(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヘスペリジン、アセトアミノフェンおよびイブプロフェンを有効成分として含有することを特徴とする好中球走化性抑制用医薬組成物。
【請求項２】
感冒の予防・治療用である請求項１記載の医薬組成物。
【請求項３】
関節痛の予防・治療用である請求項１記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、好中球走化性抑制用医薬組成物、さらに詳しくは、好中球走化性抑制作用を有し、炎症細胞の関与する疾患の治療に有用である医薬組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
炎症反応において、血管反応に続いて起こってくるのが、細胞反応である。これは、まず、血流中の好中球の炎症局所への浸潤から始まる。この過程に作用するのが炎症刺激によって局所で産生されるサイトカイン、ケモカイン、ＬＴＢ４や補体成分である。これらは血流中の好中球に対して走化刺激として作用したり、血管内皮細胞に働き、好中球に対するＩＣＡＭなどの接着分子の発現誘導を起こす。これにより、血流中の好中球は内皮と一過性の接触を繰り返し、その上をローリングするようになり、続いて、内皮上に強く接着したあと、内皮細胞間隙を通り抜け、プロテアーゼなどで基底膜を破壊して組織中へ走化する。
炎症において、血管反応時には発赤、熱感、腫脹が起きる。それに加えて、走化および貪食の経過中に活性化された好中球が放出した活性酸素やプロテアーゼ等が疼痛、機能障害を引き起こす。したがって、好中球走化作用の抑制は炎症細胞（好中球）の関与する疾患の治療に有用である。
炎症細胞に対する作用を有する医薬組成物としては、ピリジンビニルピラゾロピリジン誘導体、アリールエテニルピラゾロピリジン誘導体を含有する治療剤（特許文献１、２）やフラボノイド系化合物として、フラバノール（カテキン）類のエピガロカテキンガレートやフラボノール類のルチン（非特許文献１、２）が知られている。しかし、フラボノイド系化合物の中でも、本発明のフラボノン類を適用し、従来の組成物または従来の組合せからなる組成物を越える好中球走化性抑制作用を得たという報告はない。
【特許文献１】特開平７−３３７６８号公報
【特許文献２】特開平７−２１５９７４号公報
【非特許文献１】J Immunol. 2003 Apr 15;170(8):4335-41
【非特許文献２】Exp Toxicol Pathol. 2003 Mar;54(4):313-8
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
炎症細胞の関与する疾患は多数知られており、安全で優れた好中球走化性抑制作用を有する有効な薬剤が強く望まれている。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
本発明者らは、上記目的を達成するため鋭意検討を重ねた結果、フラボノイド系化合物の中でもフラボノン類を有効成分として含有する医薬組成物が優れた好中球走化性抑制作用を有することを見だし、さらに検討を加えて本発明を完成した。
【０００５】
すなわち、本発明は、
（１）フラボノン類を有効成分として含有することを特徴とする好中球走化性抑制用医薬組成物、
（２）フラボノン類が、ヘスペリジン、ナリンゲニンおよびそれらの誘導体から選ばれる上記（１）記載の医薬組成物、
（３）さらに、解熱鎮痛消炎剤を含有する上記（１）記載の医薬組成物、
（４）さらに、２種の解熱鎮痛消炎剤を含有する上記（１）記載の医薬組成物、
（５）解熱鎮痛消炎剤がアニリン誘導体および／またはプロピオン酸誘導体から選ばれる１種または２種である上記（３）または（４）記載の医薬組成物、
（６）アニリン誘導体がアセトアミノフェン、プロピオン酸誘導体がイブプロフェンである上記（５）記載の医薬組成物、
（７）感冒の予防・治療用である上記（１）〜（６）いずれか１項記載の医薬組成物、
（８）関節痛の予防・治療用である上記（１）〜（６）いずれか１項記載の医薬組成物などを提供するものである。
【発明の効果】
【０００６】
本発明の医薬組成物は、好中球走化性抑制作用を有するので、炎症細胞の関与する疾患を有効に改善または解消できる。また、解熱鎮痛消炎剤などを配合することにより、さらに有効に治療できる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００７】
本発明の医薬組成物の有効成分であるフラボノン類としては、例えば、医薬成分として公知のヘスペリジン、ナリンゲニンおよびそれらの誘導体（例、メチルヘスペリジン、ネオヘスペリジン、糖転移ヘスペリジン、ナリンジン等）等が使用でき、その配合量も医薬として通常採用される範囲から選択される。
【０００８】
本発明の医薬組成物は、さらに、解熱鎮痛消炎剤を含有することが好ましい。用いる解熱鎮痛消炎剤としては、例えば、アニリン誘導体（例、アセトアミノフェン、フェナセチン等、好ましくはアセトアミノフェン）、プロピオン酸誘導体（例、イブプロフェン、ケトプロフェン、ロキソプロフェン、プラノプロフェン、ザルトプロフェン等、好ましくはイブプロフェン）等があげられる。ことに、本発明の医薬組成物においては、２種の解熱鎮痛消炎剤を含有することが好ましく、特にアセトアミノフェンとイブプロフェンを含有するものが好ましい。これらの解熱鎮痛消炎剤も通常採用される範囲の量で使用される。
【０００９】
本発明の医薬組成物は、フラボノイドおよび解熱鎮痛消炎剤に加えて他の有効成分を含有していてもよい。このような有効成分物としては、例えば、抗ヒスタミン剤、鎮咳剤、去痰剤、鎮咳去痰剤、気管支拡張剤およびキサンチン類から選ばれる少なくとも１つの成分が挙げられる。さらに、中枢神経興奮剤、制酸剤や粘膜保護剤等の消化器官用薬剤、ビタミン類、ミネラル類、アミノ酸、ムコ多糖類等を含んでいてもよい。また、これらの薬効成分は、生薬であってもよい。
また、通常、医薬組成物に使用される医薬上許容される担体や賦形剤、さらには製剤添加物を含有していてもよい。
【００１０】
本発明の医薬組成物は、常法に従って経口投与用または非経口投与用の各種の剤形に製造することができ、例えば、ヒト等哺乳動物の感冒の予防・治療用、関節痛の予防・治療用に使用できる。例えば、かぜ薬、関節痛薬として治療に用いる場合は、常法により、各有効成分に関して通常採用される投与量で経口的に投与できる。
以下に実施例、試験例を挙げて、本発明をさらに詳しく説明するが、本発明はこれらの例に限定されるものではない。
【実施例１】
【００１１】
以下、本発明の好ましい製剤例を記載するが、本発明はこれらに限定されるものではない。なお、下記例において特に断らない限り、各成分の配合量は成人1日服用量を示し、常法に従い製剤化するものとする。
【表１】
0004689970.tif 000002
上記処方に従い、日本薬局方製剤総則、錠剤の項に準じて錠剤として製造した。
【試験例１】
【００１２】
以下の方法により、被験物質の好中球走化性抑制作用を測定した。
ラット好中球の調製
（１）ラットを軽くエーテル麻酔し、1w/v％カゼイン溶液を腹腔内に120 mL/kgの割合で注入する。
（２）15〜18時間後にエーテル麻酔下でラットの頚動脈を切断し、放血死させる。
（３）氷冷したPBSを腹腔内に約20 mL注入し、腹部を軽くマッサージする。腹壁を消毒用アルコールでよく拭いた後、試験管が挿入できる程度に腹部を切開する。
（４）先方に多数の小孔を開けた試験管を腹腔内に挿入し、シリンジ内に浸み込んできた腹腔内液をパスツールピペット等を用いて採取する。腹腔内液は遠心(150×g、3 min、4℃)する。
（５）細胞沈渣に赤血球が混入していた場合は溶血操作を行う。すなわち、細胞沈渣に氷冷した0.2％NaCl溶液を4 mL添加して素早く懸濁し、約20〜30秒後に同量の1.6％NaCl溶液を加え、遠心分離(150×g、3 min、4℃)する。
（６）HBSS（Ca2+、Mg2+-free Hanks balanced salt solution）で洗浄したのち、反応用培地に懸濁してラット好中球浮遊液を調製する。
（７）チュルク染色法によって算出した好中球の割合が95％以上で、かつトリパンブルー色素排除法で算出した生存率が95％以上であるものを実験に用いる。好中球は採血した当日にのみ使用する。
ラット好中球走化性の測定及び評価
（１）ラット好中球浮遊液(5×106 cells/mL)と0.2％DMSO含有反応用培地あるいは各被験物質添加液を等容量ずつ混合する。
（２）下表に従って反応用培地あるいは10-8 mol/L fMLP（N-formyl-L-methionyl-L-leucyl-L-phenylalanine）溶液を24ウェルプレートに600 μＬ/ウェルずつ入れ、（１）の混合液を200 μＬずつ注入したケモタキセル（登録商標、倉敷紡績株式会社製ケモタキシス研究用カルチャーチャンバー、孔径３μｍ）をセットする。この時、ケモタキセルのフィルターとプレートウェルの液面との間に気泡が生じないように注意する。
（３）それぞれの条件について3ウェルずつを使用する。
（４）ケモタキセルをセットしたプレートをCO2インキュベーター内で37℃、90分間インキュベートする。
（５）インキュベーション後、ケモタキセルをプレートウェルから取り外し、プレートウェル内の細胞をマイクロチューブに回収する。
（６）さらに反応用培地をプレートウェルに少量加えてウェルに付着している細胞を回収し、（５）の細胞回収液に加える。
（７）遠心分離して細胞を沈降させ、0.1％ Triton X-100溶液に懸濁して細胞を溶解し、細胞溶解液とする．
（８）96ウェルマイクロプレートに細胞溶解液50 μＬ及びOPD溶液100 μＬを添加し、室温で反応後、2 mol/L H2SO4 50 μＬを加えて反応を停止する。492 nmにおける吸光度をマイクロプレートリーダーを用いて測定しパーオキシダーゼ活性を求める。
（９）各群3ウェルの吸光度の平均値を算出する。平均値を用いて次式により各濃度における走化性抑制率を求める。
【数１】
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【００１３】
試験群構成は表２のとおりである。
【表２】
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【００１４】
結果を表３に示す。
【表３】
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表３に示すごとく、単剤の場合、被検物質Ａ、Ｂ（１）、Ｂ（２）およびＢ（３）は、ラット好中球走化性を、各々、２９％、４９％、２８％および−７％抑制するが、混合物の場合、被検物質ＡとＢ（１）では、６８％、ＡとＢ（２）では５７％、ＡとＢ（３）では４２％ラット好中球走化性を抑制する。
【産業上の利用可能性】
【００１５】
炎症細胞の関与する疾患は多数知られており、安全で優れた好中球走化性抑制作用を有する有効な薬剤が強く望まれている。