(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
サラシア属植物の根、幹、枝、茎又は葉の乾燥細断物の熱水抽出物を有効成分とする血管攣縮抑制剤。
【請求項２】
サラシア属植物が、サラシア・オブロンガ（Salacia oblonga）であることを特徴とする請求項１に記載の血管攣縮抑制剤。
【請求項３】
乾燥が天日乾燥であることを特徴とする請求項１又は２記載の血管攣縮抑制剤。
【請求項４】
熱水抽出が、乾燥細断物１００質量部に対して熱水１５００〜２５００質量部を使用することにより行われることを特徴とする請求項１〜３のいずれか記載の血管攣縮抑制剤。
【請求項５】
熱水抽出が、８５〜９５℃で２〜５時間行われることを特徴とする請求項１〜４のいずれか記載の血管攣縮抑制剤。
【請求項６】
脳血管攣縮抑制剤であることを特徴とする請求項１〜５のいずれかの血管攣縮抑制剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、サラシア属植物の根、幹、枝、茎及び葉の各部位に含まれる血管攣縮抑制剤に関し、より詳しくは、サラシア属植物の根、幹、枝、茎又は葉の乾燥細断物を熱水抽出することにより得られる血管攣縮抑制剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
心筋梗塞や脳梗塞は、心臓や脳などの臓器自体の機能障害が原因となり発症する訳ではなく、そこに分布する血管の異常によって血行が障害されることにより発症する「血管病」である。この血管病は、合計すると我が国死因の第２位を占め、２０１１年厚生労働省人口動態統計によると、がんと並び死因の約２６％にも及んでいる。いわゆる血管病の病因としては、二通りあるとされている。第一の病因は、動脈硬化であり、高血圧や喫煙などの危険因子によって長い年月を掛けて進行する。第二の病因は、血管攣縮である。
【０００３】
血管の収縮にはＣａ２＋濃度に依存した「正常収縮」と、Ｃａ２＋濃度に依存せずに血管平滑筋が収縮する「血管異常収縮（血管攣縮）」とが知られており、血圧維持等の血管の正常機能を担う正常収縮についてはその機構を含めかなりの部分が明らかになってきている。このため、脳梗塞、狭心症、心筋梗塞等の疾患に対しては、まず機構の明らかな正常収縮の阻害、特にＣａ２＋チャネルを阻害することによる治療法や治療薬が報告されている（例えば、特許文献１参照）。
【０００４】
しかしながら、脳梗塞、狭心症、心筋梗塞などの発症に関連し、重篤な症状を引き起こす上記血管攣縮については、正常収縮とは異なるメカニズムで起こるとされ、ほとんど詳細が明らかになっていない。血管攣縮を起こした患者は、前触れなしに突然血管平滑筋が異常収縮し、重篤な血行障害を引き起こす。危険因子の存在が不明瞭で“健康にみえる”患者にも突発することから、日本人の年間６万人が亡くなっている突然死の主因（２００９年日本心臓病学会発表）として恐れられている。現時点における前記疾患の治療法は、疾患への関連性が少ない正常収縮を抑制することにより血管の収縮を抑制するという、いわば見かけ上の治療法であり、本質的な治療法、すなわち血管攣縮の原因究明と対策が切望されている。
【０００５】
近年、血管攣縮抑制作用を有する組成物として、抗ＨＭＧＢ１モノクローナル抗体を有効成分とする脳血管攣縮抑制剤（例えば、特許文献２参照）や、脳血管攣縮抑制薬として用いることができるＲｈｏキナーゼ阻害剤を含有する医薬（例えば、特許文献３参照）や、脳血管攣縮抑制物質がニカルジピン、ニモジピン又はこれらの薬理学上許容される塩である、脳内埋め込み用製剤（例えば、特許文献４参照）や、シベレスタットを有効成分とする、血管異常収縮の抑制剤（例えば、特許文献５参照）が報告されている。
【０００６】
一方、本発明者らは、スフィンゴ脂質の一種であるスフィンゴシルフォスフォリルコリン(sphingosylphosphorylcholine、以下ＳＰＣと略す)が血管攣縮の原因分子であることを突き止めた。さらにＳＰＣはＲｈｏ ｋｉｎａｓｅの活性化を介してＣａ２＋濃度非依存的に血管平滑筋を収縮させるが、ＳＰＣはＦｙｎという別のタンパク質を活性化し、活性化されたＦｙｎが血管平滑筋細胞膜壁上のメンブレンラフトと呼ばれる構造に結合することによりＲｈｏ ｋｉｎａｓｅを活性化することが、血管攣縮における重要なメカニズムであることを明らかにしている（例えば、非特許文献１〜４参照）。また、魚類などから得られる不飽和脂肪酸の一種であるエイコサペンタエン酸（eicosapentaenoic acid、以下ＥＰＡと略す）を有効成分とし、血管攣縮に起因する血管病予防用に提供される食品組成物（例えば、特許文献６参照）を提案している。
【０００７】
他方、サラシア属植物は、主として南アジアに生育するニシキギ科のつる性多年生植物として知られている。これらのサラシア属植物は、インドやスリランカの伝統医学アーユルヴェーダにおいて根や幹を茶として飲むことでダイエット等に利用されてきたが、近年になって、当該植物の根皮に含まれるサラシノールやコタラノールがα−グルコシダーゼに対する強力な阻害活性を有することが確認され、これらの化合物を含有する血糖値上昇抑制用医薬組成物（例えば、特許文献７参照）が報告されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】特開２００４−４３３７４号公報
【特許文献２】特開２００７−３０８４３６号公報
【特許文献３】特開２００８−０６９１７４号公報
【特許文献４】特開２０１１−０８８９３１号公報
【特許文献５】特開２００８−２１４３０９号公報
【特許文献６】特開２００７−１１２７８４号公報
【特許文献７】特開２０１０−２０２５９７号公報
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】月刊バイオインダストリー２００３年１１月号 「エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）による血管攣縮の予防効果」
【非特許文献２】Nakao F, Kobayashi S.et al. (2002) Circ.Res. 91：953-960
【非特許文献３】Shirao S, Kobayashi S.et al. (2002) Circ.Res. 91：112-119
【非特許文献４】Somlyo A.V. (2002) Circ.Res. 91：83-84
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
血管攣縮の特効薬成分として唯一広く実用化されている上記ＥＰＡは、魚臭がする、海洋汚染などの影響により供給量が不安定である、油溶性の脂肪酸を血液に注射により投与することは困難である点が問題とされている。
【００１１】
本発明の課題は、不快な臭いを有さず、安定供給が可能であって、水溶性の血管攣縮抑制剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明者らは、近年農業分野だけでなく、医学分野においても注目されている植物由来成分に着目した。植物由来成分は、魚由来のＥＰＡとは異なり、風味をコントロールしやすく、安定供給が可能であり、また、熱水抽出等を行うことにより得られる水溶性成分は、即効性の注射薬として用いることができ、突然死を阻止することができる。
【００１３】
本発明者らは、血管攣縮抑制剤を標的とし、様々な植物から抽出液を調製し、スクリーニングを行ってきたが、サラシア・オブロンガの根や、幹の熱水抽出物の分画物が血管異常収縮（血管攣縮）を強力に抑制し、血圧や血流を維持している血管の正常収縮に対しては、わずかな抑制作用しか示さないことを確認した。さらに、根、幹、枝（茎）及び葉のそれぞれに由来する熱水抽出物のいずれもが、血管異常収縮（血管攣縮）を強く抑制する作用を有することを見いだした。さらに、サラシア属植物に含まれ、糖尿病抑制成分として公知であるサラシノールとコタラノールは、血管異常収縮（血管攣縮）の抑制作用を有さないことを確認した。本発明はこれら知見に基づき完成するに至ったものである。
【００１４】
すなわち、本発明は以下のとおりである。
［１］サラシア属植物の根、幹、枝、茎及び葉の各部位に含まれ、サラシア属植物の根、幹、枝、茎又は葉の乾燥細断物を熱水抽出することにより得られる血管攣縮抑制剤。
［２］サラシア属植物が、サラシア・オブロンガ（Salacia oblonga）であることを特徴とする上記［１］に記載の血管攣縮抑制剤。
［３］乾燥が天日乾燥であることを特徴とする上記［１］又は［２］記載の血管攣縮抑制剤。
［４］熱水抽出が、乾燥細断物１００質量部に対して熱水１５００〜２５００質量部を使用することにより行われることを特徴とする上記［１］〜［３］のいずれか記載の血管攣縮抑制剤。
［５］熱水抽出が、８５〜９５℃で２〜５時間行われることを特徴とする上記［１］〜［４］のいずれか記載の血管攣縮抑制剤。
［６］脳血管攣縮抑制剤であることを特徴とする上記［１］〜［５］のいずれかの血管攣縮抑制剤。
また本発明の他の態様としては、［７］サラシア属植物の根、幹、枝、茎及び葉の各部位に含まれ、サラシア属植物の根、幹、枝、茎又は葉の乾燥細断物の熱水抽出物の有効量を対象に投与することを特徴とする血管攣縮の抑制方法や、［８］血管攣縮を抑制するために用いるための、サラシア属植物の根、幹、枝、茎及び葉の各部位に含まれ、サラシア属植物の根、幹、枝、茎又は葉の乾燥細断物の熱水抽出物や、［９］サラシア属植物の根、幹、枝、茎及び葉の各部位に含まれ、サラシア属植物の根、幹、枝、茎又は葉の乾燥細断物の熱水抽出物の、血管攣縮抑制剤の調製のための使用に関する。
【発明の効果】
【００１５】
本発明の血管攣縮抑制剤は、食用植物から抽出することができるため安全性が高く、正常収縮作用を殆ど抑制しないという点で血管攣縮剤として優れた効果を奏する。また、本発明の血管攣縮抑制剤は、経口投与のみならず、即効性の注射薬として用いることができる点で実用性が高い。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】サラシア抽出物による、（ａ）血管の異常収縮（攣縮）抑制、及び（ｂ）Ｃａ２＋濃度に依存した血管の正常収縮抑制の概略説明図である。
【図２】サラシア・オブロンガの根、幹、枝と茎、葉の全ての部位の熱水抽出物による、血管の異常収縮（攣縮）と正常収縮の抑制効果を示すグラフである。縦軸が抑制率を示す。
【図３】サラシア・オブロンガの幹熱水抽出物による、血管の異常収縮（攣縮）と正常収縮の抑制効果を示すグラフである。縦軸が抑制率を示す。
【図４】サラシア・オブロンガ根熱水抽出物のカラムクロマトグラフィー法による分離処理を行った結果を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
本発明の血管攣縮抑制剤としては、サラシア属植物の根、幹、枝、茎及び葉の各部位に含まれ、サラシア属植物の根、幹、枝、茎及び／又は葉の乾燥細断物を熱水抽出することにより得られる血管攣縮抑制剤であれば特に制限されず、血管攣縮とは、細胞質Ｃａ２＋濃度に依存しない血管平滑筋の異常収縮を意味し、Ｃａ２＋濃度に依存する「正常収縮」に該当しない収縮をいう。
【００１８】
上記サラシア属植物としては、主としてスリランカやインドや東南アジア地域に自生するニシキギ科サラシア属の植物であれば特に制限されず、サラシア・オブロンガ（Salacia oblonga）、サラシア・レティキュラータ（S. reticulata）、サラシア・キネンシス（S. chinensis）、サラシア・プリノイデス（S. prinoides）、サラシア・ラティフォリア（S. latifolia）、サラシア・ブルノニアーナ（S. burunoniana）、サラシア・グランディフローラ（S. grandiflora）、サラシア・マクロスペルマ（S. macrosperma)を例示することができる、また、上記サラシア属植物は、一種単独で又は二種以上を混合して用いることもできる。
【００１９】
上記乾燥処理の方法としては、伐採収穫や採取後の上記サラシア属植物の根、幹、枝、茎、葉、又はこれらの二種以上の混合物の水分含有率を低下させ、保存や輸送に適したサラシア属植物乾燥物を調製するための処理方法であれば特に制限されず、太陽の光を利用してサラシア属植物を乾燥させる天日乾燥；風通しを確保した室内に放置することによりサラシア属植物を乾燥させる自然乾燥；送風設備を有する乾燥室内で、例えば４０〜１００℃の送風下にサラシア属植物を曝す加熱送風乾燥、又は常温の送風下にサラシア属植物を曝す常温送風乾燥；真空乾燥；あるいはマイクロ波照射による乾燥；等による処理方法を例示することができるが、コスト的に天日乾燥が好ましい。
【００２０】
上記乾燥細断物の調製方法としては、上記サラシア属植物乾燥物を熱水抽出に適したサイズに調製する方法であれば特に制限されず、例えば、手作業による細断や、粉砕機による細断や、粗粉砕機により粗粉砕処理を行った後、微粉砕機で微粉砕処理を行うことによる細断や、微粉砕処理後に１０メッシュ程度の篩を通過させることによる細断等により、サラシア属植物の根、幹、枝、茎又は葉の乾燥細断物を調製する方法を挙げることができる。細断物のブロック切片としては、１〜１００ｍｍ、好ましくは１〜１０ｍｍ、中でも６ｍｍを挙げることができる。
【００２１】
前記サラシア属の植物の熱水抽出を行う方法としては、上記サラシア属植物の根、幹、枝、茎又は葉の乾燥細断物を熱水に浸漬させることにより、サラシア属植物の根、幹、枝、茎及び葉の各部位に含まれる水溶性成分を抽出することができる方法であれば特に制限されず、抽出温度としては、１気圧又は略１気圧においては、０℃〜１００℃、好ましくは６０℃〜１００℃、より好ましくは７０℃〜９８℃、さらに好ましくは８５℃〜９５℃の熱水を挙げることができ、加圧下では、１００℃以上、好ましくは１００℃〜２００℃を挙げることができ、必要に応じ、撹拌処理や加熱還流を併用することもできる。
【００２２】
上記熱水抽出を行う処理時間としては、血管攣縮抑制作用を有する有効成分が効率よく抽出できる条件であれば特に限定されず、３０分〜４８時間、好ましくは１〜２４時間、より好ましくは１０〜２０時間、さらに好ましくは２〜５時間を挙げることができる。また、１回目の抽出を行った残渣を用いて２回目の抽出を行い２回目の二番液と１回目の一番液とを合わせて抽出液とすることもでき、この場合の抽出時間としては、１回目、２回目共に、１５分〜２４時間、好ましくは３０分〜１２時間、より好ましくは１〜１０時間、中でも２〜５時間を挙げることができる。
【００２３】
上記抽出において用いられる抽出水としては、水道水、井戸水、蒸留水、脱イオン水を挙げることができるが、蒸留水や脱イオン水が好ましい。また、水に代えてアルコール水溶液を用いることもできる。
【００２４】
上記水抽出におけるサラシア属植物乾燥細断物の質量に対する水（熱水）の質量比としては、水溶性成分を効率よく抽出できる質量比であれば特に限定されず、例えば、乾燥細断物１００質量部に対して熱水５００〜５０００質量部、好ましくは熱水１０００〜３０００質量部、より好ましくは熱水１５００〜２５００質量部を挙げることができ、熱水抽出後、上記抽出用熱水から、熱水抽出不溶物を濾過又は遠心分離によって除去することにより、サラシア属植物熱水抽出物を取得することができる。さらに、上記サラシア属植物熱水抽出物は、噴霧乾燥等により水分を除去することによりサラシア属植物乾燥エキス粉末として用いることもできる。
【００２５】
上記サラシア属植物熱水抽出物は、そのままで血管攣縮抑制剤として用いることができるが、当該抽出物を、さらに適当な精製手段、例えばカラムクロマトグラフィー、順相クロマトグラフィー法、逆相クロマトグラフィー法、高速液体クロマトグラフィー法、遠心液体クロマトグラフィー、薄層クロマトグラフィー、サイズ排除クロマトグラフィー等により血管攣縮抑制活性の高い画分に分画して用いることもできる。血管攣縮抑制活性の高い画分としては、２５〜１００００の分子量、好ましくは５０〜４０００の分子量、より好ましくは１００〜３０００の分子量、さらに好ましくは１００〜２０００の分子量からなる画分を好適に例示することができる。
【００２６】
本発明において、血管異常収縮（血管攣縮）の抑制率は、正常収縮の抑制率と同様の方法で測定することができ、例えば、マグヌス管中に、動脈血管中膜条片をオーガンチャンバーに懸垂して一端を固定し、もう一端をトランスデューサーに連結した後、マグヌス管にＳＰＣを加えて人為的に血管異常収縮（血管攣縮）を起こさせ、別のマグヌス管に高カリウム溶液を加えて脱分極による正常収縮（Ｃａ２＋濃度依存性収縮）を起こさせ、張力がプラトーになり安定したところで各被検試料を添加することにより、血管異常収縮（血管攣縮）や正常収縮の抑制率を測定する方法を挙げることができる。
【００２７】
本発明の血管攣縮抑制剤の血管攣縮抑制能としては、上記血管異常収縮（血管攣縮）の抑制率が５０％以上であることを挙げることができ、６０％以上が好ましく、７０％以上がより好ましく、８０％以上がさらに好ましく、９０％以上が特に好ましく、かつ、血管の正常収縮の抑制率が６０％以下であり、５０％以下がより好ましく、４０％以下がさらに好ましく、３０％以下がさらにより好ましく、２０％以下が特に好ましく、１０％以下であることが非常に好ましい。
【００２８】
本発明の血管攣縮抑制剤の理想形としては、例えば血管異常収縮（血管攣縮）の抑制率が７５％以上であり、正常収縮に対する抑制率が０である血管攣縮抑制剤を挙げることができ、血管攣縮抑制剤を添加した場合の張力の変化の理想形の例を図１に示す。図１（ａ）は、異常収縮（攣縮）している血管に血管攣縮抑制剤を投与した場合の張力の変化の理想形を示すグラフであり、図１（ｂ）は、正常収縮している血管に血管攣縮抑制剤を投与した場合の張力の変化の理想形を示すグラフである。
【００２９】
本発明の血管攣縮抑制剤は、脳梗塞防止作用、心筋梗塞防止作用、くも膜下出血後等における脳血管攣縮抑制作用、狭心症予防作用などを有することから、脳梗塞関連疾患治療剤、心筋梗塞関連疾患治療剤、脳血管攣縮抑制剤等の医薬品として、また、血管攣縮が関与する病態の予防剤や症状改善剤として、さらに血管攣縮が関与する病態の予防・改善作用を有するサプリメントを生産するための薬理組成物素材として、有利に用いることができる。
【００３０】
本発明の血管攣縮抑制剤の投与形態としては、溶液、乳剤、懸濁液、顆粒等の剤型を経口により投与する形態や、溶液等の剤型を皮下注、静注、筋注、腹腔内注等により非経口的に投与する形態を挙げることができるが、溶液等を静注する投与形態を特に好適に例示することができる。
【００３１】
本発明の血管攣縮抑制剤の投与量としては、必要とする対象において血管攣縮が関与する病態を改善することができる量であれば特に制限されず、例えば、上記サラシア属植物乾燥細断物１ｋｇに対し１００Ｌ、好ましくは５０Ｌ、さらに好ましくは２０Ｌの熱水を用いて抽出した熱水抽出物を投与する場合、１日あたり、０．１〜１０００ｍｇ／ｋｇ体重、好ましくは１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重の範囲で投与することができるが、症状、性別、年齢等に応じて、摂取量は適宜調整することができ、上記投与量は、上記血管攣縮が関与する病態を予防するための投与量にも便宜上適用することができる。
【００３２】
本発明の血管攣縮抑制剤を医薬品やサプリメントとして用いる場合は、薬学的に許容される通常の担体、結合剤、安定化剤、賦形剤、希釈剤、ｐＨ緩衝剤、崩壊剤、可溶化剤、溶解補助剤、等張剤などの各種調剤用配合成分を添加することもでき、血管攣縮が関与する病態の他の治療薬と併用することもできる。
【００３３】
以下、実施例により本発明をより具体的に説明するが、本発明の技術的範囲はこれらの例示に限定されるものではない。
【００３４】
［実施例１］
［サラシア属植物熱水抽出物の調製］
サラシア属植物としては、サラシア・オブロンガを使用した。サラシア・オブロンガからの熱水抽出物は、山口大学、丸善製薬株式会社の双方において調製した。山口大学では、サラシア・オブロンガ各部位［根、幹、枝、茎、葉］を６ｍｍブロック切片に粗切した乾燥細断物２００ｇに対し水を２Ｌ加え、９０℃で２０時間抽出した。丸善製薬株式会社では、サラシア・オブロンガ幹を６ｍｍブロック切片に粗切した乾燥細断物１ｋｇに対し水を１０Ｌ加え９０℃で１時間抽出し、濾過によって残渣と抽出液（一番液）に分け、残渣を更に１０Ｌの水を加え、９０℃で１時間の抽出後、濾過してできた抽出液（二番液）を先の抽出液（一番液）と合わせ全体の抽出液とした。
【００３５】
上記、丸善株式会社での熱水抽出により得られたサラシア幹熱水抽出物、サラシア枝茎熱水抽出物、サラシア根熱水抽出物、サラシア葉熱水抽出物を被検試料として血管攣縮抑制実験を行った。
【００３６】
［実施例２］
［血管攣縮抑制実験］
血管収縮実験はブタの冠状動脈（前下行枝）を用いて８チャンネル収縮実験装置で実施した。食肉処理場にて処理されたブタの心臓より、取得したブタ冠状動脈（左冠状動脈前下行枝）を主幹分岐部から１ｃｍ遠位で約３ｃｍ切り取り、血管の周りの脂肪を取り除いた後、外膜を取り除き、綿棒で内皮を除去し、剃刀を用いてブタ冠状動脈中膜条片幅１ｍｍ×長さ３〜４ｍｍを作製した。
【００３７】
マグヌス管中に細胞外液のイオン組成と類似する組成を有するＫｒｅｂｓ液（１２３ｍＭ ＮａＣｌ，４．７ｍＭ ＫＣｌ，１５．５ｍＭ ＮａＨＣＯ３，１．２ｍＭ ＭｇＣｌ２，１．２５ｍＭ ＣａＣｌ２，１１．５ｍＭ Ｄ−ｇｌｕｃｏｓｅ）を満たし、上記ブタ冠状動脈血管中膜条片を５ｍＬのオーガンチャンバーに懸垂して一端を固定し、もう一端をトランスデューサー（張力検知器）（ＴＢ−６１２Ｔ、日本光電社製）に連結して等尺性張力の測定を行い、血管の張力を評価した。
【００３８】
マグヌス管に３０μＭのＳＰＣを加えて異常収縮（攣縮）を起こさせ、別のマグヌス管に４０ｍＭの高カリウム溶液を加えて脱分極による正常収縮（Ｃａ２＋濃度依存性収縮）を起こさせ、ともに張力がプラトーになり安定したところで、前記各被検試料を終濃度０．５ｍｇ／ｍＬとなるように、ＳＰＣを加えたマグヌス管とカリウム溶液を加えたマグヌス管とに添加して血管収縮抑制効果を比較した。結果を図２に示す。
【００３９】
（結果）
図２から明らかなとおり、サラシア・オブロンガの根、幹、枝、茎、葉の全ての部位の熱水抽出物において血管異常収縮抑制効果が確認できた。サラシア・オブロンガの幹、枝、茎の熱水抽出物は、根の熱水抽出物と比較してより高い異常収縮抑制効果を示し、正常収縮抑制効果は根の熱水抽出物と同等かそれ以下を示した。サラシア・オブロンガの葉の熱水抽出物については、異常収縮抑制効果は他の部位の熱水抽出物よりもやや低かったが、正常収縮に対しては非常に低い抑制効果を示した。サラシア葉抽出物は、異常収縮を抑制し正常収縮には影響を与えない物質を含有している可能性が高いと判断したが、サラシア属植物の葉は、一定の品質を保った原料の確保が困難という問題があるため、原料が確保しやすく比較的優れた値を示したサラシア幹熱水抽出物を用いて引き続き実験を行った。
【００４０】
［実施例３］
［血管攣縮抑制実験］
サラシア・オブロンガの幹の乾燥細断物からの熱水抽出処理と、該サラシア幹熱水抽出物のカラムクロマトグラフィー法によるカラムを用いた分離処理とを丸善製薬株式会社に委託した。ダイアイオンＨＰ２０（三菱化学株式会社）を充填したオープンカラムに、サラシア幹熱水抽出物を超純水で溶解、調製したサンプルを添加し、通液・水洗部、３０％エタノール溶出部、５０％エタノール溶出部、１００％エタノール溶出部に分離した。通液・水洗部をさらに分子量分画を行うことができる親水性ビニルポリマーＴｏｙｏｐｅａｒｌ ＨＷ-４０Ｃ（東ソー株式会社製）を使用し、フラクション１〜６に分離した。得られたサラシア幹熱水抽出物の各画分を用いて、上記実施例２と同様の血管収縮実験を行った結果を図３に示す。
【００４１】
（結果）
フラクション１〜３は、他のフラクション（フラクション４〜６）と比較して、異常収縮に対して高い抑制効果を示し、かつ、正常収縮に対して非常に低い抑制効果を示した。これらのフラクションは、分子量が１５０〜２０００程度の化合物を主として含み、他のフラクションと比較して極性が高く、水溶性画分であるため、有効成分も水溶性である可能性が高いといえる。エタノール溶出部は、異常収縮に対して高い抑制効果を示すものの、エタノール濃度依存的に、正常収縮に対しても高い抑制効果を示した。
【００４２】
［実施例４］
［血管攣縮抑制実験］
実施例１で調製したサラシア・オブロンガ根熱水抽出物のカラムクロマトグラフィー法によるカラムを用いた分離処理を山口大学にて行った。ダイアイオンＨＰ２０（三菱化学株式会社）を充填したオープンカラムに、抽出物を超純水で、約１００ｍｇ／ｍＬに調整したサンプル３０ｍＬを添加し、水分画(色調の違いよりフラクション１と２に分離した)とメタノール分画(色調の違いよりフラクション３、４、及び５に分離した。得られたサラシア根熱水抽出物の各画分を用いて、上記実施例２と同様の血管収縮実験を行った。
【００４３】
（結果）フラクション１〜５は、全て異常収縮に対して高い抑制効果を示した。その中でもフラクション２は、正常収縮に対して全く影響を与えることはなく、強力に異常収縮抑制効果を示した。フラクション２は、水溶性画分であるため、有効成分も水溶性である可能性が高いといえる。フラクション２の実験結果を図４に示す。
【産業上の利用可能性】
【００４４】
本発明の血管攣縮抑制剤は、静脈注射による投与が可能であり、脳血管攣縮等の重篤な血管疾病の即効性を有する治療剤や予防剤として医薬品の分野で有用であり、個人の老後の健康的な生活に資するばかりでなく、高齢化社会の医療費削減への貢献が期待できる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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