(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
可食キノコの粉砕品とクロレラ粉末との混合物に、繊維分解酵素による分解処理と、蛋白質分解酵素による蛋白質分解処理とを施して得られるキノコクロレラ抽出物と、
少なくとも大麦、高麗人参、アロエ、ヨモギ、クマザサ、月桃葉、カリンを含んだ複数の可食植物素材を発酵させて得られる植物発酵物と、
小麦粉をアミラーゼで処理した小麦粉アミラーゼ処理液をパントエア・アグロメランスによって発酵させて、同時に該パントエア・アグロメランスを培養して得られた小麦発酵抽出物と、
を混合し、エクストルーダーで膨化したことを特徴とするダイエット食品。
【請求項２】
請求項１に記載のダイエット食品において、
前記可食キノコには、エリンギ、ハナビラタケ、ヒマラヤヒラタケ、アガリクス、シイタケ、エノキタケ、ブナシメジのうち少なくとも１種が含まれていることを特徴とするダイエット食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、コレステロールおよび中性脂肪を吸着し、そのまま排せつさせることで、ダイエット効果を生じさせるダイエット食品に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
食生活の変化に伴い、今や、我が国では肥満型およびかくれ肥満型体型の人々が２０００万人を超え、そのおよそ半数が糖尿病などの生活習慣病を合併していることから大きな社会問題となっている。また、これにより従来のように美容のためだけでなく、生活習慣病の予防・改善のためにもダイエットを求める人々が増えている。そして、その多くは食事制限をすることなく、簡易にダイエットしたいと希望している。
【０００３】
このため、コレステロールを吸着し、そのまま排せつする作用のあることが知られているキトサンを用いた食事制限不要のダイエット食品が提案されている（特許文献１〜３）。
【０００４】
しかし、ダイエットにおいては、コレステロールの吸収を抑えるだけでなく、中性脂肪の吸収を抑えることも非常に重要である。このため、コレステロールおよび中性脂肪を吸着し、そのまま排せつさせる作用を有する安全で有効なダイエット食品の開発が強く望まれていた。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開平１１−３４６７１４号公報
【特許文献２】特開平１１−１４７８２８号公報
【特許文献３】特開平６−７１１７号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、このような事情に鑑みてなされたものであり、コレステロール吸着効果を有するとともに中性脂肪吸着作用をも有するダイエット食品を提供することを目的としている。また、ダイエットにおいては、糖質の吸収を抑えることも重要であることから、本発明のさらに別の目的は、糖質吸着作用をも有するダイエット食品を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
請求項１に係る発明のダイエット食品では、可食キノコの粉砕品とクロレラ粉末との混合物に、繊維分解酵素による分解処理と、蛋白質分解酵素による蛋白質分解処理とを施して得られるキノコクロレラ抽出物と、少なくとも大麦、高麗人参、アロエ、ヨモギ、クマザサ、月桃葉、カリンを含んだ複数の可食植物素材を発酵させて得られる植物発酵物と、小麦粉をアミラーゼで処理した小麦粉アミラーゼ処理液をパントエア・アグロメランスによって発酵させて、同時にパントエア・アグロメランスを培養して得られた小麦発酵抽出物と、を混合し、エクストルーダーで膨化したことを特徴としている。
【０００８】
請求項２に係る発明のダイエット食品では、請求項１に記載のダイエット食品において、可食キノコには、エリンギ、ハナビラタケ、ヒマラヤヒラタケ、アガリクス、シイタケ、エノキタケ、ブナシメジのうち少なくとも１種が含まれていることを特徴としている。
【発明の効果】
【０００９】
本発明のダイエット食品は、すぐれたコレステロール吸着効果を有するとともに中性脂肪吸着作用をも有している。これにより、体内で吸着させたコレステロールおよび中性脂肪をそのまま体外に排せつさせることができる。また、本発明のダイエット食品は、糖質吸着作用をも有している。これにより、体内で吸着させた糖質をそのまま体外に排せつさせることができる。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
以下の説明において、百分率の表示は、特に断りのない限り、質量による値である。本発明のダイエット食品は、キノコクロレラ抽出物と植物発酵物と小麦発酵抽出物とを混合し、エクストルーダーで膨化することによって得られる。
【００１１】
まず、キノコクロレラ抽出物ついて説明する。このキノコクロレラ抽出物は、一例として、
（１）可食キノコの粉砕品とクロレラ粉末との混合物に水を加える加水工程と、
（２）使用する繊維分解酵素に適したｐＨ値に調整し、繊維分解酵素を添加した後、繊維分解酵素に適した温度で適時時間（例えば１〜２時間）保持する繊維分解処理工程と、
（３）使用する蛋白質分解酵素に適したｐＨ値に調整し、蛋白質分解酵素を添加した後、蛋白質分解酵素に適した温度で適時時間（例えば１〜２時間）保持する蛋白質分解処理工程と、
（４）品温を高くして両酵素を失活させる酵素失活工程と、
（５）固形分を除去するろ過工程と、
（６）ろ液を濃縮し、凍結乾燥によって粉末状にする最終工程と、
を経て製造される。
【００１２】
可食キノコは、エリンギ、ハナビラタケ、ヒマラヤヒラタケ、アガリクス、シイタケ、エノキタケ、ブナシメジが好ましいが、これらに限定されるものではなく、少なくとも毒キノコでなければ使用可能である。可食キノコを粉砕品とするのは、繊維分解酵素による繊維分解処理および蛋白質分解酵素による蛋白質分解処理を効率よく行うためである。クロレラ粉末についても同様である。なお、これに該当する市販のキノコクロレラ抽出物としては、例えば、株式会社ＡＳＰ製のキノコモス（登録商標）などが挙げられる。
【００１３】
繊維分解処理工程では、繊維分解酵素が活性を呈して、可食キノコ粉砕品およびクロレラ粉末の細胞壁などの繊維を分解してβ−グルカン等が生成される。また、蛋白質分解処理工程では、蛋白質分解酵素が活性を呈して、可食キノコ粉砕品およびクロレラ粉末の蛋白質を分解してペプチドやアミノ酸が生成される。繊維分解酵素による繊維分解処理と蛋白質分解酵素による蛋白質分解処理の順番を入れ替えてもキノコクロレラ抽出物を得ることは可能であるが、繊維分解処理を先行したほうが良い。繊維分解酵素は公知のものを使用すればよく、蛋白質分解酵素も同様である。
【００１４】
つぎに、植物発酵物について説明する。この植物発酵物は、一例として、
（１）植物素材に水を加え混合する加水工程と、
（２）原料を蒸すための加熱工程と、
（３）種切りに適した温度に冷却し、発酵菌を接種した後、適温で適時時間（例えば１〜３日）保持する発酵工程と、
（４）殺菌のために加熱する殺菌工程と、
（５）乾燥させ粉砕し、ふるいにかける分級工程と、
（６）殺菌工程と、
を経て製造される。
【００１５】
可食植物素材は、可食植物の根、幹、葉、花、果実など可食部の粉砕物、乾燥物、抽出物またはその乾燥粉末（エキス末）であり、１種類以上の部位を混合して使用しても良い。使用する可食植物は、大麦、高麗人参、アロエ、ヨモギ、クマザサ、月桃葉、カリンを必須とし、その他に可食植物素材を加える場合は、あわ、ひえ、きび、たかきび、紫黒米、米粉、ワカメ、ノブドウ、ウコンなどが好ましいが、これらに限定されるものではない。また、植物由来の発酵物を用いても良い。
【００１６】
発酵工程に用いる発酵菌は、麹菌が好ましいが、これに限定されるものではない。分級工程に用いるふるいは、粉砕物が微細化されればよく、粒度は特に限定されないが、３０メッシュパス９５％以上であることが好ましい。
【００１７】
つぎに、小麦発酵抽出物について説明する。この小麦発酵抽出物は、一例として、
（１）０．０５〜１０％の濃度になるように小麦粉を水に懸濁する加水工程と、
（２）１リットルあたり１０〜５００００単位アミラーゼを加えて１０℃〜８０℃で１〜２４時間保温して、小麦でん粉を部分消化させるアミラーゼ処理工程と、
（３）予め調整した無機塩類混合溶液、塩化マグネシウム溶液、および、塩化カルシウム溶液を適量混合し、水を加え、０．１〜５％の小麦粉を含む懸濁液とする培地作成工程と、
（４）予め単離したパントエア・アグロメランスを添加し、１〜４０℃で６時間から一週間発酵させる発酵工程と、 
（５）発酵を終了させ、遠心分離（１０００〜５０００ｒｐｍ、１０〜６０分間）等の操作により固形分を沈殿物として回収する回収工程と、
（６）回収した沈殿物を水または塩類緩衝液等で懸濁し、これを８０〜１４０℃で１０分から６時間保持して加熱抽出した後、遠心分離やろ過によって固形分を除去する加熱抽出工程と、
（７）ろ液を濃縮した後凍結乾燥にて粉末状にする最終工程と、
を経て製造される。
【００１８】
加水工程では小麦粉を水に懸濁した後、オートクレープ等によって減菌処理を行うことが好ましい。
【００１９】
培地作成工程における無機塩類混合溶液は、０．５〜１０％のリン酸第二ナトリウム、０．０５〜５％のリン酸第一カリウム、０．０５〜５％の塩化ナトリウム、および、０．０５〜５％の塩化アンモニウムにより調整する。塩化マグネシウム溶液は、０．２〜３モルに調整する。塩化カルシウム溶液は、０．２〜３モルに調整する。なお、無機塩類混合溶液に代えて０.０５〜５％の食塩、および、０．００５〜１モルのリン酸緩衝液を用いても良い。これらの溶液については、オートクレープ等によって減菌処理を行うことが好ましい。また、作成された懸濁液については、アルカリ溶液や酸性溶液を加えｐＨを中性にするのが好ましい。
【００２０】
発酵工程に使用するパントエア・アグロメランスは、以下の方法により小麦粉より単離することができる。小麦粉を水に懸濁し、上澄み液をＬブロス寒天培地に塗り広げ培養を行うと、微生物のコロニーが出現する。これらのコロニーを定法により微生物の同定を行う。例えば、グラム染色陰性、グルコース嫌気的代謝反応陽性、オキシダーゼ活性陰性のコロニーを選択し、さらに、ＩＤテスト・ＥＢ-２０（日水製薬）等を用いて、スタンダードのパントエア・アグロメランスと同じ性質を有するものを選択する。スタンダードとなるパントエア・アグロメランスは理化学研究所生物基盤研究部微生物系統保存施設より入手することができる。なお、一度、単離同定すれば、この菌を５０％グリセロール等で保存することが可能である。
【００２１】
発酵工程では、場合によっては静置や震盪しても良い。また、数時間おきに撹拌を行うのも良い。発酵途中に適宜アルカリ溶液を加え、ｐＨを中性にすることや、小麦粉懸濁液や無機塩類混合溶液を添加することも良い。
【００２２】
加熱抽出工程の後、さらに簡便な精製を追加しても良い。具体的には、加熱抽出したエキスに、最終濃度０．０５〜１モル／ｌになるように塩化ナトリウム等の塩を加え、その後、エタノール等の溶媒をエキスの１〜３倍量添加すると沈殿が生じる。これを遠心分離機等で回収するのである。この沈殿をさらに、エタノール等の溶媒で洗浄しても良い。この沈殿を乾燥させれば、粉末とすることもできる。
【００２３】
キノコクロレラ抽出物と植物発酵物と小麦発酵抽出物の配合割合は、特に限定されないが、乾燥質量比でキノコクロレラ抽出物２９〜３７％、植物発酵物２９〜３７％、小麦発酵抽出物２６〜４２％が好ましく、キノコクロレラ抽出物３３％、植物発酵物３３％、小麦発酵抽出物３３％、すなわち１：１：１がより好ましい。
【００２４】
つぎに、エクストルーダーによる膨化について説明する。エクストルーダーは、１軸型であっても２軸型であっても良いが、２軸型のほうが好ましい。エクストルーダーによる膨化処理は、一例として、エクストルーダーにキノコクロレラ抽出物と植物発酵物と小麦発酵抽出物の混合物を入れ、撹拌しながら、加湿・加熱・加圧する工程と、加熱・加圧等の処理をしたものをダイと呼ばれる部分の穴から押し出す工程と、ダイから押し出されたものをカッターで粒状にし、乾燥させる工程と、乾燥後、粉砕する工程とからなる。
【００２５】
膨化処理では、加湿は必須である。これは、適当な量の水分が存在することで、ダイから押し出される際に水蒸気により十分に膨化することができるからである。水分量は十分に膨化されれば特に限定されないが、１〜５０％が好ましく、８〜１２％がより好ましい。なお、押し出し後の乾燥は必須ではない。湿った状態であっても、微細化することはできるからである。乾燥させる場合には、通常、温風乾燥法が用いられる。
【００２６】
膨化処理の条件は十分に膨化されれば特に限定されないが、スクリュー回転数５０〜３００ｒｐｍ、バレル温度５０〜２００℃、加圧力０．５〜３０ＭＰａが好ましい。
【００２７】
粉砕は、通常、粉砕機を用いて行う。粉砕物は、微細化されればよく、粒度は特に限定されないが、汎用性向上、特に飲料等の用途を考慮すると、２００メッシュパス（目開き７５μｍ）９５％以上であることが好ましい。
【００２８】
本発明のダイエット食品は、そのままかあるいは必要に応じて、通常食品に用いられる種々の添加剤を加えても良い。このような添加剤としては、賦形剤、増量剤、結合剤、増粘剤、乳化剤、着色料、香料、食品添加物などが挙げられる。例えば、栄養補助剤として、ローヤルゼリー、ビタミン、プロテイン、レシチンなどを加え、さらに糖液や調味料を加えて、味を整えても良い。これらは、必要に応じて、ハードカプセル、ソフトカプセルのようなカプセル剤、錠剤、もしくは丸剤の形状に成形され、または粉末状、顆粒状、飴状、ゲル状、液状などの形態にすることができる。また、各種食品に適宜配合して使用しても良く、例えばビスケット等に配合しても良い。
【００２９】
本発明のダイエット食品の１日の摂取量は、特に限定されないが、２０〜３００ｍｇが好ましく、６０〜１２０ｍｇがより好ましい。これを数回に分けて摂取しても良い。また、摂取時間は、食前３０分〜食後３０分が好ましく、食前３０分がより好ましい。
【実施例】
【００３０】
以下、本発明を参考例、実施例および比較例をあげて更に詳細に説明するが、本発明の技術的範囲は、もちろんこれだけに限定されるものではない。
【００３１】
（参考例１）
次のとおり参考例１のダイエット食品を製造した（キノコクロレラ抽出物膨化品）。
（１）加水工程
エリンギ９０％、ハナビラタケ６％、ヒマラヤタケ４％の混合粉砕物１５ｋｇと、クロレラ粉末１５ｋｇとを混合し、水を加えて増量して加熱した。品温９０℃に達したところで加熱を終了し、その後４０℃に保持した。
（２）繊維分解処理工程
繊維分解酵素のためのｐＨ調整を行った。ここでは繊維分解酵素としてセルラーゼを使用するので、ｐＨ４．５に調整した。続いてセルラーゼＡを１．７ｋｇ（クロレラ粉末の１１．４％）添加した。その後、品温を４０℃に保ち、２時間経過するのを待った。
（３）蛋白質分解処理工程
蛋白質分解酵素のためのｐＨ調整を行った。ここでは蛋白質分解酵素としてパンクレアチンを使用するので、ｐＨ８．０に調整した。続いてパンクレアチンＦを１．７ｋｇ（クロレラ粉末の１１．４％）添加した。その後、品温を４５℃に保ち、２時間経過するのを待った。
（４）酵素失活工程
品温が８０℃に達するまで加熱して酵素を失活させた。
（５）ろ過工程
珪藻土ろ過により固形分を除去した。
（６）最終工程
ろ液を減圧濃縮、加熱減菌し、凍結乾燥して、キノコクロレラ抽出物を得た。
（７）膨化処理工程
膨化処理は、二軸型エクストルーダー（スエヒロＥＰＭ社製）により行った。キノコクロレラ抽出物のフィード量を１０ｋｇ／時、添加水量を１ｋｇ／時、スクリュー回転数を１００ｒｐｍ、加圧力を１．３ＭＰａとし、加圧・加熱処理を行った。このときの中間バレル温度は８０℃、先端バレル温度は１００℃、ダイプレート温度は１００℃であった。ダイから押し出すことで膨化させた後、乾燥させ、２００メッシュパス９５％以上に粉砕し、ダイエット食品を得た。
【００３２】
（参考例２）
次のとおり参考例２のダイエット食品を製造した（植物発酵物の膨化品）。
（１）加水工程
大麦８４．５％、あわ２．５％、ひえ２．５％、きび２．５％、たかきび１．５％、紫黒米１．５％、米粉１％、高麗人参エキス０．５％、アロエエキス０．５％、ヨモギエキス０．５％、クマザサエキス０．５％、月桃葉エキス０．５％、カリンエキス０．５％、ノブドウエキス０．５％、ウコンエキス０．５％の植物素材３０ｋｇに水１０ｋｇを加え混合した。
（２）加熱工程
原料を蒸すために品温を１２０度に加熱し、６０分間保持した。
（３）発酵工程
４０℃まで冷却し、麹菌３ｇを接種した。その後品温を４０℃に保持したままで、２日間経過するのを待った。
（４）殺菌工程
殺菌のために品温を１２０度に加熱し、６０分間保持した。
（５）分級工程
乾燥室（４０℃）において１日間乾燥させた後、トルネード式粉砕機によって粉砕し、５０メッシュパス９５％以上にふるい分けした。
（６）殺菌工程
乾燥機（１１０℃）によって、１８時間殺菌し、植物発酵物を得た。
（７）膨化処理工程
参考例１と同様であるため省略する。
【００３３】
（実施例１）
次のとおり本実施例１のダイエット食品を製造した（キノコクロレラ抽出物と植物発酵物と小麦発酵抽出物の混合品の膨化品）。キノコクロレラ抽出物および植物発酵物の製造並びに膨化処理については、参考例１および参考例２と同様であるため、小麦発酵抽出物の製造についてのみ説明する。
（Ａ）種菌の調整
（Ａ−１）小麦粉０．５ｇに蒸留水５ｍｌを加え懸濁し、上澄みをＬブロス寒天培地に０.１ｍｌ添加し、３７℃で一晩培養した。
（Ａ−２）黄色のコロニーを単離し、通常の方法で菌を同定し、パントエア・アグロメランスを単離し、これを５０％グリセロール溶液に懸濁し、冷凍庫に保存した。このストックの一部をＬＢ寒天培地にとり、３７℃に放置してパントエア・アグロメランスの独立コロニーを作成した。
（Ａ−３）前もって（Ｃ−３）と同じ組成で調製しておいた小麦粉培地１０ｍｌに、（Ａ−２）で小麦粉より単離しておいたパントエア・アグロメランスのコロニーを一つ加え３７℃で一晩（１２〜１５時間）緩やかに撹拌し、発酵させて、小麦粉発酵用の種菌を準備した。
（Ｂ）溶液の調整
（Ｂ−１）２リットルの三角フラスコにリン酸第二ナトリウム・７結晶水６４ｇ、リン酸第一カリウム１５ｇ、塩化ナトリウム２．５ｇ、塩化アンモニウム５ｇをとり、精製水を加え全量１リットルとした（無機塩類混合溶液）。
（Ｂ−２）塩化マグネシウム・２結晶水１３．１ｇをとり、精製水を加え全量を１００ｍｌとした（塩化マグネシウム溶液）。
（Ｂ−３）塩化カルシウム１１．１ｇをとり、精製水を加え全量を１００ｍｌとした（塩化カルシウム溶液）。
（Ｂ−４）４リットルの精製水を５リットルの三角フラスコにいれた（精製水）。
（Ｂ−５）上記の溶液、精製水はすべてオートクレーブ（ＴＯＭＹ
ＢＳ−３２５、１２０℃、２０分）して滅菌処理を行った。
（Ｃ）小麦発酵抽出物の製造
（Ｃ−１）加水工程
１リットルの三角フラスコに小麦粉（日清製粉）２４ｇをとり、精製水を加え全量６００ｍｌとした（小麦粉加水液）。
（Ｃ−２）アミラーゼ処理工程
これを（Ｂ−５）と同様にオートクレーブした後、α−アミラーゼ（ＳＩＧＭＡ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ、タンパク質１ｍｇ当たり１５００〜３０００単位の酵素活性）３ｍｇを加え、６５℃の水浴で４〜１２時間加熱した（小麦粉アミラーゼ処理液）。
（Ｃ−３）培地作成工程
調整した溶液等をそれぞれ表１に示した量、無菌的に滅菌した３リットルの坂口フラスコに入れ小麦粉培地とした。
【００３４】
【表１】
0004671450.tif 000002
【００３５】
（Ｃ−４）発酵工程
小麦粉培地に種菌を全量加え３７℃で撹拌しながら、２０〜３０時間発酵させた。発酵液のｐＨを測定し、アンモニア水を加え、ｐＨを７に調整した。これに、１５０ｍｌの小麦粉アミラーゼ処理液と無機塩類混合溶液３７．５ｍｌを無菌的に添加し、同様に発酵を２０〜３０時間行った。同じ操作をさらに、もう一度繰り返し、合計で６５〜８０時間発酵させた。
（Ｃ−５）回収工程
発酵させた小麦粉発酵溶液を遠心分離（日立、高速冷却遠心機
ＳＣＲ−２０Ｂ、５０００ｒｐｍ、２０分間、４℃）し、沈殿を回収した。
（Ｃ−６）加熱抽出工程
回収した沈殿にリン酸緩衝液を加えて懸濁し、全量１００ｍｌとして、３３ｍｌずつ５０ｍｌ遠心管に移し、沸騰水浴中で３０分間加熱抽出した。加熱終了後、室温まで冷却し、本液を遠心分離（日立、高速冷却遠心機
ＳＣＲ−２０Ｂ、１００００ｒｐｍ、２０分間、２０℃）した。遠心後、淡黄色の上清８２ｍｌをデカントで別の容器に回収した。
（Ｃ−７）最終工程
回収した上清を濃縮した後、凍結乾燥にて粉末状とし、小麦発酵抽出物を得た。
（Ｄ）配合および膨化処理
キノコクロレラ抽出物と植物発酵物と小麦発酵抽出物を１：１：１（質量比）の割合で混合した。その後、参考例１と同様の方法で膨化し、ダイエット食品を得た。
【００３６】
（比較例１）
参考例１と同様の方法で得たキノコクロレラ抽出物（未膨化品）を比較例１とした。
【００３７】
（比較例２）
参考例２と同様の方法で得た植物発酵物（未膨化品）を比較例２とした。
【００３８】
（比較例３）
次のとおり比較例３の粉末試料を製造した（キノコクロレラ抽出物と植物発酵物と小麦発酵抽出物の混合品の未膨化品）。
（１）参考例１と同様の方法でキノコクロレラ抽出物を得た。参考例２と同様の方法で植物発酵物を得た。実施例１と同様の方法で小麦発酵抽出物を得た。
（２）それぞれを１：１：１の割合（質量比）で混合し、粉末試料を得た。
【００３９】
＜評価例１＞  
参考例１〜２、実施例１および比較例１〜３について下記の条件で栄養分の吸着試験を行った。
【００４０】
可溶性成分を除去し検体とした。具体的には、４．０ｇを１００ｍｇ／ｍｌの濃度でリン酸緩衝液に懸濁した後、５０ｍｌコニカルチューブに分注し、室温で遠心分離（クボタ、卓上遠心機５２２０、３０００ｒｐｍ、１０分間）を行い、上清を可溶性成分として除去した。そして、沈殿に再度リン酸緩衝液を加え前記と同様の操作を行い、上清の糖定量の測定値（グルコース換算値）が、１０μｇ／ｍｌ以下になるまでこれを繰り返し、得られた固形分を検体として回収した。
【００４１】
（Ａ）脂溶性栄養分の吸着試験
脂溶性栄養分として、コレステロールおよびトリグリセリド（中性脂肪）について、吸着試験を行った。コレステロールまたはトリグリセリドの一定量を薬局方第２液（５ｍｍｏｌ／Ｌコール酸（和光純薬工業）、１０ｎＭオレイン酸（和光純薬工業）を含むリン酸緩衝液ｐＨ６．８）と混ぜ、吸着能を評価したい検体を一定量（３０ｍｇ／ｍｌ）加えた。３７℃で６０分振盪後、遠心分離により得られた上清中の残存栄養分を定量した。コレステロールおよびトリグリセリド濃度の測定は、ＢｉｏＶｉｓｉｏｎ社の測定キットの説明書に従った。
［式１］
残存栄養分の濃度／試験開始時の栄養分濃度×１００＝残存率（％）
１００％−残存率（％）＝吸着率（％）
【００４２】
実施例１および比較例３については、下記の条件でさらに栄養分の吸着試験を行った。
（Ｂ）水溶性栄養分の吸着試験
水溶性栄養分として、可溶性でんぷん、乳糖（ラクトース）、麦芽糖（マルトース）、ショ糖（スクロース）、グルコースの５種（全て和光純薬工業）について、吸着試験を行った。吸着試験の方法は、検体に、直接、糖質を添加したリン酸緩衝液を加え、一定時間、吸着された後に、溶液中の未吸着の糖質を除き、その後、沈殿にリン酸緩衝液を加え、加熱することで溶液中に遊離した糖質を測定するというものである。糖質の測定には、フェノール硫酸法を用いた。以下、具体的な方法を示す。
【００４３】
（Ｂ−１）吸着能を評価したい検体を１０ｍｇ秤量し、１７ｍｌチューブに入れた。
（Ｂ−２）リン酸緩衝液を６９０μｌ加え、さらに３００μｌの各糖（１０ｍｇ／ｍｌ）を含むリン酸緩衝液を加え、撹拌した。その後、１時間、３７℃にて振盪した。
（Ｂ−３）マイクロ遠心機（日立、ＳＣＴ１５Ｂ）を用いて遠心分離（１００００ｒｐｍ、５分間）を行い、上清を除いた。
（Ｂ−４）沈殿に、リン酸緩衝液を１ｍｌ加え、撹拌した。その後、ブロックヒーターを用いて１００℃に加熱し、２０分間保持した。
（Ｂ−５）室温まで冷ました後、マイクロ遠心機（日立、ＳＣＴ１５Ｂ）を用いて遠心分離（１００００ｒｐｍ、５分間）を行い、上清を糖含量の測定に供した。測定は、ｎ＝３で実施した。
（Ｂ−６）
上記測定用の上清１００μｌを１．５ｍｌプラスチックチューブに入れ、５％フェノール水溶液１００μｌを加え、ボルテックスミキサーで撹拌した。
（Ｂ−７）濃硫酸５００μｌを加え、フタをして、直ちにボルテックスミキサーで撹拌した。
（Ｂ−８）反応液の温度が室温まで下がった後、各反応液２００μｌを９６穴マイクロプレートに移し、プレートリーダーにより、主波長４９０ｎｍ、副波長６６８ｎｍの吸光度値を測定した（島津製作所、分光光度計ＵＶ−１７００）。
（Ｂ−９）グルコースを標準品として０μｇ／ｍｌ、１２．５μｇ／ｍｌ、２５μｇ／ｍｌ、５０μｇ／ｍｌ、７５μｇ／ｍｌ、および、１００μｇ／ｍｌにより検量線を作成し、各検体の糖濃度をグルコース換算の値で求めた。
【００４４】
＜評価結果１＞
（Ａ）脂溶性栄養分の吸着試験について
コレステロールの吸着率についての結果を表２に示した。また、トリグリセリドの吸着率についての結果を表３に示した。
【００４５】
【表２】
0004671450.tif 000003
【００４６】
【表３】
0004671450.tif 000004
【００４７】
コレステロールの吸着率は、参考例１のダイエット食品がその未膨化品である比較例１と比較して高い値を示した。参考例２と実施例１においては、その未膨化品である比較例２および比較例３と比較して差が見られなかった。しかし、参考例１〜２および実施例１のいずれもがコレステロールに対する高い吸着率を示した。
【００４８】
トリグリセリド（中性脂肪）の吸着率は、参考例１〜２および実施例１のいずれにおいてもその未膨化品である比較例１〜３と比較して高い値を示した。また、参考例１〜２および実施例１のいずれもがトリグリセリドに対する高い吸着率を示した。
【００４９】
上記の結果から、参考例１〜２および実施例１のダイエット食品は、コレステロールに対する高い吸着効果を有し、なおかつ、トリグリセリド（中性脂肪）についても高い吸着効果を有することが確認できた。
【００５０】
（Ｂ）水溶性栄養分の吸着試験について
可溶性でんぷん、乳糖（ラクトース）、麦芽糖（マルトース）、ショ糖（スクロース）、グルコースの吸着率についての結果を表４に示した。
【００５１】
【表４】
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【００５２】
いずれの糖質においても、実施例１は、その未膨化品である比較例３と比較して高い吸着能を示した。この結果から糖質についても、膨化品のほうが未膨化品と比較してより高い吸着効果を有することが確認できた。  
【００５３】
（実施例４）
次のとおり本実施例２のダイエット食品を製造した（錠剤）。
実施例１のダイエット食品７２ｇ、還元麦芽糖水飴（三菱商事フードテック）１０００ｇ、および、セルロース（旭化成）６２０ｇを混合し、整粒して顆粒を製造した。この顆粒を二酸化ケイ素（富士シリシア化学）１８ｇおよびショ糖エステル（三菱化学フーズ）９０ｇを加えて打錠用顆粒とし、打錠機を用いて打錠し、１錠が３００ｍｇの錠剤６０００個を製造した。
＜評価例２＞  
年齢２０〜５０歳で、ＢＭＩが２５以上３０未満（肥満１度）の健康な２０人（男性１０名、女性１０名）をボランティアとして、ダイエット効果の評価試験に参加させた。各ボランティアのダイエット食品摂取前の体重を測定し、上記ダイエット食品を４週間毎日１０錠ずつ摂取させた。そして、最後に摂取した翌日に体重を測定し、体重の減少率を下記式により算出した。なお、ボランティアには、朝・夕食前にそれぞれ５錠ずつ、１日合計１０錠を摂取することだけを遵守させ、これまで摂取していた食事を制限する必要がないことを伝えた。
［式２］
（摂取４週間後の体重−摂取前の体重）／摂取前の体重×１００＝体重減少率（％）
【００５４】
＜評価結果２＞
その結果、体重減少率は、平均４．０％±１．０（標準誤差）であり、体重が減少する傾向が見られた。この結果は、本発明のダイエット食品が、ダイエット効果を有することを示している。
【要約】
【課題】キトサンなどの公知のダイエット食品と同様に、またはよりすぐれたコレステロール吸着効果を有するとともに中性脂肪吸着作用をも有するダイエット食品を提供する。
【解決手段】可食キノコの粉砕品とクロレラ粉末との混合物に、繊維分解酵素による分解処理と、蛋白質分解酵素による蛋白質分解処理とを施して得られるキノコクロレラ抽出物と、少なくとも大麦、高麗人参、アロエ、ヨモギ、クマザサ、月桃葉、カリンを含んだ複数の可食植物素材を発酵させて得られる植物発酵物と、小麦粉をアミラーゼで処理した小麦粉アミラーゼ処理液をパントエア・アグロメランスによって発酵させて、同時に該パントエア・アグロメランスを培養して得られた小麦発酵抽出物と、を混合し、エクストルーダーで膨化することによって、課題を解決するダイエット食品を実現した。
【選択図】なし