(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物
【化１】
0006353849.tif 000092
［式中、
Ｒ３は、式（ｉｉｉ）のラジカル、式（ｉｖ）のラジカル、又は式（ｉｖ）（ａ）のラジカルであり、
【化２】
0006353849.tif 000093
Ｒ５は、式（ｖ）、（ｖｉ）、（ｖｉｉ）、（ｖｉｉｉ）又は（ｉｘ）のラジカルであり、
【化３】
0006353849.tif 000094
ｊは、１〜６の整数であり、
ｋは、０〜５の整数であり、
Ｒ６は、Ｈ、ＳＯ３Ｈ、場合により放射標識されているアシル基であるか、又はＲ６は、Ｃ（＝Ｏ）Ｒ８であり、Ｒ８はアリール又はアラルキルであり、
Ｒ７は、Ｈ又はＳＯ３Ｈであり、
且つ、
ＹはＣであり、
ＸはＯであり、
Ｂは（ＣＨ２）ｐであり、
Ａ、Ｅ及びＤは、すべてＣＨ２であり、
Ｒ１は、Ｈ、ＮＨＺ若しくはＣ１〜６アルキルであり、Ｒ２は、式（ｉ）のラジカル、式（ｉｉ）のラジカル、若しくは式（ｉｉ）（ａ）のラジカルであり、
【化４】
0006353849.tif 000095
Ｚは、Ｈ、アシル、Ｃ（Ｏ）（ＣＨ２）ｗＮ（Ｈ）Ｇ、＊ＣＨ３＊Ｃ（Ｏ）−（＊Ｃは、１３Ｃ又は１４Ｃを意味する）、４−カルボキシテトラメチルローダミン、レゾルシノールフタレイン、７−アミノ−４−メチル−６−スルホクマリン−３−酢酸、４，４−ジフルオロ−４−ボラ−３ａ，４ａ−ジアザ−ｓ−インダセン）、若しくは１−｛３−｛［４−（２−シクロオクチン−１−イルメチル）ベンゾイル］アミノ｝プロピル｝−４−｛２−［４−（ジメチルアミノ）フェニル］エテニル｝ピリジニウムヘキサフルオロホスファートであり、
ｗは、１〜１１の整数であり、
Ｇは、Ｈ、アシル、ｔ−ブトキシカルボニル、２，２，２−トリクロロエチルオキシカルボニル、９−フルオレニルメトキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル、＊ＣＨ３＊Ｃ（Ｏ）−（＊Ｃは、１３Ｃ又は１４Ｃを意味する）、４−カルボキシテトラメチルローダミン、レゾルシノールフタレイン、７−アミノ−４−メチル−６−スルホクマリン−３−酢酸、４，４−ジフルオロ−４−ボラ−３ａ，４ａ−ジアザ−ｓ−インダセン、又は１−｛３−｛［４−（２−シクロオクチン−１−イルメチル）ベンゾイル］アミノ｝プロピル｝−４−｛２−［４−（ジメチルアミノ）フェニル］エテニル｝ピリジニウムヘキサフルオロホスファートであり、
又は、
ＹはＣであり、
ＸはＯであり、
Ｂは（ＣＨ２）ｐであり、
Ａ、Ｅ及びＤは、すべてＣＨ２であり、
Ｒ１及びＲ２は、どちらも同じ、式（ｉ）のラジカル、式（ｉｉ）のラジカル、若しくは式（ｉｉ）（ａ）のラジカルであり、
【化５】
0006353849.tif 000096
Ｔはそれぞれ、（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｘＣＨ２ＣＨ２及びＣＨ２からなる群から独立して選択され、
ｘはそれぞれ独立して、１〜１２の整数であり、
ｎは、１〜１１の整数であり、ただし、Ｔが（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｘＣＨ２ＣＨ２である場合、ｎは１であり、
ｑは、１〜１１の整数であり、
ｍは、１〜１１の整数であり、ただし、Ｔが（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｘＣＨ２ＣＨ２である場合、ｍは１であり、
ｐは、１〜５の整数である］
又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項２】
ＴがそれぞれＣＨ２である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ３が、式（ｉｉｉ）のラジカル又は式（ｉｖ）のラジカルである、請求項１又は請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１及びＲ２が、どちらも同じ、式（ｉ）のラジカル若しくは式（ｉｉ）のラジカルであるか、又はＲ１がＨ、ＮＨＺ、若しくはＣ１〜６アルキルであり、Ｒ２が式（ｉ）のラジカル若しくは式（ｉｉ）のラジカルである、請求項１又は請求項２に記載の化合物。
【請求項５】
少なくとも１つのＴが、（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｘＣＨ２ＣＨ２である、請求項１、３又は４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ５が、式（ｖｉ）、（ｖｉｉ）、（ｖｉｉｉ）、又は（ｉｘ）のラジカルであり、ラジカル（ｖｉ）、（ｖｉｉ）、（ｖｉｉｉ）、又は（ｉｘ）が、ｉｄｏ型糖単位を含有しない、請求項１から５までのいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ５が、式（ｖｉ）、（ｖｉｉ）、（ｖｉｉｉ）、又は（ｉｘ）のラジカルであり、ラジカル（ｖｉ）、（ｖｉｉ）、（ｖｉｉｉ）、又は（ｉｘ）が、ｇｌｕｃｏ型糖単位を含有しない、請求項１から５までのいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ５が、式（ｖｉ）、（ｖｉｉ）、（ｖｉｉｉ）、又は（ｉｘ）のラジカルであり、ラジカル（ｖｉ）、（ｖｉｉ）、（ｖｉｉｉ）、又は（ｉｘ）が、ｇｌｕｃｏ型糖単位とｉｄｏ型糖単位との混合物を含む、請求項１から５までのいずれか一項に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ１及びＲ２が、どちらも同じ、式（ｉｉ）（ａ）のラジカル
【化６】
0006353849.tif 000097
である、請求項１から３まで、又は５から８までのいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１０】
ＹがＣであり、ＸがＯであり、Ａ、Ｅ及びＤがすべてＣＨ２であり、Ｂが（ＣＨ２）ｐであり、
Ｒ１がＨ、ＮＨＺ又はＣ１〜６アルキルであり、
Ｒ２が、式（ｉ）のラジカル、式（ｉｉ）のラジカル、又は式（ｉｉ）（ａ）のラジカルであり、
【化７】
0006353849.tif 000098
Ｚは、Ｈ、アシル、ＣＯ（ＣＨ２）ｗＮ（Ｈ）Ｇ、＊ＣＨ３＊ＣＯ−（＊Ｃは、１３Ｃ又は１４Ｃを意味する）、４−カルボキシテトラメチルローダミン、レゾルシノールフタレイン、７−アミノ−４−メチル−６−スルホクマリン−３−酢酸、４，４−ジフルオロ−４−ボラ−３ａ，４ａ−ジアザ−ｓ−インダセン、又は１−｛３−｛［４−（２−シクロオクチン−１−イルメチル）ベンゾイル］アミノ｝プロピル｝−４−｛２−［４−（ジメチルアミノ）フェニル］エテニル｝ピリジニウムヘキサフルオロホスファートであり、
ｗは、１〜１１の整数であり、
Ｇは、Ｈ、アシル、ｔ−ブトキシカルボニル、２，２，２−トリクロロエチルオキシカルボニル、９−フルオレニルメトキシカルボニル、カルボキシベンジル、＊ＣＨ３＊ＣＯ−（＊Ｃは、１３Ｃ又は１４Ｃを意味する）、４−カルボキシテトラメチルローダミン、レゾルシノールフタレイン、７−アミノ−４−メチル−６−スルホクマリン−３−酢酸、４，４−ジフルオロ−４−ボラ−３ａ，４ａ−ジアザ−ｓ−インダセン、又は１−｛３−｛［４−（２−シクロオクチン−１−イルメチル）ベンゾイル］アミノ｝プロピル｝−４−｛２−［４−（ジメチルアミノ）フェニル］エテニル｝ピリジニウムヘキサフルオロホスファートである、
請求項１から８までのいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１１】
ＹがＣであり、ＸがＯであり、Ａ、Ｅ及びＤがすべてＣＨ２であり、Ｂが（ＣＨ２）ｐであり、
Ｒ１及びＲ２が、どちらも同じ、式（ｉ）のラジカル、式（ｉｉ）のラジカル、又は式（ｉｉ）（ａ）のラジカル
【化８】
0006353849.tif 000099
である、請求項１から８までのいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｒ５が式（ｖｉｉｉ）のラジカルであり、ｊが１である、請求項１から１１までのいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１３】
Ｒ５が式（ｉｘ）のラジカルであり、ｋが０又は１である、請求項１から１１までのいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１４】
ｐが１である、請求項１から１３までのいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１５】
ｑが６である、請求項１から１４までのいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１６】
ｎが７である、請求項１から１５までのいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１７】
ｍが７である、請求項１から１６までのいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１８】
ｘが３である、請求項１から１５までのいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１９】
【化９−１】
0006353849.tif 000100
【化９−２】
0006353849.tif 000101
【化９−３】
0006353849.tif 000102
【化９−４】
0006353849.tif 000103
【化９−５】
0006353849.tif 000104
【化９−６】
0006353849.tif 000105
【化９−７】
0006353849.tif 000106
【化９−８】
0006353849.tif 000107
からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物、
又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項２０】
薬学的に有効な量の請求項１から１９までのいずれか一項に記載の化合物、及び場合により薬学的に許容される担体、賦形剤、又は添加剤を含む、医薬組成物。
【請求項２１】
ＢＡＣＥ−１を阻害することが望ましい疾患又は障害を処置又は予防するための、薬学的に有効な量の請求項１から１９までのいずれか一項に記載の化合物を含む医薬組成物。
【請求項２２】
疾患又は障害が神経変性障害である、請求項２１に記載の医薬組成物。
【請求項２３】
疾患又は障害が、老人性認知症、初老性認知症、多発脳梗塞性認知症、又はアルツハイマー病である、請求項２２に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、一般に、樹状化合物、医薬品としてのこれらの化合物の使用、該化合物を含有する医薬組成物、該化合物を調製する方法、及びβ−セクレターゼを阻害することが望ましい疾患又は状態を処置する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
集団が高齢化するにつれて、アルツハイマー病などの老齢の神経変性障害が、一層増えている。アルツハイマー病は、認知症の一般的な形態であり、進行性且つ不可逆性である。この疾患の病因は、凝集したアミロイドβ−ペプチドの大脳での沈着物が関与していると考えられている。アミロイドβ−ペプチド生成の第１（及び律速）段階は、β−セクレターゼ（β−位アミロイド前駆タンパク質切断酵素−１、すなわちβ−セクレターゼ−１、これ以降「ＢＡＣＥ−１」）によるアミロイド前駆タンパク質の切断である。これにより、ＢＡＣＥ−１は新しいアルツハイマー病治療にとって、魅力的な標的となっている。
【０００３】
ヘパラン硫酸（ＨＳ）及びその高度に硫酸化されている類似体のヘパリンは、ＢＡＣＥ−１活性を阻害することが示されている。ＨＳ及びヘパリンはどちらも、Ｎ−アセチル−α−Ｄ−グルコサミン（ＨＳの場合に優位）又はＮ−スルホ−α−Ｄ−グルコサミン（ヘパリンの場合に優位）とβ−Ｄ−イズロン酸又はα−Ｌ−イズロン酸とが１，４−連結している二糖単位、及びさらなるＯ−硫酸エステル置換基を含む、グリコサミノグリカンである。ヘパリンは、抗凝血活性を有する周知の医薬品である。しかし、ヘパリンを他の医薬用途に使用しようとする場合、その抗凝血特性を弱める必要があり、さもなければ、内部出血及び血液凝固の悪化などの考えられる副作用が問題となる恐れがある。
【０００４】
ＢＡＣＥ−１の阻害剤である、さらなるオリゴ糖が必要とされている。さらに、こうしたオリゴ糖が合成である場合、言い換えると、これらがｄｅ  ｎｏｖｏ合成され得る場合、それらは、十分な特徴づけがなされている単一の化学的実体であるのが有利であると思われる。これにより、それらを医薬品としての使用を魅力あるものにすると思われる。しかし、長直鎖のヘパラン硫酸ミミックは複雑であり、合成するには高価となる恐れがある。デンドリマー構築物は、強固な結合に必要な複数の結合エピトープを供給し、合成的に調製するのがより簡単であると思われる。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
したがって、本発明の目的は、ＢＡＣＥ−１の阻害剤である化合物を提供すること、又は少なくとも有用な選択肢を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
第１の態様では、本発明は、式（Ｉ）の化合物
【化１】
0006353849.tif 000002
［式中、
Ｒ３は、式（ｉｉｉ）のラジカル、式（ｉｖ）のラジカル、又は式（ｉｖ）（ａ）のラジカルであり、
【化２】
0006353849.tif 000003
Ｒ５は、式（ｖ）、（ｖｉ）、（ｖｉｉ）、（ｖｉｉｉ）又は（ｉｘ）のラジカルであり、
【化３】
0006353849.tif 000004
ｊは、１〜６の整数であり、
ｋは、０〜５の整数であり、
Ｒ６は、Ｈ、ＳＯ３Ｈ、場合により放射標識されているアシル基であるか、又はＲ６は、Ｃ（＝Ｏ）Ｒ８であり、Ｒ８はアリール又はアラルキルであり、
Ｒ７は、Ｈ又はＳＯ３Ｈであり、
且つ、
ＹはＯであり、
ＢはＯであり、
Ｒ１及びＲ２は、存在せず、
Ａ、Ｅ、Ｄ及びＸはすべてＣＨ２であるか、若しくはＡ、Ｄ及びＸはすべてＣＨ２であり、Ｅは（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｔ＃ＣＨ２であり、
＃は、その隣接カルボニル基へのＥの結合点を示し、
ｔは、１〜１０の整数であり、
又は、
ＹはＣであり、
Ｒ１及びＲ２は、どちらもＨであり、
Ａ、Ｅ、Ｂ及びＤは、ＣＨ２であり、ＸはＯであり、
又は、
ＹはＣであり、
Ａは（ＣＨ２）ｕであり、
Ｒ１及びＲ２は、どちらもＨであり、
Ｂ、Ｘ、Ｄ及びＥは、すべて存在せず、
ｕは、１〜１０の整数であり、
又は、
ＹはＣであり、
ＸはＯであり、
Ｂは（ＣＨ２）ｐであり、
Ａ、Ｅ及びＤは、すべてＣＨ２であり、
Ｒ１は、Ｈ、ＮＨＺ若しくはＣ１〜６アルキルであり、Ｒ２は、式（ｉ）のラジカル、式（ｉｉ）のラジカル、若しくは式（ｉｉ）（ａ）のラジカルであり、
【化４】
0006353849.tif 000005
Ｚは、Ｈ、アシル、Ｃ（Ｏ）（ＣＨ２）ｗＮ（Ｈ）Ｇ、＊ＣＨ３＊Ｃ（Ｏ）−（＊Ｃは、１３Ｃ又は１４Ｃを意味する）、５−ＴＡＭＲＡ（４−カルボキシテトラメチルローダミン）、フルオレセイン（レゾルシノールフタレイン）、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ３５０（７−アミノ−４−メチル−６−スルホクマリン−３−酢酸）、ＢＯＤＩＰＹ（４，４−ジフルオロ−４−ボラ−３ａ，４ａ−ジアザ−ｓ−インダセン）、若しくはＡｌｋｙｎｅ  ＭｅｇａＳｔｏｋｅｓ  ｄｙｅ６０８（１−｛３−｛［４−（２−シクロオクチン−１−イルメチル）ベンゾイル］アミノ｝プロピル｝−４−｛２−［４−（ジメチルアミノ）フェニル］エテニル｝ピリジニウムヘキサフルオロホスファート）であり、
ｗは、１〜１１の整数であり、
Ｇは、Ｈ、アシル、Ｂｏｃ（ｔ−ブトキシカルボニル）、Ｔｒｏｃ（２，２，２−トリクロロエチルオキシカルボニル）、Ｆｍｏｃ（９−フルオレニルメトキシカルボニル）、Ｃｂｚ（ベンジルオキシカルボニル）、＊ＣＨ３＊Ｃ（Ｏ）−（＊Ｃは、１３Ｃ又は１４Ｃを意味する）、５−ＴＡＭＲＡ（４−カルボキシテトラメチルローダミン）、フルオレセイン（レゾルシノールフタレイン）、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ３５０（７−アミノ−４−メチル−６−スルホクマリン−３−酢酸）、ＢＯＤＩＰＹ（４，４−ジフルオロ−４−ボラ−３ａ，４ａ−ジアザ−ｓ−インダセン）、若しくはＡｌｋｙｎｅ  ＭｅｇａＳｔｏｋｅｓ  ｄｙｅ６０８（１−｛３−｛［４−（２−シクロオクチン−１−イルメチル）ベンゾイル］アミノ｝プロピル｝−４−｛２−［４−（ジメチルアミノ）フェニル］エテニル｝ピリジニウムヘキサフルオロホスファート）であり、
又は、
ＹはＣであり、
ＸはＯであり、
Ｂは（ＣＨ２）ｐであり、
Ａ、Ｅ及びＤは、すべてＣＨ２であり、
Ｒ１及びＲ２は、どちらも同じ、式（ｉ）のラジカル、式（ｉｉ）のラジカル、若しくは式（ｉｉ）（ａ）のラジカルであり、
【化５】
0006353849.tif 000006
Ｔはそれぞれ、（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｘＣＨ２ＣＨ２及びＣＨ２からなる群から独立して選択され、
ｘはそれぞれ独立して、１〜１２の整数であり、
ｎは、１〜１１の整数であり、ただし、Ｔが（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｘＣＨ２ＣＨ２である場合、ｎは１であり、
ｑは、１〜１１の整数であり、
ｍは、１〜１１の整数であり、ただし、Ｔが（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｘＣＨ２ＣＨ２である場合、ｍは１であり、
ｐは、１〜５の整数である］
又は薬学的に許容されるその塩、若しくはそのプロドラッグ
を提供する。
【０００７】
好ましくは、Ｔがそれぞれ、ＣＨ２である。
【０００８】
或いは、好ましくは、少なくとも１つのＴは、ＣＨ２である。
【０００９】
或いは、好ましくは、少なくとも１つのＴは、（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｘＣＨ２ＣＨ２である。
【００１０】
好ましくは、薬学的に許容される塩は、アンモニウム塩、金属塩、又は有機陽イオンの塩、又はそれらの混合物である。より好ましくは、薬学的に許容される塩は、ナトリウム塩である。
【００１１】
好ましくは、ラジカル（ｖｉ）、（ｖｉｉ）、（ｖｉｉｉ）、又は（ｉｘ）は、すべてｇｌｕｃｏ型である。或いは、ラジカル（ｖｉ）、（ｖｉｉ）、（ｖｉｉｉ）、又は（ｉｘ）は、すべてｉｄｏ型であるのが好ましい。
【００１２】
好ましくは、ラジカル（ｖｉ）は、
【化６】
0006353849.tif 000007
である。
【００１３】
或いは、好ましくは、ラジカル（ｖｉ）は、
【化７】
0006353849.tif 000008
である。
【００１４】
好ましくは、ラジカル（ｖｉｉ）は、
【化８】
0006353849.tif 000009
（ｊは、上で定義した通りである）
である。
【００１５】
或いは、好ましくは、ラジカル（ｖｉｉ）は、
【化９】
0006353849.tif 000010
（ｊは、上で定義した通りである）
である。
【００１６】
好ましくは、ラジカル（ｖｉｉｉ）は、
【化１０】
0006353849.tif 000011
（ｊは、上で定義した通りである）
である。
【００１７】
或いは、好ましくは、ラジカル（ｖｉｉｉ）は、
【化１１】
0006353849.tif 000012
（ｊは、上で定義した通りである）
である。
【００１８】
好ましくは、ｊは１である。
【００１９】
好ましくは、ラジカル（ｉｘ）は、
【化１２】
0006353849.tif 000013
（ｋは、上で定義した通りである）
である。
【００２０】
或いは、好ましくは、ラジカル（ｉｘ）は、
【化１３】
0006353849.tif 000014
（ｋは、上で定義した通りである）
である。
【００２１】
好ましくは、ｋは０又は１である。
【００２２】
或いは、好ましくは、ラジカル（ｖｉ）、（ｖｉｉ）、（ｖｉｉｉ）又は（ｉｘ）は、ｇｌｕｃｏ型及びｉｄｏ型糖単位の混合物を含む。
【００２３】
好ましくは、Ｒ６は場合により放射標識されているアセチル基である。
【００２４】
好ましくは、Ｚはアセチルである。
【００２５】
好ましくは、Ｇはアセチルである。
【００２６】
好ましくは、Ｒ１及びＲ２はどちらも、式（ｉ）のラジカル
【化１４】
0006353849.tif 000015
である。
【００２７】
或いは、Ｒ１及びＲ２はどちらも、式（ｉｉ）のラジカル
【化１５】
0006353849.tif 000016
であるのが好ましい。
【００２８】
或いは、Ｒ１及びＲ２はどちらも、式（ｉｉ）（ａ）のラジカル
【化１６】
0006353849.tif 000017
であるのが好ましい。
【００２９】
Ｒ１において、Ｔの１つは（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｘＣＨ２ＣＨ２であり、且つＴの１つはＣＨ２であり、Ｒ２において、Ｔの１つは（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｘＣＨ２ＣＨ２であり、且つＴの１つは、ＣＨ２であるのがさらに好ましい。
【００３０】
Ｒ１及びＲ２の両方において、（Ｔ）ｍは（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｘＣＨ２ＣＨ２であり、（Ｔ）ｎは、（ＣＨ２）ｎであるのがさらに好ましい。或いは、Ｒ１及びＲ２の両方において、（Ｔ）ｍは（ＣＨ２）ｍであり、且つ（Ｔ）ｎは（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｘＣＨ２ＣＨ２であるのが好ましい。
【００３１】
或いは、好ましくは、Ｒ１及びＲ２は、どちらも式（ｉｉ）（ａ）のラジカルであり、Ｔはそれぞれ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｘＣＨ２ＣＨ２であり、式（ｉｉ）（ａ）の各ラジカルにおけるｘはそれぞれ、独立して選択される。
【００３２】
好ましくは、Ｒ３は、式（ｉｉｉ）のラジカル
【化１７】
0006353849.tif 000018
である。
【００３３】
或いは、Ｒ３は、式（ｉｖ）のラジカル
【化１８】
0006353849.tif 000019
であるのが好ましい。
【００３４】
或いは、Ｒ３は、式（ｉｖ）（ａ）のラジカル
【化１９】
0006353849.tif 000020
であるのが好ましい。Ｒ３において、Ｔの１つは、（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｘＣＨ２ＣＨ２であり、且つＴの１つはＣＨ２であるのがさらに好ましい。Ｒ３において、（Ｔ）ｍは（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｘＣＨ２ＣＨ２であり、且つ（Ｔ）ｎは（ＣＨ２）ｎであるのがさらに好ましい。或いは、Ｒ３において、（Ｔ）ｎは（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｘＣＨ２ＣＨ２であり、且つ（Ｔ）ｍは（ＣＨ２）ｍであるのが好ましい。
【００３５】
或いは、好ましくは、Ｒ３は式（ｉｖ）（ａ）のラジカルであり、Ｔはそれぞれ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｘＣＨ２ＣＨ２であり、式（ｉｖ）（ａ）の各ラジカルにおけるｘはそれぞれ、独立して選択される。
【００３６】
Ｒ１は、Ｈ又はＣ１〜６アルキル、例えばＣＨ３又はＣＨ２ＣＨ３であるのが好ましい。或いは、Ｒ１はＮＨ２であるのが好ましい。或いは、Ｒ１は、ＮＨＺであるのが好ましく、ＺがＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｗＮ（Ｈ）Ｇ（例えば、Ｇは、Ｔｒｏｃ（２，２，２−トリクロロエチルオキシカルボニル）、Ｆｍｏｃ（フルオレニルメチルオキシカルボニル）又はＣｂｚ（ベンジルオキシカルボニル））である、ＮＨＺがより好ましい。好ましくは、ｗは７である。
【００３７】
好ましくは、ＹはＯであり、ＢはＯであり、Ｒ１及びＲ２は存在せず、Ａ、Ｅ、Ｄ及びＸはすべてＣＨ２であるか、又はＡ、Ｄ及びＸはすべてＣＨ２であり、Ｅは（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｔＣＨ２であり、ｔは１〜１０の整数、好ましくは１〜２の整数である。
【００３８】
或いは、ＹがＣであり、Ｒ１及びＲ２がどちらもＨであり、Ａ、Ｅ、Ｂ及びＤがＣＨ２であり、ＸがＯであるのが好ましい。
【００３９】
或いは、ＹがＣであり、Ａが（ＣＨ２）ｕであり、Ｒ１及びＲ２がどちらもＨであり、Ｂ、Ｘ、Ｄ及びＥがすべて存在せず、ｕが１〜１０の整数であるのが好ましい。
【００４０】
或いは、
ＹがＣであり、ＸがＯであり、Ａ、Ｅ及びＤがすべてＣＨ２であり、Ｂが（ＣＨ２）ｐであり、
Ｒ１がＨ、ＮＨＺ又はＣ１〜６アルキルであり、
Ｒ２が、式（ｉ）のラジカル、式（ｉｉ）のラジカル、又は式（ｉｉ）（ａ）のラジカルであり、
【化２０】
0006353849.tif 000021
Ｚは、Ｈ、アシル、Ｃ（Ｏ）（ＣＨ２）ｗＮ（Ｈ）Ｇ、＊ＣＨ３＊Ｃ（Ｏ）−（＊Ｃは、１３Ｃ又は１４Ｃを意味する）、５−ＴＡＭＲＡ（４−カルボキシテトラメチルローダミン）、フルオレセイン（レゾルシノールフタレイン）、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ３５０（７−アミノ−４−メチル−６−スルホクマリン−３−酢酸）、ＢＯＤＩＰＹ（４，４−ジフルオロ−４−ボラ−３ａ，４ａ−ジアザ−ｓ−インダセン）、又はＡｌｋｙｎｅ  ＭｅｇａＳｔｏｋｅｓ  ｄｙｅ６０８（１−｛３−｛［４−（２−シクロオクチン−１−イルメチル）ベンゾイル］アミノ｝プロピル｝−４−｛２−［４−（ジメチルアミノ）フェニル］エテニル｝ピリジニウムヘキサフルオロホスファート）であり、
ｗは、１〜１１の整数であり、
Ｇは、Ｈ、アシル、Ｂｏｃ（ｔ−ブトキシカルボニル）、Ｔｒｏｃ（２，２，２−トリクロロエチルオキシカルボニル）、Ｆｍｏｃ（９−フルオレニルメトキシカルボニル）、Ｃｂｚ（カルボキシベンジル）、＊ＣＨ３＊Ｃ（Ｏ）−（＊Ｃは、１３Ｃ又は１４Ｃを意味する）、５−ＴＡＭＲＡ（４−カルボキシテトラメチルローダミン）、フルオレセイン（レゾルシノールフタレイン）、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ３５０（７−アミノ−４−メチル−６−スルホクマリン−３−酢酸）、ＢＯＤＩＰＹ（４，４−ジフルオロ−４−ボラ−３ａ，４ａ−ジアザ−ｓ−インダセン）、又はＡｌｋｙｎｅ  ＭｅｇａＳｔｏｋｅｓ  ｄｙｅ６０８（１−｛３−｛［４−（２−シクロオクチン−１−イルメチル）ベンゾイル］アミノ｝プロピル｝−４−｛２−［４−（ジメチルアミノ）フェニル］エテニル｝ピリジニウムヘキサフルオロホスファート）である
のが好ましい。
【００４１】
好ましくは、Ｒ１はＨ、ＮＨＺ又はＣ１〜６アルキルであり、Ｒ２は式（ｉ）のラジカル
【化２１】
0006353849.tif 000022
である。
【００４２】
或いは、好ましくは、Ｒ１はＨ、ＮＨＺ又はＣ１〜６アルキルであり、Ｒ２は式（ｉｉ）のラジカル
【化２２】
0006353849.tif 000023
である。
【００４３】
或いは、好ましくは、Ｒ１はＨ、ＮＨＺ又はＣ１〜６アルキルであり、Ｒ２は式（ｉｉ）（ａ）のラジカル
【化２３】
0006353849.tif 000024
である。Ｒ２において、（Ｔ）ｍが（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｘＣＨ２ＣＨ２であり、且つ（Ｔ）ｎが（ＣＨ２）ｎであるのがさらに好ましい。或いは、Ｒ２において、（Ｔ）ｍが（ＣＨ２）ｍであり、且つ（Ｔ）ｎが（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｘＣＨ２ＣＨ２であるのが好ましい。或いは、好ましくは、Ｒ２が式（ｉｉ）（ａ）のラジカルであり、Ｔがそれぞれ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｘＣＨ２ＣＨ２であり、式（ｉｉ）（ａ）の各ラジカルにおけるｘはそれぞれ、独立して選択される。
【００４４】
或いは、ＹがＣであり、ＸがＯであり、Ａ、Ｅ及びＤがすべてＣＨ２であり、Ｂが（ＣＨ２）ｐであり、
Ｒ１及びＲ２が、どちらも同じ、式（ｉ）のラジカル、式（ｉｉ）のラジカル、又は式（ｉｉ）（ａ）のラジカル
【化２４】
0006353849.tif 000025
であるのが好ましい。
【００４５】
好ましくは、ＹはＣであり、ＸはＯであり、Ａ、Ｅ及びＤはすべてＣＨ２であり、Ｂは（ＣＨ２）ｐであり、Ｒ１及びＲ２は、どちらも同じ、式（ｉ）のラジカル
【化２５】
0006353849.tif 000026
であり、
Ｒ３は式（ｉｉｉ）のラジカル
【化２６】
0006353849.tif 000027
である。
【００４６】
より好ましくは、ＹはＣであり、ＸはＯであり、Ａ、Ｅ及びＤはすべてＣＨ２であり、Ｂは（ＣＨ２）ｐであり、Ｒ１及びＲ２は、どちらも同じ、式（ｉ）のラジカル
【化２７】
0006353849.tif 000028
であり、
Ｒ３は式（ｉｉｉ）のラジカル
【化２８】
0006353849.tif 000029
であり、
Ｒ５は式（ｉｘ）のラジカル
【化２９】
0006353849.tif 000030
である。
【００４７】
或いは、好ましくは、ＹはＣであり、ＸはＯであり、Ａ、Ｂ、Ｅ及びＤはすべてＣＨ２であり、Ｒ１及びＲ２は、どちらも同じ、式（ｉｉ）のラジカル
【化３０】
0006353849.tif 000031
であり、
Ｒ３は式（ｉｖ）のラジカル
【化３１】
0006353849.tif 000032
である。
【００４８】
或いは、好ましくは、ＹはＣであり、ＸはＯであり、Ａ、Ｂ、Ｅ及びＤはすべてＣＨ２であり、Ｒ１及びＲ２は、どちらも同じ、式（ｉｉ）（ａ）のラジカル
【化３２】
0006353849.tif 000033
であり、
Ｒ３は式（ｉｖ）（ａ）のラジカル
【化３３】
0006353849.tif 000034
である。
【００４９】
より好ましくは、好ましくは、ＹはＣであり、ＸはＯであり、Ａ、Ｂ、Ｅ及びＤはすべてＣＨ２であり、Ｒ１及びＲ２は、どちらも同じ、式（ｉｉ）のラジカル
【化３４】
0006353849.tif 000035
であり、
Ｒ３は式（ｉｖ）のラジカル
【化３５】
0006353849.tif 000036
であり、
Ｒ５は式（ｉｘ）のラジカル
【化３６】
0006353849.tif 000037
である。
【００５０】
好ましくは、ＹはＣであり、Ｒ１及びＲ２は、どちらもＨであり、Ａ、Ｅ、Ｂ及びＤはＣＨ２であり、ＸはＯであり、Ｒ３は式（ｉｉｉ）のラジカル
【化３７】
0006353849.tif 000038
である。
【００５１】
或いは、好ましくは、ＹはＣであり、Ｒ１及びＲ２は、どちらもＨであり、Ａ、Ｅ、Ｂ及びＤはＣＨ２であり、ＸはＯであり、Ｒ３は式（ｉｖ）のラジカル
【化３８】
0006353849.tif 000039
である。
【００５２】
好ましくは、ＹはＣであり、ＸはＯであり、Ａ、Ｂ、Ｅ及びＤはすべてＣＨ２であり、Ｒ１はＨであり、Ｒ２は式（ｉ）のラジカル
【化３９】
0006353849.tif 000040
であり、
Ｒ３は式（ｉｉｉ）のラジカル
【化４０】
0006353849.tif 000041
である。
【００５３】
或いは、好ましくは、ＹはＣであり、ＸはＯであり、Ａ、Ｂ、Ｅ及びＤはすべてＣＨ２であり、Ｒ１はＨであり、Ｒ２は式（ｉｉ）のラジカル
【化４１】
0006353849.tif 000042
であり、
Ｒ３は式（ｉｖ）のラジカル
【化４２】
0006353849.tif 000043
である。
【００５４】
或いは、好ましくは、ＹはＣであり、ＸはＯであり、Ａ、Ｂ、Ｅ及びＤはすべてＣＨ２であり、Ｒ１はＨであり、Ｒ２は式（ｉｉ）のラジカル
【化４３】
0006353849.tif 000044
であり、
Ｒ３は式（ｉｉｉ）のラジカル
【化４４】
0006353849.tif 000045
である。
【００５５】
或いは、好ましくは、ＹはＣであり、ＸはＯであり、Ａ、Ｂ、Ｅ及びＤはすべてＣＨ２であり、Ｒ１はＨであり、Ｒ２は式（ｉ）のラジカル
【化４５】
0006353849.tif 000046
であり、
Ｒ３は式（ｉｖ）のラジカル
【化４６】
0006353849.tif 000047
である。
【００５６】
好ましくは、ＹはＣであり、Ａは（ＣＨ２）ｕであり、Ｒ１及びＲ２はどちらもＨであり、Ｂ、Ｘ、Ｄ及びＥはすべて存在せず、ｕは１〜１０の整数であり、Ｒ３は式（ｉｉｉ）のラジカル
【化４７】
0006353849.tif 000048
である。
【００５７】
或いは、好ましくは、ＹはＣであり、Ａは（ＣＨ２）ｕであり、Ｒ１及びＲ２はどちらもＨであり、Ｂ、Ｘ、Ｄ及びＥはすべて存在せず、ｕは１〜１０の整数であり、Ｒ３は式（ｉｖ）のラジカル
【化４８】
0006353849.tif 000049
である。
【００５８】
好ましくは、ＹはＯであり、ＢはＯであり、Ｒ１及びＲ２は存在せず、Ａ、Ｅ、Ｄ及びＸはすべてＣＨ２であるか、又はＡ、Ｄ及びＸはすべてＣＨ２であり、Ｅは（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｔＣＨ２であり、ｔは１〜１０の整数、好ましくは１〜２の整数であり、Ｒ３は、式（ｉｉｉ）のラジカル
【化４９】
0006353849.tif 000050
である。
【００５９】
或いは、好ましくは、ＹはＯであり、ＢはＯであり、Ｒ１及びＲ２は存在せず、Ａ、Ｅ、Ｄ及びＸはすべてＣＨ２であるか、又はＡ、Ｄ及びＸはすべてＣＨ２であり、Ｅは（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｔＣＨ２であり、ｔは１〜２の整数であり、Ｒ３は、式（ｉｖ）のラジカル
【化５０】
0006353849.tif 000051
である。
【００６０】
好ましくは、ｐは１である。
【００６１】
好ましくは、ｑは３〜１０の整数、例えば４〜９の整数、例えば５〜８の整数、例えば６〜７の整数である。最も好ましくは、ｑは６である。
【００６２】
好ましくは、ｎは３〜１０の整数、例えば４〜９の整数、例えば５〜８の整数、例えば６〜７の整数である。最も好ましくは、ｎは７である。
【００６３】
好ましくは、ｍは３〜１０の整数、例えば４〜９の整数、例えば５〜８の整数、例えば６〜７の整数である。最も好ましくは、ｎは７である。
【００６４】
好ましくは、ＴはそれぞれＣＨ２であり、ｑは３〜１０の整数、例えば４〜９の整数、例えば５〜８の整数、例えば６〜７の整数である。最も好ましくは、ｑは６である。
【００６５】
好ましくは、ＴはそれぞれＣＨ２であり、ｎは３〜１０の整数、例えば４〜９の整数、例えば５〜８の整数、例えば６〜７の整数である。最も好ましくは、ｎは７である。より好ましくは、ＴはそれぞれＣＨ２であり、ｑ及びｎはそれぞれ独立して、３〜１０の整数、例えば４〜９の整数、例えば５〜８の整数、例えば６〜７の整数である。
【００６６】
或いは、好ましくは、少なくとも１つのＴはＣＨ２であり、ｑは３〜１０の整数、例えば４〜９の整数、例えば５〜８の整数、例えば６〜７の整数である。最も好ましくは、ｑは６である。
【００６７】
好ましくは、少なくとも１つのＴはＣＨ２であり、ｎは３〜１０の整数、例えば４〜９の整数、例えば５〜８の整数、例えば６〜７の整数である。最も好ましくは、ｎは７である。
【００６８】
或いは、好ましくは、少なくとも１つのＴは（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｘＣＨ２ＣＨ２であり、ｘは２〜１０の整数、例えば２〜９の整数、例えば２〜８の整数、例えば２〜７の整数、例えば２〜６の整数、例えば２〜５の整数、例えば２〜４の整数である。最も好ましくは、ｘは３である。
【００６９】
より好ましくは、少なくとも１つのＴはＣＨ２であり、ｑは６であり、ｎは７である。
【００７０】
さらにより好ましくは、少なくとも１つのＴはＣＨ２であり、ｐは１であり、ｑは６である。より好ましくは、少なくとも１つのＴはＣＨ２であり、ｐは１であり、ｍは７であり、ｑは６である。
【００７１】
好ましくは、式（Ｉ）の化合物は、
【化５１−１】
0006353849.tif 000052
【化５１−２】
0006353849.tif 000053
【化５１−３】
0006353849.tif 000054
【化５１−４】
0006353849.tif 000055
【化５１−５】
0006353849.tif 000056
【化５１−６】
0006353849.tif 000057
【化５１−７】
0006353849.tif 000058
【化５１−８】
0006353849.tif 000059
【化５１−９】
0006353849.tif 000060
【化５１−１０】
0006353849.tif 000061
からなる群から選択されるか、
又は薬学的に許容されるそれらの塩である。
【００７２】
別の態様では、本発明は、薬学的に有効な量の式（Ｉ）の化合物、及び場合により担体を含む組成物を提供する。
【００７３】
別の態様では、本発明は、薬学的に有効な量の式（Ｉ）の化合物、及び場合により薬学的に許容される担体、賦形剤、又は添加剤を含む医薬組成物を提供する。
【００７４】
別の態様では、本発明は、少なくとも１つの他の化合物、例えば第２の薬物化合物と組み合わせた、式（Ｉ）の化合物を提供する。この他の化合物とは、例えば、オリゴ糖化合物、シロ−イノシトール又はＤ−カイロ−イノシトールなどのシクリトール、アセチルコリンエステラーゼ阻害剤、ニコチン作動性アゴニスト、β−アミロイドを標的とする抗体、β−アミロイドの阻害剤、タウ凝集の阻害剤又はメマンチンとすることができる。
【００７５】
別の態様では、本発明は、ＢＡＣＥ−１を阻害するための式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【００７６】
別の態様では、本発明は、医薬としての式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【００７７】
別の態様では、本発明は、ＢＡＣＥ−１を阻害することが望ましい疾患又は障害を処置又は予防するための、式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【００７８】
別の態様では、本発明は、老人性認知症、初老性認知症、多発脳梗塞性認知症又はアルツハイマー病などの神経変性障害、好ましくはアルツハイマー病を処置又は予防するための、式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【００７９】
別の態様では、本発明は、ＢＡＣＥ−１を阻害することが望ましい疾患又は障害を処置又は予防するための、薬学的に有効な量の式（Ｉ）の化合物を含む医薬組成物の使用を提供する。
【００８０】
別の態様では、本発明は、老人性認知症、初老性認知症、多発脳梗塞性認知症又はアルツハイマー病などの神経変性障害、好ましくはアルツハイマー病を処置又は予防するための、薬学的に有効な量の式（Ｉ）の化合物を含む医薬組成物の使用を提供する。
【００８１】
別の態様では、本発明は、医薬製造に使用するための、式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【００８２】
別の態様では、本発明は、ＢＡＣＥ−１を阻害することが望ましい疾患又は障害を処置又は予防するための、式（Ｉ）の化合物を含む医薬組成物を提供する。
【００８３】
別の態様では、本発明は、老人性認知症、初老性認知症、多発脳梗塞性認知症又はアルツハイマー病などの神経変性障害、好ましくはアルツハイマー病を処置又は予防するための、式（Ｉ）の化合物を含む医薬組成物を提供する。
【００８４】
別の態様では、本発明は、ＢＡＣＥ−１を阻害することが望ましい疾患又は障害を処置又は予防するための、医薬製造における式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【００８５】
別の態様では、本発明は、ＢＡＣＥ−１を阻害することが望ましい疾患又は障害を処置又は予防する方法であって、処置を必要とする患者に薬学的に有効な量の式（Ｉ）の化合物を投与するステップを含む上記方法を提供する。
【００８６】
別の態様では、本発明は、老人性認知症、初老性認知症、多発脳梗塞性認知症又はアルツハイマー病などの神経変性障害、好ましくはアルツハイマー病を処置又は予防する方法であって、処置を必要とする患者に薬学的に有効な量の式（Ｉ）の化合物を投与するステップを含む上記方法を提供する。
【００８７】
別の態様では、本発明は、ＢＡＣＥ−１を阻害することが望ましい疾患又は障害（例えば、老人性認知症、初老性認知症、多発脳梗塞性認知症、又はアルツハイマー病などの神経変性障害、好ましくはアルツハイマー病）を処置又は予防するための、少なくとも１つの他の化合物、例えば第２の薬物化合物、例えばオリゴ糖化合物、シロ−イノシトール又はＤ−カイロ−イノシトールなどのシクリトール、アセチルコリンエステラーゼ阻害剤、ニコチン作動性アゴニスト、β−アミロイドを標的とする抗体、β−アミロイドの阻害剤、タウ凝集の阻害剤又はメマンチンと組み合わせる、式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【００８８】
別の態様では、本発明は、ＢＡＣＥ−１を阻害することが望ましい疾患又は障害（例えば、老人性認知症、初老性認知症、多発脳梗塞性認知症、又はアルツハイマー病などの神経変性障害、好ましくはアルツハイマー病）を処置又は予防する方法であって、少なくとも１つの他の化合物、例えば第２の薬物化合物、例えばオリゴ糖化合物、シロ−イノシトール又はＤ−カイロ−イノシトールなどのシクリトール、アセチルコリンエステラーゼ阻害剤、ニコチン作動性アゴニスト、β−アミロイドを標的とする抗体、β−アミロイドの阻害剤、タウ凝集の阻害剤又はメマンチンと組み合わせて、薬学的に有効な量の式（Ｉ）の化合物を投与するステップを含む上記方法を提供する。式（Ｉ）の化合物及び他の化合物は、個別に、同時に、又は逐次に投与されてもよい。
【００８９】
疾患又は障害には、老人性認知症、初老性認知症、多発脳梗塞性認知症又はアルツハイマー病などの神経変性障害、好ましくはアルツハイマー病が含まれる。
【００９０】
式（Ｉ）の化合物は、上記で定義されている（ａ）〜（ｈ）、及び（ｊ）〜（ｕ）、及び（ｗ）、（ｙ）、及び（ｚ）からなる群から選択することができる。
【００９１】
式（Ｉ）の化合物は、これ以降、「本発明の化合物」と記載する。本発明の化合物には、任意の形態、例えば遊離形態、又は塩若しくは溶媒和物の形態の化合物が含まれる。
【発明を実施するための形態】
【００９２】
定義
用語「Ｃ１〜Ｃ６アルキル」は、最大６個の炭素原子を有する任意の飽和炭化水素ラジカルを意味しており、直鎖及び分岐鎖アルキル基のどちらも含むことが意図される。アルキル基の例には、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソ−プロピル基、ｎ−ブチル基、イソ−ブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔ−ブチル基、ｎ−ペンチル基、１，１−ジメチルプロピル基、１，２−ジメチルプロピル基、２，２−ジメチルプロピル基、１−エチルプロピル基、２−エチルプロピル基、ｎ−ヘキシル基、及び１−メチル−２−エチルプロピル基が含まれる。
【００９３】
用語「アルキレン」は、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル基に対応するジラジカルを意味しており、Ｃ１〜Ｃ１２アルキルが最大１２個の炭素原子を有する任意の飽和炭化水素ラジカルを意味し、且つ直鎖アルキル基を含むことが意図される。アルキレン基の例には、メチレン基及びエチレン基が含まれる。
【００９４】
用語「アシル」は、Ｃ（＝Ｏ）Ｒ’基を意味しており、Ｒ’がＣ１〜Ｃ３０アルキル基であり、Ｃ１〜Ｃ３０アルキルが最大３０個の炭素原子を有する任意の飽和炭化水素ラジカルを意味し、且つ直鎖アルキル基を含むことが意図される。例には、アセチル基が含まれる。
【００９５】
用語「アリール」は、４〜１８個の炭素原子を有する芳香族ラジカルを意味し、複素芳香族ラジカルを含む。例には、単環式基、並びに二環式基及び三環式基などの縮合基が含まれる。例には、フェニル基、インデニル基、１−ナフチル基、２−ナフチル基、アズレニル基、ヘプタレニル基、ビフェニル基、インダセニル基、アセナフチル基、フルオレニル基、フェナレニル基、フェナントレニル基、アントラセニル基、シクロペンタシクロオクテニル基、及びベンゾシクロオクテニル基、ピリジル基、ピロリル基、ピリダジニル基、ピリミジニル基、ピラジニル基、トリアゾリル基（１−Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル及び１−Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル基を含む）、テトラゾリル基、ベンゾトリアゾリル基、ピラゾリル基、イミダゾリル基、ベンゾイミダゾリル基、インドリル基、イソインドリル基、インドリジニル基、プリニル基、インダゾリル基、フリル基、ピラニル基、ベンゾフリル基、イソベンゾフリル基、チエニル基、チアゾリル基、イソチアゾリル基、ベンゾチアゾリル基、オキサゾリル基、及びイソキサゾリル基が含まれる。
【００９６】
用語「アラルキル」は、アルキレン部位に結合しているアリール基を意味し、アリール及びアルキレンは、上で定義した通りである。例には、ベンジル基が含まれる。
【００９７】
本明細書において使用される用語「プロドラッグ」とは、式（Ｉ）の化合物の薬理学的に許容される誘導体であって、この誘導体のインビボ生体変換により、式（Ｉ）において定義されている化合物がもたらされる、上記誘導体を意味する。式（Ｉ）の化合物のプロドラッグは、その修飾体がインビボで切断されて親化合物がもたらされるよう、該化合物中に存在している官能基を修飾することによって調製することができる。通常、式（Ｉ）の化合物のプロドラッグは、エステルプロドラッグの形態であろう。
【００９８】
用語「薬学的に許容される塩」は、アンモニウム塩、金属塩、例えばナトリウム塩若しくは有機陽イオンの塩、又はこれらの混合物などの、無毒性塩が該当することを意図している。
【００９９】
用語「保護基」とは、有機官能基を選択的に保護する基であって、その官能基の化学的性質を一時的にマスキングし、その官能基に影響を及ぼすことなく、分子内の他の部位に操作を行うことを可能にする上記基を意味する。適切な保護基は、当業者に公知であり、例えば、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（３ｒｄ  Ｅｄ．），Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ  Ｉｎｃ（１９９９）において記載されている。保護基の例には、以下に限定されないが、Ｏ−ベンジル、Ｏ−ベンズヒドリル、Ｏ−トリチル、Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル、Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル、Ｏ−４−メチルベンジル、Ｏ−アセチル、Ｏ−クロロアセチル、Ｏ−メトキシアセチル、Ｏ−ベンゾイル、Ｏ−４−ブロモベンゾイル、Ｏ−４−メチルベンゾイル、Ｏ−フルオレニルメトキシカルボニル、及びＯ−レブリノイルが含まれる。
【０１００】
用語「患者」には、ヒト及び非ヒト動物が含まれる。
【０１０１】
用語「処置（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」、「処置する（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」などは、１種若しくは複数の症状の軽減、又は疾患若しくは障害に関連する状態の改善、例えば、認知力の改善、記憶機能の改善を含む。
【０１０２】
用語「予防する（ｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇ）」、「予防（ｐｒｅｖｅｎｔ）」などは、疾患又は障害に関連する１種又は複数の症状の予防を含む。
【０１０３】
当業者は、本発明の化合物が、立体異性体として存在し得ることを理解するであろう。例えば、糖環とカルボキシル基（以下に示されているものなど）とを連結する、結合
【化５２】
0006353849.tif 000062
を含めた、本明細書において示されている構造は、糖のｇｌｕｃｏ型及びｉｄｏ型を含むものと意図される。当業者は、本発明の化合物は、ｇｌｕｃｏ型のみ、ｉｄｏ型のみ、又はｇｌｕｃｏ型とｉｄｏ型との混合物を組み込むことが可能であることも理解しよう。
【化５３】
0006353849.tif 000063
【０１０４】
本発明の化合物
本発明の化合物、特に、例示されているものは、ＢＡＣＥ−１の阻害剤であり、特に、ＢＡＣＥ−１を阻害することが望ましい疾患又は状態、例えば、老人性認知症、初老性認知症、多発脳梗塞性認知症、又はアルツハイマー病などの神経変性障害、特にアルツハイマー病を処置又は予防するための医薬品として有用である。
【０１０５】
本発明の化合物は、遊離塩基の形態、並びに塩及び／又は溶媒和物の形態の両方で有用である。
【０１０６】
理論に拘束されることを望むものではないが、本出願人らは、本発明の化合物が、各樹状構造においてＨＳフラグメントの複数のコピーを使用することにより、「クラスター効果」を実現することができるという仮説を立てている。こうしたクラスター効果は、個々のサブ単位構造の繰返しにより、ＨＳにおいて、通常は弱い個々のサブ単位構造の相互作用が強化され得るので、有利である。
【０１０７】
例２に示される通り、本発明の化合物はＢＡＣＥ−１の阻害剤である。
【０１０８】
有利には、本発明のある種の化合物、例えば化合物１８ｅ、１８ｈ、１８ｂ、１８ｃ、２０ｂ、２０ｃ、２２ａは、ペプチド基質の切断により測定した場合、第Ｘａ因子の抗トロンビンＩＩＩ媒介性相互作用を促進する、測定可能な能力をなんら示さない（例３において記載されている通りである）。本発明の他の化合物は、同一アッセイにおいて測定した場合、ヘパリン対照の活性の＜５％を有する。
【０１０９】
本発明の化合物は、脳スライスアッセイにおいて活性も示す（例４）。脳スライスモデルは、インビボ状況の多くの側面を再現することができる。スライスは、それらが由来する脳領域の組織アーキテクチャを大部分保存しており、無傷の機能性局所シナプス回路を含む、神経活性を維持する。薬物発見過程において脳スライスを使用することにより、脳の神経病理学をモデル化するための動物の長い外科的処置、及びインビボ操作後の、手間のかかる複数の生理学的パラメータのモニタリングがなくなる。スライスに基づくアッセイは、良好な実験的手段をもたらし、細胞外環境の正確な制御を可能にし、神経病理学的転帰に伴う分子の変化間に、明確な相関関係の確立を容易にする。
【０１１０】
アルツハイマー病の重要な特徴は、脳内にアミロイドβ−ペプチド（Ａβ）の不溶性蓄積物の沈着である。このＡβは、それ自体、ＢＡＣＥ−１によるアミロイド前駆タンパク質の段階的な細胞外酵素的切断に起因する。Ａβの蓄積は、アミロイドカスケード仮説によるアルツハイマー病の病理学に対する決定的な推進力である。
【０１１１】
例４、並びに図面１ａ及び１ｂにおいて示されている通り、本発明のある種の化合物、例えば化合物１８ａ（図１ｂにおけるデンドリマー９と呼ぶもの）は、トランスジェニックＴＧ２５７６マウスの脳内のＡβ１−４０の量を低下させる能力があることを実証している。
【０１１２】
本発明の化合物は、経口、非経腸、吸入スプレーによる、局所、直腸、経鼻、舌下、又は埋込みレザバー経由を含む、様々な経路によって、患者に投与することができる。本化合物は、脳内、脳室内、又は髄膜下送達によっても投与することができる。非経腸投与の場合、静脈内、動脈内、筋肉内、又は皮下に注射で投与することができる。
【０１１３】
患者に投与される本発明の化合物の量は、処置される患者の性質、並びに障害の性質及び程度によって、広く変動することになろう。通常、成人に対する投与量は、約０．０１μｇ／ｋｇ〜約１ｇ／ｋｇ、好ましくは約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇの範囲になろう。任意の特定の患者に必要とされる特定の投与量は、患者の年齢、体重、全般的な健康、性別及び食事などの様々な要因に依存するであろう。最適用量は、投与形式、及び疾患又は障害の進行レベルなどの他の要因に依存するであろう。用量は、１日１回投与されてもよく、又は１日当たり２回以上の用量を要することがある。例えば、アルツハイマー患者向けの投与レジメは、朝方に１回用量及び夕方に１回用量を必要とすることがある。或いは、このような患者向けの投与レジメは、１時間毎に４回の用量を必要とすることがある。
【０１１４】
経口投与の場合、本化合物は、固体又は液体製剤、例えば、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、液剤、懸濁剤、シロップ剤、エリキシル剤、及び分散液剤に製剤化することができる。このような製剤は、ここに列挙されていない他の経口投与レジメと同様に、当分野において、周知である。
【０１１５】
非経腸投与の場合、本発明の化合物は、無菌液剤、エマルション剤、及び懸濁液剤に製剤化することができる。
【０１１６】
本発明の化合物は、適切なビヒクルと混合し、次いで圧縮して所望の形状及びサイズにすることができる。本化合物は、結合剤、崩壊剤及び滑沢剤と一緒に、ラクトース、スクロース及びトウモロコシデンプンなどの慣用的な錠剤用基剤を用いて錠剤化することができる。結合剤は、例えば、トウモロコシデンプン又はゼラチンとすることができ、崩壊剤はジャガイモデンプン又はアルギン酸とすることができ、滑沢剤はステアリン酸マグネシウムとすることができる。カプセル剤の形態で経口投与する場合、ラクトース及び乾燥トウモロコシデンプンなどの賦形剤を使用することができる。着色剤、甘味剤又は香味剤などの他の構成要素を添加してもよい。経口投与用の錠剤、カプセル剤又は散剤は、本発明の化合物を最大約９９％含有することができる。
【０１１７】
経口用途向けに液体製剤を必要とする場合、本発明の化合物は、水、エタノールなどの有機溶媒、又は両者の混合物などの薬学的に許容される担体と組み合わせることができ、場合によって、乳化剤、懸濁化剤、緩衝剤、保存剤、及び／又は界面活性剤などの他の添加物を使用してもよい。着色剤、甘味剤又は香味剤も添加することができる。
【０１１８】
本化合物は、水又は生理食塩水などの薬学的に許容される賦形剤中で、注射により投与することもできる。この賦形剤は、エタノール、プロピレングリコール、油、又は薬学的に許容される界面活性剤などの１種又は複数の他の成分を含んでもよい。
【０１１９】
本発明の化合物は、局所投与することもできる。本化合物の局所投与用担体には、鉱物油、液状ワセリン、白色ワセリン、プロピレングリコール、ポリオキシエチレン、ポリオキシプロピレン化合物、乳化性ワックス及び水が含まれる。本化合物は、皮膚又は粘膜に局所投与するためのローション剤又はクリーム剤中の成分として存在することができる。このようなクリーム剤は、１種又は複数の薬学的に許容される担体中に懸濁又は溶解している活性化合物を含有することができる。適切な担体には、鉱物油、一ステアリン酸ソルビタン、ポリソルベート６０、セチルエステルワックス、セテアリールアルコール、２−オクチルドデカノール、ベンジルアルコール及び水が含まれる。
【０１２０】
本発明の化合物はさらに、除放系によって投与することができる。例えば、本発明の化合物は、緩溶解性錠剤又はカプセル剤中に組み込んでもよい。
【０１２１】
本発明の化合物の合成
本発明の化合物は、様々な異なる方法によって調製することができる。下記は、本発明の化合物を合成するための、非限定的な代表的一般法である。
【０１２２】
１．樹状「コア」出発原料の合成
本発明の樹状化合物のための出発原料として使用される「コア」は、以下に記載されている様々な方法によって合成することができる。（注：当業者は、以下のスキーム２〜７が、スクシンイミジル基（単数又は複数）を含有するコアを示していることを認識するであろう。しかし、スクシンイミジル基以外を有するコアも同様に調製することができる。例えば、スクシンイミジル基をヒドロキシルに置きかえた化合物は、周囲温度、及び周囲圧又は５〜５０ｐｓｉ、好ましくは５〜２５ｐｓｉの水素雰囲気下で撹拌した、水性ＴＨＦ、メタノール、エタノール、酢酸エチルなどの溶媒中、ＯＢｎ前駆体（例えば、以下のスキーム２〜７）を炭素担持パラジウム又は炭素担持水酸化パラジウム又は炭素担持白金触媒により処理することによって、調製することができる。
【０１２３】
「四量体の」コアは、ペンタエリスリトールから３工程で合成される化合物１から調製される（スキーム１）。
【化５４】
0006353849.tif 000064
【０１２４】
（Ｈｕｋｋａｍａｋｉ，Ｊ．；Ｐａｋｋａｎｅｎ，Ｔ．Ｔ．Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃａｔａｌｙｓｉｓ  Ａ：Ｃｈｅｍｉｃａｌ  ２００１，１７４，２０５−２１１、参照文献２  Ｎｅｗｃｏｍｂｅ，Ｇ．Ｒ．；Ｍｉｓｈｒａ，Ａ；Ｍｏｏｒｆｉｅｌｄ，Ｃ．Ｎ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２００２，６７，３９５７−３９６０）。
【０１２５】
次に、化合物１は、３−アミノプロパン酸、４−アミノブタン酸、５−アミノペンタン酸、６−アミノヘキサン酸、７−アミノヘプタン酸、８−アミノオクタン酸、９−アミノノナン酸、１０−アミノデカン酸、１１−アミノウンデカン酸、又は１２−アミノドデカン酸などの、適切なアミノ置換カルボン酸との反応により、他のコア化合物に変換される（スキーム２）。
【化５５】
0006353849.tif 000065
【０１２６】
「二量体の」樹状コア（ＹはＣであり、Ｒ１及びＲ２は、どちらもＨである）は、３−アミノプロパン酸、４−アミノブタン酸、５−アミノペンタン酸、６−アミノヘキサン酸、７−アミノヘプタン酸、８−アミノオクタン酸、９−アミノノナン酸、１０−アミノデカン酸、１１−アミノウンデカン酸、又は１２−アミノドデカン酸などの、適切なアミノ置換カルボン酸を使用し、３，３’−（プロパン−１，３−ジイルビス（オキシ）二プロパン酸から調製する（スキーム３）。
【化５６】
0006353849.tif 000066
【０１２７】
本発明の「二量体の」樹状コア化合物（ＹはＣであり、Ａは（ＣＨ２）ｕであり、Ｒ１及びＲ２は、どちらもＨである）は、スキーム４において示されている通り、適切な二酸から調製される。
【化５７】
0006353849.tif 000067
【０１２８】
本発明の「二量体の」樹状コア化合物（ＹはＯであり、Ｅは（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｔＣＨ２である）は、スキーム５において示されている通り、調製される。適切な出発原料には、例えば、３，６，９−トリオキサウンデカン二酸、３，６，９，１２−テトラオキサテトラデカン二酸、又は３，６，９，１２，１５−ペンタオキサヘプタデカン二酸が含まれる。
【化５８】
0006353849.tif 000068
【０１２９】
「三量体の」コア（ＹはＣであり、Ｒ１はＮＨＺである）は、スキーム６に示されている通り、２−アミノ−２−ヒドロキシメチル−プロパン−１，３−ジオールから調製される。当業者は、三量体の樹状コア化合物（Ｒ１がＮＨ２である）を使用して、Ｒ１位における置換をさらに行うことができることを認識するであろう。例えば、こうした化合物は、放射又は蛍光標識に連結することができ、又はアミノ官能基を他の官能基に変換することができる。
【化５９】
0006353849.tif 000069
【０１３０】
「三量体の」コア（ＹはＣであり、Ｒ１は、Ｈ、ＣＨ３又はＣＨ２ＣＨ３である）は、それぞれ、２−ヒドロキシメチル−プロパン−１，３−ジオール、１，１，１−トリス（ヒドロキシメチル）エタン、又は１，１，１−トリス（ヒドロキシメチル）プロパンから調製される（スキーム７）。
【化６０】
0006353849.tif 000070
【０１３１】
２．グリコシド単位の合成
コア出発原料に結合することができるグリコシドとして使用されるか、又はこれを調製するために使用される単糖、二糖及び四糖単位は、ＷＯ２０１２／１２１６１７において記載されている通り合成することができる。
【０１３２】
スキーム８は、本発明の四量体、三量体、及び二量体化合物を調製するために使用することができる、グリコシド合成の一般法を示している。
【０１３３】
（注：スキーム８〜１２、ｆ、ｇ、ｒ、及びｊは、それぞれ独立して、０〜６の整数である。）
【化６１−１】
0006353849.tif 000071
【化６１−２】
0006353849.tif 000072
【０１３４】
３．本発明の樹状化合物の合成
「コア」出発原料は、遊離アミノ基を有するグリコシドに結合することができ、これにより、本発明の樹状化合物の調製が可能となる。カップリング手順は、適切な溶媒（例えば、ＤＭＦ、ＤＭＳＯ、水）、少量の塩基、例えばトリエチルアミン、及び適切なグリコシド（少なくとも約２当量のグリコシド、例えば約２．２当量のグリコシドが二量体のコアとのカップリングに使用され、少なくとも約３当量のグリコシド、例えば約３．３当量のグリコシドが三量体のコアとのカップリングに使用され、少なくとも約４当量のグリコシド、例えば約４．４当量のグリコシドが四量体のコアとのカップリングに使用される）を必要とする。
【０１３５】
スキーム９〜１２は、四量体、三量体、及び二量体のコアにグリコシドをカップリングする一般法を示している。（注：当業者は、明瞭性のため、基（ＣＨ２）ｐは、スキーム９及び１０の最初の構造において示されているだけであるが、スキーム中の残りの構造中に含まれているものとして読み取るものと意図されていることを認識するであろう。さらに、スキーム９及び１１において示されている化合物は、ＴがそれぞれＣＨ２であるものであるが、当業者は、１つ又は複数のＴが（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｘＣＨ２である化合物も、スキーム９及び１１において示されている手順に従って、合成することができることを理解するであろう。）
【化６２−１】
0006353849.tif 000073
【化６２−２】
0006353849.tif 000074
【化６２−３】
0006353849.tif 000075
【化６３−１】
0006353849.tif 000076
【化６３−２】
0006353849.tif 000077
【化６４−１】
0006353849.tif 000078
【化６４−２】
0006353849.tif 000079
【化６５−１】
0006353849.tif 000080
【化６５−２】
0006353849.tif 000081
【図面の簡単な説明】
【０１３６】
【図１ａ】例３において記載されている方法による、様々な濃度のＮＨＡｃ−ＬＭＷＨ（低分子量ヘパリン）の添加による、脳スライスアッセイに存在しているＡβ１−４０の割合を示すグラフである。
【図１ｂ】例３において記載されている方法による、様々な濃度の化合物１８ａ（図１ｂ中、「デンドリマー９」と呼ぶもの）の添加による、脳スライスアッセイに存在しているＡβ１−４０の割合を示すグラフである。
【０１３７】
略語
ＮＭＲ  核磁気共鳴
ＨＲＭＳ  高分解能質量分析法
ＥＳＩ  エレクトロスプレーイオン化
ＴＬＣ  薄層クロマトグラフィー
ＲＴ  室温
ＤＣＭ  ジクロロメタン
ＴＥＭＰＯ  ２，２，６，６−テトラメチルピペリジニルオキシ
ＴＨＦ  テトラヒドロフラン
ＤＭＦ  ジメチルホルムアミド
ＴＭＳ  トリメチルシリル
ＴＭＳ−ジアゾメタン  トリメチルシリル−ジアゾメタン
ＮＨＳ  Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド
ＥＤＣ  １−エチル−３−［３−ジメチルアミノプロピル］カルボジイミド塩酸塩
ＴＣＡ  トリクロロ酢酸
ＤＡＢＣＯ  １，４−ジアザビシクロ［２．２．２］オクタン
ＢＡＩＢ  ［ビス（アセトキシ）ヨード］ベンゼン
【０１３８】
以下の例は、本発明をさらに例示する。本発明は、これらの例に限定されるものではないことを理解されたい。
【実施例】
【０１３９】
（例１）化合物の合成
（例１．１）テトラ−スクシンイミジルエステルの合成
【化６６】
0006353849.tif 000082
【０１４０】
１’の調製
テトラニトリル前駆体（参照文献１、Ｈｕｋｋａｍａｋｉ，Ｊ．；Ｐａｋｋａｎｅｎ，Ｔ．Ｔ．Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃａｔａｌｙｓｉｓ  Ａ：Ｃｈｅｍｉｃａｌ  ２００１，１７４，２０５−２１１）は、ペンタエリスリトールへのアクリロニトリルのマイケル型付加により調製される。テトラニトリルの酸加水分解（参照文献２、Ｎｅｗｃｏｍｂｅ，Ｇ．Ｒ．；Ｍｉｓｈｒａ，Ａ；Ｍｏｏｒｆｉｅｌｄ，Ｃ．Ｎ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２００２，６７，３９５７−３９６０）により、四酸（ｔｅｔｒａａｃｉｄ）が得られる。四酸（１．０ｇ、２．３５ｍｍｏｌ）を乾燥ＤＭＦ（１５ｍＬ）に溶解する。この反応混合物に、室温でＮ−ヒドロキシスクシンイミド（１．６２ｇ、１４．１４ｍｍｏｌ）及び１−エチル−３−［３−ジメチルアミノプロピル］カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ、２．７１ｇ、１４．１４ｍｍｏｌ）を加え、２４時間、撹拌を継続する。この混合物をＤＣＭにより希釈して、水、次に希ＨＣｌ及び水により洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水して濃縮する。残渣を、ＥｔＯＡｃ、次いでＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ、１９：１→９：１→７：１→４：１で溶出したシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製すると、テトラ−スクシンイミジルエステル（１’、１．２ｇ、１．４８ｍｍｏｌ、６３％）が得られる。Ｒｆ＝０．２５（酢酸エチル：ＭｅＯＨ、９：１）。13C-NMR (125MHz, DMSO-D6) δ 170.7, 170.1, 68.7, 65.5, 44.9, 31.5, 25.7. HRMS C33H40N4O20Na (M+Na)+ m/zの計算値835.2134, 実測値835.2128。
【０１４１】
２’の調製
アミノオクタン酸を、塩化チオニルの存在下、ベンジルアルコールと処理すると（参照文献３、Ｐａｔｅｌ，Ｒ．Ｐ；Ｐｒｉｃｅ，Ｓ．Ｊ．Ｏｒｇ  Ｃｈｅｍ．１９６５，３０（１０），３５７５−３５７６）、テトラベンジルエステル（２ｇ、８．１２ｍｍｏｌ）が得られる。これ及びテトラ−スクシンイミジルエステル（１’、１．１ｇ、１．３５ｍｍｏｌ）を、乾燥ＴＨＦ（５５ｍＬ）と乾燥ＤＭＦ（３ｍＬ）との混合物に溶解し、トリエチルアミン（１．５ｍＬ、１０．８３ｍｍｏｌ）により処理する。２４時間、撹拌した後、この混合物を酢酸エチルにより希釈して水により２回洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水して濃縮する。残渣を熱ＥｔＯＡｃに溶解し、結晶をろ別して、取り出す。この母液を濃縮し、残渣をクロロホルム：ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ、５：２：０．５で溶出したシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製すると、テトラ−ベンジルエステル（２’、１．７ｇ、１．２６ｍｍｏｌ、９３％）が得られる。Ｒｆ＝０．３（クロロホルム：酢酸エチル：ＭｅＯＨ、５：２：１）。13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 173.5, 171.2, 136.1, 128.5, 128.2, 128.1, 69.1, 67.4, 66.1, 45.3, 39.5, 36.9, 34.2, 29.6, 29.4, 28.9, 26.7, 26.6, 24.8. HRMS C77H112N4O16Na (M+Na)+ m/zの計算値1371.7971, 実測値1371.7977。
【０１４２】
３’の調製
テトラベンジルエステル（２’、０．５９５ｇ、４４１μｍｏｌ）を乾燥ＴＨＦ（１６ｍＬ）に溶解する。水（４ｍＬ）及び氷酢酸（５滴）を加える。この反応混合物を炭素担持水酸化パラジウム（２０％Ｐｄ、１ｇ）により処理し、周囲温度及び圧力で、水素下３時間撹拌する。この触媒をろ別し、５０％水性ＥｔＯＨにより洗浄する。この溶液を濃縮乾固すると、「長腕の」四酸（３’、０．４２ｇ、４２９μｍｏｌ、９７％）が得られる。この生成物を、さらに精製することなく、次の工程に使用する。Ｒｆ＝０．０（ベースライン、クロロホルム：酢酸エチル：ＭｅＯＨ、５：２：１）。13C-NMR (125MHz, DMSO-D6) δ 174.5, 169.9, 68.8, 67.3, 45.0, 39.0, 38.4, 36.1, 33.8, 29.1, 28.5, 38.4, 26.3, 25.2, 24.5. HRMS C49H87N4O16(M-H)- m/zの計算値987.6117, 実測値987.6110。
【０１４３】
１３ｂの調製
「長腕の」四酸（３’、４２４ｍｇ、４２９μｍｏｌ）を乾燥ＤＭＦ（７ｍＬ）に溶解する。この反応混合物に、室温でＮ−ヒドロキシスクシンイミド（２９６ｍｇ、２．５７ｍｍｏｌ）及び１−エチル−３−［３−ジメチルアミノプロピル］カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ、４９３ｍｇ、２．５７ｍｍｏｌ）を加え、２４時間、撹拌を継続する。この混合物をＤＣＭにより希釈して、水、次に希ＨＣｌ及び水により洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水して濃縮する。残渣を、クロロホルム：酢酸エチル：ＭｅＯＨ、５：２：０．５→５：４：１で溶出したシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製すると、「長腕の」テトラ−スクシンイミジルエステル（１３ｂ、４１５ｍｇ、３０１μｍｏｌ、７０．３％）が得られる。Ｒｆ＝０．２５（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ、９：１）。13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 171.5, 169.4, 168.6, 68.9, 67.4, 45.3, 39.4, 36.7, 30.8, 29.5, 29.4, 28.6, 28.5, 26.6, 25.5, 25.4, 24.4. HRMS C65H100N8O24Na (M+Na)+ m/zの計算値1399.6748, 実測値1399.6737。
【０１４４】
４’の調製
Ｈ２Ｎ（ＰＥＧ）３ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨ（又はＰＥＧアミノ酸）（１．０ｇ、４．５２ｍｍｏｌ）をベンジルアルコール（３０ｍＬ、２８７ｍｍｏｌ）に溶解し、０℃に冷却する。塩化チオニル（６ｍＬ、８２．２ｍｍｏｌ）をゆっくりと滴下して加える。この反応混合物を０℃で１５分間撹拌し、次いで１００℃で５時間加熱する。次に、これをジエチルエーテルにより希釈し、油状残渣を集め、ジクロロメタン：ＭｅＯＨ、９：１→１：１で溶出したシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製すると、ベンジルエステル（４’、１．２ｇ、３．９ｍｍｏｌ、８５％）が得られる。Ｒｆ＝０．１５（ジクロロメタン：ＭｅＯＨ、９：１）。13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 171.6, 135.8, 128.5, 128.2, 128.1, 70.2, 70.14, 70.13, 69.9, 66.7, 66.4, 66.3, 50.0, 39.7, 35.0. HRMS C16H26NO5(M+H)+ m/zの計算値312.1811, 実測値312.1806。
【０１４５】
５’の調製
ベンジルエステル４’（６５ｍｇ、２１０μｍｏｌ）及びテトラ−スクシンイミジルエステル（１３ｂ、５８ｍｇ、４２．１μｍｏｌ）を乾燥ＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解し、トリエチルアミン（４７μＬ、３３６μｍｏｌ）により処理する。２４時間、撹拌した後、この混合物を酢酸エチルにより希釈して水により２回洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水して濃縮する。残渣を熱ＥｔＯＡｃに溶解し、結晶をろ別して、取り出す。この母液を濃縮し、残渣をクロロホルム：ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ、５：２：０．５で溶出したシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製すると、テトラ−ベンジルエステル（５’、７１ｍｇ、３２．８μｍｏｌ、７８％）が得られる。Ｒｆ＝０．３（クロロホルム：酢酸エチル：ＭｅＯＨ、５：２：１）。13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 173.2, 171.3, 135.8, 128.5, 128.2, 128.1, 70.5, 704, 70.2, 69.9, 69.2, 67.5, 66.5, 66.3, 45.3, 39.4, 39.1, 36.9, 36.5, 35.1, 29.6, 29.1, 29.0, 26.7, 25.5。
【０１４６】
６’の調製
テトラベンジルエステル（５’、１６ｍｇ、７．２１μｍｏｌ）を乾燥ＴＨＦ（４ｍＬ）に溶解する。水（１ｍＬ）及び氷酢酸（２滴）を加える。この反応混合物を炭素担持水酸化パラジウム（２０％Ｐｄ、２０ｍｇ）により処理し、周囲温度及び圧力で、水素下３時間撹拌する。この触媒をろ別し、５０％水性ＥｔＯＨにより洗浄する。この溶液を濃縮乾固すると、「長腕の」ＰＥＧ四酸（６’、１３ｍｇ、７．２１μｍｏｌ、９７％）が得られる。この生成物を、さらに精製することなく、次の工程に使用する。Ｒｆ＝０．０（ベースライン、クロロホルム：酢酸エチル：ＭｅＯＨ、５：２：１）。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 176.7, 174.2, 71.4, 71.3, 71.2, 70.6, 68.8, 67.8, 62.8, 48.5, 40.6, 40.3, 37.8, 37.1, 35.8
【０１４７】
７’の調製
「長腕の」ＰＥＧ四酸（６’、１３ｍｇ、７．２１μｍｏｌ）を乾燥ＤＭＦ（１ｍＬ）に溶解する。この反応混合物に、室温でＮ−ヒドロキシスクシンイミド（５．１ｍｇ、４３．２μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（７．６μＬ、４３．２μｍｏｌ）及び１−エチル−３−［３−ジメチルアミノプロピル］カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ、８．３ｍｇ、４３．２μｍｏｌ）を加え、２４時間、撹拌を継続する。この混合物をＤＣＭにより希釈して、水、次に希ＨＣｌ及び水により洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水して濃縮する。残渣を、クロロホルム：酢酸エチル：ＭｅＯＨ、５：２：０．５→５：４：１で溶出したシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製すると、「長腕の」ＰＥＧテトラ−スクシンイミジルエステル（７’、１５ｍｇ、６．８５μｍｏｌ、９４％）が得られる。Ｒｆ＝０．２５（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ、９：１）。
【０１４８】
（例１．２）ジ−スクシンイミジルエステルの合成
【化６７】
0006353849.tif 000083
【０１４９】
１４’の調製
３，６，９−トリオキサウンデカン二酸（５００ｍｇ、２．２５ｍｍｏｌ）を乾燥ＤＭＦ（１０ｍＬ）に溶解する。この反応混合物に、室温でＮ−ヒドロキシスクシンイミド（７８５ｍｇ、６．７５ｍｍｏｌ、３当量）、１−エチル−３−［３−ジメチルアミノプロピル］カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ、１．３２ｇ、６．７５ｍｍｏｌ、３当量）、及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（２．３８ｍＬ、１３．５ｍｍｏｌ）、次いで８−アミノオクタン酸ベンジル（１．６８ｇ、６．７５ｍｍｏｌ、３当量）を加え、４時間撹拌を継続する。この混合物をＤＣＭにより希釈して、水、次に希ＨＣｌ及び水により洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水して濃縮する。残渣を熱ＥｔＯＡｃに溶解し、結晶をろ別して、取り出す。この母液を濃縮し、残渣をクロロホルム：ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨを５：２：０．３で溶出したシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製すると、ジ−ベンジルエステル（１０、１．１ｇ、１．６１ｍｍｏｌ、７１％）が得られる。13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 173.4, 169.9, 136.1, 128.4, 128.3, 128.1, 127.8, 127.7, 65.9, 63.9, 60.3, 39.5, 36.8, 31.9, 30.9, 29.3, 28.8, 26.6, 25.3, 24.7, 24.4, 21.2, 20.9. HRMS C38H56N2O9Na (M+Na)+m/zの計算値707.3884, 実測値707.3876。
【０１５０】
１５’の調製
ジ−ベンジルエステル（１４’、２０４ｍｇ、２９７μｍｏｌ）を乾燥ＴＨＦ（８ｍＬ）に溶解する。水（２ｍＬ）及び氷酢酸（３滴）を加える。この反応混合物を炭素担持水酸化パラジウム（２０％Ｐｄ、０．５ｇ）により処理し、周囲温度及び圧力で、水素下３時間撹拌する。この触媒をろ別し、５０％水性ＥｔＯＨにより洗浄する。この溶液を濃縮乾固すると、「長腕の」二酸（１５’、１５０ｍｇ、２９７μｍｏｌ、９９．８％）が得られる。この生成物を、さらに精製することなく、次の工程に使用する。Ｒｆ＝０．０（ベースライン、クロロホルム：酢酸エチル：ＭｅＯＨ、５：２：１）。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 178.1, 175.3, 172.9, 72.3, 71.7, 71.6, 40.4, 35.5, 30.9, 30.6, 30.5, 28.3, 26.5. HRMS C24H44N2O9Na (M+Na)+ m/zの計算値527.2945, 実測値527.2943。
【０１５１】
３３ａの調製
「長腕の」二酸（１５’、１５０ｍｇ、２９７μｍｏｌ）を乾燥ＤＭＦ（４ｍＬ）に溶解する。この反応混合物に、室温でＮ−ヒドロキシスクシンイミド（１０４ｍｇ、８９２μｍｏｌ）、１−エチル−３−［３−ジメチルアミノプロピル］カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ、１７４ｍｇ、８９２μｍｏｌ）、及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１５７ｍＬ、８９２μｍｏｌ）を加え、２４時間、撹拌を継続する。この混合物をＤＣＭにより希釈し、水、次に希ＨＣｌ及び水により洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水して濃縮する。残渣をクロロホルム：酢酸エチル：ＭｅＯＨ、５：２：０．５→５：４：１で溶出したシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製すると、「長腕の」ジ−スクシンイミジルエステル（３３ａ、１８８ｍｇ、２６９μｍｏｌ、９０％）が得られる。Ｒｆ＝０．２５（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ、９：１）。13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 170.9, 169.9, 169.5, 168.5, 70.7, 70.6, 70.5, 70.4, 70.0, 38.7, 31.4, 30.7, 29.4, 28.6, 28.5, 28.4, 26.5, 25.5, 24.4. HRMS C32H50N4O13Na (M+Na)+ m/zの計算値721.3272, 実測値721.3259。
【０１５２】
（例１．３）樹状クラスター化合物の合成
６ｅの調製（スキーム８）
チオグリコシド供与体（ＷＯ２０１２／１２１６１７）（１ｇ、２．２ｍｍｏｌ）及びＣｂｚ保護ヘキサ−アミノアルコール（Ｃｈｉｐｏｗｓｋｙ，Ｓ．；Ｌｅｅ，Ｙ．Ｃ．Ｃａｒｂ．Ｒｅｓ．，１９７３，３１，３３９−３４６）（１ｇ、４．３ｍｍｏｌ、２．０当量）を無水ジクロロメタン（２０ｍＬ）に溶解して−１５℃に冷却し、粉末モレキュラーシーブ（４Å）を加える。１０分後、Ｎ−ヨードスクシンイミド（８３６ｍｇ、３．７ｍｍｏｌ、１．７当量）及びトリフルオロメタンスルホン酸銀（２８１ｍｇ、１ｍｍｏｌ、０．５当量）を加える。この反応混合物を１時間かけて、室温まで温める。この混合物を酢酸エチルにより希釈し、セライトによりろ過する。このろ液を飽和水性炭酸水素ナトリウムと水性チオ硫酸ナトリウム（３０％）との１：１混合物により洗浄し、飽和水性塩化ナトリウムにより洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水して濃縮する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ：石油エーテル、１：２）により精製すると、グリコシド６ｅがシロップ（１．３５ｇ、２．０ｍｍｏｌ、９３％）として得られる。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：石油エーテル、１：２  ｖ／ｖ）：Ｒｆ＝０．２５。さらなる精製を行うことなく、化合物６ｆの合成に直接使用する。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ３８Ｈ４８Ｎ２Ｏ９Ｎａ（Ｍ＋Ｎａ）＋計算値ｍ／ｚ６９９．３２５８、測定値６９９．３２５７。
【０１５３】
１２ｄの調製（スキーム８）
化合物６ｆ（０．５６ｇ、０．８２７ｍｍｏｌ）をメタノール（１２ｍＬ）に溶解し、炭素担持水酸化パラジウム（２０％Ｐｄ、５００ｍｇ）により処理する。この反応混合物を周囲温度及び周囲圧力で、水素下、ちょうど２０分間、撹拌する。この触媒をろ別し、ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ、１：１（４０ｍＬ）により洗浄する。この溶液を濃縮乾固し、残渣のクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ：メタノール：アンモニア水、４：１：０．０５）により、化合物１２ｄ（０．４ｇ、０．７５ｍｍｏｌ、９１％）が得られる。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：メタノール：アンモニア水、４：１：０．０５）：Ｒｆ＝０．１５、13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 170.7, 170.4, 138.3, 137.7, 128.5, 128.4, 127.9, 127.8, 99.8, 80.4, 78.5, 78.1, 75.9, 75.4, 75.0, 74.7, 74.6, 72.8, 69.6, 63.3, 57.2, 41.8, 33.0, 29.3, 26.4, 26.1, 25.7, 25.5, 23.5, 20.8.  HRMS (ESI) C30H43N2O7Na (M+H)+ m/zの計算値543.3070, 実測値543.3077。
【０１５４】
１２ａの調製（スキーム８）
化合物１１ａ（０．５６ｇ、０．５２８ｍｍｏｌ）をメタノール（１５ｍＬ）に溶解し、炭素担持水酸化パラジウム（２０％Ｐｄ、５００ｍｇ）により処理する。この反応混合物を周囲温度及び周囲圧力で、水素下、ちょうど１５分間、撹拌する。この触媒をろ別し、ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ、１：１（４０ｍＬ）により洗浄する。この溶液を濃縮乾固し、残渣のクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ：メタノール：アンモニア水、４：１：０．０５）により、化合物１２ａ（０．４５ｇ、０．４９ｍｍｏｌ、９２％）が得られる。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：メタノール：アンモニア水、４：１：０．０５）：Ｒｆ＝０．１５、13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 173.3, 172.7, 170.8, 166.7, 139.8, 139.5, 138.5, 134.8, 130.9, 130.8, 129.9, 129.5, 129.1, 128.9, 128.8, 128.7, 128.6, 102.4, 98.9, 83.7, 81.7, 78.9, 76.2, 75.2, 71.5, 70.9, 63.7, 54.1, 53.5, 40.6, 30.2, 28.4, 26.9, 26.5, 22.9, 20.8.  HRMS (ESI) C51H63N2O14(M+H)+ m/zの計算値927.4279, 実測値927.4270。
【０１５５】
１２ｂの調製（スキーム８）
化合物１１ｂ（１．０ｇ、０．９４２ｍｍｏｌ）をメタノール（２０ｍＬ）に溶解し、炭素担持水酸化パラジウム（２０％Ｐｄ、１ｇ）により処理する。この反応混合物を周囲温度及び周囲圧力で、水素下、ちょうど１５分間、撹拌する。この触媒をろ別し、ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ、１：１（４０ｍＬ）により洗浄する。この溶液を濃縮乾固し、残渣のクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ：メタノール：アンモニア水、４：１：０．０５）により、化合物１２ｂ（０．４２ｇ、０．４５ｍｍｏｌ、４８％）が得られる。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：メタノール：アンモニア水、４：１：０．０５）：Ｒｆ＝０．１５、13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 170.6, 169.9, 169.5, 165.7, 138.0, 137.9, 137.2, 133.7, 129.7, 129.3, 128.9, 128.8, 128.5, 128.4, 128.0, 127.9, 127.7, 127.6, 99.9, 98.3, 80.5, 74.8, 74.0, 72.9, 72.3, 70.4, 68.9, 68.8, 67.6, 62.4, 59.7, 52.6, 52.3, 51.9, 45.4, 36.3, 29.6, 29.3, 27.6, 27.2, 27.0, 25.9, 22.9, 20.8.  HRMS (ESI) C51H63N2O14(M+H)+ m/zの計算値927.4279, 実測値927.4275。
【０１５６】
４ａの調製（スキーム８）
【化６８】
0006353849.tif 000084
トリエチルアミン（８．０ｍＬ）を３ａ（１．８ｇ、１．４２ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（４０ｍＬ）溶液に加え、この溶液を室温で３時間撹拌し、次に、水性ＨＣｌ、水性ＮａＨＣＯ３により洗浄し、乾燥して、濃縮乾固する。（クロマトグラフィー（５〜４０％のＥｔＯＡｃ／トルエン）により、表題化合物が発泡体として得られる（１．１９ｇ、１．１４ｍｍｏｌ、８０％）。1H NMR (CDCl3), δ 8.05 (m, 2H), 7.58 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 7.47-7.44 (m, 2H), 7.41-7.30 (m, 5H), 7.23-7.16 (m, 5H), 5.57 (d, J = 3.9 Hz, 1H), 5.31 (dd, J = 8.8, 7.8 Hz, 1H), 4.94-4.88 (m, 3H), 4.79-4.71 (m, 4H), 4.62-4.57 (m, 2H), 4.51 (dd, J = 12.4, 4.0 Hz, 1H), 4.33 (dd, J = 11.8, 5.4 Hz, 1H), 4.15-4.12 (m, 3H), 4.03 (t, J = 8.5 Hz, 1H), 3.93 (t, J = 9.4 Hz, 1H), 3.86-3.73 (m, 4H), 3.47-3.42 (m, 2H), 3.23 (dd, J = 10.3, 3.9 Hz, 1H), 3.07-3.01 (m, 3H), 2.09 (s, 3H), 1.52-1.42 (m, 2H), 1.32-1.13 (m, 6H). 13C NMR δ 171.87, 167.10, 165.03, 154.51, 137.82, 137.42, 133.38, 129.75, 129.04, 128.65, 128.57, 128.34, 128.18, 128.14, 127.72, 127.64, 100.86, 98.13, 82.99, 79.12,, 75.34, 74.55, 74.46, 74.26, 74.06, 72.40, 71.28, 70.69, 69.78, 64.98, 62.89, 62.65, 41.08, 40.70, 29.42, 29.14, 26.12, 25.47, 20.79. HRMS (ESI) C46H54Cl4N4O15Na [M+Na]+ m/zの計算値1065.2237, 実測値1065.2229。
【０１５７】
１２ｃの調製（スキーム８）
室温で、四糖１１ｃ（６６０ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）を乾燥ＴＨＦ（５ｍＬ）及び氷ＡｃＯＨ（４．５ｍＬ）に溶解する。この反応混合物を、予め活性化したＺｎ（１．９ｇ、２９ｍｍｏｌ、８０当量）により処理し、室温で３．５時間撹拌する。この溶媒を真空で除去し、残渣をクロロホルムに溶解して、氷冷飽和水性炭酸水素ナトリウム及び水により洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水して濃縮すると、グリコシド１２ｃが、発泡体として得られる（６１０ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ、１００％）。ＴＬＣ（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ、１：９  ｖ／ｖ）：Ｒｆ＝０．２。この生成物は非常に純度が高く、さらに精製することなく、次の工程に使用する。13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 170.7, 170.6, 170.2, 170.1, 167.9, 167.5, 164.9, 138.7, 138.1, 137.7, 136.5, 136.4, 133.8, 133.4, 129.8, 129.7, 129.5, 128.8, 128.6, 128.5, 128.4, 128.3, 128.2, 128.1, 128.0, 127.9, 127.8, 127.4, 127.3, 127.1, 101.3, 101.2, 99.5, 99.1, 81.4, 81.2, 80.5, 78.1, 77.2, 77.1, 76.9, 75.4, 75.2, 74.9, 74.8, 74.7, 74.4, 73.8, 73.6, 70.7, 70.2, 70.0., 62.5, 62.2, 61.5, 52.8, 52.7, 52.5, 52.2, 49.6, 49.3, 41.9, 32.6, 30.3, 29.7, 29.4, 29.2, 28.8, 26.8, 26.3, 25.6, 22.6, 22.5, 20.8, 20.7.  HRMS (ESI) C89H104N3O27 (M+H)+m/zの計算値1646.6857, 実測値1646.6847。
【０１５８】
４ｂの調製（スキーム８）
二糖３ｂ（２．４ｇ、２．０ｍｍｏｌ）を乾燥ジクロロメタン（３２ｍＬ）とトリエチルアミン（８ｍＬ）との混合物に溶解し、室温で３時間撹拌する。この混合物をジクロロメタンにより希釈し、希水性ＨＣｌ、水、及び飽和水性塩化ナトリウムにより洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水して濃縮する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル：石油エーテル、１：３→１：２）により精製すると、グリコシド４ｂが発泡体として得られる（１．７５ｇ、１．８ｍｍｏｌ、９０％）。ＴＬＣ（酢酸エチル：石油エーテル、１：３２  ｖ／ｖ）。Ｒｆ＝０．２５。13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 171.7, 171.5, 167.0, 166.1, 156.0, 138.1, 137.7, 137.6, 133.3, 129.9, 129.8, 128.6, 128.5, 128.3, 128.1, 128.0, 127.9, 127.8, 127.7, 127.3, 98.7, 98.4, 82.5, 79.7, 76.1, 75.3, 75.1, 74.9, 74.7, 74.2, 73.6, 73.0, 72.9, 72.6, 72.4, 72.1, 71.3, 71.1, 70.7, 70.6, 70.1, 69.5, 68.8, 66.4, 65.9, 65.4, 65.3, 64.9, 64.1, 63.2, 60.4, 40.7, 40.6, 29.9, 29.7, 29.3, 28.4, 28.1, 26.5, 25.9, 25.6, 20.7, 20.6.  HRMS (ESI) C48H61N4ClO15Na (M+Na)+m/zの計算値991.3720, 実測値991.3711。
【０１５９】
１０の調製（スキーム８）
四糖９ｄ（１１０ｍｇ、６４μｍｏｌ）を乾燥ジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解し、０℃に冷却する。ＴＦＡ（０．５ｍＬ）を加え、室温で１８時間、撹拌する。この混合物をジクロロメタンにより希釈し、飽和水性炭酸水素ナトリウム、水により洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水して濃縮すると、グリコシド１０が発泡体（９８ｍｇ、６１μｍｏｌ、９５％）として得られる。ＴＬＣ（酢酸エチル：石油エーテル、１：２、ｖ／ｖ）：Ｒｆ＝０．２５。この生成物は非常に純度が高く、さらに精製することなく、次の工程に使用する。13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 170.7, 170.5, 169.7, 169.4, 165.7, 165.2, 137.8, 137.7, 137.6, 137.3, 133.4, 130.9, 130.0, 129.9, 129.7, 129.3, 128.8, 128.7, 128.5, 128.4, 128.3, 128.2, 128.1, 127.9, 127.8, 127.6, 99.1, 99.0, 98.9, 98.5, 79.9, 78.7, 76.8, 75.7, 75.6, 75.5, 75.0, 74.8, 74.6, 73.9, 73.6, 72.9, 72.3, 70.5, 70.2, 70.1, 69.7, 68.7, 68.3, 67.5, 64.7, 63.6, 63.5, 62.3, 61.8, 52.1, 52.0, 41.4, 31.9, 30.5, 29.9, 29.7, 26.5, 25.8, 20.8.  HRMS (ESI) C85H96N7O25 (M+H)+m/zの計算値1614.6456, 実測値1614.6440。
【０１６０】
２２ａの調製（スキーム９）
Ｉｄｏ立体配置型四量体２０ｄ（７ｍｇ、１．３μｍｏｌ）を水（１ｍＬ）に溶解する。三酸化硫黄トリメチルアミン錯体（２０ｍｇ、１４４μｍｏｌ）及び炭酸ナトリウム（２０ｍｇ）を室温で加える。この混合物を室温で７２時間撹拌し、シリカゲルカラムの上に注ぎ入れる。残渣をクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール：アンモニア水、７：２：０．５→５：４：１→メタノール：水：アンモニア水、３：１：１）により精製すると、Ｎ−硫酸化四量体２２ａが発泡体（６ｍｇ、１．１μｍｏｌ、８９％収率）として得られる。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：エタノール：水、２：１：１）：Ｒｆ＝０．１２。
【０１６１】
一般手順Ａ（ＧＰＡ）：テトラ−スクシンイミジルエステルとのカップリング
炭素６にリンカーとマスクしていないアミノ官能基とを有するグリコシド（６当量）の乾燥ＤＭＦ（ＤＭＦ１ｍＬ当たり１００ｍｇ）溶液に、室温でテトラ−スクシンイミジルエステル１３ａ又は１３ｂ（１当量）の乾燥ＤＭＦ（ＤＭＦ１ｍＬあたり４０ｍｇ）溶液を加える。この反応混合物をトリエチルアミン（８当量）により処理し、室温で１〜２４時間撹拌する。ＤＭＦを真空で除去し、残渣をＥｔＯＡｃ、次いで酢酸エチル：ＭｅＯＨ、９：１→３：２により溶出したシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製すると、テトラ−スクシンイミジルエステルが得られる。
【０１６２】
１４ｅの合成（スキーム９）
化合物１４ｅは、一般手順Ａの後に、化合物１２ｄ及び１３ａから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル：ＭｅＯＨ、９：１→３：２）により精製すると、四量体１４ｅが発泡体として得られる（１３５ｍｇ、５３．５ｍｍｏｌ、９２％収率）。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ、９：１  ｖ／ｖ）。Ｒｆ＝０．６５。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 173.8, 173.2, 172.5, 140.0, 139.8, 139.4, 129.5, 129.4, 129.1, 129.0, 128.9, 128.8, 128.7, 102.5, 84.4, 79.6, 79.5, 77.2, 76.3, 76.1, 75.8, 74.2, 70.7, 70.6, 70.5, 68.8, 64.3, 62.3, 56.8, 46.7, 40.5, 37.8, 30.5, 27.8, 26.8, 26.3, 23.3, 20.8.  HRMS (ESI) C137H188N8O36Na (M+Na)+m/zの計算値2544.3024, 実測値2544.3049。
【０１６３】
１４ｈの合成（スキーム９）
化合物１４ｈは、一般手順Ａの後に、化合物１２ｄ及び１３ｂから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ→酢酸エチル：ＭｅＯＨ、９：１→３：２）により精製すると、四量体１４ｈが発泡体として得られる（１７６ｍｇ、５７ｍｍｏｌ、９５％収率）。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ、９：１、ｖ／ｖ）。Ｒｆ＝０．５５。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 174.6, 174.2, 172.3, 171.7, 138.4, 138.1, 128.2, 128.1, 127.7, 127.6, 127.4, 101.1, 82.7, 78.2, 77.9, 77.7, 77.4, 75.7, 75.6, 74.8, 74.6, 69.7, 69.3, 67.4, 61.7, 61.0, 55.6, 45.3, 39.3, 39.0, 36.9, 36.5, 36.4, 35.9, 34.8, 32.9, 32.2, 29.8, 29.2, 29.1, 28.9, 28.8, 26.6, 26.5, 26.4, 25.7, 25.4, 25.3, 24.9, 22.2。
【０１６４】
１４ａの合成（スキーム９）
化合物１４ａは、一般手順Ａの後に、化合物１２ａ及び１３ｂから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ→酢酸エチル：ＭｅＯＨ、９：１→４：１）により精製すると、四量体１４ａが発泡体として得られる（３１４ｍｇ、６７．９ｍｍｏｌ、９３％収率）。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ、９：１、ｖ／ｖ）。Ｒｆ＝０．５５。13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 170.6, 169.9, 169.5, 165.7, 156.4, 138.1, 137.9, 137.8, 137.2, 136.7, 133.7, 129.7, 129.3, 129.1, 129.0, 128.8, 128.5, 128.4, 128.2, 128.1, 127.9, 127.7, 127.6, 125.3, 98.9, 98.3, 80.5, 74.8, 74.7, 73.9, 72.9, 72.4, 70.4, 68.9, 68.8, 67.7, 66.5, 62.5, 52.6, 52.4, 40.9, 29.8, 29.2, 26.4, 25.7, 22.9, 21.4, 20.8.  HRMS (ESI) C253H326N12O68Na2[M+2Na]2+ m/z (%)の計算値, 2334.1187 (20), 2334.6204 (65), 2335.1218 (98), 2335.6235 (100), 2336.1250 (80), 2336.6267 (50), 2337.1282 (30); 実測値, 2334.6121 (50), 2335.1125 (85), 2335.6130 (100), 2336.1157 (98), 2336.6216 (85), 2337.1265 (70), 2337.6304 (50), 2338.1331 (40), 2338.6350 (30)。
【０１６５】
１４ｂの合成（スキーム９）
化合物１４ｂは、一般手順Ａの後に、化合物１２ｂ及び１３ｂから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ→酢酸エチル：ＭｅＯＨ、９：１→４：１→メタノール）により精製すると、四量体１４ｂが発泡体として得られる（３９４ｍｇ、８５ｍｍｏｌ、９６％収率）。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ、９：１、ｖ／ｖ）。Ｒｆ＝０．５５。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 173.9, 173.5, 172.5, 172.1, 171.2, 170.2, 165.9, 163.6, 138.5, 138.2, 137.9, 133.5, 129.8, 129.7, 128.9, 128.4, 128.3, 128.2, 128.1, 127.9, 127.8, 127.5, 127.4, 99.2, 97.1, 80.6, 78.3, 78.1, 77.9, 77.8, 74.9, 74.8, 73.7, 73.5, 72.6, 72.5, 72.4, 70.6, 69.7, 69.4, 68.8, 68.7, 68.3, 68.2, 67.6, 62.9, 53.1, 51.9, 49.9, 45.5, 39.4, 39.2, 36.7, 36.1, 35.9, 35.1, 33.3, 32.9, 32.7, 30.7, 29.3, 29.2, 29.1, 28.9, 28.3, 27.0, 26.8, 26.6, 26.5, 25.9, 25.5, 25.2, 25.1。
【０１６６】
１４ｃの合成（スキーム９）
化合物１４ｃは、一般手順Ａの後に、化合物１２ｃ及び１３ｂから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ→酢酸エチル：ＭｅＯＨ、９：１→４：１→メタノール）により精製すると、四量体１４ｃが発泡体として得られる（５４４ｍｇ、０．０７２ｍｍｏｌ、９９％収率）。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ、９：１、ｖ／ｖ）。Ｒｆ＝０．４５。13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 174.2, 172.0, 171.0, 168.5, 168.0, 165.1, 164.8, 163.0, 138.7, 137.9, 137.5, 136.3, 133.7, 133.3, 129.5, 129.3, 128.6, 128.3, 128.1, 127.9, 127.7, 127.3, 126.9, 100.9, 100.8, 97.8, 97.2, 81.9, 80.2, 78.0, 74.5, 74.3, 74.1, 73.4, 69.9, 69.8, 69.5, 69.0, 67.2, 62.2, 61.6, 52.3, 52.0, 51.9, 48.8, 48.6, 48.4, 48.3, 48.1, 47.9, 47.8, 39.1, 38.9, 36.4, 36.2, 35.9, 30.9, 29.3, 29.1, 28.8, 26.5, 26.2, 25.5, 21.9, 20.1。
【０１６７】
１４ｄの合成（スキーム９）
化合物１４ｄは、一般手順Ａの後に、化合物１０及び１３ｂから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ→酢酸エチル：ＭｅＯＨ、９：１→４：１→メタノール）により精製すると、四量体１４ｄが発泡体として得られる（８３ｍｇ、１１．３μｍｏｌ、９３％収率）。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ、９：１、ｖ／ｖ）。Ｒｆ＝０．５５。13C-NMR (125MHz, DMSO-D6) δ 171.9, 171.8, 170.1, 169.9, 169.0, 168.9, 168.5, 164.9, 164.5, 162.3, 137.8, 137.7, 137.5, 133.5, 133.3, 129.4, 129.3, 129.1, 128.8, 128.6, 128.3, 128.2, 128.1, 128.0, 127.8, 127.7, 127.6, 127.5, 127.4, 127.3, 127.2, 98.1, 98.0, 97.7, 97.0, 79.7, 79.2, 78.9, 78.7, 78.3, 77.2, 74.9, 74.3, 74.2, 73.9, 73.5, 73.3, 73.2, 72.5, 72.3, 71.7, 69.7, 69.6, 69.2, 69.1, 68.8, 68.7, 67.9, 67.6, 67.3, 62.5, 62.4, 61.8, 61.6, 51.8, 51.5, 45.0, 39.0, 38.5, 38.3, 38.2, 36.1, 35.7, 35.4, 30.7, 29.1, 29.0, 28.9, 28.7, 28.5, 26.3, 26.2, 25.3, 25.2, 20.4。
【０１６８】
一般手順Ｂ（ＧＰＢ）：グリコシル化−ＴＣＡの化学
トリクロロアセトイミダート供与体（１．３当量）及びグリコシル受容体アルコール（１当量）の無水トルエン（受容体１ｍｍｏｌあたり４０ｍＬ）溶液を反応温度（−１０〜−２０℃の間）まで冷却し、粉末モレキュラーシーブ（４Å）を加え、この懸濁液をこの温度で撹拌する。１５分後、トリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリル（０．３当量）を加え、ＴＬＣ（トルエン／酢酸エチル４：１）により完了するのが示されるまで、この反応混合物を反応温度で撹拌する。この混合物を酢酸エチルにより希釈し、セライトによりろ過して水性炭酸水素ナトリウムに入れ、有機層を水及び飽和水性塩化ナトリウムにより洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水して濃縮する。この残渣をフラッシュクロマトグラフィーにより精製すると、完全に保護されているオリゴ糖が得られる。
【０１６９】
６ａの合成（スキーム８）
【化６９】
0006353849.tif 000085
乾燥ＤＣＭ（１０ｍＬ）中のイミダート７ａ（１．７ｇ、１．６９ｍｍｏｌ）、Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−６−ヒドロキシヘキシルアミン（２ａ）（０．８５ｇ、３．３８ｍｍｏｌ）、及び乾燥４Åモレキュラーシーブ（１．０ｇ）の混合物を１時間撹拌し、次に氷浴中で冷却して、トリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリル（０．０９２ｍＬ、０．５０８ｍｍｏｌ）を加える。３０分後、この反応をトリエチルアミンによりクエンチしてろ過し、ろ液を水性ＮａＨＣＯ３により洗浄して乾燥し、濃縮する。クロマトグラフィー（ヘキサン中の１５〜４０％ＥｔＯＡｃ）により、表題化合物（１．４２ｇ、１．３ｍｍｏｌ、７７％）が得られる。1H NMR (CDCl3) δ 8.05-8.03 (m, 2H), 7.55-7.17 (m, 23H), 5.55 (d, J = 3.9 Hz, 1H), 5.30 (dd, J = 8.7, 7.7 Hz, 1H), 5.08 (bs, 2H), 4.88 (bs, 2H), 4.83 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.77 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 4.73 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 4.60-4.56 (m, 3H), 4.34 (dd, J = 11.8, 5.5 Hz, 1H), 4.27-4.19 (m, 2H), 4.14-4.09 (m, 3H), 4.02 (t, J = 8.5 Hz, 1H), 3.94-3.90 (m, 2H), 3.85-3.82 (m, 2H), 3.74-3.71 (m, 1H), 3.50 (dd, J = 9.8, 8.9 Hz, 1H), 3.44-3.39 (m, 1H), 3.29 (dd, J = 10.4, 3.9 Hz, 1H), 3.04-2.98 (m, 2H), 2.03 (s, 3H), 1.51-1.41 (m, 2H), 1.26-1.12 (m, 6H). 13C NMR δ 170.51, 167.01, 165.00, 156.33, 137.57, 137.48, 137.25, 136.77, 133.33, 129.72, 128.61, 128.53, 128.34, 128.19, 128.13, 128.02, 127.69, 127.61, 100.83, 97.98, 83.35, 82.93, 80.08, 77.90, 75.51, 75.23, 74.76, 74.24, 74.02, 73.17, 72.36, 70.29, 69.76, 67.04, 66.53, 65.03, 63.22, 62.57, 60.38, 40.88, 40.69, 29.65, 29.19, 26.21, 25.48, 20.77. HRMS (ESI) C58H65ClN4O15Na [M+Na]+m/zの計算値, 1115.4033; 実測値, 1115.4033。
【０１７０】
６ｂの合成（スキーム８）
化合物６ｂは、一般手順Ｂの後に、トリクロロアセトイミダート二糖供与体（ＷＯ２０１２／１２１６１７）（１ｇ）及びＣｂｚ保護ヘキサ−アミノアルコール（Ｃｈｉｐｏｗｓｋｙ，Ｓ．；Ｌｅｅ，Ｙ．Ｃ．Ｃａｒｂ．Ｒｅｓ．，１９７３，３１，３３９−３４６）（２．０当量）から調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル：石油エーテル、１：３→１：２）により精製すると、グリコシド６ｂが発泡体として得られる（１．７ｇ、１．５５ｍｍｏｌ、８２％収率）。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：石油エーテル、１：２、ｖ／ｖ）。Ｒｆ＝０．４５。13C-NMR (125MHz, CDCl3) 170.6, 166.9, 166.1, 165.6, 156.4, 137.7, 137.5, 137.4, 136.7, 133.2, 129.9, 129.8, 128.6, 128.5, 128.4, 128.3, 128.1, 127.9, 98.8, 98.4, 80.6, 80.3, 76.8, 75.2, 75.1, 74.7, 74.1, 72.9, 72.4, 70.4, 70.2, 69.7, 68.7, 68.2, 66.5, 65.8, 65.3, 65.2, 63.8, 63.6, 62.7, 60.4, 40.6, 29.8, 29.3, 26.4, 25.9, 25.7, 20.7.  HRMS (ESI) C58H65ClN4O15Na [M+Na]+ m/zの計算値, 1115.4033; 実測値, 1115.4031。
【０１７１】
３ａの合成（スキーム８）
【化７０】
0006353849.tif 000086
イミダート（２．１４ｇ、１．８８ｍｍｏｌ）（１）（ＷＯ２０１２／１２１６１７）及び６−ヒドロキシヘキシルカルバミン酸２，２，２−トリクロロエチル（２ｂ）（１．１０ｇ、３．７６ｍｍｏｌ）を乾燥アセトニトリル（１５ｍＬ）に溶解し、次に濃縮乾固する。残渣を乾燥ジクロロメタン（１５ｍＬ）に溶解し、アルゴン下、トリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリル（０．０６８ｍＬ、０．３７６ｍｍｏｌ）を加えている間、アルゴン下、撹拌しながら氷浴中で冷却する。３０分後、この溶液を水性ＮａＨＣＯ３により洗浄し、乾燥して濃縮乾固する。クロマトグラフィー［ヘキサン中の２５〜６０％（ＥｔＯＡｃ／ＣＨＣｌ３  １：２）］により、表題化合物が発泡体（１．８４ｇ、１．４５ｍｍｏｌ、７７％）として得られる。1H NMR (CDCl3), δ 8.07-8.05 (m, 2H), 7.76-7.74 (m, 2H), 7.61-7.54 (m, 3H), 7.47-7.44 (m, 2H), 7.40-7.37 (m, 2H), 7.30-7.16 (m, 12H), 5.60 (d, J = 3.9 Hz, 1H), 5.31 (dd, J = 8.7, 7.7 Hz, 1H), 4.90 (bs, 1H), 4.87 (t, J = 9.3 Hz, 1H), 4.76-4.72 (m, 4H), 4.66-4.58 (m, 3H), 4.48 (dd, J = 10.5, 6.7 Hz, 1H), 4.38-4.25 (m, 3H), 4.18 (t, J = 6.9 Hz, 1H), 4.14 (s, 2H), 4.09-3.92 (m, 4H), 3.87-3.83 (m, 1H), 3.78-3.74 (m, 1H), 3.45-3.43 (m, 1H), 3.35 (dd, J = 10.3, 3.9 Hz, 1H), 3.08-3.04 (m, 2H), 2.05 (s, 3H), 1.54-1.43 (m, 6H). 13C NMR δ 170.49, 167.05, 165.01, 154.50, 154.14, 143.24, 143.01, 141.32, 137.35, 137.13, 133.40, 129.75, 129.71, 128.58, 128.39, 127.97, 127.89, 127.79, 127.61, 127.25, 125.10, 124.91, 120.11, 100.83, 95.80, 82.79, 77.38, 75.11, 74.88, 74.72, 74.47, 74.25, 73.97, 72.31, 70.39, 69.77, 68.71, 64.98, 62.60, 61.98, 46.71, 41.08, 40.68, 29.44, 29.15, 26.13, 25.47, 20.69. HRMS (ESI) C61H64Cl4N4O17Na [M+Na]+ m/zの計算値1287.2918, 実測値1287.2927。
【０１７２】
６ｃの合成（スキーム８）
【化７１】
0006353849.tif 000087
アセトイミダート供与体（ＷＯ２０１２／１２１６１７）（５ａ）（１．３７ｇ、１．３６ｍｍｏｌ）及び４ａ（１．１９ｇ、１．１４ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液を氷浴中で冷却し、トリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリル（０．０６２ｍＬ、０．３４ｍｍｏｌ）を撹拌しながら加える。３０分後、この溶液を水性ＮａＨＣＯ３により洗浄し、乾燥して濃縮乾固する。クロマトグラフィー（１０〜３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）により、表題化合物がシロップとして得られる。1H NMR (CDCl3) δ 8.07-8.02 (m, 4H), 7.62-7.55 (m, 2H), 7.48-7.42 (m, 4H), 7.37-7.11 (m, 25H), 5.49-5.46 (m, 2H), 5.37 (dd, J = 8.6, 8.1 Hz, 1H), 5.23 (dd, J = 8.8, 7.8 Hz, 1H), 5.10 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.91-4.87 (m, 3H), 4.83-4.79 (m, 2H), 4.72-4.62 (m, 7H), 4.56 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 4.51 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 4.39-4.32 (m, 2H), 4.24-4.08 (m, 6H), 4.01-3.57 (m, 15H), 3.49 (t, J = 9.4 Hz, 1H), 3.41-3.37 (m, 1H), 3.30 (dd, J = 10.3, 3.9 Hz, 1H), 3.22 (dd, J = 10.2, 4.0 Hz, 1H), 3.07-3.03 (m, 2H), 2.02, 2.00 (s, 各3H), 1.50-1.37 (m, 2H), 1.30-1.12 (m, 6H); 13C NMR δ 170.50, 170.44, 166.88, 166.48, 164.99, 164.95, 154.50, 138.30, 137.52, 137.40, 137.32, 137.24, 133.80, 133.35, 129.77, 129.73, 129.05, 128.90, 128.81, 128.61, 128.57, 128.37, 128.32, 128.25, 128.21, 128.11, 128.05, 127.75, 127.69, 127.49, 127.41, 125.32, 100.98, 100.81, 98.08, 97.66, 95.81, 82.95, 82.83, 80.14, 77.81, 77.77, 77.60, 75.58, 75.23, 75.05, 74.72, 74.64, 74.47, 74.20, 74.01, 72.41, 72.32, 70.37, 69.73, 69.68, 65.01, 64.26, 63.23, 62.65, 62.42, 61.90, 41.09, 40.53, 40.47, 29.42, 29.12, 26.10, 25.45, 20.77. HRMS (ESI) C90H98Cl5N7O27Na [M+Na]+ m/z (%)の計算値, 1906.4851 (62), 1907.4885 (61), 1908.4821 (100), 1909.4855 (97), 1910.4792 (64), 1911.4826 (62); 実測値, 1906.4845 (50), 1907.4875 (60), 1908.4772 (100), 1909.4808 (90), 1910.4786 (90), 1911.4829 (70).  HRMS (ESI) C90H98N7Cl5O27Na (M+Na)+ m/zの計算値1906.4851, 実測値1906.4861。
【０１７３】
３ｂの合成（スキーム８）
化合物３ｂは、一般手順Ｂの後に、トリクロロアセトイミダート二糖供与体（ＷＯ２０１２／１２１６１７）（１ｇ）及びＢｏｃ保護ヘキサ−アミノアルコール（２ｄ）（Ｐｉｃｈｏｔ，Ｃ．，Ｄｅｌａｉｒ，Ｔ．，Ｍａｎｄｒａｎｄ，Ｂ．ａｎｄ  Ｌｌａｕｒｏ，Ｍ．Ｆ．；Ｍａｋｒｏｍｏｌ．Ｃｈｅｍ．，１９９３，１９４，１１７−１３５）から調製される。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル：クロロホルム：石油エーテル、１：３：３）により精製すると、グリコシド３ｂが発泡体として得られる（３．０ｇ、２．５６ｍｍｏｌ、８６％収率）。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：石油エーテル、１：２、ｖ／ｖ）。Ｒｆ＝０．４５。13C-NMR (125MHz, CDCl3) 170.5, 166.9, 165.6, 156.0, 154.2, 143.3, 143.1, 141.4, 141.3, 137.7, 137.2, 133.4, 129.9, 129.8, 129.1, 128.7, 128.5, 128.4, 128.3, 128.1, 128.0, 127.8, 127.7, 127.3, 125.1, 124.9, 120.1, 98.9, 98.5, 78.9, 78.2, 75.8, 74.9, 74.6, 72.8, 72.4, 70.2, 69.8, 68.9, 68.5, 68.2, 65.2, 65.0, 63.3, 62.1, 60.4, 46.8, 40.6, 30.0., 29.4, 28.5, 26.6, 25.9, 25.7, 20.7.  HRMS (ESI) C63H71N4ClO17Na (M+Na)+ m/zの計算値1213.4400, 実測値1213.4409。
【０１７４】
６ｄの合成（スキーム８）
化合物６ｄは、一般手順Ｂの後に、トリクロロアセトイミダート二糖供与体（ＷＯ２０１２／１２１６１７）（１ｇ）及びグリコシド４ｂから調製される。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル：石油エーテル、１：１）により精製すると、Ｎ−Ｂｏｃ保護基が一部失われるために中程度の収率で、グリコシド６ｄが発泡体として得られる（１．２ｇ、０．６６ｍｍｏｌ、４５％収率）。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：石油エーテル、１：２、ｖ／ｖ）。Ｒｆ＝０．３５。13C-NMR (125MHz, CDCl3) 170.6, 170.5, 167.1, 167.0, 166.9, 165.9, 165.7, 165.5, 156.0, 137.7, 137.5, 137.3, 136.5, 133.4, 133.3, 129.8, 129.5, 128.7, 128.6, 128.5, 128.4, 128.3, 128.2, 128.1, 128.0, 127.9, 127.7, 98.8, 98.4, 98.1, 97.9, 80.6, 78.9, 77.2, 76.9, 75.6, 75.3, 75.2, 74.9, 74.7, 74.5, 74.1, 73.4, 73.2, 72.4, 70.5, 70.3, 70.1, 69.8, 68.8, 68.2, 67.4, 65.5, 65.2, 65.1, 64.7, 63.9, 63.8, 63.7, 62.7, 62.3, 60.4, 40.6, 40.5, 29.9, 29.7, 29.3, 28.5, 26.5, 25.9, 20.8.  HRMS (ESI) C92H105N7Cl2O27Na (M+Na)+ m/zの計算値1832.6333, 実測値1832.6316。
【０１７５】
一般手順Ｃ（ＧＰＣ）：選択的脱クロロアセチル化
ＤＡＢＣＯ（クロロアセチル基あたり６当量）を、室温で乾燥エタノール（４０μｍｏｌに対し５ｍＬ）中の出発原料に加える。この混合物をアルゴン下、６０〜７０℃で２時間加熱する。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：石油エーテル、３：２）により反応の完了が示された後、Ｄｏｗｅｘ  ５０ＷＸ８−２００イオン交換樹脂を加え、溶液を中和する。１５分後、この樹脂をろ別し、この溶液を濃縮乾固する。クロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ：石油エーテル、３：２）により、ブロックされていない一級ヒドロキシル基を有する生成物が得られる。
【０１７６】
８ａの合成（スキーム８）
【化７２】
0006353849.tif 000088
ＥｔＯＨ（２０ｍＬ）及びピリジン（２ｍＬ）中のクロロアセタート６ａ（１．１ｇ、１．００６ｍｍｏｌ）の溶液に、１，４−ジアザビシクロ（２．２．２）オクタン（０．３３８ｇ、３．０２ｍｍｏｌ）を加え、この溶液を、約７０〜８０℃で３時間加熱する。クロロホルムを加え、この混合物を水、水性ＨＣｌ、水性ＮａＨＣＯ３により洗浄し、乾燥して濃縮する。クロマトグラフィー（２０〜６０％ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）により、生成物８ａが発泡体として得られる（０．９３２ｇ、０．９１６ｍｍｏｌ、９１％）。1H NMR (CDCl3) δ 8.04-8.02 (m, 2H), 7.54-7.15 (m, 23H), 5.62 (d, J = 3.9 Hz, 1H), 5.29 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 5.08 (bs, 2H), 4.89 (bs, 2H), 4.82 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 4.76 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.72 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.65 (bs, 1H), 4.59-4.55 (m, 2H), 4.29 (dd, J = 11.9, 2.0 Hz, 1H), 4.23 (dd, J = 12.0, 4.8 Hz, 1H), 4.07-4.00 (m, 2H), 3.95-3.77 (m, 5H), 3.54-3.41 (m, 3H), 3.27 (dd, J = 10.4, 4.0 Hz, 1H), 3.03-2.98 (m, 2H), 2.03 (s, 3H), 1.51-1.41 (m, 2H), 1.26-1.11 (m, 6H). 13C NMR δ 170.63, 165.01, 156.34, 137.66, 137.53, 137.36, 136.75, 133.26, 129.82, 129.70, 128.57, 128.52, 128.31, 128.10, 128.00, 127.68, 101.18, 97.64, 83.47, 80.17, 78.04, 75.49, 75.18, 74.89, 74.41, 74.29, 72.82, 70.06, 69.88, 66.54, 63.24, 62.96, 61.93, 40.86, 29.64, 29.22, 26.19, 25.46, 20.78。
【０１７７】
８ｂの合成（スキーム８）
化合物８ｂは、一般手順Ｃの後に、化合物６ｂから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ：ＰＥ、１：２→１：１）により精製すると、８ｂが発泡体として得られる（１．８ｇ、１．７７ｍｍｏｌ、９２％収率）。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：ＰＥ、１：２、ｖ／ｖ）：Ｒｆ＝０．１５。13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 170.6, 165.7, 156.5, 137.8, 137.5, 137.4, 136.7, 133.1, 130.1, 129.8, 128.5, 128.4, 128.3, 128.1, 128.0, 127.9, 127.8, 127.7, 98.6, 98.4, 80.7, 80.5, 76.8, 75.8, 75.1, 74.5, 73.5, 72.7, 72.1, 70.3, 69.8, 68.8, 67.8, 67.3, 66.6, 63.9, 63.7, 63.1, 61.7, 60.4, 40.9, 29.8, 29.4, 29.2, 26.3, 25.7, 20.7.  HRMS (ESI) C56H64N4O14Na [M+Na]+ m/zの計算値1039.4317, 実測値1039.4310。
【０１７８】
８ｃの合成（スキーム８）
化合物８ｃは、一般手順Ｃの後に、化合物６ｃから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ：トルエン、１：９→１：１）により精製すると、８ｃが発泡体として得られる（１．６ｇ、０．９２３ｍｍｏｌ、８７％収率）。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：トルエン、２：１、ｖ／ｖ）。Ｒｆ＝０．４５。13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 170.4, 166.9, 166.5, 164.9, 138.2, 137.5, 137.4, 137.3, 137.2, 133.8, 133.3, 129.7, 128.9, 128.8, 128.6, 128.5, 128.4, 128.3, 128.2, 128.1, 128.0, 127.7, 127.5, 127.4, 100.9, 100.8, 98.1, 97.6, 82.9, 82.8, 80.1, 77.0, 76.8, 75.6, 75.2, 75.0, 74.7, 74.6, 74.5, 74.2, 74.0, 72.4, 72.3, 70.3, 69.7, 65.0, 64.3, 63.2, 62.6, 62.4, 61.9, 41.1, 40.5, 29.4, 29.1, 26.1, 25.4, 20.7.  HRMS (ESI) C86H96N7Cl3O25Na (M+Na)+ m/zの計算値1754.5419, 実測値1754.5426。
【０１７９】
８ｄの合成（スキーム８）
化合物５１は、一般手順Ｃの後に、化合物５０から調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ：ＰＥ、１：１→２：１）により精製すると５１が発泡体として得られる（２１５ｍｇ、１４０μｍｏｌ、９３％収率）。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：ＰＥ、３：２、ｖ／ｖ）。Ｒｆ＝０．２５。13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 171.1, 170.6, 170.5, 165.8, 165.7, 156.1, 137.8, 137.5, 137.4, 133.3, 130.3, 130.1, 129.8, 129.7, 128.6, 128.5, 128.4, 128.39, 128.33, 128.2, 128.1, 128.0, 127.9, 127.8, 98.5, 98.2, 98.0, 97.9, 80.6, 79.3, 79.0, 76.9, 75.6, 75.2, 74.9, 74.6, 74.2, 74.0, 73.6, 73.5, 72.9, 72.4, 72.1, 70.3, 70.0, 69.4, 69.0, 68.1, 67.9, 67.2, 64.1, 63.8, 62.7, 62.6, 61.9, 61.7, 60.4, 31.9, 29.7, 29.4, 28.8, 26.4, 25.8, 20.74, 20.73.  HRMS (ESI) C88H103N7O25Na (M+Na)+ m/zの計算値1680.6901, 実測値1680.6919。
【０１８０】
一般手順Ｄ１（ＧＰＤ）：ＴＥＭＰＯ／ＢＡＩＢ酸化及びジアゾメタンによるエステル化
アセトニトリル（３２μｍｏｌに対し５ｍＬ）及び水（０．９ｍＬ）中の出発原料の溶液を、室温で４〜２４時間、ＴＥＭＰＯ（０．２当量）及びＢＡＩＢ（ヒドロキシル基あたり２．５当量）により処理する。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：石油エーテル、３：２）により反応の完了が示された後、クロロホルム及び水を加える。この溶液を希ＨＣｌにより酸性にし、クロロホルムにより逆抽出して乾燥し、濃縮する。残渣を乾燥エーテルに溶解し、ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：石油エーテル、２：３）によりメチルエステルの形成が示されるまで、過剰量の新しく調製したジアゾメタンのエーテル溶液により処理する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ：石油エーテル、２：３）により精製すると、エステルが得られる。
【０１８１】
９ｂの合成（スキーム８）
化合物９ｂは、一般手順Ｄ１の後に、化合物８ｂから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ：ＰＥ、１：２→１：１）により精製すると、９ｂが発泡体として得られる（１．１ｇ、１．０ｍｍｏｌ、８４％収率）。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：ＰＥ、１：１、ｖ／ｖ）：Ｒｆ＝０．７５。13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 170.5, 169.7, 165.5, 156.4, 137.8, 137.7, 136.7, 133.2, 129.9, 129.7, 129.0, 128.7, 128.5, 128.4, 128.3, 128.2, 128.0, 127.9, 127.8, 127.7, 125.3, 99.5, 99.2, 80.1, 76.8, 76.0, 74.8, 74.7, 73.4, 72.3, 70.1, 68.7, 68.0, 67.4, 66.6, 63.8, 62.4, 52.3, 40.9, 29.8, 29.3, 26.5, 25.8, 20.8.  HRMS (ESI) C57H64N4O15Na (M+Na)+ m/zの計算値1067.4266, 実測値1067.4269。
【０１８２】
一般手順Ｄ２（ＧＰＤ）：ＴＥＭＰＯ／ＢＡＩＢ酸化及びＴＭＳ−ジアゾメタンによるエステル化
アセトニトリル（３２μｍｏｌに対し５ｍＬ）及び水（０．９ｍＬ）中の出発原料の溶液を、室温で４〜２４時間、ＴＥＭＰＯ（０．２当量）及びＢＡＩＢ（ヒドロキシル基あたり２．５当量）により処理する。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：石油エーテル、３：２）により反応の完了が示された後、クロロホルム及び水を加える。この溶液を希ＨＣｌにより酸性にし、クロロホルムにより逆抽出して乾燥し、濃縮する。残渣をジエチルエーテル／メタノール（３：２）に溶解し、ＴＭＳ−ジアゾメタンの２Ｍヘキサン溶液（カルボキシラートあたり１．５当量）を０℃で滴下して加える。完了（ＴＬＣ：Ｔｏｌ／ＥｔＯＡｃ  ３：２）後、酢酸（０．５ｍＬ）を加えて、反応をクエンチする。溶媒を真空で蒸発させて、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製すると、エステルが得られる。
【０１８３】
９ａの合成（スキーム８）
【化７３】
0006353849.tif 000089
アセトニトリル（１０ｍＬ）及び水（２ｍＬ）中のアルコール８ａ（０．９３ｇ、０．９１４ｍｍｏｌ）の溶液に、ヨードベンゼンジアセタート（０．５８９ｇ、１．８２９ｍｍｏｌ）及びＴＥＭＰＯ（２，２，６，６−テトラメチルピペリジニルオキシ、遊離ラジカル）（０．０４３ｇ、０．２７４ｍｍｏｌ）を加え、次にこの溶液を室温で２４時間撹拌する。溶媒のほとんどを蒸発させて、クロロホルムを加え、この混合物を２Ｍ水性ＨＣｌにより洗浄して、次に乾燥し濃縮乾固する。粗製残渣のエーテル（１５ｍＬ）とＭｅＯＨ（５ｍＬ）との溶液を氷浴中で冷却し、ヘキサン中２Ｍ（トリメチルシリル）ジアゾメタン（０．４２９ｍｌ、２．７４ｍｍｏｌ）を加える。３０分後、過剰量のジアゾメタンを少量の酢酸によりクエンチし、次にこの溶液を濃縮乾固する。クロマトグラフィー（１０〜４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）により、表題化合物９ａがシロップとして得られる（０．８４４ｇ、０．８０８ｍｍｏｌ、８８％）。1H NMR (CDCl3) δ 8.03-8.01 (m, 2H), 7.55-7.16 (m, 23H), 5.50 (d, J = 3.7 Hz, 1H), 5.32 (dd, J = 8.4, 7.1 Hz, 1H), 5.08 (bs, 2H), 4.87 (bs, 2H), 4.81 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 4.78 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 4.71 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 4.69 (bs, 1H), 4.62 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 4.56 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 4.33-4.27 (m, 2H), 4.22 (dd, J = 12.1, 3.6 Hz, 1H), 4.07 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 4.00 (t, J = 8.5 Hz, 1H), 3.92-3.82 (m, 2H), 3.77 (s, 3H), 3.66-3.63 (m, 1H), 3.51 (t, J = 9.4 Hz, 1H), 3.44-3.39 (m, 1H), 3.29 (dd, J = 10.4, 3.7 Hz, 1H), 3.04-3.00 (m, 2H), 2.03 (s, 3H), 1.51-1.41 (m, 2H), 1.28-1.12 (m, 6H). 13C NMR δ 170.63, 168.63, 164.96, 156.34, 137.66, 137.56, 137.41, 136.79, 133.33, 129.74, 129.68, 128.52, 128.31, 128.04, 127.94, 127.78, 127.72, 101.20, 97.66, 82.26, 80.11, 77.60, 75.48, 75.01, 74.95, 74.49, 74.32, 73.81, 69.89, 69.79, 66.52, 63.40, 62.31, 52.75, 40.89, 29.66, 29.11, 26.23, 25.47, 20.82. HRMS (ESI) C57H64N4O15Na [M+Na]+m/zの計算値, 1067.4266; 実測値, 1067.4269。
【０１８４】
９ｃの合成（スキーム８）
化合物９ｃは、一般手順Ｄ２の後に、化合物８ｃから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ：トルエン、１：９→１：１）により精製すると９ｃが発泡体として得られる（１．０ｇ、０．５６ｍｍｏｌ、７１％収率）。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：ＰＥ、１：１、ｖ／ｖ）：Ｒｆ＝０．７５。13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 170.6, 168.5, 167.7, 164.9, 164.7, 154.5, 138.2, 137.8, 137.6, 137.5, 137.3, 137.2, 133.8, 133.3, 129.9, 129.7, 129.6, 129.1, 128.9, 128.8, 128.5, 128.3, 128.2, 128.1, 128.0, 127.9, 127.8, 127.7, 127.6, 127.5, 125.3, 101.2, 101.1, 97.7, 97.3, 82.6, 80.2, 77.7, 76.8, 75.6, 75.5, 75.3, 75.0, 74.9, 74.8, 74.5, 74.1, 73.8, 73.5, 69.8, 69.1, 63.4, 62.7, 62.2, 61.5, 52.7, 52.1, 41.1, 29.4, 29.0, 26.1, 25.5, 21.5, 20.8.  HRMS (ESI) C88H96N7Cl3O27Na (M+Na)+ m/zの計算値1810.5317, 実測値1810.5317。
【０１８５】
９ｄの合成（スキーム８）
化合物９ｄは、一般手順Ｄ２の後に、化合物８ｄから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ：ＰＥ、１：２→１：１）により精製すると、９ｄが発泡体として得られる（１６５ｍｇ、９６μｍｏｌ、９３％収率）。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：ＰＥ、１：１、ｖ／ｖ）：Ｒｆ＝０．７５。13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 170.7, 170.5, 169.7, 169.4, 165.7, 165.2, 155.9, 137.8, 137.7, 137.6, 137.3, 133.4, 130.0, 129.9, 129.7, 129.4, 128.8, 128.7, 128.5, 128.4, 128.3, 128.2, 128.0, 127.9, 127.8, 127.6, 99.2, 99.1, 98.9, 98.5, 79.9, 79.0, 78.7, 76.8, 75.8, 75.6, 75.5, 75.0, 74.8, 74.6, 73.9, 72.9, 72.3, 70.5, 70.2, 70.1, 69.7, 68.7, 68.2, 67.5, 63.6, 63.5, 62.3, 62.2, 61.8, 60.4, 40.5, 29.9, 29.7, 29.3, 28.5, 26.5, 25.8, 20.8.  HRMS (ESI) C90H103N7O27Na (M+Na)+ m/zの計算値1736.6800, 実測値1736.6814。
【０１８６】
一般手順Ｅ（ＧＰＥ）：アジド基の還元
乾燥ピリジン（２０μｍｏｌに対し１ｍＬ）中の出発原料に、室温でチオール酢酸（２０μｍｏｌあたり１ｍＬ）を加える。この反応混合物を室温で４８〜７２時間撹拌する。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：トルエン、４：１）により反応の完了が示された後、トルエンを加え、この溶液を水、希ＨＣｌ、及びＮａＨＣＯ３溶液（飽和水性）により洗浄し、乾燥して濃縮する。クロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ：トルエン、４：１）により、Ｎ−アセチル化生成物が得られる。
【０１８７】
６ｆの合成（スキーム８）
化合物６ｆは、一般手順Ｅの後に、化合物６ｅから発泡体として調製される。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（トルエン→ＥｔＯＡｃ：トルエン、３：１→１：１）により精製すると、６ｆが得られる（０．９８ｇ、１．４５ｍｍｏｌ、９６％収率）。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：トルエン、１：１、ｖ／ｖ）。Ｒｆ＝０．１５。13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 170.7, 170.4, 156.5, 138.4, 137.7, 136.7, 129.0, 128.5, 128.4, 128.2, 128.0, 127.9, 127.8, 127.7, 125.3, 99.8, 80.5, 78.3, 74.6, 74.5, 72.8, 69.3, 66.5, 63.3, 56.9, 40.7, 29.7, 29.1, 26.1, 25.4, 23.5, 21.4, 20.9.  HRMS (ESI) C38H48N2O9(M+H)+ m/zの計算値699.3258, 実測値699.3257。
【０１８８】
１１ａの合成（スキーム８）
【化７４】
0006353849.tif 000090
ピリジン（３ｍＬ）及びチオ酢酸（３ｍＬ）中のアジド９ａ（０．８４ｇ、０．８０４ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で２４時間撹拌する。次に、トルエンを加え、この溶液を水、水性ＨＣｌ、次いで水性ＮａＨＣＯ３により洗浄し、乾燥して濃縮乾固する。クロマトグラフィー（２０〜６０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）により、生成物が発泡体として得られる（０．６４９ｇ、０．６１２ｍｍｏｌ、７６％）。1H NMR (CDCl3) δ 8.01-7.99 (m, 2H), 7.56-7.52 (m, 1H), 7.43-7.40 (m, 2H), 7.36-7.25 (m, 16H), 7.17-7.12 (m, 4H), 5.81 (d, J = 9.7 Hz, 1H), 5.34 (dd, J = 8.7, 7.0 Hz, 1H), 5.09 (bs, 2H), 4.96 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 4.83 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.78 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.70 (d, J = 10.7 Hz, 1H), 4.68 (bs, 1H), 4.62-4.52 (m, 4H), 4.35 (dd, J = 12.0, 2.1 Hz, 1H), 4.28 (dt, J = 10.0, 3.5 Hz, 1H), 4.21-4.14 (m, 2H), 3.95 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 3.89-3.80 (m, 3H), 3.78 (s, 3H), 3.69 (t, J = 10.0 Hz, 1H), 3.63 (t, J = 9.3 Hz, 1H), 3.43-3.38 (m, 1H), 3.04-3.00 (m, 2H), 2.04 (s, 3H), 1.51-1.40 (m, 2H), 1.36 (s, 3H), 1.27-1.11 (m, 6H). 13C NMR δ 170.69, 170.15, 167.94, 164.97, 156.34, 138.17, 137.73, 136.75, 136.60, 133.48, 129.71, 129.45, 128.67, 128.54, 128.52, 128.47, 128.38, 128.29, 128.17, 128.15, 128.08, 128.05, 127.90, 127.79, 101.44, 100.00, 81.01, 80.81, 77.93, 77.25, 75.52, 75.06, 74.94, 74.80, 73.88, 70.77, 69.98, 66.54, 62.31, 52.92, 52.71, 40.88, 29.67, 29.08, 26.22, 25.45, 22.57, 20.81. HRMS (ESI) C59H68N2O16Na [M+Na]+ m/zの計算値, 1083.4467; 実測値, 1083.4462。
【０１８９】
１１ｂの合成（スキーム８）
化合物１１ｂは、一般手順Ｅの後に、化合物９ｂから発泡体として調製される。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（トルエン→ＥｔＯＡｃ：トルエン、３：１→１：１）により精製すると、１１ｂが得られる（１．０ｇ、０．９５ｍｍｏｌ、９９％収率）。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：トルエン、１：１、ｖ／ｖ）：Ｒｆ＝０．２。13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 170.6, 169.9, 169.5, 165.7, 156.4, 138.1, 137.9, 137.3, 137.2, 136.7, 133.7, 129.8, 129.3, 129.0, 128.9, 128.8, 128.7, 128.5, 128.4, 128.2, 127.9, 127.7, 127.6, 127.3, 125.3, 99.9, 98.3, 81.7, 80.5, 76.8, 75.9, 74.8, 74.7, 74.0, 73.0, 72.7, 72.4, 70.4, 68.9, 68.8, 67.7, 66.5, 62.5, 52.6, 52.3, 40.9, 29.8, 29.2, 26.4, 25.7, 22.9, 21.4, 20.8.  HRMS (ESI) C59H68N2O16Na (M+Na)+ m/zの計算値1083.4467, 実測値1083.4471。
【０１９０】
１１ｃの合成（スキーム８）
化合物１１ｃは、一般手順Ｅの後に、化合物９ｃから発泡体として調製される。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（トルエン→ＥｔＯＡｃ：トルエン、９：１→１：１）により精製すると１１ｃが得られる（６８１ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ、７５％収率）。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：トルエン、４：１、ｖ／ｖ）：Ｒｆ＝０．７５。13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 172.7, 170.7, 170.6, 170.2, 170.1, 167.9, 167.4, 164.9, 154.5, 138.8, 138.1, 137.9, 137.7, 136.5, 136.4, 133.8, 133.5, 136.4, 133.8, 133.5, 129.8, 129.7, 129.5, 129.0, 128.9, 128.8, 128.6, 128.5, 128.3, 128.2, 128.1, 128.0, 127.9, 127.8, 127.7, 127.5, 127.4, 127.3, 127.1, 125.3, 101.3, 101.2, 99.5, 99.2, 81.4, 81.2, 80.5, 78.1, 77.2, 77.1, 76.8, 76.1, 75.4, 75.2, 75.1, 74.9, 74.8, 74.7, 74.5, 74.3, 74.0, 73.8, 73.6, 70.7, 70.2, 69.9, 69.0, 62.2, 61.5, 52.8, 52.7, 52.5, 52.2, 41.0, 29.4, 29.0, 26.1, 25.4, 22.6, 22.5, 21.5, 20.8.  HRMS (ESI) C92H104N3Cl3O29Na (M+Na)+ m/zの計算値1842.5719, 実測値1842.5718。
【０１９１】
一般手順Ｆ（ＧＰＦ）：ゼムプレン（Ｚｅｍｐｌｅｎ）脱Ｏアセチル化
出発原料を、乾燥メタノール（５０μｍｏｌに対し１０ｍＬ）に室温で溶解し、新しく調製した１％ナトリウムメトキシド（１５０ｍｇに対し２０μＬ）溶液により処理する。室温で、この反応混合物の撹拌を２４時間継続する。ＴＬＣ（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ、９：１）により反応の完了が示された後、この溶液を濃縮して乾燥する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ、９：１→５：１）により精製すると、脱Ｏ−アセチル化生成物が得られる。
【０１９２】
１５ｅの合成（スキーム９）
化合物１５ｅは、一般手順Ｆの後に、化合物１４ｅから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ、９：１→５：１）により精製すると、テトラオール１５ｅが発泡体として得られる（８５ｍｇ、３６μｍｏｌ、８３％収率）。ＴＬＣ（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ、９：１、ｖ／ｖ）：Ｒｆ＝０．５５。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 172.4, 171.7, 138.4, 138.1, 128.1, 128.0, 127.7, 127.5, 127.3, 101.1, 82.7, 78.2, 77.9, 77.7, 77.4, 75.7, 74.7, 74.6, 69.2, 67.4, 61.0, 55.5, 45.3, 39.2, 36.5, 29.2, 26.4, 25.5, 22.2.  HRMS (ESI) C129H180N8O32Na (M+Na)+m/zの計算値2376.2601, 実測値2376.2625。
【０１９３】
１４の合成（スキーム９）
化合物１５ｈは、一般手順Ｆの後に、化合物１４ｈから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ、９：１→４：１）により精製すると、テトラオール１５ｈが発泡体として得られる（７２ｍｇ、２４．７μｍｏｌ、７６％収率）。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ、４：１、ｖ／ｖ）：Ｒｆ＝０．５１。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 174.6, 174.2, 172.3, 171.8, 171.2, 139.4, 138.3, 138.2, 137.8, 128.2, 128.1, 128.0, 127.8, 127.7, 127.6, 127.5, 127.4, 101.2, 101.1, 82.7, 77.6, 75.5, 74.8, 74.6, 72.8, 69.4, 69.3, 67.4, 63.0, 60.9, 55.5, 45.3, 39.2, 39.0, 36.9, 36.5, 35.9, 34.8, 32.9, 29.2, 29.1, 28.9, 28.8, 26.6, 26.4, 25.7, 25.4, 24.9, 22.2, 19.9.  HRMS (ESI) C161H240N12O36Na (M+Na)+m/zの計算値2940.7216, 実測値2940.7217。
【０１９４】
一般手順Ｇ（ＧＰＧ）：選択的脱Ｏ−アセチル化
出発原料を乾燥ジクロロメタン（９μｍｏｌに対して２ｍＬ）に０℃で溶解し、塩化アセチル（８０μＬ）を含有している冷乾燥メタノール（４ｍＬ）溶液により処理する。反応混合物の撹拌を０℃で３０分間、次に２３℃で４８時間、継続する。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ）により反応の完了が示された後、ジクロロメタンを加え、この溶液を水及びＮａＨＣＯ３溶液（飽和水性）により洗浄し、乾燥して濃縮する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ、９：１）により精製すると、脱Ｏ−アセチル化生成物が得られる。
【０１９５】
１５ａの合成（スキーム９）
化合物１５ａは、一般手順Ｇの後に、化合物１４ａから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ→ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ、９：１→４：１）により精製すると、テトラオール１５ａが発泡体として得られる（２５０ｍｇ、５６．１μｍｏｌ、９１％収率）。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ、４：１、ｖ／ｖ）。Ｒｆ＝０．５１。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 175.9, 173.8, 173.1, 170.7, 166.7, 140.1, 139.9, 138.4, 134.8, 131.0, 130.8, 129.9, 129.5, 129.46, 129.42, 129.1, 128.8, 128.7, 128.6, 128.5, 128.2, 102.5, 99.1, 83.8, 81.6, 78.9, 76.0, 75.9, 75.8, 75.6, 75.3, 75.2, 73.8, 71.1, 70.7, 68.8, 61.5, 54.2, 53.5, 46.8, 40.5, 40.3, 37.9, 37.2, 30.6, 30.5, 30.3, 30.2, 27.9, 27.6, 27.1, 26.7, 23.1。
【０１９６】
１５ｂの合成（スキーム９）
化合物１５ｂは、一般手順Ｇの後に、化合物１４ｂから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ→ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ、９：１→４：１）により精製すると、テトラオール１５ｂが発泡体として得られる（３４３ｍｇ、７７μｍｏｌ、９６％収率）。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ、４：１、ｖ／ｖ）：Ｒｆ＝０．５１。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 175.2, 173.8, 173.3, 171.6, 167.1, 139.9, 139.8, 139.2, 134.6, 130.9, 130.1, 129.5, 129.4, 129.1, 128.9, 128.8, 128.7, 128.5, 100.4, 98.7, 81.7, 79.4, 76.1, 75.9, 75.7, 74.6, 74.1, 74.0, 73.9, 73.8, 71.6, 70.7, 70.2, 70.1, 70.0, 69.9, 68.8, 62.0, 54.4, 53.1, 51.1, 46.8, 40.5, 37.8, 37.2, 36.1, 34.5, 34.0, 33.8, 30.6, 30.5, 30.3, 30.2, 29.4, 28.2, 28.0, 27.7, 27.6, 27.4, 27.0, 26.7, 26.3, 22.9。
【０１９７】
１５ｃの合成（スキーム９）
化合物１５ｃは、一般手順Ｇの後に、化合物１４ｃから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（クロロホルム→クロロホルム：ＭｅＯＨ、１９：１→９：１→４：１）により精製すると、オクタオール５５が発泡体として得られる（２５５ｍｇ、４０．７μｍｏｌ、８９％収率）。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ、９：１、ｖ／ｖ）：Ｒｆ＝０．６５。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 175.9, 173.8, 173.0, 172.9, 170.4, 170.1, 166.8, 166.5, 140.6, 139.9, 139.8, 138.2, 138.1, 135.3, 134.9, 130.9, 130.8, 130.5, 130.2, 129.9, 129.6, 129.5, 129.2, 129.0, 128.9, 128.8, 128.6, 126.5, 102.5, 102.1, 99.1, 98.8, 83.9, 83.8, 81.6, 79.4, 79.3, 79.2, 78.9, 78.4, 76.2, 76.0, 75.9, 75.7, 75.5, 75.2, 73.9, 73.3, 71.3, 70.7, 68.9, 61.7, 60.4, 54.2, 53.7, 53.4, 46.8, 40.7, 40.5, 38.0, 37.5, 30.7, 30.5, 30.4, 30.3, 28.1, 27.7, 27.2, 26.7, 23.5, 22.2。
【０１９８】
一般手順Ｈ（ＧＰＨ）：Ｏ−硫酸化
乾燥ＤＭＦ（５０ｍｇに対し３ｍＬ）中の出発原料に、三酸化硫黄トリメチルアミン錯体（ヒドロキシル基あたり５当量）を加える。この混合物をアルゴン下、５０〜６０℃で４８〜７２時間、加熱する。ＭｅＯＨ（１ｍＬ）を加え、この混合物を１５分間撹拌し、真空で濃縮する。クロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール：アンモニア水、７：２：０．５）により、Ｏ−硫酸化生成物が得られる。
【０１９９】
１６ｅの合成（スキーム９）
化合物１６ｅは、一般手順Ｈの後に、化合物１５ｅから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール：アンモニア水、７：２：０．５）により精製すると、テトラ−サルファート１６ｅが発泡体（８３ｍｇ、３１ｍｍｏｌ、９６％収率）として得られる。ＴＬＣ（ジクロロメタン：メタノール：アンモニア水、７：２：０．５）：Ｒｆ＝０．１５。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 173.9, 173.3, 140.0, 139.7, 129.3, 128.8, 128.7, 128.6, 102.6, 84.1, 79.5, 76.2, 75.8, 74.9, 70.7, 68.8, 67.7, 56.8, 46.7, 40.5, 37.8, 30.5, 27.7, 26.7, 23.2.  HRMS (ESI, 陰モード) C129H179N8O44S4(M-H)- m/zの計算値2672.0898, 実測値2672.0876。
【０２００】
１６ｈの合成（スキーム９）
化合物１６ｈは、一般手順Ｈの後に、化合物１５ｈから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール：アンモニア水、７：２：０．５）により精製すると、テトラ−サルファート１６ｈが発泡体（７０ｍｇ、２１．６ｍｍｏｌ、９０％収率）として得られる。ＴＬＣ（ジクロロメタン：メタノール：アンモニア水、７：２：０．５）：Ｒｆ＝０．２５。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 176.1, 175.7, 173.9, 173.2, 140.0, 139.6, 129.4, 129.3, 128.8, 128.7, 128.6, 102.6, 84.1, 79.5, 76.0, 75.9, 75.0, 70.7, 70.5, 68.8, 67.7, 56.8, 46.7, 40.5, 40.3, 37.9, 37.8, 37.2, 35.8, 34.2, 30.5, 30.4, 30.2, 30.1, 27.9, 27.7, 27.0, 26.7, 26.3, 23.1。
【０２０１】
１６ａの合成（スキーム９）
化合物１６ａは、一般手順Ｈの後に、化合物１５ａから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール：アンモニア水、７：２：０．５）により精製すると、テトラ−サルファート１６ａが発泡体（２５２ｍｇ、５２．７ｍｍｏｌ、９５％収率）として得られる。ＴＬＣ（ジクロロメタン：メタノール：アンモニア水、７：２：０．５）：Ｒｆ＝０．２５。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 176.0, 173.9, 173.2, 170.9, 166.8, 140.1, 139.8, 138.6, 134.8, 130.9, 130.8, 129.9, 129.5, 129.4, 129.38, 129.32, 128.9, 128.7, 128.6, 102.5, 99.2, 83.5, 81.6, 78.9, 76.1, 76.0, 75.9, 75.7, 75.5, 75.3, 71.9, 71.2, 70.7, 68.8, 66.8, 55.2, 54.2, 53.6, 46.8, 40.5, 40.3, 37.8, 37.2, 30.6, 30.5, 30.3, 30.2, 27.9, 27.6, 27.1, 26.7, 23.1。
【０２０２】
１９ａの合成（スキーム９）
化合物１９ａは、一般手順Ｈの後に、化合物１７ａから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール：アンモニア水、７：２：０．５）により精製すると、オクタ−サルファート１９ａが発泡体（８９ｍｇ、１９．２ｍｍｏｌ、８９％収率）として得られる。ＴＬＣ（ジクロロメタン：メタノール：アンモニア水、７：２：０．５）：Ｒｆ＝０．２５。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 176.2, 175.5, 173.9, 173.1, 140.3, 139.9, 139.3, 129.7, 129.5, 129.3, 129.2, 128.7, 128.6, 128.5, 102.3, 98.6, 84.1, 82.0, 80.7, 79.3, 77.4, 76.3, 75.9, 75.4, 74.4, 71.5, 70.7, 68.8, 67.3, 54.4, 44.7, 40.5, 40.4, 37.8, 37.2, 30.5, 30.3, 30.2, 27.9, 27.8, 27.1, 26.7, 23.0。
【０２０３】
１６ｂの合成（スキーム９）
化合物１６ｂは、一般手順Ｈの後に、化合物１５ｂから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール：アンモニア水、７：２：０．５→５：４：１）により精製すると、テトラ−サルファート１６ｂが発泡体（３３０ｍｇ、６９．１ｍｍｏｌ、９９％収率）として得られる。ＴＬＣ（ジクロロメタン：メタノール：アンモニア水、７：２：０．５）：Ｒｆ＝０．２１。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 175.3, 173.8, 173.3, 171.7, 167.1, 140.0, 139.9, 139.2, 134.6, 130.9, 130.1, 129.6, 129.5, 129.4, 128.9, 128.8, 128.6, 128.4, 100.5, 98.8, 81.5, 79.2, 76.2, 75.9, 75.5, 75.4, 75.3, 74.2, 73.7, 72.4, 71.2, 70.7, 69.9, 69.8, 69.6, 69.5, 68.8, 67.2, 54.4, 53.2, 51.1, 46.8, 40.5, 40.4, 37.8, 37.2, 34.5, 33.9, 33.8, 30.5, 30.4, 30.3, 30.2, 30.1, 29.4, 28.2, 28.0, 27.8, 27.6, 27.4, 27.0, 26.7, 26.3, 22.8。
【０２０４】
１９ｂの合成（スキーム９）
化合物１９ｂは、一般手順Ｈの後に、化合物１７ｂから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール：アンモニア水、７：２：０．５→５：４：１）により精製すると、オクタ−サルファート１９ｂが発泡体（１２０ｍｇ、２５．９ｍｍｏｌ、９４％収率）として得られる。ＴＬＣ（ジクロロメタン：メタノール：アンモニア水、７：２：０．５）：Ｒｆ＝０．１５。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 174.4, 174.3, 174.2, 174.1, 173.2, 173.1, 172.9, 172.8, 139.2, 138.7, 138.3, 138.2, 128.7, 128.5, 128.4, 128.3, 128.2, 127.9, 127.8, 127.6, 117.4, 100.1, 98.6, 80.9, 78.2, 75.5, 75.1, 74.1, 72.5, 72.4, 72.1, 71.5, 70.6, 70.5, 69.6, 68.2, 68.1, 67.8, 67.2, 66.2, 54.3, 53.7, 50.2, 45.7, 40.3, 39.5, 39.4, 38.7, 36.8, 36.2, 35.2, 34.1, 33.4, 33.0, 32.8, 29.6, 29.5, 29.4, 29.3, 29.2, 29.1, 28.5, 27.2, 26.9, 26.8, 26.7, 26.5, 26.2, 26.1, 26.0。
【０２０５】
１６ｃの合成（スキーム９）
化合物１６ｃは、一般手順Ｈの後に、化合物１５ｃから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール：アンモニア水、７：２：０．５→５：４：１）により精製すると、オクタ−サルファート１６ｃが発泡体（２７８ｍｇ、３５．６ｍｍｏｌ、１００％収率）として得られる。ＴＬＣ（ジクロロメタン：メタノール：アンモニア水、７：２：０．５）：Ｒｆ＝０．２。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 176.0, 173.9, 173.3, 173.2, 170.6, 170.4, 166.8, 166.6, 140.4, 140.1, 139.9, 138.6, 138.5, 135.1, 1334.9, 131.3, 130.9, 130.8, 130.6, 130.2, 129.9, 129.4, 129.3, 129.2, 128.9, 128.6, 128.5, 102.4, 101.7, 98.9, 98.8, 84.0, 83.7, 81.8, 79.5, 79.0, 78.3, 76.3, 75.9, 75.8, 75.5, 75.3, 75.1, 74.9, 71.8, 71.3, 71.2, 70.7, 68.8, 66.8, 65.7, 54.1, 53.4, 52.9, 46.8, 40.5, 40.3, 37.9, 37.2, 30.5, 30.4, 30.3, 30.2, 30.1, 27.9, 27.6, 27.1, 26.7, 23.1, 23.0。
【０２０６】
１９ｃの合成（スキーム９）
化合物１９ｃは、一般手順Ｈの後に、化合物１７ｃから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール：アンモニア水、７：２：０．５→５：４：１）により精製すると、ヘキサデカ−サルファート１９ｃが発泡体（９９ｍｇ、１４．６μｍｏｌ、９０％収率）として得られる。ＴＬＣ（ジクロロメタン：メタノール：アンモニア水、７：２：０．５）：Ｒｆ＝０．２。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 176.2, 175.8, 175.1, 173.9, 173.4, 140.5, 139.9, 139.7, 139.6, 139.5, 129.8, 129.6, 129.5, 129.4, 129.39, 129.35, 129.3, 129.2, 128.8, 128.7, 128.6, 128.5, 102.4, 101.4, 98.7, 97.4, 83.8, 81.8, 80.9, 80.4, 79.3, 77.3, 76.5, 76.3, 75.9, 75.5, 74.5, 74.2, 71.6, 71.2, 70.9, 70.7, 68.8, 67.2, 66.8, 55.2, 54.4, 53.2, 46.8, 41.1, 40.5, 40.4, 37.8, 37.2, 35.5, 30.5, 30.3, 30.2, 30.1, 27.9, 27.8, 27.1, 26.8, 23.3, 23.1。
【０２０７】
１６ｄの合成（スキーム９）
化合物１６ｄは、一般手順Ｈの後に、化合物１５ｄから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール：アンモニア水、７：２：０．５→５：４：１）により精製すると、サルファート１６ｄが発泡体（１３．３ｍｇ、１．８μｍｏｌ、９９％収率）として得られる。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：エタノール：水、３：１：１）：Ｒｆ＝０．１５。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 176.2, 173.9, 139.9, 139.6, 138.8, 129.5, 129.3, 129.2, 129.1, 128.8, 128.7, 101.3, 99.8, 97.8, 95.1, 82.3, 79.0, 76.3, 76.1, 73.1, 72.7, 71.6, 71.3, 70.7, 69.1, 68.8, 67.2, 65.9, 48.5, 40.5, 40.4, 37.8, 37.2, 30.5, 30.4, 30.3, 30.2, 27.9, 27.8, 27.1。
【０２０８】
一般手順Ｉ（ＧＰＩ）：鹸化
出発原料を、水酸化ナトリウム２Ｍ溶液（反応混合物１．２５ｍＬあたり５０μＬ）を含有するメタノール及び水（４／１、ｖ／ｖ、２０ｍｇに対し１．２５ｍＬ）に０℃で溶解する。この反応混合物を室温で４８〜７２時間撹拌する。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：ＥｔＯＨ：水、３：１：１）が反応の完了を示した後、溶媒の体積を真空で減少させる。この溶液を、フラッシュクロマトグラフィーのためのシリカカラム（ジクロロメタン：メタノール：アンモニア水、７：２：０．５）にかけると、脱Ｏ−ベンゾイル化生成物が得られる。
【０２０９】
１７ａの合成（スキーム９）
化合物１７ａは、一般手順Ｉの後に、化合物１６ａから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール、９：１→ジクロロメタン：メタノール：アンモニア水、７：２：０．５→５：４：１）により精製すると、四量体１７ａが発泡体（２１９ｍｇ、５０．９ｍｍｏｌ、９９％収率）として得られる。ＴＬＣ（アセトニトリル：水：アンモニア水、３：１：１）：Ｒｆ＝０．１５。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 176.2, 175.4, 173.9, 172.9, 140.2, 139.8, 139.7, 138.7, 130.8, 129.9, 129.5, 129.4, 129.38, 129.31, 128.9, 128.7, 128.6, 104.6, 98.8, 86.3, 81.9, 79.3, 77.9, 76.3, 76.1, 75.9, 75.8, 75.6, 75.4, 71.4, 71.1, 70.7, 68.8, 67.4, 55.2, 54.4, 46.8, 40.5, 40.4, 37.9, 37.2, 30.7, 30.5, 30.4, 30.3, 30.2, 27.9, 27.8, 27.6, 27.1, 26.8, 23.1。
【０２１０】
１７ｂの合成（スキーム９）
化合物１７ｂは、一般手順Ｉの後に、化合物１６ｂから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール、９：１→ジクロロメタン：メタノール：アンモニア水、７：２：０．５→５：４：１）により精製すると、四量体１７ｂが発泡体（２５５ｍｇ、５９．２ｍｍｏｌ、９６％収率）として得られる。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：エタノール：水、３：１：１）：Ｒｆ＝０．１５。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 176.1, 175.4, 174.8, 174.7, 173.9, 173.2, 140.2, 139.8, 139.6, 139.5, 129.5, 129.4, 129.3, 128.9, 128.8, 128.7, 128.6, 102.7, 97.2, 82.2, 79.1, 76.3, 76.0, 74.9, 73.2, 72.8, 72.1, 70.7, 69.2, 69.1, 68.8, 68.7, 67.8, 67.7, 67.2, 54.4, 51.2, 46.8, 40.6, 40.4, 37.9, 37.2, 36.2, 34.5, 34.0, 33.8, 30.7, 30.5, 30.4, 30.35, 30.3, 30.2, 29.5, 28.2, 28.0, 27.9, 27.7, 27.6, 27.2, 27.1, 26.7, 26.4, 23.1。
【０２１１】
１７ｃの合成（スキーム９）
化合物１７ｃは、一般手順Ｉの後に、化合物１６ｃから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール、９：１→ジクロロメタン：メタノール：アンモニア水、７：２：０．５→５：４：１）により精製すると、四量体１６ｃが発泡体（８８ｍｇ、１２．８μｍｏｌ、８６％収率）として得られる。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：エタノール：水、３：１：１）：Ｒｆ＝０．１５。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 176.3, 176.2, 175.1, 173.9, 173.1, 172.9, 140.3, 140.2, 139.9, 139.8, 139.7, 129.5, 129.4, 129.38, 129.31, 129.0, 128.9, 128.6, 104.7, 104.1, 98.7, 98.2, 86.6, 85.8, 81.9, 80.4, 79.3, 78.2, 77.8, 76.5, 76.3, 76.1, 75.9, 75.5, 75.3, 75.1, 74.9, 71.9, 71.3, 71.1, 70.7, 68.8, 67.4, 67.1, 54.4, 53.4, 46.8, 40.5, 40.4, 37.9, 37.2, 30.7, 30.5, 30.4, 30.3, 30.2, 27.9, 27.8, 27.1, 26.8, 23.0。
【０２１２】
１７ｄの合成（スキーム９）
化合物１７ｄは、一般手順Ｉの後に、化合物１６ｄから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール：アンモニア水、７：２：０．５→５：４：１、ＭｅＯＨ：アンモニア水→７：１）により精製すると、四量体１７ｄが発泡体（５９ｍｇ、９．７μｍｏｌ、９４％収率）として得られる。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：エタノール：水、３：１：１）：Ｒｆ＝０．１２。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 176.4, 176.1, 175.2, 173.9, 129.3, 129.2, 129.0, 128.9, 128.8, 128.7, 128.5, 102.7, 101.1, 97.2, 96.0, 82.1, 79.6, 76.3, 75.8, 74.9, 73.6, 73.4, 72.7, 71.9, 70.7, 69.1, 68.8, 68.0, 65.6, 62.1, 61.8, 46.7, 40.5, 40.4, 37.8, 37.2, 30.7, 30.5, 30.4, 30.3, 30.2, 27.9, 27.8, 27.2, 27.1, 26.8。
【０２１３】
一般手順Ｊ（ＧＰＪ）：総体的な脱ベンジル化
出発原料を、アンモニア水溶液（反応混合物の１０％）を含有するＴＨＦ及び水（１／１、ｖ／ｖ、１０ｍｇに対し３ｍＬ）に溶解し、炭素担持水酸化パラジウム（２０％Ｐｄ、出発原料の５倍重量）により処理する。この反応混合物を周囲温度及び周囲圧力で、水素下、２４〜４８時間、撹拌する。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：ＥｔＯＨ：水、２：１：１）により反応の完了が示された後、触媒をろ別し、５０％水性ＴＨＦにより洗浄する。この溶液を濃縮乾固し、残渣のクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール：アンモニア水、５：４：１）により、最終生成物がアンモニウム塩として得られる。得られた物質を水に溶解し、Ｄｏｗｅｘ５０ＷＸ８−２００（Ｎａ＋）樹脂カラム（８×１ｃｍ）に通し、水により溶出する。生成物を含有するフラクションを蒸発させて真空で乾燥すると、最終生成物のナトリウム塩が得られる。
【０２１４】
１８ｅの合成（スキーム９）
化合物１８ｅは、一般手順Ｊの後に、化合物１６ｅから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（アセトニトリル：水：アンモニア水、６：２：１）により精製すると、四量体１８ｅが発泡体（５２ｍｇ、２６．６ｍｍｏｌ、８９％収率）として得られる。ＴＬＣ（アセトニトリル：水：アンモニア水、６：２：１）。Ｒｆ＝０．３３。13C-NMR (125MHz, D2O) δ 174.4, 174.1, 173.9, 101.3, 73.7, 70.5, 69.7, 69.4, 69.0, 67.7, 67.1, 61.1, 55.6, 45.3, 39.5, 36.5, 28.7, 28.6, 25.9, 24.9, 22.37.  HRMS (ESI, 陰モード) C73H131N8O44S4 (M-H)-m/zの計算値1951.7142, 実測値1951.7120。
【０２１５】
１８ｈの合成（スキーム９）
化合物１８ｈは、一般手順Ｊの後に、化合物１６ｈから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（アセトニトリル：水：アンモニア水、６：２：１）により精製すると、四量体１８ｈが発泡体（３０ｍｇ、１１．９ｍｍｏｌ、８６％収率）として得られる。ＴＬＣ（アセトニトリル：水：アンモニア水、６：２：１）。Ｒｆ＝０．４。13C-NMR (125MHz, D2O) δ 176.6, 176.4, 174.3, 173.8, 101.3, 73.8, 70.5, 69.7, 69.2, 67.7, 67.2, 55.6, 45.4, 39.5, 39.3, 37.7, 36.5, 35.8, 35.5, 32.9, 28.6, 28.5, 28.4, 28.3, 28.2, 26.2, 25.8, 25.5, 24.9, 24.8, 22.3。
【０２１６】
１８ａの合成（スキーム９）
化合物１８ａは、一般手順Ｊの後に、化合物１７ａから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（アセトニトリル：水：アンモニア水、６：２：１）により精製すると、四量体１８ａが発泡体（５７ｍｇ、１７．７ｍｍｏｌ、９１％収率）として得られる。ＴＬＣ（アセトニトリル：水：アンモニア水、６：２：１）：Ｒｆ＝０．４。13C-NMR (125MHz, D2O) δ 176.6, 174.4, 174.1, 173.8, 102.3, 97.3, 76.6, 76.3, 73.5, 70.7, 70.2, 69.3, 69.1, 67.7, 66.4, 53.6, 45.4, 39.5, 39.3, 36.5, 35.9, 29.7, 28.7, 28.6, 28.4, 28.3, 26.2, 25.9, 25.5, 24.8, 22.0。
【０２１７】
２０ａの合成（スキーム９）
化合物２０ａは、一般手順Ｊの後に、化合物１９ａから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール、９：１→ジクロロメタン：メタノール：アンモニア水、７：２：０．５→５：４：１→メタノール：アンモニア水、７：１）により精製すると、四量体２０ａが発泡体（４５ｍｇ、１２．７ｍｍｏｌ、９８％収率）として得られる。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：エタノール：水、２：１：１）：Ｒｆ＝０．１５。13C-NMR (125MHz, D2O) δ 176.7, 174.5, 173.9, 173.8, 100.6, 97.6, 80.4, 76.5, 75.8, 75.2, 70.8, 70.6, 70.3, 69.2, 69.1, 67.7, 66.4, 53.6, 45.4, 39.5, 39.3, 36.5, 35.9, 29.5, 28.7, 28.6, 28.3, 28.2, 28.1, 25.9, 25.5, 24.7, 22.0。
【０２１８】
１８ｂの合成（スキーム９）
化合物１８ｂは、一般手順Ｊの後に、化合物１７ｂから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール、９：１→ジクロロメタン：メタノール：アンモニア水、７：２：０．５→５：４：１→メタノール：アンモニア水、７：１）により精製すると、四量体１８ｂが発泡体（５５ｍｇ、１７．１ｍｍｏｌ、９２％収率）として得られる。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：エタノール：水、２：１：１）：Ｒｆ＝０．１５。13C-NMR (125MHz, D2O) δ 175.6, 175.1, 174.9, 173.5, 173.4, 172.8, 99.8, 93.8, 72.8, 70.2, 69.4, 68.2, 67.7, 67.6, 67.5, 67.3, 66.8, 65.6, 52.5, 49.5, 48.0, 46.8, 44.4, 38.6, 38.4, 35.6, 34.9, 32.7, 32.3, 31.7, 32.3, 31.7, 29.2, 27.7, 27.5, 27.4, 26.8, 25.5, 25.3, 25.0, 24.9, 24.8, 24.6, 24.5, 24.4, 24.3, 24.2, 24.1, 24.0, 21.1。
【０２１９】
２０ｂの合成（スキーム９）
化合物２０ｂは、一般手順Ｊの後に、化合物１９ｂから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール、９：１→ジクロロメタン：メタノール：アンモニア水、７：２：０．５→５：４：１→メタノール：アンモニア水、７：１）により精製すると、四量体２０ｂが発泡体（４９ｍｇ、１３．８ｍｍｏｌ、９１％収率）として得られる。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：エタノール：水、２：１：１）：Ｒｆ＝０．１５。13C-NMR (125MHz, D2O) δ 175.7, 175.2, 175.0, 173.9, 173.8, 172.9, 97.5, 93.2, 72.6, 70.3, 70.2, 69.3, 68.3, 68.2, 67.7, 67.6, 66.7, 65.7, 65.6, 62.8, 56.5, 52.4, 49.5, 46.8, 44.4, 38.6, 38.4, 35.6, 34.9, 32.7, 32.3, 31.6, 29.2, 27.6, 27.5, 27.4, 27.3, 26.8, 25.5, 25.3, 24.9, 24.8, 24.7, 24.6, 24.5, 24.3, 24.1, 21.4。
【０２２０】
１８ｃの合成（スキーム９）
化合物１８ｃは、一般手順Ｊの後に、化合物１７ｃから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール、９：１→ジクロロメタン：メタノール：アンモニア水、７：２：０．５→５：４：１→メタノール：アンモニア水、７：１）により精製すると、八硫酸化四量体１８ｃが発泡体（６６ｍｇ、１３．１μｍｏｌ、９９％収率）として得られる。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：エタノール：水、２：１：１）：Ｒｆ＝０．１５。13C-NMR (125MHz, D2O) δ 176.6, 174.5, 174.4, 174.3, 173.9, 102.3, 101.9, 97.2, 97.0, 77.4, 76.6, 76.4, 76.3, 76.2, 76.1, 73.5, 70.6, 70.2, 69.3, 69.2, 69.0, 68.9, 67.7, 66.4, 65.8, 60.3, 53.5, 53.2, 45.4, 39.5, 39.3, 36.5, 35.9, 29.5, 28.7, 28.6, 28.4, 28.3, 26.2, 25.9, 25.5, 24.8, 22.0。
【０２２１】
２０ｃの合成（スキーム９）
化合物２０ｃは、一般手順Ｊの後に、化合物１９ｃから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール、９：１→ジクロロメタン：メタノール：アンモニア水、７：２：０．５→５：４：１→メタノール：アンモニア水、７：１）により精製すると、十六硫酸化四量体２０ｃが発泡体（７９ｍｇ、１４μｍｏｌ、９９％収率）として得られる。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：エタノール：水、２：１：１）：Ｒｆ＝０．１５。13C-NMR (125MHz, D2O) δ 177.9, 176.7, 174.5, 174.4, 173.9, 173.4, 100.6, 99.8, 97.8, 97.3, 80.4, 80.0, 77.8, 77.5, 76.1, 75.6, 75.3, 74.9, 70.8, 70.6, 70.2, 69.3, 69.2, 68.8, 67.7, 66.4, 65.8, 53.5, 53.3, 45.4, 39.5, 39.3, 36.5, 35.9, 29.6, 28.7, 28.6, 28.4, 28.3, 26.2, 25.9, 25.5, 24.7, 22.0。
【０２２２】
１８ｄの合成（スキーム９）
化合物１８ｄは、一般手順Ｊの後に、化合物１７ｄから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール、９：１→ジクロロメタン：メタノール：アンモニア水、７：２：０．５→５：４：１→メタノール：水：アンモニア水、３：１：１）により精製すると、硫酸化四量体１８ｄが発泡体（７ｍｇ、１．３μｍｏｌ、７４％収率）として得られる。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：エタノール：水、２：１：１）：Ｒｆ＝０．１５。13C-NMR (125MHz, D2O) δ 176.8, 175.3, 173.9, 98.6, 97.9, 91.3, 90.9, 75.3, 72.8, 70.4, 69.6, 69.3, 68.8, 68.1, 67.7, 67.2, 66.2, 62.7, 62.5, 54.3, 54.1, 45.3, 39.5, 39.3, 36.5, 35.9, 28.5, 28.4, 28.2, 26.1, 25.9, 25.5, 25.0。
【０２２３】
一般手順Ａ２（ＧＰＡ２）：ジ−スクシンイミジルエステルとのカップリング
炭素６にリンカーとマスクしていないアミノ官能基を有するグリコシド（３当量）の乾燥ＤＭＦ（ＤＭＦ１ｍＬあたり１００ｍｇ）溶液に、室温でジ−スクシンイミジルエステル３３ａ（１当量）の乾燥ＤＭＦ（ＤＭＦ１ｍＬあたり４０ｍｇ）溶液を加える。この反応混合物をトリエチルアミン（４当量）により処理し、室温で１〜２４時間撹拌する。ＤＭＦを真空で除去し、残渣をＥｔＯＡｃ、次いで酢酸エチル：ＭｅＯＨ、９：１→３：２により溶出したシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製すると、ジ−スクシンイミジルエステルが得られる。
【０２２４】
３４ａの合成（スキーム１１）
化合物３４ａは、一般手順Ａ２の後に、化合物１２ｂ及び３３ａから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル：ＭｅＯＨ、９：１→３：２）により精製すると、二量体３４ａが発泡体として得られる（３３０ｍｇ、１４２μｍｏｌ、９３％収率）。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ、９：１、ｖ／ｖ）：Ｒｆ＝０．５５。13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 173.1, 170.5, 169.6, 165.6, 138.1, 137.8, 137.2, 133.6, 129.7, 129.3, 128.9, 128.6, 128.4, 128.3, 128.1, 128.0, 127.9, 127.8, 127.7, 127.6, 127.5, 98.9, 98.3, 80.3, 74.8, 74.7, 73.9, 73.1, 72.3, 70.8, 70.4, 70.3, 70.1, 68.9, 68.8, 67.7, 62.4, 60.3, 52.6, 52.3, 39.3, 38.8, 36.5, 29.5, 29.4, 29.2, 29.0, 28.8, 26.6, 25.3, 22.8, 20.7.  HRMS (ESI) C126H164N6O35Na (M+Na)+ m/zの計算値2344.1135, 実測値2344.1116。
【０２２５】
３５ａの合成（スキーム１１）
化合物３５ａは、一般手順Ｇの後に、化合物３４ａから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ→ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ、９：１→７：１→６：１）により精製すると、ジオール３５ａが発泡体として得られる（２０９ｍｇ、９３．３μｍｏｌ、９２％収率）。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ、４：１、ｖ／ｖ）：Ｒｆ＝０．５。13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 173.0, 169.9, 169.7, 169.5, 138.2, 138.1, 137.2, 133.7, 129.8, 129.3, 128.9, 128.7, 128.5, 128.4, 128.1, 128.0, 127.9, 127.7, 127.6, 127.5, 99.1, 98.6, 79.9, 76.9, 75.0, 74.6, 74.5, 73.6, 73.2, 72.4, 70.8, 70.5, 70.2, 68.9, 68.8, 67.7, 61.7, 52.8, 52.4, 39.3, 38.8, 36.5, 29.5, 29.4, 29.2, 29.1, 28.8, 26.6, 26.5, 25.7, 25.6, 22.9.  HRMS (ESI) C122H160N6O33Na (M+Na)+ m/zの計算値2260.0924, 実測値2260.0906。
【０２２６】
３６ａの合成（スキーム１１）
化合物３６ａは、一般手順Ｈの後に、化合物３５ａから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール：アンモニア水、７：２：０．５）により精製すると、ジ−サルファート３６ａが発泡体（１３８ｍｇ、５７．５μｍｏｌ、９１％収率）として得られる。ＴＬＣ（ジクロロメタン：メタノール：アンモニア水、７：２：０．５）：Ｒｆ＝０．１５。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 176.2, 176.0, 173.4, 172.5, 171.7, 167.1, 139.9, 139.8, 139.2, 134.6, 131.1, 130.9, 130.1, 129.8, 129.6, 129.5, 129.4, 129.0, 128.9, 128.8, 128.6, 128.5, 100.5, 98.9, 81.4, 79.2, 76.2, 76.0, 75.4, 74.3, 73.7, 72.4, 71.6, 71.2, 69.9, 69.5, 67.2, 54.4, 53.2, 40.5, 40.3, 40.1, 37.2, 37.0, 30.5, 30.4, 30.2, 30.0, 27.8, 27.7, 27.0, 26.9, 22.8.  HRMS (ESI, 陰モード) C122H158N6O39S2Na (M-2H)2- m/zの計算値1198.5031, 実測値1198.5035。
【０２２７】
３９ａの合成（スキーム１１）
化合物３９ａは、一般手順Ｈの後に、化合物３７ａから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール：アンモニア水、７：２：０．５）により精製すると、テトラ−サルファート３９ａが発泡体（５１ｍｇ、２１．９μｍｏｌ、８９％収率）として得られる。ＴＬＣ（ジクロロメタン：メタノール：アンモニア水、７：２：０．５）：Ｒｆ＝０．１５。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 176.1, 175.9, 174.1, 172.4, 169.2, 140.3, 139.8, 139.3, 129.8, 129.6, 129.4, 129.3, 129.1, 129.0, 128.8, 128.7, 128.5, 100.4, 98.9, 82.0, 79.2, 76.5, 76.1, 74.9, 73.5, 72.5, 71.9, 71.5, 71.3, 71.2, 71.0, 69.0, 68.4, 67.2, 54.7, 40.4, 40.1, 37.1, 30.6, 30.5, 30.4, 30.2, 30.1, 27.9, 27.8, 27.1, 27.0, 23.4.  HRMS (ESI, 陰モード) C106H146N6O43S4Na (M-2H)2- m/zの計算値1159.9169, 実測値1159.9193。
【０２２８】
３７ａの合成（スキーム１１）
化合物３７ａは、一般手順Ｉの後に、化合物３６ａから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール、９：１→ジクロロメタン：メタノール：アンモニア水、７：２：０．５→５：４：１）により精製すると、四量体３７ａが発泡体（９４ｍｇ、４３．４μｍｏｌ、８７％収率）として得られる。ＴＬＣ（アセトニトリル：水：アンモニア水、３：１：１）：Ｒｆ＝０．１５。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 176.1, 175.5, 173.1, 172.4, 140.2, 139.8, 139.5, 139.1, 129.5, 129.4, 129.3, 129.2, 128.9, 128.8, 128.7, 128.6, 102.5, 97.2, 82.3, 79.1, 76.3, 76.0, 74.9, 73.4, 72.7, 71.8, 71.6, 71.3, 71.2, 69.2, 67.9, 67.2, 54.5, 40.4, 40.0, 37.2, 30.7, 30.5, 30.4, 30.2, 30.1, 27.8, 27.1, 27.0, 23.1.  HRMS (ESI, 陰モード) C106H146N6O37S2Na (M-2H)2-m/zの計算値1079.9601, 実測値1079.9614。
【０２２９】
３８ａの合成（スキーム１１）
化合物３８ａは、一般手順Ｊの後に、化合物３７ａから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（アセトニトリル：水：アンモニア水、６：２：１）により精製すると、四量体３８ａが発泡体（３８ｍｇ、２３．４μｍｏｌ、９５％収率）として得られる。ＴＬＣ（アセトニトリル：水：アンモニア水、６：２：１）：Ｒｆ＝０．３。13C-NMR (125MHz, D2O) δ 176.8, 174.9, 174.3, 172.2, 100.7, 94.5, 73.7, 71.0, 70.4, 69.6, 69.5, 69.4, 69.2, 68.8, 68.5, 68.4, 66.5, 53.4, 39.3, 39.0, 35.8, 28.5, 28.4, 28.3, 28.1, 25.9, 25.8, 25.4, 25.0, 22.0.  HRMS (ESI, 陰モード) C64H110N6O37S2Na (M-2H)2- m/zの計算値1641.6250, 実測値1641.6233。
【０２３０】
４０ａの合成（スキーム１１）
化合物４０ａは、一般手順Ｊの後に、化合物３９ａから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（アセトニトリル：水：アンモニア水、６：２：１）により精製すると、二量体４０ａが発泡体（２９ｍｇ、１６．３μｍｏｌ、８４％収率）として得られる。ＴＬＣ（アセトニトリル：水：アンモニア水、６：２：１）：Ｒｆ＝０．３２。13C-NMR (125MHz, D2O) δ 176.0, 174.3, 173.9, 171.3, 97.5, 92.9, 72.7, 70.3, 70.0, 69.5, 69.2, 68.7, 68.6, 68.4, 67.6, 65.9, 65.7, 62.7, 60.3, 52.4, 38.4, 38.1, 34.9, 27.5, 27.4, 27.1, 25.1, 24.9, 24.5, 24.1, 21.4。
【０２３１】
（例２）インビトロＦＲＥＴペプチド切断アッセイによるＢＡＣＥ−１阻害の決定
本発明の化合物の、ＡＰＰのＢＡＣＥ−１切断を阻害する能力は、ＦＲＥＴペプチドＨｉＬｙｔｅ  ４８８−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ（ＱＸＬ５２０）−ＯＨ（Ａｎａｓｐｅｃ，Ｉｎｃ．、ＣＡ、米国、カタログ番号６０６０４−０１）を使用する、蛍光共鳴エネルギー移動（ＦＲＥＴ）ペプチド切断アッセイを使用して評価する。無傷の場合、アミノ末端フルオロフォアはクエンチされるが、酵素切断の際には、フルオロフォアがクエンチャーから放出されて蛍光（５２０ｎｍ）を発する。アッセイは、９６ウェル黒色プレートに三連で行う（２０ｍＭ酢酸ナトリウム、０．１％Ｔｒｉｔｏｎ−Ｘ−１００、ｐＨ４．５、ウェルあたりペプチド２．２ｎｇ、及び組換えヒトＢＡＣＥ−１（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、カタログ番号９３１−ＡＳ）２５ｎｇ／ウェル）。酵素活性（基質と酵素、及び基質のみ）に対する適切な対照を用い、プレートをインキュベートする（１時間、２５℃、２．５Ｍ酢酸ナトリウムにより活性を停止）。本発明の化合物を１００〜０．０００１μｇ／ｍＬの濃度範囲で加える。蛍光４８０ｅｘ／５２０ｅｍをＰｏｌａｒｓｔａｒプレートリーダー（ＢＭＧ  ＬａｂＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、英国）で測定し、データは阻害率に対してｌｏｇ１０（化合物の濃度）をプロットして、ＯｒｉｇｉｎＰｒｏ８（ＯｒｉｇｉｎＬａｂｓ、Ｍａｓｓ、米国）を使用するロジスティック用量応答Ｓ字曲線に当てはめることにより解析する。
【表１】
0006353849.tif 000091
【０２３２】
（例３）第Ｘａ因子抗凝固アッセイプロトコル
本発明の化合物、標準又は対照（５μｌ）を、アッセイ用緩衝液（０．９％塩化ナトリウム）中で、９６ウェルプレート（Ｃｏｓｔａｒ  ３５９５）にピペット操作で移し、アッセイ用緩衝液中の０．０３ＩＵ／ｍｌヒト抗トロンビンＩＩＩ（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃａ  Ｉｎｃ．、製品番号４３３）１９μｌを各ウェルに加える。このプレートを３７℃で２分間インキュベートする。アッセイ用緩衝液中のウシ第Ｘａ因子（１４ｎｋａｔ／ｍｌ、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、製品番号３２５２１）１９μｌを各ウェルに加え、３７℃で１分間インキュベートする。アッセイ用緩衝液中の２．５ｍＭ発色性基質（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃａ  Ｉｎｃ．Ｓｐｅｃｔｒｏｚｙｍｅ  ＦＸａ、製品番号２２２Ｌ）１９μｌを各ウェルに加え、３７℃で２時間インキュベートし、次いで３０％酢酸５μｌを各ウェルに加える。マルチプレートリーダーで、４０５ｎｍの吸光度を読み取る。
【０２３３】
化合物はすべて、０．００４〜５０μｇ／ｍｌの用量範囲で試験し、ペプチド基質の切断により測定したところ、第Ｘａ因子の抗トロンビンＩＩＩ媒介性不活性化を促進する、なんらかの測定可能な能力を示すものは１つもない。
【０２３４】
（例４）脳スライスアッセイ
ヒトＳＷＥ変異アミロイド前駆タンパク質を発現するトランスジェニックＴＧ２５７６マウスを、８〜１０か月齢で、頚椎脱臼により犠牲にする。脳を取り除き、手動のティッシュチョッパー（Ｌｅｉｃａ  Ｍｉｃｒｏｓｙｓｔｅｍｓ）を使用して、４００μｍの冠状切断物を得る。スライスは４．５ｍｇ／ｍｌグルコース（Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ）及び３．７５μｇ／ｍｌアムホテリシンＢ（Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ）を補充したＨＢＳＳ（ハンク平衡塩溶液、Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）中で手短に洗浄し、トランスウェルプレート（Ｃｏｓｔａｒ３３９６、０．４μｍのポリカーボネート膜を備えたＨＴＳ２４ウェルのトランスウェルプレート）の、２５％加熱不活性化ウマ血清（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、２５％ＨＢＳＳ、０．５ｍＭグルタミン（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、４．５ｍｇ／ｍｌグルコース、及び３．７５μｇ／ｍｌアムホテリシンＢを補充した５０％ＭＥＭ（最小必須培地、Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）１ｍｌ中に移す。スライスは、３７℃、５％ＣＯ２で４８時間インキュベートする。４８時間後、培地を各ウェルから採集し、保存する。本発明の化合物又はＮＡｃ−ＬＭＷＨを（１、１０及び１００μｇ／ｍｌの濃度で）含む又は含まない新しい培地１ｍｌを、各ウェルに加える。スライスをさらに４８時間インキュベートし、培地を採集して保存する。製造元の指示書に従い、ＳｅｎｓｏＬｙｔｅ（商標）Ａｎｔｉ−Ｈｕｍａｎ  βｅｔａ−Ａｍｙｌｏｉｄ（１−４０）ＥＬＩＳＡキット（Ａｎａｓｐｅｃ）を使用して、培地中の可溶性Ａβ１−４０を定量する。手短に言えば、試料希釈用緩衝液中に１：４で、培地を希釈し、適切なウェルに１００ｍｌを加える。検出用抗体（５０μｌ）を各ウェルに加え、このプレートを暗所において４℃で一晩インキュベートする。ウェルは、各洗浄の浸け時間を３０秒にして、洗浄用緩衝液３５０μｌにより７ｘ洗浄する。ＴＭＢ着色用基質溶液（１００μｌ）を各ウェルに加え、このプレートを暗所において室温で１５分間インキュベートする。着色反応は、停止溶液５０μｌにより停止させ、吸光度プレートリーダー（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｍｕｌｔｉｓｋａｎ  ＥＸ）を使用して、このプレートを４５０ｎｍで読み取る。Ａβ１−４０の量は、Ａβ１−４０の標準曲線（ＳｅｎｓｏＬｙｔｅ（商標）キット中に提供されている）を参照することにより定量する。データは、各条件について、９６時間体４８時間において存在している、Ａβ１−４０の割合として表す。結果を図１ａ及び１ｂに示す。
【０２３５】
本発明は、実施例により説明されたが、本発明の範囲から逸脱することなく、改変又は修正がなされてもよいことを理解すべきである。さらに、公知の均等物が特定の特徴に存在する場合、こうした均等物は、あたかも具体的に本明細書中において参照されているかのごとく、組み込まれている。
【産業上の利用可能性】
【０２３６】
本発明は、ＢＡＣＥ−１の阻害剤である化合物に関する。したがって、本化合物は、ＢＡＣＥ−１の阻害が望ましい疾患、例えば老人性認知症、初老性認知症、多発脳梗塞性認知症又はアルツハイマー病などの神経変性障害の処置又は予防に適応される。
【図１ａ】
0006353849.tif 000108
【図１ｂ】
0006353849.tif 000109