(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ｉ）０．１〜０．５ｍｇ／ｍＬ  ペグ化（pegylated）α型インターフェロン；（ｉｉ）６．０±０．５のｐＨを維持するための２０ｍＭ  酢酸塩（acetate）緩衝液系；（ｉｉｉ）５〜２０ｍＭ  Ｌ−メチオニン；（ｉｖ）１２０〜１５０ｍＭ  塩化ナトリウム；（ｖ）ペグ化α型インターフェロンをその活性の損失に抗して安定化するのに有効な０．０１〜０．０７重量パーセントの界面活性剤、及び（ｖｉ）上記収載成分の溶液剤を調製するのに十分な量の注射用水を含んでなり、
前記界面活性剤がポリソルベート２０又はポロキサマー１８８のいずれかであり、
前記ペグ化α型インターフェロンが式（Ｉ）：
【化１】
0006445169.tif 000017
［式中、ＲとＲ’はメチルであり、ＸはＮＨであり、ｎとｎ’の平均和は８５０〜１０００であり、ポリエチレングリコール単位の分子量は約４０ｋＤａであり、そしてＩＦＮαはＩＦＮα−２ａである］の生理的に活性なペグ化α型インターフェロンコンジュゲートである、安定した等張性の水溶液製剤。
【請求項２】
界面活性剤がポリソルベート２０である、請求項１の製剤。
【請求項３】
（ｉ）式（Ｉ）：
【化２】
0006445169.tif 000018
［式中、ＲとＲ’はメチルであり、ＸはＮＨであり、ｎとｎ’の平均和は８５０〜１０００であり、ポリエチレングリコール単位の分子量は約４０ｋＤａであり、そしてＩＦＮαはＩＦＮα−２ａである］のペグ化α型インターフェロン          ０．３６ｍｇ／ｍＬ
（ｉｉ）６．０±０．５のｐＨを維持するための酢酸塩緩衝液；      ２０ｍＭ
（ｉｉｉ）Ｌ−メチオニン                                        １０ｍＭ
（ｉｖ）塩化ナトリウム                                        １３７ｍＭ
（ｖ）ポリソルベート２０                                  ０．０２重量％
（ｖｉ）注射用水                                  （適量加えて１ｍＬとする）
を含んでなる、安定した水溶液製剤。
【請求項４】
（ｉ）式（Ｉ）：
【化３】
0006445169.tif 000019
［式中、ＲとＲ’はメチルであり、ＸはＮＨであり、ｎとｎ’の平均和は８５０〜１０００であり、ポリエチレングリコール単位の分子量は約４０ｋＤａであり、そしてＩＦＮαはＩＦＮα−２ａである］のペグ化α型インターフェロン          ０．３６ｍｇ／ｍＬ
（ｉｉ）６．０±０．５のｐＨを維持するための酢酸塩緩衝液；      ２０ｍＭ
（ｉｉｉ）Ｌ−メチオニン                                        １０ｍＭ
（ｉｖ）塩化ナトリウム                                        １３７ｍＭ
（ｖ）ポロキサマー１８８                                    ０．０２重量％
（ｖｉ）注射用水                                （適量加えて１ｍＬとする）
を含んでなる、安定した水溶液製剤。
【請求項５】
包装材料と請求項１〜請求項４のいずれかの製剤を含んでなり、前記包装材料は、ガラスバイアルである、製品。
【請求項６】
包装材料と請求項１〜請求項４のいずれかの製剤を含んでなり、前記包装材料は、充填済シリンジである、製品。
【請求項７】
（ｉ）０．１〜０．５ｍｇ／ｍＬ  ペグ化α型インターフェロン；（ｉｉ）６．０±０．５のｐＨを維持するための２０ｍＭ酢酸塩緩衝液系；（ｉｉｉ）１０ｍＭ  Ｌ-メチオニン；（ｉｖ）１４０ｍＭ  塩化ナトリウム；（ｖ）ペグ化α型インターフェロンをその活性の損失に抗して安定化するのに有効な０．０２重量パーセントの界面活性剤、及び（ｖｉ）水溶液剤を作製するのに十分な水を混合する工程を含んでなり、
前記界面活性剤がポリソルベート２０又はポロキサマー１８８のいずれかであり、
前記ペグ化α型インターフェロンが式（Ｉ）：
【化４】
0006445169.tif 000020
［式中、ＲとＲ’はメチルであり、ＸはＮＨであり、ｎとｎ’の平均和は８５０〜１０００であり、ポリエチレングリコール単位の分子量は約４０ｋＤａであり、そしてＩＦＮαはＩＦＮα−２ａである］の生理的に活性なペグ化α型インターフェロンコンジュゲートである、高生物活性のペグ化α型インターフェロンを有する、安定した等張性の水溶液製剤を製造する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
α型インターフェロン（好ましくは、ペグ化α型インターフェロン）、６．０±０．５のｐＨを維持するための緩衝液、界面活性剤としてのポリソルベート２０又はポロキサマー１８８、安定化剤としてのＬ−メチオニン、及び等張剤を含有して、ペグ化α型インターフェロンの高い化学的及び物理的安定性を長期の保存期間（最短でも、２〜８℃の目標保存温度で１８ヶ月、又は２５℃の上昇温度で６ヶ月）維持する、安定したベンジルアルコールフリーの水溶液製剤を開示する。
【背景技術】
【０００２】
本発明は、インターフェロンα（好ましくは、ペグ化インターフェロンα）の高い生物活性と高い化学的及び物理的安定性を、市販のバイオ医薬品で典型的に求められるように、企図される保存温度（２〜８℃）で長期間（即ち、少なくとも１８ヶ月、好ましくは２４ヶ月以上）維持する、安定した水溶液製剤に関する。物理的安定性は、可溶性の凝集分子種（例えば、サイズ排除クロマトグラフィーによって示されるようなオリゴマー形態とより高次の可溶性凝集体）と不溶性の凝集分子種（可視及び／又は半可視粒子）の形成の制御によって、濁度及び変色のような外観的な側面の制御、並びに有効成分の一定した全体濃度（例えば、逆相ＨＰＬＣによって示される）の制御によって実証される。化学的安定性は、典型的には、断片化（例えば、逆相ＨＰＬＣによって示される）、酸化（特に、メチオニン側鎖の）、アスパラギン残基の脱アミド化、アスパラギン酸残基の異性化（後半の３つは、例えば、制御されたタンパク質限定分解後のペプチドの質量分析法を使用するペプチドマッピングによって示される）によって起こる有効成分の分解の制御によって実証される。
【０００３】
インターフェロン溶液剤の製造には、物理的影響と化学的影響に対する有効成分の感受性によって引き起こされるいくつかの問題が絡むものである。他のタンパク質のように、水溶液中のインターフェロンは、タンパク質分解、酸化、ジスルフィド交換、オリゴマー化、脱アミド化、及びβ脱離のような化学的分解機序と、凝集、沈殿、及び吸着のような物理的機序を受けやすい。故に、インターフェロン溶液剤は、これらの影響に対抗するために存在する添加剤を含有するものである。
【０００４】
米国特許第４，４９６，５３７号は、インターフェロンα、ヒト血清アルブミンとアラニン又はグリシン、水、及びｐＨを６．５〜８．０で維持するための緩衝液系を含有する生物学的に安定したインターフェロンα水溶液製剤を開示する。ヒト血清アルブミン（「ＨＳＡ」）は、インターフェロンαの安定化剤として作用して、調合容器、プロセス機器、及び保存容器のステンレス鋼及びガラス表面上へのインターフェロンαのコーティング及び／又は吸着による、インターフェロンαの溶液からの損失を妨げる。インターフェロンαとＨＳＡを含有する溶液製剤は、そのような溶液剤が２〜８℃で長期間（即ち、２年より長く）保存されるときに、インターフェロンαの化学的及び生物学的安定性を維持した。しかしながら、ＨＳＡは、潜在的なウイルス汚染と（ジスルフィド形成／その遊離チオール基とのジスルフィドシャッフリングを介した）共有結合性の凝集体の形成［このことは、免疫原性を引き起こして、効力の損失又はアナフィラキシー反応さえ潜在的にもたらす場合がある］の観点から問題が多いとされてきた。
【０００５】
後になって、ＨＳＡの使用を回避して、他の補助剤、中でも、非イオン性界面活性剤を含有するインターフェロンα溶液剤が提起された（例えば、ＷＯ８９／０４１７７を参照のこと）。インターフェロンαは、高活性であり、医薬調製品においては最低濃度で存在するので、インターフェロン調製品の安定性とその有効成分の一定濃度を確保することは、特に重要である。最適な利用特性を保証するためには、インターフェロン溶液剤の賦形剤を多数の潜在的に好適な薬剤より慎重に選択しなければならず、それらが互いに調和しなければならないことがわかった。例えば、インターフェロンα２ａのガラス表面上での吸着は、ｐＨ５〜６で最大になるので、このｐＨは、原理的には、好ましくないと思われよう。一方、このｐＨでは、共有結合性の分解反応が最低値で進行する。市販のＨＳＡ安定化溶液剤は、ｐＨ７を有する。インターフェロン溶液剤の利用特性は、いくつかの非相関因子によって、予測不能なやり方で影響を受けるわけである。
【０００６】
米国特許第５，７６２，９２３号は、最適の利用特性（即ち、申告量の有効成分の保存安定性とバイオアベイラビリティ）を明示する、インターフェロンα、非イオン性界面活性剤、ｐＨを４．５〜６．０に調整するための緩衝液、ベンジルアルコール、及び、任意選択的に等張化剤を含有する、ＨＳＡフリーのインターフェロン−α水溶液製剤を開示する。より具体的には、米国特許第５，７６２，９２３号は、式（Ｉ）：
【０００７】
【化１】
0006445169.tif 000002
【０００８】
のペグ化インターフェロンα−２ａ、１０ｍｇ／ｍｌの量のベンジルアルコール、最終のｐＨ６．０へ調整された緩衝液としての酢酸ナトリウム／酢酸、等張剤としての塩化ナトリウム、及び界面活性剤としてのポリソルベート８０を含有する、インターフェロン水溶液製剤を開示する。米国特許第５，７６２，９２３号に示されるデータからは、この溶液剤をベンジルアルコールを添加して調製すれば、溶液剤の許容され得る安定性が達成されることが明白である。
【０００９】
しかしながら、（ペグ化）α型インターフェロンを製造するための製造法といった数多くの創薬及び生物工学上の応用においては、流体の移動の間に流体完全性（即ち、定性的及び定量的な組成、並びに全体容量）を維持することがきわめて重要である。例えば、管壁への移送を通した、流体又はその１つ又は数種の成分の損失は、最終の製品結果において非一貫性を引き起こす可能性がある。ベンジルアルコールは、様々な管材によって、そして特に多くの医薬品製造施設において広く使用されているシリコーンゴム製の管によって吸収されることが知られている。
【００１０】
故に、製造法の視点からすれば、ベンジルアルコールを回避することが望ましいであろう。しかしながら、ベンジルアルコールフリーのα型インターフェロン、好ましくはペグ化α型インターフェロン製剤であっても、少なくとも同等の保存安定性を提供すべきである。従って、高い化学的、高い物理的安定性と高いインターフェロンα（好ましくは、ペグ化インターフェロンα）活性を水溶液製剤において長期の保存期間維持する一方で、ベンジルアルコールを含まない溶液製剤を入手するために、既存のα型インターフェロン（好ましくは、ペグ化α型インターフェロン）の溶液製品を再製剤化することへのニーズがある。
【発明の概要】
【００１１】
本発明は、α型インターフェロン（好ましくは、ペグ化α型インターフェロン）の製剤において安定化剤として従来使用されたベンジルアルコールを、該製剤がポリソルベート２０又はポロキサマー１８８を界面活性剤としてさらに含むという条件でＬ−メチオニンに置き換えることによって、回避することが可能であるという驚くべき知見に基づく。例えば、Ｐｅｇａｓｙｓ（登録商標）（４０ｋＤａの分岐鎖ペグ化インターフェロンα２ａ）の市販製剤においてベンジルアルコールをＬ−メチオニンに置き換えるだけでは、この水溶液製剤において、市販のＰｅｇａｓｙｓ（登録商標）製剤によって提供されるような長期の保存期間に、より低い化学的、物理的安定性とより低いペグ化インターフェロンα活性をもたらす。しかしながら、Ｌ−メチオニンをポリソルベート２０又はポロキサマー１８８のいずれかと組み合わせると、同等の安定性がある製剤がもたらされるのである。
【００１２】
いかなる理論によっても拘束される意図無く言えば、本発明による製剤中の界面活性剤がより安定しているように見えるのは、ＰＳ２０がＰＳ８０より分解しにくいためであって、そのことが結果的に得られる製剤において酸化ストレスの低下をもたらすのだろう。Ｌ−メチオニンは、（ベンジルアルコールとは対照的に）過酸化物を形成しないので、本発明による製剤は、不活性気体（例えば、窒素）の上乗せ無しに保存することができて、それ故に改善された保存安定性を有する。さらに、本医薬品の製造法は、Ｌ−メチオニンが（ベンジルアルコールとは対照的に）製造法において典型的に使用されるプラスチック又はエラストマー（例えば、シリコーン管、ＰＴＦＥ管、プラスチック継手のような）によって容易に吸収されることもそれらへ容易に吸着することもなく、それが蒸発することもないので、簡略化される。従って、ライン停止はさほど重要な課題ではなくて、フラッシュ量（flush volumes）又はライン停止後に処分される医薬品単位の数を抑えることができる。本発明による製剤はまた、Ｌ−メチオニンが蒸発することも、エラストマー容器の閉止部品（例えば、ゴム製のプランジャーストッパーのような）に浸透することもなくて、それらによって吸収されることもそれらへ吸着することもないので、医薬品組成のより良好な安定性をもたらす。
【００１３】
本発明は、α型インターフェロンの高い生物活性を維持して、ベンジルアルコールを含まない、安定した等張性の水溶液製剤を提供し、該製剤は：
（ｉ）０．１〜０．５ｍｇ／ｍＬ（好ましくは、０．１８、０．２７、又は０．３６ｍｇ／ｍＬ）のα型インターフェロン、好ましくはペグ化α型インターフェロン；
（ｉｉ）６．０±０．５のｐＨを維持するための２０ｍＭ  酢酸塩（好ましくは、酢酸ナトリウム）緩衝液系；
（ｉｉｉ）５〜２０ｍＭ（好ましくは、１０ｍＭ）Ｌ−メチオニン；
（ｉｖ）１２０〜１５０ｍＭ（好ましくは、１３０〜１４０ｍＭ又は１３７ｍＭ）塩化ナトリウム；
（ｖ）α型インターフェロン、好ましくはペグ化α型インターフェロンをその活性の損失に抗して安定化するのに有効な０．０１〜０．０７（好ましくは、０．０２）重量パーセントの界面活性剤；及び
（ｖｉ）上記収載成分の溶液剤を調製するのに十分な量の注射用水を含んでなる。
【００１４】
本発明の代替態様において、界面活性剤は、ポリソルベート２０又はポロキサマー１８８のいずれかである。１つの態様において、界面活性剤は、ポリソルベート２０である。
本発明のさらなる態様において、ペグ化α型インターフェロンは、式（Ｉ）：
【００１５】
【化２】
0006445169.tif 000003
【００１６】
［式中、ＲとＲ’はメチルであり、ＸはＮＨであり、ｎとｎ’の平均和は８５０〜１０００であり、そしてポリエチレングリコール単位の分子量は約４０ｋＤａである］の生理的に活性なペグ化α型インターフェロンコンジュゲートである。
【００１７】
なお別の態様において、上記のペグ化α型インターフェロンは、α−２ａインターフェロンである。
本発明は、
（ｉ）式（Ｉ）：
【００１８】
【化３】
0006445169.tif 000004
【００１９】
［式中、ＲとＲ’はメチルであり、ＸはＮＨであり、ｎとｎ’の平均和は８５０〜１０００であり、ポリエチレングリコール単位の分子量は約４０ｋＤａであり、そしてＩＦＮαはＩＦＮα−２ａである］のペグ化α型インターフェロン          ０．１８ｍｇ／ｍＬ
（ｉｉ）６．０±０．５のｐＨを維持するための酢酸塩、好ましくは酢酸ナトリウム緩衝液                                                            ２０ｍＭ
（ｉｉｉ）Ｌ−メチオニン                                        １０ｍＭ
（ｉｖ）塩化ナトリウム                                        １３７ｍＭ
（ｖ）ポリソルベート２０                                  ０．０２重量％
（ｖｉ）注射用水                                  （適量加えて１ｍＬとする）
を含んでなる、安定した水溶液製剤をさらに提供する。
【００２０】
本発明はまた、
（ｉ）式（Ｉ）：
【００２１】
【化４】
0006445169.tif 000005
【００２２】
［式中、ＲとＲ’はメチルであり、ＸはＮＨであり、ｎとｎ’の平均和は８５０〜１０００であり、ポリエチレングリコール単位の分子量は約４０ｋＤａであり、そしてＩＦＮαはＩＦＮα−２ａである］のペグ化α型インターフェロン          ０．１８ｍｇ／ｍＬ
（ｉｉ）６．０±０．５のｐＨを維持するための酢酸塩、好ましくは酢酸ナトリウム緩衝液                                                            ２０ｍＭ
（ｉｉｉ）Ｌ−メチオニン                                        １０ｍＭ
（ｉｖ）塩化ナトリウム                                        １３７ｍＭ
（ｖ）ポロキサマー１８８                                    ０．０２重量％
（ｖｉ）注射用水                                  （適量加えて１ｍＬとする）
を含んでなる、安定した水溶液製剤を提供する。
【００２３】
本発明は、
（ｉ）式（Ｉ）：
【００２４】
【化５】
0006445169.tif 000006
【００２５】
［式中、ＲとＲ’はメチルであり、ＸはＮＨであり、ｎとｎ’の平均和は８５０〜１０００であり、ポリエチレングリコール単位の分子量は約４０ｋＤａであり、そしてＩＦＮαはＩＦＮα−２ａである］のペグ化α型インターフェロン          ０．２７ｍｇ／ｍＬ
（ｉｉ）６．０±０．５のｐＨを維持するための酢酸塩、好ましくは酢酸ナトリウム緩衝液                                                            ２０ｍＭ
（ｉｉｉ）Ｌ−メチオニン                                        １０ｍＭ
（ｉｖ）塩化ナトリウム                                        １３７ｍＭ
（ｖ）ポリソルベート２０                                    ０．０２重量％
（ｖｉ）注射用水                                  （適量加えて１ｍＬとする）
を含んでなる、なお別の安定した水溶液製剤を提供する。
【００２６】
本発明は、
（ｉ）式（Ｉ）：
【００２７】
【化６】
0006445169.tif 000007
【００２８】
［式中、ＲとＲ’はメチルであり、ＸはＮＨであり、ｎとｎ’の平均和は８５０〜１０００であり、ポリエチレングリコール単位の分子量は約４０ｋＤａであり、そしてＩＦＮαはＩＦＮα−２ａである］のペグ化α型インターフェロン          ０．２７ｍｇ／ｍＬ
（ｉｉ）６．０±０．５のｐＨを維持するための酢酸塩、好ましくは酢酸ナトリウム緩衝液                                                            ２０ｍＭ
（ｉｉｉ）Ｌ−メチオニン                                        １０ｍＭ
（ｉｖ）塩化ナトリウム                                        １３７ｍＭ
（ｖ）ポロキサマー１８８                                    ０．０２重量％
（ｖｉ）注射用水                                  （適量加えて１ｍＬとする）
を含んでなる、なお別の安定した水溶液製剤を提供する。
【００２９】
本発明は、
（ｉ）式（Ｉ）：
【００３０】
【化７】
0006445169.tif 000008
【００３１】
［式中、ＲとＲ’はメチルであり、ＸはＮＨであり、ｎとｎ’の平均和は８５０〜１０００であり、ポリエチレングリコール単位の分子量は約４０ｋＤａであり、そしてＩＦＮαはＩＦＮα−２ａである］のペグ化α型インターフェロン          ０．３６ｍｇ／ｍＬ
（ｉｉ）６．０±０．５のｐＨを維持するための酢酸塩、酢酸ナトリウム緩衝液  ２０ｍＭ  （ｉｉｉ）Ｌ−メチオニン                                  １０ｍＭ
（ｉｖ）塩化ナトリウム                                        １３７ｍＭ
（ｖ）ポリソルベート２０                                    ０．０２重量％
（ｖｉ）注射用水                                  （適量加えて１ｍＬとする）
を含んでなる、なお別の安定した水溶液製剤を提供する。
【００３２】
本発明は、
（ｉ）式（Ｉ）：
【００３３】
【化８】
0006445169.tif 000009
【００３４】
［式中、ＲとＲ’はメチルであり、ＸはＮＨであり、ｎとｎ’の平均和は８５０〜１０００であり、ポリエチレングリコール単位の分子量は約４０ｋＤａであり、そしてＩＦＮαはＩＦＮα−２ａである］のペグ化α型インターフェロン          ０．３６ｍｇ／ｍＬ
（ｉｉ）６．０±０．５のｐＨを維持するための酢酸塩、好ましくは酢酸ナトリウム緩衝液                                                            ２０ｍＭ
（ｉｉｉ）Ｌ−メチオニン                                        １０ｍＭ
（ｉｖ）塩化ナトリウム                                        １３７ｍＭ
（ｖ）ポロキサマー１８８                                    ０．０２重量％
（ｖｉ）注射用水                                  （適量加えて１ｍＬとする）
を含んでなる、なお別の安定した水溶液製剤を提供する。
すなわち、本明細書は以下の発明の開示を包含する：
［１］（ｉ）０．１〜０．５ｍｇ／ｍＬ  α型インターフェロン、好ましくはペグ化（pegylated）α型インターフェロン；（ｉｉ）６．０±０．５のｐＨを維持するための２０ｍＭ  酢酸塩（acetate）緩衝液系；（ｉｉｉ）５〜２０ｍＭ  Ｌ−メチオニン；（ｉｖ）１２０〜１５０ｍＭ  塩化ナトリウム；（ｖ）α型インターフェロン、好ましくはペグ化α型インターフェロンをその活性の損失に抗して安定化するのに有効な０．０１〜０．０７重量パーセントの界面活性剤、及び（ｖｉ）上記収載成分の溶液剤を調製するのに十分な量の注射用水を含んでなる、安定した等張性の水溶液製剤。
［２］界面活性剤がポリソルベート２０又はポロキサマー１８８のいずれかである、［１］の組成物。
［３］界面活性剤がポリソルベート２０である、［１］の組成物。
［４］ペグ化α型インターフェロンが式（Ｉ）：
【化９】
0006445169.tif 000010
［式中、ＲとＲ’はメチルであり、ＸはＮＨであり、ｎとｎ’の平均和は８５０〜１０００であり、ポリエチレングリコール単位の分子量は約４０ｋＤａであり、そしてＩＦＮαはＩＦＮα−２ａである］の生理的に活性なペグ化α型インターフェロンコンジュゲートである、［１］の組成物。
［５］（ｉ）式（Ｉ）：
【化１０】
0006445169.tif 000011
［式中、ＲとＲ’はメチルであり、ＸはＮＨであり、ｎとｎ’の平均和は８５０〜１０００であり、ポリエチレングリコール単位の分子量は約４０ｋＤａであり、そしてＩＦＮαはＩＦＮα−２ａである］のペグ化α型インターフェロン          ０．３６ｍｇ／ｍＬ
（ｉｉ）６．０±０．５のｐＨを維持するための酢酸塩緩衝液；      ２０ｍＭ
（ｉｉｉ）Ｌ−メチオニン                                        １０ｍＭ
（ｉｖ）塩化ナトリウム                                        １３７ｍＭ
（ｖ）ポリソルベート２０                                  ０．０２重量％
（ｖｉ）注射用水                                  （適量加えて１ｍＬとする）
を含んでなる、安定した水溶液製剤。
［６］（ｉ）式（Ｉ）：
【化１１】
0006445169.tif 000012
［式中、ＲとＲ’はメチルであり、ＸはＮＨであり、ｎとｎ’の平均和は８５０〜１０００であり、ポリエチレングリコール単位の分子量は約４０ｋＤａであり、そしてＩＦＮαはＩＦＮα−２ａである］のペグ化α型インターフェロン          ０．３６ｍｇ／ｍＬ
（ｉｉ）６．０±０．５のｐＨを維持するための酢酸塩緩衝液；      ２０ｍＭ
（ｉｉｉ）Ｌ−メチオニン                                        １０ｍＭ
（ｉｖ）塩化ナトリウム                                        １３７ｍＭ
（ｖ）ポロキサマー１８８                                    ０．０２重量％
（ｖｉ）注射用水                                （適量加えて１ｍＬとする）
を含んでなる、安定した水溶液製剤。
［７］包装材料と［１］〜［６］のいずれかの製剤を含んでなり、前記包装材料は、ガラスバイアルである、製品。
［８］包装材料と［１］〜［６］のいずれかの製剤を含んでなり、前記包装材料は、充填済シリンジである、製品。
［９］（ｉ）０．１〜０．５ｍｇ／ｍＬ  α型インターフェロン、好ましくはペグ化α型インターフェロン；（ｉｉ）６．０±０．５のｐＨを維持するための２０ｍＭ酢酸塩緩衝液系；（ｉｉｉ）１０ｍＭ  Ｌ-メチオニン；（ｉｖ）１４０ｍＭ  塩化ナトリウム；（ｖ）α型インターフェロン、好ましくはペグ化α型インターフェロンをその活性の損失に抗して安定化するのに有効な０．０２重量パーセントの界面活性剤、及び（ｖｉ）水溶液剤を作製するのに十分な水を混合する工程を含んでなる、高生物活性のα型インターフェロン、好ましくはペグ化α型インターフェロンを有する、安定した等張性の水溶液製剤を製造する方法。
【図面の簡単な説明】
【００３５】
【図１】図１は、サイズ排除クロマトグラフィーによる純度を示す（５℃保存でのモノマー含量）。
【図２】図２は、サイズ排除クロマトグラフィーによる純度を示す（２５℃保存でのモノマー含量）。
【図３】図３は、逆相ＨＰＬＣによる純度を示す（５℃保存での非酸化ＡＰＩの含量。
【図４】図４は、逆相ＨＰＬＣによる純度を示す（２５℃保存での非酸化ＡＰＩの含量）。
【発明を実施するための形態】
【００３６】
我々は、ベンジルアルコールを含有しないが、ペグ化α型インターフェロンの高い化学的、生物学的、及び物理的安定性を長期間維持する、ペグ化α型インターフェロンの水溶液製剤を我々が開発することを可能にする、特定量の特定成分セットを選択した。
【００３７】
本発明の製剤に関連して本明細書において使用される「ベンジルアルコールを含まない」又は「ベンジルアルコールフリー」という用語は、本発明の溶液製剤の製造においてベンジルアルコールが使用されないことを意味する。
【００３８】
本発明の製剤に適した緩衝液系は、この水溶液製剤のｐＨを５．５〜６．５、好ましくは５．８〜６．２の範囲に、そして最も好ましくは６．０に維持するものである。酢酸ナトリウム／酢酸の緩衝液系の使用が好ましい。所望される５．５〜６．５のｐＨ範囲を維持する他の好適な緩衝液系には、クエン酸ナトリウム／クエン酸と二塩基性リン酸ナトリウム及び一塩基性リン酸ナトリウムが含まれる。本発明において有用な等張剤は、本発明の製剤をヒト血清と等浸透圧性にすることが可能などの薬剤でもよい。典型的に好適な等張剤には、塩化ナトリウム、マンニトール、グリシン、グルコース、及びソルビトールが含まれる。塩化ナトリウムの等張剤としての使用が好ましい。
【００３９】
ソルビタンモノ−９−オクタデセノエートポリ（オキシ−１，２−エタンジイル）誘導体のポリソルベート２０は、ペグ化α型インターフェロンを含有する当該（indictable）製剤を作製するのに使用される機器のステンレス鋼及びガラス表面上への４０ｋＤａ分岐鎖ペグ化α−２ａインターフェロン（Ｐｅｇａｓｙｓ（登録商標））のようなペグ化α型インターフェロンタンパク質の吸着を防ぐための界面活性剤として有用である。ポリソルベート２０の量は、０．１〜０．５ｍｇ／ｍＬのペグ化α型インターフェロンを含有する製剤では、０．００５〜０．５重量パーセントの範囲にあり、好ましくは０．０２重量パーセントである。驚くべきことに、我々は、ポリソルベート２０がペグ化α−２ａインターフェロンの損失を防いで、ペグ化α−２ａインターフェロンの全身送達を生物活性の損失無く可能にすることを見出した。本発明の製剤の開発の経過において、我々は、驚くべきことに、Ｌ−メチオニン（ベンジルアルコールに置き換えて）の存在下において、ポリソルベート２０が他のソルビタンモノ−９−オクタデセノエートポリ（オキシ−１，２−エタンジイル）誘導体の界面活性剤（例、ポリソルベート８０）に比較して、より優れた化学的及び生物学的安定性をペグ化α−２ａインターフェロンへもたらすことを見出した。
【００４０】
ポリソルベート２０の代わりにポロキサマー１８８を同じ濃度で使用するときにも、同様の化学的及び生物学的安定性が達成される。
本発明の製剤において有用なペグ化α型インターフェロンの量は、０．１〜０．５ｍｇ／ｍＬの範囲にある。本明細書に使用されるように、「ペグ化α型インターフェロン」という用語は、１以上のポリエチレングリコール（ＰＥＧ）分子と１以上のα型インターフェロン分子の共有結合性コンジュゲートを意味する。本発明の製剤における使用に好ましいコンジュゲートは、インターフェロン１分子につき１〜４のＰＥＧ分子を有しており、より好ましくは、このコンジュゲートは、単一のＰＥＧ分子と単一のインターフェロン分子の間のコンジュゲートである。ペグ化インターフェロンは、単一の位置異性体又はコンジュゲート位置異性体の混合物を含み得て、例えば、ＰＥＧ分子は、個別のインターフェロン分子上の異なるアミノ酸残基へ共有結合する。例えば、米国特許５，９５１，９７４号は、ＰＥＧ−インターフェロンαコンジュゲートの位置異性体の混合物の製造について記載しており、ここでは、その異性体の一部がＰＥＧとインターフェロン分子のヒスチジン残基の間のコンジュゲートであって、当該混合物中の他の異性体がＰＥＧとインターフェロンのリジン残基の間のコンジュゲートであって、なお他の異性体がＰＥＧとインターフェロン分子のアミノ末端の間のコンジュゲートである。
【００４１】
このコンジュゲート中のＰＥＧ分子は、異なる分子量を有し得る。好ましくは、ＰＥＧ分子は、４０，０００の平均分子量を有する。特に好ましい態様において、当該コンジュゲートは、分岐鎖ＰＥＧ４００００（即ち、これは、コンジュゲート中のＰＥＧ分子が約４０，０００の平均分子量を有することを意味する）を使用して製造される。
【００４２】
本発明において使用されるペグ化α型インターフェロンコンジュゲートのインターフェロン部分は、当業者に知られているどの天然に存在する又は組換え型のインターフェロンαでもよい。本発明の製剤において使用し得る天然及び組換え型のα−インターフェロンには、インターフェロンα−ｎ１（例、Ｓｕｒｎｉｆｅｒｏｎ（登録商標）、Ｓｕｒｎｉｔｏｍｏ（登録商標））、インターフェロンα−ｎ３、インターフェロンα−２ａ（Ｒｏｆｅｒｏｎ（登録商標）Ａ、ホフマン・ラ・ロシュ社）、インターフェロンα−２ｂ（ＩＮＴＲＯＮ（登録商標）Ａ、シェリング・プラウ社）、インターフェロンα−２ｃ（Ｂｅｒｏｆｏｒ（登録商標）、ベーリンガー・インゲルハイム社）、及びコンセンサスインターフェロン（Ｉｎｆｅｒｇｅｎ（登録商標）、InterMune 社）が含まれる。好ましいインターフェロンは、インターフェロンα−２ａとインターフェロンα−２ｂである。最も好ましくは、インターフェロンα−２ａを使用して、本発明の製剤の有効成分を製造する。
【００４３】
ＰＥＧとインターフェロン分子のコンジュゲーションは、例えば、米国特許第５，６１２，４６０号、第５，７１１，９４４号、及び第５，９５１，９７４号に記載されるような、当業者に知られたどのコンジュゲーション反応によっても実施してよい。好ましくは、ＰＥＧ分子は、インターフェロン分子へウレタン結合で共有結合させる。
【００４４】
本発明の製剤における使用に最も好ましいペグ化α型インターフェロンは、分岐鎖ＰＥＧ４００００−インターフェロンα−２ａである。
本発明の製剤の製造に使用される水は、好ましくは注射用水である。
【００４５】
ベンジルアルコールを安定化剤として利用せずとも、長期の保存期間にわたって、ペグ化α型インターフェロンの高い化学的安定性と高い物理的安定性だけでなく高い生物活性も維持する、本発明の水溶液製剤の開発の経過の間に、我々は、Ｌ−メチオニンを安定化剤としてベンジルアルコールに成功裡に置き換えることが可能であるのは、ポリソルベート２０又はポロキサマー１８８のいずれかを界面活性剤として使用する場合だけであることを特定した。
【００４６】
ペグ化α型インターフェロン製剤は、腎細胞癌、ＡＩＤＳ関連カポシ肉腫、慢性及び急性Ｂ型肝炎、慢性及び急性非Ａ型、非Ｂ型／Ｃ型肝炎といった、多様な病態の治療に有用である。本発明の製剤は、好ましくは注射可能な水溶液剤として、上記病態を治療するのに有用である。
【実施例】
【００４７】
以下の非限定的な実施例は、ペグ化α型インターフェロンの水溶液剤の製造について説明する。
製剤の製造及び組成
市販のＰｅｇａｓｙｓ医薬原料（１〜２ｍｇ／ｍＬ  ペグインターフェロンα−２ａ、２０ｍＭ  酢酸／酢酸ナトリウム（ｐＨ６．０）、５０ｍＭ  塩化ナトリウム）に異なる濃度の賦形剤ストック溶液を注入（spiked）すると同時に希釈して、０．２７ｍｇ／ｍＬ  ペグインターフェロンα−２ａ、２０ｍＭ  酢酸／酢酸ナトリウム（ｐＨ６．０）、１３７ｍＭ  ＮａＣｌ、下記に指定するレベルのＬ−メチオニン、０．２ｍｇ／ｍＬ  ポリソルベート２０又はポロキサマー１８８を含有する最終の医薬品製剤を入手した。対照として、現行のＰｅｇａｓｙｓ医薬品市販製剤（０．２７ｍｇ／ｍＬ  ペグインターフェロンα−２ａ、２０ｍＭ  酢酸／酢酸ナトリウム（ｐＨ６．０）、１３７ｍＭ  ＮａＣｌ、１０ｍｇ／ｍＬベンジルアルコール、０．０５ｍｇ／ｍＬ  ポリソルベート８０）を同じ手順に従って調合した。撹拌による慎重な均質化の後で、０．２２μｍ親水性ＰＶＤＦフィルターを使用して、すべての最終バルク溶液剤を滅菌濾過した。安定性評価のために、これらの溶液剤を予めシリコン処理した滅菌ガラスシリンジへ無菌的に充填して（最終容量：１ｍＬ）、滅菌ゴム栓で密封した。この試料を５℃と２５℃でそれぞれ保存して、市販医薬品用に確立された分析手順（サイズ排除クロマトグラフィーと逆相ＨＰＬＣ）を使用して、下記指定の時点で純度を分析した。
【００４８】
安定性データ
上記製剤の異なる温度での保存の間の純度を示すために適用された分析法は、現行のベンジルアルコール含有製剤（Ｆ２０）に比較して、この新しい製剤（Ｆ１とＦ２）がごく同様〜ほとんど同一の安定性の特性を有することを明らかにする。Ｌ−メチオニンもベンジルアルコールも含有しないＦ１７は、このＡＰＩを酸化から保護するには、抗酸化特性のある薬剤の存在が求められることを明示する。
【００４９】
Ｆ１：１０ｍＭ  Ｌ−メチオニンを含有するポリソルベート２０含有製剤、Ｆ２：１０ｍＭ  Ｌ−メチオニンを含有するポロキサマー１８８含有製剤、Ｆ１７：Ｌ−メチオニン無しのＦ２同等品、Ｆ２０：現行製剤（２０ｍＭ  酢酸／酢酸Ｎａ（ｐＨ６．０）、１３７ｍＭ  ＮａＣｌ、１０ｍｇ／ｍＬ  ベンジルアルコール、０．０５ｍｇ／ｍＬ  ポリソルベート８０）。
【００５０】
図表１は、サイズ排除クロマトグラフィーによる純度を示す（５℃保存でのモノマー含量）。
【００５１】
【表１】
0006445169.tif 000013
【００５２】
図表２は、サイズ排除クロマトグラフィーによる純度を示す（２５℃保存でのモノマー含量）。
【００５３】
【表２】
0006445169.tif 000014
【００５４】
図表３は、逆相ＨＰＬＣによる純度を示す（５℃保存での非酸化ＡＰＩの含量）。
【００５５】
【表３】
0006445169.tif 000015
【００５６】
図表４は、逆相ＨＰＬＣによる純度を示す（２５℃保存での非酸化ＡＰＩの含量。
【００５７】
【表４】
0006445169.tif 000016
【図１】
0006445169.tif 000021
【図２】
0006445169.tif 000022
【図３】
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【図４】
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