(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
カンプトテシンの製造方法であって、次の（ａ）及び（ｂ）工程；
（ａ）  ９−メトキシカンプトテシン又は９−メトキシカンプトテシンを含有する天然素材を加水分解する工程、
（ｂ）  工程（ａ）で得られる９−ヒドロキシカンプトテシンを９−Ｏ−パーフルオロ低級アルキルスルホニル化又は９−Ｏ−フェニルテトラゾリル化し、次いで水素化分解することによりカンプトテシンへ変換する工程、
を含むことを特徴とする、前記方法。
【請求項２】
（ｂ）工程において、９−ヒドロキシカンプトテシンを９−Ｏ−トリフルオロメタンスルホニル化することを特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
９−ヒドロキシカンプトテシンが２０（Ｓ）体であり、カンプトテシンが２０（Ｓ）−カンプトテシンである、請求項１又は２に記載のカンプトテシンの製造方法。
【発明の詳細な説明】
技術分野
本発明は、抗腫瘍剤である塩酸イリノテカン及び各種カンプトテシン誘導体の製造原料として有用なカンプトテシンの新規な製造方法に関する。
背景技術
カンプトテシン（以下ＣＰＴと記載する）は、中国原産の喜樹（Ｃａｍｐｔｏｔｈｅｃａ  ａｃｕｍｉｎａｔａ，Ｎｙｓｓａｃｅａｅ）等の天然素材から単離される５環式アルカロイドであり、これを出発化合物として製造される抗腫瘍活性を有する種々の有用な半合成誘導体が、本発明者らによる探索研究によって提供されてきた（例えば特開平１−１８６８９２号、特開平１−１３１１７９号、特開平８−７３４６１号及び特開平１１−１４００８５号公報等を参照されたい）。
カンプトテシンから誘導される７−エチル−１０−ピペリジノピペリジノカルボニルオキシカンプトテシン（以下、「ＣＰＴ−１１」と記載することがある）は、高い抗腫瘍活性を有し、かつ毒性の少ない化合物であって、現在、抗腫瘍剤（一般名；塩酸イリノテカン）として広く販売されている。また、ＣＰＴ−１１の類縁体にも同様に抗腫瘍効果を有するものが多く知られている。
ところが、原材料である喜樹等の天然素材から得られるＣＰＴの量は極めてわずかであるため、有用な誘導体であるＣＰＴ−１１等の需要が高まるにつれて、植樹等の原材料調達手段を講じているにも拘わらず、ＣＰＴを充分量供給することが困難になるものと予想される。また全合成による製法も検討されているが、設備、収率及びコスト等の面で問題が多く、実用化までは至っていないのが現状である。
発明の開示
従って、本発明の課題は、塩酸イリノテカン及び各種カンプトテシン誘導体の出発化合物であるＣＰＴを安価かつ簡便に供給することにある。
本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意研究を行う中で、従来廃棄されていた喜樹等の天然素材に含有されているＣＰＴ類縁体に着目したところ、９−メトキシカンプトテシン（以下、「９−ＭＣ」と記載することがある）が、ＣＰＴ製造の副産物として意外にも相当量得られていることを究明した。さらにこれを有効利用すべく研究を続けた結果、９−ＭＣを出発物質としてＣＰＴを簡便にかつ効率よく製造し、もってＣＰＴを安定的に供給できる手段を見出し、本発明を完成するに至った。
すなわち、本発明は、カンプトテシンの製造方法であって、次の（ａ）及び（ｂ）工程；
（ａ）９−メトキシカンプトテシン又は９−メトキシカンプトテシンを含有する天然素材を加水分解する工程、
（ｂ）工程（ａ）で得られる９−ヒドロキシカンプトテシンを９−Ｏ−パーフルオロ低級アルキルスルホニル化又は９−Ｏ−フェニルテトラゾリル化し、次いで水素化分解することによりカンプトテシンへ変換する工程、
を含むことを特徴とする、前記方法に関する。
また本発明は、（ｂ）工程において、９−ヒドロキシカンプトテシンを９−Ｏ−トリフルオロメタンスルホニル化することを特徴とする、前記方法に関する。
さらにまた本発明は、９−ヒドロキシカンプトテシンが２０（Ｓ）体であり、カンプトテシンが２０（Ｓ）−カンプトテシンである、前記カンプトテシンの製造方法に関する。
本発明において、ＣＰＴの出発化合物となる９−ＭＣとしては、各種の天然素材等から単離、精製したもの、類似の化合物から化学的に変換したもの、又は９−ＭＣを含む天然素材そのものを使用することができる。９−ＭＣを含む天然素材としては、例えば喜樹、クサミズキ（Ｎｏｔｈａｐｏｄｙｔｅｓ  ｆｏｅｔｉｄａ）、Ｅｒｖａｔａｍｉａ  ｈｅｙｎｅａｎａ、サツマイナモリ（Ｏｐｈｉｏｒｒｈｉｚａ  ｊａｐｏｎｉｃａ）等が挙げられるが、とりわけクサミズキは９−ＭＣの含量が高いため、これを用いることが好ましい。これらの天然素材を使用する場合には、まず素材をそのままあるいは細断、破砕等の処理を施した後、メタノール、エタノール、アセトン、酢酸エチル、クロロホルム−メタノール混液、ジクロロメタン−メタノール混液等の有機溶媒で抽出する。  こうして得られる抽出液は、これを乾固し、そのまま用いてもよく、またカラムクロマトグラフ法、再結晶、再沈殿等の手段で適宜精製したものを用いてもよい。
本発明においては、まず９−ＭＣ又は９−ＭＣを含む天然素材を加水分解して、９−ヒドロキシカンプトテシン（以下、「９−ＨＣ」と記載することがある）に変換する。変換の方法としては、キノリン又はクロロホルム等中ヨードトリメチルシランで処理する方法、ジメチルホルムアミドを溶媒として用いエチルメルカプタン  ナトリウム、チオフェノキシド  カリウム、チオクレゾレート  ナトリウム等と加熱する方法、ジメチルスルホキシド中シアン化ナトリウムと加熱する方法、ジクロロメタン又は１，２−ジクロロエタンを溶媒として用い三塩化ホウ素、三臭化ホウ素又は三臭化ホウ素・ジメチルスルフィド錯体で処理する方法、ピリジン塩酸塩と加熱する方法、塩化アルミニウムで処理する方法、チオアニソール存在下トリフルオロメタンスルホン酸で処理する方法、５７％ヨウ化水素酸と加熱する方法（ここで酢酸中赤リンの存在下に反応を行ってもよい）、４７％臭化水素酸と加熱する方法（ここで酢酸、ジオキサン等の補助溶媒を用いてもよい）等が挙げられ、中でも効率よく、安価かつ簡便な４７％臭化水素酸と煮沸還流する方法を用いることが好ましい。
次いで、上記の反応にて得られた９−ＨＣをＣＰＴへと変換する。変換の方法としては、９−ＨＣをトリフレート（ＯＳＯ２ＣＦ３：ＯＴｆ）体へ導き、水素化分解する方法、ノナフレート（ＯＳＯ２Ｃ４Ｆ９−ｎ：ＯＮｆ）体へ導き、水素化分解する方法、１−フェニル−５−テトラゾリルオキシ（ＯＴｚ）体へ導き、水素化分解する方法等が挙げられる。
上記のいずれのＣＰＴ変換工程でもＣＰＴを得ることができるが、とりわけ、工程数が少なく、使用する試薬が安価であって、水素化分解に水素源として水素ガスを用いることなく安価なギ酸を用いて行うことができ、さらに通常用いられる反応装置で加熱攪拌できる、という簡便な操作でＣＰＴを製造できる点から、また各工程が収率よく進行する点から９−ＨＣを塩化トリフルオロメタンスルホニル、無水トリフルオロメタンスルホン酸又はＮ−フェニルトリフルオロメタンスルホンイミド等を用いて処理し、９−トリフルオロメタンスルホニルオキシカンプトテシン（以下９−ＯＴｆＣと記載する）に変換させ、更にパラジウム触媒を用い、トリエチルアミン又はｎ−ブチルアミン等の三級アミンの存在下ギ酸を水素源として水素化分解することにより９−ＯＴｆＣをＣＰＴへと変換することが好ましい。
発明を実施するための形態
以下に本発明による９−ＭＣを原料とするＣＰＴの製造方法の実施の形態について説明するが、本発明はこれにより限定されるものではない。
下図は９−ＭＣをＣＰＴへ変換するスキームである。
0004624633.tif 000002
９−ＭＣからＣＰＴへ変換するための好ましい実施態様は、次の３工程：
▲１▼  ９−ヒドロキシプトテシン（９−ＨＣ）の製造工程、
▲２▼  ９−トリフロオロメタンスルホニルオキシカンプトテシン（９−ＯＴｆＣ）の製造工程、
▲３▼  カンプトテシンの製造工程（９−ＯＴｆＣの水素化分解）
を含む。
さらに詳細に説明すると、具体的には
▲１▼においては、９−メトキシカンプトテシン（９−ＭＣ）を４７％臭化水素酸に懸濁し、減圧下に脱気し、アルゴンガス置換後攪拌しながら加熱することにより９−ＨＣが得られる。４７％臭化水素酸の使用量は、１ｇに対して１０ｍＬから１００ｍＬの範囲であり、好ましくは１５ｍＬから２５ｍＬの範囲で使用できる。加熱の温度は、１００℃から１８０℃の範囲であり、好ましくは１６０℃から１８０℃の範囲である。また反応時間については、１時間から２４時間の範囲であり、好ましくは３時間から４時間加熱することが望ましい。
原料の９−ＭＣは、特に精製品でなくても用いることができる。
またこの工程は、芳香族メトキシ基の加水分解に一般的に使用される他の公知の方法を用いることもできる。
▲２▼においては、上記９−ＨＣにＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、ジクロロメタン、クロロホルム等を溶媒として用い、塩基の存在下Ｎ−フェニルトリフルオロメタンスルホンイミド、塩化トリフルオロメタンスルホニル又は無水トリフルオロメタンスルホン酸を１．０当量から５．０当量を加え、氷冷から１００℃で０．５時間から３時間反応させることにより、９−ＯＴｆＣを得ることができる。この反応は、好ましくはアルゴンガス等の不活性ガス雰囲気下に行われる。原料の９−ＨＣは、単離してこのまま用いてもよく、カラムクロマトグラフ法、再結晶又は再沈殿等の手段で適宜精製したものを用いてもよい。
塩基としては、トリエチルアミン、ｎ−ブチルアミン、ピリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン等の有機塩基類、又は炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸水素ナトリウム及び炭酸水素カリウム等のアルカリ金属塩類が挙げられる。好ましくは、溶媒としてＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを使用し、３．０当量から７．０当量のトリエチルアミンの存在下Ｎ−フェニルトリフルオロメタンスルホンイミドを１．５当量から３．５当量用い、５０℃から６０℃で０．５から１時間加熱することによりほぼ定量的に９−ＯＴｆＣを得ることができる。また、トリフルオロメタンスルホン酸エステル化剤として、塩化トリフルオロメタンスルホニルや無水トリフルオロメタンスルホン酸を用いる場合には、溶媒はジクロロメタン、クロロホルム等が望ましい。
▲３▼においては、９−ＯＴｆＣをＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを溶媒とし、塩基の存在下パラジウム触媒を用い、水素源としてギ酸を加え、アルゴンガス雰囲気下に４０℃−８０℃で１時間から１８時間加熱して攪拌し、水素化分解することによりＣＰＴが得られる。この場合、モレキュラシーブ３Å（ＭＳ３Å）を添加することにより反応が促進される。
塩基としては、例えばトリエチルアミン又はｎ−トリブチルアミン等の三級アミンが挙げられ、３から２０当量の範囲で用いることができる。また、ギ酸は２から１０当量の範囲で用いることができる。パラジウム触媒としては、例えば酢酸パラジウム（Ｐｄ（ＯＡｃ）２）−トリフェニルホスフィン（Ｐｈ３Ｐ）、酢酸パラジウム−１、１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン（ＤＰＰＦ）、酢酸パラジウム−トリｎ−ブチルホスフィン（ｎ−Ｂｕ３Ｐ）、テトラキストリフェニルホスフィンパラジウム（Ｐｄ（ＰＰｈ３）４）、ジクロロビストリフェニルホスフィンパラジウム（ＰｄＣｌ２（ＰＰｈ３）２）等が挙げられる。パラジウム触媒は、４から５０モル％の範囲で用いることができる。酢酸パラジウムの場合、ホスフィンリガンドを８から１００モル％の範囲で添加する。またパラジウム触媒存在下、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを溶媒とし、塩基として炭酸カリウム、水素源としてボラン・ジメチルアミン錯体を用いて行うこともできる。
好ましくはパラジウム触媒として、酢酸パラジウムを３から６モル％、トリフェニルホスフィンを６から１２モル％又はジクロロビストリフェニルホスフィンパラジウムを５から１５モル％用い、塩基としてトリエチルアミンを３から１４当量、ギ酸を１．５から７当量を加え、アルゴンガス等の不活性ガス雰囲気下で６０℃付近で２から６時間反応させることが望ましい。
この水素化分解の工程は、トリフレート化反応後９−ＯＴｆＣを単離することなく用いてもよく、またカラムクロマトグラフ法又は再結晶等の手段によって適宜精製したものを用いてもよい。
なお、本発明で使用される出発化合物、中間体化合物及び得られる目的化合物には、その立体異性体、光学異性体、互変異性体等も含まれる。
以下、実施例により本発明を更に詳細に説明するが、これによって本発明が何ら限定されるものではない。
（実施例１）  ９−ヒドロキシカンプトテシン（９−ＨＣ）の製造：
0004624633.tif 000003
９−メトキシカンプトテシン（９−ＭＣ；１０．０ｇ，２６．４３ｍｍｏｌ）を４７％臭化水素酸（２００ｍＬ）に懸濁し、減圧下に脱気し、アルゴンガス雰囲気下で３．５時間煮沸還流した。反応混合物を室温に冷却し、攪拌下に水（９００ｍＬ）に分割して注ぎ、析出物をセライトパッド上にろ取し、水洗した。ろ取物を２０％メタノール含有クロロホルムに溶解し、活性炭（２０ｇ）及び無水硫酸ナトリウムを加え１時間攪拌し、ろ過後、減圧下に濃縮乾固して粗生成物を得た。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフ法（８％メタノール含有クロロホルム）により精製して、茶褐色固体として９−ヒドロキシカンプトテシン（９−ＨＣ）；ｍｐ  ２３１−２３７℃（分解）（６．４７ｇ，収率６７％）を得た。
以下にＮＭＲスペクトル、ＩＲスペクトル及びＭＳスペクトルを示す。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：０．８７（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，２０−ＣＨ２ＣＨ３），１．７８−１．９８（２Ｈ，ｍ，２０−ＣＨ２ＣＨ３），５．２６（２Ｈ，ｓ），５．４２（２Ｈ，ｓ），６．７３−７．４６（１Ｈ，ｂｒ，Ｄ２Ｏ  ｅｘｃｈａｎｇａｂｌｅ），７．０３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ），７．３２（１Ｈ，ｓ，１４−Ｈ），７．５２−７．７０（２Ｈ，ｍ），７．８３（１Ｈ，ｓ，７−Ｈ），１０．５０−１０．９２（１Ｈ，ｂｒ，Ｄ２Ｏ  ｅｘｃｈａｎｇａｂｌｅ）
ＩＲ（ＫＢｒ）：３３９０，３１２１，１７４９，１６５７，１６１６，１５９１ｃｍ−１．
ＥＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ：３６４（Ｍ＋）．
（実施例２）  ９−トリフルオロメタンスルホニルオキシカンプトテシン（９−ＯＴｆＣ）の製造：
0004624633.tif 000004
９−ヒドロキシカンプトテシン（９−ＨＣ；３００ｍｇ，０．８２ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（８ｍＬ）溶液に、アルゴンガス雰囲気下室温でトリエチルアミン（０．３４ｍＬ，２．４７ｍｍｏｌ，３．０ｅｑ）及びＮ−フェニルトリフルオロメタンスルホンイミド（４４２ｍｇ，１．２４ｍｍｏｌ，１．５ｅｑ）を加え、０．５時間撹拌した。薄層クロマトグラフ法（クロロホルム：メタノール＝２０：１）により原料の消失を確認し、溶媒を減圧下に留去した。残留物にクロロホルム（２００ｍＬ）及び水（１００ｍＬ）を加え、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を減圧下に留去した。残留物をクロロホルム（５ｍＬ）に溶解し、これにｎ−ヘキサン（５０ｍＬ）を加え、析出物を吸引ろ取し、減圧下に乾燥して淡黄色固体として９−トリフルオロメタンスルホニルオキシカンプトテシン（９−ＯＴｆＣ）；ｍｐ  ２６３−２６６℃（分解）（３５０ｍｇ，収率８６％）を得た。
以下にＮＭＲスペクトル、ＩＲスペクトル及びＭＳスペクトルを示す。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．０５（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ），１．８３−１．９６（２Ｈ，ｍ），３．７７（１Ｈ，ｓ），５．３２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１７Ｈｚ），５．３８（２Ｈ，ｓ），５．７６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１７Ｈｚ），７．６５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ），７．７１（１Ｈ，ｓ），７．８７（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ），８．３０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ），８．６２（１Ｈ，ｓ）
ＩＲ（ＫＢｒ）：３３８７，１７５１，１６６３，１６２６，１６０７ｃｍ−１．
ＥＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ：４９６（Ｍ＋）．
（実施例３）  カンプトテシン（ＣＰＴ）の製造（９−ＯＴｆＣの水素化分解反応）：
0004624633.tif 000005
９−トリフルオロメタンスルホニルオキシカンプトテシン（９−ＯＴｆＣ；１００ｍｇ，０．２０ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）溶液に、室温で攪拌しながらトリエチルアミン（６１ｍｇ，０．６０６ｍｍｏｌ，３．０ｅｑ）、酢酸パラジウム（２ｍｇ，０．００８１ｍｍｏｌ，４ｍｏｌ％）、トリフェニルホスフィン（４ｍｇ，０．０１６２ｍｍｏｌ，８ｍｏｌ％）及びギ酸（１９ｍｇ，０．４０４ｍｍｏｌ，２．０ｅｑ）を加え、アルゴンガス雰囲気下６０℃で１時間撹拌した。薄層クロマトグラフ法（クロロホルム：メタノール＝５０：１）により原料の消失を確認し、溶媒を減圧下に留去した。残留物にクロロホルム（５ｍＬ）及びｎ−ヘキサン（２００ｍＬ）を加え、生じた沈殿物を吸引ろ取し、黄色固体としてカンプトテシン（ＣＰＴ）（４４ｍｇ，収率６３％）を得た。
以下にＮＭＲスペクトルを示す。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：０．８８（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ），１．８３−１．９０（２Ｈ，ｍ），５．２９（２Ｈ，ｓ），５．４２（２Ｈ，ｓ），６．５３（１Ｈ，ｓ），７．３５（１Ｈ，ｓ），７．６９−７．７３（１Ｈ，ｍ），７．８４−７．８８（１Ｈ，ｍ），８．１２−８．１８（２Ｈ，ｍ），８．６９（１Ｈ，ｓ）
（実施例４）  ９−ＨＣからカンプトテシンへのワンポット反応による製造：
９−ヒドロキシカンプトテシン（９−ＨＣ；３００ｍｇ，０．８２ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１５ｍＬ）溶液に、トリエチルアミン（０．６８ｍｌ，４．９２ｍｍｏｌ，６．０ｅｑ．）及びＮ−フェニルトリフルオロメタンスルホンイミド（８７９ｍｇ，２．４６ｍｍｏｌ，３．０ｅｑ．）を加え、アルゴンガス雰囲気下６０℃で０．５時間撹拌した。薄層クロマトグラフ法（クロロホルム：メタノール＝２０：１）により原料の消失を確認した後、この反応溶液に、トリエチルアミン（１．１４ｍＬ，８．２０ｍｍｏｌ，１０．０ｅｑ．）、ジクロロビストリフェニルホスフィンパラジウム（５８ｍｇ，０．０８ｍｍｏｌ，１０ｍｏｌ％）、ギ酸（１８９ｍｇ，４．１０ｍｍｏｌ，５．０ｅｑ．）を加え、６０℃で３時間加熱した。薄層クロマトグラフ法（クロロホルム：メタノール＝５０：１）により９−ＯＴｆＣの消失を確認し、反応混合物を放冷後、溶媒を減圧下で留去した。残留物にクロロホルム（５ｍＬ）及びｎ−ヘキサン（２００ｍＬ）を加え、生じた沈殿物を吸引ろ取し、黄色固体としてカンプトテシン（２０９ｍｇ，収率７３％）を得た。
（実施例５）  ９−ノナフルオロブタンスルホニルオキシカンプトテシン（９−ＯＮｆＣ）の製造：
0004624633.tif 000006
９−ヒドロキシカンプトテシン（９−ＨＣ；１８０ｍｇ，０．４９ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１５ｍＬ）溶液に、アルゴンガス雰囲気下室温で水素化ナトリウム（鉱油中６０％分散）（３０ｍｇ，０．７４ｍｍｏｌ，１．５ｅｑ）及びノナフルオロブタンスルホニルフルオリド（２４３ｍｇ，０．７４ｍｍｏｌ，１．５ｅｑ）を加え、２時間攪拌した。反応液を撹拌下に精製水（２００ｍＬ）中に注ぎ、この溶液にクロロホルム（２００ｍＬ）及び０．１Ｎ塩酸（５０ｍＬ）を加えた。生じた沈殿物をろ去し、ろ液の有機層を分取し、精製水及び飽和食塩水（各１００ｍＬ）により洗浄、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を減圧下に留去した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフ法（１％メタノール含有クロロホルム）により精製して、黄色固体として９−ノナフルオロブタンスルホニルオキシカンプトテシン（９−ＯＮｆＣ）；ｍｐ  ２６０−２６２℃（分解）（８５ｍｇ，  収率２７％）を得た。
以下にＮＭＲスペクトル、ＩＲスペクトル及びＭＳスペクトルを示す。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．０５（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ），１．８５−１．９６（２Ｈ，ｍ），３．７４（１Ｈ，ｓ），５．３２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１７Ｈｚ），５．３８（２Ｈ，ｓ），５．７７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１７Ｈｚ），７．６７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ），７．７０（１Ｈ，ｓ），７．８５−７．８９（１Ｈ，ｍ），８．３０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ），８．６３（１Ｈ，ｓ）．ＩＲ（ＫＢｒ）：３３９６，１７５５，１６６３，１６０３ｃｍ−１．
ＥＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ：６４６（Ｍ＋）．
（実施例６）  カンプトテシン（ＣＰＴ）の製造（９−ＯＮｆＣの水素化分解反応）：
0004624633.tif 000007
９−ノナフルオロブタンスルホニルオキシカンプトテシン（９−ＯＮｆＣ；５０ｍｇ，０．０７７ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３ｍＬ）溶液に、トリエチルアミン（１０７μＬ，０．７７ｍｍｏｌ，１０．０ｅｑ）、ジクロロビストリフェニルホスフィンパラジウム（５ｍｇ，０．００７７ｍｍｏｌ，１０ｍｏｌ％）及びギ酸（１５μＬ，０．３９ｍｍｏｌ，５．０ｅｑ）を順次加え、アルゴンガス雰囲気下６０℃で０．５時間攪拌した。溶媒を減圧下に留去し、残留物にアセトン（２０ｍＬ）を加え、生じた沈殿物を吸引ろ取し、カンプトテシン（ＣＰＴ）（２５ｍｇ，収率９３％）を得た。
（実施例７）  ９−（１−フェニル−５−テトラゾリルオキシ）カンプトテシン（９−ＯＴｚＣ）の製造：
0004624633.tif 000008
９−ヒドロキシカンプトテシン（９−ＨＣ；５６０ｍｇ，１．５４ｍｍｏｌ）の乾燥Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５０ｍＬ）溶液に、アルゴンガス雰囲気下室温でｔｅｒｔ−ブトキシカリウム（２０８ｍｇ，１．８５ｍｍｏｌ，１．２ｅｑ）を加え、１０分間撹拌した後、この溶液に５−クロロ−１−フェニルテトラゾール（３３４ｍｇ，１．８５ｍｍｏｌ，１．２ｅｑ）を加え、６時間攪拌した。溶媒を減圧下に留去し、残留物をクロロホルムで抽出し、不溶物をろ去した。抽出液を減圧下に乾固し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフ法（１％メタノール含有酢酸エチル）により精製して、黄色固体として９−（１−フェニル−５−テトラゾリルオキシ）カンプトテシン（９−ＯＴｚＣ）；ｍｐ  １６９−１７５℃（分解）（３７５ｍｇ，収率４８％）を得た。
以下にＮＭＲスペクトル、ＩＲスペクトル及びＭＳスペクトルを示す。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．０２（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ），１．７８−１．９７（２Ｈ，ｍ），３．８２（１Ｈ，ｂｒ−ｓ），５．２２（２Ｈ，ｂｒ−ｓ），５．２９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１６Ｈｚ），５．７２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１６Ｈｚ），７．５５−７．７５（４Ｈ，ｍ），７．８２−７．９３（４Ｈ，ｍ），８．１５−８．２４（１Ｈ，ｍ），８．４５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１Ｈｚ）．
ＩＲ（ＫＢｒ）：３４２０，１７５１，１６５９，１５９７，１５３９ｃｍ−１．
ＥＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ：５０８（Ｍ＋）．
（実施例８）  カンプトテシン（ＣＰＴ）の製造（９−ＯＴｚＣの水素化分解反応）：
0004624633.tif 000009
９−（１−フェニル−５−テトラゾリルオキシ）カンプトテシン（９−ＯＴｚＣ；１００ｍｇ，０．３９ｍｍｏｌ）のジオキサン−エタノール（１：１）（２０ｍＬ）溶液に、１０％パラジウム／炭素（１５ｍｇ）を加え、水素ガス雰囲気下４０℃付近で２４時間激しく攪拌した。触媒をろ去し、減圧下に乾固し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフ法（２％メタノール含有クロロホルム）により精製して、カンプトテシン（２０ｍｇ，収率２９％）を得た。