(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
パフィア・グロメラータ（Ｐｆａｆｆｉａ  ｇｌｏｍｅｒａｔａ）の加工物、並びにヘスペリジン及びルチンから選ばれるフラボノイドを含んでなる免疫増強剤及び／又は向精神剤としての組成物。
【請求項２】
パフィア・グロメラータ（Ｐｆａｆｆｉａ  ｇｌｏｍｅｒａｔａ）の加工物が、当該植物の根の細断物、破砕物、磨砕物、粉砕物、圧搾物、発酵物及び／又は抽出物である請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
パフィア・グロメラータ（Ｐｆａｆｆｉａ  ｇｌｏｍｅｒａｔａ）の抽出物が、当該植物の根を水及び／又はアルコールで抽出して得られる請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
パフィア・グロメラータ（Ｐｆａｆｆｉａ  ｇｌｏｍｅｒａｔａ）の加工物がエクジステロンを含んでなる請求項１、２又は３に記載の組成物。
【請求項５】
エクジステロンを固形物換算で０．０００１乃至２％（ｗ／ｗ）含んでなる請求項４に記載の組成物。
【請求項６】
パフィア・グロメラータ（Ｐｆａｆｆｉａ  ｇｌｏｍｅｒａｔａ）の加工物に対し、ヘスペリジン及びルチンから選ばれるフラボノイドを固形物重量換算で０．０００５乃至０．０５倍量の範囲で含有せしめてなる請求項１、２、３、４又は５に記載の組成物。
【請求項７】
ガラナの加工物及び／又は藍の加工物をさらに含んでなる請求項１、２、３、４、５、又は６に記載の組成物。
【請求項８】
ガラナの加工物が、当該植物の種子の細断物、破砕物、磨砕物、粉砕物、圧搾物、発酵物及び／又は抽出物であり、藍の加工物が、当該植物の葉及び／又は茎の細断物、破砕物、磨砕物、粉砕物、圧搾物、発酵物及び／又は抽出物である請求項７に記載の組成物。
【請求項９】
ガラナの抽出物が、当該植物の種子を水及び／又はアルコールで抽出して得られ、藍の抽出物が当該植物の葉及び／又は茎を水及び／又はアルコールで抽出して得られる請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
パフィア属に属する植物の加工物に対し、ガラナの加工物を固形物重量換算で０．０１乃至１０倍量の範囲で含有せしめてなる請求項８又は９に記載の組成物。
【請求項１１】
パフィア属に属する植物の加工物に対し、藍の加工物を固形物換算で０．０００１乃至０．１倍量の範囲で含有せしめてなる請求項８、９、又は１０に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
この発明は、新規な組成物、詳細には、パフィア（Ｐｆａｆｆｉａ）属に属する植物の加工物とフラボノイドを含んでなる新規な組成物に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
人類が罹患する疾患の多くは、西洋医学の飛躍的な進歩により比較的容易に治療できるようになった。しかしその一方で、西洋医学による治療法は、逆効果や深刻な副作用を呈する場合もあり、必ずしも所期の効果を十分に発揮すると言えるものではない。昨今の健康に対する気運の高まりとも相まって、常用しても人体に悪影響を及ぼさず、かつ、健康の維持・増進ならびに、疾患の治療・予防に有用な組成物の確立に、極めて強い期待が寄せられている。斯かる要望に応えるものとして、古来より人類が経験に基づいて利用してきた、いわゆる民間療法薬が近年再び注目を集めている。然るに民間療法薬は、一般に薬効が顕著ではないという点で問題がある。
【０００３】
民間療法薬からの有効成分の単離や、有効成分以外の成分の除去は、斯かる問題点を解決するに有効な策の一つと考えられる。しかしながら民間療法薬の薬効は一般に、限られた特定の成分のみにより発揮されるものではなく、したがってほとんどの場合は、たとえ有効成分と思われる特定成分を単離したとしても期待されるような顕著な薬効を示さないというのが実情である。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
斯かる状況に鑑み、この発明の課題は、副作用が低く、健康の維持・増進ならびに疾患の治療・予防に著効を発揮する組成物を提供することにある。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、古来より世界各地で用いられてきた民間療法薬と、古来より食経験のある植物に着目し、上記課題を解決し得る組成物を天然界より広く鋭意検索した。その結果、南米に自生し、当地では古くから民間療法薬として用いられてきたパフィア（Ｐｆａｆｆｉａ）属に属する植物に、フラボノイドを添加せしめて組成物としたとき、通常一般の民間療法薬に比べて際だって顕著な免疫増強作用や抗アレルギー作用等を示すことを見出した。さらに当該組成物は、極めて毒性が低く、またパフィアが本来有している苦味・えぐ味等が低減されているために経口摂取が極めて容易であり、健康の維持・増進ならびに疾患の治療・予防に有用であることを確認して本発明を完成した。
【０００６】
すなわち、この発明は、上記の課題を、パフィア（Ｐｆａｆｆｉａ）属に属する植物の加工物及びフラボノイドを含んでなる組成物により解決するものである。
【０００７】
【発明の実施の形態】
この発明の組成物は、パフィア（Ｐｆａｆｆｉａ）属に属する植物（以下、単に「パフィア」と記す場合がある。）の加工物及びフラボノイドを含んでなる。この発明で用いるパフィアの加工物とは、パフィア属に属する植物の物理的及び／又は化学的処理による加工物全般を包含し、原料・製造方法は問わない。パフィア属に属する植物としては、例えば、パフィア・グロメラータ（Ｐｆａｆｆｉａ  ｇｌｏｍｅｒａｔａ）、パフィア・イレジノイデス（Ｐｆａｆｆｉａ  ｉｒｅｓｉｎｏｉｄｅｓ）、パフィア・ジュバータ（Ｐｆａｆｆｉａ  ｊｕｂａｔａ）、パフィア・パニキュラータ（Ｐｆａｆｆｉａ  ｐａｎｉｃｕｌａｔａ）、パフィア・プルベルレンタ（Ｐｆａｆｆｉａ  ｐｕｌｖｅｒｕｌｅｎｔａ）及びパフィア・スピカータ（Ｐｆａｆｆｉａ  ｓｐｉｃａｔａ）などを挙げることができる。物理的及び／又は化学的処理による加工物とは、例えば、細断物、破砕物、磨砕物、粉砕物、圧搾物、発酵物及び／又は抽出物を挙げることができる。当該加工物は、通常、エクジステロン及び／又はその誘導体、例えば、ルブロステロンやプテロステロンなどを含んでなる。
【０００８】
この発明で用いるパフィアの加工物の製造方法について説明すると、先ず、その原料としては、パフィア属に属する上記の如き植物から選ばれる１又は複数や、これらを常法により育種して得られる変異株などを挙げることができる。斯かる植物は、自生植物や栽培植物などの植物体であっても、また、組織培養、カルス培養、細胞培養などにより得られる培養物であってもよい。植物体を原料として用いる場合、その植物体全体であっても、また、根、茎、葉、花冠、花弁、花粉、雄しべ、雌しべ、種子、胚乳、根毛などから選ばれる１又は複数の特定の器官などの、植物体全体から分離された一部分であっても、いずれも有利に用いることができる。また、原料は新鮮な、すなわち、水分を含む状態であっても、乾燥させた状態であってもよい。とりわけ、パフィア・グロメラータの乾燥させた根は、この発明に有利に用いることができる。
【０００９】
以上の如き原料に、食品工業や医薬品工業などにおいて通常一般に用いられる、物理的及び／又は化学的処理を施すことによりこの発明で用いるパフィアの加工物は得ることができる。例えば、通常の、細断、破砕、磨砕、粉砕、圧搾、発酵、抽出などの処理や、さらに、濾過、濃縮、乾燥などの処理を適宜組み合わせことにより、この発明で用いる当該加工物としての細断物、破砕物、磨砕物、粉砕物、圧搾物、発酵物、抽出物は得ることができる。
【００１０】
この発明で用いるパフィアの加工物としての、パフィア抽出物の製造方法についてさらに詳細に説明すると、通常は、上述の如き原料に細断、磨砕、破砕等の適宜の処理を施した後、適宜の溶媒を用いて通常の抽出処理を施す。抽出溶媒としては、水や、水以外の水溶性の有機溶媒、水不溶性の有機溶媒等、いずれも適宜に用いることができるが、とりわけ、水、水溶性の有機溶媒、ないしは当該有機溶媒の水溶液を抽出溶媒として用いるのが、この発明の実施に有用である。水溶性の有機溶媒としては、例えば、エタノール、メタノール、プロパノール、２−プロパノール、アセトンなどを挙げることができる。これら有機溶媒の水溶液を抽出溶媒として用いる場合、当該有機溶媒の濃度は問わないが、有機溶媒が体積比で５０％以下の水溶液はこの発明の実施に有用である。適宜の緩衝剤等により抽出溶媒を所望のｐＨに保つことも随意である。以上の如き抽出溶媒を、前述の原料に適量、通常望ましくは、重量比で０．１乃至３０倍量添加し、必要に応じて、撹拌処理や加熱処理を施し抽出する。濾過、遠心分離、デカンテーションなどの適宜の方法で、液体部分と残渣に分け、液体部分を採取すれば、この発明で用いるパフィアの抽出物を得ることができる。残渣にさらに繰り返し同様の抽出処理を施し、採取されるそれぞれの液体部分を合一して抽出物を得ることも随意である。また原料及び残渣に、２回以上の抽出処理を施す場合、それぞれ異なる抽出溶媒を用いて所望の液体部分のみを採取したり、これらを合一することによっても、この発明で用いるパフィアの抽出物は得ることができる。
【００１１】
当該抽出物に、さらに、適宜の精製処理を施し、パフィアの加工物として用いることも随意である。当該抽出物は、通常、アルカロイド、テルペノイド、ステロイド、フェノール類、色素などの二次代謝産物や、糖類、蛋白質、アミノ酸、核酸、ペプチド、脂質などを含み、これに斯界において通常用いられる精製手段のいずれかを適用すれば、これらから選ばれる１種又は２種以上の適宜の成分が精製される。目的とする成分の種類にもよるが、精製手段は、例えば、濾過、濃縮、遠心分離、晶析、溶媒分別、分別沈澱、透析、疎水性クロマトグラフィー、逆相クロマトグラフィー、吸着クロマトグラフィー、親和性クロマトグラフィー、ゲル濾過クロマトグラフィー及び／又はイオン交換クロマトグラフィーなどから適宜の方法が選ばれる。
【００１２】
以上のようにして得られるパフィアの加工物は、得られたそのままの形態でもこの発明に有利に用いることができるが、また、濃縮・乾燥等の処理をさらに施したり、さらには、後に詳述するような生理的に許容される適宜の成分を添加混合するなどして、液状、固状、粉状、ペースト状、半固状、乳液状、懸濁状等の適宜の形態として用いることも随意である。濃縮・乾燥には、通常の食品工業、医薬品工業などにおいて慣用の方法、例えば、真空濃縮、精密膜濃縮、逆浸透膜濃縮、限外濾過濃縮、真空乾燥、凍結乾燥、噴霧乾燥などはいずれも有利に適用することができる。
【００１３】
以上の如き、この発明で用いるパフィアの加工物は、通常、エクジステロンを固形物換算で０．１乃至１０％（ｗ／ｗ）の範囲で含む。また、当該加工物は、ルブロステロンやプテロステロンなどのエクジステロン誘導体を含む場合がある。当該加工物中のエクジステロン及び／又はその誘導体は、例えば、逆相クロマトグラフィーを適用する高速液体クロマトグラフィー等により検出することができる。加工物の固形物含量は、例えば、第一法規出版発行の『第十三改正日本薬局方』（１９９６年）、３４頁に記載の乾燥減量試験法や、同じく第一法規出版発行の『第十三改正日本薬局方』（１９９６年）、５１乃至５５頁に記載のカールフィッシャー法などにより水分を求め算出することがきる。
【００１４】
この発明で用いるフラボノイドには、ヘスペレチン、ナリンゲニン、エリオジクチオール、シトロネチン、ヘスペリジン、ナリンジン、エリオジクチン、シトロニンなどのフラバノン類、ケルセチン、ミリセチン、ルチン、ミリシトリンなどのフラボノール類、バイカレイン、アピゲニン、バイカリン、アピインなどのフラボン類、ゲニステイン、ゲニスチンなどのイソフラボン類など、通常のフラボノイド全般に加え、さらに、以上の如きフラボノイドに、加水分解酵素や糖転移酵素などを作用させた酵素処理物も包含される。これらフラボノイドの出所・由来は問わない。例えば、柑橘類の植物などの天然の給源から得られるものであっても、また、例えば化学合成して得られるものであってもよい。
【００１５】
この発明において以上の如きフラボノイドは、いずれも有利に用いることができるが、とりわけ、ヘスペリジン、ルチン、ナリンジン、エリオジクチン、ヘスペレチン、ケルセチン、ナリンゲニン、エリオジクチオール、酵素処理ヘスペリジン、酵素処理ルチン、酵素処理ナリンジン、酵素処理エリオジクチンなどの、ビタミンＰとして知られているフラボノイドはこの発明に有利に利用される。ここでいう酵素処理物のうち、糖転移酵素等を作用させて得られる酵素処理物は、通常、フラボノイドに、グルコース、フラクトース及びガラクトースをはじめとする単糖類や、さらには、これら単糖類のうちの１種又は２種以上よりなる少糖類ないし多糖類を転移せしめてなるものであり、フラボノイド本来の性質を有している上、水に対する溶解性が酵素処理をしないものに比べて増しており、光に対する安定性なども向上しているので、この発明を実施する上で有用である。
【００１６】
斯かる酵素処理物の調製方法は問わない。例えば、シクロマルトデキストリン・グルカノトランスフェラーゼ、α−グルコシダーゼ、β−グルコシダーゼ、β−フラクトフラノシダーゼ、β−ガラクトシダーゼなどの酵素の作用によれば、斯かる酵素処理物を得ることができる。すなわち、用いる酵素に応じて、上記の如きフラボノイドから選ばれる１種又は２種以上と、適宜の糖類から選ばれる１種又は２種以上とを、適宜の溶媒例えば、水や有機溶媒の水溶液などの中で混合し、必要に応じて所望のｐＨに調整した上で、上記の如き酵素のいずれかを添加して、所望の温度で保持して反応せしめればよい。反応に用いる糖類、ｐＨ、温度は、用いる酵素の性質、すなわち、基質特異性、至適ｐＨ、ｐＨ安定性、至適温度及び、温度安定性等に応じて選択される。これら酵素の性質は、例えば、朝倉書店発行の『酵素ハンドブック』（１９８２年）などに記載されている。また、同じ出願人による特開平３−７５９３号公報、特開平３−１１５２９２号公報、特開平４−１３６９１号公報、特開平４−３１２５９７号公報及び特開平５−３２６９０号公報には、シクロマルトデキストリン・グルカノトランスフェラーゼを用いるこれら酵素処理物の調製方法が種々詳述されている。また、斯かる酵素処理物として、市販品、例えば、東洋精糖製の酵素処理ルチンや酵素処理ヘスペリジン（別名、「糖転移ヘスペリジン」又は「糖転移ビタミンＰ」。）などを用いることも有利に実施することができる。
【００１７】
この発明の組成物は、さらに、カフェイン含有植物の加工物及び／又はインディカン含有植物の加工物を含んでなる場合がある。この発明で用いるカフェイン含有植物の加工物とは、植物体ないしは細胞内にカフェインを含有する植物の物理的及び／又は化学的処理による加工物全般を包含し、原料・製造方法は問わない。カフェイン含有植物としては、例えば、パウリニア（Ｐａｕｌｌｉｎｉａ）属、コフィア（Ｃｏｆｆｅａ）属、茶（Ｔｈｅａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ）属又はコラ（Ｃｏｌａ）属に属する植物などを挙げることができる。斯かる植物の加工物は、通常、カフェイン及び／又はその誘導体を含んでなる。この発明で用いるインディカン含有植物の加工物とは、植物体内ないし細胞内にインディカンを含有する植物の物理的及び／又は化学的処理による加工物全般を包含し、原料・製造方法は問わない。インディカン含有植物としては、例えば、蓼（Ｐｅｒｃｉｃａｒｉａ）属又はコマツナギ（Ｉｎｄｉｇｏｆｅｒａ）属に属する植物を挙げることができる。斯かる植物の加工物は、インディカン及び／又はその誘導体を含む場合がある。
【００１８】
この発明で用いるカフェイン含有植物ならびにインディカン含有植物の加工物の製造方法について説明すると、先ず、その原料としては、上記の如き植物から選ばれる１又は複数や、これらを常法により育種して得られる変異株などを挙げることができる。斯かる植物は、自生植物や栽培植物などの植物体であっても、また、組織培養、カルス培養、細胞培養などにより得られる培養物であってもよい。植物体を原料として用いる場合、その植物体全体であっても、また、根、茎、葉、花冠、花弁、花粉、雄しべ、雌しべ、種子、胚乳、根毛などから選ばれる１又は複数の特定の器官などの、植物体全体から分離された一部分であっても、いずれも有利に用いることができる。また、原料は新鮮な、すなわち、水分を含む状態であっても、乾燥させた状態であってもよい。カフェイン含有植物としては、とりわけ、パウリニアに属するガラナ（Ｇｕａｒａｎａ）の乾燥させた種子が、また、インディカン含有植物としては、とりわけ、蓼属に属する藍の新鮮な葉及び／又は茎が、この発明の実施に有用である。
【００１９】
以上の如き原料に、食品工業や医薬品工業などにおいて通常一般に用いられる、物理的及び／又は化学的処理を施すことによりこの発明で用いるカフェイン含有植物及び／又はインディカン含有植物の加工物は得ることができる。例えば、通常の、細断、破砕、磨砕、粉砕、圧搾、発酵、抽出などの処理や、さらには、濾過、濃縮、乾燥などの処理を適宜組み合わせことにより、この発明で用いる当該加工物としての細断物、破砕物、磨砕物、粉砕物、圧搾物、発酵物、抽出物は得ることができる。
【００２０】
この発明で用いるカフェイン含有植物及び／又はインディカン含有植物の加工物としての当該植物の抽出物の製造方法についてさらに詳細に説明すると、通常は、上述の如き原料に細断、磨砕、破砕等の適宜の処理を施した後、適宜の溶媒を用いて通常の抽出処理を施す。抽出溶媒としては、水や、水以外の水溶性の有機溶媒、水不溶性の有機溶媒等、いずれも適宜に用いることができるが、とりわけ、水、水溶性の有機溶媒、ないしは当該有機溶媒の水溶液を抽出溶媒として用いるのが、この発明の実施に有用である。水溶性の有機溶媒としては、例えば、エタノール、メタノール、プロパノール、２−プロパノール、アセトンなどを挙げることができる。これら有機溶媒の水溶液を抽出溶媒として用いる場合、当該有機溶媒の濃度は問わないが、有機溶媒が体積比で７０％以下の水溶液はこの発明の実施に有用である。適宜の緩衝剤等により抽出溶媒を所望のｐＨに保つことも随意である。以上の如き抽出溶媒を、前述の原料に適量、通常望ましくは、重量比で０．１乃至５０倍量添加し、必要に応じて、撹拌処理や加熱処理を施し抽出する。濾過、遠心分離、デカンテーションなどの適宜の方法で、液体部分と残渣に分け、液体部分を採取すれば、この発明で用いるカフェイン含有植物及び／又はインディカン含有植物の抽出物を得ることができる。残渣にさらに繰り返し同様の抽出処理を施し、採取されるそれぞれの液体部分を合一して抽出物を得ることも随意である。また原料及び残渣に、２回以上の抽出処理を施す場合、それぞれ異なる抽出溶媒を用いて所望の液体部分のみを採取したり、これらを合一することによっても、この発明で用いる当該抽出物は得ることができる。
【００２１】
当該抽出物に、さらに、適宜の精製処理を施し、カフェイン含有植物及び／又はインディカン含有植物の加工物として用いることも随意である。当該抽出物は、通常、アルカロイド、テルペノイド、ステロイド、フェノール類、色素などの二次代謝産物や、糖類、蛋白質、アミノ酸、核酸、ペプチド、脂質などを含み、これに斯界において通常用いられる精製手段のいずれかを適用すれば、これらから選ばれる１種又は２種以上の適宜の成分が精製される。目的とする成分の種類にもよるが、精製手段は、例えば、濾過、濃縮、遠心分離、晶析、溶媒分別、分別沈澱、透析、疎水性クロマトグラフィー、逆相クロマトグラフィー、吸着クロマトグラフィー、親和性クロマトグラフィー、ゲル濾過クロマトグラフィー及び／又はイオン交換クロマトグラフィーなどから適宜の方法が選ばれる。
【００２２】
以上のようにして得られるカフェイン含有植物及び／又はインディカン含有植物の加工物は、得られたそのままの形態でもこの発明に有利に用いることができるが、また、濃縮・乾燥等の処理をさらに施したり、さらには、後に詳述するような生理的に許容される適宜の成分を添加混合するなどして、液状、固状、粉状、ペースト状、半固状、乳液状、懸濁状等の適宜の形態として用いることも随意である。濃縮・乾燥には、通常の食品工業、医薬品工業などにおいて慣用の方法、例えば、真空濃縮、精密膜濃縮、逆浸透膜濃縮、限外濾過濃縮、真空乾燥、凍結乾燥、噴霧乾燥などはいずれも有利に適用することができる。
【００２３】
上記の如き、この発明で用いるカフェイン含有植物の加工物は、通常、カフェイン及び／又はその誘導体を固形物換算で０．１乃至２０％（ｗ／ｗ）の範囲で含む。当該加工物中のカフェイン及び／又はその誘導体は、例えば、逆相クロマトグラフィーを適用する高速液体クロマトグラフィー等により検出することができる。当該加工物の固形物含量は、例えば、第一法規出版発行の『第十三改正日本薬局方』（１９９６年）、３４頁に記載の乾燥減量試験法や、同じく第一法規出版発行の『第十三改正日本薬局方』（１９９６年）、５１乃至５５頁に記載のカールフィッシャー法などにより水分を求め算出することがきる。
【００２４】
この発明の組成物は、上述のパフィアの加工物とフラボノイドとを混合せしめ、さらに、必要に応じて、上述のカフェイン含有植物の加工物及びインディカン含有植物の加工物から選ばれる１種又は２種以上を混合せしめることにより得られる。混合の方法に制限はなく、食品工業や医薬品工業等において通常一般の技術はいずれも有利に適用される。各成分の配合比にも特に制限はないく、いずれも有利に用いることができるが、後に詳述する、この発明の組成物の種々の作用を全般的に効果的に発揮せしめる上では、パフィアの加工物に対し固形物重量換算で、フラボノイドを０．００１乃至１倍量混合せしめるのが望ましい。カフェイン含有植物の加工物及びインディカン含有植物の加工物をさらに混合せしめる場合も配合比に特に制限はなく、いずれも有利に用い得るが、パフィアの加工物に対し固形物重量換算で、それぞれ、０．０１乃至１０倍量及び０．０００１乃至０．１倍量混合せしめてなる組成物は、当該組成物の作用をより効果的に発揮せしめる上でさらに有用である。
【００２５】
一方、パフィアの加工物に対し、固形物重量換算で、フラボノイドを０．０００５乃至０．０５倍量混合せしめてなるこの発明の組成物は、後述の種々の作用のうち、とりわけ免疫増強作用や向精神作用が特に顕著となる。パフィアの加工物に対し、固形物重量換算で、フラボノイドを０．０１乃至２倍量混合せしめてなるこの発明の組成物は、とりわけ抗アレルギー作用が特に顕著となる。また、この発明の組成物の強精作用は、パフィアの加工物に対し、固形物重量換算で１乃至１０倍量のカフェイン含有植物を混合せしめるとき特に顕著となる。
【００２６】
以上の如きこの発明の組成物は、フラボノイド及びエクジステロンを、通常、固形物換算でそれぞれ、０．０１乃至２０％（ｗ／ｗ）及び０．０００１乃至２％（ｗ／ｗ）含んでなる。当該組成物がカフェイン含有植物の加工物を含んでなる場合には、カフェインを固形物換算で、通常、０．００１乃至４％（ｗ／ｗ）含んでなる。当該組成物は、配合される成分の種類・形状や調製方法などにより、液状、粉状、固状、半固形状、ペースト状又は懸濁状等、種々の形状となるが、いずれも有利に用いることができる。
【００２７】
斯くして得られるこの発明の組成物は、免疫増強作用、抗アレルギー作用、向精神作用及び強精作用を顕著に示す。また、この発明の組成物は、これに含まれるパフィアにおいて従来から知られている作用、例えば、橋本ら、『ブラジル産薬用植物辞典』（１９９６年）、アボック社出版局発行、２４乃至２７頁に記載されているような、強壮作用、緩下作用、痔・下痢・腸の炎症・皮膚の傷・潰瘍などの治癒作用をも顕著に発揮する。さらに、この発明の組成物は、パフィア本来の苦味・えぐ味等の呈味が改善されているので、健康の維持・増進ならびに、疾患の治療・予防に奏功する経口摂取物として有用である。上記のような個々の作用は、互いに阻害し合うことなく協調して働き、しかもこの発明の組成物は毒性が極めて低いので、生体の抵抗力を高めたり、肉体的及び／又は精神的活力を高める、いわゆる、強壮剤として極めて有用である。また、この発明の組成物が、後述のように、糖質などの栄養源を含む場合、当該組成物は滋養強壮剤として極めて有用である。この発明の組成物は上記したような作用故に、治療・予防のための免疫増強剤、抗アレルギー剤、向精神剤及び／又は強精剤としても有用である。
【００２８】
ここでいう免疫増強作用とは、ヒトを含む温血動物の、免疫担当細胞の増殖の促進、当該細胞の伸展の促進、当該細胞の分化の促進及び、当該細胞の活性化等の作用の１種又は２種以上の作用を言い、具体的には、（１）マクロファージなどの食細胞の増殖及び／又は伸展、骨髄幹細胞からの当該細胞への分化、当該細胞の食作用による異物の消化の増強、（２）ナチュラル・キラー細胞による腫瘍細胞やウイルス感染細胞などの致死効果の増強、（３）Ｂ細胞の増殖、造血幹細胞からの当該細胞への分化、当該細胞による抗体産生能の増強、（４）細胞障害性Ｔ細胞の増殖、造血幹細胞からの当該細胞への分化、当該細胞による腫瘍細胞やウイルス感染細胞などの致死効果の増強、（５）ヘルパーＴ細胞の増殖、造血肝細胞からの当該細胞への分化、又は種々のサイトカイン産生の増強による免疫系の賦活化、などの作用のうちの１種又は２種以上が挙げられる。
【００２９】
ここでいう抗アレルギー作用とは、いわゆる、Ｉ乃至ＩＶ型アレルギーの抑制作用の１種又は２種以上を言う。例えば、（１）ＩｇＥ抗体の産生の抑制、当該抗体のＩｇＥレセプターへの結合及び、それに引き続いて起こるヒスタミン遊離等の各種生体反応の抑制などによるＩ型アレルギーの抑制、（２）貪食細胞やキラー細胞による標的細胞の破壊の抑制によるＩＩ型アレルギーの抑制、（３）生体内に生じた免疫複合体への補体の結合や、それに引き続いて起こるアナフィラトキシン形成等の補体系の活性化を抑制することなどによるＩＩＩ型アレルギーの抑制、（４）Ｔ細胞の抗原による感作の抑制や、感作されたＴ細胞からの炎症性のサイトカイン産生の抑制などによるＩＶ型アレルギーの抑制、などの作用のうちの１種又は２種以上が挙げられる。これらのうち、とりわけ、この発明の組成物はＩ型アレルギーの抑制に著効を発揮する。
【００３０】
ここでいう向精神作用とは、精神神経の不安定や精神神経疾患の改善及び治療作用等の１種又は２種以上を言い、例えば、この発明の組成物は、不安・緊張を和らげる、いわゆる抗不安作用、抑鬱気分を改善する、いわゆる抗鬱作用、及び／又は精神刺激作用を示す。とりわけ、赤面などの対人恐怖の改善ないしは抑制に有効である。
【００３１】
ここでいう強精作用とは、ヒトを含む温血動物の、男性及び／又は女性の生殖能力の向上をもたらす作用を言い、例えば、この発明の組成物は、男性における陰萎の改善、精子の活力の向上、精子形成能の向上、男性及び／又は女性における発情の促進等に奏功して所期の効果を発揮する。
【００３２】
斯くしてこの発明の組成物は、免疫系の増強、アレルギー反応の抑制、精神的な安定及び／又は、精力の増強に奏功して生体を強壮にするほか、更年期障害の治療・予防、さらには、感受性疾患、例えば、細菌・ウイルス・真菌などの外来性の異物の生体内への侵入や、腫瘍細胞やウイルス感染細胞など内因性の異物の生体内での発生に伴う諸疾患、鼻炎、アナフィラキシー、花粉症、食物アレルギー、アトピー性皮膚炎、喘息、自己免疫性溶血性貧血、グッドパスチャー症候群、血清病、過敏性肺臓炎、接触性皮膚炎、リウマチ、潰瘍性大腸炎などアレルギー反応に伴う諸疾患、情緒不安定、対人恐怖症及び赤面症などの精神・神経系の諸疾患、陰萎などの生殖能力の低下を伴う諸疾患の治療・予防に効果を発揮する。
【００３３】
ところで、この発明の組成物は、通常一般の経口摂取物に配合された形態をも包含する。経口摂取物としては、例えば、キャンディー、トローチ、ゼリー、グミ、チューインガム、チョコレート、ジュース、清涼飲料水、アルコール飲料、乳酸菌飲料、スポーツドリンク、ジャム、クリーム、クッキー、ビスケット、煎餅、クラッカー、うどん、そば、ソーセージ、ハム、蒲鉾、竹輪、半平、佃煮、即席ジュース、即席スープなどを挙げることができる。
【００３４】
また、この発明の組成物は、以上に述べた成分以外の成分、すなわち、生理的に許容される、例えば、担体、賦形剤、希釈剤、アジュバント、安定剤、さらには、必要に応じて、他の生理活性物質の１又は複数との組成物としての形態をも包含する。安定剤としては、例えば、血清アルブミンやゼラチンなどの蛋白質、グルコース、シュクロース、ラクトース、マルトース、トレハロースなどの糖質、ソルビトール、マルチトール、マンニトール、ラクチトールなどの糖アルコール及び、クエン酸塩若しくは燐酸塩を主体とする緩衝剤が、また、併用し得る他の生理活性物質としては、例えば、シクロスポリン、ＦＫ５０６、シクロフォスファミド、ナイトロゲンマスタード、トリエチレンチオフォスファミド、ブズルファン、フェラミンマスタード、クロランブシル、アザチオプリン、６−メルカプトプリン、６−チオグアニン、６−アザグアニン、８−アザグアニン、フルオロウラシル、シタラビン、メトトレキサート、アミノプテリン、マイトマイシンＣ、塩酸ダウノルビシン、アクチノマイシンＤ、クロモマイシンＡ３、塩酸ブレオマイシン、塩酸ドキソルビシン、サイクロスポリンＡ、Ｌ−アスパラギナーゼ、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ヒドロキシウレア、塩酸プロカルバジン、副腎皮質ホルモン、ルミン、ビタミンＡ、ビタミンＢ、ビタミンＣ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、ビタミンＫ、アミノ酸、金製剤、臭化カリウム、乳酸カルシウム、グリセロリン酸カルシウム、ヨウ化カリウム、還元鉄、ヘパリンナトリウム、抱水クロラール、メプロバネート、オキサゾラム、フェニトイン、エルシナン、ニコチン酸アミド、クロレラエキス、アロエエキス、プロポリスエキス、スッポンエキス、カキニクエキス、薬用人参エキス、乳酸菌、酵母、ローヤルゼリーなどの他に、インターフェロン、ツモアー・ネクロシス・ファクター、エリトロポエチン、インターロイキン、サイトカイン受容体、当該受容体のアンタゴニストなどが挙げられる。
【００３５】
さらに、この発明の組成物は、投薬単位形態の薬剤をも包含する。その投薬単位形態の薬剤とは、パフィアの加工物及びフラボノイドを、例えば、１回当りの用量又はその整数倍（４倍まで）若しくはその約数（１／４０まで）に相当する量を含んでなり、投薬に適する物理的に一体の剤型にある薬剤を意味する。このような投薬単位形態の薬剤としては、注射剤、液剤、散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、舌下剤、点眼剤、点鼻剤、坐剤、外用剤などが挙げられる。この発明の組成物は経口的に投与しても非経口的に投与してもよく、いずれの場合にも、感受性疾患の治療・予防に効果を発揮する。感受性疾患の種類・症状や、当該免疫疾患剤の組成にもよるが、具体的には、患者の症状や投与後の経過を観察しながら、パフィアの加工物及びフラボノイドの総量として固形物重量で、成人当り約０．１ｍｇ乃至１０ｇ／回、望ましくは、約１ｍｇ乃至１ｇ／回で１乃至４回／日又は１乃至５回／週の用量で１日乃至１年間に亙って経口投与するか、皮内、皮下、筋肉内又は静脈内に非経口投与すればよい。
【００３６】
以下の実験例１乃至７を示してこの発明の組成物の作用、呈味及び毒性について具体的に説明する。
【００３７】
【実験例１】
〈加工物の調製〉
【００３８】
【実験例１−１】
〈パフィア抽出物〉
ブラジル産のパフィア・グロメラータ（Ｐｆａｆｆｉａ  ｇｌｏｍｅｒａｔａ）塊根の乾燥チップ３ｋｇと脱イオン水４５ｌを１００ｌ容のステンレス製ジョッキにとり、直火にかけ沸騰後４０分間保持した。ざるで濾して濾液２８．８ｋｇを得た。残渣は再び同じジョッキに回収し、脱イオン水２０ｌを加え、直火にかけ沸騰後３０分間保持した。再びざるで濾して得た濾液１９．６ｋｇと、先に得た濾液を合一した。バスケット型遠心濾過機（日立鉄工所製）で処理して不溶物を除去した後、逆浸透膜（東洋紡製『ホロセップ  ＨＲ５１５５Ｆ１』）を用いて約３０ｌ／時間の透過速度で処理して濃縮して重量１０．７ｋｇとした。この液をジャケット付きステンレスタンク中で、８０℃で２１時間半保持してさらに濃縮し、重量２７７０ｇの、パフィアの加工物としての、液状のパフィア抽出物を得た。固形物濃度は約５０％（ｗ／ｗ）であった。
【００３９】
上記の方法で得たパフィア抽出物の一部にエヌ・、ニシモトら、『ファイトケミストリー（Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）』、第３２巻、１，５２７乃至１，５３０頁（１９９３年）、に記載のエクジステロンの精製方法を適用して、針状の結晶を得た。常法にしたがい分析したところ、本結晶の融点は２４０乃至２４２℃、比旋光度は［α］D+８９゜であった。これらの値は、エヌ・ニシモトら、『ファイトケミストリー（Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）』、第２６巻、２５０５頁（１９８７年）に記載のエクジステロンの理化学的性質とよく一致したことから、本結晶をエクジステロンと同定した。
【００４０】
この結晶標品１ｍｇを体積比１５：８５のアセトニトリル・水混液に溶解して全量を２ｍｌとし、孔径０．４５μｍのメンブランフィルターで濾過し、さらに同じ溶媒で希釈することにより、５００μｇ／ｍｌ、２００μｇ／ｍｌ、１００μｇ／ｍｌ、５０μｇ／ｍｌの、エクジステロンの標準溶液を調製した。これら標準溶液の２０μｌずつを以下のように高速液体クロマトグラフィー（以下、「ＨＰＬＣ」と略記する。）で分析した。すなわち、カラムとして資生堂製の『Ｃａｐｃｅｌｌ  ｐａｋ  Ｃ18  ＡＧ１２０』を、溶離液として体積比１５：８５のアセトニトリル・水混液を用い、カラムを３５℃で保持し、流速を０．５ｍｌ／分とした。検出は紫外可視分光検出器（日本分光工業製『８７５−ＵＶ型』）を用いて、２４０ｎｍにおける吸光度を測定した。検出結果は、データ処理器（島津製作所製『ＣＲ−４Ａ』）で処理した。その結果、標準溶液はいずれも溶出時間約１７分の位置に主たるピークを与えた。本ピークがエクジステロンである。それぞれのピーク面積に基づき標準曲線を作成した。
【００４１】
次に、上記の方法で得たパフィア抽出物１ｇを取り、体積比１５：８５のアセトニトリル・水混液を加えて全量２５ｍｌとした後、孔径０．４５μｍのメンブランフィルターで濾過して濾液を採取した。この濾液２０μｌを、上記のエクジステロン精製標品の場合と同様にしてＨＰＬＣ分析した。上述の標準溶液の分析で認められたピークと保持時間の一致するピークを検出し、当該ピーク面積を、前記で得た標準曲線に内挿して、上記の方法で得たパフィア抽出物が、固形物換算で約１％（ｗ／ｗ）のエクジステロンを含むことを確認した。
【００４２】
【実験例１−２】
〈ガラナ粉砕物〉
ガラナの加工物として、ガラナ粉砕物（オノブラス（ＯＮＯＢＲＡＳ）製『パウダード・ガラナ（ｐｏｗｄｅｒｅｄ  ＧＵＡＲＡＮＡ）』）を用いた。以下に示すようにＨＰＬＣで分析してカフェインを検出した。先ず、和光純薬製の無水カフェインの１ｍｇ／ｍｌ水溶液を調製し、当該溶液の希釈により、２５０μｇ／ｍｌ、１００μｇ／ｍｌ、５０μｇ／ｍｌ、２５μｇ／ｍｌ、１０μｇ／ｍｌの標準溶液を調製した。これら標準溶液それぞれ２０μｌずつを、カラムとして東ソー製の『ＴＳＫ  ｇｅｌ  ＯＤＳ−８０ＴM』（内径４．６ｍｍ×長さ１５ｃｍ）を用い、溶離液として５ｍＭオクタンスルホン酸ナトリウムを含む５０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ６．５）とメタノールの体積比４：１の混液を用いるＨＰＬＣに供した。流速は１．０ｍｌ／分、カラム温度は４０℃とし、溶出液の２７０ｎｍにおける吸光度を、紫外可視分光検出器（日本分光工業製『８７５−ＵＶ型』）で検出した。検出結果はデータ処理器（島津製作所製『ＣＲ−４Ａ』）で処理した。いずれの溶液も、溶出時間約７分の位置に主たるピークを与えた。本ピークがカフェインである。それぞれのピーク面積に基づき標準曲線を作成した。一方、前記の『パウダード・ガラナ』７５ｍｇを試験管にとり、約１０ｍｌの蒸留水を加えて約１５分間煮沸し、冷却の後、さらに蒸留水を加えて全量を２５ｍｌとした。当該溶液を、１０，０００回転で５分間遠心分離し、上清を回収した。この上清を、孔径０．４５μｍのメンブランフィルターで濾過し、濾液の２０μｌを、標準溶液の分析と同様にしてＨＰＬＣで分析した。標準溶液の分析で認められたピークと溶出時間の一致するピークを検出し、当該ピークの面積を、先に作成しておいた標準曲線に内挿したところ、『パウダード・ガラナ』は固形物換算で約４％（ｗ／ｗ）のカフェインを含むものであった。
【００４３】
【実験例１−３】
〈藍抽出物〉
植生の藍の葉及び茎を含む地上部分を収穫し、生重量で約１０ｋｇ得た。混入している枯葉や雑草などを取り除き、水道水で洗浄の後、脱水し、チョッパー（大道産業製『モデルＯＭＣ−１２』）で処理し、藍破砕物約１０ｋｇを得た。このうち３７０ｇに、脱イオン水５５５ｇと混合し、ブレンダー（トリオサイエンス製『トリオブレンダー』）で２分間処理した。遠心濾過して上澄液６８８ｇをステンレス製ジョッキに採取し、１２１℃で１０分間オートクレーブし、放冷の後、４℃、１５，０００ｒｐｍ、２０分間の条件で遠心分離して形成される上清６１９ｇを採取した。この上清の固形物濃度は約１．９％であった。これに脱イオン水を加え、固形物濃度約１．０％の藍抽出物を調製した。
【００４４】
【実験例２】
〈免疫増強作用〉
実験例１−１の方法で得たパフィア抽出物と、フラボノイドとして、酵素処理ヘスペリジン（東洋精糖製『αＧヘスペリジンＰＡ』）及び酵素処理ルチン（東洋精糖製『αＧルチンＰＳ』）を適宜配合し、精製水で希釈し、膜濾過により滅菌して、表１に示す組成の５種類の試料（試料番号１乃至５）を調製した。
【００４５】
【表１】
0004676040.tif 000002
【００４６】
この５種類の試料の免疫増強作用を以下の様にして調べた。すなわち、常法にしたがって、ＢＡＬＢ／ｃマウスの腹腔からマクロファージを採取し、９６ウェルのマイクロ・プレートに播種して付着させた。これに、予め調製しておいた、上記５種類の試料を、１０％（ｖ／ｖ）牛胎仔血清及び１０ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ緩衝液（ｐＨ７．４）を含むＲＰＭＩ１６４０培地で１００倍希釈した溶液をそれぞれ別々のウェルに１ウェル当たり０．１ｍｌずつ添加し、５％ＣＯ2 インキュベーター中で３７℃で５時間インキュベートした。各ウェルごとに写真撮影し、それぞれの、全マクロファージ数に対する伸展したマクロファージ数の百分率（％）を求めた。対照として、上記の試料の希釈物に代えて、１０％（ｖ／ｖ）牛胎仔血清及び１０ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ緩衝液（ｐＨ７．４）を含むＲＰＭＩ１６４０培地のみを添加する系を設けた。結果を表２に示す。
【００４７】
【表２】
0004676040.tif 000003
【００４８】
表２に示される結果において、各試料（試料番号１乃至５）を添加した系で求められた値と、対照の系で求められた値の差を、各試料によるマクロファージ活性化効果として評価すると、パフィア抽出物やフラボノイドには、顕著なマクロファージ活性化効果があることがわかる。さらに、このマクロファージ活性化効果は、パフィア抽出物とフラボノイドの併用により相乗的に強まる。このことは、試料番号４及び５の組成の、この発明の組成物が顕著な免疫増強作用を示すことを表している。なお、この実験例で用いたフラボノイドの酵素処理物は、生体内でグルコシダーゼの作用により本来のフラボノイドに変換されることは周知であり、したがって、以上の結果は、酵素処理物ではないフラボノイドも同等にこの発明に用い得ることをも示している。
【００４９】
実験例１−１の方法で得たパフィア抽出物、実験例１−２に記載のガラナ粉砕物及び実験例１−３の方法で得た藍抽出物と、フラボノイドとして、酵素処理ヘスペリジン（東洋精糖製『αＧヘスペリジンＰＡ』）及び酵素処理ルチン（東洋精糖製『αＧルチンＰＳ』）を適宜配合し、精製水で希釈し、膜濾過により滅菌して、表３に示す組成の１０種類の試料（試料番号６乃至１５）を調製した。
【００５０】
【表３】
0004676040.tif 000004
【００５１】
これら１０種類の試料の免疫増強作用を、上述と同じ方法で調べ、同様にして対照との差により評価した。結果を表４に示す。
【００５２】
【表４】
0004676040.tif 000005
【００５３】
先の試料番号４及び５の組成に、藍抽出物及び／又はガラナ粉砕物をさらに添加することにより、マクロファージ活性化効果はさらに一段と相乗的に強まった。このことは、この発明の組成物がいずれも顕著な免疫増強作用を示すことを表している。
【００５４】
以上に示した実験例２で用いたパフィア抽出物に代えて、常法にしたがい調製したドクダミ抽出物、イチョウ抽出物及びクロレラ抽出物のいずれかを用いて、同様に試験した。これら抽出物は各地で古来より民間療法薬として用いられてきたものである。これら抽出物には、フラボノイドや、ガラナ粉砕物、藍抽出物がそれ自体で示すマクロファージ活性化効果の増強する作用は認められなかった。この結果は、この発明の組成物が、民間療法薬と天然物との配合品でありながら、極めて顕著な薬効を発揮することを示している。
【００５５】
【実験例３】
〈抗アレルギー作用〉
実験例１−１の方法で得たパフィア抽出物、フラボノイドとして酵素処理ヘスペリジン（東洋精糖製『αＧヘスペリジンＰＡ』）、実験例１−２に記載のガラナ粉砕物及び、実験例１−３の方法で得た藍抽出物を配合し、精製水で希釈し、膜濾過により滅菌して、表５に示す組成の８種類の試料（試料番号１６乃至２３）を調製した。
【００５６】
【表５】
0004676040.tif 000006
【００５７】
この８種類の試料の、実験動物の受動的感作皮膚アナフィラキシーに対する影響を比較することにより、抗アレルギー作用を調べた。受動的感作皮膚アナフィラキシーは、福田英臣ら、廣川書店発行、『続医薬品の開発  第２巻  病態動物モデル』（１９９３年）、９５乃至９６頁に記載のように、抗アレルギー剤のスクリーニング法として広く用いられていることから、被検試料の抗アレルギー作用の検討にも有効といえる。
【００５８】
先ず、３０匹の６週齢のウイスター雄性ラット（日本チャールズ・リバー）を常法により１週間予備飼育した。これらラットの背部を剃毛し、抗２，４−ジニトロフェニレイテッド・アスカリス・エキストラクト血清（エル・エス・エル製。以下、『抗ＤＮＰ−ＡＳ血清』と略記する。）を、それぞれの皮内３箇所に０．１ｍｌずつ注射し、感作した。感作の４７時間後に、ラット１匹当たり、先に調製した８種類の試料のいずれか１ｇを経口投与した。対照として、試料に代えて滅菌蒸留水を経口投与する系を設けた。同一の試料を３匹ずつに同じ手順で投与した。さらに感作の４８時間後に０．５ｍｇ／ｍｌ  ２，４−ジニトロフェニレイテッド・アスカリス・エキストラクト（エル・エス・エル製。以下、『ＤＮＰ−ＡＳ』と略記する。）を含む０．５％（ｗ／ｖ）エバンスブルーを含む生理食塩水１ｍｌを尾静脈から投与し、受動的感作皮膚アナフィラキシーを惹起させた。ＤＮＰ−ＡＳ投与の３０分後に、常法により、放血致死せしめ、背部皮膚を剥離し、色素斑を一定の大きさで切り取り、エス・カタヤマら、『マイクロバイオロジー・イムノロジー（Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ）』、第２２巻、８９乃至１０１頁（１９７８年）に記載の方法に準じて、青染部の漏出色素量を測定した。すなわち、各皮膚片に１ｍｌの１．２Ｎ  苛性カリを加え、３７℃で１５時間以上加温して皮膚組織を溶解した後に、９ｍｌの０．６Ｎリン酸・アセトン混合液（５：１３）を加えて色素を抽出した。常法により遠心分離の後、上清の６２０ｎｍにおける吸光度を測定し、測定結果に基づき漏出色素量を算出した。投与した試料毎の、漏出色素量の平均値を表６に示した。
【００５９】
【表６】
0004676040.tif 000007
【００６０】
表６に示すように、受動的感作皮膚アナフィラキシー反応ラットからの色素の漏出はパフィア抽出物やフラボノイドにより有意に抑制された。この抑制は、パフィア抽出物とフラボノイドの併用により相乗的に強まる。ここに藍抽出物及び／又はガラナ粉砕物を添加することにより、この抑制はさらに一段と相乗的に強まる。また、フラボノイドとしてここで用いた酵素処理ヘスペリジンに代えて、酵素処理ルチン（東洋精糖製『αＧルチンＰＳ』）を用いた場合にも、ほぼ同等の結果が得られた。なお、この実験例で用いたフラボノイドの酵素処理物は、生体内でグルコシダーゼの作用により本来のフラボノイドに変換されることは周知であり、したがって、この結果は、酵素処理物ではないフラボノイドも同等にこの発明に用い得ることを示している。以上の結果は、この発明の組成物が、顕著な抗アレルギー作用を示すことを表している。
【００６１】
以上に示した実験例３で用いたパフィア抽出物に代えて、常法にしたがい調製したドクダミ抽出物、イチョウ抽出物及びクロレラ抽出物のいずれかを用いて、同様に試験した。これら抽出物は各地で古来より民間療法薬として用いられてきたものである。これら抽出物には、フラボノイドや、ガラナ粉砕物、藍抽出物がそれ自体で示す抗アレルギー作用を増強する作用は認められなかった。この結果は、この発明の組成物が、民間療法薬と天然物との配合品でありながら、極めて顕著な薬効を発揮することを示している。
【００６２】
【実験例４】
〈向精神作用〉
実験例１−１の方法で得たパフィア抽出物、フラボノイドとして酵素処理ヘスペリジン（東洋精糖製『αＧヘスペリジンＰＡ』）、実験例１−２に記載のガラナ粉砕物及び、実験例１−３の方法で得た藍抽出物を適宜配合して、精製水で希釈し、膜濾過により滅菌して、表７に示す組成の８種類の試料（試料番号２４乃至３１）を調製した。
【００６３】
【表７】
0004676040.tif 000008
【００６４】
これらの試料の向精神作用を、森本ら、『日薬理誌』、第１０４巻、３９乃至４９頁（１９９４年）に記載の回転棒法に準じて調べた。すなわち、５週齢の雄性スプラギュー−ダウレイ（Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ）ラットを、毎分６回転する直径１．２ｃｍの木製棒上に１匹につき５乃至６回乗せた。その後ラットが回転棒上から落下するまでの時間（以下、この実験例３においては「反応時間」という。）を測定し、２乃至３回の反応時間がほぼ一定のラットを選び、上記の試料を経口投与した。投与は、ラット１匹当たり１ｇとし、対照として滅菌蒸留水を同様に投与する系を設けた。同一の試料をそれぞれ３匹のラットに同一の手順で投与した。試料の投与の１時間後、各ラットの反応時間を測定し、試料毎の平均値を求めた。試料の投与前の各ラットの反応時間を１とし、各試料投与系の反応時間を相対的に表し対照と比較した。投与した試料毎の、反応時間の相対値の平均値を表８に示した。
【００６５】
【表８】
0004676040.tif 000009
【００６６】
表８に示すように、ラットの反応時間はパフィア抽出物やフラボノイドにより、対照に比べて顕著に延長された。この、対照に対して延長された反応時間の長さは、パフィア抽出物とフラボノイドの併用により相乗的に増大する。ここに藍抽出物及び／又はガラナ粉砕物を添加することにより、この延長された反応時間はさらに一段と相乗的に増大する。また、フラボノイドとしてここで用いた酵素処理ヘスペリジンに代えて、酵素処理ルチン（東洋精糖製『αＧルチンＰＳ』）を用いた場合にも、ほぼ同等の結果が得られた。なお、この実験例で用いたフラボノイドの酵素処理物は、生体内でグルコシダーゼの作用により本来のフラボノイドに変換されることは周知であり、したがって、この結果は、酵素処理物ではないフラボノイドも同等にこの発明に用い得ることを示している。以上の結果は、この発明の組成物が、顕著な向精神作用を示すことを表している。
【００６７】
【実験例５】
〈強精作用〉
実験例３で調製し、表５に示した組成の、８種類の試料（試料番号１６乃至２３）の、実験マウスにおける精子形成能を比較して強精作用を調べた。先ず、１８週齢の雄性ＩＣＲマウスに、１匹当たり、１回当たり０．５ｇのいずれかの試料を経口投与した。投与は１週間５回のスケジュールで３週間続け、合計１５回行った。対照として、滅菌蒸留水を同様に投与する系を設けた。同一の試料の投与を、それぞれをマウス３匹ずつに対して行った。試料の投与終了の翌日に、アマシャム製の細胞増殖検出キットに添付のブロモデオキシウリジン標識試薬を、マウス１匹当たり０．５ｍｌ腹腔内に投与し、その２時間後にマウスより睾丸を摘出し、１０％緩衝ホルマリン液に２日間浸漬した。浸漬の後、常法により、パラフィン包埋切片を作成し、細胞増殖検出キット（アマシャム製）に添付の抗ブロモデオキシウリジン・モノクローナル抗体を用いて、添付のプロトコールに従い、細胞内に取り込まれたブロモデオキシウリジンを免疫組織化学染色により検出して増殖細胞数すなわち、各試料の精子形成能を調べた。増殖細胞は、顕微鏡（１００倍）観察して一視野内に認められた、染色された細胞数をカウントし、試料毎の染色された細胞数の平均値を求め、対照を１とした相対値として表した。結果を表９に示す。
【００６８】
【表９】
0004676040.tif 000010
【００６９】
表９に示すように、染色された細胞数はパフィア抽出物やフラボノイドの投与により顕著に上昇した。この上昇は、パフィア抽出物とフラボノイドの併用により相乗的に強まる。さらに、ここに藍抽出物及び／又はガラナ粉砕物を添加することにより、この上昇はさらに一段と相乗的に強まる。また、フラボノイドとしてここで用いた酵素処理ヘスペリジンに代えて、酵素処理ルチン（東洋精糖製『αＧルチンＰＳ』）を用いた場合にも、ほぼ同等の結果が得られた。なお、この実験例で用いたフラボノイドの酵素処理物は、生体内でグルコシダーゼの作用により本来のフラボノイドに変換されることは周知であり、したがって、この結果は、酵素処理物ではないフラボノイドも同等にこの発明に用い得ることを示している。以上の結果は、この発明の組成物が、顕著な強精作用を有することを示している。
【００７０】
【実験例６】
〈組成物の呈味〉
実験例１−１の方法で得たパフィア抽出物と、フラボノイドとして、酵素処理ヘスペリジン（東洋精糖製『αＧヘスペリジンＰＡ』）及び酵素処理ルチン（東洋精糖製『αＧルチンＰＳ』）、及びスクロースを適宜配合し、精製水で希釈し、膜濾過により滅菌して、表１０に示す組成の７種類の試料（試料番号３２乃至３８）を調製した。
【００７１】
【表１０】
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【００７２】
この７種類の試料の呈味をパネルテストにより評価した。すなわち、先ず、室温２４℃に保った室内に上記の試料を設置し、男性１０名及び女性６名のパネラーに、個々にスプーン１杯程度のそれぞれの試料を適宜試飲させ、試飲後、各試料につき（Ａ）全く抵抗なく経口摂取できる、（Ｂ）苦味・えぐ味はあるものの経口摂取は十分可能である、（Ｃ）苦味・えぐ味が強すぎて経口摂取がつらい、の３段階で評価させた。試料毎に、それぞれの評価を与えたパネラーの人数を合計した。結果を表１１に示す。
【００７３】
【表１１】
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【００７４】
表１１に示されるように、パフィア抽出物とフラボノイドを配合するすることにより、パフィア本来の呈味は著しく改善される。また、試料番号３６及び３７の組成に、さらにガラナ粉砕物や藍抽出物を配合して同様にパネルテストをしたところ、やはり経口摂取は容易であることが確認された。以上の結果は、この発明の組成物は、パフィア本来の苦味・えぐ味が著しく低減されていることを示している。
【００７５】
【実験例７】
〈急性毒性〉
７週齢のｄｄ系マウス（体重約１９乃至２１ｇ）を使用して、実験例２で調製した試料番号８乃至１５の組成の組成物及び、実験例３で調製した試料番号２０乃至２３の組成の組成物を凍結乾燥した上で、経口投与して急性毒性を試験したところ、いずれも１匹当たり０．５ｇの投与量までは死亡例は認められず、それ以上の投与は困難であった。以上のことは、この発明の組成物の毒性が極めて低いことを示している。
【００７６】
以下に実施例を示し、この発明の組成物につき、さらに具体的に説明する。
【００７７】
【実施例１】
〈粉末状組成物〉
実験例１−１に示す方法で得た、固形物濃度約５０％の、液状のパフィア抽出物２７７０ｇに、トレハロース（林原製『トレハオース』）６８７９ｇを加え、万能混合撹拌機（ダルトン製『５ＤＭ』）を用いて５回に分けて処理して混合し、乾燥機（ヤマト製『ＤＫ８３』）中で６０℃で１７時間保持し、さらに、真空乾燥機（ヤマト製）中で減圧下６０℃で４時間半保持して乾燥させた。粉砕機（ダルトン製『パワーミル  Ｐ−３』）を用いて粉砕し、パフィア抽出物含有粉末８６４５ｇを得た。
【００７８】
酵素処理ヘスペリジン（東洋精糖製『αＧヘスペリジンＰＡ』）１００ｇと、トレハロース（林原製『トレハオース』）９００ｇとを、万能混合撹拌機（ダルトン製『５ＤＭ』）を用いて混合し、粉砕機（ダルトン製『パワーミルＰ−３』）を用いて粉砕し、フラボノイド含有粉末を得た。
【００７９】
実験例１−３に示す方法で得た、固形物濃度約１．９％の、液状の藍抽出物６１９ｇに、トレハロース（林原製『トレハオース』）８６３６ｇを加えて混合し、室温下で１５時間保持した。ダルトン製の粉砕機『パワーミルＰ−３』を用いて粉砕し、藍抽出物含有粉末９１４１ｇを得た。
【００８０】
以上のようにして得た、パフィア抽出物含有粉末  ７００ｇ、フラボノイド含有粉末  １００ｇ、藍抽出物含有粉末  １００ｇ及び、実験例１−２に記載のガラナ粉砕物  １００ｇを万能混合機（ダルトン製『５ＤＭ』）で混合し、粉末状のこの発明の組成物を得た。実験例１−１及び１−３に記載の方法に準じて分析したところ、本品は、固形物換算で約０．０５％（ｗ／ｗ）のエクジステロンと、約０．４％（ｗ／ｗ）のカフェインを含んでいた。
【００８１】
本品は、パフィア本来の苦味・えぐ味が低減されており、なおかつトレハロースのまろやかな甘みを呈するので、経口摂取が容易である。本品は、免疫増強作用・抗アレルギー作用・向精神作用・強精作用が顕著な上、これら作用は互いに阻害し合うことなく協調して働くので、摂取したとき肉体的・精神的に生体に活力が与えられる。しかも、本品はトレハロースを含むことにより栄養豊富である上、毒性が極めて低い。以上の如き性質を有するこの発明の組成物は、健康の維持・増進や、免疫疾患、アレルギー疾患、精神神経疾患及び／又は性能力の低下などの感受性疾患の治療・予防・回復の促進などに、食品分野や医薬品分野において有利に利用できる。
【００８２】
【実施例２】
〈タブレット状組成物〉
実施例１の方法で得た粉末状組成物と、日本感光色素研究所製の細胞賦活剤『ルミン』とを混合し、直径１２ｍｍ、２０Ｒ杆を用いて常法により打錠して、製品重量当たり約２％のルミンを含む、タブレット状のこの発明の組成物を得た。本品は、免疫増強作用・抗アレルギー作用・向精神作用・強精作用が顕著なことに加え、細胞賦活効果をも発揮し、摂取したとき肉体的・精神的に生体に活力が与えられる。しかも、本品はトレハロースを含むことにより栄養豊富である上、毒性が極めて低い。以上の如き性質を有するこの発明の組成物は、健康の維持・増進や、免疫疾患、アレルギー疾患、精神神経疾患及び／又は性能力の低下などの感受性疾患の治療・予防・回復の促進などに、食品分野や医薬品分野において有利に利用できる。
【００８３】
【実施例３】
〈乳液状組成物〉
実験例１−１に示す方法で得た固形物濃度約５０％の液状のパフィア抽出物１ｋｇと、酵素処理ルチン５０ｇ（東洋精糖製『αＧルチンＰＡ』）とを均一に混合した後、凍結乾燥した。この凍結乾燥品１００ｇに対し、トレハロース（林原製『トレハオース』）２５０ｇ、ポリオキシエチレンベヘニルエーテル５０ｇ、テトラオレイン酸ポリオキシエチレンソルビトール１００ｇ、親油型モノステアリン酸グリセリン１００ｇ、ベヘニルアルコール５０ｇ及びアボガド油１００ｇの割合で加え、さらにビタミンＥ及び防腐剤の適量を加え、常法に従って加熱溶解し、これに１，３−ブチレングリコール５００ｇ、カルボキシビニルポリマー１０ｇ及び精製水８．５ｋｇを加え、ホモゲナイザーにかけて乳化し、乳液状のこの発明の組成物を調製した。本品を皮膚や粘膜などに適用すれば、本品の有する免疫増強作用が発揮される。さらに本品は抗アレルギー作用を有しているので、安心して適用することができる。これら作用に加え、本品は保湿性にも優れているので、皮膚癌の治療・予防や、日焼け止め、色白剤などとして、化粧品分野や医薬品分野において有利に利用できる。
【００８４】
【実施例４】
〈ハードキャンディー〉
トレハロース含有水飴（林原製『トレハスター』）３００ｇに対し、還元麦芽糖水飴（水分２５％）８００ｇを加えて混合溶解し、減圧下で水分が２％未満になるまで濃縮し、これにクエン酸１０ｇ及び適量のレモン香料と着色料とを混和し、さらに、実施例３に示す方法で得た凍結乾燥品１０ｇを加えて混和した。次いで、常法に従って成形し、この発明の組成物を含んでなるハードキャンディーを調製した。本品は、上品な甘味に加え適度の苦味を有し、吸湿性少なく、ダレを起こしにくい歯切れの良いハードキャンディーである。本品は、免疫増強作用・抗アレルギー作用・向精神作用・強精作用が顕著な上、これら作用は互いに阻害し合うことなく協調して働くので、摂取したとき肉体的・精神的に生体に活力が与えられる。過労、加齢、寒冷条件、栄養不良などに伴う種々の生体機能の減退時の滋養強壮や、他の治療方法による治療効果を促進するのに有用である。
【００８５】
【実施例５】
〈清涼飲料〉
実施例１の方法で得た粉末状組成物１００ｇ、異性化糖５０ｇ、クエン酸０．５ｇ及びＬ−アスコルビン酸０．５ｇに水を加えて全量を１ｋｇとして、この発明の組成物を含んでなる清涼飲料を調製した。本品は、まろやかな甘味と適度の苦味に加え、さわやかな風味を呈する嗜好性に優れた製品である。本品は、免疫増強作用・抗アレルギー作用・向精神作用・強精作用が顕著な上、これら作用は互いに阻害し合うことなく協調して働くので、摂取したとき肉体的・精神的に生体に活力が与えられる。過労、寒冷条件、栄養不良などに伴う種々の生体機能の減退時の滋養強壮や、他の治療方法による治療効果を促進するのに有用である。
【００８６】
【実施例６】
〈合成酒〉
３０ｖ／ｖ％アルコール水溶液６５１８ｇ、７０％ぶどう糖水溶液６００ｇ、マルトテトラオース含有水飴（林原製『テトラップ』）５０ｇ、コハク酸１１．１ｇ、７５％乳酸水溶液３．６６ｇ、グルタミン酸ナトリウム２．３ｇ、グリシン１．２ｇ、アラニン１．２ｇ、コハク酸ナトリウム２．２２ｇ、食塩１．６ｇ、天然塩１．４ｇ、実施例１の方法で得た粉末状組成物２００ｇ及び水２５００ｇを混合して、アルコール含量約２０ｖ／ｖ％の原酒を得た。これを水で希釈して、アルコール含量１５乃至１６ｖ／ｖ％の、この発明の組成物を含んでなる合成酒を調製した。本品は、まろやかな甘みに加え、適度の苦味を有する上品な風味のアルコール飲料である。本品は、免疫増強作用・抗アレルギー作用・向精神作用・強精作用が顕著な上、これら作用は互いに阻害し合うことなく協調して働くので、摂取したとき肉体的・精神的に生体に活力が与えられる。過労、加齢、寒冷条件、栄養不良などに伴う種々の生体機能の減退時の滋養強壮や、他の治療方法による治療効果を促進するのに有用である。
【００８７】
【実施例７】
〈チューインガム〉
実施例１の方法で得た粉末状組成物２重量部、グルコース６重量部及び、柔らかくなる程度に加熱溶融したガムベース２重量部を加えて混合し、さらに適量のハッカ香料を混合した後、常法にしたがってロールにより練り合わせ、成形することによってこの発明の組成物を含んでなるチューインガムを製造した。本品は、まろやかな甘味と適度の苦味に加え、さわやかな風味を呈するテクスチャーに優れた製品である。本品は、免疫増強作用・抗アレルギー作用・向精神作用・強精作用が顕著な上、これら作用は互いに阻害し合うことなく協調して働くので、摂取したとき肉体的・精神的に生体に活力が与えられる。過労、寒冷条件、栄養不良などに伴う種々の生体機能の減退時の強壮に有利に利用できる。
【００８８】
【実施例８】
〈座剤〉
実験例１−１に示す方法で得た固形物濃度約５０％の液状のパフィア抽出物１ｋｇと、酵素処理ルチン（東洋精糖製『αＧルチンＰＡ』）５ｇとを均一に混合した後、凍結乾燥した。この凍結乾燥品１００ｇに対し、ポリエチレングリコール＃１０００を７２０ｇ、ポリエチレングリコール＃４０００を１８０ｇの割合で混合せしめ、常法にしたがって、座剤としてのこの発明の組成物を調製した。本品を投与すれば、その免疫増強作用により、大腸や直腸近傍の腫瘍性疾患、例えば、大腸癌や結腸癌などの治療・予防・回復の促進に著効を発揮する。
【００８９】
【発明の効果】
以上説明したごとく、この発明は、パフィアの加工物とフラボノイドとを含んでなる組成物が、免疫増強作用・抗アレルギー作用・向精神作用・強精作用を顕著に示し、健康の維持・増進や疾患の治療・予防に有効であるという全く独自の知見に基づくものである。この発明の組成物を生体に投与したとき、個々の作用は互いに阻害し合わず協調して働くので、肉体的及び／又は精神的に生体に活力が与えられる。さらに、この発明の組成物は、パフィア本来の苦味・えぐ味が低減されている上、毒性が極めて低い。したがって、この発明の組成物は経口的に用いる強壮剤として極めて有用である。また、糖類等の栄養源をさらに含んでなるこの発明の組成物は、滋養強壮剤として極めて有用である。この発明の組成物は、以上の如き顕著な作用を示すので、治療・予防のための感受性疾患剤としても極めて有用である。
【００９０】
この発明は、斯くも顕著な作用効果を奏する発明であり、斯界に貢献すること誠に多大な意義のある発明である。