(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒト成長ホルモンを除く薬物が、
ヒドロキシアパタイトのカルシウム原子の一部を製造時に亜鉛に置換した、亜鉛含有多孔性ヒドロキシアパタイトに吸着されていることを特徴とする薬物含有徐放性微粒子。
【請求項２】
請求項１に記載の薬物含有徐放性微粒子、および塩化亜鉛、酢酸亜鉛又は塩化カルシウムからなることを特徴とする薬物含有徐放性微粒子。
【請求項３】
亜鉛含有多孔性ヒドロキシアパタイトが含有する亜鉛の原子数は、ヒドロキシアパタイトのカルシウム１０原子に対して０．１〜２．０であることを特徴とする請求項１又は２に記載の薬物含有徐放性微粒子。
【請求項４】
請求の範囲１ないし３に記載された薬物含有徐放性微粒子を有効成分として含有することを特徴とする非経口的投与用製剤。
【請求項５】
非経口的投与用製剤が皮下注射剤または筋肉注射剤のいずれかであることを特徴とする請求項４に記載の製剤。
【請求項６】
ヒドロキシアパタイトのカルシウム原子の一部を製造時に亜鉛に置換した、亜鉛含有多孔性ヒドロキシアパタイトの微粒子を、ヒト成長ホルモンを除く薬物含有の水溶液中に攪拌・分散し、水溶液が該亜鉛含有多孔性ヒドロキシアパタイト中に浸潤したのち、塩化亜鉛、酢酸亜鉛又は塩化カルシウムを含む水溶液を添加して該亜鉛含有多孔性ヒドロキシアパタイトに浸潤させ、その後安定剤などの添加物を加えて、凍結乾燥または真空乾燥することにより製造されることを特徴とする薬物含有徐放性微粒子の製造法。
【請求項７】
亜鉛含有多孔性ヒドロキシアパタイトの亜鉛の置換または含有率が０．１〜２．０であることを特徴とする請求の範囲第６項記載の製造法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】  本発明は、生体内で消失する多孔性アパタイト誘導体の微粒子を基剤とする薬物含有徐放性微粒子、その製造法、及びそれを含有する製剤に関する。
【背景技術】
【０００２】  薬物の長期間にわたる微粒子の徐放性注射剤は、これまでポリ乳酸・グリコール酸（ＰＬＧＡ）を基剤にしてその多くは検討されてきた（特開平１１−２８６４０３、特開２０００−２３９１０４、特開２００２−３２６９６０参照）。又、ヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）を含有するＰＬＧＡを基剤とした徐放性マイクロカプセルが報告されている（Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，２：７９５−７９９，１９９６）。又、ＬＨＲＨアゴニストであるリュープロレリンを含有するＰＬＧＡを基剤とした徐放性マイクロカプセルが報告されている（Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｂｕｌｌｅｔｉｎ，３６：１０９５−１１０３，１９８８）。ＰＬＧＡは生体内で加水分解して消失する生体内消化性の基剤で注射剤の基剤としては好ましい性質を有している。しかし、一般的にＰＬＧＡを使用する微粒子型の徐放性製剤において内封される薬物の水溶性が高ければ、投与初期に過剰な放出（初期バースト）をすることは避けられない問題点がある。また、製造に際して、有機溶媒の使用が避けられず、タンパク性薬物においては失活の問題がある。さらに、通常使用される製造方法としての溶媒除去法を採用すると、水溶性薬物の場合、その封入量は１０重量％以下となり、活性の弱い薬物では全体の投与量が大きくなり、投与しにくい。また、製剤の平均粒子径が２０μｍ以上となり、比較的大きく、注射用針は２１〜２３Ｇと太い針が必要となる。また、ヒドロキシアパタイトを用いた薬物の徐放性粒子についてはすでにいくつかの報告はある（Ｈ．Ｇａｕｔｉｅｒ  ｅｔ  ａｌ：Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ  Ｍａｔｅｒｉａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，４０，６０６−６１３，１９９８、Ｊ．Ｇｕｉｃｈｅｕｘ  ｅｔ  ａｌ：Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ  Ｍａｔｅｒｉａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，３４，１６５−１７０，１９９７）。しかし、いずれも薬物とヒドロキシアパタイトとの２成分系であり、ヒドロキシアパタイトの粒子径も４０〜８０μｍあるいは２００μｍと大きく、また、ｉｎ  ｖｉｖｏにおける徐放効果は不明である。さらに、アパタイト粒子に吸着した薬物（封入量）も１％以下と小さいものであった。
【発明の開示】
【０００３】  徐放性基剤には、投与後、薬物の放出の終了に近い時間内に生体内から消失するいわゆる生体内分解性あるいは生体内消失性の性質を有する素材を選定しなければならない。水溶性の高い薬物の場合においても投与初期に過剰の薬物が放出する初期バースト放出も小さいものでなければならない。さらに、薬物がタンパク性である場合を考慮して、有機溶媒を極力使用しないで製造ができる徐放性基剤と製造方法をみいださなければならない。薬物含有微粒子中の薬物封入量は１０重量％以上とし、２３Ｇ以下の細い注射針でも容易に通過でき、薬物徐放期間は少なくとも３日間以上にわたる微粒子製剤を調製するものでなければならない。
【０００４】  本発明者らは、これらの問題を解決するために、多孔性アパタイト誘導体の微粒子を利用することによって、種々の薬物に関する徐放性微粒子が得られることをみいだした。さらに、水溶性２価金属化合物及びヒト成長ホルモンを除く薬物を併用することによって少なくとも３日間以上にわたり薬物が徐放されること、ならびに水溶性の高い薬物においても初期バースト放出が抑制されることをみいだした。さらに、水溶性２価金属化合物を用いない場合でも同様の効果があることをみいだした。
【０００５】  そこで、本発明は、種々の薬物に関する徐放性微粒子を得ること、又少なくとも３日間以上にわたり薬物が徐放され、かつ水溶性の高い薬物においても初期バースト放出を回避することが出来る薬物含有徐放性微粒子、その製造法、及びそれを含有する製剤を提供することを目的とする。
【０００６】  本発明の薬物含有徐放性微粒子は、ヒト成長ホルモンを除く薬物、及び多孔性アパタイト誘導体からなり、さらに、ヒト成長ホルモンを除く薬物、多孔性アパタイト誘導体および水溶性多価金属化合物からなるものであり、水溶性多価金属化合物としては、塩化亜鉛、塩化カルシウム、水酸化カルシウム、塩化鉄、水酸化鉄、塩化コバルト、塩化アルミニウム、酢酸亜鉛などがあげられるが、なかでも水溶性２価金属化合物が最も好ましい。水溶性２価金属化合物としては亜鉛化合物及びカルシウム化合物が好適であるが、塩化亜鉛が最も好ましい。その他酢酸亜鉛、塩化カルシウム等も好適である。
又、本発明の非経口的投与用製剤は薬物含有徐放性微粒子を有効成分とすることからなる。
又、非経口的投与用製剤が皮下注射剤または筋肉注射剤であることが好適である。
又、多孔性アパタイト誘導体がヒドロキシアパタイトの構成成分であるカルシウムの一部を組成として製造時に亜鉛に置換した多孔性アパタイト誘導体であることが好適である。
又、多孔性アパタイト誘導体の亜鉛置換率または含有率が０．１〜２．０であることが好適である。
【０００７】  又、本発明の薬物含有徐放性微粒子の製造法は、多孔性アパタイト誘導体の微粒子を薬物含有の水溶液中に攪拌・分散し、水溶液が該多孔性アパタイト誘導体中に浸潤したのち水溶性２価金属化合物を含む水溶液を添加し、水溶性２価金属化合物を該多孔性アパタイト誘導体に浸潤させ、その後安定剤などの添加物を加えて、凍結乾燥または真空乾燥することからなる。
さらに、その製造法において、水溶性２価金属化合物を含む水溶液を添加せず、したがって水溶性２価金属化合物を該多孔性アパタイト誘導体に浸潤させない場合もある。
又、同様に、多孔性アパタイト誘導体がヒドロキシアパタイトの構成部分であるカルシウムの一部を製造時に亜鉛に置換した多孔性アパタイト誘導体であること、多孔性アパタイト誘導体の亜鉛の置換または含有率が０．１〜２．０であること、水溶性２価金属化合物が塩化亜鉛または酢酸亜鉛であることが好適である。
【０００８】  また、ここで用いられるヒト成長ホルモンを除く薬物についてはとくに限定しないが水溶性の薬物が好ましい。例えば、タンパク性薬物では、インターフェロン類、インターリュウキン類、Ｇ−ＣＳＦ、ＢＤＮＦ、ＦＧＦ、ＥＧＦ、各種抗体などがあげられる。ペプチド系薬物としては、ＧｎＲＨ誘導体、ＴＲＨ、エンケファリン類、ＰＴＨ、カルシトニンなどがあげられる。ＤＮＡ関連物質として、アンチセンス、リボザイムなどがあげられる。その他、抗炎症薬、ステロイド、抗痴呆薬、循環器系疾患治療薬などがあげられる。
【０００９】  基本的な製造方法は、多孔性アパタイト誘導体の微粒子を薬物含有の水溶液中に攪拌・分散し、十分に水溶液が該多孔性アパタイト誘導体中に浸潤したのち、さらに水溶性２価金属化合物を含む水溶液を添加し、水溶性２価金属化合物を十分に該多孔性アパタイト誘導体中に浸潤させる。その後、適当な安定剤などの添加物を加えて凍結乾燥または真空乾燥することによって薬物を含む多孔性アパタイト誘導体微粒子を基剤とする粉末の薬物含有徐放性微粒子を得る。実際に投与するときには、この得られた粉末を適当な分散媒中に分散して、皮下または筋肉内などに注射投与する。このようにして得られた微粒子を室温で多量の精製水中に分散することによって封入した薬物の脱離を測定すると、薬物により異なるが、多孔性アパタイト誘導体類に対して一定の量までは薬物は脱離しなかった。すなわち、薬物は、多孔性アパタイト類の細孔内に浸潤して吸着しているものと考えられる。
【００１０】  ここで使用する多孔性アパタイト誘導体微粒子は、既知の方法で得ることができる。たとえば、「山口喬・柳田博明編、牧島亮男・青木秀希著：セラミックスサイエンスシリーズ７バイオセラミックス．技報堂出版株式会社、７−９ページ，１９８４」に記載されている方法などが挙げられる。多孔性アパタイト誘導体としては、ヒドロキシアパタイトの組成としてＣａの一部を亜鉛（Ｚｎ）で置換したものが最も好ましい。その置換率（Ｃａ１０原子に対するＺｎの原子数）は、０．１〜５．０が好ましく、０．１〜２．０がより好ましい。このとき、（Ｃａ＋Ｚｎ）／Ｐの比率によって生体内での消失速度が異なり、１．６７よりも小さい方が水に溶けやすく、すなわち生体内で消失する速度が速くなる。（Ｃａ＋Ｚｎ）／Ｐの比が１．６７〜１．５１の範囲内であることが好ましい。この範囲の多孔性アパタイト誘導体を使用すると生体内で数週間から数ヶ月以内で消失する。その置換率または含有率（Ｃａ１０原子に対するＺｎの原子数）は、０．１〜５．０が好ましく、０．１〜２．０がより好ましい。また、多孔性アパタイト誘導体を製造するときの焼成温度は、低い方が水に溶けやすく、したがって生体内での消失速度も速くなる。焼成温度は、室温〜８００℃が用いられるが、１５０℃〜６００℃が好ましい。さらには１５０℃〜４００℃がより好ましい。８００℃以上で焼成されると生体内で消失しなくなる。微粒子の粒子径は、焼成温度で制御できるが０．１μｍ〜１００μｍの範囲で使用できる。このうち、０．１μｍ〜２０μｍが好ましい。さらには、０．２μｍ〜１０μｍがより好ましく利用できる。
【００１１】  上記の薬物の多孔性アパタイト誘導体への吸着率は、Ｚｎ置換をしないヒドロキシアパタイトに比較して多孔性アパタイト誘導体の方がはるかに大きい。これは亜鉛を置換または含有させることで、有意に比表面積・気孔率が高くなるためである。吸着率の大きいほど薬物含有徐放性微粒子の総投与量が少なくなり好ましい。好ましい吸着率は、薬物の至適投与量によって異なるが、一般的には、多孔性アパタイト類の２〜３０重量％である。このうち５〜２５重量％が好ましく用いられる。さらには１０重量％以上吸着するものがより好ましい。
【００１２】  多孔性アパタイト誘導体類に薬物を吸着させた後添加する水溶性２価金属化合物は、ＺｎまたはＣａが好ましい。なかでもＺｎが最も好ましい。その使用量は、薬物の物理化学的性質によって異なるが、一般的には、多孔性アパタイト誘導体の１〜７０重量％の範囲で使用される。十分な徐放性を維持させるには、５〜７０重量％が好ましく用いられる。使用される水溶性２価金属化合物は、塩化物、有機酸の塩が好んで用いられる。たとえば塩化亜鉛、酢酸亜鉛、塩化カルシウムなどが挙げられる。
【００１３】  以上のようにして得られた薬物を含有する徐放性微粒子の徐放期間は、ＨＡＰ誘導体の焼成温度、２価金属化合物の使用量により制御でき、３日間以上にわたり薬物の徐放が可能である。１週間以上にわたる徐放も可能で、実用的には１週間以上の徐放が好ましい。
【００１４】  最終的に得られた薬物含有徐放性微粒子の粒子径は、通常の投与に用いられる注射針を通過すればよい。実際には、注射針の径は細いほど患者に対する恐怖心も小さい。注射針の太さをあらわす国際基準で２５Ｇ以下（数字の大きいほど細くなる）の太さの針を通過することが好ましい。このため、薬物含有徐放性微粒子の粒子径は小さいほど好ましいが、極端に小さくすると薬物の保持量が少なくなるし、かつ、初期バースト放出が大きくなる。実際には０．５μｍ〜２０μｍが好ましい。さらに、０．５μｍ〜１０μｍがより好ましい。１０μｍ以下の粒子とすると２７Ｇの注射針を容易に通過する。ここで使用される薬物には特に制限がないが、水溶性であることおよび多孔性アパタイト誘導体類に吸着すればよい。水溶性の尺度は、水に対する溶解度で評価できる。その溶解度は１００μｇ／ｍＬ以上あれば通常は薬物含有徐放性微粒子を調製できる。より好ましくは５００μｇ／ｍＬ以上、１ｍｇ／ｍＬ以上の溶解度がさらに好ましい。
【実施例】
【００１５】  以下に実施例をあげて本発明を詳細に記載するがもちろんこの例に限定されるのものではない。
【実施例１】
【００１６】  リン酸ベタメタゾンあるいはリン酸ヒドロキシコーチゾン水溶液（１００μＬ、１００μｇ／ｍＬ）に所定量の多孔性ヒドロキシアパタイト（ＨＡＰ）または多孔性アパタイト０．５モル亜鉛置換誘導体（ＨＡＰ−Ｚｎ−０．５）の水懸濁液（１００μＬ）を混合し、室温１０分間放置後２５００Ｇで遠心し、その上清の２３０ｎｍでの吸収値から上清に遊離したリン酸ベタメタゾンまたはリン酸ヒドロキシコーチゾンを定量した。はじめに適用した所定量の薬物量から上清中に流失した残りの薬物量を吸着量とした。その結果を下記の表１に示す。表１から明らかのように、薬物に対してＨＡＰまたは多孔性アパタイト誘導体の量が大きくなるほど薬物はＨＡＰまたは多孔性アパタイト誘導体に高い比率で吸着した。その吸着比は、ＨＡＰに比べて多孔性アパタイト誘導体を用いた方が有意に高かった。
0004709007.tif 000002
表１中Ｂｅｔａは、リン酸ベタメサゾンを意味し、Ｈｙｄは、リン酸ヒドロコルチゾンを意味する。また、ステロイドとは、リン酸ベタメタゾンまたはリン酸ヒドロキシコーチゾンを意味する。
【実施例２】
【００１７】  多孔性ヒドロキシアパタイト（ＨＡＰ）または多孔性アパタイト誘導体（０．５モル亜鉛置換または含有誘導体（ＨＡＰ−Ｚｎ−０．５））を４５ｍｇ精秤し、それにインターフェロン−α（ＩＦＮ）の２．４ｍｇ／ｍＬ溶液からＩＦＮとして３０μｇを加え、１０分間放置した。その後、これに２０ｍＭの酢酸亜鉛溶液を１ｍＬ加え、３０分間振とうした。この分散液に１．５ｍＬの水を加え、洗浄して洗浄液中ＩＦＮを定量したところ、ＨＡＰの場合もＨＡＰ−Ｚｎ−０．５の場合もＩＦＮは検出されなかった。すなわち、全てのＩＦＮはＨＡＰまたはＨＡＰ−Ｚｎ−０．５に吸着していることが確認された。このように、有機溶媒を使用しないでタンパク質であるＩＦＮを吸着した薬物含有微粒子をえることができた。洗浄後、得られた粉末に２０％ＦＣＳ含有のＰＢＳ溶液２０ｍＬを加え、３７℃で１６時間振とうした。上清に溶出してきたＩＦＮを定量して溶出率を算出した。下記の表２に示す結果が得られた。
0004709007.tif 000003
いずれのシステムでも酢酸亜鉛の添加によって溶出は抑制され、無添加に比較してより長時間にわたる徐放性をしめした。ＨＡＰとＨＡＰ−Ｚｎ−０．５とを比較すると、明らかにＨＡＰ−Ｚｎ−０．５の方が溶出は遅延され、より長時間の徐放性を示した。