(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
醤油麹を調製し、
前記醤油麹に、前記醤油麹の調製に用いられた植物種子の容積（生種子換算）に対する容積比が１７０〜４５０％（Ｖ／Ｖ）となる量の食塩水を仕込んで醤油諸味を調製し、
前記醤油諸味を発酵熟成させ、
前記発酵熟成途中の醤油諸味に、醤油麹あるいは醤油麹及び食塩水を添加し、
前記添加後の醤油諸味を更に発酵熟成させることを特徴とする、醸造醤油の製造法。
【請求項２】
請求項１記載の方法により得られる醸造醤油であって、全窒素１．０％（Ｗ／Ｖ）当り４−ヒドロキシ−２（又は５）エチル−５（又は２）メチル−３（２Ｈ）フラノンを１５．０ｐｐｍ以下且つメチオノールを２．０ｐｐｍ以上含有する前記醤油。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、醸造醤油であるにも拘らず、醤油香が少なく芳醇な香気を有する新規な醤油に関する。
【背景技術】
【０００２】
醤油は、日本古来の伝統的調味料の一つであって、大豆若しくは大豆及び麦等の穀類を加熱変性し、水分を調整し、これに麹菌を接種培養して醤油麹となし、これに食塩水を仕込み（混和して）醤油諸味となし、これを発酵熟成させ、圧搾濾過して清澄な液体となし、これを火入れ（加熱殺菌）して得られる。本発明では、このようにして得られる醤油を「醸造醤油」という。【０００３】
醸造醤油は、３〜１０カ月の長期の発酵熟成の過程を必要とし、この間、醤油麹、醤油諸味中の種々の酵素、微生物の働きにより独特の色、味、香りを有するものとなる。特にその香りは、３００種以上の成分からなることが知られており、これらが複雑にからみあって醤油独特の風味を醸し出す。その香り成分として知られる４−Ｈｙｄｒｏｘｙ−２（ｏｒ５）ｅｔｈｙｌ−５（ｏｒ２）ｍｅｔｈｙｌ−３（２Ｈ）−ｆｕｒａｎｏｎｅ（以下、ＨＥＭＦという）は醸造醤油中に含まれる代表的な醤油の特徴香であり、この成分が多いほど、醤油として好まれる傾向にある。【０００４】
そのため、これまでにＨＥＭＦを増加させるための方法が種々検討され、開発されてきた（特許文献１〜３参照）。【０００５】
しかし近年消費者のニーズが多様化し、醤油の香りを抑えた醤油の需要が増えてきた。こうしたニーズに対応すべく、醤油の香りを低減するための方法も種々検討され、開発されてきた（特許文献４〜６参照）が、操作が煩雑であり、また工業的に実施するにはコストが嵩む問題点を有する。また、醤油の高沸点成分であるＨＥＭＦを減圧、吸着剤等により効率的に除去する方法も知られているが、この方法はＨＥＭＦのみを選択的に除去することはできず、その結果醤油品質を著しく損ない、かつコストが嵩むという問題を有している。【０００６】
ところで、ＨＥＭＦは醤油酵母の発酵により生成蓄積されるものであるから、醤油諸味中にＨＥＭＦを生成蓄積させないためには、醤油酵母の生育を抑えることが有効な手段となる。その極端な例として、醤油諸味を短時間、高温で消化を行い、酵母発酵を抑制して醤油様の調味液を得る手法も提案されている（非特許文献１）。【０００７】
しかし、酵母発酵を抑制しつつ調製した諸味や、短時間、高温消化して得られた醤油酵母非発酵諸味は原料臭、温醸臭が強く、マスキング力に劣り、またアルコールの生成蓄積が殆ど行われないため、アルコールが不足し、防黴性にも問題があり、調味料しての利用価値が低くなってしまうという欠点を有する。【０００８】
また、酵母発酵を抑制した、または行わない醤油諸味液汁は、酵母由来の複雑味を期待することが難しく、熟成感の不足した単調な風味のものとなる。【０００９】
それゆえ酵母発酵を抑制することなく、ＨＥＭＦの生成蓄積を抑制することができれば、醤油の熟成した旨味をそのまま残し、酵母由来の複雑味を有し、原料臭が目立たず、醤油香のみを減らした、汎用性に優れた醤油を得ることができるものと思われる。【００１０】
さて、醸造醤油の製造において、醤油の芳醇な香りを形成する各種の香気成分は主に醤油酵母により生成蓄積され、「醸造香」とも称される。中でも、メチオノールに代表されるアルコール系の香気成分は、酵母発酵との相関が高く、蒸煮大豆や炒熬割砕した小麦などの原料臭、醤油麹臭の低減作用を有し、また調味料として用いた場合に各種具材、調味素材の有する不快な香りを消去する（マスキング）効果を有することが知られている（非特許文献２）。【００１１】
このようなことから、醤油酵母の発酵によりメチオノールに代表される醸造香を著量生成蓄積させ、反対に醸造醤油の「特徴香」であるＨＥＭＦの生成蓄積をできる限り抑制することができれば、醤油醸造業界において多大な貢献となるものと思われる。【００１２】
しかし一般的に、醸造醤油ではメチオノールとＨＥＭＦの含量は連動しており、ＨＥＭＦが少ない醤油ではメチオノールも少なく、メチオノールが多い醤油ではＨＥＭＦも多い。これは、ＨＥＭＦもメチオノールも共に醤油酵母の発酵に由来しており、従来の醸造醤油の製造法により醤油を製造すると、メチオノールを維持しつつＨＥＭＦを低減することが困難であることを意味している。【００１３】
醸造醤油の製造法において、適正な酵母発酵を経過した醤油諸味にはＨＥＭＦが全窒素１．０％（Ｗ／Ｖ）あたり２０〜１５０ｐｐｍ程度含有しており、同時にメチオノールも１．０〜３．０ｐｐｍ程度含有している（非特許文献３）。【００１４】
しかし、このような醸造醤油は醤油の香りが強く、醤油様又は醤油由来の香気を望まない加工食品への用途には適さない。【００１５】
このように、従来の醸造醤油の製造法においては、メチオノールを維持したままＨＥＭＦを低減した醤油を製造することは全く不可能と考えられ、実施されていない。【００１６】
一方、ＨＥＭＦを含有しない醤油として、脱脂大豆を塩酸分解しアルカリで中和した後圧搾濾過して得られるアミノ酸醤油が知られているが、この醤油は塩酸分解に伴い、一種独特なアミノ酸臭を有し、また酵母発酵を行わないことから、ＨＥＭＦ、及びメチオノールを含有しない。従ってアミノ酸醤油は、ＨＥＭＦを含有しない点で本発明の目的と共通しているが、メチオノールも含有しない点で本発明の醤油とは相違し、明確に区別されるものである。
【特許文献１】特開平３−１８３４９０号公報
【特許文献２】特開平５−１７６７８１号公報
【特許文献３】特開平６−２７７０８３号公報
【特許文献４】特開平５−１１５２６１号公報
【特許文献５】特開平９−２７１３５１号公報
【特許文献６】特開２００４−１４１０１４号公報
【非特許文献１】醤油叢書第１集、永瀬一郎著、昭和４２年（１９６７年）６月１日発行、Ｐ２９
【非特許文献２】静岡県沼津工業技術センター研究報告Ｎｏ．８ＮＯＶＥＭＶＥＲ．２０００、微生物を利用した新規調味素材の開発
【非特許文献３】増補  醤油の科学と技術、板倉振六郎編著、平成６年（１９９４年）３月３１日増補、Ｐ２８５
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１７】
本発明の課題は、醸造醤油であるにも拘らず、醤油香が少なく芳醇な香気を有する新規な醤油を得ることにある。
【課題を解決するための手段】
【００１８】
本発明者等は、上記の課題を解決するため鋭意研究を重ねた結果、大豆若しくは大豆及び小麦等の植物種子を加熱変性し、水分を調整し、これに麹菌を接種培養して醤油麹となし、これに食塩水を仕込み（混和して）醤油諸味となし、これを発酵熟成させ、圧搾濾過して清澄な液体となし、これを火入れ（加熱殺菌）する醸造醤油の製造法において、食塩水の汲水歩合を、従来法のそれ（約１２０％（Ｖ／Ｖ））に比べて著しく高い値（１７０〜４５０％（Ｖ／Ｖ））に設定し、また該発酵熟成の途中の醤油諸味に対し、醤油麹あるいは醤油麹及び食塩水を再び添加し、発酵熟成するときは、醤油香が少なく芳醇な香気を有する醤油が得られることを見出した。本発明者等はまた、このような特徴的な方法により製造された醸造醤油は、全窒素１．０％（Ｗ／Ｖ）当り４−ヒドロキシ−２（又は５）エチル−５（又は２）メチル−３（２Ｈ）フラノンを１５．０ｐｐｍ以下且つメチオノールを２．０ｐｐｍ以上含有するものであることを見出した。そして、これらの知見に基づいて本発明を完成した。【００１９】
本発明の第１の形態は、
醤油麹を調製し、
前記醤油麹に、前記醤油麹の調製に用いられた植物種子の容積（生種子換算）に対する容積比が１７０〜４５０％（Ｖ／Ｖ）となる量の食塩水を仕込んで醤油諸味を調製し、
前記醤油諸味を発酵熟成させ、
前記発酵熟成途中の醤油諸味に、醤油麹あるいは醤油麹及び食塩水を添加し、
前記添加後の醤油諸味を更に発酵熟成させることを特徴とする、醤油香の少ない醸造醤油の製造法に関する。【００２０】
本発明の第２の形態は、
前記方法により得られる醤油香の少ない醸造醤油であって、全窒素１．０％（Ｗ／Ｖ）当り４−ヒドロキシ−２（又は５）エチル−５（又は２）メチル−３（２Ｈ）フラノンを１５．０ｐｐｍ以下且つメチオノールを２．０ｐｐｍ以上含有する前記醤油に関する。【００２１】
本発明においては、醤油麹の調製に用いられた植物種子の容積（生種子として換算した容積）に対する食塩水の容積比を、食塩水の「汲水歩合」と称する。例えば、生大豆５Ｌ＋生小麦３Ｌ、合計８Ｌの生種子に対して、１０Ｌの食塩水を汲んだ時には、汲水歩合は、（食塩水の容積／生種子容積）×１００＝（１０Ｌ／８Ｌ）×１００＝１２５％（Ｖ／Ｖ）となる。本発明において、生種子の容積は、メスシリンダー等を用いて測定される、空隙部分も含んだ「かさ容積」を意味する。
【発明の効果】
【００２２】
本発明によれば、醸造醤油であるにも拘らず、醤油香が少なく芳醇な香気を有する新規な醤油が得られる。また調味料として用いた場合に各種具材、調味素材の有する不快な香りを消去する（マスキング）効果を有する醤油が得られる。また後味に優れた醤油が得られる。また、汲水歩合が同一であるにも拘らず非常に淡色な醤油が得られる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２３】
以下本発明を詳細に説明する。【００２４】
本発明においては、醤油麹に所定量の食塩水を仕込んで得られた醤油諸味の発酵熟成を開始させてから、醤油麹あるいは醤油麹及び食塩水を添加するまでの間の工程を「第１段発酵熟成工程」と称することがある。そして、第１段発酵熟成工程における醤油諸味を「第１段諸味」と称することがある。【００２５】
本発明においては、第１段発酵熟成工程の途中で、すなわち発酵熟成が完全に終了する前に、第１段諸味に、醤油麹あるいは醤油麹及び食塩水が添加される。第１段諸味に醤油麹が添加される実施形態において、第１段諸味に添加される醤油麹を特に「追加麹」と称することがある。第１段諸味に醤油麹及び食塩水が添加される実施形態においては、醤油麹と食塩水とを予め混合して醤油諸味とし、醤油諸味の形態で第１段諸味に添加することが好ましいが、この実施形態において第１段諸味に添加される醤油諸味（醤油麹と食塩水との混合物）を特に「追加諸味」と称することがある。【００２６】
本発明においては、第１段諸味に追加麹又は追加諸味を添加した後の醤油諸味を更に発酵熟成させる工程を「第２段発酵熟成工程」と称することがある。そして、「第２段発酵熟成工程」における醤油諸味を「第２段諸味」と称することがある。【００２７】
（醤油麹の調製）
先ず、通常の醸造醤油の製造法に従い、大豆、脱脂加工大豆等の蛋白質原料を蒸煮変性したものと、麦類（小麦、大麦、裸麦、はと麦）及び米類等の澱粉質原料を加熱変性したものとを混和し、該混和物の水分を３５〜５０％（Ｗ／Ｗ）に調整した後、これにアスペルギルス・ソーヤ、アスペルギルス・オリーゼなどの種麹菌を接種し、２０〜４０℃で２〜４日間培養して醤油麹を調製する。【００２８】
麦類の加熱変性は炒熬割砕により行うことが好ましい。米類の加熱変性は蒸煮あるいは炊飯により行うことが好ましい。【００２９】
本発明において醤油麹の調製に用いられる「植物種子」とは、大豆、脱脂加工大豆等の蛋白質原料、ならびに、麦類（小麦、大麦、裸麦、はと麦）、米類等の澱粉質原料の総称である。【００３０】
本発明において「生種子」とは、乾燥、加熱、粉砕、蒸煮等の処理を施す前の前記植物種子を指す。【００３１】
蛋白質原料と澱粉質原料の配合比率は任意でよいが、その生種子容積比で、蛋白質原料：澱粉質原料＝５０〜７５％（Ｖ／Ｖ）：５０〜２５％（Ｖ／Ｖ）で行うことがより好ましい。【００３２】
なお植物蛋白質原料として脱脂加工大豆を用いる場は、脱脂加工大豆重量（ｋｇ）＝生大豆原料容積（Ｌ）×０．６として算出し、澱粉質原料として小麦を用いる場合は、生小麦原料重量（ｋｇ）＝生小麦原料容積（Ｌ）×０．７５として算出する。その他原料を用いる場合も、同様に単位容積あたりの重量を係数として算出すればよい。【００３３】
（食塩水の調製）
食塩水は、第２段発酵熟成工程後の、熟成が完了した第２段諸味中の食塩濃度が１３．０〜２０．０％（Ｗ／Ｖ）となる濃度が好ましく、１４．０〜１８．０％（Ｗ／Ｖ）がより好ましく、１５．０〜１７．０％（Ｗ／Ｖ）が最も好ましい。【００３４】
なお、第１段諸味中の食塩濃度は、上記第２段諸味の濃度を採用することが好ましい。【００３５】
第１段諸味及び第２段諸味の食塩濃度は１３.０％（Ｗ／Ｖ）未満では諸味が腐敗する危険があるため好ましくない。反対に２０．０％（Ｗ／Ｖ）より高い濃度では酵母の増殖が著しく阻害されるため好ましくない。【００３６】
（第１段諸味の調製）
仕込に用いる食塩水は、汲水歩合１７０〜４５０％（Ｖ／Ｖ）となる量の食塩水である。すなわち醤油麹の原料である蛋白質原料を生種子に換算したときの容積（イ）と、同じく醤油麹の原料である澱粉質原料を生種子に換算したときの容積（ロ）との合計容積に対して１７０〜４５０％（Ｖ／Ｖ）となる容積の食塩水を用いる。【００３７】
本発明において、このことは重要であって、汲水歩合が１７０％（Ｖ／Ｖ）未満及び４５０％（Ｖ／Ｖ）を越えるときは、醤油香が少なく、かつ芳醇な香気を有する醸造醤油を得ることができない。【００３８】
（第１段発酵熟成工程）
第１段発酵熟成工程では、乳酸菌による乳酸発酵と酵母菌による酵母発酵が進行する。【００３９】
（乳酸発酵）
上記条件で仕込んだ第１段諸味は、乳酸菌を添加して、あるいは添加せずに、１０〜２０℃の温度にて乳酸発酵を行う。このとき、醤油酵母発酵が先行しないよう、極力通気を避け、２０℃以下の低温で管理することが望ましい。乳酸発酵は、醤油諸味中に０．５％（Ｗ／Ｖ）以上の乳酸を生成させるまで行うことが好ましい。このように乳酸の生成蓄積した醤油は、醤油として良好な風味を有するので好ましい。【００４０】
（醤油酵母の添加）
醤油麹を食塩水に仕込んで得られる醤油諸味（ｐＨ５．８〜６．２である）は、次第に溶解（加水分解）して、原料溶出及び乳酸発酵が開始され、諸味のｐＨが５．３〜４．５に低下する。そして酵母の増殖に好適な醤油諸味となる。【００４１】
醤油酵母は早湧きを防止するため、乳酸発酵終了後、すなわち諸味のｐＨが５．３以下に低下したときに添加することが好ましい。【００４２】
本発明において酵母発酵に用いられる醤油酵母としては、食塩濃度１０．０〜２０．０％（Ｗ／Ｖ）の醤油諸味中で旺盛に生育繁殖可能な耐塩性醤油酵母が好ましい。このような醤油酵母としては、Ｚｙｇｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｒｏｕｘｉｉ、Ｃａｎｄｉｄａ（Ｔｏｒｕｌｏｐｓｉｓ）属酵母、Ｃ．ｅｔｃｈｅｌｌｓｉｉ、Ｃ．ｖｅｒｓｔｉｌｉｓ等が挙げられる。【００４３】
酵母は、速やかな発酵を促すため、初発菌数が諸味１ｇ当たり１×１０５〜１×１０７個となるように、予め培養しておいた酵母を醤油諸味に添加することが好ましい。【００４４】
（好気的発酵）
酵母発酵は、諸味を好気的に保つことが好ましい。本発明者らは、このように第１段諸味の仕込み時における汲水歩合を、従来法に比べて著しく高い値（１７０〜４５０％（Ｖ／Ｖ））とした醤油諸味を好気的に保持するときは、酵母の生育は旺盛になるが、驚くべきことにＨＥＭＦの生成を顕著に抑制できることを発見した。【００４５】
諸味を好気的に保つためには、該諸味に酸素、空気又はそれらの混合気体を通気するか、または通気と機械的攪拌（プロペラ式回転攪拌機、ブレード式回転攪拌機）を併用する。【００４６】
このようにして製造した醤油諸味は、通常の醤油諸味と比較してかなりの高汲水歩合となる。そのため、従来法における醤油諸味の汲水歩合（約１２０％（Ｖ／Ｖ））と比べて、醤油諸味中の固形分含量が少なく、諸味粘度が低くなるために通気効率が良く、その結果必要通気量も少なくてすむために、諸味の着色、アルコールの飛散等を最小限に抑えることができるという利点を有する。【００４７】
さらにはＨＥＭＦの生成前駆体である全窒素濃度と糖濃度が低いことから、酵母の増殖が旺盛となるにもかかわらず、ＨＥＭＦ生成量を規定量以下に抑えることができるため、好ましい。【００４８】
（第１段諸味の特徴）
第１段発酵熟成工程を完了させて、第１段諸味から直接に製品を得ると、醤油香が少ない醤油が得られる。しかし、全窒素濃度が低く、味に厚みが出ない。またアルコール濃度が低く、有害微生物による汚染を招く危険性があるため、諸味管理が困難である。さらには諸味も柔らかすぎるため、通常の圧搾装置で圧搾することは困難であり、特別な圧搾装置を必要とする。また好気的条件下で発酵させることから、芳醇な香りに欠け、熟成させると酵母臭が生じるという問題を有する。【００４９】
このように、第１段諸味の段階での製品化には種々の問題が生じるため、第２段諸味を調製する、すなわち第１段発酵熟成工程の途中の第１段諸味に対し醤油麹（追加麹）若しくは醤油麹及び食塩水（追加諸味）を添加することが必要である。【００５０】
（第２段諸味の調製）
第１段諸味に対する追加麹又は追加諸味の添加は、第１段諸味で不足している全窒素やアルコールを補うことを目的とする。追加麹、又は追加諸味の調製に用いる醤油麹に、特別なものを用いる必要はない。【００５１】
追加麹又は追加諸味の使用量は、第１段諸味の仕込み時における汲水歩合に応じて適宜決定することができる。追加麹又は追加諸味の使用量は、最終的に得られる醤油製品中の全窒素濃度が通常の醸造醤油並みとなる量であることが好ましい。ゆえに、最終的な汲水歩合（総汲水歩合）は、８０〜１６０％（Ｖ／Ｖ）の範囲に調製することが好ましく、さらに１００〜１５０％（Ｖ／Ｖ）の範囲では、圧搾等、諸味の取扱が容易になるためより好ましく、特に１２０〜１４０％（Ｖ／Ｖ）の範囲では、歩留まり、品質共に優れているため、最も好ましい。「最終的な汲水歩合」あるいは「総汲水歩合」とは、最終製品である醸造醤油の製造工程の全体で使用された植物種子材料の合計容積に対する食塩水の合計容積の比である。具体的には、第１段諸味に追加麹を添加する実施形態においては、「最終的な汲水歩合」あるいは「総汲水歩合」は、第１段諸味の調製のための醤油麹の原料である植物種子材料の容積（生種子換算）と、追加麹の原料である植物種子材料の容積（生種子換算）との合計容積に対する、第１段諸味の調製のための食塩水の容積の比を意味する。また第１段諸味に追加諸味を添加する実施形態においては、「最終的な汲水歩合」あるいは「総汲水歩合」は、第１段諸味の調製のための醤油麹の原料である植物種子材料の容積（生種子換算）と、追加諸味の調製のための醤油麹の原料である植物種子材料の容積（生種子換算）との合計容積に対する、第１段諸味の調製のための食塩水の容積と、追加諸味の調製のための食塩水の容積との合計容積の比を意味する。【００５２】
また、第１段諸味の調製のための醤油麹に対する、追加麹、又は追加諸味の調製のための醤油麹の割合は５０〜３００％（Ｗ／Ｗ）になるようにすればよい。この割合が５０％（Ｗ／Ｗ）以下であると、追加諸味でなく追加麹を添加する場合であっても、最終的に得られる醸造醤油中の全窒素濃度が低くなるため、好ましくない。反対にこの割合が３００％（Ｗ／Ｗ）を超える場合は、第２段諸味の原料溶出が悪化するため、原料利用率が低下し、好ましくない。この割合が５０〜３００％（Ｗ／Ｗ）の範囲内の場合は、諸味粘度も適正で、圧搾の問題もなく良好な品質の諸味が得られる。特に１００〜２００％（Ｗ／Ｗ）の範囲内である場合には、品質のバランスが良く、好ましい。【００５３】
また、追加諸味の調製に用いる食塩水の濃度は、第１段諸味の食塩濃度、及び追加諸味の調製に用いる醤油麹と食塩水との配合割合に左右されるが、追加諸味添加後の醤油諸味（第２段諸味）の食塩濃度が１３．０〜２０．０％（Ｗ／Ｖ）となるような濃度であればよい。【００５４】
（追加麹又は追加諸味の添加時期）
追加麹又は追加諸味の添加時期については、厳密に規定されるわけではないが、第１段諸味において、酵母の生菌数が第１段諸味１ｇ当たり３×１０７個以上、特に５×１０７個以上に達している期間に添加することが望ましい。酵母の生菌数が第１段諸味１ｇ当たり３×１０７個以上に達していない状態、あるいは死滅期に入り、酵母の生菌数が３×１０７個を下回った状態で追加麹又は追加諸味を添加すると、原料溶出による糖源の蓄積速度が、酵母による糖源の資化速度を上回り、ＨＥＭＦが生成するため好ましくない。逆に第１段諸味１ｇ当たり３×１０７個以上の生菌数に達している場合は、溶出とほぼ同時に糖源が資化されるため、ＨＥＭＦが生成せず、また最終諸味の還元糖（ＲＳ）も低く抑えることができるため、色も淡色に仕上がり、色沢安定性に優れているため、より好ましい。【００５５】
（諸味の酵母の生菌数の測定）
諸味中における醤油酵母の生菌数の測定は、耐塩性酵母数測定用培地（しょうゆ試験法、財団法人日本醤油研究所編、昭和６０年（１９８５年）３月１日発行、Ｐ２４８参照）にクロラムフェニコールを加えた下記改変培地に、所定濃度に希釈調整した諸味希釈液を所定量添加し、３０℃で２４時間培養後の醤油酵母コロニー数を測定し、測定結果に基づき醤油酵母生菌数（個／ｇ諸味）を求める。【００５６】
（改変培地）
組成
グルコース：３０ｇ
カザミノ酸：４ｇ
粉末酵母：２ｇ
ＫＨ２ＰＯ４：１ｇ
ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ：０．５ｇ
ＣａＣｌ２・２Ｈ２Ｏ：０．１ｇ
食塩：５０ｇ
クロラムフェニコール：０．０２５ｇ
寒天：２０ｇ
ｐＨ：４．８
水を用いて合計１０００ｍｌに調整
（第２段発酵熟成工程）
第２段発酵熟成工程では、追加麹又は追加諸味の添加後の諸味（すなわち第２段諸味）を更に発酵熟成させる。この工程では新たな乳酸菌および酵母の添加は行わずに、第１段諸味から移行した酵母および乳酸菌の働きにより発酵熟成を完了させることが好ましい。この工程では糖源の溶出と、第１段諸味から移行した酵母による糖源の資化がほぼ同時に行われる。すなわち、諸味中の糖濃度が顕著に上昇することなくアルコールが生成蓄積される。その結果ＨＥＭＦの生成量を最小限に抑えることができる。またこの発酵により、諸味の香気バランスも良好となり、諸味の微生物安定性も向上する。追加諸味添加後の通気については、激しく実施するとアルコールが飛散するため、適度に実施することが望ましい。第１段発酵熟成工程の途中で追加麹又は追加諸味を添加して得られる第２段諸味は、該添加後の乳酸発酵が期待できないため、第１段発酵熟成工程において、充分に乳酸発酵を行わせ、０．５％（Ｗ／Ｖ）以上の乳酸を生成させておくことが好ましい。【００５７】
（第２段諸味の管理）
第２段発酵熟成工程における第２段諸味の管理は、一般的な諸味管理方法に準じればよいが、ＨＥＭＦを低めに調製したい場合は２５℃以下の低温管理を行うことが好ましい。【００５８】
特に２０℃以下で管理を行えば、ＨＥＭＦの生成量をほぼゼロに抑えることが可能となるため、さらに好ましい。【００５９】
（圧搾、製品化）
このようにして熟成した諸味は、定法により圧搾濾過し、得られた清澄な液体を火入して、本発明の醤油香の少ない醸造醤油を得る。
【実施例】
【００６０】
（醤油麹の調製）
脱脂加工大豆１０Ｋｇ（生大豆容積換算で１６．７Ｌ）に８０℃の温水を１３Ｌ加え、これを飽和水蒸気を用いて蒸煮圧力２Ｋｇ／ｃｍ２（ゲージ圧力）で２０分間加圧加熱蒸煮したものに、生小麦１０Ｋｇ（生小麦容積換算で１３．３Ｌ）を炒熬した後割砕して得られる炒熬割砕小麦を混合して水分約４０％（Ｗ／Ｗ）の製麹用原料を調製した。次いで、この製麹用原料に、アスペルギルス・オリーゼ（ＡＴＣＣ１４８９５）のフスマ種麹（有効胞子数：１×１０９個／ｇ）を０．１％（Ｗ／Ｗ）（千分の１重量）接種し、一試験区毎に麹蓋に盛り込み３０℃に調整した恒温恒湿の製麹室に入れ、通常の製麹管理を４２時間行い、醤油麹を得た。この醤油麹０．８Ｋｇ当たりに含まれる大豆及び小麦の合計容積（それぞれ生大豆及び生小麦の容積で換算）は１．０Ｌであった。【００６１】
（第１段発酵熟成工程）
次いで、表１に示すように、醤油麹０．８Ｋｇずつ１０区分用意して、仕込タンクに採り、諸味の発酵熟成後の食塩濃度が１６．０％（Ｗ／Ｖ）となるように各区分に対し食塩水と水を混和した。すなわち、生大豆と生小麦の合計容積に対して表１に示す容積の食塩水を混和（表１には、この食塩水を、第１段諸味汲水歩合、％（Ｖ／Ｖ）と表記）、次いで、常法に従い、醤油乳酸菌を初発濃度が１×１０５個／ｇ諸味となるように添加し、諸味品温を１５℃に保持しつつ諸味管理を行い、原料溶出、乳酸発酵を約１ケ月行い、表１記載の成分分析値を有する第１段諸味（酵母添加対象諸味）を得た。【００６２】
次いで耐塩性の醤油酵母（チゴサッカロマイセス・ルーキシ）を初発菌数が５×１０５個／ｇ諸味となるように添加し、諸味品温２０℃で通気攪拌（通気量：１．０ｖｖｍ）を１０日間行い、表１記載の酵母菌数を有し、ＨＥＭＦ及びメチオノールがそれぞれ表１記載の第１段諸味を得た。【００６３】
（追加諸味の添加）
表２に示すように、この酵母高含有第１段諸味に対し、第１段諸味に使用したものと同様の製法で製造した醤油麹と食塩水とを混和して追加諸味を調製し速やかに該追加諸味を、総汲水歩合が１４０％（Ｖ／Ｖ）になるよう各区分に添加した。こうして第２段諸味を仕込んだ。【００６４】
（第２段発酵熟成工程）
第２段諸味を、諸味品温２０〜２５℃で２カ月間発酵、熟成させた。【００６５】
（圧搾濾過及び成分分析）
発酵、熟成後の第２段諸味を常法により圧搾濾過して、表２記載の成分分析値を有する最終製品（醤油）を得た。【００６６】
なお、比較のため、通常のアミノ酸醤油（化学醤油ともいう）の製造法に従い、脱脂大豆を塩酸で加水分解してアミノ酸を遊離せしめ、これを炭酸水素ナトリウム（ソーダ灰）で中和濾過し、これに補塩して食塩を約１６％（Ｗ／Ｖ）に調整してアミノ酸醤油を得た。こうして得られたアミノ酸醤油を区分１１の比較例とした。【００６７】
また表３に示す区分１２および１３の比較例は、追加諸味の添加を行わず、第１段諸味の発酵熟成を完了させ、醤油を製造した例である。【００６８】
これらの諸味液汁及びアミノ酸醤油の一般成分分析を行い、またＨＥＭＦ及びメチオノールの含量を測定した。なお表１、２及び後述の表３において、諸味液汁の成分分析は、しょうゆ試験法（財団法人、日本醤油研究所編、昭和６０年（１９８５年）３月１日発行）に記載されている方法により行った。また、ＨＥＭＦ及びメチオノールは、ガスクロマトグラフィーにて分析定量した（Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ  ａｎｄ  Ｆｏｏｄ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｖｏｌ．３９，９３４（１９９１）参照）。表中のＨＥＭＦ及びメチオノールの値は、全窒素１．０％（Ｗ／Ｖ）当りに換算して示した。原料利用率は、醤油原料（脱脂大豆及び小麦）中の全窒素に対する溶解全窒素の割合を％（Ｗ／Ｖ）で示した。【００６９】
表２の結果から、第１段諸味の調製の際に、食塩水の汲水歩合を１７０〜４５０％（Ｖ／Ｖ）とする本発明（区分５〜９）の醸造醤油は、従来の醸造醤油の製造法において採用される、食塩水の汲水歩合を１２０％（Ｖ／Ｖ）とする対照例の醸造醤油（区分３）と比べてＨＥＭＦ濃度が顕著に減少し、反対にメチオノール濃度が２〜３倍に増大することが判る。
【表１】
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【表２】
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【００７０】
（官能検査用醤油の調製）
上記で得られた各醤油の全窒素、食塩を、一般的な濃口醤油の規格である全窒素１．６％（Ｗ／Ｖ）、食塩１６．２％（Ｗ／Ｖ）に規格調整した後、８０℃で１時間火入を行い製品とした。なお規格調整が困難な区分８〜区分１０、区分１２及び区分１３については、全窒素を調整可能な最大値に調整し、食塩濃度は１６．２％（Ｗ／Ｖ）に調整統一した。【００７１】
（醤油の官能検査）
上記で得られた各醤油製品について、醤油感、及び風味の官能検査を実施した。官能検査は、識別能力を有する訓練されたパネル２０人により、対照例（区分３）に対し醤油感が強いと感じたパネルの人数（結果）を示す。また、風味が良好と感じたパネルの人数（結果）を示す。【００７２】
官能検査の結果は、表３に記載した。【００７３】
符号※：５％危険率で有意差あり、符号※※：１％危険率で有意差あり、符号※※※：０．１％危険率で有意差あり、符号なし：有意差なしをそれぞれ意味する。【００７４】
（ラーメンスープの官能検査）
上記で得られた各醤油製品を用いて、下記レシピによりラーメンスープを調製した。【００７５】
レシピ：
豚骨の熱水抽出濃縮物（Ｓ＆Ｂ社製固形スープ「白湯スープ」）  ２５ｇ
醤油                                              ５０ｍｌ
水                                            １０００ｍｌ
これらの材料を混合し、８０℃に加熱して試験に供した。【００７６】
上記ラーメンスープの醤油感及び、スープの獣臭（生臭さ）及びスープの後味の伸びについて官能検査を実施した。【００７７】
官能検査は、識別能力を有する訓練されたパネル２０人により、対照例（区分３）に対し、スープの醤油感が強いと感じたパネルの人数（結果）、スープの獣臭（生臭さ）が強いと感じたパネルの人数（結果）、及びスープの後味の伸びが強いと感じたパネルの人数（結果）を示す。【００７８】
官能検査の結果を表３に示す。【００７９】
符号※：５％危険率で有意差あり、符号※※：１％危険率で有意差あり、符号※※※：０．１％危険率で有意差あり、符号なし：有意差なしをそれぞれ意味する。
【表３】
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【００８０】
表３の結果から、本発明の醤油は、対照例（区分３）と比較して醤油感が顕著に低減されていることが判る。また風味も対照例（区分３）と同等であり、芳醇な風味を有することが判る。また本発明の醤油を用いたラーメンスープは、醤油感がほとんどなく、かつ獣臭（生臭さ）がマスキングされ、また後味の伸びが強いことが判る。すなわち、従来法による醤油の醸造法と比べて、同一の原料を同容積使用し、原料利用率を犠牲にすることなく、醤油香が非常に少なく、芳醇な風味を有し、しかもコク味のある醤油が得られることが判る。一方、比較例（区分１１）のアミノ酸醤油、及び比較例（区分１２及び１３）の第１段諸味より得られた醤油については、対照例（区分３）と比較して、醤油原液、ラーメンスープ共に醤油感が弱いものの、醤油原液では風味が悪く、ラーメンスープでは生臭さが目立った。またラーメンスープにおける後味の伸びについても、比較例（区分３）と同等かそれ以下であり、本発明の醤油が持つ後味の伸びには、遠く及ばないものであることが判る。【００８１】
本明細書で引用した全ての刊行物、特許および特許出願をそのまま参考として本明細書にとり入れるものとする。