(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
竹のアルコール抽出物と、メシマコブの熱水抽出物の両者を、共に、有効成分として含有せしめたことを特徴とする抗腫瘍剤。
【請求項２】
前記竹のアルコール抽出物と前記メシマコブの熱水抽出物とが、重量比で、２：８〜８：２の割合において含有せしめられている請求項１に記載の抗腫瘍剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗腫瘍剤及びそれを含む健康食品に係り、特に、経口投与、腫瘍細胞への直接投与の何れにおいても、著しい抗腫瘍効果を示す抗腫瘍剤と、そのような抗腫瘍剤を含んで、優れた抗腫瘍作用を発揮する、人の健康を維持するための健康食品に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
従来から、サルノコシカケにて代表されるキノコ類には、腫瘍の他、糖尿病、高血圧、心臓病や肝臓病、更には、滋養強壮等の薬効があるとされて、漢方薬等として、広く用いられてきている。特に、その熱水抽出物は、経口摂取において、優れた抗腫瘍効果を示すことが明らかにされているが、腫瘍細胞に直接作用させた場合にあっては、その効果が低いことも認められている。
【０００３】
一方、本願出願人は、先に、特開２００３−１９９５３０において、成長した竹やその若芽である筍等の竹類を、アルコール溶液で抽出して得られる竹の抽出物が、優れた抗腫瘍作用を有することを、明らかにした。而して、そのような竹の抽出物を有効成分とする抗腫瘍剤は、腫瘍細胞に直接作用させた場合（腫瘍内投与）において、著しい抗腫瘍作用を示すものではあるが、その経口摂取の場合において、ある程度の抗腫瘍効果を示すものの、その効果は今一つ充分ではないことが、明らかとなったのである。
【０００４】
このように、従来から知られているサルノコシカケ等の熱水抽出物や竹の抽出物は、何れも、その抗腫瘍作用において、経口投与と腫瘍内投与の何れか一方において、その優れた効果を示すものであったのであり、その経口投与と腫瘍内投与の両方において、その優れた作用乃至は効果を発揮し得るものではなかったのである。
【０００５】
【特許文献１】特開２００３−１９９５３０
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
ここにおいて、本発明は、かかる事情を背景にして為されたものであって、その解決課題とするところは、経口投与及び腫瘍細胞への直接投与の何れにおいても著しい抗腫瘍効果を発揮し得る抗腫瘍剤、並びにそれを含む、人の健康の維持増進を補助する健康食品を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
そこで、本発明者等が、上記の課題を解決すべく、鋭意検討した結果、従来では単独にて使用されているサルノコシカケ乃至はキノコの熱水抽出物と、本願出願人が先に提案した竹の抽出物の作用に着目して、それら２種の抽出物を組み合わせ、共に、含有せしめることにより、抗腫瘍作用において、相乗的な向上効果が実現され得ると共に、その著しい抗腫瘍効果が、経口投与においても、また腫瘍細胞への直接投与においても、効果的に発揮され得ることが明らかとなったのである。
【０００８】
従って、本発明は、かかる知見に基づいて完成されたものであって、その要旨とするところは、竹のアルコール抽出物と、メシマコブの熱水抽出物の両者を、共に、有効成分として含有せしめたことを特徴とする抗腫瘍剤にある。
【００１０】
そして、本発明にあっては、前記竹のアルコール抽出物と前記メシマコブの熱水抽出物とは、有利には、２：８〜８：２の割合（重量比）において含有せしめられることとなる。
【００１１】
また、本発明は、上述の如き抗腫瘍剤、具体的には、それを構成する竹のアルコール抽出物とメシマコブの熱水抽出物の両者を、健康食品構成成分として含有していることを特徴とする健康食品をも、その対象としているのである。
【発明の効果】
【００１２】
このように、本発明に従う抗腫瘍剤にあっては、竹のアルコール抽出物と共に、メシマコブの熱水抽出物が、共に含有せしめられていることによって、それら両成分の相互作用に基づいて、優れた抗腫瘍効果を相乗的に発揮し得るものであり、また、経口投与及び腫瘍細胞への直接投与の何れの場合においても、著しい抗腫瘍効果を示し、以て、腫瘍の治療薬として有利に用いられ得るのである。
【００１３】
また、本発明に従って、そのような抗腫瘍剤の成分、具体的には、竹のアルコール抽出物及びメシマコブの熱水抽出物の両者を、共に含有せしめてなる健康食品にあっては、それを日常的に経口摂取するようにすれば、腫瘍（癌）の進行を効果的に防いだり、或いは、その病巣の改善を効果的に図り得ることとなる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１４】
ところで、かかる本発明において用いられる竹の抽出物は、一般に、よく知られている竹を原料として、それを、適当な抽出溶媒を用いて、通常の抽出操作手法に従って抽出して得られる抽出物であって、そこでは、原料としての竹は、例えば淡竹、真竹、孟宗竹、黒竹、矢竹、めだけ、バンブータリ（原産地：インドネシア）等が対象とされ、また、各種の竹を寄せ集めた雑竹であっても、何等差支えない。更に、成長した竹は勿論、その若芽である筍であってもよく、更に、使用する部位にあっても、稈、全草の何れであってもよいが、特に、真竹の稈の外周部が、特に好適に用いられることとなる。なお、竹は、筍を除いて、伐採後一年未満で、なるべく新鮮なものがよく、また筍の場合は、収穫後速やかに抽出処理するのが望ましい。但し、何れの場合も、新鮮なうちに冷凍保存すれば、長期間経過後も使用可能である。
【００１５】
また、そのような竹を抽出する抽出溶媒としては、アセトン、ヘプタン、ヘキサン、シクロヘキサン、四塩化炭素、クロロホルム、ジクロロメタン、酢酸メチル、酢酸エチル、酢酸ブチル、アセトニトリル、グリセリン、トルエン、ジエチルエーテル、石油エーテル、ｏ−キシレン、ｍ−キシレン、ｐ−キシレン、１−ブタノール、ｔ−ブタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、メタノール等、油溶性物質を抽出する有機溶媒が好適に用いられ、そして、そのような溶媒により抽出して得られる油溶性抽出物、中でも、アセトンを抽出溶媒として得られた抽出物（アセトン抽出物）が、特に腫瘍細胞の増殖を著しく抑制し得るものとして、有利に用いられることとなる。
【００１６】
なお、竹の抽出溶媒としては、上記で例示したものの他、本発明者等が先の出願において明らかにした、エタノールの如きアルコールやその水溶液、例えば、アルコール濃度が５０〜７０％程度のアルコール水溶液を用いることも可能であり、それによって得られる竹のアルコール抽出物も、本発明においては、使用可能である。
【００１７】
そして、かかる抽出溶媒を用いた竹の抽出操作は、従来の抽出操作と同様にして行われ得るものであって、例えば、先ず、原料となる竹を水洗いし、異物を除去した後、粉砕して、最終的に３〜５ｍｍ程度の大きさ、又は１０ｍｍ径程度のスクリーンを通過する程度の大きさとされる。次いで、そのような大きさの粉砕物を、上述の如き抽出溶媒に浸漬して、その抽出が行われるのであるが、その浸漬は、溶液中に充分に色が出るまで継続される。その期間は、常温下で、一般に、約６ヶ月程度が目安となるが、それは、抽出溶媒毎に異なり、また、加熱した場合にあっては、その抽出時間を短縮せしめることが出来、例えば、１〜２時間程度の浸漬・抽出時間において、充分な抽出物を得ることも可能であるが、また、これも、抽出溶媒毎に、抽出に有効な時間乃至は期間が、適宜に決定されることとなる。
【００１８】
次いで、この得られた抽出液は、遠心分離機にて固液分離され、その液相が、回収されて、濃縮された後、その濃縮した竹抽出物に、固形分で等量の賦形剤を加えて、フリーズドライ手法にて乾燥せしめられ、目的とする竹抽出物が、粉末として取り出されることとなるのである。
【００１９】
なお、ここで、そのような竹抽出物を粉末化するために用いられる賦形剤としては、公知の何れのものをも、適宜に選択して用いられ得るものであって、例えば、カオリン、タルク、軽質無水ケイ酸、小麦デンプン、米デンプン、結晶セルロース、粉末セルロース、デキストリン、乳糖、無水乳糖、馬鈴薯デンプン、リン酸水素カルシウム、無水リン酸水素カルシウム、リン酸二水素カルシウム、オキシセル（酸化セルロース）、果糖、カルメロース、キシリトール、Ｄ−ソルビトール、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、トウモロコシデンプン、白糖、精製白糖、ヒドロキシプロピルセルロース、ポビドン、Ｄ−マンニトール、アルファー化デンプン、クロスポビドン、結晶セルロース・カルメロースナトリウム、結晶セルロース（粒）、ヒドロキシプロピルスターチ、ブドウ糖水和物、部分アルファー化デンプン、粉末還元麦芽糖水飴等を例示することが出来る。
【００２０】
一方、本発明に従って、上述の如き竹抽出物と組み合わされて、共に用いられるサルノコシカケ乃至はキノコの熱水抽出物は、それら抽出対象とされるサルノコシカケやキノコに対して、通常の熱水による抽出操作を施して得られるものであって、キノコとしては、例えば、アガリスク、マイタケ、ハナビラタケ、ヤマブシタケ、シイタケ等の真菌に属する担子菌類及び子嚢菌類を主とする子実体を形成するものであり、菌糸体若しくは子実体又はその一部が用いられる。また、メシマコブ、レイシ、鹿角レイシ、コフキタケ、チャーガ、カワラタケ等、担子菌類の多孔菌科やキコブタケ科のうちの、質の硬い多年生のもの、所謂サルノコシカケも対象とされ、その外周部、内部、全体の何れをも原料として用いて、熱水抽出される。
【００２１】
なお、かかる熱水抽出操作は、具体的には、例えば、サルノコシカケやキノコを粉砕して、３〜５ｍｍ角程度の大きさとした後、水を加えて、１〜１０時間程度、加熱抽出することにより、抽出液が形成され、その後、遠心分離機にて固液分離した後、液相の抽出液が、濃縮される。その際、加熱抽出時間は、原料（サルノコシカケ等のキノコ）の種類や加熱温度、更には、目的とする抽出成分の濃度等に応じて、適宜に選定されることとなる。そして、前記した濃縮操作にて濃縮された抽出液には、更に、その固形分に等量の、前記例示の如き賦形剤が添加され、更に、噴霧乾燥手法等に従って粉末化されて、用いられることとなるのである。
【００２２】
そして、かくの如くして得られる竹抽出物（粉末）とサルノコシカケ乃至はキノコの熱水抽出物（粉末）とを混合することにより、本発明に従う抗腫瘍剤や、それを含む健康食品を得ることが出来るのであるが、その際、竹の抽出物とサルノコシカケ乃至はキノコの熱水抽出物の混合割合は、目的に応じて、適宜に決定され、特に限定されるものではないが、一般に、竹抽出物：サルノコシカケ／キノコ熱水抽出物は、重量比にて、２：８〜８：２の範囲内において決定されることとなる。
【００２３】
また、本発明にあっては、上記した竹の抽出物とサルノコシカケ乃至はキノコの熱水抽出物の両者を混合して得られる混合物を用いて、或いは、それら抽出物を順次配合せしめることによって、それら２種の抽出物が共存せしめられてなる抗腫瘍剤や健康食品が形成されることとなるのであるが、それら抗腫瘍剤や健康食品の形態としては、固形、粉末、顆粒、液体等の適宜の形態が、目的に応じて選択されることとなる。例えば、抗腫瘍剤を注射薬とする場合にあっては、液体形態において、従来からの注射薬と同様にして調製されることとなるのである。また、健康食品とする場合にあっては、竹の抽出物やサルノコシカケ乃至はキノコの熱水抽出物が、そのまま用いられる他、それら抽出物が、食品材料に添加、配合されたり、デンプンやビタミン等の他の成分と配合されたりして、目的とする形態の健康食品に仕上げられることとなる。
【００２４】
また、かかる本発明に従う抗腫瘍剤やそれを含む健康食品の服用量や摂取量としては、特別な限定はないものの、一般に、一日あたり、大人で２００〜６００ｍｇ／人程度である。
【実施例】
【００２５】
以下に、本発明の実施例を示し、本発明を更に具体的に明らかにすることとするが、本発明が、そのような実施例の記載によって、何等の制約をも受けるものでないことは、言うまでもないところである。また、本発明には、以下の実施例の他にも、更には、上記した具体的記述以外にも、本発明の趣旨を逸脱しない限りにおいて、当業者の知識に基づいて、種々なる変更、修正、改良等を加え得るものであることが、理解されるべきである。なお、以下の実施例において、特に断りのない限り、部や比、百分率は、何れも重量基準にて示されている。
【００２６】
実施例  １
真竹を水洗いして、異物を除去した後、粉砕し、最終的に３〜５ｍｍの粉砕物とした。そして、その粉砕物に１０倍量の６０％アルコール水溶液を加え、約６０℃の温度において２時間加熱することにより、抽出操作を、実施した、次いで、この加熱抽出操作の後、遠心分離機にて固液分離することにより、アルコール抽出液を得て、更にそれを濃縮した後、固形分等量の賦形剤（シクロデキストリン）を加えて、フリーズドライ手法にて乾燥せしめることにより、竹のアルコール抽出物の粉末を得た。
【００２７】
一方、メシマコブ（サルノコシカケ）を用い、それを粉砕することにより、５ｍｍ以下の大きさのメシマコブ粉砕物とした。そして、その粉砕物に対して、１０倍量の精製水を加え、１６時間浸漬保持した後、８０℃の温度で４時間抽出操作を実施し、その後、濾過濃縮した後、固形分等量の賦形剤（シクロデキストリン）を加えて、噴霧乾燥することにより、メシマコブ熱水抽出物の粉末を得た。
【００２８】
そして、本発明品の経口投与による抗腫瘍効果を確認するために、上記調製された竹アルコール抽出物及びメシマコブ熱水抽出物を用い、次の試料１〜４を、マウス飼育飼料として、調製した。なお、試料１は、竹アルコール抽出物配合飼料であって、マウスの通常飼料：ラボラトリーローデントダイエット（日本ＳＬＣ株式会社製品）に、竹アルコール抽出物を１％の割合において混合したものであり、試料２は、メシマコブ熱水抽出物配合飼料であって、上記のラボラトリーローデントダイエットにメシマコブ熱水抽出物を１％の割合で混合せしめたものである。また、試料３は、本発明品配合飼料であって、上記の竹アルコール抽出物及びメシマコブ熱水抽出物を１：１の割合で混合せしめ、その混合物（本発明品）を、上記した通常飼料（ラボラトリーローデントダイエット）に１％の割合において混合せしめたものである。なお、試料４は、コントロールであって、前記した抽出物が全く配合されていない通常飼料（ラボラトリーローデントダイエット）のみのものである。
【００２９】
そして、マウス実験においては、５週齢の雄性ＩＣＲマウス（日本ＳＬＣ株式会社）を用い、それを、１週間通常飼料（ラボラトリーローデントダイエット）にて予備飼育した後、その右下腹部皮下に腹水癌細胞（ sarcoma-180 ）の２．０×１０6 cells/head を移植して、飼育を行なった。なお、動物飼育室条件としては、実験期間を通じて、恒温（２４℃±１℃）で、明暗周期を１２時間（明周期：６時〜１８時）とした。
【００３０】
そして、かかる移植の２週間後、各群１０匹に群分けした。更に、この群分けの後、各群のマウスには、先に調製した試料１〜４のいずれかを、２８日間自由摂取させた。各マウスの腫瘍面積は、ノギスにより、２，３日毎に長径と短径を計測し、その積により求めた。
【００３１】
このようにして得られた試料１〜４の摂取による腫瘍面積の結果を、図１に示すが、それより明らかな如く、本発明品を配合した飼料（試料３）を与えた群は、通常食（試料４）を与えた場合は勿論のこと、竹アルコール抽出物やメシマコブ熱水抽出物を、それぞれ単独で配合した飼料（試料１及び試料２）を摂取した群よりも、その腫瘍面積の拡大が効果的に抑制されているのであり、このことよりしても、本発明品が、優れた抗腫瘍効果を発揮することが確認されるのである。
【００３２】
実施例  ２
実施例１において調製した竹抽出物粉末及びメシマコブ熱水抽出物粉末を用い、それぞれ精製水に溶解して、水溶液とすることにより、竹抽出物液（試料５）及びメシマコブ熱水抽出物液（試料６）を調製した。また、それら竹抽出物粉末及びメシマコブ熱水抽出物粉末を１：１の割合で混合して、本発明品とし、それを精製水に溶解して、水溶液とすることにより、本発明品の水溶液（試料７）を調製した。
【００３３】
そして、本発明品の腫瘍細胞に対する直接的な抗腫瘍効果を確認するために、上記で調製された試料５〜７を、それぞれ滅菌濾過し、最終濃度で各抽出物又はその混合物である本発明品の固形分が１００又は２００μｇ／ｍＬとなるように、ＥＭＥ・Ｍ培地（１０％ＦＢＳ）（大日本製薬株式会社）に添加した。次いで、９６穴マイクロプレートに、各検体入り培地と腹水癌細胞（ sarcoma-180 ）の２．５×１０3 cells/well ずつ分注して、炭酸ガス・インキュベータ内において、４８時間培養した。更に、かかる培養の後、セル・カウンティング・キット（Cell Counting Kit ）−８（株式会社同仁化学研究所製）を各ウェルに１０μＬずつ添加し、そして、炭酸ガス・インキュベータ内において、４時間呈色反応を行なった。この呈色反応の後、マイクロレートリーダを用い、４５０ｎｍの吸光度を測定して、それぞれの試料の各濃度における腫瘍細胞の増殖抑制率（％）を求めた。そして、その結果を、図２に示す。
【００３４】
かかる図２に示される各試料の腫瘍細胞増殖抑制率において、本発明品が２００μｇ／ｍＬ添加された試料７（２００μｇ／ｍＬ）、竹抽出物が１００μｇ／ｍＬ添加された試料５ａ（１００μｇ／ｍＬ）、メシマコブ熱水抽出物が１００μｇ／ｍＬ添加された試料６ａ（１００μｇ／ｍＬ）の抑制率は、それぞれ、９７．５％、９２．２％、５０．３％であり、それら試料５ａと試料６ａを混合した形態となる試料７ａとすることにより、腫瘍細胞の増殖に対する抑制効果が効果的に高められ得ることが、理解されるのである。また、かかる試料７（２００μｇ／ｍＬ）と竹抽出物を２００μｇ／ｍＬ配合した試料５ｂ（２００μｇ／ｍＬ）、メシマコブ熱水抽出物を２００μｇ／ｍＬ配合した試料６ｂ（２００μｇ／ｍＬ）を比較しても、それら竹抽出物とメシマコブ熱水抽出物を組み合わせて配合した本発明品を用いることによって、それら抽出物が有する抗腫瘍効果が相乗的に増強されていることも認めることが出来る。
【００３５】
そして、上記した実施例１及び実施例２の結果より、本発明品においては、サルノコシカケ乃至はキノコの抽出物と竹抽出物を混合することにより、経口摂取によって優れた抗腫瘍効果を発揮すると同時に、細胞に直接作用させても、強い抗腫瘍作用を有していることが明らかとなったのであり、従って、本発明品は、健康食品又は経口用抗腫瘍剤としてのみならず、注射薬等のように、直接患部に作用させることにより、癌の進行を阻止したり、或いは改善させ得る効果を奏し得るのである。
【図面の簡単な説明】
【００３６】
【図１】実施例１において得られた、試料１〜４が与えられたマウスの飼育日数と、腫瘍面積との関係を示すグラフである。
【図２】実施例２において得られた、各種試料における腫瘍細胞の増殖抑制率を示すグラフである。
【図１】
0004800687.tif 000002
【図２】
0004800687.tif 000003