(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記の組成の水からなる、化粧剤又は皮膚科用剤であって、
前記水が、下記の組成、即ち
カルシウム（Ｃａ２＋）６．４ｍｇ／ｌ、
塩素（Ｃｌ−）１３ｍｇ／ｌ、
マグネシウム（Ｍｇ２＋）２．４ｍｇ／ｌ、
カリウム（Ｋ＋）０．６ｍｇ／ｌ、
ナトリウム（Ｎａ＋）１２ｍｇ／ｌ、
重炭酸塩（ＨＣＯ３−）、
硫酸塩（ＳＯ４２−）３．４ｍｇ／ｌ、を有し、
前記水が、６２ｍｇ／ｌの全溶解固形分（ＴＤＳ）濃度を有し、
前記水が、８．４のｐＨを有し、
皮膚の色素斑、皮膚の色素沈着過剰な領域、皮膚の色素沈着過剰領域の呈色、薬物誘発性光線皮膚症、肝斑、光線性角化症、日光黒子、瘢痕若しくは火傷から生じる色素斑、アレルギー若しくは光毒性反応により誘発される色素斑、又は皮膚の脱色領域の周辺の色素沈着を、予防し又は低減するため、
に用いられる、化粧剤又は皮膚科用剤。
【請求項２】
請求項１に記載の化粧剤又は皮膚科用剤を含む、化粧品用又は皮膚科用組成物。
【請求項３】
組成物の全重量に対する前記水の重量濃度が１０％〜９９％である、請求項２に記載の化粧品用又は皮膚科用組成物。
【請求項４】
局所組成物である、請求項２に記載の化粧品用又は皮膚科用組成物。
【請求項５】
少なくとも１種の他の活性剤、又は、化粧品用として若しくは皮膚科用として許容される少なくとも１種の添加物をさらに含む、請求項２に記載の化粧品用又は皮膚科用組成物。
【請求項６】
組成物の全重量に対する前記水の重量濃度が少なくとも１５％である、請求項２に記載の化粧品用又は皮膚科用組成物。
【請求項７】
溶液、美容液、ローション、スプレー、ミルク、水中油型エマルジョン、又はヒドロゲルの形で配合される、請求項２に記載の化粧品用又は皮膚科用組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明の主題は、特定の水を含有する化粧品用又は皮膚科用組成物と、化粧剤としてのこの水の使用と、この水の又はこの水を含有する組成物の皮膚又はケラチン線維への局所施用を含む、コスメティック又は皮膚科学的ケア方法でもある。
【０００２】
本発明は、皮膚又はケラチン線維を脱色、淡色化、又は漂白するための化粧剤としての、この特定の水の使用にも関し、また、化粧品抗加齢剤としてのこの水の使用にも関する。
【背景技術】
【０００３】
皮膚の内因性加齢、太陽からの紫外放射線への曝露など、皮膚が曝される外的侵襲、又はホルモン変動は、皮膚に有害な変化を誘発させる。これらの事象は、皮膚の組織、皮膚の目に見える質、及び皮膚の美しさを変化させ、皺、炎症反応、弾力性の損失、湿分の低下、或いは、特に手の甲、又は顔、首筋、若しくは頭頂部での褐斑病の出現、例えば黒子の出現として示される不均質な色素沈着など、特徴的な臨床的徴候の出現を誘発させる。
【０００４】
乾燥肌は、あまり明るくなく、輝きがなく、色素障害を受ける皮膚であることが知られている。ＵＶ放射線、風、温度の変動、及び汚染などの外的侵襲は、皮膚バリアを脆弱にすることによって、皮膚の乾きを引き起こし又は強化する。
【０００５】
本発明は、皮膚の内因性加齢又は外因性加齢と、皮膚の加齢に関連していてもいなくてもよい皮膚色素沈着状態にも焦点を当てる。
【０００６】
皮膚の外因性加齢は、太陽への曝露、光への曝露、ＵＶ放射線への曝露、ストレス、及び汚染などの過剰な化学的及び物理的刺激によって誘発され、この刺激によって、皮膚の正常な機能が損なわれ、皺や、引締まり、柔らかさ、及び弾力性の損失などの有害な変化の臨床的徴候の出現を引き起こすが、この変化は、表皮における有害な細胞及び組織変化、例えばケラチノサイト分化の崩壊、又は、メタロプロテイナーゼ（ＭＭＰ）、特にメタロプロテイナーゼ−１（ＭＭＰ−１）の酵素活性に起因する真皮でのコラーゲン線維の分解によって、本質的に引き起こされるものである。
【０００７】
同時に、内因性の又は年を経ることによる加齢は、内生要因が関わっている、遺伝子にプログラムされている加齢の結果である。この内因性加齢は、細胞代謝不全によって引き起こされ、その結果、ＤＮＡへの損傷の蓄積と、分解酵素の調節、酸化的ストレスに対する耐性、或いは機能的細胞外基質を合成する能力の損失などの生化学的経路の異常調節とをもたらし、これらは、例えば、皺及び／又は微細な線の出現や弾性繊維の変化などの組織学的変化によって反映されるものである。
【０００８】
ヒトの場合、色素沈着は、皮膚、毛包、又は毛髪などのケラチン物質における、メラニン色素の合成及び分布から生じる。この色素沈着は、多くの内部又は外部要因によって調節される。
【０００９】
皮膚及びケラチン線維の色素沈着は、特殊化細胞、メラノサイトの代謝活性から生じる。表皮のこれら樹状細胞は、胚形成中に、神経提の未分化前駆体、メラノブラストから生じる。メラノサイトは、メラノソームと呼ばれるオルガネラでメラニンを産生し、それらの樹状突起を介して隣接するケラチノサイトに移る。
【００１０】
メラニンの過剰産生は、皮膚の呈色の不均質性、例えば黒子を引き起こす。
【００１１】
審美的な又はコスメティックな目的で、
ｉ）皮膚の外因性及び／又は内因性加齢の徴候の出現を予防し又は遅延させ、又はｉｉ）その作用を低速化させ又は低減すること、及び／又は
ｊ）皮膚の色の均一性を改善し、ｉｉ）皮膚の艶を明るくし、又はｉｉｉ）皮膚の色素斑を修正し又は減少させること
を目的とする、多くの抗加齢及び／又は脱色技法と物質が知られている。
【００１２】
したがって、効果的で毒性のない新しい抗加齢及び／又は脱色物質への探求が、化粧品工業では必要である。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１３】
本発明の主な目的は、新規な化粧剤及びこの化粧剤を含有する化粧品用組成物の提供からなる技術的問題を解決することであり、前記化粧剤及び組成物は、皮膚の外因性及び／又は内因性加齢の徴候の出現を予防し又は遅延させ、或いは、その作用を低速化させ又は低減させようとするものである。
【００１４】
本発明の目的は、ｉ）皮膚の外因性及び／又は内因性加齢の徴候の出現を予防し又は遅延させるための、或いはｉｉ）少なくとも、そのような徴候を示す領域で、その作用を低速化させ又は低減させるための、コスメティック又は皮膚科学的ケア方法、特にコスメティックスキンケア方法を提供することでもある。
【００１５】
本発明の目的は、皮膚又はケラチン線維を漂白、淡色化、又は脱色する特性を有する化粧品用組成物を提供することからなる、技術的問題を解決することでもある。本発明の目的は、コスメティック又は皮膚科学用ケア方法、特に、少なくとも色素沈着過剰領域で皮膚又はケラチン線維の漂白、淡色化、又は脱色を実施することによる皮膚及びケラチン線維ケアの方法を、提供することでもある。
【００１６】
本発明の目的は、化粧品又は皮膚科学工業用に十分な量で入手可能な、新規で安価な化粧品活性剤と、容易に工業化可能なこの活性剤の使用とを見出すことでもある。
【課題を解決するための手段】
【００１７】
したがって本発明の主題は、特定の水の、化粧剤としての使用と、外因性及び／又は内因性皮膚加齢を予防し修復する特性を有するこの水を含有する化粧品用組成物と、ケラチン物質へのこの水又はこの組成物の局所施用を含むコスメティック又は皮膚科学的ケア方法とでもある。
【００１８】
本発明の主題は、皮膚及び／又はケラチン線維を漂白し、淡色化し、又は脱色する特性を有する化粧品用又は皮膚科用組成物でもある。
【００１９】
本発明の発明者らは、非常に驚くべきことに、以下に続く説明で「本発明の水」とも呼ばれるこの特定の水が：
正常なヒトケラチノサイト（ＮＨＫ）では、ＨＳＰ−７０（熱ショックタンパク質  ７０ＫＤａ、又はＨＳＰＡ１Ａ／ＨＳＰＡ１Ｂ）をコードする遺伝子及び／又はインボルクリンをコードする遺伝子の発現に対する調節作用と、
正常なヒト線維芽細胞（ＮＨＦ）では、ＭＭＰ−１をコードする遺伝子及び／又はＭＭＰ−３をコードする遺伝子の発現の調節作用と
を有することを発見した。
【００２０】
本発明者らは、本発明により使用される水が、ＨＳＰ−７０及びインボルクリンをコードする遺伝子の産物の発現の増加を誘発し、ＭＭＰ−１及びＭＭＰ−３をコードする遺伝子の発現の阻害を引き起こすことを実証した。ＨＳＰ−７０をコードする遺伝子の発現の増加は、ケラチノサイト上で、ストレス及び外的侵襲に対するより良好な耐性を与えるが、これは例えばアポトーシスの減少により反映させることができる。これらの条件下で、ケラチノサイトは、細胞外基質分解及びメラニン形成の刺激に関わる炎症促進因子であるサイトカイン及びケモカインの分泌が少なくなる。同様に、ケラチノサイト分化では重要な因子であるインボルクリンをコードする遺伝子の発現産物の刺激によって、外的侵襲に対して保護する表皮バリアが形成される。例えばＵＶ曝露又は酸化的ストレスに応答して活性化する、細胞外基質分解酵素であるメタロプロテイナーゼ１及び３をコードする遺伝子の産物の低減は、これら酵素の発現の減少をもたらし、その結果、例えばコラーゲンの分解を介した細胞外基質分解の低減をもたらす。
【００２１】
これらの作用全ては、皮膚保護と、皮膚の色素障害及び外因性及び／又は内因性加齢に対する予防との活性の重要な因子である、皮膚ホメオスタシス及び表皮の増殖／分化平衡を維持する。
【００２２】
本発明者らは、非常に驚くベきことに、本発明の水が、正常なヒトメラノサイト（ＮＨＭ）では、メラニン形成の重要な酵素であるチロシナーゼ関連タンパク質１（ＴＲＰ−１）をコードする遺伝子及び／又はチロシナーゼをコードする遺伝子の発現の調節作用を有することも発見した。
【００２３】
本発明者らは、本発明により使用される水が、ＴＲＰ−１及びチロシナーゼ遺伝子の発現に対して阻害効果を発揮することを実証した。メラニン形成に関与するタンパク質をコードする遺伝子の発現に対するそのような阻害効果は、皮膚及び／又はケラチン線維を漂白し、淡色化し、又は脱色する活性を誘発する、メラニン形成の阻害を実施することを可能にする。
【図面の簡単な説明】
【００２４】
【図１】正常なヒトケラチノサイト（ＮＨＫ）のＨＳＰ  ７０（ＨＳＰＡ１Ａ／ＨＳＰＡ１Ｂ）及びインボルクリン（ＩＶＬ）をコードする遺伝子発現に対する、「アイスランド水」又は「アイスランディックグレーシャル（登録商標）水」と呼ばれる本発明の水（ＥＩ）の作用を表すヒストグラムに関する図である。この図は、より詳細には、８時間処理した後の、ＮＨＫ中のＨＳＰ−７０及びインボルクリンをコードする遺伝子の転写物のレベルに対するアイスランド水の作用に関する。図１に示される結果は、ＧＡＰＤＨ参照遺伝子を用いて標準化された処理／未処理（ＮＴ）の比に従って表される。
【図２】正常なヒト線維芽細胞（ＮＨＦ）のＭＭＰ−１及びＭＭＰ−３をコードする遺伝子の発現に対する、本発明の水（ＥＩ）の作用を表すヒストグラムに関する図である。この図２は、より詳細には、２４時間の処理の、ＮＨＦ中のＭＭＰ−１及びＭＭＰ−３遺伝子の転写物のレベルに対するアイスランド水の作用に関する。図１及び図２に示される結果は、ＧＡＰＤＨ不変参照遺伝子の発現を用いて標準化された処理／未処理（ＮＴ）の比に従って表される。
【図３】正常なヒトメラノサイトのチロシナーゼをコードする遺伝子の発現に対する、本発明の水（ＥＩ）の作用を表すヒストグラムに関する図である。特に、図３は、２４時間処理された正常なヒトメラノサイト中のチロシナーゼ遺伝子の転写物のレベルに対する、アイスランド水の作用に関する。
【図４】正常なヒトメラノサイトのチロシナーゼをコードする遺伝子の発現に対する、ミリキュー（Ｍｉｌｌｉ−Ｑ）（登録商標）水（ＥＭ）の作用を表すヒストグラムに関する図である。特に図４は、２４時間処理された正常なヒトメラノサイト中のチロシナーゼ遺伝子の転写物のレベルに対する、ミリキュー（登録商標）水の作用に関する。
【図５】正常なヒトメラノサイトのＴＲＰ−１をコードする遺伝子の発現に対する、本発明の水（ＥＩ）の作用を表すヒストグラムに関する図である。特に図５は、２４時間処理した正常なヒトメラノサイト中のＴＲＰ−１遺伝子の転写物のレベルに対する、アイスランド水の作用に関する。
【図６】正常なヒトメラノサイトのチロシナーゼをコードする遺伝子の発現に対する、本発明の水（ＥＩ）の作用を表すヒストグラムに関する図である。特に図６は、２４時間処理した正常なヒトメラノサイト中のチロシナーゼ遺伝子の転写物のレベルに対する、アイスランド水の作用に関する。
【図７】２４時間処理した正常なヒトメラノサイトのチロシナーゼをコードする遺伝子の発現に対する、本発明の水を含めた様々な水の作用を表すヒストグラムに関する図である。図３〜７に示される結果は、β−２ミクログロブリン（β２−ｍ）不変参照遺伝子の発現を用いて標準化された比［処理／未処理（ＮＴ）］によって表される。図３〜７において、処理した細胞と未処理の細胞（ＮＴ）との間の転写作用を比較するのに、ステューデント統計検定を使用した。
【発明を実施するための形態】
【００２５】
第１の主題によれば、本発明は、水を含む化粧品用又は皮膚科用組成物と、化粧品用又は皮膚科用組成物での水の使用とに関し、水は：
７．６〜１０の間、好ましくは７．８〜８．８の間、より好ましくは７．８〜８．６の間のｐＨと、
１０〜２５０ｍｇ／ｌの間、好ましくは２０〜１００ｍｇ／ｍｌの間の全溶解固形分（ＴＤＳ）濃度と
を有する。
【００２６】
組成物の全重量に対する水の重量濃度は、好ましくは１０％〜９９％、より好ましくは１５％〜９５％、最も好ましくは３０％〜８５％である。
【００２７】
組成物の全重量に対する水の重量濃度は、例えば１０％〜９９％、１５％〜９５％、４０％〜８５％、又は６０％〜８０％である。
【００２８】
物理化学的分析から得られる様々なパラメータに応じて水を定義することが可能であり、特に：
ｍｇ／ｌを単位として表され、下記の分類を有する、その全溶解固形分（ＴＤＳ）濃度：
【表１】
0006351023.tif 000002
下記の分類を有するそのｐＨ：
【表２】
0006351023.tif 000003
に応じて定義することが可能である。
【００２９】
有利には、本発明の水は、下記の濃度、即ち：
３〜１４ｍｇ／ｌの間、好ましくは４〜１０ｍｇ／ｌの間のカルシウム（Ｃａ２＋）；
２〜１６ｍｇ／ｌの間、好ましくは８〜１４ｍｇ／ｌの間の塩化物（Ｃｌ−）；
０．８〜５ｍｇ／ｌの間、好ましくは０．８〜３ｍｇ／ｌの間のマグネシウム（Ｍｇ２＋）；
０．０１〜２ｍｇ／ｌの間、好ましくは０．１〜１ｍｇ／ｌの間のカリウム（Ｋ＋）；
２〜１４ｍｇ／ｌの間、好ましくは８〜１３ｍｇ／ｌの間のナトリウム（Ｎａ＋）；
０〜５０ｍｇ／ｌの間、好ましくは１０〜４０ｍｇ／ｌの間の重炭酸塩（ＨＣＯ３−）；
１〜８ｍｇ／ｌの間、好ましくは２〜５ｍｇ／ｌの間の硫酸塩（ＳＯ４２−）
を含む。
【００３０】
好ましくは、本発明の水は、７．９〜８．４の間のｐＨ、又は８．２〜８．８の間のｐＨを有する。
【００３１】
本発明の水は、有利には、５０〜１００ｍｇ／ｌの間、好ましくは４０〜８０ｍｇ／ｌの間、より好ましくは５５〜７５ｍｇ／ｌの間の全溶解固形分（ＴＤＳ）濃度を有する。
【００３２】
有利には、本発明の水は、特定の源泉から生じる水である。
【００３３】
「源泉からの水」という表現は、有利にはヒトが消費するのに自然に適した、地下水から得られた水を意味するものである。この水は、例えばボーリングによって地中深い場所から、或いは、例えばリサージェンスの場合には地表で取り出すことができる。
【００３４】
第１の好ましい変形例によれば、本発明の水は、アイスランド、Ｏｌｆｕｓ地方のＨｌｉｄａｒｅｎｄｉ（「Ｈｌｉｄａｒｅｎｄｉ」とも綴る。）源泉から抽出される。この源泉は、火山性の地面での雨水の流出と雪及び氷の融解によって供給される。
【００３５】
この水は、Ｉｃｅｌａｎｄｉｃ  Ｗａｔｅｒ  Ｈｏｌｄｉｎｇｓ  ｅｈｆ社からアイスランディックグレーシャル（Ｉｃｅｌａｎｄｉｃ  Ｇｌａｃｉａｌ）（登録商標）という名称で販売され、例えば、フランスでは、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｂｒｅｗｅｒｉｅｓ  ＆  Ｂｅｅｒｓ（ＩＢＢ），Ｒａｉｍｂｅａｕｃｏｕｒｔ  ５９２８３−Ｆｒａｎｃｅにより流通がなされる。
【００３６】
この水は、特に、下記の組成により特徴付けることができ：
カルシウム（Ｃａ２＋）約６．４ｍｇ／ｌ；
塩素（Ｃｌ−）約１３ｍｇ／ｌ；
マグネシウム（Ｍｇ２＋）約２．４ｍｇ／ｌ；
カリウム（Ｋ＋）約０．６ｍｇ／ｌ；
ナトリウム（Ｎａ＋）約１２ｍｇ／ｌ；
重炭酸塩（ＨＣＯ３−）；
硫酸塩（ＳＯ４２−）約３．４ｍｇ／ｌ；
ＴＤＳ約６２ｍｇ／ｌ；
約８．４のｐＨを有する。
【００３７】
第２の好ましい変形例によれば、本発明の水は、アイスランドのＨｅｉｄｍｏｒｋに位置する源泉から抽出される。
【００３８】
この水は、Ｉｃｅｌａｎｄｉｃ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｉｎｃ．社、ＵＳＡからアイスランドスプリング（Ｉｃｅｌａｎｄ  Ｓｐｒｉｎｇ）（登録商標）という名称で販売される。
【００３９】
この水は、特に、下記の組成により特徴付けることができ：
【００４０】
カルシウム（Ｃａ２＋）約４．６ｍｇ／ｌ；
塩素（Ｃｌ−）約１１．０ｍｇ／ｌ；
マグネシウム（Ｍｇ２＋）約０．９ｍｇ／ｌ；
カリウム（Ｋ＋）約０．５ｍｇ／ｌ；
ナトリウム（Ｎａ＋）約１２ｍｇ／ｌ；
硫酸塩（ＳＯ４２−）約２．３ｍｇ／ｌ；
ＴＤＳ約４８ｍｇ／ｌ；
約８．７のｐＨを有する。
【００４１】
第３の変形例によれば、本発明の水は、ｔｈｅ  Ｐａｒｍａ  Ａｐｐｅｎｉｎｅｓ，Ｅｍｉｌｉａ−Ｒｏｍａｇｎａ，ＩｔａｌｙのＭｏｎｔｅ  Ｚｕｃｃｏｎｅに位置する源泉から抽出される。
【００４２】
この水は、Ｎｏｒｄａ社からデュケール（Ｄｕｃａｌｅ）（登録商標）という名称で販売される。
【００４３】
この水は、特に、下記の組成により特徴付けることができ：
カルシウム（Ｃａ２＋）約１２．５ｍｇ／ｌ；
塩素（Ｃｌ−）約３．８ｍｇ／ｌ；
マグネシウム（Ｍｇ２＋）約１．３ｍｇ／ｌ；
カリウム（Ｋ＋）約０．４ｍｇ／ｌ；
ナトリウム（Ｎａ＋）約３ｍｇ／ｌ；
硫酸塩（ＳＯ４２−）約６．９ｍｇ／ｌ；
ＴＤＳ約５６ｍｇ／ｌ；
約８．３のｐＨを有する。
【００４４】
ここで示される値は平均値であり、水の組成は経時的に安定している。しかし、この平均値に関する変動、特に分析方法に結び付いている変動が、観察されることがある。
【００４５】
この組成を、カルシウム、カリウム、マグネシウム、及びナトリウムイオンに関してはＵＳ−ＥＰＡ（米国環境保護庁）の方法２００．７に従って；塩化物、硝酸、重炭酸、及び硫酸イオンに関してはＵＳ−ＰＥＡ３００．０に従って；全溶解固形分（ＴＤＳ）濃度に関してはＳＭ  ２５４０−Ｃに従って；及びｐＨに関してはＳＭ  ４５００−ＨＢに従って分析する。
【００４６】
ある特定の変形例によれば、本発明の水は、皮膚を保護し皮膚の外因性及び／又は内因性加齢を予防するための、又はその作用を低速化させるための化粧剤として使用され、及び／又は、皮膚及びケラチン線維（毛髪、体毛）を脱色、漂白、若しくは淡色化するための化粧剤として使用される。
【００４７】
好ましくは、本発明の水は、
ＨＳＰ−７０をコードする遺伝子及び／又はインボルクリンをコードする遺伝子の発現を刺激するための、及び／又は
ＭＭＰ−１及び／又はＭＭＰ−３及び／又はチロシナーゼ関連タンパク質−１（ＴＲＰ−１）及び／又はチロシナーゼをコードする遺伝子を阻害するための
化粧剤として使用される。
【００４８】
一実施形態によれば、本発明は、
皮膚及びケラチン線維を脱色、漂白、又は淡色化するための化粧剤としての、及び／又は
チロシナーゼ関連タンパク質−１（ＴＲＰ−１）をコードする遺伝子及び／又はチロシナーゼをコードする遺伝子の発現を阻害するための化粧剤としての
上記にて定義された水の、化粧品用組成物での使用に関する。
【００４９】
別の実施形態によれば、本発明は、皮膚を保護し皮膚の外因性及び／又は内因性加齢を予防するための、又はその作用を低速化させるための化粧剤としての、上記にて定義された水の使用に関する。
【００５０】
説明したように、この水は、皮膚を保護し皮膚の外因性及び／又は内因性加齢を予防するための薬剤としての、及び／又はメラニン形成阻害剤としての、活性を有する。
【００５１】
この活性により、水は、皮膚の内因性及び／又は外因性加齢の徴候の出現を予防し又は遅延させるための、又はその作用を低速化させるための活性剤として、及び／又は脱色、淡色化、若しくは漂白剤として、化粧品用又は皮膚科用組成物で使用することができる。
【００５２】
第２の主題によれば、本発明は、上記にて定義された少なくとも１種の水を含む、化粧品用又は皮膚科用組成物に関する。
【００５３】
１つの好ましい変形例によれば、組成物の全重量に対する本発明の水の重量濃度は、少なくとも１５％、好ましくは少なくとも４０％、好ましくは少なくとも６０％、より好ましくは少なくとも８０％である。
【００５４】
本発明の組成物は、有利には、活性剤として上記にて定義された少なくとも１種の水と、化粧品用として又は皮膚科用として許容される添加物などの少なくとも１種の添加物とを含む、化粧品用又は皮膚科用組成物である。
【００５５】
一実施形態によれば、組成物は、皮膚の内因性及び／又は外因性加齢の徴候の出現を予防し又は遅延させるための、又はその作用を低速化させるための組成物であり、及び／又は、皮膚及びケラチン線維を脱色、漂白、及び／又は淡色化するための組成物である。
【００５６】
本発明による組成物は、有利には、局所施用が意図される。
【００５７】
本発明の組成物は、有利には、局所組成物であってもよく、溶液、美容液、ローション、スプレー、ミルク、エマルジョン、好ましくは水中油タイプのもの、又はヒドロゲルの形で配合されていてもよい。
【００５８】
ある特定の実施形態によれば、本発明の組成物は、少なくとも１種の他の活性剤と、少なくとも１種の、化粧品用として又は皮膚科用として許容される添加物とを含む。
【００５９】
第１の態様によれば、組成物は、皮膚の内因性及び／又は外因性加齢の作用の出現を予防し又は遅延させること、又はその作用を低速化させることを目標とする。
【００６０】
また、組成物は、フリーラジカル捕捉活性を有する物質；皮膚の構造の維持を促進させること、及び／又は、真皮及び表皮の表層の細胞外基質の分解を制限すること、及び／又は、皮膚の保護、修正、若しくは再構成作用を得ることを目的とした活性を用いて、皮膚の加齢の作用、特に皺の形成を、低減し又は遅延させることが意図される物質；及び抗炎症活性を有する物質から選択することができる、１種又は複数の他の活性剤を、有利に含んでいてもよい。
【００６１】
第２の態様によれば、組成物は、皮膚及びケラチン線維を脱色すること、特に艶を明るくすること、又は皮膚の呈色の均一性を改善すること、或いは、色素皮膚斑若しくは色素沈着過剰な皮膚領域を修正し又は低減させることを目標とする。
【００６２】
組成物は、皮膚及びケラチン線維に対する脱色活性又は淡色化活性、又は、皮膚及びケラチン線維に対する漂白活性を有する物質から選択することができる、１種又は複数の他の活性剤を、有利に含んでいてもよい。
【００６３】
当業者に知られている脱色剤は、例えば、アルブチン、コウジ酸、アゼライン酸、フェルラ酸、ビタミンＢ３又はＰＰ、カルシウム−Ｄ−パンテテイン−Ｓ−スルホネート、レゾルシノール誘導体、レスベラトロール、カンゾウ又はトウグワの抽出物、α−リポ酸、リノール酸、ＥＤＴＡ（エチレンジアミン四酢酸）などの陽イオンキレート剤、大豆の抽出物、ウンシュウミカン（Ｃｉｔｒｕｓ  ｕｎｓｈｉｕ）の抽出物、ジアセチルボルジン、レチノール、プロピオン酸レチニル又はパルミチン酸レチニルなどのレチノールエステル、β−エクジソン、リン酸トコフェリル又はカリウムアスコルビルトコフェリルホスフェートなどのトコフェロール誘導体である。
【００６４】
組成物は、例えば、スリミング活性を有する物質；湿潤活性を有する物質；鎮静、鎮痛、又は弛緩活性を有する物質；特に顔の艶の輝きを改善するための、皮膚微小循環刺激活性を有する物質；油性肌をケアするための皮脂調節活性を有する物質；及び皮膚をクレンジングし又は汚れを取ることを目的とした物質から選択することができる、他の化粧品活性を有する他の活性剤を含んでいてもよい。
【００６５】
本発明による組成物は、ポリマー、界面活性剤、レオロジー剤、香料、電解質、ｐＨ調節剤、抗酸化剤、保存剤、染料、真珠光沢剤、及び顔料と、これらの混合物から有利に選択することができる、少なくとも１種の、化粧品用として又は皮膚科用として許容される添加物も有利に含む。
【００６６】
第３の主題では、本発明は、化粧品用若しくは皮膚科用組成物における、又は化粧品用若しくは皮膚科用組成物を調製するための、上述の本発明の水の使用に関し、前記組成物は：
皮膚の内因性及び／又は外因性加齢の徴候の出現を予防し又は遅延させ、又はその作用を低速化させること；
皮膚の色素斑（色素沈着過剰な領域）又は皮膚の色素沈着過剰領域の呈色、特に皮膚の様々な異常変色からなるもの、特に接触性皮膚炎、薬物誘発性光線皮膚症、肝斑、角化症、例えば老人性若しくは光線性角化症、老人性黒子（しみ）若しくは日光黒子、瘢痕若しくは火傷から生じる色素斑、又はアレルギー若しくは光毒性反応により誘発される色素斑を、予防し又は低減すること；
特に、白斑などの白皮によって誘発される、脱色領域の周辺の色素沈着を予防し又は低減すること；
皮膚呈色の均一性を改善すること；或いは皮膚の艶を明るくすること
を目的とするものである。
【００６７】
第４の主題によれば、本発明は、少なくとも１種の水の又は上記にて定義された組成物の局所施用を含む、非治療的コスメティックケア方法又は皮膚科学的トリートメントに関する。
【００６８】
ある特定の実施形態によれば、コスメティックケア方法は、治療効果を発揮することなく、特に：
皮膚の内因性及び／又は外因性加齢の徴候の出現を予防し又は遅延させ、又はその作用を低速化させるために；
皮膚の色素斑（色素沈着過剰な領域）又は皮膚の色素沈着過剰領域の呈色、特に皮膚の様々な異常変色からなるもの、特に接触性皮膚炎、薬物誘発性光線皮膚症、肝斑、角化症、例えば老人性若しくは光線性角化症、老人性黒子（しみ）若しくは日光黒子、瘢痕若しくは火傷から生じる色素斑、又はアレルギー若しくは光毒性反応により誘発される色素斑を、予防し又は低減するために；
特に、白斑などの白皮によって誘発される、脱色領域の周辺の色素沈着を予防し又は低減するために；
皮膚呈色の均一性を改善するために；或いは皮膚の艶を明るくするために、
皮膚の外観に審美上の改善をもたらすことを目的とする。
【００６９】
本発明は、特に、皮膚及びケラチン線維のためのコスメティックケア方法であって、皮膚の外因性及び／又は内因性加齢の徴候を示す皮膚の少なくとも１つの領域への、及び／又は身体若しくは顔の皮膚若しくはケラチン線維の少なくとも１つの色素沈着過剰領域への、上記にて定義された少なくとも１種の化粧品用組成物の有効量の施用を含む方法に関する。
【００７０】
本発明の最初の３つの主題に関連して記載された特徴全ては、本発明による非治療的コスメティックケア方法及び皮膚科学的トリートメント方法にも当てはまる。
【００７１】
本発明の任意の態様で、「有効量」という用語は、指定された化粧品作用を発揮するのに必要な量に、少なくとも等しい量を意味するものとする。
【００７２】
本発明のその他の目的、特徴、及び利点は、例として示される実施例を参照し本発明の範囲をいかようにも限定するものではない説明的な記載を読むことによって、当業者に明らかに理解されよう。
【００７３】
実施例は本発明の一体的部分を形成し、この記載から得られる任意の特徴は全体として、これら実施例も含め、任意の従来技術にも勝る新規なものと思われるもので、その機能及びその一般性に関して本発明の一体的部分を形成する。
【００７４】
さらに、これら実施例において、全てのパーセンテージは、他に指示しない限り重量を単位として示され、温度は、他に指示しない限り摂氏温度で表され、圧力は、他に指示しない限り気圧で表される。
【実施例】
【００７５】
以下の実施例において、単独で使用される「水」という用語は、精製された実験室用の水を指す。実施例で使用される本発明の水（ＥＩ）は、アイスランディックグレーシャル（登録商標）水であり、アイスランドに位置する源泉からの、「アイスランディックグレーシャル（登録）水」という名称で販売される水である。この水は、以下の実施例では「アイスランド水」とも呼ばれる。
【００７６】
実施例１−表皮の細胞及び組織保護に関わる遺伝子の発現に対する、本発明の水による処理の作用。
【００７７】
この研究の目的は、ＨＳＰ−７０及びインボルクリンをコードする遺伝子の発現に対する、本発明の水の作用を評価することであった。
【００７８】
１．細胞培養
使用した正常なヒトケラチノサイト（ＮＨＫ）を、白色人種の成人ドナーから得た。ＮＨＫを、培地１中に、２．５×１０４細胞／ウェルの割合で６ウェルプレートに播種した。培養条件当たり、ＮＨＫの３つのウェルに播種し、これは８時間の処理用であった。
【００７９】
２．処理
８０％の集密度で、細胞を、下記の培地１中で１５％のアイスランド水により、任意選択で処理した：
供給業者
エピリフェ（Ｅｐｉｌｉｆｅ）    Ｆｉｓｈｅｒ
サプリメント                    Ｆｉｓｈｅｒ
【００８０】
８時間処理した後の、トータルＲＮＡを抽出するために細胞を回収した。
【００８１】
３．ＰＣＲタクマン（Ｔａｑｍａｎ）低密度アレイ
【００８２】
３．１  トータルＲＮＡを得る
細胞培地を取り除き、ＲＬＴ溶解緩衝液（ヌクレオスピンＲＮＡトレースキットで供給された）２５０μｌを添加した。細胞を、セルスクレーパーを使用してか掻き取り、次いで細胞溶解産物を、１．２ｍｌのディープウェル（キットで供給された）に回収した。トータルＲＮＡを、ヌクレオスピンＲＮＡトレースキット（Ｍａｃｈｅｒｅｙ  Ｎａｇｅｌ）を備えたエピモーション（Ｅｐｉｍｏｔｉｏｎ）５０７５（Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ）を使用して抽出した。
【００８３】
得られたトータルＲＮＡ溶液について、バイオアナライザ２１００（Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用してアッセイを行いその品質を検証した。この機器を、特定結果分析ソフトウェア（２１００エキスパートソフトウェア）を有するコンピュータに接続した。この技法は、１２ウェルマイクロプレート（ＲＮＡ  ６０００ナノチップ）と、試薬のキット（ＲＮＡ  ６０００  Ｎａｎｏ  Ｒｅａｇｅｎｔｓ  ＆  Ｓｕｐｐｌｉｅｓ）、即ち真核トータルＲＮＡをアッセイするのに特異的なものを必要とした。
【００８４】
３．２  相補的ＤＮＡの合成
使用した逆転写（ＲＴ）キットは、高容量ｃＤＮＡ逆転写キット（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）であった。トータルＲＮＡ  １００ｎｇを水で希釈して、最終体積５０μｌを与えた。次いでこれらを２５℃で１０分間、次いで３７℃で２時間、下記の通り事前に調製された高容量逆転写キットからの５０μｌの２×反応混合物と共にインキュベートした。
【００８５】
試薬              体積
ＲＴ緩衝液          １０μｌ
ｄＮＴＰ緩衝液        ４μｌ
ランダムプライマー  １０μｌ
ＲＮＡｓｅアウト      １μｌ
ＲＴ                  ５μｌ
Ｈ２Ｏ                ２０μｌ
【００８６】
３．３  ＰＣＲタクマン低密度アレイ
各ＲＴ  ５０μｌをサンプリングし、「タクマン遺伝子発現マスターミックス」５０μｌと混合した。均質化後、１００μｌを微小流体カード上に堆積させ、後者を遠心分離し、次いで密封した。
【００８７】
対照遺伝子を使用して、結果を標準化した。ＰＣＲを、ＡＢＩ  Ｐｒｉｓｍ  ７９００ＨＴ配列検出システム装置で、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓから提供されたプロトコルに従い実施した。ｑＰＣＲのステップは、５０℃で２分、９４．５℃で１０分、次いで９７℃で３０秒、５９．７℃で１分を、４０サイクルにわたり行った。
【００８８】
４．結果の分析
ＲＴ−ＰＣＲ  ＴＬＤＡ法では、定量を、ΔＣｔ比較法を使用して実施する。この方法は、各遺伝子ごとのバックグラウンドノイズを考慮するＲＱマネジャーソフトウェアを使用して、カードの各遺伝子のサイクル数（Ｃｔ）を決定する。このサイクル数（Ｃｔ）を、細胞内の不変のＧＡＰＤＨハウスキーピング遺伝子のＣｔに対して標準化した。
【００８９】
結果を図１に示す。
【００９０】
本発明の水、アイスランディックグレーシャル（登録商標）水による処理の後に観察された、ＨＳＰ  ７０をコードする遺伝子の発現の増加（×２．１）は、ストレス及び外的侵襲に対するより良好な耐性を、ケラチノサイトに与えた。その結果、ケラチノサイトは、細胞外基質の分解及びメラニン形成の刺激に関与する炎症性因子である、サイトカイン及びケモカインを少ない量で分泌することができる。同様に、ケラチノサイト分化の重要な因子である、インボルクリンをコードする遺伝子の発現産物の、本発明の水、アイスランディックグレーシャル（登録商標）水で処理した後に観察された刺激（×１．８）によれば、外的侵襲に対して保護する表皮バリアの形成が可能になる。
【００９１】
実施例２−真皮の細胞及び組織の保護に関与する遺伝子の発現に対する、本発明の水による処理の作用。
【００９２】
この研究の目的は、単層で培養された正常なヒト線維芽細胞（ＮＨＦ）の培養物に対する、アイスランディックグレーシャル（登録商標）水の生物活性を研究することであった。実施例１の場合と同様に、この研究は、ＴＬＤＡ技術を用いて実施され、ＴＬＤＡはタクマン低密度アレイ（Ｔａｑｍａｎ  Ｌｏｗ  Ｄｅｎｓｉｔｙ  Ａｒｒａｙ）に因んだものである。アイスランディックグレーシャル（登録商標）水による２４時間にわたる処理に応答した、線維芽細胞関連の生物学的経路に特異的なタンパク質をコードする、遺伝子のパネルの発現の調節について研究した。
【００９３】
メタロプロテイナーゼ１及び３（ＭＭＰ−１及びＭＭＰ−３）は同じタンパク質分解カスケードに属し、コラーゲン、より詳細にはコラーゲン１及び３の分解と協調して働く。これらは特に、皮膚の加齢中に及びＵＶ曝露に応答して誘発される。したがって、真皮細胞外基質の分解を制御するように、発現を阻害することを望むことが戦略である。
【００９４】
１．材料及び方法
【００９５】
細胞培養
【００９６】
使用される正常なヒト線維芽細胞（ＮＨＦ）は、白色人種の成人ドナーから得た。
【００９７】
細胞を、下記の組成を有する培地１中に、２．５×１０４細胞／ウェルの割合で６ウェルプレートに播種した：
培地１
供給業者        最終濃度
ＦＣＳ    Ｂｉｏｗｅｓｔ  １０％
ＤＭＥＭ  Ｆｉｓｈｅｒ    ｑｓ
【００９８】
ＮＨＦの３つのウェルは、培養条件当たりで播種した。
【００９９】
処理の２４時間前に、集密状態で、細胞からウシ胎児血清が枯渇した（下記の組成を有する培地２）：
培地２
供給業者
ＤＭＥＭ  Ｆｉｓｈｅｒ
【０１００】
２．処理
ウシ胎児血清を含まずに培養した２４時間後、細胞を、培地２中で１５％のアイスランディックグレーシャル（登録商標）水により、任意選択で処理した。８及び２４時間処理した後の、トータルＲＮＡを抽出するために細胞を回収した。
【０１０１】
３．ＰＣＲタクマン低密度アレイ
この方法は、実施例１の場合に従った。
【０１０２】
４．結果
２４時間処理した後の、トータルＲＮＡを抽出するためにＮＨＦを回収した。
【０１０３】
得られた結果は、１５重量％のアイスランディックグレーシャル（登録商標）水によるＮＨＦの処理によって、２４時間処理した後にＭＭＰ−１及びＭＭＰ−３の発現を著しく低減させる（それぞれ４４％及び４０％）ことが可能になることを実証する（図２）。
【０１０４】
これら２種のメタロプロテイナーゼの発現に対するアイスランディックグレーシャル（登録商標）水の作用は、ＥＣＭ分解に働きかけることによって皮膚の加齢を予防し又は低速化させるのに特に有利である。
【０１０５】
実施例３−メラニン形成及び皮膚色素沈着の欠陥に関与する遺伝子の発現に対する、本発明の水を含めた種々の組成の水による処理の作用。
【０１０６】
この研究の目的は、正常なヒトメラノサイト（ＮＨＭ）に関し、リアルタイム定量ＲＴ−ＰＣＲ（ｑＲＴ−ＰＣＲ）によって、チロシナーゼ関連タンパク質１（ＴＲＰ−１）又はチロシナーゼをコードする遺伝子の発現に対する活性剤、アイスランディックグレーシャル（登録商標）水の作用を評価することであった。
【０１０７】
この活性剤の作用を、本発明によらない水と、下記の試験において任意選択で比較した。
【０１０８】
細胞培養
ドナー１からの正常なヒトメラノサイト（ＮＨＭ）を、培養液中に置き、培地３（下記の組成）中に、２．５×１０５細胞／ウェルの割合で６ウェルプレートに播種した。３つのウェルを培養条件当たりに播種し、即ち；３つの未処理対照ウェル、及び２４時間の処理時間で処理した３つのウェルである。
【０１０９】
培地１の組成：
供給業者      最終濃度
グルタマックスを含む培地Ｅ−１９９  Ｆｉｓｈｅｒ
ウシ胎児血清                        Ａｂｃｙｓ    １０％
【０１１０】
培地２の組成：
供給業者      最終濃度
ＫＳＦＭ      Ｆｉｓｈｅｒ
下垂体抽出物  Ｆｉｓｈｅｒ  ５０μｇ／ｍｌ  ＫＳＦＭ
【０１１１】
培地３の組成：
供給業者      最終濃度
培地２                                ９０％
培地１                                １０％
ｂ−線維芽細胞成長因子  Ｆｉｓｈｅｒ  １０ｎｇ／ｍｌ
【０１１２】
メラノサイトの処理
播種した４８時間後、細胞を、本発明の水又はアイスランディックグレーシャル（登録商標）水とは異なる組成を有する水に接触させることによって処理し（パラグラフ１．１〜１．３に指定された処理条件）、培地３で希釈し、０．２２μｍフィルタに通して濾過した。未処理の対照も調製した。
【０１１３】
２４時間処理した後、トータルＲＮＡを抽出するために細胞を回収した。
【０１１４】
Ｒｎｅａｓｙキット（Ｑｉａｇｅｎ）を使用してトータルＲＮＡを得る
細胞培地を取り出し、ＲＬＴ溶解緩衝液（キットで供給された）３５０μｌを添加した。細胞を、セルスクレーパーを使用してか掻き取り、細胞溶解産物を、シリンジを使用して均質化した。
【０１１５】
トータルＲＮＡを、供給業者のプロトコルに従い抽出した。
【０１１６】
このように得られたトータルＲＮＡ溶液についてアッセイを行った。この技法は、１２ウェルマイクロプレート（ＲＮＡ  ６０００ナノチップ）と、試薬のキット（ＲＮＡ  ６０００  Ｎａｎｏ  Ｒｅａｇｅｎｔｓ  ＆  Ｓｕｐｐｌｉｅｓ）、即ち真核トータルＲＮＡをアッセイするのに特異的なものを必要とした。
【０１１７】
相補的ＤＮＡの合成
使用した逆転写（ＲＴ）キットは、「高容量ｃＤＮＡ逆転写キット、１０００反応」（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）であり、供給業者のプロトコルに従い使用される。ＤＮＡｓｅの後、トータルＲＮＡ  １００ｎｇを水で希釈して、最終体積２５μｌを得た。次いでこれを２５℃で１０分間、次いで３７℃で２時間、下記の通り予め調製された、容量ｃＤＮＡアーカイブキットからの２５μｌの２×反応混合物と共にインキュベートした。
【０１１８】
試薬                体積
ＲＴ緩衝液          １０μｌ
ｄＮＴＰ緩衝液        ４μｌ
ランダムプライマー  １０μｌ
ＲＮＡｓｅアウト      １μｌ
ＲＴ                  ５μｌ
Ｈ２Ｏ                ２０μｌ
【０１１９】
リアルタイム定量ＲＴ−ＰＣＲ
分析に使用される試薬
供給業者
キットＲＮｅａｓｙ                        Ｑｉａｇｅｎ
ＲＮＡｓｅアウト                          Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ
タクマン高速ユニバーサルマスターミックス  Ａｐｐｌｉｅｄ
タクマンβ２−ｍ発現                      Ａｐｐｌｉｅｄ
タクマンＴＲＰ−１発現                    Ａｐｐｌｉｅｄ
タクマンチロシナーゼ発現                  Ａｐｐｌｉｅｄ
【０１２０】
処理の影響を、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓからの７９００ＨＴ高速９６ウェルブロックを用いたリアルタイム定量ＰＣＲ（ｑＲＴ−ＰＣＲ）によって評価した。
【０１２１】
１反応に関する反応混合物の調製：
タクマン高速ユニバーサルＰＣＲマスターミックス（２×）  １０μｌ
タクマン遺伝子発現アッセイ                                １μｌ
Ｈ２Ｏ                                                    ４μｌ
【０１２２】
混合物１５μｌを、７９００ＨＴ機器用に特別に設計された９６ウェルプレートのウェルに置き、水５μｌ（ブランク用）又はｃＤＮＡの連続希釈物５μｌ（レンジ用）又は精製水で１／５０に希釈したサンプル５μｌを、遺伝子とは無関係に、対応するウェルに添加した。
【０１２３】
結果の分析
各サンプルごとに、シグナルが現れるサイクル数を、ＳＤＳ  ２．３ソフトウェア（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を使用して決定し、較正範囲が確立された較正線を用いて、転写物のコピー数に関する濃度をしたがって計算することができた。
【０１２４】
同じアッセイで、得られたＴＲＰ−１及びチロシナーゼ転写物の発現レベルを、β２−ｍ遺伝子に関して得られた値に対して標準化した。この遺伝子は、その発現が構成的であり不変であり、アッセイ間での量のいかなるばらつきも、特に、異なる逆転写効率に起因するばらつきをなくすことを可能にした。
【０１２５】
統計分析
統計的に有意な転写活性のばらつきを、ステューデント検定を適用することによって評価した。
【０１２６】
各条件は、３重に実施した（３つの未処理対照及び３つの処理のもの）。フィッシャー検定を、２つのデータマトリックスを比較することによって、まず最初に適用した。フィッシャー検定が０．０５よりも大きい場合、ステューデント検定での分散は２に等しかった。フィッシャー検定が０．０５未満であった場合、分散は３に等しかった。
【０１２７】
維持された転写のばらつきは、０．０５未満のステューデント検定を有するものであった。結果のセクションで示されたデータは、処理サンプル対未処理対照サンプル得られた量の比であり、全ては不変のβ２−ミクログロブリン（β２−ｍ）遺伝子と関連付けられる。
【０１２８】
結果
【０１２９】
１．１−２４時間処理した後のＮＨＭ中のチロシナーゼ遺伝子の発現に対する、ある濃度範囲のアイスランド水（本発明の水）による処理の効果
アイスランド水（本発明の水）の作用を、ミリキュー（登録商標）（供給業者Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）という名称で販売されている高度に精製された脱イオン水により発揮された作用と比較した。
【０１３０】
６ウェルプレートに播種した、ドナー１からの正常なヒトメラノサイトを、２４時間にわたり５又は１５％のアイスランド水又はミリキュー（登録商標）水で、３つにわたり集密状態で処理した。未処理の対照も調製した。
【０１３１】
チロシナーゼをコードする遺伝子をコードする転写物のレベルを、サンプルに関して測定し、不変のβ２−ｍ遺伝子をコードする転写物のレベルと関連付けた。
【０１３２】
得られた結果をヒストグラムの形に処理した。
【０１３３】
図３は、アイスランド水で２４時間処理した後の、１６％というチロシナーゼをコードする遺伝子の転写物のレベルの低下を示す。
【０１３４】
図４は、ミリキュー（登録商標）水が、チロシナーゼ遺伝子発現に何の効果も及ぼさないことを示す。
【０１３５】
ミリキュー（登録商標）水とは異なり、本発明の水は、メラニン形成で及び皮膚色素沈着で重要な酵素であるチロシナーゼをコードする遺伝子の発現を、著しく阻害することを可能にする。
【０１３６】
１．２−２４時間処理した後のＮＨＭ中のＴＲＰ−１をコードする遺伝子の発現に対する、本発明の水による処理の効果
６ウェルプレートに播種した、ドナー２から得た正常なヒトメラノサイトを、２４時間にわたり１５％のアイスランド水で３つにわたり集密状態で処理した。未処理の対照も調製した。ＴＲＰ−１遺伝子をコードする転写物のレベルをサンプルに関して測定し、不変のβ２−ｍ遺伝子をコードする転写物のレベルと関連付けた。
【０１３７】
得られた結果をヒストグラムの形に処理する。
【０１３８】
図５は、アイスランド水で２４時間処理した後の、４７．１０％というＴＲＰ−１遺伝子の転写物のレベルの低下を示す。
【０１３９】
本発明の水は、メラニン形成及び皮膚色素沈着に関与するＴＲＰ−１をコードする遺伝子の発現を著しく阻害することを可能にする。
【０１４０】
１．３−２４時間処理した後のチロシナーゼをコードする遺伝子の発現に対する、１５％での本発明の水による正常なヒトメラノサイトの処理の効果
６ウェルプレートに播種した、ドナー２から得た正常なヒトメラノサイトを、２４時間にわたり、１５％のアイスランド水で３つにわたり集密状態で処理した。未処理の対照も調製した。
【０１４１】
チロシナーゼ遺伝子をコードする転写物のレベルを、サンプルに関して測定し、不変のβ２−ｍ遺伝子をコードする転写物のレベルと関連付けた。
【０１４２】
得られた結果をヒストグラムの形で処理した。
【０１４３】
図６は、アイスランド水で２４時間処理した後の、３７．６０％というチロシナーゼをコードする遺伝子の転写物のレベルの低下を示す。
【０１４４】
１．４−２４時間処理した後のＮＨＭ中のチロシナーゼ遺伝子の発現に対する、本発明の水及び鉱水による処理の効果の比較
アイスランド水（本発明の水）によって発揮された作用を、本発明の水の特徴とは異なる特徴（組成、ｐＨ、ＴＤＳ）を有する「エビアン（Ｅｖｉａｎ）（登録商標）水」という名称で販売されている鉱水及び非常に純粋な氷河水により発揮された作用と比較した。下記の表３は、アイスランディックグレーシャル（登録商標）水（本発明の水）及び本発明によらないエビアン（登録商標）水のそれぞれの特徴を示す（データは、製造業者のウェブサイトで得られ、アドレスは下記の通りである。）。
【表３】
0006351023.tif 000004
【０１４５】
アイスランド水は、試験をした他の２種の水よりもアルカリ性が高いことに特に留意されたい。アイスランド水は、エビアン（登録商標）水よりも低い鉱物負荷を有する（カルシウム参照）。しかしアイスランド水は、非常に純粋であるという評判でありそのＴＤＳ値が４であるイスブル（Ｉｓｂｒｅ）（登録商標）グレイシャー水よりも多い鉱物を含有する。
【０１４６】
正常なヒトメラノサイトを、２４時間にわたり、１５％のアイスランド水又はエビアン（登録商標）水で３つにわたり集密状態で処理した。未処理の対照も調製した。
【０１４７】
チロシナーゼをコードする遺伝子をコードする転写物のレベルを、サンプルに関して測定し、不変のβ２−ｍ遺伝子をコードする転写物のレベルと関連付けた。
【０１４８】
得られた結果をヒストグラムの形に処理した。
【０１４９】
図７は、アイスランド水で２４時間処理した後の、１６％というチロシナーゼをコードする遺伝子の転写物のレベルの低下を示す。
【０１５０】
本発明の水であるアイスランディックグレーシャル（登録商標）水は、チロシナーゼをコードする遺伝子の発現を著しく阻害し、したがってメラニン形成及び皮膚色素沈着に作用することを可能にする。
【０１５１】
一方、より鉱物化された水（エビアン（登録商標））又は逆に非常に弱く鉱物化された水（イスブル（登録商標））又は全体的に鉱物が除去された水（ミリキュー（登録商標））は、チロシナーゼをコードする遺伝子の発現に何の作用も示さない。
【０１５２】
結論
この研究は、本発明の水が、正常なヒトメラノサイト（ＮＨＭ）中のチロシナーゼをコードする遺伝子及びチロシナーゼ関連タンパク質１（ＴＲＰ−１）をコードする遺伝子の転写物を、部分的に阻害することを示すことを可能にした。アイスランド水での２４時間にわたる処理は、本発明の特徴によらない特徴を有する水に関して示される作用とは対照的に、ＴＲＰ−１及びチロシナーゼをコードする遺伝子の発現に著しい低下をもたらす。
【０１５３】
したがって、本発明の水、特にアイスランディックグレーシャル（登録商標）水は、化粧品用組成物中の皮膚の脱色、漂白、又は淡色化活性剤として使用することができる。
【０１５４】
実施例４−本発明による化粧品配合物
組成物を下記の配合に従い調製し、パーセンテージは最終組成物に対する重量で表し、成分の名称は、その化学名、商標、又はＩＮＣＩ名に対応する。
【０１５５】
４．１−抗加齢美容液
抗加齢美容液を、下記の配合により調製した。
【０１５６】
重量％
グリセロール                                                  ５
ブチレングリコール                                            ３
ペンチレングリコール                                          ３
ポリグリセロール−３                                          ２．５
メチルグルセス−２０                                          １．８
デシルオキサゾリドン                                          １
フェノキシエタノール                                          ９
タルク                                                        １
レシチン                                                      １
カルボマー                                                    ０．５
ソルビトール                                                  ３
シリカ                                                        ０．２
アルミナ                                                      ０．２
水酸化ナトリウム                                              ０．２
アルギン                                                      ０．１
ポリビニルアルコール                                        ＜０．１
ヒアルロン酸ナトリウム                                      ＜０．１
ウスベニアオイ（Ｍａｌｖａ  ｓｙｌｖｅｓｔｒｉｓ）抽出物      ０．７
加水分解大豆粉                                              ＜０．１
アデノシン                                                  ＜０．１
アスコルビン酸                                              ＜０．１
オクラ（Ｈｉｂｉｓｃｕｓ  ｅｓｃｕｌｅｎｔｕｓ）果実の抽出物  ＜０．１
アイスランディックグレーシャル（登録商標）水                ７７
【０１５７】
ローションは、朝晩に顔に付ける、本発明の水を含む流体水性組成物である。本発明の水を含むその組成物は、皮膚の加齢の出現の徴候、特に皮膚の艶の輝き又は皮膚の引締まりの損失に対する予防的効果を可能にする。
【０１５８】
４．２−ライトな抗加齢クリーム
重量％
カプリル酸／カプリン酸トリグリセリド                        １０
グリセロール                                                  ５
セテアリールアルコール                                        ４
ブチレングリコール                                            ３
ペンチレングリコール                                          ３
マンゴー（Ｍａｎｇｉｆｅｒａ  ｉｎｄｉｃａ）バター            １．５
ステアリン酸グリセリル                                        １．２
デシルオキサゾリドン                                          １
ステアレス−２１                                              １
フェノキシエタノール                                          ０．９
セテアリールグルコシド                                        ０．８
水素化ココグリセリド                                          ０．７
タルク                                                        ０．６
ソルビトール                                                  ０．５
ジメチコン                                                    ０．５
パルミチン酸セチル                                            ０．３
アルギン                                                      ０．２
ココグリセリド                                                ０．２
シリカ                                                        ０．２
カルボマー                                                    ０．２
アルミナ                                                      ０．２
キサンタンガム                                                ０．１
ポリビニルアルコール                                          ０．１
二酸化チタン                                                  ０．１
トロメタミン                                                  ０．１
セルロースガム                                              ＜０．１
ヒアルロン酸ナトリウム                                      ＜０．１
ウスベニアオイ（Ｍａｌｖａ  ｓｙｌｖｅｓｔｒｉｓ）抽出物      ０．７
加水分解大豆粉                                              ＜０．１
アデノシン                                                  ＜０．１
アスコルビン酸                                              ＜０．１
オクラ（Ｈｉｂｉｓｃｕｓ  ｅｓｃｕｌｅｎｔｕｓ）果実の抽出物  ＜０．１
アイスランドスプリング（登録商標）水                        ７３
【０１５９】
連続水相が本発明の水からなるクリームを、朝、顔及び首筋に付け、皮膚の加齢の徴候を示す領域を特に重視して付けた。このようにすることによって、皮膚の外因性及び／又は内因性加齢に対する保護効果を得ることが可能になる。
【０１６０】
４．３−リッチな抗加齢クリーム
水中油型エマルジョンを、下記の組成に従い調製した：
【０１６１】
重量％
カプリル酸／カプリン酸トリグリセリド                        １５
グリセロール                                                  ５
セテアリールアルコール                                          ４
ブチレングリコール                                            ３
ペンチレングリコール                                          ３
マンゴー（Ｍａｎｇｉｆｅｒａ  ｉｎｄｉｃａ）バター            ２
ステアリン酸グリセリル                                        ２．２
水素化ココグリセリド                                          ２
ジメチコン                                                    １
パルミチン酸セチル                                            ０．６
デシルオキサゾリドン                                          １
ステアレス−２１                                              １
フェノキシエタノール                                          ０．９
セテアリルグリコシド                                          ０．８
タルク                                                        ０．６
ソルビトール                                                  ０．５
ココグリセリド                                                ０．５
シリカ                                                        ０．２
アルギン                                                      ０．３
カルボマー                                                    ０．２
キサンタンガム                                                ０．１
ポリビニルアルコール                                          ０．１
トロメタミン                                                  ０．１
セルロースガム                                              ＜０．１
ヒアルロン酸ナトリウム                                      ＜０．１
ウスベニアオイ（Ｍａｌｖａ  ｓｙｌｖｅｓｔｒｉｓ）抽出物      ０．７
加水分解大豆粉                                              ＜０．１
アデノシン                                                  ＜０．１
アスコルビン酸                                              ＜０．１
オクラ（Ｈｉｂｉｓｃｕｓ  ｅｓｃｕｌｅｎｔｕｓ）果実の抽出物  ＜０．１
デュケール（Ｄｕｃａｌｅ）（登録商標）水                      ５５
【０１６２】
水相が本発明の水を含んでいるリッチなクリームを、晩に、顔に付けた。このようにすることによって、皮膚の外因性及び／又は内因性加齢に対する予防的効果を得ることが可能になる。
【０１６３】
４．４−脱色フェイシャルデイゲルエマルジョン
ゲルエマルジョンを、下記の組成に従い調製した。
【０１６４】
重量％
グリセロール                                              ５
カプリル酸／カプリン酸／コハク酸トリグリセリド            ５
メトキシケイ皮酸オクチル                                  １
ジメチコンコポリオール                                    ０．５
アクリレート／Ｃ１０〜３０アルキルアクリレートクロスポリマー  ０．５
アスコルビル−２グルコシド                                ２
アイスランディックグレーシャル（登録商標）水            ９０
保存剤、香料、染料                                      ｑｓ
【０１６５】
多かれ少なかれ強度の放射線を日光から受け又は太陽から直接受けた何人かの個人は、明るい艶を保つこと及び色素斑の出現を避けることを望む。
【０１６６】
上記ゲルエマルジョンの使用は、この目的の達成を可能にする。この組成物を、朝、顔全体に付ける。この組成物は、顔のものであってもなくてもよい色素沈着に対して予防的に又は治療的に働く。
【０１６７】
４．５−色素斑を予防するＳＰＦ３０保護流体
保護流体を、下記の組成に従って調製した：
重量％
揮発性ペンタシクロメチコン                    ４９
二酸化チタン                                  １５
メトキシケイ皮酸オクチル                        ７．５
グリセロール                                    ５
フェニルトリメチコン                            ５
ジメチコンコポリオール                          ３
ポリ（メチルメタクリレート）                    ２．５
ブチルメトキシジベンゾイルメタン                １
アイスランディックグレーシャル（登録商標）水  １５
中和剤、香料、保存剤、抗酸化剤                ｑｓ
【０１６８】
保護流体は、強度の太陽放射線に曝される前に、この現象を引き起こす傾向がある個人で色素斑の出現を予防するために使用される。高濃度の日焼け止め剤の存在によって、メラニンのレベルの低下から生じる生来の保護の低下の補償が、可能になることに留意されたい。
【０１６９】
４．６−脱色フェイスクリーム
クリームを、下記の組成に従い調製した：
重量％
ステアリン酸グリセリル＋Ｐｅｇ−１００ステアレート  ５
水素化ポリイソブテン                                ４
マグネシウムアスコルビルホスフェート                ３
グリセリルトリカプリレート／カプレート              ３
スクアラン                                          ３
グリセロール                                        ２
蜜蝋                                                １
オクタン酸セテアリール                              １．５
セチルアルコール                                    １
ステアリルアルコール                                １
ジメチコン                                          １
キサンタンガム                                      ０．３
エチレンジアミン四酢酸                              ０．２
グリセルリチン酸ジカリウム                          ０．２
酢酸トコフェリル                                    ０．２
サリチル酸                                          １
クエン酸ナトリウム                                  ０．１
アイスランドスプリング（登録商標）水              ７０
中和剤、香料、保存剤                              ｑｓ
【０１７０】
水中油型エマルジョンの形をとるこのクリームを使用することにより、老人斑又は光線性色素斑を低減し又はなくすことによって皮膚の色素沈着のむらを処置することが可能になる。それによって、皮膚の呈色が均一になり、艶が明るくなる。
【０１７１】
４．７−艶を明るくするためのフェイスローション
ローションを、下記の組成に従い調製した：
重量％
エチルアルコール                                        ３０
ＰＰＧ−３ミリスチルエーテル                              ５
グリセロール                                              ２
カルボマー                                                ０．２
ブチレングリコール                                        ３
ポリソルベート２０                                        ０．２
カルシウムＤ−パンテテイン−Ｓ−スルホネート              ０．２
ウンシュウミカン（Ｃｉｔｒｕｓ  ｕｎｓｈｉｕ）の抽出物    ２
デュケール（登録商標）水                                ５６
中和剤、香料、保存剤                                    ｑｓ
【０１７２】
艶を明るくするためのこのローションは、化粧を落とした後及び皮膚のクレンジング後に使用される。
【０１７３】
４．８−ライトニングフェイス美容液
美容液を、下記の組成に従い調製した：
重量％
アイスランディックグレーシャル（登録商標）水            ８８
グリセロール                                              ２
テトラナトリウムＥＤＴＡ／クエン酸／クエン酸三ナトリウム  所望のｐＨまでのｑｓ
キサンタンガム                                              ０．２５
ワレモコウの抽出物                                        ０．５
アスコルビル−２グルコシド                                ２
ポリメチルシルセルキオキサン                              ２
エチルアルコール                                          ２
乳酸                                                      １
ポリアクリルアミド、Ｃ１３〜１４イソパラフィン、ラウレスー７  ０．５
ジメチコンコポリオール                                    ０．２５
香料、染料、保存剤                                        ｑｓ
【０１７４】
この高濃縮美容液組成物の１滴を、フェイスクリームを付ける前に顔全体に付ける。この美容液は、艶の明るさを得るために又は維持するために、１〜２週間のトリートメントとして習慣的に使用される。
【０１７５】
４．９−頭髪を明るくするためのヘアローション
ヘアローションを、下記の組成に従い調製した：
重量％
アイスランドスプリング（登録商標）水  ４６
アルコール                            ５０
パンテニルエチルエーテル                ０．５
ＤＬ−α−トコフェリルアセテート        ０．２
ポリソルベート６０                      １
カンゾウの抽出物                        ０．１
香料                                    ０．２
グリセロール                            ０．５
染料                                    ｑｓ
【０１７６】
このローションは、頭髪を緩やかに明るくするために、朝晩、数週間にわたって毛髪に付ける。
【０１７７】
４．１０−手のための抗斑クリームゲル
クリームゲルを、下記の組成に従って調製した：
重量％
デュケール（登録商標）水                                ６９
カプリル酸／カプリン酸ジグリセリルスクシネート            ６
オクタン酸オクチル                                        ２．５
メトキシケイ皮酸オクチル                                  ６
アスコルビル−２−グルコシド                              ２
フェニルトリメチコン                                      ２．５
ベンゾフェノン−３                                        ０．５
ヒアルロン酸ナトリウム                                    ０．０５
キサンタンガム                                            ０
アクリレート／Ｃ１０〜３０アルキルアクリレートコポリマー  ０．５
ポリ（メチルメタクリレート）                              １
グリセロール                                              ２
ＰＥＧ１５０                                              ３
中和剤、染料、香料、保存剤                                ｑｓ
【０１７８】
このクリームゲルは、呈色を低減させるために、手の老人斑（老人性黒子）に直接付けるべきである。
【０１７９】
実施例において「ｑｓ」は、「十分な量」、即ち合計して１００％を得るのに十分な量を意味する。
【図１】
0006351023.tif 000005
【図２】
0006351023.tif 000006
【図３】
0006351023.tif 000007
【図４】
0006351023.tif 000008
【図５】
0006351023.tif 000009
【図６】
0006351023.tif 000010
【図７】
0006351023.tif 000011