(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
細胞培養容器であって、
細胞及び培養液を収容するための内部空間を有する少なくとも１つのウェルを備え、
前記ウェルの前記内部空間を形成する壁面は、ウェル底面と、該ウェル底面の周縁から起立し前記内部空間を囲うウェル周壁面とを含み、
前記ウェル底面には窪み部が形成されており、
前記ウェル底面のうち、前記ウェルの深さ方向に沿って前記窪み部の窪みが最も深い部分を最深部としたとき、前記ウェル底面を、前記深さ方向に垂直な仮想平面に投影して形成される領域において、前記最深部を前記仮想平面に投影した部分が、該領域の重心から外れた位置となるように、前記ウェル底面が形成されており、
前記最深部は前記ウェル底面において１つのみ存在し、
前記細胞培養容器は、容器底部と、該容器底部の周縁から上方に向け立設された容器側壁部とを備え、
前記容器底部の中央部に、細胞及び培養液を収容するための内部空間を有する収容部が形成されており、
前記容器底部の、前記収容部と容器側壁部との間の部分に、少なくとも１つの前記ウェルが形成されており、
前記収容部の内部空間の容量が、前記ウェルの内部空間の容量よりも大きい
ことを特徴とする、細胞培養容器。
【請求項２】
細胞培養容器であって、
細胞及び培養液を収容するための内部空間を有する少なくとも１つのウェルを備え、
前記ウェルの前記内部空間を形成する壁面は、ウェル底面と、該ウェル底面の周縁から起立し前記内部空間を囲うウェル周壁面とを含み、
前記ウェル底面には窪み部が形成されており、
前記ウェル底面のうち、前記ウェルの深さ方向に沿って前記窪み部の窪みが最も深い部分を最深部としたとき、前記ウェル底面を、前記深さ方向に垂直な仮想平面に投影して形成される領域において、前記最深部を前記仮想平面に投影した部分が、該領域の重心から外れた位置となるように、前記ウェル底面が形成されており、
前記最深部は前記ウェル底面において１つのみ存在し、
前記細胞培養容器は、容器底部と、該容器底部の周縁から上方に向け立設された容器側壁部とを備え、
前記容器底部の中央部に、細胞及び培養液を収容するための内部空間を有する収容部が形成されており、
前記容器底部の、前記収容部と容器側壁部との間の部分に、少なくとも１つの前記ウェルが形成されており、
前記細胞培養容器の上面視において、
前記収容部の外縁と接し、前記収容部を挟む、互いに平行な一対の仮想直線をそれぞれ第一直線及び第二直線とし、前記容器側壁部の、前記第一直線と前記第二直線とにより挟まれた一対の部分をそれぞれ第一部分及び第二部分とし、
前記容器底部の、前記収容部の外縁と、前記容器側壁部の前記第一部分と、前記第一直線と、前記第二直線とにより囲まれた部分である第一底部に、少なくとも１つの前記ウェルが形成されており、
前記容器底部の、前記収容部の外縁と、前記容器側壁部の前記第二部分と、前記第一直線と、前記第二直線とにより囲まれた部分である第二底部に、少なくとも１つの前記ウェルが形成されており、
前記第一底部及び前記第二底部に形成された各ウェルは、前記最深部が、前記ウェル底面の重心よりも前記容器側壁部に近い位置となるように形成されている
ことを特徴とする、細胞培養容器。
【請求項３】
前記ウェル底面は、前記周縁から前記最深部に近づく従い、前記ウェルの深さ方向に沿って前記窪み部の窪みが深くなるように形成された傾斜面を含む、請求項１又は２の細胞培養容器。
【請求項４】
前記細胞培養容器の上面視において、
前記収容部の外縁と接し、前記収容部を挟む、互いに平行な一対の仮想直線をそれぞれ第一直線及び第二直線とし、前記容器側壁部の、前記第一直線と前記第二直線とにより挟まれた一対の部分をそれぞれ第一部分及び第二部分とし、
前記容器底部の、前記収容部の外縁と、前記容器側壁部の前記第一部分と、前記第一直線と、前記第二直線とにより囲まれた部分である第一底部に、少なくとも１つの前記ウェルが形成されており、
前記容器底部の、前記収容部の外縁と、前記容器側壁部の前記第二部分と、前記第一直線と、前記第二直線とにより囲まれた部分である第二底部に、少なくとも１つの前記ウェルが形成されており、
前記第一底部に形成された各ウェルは、前記最深部が、前記ウェル底面の重心よりも前記容器側壁部に近い位置となるように形成されており、
前記第二底部に形成された各ウェルは、前記最深部が、前記ウェル底面の重心よりも前記収容部に近い位置となるように形成されている、請求項１の細胞培養容器。
【請求項５】
前記収容部の内部空間の容量が、前記ウェルの内部空間の容量よりも大きい、請求項２の細胞培養容器。
【請求項６】
前記ウェル底面及び前記ウェル周壁面の水接触角は６０°以下である、請求項１〜５のいずれか１項の細胞培養容器。
【請求項７】
前記ウェルの内部空間の容量が５〜５０μｌである、請求項１〜６のいずれか１項の細胞培養容器。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、少量の培養液を用いたマイクロドロップ法による細胞培養のためのウェルを備える細胞培養容器に関する。
【背景技術】
【０００２】
培養系で精子と卵子とを体外受精させて受精卵（接合子）を作製して、さらに受精卵を卵割、桑実胚、胚盤胞の段階を経て、透明帯から孵化した脱出胚盤胞の段階まで培養することが可能となり、この卵割から胚盤胞の段階にある受精卵を子宮に移植して産子を得る補助的生殖技術（ＡＲＴ）が、家畜領域のみならずヒトの不妊医療でも確立されている。
【０００３】
体外受精においては、容器中に培養液のドロップを作り、この中に受精卵を入れて体外培養するマイクロドロップ法が用いられることが多い。従来、このマイクロドロップ法には、細胞培養容器として、底面が単一平面であり、直径が３０〜６０ｍｍのシャーレが使用され、シャーレの底面に、培養液のドロップを、間隔をあけて複数個作製する方法が使用されてきた。
【０００４】
この培養液ドロップの作製については、定められた手段は確立されておらず、培養液の使用量も各クリニックや病院の経験に基づき、多様な培養液量が用いられている。そのため、用いられている培養液量の範囲は、数十μｌ〜数百μｌとかなりの幅がある。しかし、そのような多様な培養液量にそれぞれ対応する細胞培養容器を準備するのはコストの点で問題があり、通常のシャーレで多様な大きさのドロップを作成しているのが現状である。
【０００５】
一方、通常のシャーレでドロップを作成するとドロップ形成位置が定まらず、振動等でドロップがずれてしまうといった問題があった。ドロップがずれてしまうと、その中で培養して観察していた受精卵の特定が難しくなるという問題があった。また、複数のドロップが合流してしまうと、さらに受精卵の特定が難しくなるという問題があった。したがって、ドロップの位置が制御でき、受精卵培養作業時や培養時の振動による影響を抑制できる手段が求められていた。
【０００６】
培養液の個々のマイクロドロップを、窪み形状を有するマイクロウェル中に形成して培養を行えば上記の問題は解消できる。特許文献１では、窪み形状を有する細胞培養用のマイクロウェルを開示している。これらの文献に開示されているマイクロウェルは、その底面がすり鉢状に傾斜し、培養細胞が最も低い中央部に保持できる構造を有する。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特許第５１４３２２７号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
特許文献１等に開示されている従来の細胞培養用のウェルは、図７に示すように、ウェル底面１１０の最深部１１５が、ウェル７０の中央にあり、細胞Ｃはウェル中央に保持される。このためピペット２００で培養中の細胞Ｃを取り扱う場合、ウェルの周壁面１０６の上端にピペット２００が干渉し易く、ピペット２００の操作角度の範囲が制約されるという課題があった。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
そこで本発明では、
細胞培養容器であって、
細胞及び培養液を収容するための内部空間を有する少なくとも１つのウェルを備え、
前記ウェルの前記内部空間を形成する壁面は、ウェル底面と、該ウェル底面の周縁から起立し前記内部空間を囲うウェル周壁面とを含み、
前記ウェル底面には窪み部が形成されており、
前記ウェル底面のうち、前記ウェルの深さ方向に沿って前記窪み部の窪みが最も深い部分を最深部としたとき、前記ウェル底面を、前記深さ方向に垂直な仮想平面に投影して形成される領域において、前記最深部を前記仮想平面に投影した部分が、該領域の重心から外れた位置となるように、前記ウェル底面が形成されており、
前記最深部は前記ウェル底面において１つのみ存在する
ことを特徴とする、
細胞培養容器を提供する。
【００１０】
本発明によれば、ウェルの最深部がウェルの重心位置から偏心された位置にあるため、ウェル内に収容された培養液ドロップ中の細胞をピペットにより操作する際に、ピペットがウェル周壁面を含む壁部の上端に干渉し難く操作が容易となる。
【００１１】
本発明の細胞培養容器の好ましい実施形態では、前記ウェル底面は、前記周縁から前記最深部に近づく従い、前記ウェルの深さ方向に沿って前記窪み部の窪みが深くなるように形成された傾斜面を含む。
【００１２】
この実施形態によれば、収容された細胞が重力を駆動力として最深部に移動し易く、定位置で保持され易い。
【００１３】
本発明の細胞培養容器の好ましい実施形態では、
前記細胞培養容器は、容器底部と、該容器底部の周縁から上方に向け立設された容器側壁部とを備え、
前記容器底部の中央部に、細胞及び培養液を収容するための内部空間を有する収容部が形成されており、
前記容器底部の、前記収容部と容器側壁部との間の部分に、少なくとも１つの前記ウェルが形成されている。
【００１４】
この実施形態によれば、中央部の収容部の内部空間での細胞培養と、周辺に配置された各ウェルの内部空間での細胞培養とを並行して進めることが可能になる。
【００１５】
前記実施形態の更に好ましい実施形態では、
前記細胞培養容器の上面視において、
前記収容部の外縁と接し、前記収容部を挟む、互いに平行な一対の仮想直線をそれぞれ第一直線及び第二直線とし、前記容器側壁部の、前記第一直線と前記第二直線とにより挟まれた一対の部分をそれぞれ第一部分及び第二部分とし、
前記容器底部の、前記収容部の外縁と、前記容器側壁部の前記第一部分と、前記第一直線と、前記第二直線とにより囲まれた部分である第一底部に、少なくとも１つの前記ウェルが形成されており、
前記容器底部の、前記収容部の外縁と、前記容器側壁部の前記第二部分と、前記第一直線と、前記第二直線とにより囲まれた部分である第二底部に、少なくとも１つの前記ウェルが形成されており、
前記第一底部及び前記第二底部に形成された各ウェルは、前記最深部が、前記ウェル底面の重心よりも前記容器側壁部に近い位置となるように形成されている。
【００１６】
この更に好ましい実施形態によれば、２つの対向する側（例えば左右両側）からそれぞれ利用しやすい位置に少なくとも１つのウェルを配置することができ好ましい。
【００１７】
前記実施形態の更に好ましい実施形態では、
前記細胞培養容器の上面視において、
前記収容部の外縁と接し、前記収容部を挟む、互いに平行な一対の仮想直線をそれぞれ第一直線及び第二直線とし、前記容器側壁部の、前記第一直線と前記第二直線とにより挟まれた一対の部分をそれぞれ第一部分及び第二部分とし、
前記容器底部の、前記収容部の外縁と、前記容器側壁部の前記第一部分と、前記第一直線と、前記第二直線とにより囲まれた部分である第一底部に、少なくとも１つの前記ウェルが形成されており、
前記容器底部の、前記収容部の外縁と、前記容器側壁部の前記第二部分と、前記第一直線と、前記第二直線とにより囲まれた部分である第二底部に、少なくとも１つの前記ウェルが形成されており、
前記第一底部に形成された各ウェルは、前記最深部が、前記ウェル底面の重心よりも前記容器側壁部に近い位置となるように形成されており、
前記第二底部に形成された各ウェルは、前記最深部が、前記ウェル底面の重心よりも前記収容部に近い位置となるように形成されている。
【００１８】
この更に好ましい実施形態によれば、一方の側からピペットを操作する場合に、各ウェルが利用しやすい位置に配置されるため好ましい。
【００１９】
前記実施形態の他の更に好ましい実施形態では、
前記収容部の内部空間の容量が、前記ウェルの内部空間の容量よりも大きい。
【００２０】
この実施形態に係る細胞培養容器は、複数の細胞を前記収容部に収容して培養を行いながら、その中から一部の細胞を取り出して前記ウェルに移し、該一部の細胞については該ウェル中で別途培養を継続するという用い方が可能である。
【００２１】
本発明の細胞培養容器の他の好ましい実施形態では、
前記ウェル底面及び前記ウェル周壁面の水接触角は６０°以下である。
【００２２】
この実施形態では、前記ウェル底面及び前記ウェル周壁面の水溶液に対する濡れ性が高いため、前記ウェルの内部空間に水溶液である培養液を収容することが容易である。前記ウェルの内部空間を囲う前記ウェル周壁面が存在しない表面上（例えば、平坦な基板表面上）において水溶液である培養液のドロップを形成しようとする場合に前記表面の水接触角が６０°以下であるとドロップは前記表面上で形状を保持できず崩れやすいが、本発明のように前記ウェル周壁面により内部空間が囲われたウェルを用いれば、そのような問題もない。
【００２３】
本発明の細胞培養容器の他の好ましい実施形態では、
前記ウェルの内部空間の容量が５〜５０μｌである。
【００２４】
この容量のウェルは、１個の受精卵を培養液のドロップで培養するのに適しており好ましい。
【発明の効果】
【００２５】
本発明の細胞培養容器が備えるウェルは、最深部に細胞を保持することができ、且つ、保持された細胞のピペットを用いた操作が容易である。
【図面の簡単な説明】
【００２６】
【図１Ａ】本発明の細胞培養容器１の第１実施形態の平面図の模式図を示す。
【図１Ｂ】図１Ａに示す細胞培養容器１におけるＩ−Ｉ’断面の模式図を示す。
【図１Ｃ】図１Ａに示す細胞培養容器１におけるＩＩ−ＩＩ’断面の模式図を示す。
【図１Ｄ】図１Ａに示す細胞培養容器１におけるＩＩＩ−ＩＩＩ’断面の模式図を示す。
【図１Ｅ】図１Ａに示す細胞培養容器１におけるＩＶ−ＩＶ’断面の模式図を示す。
【図１Ｆ】第１実施形態に係る細胞培養容器１のウェル底面１０１を、図１Ｂに示す仮想平面Ｂに投影して形成される領域Ｆの模式図である。
【図２】本発明の細胞培養容器１の第１実施形態を用いて細胞Ｃを培養し、細胞Ｃをピペット２００の先端で操作する際の、ピペット２００の状態を示す模式図である。
【図３Ａ】本発明の細胞培養容器１の第２実施形態の平面図の模式図を示す。
【図３Ｂ】図３Ａに示す細胞培養容器１におけるＩ−Ｉ’断面の模式図を示す。
【図３Ｃ】図３Ａに示す細胞培養容器１におけるＩＩ−ＩＩ’断面の模式図を示す。
【図３Ｄ】図３Ａに示す細胞培養容器１におけるＩＩＩ−ＩＩＩ’断面の模式図を示す。
【図３Ｅ】図３Ａに示す細胞培養容器１におけるＩＶ−ＩＶ’断面の模式図を示す。
【図３Ｆ】第２実施形態に係る細胞培養容器１のウェル底面１０１を、図３Ｂに示す仮想平面Ｂに投影して形成される領域Ｆの模式図である。
【図４Ａ】本発明の細胞培養容器１の第３実施形態のうちウェル１００’の近傍の平面図の模式図を示す。
【図４Ｂ】図４Ａに示すウェル１００’の近傍におけるＩ−Ｉ’断面の模式図を示す。
【図４Ｃ】図４Ａに示すウェル１００’の近傍におけるＩＩ−ＩＩ’断面の模式図を示す。
【図４Ｄ】第３実施形態に係る細胞培養容器１のウェル底面１０１を、図４Ｂに示す仮想平面Ｂに投影して形成される領域Ｆの模式図である。
【図５Ａ】本発明の細胞培養容器１の第４実施形態のうちウェル１００’’の近傍の平面図の模式図を示す。
【図５Ｂ】図５Ａに示すウェル１００’’の近傍におけるＩ−Ｉ’断面の模式図を示す。
【図５Ｃ】図５Ａに示すウェル１００’’の近傍におけるＩＩ−ＩＩ’断面の模式図を示す。
【図５Ｄ】第４実施形態に係る細胞培養容器１のウェル底面１０１を、図５Ｂに示す仮想平面Ｂに投影して形成される領域Ｆの模式図である。
【図６Ａ】本発明の細胞培養容器１の第５実施形態のうちウェル１００’’’の近傍の平面図の模式図を示す。
【図６Ｂ】図６Ａに示すウェル１００’’’の近傍におけるＩ−Ｉ’断面の模式図を示す。
【図６Ｃ】図６Ａに示すウェル１００’’’の近傍におけるＩＩ−ＩＩ’断面の模式図を示す。
【図６Ｄ】第５実施形態に係る細胞培養容器１のウェル底面１０１を、図６Ｂに示す仮想平面Ｂに投影して形成される領域Ｆの模式図である。
【図７】最深部が偏心していない従来のウェルを用いて細胞Ｃを培養し、細胞Ｃをピペット２００の先端で操作する際の、ピペット２００の状態を示す模式図である。
【発明を実施するための形態】
【００２７】
＜第１実施形態（図１Ａ〜Ｆ、図２）＞
本発明の細胞培養容器の第１実施形態を図１Ａ〜Ｆ、図２を参照して説明する。
図１Ａ〜Ｆに示す細胞培養容器１は、容器底部２０と、容器底部２０の周縁から上方に向け立設された容器側壁部３０とを備え、細胞培養容器１の上面視において、容器底部２０の中央部に、細胞及び培養液を収容するための内部空間を有する収容部４０が形成されており、容器底部２０の、収容部４０と容器側壁部３０との間の部分に、少なくとも１つのウェル１００が形成されている。
【００２８】
本発明の第一の特徴は、ウェル１００の構造にあるが、先に培養容器１全体の構成を説明し、後にウェル１００の構造の特徴を説明する。
【００２９】
収容部４０は、収容部底部４１と、収容部底部４１の周縁に立設された収容部周壁４２とを少なくとも含み、上方に開口した有底の内部空間４５（収容部内部空間と称することがある）を有する。収容部周壁４２は、それが囲う内部空間４５が細胞及び培養液を収容可能であればどのような構造を有していてもよいが、より好ましくは、図示するように、収容部底部４１の周縁に立設された外縁に進むに従って高くなるように形成された収容部第一周壁４３と、収容部第一周壁４３の上端と接続し、更に外縁に進むに従って高くなるように形成された収容部第二周壁４４とを含む。収容部周壁４２の上端と容器底部２０とは、収容部外壁４６により接続されている。
【００３０】
収容部４０、容器底部２０及び容器側壁部３０を有する細胞培養容器を用いて細胞培養する場合、収容部４０の内部空間４５内に細胞と培養液とを含むドロップを収容し、更に、培養液の乾燥を防ぐために、ドロップを含んだ収容部４０全体と収容部外の容器底部２０とを覆うようにオイルを満たして培養を行う。収容部４０内で複数の細胞（例えば受精卵）を一度にグループで培養する場合、発育の悪い細胞を同一のドロップ内に配置し続けることによって発育の良好な細胞の発育を阻害する可能性がある。このような場合に発育の悪い細胞を収容部４０から取り出し、別の培養液ドロップ中に移して培養を継続することが求められる。このとき、仮にウェル１００を有していない細胞培養容器を用いた場合、容器底部２０の底面（容器側壁部３０が設けられる側の面）２１上に独立した培養液のドロップを形成し、該ドロップ中で発育の悪い細胞の培養が継続される。細胞培養容器１において表面を親水化する場合、底面２１も親水化されるため培養液のドロップを形成することが難しい。この問題を解決すために、培養液のドロップを形成するためのウェル１００を容器底部２０の、収容部４０と容器側壁部３０との間の部分に少なくとも１つ設ける。すなわち内部空間４５内に細胞及び培養液のドロップを収容し細胞培養を行うための収容部４０と、下記の特徴を有するウェル１００とを一体化して同一の細胞培養容器とすることにより、収容部４０内での細胞培養と、ウェル１００内での細胞培養とを並行して進めることが容易となる。
【００３１】
次に、ウェル１００の特徴について説明する。なお、本発明の細胞培養容器は、少なくとも下記特徴を有するウェルを備えていればよく、収容部や他の構成と組み合わされた実施形態には限定されない。
【００３２】
本発明において「ウェル」とは、細胞及び培養液を収容するための内部空間１０３が形成された、細胞及び培養液の収容用容器部を指す。内部空間１０３を形成する壁面が後述する特徴を有するものである限り、ウェル１００はどのように形成されてもよい。図示するように、細胞培養容器１の容器底部２０の上面２１の一部をウェル底面１０１とし、該ウェル底面１０１の周縁を起点にウェル周壁１０６を設けて、ウェル周壁１０６の内部空間１０４を囲う面をウェル周壁面１０２としてウェル１００を形成することができる。或いは、図示しないが、ウェル周壁１０６を別途設けず、容器底部２０の表面の一部を窪ませ、内部空間１０４を画定するウェル底面１０１とウェル周壁面１０２とを有する凹穴を設けることによりウェル１００を形成することもできる。更に、ウェル１００は、細胞培養容器１の容器底部２０と一体に形成されている必要はなく、独立の部材でウェル１００を形成してからそれを容器底部２０に固定してもよい。
【００３３】
なお本明細書における収容部を「第二収容部」と称し、ウェルを「第一収容部」と称することもできる。この場合、本明細書における収容部底部、収容部周壁、収容部第一周壁、収容部第二周壁、収容部外壁、ウェル底面、ウェル周壁面、ウェル周壁を、それぞれ、第二収容部底部、第二収容部周壁、第二収容部第一周壁、第二収容部第二周壁、第二収容部外壁、第一収容部底面、第一収容部周壁面、第一収容部周壁と称することができる。
【００３４】
ウェル１００は、細胞及び培養液を収容するための内部空間１０３を有する。内部空間１０３を形成する壁面は、ウェル底面１０１と、ウェル底面１０１の周縁から起立し内部空間１０３を囲うウェル周壁面１０２とを含む。
【００３５】
ウェル底面１０１には窪み部１０４が形成されている。本発明において「窪み部」とは、窪んだ形状のウェル底面に囲まれた空間を指し、内部空間の一部を構成する。窪み部を形成するためには、ウェル底面の一部のみが部分的に窪んで窪み部を形成していてもよいし（例えば下記第５実施形態）、ウェル底面の全体が窪んで窪み部を形成していてもよい（例えば第１実施形態〜第４実施形態）。
【００３６】
本発明では、ウェル底面のうち、ウェルの深さ方向に沿って窪み部の窪みが最も深い部分を「最深部」と呼ぶ。本発明において「ウェルの深さ方向」とは、本発明の細胞培養容器を水平面上に載置した状態でウェルの内部空間に培養液等の液体を収容したときに、該液体の深さ方向（すなわち鉛直方向）と一致する方向を指す。図１Ｂにおいてウェルの深さ方向に沿う軸を「Ａ」として示す。本明細書では、ウェルの深さ方向（軸Ａに沿う方向）を「深さ方向Ａ」と称する。１つの細胞培養容器にウェルが複数存在する場合、各ウェルの深さ方向は、いずれも、細胞培養容器を水平面上に載置した状態での鉛直方向であるから、同一の方向である。「最深部」はウェル底面のうちの一部を指し、点状であってもよいし、線状であってもよいし、面状であってもよいし、線状と面状とが組み合わされた形状であってもよい。図１Ａ〜Ｅ，図２に示すウェル１００においては、最深部１０５は点状である。線状の最深部は、直線又は任意の曲線（折れ線を含む）の一区画の形状であることができる。面状の最深部は、任意の形状、例えば、円状（円形および楕円形を含む）、三角形、四角形、五角形、六角形、八角形等の多角形の形状であることができる。最深部は好ましくは点状の最深部、又は、円状の形状である面状の最深部である。
【００３７】
ウェル１００の内部空間１０３に細胞Ｃを含む培養液のドロップＤを収容したとき、図２に示すように、最深部１０５に細胞Ｃを保持することが可能である。
【００３８】
本発明では、ウェル底面１０１を深さ方向Ａに垂直な仮想平面Ｂに投影して形成される領域Ｆ（図１Ｂ及び図１Ｆ参照）において、最深部１０５を仮想平面Ｂに投影した部分１１５が、前記領域の重心Ｐ１から外れた位置となる（すなわち、ウェル底面１０１の最深部１０５がウェル底面１０１の重心から偏心された位置にある）ように、ウェル底面１０１が形成されていることを特徴とする。仮想平面Ｂは、図１Ｂ、３Ｂ、３Ｃ、４Ｂ、５Ｂ、６Ｂにおいて、断面を含む平面に対し垂直な平面として示す。
【００３９】
ここでウェル底面を、ウェルの深さ方向に垂直な仮想平面に投影して形成される領域は、その形状が特に限定されず、任意の形状、例えば、円状（円形および楕円形を含む）、三角形、四角形、五角形、六角形、八角形等の多角形であることができる。該領域の重心は、該領域が円形である場合は、円形の中心と一致する。該領域が他の形状であっても重心は適宜求めることができる。そして、ウェル底面１０１を深さ方向Ａに垂直な仮想平面Ｂに投影して形成される領域において、最深部１０５を仮想平面Ｂに投影した部分が、前記領域の「重心から外れた位置となる」とは、図１Ｆに示すように、前記領域Ｆにおいて、最深部１０５を仮想平面Ｂに投影した部分１１５の全体が領域Ｆの重心Ｐ１と重ならないことを指す。最深部１０５が線状、面状又はそれらを組み合わせた形状である場合には、最深部１０５を仮想平面Ｂに投影した部分１１５が線状、面状又はそれらを組み合わせた形状となるが、該部分１１５の全体がどこも領域Ｆの重心Ｐ１と重ならず、領域Ｆの重心Ｐ１から外れた位置にある。
【００４０】
ウェル底面１０１の最深部１０５がウェル底面１０１の重心から偏心された位置にあることによる効果を図２に基づき説明する。ウェル１００の内部空間１０３に細胞Ｃを含む培養液のドロップＤを収容したとき、細胞Ｃは重力により最深部１０５まで移動し保持される。細胞Ｃをピペット２００の先端で操作するとき、ウェル周壁面１０２を有するウェル周壁１０６の、最深部１０５から離れた部分の上方からピペット２００を挿入すれば、ピペット２００がウェル周壁１０６の上端と干渉し難く、最深部１０５が偏心していないウェル７０を用いた場合（図７に示す）と比較してピペット２００の操作できる角度範囲が広い。
【００４１】
より好ましい実施形態では、ウェル底面１０１を深さ方向Ａに垂直な仮想平面Ｂに投影して形成される領域Ｆの重心をＰ１とし、前記領域において前記最深部を仮想平面Ｂに投影した部分１１５の重心をＰ２（前記部分１１５が点状である場合は、部分１１５と重心Ｐ２とは一致する）とし、Ｐ１からＰ２までの直線距離をＬ１とし、Ｐ１からＰ２を通り前記領域の周縁に至るまでの直線距離をＬ２としたとき、
０．２０Ｌ２≦Ｌ１≦０．９０Ｌ２
を満足することが好ましい。
【００４２】
また、Ｌ１とＬ２との差（Ｌ２−Ｌ１）が、０．５ｍｍ以上であることが好ましく、１．０ｍｍ以上であることがより好ましい。Ｌ１とＬ２との差がこの範囲であるとき、最深部１０５に保持された細胞は、ウェル周壁面１０２と十分に離れた位置にあるため、ウェル１の上方又は下方からの観察がウェル周壁面１０２によって妨げられ難く好ましい。
【００４３】
更に、最深部１０５が線状、面状又はこれらの組み合わせである場合には、最深部１０５を仮想平面Ｂに投影した部分１１５に含まれる全ての点について、該点を前記Ｐ２として扱った場合に前記Ｌ１及び前記Ｌ２が上記の特徴を有することが好ましい。
【００４４】
より好ましい実施形態では、ウェル周壁面１０２の開口側の辺上の点のなかから、ウェル底面１０１の最深部１０５の重心Ｐ３（仮想平面Ｂに最深部１０５を投影した部分１１５の重心Ｐ２に対応する、ウェル底面１上の点を指す。最深部１０５が点状である場合は、Ｐ３と最深部１０５は一致する。）と結んで形成される直線の、ウェル１００の深さ方向Ａに垂直な仮想平面Ｂと成す角の角度（鋭角とする）が最も小さくなる点Ｐ４を選択したとき、ウェル周壁面１０２の開口側の辺上の前記選択された点Ｐ４とウェル底面１０１の最深部１０５の重心Ｐ３とを結ぶ直線Ｌと前記仮想平面Ｂとが成す角の角度θ１（鋭角とする）は、４５°以下が好ましく、３０°以下が最も好ましい。θ１がこの範囲である場合、ピペット等の器具を用いて細胞を取り扱う際の器具の操作角度の範囲が十分に広いため好適である。
【００４５】
図１Ａ〜Ｆに示す実施形態では、ウェル底面１０１は、その周縁から最深部１０５に近づく従い、ウェルの深さ方向Ａに沿って窪み部１０４の窪みが深くなるように形成された傾斜面１０７により形成される。この場合、ウェル１００の内部空間１０３に細胞Ｃを含む培養液のドロップＤを収容したとき、細胞Ｃは重力により最深部１０５まで移動し保持されるため好ましい。傾斜面１０７は、該傾斜面１０７の法線Ｎとウェルの深さ方向Ａに垂直な仮想平面Ｂとが成す角の角度θ（鋭角とする）が通常は８９〜４５°、好ましくは８８〜６５°、より好ましくは７９°〜８７°、最も好ましくは８１〜８５°となるように形成される。角度θがこの範囲であるとき、ウェルの深さ方向Ａに沿ってウェル底面１０１上の培養物を顕微鏡で透過観察する際の傾斜面１０７での反射、散乱が起こりにくくなり、鮮明な観察像を得ることができる。
【００４６】
図１Ａ〜Ｆ，図２に示す実施形態では、ウェル底面１０１は、その周縁を含む平面が、ウェルの深さ方向Ａに対して垂直な平面となるように形成されている。このため、ウェル底面１０１を構成する傾斜面１０７の傾斜角（及び角度θ）は、最深部１０５を中心とした周方向の位置により異なるが、より好ましくは、傾斜面１０７のどの部分においても角度θが前記範囲であることが好ましい。
【００４７】
図示する実施形態ではいずれも、傾斜面１０７の勾配は、ウェル底面１０１の周縁の任意の点から最深部１０５に最短距離で進む場合に一定であり変化しないが、これには限定されず、勾配が変化する傾斜面であってもよい。ただし、より好ましくは、傾斜面１０７の勾配が、ウェル底面１０１の周縁の任意の点から最深部１０５に最短距離で進む経路の少なくとも一部の区間、好ましくは全部の区間において一定である。勾配が一定であることにより、細胞を最深部１０５に固定し易くなる。したがって、顕微鏡で観察した場合に鮮明な画像を得ることができる。
【００４８】
傾斜面１０７の表面粗さは、大きい値であると、顕微鏡で透過観察を行った画像を輪郭抽出処理に付す際に、傾斜面上の凹凸に起因して明瞭な輪郭が得られない恐れがあるため、可能な限り小さい値であることが好ましい。具体的には、最大高さＲｙ（粗さ曲線からその平均線の方向に基準長さだけを抜き取り、この抜き取り部分における山頂線と谷底線との間隔をいう）が１．０μｍ未満、特に０．５μｍ未満であることが好ましい。なお、傾斜面の表面粗さは、培養容器の鋳型を作製する際に磨き処理を施す等して、鋳型の加工精度を高めることにより小さくすることができる。表面粗さの計測は通常の断面形状計測装置を用いて行うことができる。計測条件としては、例えばキーエンス社製ダブルスキャン高精度レーザ測定器ＬＴ−９０１０Ｍ及び高精度形状測定システムＫＳ−１１００を用い、測定間隔５μｍで計測することができる。
【００４９】
ウェル底面１０１の幅寸法を、次のように定義する。ウェル底面１０１をウェルの深さ方向Ａに垂直な仮想平面Ｂに投影して形成される領域において、該領域の周縁線上の、重心を介して対向する一対の点の間の直線距離の最大値（最大幅）と最小値（最小幅）との平均値を、ウェル底面１０１の幅寸法とする。そしてウェル底面１０１の幅寸法は好ましくは０．５〜１０ｍｍ、より好ましくは１．５〜５ｍｍであり、典型的には３．８ｍｍである。
【００５０】
ウェル周壁面１０２のウェルの深さ方向Ａに沿った幅寸法を、次のように定義する。すなわち、ウェル周壁面１０２のウェルの深さ方向Ａに沿った幅のうち最大値と最小値との平均値を、ウェル周壁面１０２のウェルの深さ方向Ａに沿った幅寸法とする。そして、ウェル周壁面１０２のウェルの深さ方向Ａに沿った幅寸法は好ましくは０．１〜５ｍｍ、より好ましくは０．２〜３ｍｍであり、典型的には１ｍｍである。
【００５１】
ウェル１００の内部空間１０３の容量は特に限定されないが、好ましくは５〜５０μｌ、より好ましくは１０〜３０μｌである。
【００５２】
ウェル底面１０１、ウェル周壁面１０２及び内部空間１０３が上記の範囲であるとき１個の受精卵を培養液のドロップで培養するのに適した寸法であり好ましい。
【００５３】
図示するように、培養容器１の容器底部２０の上面２１をウェル底面１０１とし、該ウェル底面１０１の周縁を起点にウェル周壁１０６を設けて、ウェル周壁１０６の内部空間１０４を囲う面をウェル周壁面１０２としてウェル１００を形成する場合、ウェル周壁１０６の径方向の幅は好ましくは０．１〜２ｍｍであり、例えば０．５ｍｍである。
【００５４】
ウェル底面１０１とウェル周壁面１０２は、水接触角が６０°以下の面であることが好ましい。本発明において水接触角とは温度２５℃において測定された水接触角を指す。水接触角がこの範囲内であると、ウェル底面１０１とウェル周壁面１０２の水溶液に対する濡れ性が高いため、ウェル１００の内部空間１０３に培養液を収容することが容易であるため好ましい。
【００５５】
図１Ａ〜Ｆに示す細胞培養容器１では各ウェル１００の配置に以下の特徴を有する。
細胞培養容器１の上面視において、収容部４０の外縁４７と接し、収容部４０を挟む、互いに平行な一対の仮想直線をそれぞれ第一直線Ｘ及び第二直線Ｙとする。本発明において「上面視」とは、細胞培養容器１を、収容部４０の深さ方向に沿って、収容部４０の開口の側から見たときの見え方を指す。そして収容部４０の深さ方向とは、本発明の細胞培養容器１を水平面上に載置した状態で収容部４０の内部空間４５に培養液等の液体を収容したときに、該液体の深さ方向（すなわち鉛直方向）と一致する方向を指す。細胞培養容器１を、収容部４０の深さ方向に沿って、収容部４０及び各ウェル１００の開口の側から見たときの模式図が図１Ａに示す平面図である。収容部４０の深さ方向は、細胞培養容器１を水平面上に載置した状態での鉛直方向であるから、各ウェル１００の深さ方向と同一の方向である。また、収容部４０の外縁４７とは、前記平面図において収容部４０の外側の輪郭を成す部分であり、図１Ａ〜Ｆに示す例では収容部外壁４６の外側面に対応する。そして、容器側壁部３０のうち、第一直線Ｘと第二直線Ｙとにより挟まれた一対の部分をそれぞれ第一部分３１及び第二部分３２とする。更に、容器底部２０の、収容部４０の外縁４７と、容器側壁部３０の第一部分３１と、第一直線Ｘと、第二直線Ｙとにより囲まれた部分を第一底部２５とする。更に、容器底部２０の、収容部４０の外縁４７と、容器側壁部３０の第二部分３２と、第一直線Ｘと、第二直線Ｙとにより囲まれた部分を第二底部２６とする。
【００５６】
このとき、第一底部２５に、少なくとも１つ（図１Ａに示す例では２つ）のウェル１００が形成されている。ここで第一底部２５にウェル１００が形成されているとは、前記平面図上において、各ウェル１００のウェル底面１０１の少なくとも一部分が第一底部２５に位置することを指し、より好ましくは、図１Ａに示すようにウェル１００のウェル底面１０１の全体が第一底部２５に位置する。第一底部２５に形成されるウェル１００の数は特に限定されないが通常は１〜５である。
【００５７】
なおかつ、第二底部２６にも、少なくとも１つ（図１Ａに示す例では２つ）のウェル１００が形成されている。ここで第二底部２６にウェル１００が形成されているというためには、前記平面図上において、各ウェル１００のウェル底面１０１の少なくとも一部分が第二底部２６に位置することを指し、より好ましくは、図１Ａに示すようにウェル１００のウェル底面１０１の全体が第二底部２６に位置する。第二底部２６に形成されるウェル１００の数は特に限定されないが通常は１〜５である。
【００５８】
そして、細胞培養容器１を収容部４０の深さ方向に沿って収容部４０及び各ウェル１００が開口する側から見たときの、各ウェル１００のウェル底面１０１の形状の重心を、底面１０１の重心Ｐ５とする。第一底部２５及び第二底部２６に形成された各ウェル１００は、細胞培養容器１を収容部４０の深さ方向に沿って見たとき、各ウェル１００の最深部１０５（最深部１０５が線状、面状又はそれらを組み合わせた形状である場合は、最深部１０５の全部分を指す）が、ウェル底面１０１の重心Ｐ５よりも容器側壁部３０に近い位置に形成されている。換言すれば、ウェルの深さ方向Ａに垂直な仮想平面Ｂに投影して形成される領域Ｆにおいて、その最深部１０５を仮想平面Ｂに投影した部分１１５（最深部１０５が線状、面状又はそれらを組み合わせた形状である場合は、最深部１０５を仮想平面Ｂに投影した部分１１５の全部分を指す）が、該領域Ｆの重心Ｐ１よりも、容器側壁部３０に近い位置に形成されている。このようにウェル底面１０１が形成されていることにより、ピペットを右手で操作する者にとっては、第一底部２５に形成されたウェル１００が収容部４０よりも左側に位置するように細胞培養容器１を設置した場合に第一底部２５に形成されたウェル１００を用いることが容易である。そして、ピペットを左手で操作する者にとっては、細胞培養容器１を移動させることなく収容部４０よりも右側に位置する第二底部２６に形成されたウェル１００を用いることが可能である。
【００５９】
本発明の細胞培養容器１の材質は、特に制限されない。具体的には、金属、ガラス、及びシリコン等の無機材料、プラスチック（例えば、ポリスチレン樹脂、ポリエステル樹脂、ポリエチレン樹脂、ポリプロピレン樹脂、ＡＢＳ樹脂、ナイロン、アクリル樹脂、フッ素樹脂、ポリカーボネート樹脂、ポリウレタン樹脂、メチルペンテン樹脂、フェノール樹脂、メラミン樹脂、エポキシ樹脂、塩化ビニル樹脂）で代表される有機材料を挙げることができる。本発明の細胞培養容器１は、当業者に公知の方法で製造することができる。例えば、プラスチック材料からなる培養容器を製造する場合には、慣用の成形法、例えば射出成形により製造することができる。
【００６０】
光学顕微鏡での観察のためには、細胞培養容器１は光透過性の材料により形成されていることが好ましい。
【００６１】
本発明の細胞培養容器１は、受精卵の発育を促進するような表面処理又は表面コートがなされていてもよい。特に、受精卵の発育を促進するために、他の器官の細胞（例えば、子宮内膜細胞や卵管上皮細胞）と共培養をする場合、これらの細胞をあらかじめ培養容器に接着させる必要がある。このような場合に、細胞培養容器１の表面に細胞接着性の材料をコートすると有利である。
【００６２】
本発明の細胞培養容器１を用いて培養し観察する細胞としては、特に限定されないが、例えば、受精卵、卵細胞、ＥＳ細胞（胚性幹細胞）及びｉＰＳ細胞（人工多能性幹細胞）が挙げられる。卵細胞は、未受精の卵細胞をさし、未成熟卵母細胞及び成熟卵母細胞が含まれる。受精卵は、受精後、卵割により２細胞期、４細胞期、８細胞期と細胞数が増えていき、桑実胚を経て、胚盤胞へと発生する。受精卵には、２細胞胚、４細胞胚及び８細胞胚などの初期胚、桑実胚、胚盤胞（初期胚盤胞、拡張胚盤胞及び脱出胚盤胞を含む）が含まれる。胚盤胞は、胎盤を形成する潜在能力がある外部細胞と胚を形成する潜在能力がある内部細胞塊からなる胚を意味する。ＥＳ細胞は胚盤胞の内部細胞塊から得られる未分化な多能性又は全能性細胞をさす。ｉＰＳ細胞は、体細胞（主に線維芽細胞）へ数種類の遺伝子（転写因子）を導入することにより、ＥＳ細胞に似た分化万能性を持たせた細胞をさす。すなわち、本発明において培養の対象となる細胞には、受精卵や胚盤胞のように複数の細胞の集合体も包含される。本発明の細胞培養容器１は、哺乳動物及び鳥類の細胞、特に哺乳動物の細胞の培養に好適である。哺乳動物は、温血脊椎動物をさし、例えば、ヒト及びサルなどの霊長類、マウス、ラット及びウサギなどの齧歯類、イヌ及びネコなどの愛玩動物、ならびにウシ、ウマ及びブタなどの家畜が挙げられる。本発明の細胞培養容器１は、ウシの受精卵の培養に特に好適である。
【００６３】
以下、図面に示す他の実施形態を説明するが、本発明の範囲はこれらの実施形態には限定されない。また、本明細書の図面では各構成の寸法及び形状に関わらず同じ機能を有する構成は同じ符号を付しており、上記第１実施形態との特段の相違点を除き説明を省略する。
【００６４】
＜第２実施形態（図３Ａ〜Ｆ）＞
図３Ａ〜Ｆに示す第２実施形態に係る細胞培養容器１では、第一底部２５に形成された少なくとも１つのウェル１００（個数は第１実施形態で説明した通り）はそれぞれ、細胞培養容器１の上面視において、各ウェル１００の最深部１０５（最深部１０５が線状、面状又はそれらを組み合わせた形状である場合は、最深部１０５の全部分を指す）が、ウェル底面１０１の重心Ｐ５よりも容器側壁部３０に近い位置に形成されている。換言すれば、第一底部２５に形成された各ウェルのウェル底面１０１を、ウェルの深さ方向Ａに垂直な仮想平面Ｂに投影して形成される領域Ｆにおいて、該ウェルの最深部１０５を仮想平面Ｂに投影した部分１１５（最深部１０５が線状、面状又はそれらを組み合わせた形状である場合は、最深部１０５を仮想平面Ｂに投影した部分１１５の全部分を指す）が、該領域Ｆの重心Ｐ１よりも、容器側壁部３０に近い位置に形成されている。尚且つ、第二底部２６に形成された少なくとも１つのウェル１００（個数は第１実施形態で説明した通り）はそれぞれ、細胞培養容器１の上面視において、各ウェル１００の最深部１０５（最深部１０５が線状、面状又はそれらを組み合わせた形状である場合は、最深部１０５の全部分を指す）が、ウェル底面１０１の重心Ｐ５よりも収容部４０に近い位置に形成されている。換言すれば、第二底部２６に形成された各ウェルのウェル底面１０１を、ウェル１００の深さ方向Ａに垂直な仮想平面Ｂに投影して形成される領域Ｆにおいて、該ウェルの最深部１０５を仮想平面Ｂに投影した部分１１５（最深部１０５が線状、面状又はそれらを組み合わせた形状である場合は、最深部１０５を仮想平面Ｂに投影した部分１１５の全部分を指す）が、該領域Ｆの重心Ｐ１よりも、前記収容部４０に近い位置に形成されている。
【００６５】
この実施形態によれば、第二底部２６の側からピペットを操作する者にとって、全てのウェルが利用しやすい位置に配置されていることになり好適である。
【００６６】
＜第３実施形態（図４Ａ〜Ｄ）＞
図４Ａ〜Ｄには、第３実施形態に係る細胞培養容器１において、１つのウェル１００’のみを拡大して説明する。細胞培養容器１のウェル以外の構成については他の実施形態と同一である。
【００６７】
ウェル１００’では、ウェル底面１０１’が、その周縁から最深部１０５に近づく従い、ウェルの深さ方向Ａに沿って窪み部１０４の窪みが深くなるように形成された傾斜面１０７’により形成される。この実施形態では、ウェル底面１０１’を構成する傾斜面１０７’の傾斜角（及び、傾斜面１０７’の法線Ｎと仮想平面Ｂとが成す角の角度θ（鋭角とする））は、最深部１０５を中心とした周方向のどの位置においても等しくなるように形成されている。この結果として、ウェル底面１０１’及び傾斜面１０７’は、その周縁を含む平面が、ウェルの深さ方向Ａに垂直な平面ではなく、ウェルの深さ方向Ａに垂直な平面に対して傾斜した平面となる。
【００６８】
この第３実施形態によればウェル底面１０１’を構成する傾斜面１０７’の傾斜角を全周にわたって均一にできるため、次のような利点がある。傾斜面１０７’の傾斜角は、細胞の位置を固定するには大きいほうが有利であり、一方で、傾斜角が大きいと、ウェルの深さ方向Ａに沿って顕微鏡で透過観察する際に傾斜面１０７’により反射や散乱が起きやすいため、観察のためには前記傾斜角は小さいほうが有利である。これらの相反する二つの要請を満たすために傾斜面１０７’の傾斜角には最適値が存在するが、第３実施形態によればウェル底面１０１’の全周に亘って傾斜面１０７’の傾斜角を前記最適値に揃えることが可能であるため有利である。また、第３実施形態によれば、ウェル１００’内をウェルの深さ方向Ａに沿って顕微鏡で透過観察する際のウェル底面１０１’による反射、散乱の程度が均一化でき、ムラのない観察像を得ることができ有利である。
【００６９】
＜第４実施形態（図５Ａ〜Ｄ）＞
図５Ａ〜Ｄには、第４実施形態に係る細胞培養容器１において、１つのウェル１００’’のみを拡大して説明する。細胞培養容器１のウェル以外の構成については他の実施形態と同一である。
【００７０】
ウェル１００’’の最深部１０５’’は、ウェルの深さ方向Ａに垂直な仮想平面Ｂと平行に広がる円形の面状の部分である。
【００７１】
また、ウェル底面１０１’’は、その周縁から最深部１０５’’に近づく従い、ウェルの深さ方向Ａに沿って窪み部１０４’’の窪みが深くなるように形成された傾斜面１０７’’と、傾斜面１０７’’の最深部１０５’’の近傍の端からウェルの深さ方向Ａに沿って、窪み部１０４’’の窪みが更に深くなるように延びる側壁面１０８と、側壁面１０８のうち前記窪みが最も深い部分に接続された面状の最深部１０５’’とを備える。
【００７２】
この実施形態では、窪み部１０４’’は、最深部１０５’’を底とし周囲が側壁面１０８により囲われた第一窪み部１０９と、第一窪み部１０９に隣接し傾斜面１０７’’に周囲が囲われた第二窪み部１１０とから構成される。
【００７３】
第一窪み部１０９は細胞を収容し定位置に保持可能な径を有している。内部空間１０３に収容された細胞は、重力を駆動力として第一窪み部１０９に移動し保持される。
【００７４】
図示しない他の実施形態としては、傾斜面１０７’’の最深部１０５’’の近傍の端と、面状の最深部１０５’’の周縁とが直接接続されている実施形態が挙げられる。
【００７５】
＜第５実施形態（図６Ａ〜Ｄ）＞
図６Ａ〜Ｄには、第５実施形態に係る細胞培養容器１における１つのウェル１００’’’のみを拡大して説明する。細胞培養容器１のウェル以外の構成については他の実施形態と同一である。
【００７６】
ウェル底面１０１’’’の一部のみが部分的に窪んで窪み部１０４’’’を形成している。
【００７７】
ウェル底面１０１’’’は、周縁から最深部１０５’’’に向かって延びる平坦面１１２と、平坦面１１２の最深部１０５’’’の近傍の端からウェルの深さ方向Ａに沿って、窪み部１０４’’’の窪みが深くなるように延びる側壁面１１１と、側壁面１１１のうち前記窪みが最も深い部分に接続された面状の最深部１０５’’’とを備える。深部１０５’’’は、ウェルの深さ方向Ａに垂直な仮想平面Ｂと平行に広がる円形の面状の部分である。
【００７８】
この実施形態では、窪み部１０４’’’は、最深部１０５’’’を底とし周囲が側壁面１１１により囲われている。窪み部１０４’’’は細胞を収容し定位置に保持可能な径を有している。培養しようとする細胞を窪み部１０４’’’に配置することにより、細胞を定位置で培養することが可能である。
【符号の説明】
【００７９】
１・・細胞培養容器
１００・・ウェル
１０１・・ウェル底面
１０２・・ウェル周壁面
１０３・・ウェルの内部空間
１０５・・最深部
１０４・・窪み部
１０７・・傾斜面
１１５・・領域Ｆにおいて、最深部１０５を仮想平面Ｂに投影した部分
２０・・容器底部
２５・・第一底部
２６・・第二底部
３０・・容器側壁部
３１・・容器側壁部の第一部分
３２・・容器側壁部の第二部分
４０・・収容部
４５・・収容部の内部空間
４７・・収容部４０の外縁
Ａ・・ウェルの深さ方向
Ｂ・・仮想平面
Ｃ・・細胞
Ｄ・・培養液のドロップ
Ｆ・・ウェル底面を仮想平面Ｂに投影して形成される領域
Ｐ１・・領域Ｆの重心
Ｘ・・第一直線
Ｙ・・第二直線
【図１Ａ】
0006427988.tif 000002
【図１Ｂ】
0006427988.tif 000003
【図１Ｃ】
0006427988.tif 000004
【図１Ｄ】
0006427988.tif 000005
【図１Ｅ】
0006427988.tif 000006
【図１Ｆ】
0006427988.tif 000007
【図２】
0006427988.tif 000008
【図３Ａ】
0006427988.tif 000009
【図３Ｂ】
0006427988.tif 000010
【図３Ｃ】
0006427988.tif 000011
【図３Ｄ】
0006427988.tif 000012
【図３Ｅ】
0006427988.tif 000013
【図３Ｆ】
0006427988.tif 000014
【図４Ａ】
0006427988.tif 000015
【図４Ｂ】
0006427988.tif 000016
【図４Ｃ】
0006427988.tif 000017
【図４Ｄ】
0006427988.tif 000018
【図５Ａ】
0006427988.tif 000019
【図５Ｂ】
0006427988.tif 000020
【図５Ｃ】
0006427988.tif 000021
【図５Ｄ】
0006427988.tif 000022
【図６Ａ】
0006427988.tif 000023
【図６Ｂ】
0006427988.tif 000024
【図６Ｃ】
0006427988.tif 000025
【図６Ｄ】
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【図７】
0006427988.tif 000027