(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
乾燥カシュウの含水エタノール（５０％エタノール）抽出物を有効成分とする抗肥満剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、カシュウ（何首鳥、学名：Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ  ｍｕｌｔｉｆｌｏｒｕｍ）からの抽出物を有効成分とする糖質分解酵素阻害物質に関し、さらに詳しくは体内でのエネルギー源となる糖質の消化吸収を抑制または阻害することにより肥満の治療・予防を行うためのα−アミラーゼ阻害物質、および抗肥満剤、食品に関する。
【０００２】
【従来の技術】
α−アミラーゼは、動物の脾臓及び唾液腺から分泌される消化酵素の１つとして知られており、デンプン、アミロース、アミロペクチンなどの多糖類のα−１，４結合を加水分解する。
また、α−アミラーゼ阻害物質を利用することによって、α−アミラーゼの活性を阻害し、腸管からの栄養素の消化・吸収を抑制する方法がある。このことにより、肥満症の予防・治療が可能となる。すなわち、α−アミラーゼ阻害物質を含有して製造された肥満予防剤、食品は、過体重や肥満症患者への療法に適しており、さらに健康人の疾病予防としても適用できる。
【０００３】
古くより、α−アミラーゼ阻害物質の研究・開発が行われてきた。そのうち特に微生物の産出するオリゴ糖系、並びにペプチド系アミラーゼ阻害物質が報告されており、医薬品として市販されている。また、一例として植物由来のものでは、ゲッケイジュ（特開平４−２７３８９号）、グアバ（特開平７−５９５３９号）、ケイヒ（特開平９−２７５９７９号）、マオウ（特開平９−２９６３号）、ボタンピ（特開平９−２９６６号）、カキ（特開平１０−１５８１８０号）等からの抽出物が抗肥満用素材として開示されている。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
以上のように、現在までに多くのα−アミラーゼ阻害物質が開発されてきた。しかし、植物由来の素材はまだ医薬品及び食品への実用化が充分には行われていない。したがって、本発明は、毎日常用することにより肥満の予防ならびに改善が可能となり、また有効で安全な植物性天然由来のα−アミラーゼ阻害物質を提供することを目的としている。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
本発明者は、肥満症状を改善する新規なα−アミラーゼ阻害物質を香辛料、香草、漢方生薬等からスクリーニングして鋭意研究を重ねた結果、カシュウ、とりわけカシュウ根からの抽出エキス中に安全性及び有効性に優れ、肥満の予防及び改善に有用なα−アミラーゼ阻害物質を見出し、本発明を完成した。
【０００６】
本発明は以下の項目より構成される。
（項１）乾燥カシュウの含水エタノール（５０％エタノール）抽出物を有効成分とする抗肥満剤。
【０００７】
【発明の実施の形態】
カシュウ（和名：ツルドクダミ）は、タデ科の多年性つる草であり、原産地は中国であるが、享保年間に渡来し国内各地に生育している。塊根を乾燥させたものは、何首鳥と呼び、漢方では補陰・補血・強壮などの効果がある。根には、オキシメチルアントラキノン類のエモジン、クリソファノール、フィスチオンなどが含まれ、血中コレステロール低下作用や降圧作用、抗菌作用、抗酸化作用が報告されている。しかしながら、抗肥満作用としてのα−アミラーゼ活性阻害物質の報告はない。
【０００８】
採取したカシュウは未乾燥の状態で抽出を行っても良いが、通常乾燥後抽出を行う。また、一般に漢方薬として市販されている乾燥したカシュウも用いることができる。それらの性状は、チップ状あるいは粉末状などを問わない。これらのα−アミラーゼ阻害有効成分は、水あるいは親水性有機溶媒に浸漬することにより得ることができる。抽出方法としては、加熱抽出、連続抽出を行っても良い。得られた抽出エキスは、凍結乾燥、スプレードライなどによって乾燥させることができる。
【０００９】
本発明のα−アミラーゼ阻害物質は、上記のカシュウからの抽出物を有効成分とするものである。薬剤として使用する場合には、例えば、水、エチレングリコール、エタノール、ポリエチレングリコールなどの液状担体や、乳糖、デンプン、セルロース、などの固体担体である無毒性担体で希釈して、錠剤、顆粒剤、ソフトカプセル剤、丸剤、シロップ剤などにすることができる。
【００１０】
本発明のα−アミラーゼ阻害物質は、抗肥満作用を有していることから、例えば、清涼飲料、栄養補助ドリンクなどの液状食品、さらにクラッカー、スナック菓子、クッキー、キャンデイーなどの固形食品に添加して、患者の食餌療法食、あるいは健康人の疾病予防食として用いることができる。このときの添加量としては、特に０．０１〜２重量％が好ましい。さらに、本発明のα−アミラーゼ阻害物質を含有する製剤は、食前、食中、食後などに服用することによって、喫食後の急激な糖類の体内への吸収を抑制したり、遅延することができる。
【００１１】
用いる容量は、抽出物で一日当り２〜２００ｍｇ／ｋｇ体重、好ましくは１〜１５０ｍｇ／ｋｇ体重であり、通常一日１〜４回摂取する。ただし、正確な用量は、年齢、体重、症状などを考慮して、前記範囲から選択すれば良い。
以下、具体的に例を挙げて説明する。
【００１２】
【実施例１】
（含水エタノール抽出）
乾燥カシュウ１０００ｇを粉砕し、この粉末に８０００ｍｌの５０％エタノールを加え時々攪拌して室温下に放置し、２４時間後に抽出した。
得られた抽出液を濾過後、減圧濃縮し、さらに凍結乾燥によって乾燥させて目的のα―アミラーゼ阻害物質の抽出物８５．３ｇを得た。
【００１３】
α―アミラーゼ阻害活性率は、以下の方法により求めた。
１． α―アミラーゼ［ＥＣ：３．２．２．１．１］
α―アミラーゼとしては、ヒト唾液由来のα−アミラーゼ（ＳＩＧＭＡ社、ＴｙｐｅＩＸ‐Ａ）を用いた。
【００１４】
２．測定原理
可溶性デンプンにα―アミラーゼを加えた溶液に試料溶液を一定時間作用させ、反応溶液中の加水分解されたデンプン量を測定。
【００１５】
３．酵素反応
（１）試料溶液（５０μｌ）
被験抽出物エキス（カシュウからの抽出物）を５０％エタノールに溶解。
（２）基質緩衝液（３００μｌ）
０．０５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）に可溶性デンプンが０．０４％含まれたものを用いた。
（３）酵素溶液（５０μｌ）
α−アミラーゼ酵素液（１単位、０．０５Ｍリン酸緩衝液）（ｐＨ７．０）に溶解）を用いた。
（４）発色試液（１００μｌ）
０．０１Ｎヨウ素溶液を用いた。
（５）希釈液（１０００μｌ）
精製水を用いた。
試料溶液５０μｌに基質緩衝液３００μｌを加え３７°Ｃで５分間恒温槽において温度平衡させた。その後、酵素溶液５０μｌを加えて３７°Ｃで１５分間反応させた。反応終了後、発色試液を１００μｌ加えて発色させた後、さらに精製水１０００μｌを加えて希釈し、加水分解して生成されたデンプン量を６６０ｎｍの吸光度から算出した。対照には、試料溶液の代わりに ５０%エタノールを用いた。なお、それぞれのブランクとしては、発色試液を加えてから酵素溶液を加えたものを用いた。
【００１６】
４．α−アミラーゼ阻害活性の算出方法
阻害活性率（％）＝［（（Ａ−Ｂ）−（Ｃ−Ｄ））／（Ａ−Ｂ）］×１００
Ａ：対照溶液の吸光度
Ｂ：対照溶液のブランクの吸光度
Ｃ：試料溶液の吸光度
Ｄ：試料溶液のブランクの吸光度
【００１７】
実施例１で得られた含水エタノール抽出物におけるα−アミラーゼ阻害活性率（％）の測定を行い、その結果を表１に示す。なお、被験試料濃度は、反応液に対する濃度で示した。
【００１８】
【表１】
0004727790.tif 000002
【００１９】
表１に示したように、カシュウのエタノール抽出物は、１２５μｇ／ｍｌの反応液濃度でα―アミラーゼ活性を完全に阻害するとともに、その阻害度合は抽出液濃度に依存することが明らかとなった。
【００２０】
【実施例２】
（水抽出）
乾燥カシュウ５００ｇを粉砕し、この粉末に２５００ｍｌの精製水を加え、９５〜１００°Ｃまで昇温させて２０分間抽出した。得られた抽出液を濾過後、減圧濃縮し、さらに凍結乾燥の方法によって乾燥させて目的のα―アミラーゼ阻害剤の抽出物５３．６ｇを得た。
【００２１】
（５０％阻害活性濃度の算出）
実施例１、２で得られたカシュウ抽出物のα−アミラーゼ阻害活性率を検討し、５０%阻害活性濃度（ＩＣ５０：μｇ・乾燥重量／ｍｌ・反応液）を算出した。なお、小麦種子由来のα−アミラーゼ阻害物質（ＳＩＧＭＡ社製、Ｔｙｐｅ１）を指標阻害剤としてそのＩＣ５０値を算出し比較した。それぞれの結果を表２に示した。
【００２２】
【表２】
0004727790.tif 000003
【００２３】
表２に示されるように、特に、本発明のカシュウの含水エタノール抽出物を有効成分とするα−アミラーゼ阻害物質は、指標阻害剤の小麦種子由来物質と比較して６倍ほど高い阻害活性を示し、これまで報告されている天然物由来の阻害物質素材と比較しても十分に強い作用を有するものであることが明らかとなった。
【００２４】
【実施例３】
（製剤）
実施例１で得られたカシュウ抽出物を用い、以下の成分組成で調製した。
カシュウ抽出物                  １０重量％
乳糖                            ７８重量％
結晶セルロース                    ８重量％
カルボキシメチルセルロースカルシウム  ２重量％
ステアリング酸マグネシウム            ２重量％
上記の材料を均一に混合し、精製水で混練りした後、乾燥させて単発式打錠機にて錠剤を製造した。
【００２５】
【実施例４】
（顆粒剤）
実施例３（錠剤）で得た錠剤を粉砕、整粒、篩別して１０〜３０メッシュの顆粒剤を得た。
【００２６】
【発明の効果】
本発明によれば、カシュウからの溶媒抽出物を主成分とするα−アミラーゼ阻害物質が提供される。本発明によって得られるα−アミラーゼ阻害物質は、従来のα−アミラーゼ阻害剤と比較してα−アミラーゼ阻害が高く、しかも低濃度で有効であり、さらに植物天然物由来で安全性に優れている。また、本発明のα−アミラーゼ阻害物質は、食品中に含有することで,積極的な食餌療法により、肥満症の予防および改善のために使用することができる。