(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
複数のマーカーを有するマーキングシステムであって、
前記複数のマーカーのそれぞれがＤＮＡ断片型を含むマーカーであり、
前記ＤＮＡ断片型は複数の異なるＤＮＡ断片を含み、
（ａ）一つのＤＮＡ断片型におけるすべての前記ＤＮＡ断片は互いに異なり；
（ｂ）前記異なるＤＮＡ断片のそれぞれが長さの可変部分を有し；
（ｃ）一つのＤＮＡ断片型における前記異なるＤＮＡ断片のそれぞれは、前記長さの可変部分が異なっていることによって互いに長さが異なっており；
（１）前記異なるＤＮＡ断片のそれぞれはさらに、一つ又は二つの独自性の可変部分を含み；
（２）前記独自性の可変部分は、前記長さの可変部分と比較して前記ＤＮＡ断片の５´末端の方にあり、及び／又は、前記長さの可変部分と比較して前記ＤＮＡ断片の３´末端の方にあり；
（３）前記１又は複数の独自性の可変部分は、いくつかの異なる配列から選択された配列を有し；さらに、
２つ以上のフォワードプライマー及び１つのリバースプライマーを使用した前記ＤＮＡ断片型の増幅は、前記プライマーのうち２つ以上に検出可能な要素が提供される場合に、増幅産物に検出可能な要素を提供し、前記一つ又は二つの独自性の可変部分による独自性は、前記増幅産物において増幅によって提供される前記検出可能な要素の独自性を決定し、
可能なマーカーの数は、可能なＤＮＡ断片型の数に依存し、可能なＤＮＡ断片型の数は、ＤＮＡ断片型に含まれる可能な長さの可変部分の数、可能な独自性の可変部分の数、及び、異なるＤＮＡ断片の数に依存することを特徴とするマーキングシステム。
【請求項２】
前記異なる独自性の可変部分は同じ長さであることを特徴とする請求項１に記載のマーキングシステム。
【請求項３】
前記ＤＮＡ断片の５´末端及び３´末端における前記独自性の可変部分が提供されることを特徴とする請求項１又は２に記載のマーキングシステム。
【請求項４】
前記独自性の可変部分による独自性は、前記配列の５つ以上の塩基の違いにより、変化することを特徴とする前述までの請求項の何れかの請求項に記載のマーキングシステム。
【請求項５】
使用される前記独自性の可変部分及び／又はプライマーは、互いにハイブリダイズしないことを特徴とする前述までの請求項の何れかの請求項に記載のマーキングシステム。
【請求項６】
前記独自性の可変部分における選択された数の可能な独自性は、すべてのＤＮＡ断片において提供されることを特徴とする前述までの請求項の何れかの請求項に記載のマーキングシステム。
【請求項７】
前記独自性の可変部分における選択された数の可能な独自性は、特に前記５´末端及び３´末端の独自性の可変部分における、前記ＤＮＡ断片の前記独自性の可変部分の各々において提供されることを特徴とする前述までの請求項の何れかの請求項に記載のマーキングシステム。
【請求項８】
前記ＤＮＡ断片は、前記５´末端で３つの可能な独自性の可変部分のうちの一つ及び前記３´末端で３つの可能な独自性の可変部分のうちの一つを有することを特徴とする前述までの請求項の何れかの請求項に記載のマーキングシステム。
【請求項９】
前記ＤＮＡ断片の５´末端の独自性の可変部分及び３´末端の独自性の可変部分は、前記長さの可変部分によって接続されることを特徴とする前述までの請求項の何れかの請求項に記載のマーキングシステム。
【請求項１０】
少なくとも５つの異なる長さのＤＮＡ断片が、一つのＤＮＡ断片型に提供されることを特徴とする前述までの請求項の何れかの請求項に記載のマーキングシステム。
【請求項１１】
ＤＮＡ断片型のすべての前記ＤＮＡ断片は、その他のＤＮＡ断片型のＤＮＡ断片の長さとそれぞれ一致することを特徴とする前述までの請求項の何れかの請求項に記載のマーキングシステム。
【請求項１２】
複数の異なるＤＮＡ断片を含むＤＮＡ断片型を有するマーカーであって、
（ａ）一つのＤＮＡ断片型におけるすべての前記ＤＮＡ断片は互いに異なり；
（ｂ）前記異なるＤＮＡ断片のそれぞれが長さの可変部分を有し；
（ｃ）一つのＤＮＡ断片型における前記異なるＤＮＡ断片のそれぞれは、前記長さの可変部分が異なっていることによって互いに長さが異なっており；
（１）前記異なるＤＮＡ断片のそれぞれはさらに、一つ又は二つの独自性の可変部分を含み；
（２）前記独自性の可変部分は、前記長さの可変部分と比較して前記ＤＮＡ断片の５´末端の方にあり、及び／又は、前記長さの可変部分と比較して前記ＤＮＡ断片の３´末端の方にあり；
（３）前記１又は複数の独自性の可変部分は、いくつかの異なる配列から選択された配列を有し；さらに、
２つ以上のフォワードプライマー及び１つのリバースプライマーを使用した前記ＤＮＡ断片型の増幅は、前記プライマーのうち２つ以上に検出可能な要素が提供される場合に、増幅産物に検出可能な要素を提供し、前記一つ又は二つの独自性の可変部分による独自性は、前記増幅産物において増幅によって提供される前記検出可能な要素の独自性を決定し、
可能なＤＮＡ断片型の数は、ＤＮＡ断片型に含まれる可能な長さの可変部分の数、可能な独自性の可変部分の数、及び、異なるＤＮＡ断片の数に依存することを特徴とするマーカー。
【請求項１３】
請求項１乃至１１に記載の何れかの前記ＤＮＡ断片を備えて提供されることを特徴とする請求項１２に記載のマーカー。
【請求項１４】
製品のマーキング方法であって、
複数のマーカーを含むマーキングシステムを提供するステップを含み、
前記複数のマーカーのそれぞれがＤＮＡ断片型を含むマーカーであり、
前記ＤＮＡ断片型は複数の異なるＤＮＡ断片を含み、
（ａ）一つのＤＮＡ断片型におけるすべての前記ＤＮＡ断片は互いに異なり；
（ｂ）前記異なるＤＮＡ断片のそれぞれが長さの可変部分を有し；
（ｃ）一つのＤＮＡ断片型における前記異なるＤＮＡ断片のそれぞれは、前記長さの可変部分が異なっていることによって互いに長さが異なっており；
（１）前記異なるＤＮＡ断片のそれぞれはさらに、一つ又は二つの独自性の可変部分を含み；
（２）前記独自性の可変部分は、前記長さの可変部分と比較して前記ＤＮＡ断片の５´末端の方にあり、及び／又は、前記長さの可変部分と比較して前記ＤＮＡ断片の３´末端の方にあり；
（３）前記１又は複数の独自性の可変部分は、いくつかの異なる配列から選択された配列を有し；
既知のＤＮＡ断片型が前記製品に適用され、さらに、
２つ以上のフォワードプライマー及び１つのリバースプライマーを使用した前記ＤＮＡ断片型の増幅は、前記プライマーのうち２つ以上に検出可能な要素が提供される場合に、増幅産物に検出可能な要素を提供し、前記一つ又は二つの独自性の可変部分による独自性は、前記増幅産物において増幅によって提供される前記検出可能な要素の独自性を決定し、
可能なＤＮＡ断片型の数は、ＤＮＡ断片型に含まれる可能な長さの可変部分の数、可能な独自性の可変部分の数、及び、異なるＤＮＡ断片の数に依存することを特徴とする方法。
【請求項１５】
前記ＤＮＡ断片型は、液体状の前記ＤＮＡ断片型を前記製品と接触させることによって適用されることを特徴とする請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記製品は、前記ＤＮＡ断片型において湿らされることを特徴とする請求項１４又は１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記ＤＮＡ断片型は前記製品における前記ＤＮＡ断片型のペイント若しくはプリントによって適用されることを特徴とする請求項１４又は１５に記載の方法。
【請求項１８】
前記ＤＮＡ断片はエアゾールとして前記製品に適用されることを特徴とする請求項１４又は１５に記載の方法。
【請求項１９】
前記ＤＮＡ断片型は前記製品の一部に適用されることを特徴とする請求項１５乃至１８の何れかに記載の方法。
【請求項２０】
前記ＤＮＡ断片型は、前記製品の製造過程に適用されることを特徴とする請求項１５乃至１９の何れかに記載の方法。
【請求項２１】
前記ＤＮＡ断片型は、前記製品の包装過程に適用されることを特徴とする請求項１５乃至１９の何れかに記載の方法。
【請求項２２】
前記ＤＮＡ断片型は、製造後に適用されることを特徴とする請求項１５乃至１９の何れかに記載の方法。
【請求項２３】
製品に対して潜在的なマーキングを提供する方法であって、複数の異なるＤＮＡ断片を有するＤＮＡ断片型を含む既知のマーカーを提供するステップを有し、該製品は容器の近隣に提供され、
（ａ）一つのＤＮＡ断片型におけるすべての前記ＤＮＡ断片は互いに異なり；
（ｂ）前記異なるＤＮＡ断片のそれぞれが長さの可変部分を有し；
（ｃ）一つのＤＮＡ断片型における前記異なるＤＮＡ断片のそれぞれは、前記長さの可変部分が異なっていることによって互いに長さが異なっており；
（１）前記異なるＤＮＡ断片のそれぞれはさらに、一つ又は二つの独自性の可変部分を含み；
（２）前記独自性の可変部分は、前記長さの可変部分と比較して前記ＤＮＡ断片の５´末端の方にあり、及び／又は、前記長さの可変部分と比較して前記ＤＮＡ断片の３´末端の方にあり；
（３）前記１又は複数の独自性の可変部分は、いくつかの異なる配列から選択された配列を有し；さらに、
２つ以上のフォワードプライマー及び１つのリバースプライマーを使用した前記ＤＮＡ断片型の増幅は、前記プライマーのうち２つ以上に検出可能な要素が提供される場合に、増幅産物に検出可能な要素を提供し、前記一つ又は二つの独自性の可変部分による独自性は、前記増幅産物において増幅によって提供される前記検出可能な要素の独自性を決定し、
前記ＤＮＡ断片型は前記容器に対する侵害の結果として前記製品に適用され、
可能なＤＮＡ断片型の数は、ＤＮＡ断片型に含まれる可能な長さの可変部分の数、可能な独自性の可変部分の数、及び、異なるＤＮＡ断片の数に依存することを特徴とする方法。
【請求項２４】
前記容器は、前記製品を囲んで前記製品に対するアクセスを防ぐことを特徴とする請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記１又は複数の製品に対する許可されたアクセスは、キー、セキュリティコード、又は他の作動装置を使用することによって前記容器を侵害せずに得られることを特徴とする請求項２３又は２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記１又は複数の製品は、紙幣、チェック、証書、又は経済的価値を有する他の紙若しくは紙の型の品目、銀行のカード、クレジットカード、或いはセキュリティカードであることを特徴とする請求項２３乃至２５の何れかの請求項に記載の方法。
【請求項２７】
前記容器への侵害は、許可されていない人物によるエントリー、許可されていない時間のエントリー、許可されていない手段によるエントリー、前記容器若しくはその一部の破壊、前記容器に対する強要されたアクセス、前記容器に対する破損、ある位置からの前記容器の除去、前記容器に対する傾斜の変化、又は、特定人物若しくは人物の所有物の種類から前記容器の除去を含むことを特徴とする請求項２３乃至２６の何れかの請求項に記載の方法。
【請求項２８】
前記ＤＮＡ断片型は、前記ＤＮＡ断片型と前記製品との間の障壁の浮上によって前記製品に適用されることを特徴とする請求項２３乃至２７の何れかの請求項に記載の方法。
【請求項２９】
前記ＤＮＡ断片型は、前記ＤＮＡ断片型による前記製品の湿潤によって前記製品に適用されることを特徴とする請求項２３乃至２８の何れかの請求項に記載の方法。
【請求項３０】
複数の異なるマーカーから選択されるマーカーによって製品のＤＮＡマーキングを検出する方法であって、
前記マーカーはＤＮＡ断片型を含み、
前記ＤＮＡ断片型は複数の異なるＤＮＡ断片を含み、
（ａ）一つのＤＮＡ断片型におけるすべての前記ＤＮＡ断片は互いに異なり；
（ｂ）前記異なるＤＮＡ断片のそれぞれが異なる長さの可変部分を有し；
（ｃ）一つのＤＮＡ断片型における前記異なるＤＮＡ断片のそれぞれは、前記長さの可変部分が異なっていることによって互いに長さが異なっており；さらに、
（１）前記異なるＤＮＡ断片のそれぞれはさらに、一つ又は二つの独自性の可変部分を含み；
（２）前記独自性の可変部分は、前記長さの可変部分と比較して前記ＤＮＡ断片の５´末端の方にあり、及び／又は、前記長さの可変部分と比較して前記ＤＮＡ断片の３´末端の方にあり；
（３）前記１又は複数の独自性の可変部分は、いくつかの異なる配列から選択された配列を有し；
当該方法は、前記製品からＤＮＡのサンプルを得るステップ、前記サンプルを増幅混合液と接触させるステップであり、前記増幅混合液が２つ以上のフォワードプライマー及び１又は複数のリバースプライマーを含むステップ、並びに、前記ＤＮＡ断片型を増幅するステップを含み、
前記ＤＮＡ断片型の増幅は検出可能な要素を提供し、前記一つ又は二つの独自性の可変部分による独自性は増幅によって提供される前記検出可能な要素の独自性を決定し、
当該方法は、互いに異なる検出可能な要素を提供する前記プライマーのうちの２つ以上を含み、増幅された断片型における前記異なる長さのＤＮＡ断片のうち少なくとも数多に対する前記検出可能な要素の独自性を考慮するステップを含み、
可能なＤＮＡ断片型の数は、ＤＮＡ断片型に含まれる可能な長さの可変部分の数、可能な独自性の可変部分の数、及び、異なるＤＮＡ断片の数に依存することを特徴とする方法。
【請求項３１】
前記プライマーは、存在し得る各異なる独自性の可変部分に対して提供されることを特徴とする請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
３又は４つのフォワードプライマーは、同じ数のリバースプライマーと共に提供されることを特徴とする請求項３０又は３１に記載の方法。
【請求項３３】
４つのフォワードプライマー及び単一のリバースプライマーが提供されることを特徴とする請求項３１又は３２に記載の方法。
【請求項３４】
前記フォワードプライマー及び／又は前記リバースプライマーに提供された前記検出可能な要素は、使用される前記異なるフォワードプライマーの各々において異なっていることを特徴とする請求項３１乃至３３の何れかの請求項に記載の方法。
【請求項３５】
前記検出可能な要素は色素であることを特徴とする請求項３１乃至３４の何れかの請求項に記載の方法。
【請求項３６】
前記検出可能な要素の独自性は、前記異なる長さのＤＮＡ断片を互いから分離することによって決定されることを特徴とする請求項３１乃至３５の何れかの請求項に記載の方法。
【請求項３７】
前記検出可能な要素は、前記一つ以上の異なる長さの断片の増幅に含まれる前記１又は複数の特定のプライマーを決定することを特徴とする請求項３１乃至３６の何れかの請求項に記載の方法。
【請求項３８】
前記分離することは、結果においてバンド又は位置を与え、前記バンド又は位置は、前記ＤＮＡ断片の前記１又は複数の独自性の可変部分による独自性を提示し、及び／又は前記ＤＮＡ断片の前記長さの可変部分の長さを提示することを特徴とする請求項３６に記載の方法。
【請求項３９】
前記複数の異なるマーカーから選択されるマーカーによって製品のＤＮＡマーキングを検出する方法は結果を与え、前記結果は、前記サンプルの前記特定のＤＮＡ断片型と既知のＤＮＡ断片型及び／又は一つ以上の記録されたＤＮＡ断片型との間での一致を決定するためにマーキングシステムの記録又はデータベースと比較されることを特徴とする請求項３１乃至３８の何れかの請求項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明はマーキングにおける改良及びマーキングとの関連に関し、限定するわけではないが、より詳細にはＤＮＡの使用によるアイテムのマーキング、ラべリング、又は識別に関する。
【０００２】
多様な適用及び条件は、セキュリティ又は他の理由のためにアイテムのマーキングのある形態を利用する。あるマーキングは可視できるように意図され、一方で多くの形態が正常な使用において可視できないマーキングを要求し、ある環境においてだけ可視できるようになる。実施例は、ある光の状態下において可視できる、インクを含む。
【０００３】
ある他の状態は、ある状況が生じる場合にマークされるアイテムを要求し、マークされたアイテムに接触する個人に対するマーキング及び／又はアイテムと接触する別の位置の移動を追加的に含むかもしれない。実施例は、強盗が発生した場合に、高度な可視ができる染料を備えた紙幣のマーキングを含んでいる。
【０００４】
本発明の目的は、密かに行なうものであるが、容易に検査できる、マーキングシステムを提供することである。本発明の目的は、容易に移動し、さらに追跡できるマーキングシステムを提供することである。本発明の目的は、最低限の調査剤（プライマーなど）及び／又は調査段階（増幅セットなど）を使用して容易に検査できる、マーキングシステムを提供することである。本発明の目的は、製造と使用が容易であるマーキングシステムを提供することである。本発明の目的は、かなり多数の個々のマーカーを容易に提供できる、マーキングシステムを提供することである。
【０００５】
本発明の第一の態様によると、我々は、複数の異なったＤＮＡ断片型の各々が複数の異なる長さのＤＮＡ断片を有する、複数の異なったＤＮＡ断片型を含むマーキングシステムを提供する。
【０００６】
好ましくは、複数の異なったＤＮＡ断片型はマーカーに含まれる。
【０００７】
本発明の第二の態様によると、我々は、複数の異なる長さのＤＮＡ断片を有するＤＮＡ断片型を含むマーカーを提供する。
【０００８】
本発明の第一及び／又は第二の態様は、下記の記載を含む、本明細書において記載される特徴、選択及び可能性を含むかもしれない。
【０００９】
好ましくは、ＤＮＡ断片型は、ＤＮＡ断片型を形成する、各ＤＮＡ断片における２又は３つの可変物の特異的な独自性に関してお互いに異なる。
【００１０】
むしろ、可変物の一つは、特にＤＮＡ断片の長さの可変部分である、ＤＮＡ断片の長さである。好ましくは、一のＤＮＡ断片型におけるすべてのＤＮＡ断片は、お互いに異なる。
【００１１】
むしろ、可変物の一つは、特にＤＮＡ断片の一つ以上の独自性の可変部分による独自性である、ＤＮＡ断片を形成する配列の一部分の独自性である。好ましくは、異なる独自性の可変部分は、同じ長さである。好ましくは、独自性の可変部分は、ＤＮＡ断片の５´端に向かう部分であるか、又はＤＮＡ断片の５´末端に向かう部分を含む。独自性の可変部分は、代替として又は追加的にＤＮＡ断片の３´末端に向かう部分である。好ましくは、独自性の可変部分はＤＮＡ断片の５´末端及び／又は３´末端にある。
【００１２】
ＤＮＡ断片型の異なる長さのＤＮＡ断片は、配列の部分において同じか、又は異なる独自性を有するかもしれない。より詳細には、ＤＮＡ断片型の異なる長さの可変部分を有するＤＮＡ断片は、同じであるか、又は異なる独自性の可変部分を有するかもしれない。
【００１３】
お好ましくは、異なる独自性の可変部分は、ＤＮＡ断片を形成する一つ以上の塩基の可変、特にＤＮＡ断片の５´末端における可変によって異なる。
【００１４】
本発明の好ましい実施態様において、独自性の可変部分による独自性は、配列の５以上の塩基、より詳細には１０以上の塩基の違いによって可変である。したがって、好ましくは、使用した独自性の可変部分及び／又はプライマーは、お互いにハイブリダイズしないだろう。独自性の可変部分における可能な独自性の選択された数が、すべてのＤＮＡ断片に供給されることが好まれる。選択された数は、３又は４の異なる可能な独自性であるかもしれない。選択された数は、ＤＮＡ断片、特に５´末端及び３´末端の独自性の可変部分における独自性の可変部分の各々に提供されるかもしれない。好ましくは、選択された数はＤＮＡ断片の両端において同じである。特に好ましい形態において、ＤＮＡ断片は、５´末端において３つの可能な独自性の可変部分のうちの一つを有し、３´末端において３つの可能な独自性の可変部分のうちの一つを有するかもしれない。ＤＮＡ断片は、一つ以上の独自性の可変部分と長さの可変部分以外に、一つ以上の他の部分を含むかもしれない。
【００１５】
本発明の代替となる形態において、独自性の可変部分による独自性は、ＤＮＡ断片の５´末端の第一塩基に関して可変するだけであるかもしれない。特に５´末端において、Ｇ塩基又はＣ塩基又はＴ塩基或いはＡ塩基のＤＮＡ断片が提供されるかもしれない。理想的には、少なくとも２つのかかる塩基、より詳細には３つのかかる塩基、さらにより詳細には４つのかかる塩基は、ＤＮＡ断片における異なる独自性の可変部分を形成するために使用される。かかる形態において、異なるＤＮＡ断片型における違いを区別する、可変の好ましい部分は、ＤＮＡ断片の５´末端部分の一部分として提供される。ＤＮＡ断片の５´部分の残りの部分は９０％同じ配列で、理想的には他のＤＮＡ断片の５´末端部分として全く同じ配列であることが特に好ましい。かかる形態において、好ましくは異なるＤＮＡ断片は、各異なるＤＮＡ断片において、３´末端部分を備えて提供され、かかる３´末端部分は少なくとも９０％同一の配列であり、理想的には完全に同じ配列である。
【００１６】
本発明の代替となる場合の好ましい形態において、４つの断片型のうちの３つが提供され、各断片型は１３の異なる長さのＤＮＡ断片を提供する。上に記載の特に好ましい実施態様において、異なるＤＮＡ断片型は、５´塩基の独自性の異なった独自性によって定義される。好ましい実施態様において、各断片型における同一の長さのＤＮＡ断片は、５´末端の塩基の可変を保存するためお互いに一致した配列である。
【００１７】
好ましくは、ＤＮＡ断片の５´末端の独自性の可変部分と３´末端の独自性の可変部分は、介在する配列によって、好ましくは長さが可変な部分によって接続される。好ましくは、複数の異なるＤＮＡ断片は、ＤＮＡ断片型の一のＤＮＡ断片と別のＤＮＡ断片との間の長さの可変部分における、長さの変化によって提供される。好ましくは、少なくとも５つ、より好ましくは少なくとも６つ、理想的には少なくとも８つの異なるＤＮＡ断片の長さは、ＤＮＡ断片型に提供される。異なるＤＮＡ断片の長さの数は、可変部分の長さにおける長さが変化することで提供される、少なくとも１０であるか、又は少なくとも１３の異なる長さであるかもしれない。
【００１８】
好ましくは、同じ長さのＤＮＡ断片は、各々の異なるＤＮＡ断片型に提供される。好ましくは、ＤＮＡ断片型のすべてのＤＮＡ断片は、他のＤＮＡ断片型のＤＮＡ断片長に対応する。好ましくはＤＮＡ断片の同じ数は、各ＤＮＡ断片型に提供される。理想的には、同じ長さの同じ数の断片は、各ＤＮＡ断片型に提供される。
【００１９】
本発明の第三の態様によると、我々は製品をマーキングする方法を提供し、かかる方法はマーキングシステムの提供を含み、かかるマーキングシステムは複数の異なるＤＮＡ断片型を含み、複数のＤＮＡ断片型の各々は複数の異なるＤＮＡ断片を含み、異なるＤＮＡ断片は異なる長さであり、周知のＤＮＡ断片型は製品に適用される。
【００２０】
本発明の第四の態様によると、我々は製品のマーキング方法を提供し、かかる方法は周知のＤＮＡ断片型を提供することを含み、かかるＤＮＡ断片型は複数の異なる長さのＤＮＡ断片を含み、ＤＮＡ断片型は製品に適用される。
【００２１】
第三及び／又は第四の態様は、特に本発明の第一及び／又は第二の態様以外に記載の特徴、選択又は可能性を含むかもしれない。
【００２２】
ＤＮＡ断片型は、液体状でＤＮＡ断片型を製品と接触することによって適用されるかもしれない。製品は、ＤＮＡ断片型において湿潤であるか及び／又は染み込んでいるかもしれない。ＤＮＡ断片型は、製品にＤＮＡ断片型をペイント又はプリントすることによって適用されるかもしれない。ＤＮＡ断片は溶液から製品へと適用されるかもしれない。ＤＮＡ断片はエアゾールとして製品に適用されるかもしれない。
【００２３】
ＤＮＡ断片型は製品の一部分又は全体に適用されるかもしれない。ＤＮＡ断片型は製品の外面及び／又は製品の内部部位に適用されるかもしれない。
【００２４】
ＤＮＡ断片型は、製品の製造過程、例えば、製品の形成過程及び／又は製品の仕上げ過程及び／又は製品の包装過程において適用されるかもしれない。ＤＮＡ断片型は、製造後に、例えば購入者及び／又は購入者に代わって、製品に適用されるかもしれない。
【００２５】
本発明の第五の態様によると、我々は製品のために潜在的なマーキングを提供する方法を提供し、かかる製品は容器と接近して提供され、かかる方法は周知のＤＮＡ断片型の提供を含み、かかるＤＮＡ断片型は複数の異なる長さのＤＮＡ断片を含み、かかるＤＮＡ断片型は容器に対する妨害の結果として製品に適用される。
【００２６】
本発明の第五の態様は、特に本発明の第一の態様以外の特徴、選択又は可能性を含むかもしれない。
【００２７】
製品は容器に提供されるかもしれない。容器は、ボックス、ケース又はキャニスターであるかもしれない。容器はアクセスに対する、及び／又は概観から製品を囲むかもしれない。例えば、キー、セキュリティコード、又は他の作動装置を用いて、容器は開封可能であるかもしれない。かかる手法において、製品への許可されたアクセスが得られ、及び／又は、製品へのアクセスは容器へ妨害することなしに得られるかもしれない。
【００２８】
製品は紙幣であるか、チェックであるか、証書であるか、又は経済的な価値を有する別の紙若しくは紙の型の商品であるかもしれない。製品は紙幣、クレジットカード、セキュリティカード等であるかもしれない。相当数の同一又は同様の型の製品は、容器内に提供されるかもしれない。
【００２９】
容器に対する妨害は、許可されていない人物による侵入、許可されていない時間又は許可されていない手段による侵入を含むかもしれない。容器に対する妨害は、容器の破損又はかかる破損の一部、容器に対する強制的なアクセス、容器に対する損傷、容器の位置からの移動、又は容器の傾きの変化を含むかもしれない。妨害は、セキュリティスタッフ、所有者などの特定の人物からの容器の移動を含むかもしれない。
【００３０】
ＤＮＡ断片型は、ＤＮＡ断片型と製品との間の障壁の浮上によって製品に適用されるかもしれない。障壁は、ＤＮＡ断片型及び／又はＤＮＡ断片型を含む管の破損及び／又はＤＮＡ断片型部分の破損若しくは取り除きを含む容器の部分からの製品を有する容器の部分を分離する要素を含むかもしれない。ＤＮＡ断片型は容器内に提供され、及び／又は容器に付着されるかもしれない。
【００３１】
ＤＮＡ断片型は、ＤＮＡ断片型による製品の湿潤によって製品に適用される。ＤＮＡ断片型は流れ、及び／又は噴霧され、及び／又は製品に滴下されるかもしれない。
【００３２】
本発明の第六の態様によると、我々は複数の異なるＤＮＡ断片型からのＤＮＡ断片型によって製品のＤＮＡマーキングを検出するための方法を提供し、複数のＤＮＡ断片型の各々は複数の異なる長さのＤＮＡ断片を含み、かかる方法は製品からＤＮＡサンプルを採取すること、かかるサンプルを増幅した混合液に接触すること、二つ以上のフォワードプライマーと一つ以上のリバースプライマーを含む混合液を増幅すること、お互いに異なる検出可能な要素を提供する二つ以上のプライマー、ＤＮＡ断片型の増幅、及び増幅したフラグメント型で少なくとも数多の異なる長さのＤＮＡ断片において検出可能な要素の独自性を考慮すること、を含むことによりなる。
【００３３】
本発明の第六の態様は、記載された他の特徴、選択又は可能性を含むかもしれない。
【００３４】
ＤＮＡサンプルは、アイテム、例えばスワブなどの特に湿っているアイテムで製品を触れることによって製品から得られる。ＤＮＡは洗浄によってアイテムから取り除かれるかもしれない。ＤＮＡは、遠心分離又は濾過、特に遠心超濾過によって回収されるかもしれない。
【００３５】
製品は固体又は液体であるかもしれない。固体製品の例は、紙幣、チェック、及び経済的な価値を有するか又は提供する、他の印刷物などの紙製品を含む。他の製品の例は、プラスチック製品を含み、宝飾品、骨董品などの個人的な所有物、絵画、骨董品、家財、宝飾品、美術品などの財産的価値の高い物、コンピューター、コンピューター周辺機器、プリンター、マイクロチップ、ディスクドライブなどの電子製品、衣服、時計、香水などの偽造防止を必要とする製品を含む。
【００３６】
前述のサンプル又は一つ以上の部分は、ＰＣＲを用いて増幅されるかもしれない。好ましくは、増幅工程はＤＮＡの条件下における適切なプライマーを使用して実行される。プライマーの混合液は増幅を達成するために使用される。プライマーは、存在するであろう、各々の異なる独自性の可変部分に提供されるかもしれない。好ましくは、何れのプライマーも、意図された可変する独自性の部分以外は可変する独自性の部分にアニールしない。
【００３７】
好ましい事例において、３又は４つのフォーワードプライマーは、好ましくは、３又は４つのリバースプライマーの整合する数と共に提供される。
【００３８】
代替となる事例において、好ましくは２、３又は４つのフォワードプライマーと単一のリバースプライマーが提供される。かかる代替となる事例において、フォワードプライマーはお互いに実質的に同等（つまり、８０又は９０％以上の相同性）で等価な配列を有し、好ましくは３´末端部分を保存する配列において互いに同一である。理想的には、フォワードプライマー間のただ一つの可変は、プライマーの３´末端塩基の独自性にある。Ａ又はＴ又はＣ或いはＧを３´末端塩基に有するプライマーが提供されるかもしれない。好ましくは、フォワードプライマーは、使用される３´末端の可変の独自性により、ＤＮＡ断片型の一つと特異的である。好ましくは、単一のリバースプライマーが提供される。好ましくは、リバースプライマーは、理想的にはすべての断片において、ＤＮＡ断片の３´末端と理想的には完全に合致する、少なくとも９０％以上整合する、配列を有する。
【００３９】
フォワードプライマーに提供される検出可能な要素は、使用される各々の異なったフォワードプライマーにおいて異なる。リバースプライマーに提供される検出可能な要素は、使用される各々の異なったリバースプライマーにおいて異なる。検出可能な要素は色素であるか、又は他の色を提供するか若しくは生じる手段であるかもしれない。色は裸眼で可視できるか、及び／又は分析装置に対して可視可能である。色は直ちに可視できるか、又は可視できるように表現する処理又は作動を必要とする。検出可能な要素は、放射線照射物を含む、別の形態であるかもしれない。
【００４０】
好ましくは、かかる方法は、与えられたＤＮＡ断片型のすべての異なる長さのＤＮＡ断片の増幅を含む。好ましくは、与えられたＤＮＡ断片型は、８又はさらに１３の異なる長さのＤＮＡ断片を含む。与えられたＤＮＡ断片型のＤＮＡ断片は、本発明の最も好ましい形態において６つの潜在的な独自性の可変部分を有するかもしれない。代替の事例において、３又は４つの異なる独自性の可変部分は、断片型を構成する何れか一つの断片に存在するかもしれない。
【００４１】
検出可能な要素の独自性は、ヒトの目、着色を検出するための装置又は放射線照射若しくは検出可能な要素の他の特質を検出するための装置を用いて考慮されるかもしれない。検出可能な要素の独自性は、お互いに異なる長さのＤＮＡ断片を分離することによって考慮されるかもしれない。断片の長さの分離は、例えば、ゲル電気泳動及び／又はキャピラリ電気泳動などの電気泳動によって達成されるかもしれない。質量分析はＤＮＡ断片の質量を決定するために使用される。分離技術は、一連のバンド又は位置、異なる長さの断片に対応する各バンド又は位置を提供するかもしれない。検出可能な要素は、好ましくはすべての一つ以上の異なる長さの断片の増幅で提供される、特定のプライマーを示すかもしれない。バンド又は位置は、バンド又は帯域におけるそれぞれの断片の増幅に含まれるプライマーの独自性の可変部分による独自性を示すかもしれない。バンド又は位置は、ＤＮＡ断片の独自性の可変部分による独自性を示し、及び／又はＤＮＡ断片の長さの可変部分の長さによる独自性を示すかもしれない。
【００４２】
好ましくは、すべての増幅した断片は、かかる手法で考慮される。考慮の結果は、３´末端の独自性の可変部分による独自性として表され、及び／又は特定のＤＮＡ断片の５´末端の独自性の可変部分による独自性として表され、及び／又は一つ以上のかかる可変部分を表現する数を表す。
【００４３】
結果は、サンプルの特定のＤＮＡ断片型と周知のＤＮＡ断片型及び／又は一つ以上の記録されたＤＮＡ断片型との間の整合を決定するマーキングシステムの記録又はデータベースと比較されるかもしれない。整合又は整合の欠如は、製品の供給源、及び／又は製品の本来の性質、及び／又はＤＮＡ断片型でマークされた製品と製品の接触を確定又は否定するために使用されるかもしれない。したがって、結果は、ヒト、乗り物又は紙幣などのＤＮＡ断片型でマークされた製品を備える同様の物などの製品間の直接的又は間接的な物理的接触を確認するために使用されるかもしれない。結果は容疑者を告発する証拠として使用されるかもしれない。
【００４４】
本発明の様々な態様は、図面を参照しながら実施例によって記載される。
【００４５】
本発明の目的は、用途が広く、様々な状況（それらのうちの数多はより詳細に下に記述される）に役に立つように有能である、マーキングシステムを提供することである。
【００４６】
本発明の一般的な概念は、特定の識別が必要とされる場合における明白なマーカーの規定である。マーカーシステムは、相当数のＤＮＡ断片型の置換を有するマーカーによって形成される。各ＤＮＡ断片型は、各ＤＮＡ断片の３´末端と５´末端配列に関して生じるさらなる変化を備える、多くの異なる大きさのＤＮＡ断片で形成している。ある数の異なった大きさのＤＮＡ断片は、３´及び／又は５´末端配列における、ある可能な独自性を備えて、各ＤＮＡ断片型で使用されるかもしれない。したがって、与えられたＤＮＡ断片は、ある大きさ（使用される可能な大きさから選択される）とある３´及び／又は５´末端配列（使用される可能な配列から選択される）を有するだろう。相当数の異なるサイズで異なる３´及び／又は５´配列は、すぐに特別の場合においてマークするために使用される個々のＤＮＡ断片型の組立てにおける極めて多数の可能な置換に結びつく。
【００４７】
しかしながら、異なるサイズと３´及び／又は５´末端配列における注意深く選択され提供された変化による変化を得ることによって、極めて多数の置換が達成され、一方で完全に限定された数のプライマーが分析工程をもたらすことを可能にする。これは、プライマーと時間を提供するコスト及び分析を実行するコストを低く抑えていることを意味する。これは、マーカー・システムを構成する、極めて多数の異なっており、無関係なＤＮＡ配列に基づくことができる、潜在的なシステムと対照的である。
【００４８】
発明の好ましい実施態様
本発明の好ましい実施態様において、上に記載の一般的な概念が展開される。ＤＮＡ断片型を形成する、かかるＤＮＡ断片の数を備えるＤＮＡ断片の一般的な形態が図１に例示されている。
【００４９】
ＤＮＡ断片１０の全体は、５´末端部分１２、３´末端部分１４、及び中間部分１６を有する。中間部分１６は、異なる長さのＤＮＡ断片１０が提供されることを達成するための可変断片１０の部分である。このようにして、一つの断片１０の中間部分１６における塩基数は、マーカーシステムの与えられたＤＮＡ断片型のサイズの変化を形成する、別の断片１０の数とは異なる。
【００５０】
本発明のかかる特定の実施態様において、８つの異なる大きさは、各ＤＮＡ断片型の８つの異なる大きさのＤＮＡ断片を与えるために中間部分１６で使用される。
【００５１】
ＤＮＡ断片のサイズの変化と同様に、かかる実施態様はまた、５´末端部分１２と３´末端部分１４の多くの異なる配列を提供する。本発明の特定の実施態様において、５´末端部分１２は３つの設計された配列の一つを有し、３´末端部分１４はまた、３つの異なって設計された配列の一つを有する。このようにして、与えられたＤＮＡ断片１０は、特定の大きさ（８つの選択から）、特定の５´末端部分（３つの選択から）、及び特定の３´末端部分（３つの選択から）を有するだろう。
【００５２】
異なる５´末端部分と３´末端部分の配列は、互いに比較可能な最適の増幅条件及び一致する効率を備える、複数のプライマーを使用して効率的に増幅することができるように設計される。
【００５３】
ＤＮＡ断片型において、８つの異なるＤＮＡ断片１０が提供され、それらの各々はそれぞれ独特の大きさ（ＤＮＡ断片型において他のＤＮＡ断片１０に関して）であり、各ＤＮＡ断片は、３つの５´末端部分配列のうちの一つ及び３つの３´末端部分配列のうちの一つを有するだろう。
【００５４】
断片型は多くの手法のマーカーで展開でき、それらの幾つかは下記に例証される。
【００５５】
マーキングシステムからのマーカーは、生じたある状況の場合に製品に適用され、次いで製品の残りの期限又は少なくとも重要な期間において製品に存続する。状況は製品及び／又は製品の容器の妨害であるかもしれない。一つの実施例において、マーカーは、セキュリティ装置として金庫内の容器に提供される。破壊された場合には、容器は壊され、したがって、マーカーが金銭と接触するように設計されている。人、アイテム又は位置との金銭のどのような後に起こる接触も、それらの製品にマーカーの部分的な転送を与えることを目指している。したがって、マーカーは、盗まれた金銭、その金銭及び自動車を扱う人、強盗と関連付けされる家及びその他同種のものを許容するように意図される。
【００５６】
マーカーは、その製品の製造段階において製品に適用し、その後の有効期限においてその特徴を維持しているか、又は後に購入者ら自身によって追加することができる。この形態において、マーカーは、例えば偽造の香水ではなく本物を確認するような、製品の本来の特性を確認するために使用でき、及び／又は、例えば、問題が発生する製造の源を追跡するために製品を製造した製造者の特定位置など、製品の製造の特徴を識別するために使用できる。かかるマーキングシステムのマーカーはそれらの利点を可能にするが、しかし製品に干渉せずに、通常の使用であるか、又は外観を有する。かかる形態において、別の製品との接触の場合、製品によってＤＮＡが保持されることは望ましい。
【００５７】
製品がその製品の源を調査するためにそのＤＮＡ断片の混合を解読する必要がある場合に、例えば、ＤＮＡサンプルは回収される。これは湿っている綿球で製品を拭き取ることを含むかもしれない。ＤＮＡ断片型マーカーの回収されたサンプルは、後続する分析のためのサンプルを得るために、洗浄及び遠心精密濾過を受ける。代替として、製品が適する場合、マーカーを有する製品の領域、又は製品全体は、遠心精密濾過を用いる後のサンプルの精製でＤＮＡ断片型を取り除くために洗浄される（滅菌水又はバッファー溶液）。
【００５８】
一度獲得されると、ＤＮＡ断片型のサンプルはプライマーの混合液と接触される。かかる混合液は、各々の５´末端部分配列の可能な設計におけるフォワードプライマーと各々の３´末端部分配列の可能な設計におけるリバースプライマーを含有する。上に記載のように、この特定の実施例において、３つの可能な５´末端部分と３つの可能な３´末端部分があり、したがって、３つのフォワードプライマーと３つのリバースプライマーが提供され、それらのオリゴヌクレオチドの各々は末端部分の６つの配列のうちの一つに特異的である。
【００５９】
３つのフォワードプライマーのうち１つだけが５´末端部分の配列と整合し、３つのリバースプライマーのうち１つだけが３´末端部分の配列とペアのリバースシークエンスと整合するので、かかる２つのプライマーだけがアニールして、そのＤＮＡ断片を増幅するであろう。等価な手続きは、分析したＤＮＡ断片型を構築する他の異なるサイズのＤＮＡ断片の各々に当てはまり、各場合にアニールする、特定のフォワードプライマーと特定のリバースプライマーは、ＤＮＡ断片間の５´末端部分と３´末端部分の変化にしたがって変化する。
【００６０】
各々のフォワード及びリバースプライマーはその配列に関して変化するだけでなく、フォワードの５´末端とリバースの５´末端での実際のアニールが両者識別できる、プライマーのラベリングに関して変化する。本発明の好ましい実施態様は、各フォワードプライマーと各リバースプライマーにおける異なる有色の色素ラベルを使用する。同じ３色は各々において使用できるか、又は異なる色が使用できる。
【００６１】
全体の結果は、増幅した産物が、フォワードプライマーとリバースプライマーの独自性に特異的な色でラベルされることであり、したがって、特定の製品におけるマーキングシステムから選択される特定のマーカーとして使用される、ＤＮＡ断片型の５´末端部分と３´末端部分に特異的である。
【００６２】
必要なプライマーの制限された数において必要な整合する条件によって操作が容易な増幅工程が完結すると、適合される非常に多くの置換をさらに許容し、増幅産物は分離でき、次いで検査できる。
【００６３】
一つの実施態様において、検査処理は、増幅した断片の長さ／サイズにしたがって、増幅した断片の長さを分離するためにゲル電気泳動を使用する。次いで、結果は、アニールされたフォワードとリバースプライマーによってＤＮＡ断片型の各ＤＮＡ断片に関係するようになったラベルの色を決定するために考慮される。例えば、検査するために使用された３つのフォワードプライマーと３つのリバースプライマーで表１に概略するように、ＤＮＡ断片型は、３つの可能な５´末端部分と３つの可能な３´末端部分を備える８つの異なる大きさのＤＮＡ断片から形成され、表１に下記の結果が得られる。
【００６４】
【表１】
0004703092.tif 000002
色、末端部分及び特定の代表的な数は、例えば、特定の札付けされた製品とサンプルを関連付けする、記録を備えて得られたＤＮＡを比較するために使用できる。
【００６５】
異なる断片の長さの増大する数及び／又は末端部分配列の増大する数は、可能な組み合わせの数を増大する。
【００６６】
本発明の代替となる実施態様
本システムの代替となる実施態様は、同じ基礎的な概念に関して基づいているが、変化が提供される正確な方法において異なる。
【００６７】
かかる実施態様は、アイテムをマークする多くのＤＮＡ断片型のうち、一つの使用を含む。各ＤＮＡ断片型は、サイズの変化によって、お互いに異なる一連のＤＮＡ断片を含む。各ＤＮＡ断片は図２に例示される形態に基づく。
【００６８】
各断片１１０は、フォワードのユニバーサル配列部分１１２とリバースのユニバーサル配列部分１１４から構成され、この二つは可変する長さ部分１１６によって分離している。可能な可変する長さ部分１１６を形成する配列の様々な長さを使用することによって、一方で同じフォワードのユニバーサル配列部分１１２とリバースのユニバーサル部分１１４を用いることによって、異なる長さが達成される。
【００６９】
本発明のかかる実施態様において、１３の異なる長さの断片は、各断片型で使用される。
【００７０】
異なる断片型間の変化は、フォワードのユニバーサル配列部分１１２の開始塩基の独自性を変化することによって達成される。したがって、一つの断片型は断片１０の位置１８がＴ塩基で提供され、一方で別の断片型は、Ｃ塩基又はＧ塩基或いはＡ塩基で提供される。
【００７１】
最終的な結果は、４つまでの異なる末端が、ＤＮＡ断片型を形成する一連の１３の異なった長さの断片の各々において提供される。
【００７２】
かかる特定の実施態様において、３つの異なる末端が考慮される。１３の異なる長さの各々において３つの可能な末端のうち１つを選択することによって、ＤＮＡ断片型は生成され、かかる断片型は１５９万以上の可能な型のうちの１つである。
【００７３】
１３の異なった長さの各々において４つの可能な末端のうち１つを選択することによって、ＤＮＡ断片型は再度生成され、かかる断片型は６７００万以上の可能な型のうちの１つである。
【００７４】
特定のＤＮＡ断片型を有するマーカーを提示する製品を分析する必要がある場合、ＤＮＡ断片型のサンプルは、本発明の好ましい実施態様において上に概説された方法で得ることができる。
【００７５】
一旦サンプルが獲得されると、ＤＮＡサンプルは、異なる末端塩基の可能な数に対応するフォワードプライマーとリバースプライマーの数と接する。
【００７６】
リバースのユニバーサル配列がすべての断片型とすべての断片の長さに共通であるために、増幅工程の必要なリバースの伸長を達成するだろう。
【００７７】
使用されるフォワードプライマーは、潜在的に使用されるかもしれない、異なる末端の数に依存するだろう。一般的に、４つのフォワードプライマーは、最後の塩基とは別に共通配列を有する、各プライマーで使用されるだろう。かかる配列はまた、フォワードのユニバーサル部位１２と整合する配列と共通である。しかしながら、４つのプライマーの最後の塩基は、Ｔ、Ａ、Ｇ、Ｃがお互いに異なり、平均的な結果として、一つだけのフォワードプライマーがアニールして、続いて断片の長さを増幅するだろう。Ｔの開始プライマーはＡの開始断片の長さを増幅し、Ａの開始プライマーはＴの開始断片の長さを増幅し、Ｃの開始プライマーはＧの開始断片の長さを増幅し、Ｇの開始プライマーはＣの開始断片の長さを増幅する。４つのプライマーの結果として、各断片長を加えた増幅は、開始塩基の独自性に依存する長さが変化するプライマーで達成される。
【００７８】
断片の混合液が３つだけの開始塩基の変化を含むことが周知である場合、３つのプライマーだけが必要とされる。
【００７９】
各プライマーは開始塩基の独自性に関して変化するだけでなく、色のラべリングに関しても変化し、異なる色が各プライマーで使用される。増幅産物がフォワードプライマーの開始塩基に特異的であり、断片の長さの開始塩基に特異的である色でラベルされる結果となる。
【００８０】
増幅工程が完結すると、本発明の好ましい実施態様に記載と同等の手法で、異なる大きさに分離されて分析できる。結果を考慮することによって、プライマーの開始と断片の開始としての各断片の長さと関連できるラベルの色を決定することが可能である。かかる型の結果は、使用される３つのプライマーで、代表的な数字を形成する、表１に概略されている。
【００８１】
【表２】
0004703092.tif 000003
色、塩基の独自性及び特定の代表的な数は、例えば、特定に札付けされた製品を備えるサンプルと関連付けする記録で獲得されるＤＮＡと比較するために使用できる。
【００８２】
異なる長さの数の増大は、本発明の別の実施態様のように、可能な組み合わせ数を増大する。
【図面の簡単な説明】
【図１】  本発明の好ましい実施態様による札付け構造の実施例の概略図である。
【図２】  本発明の別の実施態様による札付け構造の実施例の概略図である。
【図１】
0004703092.tif 000004
【図２】
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