(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
固形臓器移植のレシピエントに混合キメリズムを少なくとも６ヶ月間維持させ、前記レシピエントに拒絶発現または移植対宿主疾患がなくて前記６ヶ月間の後で免疫抑制剤を中止するための工学的に作製された造血細胞組成物であって、
前記固形臓器のドナーと前記レシピエントとはＨＬＡ−適合しており、
少なくとも５×１０5 ＣＤ３４+ 細胞／ｋｇレシピエント体重と、１．５×１０5 〜１×１０10ＣＤ３+ Ｔ細胞／ｋｇレシピエント体重とを含んでいる
ことを特徴とする造血細胞組成物。
【請求項２】
１．７×１０7 ＣＤ３４+ 細胞／ｋｇレシピエント体重未満を含むことを特徴とする請求項１記載の造血細胞組成物。
【請求項３】
５×１０5 〜１．７×１０7 ＣＤ３４+ 細胞／ｋｇレシピエント体重を含むことを特徴とする請求項１記載の造血細胞組成物。
【請求項４】
前記ドナーは、生体ドナーまたは死体ドナーであることを特徴とする請求項１記載の造血細胞組成物。
【請求項５】
少なくとも１×１０6 ＣＤ３４+ 細胞／ｋｇレシピエント体重と、少なくとも１×１０6 ＣＤ３+ Ｔ細胞／ｋｇレシピエント体重とを含んでいることを特徴とする請求項１記載の造血細胞組成物。
【請求項６】
少なくとも４×１０6 ＣＤ３４+ 細胞／ｋｇレシピエント体重と、少なくとも１×１０6 ＣＤ３+ Ｔ細胞／ｋｇレシピエント体重とを含んでいることを特徴とする請求項１記載の造血細胞組成物。
【請求項７】
前記ＣＤ３４+ 細胞は、９５％より高い純度に純化されていることを特徴とする請求項１記載の造血細胞組成物。
【請求項８】
前記固形臓器は、心臓、腸、肺、膵臓及び腎臓からなる群より選ばれることを特徴とする請求項１記載の造血細胞組成物。
【請求項９】
ＨＬＡ適合は、前記ドナーと前記レシピエントとの間で同一であるＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ及びＨＬＡ−ＤＲを含むことを特徴とする請求項１記載の造血細胞組成物。
【請求項１０】
１．７×１０7 ＣＤ３４+ 細胞／ｋｇレシピエント体重未満と、少なくとも１×１０6 ＣＤ３+ Ｔ細胞／ｋｇレシピエント体重とを含んでいることを特徴とする請求項１記載の造血細胞組成物。
【請求項１１】
１×１０6 〜１．７×１０7 ＣＤ３４+ 細胞／ｋｇレシピエント体重と、少なくとも１×１０6 ＣＤ３+ Ｔ細胞／ｋｇレシピエント体重とを含んでいることを特徴とする請求項１記載の造血細胞組成物。
【請求項１２】
前記固形臓器のドナーから単離されることを特徴とする請求項１記載の造血細胞組成物。
【請求項１３】
前記混合キメリズムは、少なくとも１％及び９５％未満の循環ドナー造血細胞を有すると定義されることを特徴とする請求項１記載の造血細胞組成物。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
感染及び拒絶を抑制する外科技術及び改善された薬物の進歩は、固形臓器の移植を、多数の疾患の効果的な治療となるようにさせてきた、移植された臓器は心臓、小腸、肝臓、肺、膵臓及び腎臓を含む。腎臓移植（ｋｉｄｎｅｙ  ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ）または腎臓移植（ｒｅｎａｌ  ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ）は、終末期の腎疾患を有する患者への腎臓の臓器移植である。腎臓移植は、死亡者のまたは生体ドナーの移植として分類され、また、ドナーとレシピエントとの関係の度合いによって関連または非関連として分類され、ヒト白血病抗原（ＨＬＡ）適合またはＨＬＡ非適合の数によって分類され得る。
【０００２】
腎臓移植の症状は、主因にかかわらず、一定のレベル未満の糸球体濾過として定義される末期腎不全（ＥＳＲＤ）である。ＥＳＲＤをもたらす共通の疾患は、悪性高血圧、感染症、糖尿病、及び巣状糸球体硬化症を含み、遺伝的原因は、多発性嚢胞腎、多数の先天性代謝異常、及び狼瘡等の自己免疫疾患を含む。糖尿病は、腎臓移植の共通の原因であり、米国では約２５％を占める。腎臓移植レシピエントの大部分は、移植時に透析を受けている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】米国特許出願公開第２０１１／０１１０９０９号明細書
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
遺伝的に非同一の患者間の臓器移植に対する主な障害は、移植された肝臓を「自己でない」と応答し、それを拒絶し得る、レシピエントの免疫系にある。従って、免疫系を抑制するための薬剤を有することは必須であるが、個々の免疫系を抑制することは、薬剤の副作用に加えて感染症及び癌のより大きなリスクに個体を曝す。レシピエントは、通常、シクロスポリンＡ、タクロリムスまたはシロリムスのカルシニューリン阻害剤、プレドニソン、及びミコフェノール酸モフェチル等の核酸合成阻害剤を含む３つの維持免疫抑制剤の混合物を投与される。後者の薬剤は、長期の患者の障害及び移植片機能損失の原因となる高血圧、腎毒性、感染症及び心疾患を含む副作用を有する。現代の免疫抑制剤であるにもかかわらず、センターによっては、急性拒絶が移植後の人の１０〜２５％で起こり得る。
【０００５】
一般的に、移植レシピエントは、移植された腎臓が機能する間、免疫抑制の抗拒絶剤を受けることになる。広く使用されている免疫抑制剤の混合物についてさえ、費用は高いことがある。
【０００６】
全身リンパ節照射（ＴＬＩ）及び抗胸腺細胞グロブリン（ＡＴＧ）による前処置が、組み合わされた臓器及び骨髄移植後に寛容を誘導するためには有利であることを前臨床試験は示している。なぜならば、該レジメンは、全身照射法（ＴＢＩ）と比べて移植対宿主疾患（ＧＶＨＤ）を抑制するからである。参考のために、Ｓｔｒｏｂｅｒ等（２０１１年）Ｓｅｍｉｎａｒｓ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  ２３：２７３−２８１参照。
【０００７】
従って、成人移植患者においてＧＶＨＤを誘発することなく、寛容に成功し免疫抑制剤を完全に中止する治療レジメンを開発することは非常に臨床的に興味深いことである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
レシピエントへの固形臓器及び造血細胞の組み合わせ移植のための方法及び組成物であって、移植片への寛容が安定な混合キメラの開発によって確立されている方法及び組成物が本明細書で提供される。好ましくは、固形臓器は腎臓である。通常、少なくとも６ヶ月間、安定な混合キメリズムを有する個体は、寛容を確立するために十分な時間の後に免疫抑制剤の使用を中止することができる。
【０００９】
臓器移植の方法が本明細書で開示される。本明細書で提供された方法は、場合によっては、ＨＬＡ−適合またはＨＬＡ−非適合の固形臓器の移植後の、レシピエントへのドナー由来造血幹細胞の投与を記載している。場合によっては、ドナー由来造血細胞は、工学的に作製された造血細胞組成物として調合前に少なくとも７０％の純度であるように調製され得る。
【００１０】
場合によっては、ドナーからのＨＬＡ−非適合固形ヒト臓器をレシピエント人体に移植し、骨髄非破壊的処理で該レシピエントを処置し、少なくとも１×１０6 ＣＤ３４+ 細胞／ｋｇ及び少なくとも１．０×１０7 ＣＤ３+ 細胞／ｋｇを含む工学的に作製された造血細胞組成物を、該レシピエントに注入し、そして、混合キメリズムを少なくとも６ヶ月間発生するために十分な時間、免疫抑制レジメンで該レシピエントを維持することを含む、ドナーからのＨＬＡ非適合固形臓器の移植方法が提供される。
【００１１】
場合によっては、本方法は、少なくとも１０×１０6 ＣＤ３４+ 細胞／ｋｇレシピエント体重及び少なくとも１．０×１０6 ＣＤ３+ 細胞／ｋｇを該レシピエントに注入することを含んでよい。場合によっては、本方法は、少なくとも１０×１０6 ＣＤ３４+ 細胞／ｋｇレシピエント体重及び少なくとも１．０×１０7 ＣＤ３+ 細胞／ｋｇが該レシピエントに注入される。場合によっては、少なくとも１０×１０6 ＣＤ３４+ 細胞／ｋｇレシピエント体重及び少なくとも１．０〜５．０×１０6 ＣＤ３+ 細胞／ｋｇが該レシピエントに注入される。場合によっては、１５×１０6 ＣＤ３４+ 細胞／ｋｇレシピエント体重未満及び少なくとも５０××１０6 ＣＤ３+ 細胞／ｋｇが該レシピエントに注入される。
【００１２】
場合によっては、固形臓器を移植する方法であって、レシピエント人体にドナー由来の固形ヒト臓器を移植し、そして、該レシピエントにおいて免疫抑制剤を少なくとも６ヶ月間中止するために十分な時間、ドナー由来のＣＤ３４+ 細胞及びＣＤ３+ 細胞を含む同種造血細胞組成物を該レシピエントに注入することを含む方法が提供される。例えば、該ドナー由来のＣＤ３４+ 細胞中の鉄（例えば、結合されているかまたは内在化されている）の細胞濃度及び／または該ドナー由来のＣＤ３+ 細胞中の鉄の細胞濃度は、５〜１００ｐｇの間でよい。
【００１３】
場合によっては、固形臓器の移植方法であって、レシピエント人体にドナー由来の固形ヒト臓器を移植し、そして、該レシピエントにおいて免疫抑制剤を少なくとも６ヶ月間中止するために十分な時間、少なくとも７０％の純度のドナー由来のＣＤ３４+ 細胞及びＣＤ３+ 細胞を含む同種造血細胞組成物を、該レシピエントに注入することを含む方法が提供される。
【００１４】
場合によっては、本方法は、少なくとも１つのアフェレーシス生成物、２つのアフェレーシス生成物、３つのアフェレーシス生成物、４つのアフェレーシス生成物、または５つのアフェレーシス生成物からのＣＤ３４+ 細胞の単離を含んでよい。場合によっては、該アフェレーシス生成物は、固形臓器ドナーから単離される。場合によっては、ＣＤ３+ 細胞は、該アフェレーシス生成物のＣＤ３４枯渇分画から単離される。場合によっては、該アフェレーシス生成物のＣＤ３４枯渇分画は、アフィニティカラムからのＣＤ３４枯渇フロースルー分画である。
【００１５】
場合によっては、本方法は、レシピエントへのドナー由来の固形臓器の移植を含み得、該固形臓器は、心臓、腸、肝臓、肺、膵臓及び腎臓からなる群より選ばれる。該固形臓器は、臓器全体の一部でもよく、生体ドナーまたは死体ドナーから得られ、及び／またはレシピエントに関連してもよくまたは関連しなくてもよい。
【００１６】
場合によっては、本方法は、ドナー及びレシピエントの各々におけるＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ及びＨＬＡ−ＤＲの６つのＨＬＡアレルをタイピングすることによって、ドナー及びレシピエントがＨＬＡ−適合またはＨＬＡ−非適合かを決定することを含む。ＨＬＡ−適合細胞は、該ＨＬＡアレルの６つ全てがドナー及びレシピエント間で同一である細胞である。ＨＬＡ−非適合細胞は、該６つの内の少なくとも１つのＨＬＡアレルがドナー及びレシピエント間で異なる細胞である。
【００１７】
場合によっては、本方法は、レシピエントが骨髄非破壊的処理を受けることを含んでよく、前記処理は、細胞組成物を注入する前にＴ細胞枯渇抗体または薬剤と組み合わせてリンパ組織照射を含む。場合によっては、本方法は、レシピエントが、カルシニューリン阻害剤及びプリン代謝阻害剤を含むがこれに限定されない免疫抑制レジメンを少なくとも６ヶ月間、受けることを含んでよい。
【００１８】
場合によっては、本方法はまた、安定な混合キメリズムについてレシピエントを監視することを含んでよい。混合キメリズムは、少なくとも１％及び９５％未満の循環ドナー造血細胞及び／または免疫細胞を有する個体と定義される。場合によっては、安定な混合キメリズムは、少なくとも１％及び１０％未満、１５％未満、２０％未満、２５％未満、３０％未満、４０％未満、４５％未満、５０％未満、５５％未満、６０％未満、６５％未満、７０％未満、８０％未満、８５％未満、または９０％未満の循環ドナー造血細胞及び／または免疫細胞を一定時間、例えば少なくとも１ヶ月、少なくとも２ヶ月、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月間有する個体と定義される。
【００１９】
場合によっては、本方法は、少なくとも３ヶ月間、少なくとも６ヶ月間、または少なくとも１２ヶ月間、混合キメリズムを有すると分かった個体からの免疫抑制の中止を含んでよい。
【００２０】
本明細書には、臓器移植を伴う使用のための組成物が開示される。本明細書で提供された組成物は、場合によっては、ＨＬＡ−適合またはＨＬＡ−非適合固形臓器の移植後にレシピエントへのドナー由来の造血幹細胞の組成物の投与のために使用される。場合によっては、かかる組成物は、少なくとも７０％純粋であり得るドナー由来造血幹細胞を含む。場合によっては、同種造血細胞組成物は、ドナー由来ＣＤ３４+ 細胞及びドナー由来ＣＤ３+ 細胞を含み、ドナー由来細胞の各々における鉄の細胞濃度は５〜１００ｐｇであり、細胞数は、固形移植後の少なくとも１年間にレシピエントに移植された場合に、免疫抑制剤を中止するために十分な量である。
【００２１】
場合によっては、該組成物は、少なくとも１０×１０6 ＣＤ３４+ 細胞／ｋｇレシピエント体重及び少なくとも１．０×１０6 ＣＤ３+ 細胞／ｋｇのレシピエントへの注入を含んでよい。場合によっては、少なくとも１０×１０6 ＣＤ３４+ 細胞／ｋｇレシピエント体重及び少なくとも１．０×１０7 ＣＤ３+ 細胞／ｋｇがレシピエントに注入される。場合によっては、少なくとも１０×１０6 ＣＤ３４+ 細胞／ｋｇレシピエント体重及び１．０〜５．０×１０6 ＣＤ３+ 細胞／ｋｇがレシピエントに注入される。場合によっては、１５×１０6 ＣＤ３４+ 細胞／ｋｇレシピエント体重未満及び少なくとも５０××１０6 ＣＤ３+ 細胞／ｋｇがレシピエントに注入される。
【００２２】
場合によっては、固形臓器は、ＨＬＡ−適合かまたはＨＬＡ−非適合である。場合によっては、固形臓器は、心臓、腸、肝臓、肺、膵臓及び腎臓からなる群より選ばれる。
【００２３】
場合によっては、本組成物は、ドナーからレシピエントに固形臓器の移植と共に投与され得、固形臓器は、心臓、腸、肝臓、肺、膵臓及び腎臓からなる群より選ばれる。固形臓器は、臓器全体の一部でよく、生体ドナーまたは死体ドナーから得られ、及び／またはレシピエントに関連してもよくまたは関連しなくてもよい。
【００２４】
場合によっては、本組成物は、ドナー及びレシピエントにおけるＨＬＡアレルＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ及びＨＬＡ−ＤＲをタイピングすることによって、該ドナー及びレシピエントがＨＬＡ−適合かまたはＨＬＡ−非適合かを決定した後に投与され得る。ＨＬＡ−適合は、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ及びＨＬＡ−ＤＲでのＨＬＡアレルの各々がドナーとレシピエント間で同一である適合を意味し得る。ＨＬＡ−非適合は、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ及びＨＬＡ−ＤＲでの少なくとも１つのＨＬＡアレルのドナーとレシピエントとの間で異なっている適合を意味し得る。
【００２５】
場合によっては、レシピエントへの投与用に調合された単離造血細胞の組成物は、ドナー由来アフェレーシス生成物から単離された少なくとも１×１０6 ／ｋｇの対象とするレシピエントのＣＤ３４+ 細胞、ここで、該ＣＤ３４+ 細胞中の鉄の細胞濃度は５〜１００ｐｇの鉄／細胞であり、ドナー由来アフェレーシス生成物から単離された少なくとも１×１０7 ／ｋｇの対象とするレシピエントのＣＤ３+ Ｔ細胞、ここで、該ＣＤ３+ 細胞中の鉄の細胞濃度は５〜１００ｐｇの鉄／細胞であり、及び薬学的な担体を含んでよい。対象とするレシピエントの体重は、工学的に作製された生成物の調合前に決定され得る。あるいは、生成物はＣＤ３４+ 細胞とＣＤ３+ 細胞の適切な割合、及びレシピエントに投与された生成物の適切な体積で調合され得る。
【００２６】
場合によっては、本組成物は、少なくとも１０マイクログラム／ｋｇのＧ−ＣＳＦで処置されたドナーから得られるアフェレーシス生成物から作製され得る。場合によっては、Ｇ−ＣＳＦは、２回の投薬でドナーに投与される。場合によっては、アフェレーシス生成物が、Ｇ−ＣＳＦの２回目の投薬後５時間未満にドナーから単離される。
【００２７】
場合によっては、本組成物は、少なくとも親和性試薬及びカラムを用いてアフェレーシス生成物から単離されたＣＤ３４+ 細胞及びＣＤ３+ 細胞を含んでよく、該ＣＤ３４+ 細胞は該カラムからの溶出液中に存在し、ＣＤ３+ 細胞は該カラムからのＣＤ３４+ 細胞枯渇フロースルー分画中に存在する。
【００２８】
場合によっては、組成物中のＣＤ３４+ 細胞中の鉄の細胞濃度は、５〜１００ｐｇ／細胞、例えば、５〜１０ｐｇの鉄／細胞、７．５〜１５ｐｇの鉄／細胞、１０〜２０ｐｇの鉄／細胞、１５〜３０ｐｇの鉄／細胞、２０〜４０ｐｇの鉄／細胞、３０〜５０ｐｇの鉄／細胞、４０〜６０ｐｇの鉄／細胞、５０〜７０ｐｇの鉄／細胞、６０〜８０ｐｇの鉄／細胞、７０〜９０ｐｇの鉄／細胞、または８０〜１００ｐｇの鉄／細胞である。
【００２９】
場合によっては、組成物中のＣＤ３+ 細胞中の鉄の細胞濃度は、５〜１０ｐｇの鉄／細胞、７．５〜１５ｐｇの鉄／細胞、１０〜２０ｐｇの鉄／細胞、１５〜３０ｐｇの鉄／細胞、２０〜４０ｐｇの鉄／細胞、３０〜５０ｐｇの鉄／細胞、４０〜６０ｐｇの鉄／細胞、５０〜７０ｐｇの鉄／細胞、６０〜８０ｐｇの鉄／細胞、７０〜９０ｐｇの鉄／細胞、または８０〜１００ｐｇの鉄／細胞である。
【００３０】
場合によっては、造血細胞組成物のＣＤ３４+ 細胞は、該造血細胞組成物の調合前に少なくとも７０％純粋である。場合によっては、該組成物は、ＣＤ３４+ 細胞及びＣＤ３+ 細胞にＨＬＡ−適合するか、またはＣＤ３４+ 細胞及びＣＤ３+細胞にＨＬＡ−非適合である、レシピエントに投与される。場合によっては、組成物の細胞は、ドナー及びレシピエントにおけるＨＬＡアレルＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ及びＨＬＡ−ＤＲをタイピングすることによって、ＨＬＡ−適合またはＨＬＡ−非適合であると決定される。
【００３１】
場合によっては、細胞組成物は、ＨＬＡ−適合する造血細胞から作製され、ＨＬＡアレルＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ、ＨＬＡ−ＤＲはドナー及びレシピエント間で同一である。場合によっては、ＨＬＡ−非適合する造血細胞から作製され、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ、ＨＬＡ−ＤＲの少なくとも１つのＨＬＡアレルは、ドナー及びレシピエント間で異なる。場合によっては、該組成物は、レシピエントに関連するかまたは関連しないドナーから採取されたアフェレーシス生成物から作製される。
【００３２】
場合によっては、本組成物は、少なくとも１つのアフェレーシス生成物、少なくとも２つのアフェレーシス生成物、少なくとも３つのアフェレーシス生成物、少なくとも４つのアフェレーシス生成物、または少なくとも５つのアフェレーシス生成物から単離されるＣＤ３４+ 細胞を含み得る。場合によっては、アフェレーシス生成物は、固形臓器ドナーから単離される。場合によっては、ＣＤ３+ 細胞はアフェレーシス生成物のＣＤ３４枯渇分画から単離される。場合によっては、アフェレーシス生成物のＣＤ３４枯渇分画は、アフィニティカラムからのＣＤ３４枯渇フロースルー分画である。
【００３３】
本明細書には臓器移植用のキットが開示される。本明細書に開示されたキットは、場合によっては、ＨＬＡ−適合またはＨＬＡ−非適合の固形臓器の移植後のレシピエントに投与され得る、造血幹細胞の組成物の調製を記載する。場合によっては、工学的に作製された造血細胞組成物の調製において使用することができる成分部分のキットは、少なくとも１つのＣＤ３４親和性試薬、複数の細胞からＣＤ３４+ 細胞を分離するための少なくとも１つの装置、ＣＤ３+ 細胞数を決定するための少なくとも１つの試薬、及び工学的に作製された造血細胞組成物を作製するためのキットの少なくとも成分部分を用いて、複数の細胞からＣＤ３４+ 細胞を単離し、ＣＤ３+ 細胞数を決定するための指示書を含む。
【００３４】
参照による組み込み
本明細書に記載の全ての文献、特許及び特許出願は、各々の文献、特許または特許出願が参照によって組み込まれるように具体的にかつ個別に指摘された程度に、参照により本明細書に組み込まれている。
【００３５】
本開示の新規な特徴は、添付の特許請求の範囲に詳細に記載する。本開示の特徴及び利点、本発明の原理を利用した例示的実施例を記載する以下の詳細な説明、及び以下について示す添付の図を参照することにより、よりよい理解が得られるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００３６】
【図１】ハプロタイプが一致するドナーとレシピエントとの腎移植及び造血細胞移植のプロトコールを示す。
【図２】ハプロタイプが一致する臓器移植の結果を表で示す。
【図３】ハプロタイプが一致する臓器組み合わせ移植後のキメラ状態を図２の患者＃２で評価するグラフである。
【図４】キメラ状態を異なるレシピエント４例について評価するグラフである。レシピエント毎にＡ、Ｂ、Ｃ及びＤのパネルの１つで示されている。レシピエントに投与されたＣＤ３４+ 細胞数及びＣＤ３+ 細胞数はグラフ上方に示されている。
【発明を実施するための形態】
【００３７】
詳細な説明
本開示の好ましい態様を示し、本明細書に記載するが、ご承知のように、特定の態様の変更がなされ、それは添付の特許請求の範囲内に依然として入るので、本開示が以下に記載の開示の特定の特徴に限定されるものではない。採用された専門用語は本開示の特定の特徴を記載する目的であり、限定する意図でないことも承知されたい。その代わりに、本開示の範囲は、添付の特許請求の範囲によって確立されている。本明細書及び添付の特許請求の範囲では、単数形「ａ（１つの）」、「ａｎ（１つの）」及び「ｔｈｅ（その）」は、文脈が他の意味を指摘しない限り、複数形を含む。
【００３８】
定義
数値範囲が記載される場合には、文脈が他に定義していない限り、範囲の下限と上限との間の、下限の単位の１０分の１までの各々の間の数値、及び規定された範囲内の任意の他の規定された数値またはその間の数値は、本明細書で提供された開示の範囲に包含される。これらのより狭い範囲の上限値及び下限値は、独立に、該狭い範囲に含まれることがあり、また、上記規定された範囲内で任意の具体的に除かれた限界と仮定して本発明の範囲に包含される。上記規定された範囲が上記限界のいずれかまたは両方を含む場合には、この包含された限界のいずれかまたは両方を除く範囲も本明細書で提供された開示に含まれる。
【００３９】
他に定義しない限り、本明細書に記載の全ての技術的及び科学的用語は、本開示が属する当業者に一般的に理解される意味と同一の意味を有する。本明細書に記載の方法、装置及び材料と類似または等価な任意の方法、装置及び材料は本開示の実施または試験において使用され得るが、好ましい方法、装置及び材料は以下に記載される。
【００４０】
「主要組織適合性複合体抗原」（「ＭＨＣ」は「ヒト白血球型抗原」、ＨＬＡとも称される）は、これらの細胞に特有の抗原性同一性を付与する細胞表面上に発現されるタンパク質分子である。ＭＨＣ／ＨＬＡ抗原は、免疫エフェクタ細胞と同一の起源の造血幹細胞（「自己」）から得られるものとして、または別の起源の造血再構成細胞（「非自己」）から得られるものとして、Ｔ細胞及びナチュラルキラー（ＮＫ）細胞によって認識される標的分子である。ＨＬＡ抗原の２つの主なクラス、つまりＨＬＡクラスＩ及びＨＬＡクラスＩＩが認識される。ＨＬＡクラスＩ抗原（ヒトではＡ、Ｂ及びＣ）は各細胞に「自己」として認識可能にさせ、一方、ＨＬＡクラスＩＩ抗原（ヒトではＤＲ、ＤＰ及びＤＱ）はリンパ球と抗原提示細胞との反応に関与する。いずれも移植臓器の拒絶に関係があるとされる。
【００４１】
ＨＬＡ遺伝子系の重要な特徴は、その多形性である。各遺伝子、ＭＨＣクラスＩ（Ａ、Ｂ及びＣ）及びＭＨＣクラスＩＩ（ＤＲ、ＤＰ及びＤＱ）は、異なるアレルに存在する。ＨＬＡアレルは数及び下付きによって表される。例えば、２つの非血縁個体は、それぞれ、クラスＩ  ＨＬＡ−Ｂ、遺伝子  Ｂ５及びＢｗ４１を有し得る。アレル遺伝子産物は、α及び／またはβドメイン（複数）において１またはそれ以上のアミノ酸が異なる。特定の抗体または核酸試薬の大きなパネルは、クラスＩ及びクラスＩＩ分子を発現する白血球を用いて、個体のＨＬＡハプロタイプをタイピングするために使用される。ＨＬＡタイピングのために最も重要な遺伝子は、６つのＭＨＣクラスＩ及びクラスＩＩタンパク質であり、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ及びＨＬＡ−ＤＲの各々について２つのアレルがある。
【００４２】
ＨＬＡ遺伝子は、６つの典型的な移植ＨＬＡ遺伝子及び免疫系の制御に重要な役割を有する少なくとも１３２タンパク質コーディング遺伝子並びにいくつかの他の基本的な分子及び細胞プロセスをコードする、染色体の位置６ｐ２１に存在する「スーパー座」にクラスター形成される。完全座は、大まかに３．６Ｍｂであり、少なくとも２２４遺伝子座を有する。このクラスター形成の１つの効果は、「ハプロタイプ」、すなわち、１つ親から遺伝する１つの染色体に存在するアレルの１セットが１群として遺伝する傾向があることである。各親から遺伝したアレルのセットは、一部のアレルが互いに結合する傾向があるハプロタイプを形成する。患者のハプロタイプを同定することは、適合するドナーを見出す確率を予測し、検索方法の開発を助けることができる。なぜならば、一部のアレル及びハプロタイプは他のものより一般的であり、異なった人種及び民族群において異なった頻度で分布されるからである。
【００４３】
本明細書で用いられる用語「ＨＬＡ−適合」とは、ＨＬＡ抗原がドナー及びレシピエント間で非適合である、ドナーレシピエント対を言う。ＨＬＡ−適合（すなわち、６つのアレルの全てが適合する）ドナー／レシピエント対は、非適合対（すなわち、６つのアレルの少なくとも１つが非適合である）に比べて、移植対宿主疾患（ＧＶＨＤ）の減少したリスクを有する。
【００４４】
本明細書で使用される用語「ＨＬＡ−非適合」とは、特にＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ及びＨＬＡ−ＤＲに関する少なくとも１つのＨＬＡ抗原がドナー及びレシピエント間で非適合である、ドナーレシピエント対を言う。場合によっては、１つのハプロタイプは適合し、他のハプロタイプは非適合である。この状況は、生体または死体ドナーからの臓器で頻繁に見出される。ＨＬＡ−非適合ドナー／レシピエント対は、完全に適合した対（すなわち、６つのアレルの全てが適合する）に比べて、ＧＶＨＤの高いリスクを有する。
【００４５】
ＨＬＡアレルは、典型的には、詳細な様々なレベルで記載される。ほとんどの命名はＨＬＡ−及び座名で始まり、次いで＊、及びアレルを特定する数字（偶数）で命名される。最初の２つの数字はアレル群を特定する。より古いタイピング法は、通常、アレルを完全に識別できず、このレベルに留まっていた。第３〜第４の数字は、同義のアレルを特定する。第５〜第６の数字は、遺伝子のコーディングフレーム内の同義変異を言う。第７及び８の数字は、コーディング領域の外側の変異を識別する。Ｌ、Ｎ、ＱまたはＳ等の文字は、発現レベルまたはそれについて知られた他の非ゲノムデータを特定するためのアレル命名に従うことがある。従って、完全に記載されたアレルは、ＨＬＡ−接頭辞及び座表記を含まない、最大９つの数字長でよい。
【００４６】
本明細書で用いる「レシピエント」は、一般的に同一の種である別の個体（ドナー）由来の臓器、組織または細胞が移植される個体である。本開示の目的のために、レシピエント及びドナーはＨＬＡ−適合またはＨＬＡ−非適合のいずれかである。
【００４７】
本明細書で用いる用語「固形臓器移植」は、ドナー由来の臓器が、そのドナーは生体であっても死体であってもよいが、レシピエントに生理学的に統合されるように適切な位置かつ心循環結合でレシピエントの体に置かれている、との該用語の慣用的意味に従って使用される。腎臓の移植は、本開示の方法では特に興味深い。但し、本方法は、当該分野で知られているように、例えば膵島を含む膵臓、心臓、肺、腸、肝臓等他の臓器の移植を除外しない。移植された臓器は、「移植片」と言われ、該臓器の生理学的統合は生着と言われる。
【００４８】
造血幹細胞移植（ＨＣＴ）は、通常、骨髄、末梢血または臍帯血から得られる多能性造血幹細胞の移植である。本開示の方法のために、造血細胞は、２つの生成物のうちの１つに操作されてもよい。造血細胞は、精製された（例えば、≧７０％純度）ＣＤ３４+ 前駆細胞及びＣＤ３+ Ｔ細胞の特定の所定数を有する注入用生成物に操作される。造血細胞は、固形臓器ドナーから得られ、従って該固形臓器にＨＬＡ−適合し、該臓器のレシピエントにＨＬＡ−非適合する。造血細胞は、固形臓器ドナーから得てよく、従って該固形臓器にＨＬＡ−適合し、該臓器のレシピエントにＨＬＡ−適合する。
【００４９】
ドナーが死体である場合に、造血細胞は骨髄（例えば、椎骨、骨盤等）から得られる。ドナーが生体ドナーである場合には、造血細胞は（例えば、Ｇ−ＣＳＦで）動員され、アフェレーシスまたは類似の方法によって回収され得る。あるいは、細胞は骨髄（例えば、骨盤等）から得られ得る。
【００５０】
造血細胞は、多数の細胞を損傷することなく長期間、凍結され得る（例えば、凍結保存され得る）。ＨＳＣを凍結保存するために、保存料であるＤＭＳＯが添加され、細胞は氷結晶形成中の浸透性細胞損傷を避けるために速度制御フリーザー中で非常にゆっくりと冷却されなければならない。ＨＳＣは、典型的には液体窒素を使用する低温フリーザー中で数年保存され得る。
【００５１】
レシピエントの免疫系は、造血細胞の注入前に骨髄非破壊的処理で前処置される。骨髄非破壊的移植は、低すぎてレシピントの全ての骨髄細胞を全滅させることができない抗体及び照射の量を使用し、よって、レシピエント及びドナーのＨＳＣが骨髄空間で共存する安定な混合キメリズムの所望の目標を可能にする。レジメンは、通常約１０〜１２日間（例えば、約１１日間）、抗胸腺細胞グロブリン（ＡＴＧ）、全身リンパ節照射、及びコルチコステロイド（例えば、プレドニソン）での処置を含む。
【００５２】
本明細書で使用される「免疫抑制」は、主に移植片に対する宿主免疫系の免疫応答を減少させるための、薬剤での移植レシピエントの処置を意味する。しかし、該薬剤はドナー造血細胞のＧＶＨＤも減少させ得る。例示的な免疫抑制レジメンは、本明細書により詳細に記載するが、一般的には約６〜１２ヶ月間が慣用である。レシピエントは、造血系の混合キメリズムについて試験され、少なくとも６ヶ月後に混合キメリズムを有すると判明した場合には、免疫抑制が徐々に減少する。
【００５３】
移植患者の免疫抑制処置は、誘導期、周術的に、及び移植直後に開始する。次いで、維持療法は、安定な混合キメリズムを示す個体について中止するまで継続する。誘導及び維持方法は、特定の用量、または標的治療レベルを達成して、長期の移植体生存について最大の希望を移植患者に与えるようにされた用量での異なった医薬を用いる。
【００５４】
主な免疫抑制剤は、カルシニューリン活性を阻害するための結合タンパク質と組み合わせるカルシニューリン阻害剤を含み、該阻害剤は、例えばタクロリムス、シクロスポリンＡ等を含む。シクロスポリン及びタクロリムスの両レベルは、注意深く監視されなければならない。最初に、レベルは、１０〜２０ｎｇ／ｍＬの範囲で維持され得るが、腎毒性のリスクを減少させるために３ヶ月後にレベルはより低くなる（５〜１０ｎｇ／ｍＬ）。
【００５５】
アジュバント剤は、通常、カルシニューリン阻害剤と組み合わされ、ステロイド、アザチオプリン、ミコフェノール酸モフェチル及びシロリムスを含む。対象のプロトコールは、ミコフェノール酸モフェチルと共にカルシニューリン阻害剤を含む。アジュバント剤の使用は、臨床医に十分な免疫抑制を達成させると同時に、個々の薬剤の用量及び毒性を減少させる。いくつかの臨床試験が、アザチオプリンと比べて急性細胞拒絶の顕著に減少した有病割合及び１年の処置不成功の減少を示した後に、腎臓移植レシピエントにおけるミコフェノール酸モフェチルは、免疫抑制での重要な役割を推定する。
【００５６】
抗体に基づいた治療は、モノクローナル（例えば、ムロモナブ−ＣＤ３）またはポリクローナル抗体、または抗ＣＤ２５抗体（例えば、バシリキシマブ、ダクリズマブ）を使用し、初期の移植後期間（最大８週間）に投与される。抗体に基づいた治療は、カルシニューリン阻害剤を回避させるかまたは用量減少を可能とし、おそらく腎毒性のリスクを減少させる。ポリクローナル及びモノクローナル抗体の逆効果プロファイルは、患者によってその使用を制限する。
【００５７】
移植対宿主疾患（ＧＶＨＤ）は、造血細胞の移植に特異な炎症性疾患である。それは、レシピエントの組織に対してドナー骨髄の免疫細胞の攻撃である。ＧＶＨＤは、ＨＬＡ−適合及びＨＬＡ−非適合移植の両方についてのリスクである。ＧＶＨＤは、ドナー及びレシピエントがＨＬＡ−適合であるとしてもＧＶＨＤは起こり得る。なぜならば、免疫系はなお、その組織間で他の相違を認識し得るからである。ＧＶＨＤは、通常、宿主のＭＨＣに提示される外来ペプチドに反応するＴ細胞によって介在される。ＧＶＨＤのリスクは、完全なキメリズムの代わりに混合キメリズムを有する患者で顕著に減少し、この理由により混合キメリズムを達成することが望ましい。加えて、免疫不全及び感染症は、完全対混合キメリズムでより頻繁に観察される。
【００５８】
ＧＶＨＤには２つの種類、急性及び慢性がある。急性ＧＶＨＤは、典型的には、移植後最初の３ヶ月に起こり、皮膚、腸または肝臓に関連し得る。高用量のプレドニソン等のコルチコステロイドは標準的処置である。
【００５９】
慢性ＧＶＨＤは、ハプロタイプ適合移植後に発症することがあり、典型的には移植後の最初の３ヶ月後に起こる。ほとんど死に至ることはないが、後期処置関連合併症の主な原因である。炎症に加えて、慢性ＧＶＨＤは、強皮症に似た線維症または瘢痕組織の発症を招くことがあり、機能的不能を引き起こして、長期の免疫抑制療法を必要とすることがある。
【００６０】
「急性移植拒絶」は、移植された臓器の免疫系による拒絶である。急性拒絶は、そのエフェクタ機能を行い、移植された組織を破壊する、レシピエントの免疫細胞による移植された組織の浸潤によって特徴付けられる。急性拒絶の発症は急速であり、一般的にヒトでは移植手術後数週間以内に起こる。
【００６１】
一般的に、急性拒絶は、免疫抑制剤で阻害または抑制される。ステロイドは、急性拒絶エピソードの治療の頼みの綱である。典型的な投薬量は、３〜５日間、３〜５ｍｇ／ｋｇ／ｄであって、維持量に徐々に減少していく。ＡＴＧ及びムロモナブ−ＣＤ３も用途がある。
【００６２】
「慢性移植拒絶」は、一般的に、急性拒絶の成功的な免疫抑制の存在下であっても、生着後数ヶ月から数年内にヒトで起こり得る。線維症は、臓器移植の全ての種類の慢性拒絶における共通の因子である。慢性拒絶は、特定の臓器の特徴である特定の疾患の範囲によって典型的には記載され得る。例えば、肺移植では、かかる障害は、気道の線維増殖性不全（閉塞性細気管支炎）、心臓移植または心臓組織の移植、例えばバルブ交換を含み、かかる疾患は線維性アテロームを含み、腎移植では、かかる障害は、閉塞性腎症、腎硬化症、尿細管間質性腎炎を含み、肝臓移植では、かかる障害は、胆管消失症候群を含む。
【００６３】
慢性拒絶はまた、虚血発作、移植された組織の除神経、高脂血症、及び免疫抑制剤と関連する高血圧によっても特徴付けられる。不十分な免疫抑制が拒絶の原因でない場合、免疫抑制療法の変化は一般的に慢性拒絶を逆転させる点で効果的でない。血圧のコントロール、高脂血症の治療、及び糖尿病の管理は、現在、移植保持のための治療の頼みの綱である。
【００６４】
用語「移植拒絶」は、急性及び慢性移植拒絶の両方を包含する。移植拒絶では、移植された組織は、レシピエントの免疫系によって拒絶され破壊される。急性拒絶は、一卵性双生児の場合または免疫抑制中を除いて、全ての移植に同程度に起こり得る。急性拒絶は、移植後１週間のできるだけ早くに始まることがあり、急性拒絶の発症の最も高いリスクは移植後最初の３ヶ月に起こる。慢性拒絶は、移植された臓器の機能の長期失敗である。
【００６５】
造血細胞移植失敗は、同種移植（原発性移植片拒絶）後４５日目でのドナー起源の造血再調製の不存在、またはドナー起源の造血の一時的生着後のドナー細胞の確認された失敗である。腎移植失敗は、１０ｍｌ／分未満に減少するクレアチニン除去、または透析への患者の戻り、あるいは再移植用の移植リストへの患者の戻りである。
【００６６】
本明細書で使用されるキメリズムは、他に断らない限り、一般的に、造血系のキメリズムを言う。個体が完全キメラ、混合キメラ、または非キメラであるかの決定は、当業者に知られているように、移植レシピエントからの造血細胞試料、例えば末梢血、骨髄等の分析によってなされる。分析は、タイピングの任意の慣用的な方法になされる。実施態様によっては、キメリズムの程度は、全ての単核細胞、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ＣＤ５６+ ＮＫ細胞及びＣＤ１５+ 好中球の中で、マイクロサテライト分析用プローブを用いるＰＣＲを用いて規定通りに監視される。例えば、ドナーの短末端反復長の多形と宿主起源とを識別する商業的キットが入手できる。自動リーダーは、人工ドナー及び宿主細胞混合物からの標準曲線に基づいてドナー種細胞の割合を与える。
【００６７】
そのような分析によって移植後の任意の時点で所定の血球系譜で９５％超のドナー細胞を示した個体は、この移植患者群において完全ドナーキメリズムを有すると言われる。混合キメリズムは、かかる分析において、１％超であるが９５％未満のドナーＤＮＡと定義される。混合キメリズムを示した個体は、キメリズムの発展に従って更に分類され得る。混合キメリズムを改善することは、少なくとも６ヶ月間に渡ってドナー細胞の割合が継続的に増加することと定義される。安定な混合キメリズムは、ドナー細胞の完全な損失なしに、長期に渡るレシピエント細胞の割合の変動と定義される。免疫抑制の中止のための候補は、移植後少なくとも６ヶ月間まで混合キメリズムを有する。
【００６８】
本明細書で使用される「診断」は、一般的に、疾患または障害への対象の罹りやすさの決定、対象が疾患または障害に現在罹患しているか否かの決定、疾患または障害に罹患した対象の診断（例えば、前転移性または転移性癌の状態、癌の状態、または治療への癌の反応性の同定）、及び治療測定法（ｔｈｅｒａｍｅｔｒｉｃ）の使用（例えば、治療の効果または効力についての情報を与えるために対象の症状を監視すること）を含む。
【００６９】
用語「生物学的試料」は、有機体から得られる様々な試料種を包含し、診断または監視アッセイで使用され得る。該用語は、血液及び生物学的起源の他の液体試料、固形組織試料、例えば生検材料または組織培養物、またはそれから得られる細胞及びその子孫を包含する。該用語は、その入手後に任意の方法で、例えば試薬による処理、可溶化またはある成分の濃縮により、工学的に作製された試料を包含する。該用語は、臨床試料を包含し、細胞培養物中の細胞、細胞上清、細胞溶解物、血清、血漿、生物学的流体、及び組織試料も含む。
【００７０】
用語「治療」、「治療すること」、「治療する」等は、所望の薬理学的及び／または生理学的効果を得ることを言うために、本明細書において一般的に使用される。該効果は、疾患または症状を完全にまたは部分的に抑制する点で予防的であり、及び／または、疾患及び／または該疾患の原因となる逆効果の完全なまたは部分的な安定化または治癒の点で治療的であり得る。
【００７１】
本明細書で使用される「治療」は、哺乳動物、特にヒトでの疾患の任意の処置を含み、（ａ）疾患または症状に罹りやすいが未だそれを有すると診断されていない対象で、該疾患または症状が起こらないようにすること、（ｂ）疾患症状を阻害すること、すなわち、その発症を止めること、または（ｃ）疾患症状を緩和すること、すなわち、該疾患症状を後退させることを含む。
【００７２】
用語「個体」、「対象」、「宿主」及び「患者」は、本明細書で交換的に使用され、診断、処置、または治療が望まれる任意の哺乳動物対象、特にヒトを言う。
【００７３】
用語「移植管理」は、腎臓移植に限定されない、固形臓器の修復生着を誘導し及び／または促進する治療方法を言う。
【００７４】
本明細書で使用される用語「薬学的に許容される」は、レシピエントの生存能力が損なわれる程度にレシピエントのヒトまたは動物の生理学を害さない化合物または化合物の組み合わせを言う。好ましくは、投与された化合物または化合物の組み合わせは、多くても、レシピエントのヒトまたは動物の健康に対する一時的な有害効果を誘発することになる。
【００７５】
本明細書で使用される用語「担体」は、治療組成物を皮膚の損傷に直接的に投与させることになる、薬剤の任意の薬学的に許容される溶媒を言う。担体は、移植のための臓器の曝露された表面、及び臓器が置かれるレシピエントの部位に、組成物を局所的に適用させることになる。従って、本明細書で使用される「担体」は、かかる溶媒を言うが、水、生理食塩水、油水エマルジョン、あるいは、レシピエントのヒトまたは動物に薬学的に及び生理学的に許容される、当業者に公知である他の任意の溶媒もしくは溶媒と化合物との組み合わせに限定されない。
【００７６】
用語「評価すること（ａｓｓｅｓｓｉｎｇ）」及び「評価すること（ｅｖａｌｕａｔｉｎｇ）」は、測定の任意の形態を言うために交換的に使用され、要素が存在するかまたは存在しないかを決定することを含む。用語「決定すること」、「測定すること」、「評価すること」及び「アッセイすること」は、交換的に使用され、定量的及び定性的決定の両方を含む。アッセイすることは、相対的でもまたは絶対的でもよい。「存在を評価すること」は、存在するものの量を決定すること、並びにそれが存在するかまたは存在しないかを決定することを含む。
【００７７】
方法
本開示の方法は以下に詳細に考察される。場合によっては、本明細書に記載の方法は、以下のステップ、つまり、ＨＬＡ−適合またはＨＬＡ−非適合対を決定するためにドナー及びレシピエントをＨＬＡタイピングすることを含み得る。「ＨＬＡ−適合」とは、６つのＨＬＡ抗原（例えば、ＨＬＡ−Ａ、Ｂ、ＤＲ）の全てがドナー及びレシピエント間で適合することを指す。「ＨＬＡ−非適合」とは、６つのＨＬＡ抗原（例えば、ＨＬＡ−Ａ、Ｂ、ＤＲ）の少なくとも１つ、少なくとも２つ、少なくとも３つがドナー及びレシピエント間で非適合することを指す。一般的に、６つのＨＬＡ抗原（例えば、ＨＬＡ−Ａ、Ｂ、ＤＲ）の少なくとも一部は適合し、例えば、少なくとも１つ、少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つ、少なくとも６つが適合する。
【００７８】
場合によっては、本方法は、少なくとも以下のステップ、つまり、ドナーから固形臓器及び造血細胞を取得し、適切な種類及び量の造血細胞を分離し、固形臓器を移植し、固形臓器の移植後で工学的に作製された造血細胞の注入前にレシピエントでレジメンを行い、免疫抑制レジメンでレシピエントを少なくとも６ヶ月間維持し、造血系の混合キメリズムについてレシピエントを監視し、そして、レシピエントが安定な混合キメリズムを示す場合には、免疫抑制を中止することを含んでよい。本明細書に記載の方法は、ＨＬＡ−適合及びＨＬＡ−非適合移植条件の両方に適用される。
【００７９】
本明細書に記載の方法のために選択された個体は、以下の基準、つまり、（ｉ）固形臓器移植を必要とすること、及び（ｉｉ）固形臓器及び造血細胞が得られるＨＬＡ−適合またはＨＬＡ−非適合ドナーのいずれかを有することを満たし得る。骨髄非破壊的処理と組み合わせて、個体のために適切な、固形臓器及び工学的に作製された造血細胞注入の組み合わせ移植を行うことによって、患者は、少なくとも６ヶ月間、持続的な混合キメリズムを発症する高い可能性を有し得る。少なくとも６ヶ月間、継続する混合キメリズムは、長期間、免疫抑制の中止を可能にし得る。
【００８０】
ヒト白血球抗原をタイピングすること
ドナー由来細胞及びレシピエントからの試料をタイピングするために、当該分野で公知の任意の方法が使用され得る。例えば、ＨＬＡタイピングを行うために３つの主な手法が使用され得る。第１は、慣用的な血清学的な細胞毒性方法であって、（例えば、血液または脾臓から採取された）リンパ球の試料がテラサキプレートに添加される。場合によっては、Ｂリンパ球は、クラスＩＩタイピングのために使用され得る。場合によっては、クラスＩタイピングは、残りの白血球で行われ得る。磁性ビーズは血液または脾臓から細胞を精製するために使用され得る。
【００８１】
場合によっては、テラサキプレートのウェルの各々は、複数の抗体（例えば、母体血清由来または工学的に作製されたモノクローナル抗体）を含んでよい。場合によっては、細胞によって発現されたＨＬＡ抗原は、ウェル中の抗体に結合する。補体の添加後、ＨＬＡ抗原及び抗体が結合されたウェル中の細胞は、殺傷され得る。場合によっては、細胞死のパターンは、ウェルから決定され得る。該パターンは、最初の組織に存在したＨＬＡ抗原の組み合わせを推測させ得る。場合によっては、ＨＬＡ抗原の組み合わせの推測はＨＬＡ抗原のタイピングをもたらすことがある。
【００８２】
ＨＬＡタイピングのために使用され得る別の方法は、フローサイトメトリーである。慣用的な血清学的な細胞毒性方法と異なり、フローサイトメトリーは１またはそれ以上のＨＬＡアレルを同定するために使用され得る。この方法では、白血球は、対象のＨＬＡ型に結合する抗体と組み合わせてよい。場合によっては、該抗体は、モノクローナルまたはポリクローナル抗体でよい。場合によっては、該抗体は、検出可能なレベルを含んでよい。場合によっては、該抗体は、検出可能なラベルに直接複合化され得る。場合によっては、検出可能なラベルを有する異なった抗体はＨＬＡ抗体に結合し、次いで複合体が検出される。フローサイトメトリーによるＨＬＡタイピングのために使用され得る検出可能なラベルの種類は、容易に入手でき、当業者に知られている。試料は、どのＨＬＡ抗体が細胞に結合したかを決定するために分析され得る。
【００８３】
ＨＬＡタイピングのために使用され得る更に別の方法は、ＤＮＡタイピングである。場合によっては、ＤＮＡタイピングは、細胞からＤＮＡを抽出して、配列データを生じるポリメラーゼ連鎖反応技術を用いてＨＬＡペプチドをコードする遺伝子を増幅することを含む。ポリメラーゼ連鎖反応技術は、当業者に公知の配列データを生じる任意のポリメラーゼ連鎖反応技術を含み得る。
【００８４】
場合によっては、遺伝子配列は、いくつかの遺伝的（例えば、ジーンバンク）データベースの少なくとも１つに存在するＨＬＡアレルの公知のヌクレオチド配列と適合し得る。場合によっては、ジーンバンク・データベースは、ＩＭＧＴ／ＨＬＡ（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ  Ｐｒｏｊｅｃｔ）データベースでよい。
【００８５】
固形臓器移植
固形臓器は、レシピエントの体の適切な位置に臓器が置かれるように、ドナーからレシピエントに移植され得る。場合によっては、固形臓器間の心循環結合は、レシピエントの体に生理学的に統合され得る。場合によっては、臓器は、生体ドナー由来でよい。場合によっては、臓器は、死体ドナー由来でよい。場合によっては、固形臓器はドナーとレシピエントとの間でＨＬＡ−適合してもよく、または固形臓器はドナーとレシピエントとの間でＨＬＡ−非適合してもよい。
【００８６】
臓器移植のために使用され得る任意の固形臓器は、本明細書に記載の方法と共に使用され得る。場合によっては、臓器は、当業者には公知である腎臓、肺、膵臓、膵島、心臓、腸、結腸、肝臓、皮膚、筋肉、歯肉、眼、歯等でよい。場合によっては、臓器は完全な臓器であってよい。場合によっては、臓器は一部であってもよい。場合によっては、臓器は組織由来の細胞であってもよい。
【００８７】
本明細書に記載の方法を用いて、固形臓器は、慣用的な方法に従って摘出され、移植される。場合によっては、固形臓器は、工学的に作製された造血細胞の注入前の、少なくとも１日、２日、３日、４日、５日、６日、７日、８日、９日、１０日、１１日、１２日、１３日、１４日、１５日、１６日、１７日、１８日、１９日または少なくとも２０日に移植され得る。
【００８８】
移植用造血幹細胞を取得すること
造血幹細胞移植（ＨＣＴ）は、ドナーからレシピエントへの多能性造血幹細胞の移植を含む。本明細書に記載の方法のために、ＨＣＴは固形臓器移植と組み合わせられ得る。場合によっては、造血幹細胞は、ドナー及びレシピエント間でＨＬＡ−適合でよい。場合によっては、造血幹細胞は、ドナー及びレシピエント間でＨＬＡ−非適合でよい。
【００８９】
場合によっては、造血幹細胞は、固形臓器ドナーから単離及び精製される。固形臓器ドナーは、生体でも死体でもよい。生体ドナーの場合には、造血細胞は、生体ドナーから動員された末梢血のアフェレーシス、死体ドナーの骨髄から造血細胞を採取する等を含む、当業者に公知の様々な方法の任意を用いて、固形臓器ドナーから得られ得る。死体ドナーの場合には、造血細胞は、骨髄から得られる。例えば、この細胞は脊椎動物の骨髄、骨盤骨、大腿骨、または造血細胞を抽出する十分な骨髄を含む任意の他の骨から得られ得る。
【００９０】
場合によっては、造血細胞は、単離及び精製の前に動員され得る。場合によっては、造血細胞は、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）でドナーを治療することによって動員され得る。例えば、ドナーは、造血細胞を単離及び精製する前に、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０またはそれ以上のＧ−ＣＳＦの投与で治療され得る。
【００９１】
場合によっては、Ｇ−ＣＳＦの投与量は、１日で（例えば、２４時間）または複数日のコースでドナーに送達され得る。例えば、複数日は２、３、４、５、６、７、８、９、１０またはそれ以上を含んでよい。好ましい場合には、ドナーは２回／日投与を受ける。
【００９２】
場合によっては、ドナーに送達されたＧ−ＣＳＦの各投与量は、１６マイクログラム／ｋｇドナー体重である。場合によっては、ドナーに送達されたＧ−ＣＳＦの各投与量は、８マイクログラム／ｋｇドナー体重である。例えば、Ｇ−ＣＳＦの各投与量は、１マイクログラム／ｋｇドナー体重超、２マイクログラム／ｋｇドナー体重超、３マイクログラム／ｋｇドナー体重超、４マイクログラム／ｋｇドナー体重超、５マイクログラム／ｋｇドナー体重超、６マイクログラム／ｋｇドナー体重超、７マイクログラム／ｋｇドナー体重超、８マイクログラム／ｋｇドナー体重超、９マイクログラム／ｋｇドナー体重超、１０マイクログラム／ｋｇドナー体重超、１１マイクログラム／ｋｇドナー体重超、１２マイクログラム／ｋｇドナー体重超、１３マイクログラム／ｋｇドナー体重超、１４マイクログラム／ｋｇドナー体重超、１５マイクログラム／ｋｇドナー体重超、１６マイクログラム／ｋｇドナー体重超、１７マイクログラム／ｋｇドナー体重超、１８マイクログラム／ｋｇドナー体重超、１９マイクログラム／ｋｇドナー体重超、２０マイクログラム／ｋｇドナー体重超、または２０マイクログラム／ｋｇドナー体重超でよい。好ましい場合にあっては、ドナーに送達されたＧ−ＣＳＦの各投与量は、８マイクログラム／ｋｇドナー体重超である。
【００９３】
場合によっては、アフェレーシスは、ドナーがＧ−ＣＳＦの単回投与を受けた後に行われ得る。例えば、アフェレーシスは、ドナーがＧ−ＣＳＦの単回投与を受けた後に、１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間、１１時間、１１時間、１２時間、１３時間、１４時間、１５時間、１６時間、１７時間、１８時間、１９時間、２０時間、２１時間、２２時間、２３時間、２４時間、２５時間、２６時間、２７時間、２８時間、２９時間、３０時間、３１時間、３２時間、３３時間、３４時間、３５時間、３６時間、３７時間、３８時間、３９時間、４０時間、４１時間、４２時間、４３時間、４４時間、４５時間、４６時間、４７時間、４８時間、または４８時間超だけ行われ得る。
【００９４】
場合によっては、アフェレーシスは、ドナーがＧ−ＣＳＦの多回投与の最終投与を受けた後に行われ得る。例えば、アフェレーシスは、ドナーがＧ−ＣＳＦの多回投与の最終投与を受けた後に、１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間、１１時間、１２時間、１３時間、１４時間、１５時間、１６時間、１７時間、１８時間、１９時間、２０時間、２１時間、２２時間、２３時間、２４時間、２５時間、２６時間、２７時間、２８時間、２９時間、３０時間、３１時間、３２時間、３３時間、３４時間、３５時間、３６時間、３７時間、３８時間、３９時間、４０時間、４１時間、４２時間、４３時間、４４時間、４５時間、４６時間、４７時間、４８時間、または４８時間超だけ行われ得る。
【００９５】
場合によっては、アフェレーシスは、ドナー由来のアフェレーシス生成物を得るために行われ得る。例えば、少なくとも１つのアフェレーシス生成物、２つのアフェレーシス生成物、３つのアフェレーシス生成物、４つのアフェレーシス生成物または５つのアフェレーシス生成物がドナーから得られる。場合によっては、少なくとも２つのアフェレーシス生成物、３つのアフェレーシス生成物、４つのアフェレーシス生成物、５つのアフェレーシス生成物、６つのアフェレーシス生成物、７つのアフェレーシス生成物、８つのアフェレーシス生成物、９つのアフェレーシス生成物、１０のアフェレーシス生成物、１１のアフェレーシス生成物、１２のアフェレーシス生成物、１３のアフェレーシス生成物、１４のアフェレーシス生成物、または少なくとも１５のアフェレーシス生成物がドナーから得られ得る。
【００９６】
場合によっては、造血細胞は、レシピエントにＨＬＡ−適合した固形臓器から得られ得る。この場合に、造血細胞は、固形臓器及び固形臓器レシピエントにＨＬＡ−適合する。場合によっては、造血細胞は、レシピエントに非ＨＬＡ−適合した固形臓器から得られ得る。この場合に、造血細胞は、固形臓器に非ＨＬＡ−適合し、固形臓器レシピエントに非ＨＬＡ−適合する。
【００９７】
本明細書に記載の方法について、固形臓器ドナーからの単離後または単離・精製後に、造血細胞は凍結され得る（例えば、凍結保存される）。場合によっては、造血細胞は、当業者に公知である凍結保存媒体及び凍結保存方法を用いて凍結保存され得る。場合によっては、造血細胞は、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ノルモゾル、ヘタスターチ及びヒト血清アルブミン（ＨＡＳ）を含む凍結保存媒体を用いて凍結保存され得る。
【００９８】
場合によっては、凍結保存媒体中のＤＭＳＯの濃度が、０．１％未満のＤＭＳＯ、０．２％未満のＤＭＳＯ、０．３％未満のＤＭＳＯ、０．４％未満のＤＭＳＯ、０．５％未満のＤＭＳＯ、０．６％未満のＤＭＳＯ、０．７％未満のＤＭＳＯ、０．８％未満のＤＭＳＯ、０．９％未満のＤＭＳＯ、１．０％未満のＤＭＳＯ、１．１％未満のＤＭＳＯ、１．２％未満のＤＭＳＯ、１．３％未満のＤＭＳＯ、１．４％未満のＤＭＳＯ、１．５％未満のＤＭＳＯ、１．６％未満のＤＭＳＯ、１．７％未満のＤＭＳＯ、１．８％未満のＤＭＳＯ、１．９％未満のＤＭＳＯ、２．０％未満のＤＭＳＯ、２．１％未満のＤＭＳＯ、２．２％未満のＤＭＳＯ、２．３％未満のＤＭＳＯ、２．４％未満のＤＭＳＯ、２．５％未満のＤＭＳＯ、２．６％未満のＤＭＳＯ、２．７％未満のＤＭＳＯ、２．８％未満のＤＭＳＯ、２．９％未満のＤＭＳＯ、３．０％未満のＤＭＳＯ、３．１％未満のＤＭＳＯ、３．２％未満のＤＭＳＯ、３．３％未満のＤＭＳＯ、３．４％未満のＤＭＳＯ、３．５％未満のＤＭＳＯ、３．６％未満のＤＭＳＯ、３．７％未満のＤＭＳＯ、３．８％未満のＤＭＳＯ、３．９％未満のＤＭＳＯ、４．０％未満のＤＭＳＯ、４．１％未満のＤＭＳＯ、４．２％未満のＤＭＳＯ、４．３％未満のＤＭＳＯ、４．４％未満のＤＭＳＯ、４．５％未満のＤＭＳＯ、４．６％未満のＤＭＳＯ、４．７％未満のＤＭＳＯ、４．８％未満のＤＭＳＯ、４．９％未満のＤＭＳＯ、５．０％未満のＤＭＳＯ、５．１％未満のＤＭＳＯ、５．２％未満のＤＭＳＯ、５．３％未満のＤＭＳＯ、５．４％未満のＤＭＳＯ、５．５％未満のＤＭＳＯ、５．６％未満のＤＭＳＯ、５．７％未満のＤＭＳＯ、５．８％未満のＤＭＳＯ、５．９％未満のＤＭＳＯ、６．０％未満のＤＭＳＯ、６．１％未満のＤＭＳＯ、６．２％未満のＤＭＳＯ、６．３％未満のＤＭＳＯ、６．４％未満のＤＭＳＯ、６．５％未満のＤＭＳＯ、６．６％未満のＤＭＳＯ、６．７％未満のＤＭＳＯ、６．８％未満のＤＭＳＯ、６．９％未満のＤＭＳＯ、７．０％未満のＤＭＳＯ、７．１％未満のＤＭＳＯ、７．２％未満のＤＭＳＯ、７．３％未満のＤＭＳＯ、７．４％未満のＤＭＳＯ、７．５％未満のＤＭＳＯ、７．６％未満のＤＭＳＯ、７．７％未満のＤＭＳＯ、７．８％未満のＤＭＳＯ、７．９％未満のＤＭＳＯ、８．０％未満のＤＭＳＯ、８．１％未満のＤＭＳＯ、８．２％未満のＤＭＳＯ、８．３％未満のＤＭＳＯ、８．４％未満のＤＭＳＯ、８．５％未満のＤＭＳＯ、８．６％未満のＤＭＳＯ、８．７％未満のＤＭＳＯ、８．８％未満のＤＭＳＯ、８．９％未満のＤＭＳＯ、９．０％未満のＤＭＳＯ、９．１％未満のＤＭＳＯ、９．２％未満のＤＭＳＯ、９．３％未満のＤＭＳＯ、９．４％未満のＤＭＳＯ、９．５％未満のＤＭＳＯ、９．６％未満のＤＭＳＯ、９．７％未満のＤＭＳＯ、９．８％未満のＤＭＳＯ、９．９％未満のＤＭＳＯ、１０％未満のＤＭＳＯ、１０．５％未満のＤＭＳＯ、１１％未満のＤＭＳＯ、１１．５％未満のＤＭＳＯ、１２％未満のＤＭＳＯ、１２．５％未満のＤＭＳＯ、１３％未満のＤＭＳＯ、１３．５％未満のＤＭＳＯ、１４％未満のＤＭＳＯ、１４．５％未満のＤＭＳＯ、１５％未満のＤＭＳＯ、１５．５％未満のＤＭＳＯ、１６％未満のＤＭＳＯ、１６．５％未満のＤＭＳＯ、１７％未満のＤＭＳＯ、１７．５％未満のＤＭＳＯ、１８％未満のＤＭＳＯ、１８．５％未満のＤＭＳＯ、１９％未満のＤＭＳＯ、２０％未満のＤＭＳＯ、２０．５％未満のＤＭＳＯ、２１％未満のＤＭＳＯ、２１．５％未満のＤＭＳＯ、２２％未満のＤＭＳＯ、２２．５％未満のＤＭＳＯ、２３％未満のＤＭＳＯ、２３．５％未満のＤＭＳＯ、２４％未満のＤＭＳＯ、２４．５％未満のＤＭＳＯ、２５％未満のＤＭＳＯ、２５．５％未満のＤＭＳＯ、２６％未満のＤＭＳＯ、２６．５％未満のＤＭＳＯ、２７％未満のＤＭＳＯ、２７．５％未満のＤＭＳＯ、２８％未満のＤＭＳＯ、２８．５％未満のＤＭＳＯ、２９％未満のＤＭＳＯ、２９．５％未満のＤＭＳＯ、３０％未満のＤＭＳＯ、４０％未満のＤＭＳＯ、または５０％未満のＤＭＳＯであってよい。
【００９９】
場合によっては、凍結保存媒体中のノルモゾルの濃度は、０．１％未満のノルモゾル、０．２％未満のノルモゾル、０．３％未満のノルモゾル、０．４％未満のノルモゾル、０．５％未満のノルモゾル、０．６％未満のノルモゾル、０．７％未満のノルモゾル、０．８％未満のノルモゾル、０．９％未満のノルモゾル、１．０％未満のノルモゾル、１．１％未満のノルモゾル、１．２％未満のノルモゾル、１．３％未満のノルモゾル、１．４％未満のノルモゾル、１．５％未満のノルモゾル、１．６％未満のノルモゾル、１．７％未満のノルモゾル、１．８％未満のノルモゾル、１．９％未満のノルモゾル、２．０％未満のノルモゾル、２．１％未満のノルモゾル、２．２％未満のノルモゾル、２．３％未満のノルモゾル、２．４％未満のノルモゾル、２．５％未満のノルモゾル、２．６％未満のノルモゾル、２．７％未満のノルモゾル、２．８％未満のノルモゾル、２．９％未満のノルモゾル、３．０％未満のノルモゾル、３．１％未満のノルモゾル、３．２％未満のノルモゾル、３．３％未満のノルモゾル、３．４％未満のノルモゾル、３．５％未満のノルモゾル、３．６％未満のノルモゾル、３．７％未満のノルモゾル、３．８％未満のノルモゾル、３．９％未満のノルモゾル、４．０％未満のノルモゾル、４．１％未満のノルモゾル、４．２％未満のノルモゾル、４．３％未満のノルモゾル、４．４％未満のノルモゾル、４．５％未満のノルモゾル、４．６％未満のノルモゾル、４．７％未満のノルモゾル、４．８％未満のノルモゾル、４．９％未満のノルモゾル、５．０％未満のノルモゾル、５．１％未満のノルモゾル、５．２％未満のノルモゾル、５．３％未満のノルモゾル、５．４％未満のノルモゾル、５．５％未満のノルモゾル、５．６％未満のノルモゾル、５．７％未満のノルモゾル、５．８％未満のノルモゾル、５．９％未満のノルモゾル、６．０％未満のノルモゾル、６．１％未満のノルモゾル、６．２％未満のノルモゾル、６．３％未満のノルモゾル、６．４％未満のノルモゾル、６．５％未満のノルモゾル、６．６％未満のノルモゾル、６．７％未満のノルモゾル、６．８％未満のノルモゾル、６．９％未満のノルモゾル、７．０％未満のノルモゾル、７．１％未満のノルモゾル、７．２％未満のノルモゾル、７．３％未満のノルモゾル、７．４％未満のノルモゾル、７．５％未満のノルモゾル、７．６％未満のノルモゾル、７．７％未満のノルモゾル、７．８％未満のノルモゾル、７．９％未満のノルモゾル、８．０％未満のノルモゾル、８．１％未満のノルモゾル、８．２％未満のノルモゾル、８．３％未満のノルモゾル、８．４％未満のノルモゾル、８．５％未満のノルモゾル、８．６％未満のノルモゾル、８．７％未満のノルモゾル、８．８％未満のノルモゾル、８．９％未満のノルモゾル、９．０％未満のノルモゾル、９．１％未満のノルモゾル、９．２％未満のノルモゾル、９．３％未満のノルモゾル、９．４％未満のノルモゾル、９．５％未満のノルモゾル、９．６％未満のノルモゾル、９．７％未満のノルモゾル、９．８％未満のノルモゾル、９．９％未満のノルモゾル、１０％未満のノルモゾル、１０．５％未満のノルモゾル、１１％未満のノルモゾル、１１．５％未満のノルモゾル、１２％未満のノルモゾル、１２．５％未満のノルモゾル、１３％未満のノルモゾル、１３．５％未満のノルモゾル、１４％未満のノルモゾル、１４．５％未満のノルモゾル、１５％未満のノルモゾル、１５．５％未満のノルモゾル、１６％未満のノルモゾル、１６．５％未満のノルモゾル、１７％未満のノルモゾル、１７．５％未満のノルモゾル、１８％未満のノルモゾル、１８．５％未満のノルモゾル、１９％未満のノルモゾル、２０％未満のノルモゾル、２０．５％未満のノルモゾル、２１％未満のノルモゾル、２１．５％未満のノルモゾル、２２％未満のノルモゾル、２２．５％未満のノルモゾル、２３％未満のノルモゾル、２３．５％未満のノルモゾル、２４％未満のノルモゾル、２４．５％未満のノルモゾル、２５％未満のノルモゾル、２５．５％未満のノルモゾル、２６％未満のノルモゾル、２６．５％未満のノルモゾル、２７％未満のノルモゾル、２７．５％未満のノルモゾル、２８％未満のノルモゾル、２８．５％未満のノルモゾル、２９％未満のノルモゾル、２９．５％未満のノルモゾル、３０％未満のノルモゾル、４０％未満のノルモゾル、または５０％未満のノルモゾルでよい。
【０１００】
場合によっては、凍結保存媒体中のヘタスターチの濃度は、０．１％未満のヘタスターチ、０．２％未満のヘタスターチ、０．３％未満のヘタスターチ、０．４％未満のヘタスターチ、０．５％未満のヘタスターチ、０．６％未満のヘタスターチ、０．７％未満のヘタスターチ、０．８％未満のヘタスターチ、０．９％未満のヘタスターチ、１．０％未満のヘタスターチ、１．１％未満のヘタスターチ、１．２％未満のヘタスターチ、１．３％未満のヘタスターチ、１．４％未満のヘタスターチ、１．５％未満のヘタスターチ、１．６％未満のヘタスターチ、１．７％未満のヘタスターチ、１．８％未満のヘタスターチ、１．９％未満のヘタスターチ、２．０％未満のヘタスターチ、２．１％未満のヘタスターチ、２．２％未満のヘタスターチ、２．３％未満のヘタスターチ、２．４％未満のヘタスターチ、２．５％未満のヘタスターチ、２．６％未満のヘタスターチ、２．７％未満のヘタスターチ、２．８％未満のヘタスターチ、２．９％未満のヘタスターチ、３．０％未満のヘタスターチ、３．１％未満のヘタスターチ、３．２％未満のヘタスターチ、３．３％未満のヘタスターチ、３．４％未満のヘタスターチ、３．５％未満のヘタスターチ、３．６％未満のヘタスターチ、３．７％未満のヘタスターチ、３．８％未満のヘタスターチ、３．９％未満のヘタスターチ、４．０％未満のヘタスターチ、４．１％未満のヘタスターチ、４．２％未満のヘタスターチ、４．３％未満のヘタスターチ、４．４％未満のヘタスターチ、４．５％未満のヘタスターチ、４．６％未満のヘタスターチ、４．７％未満のヘタスターチ、４．８％未満のヘタスターチ、４．９％未満のヘタスターチ、５．０％未満のヘタスターチ、５．１％未満のヘタスターチ、５．２％未満のヘタスターチ、５．３％未満のヘタスターチ、５．４％未満のヘタスターチ、５．５％未満のヘタスターチ、５．６％未満のヘタスターチ、５．７％未満のヘタスターチ、５．８％未満のヘタスターチ、５．９％未満のヘタスターチ、６．０％未満のヘタスターチ、６．１％未満のヘタスターチ、６．２％未満のヘタスターチ、６．３％未満のヘタスターチ、６．４％未満のヘタスターチ、６．５％未満のヘタスターチ、６．６％未満のヘタスターチ、６．７％未満のヘタスターチ、６．８％未満のヘタスターチ、６．９％未満のヘタスターチ、７．０％未満のヘタスターチ、７．１％未満のヘタスターチ、７．２％未満のヘタスターチ、７．３％未満のヘタスターチ、７．４％未満のヘタスターチ、７．５％未満のヘタスターチ、７．６％未満のヘタスターチ、７．７％未満のヘタスターチ、７．８％未満のヘタスターチ、７．９％未満のヘタスターチ、８．０％未満のヘタスターチ、８．１％未満のヘタスターチ、８．２％未満のヘタスターチ、８．３％未満のヘタスターチ、８．４％未満のヘタスターチ、８．５％未満のヘタスターチ、８．６％未満のヘタスターチ、８．７％未満のヘタスターチ、８．８％未満のヘタスターチ、８．９％未満のヘタスターチ、９．０％未満のヘタスターチ、９．１％未満のヘタスターチ、９．２％未満のヘタスターチ、９．３％未満のヘタスターチ、９．４％未満のヘタスターチ、９．５％未満のヘタスターチ、９．６％未満のヘタスターチ、９．７％未満のヘタスターチ、９．８％未満のヘタスターチ、９．９％未満のヘタスターチ、１０％未満のヘタスターチ、１０．５％未満のヘタスターチ、１１％未満のヘタスターチ、１１．５％未満のヘタスターチ、１２％未満のヘタスターチ、１２．５％未満のヘタスターチ、１３％未満のヘタスターチ、１３．５％未満のヘタスターチ、１４％未満のヘタスターチ、１４．５％未満のヘタスターチ、１５％未満のヘタスターチ、１５．５％未満のヘタスターチ、１６％未満のヘタスターチ、１６．５％未満のヘタスターチ、１７％未満のヘタスターチ、１７．５％未満のヘタスターチ、１８％未満のヘタスターチ、１８．５％未満のヘタスターチ、１９％未満のヘタスターチ、２０％未満のヘタスターチ、２０．５％未満のヘタスターチ、２１％未満のヘタスターチ、２１．５％未満のヘタスターチ、２２％未満のヘタスターチ、２２．５％未満のヘタスターチ、２３％未満のヘタスターチ、２３．５％未満のヘタスターチ、２４％未満のヘタスターチ、２４．５％未満のヘタスターチ、２５％未満のヘタスターチ、２５．５％未満のヘタスターチ、２６％未満のヘタスターチ、２６．５％未満のヘタスターチ、２７％未満のヘタスターチ、２７．５％未満のヘタスターチ、２８％未満のヘタスターチ、２８．５％未満のヘタスターチ、２９％未満のヘタスターチ、２９．５％未満のヘタスターチ、３０％未満のヘタスターチ、４０％未満のヘタスターチ、または５０％未満のヘタスターチでよい。
【０１０１】
場合によっては、凍結保存媒体中のＨＳＡの濃度は、０．１％未満のＨＳＡ、０．２％未満のＨＳＡ、０．３％未満のＨＳＡ、０．４％未満のＨＳＡ、０．５％未満のＨＳＡ、０．６％未満のＨＳＡ、０．７％未満のＨＳＡ、０．８％未満のＨＳＡ、０．９％未満のＨＳＡ、１．０％未満のＨＳＡ、１．１％未満のＨＳＡ、１．２％未満のＨＳＡ、１．３％未満のＨＳＡ、１．４％未満のＨＳＡ、１．５％未満のＨＳＡ、１．６％未満のＨＳＡ、１．７％未満のＨＳＡ、１．８％未満のＨＳＡ、１．９％未満のＨＳＡ、２．０％未満のＨＳＡ、２．１％未満のＨＳＡ、２．２％未満のＨＳＡ、２．３％未満のＨＳＡ、２．４％未満のＨＳＡ、２．５％未満のＨＳＡ、２．６％未満のＨＳＡ、２．７％未満のＨＳＡ、２．８％未満のＨＳＡ、２．９％未満のＨＳＡ、３．０％未満のＨＳＡ、３．１％未満のＨＳＡ、３．２％未満のＨＳＡ、３．３％未満のＨＳＡ、３．４％未満のＨＳＡ、３．５％未満のＨＳＡ、３．６％未満のＨＳＡ、３．７％未満のＨＳＡ、３．８％未満のＨＳＡ、３．９％未満のＨＳＡ、４．０％未満のＨＳＡ、４．１％未満のＨＳＡ、４．２％未満のＨＳＡ、４．３％未満のＨＳＡ、４．４％未満のＨＳＡ、４．５％未満のＨＳＡ、４．６％未満のＨＳＡ、４．７％未満のＨＳＡ、４．８％未満のＨＳＡ、４．９％未満のＨＳＡ、５．０％未満のＨＳＡ、５．１％未満のＨＳＡ、５．２％未満のＨＳＡ、５．３％未満のＨＳＡ、５．４％未満のＨＳＡ、５．５％未満のＨＳＡ、５．６％未満のＨＳＡ、５．７％未満のＨＳＡ、５．８％未満のＨＳＡ、５．９％未満のＨＳＡ、６．０％未満のＨＳＡ、６．１％未満のＨＳＡ、６．２％未満のＨＳＡ、６．３％未満のＨＳＡ、６．４％未満のＨＳＡ、６．５％未満のＨＳＡ、６．６％未満のＨＳＡ、６．７％未満のＨＳＡ、６．８％未満のＨＳＡ、６．９％未満のＨＳＡ、７．０％未満のＨＳＡ、７．１％未満のＨＳＡ、７．２％未満のＨＳＡ、７．３％未満のＨＳＡ、７．４％未満のＨＳＡ、７．５％未満のＨＳＡ、７．６％未満のＨＳＡ、７．７％未満のＨＳＡ、７．８％未満のＨＳＡ、７．９％未満のＨＳＡ、８．０％未満のＨＳＡ、８．１％未満のＨＳＡ、８．２％未満のＨＳＡ、８．３％未満のＨＳＡ、８．４％未満のＨＳＡ、８．５％未満のＨＳＡ、８．６％未満のＨＳＡ、８．７％未満のＨＳＡ、８．８％未満のＨＳＡ、８．９％未満のＨＳＡ、９．０％未満のＨＳＡ、９．１％未満のＨＳＡ、９．２％未満のＨＳＡ、９．３％未満のＨＳＡ、９．４％未満のＨＳＡ、９．５％未満のＨＳＡ、９．６％未満のＨＳＡ、９．７％未満のＨＳＡ、９．８％未満のＨＳＡ、９．９％未満のＨＳＡ、１０％未満のＨＳＡ、１０．５％未満のＨＳＡ、１１％未満のＨＳＡ、１１．５％未満のＨＳＡ、１２％未満のＨＳＡ、１２．５％未満のＨＳＡ、１３％未満のＨＳＡ、１３．５％未満のＨＳＡ、１４％未満のＨＳＡ、１４．５％未満のＨＳＡ、１５％未満のＨＳＡ、１５．５％未満のＨＳＡ、１６％未満のＨＳＡ、１６．５％未満のＨＳＡ、１７％未満のＨＳＡ、１７．５％未満のＨＳＡ、１８％未満のＨＳＡ、１８．５％未満のＨＳＡ、１９％未満のＨＳＡ、２０％未満のＨＳＡ、２０．５％未満のＨＳＡ、２１％未満のＨＳＡ、２１．５％未満のＨＳＡ、２２％未満のＨＳＡ、２２．５％未満のＨＳＡ、２３％未満のＨＳＡ、２３．５％未満のＨＳＡ、２４％未満のＨＳＡ、２４．５％未満のＨＳＡ、２５％未満のＨＳＡ、２５．５％未満のＨＳＡ、２６％未満のＨＳＡ、２６．５％未満のＨＳＡ、２７％未満のＨＳＡ、２７．５％未満のＨＳＡ、２８％未満のＨＳＡ、２８．５％未満のＨＳＡ、２９％未満のＨＳＡ、２９．５％未満のＨＳＡ、３０％未満のＨＳＡ、４０％未満のＨＳＡ、または５０％未満のＨＳＡでよい。
【０１０２】
場合によっては、凍結保存媒体は、本明細書に記載の方法に従って及び該方法と共に使用するための造血細胞を凍結するために、他の成分を含んでよい。
【０１０３】
本明細書に記載の方法のために、造血細胞は、固形臓器ドナーから単離後または単離及び精製後に凍結され得る（例えば、凍結保存され得る）。場合によっては、造血細胞は、当業者に公知の凍結保存媒体及び凍結保存方法を用いて凍結保存され得る。場合によっては、造血細胞は、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ウシ胎児血清（ＦＣＳ）及びＲＰＭＩ媒体を含む凍結保存媒体を用いて凍結保存され得る。
【０１０４】
場合によっては、凍結保存媒体中のＤＭＳＯの濃度は、０．１％未満のＤＭＳＯ、０．２％未満のＤＭＳＯ、０．３％未満のＤＭＳＯ、０．４％未満のＤＭＳＯ、０．５％未満のＤＭＳＯ、０．６％未満のＤＭＳＯ、０．７％未満のＤＭＳＯ、０．８％未満のＤＭＳＯ、０．９％未満のＤＭＳＯ、１．０％未満のＤＭＳＯ、１．１％未満のＤＭＳＯ、１．２％未満のＤＭＳＯ、１．３％未満のＤＭＳＯ、１．４％未満のＤＭＳＯ、１．５％未満のＤＭＳＯ、１．６％未満のＤＭＳＯ、１．７％未満のＤＭＳＯ、１．８％未満のＤＭＳＯ、１．９％未満のＤＭＳＯ、２．０％未満のＤＭＳＯ、２．１％未満のＤＭＳＯ、２．２％未満のＤＭＳＯ、２．３％未満のＤＭＳＯ、２．４％未満のＤＭＳＯ、２．５％未満のＤＭＳＯ、２．６％未満のＤＭＳＯ、２．７％未満のＤＭＳＯ、２．８％未満のＤＭＳＯ、２．９％未満のＤＭＳＯ、３．０％未満のＤＭＳＯ、３．１％未満のＤＭＳＯ、３．２％未満のＤＭＳＯ、３．３％未満のＤＭＳＯ、３．４％未満のＤＭＳＯ、３．５％未満のＤＭＳＯ、３．６％未満のＤＭＳＯ、３．７％未満のＤＭＳＯ、３．８％未満のＤＭＳＯ、３．９％未満のＤＭＳＯ、４．０％未満のＤＭＳＯ、４．１％未満のＤＭＳＯ、４．２％未満のＤＭＳＯ、４．３％未満のＤＭＳＯ、４．４％未満のＤＭＳＯ、４．５％未満のＤＭＳＯ、４．６％未満のＤＭＳＯ、４．７％未満のＤＭＳＯ、４．８％未満のＤＭＳＯ、４．９％未満のＤＭＳＯ、５．０％未満のＤＭＳＯ、５．１％未満のＤＭＳＯ、５．２％未満のＤＭＳＯ、５．３％未満のＤＭＳＯ、５．４％未満のＤＭＳＯ、５．５％未満のＤＭＳＯ、５．６％未満のＤＭＳＯ、５．７％未満のＤＭＳＯ、５．８％未満のＤＭＳＯ、５．９％未満のＤＭＳＯ、６．０％未満のＤＭＳＯ、６．１％未満のＤＭＳＯ、６．２％未満のＤＭＳＯ、６．３％未満のＤＭＳＯ、６．４％未満のＤＭＳＯ、６．５％未満のＤＭＳＯ、６．６％未満のＤＭＳＯ、６．７％未満のＤＭＳＯ、６．８％未満のＤＭＳＯ、６．９％未満のＤＭＳＯ、７．０％未満のＤＭＳＯ、７．１％未満のＤＭＳＯ、７．２％未満のＤＭＳＯ、７．３％未満のＤＭＳＯ、７．４％未満のＤＭＳＯ、７．５％未満のＤＭＳＯ、７．６％未満のＤＭＳＯ、７．７％未満のＤＭＳＯ、７．８％未満のＤＭＳＯ、７．９％未満のＤＭＳＯ、８．０％未満のＤＭＳＯ、８．１％未満のＤＭＳＯ、８．２％未満のＤＭＳＯ、８．３％未満のＤＭＳＯ、８．４％未満のＤＭＳＯ、８．５％未満のＤＭＳＯ、８．６％未満のＤＭＳＯ、８．７％未満のＤＭＳＯ、８．８％未満のＤＭＳＯ、８．９％未満のＤＭＳＯ、９．０％未満のＤＭＳＯ、９．１％未満のＤＭＳＯ、９．２％未満のＤＭＳＯ、９．３％未満のＤＭＳＯ、９．４％未満のＤＭＳＯ、９．５％未満のＤＭＳＯ、９．６％未満のＤＭＳＯ、９．７％未満のＤＭＳＯ、９．８％未満のＤＭＳＯ、９．９％未満のＤＭＳＯ、１０％未満のＤＭＳＯ、１０．５％未満のＤＭＳＯ、１１％未満のＤＭＳＯ、１１．５％未満のＤＭＳＯ、１２％未満のＤＭＳＯ、１２．５％未満のＤＭＳＯ、１３％未満のＤＭＳＯ、１３．５％未満のＤＭＳＯ、１４％未満のＤＭＳＯ、１４．５％未満のＤＭＳＯ、１５％未満のＤＭＳＯ、１５．５％未満のＤＭＳＯ、１６％未満のＤＭＳＯ、１６．５％未満のＤＭＳＯ、１７％未満のＤＭＳＯ、１７．５％未満のＤＭＳＯ、１８％未満のＤＭＳＯ、１８．５％未満のＤＭＳＯ、１９％未満のＤＭＳＯ、２０％未満のＤＭＳＯ、２０．５％未満のＤＭＳＯ、２１％未満のＤＭＳＯ、２１．５％未満のＤＭＳＯ、２２％未満のＤＭＳＯ、２２．５％未満のＤＭＳＯ、２３％未満のＤＭＳＯ、２３．５％未満のＤＭＳＯ、２４％未満のＤＭＳＯ、２４．５％未満のＤＭＳＯ、２５％未満のＤＭＳＯ、２５．５％未満のＤＭＳＯ、２６％未満のＤＭＳＯ、２６．５％未満のＤＭＳＯ、２７％未満のＤＭＳＯ、２７．５％未満のＤＭＳＯ、２８％未満のＤＭＳＯ、２８．５％未満のＤＭＳＯ、２９％未満のＤＭＳＯ、２９．５％未満のＤＭＳＯ、３０％未満のＤＭＳＯ、４０％未満のＤＭＳＯ、または５０％未満のＤＭＳＯであってよい。
【０１０５】
場合によっては、凍結保存媒体中のＦＣＳの濃度は、１．０％超ＦＣＳ、２．０％超ＦＣＳ、３．０％超ＦＣＳ、４．０％超ＦＣＳ、５．０％超ＦＣＳ、６．０％超ＦＣＳ、７．０％超ＦＣＳ、８．０％超ＦＣＳ、９．０％超ＦＣＳ、１０％超ＦＣＳ、１０．５％超ＦＣＳ、１１％超ＦＣＳ、１１．５％超ＦＣＳ、１２％超ＦＣＳ、１２．５％超ＦＣＳ、１３％超ＦＣＳ、１３．５％超ＦＣＳ、１４％超ＦＣＳ、１４．５％超ＦＣＳ、１５％超ＦＣＳ、１５．５％超ＦＣＳ、１６％超ＦＣＳ、１６．５％超ＦＣＳ、１７％超ＦＣＳ、１７．５％超ＦＣＳ、１８％超ＦＣＳ、１８．５％超ＦＣＳ、１９％超ＦＣＳ、２０％超ＦＣＳ、２０．５％超ＦＣＳ、２１％超ＦＣＳ、２１．５％超ＦＣＳ、２２％超ＦＣＳ、２２．５％超ＦＣＳ、２３％超ＦＣＳ、２３．５％超ＦＣＳ、２４％超ＦＣＳ、２４．５％超ＦＣＳ、２５％超ＦＣＳ、２５．５％超ＦＣＳ、２６％超ＦＣＳ、２６．５％超ＦＣＳ、２７％超ＦＣＳ、２７．５％超ＦＣＳ、２８％超ＦＣＳ、２８．５％超ＦＣＳ、２９％超ＦＣＳ、２９．５％超ＦＣＳ、３０％超ＦＣＳ、３０．５％超ＦＣＳ、３１％超ＦＣＳ、３１．５％超ＦＣＳ、３２％超ＦＣＳ、３２．５％超ＦＣＳ、３３％超ＦＣＳ、３３．５％超ＦＣＳ、３４％超ＦＣＳ、３４．５％超ＦＣＳ、３５％超ＦＣＳ、３５．５％超ＦＣＳ、３６％超ＦＣＳ、３６．５％超ＦＣＳ、３７％超ＦＣＳ、３７．５％超ＦＣＳ、３８％超ＦＣＳ、３８．５％超ＦＣＳ、３９％超ＦＣＳ、４０％超ＦＣＳ、４０．５％超ＦＣＳ、４１％超ＦＣＳ、４１．５％超ＦＣＳ、４２％超ＦＣＳ、４２．５％超ＦＣＳ、４３％超ＦＣＳ、４３．５％超ＦＣＳ、４４％超ＦＣＳ、４４．５％超ＦＣＳ、４５％超ＦＣＳ、４５．５％超ＦＣＳ、４６％超ＦＣＳ、４６．５％超ＦＣＳ、４７％超ＦＣＳ、４７．５％超ＦＣＳ、４８％超ＦＣＳ、４８．５％超ＦＣＳ、４９％超ＦＣＳ、５０％超ＦＣＳ、５０．５％超ＦＣＳ、５１％超ＦＣＳ、５１．５％超ＦＣＳ、５２％超ＦＣＳ、５２．５％超ＦＣＳ、５３％超ＦＣＳ、５３．５％超ＦＣＳ、５４％超ＦＣＳ、５４．５％超ＦＣＳ、５５％超ＦＣＳ、５５．５％超ＦＣＳ、５６％超ＦＣＳ、５６．５％超ＦＣＳ、５７％超ＦＣＳ、５７．５％超ＦＣＳ、５８％超ＦＣＳ、５８．５％超ＦＣＳ、５９％超ＦＣＳ、６０％超ＦＣＳ、６０．５％超ＦＣＳ、６１％超ＦＣＳ、６１．５％超ＦＣＳ、６２％超ＦＣＳ、６２．５％超ＦＣＳ、６３％超ＦＣＳ、６３．５％超ＦＣＳ、６４％超ＦＣＳ、６４．５％超ＦＣＳ、６５％超ＦＣＳ、６５．５％超ＦＣＳ、６６％超ＦＣＳ、６６．５％超ＦＣＳ、６７％超ＦＣＳ、６７．５％超ＦＣＳ、６８％超ＦＣＳ、６８．５％超ＦＣＳ、６９％超ＦＣＳ、７０％超ＦＣＳ、７０．５％超ＦＣＳ、７１％超ＦＣＳ、７１．５％超ＦＣＳ、７２％超ＦＣＳ、７２．５％超ＦＣＳ、７３％超ＦＣＳ、７３．５％超ＦＣＳ、７４％超ＦＣＳ、７４．５％超ＦＣＳ、７５％超ＦＣＳ、７５．５％超ＦＣＳ、７６％超ＦＣＳ、７６．５％超ＦＣＳ、７７％超ＦＣＳ、７７．５％超ＦＣＳ、７８％超ＦＣＳ、７８．５％超ＦＣＳ、７９％超ＦＣＳ、または８０％超ＦＣＳでよい。
【０１０６】
場合によっては、凍結保存媒体中のＲＰＭＩ濃度は、１．０％超ＲＰＭＩ、２．０％超ＲＰＭＩ、３．０％超ＲＰＭＩ、４．０％超ＲＰＭＩ、５．０％超ＲＰＭＩ、６．０％超ＲＰＭＩ、７．０％超ＲＰＭＩ、８．０％超ＲＰＭＩ、９．０％超ＲＰＭＩ、１０％超ＲＰＭＩ、１０．５％超ＲＰＭＩ、１１％超ＲＰＭＩ、１１．５％超ＲＰＭＩ、１２％超ＲＰＭＩ、１２．５％超ＲＰＭＩ、１３％超ＲＰＭＩ、１３．５％超ＲＰＭＩ、１４％超ＲＰＭＩ、１４．５％超ＲＰＭＩ、１５％超ＲＰＭＩ、１５．５％超ＲＰＭＩ、１６％超ＲＰＭＩ、１６．５％超ＲＰＭＩ、１７％超ＲＰＭＩ、１７．５％超ＲＰＭＩ、１８％超ＲＰＭＩ、１８．５％超ＲＰＭＩ、１９％超ＲＰＭＩ、２０％超ＲＰＭＩ、２０．５％超ＲＰＭＩ、２１％超ＲＰＭＩ、２１．５％超ＲＰＭＩ、２２％超ＲＰＭＩ、２２．５％超ＲＰＭＩ、２３％超ＲＰＭＩ、２３．５％超ＲＰＭＩ、２４％超ＲＰＭＩ、２４．５％超ＲＰＭＩ、２５％超ＲＰＭＩ、２５．５％超ＲＰＭＩ、２６％超ＲＰＭＩ、２６．５％超ＲＰＭＩ、２７％超ＲＰＭＩ、２７．５％超ＲＰＭＩ、２８％超ＲＰＭＩ、２８．５％超ＲＰＭＩ、２９％超ＲＰＭＩ、２９．５％超ＲＰＭＩ、３０％超ＲＰＭＩ、３０．５％超ＲＰＭＩ、３１％超ＲＰＭＩ、３１．５％超ＲＰＭＩ、３２％超ＲＰＭＩ、３２．５％超ＲＰＭＩ、３３％超ＲＰＭＩ、３３．５％超ＲＰＭＩ、３４％超ＲＰＭＩ、３４．５％超ＲＰＭＩ、３５％超ＲＰＭＩ、３５．５％超ＲＰＭＩ、３６％超ＲＰＭＩ、３６．５％超ＲＰＭＩ、３７％超ＲＰＭＩ、３７．５％超ＲＰＭＩ、３８％超ＲＰＭＩ、３８．５％超ＲＰＭＩ、３９％超ＲＰＭＩ、４０％超ＲＰＭＩ、４０．５％超ＲＰＭＩ、４１％超ＲＰＭＩ、４１．５％超ＲＰＭＩ、４２％超ＲＰＭＩ、４２．５％超ＲＰＭＩ、４３％超ＲＰＭＩ、４３．５％超ＲＰＭＩ、４４％超ＲＰＭＩ、４４．５％超ＲＰＭＩ、４５％超ＲＰＭＩ、４５．５％超ＲＰＭＩ、４６％超ＲＰＭＩ、４６．５％超ＲＰＭＩ、４７％超ＲＰＭＩ、４７．５％超ＲＰＭＩ、４８％超ＲＰＭＩ、４８．５％超ＲＰＭＩ、４９％超ＲＰＭＩ、５０％超ＲＰＭＩ、５０．５％超ＲＰＭＩ、５１％超ＲＰＭＩ、５１．５％超ＲＰＭＩ、５２％超ＲＰＭＩ、５２．５％超ＲＰＭＩ、５３％超ＲＰＭＩ、５３．５％超ＲＰＭＩ、５４％超ＲＰＭＩ、５４．５％超ＲＰＭＩ、５５％超ＲＰＭＩ、５５．５％超ＲＰＭＩ、５６％超ＲＰＭＩ、５６．５％超ＲＰＭＩ、５７％超ＲＰＭＩ、５７．５％超ＲＰＭＩ、５８％超ＲＰＭＩ、５８．５％超ＲＰＭＩ、５９％超ＲＰＭＩ、６０％超ＲＰＭＩ、６０．５％超ＲＰＭＩ、６１％超ＲＰＭＩ、６１．５％超ＲＰＭＩ、６２％超ＲＰＭＩ、６２．５％超ＲＰＭＩ、６３％超ＲＰＭＩ、６３．５％超ＲＰＭＩ、６４％超ＲＰＭＩ、６４．５％超ＲＰＭＩ、６５％超ＲＰＭＩ、６５．５％超ＲＰＭＩ、６６％超ＲＰＭＩ、６６．５％超ＲＰＭＩ、６７％超ＲＰＭＩ、６７．５％超ＲＰＭＩ、６８％超ＲＰＭＩ、６８．５％超ＲＰＭＩ、６９％超ＲＰＭＩ、７０％超ＲＰＭＩ、７０．５％超ＲＰＭＩ、７１％超ＲＰＭＩ、７１．５％超ＲＰＭＩ、７２％超ＲＰＭＩ、７２．５％超ＲＰＭＩ、７３％超ＲＰＭＩ、７３．５％超ＲＰＭＩ、７４％超ＲＰＭＩ、７４．５％超ＲＰＭＩ、７５％超ＲＰＭＩ、７５．５％超ＲＰＭＩ、７６％超ＲＰＭＩ、７６．５％超ＲＰＭＩ、７７％超ＲＰＭＩ、７７．５％超ＲＰＭＩ、７８％超ＲＰＭＩ、７８．５％超ＲＰＭＩ、７９％超ＲＰＭＩ、または８０％超ＲＰＭＩでよい。
【０１０７】
場合によっては、凍結保存媒体は、本明細書に記載の方法に従って及び該方法と共に使用するための、造血細胞を凍結保存するために他の成分を含んでよい。
【０１０８】
造血細胞の凍結保存は、凍結保存媒体中に一度含まれた細胞を制御した速度で凍結する（ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  ｒａｔｅ  ｆｒｅｅｚｉｎｇ）方法を含む。場合によっては、制御した速度での凍結の速度及び温度をコントロールするためのコンピュータを備えた低温フリーザーが、造血細胞の凍結保存を行うために使用され得る。例えば、造血細胞は、６．５℃またはそれ未満のチャンバー温度を備えた低温フリーザーに置かれる。コンピュータは、低温フリーザーが少なくとも−１３０℃またはそれ未満の温度に到達するように、造血細胞が本明細書に記載の方法に従った方法で保存されるように、制御された速度での凍結の速度及び温度をコントロールし得る。場合によっては、低温フリーザーは、造血細胞が保存されるフリーザーの温度をコントロールするために液体窒素を使用する。
【０１０９】
場合によっては、造血細胞は、レシピエントへの送達の前に低温フリーザーで凍結保存され得る。場合によっては、造血細胞は、１日未満、２日未満、３日未満、４日未満、５日未満、６日未満、７日未満、８日未満、９日未満、１０日未満、１１日未満、１２日未満、１３日未満、１４日未満、１５日未満、１６日未満、１７日未満、１８日未満、１９日未満、２０日未満、２１日未満、２２日未満、２３日未満、２４日未満、２５日未満、２６日未満、２７日未満、２８日未満、２９日未満、３０日未満、３１日未満、３２日未満、３３日未満、３４日未満、３５日未満、３６日未満、３７日未満、３８日未満、３９日未満、４０日未満、４１日未満、４２日未満、４３日未満、４４日未満、４５日未満、４６日未満、４７日未満、４８日未満、４９日未満、５０日未満、５１日未満、５２日未満、５３日未満、５４日未満、５５日未満、５６日未満、５７日未満、５８日未満、５９日未満、または６０日未満の間、凍結保存され得る。
【０１１０】
場合によっては、造血細胞は、１ヶ月未満、２ヶ月未満、３ヶ月未満、４ヶ月未満、５ヶ月未満、６ヶ月未満、７ヶ月未満、８ヶ月未満、９ヶ月未満、１０ヶ月未満、１１ヶ月未満、１２ヶ月未満、１３ヶ月未満、１４ヶ月未満、１５ヶ月未満、１６ヶ月未満、１７ヶ月未満、１８ヶ月未満、１９ヶ月未満、２０ヶ月未満、２１ヶ月未満、２２ヶ月未満、２３ヶ月未満、２４ヶ月未満、２５ヶ月未満、２６ヶ月未満、２７ヶ月未満、２８ヶ月未満、２９ヶ月未満、３０ヶ月未満、３１ヶ月未満、３２ヶ月未満、３３ヶ月未満、３４ヶ月未満、３５ヶ月未満、３６ヶ月未満、３７ヶ月未満、３８ヶ月未満、３９ヶ月未満、４０ヶ月未満、４１ヶ月未満、４２ヶ月未満、４３ヶ月未満、４４ヶ月未満、４５ヶ月未満、４６ヶ月未満、４７ヶ月未満、４８ヶ月未満、４９ヶ月未満、５０ヶ月未満、５１ヶ月未満、５２ヶ月未満、５３ヶ月未満、５４ヶ月未満、５５ヶ月未満、５６ヶ月未満、５７ヶ月未満、５８ヶ月未満、５９ヶ月未満、または６０ヶ月未満の間、凍結保存され得る。
【０１１１】
場合によっては、造血細胞は、１年未満、２年未満、３年未満、４年未満、５年未満、６年未満、７年未満、８年未満、９年未満、１０年未満、１１未満、１２年未満、１３年未満、１４年未満、１５年未満、１６年未満、１７年未満、１８年未満、１９年未満、２０年未満、２１年未満、２２年未満、２３年未満、２４年未満、２５年未満、２６年未満、２７年未満、２８年未満、２９年未満、３０年未満、３１年未満、３２年未満、３３年未満、３４年未満、３５年未満、３６年未満、３７年未満、３８年未満、３９年未満、４０年未満、４１年未満、４２年未満、４３年未満、４４年未満、４５年未満、４６年未満、４７年未満、４８年未満、４９年未満、５０年未満、５１年未満、５２年未満、５３年未満、５４年未満、５５年未満、５６年未満、５７年未満、５８年未満、５９年未満、または６０年未満の間、凍結保存され得る。
【０１１２】
場合によっては、造血細胞は、１日超、２日超、３日超、４日超、５日超、６日超、７日超、８日超、９日超、１０日超、１１日超、１２日超、１３日超、１４日超、１５日超、１６日超、１７日超、１８日超、１９日超、２０日超、２１日超、２２日超、２３日超、２４日超、２５日超、２６日超、２７日超、２８日超、２９日超、３０日超、３１日超、３２日超、３３日超、３４日超、３５日超、３６日超、３７日超、３８日超、３９日超、４０日超、４１日超、４２日超、４３日超、４４日超、４５日超、４６日超、４７日超、４８日超、４９日超、５０日超、５１日超、５２日超、５３日超、５４日超、５５日超、５６日超、５７日超、５８日超、５９日超、または６０日超の間、凍結保存され得る。
【０１１３】
場合によっては、造血細胞は、１ヶ月超、２ヶ月超、３ヶ月超、４ヶ月超、５ヶ月超、６ヶ月超、７ヶ月超、８ヶ月超、９ヶ月超、１０ヶ月超、１１ヶ月超、１２ヶ月超、１３ヶ月超、１４ヶ月超、１５ヶ月超、１６ヶ月超、１７ヶ月超、１８ヶ月超、１９ヶ月超、２０ヶ月超、２１ヶ月超、２２ヶ月超、２３ヶ月超、２４ヶ月超、２５ヶ月超、２６ヶ月超、２７ヶ月超、２８ヶ月超、２９ヶ月超、３０ヶ月超、３１ヶ月超、３２ヶ月超、３３ヶ月超、３４ヶ月超、３５ヶ月超、３６ヶ月超、３７ヶ月超、３８ヶ月超、３９ヶ月超、４０ヶ月超、４１ヶ月超、４２ヶ月超、４３ヶ月超、４４ヶ月超、４５ヶ月超、４６ヶ月超、４７ヶ月超、４８ヶ月超、４９ヶ月超、５０ヶ月超、５１ヶ月超、５２ヶ月超、５３ヶ月超、５４ヶ月超、５５ヶ月超、５６ヶ月超、５７ヶ月超、５８ヶ月超、５９ヶ月超、または６０ヶ月超の間、凍結保存され得る。
【０１１４】
場合によっては、造血細胞は、１年超、２年超、３年超、４年超、５年超、６年超、７年超、８年超、９年超、１０年超、１１年超、１２年超、１３年超、１４年超、１５年超、１６年超、１７年超、１８年超、１９年超、２０年超、２１年超、２２年超、２３年超、２４年超、２５年超、２６年超、２７年超、２８年超、２９年超、３０年超、３１年超、３２年超、３３年超、３４年超、３５年超、３６年超、３７年超、３８年超、３９年超、４０年超、４１年超、４２年超、４３年超、４４年超、４５年超、４６年超、４７年超、４８年超、４９年超、５０年超、５１年超、５２年超、５３年超、５４年超、５５年超、５６年超、５７年超、５８年超、５９年超、または６０年超の間、凍結保存され得る。
【０１１５】
場合によっては、凍結保存は、レシピエントへの注入前に造血細胞の解凍時に決定される、造血細胞死をもたらすことがある。当業者に公知である細胞死を決定する慣用的方法（例えば、トリパンブルー染色、フローサイトメトリー等）を用いて、凍結保存された造血細胞のバッチの死細胞の割合が決定され得る。場合によっては、凍結保存された細胞を解凍した後に、０．１％未満の死細胞、０．２％未満の死細胞、０．３％未満の死細胞、０．４％未満の死細胞、０．５％未満の死細胞、０．６％未満の死細胞、０．７％未満の死細胞、０．８％未満の死細胞、０．９％未満の死細胞、１．０％未満の死細胞、１．１％未満の死細胞、１．２％未満の死細胞、１．３％未満の死細胞、１．４％未満の死細胞、１．５％未満の死細胞、１．６％未満の死細胞、１．７％未満の死細胞、１．８％未満の死細胞、１．９％未満の死細胞、２．０％未満の死細胞、２．１％未満の死細胞、２．２％未満の死細胞、２．３％未満の死細胞、２．４％未満の死細胞、２．５％未満の死細胞、２．６％未満の死細胞、２．７％未満の死細胞、２．８％未満の死細胞、２．９％未満の死細胞、３．０％未満の死細胞、３．１％未満の死細胞、３．２％未満の死細胞、３．３％未満の死細胞、３．４％未満の死細胞、３．５％未満の死細胞、３．６％未満の死細胞、３．７％未満の死細胞、３．８％未満の死細胞、３．９％未満の死細胞、４．０％未満の死細胞、４．１％未満の死細胞、４．２％未満の死細胞、４．３％未満の死細胞、４．４％未満の死細胞、４．５％未満の死細胞、４．６％未満の死細胞、４．７％未満の死細胞、４．８％未満の死細胞、４．９％未満の死細胞、５．０％未満の死細胞、５．１％未満の死細胞、５．２％未満の死細胞、５．３％未満の死細胞、５．４％未満の死細胞、５．５％未満の死細胞、５．６％未満の死細胞、５．７％未満の死細胞、５．８％未満の死細胞、５．９％未満の死細胞、６．０％未満の死細胞、６．１％未満の死細胞、６．２％未満の死細胞、６．３％未満の死細胞、６．４％未満の死細胞、６．５％未満の死細胞、６．６％未満の死細胞、６．７％未満の死細胞、６．８％未満の死細胞、６．９％未満の死細胞、７．０％未満の死細胞、７．１％未満の死細胞、７．２％未満の死細胞、７．３％未満の死細胞、７．４％未満の死細胞、７．５％未満の死細胞、７．６％未満の死細胞、７．７％未満の死細胞、７．８％未満の死細胞、７．９％未満の死細胞、８．０％未満の死細胞、８．１％未満の死細胞、８．２％未満の死細胞、８．３％未満の死細胞、８．４％未満の死細胞、８．５％未満の死細胞、８．６％未満の死細胞、８．７％未満の死細胞、８．８％未満の死細胞、８．９％未満の死細胞、９．０％未満の死細胞、９．１％未満の死細胞、９．２％未満の死細胞、９．３％未満の死細胞、９．４％未満の死細胞、９．５％未満の死細胞、９．６％未満の死細胞、９．７％未満の死細胞、９．８％未満の死細胞、９．９％未満の死細胞、１０％未満の死細胞、１０．５％未満の死細胞、１１％未満の死細胞、１１．５％未満の死細胞、１２％未満の死細胞、１２．５％未満の死細胞、１３％未満の死細胞、１３．５％未満の死細胞、１４％未満の死細胞、１４．５％未満の死細胞、１５％未満の死細胞、１５．５％未満の死細胞、１６％未満の死細胞、１６．５％未満の死細胞、１７％未満の死細胞、１７．５％未満の死細胞、１８％未満の死細胞、１８．５％未満の死細胞、１９％未満の死細胞、２０％未満の死細胞、２０．５％未満の死細胞、２１％未満の死細胞、２１．５％未満の死細胞、２２％未満の死細胞、２２．５％未満の死細胞、２３％未満の死細胞、２３．５％未満の死細胞、２４％未満の死細胞、２４．５％未満の死細胞、２５％未満の死細胞、２５．５％未満の死細胞、２６％未満の死細胞、２６．５％未満の死細胞、２７％未満の死細胞、２７．５％未満の死細胞、２８％未満の死細胞、２８．５％未満の死細胞、２９％未満の死細胞、２９．５％未満の死細胞、３０％未満の死細胞、４０％未満の死細胞、または５０％未満の死細胞がある。
【０１１６】
造血幹細胞の単離及び精製
本明細書に記載の方法について、造血幹細胞は、骨髄、末梢血、または臍帯血から得られ得る。場合によっては、造血細幹細胞はドナーとレシピエントとの間でＨＬＡ−適合でよい。場合によっては、造血細幹細胞はドナーとレシピエントとの間でＨＬＡ−非適合でよい。
【０１１７】
場合によっては、細胞の特定の種類は、造血幹細胞から単離及び精製され得る。場合によっては、造血幹細胞から単離及び精製され得る細胞は、ＣＤ３４+ 細胞及びＣＤ３+ 細胞である。場合によっては、ＣＤ３４+ 細胞及びＣＤ３+細胞は、造血幹細胞の同一の分画から単離され得る。場合によっては、ＣＤ３４+ 細胞及びＣＤ３+細胞は、造血幹細胞の異なる分画から単離され得る。場合によっては、ＣＤ３４+ 細胞は前駆細胞である。場合によっては、ＣＤ３+ 細胞はＴ細胞である。
【０１１８】
場合によっては、ＣＤ３４+ 細胞は、ドナー造血細胞から単離及び精製される。例えば、ＣＤ３４+ 細胞は、好適なＣＤ３４親和性試薬を選択的に結合することによってドナー造血細胞から単離及び精製され得る。場合によっては、ＣＤ３４親和性試薬は、抗体、完全長抗体、抗体のフラグメント、天然の抗体、合成抗体、遺伝子組み換え抗体、完全長アフィボディ、アフィボディのフラグメント、完全長アフィリン、アフィリンのフラグメント、完全長アンチカリン、アンチカリンのフラグメント、完全長アビメル、アビメルのフラグメント、完全長ＤＡＲＰｉｎ、ＤＡＲＰｉｎのフラグメント、完全長フィノマー、フィノマーのフラグメント、完全長クニッツドメインペプチド、クニッツドメインペプチドのフラグメント、完全長モノボディー、モノボディーのフラグメント、ぺプチド、ポリアミノ酸等でよい。
【０１１９】
場合によっては、親和性試薬は検出試薬及び／または精製試薬に直接に複合化される。場合によっては、検出試薬及び精製試薬は同一である。場合によっては、検出試薬及び精製試薬は異なる。例えば、検出試薬及び精製試薬は、蛍光、磁性等である。場合によっては、検出及び／または精製試薬は、カラム精製用の磁性粒子である。例えば、磁性カラム精製は、当業者に公知のカラム、抗体、緩衝液、調製物質及び試薬等のミルテニー（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ）装置を用いて行われる。
【０１２０】
場合によっては、磁性粒子を用いて単離及び精製されたＣＤ３４+ 細胞は、鉄を含んでよい。単離及び精製されたＣＤ３４+ 細胞中の鉄含量は、単離及び精製前のＣＤ３４+ 細胞中の鉄含量よりも磁性粒子を用いる単離及び精製後に高いことがある。例えば、単離及び精製されたＣＤ３４+ 細胞は、５００ｐｇ未満の鉄／細胞、４５０ｐｇ未満の鉄／細胞、４００ｐｇ未満の鉄／細胞、３５０ｐｇ未満の鉄／細胞、３００ｐｇ未満の鉄／細胞、２５０ｐｇ未満の鉄／細胞、２２５ｐｇ未満の鉄／細胞、２００ｐｇ未満の鉄／細胞、１９０ｐｇ未満の鉄／細胞、１８０ｐｇ未満の鉄／細胞、１７０ｐｇ未満の鉄／細胞、１６０ｐｇ未満の鉄／細胞、１５０ｐｇ未満の鉄／細胞、１４０ｐｇ未満の鉄／細胞、１３０ｐｇ未満の鉄／細胞、１２０ｐｇ未満の鉄／細胞、１１０ｐｇ未満の鉄／細胞、１０９ｐｇ未満の鉄／細胞、１０８ｐｇ未満の鉄／細胞、１０７ｐｇ未満の鉄／細胞、１０６ｐｇ未満の鉄／細胞、１０５ｐｇ未満の鉄／細胞、１０４ｐｇ未満の鉄／細胞、１０３ｐｇ未満の鉄／細胞、１０２ｐｇ未満の鉄／細胞、１０１ｐｇ未満の鉄／細胞、１００ｐｇ未満の鉄／細胞、９９ｐｇ未満の鉄／細胞、９８ｐｇ未満の鉄／細胞、９７ｐｇ未満の鉄／細胞、９６ｐｇ未満の鉄／細胞、９５ｐｇ未満の鉄／細胞、９４ｐｇ未満の鉄／細胞、９３ｐｇ未満の鉄／細胞、９２ｐｇ未満の鉄／細胞、９１ｐｇ未満の鉄／細胞、９０ｐｇ未満の鉄／細胞、８９ｐｇ未満の鉄／細胞、８８ｐｇ未満の鉄／細胞、８７ｐｇ未満の鉄／細胞、８６ｐｇ未満の鉄／細胞、８５ｐｇ未満の鉄／細胞、８４ｐｇ未満の鉄／細胞、８３ｐｇ未満の鉄／細胞、８２ｐｇ未満の鉄／細胞、８１ｐｇ未満の鉄／細胞、８０ｐｇ未満の鉄／細胞、７９ｐｇ未満の鉄／細胞、７８ｐｇ未満の鉄／細胞、７７ｐｇ未満の鉄／細胞、７６ｐｇ未満の鉄／細胞、７５ｐｇ未満の鉄／細胞、７４ｐｇ未満の鉄／細胞、７３ｐｇ未満の鉄／細胞、７２ｐｇ未満の鉄／細胞、７１ｐｇ未満の鉄／細胞、７０ｐｇ未満の鉄／細胞、６９ｐｇ未満の鉄／細胞、６８ｐｇ未満の鉄／細胞、６７ｐｇ未満の鉄／細胞、６６ｐｇ未満の鉄／細胞、６５ｐｇ未満の鉄／細胞、６４ｐｇ未満の鉄／細胞、６３ｐｇ未満の鉄／細胞、６２ｐｇ未満の鉄／細胞、６１ｐｇ未満の鉄／細胞、６０ｐｇ未満の鉄／細胞、５９ｐｇ未満の鉄／細胞、５８ｐｇ未満の鉄／細胞、５７ｐｇ未満の鉄／細胞、５６ｐｇ未満の鉄／細胞、５５ｐｇ未満の鉄／細胞、５４ｐｇ未満の鉄／細胞、５３ｐｇ未満の鉄／細胞、５２ｐｇ未満の鉄／細胞、５１ｐｇ未満の鉄／細胞、５０ｐｇ未満の鉄／細胞、４９ｐｇ未満の鉄／細胞、４８ｐｇ未満の鉄／細胞、４７ｐｇ未満の鉄／細胞、４６ｐｇ未満の鉄／細胞、４５ｐｇ未満の鉄／細胞、４４ｐｇ未満の鉄／細胞、４３ｐｇ未満の鉄／細胞、４２ｐｇ未満の鉄／細胞、４１ｐｇ未満の鉄／細胞、４０ｐｇ未満の鉄／細胞、３９ｐｇ未満の鉄／細胞、３８ｐｇ未満の鉄／細胞、３７ｐｇ未満の鉄／細胞、３６ｐｇ未満の鉄／細胞、３５ｐｇ未満の鉄／細胞、３４ｐｇ未満の鉄／細胞、３３ｐｇ未満の鉄／細胞、３２ｐｇ未満の鉄／細胞、３１ｐｇ未満の鉄／細胞、３０ｐｇ未満の鉄／細胞、２９ｐｇ未満の鉄／細胞、２８ｐｇ未満の鉄／細胞、２７ｐｇ未満の鉄／細胞、２６ｐｇ未���の鉄／細胞、２５ｐｇ未満の鉄／細胞、２４ｐｇ未満の鉄／細胞、２３ｐｇ未満の鉄／細胞、２２ｐｇ未満の鉄／細胞、２１ｐｇ未満の鉄／細胞、２０ｐｇ未満の鉄／細胞、１９ｐｇ未満の鉄／細胞、１８ｐｇ未満の鉄／細胞、１７ｐｇ未満の鉄／細胞、１６ｐｇ未満の鉄／細胞、１５ｐｇ未満の鉄／細胞、１４ｐｇ未満の鉄／細胞、１３ｐｇ未満の鉄／細胞、１２ｐｇ未満の鉄／細胞、１１ｐｇ未満の鉄／細胞、１０ｐｇ未満の鉄／細胞、９ｐｇ未満の鉄／細胞、８ｐｇ未満の鉄／細胞、７ｐｇ未満の鉄／細胞、６ｐｇ未満の鉄／細胞、５ｐｇ未満の鉄／細胞、４ｐｇ未満の鉄／細胞、３ｐｇ未満の鉄／細胞、２ｐｇ未満の鉄／細胞、または１ｐｇ未満の鉄／細胞を含んでよい。
【０１２１】
場合によっては、ＣＤ３+ 細胞は、ドナー造血細胞から単離及び精製される。例えば、ＣＤ３+ 細胞は、好適なＣＤ３親和性試薬を選択的に結合することによって、ドナー造血細胞から単離及び精製され得る。場合によっては、ＣＤ３親和性試薬は、抗体、完全長抗体、抗体のフラグメント、天然の抗体、合成抗体、遺伝子組み換え抗体、完全長アフィボディ、アフィボディのフラグメント、完全長アフィリン、アフィリンのフラグメント、完全長アンチカリン、アンチカリンのフラグメント、完全長アビメル、アビメルのフラグメント、完全長ＤＡＲＰｉｎ、ＤＡＲＰｉｎのフラグメント、完全長フィノマー、フィノマーのフラグメント、完全長クニッツドメインペプチド、クニッツドメインペプチドのフラグメント、完全長モノボディー、モノボディーのフラグメント、ぺプチド、ポリアミノ酸等でよい。
【０１２２】
場合によっては、親和性試薬は検出試薬及び／または精製試薬に直接に複合化される。場合によっては、検出試薬及び精製試薬は同一である。場合によっては、検出試薬及び精製試薬は異なる。例えば、検出試薬及び精製試薬は、蛍光、磁性等である。場合によっては、検出試薬及び精製試薬は、カラム精製用の磁性粒子である。例えば、磁性カラム精製は、当業者に公知の、カラム、抗体、緩衝液、調製物質及び試薬等のミルテニー（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ）装置を用いて行われる。
【０１２３】
ＣＤ３+ 細胞は、２つの細胞集団の１つから選択され得る。場合によっては、アフェレーシス生成物は、２つの部分に分割され得る、１つは、ＣＤ３+ 細胞を単離及び精製するために使用され、他の１つは、ＣＤ３４+ 細胞を単離及び精製するために使用される。場合によっては、ＣＤ３４+ 細胞は、ＣＤ３４陰性細胞分画をつくるアフェレーシス生成物から単離及び精製される。場合によっては、ＣＤ３４陰性細胞分画中のＣＤ３+ 細胞の数が決定され、ＣＤ３+ 細胞の適切な用量を含むＣＤ３４陰性細胞分画の１体積が単離及び精製されたＣＤ３４+ 細胞の１体積と混合される。例えば、ＣＤ３４+ 細胞及びＣＤ３+ 細胞は、少なくとも親和性試薬及びカラムを用いて少なくとも１つのアフェレーシス生成物から単離され、該ＣＤ３４+ 細胞は該カラムからの溶出液中に存在し、該ＣＤ３+ 細胞は該カラムからのＣＤ３４+ 細胞枯渇フロースルー分画中に存在する。別の例では、アフェレーシス生成物のＣＤ３４枯渇分画はアフィニティカラムからのＣＤ３４枯渇フロースルー分画である。
【０１２４】
場合によっては、陰性分画中のＣＤ３+ 細胞の数は、ＣＤ３+ 用の親和性試薬を用いて決定され得る。例えば、親和性試薬は、本明細書に先に記載された抗体、ペプチド等でよい。場合によっては、親和性試薬は、検出部分を含んでよい。例えば、検出部分は、本明細書に先に記載された蛍光、磁性等でよい
【０１２５】
場合によっては、磁性粒子を用いて単離及び精製されたＣＤ３+ 細胞は鉄を含有してよい。単離及び精製されたＣＤ３+ 細胞の鉄含量は、単離及び精製前のＣＤ３+ 細胞中の鉄含量よりも、磁性粒子を用いる単離及び精製後には高いことがある。例えば、単離及び精製されたＣＤ３+ 細胞は、５００ｐｇ未満の鉄／細胞、４５０ｐｇ未満の鉄／細胞、４００ｐｇ未満の鉄／細胞、３５０ｐｇ未満の鉄／細胞、３００ｐｇ未満の鉄／細胞、２５０ｐｇ未満の鉄／細胞、２２５ｐｇ未満の鉄／細胞、２００ｐｇ未満の鉄／細胞、１９０ｐｇ未満の鉄／細胞、１８０ｐｇ未満の鉄／細胞、１７０ｐｇ未満の鉄／細胞、１６０ｐｇ未満の鉄／細胞、１５０ｐｇ未満の鉄／細胞、１４０ｐｇ未満の鉄／細胞、１３０ｐｇ未満の鉄／細胞、１２０ｐｇ未満の鉄／細胞、１１０ｐｇ未満の鉄／細胞、１０９ｐｇ未満の鉄／細胞、１０８ｐｇ未満の鉄／細胞、１０７ｐｇ未満の鉄／細胞、１０６ｐｇ未満の鉄／細胞、１０５ｐｇ未満の鉄／細胞、１０４ｐｇ未満の鉄／細胞、１０３ｐｇ未満の鉄／細胞、１０２ｐｇ未満の鉄／細胞、１０１ｐｇ未満の鉄／細胞、１００ｐｇ未満の鉄／細胞、９９ｐｇ未満の鉄／細胞、９８ｐｇ未満の鉄／細胞、９７ｐｇ未満の鉄／細胞、９６ｐｇ未満の鉄／細胞、９５ｐｇ未満の鉄／細胞、９４ｐｇ未満の鉄／細胞、９３ｐｇ未満の鉄／細胞、９２ｐｇ未満の鉄／細胞、９１ｐｇ未満の鉄／細胞、９０ｐｇ未満の鉄／細胞、８９ｐｇ未満の鉄／細胞、８８ｐｇ未満の鉄／細胞、８７ｐｇ未満の鉄／細胞、８６ｐｇ未満の鉄／細胞、８５ｐｇ未満の鉄／細胞、８４ｐｇ未満の鉄／細胞、８３ｐｇ未満の鉄／細胞、８２ｐｇ未満の鉄／細胞、８１ｐｇ未満の鉄／細胞、８０ｐｇ未満の鉄／細胞、７９ｐｇ未満の鉄／細胞、７８ｐｇ未満の鉄／細胞、７７ｐｇ未満の鉄／細胞、７６ｐｇ未満の鉄／細胞、７５ｐｇ未満の鉄／細胞、７４ｐｇ未満の鉄／細胞、７３ｐｇ未満の鉄／細胞、７２ｐｇ未満の鉄／細胞、７１ｐｇ未満の鉄／細胞、７０ｐｇ未満の鉄／細胞、６９ｐｇ未満の鉄／細胞、６８ｐｇ未満の鉄／細胞、６７ｐｇ未満の鉄／細胞、６６ｐｇ未満の鉄／細胞、６５ｐｇ未満の鉄／細胞、６４ｐｇ未満の鉄／細胞、６３ｐｇ未満の鉄／細胞、６２ｐｇ未満の鉄／細胞、６１ｐｇ未満の鉄／細胞、６０ｐｇ未満の鉄／細胞、５９ｐｇ未満の鉄／細胞、５８ｐｇ未満の鉄／細胞、５７ｐｇ未満の鉄／細胞、５６ｐｇ未満の鉄／細胞、５５ｐｇ未満の鉄／細胞、５４ｐｇ未満の鉄／細胞、５３ｐｇ未満の鉄／細胞、５２ｐｇ未満の鉄／細胞、５１ｐｇ未満の鉄／細胞、５０ｐｇ未満の鉄／細胞、４９ｐｇ未満の鉄／細胞、４８ｐｇ未満の鉄／細胞、４７ｐｇ未満の鉄／細胞、４６ｐｇ未満の鉄／細胞、４５ｐｇ未満の鉄／細胞、４４ｐｇ未満の鉄／細胞、４３ｐｇ未満の鉄／細胞、４２ｐｇ未満の鉄／細胞、４１ｐｇ未満の鉄／細胞、４０ｐｇ未満の鉄／細胞、３９ｐｇ未満の鉄／細胞、３８ｐｇ未満の鉄／細胞、３７ｐｇ未満の鉄／細胞、３６ｐｇ未満の鉄／細胞、３５ｐｇ未満の鉄／細胞、３４ｐｇ未満の鉄／細胞、３３ｐｇ未満の鉄／細胞、３２ｐｇ未満の鉄／細胞、３１ｐｇ未満の鉄／細胞、３０ｐｇ未満の鉄／細胞、２９ｐｇ未満の鉄／細胞、２８ｐｇ未満の鉄／細胞、２７ｐｇ未満の鉄／細胞、２６ｐｇ未満の鉄���細胞、２５ｐｇ未満の鉄／細胞、２４ｐｇ未満の鉄／細胞、２３ｐｇ未満の鉄／細胞、２２ｐｇ未満の鉄／細胞、２１ｐｇ未満の鉄／細胞、２０ｐｇ未満の鉄／細胞、１９ｐｇ未満の鉄／細胞、１８ｐｇ未満の鉄／細胞、１７ｐｇ未満の鉄／細胞、１６ｐｇ未満の鉄／細胞、１５ｐｇ未満の鉄／細胞、１４ｐｇ未満の鉄／細胞、１３ｐｇ未満の鉄／細胞、１２ｐｇ未満の鉄／細胞、１１ｐｇ未満の鉄／細胞、１０ｐｇ未満の鉄／細胞、９ｐｇ未満の鉄／細胞、８ｐｇ未満の鉄／細胞、７ｐｇ未満の鉄／細胞、６ｐｇ未満の鉄／細胞、５ｐｇ未満の鉄／細胞、４ｐｇ未満の鉄／細胞、３ｐｇ未満の鉄／細胞、２ｐｇ未満の鉄／細胞、または１ｐｇ未満の鉄／細胞を含有してよい。
【０１２６】
場合によっては、磁性粒子を用いて単離及び精製されたＣＤ３４+ 細胞及びＣＤ３+ 細胞は鉄を含有してよい。単離及び精製されたＣＤ３４+細胞及びＣＤ３+ 細胞の鉄含量は、単離及び精製前のＣＤ３+ 細胞中の鉄含量よりも、磁性粒子を用いる単離及び精製後には高いことがある。例えば、単離及び精製されたＣＤ３４+ 細胞及びＣＤ３+ 細胞は、５００ｐｇ未満の鉄／細胞、４５０ｐｇ未満の鉄／細胞、４００ｐｇ未満の鉄／細胞、３５０ｐｇ未満の鉄／細胞、３００ｐｇ未満の鉄／細胞、２５０ｐｇ未満の鉄／細胞、２２５ｐｇ未満の鉄／細胞、２００ｐｇ未満の鉄／細胞、１９０ｐｇ未満の鉄／細胞、１８０ｐｇ未満の鉄／細胞、１７０ｐｇ未満の鉄／細胞、１６０ｐｇ未満の鉄／細胞、１５０ｐｇ未満の鉄／細胞、１４０ｐｇ未満の鉄／細胞、１３０ｐｇ未満の鉄／細胞、１２０ｐｇ未満の鉄／細胞、１１０ｐｇ未満の鉄／細胞、１０９ｐｇ未満の鉄／細胞、１０８ｐｇ未満の鉄／細胞、１０７ｐｇ未満の鉄／細胞、１０６ｐｇ未満の鉄／細胞、１０５ｐｇ未満の鉄／細胞、１０４ｐｇ未満の鉄／細胞、１０３ｐｇ未満の鉄／細胞、１０２ｐｇ未満の鉄／細胞、１０１ｐｇ未満の鉄／細胞、１００ｐｇ未満の鉄／細胞、９９ｐｇ未満の鉄／細胞、９８ｐｇ未満の鉄／細胞、９７ｐｇ未満の鉄／細胞、９６ｐｇ未満の鉄／細胞、９５ｐｇ未満の鉄／細胞、９４ｐｇ未満の鉄／細胞、９３ｐｇ未満の鉄／細胞、９２ｐｇ未満の鉄／細胞、９１ｐｇ未満の鉄／細胞、９０ｐｇ未満の鉄／細胞、８９ｐｇ未満の鉄／細胞、８８ｐｇ未満の鉄／細胞、８７ｐｇ未満の鉄／細胞、８６ｐｇ未満の鉄／細胞、８５ｐｇ未満の鉄／細胞、８４ｐｇ未満の鉄／細胞、８３ｐｇ未満の鉄／細胞、８２ｐｇ未満の鉄／細胞、８１ｐｇ未満の鉄／細胞、８０ｐｇ未満の鉄／細胞、７９ｐｇ未満の鉄／細胞、７８ｐｇ未満の鉄／細胞、７７ｐｇ未満の鉄／細胞、７６ｐｇ未満の鉄／細胞、７５ｐｇ未満の鉄／細胞、７４ｐｇ未満の鉄／細胞、７３ｐｇ未満の鉄／細胞、７２ｐｇ未満の鉄／細胞、７１ｐｇ未満の鉄／細胞、７０ｐｇ未満の鉄／細胞、６９ｐｇ未満の鉄／細胞、６８ｐｇ未満の鉄／細胞、６７ｐｇ未満の鉄／細胞、６６ｐｇ未満の鉄／細胞、６５ｐｇ未満の鉄／細胞、６４ｐｇ未満の鉄／細胞、６３ｐｇ未満の鉄／細胞、６２ｐｇ未満の鉄／細胞、６１ｐｇ未満の鉄／細胞、６０ｐｇ未満の鉄／細胞、５９ｐｇ未満の鉄／細胞、５８ｐｇ未満の鉄／細胞、５７ｐｇ未満の鉄／細胞、５６ｐｇ未満の鉄／細胞、５５ｐｇ未満の鉄／細胞、５４ｐｇ未満の鉄／細胞、５３ｐｇ未満の鉄／細胞、５２ｐｇ未満の鉄／細胞、５１ｐｇ未満の鉄／細胞、５０ｐｇ未満の鉄／細胞、４９ｐｇ未満の鉄／細胞、４８ｐｇ未満の鉄／細胞、４７ｐｇ未満の鉄／細胞、４６ｐｇ未満の鉄／細胞、４５ｐｇ未満の鉄／細胞、４４ｐｇ未満の鉄／細胞、４３ｐｇ未満の鉄／細胞、４２ｐｇ未満の鉄／細胞、４１ｐｇ未満の鉄／細胞、４０ｐｇ未満の鉄／細胞、３９ｐｇ未満の鉄／細胞、３８ｐｇ未満の鉄／細胞、３７ｐｇ未満の鉄／細胞、３６ｐｇ未満の鉄／細胞、３５ｐｇ未満の鉄／細胞、３４ｐｇ未満の鉄／細胞、３３ｐｇ未満の鉄／細胞、３２ｐｇ未満の鉄／細胞、３１ｐｇ未満の鉄／細胞、３０ｐｇ未満の鉄／細胞、２９ｐｇ未満の鉄／細胞、２８ｐｇ未満��鉄／細胞、２７ｐｇ未満の鉄／細胞、２６ｐｇ未満の鉄／細胞、２５ｐｇ未満の鉄／細胞、２４ｐｇ未満の鉄／細胞、２３ｐｇ未満の鉄／細胞、２２ｐｇ未満の鉄／細胞、２１ｐｇ未満の鉄／細胞、２０ｐｇ未満の鉄／細胞、１９ｐｇ未満の鉄／細胞、１８ｐｇ未満の鉄／細胞、１７ｐｇ未満の鉄／細胞、１６ｐｇ未満の鉄／細胞、１５ｐｇ未満の鉄／細胞、１４ｐｇ未満の鉄／細胞、１３ｐｇ未満の鉄／細胞、１２ｐｇ未満の鉄／細胞、１１ｐｇ未満の鉄／細胞、１０ｐｇ未満の鉄／細胞、９ｐｇ未満の鉄／細胞、８ｐｇ未満の鉄／細胞、７ｐｇ未満の鉄／細胞、６ｐｇ未満の鉄／細胞、５ｐｇ未満の鉄／細胞、４ｐｇ未満の鉄／細胞、３ｐｇ未満の鉄／細胞、２ｐｇ未満の鉄／細胞、または１ｐｇ未満の鉄／細胞を含有してよい。
【０１２７】
医薬組成物用造血幹細胞の作製、調製
本明細書に記載の方法を用いてドナーから得られたＣＤ３４+細胞及びＣＤ３+ 細胞の組み合わせは、固形臓器レシピエントへの投与のための医薬組成物に製造され得る。場合によっては、造血細胞は、レシピエントへの注入のための単一の医薬組成物に製造され得る。場合によっては、造血細胞は、レシピエントへの注入のための複数の医薬組成物に製造され得る。場合によっては、ＣＤ３４+細胞及びＣＤ３+ 細胞はドナー及びレシピエント間でＨＬＡ−適合でよい。場合によっては、ＣＤ３４+細胞及びＣＤ３+ 細胞はドナー及びレシピエント間でＨＬＡ−非適合でよい。
【０１２８】
場合によっては、造血細胞は、ＣＤ３４+ 造血細胞の所定の純度を有する医薬組成物に作製され得る。例えば、工学的に作製された造血細胞中のＣＤ３４+ 前駆細胞の純度は、≧３０％純度、≧４０％純度、≧５０％純度、≧５５％純度、≧６０％純度、≧６５％純度、≧７０％純度、≧７５％純度、≧８０％純度、≧８５％純度、≧９０％純度、≧９５％純度、または≧９８％純度でよい。別の例では、工学的に作製された造血細胞中のＣＤ３４+ 前駆細胞の純度は、１０〜３０％純度、１５〜３５％純度、２０〜４０％純度、２５〜４５％純度、３０〜５０％純度、３５〜５５％純度、４０〜６０％純度、４５〜６５％純度、５０〜７０％純度、５５〜７５％純度、６０〜８０％純度、６５〜８５％純度、７０〜９０％純度、７５〜９５％純度、及び８０〜１００％純度でよい。例としては、工学的に作製された造血細胞中のＣＤ３４+ 前駆細胞の純度は、≧７０％純度である。
【０１２９】
例えば、工学的に作製された造血細胞中のＣＤ３+ 前駆細胞の純度は、≧３０％純度、≧４０％純度、≧５０％純度、≧５５％純度、≧６０％純度、≧６５％純度、≧７０％純度、≧７５％純度、≧８０％純度、≧８５％純度、≧９０％純度、≧９５％純度、または≧９８％純度でよい。別の例では、工学的に作製された造血細胞中のＣＤ３+ 前駆細胞の純度は、１０〜３０％純度、１５〜３５％純度、２０〜４０％純度、２５〜４５％純度、３０〜５０％純度、３５〜５５％純度、４０〜６０％純度、４５〜６５％純度、５０〜７０％純度、５５〜７５％純度、６０〜８０％純度、６５〜８５％純度、７０〜９０％純度、７５〜９５％純度、及び８０〜１００％純度でよい。例としては、工学的に作製された造血細胞中のＣＤ３+ 前駆細胞の純度は、≧７０％純度である。
【０１３０】
場合によっては、造血細胞は、ＣＤ３４+ 前駆細胞の一定の純度を有する生成物へ作製され得る。例えば、工学的に作製された造血細胞中のＣＤ３４+ 前駆細胞の純度は、≧３０％純度、≧４０％純度、≧５０％純度、≧５５％純度、≧６０％純度、≧６５％純度、≧７０％純度、≧７５％純度、≧８０％純度、≧８５％純度、≧９０％純度、≧９５％純度、または≧９８％純度でよい。別の例では、工学的に作製された造血細胞中のＣＤ３４+ 前駆細胞の純度は、１０〜３０％純度、１５〜３５％純度、２０〜４０％純度、２５〜４５％純度、３０〜５０％純度、３５〜５５％純度、４０〜６０％純度、４５〜６５％純度、５０〜７０％純度、５５〜７５％純度、６０〜８０％純度、６５〜８５％純度、７０〜９０％純度、７５〜９５％純度、及び８０〜１００％純度でよい。例としては、工学的に作製された造血細胞中のＣＤ３４+ 前駆細胞の純度は、ＣＤ３+ 細胞と組み合わせる前に≧７０％純度である。
【０１３１】
工学的に作製された造血細胞は、レシピエントへの注入用の特定数のＣＤ３４+ 細胞を含んでよい。場合によっては、レシピエントに注入されるべきＣＤ３４+ 細胞の標的用量は、≧１０×１０3 細胞／ｋｇ体重、≧１５×１０3 細胞／ｋｇ体重、≧２０×１０3 細胞／ｋｇ体重、≧２５×１０3 細胞／ｋｇ体重、≧３０×１０3 細胞／ｋｇ体重、≧３５×１０3 細胞／ｋｇ体重、≧４０×１０3 細胞／ｋｇ体重、≧４５×１０3 細胞／ｋｇ体重、≧５０×１０3 細胞／ｋｇ体重、≧５５×１０3 細胞／ｋｇ体重、≧６０×１０3 細胞／ｋｇ体重、≧６５×１０3 細胞／ｋｇ体重、≧７０×１０3 細胞／ｋｇ体重、≧７５×１０3 細胞／ｋｇ体重、≧８０×１０3 細胞／ｋｇ体重、≧８５×１０3 細胞／ｋｇ体重、９０×１０3 細胞／ｋｇ体重、≧９５×１０3 細胞／ｋｇ体重、≧１０×１０4 細胞／ｋｇ体重、≧１５×１０4 細胞／ｋｇ体重、≧２０×１０4 細胞／ｋｇ体重、≧２５×１０4 細胞／ｋｇ体重、≧３０×１０4 細胞／ｋｇ体重、≧３５×１０4 細胞／ｋｇ体重、≧４０×１０4 細胞／ｋｇ体重、≧４５×１０4 細胞／ｋｇ体重、≧５０×１０4 細胞／ｋｇ体重、≧５５×１０4 細胞／ｋｇ体重、≧６０×１０4 細胞／ｋｇ体重、≧６５×１０4 細胞／ｋｇ体重、≧７０×１０4 細胞／ｋｇ体重、≧７５×１０4 細胞／ｋｇ体重、≧８０×１０4 細胞／ｋｇ体重、≧８５×１０4 細胞／ｋｇ体重、９０×１０4 細胞／ｋｇ体重、≧９５×１０4 細胞／ｋｇ体重、≧１０×１０5 細胞／ｋｇ体重、≧１５×１０5 細胞／ｋｇ体重、≧２０×１０5 細胞／ｋｇ体重、≧２５×１０5 細胞／ｋｇ体重、≧３０×１０5 細胞／ｋｇ体重、≧３５×１０5 細胞／ｋｇ体重、≧４０×１０5 細胞／ｋｇ体重、≧４５×１０5 細胞／ｋｇ体重、≧５０×１０5 細胞／ｋｇ体重、≧５５×１０5 細胞／ｋｇ体重、≧６０×１０5 細胞／ｋｇ体重、≧６５×１０5 細胞／ｋｇ体重、≧７０×１０5 細胞／ｋｇ体重、≧７５×１０5 細胞／ｋｇ体重、≧８０×１０5 細胞／ｋｇ体重、≧８５×１０5 細胞／ｋｇ体重、９０×１０5 細胞／ｋｇ体重、≧９５×１０5 細胞／ｋｇ体重、≧１０×１０6 細胞／ｋｇ体重、≧１５×１０6 細胞／ｋｇ体重、≧２０×１０6 細胞／ｋｇ体重、≧２５×１０6 細胞／ｋｇ体重、≧３０×１０6 細胞／ｋｇ体重、≧３５×１０6 細胞／ｋｇ体重、≧４０×１０6 細胞／ｋｇ体重、≧４５×１０6 細胞／ｋｇ体重、≧５０×１０6 細胞／ｋｇ体重、≧５５×１０6 細胞／ｋｇ体重、≧６０×１０6 細胞／ｋｇ体重、≧６５×１０6 細胞／ｋｇ体重、≧７０×１０6 細胞／ｋｇ体重、≧７５×１０6 細胞／ｋｇ体重、≧８０×１０6 細胞／ｋｇ体重、≧８５×１０6 細胞／ｋｇ体重、９０×１０6 細胞／ｋｇ体重、≧９５×１０6 細胞／ｋｇ体重、≧１０×１０7 細胞／ｋｇ体重、≧１５×１０7 細胞／ｋｇ体重、≧２０×１０7 細胞／ｋｇ体重、≧２５×１０7 細胞／ｋｇ体重、≧３０×１０7 細胞／ｋｇ体重、≧３５×１０7 細胞／ｋｇ体重、≧４０×１０7 細胞／ｋｇ体重、≧４５×１０7 細胞／ｋｇ体重、≧５０×１０7 細胞／ｋｇ体重、≧５５×１０7 細胞／ｋｇ体重、≧６０×１０7 細胞／ｋｇ体重、≧６５×１０7 細胞／ｋｇ体重、≧７０×１０7 細胞／ｋｇ体重、≧７５×１０7 細胞／ｋｇ体重、≧８０×１０7 細胞／ｋｇ体重、≧８５×１０7 細胞／ｋｇ体重、９０×１０7 細胞／ｋｇ体重、≧９５×１０7 細胞／ｋｇ体重��≧１０×１０8 細胞／ｋｇ体重、≧１５×１０8 細胞／ｋｇ体重、≧２０×１０8 細胞／ｋｇ体重、≧２５×１０8 細胞／ｋｇ体重、≧３０×１０8 細胞／ｋｇ体重、≧３５×１０8 細胞／ｋｇ体重、≧４０×１０8 細胞／ｋｇ体重、≧４５×１０8 細胞／ｋｇ体重、≧５０×１０8 細胞／ｋｇ体重、≧５５×１０8 細胞／ｋｇ体重、≧６０×１０8 細胞／ｋｇ体重、≧６５×１０8 細胞／ｋｇ体重、≧７０×１０8 細胞／ｋｇ体重、≧７５×１０8 細胞／ｋｇ体重、≧８０×１０8 細胞／ｋｇ体重、≧８５×１０8 細胞／ｋｇ体重、９０×１０8 細胞／ｋｇ体重、≧９５×１０8 細胞／ｋｇ体重、または≧１０×１０9 細胞／ｋｇ体重でよい。
【０１３２】
工学的に作製された造血細胞は、レシピエントへの注入用の特定数のＣＤ３+ 細胞を含んでよい。場合によっては、レシピエントに注入されるべきＣＤ３+ 細胞の標的用量は、≧１０×１０3 細胞／ｋｇ体重、≧１５×１０3 細胞／ｋｇ体重、≧２０×１０3 細胞／ｋｇ体重、≧２５×１０3 細胞／ｋｇ体重、≧３０×１０3 細胞／ｋｇ体重、≧３５×１０3 細胞／ｋｇ体重、≧４０×１０3 細胞／ｋｇ体重、≧４５×１０3 細胞／ｋｇ体重、≧５０×１０3 細胞／ｋｇ体重、≧５５×１０3 細胞／ｋｇ体重、≧６０×１０3 細胞／ｋｇ体重、≧６５×１０3 細胞／ｋｇ体重、≧７０×１０3 細胞／ｋｇ体重、≧７５×１０3 細胞／ｋｇ体重、≧８０×１０3 細胞／ｋｇ体重、≧８５×１０3 細胞／ｋｇ体重、９０×１０3 細胞／ｋｇ体重、≧９５×１０3 細胞／ｋｇ体重、≧１０×１０4 細胞／ｋｇ体重、≧１５×１０4 細胞／ｋｇ体重、≧２０×１０4 細胞／ｋｇ体重、≧２５×１０4 細胞／ｋｇ体重、≧３０×１０4 細胞／ｋｇ体重、≧３５×１０4 細胞／ｋｇ体重、≧４０×１０4 細胞／ｋｇ体重、≧４５×１０4 細胞／ｋｇ体重、≧５０×１０4 細胞／ｋｇ体重、≧５５×１０4 細胞／ｋｇ体重、≧６０×１０4 細胞／ｋｇ体重、≧６５×１０4 細胞／ｋｇ体重、≧７０×１０4 細胞／ｋｇ体重、≧７５×１０4 細胞／ｋｇ体重、≧８０×１０4 細胞／ｋｇ体重、≧８５×１０4 細胞／ｋｇ体重、９０×１０4 細胞／ｋｇ体重、≧９５×１０4 細胞／ｋｇ体重、≧１０×１０5 細胞／ｋｇ体重、≧１５×１０5 細胞／ｋｇ体重、≧２０×１０5 細胞／ｋｇ体重、≧２５×１０5 細胞／ｋｇ体重、≧３０×１０5 細胞／ｋｇ体重、≧３５×１０5 細胞／ｋｇ体重、≧４０×１０5 細胞／ｋｇ体重、≧４５×１０5 細胞／ｋｇ体重、≧５０×１０5 細胞／ｋｇ体重、≧５５×１０5 細胞／ｋｇ体重、≧６０×１０5 細胞／ｋｇ体重、≧６５×１０5 細胞／ｋｇ体重、≧７０×１０5 細胞／ｋｇ体重、≧７５×１０5 細胞／ｋｇ体重、≧８０×１０5 細胞／ｋｇ体重、≧８５×１０5 細胞／ｋｇ体重、９０×１０5 細胞／ｋｇ体重、≧９５×１０5 細胞／ｋｇ体重、≧１０×１０6 細胞／ｋｇ体重、≧１５×１０6 細胞／ｋｇ体重、≧２０×１０6 細胞／ｋｇ体重、≧２５×１０6 細胞／ｋｇ体重、≧３０×１０6 細胞／ｋｇ体重、≧３５×１０6 細胞／ｋｇ体重、≧４０×１０6 細胞／ｋｇ体重、≧４５×１０6 細胞／ｋｇ体重、≧５０×１０6 細胞／ｋｇ体重、≧５５×１０6 細胞／ｋｇ体重、≧６０×１０6 細胞／ｋｇ体重、≧６５×１０6 細胞／ｋｇ体重、≧７０×１０6 細胞／ｋｇ体重、≧７５×１０6 細胞／ｋｇ体重、≧８０×１０6 細胞／ｋｇ体重、≧８５×１０6 細胞／ｋｇ体重、９０×１０6 細胞／ｋｇ体重、≧９５×１０6 細胞／ｋｇ体重、≧１０×１０7 細胞／ｋｇ体重、≧１５×１０7 細胞／ｋｇ体重、≧２０×１０7 細胞／ｋｇ体重、≧２５×１０7 細胞／ｋｇ体重、≧３０×１０7 細胞／ｋｇ体重、≧３５×１０7 細胞／ｋｇ体重、≧４０×１０7 細胞／ｋｇ体重、≧４５×１０7 細胞／ｋｇ体重、≧５０×１０7 細胞／ｋｇ体重、≧５５×１０7 細胞／ｋｇ体重、≧６０×１０7 細胞／ｋｇ体重、≧６５×１０7 細胞／ｋｇ体重、≧７０×１０7 細胞／ｋｇ体重、≧７５×１０7 細胞／ｋｇ体重、≧８０×１０7 細胞／ｋｇ体重、≧８５×１０7 細胞／ｋｇ体重、９０×１０7 細胞／ｋｇ体重、≧９５×１０7 細胞／ｋｇ体重、≧��０×１０8 細胞／ｋｇ体重、≧１５×１０8 細胞／ｋｇ体重、≧２０×１０8 細胞／ｋｇ体重、≧２５×１０8 細胞／ｋｇ体重、≧３０×１０8 細胞／ｋｇ体重、≧３５×１０8 細胞／ｋｇ体重、≧４０×１０8 細胞／ｋｇ体重、≧４５×１０8 細胞／ｋｇ体重、≧５０×１０8 細胞／ｋｇ体重、≧５５×１０8 細胞／ｋｇ体重、≧６０×１０8 細胞／ｋｇ体重、≧６５×１０8 細胞／ｋｇ体重、≧７０×１０8 細胞／ｋｇ体重、≧７５×１０8 細胞／ｋｇ体重、≧８０×１０8 細胞／ｋｇ体重、≧８５×１０8 細胞／ｋｇ体重、９０×１０8 細胞／ｋｇ体重、≧９５×１０8 細胞／ｋｇ体重、または≧１０×１０9 細胞／ｋｇ体重でよい。
【０１３３】
場合によっては、工学的に作製された造血細胞は、ＨＬＡ−適合またはＨＬＡ−非適合レシピエントへの注入のためのＣＤ３４+ 細胞及びＣＤ３+ 細胞の組み合わせを含み得る。ある場合には、少なくとも１０×１０6 ＣＤ３４+細胞／ｋｇレシピエント体重及び少なくとも１．０×１０6 ＣＤ３+ 細胞／ｋｇがレシピエントへ注入される。場合によっては、少なくとも１０×１０6 ＣＤ３４+細胞／ｋｇレシピエント体重及び少なくとも１．０×１０7 ＣＤ３+ 細胞／ｋｇがレシピエントへ注入される。場合によっては、少なくとも１０×１０6 ＣＤ３４+細胞／ｋｇレシピエント体重及び１．０〜５．０×１０6 ＣＤ３+ 細胞／ｋｇがレシピエントへ注入される。場合によっては、少なくとも１５×１０6 ＣＤ３４+細胞／ｋｇレシピエント体重及び５０×１０6 ＣＤ３+ 細胞／ｋｇがレシピエントへ注入される。
【０１３４】
単離及び精製されたＣＤ３４+ 細胞及びＣＤ３+ 細胞は、工学的に作製された造血細胞組成物での使用前に、新鮮に単離されるかまたは凍結され得る（例えば、凍結保存され得る）。場合によっては、ＣＤ３４+ 細胞は、工学的に作製された造血細胞組成物を調製するための新鮮に単離されたまたは凍結された細胞としての使用前に、ＣＤ３+ 細胞と組み合わされ得る。
【０１３５】
場合によっては、ＣＤ３４+ 細胞及びＣＤ３+ 細胞は、新鮮に単離された細胞または凍結保存された細胞のいずれかとして、独立に維持される。例えば、新鮮に維持されたＣＤ３４+ 細胞及びＣＤ３+ 細胞は、ＣＤ３４+ 細胞及びＣＤ３+細胞の標的用量が注入用の工学的に作製された組成物で達成されるように組み合わされる。場合によっては、独立に凍結保存されたＣＤ３４+ 細胞及びＣＤ３+ 細胞は解凍され、各細胞種の標的用量が解凍後に決定され得る。解凍されたＣＤ３４+ 細胞及びＣＤ３+細胞は、ＣＤ３４+ 細胞及びＣＤ３+ 細胞の標的用量が注入用の工学的に作製された組成物で達成されるように組み合わされる。
【０１３６】
医薬組成物用の工学的に作製された造血細胞の処理
工学的に作製された造血細胞（例えば、ＣＤ３４+ 細胞及びＣＤ３+ 細胞）は、レシピエントへの投与用医薬組成物を調製する前に、新鮮に調製されるかまたは前もって凍結され得る（例えば、凍結保存され得る）。場合によっては、ＣＤ３４+ 細胞及びＣＤ３+ 細胞は、ドナーとレシピエント間でＨＬＡ−適合してよい。場合によっては、ＣＤ３４+ 細胞及びＣＤ３+ 細胞は、ドナーとレシピエント間でＨＬＡ−非適合してよい。
【０１３７】
凍結保存の方法は、本明細書の至る所に記載されている。場合によっては、ＣＤ３４+ 細胞の１アリコートが解凍される。場合によっては、ＣＤ３４+ 細胞の１超アリコートが解凍される。例えば、少なくとも１アリコート、少なくとも２アリコート、少なくとも３アリコート、少なくとも４アリコート、少なくとも５アリコート、少なくとも６アリコート、少なくとも７アリコート、少なくとも８アリコート、少なくとも９アリコート、少なくとも１０アリコート、少なくとも１１アリコート、少なくとも１２アリコート、少なくとも１３アリコート、少なくとも１４アリコート、少なくとも１５アリコート、少なくとも１６アリコート、少なくとも１７アリコート、少なくとも１８アリコート、少なくとも１９アリコート、少なくとも２０アリコート、少なくとも２１アリコート、少なくとも２２アリコート、少なくとも２３アリコート、少なくとも２４アリコート、少なくとも２５アリコート、少なくとも２６アリコート、少なくとも２７アリコート、少なくとも２８アリコート、少なくとも２９アリコート、少なくとも３０アリコート、少なくとも３１アリコート、少なくとも３２アリコート、少なくとも３３アリコート、少なくとも３４アリコート、少なくとも３５アリコート、少なくとも３６アリコート、少なくとも３７アリコート、少なくとも３８アリコート、少なくとも３９アリコート、少なくとも４０アリコート、少なくとも４１アリコート、少なくとも４２アリコート、少なくとも４３アリコート、少なくとも４４アリコート、少なくとも４５アリコート、少なくとも４６アリコート、少なくとも４７アリコート、少なくとも４８アリコート、少なくとも４９アリコート、または少なくとも５０アリコート、またはそれ以上のアリコートが解凍される。
【０１３８】
場合によっては、ＣＤ３+ 細胞の１アリコートが解凍される。場合によっては、ＣＤ３+ 細胞の１超アリコートが解凍される。例えば、少なくとも１アリコート、少なくとも２アリコート、少なくとも３アリコート、少なくとも４アリコート、少なくとも５アリコート、少なくとも６アリコート、少なくとも７アリコート、少なくとも８アリコート、少なくとも９アリコート、少なくとも１０アリコート、少なくとも１１アリコート、少なくとも１２アリコート、少なくとも１３アリコート、少なくとも１４アリコート、少なくとも１５アリコート、少なくとも１６アリコート、少なくとも１７アリコート、少なくとも１８アリコート、少なくとも１９アリコート、少なくとも２０アリコート、少なくとも２１アリコート、少なくとも２２アリコート、少なくとも２３アリコート、少なくとも２４アリコート、少なくとも２５アリコート、少なくとも２６アリコート、少なくとも２７アリコート、少なくとも２８アリコート、少なくとも２９アリコート、少なくとも３０アリコート、少なくとも３１アリコート、少なくとも３２アリコート、少なくとも３３アリコート、少なくとも３４アリコート、少なくとも３５アリコート、少なくとも３６アリコート、少なくとも３７アリコート、少なくとも３８アリコート、少なくとも３９アリコート、少なくとも４０アリコート、少なくとも４１アリコート、少なくとも４２アリコート、少なくとも４３アリコート、少なくとも４４アリコート、少なくとも４５アリコート、少なくとも４６アリコート、少なくとも４７アリコート、少なくとも４８アリコート、少なくとも４９アリコート、または少なくとも５０アリコート、またはそれ以上のアリコートが解凍される。
【０１３９】
場合によっては、ＣＤ３４+ 細胞及びＣＤ３+ 細胞の組み合わせの１アリコートが解凍される。場合によっては、ＣＤ３４+ 細胞及びＣＤ３+細胞の組み合わせの１超アリコートが解凍される。例えば、少なくとも１アリコート、少なくとも２アリコート、少なくとも３アリコート、少なくとも４アリコート、少なくとも５アリコート、少なくとも６アリコート、少なくとも７アリコート、少なくとも８アリコート、少なくとも９アリコート、少なくとも１０アリコート、少なくとも１１アリコート、少なくとも１２アリコート、少なくとも１３アリコート、少なくとも１４アリコート、少なくとも１５アリコート、少なくとも１６アリコート、少なくとも１７アリコート、少なくとも１８アリコート、少なくとも１９アリコート、少なくとも２０アリコート、少なくとも２１アリコート、少なくとも２２アリコート、少なくとも２３アリコート、少なくとも２４アリコート、少なくとも２５アリコート、少なくとも２６アリコート、少なくとも２７アリコート、少なくとも２８アリコート、少なくとも２９アリコート、少なくとも３０アリコート、少なくとも３１アリコート、少なくとも３２アリコート、少なくとも３３アリコート、少なくとも３４アリコート、少なくとも３５アリコート、少なくとも３６アリコート、少なくとも３７アリコート、少なくとも３８アリコート、少なくとも３９アリコート、少なくとも４０アリコート、少なくとも４１アリコート、少なくとも４２アリコート、少なくとも４３アリコート、少なくとも４４アリコート、少なくとも４５アリコート、少なくとも４６アリコート、少なくとも４７アリコート、少なくとも４８アリコート、少なくとも４９アリコート、または少なくとも５０アリコート、またはそれ以上のアリコートが解凍される。
【０１４０】
場合によっては、新鮮に調製された作製造血細胞は、当業者に公知の方法を用いてエクスビボで拡張され得る。場合によっては、先に凍結された作製造血細胞は、当業者に公知の方法を用いてエクスビボで拡張され得る。場合によっては、新鮮に調製されたまたは先に凍結された、工学的に作製された造血細胞は、少なくとも１つの成長因子の使用によってエクスビボで拡張され得る。場合によっては、１超の成長因子は、該細胞を拡張するために使用され得る。例えば、成長因子は、アクチビンＡ、ＡＤＡＭ−１０、アンギオゲニン、アンジオポイエチン−１、アンジオポイエチン−２、アンジオポイエチン−３、アンジオポイエチン−４、ＢＩＯ、骨形成タンパク質−２、骨形成タンパク質−３、骨形成タンパク質−４、骨形成タンパク質−５、骨形成タンパク質−６、骨形成タンパク質−７、脳由来神経栄養因子、Ｅ−カドヘリン、Ｆｃキメラ、カテプシンＧ、ＩＩ型ｃｈ２阻害剤、上皮成長因子、エオタキシン、エオタキシン−２、エオタキシン−３、Ｆａｓ、線維芽細胞増殖因子−４、線維芽細胞増殖因子−５、線維芽細胞増殖因子−６、線維芽細胞増殖因子−８ｂ、線維芽細胞増殖因子−８ｃ、線維芽細胞増殖因子−９、線維芽細胞増殖因子−１０、線維芽細胞増殖因子−１７、線維芽細胞増殖因子−１８、線維芽細胞増殖因子、酸性線維芽細胞増殖因子、塩基性線維芽細胞増殖因子、１−２４ウシ塩基性線維芽細胞増殖因子フラグメント、線維芽細胞増殖因子受容体１ａ、線維芽細胞増殖因子受容体１ｂ、線維芽細胞増殖因子受容体２ａ、線維芽細胞増殖因子受容体２ｂ、線維芽細胞増殖因子受容体３ａ、線維芽細胞増殖因子受容体４、ｆｌｔ−３、ｆｌｋ−２リガンド、顆粒球コロニー刺激因子、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子、ＧＲＯａ、ＧＲＯｂ、ヘパリン結合ＥＧＦ様成長因子、ヘレグリン−ａ１  ＥＧＦドメイン、ヘレグリン−ｂ１  ＥＧＦドメイン、ヘレグリンＢ、インスリン様増殖因子−１、インスリン様増殖因子−ＩＩフラグメント３３−４０、インスリン様増殖因子結合タンパク質−２、インスリン様増殖因子−１、インスリン様増殖因子ＩＩ、インターフェロンａ、インターフェロンａＡ、インターフェロンａＡ／Ｄ、インターフェロンｂ、インターフェロンｇ、インターフェロン、インターフェロンｇ受容体１、インターロイキン−１ａ、インターロイキン−１ｂ、ＩＩ型インターロイキン可溶性受容体、インターロイキン−２、インターロイキン−２可溶性受容体ａ、インターロイキン−２可溶性受容体ｂ、インターロイキン−２可溶性受容体ｇ、インターロイキン−３、インターロイキン−５、インターロイキン−６、インターロイキン−６可溶性受容体、インターロイキン−７、インターロイキン−８、インターロイキン−１１、インターロイキン−１２、白血病阻止因子、ＬＯＮＧ  ＥＧＦ、ＬＯＮＧ  Ｒ２  ＩＧＦ−１、ＬＹＮ  Ａ、マクロファージ炎症性タンパク質−１ａ、マクロファージ炎症性タンパク質−１ｂ、マクロファージ炎症性タンパク質−１ｇ、マトリックスメタロプロテアーゼ−１、マトリックスメタロプロテアーゼ−２、マトリックスメタロプロテアーゼ−９、ＭＩＧ、単球走化性タンパク質−１、単球走化性タンパク質−３、単球走化性タンパク質−４、単球走化性タンパク質−５、神経増殖因子受容体、ニュートロフィン−３、ニュートロフィン−４、ノギン、ノッチ−１、オンコスタチンＭ、オンコスタチンＭ受容体ｂ、オステオポンチン、オステオポプロテグリン、フェニルアルシンオキシド、血小板由来成長因子、血小板由来成長因子−ＡＢ、血小板由来成長因子−ＢＢ、血小板由来成長因子  可溶性受容体ａ、血小板由来成長因子受容体ｂ、抗ＰＯＵ５Ｆ１、ｏｃｔ４、ＲＡＮＴＥＳ、ＳＣＦ可溶性受容体、Ｌ−セレクチン、幹細胞因子、ストロマ細胞由来因子１ａ、ストロマ細胞由来因子１ｂ、トロンボポエチン、Ｔｉｅ−１、組織メタロプロテアーゼ阻害物質−２、トランスフォーミング増殖因子−ａ、トランスフォーミング増殖因子−ｂ１、トランスフォーミング増殖因子−ｂ２、トランスフォーミング増殖因子−ｂ３、トランスフォーミング増殖因子−ｂ１  ＩＩ型可溶性フラグメント、トランスフォーミング増殖因子−ｂ可溶性受容体ＩＩＩ、ＴｒｋＢ、血管内皮細胞増殖因子受容体１２０、血管内皮細胞増殖因子受容体１２１、血管内皮細胞増殖因子受容体１６４、ＶＥＧＦ受容体−２／Ｆｌｋ１／ＫＤＲ、及び／またはＶＥＧＦ受容体−３／Ｆｌｔ−４でよい。エクスビボ拡張のために使用される各増殖因子の量は、当業者に公知であり、本明細書に記載の方法での使用に好適である。
【０１４１】
場合によっては、新鮮に調製されたまたは先に凍結された、工学的に作製された造血細胞は、フィーダー細胞の少なくとも１種の使用によってエクスビボで拡張され得る。フィーダー細胞の任意の種類は、該フィーダー細胞が工学的に作製された造血細胞の生存を維持し、工学的に作製された造血細胞増殖及び分化を促進するように使用され得る。場合によっては、少なくとも１つのフィーダー細胞と組み合わされた少なくとも１つの成長因子は、該フィーダー細胞が工学的に作製された造血細胞の生存を維持し、工学的に作製された造血細胞増殖及び分化を促進するように使用され得る。場合によっては、フィーダー細胞は、有糸分裂的に不活性でよい。場合によっては、フィーダー細胞の１超の種類は、細胞を拡張するために使用され得る。場合によっては、フィーダー細胞種は、成体マウス内皮細胞、マウス胚性内皮細胞、生体マウス線維芽細胞、マウス胚性線維芽細胞、成人ヒト内皮細胞、ヒト胚性内皮細胞、ヒト成人線維芽細胞、成人ヒト線維芽細胞、成人非ヒト霊長類内皮細胞、胚性非ヒト霊長類内皮細胞、成人非ヒト霊長類線維芽細胞、胚性非ヒト霊長類線維芽細胞、成体ウシ内皮細胞、胚性ウシ内皮細胞、成体ウシ線維芽細胞、胚性ウシ線維芽細胞、成体ブタ内皮細胞、胚性ブタ内皮細胞、成体ブタ線維芽細胞、胚性ブタ線維芽細胞などから得られる。
【０１４２】
場合によっては、フィーダー細胞は修飾され得る。例えば、修飾は遺伝的でよい。場合によっては、フィーダー細胞は、非野生型遺伝子を発現し、野生型遺伝子の発現を抑制するか、または野生型遺伝子を過剰発現する。例えば、フィーダー細胞は、ＬａｃＺ、ＧＦＰ、ＲＦＰ等を発現することがある。
【０１４３】
造血幹細胞の組成物
本明細書で提供される方法の造血幹細胞及びその組成物は、ヒト投与のための十分な殺菌条件下で調製された等張賦形剤を含む、医薬組成物の形態で供給され得る。細胞賦形剤及び組成物の任意の添加要素の選択は、投与経路及び投与に使用される装置に従って変化する。医薬製造における一般的原則のためには、Ｃｅｌｌ  Ｔｈｅｒａｐｙ：  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ，Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ，ａｎｄ  Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ，Ｇ．Ｍｏｒｓｔｙｎ＆Ｗ．Ｓｈｅｒｉｄａｎ著，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ，１９９６年；及びＨｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ  Ｔｈｅｒａｐｙ，Ｅ．Ｄ．Ｂａｌｌ，Ｊ．Ｌｉｓｔｅｒ＆Ｐ．Ｌａｗ，Ｃｈｕｒｃｈｉｌｌ  Ｌｉｖｉｎｇｓｔｏｎｅ，２０００年を参照されたい。
【０１４４】
場合によっては、造血細胞は、ドナーとレシピエントとの間でＨＬＡ−適合でよい。場合によっては、造血細胞は、ドナーとレシピエントとの間でＨＬＡ−非適合でよい。
【０１４５】
場合によっては、医薬組成物は、レシピエントにおける造血細胞の生着を亢進する薬剤を含み得る。場合によっては、医薬組成物は、レシピエントにおける造血細胞の生着に影響を与えない薬剤を含み得る。場合によっては、造血細胞に対するレシピエントの負の反応を避ける薬剤を含み得る。例えば、上記の任意の薬剤は、サイトカイン、ケモカイン、増殖因子、賦形剤、担体、不活性分子、抗体またはそのフラグメント、低分子、薬物、アゴニスト、アンタゴニスト、化学物質等でよい。レシピエントにおいて造血細胞の医薬組成物で使用される任意の薬剤が生理学的に許容される。
【０１４６】
レシピエントに造血細胞を送達するために様々な方法が使用され、当業者に公知である任意の方法が本明細書に記載の造血細胞に適用され得る。例えば、造血細胞は、ニードル、カテーテル、中心経路等を用いて注入によってレシピエントに送達され得る、場合によっては、造血細胞は、血管内に、静脈内で、動脈内に、頭蓋内に、腹腔内で、皮下的に、筋肉内で、眼窩内に、または造血細胞がレシピエントで持続し、再生し及び分化するように、造血細胞をレシピエントの適切な部位に存在させる任意のソースによって、送達され得る。
【０１４７】
工学的に作製された造血細胞の組成物は、細胞の生着及び機能的動員を促進する１またはそれ以上の成分を含んでもまたはそれを組み合わせてもよい。例えば、成分は、細胞を支持し、細胞の接着を促進するマトリックスタンパク質、または補足的な細胞種（例えば、内皮細胞）を含んでよい。
【０１４８】
場合によっては、造血細胞は、レシピエント内の臓器、組織または細胞種に存在し得る。例えば、臓器は、脳、甲状腺、眼、皮膚、肺、膵臓、脾臓、膀胱、前立腺、腎臓、胃、肝臓、心臓、副腎、気管支、大腸、小腸、脊髄、骨、骨髄、下垂体、唾液腺、胆嚢、咽頭、リンパ節、前立腺、骨格筋、虫垂、食道、副甲状腺、気管、尿道、卵巣、睾丸、子宮、尿管、卵管、または体の任意の内分泌腺でよい。場合によっては、組織または細胞種は臓器の一部でよい。場合によっては、組織または細胞種は臓器から得られる。場合によっては、組織または細胞種は臓器から単離され得る。
【０１４９】
場合によっては、造血幹細胞のレシピエントは、固形臓器移植を受けていないことがある。場合によっては、該レシピエントは、固形臓器移植を受けたかもしれない。場合によっては、固形臓器移植は、該レシピエントへの工学的に作製された造血幹細胞の投与前に、少なくとも０．１日、少なくとも０．２日、少なくとも０．３日、少なくとも０．４日、少なくとも０．５日、少なくとも０．６日、少なくとも０．７日、少なくとも０．８日、少なくとも０．９日、少なくとも１．０日、少なくとも１．１日、少なくとも１．２日、少なくとも１．３日、少なくとも１．４日、少なくとも１．５日、少なくとも１．６日、少なくとも１．７日、少なくとも１．８日、少なくとも１．９日、少なくとも２．０日、少なくとも２．１日、少なくとも２．２日、少なくとも２．３日、少なくとも２．４日、少なくとも２．５日、少なくとも２．６日、少なくとも２．７日、少なくとも２．８日、少なくとも２．９日、少なくとも３．０日、少なくとも３．１日、少なくとも３．２日、少なくとも３．３日、少なくとも３．４日、少なくとも３．５日、少なくとも３．６日、少なくとも３．７日、少なくとも３．８日、少なくとも３．９日、少なくとも４．０日、少なくとも４．１日、少なくとも４．２日、少なくとも４．３日、少なくとも４．４日、少なくとも４．５日、少なくとも４．６日、少なくとも４．７日、少なくとも４．８日、少なくとも４．９日、少なくとも５．０日、少なくとも５．１日、少なくとも５．２日、少なくとも５．３日、少なくとも５．４日、少なくとも５．５日、少なくとも５．６日、少なくとも５．７日、少なくとも５．８日、少なくとも５．９日、少なくとも６．０日、少なくとも６．１日、少なくとも６．２日、少なくとも６．３日、少なくとも６．４日、少なくとも６．５日、少なくとも６．６日、少なくとも６．７日、少なくとも６．８日、少なくとも６．９日、少なくとも７．０日、少なくとも７．１日、少なくとも７．２日、少なくとも７．３日、少なくとも７．４日、少なくとも７．５日、少なくとも７．６日、少なくとも７．７日、少なくとも７．８日、少なくとも７．９日、少なくとも８．０日、少なくとも８．１日、少なくとも８．２日、少なくとも８．３日、少なくとも８．４日、少なくとも８．５日、少なくとも８．６日、少なくとも８．７日、少なくとも８．８日、少なくとも８．９日、少なくとも９．０日、少なくとも９．１日、少なくとも９．２日、少なくとも９．３日、少なくとも９．４日、少なくとも９．５日、少なくとも９．６日、少なくとも９．７日、少なくとも９．８日、少なくとも９．９日、少なくとも１０日、少なくとも１０．５日、少なくとも１１日、少なくとも１１．５日、少なくとも１２日、少なくとも１２．５日、少なくとも１３日、少なくとも１３．５日、少なくとも１４日、少なくとも１４．５日、少なくとも１５日、少なくとも１５．５日、少なくとも１６日、少なくとも１６．５日、少なくとも１７日、少なくとも１７．５日、少なくとも１８日、少なくとも１８．５日、少なくとも１９日、少なくとも２０日、少なくとも２０．５日、少なくとも２１日、少なくとも２１．５日、少なくとも２２日、少なくとも２２．５日、少なくとも２３日、少なくとも２３．５日、少なくとも２４日、少なくとも２４．５日、少なくとも２５日、少なくとも２５．５日、少なくとも２６日、少なくとも２６．５日、少なくとも２７日、少なくとも２７．５日、少なくとも２８日、少なくとも２８．５日、少なくとも２９日、少なくとも３０日、少なくとも３０．５日、少なくとも３１日、少なくとも３１．５日、少なくとも３２日、少なくとも３２．５日、少なくとも３３日、少なくとも３３．５日、少なくとも３４日、少なくとも３４．５日、少なくとも３５日、少なくとも３５．５日、少なくとも３６日、少なくとも３６．５日、少なくとも３７日、少なくとも３７．５日、少なくとも３８日、少なくとも３８．５日、少なくとも３９日、少なくとも４０日、少なくとも４０．５日、少なくとも４１日、少なくとも４１．５日、少なくとも４２日、少なくとも４２．５日、少なくとも４３日、少なくとも４３．５日、少なくとも４４日、少なくとも４４．５日、少なくとも４５日、少なくとも４５．５日、少なくとも４６日、少なくとも４６．５日、少なくとも４７日、少なくとも４７．５日、少なくとも４８日、少なくとも４８．５日、少なくとも４９日、または少なくとも５０日に行われる。
【０１５０】
場合によっては、固形臓器レシピエントは、工学的に作製された造血幹細胞を１回投与され得る。場合によっては、固形臓器レシピエントは、工学的に作製された造血幹細胞を１回超投与され得る。場合によっては、工学的に作製された造血幹細胞の各投与間の経過時間は、同一でよい。場合によっては、工学的に作製された造血幹細胞の各投与間の経過時間は、異なってよい。
【０１５１】
例えば、固形臓器移植レシピエントは、工学的に作製された造血幹細胞の第１回投与が、固形臓器移植後の、少なくとも０．１日、少なくとも０．２日、少なくとも０．３日、少なくとも０．４日、少なくとも０．５日、少なくとも０．６日、少なくとも０．７日、少なくとも０．８日、少なくとも０．９日、少なくとも１．０日、少なくとも１．１日、少なくとも１．２日、少なくとも１．３日、少なくとも１．４日、少なくとも１．５日、少なくとも１．６日、少なくとも１．７日、少なくとも１．８日、少なくとも１．９日、少なくとも２．０日、少なくとも２．１日、少なくとも２．２日、少なくとも２．３日、少なくとも２．４日、少なくとも２．５日、少なくとも２．６日、少なくとも２．７日、少なくとも２．８日、少なくとも２．９日、少なくとも３．０日、少なくとも３．１日、少なくとも３．２日、少なくとも３．３日、少なくとも３．４日、少なくとも３．５日、少なくとも３．６日、少なくとも３．７日、少なくとも３．８日、少なくとも３．９日、少なくとも４．０日、少なくとも４．１日、少なくとも４．２日、少なくとも４．３日、少なくとも４．４日、少なくとも４．５日、少なくとも４．６日、少なくとも４．７日、少なくとも４．８日、少なくとも４．９日、少なくとも５．０日、少なくとも５．１日、少なくとも５．２日、少なくとも５．３日、少なくとも５．４日、少なくとも５．５日、少なくとも５．６日、少なくとも５．７日、少なくとも５．８日、少なくとも５．９日、少なくとも６．０日、少なくとも６．１日、少なくとも６．２日、少なくとも６．３日、少なくとも６．４日、少なくとも６．５日、少なくとも６．６日、少なくとも６．７日、少なくとも６．８日、少なくとも６．９日、少なくとも７．０日、少なくとも７．１日、少なくとも７．２日、少なくとも７．３日、少なくとも７．４日、少なくとも７．５日、少なくとも７．６日、少なくとも７．７日、少なくとも７．８日、少なくとも７．９日、少なくとも８．０日、少なくとも８．１日、少なくとも８．２日、少なくとも８．３日、少なくとも８．４日、少なくとも８．５日、少なくとも８．６日、少なくとも８．７日、少なくとも８．８日、少なくとも８．９日、少なくとも９．０日、少なくとも９．１日、少なくとも９．２日、少なくとも９．３日、少なくとも９．４日、少なくとも９．５日、少なくとも９．６日、少なくとも９．７日、少なくとも９．８日、少なくとも９．９日、少なくとも１０日、少なくとも１０．５日、少なくとも１１日、少なくとも１１．５日、少なくとも１２日、少なくとも１２．５日、少なくとも１３日、少なくとも１３．５日、少なくとも１４日、少なくとも１４．５日、少なくとも１５日、少なくとも１５．５日、少なくとも１６日、少なくとも１６．５日、少なくとも１７日、少なくとも１７．５日、少なくとも１８日、少なくとも１８．５日、少なくとも１９日、少なくとも２０日、少なくとも２０．５日、少なくとも２１日、少なくとも２１．５日、少なくとも２２日、少なくとも２２．５日、少なくとも２３日、少なくとも２３．５日、少なくとも２４日、少なくとも２４．５日、少なくとも２５日、少なくとも２５．５日、少なくとも２６日、少なくとも２６．５日、少なくとも２７日、少なくとも２７．５日、少なくとも２８日、少なくとも２８．５日、少なくとも２９日、少なくとも３０日、少なくとも３０．５日、少なくとも３１日、少なくとも３１．５日、少なくとも３２日、少なくとも３２．５日、少なくとも３３日、少なくとも３３．５日、少なくとも３４日、少なくとも３４．５日、少なくとも３５日、少なくとも３５．５日、少なくとも３６日、少なくとも３６．５日、少なくとも３７日、少なくとも３７．５日、少なくとも３８日、少なくとも３８．５日、少なくとも３９日、少なくとも４０日、少なくとも４０．５日、少なくとも４１日、少なくとも４１．５日、少なくとも４２日、少なくとも４２．５日、少なくとも４３日、少なくとも４３．５日、少なくとも４４日、少なくとも４４．５日、少なくとも４５日、少なくとも４５．５日、少なくとも４６日、少なくとも４６．５日、少なくとも４７日、少なくとも４７．５日、少なくとも４８日、少なくとも４８．５日、少なくとも４９日、または少なくとも５０日に行われる。
【０１５２】
場合によっては、工学的に作製された臓器幹細胞の第２回投与は、少なくとも該レシピエントに行われ得る。場合によっては、固形臓器移植は、工学的に作製された造血幹細胞の投与が反復されるように該工学的に作製された造血幹細胞の第１回投与後、少なくとも０．１日、少なくとも０．２日、少なくとも０．３日、少なくとも０．４日、少なくとも０．５日、少なくとも０．６日、少なくとも０．７日、少なくとも０．８日、少なくとも０．９日、少なくとも１．０日、少なくとも１．１日、少なくとも１．２日、少なくとも１．３日、少なくとも１．４日、少なくとも１．５日、少なくとも１．６日、少なくとも１．７日、少なくとも１．８日、少なくとも１．９日、少なくとも２．０日、少なくとも２．１日、少なくとも２．２日、少なくとも２．３日、少なくとも２．４日、少なくとも２．５日、少なくとも２．６日、少なくとも２．７日、少なくとも２．８日、少なくとも２．９日、少なくとも３．０日、少なくとも３．１日、少なくとも３．２日、少なくとも３．３日、少なくとも３．４日、少なくとも３．５日、少なくとも３．６日、少なくとも３．７日、少なくとも３．８日、少なくとも３．９日、少なくとも４．０日、少なくとも４．１日、少なくとも４．２日、少なくとも４．３日、少なくとも４．４日、少なくとも４．５日、少なくとも４．６日、少なくとも４．７日、少なくとも４．８日、少なくとも４．９日、少なくとも５．０日、少なくとも５．１日、少なくとも５．２日、少なくとも５．３日、少なくとも５．４日、少なくとも５．５日、少なくとも５．６日、少なくとも５．７日、少なくとも５．８日、少なくとも５．９日、少なくとも６．０日、少なくとも６．１日、少なくとも６．２日、少なくとも６．３日、少なくとも６．４日、少なくとも６．５日、少なくとも６．６日、少なくとも６．７日、少なくとも６．８日、少なくとも６．９日、少なくとも７．０日、少なくとも７．１日、少なくとも７．２日、少なくとも７．３日、少なくとも７．４日、少なくとも７．５日、少なくとも７．６日、少なくとも７．７日、少なくとも７．８日、少なくとも７．９日、少なくとも８．０日、少なくとも８．１日、少なくとも８．２日、少なくとも８．３日、少なくとも８．４日、少なくとも８．５日、少なくとも８．６日、少なくとも８．７日、少なくとも８．８日、少なくとも８．９日、少なくとも９．０日、少なくとも９．１日、少なくとも９．２日、少なくとも９．３日、少なくとも９．４日、少なくとも９．５日、少なくとも９．６日、少なくとも９．７日、少なくとも９．８日、少なくとも９．９日、少なくとも１０日、少なくとも１０．５日、少なくとも１１日、少なくとも１１．５日、少なくとも１２日、少なくとも１２．５日、少なくとも１３日、少なくとも１３．５日、少なくとも１４日、少なくとも１４．５日、少なくとも１５日、少なくとも１５．５日、少なくとも１６日、少なくとも１６．５日、少なくとも１７日、少なくとも１７．５日、少なくとも１８日、少なくとも１８．５日、少なくとも１９日、少なくとも２０日、少なくとも２０．５日、少なくとも２１日、少なくとも２１．５日、少なくとも２２日、少なくとも２２．５日、少なくとも２３日、少なくとも２３．５日、少なくとも２４日、少なくとも２４．５日、少なくとも２５日、少なくとも２５．５日、少なくとも２６日、少なくとも２６．５日、少なくとも２７日、少なくとも２７．５日、少なくとも２８日、少なくとも２８．５日、少なくとも２９日、少なくとも３０日、少なくとも３０．５日、少なくとも３１日、少なくとも３１．５日、少なくとも３２日、少なくとも３２．５日、少なくとも３３日、少なくとも３３．５日、少なくとも３４日、少なくとも３４．５日、少なくとも３５日、少なくとも３５．５日、少なくとも３６日、少なくとも３６．５日、少なくとも３７日、少なくとも３７．５日、少なくとも３８日、少なくとも３８．５日、少なくとも３９日、少なくとも４０日、少なくとも４０．５日、少なくとも４１日、少なくとも４１．５日、少なくとも４２日、少なくとも４２．５日、少なくとも４３日、少なくとも４３．５日、少なくとも４４日、少なくとも４４．５日、少なくとも４５日、少なくとも４５．５日、少なくとも４６日、少なくとも４６．５日、少なくとも４７日、少なくとも４７．５日、少なくとも４８日、少なくとも４８．５日、少なくとも４９日、または少なくとも５０日に行われる。
【０１５３】
場合によっては、工学的に作製された臓器幹細胞の２回超投与は、該レシピエントに行われ得る。工学的に作製された造血幹細胞の投与が反復されるように、例えば、少なくとも０．１日、少なくとも０．２日、少なくとも０．３日、少なくとも０．４日、少なくとも０．５日、少なくとも０．６日、少なくとも０．７日、少なくとも０．８日、少なくとも０．９日、少なくとも１．０日、少なくとも１．１日、少なくとも１．２日、少なくとも１．３日、少なくとも１．４日、少なくとも１．５日、少なくとも１．６日、少なくとも１．７日、少なくとも１．８日、少なくとも１．９日、少なくとも２．０日、少なくとも２．１日、少なくとも２．２日、少なくとも２．３日、少なくとも２．４日、少なくとも２．５日、少なくとも２．６日、少なくとも２．７日、少なくとも２．８日、少なくとも２．９日、少なくとも３．０日、少なくとも３．１日、少なくとも３．２日、少なくとも３．３日、少なくとも３．４日、少なくとも３．５日、少なくとも３．６日、少なくとも３．７日、少なくとも３．８日、少なくとも３．９日、少なくとも４．０日、少なくとも４．１日、少なくとも４．２日、少なくとも４．３日、少なくとも４．４日、少なくとも４．５日、少なくとも４．６日、少なくとも４．７日、少なくとも４．８日、少なくとも４．９日、少なくとも５．０日、少なくとも５．１日、少なくとも５．２日、少なくとも５．３日、少なくとも５．４日、少なくとも５．５日、少なくとも５．６日、少なくとも５．７日、少なくとも５．８日、少なくとも５．９日、少なくとも６．０日、少なくとも６．１日、少なくとも６．２日、少なくとも６．３日、少なくとも６．４日、少なくとも６．５日、少なくとも６．６日、少なくとも６．７日、少なくとも６．８日、少なくとも６．９日、少なくとも７．０日、少なくとも７．１日、少なくとも７．２日、少なくとも７．３日、少なくとも７．４日、少なくとも７．５日、少なくとも７．６日、少なくとも７．７日、少なくとも７．８日、少なくとも７．９日、少なくとも８．０日、少なくとも８．１日、少なくとも８．２日、少なくとも８．３日、少なくとも８．４日、少なくとも８．５日、少なくとも８．６日、少なくとも８．７日、少なくとも８．８日、少なくとも８．９日、少なくとも９．０日、少なくとも９．１日、少なくとも９．２日、少なくとも９．３日、少なくとも９．４日、少なくとも９．５日、少なくとも９．６日、少なくとも９．７日、少なくとも９．８日、少なくとも９．９日、少なくとも１０日、少なくとも１０．５日、少なくとも１１日、少なくとも１１．５日、少なくとも１２日、少なくとも１２．５日、少なくとも１３日、少なくとも１３．５日、少なくとも１４日、少なくとも１４．５日、少なくとも１５日、少なくとも１５．５日、少なくとも１６日、少なくとも１６．５日、少なくとも１７日、少なくとも１７．５日、少なくとも１８日、少なくとも１８．５日、少なくとも１９日、少なくとも２０日、少なくとも２０．５日、少なくとも２１日、少なくとも２１．５日、少なくとも２２日、少なくとも２２．５日、少なくとも２３日、少なくとも２３．５日、少なくとも２４日、少なくとも２４．５日、少なくとも２５日、少なくとも２５．５日、少なくとも２６日、少なくとも２６．５日、少なくとも２７日、少なくとも２７．５日、少なくとも２８日、少なくとも２８．５日、少なくとも２９日、少なくとも３０日、少なくとも３０．５日、少なくとも３１日、少なくとも３１．５日、少なくとも３２日、少なくとも３２．５日、少なくとも３３日、少なくとも３３．５日、少なくとも３４日、少なくとも３４．５日、少なくとも３５日、少なくとも３５．５日、少なくとも３６日、少なくとも３６．５日、少なくとも３７日、少なくとも３７．５日、少なくとも３８日、少なくとも３８．５日、少なくとも３９日、少なくとも４０日、少なくとも４０．５日、少なくとも４１日、少なくとも４１．５日、少なくとも４２日、少なくとも４２．５日、少なくとも４３日、少なくとも４３．５日、少なくとも４４日、少なくとも４４．５日、少なくとも４５日、少なくとも４５．５日、少なくとも４６日、少なくとも４６．５日、少なくとも４７日、少なくとも４７．５日、少なくとも４８日、少なくとも４８．５日、少なくとも４９日、または少なくとも５０日が、工学的に作製された造血幹細胞の第２回の投与と第３回の投与との間に経過してよい。
【０１５４】
上記の時間枠は、任意で第３回と第４回との投与間、第４回と第５回との投与間、第５回と第６回との投与間、第６回と第７回との投与間、第７回と第８回との投与間、第８回と第９回との投与間、第９回と第１０回との投与間等に経過してもよい。
【０１５５】
骨髄非破壊的処置
ＨＬＡ−適合またはＨＬＡ−非適合の固形臓器の移植後に、レシピエントは、骨髄非破壊的処置で治療され得る。場合によっては、骨髄非破壊的処置は、当業者に公知の方法を用いて行われる。場合によっては、レシピエントは複数の薬剤を含む骨髄非破壊的処置を受け得る。場合によっては、該薬剤はサイモグロブリン（ＡＴＧ）、Ｔ細胞枯渇剤及び／または照射を含み得る。
【０１５６】
場合によっては、ＡＴＧは静脈内で送達され得る。場合によっては、ＡＴＧの１投与は、レシピエントに送達され得る。場合によっては、レシピエントはＡＴＧの１超投与を受け得る。例えば、レシピエントは、ＡＴＧの少なくとも１投与、ＡＴＧの少なくとも２投与、ＡＴＧの少なくとも３投与、ＡＴＧの少なくとも４投与、ＡＴＧの少なくとも５投与、ＡＴＧの少なくとも６投与、ＡＴＧの少なくとも７投与、ＡＴＧの少なくとも８投与、ＡＴＧの少なくとも９投与、ＡＴＧの少なくとも１０投与、ＡＴＧの少なくとも１１投与、ＡＴＧの少なくとも１２投与、ＡＴＧの少なくとも１３投与、ＡＴＧの少なくとも１４投与、ＡＴＧの少なくとも１５投与、ＡＴＧの少なくとも１６投与、ＡＴＧの少なくとも１７投与、ＡＴＧの少なくとも１８投与、ＡＴＧの少なくとも１９投与、またはＡＴＧの少なくとも２０投与を受け得る。
【０１５７】
場合によっては、ＡＴＧの各用量は、少なくとも０．１ｍｇ／ｋｇ、少なくとも０．２ｍｇ／ｋｇ、少なくとも０．３ｍｇ／ｋｇ、少なくとも０．４ｍｇ／ｋｇ、少なくとも０．５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも０．６ｍｇ／ｋｇ、少なくとも０．７ｍｇ／ｋｇ、少なくとも０．８ｍｇ／ｋｇ、少なくとも０．９ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１．０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１．１ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１．２ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１．３ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１．４ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１．５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１．６ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１．７ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１．８ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１．９ｍｇ／ｋｇ、少なくとも２．０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも２．１ｍｇ／ｋｇ、少なくとも２．２ｍｇ／ｋｇ、少なくとも２．３ｍｇ／ｋｇ、少なくとも２．４ｍｇ／ｋｇ、少なくとも２．５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも２．６ｍｇ／ｋｇ、少なくとも２．７ｍｇ／ｋｇ、少なくとも２．８ｍｇ／ｋｇ、少なくとも２．９ｍｇ／ｋｇ、少なくとも３．０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも３．１ｍｇ／ｋｇ、少なくとも３．２ｍｇ／ｋｇ、少なくとも３．３ｍｇ／ｋｇ、少なくとも３．４ｍｇ／ｋｇ、少なくとも３．５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも３．６ｍｇ／ｋｇ、少なくとも３．７ｍｇ／ｋｇ、少なくとも３．８ｍｇ／ｋｇ、少なくとも３．９ｍｇ／ｋｇ、少なくとも４．０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも４．１ｍｇ／ｋｇ、少なくとも４．２ｍｇ／ｋｇ、少なくとも４．３ｍｇ／ｋｇ、少なくとも４．４ｍｇ／ｋｇ、少なくとも４．５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも４．６ｍｇ／ｋｇ、少なくとも４．７ｍｇ／ｋｇ、少なくとも４．８ｍｇ／ｋｇ、少なくとも４．９ｍｇ／ｋｇ、少なくとも５．０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも５．１ｍｇ／ｋｇ、少なくとも５．２ｍｇ／ｋｇ、少なくとも５．３ｍｇ／ｋｇ、少なくとも５．４ｍｇ／ｋｇ、少なくとも５．５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも５．６ｍｇ／ｋｇ、少なくとも５．７ｍｇ／ｋｇ、少なくとも５．８ｍｇ／ｋｇ、少なくとも５．９ｍｇ／ｋｇ、少なくとも６．０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも６．１ｍｇ／ｋｇ、少なくとも６．２ｍｇ／ｋｇ、少なくとも６．３ｍｇ／ｋｇ、少なくとも６．４ｍｇ／ｋｇ、少なくとも６．５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも６．６ｍｇ／ｋｇ、少なくとも６．７ｍｇ／ｋｇ、少なくとも６．８ｍｇ／ｋｇ、少なくとも６．９ｍｇ／ｋｇ、少なくとも７．０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも７．１ｍｇ／ｋｇ、少なくとも７．２ｍｇ／ｋｇ、少なくとも７．３ｍｇ／ｋｇ、少なくとも７．４ｍｇ／ｋｇ、少なくとも７．５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも７．６ｍｇ／ｋｇ、少なくとも７．７ｍｇ／ｋｇ、少なくとも７．８ｍｇ／ｋｇ、少なくとも７．９ｍｇ／ｋｇ、少なくとも８．０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも８．１ｍｇ／ｋｇ、少なくとも８．２ｍｇ／ｋｇ、少なくとも８．３ｍｇ／ｋｇ、少なくとも８．４ｍｇ／ｋｇ、少なくとも８．５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも８．６ｍｇ／ｋｇ、少なくとも８．７ｍｇ／ｋｇ、少なくとも８．８ｍｇ／ｋｇ、少なくとも８．９ｍｇ／ｋｇ、少なくとも９．０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも９．１ｍｇ／ｋｇ、少なくとも９．２ｍｇ／ｋｇ、少なくとも９．３ｍｇ／ｋｇ、少なくとも９．４ｍｇ／ｋｇ、少なくとも９．５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも９．６ｍｇ／ｋｇ、少なくとも９．７ｍｇ／ｋｇ、少なくとも９．８ｍｇ／ｋｇ、少なくとも９．９ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１０．５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１１ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１１．５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１２ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１２．５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１３ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１３．５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１４ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１４．５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１５．５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１６ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１６．５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１７ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１７．５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１８ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１８．５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１９ｍｇ／ｋｇ、または少なくとも２０ｍｇ／ｋｇでよい。
【０１５８】
ＡＴＧは、固形臓器移植の同日に投与され得る。場合によっては、ＡＴＧの複数回投与は、臓器移植後の期間に渡って行われる。場合によっては、ＡＴＧの複数回投与は、少なくとも０．１日、少なくとも０．２日、少なくとも０．３日、少なくとも０．４日、少なくとも０．５日、少なくとも０．６日、少なくとも０．７日、少なくとも０．８日、少なくとも０．９日、少なくとも１．０日、少なくとも１．１日、少なくとも１．２日、少なくとも１．３日、少なくとも１．４日、少なくとも１．５日、少なくとも１．６日、少なくとも１．７日、少なくとも１．８日、少なくとも１．９日、少なくとも２．０日、少なくとも２．１日、少なくとも２．２日、少なくとも２．３日、少なくとも２．４日、少なくとも２．５日、少なくとも２．６日、少なくとも２．７日、少なくとも２．８日、少なくとも２．９日、少なくとも３．０日、少なくとも３．１日、少なくとも３．２日、少なくとも３．３日、少なくとも３．４日、少なくとも３．５日、少なくとも３．６日、少なくとも３．７日、少なくとも３．８日、少なくとも３．９日、少なくとも４．０日、少なくとも４．１日、少なくとも４．２日、少なくとも４．３日、少なくとも４．４日、少なくとも４．５日、少なくとも４．６日、少なくとも４．７日、少なくとも４．８日、少なくとも４．９日、少なくとも５．０日、少なくとも５．１日、少なくとも５．２日、少なくとも５．３日、少なくとも５．４日、少なくとも５．５日、少なくとも５．６日、少なくとも５．７日、少なくとも５．８日、少なくとも５．９日、少なくとも６．０日、少なくとも６．１日、少なくとも６．２日、少なくとも６．３日、少なくとも６．４日、少なくとも６．５日、少なくとも６．６日、少なくとも６．７日、少なくとも６．８日、少なくとも６．９日、少なくとも７．０日、少なくとも７．１日、少なくとも７．２日、少なくとも７．３日、少なくとも７．４日、少なくとも７．５日、少なくとも７．６日、少なくとも７．７日、少なくとも７．８日、少なくとも７．９日、少なくとも８．０日、少なくとも８．１日、少なくとも８．２日、少なくとも８．３日、少なくとも８．４日、少なくとも８．５日、少なくとも８．６日、少なくとも８．７日、少なくとも８．８日、少なくとも８．９日、少なくとも９．０日、少なくとも９．１日、少なくとも９．２日、少なくとも９．３日、少なくとも９．４日、少なくとも９．５日、少なくとも９．６日、少なくとも９．７日、少なくとも９．８日、少なくとも９．９日、少なくとも１０日、少なくとも１０．５日、少なくとも１１日、少なくとも１１．５日、少なくとも１２日、少なくとも１２．５日、少なくとも１３日、少なくとも１３．５日、少なくとも１４日、少なくとも１４．５日、少なくとも１５日、少なくとも１５．５日、少なくとも１６日、少なくとも１６．５日、少なくとも１７日、少なくとも１７．５日、少なくとも１８日、少なくとも１８．５日、少なくとも１９日、または少なくとも２０日の期間、投与され得る。
【０１５９】
場合によっては、ＡＴＧは、移植された臓器が宿主血液で潅流される前に、手術中に送達される。場合によっては、ＡＴＧは、移植された臓器が宿主血液で潅流された後に、手術中に送達される。場合によっては、ＡＴＧは、移植された臓器が宿主血液で潅流される前に、静脈内で送達される。場合によっては、ＡＴＧは、移植された臓器が宿主血液で潅流された後に、静脈内で送達される。場合によっては、ＡＴＧは、移植された臓器が宿主血液で潅流される前に、動脈内で送達される。場合によっては、ＡＴＧは、移植された臓器が宿主血液で潅流された後に、動脈内で送達される。場合によっては、ＡＴＧは、移植された臓器が宿主血液で潅流される前に、皮下的に送達される。場合によっては、ＡＴＧは、移植された臓器が宿主血液で潅流された後に、皮下的に送達される。場合によっては、ＡＴＧは、移植された臓器が宿主血液で潅流される前に、腹腔内で送達される。場合によっては、ＡＴＧは、移植された臓器が宿主血液で潅流された後に、腹腔内で送達される。
【０１６０】
コルチコステロイド療法は、ＡＴＧ投与の前に医師によってなされ得る。ＡＴＧの副作用を減少させるために十分な当業者に公知の任意のコルチコステロイドは有効量で使用され得るが、場合によってはソルメドロールが投与され得る。場合によっては、コルチコステロイドは、ＡＴＧが投与される同日に投与され得る。例えば、ソルメドロールは、０〜４０ｍｇ、５〜５０ｍｇ、１０〜６０ｍｇ、１５〜６５ｍｇ、２０〜７０ｍｇ、２５〜７５ｍｇ、３０〜８０ｍｇ、３５〜８５ｍｇ、４０〜９０ｍｇ、４５〜９５ｍｇ、５０〜１００ｍｇ、５５〜１０５ｍｇ、６０〜１１０ｍｇ、６５〜１１５ｍｇ、７０〜１２０ｍｇ、７５〜１２５ｍｇ、８０〜１３０ｍｇ、８５〜１３５ｍｇ、９０〜１４０ｍｇ、９５〜１４５ｍｇ、１００〜１５０ｍｇ、１０５〜１５５ｍｇ、１１０〜１６０ｍｇ、１１５〜１６５ｍｇ、１２０〜１７０ｍｇ、１２５〜１７５ｍｇ、１３０〜１８０ｍｇ、１３５〜１８５ｍｇ、１４０〜１９０ｍｇ、１４５〜１９５ｍｇ、または１５０〜２００ｍｇの範囲内の用量で投与され得る。
【０１６１】
レシピエントに投与されたＡＴＧの最終投与の後で、プレドニソンが投与され得る。場合によっては、プレドニソンの１回投与が行われる。場合によっては、プレドニソンの１回超投与が行われる。例えば、プレドニソンの複数回投与が行われる。例えば、プレドニソンの複数回投与は、漸減コースまたは一定コースに従って行われる。
【０１６２】
場合によっては、漸減コースについては、プレドニソンの第１回投与は、１００ｍｇ／ｄで開始し、次いで５ｍｇ／ｄに減少され、少なくとも１５日間、５ｍｇ／ｄで一定であり、プレドニソンの第１回投与は、９０ｍｇ／ｄで開始し、５ｍｇ／ｄに減少され、少なくとも１５日間一定であり、プレドニソンの第１回投与は、８０ｍｇ／ｄで開始し、５ｍｇ／ｄに減少され、少なくとも１５日間一定であり、プレドニソンの第１回投与は、７０ｍｇ／ｄで開始し、５ｍｇ／ｄに減少され、少なくとも１５日間一定であり、プレドニソンの第１回投与は、６０ｍｇ／ｄで開始し、５ｍｇ／ｄに減少され、少なくとも１５日間一定であり、プレドニソンの第１回投与は、５０ｍｇ／ｄで開始し、５ｍｇ／ｄに減少され、少なくとも１５日間一定であり、プレドニソンの第１回投与は、４０ｍｇ／ｄで開始し、５ｍｇ／ｄに減少され、少なくとも１５日間一定であり、プレドニソンの第１回投与は、３０ｍｇ／ｄで開始し、５ｍｇ／ｄに減少され、少なくとも１５日間一定であり、プレドニソンの第１回投与は、２０ｍｇ／ｄで開始し、５ｍｇ／ｄに減少され、少なくとも１５日間一定であり、または、プレドニソンの第１回投与は、１０ｍｇ／ｄで開始し、５ｍｇ／ｄに減少され、少なくとも１５日間一定であり得る。場合によっては、一定コースについては、プレドニソンの投与は、少なくとも１５日間、１００ｍｇ／ｄ、９０ｍｇ／ｄ、８０ｍｇ／ｄ、７０ｍｇ／ｄ、６０ｍｇ／ｄ、５０ｍｇ／ｄ、４０ｍｇ／ｄ、３０ｍｇ／ｄ、２０ｍｇ／ｄ、１０ｍｇ／ｄ、または５ｍｇ／ｄでよい。
【０１６３】
場合によっては、漸進コースについては、プレドニソンの第１回投与は、１００ｍｇ／ｄで開始し、５ｍｇ／ｄに減少し、少なくとも３０日間一定であり、プレドニソンの第１回投与は、９０ｍｇ／ｄで開始し、５ｍｇ／ｄに減少し、少なくとも３０日間一定であり、プレドニソンの第１回投与は、８０ｍｇ／ｄで開始し、５ｍｇ／ｄに減少し、少なくとも３０日間一定であり、プレドニソンの第１回投与は、７０ｍｇ／ｄで開始し、５ｍｇ／ｄに減少し、少なくとも３０日間一定であり、プレドニソンの第１回投与は、６０ｍｇ／ｄで開始し、５ｍｇ／ｄに減少し、少なくとも３０日間一定であり、プレドニソンの第１回投与は、５０ｍｇ／ｄで開始し、５ｍｇ／ｄに減少し、少なくとも３０日間一定であり、プレドニソンの第１回投与は、４０ｍｇ／ｄで開始し、５ｍｇ／ｄに減少し、少なくとも３０日間一定であり、プレドニソンの第１回投与は、２０ｍｇ／ｄで開始し、５ｍｇ／ｄに減少し、少なくとも３０日間一定であり、プレドニソンの第１回投与は、１０ｍｇ／ｄで開始し、５ｍｇ／ｄに減少し、少なくとも３０日間一定であり得る。場合によっては、一定コースについては、プレドニソンの投与は、少なくとも３０日間、１００ｍｇ／ｄ、９０ｍｇ／ｄ、８０ｍｇ／ｄ、７０ｍｇ／ｄ、６０ｍｇ／ｄ、５０ｍｇ／ｄ、４０ｍｇ／ｄ、３０ｍｇ／ｄ、２０ｍｇ／ｄ、１０ｍｇ／ｄ、または５ｍｇ／ｄでよい。
【０１６４】
場合によっては、漸進コースについては、プレドニソンの第１回投与は、１００ｍｇ／ｄで開始し、５ｍｇ／ｄに減少し、少なくとも４５日間一定であり、プレドニソンの第１回投与は、９０ｍｇ／ｄで開始し、５ｍｇ／ｄに減少し、少なくとも３０日間一定であり、プレドニソンの第１回投与は、８０ｍｇ／ｄで開始し、５ｍｇ／ｄに減少し、少なくとも４５日間一定であり、プレドニソンの第１回投与は、７０ｍｇ／ｄで開始し、５ｍｇ／ｄに減少し、少なくとも４５日間一定であり、プレドニソンの第１回投与は、６０ｍｇ／ｄで開始し、５ｍｇ／ｄに減少し、少なくとも４５日間一定であり、プレドニソンの第１回投与は、５０ｍｇ／ｄで開始し、５ｍｇ／ｄに減少し、少なくとも４５日間一定であり、プレドニソンの第１回投与は、４０ｍｇ／ｄで開始し、５ｍｇ／ｄに減少し、少なくとも４５日間一定であり、プレドニソンの第１回投与は、２０ｍｇ／ｄで開始し、５ｍｇ／ｄに減少し、少なくとも４５日間一定であり、プレドニソンの第１回投与は、１０ｍｇ／ｄで開始し、５ｍｇ／ｄに減少し、少なくとも４５日間一定であり得る。場合によっては、一定コースについては、プレドニソンの投与は、少なくとも４５日間、１００ｍｇ／ｄ、９０ｍｇ／ｄ、８０ｍｇ／ｄ、７０ｍｇ／ｄ、６０ｍｇ／ｄ、５０ｍｇ／ｄ、４０ｍｇ／ｄ、３０ｍｇ／ｄ、２０ｍｇ／ｄ、１０ｍｇ／ｄ、または５ｍｇ／ｄでよい。
【０１６５】
場合によっては、漸進コースについては、プレドニソンの第１回投与は、１００ｍｇ／ｄで開始し、５ｍｇ／ｄに減少し、少なくとも６０日間一定であり、プレドニソンの第１回投与は、９０ｍｇ／ｄで開始し、５ｍｇ／ｄに減少し、少なくとも３０日間一定であり、プレドニソンの第１回投与は、８０ｍｇ／ｄで開始し、５ｍｇ／ｄに減少し、少なくとも６０日間一定であり、プレドニソンの第１回投与は、７０ｍｇ／ｄで開始し、５ｍｇ／ｄに減少し、少なくとも６０日間一定であり、プレドニソンの第１回投与は、６０ｍｇ／ｄで開始し、５ｍｇ／ｄに減少し、少なくとも６０日間一定であり、プレドニソンの第１回投与は、５０ｍｇ／ｄで開始し、５ｍｇ／ｄに減少し、少なくとも６０日間一定であり、プレドニソンの第１回投与は、４０ｍｇ／ｄで開始し、５ｍｇ／ｄに減少し、少なくとも６０日間一定であり、プレドニソンの第１回投与は、２０ｍｇ／ｄで開始し、５ｍｇ／ｄに減少し、少なくとも６０日間一定であり、プレドニソンの第１回投与は、１０ｍｇ／ｄで開始し、５ｍｇ／ｄに減少し、少なくとも６０日間一定であり得る。場合によっては、一定コースについては、プレドニソンの投与は、少なくとも６０日間、１００ｍｇ／ｄ、９０ｍｇ／ｄ、８０ｍｇ／ｄ、７０ｍｇ／ｄ、６０ｍｇ／ｄ、５０ｍｇ／ｄ、４０ｍｇ／ｄ、３０ｍｇ／ｄ、２０ｍｇ／ｄ、１０ｍｇ／ｄ、または５ｍｇ／ｄでよい。
【０１６６】
コルチコステロイド及び／またはプレドニソンは、血管内に、静脈内に、動脈内に、頭蓋内に、腹腔内に、皮下的に、筋肉内に、眼窩内に、経口で、局所的に、またはレシピエントによる適正なコルチコステロイド及び／またはプレドニソンの代謝を可能にする任意のソースによって、投与され得る。
【０１６７】
場合によっては、レシピエントのための骨髄非破壊的処理レジメンの一部として、当業者に公知の任意のＴ細胞枯渇剤が使用され得る。場合によっては、Ｔ細胞枯渇剤は、抗Ｔ細胞モノクローナル抗体またはＴ細胞枯渇剤（例えば、フルダラビン）でよい。場合によっては、１つのＴ細胞枯渇剤がレシピエントに投与される。場合によっては、１超のＴ細胞枯渇剤がレシピエントに投与される。
【０１６８】
場合によっては、Ｔ細胞枯渇剤は静脈内で投与され得る。場合によっては、Ｔ細胞枯渇剤の１回投与は静脈内で行われる。場合によっては、Ｔ細胞枯渇剤の１回投与はレシピエントに送達され得る。場合によっては、レシピエントは、Ｔ細胞枯渇剤の１回超投与を受け得る。例えば、レシピエントは、Ｔ細胞枯渇剤の少なくとも１回投与、Ｔ細胞枯渇剤の少なくとも２回投与、Ｔ細胞枯渇剤の少なくとも３回投与、Ｔ細胞枯渇剤の少なくとも４回投与、Ｔ細胞枯渇剤の少なくとも５回投与、Ｔ細胞枯渇剤の少なくとも６回投与、Ｔ細胞枯渇剤の少なくとも７回投与、Ｔ細胞枯渇剤の少なくとも８回投与、Ｔ細胞枯渇剤の少なくとも９回投与、Ｔ細胞枯渇剤の少なくとも１０回投与、Ｔ細胞枯渇剤の少なくとも１１回投与、Ｔ細胞枯渇剤の少なくとも１２回投与、Ｔ細胞枯渇剤の少なくとも１３回投与、Ｔ細胞枯渇剤の少なくとも１４回投与、Ｔ細胞枯渇剤の少なくとも１５回投与、Ｔ細胞枯渇剤の少なくとも１６回投与、Ｔ細胞枯渇剤の少なくとも１７回投与、Ｔ細胞枯渇剤の少なくとも１８回投与、Ｔ細胞枯渇剤の少なくとも１９回投与、またはＴ細胞枯渇剤の少なくとも２０回投与を受け得る。
【０１６９】
Ｔ細胞枯渇剤は、固形臓器移植と同日に投与され得る。場合によっては、複数のＴ細胞枯渇剤の用量は、臓器移植後の一定期間に送達され得る。場合によっては、複数のＴ細胞枯渇剤の用量は、少なくとも０．１日、少なくとも０．２日、少なくとも０．３日、少なくとも０．４日、少なくとも０．５日、少なくとも０．６日、少なくとも０．７日、少なくとも０．８日、少なくとも０．９日、少なくとも１．０日、少なくとも１．１日、少なくとも１．２日、少なくとも１．３日、少なくとも１．４日、少なくとも１．５日、少なくとも１．６日、少なくとも１．７日、少なくとも１．８日、少なくとも１．９日、少なくとも２．０日、少なくとも２．１日、少なくとも２．２日、少なくとも２．３日、少なくとも２．４日、少なくとも２．５日、少なくとも２．６日、少なくとも２．７日、少なくとも２．８日、少なくとも２．９日、少なくとも３．０日、少なくとも３．１日、少なくとも３．２日、少なくとも３．３日、少なくとも３．４日、少なくとも３．５日、少なくとも３．６日、少なくとも３．７日、少なくとも３．８日、少なくとも３．９日、少なくとも４．０日、少なくとも４．１日、少なくとも４．２日、少なくとも４．３日、少なくとも４．４日、少なくとも４．５日、少なくとも４．６日、少なくとも４．７日、少なくとも４．８日、少なくとも４．９日、少なくとも５．０日、少なくとも５．１日、少なくとも５．２日、少なくとも５．３日、少なくとも５．４日、少なくとも５．５日、少なくとも５．６日、少なくとも５．７日、少なくとも５．８日、少なくとも５．９日、少なくとも６．０日、少なくとも６．１日、少なくとも６．２日、少なくとも６．３日、少なくとも６．４日、少なくとも６．５日、少なくとも６．６日、少なくとも６．７日、少なくとも６．８日、少なくとも６．９日、少なくとも７．０日、少なくとも７．１日、少なくとも７．２日、少なくとも７．３日、少なくとも７．４日、少なくとも７．５日、少なくとも７．６日、少なくとも７．７日、少なくとも７．８日、少なくとも７．９日、少なくとも８．０日、少なくとも８．１日、少なくとも８．２日、少なくとも８．３日、少なくとも８．４日、少なくとも８．５日、少なくとも８．６日、少なくとも８．７日、少なくとも８．８日、少なくとも８．９日、少なくとも９．０日、少なくとも９．１日、少なくとも９．２日、少なくとも９．３日、少なくとも９．４日、少なくとも９．５日、少なくとも９．６日、少なくとも９．７日、少なくとも９．８日、少なくとも９．９日、少なくとも１０日、少なくとも１０．５日、少なくとも１１日、少なくとも１１．５日、少なくとも１２日、少なくとも１２．５日、少なくとも１３日、少なくとも１３．５日、少なくとも１４日、少なくとも１４．５日、少なくとも１５日、少なくとも１５．５日、少なくとも１６日、少なくとも１６．５日、少なくとも１７日、少なくとも１７．５日、少なくとも１８日、少なくとも１８．５日、少なくとも１９日、または少なくとも２０日の期間、送達され得る。
【０１７０】
場合によっては、Ｔ細胞枯渇剤は、移植された臓器が宿主血液で潅流される前に手術中に送達される。場合によっては、Ｔ細胞枯渇剤は、移植された臓器が宿主血液で潅流された後に手術中に送達される。場合によっては、Ｔ細胞枯渇剤は、移植された臓器が宿主血液で潅流される前に静脈内で送達される。場合によっては、Ｔ細胞枯渇剤は、移植された臓器が宿主血液で潅流された後に静脈内で送達される。場合によっては、Ｔ細胞枯渇剤は、移植された臓器が宿主血液で潅流される前に動脈内で送達される。場合によっては、Ｔ細胞枯渇剤は、移植された臓器が宿主血液で潅流された後に動脈内で送達される。場合によっては、Ｔ細胞枯渇剤は、移植された臓器が宿主血液で潅流される前に皮下的に送達される。場合によっては、Ｔ細胞枯渇剤は、移植された臓器が宿主血液で潅流された後に皮下的に送達される。場合によっては、Ｔ細胞枯渇剤は、移植された臓器が宿主血液で潅流される前に腹腔内で送達される。場合によっては、Ｔ細胞枯渇剤は、移植された臓器が宿主血液で潅流された後に腹腔内で送達される。
【０１７１】
場合によっては、フルダラビンは静脈内で投与され得る。場合によっては、フルダラビンの１回投与がレシピエントに行われ得る。場合によっては、レシピエントは、フルダラビンの１回超投与を受け得る。例えば、レシピエントは、フルダラビンの少なくとも１回投与、フルダラビンの少なくとも２回投与、フルダラビンの少なくとも３回投与、フルダラビンの少なくとも４回投与、フルダラビンの少なくとも５回投与、フルダラビンの少なくとも６回投与、フルダラビンの少なくとも７回投与、フルダラビンの少なくとも８回投与、フルダラビンの少なくとも９回投与、フルダラビンの少なくとも１０回投与、フルダラビンの少なくとも１１回投与、フルダラビンの少なくとも１２回投与、フルダラビンの少なくとも１３回投与、フルダラビンの少なくとも１４回投与、フルダラビンの少なくとも１５回投与、フルダラビンの少なくとも１６回投与、フルダラビンの少なくとも１７回投与、フルダラビンの少なくとも１８回投与、フルダラビンの少なくとも１９回投与、またはフルダラビンの少なくとも２０回投与を受け得る。
【０１７２】
場合によっては、フルダラビンの各用量は、少なくとも０．１ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも０．２ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも０．３ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも０．４ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも０．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも０．６ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも０．７ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも０．８ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも０．９ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも１．０ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも１．１ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも１．２ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも１．３ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも１．４ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも１．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも１．６ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも１．７ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも１．８ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも１．９ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも２．０ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも２．１ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも２．２ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも２．３ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも２．４ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも２．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも２．６ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも２．７ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも２．８ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも２．９ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも３．０ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも３．１ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも３．２ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも３．３ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも３．４ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも３．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも３．６ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも３．７ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも３．８ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも３．９ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも４．０ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも４．１ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも４．２ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも４．３ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも４．４ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも４．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも４．６ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも４．７ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも４．８ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも４．９ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも５．０ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも５．１ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも５．２ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも５．３ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも５．４ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも５．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも５．６ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも５．７ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも５．８ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも５．９ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも６．０ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも６．１ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも６．２ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも６．３ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも６．４ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも６．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも６．６ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも６．７ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも６．８ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも６．９ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも７．０ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも７．１ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも７．２ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも７．３ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも７．４ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも７．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも７．６ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも７．７ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも７．８ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも７．９ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも８．０ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも８．１ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも８．２ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも８．３ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも８．４ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも８．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも８．６ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも８．７ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも８．８ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも８．９ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも９．０ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも９．１ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも９．２ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも９．３ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも９．４ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも９．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも９．６ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも９．７ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも９．８ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも９．９ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも１０ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも１０．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも１１ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも１１．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも１２ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも１２．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも１３ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも１３．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも１４ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも１４．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも１５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも１５．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも１６ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも１６．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも１７ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも１７．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも１８ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも１８．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも１９ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも２０ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも２０．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも２１ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも２１．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも２２ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも２２．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも２３ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも２３．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも２４ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも２４．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも２５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも２５．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも２６ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも２６．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも２７ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも２７．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも２８ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも２８．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも２９ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも３０ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも３０．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも３１ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも３１．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも３２ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも３２．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも３３ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも３３．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも３４ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも３４．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも３５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも３５．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも３６ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも３６．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも３７ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも３７．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも３８ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも３８．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも３９ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも４０ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも４０．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも４１ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも４１．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも４２ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも４２．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも４３ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも４３．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも４４ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも４４．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも４５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも４５．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも４６ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも４６．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも４７ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも４７．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも４８ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも４８．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも４９ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも５０ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも５０．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも５１ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも５１．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも５２ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも５２．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも５３ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも５３．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも５４ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも５４．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも５５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも５５．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも５６ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも５６．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも５７ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも５７．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも５８ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも５８．５ｍｇ／ｍ２／ｄ、少なくとも５９ｍｇ／ｍ２／ｄ、または少なくとも６０ｍｇ／ｍ２／ｄでよい。
【０１７３】
フルダラビンは、固形臓器移植の同日に投与され得る。場合によっては、複数のフルダラビン投与は、臓器移植後の一定期間に送達され得る。場合によっては、複数のフルダラビン投与は、少なくとも０．１日、少なくとも０．２日、少なくとも０．３日、少なくとも０．４日、少なくとも０．５日、少なくとも０．６日、少なくとも０．７日、少なくとも０．８日、少なくとも０．９日、少なくとも１．０日、少なくとも１．１日、少なくとも１．２日、少なくとも１．３日、少なくとも１．４日、少なくとも１．５日、少なくとも１．６日、少なくとも１．７日、少なくとも１．８日、少なくとも１．９日、少なくとも２．０日、少なくとも２．１日、少なくとも２．２日、少なくとも２．３日、少なくとも２．４日、少なくとも２．５日、少なくとも２．６日、少なくとも２．７日、少なくとも２．８日、少なくとも２．９日、少なくとも３．０日、少なくとも３．１日、少なくとも３．２日、少なくとも３．３日、少なくとも３．４日、少なくとも３．５日、少なくとも３．６日、少なくとも３．７日、少なくとも３．８日、少なくとも３．９日、少なくとも４．０日、少なくとも４．１日、少なくとも４．２日、少なくとも４．３日、少なくとも４．４日、少なくとも４．５日、少なくとも４．６日、少なくとも４．７日、少なくとも４．８日、少なくとも４．９日、少なくとも５．０日、少なくとも５．１日、少なくとも５．２日、少なくとも５．３日、少なくとも５．４日、少なくとも５．５日、少なくとも５．６日、少なくとも５．７日、少なくとも５．８日、少なくとも５．９日、少なくとも６．０日、少なくとも６．１日、少なくとも６．２日、少なくとも６．３日、少なくとも６．４日、少なくとも６．５日、少なくとも６．６日、少なくとも６．７日、少なくとも６．８日、少なくとも６．９日、少なくとも７．０日、少なくとも７．１日、少なくとも７．２日、少なくとも７．３日、少なくとも７．４日、少なくとも７．５日、少なくとも７．６日、少なくとも７．７日、少なくとも７．８日、少なくとも７．９日、少なくとも８．０日、少なくとも８．１日、少なくとも８．２日、少なくとも８．３日、少なくとも８．４日、少なくとも８．５日、少なくとも８．６日、少なくとも８．７日、少なくとも８．８日、少なくとも８．９日、少なくとも９．０日、少なくとも９．１日、少なくとも９．２日、少なくとも９．３日、少なくとも９．４日、少なくとも９．５日、少なくとも９．６日、少なくとも９．７日、少なくとも９．８日、少なくとも９．９日、少なくとも１０日、少なくとも１０．５日、少なくとも１１日、少なくとも１１．５日、少なくとも１２日、少なくとも１２．５日、少なくとも１３日、少なくとも１３．５日、少なくとも１４日、少なくとも１４．５日、少なくとも１５日、少なくとも１５．５日、少なくとも１６日、少なくとも１６．５日、少なくとも１７日、少なくとも１７．５日、少なくとも１８日、少なくとも１８．５日、少なくとも１９日、または少なくとも２０日の一定期間に送達され得る。
【０１７４】
場合によっては、フルダラビンは移植された臓器が宿主細胞で潅流される前に手術中に送達される。場合によっては、フルダラビンは、移植された臓器が宿主血液で潅流された後に手術中に送達される。場合によっては、フルダラビンは、移植された臓器が宿主血液で潅流される前に静脈内で送達される。場合によっては、フルダラビンは、移植された臓器が宿主血液で潅流された後に静脈内で送達される。場合によっては、フルダラビンは、移植された臓器が宿主血液で潅流される前に動脈内で送達される。場合によっては、フルダラビンは、移植された臓器が宿主血液で潅流された後に動脈内で送達される。場合によっては、フルダラビンは、移植された臓器が宿主血液で潅流される前に皮下的に送達される。場合によっては、フルダラビンは、移植された臓器が宿主血液で潅流された後に皮下的に送達される。場合によっては、フルダラビンは、移植された臓器が宿主血液で潅流される前に腹腔内で送達される。場合によっては、フルダラビンは、移植された臓器が宿主血液で潅流された後に腹腔内で送達される。
【０１７５】
場合によっては、レシピエントは放射線照射で治療される。放射線照射は、分割されても分割されなくてもよい。レシピエントが１回超の放射線照射で治療される場合には、全ての投与が分割され得る。レシピエントが１回超の放射線照射で治療される場合には、全ての投与が分割されないこともある。レシピエントが１回超の放射線照射で治療される場合には、投与が分割と非分割との組み合わせでもよい。
【０１７６】
場合によっては、放射線照射は手術中に送達される。場合によっては、放射線照射は静脈内で送達される。場合によっては、放射線照射は動脈内で送達される。場合によっては、放射線照射は皮下で送達される。場合によっては、放射線照射は腹腔内で送達される。
【０１７７】
場合によっては、１回の放射線照射がレシピエントに送達され得る。場合によっては、１回超の放射線照射がレシピエントに送達され得る。例えば、レシピエントは、少なくとも１回の放射線照射、少なくとも２回の放射線照射、少なくとも３回の放射線照射、少なくとも４回の放射線照射、少なくとも５回の放射線照射、少なくとも６回の放射線照射、少なくとも７回の放射線照射、少なくとも８回の放射線照射、少なくとも９回の放射線照射、少なくとも１０回の放射線照射、少なくとも１１回の放射線照射、少なくとも１２回の放射線照射、少なくとも１３回の放射線照射、少なくとも１４回の放射線照射、少なくとも１５回の放射線照射、少なくとも１６回の放射線照射、少なくとも１７回の放射線照射、少なくとも１８回の放射線照射、少なくとも１９回の放射線照射、または少なくとも２０回の放射線照射を受け得る。
【０１７８】
場合によっては、各放射線照射は、少なくとも１ｃＧｙ、少なくとも２ｃＧｙ、少なくとも３ｃＧｙ、少なくとも４ｃＧｙ、少なくとも５ｃＧｙ、少なくとも６ｃＧｙ、少なくとも７ｃＧｙ、少なくとも８ｃＧｙ、少なくとも９ｃＧｙ、少なくとも１０ｃＧｙ、少なくとも１１ｃＧｙ、少なくとも１２ｃＧｙ、少なくとも１３ｃＧｙ、少なくとも１４ｃＧｙ、少なくとも１５ｃＧｙ、少なくとも１６ｃＧｙ、少なくとも１７ｃＧｙ、少なくとも１８ｃＧｙ、少なくとも１９ｃＧｙ、少なくとも２０ｃＧｙ、少なくとも２１ｃＧｙ、少なくとも２２ｃＧｙ、少なくとも２３ｃＧｙ、少なくとも２４ｃＧｙ、少なくとも２５ｃＧｙ、少なくとも２６ｃＧｙ、少なくとも２７ｃＧｙ、少なくとも２８ｃＧｙ、少なくとも２９ｃＧｙ、少なくとも３０ｃＧｙ、少なくとも３１ｃＧｙ、少なくとも３２ｃＧｙ、少なくとも３３ｃＧｙ、少なくとも３４ｃＧｙ、少なくとも３５ｃＧｙ、少なくとも３６ｃＧｙ、少なくとも３７ｃＧｙ、少なくとも３８ｃＧｙ、少なくとも３９ｃＧｙ、少なくとも４０ｃＧｙ、少なくとも４１ｃＧｙ、少なくとも４２ｃＧｙ、少なくとも４３ｃＧｙ、少なくとも４４ｃＧｙ、少なくとも４５ｃＧｙ、少なくとも４６ｃＧｙ、少なくとも４７ｃＧｙ、少なくとも４８ｃＧｙ、少なくとも４９ｃＧｙ、少なくとも５０ｃＧｙ、少なくとも５１ｃＧｙ、少なくとも５２ｃＧｙ、少なくとも５３ｃＧｙ、少なくとも５４ｃＧｙ、少なくとも５５ｃＧｙ、少なくとも５６ｃＧｙ、少なくとも５７ｃＧｙ、少なくとも５８ｃＧｙ、少なくとも５９ｃＧｙ、少なくとも６０ｃＧｙ、少なくとも６１ｃＧｙ、少なくとも６２ｃＧｙ、少なくとも６３ｃＧｙ、少なくとも６４ｃＧｙ、少なくとも６５ｃＧｙ、少なくとも６６ｃＧｙ、少なくとも６７ｃＧｙ、少なくとも６８ｃＧｙ、少なくとも６９ｃＧｙ、少なくとも７０ｃＧｙ、少なくとも７１ｃＧｙ、少なくとも７２ｃＧｙ、少なくとも７３ｃＧｙ、少なくとも７４ｃＧｙ、少なくとも７５ｃＧｙ、少なくとも７６ｃＧｙ、少なくとも７７ｃＧｙ、少なくとも７８ｃＧｙ、少なくとも７９ｃＧｙ、少なくとも８０ｃＧｙ、少なくとも８１ｃＧｙ、少なくとも８２ｃＧｙ、少なくとも８３ｃＧｙ、少なくとも８４ｃＧｙ、少なくとも８５ｃＧｙ、少なくとも８６ｃＧｙ、少なくとも８７ｃＧｙ、少なくとも８８ｃＧｙ、少なくとも８９ｃＧｙ、少なくとも９０ｃＧｙ、少なくとも９１ｃＧｙ、少なくとも９２ｃＧｙ、少なくとも９３ｃＧｙ、少なくとも９４ｃＧｙ、少なくとも９５ｃＧｙ、少なくとも９６ｃＧｙ、少なくとも９７ｃＧｙ、少なくとも９８ｃＧｙ、少なくとも９９ｃＧｙ、少なくとも１００ｃＧｙ、少なくとも１０５ｃＧｙ、少なくとも１１０ｃＧｙ、少なくとも１１５ｃＧｙ、少なくとも１２０ｃＧｙ、少なくとも１２５ｃＧｙ、少なくとも１３０ｃＧｙ、少なくとも１３５ｃＧｙ、少なくとも１４０ｃＧｙ、少なくとも１４５ｃＧｙ、少なくとも１５０ｃＧｙ、少なくとも１５５ｃＧｙ、少なくとも１６０ｃＧｙ、少なくとも１６５ｃＧｙ、少なくとも１７０ｃＧｙ、少なくとも１７５ｃＧｙ、少なくとも１８０ｃＧｙ、少なくとも１８５ｃＧｙ、少なくとも１９０ｃＧｙ、少なくとも１９５ｃＧｙ、少なくとも２００ｃＧｙ、少なくとも２０５ｃＧｙ、少なくとも２１０ｃＧｙ、少なくとも２１５ｃＧｙ、少なくとも２２０ｃＧｙ、少なくとも２２５ｃＧｙ、少なくとも２３０ｃＧｙ、少なくとも２３５ｃＧｙ、少なくとも２４０ｃＧｙ、少なくとも２４５ｃＧｙ、少なくとも２５０ｃＧｙ、少なくとも２５５ｃＧｙ、少なくとも２６０ｃＧｙ、少なくとも２６５ｃＧｙ、少なくとも２７０ｃＧｙ、少なくとも２７５ｃＧｙ、少なくとも２８０ｃＧｙ、少なくとも２８５ｃＧｙ、少なくとも２９０ｃＧｙ、少なくとも２９５ｃＧｙ、少なくとも３００ｃＧｙ、少なくとも３０５ｃＧｙ、少なくとも３１０ｃＧｙ、少なくとも３１５ｃＧｙ、少なくとも３２０ｃＧｙ、少なくとも３２５ｃＧｙ、少なくとも３３０ｃＧｙ、少なくとも３３５ｃＧｙ、少なくとも３４０ｃＧｙ、少なくとも３４５ｃＧｙ、少なくとも３５０ｃＧｙ、少なくとも３５５ｃＧｙ、少なくとも３６０ｃＧｙ、少なくとも３６５ｃＧｙ、少なくとも３７０ｃＧｙ、少なくとも３７５ｃＧｙ、少なくとも３８０ｃＧｙ、少なくとも３８５ｃＧｙ、少なくとも３９０ｃＧｙ、少なくとも３９５ｃＧｙ、少なくとも４００ｃＧｙ、少なくとも４０５ｃＧｙ、少なくとも４１０ｃＧｙ、少なくとも４１５ｃＧｙ、少なくとも４２０ｃＧｙ、少なくとも４２５ｃＧｙ、少なくとも４３０ｃＧｙ、少なくとも４３５ｃＧｙ、少なくとも４４０ｃＧｙ、少なくとも４４５ｃＧｙ、少なくとも４５０ｃＧｙ、少なくとも４５５ｃＧｙ、少なくとも４６０ｃＧｙ、少なくとも４６５ｃＧｙ、少なくとも４７０ｃＧｙ、少なくとも４７５ｃＧｙ、少なくとも４８０ｃＧｙ、少なくとも４８５ｃＧｙ、少なくとも４９０ｃＧｙ、少なくとも４９５ｃＧｙ、または少なくとも５００ｃＧｙでよい。
【０１７９】
放射線照射は、固形臓器移植の同日に行われ得る。場合によっては、複数回の放射線照射は、臓器移植後の期間に行われ得る。場合によっては、複数回の放射線照射は、少なくとも０．１日、少なくとも０．２日、少なくとも０．３日、少なくとも０．４日、少なくとも０．５日、少なくとも０．６日、少なくとも０．７日、少なくとも０．８日、少なくとも０．９日、少なくとも１．０日、少なくとも１．１日、少なくとも１．２日、少なくとも１．３日、少なくとも１．４日、少なくとも１．５日、少なくとも１．６日、少なくとも１．７日、少なくとも１．８日、少なくとも１．９日、少なくとも２．０日、少なくとも２．１日、少なくとも２．２日、少なくとも２．３日、少なくとも２．４日、少なくとも２．５日、少なくとも２．６日、少なくとも２．７日、少なくとも２．８日、少なくとも２．９日、少なくとも３．０日、少なくとも３．１日、少なくとも３．２日、少なくとも３．３日、少なくとも３．４日、少なくとも３．５日、少なくとも３．６日、少なくとも３．７日、少なくとも３．８日、少なくとも３．９日、少なくとも４．０日、少なくとも４．１日、少なくとも４．２日、少なくとも４．３日、少なくとも４．４日、少なくとも４．５日、少なくとも４．６日、少なくとも４．７日、少なくとも４．８日、少なくとも４．９日、少なくとも５．０日、少なくとも５．１日、少なくとも５．２日、少なくとも５．３日、少なくとも５．４日、少なくとも５．５日、少なくとも５．６日、少なくとも５．７日、少なくとも５．８日、少なくとも５．９日、少なくとも６．０日、少なくとも６．１日、少なくとも６．２日、少なくとも６．３日、少なくとも６．４日、少なくとも６．５日、少なくとも６．６日、少なくとも６．７日、少なくとも６．８日、少なくとも６．９日、少なくとも７．０日、少なくとも７．１日、少なくとも７．２日、少なくとも７．３日、少なくとも７．４日、少なくとも７．５日、少なくとも７．６日、少なくとも７．７日、少なくとも７．８日、少なくとも７．９日、少なくとも８．０日、少なくとも８．１日、少なくとも８．２日、少なくとも８．３日、少なくとも８．４日、少なくとも８．５日、少なくとも８．６日、少なくとも８．７日、少なくとも８．８日、少なくとも８．９日、少なくとも９．０日、少なくとも９．１日、少なくとも９．２日、少なくとも９．３日、少なくとも９．４日、少なくとも９．５日、少なくとも９．６日、少なくとも９．７日、少なくとも９．８日、少なくとも９．９日、少なくとも１０日、少なくとも１０．５日、少なくとも１１日、少なくとも１１．５日、少なくとも１２日、少なくとも１２．５日、少なくとも１３日、少なくとも１３．５日、少なくとも１４日、少なくとも１４．５日、少なくとも１５日、少なくとも１５．５日、少なくとも１６日、少なくとも１６．５日、少なくとも１７日、少なくとも１７．５日、少なくとも１８日、少なくとも１８．５日、少なくとも１９日、少なくとも２０日、少なくとも２０．５日、少なくとも２１日、少なくとも２１．５日、少なくとも２２日、少なくとも２２．５日、少なくとも２３日、少なくとも２３．５日、少なくとも２４日、少なくとも２４．５日、少なくとも２５日、少なくとも２５．５日、少なくとも２６日、少なくとも２６．５日、少なくとも２７日、少なくとも２７．５日、少なくとも２８日、少なくとも２８．５日、少なくとも２９日、少なくとも３０日、少なくとも３０．５日、少なくとも３１日、少なくとも３１．５日、少なくとも３２日、少なくとも３２．５日、少なくとも３３日、少なくとも３３．５日、少なくとも３４日、少なくとも３４．５日、少なくとも３５日、少なくとも３５．５日、少なくとも３６日、少なくとも３６．５日、少なくとも３７日、少なくとも３７．５日、少なくとも３８日、少なくとも３８．５日、少なくとも３９日、少なくとも４０日、少なくとも４０．５日、少なくとも４１日、少なくとも４１．５日、少なくとも４２日、少なくとも４２．５日、少なくとも４３日、少なくとも４３．５日、少なくとも４４日、少なくとも４４．５日、少なくとも４５日、少なくとも４５．５日、少なくとも４６日、少なくとも４６．５日、少なくとも４７日、少なくとも４７．５日、少なくとも４８日、少なくとも４８．５日、少なくとも４９日、または少なくとも５０日、の期間に送達され得る。
【０１８０】
場合によっては、放射線照射量は、投与コースにおいて規則的な間隔で送達される。場合によっては、放射線照射量は、投与コースにおいて規則的な間隔で送達されない。例えば、放射線照射は、移植後１日〜４日及び７日〜１１日に胸腺に送達され得る。
【０１８１】
放射線照射は、レシピエントの体の特定の位置に標的化され得る。場合によっては、放射線照射は、組織、臓器、体の部位または全身に標的化され得る。場合によっては、放射線照射は、リンパ節、脾臓、または胸腺または当業者に公知の任意の他の部位に標的化され得る。場合によっては、放射線照射は、リンパ節、脾臓、もしくは胸腺または当業者に公知の任意の他の部位に標的化され得る。場合によっては、放射線照射は、放射線照射の少なくとも１超の投与が患者に送達される場合に、同じ位置に標的化され得る。場合によっては、放射線照射は、放射線照射の少なくとも１超の投与が患者に送達される場合に、異なる位置に標的化され得る。
【０１８２】
骨髄非破壊的処理中に、レシピエントは、骨髄非破壊的処理に関連した処置の発症について監視され得る。このような疾患は、好中球減少症（例えば、顆粒球＜２，０００／ｍＬ）、血小板減少症（例えば、血小板＜６０，０００／ｍＬ）、及び二次感染を含む。場合によっては、Ｇ−ＣＳＦ（例えば、１０μｇ／ｋｇ／日）は、好中球減少症に投与され得る。場合によっては、当業者に公知の任意の標準的な処置は、血小板減少症または任意の二次感染に投与され得る。
【０１８３】
場合によっては、骨髄非破壊的処理は、レシピエントが好中球減少症、血小板減少症または任意の二次感染を発症している場合には、一時的に停止され得る。好中球減少症、血小板減少症及び任意の二次感染が解消されると、骨髄非破壊的処理は継続され得る。場合によっては、レシピエントが１，０００細胞／ｍｍ3 の白血球数を有する場合には、レシピエントは、骨髄非破壊的処理後にＧ−ＣＳＦ（例えば、１０μｇ／ｋｇ／日）で処置され得る。
【０１８４】
免疫抑制及び移植管理
ＨＬＡ−適合またはＨＬＡ−非適合固形臓器、及び工学的に作製されたＨＬＡ−適合またはＨＬＡ−非適合造血細胞の投与後に、レシピエントは免疫抑制レジメンを受け得る。免疫抑制レジメンは、２つの期間、すなわち誘導期及び維持期を有してよい。誘導期及び維持期の方法は、レシピエントにおいて長期間の移植維持を亢進するための標的治療レベルを達成するために調整された用量で異なった医薬を使用してよい。場合によっては、誘導期は周術的に開始し得る。場合によっては、誘導期は、移植後直ちに開始し得る。場合によっては、誘導期は周術的及び移植直後でよい。場合によっては、免疫抑制レジメンは、レシピエントがキメリズムを達成するまで維持療法として継続し得る。例えば、キメリズムは、本明細書に記載の安定な混合キメリズムでよい。
【０１８５】
場合によっては、免疫抑制レジメンは１つの薬剤を含んでよい。場合によっては、免疫抑制レジメンは１超の薬剤を含んでよい。例えば、免疫抑制レジメンのための好適な薬剤は、カルシニューリン阻害剤及び／またはアジュバントを含み得る。場合によっては、一次的な免疫抑制剤は、カルシニューリン活性を阻害するための結合タンパク質と組み合わせる、カルシニューリン阻害剤を含む。場合によっては、カルシニューリン阻害剤がタクロリムス、シクロスポリンＡ、または当業者に公知の任意のカルシニューリン阻害剤でよく、カルシニューリン阻害剤として標的化された免疫抑制を提供するために有効な用量でレシピエントに投与され得る。
【０１８６】
場合によっては、シクロスポリンＡは、１ヶ月未満、２ヶ月未満、３ヶ月未満、４ヶ月未満、５ヶ月未満、６ヶ月未満、７ヶ月未満、８ヶ月未満、９ヶ月未満、１０ヶ月未満、１１ヶ月未満、１２ヶ月未満、１３ヶ月未満、１４ヶ月未満、１５ヶ月未満、１６ヶ月未満、１７ヶ月未満、１８ヶ月未満、１９ヶ月未満、２０ヶ月未満、２１ヶ月未満、２２ヶ月未満、２３ヶ月未満、または２４ヶ月未満の期間後にレシピエントで中止され得る。
【０１８７】
場合によっては、シクロスポリンＡは、１ヶ月超、２ヶ月超、３ヶ月超、４ヶ月超、５ヶ月超、６ヶ月超、７ヶ月超、８ヶ月超、９ヶ月超、１０ヶ月超、１１ヶ月超、１２ヶ月超、１３ヶ月超、１４ヶ月超、１５ヶ月超、１６ヶ月超、１７ヶ月超、１８ヶ月超、１９ヶ月超、２０ヶ月超、２１ヶ月超、２２ヶ月超、２３ヶ月超、または２４ヶ月超の期間後にレシピエントで中止され得る。
【０１８８】
場合によっては、シクロスポリンＡの用量は、レシピエントが拒絶及びＧＶＨＤの欠如の臨床的基準を満たす場合に、ゆっくりと漸進され得る。例えば、投与されたシクロスポリンＡの総量は経時で減少され得る。場合によっては、シクロスポリンＡの漸進は、漸進レジメンの最後にシクロスポリンＡの用量がゼロに漸進されるように、１ヶ月未満、２ヶ月未満、３ヶ月未満、４ヶ月未満、５ヶ月未満、６ヶ月未満、７ヶ月未満、８ヶ月未満、９ヶ月未満、１０ヶ月未満、１１ヶ月未満、１２ヶ月未満、１３ヶ月未満、１４ヶ月未満、１５ヶ月未満、１６ヶ月未満、１７ヶ月未満、１８ヶ月未満、１９ヶ月未満、２０ヶ月未満、２１ヶ月未満、２２ヶ月未満、２３ヶ月未満、または２４ヶ月未満の期間、起こり得る。場合によっては、シクロスポリンＡの漸進は、漸進レジメンの最後にシクロスポリンＡの用量がゼロに漸進されるように、１ヶ月超、２ヶ月超、３ヶ月超、４ヶ月超、５ヶ月超、６ヶ月超、７ヶ月超、８ヶ月超、９ヶ月超、１０ヶ月超、１１ヶ月超、１２ヶ月超、１３ヶ月超、１４ヶ月超、１５ヶ月超、１６ヶ月超、１７ヶ月超、１８ヶ月超、１９ヶ月超、２０ヶ月超、２１ヶ月超、２２ヶ月超、２３ヶ月超、または２４ヶ月超の期間、起こり得る。
【０１８９】
場合によっては、シクロスポリンＡは、レシピエントに単回投与によって送達され得る。場合によっては、レシピエントは、シクロスポリンＡの１超投与を受け得る。例えば、レシピエントは、シクロスポリンＡの少なくとも１投与、シクロスポリンＡの少なくとも２投与、シクロスポリンＡの少なくとも３投与、シクロスポリンＡの少なくとも４投与、シクロスポリンＡの少なくとも５投与、シクロスポリンＡの少なくとも６投与、シクロスポリンＡの少なくとも７投与、シクロスポリンＡの少なくとも８投与、シクロスポリンＡの少なくとも９投与、シクロスポリンＡの少なくとも１０投与、シクロスポリンＡの少なくとも１１投与、シクロスポリンＡの少なくとも１２投与、シクロスポリンＡの少なくとも１３投与、シクロスポリンＡの少なくとも１４投与、シクロスポリンＡの少なくとも１５投与、シクロスポリンＡの少なくとも１６投与、シクロスポリンＡの少なくとも１７投与、シクロスポリンＡの少なくとも１８投与、シクロスポリンＡの少なくとも１９投与、またはシクロスポリンＡの少なくとも２０投与を受け得る。
【０１９０】
場合によっては、複数のシクロスポリンＡ投与は、臓器移植後の期間に送達され得る。場合によっては、複数のシクロスポリンＡ投与は、少なくとも０．１日、少なくとも０．２日、少なくとも０．３日、少なくとも０．４日、少なくとも０．５日、少なくとも０．６日、少なくとも０．７日、少なくとも０．８日、少なくとも０．９日、少なくとも１．０日、少なくとも１．１日、少なくとも１．２日、少なくとも１．３日、少なくとも１．４日、少なくとも１．５日、少なくとも１．６日、少なくとも１．７日、少なくとも１．８日、少なくとも１．９日、少なくとも２．０日、少なくとも２．１日、少なくとも２．２日、少なくとも２．３日、少なくとも２．４日、少なくとも２．５日、少なくとも２．６日、少なくとも２．７日、少なくとも２．８日、少なくとも２．９日、少なくとも３．０日、少なくとも３．１日、少なくとも３．２日、少なくとも３．３日、少なくとも３．４日、少なくとも３．５日、少なくとも３．６日、少なくとも３．７日、少なくとも３．８日、少なくとも３．９日、少なくとも４．０日、少なくとも４．１日、少なくとも４．２日、少なくとも４．３日、少なくとも４．４日、少なくとも４．５日、少なくとも４．６日、少なくとも４．７日、少なくとも４．８日、少なくとも４．９日、少なくとも５．０日、少なくとも５．１日、少なくとも５．２日、少なくとも５．３日、少なくとも５．４日、少なくとも５．５日、少なくとも５．６日、少なくとも５．７日、少なくとも５．８日、少なくとも５．９日、少なくとも６．０日、少なくとも６．１日、少なくとも６．２日、少なくとも６．３日、少なくとも６．４日、少なくとも６．５日、少なくとも６．６日、少なくとも６．７日、少なくとも６．８日、少なくとも６．９日、少なくとも７．０日、少なくとも７．１日、少なくとも７．２日、少なくとも７．３日、少なくとも７．４日、少なくとも７．５日、少なくとも７．６日、少なくとも７．７日、少なくとも７．８日、少なくとも７．９日、少なくとも８．０日、少なくとも８．１日、少なくとも８．２日、少なくとも８．３日、少なくとも８．４日、少なくとも８．５日、少なくとも８．６日、少なくとも８．７日、少なくとも８．８日、少なくとも８．９日、少なくとも９．０日、少なくとも９．１日、少なくとも９．２日、少なくとも９．３日、少なくとも９．４日、少なくとも９．５日、少なくとも９．６日、少なくとも９．７日、少なくとも９．８日、少なくとも９．９日、少なくとも１０日、少なくとも１０．５日、少なくとも１１日、少なくとも１１．５日、少なくとも１２日、少なくとも１２．５日、少なくとも１３日、少なくとも１３．５日、少なくとも１４日、少なくとも１４．５日、少なくとも１５日、少なくとも１５．５日、少なくとも１６日、少なくとも１６．５日、少なくとも１７日、少なくとも１７．５日、少なくとも１８日、少なくとも１８．５日、少なくとも１９日、または少なくとも２０日の期間送達され得る。
【０１９１】
場合によっては、シクロスポリンＡの各用量は、少なくとも０．１ｍｇ／ｋｇ、少なくとも０．２ｍｇ／ｋｇ、少なくとも０．３ｍｇ／ｋｇ、少なくとも０．４ｍｇ／ｋｇ、少なくとも０．５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも０．６ｍｇ／ｋｇ、少なくとも０．７ｍｇ／ｋｇ、少なくとも０．８ｍｇ／ｋｇ、少なくとも０．９ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１．０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１．１ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１．２ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１．３ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１．４ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１．５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１．６ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１．７ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１．８ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１．９ｍｇ／ｋｇ、少なくとも２．０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも２．１ｍｇ／ｋｇ、少なくとも２．２ｍｇ／ｋｇ、少なくとも２．３ｍｇ／ｋｇ、少なくとも２．４ｍｇ／ｋｇ、少なくとも２．５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも２．６ｍｇ／ｋｇ、少なくとも２．７ｍｇ／ｋｇ、少なくとも２．８ｍｇ／ｋｇ、少なくとも２．９ｍｇ／ｋｇ、少なくとも３．０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも３．１ｍｇ／ｋｇ、少なくとも３．２ｍｇ／ｋｇ、少なくとも３．３ｍｇ／ｋｇ、少なくとも３．４ｍｇ／ｋｇ、少なくとも３．５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも３．６ｍｇ／ｋｇ、少なくとも３．７ｍｇ／ｋｇ、少なくとも３．８ｍｇ／ｋｇ、少なくとも３．９ｍｇ／ｋｇ、少なくとも４．０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも４．１ｍｇ／ｋｇ、少なくとも４．２ｍｇ／ｋｇ、少なくとも４．３ｍｇ／ｋｇ、少なくとも４．４ｍｇ／ｋｇ、少なくとも４．５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも４．６ｍｇ／ｋｇ、少なくとも４．７ｍｇ／ｋｇ、少なくとも４．８ｍｇ／ｋｇ、少なくとも４．９ｍｇ／ｋｇ、少なくとも５．０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも５．１ｍｇ／ｋｇ、少なくとも５．２ｍｇ／ｋｇ、少なくとも５．３ｍｇ／ｋｇ、少なくとも５．４ｍｇ／ｋｇ、少なくとも５．５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも５．６ｍｇ／ｋｇ、少なくとも５．７ｍｇ／ｋｇ、少なくとも５．８ｍｇ／ｋｇ、少なくとも５．９ｍｇ／ｋｇ、少なくとも６．０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも６．１ｍｇ／ｋｇ、少なくとも６．２ｍｇ／ｋｇ、少なくとも６．３ｍｇ／ｋｇ、少なくとも６．４ｍｇ／ｋｇ、少なくとも６．５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも６．６ｍｇ／ｋｇ、少なくとも６．７ｍｇ／ｋｇ、少なくとも６．８ｍｇ／ｋｇ、少なくとも６．９ｍｇ／ｋｇ、少なくとも７．０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも７．１ｍｇ／ｋｇ、少なくとも７．２ｍｇ／ｋｇ、少なくとも７．３ｍｇ／ｋｇ、少なくとも７．４ｍｇ／ｋｇ、少なくとも７．５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも７．６ｍｇ／ｋｇ、少なくとも７．７ｍｇ／ｋｇ、少なくとも７．８ｍｇ／ｋｇ、少なくとも７．９ｍｇ／ｋｇ、少なくとも８．０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも８．１ｍｇ／ｋｇ、少なくとも８．２ｍｇ／ｋｇ、少なくとも８．３ｍｇ／ｋｇ、少なくとも８．４ｍｇ／ｋｇ、少なくとも８．５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも８．６ｍｇ／ｋｇ、少なくとも８．７ｍｇ／ｋｇ、少なくとも８．８ｍｇ／ｋｇ、少なくとも８．９ｍｇ／ｋｇ、少なくとも９．０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも９．１ｍｇ／ｋｇ、少なくとも９．２ｍｇ／ｋｇ、少なくとも９．３ｍｇ／ｋｇ、少なくとも９．４ｍｇ／ｋｇ、少なくとも９．５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも９．６ｍｇ／ｋｇ、少なくとも９．７ｍｇ／ｋｇ、少なくとも９．８ｍｇ／ｋｇ、少なくとも９．９ｍｇ／ｋｇ、または少なくとも１０ｍｇ／ｋｇでよい。
【０１９２】
場合によっては、患者に投与されたシクロスポリンＡの量は、血流中のシクロスポリンＡの量によって決定され得る。例えば、シクロスポリンＡは、０〜４０ｍｇ、５〜５０ｍｇ、１０〜６０ｍｇ、１５〜６５ｍｇ、２０〜７０ｍｇ、２５〜７５ｍｇ、３０〜８０ｍｇ、３５〜８５ｍｇ、４０〜９０ｍｇ、４５〜９５ｍｇ、５０〜１００ｍｇ、５５〜１０５ｍｇ、６０〜１１０ｍｇ、６５〜１１５ｍｇ、７０〜１２０ｍｇ、７５〜１２５ｍｇ、８０〜１３０ｍｇ、８５〜１３５ｍｇ、９０〜１４０ｍｇ、９５〜１４５ｍｇ、１００〜１５０ｍｇ、１０５〜１５５ｍｇ、１１０〜１６０ｍｇ、１１５〜１６５ｍｇ、１２０〜１７０ｍｇ、１２５〜１７５ｍｇ、１３０〜１８０ｍｇ、１３５〜１８５ｍｇ、１４０〜１９０ｍｇ、１４５〜１９５ｍｇ、１５０〜２００ｍｇ、１６０〜２１０ｍｇ、１７０〜２２０ｍｇ、１８０〜２３０ｍｇ、１９０〜２４０ｍｇ、２００〜２５０ｍｇ、２１０〜２６０ｍｇ、２２０〜２７０ｍｇ、２３０〜２８０ｍｇ、２４０〜２９０ｍｇ、２５０〜３００ｍｇ、２６０〜３１０ｍｇ、２７０〜３２０ｍｇ、２８０〜３３０ｍｇ、２９０〜３４０ｍｇ、３００〜３５０ｍｇ、３１０〜３６０ｍｇ、３２０〜３７０ｍｇ、３３０〜３８０ｍｇ、３４０〜３９０ｍｇ、３５０〜４００ｍｇ、３６０〜４１０ｍｇ、３７０〜４２０ｍｇ、３８０〜４３０ｍｇ、３９０〜４４０ｍｇ、４００〜４５０ｍｇ、４１０〜４６０ｍｇ、４２０〜４７０ｍｇ、４３０〜４８０ｍｇ、４４０〜４９０ｍｇ、４５０〜５００ｍｇ、４６〜５１０ｍｇ、４７０〜５２０ｍｇ、４８０〜５３０ｍｇ、４９０〜５４０ｍｇ、５００〜５５０ｍｇ、５１０〜５６０ｍｇ、５２０〜５７０ｍｇ、５３０〜５８０ｍｇ、５４０〜５９０ｍｇ、５５０〜６００ｍｇ、５６０〜６１０ｍｇ、５７０〜６２０ｍｇ、５８０〜６３０ｍｇ、５９０〜６４０ｍｇ、６００〜６５０ｍｇ、６１０〜６６０ｍｇ、６２０〜６７０ｍｇ、６３０〜６８０ｍｇ、６４０〜６９０ｍｇ、６５０〜７００ｍｇ、または７００ｍｇ超の範囲になるような用量で投与され得る。
【０１９３】
場合によっては、タクロリムスは、１ヶ月超、２ヶ月超、３ヶ月超、４ヶ月超、５ヶ月超、６ヶ月超、７ヶ月超、８ヶ月超、９ヶ月超、１０ヶ月超、１１ヶ月超、１２ヶ月超、１３ヶ月超、１４ヶ月超、１５ヶ月超、１６ヶ月超、１７ヶ月超、１８ヶ月超、１９ヶ月超、２０ヶ月超、２１ヶ月超、２２ヶ月超、２３ヶ月超、または２４ヶ月超の期間後にレシピエントで中止され得る。場合によっては、タクロリムスの用量は、レシピエントが拒絶及びＧＶＨＤの欠如の臨床的基準を満たす場合に、ゆっくりと漸進され得る。例えば、投与されたタクロリムスの総量は経時的に減少され得る。場合によっては、タクロリムスの漸進は、漸進レジメンの最後にタクロリムスの用量がゼロに漸進されるように、１ヶ月未満、２ヶ月未満、３ヶ月未満、４ヶ月未満、５ヶ月未満、６ヶ月未満、７ヶ月未満、８ヶ月未満、９ヶ月未満、１０ヶ月未満、１１ヶ月未満、１２ヶ月未満、１３ヶ月未満、１４ヶ月未満、１５ヶ月未満、１６ヶ月未満、１７ヶ月未満、１８ヶ月未満、１９ヶ月未満、２０ヶ月未満、２１ヶ月未満、２２ヶ月未満、２３ヶ月未満、または２４ヶ月未満の期間、起こり得る。
【０１９４】
場合によっては、タクロリムスは、少なくとも１ヶ月未満、２ヶ月未満、３ヶ月未満、４ヶ月未満、５ヶ月未満、６ヶ月未満、７ヶ月未満、８ヶ月未満、９ヶ月未満、１０ヶ月未満、１１ヶ月未満、１２ヶ月未満、１３ヶ月未満、１４ヶ月未満、１５ヶ月未満、１６ヶ月未満、１７ヶ月未満、１８ヶ月未満、１９ヶ月未満、２０ヶ月未満、２１ヶ月未満、２２ヶ月未満、２３ヶ月未満、または２４ヶ月未満の期間後にレシピエントで中止され得る。場合によっては、タクロリムスの用量は、レシピエント拒絶及びＧＶＨＤの欠如の臨床的基準を満たす場合に、ゆっくりと漸進され得る。例えば、投与されたタクロリムスの総量は経時的に減少され得る。場合によっては、タクロリムスの漸進は、漸進レジメンの最後にタクロリムスの用量がゼロに漸進されるように、１ヶ月超、２ヶ月超、３ヶ月超、４ヶ月超、５ヶ月超、６ヶ月超、７ヶ月超、８ヶ月超、９ヶ月超、１０ヶ月超、１１ヶ月超、１２ヶ月超、１３ヶ月超、１４ヶ月超、１５ヶ月超、１６ヶ月超、１７ヶ月超、１８ヶ月超、１９ヶ月超、２０ヶ月超、２１ヶ月超、２２ヶ月超、２３ヶ月超、または２４ヶ月超の期間、起こり得る。
【０１９５】
場合によっては、タクロリムスはレシピエントに１回で送達され得る。場合によっては、レシピエントは、タクロリムスの１超投与を受け得る。例えば、レシピエントは、タクロリムスの少なくとも１投与、タクロリムスの少なくとも２投与、タクロリムスの少なくとも３投与、タクロリムスの少なくとも４投与、タクロリムスの少なくとも５投与、タクロリムスの少なくとも６投与、タクロリムスの少なくとも７投与、タクロリムスの少なくとも８投与、タクロリムスの少なくとも９投与、タクロリムスの少なくとも１０投与、タクロリムスの少なくとも１１投与、タクロリムスの少なくとも１２投与、タクロリムスの少なくとも１３投与、タクロリムスの少なくとも１４投与、タクロリムスの少なくとも１５投与、タクロリムスの少なくとも１６投与、タクロリムスの少なくとも１７投与、タクロリムスの少なくとも１８投与、タクロリムスの少なくとも１９投与、またはタクロリムスの少なくとも２０投与を受け得る。
【０１９６】
場合によっては、複数のタクロリムス投与は、臓器移植後の期間に送達され得る。場合によっては、複数のタクロリムス投与は、少なくとも０．１日、少なくとも０．２日、少なくとも０．３日、少なくとも０．４日、少なくとも０．５日、少なくとも０．６日、少なくとも０．７日、少なくとも０．８日、少なくとも０．９日、少なくとも１．０日、少なくとも１．１日、少なくとも１．２日、少なくとも１．３日、少なくとも１．４日、少なくとも１．５日、少なくとも１．６日、少なくとも１．７日、少なくとも１．８日、少なくとも１．９日、少なくとも２．０日、少なくとも２．１日、少なくとも２．２日、少なくとも２．３日、少なくとも２．４日、少なくとも２．５日、少なくとも２．６日、少なくとも２．７日、少なくとも２．８日、少なくとも２．９日、少なくとも３．０日、少なくとも３．１日、少なくとも３．２日、少なくとも３．３日、少なくとも３．４日、少なくとも３．５日、少なくとも３．６日、少なくとも３．７日、少なくとも３．８日、少なくとも３．９日、少なくとも４．０日、少なくとも４．１日、少なくとも４．２日、少なくとも４．３日、少なくとも４．４日、少なくとも４．５日、少なくとも４．６日、少なくとも４．７日、少なくとも４．８日、少なくとも４．９日、少なくとも５．０日、少なくとも５．１日、少なくとも５．２日、少なくとも５．３日、少なくとも５．４日、少なくとも５．５日、少なくとも５．６日、少なくとも５．７日、少なくとも５．８日、少なくとも５．９日、少なくとも６．０日、少なくとも６．１日、少なくとも６．２日、少なくとも６．３日、少なくとも６．４日、少なくとも６．５日、少なくとも６．６日、少なくとも６．７日、少なくとも６．８日、少なくとも６．９日、少なくとも７．０日、少なくとも７．１日、少なくとも７．２日、少なくとも７．３日、少なくとも７．４日、少なくとも７．５日、少なくとも７．６日、少なくとも７．７日、少なくとも７．８日、少なくとも７．９日、少なくとも８．０日、少なくとも８．１日、少なくとも８．２日、少なくとも８．３日、少なくとも８．４日、少なくとも８．５日、少なくとも８．６日、少なくとも８．７日、少なくとも８．８日、少なくとも８．９日、少なくとも９．０日、少なくとも９．１日、少なくとも９．２日、少なくとも９．３日、少なくとも９．４日、少なくとも９．５日、少なくとも９．６日、少なくとも９．７日、少なくとも９．８日、少なくとも９．９日、少なくとも１０日、少なくとも１０．５日、少なくとも１１日、少なくとも１１．５日、少なくとも１２日、少なくとも１２．５日、少なくとも１３日、少なくとも１３．５日、少なくとも１４日、少なくとも１４．５日、少なくとも１５日、少なくとも１５．５日、少なくとも１６日、少なくとも１６．５日、少なくとも１７日、少なくとも１７．５日、少なくとも１８日、少なくとも１８．５日、少なくとも１９日、または少なくとも２０日の期間送達され得る。
【０１９７】
場合によっては、タクロリムスの各用量は、少なくとも０．１ｍｇ／ｋｇ、少なくとも０．２ｍｇ／ｋｇ、少なくとも０．３ｍｇ／ｋｇ、少なくとも０．４ｍｇ／ｋｇ、少なくとも０．５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも０．６ｍｇ／ｋｇ、少なくとも０．７ｍｇ／ｋｇ、少なくとも０．８ｍｇ／ｋｇ、少なくとも０．９ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１．０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１．１ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１．２ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１．３ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１．４ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１．５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１．６ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１．７ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１．８ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１．９ｍｇ／ｋｇ、少なくとも２．０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも２．１ｍｇ／ｋｇ、少なくとも２．２ｍｇ／ｋｇ、少なくとも２．３ｍｇ／ｋｇ、少なくとも２．４ｍｇ／ｋｇ、少なくとも２．５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも２．６ｍｇ／ｋｇ、少なくとも２．７ｍｇ／ｋｇ、少なくとも２．８ｍｇ／ｋｇ、少なくとも２．９ｍｇ／ｋｇ、少なくとも３．０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも３．１ｍｇ／ｋｇ、少なくとも３．２ｍｇ／ｋｇ、少なくとも３．３ｍｇ／ｋｇ、少なくとも３．４ｍｇ／ｋｇ、少なくとも３．５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも３．６ｍｇ／ｋｇ、少なくとも３．７ｍｇ／ｋｇ、少なくとも３．８ｍｇ／ｋｇ、少なくとも３．９ｍｇ／ｋｇ、少なくとも４．０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも４．１ｍｇ／ｋｇ、少なくとも４．２ｍｇ／ｋｇ、少なくとも４．３ｍｇ／ｋｇ、少なくとも４．４ｍｇ／ｋｇ、少なくとも４．５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも４．６ｍｇ／ｋｇ、少なくとも４．７ｍｇ／ｋｇ、少なくとも４．８ｍｇ／ｋｇ、少なくとも４．９ｍｇ／ｋｇ、少なくとも５．０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも５．１ｍｇ／ｋｇ、少なくとも５．２ｍｇ／ｋｇ、少なくとも５．３ｍｇ／ｋｇ、少なくとも５．４ｍｇ／ｋｇ、少なくとも５．５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも５．６ｍｇ／ｋｇ、少なくとも５．７ｍｇ／ｋｇ、少なくとも５．８ｍｇ／ｋｇ、少なくとも５．９ｍｇ／ｋｇ、少なくとも６．０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも６．１ｍｇ／ｋｇ、少なくとも６．２ｍｇ／ｋｇ、少なくとも６．３ｍｇ／ｋｇ、少なくとも６．４ｍｇ／ｋｇ、少なくとも６．５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも６．６ｍｇ／ｋｇ、少なくとも６．７ｍｇ／ｋｇ、少なくとも６．８ｍｇ／ｋｇ、少なくとも６．９ｍｇ／ｋｇ、少なくとも７．０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも７．１ｍｇ／ｋｇ、少なくとも７．２ｍｇ／ｋｇ、少なくとも７．３ｍｇ／ｋｇ、少なくとも７．４ｍｇ／ｋｇ、少なくとも７．５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも７．６ｍｇ／ｋｇ、少なくとも７．７ｍｇ／ｋｇ、少なくとも７．８ｍｇ／ｋｇ、少なくとも７．９ｍｇ／ｋｇ、少なくとも８．０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも８．１ｍｇ／ｋｇ、少なくとも８．２ｍｇ／ｋｇ、少なくとも８．３ｍｇ／ｋｇ、少なくとも８．４ｍｇ／ｋｇ、少なくとも８．５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも８．６ｍｇ／ｋｇ、少なくとも８．７ｍｇ／ｋｇ、少なくとも８．８ｍｇ／ｋｇ、少なくとも８．９ｍｇ／ｋｇ、少なくとも９．０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも９．１ｍｇ／ｋｇ、少なくとも９．２ｍｇ／ｋｇ、少なくとも９．３ｍｇ／ｋｇ、少なくとも９．４ｍｇ／ｋｇ、少なくとも９．５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも９．６ｍｇ／ｋｇ、少なくとも９．７ｍｇ／ｋｇ、少なくとも９．８ｍｇ／ｋｇ、少なくとも９．９ｍｇ／ｋｇ、または少なくとも１０ｍｇ／ｋｇでよい。
【０１９８】
場合によっては、患者に投与されたタクロリムスの量は、血流中のタクロリムスの量によって決定される。例えば、タクロリムスは、０〜４０ｍｇ、５〜５０ｍｇ、１０〜６０ｍｇ、１５〜６５ｍｇ、２０〜７０ｍｇ、２５〜７５ｍｇ、３０〜８０ｍｇ、３５〜８５ｍｇ、４０〜９０ｍｇ、４５〜９５ｍｇ、５０〜１００ｍｇ、５５〜１０５ｍｇ、６０〜１１０ｍｇ、６５〜１１５ｍｇ、７０〜１２０ｍｇ、７５〜１２５ｍｇ、８０〜１３０ｍｇ、８５〜１３５ｍｇ、９０〜１４０ｍｇ、９５〜１４５ｍｇ、１００〜１５０ｍｇ、１０５〜１５５ｍｇ、１１０〜１６０ｍｇ、１１５〜１６５ｍｇ、１２０〜１７０ｍｇ、１２５〜１７５ｍｇ、１３０〜１８０ｍｇ、１３５〜１８５ｍｇ、１４０〜１９０ｍｇ、１４５〜１９５ｍｇ、１５０〜２００ｍｇ、１６０〜２１０ｍｇ、１７０〜２２０ｍｇ、１８０〜２３０ｍｇ、１９０〜２４０ｍｇ、２００〜２５０ｍｇ、２１０〜２６０ｍｇ、２２０〜２７０ｍｇ、２３０〜２８０ｍｇ、２４０〜２９０ｍｇ、２５０〜３００ｍｇ、２６０〜３１０ｍｇ、２７０〜３２０ｍｇ、２８０〜３３０ｍｇ、２９０〜３４０ｍｇ、３００〜３５０ｍｇ、３１０〜３６０ｍｇ、３２０〜３７０ｍｇ、３３０〜３８０ｍｇ、３４０〜３９０ｍｇ、３５０〜４００ｍｇ、３６０〜４１０ｍｇ、３７０〜４２０ｍｇ、３８０〜４３０ｍｇ、３９０〜４４０ｍｇ、４００〜４５０ｍｇ、４１０〜４６０ｍｇ、４２０〜４７０ｍｇ、４３０〜４８０ｍｇ、４４０〜４９０ｍｇ、４５０〜５００ｍｇ、４６〜５１０ｍｇ、４７０〜５２０ｍｇ、４８０〜５３０ｍｇ、４９０〜５４０ｍｇ、５００〜５５０ｍｇ、５１０〜５６０ｍｇ、５２０〜５７０ｍｇ、５３０〜５８０ｍｇ、５４０〜５９０ｍｇ、５５０〜６００ｍｇ、５６０〜６１０ｍｇ、５７０〜６２０ｍｇ、５８０〜６３０ｍｇ、５９０〜６４０ｍｇ、６００〜６５０ｍｇ、６１０〜６６０ｍｇ、６２０〜６７０ｍｇ、６３０〜６８０ｍｇ、６４０〜６９０ｍｇ、６５０〜７００ｍｇ、または７００ｍｇ超の範囲になるような用量で投与され得る。
【０１９９】
レシピエントにおけるシクロスポリンまたはタクロリムスのいずれかのレベルは、監視され得る。免疫抑制の始まりでは、シクロスポリンまたはタクロリムスのいずれかのレベルは、例えば、レシピエントにおいて、０〜１５ｎｇ／ｍＬ、５〜１５ｎｇ／ｍＬ、１０〜２０ｎｇ／ｍＬ、１５〜２５ｎｇ／ｍＬ、２０〜３０ｎｇ／ｍＬ、２５〜３５ｎｇ／ｍＬ、３０〜４０ｎｇ／ｍＬ、３５〜４５ｎｇ／ｍＬ、または４０〜５０ｎｇ／ｍＬの範囲でよい。場合によっては、シクロスポリンまたはタクロリムスのいずれかのレベルは、レシピエントにおいて一定期間後に減少され得る。例えば、一定期間は、１週間未満、２週間未満、３週間未満、４週間未満、５週間未満、６週間未満、７週間未満、８週間未満、９週間未満、１０週間未満、１１週間未満、１２週間未満、１３週間未満、１４週間未満、１５週間未満、１６週間未満、１７週間未満、１８週間未満、１９週間未満、２０週間未満、２１週間未満、２２週間未満、２３週間未満、２４週間未満、２５週間未満、２６週間未満、２７週間未満、２８週間未満、２９週間未満、または３３週間未満でよい。場合によっては、シクロスポリンまたはタクロリムスのいずれかのレベルは、レシピエントにおいて、０〜１ｎｇ／ｍＬ、０．５〜１．５ｎｇ／ｍＬ、１．０〜２．０ｎｇ／ｍＬ、１．５〜２．５ｎｇ／ｍＬ、２．０〜３．０ｎｇ／ｍＬ、２．５〜３．５ｎｇ／ｍＬ、３．０〜４．０ｎｇ／ｍＬ、３．５〜４．５ｎｇ／ｍＬ、４．０〜５．０ｎｇ／ｍＬ、５．５〜６．５ｎｇ／ｍＬ、６．０〜７．０ｎｇ／ｍＬ、６．５〜７．５ｎｇ／ｍＬ、７．０〜８．０ｎｇ／ｍＬ、８．５〜９．５ｎｇ／ｍＬ、または９．０〜１０．０ｎｇ／ｍＬの範囲内で減少され得る。
【０２００】
場合によっては、カルシニューリン阻害剤は、プリン代謝物の阻害剤（例えば、ミコフェノール酸モフェチル）と組み合わせてレシピエントに投与され得る。例えば、シクロスポリンＡ及びミコフェノール酸モフェチルは、腎臓移植の場合に使用され得る。
【０２０１】
場合によっては、アジュバントは、１ヶ月超、２ヶ月超、３ヶ月超、４ヶ月超、５ヶ月超、６ヶ月超、７ヶ月超、８ヶ月超、９ヶ月超、１０ヶ月超、１１ヶ月超、１２ヶ月超、１３ヶ月超、１４ヶ月超、１５ヶ月超、１６ヶ月超、１７ヶ月超、１８ヶ月超、１９ヶ月超、２０ヶ月超、２１ヶ月超、２２ヶ月超、２３ヶ月超、または２４ヶ月超の期間、レシピエントで中止され得る。場合によっては、アジュバントの用量は、レシピエントが拒絶及びＧＶＨＤの欠如の臨床的基準を満たす場合に、ゆっくりと漸進され得る。例えば、投与されたアジュバントの総量は、経時的に減少され得る。場合によっては、アジュバントの漸進は、漸進レジメの最後にプリン代謝物阻害剤の用量がゼロに漸進されるように、１ヶ月超、２ヶ月超、３ヶ月超、４ヶ月超、５ヶ月超、６ヶ月超、７ヶ月超、８ヶ月超、９ヶ月超、１０ヶ月超、１１ヶ月超、１２ヶ月超、１３ヶ月超、１４ヶ月超、１５ヶ月超、１６ヶ月超、１７ヶ月超、１８ヶ月超、１９ヶ月超、２０ヶ月超、２１ヶ月超、２２ヶ月超、２３ヶ月超、または２４ヶ月超の期間、起こり得る。
【０２０２】
場合によっては、アジュバントは、１ヶ月未満、２ヶ月未満、３ヶ月未満、４ヶ月未満、５ヶ月未満、６ヶ月未満、７ヶ月未満、８ヶ月未満、９ヶ月未満、１０ヶ月未満、１１ヶ月未満、１２ヶ月未満、１３ヶ月未満、１４ヶ月未満、１５ヶ月未満、１６ヶ月未満、１７ヶ月未満、１８ヶ月未満、１９ヶ月未満、２０ヶ月未満、２１ヶ月未満、２２ヶ月未満、２３ヶ月未満、または２４ヶ月未満の期間後にレシピエントで中止され得る。場合によっては、アジュバントの用量は、レシピエントが拒絶及びＧＶＨＤの欠如の臨床的基準を満たす場合に、ゆっくりと漸進され得る。例えば、投与されたアジュバントの総量は、経時的に減少され得る。場合によっては、アジュバントの漸進は、漸進レジメの最後にプリン代謝物阻害剤の用量がゼロに漸進されるように、１ヶ月未満、２ヶ月未満、３ヶ月未満、４ヶ月未満、５ヶ月未満、６ヶ月未満、７ヶ月未満、８ヶ月未満、９ヶ月未満、１０ヶ月未満、１１ヶ月未満、１２ヶ月未満、１３ヶ月未満、１４ヶ月未満、１５ヶ月未満、１６ヶ月未満、１７ヶ月未満、１８ヶ月未満、１９ヶ月未満、２０ヶ月未満、２１ヶ月未満、２２ヶ月未満、２３ヶ月未満、または２４ヶ月未満の期間、起こり得る。
【０２０３】
アジュバント剤は、免疫抑制を亢進すると同時に、免疫抑制レジメンの一部である他の個々の薬剤の用量及び毒性を減少させるために使用され得る。場合によっては、アジュバント剤は、カルシニューリン阻害剤と組み合わせてよい。例えば、アジュバント剤は、ステロイド、アザチオプリン、ミコフェノール酸モフェチル、シロリムス、抗体、または当業者に公知の任意の他のアジュバント剤を含み、免疫抑制を亢進するために有効な用量でレシピエントに投与され得る。
【０２０４】
場合によっては、抗体系療法は、免疫抑制レジメンにおいてカルシニューリン阻害剤の投与を避けるかまたは減少させるために使用され得る。例えば、抗体系療法は、モノクローナル（例えば、ムロモナブ−ＣＤ３）抗体、ポリクローナル抗体、及び／または抗ＣＤ２５抗体（例えば、バシリキシマブ、ダクリズマブ）を含み得る。場合によっては、抗体系療法は、初期の移植後期間に行われ得る。例えば、初期の移植後は、移植後最大８週間でよい。
【０２０５】
移植管理は、免疫抑制で急性拒絶を予防、阻害または抑制することを含む。場合によっては、複数の薬剤が、急性拒絶のエピソードを予防、阻害または抑制するために使用され得る。例えば、薬剤はステロイドでよい。場合によっては、急性拒絶のエピソードを予防、阻害または抑制するために１またはそれ以上のステロイドが使用され得る。急性拒絶を予防、阻害または抑制するために好適な当業者に公知の任意のステロイドが使用され得る。例えば、急性拒絶を予防、阻害または抑制するために好適な当業者に公知の任意のステロイドのための任意の用量、投与形式及び投与期間が使用され得る。場合によっては、ステロイドの投与は維持用量に漸進され得る。
【０２０６】
例えば、薬剤は抗胸腺細胞グロブリンでよい。場合によっては、抗胸腺細胞グロブリンは、急性拒絶のエピソードを予防、阻害または抑制するために使用され得る。急性拒絶を予防、阻害または抑制するために好適な抗胸腺細胞グロブリンの任意の用量、投与形式及び投与期間が使用され得る。場合によっては、抗胸腺細胞グロブリンの投与は維持用量に漸進され得る。
【０２０７】
例えば、薬剤はムロモナブ−ＣＤ３でよい。場合によっては、ムロモナブ−ＣＤ３は、急性拒絶のエピソードを予防、阻害または抑制するために使用され得る。急性拒絶を予防、阻害または抑制するために好適なムロモナブ−ＣＤ３の任意の用量、投与形式及び投与期間が使用され得る。場合によっては、ムロモナブ−ＣＤ３の投与は維持用量に漸進され得る。
【０２０８】
キメリズム
ＨＬＡ−適合またはＨＬＡ−非適合の固形臓器移植、及び工学的に作製されたＨＬＡ−適合またはＨＬＡ−非適合の造血細胞の投与の後で、レシピエントはキメリズムについて監視され得る。移植後の任意の時間にキメリズムを決定するための任意の分析によって所定の血液細胞系統中の９５％超ドナー細胞を示すレシピエントは、完全ドナーキメリズムを有すると分類され得る。場合によっては、混合キメリズムは、所定の系統の１％超ドナー由来細胞でよく、９５％未満のドナー由来ＤＮＡではない。
【０２０９】
ＣＤ３+ 細胞及びＣＤ３４+ 細胞の相対的用量、及びこれらの細胞の総用量は、個体が安定な混合キメリズムを発症するか否かに影響を与え得る。場合によっては、例えば、ＣＤ３+ 細胞及びＣＤ３４+ 細胞がドナー及びレシピエント間でＨＬＡ適合である場合には、ＣＤ３+ 細胞の用量は、少なくとも約１×１０6 細胞／ｋｇであり、ＣＤ３４+細胞の用量は、少なくとも約０．５×１０6 ／ｋｇである。場合によっては、ＣＤ３+ 細胞及びＣＤ３４+ 細胞がドナー及びレシピエント間でＨＬＡ非適合である場合には、ＣＤ３+ 細胞の用量は、少なくとも約１×１０6 細胞／ｋｇ、５０×１０7 細胞／ｋｇ未満でよく、ＣＤ３４+細胞の用量は、少なくとも約１×１０6 ／ｋｇ、少なくとも約５×１０6 ／ｋｇ、少なくとも約１０×１０6 ／ｋｇ、少なくとも１５×１０6 ／ｋｇまたはそれ以上である。ＣＤ３４+ 細胞の用量が１５×１０6 ／ｋｇ未満である場合には、ＣＤ３+ 細胞のより高用量、例えば、最大約２５×１０6 ／ｋｇ、最大約３０×１０6 ／ｋｇ、最大約３５×１０6 ／ｋｇ、最大約４０×１０6 ／ｋｇ、最大約４５×１０6 ／ｋｇ、最大約５０×１０6 ／ｋｇを投与することが望ましい。
【０２１０】
ＨＬＡ適合患者では少なくとも注射される必要があるが、ＨＬＡ非適合の場合には、少なくとも６ヶ月間、継続した混合キメリズムを達成するために、ＣＤ３４+ 細胞と共に、少なくとも１０×１０6 Ｔ細胞／ｋｇ注射される必要がある。ＣＤ３４+細胞の用量が非適合患者において１５×１０6 細胞／ｋｇ未満の場合には、少なくとも５０×１０6 Ｔ細胞／ｋｇが必要とされる。
【０２１１】
混合キメリズムを示す個体は、キメリズムの発展に従って更に分類され、混合キメリズムを改善することは一定期間（例えば、少なくとも６ヶ月）にドナー細胞の割合が継続的に増加することであり得る。場合によっては、安定な混合キメリズムは、ドナー細胞の完全な損失なしに、経時的にレシピエント細胞の割合の変動を含み得る。
【０２１２】
工学的に作製された造血細胞組成物で使用されたＣＤ３４+ 細胞及びＣＤ３+ 細胞の用量は、移植後にレシピエントで安定な混合キメリズムを達成するために選択される。混合キメリズムは、１％超のレシピエントＤＮＡと定義される。場合によっては、混合キメリズムは、ドナー由来の細胞の割合及びレシピエント由来の細胞の割合を含み得る。場合によっては、混合キメリズムは、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の７０％超である。場合によっては、混合キメリズムは、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の１０％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の１５％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の２０％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の２５％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の３０％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の３５％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の４０％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の４５％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の５０％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の５５％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の５６％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の５７％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の５８％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の５９％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の６０％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の６１％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の６２％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の６３％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の６４％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の６５％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の６６％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の６７％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の６８％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の６９％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の７０％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の７１％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の７２％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の７３％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の７４％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の７５％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の７６％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の７７％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の７８％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の７９％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の８０％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の８１％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の８２％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の８３％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の８４％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の８５％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の８６％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の８７％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の８８％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の８９％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の９０％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の９１��超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の９２％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の９３％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の９４％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の９５％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の９６％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の９７％超、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の９８％超、または、ドナー由来の、レシピエントにおける細胞の９９％超である。
【０２１３】
混合キメリズムは、本明細書に記載のＣＤ３４+ ／ＣＤ３+ 作製済み造血細胞組成物を用いる移植後に安定であり得る。場合によっては、混合キメリズムは安定である。場合によっては、安定な混合キメリズムは、本明細書に記載のＣＤ３４+／ＣＤ３+ 細胞の任意の工学的に作製された造血細胞組成物で処置後少なくとも６ヶ月間持続する。場合によっては、安定な混合キメリズムは、５日間超、１０日間超、１５日間超、２０日間超、２５日間超、３０日間超、３５日間超、４０日間超、４５日間超、５０日間超、５５日間超、６０日間超、６５日間超、７０日間超、７５日間超、８０日間超、８５日間超、９０日間超、９５日間超、１００日間超、１０５日間超、１１０日間超、１１５日間超、１２０日間超、１２５日間超、１３０日間超、１３５日間超、１４０日間超、１４５日間超、１５０日間超、１５５日間超、１６０日間超、１６５日間超、１７０日間超、１７５日間超、１８０日間超、１８５日間超、１９０日間超、１９５日間超、２００日間超、２０５日間超、２１０日間超、２１５日間超、２２０日間超、２２５日間超、２３０日間超、２３５日間超、２４０日間超、２４５日間超、２５０日間超、２５５日間超、２６０日間超、２６５日間超、２７０日間超、２７５日間超、２８０日間超、２８５日間超、２９０日間超、２９５日間超、３００日間超、３０５日間超、３１０日間超、３１５日間超、３２０日間超、３２５日間超、３３０日間超、３３５日間超、３４０日間超、３４５日間超、３５０日間超、３５５日間超、３６０日間超、３６５日間超、３７０日間超、３７５日間超、３８０日間超、３８５日間超、３９０日間超、３９５日間超、４００日間超、４０５日間超、４１０日間超、４１５日間超、４２０日間超、４２５日間超、４３０日間超、４３５日間超、４４０日間超、４４５日間超、４５０日間超、４５５日間超、４６０日間超、４６５日間超、４７０日間超、４７５日間超、４８０日間超、４８５日間超、４９０日間超、４９５日間超、または５００日間超持続し得る。
【０２１４】
混合キメリズムは、レシピエント内で単一細胞種についてドナー細胞の割合を測定することによって決定され得る。例えば、組み合わされたキメリズムは、レシピエントにおけるドナー由来顆粒球の割合によって決定され得る。場合によっては、組み合わされたキメリズムは、レシピエント内の複数の細胞種についてドナー細胞の割合を測定することによって決定され得る。例えば、組み合わされたキメリズムは、レシピエントにおけるドナー由来顆粒球、ナチュラルキラー細胞、Ｂ細胞及びＴ細胞の割合によって決定され得る。
【０２１５】
場合によっては、レシピエントにおけるドナー由来顆粒球の割合が測定され得る。場合によっては、ドナー由来顆粒球の割合は、移植後にレシピエントにおいて一定でよい。場合によっては、ドナー由来顆粒球の割合は、移植後にレシピエントにおいて一定でなくてもよい。場合によっては、ドナー由来顆粒球の割合は、移植後にレシピエントにおいて経時的に変化する。例えば、移植後６０日間に、レシピエントにおけるドナー由来顆粒球の割合は、少なくとも１％、少なくとも２％、少なくとも３％、少なくとも４％、少なくとも５％、少なくとも６％、少なくとも７％、少なくとも８％、少なくとも９％、少なくとも１０％、少なくとも１１％、少なくとも１２％、少なくとも１３％、少なくとも１４％、少なくとも１５％、少なくとも１６％、少なくとも１７％、少なくとも１８％、少なくとも１９％、少なくとも２０％、少なくとも２１％、少なくとも２２％、少なくとも２３％、少なくとも２４％、少なくとも２５％、少なくとも２６％、少なくとも２７％、少なくとも２８％、少なくとも２９％、少なくとも２０％、少なくとも３１％、少なくとも３２％、少なくとも３３％、少なくとも３４％、少なくとも３５％、少なくとも３６％、少なくとも３７％、少なくとも３８％、少なくとも３９％、少なくとも４０％、少なくとも４１％、少なくとも４２％、少なくとも４３％、少なくとも４４％、少なくとも４５％、少なくとも４６％、少なくとも４７％、少なくとも４８％、少なくとも４９％、少なくとも５０％、少なくとも５１％、少なくとも５２％、少なくとも５３％、少なくとも５４％、少なくとも５５％、少なくとも５６％、少なくとも５７％、少なくとも５８％、少なくとも５９％、少なくとも６０％、少なくとも６１％、少なくとも６２％、少なくとも６３％、少なくとも６４％、少なくとも６５％、少なくとも６６％、少なくとも６７％、少なくとも６８％、少なくとも６９％、少なくとも７０％、少なくとも７１％、少なくとも７２％、少なくとも７３％、少なくとも７４％、少なくとも７５％、少なくとも７６％、少なくとも７７％、少なくとも７８％、少なくとも７９％、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％でよい。
【０２１６】
場合によっては、レシピエントにおけるドナー由来のナチュラルキラー細胞の割合が測定され得る。場合によっては、ドナー由来のナチュラルキラー細胞の割合は、移植後にレシピエントにおいて一定でよい。場合によっては、ドナー由来のナチュラルキラー細胞の割合は、移植後にレシピエントにおいて一定でなくてもよい。場合によっては、ドナー由来のナチュラルキラー細胞の割合は、移植後にレシピエントにおいて経時的に変化する。例えば、移植後６０日間に、レシピエントにおけるドナー由来のナチュラルキラー細胞の割合は、少なくとも１％、少なくとも２％、少なくとも３％、少なくとも４％、少なくとも５％、少なくとも６％、少なくとも７％、少なくとも８％、少なくとも９％、少なくとも１０％、少なくとも１１％、少なくとも１２％、少なくとも１３％、少なくとも１４％、少なくとも１５％、少なくとも１６％、少なくとも１７％、少なくとも１８％、少なくとも１９％、少なくとも２０％、少なくとも２１％、少なくとも２２％、少なくとも２３％、少なくとも２４％、少なくとも２５％、少なくとも２６％、少なくとも２７％、少なくとも２８％、少なくとも２９％、少なくとも２０％、少なくとも３１％、少なくとも３２％、少なくとも３３％、少なくとも３４％、少なくとも３５％、少なくとも３６％、少なくとも３７％、少なくとも３８％、少なくとも３９％、少なくとも４０％、少なくとも４１％、少なくとも４２％、少なくとも４３％、少なくとも４４％、少なくとも４５％、少なくとも４６％、少なくとも４７％、少なくとも４８％、少なくとも４９％、少なくとも５０％、少なくとも５１％、少なくとも５２％、少なくとも５３％、少なくとも５４％、少なくとも５５％、少なくとも５６％、少なくとも５７％、少なくとも５８％、少なくとも５９％、少なくとも６０％、少なくとも６１％、少なくとも６２％、少なくとも６３％、少なくとも６４％、少なくとも６５％、少なくとも６６％、少なくとも６７％、少なくとも６８％、少なくとも６９％、少なくとも７０％、少なくとも７１％、少なくとも７２％、少なくとも７３％、少なくとも７４％、少なくとも７５％、少なくとも７６％、少なくとも７７％、少なくとも７８％、少なくとも７９％、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％でよい。
【０２１７】
場合によっては、レシピエントにおけるドナー由来のＢ細胞の割合が測定され得る。場合によっては、ドナー由来のＢ細胞の割合は、移植後にレシピエントにおいて一定でよい。場合によっては、ドナー由来のＢ細胞の割合は、移植後にレシピエントにおいて一定でなくてもよい。場合によっては、ドナー由来のＢ細胞の割合は、移植後にレシピエントにおいて経時的に変化する。例えば、移植後６０日間に、レシピエントにおけるドナー由来のＢ細胞の割合は、少なくとも１％、少なくとも２％、少なくとも３％、少なくとも４％、少なくとも５％、少なくとも６％、少なくとも７％、少なくとも８％、少なくとも９％、少なくとも１０％、少なくとも１１％、少なくとも１２％、少なくとも１３％、少なくとも１４％、少なくとも１５％、少なくとも１６％、少なくとも１７％、少なくとも１８％、少なくとも１９％、少なくとも２０％、少なくとも２１％、少なくとも２２％、少なくとも２３％、少なくとも２４％、少なくとも２５％、少なくとも２６％、少なくとも２７％、少なくとも２８％、少なくとも２９％、少なくとも２０％、少なくとも３１％、少なくとも３２％、少なくとも３３％、少なくとも３４％、少なくとも３５％、少なくとも３６％、少なくとも３７％、少なくとも３８％、少なくとも３９％、少なくとも４０％、少なくとも４１％、少なくとも４２％、少なくとも４３％、少なくとも４４％、少なくとも４５％、少なくとも４６％、少なくとも４７％、少なくとも４８％、少なくとも４９％、少なくとも５０％、少なくとも５１％、少なくとも５２％、少なくとも５３％、少なくとも５４％、少なくとも５５％、少なくとも５６％、少なくとも５７％、少なくとも５８％、少なくとも５９％、少なくとも６０％、少なくとも６１％、少なくとも６２％、少なくとも６３％、少なくとも６４％、少なくとも６５％、少なくとも６６％、少なくとも６７％、少なくとも６８％、少なくとも６９％、少なくとも７０％、少なくとも７１％、少なくとも７２％、少なくとも７３％、少なくとも７４％、少なくとも７５％、少なくとも７６％、少なくとも７７％、少なくとも７８％、少なくとも７９％、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％でよい。
【０２１８】
場合によっては、レシピエントにおけるドナー由来のＴ細胞の割合が測定され得る。場合によっては、ドナー由来のＴ細胞の割合は、移植後にレシピエントにおいて一定でよい。場合によっては、ドナー由来のＴ細胞の割合は、移植後にレシピエントにおいて一定でなくてもよい。場合によっては、ドナー由来のＴ細胞の割合は、移植後にレシピエントにおいて経時的に変化する。例えば、移植後６０日間に、レシピエントにおけるドナー由来のＴ細胞の割合は、少なくとも１％、少なくとも２％、少なくとも３％、少なくとも４％、少なくとも５％、少なくとも６％、少なくとも７％、少なくとも８％、少なくとも９％、少なくとも１０％、少なくとも１１％、少なくとも１２％、少なくとも１３％、少なくとも１４％、少なくとも１５％、少なくとも１６％、少なくとも１７％、少なくとも１８％、少なくとも１９％、少なくとも２０％、少なくとも２１％、少なくとも２２％、少なくとも２３％、少なくとも２４％、少なくとも２５％、少なくとも２６％、少なくとも２７％、少なくとも２８％、少なくとも２９％、少なくとも２０％、少なくとも３１％、少なくとも３２％、少なくとも３３％、少なくとも３４％、少なくとも３５％、少なくとも３６％、少なくとも３７％、少なくとも３８％、少なくとも３９％、少なくとも４０％、少なくとも４１％、少なくとも４２％、少なくとも４３％、少なくとも４４％、少なくとも４５％、少なくとも４６％、少なくとも４７％、少なくとも４８％、少なくとも４９％、少なくとも５０％、少なくとも５１％、少なくとも５２％、少なくとも５３％、少なくとも５４％、少なくとも５５％、少なくとも５６％、少なくとも５７％、少なくとも５８％、少なくとも５９％、少なくとも６０％、少なくとも６１％、少なくとも６２％、少なくとも６３％、少なくとも６４％、少なくとも６５％、少なくとも６６％、少なくとも６７％、少なくとも６８％、少なくとも６９％、少なくとも７０％、少なくとも７１％、少なくとも７２％、少なくとも７３％、少なくとも７４％、少なくとも７５％、少なくとも７６％、少なくとも７７％、少なくとも７８％、少なくとも７９％、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％でよい。
【０２１９】
容易に入手でき、当業者に公知の、キメリズムを試験するための複数の方法がある。細胞のドナーまたはレシピエントの起源を識別するキメリズムの任意の試験方法は、本明細書に記載の方法で使用するために好適である。
【０２２０】
場合によっては、キメリズムの試験方法は、遺伝子に基づいた方法を含み得る。例えば、プローブを利用するポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）系の方法が使用され得る。場合によっては、ＰＣＲ系方法のプローブは、マイクロサテライト分析のためのプローブでよい。別の例では、ドナー及び宿主の起源の短末端反復長の多形を識別する商業的キットは、容易に入手でき、当業者に公知である。
【０２２１】
場合によっては、主要組織適合性複合体（ＭＨＣ）タイピングは、キメリズムを試験するために使用され得る。例えば、ＭＨＣタイピングは、血中の細胞の種類を試験するために使用され得る。場合によっては、ＭＨＣタイピングは、フローサイトメトリーと組み合わせて使用され得る。場合によっては、フローサイトメトリーによるＨＬＡ−染色細胞の分析が行われ得る。
【０２２２】
レシピエントが免疫抑制剤を中止できるために十分な安定な混合キメリズムを達成するように、本明細書に記載の方法は提供される。例えば、免疫抑制剤の中止は、免疫抑制剤を前進することを含んでよい。場合によっては、免疫抑制剤の中止は、免疫抑制剤の迅速な中止を含んでよい。場合によっては、混合キメリズムは、免疫抑制剤の中止前に少なくとも６ヶ月間持続する。場合によっては、混合キメリズムは、少なくとも１ヶ月、少なくとも２ヶ月、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、少なくとも９ヶ月、少なくとも１０ヶ月、少なくとも１１ヶ月、少なくとも１２ヶ月、少なくとも１３ヶ月、少なくとも１４ヶ月、少なくとも１５ヶ月、少なくとも１６ヶ月、少なくとも１７ヶ月、少なくとも１８ヶ月、少なくとも１９ヶ月、少なくとも２０ヶ月、少なくとも２１ヶ月、少なくとも２２ヶ月、少なくとも２３ヶ月、または少なくとも２４ヶ月の間持続する。場合によっては、アジュバントの用量は、レシピエントが拒絶及びＧＶＨＤの欠如の臨床的基準を満たす場合、ゆっくりと漸進され得る。例えば、投与されたアジュバントの総量は経時的に減少され得る。場合によっては、アジュバントの漸進は、少なくとも１ヶ月、少なくとも２ヶ月、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、少なくとも９ヶ月、少なくとも１０ヶ月、少なくとも１１ヶ月、少なくとも１２ヶ月、少なくとも１３ヶ月、少なくとも１４ヶ月、少なくとも１５ヶ月、少なくとも１６ヶ月、少なくとも１７ヶ月、少なくとも１８ヶ月、少なくとも１９ヶ月、少なくとも２０ヶ月、少なくとも２１ヶ月、少なくとも２２ヶ月、少なくとも２３ヶ月または少なくとも２４ヶ月の期間、起こり得る。
【０２２３】
場合によっては、拒絶エピソードの欠如は、免疫抑制剤の中止前の混合キメリズムと一致することがある。場合によっては、拒絶エピソードの欠如は、免疫抑制剤の中止前の少なくとも６ヶ月間一致し得る。場合によっては、拒絶エピソードの欠如は、少なくとも１ヶ月、少なくとも２ヶ月、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、少なくとも９ヶ月、少なくとも１０ヶ月、少なくとも１１ヶ月、少なくとも１２ヶ月、少なくとも１３ヶ月、少なくとも１４ヶ月、少なくとも１５ヶ月、少なくとも１６ヶ月、少なくとも１７ヶ月、少なくとも１８ヶ月、少なくとも１９ヶ月、少なくとも２０ヶ月、少なくとも２１ヶ月、少なくとも２２ヶ月、少なくとも２３ヶ月、または少なくとも２４ヶ月の間一致する。場合によっては、アジュバントの用量は、レシピエントが拒絶及びＧＶＨＤの欠如の臨床的基準を満たす場合、ゆっくりと漸進され得る。例えば、投与されたアジュバントの総量は経時的に減少され得る。場合によっては、アジュバントの漸進は、少なくとも１ヶ月、少なくとも２ヶ月、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、少なくとも９ヶ月、少なくとも１０ヶ月、少なくとも１１ヶ月、少なくとも１２ヶ月、少なくとも１３ヶ月、少なくとも１４ヶ月、少なくとも１５ヶ月、少なくとも１６ヶ月、少なくとも１７ヶ月、少なくとも１８ヶ月、少なくとも１９ヶ月、少なくとも２０ヶ月、少なくとも２１ヶ月、少なくとも２２ヶ月、少なくとも２３ヶ月または少なくとも２４ヶ月の期間、起こり得る。
【０２２４】
場合によっては、ＧＶＨＤの欠如及び拒絶エピソードの欠如は、免疫抑制剤の中止前の混合キメリズムと一致し得る。場合によっては、ＧＶＨＤの欠如及び拒絶エピソードの欠如は、免疫抑制剤の中止前の少なくとも６ヶ月間一致し得る。場合によっては、ＧＶＨＤの欠如及び拒絶エピソードの欠如は、少なくとも１ヶ月、少なくとも２ヶ月、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、少なくとも９ヶ月、少なくとも１０ヶ月、少なくとも１１ヶ月、少なくとも１２ヶ月、少なくとも１３ヶ月、少なくとも１４ヶ月、少なくとも１５ヶ月、少なくとも１６ヶ月、少なくとも１７ヶ月、少なくとも１８ヶ月、少なくとも１９ヶ月、少なくとも２０ヶ月、少なくとも２１ヶ月、少なくとも２２ヶ月、少なくとも２３ヶ月、または少なくとも２４ヶ月の間一致する。場合によっては、アジュバントの用量は、レシピエントが拒絶及びＧＶＨＤの欠如の臨床的基準を満たす場合、ゆっくりと漸進され得る。例えば、投与されたアジュバントの総量は経時的に減少され得る。場合によっては、アジュバントの漸進は、少なくとも１ヶ月、少なくとも２ヶ月、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、少なくとも９ヶ月、少なくとも１０ヶ月、少なくとも１１ヶ月、少なくとも１２ヶ月、少なくとも１３ヶ月、少なくとも１４ヶ月、少なくとも１５ヶ月、少なくとも１６ヶ月、少なくとも１７ヶ月、少なくとも１８ヶ月、少なくとも１９ヶ月、少なくとも２０ヶ月、少なくとも２１ヶ月、少なくとも２２ヶ月、少なくとも２３ヶ月または少なくとも２４ヶ月の期間、起こり得る。
【０２２５】
免疫抑制レジメンの漸進がレシピエントに適切であるかどうかを決定するために、レシピエントは、通常、規定の間隔で、混合キメリズムについて試験され得る。例えば、規定の間隔は、毎月、半月毎、毎週、隔月、毎年、半年毎などでよい。
【０２２６】
本発明を十分に記載してきたが、本発明の趣旨または範囲を逸脱せずに様々な変更及び修飾がなされることは、当業者に明らかである。
【実施例】
【０２２７】
本開示は、その開示の実施に好ましい形態を含んでいるか、またはそのような形態が提案される特定の症例に関して記載されている。本開示に照らして、個々の実施形態において、本開示で意図される範囲から逸脱することなく多数の修正及び変更が可能であることは、当業者に理解される。例えば、コドンが冗長であるため、タンパク質配列に影響を与えることなく基礎となるＤＮＡ配列に変更を行うことができる。更に、生物学的な機能的同等を考慮して、種類または量においてその生物学的作用に影響を与えることなく、タンパク質の構造に変更を行うことができる。このような修正は全て、添付の特許請求の範囲内に含まれることが意図される。
【０２２８】
本開示の実施において有用な一般技術の更なる詳細について、医師は、細胞生物学、組織培養、及び発生学の標準の教科書及び総説を参照できる。組織培養及び胚性幹細胞に関して、読者は奇形癌腫及び胚性幹細胞を参照したいと望む場合がある：Ａ  ｐｒａｃｔｉｃａｌ  ａｐｐｒｏａｃｈ  （Ｅ．Ｊ．  Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎ，  ｅｄ．，  ＩＲＬ  Ｐｒｅｓｓ  Ｌｔｄ．  １９８７）；  Ｇｕｉｄｅ  ｔｏ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ｉｎ  Ｍｏｕｓｅ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  （Ｐ．  Ｍ．  Ｗａｓｓｅｒｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．  ｅｄｓ．，  Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ  １９９３）；  Ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ  Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ  ｉｎ  Ｖｉｔｒｏ  （Ｍ．  Ｖ．  Ｗｉｌｅｓ，  Ｍｅｔｈ．  Ｅｎｚｙｍｏｌ．  ２２５：９００，  １９９３）；  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ａｎｄ  ｕｓｅｓ  ｏｆ  Ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌｓ：  Ｐｒｏｓｐｅｃｔｓ  ｆｏｒ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｔｏ  Ｈｕｍａｎ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ  （Ｐ．  Ｄ．  Ｒａｔｈｊｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｒｅｐｒｏｄ．  Ｆｅｒｔｉｌ．  Ｄｅｖ．  １０：３１，  １９９８）。
【０２２９】
分子細胞生化学の一般方法は、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：  Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，  ３ｒｄ  Ｅｄ．  （Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ  ２００１）；Ｓｈｏｒｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，  ４ｔｈ  Ｅｄ．  （Ａｕｓｕｂｅｌ  ｅｔ  ａｌ．  ｅｄｓ．，  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ  １９９９）；  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  （Ｂｏｌｌａｇ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ  １９９６）；Ｎｏｎｖｉｒａｌ  Ｖｅｃｔｏｒｓ  ｆｏｒ  Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ  （Ｗａｇｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．  ｅｄｓ．，  Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ  １９９９）；  Ｖｉｒａｌ  Ｖｅｃｔｏｒｓ  （Ｋａｐｌｉｆｔ  ＆  Ｌｏｅｗｙ  ｅｄｓ．，  Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ  １９９５）；Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｍａｎｕａｌ  （Ｉ．  Ｌｅｆｋｏｖｉｔｓ  ｅｄ．，  Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ  １９９７）；及びＣｅｌｌ  ａｎｄ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ：  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ  ｉｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  （Ｄｏｙｌｅ  ＆  Ｇｒｉｆｆｉｔｈｓ，  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ  １９９８）のような標準教科書に記載されている。本開示で言及する、遺伝子操作用の試薬、クローニングベクター、及びキットは、ＢｉｏＲａｄ、Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、及びＣｌｏｎＴｅｃｈなどのメーカーから市販されている。
【０２３０】
以下の実施例は、完全な開示並びに本開示を作製及び使用する方法についての説明を当業者に提供するものであり、開示と考えられる範囲の限定を意図せず、また、下記の実験が、実施された全実験である、または唯一の実験であることを表すことも意図しない。使用する数字に関し、正確さを保証するべく試みがなされている（例えば、量、温度など）が、実験上の一部の誤差及び偏差は考慮されるべきである。特に指定しない限り、部は重量部、分子量は重量平均分子量、温度はセ氏、そして圧力は大気圧またはその近傍圧である。
【０２３１】
実施例１−腎臓及び血幹細胞組み合わせ移植のためのＴＬＩ及びＡＴＧでの移植前処置
生涯に渡り免疫抑制剤を使用しなくてもすむようにすること、及び移植片の長期生存率を改善することを目的として、ＨＬＡハプロタイプ一致の生体血縁ドナーの腎臓同種移植片に対する免疫寛容を形成させる。現在、ＨＬＡハプロタイプ一致のレシピエントは、米国内の大部分の医療機関で実施された生体血縁ドナーからの腎移植の約半分を占める。過去１０年の間に大半の機関において割合が増加した移植片は、死体移植片の代わりとしての生体血縁ドナーによるものであった。生体血縁ドナーからの移植は、死体からの移植に比して生存率が改善されてはいるものの、依然として約４０〜５０％の生体ドナーで約１０年以内に移植片機能損失が起こる。更に、レシピエントは通常、カルシニューリン阻害剤、プレドニゾン、及びミコフェノール酸モフェチルを含む維持免疫抑制剤３種の混合を投与される。後者の２薬物には高血圧、腎毒性、及び心疾患を含む副作用があり、患者の長期的障害及び移植片機能損失につながっている。
【０２３２】
前臨床研究により、ＴＬＩ及びＡＴＧを用いた移植前処置療法はＴＢＩに比してＧＶＨＤを予防することから、この移植前処置は臓器及び骨髄の組み合わせ移植後の寛容を誘導するのに有利であることが示された。ＴＬＩ／ＡＴＧによる移植前処置で致死的ＧＶＨＤを誘導するためにはＴＢＩ前処置の場合より約１，０００倍多いドナーＴ細胞が必要とされる。ＧＶＨＤに対する防御の基本は、宿主のナチュラルキラー（ＮＫ）Ｔ細胞サブセットを有利に働かせる残存宿主Ｔ細胞のバランスの変化である。ナチュラルキラー（ＮＫ）Ｔ細胞は、ＴＬＩ／ＡＴＧで移植前処置したマウスで優勢Ｔ細胞サブセットとなり、大量のＩＬ−４を産生して通常のドナーＴ細胞をＴｈ２バイアスへ偏らせ、これによりＧＶＨＤを抑制する。幾つかの研究機関により、インビボ照射で生き残るナチュラルキラー（ＮＫ）Ｔ細胞はそれ自体がＴｈ２バイアスへ偏っていることが示されている。
【０２３３】
前臨床研究におけるＴＬＩ／ＡＴＧの対ＧＶＨＤ防御効果に基づき、この移植前処置療法は、ＨＬＡ適合細胞移植で患者にとって骨髄非破壊的レジメンとして首尾よく試験が行われている。移植前処置療法及びヘマトポエティック細胞移植片の作製において適応させるための修正を行った。造血細胞移植片を、免疫磁気ビーズカラムにより選択した、ある一定の数の精製ＣＤ３４+ 造血前駆細胞及びある一定の数のドナーＴ細胞を含有するように「工学的に作製した（ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ）」した。ＴＬＩ及びＡＴＧのスケジュールなど、移植前処置療法の他の態様はそのままにした。白血病及びリンパ腫の治療に造血細胞移植を受ける患者のために、標準プロトコールを修正してＭＭＦを１ヶ月、及びシクロスポリンを６ヶ月とし、これを移植後免疫抑制レジメンとした。注目されるのは、移植前処置療法を移植手術当日の第０日に開始し、ドナー造血細胞輸液を第１１日目に投与したことである。これは、今後の死体移植にまでプロトコールを更に適応させることを可能にし、また、ＴＬＩ／ＡＴＧを使用した組み合わせ移植に関する多数の前臨床研究においてに使用されたスケジュールでもあった。
【０２３４】
患者２０例にＨＬＡ適合組み合わせ移植片を移植して、５〜８６ヶ月の追跡調査を行った。そのうち１９例がＧＶＨＤを発症することなくキメラになった。１７例でキメラ状態が持続し（６ヶ月超）、このうち１４例は免疫抑制剤を中止した。この１７例の患者のうち２例は薬量漸減中であり、２０例中４例は薬物中止に失敗した（６ヶ月を超えるキメラ状態維持の失敗、または拒絶反応エピソードのいずれかのため）。全２０例の患者は、現在、最終観察時点で優れた移植片機能を有しており、移植手術から約５日の入院期間の後に退院した。これらの患者には３〜１０×１０6 ＣＤ３４+ 細胞／ｋｇ体重及び少なくとも１×１０6 ＣＤ３+ Ｔ細胞／ｋｇ体重を要した。
【０２３５】
上記の寛容プロトコールをＨＬＡ−不適合患者に適用するため、ＴＬＩ及びＡＴＧ移植前処置療法及び白血病またはリンパ腫を治療するためのドナー細胞移植を受けたＨＬＡハロタイプ（ｈａｌｏｔｙｐｅ）不一致患者１７例の予備試験を基にＣＤ３４+ 細胞及びＣＤ３+ ドナー細胞の用量調整を行った。ＣＤ３４+ 細胞の用量を１０×１０6 細胞／ｋｇ以上まで徐々に増量し、また、ＣＤ３+ 細胞の用量を１０×１０6 細胞／ｋｇまで徐々に増量した。後者の細胞用量の投与を受けた大部分の患者では混合キメリズムが達成されたが、これらより低レベルの細胞用量で投与を受けた患者には混合キメリズムが達成された例は１例もなかった。したがって、腎臓及び造血細胞組み合わせ移植を受けたＨＬＡハプロタイプ一致患者４例に、ＣＤ３４+ 細胞１０×１０6 ／ｋｇ以上、及びＣＤ３+ 細胞１０×１０6／ｋｇ以上という目標用量の達成を目的とした用量漸増臨床試験を実施した。本試験の目的は、これらの目標用量が達成された場合に混合キメリズムが６ヶ月を超えて形成されるのか、また、その後の免疫抑制剤中止をもたらすことができるのかを検討することであった。臨床プロトコールの詳細の一部を以下に示す。
【０２３６】
遺伝子アレイ解析（ｇｅｎｅ  ａｒｒａｙ  ｔｅｓｔｉｎｇ）によれば、薬物中止基準に合致する患者において移植前後の遺伝子発現プロファイルに変化があることが示されており、それらの患者のプロファイルが、従来の免疫抑制剤を中止して、なおかつ初回モニタリング時点で移植片拒絶反応を発症しなかった、まれな「完全離脱型（ｏｐｅｒａｔｉｏｎａｌｌｙ）」寛容である患者のプロファイルにかなりよく一致していた。この症例は、退薬基準に満たなかった患者の例ではなかった。２群間の遺伝子発現パターンの違いは後の測定時点で減少した。「完全離脱型（ｏｐｅｒａｔｉｏｎａｌｌｙ）」寛容である患者はいずれもＨＬＡ−不適合であったことに留意すべきである。このことは、寛容である遺伝子発現プロファイルを使用して適合及び不適合いずれの患者でも寛容である状態を予測できることを示している。
【０２３７】
臨床プロトコール
これは、成人腎移植患者に行った単一施設非盲検試験である。患者は、ＴＬＩ、ＲＡＴＧ及びＧ−ＣＳＦで「動員された血」単核細胞の輸液を受けたが、この単核細胞は、ＣＤ３４+ 細胞が濃縮されており、ある一定の数のＣＤ３４+ 及びＣＤ３+ ドナー細胞を含有していた。免疫抑制剤は、ミコフェノール酸モフェチルを９ヶ月（ＭＭＦ；１５ｍｇ／ｋｇを１日２回、第１０日目より開始）、及びタクロリムスを連日、第０日より開始し、目標とする１２ヶ月で中止する漸減コースという構成であった。カルシニューリン阻害剤及びプリン代謝阻害剤からなる免疫抑制剤の組み合わせは、先に使用した組み合わせと同様であった。経時的な測定時点において、（１）移植片機能の監視、（２）レシピエントの白血球サブセットのキメラ状態の測定を行った。更に、（３）移植片のプロトコール生検が行われる。６ヶ月目までにキメラ状態にならなかった、もしくは移植片廃絶がある、または拒絶反応を発症すなわちＧＶＨＤを発症した、または移植片生検で拒絶反応の組織学的所見が認められた場合では、タクロリムス及び／またはＭＭＦを中止せず、治療失敗であるとして、患者のその後の追跡が行われることになった。本試験のレシピエントには、ドナーから採取した「動員された」末梢血単核細胞のＴ細胞１×１０7 ／ｋｇという目標用量を達成するため、ＣＤ３４+ 細胞数／１ｋｇが１０×１０6 以上の目標用量及び漸増用量のＴ細胞を投与した。プロトコールに組み入れられた患者４例中、２例は目標用量投与を受け、２例は受けなかった（表１）。
【０２３８】
試験治療。本試験治療中、患者は、ウサギＡＴＧ（サイモグロブリン）静脈内注射を５回、全１，２００ｃＧｙの全身リンパ照射、ドナー細胞の単回輸注、一時的な免疫抑制剤（ＭＭＦ及びタクロリムス）、及び予防的抗ウイルス剤、抗真菌剤及び抗菌剤の投与を受けた。
【０２３９】
患者は、各用量が１．５ｍｇ／ｋｇであるサイモグロブリンの静脈内投与を５日間に渡り合計５回受ける。サイモグロブリンを移植当日（術中、移植臓器に宿主血液を潅流させる前）及び移植後４日間投与する。
【０２４０】
患者は、移植後、リンパ節、脾臓及び胸腺を標的とした分割放射線照射治療（各１２０ｃＧｙ）をＴＬＩ総用量が１，２００ｃＧｙになるように第１〜４日まで、及び第７〜１１日まで１０回受ける。第１０日目または１１日目に２回投与して合計１０回の投与となる。ＴＬＩを、逆Ｙ字照射野及びマントル照射野に照射する。ＴＬＩ照射の間は、好中球減少（顆粒球２，０００／ｍＬ未満）、血小板減少（血小板６０，０００／ｍＬ未満）及び感染症について患者をモニタリングする。任意のこれらのいずれかでも認められた場合はＴＬＩを中止し、好中球減少に対しＧ−ＣＳＦ（１０μｇ／ｋｇ／日）を投与する。ひとたび好中球減少及び／または血小板減少が回復したらＴＬＩを再開する。ＴＬＩの完了時、白血球数が１，０００細胞／ｍｍ3 を下回っている患者全員にＧ−ＣＳＦ（１０μｇ／ｋｇ／日）を投与する。途中で投与を中止しなかった場合は第１１日目までにＴＬＩは終了する。
【０２４１】
凍結保存された、ＨＬＡ−ハプロタイプ一致の生体血縁ドナーからの、Ｇ−ＣＳＦで動員された血液単核細胞（ドナー末梢血から血液成分分離により回収）の単回静脈内投与用輸液で、「工学的に作製した（ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ）」ものをＴＬＩ完了日に患者に投与する。ドナー細胞の採取を以下のように実施する。腎臓移植の約６週間前、ドナーに、Ｇ−ＣＳＦを連日（１６ｍｇ／ｋｇ／日）５日間投与し、ＨＬＡ−ハプロタイプ一致の末梢血幹細胞（ＰＢＳＣ）移植について医療被検者に関するスタンフォード委員会（Ｓｔａｎｆｏｒｄ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ  ｏｎ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｕｂｊｅｃｔｓ）によりこれまでに承認されている手順に従い、最高２０リットルまでの血液成分分離により単核細胞を採取する。更に、細胞回収を最適に行うために、最高１２リットルの第２セッションを行ってもよい。ＩｓｏｌｅｘカラムでＣＤ３４+ 細胞について細胞を選択し、カラムのフロースルーも回収する。ＣＤ３４+ 細胞及びフロースルー細胞はともに、スタンフォード血液及び骨髄移植研究室（Ｓｔａｎｆｏｒｄ  Ｂｌｏｏｄ  ａｎｄ  Ｍａｒｒｏｗ  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ  ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ）にて標準手順に従い凍結保存及び融解される。投与されるＣＤ３４+ 細胞目標用量は１０×１０6 細胞／ｋｇ以上である。カラムのフロースルー細胞を濃縮ＣＤ３４+ 細胞と共に静脈内投与することにより、ある一定の目標用量（１×１０7 ／ｋｇ）のＣＤ３+ Ｔ細胞を投与する。免疫蛍光染色法で測定したＣＤ３+ 細胞含量を基にフロースルー細胞の用量を計算する。この用量を、白血病及びリンパ腫を有するハプロタイプ一致の患者１７例に使用した。これらの患者の大部分で持続的混合キメリズムが形成され、急性ＧＶＨＤの発症は１例もなかった。Ｔ細胞用量は、組み合わせ移植を受けた３例目までのレシピエントで持続的キメラ状態達成に失敗した場合は増量し、３例目までのレシピエントで完全キメラ状態が形成されるかまたはＧＶＨＤを発症した患者がいた場合は、減量する。
【０２４２】
コルチコステロイド治療は、ＡＴＧの副作用を軽減するための前投薬としてＡＴＧ輸注日のソルメドロール（Ｉ．Ｖ．）６０〜１２０ｍｇに制限された。ＡＴＧの最終投与後、３０ｍｇ／日から開始し５ｍｇ／日ずつ減量する漸減コースでプレドニゾンを第１０日まで投与する。
【０２４３】
ＭＭＦ治療を１５ｍｇ／ｋｇ、１日２回でドナー細胞輸注日（第１０日）に始めた。ＭＭＦ治療を６ヶ月間維持した後、漸減し、９ヶ月目に中止した。
【０２４４】
タクロリムスを第０日に開始し、顕著な全血トラフ値を達成するよう調整した。免疫抑制剤の用量漸減基準を満たしている限り、タクロリムスを９ヶ月目に開始し、１２ヶ月目までに中止するように漸減させた。
【０２４５】
免疫抑制剤のタクロリムスを１２ヶ月目まで、また、ＭＭＦを９ヶ月目まで継続的に漸減する基準は以下のとおりである。１）キメラ状態が少なくとも６ヶ月間持続すること、２）拒絶反応の臨床所見がないこと、３）プロトコール生検で急性または慢性拒絶の証拠が示されないこと、４）ＧＶＨＤを発症しないこと。これらの基準に満たない患者は治療失敗とみなされ、それ以上の薬量漸減は実施されない。
【０２４６】
急性または慢性ＧＶＨＤが観察された場合、通常は免疫抑制剤による治療が行われることになるが、そうした患者は治療失敗とみなされる。免疫抑制剤を標準的方法に従って投与する。
【０２４７】
拒絶反応エピソードは、メチルプレドニゾロンの静脈内投与を含む標準的な抗拒絶反応療法で治療し、その患者は治療失敗とみなされる。２コースのステロイド治療に応答が認められない場合は、１コースの抗リンパ球抗体を投与する。タクロリムスは、拒絶反応のエピソードの間、一般用量で投与する。一旦拒絶反応エピソードを発症したら、患者は一般用量に戻した維持免疫抑制剤投与を受けることになり、上記プロトコールに従った漸減のそれ以上の試みは為されない。現在、急性拒絶エピソードの９５％が回復している。
【０２４８】
ＴＬＩ及びＡＴＧでの初期治療によりＴ細胞の顕著な除去が誘導されると予測されることから、従来の免疫抑制プロトコールの場合に比してサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、エプスタイン−バーウイスル、帯状疱疹及び単純ヘルペスウイルスなどのウイルス性感染症を新たに発症する、もしくは再発するリスクが高まる。ＣＭＶに対する予防的抗ウイルス薬を以下のとおり投与した。バルガンシクロビル（９００ｍｇ／日：経口投与）を１４日目まで腎機能により調整して投与、または１４日目まで、ガンシクロビル（ＤＨＰＧ）５ｍｇ／ｋｇを腎機能により調整してＩＶ投与した。１４日間のコース終了後、プロトコールの移植のレシピエント全員を、腎機能により調整したバルガンシクロビル（９００ｍｇ／日）の治療に入れた。これを最低でも９０日間継続したが、絶対リンパ球数が４００に満たない場合は、ステロイドを中止するまで継続する。
【０２４９】
ニューモシスチス・カリニ肺炎（ＰＣＰ）予防のためにバクトリム（１日あたり１倍量の錠剤１錠）を１年間経口投与し、カンジダ菌予防のためにマイコスタチン含嗽剤を連日３週間与えた。術前術後の標準的抗生物質には、アンセフ（１ｍｇ、ｉ．ｖ．、８時間間隔で３回）及びゲンタマイシン（１．７ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｖ．、移植時に１回）が含まれるであろう。抗菌剤は、患者のアレルギーに応じ適切なものに替える。
【０２５０】
移植後全ての免疫抑制剤が中止される直前に監視的生検（ｓｕｒｖｅｉｌｌａｎｃｅ  ｂｉｏｐｓｙ）を実施する。更に、血清クレアチニンが２０％上昇し、原因不明または回復に至らない場合は４８時間以内に「特定原因（ｆｏｒ−ｃａｕｓｅ）」についての生検を行う。
【０２５１】
目標とした細胞量の投与に至らなかった患者２例のうち、患者＃１は混合キメリズムを１ヶ月以上持続させるに至らなかった。この患者は、用量漸増試験の一部として３×１０6 ＣＤ３+ 細胞／ｋｇの投与を受けていたが、目標とした数のＣＤ３４+ 細胞／ｋｇの投与を受けていた。この患者に免疫抑制剤の中止は行われず、タクロリムス及びＭＭＦ投与を継続中で移植片機能は良好である。
【０２５２】
患者＃２及び＃３は、目標とした細胞量のＣＤ３+ Ｔ細胞（１０×１０6 細胞／ｋｇ）及び目標用量のＣＤ３４+ 細胞の投与を受けた。両患者とも、現在のところ、それぞれ１０ヶ月及び５ヶ月の持続的混合キメリズムが形成されており、薬物中止基準を満たしている。持続的混合キメリズムのパターンは図２の患者＃３の方が短い。
【０２５３】
患者＃４は１０×１０6 ＣＤ３+ 細胞／ｋｇの投与を受けたが、２コースのＧ−ＣＳＦ投与をドナーに行ったにもかかわらずドナーＣＤ３４+ 細胞の動員不良のため、必要数のＣＤ３４+ 細胞には満たなかった。この患者はキメラ状態の形成には至らず、免疫抑制剤を継続しており移植片機能は良好である。
【０２５４】
実施例２−Ｔ細胞量が混合キメリズムの形成に及ぼす効果
患者に実施例１に記載の移植を行った。ＨＬＡ適合の特徴、移植前処置レジメント（ｒｅｇｉｍｅｎｔ）及びドナー細胞組成を表１に従って実施した。
【０２５５】
【表１】
0006305443.tif 000002
【０２５６】
これらのデータ及び図４から分かるとおり、ＨＬＡ−不適合造血細胞移植を受ける個人では、安定である混合キメリズムは、最高５０×１０7 ／ｋｇの高用量のＣＤ３+ 細胞で達成でき、ＣＤ３４+ 細胞数が少ないことをこのＴ細胞用量で克服することができる。例えば、患者７及び９はＣＤ３４+ 細胞を同量投与されたが、高用量Ｔ細胞の投与を受けた患者９のみにおいて混合キメリズムが達成された。
【０２５７】
実施例３−造血細胞移植で使用するための末梢血前駆細胞の採取
品質・量ともに適した末梢血前駆細胞を採取することが、造血細胞移植用の前駆細胞として許容可能な生存率及び回収率をもたらすことにつながる。この種の手順は、ＢＭＴ移植の可能性が高い患者またはドナーに対して、更には保存を目的として実施してよい。
【０２５８】
移植片対白血病効果を起こすことを目標として、ドナーからリンパ球を採取する。
【０２５９】
樹状細胞または別の細胞株を研究用に採取する。
【０２６０】
−体重４０kｇ未満の患者についてはＰｅｄｉａｔｒｉｃ  ＣＯＢＥ（登録商標）Ｓｐｅｃｔｒａ（登録商標）Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ（手順書）で設定手順、血液またはアルブミンの準備基準及びその他対象年齢に関する記載を参照のこと。
【０２６１】
【表２】
0006305443.tif 000003
【０２６２】
チューブ取り付け
血液成分分離装置（例えば、Ｓｐｅｃｔｒａ）の電源を入れ、各電源供給が正しい電圧で確実に動作しているか簡単なセルフチェックを実施した。「ｃｏｂｅ  ｓｐｅｃｔｒａ（コーブ・スペクトラ）（バージョンソフトウェア）」が表示され、黄色の警告ｌｅｄ点灯し、休止ｌｅｄが点滅し、カートリッジクランプが未装填位置にあり、シングルステージフィラーが所定の位置にあることを確認した。ディスポーザブルセット包装を遠心分離器カバーに置き、紙テープを取り外した。包装をフロントパネルのフック下に置いてしっかりと保持した。
【０２６３】
採血コイルを取り外し、アクセス接続部をｉｖポールの左側フックに確実に懸架した。アクセス生理食塩水（緑）ラインを装置上部に置いた。返血ラインのコイルを取り外し、返血接続部をｉｖポールの左側フックに懸架した。返血生理食塩水ラインを装置上部に置いた。バッグをｉｖポールの左側から右側に向かって懸架していった。すなわち、一番左側からａｃバッグ、生理食塩水バッグ、廃液バッグ、血漿バッグ、右側が生成物バッグの順となる。生成物の早期流入を防ぐため、生成物バッグと試料バルブアセンブリＹコネクターとの間のスライドクランプを閉じた。返血ポンプカートリッジを包装右側から取り外し、血漿ポンプと採取／置換ポンプ間のカートリッジクランプにスナップ嵌めした。
【０２６４】
アクセスポンプカートリッジを包装左側から取り外し、ａｃポンプと採血ポンプとの間のカートリッジクランプにスナップ嵌めした。カートリッジのｃｏｂｅ表示が表向き上部に来るようにする。ａｃラインをａｃ検出器にセットし、プログラムでチューブからポンプへの装填を継続した。各ラインを、採取／置換バルブ及び血漿バルブに置いた。
【０２６５】
返血圧センサーをそのハウジング内に置き、下方へ押して時計方向に回し、所定の位置にロックした。Ｒｂｃラインをｒｂｃバルブに置き、ｒｂｃ検出器に完全に挿入した。返血エアーチャンバー及び採血エアーチャンバーを、廃液迂回ラインを前方にしてエアー感知器内に位置させた。エアーチャンバーフィルターを、チャンバー上部がエアー感知器ハウジングと合うように位置させた。返血エアーチャンバー上方にある雄／雌リアーコネクターから保護キャップを取り外して、廃液迂回ラインを廃液迂回バルブアセンブリ内に置いた。「ｙ」を先に押してからチューブを所定の位置に「フロス（ｆｌｏｓｓｅｄ）」して戻した。
【０２６６】
ラインを遠心分離器圧力センサーハウジング内に置いてアクセス圧力センサーをそのハウジング内に置き、下方へ押して時計方向に回し、所定の位置にロックした。返血（青）ラインを、ラインがバルブ中心を通って水平になるよう返血バルブ内に置いた。チャネルを包装から取り外した。
【０２６７】
デバイスのロックを解除し、遠心分離器内に置いた。遠心分離器を回して、充填ポートがフロントに対して開き、遠心分離器のカラーホルダーがフィラーの外側リムに乗るようにした。チャネルに接続されたチューブを伸長し、遠心分離器を時計方向に数回回転させて、チューブによじれがなくアッパーベアリングが所定の位置のままであることを確認した。遠心分離器のドアを閉じ、カバーをしてから、使い捨てチューブセット用の標準のプライミング手順を実施した。
【０２６８】
患者を接続し血液成分分離を実施
カテーテルを使用してアクセスする。カテーテルをクランプし、ハブ接続部をアルコール拭き取りティッシュで拭いて準備した。無針コネクターを取り外し、ハブ及びねじ山を新しいアルコール拭き取りティッシュでしっかりと清浄した。バキュテイナホルダーを取り付け、カテーテルのピンチクランプを開いた。カテーテルからの最初の５ｍｌまでは廃液採取に入れ、試験検体を採取した。カテーテルのピンチクランプを閉じ、取付針をｓｐｅｃｔｒａアクセスラインから抜針し、そのアクセスラインを動脈ラインが結合されたカテーテルにつなげた。試料を血液希釈について評価した。ラインピンチクランプへのアクセスは開いたまま、生理食塩水ローラークランプへのアクセスを閉じた。血液成分分離装置のプログラムを開始した。返血ラインをカテーテルの静脈ラインに接続し、一方、返血生理食塩水ラインのピンチクランプを開け、ローラークランプを閉じた。
【０２６９】
静脈穿刺を使用してアクセス：静脈穿刺部位を皮膚用アルコール含有グルコン酸クロルヘキシジン２％で約３０秒間清浄し、約３０秒間風乾した。静脈穿刺アクセスを、ｓｐｅｃｔｒａアクセスラインに付属の１７ゲージ針またはすでに持ち合わせていた１８ゲージ針を使用して実施した。血液希釈について調べるため試験検体を採取した。返血針の静脈穿刺を２０〜１７ゲージＩＶ用針で実施した。ｓｐｅｃｔｒａのアクセス及び返血ラインをアクセス針及び返血針に接続した。アクセス及び返血ライン上で白色ピンチクランプを開いた。静脈を開いた状態に保ち、針からの返血に遅延があった場合の返血針の凝固を予防するため、返血生理食塩水ラインのローラークランプを調整した。生理食塩水アクセスローラークランプへのアクセスを閉じ、カフを加圧し４０ｍｍＨｇまで膨張させてから、運転開始モードへ進んだ。
【０２７０】
仕様：カラーグラムｈｃｔ２〜４％の手順を利用して単核細胞を採取した（二次処理を行う製品、例えば、Ｉｓｏｌｅｘまたはｃｌｉｎｉｍａｃｓでは非常に軽度である０．５〜１．５％）。遠心分離チャンバーがある、マルチルーメンコネクター直下の、透明な最小採取ラインの下にカラーグラムを挿入した。カラーグラムの四角い呈色部を採取ラインの色と比較した。採取した単核細胞は最小限の赤血球数を有していることとした。典型的には、有意な数の白血球が赤血球上層にあった。最大の単核細胞の収量を得るため一部の赤血球を採取しなければならなかった。しかし、細胞選択のために生成物に更に処理を行う場合、ＣＤ３４+ 選択装置では顆粒球とＣＤ３４+ 細胞とは競合することになる。採取が薄いほど、顆粒球数は少ないが、より多くの血小板を採取した。採取ラインの色が濃すぎる場合、血漿ポンプの流量を３〜５分おきに０．３〜１ｍｌ／分だけ下げた。採取ラインの色が明るすぎる場合、血漿ポンプの流量をやはり同量調節して上げた。
【０２７１】
クイックスタートで目標運転時間が終了し完了した後、血漿を採取した。血漿採取により一時的にインターフェースが不安定になり高返血圧の警告が発生する場合がある。このため、血漿ラインのスライドクランプを開き、目標値、次いで血漿を押し、採取する血漿容積を入力して確定を押して、血漿を採取した。血漿採取の終了間際になると、返血圧の許容限度の３０〜４０ｍｌ／分まで流量が落ち、その後、徐々に前の流量まで上昇した。
【０２７２】
凍結保存品の場合：白血球数が３０ｋ／ｕｌ以上、また血小板数が患者で３０ｋ／ｕｌ以上、もしくはドナーで２００ｋ／ｕｌ以上の場合、採取速度を上げて生成物バッグに最低でも３００ｍｌ含有されるようにする。
【０２７３】
アクセサリーラインの脆弱部（ｆｒａｎｇｉｂｌｅ）上のスライドクランプを閉じ、脆弱部（ｆｒａｎｇｉｂｌｅ）を備えるチューブを前後に曲げて脆弱部（ｆｒａｎｇｉｂｌｅ）を完全に折った。無菌的手法を使用して、滅菌バリアフィルターの下のリアー接続部からキャップを取り外し、所望量の抗凝固剤を含有する注射器を取り付けた。脆弱部（ｆｒａｎｇｉｂｌｅ）上のスライドクランプを開き、抗凝固剤を滅菌バリアフィルターを通してゆっくりと生成物バッグに注入した。流体の逆流を防ぐため、チューブの脆弱部（ｆｒａｎｇｉｂｌｅ）直上のスライドクランプを閉じてから注射器を取り外した。約３ｍｌの保存料無添加生理食塩水を含有する注射器を滅菌バリアフィルターの下のルアー接続部に取り付けた。スライドクランプを脆弱部（ｆｒａｎｇｉｂｌｅ）上方で開き、生理食塩水を滅菌バリアフィルターを通して注入し抗凝固剤を生成物バッグに流した。チューブの脆弱部（ｆｒａｎｇｉｂｌｅ）直上のスライドクランプを開き、キャップを戻した。
【０２７４】
生成物バッグとバルブアセンブリＹコネクターとの間のスライドクランプ、及び試料バルブの１つとＹコネクターとの間のチューブのスライドクランプを閉じて、ミッドバッグ（ｍｉｄｂａｇ）の試料を採取した。代表的試料が得られるように生成物バッグをよく混ぜ、生成物バッグと試料バルブアセンブリＹコネクターとの間のスライドクランプを開いた。チューブに取り付けられている試料バルブを開状態のスライドクランプで搾り、生成物試料を必要量だけ採取した。生成物試料を採取しすぎた場合、試料バルブが生成物バッグ流体レベルより上に来るように位置を変え、試料バルブを搾って過剰の生成物試料を生成物バッグ内に送り、更に、残存空気を利用してチューブから生成物試料を除き、試料バルブを生成物バッグの下で直立に保持し、試料バルブ内の残存空気を利用して試料バルブを搾り、生成物試料をチューブから生成物バッグへ押し出すことにより、過剰の生成物試料を生成物バッグに流し戻した。更に、試料バルブへの圧力を維持しつつ、Ｙコネクター直下のスライドクランプを閉じた。
【０２７５】
先の鈍い１８ゲージ１インチ針及び注射器でサンプリングポートから生成物試料を吸引した。その際、注射器を取り付けた先の鈍い針をサンプリングポートに挿入し、試料バルブを逆にして生成物試料をゆっくりと注射器内に吸引し、注射器を取り付けた針をサンプリングポートから抜き、生成物試料を試験管へ移して行った。
【０２７６】
リンスバック
アクセス用カテーテルを使用してリンスバックを開始する。緑の生理食塩水ラインのローラークランプを開き、アクセスカテーテルに１０ｍｌの生理食塩水を流し、次いで、アクセスラインの白色ピンチクランプを閉じた。返血ラインに１０ｍｌの生理食塩水を流し返血ラインの白色ピンチクランプを閉じた。生理食塩水ラインのローラークランプを閉じて、接続部位をアルコールで清浄した。カテーテルをクランプし、アクセスラインを閉じてから、ヘパリン充填済みの新しい無針コネクターを取り付けた。ルーメンに３ｍｌの１００ユニット／ｍｌヘパリンを流し、注射器及びリクランプカテーテルを取り外した。返血ラインに同様の手順を繰り返した。
【０２７７】
アクセス用静脈穿刺を使用してリンスバックを開始する。カフ圧を解放し、緑の生理食塩水ラインのローラークランプをいて針に流し、次いで、アクセスラインの白色ピンチクランプを閉じた。採取ラインの針を取り外した。返血ラインの白色ピンチクランプを閉じて、返血針を抜いた。静脈穿刺部位を圧迫し、生理食塩水ラインのローラークランプを閉じた。
【０２７８】
実施例４−血液成分分離生成物からのＣＤ３４+ 細胞の分離及び精製
ＣｌｉｎｉＭＡＣＳシステムを使用して、選択及びＣＤ３４+ 造血前駆細胞（ＨＰＣ）の濃縮を行った。ＣｌｉｎｉＭＡＣＳシステムは、標的前駆細胞の標識手段として磁気粒子に結合させたＣＤ３４抗体を使用する。一旦これらの磁気粒子で標識した後、細胞懸濁液を、ＣｌｉｎｉＭＡＣＳ装置の選別カラム内の強力な磁気勾配に通過させる。磁気標識されたＣＤ３４+ 細胞はカラム内に保持されるが、未標識細胞はカラムを通過して流れるので、Ｒｅｄｕｃｅｄ  Ｆｒａｃｔｉｏｎ（減量画分）バッグに採取した。カラムを磁場から外すと、ＣＤ３４陽性細胞は解放され、Ｅｎｒｉｃｈｅｄ  Ｆｒａｃｔｉｏｎ（濃縮画分）バッグに採取される。
【０２７９】
【表３】
0006305443.tif 000004
【０２８０】
生成物調製
落下菌測定プレート（ｓｅｔｔｌｅ  ｐｌａｔｅ）をバイオセイフティ・キャビネットの両側に置き、生成物をキャビネット内に入れた。ＨＰＣについて血液成分分離を行った生成物をプールする前に各生成物の試験を実施した。３方（３−ｗａｙ）サンプリング・トランスファーセットをバッグに挿入した。冷蔵庫で一晩保存される生成物については、自己由来のドナー血漿を加えて細胞濃度２００×１０6 ／ｍｌ未満を得た。翌朝、凝集を予防するため、生成物を室温と同じ温度にしてから処理を行った。
【０２８１】
細胞を、分離された血液成分用採取バッグから「細胞調製物」の表示がついた６００ｍｌトランスファーパックに移した（後の無菌ドッキング用に、トランスファーパックチューブから６〜８インチ残してヒートシールする）。生成物を秤量し、生成物の容積を計算した。
【０２８２】
生成物が２００ｍｌを超える場合の過剰血漿の除去。生成物を量り、２５０ｇで１５分間、室温にて自然減速の遠心分離を行った。無菌生成物バッグを、「廃棄血漿」の表示がついた６００ｍｌトランスファーパックに結合し、チューブを止血鉗子でクランプした。細胞沈降の妨げにならないように生成物バッグを遠心分離バケットから取り外し、血漿抽出装置に懸架した。血漿抽出装置のハンドルを使用し、止血鉗子を開き、血漿を廃液バッグへ流した。チューブを止血鉗子でクランプし、流れを停止させた。細胞バッグを血漿抽出装置から取り外し、細胞ペレットを再懸濁させた。細胞を風袋秤量済み天秤に乗せ、バッグ容積が２００ｍｌ未満になるまで空気及び血漿双方を細胞バッグに流し戻した。止血鉗子を閉じ、細胞調製物バッグを穏やかに回して細胞ペレットをバッグに再懸濁させた。血小板洗浄へ進む。
【０２８３】
生成物が２００ｍｌ未満の場合の血小板洗浄。血漿トランスファーセットを、調製済み緩衝液バッグの１つに取り付け、トランスファーセットのチューブを無菌的に細胞バッグに結合した。ローラークランプを開き、細胞調製物バッグに緩衝液を充填した。細胞調製物バッグと緩衝液バッグとの間のチューブを６〜８インチの余裕を残してヒートシールした。残りの緩衝液バッグは、「過剰試薬除去」用にとっておいた。遠心分離器を秤量し、バッグを室温にて２５０ｇで１５分間、自然減速の遠心分離にかけた。生成物バッグを、「廃棄血小板」の表示がついた６００ｍｌトランスファーパックに無菌的に結合し、チューブを止血鉗子でクランプした。生成物バッグを、血漿抽出装置のピンにかけ、血漿抽出装置のハンドルから血漿を放出し、止血鉗子を開いて血漿を廃液バッグへ流した。チューブを止血鉗子でクランプして流れを停止させ、細胞バッグを血漿抽出装置から取り外して細胞を再懸濁させた。生成物バッグを風袋秤量済み天秤に載せ、適切な抗体インキュベーション重量に合わせて調整した（ＣＤ３４試薬の重量パラメータをまとめた下記表を参照のこと）。総有核細胞及び／またはＣＤ３４+ 細胞含量並びに生成物及び試薬の容量は、最適細胞標識の指定範囲内であった。
【０２８４】
【表４】
0006305443.tif 000005
【０２８５】
ＣｌｉｎｉＭＡＣＳのセットアップ
チューブセットを、生物学的に安全なキャビネット内部に準備し、「ＣＤ３４濃縮」採取バッグをヒートシールした。トランスファーバッグから１５０ｍｌを除去し、レシピエントバッグを取り付け、青色ピンを挿入してＣｌｉｎｉＭＡＣＳルアーコネクターに接続した。Ｐａｌｌ製フィルターを、先の鈍い端部を介してＣｌｉｎｉＭＡＣＳ気泡トラップスパイクに挿入した。ＣｌｉｎｉＭＡＣＳ装置に電源を入れ自己診断手順を実行させた。
【０２８６】
プライミング
ＣｌｉｎｉＭＡＣＳは、一旦プログラムが開始されるとシステムにより自動でプライミングが行われた。緩衝液を、チューブセットを通して循環させ、プライミング廃液バッグ及び緩衝液廃液バッグの双方に採取した。
【０２８７】
ＣＤ３４Ｒｅａｇｅｎｔ標識
総細胞数を計数し、総採取細胞数をもとに必要数のＣＤ３４  Ｒｅａｇｅｎｔ製バイアル（複数可）を生成物バッグに加えた。５〜１０分間隔での穏やかな前方転倒型回転運動（ｅｎｄ−ｏｖｅｒ−ｅｎｄ  ｍｏｔｉｏｎ）、またはバッグを傾斜角度１０％にて３０分間揺動シェーカーに載せて、２５ｒｐｍにて細胞調製物バッグの内容物を完全に混合した。
【０２８８】
「血小板洗浄の項」のステップを繰り返して過剰の試薬を除去した。但し、トランスファーバッグ２袋の表示は、廃棄血小板バッグの代わりに、１袋を「試薬洗浄１」及び１袋を「試薬洗浄２」に置き換える。ＣｌｉｎｉＭＡＣＳ緩衝液を加え、洗浄を実施した。風袋秤量済み天秤で生成物を秤量し、生成物重量をＳｔａｒｔ  Ｐｒｏｄｕｃｔ重量（開始時生成物重量）の８０ｇ〜３１８ｇの範囲に調節した。
【０２８９】
ＣＤ３４選択
Ｓｔａｒｔ  Ｐｒｏｄｕｃｔ  Ｂａｇ（開始時生成物バッグ）を、ＣｌｉｎｉＭＡＣＳに接続し、Ｐａｌｌ製フィルターの上部からキャップを取り外し、Ｓｔａｒｔ  Ｐｒｏｄｕｃｔ（開始時生成物）バッグにスパイクした。Ｓｔａｒｔ  Ｐｒｏｄｕｃｔ（開始時生成物）バッグを中央のハンガーバーに載せ、ＣｌｉｎｉＭＡＣＳ上でＲＵＮを押してＣＤ３４+ 選択手順を開始した。選択工程は自動で行われるようになっており、約４０分であった。
【０２９０】
細胞配合物
細胞数、生存率、無菌性を測定するためにＲｅｄｕｃｅｄ  Ｆｒａｃｔｉｏｎ  Ｂａｇ（減量画分バッグ）から試料を採り、ＣＤ３+ 細胞数についてＦＡＣＳアッセイを実施する。
【０２９１】
凍結保存
遠心分離器を予め４℃まで冷却し、細胞数、生存率、任意のコロニー形成単位を測定しフローサイトメトリー解析を行うためにＣＤ３４Ｅｎｒｉｃｈｅｄ  Ｆｒａｃｔｉｏｎ  Ｂａｇ（ＣＤ３４濃縮画分バッグ）から試料を採取した。ＣＤ３４Ｅｎｒｉｃｈｅｄ  Ｆｒａｃｔｉｏｎ（ＣＤ３４濃縮画分）バッグの内容物を表示ラベルのついた２本の５０ｍｌ遠沈管に等量で移した。ＣＤ３４Ｅｎｒｉｃｈｅｄ  Ｆｒａｃｔｉｏｎ（ＣＤ３４濃縮画分）バッグを、Ｎｏｒｍｏｓｏｌ／２％洗浄混合液ですすぎ、管２本に分割した。管を４℃にて１７００ｒｐｍで８分間ソフトブレーキの遠心分離にかけた。上清を除去して、滅菌廃液管（複数可）に移し、ペレットをそっと軽く叩いて再懸濁させた。上清を、細胞数、無菌性及びエンドトキシンの各試験に使用した。
【０２９２】
Ｎｏｒｍｏｓｏｌ／２％ＨＳＡ４ｍｌを管の１本に加え、内容物を混合し別の管に移した。最初の管をＮｏｒｍｏｓｏｌ／２％ＨＳＡ２ｍｌですすいで別の管に移し、細胞容積を７．８ｍｌに調整して細胞懸濁液を冷蔵庫で５〜３０分間冷却した。
【０２９３】
凍結速度を制御するために製造者のプロトコールにしたがい速度制御フリーザーを準備し、詳細を下記実施例４に説明した。速度制御を行ってフリーザー温度が−６℃未満になったところで、７．８ｍｌの凍結防止剤溶液を細胞に加えた。１５ｍｌの細胞／凍結防止剤を５０ｍｌクリオバッグ（ｃｒｙｏｂａｇ）に移し、ヒートシールした。試料プローブを、クリオバッグ（ｃｒｙｏｂａｇ）中央にテープで取り付けて、バッグをプレス内に置き、ポートがプレス上部から突き出るように位置させた。プレスを閉じ、表示ラベルをつけたカセットを速度制御されたフリーザー内に置いてから、速度制御されたフリーザーの運転を実行した。
【０２９４】
実施例５−血液成分分離生成物からのＣＤ３４+ 細胞の凍結保存
治療用凍結細胞の最適な生存率は凍結防止剤の使用及び緩徐な冷却速度により達成される。氷結晶の形成による細胞損傷を防ぐため、ＤＭＳＯを凍結防止剤として使用した凍結溶液を細胞生成物に加えた。ＣＢＳ速度制御凍結システムは、凍結チャンバー、Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ  Ｗｉｎｄｏｗｓ（登録商標）オペレーティングシステム搭載ノートブック型ＰＣ、Ｃｒｙｏｇｅｎｉｃ  Ｆｒｅｅｚｉｎｇ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ、試料プローブ、試料架台、及びＬＮ2 （液体窒素）移送ホースで構成される。各生成物について実行時それぞれの凍結曲線のコピーが得られるように、また、それを工程記録に含めるために、プリンターを追加した。ＣＲＦは、ユーザーにより予め定義したプログラム可能な速度で凍結する。熱電対プローブをクリオバッグ（ｃｒｙｏｂａｇ）の１つに取り付ける、またはクリオバイアル・モニターに挿入する。チャンバー温度を継続的に監視する。凍結保存プロファイルステップは、予め定義した目標温度を熱電対が記録するにつれて進行する。プロファイルで指定した最終チャンバー温度に達すると警告音が鳴るので、生成物を取り出し、永久保存用フリーザー内に置く。チャンバー温度とプログラムした目標温度との間に逸脱が検出されると、可聴かつ可視的アラームが発生する。
【０２９５】
凍結防止剤の調製
適切な凍結防止剤溶液を下記表に記載のとおり調製した。凍結防止剤溶液を、使用前に少なくとも４〜６℃で３０分間冷却した。
【０２９６】
【表５】
0006305443.tif 000006
【０２９７】
凍結保存容器の選択
使用に適切な凍結保存容器は、細胞密度、生成物の種類、容積及びプロトコールの個々の要件に基づく。個々の処理手順にしたがい、適切な凍結容器及び細胞／凍結防止剤の容量調製を下記のとおり行った。
【０２９８】
【表６】
0006305443.tif 000007
【０２９９】
生成物への凍結防止剤の添加
速度制御されたフリーザーが生成物を入れる温度に到達したところで、凍結培地を生成物（複数可）に加えた。適切な容量の凍結防止剤を、個々の処理手順にしたがい各バイアルまたはバッグに加えた。凍結防止剤を添加してから生成物をＣＲＦに入れるまでの時間が最短となったときに、最適な生存率が達成された。クリオバッグ（ｃｒｙｏｂａｇ）をヒートシールし、余分なチューブを取り除いた。
【０３００】
バッグ（複数可）を適切な保存カセットに置き、それぞれのカセットを速度制御されたフリーザー内に置いた。２５０〜５００ｍｌクリオバッグ（ｃｒｙｏｂａｇ）については、凍結生成物の１つを監視用プローブの入ったカセットに置いた。この生成物の長期保存用に準備したカセットを速度制御されたフリーザー内の監視用カセットのそばに置いて実行し、実行終了時、凍結生成物は冷却されたカセットに移された。
【０３０１】
チャンバーの準備
２５０〜５００ｍｌクリオバッグ（ｃｒｙｏｂａｇ）に入れた生成物用の大型カセット架台、５０ｍｌクリオバッグ（ｃｒｙｏｂａｇ）用バッグプレスまたはクリオバイアルに入れた生成物用クリオバイアル架台といった、適切な架台をチャンバー内に置いた。２５０〜５００ｍｌクリオバッグ（ｃｒｙｏｂａｇ）では、試料プローブを、プローブ端が突き出た側が表を向くようにテープ付きカセットに取り付けて、クリオバッグ（ｃｒｙｏｂａｇ）の中央部（容量の最も多い部分）と接触するように位置させた。クリオバイアルでは、クリオバイアル・モニターを密封するゴム栓を通して熱電対プローブ針を挿入した。小容量の５０ｍｌクリオバッグ（ｃｒｙｏｂａｇ）では、バッドプレス内に置く前に、試料プローブを生成物中央部に直接テープで留めた。試料プローブ接続部は、チャンバー内側のファンガード左手の上隅に位置させる。プローブをジャックに差し込み、チャンバードアを固定した。
【０３０２】
凍結保存
一旦チャンバーが６．５℃以下になった場合、凍結保存用に調製した生成物（複数可）を、チャンバーに入れた。２５０ｍｌバッグ及び５００ｍｌバッグでは、生成物の１つにプローブを付けてカセット内に置くことで、プローブがクリオバッグ（ｃｒｙｏｂａｇ）背面の中央（最も量が多い部分）に押し付けられるようにし、カセットに入れて閉じた。５０ｍｌクリオバッグ（ｃｒｙｏｂａｇ）では、プローブをバッグの中央背面にテープ片で取り付け、生成物を、ポートがプレス上部から突き出るようにバッグプレス内に位置させた。プレスを閉じ、第２の５０ｍｌバッグを第２のプレスに置き、必要に応じ、上に積み重ねた。凍結プログラムを標準手順にしたがい開始させた。
【０３０３】
実施例６−細胞生成物の融解及び洗浄
この実施例は、自家で採取及び処理が行われたＨＰＣ／ＴＣ生成物、またはＳＨＣもしくはＬＰＣＨのレシピエントのために外部施設で採取、処理及び輸送が行われたＨＰＣ／ＴＣ生成物に適用される。医療及び／または試験の管理責任者並びに主治医の依頼に応じて、試験機関は、生成物輸注に先立ち、同機関で凍結保存した生成物の融解及び洗浄を行う。融解した生成物を低分子量デキストロース及びアルブミンで洗浄する。生成物の洗浄を行う目的は、赤血球容積限界を超える、ＨＰＣ／ＴＣ生成物の過剰なヘモグロビンを除去すること、特に体の小さなレシピエント（５０ｋｇ未満）用のＤＭＳＯ容積を減量すること、同種設定において余剰となる血漿タンパク質を除去すること、及び生存細胞回収率を改善することである。
【０３０４】
試薬及び装置の準備−輸注前日
１０％ＬＭＤ、ＡＣＤ−Ａ、及び５％ＨＳＡを、監視対象の冷蔵庫内に置き、十分に冷却したジェルマットを冷蔵庫内に敷いた。恒温水槽を準備した。
【０３０５】
試薬及び装置の準備−輸注当日
恒温水槽、ＢＳＣ及び処理装置一式を準備し、遠心分離器を６℃まで下げ、３０分間冷却した。冷却したジェルマット２枚をＩＰＡ拭き取りティッシュで清浄し、それぞれ滅菌プラスチック製バッグに入れた。バッグを密封し監視対象の冷蔵庫内に戻した。輸送用冷却器及び中サイズの凍結ジェルパックをＩＰＡ拭き取りティッシュで清浄した。
【０３０６】
培地の調製
培地を融解する。「融解培地」の表示がついた１５０ｍｌトランスファーバッグのチューブをヒートシールして、青色調剤ピンをポートの１つに取り付けた。青色調剤ピンを１０％ＬＭＤバッグの適切なポートに挿入した。６０ｍｌ注射器を使用して１０％ＬＭＤを６０ｍｌ抜き取り、Ｔｈａｗｉｎｇ  Ｍｅｄｉａ（融解培地）バッグに移した。ミニスパイクを５％ＨＳＡ瓶のポートに挿入した。６０ｍｌ注射器を使用して５％ＨＳＡ瓶から６０ｍｌ抜き取り、Ｔｈａｗｉｎｇ  Ｍｅｄｉａ（融解培地）バッグに移した。青色調剤ピンをＡＣＤ−Ａバッグの適切なポートに挿入した。１２ｍｌ注射器を使用してＡＣＤ−Ａを１２ｍｌ抜き取り、Ｔｈａｗｉｎｇ  Ｍｅｄｉａ（融解培地）バッグに移した。Ｔｈａｗｉｎｇ  Ｍｅｄｉａ（融解培地）を完全に混合した。
【０３０７】
再調製培地。「Ｒｅｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎ  Ｍｅｄｉａ（再調製培地）」の表示がついた１５０ｍｌトランスファーバッグのチューブをヒートシールし、青色調剤ピンをポートの１つに取り付けた。６０ｍｌ注射器を使用して１０％ＬＭＤを６０ｍｌ抜き取り、Ｒｅｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎ  Ｍｅｄｉａ（再調製培地）バッグに移した。６０ｍｌ注射器を使用して５％ＨＳＡを６０ｍｌ抜き取り、Ｒｅｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎ  Ｍｅｄｉａ（再調製培地）バッグに移した。Ｒｅｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎ  Ｍｅｄｉａ（再調製培地）を完全に混合する。
【０３０８】
生成物の融解
生成物を、「雪解け」状態になるかならないかという状態まで融解させた。多少の氷が混じっていても許容される。生成物バッグをＩＰＡ拭き取りティッシュで拭き取りＢＳＣ内に置いた。生成物を冷却ジェルマットでくるんでＢＳＣに入れ、残りの処理工程中、生成物の冷却を維持した。
【０３０９】
３０ｍｌ以下の生成物。この容量の生成物には、バッグ２袋及びチューブ３部のＣｅｌｌ  Ｗａｓｈ／Ｉｎｆｕｓｉｏｎ（細胞洗浄／輸注）バッグセットを使用した。スパイク２個付きチューブはクリオバッグ（ｃｒｙｏｂａｇ）に接続され、青色ルアーアダプター付きチューブは融解培地含有注射器に接続されている。洗浄済み生成物を採取し、「Ｃｅｌｌ  Ｗａｓｈ／Ｉｎｆｕｓｉｏｎ（細胞洗浄／輸注）バッグ」の表示ラベルがついたバッグに入れて遠心分離を行い、上清は、残ったバッグに移した。洗浄／輸注セットのクランプを閉じ、クリオバッグ（ｃｒｙｏｂａｇ）のポートカバー外側を滅菌アルコールパッドで清浄した。
【０３１０】
バッグを直立に保持し、ポート毎に、ポートの固い部分を片手の親指と人差し指とで持った。もう片方の手で、輸注セットのスパイクを消毒済みポートに挿入し固定した。Ｔｈａｗｉｎｇ  Ｍｅｄｉａ（融解培地）注射器とクリオバッグ（ｃｒｙｏｂａｇ）間のチューブのクランプを解放することにより、Ｔｈａｗｉｎｇ  Ｍｅｄｉａ（融解培地）を無菌的にバッグに加えた。Ｔｈａｗｉｎｇ  Ｍｅｄｉａ（融解培地）の半分を両クリオバッグ（ｃｒｙｏｂａｇ）コンパートメントに移して穏やかに混合した。
【０３１１】
Ｃｅｌｌ  Ｗａｓｈ／Ｉｎｆｕｓｉｏｎ（細胞洗浄／輸注）バッグのクランプを開き、希釈細胞懸濁液をクリオバッグ（ｃｒｙｏｂａｇ）からＣｅｌｌ  Ｗａｓｈ／Ｉｎｆｕｓｉｏｎ（細胞洗浄／輸注）バッグに移した。すすぎ工程のためにＣｅｌｌ  Ｗａｓｈ／Ｉｎｆｕｓｉｏｎ（細胞洗浄／輸注）バッグのクランプを閉じた。残ったＴｈａｗｉｎｇ  Ｍｅｄｉａ（融解培地）の少量をクリオバッグ（ｃｒｙｏｂａｇ）の両コンパートメントに加えてすすぎ、そのすすぎ液をＣｅｌｌ  Ｗａｓｈ／Ｉｎｆｕｓｉｏｎ（細胞洗浄／輸注）バッグに移した。混合物を５分間平衡化した。
【０３１２】
１０％ＬＭＤの分注液をクリオバッグ（ｃｒｙｏｂａｇ）に加え、クリオバッグ（ｃｒｙｏｂａｇ）をすすぎ、そのすすぎ液をＣｅｌｌ  Ｗａｓｈ／Ｉｎｆｕｓｉｏｎ（細胞洗浄／輸注）バッグに移した。クリオバッグ（ｃｒｙｏｂａｇ）に適量の１０％ＬＭＤが分注されるまで上記ステップを繰り返した。
【０３１３】
Ｃｅｌｌ  Ｗａｓｈ／Ｉｎｆｕｓｉｏｎ（細胞洗浄／輸注）バッグをプラスチック製遠心分離バッグに入れ、遠心分離器の秤量後、生成物を６℃、４００×ｇ、ソフトブレーキで２０分間の遠心分離にかけた。希釈生成物のバッグを血漿エクスプレッサ（ｅｘｐｒｅｓｓｏｒ）に置き、その上清を、接続されている上清バッグにゆっくりと流し入れ、流量を止血鉗子で制御した。調剤ピンをＣｅｌｌ  Ｗａｓｈ／Ｉｎｆｕｓｉｏｎ（細胞洗浄／輸注）バッグのポートの１つに挿入し、細胞ペレットを揉んで再懸濁させた。再調製培地をＣｅｌｌ  Ｗａｓｈ／Ｉｎｆｕｓｉｏｎ（細胞洗浄／輸注）バッグに加え、内容物を完全に混合した。
【０３１４】
３０ｍｌを超える生成物。調剤ピンをクリオバッグ（ｃｒｙｏｂａｇ）のポートの１つに挿入し、Ｔｈａｗｉｎｇ  Ｍｅｄｉａ（融解培地）を含有する注射器を調剤ピンに取り付けた。Ｔｈａｗｉｎｇ  Ｍｅｄｉａ（融解培地）の半分をクリオバッグ（ｃｒｙｏｂａｇ）に移して混合し、クリオバッグ（ｃｒｙｏｂａｇ）に３００ｍｌまたは６００ｍｌトランスファーパックの付いたスパイクを入れ、クリオバッグ（ｃｒｙｏｂａｇ）の内容物をトランスファーパックに移した。クリオバッグ（ｃｒｙｏｂａｇ）を、残ったＴｈａｗｉｎｇ  Ｍｅｄｉａ（融解培地）ですすいで、細胞を含有するトランスファーパックに加え、その混合物を５分間平衡化した。
【０３１５】
１０％ＬＭＤの分注液をクリオバッグ（ｃｒｙｏｂａｇ）に加え、クリオバッグ（ｃｒｙｏｂａｇ）をすすぎ、そのすすぎ液をＣｅｌｌ  Ｗａｓｈ／Ｉｎｆｕｓｉｏｎ（細胞洗浄／輸注）バッグに移した。適量の１０％ＬＭＤがクリオバッグ（ｃｒｙｏｂａｇ）に分注されるまで、上記のステップを繰り返した。
【０３１６】
Ｃｅｌｌ  Ｗａｓｈ／Ｉｎｆｕｓｉｏｎ（細胞洗浄／輸注）バッグをプラスチック製遠心分離バッグに入れ、遠心分離器を秤量した後、生成物を６℃、４００×ｇ、ソフトブレーキで２０分間、遠心分離にかけた。希釈生成物のバッグを血漿エクスプレッサ（ｅｘｐｒｅｓｓｏｒ）に置き、その上清を、接続された上清バッグにゆっくりと流し入れ、流量を止血鉗子で制御した。調剤ピンをＣｅｌｌ  Ｗａｓｈ／Ｉｎｆｕｓｉｏｎ（細胞洗浄／輸注）バッグのポートの１つに挿入し、細胞ペレットを揉んで再懸濁させた。再調製培地をＣｅｌｌ  Ｗａｓｈ／Ｉｎｆｕｓｉｏｎ（細胞洗浄／輸注）バッグに加え、内容物を完全に混合した。
【０３１７】
融解後の計数
上清を完全に混合し、試料を細胞計数に使用した。上清バッグを秤量し、上清のＴＮＣを計算した。
【０３１８】
輸注用細胞
２試料を分析用に取り出し、１ｍＬをフロー解析に、また０．２ｍｌを有核細胞数、ＣＦＵ及び生存率の解析に供した。輸注バッグを秤量して滅菌プラスチック製バッグに入れ、輸注まで凍結ジェルパックとともに輸送用冷却器内で保存した。融解後のＴＮＣ及びＴＮＣ回収率（％）を計算し、細胞を下記表６にしたがい再度遠心にかけた。
【０３１９】
【表７】
0006305443.tif 000008
【０３２０】
上清の再遠心
上清を別のトランスファーバッグに移し、４００×ｇソフトブレーキで６℃にて２０分間遠心分離にかけた。次いで、バッグを血漿エクスプレッサ（ｅｘｐｒｅｓｓｏｒ）内に置き、青色調剤ピンをバッグのポートの１つに挿入した。ルアーコネクターを、トランスファーバッグのピン、調剤ピンに取り付け、エクスプレッサ（ｅｘｐｒｅｓｓｏｒ）ハンドルを解放して上清を放出させ、その流量を止血鉗子で制御した。１０％ＬＭＤ及び５％ＨＳＡをそれぞれ５ｍｌずつこの第２の細胞バッグに加え、細胞を再懸濁させ、回収した細胞を最初の細胞輸注バッグに加えた。
【０３２１】
有核細胞計数及び生存率、フロー解析、並びにＣＦＵ解析のために試料を細胞輸注バッグから取り出した。輸注バッグを秤量し、容積を計算し、記録した。
計数
ＴＮＣ回収率（％）＝融解後ＴＮＣ（細胞）÷［融解後ＴＮＣ（細胞）＋上清ＴＮＣ］
×１００
総ＣＦＵ数Ｘ＝ＴＮＣ×（プレートに播種した１０5 細胞あたりのコロニー数）
÷１０5 
ＣＤ３４細胞数／μｌ＝（ＮＣ×１０6 ／ｍｌ）×％ＣＤ３４÷１０００
【０３２２】
輸注
凍結ジェルパックを入れて準備した輸送用冷却器から輸注細胞バッグをから取り出し、融解生成物をユニットにとった。
【０３２３】
実施例７−新鮮なまたは凍結保存した同種移植片または自家移植片に由来する造血前駆細胞及び治療的細胞輸注液
同種移植片（同種）移植では、ドナー骨髄、造血前駆細胞（ＨＰＣ）または治療的細胞（ＴＣ）を、遺伝的に異なるレシピエントに輸注する。一致または部分的一致の家族または非血縁ドナーをドナーとすることができる。造血細胞を採取した後、２４時間以内にレシピエントに輸注する。治療的細胞を採取し、通常２４時間以内に輸注する。別の方法では、造血細胞を採取して凍結保存してよい。
【０３２４】
非血縁の臍帯血（ＵＣＢ）は、ＨＰＣ移植にとっては価値があるドナー細胞源であるため、この治療方法を他のドナーを欠く患者に対して広げることになる。
【０３２５】
自家移植片（自家）移植では、レシピエントは自身の骨髄または造血前駆細胞（ｈｐｃｓ）を受け取る。
【０３２６】
大量のｈｐｃｓ（４バッグ超）の輸注を行う場合、医師は、バッグが半数になったら輸注を中止し、１〜２時間後に移植を行うことができる。これは、大量の流体を短時間に注入することによる循環過負荷を予防するためである。移植開始前に再度の投薬が患者に必要であるか否か、医師とともに確認する。
【０３２７】
【表８−１】
0006305443.tif 000009
【０３２８】
【表８−２】
0006305443.tif 000010
【０３２９】
【表８−３】
0006305443.tif 000011
【０３３０】
相互参照
本願は、本明細書に参照として引用される、２０１３年２月２６日に出願された米国仮出願第６１／７６９，５９６号の利益を請求する。
【図１】
0006305443.tif 000012
【図２】
0006305443.tif 000013
【図３】
0006305443.tif 000014
【図４】
0006305443.tif 000015