(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ファロペネムナトリウムを有効成分とする、α、ω−ジアミン酢酸化合物を含有することを特徴とする、ドライシロップとして製剤化された経口投与用抗菌医薬組成物。
【請求項２】
α、ω−ジアミン酢酸化合物が、エチレンジアミン四酢酸、ヒドロキシエチルエチレンジアミン三酢酸、ジヒドロキシエチルエチレンジアミン二酢酸、１、３プロパンジアミン四酢酸、ジエチレントリアミン五酢酸、トリエチレンテトラミン六酢酸、およびこれらの塩からなる群から選択されるものである、請求項１に記載の抗菌医薬組成物。
【請求項３】
α、ω−ジアミン酢酸化合物が、エチレンジアミン四酢酸またはその塩である、請求項２に記載の抗菌医薬組成物。
【請求項４】
有効成分が水分に接触する状態を経て製造される、請求項１ないし請求項３に記載の抗菌医薬組成物。
【請求項５】
固体状態にあり、水を含む溶媒に溶解または懸濁させた状態で投与される、請求項１ないし請求項４に記載の抗菌医薬組成物。
【請求項６】
水を添加すると澄明な溶液となる、請求項１ないし請求項５に記載の抗菌医薬組成物。
【請求項７】
５〜２００ｍｇ（力価）／ｍｌの有効成分の濃度で水に均一に溶解する、請求項１ないし請求項６に記載の抗菌医薬組成物。
【請求項８】
水を添加すると、少なくとも４９．４ｍｇ／ｍｌの濃度でファロペネムナトリウムを含有する澄明な溶液となる、請求項７に記載の抗菌医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
技術分野
本発明は、安定でかつ、良好な消化管吸収性を示す、ペネム系抗生物質を有効成分とする抗菌医薬組成物に関する。
従来技術
ペネム系の化合物は、ペニシリンとセファロスポリンの構造を融合するという概念に基づいて設計された非天然型のβラクタム系化合物であり（例えばＷｏｏｄｗａｒｄ，Ｒ．Ｂ．，Ｉｎ  Ｒｅｃｅｎｔ  Ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  β−Ｌａｃｔａｍ  Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ；Ｅｌｋｓ，Ｊ．，Ｅｄ；Ｔｈｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ；Ｌｏｎｄｏｎ，１９７７；Ｓｐｅｃ．Ｎｏ．２８，ｐ１６７−１８０、特開昭６１−２０７３８７号、特開昭６３−１６２６９４号、特開昭６０−２２２４８６号および特開昭５４−１１９４８６号）、βラクタム系抗生物質のペニシリン系抗生物質およびセフェム系抗生物質が有する幅広い抗菌スペクトルおよび高い安全性と、カルバペネム系抗生物質がもつ強い抗菌力およびβラクタマーゼに対する高い安定性を兼ね備えた新しいタイプの抗生物質であり、現在、（＋）−（５Ｒ，６Ｓ）−６−〔（Ｒ）−１−ヒドロキシエチル〕−７−オキソ−３−〔（Ｒ）−２−テトラヒドロフリル〕−４−チア−１−アザビシクロ〔３．２．０〕ヘプト−２−エン−２−カルボン酸ナトリウムの２．５水和物（ファロペネムナトリウム、以下、化合物１という）が種々の感染症の経口治療薬として使用されており、ペネム環という新規な骨格により、メチシリン感性黄色ブドウ球菌（ＭＳＳＡ）、化膿連鎖球菌、肺炎球菌のみならず、従来のβ−ラクタム薬では十分効果が及ばなかったペニシリン耐性肺炎球菌（ＰＲＳＰ）、口腔連鎖球菌、腸球菌をはじめとするグラム陽性菌に強い抗菌活性を示し、また、インフルエンザ菌などのグラム陰性菌、バクテロイデス属などの嫌気性菌まで幅広く抗菌力を示すことが報告されている（化学療法の領域，Ｖｏｌ．１３，Ｎｏ．１０，ｐ．７４−８０，１９９７）。さらに、Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ  ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓをはじめとする歯周炎の病原性菌に対する強い抗菌活性（ＣＨＥＭＯＴＨＥＲＡＰＹ，Ｖｏｌ．４２，Ｓ−１，ｐ．３８−５０，１９９４）の他、近年耐性化が目立っている歯性感染症由来の菌種に対しても強い抗菌活性をもつことが報告されている（日本化学療法学会雑誌，Ｖｏｌ．４５，Ｎｏ．１１，ｐ．９６５−９７１，１９９７）。
しかしながら、ペネム系化合物は、他のβ−ラクタム系化合物と同様、加水分解や酸化、光異性化などを受けやすい化学的に不安定な物質である。
さらに、水溶性のβ−ラクタム系化合物は脂溶性の化合物に比して、消化管での吸収性は良くないことが知られている（大塚昭信ら、製剤学改定第２版、南江堂）。消化管での吸収率の低い製剤は、確実な治療効果を得る上で問題となる。特に、ペネム系化合物など抗菌作用を持つ化合物の場合、腸内細菌への影響を与えることがあり、軟便や下痢などを引き起こす可能性もある。
このように、安定性が良くないこと、および消化管での吸収性が良くないことは、ペネム系化合物の適用範囲、投与経路および製剤化における剤形に制限を与えていた。
一方、高齢者や幼小児にも服用しやすい剤形として、シロップ剤がある。シロップ剤は医薬品の苦味や不味を糖類の甘味作用と粘稠性および添加される種々の芳香剤などによって隠ぺいし、適当な着色料による好ましい色調などにより服用しやすくした優れた特性を有する剤形である。また、水に不安定な有効成分をシロップ剤とする際には、用時溶解または用時懸濁することを想定したドライシロップが検討される。ドライシロップは、用時溶解または用時懸濁するシロップ剤であり、溶媒として水、ジュースまたは牛乳などの水を含む液体が用いられる。
一般に水に不安定なものが多い抗生物質に関しては、いくつかのドライシロップ製剤が開発されている。その例としては、マクロライド系抗生物質製剤であるプロピオン酸ジョサマイシン（ジョサマイドライシロップ（登録商標）、山之内製薬（株））やエチルコハク酸エリスロマイシン（エリスロシンドライシロップ（登録商標）、大日本製薬（株））、及びセフェム系抗生物質製剤であるセフポドキシムプロキセチル（バナンドライシロップ（登録商標）、三共（株））などがある。これらはいずれも用時に水を添加し、懸濁液として用いられている。
懸濁液として使用する場合には例えば、病院においては、ドライシロップに水を添加してから入院患者の服用までに時間を要する場合がある。あるいは、主に家庭では、ドライシロップに水を添加してから数回に分けて使用される。これらの場合、懸濁液は静置されることになるため、不溶性成分が沈殿し、そのため、有効成分の均一性が損なわれ、用法用量が守られない事態が起こる。
また、飲みやすさの点からは、幼小児、特に、発症している幼小児に適用する際には、患者に服用を嫌がられることは避けなければならない。しかし、懸濁液は感覚的に好まれないばかりか、服用した際に不溶性成分が存在すると口腔内や咽喉内での違和感の原因となり、幼小児の２度目以降の服用の拒否に繋がる。また、高齢者においては、不溶性成分が入れ歯の隙間に入ることによる痛みを生じるうなどの不具合が生じる。その結果、コンプライアンスの低下に結びつき、用法用量が守られない事態が起こる。
また、α、ω−ジアミン酢酸化合物は銅、鉄などの金属イオンと錯体を形成することが知られている。従って、重金属を触媒とする分解反応の抑制作用を示すことから、当該反応によって分解されやすい成分、例えば油脂や一部の医薬品の有効成分に対する安定化剤として使用されている。
α、ω−ジアミン酢酸化合物の一種であるエチレンジアミン四酢酸二ナトリウムは、消化管粘膜細胞隙部の構造保持に作用しているカルシウムイオンと錯体を形成することにより、細胞隙部の透過性を上昇されると考えられている（伊賀立二ら、生物薬剤学最近の進歩、１９９４年、薬事日報社）。
上述したように、高い安全性や強い抗菌力を持つペネム系化合物は、抗菌医薬組成物として広い適用が望まれるが、経口製剤や液剤などの各種剤形として製剤化できる技術が開発されておらず、世の中のニーズに充分には応えられていない。また、幼小児や高齢者において、適切なコンプライアンスを保持し、その用法用量の遵守が容易であり安全かつ有効な抗菌組成物はとりわけ望まれている。
発明の開示
本発明者らは、ペネム系化合物を抗菌医薬組成物として広く適用する技術の開発を課題として、ペネム系化合物の水溶液中の安定性と、消化管における吸収性に着目し鋭意製剤化技術の研究を重ねた結果、組成物中にα、ω−ジアミン酢酸化合物を配合すれば、ペネム系化合物は水を含む溶媒中で安定であり、更に驚くべきことに消化管での吸収性を改善しうるという知見を得て本発明を完成した。
すなわち、本発明者らによれば、経口製剤や液剤などの各種剤形で製剤化されうる、ペネム系化合物を有効成分とする抗菌医薬組成物、特に水に対する溶解度の高いペネム系化合物について、高齢者や幼小児に対してコンプライアンスの良い澄明な水溶液として投与できるシロップ剤、なかでもドライシロップを提供する。
本発明の組成物は、ペネム系化合物を有効成分として、α、ω−ジアミン酢酸化合物および必要によりその他の添加剤を配合された抗菌医薬組成物である。
発明を実施するための形態
本発明に用いられるペネム系化合物としては、抗菌活性を有し、感作性および経口毒性がない等の安全性を有し、医薬上許容されるものであれば、特に限定されず、また、これらは、遊離のカルボン酸であっても、例えばナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムのようなアルカリ金属またはアルカリ土類金属との塩やリジンなどのアミノ酸塩あるいはアンモニウム塩などの医薬上許容される塩のいずれでも良く、また水和物などの溶媒和物として使用しても良い。また、本発明においては、医薬組成物として水に溶解する性質が必要な場合、有効成分のペネム系化合物は、水への溶解性を考慮して適宜選択することが出来る。
本発明に用いられるペネム系化合物としては、前述のファロペネムナトリウム（化合物１）が挙げられる。さらに、化合物１の３位の置換基が、１，４−ジオキサン−２−イル基、エチルスルファニル基、３−テトラヒドロフリルメチル基、メトキシメチル基、（（アミノカルボニル）オキシ）メチル基、（４Ｒ）−ピロリジン−２−チオン−４−イルチオ基等の化合物が挙げられる。
また、組成物中の有効成分の含有量は薬剤の種類や適応疾患等に応じて適宜決定すればよい。化合物１を用いる場合、遊離無水物として組成物全体に対して、例えば、錠剤では１０〜９０重量％程度、注射剤では固形分として５０〜９９．９重量％程度、ドライシロップでは２〜２０重量％程度配合される。
α、ω−ジアミン酢酸化合物は鎖状炭化水素の両末端にアミノ酢酸を有する化合物である。本発明で使用するα、ω−ジアミン酢酸化合物の鎖状炭化水素には鎖中に酢酸アミノ基を含んでいても良い。鎖状炭化水素の長さには制限はないが、好ましくはエチレンが望ましい。
α、ω−ジアミン酢酸化合物の例としては、エチレンジアミン四酢酸、ヒドロキシエチルエチレンジアミン三酢酸、ジヒドロキシエチルエチレンジアミン二酢酸、１、３プロパンジアミン四酢酸、ジエチレントリアミン五酢酸、トリエチレンテトラミン六酢酸などのポリアミノカルボン酸系キレート化剤、およびこれらの塩が挙げられる。また水和物などの溶媒和物として使用されても良い。なかでも、安全性の面からエチレンジアミン四酢酸およびその塩、特に、エチレンジアミン四酢酸カルシウム、エチレンジアミン四酢酸カルシウム二ナトリウム、エチレンジアミン四酢酸ナトリウム、エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム、エチレンジアミン四酢酸四ナトリウム、エチレンジアミン四酢酸四ナトリウム四水塩などが好適に用いられる。本発明ではこれらの例に限らずα、ω−ジアミン酢酸化合物を適宜選択して、１種または２種以上のものを使用できる。
本発明の組成物中のα、ω−ジアミン酢酸化合物の添加量はその種類、あるいは、組成物の剤形によって変わるが、ペネム系化合物の水を含む溶媒中での安定性及び消化管からの吸収性を評価して設定できる。通常、遊離無水物としての有効成分に対して、０．１〜１００％程度、好ましくは０．１〜２０％程度である。
本発明においては、ペネム系化合物の安定性が改善される。従って、本発明の抗菌医薬組成物は、水を含む溶媒に溶解または懸濁させた状態で投与される製剤、すなわち（１）水を含む溶媒の溶液または懸濁液、あるいは（２）用時溶解または用時懸濁して用いる製剤として用いることが出来る。このような製剤の例としては、注射剤、液剤、シロップ剤、点眼剤、懸濁剤、乳剤、エアゾール剤、エリキシル剤、内容物が溶液または懸濁液であるカプセル剤、リニメント剤、リモナーデ剤またはローション剤が挙げられる。例えば、注射剤の場合、用時溶解または用時懸濁する製剤、または液剤のいずれをも選択することができる。なお、本発明で言う、用時溶解または用時懸濁する製剤とは、製品出荷時の形態としては固形であるが、医薬品の開封後から適用までの間に溶解または懸濁する製剤のことを言う。通常は適用の直前に溶解または懸濁される。
水を含む溶媒に溶解または懸濁させた状態で投与される各剤形の製剤は、有効成分、α、ω−ジアミン酢酸化合物および他の添加剤を配合して、各剤形ごとの常法により製造することが出来る。たとえば、注射剤の場合、他の添加剤として、（１）塩化ナトリウム、Ｄ−マンニトール、Ｄ−ソルビトールなど等張化剤、（２）塩酸、クエン酸、水酸化ナトリウムなどのｐＨ調整剤、（３）クエン酸ナトリウム、リン酸、リン酸ナトリウム、リン酸カリウム、酢酸ナトリウム、ホウ酸などの緩衝剤、（４）塩酸プロカインなど無痛化剤の他、界面活性剤などを添加することができる。上記添加剤の配合量は製剤として求められる特性などの点から適宜設定される。
更に、上記の製剤以外でも、製造工程において、有効成分が水分に接触する状態を経る工程、例えば、有効成分を水に溶解して添加する工程などを経て製造される製剤については、本発明におけるペネム系化合物の安定性が改善される点から、本発明の抗菌医薬組成物は有用である。その例としては、流動層造粒工程、攪拌造粒工程、練合造粒工程またはコーティング工程といった操作を経て製造される錠剤、カプセル剤、丸剤、顆粒剤、細粒剤および散剤などが挙げられる。
また、本発明においては、α、ω−ジアミン酢酸化合物を配合することにより、消化管からの吸収性のよい抗菌医薬組成物が得られる。従って、本発明の抗菌医薬組成物は経口剤として有用である。その例としては、錠剤、カプセル剤、液剤、シロップ剤、丸剤、顆粒剤、細粒剤、散剤、トローチ剤、エアゾール剤、エリキシル剤、リモナーデ剤が挙げられる。
これらの製剤は、有効成分、α、ω−ジアミン酢酸化合物および他の添加剤を配合して、各剤形ごとの常法により製造することが出来る。たとえば、錠剤の場合、（１）乳糖、デンプンまたは結晶セルロースなどの賦形剤、（２）ヒドロキシプロピルセルロースやポリビニルピロリドンのような結合剤、（３）デンプン、クロスカルメロースナトリウムのような崩壊剤、（４）ステアリン酸マグネシウムやタルクのような滑沢剤、（５）ヒドロキシプロピルメチルセルロース、オイドラギットなどのコーティング基剤の他、可塑剤や着色剤などを用いることができる。上記添加剤の配合量は製剤として求められる特性などの点から適宜設定される。
本発明において、水を含む溶媒に溶解または懸濁された状態でのペネム系化合物の安定性が改善され、加えて、消化管からの吸収性が改善されるため、本発明の抗菌医薬組成物は、（１）水に溶解または懸濁した経口剤、ならびに（２）用時溶解または用時懸濁して用いる経口剤に有用であり、具体的には、液剤、シロップ剤およびドライシロップなどが好ましく使用される。
ドライシロップは、用時溶解または用時懸濁して用いるシロップ剤のことを言うが、本発明ではそれに類似した粉粒状の経口剤、すなわち、白糖を多く含み実質的に用時溶解または用時懸濁して用いられる顆粒剤、細粒剤または散剤なども本発明の実施の態様として同様に好適である。
有効成分が水に均一に溶解するドライシロップは本発明の好ましい態様の一つである。
本発明における、水に溶解するドライシロップとは、適量の水と混和した際に不溶性成分を認めずに澄明となるドライシロップを言う。一般に、ドライシロップを溶解または懸濁する際の水の量は、（１）有効成分の安定性に与える濃度の影響、（２）医療現場での扱い易さ、および（３）患者の飲みやすさなどを考慮して適宜設定される。例えば、市販されているドライシロップのうち、ジョサマイドライシロップ（山之内製薬（株））やエリスロシンドライシロップＷ（大日本製薬（株））については、添付文書に３０、４０および１００ｍｇ（力価）／ｍＬの懸濁液の調製例が示されている。本発明においては、水を含む溶媒に溶解または懸濁された状態でのペネム系化合物の安定性が改善され、加えて消化管からの吸収性が改善されるため、本発明の医薬組成物は有効成分の広い濃度範囲、具体的には５〜２００ｍｇ（力価）／ｍＬ、例えば、４０ｍｇ（力価）／ｍＬの濃度で水に均一に溶解するドライシロップとして使用することができる。これは用法用量の遵守、および高齢者や幼小児のコンプライアンスの向上という観点から特に好ましい態様である。
ドライシロップは、有効成分、α、ω−ジアミン酢酸化合物および他の添加剤を配合して、常法により製造することが出来る。他の添加剤として、（１）白糖、乳糖、果糖、マンニトール、ぶどう糖などの賦形剤、（２）ヒドロキシプロピルセルロースやポリビニルピロリドンのような結合剤、（３）デンプンのような崩壊剤、（４）マクロゴール、ポリエチレングリコールおよびクエン酸トリエチルのような可塑剤、（５）アスパルテームやクエン酸のような矯味剤、（６）ヒドロキシプロピルメチルセルロース、オイドラギットなどのコーティング基剤の他、矯臭剤、着色剤などを用いることができる。上記添加剤の配合量は製剤として求められる特性などの点から適宜設定される。
調製された製剤は各剤形ごとに適した形態で包装される。例えば、瓶包装、分包、ＰＴＰ包装、アンプル、バイアルにといった包装形態をとることが可能である。このようにして得られる製剤の投与量は、投与経路、適応症、症状や年齢などにより差異はあるが、一般的に成人（６０ｋｇとして）においては、一日につき５０〜１５００ｍｇ（力価）、好ましくは約１００〜１０００ｍｇ（力価）である。小児の場合も、体重に応じて換算した量を投与することができる。
実施例
以下の実施例により、本発明をさらに具体的に説明する。これらの実施例は発明の範囲を限定するものではない。
実施例１（化合物１の固体状態での安定性の評価）
化合物１の固体状態での安定性に対するエチレンジアミン四酢酸二ナトリウムの影響を評価した。表１に示す処方に基づく組成物の混合粉末または圧縮成形品をガラス瓶に入れ、乾燥剤非共存下または共存下に密栓し、６０℃で７日間保存し、性状を観察した。その結果、いずれの組成物についても性状に変化は認められなかった（表１）。従って、以後エチレンジアミン四酢酸二ナトリウムを各種剤形の製剤の組成物に配合した。
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実施例２（化合物１を含む圧縮成形品（錠剤）の安定性の評価）
化合物１を含む圧縮成形品（錠剤）の固体状態での安定性に対するエチレンジアミン四酢酸二ナトリウムの影響を評価した。表２に示す処方に基づく組成物の錠剤を後述の方法（実施例６の錠剤の製造例２）に従って調製し、ガラス瓶に入れ、乾燥剤非共存下に密栓し、４０℃で１ヶ月間保存し、性状を観察するとともに化合物１の含量を測定した。
錠剤中の化合物１の含量の測定は高速液体クロマトグラフ法で行った。すなわち、オクタデシルシリル化シリカゲルを充填したステンレス製の高速液体クロマトグラフ用カラムを用いた。カラム温度は４０℃に設定した。移動相には、４５ｍＭリン酸二水素カリウム、５ｍＭリン酸一水素ナトリウムおよび５ｍＭ臭化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウムからなる溶液の８７０ｍＬにアセトニトリル１３０ｍＬを混合した液を用いた。流量は、化合物１の保持時間が１１分になるように調整した。検出器には、紫外吸光光度計を用い、３０５ｎｍの波長で測定した。なお、以後の実施例４までの化合物１の含量の測定には当該測定法に従った。
その結果、各錠剤とも性状に変化は認められず、また、化合物１の残存率はエチレンジアミン四酢酸二ナトリウムの有無に関わらず同等であった（表２）。
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実施例３（水溶液中での化合物１の安定性の評価）
水溶液中での化合物１の安定性に対するエチレンジアミン四酢酸二ナトリウムの影響を評価した。化合物１の濃度が４９．４ｍｇ／ｍＬ（４０．０ｍｇ（力価）／ｍＬ）である表３に示す処方の水溶液５ｍＬをガラス瓶に入れ密栓し、室温で７日間保存し、性状を観察するとともに化合物１の含量を測定した。
その結果、コントロール（エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム非添加）に比して、エチレンジアミン四酢酸二ナトリウムの濃度が０．４ｍｇ／ｍＬまたは２ｍｇ／ｍＬのいずれの場合においても、性状の変化や化合物１の残存率の低下に対して抑制効果が認められた（表３）。
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実施例４（懸濁液中での化合物１の安定性の評価）
懸濁液中での化合物１の安定性に対するエチレンジアミン四酢酸二ナトリウムの影響を評価した。水に不溶性であるメタケイ酸アルミン酸マグネシウムを含み、化合物１の濃度が４９．４ｍｇ／ｍＬである表４に示す処方の組成物の懸濁液５ｍＬをガラス瓶に入れ密栓し、２５℃で７日間保存し、性状を観察するとともに化合物１の含量を測定した。
その結果、試験開始時において、いずれの組成物についても水を添加後の性状は白色の懸濁液であった。これはメタケイ酸アルミン酸マグネシウムが水に不溶性であるためである。また、保存後の懸濁液については、コントロール（エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム非添加）に比して、エチレンジアミン四酢酸二ナトリウムの濃度が０．４ｍｇ／ｍＬ、２ｍｇ／ｍＬまたは４ｍｇ／ｍＬのいずれの場合も、性状の変化や化合物１の残存率の低下に対して抑制効果が認められた（表４）。
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実施例３および４より、エチレンジアミン四酢酸二ナトリウムは、水溶液または懸濁液中の化合物１の安定性を改善することが確認された。
実施例５（化合物１の消化管から吸収性の改善）
７週令スプラーグ・ドウリー系雄性ラットに、７０．５ｍｇ／ｋｇ（５７．１ｍｇ（力価）／ｋｇ）の化合物１と５７．１ｍｇ／ｋｇのエチレンジアミン四酢酸二ナトリウムを経口投与した。コントロール群には７０．５ｍｇ／ｋｇの化合物１のみを経口投与した。投与後、０．１時間から１０時間まで採血を行った。血漿中の化合物１の遊離酸濃度を高速液体クロマトグラフ法で測定した。測定に際しては、血漿を前処理してから使用した。すなわち、血漿０．２ｍＬにアセトニトリル０．２ｍＬを加えて攪拌後、４℃、１２０００ｒｐｍで１５分間遠心分離した。この上清２００μＬを１０ｍＭリン酸緩衝液８００μＬで希釈し、その２００μＬを高速液体クロマトグラフに注入した。高速液体クロマトグラフ条件は以下の通りとした。すなわち、オクタデシルシリル化シリカゲルを充填したステンレス製の高速液体クロマトグラフ用カラムを用いた。カラム温度は室温に設定した。移動相には、リン酸でｐＨ２に調整した２０ｍＭリン酸二水素ナトリウム水溶液の６８０ｍＬにアセトニトリル３２０ｍＬを混合した液を用いた。流量は１ｍＬ／分になるように調整した。検出器には、紫外吸光光度計を用い、３１８ｎｍの波長で測定した。
分析の結果、コントロール群に比して、エチレンジアミン四酢酸二ナトリウムの同時投与群の血漿中濃度時間曲線下面積（ＡＵＣ）は約２倍に増加した。従って、エチレンジアミン四酢酸二ナトリウムは、消化管における化合物１の吸収性の改善に優れた効果があることが確認できた（表５）。
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実施例６（製剤の製造例）
以下に、α，ω−ジアミン酢酸化合物を添加した、化合物１を有効成分とする各種剤形の製剤の製造例を示す。
錠剤の製造例１
成分 １錠当たりの重量
化合物１                                ２４７ｍｇ
トウモロコシデンプン                      ２０ｍｇ
ヒドロキシプロピルセルロース                ９ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム                    ４ｍｇ
エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム        １０ｍｇ
上記組成を１錠分の材料として錠剤を得た。すなわち、ステアリン酸マグネシウム以外の成分のすべてを湿式造粒法により顆粒化し、この顆粒にステアリン酸マグネシウムを加え混合した。この混合物を錠剤機を使用して圧縮し、所望重量の錠剤を得た。
錠剤の製造例２
成分 １錠当たりの重量
化合物１                                ２４７ｍｇ
結晶セルロース                            ２０ｍｇ
ヒドロキシプロピルセルロース                ９ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム                    ４ｍｇ
グルタチオン                              ４０ｍｇ
エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム        １０ｍｇ
上記組成を１錠分の材料として錠剤を得た。すなわち、ステアリン酸マグネシウム以外の成分のすべてを湿式造粒法により顆粒化し、この顆粒にステアリン酸マグネシウムを加え混合した。この混合物を錠剤機を使用して圧縮し、所望重量の錠剤を得た。
注射剤の製造例
成分 １バイアル当たりの重量
化合物                                  １１．２３５ｇ
エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム        ０．０１２ｇ
上記組成を１バイアル分の材料として凍結乾燥注射剤を得た。すなわち、化合物１及びエチレンジアミン四酢酸二ナトリウムを９．８ｇ／バイアル相当の注射用水に溶解した。この液を０．２２μｍのフィルターで無菌ろ過し、凍結乾燥用調製液とした。この液をバイアルに無菌的に充填した。高圧蒸気滅菌したゴム栓をバイアルに無菌的に半打栓した。このバイアルを凍結乾燥庫内に入れて凍結乾燥した。乾燥確認後窒素ガスで庫内を満たしバイアルにゴム栓を全打栓した。庫内よりバイアルを搬出して所望の凍結乾燥注射剤を得た。
得られた凍結乾燥注射剤に注射用水１０ｍＬを添加したとろ、速やかに溶解し、澄明な溶液となった。
ドライシロップの製造例１
成分 重量：ｍｇ／ｇ
化合物１                              １２３．５
白糖                                  ８６５．０
ポリエチレングリコール                  １０．０
黄色５号                                  ０．５
エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム        １．０
オレンジエッセンス                          微量
上記成分の組成比でドライシロップを得た。すなわち、化合物１、白糖、ポリエチレングリコール及びエチレンジアミン四酢酸二ナトリウムを攪拌造粒機に投入して混合した。これに、別に黄色５号を溶解した水を噴霧しながら攪拌造粒した。この造粒物を流動層造粒機で乾燥後、オレンジエッセンスを噴霧した。さらに同装置で乾燥した後、造粒物を取り出して３０メッシュの篩で篩過して所望のドライシロップを得た。
得られたドライシロップについて、化合物１の濃度が４９．４ｍｇ／ｍＬ（４０．０ｍｇ（力価）／ｍＬ）となるように精製水を添加したとろ、速やかに溶解し、澄明なオレンジ色の溶液となった。
ドライシロップの製造例２
成分 重量：ｍｇ／ｇ
化合物１                              １２３．５
白糖                                  ５６３．７５
Ｄ−マンニトール                      ２９０．０
サッカリンナトリウム                      １．２５
ヒドロキシプロピルセルロース            ２０．０
黄色５号                                  ０．５
エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム        １．０
オレンジエッセンス                        微量
上記成分の組成比でドライシロップを得た。すなわち、化合物１、白糖、Ｄ−マンニトール、サッカリンナトリウム及びエチレンジアミン四酢酸二ナトリウムを攪拌造粒機に投入して混合した。これに、別にヒドロキシプロピルセルロースおよび黄色５号を水に溶解して調製した結合液を噴霧しながら攪拌造粒した。さらにこの造粒物を押し出し造粒機に投入し４２メッシュのスクリーンで押し出し造粒した。この造粒物を流動層造粒機で乾燥後、さらにオレンジエッセンスを噴霧した。同装置で乾燥した後、造粒物を取り出して３０メッシュの篩で篩過して所望のドライシロップを得た。
得られたドライシロップについて、化合物１の濃度が４９．４ｍｇ／ｍＬとなるように精製水を添加したとろ、速やかに溶解し、澄明なオレンジ色の溶液となった。
ドライシロップの製造例３
成分 重量：ｍｇ／ｇ
化合物１                                        １２３．５
白糖                                            ５５７．５
Ｄ−マンニトール                                ２９７．５
ヒドロキシプロピルセルロース                      ２０．０
黄色５号                                            ０．５
エチレンジアミン四酢酸カルシウム二ナトリウム        １．０
オレンジエッセンス                                  微量
上記成分の組成比でドライシロップを得た。すなわち、化合物１、白糖、Ｄ−マンニトール及びエチレンジアミン四酢酸カルシウム二ナトリウムをＶ型混合機で混合した。別にヒドロキシプロピルセルロース及び黄色５号を水に溶解して結合液を調製した。混合粉末を流動層造粒機に投入し、結合液を噴霧しながら造粒した。さらにオレンジエッセンスを噴霧した後に同装置で乾燥した。造粒物を取り出して３０メッシュの篩で篩過して所望のドライシロップを得た。
得られたドライシロップについて、化合物１の濃度が４９．４ｍｇ／ｍＬとなるように精製水を添加したとろ、速やかに溶解し、澄明なオレンジ色の溶液となった。該溶解後の液を１０℃で６日間保存したところ、性状に変化はなく、保存後の力価残存率は９８．３％であり、エチレンジアミン四酢酸カルシウム二ナトリウムの効果による良好な安定性を示した。