(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
分析物の存在または量を検出するための分析を行なうための、免疫学的検定用試験スライドであって、
キャビティを規定するハウジング、および
分析物を含む流体サンプルあるいは１つまたはそれ以上の液体試薬を受けるために、ハウジングのキャビティ内に配置される流体流動マトリクスを備え、
ハウジングは、光透過性の材料で形成されるボトム側、および流体流動マトリクスを受容するキャビティを少なくとも部分的に規定するための凹部部分、前部辺、前部辺に対向して位置する後部辺および対向する側面辺を含む上側を含み、キャビティは、前部辺および後部辺の間でかつハウジングの対向する側面辺の間に位置され、
試験スライドはさらに、
ボトム側に対向するハウジング上に位置され、流体流動マトリクスに整列しかつそれを覆う上薄膜部分を備え、上薄膜部分は、それの厚さを貫通して形成される開口を有し、その開口は、ハウジングのキャビティに連通しつかつ分析物を含む流体サンプルあるいは１つまたはそれ以上の液体試薬を受けるように設けられ、流体流動マトリクスは、流体サンプルあるいは１つまたはそれ以上の液体試薬をそれの上に受けるように、ハウジング内に配置されかつ上薄膜部分に形成される開口に整列して位置され、
ハウジングの上側は少なくとも１つの嵌め込み棚を含み、少なくとも１つの嵌め込み棚は流体流動マトリクスを受容する凹部部分に隣接して位置され、少なくとも１つの嵌め込み棚は、上薄膜部分の裏面表面の一部がそれの上に載る上表面を有する、免疫学的検定用試験スライド。
【請求項２】
ハウジングは台形形状を有し、ハウジングの前部辺および後部辺は互いにほぼ平行であり、後部辺は前部辺より長い、請求項１記載の免疫学的検定用試験スライド。
【請求項３】
上薄膜部分はポリスチレン材料で形成される、請求項１記載の免疫学的検定用試験スライド。
【請求項４】
上薄膜部分は０.２ミリの厚さを有する、請求項１記載の免疫学的検定用試験ス
ライド。
【請求項５】
上薄膜部分を貫通して形成される開口は、円形または楕円形のどちらかである、請求項１記載の免疫学的検定用試験スライド。
【請求項６】
上薄膜部分を貫通して形成される開口は、６ミリおよび１２ミリの間のその短軸に沿う幅を有する楕円形または６ミリおよび１２ミリの間の直径を有する円形のどちらかである、請求項１記載の免疫学的検定用試験スライド。
【請求項７】
流体流動マトリクスは、プラスチックバインダを含むグラスファイバーベースの材料で形成される、請求項１記載の免疫学的検定用試験スライド。
【請求項８】
ハウジングはポリスチレン材料で形成される、請求項１記載の免疫学的検定用試験スライド。
【請求項９】
ハウジングの上側はその上に位置されたバーコードを含む、請求項１記載の免疫学的検定用試験スライド。
【請求項１０】
ハウジングはキャビティを囲繞する側壁を含み、側壁の少なくとも一部は流体流動マトリクスから横方向に間隔を隔ててそれらの間に流体サンプルあるいは１つまたはそれ以上の液体試薬の超過した量を受けるチャネルを規定する、請求項１記載の免疫学的検定用試験スライド。
【請求項１１】
分析物の存在または量を検出するための分析を行なうための、免疫学的検定用試験スライドであって、
全体形状が台形であり、前部、後部、第１および第２の側面部およびボトム側を含み、前部および後部は互いに平行であり、後部が前部より長く、キャビティを規定するハウジング、および
ハウジングのキャビティ内に配置された吸収性の材料を備え、
ハウジングは、光透過性の材料で形成されるボトム側、および吸収性の材料を受容するキャビティを少なくとも部分的に規定するための凹部部分、前部辺、前部辺に対向して位置する後部辺および対向する側面辺を含む上側を含み、キャビティは、前部辺および後部辺の間でかつハウジングの対向する側面辺の間に位置され、
試験スライドはさらに、
ボトム側に対向するハウジング上に位置され、吸収性の材料に整列しかつそれを覆う上薄膜部分を備え、上薄膜部分は、それの厚さを貫通して形成される開口を有し、その開口は、ハウジングのキャビティに連通しつかつ分析物を含む流体サンプルあるいは１つまたはそれ以上の液体試薬を受けるように設けられ、吸収性の材料は、流体サンプルあるいは１つまたはそれ以上の液体試薬をそれの上に受けるように、ハウジング内に配置されかつ上薄膜部分に形成される開口に整列して位置され、
ハウジングの上側は少なくとも１つの嵌め込み棚を含み、少なくとも１つの嵌め込み棚は吸収性の材料を受容する凹部部分に隣接して位置され、少なくとも１つの嵌め込み棚は、上薄膜部分の裏面表面の一部がそれの上に載る上表面を有する、免疫学的検定用試験スライド。
【請求項１２】
分析物の存在または量を検出するための分析を行なうための、免疫学的検定用試験スライドであって、
カバー部分およびカバー部分に接合されるボトム部分を有し、カバー部分およびボトム部分の間に内部キャビティを規定し、カバー部分はそれの厚さを貫通して形成された上開口を有し、上開口はハウジングの内部キャビティと流体連通しかつ分析物を含む流体サンプルあるいは１つまたはそれ以上の液体試薬を受けるように設けられている、ハウジング、および
ハウジング内に配置されかつカバー部分に形成された上開口と整列して位置され、それの上に流体サンプルあるいは１つまたはそれ以上の液体試薬を受ける流体流動マトリクスを備え、
ハウジングは、内部キャビティを囲繞する側壁を含み、側壁の少なくとも一部は、それらの間に流体サンプルあるいは１つまたはそれ以上の液体試薬の超過した量を受けるためのチャネルを規定するように、流体流動マトリクスから横方向に間隔を隔てられ、
カバー部分はハウジングのボトム部分に固着される薄膜として形成される、免疫学的検定用試験スライド。
【請求項１３】
カバー部分の上開口と整列した流体流動マトリクスの上に位置された少なくとも１つの固定化された分析物捕捉試薬をさらに備える、請求項１２記載の免疫学的検定用試験スライド。
【請求項１４】
ハウジングの内部キャビティ内のカバー部分およびボトム部分の間に延びる少なくとも１つの支柱をさらに備える、請求項１２記載の免疫学的検定用試験スライド。
【請求項１５】
流体流動マトリクスは少なくとも１つの支柱と整列して位置されてそれの厚さを貫通して形成されたた少なくとも１つの開口を含み、少なくとも１つの支柱は、流体流動マトリクス中の少なくとも１つの開口を通過する、請求項１４記載の免疫学的検定用試験スライド。
【請求項１６】
ハウジングの内部のキャビティの内のカバー部分およびボトム部分の間に延びる複数の支柱をさらに備え、複数の支柱は、カバー部分の上開口の周囲に沿って配置される、請求項１２記載の免疫学的検定用試験スライド。
【請求項１７】
流体流動マトリクスは、それの厚さを貫通して形成された複数の開口を含み、流体流動マトリクスの開口は対応している支柱に整列して位置されかつそこを通して支柱を受容する、請求項１６記載の免疫学的検定用試験スライド。
【請求項１８】
ボトム部分はそれの厚さを貫通して形成されるボトム開口を有し、ボトム部分のボトム開口は少なくとも部分的にカバー部分の上開口と整列して位置される、請求項１２記載の免疫学的検定用試練スライド。
【請求項１９】
光透過性薄膜をさらに備え、光透過性薄膜はハウジングの内部キャビティ内に位置され、ボトム部分のボトム開口を覆う、請求項１８記載の免疫学的検定用試験スライド。
【請求項２０】
ボトム部分は光透過性の材料で形成される、請求項１２記載の免疫学的検定用試験スライド。
【請求項２１】
ハウジングは長方形の形状である、請求項１２記載の免疫学的検定用試験スライド。
【請求項２２】
ハウジングは台形の形状であり、前部壁、前部壁と対向して位置される後部壁および２つの対向する側面壁を含み、２つの側面壁は互いに非平行方向に延び、前部壁は後部壁の長さより短い長さを有する、請求項１２記載の免疫学的検定用試験スライド。
【請求項２３】
ハウジングの前部壁はその中に形成された指標ノッチを含む、請求項２２記載の免疫学的検定用試験スライド。
【請求項２４】
ハウジングの各側面壁はそこに形成された凹部を含む、請求項２２記載の免疫学的検定用試験スライド。
【請求項２５】
流体流動マトリクスは、天然の、合成の、または天然に発生するまたは合成して変化させられた材料、繊維性の材料、紙、セルロースおよびセルロース酢酸塩およびニトロセルロースを含むセルロース派生物、ガラス繊維、グラスファイバー、共に、コットンを含む天然のおよびナイロンを含む合成の布を含むセルロース材料の薄膜、珪土ジェル、アガロース、デキストランおよびゼラチンを含む多孔性のジェル、多孔性の繊維性マトリクス、でんぷんベースの材料、交差架橋のデキストラン連鎖、セラミック材料、オレフィンおよびポリ塩化ビニール、ポリエチレン、ポリビニル酢酸塩、ポリイミド、ポリカーボネート、ポリスチレン、ビニール酢酸塩と塩化ビニールのコポリマーおよびポリ塩化ビニール珪土の化合物を含む熱可塑性の材料、からなるグループから選ばれた多孔性材料で形成される、請求項１２記載の免疫学的検定用試験スライド。
【請求項２６】
請求項１２で規定する免疫学的検定用試験スライドを使用して分析を行う方法であって、
スライドのカバー部分の上開口を通して流体流動マトリクス上に流体サンプルおよび共役試薬の混合物を置くステップ、
スライドのカバー部分の上開口を通して少なくとも１回流体流動マトリクスの上に洗浄試薬を置いて、結合していない混合物を流体流路マトリクスの少なくとも中央部分から除去するステップ、および
スライドのカバー部分の上開口を通して流体流動マトリクス上に基質を置くステップを含む、分析方法。
【請求項２７】
所定の波長の光でスライドのボトム部分を照らすステップ、および
スライドによって反射されたまたは放出されたが光を検出するステップをさらに含む、請求項２６記載の分析方法。
【請求項２８】
請求項１２に規定する免疫学的検定用試験スライドを製造する方法であって、
スライドのカバー部分およびボトム部分を形成するステップ、
流体流動マトリクスをカバー部分およびボトム部分の間に位置決めするステップ、および
カバー部分およびボトム部分を一緒に接合してそれらの間に流体流動マトリクスを介挿するステップを含む、製造方法。
【請求項２９】
カバー部分およびボトム部分を一緒に接合するステップは、 a) 接着剤をカバー部分およびボトム部分の少なくとも一方にするステップ、および b) 熱圧着および超音波融着の一方によってカバー部分およびボトム部分の少なくとも一方の少なくとも一部を溶融するステップの少なくとも１つのサブステップを含む、請求項２８記載の製造方法。
【請求項３０】
少なくとも１つのノッチが形成される、請求項１２記載免疫学的検定用試験スライド。
【請求項３１】
少なくとも１つのノッチはカバー部分およびボトム部分の両方の前部部分における材料の不存在によって規定される、請求項３０記載の免疫学的検定用試験スライド。
【請求項３２】
流体流動マトリクスは、焼結ポリエチレンビーズ、ニトロセルロース、グラスファイバーおよび紙からなるグループから選ばれる、請求項１２記載の免疫学的検定用試験スライド。
【請求項３３】
流体流動マトリクスは界面活性剤で処理される、請求項１２記載の免疫学的検定用試験スライド。
【請求項３４】
カバー部分およびボトム部分は同じ材料で作られる、請求項１２記載の免疫学的検定用試験スライド。
【請求項３５】
カバー部分およびボトム部分はポリスチレンを含む材料で作られる、請求項１２記載の免疫学的検定用試験スライド。
【請求項３６】
ボトム部分は可視光または赤外光を透過できる材料で作られる、請求項１２記載の免疫学的検定用試験スライド。
【請求項３７】
ボトム部分は６４５ナノメートルの波長を持つ光を透過できる材料で作られる、請求項３６記載の免疫学的検定用試験スライド。
【請求項３８】
流体流動マトリクスの上に配置された抗体または抗原をさらに備える、請求項１２記載の免疫学的検定用試験スライド。
【請求項３９】
ボトム部分へカバー部分を接合するための手段をさらに備え、その結合するための手段は、カバー部分、ボトム部分または溶融されかつ硬化されたカバー部分およびボトム部分の両方のいずれかからの材料を備える、請求項１２記載の免疫学的検定用試験スライド。
【請求項４０】
材料は超音波融着することによって溶融される、請求項３９記載の免疫学的検定用試験スライド。
【請求項４１】
材料は熱圧着によって溶融される、請求項３９記載の免疫学的検定用試験スライド。
【請求項４２】
ボトム部分へカバー部分を接合するための手段をさらに備え、その接合するための手段は、カバー部分の底部側から延びる少なくとも１つの突起およびボトム部分の上側に形成された少なくとも１つの構造を含み、この構造は、カバー部分およびボトム部分を一緒に接合するとき、カバー部分からの少なくとも１つの突起を受容するように形成されている、請求項１２記載の免疫学的検定用試験スライド。
【請求項４３】
ボトム部分へカバー部分を接合するための手段をさらに備え、その結合するための手段は、ボトム部分の上側から延びる少なくとも１つの突起およびカバー部分の底部側に形成された少なくとも１つの構造を含み、この構造は、カバー部分およびボトム部分を一緒に接合するとき、ボトム部分からの少なくとも１つの突起を受容するように形成されている、請求項１２記載の免疫学的検定用試験スライド。
【請求項４４】
流体流動マトリクスは内部キャビティの少なくとも５０％を占める容量を有する、請求項１２記載の免疫学的検定用試験スライド。
【請求項４５】
流体流動マトリクスは内部キャビティの少なくとも６０％を占める容量を有する、請求項１２記載の免疫学的検定用試験スライド。
【請求項４６】
流体流動マトリクスは内部キャビティの少なくとも７０％を占める容量を有する、請求項１２記載の免疫学的検定用試験スライド。
【請求項４７】
流体流動マトリクスは内部キャビティの少なくとも８０％を占める容量を有する、請求項１２記載の免疫学的検定用試験スライド。
【請求項４８】
流体流動マトリクスは内部キャビティの少なくとも９０％を占める容量を有する、請求項１２記載の免疫学的検定用試験スライド。
【請求項４９】
上薄膜部分を貫通して形成された開口は、１０ミリの短軸に沿う幅を有する楕円形または１０ミリの直径を持つ円形のどちらかである、請求項６記載の免疫学的検定用試験スライド。
【発明の詳細な説明】
【発明の分野】
【０００１】
この発明は、流体サンプル中の注目する特定の分析物（analyte）の存在または量を測定するために、分析（assay：アッセイ）を行なうための装置および方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
流体サンプル中の注目する分析物の検出および／または定量化のための多くの装置がよく知られていて、それらはラテラルフロー（lateral-flow）型あるいはマイクロウェル（micro-well）型である。一般に、ラテラルフロー装置は、固相流体透過性流路を含み、それを通して、毛細管作用によってサンプルおよび種々の試薬が移動する。流路は、分析物（あるいはそれの類似物）のための種々の結合試薬（binding reagents）、他の結合パートナー、あるいは信号生成システムの分析物および要素（たとえば、ラベル）のための結合パートナーを含む共役（conjugates）を、それの上に固定化する。これらの装置とともに使用される種々の分析形態が、試験サンプル中の注目する分析物の直接的または間接的な検出のためによく知られている。
【０００３】
それぞれがスコット・エム・クラーク（Scott M. Clark）に発行され、そして記録上でアイデックスラボラトリーズ社（IDEXX Laboratories, Inc.）に譲渡されている、かつそれらの開示が参照によってここに取り入れられる、合衆国特許第５,７２６,０１０号、第５,７２６,０１３号、第５,７５０,３３３号および第７,８１６,１２２号は、流体サンプル中の注目する分析物を検出するために、固相結合した三級複合体（tertiary complex）の形成を使用する分析方法および装置を記述する。クラーク特許に開示された装置は、クロマトグフィー結合分析における可逆流を利用する。分析物含有溶液が、装置に付与され、そして次に細長い流動マトリクスに沿って、最初に一方方向に、次に逆方向に、毛細管作用によって移送される。流動マトリクスは一般に４つの異なる領域を含む。領域１は、ラベルを付された抗体または抗原のいずれかと混合されたサンプルを有する溶液が付加されるところである。領域２は、検出ゾーンとも呼ばれ、第２の抗体または抗原を含み、それらが固相に固定化される。領域３は、洗浄（wash）溶液を適用する場所を含む。領域４は、領域１の近傍に配置される吸収剤の貯蔵器を含み、流れを反対方向に行かせる。装置はまた、分析物の存在あるいは量を検出するための手段を含む。
【０００４】
クラーク特許で開示される可逆ラテラルフロー装置は、流体サンプル中の分析物を検出する際に非常によく機能する。しかしながら、他のラテラルフロー装置と同様に、サンプル液、洗浄および基質（substrate）のラテラルフローを可能にするためには、マトリクスが十分に濡らされ得るように、比較的大量のサンプル量と他の試薬を必要とする。より詳しく言うと、このようなラテラルフロー装置は、およそ０.３５グラム（０.３５ミリリットル）のサンプル液を必要とする。したがって、サンプル量が少しの場合、しばしば、サンプルは薄められる必要がある。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
フレームによって囲まれる薄膜を有する乾式化学試薬の試験スライドがこの技術分野でまたよく知られていて、そして、それらの開示が参照によってここに取り入れられる、合衆国特許第５,０８９,２２９号（ハイト等（Heidt, et al.））および合衆国特許出願公開第２０１０／０２５４８５４号（リッチ等（Rich, et al.））に開示されているように、化学分析器において、試験スライドは、それの上に置かれた（deposited）血液または流体サンプルを分析するために使用される。スライド上に置かれたサンプルは薄膜上で化学試薬に反応し、そしてスライドの反射率（reflectance）または蛍光光度（fluorescence）がついで化学分析器によって計測され、病状ないし病気の指標であり得る、カルシウム（Ca）、アスパラギン酸アミノ基転移酵素（AST）またはブドウ糖（Glu）のような、サンプル中に見いだされる化合物あるいは物質を検出する。サンプル液の少量の一定分量（aliquot）だけが病気の特定の指標の検出のために、スライド上に置かれる必要がある。もし、免疫学的検定を、試験スライドを使うこのような乾式化学分析器具上で行うことができたなら、有利である。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
この発明の目的は、乾式化学分析器具において使用され得る、この発明に従って形成された免疫学的検定用試験スライドを提供することである。
【０００７】
この発明の他の目的は、このような免疫学的検定用スライドを製造するための、この発明に従った方法を提供すことである。
【０００８】
この発明の別の目的は、この発明の免疫学的検定用試験トスライドを使用する乾式化学分析器具において分析を行なうための、この発明に従った方法を提供することである。
【０００９】
この発明の１つの形態に従えば、乾式化学分析器具における使用のための、および分析物（たとえば、抗原あるいは抗体など）の存在または量を検出するための分析を行なうための、免疫学的検定用試験スライドは、２つの接合可能部分から形成されたスライドハウジングないしケースを含み、２つの接合可能部分は、全体として平らなスライドのカバー部分（cover piece）およびカバー部分へ接合可能な全体として平らなスライドのボトム部分（bottom piece）を含む。カバー部分とボトム部分で形成されたこのスライドハウジングは、それらが一緒に接合されたとき、使用中実質的に防漏（leakproof）であり、かつ内部キャビティを規定する。シート状の多孔性キャリア（carrier）マトリクスが、ハウジングキャビティの境界内に配置される。
【００１０】
スライドのカバー部分は、流体流動マトリクスの中央部分を露出するために、それの厚さを貫通して形成される開口を有する。カバー部分の開口は、多孔性キャリアマトリクスの中央部分を露出するように設けられ、それによって、後に説明するような共役試薬、洗浄試薬および基質（検出試薬）と好ましくは予混合（pre-mixed）された正確な量の流体サンプル（たとえば、血液、血清など）が、分析器具の調量（metering）装置によって、その開口を通してマトリクス上に置かれる（deposited）。キャリアマトリクスの中央部分は、カバー部分の中央開口と整列して位置している、乾燥して固定化された特定の結合試薬を、それの上に置いている。
【００１１】
免疫学的検定用試験スライドのボトム部分は、また、それの厚さを貫通して形成された中央開口を含み、その開口は、汚染を回避しかつハウジングの防漏性を維持するために、マイラ（Mylar）のような透明な（透き通った）材料の薄いシートで覆われてもよい。ボトム部分の開口は、分析器具の一部を形成する反射率計（reflectometer）または蛍光光度計（fluorometer）の上を分析器具によって移送されるとき、反射率や蛍光光度の計測が免疫学的検定用スライドによってなされるように、設けられる。あるいは、免疫学的検定用試験スライドのボトム部分は、スライド上でのこのような計測を行なうために、ボトム部分に形成された開口を持つことに代えて、透明材料で形成されてもよい。
【００１２】
免疫学的検定用試験スライドの全体的な形状は、好ましくは、前述のハイト等の‘２２９特許（合衆国特許第５,０８９,２２９号）に開示される化学試薬試験スライドに類似する長方形かあるいは正方形であり、または前述のリッチ等の出願公開（公開第２０１０／０２５４８５４）に開示された化学試薬試験スライドに類似する台形である。免疫学的検定用試験スライドの厚さは、好ましくは、従来の乾式化学スライドと同じかそれよりわずかに大きく、それによって、前述のハイト等の特許やリッチ等の出願公開で開示したような、このような乾式化学スライドを受け入れる既存の乾式化学分析器具とともに使用可能にされてもよい。
【００１３】
分析を行うために乾式化学分析器具上で免疫学的検定用試験スライドを使用する方法に従えば、免疫学的検定用試験スライドは分析器具の移送機構に装着され、移送機構はサンプル調量装置の下でかつ反射率計や蛍光光度計の上でスライドを移動させる。小瓶に入れられた流体サンプルの一定分量がまた、分析器具中に装填される（loaded）。流体サンプルは、分析器具に装填される前に共役試薬と予混合されるか、または分析器具によって共役試薬と混合されてもよい。分析形態によっては、共役試薬は、分析物の合成物ないし複合体および共役試薬を形成するために、流体サンプル中において分析物と特異的に結合してもよい。他の局面では、共役試薬は分析物の類似物を含むが、それは、分析物とは合成しない。サンプル／共役試薬混合物はついで、所定の時間期間の間、培養される。
【００１４】
そして、所定量のサンプル／共役が、分析器具の調量装置によって、カバー部分に形成された開口を通して免疫学的検定用試験スライド上で調量される。分析物および共役試薬を含むサンプル液は、合成されているか否かに拘わらず、カバー部分の上（top）開口に配置されているマトリクスの中央部分へ流れ込み、マトリクスの中で全方向に毛細管作用によって移送される。その後、試験スライドの一連の洗浄が、分析器具の調量装置によって、所定量の洗浄試薬をカバー部分の上開口を通してスライド上に置かせることによって、実行される。最終的に、検出（detector）試薬のような、所定量の基質が、分析器具の調量装置によって上開口を通してスライド上に加えられる。
【００１５】
反射率または蛍光光度の計測がその後、特定の波長で、透明なボトム部分またはスライドのボトム開口を通して、スライドについて行われる。流体サンプル中の注目する特定の分析物の存在あるいは量が、このような計測によって測定され得る。好ましくは、流体サンプル中の分析物の検出や定量化で使用される分析器具によって計測されるスライド上に、検出可能な色反応がある。
【００１６】
この発明の免疫学的検定用試験スライドは、ポリスチレンのようなプラスチック材料の、特に接合可能に形成されたカバー部分およびボトム部分の間に、同じ材料のシートから多孔性キャリアマトリクスのダイカット（die cut）部分を配置することによって、形成されてもよい。２つの部分は、多孔性キャリアマトリクスが存在する実質的に防漏ハウジングを規定するために、熱あるいは接着剤を適用することによって、一緒に接合されてもよい。多孔性キャリアマトリクスは、２つの接合スライド部分の間にそれを挿入する前に、固定化された特定の結合試薬で汚染されるかもしれず、あるいは特定の結合試薬で汚染されて、そしてカバー部分の開口の下のマトリクスの中央部分で結合試薬を乾かして固定化するために、所定の時間期間の間特定の温度まで加熱されるかもしれない。もし、免疫学的検定用試験スライドのボトム部分に形成されている、ボトム開口が設けられると、カバー部分およびボトム部分の間への多孔性キャリアマトリクスの挿入の前に、マイラのような、透明な（透き通った）材料の薄いシートが、ボトム開口上にスライドハウジングによって規定される内部キャビティの中に配置される。あるいは、もしスライドのボトム部分が光透過性ないし透明材料で形成されるなら、このようなボトム開口やカバーシートは必要ではない。
【００１７】
この発明のこれらのおよび他の目的、特徴および利点は添付の図画に関連して読まれる、具体的な実施例の以下の詳細な説明から明らかとなろう。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１】図１はこの発明に従って構成された免疫学的検定用試験スライドの１つの形態の分解上面斜視図である。
【図２】図２は図１に示すこの発明の免疫学的検定用試験スライドの分解側面図である。
【図３】図３は図１に示すこの発明の免疫学的検定用試験スライドの上面図である。
【図４】図４はこの発明に従って形成された免疫学的検定用試験スライドの他の実施例の分解上面斜視図である。
【図５】図５はこの発明に従って形成されたｆＰＬ免疫学的検定用試験スライドを使用する２ステップ試験プロトコルについて進行曲線を示す光学的反射率対時間のグラフである。
【図６】図６はこの発明に従って形成されたｆＰＬ免疫学的検定用試験スライドを使用する２ステップの試験プロトコルについての校正器の用量曲線（dose curve）を示す光学的反射率対ナノグラム／ミリリットルのグラフである。
【図７】図７はこの発明に従って形成されたｆＰＬ免疫学的検定用試験スライドを使用する１ステップ試験プロトコル（シングル予混合分注）についての校正器の用量曲線を示す光学的反射率対ナノグラム／ミリリットルのグラフである。
【図８】図８はこの発明に従って形成されたｆＰＬ免疫学的検証テストスライドを使用する１ステップ試験プロトコル（マルチ予混合分注）についての校正器の用量曲線を示す光学反射率対ナノグラム／ミリリットルのグラフである。
【図９】図９はこの発明に従って形成された免疫学的検定用試験スライドの別の実施例の上面斜視図である。
【図１０】図１０は図９に示すこの発明の免疫学的検定用試験スライドの底面斜視図である。
【図１１】図１１は図９および１０に示すこの発明の免疫学的検定用試験スライドの分解上面斜視図である。
【図１２】図１２は図９−１１に示すこの発明の免疫学的検定用試験スライドの分解底面斜視図である。
【図１２Ａ】図１２Ａは図９-１２に示すものとは別の形状を有する、この発明の免疫学的検定用試験スライドの上面斜視図である。
【図１３】図１３はこの発明に従って形成された免疫学的検定用試験スライドのカバー部分の外側の平面図である。
【図１４】図１４はこの発明に従って形成された免疫学的検定用試験スライドのカバー部分の内側の平面図である。
【図１５】図１５はこの発明に従って形成された免疫学的検定用試験スライドのカバー部分の側面図である。
【図１６】図１６は図１４の線１６-１６に沿ったこの発明の免疫学的検定用試験スライドのカバー部分の断面図である。
【図１７】図１７はこの発明に従って形成された免疫学的検定用試験スライドのボトム部分の外側の平面図である。
【図１８】図１８はこの発明に従って形成された免疫学的検定用試験スライドのボトム部分の内側の平面図である。
【図１９】図１９はこの発明に従って形成された免疫学的検定用試験スライドのボトム部分の側面図である。
【図２０】図２０は図１８の線２０‐２０に沿ったこの発明の免疫学的検定用試験スライドのボトム部分の断面図である。
【図２１Ａ】図２１Ａはサンプル流体中の分析物を検出するためのこの発明の免疫学的検定用試験スライドを使用する方法の図表による例示である。
【図２１Ｂ】図２１Ｂは図２１Ａに示すこの発明の方法に従ってＴ４スライド上で行なわれる試験の例示的な結果を示す反射率の計測値対時間のグラフである。
【図２２】図２２は従来の乾式化学分析スライドおよびこの発明の免疫学的検定用試験スライドの両方での使用のためにこの発明の１つの形態に従って形成された化学分析器の正面斜視図である。
【図２３】図２３は図２２に示す化学分析器の正面斜図であり、分析器の前面上の開いている第１スライドドアおよび分析器ハウジングの前面を越えて延びる化学分析器の第１スライド挿入器機構を示している。
【図２４】図２４は部分的に破断されたハウジングを有する化学分析器の正面斜視図であり、この発明の分析器の種々のコンポーネントを図示する。
【図２５】図２５はこの発明の化学分析器で使用される反射率計の上面斜視図であり、反射率計の部分が部分的に破断されている。
【図２６】図２６はこの発明の化学分析器で使用される蛍光光度計の破断図である。
【図２７】図２７はこの発明の化学分析器で使用されるスライド挿入器機構の一部の正面斜視図であり、遠心分離機のロータあるいはそれの上のサンプルの小瓶を図示する。
【図２８】図２８は図２２に示すこの発明の化学分析器の正面斜視図であり、希釈剤および混合カップまたは試薬などを入れるための他のカップを保持するトレイの分析器ハウジングの前面からの延長を図示する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１９】
初めに図９-２０を参照して、この発明に従って構成された免疫学的検定用試験スライド２は、２つの部分で形成された、実質的に防漏のハウジングないしケース４を含み、２つの部分はカバー部分６およびそのカバー部分６に接合可能なボトム部分８である。接合されたときカバー部分６およびボトム部分８によって規定されるハウジングないしケース４は内部キャビティ１０を規定し、その中に、ここでは多孔性キャリアマトリクスまたは流体流動マトリクスと呼び、後に一層詳しく説明する、吸収材１２が位置される。
【００２０】
ハウジング４のカバー部分６およびボトム部分８は、ポリスチレン、ポリプロピレンあるいはポリエチレンのような、プラスチック材料で形成される。カバー部分６およびボトム部分８の各々は、ハウジング４の内部キャビティ１０に面している内表面１４、１８と、露出している反対側の外表面２２、２４を含む。ボトム部分８は、ボトム部分の内表面１８から外方へ延びる１つまたはそれ以上の突起ないしリブ２８を含み、そのリブ２８はボトム部分８の周縁からわずかに内方に設定される。リブ２８はカバー部分６をボトム部分８へしっかり固定するのを助けるために設けられ、すなわちリブ２８は、溶着動作中に流動し得る材料を提供する。
【００２１】
カバー部分６はカバー部分の周囲に沿って延びる連続的な側壁３０を含む。カバー部分６の側壁３０の好ましい厚さは、ボトム部分８のリブ２８がボトム部分の周縁から内方に設定されている距離と等しく、そのため、カバー部分６がボトム部分８上に組み立られるとき、カバー部分の側壁３０の下方縁がボトム部分８の内表面１８上に載り、側壁３０の外表面がボトム部分８の周縁と面一にされ、さらにボトム部分のリブ２８がカバー部分の側壁３０の内表面に接触または隣接して位置される。もちろん、カバー部分６およびボトム部分８について先に説明した構造は逆にされてもよいことを理解すべきである。すなわち、リプ２８をカバー部分６の上に位置させ、そして側壁３０をボトム部分８の上に位置させることによって、そのような構造がこの発明の範囲以内にあることが認識されなければならない。
【００２２】
免疫学的検定用試験スライドのハウジング４のための実質的に防漏のシールを形成するように、カバー部分６およびボトム部分８が、接着剤を用いてまたは２つの部分を一緒に熱融着することによって、一緒に接合される。好ましくは、カバー部分６およびボトム部分８の一部は、超音波溶着または熱圧着によって一緒に接合されてもよく、それらの部分は一緒に溶融しかつ硬化できる。
【００２３】
強度を加えるために、そしてさらに、２つの部分が一緒に接合されるときにボトム部分８に対するカバー部分６の位置決めを容易にするために、カバー部分６は、カバー部分６の内表面１４から直角に外方に延びて所定距離内部キャビティ１０の中へ至る１つまたはそれ以上（好ましくは、４つ）のポスト３２を含んでよい。さらに、ボトム部分８は、ボトム部分８の内表面１８から直角に外方に延びて所定距離内部キャビティ１０の中へ至る１つまたはそれぞれ以上（好ましくは、４つ）のコラムないし支柱３４を含んでよい。ボトム部分の各々のコラムないし支柱３４は、少なくとも部分的に軸方向にその中に形成される穴３６を含み、その穴はカバー部分６の対応するポスト３２を受け入れるに必要な寸法にされる。ボトム部分８のコラムないし支柱３４がカバー部分６のポスト３２と整列するように位置決めされ、そのために、カバー部分６がボトム部分８に接合されるとき、カバー部分のポスト３２がボトム部分の支柱ないしコラム３４中の穴３６によって受容され、ポスト３２の自由端が好ましくは各コラムないし支柱３４内においてボトム部分８の内表面１８上に載る。それぞれカバー部分６およびボトム部分８のポスト３２およびコラム３４は、免疫学的検定用試験スライド２、特に内部キャビティへさらなる強度および剛性を付加するとともに、免疫学的検定用試験スライド２のハウジング４の全体的な厚さを所望の寸法に維持するのを助ける。もちろん、ポスト３２およびコラム３４の位置決めが逆にされてもよいことが理解されるべきであり、すなわち、ポスト３２がボトム部分８の内表面１８から外方に延び、コラム３４がカバー部分６の内表面１４８から外方に延び、そしてそのような構造がこの発明の範囲以内にあることが認識されなければならない。
【００２４】
免疫学的検定用試験スライド２のカバー部分６は、その厚さを貫通して形成される開口３８を有し、その開口の形状は、円形、長方形、あるいは図示しただ円形であってよい。正確な量の血液、血清などのようなサンプル流体および試薬が、前述のハイト等の‘２２９の特許やリッチ等の出願公開に開示され、後により詳細を説明するような、乾式化学分析器具のサンプル調量装置によって、試験スライド２上へ調量されて、開口３８の下に位置された吸収材１２（多孔性キャリアマトリクスあるいは流体流動マトリクス）上に置かれるように、この上開口３８は設けられる。さらに、ボトム部分８はその厚さを貫通して形成される開口４０を有してよく、そのボトム開口４０は、２つの部分が一緒に接合されるとき、カバー部分６の上開口３８と整列するように位置される。分析器具の反射率計あるいは蛍光光度計によって放出された光がそれを通り過ぎ、そして免疫学的検定用試験スライド２内の流体流動マトリクス１２に衝突し、それによって反射されあるいは蛍光を発せられるように、ボトム開口４０が設けられ、反射されたあるいは蛍光を発せられた光は、分析器具の移送機構によって、免疫学的検定用試験スライドが反射率計あるいは蛍光光度計上を移送されるとき、免疫学的検定用試験スライド上で行なわれる計測の間に、反射率計あるいは蛍光光度計によって検出される。上開口３８と同様に、ボトム開口４０の形状は、長方形、楕円形、あるいは図示している円形であってよい。
【００２５】
カバー部分６の上開口３８およびボトム部分８のボトム開口４０の両方は、各部分の実質的に中心に位置され、そして互いに整列され、基本的に４つのポスト３２およびコラム３４の間に位置される。
【００２６】
もし、ボトム開口４０が設けられるなら、ハウジング４の防漏性を保証するために、マイラのような透明または透き通った（光透過性）の薄いシート材料４２がボトム開口を覆って載置され、ハウジングの内部キャビティ１０内でボトム部分８の内表面１８に接着によって接合されあるいは熱融着され、すなわち、ボトム部分の内表面１８と多孔性吸収材１２との間に介挿されてもよい。あるいは、ボトム部分８が透明または透き通った（光透過性の）材料（たとえば、ガラスあるいはプラスチック）で形成されてもよく、ボトム開口は省略されてもよい。より具体的には、この代わりの実施例に関して、ボトム部分８を製造する材料は、可視光または赤外光、より好ましくは、６４５ナノメートルの波長の光がそれを通って透過できるように選ばれる。分析器具が免疫学的検定用試験スライド２の上での反射率または蛍光光度の計測を行うとき、分析器具の反射率計または蛍光光度計によって放出される光は、透明なマイラカバー４２または透明なボトム部分８を通過して吸収材１２上に衝突する。
【００２７】
カバー部分６およびボトム部分８によってそれらが接合するとき規定される免疫学的検定用試験スライドのハウジング４は、好ましくは、前述のハイト等の‘２２９特許に開示された従来の乾式化学試薬試験スライドのものと同様の全体的な長方形形状または前述のリッチ等の出願公開に開示された化学試薬試験スライドと同様の全体的な台形形状を有する。したがって、ハウジング４は前部壁４４、前部壁の反対側に位置された後部壁４６および２つの対向する側面壁４８を含み、その各々はカバー部分６の側壁３０によって少なくとも部分的に規定される。もし、免疫学的検定用試験スライドハウジング４が長方形の形状を有するなら、図１２Ａに示されるように、各壁４４‐４８が直角に次に隣接する壁に接合される。もし、免疫学的検定用試験スライドハウジングが、図９-１２および図１２Ａ−２０に示すように台形形状を持っているなら、前部壁４４および後部壁４６は、互いに概ね平行となり、後部壁４６が前部壁４４のものより大きい長さを有し、対向する側面壁４８は互いに平行ではなく、互いに後部壁４６から前部壁４４へ集束する。
【００２８】
さらに、免疫学的検定用試験スライド２の全体的な大きさおよびそれの全体的な厚さは、ハイト等の特許およびリッチ等の出願公開で開示された乾式化学試薬試験用のスライドの大きさおよび厚さと実質的に同じである。この方法によって、免疫学的検定用試験スライド２は、ハイト等の特許およびリッチ等の出願公開で開示された分析器具、あるいは前述のハイト等の特許およびリッチ等の出願公開で開示された乾式化学試験スライドと同様、他の従来の分析器具とともに使用され得る。
【００２９】
さらに、カバー部分６およびボトム部分８の各々は、前述のハイト等の特許およびリッチ等の出願公開に開示された乾式化学試験スライドに含まれているノッチおよび側面凹部と同じ態様で同じ位置に設けられた、分析器具上での試験スライドの適切な配向のための指標ノッチ５０、および分析器具上の試験スライドの装着のために使用される側面凹部５４を含むように形成され、かつ免疫学的検定用試験スライド２のハウジング４を規定するように形成される。なお、ハウジング４が実質的に防漏であることを保証するために、カバー部分６の側壁３０がノッチ５０および側面凹部５４のあたりに延びることに注目すべきである。
【００３０】
前述のように、吸収材１２（すなわち、多孔性キャリアマトリクスあるいは流体流動マトリクス）がハウジングキャビティ１０の境界内に配置される。流体流動マトリクス１２は好ましくは、１枚のそのような材料からダイカットされ、ハウジング４の内部の寸法に適合するような形状にされる。より具体的には、また図画からわかるように、流体流動マトリクス１２は、ハウジング４に形成されたノッチ５０および側面凹部５４を収容するための切欠き部５６および凹側面部５８含み、さらに、ボトム部分８のコラムの穴３６で受容されるカバー部分６のポスト３２の性能を妨害しないように、ボトム部分８のコラムないし支柱３４に整列しかつそれを受容する寸法にされた、その厚みを貫通して形成される４つの切り抜き６０を含む。そのため、ボトム部分８およびカバー部分６のそれぞれのコラム３４およびポスト３２は、流体流動マトリクス１２の厚さを貫通して通過し、ハウジングの内部キャビティ１０内の適所に流体流動マトリクスを保持するのに役立つ。
【００３１】
前にさらに述べたように、流体流動マトリクス１２は、ハウジング４の内部キャビティ１０の境界内に適合するような寸法および形状にされる。しかしながら、好ましくは、マトリクス１２と側壁３０の間で少なくとも部分的にハウジングの周囲にチャネルないし井戸（well）６２（図２０参照）を規定するために、その側面端がカバー部分６の側壁３０の内表面から間隔を隔ててわずかに離れるように、マトリクスは内部キャビティ１０の寸法よりわずかに小さくなる寸法にされる。このチャネルないし井戸６２は、そのような流体で飽和することが想定されるマトリクス１２から流体サンプル、試薬あるいは洗浄溶液のオーバーフローを受けるために設けられる。井戸ないしチャネル６２は、流体流動マトリクス１２を満たしている流体サンプル、試薬および洗浄溶液の量を超える容量を提供する。免疫学的検定用試験スライドのハウジング４によって規定される内部キャビティ１０の好ましい量（ボリューム）は、およそ２０マイクロリットルおよびおよそ２００マイクロリットルの間であり、さらに好ましくは、およそ２７０マイクロリットルである。この発明の免疫学的検定用試験スライド２の種々の代替実施例では、吸収マトリクス１２は、ハウジングによって規定された内部空間１０の、およそ５０パーセント、あるいはおよそ６０パーセント、あるいはおよそ７０パーセント、あるいはおよそ８０パーセント、あるいはおよそ９０パーセントを占める量（ボリューム）を有していてもよい。
【００３２】
流動マトリクスの材料は好ましくは、次の特徴を持つ：（１）サンプル材料およびラベル付けされた特定の結合試薬への低い非特異的な親和性、（２）一貫した流体流動がマトリクス１２にある距離を越えて毛細管作用によって流体を移送する性能、および（３）固定化された特定の結合試薬への迅速な結合（たとえば、共有結合性（covalent）あるいは非共有結合性の付着（attachment）によってあるいは物理的な罠（physical entrapment）による。）。これらの特性を持つ材料は、合成のまたは天然の繊維（たとえば、ガラスまたはセルロースベースの材料あるいはポリエチレン、ポリプロピレンまたはポリエステルのような熱可塑性のポリマー）で構成された繊維性のマット、微粒材料（たとえば、ガラスまたは種々の熱可塑性のポリマー）で構成された焼結構造、もしくは（一般的には、本質的に合成の）ニトロセルロース（nitrocellulose）、ナイロン、ポリスルホン樹脂（polysulfone）などで構成された成形薄膜（cast membrane films）を含む。この発明は、焼結ポリエチレンビーズのような、多孔性ポリエチレンとして一般に知られている、ポリエチレンの焼結微粒子（好ましくは、このような材料は、１立方センチメートル当たり０.３５‐０.５５グラムの間の密度、５‐４０ミクロンの微細孔サイズ、４０‐６０パーセントのボイド（void）ボリュームを有する）で、構成された流動マトリクス１２を利用してもよい。交差架橋されたもしくは超高分子量ポリエチレンで構成された微粒ポリエチレンが好ましい。多孔性ポリエチレンで構成された流動マトリクス１２は、上で挙げた望ましい特性のすべてを持ち、加えて、種々の大きさと形状に容易に製造される。特に好ましい材料は、クロメックス社（Chromex Corporation：FN#38-244-1（Brooklyn, N.Y.）からの１０-１５ミクロンの多孔性ポリエチレンである。他の好ましい材料は、ウォットマン社（Whatman, Inc., USA）から入手可能なフュージョン５（Fusion 5：商標）ラテラルフローマトリクスである。
【００３３】
多孔性キャリアマトリクス１２は、分析物および試験試薬への低い親和性を持つ材料で作られてもよい。このことが、分析物および／または試薬の非特異的な結合を防ぐための試験マトリクスの前処理を最小にするかあるいは回避することになる。しかしながら、前処理必要とする材料が、前処理を必要としない材料に対する利点を提供することもある。そのために、単純に前処理を必要とするというだけの理由で、材料を回避する必要はない。親水性のマトリクスが、一般に、マトリクス１２への非特異的な結合の量を減じる。
【００３４】
１つの局面では、多孔性キャリアマトリクス１２は、１‐２５０ミクロン、別の局面では、およそ３‐１００ミクロン、あるいはおよそ１０‐５０ミクロンの平均孔径の開放気孔構造（open pore structure）を有してもよい。マトリクス１２は、２ないし４（few）ミル（０.００１インチ：25.4ミクロン）から４ないし８（several）ミルの厚さであり、典型的には、およそ１０ミルからおよそ２０ミルの範囲であり、最も好ましくは、およそ１６ミルである。
【００３５】
全方向性の流れが生じる適切な多孔性キャリアマトリクス１２の例は、ポーレックステクノロジー社（Porex Technologies Corp. Fairburn、Ga. USA）によって生産された高密度または超高分子量ポリエチレンシート材料である。この材料は、焼結することによって、超高分子量ポリエチレン（ＵＨＷＭ−ＰＥ）の球形の微粒子を溶融して作られる。これは、粒子のサイズ（それぞれ２０-６０ミクロン）にもよるが、８-２０ミクロンの平均孔径サイズの多孔性構造を作る。ポリエチレンの表面は、０．０１‐０．５センチメートル／秒のウィッキング（wicking）速度を有する界面活性剤なしの親水性の表面を作るために、酸素プラズマで処理され、ついで、ポリエチレンイミン（polyethylenimine：ＰＥＩ）およびポリアクリル酸（poly acrylic acid：PAA）の交互の層で被覆される。
【００３６】
ポリエチレンで作ったマトリクス１２が大いに満足がいくことが分かったが、他のオレフィン（olefin）あるいは他の熱可塑性ブラスチック材料、たとえば、ポリ塩化ビニール（polyvinyl chloride）、ポリビニル酢酸塩（polyvinyl acetate）、酢酸ビニールと塩化ビニールのコポリマー（copolymers of vinyl acetate and vinyl chloride）、ポリアミド（polyamide）、ポリカーボネート（polycarbonate）、ポリスチレン（polystyrene）などで形成した全方向流動材料が使用できる。適切な材料の例は、ジーイーオスモニクス（GE Osmonics、Minnetonka、Minn.）からのマグナ（Magna）ナイロン担持薄膜、クノ社（CUNO、Meriden, Conn.）からのノビロン（Novylon）ナイロン薄膜、およびミリポア社（Millipore、Billerica, Mass.）からのデュラポア（Durapore）薄膜を含む。
【００３７】
マトリクス材料は、この発明の免疫学的検定用試験スライド２の中に取り入れる前に、いろいろな形状に、切り開かれ、切断され、ダイカットされあるいは孔開けされてもよい。
【００３８】
吸収材キャリア１２に適した他の多孔性材料は、天然の、合成の、あるいは天然に発生するか、あるいは合成して変化させられた材料、紙、セルロース、あるいはセルロース酢酸塩とニトロセルロース（nitrocellulose）、繊維ガラス、グラスファイバー、天然に発生する布（たとえば、コットン）と合成物の布（たとえば、ナイロン）のようなセルロース派生物のようなセルロース材料の紙（繊維性）または薄膜（微孔性）、珪土ジェル（silica gel）、アガロース（agarose）、デキストラン（dextran）およびゼラチン（gelatin）のような多孔性ジェル、多孔性繊維性のマトリクス、でんぷんベースの材料、交差架橋デキストランチェーン、セラミック材料、ポリ塩化ビニール、ポリエチレン、ポリビニル酢酸塩、ポリアミド、ポリカーボネート、ポリスチレン、ビニール酢酸塩と塩化ビニールのポリマー、ポリ塩化ビニールおよび珪土の化合物などの薄膜を含むオレフィンまたは熱可塑性プラスチック材料を含んでよい。このリストは代表的ではあるが、限定することを意図してはいない。
【００３９】
前述のたとえば合衆国特許第５,７２６,０１０号で述べた流体流動マトリクスのための多孔性材料および仕様は、この発明の免疫学的検定用試験スライド２で使用されてもよく、そしてこのような開示が参照によってここに取り入れられる。
【００４０】
１つまたはそれ以上の分析物捕捉試薬が、ボトム部分８に形成したボトム開口４０の上方でありかつカバー部分６に形成した上開口３８の下方において、流体流動マトリクス１２上で固定化されかつそれの上に位置される。分析物捕捉試薬は、マトリクスに結合されかつ注目する分析物に対する特異的な親和性を持つ分子である。好ましくは、酵素と基質または抗原と抗体の間の関係に見られるように、親和性は、たとえば分析物への相補的な３次元構造を保持する試薬によって生じる。或る対の内で、一方の要素が分析物または捕捉試薬であると考えられてよい。この定義は、免疫学的検定用試験スライド２に含まれている試薬（すなわち、分析物捕捉試薬）からサンプル（すなわち、分析物）で検出される成分を区別することだけに役立つ。
【００４１】
上に述べたように、異なる分析物捕捉試薬が異なる試験のためにマトリクス１２上に固定化されてもよい。たとえば、１つの分析物捕捉試薬がネコ科の動物免疫不全ウイルスに特異的な固定化された抗体を含むかもしれず、もう１つはネコ科の動物白血病ウイルスに特異的な固定化された抗体を含むかもしれない。１つの生物学上のサンプル（たとえば、ネコ科の動物血清のサンプル）がスライド２上に置かれ、そして一方または両方のウイルスの存在のために分析され得る。パートナーと結合する固定化された分析物は、免疫学的検定用試験スライド２の組み立て前に、その上に予め置かれるか、あるいは組み立てたスライド上に置かれて場合によっては加熱乾燥されてよい。
【００４２】
例：Ｔ４免疫学的検定
この発明の免疫学的検定用試験スライド２を使用して分析を行なう方法が、図２１Ａ‐２８を参照して、ここで説明される。図２１Ａおよび２１Ｂで示された例においては、分析が、抗体セイヨウワサビペルオキシダーゼ（antibody-horseradish peroxidase）共役を使用してチロキシン（thyroxine）（Ｔ４）について行なわれる。この説明のために、前述のリッチ等の出願公開およびそれの中での化学分析器の構成および動作の説明、リッチ等の出願公開で開示したものと類似する化学分析器６４を描いた図２２、および化学分析器の引用するコンポーネントを示す図２３-２８が、また参照されなければならない。分析消耗品は、Ｔ４スライド、共役、洗浄バッファおよび基質を含む「ＣＴｄｘ」希釈剤引き出しパッケージ、および血清あるいは血漿のようなサンプルを含む。
【００４３】
この方法における最初のステップは、消耗品のすべてを化学分析器に装着することである。より具体的には、１つまたはそれ以上のこの発明の免疫学的検定用試験スライド２が、化学分析器のドア１６（図２３参照）（リッチ等でも参照番号１６）の後ろに位置されるスライド挿入器機構２０（図２３参照）（リッチ等の出願公開でも参照番号２０）に装着され、ドア１６は２つのスライド挿入器機構の一方へ接近するために開く。スライド挿入器機構は、スライド移送機構２６（図２４参照）（リッチ等の出願でも参照番号２６）上に、他の化学的な試薬試験スライドから、免疫学的検定用試験スライドを装着する。スライド移送機構２６は、免疫学的検定用試験スライドを、流体サンプル調量装置８４（図２４参照）（リッチ等の出願でも参照番号８４）の下方でかつ反射率計６８４（図２５参照）（リッチ等の出願でも参照番号６８４）および蛍光光度計６５４（図２６参照）（リッチ等の出願でも参照番号６５４）のどちらかまたは両方の上方に、選択的に位置決めし、比色定量（colorimetric）または蛍光発光計測を行なう。
【００４４】
所定の量の血液、血清などのような流体サンプルが、サンプルの小瓶２４２（図２７参照）（リッチ等の出願でも参照番号２４２である。）に加えられ、そしてそのサンプルの小瓶は、その小瓶を保持するために、井戸２０６（図２７参照）（リッチ等の出願でも参照番号２０６）中のスライド挿入器機構２０の上に置かれる。さらに、流体共役試薬、洗浄試薬および検出試薬（ＴＭＢ）を入れた別々の小瓶が、化学分析器のドア１３２の後ろの希釈剤引出し１３６（図２８参照）（リッチ等の出願では参照番号３６および３２）中に、または分析器の流体調量システム（図２１Ａのステップ１を参照）に試薬が接近可能である限り、他の適宜の場所中に形成されたそれぞれの井戸に装着される。
【００４５】
そして、ステップ２（図２１Ａ参照）では、流体サンプルと共役試薬が、共役の小瓶中またはドア１３２の後ろの希釈剤引出し１３６に位置された別個の空の小瓶中において、化学分析器の調量装置８４によって混合される。サンプルおよび共役の混合は、リッチ等の出願公開に開示された方法で行われ得る。サンプル／共役の混合物は、次いで、所定の時間期間（たとえば、５分）の間、所定の温度（たとえば、３７度（摂氏））で化学分析器６４内で培養される。サンプルおよび共役試薬が混合されるとき、Ｔ４は、流体サンプル中で血清結合タンパク質から切り離し、そして次に、Ｔ４‐抗体＊ＨＲＰに結合する。
【００４６】
培養の後に、図２１Ａに示されるステップ３で述べたように、比較的少量（好ましくは、８マイクロリットル）のサンプル／共役混合物が、化学分析器の調量装置８４によって免疫学的検定用試験スライド２上に置かれる。ここで、結合していないＴ４‐抗体＊ＨＲＰは、示された例ではＴ３‐ＰＡＡであるが、流体流動マトリクス１２上の固定化された捕捉試薬の汚染に結合する。化学分析器の調量装置８４によってサンプル／共役の混合物を小瓶から吸引し、免疫学的検定用試験スライド２にその混合物を置く１つの有用な方法が、前述のリッチ等の出願公開に開示される。
【００４７】
図２１Ａで示さるステップ４で、免疫学的検定用試験スライド２が何度も洗浄される。すなわち、試験スライドは好ましくは、化学分析器の調量装置８４によって分配された８マイクロリットルの各洗浄のための洗浄試薬を使用して、４回の洗浄を受け、各洗浄は、好ましくは、およそ３０秒の時間間隔である。化学分析器の調量装置８４は、そのような溶剤が入った希釈剤引き出しにある小瓶から少なくとも３２マイクロリットルの洗浄試薬を吸引し、スライド２上に好ましくは８マイクロリットルの洗浄試薬を周期的に分配する。このような洗浄によって、血清Ｔ４に結合したＴ４‐抗体＊ＨＲＰが洗い流される。
【００４８】
洗浄溶液は、ボトム部分８中あるいは反射率計または蛍光光度計による計測試験を受けるマトリクス１２の領域中のボトム開口４０の上方に位置された、少なくとも流体流動マトリクス１２の中央部分から、結合していない材料を除去するのに役立つ液体試薬である。洗浄試薬は、界面活性剤または洗浄によって流体流動マトリクス１２を濡らさせることができる任意の他の成分のような、表面活性剤を含む。洗浄試薬の他の例は、アルコール（たとえばメタノール）あるいは任意の他の水溶性有機溶媒である。したがって、図２１Ａおよび２１Ｂで示された例では、結合していないサンプルおよび結合していない抗体-セイヨウワサビペルオキシダーゼ共役が洗浄試薬によって置換される。特定の結合試薬へのサンプル分析物の結合を最大にするためには、スライド上にサンプル／共役混合物を分配すること（図２１Ａでのステップ３）と多数回の洗浄ステップ（図２１Ａでのステップ４）の開始との間に割り当てられた十分な時間を設けるべきである。
【００４９】
流体流動マトリクス１２が４回目に洗浄されてから、およそ３０秒待った後、基質ないし検出試薬が免疫学的検定用試験スライド２上に、所定の量、好ましくは、８マイクロリットル分配される（図２１Ａのステップ５を参照）。基質ないし検出試薬は、マトリクス１２の中央部分で、酵素抗体共役（enzyme-antibody conjugate）との反応に応じて、検出可能信号を生成する。酵素、セイヨウワサビペルオキシダーゼとの反応に続く不溶解性の最終生成物を生成する検出試薬ないし基質の例は、ＴＳＩ社（TSI Incorporated Worcester, Massachusetts）から入手できるＴＭＢｌｕｅ、部品番号ＴＭ１０１のようなテトラメチルベンジジン（tetramethybenzidine）ないしＴＭＢである。ＴＭＢｌｕｅ基質によって生成された最終生成物は、光を吸収する染料である。図２１Ａおよび２１Ｂに示される例では、汚染したＴ３‐ＰＡＡに結合したＴ４‐抗体＊ＨＲＰが色を発生させ、そしてそれは化学分析器の反射率計６８４によって検出可能である。あるいは、検出試薬ないし基質は、化学分析器の蛍光光度計６５４による放射（eradiation）、たとえば蛍光発光に応答してスライドから光を放出させるように選ばれてもよい。マトリクスの色変化の程度は、流体サンプル中の分析物の量の反映である。種々の共役試薬、特定の結合試薬、流体流動マトリクス、洗浄試薬、検出試薬および基質の例と説明が、前述の合衆国特許第５,７２６,０１０号およびその中に引用された特許および刊行物に開示されていて、ここでは、参照によってそのような開示を取り入れる。
【００５０】
図２１Ｂは、上で述べたかつ図２１Ａで示される方法のステップの後に続くＴ４スライドについての、反射率の大きさ対時間の例示的な試験結果をプロットしたグラフを示す。反射率の計測が、サンプルで汚染したＴ４スライド（図２１Ａの中の「７.０ug／dL Ｔ４」というラベルの付いた）および好ましくはサンプルで汚染していない実験照査基準Ｔ４スライド（図２１Ａで「０.０ug／dL Ｔ４」というラベルの付いた）上で、好ましくは１５秒毎に６４５ナノメートルの波長で行われる。サンプルＴ４スライド（ひし形の付いた線によって示される）と（正方形の付いた線によって示される）実験照査基準Ｔ４スライドの両方の例示的な反射率測定が、図２１Ｂのグラフ中にプロットされている。
【００５１】
例：ネコ科の膵臓のリパーゼ（Lipase）の免疫学的検定
この発明に従って形成される、ネコ科の膵臓のリパーゼ（ｆＰＬ）の免疫学的検定用試験スライドの製造および使用を以下説明する。ｆＰＬ免疫学的検定用試験スライドは、以下に一層詳細に説明するように、図９‐２０の実施例または図１‐４に示す実施例で示される構造を有してよい。
【００５２】
好ましくは、ｆＰＬ免疫学的検定用試験スライドを形成する際、Fusion５（商品名）の吸収材から好ましくは形成される多孔性マトリクス１２が、水晶のように透き通った（すなわち、光透過性の）ボトム側を有するスライドハウジング４の中に配置される。１０マイクロリットルのｆＰＬ１７Ａ試薬粒子が、多孔性マトリクス（マトリクスの上側あるいは底部側のいずれか）の上に汚染される。汚染されたスライドはついで、およそ０.５時間およそ９５°（華氏）で、乾燥トンネルで乾燥される。乾燥されたスライドはついで、ただちに使用されるか、または好ましくはおよそ４°（摂氏）で保管される。
【００５３】
ネコ科の膵臓のリパーゼを試験するための２ステップのプロトコルが、以下に説明されるとともに、図５および６に示される。１６マイクロリットルのサンプルがサンプルカップから吸引され、そして次に、４マイクロリットルの一定分量で試験スライド上に分配される。そして、１６マイクロリットルの共役が、共役カップから吸引され、次に４マイクロリットルの一定分量でスライド上に分配される。この後、２４マイクロリットルの洗浄バッファが、洗浄カップから吸引され、そして次に４マイクロリットルの一定分量でスライド上に分配される。続いて、２４マイクロリットルのＴＭＢ基質（すなわち、検出試薬）がＴＭＢカップから吸引され、そして４マイクロリットル一定分量でスライド上に分配される。最終的に、マトリクスの汚染の青色の発生が、好ましくは１秒間隔で、６０秒間、光学的反射率（６４５ナノメートルで）によって記録される。データがプロットされ、そして分析の動的な読み取り（read）を入手するために、エクセル（商標）で当てはめられた（フィッテングされた）線分曲線（linear curve）が結果的に生じる。ｆＰＬ進行曲線（progress curve）およびこの発明の免疫学的検定用試験スライドを使用するこの２ステッププロトコルのためのｆＰＬの校正された用量曲線（dose curve）が、それぞれ図５および６に示される。
【００５４】
この発明のｆＰＬ免疫学的検定用試験スライドを使用する１ステッププロトコルをここで説明する。この１ステッププロトコルでは、サンプルおよび共役は予め化学分析器のピペット先端の中で混合されていて、その混合物が次いで分配される。マルチの、３つのｆＰＬ免疫学的検定用スライドを試験するための先端内混合１ステッププロトコルを説明する。
【００５５】
典型的には、８０マイクロリットルのサンプルがサンプルカップから化学分析器のピペットの先端内へ吸引される。８０マイクロリットルの共役が、次いで、共役カップから、サンプルを含んでいる分析器のピペット先端内へ吸引される。サンプルおよび共役は、１０マイクロリットルの先端混合量で、１０秒間分析器のピペットの中で混合される。
【００５６】
マルチの予混合分配プロトコルのために、３０マイクロリットルのサンプル／共役の予混合が、１０マイクロリットルの一定分量でこの発明の免疫学的検定用試験スライド上に分配される。
【００５７】
シングルの予混合分配プロトコルのために、１５マイクロリットルのサンプル／共役の予混合が、１５マイクロリットルの一定分量で、好ましくは９０秒後混合分配時間遅延を有して、この発明の免疫学的検定用試験スライド上に分配される.後予混合（post-premix）分配時間遅延が、好ましくは、スライド上での免疫反応のための十分な培養時間を許容するために設けられる。
【００５８】
そして、３０マイクロリットルの洗浄バッファが、１０マイクロリットルの一定分量でスライド上に分配される。これに引き続いて、１２マイクロリットルのＴＭＢ基質が、１２マイクロリットルの一定分量でスライド上に分配される。最終的に、試験スライドマトリクス１２上の汚染の青色の発生が、好ましくは２秒の間隔で、６０秒間、６４５ナノメートルでの光学的反射率（ＯＲ）によって記録される。データが次いで、分析のエンドポイント（end point）の読み取りを得るためにプロットされる。先端内混合の１ステップ試験プロトコルのために、シングルのおよびマルチの予混合分配に対応するスペックの（spec）ｆＰＬ校正（calibrator）用量曲線が、それぞれ図７および８に示される。
【００５９】
流体サンプル中での分析物の量を測定するために（図２１Ａおよび図２１Ｂ中のステップ６参照）、化学分析器において、反射率計によって検出されたスライド２上の色変化、または蛍光光度計によって検出されたスライド上の蛍光発光が、定量的にまたは定性的に測定される。この発明の免疫学的検定用試験スライド２が、他の免疫学的検定用スライドまたは乾式化学試薬試験スライドとともに、化学分析器中に装着されてもよく、スライドが同時に試験される。分析を行なうための他の従来の方法および装置に対する免疫学的検定用試験スライドの他の利点は、流体サンプル中の分析物の存在を検出するために必要とされる流体サンプルおよび流体試薬の微小な量である。一般に商標「スナップ」で呼ばれ、アイデックスラボラトリーズ社によって製造される１つの従来の免疫学的検定用試験装置では、分析を行ないかつ検出可能な結果を得るためには、典型的には、およそ１,３３０マイクロリットルのサンプルおよび流体試薬が必要になる。しかしながら、この発明の免疫学的検定用試験スライド２を用いれば、分析を行ないかつ検出可能な結果を得るためには、１００マイクロリットル以下のサンプルおよび流体試薬が必要なだけである。
【００６０】
この発明の免疫学的検定用試験スライド２は、ポリスチレンのようなプラスチック材料からなり、特に接合可能に形づくられたカバー部分６およびボトム部分８の間に、１枚の同じ材料からの多孔性キャリアマトリクス１２のダイカット部分を配置することによって、形成され得る。２つの部分は、多孔性キャリアマトリクス１２が存在する実質的に防漏のハウジング４を規定するために、熱あるいは接着剤を適用することによって、一緒に接合され得る。多孔性キャリアマトリクス１２は、２つの接合スライド部分の間へのそれの挿入の前に固定化された特定の結合試薬で汚染されるかもしれず、または特定の結合試薬で汚染され、そしてマトリクス１２の中央部分で結合試薬を乾燥して固定化するために、特定の温度で所定時間期間加熱されるかもしれない。もし、免疫学的検定用試験スライド２のボトム部分８に形成されるボトム開口４０が設けられれば、多孔性キャリアマトリクス１２のカバー部分６およびボトム部分８の間への挿入の前に、好ましくはマイラのような、１枚の薄い透明な（透き通った）材料４２が用いられかつボトム開口４０上のスライドハウジング４によって規定された内部キャビティ１０の中に配置される。あるいは、ボトム部分８がポリスチレンのような光透過性のまたは透明材料で形成されるなら、このようなボトム開口やカバーシートは必要ない。
【００６１】
この発明の免疫学的検定用試験スライド２の他の実施例が図１‐４に示される。これらの別の実施例の試験スライド２の各々は、スライドハウジング４、前に記説明したような、多孔性キャリアマトリクスないし薄膜１２、および薄膜ないしカバーシート７０を含む。図１‐４に示されるように、スライドハウジング４は、好ましくは、全体形状が台形であるが、長方形または正方形であってもよい。そのため、スライドハウジングは、前部壁４４、前部壁の反対側に位置される後部壁４６および２つの対向する側面壁４８を含む。もし、免疫学的検定用試験スライドのハウジング４が長方形であるなら、それぞれの壁４４‐４８は直角にその次の隣接した壁に結合される。もし、免疫学的検定用試験スライドのハウジングが、図１‐４に示す、台形形状を持っているなら、前部壁および後部壁４４、４６は互いにほぼ平行であるが、後部壁４６は前部壁４４の長さより大きい長さを有し、対向する側面壁４８は、互いに平行ではなく、後部壁４６から前部壁４４に向かって相互に集束する。図４で示される免疫学的検定用試験スライドの実施例は、構造において、２つの対向する側面壁４８が図１‐３で示される免疫学的検定用試験スライドのそれらより長く、図４で示されたスライドハウジングの実施例に細長い台形の形を与えていることを除いて、図１‐３に示される免疫学的検定用試験スライドと類似している。前に説明した実施例で、図１‐４で示された免疫学的検定用試験スライド２は、前述のハイト等の特許およびリッチ等の出願公開に開示された乾式化学成分試験スライドに含まれていると同じ形態および同じ位置に、分析器具上の試験スライドの適切な配向のための指標ノッチ５０および分析器具上へ試験スライドを装着するために使用される側面凹部５４を含んでもよい。
【００６２】
図１‐４で示されたこの発明の免疫学的検定用試験スライドの実施例では、試験スライドハウジング４は、正方形、長方形あるいは台形でもよい凹部ないしキャビティ１０を規定するために、それの上側７４の凹部部分７２を含む。このキャビティ１０は少なくとも部分的にその中に、多孔性キャリアマトリクス１２を受容する寸法にされる。マトリクス１２は、同じ機能を行ない、そして、免疫学的検定用試験スライドの他の実施例に関して前に説明した、すなわち特定の結合試薬を保持し、かつ所定量の流体サンプルおよび共役試薬を吸収するための、マトリクスと同じ材料で作られてもよい。さらに、多孔性キャリアマトリクス１２は、前に免疫学的検定用試験スライドの他の実施例で説明したと同じ方法で形成され、そして、好ましくは、マトリクス１２およびハウジングの周囲に少なくとも部分的に沿う内側壁７８の間にチャネルないし井戸６２を規定するように、側面縁７６が、キャビティ１０を規定しているスライドハウジング４の内側壁７８からわずかに離れて間隔を隔てるように、スライドハウジング４中に形成されるキャビティ１０の寸法よりわずかに小さい寸法にされる。他の実施例でのように、このチャネルないし井戸６２は、流体サンプル、試薬または洗浄溶液によって飽和すると想定されているマトリクス１２からのそれらの流体のオーバーフローを受けるために設けられている。井戸ないしチャネル６２は、多孔性マトリクス１２を満たす流体サンプル、試薬および洗浄溶液の量を超える容量を提供する。ハウジング４の凹部部分７２によって規定されるキャビティ１０の好ましい量は、免疫学的検定用試験スライドの他の実施例に関して前に説明したものと同じである。
【００６３】
多孔性マトリクス１２が形成される好ましい材料は、商標Fusion５で呼ばれかつウォットマン社から入手可能な、プラスチックバインダを含むグラスファイバーベースの材料である。
【００６４】
免疫学的検定用試験スライドの他の実施例に関して前に説明したと同じ材料から形成されてもよいが、スライドハウジング４は好ましくは、結晶ポリスチレンで形成される。結晶ポリスチレンは透明または少なくとも半透明である。しかしながら、もしハウジングがそれほど光透過性ではなくあるいは不透明な材料で形成されれば、図１０に示されるように、ボトム開口４０が、ハウジング４のボトム側を貫通して形成されればよい。それから、マイラ薄膜のような材料の透明または透き通った（光透過性の）薄いシート４２（図１１参照）が、ボトム開口の上に置かれ、スライドハウジングの凹部ないしキャビティ１０に整列してボトム側の内表面に接着剤で接合されまたは熱シールされてもよく、すなわち、ハウジング４の防漏性を確実にするために、ハウジングのボトム側の内表面および吸収性多孔性材料１２の間に介挿されてもよい。好ましくは、結晶ボリスチレン材料で形成されるスライドハウジング４は、可視または赤外光、一層好ましくは、およそ６４５ナノメートルの波長の光を通す。そのため、分析器具の反射率計６８４または蛍光光度計６５２によって放出される光が、分析器具が免疫学的検定用試験スライド上で反射率または蛍光光度の計測を行なっているとき、スライドハウジング４のボトム側を通って通過する。
【００６５】
好ましくは、マトリクス１２を受ける凹部部分７２の床の上に、しかしスライドハウジングの上側７４の表面のわずかに下に立ち上げられる、嵌め込み棚８０が、凹部ないしキャビティ１０の少なくとも２つの対向する側に形成される。好ましくは、各々の棚８０は、棚８０の上表面からわずかに上に、そして外方に突き出る細長いリブ８２を含む。やがて分かるように、細長いリブ８２は「エネルギ誘導子（energy directors）」として使われ、溶着の目的で設けられている。スライドハウジング４へカバー薄膜７０を貼り付けるために、リブ８２がカバー薄膜７０の平らな裏面表面に接着し、それによって、スライドが組み立てられるとき、薄膜カバーの下の凹部１０内にマトリクス１２を固着する。さらに、スライドハウジングの上側７４は、スライド上で使用された試薬のタイプを識別するために、それの上に位置されたバーコード８６を含んでもよく、そしてそのバーコード８６は化学分析器の一部を形成している光学式コードリーダによって読まれる。
【００６６】
薄いポリスチレン薄膜７０が多孔性マトリクス１２を覆って置かれ、そして好ましくは、スライドハウジング４の上側７４に形成された凹部ないしキャビティ１０の中または上にある。好ましくは、このポリスチレン薄膜７０はおよそ０．２ミリの厚さを有する。薄膜７０は、好ましくは、エネルギ誘導子ないしリブ８２がその中に存在する凹部１０内に密接に適合するような寸法にされていて、スライドハウジング１０の対向する内側壁７８は、薄膜７０をそれらの間に位置決めするのを助けるように位置されかつそのような寸法にされている。
【００６７】
ポリスチレンのカバー薄膜７０は、前に説明した免疫学的検定用試験スライドのカバー部分６が開口３８を持つとほぼ同じ方法で、その厚さを貫通して形成された開口８８を含む。前述のハイト等の‘２２９特許やリッチ等の出願公開で開示されたような乾式化学分析器具のサンプル調量装置８４によって、血液、血清などのサンプル流体および試薬の正確な量が試験スライド２上で調量され、そして開口８８の下に位置された多孔性マトリクス１２の上に置かれるように、上開口８８が設けられる。この上開口８８は図１-３で示されるような円形、長方形あるいは図４に示すような楕円形ないし細長い形状であってよい。好ましくは、もし開口８８が楕円形であるなら、上薄膜部分７０を貫通して形成された開口８８は、およそ６ミリおよびおよそ１２ミリの間の、より好ましくはおよそ１０ミリである、それの短軸に沿う幅を有し、もし開口が円形であるなら、およそ６ミリおよびおよそ１２ミリの間の、より好ましくはおよそ１０ミリの直径を有する。カバー薄膜７０は、薄膜７０がスライドハウジングの凹部ないしキャビティ１０の中に位置された多孔性マトリクスを完全に覆うように、ハウジングの側面壁７８によって規定される凹部１０内にカバー薄膜を密接に位置決めすることによって、試験スライドハウジング上に位置される。カバー薄膜７０は、ハウジングに薄膜を接着し、または超音波融着し、あるいは熱圧着することによって、スライドハウジング４へ接合され得る。さらに一層好ましくは、薄膜７０の裏面は棚８０上に載り、エネルギ誘導子ないしリブ８２に接触し、そして、薄膜７０はエネルギ誘導子８２を使用する超音波融着によって、棚８０に接合される。
【００６８】
この発明の図示した実施例が添付の図面を参照して説明されたが、この発明がこれらの正確な実施例に限定されるものではなく、この発明の範囲あるいは精神から逸脱することなく、当業者によって、さまざまな他の変更や修正が行われ得るということを理解すべきである。
【符号の説明】
【００６９】
２  …  免疫学的検定用試験スライド
４  …  ハウジング
６  …  カバー部分
８  …  ボトム部分
１０…  キャビティ
１２…  流体流動マトリクス（吸収材）
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１２Ａ】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１Ａ】
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【図２１Ｂ】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８】
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