(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
１つ以上の飼料成分および／または材料と、微生物由来のトリグリセリド形のアラキドン酸（ＡＲＡ）を含み、ホスホリピド形のＡＲＡを実質的に含まない水産飼料組成物であって、ＡＲＡを生産するか、またはその生産能を有する微生物を実質的に含まず、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）およびエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）を含む、組成物。
【請求項２】
ＡＲＡが真菌または藻類が産生した、またはそれらから由来するものである請求項１記載の組成物。
【請求項３】
真菌がムコラーレス（Mucorales）目のものである請求項２記載の組成物。
【請求項４】
真菌がモルチエレラ（Mortierella）、フィコマイセス（Phycomyces）、バラケスラ（Blakeslea）またはアスペルギルス（Aspergillus）属のものである請求項３記載の組成物。
【請求項５】
真菌がモルチエレラ・アルピナ（Mortierella alpina）種である請求項２ないし４のいずれか１項記載の組成物。
【請求項６】
ＡＲＡが油として存在する請求項１ないし５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項７】
油中のＡＲＡ含量が少なくとも２０％である請求項６記載の組成物。
【請求項８】
ＡＲＳを含む油を水中油型エマルジョンとして処方する請求項６または７記載の組成物。
【請求項９】
「生き」餌組成物であり、食用水産生物を含む請求項１ないし８のいずれか１項記載の組成物。
【請求項１０】
活餌として存在する食用水産生物、または組成物を食べさせる水産生物のいずれかが、幼生、ワムシ類またはノープリウスである請求項９記載の組成物。
【請求項１１】
生物がクルスタセア（Crustacea）亜門またはロチフェラ（Rotifera）門のものである請求項１０記載の組成物。
【請求項１２】
ＡＲＡが活餌中の食用水産生物中に存在する請求項１０または１１記載の組成物。
【請求項１３】
微生物由来のトリグリセリド形のアラキドン酸（ＡＲＡ）を１つ以上の飼料成分および／または材料と混合することを特徴とする水産飼料組成物の製造法であって、該組成物がＤＨＡおよびＥＰＡを含むところの方法。
【請求項１４】
請求項１ないし１２のいずれか１項に記載の飼料組成物の、水産生物の生育および／または色素形成促進のための使用。
【請求項１５】
水産生物に請求項１ないし１２のいずれか１項記載の水産飼料組成物を与えることを特徴とする水産生物の生育および／または色素形成促進方法。
【請求項１６】
水産生物に請求項１ないし１２のいずれか１項記載の飼料組成物を与えることを特徴とする水産生物への給餌方法。
【請求項１７】
水産生物が、コペポーダ（Copepoda）またはセファロポーダ（Sephalopoda）綱、モルスカ（Mollusca）門、クルスタセア（Crustacea）亜門、リーンダー（Leander）亜門またはクランゴン（Crangon）亜門のものである請求項１５または１６記載の方法。
【請求項１８】
生物が、イガイ、カキ、イカ、コウイカ、タコ、ザリガニ、エビ、小エビ、ニシン、ヒラメ、オヒョウ、サケ、マス、ブリーム、シラビラメ、バス、カレイ、チャー、ロブスターまたはハマグリである請求項１５ないし１７のいずれか１項記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
発明の分野
本発明は微生物由来のアラキドン酸（ＡＲＡ）の水産飼料組成物における使用、水棲（例、海洋）動物への給餌および水産養殖における使用に関する。該ＡＲＡは単細胞生物から誘導でき、トリグリセリドの形態でもよい。
【０００２】
背景技術
アラキドン酸（ＡＲＡ）は、長鎖ポリ不飽和脂肪酸類（ＬＣ−ＰＵＦＡ’ｓ）の１つである。これは、化学的に、シス−５，８，１１，１４エイコサテトラエン酸（２０：４）であり、ＬＣ−ＰＵＦＡ’ｓの（ｎ−６）ファミリーに属する。
アラキドン酸は、プロスタグランジン類、トロンボキサン類およびロイコトリエン類を含む群であるエイコサノイド類としてまとめて知られる広範な生物学的活性化合物の主な前駆体（魚類およびより高等な陸上脊椎動物における）である。魚介類および、ネコのような種々の陸上動物は、Δ−５デサチュラーゼ作用を欠き、脂肪酸１８：2（ｎ−６）（リノール酸）をＡＲＡに変換することができない。アラキドン酸は、エイコサノイド類を産生するのに必須であり、これらの動物にとっては必須脂肪酸であって、彼等の食事中に与えなければならない。
ＥＰＡの相対的過剰がアラキドン酸からのエイコサノイド類の産生を妨害しうるので、彼等の食事におけるエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）｛２０：５（ｎ−３）｝：ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）｛２２：６（ｎ−３）｝：アラキドン酸｛２０：４（ｎ−６）｝の比率が重要となりうる。魚介類の通常の飼料は、魚油起源のアラキドン酸の種々の量を含有している。公知の魚油のアラキドン酸含量は変動するが、通常、比較的低く、存在する全脂肪酸の約１％である（Sargent, J.R., McEvoy, L.A.およびBell, J.G.: Aquaculture, 155 (1997), p. 117-127）。
魚類幼生（larvae）の生育能力は、しばしば、食事の栄養成分によって大部分が決定される。同様な供給源でもＬＣ−ＰＵＦＡレベルは非常に変動し、存在するアラキドン酸の実質的な部分が原料の殺菌工程で破壊されるので、魚油、動物のあら等のような利用できる原料を用いてエイコサペンタエン酸：ドコサヘキサエン酸：アラキドン酸の所望の比率を得ることが困難である。
【０００３】
本発明の１つの目的は、再現性ある品質のアラキドン酸供給源を提供し、魚類幼生や、小エビ（shrimp）用の飼料（例、活餌）における十分なアラキドン酸レベルと、これらの動物にとってアラキドン酸：エイコサペンタエン酸：ドコサヘキサエン酸の適性な比率を見出すことを、水産養殖工業に可能とすることである。ほぼ全ての水産養殖（mariculture）生産システムが活餌、とりわけ、他の活餌も存在するが、ワムシ類（Brachinous plicatilis）およびブラインシュリンプ（Artemia）のノープリウス（nauplii）に依存している。
活餌を魚油由来のエイコサペンタエン酸およびドコサヘキサエン酸で強化することが報告されている（上記Sargent et al.）。彼等はまた、多量のドコサヘキサエン酸を含有する藻類および真菌類の凍結乾燥または噴霧乾燥細胞を活餌の強化に使用する可能性を記載している。
Sargentらは、アラキドン酸を示唆しているが、ホスホリピドの形である。アラキドン酸のホスホリピド類は、魚油中に存在するアラアキドン酸の形態であるので、カレイおよび小エビの活餌における天然供給源である。アラキドン酸のホスホリピドは（遊離のアラキドン酸と比較して）、酸化を受けにくく、水産養殖工業にとって好ましい。
ＷＯ−Ａ−９０／０７２８３（サントリー）は、ｎ−３脂肪酸（例、ＥＰＡ、ＤＨＡ）またはそのエステル類を含む真菌細胞を含有する魚介類の飼料に言及している。しかし、やはり、これらもしばしばＡＲＡが低く、さらに、ＡＲＡはしばしばホスホリピドとして存在する。
しかしながら、微生物由来ＡＲＡを用いることにより、水産動物内で非常に高いＡＲＡ含量を達成できることが判明した。単細胞成分から由来するＡＲＡを含有する飼料を水産動物に与えると、ＡＲＡの強化が著しく増強されることを見出した。
【０００４】
発明の開示
すなわち、本発明の第１の態様により、１つ以上の（水産）飼料成分および／または材料と、微生物由来のアラキドン酸（ＡＲＡ）を含む水産飼料組成物を提供される。かくして、このＡＲＡは、微生物のような単細胞生物から由来でき、これにより、魚油（または水産）供給源を排除するものである。通常、微生物由来ＡＲＡはトリグリセリド形であり、本発明はまた、トリグリセリド形のＡＲＡを含む水産飼料組成物に関する。
好ましくは、飼料は（実質的に）ホスホリピド形のＡＲＡを含まない。すなわち、本発明は、水産供給源（例、魚油）のＡＲＡ形であるホスホリピドＡＲＡの使用を避けることができる。このように天然供給源とは異なる、換言すれば通常その生物の摂取しない形態のＡＲＡ形を水産動物に与えることは、直観に反しているように見える。にもかかわらず、本出願人はこれにより以外な利益がもたらされることを見出した。
該ＡＲＡは、通常、油として、または油中に存在する。すなわち、この油を、微生物供給源からのような単細胞生物から誘導または産生させることができる。この油は、少なくとも１０％、例えば、少なくとも２０％、好ましくは少なくとも３０％、有利には少なくとも３５％、最適には少なくとも４０％（脂肪酸の総量に基づいて）のＡＲＡを含むことができる。この油は、少なくとも２５０ｇ／ｋｇ油、好ましくは少なくとも３００ｇ／ｋｇ油、最適には少なくとも３５０ｇ／ｋｇ油のＡＲＡ含量を有しうる。この油は、好適には最少トリグリセリド含量が９０％、少なくとも９５％、最適には少なくとも９７％である。存在するＡＲＡのうち、好ましくは少なくとも８５％、例えば、少なくとも９０％、最適には少なくとも９５％がトリグリセリドの形態である。
【０００５】
好ましくは、ＡＲＡは、例えば、ＡＲＡを産生した微生物細胞のような細胞の内部にそのまま存在することはない。すなわち、本発明の水産飼料は、ＡＲＡを生産した単細胞生物または微生物を（実質的に）含まないものとすることができる。これは、飼料組成物の処方を容易にするのみならず、驚くべきことに、ＡＲＡは、それを産生した細胞から抽出した方がより安定であることが判明した。
ＡＲＡを水産飼料に使用することは示唆されているが、通常、水産供給源からのホスホリピド形のＡＲＡを使用する傾向にある。これは、ホスホリピド形が水産動物にとって天然由来のものであるのみならず、酸化を受けにくいからである。しかしながら、この先入観にもかかわらず、本出願人は、微生物由来ＡＲＡ（またはトリグリセリド形態のＡＲＡ）がＡＲＡのホスホリピド形よりも利点を提供できることを見出した。特に、本発明の飼料組成物を与えた水産生物によるＡＲＡのより高い摂取および使用がある。さらに、微生物ＡＲＡの高い品質により、酸化の問題も克服または軽減できる。
微生物ＡＲＡのさらなる利点は、油が、例えば、魚油よりもＡＲＡ含量の高いことであり、このことはより少ない微生物油を用いて同じ量のＡＲＡをデリバリーできることを意味する。
【０００６】
ＡＲＡが由来する、または産生される微生物（または単細胞）供給源は、好適には、例えば、真菌類または藻類のような繊維状の微生物である。好ましい真菌は、ムコラーレス（Mucorales）目のものである。例えば、真菌類は、モルチエレラ（Mortierella)、フィコマイセス（Phycomyces)、バルケスラ（Blakeslea）またはアスペルギルス（Aspergillus）属のものである。例えば、好ましい真菌類は、モルチエレラ・アルピナ（Mortierella alpina）、バスケスラ・トリスポラ（Blaskeslae trispora）およびアスペルギルス・テレウス（Aspergillus terreus）種である。
好ましい藻類は、渦鞭毛虫類および／またはクリプテコディニウム（Crypthecodinium）属に属するものである。好ましい藻類は、クリプテコディニウム・コーニイ（Crypthecodinium chonii）種である。
これらのＡＲＡ供給源は、ＰＵＦＡ含量が種類および用いた加工技術によって変動しうる水産供給源とは異なり、予測できる品質のＡＲＡを産生する。
ＡＲＡは好ましくは、発酵により微生物（または単細胞生物）供給源から誘導または産生される。微生物は（大規模）ファーメンター中で増殖できる。発酵は、資化できる炭素源（例えば、グルコースまたはマルトデキストリン）および適当な窒素源（例えば、硫酸アンモニウムからのようなアンモニウムイオンまたは酵母エキス）を含む水性組成物中に微生物が存在する場合に起こる。
発酵の間または後に、例えば、水溶液のような、微生物と培地を含む発酵「ブロス」を得る。ついで、これらを分離（例、濾過、遠心分離または他の固−液分離技術により）して水溶液（例、盧液の形態で）および微生物（バイオマスと称する）を得る。ついで、ＡＲＡ（および、要すれば、他のＰＵＦＡｓ）をバイオマスから抽出および／または単離できる。これは、例えば、非極性溶媒またはＡＲＡを溶解できる他の適当な溶媒を使用して行なうことができる。特に、これはヘキサンのようなＣ3-8アルカンとすることができる。
ＡＲＡ抽出前に、バイオマスを機械的、化学的および／または物理的プロセッシングに付すことができる。例えば、バイオマスを加熱および／または殺菌することができる。バイオマスは、例えば、押出により顆粒に加工することができる。
【０００７】
上記したように、ＡＲＡは好ましくは油として水産飼料中に存在する。この油は、エマルジョンとして存在することができる。すなわち、ＡＲＡは水中油型エマルジョンの油として提供することができる。エマルジョンは、好ましくは、乳化剤を含み、さらに、抗酸化剤を含有してもよい。レシチンが両方の機能を果たし得る。
本発明の組成物は水棲動物の飼料として使用でき、一般に、水産養殖において使用できる。該組成物を与えるのに適した水産生物は塩水または海水生物である。適当には、該生物は冷水生物である。
該組成物を与える水産生物は、幼生（例、クルスタセア（Crustacea）亜門の幼生）、ワムシ類（ロチフェラ（Rotifera）門のような）またはノープリウス（例、アルテミア（Artemia）の幼生）とすることができる。好ましいワムシ類は、ブラキノウス・プリカチリス（Brachinous plicatilis）種のものである。これら全ての生物は比較的小さく、それら自体が、より大型の生物によって消化される水産飼料となり得る。この場合、これらの生物は飼料成分または材料の１つであり、「活」餌を構成する。この場合、ＡＲＡは予めこれらの生物の内部にあってもよく、または組成物の他の部分にあってもよい。
本発明の組成物を与える他の適当な水産生物は、コペポーダ類（例、コペポーダ（Copepoda）綱のもの）、例えば、チスベ（Tisbe）、アカルチア（Acartia）、アルテミアおよび／またはユリテモラ（Eurytemora）綱のものとすることができる。
特に意図する水産生物は、モルスカ（Mollusca）門、例えば、ビバルビア（Bivalvia）綱、プロトブランキア（Protobranchia）およびラメリブランキア（Lamellibranchia）亜綱（ミチリス（Mytilus）およびオストレア（Ostrea）、イガイおよびカキを含む）に属する。また、コレオイダ（Coleoida）亜綱、例えば、デカポーダ（Decapoda）、セピア（Sepia）、ロリゴ（Loligo）（イカおよびコウイカを含む）およびオクトポーダ（Octopoda) (タコ)のようなセファロポーダ（Cephalopoda）綱の生物も含まれる。
他の生物は、ザリガニを含むアスタクス（Astacus）部門のようなクルスタセア（Crustacea）亜門、およびエビおよび小エビを含むガマルス（Gammarus）部門のようなアムフィポーダ（Amphipoda）目のものである。
かくして、水産生物には、タコや、イカ、エビ（prawn、Leander）および小エビ（Crangon）のような無脊椎生物を含めることができる。また、ニシン、ヒラメ（例、Scophthalmus maximus）、オヒョウ、サケ（Atlantic、Chinook、Coho、Pacific）、マス（ニジマス、Oncorhynchus mykissのような）、ブリーム（タイ、Sparus aurataのような）、シタビラメ（普通のシタビラメ、Solea solea L、セネガルシタビラメ、Solea senegalensis Kausのような）、バス（シーバス、Dicentrarchus labraのような）、カレイ（日本のカレイのようなParlichtys、Parlichtys divaceus）、ブリ（Yellow tail）、サバヒー（Milkfish）およびイワナ（Arctic Charr)のような魚類または他の脊椎生物も含まれる。
また、ロブスターや、イガイ、カキ、ハマグリのような貝類、エビ（rosenbergiiのようなMacrobrachium）、小エビ（japonicus、Kurum shrimp、white leg shrimp、monodonおよびsetiferusのようなPenaeus）のような魚介類も含まれる。
好ましい小エビはアルテミア綱のものである。特に、アルテミアのノープリウスを、活餌として与えるか、本発明の組成物に含めることができる。
【０００８】
食用水産生物を、より大型の生物に消費させるための食物中に与える活餌は、特に、若い生物またはそれらの発生の早期段階、例えば、３日目まで、さらには５日目までまたは１０日齢までのような幼生用に適している。これは、そのような生物が用意した食事を有効に資化できない可能性があることによる。生きた生物は、通常、種々の、または標準的な飼料成分および／または材料に加えて飼料に入れる。生きたノープリウス、例えば、ブラインシュリンプまたはアルテミアは特に幼生に適している。
【０００９】
他の成分または材料には、例えば、フィッシュミール、大豆ミール、小麦ミールバインダーおよび／または安定剤と、要すれば、ミネラルおよび／またはビタミンが包含される。飼料は、ペレットおよび／または顆粒の形態とすることができる。幼生（例、魚類および甲殻類）には、最初、活餌を与え、後に活餌でない飼料を与えることができる。
含ませることのできる種々の材料の量の幾つかの例として、つぎの例を挙げる。
フィッシュミール            ３０〜６０％、例えば、４０〜５０％
酵素的に消化したフィッシュ
ミール（濃縮物）                １〜１５％、例えば、  ５〜１０％
大豆および／または小麦
ミール                          ５〜２５％、例えば、１０〜１８％（各）
ミネラル類および／または
ビタミン類                      １〜２％のような０．５〜４％（各）
多くの水産生物、特に魚類に対し、食事は１０〜４０％の脂質を含有することができる。また、３５〜５０％のタンパク質を含有することもできる。好適には、生物に利用できるリンの量は０．８％より少ない。この食事は天然または人工のカロチノイド類、ビタミン類および／またはミネラル類を含んでよい。
飼料（例、非活餌）中のＡＲＡの量は、０．１〜５％、例えば０．１〜２％が好ましい。かくして、ｎ−６ＰＵＦＡｓの総量は５〜５０％、例えば、５〜３０％とすることができる。ここで、ＡＲＡは、生食用水産生物（それによってすでに消費された）の内部にあってもよい。
【００１０】
要すれば、該水産飼料は他のポリ不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡｓ）、例えば、Ｃ１８、Ｃ２０および／またはＣ２２ω−３またはω−６ＰＵＦＡを含んでいてもよい。意図する他のＰＵＦＡｓには、例えば、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）（藻類Crypthecodiniumまたは真菌Thraustochytriumのような藻類または真菌からの）、ガンマ−リノール酸（ＧＬＡ）および／またはＥＰＡが包含される。これらのＰＵＦＡｓのいずれもが個別に与えることができ、あるいはＡＲＡを含む油中に存在させることができる。
ＡＲＡに加えてＥＰＡを与える場合、ＥＰＡ：ＡＲＡの比率は、１：０．５〜１：２、例えば１：１〜１：１．６とすることができる。ＤＨＡが存在する場合、ＤＨＡ：ＡＲＡの比率は、１：０．２〜１：１、例えば１：０．２５〜１：０．７とすることができる。かくして、ＥＰＡおよびＤＨＡの両方が存在する場合、ＤＨＡ：ＥＰＡ：ＡＲＡの比率は、３〜５：０．５〜２．０：１．０〜２．０（例、活餌でない場合）または１．０〜２．０：０．７〜１．３：０．７〜１．３（活餌の場合）とすることができる。
【００１１】
本発明の第２の態様は、微生物由来のＡＲＡまたはトリグリセリド形のＡＲＡを１つ以上の飼料成分および／または材料と混合することを特徴とする水産飼料組成物の製造法に関する。これらには、上記したフィッシュミールおよび植物由来の材料を含めることができる。
該飼料組成物は、例えば、上記した幼生、ノープリウスまたはワムシ類のような生きた多細胞水産生物を含む「生」組成物であってもよい。
したがって、本発明のこの態様には、存在する水産飼料組成物を該ＡＲＡで補足することも包含される。
【００１２】
本発明の第３の態様は、微生物由来のＡＲＡ、トリグリセリド形のＡＲＡ（またはこれらの形のＡＲＡのいずれかを含む水産飼料組成物）の、水産生物の生育および／または色素形成促進のための使用に関する。この使用も、例えば、栄養補充のような水産飼料の補足まで拡大できる。また、この使用は、水産生物のエイコサノイド産生援助も意図している。
本発明の第４の態様は、第１の態様の水産飼料組成物で水産生物を養殖することに関する。
本発明の第５の態様は、水産生物の生育および／または色素形成方法に関し、この方法では、水産生物を第１の態様の水産飼料組成物で養殖することを含む。
本発明の１つの態様の好ましい特色および特徴は他の態様にとっても必要な変更をくわえることのより好適となる。
つぎに実施例を挙げて本発明を説明するが、これは例示であり、本発明を限定するものではない。
【００１３】
比較実施例１および２ならびに実施例３
微生物由来アラキドン酸（ＡＲＡ）によるアルテミア飼料の強化
国際出願ＰＣＴ／ＥＰ９７／０１４４６（ＷＯ−Ａ−９７／３６９９６）の実施例１のプロトコールを用いて真菌Mortierella alpinaから粗アラキドン酸（ＡＲＡ）油を製造した。この油は、Gist-brocades B.V.からＶＥＶＯＤＡTMの商標で入手できる。ついで、この油を、レシチンを用いてアラキドン酸強化エマルジョンの処方用に用いた（レシチンの最終濃度１０％）。
ＡＲＡ油のエマルジョンを処方し、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）およびアラキドン酸（ＡＲＡ）比４／１／１．５（実施例３）を得た。微生物由来のＡＲＡの変わりに魚油を用いて他のエマルジョン（比較実施例２）を処方し、ＤＨＡ：ＥＰＡ：ＡＲＡの比２．５／１／０．２とした。この２つのエマルジョンを、３０００ｒｐｍで１５分間遠心分離して安定性のテストをした。両方のエマルジョンともこの遠心分離テストで安定であり、２つの層への分離は見られなかった。
アルテミアの嚢包を温度２８℃の海水中で孵化させた。孵化して２４時間後、ノープリウスを収集し、２５０ノープリウス／ｍｌの密度で強化タンクに入れた。
ついで、該２つのエマルジョンを標準的ノープリウス食の補足に使用した（各々重複して）。
ａ）３００ｐｐｍの微生物アラキドン酸（ＡＲＡ）エマルジョン（実施例３）で強化
ｂ）３００ｐｐｍの魚油エマルジョン（比較実施例２）で強化
ひき続き強化した後、ノープリウスの試料を取り、Lepage Roy,J. Lip. Res., 25: 1391-6 (1984)に記載されているＦＡＭＥ（脂肪酸メチルエステル）法を用いて脂肪酸分析を行ない、それらのＰＵＦＡ含量を測定した。対照として、どちらのエマルジョンも用いない標準飼料で幾らかのノープリウスを生育させた（ＡＲＡなし、比較実施例１）。
強化ノープリウスおよび対照ノープリウスのドコサヘキサエン酸、エイコサペンタエン酸およびアラキドン酸レベルを表１に示す。
【００１４】
【表１】
0004709380.tif 000002
【００１５】
この結果は、Mortierella alpinaが産生したアラキドン酸油をアルテミア飼料の強化に使用できることを示している。これは、飼料を与えられたノープリウスにおけるドコサヘキサエン酸、エイコサペンタエン酸およびアラキドン酸の比の変化をもたらした。該微生物油によって供給された脂肪酸の比率は、生物におけるＡＲＡ含量を著しく増加させることにより、水棲種における生育および色素形成増加に非常に適している。これらのＡＲＡ強化ノープリウスは、それら自体、より大型の水棲動物の飼料組成物の活餌成分として使用することができる。
同じ操作を、ただし、アルテミアのノープリウスの変わりに、ワムシ（Brachinous plicatilis）を用いて繰り返した。
【００１６】
比較実施例４および５ならびに施例６
商業的供給源から、４日齢のPenaeus monodon（ウシエビ（giant tiger shrimp））の後期幼生を得、２０後期幼生／ｌの密度で、２８℃の温度にて殺菌した海水中で生育させた。ＡＲＡ強化アルテミアノープリウスおよび対照ノープリウス（実施例２および３からの）を１日４回、１０日間タンクに任意に与えた（Rees, J.F., Cure, K., Piyatiratitivorkaul, Sorgeloos, P.およびMenasveta, P, Aquaculture, 122 (1994), 193-207に記載に従って）。
幼生の全体の塊の増加を生育の指標とした。実験の開始時と終わりに乾燥重量（全バイオマスの）を測定した。重量の増加を表２に示す。
【００１７】
【表２】
0004709380.tif 000003
【００１８】
この結果は、微生物ＡＲＡ強化アルテミアノープリウスの幼生生育に対する良好な効果を明確に示している。
実験の終わりに、１５日齢の後期幼生を凍結乾燥した。上記の実施例に記載した標準的な方法を用いて幼生の脂肪酸組成を分析した。結果をエビのｍｇＦＡＭＥ（脂肪酸メチルエステル）／ｇ乾燥重量で表わす。
【００１９】
【表３】
0004709380.tif 000004
【００２０】
この結果は、ＡＲＡの微生物供給源を使用により後期幼生におけるＡＲＡ含量が著しく増加することを示している。
比較実施例７および８ならびに実施例９
幼生の生育に対するＡＲＡ強化飼料の効果
実施例４〜６と同様の実験を、ただし、ホワイトバス（white bass）の幼生を使用して繰り返した。用いた方法は、J.A. ClawsonおよびT.T. Lovell, Aquaculture, 108 (1992): 125-134に記載されている。得られた結果は、微生物ＡＲＡ強化アルタミアノープリウスでのホワイトバスの飼育は、魚油強化の対照アリタミアノープリウスと比較して生育を改善した。