(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
口腔炎症の治療において有用な局所用ビタミンＤ口腔サプリメント組成物であって、
唾液可溶性無水エマルション担体と、
有効レベルのビタミンＤサプリメントと、
経口腔粘膜吸収促進剤と
を含み、
前記組成物は無水組成物であり、
口腔粘膜に適用されると、前記組成物は、唾液可溶性粘膜付着性ゲルを形成し、
前記唾液可溶性粘膜付着性ゲルが唾液流に継続して曝されると、前記粘膜付着性ゲルは、徐々に溶解して、前記ビタミンＤサプリメントおよび前記経口腔粘膜吸収促進剤の前記口腔粘膜に対する制御放出を実現し、
前記ビタミンＤサプリメントおよび経口腔粘膜吸収促進剤は、前記口腔粘膜と接触すると、前記口腔粘膜を介して受動的に拡散して、
（ａ）ビタミンＤのｉｎ  ｖｉｖｏ利用能および免疫応答を制御し、
（ｂ）妥当なレベルの循環ビタミンＤを維持し、
（ｃ）高カルシウム血症のリスクを最小限に抑え、
前記経口腔粘膜吸収促進剤が、デクスパンテノール、ｄ−リモネン、ポロキサマー、ＰＥＧ、ベンジルアルコール、カルボポール、キトサン、Ｎ−トリメチルキトサン、メントール、およびこれらの組合せからなる群から選択され、
前記唾液可溶性無水エマルションが、唾液の存在下で粘膜付着性ゲルを形成しうる非イオン性界面活性剤に乳化させたポリジメチルシロキサンを含み、
前記ポリジメチルシロキサンが、１５００ｃｓ、１２，５００ｃｓ、１００，０００ｃｓ、２５０，０００ｃｓ、５００，０００ｃｓ、７５０，０００ｃｓ、１５０万ｃｓ、２２０万ｃｓ、２５０万ｃｓのポリジメチルシロキサン、およびその組合せからなる群から選択され、
唾液の存在下で粘膜付着性ゲルを形成しうる前記非イオン性界面活性剤が、ポロキサマー２３７、ポロキサマー３３８、ポロキサマー４０７、およびこれらの組合せからなる群から選択される、
局所用ビタミンＤ口腔サプリメント組成物。
【請求項２】
前記ビタミンＤサプリメントが、
ビタミンＤ、
１、３、および２５炭素位にヒドロキシル基を有するビタミンＤ化合物、
１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3のエステル、
１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3のエステル、
１，２５（ＯＨ）2Ｄ3、１，２５（ＯＨ）2Ｄ3類似体、
カルシトリオール、２５（ＯＨ）Ｄ3、２５（ＯＨ）Ｄ3の類似体、およびこれらの組合せからなる群から選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記局所用ビタミンＤ口腔サプリメント組成物の適用手段が、前記組成物でコーティングされた歯間デバイス、口腔ゲル、口腔軟膏、口腔ペースト、口腔ワニス、口腔液、およびこれらの組合せからなる群から選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
前記歯間デバイス適用手段が、圧縮コーティングされたデンタルテープ、マルチフィラメントまたはモノフィラメントデンタルフロスまたは歯間デバイス、コーティングされた片手用の歯科用具、デンタルピック、デンタルスティミュレーター（ｄｅｎｔａｌ  ｓｔｉｍｕｌａｔｏｒ）、およびこれらの組合せからなる群から選択される、請求項３に記載の組成物。
【請求項５】
前記ビタミンＤサプリメントが、抗菌ペプチドのカテリシジンを上向き制御することにより生得免疫を強化する、請求項１に記載の局所用ビタミンＤ口腔サプリメント組成物。
【請求項６】
前記ビタミンＤサプリメントが、そのホルモン活性型である１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ形態で、炎症性サイトカイン産生を調節し、抗菌特性の分泌を刺激することにより、抗炎症および抗菌効果を示す、請求項１に記載の局所用ビタミンＤ口腔サプリメント組成物。
【請求項７】
前記ホルモン活性型である１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤが、免疫調節特性を示すカルシトリオールである、請求項６に記載の局所用ビタミンＤ口腔サプリメント組成物。
【請求項８】
１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤの前記抗炎症および抗菌効果が、ビタミンＤ受容体（ＶＤＲ）を通して調節される、請求項７に記載の局所用ビタミンＤ口腔サプリメント組成物。
【請求項９】
免疫系に対する１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤの前記効果が、
ＴＣＲを調節する、
ＴＨ１／ＴＨ１７／ＣＤ４およびＴ細胞ならびにサイトカインを減少させる、
制御性Ｔ細胞を増加させる、
Ｔ細胞によって引き起こされる産生を下向き制御する、および
樹状細胞分化を阻害する
ことを包含する、請求項７に記載の局所用ビタミンＤ口腔サプリメント組成物。
【請求項１０】
口腔炎症の治療のために口腔粘膜に局所投与されるビタミンＤサプリメント組成物を調製するための、
唾液可溶性無水エマルション担体、
有効レベルのビタミンＤサプリメント、及び、
経口腔粘膜吸収促進剤の使用であって、
前記組成物は無水組成物であり、
口腔粘膜に適用されると、前記組成物は、唾液可溶性粘膜付着性ゲルを形成し、
前記唾液可溶性粘膜付着性ゲルが唾液流に継続して曝されると、前記粘膜付着性ゲルは、徐々に溶解して、前記ビタミンＤサプリメントおよび前記経口腔粘膜吸収促進剤の前記口腔粘膜に対する制御放出を実現し、
前記ビタミンＤサプリメントおよび経口腔粘膜吸収促進剤は、前記口腔粘膜と接触すると、前記口腔粘膜を介して受動的に拡散して、
（ａ）ビタミンＤのｉｎ  ｖｉｖｏ利用能および免疫応答を制御し、
（ｂ）妥当なレベルの循環ビタミンＤを維持し、
（ｃ）高カルシウム血症のリスクを最小限に抑え、
前記経口腔粘膜吸収促進剤が、デクスパンテノール、ｄ−リモネン、ポロキサマー、ＰＥＧ、ベンジルアルコール、カルボポール、キトサン、Ｎ−トリメチルキトサン、メントール、およびこれらの組合せからなる群から選択され、
前記唾液可溶性無水エマルションが、唾液の存在下で粘膜付着性ゲルを形成しうる非イオン性界面活性剤に乳化させたポリジメチルシロキサンを含み、
前記ポリジメチルシロキサンが、１５００ｃｓ、１２，５００ｃｓ、１００，０００ｃｓ、２５０，０００ｃｓ、５００，０００ｃｓ、７５０，０００ｃｓ、１５０万ｃｓ、２２０万ｃｓ、２５０万ｃｓのポリジメチルシロキサン、およびその組合せからなる群から選択され、
唾液の存在下で粘膜付着性ゲルを形成しうる前記非イオン性界面活性剤が、ポロキサマー２３７、ポロキサマー３３８、ポロキサマー４０７、およびこれらの組合せからなる群から選択される、
使用。
【請求項１１】
前記ビタミンＤサプリメントが、
ビタミンＤ、
１、３、および２５炭素位にヒドロキシル基を有するビタミンＤ化合物、
１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3のエステル、
１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3のエステル、
１，２５（ＯＨ）2Ｄ3、１，２５（ＯＨ）2Ｄ3類似体、
カルシトリオール、２５（ＯＨ）Ｄ3、２５（ＯＨ）Ｄ3の類似体、および
これらの組合せからなる群から選択される、請求項１０に記載の使用。
【請求項１２】
前記局所用ビタミンＤ口腔サプリメント組成物の適用手段が、前記組成物でコーティングされた歯間デバイス、口腔ゲル、口腔軟膏、口腔ペースト、口腔ワニス、口腔シーラント、口腔リンス、口腔液、およびこれらの組合せからなる群から選択される、請求項１０に記載の使用。
【請求項１３】
前記組成物が、前記組成物でコーティングされた歯科用具による毎日の局所投与と組み合わせて、ビタミンＤサプリメントゲルによって１日を通して繰り返し適用される、請求項１０に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、口腔炎症の治療において有用な局所用ビタミンＤ口腔サプリメント組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
最近の研究で、ヒト歯肉上皮細胞（ＧＥＣ）が、デフェンシンやカテリシジンＬＬ−３７などの、どちらも抗菌性であり、生得免疫応答を調節する、ペプチドを産生することが示された。Diamond, G, et. al. (2008) "Hold defense peptides in the oral cavity and the lung: similarities and differences," J. Dent. Res. 87:915-927を参照されたい。研究では、こうした抗菌ペプチドが、細菌学的病因の歯周病の予防およびコントロールにおいて非常に重要であることも実証されている。詳細には、こうしたペプチドは、歯周病病原体であるアグリゲイティバクター・アクチノミセテムコミタンス（Ａｇｇｒｅｇａｉｔｂａｃｔｅｒ  ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｍｃｏｍｉｔａｎｓ）の存在下で、増大した免疫応答を誘発し、抗菌活性を示すことがわかっている。こうした抗菌ペプチドの産生を担う遺伝子が、補助的に投与したビタミンＤサプリメント、すなわち、ビタミンＤ３［１，２５（ＯＨ）２Ｄ３］ならびにその前駆体および誘導体の存在下で、上向き制御または誘導されて、こうした保護因子の発現が増大しうることも実証されている。McMahone, L, et. al. (Jun 2011) "Vitamin D-mediated induction of innate immunity in gingival epithelial cells," Infect. Immun., 79(6) 2250-7を参照されたい。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００３】
本発明は、口腔炎症の治療において有用な局所用ビタミンＤ口腔サプリメント組成物を対象とする。本発明の目的に適するビタミンＤとしては、
ビタミンＤ、
１、３、および２５炭素位にヒドロキシル基を有するビタミンＤ化合物、
１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3のエステル、
１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3のエステル、
１，２５（ＯＨ）2Ｄ3  １，２５（ＯＨ）2Ｄ3類似体、
カルシトリオール、２５（ＯＨ）Ｄ3、２５（ＯＨ）Ｄ3の類似体、およびこれらの組合せ
が挙げられる。
ビタミンＤサプリメントは、無水エマルション中に、経口腔粘膜吸収促進剤と共に含まれる。
【０００４】
本発明は、口腔炎症の治療において有用な局所用ビタミンＤ口腔サプリメント組成物であって、
唾液可溶性無水エマルション担体と、
有効レベルのビタミンＤサプリメントと、
経口腔粘膜吸収促進剤と
を含み、
口腔粘膜に適用されると、前記組成物は、前記口腔粘膜に対して永続的な唾液可溶性粘膜付着性ゲルを形成し、
前記唾液可溶性粘膜付着性ゲルが唾液流に継続して曝されると、前記粘膜付着性ゲルは、徐々に溶解して、前記ビタミンＤサプリメントおよび前記経口腔粘膜吸収促進剤の前記口腔粘膜に対する制御放出を実現し、
前記ビタミンＤサプリメントおよび経口腔粘膜吸収促進剤は、前記口腔粘膜と接触すると、前記口腔粘膜を介して受動的に拡散して、
（ａ）ビタミンＤのｉｎ  ｖｉｖｏ利用能および免疫応答を制御し、
（ｂ）妥当なレベルの循環ビタミンＤを維持し、
（ｃ）高カルシウム血症のリスクを最小限に抑える、
局所用ビタミンＤ口腔サプリメント組成物を対象とする。
【０００５】
本発明のビタミンＤサプリメント組成物は、無水エマルション組成物となって局所的に口腔粘膜に適用されたとき、口腔粘膜に対して永続的なゲルを形成する。こうしたゲルは、唾液の存在下で徐々に溶解して、ビタミンＤおよび経口腔粘膜吸収促進剤を放出し、これらの複合により、ビタミンＤの粘膜を介した受動的な拡散が実現される。
【０００６】
初期の歯周組織炎である歯肉炎は、歯牙解剖学的組織の全般的領域において細菌性バイオフィルムの存在によって放出されるエンドトキシンに対する炎症性反応の結果として生じることが知られている。治療しないままにしておくと、この状態は、歯周炎として知られるより悪性の病理学的状態に進行することが多い。本発明の局所用ビタミンＤサプリメント組成物を頻繁に使用すると、炎症部位においてビタミンＤ組成物を継続的に放出する粘膜付着性ゲルが生成され、それによって、ビタミンＤの粘膜への受動的拡散が誘発され、ひいては受動的拡散により、抗菌ペプチドの産生が増大し、推定上の治療的免疫調節応答が引き起こされることによって、防御が実現されると考えられる。
拡散したビタミンＤサプリメントは、高カルシウム血症のリスクを最小限に抑えながら、妥当なレベルの循環ビタミンＤを維持し、ビタミンＤのｉｎ  ｖｉｖｏ利用能および免疫応答を制御する。
【発明の効果】
【０００７】
本発明の組成物において、ビタミンＤが歯周の健康維持に果たす役割
歯周病は、プロービング時の出血、歯周付着の喪失、ならびに骨および歯の喪失につながる局部炎症反応を惹起する、口腔細菌の共同体によって始動される。歯周病は、心疾患、糖尿病、肥満、およびメタボリック症候群を含めた全身性状態と関連付けられている。歯周病とこうした全身性状態とが関連付けられるのは、これらを共通の病態生理学的機序を通して結び付けている、程度の低い炎症負荷のためと思われる。考えられるところでは、局部的に分泌されたサイトカインおよび歯周病病原体が、血流に入り、身体における他の場所で損傷の一因となる場合があり、その負荷のいくらかの証拠になると思われる。
腫瘍壊死因子α（ＴＮＦ−α）およびインターロイキン６（ＩＬ−６）は、歯周炎の進行および重症度に関係するとされている全身性炎症の始動および維持における重要なサイトカインである。加えて、こうしたサイトカインの血清レベルは、歯周炎患者において、歯周が健康な個体よりも高いことが認められている。
【０００８】
レプチン、アディポネクチン、およびレジスチンは、主として脂肪組織によって分泌されるだけでなく、単球およびマクロファージによっても産生されるアディポカインであり、炎症に直接影響を及ぼしうる。Teles, et. al. Journal of Periodontology, 2011を参照されたい。
ビタミンＤは、歯周の健康維持にとって有益となりうるであろう、骨の成長および維持において重要な役割を担う。最近では、ビタミンＤは、その骨代謝への影響ではなく、むしろ消炎の機序によって、歯周病、歯牙喪失、および歯肉炎症にプラスの影響を及ぼすことが示唆されている。したがって、局所用補助的ビタミンＤサプリメント組成物によって、ビタミンＤの妥当な血清値を維持することは、歯周病の予防および治療において重要となりうるはずである。
ビタミンＤは、カルシウム恒常性、骨成長および維持において重要な役割を担う。ビタミンＤは、抗原が誘発するＴ細胞増殖およびサイトカイン産生を阻害して、免疫調節剤として作用することが示されている。
【０００９】
最近では、ビタミンＤは、消炎特性を有することも提議されている。６，７００の対象を分析（Dietrich, et. al., Am. J. Clin. Nutr. 2005, 82:575-580を参照のこと）すると、血清ビタミンＤが最高の五分位点にある個体は、有意に少ない出血、より低いポケット深さおよび臨床的付着喪失平均値、歯牙損失数、およびＢＭＩを示したことが判明した。ビタミンＤ（およびカルシウム）補給が、歯周の健康、詳細には、プロービング時の出血、歯肉炎指数、およびＰＤにプラスの影響を及ぼしうることも示唆されている。Garcia, et. al. J. Periodontol. 82:25-32、およびMiley, et. al. J. Periodontol., 2009; 80:1433-1439を参照されたい。
【００１０】
興味深いことに、ビタミンＤ受容体の多型性は、広汎型侵襲性歯周炎（ＧＡｇＰ）（Park, et. al. J. Clin. Periodontol. 2006; 33:524-528を参照のこと）および重症慢性歯周炎（Wang, et. al. J. Periodontol. 2009; 80:603-608を参照のこと）と関連付けられている。より少ないプロービング時の出血、より低いＰＤ、ＣＡＬ、および歯牙損失数平均値、ならびに病原性細菌レベルを示した個体の間では、最高レベルの循環ビタミンＤが検出された。加えて、提議されている、ビタミンＤの消炎の役割は、アディポネクチンとの正の相関、ならびにＩＬ−６およびレプチンとの負の相関によって確認された。
【００１１】
ビタミンＤの活性型である１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３［１，２５（ＯＨ）２Ｄ３］は、カルシウムおよび骨代謝を制御し、細胞増殖および分化を制御し、免疫制御性活性を発揮する、セコステロイドホルモンである。この範囲の機能は、続発性副甲状腺機能亢進症から、骨粗鬆症、乾癬などの自己免疫疾患に至るまでの様々な状態の治療に、臨床的に活用されている。最近になって１，２５（ＯＨ）２Ｄ３機能の理解が進み、その免疫調節特性の機序に新たな見通しが得られるために、口腔炎症の治療におけるこのホルモンのより広い適用可能性が示唆される。
カルシトリオールとしても知られる、ジヒドロキシル化された、生物活性型のビタミンＤ3は、カルシウム恒常性および骨代謝の中心的なホルモンであるが、いくつかの他の機能、補助的な局所補給にとって魅力的である、特に強力な免疫調節特性も有する。
【００１２】
米国特許第５，９５２，３１７号は、カルシトリオール誘導体およびその使用を論じている。カルシトリオールは、加水分解性基を変更または修飾することにより制御すると、ｉｎ  ｖｉｖｏでの時間をかけたビタミンＤの制御放出をかくして実現することができる。構造に関して、望ましい生物学的属性を有する修飾ビタミンＤ化合物の重要な特色は、加水分解性基が、炭素２５のヒドロキシル基、場合によっては分子中に存在する他のいずれかのヒドロキシル基に結合している、２５−ジヒドロキシビタミンＤ３の誘導体、または２５−ジヒドロキシビタミンＤ類似体の誘導体であることである。結合している基の種々の構造的特色、たとえば、タイプ、大きさ、構造の複雑さに応じて、こうした誘導体は、ｉｎ  ｖｉｖｏで、２５−ジヒドロキシビタミンＤ３または２５−ジヒドロキシビタミンＤ３類似体に、異なる速度で加水分解されて、かくして、身体における生物活性ビタミンＤ化合物（すなわち、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３またはその類似体）の「徐放」をもたらすと考えられる。このような化合物の「徐放」ｉｎ  ｖｉｖｏ活性プロファイルは、誘導体の混合物（たとえば、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３の種々の誘導体、または１，２５−ジヒドロキシビタミン類似体の種々の誘導体の混合物）の使用、または１種または複数のビタミンＤ誘導体と、１，２５（ＯＨ）２Ｄ３から導かれる化学修飾分子とからなる混合物の使用によってさらに調節することができる。修飾は、分子中のいたるところに行われて、所望の特性を有する類似体が得られている。１０００を越える異なるビタミンＤ類似体が、世界中で合成されている。こうした類似体はすべて、本発明において記載および請求するビタミンＤの記述の範囲内にある。
ビタミンＤ受容体（ＶＤＲ）：ステロイドホルモンおよびレチノイド酸の核内受容体のスーパーファミリーの一員。ＶＤＲは、１，２５（ＯＨ）２Ｄ３に活性化される転写因子として機能し、最終的に、ＲＮＡポリメラーゼを媒介とする転写の速度に影響を与える。ＶＤＲは、カルシウムおよび骨代謝に通常関与する細胞にだけでなく、免疫系の細胞などの他の細胞型にも存在する。Chantal Mathieu and Luciano Adorini. "The coming age of 1,25-dihydroxyvitamin D3 analogs as immunomodulatory agents," TRENDS in Molecular Medicine. Vol 8, No 4, April 2002を参照されたい。
【００１３】
ビタミンＤの免疫調節性の役割は、際立った２つの知見を根拠に、２５年以上前に最初に提唱された。まず、肉芽腫性疾患であるサルコイドーシスの患者からの単球／マクロファージによって、前駆体２５−ヒドロキシビタミンＤ（２５ＯＨＤ）から、ビタミンＤの活性型である１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ（１，２５（ＯＨ）2Ｄ）が構成的に合成されることが示された。次に、１，２５（ＯＨ）2Ｄの受容体（ビタミンＤ受容体、ＶＤＲ）は、活性化した増殖途中のリンパ球において検出可能である。こうした知見は、単球によって産生された１，２５（ＯＨ）2Ｄが、近接するＴ細胞またはＢ細胞に作用しうる機序を示唆しているが、こうした系が正常な免疫系制御に与える影響は、判然としなかった。実際に、免疫応答性の決定因子としてのビタミンＤの役割のかなり明確なイメージが浮かび上がったのは、ここ数年のことにすぎない。２つの新たな概念によって、この変化が促された。最初に、生得免疫の研究によって、ビタミンＤによる抗菌活性の細胞内分泌誘発が、感染に対する単球／マクロファージ応答の枢要な構成要素であることが示された。次に、最適以下のビタミンＤ状態は、２５ＯＨＤの単球／マクロファージ代謝および後続の１，２５（ＯＨ）2Ｄ作用を損なう潜在的可能性を有する、世界中の多くの集団の共通の特徴であることが、現在ははっきりしている。より最近の総説は、ビタミンＤによる生得免疫制御と関連する代謝およびシグナル伝達機序、ならびにヒト疾患への影響に特に言及しながら、こうした新しい展開を詳述している。Martin Hewison, "Review: Vitamin D and the intracrinology of innate immunity," Molecular and Cellular Endocrinology 321 (2010) 103-111を参照されたい。
【００１４】
この題目の最近の総説Holick (2007) N. Engl. J. Med., 357:266-281では、ビタミンＤ不足が、ビタミンＤ欠乏（５０ｎＭまたは２０ｎｇ／ｍｌ）より高いが７５ｎＭ（３０ｎｇ／ｍｌ）未満である循環２５ＯＨＤレベルを特徴とする場合があったことが示唆された。Holick 2009, Ann. Epidemiol. 19: 73-7を参照されたい。
【００１５】
したがって、最初のサルコイドーシス研究以来初めて、感染に対する単球／マクロファージによる生得免疫応答に関して、２５ＯＨＤの細胞内分泌代謝の利益を明示する機序を提案することが可能になっている。Ｍ．ｔｂ感染などの免疫負荷に直面すると、ＴＬＲなどの、病原体を感知する受容体によって、１α−ヒドロキシラーゼおよびＶＤＲの発現の増強が誘発される。十分な２５ＯＨＤが利用可能であるという前提で、これにより、次いで、１，２５（ＯＨ）2Ｄの局部レベルが上昇して、ｈＣＡＰ遺伝子の転写が刺激され、結果として生じる抗菌タンパク質がリソソームに取り入れられて、殺菌が促進される。当初、ｈＣＡＰは、主として細菌細胞膜を破壊することにより働くと考えられていた。Nizet and Gallo, Scan. J. Infect. Dis., 2003; 35:670-676を参照されたい。
【００１６】
ビタミンＤとヒト免疫の相互作用に関する新たな展望によって、その免疫調節活性の中心となる細胞内分泌機序が浮き彫りになった。重大なことに、こうした機序は、古典的免疫系以外の様々な組織、特に「バリア」部位、たとえば、皮膚、肺、腸、胎盤、および口腔粘膜からの細胞にも共通することが現在明白になっている。ビタミンＤに対する細胞内分泌応答の媒介に関与する細胞型に関係なく、こうした研究は、不適当なビタミンＤ状態から生じうる潜在的な問題を際立たせている。不適当なビタミンＤ状態は、世界中の地域社会において頻発していると思われ、ビタミンＤ不足の生理学的および疾患因果関係、ならびに本発明において記載および請求するような局部炎症状態へのビタミンＤサプリメントの局所投与の潜在的可能性を評価することを目的とした、新たな臨床研究の必要がさらに強調される。
【００１７】
ビタミンＤ欠乏症は、感染率の増大との相互関係が示されている。１９世紀初頭以来、環境（すなわち、日光）とビタミンＤの食事供給源（すなわち、タラ肝臓）の両方が、結核の治療として特定されている。ビタミンＤが抗菌ペプチド遺伝子発現を誘発するという最近の発見によって、ビタミンＤの「抗生物質」効果が一部説明され、免疫機能を向上させるビタミンＤの能力への関心が大いに復活した。その後の研究では、この制御が、口腔感染を含めた、創傷および感染に対する生得免疫系の応答にとって生物学的に重要であること、ならびに欠乏症によって、細菌およびウイルス感染に対する応答が最適以下になる場合もあることが示唆されている。ビタミンＤの局所補給が口腔炎症に好反応を示す潜在的可能性は、最も見込みがある。
【００１８】
２５（ＯＨ）Ｄは、ビタミンＤ結合タンパク質に結合して血中を循環し、ビタミンＤ状態の確かな指標である。２５（ＯＨ）Ｄは、完全に活性化されるために、ミトコンドリアのｌα−ヒドロキシラーゼ酵素（ＣＹＰ２７８１）によって１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ（１，２５（ＯＨ）２Ｄ）へと変換される。身体の１，２５（ＯＨ）２Ｄの大半は、腎臓の一次尿細管（ｐｒｉｍａｒｙ  ｒｅｎａｌ  ｔｕｂｕｌｅ）において合成されるが、ＣＹＰ２７８１を発現させる細胞次第で、数多くの腎外部位においても合成が行われる。
１，２５（ＯＨ）２Ｄのゲノム作用は、ステロイド／ホルモン受容体ファミリーに属する転写因子であるビタミンＤ受容体（ＶＤＲ）を通して調節される。
【００１９】
ビタミンＤの欠乏は、骨の健康からがんに至る範囲の数多くの健康状態と関連付けられるが、ビタミンＤ経路による抗菌ペプチド遺伝子制御の発見で、結果として、免疫系に対するその影響への新たな関心が生まれた。生涯を通しての妥当なレベルによって、加齢と共に我々に降りかかる慢性病の多くが軽減しうることを現実のものにすることは、特に魅力的である。ビタミンＤサプリメントを１日を通して繰り返し局所投与することによって、「局部」ビタミンＤレベルに影響を及ぼすことができる。
口腔粘膜、腸管、皮膚、尿路、生殖器などの多くの上皮組織は、絶えず環境に曝されており、こうした組織において病原体に対する防御を講じることにおけるビタミンＤ−カテリシジン経路の重要性は、すでに主要な焦点である。これには、本発明において開示および請求するとおりの、１日を通して継続的な経口腔粘膜吸収を実現する組成物から、ビタミンＤサプリメントを口腔粘膜に局所適用することが含まれる。
【００２０】
ほとんどの人々においてビタミンＤのレベルが不十分であり、世界中でほぼ１０億人が欠乏していることを考慮に入れると、ヒトにおける、適性に設計された補給研究は、ビタミンＤの血清レベルを上昇させることの利益を見極めるために重要となる。Adrian F. Gombart. The Vitamin D-antimicrobial peptide pathway and its role in protection against infection. Future Microbial. (2009) 4(9):1151-1166を参照されたい。
ビタミンＤは、カルシウム恒常性を調節し、電解質および血圧の制御において役割を担うことが知られている。現在、ビタミンＤの最も活性のある代謝産物である１，２５（ＯＨ）2Ｄ3が、免疫応答を制御し、消炎活性を有することを示す証拠の量は、現在増加しつつある。Current Opinion in Gastroentarology. 2010; 26:591-595を参照されたい。
免疫機能におけるビタミンＤおよびビタミンＤ受容体（ＶＤＲ）の特性決定では、かなりの進歩が遂げられている。感染および炎症に対する応答に関与するシグナル伝達経路の研究によって、ビタミンＤに対するＶＤＲを介した細胞応答のより詳細な理解が得られている。本発明は、特に、ビタミンＤおよびＶＤＲが粘膜免疫、細菌感染、および炎症に影響を及ぼす分子機序に関して、口腔粘膜に局所投与されたビタミンＤが、粘膜の免疫機能にどのように寄与するかの理解における最近の進歩に基づく。
最近では、ビタミンＤがＴ細胞抗原受容体を調節することが示され、ビタミンＤが、免疫制御において非古典的役割を担うことがさらに実証された。ビタミンＤの消炎および抗感染機能が新たに確認され、本発明の局所用ビタミンＤサプリメント組成物は、非常に著しい活性を頼みとしている。ビタミンＤ／ＶＤＲは、腸恒常性、密着結合、病原体進入、共生細菌コロニー形成、抗菌ペプチド分泌、および粘膜防御に対する応答の制御において、いくつもの枢要な機能を有する。興味深いことに、微生物によって、ＶＤＲシグナル伝達経路は調節される。
【００２１】
ビタミンＤは、カルシウム恒常性、電解質、および血圧制御における立役者として知られている。最近では、ビタミンＤの非標準の活性が、ヒト疾患の病因および予防にどのように影響するかの理解において、重要な進歩が遂げられている。ビタミンＤおよびＶＤＲは、Ｔ細胞抗原受容体シグナル伝達に直接関与する。消炎および抗感染へのビタミンＤ／ＶＤＲの関与は、ＶＤＲについて新たに確認された非常に著しい活性を表している。研究では、ＶＤＲの制御不全が、炎症反応の悪化につながり、ビタミンＤが欠如する可能性を高める場合があることが示唆されており、ＶＤＲシグナル伝達は、歯周炎を含めた細菌感染および慢性炎症と関連付けることができる。
【００２２】
全体として、１，２５（ＯＨ）2Ｄ3が免疫系に与える効果には、ＴＣＲを調節する、Ｔｈ１／Ｔｈ１７ＣＤ４＋Ｔ細胞およびサイトカインを減少させる、制御性Ｔ細胞を増加させる、Ｔ細胞によって引き起こされる産生を下向き制御する、および樹状細胞の分化を阻害することが含まれる。
その消炎の役割と一致して、１，２５（ＯＨ）2Ｄ3は、様々な細胞型において、ＩＬ−１、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＴＮＦ−αなどの多くの炎症誘発性サイトカインの発現を下向き制御する。マクロファージ、樹状細胞、および活性化したＴ細胞を含めた免疫細胞は、細胞内ＶＤＲを発現させ、１，２５（ＯＨ）2Ｄ3に反応を示す。
【００２３】
ビタミンＤ欠乏症は、感染率の増大との相互関係が示されている。さらに、１，２５（ＯＨ）2Ｄ3は、カテリシジン（ｃａｒｔｈｅｌｉｃｉｄｉｎ）などの抗菌ペプチドの発現を誘発する。すなわち、最近の研究によって、本発明の局所用サプリメント組成物において使用する１，２５（ＯＨ）2Ｄ3の抗感染活性への関心は、大いに復活している。Gombert A.F. Future Microbial. 2009; 4:1151-1165を参照されたい。
局所補給によって、身体中の１，２５（ＯＨ）2Ｄ3のレベルを操作し、ＶＤＲの機能を回復させることは、本発明の局所用サプリメント組成物が頼みとする、歯周炎治療への新たな手法となる。１，２５（ＯＨ）2Ｄ3は、歯周炎を含めた感染性疾患の予防および治療におけるその潜在的な用途を推進した、強力な免疫調節特性を有する。Newsson M. Mol. Cell Endocrinol. 2010; 321:103-111を参照されたい。
【００２４】
歯周外科手術時のビタミンＤ欠乏は、最長で１年間、治療成果にマイナスの影響を及ぼす。データの解析から、ビタミンＤ状態は、手術後の治癒にとって肝要となりうることが示唆される。(Clinical)Trials.gov number, CT00277065。
ビタミンＤの主要な供給源は、肝臓で２５−ヒドロキシビタミンＤ［２５（ＯＨ）Ｄ］へと代謝される、ビタミンＤ２およびＤ３の形での、食物摂取および日光浴である。腎臓でのさらなる代謝によって、ビタミンＤの活性型である１，２５−ジヒドロキシビタミンＤが産生される。
歯周炎は、細菌の侵襲の際に宿主免疫応答によって誘発される歯槽骨喪失を特徴とする。ビタミンＤは、骨の維持および免疫において枢要な役割を果たすので、ビタミンＤ欠乏症が歯周組織にマイナスの影響を及ぼしかねないと推測することは、生物学的な論理的解釈になる。ビタミンＤ欠乏症の診断は、２５（ＯＨ）Ｄレベルの血清分析によってなされる。血清２５（ＯＨ）Ｄレベルの正常範囲は、２０〜７４ｎｇ／ｍＬである。欠乏状態について一般に受け入れられている絶対的な閾値はないが、ほとんどの権威者は、２０〜３０ｎｇ／ｍＬ未満のレベルが、少なくとも軽度の欠乏を引き起こし、１２ｎｇ／ｍＬのレベルで重度のビタミンＤ欠乏症が起こることについて意見が一致している。Bashutski, et. al. J. Dent. Res. 90(8). 1007-1012, 2011を参照されたい。本発明の組成物でのビタミンＤの局所補給は、攻撃を受けた細胞の「局部」ビタミンＤレベルに影響を及ぼす。
【００２５】
横断研究において、低いビタミンＤレベルは、妊娠中の歯肉炎症、歯牙喪失、臨床的付着喪失、および材料（ｍａｔｅｒｉａｌ）歯周病の増加と関連付けられている。本発明の局所用サプリメント組成物によるビタミンＤの毎日の投与は、「局部」ビタミンＤレベルを増大させるように計画される。
興味深いことに、手術時のビタミンＤ補給は、ベースライン欠乏と関連する負の臨床成果を予防しない。患者には、ビタミンＤを６週間だけ補給していたが、ビタミンＤ摂取を増加させた後、血清２５（ＯＨ）Ｄレベルが安定するのに最高で３か月かかる。Veith R, et. al. Am. J. Clin. Nutr. 2001 Feb; 73(2):288-94を参照されたい。６週間のビタミンＤ補給のみでは、血清２５（ＯＨ）Ｄレベルが、６か月までに偽薬患者におけるベースラインレベルに戻ったので、長期間の効果は発揮されなかった。
【００２６】
データの解析から、個体がビタミンＤ欠乏であると、歯周外科手術により最小限の利益しか得られない場合があることが示唆される。さらに、手術時のビタミンＤ補給によって、この影響を防ぐことはできない。ビタミンＤ欠乏症は、非常に頻発しているので、歯周外科手術より前に、妥当なビタミンＤレベルを申し分なく確保して、可能な最良の結果を得ることが賢明であるといえる。口腔ビタミンＤ補給が、本発明の局所用ビタミンＤサプリメント組成物と組み合わされ、歯周外科手術の前に長期間毎日投与されることが、推奨される。
【００２７】
疫学研究から、低いビタミンＤレベルによって、呼吸器ウイルス感染のリスクまたは重症度が増す場合があることが示唆される。ある研究では、呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）に感染したヒト気道上皮細胞に対するビタミンＤの効果が調べられた。気道上皮によって、２５−ヒドロキシビタミンＤ3（貯蔵型）が１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3（活性型）に変換される。組織中で局部的に生成した活性ビタミンＤは、免疫応答に対するその効果を含めて、ビタミンＤの非骨格作用にとって重要である。ビタミンＤは、気道上皮において、ＮＦ−ｋＢ阻害因子であるＩｋＢαを誘導し、ＩＦＮ−βやＣＸＣＬ１０などの、ＮＦ−ｋＢによって引き起こされる遺伝子のＲＳＶ誘発を低減することが判明した。
【００２８】
気道上皮細胞をビタミンＤに曝すことで、重要な抗ウイルス活性を有するＩＦＮ被刺激タンパク質（たとえば、１５ｋＤａのミクソウイルス耐性ＡおよびＩＦＮ被刺激タンパク質）の誘導が低減されたことも判明した。ＲＳＶに誘発される遺伝子発現とは対照的に、ビタミンＤは、ＩＦＮシグナル伝達、および孤立したＩＦＮ誘発による遺伝子発現には影響を及ぼさなかった。分解不能型のＩｋＢａを発現したアデノウイルスベクターを用いてＮＦ−ｋＢを阻害することで、ビタミンＤの効果が模倣された。ビタミンＤ受容体を、小さい妨害ＲＮＡによって発現停止させたとき、ビタミンＤ効果は消失した。最も重要なことに、ＩｋＢａを誘導し、ケモカインおよびＩＦＮ−βを抑制するにもかかわらず、ウイルスｍＲＮＡもしくはタンパク質またはウイルス複製の増加はなかったことが判明した。
ビタミンＤは、ウイルス排除を脅かすことなく、気道上皮においてウイルス感染に対する炎症反応を低減すると結論付けることができる。このことは、妥当なビタミンＤレベルが、ＲＳＶに感染した固体において、炎症の軽減および疾患重症度の低下に寄与するであろうことを示唆している。
ビタミンＤは、カルシウム恒常性におけるその古典的な役割を越えて拡張した機能を有する、多能性ホルモンとして次第に認識されてきている。疫学および基礎調査研究からの急速に増えつつある証拠から、ビタミンＤが免疫応答を調節しうることが明らかになっている。ビタミンＤ欠乏症は、非常に頻発しており、歯周炎を含めて、いくつかの炎症性疾患のリスクおよび感染に対する感受性の両方の増大と関連付けられている。活性ビタミンＤの局在化した組織特異的な生成は、本発明のサプリメント組成物が頼みとする、非古典的なビタミンＤ機能の枢要な構成要素であると考えられる。以前に公表されたデータは、正常な肺上皮が、２５−ヒドロキシビタミンＤ3（貯蔵型のビタミンＤ）を、構成的に１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3（１，２５Ｄ）（活性型のビタミンＤ）に変換すること、および活性ビタミンＤの生成が、ウイルス感染の存在下で増加することを示している。
【００２９】
炎症は、宿主防御の不可欠な構成要素であるが、しかし、微生物または炎症に対する激しすぎる反応は、宿主に有害であり、臓器の機能障害につながる恐れもある。ビタミンＤは、多発性硬化症や１型糖尿病などの炎症性疾患の動物モデルにおいて、炎症性ケモカインの産生を阻害することが示されている。
ＮＦ−ｋＢ転写制御因子のファミリーは、免疫応答を制御する広範な遺伝子の発現を協調させることにおいて、中心的な役割を担う。ＮＦ−ｋＢタンパク質は、ＩｋＢ（１ｋＢ）と共同して、細胞質に存在する。ＩｋＢは、細胞が刺激された後、ＩｋＢキナーゼによってリン酸化され、ユビキチン／プロテアソーム分解経路による破壊のターゲットとなる。ＩｋＢの分解によって、ＮＦ−ｋＢタンパク質が核に移動し、そのＤＮＡ結合部位に結合し、様々な遺伝子を活性化することが可能になる。Sif Hansdottir, et. al., The Journal of Immunology. 2010; 184: 965-974を参照されたい。
【００３０】
ホルモン型のビタミンＤは、抗菌ペプチド、すなわちカテリシジンを上向き制御して、種々のバリア部位および免疫細胞中での細菌の排除を強化する。ビタミンＤは、Ｔ細胞活性化、ならびに抗原提示細胞（ＡＣＰ）、詳細にはＤＣの表現型および機能に直接影響を及ぼすことによって、適応免疫系を調節する。
免疫系における細胞の制御に関してのビタミンＤの重要性は、免疫系の細胞によって発現されるビタミンＤ受容体（ＶＤＲ）およびビタミンＤ代謝鍵酵素の発見と共に、過去１０年間かけて正当な評価を得ている。動物研究、初期の疫学および臨床研究では、免疫系のバランスの維持におけるビタミンＤの潜在的な役割が裏付けられている。
【００３１】
現在、ビタミンＤは、感染に反応して、カテリシジンなどの抗菌ペプチドを上向き制御することにより、生得免疫を増強すると考えられている。この抗菌ペプチドの上向き制御は、本発明の局所用サプリメント組成物が頼みとするものである。
したがって、カテリシジンなどの抗菌ペプチドは、特に、口腔粘膜などのバリア部位における、様々な感染に対する生得免疫応答の不可欠な部分を成す。
【００３２】
総合して、こうした所見から、１，２５（ＯＨ）2Ｄ3は、様々な異なる細胞上での抗菌ペプチド産生、主としてカテリシジンを上向き制御し、本発明のビタミンＤサプリメント組成物の頼みとなりうることが示唆される。
要約すると、１，２５（ＯＨ）2Ｄの免疫系に対する効果として、Ｔｈ１／Ｔｈ１７  ＣＤ４＋Ｔ細胞およびサイトカインを減少させること、制御性Ｔ細胞を増加させること、Ｔ細胞によって引き起こされるＩｇＧ産生の下向き制御、ならびに樹状細胞分化の阻害が挙げられる。１，２５（ＯＨ）2Ｄは、防御生得免疫応答を強化する一方で、過熱した適応免疫応答を抑制することにより、自己寛容の維持を助ける。Diane L. Kamen and Via Taagpricha. Vitamin D and molecular actions on the immune system: modulation of innate and autoimmunity. J. Mol. Med. (2010) 88:441-450を参照されたい。
本発明の局所用サプリメント組成物によって投与されたビタミンＤは、炎症メディエーターの細菌放出による宿主防御細胞の活性化を伴い、結果として、結合組織および歯槽骨を含めた支持歯周組織が破壊される炎症状態である、歯周病の治療に有益となりうる。
１２，０００人の成人が参加した第３回全国健康栄養調査（ＮＨＡＮＥＳ  ＩＩＩ）によって、歯周の健康とビタミンＤおよびカルシウム摂取の有意な関連が明らかになった。したがって、この大きなコホートからのデータによって、ビタミンＤおよびカルシウムの食事摂取が少ないことが、用量依存的な形で、歯周の健康不良の一助となるという仮説が裏付けられることになる。
【００３３】
定期的な歯周ケアプログラムに参加している患者では、その食事性カルシウムまたはビタミンＤサプリメントに関わりなく、歯周の健康が改善する。しかし、カルシウムおよびビタミンＤ補給を取り入れることは、このようなサプリメントを取らないのに比べて、より良好な歯周の健康と関連付けられる。以前の報告では、ビタミンＤが、抗炎症効果によって、歯肉炎症に対する感受性を低減しうることが示唆されており、ある研究は、２５（ＯＨ）ＤとＢＯＰの逆線形の関連を示した。この報告と一致して、サプリメント摂取者において、より少ないＢＯＰおよびより少ない炎症が認められ、その差は、ベースライン時では明らかであり、対象が歯周維持療法を受けていた間、１年間有意なままであった。異なる共変数が含まれるため、ここで報告するベースライン分析の結果は、同じ集団で以前に報告されたものとわずかに異なることを留意すべきである。M. Nathalia Garcia, et. al. One-Year Effects of Vitamin D and Calcium Supplementation on Chronic Periodontitis. J. Periodontol. 2011; 82:25-32を参照されたい。
【００３４】
ビタミンＤの最適レベルは、歯周病に対して免疫抑制効果を有するはずである。D. Dixon, et. al. Calcium and vitamin D use among adults in periodontal disease maintenance programmes. British Dental Journal. 2009: 208:827-831を参照されたい。
骨格恒常性に対するその作用に加えて、ビタミンＤ、詳細には、そのホルモン活性型である１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤは、免疫細胞による炎症性サイトカイン産生の調節、および単球−マクロファージ系統の細胞による、抗菌作用を有するペプチドの刺激された分泌を通して、抗炎症および抗菌効果を有する。こうした特性は、「局部」の口腔感染症を治療するための、局所用サプリメント組成物に役立つ。
【００３５】
口腔ビタミンＤおよびカルシウム補給を取り入れた対象について、臨床およびＸ線撮影での測定はすべて、より良好な歯周の健康を示した。さらに、対象は全員が歯周維持プログラムに加入していたので、データは、ビタミンＤおよびカルシウムサプリメントを摂取することが、標準の歯周ケアを上回り、越える有益な結果となりうるという見解と一致する。
結果は、ビタミンＤおよびカルシウム補給が、歯周病管理の構成要素として支持されうるであろうことを示唆している。D. Douglas, et. al., J. Periodontol. Sept. 2009; 80:1433-1439を参照されたい。
【００３６】
得られる提案は、非常に幅広い。しかし、ビタミンＤは、筋肉の強さ、大腸がん、炎症性疾患などの、骨の健康以外の種々の成果について、有益な効果をもたらすと思われる。現在の研究では、歯肉炎症との関連がそこまでで安定に達する、２５（ＯＨ）Ｄの閾値血清濃度について、徴候は見出されなかった。したがって、ビタミンＤの抗炎症効果は、９０〜１００ｎｍｏｌ／Ｌの血清濃度に拡大する可能性もありうる。こうした結果は、歯肉炎症に対するビタミンＤの抗炎症効果と一致しており、抗炎症効果は、ビタミンＤを歯周病予防に有益なものにすることのできる別の経路となりうる。
ビタミンＤは、その抗炎症効果を通して、歯肉炎症に対する感受性を低減しうる。歯肉炎は、ビタミンＤの抗炎症効果を評価するのに有用な臨床モデルとなりうる。Thomas Dietrich, et. al. Am. J. Clin. Nutr. 2005;82-575を参照されたい。
【発明を実施するための形態】
【００３７】
本発明の好ましい局所用ビタミンＤ口腔サプリメント組成物において、ビタミンＤサプリメントは、抗菌ペプチドのカテリシジンを上向き制御することにより、生得免疫を強化する。
本発明の好ましい実施形態では、局所用ビタミンＤ口腔サプリメント組成物は、そのホルモン活性型である１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ形態で、炎症性サイトカイン産生を調節し、抗菌特性の分泌を刺激することにより、抗炎症および抗菌効果を示す。局所用ビタミンＤ口腔サプリメント組成物、および前記ホルモン活性型である１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ、すなわちカルシトリオールは、免疫調節特性を示す。
【００３８】
本発明の好ましい実施形態、局所用ビタミンＤ口腔サプリメント組成物では、１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤの抗炎症および抗菌効果は、ビタミンＤ受容体（ＶＤＲ）によって調節される。
本発明の好ましい実施形態では、免疫系に対する、局所用ビタミンＤ口腔サプリメント組成物、すなわち１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤの効果として、
ＴＣＲを調節する、
ＴＨ１／ＴＨ１７／ＣＤ４およびＴ細胞ならびにサイトカインを減少させる、
制御性Ｔ細胞を増加させる、
Ｔ細胞によって引き起こされる産生を下向き制御する、および
樹状細胞分化を阻害する
ことが挙げられる。
【００３９】
本発明は、
口腔粘膜にビタミンＤサプリメント組成物を局所投与するステップを含む、口腔炎症の治療方法であって、
唾液可溶性無水エマルション担体と、
有効レベルのビタミンＤサプリメントと、
経口腔粘膜吸収促進剤と
を含み、
口腔粘膜に適用されると、前記組成物は、前記口腔粘膜に対して永続的な唾液可溶性粘膜付着性ゲルを形成し、
前記唾液可溶性粘膜付着性ゲルが唾液流に継続して曝されると、前記粘膜付着性ゲルは、徐々に溶解して、前記ビタミンＤサプリメントおよび前記経口腔粘膜吸収促進剤の前記口腔粘膜に対する制御放出を実現する
ビタミンＤサプリメント組成物を、口腔粘膜に局所投与することを含み、
前記局所用ビタミンＤ口腔サプリメント組成物の適用手段は、前記組成物でコーティングされた歯間デバイス、口腔ゲル、口腔軟膏、口腔ペースト、口腔ワニス、口腔液、およびこれらの組合せからなる群から選択され、
口腔炎症の治療は、前記組成物でコーティングされた歯科用具による毎日の局所投与と組み合わせて、ビタミンＤサプリメントゲルによって１日を通して繰り返し適用されるビタミンＤサプリメント組成物を、局所投与することを含む、
治療方法を包含する。
【００４０】
口腔粘膜への局所投与に適するビタミンＤ組成物は、経口腔粘膜吸収促進剤も含有する、ビタミンＤ用の無水エマルション担体を含み、前記無水エマルションは、唾液に曝されると、口腔粘膜に対して永続的な粘膜付着性ゲルを形成する。唾液によってこの粘膜付着性ゲルが溶解すると、ビタミンＤ／経口腔粘膜吸収促進剤混合物が、粘膜付着性ゲルから徐々に放出されて、口腔粘膜を介して受動的に拡散し、それによって、ビタミンＤの全身血清レベルが補われる。
本発明のビタミンＤ組成物の口腔粘膜への局所投与は、口腔ゲル、またはビタミンＤ組成物でコーティングされた歯科用具によって実施することが好ましい。ビタミンＤの口腔粘膜への局所投与は、本発明のビタミンＤ組成物でコーティングされた歯科用具組成物での１日１回または２回のフロス清掃と組み合わせた、ビタミンＤサプリメント局所用ゲルの１日を通したいくつかの投与の組合せによって実施することが特に好ましい。
【００４１】
本発明の目的では、唾液可溶性無水エマルションとして、すべてが参照により本明細書に援用される次の米国特許第５，０３２，３８７号、第５，０９８，７１１、５号，第５３８，６６７号、および第５，６５１，９５９号に記載のとおりの、非イオン性界面活性剤中のポリジメチルシロキサンからなるエマルションが挙げられる。
好ましい本発明の非イオン性界面活性剤は、唾液の存在下で粘膜付着性ゲルを形成しうる。こうした界面活性剤は、ポロキサマー２３７、ポロキサマー３３８、ポロキサマー４０７、およびこれらの組合せからなる群から選択される。
【００４２】
本発明の目的では、経口腔粘膜吸収促進剤は、デクスパンテノール、ｄ−リモネン、ポロキサマー、ＰＥＧ、ベンジルアルコール、カルボポール、キトサン、Ｎ−トリメチルキトサン、メントール、およびこれらの組合せからなる群から選択される。
本発明のビタミンＤサプリメント組成物の担体として使用する、好ましい唾液可溶性無水エマルションとしては、約１５００ｃｓ〜約２５０万ｃｓの間の範囲の粘度のポリジメチルシロキサン（ＰＤＭＳ）のエマルションが挙げられる。特に好ましい無水エマルションは、不連続相として、１０，５００ｃｓ〜２５０万ｃｓの間の粘度のＰＤＭＳ、連続相として、米国特許第５，６５１，９５９号で詳述されている非イオン性界面活性剤を含む。
【００４３】
好ましいポリジメチルシロキサンは、１５００ｃｓ、１２，５００ｃｓ、１００，０００ｃｓ、２５０，０００ｃｓ、５００，０００ｃｓ、７５０，０００ｃｓ、１５０万ｃｓ、２２０万ｃｓ、２５０万ｃｓのポリジメチルシロキサン、およびその組合せからなる群から選択される。
本発明の局所用ビタミンＤ口腔サプリメント組成物の好ましい適用手段としては、口腔ゲル、口腔軟膏、口腔ペースト、口腔ワニス、口腔液、および前記局所用ビタミンＤ口腔サプリメント組成物でコーティングされた種々の歯間デバイスが挙げられる。
【００４４】
本発明の目的で好ましい口腔ゲルとしては、すべてが参照により本明細書に援用される、米国特許第５，００９，８８１号、第５，０３２，３８７号、第５，０５７，３０６号、第５，０５７，３０７号、第５，０５７，３０９号、第５，５３８，６６７号、および第５，６５１，９５９号で開示されているゲルが挙げられる。
ビタミンＤ口腔サプリメント組成物の歯間での放出に適する、好ましいコーティングされた歯間デバイスとしては、すべてが参照により本明細書に援用される、次の米国特許第４，９１１，９２７号、第４，９４２，０３４号、第５，０９８，７１１号、第５，１６５，９１３号、第５，６６５，３７４号、第５，７１１，９３５号、第６，５４５，０７７号、第６，５７５，１７６号、第７，０１７，５９１号、第７，０２５，９８６号、および第７，１５２，６１１号に記載の歯間デバイスが挙げられる。
歯科用具の使用は、適正な歯科衛生のための非常に重要な補助的手段である。歯科用具は、歯間および歯肉縁下の空隙を清潔にするのに、久しく効果的に使用されている。歯科用具は、正しく使用したとき、う歯および歯肉疾患の抑制において有効であることがわかっている。歯科用具は、日常の歯科衛生のために歯科医が推奨している。
歯科用具の有効性を増進するために、いくつかの用具には、歯芽エナメル質の酸侵食からの保護を助けるために、ある特定の医薬成分または歯磨成分が含められている。歯周病を抑制するために、殺菌剤も、デンタルフロスと関連して使用されている。
本発明の歯科用具中のビタミンＤサプリメント組成物は、ヒドロキシアパタイト歯芽構造の再石灰化のきっかけとなることが知られているイオンを含んだ塩と連係して使用することもでき、そうした塩でコーティングすることもできる。そのような化合物には、歯磨剤などの形態にした、カルシウム、リン、およびフッ素の塩が含まれる。そうした塩の例としては、限定はしないが、フッ化物または含フッ化物化合物、たとえば、フッ化ナトリウム、フッ化カリウム、フッ化アンモニウム、二フッ化ナトリウム、二フッ化カリウム、二フッ化アンモニウム、ケイフッ化ナトリウム、フッ化亜鉛、およびフッ化スズが挙げられる。他の歯磨剤としては、たとえば、ウレアーゼ、酸性リン酸塩、炭酸カルシウム、および炭酸マグネシウムが挙げられる。使用することのできる酸性リン酸塩の例としては、たとえば、オルトリン酸、リン酸一ナトリウム、リン酸一カリウム、リン酸二ナトリウム、リン酸二カリウム、リン酸一アンモニウム、リン酸ヘミナトリウム、およびヘキサメタリン酸ナトリウム塩が挙げられる。歯磨剤は、歯芽表面に有効な局所濃度を提供するのに十分な量で歯科用具に含めることが好ましい。
【００４５】
歯間デバイス内に組み入れられることのある他の活性成分として、過酸化水素または他の過酸化物生成成分、たとえば、ＰＶＰ／Ｈ2Ｏ2や過酸化カルバミド、フッ化物、歯芽酸性化剤（ｔｏｏｔｈ  ａｃｉｄｕｌａｔｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）、たとえば、緩衝化または酸性フッ素リン酸、モノフルオロリン酸ナトリウム、プラークコントロール剤、歯石コントロール剤、膿漏および歯肉炎治療のための抗生物質、歯芽ホワイトニングおよび漂白剤、ｐＨ緩衝剤、抗真菌剤、再石灰化剤、止血薬、免疫薬、ならびに非イオン性およびカチオン性抗菌剤、たとえば、塩化ベンゾトニウム（ｂｅｎｚｏｔｈｏｎｉｕｍ  ｃｈｌｏｒｉｄｅ）、アセチルトリメチルアンモニウムブロミド、サングイナリア属、トリクロサン（非イオン性）、テトラサイクリン、塩化セチルピリジニウム、塩化ベンジトニウム（ｂｅｎｚｙｔｈｏｎｉｕｍ  ｃｈｌｏｒｉｄｅ）が挙げられる。
【００４６】
本発明の歯科用具に含めることのできる追加の活性成分としては、ビタミンＡ、界面活性剤、および医薬剤、たとえば、抗がん剤、刺激剤、骨成長剤、抗原、ホルモン、ステロイド、抗炎症剤、鎮痛剤が挙げられる。
他の実施形態では、歯科用具は、フロスによって生じることのある出血を抑制するために、凝血薬を含む。凝血薬は、歯肉組織と直接接触するように、用具のコーティングに混合することが好ましい。凝血薬としては、ビタミンＫ、水溶性カルシウム塩の形のカルシウムイオン、および凝結カスケードを開始する血液因子を挙げることができる。別法として、凝血薬は、エタノール、ポリエチレンテレフタレート、ジエチルエーテルなどの非毒性溶媒に可溶化してもよい。
【００４７】
押出し後に風味剤を直接用具に加えるなどの当業界で知られている技術によって、または風味付けされたコーティングを用具の表面に適用する、もしくは揮発性風味料を風味料溜めから用具に移すことにより、本発明の歯科用具に風味剤を加えてもよい。ＩＦＦ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（ニュージャージー州Ｄａｙｔｏｎ）を始めとする種々の供給業者を通して市販品として入手可能である、ミント、シナモン、バブルガムなどの既知の風味剤は、本発明の歯科用具における使用に適する。他の風味剤を、引用した参考文献に記載の圧縮コーティング工程によって加えてもよい。
【００４８】
消費者に視覚刺激を与えるために、本発明の歯科用具に着色剤を加えて、歯科用具を着色してもよい。着色剤は、押出しが始まる前に、より糸の生成に使用するナイロンまたは他のペレットに加えることができる。ナイロン樹脂との使用がＦＤＡに承認されている、市販品として入手可能な着色剤のいずれか１種を使用してよい。色は、歯科用具の風味に対応してもよい（たとえば、シナモンには赤、ミントには緑）。さらに、いくつもの色を同時に押出し処理して、たとえば、フィラメントのある側面を赤にし、他の側面を緑にしてもよい。残存するプラーク沈着物を識別するために、用具に、たとえば、ＦＤ＆Ｃ  Ｒｅｄ３やＦＤ＆Ｃ  Ｒｅｄ４などの着色剤または蛍光染料がさらに組み込まれてもよい。
【実施例】
【００４９】
本発明について、本発明のビタミンＤ組成物の口腔粘膜および歯間表面への適用にそれぞれ使用する局所用ゲルおよびデンタルテープの、同封の実例によってさらに説明する。
【００５０】
（例１）
カルシトリオールを含んだ局所用口腔ゲル
５００ｍＬのステンレス鋼ビーカーに、オーバーヘッド型撹拌器を取り付けた。水１３５．８３４ｇを加え、適度な撹拌を開始した。この容器のための追加の原材料を加えた。ソルビトール７０％１０２ｇ、グリセリン１５ｇ、ソルビン酸カリウム０．４５ｇ、サッカリンナトリウム０．２２５ｇ、スクラロース０．６ｇ、および風味料０．９５２５ｇを、室温で適度に撹拌しながら加えた。
【００５１】
無水エマルション［ポロキサマー４０７／ポリジメチルシロキサン（２５０万ｃｓ）］（９０：１０）９．５４ｇを含有する１００ｍのビーカーを、磁気撹拌しながら９５℃に加熱した。窒素ブランケット下で、ビーカーにカルシトリオール０．１５ｇを加えた。
磁気撹拌し、加熱しながら、５０ｍＬビーカーに、プロピレングリコール３０ｇおよびメチルパラベン０．４５ｇを加えた。温度が５０℃に達したとき、カルボキシメチルセルロース９Ｈ４ＸＦ  ４．６５ｇを、３分かけてゆっくりと加えた。５分間撹拌した後、中身を、無水エマルションを含有する１００ｍＬビーカーにゆっくりと加えた。引き続き撹拌し、４０℃に冷却した後、中身をステンレス鋼ビーカーに３分かけてゆっくりと加えた。さらに２０分経過後、局所用口腔ゲルを、ヘッド部を窒素下にしてチューブから局所的に分配されるように包装した。
【００５２】
（例２）
ビタミンＤ  ＰＲＯＰＨＹ  ＴＡＰＥ（登録商標）
２ガロンのステンレス鋼容器に、オーバーヘッド型撹拌器を取り付け、ホットプレートに載せた。無水エマルション［ポロキサマー４０７／ポリジメチルシロキサン（１２，５００ｃｓ）］（９０：１０）１９６４ｇを容器に入れ、撹拌しながら融解させた。温度が９０℃に上昇し、次の原材料を加えた。Ｐｌｕｒａｃａｒｅ  Ｌ−１２２０  １２０ｇ、ステアリルアルコール  ６００ｇ、マイクロワックスＭＬ４４５、およびポリエチレングリコール８０００を、融解した無水エマルションに加えた。ホモジナイザーを容器に入れ、１０分間動作させた結果、乳化が起こった。次いで、撹拌しながら次の原材料を加えた。歯磨剤グレードのリン酸二カルシウム二水和物２４０ｇ、没食子酸プロピル４ｇ、サッカリンナトリウム７２ｇ、ＥＤＴＡ  ８ｇ。最後に、乳化したコーティング組成物にカルシトリオール２ｇを加えた。次いで、乳化したテープコーティングバッターを、テープコーティング槽に分配した。超高分子量ポリエチレンデンタルテープの圧縮コーティングに続いて、ＳＯＦＴ  ＡＢＲＡＳＩＶＥＳ（登録商標）バイオガラスでの保護コーティングが完了して、ビタミンＤおよびＳＯＦＴ  ＡＢＲＡＳＩＶＥＳ（登録商標）保護コーティングを有する、唾液可溶性組成物で圧縮コーティングされたデンタルテープが製造された。このデンタルテープを、紙に包まれた長さ２０インチの単一断片に包装した。ＰＲＯＰＨＹ  ＴＡＰＥ（登録商標）の単一断片は、およそ２０滴の揮発性風味料が加えられた風味料溜めを伴った、風味が密閉された包装材料に包装した。
本発明のまた別の態様は、以下のとおりであってもよい。
〔１〕口腔炎症の治療において有用な局所用ビタミンＤ口腔サプリメント組成物であって、
唾液可溶性無水エマルション担体と、
有効レベルのビタミンＤサプリメントと、
経口腔粘膜吸収促進剤と
を含み、
口腔粘膜に適用されると、前記組成物は、前記口腔粘膜に対して永続的な唾液可溶性粘膜付着性ゲルを形成し、
前記唾液可溶性粘膜付着性ゲルが唾液流に継続して曝されると、前記粘膜付着性ゲルは、徐々に溶解して、前記ビタミンＤサプリメントおよび前記経口腔粘膜吸収促進剤の前記口腔粘膜に対する制御放出を実現し、
前記ビタミンＤサプリメントおよび経口腔粘膜吸収促進剤は、前記口腔粘膜と接触すると、前記口腔粘膜を介して受動的に拡散して、
（ａ）ビタミンＤのｉｎ  ｖｉｖｏ利用能および免疫応答を制御し、
（ｂ）妥当なレベルの循環ビタミンＤを維持し、
（ｃ）高カルシウム血症のリスクを最小限に抑える、
局所用ビタミンＤ口腔サプリメント組成物。
〔２〕前記唾液可溶性無水エマルションが、唾液の存在下で粘膜付着性ゲルを形成しうる非イオン性界面活性剤に乳化させたポリジメチルシロキサンを含む、前記〔１〕に記載の組成物。
〔３〕前記ビタミンＤサプリメントが、
ビタミンＤ、
１、３、および２５炭素位にヒドロキシル基を有するビタミンＤ化合物、
１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3のエステル、
１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3のエステル、
１，２５（ＯＨ）2Ｄ3  １，２５（ＯＨ）2Ｄ3類似体、
カルシトリオール、２５（ＯＨ）Ｄ3、２５（ＯＨ）Ｄ3の類似体、およびこれらの組合せ
からなる群から選択される、前記〔１〕に記載の組成物。
〔４〕前記経口腔粘膜吸収促進剤が、デクスパンテノール、ｄ−リモネン、ポロキサマー、ＰＥＧ、ベンジルアルコール、カルボポール、キトサン、Ｎ−トリメチルキトサン、メントール、およびこれらの組合せからなる群から選択される、前記〔１〕に記載の組成物。
〔５〕前記局所用ビタミンＤ口腔サプリメント組成物の適用手段が、前記組成物でコーティングされた歯間デバイス、口腔ゲル、口腔軟膏、口腔ペースト、口腔ワニス、口腔液、およびこれらの組合せからなる群から選択される、前記〔１〕に記載の組成物。
〔６〕前記歯間デバイス適用手段が、圧縮コーティングされたデンタルテープ、マルチフィラメントまたはモノフィラメントデンタルフロスまたは歯間デバイス、コーティングされた片手用の歯科用具、デンタルピック、デンタルスティミュレーター（ｄｅｎｔａｌ  ｓｔｉｍｕｌａｔｏｒ）、およびこれらの組合せからなる群から選択される、前記〔５〕に記載の組成物。
〔７〕前記ポリジメチルシロキサンが、１５００ｃｓ、１２，５００ｃｓ、１００，０００ｃｓ、２５０，０００ｃｓ、５００，０００ｃｓ、７５０，０００ｃｓ、１５０万ｃｓ、２２０万ｃｓ、２５０万ｃｓのポリジメチルシロキサン、およびその組合せからなる群から選択される、前記〔２〕に記載の組成物。
〔８〕唾液の存在下で粘膜付着性ゲルを形成しうる前記非イオン性界面活性剤が、ポロキサマー２３７、ポロキサマー３３８、ポロキサマー４０７、およびこれらの組合せからなる群から選択される、前記〔２〕に記載の組成物。
〔９〕前記ビタミンＤサプリメントが、抗菌ペプチドのカテリシジンを上向き制御することにより生得免疫を強化する、前記〔１〕に記載の局所用ビタミンＤ口腔サプリメント組成物。
〔１０〕前記ビタミンＤサプリメントが、そのホルモン活性型である１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ形態で、炎症性サイトカイン産生を調節し、抗菌特性の分泌を刺激することにより、抗炎症および抗菌効果を示す、前記〔１〕に記載の局所用ビタミンＤ口腔サプリメント組成物。
〔１１〕前記ホルモン活性型である１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤが、免疫調節特性を示すカルシトリオールである、前記〔１１〕に記載の局所用ビタミンＤ口腔サプリメント組成物。
〔１２〕１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤの前記抗炎症および抗菌効果が、ビタミンＤ受容体（ＶＤＲ）を通して調節される、前記〔１１〕に記載の局所用ビタミンＤ口腔サプリメント組成物。
〔１３〕免疫系に対する１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤの前記効果が、
ＴＣＲを調節する、
ＴＨ１／ＴＨ１７／ＣＤ４およびＴ細胞ならびにサイトカインを減少させる、
制御性Ｔ細胞を増加させる、
Ｔ細胞によって引き起こされる産生を下向き制御する、および
樹状細胞分化を阻害する
ことを包含する、前記〔１１〕に記載の局所用ビタミンＤ口腔サプリメント組成物。
〔１４〕口腔炎症の治療方法であって、
唾液可溶性無水エマルション担体と、
有効レベルのビタミンＤサプリメントと、
経口腔粘膜吸収促進剤と
を含み、
口腔粘膜に適用されると、前記組成物は、前記口腔粘膜に対して永続的な唾液可溶性粘膜付着性ゲルを形成し、
前記唾液可溶性粘膜付着性ゲルが唾液流に継続して曝されると、前記粘膜付着性ゲルは、徐々に溶解して、前記ビタミンＤサプリメントおよび前記経口腔粘膜吸収促進剤の前記口腔粘膜に対する制御放出を実現し、
前記ビタミンＤサプリメントおよび経口腔粘膜吸収促進剤は、前記口腔粘膜と接触すると、前記口腔粘膜を介して受動的に拡散して、
（ａ）ビタミンＤのｉｎ  ｖｉｖｏ利用能および免疫応答を制御し、
（ｂ）妥当なレベルの循環ビタミンＤを維持し、
（ｃ）高カルシウム血症のリスクを最小限に抑える
ビタミンＤサプリメント組成物を口腔粘膜に局所投与することを含む、治療方法。
〔１５〕前記唾液可溶性無水エマルションが、唾液の存在下で粘膜付着性ゲルを形成しうる非イオン性界面活性剤に乳化させたポリジメチルシロキサンを含む、前記〔１５〕に記載の方法。
〔１６〕前記ビタミンＤサプリメントが、
ビタミンＤ、
１、３、および２５炭素位にヒドロキシル基を有するビタミンＤ化合物、
１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3のエステル、
１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3のエステル、
１，２５（ＯＨ）2Ｄ3  １，２５（ＯＨ）2Ｄ3類似体、
カルシトリオール、２５（ＯＨ）Ｄ3、２５（ＯＨ）Ｄ3の類似体、および
これらの組合せからなる群から選択される、前記〔１５〕に記載の方法。
〔１７〕前記経口腔粘膜吸収促進剤が、デクスパンテノール、ｄ−リモネン、ポロキサマー、ＰＥＧ、ベンジルアルコール、カルボポール、キトサン、Ｎ−トリメチルキトサン、メントール、およびこれらの組合せからなる群から選択される、前記〔１５〕に記載の方法。
〔１８〕前記局所用ビタミンＤ口腔サプリメント組成物の適用手段が、前記組成物でコーティングされた歯間デバイス、口腔ゲル、口腔軟膏、口腔ペースト、口腔ワニス、口腔シーラント、口腔リンス、口腔液、およびこれらの組合せからなる群から選択される、前記〔１５〕に記載の方法。
〔１９〕前記組成物が、前記組成物でコーティングされた歯科用具による毎日の局所投与と組み合わせて、ビタミンＤサプリメントゲルによって１日を通して繰り返し適用される、前記〔１５〕に記載の、ビタミンＤサプリメント組成物を局所投与することを含む、口腔炎症の治療方法。