(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（I）
【化１】
0006324956.tif 000047
［式中、
nは数字1または2を表し、かつ
Aは式
【化２】
0006324956.tif 000048
（式中、
＊は分子の残りとのそれぞれの付着点を表し、
L1は直鎖（C1〜C5）−アルカンジイルを表し、
xは数字1、2または3を表し、ここではこれらのCH2基の1つは−O−によって置き換えられていてもよく、
R1AおよびR1Bは互いに独立に、水素またはメチルを表し、
L2は結合または直鎖（C1〜C5）−アルカンジイルを表し、
Arは最大で3個のN、OおよびSからなる群のヘテロ原子を有する5−もしくは6員ヘテロアリールを表し、
R2はフッ素、塩素、臭素、シアノ、（C1〜C4）−アルキル、トリフルオロメチル、（C1〜C4）−アルコキシおよびトリフルオロメトキシからなる群から選択される置換基を表し、
pは数字0、1または2を表し、
ここでは置換基R2が2回生じる場合、それぞれの意味は同一であっても異なっていてもよく、
L3は結合、−O−、−CH2−、−CH2−CH2−または−CH＝CH−を表し、
R3は、フッ素、塩素、臭素、シアノ、（C1〜C4）−アルキル、トリフルオロメチル、（C1〜C4）−アルコキシおよびトリフルオロメトキシからなる群から選択される置換基を表し、かつ
R4は、水素またはフッ素、塩素、臭素、シアノ、（C1〜C4）−アルキル、トリフルオロメチル、（C1〜C4）−アルコキシおよびトリフルオロメトキシからなる群から選択される置換基を表す）
の基を表す］
の化合物、ならびにその塩、溶媒和物および塩の溶媒和物。
【請求項２】
請求項1に記載の前記式（I）
［式中、
nは数字1または2を表し、かつ
Aは式
【化３】
0006324956.tif 000049
（式中、
＊は分子の残りとのそれぞれの付着点を表し、
L1は直鎖（C2〜C4）−アルカンジイルを表し、
xは数字1または2を表し、ここではこれらのCH2基の1つは−O−によって置き換えられていてもよく、
L3は結合または−CH2−CH2−を表し、
R3は、フッ素、塩素、シアノ、（C1〜C4）−アルキルおよびトリフルオロメチルからなる群から選択される置換基を表し、かつ
R4は、水素またはフッ素、塩素、シアノ、（C1〜C4）−アルキルおよびトリフルオロメチルからなる群から選択される置換基を表す）
の基を表す］
の化合物、ならびにその塩、溶媒和物および塩の溶媒和物。
【請求項３】
式（II）
【化４】
0006324956.tif 000050
（式中、
nは請求項1または2に示される意味を有し、かつ
T1およびT2は同一であるまたは異なり、（C1〜C4）−アルキルを表す）
の化合物を、塩基の存在下で式（III）
【化５】
0006324956.tif 000051
（式中、
Aは請求項1または2に示される意味を有し、かつ
X1は脱離基を表す）
の化合物と反応させて、式（IV）
【化６】
0006324956.tif 000052
（式中、
n、A、T1およびT2はそれぞれ上に示される意味を有する）
の化合物を得て、次いで、これをエステル基−C（O）OT1および−C（O）OT2の加水分解によって前記式（I）の対応するジカルボン酸に変換し、
前記得られた前記式（I）の化合物を場合によりそのエナンチオマーおよび／またはジアステレオマーに分離する、ならびに／あるいは場合により適当な（i）溶媒および／または（ii）塩基もしくは酸と反応させて、その溶媒和物、塩および／または塩の溶媒和物を得ることを特徴とする、請求項1または2に記載の前記式（I）の化合物を調製する方法。
【請求項４】
疾患を治療および／または予防するための請求項1または2に記載の化合物。
【請求項５】
心不全、狭心症、高血圧、肺高血圧、血栓塞栓性障害、虚血、血管障害、微小循環障害、腎機能不全、線維性障害および動脈硬化を治療および／または予防する方法に使用するための請求項1または2に記載の化合物。
【請求項６】
心不全、狭心症、高血圧、肺高血圧、血栓塞栓性障害、虚血、血管障害、微小循環障害、腎機能不全、線維性障害および動脈硬化を治療および／または予防するための医薬を製造するための請求項1または2に記載の化合物の使用。
【請求項７】
請求項1または2に記載の化合物を、1種または複数の不活性な、非毒性の薬学的に適した賦形剤と組み合わせて含む医薬。
【請求項８】
請求項1または2に記載の化合物を、有機硝酸塩、NO供与体、cGMP−PDE阻害剤、グアニル酸シクラーゼの刺激物質、抗血栓薬、降圧剤および脂質代謝調節剤からなる群から選択される1種または複数のさらなる活性化合物と組み合わせて含む医薬。
【請求項９】
心不全、狭心症、高血圧、肺高血圧、血栓塞栓性障害、虚血、血管障害、微小循環障害、腎機能不全、線維性障害および動脈硬化を治療および／または予防するための請求項7または8に記載の医薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、新規な置換アミノインダン−およびアミノテトラリンカルボン酸、その調製法、疾患を治療および／または予防するためのその使用、ならびに疾患を治療および／または予防するため、特に心血管および心肺疾患を治療および／または予防するための医薬を製造するためのその使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
哺乳動物細胞で最も重要な細胞伝達系の1つに環状グアノシン一リン酸（cGMP）がある。これは、内皮から放出され、ホルモンおよびメカニカルシグナルを伝送する一酸化窒素（NO）と共にNO／cGMP系を形成する。グアニル酸シクラーゼは、グアノシン三リン酸（GTP）からのcGMPの生合成を触媒する。現在までに知られているこのファミリーの代表的なものを、構造的特徴またはリガンドの型によって2つのグループに分類することができる：ナトリウム利尿ペプチドによって刺激され得る粒子状グアニル酸シクラーゼ、およびNOによって刺激され得る可溶性グアニル酸シクラーゼ。可溶性グアニル酸シクラーゼは2つのサブユニットからなり、おそらくヘテロ二量体1個当たりヘム1個を含有し、ヘムは制御中心の一部である。これが活性化機構にとって非常に重要である。NOはヘムの鉄原子に結合し、したがって、酵素の活性を著しく増加させることができる。対照的に、ヘム欠失型調製物は、NOによって刺激され得ない。一酸化炭素（CO）はヘムの中心鉄原子に攻撃することができるが、COによる刺激はNOによる刺激よりはるかに小さい。
【０００３】
cGMPを形成することによって、および結果として生じるホスホジエステラーゼ、イオンチャネルおよびプロテインキナーゼの制御のために、グアニル酸シクラーゼは種々の生理学的過程、特に、平滑筋細胞の弛緩および増殖、血小板凝集および血小板粘着、ならびに神経シグナル伝達、また上記過程の破壊に基づく障害においても重要な役割を果たす。病態生理学的条件下で、NO／cGMP系を抑制することができ、これによって、例えば、高血圧、血小板活性化、細胞増殖増加、内皮機能不全、粥状動脈硬化、狭心症、心不全、血栓症、脳卒中および心筋梗塞がもたらされ得る。
【０００４】
予測される高い有効性および低レベルの副作用のために、生物のcGMPシグナル経路の影響を標的化することによるこのような障害の可能なNO非依存性治療は有望な手法である。
【０００５】
今まで、可溶性グアニル酸シクラーゼの治療的刺激のために、その効果がNOに基づく有機硝酸塩などの化合物がもっぱら使用されてきた。後者は生物変換によって形成され、ヘムの中心鉄原子の攻撃によって可溶性グアニル酸シクラーゼを活性化する。副作用に加えて、耐容性の発達がこの治療様式の重大な欠点の1つである［O. V. Evgenov等、Nature Rev. Drug Disc. 5（2006）、755］。
【０００６】
可溶性グアニル酸シクラーゼを直接、すなわち、NOの先の放出なしに刺激する物質が近年同定されている。インダゾール誘導体YC−1が最初に記載されたNO非依存性であるがヘム依存性のsGC刺激物質であった［Evgenov等、同上］。YC−1に基づいて、YC−1より強力で、かつホスホジエステラーゼ（PDE）の関連する阻害を示さないさらなる物質が発見された。これにより、ピラゾロピリジン誘導体BAY41−2272、BAY41−8543およびBAY63−2521が同定された。これらの化合物は、近年公開された構造的に異なる物質CMF−1571およびA−350619と共に、sGC刺激物質の新規なクラスを形成している［Evgenov等、同上］。この物質のクラスに共通する特徴は、ヘム含有sGCのNO非依存性のかつ選択的な活性化である。さらに、sGC刺激物質はNOと組み合わせて、ニトロシル−ヘム錯体の安定化に基づいてsGC活性化に相乗効果をもたらす。sGCにおけるsGC刺激物質の正確な結合部位はまだ議論されている。ヘム基を可溶性グアニル酸シクラーゼから除去しても、酵素はまだ検出可能な触媒基礎活性を有する、すなわち、従来通り、cGMPが形成される。ヘム欠失型酵素の残りの触媒基礎活性は、上記刺激物質のいずれによっても刺激することができない［Evgenov等、同上］。
【０００７】
さらに、NO−およびヘム−非依存性sGC活性化物質が同定され、BAY58−2667がこのクラスの原型である。これらの物質に共通の特徴は、これらの物質は、NOと組み合わせると、酵素活性化に相加効果しか有さないこと、および酸化型またはヘム欠失型酵素の活性化はヘム含有型酵素の活性化よりも著しく強力であることである［Evgenov等、同上；J. P. Stasch等、Br. J. Pharmacol. 136（2002）、773；J. P. Stasch等、J. Clin. Invest. 116（2006）、2552］。BAY58−2667が弱化した鉄−ヒスチジン結合の結果として、sGCと弱くしか結合していない酸化ヘム基に置き換わることが分光学研究から明らかである。特徴的なsGCヘム結合モチーフTyr−x−Ser−x−Argがヘム基の負に帯電したプロピオン酸の相互作用とBAY58−2667の活性の両方にとって必須であることも示されている。この背景に対して、BAY58−2667のsGCとの結合部位は、ヘム基の結合部位と同一であると仮定されている［J. P. Stasch等、J. Clin. Invest. 116（2006）、2552］。
【０００８】
本発明に記載される化合物も同様に可溶性グアニル酸シクラーゼのヘム欠失型を活性化することができる。このことは、第1に、これらの新規な活性化物質がヘム含有型酵素でNOとの相乗効果を示さないという事実、および第2に、その作用は可溶性グアニル酸シクラーゼのヘム依存性阻害剤、1H−1，2，4−オキサジアゾロ［4，3−a］キノキサリン−1−オン（ODQ）によって遮断することができないが、この阻害剤によって増強すらされるという事実によっても確認される［O. V. Evgenov等、Nature Rev. Drug Disc. 5（2006）、755；J. P. Stasch等、J. Clin. Invest. 116（2006）、2552参照］。
【０００９】
したがって、上記様式で可溶性グアニル酸シクラーゼの活性化物質として作用し、特に心血管および心肺障害を治療および予防するためにそれ自体として使用することができる新規な化合物を提供することが本発明の目的であった。
【００１０】
心血管障害を治療するための種々のアミノジカルボン酸誘導体が特許出願国際公開第01／19780−A2号パンフレット、国際公開第02／070459−A1号パンフレット、国際公開第02／070460−A1号パンフレット、国際公開第02／070461−A1号パンフレット、国際公開第02／070462−A1号パンフレットおよび国際公開第02／070510−A2号パンフレットから知られている。国際公開第95／18617−A1号パンフレットおよび国際公開第00／35882−A1号パンフレットは、神経障害を治療するための1−アミノインダンおよび1−アミノテトラリン誘導体を記載している。国際公開第2006／104826−A2号パンフレットは、糖尿病を治療するためのグルカゴン受容体拮抗薬としてN−アシル化1−アミノインダン−5−カルボキサミドおよび1−アミノテトラリン−6−カルボキサミドを開示している。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１１】
【特許文献１】国際公開第01／19780−A2号
【特許文献２】国際公開第02／070459−A1号
【特許文献３】国際公開第02／070460−A1号
【特許文献４】国際公開第02／070461−A1号
【特許文献５】国際公開第02／070462−A1号
【特許文献６】国際公開第02／070510−A2号
【特許文献７】国際公開第95／18617−A1号
【特許文献８】国際公開第00／35882−A1号
【特許文献９】国際公開第2006／104826−A2号
【非特許文献】
【００１２】
【非特許文献１】O. V. Evgenov等、Nature Rev. Drug Disc. 5（2006）、755
【非特許文献２】J. P. Stasch等、Br. J. Pharmacol. 136（2002）、773
【非特許文献３】J. P. Stasch等、J. Clin. Invest. 116（2006）、2552
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本発明は、一般式（I）
【化１】
0006324956.tif 000002
（式中、
nは数字1または2を表し、かつ
Aは式
【化２】
0006324956.tif 000003
［式中、
＊は分子の残りとのそれぞれの付着点を表し、
L1は直鎖（C1〜C5）−アルカンジイルを表し、
xは数字1、2または3を表し、ここではこれらのCH2基の1つは−O−によって置き換えられていてもよく、
R1AおよびR1Bは互いに独立に、水素またはメチルを表し、
L2は結合または直鎖（C1〜C5）−アルカンジイルを表し、
Arはフェニルまたは最大で3個のN、OおよびSからなる群のヘテロ原子を有する5−もしくは6員ヘテロアリールを表し、
R2はフッ素、塩素、臭素、シアノ、（C1〜C4）−アルキル、トリフルオロメチル、（C1〜C4）−アルコキシおよびトリフルオロメトキシからなる群から選択される置換基を表し、
pは数字0、1または2を表し、
ここでは置換基R2が2回生じる場合、それぞれの意味は同一であっても異なっていてもよく、
L3は結合、−O−、−CH2−、−CH2−CH2−または−CH＝CH−を表し、かつ
R3およびR4は互いに独立に、水素またはフッ素、塩素、臭素、シアノ、（C1〜C4）−アルキル、トリフルオロメチル、（C1〜C4）−アルコキシおよびトリフルオロメトキシからなる群から選択される置換基を表す）
の基を表す］
の化合物、ならびにその塩、溶媒和物および塩の溶媒和物を提供する。
【００１４】
本発明による化合物は、式（I）によって包含されかつ以下に言及される化合物が既に塩、溶媒和物および塩の溶媒和物ではない場合には、式（I）の化合物ならびにその塩、溶媒和物および塩の溶媒和物、以下に言及される式の式（I）によって包含される化合物ならびにその塩、溶媒和物および塩の溶媒和物、および式（I）によって包含されかつ実施例として以下に言及される化合物ならびにその塩、溶媒和物および塩の溶媒和物である。
【００１５】
本発明の文脈中で好ましい塩は、本発明による化合物の生理学的に許容される塩である。それ自体は薬学的用途に適していないが、例えば、本発明による化合物の単離、精製または貯蔵のために使用することができる塩も包含される。
【００１６】
本発明の化合物の生理学的に許容される塩には、慣用的な鉱酸、カルボン酸およびスルホン酸の酸付加塩、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、トルエンスルホン酸、ナフタレンジスルホン酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸、乳酸、酒石酸、リンゴ酸、クエン酸、フマル酸、マレイン酸および安息香酸の塩が含まれる。
【００１７】
本発明の化合物の生理学的に許容される塩には、従来の塩基の塩、例としておよび好ましくは、アルカリ金属塩（例えば、ナトリウムおよびカリウム塩）、アルカリ土類金属塩（例えば、カルシウムおよびマグネシウム塩）ならびにアンモニアまたは1〜16個の炭素原子を有する有機アミン、例としておよび好ましくは、エチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、N，N−エチルジイソプロピルアミン、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、ジメチルアミノエタノール、ジエチルアミノエタノール、プロカイン、ジシクロヘキシルアミン、ジベンジルアミン、N−メチルピペリジン、N−メチルモルホリン、アルギニン、リジンおよび1，2−エチレンジアミンから得られるアンモニウム塩も含まれる。
【００１８】
本発明の文脈中の溶媒和物は、溶媒分子による配位によって固体または液体状態で複合体を形成する本発明による化合物の形態として記載される。水和物は、配位が水によるものである溶媒和物の特定の形態である。本発明の文脈中で好ましい溶媒和物は水和物である。
【００１９】
本発明による化合物は、その構造に応じて、異なる立体異性体型で、すなわち、立体配置異性体の形態でまたは場合により配座異性体（エナンチオマーおよび／またはジアステレオマー、アトロプ異性体の場合のものを含む）として存在し得る。そのため、本発明は、エナンチオマーおよびジアステレオマー、ならびにこれらのそれぞれの混合物を包含する。立体異性的に均質な構成物を既知の様式でエナンチオマーおよび／またはジアステレオマーのこのような混合物から単離することができ、好ましくは、クロマトグラフィー法、特に、アキラルまたはキラル相でのHPLCクロマトグラフィーがこの目的のために使用される。
【００２０】
本発明による化合物が互変異性体型で生じ得る場合、本発明は全ての互変異性体型を包含する。
【００２１】
本発明はまた、本発明による化合物の全ての適当な同位体変異型も包含する。本発明による化合物の同位体変異型は、ここでは、本発明による化合物内の少なくとも1個の原子が、同じ原子番号であるが、自然界で通常または主に生じる原子質量とは異なる原子質量を有する別の原子に交換された化合物を意味するものとして理解される。本発明による化合物に組み込まれ得る同位体の例には、水素、炭素、窒素、酸素、リン、硫黄、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素の同位体、例えば、2H（重水素）、3H（トリチウム）、13C、14C、15N、17O、18O、32P、33P、33S、34S、35S、36S、18F、36Cl、82Br、123I、124I、129Iおよび131Iがある。本発明による化合物の特定の同位体変異型、特に、1個または複数の放射性同位元素が組み込まれたものは、比較的容易な準備性および検出性のために、例えば、作用機序または体内の活性化合物を調査するのに有益となり得、特に、3Hまたは14C同位体で標識された化合物がこの目的に適している。さらに、同位体、例えば、重水素の組み込みは、化合物のより大きな代謝安定性の結果として特定の治療上の利益、例えば、体内での半減期の延長または必要とされる活性剤用量の減少をもたらすことができるので、本発明による化合物のこのような修飾はまた、いくつかの場合で、本発明の好ましい実施形態を構成し得る。本発明による化合物の同位体変異型は、当業者に知られている一般的に慣用的な方法によって、例えば、以下に記載される方法および実施例で報告される手順によって、その中の特定の試薬および／または出発化合物の対応する同位体による修飾を用いて調製することができる。
【００２２】
さらに、本発明はまた、本発明による化合物のプロドラッグも包含する。「プロドラッグ」という用語は、ここでは、それ自体は生物学的に活性であっても不活性であってもよいが、体内に存在する間に、例えば、代謝または加水分解経路によって本発明による化合物に変換される化合物を指す。
【００２３】
本発明は、プロドラッグとして、特に本発明による式（I）のカルボン酸の加水分解性エステルを含む。これらは、以下に記載される生物学的試験の条件下、特にインビボで、酵素または化学経路によって、生理学的媒体中で、主に生物学的に活性な化合物としての、遊離カルボン酸に加水分解され得るエステルを意味するものとして理解されるべきである。アルキル基が直鎖であっても分岐であってもよい（C1〜C4）−アルキルエステルがこのようなエステルとして好ましい。メチル、エチルまたはtert−ブチルエステルが特に好ましい。
【００２４】
本発明の文脈中、特に指定しない限り、置換基は以下の通り定義される：
【００２５】
本発明の文脈中、（C1〜C4）−アルキルは、1〜4個の炭素原子を有する直鎖または分岐アルキル基を表す。好ましい例としては、メチル、エチル、n−プロピル、イソプロピル、n−ブチル、イソブチル、sec−ブチルおよびtert−ブチルが挙げられる。
【００２６】
本発明の文脈中の（C1〜C5）−アルカンジイル、（C1〜C4）−アルカンジイルおよび（C2〜C4）−アルカンジイルは、それぞれ1〜5個、1〜4個および2〜4個の炭素原子を有する直鎖のα，ω−二価アルキル基を表す。好ましい例としては、メチレン、エタン−1，2−ジイル（1，2−エチレン）、プロパン−1，3−ジイル（1，3−プロピレン）、ブタン−1，4−ジイル（1，4−ブチレン）およびペンタン−1，5−ジイル（1，5−ペンチレン）が挙げられる。
【００２７】
本発明の文脈中の（C1〜C4）−アルコキシは、1〜4個の炭素原子を有する直鎖または分岐アルコキシ基を表す。好ましい例としては、メトキシ、エトキシ、n−プロポキシ、イソプロポキシ、n−ブトキシ、イソブトキシ、sec−ブトキシおよびtert−ブトキシが挙げられる。
【００２８】
本発明の文脈中の5−または6員ヘテロアリールは、計5個または6個の環原子を有し、最大で3個のN、OおよびSからなる群から選択される同一のまたは異なる環ヘテロ原子を含有し、かつ環炭素原子を介してまたは場合により環窒素原子を介して結合している芳香族複素環（複素芳香族）を表す。好ましい例としては、フリル、ピロリル、チエニル、ピラゾリル、イミダゾリル、1，2−オキサゾリル（イソオキサゾリル）、1，3−オキサゾリル、1，2−チアゾリル（イソチアゾリル）、1，3−チアゾリル、1，2，3−トリアゾリル、1，2，4−トリアゾリル、1，2，4−オキサジアゾリル、1，3，4−オキサジアゾリル、1，2，4−チアジアゾリル、1，3，4−チアジアゾリル、ピリジル、ピリミジニル、ピリダジニル、ピラジニル、1，2，4−トリアジニルおよび1，3，5−トリアジニルが挙げられる。
【００２９】
本発明の文脈中、2回以上生じる全ての基について、その意味は他と独立していることが事実である。本発明による化合物中の基が置換されている場合、特に指定しない限り、基は一置換されていても多置換されていてもよい。1個または2個の同一のもしくは異なる置換基による置換が好ましい。1個の置換基による置換が特に好ましい。
【発明を実施するための形態】
【００３０】
本発明の特定の実施形態は、式（I）
（式中、
nは数字2を表し、かつ
Aは上に示される意味を有する）
の化合物、ならびにその塩、溶媒和物および塩の溶媒和物を含む。
本発明のさらなる特定の実施形態は、式（I）
［式中、
nは数字1または2を表し、かつ
Aは式
【化３】
0006324956.tif 000004
（式中、
＊は分子の残りとの付着点を表し、
L1は直鎖（C1〜C4）−アルカンジイルを表し、かつ
xは数字1または2を表し、ここではこれらのCH2基の1つは−O−によって置き換えられていてもよい）
の基を表す］
の化合物、ならびにその塩、溶媒和物および塩の溶媒和物を含む。
【００３１】
本発明のさらなる特定の実施形態は、式（I）
［式中、
nは数字1または2を表し、かつ
Aは式
【化４】
0006324956.tif 000005
（式中、
＊は分子の残りとの付着点を表し、
L2は結合または直鎖（C1〜C4）−アルカンジイルを表し、
Arはフェニルを表し、
R2はフッ素、塩素、シアノ、（C1〜C4）−アルキルおよびトリフルオロメチルからなる群から選択される置換基を表し、かつ
pは数字0、1または2を表し、
ここでは置換基R2が2回生じる場合、それぞれの意味は同一であっても異なっていてもよい）
の基を表す］
の化合物、ならびにその塩、溶媒和物および塩の溶媒和物を含む。
【００３２】
本発明のさらなる特定の実施形態は、式（I）
（式中、
nは数字1または2を表し、かつ
Aは式
【化５】
0006324956.tif 000006
［式中、
＊は分子の残りとの付着点を表し、
L3は結合、−CH2−CH2−または−CH＝CH−を表し、かつ
R3およびR4は互いに独立に、水素またはフッ素、塩素、シアノ、（C1〜C4）−アルキルおよびトリフルオロメチルからなる群から選択される置換基を表す）
の基を表す］
の化合物、ならびにその塩、溶媒和物および塩の溶媒和物を含む。
【００３３】
本発明の文脈中、式（I）
［式中、
nは数字1または2を表し、かつ
Aは式
【化６】
0006324956.tif 000007
（式中、
＊は分子の残りとのそれぞれの付着点を表し、
L1は直鎖（C2〜C4）−アルカンジイルを表し、
xは数字1または2を表し、ここではこれらのCH2基の1つは−O−によって置き換えられていてもよく、
L2は結合または直鎖（C1〜C4）−アルカンジイルを表し、
Arはフェニルを表し、
R2はフッ素、塩素、シアノ、（C1〜C4）−アルキルおよびトリフルオロメチルからなる群から選択される置換基を表し、
pは数字0または1を表し、
L3は結合または−CH2−CH2−を表し、かつ
R3およびR4は互いに独立に、水素またはフッ素、塩素、シアノ、（C1〜C4）−アルキルおよびトリフルオロメチルからなる群から選択される置換基を表す）
の基を表す］
の化合物、ならびにその塩、溶媒和物および塩の溶媒和物が好ましい。
【００３４】
本発明の文脈中、式（I）
［式中、
nは数字1または2を表し、かつ
Aは式
【化７】
0006324956.tif 000008
（式中、
＊は分子の残りとのそれぞれの付着点を表し、かつ
R2はメチル、エチル、イソプロピルまたはtert−ブチルを表す）
の基を表す］
の化合物、ならびにその塩、溶媒和物および塩の溶媒和物が特に好ましい。
【００３５】
基の特定の組み合わせまたは好ましい組み合わせ中で指定される個々の基の定義はまた、指定される基の特定の組み合わせと独立に、他の組み合わせの基の定義によって所望の通り置き換えられる。
【００３６】
上記好ましい範囲の2つ以上の組み合わせが極めて特に好ましい。
【００３７】
本発明は、式（II）
【化８】
0006324956.tif 000009
（式中、
nは上に示される意味を有し、かつ
T1およびT2は同一であるまたは異なり、（C1〜C4）−アルキルを表す）
の化合物を、塩基の存在下で式（III）
【化９】
0006324956.tif 000010
（式中、
Aは上に示される意味を有し、かつ
X1は脱離基、例えば、塩素、臭素、ヨウ素、メシレート、トリフレートまたはトシレートを表す）
の化合物と反応させて、式（IV）
【化１０】
0006324956.tif 000011
（式中、
n、A、T1およびT2はそれぞれ上に示される意味を有する）
の化合物を得て、次いで、これをエステル基−C（O）OT1および−C（O）OT2の加水分解によって式（I）の対応するジカルボン酸に変換し、
得られた式（I）の化合物を場合によりそのエナンチオマーおよび／またはジアステレオマーに分離する、ならびに／あるいは場合により適当な（i）溶媒および／または（ii）塩基もしくは酸と反応させて、その溶媒和物、塩および／または塩の溶媒和物を得ることを特徴とする、本発明による式（I）の化合物を調製する方法をさらに提供する。
【００３８】
プロセスステップ（II）＋（III）→（IV）に適した不活性溶媒は、例えば、エーテル（ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、メチルtert−ブチルエーテル、テトラヒドロフラン、1，4−ジオキサン、1，2−ジメトキシエタンもしくはビス（2−メトキシエチル）エーテルなど）、炭化水素（ベンゼン、トルエン、キシレン、ペンタン、ヘキサン、ヘプタン、シクロヘキサンもしくは鉱油留分など）、または双極性非プロトン溶媒（アセトン、メチルエチルケトン、アセトニトリル、N，N−ジメチルホルムアミド（DMF）、N，N−ジメチルアセトアミド（DMA）、ジメチルスルホキシド（DMSO）、N，N’−ジメチルプロピレン尿素（DMPU）もしくはN−メチルピロリジノン（NMP）など）である。これらの溶媒の混合物を使用することも可能である。アセトニトリルまたはジメチルホルムアミドを使用することが好ましい。
【００３９】
プロセスステップ（II）＋（III）→（IV）に適した塩基は、特に、アルカリ金属炭酸塩（炭酸ナトリウム、炭酸カリウムもしくは炭酸セシウムなど）、アルカリ金属アルコキシド（ナトリウムメトキシドもしくはカリウムメトキシド、ナトリウムエトキシドもしくはカリウムエトキシドまたはナトリウムtert−ブトキシドもしくはカリウムtert−ブトキシドなど）、アルカリ金属水素化物（水素化ナトリウムもしくは水素化カリウムなど）、アミド（ナトリウムアミド、リチウムビス（トリメチルシリル）アミドもしくはカリウムビス（トリメチルシリル）アミドもしくはリチウムジイソプロピルアミドなど）、または有機金属化合物（n−ブチルリチウムもしくはフェニルリチウムなど）である。使用される塩基は、好ましくは炭酸ナトリウム、炭酸カリウムまたは炭酸セシウムである。適当であれば、アルキル化触媒、例えば、臭化リチウム、ヨウ化ナトリウム、ヨウ化カリウム、テトラ−n−ブチルアンモニウムブロミドまたはベンジルトリエチルアンモニウムクロリドを添加することが有利である。
【００４０】
反応（II）＋（III）→（IV）は、一般的に、0℃〜＋150℃の温度範囲、好ましくは＋20℃〜＋100℃で行う。
【００４１】
プロセスステップ（IV）→（I）におけるエステル基−C（O）OT1および−C（O）OT2の加水分解は、慣用的な方法を用いて、不活性溶媒中でエステルを酸または塩基で処理することによって行い、後者の変形では、最初に形成した塩を、酸で処理することによって遊離カルボン酸に変換する。tert−ブチルエステルの場合、好ましくは酸を用いてエステル開裂を行う。
【００４２】
異なる基T1およびT2の場合、加水分解を場合によりワンポット反応で同時にまたは2つの別々の反応ステップで行うことができる。
【００４３】
これらの反応に適した不活性溶媒は、水またはエステル開裂のための慣用的な有機溶媒である。これらには、好ましくはアルコール（メタノール、エタノール、n−プロパノール、イソプロパノール、n−ブタノールもしくはtert−ブタノールなど）、エーテル（ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、1，4−ジオキサンもしくは1，2−ジメトキシエタンなど）、または他の溶媒（ジクロロメタン、アセトン、メチルエチルケトン、N，N−ジメチルホルムアミドもしくはジメチルスルホキシドなど）が含まれる。これらの溶媒の混合物を使用することも等しく可能である。塩基性エステル加水分解の場合、水とジオキサン、テトラヒドロフラン、メタノール、エタノール、ジメチルホルムアミドおよび／またはジメチルスルホキシドの混合物を使用することが好ましい。トリフルオロ酢酸を用いる反応の場合、ジクロロメタンを用いることが好ましく、塩化水素を用いる反応の場合、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル、ジオキサンまたは水を用いることが好ましい。
【００４４】
適当な塩基は慣用的な無機塩基である。これらには、特に、アルカリ金属もしくはアルカリ土類金属水酸化物、例えば、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムもしくは水酸化バリウム、またはアルカリ金属もしくはアルカリ土類金属炭酸塩、例えば、炭酸ナトリウム、炭酸カリウムもしくは炭酸カルシウムが含まれる。水酸化リチウム、水酸化ナトリウムまたは水酸化カリウムが好ましい。
【００４５】
エステル開裂に適した酸は、一般的に、場合により水を添加した、硫酸、塩化水素／塩酸、臭化水素／臭化水素酸、リン酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸もしくはトリフルオロメタンスルホン酸、またはこれらの混合物である。tert−ブチルエステルの場合、塩化水素またはトリフルオロ酢酸が好ましく、メチルエステルの場合、塩酸が好ましい。
【００４６】
エステル加水分解は、一般的に、−20℃〜＋120℃の温度範囲、好ましくは0℃〜＋80℃で行う。
【００４７】
上記プロセスステップは、大気圧、高圧または減圧（例えば、0.5〜5barの範囲）で行うことができ、一般に、反応はそれぞれ大気圧で行う。
【００４８】
その一部について、式（II）の化合物は、式（V）
【化１１】
0006324956.tif 000012
（式中、
nおよびT1は上に示される意味を有する）
のケト化合物を、還元的アミノ化で2−（2−メトキシフェニル）エチルアミン（VI）
【化１２】
0006324956.tif 000013
と反応させて、式（VII）
【化１３】
0006324956.tif 000014
（式中、
nおよびT1は上に示される意味を有する）
の二級アミンを得て、
次いで、塩基の存在下で式（VIII）
【化１４】
0006324956.tif 000015
（式中、
T2は上に示される意味を有し、かつ
X2は塩素、臭素またはヨウ素を表す）
の5−ハロ吉草酸エステルを用いてアルキル化して、式（IX）
【化１５】
0006324956.tif 000016
（式中、
n、T1およびT2はそれぞれ上に示される意味を有する）
の三級アミンを得て、次いで、三臭化ホウ素または臭化水素による処理によってフェノールメチルエーテル基を除去することによって、調製することができる。
【００４９】
反応（V）＋（VI）→（VII）は、場合により触媒としての酸および／または脱水剤の存在下、還元的アミノ化に慣用的であり、かつ反応条件下で不活性の溶媒中で行う。これらの溶媒には、例えば、テトラヒドロフラン、トルエン、ジクロロメタン、1，2−ジクロロエタン、N，N−ジメチルホルムアミドおよびアルコール、例えば、メタノール、エタノール、n−プロパノールまたはイソプロパノールが含まれ、このような溶媒の混合物を使用することも可能である。メタノールまたはエタノールを使用することが好ましい。適当な触媒は、酢酸またはp−トルエンスルホン酸などの慣用的な有機酸である。
【００５０】
これらのアミノ化反応に適した還元剤は、特に、水素化ホウ素、例えば、水素化ホウ素ナトリウム、シアノ水素化ホウ素ナトリウム、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウムまたは水素化ホウ素テトラ−n−ブチルアンモニウムであり、水素化ホウ素ナトリウムを使用することが好ましい。
【００５１】
反応（V）＋（VI）→（VII）は、一般的に、−20℃〜＋50℃、好ましくは0℃〜＋30℃の温度範囲で行う。
【００５２】
プロセスステップ（VII）＋（VIII）→（IX）中のアルキル化は、溶媒、塩基および温度に関して、反応（II）＋（III）→（IV）について上に記載されるのと同様の反応条件下で行う。ここでは、使用される好ましい塩基および溶媒は、それぞれ、アルカリ金属炭酸塩およびアセトニトリルである。アルキル化は、一般的に、＋50℃〜＋100℃の温度範囲で行う。
【００５３】
プロセスステップ（IX）→（II）におけるフェノールメチルエーテル基の開裂は、慣用的な方法により、−20℃〜＋10℃でジクロロメタン中、三臭化ホウ素による処理によって、または＋100℃〜＋130℃で氷酢酸もしくは水中、臭化水素の溶液と共に加熱することによって行う。これらの反応条件下で、エステル基−C（O）OT1および−C（O）OT2の全部またはいくつかも同時に開裂して式（X）
【化１６】
0006324956.tif 000017
（式中、
nは上に示される意味を有する）
の対応する遊離カルボン酸が得られる場合、これらを、例えば、塩化水素または塩化チオニルの存在下でメタノールまたはエタノールとその後反応させることによって再エステル化することができる。
【００５４】
上記反応は、大気圧、高圧または減圧（例えば、0.5〜5barの範囲）で行うことができ、一般に、反応はそれぞれ大気圧で行う。
【００５５】
本発明による化合物を対応するエナンチオマーおよび／またはジアステレオマーに分離することは、好都合であれば、化合物（II）、（IV）、（VII）、（IX）または（X）の段階でさえも行うことができ、次いで、これらを分離した形態で、上記プロセス順序にしたがってさらに反応させる。立体異性体のこのような分離は、当業者に知られている慣用的な方法で行うことができる。キラルまたはアキラル分離相でクロマトグラフィー法を使用することが好ましく、中間体または最終生成物としてのカルボン酸の場合には、キラル塩基を用いてジアステレオマー塩を介して分離を行ってもよい。
【００５６】
式（V）の化合物は、文献手順を用いて得ることができる［例えば、エチル1−オキソインダン−5−カルボキシレート（n＝1）については：R. TakeuchiおよびH. Yasue、J. Org. Chem. 1993、58（20）、5386〜5392；メチル5−オキソ−5，6，7，8−テトラヒドロナフタレン−2−カルボキシレート（n＝2）については：U. GerlachおよびT. Wollmann、Tetrahedron Lett. 1992、33（38）、5499〜5502参照］。
【００５７】
式（III）、（VI）および（VIII）の化合物は、商業的に入手可能である、または文献にそれ自体として記載されている、または文献に公開されている方法と同様に当業者に自明の方法で調製することができる。多数の詳細な手順は、出発化合物および中間体の調製についての節の実験部にも見出すことができる。
【００５８】
本発明による化合物の調製を、以下の反応スキームによって例として示すことができる：
スキーム1
【化１７】
0006324956.tif 000018
【００５９】
本発明による化合物は有用な薬理学的特性を有し、ヒトおよび動物の疾患を予防および治療するために使用することができる。
【００６０】
本発明の文脈中、「治療」または「治療すること」という用語は、疾患、状態、障害、傷害または健康問題、あるいはこのような状態および／またはこのような状態の症状の発達、経過または進行の阻害、遅延、確認、軽減、減弱、制限、低減、抑制、忌避または治癒を含む。「療法」という用語は、ここでは「治療」という用語と同義であると理解される。
【００６１】
「予防」、「予防法」および「妨害」という用語は、本発明の文脈中で同義的に使用され、疾患、状態、障害、傷害または健康問題、あるいはこのような状態および／またはこのような状態の症状の発達または前進を罹患する、経験する、患うまたは有するリスクの回避または低減を指す。
【００６２】
疾患、状態、障害、傷害または健康問題の治療または予防は部分的であっても完全であってもよい。
【００６３】
本発明による化合物は、可溶性グアニル酸シクラーゼの強力な活性化物質である。これらは、血管弛緩、血小板凝集阻害および血圧降下をもたらし、またこれらは冠血流量および微小循環を増加させる。これらの効果は、可溶性グアニル酸シクラーゼの直接的なヘム非依存性活性化およびcGMPの細胞内増加によって媒介される。
【００６４】
本発明による化合物は、心血管、肺、血栓塞栓性および線維性障害の治療および／または予防に特に適している。
【００６５】
したがって、本発明による化合物を、例えば、高血圧（高血圧）、心不全、冠動脈心疾患、安定および不安定狭心症、肺動脈高血圧（PAH）および他の型の肺高血圧（PH）、腎性高血圧、末梢および心臓血管障害、不整脈、心房性および心室性不整脈などの心血管障害、ならびに例えば、房室ブロックI〜III度、上室性頻脈性不整脈、心房細動、心房粗動、心室細動、心室粗動、心室性頻脈性不整脈、多形性心室頻拍、心房および心室期外収縮、房室接合部期外収縮、洞不全症候群、失神、房室結節性リエントリー性頻拍、ウォルフ・パーキンソン・ホワイト症候群、急性冠症候群（ACS）、自己免疫心臓障害（心膜炎、心内膜炎、弁膜炎、大動脈炎、心筋症）、ボクサー心筋症、動脈瘤、ショック（心原性ショック、敗血症性ショックおよびアナフィラキシーショックなど）などの伝導障害を治療および／または予防するため、さらに心筋虚血、心筋梗塞、脳卒中、心肥大、一過性および虚血性発作、子癇前症、炎症性心血管障害、冠動脈および末梢血管の攣縮、浮腫形成（例えば、肺浮腫、脳浮腫、腎性浮腫または心不全によって引き起こされる浮腫など）、末梢循環障害、再灌流障害、動脈および静脈血栓症、微量アルブミン尿、心筋不全、内皮機能不全、微小−および大血管性障害（血管炎）などの血栓塞栓性障害および虚血を治療および／または予防するため、また例えば、血栓溶解療法、経皮的血管形成術（PTA）、経皮的冠動脈形成術（PTCA）、心臓移植およびバイパス手術後の再狭窄を予防するための医薬に使用することができる。
【００６６】
本発明の文脈中、「心不全」という用語は、心不全の急性型と慢性型の両方、およびその特異的または関連疾患型、例えば、急性非代償性心不全、右心不全、左心不全、全体的不全、虚血性心筋症、拡張型心筋症、肥大型心筋症、突発性心筋症、先天性心疾患、心臓弁欠損、心臓弁欠損に伴う心不全、僧帽弁狭窄、僧帽弁閉鎖不全、大動脈弁狭窄、大動脈弁閉鎖不全、三尖弁狭窄、三尖弁閉鎖不全、肺動脈弁狭窄、肺動脈弁閉鎖不全、混合型心臓弁欠損、心筋炎症（心筋炎）、慢性心筋炎、急性心筋炎、ウイルス性心筋炎、糖尿病性心不全、アルコール性心筋症、心臓貯蔵障害ならびに拡張期および収縮期心不全も包含する。
【００６７】
さらに、本発明による化合物を、動脈硬化、脂質代謝障害、低リポ蛋白血症、脂質異常症、高トリグリセリド血症、高脂血症、混合型高脂血症、高コレステロール血症、無βリポ蛋白血症、シトステロール血症、黄色腫症、タンジール病、脂肪症、肥満およびメタボリックシンドロームを治療および／または予防するために使用することもできる。
【００６８】
本発明による化合物を、さらに一次性および二次性レイノー現象、微小循環障害、跛行、耳鳴り、末梢および自律神経ニューロパチー、糖尿病性細小血管症、糖尿病性網膜症、四肢の糖尿病性潰瘍、壊疽、CREST症候群、エリテマトーデス、爪真菌症およびリウマチ性障害を治療および／または予防するために使用することができる。
【００６９】
さらに、本発明による化合物を、臓器または組織への虚血−および／または再灌流−関連損傷を予防するために、また特に外科的介入のためまたは移植医療の分野で、ヒトまたは動物起源の臓器、臓器部分、組織または組織部分のための灌流および保存液のための添加剤として使用することができる。
【００７０】
本発明による化合物はまた、腎障害、特に腎機能不全および腎不全の治療および／または予防に適している。本発明の文脈中、「腎機能不全」および「腎不全」という用語は、その急性症状と慢性症状の両方、および根底にあるまたは関連する腎障害、例えば、異常に低下したクレアチニンおよび／または水分排泄、異常に上昇した尿素、窒素、カリウムおよび／またはクレアチニンの血中濃度、腎臓酵素、例えば、グルタミルシンテターゼの変化した活性、変化した尿浸透圧または尿量、上昇した微量アルブミン尿、マクロアルブミン尿（macroalbuminuria）、糸球体および細動脈上の病変、尿細管拡張、高リン酸塩血症ならびに／あるいは透析の必要性によって診断的に特徴づけられ得る、腎臓低灌流、透析低血圧、閉塞性尿路疾患、糸球体症、糸球体腎炎、急性糸球体腎炎、糸球体硬化症、尿細管間質疾患、腎症障害、例えば、原発性および先天性腎疾患、腎炎、免疫学的腎障害、例えば、腎移植拒絶反応および免疫複合体誘導腎障害、毒性物質によって誘導されるネフロパチー、造影剤によって誘導されるネフロパチー、糖尿病性および非糖尿病性ナフロパチー、腎盂腎炎、腎嚢胞、腎硬化症、高血圧性腎硬化症およびネフローゼ症候群を包含する。本発明はまた、腎機能不全の続発症、例えば、高血圧、肺浮腫、心不全、尿毒症、貧血、電解質障害（例えば、高カリウム血症、低ナトリウム血症）、ならびに骨および炭水化物代謝の障害を治療および／または予防するための本発明による化合物の使用を含む。
【００７１】
さらに、本発明による化合物は、泌尿生殖系の障害、例えば、良性前立腺症候群（BPS）、前立腺肥大症（BPH）、良性前立腺腫大（BPE）、膀胱下尿道閉塞（BOO）、下部尿路症状（LUTS）、神経性過活動膀胱（OAB）、失禁（例えば、混合型尿失禁、切迫性尿失禁、緊張性尿失禁または溢流性尿失禁（MUI、UUI、SUI、OUI）など）、骨盤痛、ならびに勃起不全および女性性機能不全の治療および／または予防にも適している。
【００７２】
本発明による化合物はまた、喘息性障害、慢性閉塞性肺疾患（COPD）、急性呼吸促迫症候群（ARDS）および急性肺傷害（ALI）、α1−抗トリプシン欠乏症（AATD）、肺線維症、肺気腫（例えば、タバコ煙誘導肺気腫）および嚢胞性線維症（CF）、ならびに肺動脈高血圧（PAH）および他の型の肺高血圧（PH）（左心不全、HIV、鎌状赤血球貧血、血栓塞栓症サルコイドーシス、COPDまたは肺線維症関連肺高血圧を含む）の治療および／または予防にも適している。
【００７３】
本発明に記載される化合物はまた、NO／cGMP系の障害によって特徴づけられる中枢神経系障害を制御するための活性化合物でもある。これらは、特に、軽度認知障害、加齢関連学習および記憶障害、加齢関連記憶喪失、血管性認知症、頭蓋脳損傷、脳卒中、脳卒中後に生じる認知症（脳卒中後認知症）、外傷後頭蓋脳損傷、一般的集中障害、学習および記憶の問題を有する小児における集中障害、アルツハイマー病、レビー小体型認知症、ピック症候群を含む前頭葉の変性を伴う認知症、パーキンソン病、進行性核麻痺、皮質基底核変性症を伴う認知症、筋萎縮性側索硬化症（ALS）、ハンチントン病、脱髄、多発性硬化症、視床変性症、クロイツフェルト・ヤコブ認知症、HIV認知症、認知症を伴う統合失調症またはコルサコフ精神病などの状況／疾患／症候群を伴って生じるものなどの、認知障害後の知覚、集中、学習または記憶を改善するのに適している。これらはまた、不安、緊張およびうつ状態、CNS関連性機能不全および睡眠障害などの中枢神経系障害の治療および／または予防、ならびに食物、刺激薬および習慣性物質の摂取の病理学的障害を制御するのにも適している。
【００７４】
本発明による化合物はさらに、脳血流量を制御するのにも適しているので、偏頭痛を制御する有効な薬剤に相当する。これらはまた、脳梗塞（脳溢血）の続発症、例えば、脳卒中、脳虚血および頭蓋脳損傷の予防および制御にも適している。本発明による化合物を疼痛状態を制御するために使用することもできる。
【００７５】
さらに、本発明による化合物は抗炎症作用を有するので、敗血症（SIRS）、多臓器不全（MODS、MOF）、腎臓の炎症性障害、慢性腸炎症（IBD、クローン病、潰瘍性大腸炎）、膵炎、腹膜炎、リウマチ様障害、炎症性皮膚障害および炎症性眼障害を治療および／または予防するための抗炎症薬剤として使用することができる。
【００７６】
さらに、本発明による化合物は、内臓、例えば、肺、心臓、腎臓、骨髄、特に肝臓の線維性障害、ならびに皮膚科学的線維症および線維性眼障害の治療および／または予防にも適している。本発明の文脈中、「線維性障害」という用語は、特に、肝線維症、肝硬変、肺線維症、心内膜心筋線維症、ネフロパチー、糸球体腎炎、間質性腎線維症、糖尿病から生じる線維性損傷、骨髄線維症および類似の線維性障害、強皮症、限局性強皮症、ケロイド、肥厚性瘢痕、母斑、糖尿病性網膜症、増殖性硝子体網膜症および結合組織の障害（例えば、サルコイドーシス）などの障害を含む。本発明による化合物を、創傷治癒を促進するために、例えば、緑内障手術の結果としての術後瘢痕を制御するために、および加齢または角質化皮膚のために美容的に使用することもできる。
【００７７】
本発明による化合物は、その特性プロファイルのために、心血管障害、例えば、心不全、狭心症、高血圧および肺高血圧、ならびに血栓塞栓性障害および虚血、血管障害、微小循環障害、腎機能不全、線維性障害および動脈硬化の治療および／または予防にも特に適している。
【００７８】
本発明は、障害、特に上記障害を治療および／または予防するための本発明の化合物の使用をさらに提供する。
【００７９】
本発明は、障害、特に上記障害を治療および／または予防するための医薬を製造するための本発明による化合物の使用をさらに提供する。
【００８０】
本発明は、障害、特に上記障害を治療および／または予防するための、本発明による化合物の少なくとも1種を含む医薬をさらに提供する。
【００８１】
本発明は、障害、特に上記障害を治療および／または予防する方法への本発明による化合物の使用をさらに提供する。
【００８２】
本発明は、有効量の本発明による化合物の少なくとも1種を使用する、障害、特に上記障害を治療および／または予防する方法をさらに提供する。
【００８３】
本発明による化合物は、単独で、または必要であれば、他の活性化合物と組み合わせて使用することができる。本発明は、特に上記障害を治療および／または予防するための、本発明の化合物の少なくとも1種と、1種または複数のさらなる有効成分とを含む医薬をさらに提供する。組み合わせに適した活性化合物の好ましい例としては以下が挙げられる：
有機硝酸塩およびNO供与体、例えば、ニトロプルシドナトリウム、ニトログリセリン、一硝酸イソソルビド、二硝酸イソソルビド、モルシドミンまたはSIN−1、および吸入NO；
環状グアノシン一リン酸（cGMP）および／または環状アデノシン一リン酸（cAMP）の分解を阻害する化合物、例えば、ホスホジエステラーゼ（PDE）1、2、3、4および／または5の阻害剤、特にロフルミラストもしくはレバミラストなどのPDE4阻害剤、およびシルデナフィル、バルデナフィル、タダラフィル、ウデナフィル、ダサンタフィル、アバナフィル、ミロデナフィルもしくはロデナフィルなどのPDE5阻害剤；
グアニル酸シクラーゼのNO非依存性であるがヘム依存性の刺激物質、例えば、特にリオシグアトならびに国際公開第00／06568号、国際公開第00／06569号、国際公開第02／42301号、国際公開第03／095451号、国際公開第2011／147809号、国際公開第2012／004258号、国際公開第2012／028647号および国際公開第2012／059549号に記載されている化合物；
プロスタサイクリン類似体およびIP受容体作動薬、例としておよび好ましくは、イロプロスト、ベラプロスト、トレプロスチニル、エポプロステノールまたはNS−304；
エンドセリン受容体拮抗薬、例としておよび好ましくは、ボセンタン、ダルセンタン、アンブリセンタンまたはシタキセンタン；
ヒト好中球エラスターゼ（HNE）を阻害する化合物、例としておよび好ましくは、シベレスタットまたはDX−890（レルトラン）；
特に、チロシンキナーゼ阻害剤の群からのシグナル伝達カスケードを阻害する化合物、例としておよび好ましくは、ダサチニブ、ニロチニブ、ボスチニブ、レゴラフェニブ、ソラフェニブ、スニチニブ、セディラニブ、アキシチニブ、テラチニブ、イマチニブ、ブリバニブ、パゾパニブ、バタラニブ、ゲフィチニブ、エルロチニブ、ラパチニブ、カネルチニブ、レスタウルチニブ、ペリチニブ、セマキサニブ、マシチニブまたはタンヅチニブ；
Rhoキナーゼ阻害化合物、例としておよび好ましくは、ファスジル、Y−27632、SLx−2119、BF−66851、BF−66852、BF−66853、KI−23095またはBA−1049；
例えば、慢性閉塞性肺疾患（COPD）または気管支喘息の療法に使用される抗閉塞剤、例えば、例としておよび好ましくは、吸入的にまたは全身的に投与されるβ−受容体模倣物または吸入的に投与される抗ムスカリン物質；
例えば、慢性閉塞性肺疾患（COPD）、気管支喘息または肺線維症の療法に使用される抗炎症および／または免疫抑制剤、例えば、例としておよび好ましくは、全身的にまたは吸入的投与される副腎皮質ステロイド；
化学療法剤、例えば、肺または他の臓器の新生物の療法に使用されるもの；
肺障害の全身および／または吸入治療のために、例えば、嚢胞性線維症（α1−抗トリプシン、アズトレオナム、イバカフトル、ルマカフトル、アタルレン、アミカシン、レボフロキサシン）、慢性閉塞性肺疾患（COPD）（LAS40464、PT003、SUN−101）、急性呼吸促迫症候群（ARDS）および急性肺傷害（ALI）（インターフェロンβ1a、トラウマカイン（traumakine））、閉塞型睡眠時無呼吸（VI−0521）、気管支拡張症（マンニトール、シプロフロキサシン）、閉塞性細気管支炎（シクロスポリン、アズトレオナム）および敗血症（パジバキシマブ、ボルベン、ART−123）のために使用される活性化合物；
例としておよび好ましくは、血小板凝集阻害剤、抗凝固薬または線維素溶解促進物質からなる群の抗血栓薬；
例としておよび好ましくは、カルシウム拮抗薬、アンジオテンシンAII拮抗薬、ACE阻害剤、エンドセリン拮抗薬、レニン阻害剤、α受容体遮断薬、β受容体遮断薬、ミネラルコルチコイド受容体拮抗薬および利尿剤からなる群の降圧活性化合物；および／または
例えばおよび好ましくは、甲状腺受容体作動薬、コレステロール合成阻害剤、例えば、例としておよび好ましくは、HMG−CoA還元酵素阻害剤またはスクアレン合成阻害剤、ACAT阻害剤、CETP阻害剤、MTP阻害剤、PPAR−α、PPAR−γおよび／またはPPAR−δ作動薬、コレステロール吸収阻害剤、リパーゼ阻害剤、重合胆汁酸吸着剤、胆汁酸再吸収阻害剤およびリポタンパク質拮抗薬からなる群の、脂質代謝を変化させる活性化合物。
【００８４】
抗血栓薬は、好ましくは血小板凝集阻害剤、抗凝固薬または線維素溶解促進物質からなる群の化合物を意味すると理解される。
【００８５】
本発明の好ましい実施形態では、本発明による化合物を、血小板凝集阻害剤、例としておよび好ましくは、アスピリン、クロピドグレル、チクロピジンまたはジピリダモールと組み合わせて投与する。
【００８６】
本発明の好ましい実施形態では、本発明による化合物を、トロンビン阻害剤、例としておよび好ましくは、キシメラガトラン、メラガトラン、ダビガトラン、ビバリルジンまたはクレキサンと組み合わせて投与する。
【００８７】
本発明の好ましい実施形態では、本発明による化合物を、GPIIb／IIIa拮抗薬、例としておよび好ましくは、チロフィバンまたはアブシキシマブと組み合わせて投与する。
【００８８】
本発明の好ましい実施形態では、本発明による化合物を、第Xa因子阻害剤、例としておよび好ましくは、リバロキサバン、アピキサバン、フィデキサバン、ラザキサバン、フォンダパリナックス、イドラパリナックスDU−176b、PMD−3112、YM−150、KFA−1982、EMD−503982、MCM−17、MLN−1021、DX9065a、DPC906、JTV803、SSR−126512またはSSR−128428と組み合わせて投与する。
【００８９】
本発明の好ましい実施形態では、本発明による化合物を、ヘパリンまたは低分子量（LMW）ヘパリン誘導体と組み合わせて投与する。
【００９０】
本発明の好ましい実施形態では、本発明による化合物を、ビタミンK拮抗薬、例としておよび好ましくは、クマリンと組み合わせて投与する。
【００９１】
降圧剤は、好ましくは、カルシウム拮抗薬、アンジオテンシンAII拮抗薬、ACE阻害剤、エンドセリン拮抗薬、レニン阻害剤、α受容体遮断薬、β受容体遮断薬、ミネラルコルチコイド受容体拮抗薬および利尿剤からなる群の化合物を意味すると理解される。
【００９２】
本発明の好ましい実施形態では、本発明による化合物を、カルシウム拮抗薬、例としておよび好ましくは、ニフェジピン、アムロジピン、ベラパミルまたはジルチアゼムと組み合わせて投与する。
【００９３】
本発明の好ましい実施形態では、本発明による化合物を、α1−受容体遮断薬、例としておよび好ましくは、プラゾシンと組み合わせて投与する。
【００９４】
本発明の好ましい実施形態では、本発明による化合物を、β受容体遮断薬、例としておよび好ましくは、プロプラノロール、アテノロール、チモロール、ピンドロール、アルプレノロール、オキシプレノロール、ペンブトロール、ブプラノロール、メチプラノロール、ナドロール、メピンドロール、カラザロール、ソタロール、メトプロロール、ベタキソロール、セリプロロール、ビソプロロール、カルテオロール、エスモロール、ラベタロール、カルベジロール、アダプロロール、ランジオロール、ネビボロール、エパノロールまたはブシンドロールと組み合わせて投与する。
【００９５】
本発明の好ましい実施形態では、本発明による化合物を、アンジオテンシンAII拮抗薬、例としておよび好ましくは、ロサルタン、カンデサルタン、バルサルタン、テルミサルタンまたはエンブルサタン（embursatan）と組み合わせて投与する。
【００９６】
本発明の好ましい実施形態では、本発明による化合物を、ACE阻害剤、例としておよび好ましくは、エナラプリル、カプロプリル、リシノプリル、ラミプリル、デラプリル、ホシノプリル、キノプリル、ペリンドプリルまたはトランドプリルと組み合わせて投与する。
【００９７】
本発明の好ましい実施形態では、本発明による化合物を、エンドセリン拮抗薬、例としておよび好ましくは、ボセンタン、ダルセンタン、アンブリセンタンまたはシタクスセンタンと組み合わせて投与する。
【００９８】
本発明の好ましい実施形態では、本発明による化合物を、レニン阻害剤、例としておよび好ましくは、アリスキレン、SPP−600またはSPP−800と組み合わせて投与する。
【００９９】
本発明の好ましい実施形態では、本発明による化合物を、ミネラルコルチコイド受容体拮抗薬、例としておよび好ましくは、スピロノラクトンまたはエプレレノンと組み合わせて投与する。
【０１００】
本発明の好ましい実施形態では、本発明による化合物を、利尿剤、例としておよび好ましくはフロセミド、ブメタニド、トルセミド、ベンドロフルメチアジド、クロロチアジド、ヒドロクロロチアジド、ヒドロフルメチアジド、メチクロチアジド、ポリチアジド、トリクロロメチアジド、クロルタリドン、インダパミド、メトラゾン、キネタゾン、アセタゾラミド、ジクロルフェナミド、メタゾラミド、グリセロール、イソソルビド、マンニトール、アミロリドまたはトリアムテレンと組み合わせて投与する。
【０１０１】
脂質代謝調節剤は、好ましくはCETP阻害剤、甲状腺受容体作動薬、コレステロール合成阻害剤、例えば、HMG−CoA還元酵素阻害剤またはスクアレン合成阻害剤、ACAT阻害剤、MTP阻害剤、PPAR−α、PPAR−γおよび／またはPPAR−δ作動薬、コレステロール吸収阻害剤、重合胆汁酸吸着剤、胆汁酸再吸収阻害剤、リパーゼ阻害剤、およびリポタンパク質拮抗薬からなる群の化合物を意味すると理解される。
【０１０２】
本発明の好ましい実施形態では、本発明による化合物を、CETP阻害剤、例としておよび好ましくは、トルセトラピブ（CP−529414）、JJT−705またはCETPワクチン（Avant）と組み合わせて投与する。
【０１０３】
本発明の好ましい実施形態では、本発明による化合物を、甲状腺受容体作動薬、例としておよび好ましくは、D−チロキシン、3，5，3’−トリヨードチロニン（T3）、CGS23425またはアキシチロム（CGS26214）と組み合わせて投与する。
【０１０４】
本発明の好ましい実施形態では、本発明による化合物を、スタチンのクラスのHMG−CoA還元酵素阻害剤、例としておよび好ましくは、ロバスタチン、シンバスタチン、プラバスタチン、フルバスタチン、アトルバスタチン、ロスバスタチンまたはピタバスタチンと組み合わせて投与する。
【０１０５】
本発明の好ましい実施形態では、本発明による化合物を、スクアレン合成阻害剤、例としておよび好ましくは、BMS−188494またはTAK−475と組み合わせて投与する。
【０１０６】
本発明の好ましい実施形態では、本発明による化合物を、ACAT阻害剤、例としておよび好ましくは、アバシミベ、メリナミド、パクチミベ、エフルシミベまたはSMP−797と組み合わせて投与する。
【０１０７】
本発明の好ましい実施形態では、本発明による化合物を、MTP阻害剤、例としておよび好ましくは、イミプリタピド、BMS−201038、R−103757またはJTT−130と組み合わせて投与する。
【０１０８】
本発明の好ましい実施形態では、本発明による化合物を、PPAR−γ作動薬、例としておよび好ましくは、ピオグリタゾンまたはロシグリタゾンと組み合わせて投与する。
【０１０９】
本発明の好ましい実施形態では、本発明による化合物を、PPAR−δ作動薬、例としておよび好ましくは、GW501516またはBAY68−5042と組み合わせて投与する。
【０１１０】
本発明の好ましい実施形態では、本発明による化合物を、コレステロール吸収阻害剤、例としておよび好ましくは、エゼチミベ、チケシドまたはパマケシドと組み合わせて投与する。
【０１１１】
本発明の好ましい実施形態では、本発明による化合物を、リパーゼ阻害剤、例としておよび好ましくは、オーリスタットと組み合わせて投与する。
【０１１２】
本発明の好ましい実施形態では、本発明による化合物を、重合胆汁酸吸着剤、例としておよび好ましくは、コレスチラミド、コレスチポール、コレソルバム、コレスタゲルまたはコレスチミドと組み合わせて投与する。
【０１１３】
本発明の好ましい実施形態では、本発明による化合物を、胆汁酸再吸収阻害剤、例としておよび好ましくは、ASBT（＝IBAT）阻害剤、例えば、AZD−7806、S−8921、AK−105、BARI−1741、SC−435またはSC−635と組み合わせて投与する。
【０１１４】
本発明の好ましい実施形態では、本発明による化合物を、リポタンパク質拮抗薬、例としておよび好ましくは、ゲムカベンカルシウム（CI−1027）またはニコチン酸と組み合わせて投与する。
【０１１５】
本発明は、少なくとも1種の本発明による化合物を、典型的には1種または複数の不活性な、非毒性の薬学的に適した賦形剤と一緒に含む医薬、および上記目的のためのその使用をさらに提供する。
【０１１６】
本発明による化合物は、全身的におよび／または局所的に作用することができる。この目的のために、これらの化合物を、適当な様式で、例えば、経口、非経口、経肺（pulmonal）、経鼻、舌下、舌、頬側、直腸、皮膚、経皮、結膜もしくは耳経路によって、またはインプラントもしくはステントとして投与することができる。
【０１１７】
本発明による化合物を、これらの投与経路に適した投与形態で投与することができる。
【０１１８】
経口投与に適した投与形態は、先行技術によって作用しかつ本発明による化合物を急速におよび／または修飾された様式で放出し、結晶および／または非晶化および／または溶解形態の本発明による化合物を含有するもの、例えば、錠剤（非コーティング、または例えば、本発明による化合物の放出を制御する耐胃液もしくは遅延溶解もしくは不溶性コーティングによりコーティングされた錠剤）、口腔内で急速に崩壊する錠剤またはフィルム／オブラート、フィルム／凍結乾燥物、カプセル剤（例えば、硬または軟ゼラチンカプセル）、糖衣錠、顆粒剤、ペレット剤、散剤、乳剤、懸濁剤、エアゾール剤あるいは液剤である。
【０１１９】
非経口投与は、再吸収ステップを回避して（例えば、静脈内、動脈内、心臓内、髄腔内もしくは腰椎内経路によって）または再吸収を包含して（例えば、筋肉内、皮下、皮内、経皮もしくは腹腔内経路によって）達成することができる。非経口投与に適した投与形態には、液剤、懸濁剤、乳剤、凍結乾燥物または滅菌散剤の形態での注射および注入製剤が含まれる。
【０１２０】
他の投与経路については、適した例に吸入可能な医薬形態（粉末吸入器、ネブライザー、定量エアゾール）、点鼻薬、液剤またはスプレー、舌、舌下もしくは頬側投与用の錠剤、フィルム／オブラートまたはカプセル剤、坐剤、耳または目用製剤、膣カプセル剤、水性懸濁剤（ローション、振盪混合物）、親油性懸濁剤、軟膏剤、クリーム、経皮治療システム（例えば、パッチ）、ミルク、ペースト、泡、まぶし粉、インプラントあるいはステントがある。
【０１２１】
経口、肺内（吸入）および静脈内投与が好ましい。
【０１２２】
本発明による化合物を、言及する投与形態に変換することができる。これは、不活性な、非毒性の薬学的に適した賦形剤と混合することによってそれ自体は知られている様式で達成することができる。これらの賦形剤には、担体（例えば、微結晶セルロース、乳糖、マンニトール）、溶媒（例えば、液体プロピレングリコール）、乳化剤および分散もしくは湿潤剤（例えば、ドデシル硫酸ナトリウム、オレイン酸ポリオキシソルビタン）、結合剤（例えば、ポリビニルピロリドン）、合成および天然ポリマー（例えば、アルブミン）、安定剤（例えば、抗酸化剤、例えば、アスコルビン酸）、着色剤（例えば、無機顔料、例えば、酸化鉄）ならびに香味および／または臭気矯正剤が含まれる。
【０１２３】
一般に、非経口投与の場合、有効な結果を達成するために約0.001〜1mg／kg、好ましくは約0.01〜0.5mg／kg体重の量を投与することが有利であることが分かった。経口投与の場合、投与量は約0.01〜100mg／kg、好ましくは約0.01〜20mg／kg、最も好ましくは0.1〜10mg／kg体重である。肺内投与の場合、量は一般的に約0.1〜50mg／吸入である。
【０１２４】
それにもかかわらず、適当な場合には、具体的には体重、投与経路、活性化合物に対する個体の応答、製剤の性質および投与が行われる時間または間隔の関数として、言及される量から逸脱することが必要となり得る。したがって、いくつかの場合では、上記最小量未満で十分となり得る一方、他の場合では、言及される上限を超えなければならない。より多量の投与の場合、これらを1日にわたって数回の個々の用量に分割することが賢明となり得る。
【０１２５】
以下の実施例は本発明を説明する。本発明は実施例に制限されない。
【０１２６】
特に明示しない限り、以下の試験および実施例中の百分率は重量百分率であり、部は重量部である。液体／液体溶液についての溶媒比、希釈率および濃度データは各場合で体積に基づく。
【０１２７】
A．実施例
略語および頭字語
abs.  無水
Ac  アセチル
aq.  水性、水溶液
ATP  アデノシン−5’−三リン酸
Brij（登録商標）  ポリエチレングリコールドデシルエーテル
BSA  ウシ血清アルブミン
Ex.  実施例
c  濃度
cat.  触媒
DMF  N，N−ジメチルホルムアミド
DMSO  ジメチルスルホキシド
DTT  ジチオトレイトール
ee  エナンチオマー過剰
ent  エナンチオマー的に純粋、エナンチオマー
eq.  当量
ESI  エレクトロスプレーイオン化（MS）
Et  エチル
GTP  グアノシン−5’−三リン酸
h  時間
Hal  ハロゲン
HOAc  酢酸
HPLC  高圧高速液体クロマトグラフィー
LC-MS  液体クロマトグラフィー結合質量分析
Me  メチル
min  分
MS  質量分析
NMR  核磁気共鳴分光法
quant.  定量的（収率）
rac  ラセミの、ラセミ体
RP  逆相（HPLC）
RT  室温
Rt  保持時間（HPLC）
s.a.  上記参照
TEA  トリエタノールアミン
TFA  トリフルオロ酢酸
THF  テトラヒドロフラン
UV  紫外分光
v/v  （溶液の）体積比
tog.  一緒に
【０１２８】
HPLCおよびLC−MS法：
方法1（分取HPLC）：
カラム：Grom−Sil C18 10μm、250mm×30mm；移動相A：水＋0.1％ギ酸、移動相B：アセトニトリル；プログラム：0〜5分10％B、5〜38分勾配〜95％B；流量：50ml／分；UV検出：210nm。
【０１２９】
方法2（LC−MS）：
装置：Waters Acquity SQD UPLCシステム；カラム：Waters Acquity UPLC HSS T3 1.8μ、50mm×1mm；移動相A：水1l＋99濃度ギ酸0.25ml、移動相B：アセトニトリル1l＋99％ギ酸0.25ml；勾配：0.0分90％A→1.2分5％A→2.0分5％A；流量：0.40ml／分；オーブン：50℃；UV検出：210〜400nm。
【０１３０】
方法3（LC−MS）：
MS装置型：Waters Micromass Quattro Micro；HPLC装置型：Agilent 1100シリーズ；カラム：Thermo Hypersil GOLD 3μ、20mm×4mm；移動相A：水1l＋50％濃度ギ酸0.5ml、移動相B：アセトニトリル1l＋50％ギ酸0.5ml；勾配：0.0分100％A→3.0分10％A→4.0分10％A→4.01分100％A（流量2.5ml／分）→5.00分100％A；オーブン：50℃；流量：2ml／分；UV検出：210nm。
【０１３１】
方法4（LC−MS）：
装置：Waters UPLC Acquityを備えたMicromass Quattro Premier；カラム：Thermo Hypersil GOLD 1.9μ、50mm×1mm；移動相A：水1l＋50％濃度ギ酸0.5ml、移動相B：アセトニトリル1l＋50％ギ酸0.5ml；勾配：0.0分90％A→0.1分90％A→1.5分10％A→2.2分10％A；流量：0.33ml／分；オーブン：50℃；UV検出：210nm。
【０１３２】
方法5（キラル分析HPLC）：
固定相：Daicel OD−H；カラム：250mm×4mm；UV検出：230nm；移動相：イソプロパノール／イソヘキサン30：70（v／v）；流量：1.0ml／分。
【０１３３】
方法6（キラル分析HPLC）：
固定相：Daicel OJ−H、5μm；カラム：250mm×4mm；UV検出：230nm；移動相：イソヘキサン／メタノール／エタノール50：25：25（v／v／v）；流量：1.0ml／分。
【０１３４】
方法7（キラル分析HPLC）：
固定相：Daicel Chiralpak IA；カラム：250mm×4mm；UV検出：230nm；移動相：エタノール／メチルtert−ブチルエーテル75：25（v／v）；流量：1.0ml／分。
【０１３５】
方法8（分取LC−MS）：
MS装置：Waters；HPLC装置：Waters；カラム：Waters X-Bridge C18 5μm、18mm×50mm；移動相A：水＋0.05％トリエチルアミン、移動相B：アセトニトリル＋0.05％トリエチルアミン；勾配：0.0分95％A→0.15分95％A→8.0分5％A→9.0分5％A；流量：40ml／分；UV検出：DAD、210〜400nm。
【０１３６】
方法9（分取LC−MS）：
MS装置：Waters；HPLC装置：Waters；カラム：Phenomenex Luna 5μ C18（2）100A、50mm×21.2mm；移動相A：水＋0.05％ギ酸、移動相B：アセトニトリル＋0.05％ギ酸；勾配：0.0分95％A→0.15分95％A→8.0分5％A→9.0分5％A；流量：40ml／分；UV検出：DAD、210〜400nm。
【０１３７】
方法10（LC−MS）：
MS装置：Waters SQD；HPLC装置：Waters UPLC；カラム：Zorbax SB-Aq（Agilent）、50mm×2.1mm、1.8μm；移動相A：水＋0.025％ギ酸、移動相B：アセトニトリル＋0.025％ギ酸；勾配：0.0分98％A→0.9分25％A→1.0分5％A→1.4分5％A→1.41分98％A→1.5分98％A；オーブン：40℃；流量：0.60ml／分；UV検出：DAD、210nm。
【０１３８】
出発材料および中間体：
実施例1A
rac−メチル5−｛［2−（2−メトキシフェニル）エチル］アミノ｝−5，6，7，8−テトラヒドロナフタレン−2−カルボキシレート
【化１８】
0006324956.tif 000019
メチル5−オキソ−5，6，7，8−テトラヒドロナフタレン−2−カルボキシレート［U. GerlachおよびT. Wollmann、Tetrahedron Lett. 1992、33（38）、5499〜5502］15.2g（74.5mmol）およびエタノール50ml中2−（2−メトキシフェニル）エチルアミン11.5g（74.5mmol）を還流下で2時間加熱した。次いで、混合物を減圧下で濃縮乾固し、残渣をメタノール300mlに溶解し、水素化ホウ素ナトリウム5.6g（149mmol）を、わずかに外部冷却しながら室温で20分にわたって少しずつ懸濁液に添加した。茶色がかった溶液を室温で24時間攪拌し、次いで、水900mlに注ぎ入れ、酢酸エチルで3回抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮した。残渣（24.5g）を、移動相シクロヘキサン／酢酸エチル2：1を用いてシリカゲル上フラッシュクロマトグラフィーによって精製した。
収量：21.0g（理論値の83％）
LC−MS（方法4）：Rt＝0.87分；MS（ESIポジティブ）：m／z＝340［M＋H］＋
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7.56-7.79 (m, 2H)、7.47 (d, 1H)、7.04-7.28 (m, 2H)、6.94 (d, 1H)、6.86 (t, 1H)、3.82 (s, 3H)、3.73 (br. s, 1H)、2.61-2.91 (m, 6H)、1.59-1.95 (m, 5H).
【０１３９】
実施例2A
rac−メチル5−｛（5−エトキシ−5−オキソペンチル）［2−（2−メトキシフェニル）エチル］アミノ｝−5，6，7，8−テトラヒドロナフタレン−2−カルボキシレート
【化１９】
0006324956.tif 000020
実施例1Aの化合物9.0g（26.5mmol）をアセトニトリル100mlに溶解し、エチル5−ブロモバレレート4.6ml（6.1g、29.2mmol）および炭酸ナトリウム5.65g（53mmol）を添加した。混合物を減圧下で3日間攪拌した。さらに1.3ml（8.2mmol）のエチル5−ブロモバレレートおよび1.6g（15.1mmol）の炭酸ナトリウムを添加した後、混合物を還流下でさらに一晩攪拌した。同量のエチル5−ブロモバレレートおよび炭酸ナトリウムを再度添加し、出発材料がもはやLC−MSによって検出できなくなるまで、混合物をもう一度還流下で一晩加熱した。次いで、混合物を濃縮し、水を添加し、混合物を酢酸エチルで繰り返し抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮した。粗製生成物（14.6g）を、移動相シクロヘキサン／酢酸エチル5：1を用いてシリカゲル上フラッシュクロマトグラフィーによって精製した。
収量：油11.6g（理論値の87％）
LC−MS（方法2）：Rt＝0.93分；MS（ESIポジティブ）：m／z＝468［M＋H］＋
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7.55-7.70 (m, 3H)、6.95-7.21 (m, 2H)、6.74-6.93 (m, 2H)、3.90-4.14 (m, 4H)、3.82 (s, 3H)、3.64 (s, 3H)、3.54 (t, 1H)、2.57-2.82 (m, 4H)、2.33 (t, 1H)、2.13-2.26 (m, 2H)、1.87-2.07 (m, 2H)、1.74-1.87 (m, 1H)、1.34-1.71 (m, 8H)、1.06-1.21 (m, 4H)［DMSOピークに重畳されたさらなるシグナル］。
【０１４０】
実施例3A
rac−メチル5−｛［2−（2−ヒドロキシフェニル）エチル］（5−メトキシ−5−オキソペンチル）アミノ｝−5，6，7，8−テトラヒドロナフタレン−2−カルボキシレート
【化２０】
0006324956.tif 000021
アルゴン下、実施例2Aの化合物653mg（1.4mmol）をジクロロメタン12mlに溶解し、混合物を0℃に冷却した。三臭化ホウ素のジクロロメタン中1M溶液4.6ml（4.6mmol）をゆっくり滴加し、混合物を0℃でさらに4時間攪拌した（透明な黄色溶液）。次いで、無水メタノール7mlを添加し、混合物を還流下で一晩加熱した。次いで、混合物を減圧下で濃縮乾固し、残渣を酢酸エチルと10％濃度炭酸ナトリウム水溶液に分配した。水相を酢酸エチルで再抽出し、合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。濃縮後、残渣（茶色油519mg）をシリカゲル上カラムクロマトグラフィー（移動相：勾配イソヘキサン／4〜32％酢酸エチル）によって精製した。
収量：黄色油172mg（理論値の20％）
LC−MS（方法3）：Rt＝1.62分；MS（ESIポジティブ）：m／z＝440［M＋H］＋
【０１４１】
実施例4A
rac−エチル5−｛（5−エトキシ−5−オキソペンチル）［2−（2−ヒドロキシフェニル）エチル］アミノ｝−5，6，7，8−テトラヒドロナフタレン−2−カルボキシレート
【化２１】
0006324956.tif 000022
実施例2Aの化合物8.7g（18.6mmol）を、臭化水素の氷酢酸中33％濃度溶液90ml中還流下で一晩攪拌した。さらに90mlの臭化水素溶液を添加した後、混合物を135℃の浴温度でさらに一晩攪拌した。次いで、混合物を減圧下で濃縮し、さらに40mlの臭化水素の氷酢酸中溶液を残渣に添加し、混合物を110℃の浴温度でさらに一晩攪拌した。次いで、混合物をもう一度濃縮乾固した。77％のジカルボン酸化合物5−｛（4−カルボキシブチル）［2−（2−ヒドロキシフェニル）エチル］アミノ｝−5，6，7，8−テトラヒドロナフタレン−2−カルボン酸［LC−MS（方法2）：Rt＝0.64分；MS（ESIポジティブ）：m／z＝412［M＋H］＋］を含む残渣を、エタノール190mlへの初期溶解に供し、塩化チオニル1.65mlを滴加した。混合物を70℃で一晩攪拌し、次いで、減圧下で濃縮した。残渣（約13g）を酢酸エチルに溶解し、希炭酸ナトリウム水溶液で2回洗浄した。有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮した。粗製生成物（8.8g）を、移動相シクロヘキサン／酢酸エチル5：1を用いてシリカゲル上フラッシュクロマトグラフィーによって精製した。
収量：5.3g（理論値の56％）
LC−MS（方法2）：Rt＝0.86分；MS（ESIポジティブ）：m／z＝468［M＋H］＋
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 9.21 (s, 1H)、7.54-7.76 (m, 3H)、6.93-7.04 (m, 2H)、6.61-6.78 (m, 2H)、4.29 (q, 2H)、4.21-4.36 (m, 2H)、3.92-4.11 (m, 4H)、2.66-2.81 (m, 3H)、2.35-2.66 (m, 6H)、2.13-2.27 (m, 2H)、1.89-2.08 (m, 3H)、1.36-1.69 (m, 6H)、1.31 (t, 3H)、1.11-1.22 (m, 4H).
【０１４２】
実施例5A
rac−メチル5−［（2−｛2−［（4−tert−ブチルベンジル）オキシ］フェニル｝エチル）（5−メトキシ−5−オキソペンチル）アミノ］−5，6，7，8−テトラヒドロナフタレン−2−カルボキシレート、ギ酸塩
【化２２】
0006324956.tif 000023
アルゴン下、実施例3Aの化合物170mg（0.387mmol）、4−tert−ブチルベンジルブロミド104mg（0.464mmol）および炭酸セシウム403mg（1.238mmol）をDMF3ml中室温で2時間攪拌した。次いで、水30mlを添加し、5Nギ酸を用いて懸濁液をpH5に酸性化した。混合物を酢酸エチルで繰り返し抽出し、合わせた有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。残渣（黄色油340mg）を分取HPLC（方法1）によって精製した。
収量：133mg（理論値の52％）
LC−MS（方法2）：Rt＝1.22分；MS（ESIポジティブ）：m／z＝586［M＋H］＋
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 8.15 (s, 1H)、7.60 (m, 3H)、7.33 (d, 2H)、7.23 (d, 2H)、7.04-7.18 (m, 2H)、6.97 (d, 1H)、6.83 (t, 1H)、4.93 (dd, 2H)、3.89-3.97 (m, 1H)、3.81 (s, 3H)、3.55 (s, 3H)、2.73-2.83 (m, 1H)、2.63-2.73 (m, 2H)、2.34-2.45 (m, 2H)、2.14-2.21 (m, 2H)、1.82-1.98 (m, 2H)、1.32-1.59 (m, 6H)、1.27 (s, 9H)［DMSOピークに重畳されたさらなるシグナル］。
【０１４３】
実施例6Aおよび実施例7A
メチル5−［（2−｛2−［（4−tert−ブチルベンジル）オキシ］フェニル｝エチル）（5−メトキシ−5−オキソペンチル）アミノ］−5，6，7，8−テトラヒドロナフタレン−2−カルボキシレート（エナンチオマー1および2）
【化２３】
0006324956.tif 000024
実施例5Aのラセミのメチル5−［（2−｛2−［（4−tert−ブチルベンジル）オキシ］フェニル｝エチル）（5−メトキシ−5−オキソペンチル）アミノ］−5，6，7，8−テトラヒドロナフタレン−2−カルボキシレート100mgを、キラル相での分取HPLCによってエナンチオマーに分離した［試料調製：物質をイソプロパノール3mlおよびイソヘキサン7mlに溶解した；注入体積：各場合で1ml；カラム：Daicel Chiralpak OD−H、250mm×20mm；溶離液：イソヘキサン／イソプロパノール50：50（v／v）；流量：15ml／分、温度：30℃；UV検出：210nm］：
【０１４４】
実施例6A（エナンチオマー1）：
収量：25.5mg
HPLC（方法5）：Rt＝4.34分、＞99％ee
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7.60 (m, 3H)、7.33 (d, 2H)、7.24 (d, 2H)、7.04-7.18 (m, 2H)、6.97 (d, 1H)、6.83 (t, 1H)、4.92 (dd, 2H)、3.88-3.98 (m, 1H)、3.81 (s, 3H)、3.55 (s, 3H)、2.59-2.86 (m, 4H)、2.29-2.45 (m, 2H)、2.17 (t, 2H)、1.80-1.99 (m, 2H)、1.31-1.64 (m, 6H)、1.27 (s, 9H)［DMSOピークに重畳されたさらなるシグナル］。
【０１４５】
実施例7A（エナンチオマー2）：
収量：22.6mg
HPLC（方法5）：Rt＝4.72分、＞90.5％ee
【０１４６】
実施例8A
rac−エチル5−［（2−｛2−［（4−tert−ブチルベンジル）オキシ］フェニル｝エチル）（5−エトキシ−5−オキシペンチル）アミノ］−5，6，7，8−テトラヒドロナフタレン−2−カルボキシレート
【化２４】
0006324956.tif 000025
実施例4Aの化合物500mg（1.07mmol）をDMF20mlに溶解し、4−tert−ブチルベンジルブロミド245μl（1.23mmol）および炭酸セシウム1.12g（3.4mmol）を添加し、混合物を室温で一晩攪拌した。次いで、水を混合物に添加した。5Nギ酸1.4mlを添加した後、混合物をトルエンで繰り返し抽出し、合わせた有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮した。
収量：655mg（純度92％、理論値の91％）
LC−MS（方法2）：Rt＝1.30分；MS（ESIポジティブ）：m／z＝614［M＋H］＋
【０１４７】
実施例9Aおよび実施例10A
エチル5−［（2−｛2−［（4−tert−ブチルベンジル）オキシ］フェニル｝エチル）（5−エトキシ−5−オキソペンチル）アミノ］−5，6，7，8−テトラヒドロナフタレン−2−カルボキシレート（エナンチオマー1および2）
【化２５】
0006324956.tif 000026
実施例8Aのラセミのエチル5−［（2−｛2−［（4−tert−ブチルベンジル）オキシ］フェニル｝エチル）（5−エトキシ−5−オキソペンチル）アミノ］−5，6，7，8−テトラヒドロナフタレン−2−カルボキシレート430mgを、キラル相での分取HPLCによってエナンチオマーに分離した［試料調製：物質をエタノール20mlおよびイソヘキサン20mlに溶解した；注入体積：各場合で0.5ml；カラム：Daicel Chiralpak OJ−H、5μm、250mm×20mm；移動相：イソヘキサン／エタノール／メタノール95：2.5：2.5（v／v／v）；流量：20ml／分、温度：25℃；UV検出：230nm］：
【０１４８】
実施例9A（エナンチオマー1）：
収量：112mg
HPLC（方法6）：Rt＝5.65分、＞99.5％ee
LC−MS（方法2）：Rt＝1.31分；MS（ESIポジティブ）：m／z＝614［M＋H］＋
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7.60 (s, 3H)、7.34 (d, 2H)、7.24 (d, 2H)、7.15 (t, 1H)、7.10 (d, 1H)、6.98 (d, 1H)、6.82 (t, 1H)、4.94 (dd, 2H)、4.22-4.31 (m, 2H)、3.97-4.05 (m, 2H)、3.89-3.97 (m, 1H)、2.73-2.82 (m, 1H)、2.52-2.73 (m, 5H)、2.33-2.45 (m, 2H)、2.16 (t, 2H)、1.82-1.98 (m, 2H)、1.32-1.59 (m, 6H)、1.23-1.31 (m, 13H)、1.14 (t, 3H).
【０１４９】
実施例10A（エナンチオマー2）：
収量：79mg
HPLC（方法6）：Rt＝7,095分、＞82.7％ee
LC−MS（方法2）：Rt＝1.32分；MS（ESIポジティブ）：m／z＝614［M＋H］＋
【０１５０】
実施例11A
rac−エチル1−｛［2−（2−メトキシフェニル）エチル］アミノ｝インダン−5−カルボキシレート
【化２６】
0006324956.tif 000027
標記化合物を、エチル1−オキソインダン−5−カルボキシレート［R. TakeuchiおよびH. Yasue、J. Org. Chem. 1993、58（20）、5386〜5392］2.0g（9.73mmol）で始めて、実施例1Aの手順と同様に調製した。
収量：茶色がかった油2.46g（純度87％）
LC−MS（方法3）：Rt＝1.58分；MS（ESIポジティブ）：m／z＝340［M＋H］＋
【０１５１】
実施例12A
rac−エチル1−｛（5−エトキシ−5−オキソペンチル）［2−（2−メトキシフェニル）エチル］アミノ｝インダン−5−カルボキシレート
【化２７】
0006324956.tif 000028
標記化合物を、実施例11Aの化合物2.2g（6.48mmol）で始めて、実施例2Aの手順と同様に調製した。
収量：黄色がかった油1.87g（理論値の62％）
LC−MS（方法2）：Rt＝0.93分；MS（ESIポジティブ）：m／z＝468［M＋H］＋
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7.69-7.79 (m, 2H)、7.11-7.19 (m, 2H)、7.07 (d, 1H)、6.89 (d, 1H)、6.82 (t, J = 7.34 Hz, 1H)、4.53 (t, 1H)、4.29 (q, 2H)、4.03 (q, 2H)、3.66 (s, 3H)、2.56-2.95 (m, 4H)、2.35-2.48 (m, 2H)、2.18-2.26 (m, 2H)、2.08-2.18 (m, 1H)、1.82-1.95 (m, 1H)、1.37-1.61 (m, 4H)、1.31 (t, 3H)、1.16 (t, 3H).
【０１５２】
実施例13A
rac−1−｛（4−カルボキシブチル）［2−（2−ヒドロキシフェニル）エチル］アミノ｝インダン−5−カルボン酸
【化２８】
0006324956.tif 000029
実施例3Aの手順と同様に、実施例12Aの化合物1.8g（3.85mmol）によって粗製フェノールジエステルrac−エチル1−｛（5−エトキシ−5−オキソペンチル）［2−（2−ヒドロキシフェニル）エチル］アミノ｝インダン−5−カルボキシレート1.65g［含量19％；LC−MS（方法2）：Rt＝0.88分；MS（ESIポジティブ）：m／z＝454［M＋H］＋］が得られた。この粗製生成物を還流下THF10ml、メタノール15mlおよび5N水酸化ナトリウム水溶液0.8ml中で2時間加熱した。次いで、混合物を約5mlの体積に濃縮し、5Nギ酸を用いてpH5〜6に酸性化した。これにより非晶質沈殿の沈殿が得られ、これをシリカゲルクロマトグラフィー（移動相ジクロロメタン／4〜34％メタノール）およびその後の分取HPLC（方法1）によって精製した。
収量：無色固体64g（理論値の4％）。
LC−MS（方法2）：Rt＝0.66分；MS（ESIポジティブ）：m／z＝398［M＋H］＋
【０１５３】
実施例14A
rac−エチル1−｛（5−エトキシ−5−オキソペンチル）［2−（2−ヒドロキシフェニル）エチル］アミノ｝インダン−5−カルボキシレート塩酸塩
【化２９】
0006324956.tif 000030
実施例13Aの化合物53mg（0.133mmol）をエタノール3mlに溶解し、塩化チオニル19μl（0.27mmol）を添加し、混合物を75℃で4時間攪拌した。次いで、さらに200μlの塩化チオニルを添加し、混合物の攪拌を75℃で一晩継続した。次いで、混合物を濃縮乾固し、残渣をエタノールと2回同時蒸発させた。
収量：無色非晶質固体60mg（理論値の88％）
LC−MS（方法2）：Rt＝0.88分；MS（ESIポジティブ）：m／z＝454［M＋H］＋
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 10.21-10.67 (broad, 1H)、7.83-8.06 (m, 3H)、6.96-7.20 (m, 2H)、6.65-6.90 (m, 2H)、5.20-5.42 (m, 1H)、4.33 (q, 2H)、3.96-4.13 (m, 2H)、2.85-3.21 (m, 7H)、2.68-2.81 (m, 1H)、2.34-2.44 (m, 2H)、2.23 (t, 1H)、1.38-1.97 (m, 4H)、1.33 (t, 3H)、1.07-1.22 (m, 3H)［水およびDMSOピークに重畳されたさらなるシグナル］。
【０１５４】
以下の化合物を実施例5Aの手順と同様に調製した：
【０１５５】
【表１Ａ】
0006324956.tif 000031
【表１Ｂ】
0006324956.tif 000032
【表１Ｃ】
0006324956.tif 000033
【表１Ｄ】
0006324956.tif 000034
【０１５６】
試料調製：ラセミ体71mgをイソプロパノール8mlに溶解し、イソヘキサン10mlを溶液に添加した；注入体積：各場合で0.8ml；カラム：Daicel Chiralpak OJ−H、5μm、250mm×20mm；移動相：イソヘキサン／エタノール／メタノール50：25：25（v／v／v）；流量：20ml／分、温度：25℃；UV検出：230nm。
【０１５７】
実施例：
実施例1
rac−5−［（2−｛2−［（4−tert−ブチルベンジル）オキシ］フェニル｝エチル）（4−カルボキシブチル）アミノ］−5，6，7，8−テトラヒドロナフタレン−2−カルボン酸
【化３０】
0006324956.tif 000035
実施例8Aの化合物200mg（純度92％、0.3mmol）をTHF4mlおよびメタノール2mlに溶解し、5N水酸化ナトリウム水溶液345μl（1.73mmol）を添加した後、還流下で1.5時間攪拌した。次いで、混合物を水で希釈し、その後溶媒を減圧下で除去した。5N酢酸650μlを添加し、混合物を少し冷却し、沈殿した無色固体を吸引により濾別し、高真空下で一晩乾燥させた。
収量：172mg（定量的）
LC−MS（方法2）：Rt＝1.03分；MS（ESIポジティブ）：m／z＝558［M＋H］＋
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7.53-7.64 (m, 3H)、7.35 (d, 2H)、7.24 (d, 2H)、7.15 (t, 1H)、7.09 (d, 1H)、6.98 (d, 1H)、6.83 (t, 1H)、4.93 (dd, 2H)、3.87-3.97 (m, 1H)、2.73-2.84 (m, 1H)、2.55-2.72 (m, 4H)、2.35-2.45 (m, 2H)、2.08-2.13 (m, 2H)、1.81-1.99 (m, 2H)、1.33-1.59 (m, 6H)、1.27 (s, 9H)［DMSOピークに部分的に重畳されたシグナル］。
【０１５８】
実施例2
5−［（2−｛2−［（4−tert−ブチルベンジル）オキシ］フェニル｝エチル）（4−カルボキシブチル）アミノ］−5，6，7，8−テトラヒドロナフタレン−2−カルボン酸（エナンチオマー1）
【化３１】
0006324956.tif 000036
実施例6Aの化合物23mg（0.039mmol）をTHF／水（5：1）1mlに溶解し、1N水酸化ナトリウム水溶液0.4mlと共に室温で一晩攪拌した。次いで、メタノール0.2mlを添加し、混合物を室温でさらに2時間攪拌した。次いで、5Nギ酸0.08mlを添加し、混合物を蒸発乾固した。残渣を分取HPLC（方法1）によって精製した。
収量：無色固体14g（理論値の62％）。
LC−MS（方法2）：Rt＝1.02分；MS（ESIポジティブ）：m／z＝558［M＋H］＋
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7.55-7.62 (m, 3H)、7.34 (d, 2H)、7.24 (d, 2H)、7.15 (t, 1H)、7.08 (d, 1H)、6.98 (d, 1H)、6.83 (t, 1H)、4.93 (dd, 2H)、3.88-3.97 (m, 1H)、2.73-2.83 (m, 1H)、2.58-2.73 (m, 4H)、2.39-2.46 (m, 2H)、2.09-2.15 (m, 2H)、1.82-1.99 (m, 2H)、1.32-1.58 (m, 6H)、1.27 (s, 9H)［DMSOピークに部分的に重畳されたシグナル］。
【０１５９】
実施例3
5−［（2−｛2−［（4−tert−ブチルベンジル）オキシ］フェニル｝エチル）（4−カルボキシブチル）アミノ］−5，6，7，8−テトラヒドロナフタレン−2−カルボン酸（エナンチオマー2）
【化３２】
0006324956.tif 000037
標記化合物を、実施例7Aの化合物21mg（0.036mmol）から、実施例2の手順と同様に得た。
収量：無色固体15.8mg（理論値の79％）。
LC−MS（方法2）：Rt＝1.02分；MS（ESIポジティブ）：m／z＝558［M＋H］＋
【０１６０】
以下の化合物を実施例1および2の手順と同様に調製した：
【０１６１】
【表２Ａ】
0006324956.tif 000038
【表２Ｂ】
0006324956.tif 000039
【表２Ｃ】
0006324956.tif 000040
【０１６２】
並列合成によるさらなる実施例を調製するための一般的手順
各場合で、1.2当量（0.12mmol）の当のハロゲン化アルキルを最初に96ウェル深底ウェルマイクロタイタープレートのウェルに装入し、実施例4Aの化合物47mg（0.1mmol）のDMF0.6ml中溶液を添加した。炭酸カリウム44mg（0.32mmol）をこの混合物に添加した。マイクロタイタープレートを覆い、80℃で一晩振盪した。次いで、混合物を濾過し、4N水酸化ナトリウム水溶液0.6mlを濾液に添加し、混合物を再度覆って60℃で一晩振盪した。次いで、溶媒を蒸発させた。残渣をDMSO0.6mlに溶解し、分取LC−MS（方法8または9）によって直接精製した。生成物含有分画を、遠心脱水機を用いて減圧下で濃縮した。個々の分画の残渣を各場合でDMSO0.6mlに溶解し、合わせた。溶媒を最後に遠心乾燥機で完全に蒸発させた。
【０１６３】
以下の化合物をこの手順にしたがって得た：
【０１６４】
【表３Ａ】
0006324956.tif 000041
【表３Ｂ】
0006324956.tif 000042
【表３Ｃ】
0006324956.tif 000043
【０１６５】
B．薬理学的有効性の評価
本発明の化合物の薬理学的有効性を以下のアッセイで示すことができる：
【０１６６】
B−1．組換えグアニル酸シクラーゼレポーター細胞系への効果
本発明による化合物の細胞活性を、F. Wunder等、Anal. Biochem. 339、104〜112（2005）に記載されているように、組換えグアニル酸シクラーゼ細胞系を用いて測定する。
【０１６７】
本発明による化合物についての代表的か結果を表1に列挙する：
【０１６８】
【表４】
0006324956.tif 000044
【０１６９】
B−2．sGC酵素活性の刺激
可溶性グアニル酸シクラーゼ（sGC）は、刺激を受けると、GTPをcGMPおよびピロリン酸（PPi）に変換する。PPiは下記のアッセイを用いて検出される。アッセイで産生されるシグナルは、反応が進行するにつれて増加し、所与の刺激下でのsGC酵素活性の尺度として役立つ。
【０１７０】
アッセイを行うために、酵素溶液［50mM TEA、2mM MgCl2、0.1％BSA（分画V）、0.005％Brij（登録商標）、pH7.5中0〜10nM可溶性グアニル酸シクラーゼ（Honicka等、J. Mol. Med. 77、14〜23（1999）にしたがって調製）］29μlを最初にマイクロプレートに導入し、試験する物質1μl（DMSO中連続希釈溶液として）を添加する。混合物を室温で10分間インキュベートする。次いで、検出混合物［50mM TEA、2mM MgCl2、0.1％BSA（分画V）、0.005％Brij（登録商標）、pH7.5中1.2nMホタルルシフェラーゼ（フォティナス・ピラリス（Photinus pyralis）ルシフェラーゼ、Promega）、29μMデヒドロルシフェリン（Bitler&McElroy、Arch. Biochem. Biophys. 72、358（1957）にしたがって調製）、122μMルシフェリン（Promega）、153μM ATP（Sigma）および0.4mM DTT（Sigma）］20μlを添加する。基質溶液［50mM TEA、2mM MgCl2、0.1％BSA（分画V）、0.005％Brij（登録商標）、pH7.5中1.25mMグアノシン5’−三リン酸（Sigma）］20μlを添加することによって酵素反応を開始し、ルミノメーターで連続的に測定する。試験する物質による刺激の程度を、未刺激反応のシグナルに対して決定することができる。
【０１７１】
25μMの1H−1，2，4−オキサジアゾロ［4，3−a］キノキサリン−1−オン（ODQ）を酵素溶液に添加し、その後30分間インキュベートし、野生型酵素の刺激と比較してヘム欠失型グアニル酸シクラーゼの活性化を試験する。
【０１７２】
本発明による化合物についての代表的な結果を表2に列挙する：
【０１７３】
【表５】
0006324956.tif 000045
【０１７４】
B−3．インビトロでの血管弛緩効果
ウサギをチオペンタールナトリウムの静脈内注射によって麻酔または屠殺し（約50mg／kg）、失血させた。動脈伏在静脈を取り出し、3mm幅のリングに分割する。リングを各場合で0.3mmの強い特別なワイヤー（Remanium（登録商標））でできた端部が開口した1つの三角形のフック対に個々に取り付ける。各リングを、以下の組成：NaCl 119mM；KCl 4.8mM；CaCl2×2H2O 1mM；MgSO4×7H2O 1.4mM；KH2PO4 1.2mM；NaHCO3 25mM；グルコース10mM；ウシ血清アルブミン0.001％を有する37℃の温度のカルボゲン通気（carbogen-gassed）クレブス−ヘンゼライト液を含有する5ml臓器浴に、初期負荷下で移す。収縮力をStatham UC2細胞で測定し、A／D変換器（DAS−1802HC、Keithley Instruments Munich）を用いて増幅および数値化し、線形レコーダーで並列に記録する。フェニレフリンの添加により収縮を誘導する。
【０１７５】
いくつかの（一般的に4回）制御サイクル後に、試験する物質をさらなる通過ごとに増加する投与量で添加し、試験物質の影響下で達成される収縮の高さを、最後の予備的通過で達成される収縮の高さと比較する。これから、予備的制御で達成される収縮を50％減少させるために必要な濃度（IC50）を計算する。標準投与体積は5μlである。浴溶液中のDMSOの割合は0.1％に相当する。
【０１７６】
本発明による化合物についての代表的な結果を表3に列挙する：
【０１７７】
【表６】
0006324956.tif 000046
【０１７８】
B−4．インビトロおよびインビボでの気管支拡張効果
B−4．1  インビトロでの気管支弛緩
気管支リング（2〜3分節）をラット、マウスまたはモルモットから取り出し、各場合で端部が開口した直径0.3mmの特別なワイヤー（Remanium（登録商標））でできた三角形のフック対に個々に取り付ける。各リングを37℃の温度のカルボゲン通気緩衝液（例えば、クレブス−ヘンゼライト液）を含有する5ml臓器浴に、初期負荷をかけて導入する。気管支リングを、メタコリン（1μM）で前収縮し、次いで、増加する濃度（10-9から10-6M）のそれぞれの試験物質を添加することによって気管支弛緩を試験する。結果を、メタコリンによる前収縮に対する弛緩％として評価する。
【０１７９】
B−4．2  喘息モデルにおける気管支収縮への効果を試験する動物実験
誘発試験の前に、全ての動物（ラット、マウス）を、胃管を用いて胃内にまたは吸入的に処理する。ここでは、処理群の動物は試験物質を受け、対照動物は対応してビヒクル溶液を受ける。待機期間後に、動物を麻酔および挿管する。いったん食道カテーテルを入れ、呼吸の定常状態に達したら、誘発の前に肺機能を最初に測定する。測定するパラメータは、特に、肺抵抗（RL）および動肺コンプライアンス（Cdyn）、ならびに一回換気量（TV）および呼吸数（f）である。これらの肺機能試験用に特別に開発された計算プログラム（Notocord HEM）を用いて、データ保管および統計学的評価を行う。
【０１８０】
これに、試験動物のメタコリン（Mch）エアゾールへの規定の吸入暴露が続く（非特異的誘発喘息性気管支収縮のモデル）。肺機能パラメータの記録を暴露中および暴露後3分継続する。吸入空気中のMCh濃度および用量を、開発したフィードバック用量制御システム（エアゾール濃度および毎分呼吸量を測定することを介する）を用いて制御および監視する。標的用量に達したら、試験を停止する。偽処理陽性対照と比べた抵抗の増加によって、試験物質の阻害効果を決定する。
【０１８１】
アレルギー性喘息モデルにおける試験：
陰性対照を除く全ての動物をアレルゲンのオボアルブミンおよびアジュバント（alum）で全身的に感作させる。陰性対照群は、代わりに、生理食塩水（NaCl）を受ける。次いで、全ての群をオボアルブミンで誘発する。試験は、6つの処理群−2種の試験物質のそれぞれ3種の用量群を使用し、さらに、デキサメタゾンで腹腔内処理した参照群、偽処理および偽誘発陰性対照群、ならびに偽処理およびオボアルブミン誘発陽性対照群が存在する。感作、処理および誘発プロトコル：0、14および21日に、全ての動物をオボアルブミンおよびアジュバントで腹腔内感作させ、陰性対照をNaClで処理する。28および29日に、動物をオボアルブミン溶液の気管内投与によって誘発する。試験物質を、各気管内アレルゲン誘発1時間前に胃内にまたは吸入的に投与する。各気管内アレルゲン誘発18時間および1時間前に、参照群をデキサメタゾンで腹腔内処理する。陽性および陰性対照群は対応してビヒクルで処理する。
【０１８２】
気道過敏性および炎症反応：
動物を非特異的刺激に対する気道過敏性について最初に試験する。このために、徐々に増加させる吸入的メタコリン誘発の形態の過敏性試験を、オボアルブミン誘発約24時間後に行う。
【０１８３】
動物を麻酔および経口気管内挿管し、誘発前に肺機能を身体プレチスモグラフィーで測定する（一回換気量、呼吸数、動肺コンプライアンスおよび肺抵抗などのパラメータを含む）。いったん測定を終えたら、用量／活性曲線を各動物についてプロットし、陽性対照の過敏性を陰性対照または処理群におけるその阻害に対して評価する。
【０１８４】
次いで、動物を無痛で屠殺し、血液試料を採取し、肺を洗浄（BAL）に供する。洗浄液を使用してBAL中の好酸球の数を含む全細胞数および白血球百分率数を決定する。残りの量のBAL液は最初に凍結する。これにより、必要であれば後の段階で追加のパラメータ（例えば、サイトカイン）を測定することが可能になる。肺組織を任意の病理組織学的試験のために保管する。
【０１８５】
B−5．Langendorffによる単離灌流心臓
体重200〜250gの雄ウィスターラット（系統HsdCpb：WU）をNarcoren（登録商標）（100mg／kg）で麻酔する。胸郭を開き、次いで、心臓を露出し、摘出し、カニューレを大動脈に入れることによってLangendorff装置と接続する。心臓を、クレブス−ヘンゼライト緩衝液（95％O2および5％CO2に通気、pH7.4、35℃；組成（mmol／l）：NaCl118；KCl3；NaHCO322；KH2PO41.2；MgSO41.2；CaCl21.8；グルコース10；ピルビン酸Na2）を用いて一定流量において9ml／分で逆行性に灌流する。心臓の収縮性を測定するために、PEチューブに取り付けられ、水が満たされたプラスチック薄膜でできたバルーンを、心臓の左心耳の開口部を介して左心室に導入する。バルーンを圧力トランデューサと接続する。バルーン体積を介して、拡張終期圧を5〜10mmHgに調整する。灌流圧を、第2の圧力トランデューサを用いて検出する。データを、ブリッジ増幅器を介してコンピュータに送信し、記録する。
【０１８６】
40分の平衡時間後、当の試験物質を10-7mol／l灌流液の最終濃度で20分間添加すると、冠動脈拡張の症状として、灌流圧の低下がもたらされる。次いで、心臓を、試験物質なしでさらに120分間灌流する（ウォッシュアウト期）。灌流圧の低下の可逆性（ウォッシュアウトスコア）を決定するために、ウォッシュアウト期の60分後の灌流圧の値を、試験物質による灌流圧の最大降下に基づき、％で表す。こうして得られたウォッシュアウトスコアを、作用部位での試験物質の滞留時間の尺度とみなす。
【０１８７】
B−6．麻酔した子ブタの血行動態
両方の性の体重2〜6kgの健康なGottingen Minipigs（登録商標）Ellegaard（Ellegaard、デンマーク）を使用する。これらの動物を約25mg／kgのケタミンおよび約10mg／kgのアザペロンの筋肉内投与によって鎮静させる。約2mg／kgのケタミンおよび約0.3mg／kgのミダゾラムの静脈内投与によって麻酔を開始する。麻酔の維持は、約7.5〜30mg／kg／時間のケタミンおよび約1〜4mg／kg／時間のミダゾラム（注入速度1〜4ml／kg／時間）および約150μg／kg／時間の臭化パンクロニウム（例えば、Pancuronium−Actavis）の静脈内投与による。挿管後、動物を、約5％の呼気終末CO2濃度が達成されるように、一定呼吸量（10〜12ml／kg、35呼吸／分；Avea（登録商標）、Viasys Healthcare、米国またはEngstrom Carestation、GE Healthcare、Freiburg、ドイツ）で人工呼吸器によって人工呼吸する。人工呼吸は、約40％酸素富化した（酸素正常状態）室内空気により行う。肺動脈圧（PAP）、血圧（BP）および心拍数（HR）などの血行動態パラメータを測定するために、カテーテルを頚動脈に挿入して血圧を測定し、Swan−Ganz（登録商標）カテーテルを頚静脈を介して流れに誘導された様式で肺動脈に導入する。血行動態シグナルを記録し、圧力トランデューサ（Combitransducer、B. Braun、Melsungen、ドイツ）／増幅器およびデータ取得ソフトウェアとしてのPonemah（登録商標）を用いて評価する。
【０１８８】
装置を動物に入れた後、トロンボキサンA2類似体の連続注入を開始して肺動脈圧を上昇させる。生理食塩水に溶解した約0.3〜0.75μg／kg／分の9，11−ジデオキシ−9α，11α−エポキシメタノプロスタグランジエンF2α（U−44069；Sigma、カタログ番号D0400またはCayman Chemical Company、カタログ番号16440）を注入して、25mmHg超の値への平均肺動脈圧の上昇を達成する。注入開始30分後、プラトーに達し、実験を開始する。
【０１８９】
試験物質を静脈内注入としてまたは吸入によって投与する。吸入用液剤を調製するために、以下の手順を採用する：体重4kgの動物については、ストック溶液（300μg／kg）を調製するために、試験化合物1.2mgを秤量し、総体積3ml（1％のDMSO、99％の0.2％濃度クエン酸溶液、pH8に調整するための1N水酸化ナトリウム水溶液）に溶解する。次いで、この溶液を、前もって水酸化ナトリウム水溶液でpH8に調整した0.2％濃度クエン酸を用いて、使用する濃度に希釈する。各試験で、4kg動物当たり試験化合物の溶液3mlを、Aeroneb（登録商標）Proネブライザーシステムを用いて呼吸回路の吸入アームに噴霧する。平均噴霧時間は噴霧開始から約7分とする。
【０１９０】
B−7．PAH動物モデルにおけるsGC活性化物質の吸入投与
麻酔したGottingenミニブタ、麻酔したラット、または意識のある遠隔計装イヌに実験を行う。例えば、トロンボキサンA2類似物の注入、急性低酸素処理もしくは数週間にわたる低酸素処理および／またはモノクロタリンの投与によって急性肺高血圧を誘発する。Nebutec（登録商標）またはAeroneb（登録商標）Proネブライザーシステムを用いて、実験気管内投与用の散剤および／または液剤施用装置（Liquid MicroSprayer（登録商標）、Dry Powder Insufflator（商標）、MicroSprayer（登録商標）、Penn−Century Inc.、Wyndmoor、PA、米国）を用いて、あるいは固体噴霧を人工呼吸器の吸気アームに挿入した後、試験物質を噴霧する。物質は、分子構造に応じて固体または溶液として使用する。血行動態シグナルを記録し、圧力トランデューサ（Combitransducer、B. Braun、Melsungen、ドイツ）／増幅器およびデータ取得ソフトウェアとしてPonemah（登録商標）またはCardioMems（登録商標）を用いて評価する。長期実験（例えば、モノクロタリンラット）後、組織学的評価を行うことも可能である。
【０１９１】
B−8．意識のあるラットの血圧および心拍数の無線遠隔測定
Data Sciences International DSI、米国から商業的に入手可能な遠隔測定システムを、下記の意識のあるラットの測定に使用する。システムは、3つの主要な構成部品からなる：（1）埋め込み型送信機（Physiotel（登録商標）遠隔測定送信機）、（2）受信機（Physiotel（登録商標）受信機）、これは多重化装置（DSI Data Exchange Matrix）を介して（3）データ取得コンピュータと接続されている。遠隔測定システムにより、通常の生育環境で意識のある動物の血圧、心拍数および体動を連続的に記録することが可能になる。
【０１９２】
試験は、体重200g超の成体雌ウィスターラットで行う。送信機埋め込み後、実験動物を3型Makrolonケージに単独で収容する。これらの動物は標準的な飼料および水を自由に入手できる。実験場の昼／夜リズムは、午前6：00および午後7：00に室内照明によって変化させる。
【０１９３】
送信機埋め込み：
使用する遠隔送信機（TA11 PA−C40、DSI）を、最初の実験使用の少なくとも14日前に実験動物に無菌条件下で外科的に埋め込む。創傷が治癒し、埋込物が定着した後、このように計装した動物を反復して使用することができる。
【０１９４】
埋め込みのために、絶食動物をペントバルビタール（Nembutal（登録商標）、Sanofi、50mg／kg腹腔内）で麻酔し、腹部の広い面積にわたって剪毛および消毒する。腹腔を白線に沿って開いた後、システムの液体充填測定カテーテルを、分岐より上に頭蓋方向に下行大動脈へ挿入し、組織接着剤（VetBonD（商標）、3M）によって固定する。送信機ハウジングを腹壁筋に腹腔内固定し、創傷を一層ずつ閉じる。手術後に、感染症予防のための抗生物質（Oxytetracyclin（登録商標）10％、60mg／kg皮下、0.06ml／100g体重、Beta−Pharma GmbH、ドイツ）および鎮痛薬（Rimadyl（登録商標）、4mg／kg皮下、Pfizer、ドイツ）を投与する。
【０１９５】
物質および溶液：
特に明示しない限り、試験する物質は、各場合で動物の群（n＝6）に経管栄養によって経口投与する。5ml／kg体重の投与量によると、試験物質を適当な溶媒混合物に溶解または0.5％チロースに懸濁する。動物の溶媒処理群を対照として使用する。
【０１９６】
試験手順：
遠隔測定システムを24匹の動物に構成する。各実験を実験番号で記録する。
【０１９７】
システムにおいて生きている計装ラットの各々に、別個の受信アンテナ（1010 Receiver、DSI）を割り当てる。埋め込まれた送信機は、設置された磁気スイッチを介して外部から作動させることができ、実験のプレラン中に送信に切り替える。発せられるシグナルは、データ取得システム（Dataquest（商標）A. R. T. for Windows（商標）、DSI）によってオンラインで検出し、適宜加工することができる。データは、各場合でこの目的のために作成され、実験番号を有するファイルに保管する。
【０１９８】
標準的手順では、以下を各場合で10秒間測定する：（1）収縮期血圧（SBP）、（2）拡張期血圧（DBP）、（3）平均動脈圧（MAP）、（4）心拍数（HR）および（5）活動（ACT）。
【０１９９】
測定値の取得をコンピュータ制御下5分間隔で反復する。絶対値として得られたソースデータを、測定中の大気圧を用いて図で補正し（Ambient Pressure Reference Monitor、APR−1）、個々のデータとして保管する。さらなる技術的詳細は、製造業者である企業（DSI）の膨大な数のドキュメンテーションに示されている。
【０２００】
特に指示しない限り、試験物質は実験日の午前9：00に投与する。投与後、上記パラメータを24時間にわたって測定する。
【０２０１】
評価：
実験の終了後、取得した個々のデータを、分析ソフトウェア（Dataquest（商標）A. R. T. 4. 1 Analysis）を用いてソートする。物質投与2時間前の時点でブランク値をとるので、選択されるデータセットは実験日の午前7：00から翌日の午前9：00までの期間を包含する。
【０２０２】
データを平均値（15分平均）の決定によって規定期間にわたって平滑化し、テキストファイルとしてデータ記憶媒体に移す。このように予備ソートし、圧縮した測定値をエクセルテンプレートに移し、作表する。実験の各日について、得られたデータを、実験の番号を有する専用ファイルに保管する。結果および試験プロトコルを、番号によりソートした用紙型のファイルに保管する。
【０２０３】
文献：
K. Witte、K. Hu、J. Swiatek、C. Mussig、G. ErtlおよびB. Lemmer、Experimental heart failure in rats：effects on cardiovascular circadian rhythms and on myocardial β-adrenergic signaling、Cardiovasc. Res. 47（2）：350〜358（2000）。
【０２０４】
C．医薬組成物についての実施例
本発明による化合物を、以下の通り医薬製剤に変換することができる：
【０２０５】
錠剤：
組成：
本発明による化合物100mg、乳糖（一水和物）50mg、コーンスターチ（天然）50mg、ポリビニルピロリドン（PVP25）（BASF、Ludwigshafen、ドイツ）10mgおよびステアリン酸マグネシウム2mg。
【０２０６】
錠剤重量212mg。直径8mm、曲率半径12mm。
【０２０７】
製造：
本発明の化合物、乳糖およびスターチの混合物をPVPの水中5％溶液（w／w）を用いて顆粒化する。顆粒を乾燥させ、次いで、ステアリン酸マグネシウムと5分間混合する。この混合物の従来の打錠機で圧縮する（錠剤のフォーマットについては上記参照）。圧縮に使用するガイド値は、15kNの押圧とする。
【０２０８】
経口投与することができる懸濁剤：
組成：
本発明による化合物1000mg、エタノール（96％）1000mg、Rhodigel（登録商標）（FMC、Pennsylvania、米国製のキサンタンガム）400mgおよび水99g。
【０２０９】
経口懸濁剤10mlは、本発明による化合物100mgの1回量に相当する。
【０２１０】
製造：
Rhodigelをエタノールに懸濁し、本発明による化合物を懸濁液に添加する。攪拌しながら水を添加する。Rhodigelの膨潤が完了する前に混合物を約6時間攪拌する。
【０２１１】
経口投与用の液剤：
組成：
本発明による化合物500mg、ポリソルベート2.5gおよびポリエチレングリコール400 97g。経口液剤20gは、本発明による化合物100mgの1回量に相当する。
【０２１２】
製造：
本発明による化合物を、攪拌しながらポリエチレングリコールとポリソルベートの混合物に懸濁する。本発明による化合物の溶解が完了するまで攪拌操作を継続する。
【０２１３】
静脈内液剤：
本発明による化合物を、生理学的に許容される溶媒（例えば、等張食塩水液、ブドウ糖液5％および／またはPEG400溶液30％）に、飽和溶解度未満の濃度で溶解する。この溶液を滅菌濾過に供し、滅菌およびパイロジェンフリー注射容器に分注する。