(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（９）
【化１】
0004676614.tif 000050
（式中、Ｘは、水素、ハロゲン、水酸基、炭素数１〜１０のアシルオキシ基、炭素数１〜１０のアルコキシ基、アミノ基、又は、置換アミノ基を表す。Ｙ１は、ハロゲン、水酸基、炭素数１〜１０のアシルオキシ基、炭素数１〜１０のスルホニルオキシ基、炭素数１〜１０のアルコキシ基、アミノ基、炭素数１〜１５のアルキルアミノ基、炭素数１〜１５のアラルキルアミノ基、スルファニル基、炭素数１〜１０のアルキルスルファニル基、又は、炭素数１〜１０のアラルキルスルファニル基を表す。）で表される置換アセチルピリジン誘導体を、微生物由来のカルボニル還元酵素、又は、該カルボニル還元酵素の産生能を有する微生物の培養物若しくは該処理物を用いて、（Ｒ）選択的に還元することを特徴とする、一般式（１０）
【化２】
0004676614.tif 000051
（式中、Ｘ及びＹ１は、前記と同じ基を表す。＊は不斉炭素を表す。）で表される光学活性ヒドロキシエチルピリジン誘導体の製造方法であって、
カルボニル還元酵素の産生能を有する微生物が、アシビア属、キャンディダ属、クリプトコッカス属、デバリオマイセス属、グイラーモンデラ属、ハンゼヌラ属、メツニコビア属、ピキア属、ロドトルラ属、ロドスポリジウム属、サッカロマイコプシス属、シュワニオマイセス属、スポリディオボラス属、スポロボロマイセス属、トルラスポラ属、ヤロビア属に属する微生物である製造方法。
【請求項２】
Ｙ１は、塩素を表す請求項１に記載の製造方法。
【請求項３】
置換アセチルピリジン誘導体が一般式（１２）
【化３】
0004676614.tif 000052
（式中、Ｘは前記と同じ基を表す。Ｒ６は、炭素数１〜１５のアルキル基、炭素数１〜１５のアラルキル基、又は、炭素数６〜１６のアリール基を表す。）で表される置換アセチルピリジン誘導体であり、光学活性ヒドロキシエチルピリジン誘導体が一般式（１３）
【化４】
0004676614.tif 000053
（式中、Ｘ及びＲ６は、前記と同じ基を表す。＊は不斉炭素を表す。）で表される光学活性アシロキシヒドロキシエチルピリジン誘導体である、請求項１に記載の製造方法。
【請求項４】
（Ｒ）選択的な還元反応の前に、一般式（７）
【化５】
0004676614.tif 000054
（式中、Ｘは前記と同じ基を表す。Ｙ２はハロゲンを表す。）で表される置換アセチルピリジン誘導体に、一般式（１１）
【化６】
0004676614.tif 000055
（式中、Ｒ６は前記と同じ基を表す。）で表されるカルボン酸を塩基と４級アンモニウム塩の共存下に反応させることにより一般式（１２）
【化７】
0004676614.tif 000056
（式中、Ｘ及びＲ６は前記と同じ基を表す。）で表される置換アセチルピリジン誘導体を製造する工程を含む、請求項３に記載の製造方法。
【請求項５】
Ｙ２は、塩素である請求項４に記載の製造方法。
【請求項６】
塩基が、炭酸水素ナトリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素カリウム又は炭酸カリウムのいずれかである請求項４又は５に記載の製造方法。
【請求項７】
４級アンモニウム塩が、塩化テトラｎ−ブチルアンモニウム又は臭化テトラｎ−ブチルアンモニウムのいずれかである請求項４〜６のいずれか１項に記載の製造方法。
【請求項８】
Ｒ６は、メチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、又は、フェニル基のいずれかを表す請求項３〜７のいずれか１項に記載の製造方法。
【請求項９】
Ｘは、水素、塩素又はアセチルアミノ基のいずれかを表す請求項１〜８のいずれか１項に記載の製造方法。
【請求項１０】
カルボニル還元酵素の産生能を有する微生物が、アシビア・ゴシピイ、キャンディダ・カティヌラータ、キャンディダ・フルクタス、キャンディダ・ガラクタ、キャンディダ・グロペンジェセリイー、キャンディダ・グイラーモンディー、キャンディダ・ヘムロニー、キャンディダ・ホルミイー、キャンディダ・インターメディア、キャンディダ・マグノリエ、キャンディダ・マルトーサ、キャンディダ・メリニー、キャンディダ・パラプシロシス、キャンディダ・ルゴーサ、キャンディダ・ソノレンシス、キャンディダ・トロピカリス、キャンディダ・ユティリス、キャンディダ・ベルサティリス、クリプトコッカス・アルビダス・バル・アルビダス、デバリオマイセス・ハンセニー・バラエティ・ファブリー、デバリオマイセス・ハンセニー、デバリオマイセス・マラマ、デバリオマイセス・ネパレンシシ、グイラーモンデラ・セレノスポラ、ハンゼヌラ・グルコジーマ、ハンゼヌラ・サツルヌス、メツニコビア・レウカウフィー、ピキア・ボビス、ピキア・ファリノーサ、ロドトルラ・グルティニス・バル・ダイレネンシス、ロドトルラ・グラミニス、ロドトルラ・ミヌタ、ロドトルラ・ルブラ、ロドスポリジウム・ディオボバタム、ロドスポリジウム・スファエロカーパム、ロドスポリジウム・トルロイデス、サッカロマイコプシス・マランガ、シュワニオマイセス・カステリー、スポリディオボラス・ジョンソニー、スポロボロマイセス・パラロセウス、スポロボロマイセス・サルモニカラー、トルラスポラ・デルブルエキー、ヤロビア・リポリティカからなる群から選ばれた微生物である請求項１〜９のいずれか１項に記載の製造方法。
【請求項１１】
カルボニル還元酵素の産生能を有する微生物が、キャンディダ・マグノリエ ＩＦＯ０７０５である請求項１０に記載の製造方法。
【請求項１２】
カルボニル還元酵素の産生能を有する微生物が、キャンディダ属に属する微生物由来であるカルボニル還元酵素をコードするＤＮＡ、及び該酵素が依存する補酵素を再生する能力を有する酵素をコードするＤＮＡを有するプラスミドで形質転換された形質転換細胞である請求項１〜９のいずれか１項に記載の製造方法。
【請求項１３】
形質転換細胞がＥ．ｃｏｌｉ ＨＢ１０１（ｐＮＴＣＲＧ） 受託番号ＦＥＲＭ−ＢＰ６８９８である請求項１２に記載の製造方法。
【発明の詳細な説明】
技術分野
本発明は、医薬品の製造上重要な光学活性ベータ−３アドレナリン受容体アゴニストの中間体の製造方法、及び、その重要中間体に関する。
背景技術
光学活性なベータ−３アドレナリン受容体アゴニストの中間体である、一般式（１４）
0004676614.tif 000002
（式中、Ｘは、水素、ハロゲン、水酸基、炭素数１〜１０のアシルオキシ基、炭素数１〜１０のアルコキシ基、アミノ基、又は、置換アミノ基を表す。）で表される光学活性ジヒドロキシエチルピリジン誘導体、又は、一般式（１６）
0004676614.tif 000003
（式中、Ｘは、上記と同じ基を表す。）で表される光学活性オキシラン誘導体の製造方法としては、従来、
（ｉ）ビニルピリジン誘導体の触媒的不斉ジヒドロキシ化反応を経由する方法（ＷＯ９８２１１８４号）、
（ｉｉ）ハロアセチルピリジン誘導体の塩化ジイソピノカンフェニルボランによる不斉還元を経由する方法（ＵＳ５５６１４２号、ＵＳ５７１４５０６号）、及び、
（ｉｉｉ）アミノアセチルピリジン誘導体の微生物による不斉還元を経由する方法（ＷＯ９８０３６７２号）
が知られている。
しかし、（ｉ）の方法は、毒性の高い酸化オスミウムを用い、更に、高価な不斉配位子を必要とするため、工業的な利用に問題がある。
（ｉｉ）の方法は、高価な不斉還元剤である塩化ジイソピノカンフェニルボランを化学量論量必要とするため、工業的に問題がある。また、不斉還元基質として用いられる、２位が無置換又は塩素で置換されたハロアセチルピリジン誘導体は、対応するメチルケトンのメチル基をハロゲン化することにより製造される。しかしながら、そのメチルケトンの入手が困難であり、毒性及び爆発性のため工業的に取り扱いが困難なジアゾメタンを用いて合成する必要がある。
（ｉｉｉ）の方法は、ピリジン上に置換基がない［すなわち、下記一般式（７）又は（９）でＸが水素である］誘導体に関する実施例に限られており、２−アミノピリジン誘導体等の、２位が置換されたピリジン誘導体の製造方法が開示されていない。
なお、一般式（１）
0004676614.tif 000004
（式中、Ｒ１及びＲ２は、独立して、水素、炭素数１〜１０のアルキル基、炭素数１〜１０のアラルキル基、炭素数１〜１０のアシル基又は炭素数１〜１０のアルキルオキシカルボニル基を表す。Ｙ１は、ハロゲン、水酸基、炭素数１〜１０のアシルオキシ基、炭素数１〜１０のスルホニルオキシ基、炭素数１〜１０のアルコキシ基、アミノ基、炭素数１〜１５のアルキルアミノ基、炭素数１〜１５のアラルキルアミノ基、スルファニル基、炭素数１〜１０のアルキルスルファニル基、又は、炭素数１〜１０のアラルキルスルファニル基を表す。）で表される、２位がアミノ基で置換された置換アセチルピリジン誘導体は、光学活性なベータ−３アドレナリン受容体アゴニストの中間体を製造するに際して重要な化合物であると予想されていたものの、文献上の未知化合物であった。
また、一般式（２）
0004676614.tif 000005
（式中、Ｘは、水素、ハロゲン、水酸基、炭素数１〜１０のアシルオキシ基、炭素数１〜１０のアルコキシ基、アミノ基、又は、置換アミノ基を表す。）で表されるピバロイルオキシアセチルピリジン誘導体は、同様に光学活性なベータ−３アドレナリン受容体アゴニストの中間体を製造するに際して重要な化合物であると予想されていたものの、文献上の未知化合物であった。
また、一般式（３）
0004676614.tif 000006
（式中、Ｘは、水素、ハロゲン、水酸基、炭素数１〜１０のアシルオキシ基、炭素数１〜１０のアルコキシ基、アミノ基、又は、置換アミノ基を表す。）で表される光学活性ピバロイルオキシヒドロキシエチルピリジン誘導体は、同様に光学活性なベータ−３アドレナリン受容体アゴニストの中間体を製造するに際して重要な化合物であると予想されていたものの、文献上の未知化合物であった。
また、式（４）
0004676614.tif 000007
で表される光学活性ジヒドロキシエチルピリジン誘導体、又はその塩は、同様に光学活性なベータ−３アドレナリン受容体アゴニストの中間体を製造するに際して重要な化合物であると予想されていたものの、文献上の未知化合物であった。発明の要約
本発明は、上記現状に鑑み、下記一般式（１７）
0004676614.tif 000008
で表される光学活性ベータ−３アドレナリン受容体アゴニスト（例えば、ＷＯ９８２１１８４号、ＵＳ５５６１１４２号に記載）を製造する上で重要な中間体、すなわち公知の簡便な手法により上記化合物（１７）への変換が容易な光学活性ジヒドロキシエチルピリジン誘導体及び光学活性オキシラン誘導体を、入手容易な原料から、安全かつ効率的に、更には工業的に有利な方法で製造することを目的とするものである。
すなわち、本発明は、一般式（１）
0004676614.tif 000009
（式中、Ｒ１及びＲ２は、独立して、水素、炭素数１〜１０のアルキル基、炭素数１〜１０のアラルキル基、炭素数１〜１０のアシル基又は炭素数１〜１０のアルキルオキシカルボニル基を表す。Ｙ１は、ハロゲン、水酸基、炭素数１〜１０のアシルオキシ基、炭素数１〜１０のスルホニルオキシ基、炭素数１〜１０のアルコキシ基、アミノ基、炭素数１〜１５のアルキルアミノ基、炭素数１〜１５のアラルキルアミノ基、スルファニル基、炭素数１〜１０のアルキルスルファニル基、又は、炭素数１〜１０のアラルキルスルファニル基を表す。）で表される、２位がアミノ基で置換された置換アセチルピリジン誘導体である。
また本発明は、一般式（２）
0004676614.tif 000010
（式中、Ｘは、水素、ハロゲン、水酸基、炭素数１〜１０のアシルオキシ基、炭素数１〜１０のアルコキシ基、アミノ基、又は、置換アミノ基を表す。）で表される、ピバロイルオキシアセチルピリジン誘導体である。
また本発明は、一般式（３）
0004676614.tif 000011
（式中、又は、水素、ハロゲン、水酸基、炭素数１〜１０のアシルオキシ基、炭素数１〜１０のアルコキシ基、アミノ基、又は、置換アミノ基を表す。）で表される光学活性ピバロイルオキシヒドロキシエチルピリジン誘導体である。
また本発明は、式（４）
0004676614.tif 000012
で表される光学活性ジヒドロキシエチルピリジン誘導体、又はその塩である。
本発明は、また、一般式（５）
0004676614.tif 000013
（式中、Ｙ２は、ハロゲンを表す。Ｚは、水素、アルカリ金属、ハロゲン化アルカリ土類金属、又は、炭素数１〜１０のシリル基を表す。）で表されるハロゲン化酢酸誘導体に塩基を作用させてエノラートを調製し、これを一般式（６）
0004676614.tif 000014
（式中、Ｘは、水素、ハロゲン、水酸基、炭素数１〜１０のアシルオキシ基、炭素数１〜１０のアルコキシ基、アミノ基、又は、置換アミノ基を表す。Ｒ３は、炭素数１〜１０のアルキル基又は炭素数１〜１０のアラルキル基を表す。）で表される置換ニコチン酸エステルと反応させた後、酸処理に付すことからなる、一般式（７）
0004676614.tif 000015
（式中、Ｙ２及びＸは、上記と同じ基を表す。）で表される置換アセチルピリジン誘導体の製造方法である。
また本発明は、一般式（９）
0004676614.tif 000016
（式中、Ｘは、水素、ハロゲン、水酸基、炭素数１〜１０のアシルオキシ基、炭素数１〜１０のアルコキシ基、アミノ基、又は、置換アミノ基を表す。Ｙ１は、ハロゲン、水酸基、炭素数１〜１０のアシルオキシ基、炭素数１〜１０のスルホニルオキシ基、炭素数１〜１０のアルコキシ基、アミノ基、炭素数１〜１５のアルキルアミノ基、炭素数１〜１５のアラルキルアミノ基、スルファニル基、炭素数１〜１０のアルキルスルファニル基、又は、炭素数１〜１０のアラルキルスルファニル基を表す。）で表される置換アセチルピリジン誘導体をエナンチオ選択的に還元することからなる、一般式（１０）
0004676614.tif 000017
（式中、Ｘ及びＹ１は、前記と同じ基を表す。＊は不斉炭素を表す。）で表される光学活性ヒドロキシエチルピリジン誘導体の製造方法である。
また本発明は、上記一般式（７）で表される置換アセチルピリジン誘導体に、一般式（１１）
0004676614.tif 000018
（式中、Ｒ６は、炭素数１〜１５のアルキル基、炭素数１〜１５のアラルキル基、又は、炭素数６〜１６のアリール基を表す。）で表されるカルボン酸を塩基と４級アンモニウム塩の共存下に反応させることからなる、一般式（１２）
0004676614.tif 000019
（式中、Ｘ及びＲ６は前記と同じ基を表す。）で表される置換アセチルピリジン誘導体の製造方法である。
また本発明は、上記一般式（１２）で表される置換アセチルピリジン誘導体をエナンチオ選択的に還元することからなる、一般式（１３）
0004676614.tif 000020
（式中、Ｘは、水素、ハロゲン、水酸基、炭素数１〜１０のアシルオキシ基、炭素数１〜１０のアルコキシ基、アミノ基、又は、置換アミノ基を表す。Ｒ６は、炭素数１〜１５のアルキル基、炭素数１〜１５のアラルキル基、又は、炭素数６〜１６のアリール基を表す。＊は不斉炭素を表す。）で表される光学活性アシロキシヒドロキシエチルピリジン誘導体の製造方法である。
また本発明は、上記一般式（１３）で表される光学活性アシロキシヒドロキシエチルピリジン誘導体に、低級アルコール溶媒中、水酸化４級アンモニウム存在下、加溶媒分解を行うことからなる、一般式（１４）
0004676614.tif 000021
（式中、Ｘは前記と同じ基を表す。＊は不斉炭素を表す。）で表される光学活性ジヒドロキシエチルピリジン誘導体の製造方法である。
本発明は、更にまた、上記一般式（５）で表されるハロゲン化酢酸誘導体に塩基を作用させてエノラートを調製し、これを上記一般式（６）で表される置換ニコチン酸エステルと反応させた後、酸処理に付して、上記一般式（７）で表される置換アセチルピリジン誘導体を調製し、これをエナンチオ選択的に還元することからなる、一般式（１５）
0004676614.tif 000022
（式中、Ｙ２及びＸは、上記と同じ基を表す。＊は、不斉炭素を表す。）で表される光学活性ヒドロキシエチルピリジン誘導体の製造方法でもある。
本発明は、更にまた、上記一般式（５）で表されるハロゲン化酢酸誘導体に塩基を作用させてエノラートを調製し、これを上記一般式（６）で表される置換ニコチン酸エステルと反応させた後、酸処理に付して、上記一般式（７）で表される置換アセチルピリジン誘導体を調製し、これをエナンチオ選択的に還元して、上記一般式（１５）で表される光学活性ヒドロキシエチルピリジン誘導体を調製し、更に塩基で処理することからなる、一般式（１６）
0004676614.tif 000023
（式中、Ｘは、上記と同じ基を表す。＊は、不斉炭素を表す。）で表される光学活性オキシラン誘導体の製造方法でもある。
本発明は、更にまた、上記一般式（７）で表される置換アセチルピリジン誘導体に、上記一般式（１１）で表されるカルボン酸を塩基と４級アンモニウム塩の共存下に反応させ上記一般式（１２）で表される置換アセチルピリジン誘導体を調製し、これをエナンチオ選択的に還元して上記一般式（１３）で表される光学活性アシロキシヒドロキシエチルピリジン誘導体を調製し、これを加溶媒分解することからなる、上記一般式（１４）で表される光学活性ジヒドロキシエチルピリジン誘導体の製造方法でもある。
本発明は、更にまた、上記一般式（１２）で表される置換アセチルピリジン誘導体を塩基の存在下、エナンチオ選択的に還元しつつ加溶媒分解し、上記一般式（１４）で表される光学活性ジヒドロキシエチルピリジン誘導体を直接取得することからなる、光学活性ジヒドロキシエチルピリジン誘導体（１４）の製造方法でもある。
以下、本発明を詳述する。
発明の詳細な開示
本発明の製造方法を用いることにより、一般式（１６）で表される光学活性オキシラン誘導体および一般式（１４）で表される光学活性ジヒドロキシエチルピリジン誘導体の両方を製造することができる。その概要は基本的に下記の反応式で表される。光学活性オキシラン誘導体を製造するための工程は、（ａ）一般式（６）で表される置換ニコチン酸エステルを一般式（７）で表される置換アセチルピリジン誘導体に変換する工程、（ｂ）これを一般式（１５）で表される光学活性ヒドロキシエチルピリジン誘導体に還元する工程、及び、（ｃ）更に、塩基で処理することにより光学活性オキシラン誘導体に誘導する工程の３工程からなる。
一方、光学活性ジヒドロキシエチルピリジン誘導体を製造するための工程は、（ａ）上記と同様、一般式（６）で表される置換ニコチン酸エステルを一般式（７）で表される置換アセチルピリジン誘導体に変換する工程、（ｄ）これを一般式（１２）で表されるアシロキシ基で置換された置換アセチルピリジン誘導体に変換する工程、（ｂ）上記と同様に、これを一般式（１３）で表される光学活性ヒドロキシエチルピリジン誘導体に還元する工程、及び、（ｅ）更に、アシロキシ基を加溶媒分解することにより光学活性ジヒドロキシエチルピリジン誘導体に誘導する工程の４工程からなる。以下に順を追って、これら（ａ）から（ｅ）の各工程を詳細に説明する。
0004676614.tif 000024
１．工程（ａ）
本工程（ａ）は、上記一般式（５）で表されるハロゲン化酢酸誘導体に塩基を作用させてエノラートを調製し、これを上記一般式（６）で表される置換ニコチン酸エステルと反応させた後、酸処理に付すことにより、上記一般式（７）で表される置換アセチルピリジン誘導体を調製することからなる。
一般式（５）又は（７）において、Ｙ２は、ハロゲンを表す。具体的には、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素等を挙げることができる。好ましくは、塩素又は臭素であり、より好ましくは塩素である。
また、一般式（５）において、Ｚは、水素、アルカリ金属、ハロゲン化アルカリ土類金属、又は、炭素数１〜１０のシリル基を表す。具体的には、水素、リチウム、ナトリウム、カリウム、塩化マグネシウム、臭化マグネシウム、塩化カルシウム、トリメチルシリル基、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル基、フェニルジメチルシリル基等を挙げることができるが、これらに限定されるものではない。好ましくは、ナトリウム又は塩化マグネシウムである。
一般式（５）で表されるハロゲン化酢酸誘導体としては、クロロ酢酸ナトリウム、ブロモ酢酸ナトリウム、塩化クロロ酢酸マグネシウム、及び、臭化ブロモ酢酸マグネシウムが好ましい。また、あらかじめクロロ酢酸ナトリウムと塩化マグネシウムを混合し塩化ナトリウムを析出させて系中で調製した塩化クロロ酢酸マグネシウムを用いることもできる。
一般式（５）で表されるハロゲン化酢酸誘導体の使用量は、一般式（６）で表される置換ニコチン酸エステルに対して、１〜１０モル当量であり、好ましくは１〜３モル当量である。
一般式（５）で表されるハロゲン化酢酸誘導体からエノラートを調製する際に用いられる塩基としては特に限定されず、例えば、リチウムアミド、ナトリウムアミド、リチウムジイソプロピルアミド、塩化マグネシウムジイソプロピルアミド、臭化マグネシウムジイソプロピルアミド、塩化マグネシウムジシクロヘキシルアミド等の金属アミド類；メチルリチウム、ｎ−ブチルリチウム、メチルマグネシウムブロミド、ｉ−プロピルマグネシウムクロリド、ｔｅｒｔ−ブチルマグネシウムクロリド等のアルキル金属類；ナトリウムメトキシド、マグネシウムエトキシド、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド等の金属アルコキシド；水素化リチウム、水素化ナトリウム、水素化カリウム、水素化カルシウム等の金属水素化物等を挙げることができる。なかでも好ましいものは、一般式（８）
0004676614.tif 000025
で表されるマグネシウムアミドである。一般式（８）において、Ｒ４及びＲ５は、独立して、炭素数１〜１０のアルキル基又は炭素数１〜１０のシリル基を表す。Ｒ４とＲ５は同一でもよく、異なっていてもよい。具体的には、メチル基、エチル基、ｉ−プロピル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ｎ−オクチル基、トリメチルシリル基、トリエチルシリル基、フェニルジメチルシリル基等を挙げることができるが、これらに限定されるものではない。好ましくは、Ｒ４とＲ５のそれぞれが、イソプロピル基を表す。また、Ｑは、ハロゲンを表す。好ましくは、塩素、臭素又はヨウ素であり、より好ましくは塩素である。
なお、一般式（８）で表されるマグネシウムアミドは、安価で入手容易な第２アミンと、グリニャール（Ｇｒｉｇｎａｒｄ）試薬から、公知の方法（例えば、特開平８−５２３４２０号の明細書に記載の方法）で容易に調製することができる。
このような塩基の使用量は、一般式（６）で表される置換ニコチン酸エステルに対して、１〜１０モル当量であり、好ましくは２〜６モル当量である。
上記一般式（６）又は（７）において、Ｘは、水素、ハロゲン、水酸基、炭素数１〜１０のアシルオキシ基、炭素数１〜１０のアルコキシ基、アミノ基、又は、置換アミノ基を表す。具体的には、水素、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素、水酸基、アセチルオキシ基、ベンゾイルオキシ基、メトキシ基、ブトキシ基、ベンジルオキシ基、アミノ基、アセチルアミノ基、ベンゾイルアミノ基、フタロイルアミノ基、ジメチルアミノ基、ジベンジルアミノ基、ベンジルオキシカルボニルアミノ基、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ基、エトキシカルボニルアミノ基等を挙げることができるが、これらに限定されるものではない。
なかでも好ましいものは、水素、塩素、臭素、ヨウ素等のハロゲン、水酸基、アミノ基、又は、アセチルアミノ基、ベンゾイルアミノ基、フタロイルアミノ基、ジメチルアミノ基、ジベンジルアミノ基、ベンジルオキシカルボニルアミノ基、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ基、エトキシカルボニルアミノ基等の置換アミノ基である。より好ましいものは、水素、塩素、あるいは、アミノ基、又は、アセチルアミノ基等の置換アミノ基である。特に、水素、塩素、アセチルアミノ基が好ましい。
また、一般式（６）において、Ｒ３は、炭素数１〜１０のアルキル基又は炭素数１〜１０のアラルキル基を表す。具体的には、メチル基、エチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、フェニル基、ベンジル基、ｐ−メトキシベンジル基等が挙げることができるが、これらに限定されるものではない。好ましくは、メチル基、エチル基等の低級アルキル基である。
本工程（ａ）において、ハロゲン化酢酸誘導体、塩基及び置換ニコチン酸エステルの混合順序は任意であるが、例えば、置換ニコチン酸エステルとハロゲン化酢酸誘導体の混合溶液に対して塩基の溶液を滴下することで、エノラートの調製、及び、エノラートと置換ニコチン酸エステルとの反応を一度に行うことができる。
工程（ａ）において用いられる反応溶媒は、非プロトン性有機溶媒が好ましい。非プロトン性有機溶媒としては特に限定されず、例えば、ベンゼン、トルエン、ｎ−ヘキサン、シクロヘキサン等の炭化水素系溶媒；ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、１，４−ジオキサン、メチルｔ−ブチルエーテル、ジメトキシエタン、エチレングリコールジメチルエーテル等のエーテル系溶媒；塩化メチレン、クロロホルム、１，１，１−トリクロロエタン等のハロゲン系溶媒；ジメチルホルムアミド、Ｎ−メチルピロリドン、ヘキサメチルリン酸トリアミド等の非プロトン性極性溶媒等を挙げることができる。これらは単独で用いてもよく、２種以上を併用してもよい。好ましくは、ベンゼン、トルエン、ｎ−ヘキサン、シクロヘキサン等の炭化水素系溶媒；ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン、メチルｔ−ブチルエーテル、ジメトキシエタン、ジエチレングリコールジメチルエーテル等のエーテル系溶媒である。
その反応温度としては、−８０℃〜１００℃が好ましく、より好ましくは−２０℃〜６０℃である。
本工程（ａ）の酸処理で用いられる酸は、一般的な無機酸又は有機酸であればよく、例えば、塩酸、硫酸、硝酸、酢酸、クエン酸等を挙げることができる。
この酸処理は、例えば、塩基を中和するのに充分な量の酸を０℃から室温程度で反応液と混合し、数分から数時間程度攪拌して行うことができる。
本工程（ａ）において、一連の反応が終了した後、反応液から生成物を取得するためには、一般的な後処理を行えばよい。例えば、酸処理の後、酢酸エチル、ジエチルエーテル、塩化メチレン、トルエン、ヘキサン等の一般的な抽出溶媒を用いて抽出操作を行う。得られた抽出液から、減圧加熱等の操作により反応溶媒及び抽出溶媒を留去すると、目的物が得られる。このようにして得られる目的物は、ほぼ純粋なものであるが、晶析精製、分別蒸留、カラムクロマトグラフィー等の一般的な手法により精製を行って、更に純度を高めてもよい。
２．工程（ｂ）
本工程（ｂ）は、上記一般式（９）で表される置換アセチルピリジン誘導体をエナンチオ選択的に還元することにより、上記一般式（１０）で表される光学活性ヒドロキシエチルピリジン誘導体を調製することからなる。
本発明のエナンチオ選択的な還元反応において使用できる還元基質は、一般式（９）
0004676614.tif 000026
で表される置換アセチルピリジン誘導体である。一般式（９）においてＸは、水素、ハロゲン、水酸基、炭素数１〜１０のアシルオキシ基、炭素数１〜１０のアルコキシ基、アミノ基、又は、置換アミノ基を表す。具体的には、水素、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素、水酸基、アセチルオキシ基、ベンゾイルオキシ基、メトキシ基、ブトキシ基、ベンジルオキシ基、アミノ基、アセチルアミノ基、ベンゾイルアミノ基、フタロイルアミノ基、ジメチルアミノ基、ジベンジルアミノ基、ベンジルオキシカルボニルアミノ基、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ基、エトキシカルボニルアミノ基等を挙げることができるが、これらに限定されるものではない。
なかでも好ましいものは、水素、塩素、臭素、ヨウ素等のハロゲン、水酸基、アミノ基、又は、アセチルアミノ基、ベンゾイルアミノ基、フタロイルアミノ基、ジメチルアミノ基、ジベンジルアミノ基、ベンジルオキシカルボニルアミノ基、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ基、エトキシカルボニルアミノ基等の置換アミノ基である。より好ましいものは、水素、塩素、あるいは、アミノ基、又は、アセチルアミノ基等の置換アミノ基である。特に、水素、塩素、アセチルアミノ基が好ましい。
一般式（９）においてＹ１は、ハロゲン、水酸基、炭素数１〜１０のアシルオキシ基、炭素数１〜１０のスルホニルオキシ基、炭素数１〜１０のアルコキシ基、アミノ基、炭素数１〜１５のアルキルアミノ基、炭素数１〜１５のアラルキルアミノ基、スルファニル基、炭素数１〜１０のアルキルスルファニル基、又は、炭素数１〜１０のアラルキルスルファニル基を表す。具体的には、水素、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素、水酸基、アセチルオキシ基、ベンゾイルオキシ基、トリフルオロアセチルオキシ基、メタンスルホニルオキシ基、ベンゼンスルホニルオキシ基、トルエンスルホニルオキシ基、メトキシ基、ｔｅｒｔ−ブチルオキシ基、ベンジルオキシ基、アミノ基、ジメチルアミノ基、エチルアミノ基、フェニルエチルアミノ基、ｐ−ニトロフェニルエチルアミノ基、フェノキシエチルアミノ基等を挙げることができるが、これらに限定されるものではない。
好ましくは、塩素、臭素、ヨウ素等のハロゲン；水酸基；アセチルオキシ基、ベンゾイルオキシ基等のアシルオキシ基；メタンスルホニルオキシ基、ベンゼンスルホニルオキシ基、トルエンスルホニルオキシ基等のスルホニルオキシ基であり、より好ましくは、ハロゲン、水酸基、及び、炭素数１〜１０のアシルオキシ基である。ハロゲンの中では、塩素が好ましい。
一般式（９）においてＹ１がハロゲンである置換アセチルピリジン誘導体［一般式（７）］は、前述の工程（ａ）で得られるものをそのまま利用できる。一般式（９）においてＹ１がハロゲンである置換アセチルピリジン誘導体は、公知の方法等を用いて一般式（７）から誘導することができる。例えば、一般式（７）で表される置換アセチルピリジン誘導体に対して、アルコキシアニオン、アシルオキシアニオン又はアルキルスルファニルアニオンを反応させると、それぞれ、Ｙ１がアルコキシ基、アシルオキシ基又はアルキルスルファニル基である置換アセチルピリジン誘導体が得られる。また、このようにしてアシルオキシ基等で置換された置換アセチルピリジン誘導体を加水分解すると、Ｙ１が水酸基である置換アセチルピリジン誘導体が得られる。
特に、Ｙ１がアシルオキシ基である置換アセチルピリジン誘導体、すなわち一般式（１２）
0004676614.tif 000027
で表される置換アセチルピリジン誘導体は、後述する新規な方法にて一般式（７）の置換アセチルピリジン誘導体から誘導できる。一般式（１２）において、Ｘは、前記と同じである。Ｒ６は、炭素数１〜１５のアルキル基、炭素数１〜１５のアラルキル基、又は、炭素数６〜１６のアリール基を表す。具体的には、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、ｉ−プロピル基、ｎ−ブチル基、ｉ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ｎ−オクチル基、ベンジル基、アニシル基、ｐ−ニトロベンジル基、フェニル基、ｐ−トリル基、ナフチル基、等を挙げることができるがこれらに限定されるものではない。好ましくはメチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、ｉ−プロピル基、ｎ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、フェニル基であり、より好ましくはメチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、フェニル基であり、更に好ましくはｔｅｒｔ−ブチル基である。
工程（ｂ）におけるエナンチオ選択的な還元は、生物的又は化学的な手法で行われる不斉還元である。生物的な不斉還元としては、微生物又はその還元酵素による不斉還元を挙げることができる。また、化学的な不斉還元としては、ルテニウム錯体と光学活性アミンと塩基とで調製される触媒による水素移動型還元；ロジウム、ルテニウム、イリジウム又はパラジウムと、キラルなホスフィン配位子からなる不斉触媒を用いた不斉水素化；光学活性なアルファアミノ酸から誘導されるアミノアルコールを不斉配位子とするボラン還元等を挙げることができる。なかでも、微生物を用いた還元と水素移動型還元が好ましい。
エナンチオ選択的な還元に微生物を用いる場合は、基質である置換アセチルピリジン誘導体を（Ｒ）選択的に還元し、（Ｒ）−ヒドロキシエチルピリジン誘導体を優先的に得ることができる。この場合は、微生物由来のカルボニル還元酵素、又は、該カルボニル還元酵素の産生能を有する微生物の培養物若しくは該処理物を用いて還元反応を行うことができる。
Ｒ選択的な還元において、カルボニル還元酵素の産生能を有する微生物としては、アシビア属、キャンディダ属、クリプトコッカス属、デバリオマイセス属、グイラーモンデラ属、ハンゼヌラ属、メツニコビア属、ピキア属、ロドトルラ属、ロドスポリジウム属、サッカロマイコプシス属、シュワニオマイセス属、スポリディオボラス属、スポロボロマイセス属、トルラスポラ属、ヤロビア属に属する微生物が使用しうる。
具体的には例えば、アシビア・ゴシピイ、キャンディダ・カティヌラータ、キャンディダ・フルクタス、キャンディダ・ガラクタ、キャンディダ・グロペンジェセリイー、キャンディダ・グイラーモンディー、キャンディダ・ヘムロニー、キャンディダ・ホルミイー、キャンディダ・インターメディア、キャンディダ・マグノリエ、キャンディダ・マルトーサ、キャンディダ・メリニー、キャンディダ・パラプシロシス、キャンディダ・ルゴーサ、キャンディダ・ソノレンシス、キャンディダ・トロピカリス、キャンディダ・ユティリス、キャンディダ・ベルサティリス、クリプトコッカス・アルビダス・バル・アルビダス、デバリオマイセス・ハンセニー・バラエティ・ファブリー、デバリオマイセス・ハンセニー、デバリオマイセス・マラマ、デバリオマイセス・ネパレンシシ、グイラーモンデラ・セレノスポラ、ハンゼヌラ・グルコジーマ、ハンゼヌラ・サツルヌス、メツニコビア・レウカウフィー、ピキア・ボビス、ピキア・ファリノーサ、ロドトルラ・グルティニス・バル・ダイレネンシス、ロドトルラ・グラミニス、ロドトルラ・ミヌタ、ロドトルラ・ルブラ、ロドスポリジウム・ディオボバタム、ロドスポリジウム・スファエロカーパム、ロドスポリジウム・トルロイデス、サッカロマイコプシス・マランガ、シュワニオマイセス・カステリー、スポリディオボラス・ジョンソニー、スポロボロマイセス・パラロセウス、スポロボロマイセス・サルモニカラー、トルラスポラ・デルプルエキー、ヤロビア・リポリティカなどを用いることができる。特に好ましくは、キャンディダ・マグノリエ  ＩＦＯ０７０５である。
これら微生物は一般に、入手または購入が容易な保存株から得ることができる。また、自然界から分離することもできる。また上記酵素の産生能を有する微生物としては、野生株または変異株のいずれでもあり得る。
あるいは、上記酵素の産生能を有する微生物として、細胞融合または遺伝子操作等の遺伝学的手法により誘導される微生物も用いられ得る。遺伝子操作された本酵素生産する微生物は、例えば、これらの酵素を単離及び／または精製して酵素のアミノ酸配列の一部または全部を決定する工程、このアミノ酸配列に基づいて酵素をコードするＤＮＡ配列を得る工程、このＤＮＡを他の微生物に導入して組み替え微生物を得る工程、及びこの組み替え微生物を培養して、本酵素を得る工程を含有する方法により得られ得る（特願平１１−３４５５４１号）。
例えば、キャンディダ属に属する微生物由来であるカルボニル還元酵素をコードするＤＮＡ、及び該酵素が依存する補酵素を再生する能力を有する酵素をコードするＤＮＡを有するプラスミドで形質転換された形質転換細胞が挙げられる。好ましくは、前記補酵素を再生する能力を有する酵素がグルコース脱水素酵素である上記形質転換細胞、前記グルコース脱水素酵素がバシラス・メガテリウム（Ｂａｃｉｌｌｕａｓ  ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）由来である上記形質転換細胞、前記プラスミドがｐＮＴＣＲＧである上記形質転換細胞、形質転換細胞が大腸菌である上記形質転換細胞等が挙げられる。より好ましくは、Ｅ．ｃｏｌｉ  ＨＢ１０１（ｐＮＴＣＲＧ）  受託番号ＦＥＲＭ−ＢＰ６８９８［寄託機関：通商産業省工業技術院生命工学工業技術研究所（日本国茨城県つくば市東１丁目１番３号）、寄託日：１９９９年９月２８日］が挙げられる。
これらの微生物の培養には、通常これらの微生物が資化しうる栄養源であれば何でも使用しうる。たとえば、グルコース、シュークロース、マルトース等の糖類、乳酸、酢酸、クエン酸、プロピオン酸等の有機酸類、エタノール、グリセリン等のアルコール類、パラフィン等の炭化水素類、大豆油、菜種油等の油脂類、またはこれらの混合物等の炭素源や、硫酸アンモニウム、リン酸アンモニウム、尿素、酵母エキス、肉エキス、ペプトン、コーンスチープリカー等の窒素源を混合することもできる。更に、その他の無機塩、ビタミン類等の栄養源を適宜混合することもできる。
微生物の培養は通常一般の条件により行なうことができ、例えば、ｐＨ４．０〜９．５、温度範囲２０℃〜４５℃の範囲で、好気的に１０〜９６時間培養する。還元基質に微生物を反応させる場合においては、通常、上記微生物の培養液をそのまま反応に使用することもできるが、培養液の濃縮物も用いることができる。また、培養液中の成分が反応に悪影響を与える場合には、培養液を遠心分離等により処理して得られる菌体または菌体処理物を使用することが好ましい。
上記微生物の菌体処理物としては特に限定されず、例えば、アセトンや五酸化二リンによる脱水処理またはデシケーターや扇風機を利用した乾燥によって得られる乾燥菌体、界面活性剤処理物、溶菌酵素処理物、固定化菌体または菌体を破砕した無細胞抽出標品などをあげることができる。更に、培養物より不斉還元反応を触媒する酵素を精製し、これを使用してもよい。
還元反応の際には、基質である置換アセチルピリジン誘導体を反応の初期に一括して添加してもよく、反応の進行にあわせて分割して添加してもよい。
また、反応時の温度は通常１０〜６０℃、好ましくは、２０〜４０℃であり、反応時のｐＨは２．５〜９、好ましくは、５〜９である。
反応液中の微生物の濃度はこれらの基質を還元する能力に応じ適宜決定すればよい。また、反応液中の基質濃度は０．０１〜５０％（Ｗ／Ｖ）が好ましく、より好ましくは、０．１〜３０％である。
反応は通常、振とうまたは通気攪拌しながら行なう。反応時間は基質濃度、微生物の濃度およびその他の反応条件により適宜決定される。通常、２〜１６８時間で反応が終了するように各条件を設定することが好ましい。
還元反応を促進させるために、反応液にグルコース、エタノールなどのエネルギー源を１〜３０％の割合で加えると優れた結果が得られるので好ましい。また、一般に生物学的方法による還元反応に必要とされている還元型ニコチンアミド・アデニンジヌクレオチド（ＮＡＤＨ）、還元型ニコチンアミド・アデニンジヌクレオチドりん酸（ＮＡＤＰＨ）等の補酵素を添加することにより、反応を促進させることもできる。具体的には、反応液に直接これらを添加してもよく、ＮＡＤＨ、ＮＡＤＰＨを生成する反応系を酸化型の補酵素とともに反応液に添加してもよい。例えば、ギ酸脱水素酵素がギ酸から二酸化炭素と水とを生成する際にＮＡＤをＮＡＤＨに還元する反応系や、グルコース脱水素酵素がグルコースからグルコノラクトンを生成する際にＮＡＤまたはＮＡＤＰをＮＡＤＨまたはＮＡＤＰＨにそれぞれ還元する反応系を利用することができる。
また、トリトン（ナカライテスク社製）、スパン（関東化学社製）、ツイーン（ナカライテスク社製）などの界面活性剤を反応液に添加することも効果的である。さらに、基質および／または還元反応の生成物であるアルコール体による反応の阻害を回避する目的で、酢酸エチル、酢酸ブチル、イソプロピルエーテル、トルエンなどの水に不溶な有機溶媒を反応液に添加してもよい。さらに、基質の溶解度を高める目的で、メタノール、エタノール、アセトン、テトラヒドロフラン、ジメチルスルホキシドなどの水に可溶な有機溶媒を添加することもできる。
還元反応により生成した光学活性ヒドロキシエチルピリジン誘導体（１０）の採取は、反応液から直接、あるいは菌体等を分離後、酢酸エチル、トルエン等の溶剤で抽出し、脱溶剤することにより行なう。さらに、再結晶操作、シリカゲルカラムクロマトグラフィー等により精製すれば高純度の光学活性ヒドロキシエチルピリジン誘導体を得ることができる。
一方、エナンチオ選択的な還元として水素移動型還元を行う場合は、使用する触媒の選択により基質である置換アセチルピリジン誘導体を（Ｒ）または（Ｓ）選択的に還元し、（Ｒ）−または（Ｓ）−ヒドロキシエチルピリジン誘導体を優先的に得ることができる。
水素移動型還先を行うに際しては、還元反応の事前に触媒を調製する必要がある。ここで使用される触媒は、例えばルテニウム錯体と光学活性アミンと塩基を混合して調製される触媒であり、例えば、特開平１０−１３０２８９に記載されている方法で調製することができる。
ルテニウム錯体は、２価のルテニウムアーレン錯体が好ましく、なかでも、四塩化ビス（η６−ベンゼン）二ルテニウム、四塩化ビス（η６−ｐ−シメン）二ルテニウム、又は、四塩化ビス（η６−メシチレン）二ルテニウムが特に好ましい。
光学活性アミンは、光学活性ジアミン類のモノスルホネートあるいは光学活性アミノアルコール類が好ましく、１，２−ジフェニルエチレンジアミンのスルホネート、具体的には、（Ｓ，Ｓ）−Ｎ−ｐ−トシル−１，２−ジフェニルエチレンジアミン、（Ｒ，Ｒ）−Ｎ−ｐ−トシル−１，２−ジフェニルエチレンジアミン、（Ｓ，Ｓ）−Ｎ−ベンゼンスルホニル−１，２−ジフェニルエチレンジアミン、（Ｒ，Ｒ）−Ｎ−ベンゼンスルホニル−１，２−ジフェニルエチレンジアミン、（Ｓ，Ｓ）−Ｎ−メタンスルホニル−１，２−ジフェニルエチレンジアミン、（Ｒ，Ｒ）−Ｎ−メタンスルホニル−１，２−ジフェニルエチレンジアミン、（Ｓ，Ｓ）−Ｎ−トリフルオロメタンスルホニル−１，２−ジフェニルエチレンジアミン、（Ｒ，Ｒ）−Ｎ−トリフルオロメタンスルホニル−１，２−ジフェニルエチレンジアミン、等が挙げられる。特に（Ｓ，Ｓ）−Ｎ−ｐ−トシル−１，２−ジフェニルエチレンジアミン、又は、（Ｒ，Ｒ）−Ｎ−ｐ−トシル−１，２−ジフェニルエチレンジアミンがより好ましい。
触媒調製の際に使用する塩基は、有機または無機の一般的な塩基であり特に限定されることはない。例えば、ｎ−ブチルリチウム、水素化ナトリウム、カリウムｔ−ブトキシド、ナトリウムエトキシド、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、水酸化リチウム、水酸化バリウム、水酸化マグネシウム、酢酸ナトリウム、酢酸カリウム、アンモニア、トリエチルアミン、ピリジン、ピペリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン等である。好ましくは水酸化ナトリウムまたは水酸化カリウムである。塩基は水溶液として添加しても良い。
水素移動型還元の触媒を調製するためには、上記のルテニウム錯体と光学活性アミンと塩基を適当な溶媒中、任意の順序で混合すればよい。ルテニウム錯体／光学活性アミン／塩基の混合モル比は、ルテニウム換算で１：１：１が基本であるが、光学活性アミンおよび塩基を過剰量使用しても差し支えない。触媒調製時の溶媒は、特に限定されないが、操作面の効率性を考慮して後述する還元反応時の溶媒と同じものを用いるのが好ましい。触媒調製時の温度は０〜１００℃、好ましくは１５〜６０℃である。触媒調製時間は１〜１０時間程度である。尚、このようにして調製した触媒を、溶液のまま還元反応に供するのが簡便で好ましいが、溶液から結晶化させるなどして単離した触媒を還元反応に用いても差し支えない。触媒の使用量は還元基質である置換アセチルピリジン誘導体に対し、ルテニウム換算で０．００１モル当量から５モル当量である。
水素移動型の還元反応は、例えば上記のようにして調製した触媒と基質である置換アセチルピリジン誘導体と水素移動源を混合して行うことができる。
水素移動源、すなわち基質に対して水素供与体として作用する化合物は、例えば、イソプロピルアルコール、ベンゾヒドロール、あるいは、ギ酸またはギ酸の塩が使用可能であり、イソプロピルアルコールが好ましい。
水素移動源は還元基質に対し１モル当量以上必要であり、１０当量以上の大過剰量用いるのが好ましい。イソプロピルアルコールを水素移動源として用いる場合は、これを溶媒として使用することが好ましい。
反応溶媒は任意の溶媒を使用できる。例えば、水；メタノール、エタノール、ブタノール、イソプロピルアルコール、エチレングリコール、メトキシエタノール等のアルコール系溶媒；ジエチルアミン、ピロリジン、ピペリジン等のアミン系溶媒；ベンゼン、トルエン、シクロヘキサン等の炭化水素系溶媒；ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン、メチルｔ−ブチルエーテル、ジメトキシエタン等のエーテル系溶媒；酢酸エチル、酢酸ブチル等のエステル系溶媒；アセトン、メチルエチルケトン等のケトン系溶媒；塩化メチレン、クロロホルム、１，１，１−トリクロロエタン等のハロゲン系溶媒；ジメチルホルムアミド、アセトニトリル等の含窒素系溶媒；ジメチルスルホキシド、Ｎ−メチルピロリドン、ヘキサメチルリン酸トリアミド等が挙げられる。イソプロピルアルコールが最も好ましい。
反応温度は、０〜１５０℃で、好ましくは１５〜６０℃である。
反応の終点は、反応中の反応液を薄層クロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィー、ガスクロマトグラフィー等で分析し、基質である置換アセチルピリジン誘導体の減少とヒドロキシエチルピリジン誘導体の生成を観測して判断できる。
なお、水素移動型還元の反応基質として、一般式（１２）
0004676614.tif 000028
（式中、Ｘは、水素、ハロゲン、水酸基、炭素数１〜１０のアシルオキシ基、炭素数１〜１０のアルコキシ基、アミノ基、又は、置換アミノ基を表す。Ｒ６は、炭素数１〜１５のアルキル基、炭素数１〜１５のアラルキル基、又は、炭素数６〜１６のアリール基を表す。）で表される置換アセチルピリジン誘導体を用い、水素移動源にイソプロピルアルコールを使用してエナンチオ選択的に還元をする際に、塩基を反応系中に共存させると、一般式（１４）
0004676614.tif 000029
（式中、Ｘは前記と同じ基を表す。＊は不斉炭素を表す。）で表される光学活性ジヒドロキシエチルピリジン誘導体を直接得ることができる。
光学活性ジヒドロキシピリジンを直接得るために共存させる塩基は特に限定されず、無機または有機塩基、例えば、ｎ−ブチルリチウム、水素化ナトリウム、カリウムｔ−ブトキシド、ナトリウムエトキシド、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、水酸化リチウム、水酸化バリウム、水酸化マグネシウム、酢酸ナトリウム、酢酸カリウム、アンモニア、トリエチルアミン、ピリジン、ピペリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン等である。好ましくは水酸化ナトリウムまたは水酸化カリウムである。操作面の効率性から触媒調製時に塩基を過剰量添加しておき、その過剰分をもって光学活性ジヒドロキシピリジンを直接得るための塩基とするのが好ましい。塩基の使用量は基質である置換アセチルピリジン誘導体に対し、０．１〜１０モル当量が好ましい。塩基は水溶液として添加しても良い。
反応終了後、反応液から生成物を取得するためには、一般的な後処理を行えばよい。例えば、反応終了後の反応液に水を加え、一般的な抽出溶媒、例えば酢酸エチル、ジエチルエーテル、塩化メチレン、トルエン、ヘキサン等を用いて抽出操作を行う。得られた抽出液から、減圧加熱等の操作により反応溶媒及び抽出溶媒を留去すると、目的物が得られる。また、反応終了後、直ちに減圧加熱等の操作により反応溶媒を留去してから同様の操作を行ってもよい。このようにして得られる目的物は、ほぼ純粋なものであるが、晶析精製、分別蒸留、カラムクロマトグラフィー等一般的な手法により精製を加え、さらに純度を高めてもよい。
この工程により、（Ｒ）体又は（Ｓ）体の、一般式（８）で表される光学活性ヒドロキシエチルピリジン誘導体が得られる。好ましい光学活性ヒドロキシエチルピリジン誘導体は、（Ｒ）の絶対立体配置を有するものである。
３．工程（ｃ）
本工程（ｃ）は、上記一般式（１５）で表される光学活性ヒドロキシエチルピリジン誘導体を塩基で処理することにより、上記一般式（１６）で表される光学活性オキシラン誘導体を製造することからなる。
本工程（ｃ）で用いられる塩基は、無機塩基又は有機塩基である。具体的には、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム等の金属水酸化物；炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸水素カリウム、炭酸セシウム等の炭酸金属類；メチルリチウム、ｎ−ブチルリチウム、メチルマグネシウムブロミド、ｉ−プロピルマグネシウムクロリド、ｔｅｒｔ−ブチルマグネシウムクロリド等のアルキル金属類；リチウムアミド、ナトリウムアミド、リチウムジイソプロピルアミド、塩化マグネシウムジイソプロピルアミド、臭化マグネシウムジイソプロピルアミド、塩化マグネシウムジシクロヘキシルアミド等の金属アミド類；ナトリウムメトキシド、マグネシウムエトキシド、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド等の金属アルコキシド；水素化リチウム、水素化ナトリウム、水素化カリウム、水素化カルシウム等の金属水素化物；トリエチルアミン、エチルジイソプロピルアミン、Ｎ−メチルピロリジン、ジメチルアニリン、ピリジン等のアミン類を挙げることができるが、これらに限定されるものではない。好ましくは、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム等の金属水酸化物、及び、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸水素カリウム、炭酸セシウム等の炭酸金属類である。
工程（ｃ）で用いられる塩基の使用量は、一般式（１５）で表される光学活性ヒドロキシエチルピリジン誘導体に対して、１〜１０モル当量であり、好ましくは、１〜３モル当量である。
工程（ｃ）で使用できる反応溶媒は、水、有機溶媒、又は、水と有機溶媒の混合溶媒である。上記有機溶媒としては特に限定されず、例えば、メタノール、エタノール、ブタノール、イソプロピルアルコール、エチレングリコール、メトキシエタノール等のアルコール系溶媒；ベンゼン、トルエン、シクロヘキサン等の炭化水素系溶媒；ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、１，４−ジオキサン、メチルｔ−ブチルエーテル、ジメトキシエタン等のエーテル系溶媒；酢酸エチル、酢酸ブチル等のエステル系溶媒；アセトン、メチルエチルケトン等のケトン系溶媒；塩化メチレン、クロロホルム、１，１，１−トリクロロエタン等のハロゲン系溶媒；ジメチルホルムアミド、アセトニトリル等の含窒素系溶媒；ジメチルスルホキシド、Ｎ−メチルピロリドン、ヘキサメチルリン酸トリアミド等の非プロトン性極性溶媒等が挙げられる。これらは単独で用いてもよく、２種以上を併用してもよい。好ましくは、水、アセトン、アセトニトリル及びテトラヒドロフランである。
工程（ｃ）の反応温度は、−５０℃〜１００℃であり、好ましくは−２０℃〜３０℃である。
反応終了後、反応液から生成物を取得するためには、一般的な後処理を行えばよい。例えば、反応終了後の反応液に水を加え、酢酸エチル、ジエチルエーテル、塩化メチレン、トルエン、ヘキサン等の一般的な抽出溶媒を用いて抽出操作を行う。得られた抽出液から、減圧加熱等の操作により反応溶媒及び抽出溶媒を留去すると、目的物が得られる。また、反応終了後、直ちに減圧加熱等の操作により反応溶媒を留去してから同様の操作を行ってもよい。このようにして得られる目的物は、ほぼ純粋なものであるが、晶析精製、分別蒸留、カラムクロマトグラフィー等一般的な手法により精製を加え、さらに純度を高めてもよい。
４．工程（ｄ）
本工程（ｄ）は、工程（ａ）によって生成する一般式（７）で表される置換アセチルピリジン誘導体に、一般式（１１）
0004676614.tif 000030
で表されるカルボン酸を塩基と４級アンモニウム塩の共存下に反応させることを特徴とする一般式（１２）で表される置換アセチルピリジン誘導体を調製することからなる。
一般式（１１）において、Ｒ６は、炭素数１〜１５のアルキル基、炭素数１〜１５のアラルキル基、又は、炭素数６〜１６のアリール基を表す。具体的には、具体的には、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、ｉ−プロピル基、ｎ−ブチル基、ｉ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ｎ−オクチル基、ベンジル基、アニシル基、ｐ−ニトロベンジル基、フェニル基、ｐ−トリル基、ナフチル基、等を挙げることができるがこれらに限定されるものではない。好ましくはメチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、ｉ−プロピル基、ｎ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、フェニル基であり、より好ましくはメチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、フェニル基であり、更に好ましくはｔｅｒｔ−ブチル基である。
本工程（ｄ）におけるカルボン酸（１１）の使用量は、一般式（７）の置換アセチルピリジン誘導体に対して、１〜５モル当量が好ましく、１〜３モル当量がより好ましい。
本工程（ｄ）で使用される塩基は、一般式（１１）のカルボン酸と塩を形成するものであれば良く、有機または無機の一般的な塩基が使用できる。例えば、ｎ−ブチルリチウム、水素化ナトリウム、カリウムｔ−ブトキシド、ナトリウムエトキシド、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、水酸化リチウム、水酸化バリウム、水酸化マグネシウム、トリエチルアミン、ピリジン、ピペリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン等であるが特にこれらに限定されることはない。好ましくは、炭酸水素ナトリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素カリウム、炭酸カリウムである。
本工程（ｄ）における塩基の使用量は、一般式（７）の置換アセチルピリジン誘導体に対して、１〜５モル当量が好ましく、１〜３モル当量がより好ましい。
また、本工程（ｄ）において上記のカルボン酸および塩基をそれぞれ反応系に投入するかわりに、カルボン酸および塩基を別途事前に混合して調製される塩を投入しても差し支えない。カルボン酸および塩基を別途事前に混合して調製される塩とは、例えば、カルボン酸のナトリウム塩あるいはカリウム塩であり、具体的には、酢酸ナトリウム、酢酸カリウム、ピバリル酸ナトリウム、ピバリル酸カリウム、安息香酸ナトリウム、安息香酸カリウム、等である。
本工程（ｄ）において使用される４級アンモニウム塩は、市販されており入手容易なものであれば特に限定されることはない。例えば、ハロゲン化４級アンモニウム、水酸化４級アンモニウム、硫酸４級アンモニウム、酢酸４級アンモニウム、等であり、具体的には、塩化テトラｎ−ブチルアンモニウム、臭化テトラｎ−ブチルアンモニウム、ヨウ化テトラｎ−ブチルアンモニウム、水酸化テトラｎ−ブチルアンモニウム、硫酸水素テトラｎ−ブチルアンモニウム、酢酸テトラｎ−ブチルアンモニウム、塩化テトラメチルアンモニウム、臭化テトラメチルアンモニウム、塩化ベンジルトリメチルアンモニウム、臭化ベンジルトリメチルアンモニウム、等である。好ましくは、塩化テトラｎ−ブチルアンモニウム、臭化テトラｎ−ブチルアンモニウムである。
本工程（ｄ）における４級アンモニウム塩の使用量は、一般式（７）の置換アセチルピリジン誘導体に対して、０．１〜２モル当量が好ましく、０．０５〜０．２モル当量がより好ましい。
工程（ｄ）の反応において、各種有機溶媒を反応溶媒として使用できる。上記有機溶媒としては、例えば、ベンゼン、トルエン、シクロヘキサン等の炭化水素系溶媒；ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン、メチルｔ−ブチルエーテル、ジメトキシエタン等のエーテル系溶媒；酢酸エチル、酢酸ブチル等のエステル系溶媒；塩化メチレン、クロロホルム、１，１，１−トリクロロエタン等のハロゲン系溶媒；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、アセトアミド、ホルムアミド、アセトニトリル等の含窒素系溶媒；ジメチルスルホキシド、Ｎ−メチルピロリドン、ヘキサメチルリン酸トリアミド等の非プロトン性極性溶媒等が挙げられる。上記有機溶媒は、単独で用いてもよく、２種以上を併用してもよい。好ましくはジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン、メチルｔ−ブチルエーテル、ジメトキシエタン等のエーテル系溶媒であり、より好ましくはテトラヒドロフランである。
本工程（ｄ）の反応温度としては、０℃〜１５０℃が好ましく、より好ましくは２０℃〜８０℃である。
本工程（ｄ）において、反応が終了した後、反応液から生成物を取得するためには、一般的な後処理を行えばよい。例えば、少量の水を添加し、酢酸エチル、ジエチルエーテル、塩化メチレン、トルエン、ヘキサン等の一般的な抽出溶媒を用いて抽出操作を行う。得られた抽出液から、減圧加熱等の操作により反応溶媒及び抽出溶媒を留去すると、目的物が得られる。このようにして得られる目的物は、ほぼ純粋なものであるが、晶析精製、分別蒸留、カラムクロマトグラフィー等の一般的な手法により精製を行って、更に純度を高めてもよい。
５．工程（ｅ）
本工程（ｅ）では、工程（ｂ）で得られる光学活性ヒドロキシエチルピリジン誘導体のうち、一般式（１３）で表される光学活性アシロキシヒドロキシエチルピリジン誘導体を加溶媒分解して、一般式（１４）で表される光学活性ジヒドロキシエチルピリジン誘導体を製造する。
本工程（ｅ）の加溶媒分解は、水若しくはプロトン性の有機溶媒、又は、水若しくはプロトン性有機溶媒と非プロトン性有機溶媒との混合溶媒中で反応を行う。上記プロトン性有機溶媒として、例えば、メタノール、エタノール、ブタノール、イソプロピルアルコール、エチレングリコール、メトキシエタノール等の低級アルコール系溶媒；ジエチルアミン、ピロリジン、ピペリジン等のアミン系溶媒；等が挙げられる。上記非プロトン性有機溶媒として、例えば、ベンゼン、トルエン、シクロヘキサン等の炭化水素系溶媒；ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン、メチルｔ−ブチルエーテル、ジメトキシエタン等のエーテル系溶媒；酢酸エチル、酢酸ブチル等のエステル系溶媒；アセトン、メチルエチルケトン等のケトン系溶媒；塩化メチレン、クロロホルム、１，１，１−トリクロロエタン等のハロゲン系溶媒；ジメチルホルムアミド、アセトニトリル等の含窒素系溶媒；ジメチルスルホキシド、Ｎ−メチルピロリドン、ヘキサメチルリン酸トリアミド等の非プロトン性極性溶媒等が挙げられる。好ましくは水又は低級アルコールであり、より好ましくは低級アルコールである。特に好ましくはメタノールである。
本工程（ｅ）の加溶媒分解では、塩基を添加して反応を加速することができる。加溶媒分解において使用できる塩基は、無機または有機塩基、例えば、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、水酸化リチウム、水酸化バリウム、水酸化マグネシウム、酢酸ナトリウム、酢酸カリウム、アンモニア、トリエチルアミン、ピリジン、ピペリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン、水酸化テトラｎ−ブチルアンモニウム、水酸化テトラメチルアンモニウム、水酸化ベンジルトリメチルアンモニウム、等が挙げられる。中でも、水酸化テトラｎ−ブチルアンモニウム、水酸化テトラメチルアンモニウム、水酸化ベンジルトリメチルアンモニウム、等の水酸化４級アンモニウムが塩基として好ましく、水酸化テトラｎ−ブチルアンモニウムがより好ましい。
この場合の塩基の使用量は光学活性アシロキシヒドロキシエチルピリジン誘導体に対し、０．００１当量から５当量、好ましくは、０．０１当量から１．０当量である。
工程（ｅ）の反応温度は、−２０℃から１００℃、好ましくは−１０℃から５０℃である。
反応終了後、反応液から生成物を取得するためには、一般的な後処理を行えばよい。例えば、反応終了後の反応液に水を加え、一般的な抽出溶媒、例えば酢酸エチル、ジエチルエーテル、塩化メチレン、トルエン、ヘキサン等を用いて抽出操作を行う。得られた抽出液から、減圧加熱等の操作により反応溶媒及び抽出溶媒を留去すると、目的物が得られる。また、反応終了後、直ちに減圧加熱等の操作により反応溶媒を留去してから同様の操作を行ってもよい。このようにして得られる目的物は、ほぼ純枠なものであるが、晶析精製、分別蒸留、カラムクロマトグラフィー等一般的な手法により精製を加え、さらに純度を高めてもよい。
また、生成物の水に対する溶解度が高く、有機溶媒に対する溶解度が著しく低い場合は、上記のような通常の反応操作により目的物を取得するのは困難である。その場合は、水酸化４級アンモニウムを塩基とする加溶媒分解反応を低級アルコール溶媒中で行い、加溶媒分解終了後の反応液に低極性溶剤を添加し、目的物の結晶を析出させ、これをろ過することにより、簡便な操作で高純度の目的物を収率良く取得することができる。ここで用いられる低級アルコール溶媒および水酸化４級アンモニウムは上記の通りである。低極性溶剤は、無極性溶剤を含む極性の低い溶剤のことをいい、光学活性ジヒドロキシエチルピリジン誘導体（１４）が難溶であり、加溶媒分解反応溶媒と混合するものであれば任意であり特に限定しない。加溶媒分解反応溶媒にアルコール系溶媒を用いる場合は、低極性溶剤として炭化水素系溶剤が好ましく、例えば、ｎ−ヘキサン、ｎ−ペンタン、ベンゼン、トルエン、キシレン、石油エーテル、石油ベンジン等が挙げられる。より好ましくはトルエンである。
なお、上述した一般式（９）で表される置換アセチルピリジン誘導体のなかでも、上記一般式（１）で表される、ピリジン環の２位がアミノ基である置換アセチルピリジン誘導体は、従来技術による製造方法が知られておらず、本発明の方法［工程（ａ）及び必要な場合にはその後の置換反応］によって製造することが可能になった新規の化合物である。この誘導体は、光学活性なベータ−３アドレナリン受容体アゴニストの中間体を製造する際に極めて有用なものである。
上記一般式（１）において、Ｒ１及びＲ２は、水素、炭素数１〜１０のアルキル基、炭素数１〜１０のアラルキル基、炭素数１〜１０のアシル基又は炭素数１〜１０のアルキルオキシカルボニル基を表す。Ｒ１とＲ２は、同一であってもよく、異なっていてもよい。なかでも、Ｒ１はアセチル基を表し、Ｒ２は水素を表すことが好ましい。なお、Ｙ１は一般式（９）において説明したＹ１と同じものである。
また、上述した本発明における光学活性ジヒドロキシエチルピリジン誘導体の製造過程において、一般式（２）で表されるピバロイルオキシアセチルピリジン誘導体および一般式（３）で表される光学活性ピバロイルオキシヒドロキシエチルピリジン誘導体は、ピバロイル基が導入されていることによって化合物の安定性および取り扱いが改善された有用な中間体である。またこれらは、従来技術による製造方法が知られておらず、本発明の方法によって製造することが可能になった新規の化合物である。なお、一般式（２）及び（３）のＸは一般式（６）において説明したＸと同じものである。
さらに、本発明によって製造が可能となったジヒドロキシエチルピリジン誘導体のうち、式（４）で表される化合物は、本発明者らによってβ−３受容体アゴニスト中間体への用途が示された新規化合物である。
発明を実施するための最良の形態
以下に実施例を掲げて本発明を更に詳しく説明するが、本発明はこれら実施例のみに限定されるものではない。
実施例１  Ｎ１−［５−（２−クロロアセチル）ピリジン−２−イル］エタンアミド
0004676614.tif 000031
６−（メチルカルボキシアミド）ピリジン−３−カルボン酸メチル５．８ｇ（０．０３０ｍｏｌ）をＴＨＦ１００ｍｌに溶かした溶液に、クロロ酢酸ナトリウム５．２ｇ（０．０４５ｍｏｌ）と塩化マグネシウム４．３ｇ（０．０４５ｍｏｌ）を加え室温で３時間攪拌した。この溶液に塩化マグネシウムジイソプロピルアミド溶液［１．８Ｍ／ｋｇのｎ−ブチルマグネシウムクロリドＴＨＦ溶液６７ｍｌ（０．１２０ｍｏｌ）にジイソプロピルアミン２０ｍｌ（０．１４４ｍｏｌ）を４０℃で滴下した後、４０℃で３時間攪拌した溶液］を０℃で３０分かけ滴下し、室温で２７時間攪拌した。反応溶液に、濃塩酸２５ｍｌ（０．３００ｍｏｌ）を水５０ｍｌに溶かした溶液に０℃で滴下した。酢酸エチルで抽出を行い有機相を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムにより乾燥した。減圧下溶媒を留去しシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝１：１）により単離精製し、目的のＮ１−［５−（２−クロロアセチル）ピリジン−２−イル］エタンアミドを４．５ｇ（収率７１％）得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １０．９３（１Ｈ，ｓ），８．９０（１Ｈ，ｓ），８．２９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），８．１９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），５．１６（２Ｈ，ｓ），２．１３（３Ｈ，ｓ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １８９．７，１７０．１，１５５．４，１４９．４，１３８．４，１２５．６，１１２．５，４７．４，２４．１。
ＩＲ（ＫＢｒ）  １６９０ｃｍ−１。
実施例２  ６−（メチルカルボキシアミド）−３−［２−（フェニルカルボニルオキシ）アセチル］ピリジン
0004676614.tif 000032
Ｎ１−［５−（２−クロロアセチル）ピリジン−２−イル］エタンアミド１０６ｍｇ（０．５ｍｍｏｌ）ＴＨＦ５ｍｌに溶かした溶液に、安息香酸ナトリウム１４４ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）とテトラブチルアンモニウムブロミド３２２ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）を室温で加え３時間還流した。反応溶液を吸引ろ過し、ろ液を酢酸エチルで抽出した。有機相を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムにより乾燥した。減圧下溶媒を留去しシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝１：１）により単離精製し、目的の６−（メチルカルボキシアミド）−３−［２−（フェニルカルボニルオキシ）アセチル］ピリジン１２８ｍｇ（収率８６％）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １０．９６（１Ｈ，ｓ），８．９６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ），８．３３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１．９Ｈｚ），８．２２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），８．０３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），７．７０（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），７．５７（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），５．７３（２Ｈ，ｓ），２．１５（３Ｈ，ｓ）。
１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １９１．０，１７０．１，１６５．３，１５５．６，１４９．０，１３８．０，１３３．８，１２９．４，１２９．１，１２８．９，１２５．２，１１２．６，６６．９，２４．１。ＩＲ（ＫＢｒ）１７２０，１７００，１６９０ｃｍ−１。
実施例３  ２−［６−（メチルカルボキシアミド）ピリジン−３−イル］−２−オキソエチル  エタノエート
0004676614.tif 000033
Ｎ１−［５−（２−クロロアセチル）ピリジン−２−イル］エタンアミド１０６ｍｇ（０．５ｍｍｏｌ）をＴＨＦ５ｍｌに溶かした溶液に、酢酸ナトリウム８２ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）とテトラブチルアンモニウムブロミド３２２ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）を室温で加え、その後２時間還流した。反応溶液を吸引ろ過し、ろ液を酢酸エチルで抽出した。有機相を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムにより乾燥した。減圧下溶媒を留去しシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝１：１）により単離精製し、目的の２−［６−（メチルカルボキシアミド）ピリジン−３−イル］−２−オキソエチル  エタノエート１１０ｍｇ（収率９３％）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １０．９３（１Ｈ，ｓ），８．８９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ），８．２８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２．０Ｈｚ），８．１９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），５．４３（２Ｈ，ｓ），２．１４（３Ｈ，ｓ），２．１３（３Ｈ，ｓ）。
１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １９１．１，１７０．２，１７０．１，１５５．６，１４８．９，１３８．０，１２５．３，１１２．６，６６．３，２４．２，２０．４。
ＩＲ（ＫＢｒ）１７５０，１７１０，１６９０ｃｍ−１。
実施例４  Ｎ１−［５−（２−ヒドロキシアセチル）ピリジン−２−イル］エタンアミド
0004676614.tif 000034
２−［６−（メチルカルボキシアミド）ピリジン−３−イル］−２−オキソエチル  エタノエート４８ｍｇ（０．２０ｍｍｏｌ）をメタノール５ｍｌに溶かした溶液に、炭酸カリウム３ｍｇ（０．０２ｍｍｏｌ）を加え、室温で２時間攪拌した。反応溶液を酢酸エチルで抽出し、硫酸ナトリウムにより乾燥した後、減圧下溶媒を留去しシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝１：１）により単離精製し、目的のＮ１−［５−（２−ヒドロキシアセチル）ピリジン−２−イル］エタンアミドを１８ｍｇ（収率４５％）得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １０．８６（１Ｈ，ｓ），８．８５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．４Ｈｚ），８．２４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，２．０Ｈｚ），８．１８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ），５．２０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ），４．７５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．３Ｈｚ），２．１２（３Ｈ，ｓ）。
１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １９７．５，１７０．１，１５５．２，１４８．７，１３７．９，１２５．９，１１２．６，６５．４，２４．２。
実施例５  ２−［６−（メチルカルボキシアミド）ピリジン−３−イル］−２−オキソエチル  ２，２−ジメチルプロパノエート
0004676614.tif 000035
Ｎ１−［５−（２−クロロアセチル）ピリジン−２−イル］エタンアミドド４．０ｇ（１９ｍｍｏｌ）をＴＨＦ７０ｍｌに溶かした溶液に、ピバロイル酸３．８ｇ（３８ｍｍｏｌ）、炭酸水素ナトリウム４．７ｇ（５６ｍｍｏｌ）とテトラブチルアンモニウムブロミド０．６１ｇ（１．９ｍｍｏｌ）を室温で加え２時間還流した。反応溶液に水１００ｍｌを加え、酢酸エチル１００ｍｌで三回抽出した。有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムにより乾燥した。減圧下溶媒を留去しシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝１：１）により単離精製し目的の２−［６−（メチルカルボキシアミド）ピリジン−３−イル］−２−オキソエチル２，２−ジメチルプロパノエート４．２ｇ（収率７９％）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．８１（１Ｈ，ｓ），８．３２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ），８．２０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１．９Ｈｚ），８．１０（１Ｈ，ｓ），５．２４（２Ｈ，ｓ），２．２５（３Ｈ，ｓ），１．３０（９Ｈ，ｓ）。
１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１９０．３，１７８．１，１６９．０，１５４．８，１４８．５，１３８．０，１２６．１，１１３．２，６５．６，３８．８，２７．１，２４．８。
実施例６  ２−オキソ−２−ピリジン−３−イルエチル２，２−ジメチルプロパノエート
0004676614.tif 000036
３−（２−クロロアセチル）ピリジンヒドロクロリド５．０ｇ（２６ｍｍｏｌ）をＴＨＦ８０ｍｌに溶かした溶液に、ピバロイル酸５．３ｇ（５２ｍｍｏｌ）、炭酸水素ナトリウム８．８ｇ（１０４ｍｍｏｌ）とテトラブチルアンモニウムブロミド０．８４ｇ（２．６ｍｍｏｌ）を室温で加え２時間還流した。反応溶液に水１００ｍｌを加え、酢酸エチル１００ｍｌで三回抽出した。有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムにより乾燥した。減圧下溶媒を留去しシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝１：１）により単離精製し目的の２−オキソ−２−ピリジン−３−イルエチル２，２−ジメチルプロパノエート５．３ｇ（収率９２％）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ９．１３（１Ｈ，ｓ），８．８４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ），８．２９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），７．５９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，４．９Ｈｚ），５．５０（２Ｈ，ｓ），１．２２（９Ｈ，ｓ）。
１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１９２．８，１７７．０，１５４．０，１４９．０，１３５．３，１２９．５，１２４．０，６６．４，２７．０，２６．９。
ＩＲ（ＫＢｒ）１７４０，１７００ｃｍ−１
実施例７  光学活性Ｎ１−［５−（２−クロロ−１−ヒドロキシエチル）ピリジン−２−イル］エタンアミド
0004676614.tif 000037
キャンディダ  ハルトラス（ＩＦＯ  １９４１）を、５００ｍｌ坂口フラスコで滅菌した３０ｍｌの半合成培地（グルコース４０ｇ、酵母エキス３ｇ、ＫＨ２ＰＯ４  ０．７ｇ、（ＮＨ４）２ＨＰＯ４  １．３ｇ、ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ  ０．８ｇ、ＺｎＳＯ４・７Ｈ２Ｏ  ０．０６ｇ、ＦｅＳＯ４・７Ｈ２Ｏ  ０．０９ｇ、ＣｕＳＯ４・７Ｈ２Ｏ  ０．００５ｇ、ＭｎＳＯ４  ０．０１ｇ、ＮａＣｌ０．１ｇ、ＣａＣＯ３５ｇ、水１Ｌ、ｐＨ＝６．８）に接種し、３０℃で２日間、好気的に振とう培養した。培養液にＮ１−［５−（２−クロロアセチル）ピリジン−２−イル］エタンアミド３００ｍｇ、グルコース１．２ｇを添加した後、３０℃で攪拌、４８時間反応を行った。反応終了後、反応液を酢酸エチルで抽出、減圧濃縮し、生成物の濃縮物を得た。上記濃縮物をシリカゲルカラム（ヘキサン／酢酸エチル＝１／１）で精製し、光学活性Ｎ１−［５−（２−クロロ−１−ヒドロキシエチル）ピリジン−２−イル］エタンアミドを得た。
ＨＰＬＣ分析［カラム：ＣｈｉｒａｌｃｅｌＡＳ（ダイセル社製）、溶離液：ヘキサン／イソプロパノール＝８０／２０、流速：１ｍｌ／ｍｉｎ、温度：４０℃、検出波長：２１０ｎｍ］を行ったところ、光学純度は９８％ｅｅであった。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １０．４６（１Ｈ，ｓ），８．２９（１Ｈ，ｓ），８．０１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．７６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），５．９０（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝４．４Ｈｚ），４．８２−４．７９（１Ｈ，ｍ），３．７９−３．７４（２Ｈ，ｍ），２．０７（３Ｈ，ｓ）。
１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １６９．５，１５１．６，１４６．３，１３６．４，１３２．８，１１２．９，７０．２，４９．９，２４．０。
ＩＲ（ＫＢｒ）３４４０，１６６０ｃｍ−１。
［α］Ｄ２２：＋０．０３２（Ｃ＝１．００、アセトン中）。
実施例８  光学活性Ｎ１−［５−（２−クロロ−１−ヒドロキシエチル）ピリジン−２−イル］エタンアミド
0004676614.tif 000038
ロドトルラ  ルブラ（ＩＦＯ  ０３８３）を、５００ｍｌ坂口フラスコで滅菌した３０ｍｌの半合成培地（グルコース４０ｇ、酵母エキス３ｇ、ＫＨ２ＰＯ４  ０．７ｇ、（ＮＨ４）２ＨＰＯ４  １．３ｇ、ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ  ０．８ｇ、ＺｎＳＯ４・７Ｈ２Ｏ  ０．０６ｇ、ＦｅＳＯ４・７Ｈ２Ｏ  ０．０９ｇ、ＣｕＳＯ４・７Ｈ２Ｏ  ０．００５ｇ、ＭｎＳＯ４  ０．０１ｇ、ＮａＣｌ０．１ｇ、ＣａＣＯ３５ｇ、水１Ｌ、ｐＨ＝６．８）に接種し、３０℃で２日間、好気的に振とう培養した。培養液にＮ１−［５−（２−クロロアセチル）ピリジン−２−イル］エタンアミド３００ｍｇ、グルコース１．２ｇを添加した後、３０℃で攪拌、４８時間反応を行った。反応終了後、反応液を酢酸エチルで抽出、減圧濃縮し、生成物の濃縮物を得た。上記濃縮物をシリカゲルカラム（ヘキサン／酢酸エチル＝１／１）で精製し、光学活性Ｎ１−［５−（２−クロロ−１−ヒドロキシエチル）ピリジン−２−イル］エタンアミドを得た。
ＨＰＬＣ分析［カラム：ＣｈｉｒａｌｃｅｌＡＳ（ダイセル製）、溶離液：ヘキサン／イソプロパノール＝８０／２０、流速：１ｍｌ／ｍｉｎ、温度：４０℃、検出波長：２１０ｎｍ］を行ったところ、光学純度は９８％ｅｅであった。
［α］Ｄ２２：−０．０３５（Ｃ＝１．００、アセトン中）
実施例９  光学活性２−ヒドロキシ−２−［６−（メチルカルボキシアミド）ピリジン−３−イル］エチル２，２−ジメチルプロパノエート
0004676614.tif 000039
各種酵母株を、５００ｍｌ坂口フラスコで滅菌した３０ｍｌの半合成培地（グルコース４０ｇ、酵母エキス３ｇ、ＫＨ２ＰＯ４  １ｇ、（ＮＨ４）２ＨＰＯ４  ６．５ｇ、ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ  ０．８ｇ、ＺｎＳＯ４・７Ｈ２Ｏ  ０．０６ｇ、ＦｅＳＯ４・７Ｈ２Ｏ  ０．０９ｇ、ＣｕＳＯ４・７Ｈ２Ｏ  ０．００５ｇ、ＭｎＳＯ４  ０．０１ｇ、ＮａＣｌ  ０．１ｇ、ＣａＣＯ３  ５ｇ、水  １Ｌ、ｐＨ＝６．８）に接種し、３０℃で２日間、好気的に振とう培養した。中型試験管に、得られた培養液１ｍｌ、２−［６−（メチルカルボキシアミド）ピリジン−３−イル］−２−オキソエチル  ２，２−ジメチルプロパノエート５ｍｇ、及びグルコース４０ｍｇを添加した後、３０℃で１日間振とう反応した。反応終了後、反応液を酢酸エチルで抽出した後、減圧濃縮し２−ヒドロキシ−２−［６−（メチルカルボキシアミド）ピリジン−３−イル］エチル２，２−ジメチルプロパノエート粗生成物を得た。粗生成物をＨＰＬＣ分析（カラム：Ｄｅｖｅｌｏｓｉｌ  ＯＤＳ−ＨＧ−３（野村化学製）、溶離液：アセトニトリル／０．１％ＫＨ２ＰＯ４＝２５／７５、流速：１．０ｍｌ／ｍｉｎ、カラム温度：４０℃、検出波長：２１０ｎｍ）する事により変換率を、また、粗生成物を薄層クロマトグラフィーで精製した後、ＨＰＬＣ分析（カラム：Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ  ＯＪ（ダイセル製）、溶離液：ヘキサン／イソプロパノール＝９０／１０、流速：１ｍｌ／ｍｉｎ、温度：４０℃、検出波長：２１０ｎｍ）する事により光学純度を求めた。その結果を下記表１に示した。
0004676614.tif 000040
２−ヒドロキシ−２−［６−（メチルカルボキシアミド）ピリジン−３−イル］エチル２，２−ジメチルプロパノエート：
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１０．４６（１Ｈ，ｓ），８．２６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ），８．０２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．７３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２．５Ｈｚ），５．６６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ），４．７８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．７Ｈｚ，５．９Ｈｚ），４．１５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．７Ｈｚ，５．９Ｈｚ），４．０３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．６Ｈｚ，５．４Ｈｚ），２．０６（３Ｈ，ｓ），１．０５（９Ｈ，ｓ）。
１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１７７．１，１６９．２，１５１．４，１４６．１，１３６．２，１３２．７，１１２．６，６８．０，６７．８，６７．８，３８．２，２６．８，２３．８。
実施例１０  光学活性ヒドロキシエチルピリジン誘導体
各種酵母株を、５００ｍｌ坂口フラスコで滅菌した３０ｍｌの半合成培地（グルコース４０ｇ、酵母エキス３ｇ、ＫＨ２ＰＯ４  １ｇ、（ＮＨ４）２ＨＰＯ４  ６．５ｇ、ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ  ０．８ｇ、ＺｎＳＯ４・７Ｈ２Ｏ  ０．０６ｇ、ＦｅＳＯ４・７Ｈ２Ｏ  ０．０９ｇ、ＣｕＳＯ４・７Ｈ２Ｏ  ０．００５ｇ、ＭｎＳＯ４  ０．０１ｇ、ＮａＣｌ  ０．１ｇ、ＣａＣＯ３  ５ｇ、水  １Ｌ、ｐＨ＝６．８）に接種し、３０℃で２日間、好気的に振とう培養した。中型試験管に、得られた培養液１ｍｌ、一般式（９）に示される各種置換アセチルピリジン誘導体５ｍｇ、及びグルコース４０ｍｇを添加した後、３０℃で１日間振とう反応した。反応終了後、反応液を酢酸エチルで抽出した後、減圧濃縮し粗生成物を得た。粗生成物をＨＰＬＣ分析（カラム：Ｄｅｖｅｌｏｓｉｌ  ＯＤＳ−ＨＧ−３（野村化学製）、溶離液：アセトニトリル／水＝２５／７５、流速：１．０ｍｌ／ｍｉｎ、カラム温度：４０℃、検出波長：２１０ｎｍ）する事により変換率を、また、上記粗生成物を薄層クロマトグラフィーで精製した後、ＨＰＬＣ分析（カラム：Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ  ＯＪ（ダイセル製）、溶離液：ヘキサン／イソプロパノール＝９５／５、流速：１ｍｌ／ｍｉｎ、温度：４０℃、検出波長：２１０ｎｍ）する事により光学純度を求めた。その結果を下記表２に示した。
0004676614.tif 000041
実施例１１  （Ｒ）−２−クロロ−１−ピリジン−３−イルエタン−１−オール
0004676614.tif 000042
組替え大腸菌ＨＢ１０１（ｐＮＴＣＲＧ）受託番号ＦＥＲＭ  ＢＰ−６８９８を、５００ｍｌ容坂口フラスコ中で滅菌した１００ｍｌの半合成培地（グリセリン１５ｇ、イーストエキス３ｇ、Ｎａ２ＨＰＯ４  ６ｇ、ＫＨ２ＨＰＯ４  ３ｇ、ＮａＣｌ  ２ｇ、ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ  ０．５ｇ、水１Ｌ、ｐＨ＝７．２）に接種し、３７℃で２８時間振とう培養した。２−クロロ−１−ピリジン−３−イルエタン−１−オン塩酸塩２ｇを燐酸緩衝液８ｍｌに懸濁し、懸濁液を５ＮＮａＯＨにてｐＨ＝５．５に調整した後、上記培養液４０ｍｌ、トリトンＸ−１００  ０．０４ｍｌ、グルコース２．８ｇ、ＮＡＤＰ２．３ｍｇを添加し、３０℃で攪拌、７時間反応を行った。反応終了後、反応液を酢酸エチルで抽出、減圧濃縮した後、シリカゲルカラム（ヘキサン：酢酸エチル＝１：２）にて精製する事により、（Ｒ）−２−クロロ−１−ピリジン−３−イルエタン−１−オール１．０４ｇを透明油状物として得た。また、実施例１０と同様の方法にて光学純度の分析を行ったところ、光学純度は９７．１％ｅｅであった。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００Ｍｚ、ＣＤ３ＯＤ）δ８．５８（ｄ，１Ｈ）、δ８．４６（ｄｄ，１Ｈ）、δ７．９０（ｄ，１Ｈ）、δ７．４４（ｄｄ，１Ｈ）、δ４．９３（ｍ，１Ｈ）、δ３．７５（ｍ，２Ｈ）
得られた（Ｒ）−２−クロロ−１−ピリジン−３−イルエタン−１−オールを塩酸メタノール溶液に溶解した後、メチル−ｔ−ブチルエーテルをゆっくりと滴下し、室温で１時間攪拌した。生成した白色沈殿物を濾過する事により、（Ｒ）−２−クロロ−１−ピリジン−３−イルエタン−１−オール塩酸塩１．０４ｇを白色結晶として得た。光学純度は９９．７％ｅｅであった。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００Ｍｚ、ＣＤ３ＯＤ）δ８．９３（ｄ，１Ｈ）、δ８．８４（ｄｄ，１Ｈ）、δ８．７２（ｄ，１Ｈ）、δ８．１０（ｄｄ，１Ｈ）、δ５．２３（ｍ，１Ｈ）、δ３．８８（ｍ，２Ｈ）
実施例１２  （Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−ピリジン−３−イルエチル２，２−ジメチルプロパノエート
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実施例１１で用いた培養液２０ｍｌに、２−オキソ−２−ピリジン−３−イルエチル２，２−ジメチルプロパノエート２ｇ、グルコース２．８ｇ、ＮＡＤＰ  ２．３ｍｇ、トリトンＸ１００  ０．０２ｍｌを添加し、５Ｎの水酸化ナトリウム水溶液でｐＨ＝６．５に調整しつつ３０℃で攪拌、２時間反応を行った。反応終了後、反応液を酢酸エチルで抽出し、減圧濃縮し、（Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−ピリジン−３−イルエチル２，２−ジメチルプロパノエート２．１ｇを薄黄色油状物として得た。また、実施例１０と同様の方法にて光学純度の分析を行ったところ、光学純度は１００％ｅｅであった。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．５７（１Ｈ，ｓ），８．４８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．９Ｈｚ），７．７８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ），７．３７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，４．６Ｈｚ），５．７７（１Ｈ，ｓ），４．８６（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ），４．２０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．０Ｈｚ，６．１Ｈｚ），４．０８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．３Ｈｚ，５．４Ｈｚ），１．０５（９Ｈ，ｓ）。
１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１７７．１，１４８．６，１４８．０，１３７．４，１３４．１，１２３．３，６８．３，６７．９，３８．２，２６．８。
ＩＲ（ＫＢｒ）３２００，１７３０ｃｍ−１
［α］Ｄ２５＝−２２．８７（ｃ＝１、ＭｅＯＨ）
実施例１３  （Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−［６−（メチルカルボキシアミド）ピリジン−３−イル］エチル  エタノエート
0004676614.tif 000044
四塩化ビス（η６−メシチレン）二ルテニウム３．１０ｍｇ（０．００５３ｍｍｏｌ）、（Ｓ，Ｓ）−Ｎ−ｐ−トシル−１，２−ジフェニルエチレンジアミン７．７３ｍｇ（０．０２１ｍｍｏｌ）、および実施例３の方法によって得た２−［６−（メチルカルボキシアミド）ピリジン−３−イル］−２−オキソエチル  エタノエート５０ｍｇ（０．２１２ｍｍｏｌ）を５．５ｍｌのイソプロピルアルコール中で混合し、アルゴン雰囲気下８０℃で２０分撹拌後、０℃に冷却し１Ｍ−水酸化カリウム／イソプロピルアルコール溶液０．０５３ｍｌを添加した。さらに、この溶液を０℃で２時間、１５〜２０℃で１８時間撹拌した後に、反応液に水を加え酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下に溶媒を留去し、得られた残査をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにて精製し、（Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−［６−（メチルカルボキシアミド）ピリジン−３−イル］エチル  エタノエート３６．８ｍｇ（収率７３％）を得た。また実施例９に記載の方法で生成物の光学純度を測定したところ８９．７％ｅｅであった。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  ９．１４（１Ｈ，ｂｓ），８．２７（１Ｈ，ｓ），８．２０（１Ｈ，ｄ），７．７４（１Ｈ，ｄｄ），４．９７（１Ｈ，ｄｄ），４．２８（１Ｈ，ｄｄ），４．１７（１Ｈ，ｄｄ），２．８６（１Ｈ，ｂｓ），２．２１（３Ｈ，ｓ），２．１１（３Ｈ，ｓ），１．６９（１Ｈ，ｂｓ）。
実施例１４  光学活性Ｎ１−（５−オキシラン−２−イルピリジン−２−イル）エタンアミド
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光学活性Ｎ１−［５−（２−クロロ−１−ヒドロキシエチル）ピリジン−２−イル］エタンアミド１０７ｍｇ（０．５０ｍｍｏｌ）をアセトン５ｍｌに溶かした溶液に、１Ｎ水酸化ナトリウム０．５ｍｌ（０．５０ｍｍｏｌ）を０℃で加え，０℃で２時間攪拌した。反応溶液に冷水を加え、酢酸エチルで抽出し、硫酸ナトリウムにより乾燥した後、減圧下溶媒を留去しシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝１／１）により単離精製し、目的の光学活性Ｎ１−（５−オキシラン−２−イルピリジン−２−イル）エタンアミドを８２ｍｇ（収率９２％）得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  ８．４７（１Ｈ，ｂｒ），８．２１（１Ｈ，ｓ），８．２０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．２Ｈｚ），７．５６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１．７Ｈｚ），３．８６（１Ｈ，ｓ），３．１７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ），２．８３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．９Ｈｚ，２．０Ｈｚ），２．２０（３Ｈ，ｓ）。
実施例１５  （Ｒ）−Ｎ１−［５−（１，２−ジヒドロキシエチル）ピリジン−２−イル］エタンアミド
0004676614.tif 000046
実施例９の方法によって得た（Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−［６−（メチルカルボキシアミド）ピリジン−３−イル］エチル２，２−ジメチルプロパノエート１．５０ｇ（５．３５ｍｍｏｌ、１００％ｅｅ）を１５ｍｌのメタノールに溶解し、１Ｍ−水酸化テトラｎ−ブチルアンモニウム／メタノール溶液０．５ｍｌを加え、２０℃で４時間撹拌した。この溶液にトルエン３０ｍｌを添加し、−２０℃で３時間撹拌した。析出した結晶をろ過後、トルエンで洗浄、さらに４０℃、１Ｔｏｒｒで６時間乾燥すると、（Ｒ）−Ｎ１−［５−（１，２−ジヒドロキシエチル）ピリジン−２−イル］エタンアミドが０．９３７ｇ（８９％収率）を白色結晶として得られた。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １０．４３（１Ｈ，ｓ）８．２２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ），８．００（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．６９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３，２．０Ｈｚ），５．３１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．９），４．７４−４．７７（１Ｈ，ｍ），４．５１−４．５３（１Ｈ，ｍ），３．３３−３．５９（２Ｈ，ｍ），２．０７（３Ｈ，ｓ）。
実施例１６  （Ｒ）−１−ピリジン−３−イルエタン−１，２−ジオール塩酸塩
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実施例１２で得られた２−ヒドロキシ−２−ピリジン−３−イルエチル２，２−ジメチルプロパノエート濃縮物２ｇを塩酸メタノール溶液に溶解し、４８時間還流した後、減圧濃縮した。濃縮物をメタノールに再溶解し、ゆっくりとメチル−ｔ−ブチルエーテを滴下し、室温で１時間攪拌した。生成した白色沈殿物を濾過する事により、（Ｒ）−１−ピリジン−３−イルエタン−１，２−ジオール塩酸塩１．３１ｇを白色結晶として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００Ｍｚ、ＣＤ３ＯＤ）δ８．７９（ｄ，１Ｈ）、δ８．７０（ｄ，１Ｈ）、δ８．６０（ｄ，１Ｈ）、δ８．００（ｄｄ，１Ｈ）、δ４．８７（ｍ，１Ｈ）、δ３．６８（ｍ，２Ｈ）
［α］Ｄ２５＝−２０．９９（ｃ＝１、ＭｅＯＨ）
実施例１７  （Ｒ）−１−ピリジン−３−イルエタン−１，２−ジオール
0004676614.tif 000048
実施例１２で得られた２−ヒドロキシ−２−ピリジン−３−イルエチル２，２−ジメチルプロパノエート濃縮物１００ｍｇをメタノール１ｍｌに溶解し、１Ｍ  Ｂｕ４ＮＨＯＨメタノール溶液５０ｕｌを添加し、室温で３時間反応させた。反応液を減圧濃縮した後、シリカゲルカラム（酢酸エチル：メタノール＝４：１）にて精製する事により、（Ｒ）−１−ピリジン−３−イルエタン−１，２−ジオール５０ｍｇを薄黄色油状物として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００Ｍｚ、ＣＤ３ＯＤ）δ８．７９（ｄ，１Ｈ）、δ８．７０（ｄ，１Ｈ）、δ８．６０（ｄ，１Ｈ）、δ８．００（ｄｄ，１Ｈ）、δ４．８７（ｍ，１Ｈ）、δ３．６８（ｍ，２Ｈ）
実施例１８  （Ｒ）−Ｎ１−［５−（１，２−ジヒドロキシエチル）ピリジン−２−イル］エタンアミド
0004676614.tif 000049
四塩化ビス（η６−メシチレン）二ルテニウム３．１０ｍｇ（０．００５３ｍｍｏｌ）、（Ｓ，Ｓ）−Ｎ−ｐ−トシル−１，２−ジフェニルエチレンジアミン７．７３ｍｇ（０．０２１ｍｍｏｌ）、および実施例３の方法によって得た２−［６−（メチルカルボキシアミド）ピリジン−３−イル］−２−オキソエチル  エタノエート５０ｍｇ（０．２１２ｍｍｏｌ）を５．５ｍｌのイソプロピルアルコール中で混合し、アルゴン雰囲気下８０℃で２０分撹拌後、０℃に冷却し１Ｍ−水酸化カリウム／イソプロピルアルコール溶液０．２７ｍｌを添加した。さらに、この溶液を０℃で６時間撹拌した後に、トルエン１０ｍｌを添加して析出した結晶を減圧下にろ過した。結晶を冷イソプロピルアルコールで洗浄後、真空乾燥（４０℃、１ｔｏｒｒ、６時間）すると、（Ｒ）−Ｎ１−［５−（１，２−ジヒドロキシエチル）ピリジン−２−イル］エタンアミドが２０．８ｍｇ（収率５０％）光学純度：９０．６％ｅｅで得られた。
尚、ここで得られた生成物の光学純度は、生成物のビシナルジオール部位をアセトン中２，２−ジメトキシプロパンとｐ−トルエンスルホン酸で処理してアセトニドに誘導した後、ＨＰＬＣ分析（カラム：Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ  ＯＪ（ダイセル製）、溶離液：ヘキサン／イソプロパノール＝９０／１０、流速：１ｍｌ／ｍｉｎ、温度：４０℃、検出波長：２１０ｎｍ）する事により求めた。
産業上の利用可能性
本発明は、上述の構成よりなるので、ベータ−３アドレナリン受容体アゴニストの中間体である光学活性ジヒドロキシエチルピリジン誘導体及び光学活性オキシラン誘導体を、入手容易な原料から、安全かつ効率的に、更には工業的に有利な方法で製造することができる。