(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式：
【化１】
0004631263.tif 000009
（式中、ｍ：ｎ＝９：１〜１：９であり、ｘは、６〜１８である。）
で表される共重合物。
【請求項２】
ｘが１４である、請求項１に記載の共重合物。
【請求項３】
請求項１又は２に記載の共重合物を含む、抗血栓性組成物。
【請求項４】
請求項１に記載の共重合物を用いて表面の少なくとも一部が処理されていることを特徴とする、医療用器具。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗血栓性共重合物、該抗血栓性共重合物を含む抗血栓性組成物及び抗血栓性共重合物で処理された医療用器具に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来からカテーテル、チューブ類等の体外循環回路に用いられる医療用器具や、人工腎臓、人工肺、人工肝臓等の種々の人工臓器には、それぞれの医療用機能に加えて、抗血栓性が重要な要素として要求されている。
【０００３】
一般に、人体には、血管が破損し、血液が血管外に流出すると、血液は凝固して、血栓によって血管の破損部分を補修し、それ以上の出血の危険が防止され、或いは血流中に異物が混入されると、その表面を血栓が被覆し、その異物を生体に同化する機能が備えられている。
【０００４】
従って、かかる血栓形成は、生命維持にとって必要不可欠であるが、血液と直接に接触する上記のような医療用器具や人工臓器については、かかる血栓形成は、その使用上、致命的な障害である。
【０００５】
血栓形成の機構は、非常に複雑であって、未だ必ずしも明確にはされていないが、凝固反応、線溶反応及び血小板反応が血栓形成にかかわる主要な反応であって、血液成分のうちでは、血液凝固因子と血小板とが血栓形成を支配する因子であるとされている。
【０００６】
医療用具の抗血栓性向上の中心となって検討されてきたのが抗凝血作用を有するヘパリンまたはその誘導体を医療用具の表面上になんらかの方法で固定して、抗血栓性を得る手法である。
【０００７】
例えば、ヘパリンのアミノ基と基材表面に導入したアミノ基をポリエチレングリコールジグリシジルエーテルでカップリングする共有結合方式がある（特許文献１）。
【０００８】
しかし、これらの製品に用いられるヘパリンは、そのほとんどが、ウシやブタ等の生物組織から抽出される生物由来材料である。
【０００９】
近年、生物由来製品の汚染による健康被害が相次いだことから、生物由来製品の汚染に対する安全確保の必要性が高まり、改正薬事法が平成１５年７月３０日から適用され、その製造・使用等は、厳しく制限されている。
【００１０】
上記の問題を解決する手段としては、人工的血栓性物質が有効である。人工的抗血栓性物質としては、例えば、糖側鎖を有するポリスチレン誘導体（ポリ（Ｎ−ｐ−ビニルベンジル−Ｄ−ラクトンアミド）：ＰＶＬＡ）が知られている（特許文献２）。
【００１１】
ＰＶＬＡは、そのスチレン骨格によりポリスチレンに対しては強固に疎水吸着をし、良好な抗血栓性を発現する。しかし、医療機器に汎用されている他の基材、例えば、ポリ塩化ビニル、ポリウレタン、ポリカーボネート、ポリスルホン、ポリエステル、ステンレス等に対しては、適用が困難であるという問題点があった。
【００１２】
そこで、汎用基材に適用可能な、人工的抗血栓性物質の開発が待たれていた。
【特許文献１】特開平４−１９７２６４号公報
【特許文献２】特開平２−２２４６６４号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１３】
本発明が解決しようとする課題は、安全性に優れ、汎用基材に適用可能であることを特徴とする、新規な抗血栓性共重合物を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
本発明は、下記式：
【化２】
0004631263.tif 000002
【００１５】
（式中、ｍ：ｎ＝９：１〜１：９であり、ｘは、６〜１８である。）
で表される共重合物に関する。
【００１６】
また、本発明は、ｘが１４である、上記共重合物に関する。
【００１７】
また、本発明は、上記共重合物を含む、抗血栓性組成物、及び上記共重合物を用いて表面の少なくとも一部が処理されていることを特徴とする、医療用器具にも関する。
【発明の効果】
【００１８】
本発明による抗血栓共重合体は、極めて低濃度での適用によって、血小板の活性化を抑制し、血栓形成を効果的に防止することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１９】
本発明は、下記式：
【化３】
0004631263.tif 000003
【００２０】
で表される共重合物に関し、
式中、ｍ：ｎは、９：１〜１：９、好ましくは、９：１〜５：５、より好ましくは、９：１〜６：４、ｘは、６〜１８、好ましくは、１４である。
【００２１】
すなわち、本発明は、Ｎ−ｐ−ビニルベンジル−Ｄ−ラクトンアミドと４−ビニルベンジルヘキサデカンアミドとの共重合物に関する。
【００２２】
本発明の別の態様においては、Ｎ−ｐ−ビニルベンジル−Ｄ−ラクトンアミドに代えて、Ｎ−ｐ−ビニルベンジル−Ｄ−セロビオンアミド、Ｎ−ｐ−ビニルベンジル−Ｄ−マルトンアミド、Ｎ−ｐ−ビニルベンジル−Ｄ−マルトトリオンアミド、Ｎ−ｐ−ビニルベンジル−Ｄ−マルトペンタオンアミド、又はＮ−ｐ−ビニルベンジル−Ｄ−マルトヘプタオンアミド、好ましくは、Ｎ−ｐ−ビニルベンジル−Ｄ−マルトンアミド、Ｎ−ｐ−ビニルベンジル−Ｄ−マルトトリオンアミドを用いることができる。
【００２３】
本発明の別の態様においては、４−ビニルベンジルヘキサデカンアミドに代えて、下記式：
【化４】
0004631263.tif 000004
【００２４】
（式中、
Ｘは、環員数が５〜１０の飽和もしくは不飽和の単環もしくは二環、もしくは窒素、酸素を含む分子を表し、ここで、該環は、窒素、硫黄、酸素からなる群より選択される１〜３個の原子を含んでもよく、
ｎは、０又は１であり、
Ｙは、−ＮＨＣＯ−、−ＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯＮＨ−、−ＮＨ−、−ＣＯ−、または炭素数０以上のアルキル基であり、
Ｒは、炭素数が１〜２０の直鎖または分岐のアルキル、アルケニルまたはアルキニルであり、必要により１個もしくは２個のヒドロキシ、メルカプト、アミノ、シアノ、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルオキシ、フェニル、ベンジル、ヘテロアリール、フェノキシ、ベンジルオキシ及びヘテロアリールオキシにより置換されていてもよい）
で表される化合物を用いることができる。
【００２５】
また、本発明に用いることができるモノマーは、上記モノマーに限定されるものではなく、上記モノマー以外にもＶＬＡと好ましく共重合体を形成するビニル基をもった市販あるいは合成されたモノマーを用いることができる。
【００２６】
本発明の共重合物であるＮ−ｐ−ビニルベンジル−Ｄ−ラクトンアミド：４−ビニルベンジルヘキサデカンアミドの共重合比率は、９：１〜１：９、好ましくは、９：１〜５：５、より好ましくは、９：１〜６：４である。
【００２７】
本共重合物の合成に用いるモノマーＶＬＡは、一般的にはラクトースの酸化、脱水により得られるラクトースラクトンとビニルベンジルアミンの反応により得られ、もう一方のモノマーであるビニルベンジルヘキサデカンアミド（VAL）は、ビニルベンジルアミンとパルミトイルクロライドの反応により得られる。共重合物は、一般的な開始剤を用いたラジカル重合により得る事が出来る。
【００２８】
また、本発明の抗血栓性共重合物は、従来公知の薬学的に許容可能な物質、例えば、水、緩衝液、アルコール等に溶解するか又は分散させ、所要の場合には、さらにこれに乳化剤、分散剤、懸濁剤、安定剤などを添加して用いることができる。
【００２９】
また、本発明による抗血栓性共重合物は、公知の抗血栓性物質と併用することもできる。
【００３０】
医療容器具の表面に本発明の共重合物を処理する方法としては、浸漬法、スプレー法、刷毛などで塗布する方法等が用いられるが、塗布後、紫外線やγ線等の高エネルギー線照射により表面への結合を強化することも可能である。これらに限定されるものではない。
【００３１】
ここで、医療用器具の基材の材料としては、通常使用される全ての材料が含まれる。例えば、ポリ塩化ビニル、ポリウレタン、ポリカーボネート、ポリスルホン、ポリエーテルスルホン、ポリエステル、ポリエチレンテレフタレート、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリブタジエン、シリコーンゴム、ポリメチルメタクリレート、ポリフッ化ビニリデン等の樹脂及びこれらの樹脂の混合物、ステンレス、チタニウム及びアルミニウム等の金属等を挙げることができる。
【実施例１】
【００３２】
ＶＬＡ−ｃｏ−ビニルベンジルヘキサデカンアミド（ＶＡＬ）の製造方法
適量のナスフラスコ中でクロロメチルスチレン  １kgをＤＭＦ３．２L  に溶解し、カリウムフタルイミド  １．２kgを加えた。これを５０℃、４時間反応させた。エバポレーターを用いてＤＭＦを留去したのち、ベンゼン４．５Lを加えて残さを溶解した。ベンゼンを０．２N  ＮａＯＨ溶液で数回洗浄した（全量３．２５L）。ベンゼンを更に水で数回洗浄し（全量３．２５L）、ＮａＳＯ４等で乾燥させた後、エバポレーターを用いて溶媒を留去した。残さをメタノールから再結晶して１．５kgのビニルベンジルフタルイミドを得た。
【００３３】
適量のセパラブルフラスコ中で上記ビニルベンジルフタルイミド  １Kgを２．７Lのエタノールに溶解し、窒素気流下、加熱灌流させた。これに滴下ロートを用いて、８０％ヒドラジンモノハイドレート  ０．３６kg／５４５ml  ＥｔＯＨ溶液を滴下した（滴下時間４０分程度）。反応は、９０分間、加熱灌流させて行った。反応終了後、得られた固体を濾取し、これに、ＫＯＨ溶液（１kg／６．５L  Ｈ２Ｏ）を加えて溶解したのち、エーテルにて抽出した（全量３．６L×３）。エーテル層をさらに、２％Ｋ２ＣＯ３溶液で洗浄し、さらに水で数回洗浄した。エーテル層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥した後、エーテルを留去し、残さを減圧蒸留し０．４５kgのビニルベンジルアミンを得た。
【００３４】
次に、ラクトース１２gをメタノール３００mlに分散させ、４０℃に加熱した。これに、ヨウ素１８gのメタノール溶液を滴下し、４０分間反応させた。これに、４NのＫＯＨメタノール溶液を、ヨウ素の着色が無くなるまで添加した。沈澱を濾取し、冷メタノールで数回洗浄後、エーテルで洗浄し、一旦秤量した。その後、得られた結晶をごく少量の水に溶解し、アンバーライト１２０Ｂのプロトン型イオン交換樹脂にアプライし、酸性分画を単離した。得られた水溶液にメタノールとエタノールを添加してエバポレーションした。完全に乾固したのち、再び、メタノールとエタノールを加えて溶解し、エバポレーションした。この操作を数回繰り返し、ラクトースラクトンを作製した。
【００３５】
適量のナスフラスコ中で、前記ラクトースラクトン  １kgをメタノール５．４Lに７０℃で溶解したのち、これにビニルベンジルアミン  ０．４kgを加え、１２０分、７０℃で反応させた。反応終了後、２１．７Lのアセトンを加えて、ＶＬＡを沈殿させた、これを４℃で数時間放置したのち濾取し、沈殿をメタノールから再結晶した。収量は、１．１kgであった。
【００３６】
次にもう一方のモノマーであるビニルベンジルヘキサデカンアミド（ＶＡＬ）の合成を示す。上記で得られたビニルベンジルアミン１０gを無水クロロフォルム１５０mlに溶解し、ピリジン７gを加えて、冷却した後、パルミトイルクロリド２４gを溶解した無水クロロフォルム５０mlを滴下漏斗より３０分間かけて滴下した。反応終了後、クロロフォルム溶液を水で洗浄した後、乾燥させ、溶媒を減圧留去した。残さをエタノールから再結晶して、ＶＡＬ２０gを得た。
【００３７】
ポリマーの合成のために、ＶＬＡとＶＡＬをモル比９：１、８：２，７：３等の割合で秤量し、真空反応管に分注した。ＤＭＳＯあるいはＤＭＳＯ−トルエンの混合溶媒を加えて完全に溶解した後、凍結−脱気−融解を繰り返して、酸素を溶液中から取り除いた。これに１００分の１モルのアゾイソブチロニトリル（ＡＩＢＮ）を添加して、溶解したのち、減圧密閉した。６０℃で５時間反応させてポリマーを合成した。
【００３８】
得られた溶液を大過剰のメタノールに滴下して、ポリマーを沈澱させた。これを適当な溶媒に溶解し、再びメタノールに滴下してポリマーを沈澱させる操作を３回繰り返した。
【００３９】
最終的に得られたポリマーを蒸留水に溶解し、大過剰の水に対して透析した。その後、凍結乾燥により目的のポリマーを得た。
【００４０】
上記で調製したＶＬＡ−ｃｏ−ビニルベンジルヘキサデカンアミド（共重合比率＝９：１）のポリスチレン板に対するコーティング性を従来のＰＶＬＡと比較した。
【００４１】
媒体として７０％（v/v）エタノール水溶液を用いコーティング用溶液を調製した。コーティング用溶液の濃度は、両者ともに０．３mg/mlとした。
【００４２】
ポリスチレン板上８８４（mm2）にコーティング溶液５０μLを均一に塗布し、コーティング溶液のポリスチレン板上における挙動を経時的に観察した。
【００４３】
ＶＬＡ−ｃｏ−ビニルベンジルヘキサデカンアミド（共重合比率＝９：１）溶液では、６分３０秒後においても溶液は、ポリスチレン板状に均一に広がっていた。これに対して、ＰＶＬＡ溶液は、約３０秒後から分布が不均一となり、２分３０秒後には、ポリスチレン板上に水滴状に散在していた。
【００４４】
また、処理後のポリスチレン板を風乾し、これに水を滴下したところ、ＶＬＡ−ｃｏ−ビニルベンジルヘキサデカンアミド（共重合比率＝９：１）溶液処理では、均一に水が拡がったのに対し、ＰＶＬＡ溶液処理では、ＰＶＬＡ溶液が局在した部分にのみ水が局在した。
【００４５】
これらの結果から、ＶＬＡ−ｃｏ−ビニルベンジルヘキサデカンアミド（共重合比率＝９：１）溶液は、ＰＶＬＡに比べて優れたコーティング性を有していることが明らかとなった。
【００４６】
平均直径２０７μmのガラスビーズに、医療用軟質ポリ塩化ビニル樹脂（以下ＰＶＣ）の０．３％（w/v）テトラヒドロフラン溶液を用いＰＶＣをコーティングした後、ＶＬＡ−ｃｏ−ビニルベンジルヘキサデカンアミド（共重合比率＝９：１および８：２）の９５％（vol.）メタノール水溶液を用い更にコーティング行なった。純水で充分リンスののち乾燥させ、内径２．１mmのテフロンチューブ内に細密充填し血小板粘着評価用カラムとした（図１）。
【００４７】
比較対照とし、未コートビーズ（ＰＶＣコーティングのみ）、ＰＶＬＡコーティングビーズ、市場流通品と同等のヘパリン化合物コーティングビーズを用い同様のカラムを作製した。
【００４８】
これらカラムに生理食塩水を充填後、３．８（ＩＵ／mL）の濃度となるように前もってヘパリンナトリウムを入れたシリンジを用い、家兎心臓直接穿刺による採血を行った。直ちにペリスターポンプを用いて毎分１mLの流速で上記カラムへ送血し、カラム入口側と出口側の血液サンプリングを行い、両血液中の血小板数を微粒子カウンターで測定した。両血小板数より血小板流出率（％）（出口側血小板数／入口側血小板数×１００）を求めた。結果を表１に示す。
【００４９】
【表１】
0004631263.tif 000005
【００５０】
表１中、9:1及び8:2は、それぞれ、共重合比率が、９：１及び８：２のＶＬＡ−ｃｏ−ビニルベンジルヘキサデカンアミドを表す。また、Hepは、ヘパリンを表す。
【００５１】
本発明によれば、ＶＬＡ−ｃｏ−ビニルベンジルヘキサデカンアミド（共重合比率＝９：１および８：２）を用いることにより、既知のＰＶＬＡや既存のヘパリン化合物より優れた血液適合性表面を得ることができる。
【００５２】
また別基材として平均直径１９９（μm）のステンレスビーズにＶＬＡ−ｃｏ−ビニルベンジルヘキサデカンアミド（共重合比率＝９：１）のメタノール水溶液を用いコーティングし同様の評価を行った結果を表２に示す。
【００５３】
【表２】
0004631263.tif 000006
【００５４】
本発明によればＶＬＡ−ｃｏ−ビニルベンジルヘキサデカンアミド（共重合比率＝９：１）を用いることにより、ステンレス表面の血液適合性を著しく高めることができる。
【００５５】
また、別基材として１，２−ポリブタジエンの０．３％（w/v）シクロヘキサン溶液によりコーティングを行なった上記ガラスビーズへＶＬＡ−ｃｏ−ビニルベンジルヘキサデカンアミド（共重合比率＝６：４）のジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）０．５％（ｗｔ．／ｖｏｌ．）溶液を用い更にコーティングを行なった後、５Wの紫外線照射を行なった試料の評価結果を下記表３に示す。
【００５６】
【表３】
0004631263.tif 000007
【００５７】
本発明によればＶＬＡ−ｃｏ−ビニルベンジルヘキサデカンアミド（共重合比率＝６：４）を用いることにより、ポリブタジエン表面の血液適合性を著しく高めることができる。
【００５８】
更に別基材として、ポリウレタンの０．３％（w/v）テトラヒドロフラン溶液によりコーティングを行なった上記ガラスビーズへＶＬＡ−ｃｏ−ビニルベンジルヘキサデカンアミド（共重合比率＝９：１及び８：２）の９５％（vol.）メタノール水溶液、および共重合比率＝６：４の９５％（vol.）1−プロパノール水溶液を用い更にコーティングを行なった試料の評価結果を表４に示す。
【００５９】
【表４】
0004631263.tif 000008
【００６０】
本発明によればＶＬＡ−ｃｏ−ビニルベンジルヘキサデカンアミド（共重合比率＝９：１〜６：４）を用いることにより、ポリウレタン表面の血液適合性を著しく高めることができる。
【産業上の利用可能性】
【００６１】
本発明の共重合物は、血小板の活性化を抑制し、血栓形成を効果的に予防することができる。また、血液と接触する可能性がある医療用器具の血液接触面の少なくとも一部を本発明の共重合物で処理することによって、当該医療用器具の使用による血栓形成を防止することができる。
【図面の簡単な説明】
【００６２】
【図１】血小板粘着評価用カラムを示した図である。
【図１】
0004631263.tif 000010