(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
大麦糠、大麦糠抽出物、米糠抽出物又は麦芽抽出物の何れかであるイネ科植物由来物からなる、大麦粉砕物又はオーツ麦粉砕物の何れかであるβグルカン含有物から水溶性βグルカンを抽出するためのβグルカン抽出促進剤。
【請求項２】
大麦糠、大麦糠抽出物又は米糠抽出物が、穀類粒の外周部より連続して３０重量％以内まで搗精したときの糠、又は該糠の抽出物である請求項１記載のβグルカン抽出促進剤。
【請求項３】
大麦糠抽出物又は米糠抽出物が、糠を７０℃以下５℃以上の温水により抽出して得られる抽出物である請求項１又は２記載のβグルカン抽出促進剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、穀類等のβグルカン含有物から、水溶性βグルカンを効率よく抽出するためのβグルカン抽出促進剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
国民栄養調査によると、我が国における国民１人あたりの食物繊維摂取量は、年々減少傾向にあり、食物繊維は、不足している栄養素に数えられ、積極的な摂取が推奨されている。食物繊維は、水への溶解性の違いから水溶性と不溶性の２つに分類される。不溶性食物繊維は、便容積の増加、腸内容物の通過時間の短縮、腸内圧、腹圧の低下があり、その結果、便秘、大腸ガン等各種大腸疾患の予防、治療効果があるとされる。一方、水溶性食物繊維は、消化管活動の活性化、食事成分、特に糖類や脂肪の消化吸収性の低下、消化管を循環する胆汁酸の吸着排出、消化管内での通過時間の遅延と大腸内で発酵しやすい点に特徴があり、その結果、その摂取によって便秘、大腸疾患、肥満、糖尿病、高脂血症等の予防、治療効果があるとされる。また、水溶性食物繊維の中には、免疫増強作用に優れたものがあり、抗腫瘍剤や抗ガン剤、インフルエンザ予防、その他感染症予防に役立つものがある。
【０００３】
上記のように不溶性食物繊維と水溶性食物繊維はそれぞれ異なる機能を有しており、両者のバランスよい摂取が望まれている。水溶性食物繊維を多く含む食品として、海草類のアルギン酸ナトリウム、カラギーナン、穀類では、トウモロコシ外皮や小麦フスマのヘミセルロース、大麦やオーツ麦のβグルカン、微生物類（微生物の細胞壁や胆子菌きのこの菌糸体や子実体）のβグルカンが知られている。大麦やオーツ麦のβグルカンは、血清コレステロールの低下、血清インスリン濃度の低下による血糖値上昇抑制効果等の生理作用が特に強く、ＦＤＡにおいてもその摂取が心臓疾患などの生活習慣病のリスクを低減する素材として認められるに至っている。また、大麦あるいは微生物類のβグルカンは、免疫増強活性に優れていることが知られている。
【０００４】
近年、我が国の食生活は、欧米諸外国と類似してきたのと同時に、グルメ志向、おいしさ追求のあまり、食品から食物繊維をなるべく除外するようになった。その結果、食物繊維の摂取量が減少し、現在の食物繊維の摂取不足を招くに至っている。また、味噌や納豆のような発酵食品の摂取量が減少、抗生物質の多用による微生物菌相の変化、環境からの微生物の排除等により、病原菌を含めた微生物全体に対して接触する機会が減少した。その結果、感染症に罹患する機会が減少したが、同時に免疫力の低下を招いて、自己免疫疾患やアレルギー、発ガン率等が増加傾向にある。そこで、生活習慣病や免疫力の維持・増強のためには、食品のおいしさを損ねず、食物繊維や免疫増強作用のある多糖体の摂取量を増加させることが必要となっている。このような状況の中で、食品素材より抽出・単離された水溶性食物繊維を他の食品あるいは加工食品に添加する方法が、食物繊維や多糖体の摂取量を増加させる１つの方法として非常に期待されている。
【０００５】
大麦やオーツ麦由来の水溶性食物繊維は、その主成分がβグルカンであり、このような穀類由来のβグルカンは、でんぷん・脂質・蛋白質との相和性がきわめてよく、加工食品に対する添加剤として優れていることが知られている。しかし、大麦やオーツ麦、水溶性βグルカン以外の成分を多量に含んでいるため、そのまま食品に添加すると、食品の食感を損ね、あるいは小麦加工食品においては、製パン性等の加工適性を損ねることが一般的に指摘されている。そこで、これらβグルカンを含む食品から水溶性の食物繊維を濃縮あるいは単離して利用する方法が有効とされ、大麦あるいはオーツ麦に含まれる食物繊維であるβグルカンを抽出する方法が知られている。
【０００６】
穀類から高分子量のβグルカンを得る方法としては、例えば、多ろう質大麦を原料とし、水抽出により製造する方法（特公平４−１１１９７号公報）、あるいは、大麦、オーツ麦を原料として、アルカリ抽出、中和、アルコール沈殿により、重量平均分子量１０万〜１００万のβグルカンを得る方法（特公平６−８３６５２号公報）、搗精歩留まり８２％以下の大麦糠類を原料として、８０〜９０℃の熱水にてβグルカンを抽出する方法（特開平１１−２２５７０６号公報）等が知られている。大麦のβグルカンは、麦粒の細胞壁を構成している多糖類の１種であり、分子量は、２５０万ともいわれている。抽出過程でβグルカンは、低分子化するが、通常、上記のような熱水抽出あるいはアルカリ性水溶液下では、比較的高分子量のβグルカンが得られる（分子量１０万以上）。これら抽出されたβグルカンは、高分子量であるがゆえ、水溶液は高粘性を示す。また、乾燥物を水に再可溶させるのに時間がかかり、高濃度に溶解させることも困難であるという欠点がある。
【０００７】
これらの欠点は、βグルカンを低分子化することで、改良できることが知られている。大麦粉砕物を温水で抽出することで、低分子化したβグルカンを得る方法が、ＷＯ９８／１３０５６号公報に記載されている。しかし、この公報記載の抽出温度、抽出時間を用いた方法では、必ずしも、低分子化したβグルカンを得ることはできず、公報記載の方法は、大麦原料に依存して大きく異なり、多くの大麦原料に適応できる方法でない、極めて限られたものであった。従って、作業性がよく水への溶解性に優れた、分子量１０万以下に低分子化されたβグルカンを安定して効率よく得る方法は、これまでに知られておらず、その方法の開発が望まれていた。
【０００８】
【発明が解決しようとする課題】
従って、本発明の目的は、穀類等のβグルカン含有物から、水溶性βグルカンを効率よく抽出するためのβグルカン抽出促進剤を提供することにある。
【０００９】
【課題を解決するための手段】
本発明は、大麦糠、大麦糠抽出物、米糠抽出物又は麦芽抽出物の何れかであるイネ科植物由来物からなる、大麦粉砕物又はオーツ麦粉砕物の何れかであるβグルカン含有物から水溶性βグルカンを抽出するためのβグルカン抽出促進剤を提供することにより、上記目的を達成したものである。
【００１０】
【発明の実施の形態】
本発明は、水溶性食物繊維として多くの生理機能を持つβグルカンを効率よく抽出するためのβグルカン抽出促進剤、さらに詳しくは、分子量１０万以下に低分子化されたβグルカンを効率よく安定に抽出するためのβグルカン抽出促進剤である。以下に本発明についてさらに詳しく説明する。
【００１１】
本発明のβグルカン抽出促進剤とは、βグルカン含有物から、水、冷水、温水、熱水、各種溶剤等を用いて水溶性βグルカンを抽出する場合に、水溶性βグルカンを効率よくかつ純度よく抽出することができるβグルカン抽出促進剤である。
【００１２】
本発明において水溶性βグルカンとは、グルコースを主成分とする重合体であり、分子内に1,2 、1,3 、1,4 、1,6-β-Dグルコース 結合を少なくとも１種類以上有するものをいい、分子量１０万以下のβグルカン及び、分子量１０万以下のβグルカンを主成分として水に溶解するβグルカンのことをいう。
【００１３】
本発明のβグルカン抽出促進剤は、イネ科植物由来物である。イネ科植物由来物としては、大麦糠、大麦糠抽出物、米糠抽出物又は麦芽抽出物が挙げられる。
【００１４】
本発明でいう糠とは、穀類の粒を外周部から連続して搗精したときの糠のことをいい、外周部から連続して３０重量％以内まで搗精したときの糠、いわゆる搗精歩留まり７０重量％以内の糠が好ましく、外周部から連続して２０重量％以内まで搗精したときの糠、いわゆる搗精歩留まり８０重量％以内の糠がより好ましく、外周部から連続して１８重量％以内まで搗精したときの糠、いわゆる搗精歩留まり８２重量％以内の糠がさらに好ましい。また、糠抽出物は、外周部から連続して３０重量％以内まで搗精したときの糠、いわゆる搗精歩留まり７０重量％以内の糠から抽出したものが好ましく、外周部から連続して２０重量％以内まで搗精したときの糠、いわゆる搗精歩留まり８０重量％以内の糠から抽出したものがより好ましく、外周部から連続して１８重量％以内まで搗精したときの糠、いわゆる搗精歩留まり８２重量％以内の糠から抽出したものがさらに好ましい。
【００１６】
本発明のβグルカン抽出促進剤である糠抽出物の製造方法は、糠１００重量部に温水２００〜１００００重量部、好ましくは３００〜５０００重量部、さらに好ましくは４００〜１０００重量部を加え、０．１〜１２時間、好ましくは０．２〜６時間、さらに好ましくは０．５〜２時間、撹拌しながら抽出するのが望ましい。糠は、脱脂されたものであってもかまわない。抽出後の糠―温水の混合物は、遠心分離、濾過分離、膜分離、自然沈降等、固液分離方法として知られる任意の方法で固液分離し、糠抽出物（糠抽出液）を得ることができる。ここで抽出に用いる温水とは、温度８０℃以下４℃以上の抽出用水であり、好ましくは７０℃以下５℃以上、さらに好ましくは６０℃以下１０℃以上がよい。抽出用水は、水道水、地下水、井戸水等、食品衛生上問題なく、食品製造に使用可能であればいずれも使用できる。抽出用水のｐＨは、中性付近がよく、ｐＨ１０〜ｐＨ４、好ましくはｐＨ９〜ｐＨ５、さらに好ましくはｐＨ８〜ｐＨ６がよい。抽出用水には、糠抽出物の安定性を保持するため、必要に応じて塩類、酸・アルカリ類を添加して用いることができる。
【００１７】
上記方法で得られた糠抽出物（糠抽出液）は、水溶液であり、これは、膜濃縮法、凍結濃縮法、減圧濃縮法、塩析沈殿法、有機溶媒沈殿法等、液体の濃縮方法として知られる任意の方法で濃縮し、糠抽出物濃縮物を得ることができる。また、糠抽出物、あるいは、糠抽出物濃縮物は、塩析沈殿法、有機溶媒沈殿法、凍結乾燥等、乾燥方法として知られる任意の方法で乾燥させ、糠抽出物乾燥物を得ることができる。糠抽出物乾燥物は粉砕して粉末化して使用することができる。
【００１９】
本発明のβグルカン抽出促進剤を使用することで、βグルカン含有物から、分子量１０万以下に低分子化されたβグルカンを安定して抽出することができる。
【００２０】
本発明のβグルカン抽出促進剤を用いて抽出する抽出対象のβグルカン含有物としては、大麦粉砕物又はオーツ麦粉砕物が挙げられる。大麦、オーツ麦は、主食用、醸造用、飼料用等、いずれも使用することができる。目的とするβグルカンを多く含むものが望ましく、例えば大麦ではβグルカンを比較的多量に含むことが知られている蛋白質含有量の高い性質を持った二条や六条の大麦種、あるいは、でんぷんがもち性の性質を持ったもち性皮つき大麦、もち性裸大麦等が望ましい。
【００２１】
本発明のβグルカン抽出促進剤を用いての水溶性βグルカンの抽出方法は、抽出時に本発明のβグルカン抽出促進剤を添加すればよい。具体的な抽出方法としては、βグルカン含有物に本発明のβグルカン抽出促進剤を加えたもの１００重量部に温水２５０〜１５００重量部を加えるか、又はβグルカン含有物１００重量部に、本発明のβグルカン抽出促進剤を加えた温水２５０〜１５００重量部を加え、０．５〜２４時間、好ましくは１〜１２時間、さらに好ましくは１．５〜６時間、撹拌しながら抽出するのが望ましい。抽出後に、固液分離、精製等の工程を加え、水溶性βグルカンを得ることができる。
【００２２】
βグルカン含有物に対する本発明のβグルカン抽出促進剤の添加量は、制限されることはないが、糠を抽出促進剤として使用する場合、βグルカン含有物１００重量部に対して、抽出促進剤の添加量は、２００〜０．１重量部、好ましくは１００〜１重量部、さらに好ましくは５０〜５重量部である。糠抽出物あるいは糠抽出物濃縮物を抽出促進剤として用いる場合の添加量は、βグルカン含有物１重量部に対して、０．０１〜１００重量部、好ましくは０．０５〜５０重量部、さらに好ましくは０．１〜１０重量部である。糠抽出物乾燥物を抽出促進剤として用いる場合の添加量は、βグルカン含有物１重量部に対して、０．００１〜１０重量部、好ましくは０．０１〜１重量部、さらに好ましくは０．０５〜０．５重量部である。本発明のβグルカン抽出促進剤は、抽出原料（βグルカン含有物）にそのまま添加してもよいし、抽出に用いる温水に添加してもよい。
【００２３】
水溶性βグルカン抽出時に用いる温水とは、温度８０℃以下４℃以上の抽出用水であり、好ましくは７０℃以下５℃以上、さらに好ましくは６０℃以下１０℃以上がよい。抽出用水は、水道水、地下水、井戸水等、食品衛生上問題なく、食品製造に使用可能であればいずれも使用できる。抽出用水のｐＨは、中性付近がよく、ｐＨ１０〜ｐＨ４、好ましくはｐＨ９〜ｐＨ５、さらに好ましくはｐＨ８〜ｐＨ６がよい。抽出用水には、抽出されたβグルカンの安定性を保持するため、必要に応じて塩類、酸・アルカリ類を添加して用いることができる。
【００２４】
水溶性βグルカン抽出時に、さらに本発明の効果を損なわない範囲で、αアミラーゼ、蛋白質分解酵素、グルコアミラーゼを添加して、低分子化βグルカンの抽出を促進することができる。αアミラーゼとは、糊化でんぷんやグリコーゲン等のα1-4 グリコシド結合を任意の位置で加水分解し、分解生成物としてデキストリンやオリゴ糖、グルコースを生じるものである。また、グリコアミラーゼとは、可溶性でんぷんのα1-4 グリコシド結合を非還元末端より順次グルコース単位で分解するものである。蛋白質分解酵素は、βグルカンを抽出時に同時に抽出される可溶性の蛋白質やβグルカンと複合化しているペプチド類を分解してβグルカンの抽出をさらに促進するために使用される。
【００２５】
また、抽出後には、遠心分離、濾過分離、膜分離、自然沈降等、固液分離方法として知られる任意の方法で固液分離し、水溶性βグルカン抽出液を得ることができる。さらに水溶性βグルカン抽出液は、膜濃縮法、凍結濃縮法、減圧濃縮法、塩析沈殿法、有機溶媒沈殿法等、液体の濃縮方法として知られる任意の方法や、加熱して水分を蒸発させて濃縮することにより、水溶性βグルカン抽出液濃縮物とすることができる。さらに、水溶性βグルカン抽出液や水溶性βグルカン抽出液濃縮物は、塩析沈殿法、有機溶媒沈殿法、凍結乾燥、加熱乾燥法等、乾燥方法として知られる任意の方法で乾燥させ、水溶性βグルカン抽出乾燥物を得ることができる。水溶性βグルカン抽出乾燥物は粉砕して粉末化して使用することができる。加熱濃縮法や加熱乾燥法は、同操作により、抽出液に含まれる蛋白質やペプチド等を変性沈殿あるいは分解させることができ、水溶性βグルカンの純度を向上させるため、好ましい方法である。
【００２６】
本発明のβグルカン抽出促進剤を使用すれば、βグルカン含有物に左右されずに安定して効率よく分子量１０万以下の水溶性βグルカンを抽出することが可能となる。
【００２７】
【実施例】
以下、実施例により本発明を更に説明するが、本発明はこれら実施例によって限定されるものではない。尚、特に記述がない限り、実施例中の％は重量によるものであり、分子量は重量平均分子量である。
【００２８】
調製例１（βグルカン抽出促進剤の調製）
もち性裸大麦を研削式搗精機により削り、外周部より連続して１８％（搗精歩留まり８２％）まで精麦した。このとき発生した糠を糠−１とした。また、もち性裸大麦を研削式搗精機により削り、外周部より連続して３０％（搗精歩留まり７０％）まで精麦した。このとき発生した糠を糠−２とした。また、もち性裸大麦を研削式搗精機により削り、外周部より連続して１０％（搗精歩留まり９０％）まで精麦した。このとき発生した糠を糠−３とした。
【００２９】
上記外周部より連続して１８％（搗精歩留まり８２％）まで精麦した大麦を、さらに研削式搗精機により削り、搗精歩留まり５５％まで精麦した。このとき発生した粉砕物を粉砕物−１とした。得られた大麦精麦粒をさらに削り、搗精歩留まり３５％までの粉砕物を粉砕物−２、搗精歩留まり３５〜１５％までを粉砕物―３、残った中心部１５％を粉砕し、粉砕物―４とした。
【００３０】
調製例２（βグルカン抽出促進剤：抽出液の調製）
調製例１で得た糠−１の粉砕物１０ｇを１００ｍｌコニカルビーカーにとり、５０ｍｌの蒸留水を加えて２５℃にて１０分間、撹拌抽出した。抽出後、遠心分離上清を得て、抽出促進剤液−１とした。温度１０℃、抽出時間を１時間としたこと以外は抽出促進剤液−１と同様に操作し、抽出促進剤液−２を得た。温度３０℃、抽出時間を０．５時間としたこと以外は抽出促進剤液−１と同様に操作し、抽出促進剤液−３を得た。抽出促進剤液−２の２０ｍｌを分子量３０００でカットする膜を用いた限外濃縮によって容量を半分となるまで濃縮し、抽出促進剤濃縮物を得た。抽出促進剤液−３の２０ｍｌを凍結乾燥して、０．４ｇの抽出促進剤乾燥物を得た。
【００３１】
調製例３（βグルカン抽出促進剤の調製）
調製例１で得た糠−２の粉砕物２０ｇを２００ｍｌコニカルビーカーにとり、１００ｍｌのアセトンを加えて４℃にて１０分間、撹拌抽出した。抽出後、遠心分離にて沈殿を回収し、さらに１００ｍｌのアセトンを加え、脱脂操作を繰り返した。遠心分離で回収した沈殿をドラフトに放置し、脱脂糠−１を得た。
【００３２】
調製例４（βグルカン抽出促進剤：抽出液の調製）
コシヒカリ玄米を搗精機により削り、外周部より連続して１８％（搗精歩留まり９２％）まで精米した。このとき発生した糠を米糠とした。米糠の５ｇを１００ｍｌのコニカルビーカーにとり、２５ｍｌの蒸留水を加えて２０℃にて３０分間、撹拌抽出した。抽出後、遠心分離上清を得て、抽出促進剤液−４とした。
【００３３】
調製例５（βグルカン抽出促進剤：抽出液の調製）
麦芽を粉砕し麦芽粉砕物を得た。麦芽粉砕物の５ｇを１００ｍｌのコニカルビーカーにとり、５０ｍｌの蒸留水を加えて２５℃にて４０分間、撹拌抽出した。抽出後、遠心分離上清を得て、抽出促進剤液−５とした。
【００３４】
試験例１
調製例１で得た各大麦分画物のβグルカン含有量を調べた。βグルカンの分析は、メガザイム社のβグルカン測定キットを用いて、McCleary法（酵素法）により行った。まず、５００μｍ（３０メッシュ）のふるいにかけた各分画物の水分含量を測定し、その１００ｍｇを１７ｍｌチューブに取り、５０％エタノール溶液を２００μｌ加え、分散させた。次に４ｍｌの２０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ６．５）を加え、よく混合した後、煮沸した湯浴中にて１分間加温した。よく混合し、さらに２分間、湯浴中で加熱した。５０℃に冷却後、５分間放置してから、各チューブにリケナーゼ酵素溶液（キットに付属するバイアルを２０ｍｌの２０ｍＭリン酸緩衝液で希釈、残量は凍結保存）の２００μｌ（１０Ｕ）を加え、１時間、５０℃にて反応させた。チューブに２００ｍＭ酢酸緩衝液（ｐＨ４．０）を、５ｍｌ加えて、静かに混合した。室温に５分間放置し、遠心分離にて上清を得た。１００μl を3 本のチューブに取り、１本には１００μｌの５０ｍＭ酢酸緩衝液（ｐＨ４．０）を、他の２本には１００μｌ（０．２Ｕ）のβグルコシターゼ溶液（キットに付属するバイアルを２０ｍｌの５０ｍＭ酢酸緩衝液で希釈、残量は凍結保存）を加え、５０℃にて１０分間、反応させた。３ｍｌのグスコースオキシターゼ／ペルオキシターゼ溶液を加えて、５０℃にて２０分間反応させ、各サンプルの５１０ｎｍにおける吸光度（ＥＡ）を測定した。βグルカン含有量は、次式により求めた。
【００３５】
βグルカン（％，Ｗ／Ｗ）＝（ＥＡ）×（Ｆ／Ｗ）×８．４６
Ｆ＝（１００）／（グスコース１００μｇの吸光度）
Ｗ＝算出された無水物重量（ｍｇ）
【００３６】
その結果、大麦分画物におけるβグルカン含有量は、糠−１は（３．３％）、糠−２は（３．６％）、糠−３は（２．７％）、粉砕物−１は（５．４％）、粉砕物−２は（６．５％）、粉砕物−３は（６．４％）、粉砕物−４は（８．０％）であり、外周部は、βグルカン含有量は低く、中心部がより多くβグルカンを含んでいることがわかった。βグルカンを抽出する原料としては、大麦粒の場合、より中心部に近い粉砕物を使用することが有利である。
【００３７】
試験例２
ＷＯ９８／１３０５６号公報に記載の方法にて低分子化βグルカンの製造を試みた。得られた抽出物は、さらにＨＰＬＣゲル濾過法にて分画し、βグルカンの分子量測定を行った。試験例１に示したように、中心部に近いほどβグルカン量が多いことがわかったので、外周部４５％を除去した精製大麦を原料とした。すなわち、市販の精製大麦粒（米粒様に加工されたもの）を粉砕し、５００μｍ（３０メッシュ）のふるいにかけ大麦粉砕物を得た。試験例―１と同様にβグルカン含有量を測定したところ、６．５％であった。得られた大麦粉砕物２０ｇに１００ｍｌの蒸留水を加え、温度２５，４０、４５、５５℃にて撹拌抽出した。抽出時間を０．５〜５時間まで変化させて、経時的に５ｍｌをサンプリングした。抽出混合液を１０分間、遠心分離（１００００ｒｐｍ）して、遠心上清を得た。遠心上清を−１０℃に冷却して一昼夜そのまま放置してから解凍した。遠心分離後、上清を捨て、沈殿を凍結乾燥させた。得られた沈殿の５ｍｇをチューブに取り、０．５ｍｌの蒸留水を加えて、沸騰水中で溶解させた。０．２２μｍのフィルターを通してＨＰＬＣ用のサンプルとした。分離にはＨＰＬＣゲル濾過カラムであるＳｈｏｄｅｘのパックドカラムＫＳ−８０５（昭和電工社製）を用い、流速０．６ｍｌ／ｍｉｎ．、温度５０℃、検出にはRI検出器、分離溶媒は水で実施した。分子量マーカーとしてはＳｈｏｄｅｘプルラン標準液Ｐ−８２（昭和電工社製）を用いた。温度５５℃においては、３時間の抽出まで分子量１０万以下３０００以上の範囲にピークは得られず、主に分子量４０万〜２０万のピークをもつ抽出物が得られた。５時間の抽出で得られた抽出物は分子量４０万〜２０万のピークが分子量１１万〜１０万にピークがシフトしたが１０万以下で分子量３０００以上の範囲にピークは認めなかった。４５℃で抽出したところ、２時間の抽出で分子量２０万、５時間の抽出で分子量１１万のピークを示す抽出物が得られたが、分子量１０万以下で分子量３０００以上の範囲にピークは認められなかった。４０℃の０．５時間抽出では、得られたピークは分子量４０万を示し、分子量１０万以下で３０００以上の範囲にピークは認められなかった。２５℃抽出では、０．５時間〜３時間までの抽出で、分子量４０万〜２０万のピークをもつ抽出物が得られ、分子量１０万以下で分子量３０００以上の範囲にピークは認められなかった。ＨＰＬＣ分離で分子量１０万以上に溶出される画分は、試験例１記載の方法でβグルカンであることを確認した。外周部より４５％を削除した精製大麦粒を温水抽出したが、低分子化βグルカンは得られなかった。
【００３８】
実施例１
調製例１で得た糠−１の１ｇと試験例−２で得られた大麦粉砕物１０ｇを１００ｍｌコニカルビーカーにとり、５０ｍｌの蒸留水を加えて４０℃にて２時間、撹拌抽出した。抽出後、遠心分離上清を得て、沸騰水中に１０分間放置し、再度、遠心分離して、上清を得た。その０．５ｍｌに１ｍｌのエタノールを加え、１時間放置後、遠心分離にて沈殿を回収した。凍結乾燥機で、エタノール・水分を除去し、沈殿に０．５ｍｌの蒸留水を加え、沸騰水中で溶解させた。遠心分離上清を０．２２μｍのフィルターを通した後、サンプル１とした。また、調製例１で得た糠−１の１ｇを１００ｍｌコニカルビーカーにとり、５０ｍｌの蒸留水を加えて４０℃にて２時間、撹拌抽出した。以後、サンプル１の抽出後の操作と同様に操作し、サンプル２を得た。試験例−２で得られた大麦粉砕物の１０ｇを１００ｍｌコニカルビーカーにとり、５０ｍｌの蒸留水を加えて４０℃にて２時間、撹拌抽出した。以後、サンプル１の抽出後の操作と同様に操作し、サンプル３を得た。調製例１で得た糠−１の１０ｇを１００ｍｌコニカルビーカーにとり、５０ｍｌの蒸留水を加えて４０℃にて２時間、撹拌抽出した。以後、サンプル１の抽出後の操作と同様に操作し、サンプル４を得た。サンプル１〜４は、試験例−２と同様にピークの分子量を測定するとともに、ピーク面積値を算出した。その結果、サンプル１は、分子量４０万〜１万に検出され、最大ピークは、分子量３万であり、分子量１０万以下に検出されたエリア面積値は３３万であった。サンプル２は、分子量４０万〜１万にピークを認め、最大ピークは、分子量３万であり、分子量１０万以下に検出されたエリア面積値は０．５万であった。サンプル１とサンプル２で分子量１０万以下の面積値を比較したところ、サンプル１は、サンプル２に対して６６倍であった。サンプル３は、分子量１０万以下３０００以上の範囲に検出されず、主に分子量４０万〜２０万のピークを認めた。分子量３万に検出される面積値は０であった。サンプル４は、分子量４０万〜１万にピークを認め、最大ピークは、分子量３万であり、分子量１０万以下に検出されたエリア面積値は１２万であった。サンプル１〜２、４で分子量１０万以下にHPLCで溶出された画分は、試験例１記載の方法でβグルカンであることを確認した。実施例１より、低分子化βグルカンが抽出されない大麦粒の中心部へ糠を添加してβグルカンを抽出することで、大麦粒の中心に近い部分に含まれるβグルカンが低分子化し、その抽出が促進されていることがわかった。
【００３９】
実施例２
調製例１で得た糠−１の１ｇと粉砕物−１の１０ｇを１００ｍｌコニカルビーカーにとり、６０ｍｌの蒸留水を加えて５５℃にて１．５時間、撹拌抽出した。抽出後、遠心分離上清を得て、沸騰水中に１０分間放置し、再度、遠心分離して、上清を得た。その０．５ｍｌに１ｍｌのエタノールを加え、１時間放置後、遠心分離にて沈殿を回収した。凍結乾燥機で、エタノール・水分を除去し、沈殿に０．５ｍｌの蒸留水を加え、沸騰水中で溶解させた。遠心分離上清を０．２２μｍのフィルターを通した後、サンプル５とした。また、粉砕物−１の１０ｇを１００ｍｌコニカルビーカーにとり、６０ｍｌの蒸留水を加えて５５℃にて１．５時間、撹拌抽出した。以後、前記サンプル１の抽出後の操作と同様に操作し、サンプル６を得た。また、調製例１で得た糠−２の０．５ｇと粉砕物−２の１０ｇを１００ｍｌコニカルビーカーにとり、５０ｍｌの蒸留水を加えて４０℃にて２時間、撹拌抽出した。以後、前記サンプル１の抽出後の操作と同様に操作し、サンプル７を得た。また、粉砕物−２の１０ｇを１００ｍｌコニカルビーカーにとり、５０ｍｌの蒸留水を加えて４０℃にて２時間、撹拌抽出した。以後、前記サンプル１の抽出後の操作と同様に操作し、サンプル８を得た。また、調製例１で得た糠−３の２ｇと粉砕物−３の１０ｇを２００ｍｌコニカルビーカーにとり、８０ｍｌの蒸留水を加えて５０℃にて１時間、撹拌抽出した。以後、前記サンプル１の抽出後の操作と同様に操作し、サンプル９を得た。また、調製例１で得た糠−３の０．８ｇと粉砕物−４の１０ｇを２００ｍｌコニカルビーカーにとり、１００ｍｌの蒸留水を加えて４５℃にて３時間、撹拌抽出した。以後、前記サンプル１の抽出後の操作と同様に操作し、サンプル１０を得た。サンプル５〜１０は、試験例２と同様にピークの分子量を測定するとともに、ピーク面積値を算出した。その結果、サンプル５は、分子量４０万〜１万に検出され、最大ピークは、分子量４．５万であり、分子量１０万以下に検出されたエリア面積値は４３万であった。サンプル６およびサンプル８は、分子量１０万以下３０００以上の範囲に検出されず、主に分子量４０万〜２０万のピークを認めた。分子量１０万以下に検出される面積値は０であった。サンプル７は、分子量４０万〜１万に検出され、最大ピークは、分子量５．５万であり、分子量１０万以下に検出されたエリア面積値は４０万であった。サンプル９は、分子量４０万〜１万に検出され、最大ピークは、分子量５万であり、分子量１０万以下に検出されたエリア面積値は４２万であった。サンプル１０は、分子量４０万〜１万に検出され、最大ピークは、分子量３万であり、分子量１０万以下に検出されたエリア面積値は４７万であった。サンプル５〜１０で分子量１０万以下にHPLCで溶出された画分は、試験例１記載の方法でβグルカンであることを確認した。
【００４０】
実施例３
調製例２で得た抽出促進剤液−１の１０ｍｌと試験例２の大麦粉砕物の１５ｇを２００ｍｌコニカルビーカーにとり、９０ｍｌの蒸留水を加えて４０℃にて１５分間、３０分間、１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、１２時間、２４時間、撹拌抽出した。各抽出時間が経過の後、遠心分離上清を得て、沸騰水中に１０分間放置し、再度、遠心分離して、上清を得た。その０．５ｍｌに１ｍｌのエタノールを加え、１時間放置後、遠心分離にて沈殿を回収した。凍結乾燥機で、エタノール・水分を除去し、沈殿に０．５ｍｌの蒸留水を加え、沸騰水中で溶解させた。遠心分離上清を０．２２μｍのフィルターを通した後、サンプル１１〜２０とした。サンプル１１〜２０は、すべて分子量４０万〜１万に検出され、最大ピークは、分子量９万、８．５万、７万、５．５万、４．５万、３万、２．５万、２万、１万、６０００であり、分子量１０万以下に検出されたエリア面積値は、それぞれ、１５万、１４万、１８万、２５万、３７万、４１万、４３万、４２万、４０万、３２万であった。分子量１０万以下のピーク面積値は、抽出時間とともに増加し、６時間より減少に転じた。分子量１０万以下の最大ピークは、抽出時間とともに分子量が低分子化される傾向にあり、最大ピークは、分子量９万から分子量６０００程度に移行した。分子量１０万以下にHPLCで溶出された画分は、試験例１記載の方法でβグルカンであることを確認した。
【００４１】
実施例４
調製例２で得た抽出促進剤液−２の０ｍｌ、１ｍｌ、２ｍｌ、５ｍｌ、１０ｍｌ、２０ｍｌと調製例１の粉砕物−４の１０ｇを１００ｍｌコニカルビーカーにとり、全容量が５０ｍｌとなるように蒸留水を加えて、５５℃にて２時間、撹拌抽出した。抽出後、遠心分離上清を得て、沸騰水中に１０分間放置し、再度、遠心分離して、上清を得た。その０．５ｍｌに１ｍｌのエタノールを加え、１時間放置後、遠心分離にて沈殿を回収した。凍結乾燥機で、エタノール・水分を除去し、沈殿に０．５ｍｌの蒸留水を加え、沸騰水中で溶解させた。遠心分離上清を０．２２μｍのフィルターを通した後、サンプル２１〜２６とした。サンプル２１は、分子量１０万以下３０００以上の範囲に検出されず、主に分子量４０万〜２０万のピークを認めた。分子量１０万以下に検出される面積値は０であった。サンプル２２〜２６は、分子量４０万〜１万に検出され、最大ピークは、分子量８万、８万、４．５万、４．５万、３万であり、分子量１０万以下に検出されたエリア面積値は、それぞれ、１８万、２６万、５３万、５５万、５６万であった。分子量１０万以下にHPLCで溶出された画分は、試験例１記載の方法でβグルカンであることを確認した。
【００４２】
実施例５
調製例２で得た抽出促進剤濃縮物５ｍｌを３００ｍｌコニカルビーカーにとり、蒸留水１００ｍｌおよび調製例１で得た粉砕物−１の１８ｇを加え、４２℃にて２．５時間、撹拌抽出した。抽出後、遠心分離上清を得て、沸騰水中に１０分間放置し、再度、遠心分離して、上清を得た。以後、実施例１と同様に操作し、ＨＰＬＣ検査用のサンプル２７を得た。また、調製例２で得た抽出促進剤乾燥物の０．２５ｇを３００ｍｌコニカルビーカーにとり、蒸留水１００ｍｌに溶解させてから、調製例１で得た粉砕物−１の１８ｇを加え、４２℃にて２．５時間、撹拌抽出した。抽出後、遠心分離上清を得て、沸騰水中に１０分間放置し、再度、遠心分離して、上清を得た。以後、実施例１と同様に操作し、ＨＰＬＣ検査用のサンプル２８を得た。試験例２と同様にピークの分子量および、分子量１０万以下に検出される面積値を算出した。サンプル２７、２８は、ともに分子量４０万〜１万にピークを認め、最大ピークは、分子量３．５万であった。分子量１０万以下の面積値は、それぞれ、６２万、５５万であった。分子量１０万以下にHPLCで溶出された画分は、試験例１記載の方法でβグルカンであることを確認した。
【００４３】
実施例６
抽出促進剤として調製例３で得た脱脂糠−１を用いた。すなわち、脱脂糠−１の０．７ｇと調製例１で得た粉砕物−３の１０ｇを１００ｍｌコニカルビーカーに取り、蒸留水４０ｍｌを加えて、５０℃にて３時間、撹拌抽出した。抽出後、遠心分離上清を得て、以後、実施例１と同様に操作し、ＨＰＬＣ検査用のサンプル２９を得た。サンプル２９は、分子量４０万〜１万にピークを認め、最大ピークは、分子量３万で、分子量１０万以下の検出される面積値は６０万であった。分子量１０万以下にHPLCで溶出された画分は、試験例１記載の方法でβグルカンであることを確認した。
【００４４】
実施例７
抽出促進剤として調製例４、５で得た抽出促進剤液−４、−５を用いた。すなわち、３００ｍｌコニカルビーカーに各抽出促進剤液の１ｍｌ、および蒸留水９０ｍｌを加え混合した。調製例１で得た粉砕物−１の２０ｇを加え、４０℃にて４時間、撹拌抽出した。抽出後、遠心分離上清を得て、以後、実施例１と同様に操作し、ＨＰＬＣ検査用のサンプル３０、３１を得た。サンプル３０、３１は、分子量４０万〜１万にピークを認め、最大ピークは、分子量５万、３．５万で、分子量１０万以下３０００以上に検出される面積値は２４万、３０万であった。分子量１０万以下にHPLCで溶出された画分は、試験例１記載の方法でβグルカンであることを確認した。
【００４５】
【発明の効果】
本発明のβグルカン抽出促進剤は、穀類等のβグルカン含有物から水溶性βグルカンを効率よく抽出する際に、抽出原料又は抽出用液に添加することにより、βグルカン含有物に左右されずに、作業性がよく水への溶解性に優れた、分子量１０万以下に低分子化されたβグルカンを安定して効率よく得ることができる。