(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化７２】
0006322646.tif 000078
［式中、
Ｒ１は、シクロアルキルアルコキシ又はハロアルコキシであり；
Ｒ２は、シクロアルキル又はハロアゼチジニルであり；
Ｒ３及びＲ４は、独立して、アルキル、アルコキシ、アルコキシアルキル及びアルコキシカルボニルアルキルから選択されるか；
あるいはＲ３及びＲ４は、これらが結合している窒素原子と一緒になって、ヘテロシクリル又は置換ヘテロシクリルを形成し、ここで、ヘテロシクリルは、ピロリジニル、モルホリニル、オキソモルホリニル、２−オキソ−５−アザ−ビシクロ［２．２．１］ヘプチル、７−オキサ−４−アザ−スピロ［２．５］オクチル、ピペラジニル、２−オキサ−６−アザ−スピロ［３．４］オクチル、ピペリジニル、チオモルホリニル又は５−アザスピロ［２．４］ヘプチルであり、そして、置換ヘテロシクリルは、アルキル、ハロゲン、アミノカルボニル、ヒドロキシアルキル、アルコキシカルボニル、アルキルチオカルバモイル、アルキルカルボニルオキシ及びヒドロキシルから独立して選択される１〜４個の置換基で置換されているヘテロシクリルである］
で表される化合物又はその薬学的に許容し得る塩。
【請求項２】
Ｒ１が、シクロアルキルアルコキシである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１が、シクロプロピルメトキシである、請求項１又は２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ２が、シクロプロピル又はジフルオロアゼチジニルである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ３及びＲ４が、独立して、アルキル、アルコキシ及びアルコキシアルキルから選択されるか、あるいはＲ３及びＲ４が、これらが結合している窒素原子と一緒になって、ヘテロシクリル又は置換ヘテロシクリルを形成し、ここで、ヘテロシクリルが、ピロリジニル、モルホリニル又は５−アザスピロ［２．４］ヘプチルであり、そして、置換ヘテロシクリルが、アルキル、ハロゲン及びアミノカルボニルから独立して選択される１〜３個の置換基で置換されているヘテロシクリルである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ３及びＲ４が、独立して、メチル、tert．−ブチル、メトキシエチル又はメトキシブチルから選択されるか、あるいはＲ３及びＲ４が、これらが結合している窒素原子と一緒になって、ジメチルモルホリニル、ジメチルピロリジニル、（アミノカルボニル）（ジフルオロ）ピロリジニル、（アミノカルボニル）（ジメチル）ピロリジニル又は（アミノカルボニル）５−アザスピロ［２．４］ヘプチルを形成する、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７】
（５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−イル）−（（Ｒ）−２−メチル−ピロリジン−１−イル）−メタノン；
［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−イル］−（（Ｒ）−２−メチル−ピロリジン−１−イル）−メタノン；
６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸tert−ブチル−（２−メトキシ−エチル）−アミド；
［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−イル］−（３，３−ジメチル−モルホリン−４−イル）−メタノン；
［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−イル］−（（Ｓ）−２−メチル−ピロリジン−１−イル）−メタノン；
［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−イル］−（１Ｒ，４Ｒ）−２−オキサ−５−アザ−ビシクロ［２．２．１］ヘプタ−５−イル−メタノン；
６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸tert−ブチル−メチル−アミド；
［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−イル］−（３，３−ジフルオロ−ピロリジン−１−イル）−メタノン；
６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸エチル−イソプロピル−アミド；
［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−イル］−（７−オキサ−４−アザ−スピロ［２．５］オクタ−４−イル）−メタノン；
｛tert−ブチル−［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボニル］−アミノ｝−酢酸エチルエステル；
６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸（２−メトキシ−１，１−ジメチル−エチル）−メチル−アミド；
［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−イル］−（２，２−ジメチル−モルホリン−４−イル）−メタノン；
５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−カルボン酸（２−メトキシ−１，１−ジメチル−エチル）−メチル−アミド；
（５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−イル）−（２，２−ジメチル−ピロリジン−１−イル）−メタノン；
（Ｓ）−１−（５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−カルボニル）−ピロリジン−２−カルボン酸メチルエステル；
（５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−イル）−（７−オキサ−４−アザ−スピロ［２．５］オクタ−４−イル）−メタノン；
（Ｓ）−１−（５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−カルボニル）−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−２−カルボン酸アミド；
（Ｓ）−１−［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボニル］−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−２−カルボン酸アミド；
［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−イル］−［４−（２−ヒドロキシ−エチル）−ピペラジン−１−イル］−メタノン；
［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−イル］−（２，２−ジメチル−ピロリジン−１−イル）−メタノン；
（Ｒ）−１−［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボニル］−ピロリジン−２−カルボン酸メチルエステル；
４−［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボニル］−モルホリン−２−オン；
（Ｒ）−１−［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボニル］−ピロリジン−２−カルボチオ酸ジメチルアミド；
酢酸 １−（５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−カルボニル）−３−メチル−ピロリジン−３−イルエステル；
（５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−イル）−（３，３，４，４−テトラフルオロ−ピロリジン−１−イル）−メタノン；
酢酸 （Ｓ）−１−［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボニル］−ピロリジン−３−イルエステル；
［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−イル］−（２−オキサ−６−アザ−スピロ［３．４］オクタ−６−イル）−メタノン；
酢酸 １−［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボニル］−３−メチル−ピロリジン−３−イルエステル；
［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−イル］−（３，３，４，４−テトラフルオロ−ピロリジン−１−イル）−メタノン；
５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−６−（２，２，２−トリフルオロ−エトキシ）−ピラジン−２−カルボン酸tert−ブチル−メチル−アミド；
［５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−６−（２，２，２−トリフルオロ−エトキシ）−ピラジン−２−イル］−（２，２−ジメチル−ピロリジン−１−イル）−メタノン；
１−［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボニル］−ピペリジン−２−カルボン酸アミド；
１−（５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−カルボニル）−４，４−ジメチル−ピロリジン−２−カルボン酸アミド；
１−［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボニル］−４，４−ジメチル−ピロリジン−２−カルボン酸アミド；
（−）−１−［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボニル］−ピペリジン−２−カルボン酸アミド；
（−）−４−［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボニル］−チオモルホリン−３−カルボン酸アミド；
（−）−１−［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボニル］−４，４−ジメチル−ピロリジン−２−カルボン酸アミド；
（−）−１−（５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−カルボニル）−４，４−ジメチル−ピロリジン−２−カルボン酸アミド；
（±）−５−［６−（シクロプロピルメトキシ）−５−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）ピラジン−２−カルボニル］−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−６−カルボキサミド；
（２Ｓ）−１−［６−（シクロプロピルメトキシ）−５−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）ピラジン−２−カルボニル］−４−ヒドロキシ−４−メチルピロリジン−２−カルボキサミド；及び
（２Ｓ）−１−［５−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）−６−（２，２−ジフルオロエトキシ）ピラジン−２−カルボニル］−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−２−カルボキサミドから選択される、請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８】
６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸tert−ブチル−（２−メトキシ−エチル）−アミド；
［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−イル］−（３，３−ジメチル−モルホリン−４−イル）−メタノン；
６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸tert−ブチル−メチル−アミド；
６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸（２−メトキシ−１，１−ジメチル−エチル）−メチル−アミド；
（５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−イル）−（２，２−ジメチル−ピロリジン−１−イル）−メタノン；
（Ｓ）−１−［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボニル］−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−２−カルボン酸アミド；
［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−イル］−（２，２−ジメチル−ピロリジン−１−イル）−メタノン；
１−（５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−カルボニル）−４，４−ジメチル−ピロリジン−２−カルボン酸アミド；
（−）−１−［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボニル］−４，４−ジメチル−ピロリジン−２−カルボン酸アミド；及び
（±）−５−［６−（シクロプロピルメトキシ）−５−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）ピラジン−２−カルボニル］−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−６−カルボキサミドから選択される、請求項１〜７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物の調製のためのプロセスであって、式（ＩＩ）：
【化７３】
0006322646.tif 000079
［式中、Ｒ１〜Ｒ４は、請求項１〜６のいずれか一項に定義されるとおりである］
で表される化合物を、ＮＨＲ３Ｒ４、アミドカップリング剤及び塩基の存在下で反応させることを含む、プロセス。
【請求項１０】
請求項９のプロセスに従って製造される、請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１１】
治療活性物質として使用するための、請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１２】
請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物と治療上不活性な担体とを含む、医薬組成物。
【請求項１３】
疼痛、アテローム性動脈硬化症、加齢黄斑変性、糖尿病性網膜症、緑内障、網膜静脈閉塞、未熟児網膜症、眼虚血症候群、地図状萎縮、糖尿病、炎症、炎症性腸疾患、虚血再灌流傷害、急性肝不全、肝線維症、肺線維症、腎線維症、全身性線維症、急性移植片拒絶反応、慢性移植腎症、糖尿病性腎症、糸球体腎症、心筋症、心不全、心筋虚血、心筋梗塞、全身性硬化症、熱傷、火傷、肥厚性瘢痕、ケロイド、歯肉炎、発熱、肝硬変又は腫瘍、骨量の制御、神経変性、筋萎縮性側索硬化症、卒中、一過性脳虚血発作又はブドウ膜炎の治療又は予防のための、請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
疼痛、アテローム性動脈硬化症、加齢黄斑変性、糖尿病性網膜症、緑内障、網膜静脈閉塞、未熟児網膜症、眼虚血症候群、地図状萎縮、糖尿病、炎症、炎症性腸疾患、虚血再灌流傷害、急性肝不全、肝線維症、肺線維症、腎線維症、全身性線維症、急性移植片拒絶反応、慢性移植腎症、糖尿病性腎症、糸球体腎症、心筋症、心不全、心筋虚血、心筋梗塞、全身性硬化症、熱傷、火傷、肥厚性瘢痕、ケロイド、歯肉炎、発熱、肝硬変又は腫瘍、骨量の制御、神経変性、筋萎縮性側索硬化症、卒中、一過性脳虚血発作又はブドウ膜炎の治療又は予防のための医薬の調製のための、請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項１５】
疼痛、アテローム性動脈硬化症、加齢黄斑変性、糖尿病性網膜症、緑内障、網膜静脈閉塞、未熟児網膜症、眼虚血症候群、地図状萎縮、糖尿病、炎症、炎症性腸疾患、虚血再灌流傷害、急性肝不全、肝線維症、肺線維症、腎線維症、全身性線維症、急性移植片拒絶反応、慢性移植腎症、糖尿病性腎症、糸球体腎症、心筋症、心不全、心筋虚血、心筋梗塞、全身性硬化症、熱傷、火傷、肥厚性瘢痕、ケロイド、歯肉炎、発熱、肝硬変又は腫瘍、骨量の制御、神経変性、筋萎縮性側索硬化症、卒中、一過性脳虚血発作又はブドウ膜炎の治療又は予防のための、請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、哺乳動物の治療及び／又は予防に有用な有機化合物、特に、カンナビノイド受容体２の選択的アゴニストである化合物に関する。
【０００２】
本発明は、特に、式（Ｉ）：
【化１】
0006322646.tif 000002
［式中、
Ｒ１は、シクロアルキルアルコキシ又はハロアルコキシであり；
Ｒ２は、シクロアルキル又はハロアゼチジニルであり；
Ｒ３及びＲ４は、独立して、アルキル、アルコキシ、アルコキシアルキル及びアルコキシカルボニルアルキルから選択されるか；
あるいはＲ３及びＲ４は、これらが結合している窒素原子と一緒になって、ヘテロシクリル又は置換ヘテロシクリルを形成し、ここで、ヘテロシクリルは、ピロリジニル、モルホリニル、オキソモルホリニル、２−オキソ−５−アザ−ビシクロ［２．２．１］ヘプチル、７−オキサ−４−アザ−スピロ［２．５］オクチル、ピペラジニル、２−オキサ−６−アザ−スピロ［３．４］オクチル、ピペリジニル、チオモルホリニル又は５−アザスピロ［２．４］ヘプチルであり、そして、置換ヘテロシクリルは、アルキル、ハロゲン、アミノカルボニル、ヒドロキシアルキル、アルコキシカルボニル、アルキルチオカルバモイル、アルキルカルボニルオキシ及びヒドロキシルから独立して選択される１〜４個の置換基で置換されているヘテロシクリルである］
で表される化合物又はその薬学的に許容し得る塩若しくはエステルに関する。
【０００３】
式（Ｉ）の化合物は、例えば、疼痛、アテローム性動脈硬化症、加齢黄斑変性、糖尿病性網膜症、緑内障、網膜静脈閉塞、未熟児網膜症、眼虚血症候群、地図状萎縮、糖尿病、炎症、炎症性腸疾患、虚血再灌流傷害、急性肝不全、肝線維症、肺線維症、腎線維症、全身性線維症、急性移植片拒絶反応、慢性移植腎症、糖尿病性腎症、糸球体腎症、心筋症、心不全、心筋虚血、心筋梗塞、全身性硬化症、熱傷、火傷、肥厚性瘢痕、ケロイド、歯肉炎、発熱(gingivitis pyrexia)、肝硬変又は腫瘍、骨量の制御、神経変性、筋萎縮性側索硬化症、卒中、一過性脳虚血発作又はブドウ膜炎の治療又は予防において特に有用である。
【０００４】
式（Ｉ）の化合物は、糖尿病性網膜症、網膜静脈閉塞又はブドウ膜炎の治療又は予防において特に有用である。
【０００５】
カンナビノイド受容体は、Ｇタンパク質結合受容体スーパーファミリーに属する細胞膜受容体のクラスの１つである。現在のところ、カンナビノイド受容体１（ＣＢ１）とカンナビノイド受容体２（ＣＢ２）と呼ばれる２種類のサブタイプが知られている。ＣＢ１受容体は、主に、中枢神経（すなわち、扁桃体、小脳、海馬）系で発現しており、末梢においては、その量はより少ない。ＣＮＲ２遺伝子によりコードされるＣＢ２は、大部分がマクロファージ及びＴ細胞などの免疫系の細胞（Ashton, J. C. et al. Curr Neuropharmacol 2007, 5(2), 73-80; Miller, A. M. et al. Br J Pharmacol 2008, 153(2), 299-308; Centonze, D., et al. Curr Pharm Des 2008, 14(23), 2370-42）及び消化管系（Wright, K. L. et al. Br J Pharmacol 2008, 153(2), 263-70）の末梢で発現している。
ＣＢ２受容体は、また、脳内に広く分布しており、主に小膠細胞に見出されるが、神経細胞には見出されない（Cabral, G. A. et al. Br J Pharmacol 2008, 153(2): 240-51）。
【０００６】
ここ十年間、ＣＢ２受容体アゴニストへの関心が着実に高まっているが（現在、３０〜４０人の特許出願／年）、その理由は、いくつかの開発初期化合物が、慢性疼痛（Beltramo, M. Mini Rev Med Chem 2009, 9(1), 11-25）、アテローム性動脈硬化症（Mach, F. et al. J Neuroendocrinol 2008, 20 Suppl 1, 53-7）、骨量の制御（Bab, I. et al. Br J Pharmacol 2008, 153(2), 182-8）、神経炎症（Cabral, G. A. et al. J Leukoc Biol 2005, 78(6), 1192-7）、虚血／再灌流傷害（Pacher, P. et al. Br J Pharmacol 2008, 153(2), 252-62）、全身性線維症（Akhmetshina, A. et al. Arthritis Rheum 2009, 60(4), 1129-36; Garcia-Gonzalez, E. et al. Rheumatology (Oxford) 2009, 48(9), 1050-6）、肝線維症（Julien, B. et al. Gastroenterology 2005, 128(3), 742-55; Munoz-Luque, J. et al. J Pharmacol Exp Ther 2008, 324(2), 475-83）を含む、多数のヒトの疾患の前臨床モデルにおいて、有益な効果を有することが示されたという事実によるものである。
【０００７】
虚血／再灌流（Ｉ／Ｒ）傷害は、卒中、心筋梗塞、心肺バイパス法及びその他の血管手術、ならびに臓器移植などの病状において生じる、組織損傷の主要な原因であって、様々な病因の循環性ショックの過程を悪化させる末期臓器障害の主要機序でもある。これらの病状は全て、結果として組織の酸素化不良を生じさせる、正常な血液供給の崩壊を特徴とする。再酸素化、例えば、再灌流は、正常な組織の酸素化を回復するための最終的な治療法である。しかし、血液から酸素及び栄養が供給されないことは、血液循環の回復が結果としてさらなる組織損傷を生じる病状をもたらす。再灌流傷害の損傷は、損傷した組織の炎症反応に一部起因する。新たに回復した血液によってその領域に運ばれた白血球は、組織損傷に応答して、多くの炎症性因子、例えば、インターロイキンならびにフリーラジカルを放出する。回復した血流は、細胞内に酸素を再導入し、これが、細胞タンパク質、ＤＮＡ及び細胞膜に損傷を与える。
【０００８】
遠隔虚血プレコンディショニング（ＲＩＰＣ）は、虚血及び再灌流により生じる損傷に対して身体の内因性の防御能力を利用する戦略である。それは、１つの臓器又は組織の一過性の非致死的虚血及び再灌流によって、遠隔臓器又は組織において、その後の「致死的」な虚血再灌流傷害のエピソードに対する耐性が付与されるという興味深い現象である。１つの臓器又は組織の一過性の虚血及び再灌流によって防御が付与されるその実際の機序は現在のところ分かっていないが、いくつかの仮説が提唱されている。
【０００９】
体液性仮説は、遠隔臓器又は組織において生成された内因性物質（例えば、アデノシン、ブラジキニン、オピオイド、ＣＧＲＰ、内在性カンナビノイド、アンギオテンシンＩ、又はまだ同定されていないその他の体液性因子）が血流に侵入して、標的組織においてその各受容体を活性化し、それによって、虚血プレコンディショニングに関わる心臓保護の様々な細胞内経路がリクルートされると提唱している。
【００１０】
最近のデータは、内在性カンナビノイド及びその受容体、特に、ＣＢ２がプレコンディショニングに関与し、炎症反応のダウンレギュレーションによる再灌流傷害の防止に寄与しうることを示している（Pacher, P. et al. Br J Pharmacol 2008, 153(2), 252-62）。具体的には、ＣＢ２ツールアゴニストを使用する最近の研究から、心臓（Defer, N. et al. Faseb J 2009, 23(7), 2120-30）、脳（Zhang, M. et al. J Cereb Blood Flow Metab 2007, 27(7), 1387-96）、肝臓（Batkai, S. et al. Faseb J 2007, 21(8), 1788-800）及び腎臓（Feizi, A. et al. Exp Toxicol Pathol 2008, 60(4-5), 405-10）におけるＩ／Ｒ傷害の減少に対してのこの概念の有効性が実証された。
【００１１】
さらに、ここ数年にわたり、ＣＢ２が亜慢性と慢性の状況においても関心事となりうることを示す文献が増えている。ＣＢ１及びＣＢ２の特定のアップレギュレーションが、慢性疾患の動物モデルにおいて線維症と関連性を有し（Garcia-Gonzalez, E. et al. Rheumatology (Oxford) 2009, 48(9), 1050-6; Yang, Y. Y. et al. Liver Int 2009, 29(5), 678-85）、線維症の進行の原因となる細胞である筋線維芽細胞においてＣＢ２の関連発現を伴うことが示された。
【００１２】
選択的ＣＢ２アゴニストによるＣＢ２受容体の活性化は、実際に、びまん性全身性硬化症において抗線維化効果をもたらすことが示され（Garcia-Gonzalez, E. et al. Rheumatology (Oxford) 2009, 48(9), 1050-6）、ＣＢ２受容体が、実験的な皮膚線維化（Akhmetshina, A. et al. Arthritis Rheum 2009, 60(4), 1129-36）及び肝臓の病態生理学（慢性肝疾患と関連する線維形成を含む）（Lotersztajn, S. et al. Gastroenterol Clin Biol 2007, 31(3), 255-8; Mallat, A. et al. Expert Opin Ther Targets 2007, 11(3), 403-9; Lotersztajn, S. et al. Br J Pharmacol 2008, 153(2), 286-9）において重要なターゲットとして浮上した。
【００１３】
本発明の化合物は、ＣＢ２受容体に結合して、該受容体を調節し、かつ、より低いＣＢ１受容体活性を有する。
【００１４】
本明細書において、用語「アルキル」は、単独で又は組み合わされて、１〜８個の炭素原子を有する直鎖又は分岐鎖アルキル基、具体的には、１〜６個の炭素原子を有する直鎖又は分岐鎖アルキル基、より具体的には、１〜４個の炭素原子を有する直鎖又は分岐鎖アルキル基を示す。直鎖及び分岐鎖Ｃ１−Ｃ８アルキル基の例は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、tert−ブチル、異性体ペンチル、異性体ヘキシル、異性体ヘプチル及び異性体オクチルであり、具体的には、メチル、エチル、プロピル、ブチル及びペンチルであり、より具体的には、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、イソブチル、tert−ブチル及びイソペンチルである。アルキルの具体的な例は、メチル、エチル、イソプロピル、ブチル及びtert−ブチルであり、特にメチル、エチル及びtert−ブチルである。
【００１５】
用語「シクロアルキル」は、単独で又は組み合わされて、３〜８個の炭素原子を有するシクロアルキル環、具体的には、３〜６個の炭素原子を有するシクロアルキル環を示す。シクロアルキルの例は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル及びシクロヘキシル、シクロヘプチル及びシクロオクチルである。「シクロアルキル」の具体的な例は、シクロプロピルである。
【００１６】
用語「アルコキシ」は、単独又は組み合わされて、式：アルキル−Ｏ−（式中、用語「アルキル」は前記で示した意味を有する）の基を意味し、例えば、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、イソブトキシ、sec−ブトキシ及びtert−ブトキシである。具体的な「アルコキシ」は、メトキシ及びエトキシであり、そして特にメトキシである。
【００１７】
用語「オキシ」は、単独で又は組み合わされて、−Ｏ−基を示す。
【００１８】
用語「ハロゲン」又は「ハロ」は、単独で又は組み合わされて、フッ素、塩素、臭素又はヨウ素、具体的には、フッ素、塩素又は臭素、より具体的には、フッ素及び塩素を示す。用語「ハロ」は、別の基との組み合わせにおいて、前記基が、少なくとも１個のハロゲンで置換されていること、特に、１〜５個のハロゲン、特に、１〜４個のハロゲン、すなわち、１、２、３又は４個のハロゲンで置換されていることを示す。特定の「ハロゲン」は、フッ素である。
【００１９】
用語「ハロアルキル」は、単独で又は組み合わされて、少なくとも１個のハロゲンで置換されている、特に、１〜５個のハロゲン、特に、１〜３個のハロゲンで置換されているアルキル基を示す。特定の「ハロアルキル」は、トリフルオロエチルである。
【００２０】
用語「ハロアルコキシ」は、単独で又は組み合わされて、少なくとも１個のハロゲンで置換されている、特に、１〜５個のハロゲン、特に、１〜３個のハロゲンで置換されているアルコキシ基を示す。具体的な「ハロアルコキシ」は、トリフルオロエトキシ、フルオロエトキシ、フルオロプロピルオキシ、ジフルオロエトキシおよびジフルオロプロピルオキシである。具体的な「ハロアルコキシ」は、トリフルオロエトキシである。
【００２１】
用語「ヒドロキシル」及び「ヒドロキシ」は、単独で又は組み合わされて、−ＯＨ基を示す。
【００２２】
用語「カルボニル」は、単独で又は組み合わされて、−Ｃ（Ｏ）−基を示す。
【００２３】
用語「アミノ」は、単独又は組み合わされて、第一級アミノ基（−ＮＨ２）、第二級アミノ基（−ＮＨ−）、又は第三級アミノ基（−Ｎ−）を示す。
【００２４】
用語「アミノカルボニル」は、単独で又は組み合わせて、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ２基を示す。
【００２５】
用語「薬学的に許容しうる塩」は、遊離塩基又は遊離酸の生物学的効果及び特性を保持し、生物学的にも又はその他の点でも望ましくないことはない塩を指す。塩は、無機酸、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、具体的には、塩酸と、そして、有機酸、例えば、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、シュウ酸、マレイン酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、ケイ皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、サリチル酸、Ｎ−アセチルシステインと形成される。また、これらの塩は、遊離酸に無機塩基又は有機塩基を付加させることにより調製してもよい。無機塩基から誘導される塩としては、ナトリウム、カリウム、リチウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム塩が含まれるが、これらに限定されない。有機塩基から誘導される塩としては、第一級、第二級及び第三級アミン、天然の置換アミンを含む置換アミン、環状アミン及び塩基性イオン交換樹脂、例えば、イソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、エタノールアミン、リシン、アルギニン、Ｎ−エチルピペリジン、ピペリジン、ポリアミン樹脂の塩が含まれるが、これらに限定されない。式（Ｉ）の化合物は、両性イオンの形態であってもよい。式（Ｉ）の化合物の特に好ましい薬学的に許容しうる塩は、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸及びメタンスルホン酸の塩である。
【００２６】
「薬学的に許容しうるエステル」は、一般式（Ｉ）の化合物の官能基を誘導化して、in vivoで親化合物に戻す変換をすることができる誘導体を提供することができることを意味する。そのような化合物の例としては、生理学的に許容しうる、代謝的に不安定なエステル誘導体、例えば、メトキシメチルエステル、メチルチオメチルエステル及びピバロイルオキシメチルエステルが含まれる。また、in vivoで一般式（Ｉ）の親化合物を生成することができる代謝的に不安定なエステルと類似する、一般式（Ｉ）の化合物の任意の生理学的に許容しうる等価体も本発明の範囲内である。
【００２７】
出発物質又は式（Ｉ）の化合物の１つが、１つ又は複数の反応工程の反応条件下で安定でないか又は反応性である１つ又は複数の官能基を含有するのであれば、適切な保護基（例えば、"Protective Groups in Organic Chemistry" by T. W. Greene and P. G. M. Wuts, 3rd Ed., 1999, Wiley, New York に記載されるような保護基）を、当技術分野においてよく知られた方法を適用して、重要な工程の前に導入することができる。そのような保護基は、文献に記載される標準的な方法を使用して、合成の後の段階で除去することができる。保護基の例は、tert−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）、９−フルオレニルメチルカルバメート（Ｆｍｏｃ）、２−トリメチルシリルエチルカルバメート（Ｔｅｏｃ）、カルボベンジルオキシ（Ｃｂｚ）及びｐ−メトキシベンジルオキシカルボニル（Ｍｏｚ）である。
【００２８】
式（Ｉ）の化合物は、いくつかの不斉中心を含有することができ、光学的に純粋なエナンチオマー、エナンチオマーの混合物、例えば、ラセミ体など、ジアステレオ異性体の混合物、ジアステレオ異性体のラセミ体又はジアステレオ異性体のラセミ体の混合物の形態で存在することができる。
【００２９】
用語「不斉炭素原子」は、４個の異なる置換基を有する炭素原子を意味する。Cahn-Ingold-Prelog規則に従って、不斉炭素原子は、「Ｒ」又は「Ｓ」立体配置をとることができる。
【００３０】
本発明は、特に、
Ｒ３及びＲ４が、独立して、アルキル、アルコキシ、アルコキシアルキル及びアルコキシカルボニルアルキルから選択されるか；
あるいはＲ３及びＲ４が、これらが結合している窒素原子と一緒になって、ヘテロシクリル又は置換ヘテロシクリルを形成し、ここで、ヘテロシクリルが、ピロリジニル、モルホリニル、オキソモルホリニル、２−オキソ−５−アザ−ビシクロ［２．２．１］ヘプチル、７−オキサ−４−アザ−スピロ［２．５］オクチル、ピペラジニル、２−オキサ−６−アザ−スピロ［３．４］オクチル、ピペリジニル又はチオモルホリニルであり、そして、置換ヘテロシクリルが、アルキル、ハロゲン、アミノカルボニル、ヒドロキシアルキル、アルコキシカルボニル、アルキルチオカルバモイル及びアルキルカルボニルオキシから独立して選択される１〜４個の置換基で置換されているヘテロシクリルである、式（Ｉ）の化合物に関する。
【００３１】
本発明は、特に、以下に関する：
【００３２】
Ｒ１が、シクロアルキルアルコキシである、式（Ｉ）の化合物；
【００３３】
Ｒ１が、シクロプロピルメトキシ又はトリフルオロエトキシである、式（Ｉ）の化合物；
【００３４】
Ｒ１が、シクロプロピルメトキシである、式（Ｉ）の化合物；
【００３５】
Ｒ２が、シクロプロピル又はジフルオロアゼチジニルである、式（Ｉ）の化合物；
【００３６】
Ｒ３及びＲ４が、独立して、アルキル、アルコキシ、アルコキシアルキル及びアルコキシカルボニルアルキルから選択されるか、あるいはＲ３及びＲ４が、これらが結合している窒素原子と一緒になって、置換ピロリジニル、置換モルホリニル、置換オキソモルホリニル、置換ピペリジニル、置換チオモルホリニル又は置換５−アザスピロ［２．４］ヘプチルを形成し、ここで、置換ピロリジニル、置換モルホリニル、置換オキソモルホリニル、置換ピペリジニル、置換チオモルホリニル又は置換５−アザスピロ［２．４］ヘプチルが、アルキル、ハロゲン、アミノカルボニル、ヒドロキシアルキル、アルコキシカルボニル、アルキルチオカルバモイル、アルキルカルボニルオキシ及びヒドロキシルから独立して選択される１〜４個の置換基で置換されている、ピロリジニル、モルホリニル、オキソモルホリニル、ピペリジニル(piperidiny)、チオモルホリニル又は５−アザスピロ［２．４］ヘプチルであるか、あるいはＲ３及びＲ４が、これらが結合している窒素原子と一緒になって、２−オキソ−５−アザ−ビシクロ［２．２．１］ヘプチル、７−オキサ−４−アザ−スピロ［２．５］オクチル、ピペラジニル又は２−オキサ−６−アザ−スピロ［３．４］オクチルを形成する、式（Ｉ）の化合物；
【００３７】
Ｒ３及びＲ４が、独立して、アルキル、アルコキシ、アルコキシアルキル及びアルコキシカルボニルアルキルから選択されるか、あるいはＲ３及びＲ４が、これらが結合している窒素原子と一緒になって、置換ピロリジニル、置換モルホリニル、置換オキソモルホリニル、置換ピペリジニル又は置換チオモルホリニルを形成し、ここで、置換ピロリジニル、置換モルホリニル、置換オキソモルホリニル、置換ピペリジニル又は置換チオモルホリニルが、アルキル、ハロゲン、アミノカルボニル、ヒドロキシアルキル、アルコキシカルボニル、アルキルチオカルバモイル及びアルキルカルボニルオキシから独立して選択される１〜４個の置換基で置換されている、ピロリジニル、モルホリニル、オキソモルホリニル、ピペリジニル又はチオモルホリニルであるか、あるいはＲ３及びＲ４が、これらが結合している窒素原子と一緒になって、２−オキソ−５−アザ−ビシクロ［２．２．１］ヘプチル、７−オキサ−４−アザ−スピロ［２．５］オクチル、ピペラジニル又は２−オキサ−６−アザ−スピロ［３．４］オクチルを形成する、式（Ｉ）の化合物；
【００３８】
Ｒ３及びＲ４が、独立して、アルキル、アルコキシ及びアルコキシアルキルから選択されるか、あるいはＲ３及びＲ４が、これらが結合している窒素原子と一緒になって、ヘテロシクリル又は置換ヘテロシクリルを形成し、ここで、ヘテロシクリルが、ピロリジニル、モルホリニル又は５−アザスピロ［２．４］ヘプチルであり、そして、置換ヘテロシクリルが、アルキル、ハロゲン及びアミノカルボニルから独立して選択される１〜３個の置換基で置換されているヘテロシクリルである、式（Ｉ）の化合物；
【００３９】
Ｒ３及びＲ４が、独立して、メチル、tert．−ブチル、メトキシエチル又はメトキシブチルから選択されるか、あるいはＲ３及びＲ４が、これらが結合している窒素原子と一緒になって、ジメチルモルホリニル、ジメチルピロリジニル、（アミノカルボニル）（ジフルオロ）ピロリジニル、（アミノカルボニル）（ジメチル）ピロリジニル又は（アミノカルボニル）５−アザスピロ［２．４］ヘプチルを形成する、式（Ｉ）の化合物；
【００４０】
Ｒ３及びＲ４が、独立して、アルキル、アルコキシ及びアルコキシアルキルから選択されるか、あるいはＲ３及びＲ４が、これらが結合している窒素原子と一緒になって、ヘテロシクリル又は置換ヘテロシクリルを形成し、ここで、ヘテロシクリルが、ピロリジニル又はモルホリニルであり、そして、置換ヘテロシクリルが、アルキル、ハロゲン及びアミノカルボニルから独立して選択される１〜３個の置換基で置換されているヘテロシクリルである、式（Ｉ）の化合物；
【００４１】
Ｒ３及びＲ４が、独立して、メチル、tert．−ブチル、メトキシエチル又はメトキシブチルから選択されるか、あるいはＲ３及びＲ４が、これらが結合している窒素原子と一緒になって、ジメチルモルホリニル、ジメチルピロリジニル、（アミノカルボニル）（ジフルオロ）ピロリジニル又は（アミノカルボニル）（ジメチル）ピロリジニルを形成する、式（Ｉ）の化合物；
【００４２】
Ｒ３及びＲ４が、独立して、メチル、エチル、イソプロピル、tert．−ブチル、メトキシエチル、エトキシカルボニルメチル及びメトキシブチルから選択されるか、あるいはＲ３及びＲ４が、これらが結合している窒素原子と一緒になって、メチルピロリジニル、ジメチルピロリジニル、ジメチルモルホリニル、２−オキソ−５−アザ−ビシクロ［２．２．１］ヘプチル、ジフルオロピロリジニル、７−オキサ−４−アザ−スピロ［２．５］オクチル、メトキシカルボニルピロリジニル、（アミノカルボニル）（ジフルオロ）ピロリジニル、ヒドロキシエチルピペラジニル、オキソモルホリニル、ジメチルチオカルバモイルピロリジニル、（メチルカルボニルオキシ）（メチル）ピロリジニル、テトラフルオロピロリジニル、メチルカルボニルオキシピロリジニル、２−オキサ−６−アザ−スピロ［３．４］オクチル、アミノカルボニルピペリジニル、アミノカルボニルチオモルホリニル、（アミノカルボニル）５−アザスピロ［２．４］ヘプチル又は（ヒドロキシ）（アルキル）（アミノカルボニル）ピロリジニルを形成する、式（Ｉ）の化合物；及び
【００４３】
Ｒ３及びＲ４が、独立して、メチル、エチル、イソプロピル、tert．−ブチル、メトキシエチル、エトキシカルボニルメチル及びメトキシブチルから選択されるか、あるいはＲ３及びＲ４が、これらが結合している窒素原子と一緒になって、メチルピロリジニル、ジメチルピロリジニル、ジメチルモルホリニル、２−オキソ−５−アザ−ビシクロ［２．２．１］ヘプチル、ジフルオロピロリジニル、７−オキサ−４−アザ−スピロ［２．５］オクチル、メトキシカルボニルピロリジニル、（アミノカルボニル）（ジフルオロ）ピロリジニル、ヒドロキシエチルピペラジニル、オキソモルホリニル、ジメチルチオカルバモイルピロリジニル、（メチルカルボニルオキシ）（メチル）ピロリジニル、テトラフルオロピロリジニル、メチルカルボニルオキシピロリジニル、２−オキサ−６−アザ−スピロ［３．４］オクチル、アミノカルボニルピペリジニル又はアミノカルボニルチオモルホリニルを形成する、式（Ｉ）の化合物。
【００４４】
本発明は、さらに、下記から選択される、式（Ｉ）の化合物に関する：
（５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−イル）−（（Ｒ）−２−メチル−ピロリジン−１−イル）−メタノン；
［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−イル］−（（Ｒ）−２−メチル−ピロリジン−１−イル）−メタノン；
６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸tert−ブチル−（２−メトキシ−エチル）−アミド；
［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−イル］−（３，３−ジメチル−モルホリン−４−イル）−メタノン；
［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−イル］−（（Ｓ）−２−メチル−ピロリジン−１−イル）−メタノン；
［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−イル］−（１Ｒ，４Ｒ）−２−オキサ−５−アザ−ビシクロ［２．２．１］ヘプタ−５−イル−メタノン；
６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸tert−ブチル−メチル−アミド；
［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−イル］−（３，３−ジフルオロ−ピロリジン−１−イル）−メタノン；
６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸 エチル−イソプロピル−アミド；
［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−イル］−（７−オキサ−４−アザ−スピロ［２．５］オクタ−４−イル）−メタノン；
｛tert−ブチル−［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボニル］−アミノ｝−酢酸エチルエステル；
６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸（２−メトキシ−１，１−ジメチル−エチル）−メチル−アミド；
［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−イル］−（２，２−ジメチル−モルホリン−４−イル）−メタノン；
５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−カルボン酸（２−メトキシ−１，１−ジメチル−エチル）−メチル−アミド；
（５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−イル）−（２，２−ジメチル−ピロリジン−１−イル）−メタノン；
（Ｓ）−１−（５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−カルボニル）−ピロリジン−２−カルボン酸メチルエステル；
（５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−イル）−（７−オキサ−４−アザ−スピロ［２．５］オクタ−４−イル）−メタノン；
（Ｓ）−１−（５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−カルボニル）−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−２−カルボン酸アミド；
（Ｓ）−１−［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボニル］−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−２−カルボン酸アミド；
［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−イル］−［４−（２−ヒドロキシ−エチル）−ピペラジン−１−イル］−メタノン；
［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−イル］−（２，２−ジメチル−ピロリジン−１−イル）−メタノン；
（Ｒ）−１−［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボニル］−ピロリジン−２−カルボン酸メチルエステル；
４−［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボニル］−モルホリン−２−オン；
（Ｒ）−１−［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボニル］−ピロリジン−２−カルボチオ酸ジメチルアミド；
酢酸 １−（５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−カルボニル）−３−メチル−ピロリジン−３−イルエステル；
（５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−イル）−（３，３，４，４−テトラフルオロ−ピロリジン−１−イル）−メタノン；
酢酸 （Ｓ）−１−［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボニル］−ピロリジン−３−イルエステル；
［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−イル］−（２−オキサ−６−アザ−スピロ［３．４］オクタ−６−イル）−メタノン；
酢酸 １−［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボニル］−３−メチル−ピロリジン−３−イルエステル；
［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−イル］−（３，３，４，４−テトラフルオロ−ピロリジン−１−イル）−メタノン；
５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−６−（２，２，２−トリフルオロ−エトキシ）−ピラジン−２−カルボン酸 tert−ブチル−メチル−アミド；
［５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−６−（２，２，２−トリフルオロ−エトキシ）−ピラジン−２−イル］−（２，２−ジメチル−ピロリジン−１−イル）−メタノン；
１−［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボニル］−ピペリジン−２−カルボン酸アミド；
１−（５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−カルボニル）−４，４−ジメチル−ピロリジン−２−カルボン酸アミド；
１−［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボニル］−４，４−ジメチル−ピロリジン−２−カルボン酸アミド；
（−）−１−［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボニル］−ピペリジン−２−カルボン酸アミド；
（−）−４−［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボニル］−チオモルホリン−３−カルボン酸アミド；
（−）−１−［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボニル］−４，４−ジメチル−ピロリジン−２−カルボン酸アミド；及び
（−）−１−（５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−カルボニル）−４，４−ジメチル−ピロリジン−２−カルボン酸アミド。
【００４５】
本発明は、さらに、下記から選択される、式（Ｉ）の化合物に関する：
（±）−５−［６−（シクロプロピルメトキシ）−５−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）ピラジン−２−カルボニル］−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−６−カルボキサミド；
（２Ｓ）−１−［６−（シクロプロピルメトキシ）−５−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）ピラジン−２−カルボニル］−４−ヒドロキシ−４−メチルピロリジン−２−カルボキサミド；及び
（２Ｓ）−１−［５−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）−６−（２，２−ジフルオロエトキシ）ピラジン−２−カルボニル］−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−２−カルボキサミド。
【００４６】
本発明は、さらに、下記から選択される、式（Ｉ）の化合物に関する：
６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸tert−ブチル−（２−メトキシ−エチル）−アミド；
［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−イル］−（３，３−ジメチル−モルホリン−４−イル）−メタノン；
６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸tert−ブチル−メチル−アミド；
６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸（２−メトキシ−１，１−ジメチル−エチル）−メチル−アミド；
（５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−イル）−（２，２−ジメチル−ピロリジン−１−イル）−メタノン；
（Ｓ）−１−［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボニル］−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−２−カルボン酸アミド；
［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−イル］−（２，２−ジメチル−ピロリジン−１−イル）−メタノン；
１−（５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−カルボニル）−４，４−ジメチル−ピロリジン−２−カルボン酸アミド；及び
（−）−１−［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボニル］−４，４−ジメチル−ピロリジン−２−カルボン酸アミド。
【００４７】
本発明は、さらに、化合物（±）−５−［６−（シクロプロピルメトキシ）−５−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）ピラジン−２−カルボニル］−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−６−カルボキサミドに関する。
【００４８】
式（Ｉ）の化合物は、式II：
【化２】
0006322646.tif 000003
［式中、Ｒ１及びＲ２は、本明細書前記に定義されるとおりである］
で表される化合物と、式III：
【化３】
0006322646.tif 000004
［式中、Ｒ３及びＲ４は、本明細書前記に定義されるとおりである］
で表されるアミンとを、例えば、塩基性条件下で、アミドカップリング剤の助けを借りるような当技術分野において公知のアミドカップリング法によってカップリングさせること、及び所望であれば、得られた式（Ｉ）の化合物をその薬学的に許容し得る塩に変換することを含むプロセスによって調製され得る。
【００４９】
特に指示のない限り、Ｒ１〜Ｒ４は、以下のスキームにおいて、上に与えられた意味を有する。
【００５０】
式III又はIIの化合物は、アミドカップリング工程（IIからＩへ）に記載されるカップリング手順を妨害するであろう官能基を含有し得る。この場合、式（Ｉ）の化合物を与える(deliver)ために、III又はIIがアミドカップリング手順を実施する前に当技術分野において公知の方法によって好適に保護される必要があること、及び化合物がカップリング工程後に当技術分野において公知の方法によって脱保護される必要があることを理解されたい。
【００５１】
式IIの化合物と式IIIのアミンとの反応のためのアミドカップリング剤は、例えば、Ｎ，Ｎ’−カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）、Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣＩ）、１−［ビス（ジメチルアミノ）−メチレン］−１Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジニウム−３−オキシドヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）、１−ヒドロキシ−１，２，３−ベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）、Ｏ−ベンゾトリアゾール−１−イル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）、又はＯ−ベンゾトリアゾール−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチル−ウロニウム−ヘキサフルオロ−ホスフェート（ＨＢＴＵ）である。特定のカップリング剤は、ＴＢＴＵ及びＨＡＴＵである。好適な塩基は、トリエチルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、特に、ジイソプロピルエチルアミンを含む。当技術分野において公知の代替方法は、ＩＩから酸塩化物を調製し、好適な塩基の存在下で式ＩＩＩのアミンとカップリングさせることによって開始し得る。
【００５２】
式（Ｉ）の化合物の合成は、例えば、以下のスキームに従って達成され得る。
【００５３】
スキーム１による手順に従って、化合物ＡＡ（５−クロロ−ピラジン−２−カルボン酸メチルエステル、CAN 33332-25-1）を、化合物Ｉ−ａ（式中、Ｒ２は、ハロアゼチジニルである）（Ｒ２ａは、ハロアゼチジニルである）の合成のための出発物質として使用することができる。ＡＡは、市販されているか、又は文献に記載されるように当業者によって合成され得るかのいずれかである。
【００５４】
化合物ＡＢは、ＡＡから、塩基、特にトリエチルアミンの存在下、不活性溶媒、特にジオキサン中、室温〜４５℃の範囲の温度で、対応するハロアゼチジンと反応させることによって調製され得る。
【００５５】
化合物ＡＢからＡＣへの変換は、好適な溶媒中での求電子芳香族臭素化によって、特に、クロロホルム中、高温、特に６０℃での、Ｎ−ブロモスクシンイミドを用いた臭素化によって、又は文献において公知の他の条件を使用することによって達成され得る。
【００５６】
当業者に周知の方法による−例えば、テトラヒドロフラン／エタノール又は別の好適な溶媒中、０℃〜用いられる溶媒の還流温度の間の温度で、ＬｉＯＨ、ＮａＯＨ又はＫＯＨ水溶液を使用する−一般式ＡＣのエステルの鹸化は、一般式ＡＤの酸に導く。
【００５７】
【化４】
0006322646.tif 000005
【００５８】
化合物ＡＤは、塩基、例えば水酸化カリウムの存在下、不活性溶媒、例えばＤＭＳＯを含有又は不含で、室温〜溶媒の還流温度の範囲の温度、特に室温で、好適に置換された第一級又は第二級アルコールＡＥと反応させることによって、化合物II−ａに変換され得る。
【００５９】
化合物II−ａから、例えば、塩基性条件下で、アミドカップリング剤の助けを借りるような当技術分野において公知のアミドカップリング法により、式II−ａの化合物と式ＩＩＩのアミンとをカップリングさせることによって、さらに化合物Ｉ−ａまで合成することができる。例えば、Ｎ，Ｎ’−カルボニル−ジイミダゾール（ＣＤＩ）、Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣＩ）、１−［ビス（ジメチルアミノ）−メチレン］−１Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジニウム−３−オキシドヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）、１−ヒドロキシ−１，２，３−ベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）、Ｏ−ベンゾトリアゾール−１−イル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）、及びＯ−ベンゾトリアゾール−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチル−ウロニウム−ヘキサフルオロ−ホスフェート（ＨＢＴＵ）のようなカップリング試薬が、そのような変換に作用させる(affect)ために用いられ得る。慣用な方法は、例えば、Ｏ−ベンゾトリアゾール−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチル−ウロニウム−ヘキサフルオロ−ホスフェート（ＨＢＴＵ）及び塩基、例えば、Ｎ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（ＤＩＥＡ）を、例えばジメチルホルムアミドのような不活性溶媒中、室温で使用することである。当技術分野において公知の代替方法は、II−ａから酸塩化物を調製し、好適な塩基の存在下で式IIIのアミンとカップリングさせることによって開始し得る。
【００６０】
アミンIIIは、市販されているか、文献に記載されているか、当業者によって合成され得るか、又は実験項に記載されるように得られるかのいずれかである。
【００６１】
出発物質、式ＡＥ又はIIIの化合物の１つが、１つ又は複数の反応工程の反応条件下で安定でないか又は反応性である１つ又は複数の官能基を含有する場合、適切な保護基（Ｐ）（例えば、T.W. Greene et al., Protective Groups in Organic Chemistry, John Wiley and Sons Inc. New York 1999, 3rd edition に記載されているような）が、当技術分野において周知の方法を適用する重要な工程の前に導入され得る。そのような保護基は、当技術分野において公知の標準的な方法を使用して、合成の後の段階で除去され得る。
【００６２】
式ＡＥ又はIIIの１つ又は複数の化合物がキラル中心を含有する場合、式Ｉ−ａのピリジンは、ジアステレオマー又はエナンチオマーの混合物として得られ得、これは、当技術分野において周知の方法、例えば、（キラル）ＨＰＬＣ又は結晶化によって分離され得る。ラセミ化合物は、例えば、結晶化によってジアステレオマー塩を介して、あるいはキラル吸着剤又はキラル溶離剤のいずれかを使用した特定のクロマトグラフィー法による対掌体の分離によって、それらの対掌体に分離され得る。
【００６３】
スキーム２による手順に従って、化合物ＢＡ（３，５−ジブロモ−２−ピラジンアミン、CAN 24241-18-7）を、化合物Ｉ−ｂ（式中、Ｒ２は、シクロアルキルである）（Ｒ２ｂは、シクロアルキルである）の合成のための出発物質として使用することができる。
【００６４】
化合物ＢＡは、塩基、例えば水素化ナトリウムの存在下、不活性溶媒、例えばＤＭＦを含有又は不含で、室温〜溶媒の還流温度の範囲の温度、特に室温で、好適に置換された第一級又は第二級アルコールＡＥと反応させることによって、化合物ＢＢに変換され得る。
【００６５】
当業者に周知の方法による−例えば、不活性溶媒、特にジクロロメタン中、触媒量の塩基、特にジメチルアミノピリジンの存在下で、ジ−tert−ブチル ジカルボナートを使用する−一般式ＢＢの化合物のＢｏｃ保護は、反応中に過剰なジ−tert−ブチル ジカルボナートが用いられた場合、一般式ＢＣの化合物に導く。
【００６６】
【化５】
0006322646.tif 000006
【００６７】
一般式ＢＤの化合物は、一般式ＢＣの化合物からの、好適な塩基、例えば第三級アミン塩基、特にトリエチルアミンの存在下、好適な溶媒、例えばアルコール、特にメタノール中での、パラジウム（II）、特に酢酸パラジウム（II）触媒カルボニル化によって得られ得る。
【００６８】
当業者に周知の方法による−例えば、高温、特に還流温度で、プロトン性溶媒、特にメタノールを使用する−一般式ＢＤのｂｏｃ保護化合物の加溶媒分解は、一般式ＢＥの化合物に導く。
【００６９】
一般式ＢＦの化合物は、一般式ＢＥの化合物から、臭化物源、例えば臭化水素酸又はより具体的にはトリメチルブロモシランの存在下、好適な溶媒、例えばハロゲン化炭化水素、より具体的にはジブロモメタン中で、ニトロソ化剤、例えば、亜硝酸金属又は有機亜硝酸塩、より具体的には亜硝酸tert−ブチルと反応させることによって得られ得る。
【００７０】
化合物ＢＨ（式中、Ｒ２は、シクロアルキルである）（Ｒ２ｂは、シクロアルキルである）は、ＢＦから、好適な触媒、特に酢酸パラジウム（II）のようなパラジウム触媒の存在下、シクロヘキシルホスフィンの存在下、トルエンのような不活性溶媒中、室温〜溶媒の還流温度、リン酸カリウムのような好適な塩基の存在下で、好適に置換されたシクロアルキル又はシクロアルケニル(cycloakenyl)金属種ＢＧ、特にシクロプロピルボロン酸又はシクロプロピルトリフルオロ−ボロン酸塩とＢＦとをカップリングさせることによって調製され得る。当技術分野における熟練者がシクロアルケニルボロン酸エステルのようなシクロアルケニル(cycloakenyl)金属種とカップリングさせることを選択する場合、化合物ＢＨは、例えば、パラジウム触媒、例えばパラジウム炭素の存在下、不活性溶媒、例えばエタノール中、好適な温度及び圧力、特に周囲温度及び周囲圧力での水素ガスを用いた水素化による、さらなる水素化工程後にのみ得られるだろう。
【００７１】
当業者に周知の方法による−例えば、テトラヒドロフラン／エタノール又は別の好適な溶媒中、０℃〜用いられる溶媒の還流温度の間の温度で、ＬｉＯＨ、ＮａＯＨ又はＫＯＨ水溶液を使用する−一般式ＢＨのエステルの鹸化は、一般式II−ｂの酸に導く。
【００７２】
化合物II−ｂから、例えば、塩基性条件下で、アミドカップリング剤の助けを借りるような当技術分野において公知のアミドカップリング法により、式II−ｂの化合物と式IIIのアミンとをカップリングさせることによって、さらに化合物Ｉ−ｂまで合成することができる。例えば、Ｎ，Ｎ’−カルボニル−ジイミダゾール（ＣＤＩ）、Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣＩ）、１−［ビス（ジメチルアミノ）−メチレン］−１Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジニウム−３−オキシドヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）、１−ヒドロキシ−１，２，３−ベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）、Ｏ−ベンゾトリアゾール−１−イル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）、及びＯ−ベンゾトリアゾール−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチル−ウロニウム−ヘキサフルオロ−ホスフェート（ＨＢＴＵ）のようなカップリング試薬が、そのような変換に作用させるために用いられ得る。慣用な方法は、例えば、Ｏ−ベンゾトリアゾール−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチル−ウロニウム−ヘキサフルオロ−ホスフェート（ＨＢＴＵ）及び塩基、例えば、Ｎ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（ＤＩＥＡ）を、例えばジメチルホルムアミドのような不活性溶媒中、室温で使用することである。当技術分野において公知の代替方法は、II−ｂから酸塩化物を調製し、好適な塩基の存在下で式IIIのアミンとカップリングさせることによって開始し得る。
【００７３】
アミンIIIは、市販されているか、文献に記載されているか、当業者によって合成され得るか、又は実験項に記載されるように得られるかのいずれかである。
【００７４】
出発物質、式ＡＥ、ＢＧ又はIIIの化合物の１つが、１つ又は複数の反応工程の反応条件下で安定でないか又は反応性である１つ又は複数の官能基を含有する場合、適切な保護基（Ｐ）（例えば、T.W. Greene et al., Protective Groups in Organic Chemistry, John Wiley and Sons Inc. New York 1999, 3rd edition に記載されているような）が、当技術分野において周知の方法を適用する重要な工程の前に導入され得る。そのような保護基は、当技術分野において公知の標準的な方法を使用して、合成の後の段階で除去され得る。
【００７５】
式ＡＥ、ＢＧ又はIIIの１つ又は複数の化合物がキラル中心を含有する場合、式Ｉ−ｂのピリジンは、ジアステレオマー又はエナンチオマーの混合物として得られ得、これは、当技術分野において周知の方法、例えば、（キラル）ＨＰＬＣ又は結晶化によって分離され得る。ラセミ化合物は、例えば、結晶化によってジアステレオマー塩を介して、あるいはキラル吸着剤又はキラル溶離剤のいずれかを使用した特定のクロマトグラフィー法による対掌体の分離によって、それらの対掌体に分離され得る。
【００７６】
本発明はまた、式（Ｉ）の化合物の調製のためのプロセスであって、式（II）：
【化６】
0006322646.tif 000007
［式中、Ｒ１〜Ｒ４は、上記に定義されるとおりである］
で表される化合物を、ＮＨＲ３Ｒ４、アミドカップリング剤及び塩基の存在下で反応させることを含むプロセスに関する。
【００７７】
本発明のプロセスのための好適なアミドカップリング剤及び塩基は、上記に定義したとおりである。
【００７８】
また、本発明は、特に、以下に関する：
【００７９】
疼痛、アテローム性動脈硬化症、加齢黄斑変性、糖尿病性網膜症、緑内障、網膜静脈閉塞、未熟児網膜症、眼虚血症候群、地図状萎縮、糖尿病、炎症、炎症性腸疾患、虚血再灌流傷害、急性肝不全、肝線維症、肺線維症、腎線維症、全身性線維症、急性移植片拒絶反応、慢性移植腎症、糖尿病性腎症、糸球体腎症、心筋症、心不全、心筋虚血、心筋梗塞、全身性硬化症、熱傷、火傷、肥厚性瘢痕、ケロイド、歯肉炎、発熱、肝硬変又は腫瘍、骨量の制御、神経変性、筋萎縮性側索硬化症、卒中、一過性脳虚血発作又はブドウ膜炎の治療又は予防のための、式（Ｉ）の化合物の使用；
【００８０】
疼痛、アテローム性動脈硬化症、加齢黄斑変性、糖尿病性網膜症、緑内障、網膜静脈閉塞、未熟児網膜症、眼虚血症候群、地図状萎縮、糖尿病、炎症、炎症性腸疾患、虚血再灌流傷害、急性肝不全、肝線維症、肺線維症、腎線維症、全身性線維症、急性移植片拒絶反応、慢性移植腎症、糖尿病性腎症、糸球体腎症、心筋症、心不全、心筋虚血、心筋梗塞、全身性硬化症、熱傷、火傷、肥厚性瘢痕、ケロイド、歯肉炎、発熱、肝硬変又は腫瘍、骨量の制御、神経変性、筋萎縮性側索硬化症、卒中、一過性脳虚血発作又はブドウ膜炎の治療又は予防のための医薬の調製のための、式（Ｉ）に係る化合物の使用；
【００８１】
疼痛、アテローム性動脈硬化症、加齢黄斑変性、糖尿病性網膜症、緑内障、網膜静脈閉塞、未熟児網膜症、眼虚血症候群、地図状萎縮、糖尿病、炎症、炎症性腸疾患、虚血再灌流傷害、急性肝不全、肝線維症、肺線維症、腎線維症、全身性線維症、急性移植片拒絶反応、慢性移植腎症、糖尿病性腎症、糸球体腎症、心筋症、心不全、心筋虚血、心筋梗塞、全身性硬化症、熱傷、火傷、肥厚性瘢痕、ケロイド、歯肉炎、発熱、肝硬変又は腫瘍、骨量の制御、神経変性、筋萎縮性側索硬化症、卒中、一過性脳虚血発作又はブドウ膜炎の治療又は予防のための、式（Ｉ）の化合物；及び
【００８２】
疼痛、アテローム性動脈硬化症、加齢黄斑変性、糖尿病性網膜症、緑内障、網膜静脈閉塞、未熟児網膜症、眼虚血症候群、地図状萎縮、糖尿病、炎症、炎症性腸疾患、虚血再灌流傷害、急性肝不全、肝線維症、肺線維症、腎線維症、全身性線維症、急性移植片拒絶反応、慢性移植腎症、糖尿病性腎症、糸球体腎症、心筋症、心不全、心筋虚血、心筋梗塞、全身性硬化症、熱傷、火傷、肥厚性瘢痕、ケロイド、歯肉炎、発熱、肝硬変又は腫瘍、骨量の制御、神経変性、筋萎縮性側索硬化症、卒中、一過性脳虚血発作又はブドウ膜炎の治療又は予防のための方法であって、それを必要とする患者に有効量の式（Ｉ）の化合物を投与することを含む方法。
【００８３】
本発明は、特に、虚血、再灌流傷害、肝線維症又は腎線維症、特に、虚血又は再灌流傷害の治療又は予防のための、式（Ｉ）の化合物に関する。
【００８４】
更に、本発明は、特に、糖尿病性網膜症、網膜静脈閉塞症又はブドウ膜炎の治療又は予防のための式（Ｉ）の化合物に関する。
【００８５】
本発明は、さらに、本発明のプロセスに従って製造される、式（Ｉ）の化合物をも対象にする。
【００８６】
本発明の別の実施態様は、本発明の化合物及び治療上不活性な担体、希釈剤又は賦形剤を含有する医薬組成物又は医薬、ならびにそのような組成物及び医薬を調製するための本発明の化合物を使用する方法を提供する。一例において、式（Ｉ）の化合物は、周囲温度、適切なｐＨ及び所望の純度で、生理学的に許容しうる担体、すなわち、ガレヌス投与剤形に用いられる用量及び濃度でレシピエントに非毒性である担体と混合することにより製剤化してもよい。製剤のｐＨは、主に、特定の用途及び化合物の濃度に依存するが、好ましくは、約３〜約８の範囲である。一例において、式（Ｉ）の化合物は、酢酸緩衝液中、ｐＨ５で製剤化される。別の実施形態において、式（Ｉ）の化合物は無菌である。当該化合物は、例えば、固体又は非晶質組成物として、凍結乾燥製剤として、又は水溶液として保存してよい。
【００８７】
組成物は、医療実施基準（good medical practice）に合致するように製剤化、調薬(dosed)及び投与される。この状況において考慮される要因は、処置される特定の障害、処置される特定の哺乳類、個々の患者の臨床状態、障害の原因、薬剤の送達部位、投与方法、投与計画及び医師に公知の他の要因を含む。
【００８８】
本発明の化合物は、経口、局所（口腔及び舌下を含む）、直腸、膣内、経皮、非経口、皮下、腹腔内、肺内、皮内、髄腔内及び硬膜外及び鼻腔内、ならびに局所処置が望まれる場合、病巣内投与を含む、任意の適切な手段により投与してもよい。非経口注入には、筋肉内、静脈内、動脈内、腹腔内又は皮下投与が含まれる。本発明の化合物は、硝子体内の投与により特に投与してもよい。
【００８９】
本発明の化合物は、任意の簡便な投与剤形、例えば、錠剤、粉剤、カプセル剤、液剤、分散剤、懸濁剤、シロップ剤、スプレー剤、坐剤、ゲル剤、乳剤、パッチ剤などで投与してもよい。そのような組成物は、医薬品で慣用の成分、例えば、希釈剤、担体、ｐＨ調整剤、甘味料、増量剤及びさらなる活性剤を含有してもよい。
【００９０】
典型的な製剤は、本発明の化合物及び担体又は賦形剤を混合することにより調製される。適切な担体及び賦形剤は、当業者によく知られており、例えば、Ansel, Howard C., et al., Ansel's Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems. Philadelphia: Lippincott, Williams & Wilkins, 2004; Gennaro, Alfonso R., et al. Remington: The Science and Practice of Pharmacy. Philadelphia: Lippincott, Williams & Wilkins, 2000; and Rowe, Raymond C. Handbook of Pharmaceutical Excipients. Chicago, Pharmaceutical Press, 2005 に詳述されている。製剤は、また、薬物（すなわち、本発明の化合物又はその医薬組成物）のエレガントな体裁を提供するために、又は薬品（すなわち、医薬）の製造を補助するために、１つ又は複数の緩衝剤、安定化剤、界面活性剤、湿潤剤、潤滑剤、乳化剤、懸濁剤、防腐剤、抗酸化剤、混濁剤（opaquing agent）、流動促進剤、加工助剤、着色剤、甘味料、芳香剤、香味料、希釈剤及びその他の公知の添加物を含んでもよい。
【００９１】
本発明は、以下の実施例により例証されるが、これらは限定性を有さない。
【００９２】
実施例
略語
ｂｐ＝沸点；  ＣＡＮ＝ＣＡＳ登録番号；  ＤＢＵ＝１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン；  ＤＣＭ＝ジクロロメタン；  ＤＩＥＡ＝Ｎ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン；  ＤＭＦ＝ジメチルホルムアミド；  ＤＭＳＯ＝ジメチルスルホキシド；  ｄｐｐｆ＝１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン；  ＥＩ＝電子イオン化；  ＥＳＩ＝エレクトロスプレー；  ｈ＝時間；  ＨＡＴＵ＝２−（３Ｈ−［１，２，３］トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−３−イル）−１，１，３，３−テトラメチルイソウロニウムヘキサフルオロホスファート（Ｖ）；  ＨＢＴＵ＝Ｏ−ベンゾトリアゾール−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチル−ウロニウム−ヘキサフルオロ−ホスファート；  ＨＰＬＣ＝ＬＣ＝高速液体クロマトグラフィー；  ｍ−ＣＰＢＡ＝メタ−クロロペルオキシ安息香酸；  ｍｐ＝融点；  ＭＳ＝質量分析；  ＮＭＲデータは、内部テトラメチルシランに対して百万分の一（δ）で報告され、サンプル溶媒（特に断りのない限り、ｄ６−ＤＭＳＯ）からの重水素ロックシグナルを基準とする；  結合定数（Ｊ）は、ヘルツ（Hertz）でのものである；  Ｒｔ＝保持時間；  ＴＢＭＥ＝メチル tert−ブチルエーテル、ＴＢＴＵ＝Ｏ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチル−ウロニウム−テトラフルオロボラート；  ＴＥＭＰＯ＝２，２，６，６−テトラ−メチルピペリジン  １−オキシルラジカル；  ＴＦＡ＝トリフルオロ酢酸；  ＴＨＦ＝テトラヒドロフラン；  ｔｌｃ＝薄層クロマトグラフィー。
【００９３】
実施例１
（５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−イル）−（（Ｒ）−２−メチル−ピロリジン−１−イル）−メタノン
ａ）  ５−ブロモ−３−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−イルアミン
【化７】
0006322646.tif 000008
ＤＭＳＯ（２００mL）中のシクロプロピル−メタノール（１６．４７mL、２０５．６２mmol）の溶液に、水素化ナトリウム（油中６０％、４．９３ｇ、２０５．６２mmol）を０℃で加え、反応混合物を０℃で２時間撹拌した。この懸濁液に、ＤＭＳＯ（４０mL）中の３，５−ジブロモ−ピラジン−２−イルアミン（２０ｇ、７９．０９mmol）を加え、混合物を周囲温度で１２時間撹拌した。混合物を水（３００mL）と酢酸エチルに分配し、有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、そして真空下で濃縮した。粗物質を、クロマトグラフィー（シリカゲル、５００ｇ、ヘキサン中１０％酢酸エチル）により精製して、所望の生成物（１４ｇ、７２．５２％）を黄色の固体として与えた；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積、ＥＳＩ）９４．７％、２４４．０［ＭＨ＋］。
【００９４】
ｂ）  ジ−tert−ブチル［５−ブロモ−３−（シクロプロピルメトキシ）ピラジン−２−イル］イミドジカルボナート
【化８】
0006322646.tif 000009
ＤＣＭ（２００mL）中の５−ブロモ−３−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−イルアミン（３０ｇ、１２２．９１mmol）の溶液に、ジ−tert−ブチル ジカルボナート（６７．７mL、３０７．２６mmol）及び４−ジメチルアミノピリジン（１．４９ｇ、１２．２９mmol）加えた。反応混合物を周囲温度で１８時間撹拌した。混合物を水（３００mL）とジクロロメタンに分配し、有機相を分離し、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、そして真空下で濃縮した。粗物質を、クロマトグラフィー（シリカゲル、６００ｇ、ヘキサン中５％〜７％酢酸エチル）により精製して、所望の生成物（４５ｇ、８２．８％）を黄色の油状物として与えた；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積、ＥＳＩ）９４．７％、４４５．０［ＭＨ＋］。
【００９５】
ｃ）  メチル ５−［ビス（tert−ブトキシカルボニル）アミノ］−６−（シクロプロピルメトキシ）ピラジン−２−カルボキシラート
【化９】
0006322646.tif 000010
メタノール（２００mL）中のジ−tert−ブチル［５−ブロモ−３−（シクロプロピルメトキシ）ピラジン−２−イル］イミド−ジカルボナート（２０ｇ、４５．０５mmol）の溶液に、ＰｄＣｌ２・ｄｐｐｆ・ＣＨ２Ｃｌ２（４．０４ｇ、４．９５mmol）及びトリエチルアミン（９．５mL、６７．５７mmol）を加え、混合物を３２barの一酸化炭素の雰囲気下、８０℃で５時間撹拌した。膨張(expansion)及び冷却後、固体を濾過により除去した。有機相を分離し、ブライン（３００mL）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、そして真空下で濃縮した。粗物質を、クロマトグラフィー（Combi-Flash、１２０ｇ、ヘキサン中１５％〜２０％酢酸エチル）により精製して、所望の生成物（１４ｇ、７３．７％）を黄色の半固体として与えた；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積、ＥＳＩ）９６．１％、４２４．４［ＭＨ＋］。
【００９６】
ｄ）  ５−アミノ−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−カルボン酸メチルエステル
【化１０】
0006322646.tif 000011
メチル ５−［ビス（tert−ブトキシカルボニル）アミノ］−６−（シクロプロピルメトキシ）ピラジン−２−カルボキシラート（１５ｇ、３５．４６mmol）を、メタノール（１５０mL）と水（２２５mL）に懸濁し、混合物を１００℃で１２時間加熱した。冷却後、白色の固体が形成され、濾過し、真空下で乾燥させて、標記化合物（５．７ｇ、７２．２％）をオフホワイトの固体として与えた；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積、ＥＳＩ）９９．７％、２２４．２［ＭＨ＋］。
【００９７】
ｅ）  ５−ブロモ−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−カルボン酸メチルエステル
【化１１】
0006322646.tif 000012
５−アミノ−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−カルボン酸メチルエステル（１０ｇ、４４．８４mmol）を、ジブロモメタン（１５０mL）に懸濁した。この懸濁液に、トリメチルシリルブロミド（１４．８mL、１１２．１１mmol）、続いて亜硝酸tert−ブチル（５７．５mL、４４８．４３mmol）を０℃で加え、そして混合物をその温度で３時間撹拌した。混合物を水（１９０mL）と酢酸エチルに分配し、有機相をブライン（２００mL）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、そして真空下で濃縮した。粗物質を、クロマトグラフィー（Combi-Flash、８０ｇ、ヘキサン中２０％酢酸エチル）により精製して、所望の生成物（６．３ｇ、４６．６％）を白色の固体として与えた；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積、ＥＳＩ）９０．７％、２８７．２［ＭＨ＋］。
【００９８】
ｆ）  ５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−カルボン酸メチルエステル
【化１２】
0006322646.tif 000013
５−ブロモ−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−カルボン酸メチルエステル（５ｇ、１７．４２mmol）、三塩基性リン酸カリウム（potassium phosphate tribasic）（１２．９ｇ、６０．９８mmol）及び酢酸パラジウム（II）（３８９mg、１．７４μmol）を、トルエン（４５mL）と水（５mL）に溶解し、反応混合物をアルゴンで１５分間脱気した。シクロプロピルボロン酸（２．９ｇ、３４．８４mmol）及びトリシクロヘキシルホスフィン（０．４８７ｇ、１．７４mmol）加え、反応混合物を６０℃で１６時間撹拌した。混合物を水と酢酸エチルに分配し、有機相をブライン（１００mL）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、そして真空下で濃縮した。粗物質を、クロマトグラフィー（Combi-Flash、８０ｇ、ヘキサン中１０％〜１５％酢酸エチル）により精製して、所望の生成物（２．６ｇ、６０．１％）を白色の固体として与えた；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積、ＥＳＩ）９８．９％、２４９．２［ＭＨ＋］。
【００９９】
ｇ）  ５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−カルボン酸
【化１３】
0006322646.tif 000014
ＴＨＦ（２０mL）及びＨ２Ｏ（１０mL）中の５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−カルボン酸メチルエステル（７ｇ、２８．２３mmol）の溶液に、水酸化リチウム（１．５４ｇ、２６．６９mmol）を加え、そして混合物を周囲温度で４．５時間撹拌した。溶媒を真空下で濃縮し、残留物をＨ２Ｏ（２０mL）で希釈した。水相を塩酸（１M、ｐＨ約２〜３）で酸性化し、固体を分離した。固体をトルエン（２５mL）でトリチュレートし、真空下で乾燥させて、標記化合物（５．３ｇ、８６．６％）を白色の結晶質固体として与えた；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積、ＥＳＩ）９３．２％、２３３．２［Ｍ−Ｈ−］。
【０１００】
ｈ）  （５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−イル）−（（Ｒ）−２−メチル−ピロリジン−１−イル）−メタノン
【化１４】
0006322646.tif 000015
５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−カルボン酸（５０mg、００．２１mmol）を、ＤＭＦ（１．５mL）に懸濁した。ムカイヤマ試薬（CAN 878-23-9、１１７mg、０．４２mmol）、ＤＩＥＡ（０．１６mL、１．１２mmol）及び（Ｒ）−２−メチルピロリジン（CAN 41720-98-3；１５mg、０．１７mmol）加え、そして反応混合物を室温で１２時間撹拌した。混合物を酢酸エチル及び水で抽出し；有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、そして真空下で濃縮した。粗物質を、逆相分取ＨＰＬＣ（Xterra-RP18、１０μ、１９×２５０mm／アセトニトリル／１０mM水中酢酸アンモニウム）により精製して、所望の生成物（１５mg、６４％）をオフホワイトの固体として与えた；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積、ＥＳＩ）９０．６％、３０２．２［ＭＨ＋］。
【０１０１】
実施例２
［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−イル］−（（Ｒ）−２−メチル−ピロリジン−１−イル）−メタノン
ａ）  ５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸メチルエステル
【化１５】
0006322646.tif 000016
５−クロロ−ピラジン−２−カルボン酸メチルエステル（CAN 33332-25-1；１５ｇ、８６．９２mmol）を、ジオキサン（１００mL）に溶解した。この溶液に、３，３−ジフルオロアゼチジン塩酸塩（CAN 288315-03-7；１３．５１ｇ、１０４．３１mmol）及びトリエチルアミン（３１．３mL、２２６mmol）を加えた。混合物を４５℃で２２時間撹拌し、その後室温まで冷やした。ブライン（１００mL）加え、そして混合物を酢酸エチルで抽出した。有機相を重炭酸ナトリウム溶液（１０％、３００mL）及びブライン（２００mL）で連続して洗浄した；Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、そして真空下で濃縮した。粗物質を、フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、２００ｇ、ヘキサン中３０％〜５０％酢酸エチル）により精製して、所望の生成物（１５ｇ、７５．３％）を白色の固体として与えた；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積、ＥＳＩ）９８．６％、２３０．４［ＭＨ＋］。
【０１０２】
ｂ）  ６−ブロモ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸メチルエステル
【化１６】
0006322646.tif 000017
クロロホルム（２００mL）中の５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸メチルエステル（１６．５ｇ、７２．０５mmol）の溶液に、Ｎ−ブロモスクシンイミド（２５．６４ｇ、１５１．３４mmol）を６０℃で少量ずつ加え、そして混合物を６０℃で２０時間撹拌した。冷却後、水（４００mL）を加え、そして有機相を分離し、有機相を水（２００mL）、ブライン（２００mL）で連続して洗浄し；Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、そして真空下で濃縮した。粗物質を、フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、２００ｇ、ヘキサン中５０％酢酸エチル）により精製して、所望の生成物（１７ｇ、７７．２％）を明黄色の固体として与えた；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積、ＥＳＩ）９７．８％、３０８．０［ＭＨ＋］。
【０１０３】
ｃ）  ６−ブロモ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸
【化１７】
0006322646.tif 000018
ＴＨＦ（２０mL）及びＨ２Ｏ（１０mL）中の６−ブロモ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸メチルエステル（６．０ｇ、１９．４８mmol）の溶液に、水酸化リチウム（１．０６ｇ、２５．３２mmol）を加え、そして混合物を周囲温度で５時間撹拌した。溶媒を真空下で濃縮し、そして残留物をＨ２Ｏ（３０mL）で希釈した。水相を塩酸（１M、ｐＨ約２〜３）で酸性化し、そして固体を分離した。固体をトルエン（２５mL）でトリチュレートし、真空下で乾燥させて、標記化合物（４．０ｇ、７０．２％）を白色の結晶質固体として与えた；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積、ＥＳＩ）１００％、２９４．２［ＭＨ＋］。
【０１０４】
ｄ）  ６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸
【化１８】
0006322646.tif 000019
乾燥ＤＭＳＯ（９０mL）中のシクロプロピル−メタノール（４．９６mL、６１．２１mmol）の溶液に、水酸化カリウム（５．８９ｇ、１０７．１２mmol）を周囲温度で少量ずつ加えた。この混合物に、ＤＭＳＯ（１０mL）中の６−ブロモ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸（９．０ｇ、３０．６１mmol）の溶液を加えた。反応混合物を周囲温度で３時間撹拌した。水（１００mL）加え、そして水性のものは塩酸水溶液（１０％、ｐＨ約３〜４）で酸性化し、そして固体を濾過した。固体をトルエン（５０mL）でトリチュレートし、真空下で乾燥させて、標記化合物（８．０ｇ、９１．６％）を白色の結晶質固体として与えた；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積、ＥＳＩ）１００％、２８６．２［ＭＨ＋］。
【０１０５】
ｅ）  ［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−イル］−（（Ｒ）−２−メチル−ピロリジン−１−イル）−メタノン
【化１９】
0006322646.tif 000020
標記化合物は、実施例１ｈと同様にして、出発物質として６−シクロプロピル−メトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸（実施例２ｄ、５０mg、０．１７mmol）及び（Ｒ）−２−メチル ピロリジン（CAN 41720-98-3；１５mg、０．１７mmol）を使用して合成し、そしてオフホワイトの固体として単離した（２５mg、４０．４％）；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積、ＥＳＩ）９８．４２％、４３１．０［ＭＨ＋］。
【０１０６】
実施例３
６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸 tert−ブチル−（２−メトキシ−エチル）−アミド
【化２０】
0006322646.tif 000021
標記化合物は、実施例１ｈと同様にして、出発物質として６−シクロプロピル−メトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸（実施例２ｄ、５０mg、０．１７mmol）及びtert−ブチル−（２−メトキシ−エチル）−アミン（CAN 22687-22-5；２０mg、０．１４mmol）を使用して合成し、そしてオフホワイトの固体として単離した（３５mg、６９．９％）；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積、ＥＳＩ）１００％、３９９．２［ＭＨ＋］。
【０１０７】
実施例４
［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−イル］−（３，３−ジメチル−モルホリン−４−イル）−メタノン
【化２１】
0006322646.tif 000022
標記化合物は、実施例１ｈと同様にして、出発物質として６−シクロプロピル−メトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸（実施例２ｄ、５０mg、０．１７mmol）及び３，３−ジメチルモルホリン塩酸塩（CAN 59229-63-9；２２mg、０．１４mmol）を使用して合成し、そして白色の固体として単離した（５０mg、６７．０８％）；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積、ＥＳＩ）９３．６％、３８３．２［ＭＨ＋］。
【０１０８】
実施例５
［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−イル］−（（Ｓ）−２−メチル−ピロリジン−１−イル）−メタノン
【化２２】
0006322646.tif 000023
標記化合物は、実施例１ｈと同様にして、出発物質として６−シクロプロピル−メトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸（実施例２ｄ、１００mg、０．３５mmol）及び（Ｓ）−２−メチル ピロリジン（CAN 59335-84-1；２５mg、０．２８mmol）を使用して合成し、そして白色の固体として単離した（７４mg、５９．９％）；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積、ＥＳＩ）９９．５％、３５３．０［ＭＨ＋］。
【０１０９】
実施例６
［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−イル］−２−オキサ−５−アザ−ビシクロ［２．２．１］ヘプタ−５−イル−メタノン
【化２３】
0006322646.tif 000024
標記化合物は、実施例１ｈと同様にして、出発物質として６−シクロプロピル−メトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸（実施例２ｄ、５０mg、０．１７mmol）及び２−オキサ−５−アザ−ビシクロ［２．２．１］ヘプタン（CAN 909186-56-7；２０mg、０．１７mmol）を使用して合成し、そしてオフホワイトの固体として単離した（６０mg、５９．９％）；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積、ＥＳＩ）９３．０％、３６７．０［ＭＨ＋］。
【０１１０】
実施例７
６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸 tert−ブチル−メチル−アミド
【化２４】
0006322646.tif 000025
標記化合物は、実施例１ｈと同様にして、出発物質として６−シクロプロピル−メトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸（実施例２ｄ、５０mg、０．１７mmol）及びＮ−tert−ブチル−メチルアミン（CAN 14610-37-8；２５mg、０．２６mmol）を使用して合成し、そしてオフホワイトの固体として単離した（４６mg、７４．１％）；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積、ＥＳＩ）９３．８％、３５５．２［ＭＨ＋］。
【０１１１】
実施例８
［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−イル］−（３，３−ジフルオロ−ピロリジン−１−イル）−メタノン
【化２５】
0006322646.tif 000026
標記化合物は、実施例１ｈと同様にして、出発物質として６−シクロプロピル−メトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸（実施例２ｄ、５０mg、０．１７mmol）及び３，３−ジフルオロ−ピロリジン塩酸塩（CAN 163457-23-6；３７mg、０．２６mmol）を使用して合成し、そして無色の粘着性固体として単離した（３０mg、４６．１％）；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積、ＥＳＩ）９９．８％、３７５．２［ＭＨ＋］。
【０１１２】
実施例９
６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸 エチル−イソプロピル−アミド
【化２６】
0006322646.tif 000027
標記化合物は、実施例１ｈと同様にして、出発物質として６−シクロプロピル−メトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸（実施例２ｄ、１９．４mg、６８μmol）及びＮ−エチル−２−プロパンアミン（CAN 19961-27-4；８．２μL、６８μmol）を使用して合成し、そして黄色の油状物として単離した（１６．８mg、７０％）；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積、ＥＳＩ）９９．８％、３７５．２［ＭＨ＋］。
【０１１３】
実施例１０
［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−イル］−（７−オキサ−４−アザ−スピロ［２．５］オクタ−４−イル）−メタノン
【化２７】
0006322646.tif 000028
標記化合物は、実施例１ｈと同様にして、出発物質として６−シクロプロピル−メトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸（実施例２ｄ、５０mg、０．１７mmol）及び７−オキサ−４−アザスピロ［２．５］オクタン（CAN 218595-22-3；１７mg、０．１４mmol）を使用して合成し、そして無色の粘着性固体として単離した（４５mg、６７．４％）；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積、ＥＳＩ）１００％、３８０．８［ＭＨ＋］。
【０１１４】
実施例１１
｛tert−ブチル−［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボニル］−アミノ｝−酢酸エチルエステル
【化２８】
0006322646.tif 000029
標記化合物は、実施例１ｈと同様にして、出発物質として６−シクロプロピル−メトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸（実施例２ｄ、１００mg、０．３５mmol）及びtert−ブチルアミノ−酢酸エチルエステル（CAN 37885-76-0；４５mg、０．２８mmol）を使用して合成し、そして無色の粘着性液体として単離した（５０mg、３３．４％）；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積、ＥＳＩ）１００％、４２７．０［ＭＨ＋］。
【０１１５】
実施例１２
６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸（２−メトキシ−１，１−ジメチル−エチル）−メチル−アミド
【化２９】
0006322646.tif 000030
標記化合物は、実施例１ｈと同様にして、出発物質として６−シクロプロピル−メトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸（実施例２ｄ、１００mg、０．３５mmol）及び（２−メトキシ−１，１−ジメチル−エチル）−メチル−アミン（CAN 1177316-77-6；４３mg、０．２８mmol）を使用して合成し、そして無色の粘着性液体として単離した（７０mg、５２％）；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積、ＥＳＩ）９９．８％、３８４．８［ＭＨ＋］。
【０１１６】
実施例１３
［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−イル］−（２，２−ジメチル−モルホリン−４−イル）−メタノン
【化３０】
0006322646.tif 000031
標記化合物は、実施例１ｈと同様にして、出発物質として６−シクロプロピル−メトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸（実施例２ｄ、１００mg、０．３５mmol）及び２，２−ジメチルモルホリン（CAN 147688-58-2；３３mg、０．２８mmol）を使用して合成し、そして白色の固体として単離した（６０mg、４４．７％）；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積、ＥＳＩ）１００％、３８２．８［ＭＨ＋］。
【０１１７】
実施例１４
５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−カルボン酸（２−メトキシ−１，１−ジメチル−エチル）−メチル−アミド
【化３１】
0006322646.tif 000032
標記化合物は、実施例１ｈと同様にして、出発物質として５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−カルボン酸（実施例１ｇ、５０mg、０．２１mmol）及び（２−メトキシ−１，１−ジメチル−エチル）−メチル−アミン（CAN 1177316-77-6；３７．４４mg、０．３２mmol）を使用して合成し、そして無色の粘着性液体として単離した（３０mg、４２．１％）；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積、ＥＳＩ）１００％、３３４．０［ＭＨ＋］。
【０１１８】
実施例１５
（５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−イル）−（２，２−ジメチル−ピロリジン−１−イル）−メタノン
【化３２】
0006322646.tif 000033
標記化合物は、実施例１ｈと同様にして、出発物質として５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−カルボン酸（実施例１ｇ、５０mg、０．２１mmol）及び２，２−ジメチルピロリジン（CAN 35018-15-6；５１mg、０．３２mmol）を使用して合成し、そして無色の粘着性液体として単離した（６５mg、９７．０％）；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積、ＥＳＩ）１００％、３１７［ＭＨ＋］。
【０１１９】
実施例１６
（Ｓ）−１−（５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−カルボニル）−ピロリジン−２−カルボン酸メチルエステル
【化３３】
0006322646.tif 000034
標記化合物は、実施例１ｈと同様にして、出発物質として５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−カルボン酸（実施例１ｇ、５０mg、０．２１mmol）及び（Ｓ）−ピロリジン−２−カルボン酸メチルエステル（CAN 43041-12-9；４２mg、０．３２mmol）を使用して合成し、そして無色の粘着性液体として単離した（２６mg、３５．６％）；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積、ＥＳＩ）１００％、３４５．８［ＭＨ＋］。
【０１２０】
実施例１７
（５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−イル）−（７−オキサ−４−アザ−スピロ［２．５］オクタ−４−イル）−メタノン
【化３４】
0006322646.tif 000035
標記化合物は、実施例１ｈと同様にして、出発物質として５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−カルボン酸（実施例１ｇ、５０mg、０．２１mmol）及び７−オキサ−４−アザスピロ［２．５］オクタン（CAN 126616-59-9；３６．２mg、０．３２mmol）を使用して合成し、そして無色の粘着性液体として単離した（５５mg、７８．５％）；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積、ＥＳＩ）１００％、３３０．２［ＭＨ＋］。
【０１２１】
実施例１８
（Ｓ）−１−（５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−カルボニル）−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−２−カルボン酸アミド
【化３５】
0006322646.tif 000036
標記化合物は、実施例１ｈと同様にして、出発物質として５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−カルボン酸（実施例１ｇ、５０mg、０．２１mmol）及び（２Ｓ）−４，４−ジフルオロ−２−ピロリジンカルボキサミド塩酸塩（１：１）（CAN 426844-51-1；４３．８mg、０．２４mmol）を使用して合成し、そして明黄色の固体として単離した（６２mg、７９％）；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積、ＥＳＩ）１００％、４１１．１４８６［Ｍ＋ＨＣＯＯ＋］。
【０１２２】
実施例１９
（Ｓ）−１−［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボニル］−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−２−カルボン酸アミド
【化３６】
0006322646.tif 000037
標記化合物は、実施例１ｈと同様にし、出発物質として６−シクロプロピル−メトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸（実施例２ｄ、５０mg、０．１７mmol）及び（２Ｓ）−４，４−ジフルオロ−２−ピロリジンカルボキサミド塩酸塩（１：１）（CAN 426844-51-1；３６mg、０．１９mmol）を使用して合成し、そしてオフホワイトの固体として単離した（２９mg、４０％）；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積、ＥＳＩ）１００％、４１８．１５０４［ＭＨ＋］。
【０１２３】
実施例２０
［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−イル］−［４−（２−ヒドロキシ−エチル）−ピペラジン−１−イル］−メタノン
【化３７】
0006322646.tif 000038
標記化合物は、実施例１ｈと同様にして、出発物質として６−シクロプロピル−メトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸（実施例２ｄ、５０mg、０．１７mmol）及び２−ピペラジン−１−イル−エタノール（CAN 103-76-4；１８．２７mg、０．１４mmol）を使用して合成し、そしてオフホワイトの固体として単離した（２２mg、３１．６％）；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積、ＥＳＩ）１００％、３９８．２［ＭＨ＋］。
【０１２４】
実施例２１
［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−イル］−（２，２−ジメチル−ピロリジン−１−イル）−メタノン
【化３８】
0006322646.tif 000039
標記化合物は、実施例１ｈと同様にして、出発物質として６−シクロプロピル−メトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸（実施例２ｄ、５０mg、０．１７mmol）及び２，２−ジメチルピロリジン（CAN 35018-15-6；１５mg、０．１７mmol）を使用して合成し、そしてオフホワイトの固体として単離した（４２mg、６５．６％）；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積、ＥＳＩ）９９．５％、３６７．２［ＭＨ＋］。
【０１２５】
実施例２２
（Ｒ）−１−［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボニル］−ピロリジン−２−カルボン酸メチルエステル
【化３９】
0006322646.tif 000040
標記化合物は、実施例１ｈと同様にして、出発物質として６−シクロプロピル−メトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸（実施例２ｄ、５０mg、０．１７mmol）及び（Ｒ）−ピロリジン−２−カルボン酸メチルエステル（CAN 2577-48-2；２２mg、０．１７mmol）を使用して合成し、そしてオフホワイトの固体として単離した（３２mg、４６．３％）；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積、ＥＳＩ）１００％、３９７．２［ＭＨ＋］。
【０１２６】
実施例２３
４−［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボニル］−モルホリン−２−オン
【化４０】
0006322646.tif 000041
標記化合物は、実施例１ｈと同様にして、出発物質として６−シクロプロピル−メトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸（実施例２ｄ、５０mg、０．１７mmol）及びモルホリン−２−オン（CAN 4441-15-0；１８mg、０．１７mmol）を使用して合成し、そしてオフホワイトの固体として単離した（４mg、４．６８％）；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積、ＥＳＩ）１００％、３６９．２［ＭＨ＋］。
【０１２７】
実施例２４
（Ｒ）−１−［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボニル］−ピロリジン−２−カルボチオ酸ジメチルアミド
【化４１】
0006322646.tif 000042
標記化合物は、実施例１ｈと同様にして、出発物質として６−シクロプロピル−メトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸（実施例２ｄ、５０mg、０．１７mmol）及び（Ｒ）−ピロリジン−２−カルボチオ酸ジメチルアミド（２７mg、０．１７mmol）を使用して合成し、そしてオフホワイトの固体として単離した（１９mg、２５．６％）；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積、ＥＳＩ）１００％、４２６．２［ＭＨ＋］。
【０１２８】
実施例２５
酢酸 １−（５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−カルボニル）−３−メチル−ピロリジン−３−イルエステル
【化４２】
0006322646.tif 000043
標記化合物は、実施例１ｈと同様にして、出発物質として５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−カルボン酸（実施例１ｇ、５０mg、０．２１mmol）及び酢酸 ３−メチル−ピロリジン−３−イルエステル（３０mg、０．２１mmol）を使用して合成し、そしてオフホワイトの粘着性固体として単離した（３０mg、４０％）；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積、ＥＳＩ）１００％、３５９．８［ＭＨ＋］。
【０１２９】
実施例２６
（５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−イル）−（３，３，４，４−テトラフルオロ−ピロリジン−１−イル）−メタノン
【化４３】
0006322646.tif 000044
標記化合物は、実施例１ｈと同様にして、出発物質として５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−カルボン酸（実施例１ｇ，５０mg、０．２１mmol）及び３，３，４，４−テトラフルオロ−ピロリジン（CAN 1810-13-5；３０mg、０．２１mmol）を使用して合成し、そしてオフホワイトの粘着性固体として単離した（５０mg、６５．８％）；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積、ＥＳＩ）９３．２０％、３６０．２［ＭＨ＋］。
【０１３０】
実施例２７
酢酸 （Ｓ）−１−［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボニル］−ピロリジン−３−イルエステル
【化４４】
0006322646.tif 000045
標記化合物は、実施例１ｈと同様にして、出発物質として６−シクロプロピル−メトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸（実施例２ｄ、５０mg、０．１７mmol）及び酢酸（Ｓ）−ピロリジン−３−イルエステル（２１．９３mg、０．１７mmol）を使用して合成し、そしてオフホワイトの粘着性固体として単離した（４０mg、５７．８％）；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積、ＥＳＩ）１００％、３９７．０［ＭＨ＋］。
【０１３１】
実施例２８
［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−イル］−（２−オキサ−６−アザ−スピロ［３．４］オクタ−６−イル）−メタノン
【化４５】
0006322646.tif 000046
標記化合物は、実施例１ｈと同様にして、出発物質として６−シクロプロピル−メトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸（実施例２ｄ、５０mg、０．１７mmol）及び２−オキサ−６−アザ−スピロ［３．４］オクタン（CAN 220290-68-6；２０mg、０．１７mmol）を使用して合成し、そしてオフホワイトの粘着性固体として単離した（２５mg、３７．８％）；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積、ＥＳＩ）９９．８％、３８１．０［ＭＨ＋］。
【０１３２】
実施例２９
酢酸 １−［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボニル］−３−メチル−ピロリジン−３−イルエステル
【化４６】
0006322646.tif 000047
標記化合物は、実施例１ｈと同様にして、出発物質として６−シクロプロピル−メトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸（実施例２ｄ、５０mg、０．１７mmol）及び酢酸 ３−メチル−ピロリジン−３−イルエステル（２５mg、０．１７mmol）を使用して合成し、そしてオフホワイトの固体として単離した（２０mg、２８．２％）；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積、ＥＳＩ）１００％、４１１．２［ＭＨ＋］。
【０１３３】
実施例３０
［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−イル］−（３，３，４，４−テトラフルオロ−ピロリジン−１−イル）−メタノン
【化４７】
0006322646.tif 000048
標記化合物は、実施例１ｈと同様にして、出発物質として６−シクロプロピル−メトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸（実施例２ｄ、５０mg、０．１７mmol）及び３，３，４，４−テトラフルオロ−ピロリジン（CAN 1810-13-5；３０mg、０．２１mmol）を使用して合成し、そしてオフホワイトの固体として単離した（４５mg、６０％）；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積、ＥＳＩ）９９．４％、４１１．４［ＭＨ＋］。
【０１３４】
実施例３１
５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−６−（２，２，２−トリフルオロ−エトキシ）−ピラジン−２−カルボン酸 tert−ブチル−メチル−アミド
ａ）  ５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−６−（２，２，２−トリフルオロ−エトキシ）−ピラジン−２−カルボン酸
【化４８】
0006322646.tif 000049
乾燥ＤＭＳＯ（１２mL）中の２，２，２−トリフルオロエタノール（０．４９６mL、６．８mmol）の溶液に、水酸化カリウム（０．６６８ｇ、１１．９mmol）を周囲温度で加え、続いて６−ブロモ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸（１．０ｇ、３．４mmol）を加えた。反応混合物を周囲温度で１．５時間撹拌した。水（１００mL）加え、混合物を塩酸水溶液で酸性化し（１０％、ｐＨ約３〜４）、そして酢酸エチルで抽出した。有機相を水で洗浄し、合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、そして濃縮した。固体を、ヘプタンの添加により酢酸エチルから結晶化し、真空下で乾燥させて、標記化合物（０．９６ｇ、９０．１％）を白色の結晶質固体として与えた；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積、ＥＳＩ）９１％、３１２．０４１７［Ｍ−Ｈ−］。
【０１３５】
ｂ）  ５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−６−（２，２，２−トリフルオロ−エトキシ）−ピラジン−２−カルボン酸  tert−ブチル−メチル−アミド
【化４９】
0006322646.tif 000050
標記化合物は、実施例１ｈと同様にして、出発物質として５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−６−（２，２，２−トリフルオロ−エトキシ）−ピラジン−２−カルボン酸（実施例３１ａ、４０mg、０．１２８mmol）及びＮ，２−ジメチル−２−プロパンアミン（CAN 14610-37-8；１６．９μL、０．１４０mmol）使用して合成し、そして白色の固体として単離した（４８mg、９８％）；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積、ＥＳＩ）９１％、３８３．１５１９［ＭＨ＋］。
【０１３６】
実施例３２
［５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−６−（２，２，２−トリフルオロ−エトキシ）−ピラジン−２−イル］−（２，２−ジメチル−ピロリジン−１−イル）−メタノン
【化５０】
0006322646.tif 000051
標記化合物は、実施例１ｈと同様にして、出発物質として５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−６−（２，２，２−トリフルオロ−エトキシ）−ピラジン−２−カルボン酸（実施例３１ａ、４０mg、０．１２８mmol）及び２，２−ジメチルピロリジン（CAN 35018-15-6；１４mg、０．１４０mmol）を使用して合成し、そして白色の固体として単離した（４９mg、９７％）；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積、ＥＳＩ）９１％、３９５．１５０７［ＭＨ＋］。
【０１３７】
実施例３３
１−［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボニル］−ピペリジン−２−カルボン酸アミド
【化５１】
0006322646.tif 000052
標記化合物は、実施例１ｈと同様にして、出発物質として６−シクロプロピル−メトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸（実施例２ｄ、１００mg、０．３５１mmol）及び２−ピペリジンカルボキサミド（CAN 19889-77-1；４９．４mg、０．３６８mmol）を使用して合成し、そして明黄色の固体として単離した（１２０mg、８７％）；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積、ＥＳＩ）１００％、３９６．１８５１［ＭＨ＋］。
【０１３８】
実施例３４
１−（５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−カルボニル）−４，４−ジメチル−ピロリジン−２−カルボン酸アミド
ａ）  ４，４−ジメチル−ピロリジン−１，２−ジカルボン酸 １−tert−ブチルエステル
【化５２】
0006322646.tif 000053
乾燥ジオキサン（２９mL）及び水（２４mL）中の４，４−ジメチル−プロリン（１．７ｇ、１１．８mmol）の溶液に、１N水酸化ナトリウム溶液（９mL）を加え、続いてジオキサン（５mL）に溶解したジ−tert−ブチル ジカルボナート（１．８０ｇ、８．２mmol）を周囲温度でゆっくり添加した。さらに１N水酸化ナトリウム溶液（３mL）を加え、そして混合物を一晩撹拌した。さらにジオキサン（５mL）に溶解したジ−tert−ブチル ジカルボナート（１．８０ｇ、８．２mmol）を加え、撹拌を３時間続けた。混合物を濃縮し、１N亜硫酸水素ナトリウム溶液（２２mL）加え、そして懸濁液を酢酸エチルで抽出した。有機相を水及びブラインで洗浄し、合わせ、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、そして濃縮した。固体を、ヘプタンの添加によりジエチルエーテルから結晶化し、真空下で乾燥させて、標記化合物（２．５４ｇ、８９％）を白色の結晶質固体として与えた；ＭＳ（ＥＳＩ）２４２．０［Ｍ−Ｈ−］。
【０１３９】
ｂ）  ４，４−ジメチル−ピロリジン−１，２−ジカルボン酸 １−tert−ブチルエステル ２−（２，５−ジオキソ−ピロリジン−１−イル）エステル
【化５３】
0006322646.tif 000054
ＴＨＦ（２０mL）中の４，４−ジメチル−ピロリジン−１，２−ジカルボン酸 １−tert−ブチルエステル（２．０ｇ、８．２２mmol）の溶液を、０℃に冷却した。冷溶液に、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（１．２ｇ、１０．４mmol）及びジイソプロピルカルボジイミド（１．３２ｇ、１０．４mmol）加えた。クーリング（Cooling）を除去し、そして混合物室温で３時間撹拌した。ウレアを濾別し、ジエチルエーテルで洗浄し、そして濾液を濃縮した。残留物を酢酸エチルと冷水に分配し；有機相を冷ブラインで洗浄し、合わせ、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、そして真空下で濃縮した。残留物を、フラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ヘプタン／酢酸エチル  ９：１）により精製して、標記化合物（１．９５ｇ、７０％）を無色の油状物として与えた；ＭＳ（ＥＳＩ）３４１．１［ＭＨ＋］。
【０１４０】
ｂ）  ２−カルバモイル−４，４−ジメチル−ピロリジン−１−カルボン酸 tert−ブチルエステル
【化５４】
0006322646.tif 000055
ＤＣＭ（２０mL）中の４，４−ジメチル−ピロリジン−１，２−ジカルボン酸 １−tert−ブチルエステル ２−（２，５−ジオキソ−ピロリジン−１−イル）エステル（１．９ｇ、５．５８mmol）の溶液を、０℃に冷却した。気体アンモニアを、冷溶液に通して１５分間泡立て、そして撹拌を冷却下で１時間続けた。スクシンイミドを濾別し、ＤＣＭで洗浄し、そして濾液を酢酸エチルと冷ブラインに分配し；有機相を合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、そして真空下で濃縮した。残留物を、フラッシュクロマトグラフィー（シリカ、酢酸エチル）により精製して、標記化合物（１．３３ｇ、９８％）を無色の泡状物として与えた；ＭＳ（ＥＳＩ）２４３．１［ＭＨ＋］。
【０１４１】
ｄ）  ４，４−ジメチル−ピロリジン−２−カルボン酸アミド塩酸塩
【化５５】
0006322646.tif 000056
ジオキサン（５mL）中の２−カルバモイル−４，４−ジメチル−ピロリジン−１−カルボン酸 tert−ブチルエステル（１．２ｇ、４．９５mmol）の溶液を、１０℃に冷却した。ジオキサンに溶解した塩化水素（１０mL、６．４N）加え、そして混合物を１．５時間撹拌した。ジエチルエーテル（５０mL）を、完全に生成物を沈殿させるために加え、これを濾過し、乾燥させて、標記化合物（０．８４ｇ、９５％）を無色の固体として与えた；ＭＳ（ＥＳＩ）１４３．０［ＭＨ＋］。
【０１４２】
ｅ）  １−（５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−カルボニル）−４，４−ジメチル−ピロリジン−２−カルボン酸アミド
【化５６】
0006322646.tif 000057
標記化合物は、実施例１ｈと同様にして、出発物質として５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−カルボン酸（実施例１ｇ、１００mg、０．４２７mmol）及び４，４−ジメチル−ピロリジン−２−カルボン酸アミド塩酸塩（実施例３４ｄ；８３．９mg、０．４７mmol）を使用して合成し、そして明黄色の泡状物として単離した（１４２mg、９３％）；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積、ＥＳＩ）１００％、３５９．２０８５［ＭＨ＋］。
【０１４３】
実施例３５
１−［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボニル］−４，４−ジメチル−ピロリジン−２−カルボン酸アミド
【化５７】
0006322646.tif 000058
標記化合物は、実施例１ｈと同様にして、出発物質として６−シクロプロピル−メトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸（実施例２ｄ、１００mg、０．３５１mmol）及び４，４−ジメチル−ピロリジン−２−カルボン酸アミド塩酸塩（実施例３４ｄ；６８．９mg、０．３８６mmol）を使用して合成し、そして白色の泡状物として単離した（１３３mg、９３％）；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積、ＥＳＩ）１００％、４１０．２００４［ＭＨ＋］。
【０１４４】
実施例３６
（−）−１−［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボニル］−ピペリジン−２−カルボン酸アミド
【化５８】
0006322646.tif 000059
１−［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボニル］−ピペリジン−２−カルボン酸アミド（実施例３３）のエナンチオマーを、キラルＨＰＬＣ（Reprosil Chiral NR、ｎ−ヘプタン中３０％エタノール）により分離した。（−）エナンチオマー（４８mg、４４％）を白色の固体として単離した；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積／ＥＳＩ）１００％、３９６．１８４２［ＭＨ＋］；（−）エナンチオマー、約９６％  ｅｅ；α２０Ｄ（ＭｅＯＨ）＝−２８．９°
【０１４５】
実施例３７
（−）−４−［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボニル］−チオモルホリン−３−カルボン酸アミド
ａ）  ４−［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボニル］−チオモルホリン−３−カルボン酸アミド
【化５９】
0006322646.tif 000060
標記化合物は、実施例１ｈと同様にして、出発物質として６−シクロプロピル−メトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボン酸（実施例２ｄ、１００mg、０．３５１mmol）及び３−チオモルホリンカルボキサミド（CAN 103742-31-0；５６．４mg、０．３８６mmol）を使用して合成し、そしてオフホワイトの固体として単離した（１４０mg、９７％）；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積、ＥＳＩ）１００％、４１４．１４１１［ＭＨ＋］。
【０１４６】
ｂ）  （−）−４−［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボニル］−チオモルホリン−３−カルボン酸アミド
【化６０】
0006322646.tif 000061
４−［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボニル］−チオモルホリン−３−カルボン酸アミド（実施例３７ａ）のエナンチオマーを、キラルＨＰＬＣ（Reprosil Chiral NR、ｎ−ヘプタン中３０％エタノール）により分離した。（−）エナンチオマー（４８mg、３９％）を明黄色の固体として単離した；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積／ＥＳＩ）１００％、４１４．１４０５［ＭＨ＋］；（−）エナンチオマー、約１００％  ｅｅ；α２０Ｄ（ＭｅＯＨ）＝−４２．４°
【０１４７】
実施例３８
（−）−１−［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボニル］−４，４−ジメチル−ピロリジン−２−カルボン酸アミド
【化６１】
0006322646.tif 000062
１−［６−シクロプロピルメトキシ−５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−ピラジン−２−カルボニル］−４，４−ジメチル−ピロリジン−２−カルボン酸アミド（実施例３５）のエナンチオマーを、キラルＨＰＬＣ（Reprosil Chiral NR、ｎ−ヘプタン中２０％エタノール）により分離した。（−）エナンチオマー（５２mg、４４％）を白色の固体として単離した；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積／ＥＳＩ）１００％、４１０．２００３［ＭＨ＋］；（−）エナンチオマー、約１００％  ｅｅ；α２０Ｄ（ＭｅＯＨ）＝−５２．６°
【０１４８】
実施例３９
（−）−１−（５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−カルボニル）−４，４−ジメチル−ピロリジン−２−カルボン酸アミド
【化６２】
0006322646.tif 000063
１−（５−シクロプロピル−６−シクロプロピルメトキシ−ピラジン−２−カルボニル）−４，４−ジメチル−ピロリジン−２−カルボン酸アミド（実施例３４ｅ）のエナンチオマーを、キラルＨＰＬＣ（Reprosil Chiral NR、ｎ−ヘプタン中２０％エタノール）により分離した。（−）エナンチオマー（５２mg、４１％）を白色の泡状物として単離した；ＬＣ−ＭＳ（ＵＶピーク面積／ＥＳＩ）１００％、３５９．２０８２［ＭＨ＋］；（−）エナンチオマー、約９９％  ｅｅ；α２０Ｄ（ＭｅＯＨ）＝−７９．４°
【０１４９】
実施例４０
（±）−５−［６−（シクロプロピルメトキシ）−５−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）ピラジン−２−カルボニル］−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−６−カルボキサミド
【化６３】
0006322646.tif 000064
【０１５０】
ａ）  （±）−tert−ブチル ６−カルバモイル−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−５−カルボキシラート
【化６４】
0006322646.tif 000065
カルボニルジイミダゾール（２１１mg、１．３mmol）を、ＤＭＦ（１mL）中の（±）−５−（tert−ブトキシカルボニル）−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−６−カルボン酸（CAN 1454843-77-6、１１２mg、４６４μmol）の氷冷溶液に加えた。反応混合物を周囲温度に温め、そして撹拌を２時間続けた。氷冷の下で、ＮＨ３ガスを反応混合物に通して１０分間泡立てた。撹拌を周囲温度で７２時間続けた。反応混合物を氷／水３０mLに注ぎ、ＥｔＯＡｃ（２×３０mL）で抽出した。合わせた抽出物を氷／ブライン（２０mL）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空下で濃縮して、標記化合物（５４mg、４８％）を無色の油状物として与え、これをさらに精製することなく次の反応工程において使用した、ＭＳ（ＥＳＩ）１４１．１［ＭＨ−Ｂｏｃ＋］。
【０１５１】
ｂ）  （±）−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−６−カルボキサミド塩酸塩
【化６５】
0006322646.tif 000066
ジオキサン中のＨＣｌの４M溶液（１．４mL）中の（±）−tert−ブチル ６−カルバモイル−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−５−カルボキシラート（実施例４０ａ、６５mg、２７０μmol）の溶液を、周囲温度で４時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去して、標記化合物（５５mg、定量）を明黄色の油状物として与え、これをさらに精製することなく次の反応工程において使用した、ＬＣ−ＭＳ  １４１．１０２３［ＭＨ＋］。
【０１５２】
ｃ）  （±）−５−［６−（シクロプロピルメトキシ）−５−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）ピラジン−２−カルボニル］−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−６−カルボキサミド
２−ブロモ−１−エチルピリジニウム テトラフルオロボラート（３８．３mg、１１９μmol）を、ジオキサン（１５０μL）中の６−（シクロプロピルメトキシ）−５−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）ピラジン−２−カルボン酸（実施例２ｄ、２０mg、７０．１μmol）、（±）−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−６−カルボキサミド塩酸塩（実施例４０ｂ、１８．６mg、１０５μmol）及びＤＩＥＡ（３４．１mg、４５．２μL、２６４μmol）の溶液にアルゴン雰囲気下で加えた。反応混合物を、周囲温度で１日間撹拌し、氷／０．１M ＮａＯＨ（２５mL）に注ぎ、そしてＥｔＯＡｃ（２×２５mL）で抽出した。合わせた抽出物を、氷／０．１N ＨＣｌ（２５mL）及び氷水／ブライン（２５mL）で洗浄してｐＨ６にした。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾別した。溶媒を減圧下で除去し、粗生成物を分取ＨＰＬＣ（ＡＣＮ／ＨＣＯＯＨ  ９８／２％、Gemini NX ３ｕ）により精製して、標記化合物（１８mg、６３％）をオフホワイトの固体として与えた、ＭＳ（ＥＳＩ）４０８．３［ＭＨ＋］。
【０１５３】
実施例４１
（２Ｓ）−１−［６−（シクロプロピルメトキシ）−５−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）ピラジン−２−カルボニル］−４−ヒドロキシ−４−メチルピロリジン−２−カルボキサミド
【化６６】
0006322646.tif 000067
【０１５４】
ａ）  （２Ｓ）−メチル ４−ヒドロキシ−４−メチルピロリジン−２−カルボキシラート塩酸塩
【化６７】
0006322646.tif 000068
ジオキサン中の塩化水素の４M溶液（８．９９mL、３６mmol）中の（２Ｓ）−１−tert−ブチル ２−メチル ４−ヒドロキシ−４−メチルピロリジン−１，２−ジカルボキシラート（ＣAN 1367552-84-8、４６６mg、１．８mmol）の溶液を、周囲温度で４時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去して、標記化合物（４４６mg、定量）を褐色の固体として与え、これをさらに精製することなく次の反応工程において使用した、ＭＳ（ＥＳＩ）１６０．１［ＭＨ＋］。
【０１５５】
ｂ）  （２Ｓ）−４−ヒドロキシ−４−メチルピロリジン−２−カルボキサミド塩酸塩
【化６８】
0006322646.tif 000069
メタノール中のアンモニアの７M溶液（６．５１mL、４５．６mmol）中の（２Ｓ）−メチル ４−ヒドロキシ−４−メチルピロリジン−２−カルボキシラート塩酸塩（実施例４１ａ、４４６mg、２．２８mmol）の溶液を、周囲温度で２日間撹拌した。反応混合物を氷水（３０mL）に注ぎ、ＥｔＯＡｃ（２×４０mL）で抽出した。水層を真空下で濃縮した。残留物をメタノール及びＥｔＯＡｃに懸濁した。固体を濾別した。ジオキサン中のＨＣｌの４M溶液（２mL）を加えた後、濾液を真空下で濃縮して、標記化合物（５５０mg、定量）を褐色の固体として与え、これをさらに精製することなく次の反応工程において使用した、ＭＳ（ＥＳＩ）１４４．１［ＭＨ＋］。
【０１５６】
ｃ）  （２Ｓ）−１−［６−（シクロプロピルメトキシ）−５−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）ピラジン−２−カルボニル］−４−ヒドロキシ−４−メチルピロリジン−２−カルボキサミド
実施例４０ｃに記載の手順と同様にして、６−（シクロプロピルメトキシ）−５−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）ピラジン−２−カルボン酸（実施例２ｄ、５０mg、１７５μmol）を、（２Ｓ）−４−ヒドロキシ−４−メチルピロリジン−２−カルボキサミド塩酸塩（実施例４１ｂ、３１．７mg、１７５μmol）反応させて、標記化合物（１２mg、１３％）を明黄色の油状物として得た、ＭＳ（ＥＳＩ）４１２．３［ＭＨ＋］。
【０１５７】
実施例４２
（２Ｓ）−１−［５−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）−６−（２，２−ジフルオロエトキシ）ピラジン−２−カルボニル］−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−２−カルボキサミド
【化６９】
0006322646.tif 000070
【０１５８】
ａ）  メチル ５−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）−６−（２，２−ジフルオロエトキシ）ピラジン−２−カルボキシラート
【化７０】
0006322646.tif 000071
リチウム ２−メチルプロパン−２−オラート（３．３９mL、７．４７mmol）を、ＤＭＦ（６．６７mL）中のメチル ６−ブロモ−５−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）ピラジン−２−カルボキシラート（CAN 1432507-18-0、１ｇ、３．２５mmol）及び２，２−ジフルオロエタノール（CAN 359-13-7、３４６mg、２６７μL、４．２２mmol）の溶液に周囲温度で３０分以内に加えた。反応混合物を７０℃に加熱し、２０時間撹拌した。周囲温度まで冷却した後、氷水（５０mL）及び２N ＨＣｌ（８mL）加えた。褐色の沈殿物が形成され、これを濾別し、そしてカラムクロマトグラフィーにより精製して、標記化合物（７７mg、７％）を明黄色の固体として得た；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ＝３１０．１［ＭＨ＋］。
【０１５９】
ｂ）  ５−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）−６−（２，２−ジフルオロエトキシ）ピラジン−２−カルボン酸
【化７１】
0006322646.tif 000072
テトラヒドロフラン（５００μL）及び水（５０μL）中のメチル ５−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）−６−（２，２−ジフルオロエトキシ）ピラジン−２−カルボキシラート（実施例４２ａ、７７mg、２４９μmol）及び水酸化リチウム水和物（１２．５mg、２９９μmol）の溶液を、周囲温度で１２時間撹拌した。反応混合物を氷／０．１N ＨＣｌ（１×２５mL）に注ぎ、ＥｔＯＡｃ（２×２５mL）で抽出した。合わせた抽出物を氷／ブライン（２５mL）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、蒸発乾固させて、標記化合物（６８mg、９３％）をオフホワイトの固体として与えた；ＭＳ（ＥＳＩ）  ｍ／ｅ＝２９６．１［ＭＨ＋］。
【０１６０】
ｃ）  （２Ｓ）−１−［５−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）−６−（２，２−ジフルオロエトキシ）ピラジン−２−カルボニル］−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−２−カルボキサミド
２−ブロモ−１−エチルピリジニウム テトラフルオロボラート（４６．２mg、１４４μmol）を、ジオキサン（５００μL）中の５−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）−６−（２，２−ジフルオロエトキシ）ピラジン−２−カルボン酸（実施例４２ｂ、２５mg、８４．７μmol）、（２Ｓ）−４，４−ジフルオロ−２−ピロリジンカルボキサミド塩酸塩（CAN 426844-51-1、１９．０mg、１０２μmol）及びＤＩＥＡ（４１．０mg、５４．４μL、３１８μmol）の溶液に加えた。反応混合物を周囲温度で１日間撹拌し、氷／０．１N ＨＣｌ（１×２５mL）に注ぎ、そしてＥｔＯＡｃ（２×２５mL）で抽出した。合わせた抽出物を氷水／ブライン（１×２５mL）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾別し、そして真空下で蒸発させた。粗生成物を、ＥｔＯＡｃ及びヘプタンから結晶化して、標記化合物（１９mg、５３％）をオフホワイトの固体として得た；ＭＳ（ＥＳＩ）  ｍ／ｅ＝４２８．１１６１［ＭＨ＋］。
【０１６１】
実施例４３
薬理試験
下記の試験は、式Ｉの化合物の活性を測定するために実施された：
放射性リガンド結合アッセイ
カンナビノイドＣＢ１受容体に対する本発明の化合物の親和性は、ヒトＣＮＲ１又はＣＮＲ２受容体を発現するヒト胎児腎臓（ＨＥＫ）細胞の推奨量の膜調製物（PerkinElmer）を使用し、放射性リガンドとして、それぞれ、１．５又は２．６nMの［３Ｈ］−ＣＰ−５５，９４０（Perkin Elmer）を併用して決定した。結合は、結合バッファー（ＣＢ１受容体について、５０mM Ｔｒｉｓ、５mM ＭｇＣｌ２、２．５mM ＥＤＴＡ、及び０．５％（wt/vol）ＢＳＡ不含脂肪酸、ｐＨ７．４；ＣＢ２受容体について、５０mM Ｔｒｉｓ、５mM ＭｇＣｌ２、２．５mM ＥＧＴＡ、及び０．１％（wt/vol）ＢＳＡ不含脂肪酸、ｐＨ７．４）中、総容量０．２mlで、３０℃にて、振とうしながら１時間実施した。反応は、０．５％ポリエチレンイミンでコートした精密濾過プレート（UniFilter GF/Bフィルタープレート；Packard）に通して急速濾過することにより停止した。結合した放射能はＫｉについて、非線形回帰分析を使用して分析し（Activity Base, ID Business Solution, Limited）、［３Ｈ］ＣＰ５５，９４０のＫｄ値は、飽和実験から決定した。式（Ｉ）の化合物は、以下の１０μM、より詳しくは１nM〜３μM、及び最も詳しくは１nM〜１００nMの親和性と共にＣＢ２受容体に対して優れた親和性を示す。
【０１６２】
ｃＡＭＰアッセイ
ヒトＣＢ１又はＣＢ２受容体を発現するＣＨＯ細胞を、実験の１７〜２４時間前に、透明平底の黒色９６ウェルプレート（Corning Costar #3904）において、１０％ウシ胎仔血清を含有する１×ＨＴを補充したＤＭＥＭ（Invitrogen No. 31331）中に、５０，０００細胞／ウェルで播種し、加湿インキュベーター内にて、５％ ＣＯ２、３７℃でインキュベートする。増殖培地を、１mM ＩＢＭＸを含有するクレブス−リンガー重炭酸バッファーに交換し、３０℃で３０分間インキュベートした。化合物を最終アッセイ容量１００μlまで加え、３０℃で３０分間インキュベートした。ｃＡＭＰ−Ｎａｎｏ−ＴＲＦ検出キット（Roche Diagnostics）を使用して、５０μlの溶解試薬（Ｔｒｉｓ、ＮａＣｌ、１．５％ Triton X100、２．５％ ＮＰ４０、１０％ ＮａＮ３）及び５０μlの検出液（２０μM ｍＡｂＡｌｅｘａ７００−ｃＡＭＰ１：１、及び４８μMルテニウム−２−ＡＨＡ−ｃＡＭＰ）を加えてアッセイを停止し、室温で２時間振とうした。時間分解エネルギー転移は、励起源としてＮＤ：ＹＡＧレーザーを搭載したＴＲＦリーダー（Evotec Technologies GmbH）により測定する。３５５nmでの励起で、遅延１００ns及びゲート１００nsでの発光において、７３０（帯域幅３０nm）又は６４５nm（帯域幅７５nm）で、それぞれ総照射時間１０秒でプレートを２回測定する。ＦＲＥＴシグナルは、以下のように算出される：ＦＲＥＴ＝Ｔ７３０−Alexa７３０−Ｐ（Ｔ６４５−Ｂ６４５）（式中、Ｐ＝Ｒｕ７３０−Ｂ７３０／Ｒｕ６４５−Ｂ６４５）、ここで、Ｔ７３０は、７３０nMで測定される試験ウェルであり、Ｔ６４５は、６４５nmで測定される試験ウェルであり、Ｂ７３０及びＢ６４５は、それぞれ、７３０nm及び６４５nmのバッファーコントロールである。ｃＡＭＰ含量は、１０μM〜０．１３nM ｃＡＭＰにわたる標準曲線の関数から決定する。
【０１６３】
ＥＣ５０値は、Activity Base分析（ID Business Solution, Limited）を用いて決定した。このアッセイから生成した広範囲に渡るカンナビノイド・アゴニストのＥＣ５０値は、科学文献の公表値と一致した。
【０１６４】
本発明の化合物は、０．５のμM未満のＥＣ５０を有し、かつ、ＣＢ１に対する選択性が対応するアッセイにおいて少なくとも１０倍であるＣＢ２アゴニストである。本発明の特定の化合物は、０．０５のμM未満のＥＣ５０を有し、かつ、ＣＢ１に対する選択性が対応するアッセイにおいて少なくとも５００倍であるＣＢ２アゴニストである。
【０１６５】
例えば、下記化合物は、上記の機能的ｃＡＭＰアッセイにおいて、以下のヒトＥＣ５０値を示した：
【表１】
0006322646.tif 000073
0006322646.tif 000074
【０１６６】
例Ａ
下記の成分を含有するフィルムコーティング剤は従来の方法により製造することができる。
【表２】
0006322646.tif 000075
活性成分を篩にかけ、微晶質セルロースと混合し、混合物を水中のポリビニルピロリドンの溶液で顆粒化する。次に、顆粒をグリコールデンプンナトリウム及びステアリン酸マグネシウムと混合し、圧縮して、それぞれ１２０又は３５０mgの核を得る。上記のフィルムコートの水溶液／懸濁液により核を滑らかにする(lacquered)。
【０１６７】
例Ｂ
下記の成分を含有するカプセル剤は従来の方法により製造できる。
【表３】
0006322646.tif 000076
成分を篩にかけ、混合し、サイズ２のカプセルに充填する。
【０１６８】
例Ｃ
注射剤は下記の組成を有することができる。
【表４】
0006322646.tif 000077
活性成分を、ポリエチレングリコール４００と注射用水（一部）の混合物に溶解する。
酢酸の添加により、ｐＨを５．０に調整する。水の残量を加えて、容量を１．０mlに調整する。溶液を濾過し、適切な過剰量を使用してバイアルに充填し、滅菌する。