(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
0006445046.tif 000017
に従う化合物（２Ｒ，２’Ｒ）−ビス（（（（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）オキシ）カルボニル）オキシ）メチル）１，１’−アジポイルビス（ピロリジン−２−カルボキシレート）。
【請求項２】
結晶形態の、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
治療上有効な量の請求項１または請求項２に記載の化合物と、場合により、１種類以上の薬学上許容可能な担体および／または賦形剤とを含んでなる、医薬組成物。
【請求項４】
経口投与のための、請求項３に記載の医薬組成物。
【請求項５】
１以上の投与形態の抗ＳＡＰ抗体と、１以上の投与形態の請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物または医薬組成物とを含んでなる、キット。
【請求項６】
療法における使用のための、請求項３または４に記載の医薬組成物。
【請求項７】
ＳＡＰの枯渇における使用のための、請求項３または４に記載の医薬組成物。
【請求項８】
ＳＡＰ枯渇が有益である疾患または障害の治療における使用のための、請求項３または４に記載の医薬組成物。
【請求項９】
前記疾患または障害が、アミロイドーシス、アルツハイマー病、２型真性糖尿病および変形性関節症からなる群から選択される、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
前記疾患または障害がアミロイドーシスである、請求項８または９に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
前記疾患または障害が全身性アミロイドーシスである、請求項８〜１０のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
アミロイドーシスの治療における使用のための、抗ＳＡＰ抗体と共投与される、請求項３または４に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物または医薬組成物と、抗ＳＡＰ抗体とを含んでなる、アミロイドーシスの治療における使用のための、組み合わせ医薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規化合物（２Ｒ，２’Ｒ）−ビス（（（（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）オキシ）カルボニル）オキシ）メチル）１，１’−アジポイルビス（ピロリジン−２−カルボキシレート）、それを含んでなる医薬組成物および血清アミロイドＰ成分（ＳＡＰ）の枯渇が有益である疾患または障害の治療のためのその使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
血清アミロイドＰ成分(Serum amyloid P component)（ＳＡＰ）は、肝臓によってのみ産生される正常な、構造的に不変の可溶性の非原繊維性構成血漿糖タンパク質、質量１２７，３１０Ｄａである。これは、円盤状の構成で環状５量体の対称性を有する非共有結合的に会合された５つの同一の２５，４６２Ｄａのプロトマーで構成される。扁平なβ−ゼリーロールから構成され、β鎖を接合する緊密に繋がれたループを有する各サブユニットは、無傷の５量体の平面Ｂ（結合）面上に単一のカルシウム依存性リガンド結合部位を含む。ＳＡＰは、多価相互作用によって与えられる高いアビディティであらゆる種類のアミロイド原繊維と結合する。この厳密にカルシウム依存性の相互作用は、あらゆる種類のヒトアミロイド沈着物総てにヒトＳＡＰが普遍的に存在する原因であり、それゆえに、そのタンパク質の名前の由来になっており、名前のＰは、このアミロイド成分の起源である血漿を表す。特定のリガンドとの特異的カルシウム依存性結合能力に加えて、ヒトＳＡＰの重要な特性は、そのタンパク質自体が本質的にタンパク質分解に対して耐性があることである。アミロイド原繊維とのその貪欲な結合は相互に安定しており、ｉｎ  ｖｉｔｒｏではタンパク質分解および食細胞分解から原繊維を強く保護し１、ｉｎ  ｖｉｖｏではアミロイドの残存に大きく寄与する２。これらの観察はアミロイドーシスにおける治療標的としてのＳＡＰのバリデーションの基礎となる（ＭＢ  Ｐｅｐｙｓ  ＆  ＴＬ  Ｂｌｕｎｄｅｌｌ、米国特許第６１２６９１８号、２０００年１０月３日）。さらに、新生アミロイド原繊維とのＳＡＰの結合はアミロイド原繊維形成を強く促進する３−５。欧州特許出願第０９１５０８８号には、アミロイド原繊維とのＳＡＰの結合の競合的阻害剤である化合物、ならびにそれらの製造方法が開示されている。そこに開示された化合物の１つは、（Ｒ）−１−［６−［（Ｒ）−２−カルボキシ−ピロリジン−１−イル］−６−オキソ−ヘキサノイル］ピロリジン−２−カルボン酸（ＣＰＨＰＣ）である。
【０００３】
ＳＡＰに対するこれらのパリンドローム二価リガンドの投与は、国際公開第２００３／０１３５０８号、米国特許第７，０４５，４９９号；米国特許第７，６９１，８９７号；および米国特許第８，１７３，６９４号に記載されているように、その化合物が投与される限り、循環からのＳＡＰの迅速かつほぼ完全な枯渇を引き起こす６，７。この処置はまた、アミロイド沈着物に関連するＳＡＰの量を減少させるが、ＳＡＰを総て除去するわけではない７。
【０００４】
アミロイドは、異常な不溶性の細胞外沈着物であり、主に特徴的なタンパク質原繊維８と、豊富なプロテオグリカンおよびグリコサミノグリカンとから構成される。約２５種の異なる、関連のない、本来可溶性の球状タンパク質が、種々の種類の全身性アミロイドーシスを引き起こすアミロイド原繊維を形成するが、総てのアミロイド原繊維は非常に類似した形態と同じ交差βコア構造を有する。この構造はコンゴレッド色素分子の規則配列に結合し、それにより、強い交差偏光中で特徴的な赤−緑の複屈折を生じる：アミロイドのゴールドスタンダードな診断基準。特定の可溶性の非原繊維性血漿タンパク質もまたアミロイド沈着物中に存在し得るが、唯一血清アミロイドＰ成分（ＳＡＰ）だけは、あらゆる種類のアミロイド原繊維とのその貪欲な、特異的カルシウム依存性結合によって、ヒトアミロイド沈着物総てにおいて普遍的である。
【０００５】
アミロイド沈着物は、罹患した組織および器官の構造および機能を破壊し、重篤な疾患であるアミロイドーシスを引き起こす。全身性アミロイドーシスは、身体全体の結合組織および血管壁だけでなく、主要器官の柔組織中に存在し得るが、脳質自体には存在し得ないアミロイド沈着物によって引き起こされる稀ながら致命的な病気である。限局性アミロイドーシスでは、アミロイド沈着物は、単一の解剖学的部位または単一の器官／組織系に限定されている。アミロイド沈着が脳血管の壁に限定されている脳アミロイド血管症は、限局性アミロイドーシスの最も一般的かつ重要な形態である。それは、認知症のアルツハイマー病患者および非認知症個体の両方において大脳内出血の大部分の原因となり、従って、それ自体が認知症の重要な原因である。
【０００６】
ＣＰＨＰＣによる全身性アミロイドーシス患者の処置では、薬物を投与する限り循環ＳＡＰはほぼ完全に枯渇したが、アミロイド沈着物に結合したＳＡＰの総てが除去されなかった７。患者は処置中臨床的に安定したままであり、新たなアミロイド蓄積はなく、それらの器官機能は維持されたが、アミロイドの退縮はなかった。これは恐らく、アミロイドに結合しているＳＡＰの完全な除去が失敗したためであった。組織中のアミロイド沈着物は疾患の直接の原因であるため、それらを排除することが非常に望ましい。この満たされていない重要な医学的必要性が、アミロイド沈着物に結合したＳＡＰが抗ヒトＳＡＰ抗体の標的として使用される、アミロイドーシスの治療に対する新しいアプローチの発明につながった。このような抗体は、血漿中のＳＡＰと結合して組織に損傷を与える免疫複合体を形成し、このプロセスで消費されてそれらはアミロイド中のＳＡＰとの結合に利用できなくなることから、ＳＡＰの正常な循環濃度を有する患者に安全にまたは効果的に抗体を投与することはできなかった。しかしながら、ＣＰＨＰＣの事前投与は循環からＳＡＰを枯渇させるため、抗ＳＡＰ抗体は、安全に注入することができ、アミロイド沈着物中に残っている残留ＳＡＰと結合するために利用可能なままである。アミロイド関連ＳＡＰとの抗体の結合は、補体系を活性化し、貪食のためにマクロファージを動員し、アミロイド沈着物を破壊し、臨床的利益をもたらす。
【０００７】
国際特許出願国際公開第２００９／０００９２６号には、アミロイドーシスの潜在的治療のために、ＳＡＰに特異的な抗体と共投与される、循環からＳＡＰを枯渇させる化合物の使用が開示されている。
【０００８】
国際特許出願国際公開第２００９／１５５９６２号には、マウスモノクローナル抗体Ａｂｐ１が開示され、アミロイドーシスの治療における潜在的使用のために、循環からＳＡＰを枯渇させる化合物と共投与され得る様々なマウスモノクローナル抗体についての結合および有効性のデータが提供されている。
【０００９】
国際特許出願国際公開第２０１１／１０７４８０号には、ＳＡＰに特異的な、抗原結合タンパク質、特に、ヒト化抗体、およびアミロイド沈着に関連する疾患の治療におけるそれらの潜在的使用が開示されている。
【００１０】
組織の構造および機能を破壊する細胞外アミロイド沈着によって明白に直接的に引き起こされるアミロイドーシスの稀な臨床症状に加えて、２つのよく見られる重要な疾患：アルツハイマー病および２型糖尿病でもアミロイド沈着物は存在する。これらの後者の疾患では、アミロイド沈着物は微細であり、それぞれ、脳およびランゲルハンス島に限定されており、それらはそれぞれ神経変性および糖尿病の病因に寄与し得るかどうかまたはどのように寄与し得るかは知られていない。従って、アルツハイマー病および２型糖尿病はアミロイドーシスの形態に分類することができず、アミロイド関連疾患とみなすべきである。それにもかかわらず、それらの疾患ではアミロイド沈着物は常に存在し、沈着物にはまた、常にＳＡＰが含まれる１５−１９。アルツハイマー病での脳にはまた、神経原繊維変化として知られる別のタイプの異常な不溶性原繊維性タンパク質凝集体が含まれ、ＳＡＰは、アミロイドと同様にこれらと貪欲に結合する１５−１９。ＳＡＰを有するが、アミロイドではない神経原繊維変化、前頭側頭型認知症を含む他のタイプの認知症での脳に存在する。
【００１１】
アミロイドーシスにおけるその役割に加えて、またそれとは全く無関係に、ヒトＳＡＰは脳ニューロンと結合しそれに入り、ｉｎ  ｖｉｔｒｏおよびｉｎ  ｖｉｖｏでニューロンのアポトーシスを引き起こす９−１３。ユニークで、医薬品グレードの純粋なヒトＳＡＰ１４はシナプス伝達を破壊し、器官型齧歯類脳スライスにおいて異常な対のパルス比および長期増強を引き起こすことが示されている。
【００１２】
従って、ヒトＳＡＰの脳の神経毒性は、ヒトにおける神経変性に寄与する可能性が高い９−１２、２０。認知症の共通する危険因子の大部分がＳＡＰへの脳曝露を増加させるという事実は、この概念と一致している。従って、重要な危険因子である年齢は、正常なＳＡＰ濃度への老齢脳の長期間の曝露と関連し、一方、閉鎖性頭部外傷および脳出血の主要な危険因子は、脳への血液の侵入を引き起こし、脳のＳＡＰ含有量を急増させる。アルツハイマー病では、ＳＡＰの脳内含有量は、アミロイド沈着物との結合および神経原繊維変化から異常に高い１５−１９。これはまた、神経原繊維変化を伴うがアミロイド沈着物を伴わない他の認知症においてもそうである可能性がある。重要なことに、認知症のアルツハイマー病患者では、死亡時に認知機能障害がなく、剖検時に斑および神経原繊維変化の共存を伴うまたは伴わない高齢者よりも高い脳内ＳＡＰ含有量が報告されている２０。脳のＳＡＰ含有量と認知症との間の有意な正の相関２０は、ＳＡＰの原因としての役割と一致している。
【００１３】
脳脊髄液中のＳＡＰの量、ならびに脳アミロイド沈着物および神経原繊維変化に結合しているＳＡＰの量はそれぞれ、全身の細胞外液中および全身のアミロイド沈着物上よりも劇的に低い。正常な２０〜５０ｍｇ／Ｌから＜０．１ｍｇ／Ｌへの、ＣＰＨＰＣによる血漿ＳＡＰの枯渇は、アルツハイマー病患者におけるＣＳＦ  ＳＡＰ濃度を２〜３０μｇ／Ｌから＜０．１μｇ／Ｌに低下させる２１。ヒトのＳＡＰは、肝臓によってのみ産生され、血液を介して脳に到達する２２。従って、ＣＰＨＰＣ処置は、脳脊髄液から事実上総てのＳＡＰを除去し、ＳＡＰ結合は完全に可逆的であるため、脳アミロイド沈着物および神経原繊維変化からもそれを除去する。さらに、アルツハイマー病患者では、ＣＰＨＰＣは、脳脊髄液に入り２１、そこでそれはまた、アミロイド原繊維と、神経原繊維変化および脳のニューロンとの遊離ＳＡＰの結合をブロックすることができる。総てのアミロイド原繊維タイプは、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでプロテアーゼおよび食細胞によって分解される可能性があり１、全身のアミロイド沈着物は、それぞれの原繊維前駆体タンパク質の存在量が十分に減少するとｉｎ  ｖｉｖｏでゆっくり自然消退する８。従って、アミロイドクリアランスの機構はｉｎ  ｖｉｖｏで機能する。ヒトＳＡＰが、アミロイドとの結合とは無関係に、それ自体が神経細胞傷害性であることの確認によって９−１３、ＳＡＰ枯渇の潜在的で付加的な直接的利益が示される。
【００１４】
総ての血漿タンパク質は、ｉｎ  ｖｉｖｏで罹患したまたは損傷した関節に入るが、様々な異なる関節症の患者では、臨床的に検出可能な滲出がないいくつかの関節への放射性標識ＳＡＰの取込みが観察された。さらに、滑膜滲出液中のＳＡＰの濃度は、ＳＡＰの分子サイズから予想される濃度よりも実質的に低く、シンチグラフィーにより可視化されたＳＡＰは溶解状態で遊離していないが、実際には関節内の固体構造と結合していたことが示された。高齢者の滑膜、関節軟骨および／または関節包は、変形性関節症の程度または重篤度よりもむしろ年齢と関係する微細なアミロイド沈着物を含むことが多く、これらの沈着物によりＳＡＰの局在を説明することができる。ＳＡＰはまた、ｉｎ  ｖｉｖｏだけでなくｉｎ  ｖｉｔｒｏでも、露出したＤＮＡおよびクロマチンと、ならびにアポトーシス細胞と貪欲に結合する。従って、変形性関節症の関節における細胞死の増加は、ＳＡＰ沈着のためのリガンドを提供し得る。国際公開第２００４／１０８１３１号には、変形性関節症の症状を緩和する、ＣＰＨＰＣ（（Ｒ）−１−［６−［（Ｒ）−２−カルボキシ−ピロリジン−１−イル］−６−オキソ−ヘキサノイル］ピロリジン−２−カルボン酸）の注射による変形性関節症患者の処置が開示されている。
【００１５】
ヒトＳＡＰは、ｉｎ  ｖｉｔｒｏおよびｉｎ  ｖｉｖｏの両方で、総ての形態の遊離ＤＮＡと、またクロマチンとも貪欲に結合する。実際、ＳＡＰは、ＤＮＡとのカルシウム依存性相互作用により特異的に結合する唯一の正常ヒト血漿タンパク質である２３，２４。対照的に、マウスおよびウマを含むいくつかの他の種からのＳＡＰは、たとえＤＮＡと結合したとしても弱く、イヌおよびウサギはＳＡＰ遺伝子を有してさえいないため、ＳＡＰを産生しない。免疫原自体の注射によるよりむしろ免疫原をコードするＤＮＡの注射により免疫が達成されるＤＮＡワクチン接種は、感染に対する防御免疫の誘導への非常に望ましいアプローチとしておよび癌における潜在的な免疫療法的介入として広く研究されている。しかしながら、ＤＮＡワクチン接種は、マウス、イヌ、ウサギおよびウマでは有効であるが、ヒトや、ヒトと同じように、ＤＮＡと貪欲に結合するＳＡＰを有するウシでは一貫して失敗した。ＤＮＡワクチン接種が効く種では、ＳＡＰはＤＮＡと結合しないかまたは存在しない。さらに、ヒトＳＡＰのトランスジェニック発現を有するマウスにおける実験およびそれを枯渇させるためのＣＰＨＰＣの使用により、ヒトＳＡＰの存在がＤＮＡワクチン接種の効力をブロックすることが確認されている２５，２６。
【００１６】
ＳＡＰはいくつかの細菌種と結合するが、他の種とは結合しない。ＳＡＰが結合する病原菌では、ＳＡＰは、ｉｎ  ｖｉｔｒｏおよびｉｎ  ｖｉｖｏで強力な抗オプソニン効果を有し、食作用および生物の死滅を減少させ、その結果、宿主の先天性免疫系からそれらを保護する２７。感染性および病原性を促進するこの効果は、ＳＡＰと細菌との結合を阻害するためのＣＰＨＰＣの投与によって無効となる２７。ＳＡＰはまた、侵襲性カンジダ症に罹患している患者の組織内の真菌細胞の表面に結合して存在する２８。この結合は、真菌タンパク質から形成されたアミロイド原繊維の病原生物表面での存在を反映する２８。
【００１７】
ＣＰＨＰＣは、薬理学上有効であるが、経口バイオアベイラビリティは約３〜５％と非常に低く、変動するため、所望のＳＡＰ枯渇を達成するのに最適であるのは静脈内注入または皮下注射による非経口投与だけである。しかしながら、治療的ＳＡＰ枯渇の既存の潜在的適応症の大部分は長期投与が必要である。長期静脈内投与は実際的ではない。長期皮下投与は実現可能であるが、注射は針を刺す不快感を引き起こし得、これは一部の患者には忍容されない７。
【００１８】
国際公開第２００３／０５１８３６号には、ＳＡＰ枯渇が有益な効果を有する疾患の治療に有用なＤ−プロリンプロドラッグが開示されている。そこに開示された２５の実施例は、主として油状物として得られ、それらのうち５つだけは固体であった。欧州特許庁での手続では、国際公開第２００３／０５１８３６号の対応欧州特許の分割出願は、（Ｒ）−１−（６−｛（Ｒ）−２−［１−（２，２−ジメチル−プロピオニルオキシ）−エトキシカルボニル］−ピロリジン−１−イル｝−６−オキソ−ヘキサノイル）−ピロリジン−２−カルボン酸１−（２，２−ジメチル−プロピオニルオキシ）エチルエステルに向けられた請求項とともに提出された。提出時、グラクソスミスクライングループ会社(the GlaxoSmithKline group of companies)（グラクソグループリミテッド(Glaxo Group Limited)）は、ペントラキシンセラピューティクスリミテッド(Pentraxin Therapeutics Limited)と、欧州特許第０９１５０８８号および国際公開第２００３／０５１８３６号、およびその対応出願へのライセンスを含むライセンス・研究提携契約(a Licence and Research Collaboration Agreement)を結んでいる。
【００１９】
従って、経口投与後にＳＡＰを効率的に枯渇させることが可能な量でＣＰＨＰＣを生成することが可能であり、同時に、医薬開発に好適な物理化学的性質を有する化合物が必要とされている。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００２０】
驚くべきことに、式（Ｉ）に従う化合物（２Ｒ，２’Ｒ）−ビス（（（（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）オキシ）カルボニル）オキシ）メチル）１，１’−アジポイルビス（ピロリジン−２−カルボキシレート）は、医薬開発に好適な物理化学的性質を有し、経口投与後にＳＡＰを効率的に枯渇させることが可能な量でＣＰＨＰＣを生成することが可能であることが見出された。
【００２１】
従って、第１の態様では、本発明は、式（Ｉ）に従う化合物（２Ｒ，２’Ｒ）−ビス（（（（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）オキシ）カルボニル）オキシ）メチル）１，１’−アジポイルビス（ピロリジン−２−カルボキシレート）を提供する：
【化１】
0006445046.tif 000002
【００２２】
式（Ｉ）の化合物を以下「本発明の化合物」と呼ぶ。
【００２３】
本発明の化合物は、良好な物理化学的性質を示し、経口投与後にＳＡＰを効率的に枯渇させることが可能な量でＣＰＨＰＣを生成することが可能である。
【００２４】
式（Ｉ）の化合物は、ＣＰＨＰＣを容易に生成する、良好なｐＨ溶液安定性および腸ミクロソーム安定性、ならびに低い肝ミクロソーム安定性を有し、式（Ｉ）の化合物は、ヒトにおける経口投与で循環レベルのＣＰＨＰＣを容易に生成することを示唆する。また、それは、シトクロムｐ４５０とのいかなる相互作用も示さず、式（Ｉ）の化合物はＣＹＰ４５０を介した薬物間相互作用(drug-drug interactions)（ＤＤＩ）を示さないことを示唆する。加えて、式（Ｉ）の化合物は高結晶質であり、それは活性物質の処方および医薬品の製造に関して有利である。
【００２５】
このプロフィールを有する化合物の使用は、ＳＡＰ（血清アミロイドＰ成分）の枯渇が有益である疾患または障害の治療において、例えば、アミロイドーシス（全身性アミロイドーシスおよび限局性アミロイドーシスを含む）、アルツハイマー病、ＩＩ型糖尿病、変形性関節症、細菌感染症、侵襲性カンジダ症(invasive candiasis)および他の真菌感染症において、ならびにＤＮＡワクチンの投与との併用において利点をもたらし得る。
【００２６】
さらなる態様では、本発明は、治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物と、場合により、１種類以上の薬学上許容可能な担体および／または賦形剤とを含んでなる医薬組成物を提供する。
【００２７】
さらなる態様では、対象における循環ＳＡＰの枯渇のための、式（Ｉ）の化合物または本明細書に記載される１以上の医薬組成物が提供される。
【００２８】
さらなる態様では、ＳＡＰ枯渇が有益である疾患の治療における使用のための、式（Ｉ）の化合物または本明細書に記載される１以上の医薬組成物が提供される。
【００２９】
さらなる態様では、ＳＡＰ枯渇が有益である疾患または障害の治療方法が提供される。
【００３０】
さらなる態様では、ＳＡＰ枯渇が有益である疾患の治療における使用のための医薬の製造における、式（Ｉ）の化合物または本明細書に記載される１以上の医薬組成物の使用が提供される。
【００３１】
さらなる態様では、１以上の投与形態の抗ＳＡＰ抗体（特に、国際公開第２０１１／１０７４８０号において開示されている抗体）と、１以上の投与形態の式（Ｉ）の化合物とを含んでなるキットオブパーツが提供される。
【発明を実施するための形態】
【００３２】
発明の詳細な説明
定義
以下の用語は、以下に本明細書に提示される意味を有することが意図され、本発明の説明および範囲を理解する上で有用である。
【００３３】
「薬学上許容可能な」とは、米国連邦政府(the Federal government of the United States of America)の監督官庁もしくは米国以外の国の対応官庁（例えば、ＥＭＡ、欧州医薬品庁(the European Medicines Agency)など）によって承認されたかもしくは承認可能なこと、または米国薬局方(the United States Pharmacopeia)もしくは欧州薬局方(European Pharmacopoeia)（Ｐｈ．  Ｅｕｒ．）に記載されていることを意味する。
【００３４】
「治療上有効な量」とは、疾患を治療するために対象に投与されたときに、その疾患についてそのような治療を達成するのに十分な化合物の量を意味する。
【００３５】
用語「抗体」は、免疫グロブリン様ドメインを有する分子を意味するために最も広い意味で使用され、モノクローナル抗体、組換え抗体、ポリクローナル抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体、二重特異性抗体およびヘテロコンジュゲート抗体；ならびに抗原結合フラグメントを含む。本発明による抗体は、ヒト補体系を活性化し、かつ／またはアミロイド沈着物の退縮をもたらす。
【００３６】
「治療」という場合には、急性の治療または予防、ならびに確立された症状の緩和および／または疾患の進行の遅延を含み、無症状の患者における症状の再発の抑制を含み得ることが理解されるであろう。
【００３７】
「抗体」に関連する用語「抗ＳＡＰ」、すなわち、「抗ＳＡＰ抗体」は、Ｃ反応性タンパク質(C-reactive protein)（ＣＲＰ）のような密接に関連した分子を含む、他の任意のタンパク質との結合がないかまたはわずかな結合を伴ってヒトＳＡＰと結合する抗体を意味する。
【００３８】
用語「ＣＤＲ」は、相補性決定領域を意味する。本明細書で使用される抗体のＣＤＲは、Ｋａｂａｔ法、Ｃｈｏｔｈｉａ法、ＡｂＭ法およびｃｏｎｔａｃｔ法を含む周知のＣＤＲナンバリング法のいずれかを使用して決定されたＣＤＲを意味する。
【００３９】
「循環ＳＡＰ」とは、ｉｎ  ｖｉｖｏおよびｉｎ  ｖｉｔｒｏで血漿中に遊離形態で存在し、組織中でアミロイド沈着物と会合していないＳＡＰを意味する。
【００４０】
医薬組成物
療法において式（Ｉ）の化合物を使用するために、それは通常、標準的な製薬実務に従って医薬組成物に処方される。
【００４１】
従って、本発明は、治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物と、場合により、１種類以上の薬学上許容可能な担体および／または賦形剤とを含んでなる医薬組成物を提供する。
【００４２】
本発明はまた、医薬組成物を調製するための方法であって、治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物と、場合により、１種類以上の薬学上許容可能な担体および／または賦形剤とを混合することを含んでなる方法を提供する。
【００４３】
本発明はまた、本発明の医薬組成物を含んでなる剤形を提供する。
【００４４】
好適には、周囲温度および大気圧での、混合により調製し得る本発明の医薬組成物は、通常、経口投与に適しており、従って、錠剤、カプセル剤、経口液体製剤、散剤、顆粒剤、またはロゼンジ剤の形態であり得る。
【００４５】
１つの実施形態では、経口投与のための、本発明の医薬組成物が提供される。
【００４６】
経口投与のための錠剤およびカプセル剤は、単位用量形態であり得、従来の賦形剤、例えば、結合剤（例えば、アルファ化トウモロコシデンプン、ポリビニルピロリドンまたはヒドロキシプロピルメチルセルロース）；増量剤（例えば、ラクトース、微晶質セルロースまたはリン酸水素カルシウム）；錠剤滑沢剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム、タルクまたはシリカ）；崩壊剤（例えば、バレイショデンプンまたはデンプングリコール酸ナトリウム）；および許容される湿潤剤（例えば、ラウリル硫酸ナトリウム）などを含有し得る。錠剤は、通常の製薬実務において周知の方法に従ってコーティングし得る。
【００４７】
経口液体製剤は、例えば、油性懸濁液、非水性溶液、エマルジョン、シロップもしくはエリキシルの形態であり得、または投与直前に好適な水性または非水性ビヒクルを用いて再構成するための乾燥製品の形態であり得る。そのような液体製剤は、懸濁剤（例えば、ソルビトールシロップ、セルロース誘導体または水素添加食用脂肪）、乳化剤（例えば、レシチンまたはアラビアガム）、非水性ビヒクル（食用油、例えば、アーモンド油、油性エステル、エチルアルコールまたは精留植物油を含み得るもの）、防腐剤（例えば、メチルまたはプロピル−ｐ−ヒドロキシベンゾエートまたはソルビン酸）などの従来の添加剤と、場合により、必要に応じて、従来の香味剤または着色剤、緩衝塩および甘味剤を含有し得る。経口投与のための製剤は、好適には、活性化合物の制御放出をもたらすように処方され得る。
【００４８】
別の実施形態では、前記剤形は錠剤またはカプセル剤である。
【００４９】
前記組成物は、投与方法に応じて、０．１重量％〜９９重量％、好ましくは、１０〜６０重量％の活性物質を含有し得る。上記の障害の治療に使用される化合物の用量は、通常、その障害の重篤度、患者の体重、および他の同様の因子によって変化する。しかしながら、一般的な指針として、好適な単位用量は、０．０５〜５０００ｍｇ、１．０〜１０００ｍｇ、または１００〜６００ｍｇ、例えば、１００ｍｇ、２００ｍｇまたは３００ｍｇであり得、そのような単位用量は１日２回以上、例えば、１日２回または３回投与し得る。そのような療法は、数日、数週間、数ヶ月または数年間延長し得る。
【００５０】
本発明はさらに、療法における使用に関しての、式（Ｉ）の化合物または本明細書に記載される医薬組成物を提供する。
【００５１】
従って、式（Ｉ）の化合物は、ＳＡＰ枯渇が有益である疾患の治療において有用である。
【００５２】
本発明はさらに、ＳＡＰの枯渇における使用のための、式（Ｉ）の化合物または本明細書に記載される医薬組成物を提供する。
【００５３】
さらなる態様では、ＳＡＰ枯渇が有益である対象における疾患または障害の治療方法であって、治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物を投与することを含んでなる方法が提供される。
【００５４】
さらなる態様では、ＳＡＰ枯渇が有益である対象における疾患または障害の治療方法であって、本明細書に記載される治療上有効な量の医薬組成物を投与することを含んでなる方法が提供される。
【００５５】
本発明はさらに、対象におけるＳＡＰの枯渇の方法であって、治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物をその対象に投与することを含んでなる方法を提供する。
【００５６】
本発明はさらに、対象におけるＳＡＰの枯渇の方法であって、本明細書に記載される治療上有効な量の医薬組成物をその対象に投与することを含んでなる方法を提供する。
【００５７】
多くの型の感染性海綿状脳症（プリオン病）は脳内のアミロイド沈着物と関係しており、従って、本発明は、ヒト変異型クロイツフェルト・ヤコブ病、本来のクロイツフェルト・ヤコブ病、クールーおよび様々な他の型のヒトプリオン病、さらに、ウシ海綿状脳症、ミュールジカおよびヘラジカの慢性消耗病、ならびにミンクの伝染性脳症を含む、これら総ての疾患または障害に関する。
【００５８】
本発明はさらに、対象における疾患または障害の治療方法であって、該疾患または障害は、アミロイドーシス、アルツハイマー病、２型真性糖尿病、変形性関節症、細菌感染症、侵襲性カンジダ症(invasive candiasis)、感染性海綿状脳症、ヒト変異型クロイツフェルト・ヤコブ病(variant Creutzfeld-Jakob disease in humans)、クロイツフェルト・ヤコブ病(Creutzfeld-Jakob disease)、クールー、他のヒトプリオン病、ウシ海綿状脳症、ミュールジカおよびヘラジカの慢性消耗病、ならびにミンクの伝染性脳症からなる群から選択され、治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物をその対象に投与することを含んでなる方法を提供する。
【００５９】
本発明はさらに、対象における疾患または障害の治療方法であって、該疾患または障害は、アミロイドーシス、アルツハイマー病、２型真性糖尿病、変形性関節症、細菌感染症、侵襲性カンジアシス(invasive candiasis)、感染性海綿状脳症、ヒト変異型クロイツフェルト・ヤコブ病(variant Creutzfeld-Jakob disease in humans)、クロイツフェルト・ヤコブ病(Creutzfeld-Jakob disease)、クールー、他のヒトプリオン病、ウシ海綿状脳症、ミュールジカおよびヘラジカの慢性消耗病、ならびにミンクの伝染性脳症からなる群から選択され、本明細書に記載される治療上有効な量の医薬組成物をその対象に投与することを含んでなる方法を提供する。
【００６０】
本発明はさらに、対象における疾患または障害の治療方法であって、該疾患または障害は、アミロイドーシス、アルツハイマー病、２型真性糖尿病および変形性関節症からなる群から選択され、治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物をその対象に投与することを含んでなる方法を提供する。
【００６１】
本発明はさらに、対象における疾患または障害の治療方法であって、該疾患または障害は、アミロイドーシス、アルツハイマー病、２型真性糖尿病および変形性関節症からなる群から選択され、本明細書に記載される治療上有効な量の医薬組成物をその対象に投与することを含んでなる方法を提供する。
【００６２】
本発明はさらに、対象における疾患または障害の治療方法であって、該疾患または障害は、アルツハイマー病、２型真性糖尿病および変形性関節症からなる群から選択され、治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物をその対象に投与することを含んでなる方法を提供する。
【００６３】
本発明はさらに、対象における疾患または障害の治療方法であって、該疾患または障害は、アルツハイマー病、２型真性糖尿病および変形性関節症からなる群から選択され、本明細書に記載される治療上有効な量の医薬組成物をその対象に投与することを含んでなる方法を提供する。
【００６４】
本発明はさらに、対象における疾患または障害(disordwer)の治療方法であって、該疾患または障害はアミロイドーシスであり、治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物をその対象に投与することを含んでなる方法を提供する。
【００６５】
本発明はさらに、ヒトＤＮＡワクチンの有効性の改善方法であって、治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物をその対象に投与することを含んでなる方法を提供する。
【００６６】
本発明はさらに、ヒトＤＮＡワクチンの有効性の改善方法であって、本明細書に記載される治療上有効な量の医薬組成物をその対象に投与することを含んでなる方法を提供する。
【００６７】
本発明はさらに、ＤＮＡワクチンと組み合わせた式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【００６８】
本発明はさらに、ヒトＤＮＡワクチンの有効性の改善における使用のための式（Ｉ）の化合物を提供する。
【００６９】
本発明はさらに、ヒトＤＮＡワクチンの有効性の改善における使用のための、本明細書に記載される医薬組成物を提供する。
【００７０】
本発明はさらに、ヒトＤＮＡワクチンの有効性の改善における式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【００７１】
本発明はさらに、ヒトＤＮＡワクチンの有効性の改善における本明細書に記載される医薬組成物の使用を提供する。
【００７２】
本発明はさらに、ヒトＤＮＡワクチンの有効性の改善における使用のための医薬の製造における式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【００７３】
「ヒトＤＮＡワクチンの有効性における改善」とは、ＤＮＡワクチンが、ヒトＤＮＡワクチンによりコードされる免疫原に対する免疫防御免疫応答を誘導することを可能にすることを意味する。
【００７４】
前記対象は哺乳動物であり得る。前記対象は、典型的には、ヒトである。
【００７５】
本発明はさらに、対象における疾患または障害の治療方法であって、該疾患または障害は、感染性海綿状脳症、ヒト変異型クロイツフェルト・ヤコブ病、クロイツフェルト・ヤコブ病、クールー、ウシ海綿状脳症、ミュールジカおよびヘラジカの慢性消耗病、ならびにミンクの伝染性脳症からなる群から選択され、治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物をその対象に投与することを含んでなる方法を提供する。
【００７６】
本発明はさらに、対象における疾患または障害の治療方法であって、該疾患または障害は、感染性海綿状脳症、ヒト変異型クロイツフェルト・ヤコブ病、クロイツフェルト・ヤコブ病、クールー、ウシ海綿状脳症、ミュールジカおよびヘラジカの慢性消耗病、ならびにミンクの伝染性脳症からなる群から選択され、本明細書に記載される治療上有効な量の医薬組成物をその対象に投与することを含んでなる方法を提供する。
【００７７】
「アミロイドーシス」という用語は、全身性アミロイドーシス（限定されるものではないが、ＡＬ型アミロイドーシス、ＡＡ型アミロイドーシス、透析アミロイドーシス、ＡＴＴＲ（トランスサイレチン）アミロイドーシス、遺伝性全身性アミロイドーシスを含む）および限局性アミロイドーシス（限定されるものではないが、脳アミロイド血管症を含む）の両方を包含する。
【００７８】
別の態様では、本発明は、ＳＡＰ枯渇が有益である疾患または障害の治療における使用のための、式（Ｉ）の化合物または本明細書に記載される医薬組成物を提供する。
【００７９】
別の態様では、本発明は、ＳＡＰの枯渇における使用のための、式（Ｉ）の化合物または本明細書に記載される医薬組成物を提供する。
【００８０】
１つの実施形態では、本発明は、ｉｎ  ｖｉｖｏでのＳＡＰの枯渇における使用のための、式（Ｉ）の化合物または本明細書に記載される医薬組成物を提供する。
【００８１】
別の態様では、本発明は、アミロイドーシス、アルツハイマー病、２型真性糖尿病および変形性関節症からなる群から選択される疾患または障害の治療における使用のための式（Ｉ）の化合物を提供する。
【００８２】
別の態様では、本発明は、アミロイドーシス、アルツハイマー病、２型真性糖尿病および変形性関節症からなる群から選択される疾患または障害の治療における使用のための、本明細書に記載される医薬組成物を提供する。
【００８３】
１つの実施形態では、本発明は、アルツハイマー病、２型真性糖尿病および変形性関節症からなる群から選択される疾患または障害の治療における使用のための式（Ｉ）の化合物を提供する。
【００８４】
１つの実施形態では、本発明は、アミロイドーシスの治療における使用のための式（Ｉ）の化合物を提供する。
【００８５】
別の態様では、本発明は、アルツハイマー病、２型真性糖尿病および変形性関節症からなる群から選択される疾患または障害の治療における使用のための、本明細書に記載される医薬組成物を提供する。
【００８６】
別の態様では、本発明は、アミロイドーシスの治療における使用のための、本明細書に記載される医薬組成物を提供する。
【００８７】
別の態様では、本発明は、ＳＡＰ枯渇が有益である疾患または障害の治療における、式（Ｉ）の化合物または本明細書に記載される１以上の医薬組成物の使用を提供する。
【００８８】
別の態様では、本発明は、ＳＡＰの枯渇における、式（Ｉ）の化合物または本明細書に記載される１以上の医薬組成物の使用を提供する。
【００８９】
別の態様では、本発明は、アミロイドーシス、アルツハイマー病、２型真性糖尿病および変形性関節症からなる群から選択される疾患または障害の治療における式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【００９０】
別の態様では、本発明は、アミロイドーシス、アルツハイマー病、２型真性糖尿病および変形性関節症からなる群から選択される疾患または障害の治療における、本明細書に記載される医薬組成物の使用を提供する。
【００９１】
別の態様では、本発明は、アルツハイマー病、２型真性糖尿病および変形性関節症からなる群から選択される疾患または障害の治療における式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【００９２】
別の態様では、本発明は、アミロイドーシスの治療における、式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【００９３】
別の態様では、本発明は、アルツハイマー病、２型真性糖尿病および変形性関節症からなる群から選択される疾患または障害の治療における、本明細書に記載される医薬組成物の使用を提供する。
【００９４】
別の態様では、本発明は、アミロイドーシスの治療における、本明細書に記載される医薬組成物の使用を提供する。
【００９５】
別の態様では、本発明は、ＳＡＰ枯渇が有益である疾患または障害の治療における使用のための医薬の製造における式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【００９６】
別の態様では、本発明は、ＳＡＰの枯渇における使用のための医薬の製造における式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【００９７】
別の態様では、本発明は、アミロイドーシス、アルツハイマー病、２型真性糖尿病および変形性関節症からなる群から選択される疾患または障害の治療における使用のための医薬の製造における式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【００９８】
別の態様では、本発明は、アルツハイマー病、２型真性糖尿病および変形性関節症からなる群から選択される疾患または障害の治療における使用のための医薬の製造における式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【００９９】
別の態様では、本発明は、アミロイドーシスの治療における使用のための医薬の製造における式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【０１００】
アミロイドーシスの治療に使用される場合、式（Ｉ）の化合物は抗ＳＡＰ抗体とともに投与し得る。
【０１０１】
ある実施形態では、抗ＳＡＰ抗体は、ヒトＳＡＰのＡ面に結合する。ある実施形態では、抗ＳＡＰ抗体は、国際公開第１１／１０７４８０号における配列番号２８内に存在する重鎖相補性決定領域(complementarity determining regions)（ＣＤＲ）および配列番号３５内に存在する軽鎖ＣＤＲを含んでなる。ある実施形態では、抗ＳＡＰ抗体は、国際公開第１１／１０７４８０号における配列番号２８の重鎖可変領域および配列番号３５の軽鎖可変領域を含んでなる。ある実施形態では、抗ＳＡＰ抗体は、ヒトＩｇＧｌまたはＩｇＧ３ヒト定常ドメインを含んでなる。ある実施形態では、抗ＳＡＰ抗体は、国際公開第１１／１０７４８０号における配列番号６２の重鎖および配列番号６４の軽鎖からなる。
【０１０２】
従って、さらなる態様において、本発明は、アミロイドーシスの治療方法であって、抗ＳＡＰ抗体との共投与において、式（Ｉ）の化合物または本明細書に記載される治療上有効な量の医薬組成物を対象に投与することを含んでなる方法を提供する。
【０１０３】
１つの実施形態では、抗ＳＡＰ抗体との共投与での式（Ｉ）の化合物の投与は逐次的である。
【０１０４】
さらなる実施形態では、式（Ｉ）の化合物は最初に投与される。さらなる実施形態では、対象における循環ＳＡＰのレベルが２ｍｇ／Ｌ未満のレベルに低下したときに、抗ＳＡＰ抗体は投与される。１つの実施形態では、循環ＳＡＰのレベルは１ｍｇ／Ｌ以下のレベルに低下した。さらなる実施形態では、循環ＳＡＰのレベルは０．５ｍｇ／Ｌ以下のレベルに低下した。
【０１０５】
循環ＳＡＰのレベルは、市販のＥＬＩＳＡ（酵素免疫測定法(enzyme-linked immunosorbent assay)）キット（例えば、Ｈｙｃｕｌｔ  Ｂｉｏｔｅｃｈ製ＨＫ３３１  Ｈｕｍａｎ  ＳＡＰ  ＥＬＩＳＡキット）を使用して測定することができる。
【０１０６】
さらなる実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、５〜８日間または対象において循環するＳＡＰのレベルが２ｍｇ／Ｌ未満のレベルに低下するまでのいずれかの長い期間で投与される。１つの実施形態では、対象において循環するＳＡＰのレベルは１ｍｇ／Ｌ以下に低下した。さらなる実施形態では、対象において循環するＳＡＰのレベルは０．５ｍｇ／Ｌ以下に低下した。さらなる実施形態では、式（Ｉ）の化合物の投与は、抗ＳＡＰ抗体２００〜２０００ｍｇ（好ましくは、２５０〜１０００ｍｇ、より好ましくは、２５０〜６００ｍｇ）の１回用量が投与されている間、およびその後４〜６日間継続される。これは「治療コース」を構成する−患者は、所望の治療効果を達成するために複数回のコースを必要とすることがある。また、患者は、間欠的な反復治療を必要とする可能性もある。１つの実施形態では、治療コースは、必要に応じて、３〜６週間間隔で少なくとも１回繰り返される。さらなる実施形態では、治療コースは、必要に応じて、３〜６週間間隔で少なくとも１回繰り返され、その後６〜１２ヶ月間隔で少なくとも１回の治療コースが続く。
【０１０７】
さらなる態様では、ＳＡＰ枯渇が有益である対象における疾患または障害の治療方法であって、抗ＳＡＰ抗体との共投与において、治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物を投与することを含んでなる方法が提供される。
【０１０８】
さらなる態様では、ＳＡＰ枯渇が有益である対象における疾患または障害の治療方法であって、抗ＳＡＰ抗体との共投与において、本明細書に記載される治療上有効な量の医薬組成物を投与することを含んでなる方法が提供される。
【０１０９】
さらなる態様では、ＳＡＰの枯渇の方法であって、抗ＳＡＰ抗体との共投与において、治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物を投与することを含んでなる方法が提供される。
【０１１０】
さらなる態様では、ＳＡＰの枯渇の方法であって、抗ＳＡＰ抗体との共投与において、本明細書に記載される治療上有効な量の医薬組成物を投与することを含んでなる方法が提供される。
【０１１１】
本発明はさらに、対象における疾患または障害の治療方法であって、該疾患または障害は、アミロイドーシス、アルツハイマー病、２型真性糖尿病および変形性関節症からなる群から選択され、抗ＳＡＰ抗体との共投与において、治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物をその対象に投与することを含んでなる方法を提供する。
【０１１２】
本発明はさらに、対象における疾患または障害の治療方法であって、該疾患または障害は、アミロイドーシス、アルツハイマー病、２型真性糖尿病および変形性関節症からなる群から選択され、抗ＳＡＰ抗体との共投与において、本明細書に記載される治療上有効な量の医薬組成物をその対象に投与することを含んでなる方法を提供する。
【０１１３】
別の態様では、本発明は、ＳＡＰ枯渇が有益である疾患または障害の治療における使用のための、抗ＳＡＰ抗体との共投与での、式（Ｉ）の化合物または本明細書に記載される１以上の医薬組成物を提供する。
【０１１４】
別の態様では、本発明は、ＳＡＰの枯渇における使用のための、抗ＳＡＰ抗体との共投与での、式（Ｉ）の化合物または本明細書に記載される１以上の医薬組成物を提供する。
【０１１５】
別の態様では、本発明は、アミロイドーシス、アルツハイマー病、２型真性糖尿病および変形性関節症からなる群から選択される疾患または障害の治療における使用のための、抗ＳＡＰ抗体との共投与での、式（Ｉ）の化合物を提供する。
【０１１６】
別の態様では、本発明は、アミロイドーシスの治療における使用のための、抗ＳＡＰ抗体との共投与での、式（Ｉ）の化合物を提供する。
【０１１７】
１つの実施形態では、本発明は、全身性アミロイドーシスの治療における使用のための、抗ＳＡＰ抗体との共投与での、式（Ｉ）の化合物を提供する。
【０１１８】
１つの実施形態では、本発明は、ＡＬ型アミロイドーシスの治療における使用のための、抗ＳＡＰ抗体との共投与での、式（Ｉ）の化合物を提供する。
【０１１９】
１つの実施形態では、本発明は、ＡＡ型アミロイドーシスの治療における使用のための、抗ＳＡＰ抗体との共投与での、式（Ｉ）の化合物を提供する。
【０１２０】
１つの実施形態では、本発明は、透析アミロイドーシスの治療における使用のための、抗ＳＡＰ抗体との共投与での、式（Ｉ）の化合物を提供する。
【０１２１】
１つの実施形態では、本発明は、ＡＴＴＲ（トランスサイレチン）アミロイドーシスの治療における使用のための、抗ＳＡＰ抗体との共投与での、式（Ｉ）の化合物を提供する。
【０１２２】
１つの実施形態では、本発明は、遺伝性全身性アミロイドーシスの治療における使用のための、抗ＳＡＰ抗体との共投与での、式（Ｉ）の化合物を提供する。
【０１２３】
１つの実施形態では、本発明は、限局性アミロイドーシスの治療における使用のための、抗ＳＡＰ抗体との共投与での、式（Ｉ）の化合物を提供する。
【０１２４】
１つの実施形態では、本発明は、脳アミロイド血管症の治療における使用のための、抗ＳＡＰ抗体との共投与での、式（Ｉ）の化合物を提供する。
【０１２５】
別の態様では、本発明は、アミロイドーシス、アルツハイマー病、２型真性糖尿病および変形性関節症からなる群から選択される疾患または障害の治療における使用のための、抗ＳＡＰ抗体との共投与での、本明細書に記載される医薬組成物を提供する。
【０１２６】
別の態様では、本発明は、アミロイドーシスの治療における使用のための、抗ＳＡＰ抗体との共投与での、本明細書に記載される医薬組成物を提供する。
【０１２７】
１つの実施形態では、本発明は、全身性アミロイドーシスの治療における使用のための、抗ＳＡＰ抗体との共投与での、本明細書に記載される医薬組成物を提供する。
【０１２８】
１つの実施形態では、本発明は、ＡＬ型アミロイドーシスの治療における使用のための、抗ＳＡＰ抗体との共投与での、本明細書に記載される医薬組成物を提供する。
【０１２９】
１つの実施形態では、本発明は、ＡＡ型アミロイドーシスの治療における使用のための、抗ＳＡＰ抗体との共投与での、本明細書に記載される医薬組成物を提供する。
【０１３０】
１つの実施形態では、本発明は、透析アミロイドーシスの治療における使用のための、抗ＳＡＰ抗体との共投与での、本明細書に記載される医薬組成物を提供する。
【０１３１】
１つの実施形態では、本発明は、ＡＴＴＲ（トランスサイレチン）アミロイドーシスの治療における使用のための、抗ＳＡＰ抗体との共投与での、本明細書に記載される医薬組成物を提供する。
【０１３２】
１つの実施形態では、本発明は、遺伝性全身性アミロイドーシスの治療における使用のための、抗ＳＡＰ抗体との共投与での、本明細書に記載される医薬組成物を提供する。
【０１３３】
１つの実施形態では、本発明は、限局性アミロイドーシスの治療における使用のための、抗ＳＡＰ抗体との共投与での、本明細書に記載される医薬組成物を提供する。
【０１３４】
１つの実施形態では、本発明は、脳アミロイド血管症の治療における使用のための、抗ＳＡＰ抗体との共投与での、本明細書に記載される医薬組成物を提供する。
【０１３５】
別の態様では、本発明は、ＳＡＰ枯渇が有益である疾患または障害の治療における、抗ＳＡＰ抗体との共投与での、式（Ｉ）の化合物または本明細書に記載される医薬組成物の使用を提供する。
【０１３６】
別の態様では、本発明は、ＳＡＰの枯渇における使用のための、抗ＳＡＰ抗体との共投与での、式（Ｉ）の化合物または本明細書に記載される医薬組成物の使用を提供する。
【０１３７】
別の態様では、本発明は、アミロイドーシス、アルツハイマー病、２型真性糖尿病および変形性関節症からなる群から選択される疾患または障害の治療における、抗ＳＡＰ抗体との共投与での、式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【０１３８】
別の態様では、本発明は、アミロイドーシスの治療における、抗ＳＡＰ抗体との共投与での、式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【０１３９】
１つの実施形態では、本発明は、全身性アミロイドーシスの治療における、抗ＳＡＰ抗体との共投与での、式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【０１４０】
１つの実施形態では、本発明は、ＡＬ型アミロイドーシスの治療における、抗ＳＡＰ抗体との共投与での、式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【０１４１】
１つの実施形態では、本発明は、ＡＡ型アミロイドーシスの治療における、抗ＳＡＰ抗体との共投与での、式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【０１４２】
１つの実施形態では、本発明は、透析アミロイドーシスの治療における、抗ＳＡＰ抗体との共投与での、式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【０１４３】
１つの実施形態では、本発明は、ＡＴＴＲ（トランスサイレチン）アミロイドーシスの治療における、抗ＳＡＰ抗体との共投与での、式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【０１４４】
１つの実施形態では、本発明は、遺伝性全身性アミロイドーシスの治療における、抗ＳＡＰ抗体との共投与での、式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【０１４５】
１つの実施形態では、本発明は、限局性アミロイドーシスの治療における、抗ＳＡＰ抗体との共投与での、式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【０１４６】
１つの実施形態では、本発明は、脳アミロイド血管症の治療における、抗ＳＡＰ抗体との共投与での、式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【０１４７】
別の態様では、本発明は、アミロイドーシス、アルツハイマー病、２型真性糖尿病および変形性関節症からなる群から選択される疾患または障害の治療における、抗ＳＡＰ抗体との共投与での、本明細書に記載される医薬組成物の使用を提供する。
【０１４８】
別の態様では、本発明は、アミロイドーシスの治療における、抗ＳＡＰ抗体との共投与での、本明細書に記載される医薬組成物の使用を提供する。
【０１４９】
１つの実施形態では、本発明は、全身性アミロイドーシスの治療における、抗ＳＡＰ抗体との共投与での、本明細書に記載される医薬組成物の使用を提供する。
【０１５０】
１つの実施形態では、本発明は、ＡＬ型アミロイドーシスの治療における、抗ＳＡＰ抗体との共投与での、本明細書に記載される医薬組成物の使用を提供する。
【０１５１】
１つの実施形態では、本発明は、ＡＡ型アミロイドーシスの治療における、抗ＳＡＰ抗体との共投与での、本明細書に記載される医薬組成物の使用を提供する。
【０１５２】
１つの実施形態では、本発明は、透析アミロイドーシスの治療における、抗ＳＡＰ抗体との共投与での、本明細書に記載される医薬組成物の使用を提供する。
【０１５３】
１つの実施形態では、本発明は、ＡＴＴＲ（トランスサイレチン）アミロイドーシスの治療における、抗ＳＡＰ抗体との共投与での、本明細書に記載される医薬組成物の使用を提供する。
【０１５４】
１つの実施形態では、本発明は、遺伝性全身性アミロイドーシスの治療における、抗ＳＡＰ抗体との共投与での、本明細書に記載される医薬組成物の使用を提供する。
【０１５５】
１つの実施形態では、本発明は、限局性アミロイドーシスの治療における、抗ＳＡＰ抗体との共投与での、本明細書に記載される医薬組成物の使用を提供する。
【０１５６】
１つの実施形態では、本発明は、脳アミロイド血管症の治療における、抗ＳＡＰ抗体との共投与での、本明細書に記載される医薬組成物の使用を提供する。
【０１５７】
別の態様では、本発明は、ＳＡＰ枯渇が有益である疾患または障害の治療における使用のための医薬の製造における式（Ｉ）の化合物および抗ＳＡＰ抗体の使用を提供する。
【０１５８】
別の態様では、本発明は、ＳＡＰの枯渇における使用のための医薬の製造における式（Ｉ）の化合物および抗ＳＡＰ抗体の使用を提供する。
【０１５９】
別の態様では、本発明は、アミロイドーシス、アルツハイマー病、２型真性糖尿病および変形性関節症からなる群から選択される疾患または障害の治療における使用のための医薬の製造における式（Ｉ）の化合物および抗ＳＡＰ抗体の使用を提供する。
【０１６０】
別の態様では、本発明は、アミロイドーシスの治療における使用のための医薬の製造における式（Ｉ）の化合物および抗ＳＡＰ抗体の使用を提供する。
【０１６１】
１つの実施形態では、本発明は、全身性アミロイドーシスの治療における使用のための医薬の製造における式（Ｉ）の化合物および抗ＳＡＰ抗体の使用を提供する。
【０１６２】
１つの実施形態では、本発明は、ＡＬ型アミロイドーシスの治療における使用のための医薬の製造における式（Ｉ）の化合物および抗ＳＡＰ抗体の使用を提供する。
【０１６３】
１つの実施形態では、本発明は、ＡＡ型アミロイドーシスの治療における使用のための医薬の製造における式（Ｉ）の化合物および抗ＳＡＰ抗体の使用を提供する。
【０１６４】
１つの実施形態では、本発明は、透析アミロイドーシスの治療における使用のための医薬の製造における式（Ｉ）の化合物および抗ＳＡＰ抗体の使用を提供する。
【０１６５】
１つの実施形態では、本発明は、ＡＴＴＲ（トランスサイレチン）アミロイドーシスの治療における使用のための医薬の製造における式（Ｉ）の化合物および抗ＳＡＰ抗体の使用を提供する。
【０１６６】
１つの実施形態では、本発明は、遺伝性全身性アミロイドーシスの治療における使用のための医薬の製造における式（Ｉ）の化合物および抗ＳＡＰ抗体の使用を提供する。
【０１６７】
１つの実施形態では、本発明は、限局性アミロイドーシスの治療における使用のための医薬の製造における式（Ｉ）の化合物および抗ＳＡＰ抗体の使用を提供する。
【０１６８】
１つの実施形態では、本発明は、脳アミロイド血管症の治療における使用のための医薬の製造における式（Ｉ）の化合物および抗ＳＡＰ抗体の使用を提供する。
【０１６９】
１つの実施形態では、前記疾患または障害はアミロイドーシスである。
【０１７０】
さらなる実施形態では、前記疾患または障害は全身性アミロイドーシスである。
【０１７１】
さらなる実施形態では、前記疾患または障害はＡＬ型アミロイドーシスである。
【０１７２】
さらなる実施形態では、前記疾患または障害はＡＡ型アミロイドーシスである。
【０１７３】
さらなる実施形態では、前記疾患または障害は透析アミロイドーシスである。
【０１７４】
さらなる実施形態では、前記疾患または障害はＡＴＴＲ（トランスサイレチン）アミロイドーシスである。
【０１７５】
さらなる実施形態では、前記疾患または障害は遺伝性全身性アミロイドーシスである。
【０１７６】
別の実施形態では、前記疾患または障害は限局性アミロイドーシスである。
【０１７７】
さらなる実施形態では、前記疾患または障害は脳アミロイド血管症である。
【０１７８】
１つの実施形態では、前記疾患または障害はアルツハイマー病である。
【０１７９】
１つの実施形態では、前記疾患または障害は２型真性糖尿病である。
【０１８０】
１つの実施形態では、前記疾患または障害は変形性関節症である。
【０１８１】
本発明の別の実施形態では、アミロイドーシスの治療に有用な、抗ＳＡＰ抗体の１回分以上の単位用量および式（Ｉ）の化合物の１回分以上の単位用量を含有する製造品、または「キットオブパーツ」が提供される。
【０１８２】
１つの実施形態では、前記キットオブパーツは、抗ＳＡＰ抗体の一単位用量および式（Ｉ）の化合物の１回分以上の単位用量を含んでなる。
【０１８３】
好適には、前記キットオブパーツは、式（Ｉ）の化合物の１回分以上の単位用量および抗ＳＡＰ抗体の単位用量の別々のまたは逐次投与のために処方される。
【０１８４】
１つの実施形態では、前記キットオブパーツは、式（Ｉ）の化合物または本明細書に記載される医薬組成物の１回分以上の単位用量および抗ＳＡＰ抗体の単位用量を含んでなる容器を含んでなる。
【０１８５】
別の実施形態では、前記キットオブパーツは、式（Ｉ）の化合物または本明細書に記載される医薬組成物の１回分以上の単位用量を含んでなる第１の容器と、抗ＳＡＰ抗体の単位用量を含んでなる第２の容器とを含んでなる。
【０１８６】
前記キットオブパーツは、アミロイドーシスを治療または予防するための式（Ｉ）の化合物の１回分以上の単位用量および抗ＳＡＰ抗体の単位用量の投与のための指示書をさらに含んでなり得る。
【０１８７】
本発明の他の実施形態では、式（Ｉ）の化合物または本明細書に記載される医薬組成物の１回分以上の単位用量およびＤＮＡワクチンの１回分以上の単位用量を含有する製造品、または「キットオブパーツ」が提供される。
【０１８８】
好適な容器としては、例えば、ボトル、バイアル、シリンジおよびブリスターパックなどが挙げられる。
【０１８９】
国際公開第２０１１／１３９９１７号には、トランスサイレチンの発現の調整においておよびトランスサイレチンアミロイドーシスの治療、予防、遅延または改善において潜在的に有用な抗トランスサイレチン（抗ＴＴＲ）アンチセンスオリゴヌクレオチドが開示されている。
【０１９０】
別の態様では、本発明は、ＡＴＴＲ（トランスサイレチン）アミロイドーシスの治療方法であって、ｉ）抗ＳＡＰ抗体との共投与において、式（Ｉ）の化合物または本明細書に記載される治療上有効な量の医薬組成物を対象に投与することおよびｉｉ）治療上有効な量の抗ＴＴＲアンチセンスオリゴヌクレオチドを対象に投与することを含んでなる方法を提供する。
【０１９１】
本発明の１つの実施形態では、前記抗ＴＴＲアンチセンスオリゴヌクレオチドはＩＳＩＳ  ４２０９１５である。
【０１９２】
１つの実施形態では、工程ｉ）およびｉｉ）は逐次的に行われる。
【０１９３】
１つの実施形態では、工程ｉｉ）は、工程ｉ）の後に行われる。
【０１９４】
国際公開第２００９０４０４０５号には、トランスサイレチンアミロイドーシスの治療または予防において有用なトランスサイレチンの四量体形態を安定化するための薬剤が開示されている。
【０１９５】
従って、別の態様では、本発明は、ＡＴＴＲ（トランスサイレチン）アミロイドーシスの治療方法であって、ｉ）抗ＳＡＰ抗体との共投与において、式（Ｉ）の化合物または本明細書に記載される治療上有効な量の医薬組成物を対象に投与すること、およびｉｉ）国際公開第２００９０４０４０５号に記載されている治療上有効な量の薬剤を対象に投与することを含んでなる方法を提供する。
【０１９６】
１つの実施形態では、工程ｉ）およびｉｉ）は逐次的に行われる。
【０１９７】
１つの実施形態では、工程ｉｉ）は、工程ｉ）の後に行われる。
【０１９８】
式（Ｉ）の化合物は、実質的に、反応スキーム１に従って合成し得る。
【０１９９】
式（Ｉ）の化合物は、溶媒（例えば、ジオキサン）、塩基（例えば、炭酸カリウム）および触媒量のＴＢＡＩ（テトラブチルアンモニウムヨージド）の存在下で式（ＩＩ）の炭酸クロロメチルとＣＰＨＰＣとを反応させることによって調製することができる。
【０２００】
式（ＩＩ）の炭酸クロロメチルは、溶媒（例えば、ジエチルエーテルまたはジクロロメタン）および塩基（例えば、ピリジンまたはジメチルアミノピリジン）の存在下でクロロメチルカルボノクロリデートとテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−オールとを反応させることによって調製することができる。
【０２０１】
クロロメチルカルボノクロリデート（クロロギ酸クロロメチルとしても知られている）およびテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−オールは市販されている（Ａｌｄｒｉｃｈ）。
【化２】
0006445046.tif 000003
【０２０２】
あるいは、式（Ｉ）の化合物は、実質的に、Ｄ−プロリン（（Ｒ）−ピロリジン−２−カルボン酸）から出発して反応スキーム２に従って合成することができる。
【化３】
0006445046.tif 000004
【０２０３】
四角い枠内の化合物はＣＰＨＰＣである。
【０２０４】
Ｄ−プロリンは市販されている（Ａｌｄｒｉｃｈ）。
【実施例】
【０２０５】
以下の実施例により本発明を例示する。この実施例は、本発明の範囲を限定するものではなく、むしろ、本発明の化合物、組成物、および方法を調製および使用するために当業者に指針を提供することを意図している。本発明の特定の実施形態を記載しているが、当業者は、本発明の趣旨および範囲から逸脱することなく、様々な変更および修正を行うことができることを理解するであろう。
【０２０６】
本明細書において引用する、限定されるものではないが、特許および特許出願を含む総ての刊行物は、個々の刊行物が、完全に記載されているかのように引用することにより本明細書の一部とされるように具体的にかつ個々に示されているかのように引用することにより本明細書の一部とされる。
【０２０７】
以下の中間体および実施例により本発明の化合物の調製を例示する。
【０２０８】
略号
２−ＭｅＴＨＦ              ２−メチルテトラヒドロフラン
ａｑ．                      水性
ＢｎＯＨ                    ベンジルアルコール
Ｂｕ４ＮＩ                   テトラブチルアンモニウムヨージド
ＤＣＭ                      ジクロロメタン／塩化メチレン
ＤＭＡＰ                    ジメチルアミノピリジン
ＥＳＩ                      エレクトロスプレーイオン化
ＥｔＯＡｃ                  酢酸エチル
Ｅｔ２Ｏ                     ジエチルエーテル
ｈ                          時間
ＨＣｌ                      塩化水素／塩酸
ＨＰＬＣ                    高速液体クロマトグラフィー
ＩＰＡ                      イソプロピルアルコール
ｉＰｒ２Ｏ                    イソプロピルエーテル
ＭｅＣＮ／ＣＨ３ＣＮ         アセトニトリル
Ｍｉｎ                      分
ＭＳ                        質量分析
Ｎａ２ＳＯ４                  硫酸ナトリウム
ＮＭＲ                      核磁気共鳴
ＰｈＭｅ                    トルエン
ｐｙ                        ピリジン
ＲＴ                        室温
ＴＢＡＩ                    テトラブチルアンモニウムヨージド
ＴＥＡ                      トリエチルアミン
ＴＯＦ                      飛行時間
ＴＨＦ                      テトラヒドロフラン
【０２０９】
１Ｈおよび１３Ｃ  ＮＭＲスペクトルは、Ｂｒｕｋｅｒ  ３００または４００ＭＨｚで記録した。化学シフトは、百万分率（ｐｐｍ、単位）で報告している。高分解能質量スペクトルは、分析用高速液体クロマトグラフィー(high performance liquid chromatography)（ＨＰＬＣ）と連結されたＭｉｃｒｏｍａｓｓ  ＬＣＴ（ＴＯＦ）分光計で記録した。ＨＰＬＣは、Ｗａｔｅｒｓ  Ｘ−Ｔｅｒｒａ  ＭＳ  Ｃ１８カラム（３．５μｍ  ３０×４．６ｍｍ内径）において、０．０１Ｍ酢酸アンモニウム水溶液（溶媒Ａ）および１００％アセトニトリル（溶媒Ｂ）で溶出し、４０℃で１．３ｍｌ／分の流速で以下の溶出勾配０〜０．５分  ５％Ｂ、０．５〜３．７５分  ５％〜１００％Ｂ、３．７５〜４．５分１００％Ｂ、４．５〜５分１００％〜５％Ｂ、５〜５．５分５％Ｂを用いて行った。質量スペクトル（ＭＳ）は、Ｗａｔｅｒｓ  ＬＣＴ質量分析計でエレクトロスプレー陽イオン化［ＭＨ＋分子イオンを与えるＥＳ＋ｖｅ］またはエレクトロスプレー陰イオン化［（Ｍ−Ｈ）−分子イオンを与えるＥＳ−ｖｅ］モードを用いて記録した。
【０２１０】
分析用ＨＰＬＣは、ＸＳｅｌｅｃｔ  ＸＰ  Ｃ１８カラム（２．５μｍ  ３０×４．６ｍｍ内径）において、０．１％ギ酸水溶液（溶媒Ａ）および０．１％ギ酸アセトニトリル溶液（溶媒Ｂ）で溶出し、４０℃で１．８ｍｌ／分の流速で、以下の溶出勾配０〜３．２分：５％〜１００％Ｂ、３．２〜４．０分１００％Ｂを用いて行った。質量スペクトル（ＭＳ）は、Ｗａｔｅｒｓ  ＺＱ質量分析計でエレクトロスプレー陽イオン化［ＭＨ＋分子イオンを与えるＥＳ＋］またはエレクトロスプレー陰イオン化［（Ｍ−Ｈ）−分子イオンを与えるＥＳ−］モードを用いて記録した。
【０２１１】
中間体１：炭酸クロロメチル（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）
ジエチルエーテル（５００ｍＬ）中のテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−オール（４０ｇ、３９２ｍｍｏｌ）の溶液に、ピリジン（３８．０ｍＬ、４７０ｍｍｏｌ）を加え、溶液を０℃に冷却した。クロロメチルカルボノクロリデート（４１．８ｍＬ、４７０ｍｍｏｌ）を滴下し、白色固体を生成させた。反応混合物を室温で１８時間撹拌した。反応混合物を水（２００ｍＬ）、ＨＣｌ  ０．５Ｎ（２００ｍＬ）、次に、ＮａＨＣＯ３飽和溶液（２００ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。
【０２１２】
トルエンを加え、溶液を減圧下で濃縮した（過剰のクロロメチルカルボノクロリデートを除去した）。炭酸クロロメチル（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（中間体１）を無色の油状物として得た（７０ｇ、３６０ｍｍｏｌ、収率９２％）。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 5.75 (s, 2 H), 4.92 (m, 1 H), 3.95 (m, 2 H), 3.56 (m, 2 H), 2.02 (m, 2 H), 1.80 (m, 2 H)。
【０２１３】
中間体１（別法調製）：炭酸クロロメチル（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）
ＤＣＭ（５０ｍＬ）中のクロロメチルカルボノクロリデート（５ｇ、３８．８ｍｍｏｌ）の溶液に、テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−オール（３．９６ｇ、３８．８ｍｍｏｌ）を加え、溶液を０℃に冷却した。ＤＭＡＰ（４．９７ｇ、４０．７ｍｍｏｌ）を加え、次いで、反応混合物を室温で１８時間撹拌した。反応混合物を水で希釈し、ＤＣＭ（３×１００ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。淡黄色油状物を、シクロヘキサン中１０％ＥｔＯＡｃで溶出するクロマトグラフィーにより精製した。適当な画分を合わせ、真空で濃縮し、必要な生成物を無色油状物として得た（２．２ｇ、１１．３ｍｍｏｌ、収率２９．２％）。
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ ppm 5.76 (s, 2 H), 4.92 (m, 1 H), 3.94 (m, 2 H), 3.57 (m, 2 H), 2.02 (m, 2 H), 1.80 (m, 2 H)。
【０２１４】
実施例１：（２Ｒ，２’Ｒ）−ビス（（（（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）オキシ）カルボニル）オキシ）メチル）１，１’−アジポイルビス（ピロリジン−２−カルボキシレート）
【化４】
0006445046.tif 000005
【０２１５】
溶液Ａ：１，４−ジオキサン（１Ｌ）中の（２Ｒ，２’Ｒ）−１，１’−アジポイルビス（ピロリジン−２−カルボン酸）（３５ｇ、１０３ｍｍｏｌ）の撹拌懸濁液に炭酸カリウム（２９．８ｇ、２１６ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を８０℃で３０分間撹拌した。
【０２１６】
溶液Ｂ：ジオキサン（５０ｍＬ）中の炭酸クロロメチル（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（４２．０ｇ、２１６ｍｍｏｌ）の溶液にＴＢＡＩ（７．６０ｇ、２０．５７ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で１５分間撹拌した。
【０２１７】
溶液Ａに溶液Ｂを加えた。反応混合物を８０℃で１８時間撹拌した。
【０２１８】
反応混合物を濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃ（４００ｍＬ）に溶かし、ＮａＨＣＯ３の水溶液（２×１００ｍＬ）、チオ硫酸ナトリウムの水溶液（５０ｍＬ）および０．５Ｎ  ＨＣｌ（１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。黄色油状物を２−ＭｅＴＨＦ（１００ｍＬ）に可溶化し、結晶化が起こるまで超音波処理した。混合物を室温で１時間静置した。沈殿物を濾過し、混合物２−ＭｅＴＨＦ／ｉＰｒ２Ｏ  ７０／３０で洗浄し、（２Ｒ，２’Ｒ）−ビス（（（（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）オキシ）カルボニル）オキシ）メチル）１，１’−アジポイルビス（ピロリジン−２−カルボキシレート）（実施例１）を灰白色粉末として得た（４２ｇ、６４．０ｍｍｏｌ、収率６２．２％）。生成物を減圧下（５ミリバール）および３５℃で１２時間乾燥させた。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 5.88 (d, J = 5.5 Hz, 2 H), 5.73 (d, J = 5.5 Hz, 2 H), 4.87 (m, 2 H), 4.50 (m, 2 H), 3.93 (m, 4 H), 3.65 (m, 2 H), 3.55 (m, 6 H), 2.42 - 1.90 (m, 16 H), 1.84 - 1.60 (m, 8H)。
【０２１９】
回転異性体が存在するため、いくつかの小さなピークが観察された。
【０２２０】
（２Ｒ，２’Ｒ）−ビス（（（（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）オキシ）カルボニル）オキシ）メチル）１，１’−アジポイルビス（ピロリジン−２−カルボキシレート）の再結晶化
（２Ｒ，２’Ｒ）−ビス（（（（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）オキシ）カルボニル）オキシ）メチル）１，１’−アジポイルビス（ピロリジン−２−カルボキシレート）（１７０ｇ、２５９ｍｍｏｌ）を２−ＭｅＴＨＦ中に懸濁し、完全に溶解するまで９０℃に加熱した。まだ熱いうちに溶液を濾過し、室温に冷却した。沈殿物を濾過し、２−ＭｅＴＨＦ／ｉＰｒ２Ｏ  ７０／３０の混合物で洗浄し、（２Ｒ，２’Ｒ）−ビス（（（（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）オキシ）カルボニル）オキシ）メチル）１，１’−アジポイルビス（ピロリジン−２−カルボキシレート）（１３０ｇ、１９８ｍｍｏｌ、収率７６％）を灰白色結晶性固体として得た。生成物を減圧下（５ミリバール）および３５℃で１２時間乾燥させた。
LC/MS： m/z 657 [M+H]+, Rt 1.98分。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 5.87 (d, J = 5.5 Hz, 2 H), 5.71 (d, J = 5.5 Hz, 2 H), 4.86 (m, 2 H), 4.49 (m, 2 H), 3.91 (m, 4 H), 3.63 (m, 2 H), 3.54 (m, 6 H), 2.43 - 1.85 (m, 16 H), 1.84 - 1.59 (m, 8H)。
【０２２１】
回転異性体が存在するため、いくつかの小さなピークが観察された。
13C NMR (100 MHz, CDCl3) 171.69, 170.85, 153.12, 82.26, 77.36, 77.05, 76.72, 73.94, 65.02, 58.41, 46.95, 34.11, 31.47, 29.02, 24.80, 24.17。
ＨＲＭＳ：Ｃ３０Ｈ４５Ｎ２Ｏ１４  ［Ｍ＋Ｈ］＋のｍ／ｚ計算値６５７．２８７０、実測値６５７．２８８３。
【０２２２】
ＸＲＰＤデータは、ＰＡＮａｌｙｔｉｃａｌ  Ｘ’Ｐｅｒｔ  Ｐｒｏ粉末回折計、モデルＰＷ３０４０／６０において、Ｘ’Ｃｅｌｅｒａｔｏｒ検出器を使用して取得した。取得条件は以下であった：放射線：Ｃｕ  Ｋα、発生器電圧：４０ｋＶ、発生器電流：４５ｍＡ、開始角度：２．０°  ２θ、終了角度：４０．０°  ２θ、ステップサイズ：０．０１６７°  ２θ、ステップ当たりの時間：３１．７５秒。サンプル（式（Ｉ）の化合物）数ミリグラムをシリコンウエハー（ゼロバックグラウンドプレート）上に載せ、薄い粉末層を得ることによりサンプルを準備した。
【０２２３】
式（Ｉ）の化合物の結晶性固体形態のＸＲＰＤスペクトルを図１に示す。
［図１］
0006445046.tif 000006
【０２２４】
式（Ｉ）の化合物についての特徴的なＸＲＰＤ角度およびｄ−格子面間隔を表１に記載する。誤差の範囲は、各ピーク同定に対して約±０．１°２θである。ピーク強度は、選択配向のためにサンプルごとに変化し得る。
【０２２５】
ピーク位置は、Ｈｉｇｈｓｃｏｒｅソフトウェアを用いて測定した。
【０２２６】
【表１】
0006445046.tif 000007
【０２２７】
さらなる態様では、本発明は、結晶形態の式（Ｉ）の化合物を提供する。
【０２２８】
さらなる態様では、本発明は、実質的に、図１で示される通りのＸＲＰＤスペクトルによって特徴付けられる結晶性固体としての式（Ｉ）の化合物を提供する。
【０２２９】
さらなる態様では、本発明は、表１のピークを含んでなるＸＲＰＤスペクトルによって特徴付けられる結晶性固体としての式（Ｉ）の化合物を提供する。
【０２３０】
比較化合物
以下に報告するデータは、式（Ｉ）の化合物を（２Ｒ，２’Ｒ）−ビス（１−（ピバロイルオキシ）エチル）１，１’−アジポイルビス（ピロリジン−２−カルボキシレート）（比較化合物）と比較している。
【０２３１】
（２Ｒ，２’Ｒ）−ビス（１−（ピバロイルオキシ）エチル）１，１’−アジポイルビス（ピロリジン−２−カルボキシレート）（（Ｒ）−１−（６−｛（Ｒ）−２−［１−（２，２−ジメチル−プロピオニルオキシ）−エトキシカルボニル］−ピロリジン−１−イル｝−６−オキソ−ヘキサノイル）−ピロリジン−２−カルボン酸１−（２，２−ジメチル−プロピオニルオキシ）−エチルエステルとしても知られている）は、国際公開第２００３／０５１８３６号に開示されている実験プロトコールに従って合成することができる。
【０２３２】
物理化学的性質
物理的形態
式（Ｉ）の化合物は、結晶性固体として得ることができる。対照的に、比較化合物は油状物として得られる（国際公開第２００３／０５１８３６号参照）。
【０２３３】
溶解度
溶解度を決定するためのプロトコール
式（Ｉ）の化合物の既知量を好適な容器（例えば、スクリューキャップ付き透明ガラスバイアル）に秤量し、必要な媒体の既知容量を加えた（例えば、人工胃液(Simulated Gastric Fluid)ｐＨ１．６［ＳＧＦ］、摂食時における人工腸液(Simulated Fed State Intestinal Fluid)ｐＨ６．５［ＦｅＳＳＩＦ］、空腹時における人工腸液(Simulated Fasted State Intestinal Fluid)ｐＨ６．５［ＦａＳＳＩＦ］、水［精製水］、またはブリトン・ロビンソン緩衝液(Britton-Robinson buffer)）。化合物を３０秒〜１分間ボルテックス混合することにより媒体で湿潤させた。次いで、サンプルを目視観察して、溶解していない固体が残っていることを確認した。サンプルを穏やかなミキサー(例えば、ローラーミキサーなど)に移し、所望の時点に達するまで撹拌した。適当な時間に、サンプルを視覚的に再評価した。総ての固体が溶解していた場合、溶解度は＞ｘ  ｍｇ／ｍｌとして記録した。ここで、ｘは、使用した既知の重量を加えた容量で割ったものである。溶解していない固体が残っていた場合、サンプルの一部を採取し、遠心分離して、固体を除去し、透明な上清を残した。上清を好適な希釈液で容量測定希釈して、分析に適した濃度の分析サンプルを得た。次いで、この希釈サンプルを、既知の濃度の標準と比較してＨＰＬＣなどの好適な方法により分析した。次いで、化合物の溶解度を、標準の濃度、標準の相対応答（例えば、ピーク面積）および記載した分析サンプル、ならびに分析サンプルの希釈の知識を用いて計算することができる。
【０２３４】
様々な水性媒体中への式（Ｉ）の化合物の溶解度を以下の表２に示す。
【０２３５】
【表２】
0006445046.tif 000008
【０２３６】
従って、式（Ｉ）の化合物は生物学的に関連した媒体中への溶解性が高い。
【０２３７】
シトクロムｐ４５０および薬物−薬物相互作用
式（Ｉ）の化合物および比較化合物を、以下のシトクロムｐ４５０（ＣＹＰ  ４５０）アッセイにより評価した。結果を以下の表３に示す。
【０２３８】
蛍光発生基質を用いてｂａｃｔｏｓｏｍｅｓ源由来の酵素シトクロムＰ４５０（ＣＹＰ）３Ａ４、２Ｃ９、２Ｃ１９、１Ａ２および２Ｄ６における阻害を評価するために、アッセイを設計した。化合物（式（Ｉ）の化合物または比較化合物）をメタノールに１．６５ｍＭで溶解した。娘溶液は、メタノールで６６０μＭ、２６４μＭ、１０６μＭ、４２μＭ、１７μＭ、６．８μＭ、２．７μＭ、１．１μＭおよび０．４３μＭで調製した。ＮＡＤＰＨ補因子は、ＮａＨＣＯ３  ２％溶液１ｍＬ当たりグルコース−６−リン酸（７．８ｍｇ）、グルコース−６−リン酸デヒドロゲナーゼ（６単位）、ＮＡＤＰ（１．７ｍｇ）を用いて調製した。
【０２３９】
基質調製物は以下の通りであった：
・７−メトキシ−４−トリフルオロメチルクマリン−３−酢酸エチルエステル（ＦＣＡ）：アセトニトリル中１２．５ｍＭ
・エトキシレゾルフィン（ＥＲ）：アセトニトリル中０．０５ｍＭ
・４−メチルアミノメチル−７−メトキシクマリン（ＭＭＣ）：メタノール中２．５ｍＭ
・３−ブチリル−７メトキシクマリン（ＢＭＣ）：ＤＭＳＯ中２．５ｍＭ
・７−ベンジルオキシキノリン（７ＢＱ）：アセトニトリル中２．５ｍＭ
・ジエトキシフルオレセイン（ＤＥＦ）：アセトニトリル中０．１ｍＭ
【０２４０】
１ｍｌ当たりタンパク質１０ｍｇの濃度のｂａｃｔｏｓｏｍｅｓ（Ｃｙｐｅｘ供給）はリン酸バッファー（５０ｍＭ  ｐＨ７．４）で希釈した：
・ｂａｃｔｏｓｏｍｅｓ  ＣＹＰ２Ｃ９  ０．３３ｍｌと、バッファー２３．８ｍｌおよびＦＣＡ  ０．１１ｍｌ
・ｂａｃｔｏｓｏｍｅｓ  ＣＹＰ１Ａ２  ０．３３ｍｌと、バッファー２３．６ｍｌおよびＥＲ  ０．２７５ｍｌ
・ｂａｃｔｏｓｏｍｅｓ  ＣＹＰ２Ｄ６  ０．３３ｍｌと、バッファー２３．８ｍｌおよびＭＭＣ  ０．１１ｍｌ
・ｂａｃｔｏｓｏｍｅｓ  ＣＹＰ２Ｃ１９  ０．３３ｍｌと、バッファー２３．８ｍｌおよびＢＭＣ  ０．１１ｍｌ
・ｂａｃｔｏｓｏｍｅｓ  ＣＹＰ３Ａ４Ｈ  ０．３３ｍｌと、バッファー２３．６ｍｌおよび７ＢＱ  ０．２７５ｍｌ
・ｂａｃｔｏｓｏｍｅｓ  ＣＹＰ３Ａ４Ｌ  ０．３３ｍｌと、バッファー２３．６ｍｌおよびＤＥＦ  ０．２７５ｍｌ
【０２４１】
プレインキュベーションは、化合物溶液５μｌを希釈ｂａｃｔｏｓｏｍｅｓ  ２２０μｌと混合し、３７℃で１０分加温することにある。インキュベーションは、ＮＡＤＰＨ  ２５μｌを添加することにより開始した。次いで、基質代謝産物の蛍光をＳＡＦＩＲＥ機器（Ｔｅｃａｎ製）で５分読み取った：
・ＦＣＡ（２Ｃ９）：４１０ｎｍでの励起および５１０ｎｍでの発光
・ＥＲ（１Ａ２）：５３０ｎｍでの励起および５９０ｎｍでの発光
・ＭＭＣ（２Ｄ６）：４１０ｎｍでの励起および４８５ｎｍでの発光
・ＢＭＣ（２Ｃ１９）：４１０ｎｍでの励起および４６５ｎｍでの発光
・７ＢＱ（３Ａ４Ｈ）：４１０ｎｍでの励起および５３０ｎｍでの発光
・ＤＥＦ（３Ａ４Ｌ）：４８５ｎｍでの励起および５３０ｎｍでの発光
【０２４２】
化合物濃度に対する基質生成の阻害をプロットすることによりＩＣ５０値の決定が可能になった。
【０２４３】
【表３】
0006445046.tif 000009
【０２４４】
組換えヒトＣＹＰ４５０を用いた蛍光法によるスクリーニングアッセイでは、式（Ｉ）の化合物およびそのモノエステル誘導体は、主要なヒト肝臓シトクロムＰ４５０類（Ｃｙｐｅｘ）：ＣＹＰ３Ａ４−ＤＥＦおよび３Ａ４−７ＢＱの有意な阻害を示さず、ＩＣ５０＞３３μＭであった。他のアイソフォームもまた、両方の化合物によって有意に阻害を受けず、ＩＣ５０＞３３μＭ）であった。対照的に、比較化合物は、ＣＹＰ３Ａ４−ＤＥＦおよびＣＹＰ３Ａ４−７ＢＱの有意な阻害を示した。
【０２４５】
全身濃度が低くなる化合物では、腸阻害だけが関連する（ＣＹＰ３Ａは腸細胞に存在し、腸細胞初回通過に関与する）ため、ＣＹＰ３Ａ４阻害だけが関連する。
【０２４６】
物理的安定性
物理的安定性を決定するためのプロトコール：
様々なｐＨのバッファー中での化合物の物理的安定性を決定するために、アッセイを設計した。式（Ｉ）の化合物をＤＭＳＯに１ｍｇ／ｍｌで溶解した。リン酸バッファー（ＰＢＳ）は、ｐＨ６．０、７．０、７．５、８．０の４種のバッファーを得るために、Ｋ２ＨＰＯ４  ５０ｍＭ溶液およびＫＨ２ＰＯ４  ５０ｍＭ溶液を混合することにより調製した。
【０２４７】
安定性研究は、室温で行い、ＤＭＳＯ溶液８μｌをｐＨ６．０、７．０、７．５または８．０のＰＢＳ  ５０ｍＭ（１％ＤＭＳＯ）７９２μｌに添加することにより開始した。混合物７５μｌを０、１時間、２時間、４時間および２４時間に採取し、アセトニトリルを含有する内部標準２２５μｌを加えた。
【０２４８】
サンプル２μｌを、液体クロマトグラフィーシステムに注入し、Ａｓｃｅｎｔｉｓ  Ｃ１８カラム（５０×２．１ｍｍ内径、２．７μｍ）で、０．１％ギ酸水溶液（Ａ）および０．１％ギ酸アセトニトリル溶液（Ｂ）で溶出し、５０℃で０．５ｍＬ／分で、以下の溶出２分勾配：１．２分かけて５〜９５％Ｂ、０．６分かけて９５％Ｂおよびカラムの再平衡化のために０．１分、を用いた。
【０２４９】
サンプルは、エレクトロスプレー供給源を用いた、ポジティブモードでの質量分析により、以下の質量転移によって分析した：
・式（Ｉ）の化合物：６５７〜３８４
・ＣＰＨＰＣのモノエステル：４９９〜２２６
・ＣＰＨＰＣ：３４１〜２２６
［図２］
0006445046.tif 000010
【０２５０】
「ＣＰＨＰＣのモノエステル」とは、式（ＩＩＩ）の化合物（Ｒ）−１−（６−オキソ−６−（（Ｒ）−２−（（（（（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）オキシ）カルボニル）オキシ）メトキシ）カルボニル）ピロリジン−１−イル）ヘキサノイル）ピロリジン−２−カルボン酸を意味する。
【化５】
0006445046.tif 000011
【０２５１】
式（Ｉ）の化合物の加水分解を異なるｐＨ（ｐＨ６〜ｐＨ８）で評価し、結果を上記の図２に示している。式（Ｉ）の化合物は、７．５未満のｐＨでは加水分解の影響を受けにくいようであった。式（Ｉ）の化合物の２０％未満は酸性環境（ｐＨ７．０未満）で２４時間後に加水分解された。
【０２５２】
腸および肝臓ミクロソーム加水分解
腸および肝臓ミクロソームアッセイプロトコール
ミクロソームマトリックス中での化合物の安定性を決定するために、アッセイを設計した。化合物（式（Ｉ）の化合物）をＤＭＳＯに１ｍｇ／ｍｌで溶解した。娘溶液は、メタノール／水（５０／５０）で３０．３ｎｇ／ｍｌで調製した。ミクロソーム（Ｘｅｎｏｔｅｃｈ製）は、リン酸バッファー（５０ｍＭ  ｐＨ７．４）で１ｍｌ当たりタンパク質０．６２５ｍｇに希釈した。
【０２５３】
プレインキュベーションは、ミクロソーム溶液３９５μｌとＮａＨＣＯ３（２％）１００μｌとを３７℃で７分加温することからなった。インキュベーションは、娘溶液５μｌを添加することにより開始した。５０μｌアリコートの混合物を、０分、３分、６分、１２分および３０分に採取し、アセトニトリルを含有する内部標準１５０μｌで急冷した。
【０２５４】
４０００ｒｐｍで１０分遠心分離を行った後、サンプル２μｌを、液体クロマトグラフィーシステムに注入し、Ａｓｃｅｎｔｉｓ  Ｃ１８カラム（５０×２．１ｍｍ内径、２．７μｍ）において、０．１％ギ酸水溶液（Ａ）および０．１％ギ酸アセトニトリル溶液（Ｂ）で溶出し、５０℃で０．５ｍＬ／分で、以下の２分の溶出勾配：１．２分かけて５〜９５％Ｂ、０．６分かけて９５％Ｂおよびカラムの再平衡化のために０．１分、を用いた。
【０２５５】
サンプルは、エレクトロスプレー供給源を用いた、ポジティブモードでの質量分析により、以下の質量転移によって分析した：
・式（Ｉ）の化合物：６５７〜３８４
・ＣＰＨＰＣのモノエステル：４９９〜２２６
・ＣＰＨＰＣ：３４１〜２２６
【０２５６】
親の消失だけでなく、推測される代謝産物、すなわち、モノエステルおよび二酸形態の出現のパーセンテージを計算するために、対照を加えた。
［図３］
0006445046.tif 000012
【０２５７】
図３から分かるように、式（Ｉ）の化合物は、６０分後でさえも、ヒト腸ミクロソーム中で低い加水分解速度を示し、式（Ｉ）の化合物は腸内で過度に不安定ではなく、吸収することができることを示唆している。
【０２５８】
腸から、式（Ｉ）の化合物は、腸壁を通って輸送され、血流および肝臓（いずれもＳＡＰの循環部位である）に輸送される。
【０２５９】
血液加水分解を決定するためのプロトコール
新鮮な血液中での化合物の安定性を決定するために、アッセイを設計した。化合物（式（Ｉ）の化合物）をＤＭＳＯに１ｍｇ／ｍｌで溶解した。娘溶液は、ＤＭＳＯで１００μｇ／ｍｌで調製した。新鮮な血液は、等張バッファー（ｐＨ７．４）で１／２希釈した。
【０２６０】
プレインキュベーションは、血液７９２μｌを３７℃で７分加温することからなった。インキュベーションは、娘溶液５μｌを添加することにより開始した。混合物５０μｌを、０分、５分、１５分、３０分および６０分に採取した。水５０μｌをサンプルに加え、その後、アセトニトリルを含有する内部標準３００μｌで急冷した。
【０２６１】
４０００ｒｐｍで１０分遠心分離を行った後、サンプル２μｌを、液体クロマトグラフィーシステムに注入し、Ａｓｃｅｎｔｉｓ  Ｃ１８カラム（５０×２．１ｍｍ内径、２．７μｍ）で、０．１％ギ酸水溶液（Ａ）および０．１％ギ酸アセトニトリル溶液（Ｂ）で溶出し、５０℃で０．５ｍＬ／分で、２分にわたって以下の溶出勾配：１．２分かけて５〜９５％Ｂ、０．６分かけて９５％Ｂおよびカラムの再平衡化のために０．１分、を用いた。サンプルは、エレクトロスプレー供給源を用いた、ポジティブモードでの質量分析により、以下の質量転移によって分析した：
・式（Ｉ）の化合物：６５７〜３８４
・ＣＰＨＰＣのモノエステル：４９９〜２２６
・ＣＰＨＰＣ：３４１〜２２６
【０２６２】
親の消失だけでなく、推測される代謝産物、すなわち、モノエステルおよび二酸形態の出現のパーセンテージを計算するために、対照を加えた。
［図４］
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【０２６３】
ｉｎ  ｖｉｔｒｏでの肝臓ミクロソーム活性を、上に詳述したプロトコール（腸および肝臓ミクロソームアッセイプロトコール）を用いて評価した。
［図５］
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【０２６４】
ヒト肝臓ミクロソームでは、ＣＰＨＰＣへの式（Ｉ）の化合物の高い加水分解速度が観察され（３０分以内にＣＰＨＰＣへの約５０％変換が達成された）、式（Ｉ）の化合物は一度吸収されたら活性ＣＰＨＰＣに切断され得ることを示唆している。
【０２６５】
参考文献：
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