(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒトの皮膚に有益な効果を提供するための、美容上許容可能な媒体中に有効な量のＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現増加剤を含有する組成物であって、
前記ＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現増加剤が酵母／クリントニア・ボレアリス発酵抽出物であり、
前記組成物を必要とする皮膚の領域に、局所的に塗布することにより前記ヒトの皮膚に有益な効果を提供するための組成物。
【請求項２】
前記ＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現増加剤が非手掌足底（掌蹠）表現型を示す皮膚に塗布される、
請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記有益な効果が皮膚の厚さの増加である、
請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
前記有益な効果が女性多毛症の低減である、
請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
前記有効な量のＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現増加剤が、
皮膚移植、皮膚潰瘍、皮膚の摩擦または剥離／切除、傷害または反復的な衝撃または機械的な圧力に起因する傷つきやすくなっている皮膚質、年齢による皮膚の変化、ステロイド治療による皮膚損傷、不均一な皮膚の色素沈着、色素過剰、炎症後の色素沈着、そばかす、芳香皮膚炎、白斑、色素性母斑、ほくろ、または慢性単純性苔癬による皮膚変化、肝斑、晩発性皮膚ポルフィリン症、アジソン病、ポイツ−ジェガーズ症候群、表皮肥厚症、多毛症、先天性副腎皮質過形成症、多嚢胞性卵巣症候群、異常多量毛髪成長、及び神経性無食欲症からなる群から選択される、少なくとも１つの皮膚の病状を治療するのに十分な量で存在する、
請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
前記皮膚の有益な効果が、
（ａ）皮膚老化の徴候の治療または防止、（ｂ）細い線または小じわの治療及び／または防止、（ｃ）毛穴の大きさの低減、（ｄ）皮膚の厚さ、ハリ、及び／または張りの改善、（ｅ）皮膚のしなやかさ及び／または柔らかさの改善、（ｆ）皮膚の色合い、輝き、及び／または透明感の改善、（ｇ）皮膚のキメの改善及び／またはキメの再生の促進、（ｈ）皮膚の障壁の回復及び／または機能の改善、（ｉ）皮膚の輪郭の外観の改善、（ｊ）皮膚のつや及び／または明るさの回復、（ｋ）皮膚の必須栄養素及び／または成分の補充、（ｌ）閉経により低下した皮膚の外観の改善、（ｍ）皮膚のうるおいの改善及び／または水分補給、（ｎ）皮膚の弾性及び／または弾力性の増加及び／または損失の防止、（ｏ）コラーゲン前駆体及び／またはコラーゲンの合成の改善、（ｐ）皮膚のたるみまたは萎縮の治療及び／または防止、（ｑ）剥離の増強及び／または乾燥の減少、（ｒ）皮膚の色素過剰の治療及び／または防止、（ｓ）皮膚の明色化の改善、（ｔ）過剰な皮脂生成の治療及び／または防止、及び（ｕ）セルライトの治療及び／または防止、
からなる群から選択される、
請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
前記皮膚の色素過剰が、老化班、斑の領域、分離した色素過剰領域、日焼け領域、脇の下の領域、または黒皮症の斑点を含む、
請求項６に記載の組成物。
【請求項８】
前記有益な効果が、アクネ病変、吹き出物、またはひりひりする領域の炎症の低減を含む、
請求項１に記載の組成物。
【請求項９】
０．００１質量％から５質量％までの美容上許容可能な媒体中のＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現増加剤を含む局所外用組成物であって、
前記ＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現増加剤が酵母／クリントニア・ボレアリス発酵抽出物であり、
ローション、クリーム、美容軟膏、ジェル、またはスティックの形態である、
局所外用組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、少なくとも１つのＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現調整因子を有する皮膚に局所的に塗布するための組成物、及びかかる組成物の、皮膚に有益な効果をもたらす使用に関する。具体的には、これらに限定されるものではないが、皮膚の明色化、色素過剰の皮膚の治療、皮膚の厚さの増加、色素沈着の減少、皮膚の多毛症の低減、及び／または皮膚を非手掌足底形質から手掌足底形質に変えることに関する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚に局所的に塗布して皮膚の状態と外観を向上させる製品についての、それを開発する化粧品産業における需要は増加している。消費者は、年齢的に、またはホルモン的に老化した皮膚の皮膚病的な徴候を和らげるか遅らせる技術に興味を持ち、また表皮及び真皮の皮膚層内の細胞の成長、増殖及び機能性の進行性の損失による細い線、小じわ、皮膚のたるみ、及び他の状態の、環境ストレスによる皮膚の老化に興味を持っている。老化の過程において、皮膚の色艶、すなわち皮膚の色及び外観は、老化及び／または環境ストレス、例えば日光への長期曝露により徐々に悪化する。環境的に損傷した、老化しつつあるまたは老化した皮膚を治療する試みにおいて、多数の美容的及び薬学的な治療法が開発されてきた。しかしながら、このような化粧品または治療法は一般的にそれらの活性成分として有機酸を含んでおり、しばしば、炎症、かゆみ、及び赤みのような消費者の不快感と関連している。
【０００３】
白いまたは薄青い肌色を得るための多数の手法が知られ、皮膚明色化クリーム、漂白剤、皮剥離剤、そして経口及び注射用薬品等がある。公知の活性成分の多くはアルファヒドロキシ酸、コウジ酸、アスコルビン酸、ヒドロキノリン、及びグルタチオンを含み、さらに天然抽出物、甘草、スペインカンゾウ、アルブチン、クマコケモモ、クロレラ・ブルガリス抽出物、シソ抽出物、及びヤシ果実の抽出物、そして上述した活性成分の全ての誘導体を含む。これらのそして他の公知の明色化製品は、様々な作用に基づいて働く。あるものは、色素沈着、例えば米国特許出願公報第２００４／０１２６３４４に記載されているようなチオジプロピオン酸メラニンの生成を阻害する作用に基づいており、この技術は本明細書においてその全ての目的について取り入れられる。他のものは、剥離の促進によって古い皮膚を除去する酸であり、例えば、アルファヒドロキシ酸である。しかしながら、これらの明色化剤の多くはその強い作用により、多くの深刻な副作用を有する。
【０００４】
明色化剤の副作用のいくつかは、これらに限られるものではないが：発赤、かゆみ、刺し傷、日焼け、かさぶた、腫れあがり、こぶ、異常な退色、及びより深刻な副作用、例えば、組織褐変症、すなわち、取り除くことが困難な皮膚の非常に暗い痣のようなものがある。白斑、つまり皮膚が色素を生産する能力を全く失い、ピンクの斑点を生ずることも、またある種の知られた美白剤の使用の結果である。
【０００５】
ＤＩＣＫＫＯＰＦ−１は、タンパク質であり、ヒトの手掌及び足の裏における皮膚の真皮線維芽細胞において高く発現し、メラニン細胞においてパラ分泌作用を有することを示し、表皮のメラニン細胞の機能と増殖を阻害し、これは掌蹠皮膚の色素形成を制御するメカニズムの１つであると信じられている。（J Cell Biol.2004 Apr 26;165(2):275-85, J Invest Dermal. 2007 May;127(5):1217-25 FASEB J.2008 Apr ;22(4):1009-20, J Investig Dermal Symp Proc. 2009 Aug;14(1):73-5）。米国特許第８，１９８，２４４には、局所的なＤＩＣＫＫＯＰＦ−１の投与により皮膚の厚さを増加させ、皮膚の色素沈着を減少し、及び／または毛の成長を低減することが記述されている。
【０００６】
クリントニア・ボレアリス（Ｃ−ボレアリス）、より一般的には黄色クリントニアと呼ばれるが、中部北アメリカ地域の東方で見られる。この多年生の植物は高さ１２インチまで成長し、革のような輝く葉を有し、高い葉のない幹にブルーベリーの実、及び５月から７月に満開となる黄色のベル状の花を有する。ポタワタミ（Potawatami）やアルゴンクインズ（Algonquins）のような土着のアメリカインディアンは、クリントニアを多くの薬用の目的で使用していた。この植物は抗炎症性の特性を有するため、例えば、新鮮な葉は湿布として、やけど、炎症、打撲傷及び凶暴な動物の噛み傷に局所的に塗布されていた。植物の根は、出産を楽にするために用いられ、その後、アーチ・ケミカルズはＣ−ボレアリスの根から抽出物を生産して、ＮＡＢ（登録商標）クリントニア・ボレアリスとして市場に出した。日本国特許第２００３３０６４２４号はウブラリア（Uvularia：ユリ科の植物）抽出物（Ｃ−ボレアリスが含まれる）を含有するＣ−ボレアリスの植物の抽出溶液を含有する皮膚外用剤が、明色化剤の活性を促進することについて記述している。日本国特許公報第２００３−２９２４１６Ａは、Ｃ−ボレアリスの植物の抽出溶液を含有する皮膚外用剤が、皮膚に潤いを与え、乾性皮膚肥厚症及び色素沈着を防止することを述べており、Ｃ−ボレアリスのエタノール抽出物の有用な例が含まれている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
酵母、及び酵母抽出物のような真核性微生物において対応するものを有する好ましくない皮膚及び毛の開発において役割を果たす生理学上の工程の多くは、化粧品応用に用いられてきた。例えば、熱、紫外線放射、または他のストレスに応じて、酵母が細胞の増殖または生存能力を促進する要因を生ずることが知られている。米国特許第２，２３９，３４５号を参照のこと。このような要因を有するストレスを受けた酵母溶解物が、皮膚のある種のストレスの効果を相殺することについての化粧品応用における使用について述べられ、指摘されてきた。例えば、紫外線ストレスを受けた酵母溶解物が、化粧品応用において使用されてきた。例えば、米国特許第５，６４３，５８７号；第５，６７６，９５６号；及び第５，７７６，４４１号を参照のこと。より近年においては、オゾンのストレスを受けた酵母溶解物がオゾンの有害な作用から皮膚細胞を防御するのに有用なことが記述されている。例えば、Ｓｃｈｌｚ他による米国特許第６，４６１，８５７号及び第６，８５８，２１２号；及び米国特許出願番号２００３／０１９８６８２号及び２００６／０１１０８１５号を参照のこと。米国特許出願番号２０１０／００２１５３２号は、皮膚に有益な新しい活性成分を含む酵母／ポリフェノール抽出物について、新しい活性成分は、発酵の鍵となる間の成長因子としてポリフェノールの非細胞毒性の量に曝したピキア属に属する酵母から得られたと述べている。それにも関わらず、これらの初期の場合には、いかなる化粧品用途も見出すことができず、細胞溶解物の活性成分を特定することができなかった。
【０００８】
以下の説明は、従来の技術が直面している問題の性質のより良い理解を提供するだけのものであり、いかなる意味においても先行技術であることを認めるものと解釈されるべきではなく、ここで述べた引用もこのような参照文献が本出願に対する「先行技術」と解釈されることを認めるものと解釈されるべきではない。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
前述した目的及びその他にしたがって、驚くべきことに、クリントニア・ボレアリス抽出物の酵母との、酵母がクリントニア・ボレアリス抽出物を代謝するのに十分な時間の発酵、酵母の溶解、そして非水溶性成分を除去するように可溶性酵母溶解物成分を精製することにより作製された酵母抽出物が、ＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現を増加させるために利用することができ、よって皮膚に、以下のものが含まれるがこれらに限定されるものではない、皮膚の明色化；色素過剰皮膚の治療；色素沈着の低減；皮膚の厚さの増加；皮膚の多毛性の減少；及び／または、皮膚形質の非手掌足底（掌蹠）から手掌足底（掌蹠）形質への変化を促進する効果といった有益な効果を与えることが見出された。
【００１０】
一般的に、前記組成物及び治療方法は、色素過剰、薄い皮膚、多毛性皮膚、及び／または望ましくない暗い肌色、に関連するあらゆる皮膚の状態を治療するのに有用である。これらの有益な効果は、少なくとも部分的には、ＤＩＣＫＫＯＰＦ−１タンパク質の細胞発現を増加する能力から生ずるものと信じられる。言い換えれば、本発明の化合物はＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現増加剤である。
【００１１】
本発明の他の観点は、クリントニア・ボレアリス抽出物の酵母代謝から得られた酵母分離菌を含む組成物の、ヒトの皮膚に対する少なくとも１つの有益な効果を与える美容的な用途に関する。かかる有益な効果としては、以下のものが含まれる；
【００１２】
（ａ）細い線または小じわの治療及び／または防止；
【００１３】
（ｂ）毛穴の大きさの低減；
【００１４】
（ｃ）皮膚の薄化の治療及び／または防止を含む、皮膚の厚さ、ハリ、及び／または張りの増加及び／または維持における改善；
【００１５】
（ｄ）皮膚のしなやかさ及び／または柔らかさの改善；
【００１６】
（ｅ）皮膚の色合い、輝き、及び／または透明感の改善；
【００１７】
（ｆ）皮膚のキメの改善及び／またはキメの再生の促進；
【００１８】
（ｇ）皮膚の障壁の回復及び／または機能の改善；
【００１９】
（ｈ）皮膚の輪郭の外観の改善；
【００２０】
（ｉ）皮膚のつや及び／または明るさの回復；
【００２１】
（ｊ）皮膚の必須栄養素及び／または成分の補充；
【００２２】
（ｋ）閉経により低下した皮膚の外観の改善；
【００２３】
（ｌ）皮膚のうるおいの改善及び／または水分補給；
【００２４】
（ｍ）皮膚の弾性及び／または弾力性の増加及び／または損失の防止；
【００２５】
（ｎ）コラーゲン前駆体及び／またはコラーゲンの合成の改善；
【００２６】
（ｏ）皮膚のたるみまたは萎縮の治療及び／または防止
【００２７】
（ｐ）剥離の増強及び／または乾燥の減少；
【００２８】
（ｑ）皮膚の色素過剰の治療及び／または防止；
【００２９】
（ｒ）にきび痕及び／または炎症後の色素過剰の治療及び／または防止；
【００３０】
（ｓ）過剰な皮脂発生の治療及び／または防止；
【００３１】
（ｔ）セルライトの治療及び／または防止；
【００３２】
（ｕ）色素沈着の減少；
【００３３】
（ｖ）皮膚の明色化；
【００３４】
（ｗ）色素過剰の皮膚の治療；
【００３５】
（ｙ）皮膚形質の非手掌足底から手掌足底形質への変化；
【００３６】
欲していない特徴及び／または美的外観の全体的な改善は、以下の１または２以上に含まれる：皮膚の美白化；しみ、老化班、肝斑、むらのある肌色、にきび痕、茶色斑点、シミだらけの赤い斑点、そばかす及び黄ばみを含む色素過剰の治療；年齢による老化、光照射による老化、ホルモン的な老化、及び／または紫外線による老化の皮膚病学的な徴候の低減；線及び／または小じわの表れの防止及び／または低減；目立つ顔の線及び小じわ、顔の頬と額の小じわ、両眼の間の垂直な小じわ、眼の上の水平な小じわ、及び口の周りの小じわ、マリオネットライン（marionette lines）、及び深いしわまたは溝の目立ちやすさの低減；線及び／または小じわの外観及び／または深さの防止、低減、及び／または減少；眼窩の線及び／または眼窩周囲の線の見た目の向上；目じりの小じわの低減；皮膚の若返り及び／または回復、皮膚の脆さの低減；皮膚の萎縮の防止；皮膚の色合い、輝き、及び／または透明性の向上；皮膚のたるみの防止、低減、及び／または減少；皮膚の堅さ、緊縮性、ふっくらとした張り、しなやかさ及び／または柔らかさの向上；皮膚のキメ及び／キメの再生の向上；皮膚の障壁の回復及び／または機能の向上；皮膚の輪郭の外観の向上；皮膚のつや及び／または輝きの復活；疲労及び／またはストレスの皮膚病学的な徴候の最小化；環境ストレスへの抵抗；老化及び／または閉経により減少した必須栄養素または他の皮膚成分のような皮膚の成分の補充、エストロゲンの不均衡の影響の改善；皮膚細胞間のコミュニケーションの向上；細胞増殖及び／または増殖の増加；老化及び／または閉経により減少した増加皮膚細胞の代謝の増加；細胞の老化の遅延；皮膚の湿潤及び／または水和の改善；皮膚の弾力性及び／または弾み性の向上；プロコラーゲン及び／またはコラーゲン合成の向上；剥離の強化；微小循環の改善；乾燥度の減少；色素沈着の減少；皮膚の厚さの増加；皮膚多毛性の減少；及び／または掌蹠型から非掌蹠型への皮膚表現型の変化；及びそれらのいずれかの組み合わせ。
【００３７】
１つの実施形態においては、ヒトの皮膚の美的外観を改善するための方法であって、  色素過剰の皮膚の部分への、美容上許容可能な媒体中に有効な量のＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現増加剤を含有する組成物を局所的に塗布することを含み、前記ＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現増加剤は前記色素過剰の皮膚の領域において色素沈着の減少を示すために十分な量が存在している方法である。
【００３８】
他の実施形態においては、ＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現増加剤が酵母／クリントニア・ボレアリス抽出物である。
【００３９】
他の実施形態においては、ＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現増加剤は未代謝のＣ−ボレアリス抽出物を除く。
【００４０】
他の実施形態においては、ＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現増加剤が組成物中に約０．０００１％から約１０％の範囲で存在する。
【００４１】
他の実施形態においては、ＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現増加剤が、組成物に添加した時に約５．０から約７．０の範囲のｐＨを呈する酵母／Ｃ−ボレアリス抽出物を含む。
【００４２】
他の実施形態においては、ＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現増加剤が水性のＣ−ボレアリス抽出物に由来する。
【００４３】
他の実施形態においては、酵母がPichia pastorisである。
【００４４】
他の実施形態においては、ＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現増加剤が、チオジプロピオン酸（ＴＤＰＡ）またはそのエステル誘導体から選ばれる少なくとも１つの他の皮膚明色化剤と組み合わされている。
【００４５】
他の実施形態においては、ヒトの皮膚の美的外観を改善するための方法であって、  皮膚または毛を明るくするのに、美容上許容可能な媒体中に有効な量のＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現増加剤を含有する組成物を、皮膚または毛に局所的に塗布することを含む。
【００４６】
他の実施形態においては、ヒトの皮膚に有益な効果を提供するための方法であって、美容上許容可能な媒体中に有効な量のＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現増加剤を含有する組成物を、それを必要とする皮膚の領域に、局所的に塗布することを含む。
【００４７】
他の実施形態においては、前記ＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現増加剤が非手掌足底（掌蹄）表現型を示す皮膚に塗布される。
【００４８】
他の実施形態においては、有益な効果が皮膚の厚さの増加である。
【００４９】
他の実施形態においては、有益な効果が女性多毛症の低減である。
【００５０】
他の実施形態においては、有効な量のＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現増加剤が、皮膚移植、皮膚潰瘍、皮膚の摩擦または剥離／切除（体積欠陥を残すようなもの）、傷害または反復的な衝撃または機械的な圧力に起因する傷つきやすくなっている皮膚質、年齢による皮膚の変化（例えば、皮膚の光老化または皮膚の薄化）、ステロイド治療による皮膚損傷、不均一な皮膚の色素沈着、色素過剰、炎症後の色素沈着、そばかす、芳香皮膚炎、白斑（例えば、広範囲に白斑を有する患者において色素消失がどこで要求されるか）、色素性母斑（例えばカフェオレ様スポット）、ほくろ、または慢性単純性苔癬による皮膚変化、肝斑、晩発性皮膚ポルフィリン症、アジソン病、ポイツ−ジェガーズ症候群、黒色表皮腫、男性型多毛症、先天性副腎皮質過形成症、多嚢胞性卵巣症候群、多毛症及び神経性無食欲症からなる群から選択される、少なくとも１つの皮膚的病状を治療するのに十分な量で存在する。
【００５１】
他の実施形態においては、皮膚の有益な効果が、（ａ）皮膚老化の徴候の治療または防止；（ｂ）細い線または小じわの治療及び／または防止；（ｃ）毛穴の大きさの低減；（ｄ）皮膚の厚さ、ハリ、及び／または張りの改善；（ｅ）皮膚のしなやかさ及び／または柔らかさの改善；（ｆ）皮膚の色合い、輝き、及び／または透明感の改善；（ｇ）皮膚のキメの改善及び／またはキメの再生の促進；（ｈ）皮膚の障壁の回復及び／または機能の改善；（ｉ）皮膚の輪郭の外観の改善；（ｊ）皮膚のつや及び／または明るさの回復；（ｋ）皮膚の必須栄養素及び／または成分の補充；（ｌ）閉経により低下した皮膚の外観の改善；（ｍ）皮膚のうるおいの改善及び／または水分補給；（ｎ）皮膚の弾性及び／または弾力性の増加及び／または損失の防止；（ｏ）コラーゲン前駆体及び／またはコラーゲンの合成の改善；（ｐ）皮膚のたるみまたは萎縮の治療及び／または防止；（ｑ）剥離の増強及び／または乾燥の減少；（ｒ）皮膚の色素過剰の治療及び／または防止；（ｓ）皮膚の明色化の向上；（ｔ）過剰な皮脂発生の治療及び／または防止；及び（ｕ）セルライトの治療及び／または防止、からなる群から選択される。
【００５２】
他の実施形態においては、皮膚の色素過剰が、老化班、斑の領域、分離した色素過剰領域、日焼け領域、脇の下の領域、または黒皮症の斑点を含む。
【００５３】
他の実施形態においては、有益な効果が、アクネ病変、吹き出物、またはひりひりする領域の炎症の低減を含む。
【００５４】
他の実施形態においては、０．００１質量％から５質量％までの美容上許容可能な媒体中にＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現増加剤を含む局所外用組成物であって；前記局所外用組成物は  ローション、クリーム、美容軟膏、ジェル、またはスティックの形態である。
【００５５】
他の実施形態においては、ＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現を調整する酵母発酵製品を、それを必要とする皮膚の領域に局所的に塗布することを含む皮膚の治療方法であって、酵母発酵製品のＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現を調整する能力は、酵母発酵生成物と接触した細胞内にＤＩＣＫＫＯＰＦ−１をコードするｍＲＮＡの濃度を測定する評価分析によって決定される。
【図面の簡単な説明】
【００５６】
【図１】右側は本発明の処方で処理されたメラノダーム（商標）３Ｄ皮膚等価組織で、左側は処理されていないものである。１４日後にメラミン含有量を定量化して図表として描いた。
【００５７】
【図２】右側は本発明の処方で処理されたメラノダーム（商標）３Ｄ皮膚等価組織（実施例１３）で、左側は処理されていないものである。１４日後に組織の外観を示すため写真が撮影された。メラノダーム（商標）で処理されたものはメラノダーム（商標）で処理されていないものよりも小さい色素形成を示した。
【発明を実施するための形態】
【００５８】
本発明を実施するための詳細な形態は、ここに開示される；しかしながら、開示された実施形態は単に本発明を記述するためだけのものであり、多様な形態で実施されうることが理解されなければならない。加えて、本発明の多様な実施形態と関連して開示されたそれぞれの実施例は、具体的な一例として意図されたものであり、制限的なものではない。さらに、図は必ずしも一定の比率であるという訳ではなく、ある特性については１つの実施形態の構成部分の詳細を示すために誇張されることが許される。加えて、図に示されるいかなる尺度も、説明も、その他のものも、具体的な一例として意図されたものであり、制限的なものではない。ゆえに、ここで開示された特定の構造的及び機能的な詳細は、制限するものであると解釈されるべきではなく、単に当業者に本発明の多様な利用について教示するための基本的な事項と解釈されるべきである。
【００５９】
本明細書で使用されるとき、「質量％」または「％ｗｔ．」は、別段の定めがある場合を除いて、組成物（すなわち、皮膚に塗布される前に添加されるあらゆる担体、媒体、溶剤、充填剤、または他の成分を含む）の合計質量との関係における成分の質量パーセントを示す。
【００６０】
用語が範囲で規定されるときは、その範囲はその全ての要素を明確に開示するものと理解されるべきである。限定されない例として、１〜１０％の範囲は、１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、及び１０％、及び１から１０％の間の全ての値を含むものと理解されるべきである。
【００６１】
２またはそれ以上の置換基が、一群の列挙された選択肢から「独立して選択される」と示されるとき、それぞれの置換基がその群のいかなる要素ともなり、他の置換基とその存在が独立していることを意味する。
【００６２】
本明細書で使用されるとき、全ての用語は、特別な定義がない限り、それらの学術上の本来の意味を有することを意図している。本発明を記述し、請求の範囲を示す目的において、以下の用語が定義される。
【００６３】
用語「美容上許容可能な媒体」は、以下の意味を有する：皮膚に塗布するのに適し、技術として知られている、以下のものが含まれるがこれらに限定されるものではない、水；植物オイル；鉱物オイル；パルミチン酸オクチル、ミリスチン酸イソプロピル、及びパルミチン酸イソプロピルのようなエステル；ジカプリルエーテル及びジメチルイソソルビドのようなエーテル；エタノール及びイソプロパノールのようなアルコール；セチルアルコール、セテアリルアルコール、ステアリルアルコール及びビフェニルアルコールのような脂肪族アルコール；イソオクタン、イソドデカン及びヘキサデカンのようなイソパラフィン；シクロメチコーンのようなシリコーンオイル；鉱物オイル、ワセリン、イソエイコサン及びポリイソブテンのような炭化水素オイル；プロピレングリコール、グリセリン、ブチレングリコール、ペンチレングリコール及びヘキシレングリコールのようなポリオール；リポゾーム；ワックス；またはこれらの組み合わせまたは混合物を含むあらゆる媒体である。
【００６４】
用語「低減された多毛症」は、以下の意味を有する：基質上の毛の成長量の減少であって、フェリマン−ガーレイ採点を用いて測定できるもの（ Ferriman DM, Gallwey JD. 女性の体毛成長の臨床学的な評価、 J Clin Endocrinol 1961:21:1440-1447 ）。女性にみられる４つの異なる重大度を有する、１１の異なる身体の部分；すなわち、上唇、顎、胸、背中上方、背中下方、腹部上方、腹部下方、腕、前腕、大腿部、及び脚部；における男性型の毛の成長が紹介されている。フェリマン−ガーレイ採点法は、医師による男性型体毛の程度を採点するのに用いられる。採点カードは全ての体の位置について０（過度の体毛の成長がない）から４（広範囲の体毛の成長）までの探索結果が記載され、数値は最大値の３６になるまで加点される。ほとんどの専門家は採点結果が８またはそれ以上の場合に多毛症と診断するが、一方で合計点が６またはそれ以上で多毛症を示すのに十分という示唆もある。この採点法及び他の臨床試験に基づいて、多毛症が軽度か、中程度か、重大かを評価することができる。
【００６５】
用語「ＤＩＣＫＫＯＰＦ−１」は、以下の意味を有する： ペプチドであり、１つの実施形態としてＷｎｔ受容体であるリポタンパク質の受容−関係タンパク質６（ＬＲＰ６）に関係し、及び膜貫通型のタンパク質Ｋｒｅｍｅｎ（Ｋｒｎ）１及び２に関係する標準的なＷｎｔ信号作用の隠れた拮抗物質である。ＤＩＣＫＫＯＰＦ−１は、Ｗｎｔ受容体Frizzledに影響を与えることなくＬＲＰ６複合体の細胞内取り込み作用を誘発することによって、標準的なＷｎｔ信号作用をブロックする。ＤＩＣＫＫＯＰＦ−１は、ＢＭＰ阻害体の存在下にツメガエル内で異所性の頭の形成を誘発し、アポトーシス（プログラムされた細胞の死滅）において重大な役割を演ずる。本明細書で用いられるとき、用語ＤＩＣＫＫＯＰＦ−１は、ヒトのＤＩＣＫＫＯＰＦ−１と非ヒト生物（例えば、ラット、マウス、及びチキンＤＩＣＫＫＯＰＦ−１）タンパク質の双方を包含する。特に、ＤＩＣＫＫＯＰＦ−１タンパク質配列の限定されない例は、GenBank Accession Nos. gi37183128、gi31542557、gi7110719、gi13124053、gi4545252、gi10281590、gi118092551、gi62858825、gi11531325、gi13124044、gi114630593、gi1140630591、gi114630589、gi29504796、gi16306720、gi46394862、及びgi5360731である。特に、ＤＩＣＫＫＯＰＦ−１タンパク質片の限定されない例は、米国特許第７，０５７，０１７号にみることができる。当業者は、これらのＤＩＣＫＫＯＰＦ−１の全長タンパク質とＤＩＣＫＫＯＰＦ−１片が例として提示されることが珍しいことであると理解できよう。
【００６６】
用語「メラニン合成の低減」及びそれに関連する表現は、１または２以上の異なる型の、皮膚におけるメラニン生合成、及び／または毛における沈着の量の減少を指し、１つの実施形態ではメラニン細胞媒介過色素沈着の減少を指す。
【００６７】
用語「水性Ｃ−ボレアリス抽出物から誘導される」は、以下の意味を有する：もっぱら水性抽出過程を用いて生み出されたＣ−ボレアリス抽出物を用いた酵母発酵過程から得られる組成物。
【００６８】
用語「色素過剰の治療」は、以下の意味を有する：皮膚及び／または小胞で生合成された１または２以上の異なる型のメラニンの、対象の基準線のメラニンと比較した、毛若しくは皮膚に堆積された存在量の増加による対象の着色の程度の根絶、減少、改善、または反転。
【００６９】
用語「皮膚の明色化」は、対象の着色の基準度合いの根絶、減少、改善、及び／または逆転を意味している。皮膚の明色化は、対象のFitzpatrick階級の変化を観測することにより測定される。Fitzpatrick階級（aka Fitzpatrick皮膚タイプ試験またはFitzpatrickフォトタイプ階級）は、皮膚の色についての数的な分類表であり、皮膚病学的な研究のための認められた手法として残されている。Fitzpatrick階級は、遺伝的素因、日光曝露に対する反応及び日焼け特性を含む、いくつかの構成要素を測定する。
タイプＩ（点数０−７）白色；非常に色白；そばかす；典型的白子皮膚。
常に日焼けする、着色しない
タイプＩＩ（点数８−１６）白色；色白。
通常日焼けする、着色が困難
タイプＩＩＩ（点数１７−２４）ベージュ；非常に一般的。
時々軽く日焼けする、明るい茶色まで徐々に着色
タイプＩＶ（点数２５−３０）茶色がかったベージュ；典型的な地中海の白人。
まれに日焼けする、穏やかな茶色まで容易に着色
タイプＶ（点数３０以上）濃い茶色。
ほとんど日焼けしない、非常に容易に着色
タイプＶＩ：黒色。
日焼けしない、非常に容易に着色、深く色素沈着。
【００７０】
用語「酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物」は、以下の意味を有する：発酵した酵母の細胞質顆粒及び細胞外成分の複合体であって、Ｃ−ボレアリス抽出物とともに発酵したもので、栄養になる培養液（ＮＢ培地）、細胞タンパク質材料、細胞核材料、細胞光血漿材料、及び／または細胞壁構成要素を含むが、これらに限定されない。
【００７１】
本明細書で用いられる全ての中心粒子径または平均粒子径は、体積基準による。質量パーセンテージで提示される全ての量は、他に言及がない限り、全体の組成物についてのものである。
【００７２】
本発明の１つの実施形態は、酵母抽出物の新しい使用に関連し、また特には、皮膚の状態及び外観を改善させるために顔及び／または体へ塗布するための局所組成物中の、酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物、また同じく特には、酵母／水性Ｃ−ボレアリス発酵抽出物に関する。他の実施形態においては、本発明の酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物は、これから述べる１または２以上の他の活性剤との併用に供される。
【００７３】
本明細書で用いられる治療及び処置という用語は、老化及び／または環境ストレスによる皮膚病学的な影響の減少、改良、向上、緩和、及び／または除去を含有し包含するものと理解されなければならない。本発明の組成物及び方法は、これらに限られるものではないが、顔、額、唇、首、腕、手、脚、膝、足、胸、背中、鼠蹊部、臀部、大腿部及びそのような体の様々な範囲の皮膚の皮膚病学的な状態の処置に適している。１つの実施形態では、組成物は顔に塗布される。
【００７４】
他の実施形態においては、本明細書で用いられる治療及び処置という用語は、皮膚の明色化を含有し包含する。本発明の組成物及び方法は、これらに限られるものではないが、顔、額、唇、首、腕、手、脚、膝、足、胸、背中、鼠蹊部、臀部、大腿部及びそのような体の様々な範囲の皮膚の皮膚病学的な状態の処置に適している。他の実施形態では、組成物は顔に塗布される。
【００７５】
他の実施形態においては、本明細書で用いられる治療及び処置という用語は、非手掌足底（掌蹠）表現型を示す皮膚の手掌足底（掌蹠）表現型を示す皮膚への変化を含有し包含する。本発明の組成物及び方法は、これらに限られるものではないが、顔、額、唇、首、腕、手、脚、膝、足、胸、背中、鼠蹊部、臀部、大腿部及びそのような体の様々な範囲の皮膚の皮膚病学的な状態の処置に適している。１つの実施形態では、組成物は顔に塗布される。
【００７６】
他の実施形態においては、本明細書で用いられる治療及び処置という用語は、多毛症の低減を含有し包含する。本発明の組成物及び方法は、これらに限られるものではないが、顔、額、唇、首、腕、手、脚、膝、足、胸、背中、鼠蹊部、臀部、大腿部及びそのような体の様々な範囲の皮膚の皮膚病学的な状態の処置に適している。他の実施形態では、組成物は顔に塗布される。
【００７７】
他の実施形態においては、本明細書で用いられる治療及び処置という用語は、皮膚の厚さの増加及び／または薄い皮膚の治療を含有し包含する。本発明の組成物及び方法は、これらに限られるものではないが、顔（特に鼻と上唇の間の領域）、額、唇、首、腕、手、脚、膝、足、胸、背中、鼠蹊部、臀部、大腿部及びそのような体の様々な範囲の皮膚の皮膚病学的な状態の処置に適している。他の実施形態では、組成物は顔に塗布される。
【００７８】
以下の目的物その他に関して、ＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現が減少した組成物は、これらに限られるものではないが、黒ずんだ皮膚；色素過剰の皮膚の治療；色素沈着の増大；皮膚の厚さの減少；毛の成長の増大；及び／または皮膚の表現型を手掌足底（掌蹠）表現型から非手掌足底（掌蹠）表現型への変化の推進効果といった、皮膚に有益な効果を提供する治療の組成物及び方法において活用することができる。
【００７９】
一般的に、本組成物及び方法は、色素過剰または色素脱質症；厚い皮膚；頭皮；及び／または好ましくない明るい皮膚の色合いに関するあらゆる皮膚の状態を治療するのに有用である。これらの有益な効果は、少なくともその一部が、ＤＩＣＫＫＯＰＦ−１タンパク質の細胞発現を減少させる本組成物の能力によってもたらされると信じられる。言い換えれば、本発明の組成物は、ＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現抑制体である。
【００８０】
他の実施形態においては、本明細書で用いられる治療及び処置という用語は、皮膚の暗化を含有し包含する。本発明の組成物及び方法は、これらに限られるものではないが、顔、額、唇、首、腕、手、脚、膝、足、胸、背中、鼠蹊部、臀部、大腿部及びそのような体の様々な範囲の皮膚の皮膚病学的な状態の処置に適している。他の実施形態では、組成物は顔に塗布される。
【００８１】
他の実施形態においては、本明細書で用いられる治療及び処置という用語は、非手掌足底（掌蹠）表現型を示す皮膚の手掌足底（掌蹠）表現型を示す皮膚への変化を含有し包含する。本発明の組成物及び方法は、これらに限られるものではないが、顔、額、唇、首、腕、手、脚、膝、足、胸、背中、鼠蹊部、臀部、大腿部及びそのような体の様々な範囲の皮膚の皮膚病学的な状態の処置に適している。１つの実施形態では、組成物は顔に塗布される。
【００８２】
他の実施形態においては、本明細書で用いられる治療及び処置という用語は、毛の成長の増加を含有し包含する。本発明の組成物及び方法は、これらに限られるものではないが、顔、頭皮、まゆ毛、まつげ、額、唇、首、腕、手、脚、膝、足、胸、背中、鼠蹊部、臀部、大腿部及びそのような体の様々な範囲の皮膚の皮膚病学的な状態の処置に適している。他の実施形態では、組成物は顔に塗布される。
【００８３】
他の実施形態においては、本明細書で用いられる治療及び処置という用語は、皮膚の薄化及び／または厚い皮膚の処置を含有し包含する。本発明の組成物及び方法は、これらに限られるものではないが、顔（特に鼻と上唇の間の領域）、額、唇、首、腕、手、脚、膝、足、胸、背中、鼠蹊部、臀部、大腿部及びそのような体の様々な範囲の皮膚の皮膚病学的な状態の処置に適している。他の実施形態では、組成物は顔に塗布される。
【００８４】
一般的に知られるように、皮膚は細胞の複数の層から形成され、大きく、最上部の表皮と下部の真皮層との２つの部分に分けられる。
【００８５】
［表皮］
表皮は皮膚の層の最上部であり、防水性を与え、汚染物質及び他の外部物質に対する障壁として機能する。この層はほとんど角質細胞からなり、角質細胞は基底層（表皮の最深層）においてケラチン幹細胞の部分から発生する。角質細胞は表皮の層を通って押し上げられて段階的に分化する。これらの細胞が皮膚の表面に移動する間に、角質細胞は細胞核を摘出され、平坦にされて高度に角質化される。やがて角質細胞は死滅して上皮角質層（表皮の最外層）を形成し、外部の物体及び伝染性の薬剤の体への侵入の効果的な障壁として機能するとともに湿度の損失を最小限にする。通常の健全な皮膚においては、角質は連続的に３０日ごとに剥離して再生する。ところが、老化した皮膚においては、上皮角質層はその湿度を保持する容量を失い、角質の再生が低減し、皮膚は水分を失う。
［真皮］
真皮は、皮膚の下部の層であり、表皮と皮下組織との間に位置している。真皮は皮膚層の中で最も厚く、線維細胞芽によって維持される皮膚の細胞外複合相を含有している。線維細胞芽は、細胞外複合相の前駆物質が継続的に分泌されることによって、接続組織の構造的に完全な状態を維持している。老化した皮膚においては、コラーゲンと弾性繊維の双方の合成と成熟の間の平衡、及びそれらの分解を確保している線維細胞芽は、この均衡をコラーゲンと弾性繊維の分解へと向ける。
【００８６】
［メラニン細胞及び皮膚の色素沈着］
皮膚及び毛の色素沈着は、表皮及び毛線維のそれぞれにおける、メラニン存在量によって決定される。例えば、３種の異なる型のメラニンが表皮に存在する：ＤＨＩ−メラニン、ＤＨＩＣＡ−メラニン及びフェオメラニンである。メラニンの異なる型は、色または陰影を多様にする。ＤＨＩ−メラニンは最も暗く、色的には黒い。ＤＨＩＣＡ−メラニンは色的には茶色がかっている。フェオメラニンは最も明るく、色的には赤みがかっている。
【００８７】
上述したようなメラニンは、色素製造細胞（メラニン形成細胞）の中のメラノゾームと呼ばれる特化された細胞器官で合成される。メラニン形成細胞は刺激に対応してメラニン合成を制御する。メラニン形成は、環境要因及びホルモン要因の変化によって制御される。メラニン形成細胞は、表皮の細胞の１％以下含まれており、様々な信号に応答してメラニン合成を変化させる。メラニンは細胞器官内に堆積して、角質細胞に変換されるメラノゾームとして知られる層を形成する。
【００８８】
［酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物］
１つの実施形態においては、限定されるものではないが、天然植物材料として酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物が用いられ、酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物はそれから誘導された成分または抽出物を含み、これは線維細胞芽及び角質細胞の増殖を促し、コラーゲンの発現を増加させ、そしてコラゲナーゼの活性を阻害し、天然植物材料を有する組成物が、老化と環境ストレスに影響を受けた皮膚に局所的に塗られた時には、老化の皮膚病学的な徴候に作用して、皮膚の状態及び美的外観、例えば、顔の線、しわ、及び皮膚のたるみが改善される。副次的に、皮膚の堅さ、皮膚の丸さ、皮膚の柔軟性、または皮膚の厚さのうち１または２以上の増加により証明される、老化した皮膚の美的外観の改善が見られる。局所組成物は、毎日塗布され、患部に残る。
【００８９】
本明細書に記載されるように、局所用組成物は、少なくとも一つの酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物を、線維芽細胞の増殖を促し、ケラチン生成細胞の増殖を促し、コラーゲンの発現を増加させ、コラゲナーゼ活性を阻害し、メラニン細胞におけるメラニンの形成を低減し、メラニン細胞から他の細胞へのメラニンの輸送をブロックしまたは遅らせるのに十分な量で含み、また、美容的、皮膚科学的、薬学的、または生理学的に許容される媒体とそれらの任意の組み合わせをも含む。
【００９０】
本発明の酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物は、発酵と呼ばれる特殊化された工程から得られる。発酵は、生きている真核性の及び／または原核性の微生物が栄養培地において、酸素の存在下で（好気性発酵として知られている）、或いは、酸素の非存在下または減少下で（嫌気発酵として知られている）、成長する際に起こる。発酵プロセスは、１つの微生物で、或いは２つ以上の微生物（しばしば共発酵と呼ばれる）で、同時に、または逐次的に行うことができる。栄養培地は、典型的には、明確に定義されたタンパク質、糖、ミネラル、またはそのようなものの混合物である。このような培地は、当業者に公知であり、種々の商業的供給元から入手することができる。
【００９１】
酵母を代謝する工程は、様々な微生物とともに起こる。微生物は、例えば、酵母、桿菌（バシリス属細菌）、糸条菌、植物細胞、及び類似物である。特に、本発明の組成物の１つの実施形態は、酵母を用いて作られた発酵物である。本明細書で用いられるとき、用語「酵母」は、単独の酵母細胞、複数の酵母細胞、及び／または酵母細胞の培養組織を含む。本発明の酵母は、種々の菌類の科であり、当業者に知られている以下のものが含まれるが、これらに限られるものではなく、ニューロスポラ属（Neurospora）、セラトストメラ属（Ceratostomella）、クラヴィセプス属（Claviceps）、キシラリア属（Xylaria）、ロゼリニア属（Rosellinia）、ヘロチウム属（Helotium）、スクレロチニア属（Sclerotinia）、ツロストーマ属（Tulostoma）、リゾポゴン属（Rhizopogon）、トルンココルメラ属（Truncocolumella）、ムコア属（Mucor）、リゾパス属（Rhizopus）、エントモフィソラ属（Entomophthora）、ディクトスティリウム属（Dictostylium）、ブラストクラジア属（Blastocladia）、シンチトリウム属（Synchytrium）、サプロレグニア属（Saprolegnia）、ペロノスポラ属（Peronospora）、アルブゴ属（Albugo）、ピキウム属（Pythium）、フィソフィソラ属（Phythophthora）、プラスモディオフィソラ属（Plasmodiophthora）、ツベル属（Tuber）、ハイドナム属（Hydnum）、レカノラ属（Lecanora）、ロッセラ属（Roccella）、ペルツサニア属（Pertusania）、ウスネア属（Usnea）、エベルニア属（Evernia）、ラマリナ属（Ramalina）、アレクトリア属（Alectoria）、クラドニア属（Cladonia）、パルメリア属（Parmelia）、セトラリア属（Cetraria）、アガリクス属（Agaricus）、カンサレルス属（Cantharellus）、オンファロツス属（Omphalotus）、コプリナス属（Coprinus）、ラクタリウス属（Lactarius）、マラスミウス属（Marasmius）、プレウロトゥス属（Pleurotus）、フェリオタ属（Pholiota）、ルスルス属（Russuls）、ラクタリウス属（Lactarius）、ストファリア属（Stopharia）、エントロマ属（Entoloma）、レピオタセア属（Lepiotaceae）、コルチシウム属（Corticium）、ペリクラリア属（Pellicularia）、属（Tricholoma）、ボルバリア属（Volvaria）、クリトサイブ属（Clitocybe）、フラムリナ属（Flammulina）、サッカロマイセス属（Saccharomyces）、シゾサッカロマイセス属（Schizosaccharomyces）、サッカロマイセタセア属（Saccharomycetaceae）、エウロチウム属（Eurotium）、アスペルギルス属（Aspergillus）、チエラビア属（Thielavia）、ペジザ属（Peziza）、プレクタニア属（Plectania）、モルチエラ属（Morchella）、ウイネア属（Wynnea）、ヘルベラ属（Helvella）、ギロミトラ属（Gyromitra）、ファラレス属（Phallales）、デクティオフェラ属（Dictyophera）、ムチヌス属（Mutinus）、クラスルス属（Clathrus）、シュウドコルス属（Pseudocolus）リコペルドン属（Lycoperdon）、カルバチア属（Calvatia）、ゲアスツルム属（Geastrurm）、ラジイゲラ属（Radiigera）、アステウス属（Asteus）、ニドゥウラリア属（Nidularia）、ガストロサイブ属（Gastrocybe）、マコワニテス属（Macowanites）、ガストロボレトゥス属（Gastroboletus）、アルバトレルス属（Albatrellus）、ネオレンティヌス属（Neolentinus）、ニグロポルス属（Nigroporus）、オリゴポルス属（Oligoporus）、ポリポルス属（Polyporus）、フィスツリナ属（Fistulina）、フォメス属（Fomes）、ボレトゥス属（Boletus）、フスコボレティヌス属（Fuscoboletinus）、レシヌム属（Leccinum）、フィロポルス属（Phylloporus）、スイルス属（Suillus）、ストロビロマイセス属（Strobilomyces）、ボレテルス属（Boletellus）、トレメラ属（Tremella）、アウリキュラリア属（Auricularia）、ダクリマイセス属（Dacrymyces）、メラムソラ属（Melampsora）、クロナルトゥム属（Cronartum）、プチニア属（Puccinia）、ギムノスポランギウム属（Gymnosporangium）、ティレティア（Tilletia）、ウロサイティス属（Urocystis）、セプトバシディウム属（Septobasidium）、ハイグロサイブ属（Hygrocybe）、ハイグロフォルス属（Hygrophorus）、ハイグロトラマ属（Hygrotrama）、ネオハイグロフォルス属（Neohygrophorus）、コルチナリウス属（Cortinarius）、ギムノピルイス属（Gymnopiluis）、トリコフィトン属（Trichophyton）、ミクロスポルス属（Microsporum）、モニリア属（Monilia）、カンジダ属（Candida）、コルコスポレラ属（Corcosporella）、ペニシリウム属（Penicillium）、ブラストマイセス属（Blastomyces）、セルコスポラ属（Cercospora）、ウスチラジノニデア属（Ustilaginoidea）、チベルクラリア属（Tibercularia）、フセリウルム属（Fusariurm）、リゾクチニア属（Rhizoctinia）、オゾニウム属（Ozonium）、スクレロティウム属（Sclerotiurm）、ゲグロスム属（Geglossum）、又はアルミラリア属（Armillaria）である。１つの実施形態においては、興味ある菌類は、サッカロマイセタセア属（Saccharomycetaceae）に属する菌類である。他の実施形態においては、興味あるのは、遺伝子ピキア属（Pichia）に属する菌類である。他の実施形態においては、興味あるのは、パストリス（pastoris）種に属する菌類である。１つの実施形態においては、ピキア・パストリス（Pichia pastoris）が発酵プロセスにおいて用いられる。
【００９２】
典型的には、子嚢菌門に属する酵母は複数の環境で生育できる嫌気性菌である；それらは酸素の存在下でも非存在下でも成長することができる。本発明の目的のために、酵母は有酸素的に成長させたので、そのため空気は成長に必須である。
【００９３】
本発明の酵母／Ｃ−ボレアリス抽出物は、酵母の細胞質内及び細胞外組成物を含み、以下を含むがこれらに限定されない、栄養物培養液、細胞タンパク質材料、細胞核材料、細胞原形質材料及び／または細胞壁成分が含まれる。典型的には、抽出物は比較的水溶性であり、例えば、１グラム以上の酵母抽出物が１グラムの水に溶解する。抽出物はまた、水／有機溶媒、限定されないが、水性グリコール及び水性グリセロールのような有機溶媒との混合物にも溶解する。
【００９４】
酵母発酵の過程は、撹拌式生化学反応器の中で進行させることができる。このような生化学反応器の例としては、例えば、ニュー・ブルンスウィック・サイエンティフィック（New Brunswick Scientific, Edison N.J.）、またはアプリコン・バイオテクノロジー・フォスター・シティ（Applikon Biotechnology Foster City Calf.）から入手できる発酵槽がある。
【００９５】
本発明の酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物を製造するために、Pichia pastoris（ピキア・パストリス）細胞培養菌が成長培地内で２５℃から３２℃の間で成長させることができる。典型的な酵母発酵培地の例は、大体がＣＲＣ印刷から出版された「微生物学的媒体ハンドブック」で見つけることができる。本発明の目的のために、酵母発酵の特別な成長培地が用いられる。この成長培地は化学的に合成された培地であり、いかなる動物由来の生成物をも有していない。１つの実施形態においては、本発明の培地における唯一の炭素源はグリセロールから得られる。
【００９６】
酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物は、最初にバイオマスを分離し、それから酵母の細胞外部分から活性成分を抽出することによって得ることができる。その代わりに、酵母細胞は、当業者に公知のプロセスによって溶解されて酵母／Ｃ−ボレアリス発酵溶液を得ることもできる。典型的に、このプロセスは化学的、酵素的または物理的手法またはこれらの組み合わせによる細胞壁の破裂を伴う。酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物は、さらにクロマトグラフィー、溶媒抽出、傾瀉（デカンテーション）、濾過または炭素処理、或いは当業者に知られる他の方法で精製される。１つの実施形態においては、酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物は、例えば、蒸発脱水法（エバポレーション）、スプレードライ、凍結乾燥、ベルトまたはドラム乾燥等の、当業者に周知のあらゆる方法によって、さらに濃縮される。
【００９７】
酵母、例えば、ピキア・パストリス（Pichia pastoris）、を発酵過程の鍵となる段階の間、Ｃ−ボレアリス成長因子に曝した後、酵母は、Ｃ−ボレアリスの処理に供されていない酵母と比較して、大きな遺伝子的及びタンパク質的変化をする。加えて、酵母マイクロアレイの調査は、Ｃ−ボレアリスの処理の結果として、発酵したピキア・パストリス（Pichia pastoris）内の様々な遺伝子が、上方制御（アップレギュレート）または下方制御（ダウンレギュレート）のいずれかを受けたことを示している。上方制御及び下方制御という用語は、Ｃ−ボレアリスが酵母内の信号遺伝子において有する、信号遺伝子がスイッチオン（上方制御）される、またはスイッチオフ（下方制御）されることに関する影響力を意味する。酵母遺伝子の上方制御及び下方制御は酵母に対して、もしＣ−ボレアリスが存在しないとすれば通常発現されないタンパク質を発現させられるようにするタンパク質発現の変化をもたらすことができる。
【００９８】
加えて、Pichia pastoris（ピキア・パストリス）は、Ｃ−ボレアリスを取り込み、Ｃ−ボレアリスを、例えば、砂糖またはタンパク質由来のＣ−ボレアリス代謝物質のような化学的誘導体に変換し始める。この酵母は、Ｃ−ボレアリスを消化する過程を始める手段として、この変換を行うものと考えられる。１つの実施形態においては、もし酵母が、Ｃ−ボレアリスに存在できるヒドロキシル群の１つの上で、化学的にＣ−ボレアリスにタンパク質を付加すると、このような分子は新たなタンパク質として２Ｄ−ジェル電気泳動を起こす。これらの新たな化学的に変換されたＣ−ボレアリス分子を、酵母が典型的に発現する通常の代謝タンパク質と識別するのは困難である。しかしながら、ＭＡＬＤ−ＴＯＦ質量分析のような技術は、タンパク質を２Ｄ−ジェルと識別するのに用いることができる。加えて、Ｃ−ボレアリスのタンパク質及び砂糖代謝物質を、高効率液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）によって検査することができる。理論にとらわれることなく、発酵により形成されたＣ−ボレアリスの第２の代謝物質は、酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物が、酵母またはＣ−ボレアリスの単独では得られないヒトの皮膚の有益な特性を促進する能力において、重要な役割を演じるものと信じられる。
【００９９】
１つの実施形態においては、酵母はＣ−ボレアリス抽出物とともに、約７２から約１４０時間の範囲の期間、発酵する。１つの実施形態においては、Ｃ−ボレアリス抽出物は、酵母が成長段階に達してから１〜２日後に酵母に付与される。他の実施形態では、酵母／Ｃ−ボレアリス抽出物は、発酵中に酵母及びＣ−ボレアリスの両方から得られたオリゴ糖、タンパク質、及びグリコシル化糖の混合物を含む。他の実施形態においては、酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物は、消化されずに残っているＣ−ボレアリス抽出物との、部分的に消化された混合物を含有する。他の実施形態においては、有用なＣ−ボレアリス抽出物が、Ｃ−ボレアリス植物の根から得られる。
【０１００】
酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物が、ヒトの皮膚に影響を与える効果は、当業者に知られた方法の数値により測定される。１つの実施形態においては、酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物は、皮膚におけるそれらの効果について、例えば、角質細胞（ケラチン細胞）や線維芽細胞のような特定の皮膚細胞上でのヒト遺伝子マイクロアレイ、個々の皮膚細胞におけるタンパク質発現解析、或いは、組織モデルまたは生体外での皮膚モデルまたは生体内での皮膚モデルのような、分析的手法を用いることによって、守ることができる。これらの試験モデルにおいて、特定の遺伝子及び／またはタンパク質は、抽出処理の結果としてアップレギュレートまたはダウンレギュレートされると思われる。皮膚の状態を制御できる遺伝子及びタンパク質は、興味深い１つの実施形態である。本発明の目的について興味深い１つの実施形態においては、遺伝子及びタンパク質が、細胞外複合体発現、メラニン制御、皮膚の保湿、剥離作用、及びそのような作用に関連している。興味深い１つの実施形態では、タンパク質がシクロオキシゲナーゼ発現に関連し、１つの実施形態においては、シクロオキシゲナーゼ−１及び２及び細胞外複合体タンパク質発現にも、１つの実施形態では、タイプＩ、ＩＶ及びＶＩコラーゲン発現にも関連している。加えて、皮膚メラニン発現への抽出物の影響も、また相当興味深い。
【０１０１】
酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物の、これらの及び他の重要な皮膚のタンパク質の発現における効果は、ヒト遺伝子マイクロアレイ分析及びタンパク質発現により、当業者に知られた非侵蝕的な試験方法、以下のものが含まれるが限定するものではない、保湿性の向上、小じわの低減、色素沈着の低減、肌色の向上及びそのようなもので監視することができる。酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物の塗布は、皮膚の小じわの低減により、例えば、ＳｉｌＦｌｏシリコーン・モデリング、ＰＲＩＭＯＳ及びＶＩＳＩＯフォトグラフィック装置、及びそのような手法で測定される。加えて、保湿性は表皮水分蒸散量（ＴＥＷＬ）またはキュートメーター（cotometer）またはコメオメトリック（comeometric）測定法を用いて測定される。同様に、皮膚の色素沈着は、比色器（chromometer）を用いて測定できる。このような測定技術は、当業者によく知られており、「『非侵蝕的方法及び皮膚ハンドブック』第２版、Serup J, Jemec G B E, Grove G L(ed.),Taylor and Francis Boca Raton Fra. 2006」に見ることができる。
【０１０２】
酵母／ボタニカル抽出物は、市場で購入することができ、例えば酵母抽出物のメタバイオティクス・ライン（metabiotics line）は、アーク・パーソナル・ケア・プロダクツ（Arch Personal Care Products）（Ｌ.Ｐ.サウスプレインフィールド、ＮＪ）によって販売されている。
【０１０３】
１つの実施形態においては、酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物は、ＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現の増加によって、皮膚の明色化、皮膚の厚さの増加、多毛症の低減、及び／または、さもなければ皮膚形質の非手掌足底から手掌足底皮膚への変化の促進、の処置に用いうることが、最近になって見出された。これらの酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物は、老化の徴候を低減する組成物及び方法として、効果的な老化防止剤または老化予防剤であることが、最近になって認定された。つまり、この酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物は、線維芽細胞及びケラチン細胞の増殖、表皮と真皮の細胞間接着、細胞の表皮への上昇、ケラチン細胞間の固定と接着、真皮と表皮間の情報伝達、コラゲナーゼの過剰生産、コラーゲン発現を促進し、及び皮膚の機械的特性を向上させ、細い線、小じわ、及び皮膚のたるみのような、そして皮膚細胞成長の劣化の進行による他の状態の、経時的またはホルモン的老化または光老化皮膚の皮膚病的な徴候を緩和し、表皮層及び真皮層における増殖と機能性を促進する。
【０１０４】
これらの酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物を有する組成物は、１日ごとに局所的に塗布されたときに効果的である。理論にとらわれることなく、この酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物は、ＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現の増加によって、色素沈着を減少させ；皮膚を明色化し；色素過剰の皮膚を治療し；皮膚の厚さを増加させ；皮膚多毛症を低減し；及び／または皮膚形質を非手掌足底から手掌足底へ変化させる。この酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物の局所的な塗布は、また、注射や健康専門医の専門的知識を必要とせずに、必要部位への活性成分の供給を助長する。
【０１０５】
ここに開示されるように、この組成物は、約０．０００１質量％から約９０質量％の、約０．００１質量％から約２５質量％の、約０．０１質量％から約１０質量％の、約０．０１質量％から約５質量％の、約０．０５質量％から約１質量％の、及び約０．０５質量％から約０．５質量％の、組成物の合計質量に基づく濃度の、酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物を含有している。当業者は、要求される特殊な応用または効果に基づいて、用いる抽出物の量を調整することができるだろう。
【０１０６】
１つの実施形態においては、本発明の酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物は、美容上または皮膚病学的に許容可能な溶媒、媒体、希釈剤またはキャリアの中に含有される。局所的塗布を包含する実施形態においては、本発明の組成物は、ヒトの皮膚と相性が良い媒体（溶媒、希釈剤またはキャリア）を含有する。この組成物は、水、アルコール、または水／アルコールの溶液、軟膏、ローション、ジェル、油中水型、水中油型、クリームまたはジェルの形態を有する水−油−水−型の三重のエマルジョン、ミクロエマルジョン、またはエアロゾルとして形成することができる。加えて、この組成物は、上述したような、イオン性及び／または非イオン性の脂質を含有する、小胞性の分散液の形態とすることもできる。このような組成物に適した投薬量は、この技術分野で用いられる通常の知識と技術にしたがって計算される。
【０１０７】
［天然植物材料を用いる方法］
１つの実施形態においては、本発明は皮膚の状態と外観を向上させる方法を包含し、この方法は、酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物を含む組成物を、影響を受けた皮膚の領域に、色素沈着を減少させ；皮膚を明色化し；色素過剰の皮膚を治療し；皮膚の厚さを増加させ；皮膚多毛症を低減し；及び／または皮膚形質を非手掌足底から手掌足底へ変化させるために、塗布することを含む。
【０１０８】
他の実施形態は、皮膚の状態と外観を向上させるための本組成物の老化防止・予防剤としての使用に関連し、酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物を含む組成物の単独での、若しくは皮膚の状態と外観を向上させるのに有効な量の１または２以上の追加天然植物抽出物との組み合わせでの、皮膚への塗布または直接の供給方法による投与を含み、それによって酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物は、色素沈着を減少させ；皮膚を明色化し；色素過剰の皮膚を治療し；皮膚の厚さを増加させ；皮膚多毛症を低減し；及び／または皮膚形質を非手掌足底から手掌足底へ変化させる。
【０１０９】
特別な実施形態においては、酵母／Ｃ−ボレアリス抽出物の抽出物は、薬学的に、生理学的に、美容的に、及び皮膚病学的に許容可能な媒体、希釈剤、またはキャリア中に供給され、この組成物は治療が必要な影響を受けた皮膚の領域、例えば、小じわ、または薄い皮膚、またはたるんだ皮膚、に局所的に塗布される。そして、組成物は影響を受けた皮膚の領域に、老化の皮膚病学的な徴候を処置するために有効な量が残されて留まり、皮膚の状態と美的外観を向上させる。典型的には、この組成物は薄いフィルムとして皮膚に、処置されるべき影響を受けた皮膚に塗布され、そして時々は皮膚の他の領域に予防的に塗布される。
【０１１０】
開業医にとって好ましいように、酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物を含んでいる組成物を含有する美容処置は、本発明に含まれる抽出物、成分、及び／または構成要素は、例えば、本明細書に記載されるような化粧品組成物の局所的な塗布によって、このような組成物を管理するための日常的な技術にしたがって運び出される。化粧品組成物は、典型的には毎日１回または２回（例えば、朝と夜）、少なくとも１週間の期間は塗布される。しかし、約２週間、４週間、８週間、または１２週間でもよい。消費者はこの組成物をより長く継続して使用することを望むであろう。化粧品組成物は顔と首に塗布されるが、外観の向上を必要とする皮膚のあらゆる領域に塗布されると考えられ、化粧品組成物は影響を受けた皮膚の領域に残り、クリーム、ローション、ジェル、マスク、血清、軟膏、膏薬、化粧品、化粧落とし、日よけ組成物、またはそのようなものの皮膚への塗布を包含する日常的なそして通常の熟練技術では除去されず、すすぎ落とされない。この化粧品組成物は、塗布の形態としてスプレーも想定した場合、製剤上に局所的に残る。
【０１１１】
本発明の１つの実施形態においては、成分としてまたはそれから由来する抽出物を含む酵母／Ｃ−ボレアリス抽出物のような、限定されるものではない天然植物材料を有する組成物は、老化の影響を受けた皮膚の、１つの実施形態では円熟したまたは円熟しつつある皮膚の状態と美的外観を向上させるのに、以下の方法によって誰にでも有用である；年代による老化、光老化、ホルモン的な老化、及び／または日射による老化の皮膚医学的な徴候；線及び／または小じわの防止及び／または低減；目立つ顔の線及びしわの低減；頬の顔の小じわ；額；両眼の間の垂直なしわ、眼の上の水平なしわ、及び口の周囲、マリオネットライン（marionette lines）、そして１つの実施形態では深いしわや襞；外観及び／または線の深さ及び／または小じわ；の防止、低減、及び／または減少、眼窩下の線及び／または眼窩周囲の線の外観向上；皮膚の輪郭、へこんだ頬、窪んだ眼の外観の向上、目尻の小じわの見た目の低減；皮膚の若返りと蘇り、１つの実施形態では老化した皮膚；皮膚の脆弱性の低減；エストロゲン不安定の影響の改善；皮膚の萎縮の治療；皮膚色の引き締まりの向上；皮膚のたるみの防止、低減及び／または改善；皮膚の薄化の防止、低減及び／または改善、皮膚の堅さ、ふくよかさ、及び／またはしなやかさの向上；プロコラーゲン及び／またはコラーゲンの生成の向上；皮膚のキメの向上及び／または再組織化の促進；皮膚障壁の再生及び／または機能の向上；皮膚の輪郭の外観の向上；疲労及び／またはストレスの皮膚病学的な徴候の最小化；環境ストレスの防御；老化及び／または閉経により減少した皮膚成分の補給；皮膚細胞間の情報伝達の向上；細胞の繁殖及び／または増殖の増加；老化及び／または閉経により減少した皮膚細胞の消化の増加；細胞老化の遅延；皮膚の保湿性の向上；皮膚の弾力性及び／または回復力の増加；剥離の促進；微少循環の向上；セルライト形成の減少及び／または防止；色素沈着の減少；皮膚の明色化；色素過剰の皮膚の治療；皮膚の厚さの増加；皮膚多毛症の低減；及び／または皮膚形質の非手掌足底から手掌足底への変化；及びこれらのあらゆる組合せ。
【０１１２】
［第２の活性剤］
本発明の組成物は、酵母／Ｃ−ボレアリス抽出物に加えて、１または２以上の活性皮膚処理剤を含む。
【０１１３】
本明細書に開示された組成物に含まれるのが好ましい他の皮膚治療活性成分は、以下に含まれるが、これらに限定されない；モミピンドロウ（ Abies pindrow） 抽出物、アセンヤクノキ（Acacia catechu）抽出物、アノゲイッススマコモ（Anogeissus latifolia） 抽出物、クサウオ属（ Asmunda japonica ）抽出物、インドセンダン（Azadirachta indica）抽出物、ブテアマイタケ（Butea frondosa） 抽出物、ヒマラヤスギ（Cedrus deodara） 抽出物、マラッカノキ（ Emblica officinalis ） 抽出物、イチジクベンガレンシス（Ficus benghalensis）抽出物、カンゾウ（Glycyrrhiza  glabra）抽出物、ナナミノキ（Ilex  purpurea  Hassk ） 抽出物、総状花序キク（Innula  racemosa ） 抽出物、センキュウ（Ligusticum  chiangxiong）抽出物、センキュウシバ（Ligusticum lucidum）抽出物、アカメガシワ（Mallotus philippinensis）抽出物、スパニッシュチェリー（Mimusops elengi ）抽出物、スベリヒユ（Portulaca oleracea）抽出物、タチスベリヒユ（Portulaca sativa）抽出物、ホコガタアカザ（Atriplex portulacoides ） 抽出物、ヤエヤマアオキ（Morinda citrifolia ）抽出物、ワサビノキ（Moringa oleifera） 抽出物、ナリンギクレヌラータ（Naringi crenulata ）抽出物、キョウチクトウゴマ（Nerium  indicum）抽出物、オランダビユ（Psoralea corylifolia）抽出物、ステノローマホラシノブ（Stenoloma chusana ）抽出物、ミロバラン（Terminalia bellerica）抽出物、トマト糖脂質、コンニャク（Amorphophallus campanulatus ） 抽出物、サジオモダカ（Olisma orientale）抽出物、ルリマツリ（Plumbago  indica）抽出物、イランイラン（Cananga odorata）抽出物、ムクロジ（Sapindus rarak）抽出物、クルクマ（Curcuma xanthorrhiza）抽出物、ホオズキ極小（Physalis minima）抽出物、ステファニロタンダ（Stephania rotunda）抽出物、ハッカクレイシ（Rhinacanthus nasutus）抽出物、ノボリウチワ（Humulus scandens）抽出物、セスバニアマツバ（Sesbania grandiflora）抽出物、オオバヒメマオ（Pouzolzia pentandra）抽出物、パイパーキンマ（Piper betel）抽出物、マツリカ（Jasminum sambac）抽出物、ニセヒナギク（Eliptica prostrata Linn）抽出物； チョウマメ（Clitoria ternatea Linn）抽出物； ムギワラギク（Ozothamnus obcordatus）抽出物；デイゴ属ヤシ（Erythrina flabelliformis）抽出物； ロンコカルパス属カパッサ（Lonchocarpus capassa ） 抽出物； 槐トメントーサ 抽出物；テトランドリン（Tetrandrine）；カルバクロール（Carvacrol）；プニシン酸レチニル（Retinyl punicate）；カワラタケブラックコーンバイオマス（MycoFusions Coriolus Black Corn Biomass）； マイタケワキ大麦バイオマス（MycoFusions Maitake Waxy Hulless Barley Biomass）；サンショウ（Zanthoxylum nitidium）抽出物；麦門冬どくだみ（Ophiopogon Thunb. P.E.）抽出物；キキョウ根（Radix platycodonis）抽出物；及びアオツヅラフジ（Cocculus  glaucescens）抽出物；パキシリン；グランディス（Coccinia grandis）抽出物；アマリリス（hybridum）抽出物； エレモヒラ属オレンジ（Eremophila mitchellii）抽出物；エゾエンゴサク（Kunzea ambigua）抽出物；タンシノンＨＡ；テトランドリン；カルバクロール；シス−６−ノネノール、プニシン酸レチニル；オレイン酸レチニル；エクオール；モモタマナ属ベレリカ（Terminalia belerica） 抽出物；ツヅラフジ固形（Stephania solid）抽出物；及びローズマリー抽出物、Ｌ−４−チアゾリルアラニン、テトラメチルピラジン、（２Ｓ，３Ｓ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタン酸、３−ヒドロキシ−４，５−ジメチルフラン−２（５Ｈ）−オン、ブラックコホッシュ、サラシナショウマラセモサ（Cimicifuga racemosa）抽出物、トウガラシアムウム（Capsicum amuum）抽出物、杉、デリス属マメ（Derris  Scandens Benth） 抽出物、ウェスタンサンゴマメ（Erythrina flabelliformis）抽出物、アシュアガンダ（Withania somniferia）抽出物、モミ針（Abies alba）、ヘリクリサムジムノセフェラス（gymnocephalu）抽出物、ヒイラギ（アイレックス）抽出物、ローレルオーク（Thunbergia laurifloria）抽出物、ギョリュウバイ属灌木（Leptospermum lanigerum）抽出物、マイタケ（Grifola frondosa）抽出物、ミカン科ヘイズィー（Melicope hayesii）抽出物、ドイツトウヒ（Norway spruce）、ノウゼンカズラ属ヤマユリ（Phyllarthron bojeranum）抽出物、松葉、コショウ（Piper nigrum）抽出物、クララトメントーサ（Sophora tomentosa）抽出物、トウヒ針、ヒノキ科クロベ属（Thuja）抽出物、１−アロイル−Ｎ（２−オキソ−３−ピペリジニル）−２−ピペラジン、または美容的に許容されるその塩、デスチオビオチン、及びこれらの互換性のある組み合わせ。
【０１１４】
他の第２の活性剤は、酵母（例えば、Pichia pastoris）が活性剤とともに発酵された（或いはストレス下で）ときに生成した他の酵母発酵物を含む。このような第２の活性剤は、その全体が全ての目的について参照としてそのまま取り入れられる、米国特許出願番号第２０１１／００５２５１７に記載された活性剤を含む。このような第２の活性剤を製造する方法の例は、例えば、その全体が全ての目的について参照としてそのまま取り入れられる、米国特許出願番号第２０１０／００２１５３２に見出すことができる。
【０１１５】
他の第２の活性剤は、以下に含まれるが限定されるものではない；ボタニカル（例えば、上述された）；フィトール；アスコルビン酸とその誘導体；チオジプロピオン酸（ＴＤＰＡ）及びそのエステル；レチノイド（例えば、９−シス−レチノイン酸、１３−シス−レチノイン酸、全てのトランス−レチノイン酸及びそれらの誘導体、フィタン酸、レチノール（ビタミンＡ）及び、パルミチン酸レチノール、酢酸レチノール及びプロピオン酸レチノールのようなそれらのエステル、及びそれらの塩、及びその他）；ヒドロキシ酸（アルファ−ヒドロキシ酸とベータ−ヒドロキシ酸を含む）、サリチル酸及びアルキルサリチル酸；剥離剤（例えば、グリコール酸、３，６，９−トリオキサウンデカンジオン酸、等）、エストロゲンシンセターゼ促進化合物（例えば、カフェインとその誘導体）；５アルファ−レダクターゼ活性を阻害する化合物（例えば、リノレン酸、リノール酸、フィナステライド、及びそれらの混合物）；及び障壁機能促進剤（例えば、セラミド、グリセリド、コレステロール及びそのエステル、アルファ−ヒドロキシ及びオメガ−ヒドロキシ脂肪酸及びそれらのエステル、等）である。典型的には、レチノイド、以下に含まれるが限定されるものではない、レチノイン酸（例えば、全てのトランスまたは１３−シス）及びそれらの誘導体、レチノール（ビタミンＡ）及び、パルミチン酸レチノール、酢酸レチノール及びプロピオン酸レチノールのようなそれらのエステル、及びそれらの塩である。
【０１１６】
他の第２の活性剤は、酢酸トコフェリル；にんじん（Daucus carota sativa）；大豆及び大豆抽出物；藻類（Phaeodactylum tricornutum）及びその抽出物；ガンマオリザノール；kudzu （Pueraria lobata）及びその抽出物；アスコルビン酸テトラヘキシルデシル；及びSaxifraga sarmentosa及びその抽出物を含む。
【０１１７】
［媒体及び組成物］
本発明に関して、酵母／Ｃ−ボレアリス抽出物を含む組成物は、抗酸化剤、耐燃焼剤、日焼け止め剤、化粧剤、老化防止製剤、例えば、細い線及び／または小じわ用のクリーム、外用剤、皮膚浸透促進剤、スプレー、及び類似物を含む化粧品、をさらに含むことができる。また、本発明に関し、このような組成物に含まれる植物成分及び追加要素成分は、多様な製品形状に形成できる。局所的投与のための１つの実施形態では、組成物は、例えばクリーム、ローション、ジェル、血清、経皮性絆創膏、及び類似物のような、目標を定めた供与形態により作製される。目標を定めた供与及び／または浸透促進は、イオン泳動によっても達成される。
【０１１８】
本発明はさらに、特に刺激を含まない局所的投与のためまたは目標を定めた供与のための、植物成分を含む組成物を提供する。ゆえに、本発明の組成物は、敏感な皮膚に特に適している。本組成物は、皮膚の美的外観を向上させるのに十分な時間の期間、皮膚に塗布される。本組成物は、典型的には、日に一度、二度、またはそれ以上、通常は毎日一度塗布される。毎日の塗布は、１週間、２週間、４週間、またはそれ以上の期間行われる。本組成物はリポゾーム内に形成されることができ、他の添加剤又は基質を含んでもよく、及び／または、続く塗布までの間その箇所に届きまたは留まるように、さらに特に変性されることができる。
【０１１９】
本発明は、美容的にまたは皮膚病学的に許容可能な、ヒト組織を含む、生体生物組織に接触するために適した製剤を含有する、使用者に生理学的な影響を与えないと仮想される組成物を包含する。本発明に包含される組成物は、あらゆる美容的に及び／または皮膚病学的に適した形状で、ローションまたはクリームとしてのみならず、非水質または水性基質として、スプレー可能な液体状としても提供される。他の本発明の組成物に好ましい化粧品形状は、例えば、エマルジョン、リップクリーム、リップグロス、ローション、マスク、軟膏、ムース、膏薬、ポマード、溶液、スプレー、ワックスベースのスティック、またはぬれナプキンである。加えて、この発明に包含される組成物は、１または２以上の、適応する美容的に許容可能な技術的な専門家に一般的に用いられ知られている補助剤、発色剤、芳香剤、エモリエント、ヒュメクタント、ビタミン、濃縮剤、他の亢燃焼剤、抗酸化剤、着色防止剤、及び類似物、それに他のアロエ、カモミール、及び類似物、のような補助剤を含んでもよく、さらに以下に詳しく述べる。
【０１２０】
本発明の組成物に使用できる美容的にまたは皮膚病学的に許容可能な媒体は、以下に含まれるが限定されるものではない、１または２以上の水性系、グリセリン、１〜４個の炭素原子を有するアルコール、脂肪族アルコール、脂肪族エーテル、脂肪族エステル、ポリオール、グリコール、野菜油、鉱物油、リポソーム、層状の脂質材料、シリコーン油、水またはそれらのあらゆる組合せである。
【０１２１】
本発明においては、媒体は水相、油相、ジェル、水中ワックス状エマルジョン、水中シリコーンエマルジョン、シリコーン中水状、水中油状エマルジョン、または油中水状エマルジョンの形状となりうる。水相は、１または２以上の水溶性または水分散性成分の混合物であり、室温（摂氏２５度）において液体、半固体または固体である。媒体は、以下を含むか以下の形状でありうる、すなわち水または水性アルコール溶媒の懸濁液（サスペンジョン）、分散液（ディスパージョン）または溶液であり、増粘剤またはゲル化剤を含んでいることもある。当業者は、適切な製品形態、本明細書に含まれる成分、同様にそれを作製する方法を、当業者が有する知識に基づいて選択することができる。
【０１２２】
本組成物は、水相を含みまたは水相であり、水相は水、または水と少なくとも１つのアルコールのような親水性有機溶媒との混合物であり、特に直鎖または分岐の、２個から５個の炭素原子を有するモノアルコール、例えば、エタノールまたはプロパノール；ポリオール、例えば、プロピレングリコール、ソルビトール、グリセロール、ジグリセロール、パンテノール、またはポリエチレングリコール、及びそれらの混合物である。この水相は、組成物の質量に対して約０．５から約９９．９９質量％で存在する。１つの実施形態においては、酵母／Ｃ−ボレアリス抽出物は水溶性である。
【０１２３】
本発明の組成物がエマルジョンの形状を有する場合には、界面活性剤を有することもでき、その量は０．１から３０％であり、１つの実施形態においては、組成物の質量に対して約１から約２０質量％である。
【０１２４】
組成物は、増粘ポリマーを含有し、両親媒性のポリウレタン、ポリアクリル酸ホモポリマーまたはコポリマー、ポリエステル、及び／または炭化水素に基づく樹脂である。ポリマーは、美容的に許容可能な媒体に溶解可能か分散可能であり、必要に応じて可塑剤と複合される。
【０１２５】
本発明の組成物は、また油相を含んでおり、油相は室温（摂氏２５度）において液体である、油に溶解可能か分散可能な成分を含有し及び／または室温において固体である、油性またはワックス基質である炭化水素に基づく樹脂であり、ワックス、半固体、ガム、及びそれらの混合物である。この油性の相は有機溶媒をも含んでいる。
【０１２６】
室温で液体である好ましい油性材料は、ときに油と呼ばれ、動物由来の炭化水素に基づく油を含み、パーヒドロスクワレン；４個から１０個の炭素を有する脂肪酸の液体トリグリセリドのような炭化水素に基づく植物油であり、例えば、ヘプタン酸またはオクタン酸トリグリセリド、またはヒマワリ油、コーン油、大豆油、グレープシード油、ヒマシ油、アボカド油、カプリル酸／カプリン酸トリグリセリド、ホホバ油；液体パラフィンのような直鎖状または分岐鎖状の鉱物または合成由来の炭化水素、及び、ワセリン等のその誘導体；合成エステル及びエーテル、脂肪族アルコールのエステルの一つの実施形態としては、例えば、ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸２−エチルヘキシル、ステアリン酸２−オクチルドデシル、イソステアリン酸イソステアリル；ヒドロキシル化エステル、例えば乳酸イソステアリル、ヒドロキシステアリン酸オクチル、ヒドロキシステアリン酸オクチルドデシル、脂肪族アルコールのヘプタノエート、オクタノエート及びデカノエート、例えばジオクタン酸プロピレングリコール、ジヘプタン酸ネオペンチルグリコール、ジイソノナン酸ジエチレングリコール、及びペンタエリスリトールエステル等のポリオールエステル；オクチルドデカノール、２−ブチルオクタノール、２−ヘキシルデカノール、２−ウンデシル、オレイルアルコールなどの１２〜２６個の炭素原子を含む脂肪アルコール；部分的に炭化水素ベースのフッ素油及び／またはフルオロシリコーン油；そのようなフェニル基を含むシクロメチコーンとジメチコン等の室温で液体または半固体である揮発性または不揮発性の、直鎖状または環状のポリメチルシロキサン（ＰＤＭＳ）等のシリコーン油、例えば、任意にフェニル基を含んでもよく、フェニルトリメチコン、シロキサン、及びそれらの混合物である。これらの油分は、通常、油相の質量に対して、０質量％から約９０質量％、約１質量％から８０質量％の量で存在する。
【０１２７】
本開示の組成物の油相はまた、１または２以上の美容的に許容可能な有機溶剤をも含んでいる。これらの溶剤は、組成物の質量に対して０質量％から約６０質量％、約１質量％から３０質量％の量で存在している。そして、リポフィリック有機溶剤、両親媒性有機溶剤、及びそれらの混合物からなる群から選択することができる。本開示の組成物において使用することができる適切な溶剤は、酢酸エステル、メチル、エチル、ブチル、アミルまたは２−メトキシエチル酢酸；酢酸イソプロピル；トルエン、キシレン、ｐ−キシレン、ヘキサンまたはヘプタンのような炭化水素；少なくとも３個の炭素原子を有するエーテル、及びそれらの混合物である。
【０１２８】
本開示の組成物はさらに、化粧品の分野で従来使用される任意の成分を含むことができる。これらの成分は、保存剤、水相増粘剤（多糖生体高分子、合成ポリマー）及び脂肪相増粘剤、芳香剤、親水性及び親油性活性剤、及びこれらの混合物を含む。これらの様々な成分の量は、それらの意図された目的を達成するために化粧品分野で使用される量であり、典型的には組成物の質量の約０．０１質量％から約２０質量％までの範囲である。これらの成分の性質およびその量は、本開示の組成物の製造と両立するものでなければならない。
【０１２９】
本開示の組成物は、追加の粒子相をさらに含んでもよく、典型的には、組成物の質量に対して０質量％から約３０質量％まで、約０．０５質量％から約２０質量％までの量で存在し、化粧品組成物に使用される顔料及び／または真珠光沢剤及び／または充填剤を含むことができる。好適な無機顔料としては、酸化チタン、酸化ジルコニウム、酸化セリウム、並びに酸化亜鉛、酸化鉄、酸化クロム及びフェリックブルーが含まれる。好適な有機顔料としては、バリウムレーキ、ストロンチウムレーキ、カルシウムレーキ、及びアルミニウムレーキ、並びにカーボンブラックが含まれる。好適な真珠光沢剤としては、酸化チタン、酸化鉄または天然顔料で被覆されたマイカが含まれる。充填剤は、組成物の質量に対して、０質量％から約２０質量％まで、約０．１質量％から約１０質量％までの量で通常存在する。好適な充填剤としては、タルク、シリカ、ステアリン酸亜鉛、マイカ、カオリン、ナイロン（一実施形態としてオルガゾル）粉末、ポリエチレン粉末、テフロン（登録商標）、デンプン、窒化ホウ素、エクスパンセル（ノーベルインダストリー社）、ポリトラップ（ダウコーニング社）のような共重合体ミクロスフェア、及びシリコーン樹脂マイクロビーズ（東芝のトスパール）が含まれる。
【０１３０】
本開示の組成物の油相は、１以上のワックス、ガム、またはそれらの混合物を含んでもよい。ワックスは、炭化水素系ワックス、フルオロワックス及び／またはシリコーンワックスが含まれ、植物、鉱物、動物及び／または合成物起源であり得る。一実施形態では、ワックスは２５℃より高い、さらに４５℃より高い、融点を有する。本発明の組成物は、組成物の質量の０から約２０重量％のワックスを含有してもよい。ガムは、一般に、高分子量のＰＤＭＳまたはセルロースガムまたは多糖類であり、半固体材料は、一般に、そのようなラノリン及びその誘導体または代替のＰＤＭＳなどの炭化水素系化合物である。本開示の組成物は、組成物の質量の０から約２０質量％の、典型的には約０．１質量％から約１０質量％までのガムを含有することができる。
【０１３１】
本開示の他の実施形態は、記載された組成物を標的化送達システム、例えば、リポソーム、ミクロスフェア（例えば、米国特許第５，７７０，２２２号、アンガーらを参照）、及びそのようなものを用いて送達することに向けられ、これによって、コンポーネント及び／または活性成分が適用領域、例えば、顔や首、または皮膚の他の領域の皮下層により容易に到達し、影響を与えることができる。
【０１３２】
他の実施形態においては、本発明の局所用組成物はまた、以下のうちの少なくとも１つを含む：皮膚浸透促進剤、表面滑らかな皮膚プランパー、光拡散、日焼け止め剤、剥離促進剤、及び酸化防止剤。これらおよび他の適切な化粧品成分についての詳細は、「国際化粧品成分辞典及びハンドブック」化粧品、トイレタリー、および香料協会（ＣＴＦＡ）によって公開第１０版（２００４）pp. 2177 - 2299  に記載されている。本明細書にその全体が参考として組み込まれる。
【０１３３】
日焼け止めは、紫外線の損傷から皮膚を守る。本開示の例示的な実施形態では、日焼け止め剤は、単一の日焼け止めまたは日焼け止め剤の組み合わせのいずれかを使用することによって、ＵＶＡ及びＵＶＢ保護の両方を提供することができる。本発明の組成物において使用することができる日焼け止め剤は、アボベンゾン、ケイ皮酸誘導体（例えば、ケイ皮酸オクチルメトキシ）、サリチル酸オクチル、オキシベンゾン、二酸化チタン、酸化亜鉛、またはそれらの任意の混合物である。日焼け止め剤は、組成物の総質量の約１質量％から約３０質量％まで存在していてもよい。日焼け止め剤の添加は、パッケージされている間の組成物の光分解を防御／低減しながら、紫外線から皮膚を保護する働きをすることができる。
【０１３４】
日焼け止めを有する本開示の組成物は、以下の少なくとも一つを含む皮膚の美的外観の追加の改善をもたらす；日焼け状態の最小限化、日焼けの最小限化、及び、赤みの低減。
【０１３５】
抗酸化剤は、とりわけ、環境の侵略から皮膚を保護するために、皮膚からフリーラジカルを除去する機能をする。本発明の組成物において使用され得る抗酸化剤の例には、アルファヒドロキシ酸（ＡＨＡ）；過酸化ベンゾイル；ベータヒドロキシ酸；ピルビン酸、２−オキソプロパン酸、２−オキソブタン酸、２−オキソペンタン酸等のケト酸；米国特許第５，８４７，００３及び５，８３４，５１３に開示されているようなオキサ酸（これらの開示は参照により本明細書に取り込まれる）；サリチル酸；尿素；またはそれらの任意の混合物を有する化合物が挙げられる。抗酸化剤は、３，６，９−トリオキサウンデカンジオン酸、グリコール酸、乳酸、またはそれらの任意の混合物；アスコルビン酸及びその誘導体／エステル等のフェノールヒドロキシ官能化合物；ベータカロチン；カテキン；クルクミン；フェルラ酸誘導体（例えば、フェルラ酸エチル、フェルラ酸ナトリウム）；没食子酸誘導体（例えば、没食子酸プロピル）；リコピン；レダ酸；ロスマリン酸；タンニン酸；テトラヒドロクルクミン、トコフェロール及びその誘導体；尿酸；またはそれらの任意の混合物である。他の好適な抗酸化剤は、グルタチオン、リポ酸、チオグリコール酸、および他のスルフヒドリル化合物のような低減または非還元型のいずれかで、一つ以上のチオール官能基（−ＳＨ）を有するものである。酸化防止剤は、亜硫酸水素塩、メタ重亜硫酸塩、亜硫酸塩、または硫黄を含有する他の無機塩や酸などの、無機化合物であってもよい。本発明の組成物は、組成物の総質量の約０．００１質量％から約１０質量％まで、より好ましくは約０．００１質量％から約５質量％までの酸化防止剤を有していてもよい。
【０１３６】
本発明の組成物はまた、以下の活性剤、成分または補助剤（adjuvantアジュバント）の一つまたは複数を有していてもよい：麻酔剤、抗アレルギー剤、抗真菌剤、防腐剤、キレート剤、着色剤、粘滑剤、皮膚軟化剤、乳化剤、香料、保湿剤、潤滑剤、モイスチャライザー、ｐＨ調整剤、顔料改変剤、防腐剤、安定剤、界面活性剤、増粘剤、粘度調整剤、ビタミン類、またはそれらの任意の混合物。これらの種々の物質の量は、慣習的に、化粧品又は医薬品の分野で使用されるものは、例えば、それらが組成物の総重量の約０．０１％〜約２０％を構成することができる。
【０１３７】
本開示の組成物に製剤化するための活性剤の非限定的な例には、角質溶解剤として、すなわち、落屑、剥離、または洗浄の特性、または皮膚の角質層を柔らかくすることができる活性剤として説明されている天然植物活性物質に加えて、しわ及び／または小じわの治療効果を有する試薬を含む。抗しわ剤または抗細線活性剤の他の例には、ヒドロキシ酸およびレチノイドが含まれる。これらの薬剤は、例えば、組成物の総重量に対して、約０．０００１％から約５重量％までの量で、処方することができる。
【０１３８】
適切なヒドロキシ酸としては、例えば、グリコール酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、２−ヒドロキシアルカン酸、マンデル酸、サリチル酸、及びそのアルキル誘導体が含まれ、５−ｎ−オクタノイルサリチル酸、５−ｎ−ドデカノイルサリチル酸、５−ｎ−デカノイルサリチル酸、５−ｎ−オクチルサリチル酸、５−ｎ−ヘプチルオキシサリチル酸、４−ｎ−ヘプチルオキシサリチル酸、及び、２−ヒドロキシ−３−メチル安息香酸、または、２−ヒドロキシ−３−メトキシ安息香酸のような、そのアルコキシ誘導体が含まれる。
【０１３９】
典型的なレチノイドには、これらに限定されるものではないが、レチノイン酸（例えば、オールトランスまたは１３−シス）及びその誘導体、レチノール（ビタミンＡ）及び、パルミチン酸レチノール、酢酸レチノール及びプロピオン酸レチノール等のそのエステル、及びそれらの塩が含まれる。
【０１４０】
一実施形態では、局所適用のための組成物は、顔、首、手、足、または身体の他の領域のために、皮膚の保護ケア組成物の形態であってもよい。非限定的な例としては、デイクリームまたはローション、ナイトクリームまたはローション、日焼け止めクリーム、ローション、または油、ボディミルク、化粧（基礎）、人工日焼け組成物、脱毛剤、およびパッチが含まれる。
【０１４１】
乳化剤は、典型的には組成物の全質量に対して約０．１％質量から約３０質量％まで、さらには約０．５質量％から約３０質量％まで、本開示のエマルジョン組成物中に存在する。しかしながら、全ての組成物が必ず乳化剤を含むわけではない。
【０１４２】
［過剰色素沈着］
ある実施形態においては、本明細書に記載の化粧品組成物は、皮膚及び／または毛髪の過剰色素沈着を治療し及び／または防止するために使用することができ、例えば、皮膚または毛髪を明るくするために使用できる。いくつかの実施形態では、有効な量の酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物を含有する組成物は、皮膚または毛髪に局所的に塗布され、例えば過剰色素沈着した皮膚または毛髪の領域に塗布される。過剰色素沈着には、個人にとって好ましい色よりも濃いあらゆる皮膚または毛髪の着色、及びメラニン形成細胞に起因するものが含まれる。このような望まない色素沈着も変色と呼ばれることがある。皮膚の過剰色素沈着の領域には、分離したまたは斑の過剰色素沈着の領域が含まれる。分離した過剰色素沈着の領域は、より濃い色の明確で均一な領域とすることができ、皮膚に茶色の斑点やそばかすとして現れ、一般的に色素斑または「加齢斑」と呼ばれるマークが含まれることがある。皮膚の斑状の過剰色素沈着の領域は分離した過剰色素沈着の面積よりも広く、より不規則な大きさと形状とを有する暗い斑点とすることができる。過剰色素沈着の領域もまた、日焼けした皮膚の領域、例えば、ＵＶ曝露により日焼けした皮膚を含む。過剰色素沈着の髪は好ましい色よりも濃い髪のあらゆる色合いが含まれる。
【０１４３】
皮膚の過剰色素沈着は多様な要因によって引き起こされ、要因には、例えば、遺伝的特性、ＵＶまたは日光暴露、年齢、瘢痕、または皮膚の裂傷、火傷、日焼け、にきび、またはその他の皮膚疾患が含まれる、皮膚の損傷に起因する変色、その他が含まれる。例えば、皮膚の過剰色素沈着領域には、肝斑状の斑点が含まれる。肝斑は、顔の皮膚の変色を伴う一般的な皮膚疾患であり、一般的に妊娠した女性において具体化され、それは面部黄肝斑または褐色斑と呼ばれる。肝斑状（または褐色斑状）の斑点は、濃褐色の、不規則な顔面の斑点であり、上部の頬、鼻、唇、上唇、及び額に一実施形態として現れる。斑点は、多くの場合、時間とともに徐々に発達し、一般的に痒くなく或いは痛みはないが、個人の外観に悪影響を与える。皮膚の過剰色素沈着はまた、腕の下の領域にも表れ、例えば、好ましい色よりも濃くなっており、または濃くなりつつある。
【０１４４】
皮膚の過剰色素沈着は、個人にとって好ましい色よりも濃い個人の目の下の領域を含みまたは含まず、それらは一般的に「目の下のくま」や「くま」と呼ばれる。くまは、遺伝、アレルギー、疲労感、または他の原因によって発生する可能性があり、それぞれの目の下に通常は丸い色素沈着の均一な領域を生ずる。過剰色素沈着の治療においては、いくつかの実施形態では、目の下の表皮の変色及び／またはだぶつきを治療することは除外される。注目すべきことに、目の下の過剰色素沈着は単純なメラニン形成細胞の仲介による色素沈着の問題ではない。病因としては、循環などの血管透過性の増大などの誤動作、皮膚表面の下における漏れが原因となって、環境への露出、及び一般に知られている低色素沈着や皮膚美白化合物によく反応しないという問題が含まれる。実際、その場合目の下側の変色を減少させるために使用される局所用組成物には、それ自体が既知の皮膚美白剤であり、ゆえに目の下の皮膚美白化の原因になっているかも知れないアスコルビルホスフェートが高い割合で含まれる。過剰色素沈着した皮膚はまた、腋窩（すなわち、脇の下）領域の皮膚を含んでいてもよい。
【０１４５】
過剰色素沈着または過剰に色素が沈着した皮膚／毛髪の治療は、影響を受けた範囲の皮膚または毛髪の知覚可能な明色化を生成するように、過剰色素沈着に関連する望ましくない外観の一つ以上を根絶、低減、改善、または回復させることをいう。皮膚の過剰色素沈着領域を明色化することは望ましいことであり、一実施形態では、老人斑の衰退；日焼けの明色化；例えば、斑点状の色素過剰の領域における皮膚の状態の平衡化または最適化；肝斑状及び褐色斑状の斑点、そばかす、火傷の痕の瘢痕、及び損傷後の色素沈着の治療における明色化である。過剰色素沈着または過剰色素沈着した皮膚を防止することは、まだ過剰色素沈着の悪影響を受けていない皮膚に、色素過剰に関連する１つまたは複数の望ましくない外観を避けるか、遅らせるか、未然に防ぐか、または最小限に抑えるのに役立つ利益を与えることを意味しており、具体的には、最終的に発達する色素過剰領域の暗さや大きさを低減する。
【０１４６】
過剰色素沈着の皮膚を治療及び／または予防することができる酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物は、「皮膚美白剤」と呼ぶことができる。髪を明るくするために使用される場合、それらは、「毛髪明色化剤」と呼ぶことができる。１つの実施形態では、本発明の酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物は、非漂白方法で髪を明るくするために使用可能である 。 つまり、髪自体を漂白することよりも、濾胞性メラニン形成細胞からのメラニンの形成及び／またはメラニンの輸送を抑制することである。１つの実施形態では、本発明によって明色化された髪は顔の毛及び体毛を含み、頭皮を含まない。１つの実施形態では、毛髪明色化剤は上唇に位置する顔の毛に塗布される。
【０１４７】
皮膚（唇を含む）や毛髪の色素沈着は、表皮または毛髪繊維中に存在するメラニンのレベルとメラニンの種類によって決定される。例えば、ＤＨＩ−メラニンのより大きな表皮レベルや、メラニンの最も暗いタイプは、より暗い皮膚をもたらす。上述したように、メラニンは色素細胞内のメラノソームと呼ばれる特殊な細胞小器官（また色素生成細胞またはメラニン形成細胞と呼ばれる）内で合成され、合成プロセスは、酵素チロシナーゼによるアミノ酸チロシンのドーパキノンへの変換で始まる。
【０１４８】
したがって、本発明のもう１つの面は、上述した酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物に加えて、さらに、皮膚及び／または毛髪の明色化のためにカルシウム流入阻害剤を含む組成物の美容的使用に関する。本明細書で使用される「カルシウム流入阻害剤」は、低下、減少、ブロック、または他の色素細胞へのカルシウムの流入を阻害するように作用するあらゆる化合物を指す。本明細書では、この用語は、「カルシウム回路阻害剤」とほぼ同等の意味で使用される。カルシウム流入阻害剤は、色素細胞へのカルシウム流入を調節することが当技術分野で知られている化合物を含み、限定されないが、２−アミノエチルホウ酸ジフェニル（２−ＡＰＢ）などであろう。例えば、この化合物は、特に、顔料細胞への流入を含む、細胞内へのカルシウム流入を遮断することが知られている。他の既知のカルシウム流入阻害剤は、これらに限定されないが、アミノヘキサヒドロフルオレン、ベプリジル、カルシクルジン、カルシセプチン、塩化カルミダゾリウム、ニフェジピン、ベラパミル、ＦＳ２（Dendroaspis polylepis polylepis）、ガラニン、プロトピン、テトラヒドロポルマチン、ソマトスタチン−１４、Ｌ−ステフォリジネアルベリン、及びそれらの塩；ならびにマンガン及びその塩、マグネシウム及びその塩が挙げられる。例えば、欧州特許EP1419764；国際特許出願公報WO 2006048671号；及び米国特許出願第2009/0028826を参照のこと；及び、例えば、米国特許公開番号第2011/0052517に記載されているように、凝集され濃縮された酵母抽出物エキスがあり、上述した文献は、本明細書において全ての目的のためにその全体が参照により組み込まれる。カルシウム流入阻害剤を含む化粧品組成物は、驚くべきことに、メラニン合成を減少させるように作用し、したがって、例えば、皮膚の過剰色素沈着や脱色毛髪を治療し及び／または予防するために、皮膚または毛髪明色化製品に用途を見出す。過剰色素沈着した皮膚を治療及び／または予防することが可能なカルシウム流入阻害剤は、皮膚明色化剤と呼ぶことができる。髪を明るくするために使用される場合には、それらは、「毛髪明色化剤」と呼ぶことができる。過剰色素沈着の用途に使用される組成物は、例えば、患部の皮膚／毛髪を明るくするような、過剰色素沈着を治療及び／または防止するために、１つまたはそれ以上のカルシウム流入阻害剤を有効な量で含むであろう。
【０１４９】
いくつかの実施形態においては、本発明の組成物は、局所的に塗布されたときに皮膚（または毛）の所定の領域におけるメラニン合成を減少させるのに十分な量で、少なくとも一つのカルシウム流入阻害剤と組み合わせて、酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物を含む。
【０１５０】
いくつかの実施形態では、例えば、皮膚（または毛髪）を明色化するような、過剰色素沈着を治療及び／または防止するための化粧品組成物は、さらに、少なくとも１つの他の皮膚明色化剤（または少なくとも１つの他の毛髪明色化剤）を含む。例えば、過剰色素沈着を治療及び／または予防するのに有効な量で、酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物を含む金属 − 複合化ペプチドを含む修飾されたペプチド及び／またはカルシウム流入阻害剤を含む化粧品組成物は、さらに少なくとも１つの他の皮膚明色化剤（または少なくとも１つの他の毛髪明色化剤）を含む。例えば、KR 2005095167；JP 2003252743；及びJP 61260009に開示されたチロシン阻害剤のいずれかを含むチロシン阻害剤は、いくつかの実施形態に含まれている。皮膚（又は毛）を明色化する皮膚（または髪）に塗布することができる任意の他の物質は、本明細書に記載の組成物に追加する皮膚（または毛）明色化剤としても使用することができる。皮膚明色化剤の例としては、これらに限定されないが、ヒドロキノン、コウジ酸、Ｎ−アセチルグルコサミン、甘草及び／またはその誘導体、アスコルビン酸及び／またはその誘導体、アルブチン、ベアベリー抽出物、カンゾウ（Glycyrrhiza glabra）及びその誘導体、クロレラ（Chlorella vulgaris）抽出物、シソ（perilla）抽出物、ヤシ果実（coconut fruit）抽出物、及び／またはその他の脱色剤が挙げられる。シソ抽出物は、例えば、米国特許第5980904及び日本の特許出願公開番号07025742、07187989、10265322、2001 163759、及び2001 181 173に、美白剤として開示されている。ヤシ果実抽出物は日本国特許第2896815B2号において、美白剤として開示されている。
【０１５１】
他の皮膚明色化剤は、ブテアマイタケ（Butea frndosa）、クレヌラタ（Naringi crenulata）、ホラシノブ（Stenoloma chusana）、インドセンダン（Azadirachta indica）、カンゾウリン（Glycyrrhiza glabra linn.）及びモリンダシトリフォリア（Morinda citrifolia）の抽出物、トマト糖脂質、チオジプロピオン酸（ＴＤＰＡ）及び／またはその誘導体、またはそれらの任意の組み合わせ、及び、アスコルビルグルコシド、ビタミンＣ、レチノール及び／またはその誘導体、アルブチン、ギシギシクリスパス抽出物、加水分解乳タンパク質などの乳タンパク質、Ｎ，Ｎ，Ｓ−トリス（カルボキシメチル）システアミン、オレアノール酸、シソ油、胎盤抽出物、ユキノシタ属サルメントーサ（Saxifragia sarmentos）、ジュニペリン酸（juniperic acid）、チオジプロピオン酸（ＴＤＰＡ）及び／またはその誘導体、センキュウ（ligusticum chiangxiong hort.）、ジャポニカどくだみ（ asmunda japonica thumb.）、ハコベメディカ（stellaria medica (L.) cyr. ）、セダムブンゲ（sedum sarmentosum bunge）、センキュウ芝（ligusticum lucidum Ait.） 、ナナミノキ（ilex purpurea hassk）、エンブリカ、アピゲニン、アスコルビルパルミトール、カルバナス  Ｃ．ボレアリス（carruba C. borealis s）、ヘスペリチン、クロストリジウム  Ｃ．ボレアリス（inabata C. borealis）、イソリクチゲニン、ケンフェロール-7-ネオヘスペリドース（isoliquirtigenin）、Ｌ−ミモシン、ルテオリン、油溶性甘草抽出物Ｐ−Ｔ（４０）、オキサ酸、フェニルイソチオシアネート、ココシン（cococin）、シリマリン、Ｔ４ＣＡ、テトラヒドロクルクミン、ユニトリエノール（unitrienol）、ウルソール−オレアノール酸、ＵＶＡ／ ＵＲＳＩ、またはこれらの任意の組み合わせが挙げられる。さらに、相乗的な改善は、いくつかの実施形態において、１つ以上のこのような追加の皮膚（又は毛）明色化剤と本発明の組成物との組合せを用いて得られ得ることが企図される。例えば、いくつかの実施形態において、本発明は、皮膚に強化された皮膚美白効果を提供するために、本明細書で記載される１つ以上の組成物と例えばＴＤＰＡ、の相乗作用に関する。
【０１５２】
［皮膚の厚さ］
皮膚の色素沈着におけるＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現増強剤の効果に加えて、ＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現促進剤はまた、非掌蹠の皮膚の厚さを増加させる。これは、様々な皮膚疾患、例えば皮膚移植、皮膚潰瘍、皮膚の擦り傷や裂離／切除（体積欠陥を残すもののような）、反復的な衝撃や機械的なストレスによる傷害または素因、年齢、皮膚学的な様々な条件に関連する皮膚の変化（例えば、薄化やしわの皮膚）、またはステロイド治療による皮膚損傷といった皮膚疾患を治療するのに有用である。
【０１５３】
皮膚の掌蹠領域における表皮は、非掌蹠領域における表皮より厚く、色素沈着が少ない。非掌蹠の真皮中の線維芽細胞にはないのに対し、掌蹠の真皮中の線維芽細胞は、間葉上皮の相互作用を介して非掌蹠のケラチン生成細胞における厚い表皮とケラチン９発現を誘導する（山口ら、J．Invest．Dermatol112：483-488、1999）。
【０１５４】
非掌蹠表皮（真皮部分を除く）は、間葉上皮の相互作用を介して掌蹠型を取り入れることができるため、掌蹠皮膚の欠損（例えば、真性糖尿病による（山口ら、Brit. J. Dermatol. 151: 1019- 1028, 2004）及びリウマチ性疾患による（山口ら、Brit. J. Dermatol. 152：664- 672、2005））を治療するために移植することができる（山口ら、Arch. Dermatol. 137: 621- 628, 2001；山口と吉川、 J. Dermatol. 28：521- 534, 2001）。
【０１５５】
タンパク質６（ＬＲＰ６；マオら、Nature 411：321 - 325, 2001）と関連するＷｎｔ受容体リポタンパク質受容体と相互作用するＤＩＣＫＫＯＰＦ−１は、カノニカルＷｎｔシグナル伝達経路の分泌拮抗物質であり、ベータカテニン及びグリコーゲンシンターゼキナーゼ３．ベータ（GSK3. beta. ）を含む多様なタンパク質複合体、アキシン、大腸腺腫性ポリポーシス（APC）及びAkt（河野＆Kypta、J. Cell Sci.116：2627-2634, 2003）を含む。
【０１５６】
ＨＯＸ遺伝子ファミリーのメンバーは、桁数および形態形成を制御する初期胚の一次および二次軸にパターニングを調節する転写因子である（Zakanyら、Science 304: 1669 - 1672, 2004）。四肢の発達中にＨＯＸ遺伝子の共線規制が幹に見られるものと同様である。上流に位置する遺伝子は、より遠位の式（HoxD12）を持っているのに対し、ＨＯＸＤ複合体（HoxD8）の中間に位置する遺伝子は、肢芽の近位の領域で表現されている（ Kmitaら、Nature 420：145-150、2002）。ＤＩＣＫＫＯＰＦ−１の効果について：ＨＯＸ遺伝子は、特に線維芽細胞によって分泌されるのに応答して、胚のニューロンの地形／部位特異的分化を指示することが知られており（Dasenら、926から933まで、2003、Nature 425）、そして、ＨＯＸ遺伝子発現は、 例えば酵母/ C−ボレアリス発酵抽出物などの増強剤ＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現の投与により、媒介ＤＩＣＫＫＯＰＦ−１の過剰発現によって増幅された発酵抽出物を介して、本明細書に提供される掌蹠表現型及び／またはその１つ以上の特性の発現をもたらすことができる。
【０１５７】
ここで提供されるのは、例えば、老化または局所的なステロイド治療に起因する薄い皮膚を有する被験者を治療するための例示的なプロトコルである。しかしながら、当業者は、そのような治療プロトコルは、薄い皮膚に生じる他の状態、例えば、被験者が反復的な衝撃や機械的ストレスによって引き起こされる皮膚移植、潰瘍、摩耗、または損傷を有する場合の治療に適していることが分かるであろう。いくつかの実施形態では、治療される皮膚は手の上の皮膚であり、例えば、皮膚の加齢に関連する薄化であり、特定の例においては、ＤＩＣＫＫＯＰＦ−１の発現増強剤は、ハンドクリームまたはローションの形態で提供される。
【０１５８】
いくつかの実施形態においては、被験者は、掌蹠炎症、足部潰瘍、例えば糖尿病性足部潰瘍、または、全身性硬化症等の膠原病に起因するもののような腐食損傷の別のタイプ、ポリリウマチ性多発動脈炎、及び関節リウマチを持っている。これらの型の皮膚損傷は、いくつかの例では、ＤＩＣＫＫＯＰＦ−１によって誘導される線維芽細胞から操作された幹由来の表皮または組織の移植片が足裏の表現型を取り入れることによって治療される。足裏の表現型は、掌蹠においてさらなる損傷に耐性があり、より耐久性の皮膚移植においてもたらされる。したがって、例えば、露出した骨のため、別の方法では難治である掌蹠創傷は、例えば骨髄暴露、密封包帯、表皮移植、及びＤＩＣＫＫＯＰＦ−１の治療の組み合わせで、治療することができる。例えば、以下を参照のこと。「Atiyehら、（2005）Burns, 31：944 - 956、クロージング火傷や他の傷の方法」のレビュー、「Wongら、（2007）Br. J.  Dermatol. 156：1149-1551、組織工学のための線維芽細胞を使用する方法」のレビュー、「山口ら、 (2004) Br. J. Dermatol.151：1019-1028、露出した骨を伴う難治性糖尿病性足部潰瘍の治癒方法」、これらは、全てが参照により本明細書に組み込まれる。それぞれの場合、移植組織は、耐久掌蹠表現型を誘導するために、移植前または後のいずれかにおいて、ＤＩＣＫＫＯＰＦ−１に暴露される。
【０１５９】
局所ＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現増加剤治療は、急性症状の治療後に見られる改善を維持するためだけでなく、皮膚の急性の薄化または皮膚移植の治療に適している。簡単に言えば、エマルジョン−ベースのＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現増加剤の製剤は、１日１回、２回、またはそれ以上、一般に、朝と夕方に、被験者の患部に局所的に塗布される。ＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現増加剤の典型的な用量は、状態の重症度、対象の年齢、及び炎症や赤みなどの有害な副作用に対する感度に応じて、体重１ｋｇあたり０．１μｇから体重１ｋｇあたり１μｇまでの範囲である。特定の実施例において、約10〜1 ,000 ng/ml のＤＩＣＫＫＯＰＦ−１ 表現増加剤が、例えば、約 50 ng/mlから約 500 ng/ml、または約100 ng/mlの量で局所的に塗布される。処置は少なくとも６週間、または好ましい効果が得られるまで続けられる。幾つかの場合には、処置は１２、２４、３６週間またはそれ以上続けられる。
【０１６０】
一度、皮膚を厚くする効果が好ましい程度に達成されれば、ＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現増加剤の塗布は、１日１回に減らされる。ある場合は、塗布処理はさらに続けられるが、他の場合には、塗布処理は維持塗布処理の期間の経過後に打ち切られる。
【０１６１】
これ以上の叙述を要することなく、以上の説明に基づいて当業者は本発明を最大限に利用できるものと信じる。以下の実施例は、本発明をさらに説明するためだけのものであり、いかなる意味においても本発明を限定するものではない。
【０１６２】
（実施例１）
［Ｃ−ボレアリス抽出物の作製］
クリントニア・ボレアリスが採取され、２００ｍｇの乾燥植物材料から１ｍＬの抽出物が得られ、１：５の水溶液として水性注入液が作製された。注入液は有機溶剤を使わない水性調合物である。
【０１６３】
（実施例２）
［酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物の作製］
上記のクリントニア・ボレアリス抽出物は、通常のPichia pastoris 発酵媒体で７２〜１４０時間の期間、植物組成物が少なくとも吸光度測定により評価される一部が代謝されるまで、発酵された。粗生成した酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物は、多糖類を含む細胞壁成要素に溶解し、精製された。不溶解物は、色彩と香りを向上させるために濾過により除去された。最終的に得られた液体発酵抽出製品が保存された。
【０１６４】
（実施例３）
［線維芽細胞の組織培養］
ヒト皮膚線維芽細胞、成人（２２ｙｒｓ；カスケード；♯５Ｃ０７５９）が、１０％ＦＢＳ、１％Ｌ−グルタミン、及び１％Ｐ／Ｓを含む線維芽細胞成長媒体中で育てられた。線維芽細胞を３５０，０００細胞／ウェルの密度で６−ウェルプレートの上に播種して、一晩培養した。上澄みを、純水粗生物から除去した。溶媒または酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物のいずれかを含有する無血清培地（１％Ｌ−グルタミン、１％Ｐ／Ｓを含み、ＦＢＳを含まない）を、細胞に添加した。４８時間後に、細胞溶解物を収集した。
【０１６５】
（実施例４）
［タンパク質濃度の測定］
タンパク質濃度は、クーマシータンパク質分析によって測定した。手短に言えば、標準物質を、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）を用いて作製した。１：１００に希釈された細胞可溶化物を用意した。標準物質と可溶化物を、同量のクーマシー溶液（♯１８５６２０９；サーモ・サイエンティフィック）と混合した。０．２ｍＬの混合物を９６ウェルプレートに加えて、５７０ｎｍの波長で読み取った。
【０１６６】
（実施例５）
［ＤＩＣＫＫＯＰＦ−１の量の測定］
ＤＩＣＫＫＯＰＦ−１の量は、Ｒ＆Ｄシステム（ＤＹ１９０６Ｅ）のヒトＤＩＣＫＫＯＰＦ−１・エリサキット（ＥＬＩＳＡ（Enzyme-Linked Immuno sorbent Assay）Ｋｉｔ）を用いて測定した。製造業者の定めた実験手順は以下のようであった。手短に言えば、９６ウェルプレートは４μｇ／ｍＬの捕獲抗体で、１００μＬ／ウェルで一晩覆われた。プレートは３回洗浄され、３００μＬ／ウェルの試薬希釈剤（ＰＢＳ中に１％のＢＳＡを含む）で１時間ブロックされた。プレートは３回洗浄された。試験サンプルがクーマシータンパク質分析のデータを用いて準備された；このように全てのサンプルが等量のタンパク質を有する。ＤＩＣＫＫＯＰＦ−１基準物質と試験サンプルが、１００μＬ／ウェルにおいて２時間添加された。プレートは３回洗浄され、それから１００μＬの検出用抗体（１０ｎｇ／ｍＬ）が添加され、２時間培養された。プレートは３回洗浄され、続いて１００μＬ／ウェルのストレプトアビジン−ＨＲＰが２０分間添加された。プレートは３回洗浄され、それから１００μＬ／ウェルの基質溶液が２０分間添加された。５０μＬ／ウェルの停止溶液を添加し、続いてプレートを静かに軽くたたいた。プレートを波長４５０ｎｍにおいて読み取った。
【０１６７】
（実施例６）
［生体外におけるＣ−ボレアリス／酵母発酵抽出物による処理後のＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現の増加］
表１に示されるように、酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物により処理された線維芽細胞は、タンパク質レベルでのＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現を誘発する。
【０１６８】
【表１】
0006353835.tif 000002
【０１６９】
（実施例７）
［生体外における酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物による皮膚の明色化］
既知の皮膚明色化剤の存在下における、生体外での皮膚の明色化の有効性を実証するための酵母／Ｃ−ボレアリス抽出物の能力を評価する実験が企画された。２種類の成分混合物が準備された：混合物１はチオジプロピオン酸／エステル、アスコルビン酸テトラヘキシルデシル、ストレスのかかった酵母抽出物、例えば米国特許公報番号第２０１１／００５２５１７号に記載されている酵母抽出物／アグーチペプチド、アスコルビングルコシドを含有し、混合物２は混合物１の成分＋酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物を含有していた。メラミン合成の速度を制限する酵素であることから、チロシナーゼ発現が皮膚の明色化の有効性を測定するために用いられた。
【０１７０】
試験は、メラノダーム（Ｍｅｌａｎｏｄｅｒｍ：商標）ＦＴＢ（ＭＥＬ-３００-ＦＴＢ；マテック、アッシュランド、ＭＡ）を用いて、通常のケラチン生成細胞、メラニン形成細胞（アフリカ系アメリカ人に由来する）、及び線維芽細胞を含有する、再構成された三次元のヒト皮膚等価組織モデルについて実施された。組織は、製造業者に推奨されるＭＥＬ−３００−ＦＴ−ＮＭＭ−１１３媒体中で、成長させた。２４時間の平衡状態の後、組織は１００μＬの媒体制御または混合物で処理された。２４時間の培養の後、組織の表皮部分がｍＲＮＡ分析のために集められた。組織は溶解し、全てのＲＮＡは製造業者の実験手順にしたがって、Ｑｉａｇｅｎ試薬を用いて分離された。チロシナーゼｍＲＮＡは、実験手順及びアプライド・バイオシステム会社から提供された試薬にしたがって、定量化された。
【０１７１】
２種類の混合物とも、媒体制御に比較してチロシナーゼｍＲＮＡ発現の低下を示した。混合物１は、媒体制御に比較して３２．７％の抑制を示した。しかしながら、酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物を含有する混合物２は、４２．２％の抑制を示し、この値は混合物１と比較して２６％大きい。これは、酵母／Ｃ−ボレアリス抽出物が、チロシナーゼを抑制することにより、皮膚の明色化を有効に提供できることを示している。
【０１７２】
（実施例８）
［生体外における酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物を含む製剤による皮膚の明色化］
酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物を含むスキンケア製剤のメラニン合成を抑制する効力は、メラノダーム（商標）ＦＴＢ（ＭＥＬ-３００-ＦＴＢ；マテック、アッシュランド、ＭＡ）を用いて、通常のケラチン生成細胞、メラニン形成細胞（アフリカ系アメリカ人に由来する）、及び線維芽細胞を含有する、再構成された三次元のヒト皮膚等価組織モデルについて評価された。組織は、製造業者に推奨されるＭＥＬ−３００−ＦＴ−ＮＭＭ−１１３媒体中で、成長した。１０マイクロＬのエッセンス製剤（実施例１３に類似したもの）が１日目、２日目、４日目、７日目、９日目及び１１日目に、局所的に塗布された。それぞれの塗布の前に、組織（Ｎ＝４または５）は３００μＬのリン酸緩衝食塩水で２回洗浄された。１４日目に、組織内のメラニン含有量が測定された。端的に言えば、組織は、０．４ｍＬの１％ＳＤＳ、５０ｍＭのＥＤＴＡ、及び１０ｍＭのＴｒｉｓ中で、ｐＨ６．８において細胞破砕された。それぞれの細胞破砕液に対して、２０μＬのタンパク質分解酵素・プロテナーゼＫ（５ｍｇ／ｍＬ）を加えて、４５℃で一晩培養した。２０μＬの追加のプロテナーゼＫを添加して、４５℃で４時間培養した。それから、０．５Ｍの炭酸ナトリウム５０μＬと、３０％のＨ２Ｏ２１０μＬを加えて、８０℃で３０分間培養した。組織を冷却して、混合物を１００μＬのクロロホルム／メタノール（２：１）で抽出した。１０，０００ｇで１０分間の遠心分離の後、上部相の吸光度を４０５ｎｍで測定した。組織の画像をメラニン分離の前に撮影した。
【０１７３】
未処理の組織のメラニン含有量は２３．４単位であるのに対して、スキンケア製剤で処理した組織のメラニン含有量は１２．４単位であった。基礎処方製剤（実施例１３に類似したもの）で処理した組織中の相対メラニン含有量減少を、基礎処方製剤で処理していない組織と比較したものを、図１に示し、１４日後のメラノダーム（商標）皮膚等価組織の形態の視覚的外観を図２に示す。
【０１７４】
（実施例９）
［消費者パネル試験］
本発明の組成物は多様な対象（パネリスト）によって、すなわち、商業的に利用可能な局所塗布用組成物として有用かがテストされ比較された。開業医にとって高く評価されるように、制御組成物及びプロトタイプ組成物を、パネリストの皮膚に、時間単位、日単位、または月単位で塗布することをパネリストに依頼することができ、パネリストは質問票に基づいて製剤を評価した。例えば、パネリストはプロトタイプ組成物が色素沈着を低減したか；皮膚を明色化したか；色素過剰を治療したか；皮膚の厚さを増加させたか；皮膚の多毛性を改善したか；及び／または皮膚形質を非手掌足底から手掌足底形質へ変化させたか、についての質問を受けた。回答結果は、皮膚の明色化の向上；色素過剰皮膚の治療；色素沈着の低減；皮膚の厚さの増加；皮膚の多毛性の改善；及び／または皮膚形質の非手掌足底から手掌足底形質への変化を証明するものと思われる。
【０１７５】
（実施例１０）
［生体内における酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物を含む製剤の局所的な塗布による皮膚への有益な効果の評価］
臨床的な有効性の研究が、光損傷を受けた顔の皮膚に関連する特質に影響を及ぼすために、他の選択された皮膚明色化成分に加えて、酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物を含む局所的なスキンケア基礎製剤を評価するために行われた。無作為のブラインド試験が、２５〜４０歳の年齢範囲の３４人の女性について、実質的に実施例１３で述べられた製剤を１日２回、１２週間にわたって顔に塗布することにより実施された。基準時、２週間後、４週間後、８週間後及び１２週間後に写真が撮影された。写真は、委員会認定の皮膚科専門医によって、以下の０〜９の等級で評価された。９等級が最も厳しい条件に相当する；分離した色素沈着、斑の色素沈着、目じりの小じわの細い線としわ、目じりの小じわの粗い線としわ、むらがない肌の色、透明性、病的に黄ばんだ肌の色、という皮膚の特質について評価された。これらのパラメータのそれぞれについて、ｔ−検定を用いて、個々の時点における基準状態からの平均パーセント変化が基準値と比較された。０．０５以下の有意確率（Ｐ値）が有意と思われた。基準値からの改善を示したもののパーセンテージも算出された。
【０１７６】
【表２】
0006353835.tif 000003
【０１７７】
（実施例１１）
［生体内での皮膚の厚さ増加］
本発明の抽出物により促進されたＤＩＣＫＫＯＰＦ−１により皮膚の厚さを増加させる効果は、メラノダーム（商標）ＦＴＢ（ＭＥＬ-３００-ＦＴＢ；マテック、アッシュランド、ＭＡ）の皮膚等価３Ｄ組織を用いて評価された。Ｃ−ボレアリスの酵母抽出物を含む組成物は、組織に局所的にまたは基底側の媒体中に数日間塗布された。処理の終了時に、組織部分は４％のパラホルムアルデヒドで固定され、そして Fontana-Masson 染色が実施された。皮膚等価物の厚さは、顕微鏡を用いて測定された。
【０１７８】
（実施例１２）
［皮膚の明色化及び／または老化防止エッセンス製剤］
典型的な、酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物を含む変性された酵母ペプチド片を含有する、皮膚に局所的に塗布するための化粧品組成物は、以下の配合で得られる。この組成物は、老化防止及び／または皮膚の明色化の応用を有するエッセンスの形で供給される。
【０１７９】
【表３】
0006353835.tif 000004
【０１８０】
（実施例１３）
［皮膚を明るくする及び／または老化防止エッセンス製剤］
さらに典型的な、酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物を含有する、皮膚に局所的に塗布するための化粧品組成物は、以下の配合で得られる。再度、組成物は、老化防止及び／または皮膚の明色化の応用を有するエッセンスの形で供給され、典型的な化粧品組成物の全体がｗ／ｗパーセンテージとして明確に示される。
【０１８１】
【表４】
0006353835.tif 000005
【０１８２】
【表５】
0006353835.tif 000006
【０１８３】
（実施例１４）
［制汗剤／または防臭剤］
典型的な、酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物を含む変性された酵母ペプチド片を含有する、皮膚に局所的に塗布するための化粧品組成物は、以下の配合で得られる。この組成物は、老化防止及び／または皮膚の明色化の応用を有する芳香剤の形で提供される。
水                                        ｑｓ
ＰＯＰ（１５Ｍ）ステアリルエーテル        １−３％
パルミチン酸イソプロピル                  １−３％
ステアレス−２                            １−４％
アルミニウムクロロハイドレート            ２５％まで  （またはアルミニウムジルコニウムトリクロロハイドレート２０％まで）
酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物            ０.００１−３％
【０１８４】
（実施例１５）
［調色液（トナー）］
典型的な、酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物を含む変性された酵母ペプチド片を含有する、皮膚に局所的に塗布するための化粧品組成物は、以下の配合で得られる。この組成物は、老化防止及び／または皮膚の明色化の応用を有するトナーの形で提供される。
【０１８５】
【表６】
0006353835.tif 000007
【０１８６】
【表７】
0006353835.tif 000008
【０１８７】
（実施例１６）
［昼用クリーム］
典型的な、酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物を含む変性された酵母ペプチド片を含有する、皮膚に局所的に塗布するための化粧品組成物は、以下の配合で得られる。この組成物は、老化防止及び／または皮膚の明色化の応用を有する昼用クリームの形で提供される。
【０１８８】
【表８】
0006353835.tif 000009
【０１８９】
【表９】
0006353835.tif 000010
【０１９０】
（実施例１７）
［乳液状ローション］
典型的な、酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物を含む変性された酵母ペプチド片を含有する、皮膚に局所的に塗布するための化粧品組成物は、以下の配合で得られる。この組成物は、老化防止及び／または皮膚の明色化の応用を有する乳液状ローションの形で提供される。
【０１９１】
【表１０】
0006353835.tif 000011
【０１９２】
【表１１】
0006353835.tif 000012
【０１９３】
（実施例１８）
［夜用クリーム］
典型的な、酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物を含む変性された酵母ペプチド片を含有する、皮膚に局所的に塗布するための化粧品組成物は、以下の配合で得られる。この組成物は、老化防止及び／または皮膚の明色化の応用を有する夜用クリームの形で提供される。
【０１９４】
【表１２】
0006353835.tif 000013
【０１９５】
【表１３】
0006353835.tif 000014
【０１９６】
（実施例１９）
［ブロックＳＰＦ５０］
典型的な、酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物を含む変性された酵母ペプチド片を含有する、皮膚に局所的に塗布するための化粧品組成物は、以下の配合で得られる。この組成物は、老化防止及び／または皮膚の明色化の応用を有するブロックＳＰＦ５０の形で提供される。
【０１９７】
【表１４】
0006353835.tif 000015
【表１５】
0006353835.tif 000016
【０１９８】
（実施例２０）
［洗顔料］
典型的な、酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物を含む変性された酵母ペプチド片を含有する、皮膚に局所的に塗布するための化粧品組成物は、以下の配合で得られる。この組成物は、洗顔料としての応用を有する芳香剤の形で提供される。
【０１９９】
【表１６】
0006353835.tif 000017
【表１７】
0006353835.tif 000018
【０２００】
（実施例２１）
［２１マスク］
典型的な、酵母／Ｃ−ボレアリス発酵抽出物を含む変性された酵母ペプチド片を含有する、皮膚に局所的に塗布するための化粧品組成物は、以下の配合で得られる。この組成物は、マスクとしての応用を有する芳香剤の形で提供される。
【０２０１】
【表１８】
0006353835.tif 000019
【表１９】
0006353835.tif 000020
【０２０２】
以上に説明され、請求の範囲に記載された発明は、以上に述べられた実施形態による範囲に限定されるものではない。これらの実施形態は、本発明の種々の側面を描出することを意図して記載されたものである。いかなる同等の実施形態も、この発明の範囲に含まれるものと意図している。実際、ここに示され述べられた実施形態に加えて、本発明の多様な変形が可能なことは、以上の記載、実施例及び図面から当業者に明白である。このような種々の変形もまた、添付した請求の範囲内に入ると考える。ここに引用される全ての文献は、参照としてそのまま取り入れられる。
［付記１］
ヒトの皮膚の美的外観を改善するための方法であって、
色素過剰の皮膚の領域に、美容上許容可能な媒体中に有効な量のＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現増加剤を含有する組成物を局所的に塗布することを含み、
前記ＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現増加剤は前記色素過剰の皮膚の領域において十分な色素沈着を減少させるのに十分な量で存在する、
ヒトの皮膚の美的外観を改善するための方法。
［付記２］
前記ＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現増加剤が酵母／クリントニア・ボレアリス発酵抽出物である、
付記１に記載の方法。
［付記３］
前記ＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現増加剤が未代謝のクリントニア・ボレアリス抽出物を除くことを条件とする、
付記１に記載の方法。
［付記４］
前記ＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現増加剤が前記組成物中に約０．０００１％から約１０％の範囲で存在する、
付記１に記載の方法。
［付記５］
前記ＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現増加剤が、前記組成物に添加した時に約５．０から約７．０の範囲のｐＨを呈する酵母／クリントニア・ボレアリス発酵抽出物を含む、
付記１に記載の方法。
［付記６］
前記ＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現増加剤が水性のクリントニア・ボレアリス抽出物に由来する、
付記２に記載の方法。
［付記７］
前記酵母がPichia pastorisである、
付記１に記載の方法。
［付記８］
前記ＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現増加剤が、チオジプロピオン酸（ＴＤＰＡ）またはその
エステル誘導体から選ばれる少なくとも１つの他の皮膚明色化剤と組み合わされている、
付記１に記載の方法。
［付記９］
ヒトの皮膚の美的外観を改善するための方法であって、
皮膚または毛を明るくするのに美容上許容可能な媒体中に有効な量のＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現増加剤を含有する組成物を、皮膚または毛に局所的に塗布することを含む、
ヒトの皮膚の美的外観を改善するための方法。
［付記１０］
ヒトの皮膚に有益な効果を提供するための方法であって、
美容上許容可能な媒体中に有効な量のＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現増加剤を含有する組成物を、それを必要とする皮膚の領域に、局所的に塗布することを含む、
ヒトの皮膚に有益な効果を提供するための方法。
［付記１１］
前記ＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現増加剤が非手掌足底（掌蹠）表現型を示す皮膚に塗布される、
付記１０に記載の方法。
［付記１２］
前記有益な効果が皮膚の厚さの増加である、
付記１０に記載の方法。
［付記１３］
前記有益な効果が女性多毛症の低減である、
付記１０に記載の方法。
［付記１４］
前記有効な量のＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現増加剤が、
皮膚移植、皮膚潰瘍、皮膚の摩擦または剥離／切除（体積欠陥を残すようなもの）、傷害または反復的な衝撃または機械的な圧力に起因する傷つきやすくなっている皮膚質、年齢による皮膚の変化（例えば、皮膚の光老化または皮膚の薄化）、ステロイド治療による皮膚損傷、不均一な皮膚の色素沈着、色素過剰、炎症後の色素沈着、そばかす、芳香皮膚炎、白斑（例えば、広範囲に白斑を有する対象において色素消失がどこで要求されるか）、色素性母斑（例えばカフェオレ様スポット）、ほくろ、または慢性単純性苔癬による皮膚変化、肝斑、晩発性皮膚ポルフィリン症、アジソン病、ポイツ−ジェガーズ症候群、表皮肥厚症、多毛症、先天性副腎皮質過形成症、多嚢胞性卵巣症候群、異常多量毛髪成長、及び神経性無食欲症からなる群から選択される、少なくとも１つの皮膚の病状を治療するのに十分な量で存在する、
付記１０に記載の方法。
［付記１５］
前記皮膚の有益な効果が、
（ａ）皮膚老化の徴候の治療または防止、（ｂ）細い線または小じわの治療及び／または防止、（ｃ）毛穴の大きさの低減、（ｄ）皮膚の厚さ、ハリ、及び／または張りの改善、（ｅ）皮膚のしなやかさ及び／または柔らかさの改善、（ｆ）皮膚の色合い、輝き、及び／または透明感の改善、（ｇ）皮膚のキメの改善及び／またはキメの再生の促進、（ｈ）皮膚の障壁の回復及び／または機能の改善、（ｉ）皮膚の輪郭の外観の改善、（ｊ）皮膚のつや及び／または明るさの回復、（ｋ）皮膚の必須栄養素及び／または成分の補充、（ｌ）閉経により低下した皮膚の外観の改善、（ｍ）皮膚のうるおいの改善及び／または水分補給、（ｎ）皮膚の弾性及び／または弾力性の増加及び／または損失の防止、（ｏ）コラーゲン前駆体及び／またはコラーゲンの合成の改善、（ｐ）皮膚のたるみまたは萎縮の治療及び／または防止、（ｑ）剥離の増強及び／または乾燥の減少、（ｒ）皮膚の色素過剰の治療及び／または防止、（ｓ）皮膚の明色化の改善、（ｔ）過剰な皮脂生成の治療及び／または防止、及び（ｕ）セルライトの治療及び／または防止、
からなる群から選択される、
付記１０に記載の方法。
［付記１６］
前記皮膚の色素過剰が、老化班、斑の領域、分離した色素過剰領域、日焼け領域、脇の下の領域、または黒皮症の斑点を含む、
付記１０に記載の方法。
［付記１７］
前記有益な効果が、アクネ病変、吹き出物、またはひりひりする領域の炎症の低減を含む、
付記１０に記載の方法。
［付記１８］
０．００１質量％から５質量％までの美容上許容可能な媒体中のＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現増加剤を含む局所外用組成物であって、
ローション、クリーム、美容軟膏、ジェル、またはスティックの形態である、
局所外用組成物。
［付記１９］
ＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現を調整する有効な量の酵母発酵製品を、それを必要とする皮膚の領域に局所的に塗布することを含む皮膚の治療方法であって、
前記酵母発酵製品のＤＩＣＫＫＯＰＦ−１発現を調整する能力は、前記酵母発酵製品と接触した細胞内にＤＩＣＫＫＯＰＦ−１をコードするｍＲＮＡの濃度を測定する評価分析によって決定される、
皮膚の治療方法。
【図１】
0006353835.tif 000021
【図２】
0006353835.tif 000022