(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式１の化合物またはその塩
Ｂ−Ｑ−Ｘ1      １
［上式中、
Ｂは、
【化１】
0004795620.tif 000011
および
Ｔｈｒ−Ｔｒｐ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ    （ｉｉ）、
Ｔｒｐ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ    （ｉｉｉ）、
Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ    （ｉｖ）、
Ｔｈｒ−Ｔｒｐ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−Ａｒｇ    （ｖ）、
Ｔｈｒ−Ｔｒｐ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ａｓｎ    （ｖｉ）、
Ｔｈｒ−Ｔｒｐ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ    （ｖｉｉ）
からなる群から選択される生物活性な細胞接着仲介分子であり、
（ｉ）中、
Ｘは、Ｈ2Ｎ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ、Ｈｅｔ−ＮＨ−、Ｈ2Ｎ−Ｃ（＝ＮＨ）−、Ａ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ−またはＨｅｔ−であり、
Ｙは、−（ＣＨ2）n−または
【化２】
0004795620.tif 000012
−（ＣＨ2）s−ＣＨ（Ｒ4）−（ＣＨ2）t−または−（ＣＨ2）p−Ｈｅｔ1−（ＣＨ2）q−であり、
Ｚは、Ｎ−Ｒ2またはＣＨ−Ｒ2であり、
Ｒ2は、Ｈまたは１から４個のＣ原子を有するアルキルであり、
Ｒ3は、Ｈ、Ａｒ、ＨｅｔまたはＡであり、
Ｒ4は、Ｈ、Ａ、Ａｒ、ＯＨ、ＯＡ、ＯＡｒ、アリールアルキル、Ｈａｌ、ＣＮ、ＮＯ2、ＣＦ3またはＯＣＦ3であり、
Ａは、ＣＯＯＨ、ＮＨ2または、非置換またはＣＯＯＨまたはＮＨ2で置換されている１〜６個のＣ原子を有するアルキルであり、
Ａｒは、非置換か、Ａ、ＯＨ、ＮＨ2、ＯＡ、ＣＦ3、ＯＣＦ3、ＣＮ、ＮＯ2またはＨａｌで一、二または三置換されているフェニルであり、このフェニルは、非置換または置換ビフェニルが生じるように、Ａ、ＯＨ、ＯＡ、ＯＣＦ3、ＣＮ、ＮＯ2またはＨａｌで一、二または三置換されているフェニルで置換されていてもよく、
Ｈａｌは、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩであり、
Ｈｅｔは、５から１０個の環員を有する飽和、部分不飽和、または完全不飽和の単環式または二環式複素環基であり、ここには、１から３個のＮおよび／または１個のＳまたはＯ原子が存在してよく、かつその複素環基は、ＣＮ、Ｈａｌ、ＯＨ、ＮＨ2、ＣＯＯＨ、ＯＡ、ＣＦ3、Ａ、ＮＯ2、ＡｒまたはＯＣＦ3で一または二置換されていてよく、
Ｈｅｔ1は、非置換か、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ａ、ＯＡまたはＯＣＦ3で一または二置換されていてもよい、１から４個のＮおよび／またはＳ原子を有する５員または６員の芳香族複素環であり、
ｎは、４、５または６であり、
ｍ、ｏ、ｐ、ｑは、０、１または２であり、
ｓ、ｔは、０、１、２、３、４、５であり、
Ｑは、存在しないか、
［ＣＯ−（ＣＨ2）x−ＮＨ−］m    （ｘｖｉｉ）、
［ＣＯ−ＣＨ2−（Ｏ−ＣＨ2ＣＨ2）y−ＮＨ−］m    （ｘｖｉｉｉ）、
［ＣＯ−（ＣＨ2）z−ＣＯ−］    （ｘｉｘ）、
［ＮＨ−（ＣＨ2）z−ＮＨ−］    （ｘｘ）、
［ＣＯ−ＣＨ2−（ＯＣＨ2ＣＨ2）y−Ｏ−ＣＨ2−ＣＯ−］    （ｘｘｉ）、
［ＮＨ−ＣＨ2ＣＨ2−（ＯＣＨ2ＣＨ2）y−ＮＨ−］    （ｘｘｉｉ）、
およびこれらの組合せからなる群から選択され、
（ここで、ｍはそれぞれ相互に独立に１から２０であり、ｘは１から１２であり、ｙは１から５０であり、ｚは１から１２である）、
Ｘ1は、
−ＣＯ−ＣＨ＝ＣＨ2    （ｖｉｉｉ）、
−ＣＯ−（ＣＨ2）1〜20−ＣＯ−ＣＨ＝ＣＨ2    （ｉｘ）、
−ＣＯ−（ＣＨ2）1〜20−ＳＨ                  （ｘ）、
−ＣＯ−ＣＨ（ＮＨ2）−ＣＨ2−ＳＨ          （ｘｉ）、
−ＮＨ−（ＣＨ2）1〜20−ＣＯ−ＣＨ＝ＣＨ2    （ｘｉｉ）、
−ＮＨ−（ＣＨ2）2〜20−ＳＨ                （ｘｉｉｉ）、
−ＮＨ−ＣＨ（ＣＯ2Ｈ）−ＣＨ2−ＳＨ        （ｘｉｖ）
からなる群から選択されるアンカー分子であり、
ここで、化合物（ｖｉｉｉ）から（ｘｉ）の場合には、基Ｂの遊離アミノ基とスペーサー分子Ｑまたはアンカー分子Ｘ1の遊離カルボキシル基とが、あるいは基Ｑの遊離アミノ基と基Ｘ1の遊離カルボキシル基とが、ペプチド様に相互に連結しており、化合物（ｘｉｉ）から（ｘｉｖ）の場合には、基Ｂの遊離カルボキシル基とスペーサー分子Ｑまたはアンカー分子Ｘ1の遊離アミノ基とが、あるいは基Ｑの遊離カルボキシル基と基Ｘ1の遊離アミノ基とが、ペプチド様に相互に連結している］。
【請求項２】
前記Ｑが、
［ＣＯ−（ＣＨ2）x−ＮＨ−］m    （ｘｖｉｉ）、
［ＣＯ−ＣＨ2−（Ｏ−ＣＨ2ＣＨ2）y−ＮＨ−］m    （ｘｖｉｉｉ）、
［ＣＯ−（ＣＨ2）z−ＣＯ−］    （ｘｉｘ）、
［ＮＨ−（ＣＨ2）z−ＮＨ−］    （ｘｘ）、
［ＣＯ−ＣＨ2−（ＯＣＨ2ＣＨ2）y−Ｏ−ＣＨ2−ＣＯ−］    （ｘｘｉ）、
［ＮＨ−ＣＨ2ＣＨ2−（ＯＣＨ2ＣＨ2）y−ＮＨ−］    （ｘｘｉｉ）、
およびこれらの組合せからなる群から選択され、
ここで、
ｍは、それぞれ相互に独立に、１から８であり、
ｘは、１から５であり、
ｙは、１から６であり、
ｚは、１から６である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
ａ）
【化３】
0004795620.tif 000013
ｂ）  Ｔｈｒ−Ｔｒｐ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｃａ−Ａｃａ−Ｃｙｓ、
ｃ）  Ｃｙｓ−Ａｃａ−Ａｃａ−Ｔｈｒ−Ｔｒｐ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ、
ｄ）  Ｌｙｓ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｃａ−Ａｃａ−Ｃｙｓ、
ｅ）  Ｃｙｓ−Ａｃａ−Ａｃａ−Ｔｈｒ−Ｔｒｐ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ、
ｆ）  Ｐｈｅ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｃａ−Ａｃａ−Ｃｙｓ、
ｇ）  Ｃｙｓ−Ａｃａ−Ａｃａ−Ｔｈｒ−Ｔｒｐ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｉｌｅ−Ａｌａである、請求項１に記載の式１の化合物。
【請求項４】
インプラントにより惹起される疾患、異常および炎症ならびに骨粗しょう症などの溶骨性疾患、血栓症、心筋梗塞および動脈硬化を治療するため、およびインプラントまたは生体適合性表面の組織への一体化過程を促進および強化するための薬剤としての、請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５】
ヒトおよび動物の器官に適し、本質的に担体マトリックスおよびこのマトリックスを包囲する生物活性な細胞接着仲介分子の層からなるインプラントにおいて、その包囲層が、請求項１から３に記載の化合物から形成され、担体マトリックスとこの化合物との間に、共有結合または吸着結合が存在することを特徴とするインプラント。
【請求項６】
担体マトリックスおよび／またはその表面が、金属または金属酸化物であることを特徴とする、請求項５に記載のインプラント。
【請求項７】
担体マトリックスおよび／またはその表面が、ポリマーであることを特徴とする、請求項５に記載のインプラント。
【請求項８】
ポリマーが、ポリメチルメタクリレート、ポリヒドロキシエチルメタクリレートまたはこれらのコポリマーであることを特徴とする、請求項７に記載のインプラント。
【請求項９】
請求項１に記載の式１の化合物またはその塩を調製する方法において、保護基を備え得る生体活性分子Ｂと、保護基を備えているスペーサー−アンカー分子（Ｑ−Ｘ1）またはアンカー分子（Ｘ1）とを、ペプチド様に相互に連結し、次いで、保護基を除去すること、および／または式Ｉの塩基性または酸性化合物を、酸または塩基で処理することにより、その塩のいずれかに変えることを特徴とする方法。
【請求項１０】
インプラントにより惹起される疾患、異常および炎症ならびに骨粗しょう症などの溶骨性疾患、血栓症、心筋梗塞および動脈硬化を治療するための、およびインプラントまたは生体適合性表面の組織への一体化過程を促進および強化するための薬剤を製造するための、請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項１１】
共有結合または吸着結合により、ヒトおよび動物器官用のインプラントを被覆するための、請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、式Ｉの化合物およびその塩に関する。
【０００２】
Ｂ−Ｑ−Ｘ1      Ｉ
［上式中、
Ｂは、
【０００３】
【化４】
0004795620.tif 000002
【０００４】
および
Ｔｈｒ−Ｔｒｐ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ    （ｉｉ）、
Ｔｒｐ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ    （ｉｉｉ）、
Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ    （ｉｖ）、
Ｔｈｒ−Ｔｒｐ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−Ａｒｇ    （ｖ）、
Ｔｈｒ−Ｔｒｐ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ａｓｎ    （ｖｉ）、
Ｔｈｒ−Ｔｒｐ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ    （ｖｉｉ）
からなる群から選択される生物活性な細胞接着仲介分子であり、
（ｉ）中、
Ｘは、Ｈ2Ｎ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ、Ｈｅｔ−ＮＨ−、Ｈ2Ｎ−Ｃ（＝ＮＨ）−、Ａ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ−またはＨｅｔ−であり、
Ｙは、−（ＣＨ2）n−または
【０００５】
【化５】
0004795620.tif 000003
【０００６】
−（ＣＨ2）s−ＣＨ（Ｒ4）−（ＣＨ2）t−または−（ＣＨ2）p−Ｈｅｔ2−（ＣＨ2）q−であり、
Ｚは、Ｎ−Ｒ2またはＣＨ−Ｒ2であり、
Ｒ2は、Ｈまたは１から４個のＣ原子を有するアルキルであり、
Ｒ3は、Ｈ、Ａｒ、ＨｅｔまたはＡであり、
Ｒ4は、Ｈ、Ａ、Ａｒ、ＯＨ、ＯＡ、ＯＡｒ、アリールアルキル、Ｈａｌ、ＣＮ、ＮＯ2、ＣＦ3またはＯＣＦ3であり、
Ａは、ＣＯＯＨ、ＮＨ2または、非置換またはＣＯＯＨまたはＮＨ2で置換されている１〜６個のＣ原子を有するアルキルであり、
Ａｒは、非置換か、Ａ、ＯＨ、ＮＨ2、ＯＡ、ＣＦ3、ＯＣＦ3、ＣＮ、ＮＯ2またはＨａｌで一、二または三置換されているフェニルであり、このフェニルは、非置換または置換されているビフェニルが生じるように、Ａ、ＯＨ、ＯＡ、ＯＣＦ3、ＣＮ、ＮＯ2またはＨａｌで一、二または三置換されているフェニルで置換されていてもよく、
Ｈａｌは、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩであり、
Ｈｅｔは、５から１０個の環員を有する飽和、部分不飽和、または完全不飽和の単環式または二環式複素環基であり、ここには、１から３個のＮおよび／または１個のＳまたはＯ原子が存在してよく、かつその複素環基は、ＣＮ、Ｈａｌ、ＯＨ、ＮＨ2、ＣＯＯＨ、ＯＡ、ＣＦ3、Ａ、ＮＯ2、ＡｒまたはＯＣＦ3で一または二置換されていてよく、
Ｈｅｔ2は、非置換か、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ａ、ＯＡまたはＯＣＦ3で一または二置換されていてもよい、１から４個のＮおよび／またはＳ原子を有する５員または６員の芳香族複素環であり、
ｎは、４、５または６であり、
ｍ、ｏ、ｐ、ｑは、０、１または２であり、
ｓ、ｔは、０、１、２、３、４、５であり、
Ｑは、存在しないか、有機スペーサー分子であり、
Ｘ1は、
−ＣＯ−ＣＨ＝ＣＨ2    （ｖｉｉｉ）、
−ＣＯ−（ＣＨ2）1〜20−ＣＯ−ＣＨ＝ＣＨ2    （ｉｘ）、
−ＣＯ−（ＣＨ2）1〜20−ＳＨ    （ｘ）、
−ＣＯ−ＣＨ（ＮＨ2）−ＣＨ2−ＳＨ    （ｘｉ）、
−ＮＨ−（ＣＨ2）1〜20−ＣＯ−ＣＨ＝ＣＨ2    （ｘｉｉ）、
−ＮＨ−（ＣＨ2）2〜20−ＳＨ    （ｘｉｉｉ）、
−ＮＨ−ＣＨ（ＣＯ2Ｈ）−ＣＨ2−ＳＨ    （ｘｉｖ）
からなる群から選択されるアンカー分子であり、
ここで、化合物（ｖｉｉｉ）から（ｘｉ）の場合には、基Ｂの遊離アミノ基とスペーサー分子Ｑまたはアンカー分子Ｘ1の遊離カルボキシル基とが、あるいは基Ｑの遊離アミノ基と基Ｘ1の遊離カルボキシル基とが、ペプチド様に相互に連結しており、化合物（ｘｉｉ）から（ｘｉｖ）の場合には、基Ｂの遊離カルボキシル基とスペーサー分子Ｑまたはアンカー分子Ｘ1の遊離アミノ基とが、あるいは基Ｑの遊離カルボキシル基と基Ｘ1の遊離アミノ基とが、ペプチド様に相互に連結している］。
【０００７】
同様の化合物が、ＤＥ１９９３２７９６号、ＤＥ１９７５５８００号およびＤＥ１９８３１７１０号に開示されている。
【０００８】
本発明は、価値のある特性を有する新規の化合物、特に、薬剤を製造するために使用することができる新規の化合物を発見するという課題に基づいている。
【０００９】
式Ｉの化合物およびその塩は、非常に価値のある薬理学的特性を良好な耐用性と共に有することが判明している。これらは特に、インテグリン阻害剤として作用し、特に、β3インテグリン受容体へのフィブリノゲンの結合のような、αvβ3またはβ5インテグリン受容体とリガンドとの相互作用を阻害する。この化合物は、インテグリンαvβ3、αvβ5、αIIbβ3、αvβ1、αvβ6およびαvβ8の場合に、特に活性を示す。
【００１０】
この作用は、例えば、Ｊ．Ｗ．ＳｍｉｔｈらがＪ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６５、１２２６７〜１２２７１、（１９９０）に記載した方法により証明することができる。
【００１１】
血管形成の発達が、血管インテグリンと細胞外マトリックスタンパク質との間の相互作用に依存していることは、Ｐ．Ｃ．Ｂｒｏｏｋｓ、Ｒ．Ａ．ＣｌａｒｋおよびＤ．Ａ．Ｃｈｅｒｅｓｈによって、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２６４、５６９〜７１（１９９４）に記載されている。
【００１２】
フィブリノゲンとフィブリノゲン受容体（糖タンパク質ＩＩｂ／ＩＩＩａ）との相互作用のような、インテグリン受容体とリガンドとの相互作用をブロックする式Ｉの化合物は、ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａアンタゴニストとして、転移による腫瘍細胞の拡散を防ぐ。このことは、次の観察により確認される：
局所腫瘍から血管系への腫瘍細胞の拡散は、腫瘍細胞と血小板との相互作用による微細凝集塊（微小血栓）の生成により生じる。腫瘍細胞は、微小凝集塊中での保護に遮られて、免疫系の細胞により認識されない。微小凝集塊は、血管壁に固着して、その組織中への腫瘍細胞のさらなる侵入を容易にする。
【００１３】
微小血栓の生成は、活性化された血小板上のフィブリノゲン受容体へのフィブリノゲンの結合に仲介されるので、ＧＰＩＩａ／ＩＩＩｂアンタゴニストは、効果的な転移阻害剤とみなすことができる。
【００１４】
（メタ）アクリル酸基を使用して、ペプチドおよびペプチド様化合物を共有結合または吸着により、例えば、遊離アクリレートまたはメタクリレート基を有するインプラント、例えばポリメチルメタクリレート造形品（骨セメント）または例えば金属表面上にアクリレートまたはメタクリレートを含有する層の生体適合性表面に結合させることができる。
【００１５】
対応して、チオール基を使用して、ペプチドを、例えば金表面に、またはコラーゲンなどの遊離アミノ基含有表面に（例えば、マレイミドにより）、プラズマ処理されたポリマーまたは金属表面に（Ｄ．Ｍ．Ｆｅｒｒｉｓ，Ｇ．Ｄ．Ｍｏｏｄｉｅ，Ｐ．Ｍ．Ｄｉｍｏｎｄ，Ｃ．Ｗ．Ｄ．Ｇｉｏｖａｎｎｉ，Ｍ．Ｇ．Ｅｈｒｌｉｃｈ，Ｒ．Ｆ．Ｖａｌｅｎｔｉｎｉ，Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ  ２０，２３２３−２３３１（１９９９）；Ｄ．Ｆ．Ｍｅｙｅｒｓ  ら，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  １２１，１２９−１４２（１９８９）参照）、あるいはＣＶＤ技術で処理された表面に（Ｌａｈａｎｎ，Ｊ．ら，Ｍａｃｒｏｍｏｌ．Ｒａｐｉｄ  Ｃｏｍｍｕｎ．１９，４４１−４４４（１９９８）参照）結合させることができる。
【００１６】
したがって本発明は、基Ｘ1の官能基を介して生体適合性表面と共有結合または吸着結合するための式Ｉの化合物に関する。
【００１７】
これに関連して、基Ｘ1が別の意味を有する、同日に本出願人により提出された第２の出願を参照することができる。
【００１８】
本発明によるペプチドおよびペプチド様化合物により、これを塗布することで、生体材料、特に、考えうる全ての器官用のインプラントを生体官能化することができ、主に、それぞれ対応する生体材料の組織組込みをもたらす細胞種の接着が刺激される。このような被覆を用いると、様々な生体材料／インプラントの組込みの促進および強化を、体にそれらを組み込んだ後の長期安定性の改善と共に、達成することができる。
【００１９】
本発明によるペプチドは、選択的にインテグリンと結合する。生体適合性表面、例えばインプラント上に固定化されると、これらは、インテグリンを有する細胞の接着を刺激する。
【００２０】
表面に化合物が塗布されると、本来の組織にインプラントした後にインプラント組込みをもたらす細胞種が、選択的に刺激されて結合する。骨芽細胞、破骨細胞および内皮細胞では、これらは例えば、αv担持細胞種である。
【００２１】
したがって本発明は、インプラント中の選択細胞を富化するためのインテグリン阻害剤としての式Ｉの化合物に関する。
【００２２】
製剤学的に活性な化合物として、生体適合性表面に係留した後に、式Ｉの化合物を、ヒトおよび動物用薬剤中で使用することができ、特に、これらを、生体材料およびインプラントの不十分かつ遅い組込みなどのインプラントにより惹起される疾患、異常および炎症、インプラントにより惹起される血栓症、骨および歯の異常、骨粗しょう症などの骨溶解性疾患、血栓症、心筋梗塞、動脈硬化を治療するための、創傷治癒で治癒プロセスを補助するための、さらに組織へのインプラントまたは生体適合性表面の組織への一体化過程を促進および強化するためのインテグリン阻害剤として使用することができる。
【００２３】
式Ｉの化合物は、生体材料、インプラント、カテーテルまたは心ペースメーカーを使用する処置で、抗菌作用を有する物質として使用することもできる。これらは、ここでは防腐作用を有する。抗菌活性の効力は、Ｐ．Ｖａｌｅｎｔｉｎ−ＷｅｉｇｕｎｄらがＩｎｆｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ、２８５１〜２８５５（１９８８）に記載した手順により証明することができる。
【００２４】
したがって本発明は、インプラントにより惹起される疾患、異常および炎症ならびに骨粗しょう症などの溶骨性疾患、血栓症、心筋梗塞および動脈硬化を治療し、かつインプラントまたは生体適合性表面の組織への一体化過程を促進および強化するインテグリン阻害剤としての式Ｉの化合物に関する。
【００２５】
さらに本発明は、インプラントにより惹起される疾患、異常および炎症ならびに骨粗しょう症などの溶骨性疾患、血栓症、心筋梗塞および動脈硬化を治療し、かつインプラントまたは生体適合性表面の組織への一体化過程を促進および強化する薬剤を製造するために、式Ｉの化合物を使用することに関する。
【００２６】
チオールアンカーを有する対応するペプチドは、インプラント、親和性クロマトグラフィまたは微量定量プレートなどの金張り担体に共有結合しうる。
【００２７】
さらに本発明は、共有結合または吸着結合により、ヒトおよび動物器官用のインプラントを被覆するために、式Ｉの化合物を使用することに関する。
【００２８】
前記および後記のアミノ酸基の略号は、次のアミノ酸基を表す。
Ａｂｕ    ４−アミノ酪酸、
Ａｈａ    ６−アミノヘキサン酸、６−アミノカプロン酸、
Ａｌａ    アラニン、
Ａｓｎ    アスパラギン、
Ａｓｐ    アスパラギン酸、
Ａｒｇ    アルギニン、
Ｃｙｓ    システイン、
Ｄａｂ    ２，４−ジアミノ酪酸、
Ｄａｐ    ２，３−ジアミノプロピオン酸、
Ｇｌｎ    グルタミン、
Ｇｌｐ    ピログルタミン酸、
Ｇｌｕ    グルタミン酸、
Ｇｌｙ    グリシン、
Ｈｉｓ    ヒスチジン、
ｈｏｍｏ−Ｐｈｅ    ホモ−フェニルアラニン、
Ｉｌｅ    イソロイシン、
Ｌｅｕ    ロイシン、
Ｌｙｓ    リシン、
Ｍｅｔ    メチオニン、
Ｎｌｅ    ノルロイシン、
Ｏｒｎ    オルニチン、
Ｐｈｅ    フェニルアラニン、
Ｐｈｇ    フェニルグリシン、
４−Ｈａｌ−Ｐｈｅ    ４−ハロフェニルアラニン、
Ｐｒｏ    プロリン、
Ｓｅｒ    セリン、
Ｔｈｒ    トレオニン、
Ｔｒｐ    トリプトファン、
Ｔｙｒ    チロシン、
Ｖａｌ    バリン。
【００２９】
さらに、下記の略号の意味を示す：
Ａｃ    アセチル、
ＢＯＣ    ｔ−ブトキシカルボニル、
ＣＢＺまたはＺ    ベンジルオキシカルボニル、
ＤＣＣＩ    ジシクロヘキシルカルボジイミド、
ＤＭＦ    ジメチルホルムアミド、
ＥＤＣＩ    Ｎ−エチル−Ｎ，Ｎ’−（ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド、
Ｅｔ    エチル、
ＦＣＡ    フルオレセインカルボン酸、
ＦＩＴＣ    イソチオシアン酸フルオレセイン、
Ｆｍｏｃ    ９−フルオレニルメトキシカルボニル、
ＦＴＨ    フルオレセインチオ尿素、
ＨＡＴＵ    Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート、
ＨＯＢｔ    １−ヒドロキシベンゾトリアゾール、
Ｍｅ    メチル、
ＭＢＨＡ    ４−メチルベンズヒドリルアミン、
Ｍｔｒ    ４−メトキシ−２，３，６−トリメチルフェニルスルホニル、
ＨＯＮＳｕ    Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、
ＯｔＢｕ    ｔ−ブチルエステル、
Ｏｃｔ    オクタノイル、
ＯＭｅ    メチルエステル、
ＯＥｔ    エチルエステル、
ＰＯＡ    フェノキシアセチル、
Ｐｂｆ    ペンタメチルベンゾフラニル、
Ｐｍｃ    ２，２，５，７，８−ペンタメチルクロマン−６−スルホニル、
Ｓａｌ    サリチロイル、
Ｓｕ    スクシニル、
ＴＦＡ    トリフルオロ酢酸、
Ｔｒｔ  トリチル（トリフェニルメチル）
前記のアミノ酸が、多くのエナンチオマー形で生じうる場合には、これらの形およびその混合物（例えば、ＤＬ形）の全てが、前記および後記では、例えば式Ｉの化合物の一部として含まれる。加えて、アミノ酸または遊離アミノ基（ｘｉ）または遊離カルボキシル基（ｘｉｖ）は、式Ｉの化合物の一部として、それ自体知られている対応する保護基を備えていてもよい。
【００３０】
特に、例えば、非ペプチドαvβ3アンタゴニストの場合に実施されるように（例えば、Ｒ．Ｋｅｅｎａｎ  ら，Ａｂｓｔｒ．Ｐａｐ．２１１ｔｈ  ＡＣＳ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｍｅｅｔｉｎｇ（Ｎｅｗ  Ｏｒｌｅａｎｓ，ＵＳＡ）１９９６，ＭＥＤＩ  ２３６）、アルギニンの側鎖変性を、シクロペプチド、例えば、ベンゾイミダゾール誘導体の場合に、グアニジン基の代わりに使用することもできる。
【００３１】
「プロドラッグ誘導体」、即ち、体内で迅速に分解されて、本発明による活性な化合物をもたらす、例えばアルキルまたはアシル基、糖またはオリゴペプチドで変性されている式Ｉの化合物も、本発明による化合物に含まれる。
【００３２】
これらには、例えば、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．１１５，６１−６７（１９９５）に記載されているような、本発明による化合物の生分解性ポリマー誘導体も含まれる。
【００３３】
さらに本発明は、担体マトリックスおよびこのマトリックスの周囲に位置する生物活性な細胞接着仲介分子の層を含み、周囲層が、式Ｉの化合物から形成されていて、担体マトリックスとこの化合物との間に、共有結合または吸着結合が存在する、ヒトおよび動物器官に適したインプラントに関する。好ましくは、担体マトリックスおよび／またはその表面は、金属または金属酸化物またはポリマーからなる。適切なポリマーは好ましくは、ポリメチルメタクリレート、ポリヒドロキシエチルメタクリレート、ポリラクチト（ｐｏｌｙｌａｃｔｉｔｅ）、ポリグリコール酸またはこれらのコポリマーである。
【００３４】
さらに本発明は、請求項１に記載の式Ｉの化合物およびその塩を調製する方法に関し、その際、保護基を備えていてもよい生体活性分子Ｂと、スペーサー−アンカー分子（Ｑ−Ｘ1）または保護基を備えているアンカー分子（Ｘ1）とを、ペプチド様に相互に架橋し、次いで、保護基を除去すること、および／または式Ｉの塩基性または酸性化合物を、酸または塩基で処理することによりその塩のいずれかに変えることを特徴とする。
【００３５】
前記および後記において、基Ｂ、ＱおよびＸ1は、特に他に記載のない限り、式Ｉに示した意味を有する。
【００３６】
Ｑは、存在しないか、有機スペーサー分子である。好ましくは、これは、［ＣＯ−（ＣＨ2）x−ＮＨ−］m−、［ＣＯ−ＣＨ2−（Ｏ−ＣＨ2ＣＨ2）y−ＮＨ−］m−、［ＣＯ−（ＣＨ2）z−ＣＯ−］−、［ＮＨ−（ＣＨ2）z−ＮＨ−］−、［ＣＯ−（ＣＨ2）−（ＯＣＨ2ＣＨ2）y−Ｏ−ＣＨ2−ＣＯ−］−または［ＮＨ−ＣＨ2ＣＨ2−（ＯＣＨ2ＣＨ2）y−ＮＨ−］基およびこれらの組合せであり、ここで、請求項２に記載の数値範囲が、指数ｍ、ｘ、ｙおよびｚに当てはまる。ｍの値が１から８、ｘの値が１から５、かつｙおよびｚの値が１から６である前記の化合物が特に有利であることが判明している。
【００３７】
Ｘ1は好ましくは、−ＣＯ−ＣＨ＝ＣＨ2、−ＣＯ−（ＣＨ2）1〜20−ＣＯ−ＣＨ＝ＣＨ2、−ＣＯ−（ＣＨ2）1〜20−ＳＨ、−ＣＯ−ＣＨ（ＮＨ2）−ＣＨ2−ＳＨ、−ＮＨ−（ＣＨ2）1〜20−ＣＯ−ＣＨ＝ＣＨ2、−ＮＨ−（ＣＨ2）2〜20−ＳＨまたは−ＮＨ−ＣＨ（ＣＯ2Ｈ）−ＣＨ2−ＳＨからのアンカー分子である。
【００３８】
Ｘは好ましくは、Ｈ2Ｎ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ−、Ｈｅｔ−ＮＨ−、Ｈ2Ｎ−Ｃ（＝ＮＨ）−、Ａ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨまたはＨｅｔ基である。
【００３９】
Ｙは好ましくは、−（ＣＨ2）n−または
【００４０】
【化６】
0004795620.tif 000004
【００４１】
−（ＣＨ2）s−ＣＨ（Ｒ4）−（ＣＨ2）t−または−（ＣＨ2）p−Ｈｅｔ2−（ＣＨ2）q−基である。
【００４２】
Ｚは好ましくは、Ｎ−Ｒ2またはＣＨ−Ｒ2であり、ここで、Ｒ2は好ましくは、Ｈ原子または１から４個のＣ原子を有するアルキル基である。
【００４３】
Ｒ3は好ましくは、Ｈ原子、Ａｒ、ＨｅｔまたはＡ基であり、ここでＡ、ＡｒおよびＨｅｔは、前記または後記に示されている意味のいずれかを有する。
【００４４】
Ｒ4は好ましくは、Ｈ原子、Ａ、Ａｒ、ＯＨ、ＯＡ、ＯＡｒ、アリールアルキル、Ｈａｌ、ＣＮ、ＮＯ2、ＣＦ3またはＯＣＦ3基である。アリールアルキルは好ましくは、ベンジル、フェニルエチル、フェニルプロピルまたはナフチルメチル、特に好ましくはベンジルである。
【００４５】
Ａは好ましくは、ＣＯＯＨ、ＮＨ2または、非置換またはＣＯＯＨまたはＮＨ2で置換されている１〜６個、好ましくは１、２、３、４、５または６個のＣ原子を有するアルキル基である。Ａは好ましくは、メチル、さらにエチル、プロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓ−ブチルまたはｔ−ブチル、加えて、ｎ−ペンチル、１−、２−または３−メチルブチル、１，１−、１，２−または２，２−ジメチルプロピル、１−エチルプロピル、ヘキシル、１−、２−、３−または４−メチルペンチル、１，１−、１，２−、１，３−、２，２−、２，３−または３，３−ジメチルブチル、１−または２−エチルブチル、１−エチル−１−メチルプロピル、１−エチル−２−メチルプロピル、１，１，２−または１，２，２−トリメチルプロピルである。Ａは特に好ましくは、メチルである。
【００４６】
Ａｒは好ましくは、非置換か、Ａ、ＯＨ、ＯＡ、ＣＦ3、ＯＣＦ3、ＣＮ、ＮＯ2またはＨａｌで一、二または三置換されているフェニルであり、このフェニルは、非置換または置換されているビフェニルが生じるように、Ａ、ＯＨ、ＯＡ、ＮＨ2、ＯＣＦ3、ＣＮ、ＮＯ2またはＨａｌで一、二または三置換されているフェニルで置換されていてもよい。
【００４７】
したがってＡｒは好ましくは、フェニル、ｏ−、ｍ−またはｐ−メチルフェニル、ｏ−、ｍ−またはｐ−エチルフェニル、ｏ−、ｍ−またはｐ−プロピルフェニル、ｏ−、ｍ−またはｐ−イソプロピルフェニル、ｏ−、ｍ−またはｐ−ｔ−ブチルフェニル、ｏ−、ｍ−またはｐ−ヒドロキシフェニル、ｏ−、ｍ−またはｐ−メトキシフェニル、ｏ−、ｍ−またはｐ−エトキシフェニル、ｏ−、ｍ−またはｐ−トリフルオロメチルフェニル、ｏ−、ｍ−またはｐ−トリフルオロメトキシフェニル、ｏ−、ｍ−またはｐ−フルオロフェニル、ｏ−、ｍ−またはｐ−クロロフェニル、ｏ−、ｍ−またはｐ−ブロモフェニル、ｏ−、ｍ−またはｐ−ニトロフェニルである。
【００４８】
Ｈｅｔは、５から１０個の環員を有する飽和の、部分不飽和の、または完全不飽和の単環式または二環式複素環基であり、ここには、１から３個のＮおよび／または１個のＳまたはＯ原子が存在してよく、かつその複素環基は、ＣＮ、Ｈａｌ、ＯＨ、ＮＨ2、ＣＯＯＨ、ＯＡ、ＣＦ3、Ａ、ＮＯ2、ＡｒまたはＯＣＦ3で一または二置換されていてよい。
【００４９】
Ｈｅｔは、次の３種の複素芳香族基の全てに関して好ましくは非置換か、あるいはメチル、エチルまたはプロピル基あるいはメチルアミノ、エチルアミノまたはプロピルアミノ基で置換されているｏ−、ｍ−またはｐ−置換ピリジル、２−、４−、５−または６−置換ピリミジルあるいは３−、４−、５−または６−置換ピリダジル、さらに、非置換か、あるいは３−メチル、３−エチルまたは３−ベンジル基で置換されている２−置換ベンズイミダゾリル、さらにまた、２−置換ジヒドロイミダゾリル、テトラヒドロピリミジルまたはテトラヒドロピリジルであるのが好ましい。
【００５０】
Ｈｅｔに含まれる好ましい例は、
【００５１】
【化７】
0004795620.tif 000005
【００５２】
である。
【００５３】
Ｈｅｔ1は、非置換か、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ａ、ＯＡまたはＯＣＦ3で一または二置換されていてもよい、１から４個のＮおよび／またはＳ原子を有する５員または６員の芳香族複素環である。
【００５４】
Ｈｅｔ1は好ましくは、２，４−、３，５−または２，５−二置換ピリジルまたは２，４−、２，５−、２，６−または４，６−二置換ピリミジル、２，４−または２，５−二置換１，３−オキサゾリルまたは１，３−チアゾリルである。
【００５５】
ＯＡは好ましくは、メトキシ、エトキシ、プロポキシまたはブトキシ、加えて、ペンチルオキシまたはヘキシルオキシである。
【００５６】
Ｈａｌは好ましくは、Ｆ、ＣｌまたはＢｒ、さらにＩである。
【００５７】
指数ｎ、ｍ、ｏ、ｐ、ｑ、ｓおよびｔは、特に他に記載のない限り、請求項１に記載の意味を有する。
【００５８】
式Ｉの化合物は、１個または複数のキラル中心を有することがあり、したがって、様々な立体異性体形で生じる。式Ｉには、これらの形の全てが含まれる。
【００５９】
したがって、本発明は特に、挙げられている基の少なくとも１個が前記の好ましい意味のいずれかを有する式Ｉの化合物に関する。
【００６０】
特に好ましい式Ｉの化合物は、次の化合物である。
ａ）
【００６１】
【化８】
0004795620.tif 000006
【００６２】
ｂ）  Ｔｈｒ−Ｔｒｐ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｃａ−Ａｃａ−Ｃｙｓ、
ｃ）  Ｃｙｓ−Ａｃａ−Ａｃａ−Ｔｈｒ−Ｔｒｐ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ、
ｄ）  Ｌｙｓ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｃａ−Ａｃａ−Ｃｙｓ、
ｅ）  Ｃｙｓ−Ａｃａ−Ａｃａ−Ｔｈｒ−Ｔｒｐ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ、
ｆ）  Ｐｈｅ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｃａ−Ａｃａ−Ｃｙｓ、
ｇ）  Ｃｙｓ−Ａｃａ−Ａｃａ−Ｔｈｒ−Ｔｒｐ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｉｌｅ−Ａｌａ。
【００６３】
式Ｉの化合物およびそれを調製するための出発物質は、文献（例えば  Ｈｏｕｂｅｎ−Ｗｅｙｌ、Ｍｅｔｈｏｄｅｎ  ｄｅｒ  ｏｒｇａｎｉｓｃｈｅｎ  Ｃｈｅｍｉｅ［Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ］（Ｇｅｏｒｇ−Ｔｈｉｅｍｅ−Ｖｅｒｌａｇ，Ｓｔｕｔｔｇａｒｔ）または  Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｖｏｌ．２７１，Ｎｏ．４４，ｐｐ．２７２２１ｆｆ．（１９９６）などの標準的な著書）中に記載されているような、それ自体知られている方法により、即ち、知られていて、前記の反応に適した反応条件下に調製する。この場合に、それ自体知られている変法を使用することもできるが、ここで詳述することはしない。
【００６４】
所望の場合には、出発物質をその場で生じさせ、それを反応混合物から単離することなく、そのままさらに反応させて、式Ｉの化合物を得ることができる。
【００６５】
フラグメントのカップリングを不活性溶剤中で実施するが、その際、カルボン酸フラグメント（アクリレートまたはチオールリンカー）をＤＭＦ中にＨＡＴＵ、ＨＯＡｔおよび２，４，６−コリジンと共に溶かし、次いで、アミンフラグメント（直鎖ペプチド、ペプチド様化合物）で処理するか、もしくはその逆で（リンカー＝アミンフラグメント；ペプチド／ペプチド様化合物＝カルボン酸フラグメント）処理する。
【００６６】
適切な不活性溶剤は、例えば、ヘキサン、石油エーテル、ベンゼン、トルエンまたはキシレンのような炭化水素；トリクロロエチレン、１，２−ジクロロエタン、四塩化炭素、クロロホルムまたはジクロロメタンなどの塩素化炭化水素；メタノール、エタノール、イソプロパノール、ｎ−プロパノール、ｎ−ブタノールまたはｔ−ブタノールなどのアルコール；ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）またはジオキサンなどのエーテル；エチレングリコールモノメチルまたはモノエチルエーテル（メチルグリコールまたはエチルグリコール）、エチレングリコールジメチルエーテル（ジグライム）などのグリコールエーテル；アセトンまたはブタノンなどのケトン；アセトアミド、Ｎ−メチルピロリドン、ジメチルアセトアミドまたはジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）などのアミド；アセトニトリルなどのニトリル；ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）などのスルホキシド、二硫化炭素；ギ酸または酢酸などのカルボン酸；ニトロメタンまたはニトロベンゼンなどのニトロ化合物；酢酸エチルなどのエステル、水あるいはこれらの溶剤の混合物である。
【００６７】
一般的な処理技術：
試薬は、Ａｌｄｒｉｃｈ社、Ｂａｃｈｅｍ社、Ｆｌｕｋａ社、Ｎｅｏｓｙｓｔｅｍ社およびＮｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ社から入手し、さらに精製することなく使用した。塩化トリチル／ポリスチレン樹脂（ＴＣＰ樹脂）は、ＰｅｐＣｈｅｍ社から得た。
【００６８】
Ｗａｔｅｒｓ社および  Ｂｅｃｋｍａｎ社製の装置で、Ｋｎａｕｅｒ  ａｎｄ  Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｐｈａｒｍａｃｉａ  Ｂｉｏｔｅｃｈ製のＵＶ検出器（Ｕｖｉｃｏｒｄ）を使用して、（ＲＰ９）ＨＰＬＣ分析および半分取用の分離を実施した。ＵＶ検出を、波長２２０ｎｍで実施した。次のカラム材料を、分析（直径４ｍｍ）および半分取用分離（直径２１ｍｍまたは４０ｍｍ）のために使用した：Ｎｕｃｌｅｏｓｉｌ  ＲＰ１８  ５μ、Ｎｕｃｌｅｏｓｉｌ  ＲＰ１８  ＨＤ  ５μおよびＮｕｃｌｅｏｓｉｌ  ＲＰ１８  ７μ（Ｍａｃｈｅｒｅｙ  ＆  Ｎａｇｅｌ社製）。溶離剤として、それぞれＴＦＡ０．１容量％を含有するアセトニトリルおよび水の移動相混合物を、勾配処理条件下に使用した。
【００６９】
ＥＳＩ質量スペクトルを、Ｆｉｎｎｉｇａｎ社のＬＣＱタイプの装置を使用して実施した。
【００７０】
ＮＭＲスペクトルを、Ｂｒｕｋｅｒ  ＤＭＳ５００で記録した。1Ｈおよび13Ｃの化学シフトに関する内標準は、ＤＭＳＯ−ｄ5の溶剤：２．４９ｐｐｍ（1Ｈ−ＮＭＲ）および３９．５ｐｐｍ（13Ｃ−ＮＭＲ）であった。
【００７１】
固相合成を、Ｖｅｔｔｅｒ−Ｌａｂｏｒｂｅｄａｒｆ社（Ｔｕｂｉｎｇｅｎ）のＰＰフリットを有する１０ｍｌプラスチックシリンジ中で実施した。樹脂懸濁液を十分に混合するために、プラスチックシリンジを、約１５ｒｐｍで回転させた。
【００７２】
固相上での活性化アザＧｌｙの反応およびグアニル化（ｇｕａｎｙｌａｔｉｏｎ）を、大気水分を排除しつつ、実施した。
【００７３】
次の実施例では、アクリレートアンカーを有するアザ−ＲＧＤ様化合物の多段階合成により、本発明の化合物を記載する。
【００７４】
実施例１：
Ｇｕａ−Ｍａｂ−アザＧｌｙ−Ａｓｐ−Ｈｄａ−εＡｈｘ−εＡｈｘ−Ａｃａ（４）の合成
【００７５】
【化９】
0004795620.tif 000007
【００７６】
Ｇｕａ（Ｂｏｃ）2−Ｍａｂ−ａｚａＧｌｙ−Ａｓｐ（Ｂｕ）−ＯＨ（１）：
【００７７】
【化１０】
0004795620.tif 000008
【００７８】
知られている多段階合成により（Ｇｉｂｓｏｎ，Ｃ．；Ｇｏｏｄｍａｎ，Ｓ．Ｌ．；Ｈａｈｎ，Ｄ．；Ｈoｌｚｅｍａｎｎ，Ｇ．；Ｋｅｓｓｌｅｒ，Ｈ．Ｎｏｖｅｌ  Ｓｏｌｉｄ−Ｐｈａｓｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  Ａｚａｐｅｐｔｉｄｅｓ  ａｎｄ  Ａｚａｐｅｐｔｏｉｄｅｓｖｉａ  Ｆｍｏｃ−Ｓｔｒａｔｅｇｙ  ａｎｄ  ｉｔｓ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  ＲＧＤ−Ｍｉｍｅｔｉｃｓ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９９９，６４，７３８８−７３９４  および  Ｇｉｂｓｏｎ，Ｃ．；Ｋｅｓｓｌｅｒ，Ｈ．２−ｆｌｕｏｒｏｐｙｒｉｍｉｄｉｎｅ  ａｓ  ａｎ  ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ  ｒｅａｇｅｎｔ  ｉｎ  ｓｏｌｉｄｐｈａｓｅ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  Ｎ−ａｒｙｌ−ａｎｄ  Ｎ−ａｌｋｙｌ−Ｎ−ｐｙｒｉｍｉｄｉｎ−２−ｙｌａｍｉｎｅｓ．Ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．２０００，４１，１７２５−１７２８、参照）、Ａｓｐ（Ｂｕ）−ＴＣＰ樹脂（１．００ｇ、０．６ｍｍｏｌ／ｇ、０．６ｍｍｏｌ）から、化合物１（７５．５ｍｇ、粗製収率２１％）を無色オイルとして得た。
【００７９】
ＨＰＬＣ（１０−９０％  ３０分）Ｒt＝２１．９分；ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ１２３９．１（３０）［２Ｍ＋Ｎａ+］、１２１７．０（３０）［２Ｍ＋Ｈ+］、６３１．１（３０）［Ｍ＋Ｎａ+）、６０９．０（１００）［Ｍ＋Ｈ+］。
【００８０】
Ｇｕａ（Ｂｏｃ）2−Ｍａｂ−ａｚａＧｌｙ−Ａｓｐ（Ｂｕ）−Ｈｄａ−Ｈ（２）：
【００８１】
【化１１】
0004795620.tif 000009
【００８２】
Ｇｕａ（Ｂｏｃ）2−Ｍａｂ−ａｚａＧｌｙ−Ａｓｐ（Ｂｕ）−ＯＨ（１）（７５．２ｍｇ、０．１２３ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｔ（１６．８ｍｇ、０．１２４ｍｍｏｌ、１．０当量）およびＨＡＴＵ（５６．５ｍｇ、０．１４８ｍｍｏｌ、１．２当量）を無水ＤＭＦ（１．５ｍｌ）に溶かし、次いで、コリジン（１６３μｌ、１４９ｍｇ、１．２３ｍｍｏｌ、１０当量）で処理した。２時間後、この溶液を、激しく攪拌しながら、１０℃で、５分かけて、１，６−ジアミノヘキサン（０．２８７ｇ、２．４７ｍｍｏｌ、２０当量）のＤＭＦ（２ｍｌ）溶液に滴下した。反応をこの温度で１０分間放置し、次いで、さらに７０分間、室温で攪拌した。次いで、反応混合物をオイルポンプ真空で濃縮した。残留物を、ＣＨ2Ｃｌ2（１５ｍｌ）中に入れ、Ｈ2Ｏ（２×１５ｍｌ）で抽出した。真空中で濃縮すると、茶色の固体として化合物２（８２．２ｍｇ、粗製収率９５％）が得られた。
【００８３】
ＨＰＬＣ（１０−９０％  ３０分）Ｒt＝２０．１分；ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ１４３５．２（３０）［２Ｍ＋Ｎａ+］、１４１３．２（３０）［２Ｍ＋Ｈ+］、７２９．２（６０）［Ｍ＋Ｎａ+］、７０７．２（１００）［Ｍ＋Ｈ+］。
【００８４】
Ｇｕａ（Ｂｏｃ）−Ｍａｂ−ａｚａＧｌｙ−Ａｓｐ（Ｂｕ）−Ｈｄａ−εＡｈｘ−εＡｈｘ−Ａｃａ（３ａ）およびＧｕａ（Ｂｏｃ）2−Ｍａｂ−ａｚａＧｌｙ−Ａｓｐ（Ｂｕ）−Ｈｄａ−εＡｈｘ−εＡｈｘ−Ａｃａ（３ｂ）の２：１混合物：
【００８５】
【化１２】
0004795620.tif 000010
【００８６】
６−｛［６−（アラノイルアミノ（Ａｌｌａｎｏｙｌａｍｉｎｏ））ヘキサノイル］アミノ｝ヘキサン酸（Ａｃａ−εＡｈｘ−εＡｈｘ−ＯＨ）（６９ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ、２．０当量）およびＨＡＴＵ（９７ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ、２．２当量）を無水ＤＭＦ（２．５ｍｌ）に溶かし、次いで、コリジン（３４０μｌ、３１０ｍｇ、２．６ｍｍｏｌ、２２当量）で処理した。１時間後、Ｇｕａ（Ｂｏｃ）2−Ｍａｂ−ａｚａＧｌｙ−Ａｓｐ（Ｂｕ）−Ｈｄａ−Ｈ（２）（８２．０ｍｇ、０．１１６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１ｍｌ）溶液を、攪拌しながら、５分かけて滴加した。２時間後、反応混合物を、オイルポンプ真空中で濃縮した。残留物を、ＣＨ2Ｃｌ2（１ｍｌ）およびＴＦＥ（２５０μｌ）からなる溶剤混合物に入れ、ＣＨ3ＣＮ（３５ｍｌ）にゆっくりと滴加した。無色の沈殿物が生じ、これを、遠心分離およびデカンテーションにより除去した。溶剤を真空除去し、ＨＰＬＣ（３０分で３０〜８０％）により精製すると、ＨＰＬＣ積分比２：１の３ａおよび３ｂの混合物（３３．９ｍｇ、３２％）が無色の固体として得られた。
【００８７】
３ａ：
ＨＰＬＣ（１０−９０％  ２０分）Ｒt＝１１．８分；ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ９０９．３（７０）［Ｍ＋Ｎａ+］、８８７．３（４０）［Ｍ＋Ｈ+］。
【００８８】
３ｂ：
ＨＰＬＣ（１０−９０％  ２０分）Ｒt＝１６．８分；ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ  １００９．３（９Ｏ）［Ｍ＋Ｎａ+］
Ｇｕａ−Ｍａｂ−ａｚａＧｌｙ−Ａｓｐ−Ｈｄａ−εＡｈｘ−εＡｈｘ−Ａｃａ（４）：
３ａおよび３ｂの２：１混合物（３３ｍｇ、３６μｍｏｌ）をＣＨ2Ｃｌ2（０．５ｍｌ）に懸濁させ、次いで、ＴＦＡ／Ｈ2Ｏの９５：５混合物で処理した。１時間後、反応混合物を真空濃縮した。Ｈ2Ｏから凍結乾燥させると、化合物４（２９．０ｍｇ、９５％、不純物の脱グアニル化（ｄｅｇｕａｎｙｌａｔｅｄ）化合物１０％含有）が、無色の固体として得られた。
【００８９】
1Ｈ−ＮＭＲ（５００  ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：δ＝１０．３１（ｓ，１Ｈ，Ａｒ−ＣＯ−ＮＨ−ＮＨ）、１０．０２（ｓ，１Ｈ，ＮＨ−Ａｒ）、８．２４（ｓ，１Ｈ，Ａｒ−ＣＯ−ＮＨ−ＮＨ）、８．０４（ｍc，１Ｈ，ＣＯ−ＮＨ）７．７７（ｄ，Ｊ＝７．８  Ｈｚ，１Ｈ，芳香族）、８．２４−７．５０（ｍ，８Ｈ，２  ×  Ａｒ−Ｈ，Ｈ2Ｎ−ＣＮＨ2−ＮＨ，２  ×  ＣＯ−ＮＨ）、７．４１（ｄ，Ｊ＝７．９  Ｈｚ，１Ｈ，芳香族）、７．１７−１７．０９（ｍ，１Ｈ，ＣＯ−ＮＨ）、６．８０（ｂｒ．ｓ，１Ｈ，ＮＨ−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ）、６．１９（ｄｄ，Ｊ＝１７．２，１０．１  Ｈｚ，１Ｈ，ＣＯ−ＣＨ＝ＣＨ2）、６．０４（ｄｄ，Ｊ＝１７．１，２．１  Ｈｚ，１Ｈ，ＣＯ−Ｈ＝ＣＨcisＨtrans）、５．５４（ｄｄ，Ｊ＝１０．１，２．１  Ｈｚ，１Ｈ，ＣＯ−ＣＨ＝ＣＨcisＨtrans）、４．４２（ｄｔ，Ｊ＝Ｊ’＝７．９  Ｈｚ，１Ｈ，ＮＨ−ＣＨ−ＣＯ）、３．１３−２．９４（ｍ，８Ｈ，４  ×  ＣＯ−ＮＨ−ＣＨ2）ＡＢシグナル（δA＝２．６３，δB＝２．５５，ＪAB＝１６．１，ＪA,H(α)＝５．４  Ｈｚ  および  ＪB,H(α)＝７．２  Ｈｚよりさらに分割，２Ｈ，ＣＨ−ＣＨ2−ＣＯ2Ｈ）、２．０１（ｔ，Ｊ＝７．３  Ｈｚ，４Ｈ，２  ×  ＣＯ−ＣＨ2）、１．５１−１．１５（ｍ，２０Ｈ，脂肪族）；13Ｃ−ＮＭＲ（１２５．０  ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：δ＝１７２．０、１７１．８３、１７１．７６、１７０．６、１６４．４、１５７．６、１５５．８、１３５．６、１３３．９、１３１．９、１２９．８、１２７．６、１２５．３、１２４．７、１２３．４、５０．１、３８．７、３８．４、３８．３、３８．２、３５．３、２９．０、２８．９、２８．８、２６．１、２５．９、２５．０；ＨＰＬＣ（１０−８０％  ３０分）Ｒt＝１０．６分；ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ  ７５３．３（１０）［Ｍ＋Ｎａ+］、７３１．３（１００）［Ｍ＋Ｈ+］。
【００９０】
細胞接着試験の実施例
インビトロで、ペプチド被覆された材料表面へのマウスＭＣ３Ｔ３  Ｈ１骨芽細胞培養の接着を調べた。この試験では、細胞５００００／ｃｍ2を接種し、無血清培地中、３７℃／大気湿度９５％で１時間インキュベーションした後に、接着した細胞の割合を求めた。
【００９１】
細胞接着率［％］＝接着細胞／接種細胞×１００
ペプチド：細胞接着率［％］
Ｇｕａ−Ｍａｂ−ａｚａＧｌｙ−Ａｓｐ−Ｈｄａ−εＡｈｘ−εＡｈｘ−Ａｃａ：７５
Ｔｈｒ−Ｔｒｐ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｃａ−Ａｃａ−Ｃｙｓ：１０５、
Ｃｙｓ−Ａｃａ−Ａｃａ−Ｔｈｒ−Ｔｒｐ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ：１０１、
Ｌｙｓ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｃａ−Ａｃａ−Ｃｙｓ：９６、
Ｃｙｓ−Ａｃａ−Ａｃａ−Ｔｈｒ−Ｔｒｐ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ：１７、
Ｐｈｅ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｃａ−Ａｃａ−Ｃｙｓ：１３、
Ｃｙｓ−Ａｃａ−Ａｃａ−Ｔｈｒ−Ｔｒｐ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｉｌｅ−Ａｌａ：７
ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）とチオールペプチドであらかじめ被覆されているポリスチレン製培養表面の被覆は、先行技術で開示されている（ＤＥ１９８１８０９８号（Ｍｅｒｃｋ  Ｐａｔｅｎｔ  ＧｍｂＨ）、実施例２参照）。アクリレートペプチドでのＰＭＭＡ表面の被覆も、ＤＥ１９８１８０９８号、実施例３に記載されている。