(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
２０１２年７月１２日にＣＮＣＭにおいて番号Ｉ−４６５０で登録されたラクトバチルス・サニビリ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓａｎｉｖｉｒｉ）、２０１２年７月１２日にＣＮＣＭにおいて番号Ｉ−４６５１、Ｉ−４６５２およびＩ−４６５３で登録されたラクトバチルス・サリヴァリゥス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ）、２０１２年７月１２日にＣＮＣＭにおいて番号Ｉ−４６５４で登録されたストレプトコッカス・ミチス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｍｉｔｉｓ）、ならびに２０１２年７月１２日にＣＮＣＭにおいて番号Ｉ−４６５５で登録されたラクトバチルス・ペントーサス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｅｎｔｏｓｕｓ）またはプランタラム（ｐｌａｎｔａｒｕｍ）から選択される細菌。
【請求項２】
有効成分、医療器具、化粧品、もしくは食品サプリメントとしての使用または医薬品、医療器具、化粧品、もしくは食品サプリメント中の有効成分としての使用のための、請求項１に記載の細菌。
【請求項３】
黄色ブドウ球菌（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）、緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、化膿性連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｙｏｇｅｎｅｓ）、エンテロコッカス・フェシウム（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃｉｕｍ）、エンテロバクター・クロアカ（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｃｌｏａｃａｅ）、プロテウス・ミラビリス（Ｐｒｏｔｅｕｓ  ｍｉｒａｂｉｌｉｓ）、バクテロイデス・フラジリス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ  ｆｒａｇｉｌｉｓ）、表皮ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）、アクネ菌（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｃｎｅｓ）、カンジダ・アルビカンス（Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓ）および癜風菌（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ  ｆｕｒｆｕｒ）から選択される少なくとも一つの細菌または一つの酵母に関連する感染および／またはコロニー形成を予防および／または治療することに使用するための、請求項１および２のいずれか一項に記載の細菌。
【請求項４】
黄色ブドウ球菌および／または緑膿菌に関連する感染および／またはコロニー形成を予防および／または治療することに使用するための、請求項１〜３のいずれか一項に記載の細菌。
【請求項５】
免疫調整剤として使用するための、請求項１〜３のいずれか一項に記載の細菌。
【請求項６】
皮膚、創傷、粘膜、および／または身体表面成長部へ適用することを特徴とする、請求項１〜４のいずれか一項に記載の細菌。
【請求項７】
前記感染および／または前記コロニー形成が皮膚又は創傷に関わることを特徴とする、請求項３または４に記載の細菌。
【請求項８】
前記創傷が、糖尿病性足底潰瘍、動脈起源の下肢潰瘍、静脈起源の下肢潰瘍、褥瘡、ひょう疽、急性創傷、外傷性創傷、および術後創傷から選択される創傷であることを特徴とする、請求項７に記載の細菌。
【請求項９】
請求項１に記載の少なくとも一つの細菌を含む組成物。
【請求項１０】
前記組成物が、少なくとも一つの、プロバイオティクス、プレバイオティクス又は酵母をも含むことを特徴とする、請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】
前記組成物が、抗真菌剤、鎮痛剤、抗炎症剤、治癒促進剤、保湿剤、角質溶解薬、再構成活性剤、および麻酔薬から選択される少なくとも一つの活性剤を含むことを特徴とする、請求項９および１０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１２】
前記組成物が、局所、経口、または非経口適用に適することを特徴とする、請求項９〜１１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１３】
前記組成物が、軟膏、クリーム、ミルク、軟膏剤、粉末、含浸パッド、合成洗剤、ワイプ、溶液、ゲル、スプレー、フォーム、懸濁液、ローション、スティック、シャンプー、洗浄基材、錠剤、ゲルカプセル、食品組成物、または注射可能溶液の形態であることを特徴とする、請求項９〜１２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１４】
前記細菌が、１０３〜１０１２個の細菌の量で存在することを特徴とする、請求項９〜１３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１５】
前記細菌が、１０６〜１０１１個の細菌の量で存在することを特徴とする、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１６】
前記細菌が、カプセル化もしくは非カプセル化、固定もしくは非固定、および凍結乾燥もしくは非凍結乾燥可能な、不活性化菌、生菌、または菌溶解物の形態で存在することを特徴とする、請求項９〜１５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１７】
請求項１に記載の少なくとも一つの細菌または請求項９〜１６のいずれか一項に記載の少なくとも一つの組成物を含む、ドレッシング材。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ）、緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、化膿性連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｙｏｇｅｎｅｓ）、エンテロコッカス・フェシウム（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃｉｕｍ）、エンテロバクター・クロアカ（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｃｌｏａｃａｅ）、プロテウス・ミラビリス（Ｐｒｏｔｅｕｓ  ｍｉｒａｂｉｌｉｓ）、バクテロイデス・フラジリス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ  ｆｒａｇｉｌｉｓ）、表皮ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）、アクネ菌（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｃｎｅｓ）、カンジダ・アルビカンス（Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓ）および／または癜風菌（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ  ｆｕｒｆｕｒ）の属や種に属する病原性細菌または酵母への拮抗作用を有する細菌（以後、「拮抗性細菌」と呼ぶ）に関する。そして、医療器具中または活性成分としてのその使用、特に、これらの病原性細菌または酵母に関連するコロニー形成および／または感染の治療および／または予防におけるその使用に関する。病原性細菌または酵母に拮抗的な細菌は、病原性細菌または酵母の接着ならびに発生および／または増殖を阻害する能力に関して選択され、従ってその生態系を安定化および／または制御する。本発明は、皮膚、創傷、粘膜、および身体表面成長部上の感染またはコロニー形成の予防または治療を目的とする一又は複数の非病原性拮抗株を含む介護用品に関する。
【背景技術】
【０００２】
黄色ブドウ球菌および緑膿菌は、いくつかの病状（例、皮膚および粘膜感染、創傷感染、特に、慢性的創傷（潰瘍、糖尿病性創傷）、熱傷、ならびに外科的創傷の感染）の原因となる。これらの細菌種は、特に、治癒遅延の原因となることが知られている。それら細菌種は、他の病状（例、胃腸管、尿路、および肺感染、耳炎または副鼻腔炎）にも関与する。
【０００３】
緑膿菌（緑膿桿菌としても知られるもの）は、ある条件下で、病原性である。この非常に抵抗性の細菌は、他のグラム陰性細菌とともに、院内感染に関与することがますます頻繁になっている。この株は、バイオフィルムとして組織化される能力を有していて、このバイオフィルムはこの株を抗生物質に対してなおいっそう耐性にする。この株は、臨床的に治療するのが最も困難な細菌の一つである。死亡率は、脆弱な（免疫が低下している）患者において５０％に達する。この株は、多数の消毒薬に対して非常に抵抗性があり、病院環境中で頻繁に見られ、そして、実際の病院における株の出現（抗生物質にそれが抵抗性であるので）につながる遍在性微生物である。この株は、各種形態の病状（眼の感染、創傷感染（特に、熱傷および外科的創傷）、尿路感染（特に、カテーテル後）、胃腸管および肺感染（例えば、気管支鏡検査後）、接種髄膜炎、敗血症（例、重症感染の最終状態）、または、免疫抑制治療される患者や白血病患者等における合併症）を引き起こす。この株は、（化学療法のためまたはＡＩＤＳによって）免疫が低下した個人、熱傷被害者、および嚢胞性繊維症患者における全身性感染を容易に誘引する。
【０００４】
黄色ブドウ球菌は、スタフィロコッカス属の中で最も病原性のある種である。この菌種は、食中毒、化膿性局所感染、そして、ある種の極端な症例では、物理的要因（移植、心臓補装具）による敗血症の原因となる。この菌種は、ある場所において又はある状況下で日和見病原体となることが証明されている。この菌種は自然浄化機構に対して強い抵抗性を有する遍在性微生物である。黄色ブドウ球菌はまた、共生フローラ（１５〜３０％の健常者の鼻窩および咽喉中のもの；また、消化管そしてしばしば会陰部のレベルにも少量見出され得る）にも見出される。
【０００５】
黄色ブドウ球菌は病原体としての能力（特に、浸潤能、生体内で増殖および拡散する能力、ならびに毒性能）を有する。黄色ブドウ球菌は、抗生物質耐性変異体を発生する能力が高い（例としては、院内感染の主要原因の一つであるメチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）に言及する）。結果として、この菌種は、病院起源の感染に主要な役割を、緑膿桿菌と共有する。
【０００６】
これらの病原性細菌と酵母は、表面、特に表皮組織に接着する能力および健常者または免疫低下宿主においてバイオフィルムの形態で発生する能力を有する。バイオフィルムは、生物表面（生体組織、皮膚等）または非生物表面（不活性材料（例、シリコーン、鋼鉄））に接着し、有機ポリマーのマトリクス中にトラップされる微生物（または微生物コミュニティー）の複合集合体として定義される（非特許文献１、Ｄｕｎｎｅ，  ２００２）。これらのバイオフィルムは、単一特異性（つまり、単一細菌もしくは酵母種の合体したもの）であるか、または、数種類の細菌もしくは酵母種からなる場合には混ぜ合わされたものである場合がある。
【０００７】
病原性細菌種の存在に関連する感染の一般的治療は、抗生物質（ペニシリン、セファロスポリン）の使用である。しかしながら、このアプローチの使用には、いくつかの欠点が存在する。
−これらの抗生物質は薬効の範囲がしばしば広く、共生フローラに関する不均衡の原因となる可能性があり、その後病原性微生物のコロニー形成を生じる場合がある。
−前記細菌は、これらの抗生物質に抵抗する能力を獲得することができる。
−バイオフィルム形態の細菌の前記耐性は、細菌単独（プランクトン細胞とも呼ばれる）と比較して、大きく増加する。
【０００８】
病原性微生物の複数抗生物質耐性の問題に直面して、この種の治療の代替手段を見出す緊急の必要性がある。
【０００９】
細菌または酵母起源の感染の予防または治療のために考え出された一つの解決策は、病原性菌種に拮抗する細菌株の使用である。用語「細菌療法」を以後使用する。これらの拮抗性株は、それらの代謝の力を利用して、抗菌分子を生産し、病原性細菌と酵母の接着を妨害し、病原性細菌と酵母との細胞コミュニケーションを破壊し、および／または血管新生作用を有することができる。これらの拮抗性株はまた、炎症を制御することができる（免疫調整特性）。これらの細菌は、皮膚、創傷、粘膜、または身体表面成長部の表面で明確なバイオフィルムを形成し、一時的に定着して、そして、病原性細菌と酵母の移植を制限することができる。
【００１０】
これが特に有利なのは、感染および／またはコロニー形成が皮膚上および／または創傷中に位置している場合である。
【００１１】
これらの拮抗性株は、一般的に、乳酸菌科に属する。これらの株は、各種マトリクスから及び主として排泄物から単離されてきた。これらの株の活性は、腸粘膜のレベルでの疾患の予防および治療のために広く用いられる。用語「プロバイオティクス細菌」を以後使用する。耳、鼻、および咽喉の粘膜および泌尿生殖器粘膜のレベルでの他の応用例を、また、記載する。例としては、吸収材または泌尿生殖器ゾーン中に存在または形成する所望でない微生物株と闘うことを可能にする拮抗特性を有する種属であるラクトバチルス・クルヴァトゥス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｕｒｖａｔｕｓ）、ラクトバチルス・プランタルム（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｌａｎｔａｒｕｍ）、またはラクトコッカス・ラクティス（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｌａｃｔｉｓ）から選択される微生物を含むおむつ又は生理用ナプキンに関連する特許文献１に言及する。特許文献２は、ストレプトコッカス・サンギス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｓａｎｇｕｉｓ）、ストレプトコッカス・オラリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｏｒａｌｉｓ）、およびストレプトコッカス・ミティス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｍｉｔｉｓ）から選択される微生物を含む、耳炎治療用組成物に関する。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１２】
【特許文献１】欧州特許第８７１  ５０３号
【特許文献２】国際公開第９９／５３９３２号
【非特許文献】
【００１３】
【非特許文献１】Ｃｏｓｔｅｒｔｏｎ，  Ｊ．Ｗ．，  Ｓｔｅｗａｒｔ，  Ｐ．  Ｓ．  ａｎｄ  Ｇｒｅｅｎｂｅｒｇ，  Ｅ．  Ｐ．  （１９９９）．Ｂａｃｔｅｒｉａｌ  ｂｉｏｆｉｌｍｓ：  ａ  ｃｏｍｍｏｎ  ｃａｕｓｅ  ｏｆ  ｐｅｒｓｉｓｔｅｎｔ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ．Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２８４  （５４１８）：１３１８−１３２２
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
出願人は、特に、病原性株である黄色ブドウ球菌および緑膿菌に拮抗する株に焦点を当てた。
【００１５】
潜在的には、本発明の目的の一つは、皮膚、身体表面成長部、粘膜、および／または創傷の表面での一過性で明確なバイオフィルムを生成し、病原体の移植およびその増殖を予防または制限することにもある。
【課題を解決するための手段】
【００１６】
本発明の拮抗性細菌は、病原性菌種である黄色ブドウ球菌および緑膿菌に関与する病状（例、胃腸管、泌尿器、および肺感染、耳炎もしくは副鼻腔炎、創傷、または創傷、皮膚、身体表面成長部、もしくは粘膜でのコロニー形成に関与する病状）中におけるその使用に関して特に有利である。
【００１７】
本発明の拮抗性細菌は、各種タイプの創傷（慢性、急性、熱傷）だけでなく、皮膚状態（例、例えば、毛包炎、膿痂疹、湿疹、おでき、悪性膿庖、ひょう疽、アトピー、口角炎、ウイルス（例、ヘルペスウイルス、水痘ウイルス）関連病変の重複感染）中におけるその使用に関して特に有利である。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１】図１は、本発明の細菌を病原性細菌と寒天培地上で接触後、４８時間インキュベートした後に観察される阻害ハローを示す。
【図２】図２は、ドレッシング材に取り込ませた本発明の細菌を病原性細菌と寒天培地上で接触後、４８時間インキュベートした後に形成される阻害ハローを示す。
【図３】図３は、本発明の細菌が再構成表皮に接着する能力を（接着細菌量をＣＦＵ／ｃｍ２として）示す。
【図４】図４は、本発明の細菌のコラーゲン表面上での黄色ブドウ球菌に対する接着競合試験の結果を（２４時間のインキュベーション後に接着した黄色ブドウ球菌の量（ＣＦＵ／ｃｍ２）として）示す。
【図５】図５は、本発明の細菌のコラーゲン表面上での黄色ブドウ球菌に対する排除試験の結果を（２４時間のインキュベーション後の黄色ブドウ球菌の量（ＣＦＵ／ｃｍ２）として）示す。
【図６】図６は、本発明の細菌のコラーゲン表面上での緑膿菌に対する接着競合試験の結果を（２４時間のインキュベーション後に接着した緑膿菌の量（ＣＦＵ／ｃｍ２）として）示す。
【図７】図７は、本発明の細菌のコラーゲン表面上での緑膿菌に対する排除試験の結果を（２４時間のインキュベーション後の緑膿菌の量（ＣＦＵ／ｃｍ２）として）示す。
【図８ａ】図８ａは、大腸菌Ｏ１２７：Ｂ８由来のＬＰＳによる刺激の有無での、本発明の細菌と接触３．５時間後のマクロファージによるＴＮＦ−α放出量（ｐｇ／ｍｌ）を示す。
【図８ｂ】図８ｂは、大腸菌Ｏ１２７：Ｂ８由来のＬＰＳによる刺激の有無での、本発明の細菌と接触３．５時間後のマクロファージによるＴＮＦ−α放出量（ｐｇ／ｍｌ）を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
確かに、創傷は外傷に引き続く病変であり、皮膚の喪失または皮膚の開口を引き起こす。創傷の形成に応じて、治癒過程が準備される。
【００２０】
創傷の自然治癒は、主として３つの連続する相（これら相の各々は、正確な時系列に従う修復過程の進行を生じる特異的細菌活性により特徴づけられる）：炎症相、粒状化相（増殖相）、および瘢痕形成相に従って起こる。
【００２１】
創傷治癒の速度と質は、罹患した生体の一般的症状、創傷の病因、創傷の状態と位置、感染の発生可能性、および治癒中の疾患に罹りやすい可能性のある遺伝的要因にも依存する。皮膚を引き裂いたり又は切開することはもやは微生物に対するバリアとしては働かず、微生物は、その後、生体内へと侵入して感染を引き起こす。
【００２２】
細菌や酵母は創傷に必然的に存在するが、これは自然なコロニー形成である。
【００２３】
細菌および／または酵母の量、存在する細菌および／または酵母の菌種、ならびに生体の応答に応じて、コロニー形成、局所的感染、および感染間で区別ができる。
【００２４】
コロニー形成とは、コロニー形成なしでは炎症反応へとつながる創傷内の細菌および／または酵母のある程度の量の存在のことである。創傷上の微生物の複製、および表皮細胞へのその接着後に、患者とその微生物フローラとの間のバランスが確立される。これらの微生物は、創傷表面に残り、そこに接着してバイオフィルムを形成する。定量的観点からは、コロニー形成の特徴は、微生物量が１０５細菌／ｍｍ３未満である。細菌および／または酵母の量がこの数値を超える場合、いく人かの著者は、重要なコロニー形成、その後、かなりの量の細菌および／または酵母コロニー形成の存在する極めて局所的な表面感染を例証する。このかなりの量の細菌および／または酵母の存在は、治癒過程が正しく行われることに対して有害であり、そして、治癒遅延を誘引する。
【００２５】
細菌および／または酵母微生物の存在が、局所領域的な炎症反応および存在する微生物による組織浸潤を反映する臨床兆候を有する一般的兆候の出現（大量の微生物の存在、細菌病原性、患者の免疫防御機構の低下）を導く場合、用語「感染」を使用する。感染は、局所領域的および一般的臨床兆候を特徴とする。
【００２６】
前記感染の結果、基礎をなす解剖構造（例、靱帯または骨）の露出をともなって傷が拡張する場合がある。
【００２７】
細菌コロニー形成には特定の治療方法を必要としないが、一方、感染は局所的および総合的抗細菌治療の準備の必要がある。
【００２８】
感染は、直接的にまたは間接的に、創傷の非治癒性または治癒遅延の一般的決定因子である。創傷における任意の細菌および／または酵母の混入は炎症を増加させる。
【００２９】
このことは、中程度の混入の場合には有利な場合があるが、治癒遅延を生じる創傷の感染の場合には有害になる。
【００３０】
従って、治癒での直接の合併症は、第一および主要なものでは、治癒過程の開始が設定されるのを阻害する感染である。創傷が感染したと考えられるのは、創傷に存在する細菌および／または酵母の量が、治癒過程を妨げるかまたは創傷を悪化させる場合である。
【００３１】
この症例では、第二意図の治癒と呼ばれる治癒は、皮膚科の医薬品および外科的用具（メス、キュレット等）の使用を通常必要とする。下肢潰瘍の症例では、例えば、消毒剤（例、クロルヘキシジンまたはヘキサミジン）で前もって傷を殺菌し、そして、その傷を洗浄することが必要である。その過程は、外科的行為により又はタンパク質分解医薬品（つまり、その医薬品の目的が傷を汚染する壊死した皮膚の破片を壊すもの）を使用するかのいずれかによって、破片および過剰な分泌物を除去することにある。創傷感染を治療するために共通して使用される活性剤の中では、銀、銅、オクテニジン、ヨウ素、ＰＨＭＢ（ポリヘキサメチレンビグアナイド）、及び蜂蜜に言及する。
【００３２】
しかしながら、抗細菌剤および／または消毒剤は、創傷には推奨されない。これらの活性剤の有効性は、その作用機序の観点からは、短時間しか効かず、活性剤は、有機物質によって不活性化され、細胞構成要素に対して細胞毒性があり、有効範囲が広く、そして、結果的には、活性剤は病原性細菌を攻撃するだけではなく、共生フローラをも破壊してしまう。さらにまた、数種類の細菌株は、消毒剤／抗細菌剤に対する抵抗性を発現させる。
【００３３】
従って、細菌および／または酵母による創傷感染またはコロニー形成の治療および／または予防に効果的であり、効率的で、使用が容易で、非侵襲的な活性剤を有する必要がある。
【００３４】
皮膚、創傷、粘膜、および身体表面成長部のレベルでの細菌起源および／または酵母に起因する感染またはコロニー形成を予防または治療するために考え出された解決策の一つは、病原性株に拮抗的な細菌株の使用である。これらの株は、それらの代謝の力を利用して、抗菌分子を生産し、および／または病原性細菌や酵母の接着を妨害することができる。これらの細菌は、皮膚、創傷、粘膜、または身体表面成長部の表面で明確なバイオフィルムを形成することもでき、一時的に樹立され、そして、病原性細菌および／または酵母の移植を制限することができる。
【００３５】
これらの拮抗性株は、一般的に乳酸菌科に属し、および／またはヒト粘膜の共生フローラから単離された。これらの株の活性は、腸粘膜、ＥＮＴ粘膜、および膣粘膜のレベルでの疾患の予防および治療のために広く用いられる。そのような株は、ＷＯ９６／３８１５９、ＷＯ００／６１２０１、ＥＰ  １  １４０  ２２６、ＥＰ  １  ４６１  ０１２およびＷＯ２００６／０１３４４１に記載される。
【００３６】
これらの株の拮抗作用は、以下の各種メカニズムによるものである。たとえば、
−  炭素性および／または窒素性基質に関する栄養競合；
−  抗菌分子（例、乳酸、過酸化水素（Ｈ２Ｏ２）、還元性分子、またはバクテリオシン）の生産；
−  粘膜上の結合部位の接着競合（バリア効果）；
−  バイオサーファクタントの生産；
−  各種細菌種間の細菌コミュニケーションの阻害または破壊；
−  局所および全身性免疫刺激を可能にする免疫調整活性がある。
【００３７】
皮膚および創傷上でプロバイオティクス株を使用する応用例も、一般的に、前述の活性の一つを使用する。
【００３８】
従って、皮膚および腸粘膜レベルでの、プロバイオティクス株（ラクトバチルス・アシドフィルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ）ＡＴＣＣ  ４３５６およびＡＴＣＣ  ４３１２１ならびにバチルス・ポリフェルメンチカス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｏｌｙｆｅｒｍｅｎｔｉｃｕｓ））の拮抗作用に関する応用例に言及する（Ｈａｌｐｅｒら，２００３，Ｉｍら，２００９）。局所適用形態での、プロバイオティクス株（ビフィドバクテリウム・ロンガム・ロイテリ（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｌｏｎｇｕｍ  ｒｅｕｔｅｒ）、ラクトバチルス・パラカセイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐａｒａｃａｓｅｉ）ＣＮＣＭ  Ｉ−２１１６、ラクトバチルス・ジョンソニー（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｊｏｈｎｓｏｎｉｉ）Ｌａ１およびビトレオシラ・フィリフォルミス（Ｖｉｔｒｅｏｓｃｉｌｌａ  ｆｉｌｉｆｏｒｍｉｓ））をまた使用して、皮膚レベルでの炎症現象および制御不全を制御してきた（Ｇｕｅｎｉｃｈｅら，２００６，Ｇｕｅｎｉｃｈｅら，２００８ａ，Ｇｕｅｎｉｃｈｅら，２００８ｂ，Ｇｕｅｎｉｃｈｅら，２００８ｃ，Ｇｕｅｎｉｃｈｅら，２００８ｄ，Ｇｕｅｎｉｃｈｅら，２００９，Ｇｕｅｎｉｃｈｅら，２０１０）。これら応用例の文脈で、著者達は前記株の免疫調整能を強調している。そのような株は、特許出願ＥＰ  １  ５９３  ３８２およびＷＯ２００６／０３７９２２に記載される。
【００３９】
ラクトバチルス・プランタラム（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｌａｎｔａｒｕｍ）ＡＴＣＣ  １０２４１株の使用は、細菌間コミュニケーション（またはクオラムセンシング）を遮断するシグナル分子を放出することにより緑膿菌の増殖とこの菌によるバイオフィルムの形成を制限することに関して記載されている。この株の培養物を含浸させたガーゼ片を、ラットの熱傷モデルおよびヒト熱傷に直接適用することにより、その有効性を実証することができる（Ｐｅｒａｌら，２００９，Ｖａｌｄｅｚら，２００５）。好中球および白血球に対するこの株の免疫調整能は、慢性的創傷（糖尿病性創傷、静脈潰瘍）を治療するために活用され、および緑膿菌により引き起こされる炎症を減少するために活用される（Ｐｅｒａｌら，２０１０，Ｒａｍｏｓら，２０１０，Ｒａｍｏｓら，２０１２）。アルギン酸フィルム中でこの株を形成させることは、緑膿菌による熱傷感染の予防に関して、Ｂｒａｃｈｋｏｖａらにより記載された（Ｂｒａｃｈｋｏｖａら，２０１１）。
【００４０】
ラクトバチルス・ファーメンタム（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ）ＲＣ−１４株は、外科的移植レベルでの黄色ブドウ球菌接着を阻害することとこの微生物に関連する感染を制限する顕著な能力を示す（Ｇａｎら，２００２）。この抗菌作用は、バイオサーファクタントの放出に起因する。
【００４１】
メチシリン耐性黄色ブドウ球菌の予防と治療における、様々なソースから単離された数種類のラクトバチルスおよびビフィドバクテリウム株の有効性は、２０１３年のＨ．Ｓｉｋｏｒｓｋａらの研究によっても実証された。
【００４２】
ラクトバチルス・ロイテリ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｒｅｕｔｅｒｉ）（ＫＣＴＣ  ３５９４、ＫＣＴＣ  ３６７８およびＫＣＴＣ  ３６７９）株による、表皮ブドウ球菌およびアクネ菌増殖の阻害は、実証されている（Ｋａｎｇら、２０１２年）。
【００４３】
皮膚の炎症性細菌（例、表皮ブドウ球菌ＡＴＣＣ  １２２２８、黄色ブドウ球菌ＡＴＣＣ  ６５３８９、化膿性連鎖球菌ＡＴＣＣ  ２１０５９、およびアクネ菌ＡＴＣＣ  ６９１９）に対する、ラクトコッカス種ＨＹ４４９が生産するバクテリオシンの効果も実証されている（Ｈｏら、２００６年）。
【００４４】
プロバイオティクス株（乳酸菌であるバチルス・コアギュランス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｏａｇｕｌａｎｓ））の使用を歌ったドレッシング材またはファブリックも既に記述されている（ＵＳ  ７  ０２５  ９７４及びＷＯ２００８／０７４３３１）。これらの処方剤の有効性は、乳酸を主要な広範囲抗菌剤として生産可能な細菌株の使用に単に基づいている。
【００４５】
本発明の目的は、病原性細菌である黄色ブドウ球菌および／または緑膿菌に対して拮抗する、ならびに、特に、皮膚、創傷、粘膜、および身体表面成長部のレベルでのこれら病原性細菌に関連するコロニー形成および／または感染の治療および／または予防に有効な細菌に基づく新規活性剤を提供することにある。また、これら活性剤は、皮膚、創傷、粘膜、および身体表面成長部に直接接触して投与可能であり、組成物、特に、局所塗布に適した組成物中に容易に取り込み可能であり、そして、非侵襲性である。
【００４６】
革新的やり方で、拮抗性細菌は以下のいくつかの判断基準に基づいて事前に選択されている。（ｉ）病原性生物（つまり、黄色ブドウ球菌および緑膿菌）の成長を阻害する能力；（ｉｉ）コラーゲンおよび表皮上に接着して、明確なバイオフィルムを形成する能力；（ｉｉｉ）コラーゲン含有マトリクス上の病原性微生物の接着を制限する能力；ならびに（ｉｖ）炎症反応（マクロファージによるＴＮＦ−α生産）を制限する能力。
【００４７】
これらの細菌は、皮膚、創傷、粘膜、および身体表面成長部のレベルでバリア効果を発生させることができ、従って、コロニー形成および感染のリスクを予防および制限することができる。
【００４８】
本発明者らは、感染、特に、院内感染に主として関わる病原菌種である黄色ブドウ球菌および緑膿菌に主として拮抗的な株を選択することに特に興味を持ち続けている。
【００４９】
さらに、本発明者らは、黄色ブドウ球菌株および緑膿菌株を阻害することに加えて、他の病原性菌種（例、化膿性連鎖球菌、エンテロコッカス・フェシウム、エンテロバクター・クロアカ、プロテウス・ミラビリス、バクテロイデス・フラジリス、表皮ブドウ球菌、アクネ菌、カンジダ・アルビカンス、および癜風菌）の発生を阻害する細菌株を選択した。これらの微生物は、創傷および皮膚感染にとりわけ関与する。
【００５０】
アクネ菌は、嫌気性グラム陽性桿菌であって、比較的ゆっくりと増殖し、通常は、皮膚、髪、および粘膜中に存在する。アクネ菌は、座瘡の原因である。
【００５１】
この細菌は、健康な成人のほとんどの皮膚フローラ中に広く存在しているが、術後感染、特に、インプラントの存在する症例において、潜在的に重症のもの（中枢神経系感染、眼内炎、心内膜炎、ＥＮＴおよび肺球の感染、脊椎椎間板炎、腹膜炎、ならびに骨関節感染）の原因にもなる。
【００５２】
表皮ブドウ球菌は、ほぼ１００％のヒトの皮膚の共生細菌である。この菌の脂肪分解特性は、この菌が皮脂中で繁殖することを可能にする。この菌は通常無害であるが、免疫系の低下した患者またはカテーテルもしくは人工補装具を有する患者における標準的感染を引き起こす。これらは、女性およびより稀ではあるが男性において、皮膚感染および鼻腔感染（例、鼻腔炎または、その他、尿路感染）である場合がある。これらの細菌は、これら細菌を医療用補装具の表面に接着することを可能にするバイオフィルムを生産する能力を有する。
【００５３】
カンジダ・アルビカンスは、場所によって異なる様式で出現する。免疫応答性のある患者（すなわち、免疫が低下した患者と違って、防御システムが有効である患者）においては、この菌は鵞口瘡の形態で、口腔、皮膚の発赤およびかゆみの部位中、基本的には、酵母の発生に好ましい温かく湿った領域であるくぼみ及び小さな生殖器局部炎症（例、ヒトの尿道炎または女性における白色系放出物およびかゆみを伴う外陰腟炎）中に現れる。
【００５４】
癜風菌は、（人口の３％〜５％に見られる）一般的炎症性皮膚疾患である脂漏性皮膚炎に主に関与する酵母である。この菌の存在する形態は、若干かゆみのある脂肪性及び黄色がかったうろこ状のもので覆われた赤いプラークであって、脂線に富む領域、つまり、脂漏領域に頻繁に見られるものである。顔面においては、病変の微細構成（鼻と唇の間の溝、眉毛の付け根、頭皮、小鼻、耳介のひだ、耳甲介、外耳道）は示唆に富む。頭皮上では、しばしば併発することにより、若干の脂漏ふけ状態を生じる。胴部では、二つの共通する領域（胸骨および２つの肩甲骨間の領域）がヒトで顕著である。
【００５５】
この菌は成人と（３か月未満の）乳児の両者において出現し、そこでは、頭皮中の従来的「新生児頭部皮膚炎」および臀部の紅斑として菌は現れる。成人では、この病状は２０〜４０歳の対象者に特に観察される。男性の方が女性より頻繁に罹患する。女性では、その発生は閉経期に特によく観察される。多因子的炎症起源のこの病状は、伝染性ではなく、ストレスまたは汚染および日光の欠如により最も一般的に惹起される発作を介して進化する可能性がある。
【００５６】
その原因は不明であるが、微小な真菌が、特定の免疫アレルギーを生み出す可能性のある状態に役割を演じると考えられている。
【００５７】
癜風は、癜風菌の皮膚上増殖に関連する表在性真菌症である。この酵母は、通常、皮膚表面で生息するが、ある種の状況では、ハイスピードで複製し、小さな褐色または変色した傷跡を生じる。
【００５８】
この真菌は、特に、脂性肌を好み、胸部上、または、首および肩の上、上背の上および上肢の上、稀には下肢の上にも位置する。
【００５９】
本発明の主題は、従って、以下の株から選択される細菌である：ラクトバチルス・サニビリ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓａｎｉｖｉｒｉ）株（本願においてはＦ３Ｃ５ｐ（２０１２年７月１２日に、番号ＣＮＣＭ  Ｉ−４６５０として、国立微生物培養物コレクション（Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ  Ｎａｔｉｏｎａｌｅ  ｄｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅｓ  ｄｅ  Ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｅｓ）、パスツール研究所（２５  ｒｕｅ  ｄｕ  Ｄｏｃｔｅｕｒ  Ｒｏｕｘ，７５７２４  Ｐａｒｉｓ  Ｃｅｄｅｘ  １５，Ｆｒａｎｃｅ）（以後「ＣＮＣＭ」と記載する）に登録されたもの）として表記されるもの）、ラクトバチルス・サリヴァリゥス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ）株（本願においてはＦ５０Ｃ２ｐ、Ｆ５２Ｃ３ｐおよびＦ４１Ｃ３ｐ（各々、ＣＮＣＭにて、番号：ＣＮＣＭ  Ｉ−４６５１、ＣＮＣＭ  Ｉ−４６５２およびＣＮＣＭ  Ｉ−４６５３として登録されたもの）として表記されるもの）、ストレプトコッカス・ミチス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｍｉｔｉｓ）株（本願においてはＦ３Ｃ２ｖ（２０１２年７月１２日に、ＣＮＣＭにて、番号：ＣＮＣＭ  Ｉ−４６５４として登録されたもの）として表記されるもの）、ならびにラクトバチルス・ペントーサス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｅｎｔｏｓｕｓ）またはプランタラム（ｐｌａｎｔａｒｕｍ）株（本願においては、Ｌ１Ｃ１（２０１２年７月１２日に、ＣＮＣＭにて、番号：ＣＮＣＭ  Ｉ−４６５５として登録されたもの）として表記されるもの）。これらの細菌は、本願においては「本発明の細菌」と呼ぶ。
【００６０】
また、本発明の主題は、免疫調整剤として使用するための本発明の細菌でもある。
【００６１】
また、本発明の主題は、有効成分として、医療器具として、化粧品として、または、その他、食品サプリメントとしてのそのような細菌の使用でもある。本発明の細菌はまた、医薬品、医療器具、化粧品、または食品サプリメント中の有効成分として使用してもよい。
【００６２】
本発明はまた、緑膿菌、黄色ブドウ球菌、化膿性連鎖球菌、エンテロコッカス・フェシウム、エンテロバクター・クロアカ、プロテウス・ミラビリス、バクテロイデス・フラジリス、表皮ブドウ球菌、アクネ菌、カンジダ・アルビカンス、および癜風菌から選択される少なくとも一つの細菌または一つの酵母に関連するコロニー形成および／または感染の治療および／または予防における使用のための本発明の細菌も指向する。
【００６３】
好ましくは、本発明は、緑膿菌および／または黄色ブドウ球菌に関連するコロニー形成および／または感染の治療および／または予防における使用のための本発明の細菌も指向する。
【００６４】
本発明は、より特には、病原性細菌または酵母による創傷および皮膚でのコロニー形成および／または感染の治療および／または予防に関する。
【００６５】
感染またはコロニー形成の用語「治療」または「治療すること」は、この感染またはコロニー形成の発生を減少および／または阻害することを意味する。
【００６６】
感染またはコロニー形成の用語「予防」または「予防すること」は、この感染またはコロニー形成の症状が現れるのを減少および／または回避することを意味する。
【００６７】
表現「創傷の感染またはコロニー形成」が意図する意味は、糖尿病性足底潰瘍、動脈起源の下肢潰瘍、静脈起源の下肢潰瘍、褥瘡、ひょう疽、急性創傷に関連する感染、外傷性創傷（例、切断が原因の創傷）に関連する感染、深い創傷、熱または腐食剤および熱傷が原因の創傷；ならびに術後創傷（例、外科切開の単純な縫合創傷、皮膚切除後の複雑な縫合創傷、外科的皮膚切除、および第二意図の治癒を必要とする縫合不能創傷）から選択される感染またはコロニー形成である。
【００６８】
本発明の細菌は、組成物、例えば、医療器具に取り込み可能である。本発明の目的に関しては、用語「医療器具」の意図する意味は、人工補装具、カテーテル、ドレッシング材、オストミーバッグ、外科用ドレープ、尿道カテーテル、気管内チューブ、鼓膜切開術用チューブ、包帯、支持包帯、整形外科用インプラントおよび乳房インプラント、コンタクトレンズ、子宮内デバイス、または、その他、縫合用材料である。
【００６９】
本発明の主題は、また、本発明の少なくとも一つの細菌を含む組成物である。前記組成物は、許容可能な媒体中で、本発明の少なくとも一つの細菌を含む。用語「許容可能な媒体」の意図する意味は、皮膚、創傷、粘膜、および身体表面成長部と相性がよい媒体である。
【００７０】
本発明の組成物または本発明の細菌は、局所、経口、または非経口投与してもよい。
【００７１】
好ましくは、そのような組成物またはそのような細菌は、皮膚、創傷、身体表面成長部、または粘膜（例、鼻およびのどの粘膜、泌尿生殖器粘膜、胃腸粘膜、呼吸器粘膜）への局所塗布に適している。この組成物を、従って、皮膚、創傷、または粘膜へ直接適用してもよい。
【００７２】
用語「局所塗布」の意図する意味は、皮膚、創傷、粘膜、および／または身体表面成長部への塗布である。
【００７３】
本発明の組成物は、好ましくは、１０３〜１０１２個の細菌、好ましくは、１０６〜１０１１個の細菌を含む。
【００７４】
局所用組成物は、液体、ペースト、または固形物の形態である場合があり、より特には、軟膏、クリーム、ミルク、軟膏剤、粉末、含浸パッド、合成洗剤、ワイプ、溶液、ゲル、スプレー、フォーム、懸濁液、ローション、スティック、シャンプー、または洗浄基材の形態である場合がある。前記組成物は、また、微小球体もしくはナノ球体の懸濁物、脂質もしくはポリマー小胞、マイクロカプセル、またはポリマーパッチ、および放出制御ハイドロゲルの形態であってもよい。この局所塗布用組成物は、無水形態、水性形態、またはエマルジョン形態であってもよい。
【００７５】
非経口用組成物は、皮下注射用の溶液（注射可能溶液）の形態である場合がある。
【００７６】
経口用組成物は、溶液、粉末、ゲル、カプセル、または錠剤の形態である場合があり、食品組成物（例、乳製品）に一体化してもよい。
【００７７】
本発明の細菌を、不活性化された菌、特に、熱により、ＵＶ照射により、または他の任意のプロセスにより不活性化された菌の形態で、組成物に取り込んでもよい。前記細菌をまた、カプセル化もしくは非カプセル化、固定もしくは非固定、および凍結乾燥もしくは非凍結乾燥可能な生菌の形態、または、その他菌抽出物の形態で取り込んでもよい。前記細菌はまた、菌溶解液または当業者に公知の他の型の仕様である場合がある。
【００７８】
好ましくは、本発明の文脈で使用される拮抗性細菌またはその細菌を含むガレヌス製剤を、局所用組成物の形態で創傷に直接適用するか、あるいは、ドレッシング材の組成物の一部である人工または非人工マトリクス中へ一体化する。
【００７９】
この実施形態では、前記細菌を、ドレッシング材中へ処方するか、または、その他、ドレッシング材中に自身が含まれる組成物中へと処方する。あるいは、前記細菌を、ドレッシング材の適用時に含ませてもよい。本発明のドレッシング材は、従って、本発明の少なくとも一つの細菌または本発明の少なくとも一つの組成物を含む。
【００８０】
本発明の拮抗性細菌またはその細菌を含む本発明の組成物を、ドレッシング材構造物の任意の構成要素へ取り込んでもよい。但し、前記細菌は創傷表面と直接的または間接的に接触することができるようにする。
【００８１】
好ましくは、および即効性を促進するために、前記細菌（またはその細菌を含む本発明の組成物）を、創傷と接触するドレッシング材層に取り込むか、または、創傷と接触するドレッシング材表面上に堆積させる。
【００８２】
有利には、したがって、前記細菌（またはその細菌を含む本発明の組成物）を、創傷と接触することを意図している表面上に、連続的または非連続的様式で（液状形態、例えば前記細菌を含む溶液もしくは懸濁液をスプレーすることによって；または固形物形態、例えば前記細菌を含む粉末をふりかけることによって）、堆積させる場合がある。
【００８３】
本発明の目的に関して、用語「ドレッシング材」は、創傷の治療に使用される全ての型のドレッシング材を表すことを意図している。典型的には、ドレッシング材は、少なくとも一つの接着もしくは非接着層またはマトリクスを含む。
【００８４】
創傷と接触する層または表面は、ドレッシング材分野で本目的のために通常使用される任意の材料またはその組み合わせからなる場合がある。これらの材料の中で、吸収性フォーム、特に、ポリウレタン系親水性フォーム；布地材料、特に、吸収性もしくは超吸収性繊維に基づく不織布；ハイドロゲル；または、これらの材料の組み合わせ；吸収性もしくは非吸収性接着材料；ならびに吸収性もしくは非吸収性界面構造物に言及する。
【００８５】
一般的には、必要とされる、前記細菌の特異的放出プロフィール（即効性または遅延性）を得るために、ガレヌス製剤またはドレッシング材の構造を調整する場合がある。
【００８６】
従って、前記細菌（またはその細菌を含む本発明の組成物）を、任意の型の既存のドレッシング材に一体化してもよいが、以下の例は、限定するものではない。
−アルギン酸塩（例、例えば、Ｌａｂｏｒａｔｏｉｒｅｓ  ＵｒｇｏによりＵｒｇｏｓｏｒｂ（登録商標）の名前、ＭｏｌｎｌｙｃｋｅによりＭｅｌｇｉｓｏｒｂ（登録商標）の名前の下販売されている製品）；
−ハイドロセル製品（例、例えば、Ｌａｂｏｒａｔｏｉｒｅｓ  Ｕｒｇｏにより  Ｕｒｇｏｔｕｌ  Ａｂｓｏｒｂ（登録商標）の名前、ＳｙｓｔａｇｅｎｉｘによりＴｉｅｌｌｅの名前の下販売されている製品）；
−ハイドロコロイドドレッシング材（例、例えば、Ｌａｂｏｒａｔｏｉｒｅｓ  ＵｒｇｏによりＡｌｇｏｐｌａｑｕｅ（登録商標）の名前、ＣｏｌｏｐｌａｓｔによりＣｏｍｆｅｅｌ（登録商標）の名前の下販売されている製品）；
−ハイドロゲル（例、例えば、Ｌａｂｏｒａｔｏｉｒｅｓ  ＵｒｇｏによりＵｒｇｏ  Ｈｙｄｒｏｇｅｌ（登録商標）の名前、Ｓｍｉｔｈ＆ＮｅｐｈｅｗによりＩｎｔｒａｓｉｔｅ  Ｇｅｌ（登録商標）の名前の下販売されている製品）；ならびに
−液状ドレッシング材（例、例えば、Ｌａｂｏｒａｔｏｉｒｅｓ  ＵｒｇｏによりＵｒｇｏ  Ｃｒｅｖａｓｓｅｓの名前、３ＭによりＮｅｘｃａｒｅ（登録商標）の名前の下販売されている製品）。
【００８７】
もちろん、ガレヌス製剤またはドレッシング材中で使用される一又は複数の細菌の量は、所望の動態およびその性質、溶解度、熱耐性等に関連する特異的制約に従って調整される。
【００８８】
ドレッシング材要素中でそれを使用する文脈では、本発明の一又は複数の細菌を、創傷浸出液中に放出される細菌量が０．００１ｇ／ｌ〜５０ｇ／ｌ、好ましくは０．０１〜１０ｇ／ｌになるような量で取り込む。
【００８９】
選択されるガレヌス製剤によれば、ドレッシング材の使用には、拮抗性細菌を活性化するために、溶液、例えば、生理食塩水でドレッシング材を前もって含浸または水性化する必要がある。
【００９０】
本発明の組成物は、一又は複数の拮抗性株を含む場合があるが、任意ではあるが、プロバイオティクス、プレバイオティクス、および酵母から選択される少なくとも一つの化合物と組み合わせてもよい。プレバイオティクスの中では、例えば、フルクタン（例、イヌリン、フラクトオリゴ糖類、もしくはトランス−ガラクトオリゴ糖類）または、その他、長鎖もしくは分岐鎖糖類に言及する。
【００９１】
また、本発明の細菌は、特に、抗真菌剤、鎮痛剤、抗炎症剤、治癒促進剤、保湿剤、角質溶解薬、再構成活性剤、および麻酔薬から選択される活性剤と組み合わせることができる。
【００９２】
特に、本発明の組成物中に導入可能な活性剤を以下のものから選択してもよい：
−抗真菌剤（例、ポリエン類、ナイスタチン、アンホテリシンＢ、ナタマイシン、イミダゾール化合物（ミコナゾール、ケトコナゾール、クロトリマゾール、エコナゾール、ビホナゾール、ブトコナゾール、フェンチコナゾール、イソコナゾール、オキシコナゾール、セルタコナゾール、スルコナゾール、チアベンダゾール、チオコナゾール）、トリアゾール化合物（フルコナゾール、イトラコナゾール、ラブコナゾール、ポサコナゾール、ボリコナゾール）、アリルアミン類、テルビナフィン、アモロルフィン、ナフチフィンまたはブテナフィン）；
フルシトシン（抗代謝薬）、グリセオフルビン、カスポファンギン、またはミカファンギン；
−鎮痛剤（例、パラセタモール、コデイン、デキストロプロポキシフェン、トラマドール、モルヒネおよびその誘導体、コルチコイド類および誘導体）；
−抗炎症薬（例、グルココルチコイド類、非ステロイド抗炎症薬、アスピリン、イブプロフェン、ケトプロフェン、フルルビプロフェン、ジクロフェナク、アセクロフェナク、ケトロラック、メロキシカム、ピロキシカム、テノキシカム、ナプロキセン（ｎａｐｒｏｘｅｎｅ）、インドメタシン、ナプロキシノド、ニメスリド、セレコキシブ、エトリコキシブ、パレコキシブ、ロフェコキシブ、バルデコキシブ、フェニルブタゾン、ニフルム酸またはメフェナム酸）；
−治癒促進活性剤（例、レチノール、ビタミンＡ、ビタミンＥ、Ｎ−アセチル−ヒドロキシプロリン、ツボクサ抽出物、パパイン、シリコーン類、タイム、ニアウリ（ｎｉａｏｕｌｉ）、ローズマリー及びセージ精油、ヒアルロン酸、１〜４個の単糖単位を有する人工多硫酸化オリゴ糖（例、シュークロースオクタ硫酸カリウム塩、シュークロースオクタ硫酸銀塩またはスクラルファート）あるいはアラントイン）；
−保湿剤（例、ヒアルロン酸、尿素、グリセリン、脂肪酸、アクアポリン調節剤、ベジタブルオイル、キトサン、（ソルビトールを含む）ある種の糖、バター、およびワックス）；
−角質溶解薬（例、サリチル酸、サリチル酸亜鉛、アスコルビン酸、α−ヒドロキシ酸（グリコール酸、乳酸、リンゴ酸、クエン酸、酒石酸）、銀葉楓、サワーチェリーまたはタマリンド抽出物、尿素、局所用レチノイドＫｅｒａｔｏｌｉｎｅ（登録商標）（Ｓｅｄｅｒｍａ社）、枯草菌を発酵してなるタンパク質分解酵素あるいは製品Ｌｉｎｋｅｄ−Ｐａｐａｉｎ（登録商標）（ＳＡＣＩ−ＣＦＰＡ社））；
−再構成活性剤（例えば、身体表面成長部用の再構成活性剤）（例、シリカ誘導体、ビタミンＥ、カモミール、カルシウム、トクサ抽出物、またはシルクリプスター（ｓｉｌｋ  ｌｉｐｅｓｔｅｒ））；ならびに
−麻酔薬（例、ベンゾカイン、リドカイン、ジブカイン、プラモキシン塩酸塩、ブピバカイン、メピバカイン、プリロカインまたはエチドカイン）。
【００９３】
如何なる限定的性質を持たせずに説明するやり方で、本発明の細菌の使用の各種実施例（本発明の拮抗性株の抗菌作用を実証することを可能にするもの）を提示する。
【実施例】
【００９４】
実施例１：細菌株であるラクトバチルス・サニビリ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓａｎｉｖｉｒｉ）Ｆ３Ｃ５ｐ（ＣＮＣＭ  Ｉ−４６５０）、ラクトバチルス・サリヴァリゥス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ）Ｆ５０Ｃ２ｐ（ＣＮＣＭ  Ｉ−４６５１）、ラクトバチルス・サリヴァリゥスＦ５２Ｃ３ｐ（ＣＮＣＭ  Ｉ−４６５２）、ラクトバチルス・サリヴァリゥスＦ４１Ｃ３ｐ（ＣＮＣＭ  Ｉ−４６５３）、ストレプトコッカス・ミチス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｍｉｔｉｓ）Ｆ３Ｃ２ｖ（ＣＮＣＭ  Ｉ−４６５４）、およびラクトバチルス・ペントーサス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｅｎｔｏｓｕｓ）またはプランタラム（ｐｌａｎｔａｒｕｍ）Ｌ１Ｃ１（ＣＮＣＭ  Ｉ−４６５５）の抗菌作用
ラクトバチルス・サニビリＦ３Ｃ５ｐ（ＣＮＣＭ  Ｉ−４６５０）、ラクトバチルス・サリヴァリゥスＦ５０Ｃ２ｐ、Ｆ５２Ｃ３ｐおよびＦ４１Ｃ３ｐ（それぞれ、ＣＮＣＭ  Ｉ−４６５１、ＣＮＣＭ  Ｉ−４６５２およびＣＮＣＭ  Ｉ−４６５３）、ストレプトコッカス・ミチスＦ３Ｃ２ｖ（ＣＮＣＭ  Ｉ−４６５４）、ならびにラクトバチルス・ペントーサスまたはプランタラムＬ１Ｃ１（ＣＮＣＭ  Ｉ−４６５５）細菌を、Ｍａｎ  Ｒｏｇｏｓａ  Ｓｈａｒｐｅ（ＭＲＳ）培地中で、１６時間、３７℃、および嫌気的条件下で培養した。寒天培地１ｍｌ当たり１０６〜１０７菌数のメチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）ＡＴＣＣ  ４３３００、緑膿菌ＡＴＣＣ  ９０２７、バクテロイデス・フラジリスＡＴＣＣ  ２３７４５、エンテロバクター・クロアカＣＩＰ  １０５１３２、エンテロコッカス・フェシウムＡＴＣＣ  ７００２２１、プロテウス・ミラビリスＣＩＰ  １０７２８３、化膿性連鎖球菌ＡＴＣＣ  １９６１５、表皮ブドウ球菌ＡＴＣＣ  １４９９０、アクネ菌ＡＴＣＣ  ６９１９、カンジダ・アルビカンスＡＴＣＣ  １０２３１、または癜風菌ＡＴＣＣ  １４５２１で寒天培地本体を前もって植菌したトリプシン処理ダイズ寒天（ＴＳＡ）培地の表面に、１０μｌの上記培養物滴を置いた。
【００９５】
ネガティブコントロールは、１０μｌの滅菌ＭＲＳ培地を置くことにより行った。
【００９６】
プレートを、嫌気的条件下、３７℃で２４時間および４８時間インキュベートした。インキュベーション後、液滴の周りに形成された阻害ハローの直径（ｍｍ）を測定した。
【００９７】
この実験の結果を、表１に示す。
【００９８】
記号「−」は、阻害ハローが無いことを示す。記号「＋」は、直径１ｍｍ未満の阻害ハローを示す。記号「＋＋」は、直径１ｍｍ〜３ｍｍの阻害ハローを示す。そして、記号「＋＋＋」は、直径３ｍｍを超える阻害ハローを示す。ネガティブコントロールでは、阻害ハローはできなかった。阻害ハローが、試験した３種類の細菌株で観察された（図１参照）。
【００９９】
【表１】
0006309967.tif 000002
【０１００】
実施例２：ドレッシング材に取り込み後の、細菌株であるラクトバチルス・サニビリＦ３Ｃ５ｐ  （ＣＮＣＭ  Ｉ−４６５０）、ラクトバチルス・サリヴァリゥスＦ５０Ｃ２ｐ（ＣＮＣＭ  Ｉ−４６５１）、ラクトバチルス・サリヴァリゥスＦ５２Ｃ３ｐ（ＣＮＣＭ  Ｉ−４６５２）、ラクトバチルス・サリヴァリゥスＦ４１Ｃ３ｐ（ＣＮＣＭ  Ｉ−４６５３）、ストレプトコッカス・ミチスＦ３Ｃ２ｖ  （ＣＮＣＭ  Ｉ−４６５４）、およびラクトバチルス・ペントーサスまたはプランタラムＬ１Ｃ１（ＣＮＣＭ  Ｉ−４６５５）の抗菌作用
細菌Ｆ３Ｃ５ｐ、Ｆ５０Ｃ２ｐ、Ｆ５２Ｃ３ｐ、Ｆ４１Ｃ３ｐ、Ｆ３Ｃ２ｖ及びＬ１Ｃ１を、Ｍａｎ  Ｒｏｇｏｓａ  Ｓｈａｒｐｅ（ＭＲＳ）培地中で、１６時間、３７℃、および嫌気的条件下で培養した。ポリウレタンフォームおよび脂質−コロイドメッシュで構成されるドレッシング材片（１ｃｍ×１ｃｍ）を、本発明の細菌培養物５００μｌ（１０９〜１０１０ＣＦＵ  ｍｌ−１の濃度のもの）で含浸した。そして、そのドレッシング材片を、１０６〜１０７菌数の黄色ブドウ球菌ＭＲＳＡであるＡＴＣＣ  ４３３００または緑膿菌ＡＴＣＣ９０２７で寒天培地本体を前もって植菌したトリプシン処理ダイズ寒天（ＴＳＡ）培地の表面に置いた。ネガティブコントロールは、５００μｌの滅菌ＭＲＳ培地を置くことにより行った。
【０１０１】
プレートを、嫌気的条件下、３７℃で２４時間および４８時間インキュベートした。インキュベーション後、抗菌作用を、阻害ハローの存在により実証する。インキュベーション後、細菌ラクトバチルス・サニビリＦ３Ｃ５ｐ、ラクトバチルス・サリヴァリゥスＦ５０Ｃ２ｐ、ラクトバチルス・サリヴァリゥスＦ５２Ｃ３ｐ、ラクトバチルス・サリヴァリゥスＦ４１Ｃ３ｐ、ストレプトコッカス・ミチスＦ３Ｃ２ｖおよびラクトバチルス・ペントーサスまたはプランタラムＬ１Ｃ１で含浸したドレッシング材の周りに、阻害ハローが視認できる（図２参照）。ＭＲＳ培地で含浸したドレッシング材の周りには、阻害ハローは視認できない。
【０１０２】
実施例３：本発明の株がコラーゲン上に接着する能力
ラクトバチルス・サニビリＦ３Ｃ５ｐ、ラクトバチルス・サリヴァリゥスＦ５０Ｃ２ｐ、ラクトバチルス・サリヴァリゥスＦ５２Ｃ３ｐ、ラクトバチルス・サリヴァリゥスＦ４１Ｃ３ｐ、ストレプトコッカス・ミチスＦ３Ｃ２ｖおよびラクトバチルス・ペントーサスまたはプランタラムＬ１Ｃ１細菌の接着試験を、ＥｐｉＳｋｉｎ（ＳｋｉｎＥｔｈｉｃ）型の再構成表皮（１．０７ｃｍ２）（１３日目）上で実施した。表皮を含む挿入片を、２ｍｌの維持培地を有する１２穴プレートに配置し、表皮を再生するために、２４時間、３５℃±２℃でインキュベートした。
【０１０３】
インキュベーション後、維持培地を除去し、２ｍｌのＭＲＳ培地を加えた。創傷浸出液を刺激する培地（Ｓｉｍｕｌａｔｅｄ  Ｗｏｕｎｄ  Ｆｌｕｉｄ（５０／５０のｖｏｌ／ｖｏｌ）（Ｗｅｒｔｈｅｎら、２０１０年に記載されるもの））を、その後、本発明の細菌（約２．５×１０７ＣＦＵ  ｍｌ−１の濃度）で植菌した。２４時間のインキュベーション後、接着しなかった細菌を、生理食塩水で洗浄することにより除去した。表皮をメスで挿入片から剥がし、９ｍｌのＭＲＳ培地を含む滅菌容器中に配置した。接着した細菌を力学的作用（超音波浴）により剥がし、寒天培地上に希釈してプレーティングすることにより数を計算した。
【０１０４】
ラクトバチルス・サニビリＦ３Ｃ５ｐ、ラクトバチルス・サリヴァリゥスＦ５０Ｃ２ｐ、ラクトバチルス・サリヴァリゥスＦ５２Ｃ３ｐ、ラクトバチルス・サリヴァリゥスＦ４１Ｃ３ｐ、ストレプトコッカス・ミチスＦ３Ｃ２ｖおよびラクトバチルス・ペントーサスまたはプランタラムＬ１Ｃ１細菌は、表皮に接着することができ、２４時間生き残ることができる。ラクトバチルス・サニビリＦ３Ｃ５ｐが最も高い接着能力を示す（図３参照）。
【０１０５】
実施例４：バリア効果−コラーゲン表面上への病原体接着の阻害
ラクトバチルス・サニビリＦ３Ｃ５ｐ、ラクトバチルス・サリヴァリゥスＦ５０Ｃ２ｐ、ラクトバチルス・サリヴァリゥスＦ５２Ｃ３ｐ、ラクトバチルス・サリヴァリゥスＦ４１Ｃ３ｐ、ストレプトコッカス・ミチスＦ３Ｃ２ｖおよびラクトバチルス・ペントーサスまたはプランタラムＬ１Ｃ１細菌株が、コラーゲン含有マトリクス上への病原体種（黄色ブドウ球菌ＭＲＳＡであるＡＴＣＣ  ４３３００または緑膿菌ＡＴＣＣ  ９０２７）の接着を制限および／または阻害する能力を評価した。試験はＩ型コラーゲンでコートした２４穴マイクロプレート（ＢＤ  Ｂｉｏｃｏａｔ（商標）コラーゲンＩ）中で実行した。
【０１０６】
病原性細菌を、トリプシン処理ダイズ寒天（ＴＳＢ）培地中で、１６時間、３７℃で培養した。インキュベーション後、培養物をＴＳＢ培地中に、濃度が約２．５×１０７ＣＦＵ  ｍｌ−１、２．５×１０５ＣＦＵ  ｍｌ−１および２．５×１０３ＣＦＵ  ｍｌ−１になるように希釈した。
【０１０７】
ラクトバチルス・サニビリＦ３Ｃ５ｐ、ラクトバチルス・サリヴァリゥスＦ５０Ｃ２ｐ、ラクトバチルス・サリヴァリゥスＦ５２Ｃ３ｐ、ラクトバチルス・サリヴァリゥスＦ４１Ｃ３ｐ、ストレプトコッカス・ミチスＦ３Ｃ２ｖおよびラクトバチルス・ペントーサスまたはプランタラムＬ１Ｃ１細菌を、Ｍａｎ  Ｒｏｇｏｓａ  Ｓｈａｒｐｅ  （ＭＲＳ）培地中で、１６時間、３７℃、および嫌気的条件下で培養した。
【０１０８】
接着競合試験については、Ｆ３Ｃ５ｐ、Ｆ５０Ｃ２ｐとＦ５２Ｃ３ｐ細菌および病原性細菌（黄色ブドウ球菌または緑膿菌）を、それぞれの濃度が約２．５×１０７ＣＦＵ  ｍｌ−１および病原性細菌に関しては２．５×１０７ＣＦＵ  ｍｌ−１、２．５×１０５ＣＦＵ  ｍｌ−１または２．５×１０３ＣＦＵ  ｍｌ−１となるように同時に加えた。Ｆ４１Ｃ３ｐ、Ｆ３Ｃ２ｖとＬ１Ｃ１細菌および病原性細菌（黄色ブドウ球菌または緑膿菌）を、それぞれの濃度が約２．５×１０７ＣＦＵ  ｍｌ−１および２．５×１０７ＣＦＵ  ｍｌ−１となるように同時に加えた。
【０１０９】
排除試験については、Ｆ３Ｃ５ｐ、Ｆ５０Ｃ２ｐおよびＦ５２Ｃ３ｐ細菌を、濃度が約２．５×１０７ＣＦＵ  ｍｌ−１となるようにウエル中に導入し、３７℃で２４時間インキュベートした。接着後、ウエルを生理食塩水で洗浄し、そして、病原性株（黄色ブドウ球菌または緑膿菌）を、約２．５×１０７ＣＦＵ  ｍｌ−１、２．５×１０５ＣＦＵ  ｍｌ−１、または２．５×１０３ＣＦＵ  ｍｌ−１の濃度でウエル中に導入した。濃度が約２．５×１０７ＣＦＵ  ｍｌ−１の病原性株（黄色ブドウ球菌または緑膿菌）とともに、Ｆ４１Ｃ３ｐ、Ｆ３Ｃ２ｖおよびＬ１Ｃ１細菌を、約２．５×１０７ＣＦＵ  ｍｌ−１の濃度で試験した。
【０１１０】
各試験について、接触２４時間後、病原性細菌は、黄色ブドウ球菌に関しては亜テルル酸カリウム含有卵黄のエマルジョンを添加したＢａｉｒｄ−Ｐａｒｋｅｒ培地上または緑膿菌に関してはセファロスポリン／フシジン（ｆｕｃｉｄｉｎ）／セトリミド（ＣＦＣ）培地上で具体的に数を計数した。３５℃±２℃で２４時間のインキュベーション後、特徴的なコロニーの数を数えた。本発明の細菌非処理コントロールを、各試験について実施した。
【０１１１】
Ｆ３Ｃ５ｐ、Ｆ５０Ｃ２ｐ、Ｆ５２Ｃ３ｐ、Ｆ４１Ｃ３ｐ、Ｆ３Ｃ２ｖおよびＬ１Ｃ１細菌は、試験した３種類の濃度に関して、非処理コントロールと較べて、黄色ブドウ球菌の接着とコラーゲンコート基質でのコロニー形成を強く制限することができる（図４および５参照）。
【０１１２】
Ｆ３Ｃ５ｐ、Ｆ５０Ｃ２ｐ、Ｆ５２Ｃ３ｐ、Ｆ４１Ｃ３ｐ、Ｆ３Ｃ２ｖおよびＬ１Ｃ１細菌は、初期混入が１０５ＣＦＵ／ｃｍ２未満の場合、非処理コントロールと較べて、緑膿菌の接着とコラーゲンコート基質でのコロニー形成を制限することができる（図６および７参照）。
【０１１３】
実施例５：マクロファージに関する免疫調整活性
ラクトバチルス・サニビリＦ３Ｃ５ｐ、ラクトバチルス・サリヴァリゥスＦ５０Ｃ２ｐ、ラクトバチルス・サリヴァリゥスＦ５２Ｃ３、ラクトバチルス・ペントーサス／プランタラムＬ１Ｃ１、ラクトバチルス・サリヴァリゥスＦ４１Ｃ３ｐ、およびストレプトコッカス・ミチスＦ３Ｃ２ｖ株を、Ｍａｎ  Ｒｏｇｏｓａ  Ｓｈａｒｐｅ（ＭＲＳ）培地中で、１６時間、３７℃、および嫌気的条件下で培養した。細菌を遠心分離により回収し、その後、細菌抽出液を得るために超音波不活性化または熱不活性化（９５℃）した。
【０１１４】
ＴＨＰ１単球（ＡＴＣＣ  ＴＩＢ−２０２）は、ローズウエルパーク記念研究所（ＲＰＭＩ）培地中で培養し、ホルボール−１２−ミリステート−１３−アセテート（ＰＭＡ）を添加してマクロファージに分化させた。培養２４時間後に、得られたマクロファージを、（ｉ）細菌抽出物単独、（ｉｉ）大腸菌Ｏ１２７：Ｂ８由来ＬＰＳ、（ｉｉｉ）菌抽出液存在下で大腸菌Ｏ１２７：Ｂ８由来ＬＰＳのいずれかに暴露した。接触３．５時間後、培養上清中の腫瘍壊死因子（ＴＮＦ−α）の濃度を、ＥＬＩＳＡ法を使用して測定した。
【０１１５】
細菌抽出液単独の添加は、菌抽出液不含有コントロールと較べて、ＴＮＦ−αの有意な放出を全く誘導しない。従って、（ＴＮＦ−αの弱い放出（１２１ｐｇ／ｍｌの濃度）を誘導するＬ１Ｃ１株を除いて）免疫反応の強化を全く誘導しない。
【０１１６】
大腸菌由来のＬＰＳでマクロファージを刺激すると、細菌抽出液の非存在下でＴＮＦ−αの大量放出（濃度は約５００ｐｇ／ｍｌ）を生じる。ＬＰＳと共に各種細菌株（Ｆ３Ｃ５ｐ、Ｆ４１Ｃ３ｐ、Ｆ５０Ｃ２ｐ、Ｆ５２Ｃ３ｐ、Ｌ１Ｃ１またはＦ３Ｃ２ｖ）から調製した菌抽出物を同時添加すると、マクロファージによるＴＮＦ−αの放出を有意に（２〜５倍）減少させることができる。これらの結果は、乳酸菌の６種類の株が抗炎症潜在力を有することを実証する。
【０１１７】
本出願で引用した参考文献は以下である：
１  Ｂｒａｃｈｋｏｖａ  ＭＩ，  Ｍａｒｑｕｅｓ  Ｐ，  Ｒｏｃｈａ  Ｊ，  Ｓｅｐｏｄｅｓ  Ｂ，  Ｄｕａｒｔｅ  ＭＡ，  Ｐｉｎｔｏ  ＪＦ  （２０１１）．  Ａｌｇｉｎａｔｅ  ｆｉｌｍｓ  ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｌａｎｔａｒｕｍ  ａｓ  ｗｏｕｎｄ  ｄｒｅｓｓｉｎｇ  ｆｏｒ  ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ  ｏｆ  ｂｕｒｎ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ．  Ｊ．  Ｈｏｓｐ．  Ｉｎｆｅｃｔ．  ７９：  ３７５−３７７
２  Ｃｏｓｔｅｒｔｏｎ，  Ｊ．Ｗ．，  Ｓｔｅｗａｒｔ，  Ｐ．  Ｓ．  ａｎｄ  Ｇｒｅｅｎｂｅｒｇ，  Ｅ．  Ｐ．  （１９９９）．  Ｂａｃｔｅｒｉａｌ  ｂｉｏｆｉｌｍｓ：  ａ  ｃｏｍｍｏｎ  ｃａｕｓｅ  ｏｆ  ｐｅｒｓｉｓｔｅｎｔ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ．  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２８４  （５４１８）：  １３１８−１３２２
３  Ｇａｎ  ＢＳ，  Ｋｉｍ  Ｊ，  Ｒｅｉｄ  Ｇ，  Ｃａｄｉｅｕｘ  Ｐ，  Ｈｏｗａｒｄ  ＪＣ  （２００２）．  Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ  ＲＣ−１４  ｉｎｈｉｂｉｔｓ  Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｓｕｒｇｉｃａｌ  ｉｍｐｌａｎｔｓ  ｉｎ  ｒａｔｓ．  Ｊ．  Ｉｎｆｅｃｔ．  Ｄｉｓ．  １８５：  １３６９−１３７２
４  Ｇｕｅｎｉｃｈｅ  Ａ，  Ｈｅｎｎｉｎｏ  Ａ，  Ｇｏｕｊｏｎ  Ｃ，  Ｄａｈｅｌ  Ｋ，  Ｂａｓｔｉｅｎ  Ｐ，  Ｍａｒｔｉｎ  Ｒ，  Ｊｏｕｒｄａｉｎ  Ｒ，  Ｂｒｅｔｏｎ  Ｌ  （２００６）．  Ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ａｔｏｐｉｃ  ｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ  ｓｋｉｎ  ｓｙｍｐｔｏｍｓ  ｂｙ  Ｖｉｔｒｅｏｓｃｉｌｌａ  ｆｉｌｉｆｏｒｍｉｓ  ｂａｃｔｅｒｉａｌ  ｅｘｔｒａｃｔ．  Ｅｕｒ．  Ｊ．  Ｄｅｒｍａｔｏｌ．  １６：  ３８０−３８４
５  Ｇｕｅｎｉｃｈｅ  Ａ，  Ｂｕｅｔｌｅｒ  Ｔ，  Ｂｅｎｙａｃｏｕｂ  Ｊ，  Ｂｌｕｍ  Ｓ  （２００８ａ）．  Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｊｏｈｎｓｏｎｉｉ  ｐｒｏｖｉｄｅｓ  ａ  ｄｏｓｅ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  ａｇａｉｎｓｔ  ＵＶＲ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ．  Ｅｕｒ．  Ｊ．  Ｄｅｒｍａｔｏｌ．  １８：  ４７６−４７７
６  Ｇｕｅｎｉｃｈｅ  Ａ，  Ｃａｔｈｅｌｉｎｅａｕ  ＡＣ，  Ｂａｓｔｉｅｎ  Ｐ，  Ｅｓｄａｉｌｅ  Ｊ，  Ｍａｒｔｉｎ  Ｒ，  Ｑｕｅｉｌｌｅ  Ｒｏｕｓｓｅｌ  Ｃ，  Ｂｒｅｔｏｎ  Ｌ  （２００８ｂ）．  Ｖｉｔｒｅｏｓｃｉｌｌａ  ｆｉｌｉｆｏｒｍｉｓ  ｂｉｏｍａｓｓ  ｉｍｐｒｏｖｅｓ  ｓｅｂｏｒｒｈｅｉｃ  ｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ．  Ｊ．  Ｅｕｒ．  Ａｃａｄ．  Ｄｅｒｍａｔｏｌ．  Ｖｅｎｅｒｅｏｌ．  ２２：  １０１４−１０１５
７  Ｇｕｅｎｉｃｈｅ  Ａ，  Ｄａｈｅｌ  Ｋ，  Ｂａｓｔｉｅｎ  Ｐ，  Ｍａｒｔｉｎ  Ｒ，  Ｎｉｃｏｌａｓ  ＪＦ，  Ｂｒｅｔｏｎ  Ｌ  （２００８ｃ）．  Ｖｉｔｒｅｏｓｃｉｌｌａ  ｆｉｌｉｆｏｒｍｉｓ  ｂａｃｔｅｒｉａｌ  ｅｘｔｒａｃｔ  ｔｏ  ｉｍｐｒｏｖｅ  ｔｈｅ  ｅｆｆｉｃａｃｙ  ｏｆ  ｅｍｏｌｌｉｅｎｔ  ｕｓｅｄ  ｉｎ  ａｔｏｐｉｃ  ｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ  ｓｙｍｐｔｏｍｓ．  Ｊ．  Ｅｕｒ．  Ａｃａｄ．  Ｄｅｒｍａｔｏｌ．  Ｖｅｎｅｒｅｏｌ．  ２２：  ７４６−７４７
８  Ｇｕｅｎｉｃｈｅ  Ａ，  Ｋｎａｕｄｔ  Ｂ，  Ｓｃｈｕｃｋ  Ｅ，  Ｖｏｌｚ  Ｔ，  Ｂａｓｔｉｅｎ  Ｐ，  Ｍａｒｔｉｎ  Ｒ，  Ｒｏｃｋｅｎ  Ｍ，  Ｂｒｅｔｏｎ  Ｌ，  Ｂｉｅｄｅｒｍａｎｎ  Ｔ  （２００８ｄ）．  Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ｎｏｎｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ  ｇｒａｍ−ｎｅｇａｔｉｖｅ  ｂａｃｔｅｒｉｕｍ  Ｖｉｔｒｅｏｓｃｉｌｌａ  ｆｉｌｉｆｏｒｍｉｓ  ｌｙｓａｔｅ  ｏｎ  ａｔｏｐｉｃ  ｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ：  ａ  ｐｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ，  ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ，  ｄｏｕｂｌｅ−ｂｌｉｎｄ，  ｐｌａｃｅｂｏ−ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｓｔｕｄｙ．  Ｂｒ．  Ｊ．  Ｄｅｒｍａｔｏｌ．  １５９：  １３５７−１３６３
９  Ｇｕｅｎｉｃｈｅ  Ａ，  Ｂａｓｔｉｅｎ  Ｐ，  Ｏｖｉｇｎｅ  ＪＭ，  Ｋｅｒｍｉｃｉ  Ｍ，  Ｃｏｕｒｃｈａｙ  Ｇ，  Ｃｈｅｖａｌｉｅｒ  Ｖ，  Ｂｒｅｔｏｎ  Ｌ，  Ｃａｓｔｉｅｌ−Ｈｉｇｏｕｎｅｎｃ  Ｉ  （２００９）．  Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｌｏｎｇｕｍ  ｌｙｓａｔｅ，  ａ  ｎｅｗ  ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ  ｆｏｒ  ｒｅａｃｔｉｖｅ  ｓｋｉｎ．  Ｅｘｐ．  Ｄｅｒｍａｔｏｌ．  １９：  ｅ１−８
１０  Ｇｕｅｎｉｃｈｅ  Ａ，  Ｂｅｎｙａｃｏｕｂ  Ｊ，  Ｐｈｉｌｉｐｐｅ  Ｄ，  Ｂａｓｔｉｅｎ  Ｐ，  Ｋｕｓｙ  Ｎ，  Ｂｒｅｔｏｎ  Ｌ，  Ｂｌｕｍ  Ｓ，  Ｃａｓｔｉｅｌ−Ｈｉｇｏｕｎｅｎｃ  Ｉ  （２０１０）．  Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐａｒａｃａｓｅｉ  ＣＮＣＭ  Ｉ−２１１６  （ＳＴ１１）  ｉｎｈｉｂｉｔｓ  ｓｕｂｓｔａｎｃｅ  Ｐ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｓｋｉｎ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ａｃｃｅｌｅｒａｔｅｓ  ｓｋｉｎ  ｂａｒｒｉｅｒ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ  ｒｅｃｏｖｅｒｙ  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ．  Ｅｕｒ．  Ｊ．  Ｄｅｒｍａｔｏｌ．  ２０：  ７３１−７３７
１１  Ｈａｌｐｅｒ  Ｊ，  Ｌｅｓｈｉｎ  ＬＳ，  Ｌｅｗｉｓ  ＳＪ，  Ｌｉ  ＷＩ  （２００３）．  Ｗｏｕｎｄ  ｈｅａｌｉｎｇ  ａｎｄ  ａｎｇｉｏｇｅｎｉｃ  ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ｏｆ  ｓｕｐｅｒｎａｔａｎｔｓ  ｆｒｏｍ  Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｕｌｔｕｒｅｓ．  Ｅｘｐ  Ｂｉｏｌ  Ｍｅｄ  ２２８：  １３２９−１３３７
１２  Ｏｈ  Ｓ，  Ｋｉｍ  ＳＨ，  Ｋｏ  Ｙ，  Ｓｉｍ  ＪＨ，  Ｋｉｍ  ＫＳ，  Ｌｅｅ  ＳＨ，  Ｐａｒｋ  Ｓ，  Ｋｉｍ  ＹＪ  （２００６）．  Ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ｂａｃｔｅｒｉｏｃｉｎ  ｐｒｏｄｕｃｅｄ  ｂｙ  Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｐ．  ＨＹ  ４４９  ｏｎ  ｓｋｉｎ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｂａｃｔｅｒｉａ．  Ｆｏｏｄ  ａｎｄ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ  ４４  （２００６）  １１８４‐１１９０
１３  Ｉｍ  Ｅ，  Ｃｈｏｉ  ＹＪ，  Ｋｉｍ  ＣＨ，  Ｆｉｏｃｃｈｉ  Ｃ，  Ｐｏｔｈｏｕｌａｋｉｓ  Ｃ，  Ｒｈｅｅ  ＳＨ  （２００９）．  Ｔｈｅ  ａｎｇｉｏｇｅｎｉｃ  ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ｐｒｏｂｉｏｔｉｃ  Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｏｌｙｆｅｒｍｅｎｔｉｃｕｓ  ｏｎ  ｈｕｍａｎ  ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  ｍｉｃｒｏｖａｓｃｕｌａｒ  ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  ｃｅｌｌｓ  ｉｓ  ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｂｙ  ＩＬ−８．  Ａｍ．  Ｊ．  Ｐｈｙｓｉｏｌ．  Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔ．  Ｌｉｖｅｒ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．  ２９７：  Ｇ９９９−Ｇ１００８
１４  Ｍｉ−Ｓｕｎ  Ｋａｎｇ  ＭＳ，  Ｏｈ  ＪＳ，  Ｌｅｅ  ＳＷ，  Ｌｉｍ  ＨＳ，  Ｃｈｏｉ  ＮＫ，  ａｎｄ  Ｋｉｍ  ＳＭ  （２０１２）．  Ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｒｅｕｔｅｒｉ  ｏｎ  ｔｈｅ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｃｎｅｓ  ａｎｄ  Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ．  Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  （２０１２）  Ｖｏｌ．  ５０，  Ｎｏ．  １，  ｐｐ．  １３７−１４２
１５  Ｐｅｒａｌ  ＭＣ，  Ｍａｒｔｉｎｅｚ  ＭＡ，  Ｖａｌｄｅｚ  ＪＣ  （２００９）．  Ｂａｃｔｅｒｉｏｔｈｅｒａｐｙ  ｗｉｔｈ  Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｌａｎｔａｒｕｍ  ｉｎ  ｂｕｒｎｓ．  Ｉｎｔ．  Ｗｏｕｎｄ  Ｊ．  ６：  ７３−８１
１６  Ｐｅｒａｌ  ＭＣ，  Ｒａｃｈｉｄ  ＭＭ，  Ｇｏｂｂａｔｏ  ＮＭ，  Ｈｕａｍａｎ  Ｍａｒｔｉｎｅｚ  ＭＡ，  Ｖａｌｄｅｚ  ＪＣ  （２０１０）．  Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−８  ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｂｙ  ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｏｎｕｃｌｅａｒ  ｌｅｕｋｏｃｙｔｅｓ  ｆｒｏｍ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｃｈｒｏｎｉｃ  ｉｎｆｅｃｔｅｄ  ｌｅｇ  ｕｌｃｅｒｓ  ｔｒｅａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｌａｎｔａｒｕｍ．  Ｃｌｉｎ．  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．  Ｉｎｆｅｃｔ．  １６：  ２８１−２８６
１７  Ｒａｍｏｓ  ＡＮ，  Ｇｏｂｂａｔｏ  Ｎ，  Ｒａｃｈｉｄ  Ｍ，  Ｇｏｎｚａｌｅｚ  Ｌ，  Ｙａｎｔｏｒｎｏ  Ｏ，  Ｖａｌｄｅｚ  ＪＣ  （２０１０）．  Ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｌａｎｔａｒｕｍ  ａｎｄ  Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ  ｃｕｌｔｕｒｅ  ｓｕｐｅｒｎａｔａｎｔｓ  ｏｎ  ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｏｎｕｃｌｅａｒ  ｄａｍａｇｅ  ａｎｄ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ．  Ｉｎｔ．  Ｉｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ．  １０：  ２４７−２５１
１８  Ｓｉｋｏｒｓｋａ  Ｈ，  Ｓｍｏｒａｇｉｅｗｉｃｚｂ  Ｗ  （２０１３）．  Ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｐｒｏｂｉｏｔｉｃｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｍｅｔｉｃｉｌｌｉｎ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ．  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ａｇｅｎｔｓ  ４２  （２０１３）  ４７５−４８１
１９  Ｖａｌｄｅｚ  ＪＣ，  Ｐｅｒａｌ  ＭＣ，  Ｒａｃｈｉｄ  Ｍ，  Ｓａｎｔａｎａ  Ｍ，  Ｐｅｒｄｉｇｏｎ  Ｇ  （２００５）．  Ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ  ｏｆ  Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｌａｎｔａｒｕｍ  ｗｉｔｈ  Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ａｎｄ  ｉｎ  ｉｎｆｅｃｔｅｄ  ｂｕｒｎｓ：  ｔｈｅ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｕｓｅ  ｏｆ  ｐｒｏｂｉｏｔｉｃｓ  ｉｎ  ｗｏｕｎｄ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ．  Ｃｌｉｎ．  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．  Ｉｎｆｅｃｔ．  １１：  ４７２−４７９
２０    Ａｌｂｅｒｔｏ  Ｎ．  Ｒａｍｏｓ，  Ｍａｒｉａ  Ｅ．  Ｓｅｓｔｏ  Ｃａｂｒａｌ，  Ｄｉｅｇｏ  Ｎｏｓｅｄａ，  Ａｌｅｊａｎｄｒａ  Ｂｏｓｃｈ，  Ｏｓｖａｌｄｏ  Ｍ．  Ｙａｎｔｏｒｎｏ，  Ｊｕａｎ  Ｃ．  Ｖａｌｄｅｚ，  （２０１２）．Ａｎｔｉｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ  ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ｏｆ  Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｌａｎｔａｒｕｍ  ｏｎ  Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ：Ｔｈｅ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｕｓｅ  ｏｆ  ｉｔｓ  ｓｕｐｅｒｎａｔａｎｔｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｉｎｆｅｃｔｅｄ  ｃｈｒｏｎｉｃ  ｗｏｕｎｄｓ．Ｗｏｕｎｄ  Ｒｅｐ  Ｒｅｇ  （２０１２）
【図１】
0006309967.tif 000003
【図２】
0006309967.tif 000004
【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８ａ】
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【図８ｂ】
0006309967.tif 000011