(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
シュンギクから無極性有機溶媒を用いて抽出された抽出物を有効成分として含有する慢性肝炎抑制剤。
【請求項２】
前記無極性有機溶媒がｎ−ヘキサンである請求項１に記載の慢性肝炎抑制剤。
【請求項３】
前記請求項１または２に記載の慢性肝炎抑制剤を含有する慢性肝炎抑制のための医薬用組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、シュンギクから無極性有機溶媒を用いて抽出された抽出物を有効成分として含有する肝臓障害抑制剤に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
肝臓障害のうち急性肝障害についてはある程度研究も進み種々の治療が行われているが、慢性肝障害については原因等、不明な点が多く効果的な治療方法は確立されていない。この慢性肝障害は免疫系を介する肝障害であると考えられている。
【０００３】
このような慢性肝障害に対しては漢方薬を用いた治療が行われている。この漢方療法においては、大柴胡湯、小柴胡湯、柴胡桂枝湯、柴胡桂姜湯、四逆散等が用いられている（「一般用漢方処方（漢方２１０処方）」日本製薬団体連合会漢方専門委員会（１９７５）、「漢方概論」藤平健、小倉重成著、創元社（１９７９）」）。これらの漢方薬に含まれている生薬の有効成分については不明な点が多いが、例えば三七人参については、その成分に肝保護作用が認められている（特願平８−４６１５４）。また、これらの生薬は、副作用が少ないと言うメリットが知られている。
【０００４】
しかし、これらの生薬は、海外に原料を依存するものが多いため入手が困難であり、且つ野生のものを採取するものもあり作用が一定ではない（「生薬学第４版」北川勲ら著（廣川書店）ｐｐ３８４−３８７、（１９９２）、「漢方薬の評価と開発技術」東京生薬研究会編（（株）シーエムシー）ｐｐ３５３−３５４（１９８３））という問題がある。すなわち、漢方薬は一般的に高価であり、日常的な摂取が困難であるというデメリットがある。
【０００５】
また、野菜を原料に、肝障害抑制作用を有する有効成分の抽出も試みられている。野菜では、ニンニク(Kagawa, K. et al. Japan. J. Pharmacol.,Vol. 42, p.19-26(1986), Nakagawa, S. et al. Hiroshima J. Med. Sci., Vol. 34, p.303-309(1985))、人参(Bishayee, A. et al. J. Ethnopharmacl., Vol.47, p.69-74(1995)、オオヒジキ(САРТИКОВ, А.С.et al. Khim. Farm. Zh., Vol. 24, p.38-40(1990)）が急性肝障害抑制効果を示す事が知られているが、慢性肝障害抑制効果を示すものは知られていなかった。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、安全かつ調製が容易な慢性肝炎抑制剤を提供することを課題とする。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
本発明者等は、上記課題を解決するため精鋭探索したところ、シュンギクに優れた慢性肝炎抑制作用があること見出し、本発明を完成するに至った。すなわち、本発明は、シュンギクから無極性有機溶媒を用いて抽出された抽出物を有効成分として含有する慢性肝炎抑制剤及びこの慢性肝炎抑制剤を含有する慢性肝炎抑制のための医薬用組成物である。
【０００８】
本発明においては、シュンギクから慢性肝炎抑制作用を示す有効成分を無極性有機溶媒を用いて抽出する。無極性有機溶媒の中では、ｎ−ヘキサンを用いるのが好ましい。
【０００９】
【発明の実施の形態】
以下、本発明を詳細に説明する。
＜１＞本発明の慢性肝炎抑制剤
（１）シュンギクの抽出物
本発明の慢性肝炎抑制剤は、シュンギクの抽出物を有効成分として含有する。本発明において用いるシュンギクはキク科キク属に属する植物である。本発明ではシュンギクの茎、葉、根等の植物組織のいずれの部分を使用しても良いが、特に、本発明の慢性肝炎抑制作用を示す有効成分は茎、葉の部分に多く含まれているため、これらの組織を用いることが好ましい。
【００１０】
上記シュンギクは慢性肝炎抑制作用を有する成分を含んでおり、粉砕した茎、葉の組織をそのまま用いることも可能であるが、無極性有機溶媒を用いて抽出により前記有効成分を含む抽出物を取り出して、本発明の慢性肝炎抑制剤の有効成分として用いることが好ましい。本発明の抽出物は、このように無極性有機溶媒を用いて抽出された抽出物、又はこれらの濃縮物のいずれでもよく、またこれらの混合物でもよい。
【００１１】
シュンギクの抽出処理は、連続式、バッチ式等の方法で、常法により冷浸または温浸にて任意の時間行う。例えば、シュンギクの乾燥粉末を、細かく粉砕し、抽出溶媒に、室温で１〜４８時間、浸漬及び又は振とうして行う。その後、抽出液から抽出残渣を除いて、減圧または限外濾過を行い抽出物を濃縮する。さらに、必要に応じて溶媒を留去して乾固するかまたは凍結乾燥する。
【００１２】
このような抽出に用いる溶媒としては、無極性有機溶媒を用いる。無極性有機溶媒とは、誘電率が小さく、溶媒を構成する分子の双極子モーメントの値がゼロに近い溶媒を溶媒をいい、例えば、ベンゼン、ヘキサン、四塩化炭素、クロロホルム等が挙げられる。
【００１３】
発明の有効成分の抽出例を以下に例示するが、本発明はこの抽出例に限定されるものではない。まず、シュンギクを凍結乾燥し、この乾燥粉末にヘキサン等の無極性有機溶媒を加え、本発明の有効成分を抽出する。この際に用いる無極性有機溶媒としは、ｎ−ヘキサン、シクロヘキサン等が好ましくは例示できる。シュンギクに加える溶媒の量は、乾燥粉末１ｇ当たり、１〜２００ｍｌであるのが好ましく、１０〜５０ｍｌであるのが更に好ましい。操作はシュンギクにこの溶媒を加えた後、スターラー等でよく攪拌し、無極性有機溶媒に可溶性の画分を抽出する。この操作は、通常２回〜５回繰り返りかえす。
【００１４】
このようにして得られた抽出物は、慢性肝炎抑制剤としてそのまま用いることができるが、濃縮して、溶媒を蒸発させることにより固形物として用いることが好ましい。濃縮は、常圧または減圧条件下で、通常に用いられる各種の濃縮方法を用いて行うことができる。
【００１５】
（２）慢性肝炎抑制剤
本発明の慢性肝炎抑制剤は、上記のシュンギクの抽出物を有効成分として含有するものである。また、これらの抽出物は、そのまま製剤とすることもできるし、また、各種基剤に配合して製剤としてもよい。配合量や基剤に種類は特に限定されるものではなく、適宜設定すればよい。
【００１６】
＜２＞本発明の慢性肝炎抑制剤を含有する組成物
本発明の組成物は、上記の慢性肝炎抑制剤を、常法にしたがって配合したものであり、例えば、食品、医薬品等が例示できる。本発明の医薬品の剤型は、特に限定されないが、一般に製剤上許容される１または２種類以上の担体、賦形剤、統合剤、防腐剤、安定剤、香味剤等と共に混合して、錠剤、顆粒剤、カプセル剤、水薬、ドリンク剤等の内服剤型とすることが好ましい。このような製剤化は、通常、医薬の製造に用いられる方法にしたがって製剤化することができる。上記医薬品の投与量としては、疾患の種類、症状、患者の年齢、体重等に異なるが、成人１日当たり、シュンギクの抽出物として、５００ｍｇ〜５０００ｍｇを１回ないし数回に分けて経口投与するのが好ましい。
【００１７】
食品に、上記の慢性肝炎抑制剤を用いる場合には、種々の食品に、食品として通常用いられている任意成分とともに、食品原料に抽出物を所要量配合することができる。この抽出物を配合する際に特に留意するすることはなく、通常の製造方法により加工製造することにより、健康食品、機能性食品を製造することができる。配合量は、食品の種類のより異なるが、食品の味を損なわず、且つ十分な慢性肝炎抑制効果を得るためには、食品全量に対して、０．１〜１０重量％の割合で配合するのが好ましい。
【００１８】
【実施例】
以下実施例により、本発明を更に具体的に説明する。
【００１９】
【実施例１】
＜本発明の有効成分の抽出＞
シュンギクの茎、葉の部分を凍結乾燥し、乾燥粉末１００ｇを得た。この乾燥粉末を、以下に示すように、ｎ−ヘキサンを用いて分画し、後の評価に使用した。
【００２０】
シュンギクの茎、葉の部分を凍結乾燥して得た乾燥粉末１００ｇに２Ｌのｎ−ヘキサンを加え十分に攪拌後、残渣を取り除いた上清をヘキサン抽出液として得た。この操作を更に２回繰り返し、計３回の操作により、６０００ｍｌのヘキサン抽出液を得た。この抽出液をエバポレーターを用いて濃縮乾固させることにより、２．７ｇの固形物がヘキサン画分から得られた。
【００２１】
【実施例２】
＜慢性肝炎抑制剤の評価＞
慢性肝炎に対する肝保護作用は、ラットを用いたＤ−ガラクトサミン誘導性の肝障害モデルにより評価した。このＤ−ガラクトサミン誘導体の肝障害は、免疫系を介しての肝障害作用が示唆されるため、慢性肝炎のモデルとされており、臨床試験での評価結果と相関性が高い。
【００２２】
評価には、５週齢の雄性ウィスター系ラットを用いた。４〜５日間の予備飼育の後、試験飼料を１０日間摂取させた。試験に用いた飼料の基本組成は以下の表１の通りである。また、ヘキサン抽出物の飼料への添加は、表１の基本飼料１ｋｇ当たり、各添加物とコーンスターチの合計量を４０１ｇに維持しつつ、本発明のヘキサン画分の抽出物を１．６ｇの比率で添加物として配合して飼料を調製した。
【００２３】
【表１】
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上記の試験飼料を１０日間摂取させた後に、肝障害を誘発するＤ−ガラクトサミンを３５０ｍｇ／ｋｇ腹膜内投与した。そして、その２２時間後に被検ラットを屠殺し、採血及び肝臓摘出を行った。偽薬投与群には、同容量の生理食塩水を投与した。
【００２４】
この採血した血液を用いて、肝細胞の脱落により血中濃度が上昇することが知られている酵素、すなわち、ＡＬＴ：アラニンアミノトランスフェラーゼ（ＧＰＴ）活性と、ＡＳＴ：アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（ＧＯＴ）活性を市販の測定キット（和光純薬）により測定した。そして、この酵素活性の増減を肝障害の指標とした。また、摘出した肝臓の重量も測定した。酵素活性の増減の結果を図１および２にそれぞれ示す。
【００２５】
図１および２に示したとおり、偽処理群（Ｄ−ガラクトサミン非投与群）に比べて、対照群（Ｄ−ガラクトサミン投与群）では顕著に、ＡＬＴ活性とＡＳＴ活性の両方が上昇しており、肝細胞の壊死がおきていることが示唆された。一方、シュンギクのヘキサン抽出画分を添加した飼料で飼育した群は、明かに肝障害抑制作用が観察された。なお、分散分析の後、Ｄｕｎｃａｎ法による検定を行ったところ、ヘキサン画分を添加物として加えた群は、ＡＬＴ活性とＡＳＴ活性の両方がＤ−ガラクトサミン投与群に対して５％以下の危険率で統計的に有意差があることを示した。なお、図１および２中に示してあるアルファベット（ａ，ｂ，ｃ）は、共通するアルファベットを有しない群間で、危険率５％未満で有意差があることを示す。
【００２６】
また、摘出された肝臓重量の測定結果を、各群７匹のラットの平均値として、標準偏差とともに表２に示す。表２に示すように、Ｄ−ガラクトサミン投与群では、非投与群と比較してすべての群で肝臓重量の減少が観察された。この減少はＤ−ガラクトサミン処理により肝臓の壊死が引き起こされたためであると示唆される。
【００２７】
【表２】
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【００２８】
【比較例１】
＜他の肝障害抑制作用を有する植物との比較＞
これまでに四塩化炭素誘導性の肝障害に対して抑制作用を有すると報告されているオカヒジキ、ニンジンについて、シュンギクとの比較試験を行った。いずれの植物とも、可食部分の凍結乾燥粉末をサンプルとした。
【００２９】
慢性肝炎に対する肝保護作用は、ラットを用いたＤ−ガラクトサミン誘導性の肝障害モデルにより評価した。試験に用いた飼料の基本組成は前出の表１の通りである。また、各植物の乾燥粉末の飼料への添加は、いずれも３０ｇ／ｋｇとし、粉末とコーンスターチの含有量を４０１ｇ（サンプル３０ｇ＋コーンスターチ３７１ｇ）とした。結果を、各群７匹のラットの平均値として、標準偏差とともに以下の表３に示す。
【００３０】
【表３】
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オカヒジキ、ニンジンを、シュンギクと同量添加しても、有意な肝保護作用はみとめられなかった。
【００３１】
【発明の効果】
本発明のシュンギクの抽出物を有効成分として含有する慢性肝炎抑制剤は、優れた肝障害抑制効果、特に慢性肝炎抑制効果を有する。また、本発明の慢性肝炎抑制剤は植物由来であるため安全であり、且つその抽出が容易であるため、処方が容易な、該慢性肝炎抑制剤を含む医薬用または食品用組成物を提供することができる。
【００３２】
【図面の簡単な説明】
【図１】  薬物投与２２時間後のＡＬＴ（ＧＰＴ）活性値を示す図である。
【図２】  薬物投与２２時間後のＡＳＴ（ＧＯＴ）活性値を示す図である。
【図１】
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【図２】
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