(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ｉ）約４８％から約９０％（ｗ／ｗ）のグルコマンナン、約５％から約２０％（ｗ／ｗ）のキサンタンガム、および約５％から約３０％（ｗ／ｗ）のアルギネートを含む食物繊維組成物と、（ｉｉ）メトホルミン、シタグリプチン、またはこれらの組合せのうちの少なくとも１種とを含む、医薬組成物であって、前記医薬組成物は、前記食物繊維組成物単独、あるいは、メトホルミン、シタグリプチンまたはこれらの組合せのうちの少なくとも１種からなる組成物と比較して、対象における上昇した血糖レベルおよび総血中コレステロールレベルを有意に低下させるためのものである、医薬組成物。
【請求項２】
前記食物繊維組成物およびメトホルミンを含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
前記食物繊維組成物およびシタグリプチンを含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項４】
前記食物繊維組成物、メトホルミン、およびシタグリプチンを含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項５】
前記食物繊維組成物が、約５０％から約８０％（ｗ／ｗ）のグルコマンナン、約１０％から約２０％（ｗ／ｗ）のキサンタンガム、および約１０％から約２０％（ｗ／ｗ）のアルギネートを含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項６】
前記食物繊維組成物が造粒されている、請求項１から５のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項７】
前記食物繊維組成物が、少なくとも１種の脂質またはそのブレンドをさらに含み、前記脂質またはそのブレンドが、全食物繊維組成物の少なくとも２０％（ｗ／ｗ）を構成する、請求項１から６のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項８】
外側軟質ゼラチンカプセルに含有されるか、錠剤に配合されているか、または粉末に製剤化されている、請求項１から７のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項９】
代謝疾患または代謝障害に関連した１つまたは複数の症状を予防し、処置し、または改善するためのキットであって、
（ｉ）約４８％から約９０％（ｗ／ｗ）のグルコマンナン、約５％から約２０％（ｗ／ｗ）のキサンタンガム、および約５％から約３０％（ｗ／ｗ）のアルギネートを含む食物繊維組成物と、
（ｉｉ）メトホルミン、シタグリプチン、またはこれらの組合せのうちの少なくとも１種と
を含み、（ｉ）および（ｉｉ）は、同時に投与するためのものであり、前記食物繊維組成物単独、あるいは、メトホルミン、シタグリプチンまたはこれらの組合せのうちの少なくとも１種からなる組成物と比較して、対象における上昇した血糖レベルおよび総血中コレステロールレベルを有意に低下させるためのものである、キット。
【請求項１０】
前記食物繊維組成物が、医薬組成物中で前記メトホルミンと組み合わされている、請求項９に記載のキット。
【請求項１１】
前記食物繊維組成物が、医薬組成物中で前記シタグリプチンと組み合わされている、請求項９に記載のキット。
【請求項１２】
前記食物繊維組成物が、医薬組成物中で前記メトホルミンおよび前記シタグリプチンと組み合わされている、請求項９に記載のキット。
【請求項１３】
前記メトホルミンおよびシタグリプチンが医薬組成物中で組み合わされており、前記食物繊維組成物が別である、請求項９に記載のキット。
【請求項１４】
対象の代謝疾患または代謝障害に関連した１つまたは複数の症状を、予防し、処置し、または改善するのに使用するための、請求項１から８のいずれか一項に記載の医薬組成物であって、好ましくは前記代謝疾患または代謝障害がメタボリックシンドロームまたはＩＩ型糖尿病である、医薬組成物。
【請求項１５】
１日当たり約１ｇから約５０ｇの前記食物繊維組成物の量が提供されるように前記対象に投与するための、および／または少なくとも２週間の期間にわたって１日当たり少なくとも１回投与するための、請求項１４に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
少なくとも２週間の期間にわたって１日当たり約５０ｍｇから約２０００ｍｇのメトホルミンが提供されるように前記対象に投与するための、メトホルミンを含む請求項１４または１５に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
少なくとも２週間の期間にわたって１日当たり約１０００ｍｇのメトホルミンが提供されるように前記対象に投与するための、メトホルミンを含む請求項１４または１５に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
少なくとも２週間の期間にわたって１日当たりシタグリプチンが約５ｍｇから約１００ｍｇ提供されるように前記対象に投与するための、シタグリプチンを含む請求項１４または１５に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
メトホルミンおよびシタグリプチンを含む、請求項１４から１８のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
（ｉ）約４８％から約９０％（ｗ／ｗ）のグルコマンナン、約５％から約２０％（ｗ／ｗ）のキサンタンガム、および約５％から約３０％（ｗ／ｗ）のアルギネートを含む食物繊維組成物と、
（ｉｉ）メトホルミン、シタグリプチン、またはこれらの組合せの少なくとも１種の有効量と
の組合せ物であって、
前記組合せ物は、対象の代謝疾患または代謝障害に関連した１つまたは複数の症状を予防し、処置し、または改善するのに使用するためのものであり、前記食物繊維組成物単独、あるいは、メトホルミン、シタグリプチンまたはこれらの組合せのうちの少なくとも１種からなる組成物と比較して、対象における上昇した血糖レベルおよび総血中コレステロールレベルを有意に低下させるためのものであり、（ｉ）および（ｉｉ）は、有効な量で前記対象へ同時に投与される、組合せ物。
【請求項２１】
前記代謝疾患または代謝障害がメタボリックシンドロームまたはＩＩ型糖尿病である、請求項２０に記載の組合せ物。
【請求項２２】
前記食物繊維組成物が、約５０％から約８０％（ｗ／ｗ）のグルコマンナン、約１０％から約２０％（ｗ／ｗ）のキサンタンガム、および約１０％から約２０％（ｗ／ｗ）のアルギネートを含む、請求項２０または２１に記載の組合せ物。
【請求項２３】
前記食物繊維組成物が造粒されている、請求項２０から２２のいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項２４】
前記食物繊維組成物が、１日当たり約１ｇから約５０ｇの量で前記対象に投与するためのものであるか、および／または前記食物繊維組成物が、少なくとも２週間の期間にわたって１日当たり少なくとも１回投与するためのものである、請求項２０から２３のいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項２５】
メトホルミンを含む、請求項２０から２４のいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項２６】
前記メトホルミンが、少なくとも２週間の期間にわたって１日当たり約５０ｍｇから約２０００ｍｇの量で投与するためのものである、請求項２５に記載の組合せ物。
【請求項２７】
シタグリプチンを含む、請求項２０から２４のいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項２８】
前記シタグリプチンが、少なくとも２週間の期間にわたって１日当たり約５ｍｇから約１００ｍｇの量で投与するためのものである、請求項２７に記載の組合せ物。
【請求項２９】
メトホルミンおよびシタグリプチンを含む、請求項２０から２４のいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項３０】
前記メトホルミンおよびシタグリプチンが、単一医薬組成物で投与するためのものであり、前記食物繊維組成物が、別に投与するためのものである、請求項２９に記載の組合せ物。
【請求項３１】
前記メトホルミンが、少なくとも２週間の期間にわたって１日当たり約１０００ｍｇの量で投与するためのものである、請求項２０から２６、２９または３０のいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項３２】
前記予防、処置、または改善が、前記対象の上昇した血糖レベルを低下させるステップを含む、請求項１４から１９のいずれか一項に記載の組成物または請求項２０から３１のいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項３３】
前記予防、処置、または改善が、前記対象の、島細胞集団を保存しかつ／または膵臓細胞損傷を低減させることによって、膵島機能を保存するステップを含む、請求項１４から１９のいずれか一項に記載の組成物または請求項２０から３１のいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項３４】
前記予防、処置、または改善が、前記対象の除脂肪体重を増加させるステップを含む、請求項１４から１９のいずれか一項に記載の組成物または請求項２０から３１のいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項３５】
前記予防、処置、または改善が、前記対象の総血中コレステロールを低下させるステップを含む、請求項１４から１９のいずれか一項に記載の組成物または請求項２０から３１のいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項３６】
前記予防、処置、または改善が、前記対象の肝機能を保存しかつ／または肝損傷を低減させるステップを含む、請求項１４から１９のいずれか一項に記載の組成物または請求項２０から３１のいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項３７】
前記予防、処置、または改善が、前記対象の腎機能を保存しかつ／または腎損傷を低減させるステップを含む、請求項１４から１９のいずれか一項に記載の組成物または請求項２０から３１のいずれか一項に記載の組合せ物。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
背景
ＩＩ型糖尿病の発症をもたらし得る状態の、肥満およびメタボリックシンドロームは、ますます一般的になってきている。内臓肥満、血清グルコース、およびインスリンレベルの増加は、高血圧および脂質異常と共に、まとめてメタボリックシンドロームとして公知である一群の臨床的状態である（E.J.  Gallagherら、Endocrinol.  Metab.  Clin.  North  Am.  ３７巻：５５９〜１９頁（２００８年））。これらの状態は、細胞のインスリン抵抗性を増大させることに起因することがわかっており、場合によってはこれらの症状は、ＩＩ型糖尿病の前駆状態である。ＩＩ型糖尿病は、典型的には、血糖を調節するために様々な医薬品で、より深刻な場合にはインスリン注射によって管理される。しかし食事および減量が、メタボリックシンドロームおよびＩＩ型糖尿病の両方に関連した多くの代謝異常を正すのに主要な役割を演ずる（Yipら、Obesity  Res.  ９巻：３４１Ｓ〜３４７Ｓ頁（２００１年））。研究は、メタボリックシンドロームである者が主要冠動脈事象を経験する危険性が５０％と高いことを示している（D.E.,  Mollerら、Annu  Rev  Med  ５６巻：４５〜６２頁（２００５年））。したがって、体重、空腹時インスリン、および空腹時グルコースのどのような低減も、そのように罹患している個人に対して著しい健康上の利益をもたらすと考えられる。
【０００２】
典型的には、ＩＩ型糖尿病に罹患している対象は、脂質異常（即ち、糖尿病性脂質異常）も有する可能性が高く、この場合、対象は異常に低いレベルのＨＤＬ（即ち、＜４０ｍｇ／ｄＬ）および／または異常に高いレベルの低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）（即ち、＞１００ｍｇ／ｄＬ）、コレステロール、および／または異常に高いレベルのトリグリセリドを有し、アテローム性動脈硬化症のリスクおよび心臓血管疾患の発症のリスクを増大させる（Circulation  １１０巻：２２７〜２３９頁（２００４年）参照）。
【０００３】
高血糖指数の食物の摂取は、過食および肥満をもたらすことが公知である（Ludwigら、Pediatrics  １０３巻（３号）：Ｅ２６頁（１９９９年））。したがって、糖尿病または前糖尿病状態の管理ならびに減量で使用される任意の薬剤は、血糖指数が低いことが好ましい。そのような薬剤で食物の血糖指数が低減する場合が、最も好ましい。
【０００４】
炭水化物摂取の低減も、糖尿病状態を首尾良く管理するのに必要である。食事カウンセリングが助けになるが、糖尿病は、より頻繁な低血糖状態を経験するので、食物渇望がより大きくなる（Strachanら、Physiol.  Behav.  ８０巻（５号）：６７５〜８２頁（２００４年））。さらに、糖尿病患者の血糖レベルを低下させる療法は、体重増加という望ましくない副作用をしばしば伴う（Schultesら、J.  Clin.  Endocrinol.  Metabol.  ８８巻（３）：１１３３〜４１頁（２００３年））。可溶性繊維が高い食事は、高いインスリン感受性を通して糖尿病のリスクを低減させ得ることが報告されている。（Ylonenら、Diabetes  Care  ２６巻：１９７９〜８５頁（２００３年））。これは、血糖調節における食物繊維の可能性ある役割から生じ得る。高粘度の食べ物は、低粘度の食べ物よりも大きな満足感をもたらすことも報告されている（Marcianiら、Am.  J.  Physiol.  Gastrointest.  Liver  Physiol.  ２８０巻：Ｇ１２２７〜３３頁（２００１年））。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】E.J.  Gallagherら、Endocrinol.  Metab.  Clin.  North  Am.  ３７巻：５５９〜１９頁（２００８年）
【非特許文献２】Yipら、Obesity  Res.  ９巻：３４１Ｓ〜３４７Ｓ頁（２００１年）
【非特許文献３】D.E.,  Mollerら、Annu  Rev  Med  ５６巻：４５〜６２頁（２００５年）
【非特許文献４】Circulation  １１０巻：２２７〜２３９頁（２００４年）
【非特許文献５】Ludwigら、Pediatrics  １０３巻（３号）：Ｅ２６頁（１９９９年）
【非特許文献６】Strachanら、Physiol.  Behav.  ８０巻（５号）：６７５〜８２頁（２００４年）
【非特許文献７】Schultesら、J.  Clin.  Endocrinol.  Metabol.  ８８巻（３）：１１３３〜４１頁（２００３年）
【非特許文献８】Ylonenら、Diabetes  Care  ２６巻：１９７９〜８５頁（２００３年）
【非特許文献９】Marcianiら、Am.  J.  Physiol.  Gastrointest.  Liver  Physiol.  ２８０巻：Ｇ１２２７〜３３頁（２００１年）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
したがって、血糖レベルを低下させ且つ満腹感を促進させることによって、代謝疾患および代謝障害と付随するメタボリックシンドロームであって糖尿病状態を含めたものの管理を支援する組成物が求められている。本発明は、この必要性およびその他のものに対処する。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
（概要）
一態様では、本発明は、（ｉ）約４８％から約９０％（ｗ／ｗ）のグルコマンナン、約５％から約２０％（ｗ／ｗ）のキサンタンガム、および約５％から約３０％（ｗ／ｗ）のアルギネートを含む食物繊維組成物と；（ｉｉ）メトホルミン、シタグリプチン、またはこれらの組合せのうちの少なくとも１種とを含む、医薬組成物を提供する。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、食物繊維組成物とメトホルミンとの組合せを含む。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、食物繊維組成物とシタグリプチンとの組合せを含む。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、食物繊維組成物とメトホルミンおよびシタグリプチンとの組合せを含む。
【０００８】
別の態様では、本発明は、代謝疾患または代謝障害に関連した１つまたは複数の症状を予防し、処置し、または改善する方法を提供する。本発明のこの態様による方法は、それらを必要とするヒト対象に、（ｉ）約４８％から約９０％（ｗ／ｗ）のグルコマンナン、約５％から約２０％（ｗ／ｗ）のキサンタンガム、および約５％から約３０％（ｗ／ｗ）のアルギネートを含む食物繊維組成物と；（ｉｉ）メトホルミン、シタグリプチン、またはこれらの組合せのうちの少なくとも１種の有効量とを共投与するステップを含む。いくつかの実施形態では、方法は、食物繊維組成物を対象に、１日当たり約５ｇから約１００ｇの量で投与するステップを含む。
【０００９】
いくつかの実施形態では、代謝疾患または代謝障害は、メタボリックシンドロームまたはＩＩ型糖尿病である。いくつかの実施形態では、食物繊維組成物は、メトホルミンおよび／またはシタグリプチンを投与する前に、対象に投与される。いくつかの実施形態では、食物繊維組成物は、メトホルミンおよび／またはシタグリプチンの投与と同時に対象に投与される。いくつかの実施形態では、食物繊維組成物およびメトホルミンは、単一の医薬組成物として共投与される。いくつかの実施形態では、食物繊維およびシタグリプチンは、単一の医薬組成物として共投与される。いくつかの実施形態では、食物繊維、メトホルミン、およびシタグリプチンは、単一の医薬組成物として共投与される。いくつかの実施形態では、メトホルミンおよび／またはシタグリプチンの少なくとも１種は繊維組成物の前に対象に投与される。
【００１０】
いくつかの実施形態では、本発明の方法は、食物繊維組成物、およびメトホルミン、シタグリプチン、またはこれらの組合せを投与することによって、対象の高い血糖レベルを低下させるのに有効である。
【００１１】
いくつかの実施形態では、本発明の方法は、食物繊維組成物、およびメトホルミン、シタグリプチン、またはこれらの組合せを投与することによって、対象の島細胞集団を保存しかつ／または膵臓細胞の損傷を低減させることにより、膵島機能を保存するのに有効である。
【００１２】
いくつかの実施形態では、本発明の方法は、食物繊維組成物およびシタグリプチンを投与することによって、対象の除脂肪体重を増加させるのに有効である。
【００１３】
いくつかの実施形態では、本発明の方法は、食物繊維組成物シタグリプチンを投与することによって、対象の総血中コレステロールを低下させるのに有効である。
【００１４】
いくつかの実施形態では、本発明の方法は、食物繊維組成物およびシタグリプチンを投与することによって、対象の肝機能を保存しかつ／または肝臓損傷を低減させるのに有効である。
【００１５】
いくつかの実施形態では、本発明の方法は、食物繊維組成物およびシタグリプチンを投与することによって、対象の腎機能を保存しかつ／または腎損傷を低減させるのに有効である。
【００１６】
別の態様では、本発明は、代謝疾患または代謝障害に関連した１つまたは複数の症状を保存し、処置し、または改善するためのキットであって：（ｉ）約４８％から約９０％（ｗ／ｗ）のグルコマンナン、約５％から約２０％（ｗ／ｗ）のキサンタンガム、および約５％から約３０％（ｗ／ｗ）のアルギネートを含む食物繊維組成物と；（ｉｉ）メトホルミン、シタグリプチン、またはこれらの組合せのうちの少なくとも１種とを含むキットを提供する。いくつかの実施形態では、キットは、食物繊維組成物およびメトホルミンの組合せを含む医薬組成物を含む。いくつかの実施形態では、キットは、食物繊維組成物およびシタグリプチンの組合せを含む医薬組成物を含む。いくつかの実施形態では、キットは、食物繊維組成物、メトホルミン、およびシタグリプチンの組合せを含む医薬組成物を含む。
【００１７】
本発明の前述の態様および付随する利点の多くは、添付図面と併せて解釈した場合に以下の詳細な記述を参照することによって、それらがより良く理解されるようになるにつれ、より容易に認められることになる。
特定の実施形態では、例えば以下が提供される：
（項目１）
（ｉ）約４８％から約９０％（ｗ／ｗ）のグルコマンナン、約５％から約２０％（ｗ／ｗ）のキサンタンガム、および約５％から約３０％（ｗ／ｗ）のアルギネートを含む食物繊維組成物と、（ｉｉ）メトホルミン、シタグリプチン、またはこれらの組合せのうちの少なくとも１種とを含む、医薬組成物。
（項目２）
前記食物繊維組成物およびメトホルミンを含む、項目１に記載の医薬組成物。
（項目３）
前記食物繊維組成物およびシタグリプチンを含む、項目１に記載の医薬組成物。
（項目４）
前記食物繊維組成物、メトホルミン、およびシタグリプチンを含む、項目１に記載の医薬組成物。
（項目５）
前記食物繊維組成物が、約５０％から約８０％（ｗ／ｗ）のグルコマンナン、約１０％から約２０％（ｗ／ｗ）のキサンタンガム、および約１０％から約２０％（ｗ／ｗ）のアルギネートを含む、項目１に記載の医薬組成物。
（項目６）
前記食物繊維組成物が造粒されている、項目１から５のいずれか一項に記載の医薬組成物。
（項目７）
前記食物繊維組成物が、少なくとも１種の脂質またはそのブレンドをさらに含み、前記脂質またはそのブレンドが、全食物繊維組成物の少なくとも２０％（ｗ／ｗ）を構成する、項目１から６のいずれか一項に記載の医薬組成物。
（項目８）
外側軟質ゼラチンカプセルに含有される、項目１から７のいずれか一項に記載の医薬組成物。
（項目９）
錠剤に配合されている、項目１から７のいずれか一項に記載の医薬組成物。
（項目１０）
粉末に製剤化されている、項目１から７のいずれか一項に記載の医薬組成物。
（項目１１）
代謝疾患または代謝障害に関連した１つまたは複数の症状を予防し、処置し、または改善するための方法であって、その必要がある対象に、
（ｉ）約４８％から約９０％（ｗ／ｗ）のグルコマンナン、約５％から約２０％（ｗ／ｗ）のキサンタンガム、および約５％から約３０％（ｗ／ｗ）のアルギネートを含む食物繊維組成物と、
（ｉｉ）メトホルミン、シタグリプチン、またはこれらの組合せのうちの少なくとも１種の有効量と
を共投与するステップを含む方法。
（項目１２）
前記代謝疾患または代謝障害が、メタボリックシンドロームまたはＩＩ型糖尿病である、項目１１に記載の方法。
（項目１３）
前記代謝疾患または代謝障害が、ＩＩ型糖尿病である、項目１１に記載の方法。
（項目１４）
前記食物繊維組成物が、約５０％から約８０％（ｗ／ｗ）のグルコマンナン、約１０％から約２０％（ｗ／ｗ）のキサンタンガム、および約１０％から約２０％（ｗ／ｗ）のアルギネートを含む、項目１１に記載の方法。
（項目１５）
前記食物繊維組成物が造粒されている、項目１１に記載の方法。
（項目１６）
前記食物繊維組成物が、１日当たり約１ｇから約５０ｇの量で前記対象に投与される、項目１１に記載の方法。
（項目１７）
前記食物繊維組成物を、少なくとも２週間の期間にわたって１日に少なくとも１回投与するステップを含む、項目１１に記載の方法。
（項目１８）
前記食物繊維組成物およびメトホルミンを共投与するステップを含む、項目１１に記載の方法。
（項目１９）
前記メトホルミンが、少なくとも２週間の期間にわたって１日当たり約５０ｍｇから約２０００ｍｇの量で投与される、項目１８に記載の方法。
（項目２０）
前記食物繊維組成物が、前記メトホルミンの投与前に前記対象に投与される、項目１８に記載の方法。
（項目２１）
前記食物繊維組成物が、前記メトホルミンの投与と同時に前記対象に投与される、項目１８に記載の方法。
（項目２２）
前記食物繊維組成物およびメトホルミンが、単一医薬組成物で共投与される、項目１８に記載の方法。
（項目２３）
前記食物繊維組成物が、前記メトホルミンの投与後に前記対象に投与される、項目１８に記載の方法。
（項目２４）
前記食物繊維組成物およびシタグリプチンを共投与するステップを含む、項目１１に記載の方法。
（項目２５）
前記シタグリプチンが、少なくとも２週間の期間にわたって１日当たり約５ｍｇから約１００ｍｇの量で投与される、項目２４に記載の方法。
（項目２６）
前記食物繊維組成物が、前記シタグリプチンの投与前に前記対象に投与される、項目２５に記載の方法。
（項目２７）
前記食物繊維組成物が、前記シタグリプチンの投与と同時に前記対象に投与される、項目２５に記載の方法。
（項目２８）
前記食物繊維組成物およびシタグリプチンが、単一医薬組成物で共投与される、項目２５に記載の方法。
（項目２９）
前記食物繊維組成物が、前記シタグリプチンの投与後に前記対象に投与される、項目２５に記載の方法。
（項目３０）
前記食物繊維組成物、メトホルミン、およびシタグリプチンを共投与するステップを含む、項目１１に記載の方法。
（項目３１）
前記食物繊維組成物、メトホルミン、およびシタグリプチンが、単一医薬組成物で共投与される、項目３０に記載の方法。
（項目３２）
前記メトホルミンおよびシタグリプチンが単一医薬組成物で共投与され、前記食物繊維組成物が別に投与される、項目３０に記載の方法。
（項目３３）
少なくとも２週間の期間にわたって１日当たり約１００ｍｇからの量で、メトホルミンを投与するステップを含む、項目３０に記載の方法。
（項目３４）
前記食物繊維組成物、およびメトホルミン、シタグリプチン、またはこれらの組合せを投与することにより、前記対象の上昇した血糖レベルを低下させるステップを含む、項目１１に記載の方法。
（項目３５）
前記食物繊維組成物、およびメトホルミン、シタグリプチン、またはこれらの組合せを投与することによって、前記対象の島細胞集団を保存しかつ／または膵臓細胞の損傷を低減させることにより、膵島機能を保存するステップを含む、項目１１に記載の方法。
（項目３６）
前記食物繊維組成物およびシタグリプチンを投与することによって、前記対象の除脂肪体重を増加させるステップを含む、項目１１に記載の方法。
（項目３７）
前記食物繊維組成物およびシタグリプチンを投与することによって、前記対象の総血中コレステロールを低下させるステップを含む、項目１１に記載の方法。
（項目３８）
前記食物繊維組成物およびシタグリプチンを投与することによって、前記対象の、肝機能を保存しかつ／または肝損傷を低減させるステップを含む、項目１１に記載の方法。
（項目３９）
前記食物繊維組成物およびシタグリプチンを投与することによって、前記対象の、腎機能を保存しかつ／または腎損傷を低減させるステップを含む、項目１１に記載の方法。
（項目４０）
代謝疾患または代謝障害に関連した１つまたは複数の症状を予防し、処置し、または改善するためのキットであって、
（ｉ）約４８％から約９０％（ｗ／ｗ）のグルコマンナン、約５％から約２０％（ｗ／ｗ）のキサンタンガム、および約５％から約３０％（ｗ／ｗ）のアルギネートを含む食物繊維組成物と、
（ｉｉ）メトホルミン、シタグリプチン、またはこれらの組合せのうちの少なくとも１種と
を含むキット。
（項目４１）
前記食物繊維組成物が、医薬組成物中で前記メトホルミンと組み合わされている、項目４０に記載のキット。
（項目４２）
前記食物繊維組成物が、医薬組成物中で前記シタグリプチンと組み合わされている、項目４０に記載のキット。
（項目４３）
前記食物繊維組成物が、医薬組成物中で前記メトホルミンおよび前記シタグリプチンと組み合わされている、項目４０に記載のキット。
（項目４４）
前記メトホルミンおよびシタグリプチンが医薬組成物中で組み合わされており、前記食物組成物が別である、項目４０に記載のキット。
（項目４５）
対象の代謝疾患または代謝障害に関連した１つまたは複数の症状を、予防し、処置し、または改善するのに使用するための、項目１から１０のいずれか一項に記載の医薬組成物。
（項目４６）
前記代謝疾患または代謝障害がメタボリックシンドロームである、項目４５に記載の医薬組成物。
（項目４７）
前記代謝疾患または代謝障害がＩＩ型糖尿病である、項目４５に記載の医薬組成物。
（項目４８）
１日当たり約１ｇから約５０ｇの前記食物繊維組成物の量が提供されるように前記対象に投与するための、項目４５、４６、または４７に記載の医薬組成物。
（項目４９）
少なくとも２週間の期間にわたって１日当たり少なくとも１回投与するための、項目４５から４８のいずれか一項に記載の医薬組成物。
（項目５０）
少なくとも２週間の期間にわたって１日当たり約５０ｍｇから約２０００ｍｇのメトホルミンが提供されるように前記対象に投与するための、メトホルミンを含む項目４５から４９のいずれか一項に記載の医薬組成物。
（項目５１）
少なくとも２週間の期間にわたって１日当たり約１００ｍｇのメトホルミンが提供されるように前記対象に投与するための、メトホルミンを含む項目４５から４９のいずれか一項に記載の医薬組成物。
（項目５２）
少なくとも２週間の期間にわたって１日当たりシタグリプチンが約５ｍｇから約１００ｍｇ提供されるように前記対象に投与するための、シタグリプチンを含む項目４５から４９のいずれか一項に記載の医薬組成物。
（項目５３）
メトホルミンおよびシタグリプチンを含む、項目４５から５２のいずれか一項に記載の医薬組成物。
（項目５４）
（ｉ）約４８％から約９０％（ｗ／ｗ）のグルコマンナン、約５％から約２０％（ｗ／ｗ）のキサンタンガム、および約５％から約３０％（ｗ／ｗ）のアルギネートを含む食物繊維組成物と、
（ｉｉ）メトホルミンおよびシタグリプチンの少なくとも１種の有効量と
の組合せ物であって、
前記組合せ物は、対象の代謝疾患または代謝障害に関連した１つまたは複数の症状を予防し、処置し、または改善するのに使用するためのものであり、（ｉ）および（ｉｉ）は、前記対象への共投与のためのものである、組合せ物。
（項目５５）
前記代謝疾患または代謝障害がメタボリックシンドロームである、項目５４に記載の組合せ物。
（項目５６）
前記代謝疾患または代謝障害がＩＩ型糖尿病である、項目５４に記載の組合せ物。
（項目５７）
前記食物繊維組成物が、約５０％から約８０％（ｗ／ｗ）のグルコマンナン、約１０％から約２０％（ｗ／ｗ）のキサンタンガム、および約１０％から約２０％（ｗ／ｗ）のアルギネートを含む、項目５４、５５、または５６に記載の組合せ物。
（項目５８）
前記食物繊維組成物が造粒されている、項目５４から５７のいずれか一項に記載の組合せ物。
（項目５９）
前記食物繊維組成物が、１日当たり約１ｇから約５０ｇの量で前記対象に投与するためのものである、項目５４から５８のいずれか一項に記載の組合せ物。
（項目６０）
前記食物繊維組成物が、少なくとも２週間の期間にわたって１日当たり少なくとも１回投与するためのものである、項目５４から５９のいずれか一項に記載の組合せ物。
（項目６１）
メトホルミンを含む、項目５４から６０のいずれか一項に記載の組合せ物。
（項目６２）
前記メトホルミンが、少なくとも２週間の期間にわたって１日当たり約５０ｍｇから約２０００ｍｇの量で投与するためのものである、項目６１に記載の組合せ物。
（項目６３）
前記食物繊維組成物が、前記メトホルミンの投与前に前記対象に投与するためのものである、項目６１または６２に記載の組合せ物。
（項目６４）
前記食物繊維組成物が、前記メトホルミンの投与と同時に前記対象に投与するためのものである、項目６１または６２に記載の組合せ物。
（項目６５）
前記食物繊維組成物およびメトホルミンが、単一医薬組成物で共投与するためのものである、項目６４に記載の組合せ物。
（項目６６）
前記食物繊維組成物が、前記メトホルミンの投与後に前記対象に投与するためのものである、項目６１または６２に記載の組合せ物。
（項目６７）
シタグリプチンを含む、項目５４から６０のいずれか一項に記載の組合せ物。
（項目６８）
前記シタグリプチンが、少なくとも２週間の期間にわたって１日当たり約５ｍｇから約１００ｍｇの量で投与するためのものである、項目６７に記載の組合せ物。
（項目６９）
前記食物繊維組成物が、前記シタグリプチンの投与前に前記対象に投与するためのものである、項目６７または６８に記載の組合せ物。
（項目７０）
前記食物繊維組成物が、前記シタグリプチンの投与と同時に前記対象に投与するためのものである、項目６７または６８に記載の組合せ物。
（項目７１）
前記食物繊維組成物およびシタグリプチンが、単一医薬組成物で共投与するためのものである、項目７０に記載の組合せ物。
（項目７２）
前記食物繊維組成物が、前記シタグリプチンの投与後に前記対象に投与するためのものである、項目６７または６８に記載の組合せ物。
（項目７３）
メトホルミンおよびシタグリプチンを含む、項目５４から６０のいずれか一項に記載の組合せ物。
（項目７４）
前記食物繊維組成物、メトホルミン、およびシタグリプチンが、単一医薬組成物で投与するためのものである、項目７３に記載の組合せ物。
（項目７５）
前記メトホルミンおよびシタグリプチンが、単一医薬組成物で投与するためのものであり、前記食物繊維組成物が、別に投与するためのものである、項目７３に記載の組合せ物。
（項目７６）
前記メトホルミンが、少なくとも２週間の期間にわたって１日当たり約１００ｍｇの量で投与するためのものである、項目５４から６６および７３から７５のいずれか一項に記載の組合せ物。
（項目７７）
前記予防、処置、または改善が、前記対象の上昇した血糖レベルを低下させるステップを含む、項目４５から７６のいずれか一項に記載の組成物または組合せ物。
（項目７８）
前記予防、処置、または改善が、前記対象の、島細胞集団を保存しかつ／または膵臓細胞損傷を低減させることによって、膵島機能を保存するステップを含む、項目４５から７６のいずれか一項に記載の組成物または組合せ物。
（項目７９）
前記予防、処置、または改善が、前記対象の除脂肪体重を増加させるステップを含む、項目４５から７６のいずれか一項に記載の組成物または組合せ物。
（項目８０）
前記予防、処置、または改善が、前記対象の総血中コレステロールを低下させるステップを含む、項目４５から７６のいずれか一項に記載の組成物または組合せ物。
（項目８１）
前記予防、処置、または改善が、前記対象の肝機能を保存しかつ／または肝損傷を低減させるステップを含む、項目４５から７６のいずれか一項に記載の組成物または組合せ物。
（項目８２）
前記予防、処置、または改善が、前記対象の腎機能を保存しかつ／または腎損傷を低減させるステップを含む、項目４５から７６のいずれか一項に記載の組成物または組合せ物。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１】図１は、実施例１に記述される、蒸留水での経時的な様々な繊維ブレンドの粘度プロファイルをグラフで示す。
【図２】図２は、実施例１に記述される、胃の条件下での経時的な様々な繊維ブレンドの粘度プロファイルをグラフで示す。
【図３】図３は、実施例２に記述される、腸の条件下での経時的な様々な繊維ブレンドの粘度プロファイルをグラフで示す。
【図４】図４は、実施例７に記述される、Ｚｕｃｋｅｒ  ＦＡ／ＦＡ  Ｒａｔ  ＭｏｄｅｌでのＰＧＸおよびシタグリプチンの効果を比較する７週間の比較研究の過程で、毎週測定された群１〜４のラットの体重（グラム）をグラフで示す。
【図５】図５は、実施例７に記述される、研究の７週目に測定された群１〜４のラットの総脂肪量（グラム）をグラフで示す。
【図６】図６は、実施例７に記述される、研究の７週目に測定された群１〜４のラットの総除脂肪組織量（グラム）をグラフで示す。
【図７】図７は、実施例７に記述される、７週間の研究の過程で、毎週測定された群１〜４のラットの食物消費量（グラム／日）をグラフで示す。
【図８】図８は、実施例７に記述される、７週間の研究の過程で、１週間の間隔で測定された群１〜４のラットの非空腹時血糖レベル（ｍｇ／ｄＬ）をグラフで示す。
【図９】図９は、実施例７に記述される、７週間の研究の過程で、１週間の間隔で測定された群１〜４のラットの空腹時血糖レベル（ｍｇ／ｄＬ）をグラフで示す。
【図１０】図１０は、実施例７に記述される、研究のベースライン、３週目、および６週目で決定された、群１〜４のラットから得られた血液サンプル中のグリコシル化ヘモグロビンの量（％）をグラフで示す。
【図１１】図１１は、実施例７に記述される、群１〜４のラットで実施された１６時間空腹時経口グルコース負荷試験において、グルコース後２時間の期間にわたり測定された血糖レベル（ｍｇ／ｄＬ）をグラフで示す。
【図１２】図１２は、実施例７に記述される、研究の６週目で１６時間空腹時ＯＧＴＴ試験後の、群１〜４のラットにおいてグルコース投与後２時間にわたり得られた血液サンプル中の血清インスリン濃度（ｎｇ／ｍＬ）をグラフで示す。
【図１３】図１３は、実施例７に記述される、７週目の群１〜４のラットから得られた血液サンプルで測定された、総コレステロールをグラフで示す。
【図１４】図１４は、実施例７に記述される、研究の７週目（解剖中）の群１〜４のラットで島インスリン免疫反応性（％）として測定されたβ細胞集団をグラフで示す。
【図１５】図１５は、実施例７に記述される、研究７週目（解剖中）の群１〜４のラットから得た、ヘマトキシリンおよびエオシンで染色した組織切片を使用した、スケール０（病状なし）から５（重度な病状）に基づいた膵島線維症病理学スコアをグラフで示す。
【図１６】図１６は、実施例７に記述される、研究の７週目（解剖中）の群１〜４のラットから得た組織切片を使用した、スケール０（病状なし）から５（重度な病状）に基づいた膵島肥大病理学スコアをグラフで示す。
【図１７】図１７は、実施例７に記述される、研究の７週目（解剖中）の群１〜４のラットから得た組織切片を使用した、スケール０（病状なし）から５（重度な病状）に基づいた膵島細胞変性病理学スコアをグラフで示す。
【図１８】図１８は、実施例７に記述される、研究の７週目（解剖中）の群１〜４のラットから得た組織切片を使用した、スケール０（病状なし）から５（重度な病状）に基づいた尿細管変性／再生病理学スコアをグラフで示す。
【図１９】図１９は、実施例７に記述される、研究の７週目（解剖中）の群１〜４のラットから得た組織切片を使用した、スケール０（病状なし）から５（重度な病状）に基づいた尿細管拡張病理学スコアをグラフで示す。
【図２０】図２０は、実施例７に記述される、研究の７週目（解剖中）の群１〜４のラットから得た組織切片を使用した、スケール０（病状なし）から５（重度な病状）に基づいたメサンギウム拡大病理学スコアをグラフで示す。
【図２１】図２１は、実施例７に記述される、研究の７週目の群１〜４のラットから得た終末部血サンプルから測定された、血中尿素窒素（ＢＵＮ）レベル（ｍｇ／ｄＬ）をグラフで示す。
【図２２】図２２は、実施例７に記述される、研究の７週目（解剖中）の群１〜４のラットから得られた肝臓組織切片を使用した、スケール０（染色なし）から５（強度の染色）に基づくスダンブラック染色の染色強度をグラフで示す。
【図２３】図２３は、実施例７に記述される、研究の７週目（解剖中）の群１〜４のラットから得られた組織切片を使用した、スケール０（病状なし）から５（重度な病状）に基づく肝空胞化（微小胞）病理学スコアをグラフで示す。
【図２４】図２４は、実施例７に記述される、研究の７週目の群１〜４のラットから得た終末部血サンプルで測定されたアルカリホスファターゼ活性（ＩＵ／Ｌ）をグラフで示す。
【図２５】図２５は、実施例７に記述される、研究の７週目の群１〜４のラットから得た終末部血サンプルで測定された血清アラニンアミノトランスフェラーゼ活性（ＡＬＴ／ＳＧＰＴ）（ＩＵ／Ｌ）をグラフで示す。
【図２６】図２６は、実施例７に記述される、研究の７週目の群１〜４のラットから得た終末部血サンプルで測定された血清アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ活性レベル（ＡＳＴ／ＳＧＯＴ）（ＩＵ／Ｌ）をグラフで示す。
【図２７】図２７は、実施例７に記述される、研究の７週目の群１〜４のラットから得た終末部血サンプルで測定されたアルブミン濃度（ｇ／ｄＬ）をグラフで示す。
【図２８】図２８は、実施例７に記述される、研究の７週目の群１〜４のラットから得た終末部血サンプルで測定された総循環タンパク質濃度（ｇ／ｄＬ）をグラフで示す。
【図２９】図２９は、実施例８に記述される、７週間の研究の過程で毎週測定された、群１〜６のラットの体重（グラム）をグラフで示す。
【図３０】図３０は、実施例８に記述される、研究の７週目に測定された群１〜６のラットの脂肪量（グラム）をグラフで示す。
【図３１】図３１は、実施例８に記述される、７週間の研究の過程で毎週測定された群１〜６のラットの食物消費量（グラム／日）をグラフで示す。
【図３２】図３２は、実施例８に記述される、７週間の研究の過程で１週間間隔で測定された群１〜６のラットの非空腹時血糖レベル（ｍｇ／ｄＬ）をグラフで示す。
【図３３】図３３は、実施例８に記述される、７週間の研究の過程で１週間間隔で測定された群１〜６のラットの空腹時血糖レベル（ｍｇ／ｄＬ）をグラフで示す。
【図３４】図３４は、実施例８に記述される、研究のベースライン、３週目、および６週目に決定された、群１〜６のラットから得られた血液サンプル中のグリコシル化ヘモグロビンの量（％）をグラフで示す。
【図３５】図３５は、実施例８に記述される、群１〜６のラットで実施された１６時間空腹時経口グルコース負荷試験において、グルコース投与後２時間の期間にわたり測定された血糖濃度（ｍｇ／ｄＬ）をグラフで示す。
【図３６】図３６は、実施例８に記述される、群１〜６のラットで研究の６週目に実施された１６時間空腹時経口グルコース負荷試験において、グルコース投与後２時間の期間にわたり得られた血液サンプル中の血清インスリン濃度（ｎｇ／ｄＬ）をグラフで示す。
【図３７】図３７は、実施例８に記述される、図３６に示される血清インスリン濃度から計算された複合インスリン感受性指数（ＣＩＳＩ）のスコアをグラフで示す。
【図３８】図３８は、実施例８に記述される、７週目の群１〜６のラットから得た血液サンプルで測定された総コレステロールをグラフで示す。
【図３９】図３９は、実施例８に記述される、研究の７週目（解剖中）に群１〜６のラットで島インスリン免疫反応性（％）として測定された、β細胞集団をグラフで示す。
【図４０】図４０は、実施例８に記述される、研究の７週目（解剖中）の群１〜６のラットの、ヘマトキシリンおよびエオシンで染色された組織切片を使用して、０（病状なし）から５（重度な病状）のスケールに基づく膵島線維症スコアをグラフで示す。
【図４１】図４１は、実施例８に記述される、研究の７週目（解剖中）の群１〜６のラットでの、０（病状なし）から５（重度な病状）のスケールに基づく膵島細胞変性スコアをグラフで示す。
【図４２】図４２は、実施例８に記述される、研究の７週目（解剖中）の群１〜６のラットから得られた組織切片を使用して、０（病状なし）から５（重度な病状）のスケールに基づく尿細管変性／再生病理学スコアをグラフで示す。
【図４３】図４３は、実施例８に記述される、研究の７週目（解剖中）の群１〜６のラットから得られた組織切片を使用して、０（病状なし）から５（重度な病状）のスケールに基づく尿細管拡張病理学スコアをグラフで示す。
【図４４】図４４は、実施例８に記述される、研究の７週目（解剖中）の群１〜６のラットから得られた組織切片を使用して、０（病状なし）から５（重度な病状）のスケールに基づくメサンギウム拡大病理学スコアをグラフで示す。
【図４５】図４５は、実施例８に記述される、研究の７週目に群１〜６のラットから得た終末部血サンプルから測定された血中尿素窒素（ＢＵＮ）レベル（ｍｇ／ｄＬ）をグラフで示す。
【図４６】図４６は、実施例８に記述される、研究の７週目（解剖中）の群１〜６のラットから得られた肝臓組織切片を使用して、０（病状なし）から５（重度な病状）のスケールに基づいて大滴性脂肪症（リピドーシス）をグラフで示す。
【図４７】図４７は、実施例８に記述される、研究の７週目（解剖中）の群１〜６のラットから得られた組織切片を使用して、０（病状なし）から５（重度な病状）のスケールに基づいて微小胞脂肪症（リピドーシス）病理学スコアをグラフで示す。
【図４８】図４８は、実施例８により記述される、研究の７週目に群１〜６のラットから得た終末部血サンプルで測定されたアルカリホスファターゼ活性（ＩＵ／Ｌ）をグラフで示す。
【図４９】図４９は、実施例８により記述される、研究の７週目に群１〜６のラットから得た終末部血サンプルで測定された血清アラニンアミノトランスフェラーゼ活性（ＡＬＴ／ＳＧＰＴ）（ＩＵ／Ｌ）をグラフで示す。
【図５０】図５０は、実施例８により記述される、研究の７週目に群１〜６のラットから得た終末部血サンプルで測定された血清アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ活性レベル（ＡＳＴ／ＳＧＯＴ）（ＩＵ／Ｌ）をグラフで示す。
【図５１】図５１は、実施例８により記述される、研究の７週目に群１〜６のラットから得た終末部血サンプルで測定されたアルブミン濃度（ｇ／ｄＬ）をグラフで示す。
【図５２】図５２は、実施例８により記述される、研究の７週目に群１〜６のラットから得た終末部血サンプルで測定された総循環タンパク質濃度（ｇ／ｄＬ）をグラフで示す。
【図５３】図５３は、実施例８により記述される、研究の７週目に群１〜６のラットから得た終末部血サンプルで測定された循環グロブリン濃度（ｇ／ｄＬ）をグラフで示す。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
（詳細な説明）
本発明は、メタボリックシンドロームやＩＩ型糖尿病などの代謝疾患または代謝障害の症状の少なくとも１つの発症を遅延させ、進行を遅くし、かつ／または改善するのに有効な組成物および方法を提供する。
【００２０】
本明細書で使用される「メタボリックシンドローム」という用語は、以下の症状：高血圧および脂質異常と共に、内臓肥満、血清グルコース、およびインスリンレベルの増加の、１つまたは複数を指す（E.J.  Gallagherら、Endocrinol.  Metab.  Clin.  North  Am.  ３７巻：５５９〜７９頁（２００８年））。高い血清グルコースおよび高いインスリンレベルは、それぞれ高血糖症および高インスリン血症と時々呼ばれる。メタボリックシンドロームは、一緒に生じかつ冠動脈疾患、卒中、およびＩＩ型糖尿病を発症するリスクが高いことに関連する症状の群の名称である。メタボリックシンドロームの症状には、腰回りの余分な重さ（中心性および腹部肥満）、高血圧、高トリグリセリド、インスリン抵抗性、低ＨＤＬコレステロール、および高グルコースにより引き起こされる組織損傷が含まれる。インスリン抵抗性は、メタボリックシンドロームの主な原因であると考えられる。
【００２１】
本明細書で使用される「代謝疾患または代謝障害の症状の少なくとも１つを改善する」という用語は、疾患または障害の症状を少なくし、軽減し、またはマスクする対症療法、ならびに処置がなされる状態または症状の重症度の進行を予防し、低下させ、停止させ、または逆転させるための療法を含む。したがって「処置」という用語は、確立された状態または症状の医学的な療法上の処置および／または適宜行われる予防的投与の両方を含む。
【００２２】
本明細書で使用される「処置する」という用語は、その必要がある対象の状態に応じて、代謝疾患もしくは障害の予防、または代謝疾患もしくは障害の病理学的状態に関連した１つもしくは複数の症状の予防であって、代謝疾患もしくは障害のまたはそれに関連した任意の症状の発症を含めたものの予防、ならびに代謝疾患もしくは障害の重症度の低減、または代謝疾患もしくは障害に関連した１つもしくは複数の症状の再発の予防も包含する。
【００２３】
本明細書で使用される「脂質異常」という用語は、異常に高いレベルのＬＤＬ（即ち、１００ｍｇ／ｄＬを超えるＬＤＬ）および／または異常に低いレベルのＨＤＬ（即ち、４０ｍｇ／ｄＬ未満のＨＤＬ）を指し、高脂血症、低脂血症、高トリグリセリド、高コレステロール血症、高グリセリド血症、および高トリグリセリド血症が包含される。
【００２４】
本明細書で使用される「併用療法」、「共投与」、「共投与する」、「〜と共に投与」、「投与する」、「組合せ」、および／または「同時療法」という用語は、薬物組合せの有益な効果を発揮することになる、レジメンでの連続的な各薬剤の投与を包含するものとし、実質的に同時になされるこれら薬剤の共投与も包含するものとする。
【００２５】
本明細書に示される「治療有効量」という用語は、投与された場合などに、研究者、獣医、医師、またはその他の臨床医により求められている組織、系、動物、またはヒトの生物学的または医学的応答をいくらか有意な程度まで誘発させることになる、対象化合物または医薬組成物の量を指し、処置がなされる代謝疾患または状態の症状の１つまたは複数の発症を予防しまたはある程度まで軽減するのに十分な量である。治療有効量は、化合物、疾患およびその重症度、処置がなされる哺乳類の年齢、体重などに応じて変わることになる。
【００２６】
本明細書で使用される「グルコマンナン」という用語は、β−（１，４）−結合−Ｄ−マンノース残基とβ−（１，４）−結合−Ｄ−グルコース残基とが約３：１の比でありかつ様々なα−結合ガラクトース末端基を有する、水溶性食物繊維を指す。これはコンニャクの根から最も一般的に単離されるが（Amorphophallus  konjac）、その他の植物源から単離することもできる。
【００２７】
本明細書で使用される用語「キサンタンガム」という用語は、グルコース、マンノース、グルクロン酸カリウムまたはナトリウム、アセテート、およびピルベートを含有するヘテロ多糖を指す。
【００２８】
本明細書で使用される「アルギネート」という用語は、マンヌロン酸およびグルクロン酸の混合ポリマーを指す。
【００２９】
本明細書で使用される「繊維ブレンド」という用語は、繊維の混合物を指す。
【００３０】
本明細書で使用される「粘性繊維ブレンド」（「ＶＦＢ」）という用語は、グルコマンナン、キサンタンガム、およびアルギネートの混合物を指す。
【００３１】
本明細書で使用される「粘性繊維複合体」（「ＶＦＣ」）という用語は、３種の構成要素であるグルコマンナン、キサンタンガム、およびアルギネートのからみ合い母材を指し、これらの構成要素は、個々の構成要素がその純粋な状態でそれぞれ示し得る特性を示すことのない未処理の成分間の２次および３次的な相互作用を形成することによって（接合ゾーンおよび網状構造）、３種の個別の構成要素の混合物ではない新規な成分を形成するように、相互に作用させる手法（例えば、造粒）で加工されている。
【００３２】
本明細書で使用される「相乗的」という用語は、それらの個々の効果の合計から予測され得るよりも大きな代謝疾患または代謝障害を処置する効力を有する本発明の医薬組成物、組合せ生成物、またはキットの形態のいずれかで、メタボリックシンドロームまたはＩＩ型糖尿病などの代謝疾患または代謝障害の処置で使用される、食物繊維組成物と、メトホルミン、シタグリプチン、またはこれらの組合せのうちの少なくとも１種との組合せ物を指す。本発明の実施形態の相乗効果は、メタボリックシンドロームまたは疾患の処置に関する追加の予期せぬ利点を包含する。そのような追加の利点には、組合せ物の活性化合物の１種もしくは複数の必要な用量を低下させること、組合せ物の活性化合物の１種もしくは複数の副作用を低減させること、または活性化合物の１種もしくは複数を、メタボリックシンドロームもしくは疾患の療法を必要とする患者にさらに許容されるものにすることが含まれるが、これらに限定するものではない。
【００３３】
一態様では、本発明は、メタボリックシンドロームやＩＩ型糖尿病などの代謝疾患または代謝障害に関連した１つまたは複数の症状を、予防、処置、または改善するために配合された医薬組成物を提供する。本発明のこの態様による医薬組成物は、（ｉ）食物繊維組成物と；（ｉｉ）メトホルミン、シタグリプチン、またはこれらの組合せのうちの少なくとも１種とを含む。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、食物繊維組成物とメトホルミンとの組合せを含む。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、食物繊維組成物とシタグリプチンとの組合せを含む。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、食物繊維組成物、メトホルミン、およびシタグリプチンの組合せを含む。
【００３４】
（食物繊維組成物）
本発明の組成物、キット、および方法に使用される医薬組成物は、約４８％から約９０％（ｗ／ｗ）のグルコマンナン、約５％から約２０％（ｗ／ｗ）のキサンタンガム、および約５％から約３０％（ｗ／ｗ）のアルギネートを含む、高粘性多糖食物繊維組成物を含む。
【００３５】
参照によりそのそれぞれが本明細書に組み込まれる、２００６年４月７日出願の係属中の米国特許出願第１１／４００７６８号、２００７年７月３０日出願の係属中の米国特許出願第１１／８３０６１５号、２０１１年３月１０日出願の係属中の米国特許出願第１３／０４５２８５号、および２０１１年１０月１９日出願の係属中の米国特許出願第１３／２７７０３８号に記載されるように、約４８％から約９０％（ｗ／ｗ）のグルコマンナン、約５％から約２０％（ｗ／ｗ）のキサンタンガム、および約５％から約３０％（ｗ／ｗ）のアルギネートを組み合わせることによって生成された、繊維ブレンド（ＶＦＢ）またはその複合体（ＶＦＣ）を含む高粘性多糖食物繊維組成物が開発され、これは商業的に「ＰｏｌｙＧｌｙｃｏｐｌｅＸ（登録商標）」または「ＰＧＸ（登録商標）」と呼ばれ、非常に高い保水容量およびゲル形成特性を保持するものである。この繊維組成物の構成成分である多糖構成要素は、互いに相補的であり相乗的に作用して、任意のその他の現在公知の多糖よりも３から５倍高い粘度レベルをもたらす強力な相互作用を形成する。米国特許出願第１３／０４５２８５号の実施例６に記載されるように、加工される場合（例えば、造粒）、３種の構成要素であるグルコマンナン、キサンタンガム、およびアルギネートは、個々の構成要素がその純粋な状態にある場合にそれぞれ示し得る特性を示すことなしに、未処理の成分間に２次および３次的な相互作用を形成することによって（接合ゾーンおよび網状構造）、３種の個別の構成要素の混合物ではない新規な成分を（複合体（「ＶＦＣ」））を形成することが決定された。
【００３６】
この高粘性食物繊維組成物は、その他の可溶性繊維で必要とされ得るよりも低い重量測定量で、胃腸内容物の粘度に有意な増加をもたらす。この高濃縮性により、この繊維組成物は、その他の可溶性繊維よりも有意に低い用量でかなりの生理学的効果を発揮し、したがって、この材料の意味ある量を医薬組成物に組み込むことがより容易になる。
【００３７】
一実施形態では、医薬組成物に含有される食物繊維組成物は、３種の構成要素のからみ合い母材が生成されるよう（即ち、複合体（ＶＦＣ））、造粒を介して加工される。本明細書で使用される「造粒」は、小粒子が１つに集まってより大きな永続的凝集体になる、サイズ拡大の任意のプロセスを指す。造粒は、混合設備での撹拌によって、圧密化、押出し、または球体化によって実現されてもよい。食物繊維組成物は、様々なメッシュサイズを使用して造粒されてもよい。「メッシュ」という用語は、定められた寸法の穴を有するスクリーンを通過するその能力によって決定された、粒子のサイズを指す。本明細書で使用されるメッシュサイズは、Chemical  Engineers  Handbook（５版、PerryおよびChilton編）の表２１−１２に示される、タイラー均等物である。食物繊維組成物／複合体の造粒が大きくなるほど（即ち、メッシュサイズが小さくなるほど）、所望の粘度を得るのにより長くかかる。いくつかの実施形態では、食物繊維組成物／複合体は、組み合わせたメッシュサイズを使用して、造粒された材料をその粒度によって分離し次いで粒度分離された顆粒を再び組み合わせて所望の粘度プロファイルを得ることにより造粒される。例えば組み合わせたメッシュサイズ３０から６０は、３０メッシュ（約６００ミクロン）の顆粒、約４０メッシュ（約４００ミクロン）の顆粒、約５０メッシュの顆粒、および約６０メッシュ（２５０ミクロン）の顆粒を組み合わせることによって得られる。
【００３８】
食物繊維組成物に含有される粘性食物繊維ブレンド／複合体（ＶＦＢ／Ｃ）中のグルコマンナン、キサンタンガム、およびアルギネートの割合は、グルコマンナンが約４８％から約９０％（約６０％から約８０％、または約６０％から約９０％、または約６５％から約７５％、または約５０％から約８０％、または約５０％から約７０％、または約７０％など）、キサンタンガムが約５％から約２０％（約１０％から約２０％、または約１１％から約１３％、または約１３％から約１７％、または約１３％、または約１７％など）、およびアルギネートが約５％から約３０％（約１０％から約２０％、または約１３％から約１７％、または約１３％、または約１７％など）であってもよい。いくつかの実施形態では、医薬組成物に含有される食物組成物中のグルコマンナン、キサンタンガム、およびアルギネートの割合は、約７０％のグルコマンナン、約１３％から約１７％のキサンタンガム、および約１３％から約１７％のアルギネートである。
【００３９】
（メトホルミン）
本明細書で使用される「メトホルミン」は、ＩＩ型糖尿量の管理で使用されるビグアニドクラスの経口抗高血糖薬である、塩酸メトホルミン（系統（ＩＵＰＡＣ）名Ｎ，Ｎ−ジメチルイミドジカルボンイミドジアミドヒドロクロリド）を指す。塩酸メトホルミン、ＵＳＰは、分子式がＣ４Ｈ１１Ｎ５＋ＨＣｌであり分子量が１６５．６３である白色結晶質化合物であり、水中に自由に溶解する。
【００４０】
メトホルミンは、ＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥ、ＲＩＯＭＥＴ、ＦＯＲＴＡＭＥＴ、ＧＬＵＭＥＴＺＡ、ＯＢＩＴＭＥＴ、ＧＬＵＦＯＲＭＩＮ、ＤＩＡＮＢＥＮ、ＤＩＡＢＥＸ、およびＤＩＡＦＯＲＭＩＮを含めたいくつかの商標名で販売される。
【００４１】
メトホルミンＩＲ（即時放出）は、利用可能な５００ｍｇ、８５０ｍｇ、および１０００ｍｇの錠剤として入手可能である。塩酸メトホルミン錠剤の最大推奨１日投薬量は、成人で２５５０ｍｇ、小児患者（１０〜１６才）で２０００ｍｇである。典型的には成人への投薬は、最小で１日当たり５００ｍｇを２回、最大で合計２０００ｍｇ／日を分割用量で与える。投薬は個別的に決定され、空腹時血漿グルコースは、患者の最小有効用量が特定されるよう治療上の応答を決定するのに使用してもよい。その後、グリコシル化ヘモグロビンを、約３カ月の間隔で測定してもよい。治療上の目標は、単独療法として使用しまたは本発明の食物繊維組成物と組み合わせて使用した場合に、最低有効用量を使用することによって、空腹時血漿グルコースおよびグリコシル化ヘモグロビンのレベルを正常にまたはほぼ正常に減少させることである。
【００４２】
メトホルミンは、肝臓によるグルコース産生を抑制することによって高血糖症を改善する（Kirpichnikov,  D.ら、Ann  Intern  Med  １３７巻（１号）：２５〜３３頁（２００２年））。肝臓でのグルコース産生を抑制するのに加え、メトホルミンは、インスリン感受性を増大させ、末梢グルコース取込みを高め、脂肪酸酸化を増加させ、胃腸管からのグルコースの吸収を減少させる（Collier,  C.ら、Am  J  Physiol  Endorinol  Metab  ２９１巻（１号）：Ｅ１８２〜１８９頁（２００６年））。メトホルミンは、代謝されず、細管分泌により身体から取り除かれ、変化しないまま尿として排泄される。血漿中の平均半減期は６．２時間である。Bristol-Myers  Squibb  GLUCOPHAGE  Label  information、２００８年８月２７日（www.accessdata.fda.gov）を参照されたい。
【００４３】
メトホルミンの通常の合成では、参照によりその両方が本明細書に組み込まれる、Werner,  E.ら、J  Chem  Soc  Transactions  １２１巻：１７９０〜５頁（１９２１年）；Shapiro,  S.ら、J  Am  Chem  Soc  ８１巻（９号）：２２２０〜５頁（１９５９年）に記載されるように、塩酸ジメチルアミンと２−シアノグアニジン（ジシアンジアミド）とを加熱しながら反応させる。参照によりその両方が本明細書に組み込まれる仏国特許第２３２２８６０号（１９７５年）およびPharmaceutical  Manufacturing  Encyclopedia  ３巻、Norwich、NY、２２０８頁（２００７年）に記載されるように、等モル量のジメチルアミンおよび２−シアノグアニジンを冷却しながらトルエンに溶解することにより濃縮溶液を作製し、等モル量の塩化水素をゆっくり添加する。混合物は、それ自体が沸騰し始め、冷却後、塩酸メトホルミンが９６％の収率で沈殿する。
【００４４】
（シタグリプチン）
本明細書で使用される「シタグリプチン」は、シタグリプチンおよび薬学的に許容されるその塩、例えばリン酸シタグリプチンを指す。シタグリプチン（系統ＩＵＰＡＣ名（Ｒ）−４−オキソ−４−［３−（トリフルオロメチル）−５，６−ジヒドロ［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル］−１−（２，４，５−トリフルオロフェニル）ブタン−２−アミン）は、商標名ＪＡＮＵＶＩＡで販売されている、ジペプチジルペプチダーゼ−４（ＤＰＰ−４）阻害剤クラスの経口抗高血糖物質である。この薬物は、単独で、またはＩＩ型糖尿病の処置用のメトホルミンなどのその他の経口抗高血糖剤と組み合わせて使用される。シタグリプチンで処置された人々の膵炎（いくらか致命的）に関する報告が存在している。Olansky,  L.ら、J  Diabetes  Sci  Technol  ４巻（１号）：２２８〜９頁（２０１０年）；Ｍｅｒｃｋ＆Ｃｏ．（www.januvia.com）を参照されたい。時には透析が必要になる、急性腎不全を含めたＪＡＮＵＶＩＡ摂取後の悪化した腎機能に関する報告も存在している。
【００４５】
シタグリプチンは、２００６年にＦＤＡにより承認され、Ｍｅｒｃｋ＆Ｃｏ．からＪＡＮＵＶＩＡとして米国で販売されている。２００７年には、ＦＤＡは、ＪＡＮＵＭＥＴとして米国で販売されているシタグリプチンとメトホルミンとの経口用組合せを承認した。
【００４６】
シタグリプチンは、食べ物に応答して放出される胃腸ホルモンである、グルコ−インクレチンＧＬＰ−１（グルコプゲン様ペプチド１）およびＧＩＰ（胃抑制ペプチド）を破壊する、酵素ジペプチジルペプチダーゼ４（ＤＰＰ−４）を競合的に阻害するように働く（Herma,  G.ら、J  Clin  Pharmacol  ４６巻（８号）：８７６〜８６頁（２００６年））。ＧＬＰ−１および  ＧＩＰの失活を防止することによって、ＤＰＰ−４阻害剤はインスリンの分泌を増加させ、細胞にグルコースを取り込ませ、したがって血清グルコースレベルは減少し、膵臓によるグルカゴンの放出が抑制されて血糖レベルを正常に向かわせる。
【００４７】
成人対象に関して推奨されるシタグリプチンの投薬量は、１日１回、１００ｍｇである。中程度から重度の腎不全患者には、低い投薬量が推奨される。
【００４８】
ＪＡＮＵＶＩＡ錠剤は、７−［（３Ｒ）−３−アミノ−１−オキソ−４−（２，４，５−トリフルオロフェニル）ブチ］−５，６，７，８−テトラヒドロ−３−（トリフルオロメチル）−１，２，４−トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジンホスフェート（１：１）一水和物と化学的に記述される、２５、５０、または１００ｍｇのリン酸シタグリプチンを含有する。実験式はＣ１６Ｈ１５Ｆ６Ｎ５Ｏ−Ｈ３ＰＯ４−Ｈ２Ｏであり、分子量は５２３．３２である。リン酸シタグリプチン一水和物は、白色結晶質非吸湿性粉末である。これは水に対して可溶性である。リン酸シタグリプチンの合成は、例えば、参照により本明細書に組み込まれる米国特許第６，６９９，８７１号に記載されている。
【００４９】
（医薬組成物）
本発明のいくつかの実施形態では、医薬組成物は、（ｉ）約４８％から約９０％（ｗ／ｗ）のグルコマンナン、約５％から約２０％（ｗ／ｗ）のキサンタンガム、および約５％から約３０％（ｗ／ｗ）のアルギネートを含む食物繊維組成物と；（ｉｉ）メトホルミン、シタグリプチン、またはこれらの組合せのうちの少なくとも１種との組合せを含む。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、食物繊維組成物およびメトホルミンを含む。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、食物繊維組成物およびシタグリプチンを含む。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、食物繊維組成物、メトホルミン、およびシタグリプチンを含む。
【００５０】
活性成分に加え、本発明の医薬組成物は、適切な担体および添加剤を含んでいてもよい。
【００５１】
いくつかの実施形態では、食物繊維組成物は、約５０％から約８０％（ｗ／ｗ）のグルコマンナン、約１０％から約２０％の（ｗ／ｗ）キサンタンガム、および約１０％から約２０％（ｗ／ｗ）のアルギネートを含む。いくつかの実施形態では、食物繊維組成物が造粒される。いくつかの実施形態では、医薬組成物はさらに、少なくとも１種の脂質またはそれらのブレンドを含み、この脂質またはそれらのブレンドは、全食物繊維組成物の少なくとも２０％（ｗ／ｗ）を構成する。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、外側軟質ゼラチンカプセル剤に含有される。いくつかの実施形態では、医薬組成物は錠剤に配合される。いくつかの実施形態では、医薬組成物は粉末に製剤化される。
【００５２】
本明細書に記述される本発明の医薬組成物は、本発明の方法およびキットで使用されてもよい。いくつかの実施形態では、本発明の医薬組成物は、その必要がある対象に、１日当たり少なくとも１回投与される。いくつかの実施形態では、本発明の医薬組成物は１日２回、好ましくは朝１回および午後／夜１回投与される。医薬組成物の典型的な処置レジームは、少なくとも２週間から８週間以上継続されることになる。
【００５３】
本発明の医薬組成物は、調剤の分野で周知の方法のいずれかによって調製されてもよい。医薬組成物は、グルコマンナン、キサンタンガム、およびアルギネートを含んだ粘性繊維ブレンド（ＶＦＢ）またはその複合体（ＶＦＣ）を含む食物繊維組成物の有効量と、メトホルミン、シタグリプチン、またはこれらの組合せのうちの少なくとも１種の有効量とを組み合わせることによって、調製されてもよい。いくつかの実施形態では、医薬組成物を調製する方法は、グルコマンナン、キサンタンガム、およびアルギネートを含んだ粘性繊維ブレンド（ＶＦＢ）から形成された繊維複合体（ＶＦＣ）を含む食物繊維組成物の有効量と、メトホルミンとを組み合わせるステップを含む。いくつかの実施形態では、医薬組成物を調製する方法は、グルコマンナン、キサンタンガム、およびアルギネートを含んだ粘性繊維ブレンド（ＶＦＢ）から形成された繊維複合体（ＶＦＣ）を含む食物繊維組成物の有効量と、シタグリプチンとを組み合わせるステップを含む。いくつかの実施形態では、医薬組成物を調製する方法は、グルコマンナン、キサンタンガム、およびアルギネートを含んだ粘性繊維ブレンド（ＶＦＢ）から形成された繊維複合体（ＶＦＣ）を含む食物繊維組成物の有効量と、メトホルミンおよびシタグリプチンとを組み合わせるステップを含む。
【００５４】
いくつかの実施形態では、医薬組成物は、代謝疾患または代謝障害に関連した１つまたは複数の症状の予防、処置、または改善のために配合される。いくつかの実施形態では、医薬組成物に添加される食物繊維組成物は、約４８％から約９０％（ｗ／ｗ）のグルコマンナン（約６０％から約８０％、または約６０％から約９０％、または約６５％から約７５％、または約５０％から約８０％、または約５０％から約７０％、または約７０％など）、約５％から約２０％（ｗ／ｗ）のキサンタンガム（約１０％から約２０％、または約１１％から約１３％、または約１３％から約１７％、または約１３％、または約１７％など）、および約５％から約３０％（ｗ／ｗ）のアルギネート（約１０％から約２０％、または約１３％から約１７％、または約１３％、または約１７％など）を含む、繊維ブレンド（ＶＦＢ）、または繊維ブレンド（例えば、造粒ＶＦＢ）から形成された繊維複合体（ＶＦＣ）を含む。いくつかの実施形態では、食物繊維組成物に含有される、繊維ブレンド中または繊維ブレンドから形成された繊維複合体中のグルコマンナン、キサンタンガム、およびアルギネートの割合は、グルコマンナンが約７０％、キサンタンガムが約１３％から約１７％、アルギネートが約１３％から約１７％である。
【００５５】
（製剤）
本発明による組合せ物は、任意の適切な経路によって投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本発明による医薬組成物は、経口投与用に製剤化される。例えば錠剤、コーティング付き錠剤（糖衣錠）、丸剤、カシェ剤、カプセル剤（カプレット）、顆粒剤、溶液剤、乳剤、および懸濁剤が経口投与に適している。特に前記製剤は、例えば腸溶性形態、即時放出形態、遅延放出形態、反復用量放出形態、長期放出形態、または持続放出形態を呈示するように適応させることができる。前記形態は、例えば錠剤をコーティングすることによって、または異なる条件（例えば、ｐＨ条件）下で崩壊する層により分離されたいくつかの区画に錠剤を分割することによって、または活性化合物を生物分解性ポリマーにカップリングすることによって、得ることができる。
【００５６】
経口投与用の医薬組成物は、バルク状の液体溶液もしくは懸濁液、またはバルク状の粉末の形をとることができる。しかし、より一般的には、組成物は、正確な投薬が容易になるような剤形で提示される。「単位剤形」という用語は、ヒト対象およびその他の哺乳類への単位投薬量として適切な物理的に切り離された単位を指し、各単位は、適切な医薬添加剤に関連して所望の治療効果を発揮するように計算された活性材料を、所定量含有しているものである。典型的な単位剤形には、液体組成物が事前に充填され、事前に測定された、アンプルまたは注射器、または固体組成物の場合には丸剤、錠剤、カプセル剤、もしくはロゼンジ剤などが含まれる。
【００５７】
投与可能な組成物を調製するのに適切な添加剤または担体および方法は、当業者に公知でありまたは明らかであり、Remington's  Pharmaceutical  Science、Mack  Publishing  Co、NJ  （１９９１年）などの刊行物に、より詳細に記載されている。
【００５８】
投与される量は、製剤、投与経路などに応じて変化し、一般には通常の試験で実験的に決定され、標的、宿主、および投与経路などに応じて変動が必ず生じることになる。特定の実施形態では、単位剤形は、少なくとも６、９、または１２単位剤形のシートを含む、ブリスターパックなどの連続使用に適応させたマルチパックに包装される。用いられる実際の投薬量は、患者の要件、および処置がなされる状態の重症度に応じて変化してもよい。特定の状況に適正な投薬量の決定は、当業者の範囲内である。一般に処置は、活性成分の最適用量未満のより少ない投薬量から開始される。その後、投薬量は、状況下で最適な効果に達するまで少量ずつ増加させる。便宜上、合計１日投薬量を分割し、望みに応じて１日の間に少量ずつ投与してもよい。
【００５９】
（キット）
別の態様では、本発明は、代謝疾患または代謝障害に関連した１つまたは複数の症状を本発明は、予防し、処置し、または改善するためのキットであって：（ｉ）約４８％から約９０％（ｗ／ｗ）のグルコマンナン、約５％から約２０％（ｗ／ｗ）のキサンタンガム、および約５％から約３０％（ｗ／ｗ）のアルギネートを含む食物繊維組成物と；（ｉｉ）メトホルミン、シタグリプチン、またはこれらの組合せのうちの少なくとも１種とを含むキットを提供する。いくつかの実施形態では、キットは、食物繊維組成物およびメトホルミンの組合せを含む、医薬組成物を含む。いくつかの実施形態では、キットは、食物繊維組成物およびシタグリプチンの組合せを含む、医薬組成物を含む。いくつかの実施形態では、キットは、食物繊維組成物、メトホルミン、およびシタグリプチンの組合せを含む、医薬組成物を含む。いくつかの実施形態では、キットは、食物繊維組成物と、メトホルミンおよびシタグリプチンの組合せを含んだ医薬組成物とを含む。
【００６０】
いくつかの実施形態では、キットは、食物繊維組成物を含んだ単位投薬量と、メトホルミン、シタグリプチンまたはこれらの組合せのうちの少なくとも１種を含んだ個別の単位投薬量とを含む。
【００６１】
（代謝疾患または代謝障害に関連した１種または複数の症状を予防し、処置し、または改善するための方法）
別の態様では、本発明は、メタボリックシンドロームまたはＩＩ型糖尿病などの代謝疾患または代謝障害に関連した１種または複数の症状を、予防し、処置し、または改善するための方法を提供する。
【００６２】
代謝疾患および代謝障害は、一般に、消化中にグルコースに変換される糖およびデンプンを身体が使用する手法に、悪影響を及ぼす。膵臓により産生されるホルモンであるインスリンは、エネルギーを目的に身体の細胞がグルコースを利用できるようにする。インスリンの正味の効果は、炭水化物、タンパク質、および脂肪の貯蔵および使用を促進させることである。膵臓からのインスリンの分泌は、血糖レベルによって主に制御される。ＩＩ型糖尿病では、例えば膵臓はインスリンを産生する能力を保持し、実際に正常量よりも高いインスリンを産生し得るが、インスリンの量は、インスリンに対する細胞の抵抗性に起因して、完全に有効であるとは言えない。
【００６３】
代謝疾患および代謝障害は、高血糖症（高血清グルコースレベル）であることが特徴的である。制御されていない高血糖症は、インスリンを産生する膵臓（β島細胞）、肝臓、および腎臓の細胞に損傷を与える可能性があり、長期間でより大規模なインスリン欠乏をもたらす可能性がある。
【００６４】
代謝疾患および代謝障害では、（１）様々な「末梢」組織内へのグルコースの進入が低減すること、および（２）肝臓から循環内へのグルコースの遊離が増加することよって、広範な異常が引き起こされ、その結果、細胞外でのグルコース過剰（高血糖症）および細胞内でのグルコース欠乏がもたらされる。筋肉内へのアミノ酸の浸入の減少、および脂肪分解の増加もある。脂質異常も代謝疾患および代謝障害の合併症である。
【００６５】
本発明は、グルコースおよび脂質の代謝の修正および調節を通して、一般にはインスリン抵抗性、高血糖症、高インスリン血症、肥満、高脂血症、高リポタンパク血症（カイロミクロン、ＶＬＤＬ、およびＬＤＬなど）を低減させ、体脂肪、より一般には脂質貯蔵を調節することにより、代謝疾患または代謝障害に関連する１つまたは複数の症状を予防し、処置し、または改善するための方法を提供する。
【００６６】
実施例に記述されるように、本発明の方法は、血糖レベルを低下させ安定させるのに有効であり、その結果、膵臓、肝臓、および腎臓の機能を保存するのに、かつ膵臓、肝臓、および腎臓への損傷を低減させるのに有効である。
【００６７】
本発明のこの態様による方法は、（ｉ）約４８％から約９０％（ｗ／ｗ）のグルコマンナン、約５％から約２０％（ｗ／ｗ）のキサンタンガム、および約５％から約３０％（ｗ／ｗ）のアルギネートを含む食物繊維組成物と；（ｉｉ）メトホルミン、シタグリプチン、またはこれらの組合せのうちの少なくとも１種の有効量とを、その必要があるヒト対象に共投与するステップを含む。
【００６８】
いくつかの実施形態では、方法は、約４８％から約９０％（ｗ／ｗ）のグルコマンナン、約５％から約２０％（ｗ／ｗ）のキサンタンガム、および約５％から約３０％（ｗ／ｗ）のアルギネートを含んだ粘性繊維ブレンド（ＶＦＢ）またはその複合体（ＶＦＣ、例えば造粒ＶＦＢなど）を含む食物繊維組成物を、その必要があるヒト対象に、１日当たり１．０ｇから５０ｇのＶＦＢ／Ｃの投薬量、例えば１日当たり約２．５ｇから約５０ｇのＶＦＢ／Ｃ、１日当たり約５ｇから約５０ｇのＶＦＢ／Ｃ、１日当たり約１０ｇから約３５ｇのＶＦＢ／Ｃ、１日当たり約１２ｇから３５ｇのＶＦＢ／Ｃ、または例えば約１５ｇから３５ｇのＶＦＢ／Ｃ、例えば１日当たり約２０ｇから３５ｇのＶＦＢ／Ｃ、例えば１日当たり約１２ｇから約２５ｇのＶＦＢ／Ｃ、例えば１日当たり約１５ｇから約２５ｇのＶＦＢ／Ｃの投薬量で、メトホルミン、シタグリプチン、またはこれらの組合せと組み合わせて、対象の代謝疾患または代謝障害に関連した１つまたは複数の症状を予防し、処置し、または改善するのに有効な期間にわたり投与するステップを含む。
【００６９】
いくつかの実施形態では、食物繊維組成物は、約５０％から約８０％（ｗ／ｗ）のグルコマンナン、約１０％から約２０％（ｗ／ｗ）のキサンタンガム、および約１０％から約２０％（ｗ／ｗ）のアルギネートを含む。いくつかの実施形態では、食物繊維組成物は造粒される。
【００７０】
いくつかの実施形態では、方法は、食物繊維組成物を、１日当たり約１ｇから約５０ｇの量で少なくとも２週間にわたって対象に投与するステップを含む。
【００７１】
いくつかの実施形態では、方法は、食物繊維組成物をメトホルミンと共に共投与するステップを含む。いくつかの実施形態では、メトホルミンは、１日当たり約５０ｍｇから約２０００ｍｇの量で少なくとも２週間にわたって対象に投与される。
【００７２】
いくつかの実施形態では、方法は、食物繊維組成物をシタグリプチンと共に共投与するステップを含む。いくつかの実施形態では、シタグリプチンは、１日当たり約５ｍｇから１００ｍｇの量で少なくとも２週間にわたって対象に投与される。
【００７３】
いくつかの実施形態では、方法は、食物繊維組成物をメトホルミンおよびシタグリプチンと共に共投与するステップを含む。いくつかの実施形態では、方法は、メトホルミンを１日当たり約５０ｍｇから２０００ｍｇの量で、シタグリプチンを１日当たり約５ｍｇから１００ｍｇの量で、少なくとも２週間にわたって投与するステップを含む。
【００７４】
食物繊維組成物は、メトホルミンおよび／またはシタグリプチンを、個々の構成要素を同時に投薬することによって共投与されてもよく、または個別に投薬されてもよい。個々の構成要素は、任意の順序で逐次投与されてもよい。個々の構成要素は、個々の構成要素を含む単一組成物として投与されてもよい。
【００７５】
食物繊維組成物は、メトホルミンを投与する前に、メトホルミンの投与と同時に、またはメトホルミンの投与後に、対象に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、食物繊維組成物およびメトホルミンは、単一医薬組成物として共投与される。
【００７６】
食物繊維組成物は、シタグリプチンを投与する前に、シタグリプチンの投与と同時に、またはシタグリプチンの投与後に対象に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、食物繊維組成物およびシタグリプチンは、単一医薬組成物として共投与される。
【００７７】
いくつかの実施形態では、食物繊維組成物、メトホルミン、およびシタグリプチンは、単一医薬組成物として共投与される。いくつかの実施形態では、メトホルミンおよびシタグリプチンが単一医薬組成物として投与され、食物繊維組成物が別に投与される。
【００７８】
いくつかの実施形態では、本発明の方法は、食物繊維組成物と、メトホルミン、シタグリプチン、またはこれらの組合せを投与することによって、対象の上昇した血糖レベルを低下させるステップを含む。
【００７９】
いくつかの実施形態では、本発明の方法は、食物繊維組成物と、メトホルミン、シタグリプチン、またはこれらの組合せを投与することによって、対象の島細胞集団を保存しかつ／または膵臓細胞の損傷を低減させることにより膵島機能を保存するステップを含む。
【００８０】
いくつかの実施形態では、本発明の方法は、食物繊維組成物およびシタグリプチンを投与することによって、対象の除脂肪体重を増加させるステップを含む。
【００８１】
いくつかの実施形態では、本発明の方法は、食物繊維組成物およびシタグリプチンを投与することによって、対象の総血中コレステロールを低下させるステップを含む。
【００８２】
いくつかの実施形態では、本発明の方法は、食物繊維組成物およびシタグリプチンを投与することによって、対象の肝機能を保存しかつ／または肝臓損傷を低減させるステップを含む。
【００８３】
いくつかの実施形態では、本発明の方法は、食物繊維組成物およびシタグリプチンを投与することによって、対象の腎機能を保存しかつ／または腎損傷を低減させるステップを含む。
【００８４】
いくつかの実施形態では、対象は、ＩＩ型糖尿病を有する。
【００８５】
メトホルミン、シタグリプチン、メトホルミンとシタグリプチンとを組み合わせたものは、上昇した血糖レベルを低下させることによって、ＩＩ型糖尿病の症状を処置または制御するのに使用される公知の医薬組成物である。しかし出願人らは、以下の実施例に示されるように、メトホルミンと組み合わせた、またはシタグリプチンと組み合わせた、またはメトホルミンおよびシタグリプチンの両方と組み合わせた本発明の食物繊維組成物の投与が、各活性成分（食物繊維組成物、メトホルミン、またはシタグリプチン）の単独での投与と比較した場合、またはメトホルミンおよびシタグリプチンの組合せの投与と比較した場合、統計的に有意な有益な効果を発揮することを予期せず発見した。
【００８６】
本発明は、本発明のある態様および実施形態の例示を単に目的として含まれかつ本発明を限定するものではない、下記の実施例を参照することによって、より容易に理解されよう。
【実施例】
【００８７】
（実施例１）
この実施例は、粘性繊維ブレンド（ＶＦＢ）と呼ばれる例示的な食物繊維組成物の繊維の選択と、胃腸条件下で所望の粘度プロファイルを提供する、粘性繊維複合体（ＶＦＣ）を形成するその造粒とについて記述する。
【００８８】
（背景／理論的根拠）
ＶＦＢの製剤化で、主な目的は、粘度を１５から６０分の時間にわたって実質的に増大させ得る繊維ブレンドを生成することである。口に合う状態を高めるため、繊維ブレンドの初期粘度はより薄く、かつ繊維ブレンドの最大の濃さが対象の胃および腸で生じることが望ましい。したがって繊維の選択の際、ブレンドは、胃（酸性）および腸の両方の条件下で粘度を維持しまたはより望ましくは増大もさせなければならなかった。消化系でのこの時点での高粘度は、満足感に寄与する可能性があり、炭水化物の吸収を調節することによって血糖調節も助ける可能性がある。
【００８９】
かなりの量の実験の後（データは示さず。）、グルコマンナン、アルギネート、およびキサンタンガムを含む繊維ブレンドを開発した。グルコマンナンは、その高粘度の性質により、繊維ブレンドに望ましい成分であることが決定された。グルコマンナンは、口に合う状態を高める非常に滑らかな食感も有していた。アルギネートは、グルコマンナンの強力な増粘特性を穏やかにするのを助け、消化の初期段階中に、より口に合う粘度も実現した。キサンタンも、粘度試験の終わり（３０〜６０分）近くでグルコマンナンを抑制し薄くするように見られる唯一の繊維であるので、ブレンドの一部として選択された。
【００９０】
生成されたＶＦＢの最終的な組成は、グルコマンナンが４８％〜９０％、キサンタンガムが５％〜２０％、およびアルギネートが５％〜３０％であった。グルコマンナン、キサンタン、およびアルギネートがこれらの比で組み合わされてＶＦＢを生成する場合、この組成物は、図１に示されるようにかつ実施例２に記述されるように、水とブレンドしてから１２０分後に予期せず高い粘度の値を示す。ＶＦＢは、図２に示されるようにかつ実施例２に記述されるように、胃液とブレンドされてから１０分後に予期せず高い粘度の値も生成する。
【００９１】
グルコマンナンの比がより低い場合、生成物は所望の濃さに達しないと考えられる。キサンタンの比がより高い場合、生成物はやはり、所望の濃さに達しなかった。キサンタンの比がより低い場合、繊維ブレンドは非常に素早く濃くなった。アルギネートには、生成物の初期段階中に粘度を減少させることによって、口に合う状態を高めるという重要な役割もあった。
【００９２】
好ましい実施形態では、上述の望ましい特徴を有する、６０％〜８０％のグルコマンナン、１０％〜２０％のキサンタンガム、および１０％から２０％のアルギネートを含有するＶＦＢ組成物が生成された。例えばＶＦＢ組成物は、本明細書に記述される望ましい特徴を有する、７０％のグルコマンナン、１３％のキサンタンガム、および１７％のアルギネートを含有するものが生成された。別のＶＦＢ組成物は、類似の望ましい性質を有する、７０％のグルコマンナン、１７％のキサンタンガム、および１３％のアルギネートを含有するものが生成された。
【００９３】
競合する市販繊維と比較した、ＶＦＢ（グルコマンナン７０％、キサンタンガム１３％、およびアルギネート１７％）の粘度プロファイルを、表１に示す。
【表１】
0006309943.tif 000002
【００９４】
ＶＦＢと市販繊維との間の相違の１つは、それらが、シミュレーションされた消化条件下でどのように反応するかである。表２に示されるように、ＶＦＢは、胃条件下で濃さを増大させる能力を有する。表２は、繊維２ｇが、リン酸１０滴と共に蒸留水２００ｇに添加されたときの、ＶＦＢ（グルコマンナン７０％、キサンタンガム１３％、およびアルギネート１７％）と市販繊維との粘度プロファイルを比較する。
【表２】
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【００９５】
表３は、腸条件下で市販繊維と比較した、ＶＦＢ（グルコマンナン７０％、キサンタンガム１３％、およびアルギネート１７％）の粘度プロファイルを比較する。繊維２グラムを、腸液２００ｇに添加した。腸液は、一塩基性リン酸カリウム６．８ｇを水２５０ｍＬに溶解し、混合し、０．２Ｎ  ＮａＯＨ  １９０ｍＬおよび水４００ｍＬを添加することによって作製した。パンクレアチン１０グラムを添加し、その後、混合し、ｐＨを０．２Ｎ  ＮａＯＨで７．５±０．１のｐＨに調整した。溶液を水で１，０００ｍＬに希釈した（United  States  Pharmacopoeia）。
【表３】
0006309943.tif 000004
【００９６】
これらの試験結果は、シミュレーションされた胃および腸の条件下で、ＶＦＢ繊維ブレンドが市販繊維ブレンドよりもさらに濃くなったことを示し、これはＶＦＢが胃内で市販繊維よりも高い粘度を有し、腸条件下で濃くなるまで継続され得ることを示している。
【００９７】
消費者に、より魅力のある生成物を生成するために、造粒ＶＦＢを使用して、消化の初期段階中に粘度をさらに遅延させた。造粒は、３０〜６０％（ｗ／ｗ）の水をＶＦＢブレンドに添加し、次いで添加した水を乾固することによって実現される。このプロセスは、機械式造粒機、流動床造粒機／乾燥機、機械式凝集機、または単純な混合の後に炉または真空乾燥することによって、典型的には行われる。
【００９８】
非造粒ＶＦＢは非常に微細であり、水を添加すると固まる傾向がある。これは水分を非常に素早く吸収するので、水は実際に粉末を包封する。しかし造粒ＶＦＢは、より大きい顆粒が濡れると互いに分離したままになるので、この問題を回避する。ＶＦＢ顆粒は徐々に水に溶解するので、スラリーはゆっくりと濃くなる。
【００９９】
ＶＦＢの適正なメッシュサイズの決定は、造粒プロセスで重要である。３０メッシュ粒子は直径が約６００ミクロンであり、４０メッシュ粒子は直径が約４００ミクロンであり、５０メッシュ粒子は直径が約３００ミクロンであり、６０メッシュ粒子は直径が約２５０ミクロンであり、８０メッシュ粒子は直径が約１８０ミクロンである。粘度の増大を遅くするが、造粒ＶＦＢ生成物は、満足感を発生させかつ腸内での炭水化物の吸収を遅くすることによって血糖レベルを調節することにも関与する、所望の濃さまで依然として増大する。造粒が大きくなるほど（即ち、メッシュサイズが小さくなるほど）、表４に示されるように粘度の増大はさらに遅延する。
【表４】
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【０１００】
３０−、４０−、および６０−メッシュサイズ顆粒の１：１：１の組合せからなる、３０−〜６０−メッシュサイズ造粒ＶＦＢ生成物の組合せが望ましい。より小さいメッシュがより大きい割合であることにより、粘度の増大はさらになお遅延することになる。
【０１０１】
（実施例２）
この実施例は、例示的な繊維ブレンド（ＶＦＢ）とその他の繊維ブレンドとの、様々な条件下での粘度プロファイルの比較について記述する。
【０１０２】
（方法）
実施例１に記述されるように、７０％のグルコマンナン（コンニャク）、１３％のキサンタンガム、および１７％のアルギネートを含む、様々な繊維ブレンド（ＶＦＢ）の製剤を生成した。ＶＦＢを、下記のような蒸留水中、胃条件下、および腸条件下で、コンニャク／キサンタン（７０：３０）繊維ブレンドおよびコンニャク／アルギネート（７０：３０）繊維ブレンドと比較した。
【０１０３】
試験をした組成物：
（１）ＶＦＢ：コンニャク（７０％）／キサンタン（１３％）／アルギネート（１７％）
（２）ＫＸ：コンニャク（７０％）／キサンタン（３０％）
（３）ＫＡ：コンニャク（７０％）／アルギネート（３０％）
【０１０４】
粘度プロファイル実験：
試験材料５グラムを、流体（蒸留水、胃液、または腸液のいずれか）３５０ｇと混合した。サンプルを、Ｐｒｏｃｔｏｒ／Ｓｉｌｅｘブレンダーで、低速２で３０秒間ブレンドした。粘度の読取りを、５、１０、１５、２０、３０、４５、６０、および１２０分で行った。胃液および腸液は、汎用サンプル調製（Universal  Sample  Preparation  (USP)）法に従い調製した。
【０１０５】
（結果）
表５および図１は、通常条件下（蒸留水）でＫＸおよびＫＡと比較した、ＶＦＢの粘度プロファイルを比較する。表６および図２は、胃条件下でＫＸおよびＫＡと比較した、ＶＦＢの粘度プロファイルを比較する。表７および図３は、腸条件下でＫＸおよびＫＡと比較した、ＶＦＢの粘度プロファイルを比較する。図１、２、および３に示されるように、ＫＡ（コンニャク／アルギネート７０：３０）繊維ブレンドは一貫して、試験がなされた３種の繊維ブレンドの中で最も低い粘度を有する。中性および胃条件下では、ＫＸ（コンニャク／キサンタン７０：３０）は、最大粘度に素早く到達する（例えば、約１５〜２０分以内）。ＶＦＢブレンド（コンニャク（７０％）／キサンタン（１３％）アルギネート（１７％））は、中性条件下ではＫＡと同じ粘度で出発し、胃および腸の両方の条件下では時間と共に粘度が増大し、最終的には中性および胃の条件下でＫＸよりも大きい粘度に達する。この組合せは、胃液とブレンドした１０分後に、予期せず高粘度も生成する。したがって、ＫＸの組合せへのアルギネートの添加は、中性条件でＶＦＢの粘度の低下を予期せずもたらし、その結果、経時的にＫＸ単独よりも大きい粘度になる。
【表５】
0006309943.tif 000006
【０１０６】
【表６】
0006309943.tif 000007
【０１０７】
【表７】
0006309943.tif 000008
【０１０８】
（実施例３）
この実施例は、ゼラチンカプセル剤として製剤化された、本発明の食物繊維組成物（ＶＦＢ／Ｃ）を含む組成物、およびメトホルミン、シタグリプチン、またはこれらの組合せと組み合わせた食物繊維組成物を含む組成物の、例示的な実施形態を提供する。
【０１０９】
例示的な食物繊維組成物は、２片の硬質ゼラチンカプセル剤であって、各カプセル剤が表８Ａに示すように食物繊維組成物を５００ｍｇ含有しているものとして製剤化される。表８Ｂ〜Ｄは、メトホルミン（８Ｂ）と組み合わせた、シタグリプチンと組み合わせた（８Ｃ）、メトホルミンおよびシタグリプチンと組み合わせた（８Ｄ）食物繊維組成物を含む、本発明の医薬組成物の構成要素の、予言的実施例を提供する。
【表８Ａ】
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【０１１０】
【表８Ｂ】
0006309943.tif 000010
【０１１１】
【表８Ｃ】
0006309943.tif 000011
【０１１２】
【表８Ｄ】
0006309943.tif 000012
【０１１３】
（実施例５）
この実施例は、中鎖トリグリセリド混合された粘性繊維ブレンド／複合体を含んでいる組成物を含有する軟質ゼラチン（ソフトゲル）カプセル剤の調製について記述する。
【０１１４】
（方法）
粘性繊維ブレンドを含有する軟質ゼラチンカプセル剤の調製：
【０１１５】
内側充填材
軟質ゼラチンカプセル剤は、粘性繊維ブレンド／複合体（コンニャク／キサンタン／アルギネート（７０：１３：１７））および油（例えば、中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ））を、０．０１：９９．９９から８０：２０（ｗ／ｗ  ＶＦＢ／Ｃ：ＭＣＴ）までの比で含む、内側充填材により調製した。ＶＦＢ／Ｃ：ＭＣＴの比が５２．７：４７．３ｗ／ｗである例が、以下の表９に示されている。ＭＣＴは、下記の油：大豆油、パーム核油、魚油、およびカノーラ油のいずれかで置換することができる。
【表９】
0006309943.tif 000013
【０１１６】
外側カプセルシェル
外側カプセルシェルは、ゼラチン、グリセリン、および水の混合物を含む。
【０１１７】
例示的なソフトゲルカプセル剤は、下記の通り生成した：
内側充填材：
７９０ｍｇ  ＶＦＢ／Ｃ
７１０ｍｇ  ＭＣＴ
【０１１８】
外側カプセルシェル：
ゼラチン、グリセリン、および水からなる混合物２，１３０ｍｇを使用した。
【０１１９】
外側カプセルシェルと内側充填剤との割合は、表９に示されるように、様々なカプセルサイズに順応するよう変えてもよい。
【０１２０】
中鎖トリグリセリドと混合されたＶＦＢ／Ｃを含有するソフトゲルカプセル剤は、実施例６で実証されるように、胃条件下でＶＦＢ／Ｃを最大粘度にしながら水中でのＶＦＢ／Ｃ粘性効果を遅延させるのに有効である。
【０１２１】
（実施例６）
この実施例は、油をベースにしたソフトゲルカプセル剤で包封されたＶＦＢ／Ｃが、潜在的な窒息の危険性を低減させるために水中でその粘性効果を遅延させると同時に、胃条件下で最大粘度に素早く到達させるのに有効であることを実証する。
【０１２２】
（方法）
油をベースにしたソフトゲルカプセル剤で包封されたＶＦＢ／Ｃの粘度プロファイルを、蒸留水と胃液中で比較した。
【０１２３】
油と混合したＶＦＢ／Ｃを含有する軟質ゼラチンカプセル剤を、実施例５に記述されるように調製した。各カプセル剤は、７９０ｍｇのＶＦＢ／Ｃ（コンニャク／キサンタン／アルギネート（７０：１３：１７））を含有していた。６個のカプセル剤（合計でＶＦＢ／Ｃが４．７４ｇ）を、合計体積３３１．８の蒸留Ｈ２Ｏまたは胃液（ＵＳＰガイドラインに従い調製）に溶解し、５ｇ  ＶＦＢ／Ｃ：３５０ｇ  Ｈ２Ｏの比にした。
【０１２４】
サンプルを、２５℃の水浴中に置かれた容器内の液体媒体中に入れた。液体中で１５分後、軟質カプセル剤をスプーンで押し破った。次いで混合物を手作業で５分間混合し、次いでブレンダーに入れ、機械的に４，０００ｒｐｍで３０秒間混合し、その後、８，０００ｒｐｍでさらに３０秒間混合した。粘度の読取りを、３時間を超える時間間隔で行った。
【０１２５】
（結果）
蒸留水中のＶＦＢ／Ｃソフトゲルカプセル剤の粘度プロファイルを、以下の表１０に示す。
【表１０】
0006309943.tif 000014
【０１２６】
胃液中でのＶＦＢ／Ｃソフトゲルカプセル剤の粘度プロファイルを、以下の表１１に示す。
【表１１】
0006309943.tif 000015
【０１２７】
【表１２】
0006309943.tif 000016
【０１２８】
表１１〜１２に示されるように、胃条件下では、ソフトゲルカプセル剤で送達された油をベースにしたＶＦＢ／Ｃがブレンド後に素早く（５分以内）濃くなり、９０，０００センチポアズよりも大きい粘度に到達した。対照的に、表１０および１２に示されるように、ソフトゲルカプセル剤で送達された油をベースにしたＶＦＢ／Ｃは、蒸留水中でゆっくりと濃くなり、その結果、ブレンド後５分で３，５００の粘度レベルになり、ブレンド後１６０分で最大６５，０００センチポアズまで徐々に増大した。表１０に示されるように、ソフトゲルで送達されたＶＦＢ／Ｃは、蒸留水中で１９，６３０ｃｐｓの粘度に到達するのに６０分を要し、３時間を超えた後であっても９０，０００ｃｐｓには到達しなかった。この結果は、本明細書の実施例１、表４に示されるように、１２０分で９０，０００ｃｐｓに到達する水中での撹拌の場合にＶＦＢ（非造粒、油をベースにしたカプセル剤なし）で観察される挙動とは、著しく異なる。事実、ソフトゲルカプセル剤で送達されたＶＦＢ／Ｃに関して最大濃度に到達する際に観察された時間遅延は、１２０分でそれぞれ９０，０００ｃｐｓに到達する（本明細書の表４参照）造粒ＶＦＢメッシュサイズ４０およびメッシュサイズ６０に関して観察された場合よりも、さらに顕著であることが示される。これらの結果は、ＶＦＢ／Ｃに油を添加することが、水と混合した場合にその粘性効果を遅延させるのに有効であることを示す。したがって、ＶＦＢ／Ｃと油との組合せは、ＶＦＢ／Ｃ単独の場合に水中で非常に素早く粘性になりかつ大きな塊を形成する可能性があることが観察されているので、個体へのＶＦＢ／Ｃの投与中に潜在的な窒息の危険性を回避するために使用されてもよい。
【０１２９】
さらに、水中で観察される遅延粘度とは対照的に、ソフトゲルカプセル剤として送達されたＶＦＢ／Ｃは、表１１および１２に示されるように、胃条件との接触後５分以内に９０，０００ｃｐｓに到達した。この高い粘度は、経時的に維持された（データは示さず。）。ＶＦＢ／Ｃと油との組合せが胃条件下でそのような短時間で９０，０００ｃｐｓに到達できることは、驚くべきことである。ソフトゲルカプセル剤内のＶＦＢ／Ｃに関するこの粘度プロファイルが、６０分後であってもそのような高い粘度に到達することが観察されない胃条件下でのＶＦＢ単独で観察されたもの（本明細書の表４に示されている。）とは非常に異なることを示すことは、重要である。表４に示されるように、ＶＦＢ単独では３０分後に６５００ｃｐｓにしか到達しない。
【０１３０】
したがって、水中での粘度の遅延および胃条件下で到達した素早い高粘度レベルを含めた、ソフトゲルカプセル剤内のＶＦＢで観察されたこの実施例に記述される結果は、ＶＦＢ／Ｃと油との組合せを使用して、胃の満足感に関する所望の効果を発揮しかつ個体における空腹感を低減させると共に消化中の窒息のリスクを低減させることができることを実証する。
【０１３１】
理論に拘泥するものではないが、ＶＦＢ／Ｃと油との組合せに関するこの実施例に記述される有益な結果は、繊維表面の油のコーティングに起因すると考えられる。水中で観察される遅延粘度に関して、油は、水によって粒子が一まとめに固まらないようにかつそれらの分散が制限されないように、粒子をコーティングし分離する傾向にある。しかし胃条件下では、酸性度および胃酵素は、ＶＦＢ／Ｃ繊維が最大粘度に素早く到達できるように、油のコーティングの少なくとも一部を剥離させ易くする可能性がある。さらに、いくらかの塊の形成をもたらす水中でのＶＦＢ／Ｃ（油のコーティングなし）の分散とは対照的に、ＶＦＢ／Ｃと油との組合せは水中での塊の形成を回避し、水中ではより低い初期全体粘度をもたらし、それによって、ＶＦＢ／Ｃおよび油の組合せはより均等に分散し、より多くの繊維粒子が、形成される塊ではなく水と反応できるようになるので、経時的に最終のより高い粘度が可能になる。
【０１３２】
（実施例７）
この実施例は、Ｚｕｃｋｅｒ  ＦＡ／ＦＡラットモデルでの、ＰＧＸおよびシタグリプチン（ＪＡＮＵＶＩＡ）の効果を実証する。
【０１３３】
背景／理論的根拠
この研究は、ラットモデルＺｕｃｋｅｒ  ＦＡ／ＦＡにおける代謝疾患および疾患メカニズムの評価項目（血糖コントロール、ペプチドホルモン、酵素活性、組織構造、および組織病理状態）に対する、対照（それぞれセルロースおよびビヒクル）と比較したＰＧＸおよびシタグリプチンの単独でのまたは組み合わせた場合の影響を決定するために、設計された。ＺＤＦ／Ｃｒｌ−Ｌｅｐｒｆａ／ｆａラットは、ＩＩ型糖尿病を併発する成人発症型肥満の優れたモデルと見なされる（C.  Daubioulら、J.  Nutr.  １３２巻：９６７〜９７３頁（２００２年）；  J.M.  Lenhardら、Biochem.  &  Biophys.  Res.  Comm.  ３２４巻：９２〜９７頁（２００４年）；  J.N.  Wilson、Atheriosclerosis  ４巻：１４７〜１５３頁（１９８４年））。ＺＤＦは、脳レプチン受容体が欠乏していることが見出された突然変異体である。レプチンは、食欲抑制をシグナル伝達する、脂肪組織によって分泌されるタンパク質である。したがって、これらの突然変異ラットでは、食欲を低減させまたは満腹感を誘発させるフィードバックシグナル伝達がない。ＺＤＦラットは、食物を非常に速い速度で消費し、非常に素早く肥満になる。したがって、このモデルは、過食により肥満になった人々を模倣する。ＺＤＦラットは肥満になるにつれ、人間にちょうどみられるように、インスリンに対して非感受性になる（メタボリックシンドロームとも呼ばれる。）。ＺＤＦラットは脂質異常でもあり、このラットモデルは、ヒトのメタボリックシンドロームの良好なモデルであることを示す。経時的に、ヒトでの進行と同様に糖尿病はＺＤＦモデルで進行し、膵臓β細胞（インスリン分泌細胞）集団が失われる。タンパク質は、過剰なグルコースによってグリコソル化するようになり、ＺＤＦおよび人間で、器官機能、特に腎臓に関して問題を引き起こす。高いグルコースレベルは、タンパク質のグリコシル化を引き起こし、糖尿病性腎症および血管損傷を引き起こす。
【０１３４】
タンパク質に対するグルコース損傷の程度の標準マーカーは、グリコシル化ヘモグロビン（ＨｂＡ１ｃ）であり、ＺＤＦで高い。尿中のアルブミンの測定も、腎臓に対する糖尿病性損傷の標準マーカーである。糖尿病の処置のためのＦＤＡガイドラインは、血糖コントロール、および高グルコースにより引き起こされた組織損傷の低減を必要とする。
【０１３５】
（方法および材料）
（試験材料）
本明細書でＰＧＸと呼ばれる本発明の造粒食物繊維組成物を、実施例１に記述されるように調製した。ＰＧＸを、Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｄｉｅｔｓ、Ｎｅｗ  Ｂｒｕｎｓｗｉｃｋ、ＮＪにより、５％ｗｔ／ｗｔで基本的なラット用固形飼料（Ｄ１１７２５）に組み込んだ。セルロース繊維を、対照として５％ｗｔ／ｗｔで基本的なラット用固形飼料（Ｄ１１７２５）に組み込んだ。
【０１３６】
シタグリプチンを、処方ＪＡＮＵＶＩＡ錠剤（１００ｍｇ強度で６０錠）として購入した。シタグリプチン投薬溶液を、ＪＡＮＵＶＩＡ錠剤を蒸留水中に均質化し、粒状物質を遠心分離によって分離することによって調製した。シタグリプチン投薬溶液は、毎週新たに調製した。製剤化後、シタグリプチンを冷蔵した。
【０１３７】
（品質管理）
投薬研究の開始前に、投薬溶液を分析した。ＪＡＮＵＶＩＡを参照として使用して、新鮮な投薬溶液の、十分均質化されたサンプルを分析することにより、濃度を検証した。投薬溶液の容器の上部、中間、および底部からのサンプルを分析して、均質性を検証した。１０日間を経た投薬溶液の、十分均質化されたサンプルも分析して、安定性を検証した。
【０１３８】
研究中、投薬溶液の各調製物のアリコートを、−８０℃で貯蔵した。研究が終わった後、これらの貯蔵したサンプルを分析して、試験物の濃度を検証した。
【０１３９】
（研究設計）
（動物）
４４匹の若年（９週齢）オスラット（Ｚｕｃｋｅｒ  ＺＤＦ／Ｃｒｌ−Ｌｅｐｒｆａ／ｆａ）を、Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｋｉｎｇｓｔｏｎ、ＮＹから得た。ラットは、試験開始時に、平均して２５０〜３５０グラムと計量された。ラットを、Guide  for  the  Care  and  Use  of  Laboratory  Animals（Nat'l  Res.  Council、１９９６年）のサイズ標準に一致したケージに収容した。敷き藁は、週当たり少なくとも２回交換した。動物を、１８〜２２℃の温度範囲、湿度４４〜６８％、および１２時間の光／暗サイクルの光周期で維持した。ラットを４日間馴化させた後、研究を開始した。各動物に連続番号を与え、ステンレス鋼の耳タグまたはその他の適切な永続的方法で一意的に識別した。罹患率および死亡率のチェックを、研究中に毎日２回実施した。
【０１４０】
動物を、４つの群：（１）対照５％セルロース繊維／餌［Ｃ］；（２）５％ＰＧＸ／餌［ＰＧＸ］；（３）Ｃ＋シタグリプチン（１０ｍｇ／ｋｇ／日）；および（４）ＰＧＸ＋シタグリプチン（１０ｍｇ／ｋｇ／日）の１つにランダムに割り当てた。
【０１４１】
（試験用食餌）
４５％の脂肪と、５％のセルロース（ｗ：ｗ）または５％のＰＧＸ（ｗ：ｗ）のいずれか（Research  Diets  formula  D12451に基づく）とを含有する食餌は、空腹時試験以外、随意に入手可能であった。濾過した水道水が随意に入手可能であった。試験用食餌は、ほぼ等エネルギー的であった（ＰＧＸ食餌は３．９８ｋｃａｌ／ｇを与え、セルロース食餌は３．９０ｋｃａｌ／ｇを与えた）。
【０１４２】
シタグリプチンを水中で調製し、経管栄養により毎日与えた（１０ｍＬ／ｋｇの体積中、ベースとして１０ｍｇ／ｋｇ）。シタグリプチンは、朝、投与し、サンプルとデータは処置後に収集した。
【０１４３】
（研究段階）
研究を、馴化段階（送達時から１回目の投薬までの日数；０週目とも呼ぶ。）；試験物投与段階（６週間全体、下記の表１３では１〜６を付した。）；最終停止段階（７週目）に分割した。表１３は、様々な研究段階中に実施された測定を示す。
【表１３】
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【０１４４】
注記：スポンサーの裁量で、試験物投与段階中にラットをさらなる時間にわたりモニターした。このモニタリングは、体重、食物消費量、および満腹／空腹時血糖試験を含んでいた。
【０１４５】
馴化後、ラットを、重量に応じて処置群に割り当てた（層別化されたランダムな手法で）。
【表１４】
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【０１４６】
（通常の研究評価項目）
ラットを、表１３に示されるように毎週１回計量した。食物は、週当たり３回計量し、こぼれた量を週当たり２回決定した。これらの値を使用して、馴化後毎週、１日の平均食物消費量を決定した。グルコース濃度は、手持ち式グルコースメーター（例えば、Ｂａｙｅｒ  Ａｓｅｎｃｉａ  Ｅｌｉｔｅ）を使用して決定した。血液を、シタグリプチンの投与度に尾部の切れ目を介して収集し；１つのサンプルは、食物が先の２４時間で入手可能なとき（非空腹時）に収集し、１つのサンプルは、食物が一晩入手できなかった（１６時間空腹）別の日に収集した。
【０１４７】
（経口グルコース負荷試験（ＯＧＴＴ））
空腹時（１６時間）ＯＧＴＴを、シタグリプチン投与後に実施した。ベースラインのサンプルを収集した後、グルコースを経管栄養（１ｇ／ｋｇ、ＰＯ）により投与した。血液サンプルは、グルコース投与後１０、２０、３０、６０、および１２０分で、尾部の切れ目を介して収集した。血糖濃度は、手持ち式グルコースメーターを使用して決定した。サンプルの残りは凝固させ、遠心分離して血清を分離した。血清サンプルを、インスリン分析用に凍結させた。
【０１４８】
（グルコース投入ペプチド分析）
ラットを一晩絶食させ、朝、それらの通常のシタグリプチン処置を行った。ベースラインのサンプルを収集した後、グルコースを経管栄養（２ｇ／ｋｇ、ＰＯ）により投与した。血液サンプル（目標体積：１６０μｌ、少なくとも７０μｌ血漿）を、グルコース投与後１５、３０、６０、および９０分に尾部の切れ目を介して収集した。ペプチダーゼ阻害剤（ジプロチンＡ、ＡＥＢＳＦおよびＳｉｇｍａのプロテアーゼ阻害剤カクテル、それぞれ最終濃度３４μｇ／ｍｌ、１ｍｇ／ｍｌ、および１％ｖ：ｖ）を使用した。血漿を遠心分離により分離し、ペプチド分析用に凍結させた。
【０１４９】
（脂質決定、血漿ＤＰＰＩＶ活性、および臨床化学検査）
血液サンプルを、停止段階中に、眼窩後方からの採血（イソフルラン麻酔下）を介して収集した。このサンプルの一部を、アナライザー（例えば、Ｐｏｌｙｍｅｒ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  ＣａｒｄｉｏＣｈｅｋ  ＰＡ）を使用して脂質濃度（総、ＬＤＬおよびＨＤＬコレステロールならびにトリグリセリド）に関して試験をした。血漿を遠心分離によって分離し、ＤＰＰＩＶ活性の決定のために瞬間凍結させた。残りは、包括的臨床化学検査分析用に調製した。
【０１５０】
（解剖）
ラットを一晩絶食させ、朝、それらの通常のシタグリプチン処置を行った。生存中の手順に従って、ラットにイソフルランで麻酔をかけ、心臓穿刺を介して血液サンプルを収集した。ペプチダーゼ阻害剤は使用しなかった。サンプル収集の後、限定解剖を行った。回腸切片（約１インチ、吻側から盲腸までの１インチを収集）を、冷やした生理食塩液で濯ぎ、瞬間凍結し；このサンプルをＤＰＰＩＶ  ｍＲＮＡに関して分析した。１つの腎臓を、ＤＰＰＩＶ  ｍＲＮＡ分析用に瞬間凍結し；１つの肝葉を、ＤＰＰＩＶ活性およびｍＲＮＡ分析用に瞬間凍結した。膵臓（腸の残りの部分を含めた付随する組織と共に、膵プラック（pancreatic  pluck）として収集）、１つの肝葉、および１つの腎臓を、後固定して、ヘマトキシリンおよびエオシンで染色した。１つの肝葉をスナップ凍結して、スダンブラックで染色した。
【０１５１】
組織サンプルを、委員会の認可を受けた病理学者による組織学的処理のためおよび病理学的評価のために、Ｈｉｓｔｏ−Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ  Ｉｎｃ．（Ｍｏｕｎｔ  Ｊａｃｋｓｏｎ、ＶＡ）に送った。病理分析は、３９匹のオスラットから得た肝臓（２つの葉）、右腎、および膵臓の肉眼および顕微鏡による評価に基づく。
【０１５２】
（ヘモグロビングリコシル化測定）
ヘモグロビングリコシル化の程度を、臨床アナライザー（例えば、Ｂａｙｅｒ  ＤＣＡ２０００）を使用して決定した。分析用の血液サンプルを、尾部の切れ目を介して収集した。
【０１５３】
（統計的方法）
全てのデータは、平均±ＳＥＭとして提示する。データは、分散方法の適切な分析によって分析した。２元配置分散分析を、食餌（ＰＧＸ対セルロース）および薬物（シタグリプチン対ビヒクル）と、それらの相互作用との主な効果を決定するのに使用した。有意な相互作用効果が明らかにされた場合、Ｔｕｋｅｙの多重比較事後検定による１元配置分散分析を使用して、群間の差を明らかにした。反復測定が経時的に行われるパラメーター（即ち、体重、グルコース、ＨｂＡ１ｃ、および満腹ホルモン）に関しては、対象間要因（４レベルの処置）および対象内要因（時間）を用いて２元配置反復測定分散分析を行った。不等間隔データ（例えば、組織学スコア）を、Ｋｒｕｓｋａｌ  Ｗａｌｌｉｓ検定およびＤｕｎｎ’ｓ  ＭＣＴにより分析した。有意性は、Ｐ＜０．０５に設定した。
（結果）
（体重、身体組成、および食物消費量）
【０１５４】
図４は、７週間の研究の過程で毎週測定された、群１〜４のラットの体重（グラム）をグラフで示す。全ての群は、研究の過程において重量を増加させた。しかし、ＰＧＸを含有する食餌（５％ｗ：ｗ）を与えた群は、ＪＡＮＵＶＩＡ（経管栄養、１０ｍｇ／ｋｇ  毎日）で処置してもビヒクルで処置しても、より多くの重量を得る傾向があった。群３（ＪＡＮＵＶＩＡ経管栄養によるセルロース対照食餌）は、当初は、ビヒクルで処置した群よりも多くの重量を得る傾向があったが、この研究は、ビヒクルで処置したラットに類似した体重で終了した。
【表１５】
0006309943.tif 000019
【０１５５】
ベースライン体重は、群間で有意には異ならなかった（Ｆ（３，４３）＝０．９１、ｐ〜０．４５；全てのＦ比は、１元配置分散分析を使用して計算した。））。絶対的には、上記表１５に示されるように、全ての体重は類似していた。７週目の体重は群間で異なる傾向があったが、これらの差は、統計的有意性に達しなかった。
【０１５６】
身体組成は、研究の終わり（即ち、組織病理学的サンプルの限定解剖後）に死体の２重エネルギーＸ線吸収測定法（ＤＥＸＡ）を使用して測定した。主要エンドポイントは、体脂肪量、除脂肪量、および骨ミネラル密度であった。組織組成（即ち、体脂肪％）および無脂肪量も報告したが、これらの測定値に関する情報は、その他の評価項目と重複していた。
【０１５７】
図５は、研究の７週目に測定された、群１〜４のラットの総体脂肪量（グラム）をグラフで示す。図５に示されるように、体脂肪量は、より高い最終体重の群（群２：ＰＧＸ−ビヒクル、および群４：ＰＧＸ−ＪＡＮＵＶＩＡ）で、僅かに高くなる傾向があった。しかし、これは統計的有意性には達しなかった。
【０１５８】
図６は、研究の７週目に測定された、群１〜４のラットの総除脂肪組織量（グラム）をグラフで示す。図６に示されるように、除脂肪量は、より大きい除脂肪量を示す、７週目でより重い群で、実質的に異なっていた（図４と図６を比較する。）。進行した糖尿病は、しばしば、除脂肪体重の損失を含めた悪液質を伴う。本発明の結果は、悪液質の低減に一致している。除脂肪組織量の差は、統計的有意性に達した（Ｆ（３，３８）＝７．９７、ｐ＜０．０００５）。
【０１５９】
参照群としての群１（セルロース−ビヒクル）での事後検定は、ＰＧＸ単独で有意な効果を示した（群１対群２、ＰＧＸ−ビヒクル、ｐ＜０．０５）。全ての事後検定は、他に指示しない限り、Ｎｅｗｍａｎ−Ｋｅｕｌｓ多重比較検定を使用して計算した。しかしＪＡＮＵＶＩＡ単独では、除脂肪体重に対して効果を示さなかった（群１対群３：セルロース−ＪＡＮＵＶＩＡ、ｐ＞０．０５）。ＰＧＸとＪＡＮＵＶＩＡとの組合せの効果は、群１、およびいずれかの処置のみの効果とは異なっていた（群１対群４：ＰＧＸ−ＪＡＮＵＶＩＡ、ｐ＜０．００１；群４対群２および３、共にｐ＜０．０５）。
【０１６０】
骨ミネラル密度は、群間で異なっていなかった（データは示さず。）。
【０１６１】
表１８にさらに示すように、組織組成（体脂肪％）は、群間で有意には異ならなかった。除脂肪量における明らかな差にも関わらず、身体組成における差が不十分であることは、この年齢のＺｕｃｋｅｒラットでの極めて高い体脂肪量に起因するようである（図５の値と図６の値とを比較する。）。
【０１６２】
表１５にさらに示すように、無脂肪量、除脂肪量および骨ミネラル密度の複合物は、群間で有意に異なった（Ｆ（３，３８）＝７．６６、ｐ＜０．００１）。このパラメーターは除脂肪量で主に構成されるので、類似した結果のパターンを示す（表１５の値と図６とを比較する。）。
【０１６３】
図７は、研究の７週間の過程にわたり毎週測定された、群１〜４のラットの食物消費量（グラム／日）をグラフで示す。図７に示されるように、ＰＧＸを含有する食餌を与えた群は、セルロースを含有する食餌を与えた群よりも少なく食べる傾向があり、ＪＡＮＵＶＩＡで処置した群は、ビヒクルで処置した群よりも少なく食べる傾向があった。
【０１６４】
分析のため、表１５に示されるように食物消費量の値を各ラットごとに平均した。統計的に有意な差が、全ての群間で食物消費量に観察された。群２、３、および４は全て、群１とは有意に異なっていた（全てｐ＜０．００１）。ＰＧＸおよびＪＡＮＵＶＩＡの組合せの効果は、いずれかの処置単独の効果とは異なっていた（群２対群４、ｐ＜０．０５；群３対群４、ｐ＜０．００１）。
【０１６５】
（グルコースホメオスタシス（Homeostatis）−継続評価項目）
図８は、７週間の研究の過程にわたり１週ごとの間隔で測定された、群１〜４のラットの非空腹時血糖値（ｍｇ／ｄＬ）をグラフで示す。図８に示されるように、１週ごとの間隔で測定された非空腹時血糖は、群間で明らかな差を示した。群１（セルロース−ビヒクル）は、高い血糖濃度を示した。対照的に群４（ＰＧＸ−ＪＡＮＵＶＩＡ）は、初期に持続的な血糖濃度の低下を示し、測定を行った最後の週（６週目）には僅かに上昇した。群２（ＰＧＸ−ビヒクル）および群３（セルロース−ＪＡＮＵＶＩＡ）は、結果の中間パターンを示した。
【０１６６】
血糖濃度の統計的分析は、体重に関して行ったように、ベースラインおよび最後の測定からのデータを使用して実施した。結果を、以下の表１６に示す。
【表１６】
0006309943.tif 000020
【０１６７】
表１６に示されるように、ベースライン非空腹時血糖濃度は群間で有意に異ならなかった。しかし、表１６にさらに示されるように、６週目の非空腹時血糖濃度は群間で有意に異なった（Ｆ（３，３８）＝２０．８３、ｐ＜０．０００１）。群１（セルロース−ビヒクル）と比較すると、群３（セルロース−ＪＡＮＵＶＩＡ）は有意には異ならず；しかし群２（ＰＧＸ−ビヒクル、ｐ＜０．０５）および群４（ＰＧＸ−ＪＡＮＵＶＩＡ、ｐ＜０．００１）は有意に異なった。ＰＧＸおよびＪＡＮＵＶＩＡの組合せは、いずれかの処置単独の効果と比較した場合（群４対群２または群３、ｐ＜０．００１）、血糖値の低下の際に統計的に有意な効果を発揮した。
【０１６８】
空腹時血糖（前夜から食物なし、血液採取前約１６時間）も、この研究の全体を通して１週ごとの間隔で測定した。表１６に示されるように、ベースラインの空腹時血糖濃度は群間で有意には異ならなかった。しかし、群間の明らかな差は、６週目に測定された空腹時血糖濃度で明白であった。
【０１６９】
図９は、７週間の研究の過程にわたり１週ごとの間隔で測定された、群１〜４のラットの空腹時血糖値（ｍｇ／ｄＬ）をグラフで示す。図９に示されるように、血糖レベルは、非空腹状態で観察された場合よりも低く、任意の群に関して低下せず；その他の点で、群の傾向は類似していた（図８および図９を比較する。）。
【０１７０】
表１６および図９に示されるように、６週目の空腹時血糖濃度は群間で有意に異なった（Ｆ（３，３８）２９．０３、ｐ＜０．０００１）。群１（セルロース−ビヒクル）と比較すると、群３（セルロース−ＪＡＮＵＶＩＡ）は有意には異ならなかった。しかし、群２（ＰＧＸ−ビヒクル、＜０．０５）および群４（ＰＧＸ−ＪＡＮＵＶＩＡ、ｐ＜０．００１）は、有意に異なった。ＰＧＸおよびＪＡＮＵＶＩＡの組合せの効果は、いずれかの処置単独の効果とは異なっていた（群４対群２、ｐ＜０．０１；群４対群３、ｐ＜０．００１）。
【０１７１】
図１０は、研究のベースライン、３週目、および６週目に決定された、群１〜４のラットから得られた血液サンプル中のグリコシル化ヘモグロビンの量（％）を、グラフで示す。図１０および表１９に示されるように、ヘモグロビングリコシル化のベースライン測定は群間で有意には異ならなかった。しかし、表１６および図１０でさらに示されるように、ヘモグロビングリコシル化は研究の過程にわたって増加し、この結果は、空腹時と非空腹時の両方の条件下で高い血糖濃度を観察したことに一致するものである。６週目に測定されたように、ヘモグロビングリコシル化は、表１６および図１０に示されるように群間で有意に異なった（Ｆ（３，３４）＝２１．１２、ｐ＜０．０００１）。群１（セルロース−ビヒクル）と比較すると、全ての群は、有意に低いヘモグロビングリコシル化度を示した（群２：ＰＧＸ−ビヒクル、ｐ＜０．００１；群３：セルロース−ＪＡＮＵＶＩＡ、ｐ＜０．０５；群４：ＰＧＸ−ＪＡＮＵＶＩＡ、ｐ＜０．００１）。ＰＧＸおよびＪＡＮＵＶＩＡの組合せの効果は、いずれかの処置単独の効果とは異なっていた（群２対群４、ｐ＜０．０５；群３対群４、ｐ＜０．００１）。
【０１７２】
（グルコースホメオスタシス：経口グルコース負荷試験（ＯＧＴＴ）評価項目）
６週目に一晩空腹にさせた条件下で実行した経口グルコース負荷試験では、図１１および表１７に示されるように、観察期間全体を通して群間でかなりの差が観察された。図１１は、群１〜４のラットで実施された１６時間空腹時経口グルコース負荷試験で、グルコース後２時間にわたり測定された血糖値（ｍｇ／ｄＬ）をグラフで示す。表２０は、ＯＧＴＴ試験の測定値を示す。
【表１７】
0006309943.tif 000021
【０１７３】
図１１および表１７に示すように、研究の６週目に一晩空腹にさせた条件下で実行された経口グルコース負荷試験では、観察期間全体を通して群間にかなりの差があった。ベースライン血糖測定については、上記にて論じた。グルコース投与後に収集したデータを、時間的経過における曲線下の面積（ＡＵＣ）を積分することによって分析した。ＡＵＣは、表１７に示されるように群間で有意に異なった（Ｆ（３，３８）＝５．６２、ｐ＜０．００５）。しかし、唯一統計的に有意な事後比較は、群１（セルロース−ビヒクル）と群４（ＰＧＸ−ＪＡＮＵＶＩＡ、ｐ＜０．０１；その他全て＞０．０５）との間の差であった。
【０１７４】
図１２は、研究６週目の１６時間空腹時ＯＧＴＴ試験後の群１〜４のラットで、グルコース投与後２時間にわたって得られた血液サンプル中の血清インスリン濃度（ｎｇ／ｍＬ）をグラフで示す。図１２に示されるように、図１１で分析された同じサンプルから測定した血清インスリンも、群間で明らかな差を示した。インスリン濃度は、表１７に示されるように、ベースラインで異なっていた（Ｆ（３，３８）＝３．４４、ｐ＜０．０５）。群１（セルロース−ビヒクル）と比較すると、ＰＧＸを含有する食餌を与えた群（群２：ＰＧＸ−ビヒクル、および群４：ＰＧＸ−ＪＡＮＵＶＩＡ）は、有意に高いベースラインのインスリン濃度を有していた（ｐ＜０．０５）。群３（セルロース−ＪＡＮＵＶＩＡ）は、群１よりも高いベースラインのインスリン濃度を有する傾向があったが、この差は、統計的有意性に達しなかった（ｐ＞０．０５）。
【０１７５】
インスリンＡＵＣ値は、表２０に示されるように群間で異なる傾向があったが、全体的な効果は、統計的に取るに足らなかった（Ｆ（３，３８）＝２．８５、ｐ＝０．０５２）。図１２および表１７にさらに示されるように、血清インスリン濃度は最初に上昇する（グルコース後１０分でピークに達する。）が、その後、群１（セルロース−ビヒクル）ではベースラインよりも低く低下した。群３（セルロース−ＪＡＮＵＶＩＡ）のＡＵＣ値はベースライン付近に残り、その結果、ＡＵＣ値が約ゼロになった（表１７参照）。群２（ＰＧＸ−ビヒクル）および４（ＰＧＸ−ＪＡＮＵＶＩＡ）は共に、血清インスリンの増加を示し、その結果、正のＡＵＣになるが、図１２に示されるように群４（ＰＧＸ−ＪＡＮＵＶＩＡ）だけがインスリン濃度の持続的増加を示した。
【０１７６】
（脂質分析）
各ラットからの終末部血サンプルの脂質含量を、７週目に分析した。図１３は、７週目に群１〜４のラットから得た血液サンプルで測定された、総コレステロールをグラフで示す。図１３に示されるように、総コレステロールは群ごとに有意に異なっていた（Ｆ（３，３８）＝１３．４７、ｐ＜０．０００１）。群１（セルロース−ビヒクル）と比較すると、群２（ＰＧＸ−ビヒクル）および群４（ＰＧＸ−ＪＡＮＵＶＩＡ）は共に、低い血中コレステロール  を示した（それぞれ、ｐ＜０．０１およびｐ＜０．００１）。ＪＡＮＵＶＩＡ単独での処置は、血中コレステロールを低下させるのに有効ではなかった（群１対群３、ｐ＞０．０５）。
【０１７７】
（臨床化学検査）
７週目の各ラットからの終末部血サンプルを、臨床化学検査パラメーターに関して分析した。結果を以下の表１８に示す。
【表１８】
0006309943.tif 000022
【０１７８】
表１８に示されるように、血清クレアチンキナーゼ活性は、群間で有意に異ならなかった。血清カルシウム濃度は基準範囲の上であったが、基準範囲は非肥満Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙラットで確立されたことが示される。血清カルシウムは、群間で有意には異ならなかった。血清塩化物は群間で有意に異なり、群４が最も高い濃度を有し、次いで群２が続いた（Ｆ（３，３４）＝８．７９、ｐ＜０．０００５）（データは示さず。）。しかし、この結果が示唆するところは、全ての群の平均が基準範囲内にあったので明らかではない。血清カリウム濃度は基準範囲の下であった（表１８参照）が、それらは生理学的に正常であり、群は有意には異ならなかった。全群平均ナトリウム濃度は基準範囲の下にあり、群間で有意に異なっており（Ｆ（３，３４）＝８．６８、ｐ＜０．０００５）、群４が最も高い濃度を有し、次いで群２が続いた（データは示さず。）。
【０１７９】
（標的器官効果）
顕微鏡による所見の概要を、以下の表１９に示す。
【表１９】
0006309943.tif 000023
【０１８０】
（膵臓）
概要：膵臓は、下記の変化：島肥大、島内での単核細胞浸潤、島細胞変性、島線維症、および島ヘモジデリン／出血を実証した。島肥大は、処置とは無関係に全ての動物に存在したが、肥大の量は、群１（対照）および群４（ＰＧＸおよびＪＡＮＵＶＩＡ）と比較して、ＰＧＸ単独で処置した動物（群２）およびＪＡＮＵＶＩＡ単独で処置した動物（群３）で高かった。群２および３は、最大量の肥大を有していたが、インスリン陽性細胞を含有する島面積のパーセントは群４の動物で最高であった。島細胞変性および島線維症の重症度は、対照群（群１）およびＪＡＮＵＶＩＡ単独（群３）に比較し、ＰＧＸ単独で処置した動物（群２）とＰＧＸおよびＪＡＮＵＶＩＡの組合せで処置した動物（群４）とで低減した。単核細胞浸潤の発生率および重症度は、その他の群と比較して組合せ群（群４）で低減し、一方、出血／ヘモジデリンの重症度はこれと同じ群で僅かに上昇した。
【０１８１】
図１４は、研究の７週目（解剖中）に群１〜４のラットの島インスリン免疫反応性（％）として測定したβ細胞集団をグラフで示す。図１４に示されるように、膵臓β細胞集団は、処置の関数として変化した（Ｆ（３，３７）＝５．７０、ｐ＜０．００５）。ＰＧＸを含有する食餌を与えたラットは、セルロースを含有する食餌を与えたラットよりも広いインスリン免疫応答性面積を有する傾向があった。ＪＡＮＵＶＩＡそのものはインスリン免疫反応性面積を変化させなかったが、ＰＧＸの効果を増大させる傾向があった（群１：セルロース−ビヒクル対群２：ＰＧＸ−ビヒクルまたは群３：セルロース−ＪＡＮＵＶＩＡ、ｐ＞０．０５；群１対群４：ＰＧＸ−ＪＡＮＵＶＩＡ、ｐ＜０．０１；群４対群２、ｐ＞０．０５；群４対群３、ｐ＜０．０１）。
【０１８２】
図１５は、研究の７週目（解剖中）に群１〜４のラットから得たヘマトキシリンおよびエオシンで染色した組織切片を使用して、スケール０（病状なし）から５（重度な病状）に基づき膵島線維症病理学スコアをグラフで示す。図１５に示されるように、膵島線維症は、一般に最小または軽度（１または２）であった。群のスコアは、有意に異なっていた（Ｋ（４）＝１２．６２、ｐ＜０．０１、Ｋｒｕｓｋａｌ−Ｗａｌｌｉｓ検定）。事後検定で統計的有意性に到達した唯一の群の差は、群２（ＰＧＸ−ビヒクル）と群３（セルロース−ＪＡＮＵＶＩＡ）との間の差であって、これは対照と比較して高い重症度を示しており、ＰＧＸは、単独でもＪＡＮＵＶＩＡとの組合せでも線維症の重症度を低下させる傾向があった。
【０１８３】
表２２に示されるように、膵臓出血およびヘモジデリンの沈着は一般に最小であり、処置によって変化しなかった（Ｋ（４）＝５．７５、ｐ〜０．１２、Ｋｒｕｓｋａｌ−Ｗａｌｌｉｓ）。
【０１８４】
図１６は、研究の７週目（解剖中）に群１〜４のラットから得た組織切片を使用して、スケール０（病状なし）から５（重度な病状）に基づき膵島肥大病理学スコアをグラフで示す。図１６に示すように、組織病理スコアとして測定された膵島肥大は、一般に中等度（３）から顕著（４）であった。病理学スコアは、群間で有意に異なっていた（Ｋ（４）＝９．４７、ｐ＜０．０５；Ｋｒｕｓｋａｌ−Ｗｉｌｌｉｓ）。しかし、群２および群３は、群１よりも高いスコアを有する傾向があったが（共にｐ＞０．０５、Ｄｕｎｎ検定）、群４は群１に匹敵するスコアを有していた（ｐ＞０．０５、Ｄｕｎｎ検定）。
【０１８５】
図１７は、研究の７週目（解剖中）に群１〜４のラットから得た組織切片を使用して、スケール０（病状なし）から５（重度な病状）に基づき膵島細胞変性病理学スコアをグラフで示す。図１７に示されるように、膵島細胞変性の病理学スコアは、β細胞集団で見られる差に類似する傾向があった（図１７と図１４とを比較する。）。ＪＡＮＵＶＩＡ単独は、病状の低下をほとんどまたは全くもたらさなかった（群１対群３、ｐ＞０．０５）。ＰＧＸ単独は、低下に向かう傾向をもたらしたが、統計的有意性はなかった（群１対群２、ｐ＞０．０５）。しかしＰＧＸおよびＪＡＮＵＶＩＡの組合せは、膵島細胞変性に、統計的に有意な低下をもたらした（群１対群４、ｐ＜０．０１）。
【０１８６】
表１９で既に示されるように、膵島単核細胞浸潤は一般に最小のスコアが付された。処置の統計的に有意な主な効果が観察されたが（Ｋ（４）＝８．０６、ｐ＜０．０５；Ｋｒｕｓｋａｌ−Ｗａｌｌｉｓ）、事後検定で有意な群差は見られなかった（全てｐ＞０．０５、Ｄｕｎｎ検定）。
【０１８７】
（腎臓）
概要：腎臓には、様々な変化があり、その一部は処置による影響を受けた。糸球体内には、増大したメサンギウム基質（メサンギウム拡大）があった。この糸球体性変化は、ＰＧＸおよびＪＡＮＵＶＩＡの組合せで処置した動物（群４）で重症度が最低であり、その後にＰＧＸ単独で処置した動物（群２）が続いた。群１（対照）および３（ＪＡＮＵＶＩＡ単独）は、これらの変化と同等の重症度を有していた。細管の変化には、細管拡張と細管変性および再生が含まれた。この場合も、両方のパラメーターに関して最も低い平均スコアが群４（組合せ群）で見られた。これらの変化の発生率は、群１、２、および３で１００％であったが、群４での発生率は、拡張および変性／再生に関してそれぞれ１０／１１および８／１１であった。群２（ＰＧＸ単独）も、群１および３と比較して、両方のパラメーターに関してより低いスコアを有していた。腎盂拡張は、群３を除き、一般に同等の発生率および重症度を有する全ての処置群で観察された。この処置群は、腎盂拡張の僅かに高い発生率および重症度を有していた。腎盂拡張（水腎症）は、痩せたおよび肥満の両方のＺｕｃｋｅｒラットで報告されている。Marshら、「Cardiovascular  dysfunction  in  Zucker  obese  and  Zucker  diabetic  fatty  rats:  role  of  hydronephrosis」、Am  J  Physiol  Heart  Circ  Physiol  ２９３巻（１号）：Ｈ２９２−８頁（２００７年）。
【０１８８】
図１８は、研究の７週目（解剖中）に群１〜４のラットから得た組織切片を使用した、スケール０（病状なし）から５（重度な病状）に基づく尿細管変性／再生病理学スコアをグラフで示す。図１８に示されるように、尿細管変性／再生スコアは、一般に最小（１）から軽度（２）まで変化した。群スコアは処置により変化した（Ｋ（４）＝２５．４０、ｐ＜０．０００１）。ＰＧＸを含有する食餌単独では病状を低減させる傾向があったが、差は統計的有意性に到達しなかった。ＪＡＮＵＶＩＡ単独は、病状を低減させなかったが（群１対群３）、ＪＡＮＵＶＩＡおよびＰＧＸの組合せは、どちらかの処置のみで得られなかった効果をもたらした（群１対群４、ＰＧＸ−ＪＡＮＵＶＩＡ、ｐ＜０．００１、Ｄｕｎｎ検定）。この効果は、ＰＧＸ単独の効果よりも大きくなる傾向があり、ＪＡＮＵＶＩＡ単独の効果よりも有意に大きかった（群２対群４、ｐ＞０．０５；群３対群４、ｐ＜０．００１、共にＤｕｎｎ検定による。）。
【０１８９】
図１９は、研究の７週目（解剖中）に群１〜４のラットから得た組織切片を使用した、スケール０（病状なし）から５（重度な病状）に基づく尿細管拡張病理学スコアをグラフで示す。図１９に示されるように、尿細管拡張スコアは、細管変性／再生スコアに類似したパターンに従った（図１９と図１８とを比較する。）。群スコアは処置により変化した（Ｋ（４）＝２２．８９、ｐ＜０．０００１）。ＰＧＸを含有する食餌単独では病状が低減する傾向があったが、差は統計的有意性に到達しなかった（群１、セルロース−ビヒクル対群２、ＰＧＸ−ビヒクル、ｐ＞０．０５、Ｄｕｎｎ検定）。ＪＡＮＵＶＩＡ単独では病状が低減しなかったが（群１対群３、セルロース−ＪＡＮＵＶＩＡ、ｐ＞０．０５、Ｄｕｎｎ検定）、ＪＡＮＵＶＩＡとＰＧＸとの組合せは、どちらの処置単独でも得られなかった効果を発揮した（群１対群４、ＰＧＸ−ＪＡＮＵＶＩＡ、ｐ＜０．００１、Ｄｕｎｎ検定）。この効果は、ＰＧＸ単独の効果よりも大きくなる傾向があり、ＪＡＮＵＶＩＡ単独の効果よりも有意に大きかった（群２対群４、ｐ＞０．０５；群３対群４、ｐ＜０．００１、共にＤｕｎｎ検定）。
【０１９０】
図２０は、研究の７週目（解剖中）に群１〜４のラットから得た組織切片を使用した、スケール０（病状なし）から５（重度な病状）に基づくメサンギウム拡大病理学スコアをグラフで示す。図２０に示されるように、メサンギウム拡大スコアは、細管変性／再生スコアに類似したパターンに従った（図２０と図１８とを比較する。）。しかし統計的に有意な主な効果にも関わらず（Ｋ（４）＝１０．９２、ｐ＜０．０５）、群の差は事後検定で統計的有意性に到達しなかった（全てｐ＞０．０５；Ｄｕｎｎ検定）。
【０１９１】
図２１は、研究の７週目に群１〜４のラットから得た終末部血サンプルから測定された、血中尿素窒素（ＢＵＮ）レベル（ｍｇ／ｄＬ）をグラフで示す。図２１に示されるように、血中尿素窒素は一般に、Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットで確立された基準範囲内にあった（図２１中、点線で示す。）。しかし、群は有意に異なっていた（Ｆ（３，３８）＝６．５３、ｐ＜０．００５）。ＰＧＸ単独およびＪＡＮＵＶＩＡ単独はＢＵＮを低下させる傾向があったが、効果は統計的有意性に到達しなかった（群１対群２、および群１対群３、ｐ＞０．０５）。対照的に、ＰＧＸとＪＡＮＵＶＩＡとの組合せはＢＵＮを有意に低下させた（群１対群４、ｐ＜０．０１）。さらに、組合せの効果は、ＰＧＸまたはＪＡＮＵＶＩＡ単独のいずれかとは異なっていた（群４対群２、および群４対群３、共にｐ＜０．０１）。
【０１９２】
表１９で既に示すように、腎盂拡張は一般に軽度のスコアが付され、スコアは群間で有意に異なっていた。表１９でさらに示すように、腎盂炎のスコアは凡そ０（正常限度内）または１（最小）であり、群間で有意には変化しなかった。腎盂鉱質化のスコアも、凡そ正常限度内にあり、群間で変化しなかった（表１９参照）。終末部血サンプルから測定された血清クレアチニンは、表１９に示されるように一般に低く、群間で有意には異ならなかった。
【０１９３】
（肝臓）
肝臓では、全ての処置群が微小胞および大滴性肝細胞空胞化を示した。これらの空胞は、脂質（肝臓リピドーシス）の存在と一致してスダンブラック陽性であった。全ての動物が、微小胞肝細胞空胞化を示した。しかし、この変化の重症度は、その他の処置群と比較して群４の動物で低減し、群１と比較すると群２および３で僅かに低減した。大滴性肝細胞空胞化は重症ではなく、全ての処置群に存在するが全ての動物で観察されたわけではなかった。大滴性空胞化で見られる大きい空胞は、小さい（微小胞）空胞の融合の結果であるように見なされる。処置群のいずれかの間で、大滴性空胞化の発生率または重症度の顕著な差はなかった。その他の処置群と比較した、群４の動物におけるスダンブラック陽性肝細胞の重症度の低さは、微小胞空胞化の低減に起因していた。その他の観察内容は、中等度から重度な重症度の肝臓リピドーシスを持つ動物で見られる変化に一致して、下記：群１（重症度は軽度）の１匹の動物および群３（重症度は軽度）の１匹の動物における梗塞の面積と；群３の１匹の動物における最小限の嚢胞性肝細胞変性とを含んでいた。
【０１９４】
図２２は、研究の７週目（解剖中）に群１〜４のラットから得た肝臓組織切片を使用した、スケール０（染色なし）から５（強力な染色）に基づくスダンブラック染色の染色強度をグラフで示す。空胞のスダンブラック染色は、これら空胞中に脂質（肝臓リピドーシス）が存在することを示す。図２２に示されるように、処置は、統計的に有意な変化を染色スコアにもたらした（Ｋ（４）＝９．３３、ｐ＜０．０５）。ＰＧＸおよびＪＡＮＵＶＩＡの両方は、脂肪症の重症度を低減させる傾向があったが、効果は統計的有意性に到達しなかった。しかし組合せは、統計的に有意な低減をもたらした（群１対群４、ＰＧＸ−ＪＡＮＵＶＩＡ、ｐ＜０．０５、Ｄｕｎｎ検定）。
【０１９５】
図２３は、研究の７週目（解剖中）に群１〜４のラットから得た組織断片を使用した、スケール０（病状なし）から５（重度な病状）に基づく肝臓空胞化（微小胞）病理学スコアを、グラフで示す。図２３に示されるように、微小胞肝臓空胞化は、処置によって有意に異なっていた（Ｋ（４）＝８．７０、ｐ＜０．０５、Ｋｒｕｓｋａｌ  Ｗａｌｌｉｓ）。ＰＧＸおよびＪＡＮＵＶＩＡは共に、脂肪症の重症度を低減させる傾向があったが、効果が統計的有意性に到達しなかった。しかしＰＧＸおよびＪＡＮＵＶＩＡの組合せは、統計的に有意な低減をもたらした（群１対群４、ＰＧＸ−ＪＡＮＵＶＩＡ、ｐ＜０．０５；Ｄｕｎｎ検定）。
【０１９６】
図２４は、研究の７週目に群１〜４のラットから得た終末部血サンプルで測定されたアルカリホスファターゼ活性（ＩＵ／Ｌ）を、グラフで示す。図２４に示されるように、終末部血サンプルで測定された血清アルカリホスファターゼ活性は、一般に高く、Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙラットで確立された基準範囲（図２４の点線よりも下の領域として示される。）を超えていた。処置群は、有意に異なっていた（Ｆ（３，３８）＝２９．５３、ｐ＜０．０００１）。ＰＧＸおよびＪＡＮＵＶＩＡは共に単独で、アルカリホスファターゼ活性も有意に低減させた（群１対群２、ｐ＜０．００１；群１群対群３、ｐ＜０．０５）。ＰＧＸおよびＪＡＮＵＶＩＡの組合せはさらに、活性を基準範囲内に低減させた。組合せで処置した動物は、対照とは有意に異なり（群１対群４、ｐ＜０．００１）、個々の処置の両方とも異なっていた（群２対群４、ｐ＜０．０１；群３対群４、ｐ＜０．００１）。
【０１９７】
図２５は、研究の７週目に群１〜４のラットから得た終末部血サンプルで測定された、血清アラニンアミノトランスフェラーゼ活性（血清グルタミン酸−ピルビン酸トランスアミナーゼとしても公知である。）（ＡＬＴ／ＳＧＰＴ）（ＩＵ／Ｌ）を、グラフで示す。図２５に示されるように、血清アラニンアミノトランスフェラーゼ活性（ＡＬＴ／ＳＧＰＴ）は一般に高く、基準範囲（図２５の点線の間の領域として示される。）を超えていた。処置の主な効果は統計的に有意であった（Ｆ（３，３８）＝７．７６、ｐ＜０．０００５）。ＪＡＮＵＶＩＡはＡＬＴ活性を低下させる傾向があり、ＰＧＸは有意な低下をもたらした（群１対群３、ｐ＞０．０５；群１対群２、ｐ＜０．０１）。ＰＧＸおよびＪＡＮＵＶＩＡの組合せは、いずれか単独よりも大きい低下をもたらす傾向があった（群１対群４、ｐ＜０．００１；群４対群２または群３、ｐ＞０．０５）。
【０１９８】
図２６は、研究の７週目に群１〜４のラットから得た終末部血サンプルで測定された、血清アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（血清グルタミン酸−オキサロ酢酸トランスアミナーゼとしても公知である。）活性（ＡＳＴ／ＳＧＯＴ）レベル（ＩＵ／Ｌ）を、グラフで示す。図２６に示されるように、血清アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ）活性は一般に高く、基準範囲（図２６の点線の間の領域として示される。）を超えていた。処置の主な効果は統計的に有意であった（Ｆ（３，３８）＝３．８１、ｐ＜０．０５）。３つの処置群は全て、基準範囲のほぼ最上部までＡＳＴ活性を低減させ、群１とは有意に異なっていた（群１対群２、３、または４、全てｐ＜０．０５）。
【０１９９】
図２７は、研究の７週目に群１〜４のラットから得た終末部血サンプルで測定された、アルブミン濃度（ｇ／ｄＬ）を、グラフで示す。図２７に示されるように、循環アルブミン濃度は一般に基準範囲（図２７の点線の間の領域として示される。）よりも下にあり、代謝疾患があるおよび代謝疾患がないラットのその他の関係ない研究での観察内容に一致していた。図２７に示されるように、群は有意に異なっていた（Ｆ（３，３８）＝１４．４７、ｐ＜０．０００１）。ＪＡＮＵＶＩＡは、アルブミン濃度を増加させず（群１対群３、ｐ＞０．０５）；しかしＰＧＸと、ＰＧＸおよびＪＡＮＵＶＩＡの組合せとは共に、増加させた（群１対群２、ｐ＜０．０５；群１対群４、ｐ＜０．０１）。
【０２００】
図２８は、研究の７週目に群１〜４のラットから得た終末部血サンプルで測定された、総循環タンパク質濃度（ｇ／ｄＬ）を、グラフで示す。図２８に示されるように、総循環タンパク質濃度は、アルブミンに非常に類似した効果のパターンを示した（図２８と図２７とを比較する。）。群は有意に異なった（Ｆ（３，３８）＝６．２３、ｐ＜０．００５）。ＪＡＮＵＶＩＡは、総タンパク質濃度を増加させず（群１対群３、ｐ＞０．０５）；しかしＰＧＸと、ＰＧＸおよびＪＡＮＵＶＩＡの組合せとは共に、増加させた（群１対群２、ｐ＜０．０５；群１対群４、ｐ＜０．０１）。
【０２０１】
表１９で既に示したように、ヘマトキシリンおよびエオシンスライドからスコアを付けた、線維症を持つ嚢胞性肝細胞変性は、一般に正常限度内でスコアが付けられ（０；表１９）、主な効果は統計的に有意ではなかった。肝臓局所梗塞は一般に正常限度内でスコアが付けられ（０；表１９）、主な効果は統計的に有意ではなかった。表１９でさらに示されるように、循環グロブリン濃度は一般に類似しており、群は有意には異ならなかった。総ビリルビン濃度は一般に低く（表１９）、各群は検出限界よりも下での観察を含んでいた。有意な主な効果が観察され（Ｆ（３，３４）＝３．８３、ｐ＜０．０５）、しかし事後検定で有意に異なる群の対はなかった（全てｐ＞０．０５）。
【０２０２】
（結果の概要）
【表２０−１】
0006309943.tif 000024
【表２０−２】
0006309943.tif 000025
【０２０３】
（実施例８）
この実施例は、高脂肪食を与えたＺｕｃｋｅｒ  ＦＡ／ＦＡラットモデルにおける、ＰＧＸおよびメトホルミン（ＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥ）、またはＰＧＸおよびＪＡＮＵＭＥＴ（シタグリプチンおよびメトホルミンの組合せ）の、単独または組合せでの効果を実証する。
【０２０４】
（背景／理論的根拠）
実施例７に記述される研究の追跡調査として；この研究は、実施例７に記述されるラットモデルＺｕｃｋｅｒ  ＦＡ／ＦＡ：ＺＤＦ／Ｃｒｌ−Ｌｅｐｒｆａ／ｆａラットでの代謝疾患および疾患メカニズムの評価項目（血糖コントロール、ペプチドホルモン、酵素活性、組織状態および組織病理状態）に対する、単独でのまたは組み合わせたＰＧＸ、ＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥ、およびＪＡＮＵＭＥＴの効果を、対照（それぞれセルロースおよびビヒクル）と比較して決定するように設計した。
【０２０５】
（方法および材料）
（試験材料）
造粒食物繊維組成物、ＰＧＸを、実施例１に記述されるように調製した。ＰＧＸを、Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｄｉｅｔｓ、Ｎｅｗ  Ｂｒｕｎｓｗｉｃｋ、Ｎ．Ｊ．により５％ｗ／ｗで基本的なラット用固形飼料（Ｄ１１７２５）に組み込んだ。セルロース繊維を、対照として５％ｗ／ｗで基本的なラット用固形飼料（Ｄ１１７２５）に組み込んだ。
【０２０６】
メトホルミン（ＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥ−８５０ｍｇ）と、メトホルミンおよびシタグリプチンの組合せ（ＪＡＮＵＭＥＴ−５０ｍｇシタグリプチン／１０００ｍｇメトホルミン）とを、処方錠剤として購入した。
【０２０７】
メトホルミン（２０ｍｇメトホルミン／ｍＬ）およびシタグリプチン／メトホルミン（１ｍｇ／ｍＬシタグリプチン、２０ｍｇメトホルミン／ｍＬ）の投薬溶液は、蒸留水中でＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥおよびＪＡＮＵＭＥＴ薬物錠剤をそれぞれ均質化し、粒状物質を遠心分離により分離することによって、調製した。投薬溶液は、毎週新しく調製した。製剤化後、溶液を冷蔵状態で貯蔵した。
【０２０８】
（品質管理）
投薬研究の開始前に、投薬溶液を分析した。参照としてＪＡＮＵＭＥＴおよびＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥ錠剤を使用して、新しい投薬溶液の十分均質化させたサンプルを分析することにより、濃度を検証した。投薬溶液の容器の上部、中間、および底部からのサンプルを分析して、均質性を検証した。最後に、１０日を経た投薬溶液の十分均質化されたサンプルも、安定性を検証するために分析した。
【０２０９】
研究中、投薬溶液の各調製物のアリコートを−８０℃で貯蔵した。研究の終了後、これらの貯蔵されたサンプルを分析して、試験物の濃度を検証した。
【０２１０】
（研究設計）
（動物）
６６匹の若年（７〜８週齢）オスラット（Ｚｕｃｋｅｒ  ＺＤＦ／Ｃｒｌ−Ｌｅｐｒｆａ／ｆａ）を、Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｋｉｎｇｓｔｏｎ、ＮＹから得た。ラットを、Guide  for  the  Care  and  Use  of  Laboratory  Animals  (Nat'l  Res.  Council、１９９６年)のサイズ標準に一致したケージに収容した。敷き藁は、週当たり少なくとも２回交換した。動物を、１８〜２２℃の温度範囲、湿度４４〜６８％、および１２時間の光／暗サイクルの光周期で維持した。ラットを１２日間馴化させた後、研究を開始した。各動物に連続番号を与え、ステンレス鋼の耳タグまたはその他の適切な永続的方法で一意的に識別した。罹患率および死亡率のチェックを、研究中に毎日２回実施した。
【０２１１】
（試験用食餌）
４５％の脂肪と、５％のセルロース（ｗ：ｗ）または５％のＰＧＸ（ｗ：ｗ）のいずれか（Research  Diets  formula  D12451に基づく）とを含有する食餌は、空腹時試験以外、随意に入手可能であった。濾過した水道水が随意に入手可能であった。
【０２１２】
ＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥおよびＪＡＮＵＭＥＴを、経口経管栄養（１０ｍＬ／ｋｇで投薬するために、水中で、それぞれベースとしておよび標識済みとして、２０ｍｇメトホルミン／ｍＬ、および１ｍｇシタグリプチン／ｍＬ＋２０ｍｇメトホルミン／ｍＬで製剤化）により投与した。経管栄養処置を、朝、投与し、処置後にサンプルおよびデータを収集した。投薬体積は、毎週の体重に基づいて計算した。
【０２１３】
（研究段階）
研究を、馴化段階（送達時から１回目の投薬までの日数；０週目と呼ぶ。）；試験物投与段階（６週間全体、下記では１〜６を付した。）；最終停止段階（７週目）に分割した。表２１は、様々な研究段階中に実施された測定を示す。
【表２１】
0006309943.tif 000026
【０２１４】
馴化後、ラットを、表２２に示すように重量に応じて（層別化されたランダムな手法で）処置群に割り当てた。
【表２２】
0006309943.tif 000027
【０２１５】
（通常の研究評価項目）
ラットを、表２１に示されるように毎週１回計量した。食物は、週当たり３回計量し、こぼれた量を週当たり２回決定した。これらの値を使用して、馴化後毎週、１日の平均食物消費量を決定した。グルコース濃度は、手持ち式グルコースメーター（例えば、Ｂａｙｅｒ  Ａｓｅｎｃｉａ  Ｅｌｉｔｅ）を使用して決定した。血液を、経管栄養投薬後に尾部の切れ目を介して収集し；１つのサンプルは、食物が先の２４時間で入手可能なとき（非空腹時）に収集し、１つのサンプルは、食物が一晩入手できなかった（１６時間空腹）別の日に収集した。サンプル収集の目標時間は、経管栄養投薬後１時間であった。
【０２１６】
（経口グルコース負荷試験（ＯＧＴＴ））
空腹時（１６時間）ＯＧＴＴを、経管栄養投薬後に実施した。ベースラインのサンプルを収集した後、グルコースを経管栄養（１ｇ／ｋｇ、ＰＯ）により投与した。血液サンプルは、グルコース投与後１０、２０、３０、６０、および１２０分で、尾部の切れ目を介して収集した。血糖濃度は、手持ち式グルコースメーターを使用して決定した。サンプルの残りは凝固させ、遠心分離して血清を分離した（目標体積、８０μＬ）。血清サンプルを、インスリン分析用に凍結させた。手順（ベースラインのサンプルの収集）を開始するための目標時間は、経管栄養投薬後１時間であった。
【０２１７】
（グルコース投入ペプチド分析）
ラットを一晩絶食させ、朝、それらの通常の経管栄養処置を行った。ベースラインのサンプルを収集した後、グルコースを経管栄養（２ｇ／ｋｇ、ＰＯ）により投与した。血液サンプル（目標体積：８０μＬ血漿）を、グルコース投与後１５、３０、６０、および９０分に尾部の切れ目を介して収集した。血液は、抗凝固チューブ（例えば、Ｋ３ＥＤＴＡ）内に収集した。ペプチダーゼ阻害剤（ジプロチンＡ、AEBSFおよびSigmaのプロテアーゼ阻害剤カクテル、それぞれ最終濃度３４μｇ／ｍｌ、１ｍｇ／ｍｌ、および１％ｖ：ｖ；目標体積：２％、２．５％、および１％ｖ：ｖ）を使用した。血漿を遠心分離により分離し、ペプチド分析用に凍結させた。手順（ベースラインのサンプルの収集）を開始するための目標時間は、経管栄養投薬後１時間であった。
【０２１８】
（脂質決定、血漿ＤＰＰＩＶ活性、および臨床化学検査（解剖））
ラットを一晩絶食させ、朝、それらの通常の経管栄養処置を行った。ラットにイソフルランで麻酔をかけ、心臓穿刺を介して血液サンプルを収集した。ペプチダーゼ阻害剤は使用しなかった。このサンプルの一部を、アナライザー（例えば、Ｐｏｌｙｍｅｒ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  ＣａｒｄｉｏＣｈｅｋ、ＰＡ）を使用して、脂質濃度（総、ＬＤＬ、およびＨＤＬコレステロールおよびトリグリセリド）に関して試験をした。血液を、分析前に２体積の生理食塩液で希釈した。血漿を遠心分離により分離し、ＤＰＰＩＶ活性決定のために瞬間凍結した。残りは、包括的臨床化学検査分析用に調製した。
【０２１９】
（組織収集（解剖））
サンプル収集の後、限定解剖を行った。回腸切片（約１インチ、吻側から盲腸までの１インチを収集）を、冷やした生理食塩液で濯ぎ、瞬間凍結し；このサンプルをＤＰＰＩＶ  ｍＲＮＡに関して分析した。１つの腎臓を、ＤＰＰＩＶ  ｍＲＮＡ分析用に瞬間凍結し；１つの肝葉を、ＤＰＰＩＶ活性およびｍＲＮＡ分析用に瞬間凍結した。肝葉の１つまたは２つの楔状片（約１００ｍｇ）を切除し、その後、瞬間凍結した。膵臓（腸の残りの部分を含めた付随する組織と共に、膵プラックとして収集）、１つの肝葉、および１つの腎臓を、後固定して、ヘマトキシリンおよびエオシンで染色した。膵臓は、β細胞決定のためにインスリン免疫組織化学を使用して加工もし；１つの肝葉をスナップ凍結して、スダンブラックで染色した。死体の残りは、２重エネルギーＸ線吸収測定法（即ち、ＤＥＸＡ）により、除脂肪量、体脂肪量、および骨含量に関して分析した。
【０２２０】
（ヘモグロビングリコシル化測定）
ヘモグロビングリコシル化の程度を、臨床アナライザー（例えば、Ｂａｙｅｒ  ＤＣＡ２０００）を使用して決定した。分析用の血液サンプルを、尾部の切れ目を介して収集した。
【０２２１】
（統計的方法）
データは、分散方法の適切な分析（１元配置分散分析、２元配置反復測定分散分析、またはＫｒｕｓｋａｌ−Ｗａｌｌｉｓ検定）によって分析した。全ての６つの処置群は、単一要因として処置された。
【０２２２】
（結果）
（体重、身体組成、および食物消費量）
図２９は、７週間の研究の過程において毎週測定された、群１〜６のラットの体重（グラム）をグラフで示す。図２９に示されるように、全ての群は、研究の過程において重量を増加させた。しかし、ＰＧＸを含有する食餌（５％ｗ：ｗ）を与えた群は、重量を減らす傾向があった。重量の増加は、ＰＧＸと組み合わせた、ＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥ（経管栄養により、毎日、ベースとして２００ｍｇ／ｋｇのメトホルミン）またはＪＡＮＵＭＥＴ（固定組合せの、ベースとして１０ｍｇ／ｋｇのシタグリプチン、および塩酸塩として２００ｍｇ／ｋｇのメトホルミンを、毎日、経管栄養によって）を用いた処置によって、低減した。しかし、セルロース（対照繊維、５％ｗ：ｗ）と組み合わせると、ＪＡＮＵＭＥＴは重量増加を変化させず、ＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥは重量増加を増大させた。
【０２２３】
体重を、ベースラインおよび最終測定（７週目）で分析した。図２９および表２３に示されるように、ベースラインの体重は群間で異ならなかった。７週目、体重は有意に異なった（Ｆ（５，６５）＝８．７５、ｐ＜０．０００１）。事後検定は、群６（ＰＧＸ−ＪＡＮＵＭＥＴ）が、その他全ての群よりも有意に低い体重を有することを示した（ｐ＜０．０５からｐ＜０．００１、Ｎｅｗｍａｎ−Ｋｅｕｌｓ検定による。）。群３（セルロース−ＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥ）の体重は、その他全ての群よりも有意に高かった（ｐ＜０．０１からｐ＜０．００１）。その他の比較では統計的有意性に到達しなかった。
【０２２４】
身体組成は、研究の終わり（即ち、組織病理学的サンプルの限定解剖後）に、２重エネルギーＸ線吸収測定法（ＤＥＸＡ）を使用して測定した。主要エンドポイントは、体脂肪量、除脂肪量、および骨ミネラル密度であった。組織組成（即ち、体脂肪％）および無脂肪量も報告したが、これらの評価項目における情報は、その他の評価項目と重複していた。
【０２２５】
図３０は、研究の７週目に測定された群１〜６のラットの、体脂肪量（グラム）をグラフで示す。図３０に示されるように、体脂肪量は、最終体重に見られる結果に類似した（図２９および図３０に比較して）傾向があった。体脂肪量は、群間で有意に異なっていた（Ｆ（５，５９）＝１７．６１、ｐ＜０．０００１）。群６は、その他全ての群よりも有意に低い体脂肪量を有していた（ｐ＜０．００１）。群３は、群４（ＰＧＸ−ＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥ）、群５（セルロース−ＪＡＮＵＭＥＴ）、および群６（ＪＡＮＵＭＥＴ−ＰＧＸ）よりも有意に高い体脂肪量を有していた。その他の比較は、統計的有意性に到達しなかった。
【０２２６】
以下の表２３に示されるように、組織組成（体脂肪％）は群間で有意に異なっていた（Ｆ（５，５９）＝４．８６、ｐ＜０．００５）。有意な事後差は、体脂肪量に見られるもののサブセットであった（図３０と比較）。群６（ＪＡＮＵＭＥＴ−ＰＧＸ）は、その他全ての群とは有意に異なっていた（ｐ＜０．０５からｐ＜０．０１）。その他の差は、組織組成に関する有意差に到達しなかった。
【０２２７】
図３１は、７週間の研究の過程において毎週測定された群１〜６のラットの、食物消費量（グラム／日）をグラフで示す。分析では、食物消費量の値を各ラットごとに平均した（表２３に示す。）。図３１に示されるように、ＰＧＸを含有する食餌が与えられた群は、セルロースを含有する食餌が与えられた群よりも消費が少なくなる傾向があった。全ての群は、研究の第１週の間に、ベースラインの消費量からの低下を示した。最も実質的な低下は僅かな反動を伴うが、全ての群は漸進的な低下を示した。統計的有意差は、ＰＧＸを与えた群とセルロースを与えた群との間で観察された（ｐ＜０．０１からｐ＜０．００１）。さらに、セルロースを与えた群の中で、ＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥおよびＪＡＮＵＭＥＴは共に、ビヒクルに対して食物消費量を低下させた（ｐ＜０．０１）。この効果は、ＰＧＸを与えた群では観察されなかった。この差は、体重と組み合わせて考慮した場合に有意である。群５は、ビヒクル様体重で比較的低い食物消費量を示した。群３は、任意の群の最も高い最終体重で比較的低い食物消費量を示した。いかなる特定の理論にも拘泥するものではないが、このパターンは、変化した代謝効率によって説明することができ、この変化はＰＧＸ繊維を与えることによって逆転するものであった。
【表２３】
0006309943.tif 000028
【０２２８】
表２３にさらに示されるように、無脂肪量、除脂肪量および骨ミネラル量を複合させたものは、群間で有意には異ならなかった。除脂肪量および骨ミネラル含量は、群間で有意には異ならなかったことがさらに示される（データは示さず。）。
【０２２９】
（グルコースホメオスタシス：継続評価項目）
図３２は、７週間の研究の過程において１週ごとの間隔で測定された群１〜６のラットの、非空腹時血糖レベル（ｍｇ／ｄＬ）をグラフで示す。図３２に示されるように、研究の全体を通して１週ごとの間隔で測定された非空腹時血糖は、群間で明らかな差を示した。セルロースを与えた群の全ては、血糖の漸進的な増加を示し、これはＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥおよびＪＡＮＵＭＥＴによって僅かに低減した。ＰＧＸが与えられビヒクルで処置したラットは僅かな増加を示したが、ＰＧＸが与えられＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥまたはＪＡＮＵＭＥＴで処置された群は、低血糖濃度を維持した。
【０２３０】
以下の表２４に示される、血糖濃度の統計的分析は、体重に関してなされたように、ベースラインおよび最後の測定からのデータを使用して実施した。
【表２４】
0006309943.tif 000029
【０２３１】
表２４に示されるように、ベースラインの非空腹時血糖濃度は、群間で有意には異ならなかった。表２４にさらに示されるように、６週目の非空腹時血糖濃度は群間で有意に異なった（Ｆ（５，６５）＝５６．７３、ｐ＜０．０００１）。全ての群の差は、セルロース（群３対群５）が与えられてもＰＧＸ（群４対群６）が与えられても、ＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥとＪＡＮＵＭＥＴで処置された群の比較を除いて統計的に有意であった。
【０２３２】
空腹時血糖（前夜、血液採取の約１６間前は、食餌抜き）も、研究の全体を通して１週ごとの間隔で測定した。表２４に示されるように、ベースラインの空腹時血糖濃度は群間で有意には異ならなかった。しかし、群間での明らかな差は、６週目に測定された空腹時血糖濃度で明白であった。
【０２３３】
図３３は、７週間の研究の過程において１週ごとの間隔で測定された群１〜６のラットの、空腹時血糖レベル（ｍｇ／ｄＬ）をグラフで示す。図３３に示されるように、血糖レベルは、非空腹時状態で観察された場合よりも低く、どの群に関しても低下せず；その他の点では、群の傾向は類似していた（図３２および図３３と比較）。６週目の空腹時グルコース濃度は群間で有意に異なった（表２４）（Ｆ（５，５９）＝２４．３３、ｐ＜０．０００１）。全ての群の差は、セルロース（群３対群５）が与えられてもＰＧＸ（群４対群６）が与えられても、ＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥおよびＪＡＮＵＭＥＴで処置した群の比較以外は統計的に有意であった。
【０２３４】
図３４は、研究のベースライン、３週目、および６週目に決定されたように、群１〜６のラットから得られた血液サンプル中のグリコシル化ヘモグロビンの量（％）をグラフで示す。図３４および表２４に示されるように、ヘモグロビングリコシル化のベースライン測定値は群間で有意には異ならなかった。しかし、表２４および図３４でさらに示されるように、ヘモグロビングリコシル化は一般に研究の過程にわたって増加し、この結果は、空腹時と非空腹時の両方の条件下で高い血糖濃度を観察したことに一致するものであった。６週目に測定されたように、ヘモグロビングリコシル化は、表２４および図３４に示されるように群間で有意に異なった（Ｆ（５，５２）＝３６．４９、ｐ＜０．０００１）。全ての群の差は、ＰＧＸが与えられたＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥおよびＪＡＮＵＭＥＴで処置した群の比較（群４対群６）および群２（ＰＧＸ−ビヒクル）対群３（セルロース−ビヒクル）の比較を除き、統計的に有意であった。
【０２３５】
（グルコースホメオスタシス−ＯＧＴＴ評価項目）
６週目に一晩空腹にさせた条件下で実行した経口グルコース負荷試験では、図３５および表２８に示されるように、観察期間全体を通して群間で実質的な差が観察された。図３５は、群１〜６のラットで実施された１６時間空腹時経口グルコース負荷試験で、グルコース投与後２時間にわたり測定された血糖濃度（ｍｇ／ｄＬ）をグラフで示す。表２５は、ＯＧＴＴ試験の測定値を示す。グルコース投与後に収集されたデータは、ベースラインの減算後に経時的に曲線下の面積を積分することによって分析した（ＡＵＣ）。
【表２５】
0006309943.tif 000030
【０２３６】
図３５および表２５に示されるように、ＡＵＣは群間で有意に異なった（Ｆ（５，５７）＝１７．２８、ｐ＜０．０００１）。全ての群は、ＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥとＪＡＮＵＭＥＴとの間（群３対群５；群４対群６）、群３（セルロース−ＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥ）と群６（ＰＧＸ−ＪＡＮＵＭＥＴ）との間、群１（セルロース−ビヒクル）と群２（ＰＧＸ−ビヒクル）との間の比較以外、事後検定で有意に異なった。
【０２３７】
図３６は、群１〜６のラットで研究の６週目に実施された１６時間空腹時経口グルコース負荷試験で、グルコース投与後２時間にわたって得られた血液サンプル中の血清インスリン濃度（ｎｇ／ｄＬ）をグラフで示す。図３６に示されるように、明らかな差が群間で観察された。インスリン濃度のパターンは、より高いベースライン濃度として観察された様々な程度の基底インスリン抵抗性と、鈍化インスリンベースラインおよび応答として観察された（即ち、より低いＡＵＣ値）膵臓機能障害との組合せに一致していた。ベースラインとＡＵＣ評価項目とに基づき、表２６に示されるパターンが観察された：
【表２６】
0006309943.tif 000031
【０２３８】
表２６に示されるように、ベースラインインスリン濃度は有意に異なっていた（Ｆ（５，５９）＝８．２８、ｐ＜０．０００１）。上記列挙した差の中で、群４と群２との間、群３と群５との間の差が、統計的有意性に到達し（ｐ＜０．０５）；その他は到達しなかった。表２６にさらに示されるように、インスリンＡＵＣ値も有意に異なった（Ｆ（５，５９）＝３．０２、ｐ＜０．０５）。しかし、上記事後比較の中で、統計的有意性に到達したものはなかった。
【０２３９】
表２６に示されるように、複合インスリン感受性指数（ＣＩＳＩ）スコアを計算して、図３７に示されるような経口グルコース負荷試験をまとめた。これらのスコアは群ごとに有意に異なっていた（Ｆ（５，５７）＝１７．６１、ｐ＜０．０００１）。群６（ＰＧＸ−ＪＡＮＵＭＥＴ）および群４（ＰＧＸ−ＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥ）は、その他全ての群からのものよりも有意に高く；しかし、その他の比較で統計的有意性に到達しなかった（全てｐ＞０．０５）。
【０２４０】
（脂質分析）
各ラットから得た終末部血サンプルの脂質含量を、７週目に分析した。図３８は、７週目に群１〜６のラットから得られた血液サンプルで測定された総コレステロールをグラフで示す。図３８に示されるように、総コレステロールは群ごとに有意に異なった（Ｆ（５，４４）＝４７．７５、ｐ＜０．０００１）。セルロースが与えられた群と比較すると、ＰＧＸが与えられた群は、より低い血中コレステロールを示した（例えば、群２のＰＧＸ−ビヒクルに対して群１のセルロース−ビヒクル、ｐ＜０．０１）。セルロースを含有した食餌が与えられ、ＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥ（群３）またはＪＡＮＵＭＥＴ（群５）のいずれかで処置された群は、高いコレステロールを示した（共に群１に対してｐ＜０．００１）。対照的に、ＰＧＸを含有する食餌が与えられた群では、これらの処置は、より低いコレステロール濃度に向かう傾向をもたらした（群２のＰＧＸ−ビヒクルに対して群４のＰＧＸ−ＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥまたは群のＰＧＸ−ＪＡＮＵＭＥＴ、ｐ＞０．０５）。
【０２４１】
（臨床化学検査）
７週目に各ラットから得た終末部血サンプルを、臨床化学検査パラメーターに関して分析した。結果を表２７に示す。
【表２７】
0006309943.tif 000032
【０２４２】
表２７に示されるように、血清クレアチンキナーゼ活性は、群間で有意に異なっていなかった。血清カルシウム濃度は群ごとに有意に異ならず、しかしこれらの値は、非肥満Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙラットに関して確立された基準範囲よりも僅かに高かった。血清カリウム濃度も群ごとに有意には異ならなかった。血清塩化物は群間で有意に異なったが、その値は全て基準範囲内にあった（データは図示せず。）。
【０２４３】
（標的器官効果）
顕微鏡による所見の概要を、以下の表２８に示す。
【表２８】
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【０２４４】
（膵臓）
明らかな処置に関係した差が、膵臓における、インスリン陽性細胞を含有する島面積のパーセントに見られた。詳細には、ビヒクル、ＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥ、またはＪＡＮＵＭＥＴであってセルロースを有するものの場合、パーセンテージはそれぞれ５２％、５３％、および４７％であった。ＰＧＸ処置は、ビヒクル（５７％）、ＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥ（６９％）、またはＪＡＮＵＭＥＴ（７９％）と組み合わせた場合により高いパーセンテージをもたらし、それによって、ＰＧＸと組み合わせた場合のインスリン産生に対する相乗効果が実証された。図３９は、研究の７週目（解剖中）に群１〜６のラットで島インスリン免疫反応性（％）として測定されたβ細胞集団をグラフで示す。図３９で示されるように、膵臓β細胞集団は処置の関数として変化した（Ｆ（５，５９）＝２８．５３、ｐ＜０．０００１）。ＰＧＸを含有する食餌が与えられたラットは、セルロースを含有する食餌が与えられたラットよりも大きなインスリン免疫反応性面積を有する傾向があり、この差はＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥまたはＪＡＮＵＭＥＴの投与によって増大した。セルロースを含有する食餌が与えられたラットでは、ＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥは明らかな効果を示さず、ＪＡＮＵＭＥＴはインスリン免疫反応性面積を低下させる傾向があった。全ての事後比較は、群１（セルロース−ビヒクル）と群２（ＰＧＸ−ビヒクル）との差；群３（セルロース−ＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥ）と群５（セルロース−ＪＡＮＵＭＥＴ）との差、群２と群３との差、群３と群５との差を除き、統計的有意性に到達した。
【０２４５】
図４０は、研究の７週目（解剖中）に群１〜６のラットから得た、ヘマトキシリンおよびエオシンで染色された組織切片を使用した、スケール０（病状なし）から５（重度の病状）に基づく膵島線維症スコアをグラフで示す。図４０に示されるように、膵島線維症は一般に軽度または中等度（２または３）であった。群のスコアは有意に異なった（Ｋ（６）＝１６．３１、ｐ＜０．０１；Ｋｒｕｓｋａｌ−Ｗａｌｌｉｓ検定）。島線維症の量は、ＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥおよびセルロースに比べ、ビヒクルおよびセルロースで僅かに低かった（それぞれ２．５および２．９）。セルロースを有するビヒクルまたはＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥのいずれかに比べ、ＪＡＮＵＭＥＴおよびセルロース（２．１）には低減があった。しかし、事後検定で観察された唯一の有意な差は、群３（セルロース−ＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥ）と群４（ＰＧＸ−ＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥ、ｐ＜０．０１）との差であった。
【０２４６】
図４１は、研究の７週目（解剖中）の群１〜６のラットにおける、スケール０（病状なし）から５（重度の病状）に基づく膵島細胞変性スコアをグラフで示す。図４１に示されるように、膵島細胞変性に関するスコアは、β細胞集団で見られる結果に類似する傾向があった（図４１および図３９を比較）。空胞化およびアポトーシスを含めた膵島細胞変性は、ビヒクルおよびセルロース（２．６）に比べ、ＪＡＮＵＭＥＴおよびセルロース（２．０）を用いた処置によって低減した。セルロースの代わりにＰＧＸが使用された場合、同等のセルロース処置に比べ、ビヒクルでは非常に少ない低下（２．４）があり、ＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥと組み合わせたときには大きな低下（１．５）があった。ＰＧＸおよびＪＡＮＵＭＥＴは、セルロースおよびＪＡＮＵＭＥＴに比べ、島細胞変性に大きな低減はなかった。スコアは群間で有意に異なった（Ｋ（６）＝２２．７４、ｐ＜０．００５）。しかし、事後検定で統計的有意性に到達する唯一の差は、群４と群１（ｐ＜０．０１）、群２（ｐ＜０．０５）、および群３（ｐ＜０．０１）との差であった。
【０２４７】
表２８に示されるように、膵島肥大は、処置に無関係に全ての動物に存在し、一般に中等度（３）または顕著（４）であった。病理学スコアは、群間で有意には異ならなかった。表２８にさらに示されるように、膵臓単核細胞浸潤と、膵臓出血およびヘモジデリンは、一般に最小とスコアされ、群間で異ならなかった。
【０２４８】
（腎臓）
腎臓には、Ｚｕｃｋｅｒラット糖尿病モデルに見られるものに典型的な、様々な変化があった。ビヒクルおよびＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥでは、ＰＧＸが、セルロースに比べて腎臓でのメサンギウム基質拡大の重症度を低減させた。ＪＡＮＵＭＥＴでは、ＰＧＸおよびセルロースによって、ビヒクルおよびＰＧＸを組み合わせた場合と同等のレベルまでメサンギウム変化の重症度を低減させた。ビヒクルを用いたＰＧＸは、腎臓での細管拡張および細管変性／再生の両方の低減をもたらした。ＰＧＸと組み合わせたＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥも、細管拡張、および細管変性／再生に関して、より低いスコアをもたらした。しかし、細管変性／再生に関するスコアのみ、セルロースを含むＪＡＮＵＭＥＴに対してＰＧＸを含むＪＡＮＵＭＥＴのほうが低かった。
【０２４９】
図４２は、研究の７週目（解剖中）に群１〜６のラットから得た組織切片を使用した、スケール０（病状なし）から５（重度の病状）に基づく尿細管変性／再生病理学スコアを、グラフで示す。図４２に示されるように、尿細管変性／再生スコアは一般に、最小から軽度まで変化した。群のスコアは処置により変化した（Ｋ（６）＝２１．８９、ｐ＜０．０００１）。一般に、ＰＧＸを含有する食餌は、セルロースを含有する食餌よりも病状を低減させた。しかし、事後検定で統計的有意性に到達する唯一の差は、群１（セルロース−ビヒクル、ｐ＜０．０５）対群２（ＰＧＸ−ビヒクル、ｐ＜０．０５）、群２対群３（セルロース−ＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥ）、および群２対群５（セルロース−ＪＡＮＵＶＩＡ、ｐ＜０．０１）であった。
【０２５０】
図４３は、研究の７週目（解剖中）に群１〜６のラットから得た組織切片を使用した、スケール０（病状なし）から５（重度の病状）に基づく尿細管拡張病理学スコアを、グラフで示す。図４３に示されるように、病理学スコアは最小から中等度に及んだ。群のスコアは有意に変化し（Ｋ（６）＝１４．０４、ｐ＜０．０５）；しかし事後検定での唯一の統計的有意差は、群１と群４との差であった（ＰＧＸ−ＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥ、ｐ＜０．０５）。
【０２５１】
図４４は、研究の７週目（解剖中）に群１〜６のラットから得た組織切片を使用した、スケール０（病状なし）から５（重度の病状）に基づくメサンギウム拡大病理学スコアを、グラフで示す。図４４に示されるように、メサンギウム拡大スコアはほとんど最小であり、しかし群１のスコアはほとんど軽度から中等度であった。群のスコアは有意に異なった（Ｋ（６）＝２８．５６、ｐ＜０．０００１）。事後検定では、群１が、群２（ｐ＜０．０５）、群４（ｐ＜０．００１）、および群６（ＰＧＸ−ＪＡＮＵＶＩＡ、ｐ＜０．０１）よりも有意に高かった。ビヒクルで処置された動物において、ＰＧＸは、セルロースに比べ、この糸球体性変化の重症度を低減させた（それぞれ１．５対２．７）。同様に、ＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥで処置された動物では、ＰＧＸ処置が重症度の低減をもたらした（それぞれ、ＰＧＸおよびセルロースに関し、０．９対１．６）。ＪＡＮＵＭＥＴでは、ＰＧＸ（１．５）およびセルロース（１．６）の両方によるメサンギウム変化の重症度は、ビヒクルおよびＰＧＸを組み合わせたもの（１．５）と同等のレベルまで低減した。
【０２５２】
図４５は、研究の７週目に群１〜６のラットから得た終末部血サンプルから測定された、血中尿素窒素（ＢＵＮ）レベル（ｍｇ／ｄＬ）をグラフで示す。図４５に示されるように、血中尿素窒素は一般に、非肥満Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙラットに関して確立された基準範囲の下であった（基準範囲は、図４５の点線の間の面積として示される。）。しかし、群は有意に異なった（Ｆ（５，５９）＝９．１３、ｐ＜０．０００１）。結果のパターンは、メサンギウム拡大で見られるものに類似していた（図４４および図４５を比較）。群１は、その他全ての群よりも有意に高く（ｐ＜０．０１からｐ＜０．０００１）；その他の比較は、群２対群５（ｐ＜０．０５）以外、統計的有意性に到達しなかった。
【０２５３】
表２８に示されるように、腎盂拡張は一般に最小または軽度としてスコアが付され、スコアは群間で有意には異ならなかった。表２８にさらに示されるように、腎盂鉱質化は一般に、なし、または最小としてスコアが付された。スコアは、有意な主な効果が発揮されるよう十分に異なっていた（Ｋ（６）＝１１．８９、ｐ＜０．０５）。しかし、事後比較は統計的有意性に到達しなかった（全てｐ＞０．０５）。表２８にさらに示されるように、腎盂炎症は一般に、なしのスコアが付され、スコアは群間で有意には異ならなかった。
【０２５４】
（肝臓）
概観：肝臓では、全ての処置群が微小胞および大滴性肝細胞空胞を示した。これらの空胞はスダンブラック陽性であり、脂質の存在に一致していた（大滴性および微小胞肝臓リピドーシス）。微小胞リピドーシスの重症度および発生率は、大滴性リピドーシスの場合よりも大きかった。ＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥおよびセルロース、またはＪＡＮＵＭＥＴおよびセルロースは、ビヒクルおよびセルロース処置に比べ、リピドーシススコアにいかなる改善ももたらさなかった（それぞれ、３．４、３．８、および３．６）。しかし、ＰＧＸをビヒクル、ＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥ、またはＪＡＮＵＭＥＴのいずれかと組み合わせて使用する場合、微小胞リピドーシススコアに顕著な低減があった（それぞれ、２．０、１．２、および１．０）。大滴性肝細胞空胞化は、最小からしばしば軽度であり、全ての処置群に存在するが、全ての動物で観察されるわけではなかった。発生率は、対応するセルロース処置群に対してＰＧＸ処置群のほうが低く、最も低い発生率および重症度が群６で見られた（１０匹の動物のうち４匹、平均スコア０．４）。図４６は、研究の７週目（解剖中）に群１〜６のラットから得た肝臓組織切片を使用した、スケール０（病状なし）から５（重度な病状）に基づく大滴性脂肪症（リピドーシス）をグラフで示す。図４６に示されるように、大滴性脂肪症は、一般に最小としてスコアが付された。群は有意に異なったが（Ｋ（６）＝２２．４１、ｐ＜０．０００５）、統計的有意性に到達する唯一の事後比較は、群６（ＰＧＸ−ＪＡＮＵＭＥＴ）と群３（セルロース−ＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥ、ｐ＜０．０５）および群５（セルロース−ＪＡＮＵＭＥＴ、ｐ＜０．００１）との差であり、群６はその他全ての群よりも低かった。
【０２５５】
図４７は、研究の７週目（解剖中）に群１〜６のラットから得た組織切片を使用した、スケール０（病状なし）から５（重度な病状）に基づく微小胞脂肪症（リピドーシス）病理学スコアをグラフで示す。図４７に示されるように、微小胞脂肪症スコアは、広い範囲を包含した。ＰＧＸを含有する食餌が与えられた群は、より低い脂肪症スコアを有する傾向があり；ＰＧＸと、ＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥまたはＪＡＮＵＭＥＴのいずれかとの組合せが、この効果を増大させた。処置の主な効果は統計的に有意であった（Ｋ（６）＝４３．０１、ｐ＜０．０００１）。群１（セルロース−ビヒクル）と群２（ＰＧＸ−ビヒクル）との差は統計的有意差に到達しなかったが（ｐ＞０．０５）、群３と群４（ＰＧＸ−ＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥ、ｐ＜０．００１）との差、群５（セルロース−ＪＡＮＵＭＥＴ）と群６との差（ｐ＜０．００１）は有意であった。
【０２５６】
図４８は、研究の７週目に群１〜６のラットから得た終末部血サンプルで測定された、アルカリホスファターゼ活性（ＩＵ／Ｌ）をグラフで示す。図４８に示されるように、血清アルカリホスファターゼ活性は一般に、非肥満Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙラットの基準範囲内にあり（図４８の点線の下に示される領域）；例外は、２重対照群（群１）であった。群１に対し、ＰＧＸを含有する食餌、ＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥ、およびＪＡＮＵＭＥＴはそれぞれ、血清アルカリホスファターゼ活性を低減させ；ＰＧＸを含有する食餌とＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥまたはＪＡＮＵＭＥＴとの組合せは、より大きな低減をもたらした。処置の主な効果は統計的に有意であった（Ｆ（５，５９）＝１６．５３、ｐ＜０．０００１）。全ての事後比較は、単一処置同士（群２対群３または群５；群３対群５）の比較、および組合せ処置同士（群４対群６）の比較以外、統計的有意性に到達した。
【０２５７】
図４９は、研究の７週目に群１〜６のラットから得た終末部血サンプルで測定された、血清アラニンアミノトランスフェラーゼ活性（血清グルタミン酸−ピルビン酸トランスアミナーゼとしても公知である。）（ＡＬＴ／ＳＧＰＴ）（ＩＵ／Ｌ）をグラフで示す。図４９に示されるように、血清アラニンアミノトランスフェラーゼ活性は一般に高く、基準範囲を超えた（図４９の点線の間の領域として示される。）。処置の主な効果は統計的有意性に到達しなかった。
【０２５８】
図５０は、研究の７週目に群１〜６のラットから得た終末部血サンプルで測定された、血清アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（血清グルタミン酸−オキサロ酢酸トランスアミナーゼとしても公知である。）活性（ＡＳＴ／ＳＧＯＴ）（ＩＵ／Ｌ）のレベルをグラフで示す。図５０に示されるように、血清アミノトランスフェラーゼ活性は一般に高く、基準範囲を超えた（図５０の点線の間の領域として示される。）。処置の主な効果は統計的有意性に到達しなかった。
【０２５９】
図５１は、研究の７週目に群１〜６のラットから得た終末部血サンプルで測定された、アルブミン濃度（ｇ／ｄＬ）をグラフで示す。図５１に示されるように、循環アルブミン濃度は一般に基準範囲よりも低く（図５１の点線の間の領域として示される。）、代謝疾患を持つおよび持たないラットのその他の無関係な研究での観察内容と一致していた。群は有意に異なった（Ｆ（５，５９）＝９．０６、ｐ＜０．０００１）。群１は、群５以外のその他全ての群よりも有意に低いアルブミン濃度を示した（ｐ＜０．０１からｐ＜０．００１）。群２は、群５よりも有意に高いアルブミン濃度を示し（ｐ＜０．００１）；その他の事後比較は統計的有意性に到達しなかった。
【０２６０】
図５２は、研究の７週目に群１〜６のラットから得た終末部血サンプルで測定された、総循環タンパク質濃度（ｇ／ｄＬ）をグラフで示す。図５２に示されるように、総循環タンパク質濃度は、アルブミンに非常に類似した効果のパターンを示した（図５１および図５２を比較）。処置の主な効果は統計的に有意であった（Ｆ（５，５９）＝６．４３、ｐ＜０．０００１）。群１は、群５以外のその他全ての群よりも有意に低いアルブミン濃度を示した（ｐ＜０．０５からｐ＜０．００１）。群２は、群５よりも有意に高いアルブミン濃度を示し（ｐ＜０．０１）；その他の事後比較は統計的有意性に到達しなかった。
【０２６１】
図５３は、研究の７週目に群１〜６のラットから得た終末部血サンプルで測定された、循環グロブリン濃度（ｇ／ｄＬ）をグラフで示す。図５３に示される結果は、総循環タンパク質に非常に類似している（図５２および図５３を比較）。しかし、群４で観察された値は、任意のその他の群に関するものよりも低かった。これは主な効果（Ｆ（５，５９）＝１１．０５、ｐ＜０．０００１）と、その他全ての群との有意な事後比較とをもたらした（全てｐ＜０．００１）。その他の差は統計的有意性に到達しなかった。
【０２６２】
総ビリルビン濃度は一般に低く、各群は検出限界よりも下での観察を含むことも（データは示さず。）、決定された。低濃度にも関わらず、有意な主な効果が観察された（Ｆ（５，５９）＝５．８４、ｐ＜０．０００５）。群２または群６との事後比較は統計的有意性に到達し（ｐ＜０．０５からｐ＜０．０１）;その他の比較は有意ではなかった。
【０２６３】
（結果の概要）
【表２９−１】
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【表２９−２】
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【０２６４】
本発明の様々な実施形態を例示し記述してきたが、本発明の精神および範囲から逸脱することなくそこに変更を行うことができることが明らかにされよう。
独占的所有権および特権を請求する本発明の実施形態を、以下に定義する。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８】
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【図２９】
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【図３０】
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【図３１】
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【図３２】
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【図３３】
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【図３４】
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【図３５】
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【図３６】
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【図３７】
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【図３８】
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【図３９】
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【図４０】
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【図４１】
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【図４２】
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【図４３】
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【図４４】
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【図４５】
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【図４６】
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【図４７】
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【図４８】
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【図４９】
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【図５０】
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【図５１】
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【図５２】
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【図５３】
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