(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化１】
0006275241.tif 000033
の化合物またはその薬学的に許容される溶媒和物であって、式中、
Ｒ１はＨまたはＦであり、
Ｒ１’はＨであり、
Ｒ２はＨ、ＦまたはＣｌであり、
Ｒ２’はＨまたはＦであり、
Ｒ３はＦまたはＣｌであり、
Ｒ４はメチル、トリフルオロメチル、ジフルオロメチルまたはフルオロメチルであり、
Ｘ１がＮかつＸ２がＳであるか、あるいはＸ１がＳかつＸ２がＮであり、
【化２】
0006275241.tif 000034
はＸ１とＸ２に応じて単結合または二重結合を表す、
化合物またはその薬学的に許容される溶媒和物。
【請求項２】
式Ｉａ
【化３】
0006275241.tif 000035
であって、式中、
Ｒ１はＨまたはＦであり、
Ｒ１’はＨであり、
Ｒ２はＨ、ＦまたはＣｌであり、
Ｒ２’はＨまたはＦであり、
Ｒ３はＦまたはＣｌであり、
Ｒ４はメチル、トリフルオロメチル、ジフルオロメチルまたはフルオロメチルである、
式Ｉａを有する、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容される溶媒和物。
【請求項３】
式Ｉａ−１：
【化４】
0006275241.tif 000036
であって、式中、
Ｒ３はＦまたはＣｌであり、
Ｒ４はメチル、トリフルオロメチル、ジフルオロメチルまたはフルオロメチルである、
式Ｉａ−１を有する、請求項１または請求項２に記載の化合物またはその薬学的に許容される溶媒和物。
【請求項４】
式Ｉａ−２：
【化５】
0006275241.tif 000037
であって、式中、
Ｒ１はＨまたはＦであり、
Ｒ１’はＨであり、
Ｒ２はＨ、ＦまたはＣｌであり、
Ｒ２’はＨまたはＦであり、
Ｒ３はＦまたはＣｌである、
式Ｉａ−２を有する、請求項１または請求項２に記載の化合物またはその薬学的に許容される溶媒和物。
【請求項５】
式Ｉｂ：
【化６】
0006275241.tif 000038
であって、式中、
Ｒ１はＨまたはＦであり、
Ｒ１’はＨであり、
Ｒ２はＨ、ＦまたはＣｌであり、
Ｒ２’はＨまたはＦであり、
Ｒ３はＦまたはＣｌであり、
Ｒ４はメチル、トリフルオロメチル、ジフルオロメチルまたはフルオロメチルである、
式Ｉｂを有する、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容される溶媒和物。
【請求項６】
【表１】
0006275241.tif 000039
0006275241.tif 000040
0006275241.tif 000041
から構成される群から選択される、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容される溶媒和物。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物またはその薬学的に許容される溶媒和物と、少なくとも１種の薬学的に許容される担体、希釈剤、賦形剤および／または補助剤と、を含む医薬組成物。
【請求項８】
請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物またはその薬学的に許容される溶媒和物を含む、薬剤。
【請求項９】
鬱病、不安症、精神病、統合失調症、精神病性障害、双極性障害、認知障害、パーキンソン病、アルツハイマー病、注意欠陥多動性障害（ＡＤＨＤ）、疼痛、痙攣、肥満症、過敏性腸症候群（ＩＢＳ）、炎症性腸疾患、炎症性疾患、嘔吐、子癇前症、慢性閉塞性肺疾患、喘息、気道過敏症、気管支収縮、咳、気道関連疾患、尿失禁、生殖障害、避妊および性ホルモン依存性疾患、良性前立腺肥大（ＢＰＨ）、前立腺肥大、転移性前立腺癌、精巣癌、乳癌、卵巣癌、アンドロゲン依存性座瘡、男性型禿頭症、子宮内膜症、思春期異常、子宮線維症、子宮類線維腫、子宮平滑筋腫、ホルモン依存性癌、アンドロゲン過剰症、多毛症、男性化、多嚢胞性卵巣症候群（ＰＣＯＳ）、月経前不快気分障害（ＰＭＤＤ）、ＨＡＩＲ−ＡＮ症候群（アンドロゲン過剰症、インスリン抵抗性および黒色表皮腫）、卵巣の卵胞膜細胞増殖（卵巣間質における黄体化卵胞膜細胞の過形成を伴うＨＡＩＲ−ＡＮ）、卵胞成熟停止、閉鎖症、無排卵、月経困難症、機能不全性子宮出血、不妊症、アンドロゲン産生腫瘍（男性化卵巣腫瘍もしくは男性化副腎腫瘍）、月経過多または腺筋症の治療および／または予防に使用するための請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物またはその薬学的に許容される溶媒和物を含む医薬組成物。
【請求項１０】
ホットフラッシュの治療および／または予防に使用するための請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物またはその薬学的に許容される溶媒和物を含む医薬組成物。
【請求項１１】
血中ＬＨレベルの低下剤としての使用のための請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物またはその薬学的に許容される溶媒和物を含む医薬組成物。
【請求項１２】
請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物またはその薬学的に許容される溶媒和物の製造方法であって、
ａ）式（ｉ）
【化７】
0006275241.tif 000042
であって、式中、ＰＧは、Ｂｏｃ、ＤＭＢおよびＰＭＢから選択される保護基を表す、式（ｉ）の化合物を
式（ｉｉ）
【化８】
0006275241.tif 000043
であって、式中、
Ｒ４’は請求項１で定義されるＲ４、またはＨであり、
Ｘ１およびＸ２は請求項１で定義した通りであり、
【化９】
0006275241.tif 000044
はＸ１とＸ２に応じて単結合または二重結合を表す、
式（ｉｉ）の化合物と反応させて、
式（ｉｉｉ）
【化１０】
0006275241.tif 000045
であって、
式中、ＰＧ，Ｒ４’、Ｘ１およびＸ２は上記で定義した通りであり、
【化１１】
0006275241.tif 000046
はＸ１とＸ２に応じて単結合または二重結合を表す、
式（ｉｉｉ）の化合物を得る工程と、
ｂ）式（ｉｖ）
【化１２】
0006275241.tif 000047
であって、式中、Ｒ４’、Ｘ１およびＸ２は上記で定義した通りであり、
【化１３】
0006275241.tif 000048
はＸ１とＸ２に応じて単結合または二重結合を表す、
式（ｉｖ）の化合物をもたらすよう、式（ｉｉｉ）の化合物を脱保護する工程と、
ｃ）Ｒ４’がＨの場合、Ｃ−Ｈの直接的トリフルオロメチル化あるいはジフルオロメチル化によってトリフルオロメチルまたはジフルオロメチル基を導入して、式（ｖ）
【化１４】
0006275241.tif 000049
であって、式中、Ｘ１およびＸ２は上に定義した通りであり、Ｒ４はトリフルオロメチルまたはジフルオロメチルであり、
【化１５】
0006275241.tif 000050
はＸ１とＸ２に応じて単結合または二重結合を表す、
式（ｖ）の化合物に導く工程と、
ｄ）式（ｖｉ）
【化１６】
0006275241.tif 000051
であって、式中、Ｒ１、Ｒ１’、Ｒ２、Ｒ２’およびＲ３は請求項１に定義した通りである、
式（ｖｉ）の化合物を用いて、Ｒ４’がＨではない式（ｉｖ）の化合物、あるいは式（ｖ）の化合物、をＮ−アシル化し、請求項１〜６のいずれか１項に記載の式Ｉの化合物を得る工程と、
を含むことを特徴とする、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ニューロキニン−３受容体（ＮＫ−３）に対する選択的拮抗薬であり、かつ特に広範囲な中枢神経系（ＣＮＳ）および末梢の疾患または障害の治療および／または予防において治療用化合物として有用な、新規なＮ−アシル−（３位置換）−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン、それらの薬学的に許容される溶媒和物に関する。
【背景技術】
【０００２】
タキキニン受容体は、「タキキニン」と総称されるサブスタンスＰ（ＳＰ）、ニューロキニンＡ（ＮＫＡ）およびニューロキニンＢ（ＮＫＢ）を含む構造的に関連するペプチドファミリーの標的である。タキキニンは、中枢神経系（ＣＮＳ）および末梢組織で合成され、そこで様々な生物学的活性を発揮する。ニューロキニン−１（ＮＫ−１）、ニューロキニン−２（ＮＫ−２）およびニューロキニン−３（ＮＫ−３）受容体と称される３種類のタキキニン受容体が知られている。タキキニン受容体は、ロドプシン様七回膜貫通型Ｇタンパク質共役受容体に属する。ＳＰはＮＫ−１受容体に対して、ＮＫＡはＮＫ−２受容体に対して、ＮＫＢはＮＫ−３受容体に対して最も高い親和性を有する内因性リガンドであると考えられているが、これらのリガンド間には交差反応性が存在する。ＮＫ−１、ＮＫ−２およびＮＫ−３受容体は、異なる種で同定されている。ＮＫ−１およびＮＫ−２受容体は多種多様な末梢組織で発現し、ＮＫ−１受容体はＣＮＳでも発現するが、ＮＫ−３受容体は、主にＣＮＳで発現する。
【０００３】
ニューロキニン受容体は、ＣＮＳおよび末梢における興奮性神経シグナル（例えば、疼痛）の伝達、平滑筋収縮活動の調節、免疫反応および炎症反応の調節、末梢血管系の拡張による降圧作用の誘導ならびに内分泌腺および外分泌腺分泌の刺激などの様々なタキキニン刺激性生物学的作用を媒介する。
【０００４】
ＣＮＳにおいて、ＮＫ−３受容体は、内側前頭前皮質、海馬、視床および扁桃体などの領域で発現する。さらに、ＮＫ−３受容体は、ドーパミン作動性ニューロンで発現する。ＮＫ−３受容体の活性化は、ドーパミン、アセチルコリン、およびセロトニン放出を調節することが知られており、これは、精神病性障害、不安症、鬱病、統合失調症ならびに肥満症、疼痛または炎症などの様々な障害の治療のためのＮＫ−３受容体調節剤の治療的有用性を示唆している(Giardinaら. Exp. Opinion Ther. Patents (2000), 10(6), 939-960、 Current Opinion in Investigational Drugs, 2001, 2(7), 950-956 およびDawson and Smith, Current Pharmaceutical Design, 2010, 16, 344-357)。
【０００５】
統合失調症はサブグループに分類される。妄想型は、妄想および幻覚が存在するが、思考障害、解体した行動および感情の平板化(affective flattening)が存在しないことを特徴とする。国際疾病分類（ＩＣＤ）では「破瓜型統合失調症」とも称される解体型では、思考障害および平板な感情が共に存在する。緊張型では、顕著な精神運動障害が明白であり、症状としては緊張病性昏迷および蝋屈症が挙げられる。鑑別不能型では、精神病の症状は存在するが、妄想型、解体型または緊張型の判断基準は満たされていない。統合失調症の症状は、通常、３つの広義のカテゴリー、すなわち、陽性症状、陰性症状および認知的症状で現れる。陽性症状は、幻覚および妄想などの正常な経験の「過剰」を表す症状である。陰性症状は、患者が、快感消失および社会的交流の欠如などの正常な経験の欠如に悩まされている症状である。認知的症状は、持続的注意力の欠如および意思決定の欠如などの統合失調症患者における認識機能障害に関連する。現在の抗精神病薬（ＡＰＤ）は、陽性症状の治療では、かなりの成功を収めているが、陰性症状および認知的症状ではあまり上手く行っていない。それに反して、ＮＫ−３拮抗薬は、統合失調症患者における陽性症状および陰性症状の両方を臨床的に改善させ(Meltzerら, Am. J. Psychiatry, 161, 975-984, 2004)、かつ統合失調症患者の認知行動を回復させる (Curr. Opion. Invest. Drug, 6, 717-721, 2005)ことが分かっている。
【０００６】
ラットにおける形態学的研究により、ＮＫＢニューロンと視床下部の生殖軸との推定相互作用の証拠が提供されている(Krajewskiら, J. Comp. Neurol., 2005, 489(3),372-386)。弓状核ニューロンでは、ＮＫＢの発現は、性腺刺激ホルモン放出ホルモン（ＧｎＲＨ）分泌に対するプロゲステロンフィードバックに関与するエストロゲン受容体αおよびダイノルフィンと共局在化している(Burke ら., J. Comp. Neurol., 498(5), 712-726, 2006、 Goodman ら., Endocrinology, 145, 2959-2967, 2004)。さらに、ＮＫ−３受容体は、ＧｎＲＨ放出の制御に関与するニューロンにおいて視床下部弓状核で高度に発現する。
【０００７】
国際公開第００／４３００８号には、特異的ＮＫ−３受容体拮抗薬によりゴナドトロピンおよび／またはアンドロゲン産生を抑制する方法が開示されている。より詳細には、国際公開第００／４３００８号は、ＮＫ−３受容体拮抗薬を投与して黄体形成ホルモン（ＬＨ）の血中レベルを低下させることに関する。ゴナドトロピンの抑制と同時に、あるいはその代わりとして、国際公開第００／４３００８号は、ＮＫ−３受容体拮抗薬によるアンドロゲン産生の抑制にも関する。最近では、ＮＫＢは、弓状核内のキスペプチンニューロンに対して自己シナプス性に（ａｕｔｏｓｙｎａｐｔｉｃａｌｌｙ）作用して、キスペプチンのパルス状分泌を同期および形成し、かつ正中隆起内の線維からＧｎＲＨの放出を促進すると仮定されている(Navarroら, J. of Neuroscience, 23, 2009 - pp11859-11866)。これらの全ての知見は、性ホルモン依存性疾患に対するＮＫ−３受容体調節剤の治療的有用性を示唆している。
【０００８】
ＮＫ−３受容体はまた、ヒトのＳ状結腸の腸筋層間および粘膜下神経叢、並びに胃底内において認められるが(Dassetら, Gastroenterol., 2002, 122 (Suppl 1), Abstract M1033)、特に腸筋層内在一次求心性ニューロン(ＩＰＡＮｓ)における発現が注目されている(Lomax and Furness, Cell Tissue Res, 2000, 302, 59-3)。ＩＰＡＮｓの強い刺激は、腸管の運動と腸管の感受性のパターンを変える。ＮＫ−３受容体の活性化は、ＩＰＡＮｓの活動電位の電圧閾値を変化させると共に、持続性のプラトー電位の生成(Copelら, J Physiol, 2009, 587, 1461-1479)を促進して、機械的および化学的刺激に対してこれらのニューロンを感作して、腸管の運動性および分泌に影響を及ぼし得ることが、電気生理学実験によって示されている。同様に、過敏性腸症候群（ＩＢＳ）は、機械的および化学的な刺激に対する患者の過敏症を特徴とする。従って、ＩＢＳの前臨床モデルで、ＮＫ−３拮抗薬の試験を行ったところ、これらは結腸直腸膨満に起因する侵害挙動を減少させるために有効であることが示されており(Fioramontiら, Neurogastroenterol Motil, 2003, 15, 363-369、 Shafton ら, Neurogastroenterol Motil, 2004, 16, 223-231)、そして、これに基づいて、ＮＫ−３拮抗薬によるＩＢＳの治療の臨床開発が進められている(Houghtonら., Neurogastroenterol Motil, 2007, 19, 732-743、 Dukes ら., Gastroenterol, 2007, 132, A60)。
【０００９】
タキキニン受容体のそれぞれに対して非ペプチド性拮抗薬が開発されている。それらのうちのいくつかは、ＮＫ−２およびＮＫ−３受容体の両方を調節することができる二重調節剤として記載されている（国際公開第０６／１２０４７８号）。しかし、公知の非ペプチド性ＮＫ−３受容体拮抗薬は、多くの欠点を有し、特に安全性プロファイルが不良でＣＮＳ移行性が限定的であることから、これらの化合物の臨床開発での成功は制限され得る。
【００１０】
上記から、ＮＫ−３受容体の新しい強力かつ選択的な拮抗薬は、ＮＫＢおよびＮＫ−３受容体が関与するＣＮＳおよび末梢の疾患または障害の治療および／または予防に有用な薬物の調製にとって治癒的価値があるものとなり得る。
【００１１】
競合結合データによって実証可能な標的効力のみでは、医薬品開発にとって十分ではない。インビボでの効能は、寧ろ、生理的作用部位での標的効力に対して適切な「遊離」薬物濃度を達成するかに左右される。薬物分子は、典型的には、血漿中のタンパク質および脂質に可逆的に結合する。「遊離」の分画とは、非結合で、それ故に生物学的標的に結合して薬理活性を誘発するために利用可能な薬物濃度のことを言う。この遊離分画は、一般に血漿タンパク結合（ＰＰＢ）アッセイを用いて決定される。遊離薬物分画は、所望の薬理活性の達成に関連するのみならず、迅速な肝代謝（高い初回通過のクリアランスが起こり、それによって、経口バイオアベイラビリティが不良となる）並びに安全性への懸念を導き得る可能なオフターゲット活性（例えば、心血管毒性の広く受け入れられているマーカーであるｈＥＲＧイオンチャンネル活性の阻害）を含む潜在的に望ましくない活性を達成することにも関連する。
【００１２】
従って、本発明は、一般式Ｉの化合物、それらの薬学的に許容される溶媒和物、並びにＮＫ−３受容体に対する拮抗薬のような化合物を含む、そのような化合物または組成物の使用方法を包含する。一般式Ｉの化合物は、Ｎ−アシル−（３位置換）−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジンである。本発明の化合物は、一般的に、国際特許出願であるＷＯ２０１１／１２１１３７号に開示されているが、いずれも、明細書内で具体的に例示しない。一方で、非置換の５，６，７，８−テトラヒドロ［１，２，４］トリアゾロ［４，３−α］ピラジンが、無関係な標的、すなわちＰ２Ｘ７の調節物質としてとして国際公開公報第２０１０／１２５１０２号に開示されている。
【発明の概要】
【００１３】
一般的な態様では、本発明は、一般式Ｉ：
【化１】
0006275241.tif 000002
の化合物およびそれらの薬学的に許容される溶媒和物を提供し、
式中、
Ｒ１は、Ｈ、またはＦであり、
Ｒ１’はＨであり、
Ｒ２は、Ｈ、Ｆ、またはＣｌであり、
Ｒ２’はＨ、またはＦであり、
Ｒ３は、ＦまたはＣｌであり、
Ｒ４は、メチル、トリフルオロメチル、ジフルオロメチル、またはフルオロメチルであり、
Ｘ１はＮでＸ２はＳであるか、またＸ１はＳでＸ２はＮであり、
【化２】
0006275241.tif 000003
はＸ１とＸ２に応じて単結合または二重結合を表す。
【００１４】
別の態様では、本発明は、少なくとも１種の本発明に係る化合物またはそれらの薬学的に許容される溶媒和物を含む医薬組成物を提供する。
【００１５】
本発明は、上記化合物またはそれらの薬学的に許容される溶媒和物のＮＫ−３受容体調節剤としての使用、好ましくはＮＫ−３受容体拮抗薬としての使用にも関する。
【００１６】
本発明はまた、上記化合物またはそれらの薬学的に許容される溶媒和物の血中ＬＨレベルの低下剤としての使用に関する。
【００１７】
本発明は、治療的有効量の式Ｉの化合物またはそれらの薬学的に許容される溶媒和物をそれを必要としている患者に投与することを含む、鬱病、不安症、精神病、統合失調症、精神病性障害、双極性障害、認知障害、パーキンソン病、アルツハイマー病、注意欠陥多動性障害（ＡＤＨＤ）、疼痛、痙攣、肥満症、過敏性腸症候群（ＩＢＳ）および炎症性腸疾患などの炎症性疾患、嘔吐、子癇前症、慢性閉塞性肺疾患、喘息、気道過敏症、気管支収縮および咳などの気道関連疾患、生殖障害、避妊および性ホルモン依存性疾患、例えば、限定されるものではないが、良性前立腺肥大（ＢＰＨ）、前立腺肥大、転移性前立腺癌、精巣癌、乳癌、卵巣癌、アンドロゲン依存性座瘡、男性型禿頭症、子宮内膜症、思春期異常、子宮線維症、子宮類線維腫、ホルモン依存性癌、アンドロゲン過剰症、多毛症、男性化、多嚢胞性卵巣症候群（ＰＣＯＳ）、月経前不快気分障害（ＰＭＤＤ）、ＨＡＩＲ−ＡＮ症候群（アンドロゲン過剰症、インスリン抵抗性および黒色表皮腫）、卵巣の卵胞膜細胞増殖（卵巣間質における黄体化卵胞膜細胞の過形成を伴うＨＡＩＲ−ＡＮ）、高い卵巣内アンドロゲン濃度を有する他の兆候（例えば、卵胞成熟停止、閉鎖症、無排卵、月経困難症、機能不全性子宮出血、不妊症）、アンドロゲン産生腫瘍（男性化卵巣もしくは副腎腫瘍）、月経過多および腺筋症の治療および／または予防方法をさらに提供する。
本発明は、治療的有効量の式Ｉの化合物またはそれらの薬学的に許容される溶媒和物をそれを必要としている患者に投与することを含む、鬱病、不安症、精神病、統合失調症、精神病性障害、双極性障害、認知障害、パーキンソン病、アルツハイマー病、注意欠陥多動性障害（ＡＤＨＤ）、疼痛、痙攣、肥満症、過敏性腸症候群（ＩＢＳ）および炎症性腸疾患などの炎症性疾患、嘔吐、子癇前症、慢性閉塞性肺疾患、喘息、気道過敏症、気管支収縮、および咳などの気道関連疾患、尿失禁、生殖障害、避妊および性ホルモン依存性疾患、例えば、限定されるものではないが、良性前立腺肥大（ＢＰＨ）、前立腺肥大、転移性前立腺癌、精巣癌、乳癌、卵巣癌、アンドロゲン依存性座瘡、男性型禿頭症、子宮内膜症、思春期異常、子宮線維症、子宮類線維腫、子宮平滑筋腫、ホルモン依存性癌、アンドロゲン過剰症、多毛症、男性化、多嚢胞性卵巣症候群（ＰＣＯＳ）、月経前不快気分障害（ＰＭＤＤ）、ＨＡＩＲ−ＡＮ症候群（アンドロゲン過剰症、インスリン抵抗性および黒色表皮腫）、卵巣の卵胞膜細胞増殖（卵巣間質における黄体化卵胞膜細胞の過形成を伴うＨＡＩＲ−ＡＮ）、高い卵巣内アンドロゲン濃度を有する他の兆候（例えば、卵胞成熟停止、閉鎖症、無排卵、月経困難症、機能不全性子宮出血、不妊症）、アンドロゲン産生腫瘍（男性化卵巣もしくは副腎腫瘍）、月経過多および腺筋症の治療および／または予防方法をさらに提供する。患者は、好ましくは温血動物であり、より好ましくはヒトである。
【００１８】
本発明は、婦人科障害および不妊症の治療方法をさらに提供する。特に、本発明は、治療的有効量の式Ｉの化合物またはそれらの薬学的に許容される溶媒和物をそれを必要としている患者に投与することを含む、生殖補助におけるＬＨサージの低下および／または抑制方法を提供する。患者は、好ましくは温血動物であり、より好ましくは女性である。
【００１９】
本発明は、治療的有効量の式Ｉの化合物またはそれらの薬学的に許容される溶媒和物をそれを必要としている患者に投与することを含む、男子去勢を引き起こし、および男性の性犯罪者における性欲を阻害するようにアンドロゲン産生に影響を与える方法をさらに提供する。患者は、好ましくは温血動物であり、より好ましくは男性である。
【００２０】
本発明は、式Ｉの化合物またはそれらの薬学的に許容される溶媒和物の薬としての使用も提供する。好ましくは、上記薬を、鬱病、不安症、精神病、統合失調症、精神病性障害、双極性障害、認知障害、パーキンソン病、アルツハイマー病、注意欠陥多動性障害（ＡＤＨＤ）、疼痛、痙攣、肥満症、過敏性腸症候群および炎症性腸疾患などの炎症性疾患、嘔吐、子癇前症、慢性閉塞性肺疾患、喘息、気道過敏症、気管支収縮および咳などの気道関連疾患、生殖障害、避妊および性ホルモン依存性疾患、例えば、限定されるものではないが、良性前立腺肥大（ＢＰＨ）、前立腺肥大、転移性前立腺癌、精巣癌、乳癌、卵巣癌、アンドロゲン依存性座瘡、男性型禿頭症、子宮内膜症、思春期異常、子宮線維症、子宮類線維腫、ホルモン依存性癌、アンドロゲン過剰症、多毛症、男性化、多嚢胞性卵巣症候群（ＰＣＯＳ）、月経前不快気分障害（ＰＭＤＤ）、ＨＡＩＲ−ＡＮ症候群（アンドロゲン過剰症、インスリン抵抗性および黒色表皮腫）、卵巣の卵胞膜細胞増殖（卵巣間質における黄体化卵胞膜細胞の過形成を伴うＨＡＩＲ−ＡＮ）、高い卵巣内アンドロゲン濃度を有する他の兆候（例えば、卵胞成熟停止、閉鎖症、無排卵、月経困難症、機能不全性子宮出血、不妊症）、アンドロゲン産生腫瘍（男性化卵巣もしくは副腎腫瘍）、月経過多および腺筋症の治療および／または予防のために使用する。好ましくは、上記薬を、鬱病、不安症、精神病、統合失調症、精神病性障害、双極性障害、認知障害、パーキンソン病、アルツハイマー病、注意欠陥多動性障害（ＡＤＨＤ）、疼痛、痙攣、肥満症、過敏性腸症候群および炎症性腸疾患などの炎症性疾患、嘔吐、子癇前症、慢性閉塞性肺疾患、喘息、気道過敏症、気管支収縮および咳、などの気道関連疾患、尿失禁、生殖障害、避妊および性ホルモン依存性疾患、例えば、限定されるものではないが、良性前立腺肥大（ＢＰＨ）、前立腺肥大、転移性前立腺癌、精巣癌、乳癌、卵巣癌、アンドロゲン依存性座瘡、男性型禿頭症、子宮内膜症、思春期異常、子宮線維症、子宮類線維腫、子宮平滑筋腫、ホルモン依存性癌、アンドロゲン過剰症、多毛症、男性化、多嚢胞性卵巣症候群（ＰＣＯＳ）、月経前不快気分障害（ＰＭＤＤ）、ＨＡＩＲ−ＡＮ症候群（アンドロゲン過剰症、インスリン抵抗性および黒色表皮腫）、卵巣の卵胞膜細胞増殖（卵巣間質における黄体化卵胞膜細胞の過形成を伴うＨＡＩＲ−ＡＮ）、高い卵巣内アンドロゲン濃度を有する他の兆候（例えば、卵胞成熟停止、閉鎖症、無排卵、月経困難症、機能不全性子宮出血、不妊症）、アンドロゲン産生腫瘍（男性化卵巣もしくは副腎腫瘍）、月経過多および腺筋症の治療および／または予防のために使用する。上記薬を、婦人科障害、不妊症の治療のため、およびアンドロゲン産生に影響を与えて男子去勢を引き起こすために使用してもよい。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
上に述べたように、本発明は、一般式Ｉ：
【化３】
0006275241.tif 000004
の化合物およびそれらの薬学的に許容される溶媒和物を提供し、
式中、
Ｒ１は、Ｈ、またはＦであり、
Ｒ１’はＨであり、
Ｒ２は、Ｈ、Ｆ、またはＣｌであり、
Ｒ２’はＨ、またはＦであり、
Ｒ３はＦ、または、Ｃｌであり、
Ｒ４は、メチル、トリフルオロメチル、ジフルオロメチル、またはフルオロメチルであり、
Ｘ１はＮであり、Ｘ２はＳであり、またＸ１はＳであり、およびＸ２はＮであり、
【化４】
0006275241.tif 000005
はＸ１とＸ２に応じて単結合または二重結合を表す。
【００２２】
式Ｉの好ましい化合物およびそれらの薬学的に許容される溶媒和物は、
式中、
Ｒ１は、Ｈ、またはＦであり、
Ｒ１’はＨであり、
Ｒ２は、Ｈ、Ｆ、またはＣｌであり、
Ｒ２’はＨ、またはＦであり、
Ｒ３はＦ、またはＣｌであり、
Ｒ４はメチルであり、
Ｘ１はＮであり、Ｘ２はＳである。
【００２３】
一実施形態では、式Ｉの好ましい化合物は、式Ｉａ：
【化５】
0006275241.tif 000006
およびそれらの薬学的に許容される溶媒和物であって、
式中、
Ｒ１は、Ｈ、またはＦであり、
Ｒ１’はＨであり、
Ｒ２は、Ｈ、Ｆ、またはＣｌであり、
Ｒ２’はＨまたはＦであり、
Ｒ３は、ＦまたはＣｌであり
Ｒ４は、メチル、トリフルオロメチル、ジフルオロメチルまたはフルオロメチルであり、好ましくは、Ｒ４は、メチルである。
【００２４】
一実施形態では、式Ｉａの好ましい化合物は、式Ｉａ−１：
【化６】
0006275241.tif 000007
およびそれらの薬学的に許容される溶媒和物であって、
式中、
Ｒ３は、ＦまたはＣｌであり
Ｒ４は、メチル、トリフルオロメチル、ジフルオロメチルまたはフルオロメチルであり、好ましくは、Ｒ４は、メチルである。
【００２５】
一実施形態では、式Ｉａの好ましい化合物は、式Ｉａ−２：
【化７】
0006275241.tif 000008
およびそれらの薬学的に許容される溶媒和物であって、
式中、
Ｒ１は、Ｈ、またはＦであり、
Ｒ１’はＨであり、
Ｒ２は、Ｈ、Ｆ、またはＣｌであり、
Ｒ２’はＨまたはＦであり、
Ｒ３は、ＦまたはＣｌである。
【００２６】
一実施形態では、式Ｉの好ましい化合物は式Ｉｂの化合物：
【化８】
0006275241.tif 000009
およびそれらの薬学的に許容される溶媒和物であって、
式中、
Ｒ１は、Ｈ、またはＦであり、
Ｒ１’はＨであり、
Ｒ２は、Ｈ、Ｆ、またはＣｌであり、
Ｒ２’はＨまたはＦであり、
Ｒ３は、ＦまたはＣｌであり
Ｒ４は、メチル、トリフルオロメチル、ジフルオロメチルまたはフルオロメチルであり、好ましくは、Ｒ４は、メチルである。
【００２７】
本発明の式Ｉの特に好ましい化合物は、以下の表１に列挙されている化合物、
【表１】
0006275241.tif 000010
0006275241.tif 000011
【００２８】
表１の中の「Ｃｐｄ」という用語は、化合物を意味する。
【００２９】
表１の化合物は、ＣｈｅｍＢｉｏＤｒａｗ（登録商標）Ｕｌｔｒａバージョン１２．０（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ社）を用いて命名した。
【００３０】
式Ｉの化合物は、当業者に知られている反応を用いる様々な方法で調製することができる。
【００３１】
さらに、本発明は、式Ｉの化合物：
【化９】
0006275241.tif 000012
およびそれらの薬学的に許容される溶媒和物の製造方法であって、
式中、
Ｒ１は、Ｈ、またはＦであり、
Ｒ１'はＨであり、
Ｒ２は、Ｈ、Ｆ、またはＣｌであり、
Ｒ２'はＨまたはＦであり、
Ｒ３は、Ｆ、またはＣｌであり、
Ｒ４は、メチル、トリフルオロメチル、ジフルオロメチル、またはフルオロメチルであり、好ましくは、Ｒ４は、メチルであり、
Ｘ１はＮでＸ２はＳであり、またはＸ１はＳでＸ２はＮであり、好ましくは、Ｘ１がＮでＸ２はＳであり、
【化１０】
0006275241.tif 000013
はＸ１とＸ２に応じて単結合または二重結合を表し、
以下の工程：
ａ）式（ｉ）
【化１１】
0006275241.tif 000014
式中、
ＰＧは、例えば、Ｂｏｃ、ＤＭＢ、または、ＰＭＢ、等の好適な保護基を表し、好ましくはＰＧはＢｏｃであり、
の化合物を、
式（ｉｉ）
【化１２】
0006275241.tif 000015
式中、
Ｒ4’は上で定義されるようにＲ4、またはＨであり、
Ｘ１およびＸ２は上で定義した通りであり、ならびに
【化１３】
0006275241.tif 000016
はＸ１とＸ２に応じて単結合または二重結合を表す、
の化合物と反応させて、
式（ｉｉｉ）
【化１４】
0006275241.tif 000017
式中、ＰＧ，Ｒ４’、Ｘ１およびＸ２は上記で定義した通りであり、
【化１５】
0006275241.tif 000018
はＸ１とＸ２に応じて単結合または二重結合を表す、
の化合物をもたらす工程、
ｂ）好適な脱保護剤を用いて式（ｉｉｉ）の化合物を脱保護し、式（ｉｖ）
【化１６】
0006275241.tif 000019
式中、Ｒ４’、Ｘ１およびＸ２は上記で定義した通りであり、
【化１７】
0006275241.tif 000020
はＸ１とＸ２に応じて単結合または二重結合を表す、
の化合物をもたらす工程、
ｃ）Ｒ4’がＨの場合、Ｃ−Ｈの直接的トリフルオロ−あるいはジフルオロメチル化によってトリフルオロメチルまたはジフルオロメチル基を導入して、式（ｖ）
【化１８】
0006275241.tif 000021
式中、Ｘ１およびＸ２は上に定義した通りであり、Ｒ4はトリフルオロメチルまたはジフルオロメチルであり、
【化１９】
0006275241.tif 000022
はＸ１とＸ２に応じて単結合または二重結合を表す、
の化合物に導く工程、
ｄ）式（ｖｉ）
【化２０】
0006275241.tif 000023
式中、Ｒ１、Ｒ１’、Ｒ２、Ｒ２’およびＲ３は上記に定義した通りである、
でＲ４’がＨではない式（ｉｖ）の化合物、または式（ｖ）の化合物をＮ−アシル化し、式Ｉの化合物をもたらす工程を含むことを特徴とする。
【００３２】
好ましい実施形態において、本発明の処理で用いられる保護基（ＰＧ）はＢｏｃである。
【００３３】
一実施形態によれば、工程ｃ）でのトリフルオロメチルまたはジフルオロメチル基の導入は、Ji Y.ら. in PNAS, 2011, 108(35), 14411-14415またはFujiwara Y. ら. in JACS, 2012, 134, 1494-1497に記載されているように、Ｃ−Ｈの直接的トリフルオロ−またはジフルオロメチル化によって行われる。
【００３４】
実施例の箇所に記載されている反応スキームは単なる例示であり、決して本発明を限定するものとして解釈されるべきではない。
【００３５】
本発明はさらにＮＫ−３受容体に対する拮抗薬としての本発明の化合物またはそれらの薬学的に許容される溶媒和物の使用に関する。
【００３６】
従って、特に好ましい実施形態では、本発明は、ＮＫ−３受容体拮抗薬としての式Ｉおよび部分式の化合物、特に上記表１の化合物またはそれらの薬学的に許容される溶媒和物の使用に関する。
【００３７】
従って、別の実施形態では、本発明は、選択的ＮＫ−３受容体拮抗薬等、薬学的有効成分の合成のためのこれらの化合物またはそれらの溶媒和物の使用に関する。
【００３８】
用途
従って、本発明の化合物は、特に、鬱病、不安症、精神病、統合失調症、精神病性障害、双極性障害、認知障害、パーキンソン病、アルツハイマー病、注意欠陥多動性障害（ＡＤＨＤ）、疼痛、痙攣、肥満症、過敏性腸症候群および炎症性腸疾患などの炎症性疾患、嘔吐、子癇前症、慢性閉塞性肺疾患、喘息、気道過敏症、気管支収縮および咳などの気道関連疾患、生殖障害、避妊および性ホルモン依存性疾患、例えば、限定されるものではないが、良性前立腺肥大（ＢＰＨ）、前立腺肥大、転移性前立腺癌、精巣癌、乳癌、卵巣癌、アンドロゲン依存性座瘡、男性型禿頭症、子宮内膜症、思春期異常、子宮線維症、子宮類線維腫、ホルモン依存性癌、アンドロゲン過剰症、多毛症、男性化、多嚢胞性卵巣症候群（ＰＣＯＳ）、月経前不快気分障害（ＰＭＤＤ）、ＨＡＩＲ−ＡＮ症候群（アンドロゲン過剰症、インスリン抵抗性および黒色表皮腫）、卵巣の卵胞膜細胞増殖（卵巣間質における黄体化卵胞膜細胞の過形成を伴うＨＡＩＲ−ＡＮ）、高い卵巣内アンドロゲン濃度を有する他の兆候（例えば、卵胞成熟停止、閉鎖症、無排卵、月経困難症、機能不全性子宮出血、不妊症）、アンドロゲン産生腫瘍（男性化卵巣もしくは副腎腫瘍）、月経過多および腺筋症の予防薬および／または治療薬として有用である。従って、本発明の化合物は、特に、鬱病、不安症、精神病、統合失調症、精神病性障害、双極性障害、認知障害、パーキンソン病、アルツハイマー病、注意欠陥多動性障害（ＡＤＨＤ）、疼痛、痙攣、肥満症、過敏性腸症候群および炎症性腸疾患などの炎症性疾患、嘔吐、子癇前症、慢性閉塞性肺疾患、喘息、気道過敏症、気管支収縮、咳などの気道関連疾患、尿失禁、生殖障害、避妊および性ホルモン依存性疾患、例えば、限定されるものではないが、良性前立腺肥大（ＢＰＨ）、前立腺肥大、転移性前立腺癌、精巣癌、乳癌、卵巣癌、アンドロゲン依存性座瘡、男性型禿頭症、子宮内膜症、思春期異常、子宮線維症、子宮類線維腫、子宮平滑筋腫、ホルモン依存性癌、アンドロゲン過剰症、多毛症、男性化、多嚢胞性卵巣症候群（ＰＣＯＳ）、月経前不快気分障害（ＰＭＤＤ）、ＨＡＩＲ−ＡＮ症候群（アンドロゲン過剰症、インスリン抵抗性および黒色表皮腫）、卵巣の卵胞膜細胞増殖（卵巣間質における黄体化卵胞膜細胞の過形成を伴うＨＡＩＲ−ＡＮ）、高い卵巣内アンドロゲン濃度を有する他の兆候（例えば、卵胞成熟停止、閉鎖症、無排卵、月経困難症、機能不全性子宮出血、不妊症）、アンドロゲン産生腫瘍（男性化卵巣もしくは副腎腫瘍）、月経過多および腺筋症の予防薬および／または治療薬として有用である。
【００３９】
本発明は、薬学的に有効量の式Ｉの化合物またはそれらの薬学的に許容される溶媒和物をそれを必要としている患者に投与することを含む、患者における鬱病、不安症、精神病、統合失調症、精神病性障害、双極性障害、認知障害、パーキンソン病、アルツハイマー病、注意欠陥多動性障害（ＡＤＨＤ）、疼痛、痙攣、肥満症、過敏性腸症候群および炎症性腸疾患などの炎症性疾患、嘔吐、子癇前症、慢性閉塞性肺疾患、喘息、気道過敏症、気管支収縮および咳などの気道関連疾患、生殖障害、避妊および性ホルモン依存性疾患、例えば、限定されるものではないが、良性前立腺肥大（ＢＰＨ）、前立腺肥大、転移性前立腺癌、精巣癌、乳癌、卵巣癌、アンドロゲン依存性座瘡、男性型禿頭症、子宮内膜症、思春期異常、子宮線維症、子宮類線維腫、ホルモン依存性癌、アンドロゲン過剰症、多毛症、男性化、多嚢胞性卵巣症候群（ＰＣＯＳ）、月経前不快気分障害（ＰＭＤＤ）、ＨＡＩＲ−ＡＮ症候群（アンドロゲン過剰症、インスリン抵抗性および黒色表皮腫）、卵巣の卵胞膜細胞増殖（卵巣間質における黄体化卵胞膜細胞の過形成を伴うＨＡＩＲ−ＡＮ）、高い卵巣内アンドロゲン濃度を有する他の兆候（例えば卵胞成熟停止、閉鎖症、無排卵、月経困難症、機能不全性子宮出血、不妊症）、アンドロゲン産生腫瘍（男性化卵巣もしくは副腎腫瘍）、月経過多および腺筋症の発症を遅らせる方法も提供する。本発明は、薬学的に有効量の式Ｉの化合物またはそれらの薬学的に許容される溶媒和物をそれを必要としている患者に投与することを含む、患者における鬱病、不安症、精神病、統合失調症、精神病性障害、双極性障害、認知障害、パーキンソン病、アルツハイマー病、注意欠陥多動性障害（ＡＤＨＤ）、疼痛、痙攣、肥満症、過敏性腸症候群および炎症性腸疾患などの炎症性疾患、嘔吐、子癇前症、慢性閉塞性肺疾患、喘息、気道過敏症、気管支収縮、咳、尿失禁などの気道関連疾患、生殖障害、避妊および性ホルモン依存性疾患、例えば、限定されるものではないが、良性前立腺肥大（ＢＰＨ）、前立腺肥大、転移性前立腺癌、精巣癌、乳癌、卵巣癌、アンドロゲン依存性座瘡、男性型禿頭症、子宮内膜症、思春期異常、子宮線維症、子宮類線維腫、子宮平滑筋腫、ホルモン依存性癌、アンドロゲン過剰症、多毛症、男性化、多嚢胞性卵巣症候群（ＰＣＯＳ）、月経前不快気分障害（ＰＭＤＤ）、ＨＡＩＲ−ＡＮ症候群（アンドロゲン過剰症、インスリン抵抗性および黒色表皮腫）、卵巣の卵胞膜細胞増殖（卵巣間質における黄体化卵胞膜細胞の過形成を伴うＨＡＩＲ−ＡＮ）、高い卵巣内アンドロゲン濃度を有する他の兆候（例えば卵胞成熟停止、閉鎖症、無排卵、月経困難症、機能不全性子宮出血、不妊症）、アンドロゲン産生腫瘍（男性化卵巣もしくは副腎腫瘍）、月経過多および腺筋症の発症を遅らせる方法も提供する。
【００４０】
患者は、好ましくは温血動物であり、より好ましくはヒトである。
【００４１】
本発明の化合物は、性ホルモン依存性疾患、例えば、限定されるものではないが、良性前立腺肥大（ＢＰＨ）、前立腺肥大、転移性前立腺癌、精巣癌、乳癌、卵巣癌、アンドロゲン依存性座瘡、男性型禿頭症、子宮内膜症、思春期異常、子宮線維症、子宮類線維腫、ホルモン依存性癌、アンドロゲン過剰症、多毛症、男性化、多嚢胞性卵巣症候群（ＰＣＯＳ）、月経前不快気分障害（ＰＭＤＤ）、ＨＡＩＲ−ＡＮ症候群（アンドロゲン過剰症、インスリン抵抗性および黒色表皮腫）、卵巣の卵胞膜細胞増殖（卵巣間質における黄体化卵胞膜細胞の過形成を伴うＨＡＩＲ−ＡＮ）、高い卵巣内アンドロゲン濃度を有する他の兆候（例えば、卵胞成熟停止、閉鎖症、無排卵、月経困難症、機能不全性子宮出血、不妊症）、アンドロゲン産生腫瘍（男性化卵巣もしくは副腎腫瘍）、月経過多および腺筋症の治療および／または予防に特に有用である。本発明の化合物は、性ホルモン依存性疾患、例えば、限定されるものではないが、良性前立腺肥大（ＢＰＨ）、前立腺肥大、転移性前立腺癌、精巣癌、乳癌、卵巣癌、アンドロゲン依存性座瘡、男性型禿頭症、子宮内膜症、思春期異常、子宮線維症、子宮類線維腫、子宮平滑筋腫、ホルモン依存性癌、アンドロゲン過剰症、多毛症、男性化、多嚢胞性卵巣症候群（ＰＣＯＳ）、月経前不快気分障害（ＰＭＤＤ）、ＨＡＩＲ−ＡＮ症候群（アンドロゲン過剰症、インスリン抵抗性および黒色表皮腫）、卵巣の卵胞膜細胞増殖（卵巣間質における黄体化卵胞膜細胞の過形成を伴うＨＡＩＲ−ＡＮ）、高い卵巣内アンドロゲン濃度を有する他の兆候（例えば、卵胞成熟停止、閉鎖症、無排卵、月経困難症、機能不全性子宮出血、不妊症）、アンドロゲン産生腫瘍（男性化卵巣もしくは副腎腫瘍）、月経過多および腺筋症の治療および／または予防に特に有用である。
【００４２】
具体的な実施形態において、本発明の化合物は、良性前立腺肥大（ＢＰＨ）、子宮内膜症、子宮線維症、子宮類線維腫、多嚢胞性卵巣症候群（ＰＣＯＳ）、月経前不快気分障害（ＰＭＤＤ）、ＨＡＩＲ−ＡＮ症候群（アンドロゲン過剰症、インスリン抵抗性および黒色表皮腫）、卵巣の卵胞膜細胞増殖（卵巣間質における黄体化卵胞膜細胞の過形成を伴うＨＡＩＲ−ＡＮ）、高い卵巣内アンドロゲン濃度を有する他の兆候（例えば、卵胞成熟停止、閉鎖症、無排卵、月経困難症、機能不全性子宮出血、不妊症）、アンドロゲン産生腫瘍（男性化卵巣もしくは副腎腫瘍）、月経過多および腺筋症の予防および／または治療に特に有用である。具体的な実施形態において、本発明の化合物は、良性前立腺肥大（ＢＰＨ）、子宮内膜症、子宮線維症、子宮類線維腫、子宮平滑筋腫、多嚢胞性卵巣症候群（ＰＣＯＳ）、月経前不快気分障害（ＰＭＤＤ）、ＨＡＩＲ−ＡＮ症候群（アンドロゲン過剰症、インスリン抵抗性および黒色表皮腫）、卵巣の卵胞膜細胞増殖（卵巣間質における黄体化卵胞膜細胞の過形成を伴うＨＡＩＲ−ＡＮ）、高い卵巣内アンドロゲン濃度を有する他の兆候（例えば、卵胞成熟停止、閉鎖症、無排卵、月経困難症、機能不全性子宮出血、不妊症）、アンドロゲン産生腫瘍（男性化卵巣もしくは副腎腫瘍）、月経過多および腺筋症の治療および／または予防に特に有用である。
【００４３】
具体的な実施形態において、本発明の化合物は子宮内膜症、子宮線維症、子宮類線維腫、子宮平滑筋腫、多嚢胞性卵巣症候群（ＰＣＯＳ）、および良性前立腺過形成（ＢＰＨ）の治療および／または予防に特に有用である。
【００４４】
具体的な実施形態において、本発明の化合物は、子宮内膜症の治療および／または予防に特に有用である。
【００４５】
具体的な実施形態において、本発明の化合物は、子宮線維症の治療および／または予防に特に有用である。
【００４６】
具体的な実施形態において、本発明の化合物は、子宮類線維腫の治療および／または予防に特に有用である。
【００４７】
具体的な実施形態において、本発明の化合物は、子宮平滑筋腫の治療および／または予防に特に有用である。
【００４８】
具体的な実施形態において、本発明の化合物は、多嚢胞性卵巣症候群（ＰＣＯＳ）の治療および／または予防に特に有用である。
【００４９】
具体的な実施形態において、本発明の化合物は、良性前立腺肥大症（ＢＰＨ）の治療および／または予防に特に有用である。
【００５０】
具体的な実施形態において、本発明の化合物はまた、ホットフラッシュとしても知られるホットフラッシュの治療および／または予防に特に有用である。
【００５１】
具体的な実施形態において、本発明の化合物は、閉経前後の症状（すなわち、「ホットフラッシュ」）の治療および／または予防、体外受精（‘ＩＶＦ’）、男性の避妊、女性の避妊、性犯罪者の去勢に特に有用である。
【００５２】
本発明の化合物はまた、婦人科障害および不妊症の治療に有用である。特に、本発明は、生殖補助おいてＬＨサージを低下および／または抑制する方法を提供する。
【００５３】
本発明の化合物は、男子去勢を引き起こし、かつ男性の性欲を阻害するのにも有用である。これは、男性の性犯罪者の治療において特に興味深い。
【００５４】
本発明は、患者における鬱病、不安症、精神病、統合失調症、精神病性障害、双極性障害、認知障害、パーキンソン病、アルツハイマー病、注意欠陥多動性障害（ＡＤＨＤ）、疼痛、痙攣、肥満症、過敏性腸症候群（ＩＢＳ）および炎症性腸疾患などの炎症性疾患、嘔吐、子癇前症、慢性閉塞性肺疾患、喘息、気道過敏症、気管支収縮および咳などの気道関連疾患、生殖障害、避妊および性ホルモン依存性疾患、例えば、限定されるものではないが、良性前立腺肥大（ＢＰＨ）、前立腺肥大、転移性前立腺癌、精巣癌、乳癌、卵巣癌、アンドロゲン依存性座瘡、男性型禿頭症、子宮内膜症、思春期異常、子宮線維症、子宮類線維腫、ホルモン依存性癌、アンドロゲン過剰症、多毛症、男性化、多嚢胞性卵巣症候群（ＰＣＯＳ）、月経前不快気分障害（ＰＭＤＤ）、ＨＡＩＲ−ＡＮ症候群（アンドロゲン過剰症、インスリン抵抗性および黒色表皮腫）、卵巣の卵胞膜細胞増殖（卵巣間質における黄体化卵胞膜細胞の過形成を伴うＨＡＩＲ−ＡＮ）、高い卵巣内アンドロゲン濃度を有する他の兆候（例えば卵胞成熟停止、閉鎖症、無排卵、月経困難症、機能不全性子宮出血、不妊症）、アンドロゲン産生腫瘍（男性化卵巣もしくは副腎腫瘍）、月経過多および腺筋症の治療および／または予防のための薬剤の製造のための式Ｉの化合物またはそれらの薬学的に許容される溶媒和物の使用をさらに提供する。本発明は、患者における鬱病、不安症、精神病、統合失調症、精神病性障害、双極性障害、認知障害、パーキンソン病、アルツハイマー病、注意欠陥多動性障害（ＡＤＨＤ）、疼痛、痙攣、肥満症、過敏性腸症候群（ＩＢＳ）および炎症性腸疾患などの炎症性疾患、嘔吐、子癇前症、慢性閉塞性肺疾患、喘息、気道過敏症、気管支収縮および咳などの気道関連疾患、尿失禁、生殖障害、避妊および性ホルモン依存性疾患、例えば、限定されるものではないが、良性前立腺肥大（ＢＰＨ）、前立腺肥大、転移性前立腺癌、精巣癌、乳癌、卵巣癌、アンドロゲン依存性座瘡、男性型禿頭症、子宮内膜症、思春期異常、子宮線維症、子宮類線維腫、子宮平滑筋腫、ホルモン依存性癌、アンドロゲン過剰症、多毛症、男性化、多嚢胞性卵巣症候群（ＰＣＯＳ）、月経前不快気分障害（ＰＭＤＤ）、ＨＡＩＲ−ＡＮ症候群（アンドロゲン過剰症、インスリン抵抗性および黒色表皮腫）、卵巣の卵胞膜細胞増殖（卵巣間質における黄体化卵胞膜細胞の過形成を伴うＨＡＩＲ−ＡＮ）、高い卵巣内アンドロゲン濃度を有する他の兆候（例えば卵胞成熟停止、閉鎖症、無排卵、月経困難症、機能不全性子宮出血、不妊症）、アンドロゲン産生腫瘍（男性化卵巣もしくは副腎腫瘍）、月経過多および腺筋症の治療および／または予防のための薬剤の製造のための式Ｉの化合物またはそれらの薬学的に許容される溶媒和物の使用をさらに提供する。
【００５５】
患者は、好ましくは温血動物であり、より好ましくはヒトである。
【００５６】
本発明は、特に式Ｉの化合物およびそれらの薬学的に許容される溶媒和物を、性ホルモン依存性疾患、例えば、限定されるものではないが、良性前立腺肥大（ＢＰＨ）、前立腺肥大、転移性前立腺癌、精巣癌、乳癌、卵巣癌、アンドロゲン依存性座瘡、男性型禿頭症、子宮内膜症、思春期異常、子宮線維症、子宮類線維腫、ホルモン依存性癌、アンドロゲン過剰症、多毛症、男性化、多嚢胞性卵巣症候群（ＰＣＯＳ）、月経前不快気分障害（ＰＭＤＤ）、ＨＡＩＲ−ＡＮ症候群（アンドロゲン過剰症、インスリン抵抗性および黒色表皮腫）、卵巣の卵胞膜細胞増殖（卵巣間質における黄体化卵胞膜細胞の過形成を伴うＨＡＩＲ−ＡＮ）、高い卵巣内アンドロゲン濃度を有する他の兆候（例えば卵胞成熟停止、閉鎖症、無排卵、月経困難症、機能不全性子宮出血、不妊症）、アンドロゲン産生腫瘍（男性化卵巣もしくは副腎腫瘍）、月経過多および腺筋症を治療および／または予防する薬剤の製造のための使用を提供する。本発明は、特に式Ｉの化合物およびそれらの薬学的に許容される溶媒和物を、性ホルモン依存性疾患、例えば、限定されるものではないが、良性前立腺肥大（ＢＰＨ）、前立腺肥大、転移性前立腺癌、精巣癌、乳癌、卵巣癌、アンドロゲン依存性座瘡、男性型禿頭症、子宮内膜症、思春期異常、子宮線維症、子宮類線維腫、子宮平滑筋腫、ホルモン依存性癌、アンドロゲン過剰症、多毛症、男性化、多嚢胞性卵巣症候群（ＰＣＯＳ）、月経前不快気分障害（ＰＭＤＤ）、ＨＡＩＲ−ＡＮ症候群（アンドロゲン過剰症、インスリン抵抗性および黒色表皮腫）、卵巣の卵胞膜細胞増殖（卵巣間質における黄体化卵胞膜細胞の過形成を伴うＨＡＩＲ−ＡＮ）、高い卵巣内アンドロゲン濃度を有する他の兆候（例えば卵胞成熟停止、閉鎖症、無排卵、月経困難症、機能不全性子宮出血、不妊症）、アンドロゲン産生腫瘍（男性化卵巣もしくは副腎腫瘍）、月経過多および腺筋症を治療および／または予防する薬剤の製造のための使用を提供する。
【００５７】
具体的な実施形態において、式Ｉの化合物またはそれらの薬学的に許容される溶媒和物は、子宮内膜症、子宮線維症、子宮類線維腫、子宮平滑筋腫、多嚢胞性卵巣症候群（ＰＣＯＳ）および良性前立腺肥大症（ＢＰＨ）を治療および／または予防する薬剤の製造に使用してもよい。
【００５８】
具体的な実施形態において、式Ｉの化合物またはそれらの薬学的に許容される溶媒和物は、子宮内膜症を治療および／または予防する薬剤の製造に使用してもよい。
【００５９】
具体的な実施形態において、式Ｉの化合物またはそれらの薬学的に許容される溶媒和物は、子宮線維症を治療および／または予防する薬剤の製造に使用してもよい。
【００６０】
具体的な実施形態において、式Ｉの化合物またはそれらの薬学的に許容される溶媒和物は、子宮類線維腫を治療および／または予防する薬剤の製造に使用してもよい。
【００６１】
具体的な実施形態において、式Ｉの化合物またはそれらの薬学的に許容される溶媒和物は、子宮平滑筋腫を治療および／または予防する薬剤の製造に使用してもよい。
【００６２】
具体的な実施形態において、式Ｉの化合物またはそれらの薬学的に許容される溶媒和物は、多嚢胞性卵巣症候群（ＰＣＯＳ）を治療および／または予防する薬剤の製造に使用してもよい。
【００６３】
具体的な実施形態において、式Ｉの化合物またはそれらの薬学的に許容される溶媒和物は、良性前立腺肥大（ＢＰＨ）を治療および／または予防する薬剤の製造に使用してもよい。
【００６４】
具体的な実施形態において、式Ｉの化合物またはそれらの薬学的に許容される溶媒和物は、ホットフラッシュとして知られる、ホットフラッシュを治療および／または予防する薬剤の製造に使用してもよい。
【００６５】
本発明は、患者の生殖補助におけるＬＨサージを低下および／または抑制するための薬剤の製造のための式Ｉの化合物またはそれらの薬学的に許容される溶媒和物の使用をさらに提供する。患者は、好ましくは温血動物であり、より好ましくは女性である。
【００６６】
本発明は、男子去勢を引き起こし、かつ男性の性欲を阻害するための薬剤の製造のための式Ｉの化合物またはそれらの薬学的に許容される溶媒和物の使用をさらに提供する。これは、男性の性犯罪者の治療において特に重要である。
【００６７】
本発明のさらなる特徴によれば、そのような治療を必要としている患者、好ましくは温血動物、さらにより好ましくはヒトに、有効量の本発明の化合物またはそれらの薬学的に許容される溶媒和物を投与することを含む、前記患者におけるＮＫ−３受容体活性を調節する方法が提供される。
【００６８】
一実施形態によれば、本発明の化合物、それらの薬学的に許容される溶媒和物を、併用療法の一部として投与してもよい。従って、有効成分としての本発明の化合物、それらの薬学的に許容される溶媒和物に加えて、さらなる治療物質および／または有効成分を含有する組成物および薬剤の同時投与を含む実施形態は、本発明の範囲に含まれる。「併用療法」としばしば呼ばれるそのような多剤投与計画は、ＮＫ−３受容体調節よって媒介されるかそれに関連する疾患または状態のいずれかの治療および／または予防に使用され得る。治療薬のそのような併用を用いることは、治療を必要としている患者またはそのような患者になるリスクのある人における上記障害の治療に関して特に適している。
【００６９】
式ＩのＮＫ−３受容体調節化合物またはそれらの薬学的に許容される溶媒和物に加えて活性薬剤の使用を必要とし得る治療効能が必要であることに加えて、補助療法を表す、すなわち本発明のＮＫ−３受容体調節化合物によって行われる機能を補足および追加する有効成分を伴う薬物の併用の使用を強制するか強く推奨するさらなる論理的根拠が存在し得る。補助治療の目的で使用される好適な追加的治療薬としては、ＮＫ−３受容体調節によって媒介されるかそれに関連する疾患または状態を直接治療または予防する代わりに、基礎的または基礎となるＮＫ−３受容体調節性疾患または状態に直接起因するかまたは間接的に付随する疾患または状態を治療する薬物が挙げられる。
【００７０】
本発明のさらなる特徴によれば、式Ｉの化合物、それらの薬学的に許容される溶媒和物は、有効性を高め、かつ限定されるものではないがドーパミン２／３および５−ＨＴ２受容体拮抗薬を含むＡＰＤに関連する二次的影響を最小限に抑えるために、抗精神病薬（ＡＰＤ）との併用療法で使用され得る。より詳しくは、式Ｉの化合物、それらの薬学的に許容される溶媒和物を、限定されるものではないが、リスペリドン、クロザピン、オランザピンなどの非定型抗精神病薬と組み合わせて補助療法として使用してもよく、この場合、ＮＫ−３受容体調節剤は、非定型抗精神病薬の用量を制限する役割を果たすことができ、よって、患者にそれらの非定型抗精神病薬のいくつかの副作用が生じるのを防止する。
【００７１】
従って、本発明の治療方法および医薬組成物は、式Ｉの化合物またはそれらの薬学的に許容される溶媒和物を単剤療法の形態で用いてもよいが、前記方法および組成物を多剤療法の形態で使用してもよく、その場合、１種以上の式Ｉの化合物またはそれらの薬学的に許容される溶媒和物は、１種以上の他の治療薬と組み合わせて同時投与される。
【００７２】
本発明の上記実施形態の組み合わせでは、式Ｉの化合物、それらの薬学的に許容される溶媒和物および他の治療用活性薬剤を、投与剤形に関して別々または互いに一緒に投与してもよく、それらの投与時間に関して連続的または同時に投与してもよい。従って、１種の成分薬剤の投与は、他の成分薬剤の投与の前であってもそれと同時であってもその後であってもよい。
【００７３】
本発明は、式Ｉの化合物またはそれらの薬学的に許容される溶媒和物と、少なくとも１種の薬学的に許容される担体、希釈剤、賦形剤および／または補助剤とを含む医薬組成物も提供する。上に示したように、本発明は、有効成分としての本発明の化合物、それらの薬学的に許容される溶媒和物に加えて、さらなる治療薬および／または有効成分を含有する医薬組成物も包含する。
【００７４】
本発明の別の目的は、少なくとも１種の本発明の化合物またはそれらの薬学的に許容される溶媒和物を有効成分として含む薬剤である。
【００７５】
本発明のさらなる特徴によれば、そのような治療を必要としている患者に有効量の本発明の化合物またはそれらの薬学的に許容される溶媒和物を投与することを含む、前記患者におけるＮＫ−３受容体活性を調節するための薬剤の製造のための式Ｉの化合物またはそれらの薬学的に許容される溶媒和物の使用が提供される。
【００７６】
患者は、好ましくは温血動物であり、より好ましくはヒトである。
【００７７】
上に記載したように、本発明の化合物、それらの薬学的に許容される溶媒和物を単剤療法または併用療法で使用してもよい。従って、一実施形態によれば、本発明は、上に記載した目的のうちの少なくとも１つのための薬剤の製造のための本発明の化合物の使用を提供し、その使用では、前記薬剤を、少なくとも１種のさらなる治療薬および／または有効成分と組み合わせて、それを必要としている患者、好ましくは温血動物、さらにより好ましくはヒトに投与する。そのような多剤療法、可能な投与計画ならびに好適なさらなる治療薬および／または有効成分の利益および利点は、上に記載されているものである。
【００７８】
一般に、医薬用途では、本発明の化合物は、少なくとも１種の本発明の化合物と、少なくとも１種の薬学的に許容される担体、希釈剤、賦形剤および／または補助剤と、任意に１種以上のさらなる薬学的に活性な化合物とを含む医薬品として製剤化してもよい。
【００７９】
非限定的な例として、そのような製剤は、経口投与、非経口投与（例えば、静脈内、筋肉内もしくは皮下注射または静脈内注入）、局所投与（眼投与を含む）、吸入による投与、皮膚パッチによる投与、埋め込み物による投与、坐薬による投与などに適した形態であってもよい。そのような好適な投与形態（投与様式に応じて固体、半固体または液体であってもよい）ならびにその調製に使用される方法および担体、希釈剤および賦形剤は、当業者には明らかであり、Remington’s Pharmaceutical Sciencesの最新版を参照されたい。
【００８０】
そのような製剤のいくつかの好ましいが非限定的な例としては、錠剤、丸剤、散剤、トローチ剤、小袋、カシェ剤、エリキシル剤、懸濁液、乳濁液、溶液、シロップ剤、エアロゾル、軟膏剤、クリーム剤、ローション剤、軟および硬ゼラチンカプセル、坐薬、液滴、滅菌注射溶液、およびボーラスとしての投与および／または連続投与のための無菌包装粉末（通常、使用前に再構成される）が挙げられ、これらは、ラクトース、デキストロース、スクロース、ソルビトール、マンニトール、澱粉、アカシアゴム、リン酸カルシウム、アルギン酸塩、トラガント、ゼラチン、ケイ酸カルシウム、微結晶性セルロース、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール、セルロース、（滅菌）水、メチルセルロース、メチル−およびプロピルヒドロキシ安息香酸、タルク、ステアリン酸マグネシウム、食用油、植物油および鉱油または好適なそれらの混合物などのそれ自体がそのような製剤に適した担体、賦形剤および希釈剤と共に製剤化してもよい。上記製剤は、滑沢剤、湿潤剤、乳化剤および懸濁化剤、分散剤、崩壊剤、増量剤、充填剤、保存料、甘味料、着香料、流量調整剤、離型剤などの医薬製剤に通常使用される他の物質を任意に含有することができる。また、本組成物を、その中に含有されている活性化合物の即時放出、持続放出または遅延放出を行うように製剤化してもよい。
【００８１】
本発明の医薬品は単位剤形であることが好ましく、任意に、製品情報および／または使用説明書を含む１枚以上のリーフレットと共に、例えば、箱、ブリスター、バイアル、瓶、小袋、アンプルあるいは任意の他の好適な単回もしくは複数回投与用ホルダーまたは容器（適切にラベルが貼られていてもよい）に適切に包装されていてもよい。一般に、そのような単位投与量は、０．０５〜１０００ｍｇ、通常は１〜５００ｍｇ、好ましくは２〜１５０ｍｇの少なくとも１種の本発明の化合物（例えば、単位投与量当たり約２、４、８、１６、３２、６４または１２８ｍｇ）を含む。別の実施形態によれば、そのような単位投与量は、単位投与量あたりの本発明の少なくとも１種の化合物を０．０５〜１０００ｍｇ、通常は１〜５００ｍｇ、好ましくは２〜４００ｍｇ、好ましくは２〜２００ｍｇ含み得る。
【００８２】
通常は、予防または治療される状態および投与経路に応じて、本発明の活性化合物を、通常、１日につき患者の体重１ｋｇ当たり０．００１〜１０ｍｇ、より多くの場合、０．０１〜４ｍｇ、好ましくは０．０２〜１．５ｍｇ、例えば、１日につき患者の体重１ｋｇ当たり約０．０２、０．０４、０．０８、０．１６、０．３２、０．６４または１．２８ｍｇで投与するが、それらを、単回１日用量として投与しても、１日用量を１回以上に分割して投与しても、または例えば点滴注入を用いて基本的に連続的に投与してもよい。別の実施形態によれば、本発明の活性化合物は、通常、１日につき患者の体重１ｋｇ当たり０．００１〜１０ｍｇ、より多くの場合、０．０１〜７ｍｇ、好ましくは０．０３〜３．５ｍｇで投与されるが、それらを、単回１日用量として投与しても、１日用量を１回以上に分割して投与しても、例えば点滴注入を用いて基本的に連続的に投与してもよい。
【００８３】
一実施形態によれば、本発明の活性化合物は、それらを、単回１日用量として投与しても、１日用量を１回以上に分割して投与しても、例えば、点滴注入を用いて基本的に連続的に投与してもよい。
【００８４】
定義
以下の定義および説明は、本明細書および請求の範囲の両方を含む本出願全体を通して使用されている用語のためのものである。
【００８５】
本発明の化合物について述べる場合、使用されている用語は、特に明記しない限り、以下の定義に従って解釈されるものとする。
【００８６】
本発明のＮ−アシル−（３位置換）−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジンの環原子は、以下のスキームに基づいて番号が付されている。
【化２１】
0006275241.tif 000024
「溶媒和物」という用語は、本明細書では、化学量論量または準化学量論量のエタノールなどの１種以上の薬学的に許容される溶媒分子を含有する本発明における化合物を記述するために使用する。「水和物」という用語は、前記溶媒が水である場合を指す。
【００８７】
式Ｉの化合物への言及は全て、溶媒和物、多成分複合体および液晶への言及を含む。
【００８８】
本発明の化合物は、その全ての多形および晶癖、プレドラッグ、プロドラッグおよび互変異性体および同位体で標識された式Ｉの化合物などの、本明細書において先に定義した式Ｉの化合物を含む。
【００８９】
本発明は一般に、式Ｉの化合物の全ての薬学的に許容されるプレドラッグおよびプロドラッグも包含する。
【００９０】
本明細書に使用されている「プロドラッグ」という用語は、式Ｉの化合物の薬理学的に許容される誘導体、例えば、そのインビボ生体内変換生成物が生物学的に活性な薬物を生成するエステルなどを意味する。プロドラッグは一般に、生物学的利用能を増加させることを特徴とし、容易に代謝されてインビボで生物学的に活性な化合物になる。
【００９１】
本明細書に使用されている「プレドラッグ」という用語は、プレドラッグが薬物の投与が指示されている体の領域に到達する前または後のいずれかに、体内または体外のいずれかで修飾が生じる得る薬物種を形成するように修飾されたあらゆる化合物を意味する。
【００９２】
「患者」という用語は、医療を受けるのを待っているか受けている途中である、あるいは医療処置の対象であるか今後対象となる温血動物、より好ましくはヒトを指す。
【００９３】
「ヒト」という用語は、男女両方のあらゆる発達段階（すなわち、新生児、乳幼児、少年、青年、成人）の対象を指す。
【００９４】
本明細書に使用されている「治療する」「治療すること」および「治療」という用語は、状態または疾患および／またはその付随する症状を緩和、軽減または抑制することを含むことを意味するものとする。
【００９５】
本明細書に使用されている「予防する」、「予防すること」および「予防」という用語は、状態もしくは疾患および／もしくはその付随する症状の発症を遅らせるか妨げる方法、患者が状態もしくは疾患に罹患するのを防止する方法、または患者が状態もしくは疾患に罹患するリスクを減らす方法を指す。
【００９６】
本明細書に使用されている「治療的有効量」（またはより簡単に「有効量」）という用語は、それが投与される患者において所望の治療効果または予防効果を達成するのに十分な活性薬剤すなわち有効成分（例えばＮＫ−３拮抗薬）の量を意味する。
【００９７】
用語「投与」またはその変化形（例えば「投与すること」）は、活性物質または有効成分（例えばＮＫ−３拮抗薬）を、単独または薬学的に許容される組成物の一部として、状態、症状または疾患が治療または予防される患者に与えることを意味する。
【００９８】
「薬学的に許容される」とは、医薬組成物の成分が互いに適合可能であり、かつその患者に有害でないことを意味する。
【００９９】
本明細書に使用されている「拮抗薬」という用語は、作動薬（例えば、内因性リガンド）と同じ部位で競合的または非競合的に受容体に結合し、かつ受容体のシグナル伝達を直接調節することなく、受容体に対して可逆的で競合的な結合親和性を有するが、それにもかかわらず、作動薬（例えば、内因性のリガンド）の結合部位を占有して、それによって作動薬媒介受容体シグナル伝達を遮断する化合物を意味する。
【０１００】
本明細書に使用されている「性ホルモン依存性疾患」という用語は、過剰で不適当または制御されない性ホルモン産生によって悪化するか引き起こされる疾患を意味する。男性におけるそのような疾患の例としては、良性前立腺肥大（ＢＰＨ）、前立腺肥大、転移性前立腺癌、精巣癌、アンドロゲン依存性座瘡、男性型禿頭症および少年における思春期早発症が挙げられるが、これらに限定されない。女性におけるそのような疾患の例としては、子宮内膜症、思春期異常、子宮線維症、子宮類線維腫、子宮平滑筋腫、ホルモン依存性癌（卵巣癌、乳癌）、アンドロゲン産生腫瘍（男性化卵巣もしくは副腎腫瘍）、アンドロゲン過剰症、多毛症、男性化、多嚢胞性卵巣症候群（ＰＣＯＳ）、月経前不快気分障害（ＰＭＤＤ）、ＨＡＩＲ−ＡＮ症候群（アンドロゲン過剰症、インスリン抵抗性および黒色表皮腫）、卵巣の卵胞膜細胞増殖（卵巣間質における黄体化卵胞膜細胞の過形成を伴うＨＡＩＲ−ＡＮ）、高い卵巣内アンドロゲン濃度を有する他の兆候（例えば、卵胞成熟停止、閉鎖症、無排卵、月経困難症、機能不全性子宮出血、不妊症）、月経過多および腺筋症（子宮の筋肉内での異常な子宮内膜増殖）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１０１】
本明細書に使用されている「精神病性障害」という用語は、精神に影響を及ぼす病気群を意味する。これらの病気は、患者が明瞭に考え、的確な判断をし、感情的に応答し、効果的に意思疎通を図り、現実を理解し、かつ適切に行動する能力を変化させる。症状が重度である場合、精神病性障害を有する患者は、現実に向き合うことが難しくなり、多くの場合、日常生活の通常の要求を満たすことができなくなる。精神病性障害としては、統合失調症、統合失調症様障害、統合失調性感情障害、妄想性障害、短期精神病性障害、共有精神病性障害、全身疾患による精神病性障害、物質誘発精神病性障害、またはそれら以外の特定されない精神病性障害が挙げられるが、これらに限定されない(Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders, Ed. 4th, American Psychiatric Association, Washington, D.C. 1994)。
【０１０２】
本明細書に使用されている「賦形剤」という用語は、その中に薬学的に活性な薬剤が製剤化され、かつ／または投与される溶媒または希釈剤として使用される担体または不活性媒体を意味する。賦形剤の非限定的な例としては、クリーム、ゲル、ローション、溶液およびリポソームが挙げられる。
【０１０３】
本発明は、以下の実施例を参照すればより理解されるであろう。これらの実施例は、本発明の具体的な実施形態を示すためのものであり、本発明の範囲を限定するものとして解釈されるべきではない。
【実施例】
【０１０４】
化学的実施例
報告されている温度は全て摂氏温度（℃）で表し、特に明記しない限り、全ての反応を室温（ＲＴ）で行った。
【０１０５】
全ての反応後に薄層クロマトグラフィ（ＴＬＣ）分析（ＴＬＣプレート、シリカゲル６０Ｆ２５４、Ｍｅｒｃｋ社）を行い、それを使用して反応をモニターし、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィ条件を確立した。本発明で使用した全ての他のＴＬＣ展開剤／可視化技術、実験手順または精製手順は、具体的詳細に記載していない場合、当業者に公知であると推測され、それらは、i) Gordon, A. J.、 Ford, R. A. "The Chemist's Companion - A Handbook of Practical Data, Techniquesおよび参照文献", Wiley: New York, 1972、ii) Vogel's Textbook of Practical Organic Chemistry, Pearson Prentice Hall: London, 1989などの標準的な参照マニュアルに記載されている。
【０１０６】
ＨＰＬＣ−ＭＳスペクトルは典型的に、エレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ）を用いるＡｇｉｌｅｎｔ社製ＬＣＭＳで得た。Ａｇｉｌｅｎｔ社製機器は、オートサンプラー１２００、バイナリーポンプ１１００、紫外線多波長検出器１１００および６１００シングル四重極質量分析計を備える。使用したクロマトグラフィカラムは、Ｓｕｎｆｉｒｅ（３．５μｍ、Ｃ１８、寸法３．０×５０ｍｍ）であった。
【０１０７】
使用した溶離液は典型的に、溶液Ａ（０．１％のＴＦＡ水溶液）および溶液Ｂ（０．１％ＴＦＡのＭｅＣＮ溶液）の混合物であった。
【０１０８】
以下のように１．３ｍＬ／分の流速で勾配を加えた。勾配Ａ：５％の溶液Ｂの初期条件を０．２分間維持し、６分間で９５％の溶液Ｂまで直線的に増加させ、９５％を１．７５分間維持し、０．２５分間で初期条件に戻し、２．０分間維持した。勾配Ｂ：５％の溶液Ｂの初期条件を０．２分間維持し、２．０分間で９５％まで直線的に増加させ、９５％を１．７５分間維持し、０．２５分間で初期条件に戻し、２分間維持した。
【０１０９】
手動注入により、Ａｇｉｌｅｎｔ１２００機器（分取ポンプ１２００および紫外線多波長検出器１２００）でキラル分取ＨＰＬＣ精製を行った。使用したクロマトグラフィカラムは、用いる溶離液系の種類すなわち低ｐＨまたは高ｐＨ条件に応じて、Ｗａｔｅｒｓ社製Ｓｕｎｆｉｒｅ（５μｍ、Ｃ１８、１９×１００ｍｍ）またはＸＢｒｉｄｇｅ（５μｍ、Ｃ１８、１９×１００ｍｍ）であった。
【０１１０】
高ｐＨのＨＰＬＣ精製では、溶離液は典型的に、溶液Ａ（０．０４Ｍの重炭酸アンモニウム水溶液＋０．１％の濃ＮＨ４ＯＨ）および溶液Ｂ（ＭｅＣＮ）との混合物で構成されていた。勾配を、精製した各試料中の不純物プロファイルに応じて調整し、それにより、不純物と所望の化合物を十分に分離することができた。
【０１１１】
高ｐＨのＨＰＬＣ精製が十分な純度を提供しなかったまれなケースでは、低ｐＨのＨＰＬＣを適用した。低ｐＨのＨＰＬＣ精製には、溶離液は典型的に、溶液Ａ（Ｈ２０中のＴＦＡの０．１％）と溶液Ｂ（ＭｅＣＮ）との混合物で構成した。勾配を、精製した各試料中の不純物プロファイルに応じて調整し、それにより、不純物と所望の化合物を十分に分離することができた。ＴＦＡを、液−液抽出によって蒸発分画から除去した。
【０１１２】
ＢｒｕｋｅｒＡｖａｎｃｅ  ＤＲＸ  ３００機器で１Ｈ（３００ＭＨｚ）および１３Ｃ  ＮＭＲ（７５  ＭＨｚ）および１９Ｆ  ＮＭＲ（２８２  ＭＨｚ）スペクトルを記録した。化学シフトは１００万分の１（ｐｐｍ、単位：δ）で表す。結合定数はヘルツ（Ｈｚ）で表す。ＮＭＲスペクトルで観察された多重度の省略形は、以下のとおりである：ｓ（一重線）、ｄ（二重線）、ｔ（三重線）、ｑ（四重線）、ｍ（多重線）、ｂｒ（幅広い）。
【０１１３】
溶媒、試薬および出発物質を、特に定めがない限り、市販の販売業者から購入して受け取ったものをそのまま使用した。
【０１１４】
以下の略語を使用する。
Ｂｏｃ：ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル
Ｃｐｄ：化合物
ＤＣＭ：ジクロロメタン
ＤＭＢ：２，４−ジメトキシベンジル
ｅｑ：当量
ＥｔＯＨ：エタノール
ｇ：グラム
ｈ：時間
Ｌ：リットル
ＭｅＯＨ：メタノール
μＬ：マイクロリットル
ｍｇ：ミリグラム
ｍＬ：ミリリットル
ｍｍｏｌ：ミリモル
ｍｉｎ：分
ＰＭＢ：４−メトキシベンジル
ＲＴ：室温
ＴＢＭＥ：Ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸
ＴＬＣ：薄層クロマトグラフィ
【０１１５】
以下に記載する中間体および化合物は、ＣｈｅｍＤｒａｗ（登録商標）Ｕｌｔｒａバージョン１２．０（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）を用いて命名した。
【０１１６】
Ｉ．合成
Ｉ．１．一般的な合成スキーム
スキーム１に記載されている方法論を用いて、本発明の化合物を合成した。
【化２２】
0006275241.tif 000025
スキーム１：本発明の化合物の調製のための一般的な合成スキーム
【０１１７】
一般的な合成スキームは、以下の工程を含む。
【０１１８】
工程１：Ｂｏｃ保護ケトピペラジン（１．１）を、メーヤワイン試薬（Ｅｔ３ＯＢＦ４）を用いてイミノエーテル（１）に変換した。
【０１１９】
工程２：その後、エステル（２．２）をアシルヒドラジド（２）に変換した。エステル（２．２）を酸（２．１）のエステル化によって得てもよい。
【０１２０】
工程３：アシルヒドラジド（２）とイミノエーテル（１）との脱水環化により、保護されたトリアゾロピペラジン（３．１）を得た。その後、（３．１）を酸分解脱保護に供して（３）を得た。該当する場合、Ｒ4’からＲ4を導入して（３’）を得た。
【０１２１】
工程４：このようにして得られたトリアゾロピペラジン中間体（３）を、適当な酸塩化物（４．１）との反応によりアシル化して、一般式４によって表わされる最終標的構造を得た。
【０１２２】
Ｉ．２．工程１：Ｂｏｃ保護ケトピペラジン１．１のイミノエーテル（１）への変換
方法Ａ：イミノエーテル（１）への変換
方法Ａは、Ｂｏｃ保護基によるイミノエーテル中間体（１）の合成のために使用される手順であり、以下に詳述する。
【化２３】
0006275241.tif 000026
スキーム２：イミノエーテル（１）への変換
ｔｅｒｔ−ブチル−３−エトキシ−５，６−ジヒドロピラジン−１（２Ｈ）−カルボキシレート  １の合成
【０１２３】
固体トリエチルオキソニウムテトラフルオロボレート（２．３グラム、０．０１２モル）を、無水ＤＣＭ（２０ｍＬ）中の１．１（２グラム、０．０１モル）の溶液に、氷浴上で撹拌及び冷却しながら少量ずつ添加した。添加が完了した後、冷却を取り除き、反応混合物を室温で一晩撹拌した。次いで、２０％Ｋ２ＣＯ３水溶液を、氷浴で冷却しながら少量ずつ得られたわずかに濁った溶液に添加してｐＨ８−９を得た。テトラフルオロホウ酸カリウムから生じた沈殿物を濾過により除去し、ＤＣＭでフィルター上にて洗浄した。濾液を分液漏斗に入れ、そして有機層を分離した。水層をＤＣＭ（３×１０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機抽出物をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、ロータリーエバポレーターで濃縮し、水（２０ｍＬ）で洗浄した。ヘキサンを残留物に添加し、得られた混合物を冷蔵庫に〜4時間静置した。生成した沈殿物をセライトの薄いパッドを用いた濾過により除去し、濾液を蒸発させた。得られた粘性黄色がかった油状物を４０〜５０℃で〜６時間真空乾燥し（１０−１５ｍｍ  Ｈｇ）、表題の中間体１を与えた。収率: 2.03 (88%).1H-NMR (CDCl3): δ 4.1 (q, 2H), 3.85 (s, 2H), 3.5 (m, 1H), 3.35 (t, 2H), 1.45 (s, 9H), 1.3 (t, 3H).
【０１２４】
Ｉ．３．工程２：アシルヒドラジド（２）の形成
方法Ｂ：アシルヒドラジド（２）
方法Ｂは、アシルヒドラジド（２）の合成のために使用される手順であり、以下に詳述する。
【化２４】
0006275241.tif 000027
スキーム３：アシルヒドラジド（２）の形成
【０１２５】
濃縮器を備えた丸底フラスコにおいて、エステル（２．２）（１当量）を無水エタノールに溶解し、室温から還流の範囲の温度を用いてヒドラジン水和物（１．２〜２０ｅｑ．、好ましくは１．５〜１０当量）で処理した。反応混合物を室温にした後、溶液を減圧濃縮する。市販の無水ＤＣＭ：ＭｅＯＨ（１：１）の混合物を用いて同時蒸発を行い、残留水を除去してもよい。残留物をその後シリカパッド上で再結晶化および／または沈殿もしくは精製させて（２）を得る。
【０１２６】
Ｉ．４．工程３：トリアゾロピペラジン（３）に導く脱水環化
方法Ｃ：脱水環化および酸分解
方法Ｃは、トリアゾロピペラジン（３）の合成のために使用される手順であり、以下に詳述する：
【化２５】
0006275241.tif 000028
スキーム４：トリアゾロピペラジン（３）に導く脱水環化
【０１２７】
工程１：丸底フラスコにおいて、（２）（1当量）をイミノエーテル（１）（１当量）に一度に添加する（潜在的に、溶液中のＭｅＯＨ内）。得られた混合物を１００℃で一晩撹拌する。反応混合物を室温に冷却し、粗化合物を、シリカゲル上で精製し、所望の生成物（３．１を得る。
【０１２８】
工程２：ＤＣＭを含有する丸底フラスコに（３．１）（１相当）を添加する。そして、ＴＦＡ（５〜７５当量）を室温で反応混合物に添加する。３０分間の撹拌の後、混合物は濃縮する。その後、ＤＣＭを残留物に添加し、得られたものを飽和炭酸水素ナトリウムで洗浄する。水層をＤＣＭで２回抽出し、有機層を塩水で洗浄しＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧濃縮して粗製（３）を得る。粗製（３）をさらに精製せずに、次の工程で直接使用してもよい。
【０１２９】
Ｒ４’≠Ｒ４＝Ｈの場合、直接的トリフルオロメチル化または直接的ジフルオロメチル化を介してトリフルオロまたはジフルオロメチルなどの基の導入(Ji Y. ら., PNAS, 2011, 108(35), 14411-14415、 Fujiwara Y. ら., JACS, 2012, 134, 1494-1497)を行ってもよい。
【０１３０】
Ｉ．５．工程４：最終生成物に導くアシル化
方法Ｄ：アシル化 - 二相性の条件
方法Ｄは、一般式Ｉの（４）の合成のために使用される手順である。方法Ｄについて以下に詳述する：
【化２６】
0006275241.tif 000029
スキーム５：アシル化
【０１３１】
飽和炭酸水素ナトリウム溶液を（３）（１当量）のＤＣＭスラリーに室温で添加した。
（４．１）（１当量）を加え、混合物を室温で約２０分から一晩の時間撹拌した。反応の完了をＨＰＬＣによりモニターした。層を分離し、ＤＣＭ相を水で洗浄した。ＤＣＭ抽出物を硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、ＤＣＭで濾過ケークを洗浄した。そして、ＤＣＭ抽出物を濃縮した。ＴＢＭＥを添加し、得られたスラリーを室温で一晩撹拌した。固体を濾過により回収し、ＴＢＭＥで洗浄し、吸引乾燥した。粗化合物をシリカゲルクロマトグラフィーまたは結晶化によって精製してもよい。
【０１３２】
化合物４は本発明の式Ｉの化合物である。
【０１３３】
ＩＩ．化学的特性評価
化合物１HPLC-MS: tR = 3.2 分, (M+H)+ = 345; 1H-NMR (CDCl3): δ7.5 (m, 2H), 7.2 (m, 2H), 5.1 (br, 2H), 4.7 (m, 2H), 4.1 (m, 2H), 2.7 (s, 3H); 19F-NMR (CDCl3): δ-99.1.
【０１３４】
化合物２：HPLC-MS: tR = 3.6 分, (M+H)+ = 361; 1H-NMR (CDCl3): δ7.5 (m, 4H), 5.1 (br, 2H), 4.6 (m, 2H), 4.1 (m, 2H), 2.7 (s, 3H).
【０１３５】
化合物３：HPLC-MS: tR = 3.7 分, (M+H)+ = 379; 1H-NMR (CDCl3): δ7.6 (m, 1H), 7.3 (m, 1H), 7.2 (m, 1H), 5.1 (br, 2H), 4.7 (m, 2H), 4.1 (m, 2H), 2.7 (s, 3H); 19F-NMR (CDCl3): δ -94.3.
【０１３６】
化合物４：HPLC-MS: tR = 3.7 分, (M+H)+ = 379; 1H-NMR (CDCl3): δ 7.5 (m, 1H), 7.3 (m, 1H), 7.2 (m, 1H), 5.0 (br, 2H), 4.6 (t, 2H), 4.1 (m, 2H), 2.7 (s, 3H); 19F-NMR (CDCl3): δ -96.8.
【０１３７】
化合物５: HPLC-MS: tR = 3.4 分, (M+H)+ = 363; 1H-NMR (CDCl3): δ 7.3-7.2 (m, 3H), 5.1 (br, 2H), 4.6 (t, 2H), 4.1 (m, 2H), 2.7 (s, 3H); 19F-NMR (CDCl3): δ -71.9, -74.6.
【０１３８】
化合物６: HPLC-MS: tR = 3.6 分, (M+H)+ = 381; 1H-NMR (CDCl3): δ7.2 (m, 2H), 5.1 (s, 2H), 4.7 (t, 2H), 4.1 (m, 2H), 2.7 (s, 3H); 19F-NMR (CDCl3): δ-75.8.
【０１３９】
化合物７: HPLC-MS: tR = 3.6 分, (M+H)+ = 381; 1H-NMR (CDCl3): δ7.2 (m, 2H), 5.3 (m, 1H), 4.9 (m, 1H), 4.7 (m, 2H), 4.3 (m, 1H), 3.9 (m, 1H), 2.8 (s, 3H); 19F-NMR (CDCl3): δ-48.8, -72.4, -77.6.
【０１４０】
生物学実施例
機能アッセイ
ヒトＮＫ−３受容体を用いたエクオリンアッセイ
細胞内カルシウムレベルの変化は、Ｇタンパク質共役受容体活性の認識されている指標である。本発明の化合物がＮＫＡ−媒介ＮＫ−３受容体活性化を阻害する効能を、インビトロエクオリン機能アッセイにより評価した。このアッセイのために、ヒトＮＫ−３受容体を発現するチャイニーズハムスター卵巣組み換え細胞および発光タンパク質アポエクオリンをコード化する構築物を使用した。補因子セレンテラジンの存在下で、アポエクオリンは、細胞内（細胞質）遊離カルシウムの量に比例する測定可能な発光を放出する。
【０１４１】
拮抗薬試験
本発明の化合物（様々な濃度）を細胞と共にプレインキュベートし（３分）、次いで、ＥＣ８０（３ｎＭ）に相当する最終濃度で参照作動薬（ＮＫＡ）を添加し、その後の９０秒間にわたって放射光を記録する（Ｈａｍａｍａｔｓｕ社製ＦＤＳＳ６０００）ことによって、本化合物の拮抗薬活性を測定する。放射光の強度を、リーダーソフトウェアを用いて積分する。ニューロキニンＡの添加に対する発光反応の濃度依存的阻害に基づいて、化合物の拮抗薬活性を測定する
【０１４２】
本発明の化合物の阻害曲線を得て、参照作動薬反応の５０％を阻害する化合物の濃度（ＩＣ５０）を決定した（以下の表２の結果を参照）。表２に示すＩＣ５０値は、本発明の化合物が強力なＮＫ−３拮抗化合物であることを示している。
【０１４３】
競合的結合アッセイ
十分に特性評価されているＮＫ−３放射性リガンドを濃度依存的に競合的かつ可逆的に置き換える本発明の化合物の能力を測定することにより、本発明の化合物のヒトＮＫ−３受容体に対する親和性を測定した。
【０１４４】
ヒトＮＫ−３受容体との３Ｈ−ＳＢ２２２２００結合競合アッセイ
インビトロ放射性リガンド結合アッセイにより、本発明の化合物がＮＫ−３受容体選択的拮抗薬３Ｈ−ＳＢ２２２２００の結合を阻害する能力を評価した。ヒトＮＫ−３受容体を安定に発現するチャイニーズハムスター卵巣組み換え細胞から膜を調製した。この膜を、２５ｍＭのＨＥＰＥＳ／０．１ＭのＮａＣｌ／１ｍＭのＣａＣｌ ２５  ｍＭのＭｇＣｌ２／０．５％のＢＳＡ／１０μｇ/ｍｌのサポニンを含む緩衝液（ｐＨ７．４）および各種濃度の本発明の化合物中で、５  ｎＭの３Ｈ−ＳＢ２２２２００（ＡＲＣ社）と共にインキュベートした。ＴｏｐＣｏｕｎｔ−ＮＸＴリーダー（Ｐａｃｋａｒｄ社）を用いた膜関連放射活性の定量化により、受容体に結合した３Ｈ−ＳＢ２２２２００の量を濾過後に測定した。本発明の化合物に対して競合曲線を得て、線形回帰分析により、結合した放射性リガンドの５０％を置換する濃度（ＩＣ５０）を決定し、次いで、飽和結合実験（ＣｈｅｎｇおよびＰｒｕｓｏｆｆ、１９７３年）から導き出された方程式：Ｋｉ＝ＩＣ５０／（１＋［Ｌ］／Ｋｄ）（式中、［Ｌ］は遊離放射性リガンドの濃度であり、Ｋｄは受容体におけるその解離定数である）により見かけ上の阻害定数（Ｋｉ）値を計算した（以下の表２の結果を参照）。
【０１４５】
表２は、本発明の化合物による３Ｈ−ＳＢ２２２２００結合競合アッセイを用いて得られた生物学的結果を示す。これらの結果は、本発明の化合物がヒトＮＫ−３受容体に対して強力な親和性を示すことを表している。
【表２】
0006275241.tif 000030
【０１４６】
選択性アッセイ
他のヒトＮＫ受容体すなわちＮＫ−１およびＮＫ−２受容体に対する本発明の化合物の選択性を測定した。
【０１４７】
ヒトＮＫ−１
ＮＫ−１受容体を発現するＣＨＯ組み換え細胞ヒトにおいて、本発明の化合物のＮＫ−１受容体に対する親和性を評価した。これらの細胞から膜懸濁液を調製した。このアッセイでは以下の放射性リガンド：［３Ｈ］サブスタンスＰ（Perkin Elmer社カタログ番号ＮＥＴ１１１５２０）を使用した。５０ｍＭのＴｒｉｓ／５ｍＭのＭｎＣｌ２／１５０ｍＭのＮａＣｌ／０．１％ＢＳＡ（ｐＨ７．４）中で、結合アッセイを行った。結合アッセイは、２５μｌの膜懸濁液（９６ウェルプレートの１ウェル当たり約５μｇのタンパク質）、漸増濃度（アッセイ緩衝液で希釈）の５０μｌの化合物または参照リガンド（サブスタンスＰ）および２ｎＭの［３Ｈ］サブスタンスＰで構成されていた。このプレートを水浴に入れ、２５℃で６０分間インキュベートし、次いで、濾過ユニット（Perkin Elmer社）を用いて、ＧＦ／Ｃフィルター（Perkin Elmer社、６００５１７４、０．５％のＰＥＩに室温で２時間予浸した）で濾過した。ＴｏｐＣｏｕｎｔ−ＮＸＴリーダー（Ｐａｃｋａｒｄ社）を用いて、フィルターに保持された放射活性を測定した。本発明の化合物に対して競合曲線を得て、結合した放射性リガンドの５０％を置換する化合物の濃度（ＩＣ５０）を決定し、次いで、飽和結合実験（ＣｈｅｎｇおよびＰｒｕｓｏｆｆ、１９７３年）から導き出された以下の方程式：Ｋｉ＝ＩＣ５０／（１＋［Ｌ］／ＫＤ）（式中、［Ｌ］は遊離放射性リガンドの濃度であり、ＫＤは受容体におけるその解離定数である）により、見かけ上の阻害定数Ｋｉ値を計算した。
【０１４８】
ヒトＮＫ−２
ヒトＮＫ−２受容体を発現するＣＨＯ組み換え細胞において、本発明の化合物のＮＫ−２受容体に対する親和性を評価した。これらの細胞から膜懸濁液を調製した。このアッセイでは、以下の放射性リガンド：［１２５Ｉ］−ニューロキニンＡ（Perkin Elmer社カタログ番号ＮＥＸ２５２）を使用した。２５ｍＭのＨＥＰＥＳ／１ｍＭのＣａＣｌ２／５ｍＭのＭｇＣｌ２／０．５％のＢＳＡ／１０μｇ／ｍｌのサポニン（ｐＨ７．４）中で結合アッセイを行った。結合アッセイは、２５μｌの膜懸濁液（９６ウェルプレート中１ウェルにつき約３．７５μｇのタンパク質）、漸増濃度（アッセイ緩衝液で希釈）の５０μｌの化合物または参照リガンド（ニューロキニンＡ）および０．１ｎＭの［１２５Ｉ］−ニューロキニンＡで構成されていた。このプレートを２５℃の水浴中で６０分間インキュベートし、次いで、濾過ユニット（Perkin Elmer社）を用いて、ＧＦ／Ｃフィルター（Perkin Elmer社、６００５１７４、サポニンを含まないアッセイ緩衝液に室温で２時間予浸した）で濾過した。ＴｏｐＣｏｕｎｔ−ＮＸＴリーダー（Ｐａｃｋａｒｄ社）を用いて、フィルター上に保持された放射活性を測定した。本発明の化合物に対して競合曲線を得て、結合した放射性リガンドの５０％を置換する化合物の濃度（ＩＣ５０）を決定し、次いで、飽和結合実験（ＣｈｅｎｇおよびＰｒｕｓｏｆｆ、１９７３年）から導き出された以下の方程式：Ｋｉ＝ＩＣ５０／（１＋［Ｌ］／ＫＤ）（式中、［Ｌ］は遊離放射性リガンドの濃度であり、ＫＤは受容体におけるその解離定数である）により、見かけ上の阻害定数Ｋｉ値を計算した。
【０１４９】
上記ＮＫ−１およびＮＫ−２アッセイで試験した本発明の化合物は、ヒトＮＫ−１およびヒトＮＫ−２受容体において低い親和性すなわちヒトＮＫ−３受容体と比較して２００倍超のＫｉのシフト（表３）を示した。従って、本発明に係る化合物は、ＮＫ−１およびＮＫ−２受容体と比較して選択的であることが分かった。
【表３】
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【０１５０】
ｈＥＲＧ阻害アッセイ
ヒトＥｔｈｅｒ−ａ−ｇｏ−ｇｏ関連遺伝子（ｈＥＲＧ）は、心再分極に関与する心臓の内向き整流性電位依存性カリウムチャネル（ＩＫｒ）をコード化する。ＩＫｒ電流阻害は、心臓活動電位を延長する（不整脈のリスクの増加に関連する現象）ことが分かっている。ＩＫｒ電流阻害は、薬物誘発性ＱＴ延長の公知の事例の大部分の主な原因である。これらの心臓毒性作用により、多数の薬物が後期臨床試験から撤回されているため、創薬の早期に阻害剤を同定することが重要である。
【０１５１】
ｈＥＲＧ阻害研究は、ヒトＥｔｈｅｒ−ａ−ｇｏ−ｇｏ関連遺伝子（ｈＥＲＧ）を安定に形質移入されたＨＥＫ２９３細胞において正常酸素圧条件で生成されたカリウム選択的ＩＫｒ電流に対する本発明の化合物のインビトロ効果を定量化することを目的としている。
【０１５２】
電圧パルス中に誘発された全細胞電流（手動パッチクランプによって獲得）を、ベースライン条件および被検化合物の適用（５分間の曝露）後に記録した。被検化合物の濃度（０．３μＭ、３μＭ、１０μＭ、３０μＭ）は、前臨床モデルにおいて予想される有効用量での濃度を超えると考えられる範囲を反映したものである。
【０１５３】
適用したパルスプロトコルは、以下のとおりである。保持電位（３秒ごと）を、−４０ｍＶで開始し、１秒間に＋１０ｍＶの８回の増加で、−８０ｍＶから＋４０ｍＶの最大値まで段階的に変化させた。次いで、これらの各増加工程後に、膜電位を−５５ｍＶに１秒間戻し、最終的に−８０ｍＶに１秒間再分極した。
【０１５４】
記録した電流密度をベースライン条件に対して正規化し、試験化合物を含まない条件で実験設計を用いて、溶媒効果および時間依存的電流ランダウンについて補正した。
【０１５５】
化合物の阻害曲線が得られ、ベースライン条件で測定した電流密度の５０％を減少させる濃度（ＩＣ５０）を決定した。ＩＣ５０値が１０μＭを超える全ての化合物は、ｈＥＲＧチャネルの強力な阻害剤として見なされないが、１μＭ未満のＩＣ５０値を有する化合物は、強力なｈＥＲＧチャネル阻害剤として見なされる。
【０１５６】
ｈＥＲＧ阻害アッセイで試験した場合、本発明の化合物は、表４に示すＩＣ５０値を有するものと決定した。
【０１５７】
血漿タンパク質結合の判定
化学物質／薬物の薬物動態と薬力学の性質は、主に血漿または血清タンパク質に対する化学物質の可逆的結合の関数である。一般的に、薬物の非結合または「遊離画分」のみが、細胞膜を超えての拡散または輸送、および薬理学的／毒物学的標的との相互作用に有効である。その結果、化合物の血漿タンパク質結合（ＰＰＢ）の程度は、その作用並びに、その分布および除去に影響を与える。
【０１５８】
化合物の血漿タンパク質結合（ＰＰＢ）の決定は、血漿中の非結合型薬物分画を信頼可能に推定するための容認されている標準的な方法である平衡透析により行うことができる。ＲＥＤ（迅速平衡透析）装置インサートは、透析膜（ＭＷＣＯ〜〜８０００）のＯリング封止垂直シリンダーによって区切られた隣り合った２つのチャンバ―から作られている。薬物を含む血漿（５μＭ、またはそれ以外の場合有効用量に対応する血中濃度）を、１つのチャンバに添加して、緩衝液をもう1つのチャンバに添加する。振とう下、３７℃で４時間のインキュベーション後、アリコートを各チャンバから採取し、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ法によって分析することで遊離および結合型の薬物をいずれも決定することができる。
【０１５９】
表４に提供されている割合は、本発明の化合物に関する、血漿タンパク質に対する結合薬物分画の割合を表す。「遊離の分画」は１００％−％ｒＰＰＢとして算出され得る（すなわち、結合せず、それにより生物学的標的と結合して、薬理学的活性を誘発する薬物濃度に相当する、表４に開示されている値の補完割合）。
【表４】
0006275241.tif 000032
【０１６０】
ラットにおける化合物活性を評価するためのインビボアッセイ
本発明の化合物が黄体形成ホルモン（ＬＨ）分泌を阻害する効果を以下の生物学的研究によって決定する。
【０１６１】
黄体形成ホルモン（ＬＨ）の血中レベルに対する本発明の化合物の効果を評価するための去勢した雄性ラットモデル
ヒトおよび齧歯類において、去勢により、高い持続的ＧｎＲＨシグナル伝達およびその結果生じる血中ＬＨの上昇が可能となることが、先例によって十分に支持されている。従って、去勢したラットモデルを使用して、ＧｎＲＨシグナル伝達経路の試験化合物阻害のマーカーとしてＬＨ阻害の測定に関する広範な指標を得る。
【０１６２】
去勢した成体の雄性ＳＤラット（１５０〜１７５ｇ）をＪａｎｖｉｅｒ社（フランスのＳｔＢｅｒｔｈｅｖｉｎ）から購入した。、５０±５％の相対湿度および１２時間の明期／１２時間の暗期の明暗サイクル（午後６時に消灯）の温度制御された部屋（２２±２℃）の中に、１つのケージに２匹ずつで全ての動物を収容した。これらの動物には、研究前に３週間の術後回復期間が設けられた。動物を毎日世話した。標準的な食餌および水道水を自由に与えた。動物ケージの寝わらを１週間に１回交換した。試験当日、実験開始前の１時間、動物を処置室に順化させた。
【０１６３】
本発明の化合物を、０．５％のメチルセルロース中に製剤化した。
【０１６４】
ベースラインでの試料採取（Ｔ０）後に、１回用量の本発明の化合物またはビヒクルをラットに経口投与した。次いで、投与後数回の時点で（４５、９０、１５０、３００および４２０分）血液試料を採取した。尾静脈の出血から血液試料を得、ＥＤＴＡを含むチューブに入れて、即座に遠心分離した。血漿試料を採取し、アッセイするまで−８０℃の冷凍庫に保存した。Ｚｅｎｔｅｃｈ社（ベルギーのリエージュ）製のＲＩＡＺＥＮ−Ｒａｔ  ＬＨのラジオイムノアッセイキットを用いて、血清中ＬＨレベルを決定した。ベースラインを、最初の基準血液試料として定めた。
【０１６５】
上述した去勢雄性ラットモデルで試験を行った場合、本発明の化合物番号１は、３０ｍｇ／ｋｇ以下の用量でＬＨ血中レベルを有意に抑制した（統計学的に有意、ｐ＜０．０５）。