(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
皮膚、唇、毛髪及び／又は爪の局所用化粧品の製造のための、単独使用又は少なくとも１種の別の活性成分と併用する活性成分としてのＭｏｒｉｎｇａｃｅａｅ科に属するＭｏｒｉｎｇａ属植物の種子から抽出され、少なくとも部分的に脱脂されている少なくとも１種のタンパク質フラクションの使用。
【請求項２】
タンパク質フラクションが完全に脱脂されている請求項１に記載の使用。
【請求項３】
タンパク質フラクションがＭｏｒｉｎｇａ  ｏｌｅｉｆｅｒａ植物の抽出物から構成されることを特徴とする請求項１又は２に記載の使用。
【請求項４】
タンパク質フラクションが場合により超音波発生器を使用して水又は水溶液で抽出されることを特徴とする請求項１から３のいずれか一項に記載の使用。
【請求項５】
水溶液が種々のｐＨの塩類溶液である請求項４に記載の使用。
【請求項６】
タンパク質フラクションが部分的もしくは完全に脱脂した殻つきもしくは殻をとった種子の水性もしくは緩衝溶媒抽出物又はタンパク質濃縮物又は精製タンパク質又は前記成分の少なくとも２種の混合物から構成されることを特徴とする請求項１から５のいずれか一項に記載の使用。
【請求項７】
タンパク質フラクションが乾燥抽出物に基づき０．０１〜１００重量％のタンパク質を含有していることを特徴とする請求項１から６のいずれか一項に記載の使用。
【請求項８】
タンパク質フラクションが乾燥抽出物に基づき４５重量％のタンパク質を含有していることを特徴とする請求項１から６のいずれか一項に記載の使用。
【請求項９】
タンパク質フラクションが７を上回る等電点をもつ少なくとも１種のタンパク質化合物を含むことを特徴とする請求項１から８のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１０】
タンパク質フラクションが８〜１２の等電点をもつ少なくとも１種のタンパク質化合物を含むことを特徴とする請求項１から８のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１１】
タンパク質フラクションがｐＨ８〜１２の等電点沈殿により得られることを特徴とする請求項１から１０のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１２】
タンパク質フラクションがイオン交換クロマトグラフィーにより得られることを特徴とする請求項１から１０のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１３】
タンパク質フラクションがアフィニティークロマトグラフィー、ゲル濾過、限外濾過、溶媒、硫酸アンモニウム等の塩等による沈殿又は有機ポリマーもしくは温度変化による沈殿から構成される群から選択される製造方法により得られることを特徴とする請求項１から１０のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１４】
タンパク質フラクションが天然タンパク質から構成されることを特徴とする請求項１から１３のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１５】
タンパク質フラクションが皮膜形成剤、リポソーム、シクロデキストリン、ミセル、カイロミクロン、マクロ粒子、ミクロ粒子、ナノ粒子、マクロカプセル、マイクロカプセル又はナノカプセル等の適当な化粧品ビヒクルに組み込まれているか又は結合されていることを特徴とする請求項１から１４のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１６】
タンパク質フラクションが有機ポリマー又は無機キャリヤーに吸着又はグラフトされていることを特徴とする請求項１から１４のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１７】
抽出されたタンパク質フラクションが皮膚、唇、毛髪、爪、表皮、角質層に実質及び水分補給活性を与えることを特徴とする請求項１から１４のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１８】
抽出されたタンパク質フラクションが皮膚、唇、毛髪及び爪の生理的調節作用、皮膚、唇、毛髪及び爪の再生、修復及び水分補給作用、皺防止作用並びに汚染防止作用を与えることを特徴とする請求項１から１４のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１９】
活性成分として請求項１から１８のいずれか一項に記載の１種以上のタンパク質フラクション０．０１〜８０重量％を単独又は少なくとも１種の別の活性成分と共に含むことを特徴とする皮膚、毛髪又は爪に対する局所使用のための化粧品。
【請求項２０】
前記タンパク質フラクションが２重量％である請求項１から１８のいずれか一項に記載の皮膚、毛髪又は爪に対する局所使用のための化粧品。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は特に化粧品及び皮膚科学分野、特に皮膚及び皮膚付属器ケア用化粧品に関し、化粧品、皮膚科学及び／又は医薬用途におけるＭｏｒｉｎｇａ属植物種子の少なくとも１種のタンパク質抽出物の使用と、少なくとも１種の前記抽出物を含む化粧品及び／又は医薬組成物を目的とする。
【０００２】
Ｍｏｒｉｎｇａ属は約１４種の植物（特にＭｏｒｉｎｇａ  ｐｅｒｅｇｒｉｎａ、Ｍ．ａｐｔｅｒａ、Ｍ．ｃｏｎｃａｎｅｎｓｉｓ、Ｍ．ｄｒｏｕｈａｒｄｉｉ、Ｍ．ｈｉｌｄｅｂｒａｎｄｔｉｉ、Ｍ．ｌｏｎｇｉｔｕｂａ）を含み、Ｍｏｒｉｎｇａ  ｐｔｅｒｙｇｏｓｐｅｒｍａ（Ｍｏｒｉｎｇａ  ｏｌｅｉｆｅｒａとも言う）が最もよく知られている。
【０００３】
この植物は多様な環境に非常によく適応する成長の早い樹木であり、アジア、アフリカ及び南アメリカの熱帯地方の至る所で生育している。長さ３０〜５０ｃｍの果実がドラムスティック状にぶら下がっていることから、英名では“ｄｒｕｍｓｔｉｃｋ  ｔｒｅｅ”と呼ばれ、その緑色の莢果は世界中で野菜として食用されている。そのため、種子を油の製造に利用することは稀である。
【０００４】
この植物が生育する地方では樹木の種々の部分（葉、根、根の皮、花、種子）が伝統薬として使用されている。
【０００５】
Ｍｏｒｉｎｇａ種子は品種と種子の成熟度に依存して含油率２１〜５３％を特徴とする。
【０００６】
文献によると、Ｍｏｒｉｎｇａ  ｏｌｅｉｆｅｒａ種の含油率は２１〜３４％である。
【０００７】
Ｍｏｒｉｎｇａ  ｏｌｅｉｆｅｒａ、Ｍ．ｐｅｒｅｇｒｉｎａ、Ｍ．ｃｏｎｃａｎｅｎｓｉｓ及びＭ．ｄｒｏｕｈａｒｄｉｉの種子油を比較すると、脂肪酸組成が非常によく似ており、いずれもオレイン酸（７１〜７８％）と飽和脂肪酸濃度が非常に高い。
【０００８】
ベヘン酸（Ｃ２２Ｈ４４Ｏ２）はモリンガ油に特徴的な飽和脂肪酸である（含量２．６〜４．７％）。
【０００９】
モリンガ油（ベヘン油又はベン油とも言う）は酸化安定性に優れ、香り定着性が良好であるため、古代文明で化粧品及び宗教用香油の調合者に最もよく使用された油である。
【００１０】
この油は前世紀まで化粧品調合者に使用されていたが、その使用が最近「再認」されている。
【００１１】
含油率だけでなく、Ｍｏｒｉｎｇａ種子は伝統的に浄水に使用されており、従って、最近では発展途上国で水処理及び精製の経済的資源として利用できる可能性からも研究者に注目されている。
【００１２】
更に、最も多く存在し、栽培されている６種のＭｏｒｉｎｇａ種の種子は凝集性化合物を含有していることが判明した。
【００１３】
この活性に関与する化合物は単離及び同定されており、タンパク性化合物であることが分かっている（特に論文“Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ｆｌｏｃｃｕｌａｔｉｎｇ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｆｒｏｍ  Ｍｏｒｉｎｇａ  ｏｌｅｉｆｅｒａ  ｌａｍ”，ＧＡＳＳＥＮＳＣＨＭＩＤＴ  Ｕ．，ＪＡＮＹ  Ｋ．Ｄ．，ＴＡＵＳＣＨＥ  Ｂ及びＮＩＥＢＥＲＧＡＬＬ  Ｈ．Ｒ．，Ｂｉｏｃｈｉｍｉｃａ  ｅｔ  ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａ  ａｃｔａ，１２４３：４７７−４８１，１９９５  −  “Ａｃｔｉｖｅ  ａｇｅｎｔｓ  ａｎｄ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍ  ｏｆ  ｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｕｒｂｉｄ  ｗａｔｅｒｓ  ｕｓｉｎｇ  ｍｏｒｉｎｇａ  ｏｌｅｉｆｅｒａ”，ＮＤＡＢＩＧＥＮＧＥＳＥＲＥ  Ａ．，ＳＵＢＢＡ  ＮＡＲＡＳＩＡＨ  Ｋ．及びＴＡＬＢＯＴ  ＢＧ．，Ｗａｔｅｒ  ｒｅｓｅａｒｃｈ，２９，２：７０３−７１０，１９９５参照）。
【００１４】
Ｍｏｒｉｎｇａ  ｏｌｅｉｆｅｒａ種子の脱脂粉末からこれらのタンパク質を水性緩衝溶媒で抽出した後、カチオン交換クロマトグラフィーにより単離した。
【００１５】
これらの凝集性タンパク質をＮａＣｌ勾配により溶離すると、３種の活性フラクション（ＭＯ１、ＭＯ２及びＭＯ３と呼ぶ）に分離する。
【００１６】
第２のクロマトグラフィー段階により、ＭＯ２を更に３種の活性フラクション（ＭＯ２．１、ＭＯ２．２及びＭＯ２．３）に分離することができる。
【００１７】
非変性条件下のＰＡＧＥ電気泳動によると、ＭＯ２．１、ＭＯ２．２は均質であると思われるが、ＭＯ２．３は数種のタンパク質から構成される。
【００１８】
他方、ＳＤＳ−ＰＡＧＥによるとＭＷ６．５ｋＤａ及び７ｋＤに対応する２種のバンドがタンパク質ＭＯ２．１及びＭＯ２．２に観察されるので、これらは二量体である。
【００１９】
エレクトロフォーカシングによると、これらの凝集性タンパク質の等電点は１０である。
【００２０】
ＭＯ２．１のアミノ酸組成を調べると、このタンパク質はグルタミン（１５残基）、アルギニン（７残基）及びプロリン（７残基）含量の高い６０個のアミノ酸を含み、末端はピログルタミン酸基によりブロックされている。
【００２１】
本発明者らは予想外且つ驚くべきことに、濁水浄化作用で知られるＭｏｒｉｎｇａ種子タンパク質抽出物が特殊な新規性質も備えており、良好な耐性に結び付けられる有益なその皮膚及び皮膚付属器作用によりケア用化粧品及び特に皮膚科学用途での医薬に直接利用できることを発見した。
【００２２】
従って、本発明の主目的は、皮膚及び／又は皮膚付属器の局所用化粧品及び／又は医薬組成物の製造のための、単独使用又は少なくとも１種の別の活性成分と併用する活性成分としてのＭｏｒｉｎｇａｃｅａｅ科に属するＭｏｒｉｎｇａ属植物の種子から抽出した少なくとも１種のタンパク質フラクションの使用である。
【００２３】
これらのタンパク質抽出物の新規性質はその特定性質及び特性、特に塩基性等電点と凝集能に直接起因する。
【００２４】
特に柔軟効果と、高い実質性による調節及び水分補給効果と、汚染防止活性成分の範囲での利用効果的なキレート化効果が確認された。
【００２５】
本発明の好適実施態様によると、タンパク質フラクションはＭｏｒｉｎｇａ  ｏｌｅｉｆｅｒａ植物の抽出物から構成され、前記タンパク質フラクションは乾燥抽出物に基づき０．０１〜１００重量％、好ましくは約４５重量％のタンパク質を含有している。
【００２６】
有利な態様によると、タンパク質フラクションは場合により超音波発生器を使用して水又は水溶液、特に種々のｐＨの塩類溶液で抽出される。
【００２７】
従って、タンパク質フラクションは部分的もしくは完全に脱脂した殻つきもしくは穀をとった種子の水性抽出物、種々のｐＨの塩類溶媒抽出物もしくは緩衝溶媒抽出物又はタンパク質濃縮物又は精製タンパク質又は前記成分の少なくとも２種の混合物から構成され、７を上回る等電点、好ましくは８〜１２の等電点をもつ。
【００２８】
活性成分として使用されるタンパク質フラクションは、
−ｐＨ８〜１２の等電点沈殿、
−イオン交換クロマトグラフィー、
−アフィニティークロマトグラフィー、ゲル濾過、限外濾過、溶媒、硫酸アンモニウム等の塩等による沈殿又は有機ポリマーもしくは温度変化による沈殿から構成される群から選択される抽出方法により得ることが好ましい。
【００２９】
更に、等電点沈殿の場合には、周囲温度よりも低温、特に＋４℃前後でタンパク質フラクションの獲得を助長できることが確認された。
【００３０】
以下、本発明の範囲で使用可能なＭｏｒｉｎｇａ種子抽出物及び種子タンパク質フラクションの種々の獲得及び製造方法を例示として非限定的に説明する。
【００３１】
製造例１（抽出物１の製造）
種子から殻を取り除いた後に得られる含油率３３．４％（ｗ／ｗ）のＭｏｒｉｎｇａ  ｏｌｅｉｆｅｒａの核をヘキサン還流下に２回連続抽出して脱脂し、濾過後、粉末を４０℃でオーブン乾燥し、残留含油率２．５％とする。
【００３２】
反応器に脱脂粉末２００ｇと蒸留水２リットルを加える。
【００３３】
１０分間撹拌後に４Ｎ  ＮａＯＨを加えてｐＨを７．５に調整した後、ｐＨを７．５に維持しながら周囲温度で１時間抽出する。
【００３４】
１５分間５０００ｇで遠心分離して不溶分を除去する。
【００３５】
上清を集めた後、０．４５μｍで濾過すると、乾燥抽出物含量４．６９％及びビウレット法によるタンパク質濃度２１．５４ｇ／ｌ（即ち乾燥抽出物に基づくタンパク質純度４５．９２％）の黄色い濾液１．７７リットルが得られる。
【００３６】
抽出物を噴霧乾燥すると、推定タンパク質濃度５４．７％（Ｎ×６．２５）の噴霧乾燥物６５．７２ｇが得られる。
【００３７】
排出容量とカラムの総容量の間で溶離したピークを考慮するならば、Ｓｕｐｅｒｏｓｅ  １２ＨＲカラムによるこの抽出物のゲル濾過分析のクロマトグラフィープロフィル（添付図１参照）は面積の５２％に相当し且つ７８００〜１１０００Ｄａの分子量に対応する主フラクションを示す。このピークには肩が存在するので数種の化合物の存在が裏付けられ、分子量範囲はＭｏｒｉｎｇａの凝集性タンパク質のモノマー（６５００〜７０００Ｄａ）と二量体（１３０００Ｄａ）について文献に記載されている範囲に近似する。
【００３８】
製造例２（抽出物２の製造）
製造例１と同様に脱脂粉末３００ｇを抽出し、粗水性抽出物を得る。
【００３９】
４Ｎ  ＮａＯＨを徐々に加えて濾液（２．７４リットル）のｐＨを１１．８に調整する。
【００４０】
ｐＨ８．０付近で沈殿が開始する（溶液の明白な混濁）ので３０分後に溶液を１５分間５０００ｇで遠心分離する。
【００４１】
粘着性沈殿（油状物４３．２ｇ）を集めた後、ｐＨ１１．８の蒸留水５００ｍｌで２回洗浄する。
【００４２】
次に沈殿を蒸留水２７０ｍｌ（初期容量の１０％）に溶かし、６Ｎ  ＨＣｌで溶液のｐＨを連続的に４．５に調整して沈殿を溶解させる（商品名Ｔｕｒａｘで知られる型の装置を使用して分散を助長する）。
【００４３】
３０分間撹拌後に混合物を１５分間５０００ｇで遠心分離して不溶分を除去し、Ｗｈａｔｍａｎ濾紙Ｎｏ．４１を敷いたブフナー漏斗で上清を濾過する。
【００４４】
こうして得られ黄色い透明タンパク質濃縮液２６０ｍｌを凍結乾燥する。
【００４５】
こうしてタンパク質含量９０〜９５重量％の凍結乾燥物１１．５ｇが得られる。
【００４６】
この抽出物をＳｕｐｅｒｏｓｅ  １２ＨＲカラムでゲル濾過分析すると（添付図２参照）、面積の７０％に相当し且つ約８８００Ｄａの分子量に対応する主フラクションが検出される。
【００４７】
製造例３（抽出物３の製造）
Ｍｏｒｉｎｇａ  ｏｌｅｉｆｅｒａ種子から殻を取り除いて得られる核油をＫＯＭＥＴの名称で知られる型のプレスで圧縮抽出し、得られたケーキを粉砕し、均質粉末を得る。
【００４８】
製造例１及び２に記載した操作手順によりケーキ１．２４ｋｇから粗抽出物を製造する。
【００４９】
タンパク質の沈殿を助長するために＋４℃で一晩の付加デカンテーション段階を追加する以外は製造例２に従ってタンパク質をｐＨ１１．８で沈殿させる。
【００５０】
製造例２と同一条件で沈殿を処理する（但し、沈殿の再構成用溶液のｐＨは４．５でなく６とする）。
【００５１】
こうして得られたタンパク質濃縮液（乾燥抽出物含量４．５９％、１．０５リットル）を噴霧乾燥し、噴霧乾燥物３４．６ｇを集める（即ち乾燥抽出物に基づく噴霧乾燥収率７１．５％）。
【００５２】
窒素添加量（Ｎ×６．２５）に基づくタンパク質含量は９０％を上回る（約９５％）。
【００５３】
製造例４（抽出物４の製造）
製造例１、２及び３に記載した操作手順によりケーキ１５０ｇから粗抽出物を製造する。
【００５４】
０．４５μｍで濾過後に黄色い透明濾液１．３５リットルが得られる。
【００５５】
カルボキシメチルセルロース（ＣＭ５２，ＷＨＡＴＭＡＮ）１００ｇをｐＨ７．５の蒸留水５００ｍｌで３０分間平衡化する。
【００５６】
ＷＨＡＴＭＡＮ濾紙Ｎｏ．４２を敷いたブフナー漏斗で混合物を濾過した後、セルロースを集め、ｐＨ７．５の水５００ｍｌで再び平衡化する。
【００５７】
水性媒体の濾去後、周囲温度で１時間撹拌下にセルロースをＭｏｒｉｎｇａ  ｏｌｅｉｆｅｒａの核ケーキの水性抽出物と接触させる。
【００５８】
吸着しなかった化合物（図３に破線で示すクロマトグラフィープロフィルをもつフラクション）をブフナー漏斗で濾去した後、「負荷」セルロースをｐＨ７．５の蒸留水１リットルで２回洗浄し、その後、ブフナー漏斗で濾過する。
【００５９】
次に、セルロースをｐＨ７．５の６０ｇ／ｌＮａＣｌ溶液１２０ｍｌと３０分間接触させる。
【００６０】
ＮａＣｌ溶媒で溶離したタンパク質をブフナー漏斗で濾取する（ＣＭ５２に吸着し、６０ｇ／ｌＮａＣｌ溶媒で溶離したタンパク質のクロマトグラフィープロフィルは図３に実線で示す）。
【００６１】
こうして乾燥抽出物含量９．６３％とタンパク質濃度６４．６ｇ／ｌ（即ち乾燥抽出物に基づくタンパク質純度６７％）をもつ濾液１１０ｍｌが得られる。
【００６２】
この抽出物をＳｕｐｅｒｏｓｅ  １２ＨＲカラムでゲル濾過分析すると（添付図３参照）、面積の７０％に相当し且つ約７１００Ｄａの分子量に対応する主フラクションが検出される。
【００６３】
溶液は透析又は限外濾過により脱塩し、凍結乾燥、噴霧乾燥又は他の任意の適切な手段により脱水することができる。
【００６４】
本発明により製造した生成物の活性と利点は単に非限定的な例示として以下に示す本発明者らによる試験の説明から自明である。
【００６５】
上記製造例により製造したＭｏｒｉｎｇａ種子タンパク質フラクション（抽出物１、３及び４）の実質効果を非損傷天然人毛とパーマにより損傷した人毛で脱着試験により評価した。
【００６６】
実質剤の毛髪ケラチン吸着評価プロトコールは特定条件で脱着した物質の分析に基づく。
【００６７】
ペプチド性実質タンパク質を
−高温（５０℃、１時間）、
−高イオン強度（０．５Ｍ  ＮａＣｌ、１６時間）
の異なる２条件で毛髪から抽出し、フルオレサミンとの反応（第１アミンとの反応）後に抽出液中で分光光度法（Ｔｅｇｌｉａら，１９９２）により定量した。フルオレサミンとの反応は抽出物１ではｐＨ８、抽出物３及び４ではｐＨ６の硼酸緩衝液中で実施した。
【００６８】
結果を下表Ｉと添付図４Ａ及び４Ｂに要約し、夫々非損傷対照毛髪（図４Ａ）とパーマにより損傷した毛髪（図４Ｂ）からなる人毛房に濃度２％で添加した抽出物１、３及び４の実質効果（脱着による評価）を示す。
【００６９】
【表１】
0004709377.tif 000002
【００７０】
角質層に及ぼすＭｏｒｉｎｇａ種子タンパク質フラクションの実質効果をｉｎ  ｖｉｔｒｏ角質層水分補給モデル（ＯｂａｔａとＴａｇａｍｉ，１９９０）で評価した。
【００７１】
評価プロトコールとしては、ヒト皮膚から正方形状に切り取った角質層を実質タンパク質（抽出物１、３及び４）又は対照蒸留水で処理した。
【００７２】
標準リンス及び乾燥後、角質層を誘電コンダクタンス測定によるｉｎ  ｖｉｔｒｏ皮膚水分補給評価モデルに載せた。
【００７３】
ＨＲ＝４４％の制御湿度条件で出発誘電コンダクタンスを測定後、角質層を常法で加湿し、蒸留水添加から１、２、４、６及び２４時間後にコンダクタンス測定を行った。
【００７４】
実質剤の存在下の角質層のほうが長時間水分補給される（＝良好な保湿）。
【００７５】
ｉｎ  ｖｉｔｒｏ皮膚水分補給測定により評価した角質層に対する抽出物１、３及び４の実質性試験比較結果を図５Ａ及び５Ｂに要約する（１０回の試験の平均／±ＳＥＭ／１因子ＡＮＯＶＡ／アポステリオリフィッシャー検定）。
【００７６】
抽出物３及び４は角質層水分補給効果が高く且つ持続し、添加後４時間まで５０％の誘電コンダクタンス増加を示し、添加後２４時間まで水分補給効果を観察できた。
【００７７】
抽出物１．５％とＢＡＳＦ社から商品名Ｋｏｌｌｉｄｏｎ  ３０で市販されているポリビニルピロリドン（皮膜形成剤）１．５％を加えた水溶液の保湿性試験によりＭｏｒｉｎｇａタンパク質フラクション（抽出物１、３及び４）の実質効果をヒトでｉｎ  ｖｉｖｏ確認した。
【００７８】
上腕前内面の５カ所の皮膚ゾーンで精製水を染み込ませたガーゼによりもたらされる水分補給を静電容量により３０秒おきに２分間測定した。最初のゾーンは処理せず、次の３ゾーンは１．５％の抽出物１、３又は４と１．５％のＫｏｌｌｉｄｏｎ  ３０を加えた水溶液４μｌ／ｃｍ２、最後のゾーンは１．５％のＫｏｌｌｉｄｏｎ  ３０のみを加えた水溶液４μｌ／ｃｍ２で予め処理した。
【００７９】
添付図６（被験者の保湿を示す）に示す結果から明らかなように、皮膚水分補給は無処理又は皮膜形成剤単独を加えた対照ゾーンに比較して抽出物＋Ｋｏｌｌｉｄｏｎ  ３０で予め処理した皮膚ゾーンのほうが顕著である。
【００８０】
従って、１．５％抽出物＋１．５％Ｋｏｌｌｉｄｏｎ  ３０を加えた溶液は実質効果による保湿活性をもつ。
【００８１】
Ｍｏｒｉｎｇａタンパク質の濁水浄化作用は既に知られているが、意外にもヒト皮膚に対して植物炭等の粒子収集による汚染防止作用も示した。
【００８２】
Ｍｏｒｉｎｇａ種子タンパク質フラクションのこの浄化性は、抽出物１の水溶液０．７５ｍｌと薬用植物炭の０．５％水性懸濁液３ｍｌを試験管に加え、蒸留水０．７５ｍｌを同様に同一植物炭水性懸濁液３ｍｌと接触させた場合に比較することによりｉｎ  ｖｉｔｒｏで確認された。
【００８３】
１時間接触後に抽出物１を加えた試験管では元の黒い植物炭懸濁液は試験管の底の沈殿と上清の完全に透明な水に分離したが、抽出物を加えなかった試験管では炭の黒い水性懸濁液は殆ど変化しなかった。
【００８４】
Ｋｏｌｌｉｄｏｎ  ３０（ポリビニルピロリドンの登録商標）等の皮膜形成化合物を加えると、浄化プロセスを更に促進するという利点があることも認められた。
【００８５】
特別に開発されたｉｎ  ｖｉｖｏヒト試験によると、皮膚に塗布した汚染性薬用植物炭の水性懸濁液は相当の表面汚染を生じ、角質層の表層レベルへの粒子侵入を伴うことが観察された。
【００８６】
炭のこの汚染作用と汚染性粒子の角質層侵入に対する皮膚汚染除去剤としての抽出物１の効力も実験評価した。
【００８７】
標準化条件で実施した試験では、水中１．５％のＭｏｒｉｎｇａ抽出物とＫｏｌｌｉｄｏｎの混合物４ｍｇ／ｃｍ２を上腕前内面に塗布した。この処理後に同一０．５％炭水性懸濁液で皮膚を故意に汚染した。その後、濯ぎ水を再吸収させながら皮膚をこすらずに蒸留水で濯いだ。
【００８８】
次に、「ストリッピング」乃至ゴマージュ（ピーリング支持体）を皮膚に貼付けた後、剥がした。
【００８９】
ストリッピング乃至ゴマージュを１００倍顕微鏡で観察すると、表面皮膚状態を示すストリッピングと角質層の表層レベルの微細な皮膚凹凸が観察された。
【００９０】
予め処理しない皮膚ゾーンも同様に汚染した。
【００９１】
ストリッピング乃至ゴマージュの１００倍皮膚画像から明らかなように、Ｍｏｒｉｎｇａ抽出物とＫｏｌｌｉｄｏｎの混合物で予め処理した皮膚（図７Ｂ）では炭粒子の角質層侵入が非常に少ないが、対照皮膚（図７Ａ）では侵入がかなり顕著である。
【００９２】
抽出物＋Ｋｏｌｌｉｄｏｎ混合物で予め処理した皮膚からのストリッピング（図８Ｂ）の顕微鏡画像は炭粒子量の顕著な減少を示しており、抽出物とＫｏｌｌｉｄｏｎのこの混合物が濯ぎ操作中に皮膚を著しく有効に洗浄できたことを立証している。実際に、抽出物で予め処理しなかった皮膚のストリッピング（図８Ａ）に比較すると、濯ぎ操作により除去されなかった多数の炭粒子がストリッピングに付着していた。
【００９３】
従って、Ｍｏｒｉｎｇａ抽出物は次の異なる２種の相補的方法で汚染防止活性を発揮する。
−炭粒子を捕獲し、皮膜形成剤と協働して炭粒子の角質層侵入を阻止する。
−炭粒子を保持することにより、１回の濯ぎ操作で炭粒子を除去し易くする。
【００９４】
上記本発明の抽出物はスキンケア及びヘルス用（顔及び身体用製品、昼又は夜用製品、紫外線製品、皺防止健康製品、汚染防止製品）のみならず、ヘアケア及びヘルス分野（ローション、シャンプー、クリーム、ムース、保護剤、修復剤、柔軟剤、光保護剤又はパーマ及びカラーリング剤）、爪用製品（クリーム、ローション、マニキュア、モイスチャライザー、皮膜形成剤、保護剤及び修復剤）及び唇用製品（スティックアプリケーター、口紅、バルサム、モイスチャライザー、皮膜形成剤）でも利用することができる。
【００９５】
従って、本発明は活性成分として１種以上の上記タンパク質フラクション０．０１〜８０重量％、好ましくは約２重量％を単独又は少なくとも１種の別の活性成分と共に含むことを特徴とする皮膚又は皮膚付属器の特に局所用化粧品及び／又は医薬組成物にも関する。
【００９６】
本発明による得られるタンパク質フラクションは構造を修飾せずに天然形態（天然タンパク質）で使用してもよいし、以下の処理：
−Ｍｏｒｉｎｇａ属植物から抽出した天然タンパク質の重合、
−微生物又は植物細胞による発酵、
−Ｍｏｒｉｎｇａ属植物から抽出した天然タンパク質の化学的加水分解、
−動物、植物、微生物又は真菌起源のプロテアーゼによる天然タンパク質の酵素加水分解、
−化学的又は酵素官能化、
−例えば単糖類、配糖体、脂質等の分子又は化合物のグラフトによる化学的修飾のいずれか１種により修飾又は官能化した形態で使用してもよい。
【００９７】
前記フラクションは例えば皮膜形成剤、リポソーム、シクロデキストリン、ミセル、カイロミクロン、マクロ粒子、ミクロ粒子、ナノ粒子、マクロカプセル、マイクロカプセル及びナノカプセル等の適当な任意化粧品ビヒクルに組み込むか又は結合してもよいし、有機ポリマー又は無機キャリヤーに吸着又はグラフトしてもよい。
【００９８】
以上の通り、抽出タンパク質フラクションは皮膚、唇及び皮膚付属器、特に表皮、特に角質層及び皮膚付属器、即ち皮膚、毛髪及び爪の実質及び水分補給活性に加え、皮膚、唇及び皮膚付属器（爪及び毛髪）の生理的調節作用、皮膚及び皮膚付属器（爪及び毛髪）の再生、修復及び水分補給作用、皺防止作用並びに汚染防止作用（皮膚、唇、毛髪）を特にもつことが確認及び立証された。
【００９９】
以下、本発明の組成物の非限定的な実施例として、Ｍｏｒｉｎｇａ  ｏｌｅｉｆｅｒａ植物の少なくとも１種の種子タンパク質抽出物を含む種々の化粧品処方について説明する。
【０１００】
実施例１
モイスチャライジングリペアミルク形態の化粧品は例えば下記のような水相と油相から構成される重量組成とすることができる。
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【０１０１】
上記モイスチャライジングリペアミルクの製造方法は主に油相を８０℃に加熱し、水相の水も８０℃に加熱して防腐剤（Ｅｌｅｓｔａｂ  ４１１２）を溶かした後、タービン撹拌下に水相を油相に注入し、撹拌下に徐々に冷却した後、約５０℃でＭｏｒｉｎｇａタンパク質抽出物母水溶液、次いで香料を加え、最後に完全に冷却するまで撹拌することからなる。
【０１０２】
実施例２
アンチリンクルリペアクリーム形態の化粧品は例えば下記のような水相と油相から構成される重量組成とすることができる。
0004709377.tif 000004
【０１０３】
上記アンチリンクルリペアクリームの製造方法は主に油相を８０℃に加熱し、水相も８０℃に加熱してＥｌｅｓｔａｂ  ４１１２を溶かし、別にＭｏｒｉｎｇａ  ｏｌｅｉｆｅｒａタンパク質抽出物母溶液を調製し、タービン撹拌下に油相を水相に注入した後、約５０℃でＭｏｒｉｎｇａ抽出物母溶液を加え、最後に冷却するまで撹拌することからなる。
【０１０４】
実施例３
モイスチャライジングアンチポリューションデイクリーム形態の化粧品は例えば下記のような水相と油相から構成される重量組成とすることができる。
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【０１０５】
上記モイスチャライジングアンチポリューションデイクリームの製造方法は主に油相を８０℃に加熱し、水相も８０℃に加熱してＥｌｅｓｔａｂ  ３８８とＰＶＰを溶かし、８０℃でタービン撹拌下に油相を水相に注入した後、撹拌下に徐々に冷却した後、約５０℃でＭｏｒｉｎｇａタンパク質母分散液を加え、最後に冷却するまで撹拌することからなる。
【０１０６】
実施例４
アンチポリューションリペア生体皮膜形成無リンスヘアローション形態の化粧品は例えば下記のような重量組成とすることができる。
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【０１０７】
上記アンチポリューションリペア生体皮膜形成無リンスヘアローションの製造方法は主に約５０℃に加熱した水にＥｌｅｓｔａｂ  ５０５とヒドロキシエチルセルロースを溶かし、香料とＣｒｅｍｏｐｈｏｒ  ＲＨを分散した後、混合物を周囲温度にし、Ｍｏｒｉｎｇａタンパク質を溶かし、最後に濾過することからなる。
【０１０８】
当然のことながら、本発明は上記実施態様に限定されない。本発明の保護範囲内で特に種々の成分の組成や、等価技術の置き換えによる変更が可能である。
【図面の簡単な説明】
【図１】  製造例１の抽出物のゲル濾過クロマトグラフィープロフィルを示す。
【図２】  製造例２の抽出物のゲル濾過クロマトグラフィープロフィルを示す。
【図３】  製造例４の抽出物のゲル濾過クロマトグラフィープロフィルを示す。
【図４】  図４Ａは非損傷対照毛髪に対する製造例１、３及び４の抽出物の実質効果を示す。
図４Ｂはパーマにより損傷した毛髪に対する製造例１、３及び４の抽出物の実質効果を示す。
【図５】  図５Ａは製造例１、３及び４の抽出物で処理した皮膚の誘電コンダクタンス測定によるｉｎ  ｖｉｔｒｏ皮膚水分補給評価の結果を示す。
図５Ｂは対照に対する製造例１、３及び４の抽出物の誘電コンダクタンス増加率を示す。
【図６】  精製水を染み込ませたガーゼによる水分補給後の静電容量の測定値として表した製造例１、３及び４の抽出物の保湿能を示す。
【図７】  図７Ａは無処理対照皮膚の１００倍顕微鏡写真である。
図７Ｂは製造例１の抽出物とＫｏｌｌｉｄｏｎ  ３０の混合物で予め処理した皮膚の１００倍顕微鏡写真である。
【図８】  図８Ａは無処理対照皮膚の１００倍顕微鏡写真である。
図８Ｂは製造例１の抽出物とＫｏｌｌｉｄｏｎ  ３０の混合物で予め処理した皮膚の１００倍顕微鏡写真である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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