(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−［２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−キナゾリン−４−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオンまたはその医薬的に許容可能な塩であるプロテインキナーゼＣ（ＰＫＣ）インヒビター化合物、および６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエトキシ）−アミドまたはその医薬的に許容可能な塩であるマイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＥＫ）インヒビター化合物を含む、黒色腫の治療に用いるための同時、別個または順次投与のための組合せ医薬。
【請求項２】
少なくとも一つの医薬的に許容可能な担体を更に含む、請求項１に記載の組合せ医薬。
【請求項３】
前記ＰＫＣインヒビター化合物および前記ＭＥＫインヒビター化合物の同時投与のための、請求項１または２に記載の組合せ医薬。
【請求項４】
別個の剤形としての前記ＰＫＣインヒビター化合物および前記ＭＥＫインヒビター化合物の同時投与のための、請求項３に記載の組合せ医薬。
【請求項５】
前記ＰＫＣインヒビター化合物および前記ＭＥＫインヒビター化合物の順次投与のための、請求項１または２に記載の組合せ医薬。
【請求項６】
前記ＰＫＣインヒビター化合物および前記ＭＥＫインヒビター化合物が各々経口投与用に調製されている、請求項１に記載の組合せ医薬。
【請求項７】
前記ＰＫＣインヒビター化合物および前記ＭＥＫインヒビター化合物が各々錠剤として調製されている、請求項６に記載の組合せ医薬。
【請求項８】
前記黒色腫が、ブドウ膜黒色腫、転移性ブドウ膜黒色腫、ＧＮＡＱ変異ブドウ膜黒色腫、ＧＮＡＱ変異転移性ブドウ膜黒色腫、ＧＮＡ１１変異ブドウ膜黒色腫、またはＧＮＡ１１変異転移性ブドウ膜黒色腫である、請求項１〜７のいずれか一項に記載の組合せ医薬。
【請求項９】
（ａ）前記ＰＫＣインヒビター化合物および（ｂ）前記ＭＥＫインヒビター化合物が、黒色腫の治療に相乗作用的に有効な量で提供される、請求項１〜８のいずれか一項に記載の組合せ医薬。
【請求項１０】
黒色腫の治療のための薬剤の調製における、請求項１〜８のいずれか一項に記載の組合せ医薬の使用。
【請求項１１】
前記黒色腫が、ブドウ膜黒色腫、転移性ブドウ膜黒色腫、ＧＮＡＱ変異ブドウ膜黒色腫、ＧＮＡＱ変異転移性ブドウ膜黒色腫、ＧＮＡ１１変異ブドウ膜黒色腫、またはＧＮＡ１１変異転移性ブドウ膜黒色腫である、請求項１０に記載の組合せ医薬の使用。
【請求項１２】
黒色腫がＧＮＡＱ変異転移性ブドウ膜黒色腫である、請求項１１に記載の組合せ医薬の使用。
【請求項１３】
黒色腫がＧＮＡ１１変異ブドウ膜黒色腫である、請求項１１に記載の組合せ医薬の使用。
【請求項１４】
（ａ）前記ＰＫＣインヒビター化合物および（ｂ）前記ＭＥＫインヒビター化合物が相乗作用的に有効な量で提供される、請求項１０に記載の組合せ医薬の使用。
【請求項１５】
（ａ）３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−［２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−キナゾリン−４−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオンまたはその医薬的に許容可能な塩であるＰＫＣインヒビター化合物の一つ以上の単位剤形、および（ｂ）６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエトキシ）−アミドまたはその医薬的に許容可能な塩であるＭＥＫインヒビター化合物の一つ以上の単位剤形を含む、黒色腫の治療に用いるための併用製剤。
【請求項１６】
請求項１〜７のいずれか一項に記載の組合せ医薬と、少なくとも一つの医薬的に許容可能な担体を含む、医薬組成物。
【請求項１７】
前記ＰＫＣインヒビター化合物および前記ＭＥＫインヒビター化合物が、黒色腫の治療に相乗作用的に有効な量で提供される、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
黒色腫の進行の遅延または治療に用いるための、治療薬として請求項１〜７のいずれか一項に定義された組合せ医薬を、その同時の、別個のまたは順次の投与のための説明書と一緒に含む、コマーシャルパッケージ。
【請求項１９】
６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエトキシ）−アミドまたはその医薬的に許容可能な塩であるＭＥＫインヒビター化合物と組み合わせて用いられる、３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−［２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−キナゾリン−４−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオンまたはその医薬的に許容可能な塩であるＰＫＣインヒビター化合物を含む、黒色腫を治療するための薬剤。
【請求項２０】
３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−［２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−キナゾリン−４−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオンまたはその医薬的に許容可能な塩であるＰＫＣインヒビター化合物と組み合わせて用いられる、６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエトキシ）−アミドまたはその医薬的に許容可能な塩であるＭＥＫインヒビター化合物を含む、黒色腫を治療するための薬剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、（ａ）プロテインキナーゼＣ（ＰＫＣ）インヒビター化合物、あるいはそれの医薬的に許容可能な塩、そして（ｂ）ひとつ、あるいは複数の、マイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＥＫ）インヒビター化合物、あるいはそれの医薬的に許容可能な塩、そして、オプションとして少なくとも一つの医薬的に許容可能な担体からなる医薬的組合せに関する。また、例えば癌などの増殖性疾患の治療または予防においての、そのような組合せの使用、そして、治療として有効な量でそのような組合せを投与することからなる、癌などの増殖性疾患で苦しむ対象者の治療方法に関する。
【０００２】
本発明は、また、（ａ）プロテインキナーゼＣ（ＰＫＣ）インヒビター化合物３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−［２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−キナゾリン−４−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオンあるいはそれの医薬的に許容可能な塩、そして（ｂ）６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエトキシ）−アミド、（Ｓ）−５−フルオロ−２−（２−フルオロ−４−（メチルチオ）フェニルアミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシプロポキシ）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキサミド、ＰＤ０３２５９０１、ＰＤ−１８４３５２、ＲＤＥＡ１１９、ＧＳＫ１１２０２１２、ＸＬ５１８、ＡＳ−７０１２５５、ＡＳ−７０１１７３、ＡＳ７０３０２６、ＲＤＥＡ４３６、Ｅ６２０１、ＲＯ４９８７６５５、ＪＴＰ−７４０５７、ＲＧ７１６７、およびＲＧ７４２０からなるグループから選択された少なくとも一つのマイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＥＫ）インヒビター化合物あるいはそれの医薬的に許容可能な塩、そして、オプションとして少なくとも一つの医薬的に許容可能な担体からなる医薬的組合せに関する。さらに、例えば癌などの増殖性疾患の治療または予防における、そのような組合せの使用、そして、治療として有効な量でそのような組合せを投与することからなる、癌などの増殖性疾患で苦しむ対象者の治療方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
ブドウ膜黒色腫は、眼球の色素を含む部分、特に虹彩、毛様体または脈絡膜に発生する悪性新生物である。ブドウ膜黒色腫の治療は、摘出術または近接照射療法による局所治療を含む。ほぼ半数の患者は、きまって肝臓に、そして、しばしば肺や骨に転移性疾患を発病し、新しい転移の発生が時間とともに増加し続ける。このことは、病気がゆっくりと進行することを示唆する。転移性疾患を有する患者の結末は悲惨である。現在、この病気に対する治療法で承認されたものはない。
【０００４】
ヘテロ三量体Ｇタンパク複合体のＧタンパク質αサブユニットをエンコードする二つの遺伝子（ＧＮＡＱおよびＧＮＡ１１）のいずれか一方を襲う突然変異が、ほとんどの腫瘍で発見された（非特許文献１および非特許文献２）。確認された突然変異は、典型的に、他のＧタンパク質を襲う突然変異を起こすものである。
【０００５】
癌患者に対する多くの治療オプションがあるにもかかわらず、未だに、有効で安全な治療薬や、癌に有効な長期間治療で投与可能な、新しい複合療法が必要性とされている。
【０００６】
本発明者は、今、これらのＧタンパク質のカスケード下流シグナル伝達制御の抑制が、癌などの増殖性疾患、例えばＧα変異（ＧＮＡ１１／ＧＮＡＱ）による腫瘍、そして特にブドウ膜黒色腫、転移性ブドウ膜黒色腫、そしてＧＮＡＱまたはＧＮＡ１１変異ブドウ膜黒色腫の治療に有用であることを発見した。
【０００７】
今、プロテインキナーゼＣ（ＰＫＣ）インヒビター化合物とＭＥＫインヒビター化合物の組合せが、増殖性疾患、特にブドウ膜黒色腫、転移性ブドウ膜黒色腫、そしてＧＮＡＱあるいはＧＮＡ１１変異ブドウ膜黒色腫の進行の遅延または治療に有効であることが分かった。
【０００８】
驚くべきことに、有効な量のプロテインキナーゼＣ（ＰＫＣ）インヒビター、例えば３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−［２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−キナゾリン−４−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、またはそれの医薬的に許容可能な塩、例えばそれのアセテートと、有効な量の少なくとも一つのＭＥＫインヒビター化合物、例えば６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエトキシ）−アミドあるいは（Ｓ）−５−フルオロ−２−（２−フルオロ−４−（メチルチオ）フェニルアミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシプロポキシ）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキサミドとの組合せ、この場合、６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエトキシ）−アミドがより好ましいが、これらの組合せが、増殖性疾患、特に癌、とりわけブドウ膜黒色腫、転移性ブドウ膜黒色腫、そしてＧＮＡＱまたはＧＮＡ１１変異ブドウ膜黒色腫の治療に予想外の改善をもたらすことが、最近発見された。
【０００９】
その好適プロテインキナーゼＣ（ＰＫＣ）インヒビター化合物および好適ＭＥＫインヒビター化合物は、同時に、順次、または別々に投与されると、相乗作用的に細胞増殖を強く抑制するよう相互作用し、ブドウ膜黒色腫モデルに驚くほど有効である。この予想外の相乗反応は、各化合物の必要量の削減を可能にするため、治療における、それら化合物による副作用の減少および長期臨床効果の向上をもたらす。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】Ｖａｎ  Ｒａａｍｓｄｏｎｋ  ＣＤ，Ｂｅｚｒｏｏｋｏｖｅ  Ｖ，Ｇｒｅｅｎ  Ｇ，ｅｔ  ａｌ，Ｎａｔｕｒｅ（２００９）；４５７：５９９−６０１
【非特許文献２】Ｖａｎ  Ｒａａｍｓｄｏｎｋ  ＣＤ，Ｇｒｉｅｗａｎｋ  ＫＧ，ｅｔ  ａｌ（２０１０），Ｎ  Ｅｎｇ  Ｊ  Ｍｅｄ；３６３：２１９１−９
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明は、Ｇα変異（ＧＮＡ１１／ＧＮＡＱ）を持つ腫瘍の細胞成長を抑制するのに、そして増殖性疾患、特に癌、より詳しくはブドウ膜黒色腫、転移性ブドウ膜黒色腫、そしてＧＮＡＱまたはＧＮＡ１１変異ブドウ膜黒色腫を治療するのに有用な、医薬的組合せおよび治療方法を提供する。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明は、以下のものからなる医薬的組合せを提供する。（ａ）プロテインキナーゼＣ（ＰＫＣ）インヒビター、またはそれの医薬的に許容可能な塩。そして（ｂ）少なくとも一つのマイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＥＫ）インヒビター、そしてオプションとして、少なくとも一つの医薬的に許容可能な担体。
【００１３】
本発明は、また、以下のものからなる医薬的組合せを提供する。（ａ）プロテインキナーゼＣ（ＰＫＣ）インヒビター、またはそれの医薬的に許容可能な塩。そして（ｂ）一つのマイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＥＫ）インヒビター、そしてオプションとして、少なくとも一つの医薬的に許容可能な担体。
【００１４】
上記の組合せにおいて、ＰＫＣインヒビター化合物は、
３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−［２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−キナゾリン−４−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、
３−（１．Ｈ．−インドール−３−イル）−４−［２−（ピペラジン−１−イル）−キナゾリン−４−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、
３−［２−クロロ−７−［（ジメチルアミノ）メチル］−１−ナフタレニル］−４−［７−［２−（２−メトキシエトキシ）エトキシ］−１Ｈ−インドール−３−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、
３−［３−（４，７−ジアザ−スピロ［２，５］オクト−７−イル）−イソキノリン−１−イル］−４−（７−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロール−２，５−ジオン、
（９Ｓ）−９−［（ジメチルアミノ）メチル］−６，７，１０，１１−テトラヒドロ−９Ｈ，１８Ｈ−５，２１：１２，１７−ジメテノジベンゾ−［ｅ，ｋ］ピロロ［３，４−ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１８，２０（１９Ｈ）−ジオン、
ルボキシスタウリン、そして
１２−（２−シアノエチル）−６，７，１２，１３−テトラヒドロ−１３−メチル−５−オキソ−５Ｈ−インドロ（２，３−ａ）ピロロ（３，４−ｃ）−カルバゾールからなるグループから選択してもよいし、
またはその選択した化合物の医薬的に許容可能な塩であってもよい。
上記の組合せにおいて、ＭＥＫインヒビター化合物は、ＰＫＣインヒビターから独立して選択されてもよく、６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエトキシ）−アミド、（Ｓ）−５−フルオロ−２−（２−フルオロ−４−（メチルチオ）フェニルアミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシプロポキシ）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキサミド、ＰＤ０３２５９０１、ＰＤ−１８４３５２、ＲＤＥＡ１１９、ＧＳＫ１１２０２１２、ＸＬ５１８、ＡＳ−７０１２５５、ＡＳ−７０１１７３、ＡＳ７０３０２６、ＲＤＥＡ４３６、Ｅ６２０１、ＲＯ４９８７６５５、ＪＴＰ−７４０５７、ＲＧ７１６７およびＲＧ７４２０からなるグループから選択してもよいし、またはその選択した化合物の医薬的に許容可能な塩であってもよい。
【００１５】
本発明は、また、以下のものからなる医薬的組合せを提供する。（ａ）プロテインキナーゼＣ（ＰＫＣ）インヒビター化合物３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−［２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−キナゾリン−４−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（化合物Ａ）またはそれの医薬的に許容可能な塩、そして（ｂ）６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエトキシ）−アミド（化合物Ｂ）、（Ｓ）−５−フルオロ−２−（２−フルオロ−４−（メチルチオ）フェニルアミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシプロポキシ）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキサミド（化合物Ｃ）、ＰＤ０３２５９０１、ＰＤ−１８４３５２、ＲＤＥＡ１１９、ＧＳＫ１１２０２１２、ＸＬ５１８、ＡＳ−７０１２５５、ＡＳ−７０１１７３、ＡＳ７０３０２６、ＲＤＥＡ４３６、Ｅ６２０１、ＲＯ４９８７６５５、ＪＴＰ−７４０５７、ＲＧ７１６７およびＲＧ７４２０からなるグループから選択された少なくとも一つのマイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＥＫ）インヒビターまたはそれの医薬的に許容可能な塩、そしてオプションとして、少なくとも一つの医薬的に許容可能な担体。
【００１６】
本発明による好適実施形態においては、組合せパートナーは、（ａ）ＰＫＣインヒビター化合物３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−［２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−キナゾリン−４−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（化合物Ａ）またはそれの医薬的に許容可能な塩、そして（ｂ）６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエトキシ）−アミド（化合物Ｂ）および（Ｓ）−５−フルオロ−２−（２−フルオロ−４−（メチルチオ）フェニルアミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシプロポキシ）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキサミド（化合物Ｃ）からなるグループから選択された少なくとも一つのＭＥＫインヒビター化合物、またはそれの医薬的に許容可能な塩である。
【００１７】
本発明のもう一つの好適実施形態においては、組合せパートナーは、（ａ）ＰＫＣインヒビター化合物３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−［２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−キナゾリン−４−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（化合物Ａ）またはそれの医薬的に許容可能な塩、そして（ｂ）ＭＥＫインヒビター化合物６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエトキシ）−アミド（化合物Ｂ）またはそれの医薬的に許容可能な塩である。
【００１８】
本発明は、さらに、以下のものからなる併用製剤あるいは医薬組成物に関する。（ａ）ＰＫＣインヒビター化合物３−（１．Ｈ．−インドール−３−イル）−４−［２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−キナゾリン−４−イル］−ピロール−２，５−ジオン（化合物Ａ）またはそれの医薬的に許容可能な塩、そして（ｂ）６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエトキシ）−アミド（化合物Ｂ）、（Ｓ）−５−フルオロ−２−（２−フルオロ−４−（メチルチオ）フェニルアミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシプロポキシ）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキサミド（化合物Ｃ）、ＰＤ０３２５９０１、ＰＤ−１８４３５２、ＲＤＥＡ１１９、ＧＳＫ１１２０２１２、ＸＬ５１８、ＡＳ−７０１２５５、ＡＳ−７０１１７３、ＡＳ７０３０２６、ＲＤＥＡ４３６、Ｅ６２０１、ＲＯ４９８７６５５、ＪＴＰ−７４０５７、ＲＧ７１６７およびＲＧ７４２０からなるグループから選択された少なくとも一つのＭＥＫインヒビター、またはそれの医薬的に許容可能な塩、そしてオプションとして、少なくとも一つの医薬的に許容可能な担体。一つの実施形態においては、本発明は、（ｉ）組合せパートナー（ａ）の一つ以上の単位剤形、そして（ｉｉ）組合せパートナー（ｂ）の一つ以上の単位剤形からなる併用製剤に関する。
【００１９】
本発明は、特に、増殖性疾患の治療や予防を必要とする対象者に有用な、以下のものからなる医薬的組合せに関する。（ａ）ＰＫＣインヒビター化合物３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−［２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−キナゾリン−４−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（化合物Ａ）またはそれの医薬的に許容可能な塩、そして（ｂ）６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエトキシ）−アミド（化合物Ｂ）、（Ｓ）−５−フルオロ−２−（２−フルオロ−４−（メチルチオ）フェニルアミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシプロポキシ）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキサミド（化合物Ｃ）、ＰＤ０３２５９０１、ＰＤ−１８４３５２、ＲＤＥＡ１１９、ＧＳＫ１１２０２１２、ＸＬ５１８、ＡＳ−７０１２５５、ＡＳ−７０１１７３、ＡＳ７０３０２６、ＲＤＥＡ４３６、Ｅ６２０１、ＲＯ４９８７６５５、ＪＴＰ−７４０５７、ＲＧ７１６７およびＲＧ７４２０からなるグループから選択された少なくとも一つのＭＥＫインヒビターまたはそれの医薬的に許容可能な塩、そしてオプションとして、少なくとも一つの医薬的に許容可能な担体。
【００２０】
本発明は、また、増殖性疾患の治療や予防を必要とする対象者のための医薬組成物または薬剤の調製に用いるための、以下のものからなる医薬的組合せに関する。（ａ）ＰＫＣインヒビター化合物３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−［２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−キナゾリン−４−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、（化合物Ａ）またはそれの医薬的に許容可能な塩、そして（ｂ）６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエトキシ）−アミド（化合物Ｂ）、（Ｓ）−５−フルオロ−２−（２−フルオロ−４−（メチルチオ）フェニルアミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシプロポキシ）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキサミド（化合物Ｃ）、ＰＤ０３２５９０１、ＰＤ−１８４３５２、ＲＤＥＡ１１９、ＧＳＫ１１２０２１２、ＸＬ５１８、ＡＳ−７０１２５５、ＡＳ−７０１１７３、ＡＳ７０３０２６、ＲＤＥＡ４３６、Ｅ６２０１、ＲＯ４９８７６５５、ＪＴＰ−７４０５７、ＲＧ７１６７およびＲＧ７４２０からなるグループから選択された少なくとも一つのＭＥＫインヒビターまたはそれの医薬的に許容可能な塩、そしてオプションとして、少なくとも一つの医薬的に許容可能な担体。
【００２１】
本発明は、さらに、増殖性疾患の治療あるいは予防のための医薬組成物または薬剤の調製のための、ＰＫＣインヒビター３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−［２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−キナゾリン−４−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（化合物Ａ）またはそれの医薬的に許容可能な塩の、６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエトキシ）−アミド（化合物Ｂ）、（Ｓ）−５−フルオロ−２−（２−フルオロ−４−（メチルチオ）フェニルアミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシプロポキシ）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキサミド（化合物Ｃ）、ＰＤ０３２５９０１、ＰＤ−１８４３５２、ＲＤＥＡ１１９、ＧＳＫ１１２０２１２、ＸＬ５１８、ＡＳ−７０１２５５、ＡＳ−７０１１７３、ＡＳ７０３０２６、ＲＤＥＡ４３６、Ｅ６２０１、ＲＯ４９８７６５５、ＪＴＰ−７４０５７、ＲＧ７１６７およびＲＧ７４２０からなるグループから選択された少なくとも一つのＭＥＫインヒビターまたはそれの医薬的に許容可能な塩との組み合わせ使用に関する。
【００２２】
本発明は、以下のものからなる組合せを、増殖性疾患に対して共同で治療に有効な量で増殖性疾患がある対象者に投与することからなる治療方法に関する。（ａ）ＰＫＣインヒビター化合物３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−［２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−キナゾリン−４−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（化合物Ａ）またはそれの医薬的に許容可能な塩、そして（ｂ）６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエトキシ）−アミド（化合物Ｂ）、（Ｓ）−５−フルオロ−２−（２−フルオロ−４−（メチルチオ）フェニルアミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシプロポキシ）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキサミド（化合物Ｃ）、ＰＤ０３２５９０１、ＰＤ−１８４３５２、ＲＤＥＡ１１９、ＧＳＫ１１２０２１２、ＸＬ５１８、ＡＳ−７０１２５５、ＡＳ−７０１１７３、ＡＳ７０３０２６、ＲＤＥＡ４３６、Ｅ６２０１、ＲＯ４９８７６５５、ＪＴＰ−７４０５７、ＲＧ７１６７およびＲＧ７４２０からなるグループから選択されたＭＥＫインヒビターまたはそれの医薬的に許容可能な塩、そしてオプションとして、少なくとも一つの医薬的に許容可能な担体。
【００２３】
本発明は、さらに、以下のものからなる組合せを治療薬として、増殖性疾患の進行の遅延または治療に用いるために、治療薬の同時の、別個の、順次の投与のための指示事項とを一緒に含むコマーシャルパッケージを提供する。（ａ）ＰＫＣインヒビター化合物３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−［２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−キナゾリン−４−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（化合物Ａ）またはそれの医薬的に許容可能な塩、そして（ｂ）からなるグループから選択されたＭＥＫインヒビター６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエトキシ）−アミド（化合物Ｂ）、（Ｓ）−５−フルオロ−２−（２−フルオロ−４−（メチルチオ）フェニルアミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシプロポキシ）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキサミド（化合物Ｃ）、ＰＤ０３２５９０１、ＰＤ−１８４３５２、ＲＤＥＡ１１９、ＧＳＫ１１２０２１２、ＸＬ５１８、ＡＳ−７０１２５５、ＡＳ−７０１１７３、ＡＳ７０３０２６、ＲＤＥＡ４３６、Ｅ６２０１、ＲＯ４９８７６５５、ＪＴＰ−７４０５７、ＲＧ７１６７およびＲＧ７４２０またはそれの医薬的に許容可能な塩。
【００２４】
上記の組合せは、また、特に増殖性疾患を治療する、あるいは予防するための、同時の、別個の、順次の投与にも提供される。増殖性疾患は、癌であり、より詳しくはブドウ膜黒色腫、転移性ブドウ膜黒色腫、ＧＮＡＱまたはＧＮＡ１１変異ブドウ膜黒色腫および癌、そして、より詳しくはブドウ膜黒色腫、転移性ブドウ膜黒色腫およびＧＮＡＱまたはＧＮＡ１１変異体転移性ブドウ膜黒色腫である。
【図面の簡単な説明】
【００２５】
【図１】ガラス器内におけるブドウ膜黒色腫の増殖に対する、３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−［２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−キナゾリン−４−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（化合物Ａ）、そして６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエトキシ）−アミド（化合物Ｂ）の影響を表す。６日間のコースに渡るブドウ膜黒色腫細胞系の増殖を、０．５μＭのＤＭＳＯ、０．５μＭのＡＥＢ０７１、０．５μＭの化合物Ｂまたは０．５μＭのＡＥＢ０７１＋０．５μＭの化合物Ｂの存在の下で、ｘＣＥＬＬｉｇｅｎｃｅテクノロジーによって測定した。各々ＧＮＡＱおよびＧＮＡ１１変異を有する９２．１およびＯＭＭ１細胞系において、ＡＥＢ０７１は細胞の成長を遅らせた。この影響は、化合物Ｂとの組み合わせで強化された。単剤としての化合物Ｂは、ブドウ膜黒色腫細胞系９２．１およびＯＭＭ１の両方の増殖に適度な影響を及ぼしたが、二つの薬剤の組合せは、両細胞系の増殖を驚くほど完全に抑えることができた。
【図２】９２．１ブドウ膜黒色腫細胞系におけるＡＥＢ０７１と化合物Ｂとの相乗効果のパターンを詳細に示し、二つの薬剤間の相乗効果を表す。二つの薬剤間の用量マトリックスとして表す。非処理の細胞に対する細胞成長の影響を頂部パネルに示し、過剰な抑制を中央パネルに、そして、ゼロ日目正規化での成長抑制を底部パネルに示す。単剤としての化合物ＢおよびＡＥＢ０７１の両方は、９２．１において活性だったが、重要なことに、二つの薬剤を組み合わせた方が、低用量において、反応の度合いの加算よりも効果は大きかった。このことは、一緒に両剤を組み合わせたものは、いずれの単剤を単独で用いるよりも、ガラス器内でのブドウ膜黒色腫細胞系９２．１の増殖を抑制するのに有効であることを示す。
【図３】ブドウ膜黒色腫細胞系９２．１およびＯＭＭ−１におけるこれらの薬剤の生化学的影響を、０．５μＭのＡＥＢ０７１、０．５Ｍの化合物Ｂ、または０．５μＭの各薬剤を一緒に用いて処置した後、評価した。ｐＭＡＲＣＫＳのレベルは減衰した。ＡＥＢ０７１へ化合物Ｂを付加しても、ｐＭＡＲＣＫＳ発現には全く影響がなかった。同じ細胞の化合物Ｂでの処置は、２時間後に見られるように、ｐＥＲＫ１／２レベルの減少に至ったが、２４時間までには、ｐＥＲＫ１／２の発現は戻り始めていた。さらに、化合物Ｂ単剤での処置は、両細胞系における経時的なｐＭＥＫ１／２発現の誘起に至った。これは、処置４８時間後に明確に観察できた。驚くべきことに、ＡＥＢ０７１と化合物Ｂとの組合せだけが、ｐＥＲＫ１／２およびｐＭＥＫ１／２の継続的抑制をもたらした。意義深いことに、ＡＥＢ０７１は、化合物Ｂ単剤処置に起因するｐＭＥＫ誘起を明らかに阻止した。このように、ＡＥＢ０７１と化合物Ｂとの組合せは、ｐＭＥＫ、ｐＥＲＫおよびｐＭＡＲＣＫＳの持続的リン蛋白抑制に至った。
【図４】９２．１ヒト・ブドウ膜黒色腫ヌードマウス異種移植モデルにおけるＡＥＢ０７１および化合物Ｂの生体内活性を表す。ＡＥＢ０７１を、２１日間一日３回９１ｍｇ／ｋｇの薬品注入（ＴＩＤ）で、投与した。研究に用いたすべてのマウスの最終日、１７日目に、腫瘍成長抑制から有効性を判定した。活性は、腫瘍／対照（Ｔ／Ｃ）、すなわち、ビヒクル処置マウスに対する薬物処置マウスの１日目から１７日目までのパーセント平均腫瘍体積変化（ΔＴ）、またはＴ／Ｔ０として、１日目からの群平均腫瘍体積のパーセント減少で計算した。  図４に示すように、単独療法ＡＥＢ０７１処置は、３%のＴ／Ｃ（ｐ＜０．０１）という結果になり、ＡＥＢ０７１療法に加えての、化合物Ｂの１日２回の３．５ｍｇ／ｋｇの注入は、−２２%のＴ−Ｔ０になった（ｐ＜０．００１の中央値活性、しかし、ＡＥＢ０７１単独と比較して有意ではない）。化合物Ｂは、８４%のＴ／Ｃで、この生体モデル内に、それ自体による活性を示さなかった。したがって、ＡＥＢ０７１および化合物Ｂでの処置は、９２．１生体ブドウ膜黒色腫モデルに有効である。
【図５】７０日を超えて観察した９２．１ヒト・ブドウ膜黒色腫ヌードマウス異種移植モデルにおける生体内腫瘍成長を表す。マウスには２１日間薬品注入し、その後、処置は行わず、腫瘍成長を監視した。薬品注入期間後の２週間、ＡＥＢ０７１単独療法処置群内の腫瘍は対照ペースで進行したが、組合せ群内の腫瘍は、より遅い速度で進行した。初期成長期間の後、群毎に二つ以上の腫瘍が静止したため、腫瘍成長遅延は計算しなかった。しかし、腫瘍成長率の傾向は、ＡＥＢ０７１プラス化合物Ｂの組合せ腫瘍が、ＡＥＢ０７１単剤よりも緩やかに成長することを示した。化合物Ｂ単剤治療の腫瘍は、有効性がないため、監視しなかった。化合物ＢとのＡＥＢ０７１の組合せは、ブドウ膜黒色腫の９２．１生体モデルにおいて、いずれの単剤と比較しても、反応の程度が大きく、またその期間も長い、ということをデータは示した。
【図６】９２．１ヒト・ブドウ膜黒色腫ヌードマウス異種移植モデルにおいて、一日二回の薬品注入法による３．５ｍｇ／ｋｇの化合物Ｂと組み合わせて、２１日間一日３回の薬品注入（ＴＩＤ）として、９０．９５、４５．５８および２２．７４ｍｇ／ｋｇ（８０、４０および２０ｍｇ／ｋｇの遊離塩基に等価）で投与されたＡＥＢ０７１の生体内活性を示す。２２日目に、腫瘍成長抑制から有効性を判定した。活性は、腫瘍／対照（Ｔ／Ｃ）、すなわち、ビヒクル処置マウスに対する薬物処置マウスの１日目から２２日目までのパーセント平均腫瘍体積変化（ΔＴ）、またはＴ／Ｔ０として、１日目からの群平均腫瘍体積のパーセント減少で計算した。図６に示すように、９０．９５ｍｇ／ｋｇでのＡＥＢ０７１単独療法は、１８%のＴ／Ｃ（ｐ＜０．０５）という結果になった。４５．５および２２．７ｍｇ／ｋｇでのＡＥＢ０７１単独療法は、各々、５２%および９２%Ｔ／Ｃという結果になったが、中央抑制は有意ではない。９０．９５および４５．５８ｍｇ／ｋｇのＡＥＢ０７１注入と一緒に、１日２回３．５ｍｇ／ｋｇで注入した化合物Ｂの付加は、各々、−５２%および−１２%Ｔ−Ｔ０（ｐ＜０．００１）に至った。化合物Ｂは、５６%Ｔ／Ｃで、この生体モデル内に、それ自体による活性を示さなかった。高用量での組合せは、四つの部分的退縮を生じた。化合物Ｂと組み合わせてＡＥＢ０７１を複数回注入する処置は、９２．１生体内ブドウ膜黒色腫モデルにおいて有効である。組合せの効果は、用量に依存的に増加する。化合物Ｂと組み合わせてＡＥＢ０７１用量を増やすと、反応の度合いは、より大きくなる。
【発明を実施するための形態】
【００２６】
本発明の多様な実施形態を列挙し、ここに説明する。各々の実施形態に明記された特徴は、本発明の実施形態をさらに提供するために、他の特定な特徴と組み合わせてもよい、と認識すべきである。
【００２７】
本発明は、以下のものからなる医薬的組合せを提供する。（ａ）プロテインキナーゼＣ（ＰＫＣ）インヒビター、またはそれの医薬的に許容可能な塩、そして（ｂ）少なくとも一つのマイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＥＫ）インヒビター、それとオプションとして、少なくとも一つの医薬的に許容可能な担体。
【００２８】
本発明は、特に増殖性疾患の治療あるいは予防での使用のために、同時に、別個に、あるいは順次に投与するための、そのような医薬的組合せに関する。
【００２９】
本文中で用いられる一般用語は、そうでないと明示的に述べられていない限り、以下の意味に定義される。
【００３０】
本文中、用語「からなる」および「含む」は、特に明記しない限り、制限のない非限定的な感覚で用いられる。
【００３１】
本文中にそうではないと明示される、あるいは文脈から明確に否定される場合でない限り、本発明を説明する文脈（特に以下の請求項の文脈）に存在する用語「ａ」、「ａｎ」、「ｔｈｅ」および類似語は、単数と複数の両方を扱っている、と解釈すべきである。化合物、塩類などに対して複数形が使用されている箇所では、単一の化合物、塩などをも意味する、と解釈すべきである。
【００３２】
用語「組合せ」または「医薬的組合せ」は、本文中、一つの用量単位枠内に固定組合せ、非固定組合せ、あるいは併用投与のためのパーツのキット、のいずれにも言及すると定義する。その併用投与では、ＰＫＣインヒビター化合物、例えば化合物Ａ、またはそれの医薬的に許容可能な塩、そして、少なくとも一つのＭＥＫインヒビター化合物、例えば化合物Ｂまたは化合物Ｃ、またはそれの医薬的に許容可能な塩は、同時に、独立して同時に投与されてもよいし、あるいは組合せパートナーが、協調的な、例えば相乗的な、影響を示すよう作用することを許容する時間間隔内に別々に投与されてもよい。用語「固定組合せ」は、活性成分、例えば化合物Ａと組合せパートナー、例えば化合物Ｂの両方が、単一体または単一投薬量の形式で同時に、患者に投与されることを意味する。用語「非固定組合せ」は、活性成分、例えば化合物Ａ、またはそれの医薬的に許容可能な塩、そして組合せパートナー、例えば化合物Ｂ、またはそれの医薬的に許容可能な塩の両方が、特定な制限時間なしに同時に、並行して、または順次に、別個の実体として患者に投与されることを意味する。この場合、そのような投与は、二つの化合物に関して、患者の体内で治療に有効なレベルを提供する。後者は、カクテル療法、例えば、三つ以上の活性成分の投与にもあてはまる。
【００３３】
用語「プロテインキナーゼＣインヒビター」は、プロテインキナーゼＣを標的とし、減少あるいは抑制する化合物である。用語ＰＫＣは、一般にイソ型全体に言及する。従来のイソ型、アルファ、ベータ（β１およびβ２）およびガンマ新奇イソ型、デルタ、イプシロン、イータおよびシータ、そして非定型イソ型、ゼータ、そしてタウあるいはラムダ。
【００３４】
適切なＰＫＣインヒビターは、ＵＳ  Ｐａｔｅｎｔ  Ｎｏｓ．５，５４５，６３６、５，６６８，１５２、５，６７２，６８１、５，６９８，５７８、５，７１０，１４５、６，６４５，９７０、７，２２０，７７４、７，２３５，５５５、ＵＳ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｏ．２００８／０３１８９７５、Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｐａｔｅｎｔ  Ｎｏｓ．０７７６８９５Ｂ１、０８１７６２７Ｂ１、１４４９５２９Ｂ１、１３３７５２７Ｂ１、そしてＰＣＴ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｏｓ．ＷＯ０３／０８２８５９およびＷＯ０７／００６５３３に記述の化合物のような、マレイミド誘導体を含む。上記引用文献の各々は、参照によって本文中に援用される。
【００３５】
興味深い特定なＰＫＣインヒビター化合物は、
ソトラスタウリン（ＡＥＢ０７１としても既知であり、ＵＳ  Ｐａｔｅｎｔ  Ｎｏ．６，６４５，９７０に記述）、
３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−［２−（ピペラジン−１−イル）キナゾリン−４−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（ＰＣＴ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｏ．ＷＯ２００２／０３８５６１あるいはＵＳ  Ｐａｔｅｎｔ  Ｎｏ．６，６４５，９７０の実施例７０に記述）、
３−［２−クロロ−７−［（ジメチルアミノ）メチル］−１−ナフタレニル］−４−［７−［２−（２−メトキシエトキシ）エトキシ］−１Ｈ−インドール−３−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（ＣＡＳＮｏ．９１９９９２−８５−１、ＰＣＴ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｏ．ＷＯ０７／００６５３３およびＵＳ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｏ．２００８／０３１８９７５に記述）、
３−［３−（４，７−ジアザ−スピロ［２，５］オクト−７−イル）−イソキノリン−１−イル］−４−（７−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロール−２，５−ジオン（ＵＳ  Ｐａｔｅｎｔ  Ｎｏ．７，２３５，５５５の実施例６９に記述）、
ルボキシスタウリン（９Ｓ）−９−［（ジメチルアミノ）メチル］−６，７，１０，１１−テトラヒドロ−９Ｈ，１８Ｈ−５，２１：１２，１７−ジメテノジベンゾ−［ｅ，ｋ］ピロロ［３，４−ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１８，２０（１９Ｈ）−ジオン（ＬＹ−３３３５３１としても既知であり、ＵＳ  Ｐａｔｅｎｔ  Ｎｏ．５，６９８，５７８に記述）そしてルボキシスタウリンのメシレート塩（ＵＳ  Ｐａｔｅｎｔ  Ｎｏ．５，７１０，１４５およびＥｕｒｏｐｅａｎ  Ｐａｔｅｎｔ  Ｎｏ．０７７６８９５Ｂ１に記述）、
そして１２−（２−シアノエチル）−６，７，１２，１３−テトラヒドロ−１３−メチル−５−オキソ−５Ｈ−インドロ（２，３−ａ）ピロロ（３，４−ｃ）−カルバゾール（ＣＡＳＮｏ．１３６１９４−７７−９、カルバイオケム社（Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ（登録商標））から入手可能で、ＵＳ  Ｐａｔｅｎｔ  Ｎｏ．５，４８９，６０８に記述）。
【００３６】
他のＰＫＣインヒビターは、ＡＤ１９８、アプリノカルセン、バラノール、ブリオスタチン１、バルフォスチン、セデフィンゴール、ＣＧＰ５３３５３、塩化ケレリトリン、シクロプラタム、デルカセルチブ、エンザスタウリン、ＥＰ７０９０５、ＧＦ１０９２０３Ｘ、グニジマクリン、ＧＯ６９７６、ＧＯ７７１６、ＧＯ７７７５、ＧＯ７８５２、ＨＯ０３０３、インゲノール・メブテート、ＩＳＩ６４１、ＪＴＶ５１９、ＫＡＩ１６７８、ＬＹ２９０１８１、ＬＹ３１７６４４、ミドスタウリン、ＮＡ０３４５、ＮＰＣ１５４３７、ＮＳＣ６３９３６５、ＮＳＣ６３９３６６、ＮＳＣ６４６９５８、ｐＸＳＣ、ＲＤ６５０７１、ＲＯ３１７５４９、ＲＯ３１８２２０、ＲＯ３１８４２５、ＲＯ３１８８３０、ＲＯ３２０４３２、サフィンゴール、ＳＰＣ１０４０６５、スタウロスポリン、テプレノン、トコフェロール・スクシナート、ＵＣＮ０１およびＵＣＮ１０２８Ｃからなるグループから選択してもよい。いくつかの実施形態においては、ＰＫＣインヒビターは、ミドスタウリン、エンザスタウリンまたはスタウロスポリンである。いくつかの実施形態においては、ＰＫＣインヒビターは、３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−［２−（ピペラジン−１−イル）キナゾリン−４−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（ＰＣＴ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｏ．ＷＯ２００２／０３８５６１あるいはＵＳ  Ｐａｔｅｎｔ  Ｎｏ．６，６４５，９７０の実施例７０に記述）である。
【００３７】
上記の引用文献の各々は、参照により本文に援用されるものである。
【００３８】
用語「ＭＥＫインヒビター」とは、本文中、ＭＡＰキナーゼのキナーゼ活性、ＭＥＫを標的として、減少あるいは抑制する化合物のことである。ＭＥＫインヒビターの標的は、ＥＲＫを含むが、これに限定されるものではない。ＭＥＫインヒビターの間接的な標的は、サイクリンＤ１を含むが、これに限定されるものではない。
【００３９】
用語「医薬組成物」とは、本文中、対象者、例えば哺乳動物またはヒトに対して、哺乳動物またはヒトを襲う特定な病気あるいは健康状態を予防または治療するために投与される、少なくとも一つの治療薬を含む混合物または溶液のことである。
【００４０】
用語「医薬的に許容可能な」は、本文中、合理的な利益／危険率に鑑み、過度の毒性、刺激、アレルギー反応、そして他の問題や合併症がない、適切な医学的判断の範囲内で対象者、例えば哺乳動物またはヒトの組織への接触に適当な化合物、物質、組成物や剤形に言及する、と定義する。
【００４１】
本文中で用いる用語「共投与」あるいは「併用投与」は、単一患者への選択治療薬の投与を含み、必ずしも薬剤を同じ投与ルートあるいは同時に投与することがない治療法を含むことを意図している。
【００４２】
本文中で用いる用語「治療する」または「治療」とは、対象者の少なくとも一つの症状を解消する、緩和する、あるいは軽減する、または病気の進行の遅延をもたらす治療のことである。例えば、治療は、疾患の一つあるいは複数の症状の緩和、または癌などの疾患の完全な根絶である。本発明の意味の範囲内で、用語「治療する」は、病気の開始を（すなわち、病気の臨床症状以前の期間に）阻止する、遅らせることや、発病のリスクあるいは病気の悪化を減少させることをも意味する。用語「保護する」とは、文脈に応じて、対象者、例えば哺乳動物またはヒトの病気の発症、存続または悪化を予防する、遅延させる、治療する、あるいはそれらすべてを意味するのに、本文中で用いられる。
【００４３】
本文中で用いる用語「予防する」、「予防すること」または「予防」は、予防すべき状態、病気または障害に関係する、あるいはそれに起因する少なくとも一つの症状を予防することを意味する。
【００４４】
本文中で用いる用語「共同で治療的に有効な」または「共同治療効果」は、治療すべき温血動物、特にヒトに、（望ましくは相乗的）相互作用（共同治療効果）を現すのに好適な時間間隔で、別々に（経時的にずらしたやり方、特に順序立てたやり方で）治療薬を投与してもよいことを意味する。これが適当かどうかは、とりわけ、少なくとも特定な時間間隔の間、治療すべきヒトの血液中に両化合物が存在することを示す血中レベルを追跡することによって判定できる。
【００４５】
治療薬の組合せに関する用語「医薬的に有効な量」または「臨床的に有効な量」とは、組合せで治療すべき障害の、ベースラインの臨床的に観察可能な徴候および症状を上回る観察可能な改善を提供するのに十分な量のことである。
【００４６】
本文中で用いる用語「相乗効果」は、例えば、増殖性疾患、特に癌などの症状の進行を減速させる、またはその症状を緩和させる効果を、単独で投与した場合の各々の薬の効果を単純に加算したものよりも大きく生じる、例えば、式（Ｉ）の化合物、化合物Ａなどと、本発明のＭＥＫインヒビター化合物、化合物Ｂなどとの、二つの治療薬の作用を意味する。相乗効果は、例えば、シグモイド・イーマックス式（Ｈｏｌｆｏｒｄ，Ｎ．Ｈ．Ｇ．ａｎｄ  Ｓｃｈｅｉｎｅｒ，Ｌ．Ｂ．，Ｃｌｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔ．６：４２９−４５３（１９８１））、ローウェ加算式（Ｌｏｅｗｅ，Ｓ．ａｎｄ  Ｍｕｉｓｃｈｎｅｋ，Ｈ．，Ａｒｃｈ．Ｅｘｐ．Ｐａｔｈｏｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１１４：３１３−３２６（１９２６））、そして影響中央値式（Ｃｈｏｕ，Ｔ．Ｃ．ａｎｄ  Ｔａｌａｌａｙ，Ｐ．，Ａｄｖ．Ｅｎｚｙｍｅ  Ｒｅｇｕｌ．２２：２７−５５（１９８４））のような適当な方法を用いて計算できる。上記各々の式は、薬の組合せの影響を評価する際に補助となる対応グラフを作成するために、実験データに適用できる。上記式に関連した対応グラフは、各々、濃度・影響曲線、アイソボログラム曲線および組合せインデックス曲線である。
【００４７】
本文中で用いる用語「対象者」または「患者」は、動物を含む。動物は、癌や、直接または間接的に癌に関わるいかなる障害をも患う可能性がある。対象者の例は、人間、イヌ、ウシ、ウマ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、ネコ、マウス、ウサギ・ネズミ、そして人間以外の遺伝子組換え動物などの哺乳動物を含む。好適実施形態においては、対象者はヒトであり、例えば、癌で苦しんでいる、癌を患う危険がある、あるいは潜在的に患う可能性があるヒトである。
【００４８】
用語「およそ」または「約」は、所定の値または範囲の１０%以内の意味を持ち、それが５%以内であることがより好ましい。
【００４９】
本発明の医薬的組合せは、ＰＫＣ化合物３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−［２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−キナゾリン−４−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（以下、プロテインキナーゼＣインヒビターとして（「化合物Ａ」）と呼ぶ）を含んでもよい。化合物Ａは、式ＩのプロテインキナーゼＣ（ＰＫＣ）インヒビター化合物である。
【化１】
0006437444.tif 000002
化合物Ａは、ＷＯ０２／３８５６１およびＵＳ  Ｐａｔｅｎｔ  Ｎｏ．６，６４５，９７０に説明されている。化合物Ａおよびそのアセテート塩の合成は、参照によってその全体が本文に援用されるＷＯ０２／３８５６１の実施例５６に説明されている。
【００５０】
化合物Ａに言及するとき、用語「塩」または「塩類」は、単独で存在可能な、あるいは式（Ｉ）の遊離化合物との混合物として存在可能な、化合物Ａの塩であり、そして望ましくは医薬的に許容可能な塩類であると理解すべきである。そのような塩類は、特に医薬的に許容可能な塩類として例えば、塩基性窒素原子を持つ式（Ｉ）の化合物から、望ましくは有機あるいは無機酸を含む、酸付加塩として形成される。適当な無機酸は、例えば、塩酸、硫酸またはリン酸などのハロゲン酸である。適当な有機酸は、酢酸、フマル酸またはメタンスルホン酸などの例えば、カルボン酸またはスルホン酸である。単離または精製目的で、医薬的に容認できない塩類、例えばピクリン酸塩または過塩素酸塩を使うことも可能である。治療用途には、（医薬品の形態で適用可能な場合）医薬的に許容可能な塩類だけ、または遊離化合物だけが使用されるので好ましい。遊離形態の新規化合物とそれらの塩類の形態にあるものとの緊密な関係を考慮すると、例えば、新規化合物の精製または識別において中間物として使用可能なそれら塩類を含み、前述および以下の遊離化合物へのいかなる言及も、適切な方便として、対応する塩類をも表すと理解すべきである。化合物Ａの塩類は、医薬的に許容可能な塩類であることが好ましい。適当な対イオン形成性の医薬的に許容可能な塩類は、本分野で既知である。化合物Ａの最も好ましい塩は、アセテート塩である。
【００５１】
本発明の医薬的組合せは、６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５カルボン酸酸（２−ヒドロキシエトキシ）−アミド、（Ｓ）−５−フルオロ−２−（２−フルオロ−４−（メチルチオ）フェニルアミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシプロポキシ）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキサミド、ＰＤ０３２５９０１、ＰＤ−１８４３５２、ＲＤＥＡ１１９、ＧＳＫ１１２０２１２、ＸＬ５１８、ＡＳ−７０１２５５、ＡＳ−７０１１７３、ＡＳ７０３０２６、ＲＤＥＡ４３６、Ｅ６２０１、ＲＯ４９８７６５５、ＪＴＰ−７４０５７、ＲＧ７１６７およびＲＧ７４２０からなるグループから選択されたＭＥＫインヒビター化合物、またはそれの医薬的に許容可能な塩を含んでもよい。ＭＥＫインヒビター化合物６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５カルボン酸（２−ヒドロキシエトキシ）−アミド（化合物Ｂ）は、式（II）の化合物である。
【化２】
0006437444.tif 000003
ＭＥＫインヒビター化合物６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５カルボン酸（２−ヒドロキシエトキシ）−アミド（化合物Ｂ）は、ＰＣＴ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｏ．ＷＯ０３／０７７９１４に説明されており、そしてその調製方法は、例えば、それの実施例１８で説明されている。
【００５２】
本文中に開示される場合を除き、本発明で用いる化合物は、ＰＣＴ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｏ．ＷＯ０３／０７７９１４に記載されているように、一つ以上の不斉中心を持ってもよく、（Ｒ）または（Ｓ）立体異性体として、またはそれらの混合物として形成されてもよい。別に示さない限り、明細書および請求項の特定な化合物の説明または命名は、個々の鏡像異性体の両方、ジアステレオ異性体混合物、それらのラセミであるもの、あるいはそうでないものを含むことを意図している。したがって、本発明は、本発明の化合物のジアステレオ異性混合物および分割鏡像異性体を含む、そのような異性体のすべてをも含む。ジアステレオ異性体混合物は、当業者に既知である方法、例えばクロマトグラフ法または分別晶出により、それらの物理化学的相違に基づき、個々のジアステレオ異性体に分離できる。鏡像異性体は、適切な光学活性化合物（例えば、アルコール）との反応によって鏡像異性体混合物をジアステレオ異性体混合物に変換し、ジアステレオ異性体を分離し、そして個々のジアステレオ異性体を対応する純粋な鏡像異性体に（例えば、加水分解して）変換することによって分離できる。立体化学の分析および立体異性体の分離のための方法は、周知技術である（「先進有機化学」第四版の第四章の考察を参照、“Ａｄｖａｎｃｅｄ  ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ”，４ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｊ．Ｍａｒｃｈ．Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，ＮｅｗＹｏｒｋ，１９９２）。
【００５３】
ＭＥＫインヒビター化合物（Ｓ）−５−フルオロ−２−（２−フルオロ−４−（メチルチオ）フェニルアミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシプロポキシ）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキサミド（化合物Ｃ）は、式（ＩＩＩ）の化合物である。
【化３】
0006437444.tif 000004
ＭＥＫインヒビター化合物（Ｓ）−５−フルオロ−２−（２−フルオロ−４−（メチルチオ）フェニルアミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシプロポキシ）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキサミド（化合物Ｃ）は、ＰＣＴ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｏ．ＷＯ２００７／０４４０８４の実施例２５−ＢＢに記載されており、また、その調製方法もそこに説明されている。
【００５４】
本発明の組合せに用いてもよい追加のＭＥＫインヒビターは、ＰＤ０３２５９０１（ファイザー）（ＰＣＴ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｏ．ＷＯ０２／０６２１３を参照）、ＰＤ−１８４３５２（ファイザー）、ＲＤＥＡ１１９（アルデア・バイオサイエンス、ＡｒｄｅａＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）、ＧＳＫ１１２０２１２（グラクソ・スミスクライン）（ＰＣＴ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｏ．ＷＯ０５／１２１１４２を参照）、ＸＬ５１８（エクセレクシス、Ｅｘｅｌｅｘｉｓ）、ＡＳ−７０１２５５（メルク・セロノ、ＭｅｒｃｋＳｅｒｏｎｏ）、ＡＳ−７０１１７３（メルク・セロノ）、ＡＳ７０３０２６（メルク・セロノ）、ＲＤＥＡ４３６（アルデア・バイオサイエンス）、Ｅ６２０１（エーザイ）（後藤ら、薬理学および実験的な治療学ジャーナル（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）（３３３１（２）：４８５−４９５（２００９））、ＲＯ４９８７６５５（ホフマン・ラ・ロシュ）、ＪＴＰ−７４０５７、ＲＧ７１６７やＲＧ７４２０を含むが、これに限定されるものではない。
【００５５】
本発明の組合せに用いるＭＥＫインヒビター化合物は、６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５カルボン酸（２−ヒドロキシエトキシ）−アミド（化合物Ｂ）、（Ｓ）−５−フルオロ−２−（２−フルオロ−４−（メチルチオ）フェニルアミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシプロポキシ）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキサミド（化合物Ｃ）からなるグループから選択したもの、またはそれの医薬的に許容可能な塩であることが好ましい。
【００５６】
本組合せに役立つＭＥＫインヒビター化合物は、また、ＰＤ０３２５９０１Ｎ−［２（Ｒ），３−ジヒドロキシプロポキシ］−３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）ベンズアミド（ＰＣＴ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｏ．ＷＯ０２／０６２１３を参照）である。
【００５７】
本発明の組合せに用いるＭＥＫインヒビター化合物は、６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエトキシ）−アミド（化合物Ｂ）またはそれの医薬的に許容可能な塩であることが好ましい。
【００５８】
ＭＥＫインヒビターに関連して、用語「塩」または「塩類」は、そうではないと明記しない限り、本発明の化合物内に存在する酸性基および塩基性基の塩類を含む。本来塩基性である本発明の化合物は、多様な無機および有機酸を持つ多種多様な塩類を形成することが可能である。本発明のそのような塩基性化合物の医薬的に許容可能な酸付加塩を調製するために用いてもよい酸は、無毒性酸付加塩を形成するもの、すなわち、医薬的に許容可能な陰イオンを含む塩類、例えば酢酸塩、安息香酸塩、臭化物、塩化物、クエン酸塩、フマル酸塩、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヨウ化物、乳酸塩、マレイン酸塩、マンデル酸塩、硝酸塩、シュウ酸塩、サリチル酸塩、スクシナートおよび酒石酸塩である。本発明の単一化合物が複数の酸性あるいは塩基性部分を含んでもよいため、本発明の化合物は、単一化合物内にモノ、ジまたはトリ塩を含んでもよい。
【００５９】
本発明の化合物内の酸性部分のケースでは、本発明の化合物を塩基性化合物、特に無機塩基で処理することによって塩を形成してもよい。好ましい無機塩は、例えばリチウム、ナトリウム、カリウム、バリウムおよびカルシウムなどの塩基性物質やアルカリ土類金属で形成されたものである。好ましい有機塩基塩類は、例えば、アンモニウム、ジベンジルアンモニウム、ベンジルアンモニウム、２−ヒドロキシエチルアンモニウム、ビス（２−ヒドロキシエチル）アンモニウム、フェニルエチルベンジルアミン、ジベンジル−エチレンジアミン、そのような塩を含む。酸性部分の他の塩類は、例えばプロカイン、キニーネ、そしてＮ−メチルグルソアミンで形成された塩類を含んでもよい。また、さらに、例えばグリシン、オルニチン、ヒスチジン、フェニルグリシン、リシンおよびアルギニンなどの塩基性アミノ酸で形成された塩類を含んでもよい。特に好ましい塩は、本発明の化合物のナトリウムまたはカリウム塩である。
【００６０】
塩基性部分に関しては、本発明の化合物を酸性化合物、特に無機酸で処理することによって、塩を形成する。このタイプの好ましい無機塩は、例えば、塩酸、臭酸、硫酸、リン臭酸などの塩を含んでもよい。このタイプの好ましい有機塩は、例えば、酢酸、コハク酸、クエン酸、マレイン酸、フマル酸、Ｄ−グルタミン酸、グリコール酸、安息香酸、ケイ皮酸などの有機酸で形成された塩を含んでもよい。このタイプの特に好ましい塩は、本発明の化合物Ｂの塩酸塩または硫酸塩である。
【００６１】
本発明に適当な化合物Ｂおよび化合物Ｃの追加の医薬的に許容可能な塩類は、参照によって本出願に援用されるＰＣＴ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｏ．ＷＯ０３／０７７９１４およびＰＣＴ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｏ．ＷＯ２００７／０４４０８４に開示された塩類を含む。
【００６２】
そうではないと特記される、あるいは本文に明示されることがないならば、本発明の医薬的組合せに有用な治療薬への参照は、化合物の遊離塩基と化合物のすべての医薬的に許容可能な塩類との両方を含む。
【００６３】
コード番号、総称名または商品名によって特定される化合物の構造は、標準大要「メルク・インデックス」の実版から、または例えば、国際特許（ＩＭＳ  Ｗｏｒｌｄ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ）のデータベースから採用してもよい。それらの対応する内容は、参照によって本文に援用される。
【００６４】
特許出願からの引用が上述された各ケースでは、化合物に関する主題は、参照によって本出願に援用される。本発明の医薬的組合せの治療薬として用いられる化合物は、各々、引用された文書に記載されているように、調製されて投与されることが可能である。また、本発明の範囲内にあるのは、前述のように二つの別個の治療薬の組合せである。すなわち、本発明の範囲内の医薬的組合せは、三つの治療薬またはそれ以上のものを含むことが可能である。
【００６５】
（ａ）ＰＫＣインヒビター化合物、またはそれの医薬的に許容可能な塩、そして（ｂ）少なくとも一つのＭＥＫインヒビター化合物、またはそれの医薬的に許容可能な塩、そしてオプションとして医薬的に許容可能な担体からなる医薬的組合せは、以下、本発明の組合せと称する。この用語は、また、（ａ）ＰＫＣインヒビター化合物、またはそれの医薬的に許容可能な塩、そして（ｂ）一つのＭＥＫインヒビター化合物、またはそれの医薬的に許容可能な塩、そしてオプションとして医薬的に許容可能な担体からなる医薬的組合せを意味する、と理解すべきである。この場合、ＰＫＣインヒビターおよびＭＥＫインヒビター化合物は単独の治療薬である。
【００６６】
本発明の組合せの一つの実施例は、（ａ）ＰＫＣインヒビター化合物３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−［２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−キナゾリン−４−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（化合物Ａ）、またはそれの医薬的に許容可能な塩、そして（ｂ）６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエトキシ）−アミド（化合物Ｂ）、（Ｓ）−５−フルオロ−２−（２−フルオロ−４−（メチルチオ）フェニルアミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシプロポキシ）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキサミド（化合物Ｃ）、ＰＤ０３２５９０１、ＰＤ−１８４３５２、ＲＤＥＡ１１９、ＧＳＫ１１２０２１２、ＸＬ５１８、ＡＳ−７０１２５５、ＡＳ−７０１１７３、ＡＳ７０３０２６、ＲＤＥＡ４３６、Ｅ６２０１、ＲＯ４９８７６５５、ＪＴＰ−７４０５７、ＲＧ７１６７およびＲＧ７４２０からなるグループから選択された少なくとも一つのＭＥＫインヒビター化合物、またはそれの医薬的に許容可能な塩、そしてオプションとして医薬的に許容可能な担体からなる医薬的組合せである。
【００６７】
本発明による好適実施形態における組合せパートナーは、（ａ）ＰＫＣインヒビター化合物３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−［２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−キナゾリン−４−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（化合物Ａ）またはそれの医薬的に許容可能な塩、そして（ｂ）６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエトキシ）−アミド（化合物Ｂ）および（Ｓ）−５−フルオロ−２−（２−フルオロ−４−（メチルチオ）フェニルアミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシプロポキシ）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキサミド（化合物Ｃ）からなるグループから選択したＭＥＫインヒビター化合物、またはそれの医薬的に許容可能な塩である。
【００６８】
本発明のもう一つの好適実施形態における組合せパートナーは、（ａ）ＰＫＣインヒビター化合物３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−［２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−キナゾリン−４−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（化合物Ａ）またはそれの医薬的に許容可能な塩、そして（ｂ）ＭＥＫインヒビター化合物６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエトキシ）−アミド（化合物Ｂ）またはそれの医薬的に許容可能な塩である。
【００６９】
本発明の好適実施形態における組合せパートナーは、（ａ）ＰＫＣインヒビター化合物３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−［２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−キナゾリン−４−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（化合物Ａ）またはそれの医薬的に許容可能な塩、そして（ｂ）ＭＥＫインヒビター化合物（Ｓ）−５−フルオロ−２−（２−フルオロ−４−（メチルチオ）フェニルアミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシプロポキシ）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキサミド（化合物Ｃ）、またはそれの医薬的に許容可能な塩である。
【００７０】
本発明は、また、（ａ）ＰＫＣインヒビター化合物、例えば３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−［２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−キナゾリン−４−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（化合物Ａ）、またはそれの医薬的に許容可能な塩、そして（ｂ）６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエトキシ）−アミド、（Ｓ）−５−フルオロ−２−（２−フルオロ−４−（メチルチオ）フェニルアミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシプロポキシ）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキサミド、ＰＤ０３２５９０１、ＰＤ−１８４３５２、ＲＤＥＡ１１９、ＧＳＫ１１２０２１２、ＸＬ５１８、ＡＳ−７０１２５５、ＡＳ−７０１１７３、ＡＳ７０３０２６、ＲＤＥＡ４３６、Ｅ６２０１、ＲＯ４９８７６５５、ＪＴＰ−７４０５７、ＲＧ７１６７およびＲＧ７４２０からなるグループから選択されたＭＥＫインヒビター、またはそれの医薬的に許容可能な塩、そしてオプションとして医薬的に許容可能な担体からなる併用製剤または医薬組成物に関する。
【００７１】
一つの実施形態においては、本発明は、（ｉ）組合せパートナー（ａ）の一つ以上の単位剤形、そして（ｉｉ）組合せパートナー（ｂ）の一つ以上の単位剤形からなる併用製剤に関する。
【００７２】
本発明は、増殖性疾患の治療や予防を必要とする対象者に特に有用な本発明の組合せに関する。本発明のこの実施形態においては、本発明の組合せは、増殖性疾患の治療あるいは予防のために用いられるものであって、有効な量のＰＫＣインヒビター、例えば３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−［２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−キナゾリン−４−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（化合物Ａ）、またはそれの医薬的に許容可能な塩、そしてＭＥＫインヒビター化合物またはそれの医薬的に許容可能な塩からなり、対象者に併用療法を提供する。このＭＥＫインヒビター化合物は、例えば、６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエトキシ）−アミド、（Ｓ）−５−フルオロ−２−（２−フルオロ−４−（メチルチオ）フェニルアミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシプロポキシ）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキサミド、ＰＤ０３２５９０１、ＰＤ−１８４３５２、ＲＤＥＡ１１９、ＧＳＫ１１２０２１２、ＸＬ５１８、ＡＳ−７０１２５５、ＡＳ−７０１１７３、ＡＳ７０３０２６、ＲＤＥＡ４３６、Ｅ６２０１、ＲＯ４９８７６５５、ＪＴＰ−７４０５７、ＲＧ７１６７およびＲＧ７４２０からなるグループから選択される。ＭＥＫインヒビター化合物は、併用されたときに有益な効果を提供する治療に有効な投薬量で投与されることが好ましい。投与は同時あるいは順次でもよい。
【００７３】
本発明の組合せによって治療あるいは予防される増殖性疾患は、主に腫瘍や癌である。増殖性疾患の例は、黒色腫、特にブドウ膜黒色腫、転移性ブドウ膜黒色腫、ＧＮＡＱあるいはＧＮＡ１１変異ブドウ膜黒色腫および癌であり、そして、より詳しくは、ブドウ膜黒色腫、転移性ブドウ膜黒色腫、ＧＮＡＱあるいはＧＮＡ１１変異体転移性ブドウ膜黒色腫である。
【００７４】
本発明の一つの実施形態において、増殖性疾患は固形腫瘍である。用語「固形腫瘍」は、特に黒色腫を意味し、とりわけブドウ膜黒色腫、例えば転移性ブドウ膜黒色腫を意味する。さらに、腫瘍タイプ、そして使用される特定な組合せに応じて、腫瘍体積の減少が得られる。本文中に開示された組合せは、また、腫瘍の転移拡散そして微小転移巣の成長あるいは進行を予防するためにも適当である。本文中に開示された組合せは、予後不良患者の治療に適当であり、そのような予後不良患者が転移性ブドウ膜黒色腫を患っている場合に特に適当である。
【００７５】
もう一つの実施形態においては、増殖性疾患は、黒色腫、特にブドウ膜黒色腫、例えば転移性ブドウ膜黒色腫である。
【００７６】
もう一つの実施形態においては、増殖性疾患は、ブドウ膜黒色腫、例えば転移性ブドウ膜黒色腫である。
【００７７】
明らかであるが、本発明の組合せは、本発明に従って増殖性疾患の治療のためだけに用いられてもよい。
【００７８】
本発明の組合せからなる併用療法は、単独療法と比較して、増殖性疾患の治療あるいは予防において予想外の改善をもたらすことが分かっている。同時に、順次に、または別々に投与されると、ＰＫＣインヒビター化合物３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−［２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−キナゾリン−４−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（化合物Ａ）およびＭＥＫインヒビター化合物６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエトキシ）−アミド（化合物Ｂ）は、細胞増殖を抑制するよう相乗的に相互作用する。
【００７９】
増殖性疾患の性質は多因子性である。環境条件次第で、異なる作用機序を持つ複数の薬が併用されてもよい。しかし、異なる作用様式を持つ治療薬の組合せを単に考察するだけでは、必ずしも、有益な効果を持つ組合せに至るということにはならない。
【００８０】
本発明の医薬的組合せの投与は、本発明の組合せに用いられる医薬治療的な薬剤の単に一方を適用する単独療法に比べ、例えば、症状の緩和、進行の遅延または抑制などの相乗的治療効果という有益な影響だけでなく、さらに例えば、より少ない副作用、生活の質の改善または病的状態の減少という驚くべき有益な影響をももたらす。
【００８１】
もう一つの利点は、本発明の組合せの治療薬は、低用量で用いることが可能なことである。例えば、用量をしばしば少なくできるだけでなく、投薬頻度も少なくなる、あるいは組合せパートナーの一つを単独で用いた場合に見られる副作用の発生を減らすことができるなどである。これは、治療を受ける患者の要望および条件に従ったものである。
【００８２】
本発明の組合せが、本文中に前述した有益な影響をもたらすことを既定のテスト・モデルで示すことができる。当業者にとって、そのような有益な影響を立証する関連テスト・モデルを選択することは、全く可能である。本発明の組合せの薬理活性は、例えば、以下に本質的に説明される臨床試験あるいはテスト手法で論証されてもよい。
【００８３】
適切な臨床試験は、例えば、増殖性疾患患者の非盲検用量漸増試験である。そのような試験は、本発明の組合せの治療薬の特に相乗作用を立証する。増殖性疾患に対する有益な影響は、当業者に既知であるそれら試験の結果を通して直接的に判定されてもよい。そのような試験は、いずれの治療薬での単独療法と、本発明の組合せとの効果を比較するのに特に適している。
【００８４】
一つの実施形態においては、ＰＫＣインヒビター化合物Ａの用量が、最大耐量に達するまで漸増され、そして本発明のＭＥＫインヒビター化合物は一定用量で投与される。代替例では、ＰＫＣインヒビター化合物Ａが一定用量で投与され、本発明の少なくともＭＥＫインヒビターの用量が漸増されてもよい。各患者は、本発明のＰＫＣインヒビター化合物Ａおよび／またはＭＥＫインヒビターの用量を毎日、または断続的に受けてもよい。治療の有効性は、例えば６週ごとに症状スコアを評価することによって、例えば１２、１８または２４週後にそのような試験で判定されてもよい。
【００８５】
好適実施形態においては、ＭＥＫインヒビターは、化合物Ｂまたはそれの医薬的に許容可能な塩である。好適実施形態においては、ＭＥＫインヒビターは、化合物Ｂである。
【００８６】
好適実施形態においては、ＭＥＫインヒビターは、化合物Ｃ、またはそれの医薬的に許容可能な塩である。
【００８７】
一つ以上の成分間における相乗的相互作用を判定するために、効果の最適範囲と効果のための各成分の絶対用量域は、治療が必要な患者に成分を、さまざまなｗ／ｗ比域および用量で投与することによって、決定的に測定されてもよい。
【００８８】
本発明による好適実施形態においては、本発明の組合せは、ＰＫＣインヒビター化合物３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−［２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−キナゾリン−４−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（化合物Ａ）またはそれの医薬的に許容可能な塩、そして６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエトキシ）−アミド（化合物Ｂ）、（Ｓ）−５−フルオロ−２−（２−フルオロ−４−（メチルチオ）フェニルアミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシプロポキシ）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキサミド（化合物Ｃ）、ＰＤ０３２５９０１、ＰＤ−１８４３５２、ＲＤＥＡ１１９、ＧＳＫ１１２０２１２、ＸＬ５１８、ＡＳ−７０１２５５、ＡＳ−７０１１７３、ＡＳ７０３０２６、ＲＤＥＡ４３６、Ｅ６２０１、ＲＯ４９８７６５５、ＪＴＰ−７４０５７、ＲＧ７１６７やＲＧ７４２０からなるグループから選択されたＭＥＫインヒビター化合物またはそれの医薬的に許容可能な塩からなり、例えばブドウ膜黒色腫、転移性ブドウ膜黒色腫、そしてＧＮＡＱあるいはＧＮＡ１１変異ブドウ膜黒色腫などの、増殖性疾患の治療あるいは予防に用いるためのものであり、ＧＮＡＱあるいはＧＮＡ１１のいずれかの突然変異を伴うブドウ膜黒色腫に適用することが好ましい。
【００８９】
一つの態様において、本発明は、（ａ）ＰＫＣインヒビター化合物３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−［２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−キナゾリン−４−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（化合物Ａ）またはそれの医薬的に許容可能な塩、そして（ｂ）本発明のＭＥＫインヒビター化合物、好ましくは化合物Ｂ、またはそれの医薬的に許容可能な塩からなるヒト投与のための相乗的組合せを提供する。この相乗的組合せは、例えば、相乗的相互作用を確認するために用いられる下記の実施例に記載されるような腫瘍モデルで観察される範囲と一致する組合せ範囲（ｗ／ｗ）内にある。
【００９０】
もう一つの態様においては、本発明は、（ａ）ＰＫＣインヒビター化合物３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−［２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−キナゾリン−４−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（化合物Ａ）またはそれの医薬的に許容可能な塩、そして（ｂ）本発明のＭＥＫインヒビター化合物、好ましくは化合物Ｂ、またはそれの医薬的に許容可能な塩からなるヒト投与のための相乗的組合せを提供する。この相乗的組合せは、例えば、相乗的相互作用を確認するために用いられる下記の実施例に記載されるような腫瘍モデルで観察される範囲と一致する組合せ範囲（ｗ／ｗ）内にある。
【００９１】
更なる態様によれば、本発明は、（ａ）ＰＫＣインヒビター３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−［２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−キナゾリン−４−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（化合物Ａ）またはそれの医薬的に許容可能な塩、そして（ｂ）本発明のＭＥＫインヒビター化合物、好ましくは化合物Ｂ、またはそれの医薬的に許容可能な塩からなるヒトに投与するための相乗的組合せを提供する。この場合、各成分の用量域は、主に相乗的相互作用を確認するために用いられる適切な腫瘍モデル、例えば下記の実施例で説明される腫瘍モデルで観察される相乗範囲と一致する。
【００９２】
本発明の一つの目的は、本発明の組合せからなり、増殖性疾患に対して共同で治療に有効な量からなる医薬組成物を提供することである。この組成物において、組合せパートナー（ａ）および（ｂ）は、適当なルートで、単一製剤または単位剤形として投与でき、同時に、しかし別々に、あるいは順次に投与できる。単位剤形は、固定組合せであってもよい。
【００９３】
両組合せパートナーの分離投与のための、または固定組合せでの投与のための医薬組成物、すなわち、本発明の組合せからなる単一の生薬組成物は、本質的に既知の方法で調製されてもよく、ヒトを含む哺乳動物（温血動物）への、例えば経口あるいは直腸を通した経腸および非経口投与に適当なものであり、例えば上述のように、治療に有効な量の少なくとも一つの薬理活性組合せパートナー単独、または特に経腸あるいは腸管外適用に適切な、一つ以上の医薬的に許容可能な担体との組み合わせからなる。
【００９４】
医薬組成物は、治療薬を約０．１%から約９９．９%まで含んでもよいが、約１%から約６０%であることが好ましい。
【００９５】
経腸あるいは腸管外投与のための併用療法に適切な医薬組成物は、例えば、糖衣錠、錠剤、カプセル、坐薬またはアンプルなどの単位剤形のものである。そうではないと明示されない限り、これらは、本質的に既知の方法、例えば多様な従来の混合、粉砕、直打、顆粒化、糖衣、溶解、凍結乾燥などのプロセス、あるいは当業者に明らかな製造技術によって調製される。当然ではあるが、複数の用量単位の投与によって必要有効量が得られるので、各剤形の個々の用量に含まれる組合せパートナーの単位含有量は、それ自体が有効な量である必要はない。
【００９６】
薬剤の組合せまたは薬剤の組合せの個々の薬剤を含む単位剤形は、微小錠剤の形態でカプセル、例えばゼラチン・カプセルに封じ込められてもよい。この目的で、ファイザーから入手可能なＣＡＰＳＵＧＥＬとして知られている硬質ゼラチンカプセルのような、医薬組成物に使用されるゼラチン・カプセルを、そのまま用いることができる。
【００９７】
本発明の単位剤形は、医薬品に用いられる従来の付加的な担体または賦形剤をオプションとして更に含んでもよい。そのような担体の実施例は、崩壊剤、結合剤、潤滑剤、滑走剤、安定剤、充填剤、希釈剤、着色剤、香味および防腐剤を含むが、これらに限定されない。本技術における通常の知識を有する者は、特定な所望の性質を剤形に得るために、負担の少ない日常的な実験によって前記担体の一つ以上を選択できる。用いる各担体の量は、本技術における従来の範囲内で、変化させてもよい。参照によってすべてが本文に援用される以下の参照は、経口投与剤形を調製するために用いる技術および賦形剤を開示している。「医薬賦形剤のハンドブック」第四版（Ｔｈｅ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ，４ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｒｏｗｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｄｓ．，Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ（２００３））そして「医薬の科学と実践」第２０版（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，２０ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｇｅｎｎａｒｏ，Ｅｄ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ&Ｗｉｌｋｉｎｓ（２００３））を参照。
【００９８】
これらのオプションの付加的な従来の担体は、造粒前あるいは造粒中に一つ以上の従来の担体を初期混合物に統合することによって経口投与剤形へ統合されてもよい。または、薬剤の組合せまたは薬剤の組合せの個々の薬剤からなる顆粒に一つ以上の従来の担体を結合して、経口投与剤形にしてもよい。後者の実施形態における結合混合物は、例えばＶ−ブレンダーを通して、さらに混合され、その後錠剤、例えば一体型錠剤へ圧縮あるいは成形しても、カプセルでカプセル化しても、あるいは小さい袋に充填してもよい。
【００９９】
医薬的に許容可能な崩壊剤の実施例は、デンプン、粘土、セルロース、アルギン酸塩、ガム、例えば架橋ポリビニルピロリドンなどの架橋ポリマー、またはクロスポビドン、例えばインターナショナル・スペシャルティ・プロダクツ（ウェイン、ＮＪ）からのＰＯＬＹＰＬＡＳＤＯＮＥ  ＸＬ、架橋ナトリウム・カルボキシメチルセルロース、または例えばＦＭＣからのＡＣ−ＤＩ−ＳＯＬなどのクロスカルメロース・ナトリウム、および架橋カルシウム・カルボキシメチルセルロース、大豆多糖体、そしてグアーガムを含むが、これらに限定されるものではない。崩壊剤は、組成物の約０重量%から約１０重量％までの量で存在してもよい。一つの実施形態においては、崩壊剤は、組成物の約０．１重量%から約５重量％までの量で存在する。
【０１００】
医薬的に許容可能な結合剤の実施例は、デンプン、セルロースおよびそれの誘導体、例えば微結晶性セルロース、例えばＦＭＣ（フィラデルフィア、ＰＡ）からのアビセルＰＨ、ヒドロキシプロピル・セルロース、ヒドロキシルエチル・セルロースおよびヒドロキシルプロピルメチル・セルロース、ダウ・ケミカル社（ミッドランド、ＭＩ）からのメトセル、ショ糖、ブドウ糖、コーンシロップ、多糖、そしてゼラチンを含むが、これらに限定されるものではない。結合剤は、例えば組成物の２から２０重量％など、約０%から約５０%までの量で存在してもよい。
【０１０１】
医薬的に許容可能な潤滑剤および医薬的に許容可能な滑走剤の実施例は、コロイド珪酸、三珪酸マグネシウム、デンプン、タルク、燐酸三カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、アルミニウム・ステアリン酸塩、ステアリン酸カルシウム、炭酸マグネシウム、酸化マグネシウム、ポリエチレングリコール、粉末セルロースおよび微結晶性セルロースを含むが、これらに限定されるものではない。潤滑剤は、組成物の約０重量%から約１０重量％までの量で存在してもよい。一つの実施形態においては、潤滑剤は、組成物の約０．１重量%から約１．５重量％までの量で存在してもよい。滑走剤は、約０．１重量%から約１０重量％までの量で存在してもよい。
【０１０２】
医薬的に許容可能な充填剤および医薬的に許容可能な希釈剤の実施例は、粉砂糖、圧縮性砂糖、デキストレート、デキストリン、ブドウ糖、乳糖、マンニトール、微結晶性セルロース、粉末セルロース、ソルビトール、ショ糖とタルクを含むが、これらに限定されるものではない。充填剤や希釈剤は、例えば、組成物の約０重量%から約８０重量％までの量で存在してもよい。
【０１０３】
一つの実施形態においては、本発明は、また、対象者の増殖性疾患に必要な治療あるいは予防のために、医薬組成物または薬剤の調製で使用するための本発明の組合せに関する。
【０１０４】
もう一つの実施形態における本発明は、対象者の増殖性疾患に必要な治療あるいは予防のための医薬組成物または薬剤の調製への、（ａ）ＰＫＣインヒビター化合物３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−［２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−キナゾリン−４−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（化合物Ａ）またはそれの医薬的に許容可能な塩、そして（ｂ）６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエトキシ）−アミド、（Ｓ）−５−フルオロ−２−（２−フルオロ−４−（メチルチオ）フェニルアミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシプロポキシ）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキサミド、ＰＤ０３２５９０１、ＰＤ−１８４３５２、ＲＤＥＡ１１９、ＧＳＫ１１２０２１２、ＸＬ５１８、ＡＳ−７０１２５５、ＡＳ−７０１１７３、ＡＳ７０３０２６、ＲＤＥＡ４３６、Ｅ６２０１、ＲＯ４９８７６５５、ＪＴＰ−７４０５７、ＲＧ７１６７およびＲＧ７４２０からなるグループから選択された少なくとも一つのＭＥＫインヒビター化合物、またはそれの医薬的に許容可能な塩の使用に関する。６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエトキシ）−アミド（化合物Ｂ）または（Ｓ）−５−フルオロ−２−（２−フルオロ−４−（メチルチオ）フェニルアミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシプロポキシ）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキサミド（化合物Ｃ）から選択されたＭＥＫインヒビターが好ましい。
【０１０５】
本発明によれば、本発明の組合せの組合せパートナーの各々の治療に有効な量は、同時に、または順次に、任意の順序で投与されてもよい。また、各成分は別々に、または固定組合せとして投与されてもよい。例えば、本発明による増殖性疾患の治療方法は、（ｉ）遊離形態あるいは医薬的に許容可能な塩の形態にある第一の薬剤（ａ）の投与、そして（ｉｉ）遊離形態あるいは医薬的に許容可能な塩の形態にある薬剤（ｂ）の投与からなり、同時に、または順次に、任意の順序で、合わせて治療に有効な総量として、好ましくは相乗作用的に有効な総量で、例えば本文中で説明された量に対応させた投薬量で毎日あるいは断続的に行う。本発明の組合せの個々の組合せパートナーは、治療コース中の異なる時間に別々に、または分離形態であるいは単一の組合せ形態で同時に投与してもよい。さらに、用語「投与」は、生体内で組合せパートナーとして転換する組合せパートナーの前駆薬剤の使用をも包含する。したがって、本発明は、同時の、あるいは交互の治療の、すべてのそのような療法を包含すると理解すべきであり、用語「投与」も、相応に解釈すべきである。
【０１０６】
本発明の組合せに用いられる組合せパートナーの各々の有効な投薬量は、使用される特定な化合物または医薬組成物、投与モード、治療される状態、そして治療を受ける重症度に応じて異なってもよい。したがって、本発明の組合せの投与計画は、投与のルートと患者の腎および肝機能を含む種々の要因に応じて選択される。通常の技術を有する臨床医あるいは医師は、病の進行を緩和する、対処する、または抑制するのに必要な、複数の単一治療薬の有効な量をすぐに決定し処方することができる。
【０１０７】
毒性なしで効能を提供する本発明の組合せの組合せパートナー（ａ）および（ｂ）の、最適比、個々の投薬量および合計投薬量、そして濃度は、治療薬の標的部位への有効性の動特性に基づくため、当業者に既知である方法を用いて決定してもよい。
【０１０８】
組合せパートナーの各々の有効な量は、組合せの他の化合物に比べ、化合物の一方がより頻繁に投与されることが必要であってもよい。したがって、適切な投与を促すため、包装された製薬品は、化合物の組合せを含む一つ以上の剤形を含んでもよいし、また、組合せの他方の化合物を含まず化合物の組合せの一方を含む一つ以上の剤形を含んでもよい。
【０１０９】
本発明の組合せで用いられる組合せパートナーが、複数の単一薬として市販される形態を採った場合、それらの投薬量および投与モードは、そうでないと本文中に明示されない限り、その市販薬の添付文書に提供された情報に従うことになる。
【０１１０】
ＰＫＣインヒビター化合物、化合物Ａは、適切な対象者に、一日体重１ｋｇにつき約０．０５から約５０ｍｇの範囲内の有効な投薬量で、毎日、単一用量あるいは分割用量として投与されてもよい。単一あるいは分割用量で、およそ０．１から２５ｍｇ／ｋｇ／日であることが好ましく、約０．５から１０ｍｇ／ｋｇ／日であることがより好ましい。７０ｋｇのヒトに対しては、これは、約３５から７００ｍｇ／日の好適投薬量範囲となる。
【０１１１】
ＭＥＫインヒビター化合物、化合物Ｂは、適切な対象者に、一日体重１ｋｇにつき約０．００１から約１００ｍｇの範囲内の有効な投薬量で、毎日、単一用量あるいは分割用量として投与されてもよい。単一あるいは分割用量で、約１から約３５ｍｇ／ｋｇ／日であることが好ましい。７０ｋｇのヒトに対しては、これは、約０．０５から７ｇ／日の好適投薬量範囲となり、約０．０５から約２．５ｇ／日であることが好ましい。
【０１１２】
ＭＥＫインヒビター化合物、化合物Ｃは、適切な対象者に、一日体重１ｋｇにつき約０．００１から約１００ｍｇの範囲内の有効な投薬量で、毎日、単一用量あるいは分割用量として投与されてもよい。単一あるいは分割用量で、約１ｍｇ／ｋｇ／日から約３５ｍｇ／ｋｇ／日であることが好ましい。７０ｋｇのヒトに対しては、これは、約０．０７から２．４５ｇ／日の好適投薬量範囲となる。約０．０５から約１．０ｇ／日であることが好ましい。
【０１１３】
増殖性疾患の治療のための各々の組合せパートナーの最適投薬量は、既知の方法を用いて各個人に経験的に決定でき、以下を含む種々の要因に依存するが、それらに制限されることはない。病気の進行度、個人の年齢、体重、健康状態、性別および食習慣、投与の時間および経路、そして個人が飲んでいる他の薬物。最適投薬量は、周知の技術である日常試験や手順を用いて確立されてもよい。
【０１１４】
単一剤形を形成するために担体物質と結合されてもよい各組合せパートナーの量は、治療を受ける個人や特定の投与モードによって異なる。いくつかの実施形態においては、本文中で説明される薬剤の組合せを含む単位剤形は、薬剤が単独で投与されるときに典型的に投与される組合せの各薬剤の量を含む。
【０１１５】
投薬の頻度は、用いられる化合物、そして治療される、あるいは予防される特定の状態に応じて、異なってもよい。一般に、有効な治療法を提供するのに十分な最小限の投薬量の使用が好ましい。一般に、当業者に既知である、治療あるいは予防されている状態に対して適切な分析検査を用いて、患者の治療効果を監視してもよい。本発明は、本発明の組合せを増殖性疾患に対して共同で治療に有効な量で対象者に投与することからなる、増殖性疾患を持つ対象者の治療方法に関する。特に、本発明の組合せで治療すべき増殖性疾患は、黒色腫、ブドウ膜黒色腫、転移性ブドウ膜黒色腫、ＧＮＡＱあるいはＧＮＡ１１変異ブドウ膜黒色腫およびＧＮＡＱあるいはＧＮＡ１１変異体転移性ブドウ膜黒色腫から選択される。
【０１１６】
さらに、治療は、手術または放射線療法を含むことができる。
【０１１７】
本発明は、さらに、増殖性疾患、例えばブドウ膜黒色腫、転移性ブドウ膜黒色腫、ＧＮＡＱあるいはＧＮＡ１１変異ブドウ膜黒色腫および癌、特に癌の、そして、より詳しくはブドウ膜黒色腫、転移性ブドウ膜黒色腫、そしてＧＮＡＱまたはＧＮＡ１１変異体転移性ブドウ膜黒色腫の治療に用いるための本発明の組合せに関する。
【０１１８】
本発明は、さらに、増殖性疾患の治療を必要とする対象者の疾患の進行の遅延または治療のために、同時に、別個に、あるいは順次に投与するための指示と、治療薬としての本発明の組合せを一緒にしたコマーシャルパッケージを提供する。
【０１１９】
本願は、下記の発明を提供するものでもある。
［発明１］
（ａ）プロテインキナーゼＣ（ＰＫＣ）インヒビター化合物、またはその医薬的に許容可能な塩、および
（ｂ）マイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＥＫ）インヒビター化合物、またはその医薬的に許容可能な塩
を含むかまたはそれらからなる、医薬的組合せ。
［発明２］
前記ＰＫＣインヒビター化合物が、
３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−［２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−キナゾリン−４−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、
３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−［２−（ピペラジン−１−イル）−キナゾリン−４−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、
３−［２−クロロ−７−［（ジメチルアミノ）メチル］−１−ナフタレニル］−４−［７−［２−（２−メトキシエトキシ）エトキシ］−１Ｈ−インドール−３−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、
３−［３−（４，７−ジアザ−スピロ［２，５］オクト−７−イル）−イソキノリン−１−イル］−４−（７−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロール−２，５−ジオン、
（９Ｓ）−９−［（ジメチルアミノ）メチル］−６，７，１０，１１−テトラヒドロ−９Ｈ，１８Ｈ−５，２１：１２，１７−ジメテノジベンゾ−［ｅ，ｋ］ピロロ［３，４−ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１８，２０（１９Ｈ）−ジオン、
ルボキシスタウリン、および
１２−（２−シアノエチル）−６，７，１２，１３−テトラヒドロ−１３−メチル−５−オキソ−５Ｈ−インドロ（２，３−ａ）ピロロ（３，４−ｃ）−カルバゾール
からなる群から選択される化合物であるかまたはその医薬的に許容可能な塩である、発明１に記載の医薬的組合せ。
［発明３］
前記ＭＥＫインヒビター化合物が、
６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエトキシ）−アミド、（Ｓ）−５−フルオロ−２−（２−フルオロ−４−（メチルチオ）フェニルアミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシプロポキシ）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキサミド、ＰＤ０３２５９０１、ＰＤ−１８４３５２、ＲＤＥＡ１１９、ＧＳＫ１１２０２１２、ＸＬ５１８、ＡＳ−７０１２５５、ＡＳ−７０１１７３、ＡＳ７０３０２６、ＲＤＥＡ４３６、Ｅ６２０１、ＲＯ４９８７６５５、ＪＴＰ−７４０５７、ＲＧ７１６７およびＲＧ７４２０
からなるグループから選択される化合物であるかまたはその医薬的に許容可能な塩である、発明１または２に記載の医薬的組合せ。
［発明４］
前記ＰＫＣインヒビター化合物が、３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−［２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−キナゾリン−４−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、またはその医薬的に許容可能な塩である、発明１〜３のいずれかに記載の医薬的組合せ。
［発明５］
前記ＭＥＫインヒビター化合物が、６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエトキシ）−アミド、もしくは（Ｓ）−５−フルオロ−２−（２−フルオロ−４−（メチルチオ）フェニルアミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシプロポキシ）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキサミド、またはその医薬的に許容可能な塩である、発明１〜４のいずれかに記載の医薬的組合せ。
［発明６］
前記ＰＫＣインヒビター化合物が、３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−［２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−キナゾリン−４−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオンまたはその医薬的に許容可能な塩であり、前記ＭＥＫインヒビター化合物が、６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエトキシ）−アミドまたはその医薬的に許容可能な塩である、発明１〜５のいずれかに記載の医薬的組合せ。
［発明７］
少なくとも一つの医薬的に許容可能な担体を更に含む、発明１〜６のいずれかに記載の医薬的組合せ。
［発明８］
同時に、別個に、または順次に投与するための、発明１〜７のいずれかに記載の医薬的組合せ。
［発明９］
増殖性疾患の治療に用いるための、発明１〜８のいずれかに記載の医薬的組合せ。
［発明１０］
前記増殖性疾患が癌である、発明９に記載の医薬的組合せ。
［発明１１］
前記増殖性疾患が黒色腫である、発明９に記載の医薬的組合せ。
［発明１２］
前記黒色腫が、ブドウ膜黒色腫、転移性ブドウ膜黒色腫、ＧＮＡＱ変異ブドウ膜黒色腫、ＧＮＡＱ変異転移性ブドウ膜黒色腫、ＧＮＡ１１変異ブドウ膜黒色腫、またはＧＮＡ１１変異転移性ブドウ膜黒色腫である、発明１１に記載の医薬的組合せ。
［発明１３］
（ａ）前記ＰＫＣインヒビター化合物および（ｂ）ＭＥＫインヒビター化合物が、増殖性疾患の治療に相乗作用的に有効な量で提供される、発明１〜１２のいずれかに記載の医薬的組合せ。
［発明１４］
増殖性疾患の治療のための薬剤の調製における、発明１〜８のいずれかに記載の医薬的組合せの使用。
［発明１５］
前記増殖性疾患が癌である、発明１４に記載の使用。
［発明１６］
前記増殖性疾患が黒色腫である、発明１４に記載の使用。
［発明１７］
前記黒色腫が、ブドウ膜黒色腫、転移性ブドウ膜黒色腫、ＧＮＡＱ変異ブドウ膜黒色腫、ＧＮＡＱ変異転移性ブドウ膜黒色腫、ＧＮＡ１１変異ブドウ膜黒色腫、またはＧＮＡ１１変異転移性ブドウ膜黒色腫である、発明１６に記載の使用。
［発明１８］
（ａ）ＰＫＣインヒビター化合物３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−［２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−キナゾリン−４−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオンまたはその医薬的に許容可能な塩の一つ以上の単位剤形、および（ｂ）ＭＥＫインヒビター化合物またはその医薬的に許容可能な塩の一つ以上の単位剤形を含む、併用製剤。
［発明１９］
発明１〜１３のいずれかにて定義された組合せと、少なくとも一つの医薬的に許容可能な担体を含む、医薬組成物。
［発明２０］
前記ＰＫＣインヒビターおよびＭＥＫインヒビターが、増殖性疾患の治療に相乗作用的に有効な量で提供される、発明１９に記載の医薬組成物。
［発明２１］
増殖性疾患の進行の遅延または治療に用いるための治療薬として発明１〜１３のいずれかに定義された医薬的組合せを、その同時の、別個の、または順次の投与のための説明書と一緒に含む、コマーシャルパッケージ。
以下の実施例は、前述の本発明を説明するが、本発明の範囲を制限することを全く意図していない。本発明の医薬的組合せの有益な効果は、当業者に既知である他のテスト・モデルによって判定することもできる。
【実施例１】
【０１２０】
細胞系および細胞培養
９２．１およびＯＭＭ−１ブドウ膜黒色腫細胞系を、１０%のウシ胎児血清を付加したロズウェル・パーク・メモリアル・インスティチュート培養液（ＲＰＭＩ１６４０）（米国菌培養収集所（ＡＴＣＣ＃３０−２００１））で培養し、そして３７℃／５%の二酸化炭素で温置した。９２．１細胞系はＧＮＡＱ突然変異を持ち、そしてＯＭＭ１細胞系はＧＮＡ１１に突然変異を抱える。
【０１２１】
ガラス器内での実験のための化合物の調製
３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−［２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−キナゾリン−４−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（以下ＡＥＢ０７１とする）、そして６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエトキシ）−アミド（以下化合物Ｂとする）の化合物ストックを、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）内に１０ｍＭの最終濃度で調製した。
【０１２２】
ｘＣＥＬＬｉｇｅｎｃｅによる増殖測定
ブドウ膜細胞の成長を、ｘＣＥＬＬｉｇｅｎｃｅリアルタイム・セル・アナライザーで連続的にモニターした。Ｅプレート（ロシュ＃０５２３２３６８００１）を、１ウェル毎１００μｌにつき３０００セルの最終濃度の細胞を加えて温置した。２時間おきに２４時間インピーダンスを測定した。２４時間後、ＤＭＳＯ、化合物Ｂ、ＡＥＢ０７１または両化合物を、化合物につき１μＭの最終濃度でウェルに加え、総体積１２０μｌとした。２時間おきに７日間インピーダンスを測定した。化合物添加前に、データを０日目で正規化した。
【０１２３】
ガラス器内におけるブドウ膜黒色腫の増殖に対する３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−［２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−キナゾリン−４−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（化合物Ａ）および６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエトキシ）−アミド（化合物Ｂ）の効果を示す（図１）。６日間コースに渡るブドウ膜黒色腫細胞系の成長を、ｘＣＥＬＬｉｇｅｎｃｅテクノロジーによって、０．５μＭのＤＭＳＯ、０．５μＭのＡＥＢ０７１、０．５μＭの化合物Ｂ、または０．５μＭのＡＥＢ０７１＋０．５μＭの化合物Ｂの存在下で測定した。各々ＧＮＡＱおよびＧＮＡ１１変異を持つ９２．１およびＯＭＭ１細胞系において、ＡＥＢ０７１は細胞成長を遅らせた。この効果は、化合物Ｂと組み合わせた場合、強化された。単剤としての化合物Ｂは、両ブドウ膜黒色腫細胞系９２．１およびＯＭＭ１の成長に控えめな影響を与えた。二つの薬剤の組合せが、両細胞系の増殖を完全に抑えることができたことは、全くの驚きであった。
【実施例２】
【０１２４】
細胞系および細胞培養
実施例１に従った。
ガラス器内での実験のための化合物の調製
実施例１に従った。
【０１２５】
組合せ用量マトリックスにおける細胞増殖
９６個のウエルプレート（コスター＃３９０４）内に、１ウェル毎１００μｌの培養液につき３０００セルの密度で細胞を播種し、化合物添加前の一晩温置した。化合物ストックを、適切な培養液中に新たに調製し、それを、電子多チャネル・ピペットを用いて手作業でプレートに加え、三つのレプリカを作った。化合物単独で、または０．０３９μＭから１０μＭの範囲の１０ポイント希釈剤に対して１：２に希釈したＡＥＢ０７１および化合物Ｂの組合せで、細胞を処置した。化合物添加時と処置の１４４時間後に、メーカの手順に従ってセル・タイターＧｌｏ（プロメガ＃Ｇ７５７１）を用いて細胞ＡＴＰレベルの定量化を行い、細胞の生存度を評価した。ルミネセンス・プレート・リーダー（ビクターＸ４、パーキン・エルマー）でプレートを読んだ。成長のわずかな抑制を、ＸＬｆｉｔを用いて計算し、化合物ウェルが全くない状態に正規化した。成長抑制に関して、抑制を計算する前に、０日目の値を減算した。データは、Ｃｈａｌｉｃｅソフトウェア（ｈｔｔｐ：／／ｃｈａｌｉｃｅ．ｚａｌｉｃｕｓ．ｃｏｍ／ｄｏｃｕｍｅｎｔａｔｉｏｎ／ａｎａｌｙｚｅｒ／ｉｎｄｅｘ．ｊｓｐ）によって分析し、成長抑制、抑制およびＨＳＡ過剰を計算した。
【０１２６】
結果
化合物Ｂと組み合わせたＡＥＢ０７１の抗増殖効果は、図２で実証されるように、二つの薬剤間の相乗効果による。図２は、９２．１細胞系における二つの薬剤間の相乗効果パターンの詳細を提供する、二つの薬剤間の用量マトリックスである。非処理の細胞の細胞成長に対する効果を頂部パネルに、過剰な抑制（ＨＳＡ）を中央パネルに、そして零日正規化での成長抑制を底部パネルに示す。成長抑制、抑制およびＨＳＡ過剰に関する計算方法は、本技術において既知である。
【０１２７】
化合物ＢおよびＡＥＢ０７１の単一剤は両方とも、細胞系９２．１において活性だった。しかし、重要なことに、二つの薬剤を併用することにより、低用量において、単なる反応度の加算よりも大きな効果を生じた。例えば、０．１６μＭの単剤化合物Ｂは、５７%の成長抑制を生じ、そして０．１６μＭの単剤ＡＥＢ０７１は、１９%の成長抑制を提供した。しかし、これらの用量での二つの薬剤の組合せは、８２%の成長抑制を生じた（図２、頂部パネル）。この用量組合せは、図２中央パネルから分かるように、２５の過剰な抑制を示した。図２に、すべての用量組合せに関する抑制および過剰な抑制値を示す。図２（底部パネル）に示す成長抑制パーセントの計算には、３日目のアッセイの細胞成長率を考慮した。１００%は静止を示し、アッセイ中に細胞が成長することなく、また死にもしなかったことを意味する。１００を超える値は死を示し、２００は完全な細胞死である。そして、１００よりも少ない値は、アッセイの開始から３日目終点までの成長を示す。
【実施例３】
【０１２８】
ブドウ膜黒色腫細胞系９２．１およびＯＭＭ１の薬物処置後の、タンパク質免疫ブロットによる生化学的プロフィール。
ブドウ膜黒色腫細胞を、０．５μＭのＡＥＢ０７１、０．５μＭの化合物Ｂ、両化合物またはＤＭＳＯ単独と共に温置した。処置後２、４、８、２４または４８時間の細胞を、ＰｈｏｓＳｔｏｐホスファターゼ阻害剤カクテル・タブレット（ロシュ・ダイアグノスティクス＃０４９０６８３７００１）およびコンプリート・プロテアーゼ・インヒビター・カクテル・タブレット（ロシュ・ダイアグノスティクス＃１１８３６１４５００１）を含むＭ−ＰＥＲ哺乳類タンパク質抽出バッファ中で溶解した。タンパク質を、４から１２%のＢｉｓ−ＴｒｉｓＮｕＰＡＧＥＳＤＳジェル（インヴィトロゲン＃ＷＧ１４０３Ｂｘ１０）上で分離させて、その後、ドライ・ブロッティング・システム（インヴィトロゲンｉＢＬＯＴ）を用いてニトロセルロース膜に移動させた。タンパク質を、ａｎｔｉ−ｐ４４／４２ＭＡＰＫ（セル・シグナリング・テクノロジー＃４３７７）、ａｎｔｉ−ｐＭＡＲＣＫＳ（セル・シグナリング・テクノロジー＃２７４１）、ａｎｔｉ−ｐＭＥＫｌ／２（セル・シグナリング・テクノロジー＃９１２１）そして抗βアクチン（アンビオン＃ＡＭ４２０２）の１：１０００の希釈剤で検出した。メーカの手順に従って、適切な二次抗体と赤外線色素検出システム（ＯｄｙｓｓｅｙＩＲＤｙｅ，ＬＩ−ＣＯＲ）を用いて、βアクチンを検出した。抗ウサギＨＲＰ二次抗体を用いて他のすべてのタンパク質を検出し、そしてＳｙｎｇｅｎｅイメージング・システム上で、ＳｕｐｅｒＳｉｇｎａｌＷｅｓｔＤｕｒａ化学発光サブストレート（サーモサイエンティフィック＃３４０７６）を用いて現像した。
【０１２９】
結果
これらの薬剤の生化学的効果を、ブドウ膜黒色腫細胞系９２．１およびＯＭＭ−１において、０．５μＭのＡＥＢ０７１で、０．５μＭの化合物Ｂで、または０．５μＭの各薬剤一緒で処置した後に評価した。ｐＭＡＲＣＫＳのレベルは減衰した（図３）。ＡＥＢ０７１への化合物Ｂの付加は、ｐＭＡＲＣＫＳ発現に対してさらに影響を与えることは全くなかった。同じ細胞の化合物Ｂでの処置は、２時間後に見られるように、ｐＥＲＫ１／２レベルを減少させた。２４時間までに、ｐＥＲＫ１／２の発現は戻り始めている。さらに、化合物Ｂ単剤処置は、両細胞系におけるｐＭＥＫ１／２発現の経時的誘起に至った。このことは、処置４８時間後に明確に観察された。驚くべきことに、ＡＥＢ０７１と化合物Ｂとの組合せだけが、ｐＥＲＫ１／２、ｐＭＥＫ１／２の継続的抑制を生じた。ＡＥＢ０７１が、化合物Ｂ単剤処置に起因するｐＭＥＫ誘起を明確に予防したことは重要である。ＡＥＢ０７１と化合物Ｂとの組合せは、いずれの単一薬剤と比べても、より大きな度合いおよび期間、経路成分を抑制した。
【０１３０】
ＡＥＢ０７１、化合物Ｂ、そしてＡＥＢ０７１と化合物Ｂとの組合せの生体内活性を評価するために、実施例４、５および６に示すように、ＧＮＡＱ変異を持つ９２．１ヒト・ブドウ膜黒色腫ヌードマウス異種移植モデルを用いた。得られた結果から分かるように、化合物ＢおよびＡＥＢ０７１間で観察されたガラス器内での相乗効果は、生体内の効能に移った。図４に示すように、単独療法ＡＥＢ０７１処置は、３%のＴ／Ｃ（ｐ＜０．０１）に至った。ＡＥＢ０７１療法への、３．５ｍｇ／ｋｇでの１日２回の化合物Ｂの投与による付加は、−２２%のＴ−ＴＯを生じた（ｐ＜０．００１中央値活性、しかし、ＡＥＢ０７１単独に比べて有意ではない）。化合物Ｂは、８４%のＴ／Ｃで、それ自体による活性を全く持たなかった。二つの化合物の組合せは、ブドウ膜黒色腫生体内９２．１モデル内の腫瘍成長を強力に阻止した。さらに、図６に示すように、化合物Ｂと組み合わせたＡＥＢ０７１の複数回投与の処置は、９２．１生体内ブドウ膜黒色腫モデルにおいて有効だった。組合せの効果は、用量に依存する形で増加した。化合物Ｂと組み合わせてＡＥＢ０７１の用量を増加させると、より大きな反応が生じる。
【実施例４】
【０１３１】
９２．１ヒト・ブドウ膜黒色腫ヌードマウス異種移植モデルにおける生体内活性の評価。
生体内実験のための化合物の調製
（ＡＥＢ０７１とも呼んでいる）ＮＶＰ−ＡＥＢ０７１（アセテート塩、８７．９６%遊離塩基）粉を、２０%ポリエチレングリコール４００（ＰＥＧ４００）：４．５%０．１ＭのＨＣ１：７５．５%の５%デキストロース水（Ｄ５Ｗ）に加え、ビヒクル１と呼び、撹拌して澄んだ赤色溶液を得た。（化合物Ｂとも呼んでいる）ＮＶＰ−ＣＯＭＰＯＵＮＤＢを、脱イオン水中の１%カルボキシメチルセルロース：０．５%Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０の均質懸濁液として調製した。各化合物に対する新しい懸濁液を週に一度調製し、４℃で貯蔵した。
【０１３２】
マウス
雌の胸腺欠損ヌードマウス（Ｃｒｌ：ＮＵ（Ｎｃｒ）−Ｆｏｘｎｌｎｕ，ＣｈａｒｌｅｓＲｉｖｅｒ）は、生後９週間で、試験のＤ１で体重（ＢＷ）が２０．６から２６．９ｇの範囲であった。動物には、不断給水（逆浸透、１ｐｐｍのＣｌ）、そして１８．０%粗タンパク質、５．０%粗脂肪および５．０%粗繊維からなるＮＩＨ３１  Ｍｏｄｉｆｉｅｄ  ａｎｄ  Ｉｒｒａｄｉａｔｅｄ  Ｌａｂ  Ｄｉｅｔ（登録商標）を与えた。マウスは、スタティック・マイクロ・アイソレーター内の照射を受けたＥｎｒｉｃｈ−ｏ’ｃｏｂｓ（商標）実験動物ベッディング上に、１２時間光サイクル、２０から２２℃（６８から７２°Ｆ）および４０から６０%の湿度で収容した。ＤＲＳ−ＮＣは、拘束、管理、手術、飼料および体液調節、そして獣医による処置に関して、特に、「動物実験に関する指針」の勧告に従っている。ＤＲＳ−ＮＣの動物プログラムは、実験動物の飼育および使用に対する容認標準規格の遵守を保証する「実験動物ケアの評価および認可のための協会（ＡＡＡＬＡＣ）インターナショナル」によって公認されている。
【０１３３】
腫瘍着床および測定
９２．１ブドウ膜黒色腫細胞を、指数成長中に収穫し、５０%Ｍａｔｒｉｇｅｌ（商標）（ＢＤバイオサイエンス）を含む冷ＰＢＳ（リン酸緩衝食塩水）中に再懸濁させた。各マウスの右横腹の皮下に、５ｘ１０６セル（０．２ｍｌの細胞懸濁液）を接種した。腫瘍は、それらの平均体積が所望の１００から１５０ｍｍ３の範囲に接近したとき、成長をモニターするために二次元で測定した。腫瘍サイズをｍｍ３で、以下から計算した。
【０１３４】
腫瘍体積＝（ｗ２ｘｌ）／２
この場合、腫瘍に関してｗ＝幅、そしてｌ＝長さで、単位はｍｍである。腫瘍重量は、１ｍｇが腫瘍体積の１ｍｍ３に等価であるという仮定で、推定した。腫瘍細胞着床の１２日後、試験の１日目（Ｄ１）に、１０８から２５６ｍｍ３の個々の腫瘍体積を持つ動物を、６つのグループに分けた（ｎ＝１０／グループ）。このときの群平均腫瘍体積は１５３から１５９ｍｍ３であった。
【０１３５】
ＡＥＢ０７１は、２１日間、９１ｍｇ／ｋｇでの１日３回（ＴＩＤ）の注入で投与した。研究に用いたすべてのマウスに関して、１７日目、最終日に腫瘍成長抑制から効能を判定した。活性は、腫瘍／対照（Ｔ／Ｃ）すなわち、ビヒクル処置マウスに対する薬物処置マウスの１日目から１７日目までのパーセント平均腫瘍体積変化（ΔＴ）、またはＴ／Ｔ０として、１日目からの群平均腫瘍体積のパーセント減少で計算した。  図４に示すように、ＡＥＢ０７１単独療法の処置は、３%のＴ／Ｃ（ｐ＜０．０１）に至った。ＡＥＢ０７１療法に加えて、化合物Ｂを３．５ｍｇ／ｋｇで１日につき２回注入したら、−２２%のＴ−ＴＯを生じた（ｐ＜０．００１中央値活性、しかし、ＡＥＢ０７１単独に比べ、有意ではない）。化合物Ｂは、８４%のＴ／Ｃで、それ自体による活性を示さなかった。
【実施例５】
【０１３６】
生体内実験のための化合物の調製
実施例４に従った。
マウス
実施例４に従った。
腫瘍着床および測定
実施例４に従った。
【実施例６】
【０１３７】
生体内実験のための化合物の調製
実施例４に従った。
マウス
実施例４に従った。
腫瘍着床および測定
実施例４に従った。
【０１３８】
ＡＥＢ０７１単独療法は、投与期間中、完全に近い平均腫瘍停止をもたらしたが、組合せは、控えめな平均腫瘍減少を生じた。投与期間後の２週間、腫瘍は、ＡＥＢ０７１単独療法処置群において対照ペースで進行したが、組合せ群においては、よりゆっくりと進行した（図５）。
【０１３９】
図５は、７０日間まで追跡した、９２．１ヒト・ブドウ膜黒色腫ヌードマウス異種移植モデルにおける生体内腫瘍成長を表す。マウスは、２１日間薬剤投与を受けた。その後、処置を行わず、腫瘍成長をモニターした。投与期間後の２週間、腫瘍は、ＡＥＢ０７１単独療法処置群において対照ペースで進行したが、組合せ群においては、より遅い速度で進行した。群につき二つ以上の腫瘍が初期成長期間後に静止したので、腫瘍成長遅延は計算しなかった。しかし、腫瘍成長率の傾向は、ＡＥＢ０７１プラス化合物Ｂの組合せ腫瘍が、ＡＥＢ０７１単剤よりもゆっくりと成長することを示した。化合物Ｂ単剤処置の腫瘍は、効能が欠如しているため、監視しなかった。このデータは、化合物ＢとのＡＥＢ０７１の組合せが、いずれの単一薬剤と比べても、ブドウ膜黒色腫の生体内９２．１モデルにおいて、より大きな反応度を持つことを示した。
【０１４０】
図６は、９２．１ブドウ膜黒色腫モデルを用いるもう一つの生体内試験でも、化合物Ｂと組み合わせたＡＥＢ０７１の複数回投与の処置が有効だったことを示す。組合せの効果は、用量依存的に増加した。化合物Ｂと組み合わせてＡＥＢ０７１用量を増加させると、より大きな反応度が得られる。９２．１ヒト・ブドウ膜黒色腫ヌードマウス異種移植モデルにおいて、毎日二回３．５ｍｇ／ｋｇで投与される化合物Ｂと組み合わせて、ＡＥＢ０７１を、２１日間一日３回の薬品注入（ＴＩＤ）として、９０．９５、４５．５８、そして２２．７４ｍｇ／ｋｇ（８０、４０および２０ｍｇ／ｋｇの遊離塩基に等価）で投与した。２２日目に、腫瘍成長抑制から効能を判定した。活性は、腫瘍／対照（Ｔ／Ｃ）、すなわち、ビヒクル処置マウスに対する薬物処置マウスの１日目から２２日目までのパーセント平均腫瘍体積変化（ΔＴ）、またはＴ／Ｔ０として、１日目からの群平均腫瘍体積のパーセント減少で計算した。  図６に示すように、９０．９５ｍｇ／ｋｇでの単独療法ＡＥＢ０７１は、１８%のＴ／Ｃ（ｐ＜０．０５）に至った。４５．５および２２．７ｍｇ／ｋｇでの単独療法は、各々、５２%および９２%のＴ／Ｃに至ったが、有意ではない中央抑制である。用量９０．９５および４５．５８ｍｇ／ｋｇでのＡＥＢ０７１への、１日２回３．５ｍｇ／ｋｇでの化合物Ｂの投与の追加は、各々、−５２％および−１２％のＴ−Ｔ０を生じた（ｐ＜０．００１）。化合物Ｂは、５６%のＴ／Ｃで、この生体モデルにおいて、それ自体による活性を全く示さなかった。高用量での組合せは、四つの部分的退縮を生じた。
【０１４１】
結論
したがって、ＰＫＣおよびＭＥＫ併用抑制がブドウ膜黒色腫に相乗的に有効である、という実験証拠が提供されている。したがって、この組合せは、ＧＮＡＱあるいはＧＮＡ１１変異を発動させる設定に有益である。なぜなら、いずれの遺伝子における変異の発動も、ＰＫＣシグナリングへの依存に至るからである。これらの薬剤の併用は、生体外で抗増殖性であり、そして生体内で有効である。ブドウ膜黒色腫細胞系におけるＰＫＣ抑制は、ｐＭＡＲＣＫＳを減衰させるが、ｐＥＲＫ１／２レベルに対しては控え目な影響を及ぼす。単剤ＭＥＫ抑制はｐＥＲＫ１／２を防止できるが、ＭＥＫインヒビターでは、時間経過と共にｐＭＥＫ１／２レベルが誘起され、ｐＥＲＫ１／２の再活性化に至る。ＭＥＫおよびＰＫＣ抑制の組合せだけが、ＭＡＲＣＫＳ、ＥＲＫ１／２およびＭＥＫ１／２の継続的な減衰されたリン酸化を達成することができる。
【実施例７】
【０１４２】
これは、ＡＥＢ０７１と化合物Ｂとの組合せに関する多施設共同、多国間、非盲検の試験である。適格患者は、転移性ブドウ膜黒色腫と診断された患者である。試験には、二つの部分がある。フェーズＩｂは用量漸増試験であり、フェーズＩＩは、フェーズＩｂから得たＭＴＤ／ＲＰ２Ｄ｛ＭＴＤ（最大耐量）／ＲＰ２Ｄ（推薦フェーズ２用量）｝の無作為ニ群平行群間評価である。試験は、以下のようにオープンラベル（非盲検）になるようデザインされる。試験のフェーズＩｂ部では、すべての患者が、同じ用量群内に登録された他の患者と同じ用量の投与を受ける。フェーズＩＩ試験においてのみ、ＡＥＢ０７１および化合物Ｂの組合せＢＩＤ（１日２回）または４５ｍｇの化合物ＢのＢＩＤ（１日２回）に対するＭＴＤあるいはＲＰ２Ｄのいずれかの投与を受ける。
【０１４３】
フェーズＩｂおよびフェーズＩＩにおける評価のための臨床試験中の治療は、ＡＥＢ０７１および化合物Ｂ、またはフェーズＩＩにおける単剤としての化合物Ｂからなる。臨床試験中の治療は、体重または体表面積によるのではなく、固定用量として投与される。
【０１４４】
すべての患者は、２８日のスケジュール（１サイクル）で毎日治療を受け、サイクル間の中断はない。各々の患者は、効果がなくなるまで、または退薬を必要とする深刻な症状が出るまで、治療を続けてもよいし、臨床試験責任者の裁量で中止しても、あるいは同意を取り下げてもよい。
【０１４５】
フェーズＩｂは、併用療法のＭＴＤ（最大耐量）およびＲＰ２Ｄ（推薦フェーズ２用量）を決定するようにデザインされた用量漸増試験である。
【０１４６】
フェーズＩｂ試験では、すべての患者にＡＥＢ０７１および化合物Ｂを投与する。そして、３０ｍｇ用量の化合物Ｂと組み合わせてＡＥＢ０７１の用量を増加させることによって、安全性に関して組合せ用量を評価する。
【０１４７】
この試験のフェーズＩＩ部の目的は、腫瘍サイズの客観的な測定値を用いることにより病気の反応を評価すること、そして、さらに安全性および許容度を特徴づけることである。この評価を補助するため、患者は、ＡＥＢ０７１および化合物Ｂの組合せＢＩＤまたは４５ｍｇの化合物ＢのＢＩＤ（１日２回）に対するＭＴＤあるいはＲＰ２Ｄのいずれかのみを受けるよう、１：１の様式で中心的にランダム化される。
【０１４８】
ＡＥＢ０７１および化合物Ｂの両方を、各２８日サイクル中毎日、下表に明記された用量で、ＢＩＤ（１日２回）経口投与する。
【０１４９】
【表１】
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腫瘍評価がサイト・スタッフによって再吟味されている間も、薬は投与する。患者の症状が進行したことを発見した場合、治療はすぐに止める。
【図１】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図２Ｃ】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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