(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式
【化１】
0004783967.tif 000013
［式中、Ｘ1は水素原子又はフッ素原子を示し、Ｒ1及びＲ2は同一又は異なって水素原子又は炭素数１−１０のアルキル基を示す。］で表される含フッ素アミノ酸誘導体又はその医薬上許容される塩を有効成分とする統合失調症の治療剤又は予防剤。
【請求項２】
式
【化２】
0004783967.tif 000014
［式中、Ｒ1及びＲ2は同一又は異なって水素原子又は炭素数１−１０のアルキル基を示す。］で表される相対的立体化学配置を有する含フッ素アミノ酸誘導体又はその医薬上許容される塩を有効成分とする統合失調症の治療剤又は予防剤。
【請求項３】
(1S,2S,3S,5R,6S)−２−アミノ−３−フルオロビシクロ[3.1.0]ヘキサン−2,6−ジカルボン酸、その医薬上許容される塩又はその水和物を有効成分とする統合失調症の治療剤又は予防剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、新規な化合物を有効成分とする医薬に関し、更に詳しくはグループ２メタボトロピックグルタミン酸受容体に作用し、例えば精神分裂病、不安及びその関連疾患、うつ病、二極性障害、てんかん等の精神医学的障害、並びに薬物依存症、認知障害、アルツハイマー病、ハンチントン舞踏病、パーキンソン病、筋硬直に伴う運動障害、脳虚血、脳不全、脊髄障害、頭部障害等の神経学的疾患に治療効果及び予防効果を示す医薬に関する。
【０００２】
【従来の技術】
近年、グルタミン酸受容体遺伝子のクローニングが相次ぎ、グルタミン酸受容体には驚異的な数のサブタイプが存在することが明かとなった。現在、グルタミン酸受容体は「受容体がイオンチャネル型構造を持つイオノトロピック型」及び「受容体がＧ−タンパク質と共役しているメタボトロピック型」の２つに大きく分類されている。更に、イオノトロピック受容体は薬理学的にＮＭＤＡ、α−アミノ−３−ヒドロキシ−５−メチルイソキサゾ−ル−４−プロピオネート（ＡＭＰＡ）及びカイネ−トの３種類に分類され（Science, 258, 597-603, 1992）、メタボトロピック受容体はタイプ１〜タイプ８の８種類に分類されている（J.Neurosci., 13, 1372-1378, 1993; Neuropharmacol., 34, 1-26, 1995）。
【０００３】
また、メタボトロピックグルタミン酸受容体は薬理学的に３つのグループに分類される。この中で、グループ２（ｍＧｌｕＲ２／ｍＧｌｕＲ３）は、アデニルサイクラーゼと結合し、サイクリックアデノシン１リン酸（ｃＡＭＰ）のホルスコリン刺激性の蓄積を抑制する（Trends Pharmacol. Sci., 14, 13(1993)）ことから、メタボトロピックグルタミン酸受容体に作用する化合物は、急性及び慢性の精神医学的疾患及び神経学的疾患の治療又は予防に有効なはずである。そして、グループ２メタボトロピックグルタミン酸受容体に作用する物質としては、特開平８−１８８５６１号公報に(＋)−(1S,2S,5R,6S)−２−アミノビシクロ[3.1.0]ヘキサン−２,６−ジカルボン酸が開示されている。
【０００４】
ところで、フッ素原子は強い電子吸引性と高い脂溶性を付与する傾向を有しており、フッ素原子の導入された化合物は物性を大きく変える。このため、フッ素原子の導入は化合物の吸収性、代謝的安定性及び薬理作用に大きく影響を及ぼす可能性がある。しかし、フッ素原子の導入は決して容易なことではない。実際に、特開平８−１８８５６１号公報において、(＋)−(1S,2S,5R,6S)−２−アミノビシクロ[3.1.0]ヘキサン−２,６−ジカルボン酸へのフッ素原子の導入は全く検討されていない。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の目的は、例えば精神分裂病、不安及びその関連疾患、うつ病、二極性障害、てんかん等の精神医学的障害、並びに薬物依存症、認知障害、アルツハイマー病、ハンチントン舞踏病、パーキンソン病、筋硬直に伴う運動障害、脳虚血、脳不全、脊髄障害、頭部障害等の神経学的疾患など、グループ２メタボトロピックグルタミン酸受容体が関与しているとされる疾患の治療剤又は予防剤として経口投与で有効なグループ２メタボトロピックグルタミン酸受容体拮抗薬を提供することにある。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、（(+)-(1S,2S,5R,6S)−２−アミノビシクロ[3.1.0]ヘキサン−２,６−ジカルボン酸にフッ素原子を導入した含フッ素アミノ酸誘導体について鋭意検討した結果、グループ２メタボトロピックグルタミン酸受容体に経口投与で影響を及ぼす新規含フッ素アミノ酸誘導体を見出し、本発明を完成した。
【０００７】
以下、本発明を説明する。
【０００８】
本発明は、式［１］
【０００９】
【化３】
0004783967.tif 000002
【００１０】
［式中、Ｘ1は水素原子又はフッ素原子を示し、Ｒ1及びＲ2は同一又は異なって水素原子又は炭素数１−１０のアルキル基を示す。］で表される含フッ素アミノ酸誘導体又はその医薬上許容される塩を有効成分とする、例えばグループ２メタボトロピックグルタミン酸受容体に作用する医薬である。
本発明において、炭素数１−１０のアルキル基とは直鎖状又は分岐鎖状のアルキル基を示し、直鎖状又は分岐鎖状アルキル基としては、例えばメチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ペンチル基、イソペンチル基、１−エチルプロピル基、ヘキシル基、イソヘキシル基、１−エチルブチル基、ヘプチル基、イソヘプチル基、オクチル基、ノニル基、デシル基などを挙げることができる。
また、本発明における医薬上許容される塩とは、例えば硫酸、塩酸、燐酸などの鉱酸との塩、酢酸、シュウ酸、乳酸、酒石酸、フマール酸、マレイン酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸などの有機酸との塩、トリメチルアミン、メチルアミンなどのアミンとの塩、又はナトリウムイオン、カリウムイオン、カルシウムイオンなどの金属イオンとの塩などである。なお、本発明に係る化合物は各種の溶媒和物として存在し得るが、医薬としての適用性の面からは水和物が好ましい。
【００１１】
式［１］で示される化合物の中でＸ1が水素原子の場合、１、２、３、５及び６位に５つの不斉炭素原子が存在する。従って、Ｘ1が水素原子である本発明に係る化合物は、光学活性体、ラセミ体等の２種のエナンチオマー混合物及びジアステレオマーの混合物として存在できる。更に、Ｘ1がフッ素原子の場合、１、２、５及び６位に４つの不斉炭素原子が存在する。従って、Ｘ1がフッ素原子である本発明に係る化合物は、光学活性体、ラセミ体等の２種のエナンチオマー混合物及びジアステレオマーの混合物として存在できる。
【００１２】
式［１］で示される化合物において好ましいＸ1は水素原子である。更に、Ｘ1が水素原子である場合には、式［１］で示される化合物は下記の相対的立体化学配置を有することがより好ましい。
【００１３】
【化４】
0004783967.tif 000003
【００１４】
また、Ｘ1、Ｒ1及びＲ2が水素原子の場合、本化合物の光学異性体の中で最も好ましい光学活性体は正の旋光性を有しており、この絶対立体化学配置は、本化合物の合成前駆体である２−スピロ−５'−ヒダントイン−３−フルオロビシクロ[3.1.0]ヘキサン−６−カルボン酸 (Ｒ)−(＋)−1−フェニルエチルアミン塩のＸ線単結晶構造解析により、１Ｓ,２Ｓ,３Ｓ,５Ｒ,６Ｓと決定された。
【００１５】
一方、式［１］においてＲ1とＲ2の片方又は両方が水素以外を示す場合、すなわちエステル体はグループ２メタボトロピックグルタミン酸受容体に影響を及ぼさない。しかし、このエステル体は生体内でカルボン酸に加水分解され、グループ２メタボトロピックグルタミン酸受容体に影響を及ぼすカルボン酸に変化する。従って、エステル体はプロドラッグとして機能するため、極めて有用な化合物である。
【００１６】
【発明の実施の形態】
式［１］の化合物は、以下に示す製造法により供給される。以下の反応式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｘ1は前記と同様であり、Ｒ3とＲ4は同一又は異なって炭素数１−１０のアルキル基を示し、Ｙは一般的なアミノ基の保護基（PROTECTIVE GROUPS IN ORGANIC SYNTHESIS,THEODORA W. GREENE and PETER G. M. WUTS著  参照）を示す。
【００１７】
【化５】
0004783967.tif 000004
【００１８】
光学活性体、ラセミ体等の２種のエナンチオマー混合物又はジアステレオマーの混合物であるモノフッ化化合物（２）は、対応する光学活性体、ラセミ体等の２種のエナンチオマー混合物又はジアステレオマーの混合物であるケトン体（１）を一旦エノールシリルエーテル体又はエノールエステル体とした後フッ素化試薬と反応するか、或いはケトン体（１）に直接フッ素化試薬を反応することによって得られる。また、光学活性体、ラセミ体等の２種のエナンチオマー混合物又はジアステレオマーの混合物であるジフッ化化合物（３）は、モノフッ化化合物（２）を一旦エノールシリルエーテル体とした後フッ化試薬と反応するか、モノフッ化化合物（２）に直接フッ化試薬と反応するか、或いはケトン体（１）に２当量以上のフッ素化試薬を反応することによって得られる。
【００１９】
ここで、エノールシリルエーテル体の製造は、ケトン体（１）に、例えばテトラヒドロフラン、ジエチルエーテルなどのエーテル類、トルエン、ベンゼンなどの炭化水素類、メタノール、ｔ−ブタノールなどのアルコール類、Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド等の不活性溶媒中、例えばｎ−ブチルリチウム、ｓ−ブチルリチウムなどのアルキルリチウム類、例えばリチウムビストリメチルシリルアミド、カリウムビストリメチルシリルアミド、ナトリウムアミドなどの金属アミド類、例えば水素化ナトリウムなどの水素化金属類、又は、例えばトリエチルアミン等のアミン類等の塩基の存在下、例えばクロロトリメチルシラン、クロロｔ−ブチルジメチルシラン等のシリル化剤を反応することによって得られる。ここでの反応温度は１００℃以下が好ましく、更に−７８℃から室温が最適である。
【００２０】
エノールエステル体の製造は、シリル化剤を例えば無水酢酸等の酸無水物、例えばプロピオニルクロライド等の酸ハライド、又は例えば酢酸等のカルボン酸とエトキシカルボニルクロライド等のアルコキシカルボニルハライドから調製される混合酸無水物等に変え、エノールシリルエーテル体の製造と同様に反応し得られる。
フッ素化試薬とは、例えばＮ−フルオロピリジニウムトリフラート、Ｎ−フルオロ−Ｎ−ｔ−ブチルベンゼンスルホンアミド、Ｎ−フルオロサッカリンスルタム、Ｎ−フルオロビス（ベンゼンスルホン）イミド、Ｎ−フルオロ−ｏ−ベンゼンスルホンイミドなどのＮ−フルオロ型フッ素化剤、フッ素、ＣｌＯ3Ｆ、又はＣＦ3ＣＯＯＦ等である。ここで、直接フッ素化試薬を反応させる態様としては、ケトン体（１）に、例えばテトラヒドロフラン、ジエチルエーテルなどのエーテル類、トルエン、ベンゼンなどの炭化水素類、メタノール、ｔ−ブタノールなどのアルコール類、Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド等の不活性溶媒中、例えばｎ−ブチルリチウム、ｓ−ブチルリチウムなどのアルキルリチウム類、例えばリチウムビストリメチルシリルアミド、ナトリウムアミドなどの金属アミド類、例えば水素化ナトリウムなどの水素化金属類、又は例えばトリエチルアミン等のアミン類等の塩基の存在下、反応温度を１００℃以下で、好ましくは−７８℃から室温で、上記のようなフッ素化試薬を反応させる態様が好ましい。
【００２１】
このようにして得られた光学活性体、ラセミ体等の２種のエナンチオマー混合物又はジアステレオマーの混合物であるモノ又はジフッ素化化合物（４）は、ストレッカーアミノ酸合成（Strecker Amino Acid Synthesis）（Ann.,75,27(1850);91,349(1850)）、ブッヘラー−ベルグス反応（Bucherer-Bergs Reaction）（J.Prakt.Chem.,140,69(1934)）又はこれらの変法によって得られたアミノシアニド誘導体又はヒダントイン誘導体等を加水分解することによって本発明に係る化合物である対応する光学活性体、ラセミ体等の２種のエナンチオマー混合物又はジアステレオマーの混合物である含フッ素アミノ酸誘導体（５）とすることができる。
【００２２】
具体的には、モノ又はジフッ化合物（４）を、シアン化ナトリウム又はシアン化カリウム及び炭酸アンモニウムと、例えばエタノールなどのアルコール類又はアルコール類と水の混合溶媒中、好ましくは３０℃〜５０℃で１日〜２日反応し、合成中間体であるヒダントインに導く。続いて、例えば水酸化ナトリウムなどの塩基、或いは塩酸、硫酸等の酸によって、例えばエタノールなどのアルコール類、ジオキサンなどのエーテル類、又はアセトンなどのケトン類などの不活性溶媒中加水分解することによって、本発明化合物である含フッ素アミノ酸誘導体（５）が得られる。
【００２３】
【化６】
0004783967.tif 000005
【００２４】
下記式化７に示すように、(1SR,5RS,6SR)−（１）で示されるケトン体に１つのフッ素原子が導入されたモノフッ化化合物（前出の（２）参照）のブッヘラー−ベルグス反応によって得られる、(1SR,5RS,6SR)−（６）で示されるヒダントイン誘導体は、例えばシリカゲル等を用いたカラムクロマトグラフィーや再結晶などの一般的な手法によって４つのシアステレオマーに分離することができる。
【００２５】
更に４つのジアステレオマーのエステルをそれぞれ加水分解後、例えば塩基性キラル分割剤を用いた分割等の一般的な分割方法によって８つのエナンチオマー（８）に分割できる。続いて、ヒダントイン部位を加水分解することによって本発明化合物である８つの光学活性な含フッ素アミノ酸誘導体（９）が得られる。
【００２６】
ここで、塩基性キラル分割剤としては、例えば（＋）又は（−）−１−フェニルエチルアミン、（＋）又は（−）−２−アミノ−１−ブタノール、（＋）又は（−）−アラニノール、ブルシン、シンコニジン、シンコニン、キニン、キニジン、デヒドロアビエチルアミン等の光学活性なアミン類を使用することができる。
【００２７】
【化７】
0004783967.tif 000006
【００２８】
一方、本発明化合物の一つである２つのフッ素原子を含有する４つの光学活性なアミノ酸誘導体（１２）は、下記化８に示すように、(1SR,5RS,6SR)−（１）を出発原料にしてフッ素化、ヒダントイン化、ジアステレオマーの分離、エステルの加水分解、分割及びヒダントイン部位の加水分解によて合成することができる。
【００２９】
【化８】
0004783967.tif 000007
【００３０】
１つのフッ素原子を有する式(1SR,5RS,6SR)−（２）で示されるケトン体は、下記化９に示すように、ジアステレオマーの分離、エステルの加水分解及び分割により式（１３）で示される４つの光学活性なケトカルボン酸に導かれる。従って、４つの光学活性なケトカルボン酸（１３）を直接、或いはエステル化後に、式（５）に示した化合物の合成の場合と同様の操作を行い、また更にジアステレオマーの分離を行うことによっても、光学活性な本発明化合物である含フッ素アミノ酸誘導体を製造することができる。
【００３１】
【化９】
0004783967.tif 000008
【００３２】
式（１４）で示される２つのフッ素原子を有する２つの光学活性なケトカルボン酸は、２つのフッ素原子を有する式(1SR,5RS,6SR)−（３）で示されるケトン体より、化９と同様の方法、すなわち、エステルの加水分解及び分割によって得ることができる。従って、２つの光学活性なケトカルボン酸（１４）を直接、或いはエステル化後に、化６で示したアミノ酸合成法と同様な操作を行い、また、更にジアステレオマーの分離を行うことによって、光学活性な本発明化合物である含フッ素アミノ酸誘導体（１５）を製造することができる。
【００３３】
【化１０】
0004783967.tif 000009
【００３４】
ところで、下記化１１に示すように、式（６）で示される光学活性体、ラセミ体等の２種のエナンチオマー混合物又はジアステレオマーの混合物の本発明化合物である含フッ素アミノ酸は、アミノ基をＹで示される保護基で保護した後、Ｒ3−Ｘ2又はＲ4−Ｘ2で示されるアルキルハライド、もしくはＲ3−ＯＨ又はＲ4−ＯＨで示されるアルコールを用い一般的な方法にてエステル化し、アミノ基の保護基を除去することによって、式（１５）で示される本発明化合物である含フッ素アミノ酸エステルに誘導される。
【００３５】
【化１１】
0004783967.tif 000010
【００３６】
ここで、アミノ基の保護、エステル化及びアミノ基の脱保護は、一般的方法（PROTECTIVE GROUPS IN ORGANIC SYNTHESIS,THEODORA W. GREENE and PETER G. M.WUTS著  参照）で実施される。
【００３７】
更に、式（１５）で示される含フッ素アミノ酸エステル又は式（１７）で示されるＮ−保護含フッ素アミノ酸エステルの各ジアステレオマーは、例えばシリカゲル等を用いたカラムクロマトグラフィーや再結晶などの一般的な手法によって分離することができる。式（１５）の各ジアステレオマーは、例えば酸性キラル分割剤を用いた分割等の一般的な分割方法によって各エナンチオマーに分割できる。
ここで、酸性キラル分割剤としては、（＋）又は（−）−ジ−ｐ−トルオルイル酒石酸、（＋）又は（−）−ジベンゾイル酒石酸、（＋）又は（−）−酒石酸、（＋）又は（−）−マンデル酸、（＋）又は（−）−しょうのう酸、又は（＋）又は（−）−しょうのうスルホン酸等の光学活性な有機酸類を使用することができる。
【００３８】
本発明に係る化合物は、１つ又はそれ以上の医薬的に許容される担体、賦形剤又は希釈剤と組み合わされて医薬的製剤とすることができる。前記担体、賦形剤及び希釈剤の例には、水、糖乳、デキストロース、フラクトース、ショ糖、ソルビトール、マンニトール、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、でんぷん、ガム、ゼラチン、アルギネート、ケイ酸カルシウム、リン酸カルシウム、セルロース、水シロップ、メチルセルロース、ポリビニルピロリドン、アルキルパラヒドロキシベンゾエート、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、グリセリン、ゴマ油、オリーブ油、大豆油などが含まれる。
【００３９】
本発明に係る化合物は、これらの担体、賦形剤又は希釈剤、そして、必要に応じて一般に使用される増量剤、結合剤、崩壊剤、ｐＨ調整剤、溶解剤などの添加剤が混合された上で、常用の製剤技術によって錠剤、丸剤、カプセル剤、顆粒剤、粉剤、液剤、乳剤、懸濁剤、軟膏剤、注射剤、皮膚貼付剤などの経口又は非経口用医薬、特にグロープ２メタボトロピックグルタミン酸受容体作用薬として調製されることができる。本発明に係る化合物は、成人患者に対して０.０１〜５００ｍｇを１日１回又は数回に分けて経口又は非経口で投与することが可能である。なお、この投与量は治療対象となる疾病の種類、患者の年齢、体重、症状などにより適宜増減することが可能である。
【００４０】
【発明の効果】
本発明により、医薬として有用な薬物、特にメタボトロピックなグルタミン酸受容体の作動薬が提供された。従って、例えば精神分裂病、不安及びその関連疾患、うつ病、二極性障害、てんかん等の精神医学的障害、例えば薬物依存症、認知障害、アルツハイマー病、ハンチントン舞踏病、パーキンソン病、筋硬直に伴う運動障害、脳虚血、脳不全、脊髄障害、頭部障害等の神経学的疾患に有用な治療薬及び予防薬として使用できる。
【００４１】
【実施例】
以下に製造例及び試験例を示し本発明を具体的に説明する。
製造例１
(1SR,3RS,5RS,6SR)エチル  ３−フルオロ−２−オキソビシクロ[3.1.0]ヘキサン−６−カルボキシレート、及び(1SR,3SR,5RS,6SR)エチル  ３−フルオロ−２−オキソビシクロ[3.1.0]ヘキサン−６−カルボキシレートの合成
窒素雰囲気下、ｎ−ブチルリチウム３０.９ｍｌ（１.５４Ｍヘキサン溶液）と1,1,1,3,3,3−ヘキサメチルジシラザン７.５０ｇから調製したリチウムビストリメチルシリルアミドのテトラヒドロフラン１５０ｍｌ中に、−７５℃でテトラヒドロフラン１５０ｍｌに溶解した(1SR,5RS,6SR)エチル  ２−オキソビシクロ[3.1.0]ヘキサン−６−カルボキシレート６.６０ｇを滴下した。この温度で１時間攪拌した後、クロロトリメチルシラン７.５ｍｌを加え、室温で１時間攪拌した。反応溶液を減圧下濃縮後、残渣に無水ヘキサンを加え、生じた無機塩を濾別し、濃縮した。
【００４２】
残渣を塩化メチレン６６ｍｌに溶解し、Ｎ−フルオロベンゼンスルホンイミド１５.００ｇを加え、室温で１６.５時間攪拌した。反応溶液を水で２回洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、乾燥剤を濾別後、減圧下、濃縮した。残渣をクロマトグラフィー（シリカゲル：ワコウゲル（和光純薬製）、展開溶媒：ヘキサン−塩化メチレン−酢酸エチル＝６０：４：１）で精製し、(1SR,3RS,5RS,6SR)エチル  ３−フルオロ−２−オキソビシクロ[3.1.0]ヘキサン−６−カルボキシレートと(1SR,3SR,5RS,6SR)エチル  ３−フルオロ−２−オキソビシクロ[3.1.0]ヘキサン−６−カルボキシレートの混合物を４.３０ｇ得た。
1Ｈ−ＮＭＲ(CDCl3)δ(ppm)；1.28(3Hx3/4,t,J=7.2Hz),1.29(3Hx1/4,t,J=7.2Hz),2.11-2.79(5H,m),4.18(2H,q,J=7.2Hz),4.51(1Hx1/4,dd,J=51Hz,8.1Hz),4.58(1Hx3/4,dt,J=51Hz,8.1Hz)
ＭＳ(FAB)(Pos)ｍ／ｅ；１８７（Ｍ+＋１）
【００４３】
製造例２
(1SR,3RS,5RS,6SR)エチル  ３−フルオロ−２−オキソビシクロ[3.1.0]ヘキサン−６−カルボキシレート、及び(1SR,3SR,5RS,6SR)エチル  ３−フルオロ−２−オキソビシクロ[3.1.0]ヘキサン−６−カルボキシレートの合成
窒素雰囲気下、ｎ−ブチルリチウム１.５ｍｌ（１.５４Ｍヘキサン溶液）と1,1,1,3,3,3−ヘキサメチルジシラザン０.３８ｇから調製したリチウムビストリメチルシリルアミドのテトラヒドロフラン６ｍｌ中に、−７５℃でテトラヒドロフラン６ｍｌに溶解した（1SR,5RS,6SR)エチル ２−オキソビシクロ[3.1.0]ヘキサン−６−カルボキシレート０.２０ｇを滴下した。この温度で４５分間攪拌した後、Ｎ−フルオロベンゼンスルホンイミド０.７５ｇを加え、室温で２時間攪拌した。反応溶液を水で２回洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、乾燥剤を濾別後、減圧下、濃縮した。残渣をクロマトグラフィー（シリカゲル：ワコウゲル（和光純薬製）、展開溶媒：ヘキサン−塩化メチレン−酢酸エチル＝６０：４：１）で精製し、(1SR,3RS,5RS,6SR)エチル  ３−フルオロ−２−オキソビシクロ[3.1.0]ヘキサン−６−カルボキシレートと(1SR,3SR,5RS,6SR)エチル ３−フルオロ−２−オキソビシクロ[3.1.0]ヘキサン−６−カルボキシレートの混合物を０.０８ｇ得た。
1Ｈ−ＮＭＲ(CDCl3)δ(ppm)；1.28(3Hx3/4,t,J=7.2Hz),1.29(3Hx1/4,t,J=7.2Hz),2.11-2.79(5H,m),4.18(2H,q,J=7.2Hz),4.51(1Hx1/4,dd,J=51Hz,8.1Hz),4.58(1Hx3/4,dt,J=51Hz,8.1Hz)
ＭＳ(FAB)(Pos)ｍ／ｅ；１８７（Ｍ+＋１）
【００４４】
製造例３
(1SR,5RS,6SR)エチル 3,3−ジフルオロビシクロ[3.1.0]ヘキサン−６−カルボキシレートの合成
窒素雰囲気下、ｎ−ブチルリチウム３０.９ｍｌ（１.５４Ｍヘキサン溶液）と1,1,1,3,3,3−ヘキサメチルジシラザン７.５０ｇから調製したリチウムビストリメチルシリルアミドのテトラヒドロフラン１５０ｍｌ中に、−７５℃でテトラヒドロフラン１５０ｍｌに溶解した(1SR,5RS,6SR)エチル  ２−オキソビシクロ[3.1.0]ヘキサン−６−カルボキシレート６.６０ｇを滴下した。この温度で１時間攪拌した後、クロロトリメチルシラン７.５ｍｌを加え、室温で１時間攪拌した。反応溶液を減圧下濃縮後、残渣に無水ヘキサンを加え、生じた無機塩を濾別し、濃縮した。残渣を塩化メチレン６６ｍｌに溶解し、Ｎ−フルオロベンゼンスルホンイミド１５.００ｇを加え、室温で１６.５時間攪拌した。反応溶液を水で２回洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、乾燥剤を濾別後、減圧下、濃縮した。残渣をクロマトグラフィー（シリカゲル：ワコウゲル（和光純薬製）、展開溶媒：ヘキサン−塩化メチレン−酢酸エチル＝６０：４：１）で精製し、(1SR,5RS,6SR)エチル 3,3−ジフルオロビシクロ[3.1.0]ヘキサン−６−カルボキシレートを０.０２ｇ得た。
1Ｈ−ＮＭＲ(CDCl3)δ(ppm)；1.30(3H,t,J=7.1Hz),2.42-2.80(5H,m),4.20(2H,q,J=7.1Hz)
ＭＳ(Ion Spray)(Nega)ｍ／ｅ；２０３（Ｍ+−１）
【００４５】
製造例４
(1SR,5RS,6SR)エチル 3,3−ジフルオロビシクロ[3.1.0]ヘキサン−６−カルボキシレートの合成
窒素雰囲気下、ｎ−ブチルリチウム５.０ｍｌ（１.５４Ｍヘキサン溶液）と1,1,1,3,3,3−ヘキサメチルジシラザン１.４０ｇから調製したリチウムビストリメチルシリルアミドのテトラヒドロフラン２６ｍｌ中に、−７５℃でテトラヒドロフラン６.５ｍｌに溶解した製造例１で合成した化合物１.３ｇを滴下した。この温度で１時間攪拌した後、クロロトリメチルシラン１.３ｍｌを加え、室温で１時間攪拌した。反応溶液を減圧下濃縮後、残渣に無水ヘキサンを加え、生じた無機塩を濾別し、濃縮した。
【００４６】
残渣を塩化メチレン１３ｍｌに溶解し、Ｎ−フルオロベンゼンスルホンイミド３.３０ｇを加え、室温で５時間攪拌した。反応溶液を水で２回洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、乾燥剤を濾別後、減圧下、濃縮した。残渣をクロマトグラフィー（シリカゲル：ワコウゲル（和光純薬製）、展開溶媒：ヘキサン−塩化メチレン−酢酸エチル＝６０：４：１）で精製し、(1SR,5RS,6SR)エチル 3,3−ジフルオロビシクロ[3.1.0]ヘキサン−６−カルボキシレートを０.３４ｇ得た。
1Ｈ−ＮＭＲ(CDCl3)δ(ppm)；1.30(3H,t,J=7.1Hz),2.42-2.80(5H,m),4.20(2H,q,J=7.1Hz)
ＭＳ(Ion Spray)(Nega)ｍ／ｅ；２０３（Ｍ+−１）
【００４７】
製造例５
(1SR,2SR,3SR,5RS,6SR)エチル ２−スピロ−５´−ヒダントイン−３−フルオロビシクロ[3.1.0]ヘキサン−６−カルボキシレート、(1SR,2SR,3RS,5RS,6SR)エチル  ２−スピロ−５´−ヒダントイン−３−フルオロビシクロ[3.1.0]ヘキサン−６−カルボキシレート、及び(1SR,2RS,3RS,5RS,6SR)エチル ２−スピロ−５´−ヒダントイン−３−フルオロビシクロ[3.1.0]ヘキサン−６−カルボキシレートの合成
(1SR,3RS,5RS,6SR)エチル ３−フルオロ−２−オキソビシクロ[3.1.0]ヘキサン−６−カルボキシレートと(1SR,3SR,5RS,6SR)エチル ３−フルオロ−２−オキソビロビシクロ[3.1.0]ヘキサン−６−カルボキシレートの混合物４.８４ｇを、水２６ｍｌとエタノール３８ｍｌの混合溶液に溶解し、炭酸アンモニウム６.２５ｇとシアン化カリウム１.８６ｇを加え３５℃で３７時間攪拌した。反応混合物を室温まで冷却後水３１ｍｌを加え、更に氷冷下２.５時間攪拌し生じた結晶を濾取し、２.１０ｇの第１結晶を得た。濾液に氷冷下濃塩酸を加えｐＨを１.０に調整し、生成した結晶を濾取し、２.００ｇの第２結晶を得た。
【００４８】
第１結晶をクロマトグラフィー（シリカゲル：ワコウゲル（和光純薬製）、展開溶媒：クロロホルム−メタノール＝１００：１）に付し、低極性ジアステレオマーを０.６１ｇと極性ジアステレオマーＡ（極性ジアステレオマーＢを約２５％を含む、極性ジアステレオマーＡと極性ジアステレオマーＢのＲｆ値は同じ）０.５５ｇに分離した。
低極性ジアステレオマー０.６１ｇを水−エタノール＝１：１の混合溶液より再結晶し、(1SR,2SR,3SR,5RS,6SR)エチル ２−スピロ−５'−ヒダントイン−３−フルオロビシクロ[3.1.0]ヘキサン−６−カルボキシレートを０.５２ｇを得た。
1Ｈ−ＮＭＲ(DMSO-d6)δ(ppm)；1.19(3H,t,J=7.0Hz),1.95-2.46(5H,m),4.06(2H,q,J=7.0Hz),4.81(1H,dd,J=52Hz,5.1Hz),8.44(1H,s),10.91(1H,s)
ＭＳ(EI)ｍ／ｅ；２５６（Ｍ+）
【００４９】
極性ジアステレオマーＡ０.５５ｇを水−エタノール＝１：１の混合溶液より再結晶し、(1SR,2SR,3RS,5RS,6SR)エチル ２−スピロ−５'−ヒダントイン−３−フルオロビシクロ[3.1.0]ヘキサン−６−カルボキシレート０.３７ｇを得た。
1Ｈ−ＮＭＲ(DMSO-d6)δ(ppm)；1.18(3H,t,J=7.1Hz),1.85-2.43(5H,m),4.05(2H,q,J=7.1Hz),4.70(1H,dt,J=52Hz,8.0Hz),8.21(1H,s),10.83(1H,s)
ＭＳ(EI)ｍ／ｅ；２５６（Ｍ+）
【００５０】
第２結晶を酢酸エチルで洗浄し不溶物を濾別後濾液を減圧下濃縮し、残渣を水−エタノール＝１：１で２回再結晶した。この２回の再結晶濾液を減圧下濃縮し、残渣をクロマトグラフィー（シリカゲル：ワコウゲル（和光純薬製）、展開溶媒：クロロホルム−メタノール＝１００：１）に付し前記低極性ジアステレオマーを完全に除去した。得られた極性ジアステレオマーＢ（極性ジアステレオマーＡを約１０％を含む）の結晶０.２５ｇを水−エタノール＝１：１で再結晶を行い、、(1SR,2RS,3RS,5RS,6SR)エチル ２−スピロ−５'−ヒダントイン−３−フルオロビシクロ[3.1.0]ヘキサン−６−カルボキシレートを０.１８ｇ得た。
1Ｈ−ＮＭＲ(DMSO-d6)δ(ppm)；1.18(3H,t,J=7.1Hz),1.81-2.17(4H,m),2.36(1H,dd,J=13Hz,7.2Hz),3.95-4.11(2H,m),4.90(1H,ddd,J=51Hz,8.9Hz,7.2Hz),8.54(1H,s),10.87(1H,s)
ＭＳ(EI)ｍ／ｅ；２５６（Ｍ+）
【００５１】
同様にして下記の化合物を合成した。
(1SR,2SR,5RS,6SR)エチル ２−スピロ−５'−ヒダントイン−3,3−ジフルオロビシクロ[3.1.0]ヘキサン−６−カルボキシレート
1Ｈ−ＮＭＲ(DMSO-d6)δ(ppm)；1.19(3H,t,J=7.0Hz),1.85-1.89(1H,m),2.00-2.08(1H,m),2.15-2.27(1H,m),2.33-2.50(1H,m),2.55-2.86(1H,m),4.07(2H,q,J=7.0Hz),8.49(1H,m)
ＭＳ(EI)ｍ／ｅ；２７４（Ｍ+）
【００５２】
製造例６
(1SR,2SR,3RS,5RS,6SR)−２−アミノ−３−フルオロビシクロ[3.1.0]ヘキサン−2,6−ジカルボン酸の合成
(1SR,2SR,3RS,5RS,6SR)エチル ２−スピロ−５'−ヒダントイン−３−フルオロビシクロ[3.1.0]ヘキサン−６−カルボキシレート３００ｍｇを３Ｍ水酸化ナトリウム水溶液２.５ｍｌに溶解し、１６時間加熱還流した。反応溶液を室温まで冷却後、ガラスフィルターで濾過し、濾液を濃塩酸でｐＨ３にした後、イオン交換クロマトグラフィー（ＡＧ１−Ｘ８  陰イオン交換樹脂(Bio-Rad)、展開溶媒：０.１Ｍ酢酸〜３Ｍ酢酸）で精製し、(1SR,2SR,3RS,5RS,6SR)−２−アミノ−３−フルオロビシクロ[3.1.0]ヘキサン−２,６−ジカルボン酸を５１ｍｇ得た。
1Ｈ−ＮＭＲ(TFA-d)δ(ppm)；2.23-2.24(1H,m),2.56-2.96(4H,m),5.15(1H,dt,J=52Hz,7.5Hz)
ＭＳ(CI)ｍ／ｅ；２０４（Ｍ+＋１）
【００５３】
同様にして下記の化合物を合成した。
(1SR,2SR,5RS,6SR)−２−アミノ−3,3−ジフルオロビシクロ[3.1.0]ヘキサン−2,6−ジカルボン酸
1Ｈ−ＮＭＲ(TFA-d)δ(ppm)；2.46(1H,brs),2.63-2.90(3H,m),3.01-3.12(1H,m)
ＭＳ(CI)ｍ／ｅ；２２２（Ｍ+＋１）
【００５４】
製造例７
(1SR,2SR,3SR,5RS,6SR)−２−アミノ−３−フルオロビシクロ[3.1.0]ヘキサン−２,６−ジカルボン酸の合成
(1SR,2SR,3SR,5RS,6SR)エチル ２−スピロ−５´−ヒダントイン−３−フルオロビシクロ[3.1.0]ヘキサン−６−カルボキシレート１００ｍｇを６０％硫酸水溶液１.５ｍｌに溶解し、１４０℃で１２時間加熱した。反応溶液を室温まで冷却後、５Ｍ水酸化ナトリウム水溶液でｐＨ８にした後、イオン交換クロマトグラフィー（ＡＧ１−Ｘ８  陰イオン交換樹脂(Bio-Rad)、展開溶媒：０.１Ｍ酢酸〜２Ｍ酢酸）で精製し、(1SR,2SR,3SR,5RS,6SR)−２−アミノ−３−フルオロビシクロ[3.1.0]ヘキサン−2,6−ジカルボン酸を２０ｍｇ得た。
1Ｈ−ＮＭＲ(TFA-d)δ(ppm)；2.49(1H,brs),2.59-3.06(4H,m),5.40(1H,dd,J=52Hz,5.3Hz)
ＭＳ(CI)ｍ／ｅ；２０４（Ｍ+＋１）
【００５５】
同様にして下記の化合物を合成した。
(1SR,2RS,3RS,5RS,6SR)−２−アミノ−３−フルオロビシクロ[3.1.0]ヘキサン−2,6−ジカルボン酸
1Ｈ−ＮＭＲ(TFA-d)δ(ppm)；2.33(1H,brs),2.54-2.89(4H,m),5.42-5,59(1H,m)
ＭＳ(CI)ｍ／ｅ；２０４（Ｍ+＋１）
【００５６】
製造例８
(1S,2S,3S,5R,6S)−２−アミノ−３−フルオロビシクロ[3.1.0]ヘキサン−2,6−ジカルボン酸の合成
（１）(1SR,2SR,3SR,5RS,6SR)エチル ２−スピロ−５´−ヒダントイン−３−フルオロビシクロ[3.1.0]ヘキサン−６−カルボキシレート２.２０ｇと２Ｍ水酸化ナトリウム１７ｍｌの混合物を室温で攪拌した。２時間後、濃塩酸を加えｐＨを１.０に調整した。生成した結晶を濾過により単離し、乾燥して(1SR,2SR,3SR,5RS,6SR)２−スピロ−５'−ヒダントイン−３−フルオロビシクロ[3.1.0]ヘキサン−６−カルボン酸を１.８１ｇ得た。
1Ｈ−ＮＭＲ(DMSO-d6)δ(ppm)；1.85-2.44(5H,m),4.80(1H,dd,J=52Hz,5.3Hz),8.44(1H,s),10.88(1H,s),12.30(1H,brs)
ＭＳ(FAB)(Nega)ｍ／ｅ；２２７（Ｍ+−１）
【００５７】
（２）(1SR,2SR,3SR,5RS,6SR)２−スピロ−５'−ヒダントイン−３−フルオロビシクロ[3.1.0]ヘキサン−６−カルボン酸１.８０ｇをアセトン：水＝８：５の混合溶液２６ｍｌ中５５℃で攪拌し、（Ｒ）−（＋）−1−フェニルエチルアミン０.９６ｇを加えた後、室温で１５時間 攪拌した。生成した結晶を濾過し、（Ｒ）−(＋)−1−フェニルエチルアミン塩１.３０ｇを得た。濾液は製造例９に使用した。
この塩１.２０ｇを水１５ｍｌに懸濁し、１Ｍ塩酸を用いてｐＨを１.０に調整し、室温で１４時間攪拌した。生成した結晶を濾過により単離し(1S,2S,3S,5R,6S)２−スピロ−５'−ヒダントイン−３−フルオロビシクロ[3.1.0]ヘキサン−６−カルボン酸０.６５ｇを得た。更に濾液はイオン交換クロマトグラフィー（ＡＧ５０Ｗ−Ｘ８  陽イオン交換樹脂(Bio-Rad)、展開溶媒：１Ｍ酢酸）で精製し、(1S,2S,3S,5R,6S)２−スピロ−５'−ヒダントイン−３−フルオロビシクロ[3.1.0]ヘキサン−６−カルボン酸を０.０６ｇ得た。
D［α］22＝３６.８４（ｃ＝０.２０,ＭｅＯＨ）
【００５８】
（３）(1S,2S,3S,5R,6S)２−スピロ−５'−ヒダントイン−３−フルオロビシクロ[3.1.0]ヘキサン−６−カルボン酸０.６０ｇを６０％硫酸水溶液１０ｍｌに溶解し、１４０℃で２日間攪拌した。反応溶液を室温まで冷却後、５Ｍ水酸化ナトリウム水溶液でｐＨ８にした後、イオン交換クロマトグラフィー（ＡＧ１−Ｘ８  陰イオン交換樹脂(Bio-Rad)、展開溶媒：０.１Ｍ酢酸〜２Ｍ酢酸）で精製し、(1S,2S,3S,5R,6S)−２−アミノ−３−フルオロビシクロ[3.1.0]ヘキサン−２,６−ジカルボン酸を０.３４ｇ得た。
D［α］22＝５８.６１（ｃ＝０.２０,１Ｍ ＨＣｌ）
【００５９】
製造例９
(1R,2R,3R,5S,6R)−２−アミノ−３−フルオロビシクロ[3.1.0]ヘキサン−２,６−ジカルボン酸の合成
（１）製造例８（２）の濾液を減圧下、濃縮した。得られた結晶１.３ｇと水１７ｍｌの混合物を１Ｍ塩酸を用いてｐＨを１.０に調整し、室温で攪拌した。４時間後、生成した結晶を濾取し０.８１ｇの結晶を得た。濾液はイオン交換クロマトグラフィー（ＡＧ５０Ｗ−Ｘ８  陽イオン交換樹脂(Bio-Rad)、展開溶媒：１Ｍ酢酸）で精製し、０.０８ｇの結晶を得た。
【００６０】
（２）前記２つの結晶を合わせ（０.８９ｇ）、アセトン：水=８：５の混合溶液１３ｍｌを加え、５５℃で攪拌した。この溶液に（Ｓ）−（−）−1−フェニルエチルアミン０.４７ｇを加えた後、室温で１５時間攪拌した。生成した結晶を濾過し、（Ｒ）−(−)−1−フェニルエチルアミン塩を１.１０ｇ得た。
この塩を製造例８の（２）と同様に１Ｍ塩酸を用いてフリー体とし、(1R,2R,3R,5S,6R)２−スピロ−５'−ヒダントイン−３−フルオロビシクロ[3.1.0]ヘキサン−６−カルボン酸０.５８ｇを得た。濾液をイオン交換クロマトグラフィー（ＡＧ５０Ｗ−Ｘ８  陽イオン交換樹脂(Bio-Rad)、展開溶媒：１Ｍ酢酸）で精製し、(1R,2R,3R,5S,6R)２−スピロ−５'−ヒダントイン−３−フルオロビシクロ[3.1.0]ヘキサン−６−カルボン酸を０.０７ｇ得た。
D［α］22＝−３７.５２（ｃ＝０.２０,ＭｅＯＨ）
【００６１】
（３）(1R,2R,3R,5S,6R)２−スピロ−５'−ヒダントイン−３−フルオロビシクロ[3.1.0]ヘキサン−６−カルボン酸０.５８ｇを製造例８の（３）と同様に反応し、(1R,2R,3R,5S,6R)−２−アミノ−３−フルオロビシクロ[3.1.0]ヘキサン−２,６−ジカルボン酸０.３７ｇを得た。
D［α］22＝−５９.３６（ｃ＝０.２０,１Ｍ ＨＣｌ）
【００６２】
試験例１［被検薬のcＡＭＰ蓄積に及ぼす効果］
代謝型グルタメ−ト受容体  ｍＧｌｕＲ２安定発現ＣＨＯ細胞を、１０％透析馬胎児血清含有ダルベッコ改変イ−グル培地［１％Proline 50units/ml,Penicillin 50μg/ml,Streptomycin 2mM,L-glutamine（用時添加）］を用いて１.２６×１０４cells/well/0.32cm2/150μlの割合で９６穴プレ−トに播種し、３７℃、５％ＣＯ2下で２日間培養を行った。その後、L-Glutamine free培地に交換し、４時間後に上清を吸引除去し、１５０μｌ  ＰＢＳ（＋）−ＩＢＭＸ（10mM PBS(-),1mM MgCl2,1mM CaCl2,1mM IBMX）を添加して、２０分間、３７℃、５％ＣＯ2存在下でインキュベ−ションを行った。再び上清を吸引除去し、６０μｌ １０−５Ｍ Forskolin、１０−１０〜１０−４Ｍの被検体を含有したＰＢＳ（＋）−ＩＢＭＸを添加して１５分間、３７℃で５％ＣＯ2存在下インキュベ−ションを行い、Forskolin刺激ｃＡＭＰ蓄積量に対するアゴニストの抑制効果の検討を行った（コントロ−ルは,Forskolinと化合物無添加の条件とした。（Tanabe et al,Neuron,8,169-179(1992)））。１００μｌの氷冷エタノールを添加して反応停止し、上清を別のプレ−トに全量回収した後、エバポレーターで常温乾固し、−２０℃で保存した。乾固したサンプルは、ｃＡＭＰ EIA kit（アマシャム社）を用いてｃＡＭＰ量を定量した。各ｃＡＭＰ量からコントロ−ルの値を差し引いた。１０−５Ｍ Forskolinで刺激を行ったときのｃＡＭＰ蓄積を５０％抑制する被検薬の濃度をＥＤ50値を求め、結果を表１に示した。
【００６３】
【表１】
0004783967.tif 000011
【００６４】
Ｃｏｍｐ.１：(1S,2S,3S,5R,6S)−２−アミノ−３−フルオロビシクロ[3.1.0]ヘキサン−2,6−ジカルボン酸
Ｃｏｍｐ.２：(1SR,2SR,3SR,5RS,6SR)−２−アミノ−３−フルオロビシクロ[3.1.0]ヘキサン−2,6−ジカルボン酸
ＬＹ３５４７４０：（＋）−(1S,2S,5R,6S)−２−アミノビシクロ[3.1.0]ヘキサン−2,6−ジカルボン酸
ＤＣＧIV：(2S,2'R,3'R)−２−（2',3'−ジカルボキシシクロプロピル）グリシン
(1S,3R)ＡＣＰＤ：(1S,3R)−１−アミノシクロペンタン−1,3−ジカルボン酸
Ｌ−ＣＣＧ−Ｉ：(2S,1'S,2'S)−２−（カルボキシシクロプロピル）グリシン。
【００６５】
試験例２［マウスのメタンフェタミン運動過多に及ぼす効果］
雄性ＩＣＲ系マウス（体重２３−３２ｇ、日本チャールスリバー）を１群１１〜１２匹用いた。動物は塩化ビニール製円筒透明測定ケージ（直径３０ｃｍ、高さ３０ｃｍ）に動物を入れ９０分間環境順化させた。動物に各薬物を経口投与３０分後にメタンフェタミンを１ｍｇ／ｋｇ腹腔内投与した。その１５分後に自動活動量測定装置（ＳＣＡＮＥＴ／ＳＶ−１０、東洋産業株式会社）を用いて３０分間の運動量を測定した。薬物は０.３％tween80−生理食塩水に懸濁した。溶媒投与群のカウント数と各用量のカウント数より抑制率を求め、ＥＤ50値を算出し、結果を表２に示した。また、統計処理は分散分析（ＡＮＯＶＡ）後、ダンネット検定を行った。
ＬＹ−３５４７４０は０.０１ｍｇ／ｋｇ経口投与群を除き、用量依存的にメタンフェタミン運動過多を抑制［Ｆ（４,５４）＝３.２４２,Ｐ＜０.０５］し、ＥＤ50値は０.８７ｍｇ／ｋｇであった。ＭＧＳ０００８も同様な作用が認められ［Ｆ（３,４３）＝３.３０６,Ｐ＜０.０５］、ＥＤ50値は０.０５ｍｇ／ｋｇとなり、ＬＹ−３７４７４０の１７.４倍の強度であった。
【００６６】
【表２】
0004783967.tif 000012
【００６７】
Ｎ：１群の動物数。*P<0.01 溶媒投与群との比較
Ｃｏｍｐ.１：(1S,2S,3S,5R,6S)−２−アミノ−３−フルオロビシクロ[3.1.0]ヘキサン−2,6−ジカルボン酸
ＬＹ３５４７４０：（＋）−(1S,2S,5R,6S)−２−アミノビシクロ[3.1.0]ヘキサン−2,6−ジカルボン酸