(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）で表される放射性チロシン誘導体又はその薬学的に許容可能な塩。
【化１】
0004842123.tif 000005
（式中、Ｒ１は、−１１ＣＨ３、−１１ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２１８Ｆ及び−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２１８Ｆからなる群より選ばれる基を表す。）
【請求項２】
請求項１に記載の放射性チロシン誘導体又はその薬学的に許容可能な塩の製造方法であって、Ｄ−チロシン又はその薬学的に許容可能な塩をアルキル化又はフルオロアルキル化することを特徴とする製造方法。
【請求項３】
式（ＩＩ）で表される放射性チロシン誘導体又はその薬学的に許容可能な塩からなるポジトロンイメージング用標識剤。
【化２】
0004842123.tif 000006
（式中、Ｒ２は、−１１ＣＨ３、−１１ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２１８Ｆ、−ＣＨ２ＣＨ２１８Ｆ及び−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２１８Ｆからなる群より選ばれる基を表す。）
【請求項４】
式（ＩＩ）で表される放射性チロシン誘導体又はその薬学的に許容可能な塩からなる腫瘍の悪性度評価薬剤。
【化３】
0004842123.tif 000007
（式中、Ｒ２は、−１１ＣＨ３、−１１ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２１８Ｆ、−ＣＨ２ＣＨ２１８Ｆ及び−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２１８Ｆからなる群より選ばれる基を表す。）
【請求項５】
式（ＩＩ）で表される放射性チロシン誘導体又はその薬学的に許容可能な塩が投与された被検体の組織ごとの放射線量を測定する工程を備える放射線量の測定方法。
【化４】
0004842123.tif 000008
（式中、Ｒ２は、−１１ＣＨ３、−１１ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２１８Ｆ、−ＣＨ２ＣＨ２１８Ｆ及び−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２１８Ｆからなる群より選ばれる基を表す。）
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、放射性チロシン誘導体、その製造方法、放射性チロシン誘導体からなるポジトロンイメージング用標識剤及び腫瘍の悪性度評価薬剤並びに腫瘍の検出方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
ＰＥＴ（ポジトロン・エミッション・トモグラフィー）による腫瘍診断は、腫瘍組織が正常組織と比較して急速に増殖しているという現象を利用している。例えば、現在、臨床上最も広く用いられている［１８Ｆ］−２−フルオロ−２−デオキシ−Ｄ−グルコース（以下、［１８Ｆ］ＦＤＧと略す。）はブドウ糖の類似体であり、［１８Ｆ］ＦＤＧの局在がエネルギー代謝を反映することを利用している。また、天然型アミノ酸の誘導体であるＬ−［１１Ｃ］メチオニン（以下、Ｌ−［１１Ｃ］Ｍｅｔと略す。）もＰＥＴによる腫瘍診断に用いられており、Ｌ−［１１Ｃ］Ｍｅｔの局在がアミノ酸代謝を反映することを利用している（例えば、非特許文献１参照）。【０００３】
【非特許文献１】ザ・ジャーナル・オブ・ニュークリアー・メディスン（The Journal of Nuclear Medicine）１９９１年、３２巻、６号、ｐ１２１１−１２１８
【非特許文献２】ザ・ジャーナル・オブ・ニュークリアー・メディスン（The Journal of Nuclear Medicine）１９９９年、４０巻、１号、ｐ２０５−２１２
【非特許文献３】ザ・ジャーナル・オブ・ニュークリアー・メディスン（The Journal of Nuclear Medicine）１９９９年、４０巻、８号、ｐ１３６７−１３７３
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
しかし、［１８Ｆ］ＦＤＧは炎症部位等にも集積することから、腫瘍への特異性は必ずしも高くない。また、放射線治療の効果判定に［１８Ｆ］ＦＤＧを用いるには、治療直後は炎症によるものと考えられる一過性の［１８Ｆ］ＦＤＧの上昇を示すため、治療後１ヶ月以上経過してからでないと使用できない。したがって、［１８Ｆ］ＦＤＧは治療効果の判定に用いるのには適していない。一方、Ｌ−［１１Ｃ］Ｍｅｔは、脳腫瘍などの一部の腫瘍診断には有効であるものの、腫瘍自体に対する特異性は低いという問題点がある。【０００５】
したがって、本発明の目的は、腫瘍に対する特異性の高いポジトロンイメージング用標識化合物及び早期に治療効果を判定することのできる標識化合物を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
上記目的を達成するため、本発明は、式（Ｉ）で表される放射性チロシン誘導体又はその薬学的に許容可能な塩を提供する。【０００７】
【化１】
0004842123.tif 000002
（式中、Ｒ１は、−１１ＣＨ３、−１１ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２１８Ｆ及び−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２１８Ｆからなる群より選ばれる基を表す。）【０００８】
ここで、Ｒ１が−１１ＣＨ３である化合物は、Ｏ−［１１Ｃ］メチル−Ｄ−チロシン（以下、Ｄ−［１１Ｃ］ＭＴと略す。）であり、Ｒ１が−ＣＨ２１８Ｆである化合物はＯ−［１８Ｆ］フルオロメチル−Ｄ−チロシン（以下、Ｄ−［１８Ｆ］ＦＭＴと略す。）である。また、Ｒ１が−１１ＣＨ２ＣＨ３である化合物は、Ｏ−［１１Ｃ］エチル−Ｄ−チロシン（以下、Ｄ−［１１Ｃ］ＥＴと略す。）であり、Ｒ１が−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２１８Ｆである化合物はＯ−［１８Ｆ］フルオロプロピル−Ｄ−チロシン（以下、Ｄ−［１８Ｆ］ＦＰＴと略す。）である。【０００９】
これらの放射性チロシン誘導体に類似した化合物として、式（ＩＩＩ）で表されるＯ−［１８Ｆ］フルオロエチル−Ｄ−チロシン（以下、Ｄ−［１８Ｆ］ＦＥＴと略す。）が既に知られている（例えば、非特許文献２及び３参照）。【００１０】
【化２】
0004842123.tif 000003
【００１１】
しかしながら、Ｄ−［１８Ｆ］ＦＥＴは血液脳関門の透過性が低いことや、ガン細胞への取り込みが少なく腫瘍組織に集積しないことから、腫瘍のイメージングには使えないと考えられていた（例えば、非特許文献２及び３参照）。【００１２】
しかしながら、本発明者らは、式（Ｉ）で表される放射性チロシン誘導体又はその薬学的に許容可能な塩は、非特許文献２及び３に記載されている挙動とは全く異なって、腫瘍組織に充分集積し、しかも腫瘍組織に対して特異的に集積することを見出し、ＰＥＴ用標識化合物として使用できることを明らかにした。【００１３】
そして、このように優れた特性を有する式（Ｉ）で表される放射性チロシン誘導体又はその薬学的に許容可能な塩は、Ｄ−チロシンをアルキル化又はフルオロアルキル化することにより、効率よく確実に得ることが可能である。【００１４】
本発明は、また、式（ＩＩ）で表される放射性チロシン誘導体又はその薬学的に許容可能な塩からなるポジトロンイメージング用標識剤を提供する。【００１５】
【化３】
0004842123.tif 000004
（式中、Ｒ２は、−１１ＣＨ３、−１１ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２１８Ｆ、−ＣＨ２ＣＨ２１８Ｆ及び−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２１８Ｆからなる群より選ばれるいずれかの基を表す。）【００１６】
式（Ｉ）で表される放射性チロシン誘導体のみならず、式（ＩＩ）で表される放射性チロシン誘導体も、腫瘍組織に充分集積し、しかも腫瘍組織に対して特異的に集積するため、ＰＥＴ用標識化合物として使用できる。【００１７】
本発明は、また、式（ＩＩ）で表される放射性チロシン誘導体又はその薬学的に許容可能な塩からなる腫瘍の悪性度評価薬剤を提供する。式（ＩＩ）で表される放射性チロシン誘導体又はその薬学的に許容可能な塩は、腫瘍の増殖速度に応じて腫瘍への集積度が異なるため、腫瘍の悪性度評価薬剤としても使用できる。式（ＩＩ）で表される放射性チロシン誘導体は［１８Ｆ］ＦＤＧと異なり、炎症の影響を受けにくいため、治療後速やかに治療効果の判定に用いることが可能である。【００１８】
本発明は、さらに、式（ＩＩ）で表される放射性チロシン誘導体又はその薬学的に許容可能な塩を被検体に投与する工程と、被検体の組織ごとの放射線量を測定する工程と、組織ごとの放射線量の比較により相対的に放射線量の大きい組織を腫瘍が形成された組織として検出する検出工程と、を備える腫瘍の検出方法を提供する。式（ＩＩ）で表される放射性チロシン誘導体又はその薬学的に許容可能な塩は正常組織には集積しにくく、腫瘍組織に集積しやすいことを利用して、腫瘍の検出を行うことが可能である。検出工程において、血液の放射線量を基準として相対的に放射線量の大きい組織を腫瘍が形成された組織として検出することが好ましい。血液の放射線量を基準とすることにより、正常組織と腫瘍組織の差異を明確にできるからである。
【発明の効果】
【００１９】
腫瘍に対する特異性の高いポジトロンイメージング用標識剤及び早期に治療効果を判定することのできる標識剤として有用な化合物を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
【図１】Ｌ−及びＤ−［１１Ｃ］Ｍｅｔの各臓器における集積量を表した図である。（ａ）では集積量をＳＵＶで表し、（ｂ）では集積量をＳＵＶ（臓器）／ＳＵＶ（血液）で表している。
【図２】Ｌ−及びＤ−［１１Ｃ］ＭＴの各臓器における集積量を表した図である。（ａ）では集積量をＳＵＶで表し、（ｂ）では集積量をＳＵＶ（臓器）／ＳＵＶ（血液）で表している。
【図３】Ｌ−及びＤ−［１８Ｆ］ＦＭＴの各臓器における集積量を表した図である。（ａ）では集積量をＳＵＶで表し、（ｂ）では集積量をＳＵＶ（臓器）／ＳＵＶ（血液）で表している。
【図４】Ｌ−及びＤ−［１１Ｃ］Ｍｅｔをマウスに投与した場合のプラナー計測の結果を表した図である。
【図５】Ｌ−及びＤ−［１１Ｃ］ＭＴをマウスに投与した場合のプラナー計測の結果を表した図である。
【図６】Ｌ−及びＤ−［１８Ｆ］ＦＭＴをマウスに投与した場合のプラナー計測の結果を表した図である。
【図７】ＨｅＬａ移植後の経過日数と腫瘍体積の関係を表した図である。
【図８】各化合物の血液及び腫瘍における集積量（ＳＵＶ）を表した図である。
【図９】各化合物の腫瘍における集積量（ＳＵＶ（臓器）／ＳＵＶ（血液））を表した図である。
【図１０】Ｌ−及びＤ−［１１Ｃ］ＥＴの各臓器における集積量を表した図である。集積量をＳＵＶ（臓器）／ＳＵＶ（血液）で表している。
【図１１】Ｌ−及びＤ−［１８Ｆ］ＦＥＴの各臓器における集積量を表した図である。集積量をＳＵＶ（臓器）／ＳＵＶ（血液）で表している。
【図１２】Ｌ−及びＤ−［１８Ｆ］ＦＰＴの各臓器における集積量を表した図である。集積量をＳＵＶ（臓器）／ＳＵＶ（血液）で表している。
【図１３】各化合物の腫瘍における集積量（ＳＵＶ（臓器）／ＳＵＶ（血液））を表した図である。
【符号の説明】
【００２１】
１…腫瘍部位。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２２】
以下、本発明の好適な実施形態について詳細に説明する。【００２３】
まず、本発明の放射性チロシン誘導体について説明する。本発明の放射性チロシン誘導体は式（Ｉ）で表される。これらの誘導体は、腫瘍組織に充分集積し、しかも腫瘍組織に対して特異的に集積することからポジトロンイメージング用標識剤として有用である。また、これらの誘導体は、腫瘍の増殖速度に応じて腫瘍への集積度が変化することから、腫瘍の悪性度評価薬剤としても有用である。【００２４】
式（Ｉ）で表される化合物は、Ｄ−チロシンのアルキル化又はフルオロアルキル化により合成することができる。以下に、Ｄ−［１１Ｃ］ＭＴ及びＤ−［１８Ｆ］ＦＭＴを例に挙げて合成方法について説明する。【００２５】
Ｄ−［１１Ｃ］ＭＴは、Ｄ−チロシンの［１１Ｃ］メチル化により合成することが可能である。メチル化に用いる試薬としては、例えば、［１１Ｃ］塩化メチル、［１１Ｃ］臭化メチル、［１１Ｃ］ヨウ化メチル等の［１１Ｃ］ハロゲン化メチルや［１１Ｃ］メチルトリフレート等が挙げられる。その中でも、［１１Ｃ］ヨウ化メチル及び［１１Ｃ］メチルトリフレートは、反応性が高いため短時間で収率よくＤ−［１１Ｃ］ＭＴを合成できるため、特に好ましい。これらの試薬は、公知の方法（例えば、Journal of Labelled Compounds and Radiopharmaceuticals, Vol. 46, p555-566 (2003)に記載の方法）により合成することが可能である。
【００２６】
反応溶媒は、出発原料と反応せずに溶解するものであれば特に限定されないが、例えば、ジメチルスルホキシド等を用いることが可能である。反応終了後、粗生成物を逆相ＨＰＬＣにより精製しＤ−［１１Ｃ］ＭＴを得ることができる。【００２７】
Ｄ−［１８Ｆ］ＦＭＴは、Ｄ−チロシンの［１８Ｆ］フルオロメチル化により合成することが可能である。フルオロメチル化に用いる試薬としては、例えば、［１８Ｆ］ＦＣＨ２Ｂｒや［１８Ｆ］フルオロメチルトリフレート等が挙げられる。これらの試薬は反応性が高いために短時間で効率よくＤ−［１８Ｆ］ＦＭＴを合成できる。これらの試薬は、公知の方法（例えば、Journal of Labelled Compounds and Radiopharmaceuticals, Vol. 46, p555-566 (2003)に記載の方法）により合成することが可能である。
【００２８】
反応溶媒は、出発原料と反応せずに溶解するものであれば特に限定されないが、例えば、ジメチルスルホキシド等を用いることが可能である。反応終了後、粗生成物を逆相ＨＰＬＣにより精製しＤ−［１８Ｆ］ＦＭＴを得ることができる。【００２９】
同様に、［１１Ｃ］ヨウ化エチル等により、Ｄ−チロシンを［１１Ｃ］エチル化することにより、Ｄ−［１１Ｃ］ＥＴを合成することができる。また、［１８Ｆ］ＦＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＯＴｓ（Ｔｓ：ｐ−トルエンスルホニル基）等により、Ｄ−チロシンを［１８Ｆ］フルオロプロピル化することにより、Ｄ−［１８Ｆ］ＦＰＴを合成することができる。
【００３０】
本発明の放射性チロシン誘導体の薬学的に許容可能な塩としては、例えば、アルカリ金属塩（ナトリウム塩、カリウム塩など）、カルシウム塩、アミン塩（ジエチルアミン塩など）などが挙げられる。また、塩酸塩、臭化水素塩、硫酸塩及び重硫酸塩、リン酸塩及びリン酸水素塩、酢酸塩、クエン酸塩、フマル酸塩、グルコン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩なども挙げられる。【００３１】
次に本発明のポジトロンイメージング用標識剤について説明する。本発明のポジトロンイメージング用標識剤は、式（ＩＩ）で表される放射性チロシン誘導体又はその薬学的に許容可能な塩からなる。これらの誘導体は、腫瘍組織に充分集積し、しかも腫瘍組織に対して特異的に集積することからポジトロンイメージング標識剤として有用である。【００３２】
式（ＩＩ）で表される放射性チロシン誘導体の合成は、Ｄ−［１１Ｃ］ＭＴ及びＤ−［１８Ｆ］ＦＭＴの合成方法に準じた方法で行うことが可能である。また、The Journal of Nuclear Medicine, Vol. 40, No. 1, pp205-212, 1999に記載の方法を利用することも可能である。【００３３】
薬学的に許容可能な塩としては、例えば、アルカリ金属塩（ナトリウム塩、カリウム塩など）、カルシウム塩、アミン塩（ジエチルアミン塩など）などが挙げられる。また、塩酸塩、臭化水素塩、硫酸塩及び重硫酸塩、リン酸塩及びリン酸水素塩、酢酸塩、クエン酸塩、フマル酸塩、グルコン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩なども挙げられる。【００３４】
式（ＩＩ）で表される放射性チロシン誘導体を用いたＰＥＴ計測は、例えば、式（ＩＩ）で表される放射性チロシン誘導体を被験者に投与し、ＰＥＴシステム（例えば、浜松ホトニクス（株）製、ＰＰＩＳ−４８００）を用いてＰＥＴ計測を行うことができる。ＰＥＴシステムにおいては、投与された放射性チロシン誘導体が有する放出核種（１１Ｃ又は１８Ｆ）から放出された陽電子と周囲の物質構成電子との結合により放出される消滅光子、すなわちγ線が検出される。さらに、必要に応じて、得られた計測データを画像再構成ソフトウェアにより処理して、イメージ画像を得ることも可能である。【００３５】
式（ＩＩ）で表される放射性チロシン誘導体は、腫瘍組織に集積する一方で正常組織への集積は低いため、γ線量を測定することにより又はイメージ画像を解析することにより、式（ＩＩ）で表される放射性チロシン誘導体が集積している場所を特定でき、そこに腫瘍が形成されていると判定できる。【００３６】
次に本発明の腫瘍の悪性度評価薬剤について説明する。本発明の腫瘍の悪性度評価薬剤は、式（ＩＩ）で表される放射性チロシン誘導体又はその薬学的に許容可能な塩からなる。これらの誘導体は、腫瘍の増殖速度に応じて腫瘍への集積度が異なることから、腫瘍の悪性度評価薬剤としても有用である。【００３７】
式（ＩＩ）で表される放射性チロシン誘導体を用いた腫瘍の悪性度の評価は次の方法により行うことが可能である。式（ＩＩ）で表される放射性チロシン誘導体を被験者に投与し、前述の方法と同様の方法によりＰＥＴ計測を行う。腫瘍部位のγ線量又はイメージ画像を解析することにより、その腫瘍の悪性度を評価することが可能である。すなわち、式（ＩＩ）で表される放射性チロシン誘導体は、増殖速度の速い腫瘍組織に対して集積しやすい性質を有しているため、γ線量の大きな場合には悪性度の高い（増殖速度の速い）と判定できる。【００３８】
本発明の腫瘍の悪性度の評価薬剤を用いたＰＥＴ計測を、放射線治療などの治療の前後で行うことにより、治療効果を判定することが可能である。すなわち、腫瘍部位のγ線量が治療後に低下していれば、腫瘍の増殖速度を抑制でき充分な治療効果があったと判定することができる。【００３９】
最後に、本発明の腫瘍の検出方法について説明する。本発明の腫瘍の検出方法は、式（ＩＩ）で表される放射性チロシン誘導体又はその薬学的に許容可能な塩を被検体に投与する工程と、被検体の組織ごとの放射線量を測定する工程と、組織ごとの放射線量の比較により相対的に放射線量の大きい組織を腫瘍が形成された組織として検出する検出工程と、を備える。【００４０】
腫瘍の検出を行うには、まず、式（ＩＩ）で表される放射性チロシン誘導体を被検体に投与する。投与方法は、通常、静脈内投与である。次に、被検体の組織ごとの放射線量を測定する。放射線量の測定は、既述のＰＥＴ計測により行うことが可能である。次に組織ごとの放射線量の比較により相対的に放射線量の大きい組織を腫瘍が形成された組織として検出する。比較には、ＳＵＶ（Standardized Uptake Value）、特に、血液の放射線量を基準とした相対的な値であるＳＵＶ（組織）／ＳＵＶ（血液）を用いるのが好ましい。また、イメージ画像から相対的に放射線量の大きい組織を同定してもよい。
【実施例】
【００４１】
以下、実施例を挙げて本発明について詳しく説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。【００４２】
（実施例１：Ｄ−［１１Ｃ］ＭＴの合成）
まず、［１１Ｃ］ヨウ化メチルを以下の方法で合成した。サイクロトロンを用いて、ターゲットに充填した窒素ガスにプロトンビーム（１８ＭｅＶ，２０μＡ）を照射して［１１Ｃ］炭酸ガスを生成させた。生成した［１１Ｃ］炭酸ガスを冷却した０．１Ｍ水素化アルミニウムリチウムのテトラヒドロフラン溶液（０．５ｍＬ）に吹き込み、［１１Ｃ］炭酸ガスを［１１Ｃ］メタノールに還元した。この溶液に０．５ｍＬのヨウ化水素酸を加え、［１１Ｃ］ヨウ化メチルを生成させた。【００４３】
Ｄ−チロシン（１ｍｇ）に１０％水酸化ナトリウム水溶液（４．４１μｌ）を加え、更にジメチルスルホキシド（０．３ｍＬ）を加えて原料溶液とした。上記方法により生成させた［１１Ｃ］ヨウ化メチルを吹き込んで捕集した後、反応容器を密閉して８０℃で３分間反応を行った。粗生成物に対して以下の条件でＨＰＬＣを行い、保持時間８分の放射能ピーク画分を分取し、減圧下に濃縮を行ってＤ−［１１Ｃ］ＭＴを精製した。【００４４】
ＨＰＬＣ条件
カラム  ＹＭＣ−Ｐａｃｋ  ＯＤＳ−Ａ（１０×２５０ｍｍ）（（株）ワイエムシー）
移動相  エタノール：酢酸：水＝１００：２５：８７５
流速  ４ｍＬ／ｍｉｎ
検出波長  ２８０ｎｍ。【００４５】
濃縮して得られた残渣を生理食塩水３ｍＬに再溶解し、０．２２μｍのメンブランフィルターで滅菌ろ過することにより、２〜５ＧＢｑのＤ−［１１Ｃ］ＭＴの生理食塩水溶液が得られた（放射化学的純度９７％以上）。【００４６】
（実施例２：Ｄ−［１８Ｆ］ＦＭＴの合成）
まず、［１８Ｆ］ＦＣＨ２ＢｒをRadiation and Isotopes, Vol. 57, pp347-352, 2002に記載の方法と同様の方法により合成した。【００４７】
Ｄ−チロシン（１ｍｇ）に１０％水酸化ナトリウム水溶液（４．４１μｌ）を加え、更にジメチルスルホキシド（０．３ｍＬ）を加えて原料溶液とした。上記方法により生成させた［１８Ｆ］ＦＣＨ２Ｂｒを吹き込んで捕集した後、反応容器を密閉して８０℃で５分間反応を行った。粗生成物に対して以下の条件でＨＰＬＣを行い、保持時間９分の放射能ピーク画分を分取し、減圧下に濃縮を行ってＤ−［１８Ｆ］ＦＭＴを精製した。【００４８】
ＨＰＬＣ条件
カラム  ＹＭＣ−Ｐａｃｋ  ＯＤＳ−Ａ（１０×２５０ｍｍ）（（株）ワイエムシー）
移動相  エタノール：酢酸：水＝１００：２５：８７５
流速  ４ｍＬ／ｍｉｎ
検出波長  ２８０ｎｍ。【００４９】
濃縮して得られた残渣を生理食塩水３ｍＬに再溶解し、０．２２μｍのメンブランフィルターで滅菌ろ過することにより、１〜３ＧＢｑのＤ−［１８Ｆ］ＦＭＴの生理食塩水溶液が得られた（放射化学的純度９７％以上）。【００５０】
（比較例１：Ｏ−［１１Ｃ］メチル−Ｌ−チロシン（Ｌ−［１１Ｃ］ＭＴ）の合成）
原料としてＤ−チロシンの代わりにＬ−チロシンを用いて、実施例１に記載の方法と同様の方法でＬ−［１１Ｃ］ＭＴの合成を行った。【００５１】
（比較例２：Ｏ−［１８Ｆ］フルオロメチル−Ｌ−チロシン（Ｌ−［１８Ｆ］ＦＭＴ）の合成）
原料としてＤ−チロシンの代わりにＬ−チロシンを用いて、実施例２に記載の方法と同様の方法でＬ−［１８Ｆ］ＦＭＴの合成を行った。
【００５２】
（比較例３〜７：その他の既知のＰＥＴ標識化合物の合成）
Ｌ−及びＤ−［１１Ｃ］Ｍｅｔ（比較例３及び４）は、The Journal of Nuclear Medicine, Vol. 28 pp1037-1040, 1987）に記載の方法で合成した。［１８Ｆ］ＦＤＧ（比較例５）は、The Journal of Nuclear Medicine, Vol. 27 pp235-238, 1986に記載の方法で合成した。［１１Ｃ］コリン（比較例６）は、The Journal of Nuclear Medicine, Vol. 38 pp842-847, 1997に記載の方法で合成した。３’−デオキシ−３’−［１８Ｆ］フルオロチミジン（［１８Ｆ］ＦＬＴ；比較例７）は、Journal of Radioanalytical and Nuclear Chemistry, Vol. 243 pp843-846, 2000に記載の方法で合成した。【００５３】
（試験例１：担ガンマウスにおける臓器分布計測）
ヒト子宮頸ガン細胞であるＨｅＬａ（Ｃｅｌｌ  Ｓｔｒａｉｎ：１５Ｓ３Ｄ）５×１０６個を７週齢のヌードマウス（ＢＡＬＢ／ｃＡ  Ｊｃｌ−ｎｕ、日本クレア）の大腿皮下に移植した。移植２週間後（９週齢）に実施例１〜２の化合物及び比較例１〜７の化合物（実施例１並びに比較例１、３、４及び６は１０ＭＢｑ、実施例２並びに比較例２、５及び７は１ＭＢｑ）を尾静脈より投与した。投与１時間後にマウスを断頭して、各臓器（血液、心臓、肺、肝臓、腎臓、脾臓、筋肉、骨、小腸、消化管、膵臓、脳及び腫瘍）を採取した。各臓器の放射能をオートガンマカウンターで測定し、各臓器の重量を測定し、投与化合物の集積量の指標であるＳＵＶ（Standardized Uptake Value）を求めた。さらに、集積量を補正するために、各臓器のＳＵＶを血液のＳＵＶで除したＳＵＶ（臓器）／ＳＵＶ（血液）を求めた。得られた結果を図１〜３に示す。【００５４】
図１は、Ｌ−及びＤ−［１１Ｃ］Ｍｅｔの各臓器における集積量を表した図である。図１（ａ）では集積量をＳＵＶで表し、図１（ｂ）では集積量をＳＵＶ（臓器）／ＳＵＶ（血液）で表している。図１（ｂ）に示した結果から分かるように、Ｌ−及びＤ−［１１Ｃ］Ｍｅｔは腫瘍への集積は認められるものの、正常組織（特に、肝臓、腎臓、脾臓、腸及び膵臓）への集積も高かった。したがって、腫瘍への特異性が低いことから、Ｌ−及びＤ−［１１Ｃ］Ｍｅｔは腫瘍診断には不向きであることが明らかとなった。【００５５】
図２は、Ｌ−及びＤ−［１１Ｃ］ＭＴの各臓器における集積量を表した図である。図２（ａ）では集積量をＳＵＶで表し、図２（ｂ）では集積量をＳＵＶ（臓器）／ＳＵＶ（血液）で表している。図２（ｂ）に示した結果から分かるように、Ｌ−及びＤ−［１１Ｃ］ＭＴは腫瘍への集積が認められる一方で膵臓以外の正常組織への集積は低く、腫瘍に特異的に集積した。さらに、Ｄ体はＬ体に比べて、腫瘍のＳＵＶ（臓器）／ＳＵＶ（血液）は高く、また、ＳＵＶ（臓器）／ＳＵＶ（血液）で表した膵臓への集積の、腫瘍への集積に対する比は、Ｄ−体の方がＬ−体よりも低いことが分かった。したがって、Ｄ体はＬ体に比べて優れた腫瘍診断薬として利用できることが示唆された。【００５６】
図３は、Ｌ−及びＤ−［１８Ｆ］ＦＭＴの各臓器における集積量を表した図である。図３（ａ）では集積量をＳＵＶで表し、図３（ｂ）では集積量をＳＵＶ（臓器）／ＳＵＶ（血液）で表している。図３（ｂ）に示した結果から分かるように、Ｌ−及びＤ−［１１Ｃ］ＭＴは腫瘍への集積が認められる一方で膵臓以外の正常組織への集積は低く、腫瘍に特異的に集積した。さらに、Ｄ体はＬ体に比べて、腫瘍のＳＵＶ（臓器）／ＳＵＶ（血液）は高く腫瘍に対する特異性が特に高いことが分かった。したがって、Ｄ体はＬ体に比べて優れた腫瘍診断薬として利用できることが示唆された。【００５７】
（試験例２：担ガンマウスにおけるプラナー計測）
試験例１と同様にＨｅＬａを移植したヌードマウス（ＢＡＬＢ／ｃＡ  Ｊｃｌ−ｎｕ）に実施例１〜２の化合物及び比較例１〜７の化合物（２．５ＭＢｑ）を尾静脈より投与した。計測は、プラナーイメージングシステム（浜松ホトニクス（株）製、ＰＰＩＳ−４８００）を用い、化合物の投与直後から１分×６０フレームで６０分間実施して、１０フレームずつ積算した画像で表した。各投与化合物のプラナー計測により得られた結果を図４〜６に示す。【００５８】
図４は、Ｌ−及びＤ−［１１Ｃ］Ｍｅｔを投与した場合のプラナー計測の結果を表した図である。Ｌ体及びＤ体のいずれも腫瘍部位への集積が確認されたものの、正常組織への集積の方が著しく強く、腫瘍のイメージングに適していないことが明らかとなった。【００５９】
図５は、Ｌ−及びＤ−［１１Ｃ］ＭＴを投与した場合のプラナー計測の結果を表した図である。Ｌ体及びＤ体のいずれも腫瘍部位への集積が確認された。また、Ｄ体はＬ体に比べて腫瘍に特異的に集積していることも確認された。【００６０】
図６は、Ｌ−及びＤ−［１８Ｆ］ＦＭＴを投与した場合のプラナー計測の結果を表した図である。Ｌ体及びＤ体のいずれも腫瘍部位への集積が確認された。また、Ｄ体はＬ体に比べて腫瘍に特異的に集積していることも確認された。【００６１】
（試験例３：腫瘍の増殖速度とポジトロンイメージング用標識化合物の集積度の関係）
細胞増殖速度の異なるＨｅＬａ細胞をヌードマウス（ＢＡＬＢ／ｃＡ  Ｊｃｌ−ｎｕ）に移植し、実施例１〜２の化合物及び比較例１〜７の化合物を投与した場合の腫瘍への集積を調べた。ＨｅＬａ−Ｋ（Ｃｅｌｌ  Ｓｔｒａｉｎ：１５Ｓ３Ｄ）は５×１０６個、ＨｅＬａ−Ｂ（ヒューマンサイエンス研究資源バンク：ＪＣＲＢ９００４）は２×１０７個を、メスＢＡＬＢ／ｃＡ  Ｊｃｌ−ｎｕヌードマウス(ＨｅＬａ−Ｋ：7週齢、ＨｅＬａ−Ｂ：５週齢)の大腿皮下に移植した。ＨｅＬａ−Ｋ移植マウスは移植２週間後、ＨｅＬａ−Ｂは４週間後に、また、それぞれ９週齢となったところで実験に用いた。担ガンマウスにおける各標識化合物の集積と腫瘍組織の増殖速度の関係を見るために、腫瘍の大きさを連日計測した。倍加時間（ｄｏｕｂｌｉｎｇ  ｔｉｍｅ：ＤＴ）の計算は、Ｓｃｈｗａｒｔｚの提案した計算式：ＤＴ＝ｔ×ｌｏｇ２（Ｖ１／Ｖ０）にて算出した。なおｔは腫瘍体積がＶ０（ｍｍ３）からＶ１（ｍｍ３）になるまでの日数を示し、体積（ｍｍ３）は、腫瘍の長径から、１／２×ｌｅｎｇｔｈ（ｍｍ）×ｗｉｄｔｈ２（ｍｍ２）で計算した。図７はＨｅＬａ移植後の経過日数と腫瘍体積の関係を表すグラフである。図７から分かるように、ＨｅＬａ−Ｋは増殖速度の速いガン細胞であり、ＨｅＬａ−Ｂは増殖速度の遅いガン細胞である。また、図７から、ＨｅＬａ−Ｋ及びＨｅＬａ−Ｂの倍加時間を算出したところ、それぞれ４．４日及び１１．０日であった。【００６２】
ＨｅＬａ−Ｋ及びＨｅＬａ−Ｂを移植したヌードマウスに、［１８Ｆ］ＦＤＧ、［１１Ｃ］コリン、［１８Ｆ］ＦＬＴ、Ｌ−及びＤ−［１１Ｃ］Ｍｅｔ並びにＬ−及びＤ−［１１Ｃ］ＭＴを尾静脈より投与し（［１８Ｆ］ＦＤＧ及び［１８Ｆ］ＦＬＴは１ＭＢｑ、［１１Ｃ］コリン、Ｌ−及びＤ−［１１Ｃ］Ｍｅｔ並びにＬ−及びＤ−［１１Ｃ］ＭＴは１０ＭＢｑ）、投与１時間後にマウスを断頭して、血液及び腫瘍を採取した。血液及び腫瘍の放射能をオートガンマカウンターで測定し、重量を測定し、ＳＵＶを求めた。さらに、集積量を補正するために、腫瘍のＳＵＶを血液のＳＵＶで除したＳＵＶ（臓器）／ＳＵＶ（血液）を求めた。得られた結果を図８及び９に示す。【００６３】
図８及び９は、各化合物の血液及び腫瘍における集積量を表した図である。図８では集積量をＳＵＶで表し、図９では集積量をＳＵＶ（臓器）／ＳＵＶ（血液）で表している。図９に示した結果から分かるように、Ｄ−［１１Ｃ］ＭＴの集積は増殖の早いＨｅＬａ−Ｋにより多く集積した。増殖速度の違いによる集積度の違いは、Ｌ−［１１Ｃ］ＭＴやＤ−［１１Ｃ］Ｍｅｔと比較して顕著に大きかった。なお、［１８Ｆ］ＦＤＧやＬ−［１１Ｃ］Ｍｅｔでは増殖速度の違いによる集積度の違いは検出されなかった。【００６４】
集積度の違いにより増殖速度の違いを検出できるということは、治療効果が現れて腫瘍の増殖速度が低下した際にその変化を捉えることができることを示唆している。したがって、Ｄ−［１１Ｃ］ＭＴは既存の標識化合物と比べて、腫瘍の治療効果判定に優れていると考えられる。【００６５】
（実施例３：Ｄ−［１１Ｃ］ＥＴの合成）
まず、［１１Ｃ］ヨウ化エチルをApplied Radiation and Isotopes, Vol. 50, pp693-697, 1999に記載の方法と同様の方法により合成した。【００６６】
Ｄ−チロシン（１ｍｇ）に１０％水酸化ナトリウム水溶液（４．４１μｌ）を加え、更にジメチルスルホキシド（０．３ｍＬ）を加えて原料溶液とした。上記方法により生成させた［１１Ｃ］ヨウ化エチルを吹き込んで捕集した後、反応容器を密閉して８０℃で３分間反応を行った。粗生成物に対して以下の条件でＨＰＬＣを行い、保持時間１３分の放射能ピーク画分を分取し、減圧下に濃縮を行ってＤ−［１１Ｃ］ＥＴを精製した。【００６７】
ＨＰＬＣ条件
カラム  ＹＭＣ−Ｐａｃｋ  ＯＤＳ−Ａ（１０×２５０ｍｍ）（（株）ワイエムシー）
移動相  エタノール：酢酸：水＝１２０：２５：８５５
流速  ４ｍＬ／ｍｉｎ
検出波長  ２８０ｎｍ。【００６８】
濃縮して得られた残渣を生理食塩水３ｍＬに再溶解し、０．２２μｍのメンブランフィルターで滅菌ろ過することにより、０．８〜１．５ＧＢｑのＤ−［１１Ｃ］ＥＴの生理食塩水溶液が得られた（放射化学的純度９９％以上）。【００６９】
（実施例４：Ｄ−［１８Ｆ］ＦＥＴの合成）
まず、［１８Ｆ］ＦＣＨ２ＣＨ２ＯＴｓをSynapse, Vol. 54, pp37-45, 2004に記載の方法と同様の方法により合成した。【００７０】
Ｄ−チロシン（３ｍｇ）に１０％水酸化ナトリウム水溶液（１３．２μｌ）を加え、更にジメチルスルホキシド（０．３ｍＬ）を加えて原料溶液とした。上記方法により生成させた［１８Ｆ］ＦＣＨ２ＣＨ２ＯＴｓに原料溶液を加え、反応容器を密閉して１２５℃で１０分間反応を行った。粗生成物に対して以下の条件でＨＰＬＣを行い、保持時間９分の放射能ピーク画分を分取し、減圧下に濃縮を行ってＤ−［１８Ｆ］ＦＥＴを精製した。【００７１】
ＨＰＬＣ条件
カラム  ＹＭＣ−Ｐａｃｋ  ＯＤＳ−Ａ（１０×２５０ｍｍ）（（株）ワイエムシー）
移動相  エタノール：酢酸：水＝１００：２５：８７５
流速  ４ｍＬ／ｍｉｎ
検出波長  ２８０ｎｍ。【００７２】
濃縮して得られた残渣を生理食塩水３ｍＬに再溶解し、０．２２μｍのメンブランフィルターで滅菌ろ過することにより、０．５〜２ＧＢｑのＤ−［１８Ｆ］ＦＥＴの生理食塩水溶液が得られた（放射化学的純度９９％以上）。【００７３】
（実施例５：Ｄ−［１８Ｆ］ＦＰＴの合成）
まず、［１８Ｆ］ＦＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＯＴｓを、原料にＴｓＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＯＴｓを用い、Synapse, Vol. 54, pp37-45, 2004に記載の方法と同様の方法により合成した。【００７４】
Ｄ−チロシン（３ｍｇ）に１０％水酸化ナトリウム水溶液（１３．２μｌ）を加え、更にジメチルスルホキシド（０．３ｍＬ）を加えて原料溶液とした。上記方法により生成させた［１８Ｆ］ＦＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＯＴｓに原料溶液を加え、反応容器を密閉して１２５℃で１０分間反応を行った。粗生成物に対して以下の条件でＨＰＬＣを行い、保持時間１７分の放射能ピーク画分を分取し、減圧下に濃縮を行ってＤ−［１８Ｆ］ＦＰＴを精製した。【００７５】
ＨＰＬＣ条件
カラム  ＹＭＣ−Ｐａｃｋ  ＯＤＳ−Ａ（１０×２５０ｍｍ）（（株）ワイエムシー）
移動相  エタノール：酢酸：水＝１２０：２５：８５５
流速  ４ｍＬ／ｍｉｎ
検出波長  ２８０ｎｍ。【００７６】
濃縮して得られた残渣を生理食塩水３ｍＬに再溶解し、０．２２μｍのメンブランフィルターで滅菌ろ過することにより、０．２〜０．６ＧＢｑのＤ−［１８Ｆ］ＦＰＴの生理食塩水溶液が得られた（放射化学的純度９９％以上）。【００７７】
（比較例８：Ｏ−［１１Ｃ］エチル−Ｌ−チロシン（Ｌ−［１１Ｃ］ＥＴ）の合成）
原料としてＤ−チロシンの代わりにＬ−チロシンを用いて、実施例３に記載の方法と同様の方法でＬ−［１１Ｃ］ＥＴの合成を行った。【００７８】
（比較例９：Ｏ−［１８Ｆ］フルオロエチル−Ｌ−チロシン（Ｌ−［１８Ｆ］ＦＥＴ）の合成）
原料としてＤ−チロシンの代わりにＬ−チロシンを用いて、実施例４に記載の方法と同様の方法でＬ−［１８Ｆ］ＦＥＴの合成を行った。【００７９】
（比較例１０：Ｏ−［１８Ｆ］フルオロプロピル−Ｌ−チロシン（Ｌ−［１８Ｆ］ＦＰＴ）の合成）
原料としてＤ−チロシンの代わりにＬ−チロシンを用いて、実施例５に記載の方法と同様の方法でＬ−［１８Ｆ］ＦＰＴの合成を行った。【００８０】
（試験例４：担ガンマウスにおける臓器分布計測）
試験例１と同様の方法により、実施例３〜５及び比較例８〜１０の化合物の臓器分布を計測した。得られた結果を図１０〜１２に示す。【００８１】
図１０は、Ｌ−及びＤ−［１１Ｃ］ＥＴの各臓器における集積量を表した図である。集積量をＳＵＶ（臓器）／ＳＵＶ（血液）で表している。この結果から分かるように、Ｌ−及びＤ−［１１Ｃ］ＥＴは腫瘍への集積が認められる一方で膵臓以外の正常組織への集積は低く、腫瘍に特異的に集積した。さらに、Ｄ体の腫瘍のＳＵＶ（臓器）／ＳＵＶ（血液）は、Ｌ体と比べて同程度であり、また、ＳＵＶ（臓器）／ＳＵＶ（血液）で表した膵臓への集積の、腫瘍への集積に対する比は、Ｄ−体の方がＬ−体よりも低いことが分かった。したがって、Ｄ体はＬ体に比べて優れた腫瘍診断薬として利用できることが示唆された。
【００８２】
図１１は、Ｌ−及びＤ−［１８Ｆ］ＦＥＴの各臓器における集積量を表した図である。集積量をＳＵＶ（臓器）／ＳＵＶ（血液）で表している。この結果から分かるように、Ｌ−及びＤ−［１８Ｆ］ＦＥＴは腫瘍への集積が認められる一方で膵臓以外の正常組織への集積は低く、腫瘍に特異的に集積した。さらに、Ｄ体はＬ体に比べて、腫瘍のＳＵＶ（臓器）／ＳＵＶ（血液）は高く腫瘍に対する特異性が特に高いことが分かった。また、ＳＵＶ（臓器）／ＳＵＶ（血液）で表した膵臓への集積の、腫瘍への集積に対する比は、Ｄ−体の方がＬ−体よりも低いことが分かった。したがって、Ｄ体はＬ体に比べて優れた腫瘍診断薬として利用できることが示唆された。【００８３】
図１２は、Ｌ−及びＤ−［１８Ｆ］ＦＰＴの各臓器における集積量を表した図である。集積量をＳＵＶ（臓器）／ＳＵＶ（血液）で表している。この結果から分かるように、Ｌ−及びＤ−［１８Ｆ］ＦＰＴは腫瘍への集積が認められる一方で膵臓及び骨以外の正常組織への集積は低く、腫瘍に特異的に集積した。さらに、Ｄ体の腫瘍のＳＵＶ（臓器）／ＳＵＶ（血液）は、Ｌ体と比べて同程度であり、また、ＳＵＶ（臓器）／ＳＵＶ（血液）で表した膵臓への集積の、腫瘍への集積に対する比は、Ｄ−体の方がＬ−体よりも低いことが分かった。したがって、Ｄ体はＬ体に比べて優れた腫瘍診断薬として利用できることが示唆された。【００８４】
（試験例５：腫瘍の増殖速度とポジトロンイメージング用標識化合物の集積度の関係）
ＨｅＬａ−Ｋ及びＨｅＬａ−Ｂを移植したヌードマウスに、Ｌ−及びＤ−［１１Ｃ］ＥＴ、Ｌ−及びＤ−［１８Ｆ］ＦＭＴ、Ｌ−及びＤ−［１８Ｆ］ＦＥＴ並びにＬ−及びＤ−［１８Ｆ］ＦＰＴを尾静脈より投与し（Ｌ−及びＤ−［１１Ｃ］ＥＴは１０ＭＢｑ、他は１ＭＢｑ）、投与１時間後にマウスを断頭して、血液及び腫瘍を採取した。血液及び腫瘍の放射能をオートガンマカウンターで測定し、重量を測定し、ＳＵＶを求めた。さらに、集積量を補正するために、腫瘍のＳＵＶを血液のＳＵＶで除したＳＵＶ（臓器）／ＳＵＶ（血液）を求めた。得られた結果を図１３に示す。【００８５】
図１３は、各化合物の腫瘍における集積量を表した図である。集積量をＳＵＶ（臓器）／ＳＵＶ（血液）で表している。この結果から分かるように、全ての化合物の集積は増殖の早いＨｅＬａ−Ｋにより多く集積した。Ｄ−［１８Ｆ］ＦＭＴの増殖速度の違いによる集積度の違いは、Ｌ−［１８Ｆ］ＦＭＴと比べて顕著に大きかった。したがって、これらの化合物は既存の標識化合物と比べて、腫瘍の治療効果判定に優れていると考えられる。
【産業上の利用可能性】
【００８６】
本願発明により、ＰＥＴによる腫瘍診断が可能となり、特に、放射線治療などの治療効果を早期に判定することが可能となる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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