＬのペプシンをＦａＳＳＧＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎ又はＦａＳＳＧＦ−ｃａｎｉｎｅに添加してもよい。
【０１３３】
ヒトＦａＳＳＩＦ（即ちＦａＳＳＩＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎ）の重量オスモル濃度及び緩衝性能
ＦａＳＳＩＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎの重量オスモル濃度は、１７５ｍＯｓｍ／ｋｇ〜２８０ｍＯｓｍ／ｋｇ、好ましくは１３０ｍＯｓｍ／ｋｇ〜２２５ｍＯｓｍ／ｋｇ、例えば約２００ｍＯｓｍ／ｋｇである。
【０１３４】
ＦａＳＳＩＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎの緩衝性能は、２．５ｍｍｏｌ／ｌ／ΔｐＨ〜６．０ｍｍｏｌ／ｌ／ΔｐＨ、好ましくは３ｍｍｏｌ／ｌ／ΔｐＨ〜５．８ｍｍｏｌ／ｌ／ΔｐＨ、例えば約５．６ｍｍｏｌ／ｌ／ΔｐＨである。
【０１３５】
イヌ科動物ＦａＳＳＩＦ（即ちＦａＳＳＩＦ−ｃａｎｉｎｅ）の重量オスモル濃度及び緩衝性能
ＦａＳＳＩＦ−ｃａｎｉｎｅの重量オスモル濃度は、２５ｍＯｓｍ／ｋｇ〜６００ｍＯｓｍ／ｋｇ、好ましくは５０ｍＯｓｍ／ｋｇ〜３００ｍＯｓｍ／ｋｇ、より好ましくは１００ｍＯｓｍ／ｋｇ〜２５０ｍＯｓｍ／ｋｇ、例えば１８０ｍＯｓｍ／ｋｇである。
【０１３６】
ＦａＳＳＩＦ−ｃａｎｉｎｅの緩衝性能は、１．０ｍｍｏｌ／ｌ／ΔｐＨ〜５０ｍｍｏｌ／ｌ／ΔｐＨ、好ましくは２ｍｍｏｌ／ｌ／ΔｐＨ〜３０ｍｍｏｌ／ｌ／ΔｐＨ、より好ましくは５ｍｍｏｌ／ｌ／ΔｐＨ〜１５ｍｍｏｌ／ｌ／ΔｐＨ、例えば約１０ｍｍｏｌ／ｌ／ΔｐＨである。
【０１３７】
ヒトＦａＳＳＧＦ（即ちＦａＳＳＧＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎ）の重量オスモル濃度及び緩衝性能
ＦａＳＳＧＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎの重量オスモル濃度は、１０ｍＯｓｍ／ｋｇ〜４００ｍＯｓｍ／ｋｇ、好ましくは２５ｍＯｓｍ／ｋｇ〜３００ｍＯｓｍ／ｋｇ、より好ましくは５０ｍＯｓｍ／ｋｇ〜２００ｍＯｓｍ／ｋｇ、例えば約１２０ｍＯｓｍ／ｋｇである。
【０１３８】
ＦａＳＳＧＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎの緩衝性能は、０ｍｍｏｌ／ｌ／ΔｐＨ〜５０ｍｍｏｌ／ｌ／ΔｐＨ、好ましくは０ｍｍｏｌ／ｌ／ΔｐＨ〜３０ｍｍｏｌ／ｌ／ΔｐＨ、より好ましくは０ｍｍｏｌ／ｌ／ΔｐＨ〜１０ｍｍｏｌ／ｌ／ΔｐＨである。
【０１３９】
イヌ科動物ＦａＳＳＧＦ（即ちＦａＳＳＧＦ−ｃａｎｉｎｅ）の重量オスモル濃度及び緩衝性能
ＦａＳＳＧＦ−ｃａｎｉｎｅの重量オスモル濃度は、１０ｍＯｓｍ／ｋｇ〜４００ｍＯｓｍ／ｋｇ、好ましくは２５ｍＯｓｍ／ｋｇ〜２００ｍＯｓｍ／ｋｇ、より好ましくは５０ｍＯｓｍ／ｋｇ〜１５０ｍＯｓｍ／ｋｇ、例えば約１００ｍＯｓｍ／ｋｇである。
【０１４０】
ＦａＳＳＧＦ−ｃａｎｉｎｅの緩衝性能は、１ｍｍｏｌ／ｌ／ΔｐＨ〜５０ｍｍｏｌ／ｌ／ΔｐＨ、好ましくは２ｍｍｏｌ／ｌ／ΔｐＨ〜３０ｍｍｏｌ／ｌ／ΔｐＨ、より好ましくは５ｍｍｏｌ／ｌ／ΔｐＨ〜１５ｍｍｏｌ／ｌ／ΔｐＨ、例えば約１０ｍｍｏｌ／ｌ／ΔｐＨである。
【０１４１】
固体組成物及び水性濃縮物を調製するための方法
固体生体関連組成物を調製するための方法は、界面活性剤及び任意に補助界面活性剤を、溶媒、水又はこれらの混合物中に溶解させ、溶媒を除去し、これによって含水率が５重量％未満、好ましくは３重量％未満の均質な固体組成物を提供することからなるステップを含む。
【０１４２】
乾燥させた固体組成物を粉砕し、スクリーニングするか又は篩にかけて、平均粒径１０μｍ〜１０００μｍ、好ましくは５０μｍ〜５００μｍ充填密度０．３ｇ／ｃｍ3〜０．７ｇ／ｃｍ3、含水率５重量％未満の粉末組成物；顆粒；平均粒径２００μｍ〜２０００μｍのペレット；錠剤；又はカプセルを得る。
【０１４３】
あるいは、５重量％〜６０重量％、好ましくは１０重量％〜４０重量％、最も好ましくは１０重量％〜３０重量％の界面活性剤及び任意に補助界面活性剤を含む、均質な水性濃縮物を調製するための方法は、界面活性剤及び任意に補助界面活性剤を、１５℃〜６０℃の水性媒体中に均質に溶解又は分散することからなるステップを含み、水を除去するための乾燥ステップは存在しない。
【０１４４】
絶食状態生体関連媒体は、また複数の界面活性剤及び任意に補助界面活性剤を独立して計量して、水、緩衝剤、浸透圧関連成分、安定剤、抗酸化剤、ｐＨ調整剤、殺菌剤から選択される成分を含む水性媒体に、別個に、共に又は順次溶解させることにより、直接得られる。
【０１４５】
絶食状態生体関連媒体を作製するための典型的な分析的に定義された成分について、以下に詳細に説明する。
【０１４６】
胆汁塩は、コール酸ナトリウム、タウロコール酸ナトリウム、グリココール酸ナトリウム、デオキシコール酸ナトリウム、タウロデオキシコール酸ナトリウム、グリコデオキシコール酸ナトリウム、ウルソデオキシコール酸ナトリウム、ケノデオキシコール酸ナトリウム、タウロケノデオキシコール酸ナトリウム、グリコケノデオキシコール酸ナトリウム、コリルサルコシン酸ナトリウム、Ｎ−メチルタウロコール酸ナトリウム及びこれらの遊離酸からなる群から選択される。コール酸が天然由来のものである場合、これは、典型的には最小で約９５％のコール酸を含むブタ又は非ＴＳＥ／ＢＳＥウシ源由来のものであることが好ましい。
【０１４７】
リン脂質は例えば、ホスファチジルコリン（ＰＣ）；ホスファチジルエタノールアミン（ＰＥ）；ホスファチジルセリン（ＰＳ）；ホスファチジン酸（ＰＡ）；ホスファチジルイノシトール（ＰＩ）；ホスファチジルグリセロール（ＰＧ）を含む、卵黄；大豆；牛乳；ヒマワリ；燕麦から得られる。リン脂質はジアシルリン脂質及びモノアシルリン脂質を含む。
【０１４８】
本明細書において明示されるジアシルリン脂質は、１４〜２４個の炭素原子を有する脂肪酸鎖を有する、６０重量％から好ましくは＜８０重量％、より好ましくは９０重量％〜９９重量％のホスファチジルコリン（ＰＣ）を含む。
【０１４９】
部分的に酵素分解されたジアシルリン脂質は、モノアシルＰＣ（５０重量％〜９０重量％）、ＰＣ、及びＰＣとの逆混合プロセスによって得られた５重量％未満の付随成分を含む。部分的に酵素分解されたジアシルリン脂質は、本発明のモノアシルリン脂質、特にモノアシルＰＣを提供するために使用される。
【０１５０】
酵素分解によってモノアシルＰＣを一定レベルに直接制御するのは困難である。逆混合は、好ましくは９８重量％〜９９重量％の（純粋な）ＰＣ、及び最終製品に必要な量を超える量のモノアシルＰＣを含む部分的に酵素分解されたジアシルリン脂質（好ましくは精製後）を用いて、分析的に定義された量のモノアシルＰＣを滴定によって得るための方法である。溶媒を除去した後、均質な固体混合物は、所定の量のモノアシルＰＣを含む。
【０１５１】
脂肪酸は、例えばミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、アラキジン酸、ベヘニン酸といった、１４〜２２個の炭素原子を有する少なくとも１つの脂肪酸又は脂肪酸の１価塩を含む群から選択される。
【０１５２】
脂肪酸の１価塩は、乾燥ナトリウム又はカリウム塩の形態を少なくとも９７％含む上記リストの脂肪酸のナトリウム又はカリウム塩を含む。典型的には、オレイン酸ナトリウムは少なくとも８５％のオレイン酸を含む。
【０１５３】
コレステロール：少なくとも８０重量％、好ましくは９０重量％、最も好ましくは少なくとも９５重量％のコレステロール又はコレステロールエステルを含む、コレステロール及びコレステロールエステル。
【０１５４】
モル濃度及びモル比の算出に使用する分子量
タウロコール酸ナトリウム：５３８
モノアシルリン脂質：５０５
ジアシルリン脂質：７８７
オレイン酸ナトリウム：３０４
オレイン酸：２８２
コレステロール：３８７
【０１５５】
緩衝剤及びｐＨ：ｐＨを１．５；６．５及び７．５に維持するための例示的な緩衝媒体を比較例１１〜１３に示すが、これらに限定されるものではない。
【０１５６】
浸透圧関連成分
例示的な浸透圧関連成分は、塩化ナトリウムを含むがこれに限定されない。
【０１５７】
固体生体関連組成物を調製するための方法
所望の量の胆汁塩、リン脂質、脂肪酸又はその１価塩、任意にコレステロールを、溶媒又は水及び溶媒の混合物中に溶解させる。好ましい溶媒は、メタノール、エタノール、第３級ブタノール、及び親水性溶媒の組み合わせ又はジクロロメタンそれ自体である。好ましくは同量の第３級ブタノール及び水の溶液が特に好ましい。
【０１５８】
界面活性剤が完全に溶解したら、Ｃｈｒｉｓｔ  Ｅｐｓｉｌｏｎ  ２−４  ＬＳＣ凍結乾燥機を用いて、無色、白色又は黄色溶液を凍結乾燥する。
【０１５９】
あるいは上記溶液を噴霧乾燥する。
【０１６０】
凍結乾燥語の固体の含水率は５重量％未満である。
【０１６１】
粉砕又は磨砕によって、この固体を平均粒径が１０μｍ〜１０００μｍの微粒子とする。
【０１６２】
粉砕及びスクリーニングの後、この粉末は、以下の例に示すような浸透圧関連成分を含む緩衝溶液に所望のモル濃度を溶解させることによって、絶食状態生体関連媒体を調製するために使用できる状態となる。
【０１６３】
粉末の物理的特徴
平均粒径は１０μｍ〜１０００μｍである。
【０１６４】
充填密度は０．３ｇ／ｃｍ3〜０．７ｇｃｍ3である。
【０１６５】
含水率は５重量％未満、好ましくは３重量％未満である。
【０１６６】
液体生体関連組成物（水性濃縮物）を調製する方法
所望の量の胆汁塩；リン脂質；５重量％〜６０重量％、好ましくは１０重量％〜４０重量％、最も好ましくは１０重量％〜３０重量％の界面活性剤を含む脂肪酸又はその１価塩；任意にコレステロールを、１５℃〜６０℃の水中に溶解させる。例えばアジ化ナトリウム、チオメルサール、ＥＤＴＡ、トコフェロールといった安定剤をこの水性溶液に含めてよい。室温に冷却し、例えば０．２２μｍのフィルタを用いて濾過した後、この水性濃縮物を、浸透圧関連成分を含む緩衝溶液中の所望のモル濃度を用いて絶食状態生体関連媒体を調製するために使用できる。
【０１６７】
水性濃縮物の物理的特徴
１重量％の液体生体関連組成物を希釈して生体関連媒体とした後にＰＣＳを用いて測定したＺ平均粒径：２ｎｍ〜１０００ｎｍ。
【０１６８】
光学特性：視覚的に透明。
【０１６９】
表面張力を測定するための方法：
表面張力測定は、ＤｕＮｏｕｙの原理に基づいてＫｉｂｒｏｎ  ＡｑｕａＰｉ張力計で実施される。
【０１７０】
この機器は、２０℃の温度に合わせて事前に較正される。いずれの偏差に対して補正係数が適用される。
【０１７１】
表面張力測定を行う前にチタン製ロッドを加熱して、不純物を気化させる。
【０１７２】
エタノール及び純水を用いて、試料用カップを洗浄する。
【０１７３】
プローブを交換する度に、又は少なくとも毎日、再較正を実施する。
【０１７４】
平均及び標準偏差を算出するために、測定を二重に行う。試料の温度が２０℃からずれている場合、温度補正係数を考慮する。
【０１７５】
実施例１
ヒトＦａＳＳＩＦ  （即ちＦａＳＳＩＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎ）を作製するための典型的な生体関連粉末組成物の調製
マグネチックスターラを用いて、１．６２２ｇのタウロコール酸ナトリウムを１０ｍｌの精製水に室温で溶解させることにより、ＦａＳＳＩＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎの調製のための約２ｇの固体生体関連粉末組成物を調製する。タウロコール酸ナトリウムが完全に溶解し、透明な溶液が得られたら、１０ｍｌのｔｅｒｔ−ブタノールを溶液に添加する。次のステップにおいて、０．００９ｇのジアシルリン脂質（特にＰＣ）及び０．１９９ｇの（特に逆混合によって５０％〜９０％のモノアシルＰＣを含む部分的に酵素分解したジアシルリン脂質からの）モノアシルリン脂質を溶液に溶解させる（或いは、脂質を別個のステップにおいて添加する）。脂質成分が完全に溶解し、透明〜僅かに黄色がかった溶液が得られたら、０．１２８ｇのオレイン酸ナトリウムを溶液に添加する。無色〜僅かに黄色がかった溶液を凍結乾燥に適したコンテナに移す。
【０１７６】
実施例２
実施例１で示した固体生体関連組成物からのヒトＦａｓｓＩＦ（即ちＦａＳＳＩＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎ）の作製
タウロコール酸ナトリウム：１．４ｍｍｏｌ、０．７５９ｇ／ｌ
グリココール酸ナトリウム：１．４ｍｍｏｌ、０．６８３ｇ／ｌ
ジアシルリン脂質（特にＰＣ）：０．０３５ｍｍｏｌ、０．００７ｇ／ｌ
モノアシルリン脂質（特に＊モノアシルＰＣ）：０．３１５ｍｍｏｌ、０．１８６ｇ／ｌ
オレイン酸ナトリウム：０．３５ｍｍｏｌ、０．１２０ｇ／ｌ
ｐＨ：６．７（マレイン酸塩緩衝剤）
表面張力：３７．７ｍＮ／ｍ
＊酵素は約８０重量％のモノアシルＰＣを含むジアシルリン脂質を部分的に分解した
【０１７７】
１．７４１ｇの実施例１からの均質な粉末組成物を、緩衝剤及び浸透圧剤を含むマイレン酸塩緩衝剤（比較例１４）に溶解させる。生体関連媒体のｐＨをｐＨ６．７に調整した。
【０１７８】
あるいは、液体組成物中の重量による均等な量の界面活性剤、例えば１０重量％〜６０重量％の界面活性剤及び任意に補助界面活性剤を含む水性濃縮物を粉末組成物の代わりに用いてもよい。
【０１７９】
あるいは、成分を別個に添加してもよい。
【０１８０】
実施例３
実施例１で示した固体生体関連組成物からのＦａｓｓＩＦ（即ちＦａＳＳＩＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎ）の作製
タウロコール酸ナトリウム：２．８ｍｍｏｌ、１．５１８ｇ／ｌ
ジアシルリン脂質（特にＰＣ）：０．０３５ｍｍｏｌ、０．００７ｇ／ｌ
モノアシルリン脂質（特に＊モノアシルＰＣ）：０．３１５ｍｍｏｌ、０．１８６ｇ／ｌ
オレイン酸ナトリウム：０．３５ｍｍｏｌ、０．１２０ｇ／ｌ
ｐＨ：６．５（マレイン酸塩緩衝剤）
表面張力：３４．７ｍＮ／ｍ
＊酵素は約８０重量％のモノアシルＰＣを含むジアシルリン脂質を部分的に分解した
【０１８１】
１．８７ｇの実施例１からの均質な粉末組成物を緩衝剤及び浸透圧剤を含むマイレン酸塩緩衝剤（比較例１３）に溶解する。生体関連媒体のｐＨをｐＨ６．５に調整した。
【０１８２】
あるいは、１０重量％〜６０重量％の界面活性剤を含む水性濃縮物に含有される３．５ｍｍｏｌの界面活性剤を粉末組成物の代わりに用いてもよい。
【０１８３】
あるいは、絶食状態媒体を調製するために成分を別個に添加してもよい。
【０１８４】
実施例４
イヌ科動物ＦａＳＳＧＦ及びイヌ科動物ＦａＳＳＩＦ（即ちＦＡＳＳＧＦ−ｃａｎｉｎｅ及びＦａＳＳＩＦ−ｃａｎｉｎｅ）を作製するための生体関連粉末組成物の調製
マグネチックスターラを用いて、０．７２７ｇのタウロコール酸ナトリウム及び０．７１１ｇのタウロデキシコール酸ナトリウムを１０ｍｌの精製水に室温で溶解させることにより、２．００ｇの固体生体関連粉末組成物を調製する。あるいは、胆汁塩を別個のステップにおいて添加し、透明な溶液が得られるまで完全に溶解させる。１０ｍｌのｔｅｒｔ−ブタノールを溶液に添加する。次のステップにおいて、０．２４９ｇのジアシルリン脂質（特にＰＣ）及び０．１９８ｇの（好ましくは特に逆混合によって５０％〜９０％のモノアシルＰＣを含む部分的に酵素分解したモノアシルＰＣからの）モノアシルリン脂質を溶液に溶解させる。脂質成分が完全に溶解し、透明〜僅かに黄色がかった溶液が得られたら、０．１１５ｇのオレイン酸ナトリウムを溶液に添加する。透明〜僅かに黄色がかった溶液を凍結乾燥に適したコンテナに移す。
【０１８５】
実施例５
イヌ科動物ＦａＳＳＧＦ（即ちＦＡＳＳＧＦ−ｃａｎｉｎｅ）の作製
（タウロコール酸ナトリウム、タウロデキシコール酸ナトリウム、ジアシルリン脂質（特にジアシルＰＣ）、モノアシルリン脂質（特にモノアシルＰＣ）、オレイン酸ナトリウムを含む）０．１４９ｇの実施例３からの均質な粉末組成物を、緩衝剤及び浸透圧剤を含む１リットルのリン酸緩衝剤（比較例１１）又は浸透圧関連成分を含む１リットルのｐＨ１．５の緩衝剤で処理されていないＨＣｌ溶液に溶解させる。生体関連媒体のｐＨをｐＨ６．５又は１．５に調整した。
【０１８６】
タウロコール酸ナトリウム：０．１ｍｍｏｌ、０．０５４ｇ／ｌ
タウロデキシコール酸ナトリウム：０．１ｍｍｏｌ、０．０５３ｇ／ｌ
ジアシルリン脂質（特にＰＣ）：０．０２５ｍｍｏｌ、０．０１９ｇ／ｌ
モノアシルリン脂質（特に＊モノアシルＰＣ）：０．０２５ｍｍｏｌ、０．０１５ｇ／ｌ
脂肪酸又は１価塩：０．２５ｍｍｏｌ、０．００９ｇ／ｌ
ｐＨ：＊＊１．５（±０．２５）（ペンタガストリンで処理したイヌ）及び
＊＊＊６．５（±０．２５）（ペンタガストリンで処理していないイヌ）
表面張力：３５．０ｍＮ／ｍ
＊酵素は約８０重量％のモノアシルＰＣを含むジアシルリン脂質を部分的に分解した
【０１８７】
実施例６
イヌ科動物ＦａＳＳＩＦ（即ちＦＡＳＳＩＦ−ｃａｎｉｎｅ）の作製
（タウロコール酸ナトリウム、タウロデキシコール酸ナトリウム、ジアシルリン脂質、モノアシルリン脂質、オレイン酸ナトリウムを含む）７．４６ｇの実施例３からの均質な粉末組成物を、緩衝剤及び浸透圧剤を含む１リットルのリン酸緩衝剤（比較例１２）に溶解させる。生体関連媒体のｐＨをｐＨ７．５に調整した。
【０１８８】
タウロコール酸ナトリウム：５．００ｍｍｏｌ
タウロデキシコール酸ナトリウム：５．００ｍｍｏｌ
ジアシルリン脂質（特にＰＣ）：１．２５ｍｍｏｌ
モノアシルリン脂質（特に＊モノアシルＰＣ）：１．２５ｍｍｏｌ
脂肪酸又は１価塩：１．２５ｍｍｏｌ
ｐＨ：７．５
表面張力：４０．６ｍＮ／ｍ
＊酵素は約８０重量％のモノアシルＰＣを含むジアシルリン脂質を部分的に分解した
【０１８９】
実施例７
ジアシルリン脂質及び脂肪酸、特にＰＣ及び脂肪酸を有するＦａＳＳＩＦ組成物（即ちＦａＳＳＩＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎ）
タウロコール酸ナトリウム：３．００ｍｍｏｌ
ジアシルリン脂質（特にＰＣ）：０．７５ｍｍｏｌ
オレイン酸ナトリウム：０．７５ｍｍｏｌ
ｐＨ：６．５（リン酸緩衝剤）
表面張力：３９．３ｍＮ／ｍ
【０１９０】
実施例８
モノアシルリン脂質及びジアシルリン脂質、特にＰＣ及びモノアシルＰＣを有するＦａＳＳＩＦ組成物（即ちＦａＳＳＩＦ）
タウロコール酸ナトリウム：３ｍｍｏｌ
ジアシルリン脂質（特にＰＣ）：０．０７５ｍｍｏｌ
モノアシルリン脂質（特に＊モノアシルＰＣ）：０．６７５ｍｍｏｌ
ｐＨ：６．５（リン酸緩衝剤）
表面張力：４２．３ｍＮ／ｍ
＊酵素は約８０重量％のモノアシルＰＣを含むジアシルリン脂質を部分的に分解した
【０１９１】
比較例
比較例９
ＦａＳＳＩＦ  Ｖ２（Ｊａｎｔｒａｔｉｄ  ２００８）
タウロコール酸ナトリウム：３ｍｍｏｌ
ジアシルリン脂質：０．２ｍｍｏｌ
ｐＨ：６．５（マレイン酸塩緩衝剤）
表面張力：５４．３ｍＮ／ｍ
【０１９２】
比較例１０
ＦａＳＳＩＦ  Ｏｒｉｇｉｎａｌ（国際公開第２００７／０５４３４２号）
タウロコール酸ナトリウム：３ｍｍｏｌ
ジアシルリン脂質：０．７５ｍｍｏｌ
ｐＨ：６．５（リン酸緩衝剤）
表面張力：５３．３ｍＮ／ｍ
【０１９３】
比較例１１
ＦａｓｓＩＦ−Ｏｒｉｇｉｎａｌを調製するための未加工のリン酸緩衝剤  ｐＨ６．５
リン酸二水素ナトリウム：２８．６５ｍｍｏｌ
水酸化ナトリウム：１０．５ｍｍｏｌ
塩化ナトリウム：１０５．８５ｍｍｏｌ
ｐＨ：６．５
表面張力：７３．６ｍＮ／ｍ
【０１９４】
比較例１２
イヌ科動物ＦａＳＳＩＦ（即ちＦＡＳＳＩＦ−ｃａｎｉｎｅ）を調製するための未加工のリン酸緩衝剤  ｐＨ７．５
リン酸二水素ナトリウム：２８．６５ｍｍｏｌ
水酸化ナトリウム：２１．６６ｍｍｏｌ
塩化ナトリウム：３９．１４ｍｍｏｌ
ｐＨ：７．５
表面張力：７２．９ｍＮ／ｍ
【０１９５】
比較例１３
ＦａｓｓＩＦ（即ちＦａｓｓＩＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎ）を調製するための未加工のマイレン酸塩緩衝剤  ｐＨ６．５
マイレン酸：２１．６８ｍｍｏｌ
水酸化ナトリウム：４０．２３ｍｍｏｌ
塩化ナトリウム：２３．１２ｍｍｏｌ
ｐＨ：６．５
表面張力：７３．４ｍＮ／ｍ
【０１９６】
比較例１４
ＦａｓｓＩＦ（即ちＦａｓｓＩＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎ）を調製するための未加工のマイレン酸塩緩衝剤  ｐＨ６．７
マイレン酸：１０．２７ｍｍｏｌ
水酸化ナトリウム：１６．５５ｍｍｏｌ
塩化ナトリウム：９３．３ｍｍｏｌ
ｐＨ：６．７
【０１９７】
比較例１５
イヌ科動物ＦａＳＳＧＦ（即ちＦＡＳＳＧＦ−ｃａｎｉｎｅ）を調製するためのＨＣｌ  ｐＨ１．５
塩酸：適量、ｐＨ１．５
塩化ナトリウム：２０．００ｍｍｏｌ
ｐＨ：１．５
表面張力：７２．８ｍＮ／ｍ
【０１９８】
本発明の寄与
本発明は、ヒト及びイヌ科動物モデルを含むがこれらに限定されない所定の哺乳類種の胃及び上部小腸の絶食状態条件を模擬する最適化された生体関連媒体を開示する。本発明による最適化されたＦａＳＳＧＦ及びＦａＳＳＩＦ（ＦａＳＳＧＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎ及びＦａＳＳＩＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎタイプ等）は、所定の量の固体組成物若しくは液体濃縮物を用いて、又は例えばこれらの成分を別個に水性溶媒中に溶解若しくは分散させることによって初めから調製される絶食状態生体関連媒体の具体例である。
【０１９９】
本発明による絶食状態生体関連媒体（ＦａＳＳＧＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎ、ＦａＳＳＩＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎ、ＦａＳＳＧＦ−ｃａｎｉｎｅ、ＦａＳＳＩＦ−ｃａｎｉｎｅタイプ等）は更に、分析的に特定された成分によって定義され、また２５ｍＮ／ｍ〜５０ｍＮ／ｍという幅広い表面張力を安定して標的とする。このような生体関連媒体は、前臨床開発、処方最適化、リスク回避のための生物学的同等性ブリッジング研究、並びにモデリング及び模擬におけるインビトロ溶出試験のための、極めて再現可能性が高く有益な道具となる。
【０２００】
この組成物は（ａ）少なくとも１つの胆汁塩、及び（ｂ）少なくとも１つのリン脂質によって定義され、上記少なくとも１つのリン脂質はＰＣであってよく；及び／又は５０重量％〜９９重量％のモノアシルＰＣを含む酵素分解されたジアシルリン脂質から得られるモノアシルＰＣであってもよい。従来技術の生体関連媒体は、開示されている組成物が脂肪酸及び／又は部分的に酵素分解されたジアシルリン脂質の形態で提供されるモノアシルＰＣを含んでいないという点で、最適化されていない。
【０２０１】
従来技術は、インビトロ試験のための生体関連媒体における表面張力を積極的な標的としていなかった。表面張力を低下させると、絶食状態生体関連媒体と、難溶性薬剤粒子又は薬剤製品の表面との間の接触（「ぬれ」）が増大し、これによって溶出が促進されるため、表面張力は望ましい特性である。
【０２０２】
従来技術に開示されている絶食状態生体関連媒体はいずれも、ここで請求するものと同様の、分析的に定義された界面活性剤（特にＦａＳＳＧＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎ、ＦａＳＳＩＦ−Ｖ３  ｈｕｍａｎ、ＦａＳＳＧＦ−ｃａｎｉｎｅ、ＦａＳＳＩＦ−ｃａｎｉｎｅタイプ）の選択又は比率を正確に含んではいない。従来技術は、このような媒体の表面張力を標的としていること、及びこのような媒体を、溶解性試験のための絶食状態の胃液及び上部腸液を模擬する再現可能な生体関連媒体を提供するために最適化することについて、明記していない。特に、バッチ間変動に関する剤形の評価、及びインビボ評価のための処方をスクリーニングする際の再現可能性の確認について明記していない。
【０２０３】
また本媒体は効率的な様式で容易かつ再現可能に調製できるという点で有利である。これというのは、これによって結果の信頼性がより高くなり、インビボ薬剤性能を良好に予測できるようになるからである。更に、２５ｍＮ／ｍ〜５０ｍＮ／ｍの表面張力パラメータを特徴とし、かつ実験室レベルでの再現可能性を包括的に保証して実装できる媒体を、分析的品質の界面活性剤を選択することによって最適化することに関して、未だ対処されていないニーズが存在する。
【０２０４】
インビトロ−インビボ相関及び予測のためのイヌ科動物モデルにおける初期薬剤開発研究で現在使用されている生体関連媒体、例えばＦａＳＳＧＦ−Ｏｒｉｇｉｎａｌ、ＦａＳＳＩＦ−Ｏｒｉｇｉｎａｌ、ＦａＳＳＩＦ−Ｖ２は、実際にはヒトにおける研究のために設計されており、ここで提案した２５ｍＮ／ｍ〜５０ｍＮ／ｍの表面張力という点において最適化されていない。本発明は、獣医学におけるインビボブリッジング評価のために使用できるイヌ科動物生体関連媒体を提供し、これによってイヌにおけるインビボ研究の数を最小化できる。