(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
分離カラムであって、
入口と出口との間に延設されかつチャネル壁を有する分離チャネルと、
前記分離チャネル中の分離媒質であって、前記分離チャネルは前記分離媒質を前記分離チャネル中に保持するようにした少なくとも１つの感光性ポリマフリットを有し、前記少なくとも１つの感光性ポリマフリットは制御された多孔性を有する分離媒質と、
からなる分離カラム。
【請求項２】
請求項１記載の分離カラムにおいて、
感光性ポリマフリットは、チャネル壁の内表面と結合している分離カラム。
【請求項３】
請求項１記載の分離カラムにおいて、
前記少なくとも１つの感光性ポリマフリットは、入口、出口、または入口と出口の両方と隣接している分離カラム。
【請求項４】
請求項１記載の分離カラムにおいて、
感光性ポリマフリットの平均気孔寸法は、１．０μｍ〜５．０μｍである分離カラム。
【請求項５】
請求項１記載の分離カラムにおいて、
分離チャネルは、５〜３００μｍの内径を有する溶融シリカキャピラリであり、感光性ポリマフリットは、前記分離チャネル中への分離媒質の充填中の高圧に十分耐える構造である分離カラム。
【請求項６】
請求項５記載の分離カラムにおいて、
感光性ポリマフリットは、メタクリレートモノマまたはメタクリレート置換ケイ酸塩から誘導される分離カラム。
【請求項７】
請求項６記載の分離カラムにおいて、
感光性ポリマフリットは、光重合開始により重合されるメタクリレートモノマから誘導される分離カラム。
【請求項８】
請求項６記載の分離カラムにおいて、
感光性ポリマフリットは、光硬化可能なメタクリレート置換ケイ酸塩から誘導される分離カラム。
【請求項９】
請求項１記載の分離カラムにおいて、
前記分離カラムは、前記分離媒質で満たされた第１の部分および放射を伝達する前記第１の部分に隣接する第２の部分を有する分離カラム。
【請求項１０】
請求項９記載の分離カラムにおいて、
前記第２の部分は、前記分離媒質を含んでいない分離カラム。
【請求項１１】
請求項１記載の分離カラムにおいて、
チャネル壁は、保護コーティングにより被覆されている外表面を有する分離カラム。
【請求項１２】
請求項１１記載の分離カラムにおいて、
保護コーティングは、ポリイミドを含む分離カラム。
【請求項１３】
分離カラムであって、
入口と出口との間に延設されかつチャネル壁を有する分離チャネルと、
前記分離チャネル中の分離媒質であって、
感光性ポリマで形成されている多孔性マトリクスと、
前記多孔性マトリクス中に分散されたクロマトグラフ粒子と
からなる分離媒質と、
からなる分離カラム。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、分離カラム、特にキャピラリ電気クロマトグラフィを含むキャピラリゾーン電気泳動において有用なキャピラリに関し、より詳細には、感光性ポリマ部材を含む分離カラムに関する。この感光性ポリマ部材は、フリットの形をとり得る。
【０００２】
【従来の技術】
過去１０年間にわたり、キャピラリゾーン電気泳動（ＣＺＥ）は、そのピーク容量（すなわち、単位時間当たりに分離されるピーク数）の高さによって、イオン種をそれらの電気泳動移動度によって分離するための強力で広範囲に使用される技術へと発展してきた。しかしながら、ＣＺＥには、非荷電の分析対象物に対する選択性が欠けているために、これがより大きな問題として残った。非荷電化合物が分離できる擬似固定相を提供することによりこの問題の克服を助けるため、ミセル電動クロマトグラフィ（ＭＥＫＣ）のようないくつかの方法が開発されてきた。ＭＥＫＣなどの方法の適用は、この手法において使用できる擬似固定相の数が限定されるために制約がある。
【０００３】
クロマトグラフィ的移動機構と電気泳動的移動機構の両方が組み合わされているキャピラリ電気クロマトグラフィ（ＣＥＣ）の出現によって、非荷電分析対象物混合物の分離および分析が、少量の試料を用いて高い分解能および効率で達成し得る。分析用途についてのＣＥＣへの関心の高まりは、プレート数が多いことおよび相対的に高い分離速度が達成されることならびに使用できる固定相（高速液体クロマトグラフィにおいて一般的に使用されるもの）が広範囲であることに起因する。
【０００４】
多くのグループが、７５μｍの典型的な内径の電気クロマトグラフィキャピラリカラム製作のためにスラリまたは動電学的充填法の使用を報告している。逆相キャピラリカラムが、典型的には粒径が１．５〜５μｍのオクタデシルシリカ（ＯＤＳ）を用いて調製されている。両方の充填方法において、キャピラリの入口と出口の双方における保持フリットの使用は、クロマトグラフィ充填材のキャピラリからの漏出防止用に必要とされてきた。そのようなキャピラリの性能に対するフリットの影響に関する体系的研究は報告されていない、これらのフリットがこれらのキャピラリカラムの効率を低下し得ると考えられる。
【０００５】
スラリおよび動電学的充填に伴うフリット製作およびカラム調製の技術的問題を回避するキャピラリカラム調製用の代わりのやり方が報告されている。あるやり方では、接合された固定相が使われる。しかしながら、このやり方で調製されたキャピラリカラムは、調製時間が長いだけでなく保持容量および試料容量が低いという欠点がある。中空チューブキャピラリカラムの別の調製方法では、モノリシック充填技術を用いる。例えば、Ｄｕｌａｙらはゾル−ゲル化学に基づくクロマトグラフィ粒子を充填したモノリシック多孔性キャピラリカラムの調製とキャラクタリゼーションについて述べている（Dulay et al., Anal. Chem., 70, pp. 5103-5107, 1998）。
【０００６】
それにもかかわらず、フリットを必要とする分離カラムが望まれる場合、フリット製作のための単純かつ再現可能な方法があることが望ましいであろう。
【０００７】
粒子充填カラム用フリット製作の従来方法は、ＯＤＳ（オクタデシルシリカ粒子）などの充填材部分の焼結を伴う。このやり方にはいくつかの欠点があり、それは（１）フリットを確実かつ再現可能に生成することの困難さ、（２）フリット自体内部の固定相の特性の変質、（３）フリットの多孔性の制御の困難さ、（４）フリット位置のキャピラリの弱さ（５）フリットにより引き起こされるバンドのブロード化、（６）気泡形成およびフリット表面への極性分析対象物の吸着である。これらの問題は、カラム性能およびカラム−カラムの再現性に直接的に影響し得る。
【０００８】
本発明の１つの特徴において、チャンネル壁および前記チャンネル内の分離媒体から成る分離カラムが提供され、前記分離カラムは感光性ポリマ部材を含んでいる。１つの実施の形態においては、感光性ポリマ部材は、分離媒体を保持するようにしたフリットである。このフリットは、多孔性が制御されており、好ましくは、光重合開始により重合されるメタクリレートモノマからあるいは光硬化可能なメタクリレート置換ケイ酸塩から誘導される。重合が放射により開始すなわち硬化されるので、ポリマ性部材の位置を局限することができ、多孔性が再現可能に制御できる。さらに、重合は、典型的な保護ポリイミドコーティングを除去せずに行える。
【０００９】
本発明の別の特徴は、溶融シリカキャピラリ中でのフリットの製作方法であって、より詳細には多孔性が制御されたフリットの製作にある。本発明の利点は、（ｉ）簡単かつ迅速な調製、（ｉｉ）短い反応時間、（ｉｉｉ）感光性ポリマのＵＶ透明性、および（ｉｖ）気孔寸法の細かい制御が含まれる。この結果、フリットの総調製時間が短くなり、かつ高温の使用を回避できる。
【００１０】
【発明の実施の形態】
キャピラリゾーン電気泳動（ＣＺＥ）は久しく、イオン種をその電気泳動移動度によって分離するための魅力的な分析手法であった。しかしながら、ＣＺＥの限界は、中性化合物の分離において効果がないことであった。この目的のため、ＣＺＥとクロマトグラフィとを組合せたキャピラリ電気クロマトグラフィ（ＣＥＣ）が中性種の分離を改善すべく開発されてきた。分配と電気泳動移動度とに基づく機構の組み合わせは、ＣＥＣ中で生じる分離の説明に用い得る。
【００１１】
充填キャピラリカラム中で保持フリットを調製するための現行の技術は、カラム内でのシリカビーズの焼結を伴う。この焼結方法は、キャピラリカラムフリットの調製に現在使用されている共通の技術である。焼結シリカフリットの欠点は、フリットの多孔性および長さの再現性がないことならびに非常な高温を必要とすることである。
【００１２】
本発明者らは、キャピラリカラム中で感光性ポリマフリットを調製すべく、ポリマの光化学を用いた。感光性ポリマ法には、現行の焼結シリカ法に対して、いくつかの利点がある。すなわち、（ｉ）簡単かつ迅速な調製、（ｉｉ）室温での短い反応時間、（ｉｉｉ）感光性ポリマのＵＶ透明性、（ｉｖ）気孔寸法の細かい制御、および（ｖ）フリット長さおよびフリット位置の制御である。
【００１３】
本発明の１つの実施の形態においては、感光性ポリマフリットは、メタクリレートモノマ、気孔発生溶媒、および光開始剤の混合物から調製される。メタクリレートモノマは、クロマトグラフィ分離媒質の調製における使用が公知である（Viklund et al., Chemistry of Materials, 9, pp. 463-471, 1997）。Ｖｉｋｌｕｎｄらは、光重合により調製される様々なポリマを研究して、これらが分析化学における吸着剤として適していることを見出した。Ｖｉｋｌｕｎｄらは、参照により本出願に全体として含まれている。
【００１４】
本発明者らの研究の１つの特徴は、適切なフリットの調製およびＣＥＣ分離に対するその影響に集中した。本発明者らは、メタクリレートをベースとする多孔性ポリマ調製用の特に好ましい気孔発生溶媒としてイソオクタンとトルエンとの混合物を選んだ。ポリマ混合物中の気孔寸法は、気孔発生溶媒の使用によって、およびモノマと気孔発生剤とのモル比を変えることにより制御し得る。例えば、これらの溶媒の比率を変えることにより、本発明者らの実験において、１．０〜５．０ミクロン、より好ましくは２．５〜４．０μｍのフリット気孔寸法が使われた。構成成分比と気孔寸法との関係は、例えばＶｉｋｌｕｎｄら（p. 464）により論じられている。光重合は、ポリイミドコーティングの除去なしで、シリカキャピラリ中でさえも行なえる。この方法は、入口フリットの調製に特に有利である。グリシジルメタクリレートの加水分解により、フリットの疎水性が増大できることが見出された。これにより、逆相クロマトグラフィ材料を有するカラム上でのフリットの保持効果が最小になった。
【００１５】
本発明の別の実施の形態において、感光性ポリマフリットは、ゾル−ゲル反応を経て、メタクリレート置換されたケイ酸塩を光硬化することにより調製される。適切な光硬化ゾル−ゲルは公知であり、Ｅｔｉｅｎｎｅら（J. Sol-Gel Sci. & Tech., 13, pp. 523-527 (1998)）により記載されているように、本発明のこの面を実行するのに便利であり、これは参照により、全体として含まれている。要するに、３−（トリメトキシシリル）プロピルメタクリレート（ＭＡＰＴＭＳ）のようなモノマが照射されてゾル−ゲルマトリクスを形成する。そのような試薬は、本発明の第１の実施の形態においてすでに説明されているメタクリレートベースの試薬であり、光硬化可能である。大まかには、金属アルコキシドゾル−ゲルプロセスは、Ｂｒｉｎｋｅｒら（Sol-Gel Science, Academic Press, Inc., New York (1990)）により説明されている。ゲル硬化時に、硬質で多孔性のガラスが得られる。
【００１６】
キャピラリの検出部位のポリイミドコーティングを化学的または熱的手段により除去することは一般に行なわれていることである。なぜならば、ポリイミドは、キャピラリ内にＵＶ光をわずかしか透過させないからである。ＣＥＣで用いられる充填キャピラリカラム内でのフリットの調製において、キャピラリカラム中のシリカビーズを集中させるのに必要な高熱は、ポリイミドコーティングの除去につながり、これはシリカフリットを含むキャピラリの部分にもろい溶融シリカを強いることになる。しかしながら、部材として感光性ポリマを使用することにより本発明を実施する際に（入口および出口フリットとしてまたは支持マトリクス自体として）、ポリイミドコーティングを除去する必要は全くない。なぜならば、ポリマの調製に用いられる光化学は、比較的低レベルのＵＶ光で実施できるからである。従って、キャピラリ外表面コーティングはそのまま残り、カラムの機械的強度は維持される。
【００１７】
ＯＤＳ粒子を含むまたは含まないメタクリレートモノマの重合に基づく感光性ポリマフリットの実施の形態の画像は、図１のパネル（Ａ）〜（Ｃ）の電子顕微鏡写真で説明されている。図１のパネル（Ａ）は、内径７５μｍのキャピラリ中の感光性ポリマを示し、図１のパネル（Ｂ）はこのポリマの拡大図である。図１のパネル（Ｃ）は、１．５μｍＯＤＳ粒子存在下におけるポリマ構造を示す。この顕微鏡写真は、ＯＤＳ粒子の存在下において感光性ポリマがその球形形状を失い、気孔がシリカビーズを取り込みそれをその領域内に保持することも示している。
【００１８】
重合が完了した後、１つのフリットを有しＯＤＳ粒子が存在しないキャピラリーカラムに（手動のハンドヘルドシリンジポンプを用いて）緩衝溶液を通した。感光性ポリマフリットのない空のキャピラリと比較して、背圧増加はほとんど全く観察されなかった。この観察により、フリットがシステムの流動抵抗を大きく増加させないことが示される。重合に先立ち、キャピラリ内表面の特定の機能化は全く行なわれなかったが、出口フリットは、カラム充填時に用いられた高圧（＞６０００ｐｓｉ）に短時間さらされても容易に耐える。この挙動は、モノリシック多孔性ポリマフリットがキャピラリ壁の剥き出しの内面と強固に結合していることを示している。充填粒子は、その径が平均気孔径よりも小さいにもかかわらず、充填作業またはＣＥＣ適用の間にフリット気孔を通過するものは全く見られなかった。これは、気孔の蛇行した通路およびモノリシック構造内部のボトルネック形状の気孔の存在などのいくつかの効果の協同的な作用に起因している。この充填法により５つのカラムが調製され、すべてのケースにおいて、感光性ポリマフリットは本発明者らの実験条件下で同様な機械的安定性を示した。
【００１９】
いくつかの他の方法とは対照的に、ＵＶ光開始重合は、反応が完了するために高温を必要としない。従って、充填に用いられる移動相は、重合の間、入口フリットと充填剤双方の中に留まる。その結果、カラムの使用に先立つカラムの調整時間はかなり短縮される。
【００２０】
メタクリレート重合に基づく感光性ポリマフリットを有する１．５μｍＯＤＳ充填キャピラリカラムを用いたすべての分離行程の間に、気泡形成は全くなかった。気泡形成の抑制は、ランニングバッファへのＳＤＳの添加および感光性ポリマフリットによる焼結シリカフリットの代替に起因するものであろう。
【００２１】
メタクリレートモノマの重合に基づく感光性ポリマフリットを有する充填カラム（カラム２）の実施の形態の効率Ｎ、プレート高さＨ、および減少プレート高さｈが表１に示してある。
【表１】
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【００２２】
図２は、平均気孔径がそれぞれ２．５μｍ（図２、パネル（Ａ））および４．０μｍ（図２、パネル（Ｂ））の多孔性ポリマフリットを備えたカラムで行なった２つの中性化合物、すなわちチオ尿素および２−メチルナフタレンの分離を比較したものである。４μｍフリットのカラムは、他方のカラムに比べ、保持時間がより短くかつより良好なカラム効率を示した。
【００２３】
チオ尿素、ベンジルアルコール、ベンズアルデヒド、および２−メチルナフタレンから成る中性分子混合物の分析についてのラン−ラン間の再現性の体系的な研究を３日間かけて行なった。図３は、表１の実施の形態のラン１０、３０、および５０の電気クロマトグラムを示す。試験したすべての化合物の保持時間にはほとんど全く変化がない。表２は、各化合物について、容量比ｋ1 、効率Ｎ、および分解能Ｒの相対標準偏差を示すものである。モニタした３つの変数全て（６０回のランで平均をとった）についてのこれらのＲＤＳは、それぞれ３．５％、３．３％、および５．５％であった。
【表２】
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【００２４】
充填カラムの完全性は変化せず、このカラムはより長期間に渡って有用であると考えられる。図３において、チオ尿素、ベンジルアルコール、ベンズアルデヒド、および２−メチルナフタレンの効率は、それぞれ２０００００プレート／ｍ、１６００００プレート／ｍ、６００００プレート／ｍ、および２００００プレート／ｍである。保持されない化合物であるチオ尿素は、効率が最も高かった。チオ尿素よりも多く保有された化合物について効率は低下した。最後の２本のピークを図２のものと比較した時のかなりの効率低下は、主としてランニングバッファ中のアセトニトリルのパーセンテージがより低い（５０％）ことに起因する。さらに、２−メチルナフタレンのピークは、主としてＯＤＳ粒子表面への吸着に起因するテーリングを示している。
【００２５】
実  験
材料。トリメチロールプロパントリメタクリレート（ＴＲＩＭ）および２，３−エポキシプロピルメタクリレート（グリシジルメタクリレート、ＧＭＡ）のモノマは、Ａｌｄｒｉｃｈ社（ミルウォーキー、ＷＩ）製の最高純度のものであった。Ｓｉｇｍａ社（セントルイス、ＭＯ）製トルエンおよび２，２，４−トリメチルペンタン（イソオクタン）を気孔発生溶媒として用いた。本研究において用いた溶融キャピラリは、Ｐｏｌｙｍｉｃｒｏ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社（フェニックス、ＡＺ）から購入した。１．５μｍ球形ＯＤＳ粒子は、Ｍｉｃｒａ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｉｎｃ．（ラファイエット、ＩＮ）から購入し、α−メトキシ−α−フェニルアセトフェノン（ベンゾインメチルエーテル、９９％）、チオ尿素、ベンズアルデヒド、ベンジルアルコール、２−メチルナフタレン、リン酸ナトリウム、およびアセトニトリル（ＨＰＬＣグレード）はＡｌｄｒｉｃｈ社（ミルウォーキー、ＷＩ）から購入した。水は、ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ社（ミルフォード、ＭＡ）製Ｕｌｔｒａｐｕｒｅ  ｗａｔｅｒ  ｓｙｓｔｅｍで精製した。
【００２６】
重合方法。光重合は、前記のように行なった(Viklund et al., Chem. Mater., 9, pp. 463-471, 1997)。現場（ｉｎ  ｓｉｔｕ）遊離基重合は、モノマ溶液を内径４ｍｍの石英管および内径７５μｍのキャピラリ中で６０分間室温で、Ｓｐｅｃｔｒｏｌｉｎｋｅｒ  ＸＬ１５００Ａ（Ｓｐｅｃｔｒｏｎｉｃｓ  Ｃｏｒｐ．、ウエストベリー、ＮＹ）中で照射することにより開始した。この装置は、１５Ｗ蛍光ブラックライト管６本を備え、主に波長が３６５μｍ（？）のＵＶ光を作り出す。１時間後、ＨＰＬＣポンプを用いてエタノール洗浄することにより、気孔発生剤、未反応モノマ、およびその他の可溶性化合物が気孔から除去された。
【００２７】
気孔寸法測定。多孔性ポリマの気孔寸法分布は、キャピラリと同じ重合混合物から４ｍｍ管中で調製した試料について、特注の自動化ＢＥＴ収着測定装置−多孔度測定装置（Ｐｏｒｏｕｓ  Ｍａｔｅｒｉａｌｓ，Ｉｎｃ．，イサカ、ＮＹ）を用い、水銀圧入式多孔度測定法により求めた。
【００２８】
フリット製作およびカラム充填。出口フリットは、モノマ混合物をキャピラリに導入することにより調製した。キャピラリの両端はパラフィルム（Ｐａｒａｆｉｌｍ）で密封した。次に、キャピラリをアルミニウム箔で覆い、ポリイミドコーティング無しの出口部分の１ｍｍ分はＵＶ光に曝した。出口部分の残りの部分は、ＣＥ実験用の検出窓のため、光重合中はマスキングした。室温で１時間の重合の後、未反応モノマ溶液をシリンジポンプによりカラムからフラッシングした。カラムをスラリ充填した後、１．５μｍＯＤＳ粒子をキャピラリの入口端部まで満たした。出口フリット製作と同じ方法を用いて入口フリットを形成した。結果として得られたカラムを、それらの使用に先立ち、手動シリンジポンプ（Ｕｎｉｍｉｃｒｏ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ．，プレザントン、ＣＡ）で数時間、約５００ｐｓｉまでカラム入口を与圧することにより事前調整した。ポリイミドコーティングを除去しなくても重合が生じることが分かったが、工程は約４〜６時間要した。
【００２９】
キャピラリ電気クロマトグラフィ。ＣＥＣ実験は、ＵＶ吸光度検出器を備えたＢｅｃｋｍａｎモデル２０００Ｐ／ＡＣＥキャピラリ電気泳動システム（Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ，フラータトン、ＣＡ）を用いて実施した。内径７５μｍの充填キャピラリカラムをカートリッジホルダに取り付け、次にこれを測定装置に挿入した。このシステム中で充填カラムには全く圧力が加えられない。いったん充填カラムを取り付けたら、使用に先立ち、５ｋＶの印加電圧で１時間、キャピラリに移動相を通してさらに調整した。試料は、キャピラリカラムの陽極端部で動電学的に導入した。これらの分離において使用された移動相は、リン酸塩５ｍＭおよび８０％（ｖ／ｖ）アセトアニリドを含むＳＤＳ緩衝液（ｐＨ７．０）２ｍＭであった。分離は、印加電圧１０ｋＶおよび温度２０℃で行なった。分析対象物は、２５４ｎｍにおけるそれらの吸光度を監視することにより検出した。
【００３０】
中性化合物の混合物を２つのカラム、１および２において分離した。カラム１は、内径７５μｍ×２７ｃｍ（１．５μｍＯＤＳ粒子で２０ｃｍ充填）の溶融シリカキャピラリであった。このカラムのフリット気孔寸法は２．５μｍであった。カラム２は、フリット気孔寸法が４．０μｍであることを除き、カラム１と同じであった。
【００３１】
半予備的なＣＥＣ作業を自作のＣＥ測定装置を用いて行なった。キャピラリカラム（内径５５０μｍおよび外径６５０μｍ）は、スラリ充填法を用いて直径１．５μｍのＯＤＳ粒子を充填した。これらの大口径キャピラリカラムのフリットは、すでに説明した方法と同じ方法で、メタクリレートモノマ、気孔生成溶媒、および光重合開始剤の混合物（Ｖｉｋｌｕｎｄら）から調製された。ランニングバッファは、５ｍＭリン酸塩２０％およびアセトアニリド８０％であった。キャピラリの全長は３４ｃｍであった。ＣＥＣカラムに印加した電圧は２ｋＶであった。試料注入量は１５０ｎｌであった。ＴａｘｏｌおよびＢａｃｃａｔｉｎ  ＩＩＩ分析の電気クロマトグラムは、それぞれ図４のパネル（Ａ）および（Ｂ）に示される。
【００３２】
本発明は、好ましい特定の実施の形態と共に上記で説明されてきたが、説明および実施例は、例示を意図するものであって、添付の特許請求の範囲により定義される本発明の範囲を限定するものでないことが理解されるべきである。
【図面の簡単な説明】
【図１】パネル（Ａ）、（Ｂ）、および（Ｃ）は、ＳＥＭ顕微鏡写真であって、パネル（Ａ）はキャピラリ中の感光性ポリマの出口フリットの斜視図（粒子は全く存在しない）、パネル（Ｂ）は（Ａ）の５倍拡大図、パネル（Ｃ）はクロマトグラフィ粒子が埋め込まれた感光性ポリマの入口フリットの断面図。
【図２】一方のカラムについてはパネル（Ａ）において、他方のカラムについてはパネル（Ｂ）において、保持時間に対する吸光度のプロットを示すグラフであって、２つの分析対象物はチオ尿素および２−メチルナフタレンであった（溶出順）。
【図３】本発明の実施の形態を用いた３つの代表的電気クロマトグラムであって（図２のカラム２、パネル（Ｂ））、分析対象物は、チオ尿素、ベンジルアルコール、ベンズアルデヒド、および２−メチルナフタレンであった（溶出順）。
【図４】パネル（Ａ）および（Ｂ）は、２つの代表的な電気クロマトグラムであって、パネルＡでは、Ｔａｘｏｌ（有望な抗がん剤）を通し、パネル（Ｂ）は、Ｔａｘｏｌ類似物（Ｂａｃｃａｔｉｎ  ＩＩＩ）であり、どちらも発明のフリットを有する比較的大内径のキャピラリ中におけるものである。
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図１】
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