(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（１）
【化１】
0004676883.tif 000016
（式中、Ｘ1はフッ素原子又は水素原子を示す）
で表される２，４−ビス（トリフルオロエトキシ）ピリジン化合物又はその塩。
【請求項２】
請求項１記載の化合物又はその塩を有効成分とする医薬。
【請求項３】
高脂血症及び／又は動脈硬化症の予防・治療薬である請求項２記載の医薬。
【請求項４】
一般式（２）
【化２】
0004676883.tif 000017
（式中、Ｘ1はフッ素原子又は水素原子を示す）
で表されるピペラジン化合物に一般式（３）
【化３】
0004676883.tif 000018
（式中、Ｘ2は塩素原子、臭素原子又はヨウ素原子を示す）
で表されるピリジン化合物を反応させることを特徴とする請求項１記載の化合物又はその塩の製造法。
【請求項５】
一般式（２）
【化４】
0004676883.tif 000019
（式中、Ｘ1はフッ素原子又は水素原子を示す）
で示されるピペラジン化合物又はその塩。
【請求項６】
一般式（４）
【化５】
0004676883.tif 000020
（式中、Ｒ1は水素原子、クロロアセチル基、ブロモアセチル基又はヨードアセチル基を示す）
で表されるピリジン化合物又はその塩。
【請求項７】
２，４−ビス（２，２，２−トリフルオロエトキシ）−６−メチル−３−ニトロピリジン。
【請求項８】
Ｎ−［２，４−ビス（２，２，２−トリフルオロエトキシ）−６−メチルピリジン−３−イル］−２−［４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−１−イル］アセトアミド。
【請求項９】
請求項１記載の化合物又はその塩及び薬学的に許容される担体を含有する医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】  本発明は、経口投与により強いアシル  コエンザイム  Ａ  コレステロール  アシルトランスフェラーゼ（ＡＣＡＴ）阻害作用を有し、高脂血症、各種動脈硬化症等の予防及び治療に有用な２，４−ビス（トリフルオロエトキシ）ピリジン化合物及びその製造中間体に関する。
【背景技術】
【０００２】  アシル  コエンザイム  Ａ  コレステロール  アシルトランスフェラーゼ（ＡＣＡＴ）は、コレステロールからコレステロールエステルへの合成を触媒する酵素であり、コレステロールの代謝と消化管での吸収に重要な役割を果たすものである。これまでの抗高脂血症剤、抗動脈硬化剤としてのＡＣＡＴ阻害剤の多くは小腸、肝臓のＡＣＡＴ酵素に作用し、血中コレステロールの低下作用を促すものであったが、これらは腸管出血、腸管障害、下痢や肝障害等の副作用が問題とされていた。【０００３】  最近の研究で、動脈硬化病巣の形成に中心的な役割を果たしているマクロファージの泡沫化を抑えることにより、動脈硬化病巣そのものの退縮が期待できるとされている。すなわち粥状動脈硬化の病巣では泡沫化したマクロファージ（コレステロールエステルを脂肪滴として細胞内に貯蔵している）が観察され、このマクロファージの泡沫化が病変の進展に深く関わっているとされている。また、動脈硬化病変部位では、血管壁に存在するＡＣＡＴの活性が亢進しており、血管壁にコレステロールエステルが蓄積していることから血管壁のＡＣＡＴ活性と動脈硬化症との関わりは強いとされている（非特許文献１）。
従って、血管壁におけるＡＣＡＴ阻害剤によるコレステロールのエステル化の阻害は、血管壁の細胞内への遊離コレステロールの蓄積につながり、蓄積された遊離コレステロールは高比重リポ蛋白質（ＨＤＬ）により細胞内から取り去られ肝臓に運ばれて（ＨＤＬによる逆転送）代謝されるので、動脈硬化病変部位でのコレステロールエステルの蓄積が抑制されることが期待される（非特許文献２）。このように血管壁に存在するＡＣＡＴを阻害するＡＣＡＴ阻害剤は、直接的な抗動脈硬化作用を有すると考えられている。【０００４】  先に本発明者らは、血管壁に存在するＡＣＡＴを選択的に阻害し、マクロファージの泡沫化を抑制する薬剤がより副作用の少ない動脈硬化症の予防・治療剤になりうると考え、鋭意検討を行なった結果、次式の一般式（Ａ）【０００５】
【化１】
0004676883.tif 000002
【０００６】（式中、Ａｒは置換基を有してもよいアリール基を示し、【０００７】
【化２】
0004676883.tif 000003
【０００８】は、置換基を有してもよいベンゼン、ピリジン、シクロヘキサン、又はナフタレンの２価残基を示し、ＸはＮＨ、酸素原子、又は硫黄原子を示し、Ｙは硫黄原子等を示し、Ｚは単結合等を示し、ｌは０から１５の整数を示し、ｍは２又は３の整数を示し、ｎは１から３の整数を示す）
で表される化合物、これらの塩又はこれらの溶媒和物が高脂血症及び動脈硬化症の予防・治療剤として有用であり、血管に存在するＡＣＡＴを選択的に阻害する化合物であることを見出した（特許文献１）。【０００９】
【非特許文献１】Ｅｘｐ．Ｍｏｌ．Ｐａｔｈｏｌ．，４４，３２９−３３９（１９８６）
【非特許文献２】Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ．２００１  １５，１５３０（１）：１１１−１２２
【特許文献１】国際公開第９８／５４１５３号パンフレット
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】  特許文献１に記載の化合物の中で、下記式（Ｂ）に示される化合物及びその塩は、高い水溶性と強いＡＣＡＴ阻害作用を有し、各種動物モデルでも特徴的な薬効を示すことが確認された。しかしながら、化合物（Ｂ）に代表される特許文献１記載の化合物は、動物実験におけるＡＣＡＴ阻害作用に基づく薬効は優れているものの、ヒト肝臓ミクロソームを用いたｉｎ  ｖｉｔｒｏ試験では、代謝が速く未変化体の残存率が低いことが明らかになった。このことからヒトにおけるこれら化合物の血中濃度が懸念された。さらに近年、薬物相互作用の観点から、より代謝抵抗性の高い化合物がより安全性の高い薬剤になりうるとの考えから、ヒト肝臓ミクロソームにおいて、より代謝抵抗性の高い化合物が望まれている。
しかしながら、化合物（Ｂ）は一般的に生体において代謝を受け易い官能基を多数有しており、これらの官能基が薬理活性の発現に重要であるとも考えられることから、ＡＣＡＴ阻害作用を維持し代謝安定性を高めることの難易度は極めて高いものと考えられた。【００１１】
【化３】
0004676883.tif 000004
【課題を解決するための手段】
【００１２】  そこで、本発明者は、ヒト肝臓ミクロソームに対する代謝抵抗性を改善し、経口吸収性が良く、高い血中濃度の得られる化合物を見出すべく種々検討した結果、全く意外にも下記式（１）で表される２，４−ビス（トリフルオロエトキシ）ピリジン化合物が化合物（Ｂ）に比べて水溶性が低いにもかかわらず高い血中濃度（Ｃｍａｘ）と、大きな血中濃度時間曲線下面積（ＡＵＣ）値を示し、良好な経口吸収性を示すことが確認された。またこれらは、優れたＡＣＡＴ阻害活性を示すことから、高脂血症及び動脈硬化症の予防・治療剤として有用であることを見出し、本発明を完成した。【００１３】  すなわち、本発明は、次の一般式（１）【００１４】
【化４】
0004676883.tif 000005
【００１５】（式中、Ｘ１はフッ素原子又は水素原子を示す）
で表される２，４−ビス（トリフルオロエトキシ）ピリジン化合物又はその塩、及びその製造法を提供するものである。【００１６】  また、本発明は、次の一般式（２）【００１７】
【化５】
0004676883.tif 000006
【００１８】（式中、Ｘ１は水素原子又はフッ素原子を示す）
で表されるピペラジン化合物又はその塩を提供するものである。【００１９】  また、本発明は、次の一般式（４）【００２０】
【化６】
0004676883.tif 000007
【００２１】（式中、Ｒ１は水素原子、クロロアセチル基、ブロモアセチル基又はヨードアセチル基を示す）
で表されるピリジン化合物又はその塩を提供するものである。【００２２】  また、本発明は、２，４−ビス（２，２，２−トリフルオロエトキシ）−６−メチル−３−ニトロピリジンを提供するものである。【００２３】  また、本発明は、Ｎ−［２，４−ビス（２，２，２−トリフルオロエトキシ）−６−メチルピリジン−３−イル］−２−［４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−１−イル］アセトアミドを提供するものである。【００２４】  また、本発明は、上記一般式（１）で表わされる化合物又はその塩を有効成分とする医薬を提供するものである。
また、本発明は、上記一般式（１）で表わされる化合物又はその塩の、医薬製造のための使用を提供するものである。
更にまた本発明は、上記一般式（１）で表わされる化合物又はその塩の有効量を投与することを特徴とする、動脈硬化症の処置方法を提供するものである。
【発明の効果】
【００２５】  本発明化合物（１）は血管壁に存在するＡＣＡＴを選択的に阻害し、優れたヒト肝臓ミクロソーム代謝安定性を有し、良好な経口吸収性を示し、高脂血症及び動脈硬化症等の予防又は治療薬として有用である。
【図面の簡単な説明】
【００２６】
【図１】図１は化合物（１ａ）、（１ｂ）及び化合物（Ｂ）塩酸塩のヒト肝臓ミクロソームの代謝に対する安定性を示す図である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２７】  本発明化合物（１）は、ベンズイミダゾール環上に１又は２個のフッ素原子を有し、かつピリジン環上に２個の２，２，２−トリフルオロエトキシ基を有するという構造上の特徴を有する。このような特殊な化学構造は、特許文献１には全く記載されていない。【００２８】  本発明には、次の２つの化合物及びそれらの塩が含まれる。【００２９】
【化７】
0004676883.tif 000008
【００３０】  本発明化合物（１）の塩としては、例えば、塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩等の無機酸塩、及びメタンスルホン酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、クエン酸塩、酪酸塩、乳酸塩、酒石酸塩、アスコルビン酸塩、リンゴ酸塩、マンデル酸塩、サリチル酸塩、パントテン酸塩、タンニン酸塩、エタンジスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、グルタミン酸塩、アスパラギン酸塩、トリフルオロ酢酸塩、パモ酸塩、グルコン酸塩等の有機酸塩などが挙げられる。
また、本発明化合物（１）又はその塩は、溶媒和物の形態であってもよい。溶媒和物としては、製造時、精製時などに用いた溶媒、例えば、水、アルコールなどが付加したものであり、ＡＣＡＴ阻害作用などに悪影響を及ぼさないものであれば特に制限されるものではない。溶媒和物としては水和物が好ましい。【００３１】  本発明化合物（１）は、例えば以下の製造方法により得ることが出来る。【００３２】
【化８】
0004676883.tif 000009
【００３３】（式中、Ｒは保護基を示し、Ｙはアルキル又はアリールスルホニル基を示し、Ｘ１は水素原子又はフッ素原子を示し、Ｘ２は塩素原子、臭素原子又はヨウ素原子を示す）【００３４】  すなわち、２，４−ジクロロ−６−メチル−３−ニトロピリジン（５）に２，２，２−トリフルオロエタノールを反応させて化合物（６）を得、このニトロ基を還元して化合物（７）とし、次いでこれにハロゲノ酢酸又はその反応性誘導体を反応させることにより化合物（３）が得られる。
一方、アミノ基を保護したピペラジンエタノール類（８）をスルホニル化して化合物（９）を得、当該化合物（９）にチオール誘導体（１０ａ）を反応させて化合物（１１）とする。また、リン化合物の存在下に、化合物（８）とチオール誘導体（１０ａ）又は（１０ｂ）とを反応させて化合物（１１）とすることもできる。この化合物（１１）の保護基（Ｒ）を脱離させることにより化合物（２）が得られる。
このようにして得られた化合物（２）に化合物（３）を反応させることにより本発明化合物（１）が得られる。
従って、上記化合物（２）、下記化合物（４）及び上記化合物（２，４−ビス（２，２，２−トリフルオロエトキシ）−６−メチル−３−ニトロピリジン（６））は、本発明化合物（１）の製造中間体として有用である。【００３５】
【化９】
0004676883.tif 000010
【００３６】（式中、Ｒ１は水素原子、クロロアセチル基、ブロモアセチル基又はヨードアセチル基を示す）【００３７】  以下、上記各反応工程毎に説明する。【００３８】  ２，４−ジクロロ−６−メチル−３−ニトロピリジン（５）と２，２，２−トリフルオロエタノールの反応は、２，２，２−トリフルオロエタノールを溶媒とするか、又はそれとジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）等との混合溶媒中、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム等の炭酸アルカリ金属；水酸化カリウム、水酸化ナトリウム等の水酸化アルカリ金属；又は水素化ナトリウム、水素化カリウム、水素化リチウム等の水素化アルカリ金属等の塩基の存在下、室温から還流温度で５時間〜２４時間、好ましくは還流温度で１５〜２０時間反応させることにより行なわれる。【００３９】  化合物（６）の還元は、１）亜二チオン酸ナトリウム、硫化ナトリウム、硫化水素ナトリウム、硫化水素等の含硫還元剤、２）亜鉛、鉄、塩化第一スズ等の金属還元剤による還元反応、又は３）水素雰囲気下、接触還元反応によるのが好ましい。含硫還元剤による反応は、例えば化合物（６）をイソプロパノール、エタノール、ＴＨＦ等の溶媒に溶解し、８０℃にて、含硫還元剤の水溶液を加え、１０分〜２時間反応させることにより行なわれる。金属還元剤による反応は、例えば化合物（６）をエタノール、イソプロパノール等のアルコール溶媒、酢酸及びそれらの含水溶媒に溶解し、０〜１００℃にて３０分から２４時間反応させることにより行なわれる。反応は、必要に応じて、塩酸、硫酸等の酸を加えてもよい。また、接触還元反応は、化合物（６）をジオキサン、酢酸、メタノール、エタノール、イソプロパノール等の単一又は混合溶媒に溶解し、ラネーニッケル、パラジウム炭素、水酸化パラジウム、パラジウム黒等の触媒存在下、水素雰囲気下で、０〜５０℃にて３０分〜１２時間、好ましくは、室温にて、３０分〜３時間反応させることにより行なわれる。【００４０】  化合物（７）と反応させるハロゲノ酢酸としては、クロロ酢酸、ブロモ酢酸、ヨード酢酸が挙げられる。ハロゲノ酢酸の反応性誘導体としては、ハロゲノ酢酸ハライド、ハロゲノ酢酸無水物等が挙げられる。化合物（７）とハロゲノ酢酸ハライドを反応させるのが好ましい。化合物（７）とハロゲノ酢酸ハライドの反応は、例えば塩化メチレン、クロロホルム、酢酸エチル、アセトニトリル、トルエン等の溶媒中、Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリン、トリエチルアミン、ピリジン、４−ジメチルアミノピリジン、４−ピロリジノピリジン等の塩基の存在下、０〜５０℃にて１０分〜５時間、好ましくは、０℃にて１０〜６０分反応させることにより行なわれる。【００４１】  ピペラジンエタノール類（８）から化合物（１１）への合成は、アルキル又はアリールスルホニル化反応を用いるルートａとリン化合物による反応を用いるルートｂが可能である。
ルートａにおいて、ピペラジンエタノール類（８）のアルキル又はアリールスルホニル化反応は、ＤＭＦ、ＴＨＦ、酢酸エチル、アセトニトリル等の溶媒中、トリエチルアミン、ピリジン、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリン、４−ジメチルアミノピリジン等の塩基の存在下、アルキル又はアリールスルホニル化剤としてメタンスルホニルクロリド、ベンゼンスルホニルクロリド、ｐ−トルエンスルホニルクロリド等のスルホニルクロリド体を用い、０〜５０℃にて３０分〜３時間反応させることにより行なわれる。
ここでピペラジンエタノール類（８）のアミノ基の保護基（Ｒ）としては、ペプチド合成に用いられる各種の保護基を使用することができる。好ましい保護基としては、ベンジルオキシカルボニル基、２，２，２−トリクロロエチルオキシカルボニル基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基等のアルコキシカルボニル基、ホルミル基等が挙げられる。【００４２】  化合物（９）と化合物（１０ａ）の反応は、ＤＭＦ、ＤＭＳＯ、アセトニトリル等の溶媒中、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム等の塩基及び１８−クラウン−６等の触媒の存在下、室温〜１００℃にて１〜５時間、好ましくは、５０〜８０℃にて１〜２時間反応させることにより行なわれる。【００４３】  ルートｂにおいては、ピペラジンエタノール類（８）とチオール誘導体（１０ａ）又は（１０ｂ）とをリン化合物存在下、反応させることにより行われる。
リン化合物としては、光延反応に用いられるホスフィン試薬、当該ホスフィン試薬とアゾ系試薬又はマレイン酸ジメチル、Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルフマルアミド等のエチレンジカルボン酸試薬からなるリン試薬、ホスホニウムイリド試薬等が挙げられる。【００４４】  当該ルートｂの好ましい態様としては、１）ホスフィン試薬とアゾ系試薬又はマレイン酸ジメチル、Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルフマルアミド等のエチレンジカルボン酸試薬の存在下に、チオール誘導体（１０ａ）を反応させる方法（Ａ法）、２）ホスホニウムイリド試薬の存在下、チオール誘導体（１０ａ）を反応させる方法（Ｂ法）、３）ホスフィン試薬の存在下に、チオール誘導体（１０ｂ）を反応させる方法（Ｃ法）が挙げられる。【００４５】＜Ａ法＞
Ａ法は、化合物（８）、チオール誘導体（１０ａ）及びホスフィン試薬を反応溶媒に溶解し、これにアゾ系試薬又はエチレンジカルボン酸試薬を加えて、アルゴン又は窒素雰囲気下、０℃〜１００℃、好ましくは、室温〜８０℃で、２時間〜２４時間反応させることにより行うことができる。【００４６】  本反応で用いられるホスフィン試薬としては、例えば、トリメチルホスフィン、トリエチルホスフィン、トリプロピルホスフィン、トリイソプロピルホスフィン、トリブチルホスフィン、トリイソブチルホスフィン、トリシクロヘキシルホスフィン等のトリアルキルホスフィン及びトリフェニルホスフィン、ジフェニルホスフィノポリスチレン等のトリアリールホスフィンが挙げられ、このうちトリメチルホスフィン、トリブチルホスフィン、トリフェニルホスフィンが好ましい。【００４７】  アゾ系試薬としては、例えばアゾジカルボン酸ジエチル（ＤＥＡＤ）、１，１’−アゾビス（Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド）（ＴＭＡＤ）、１，１’−（アゾジカルボニル）ジピペリジン（ＡＤＤＰ）、１，１’−アゾビス（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルホルムアミド）（ＴＩＰＡ）、１，６−ジメチルー１，５，７−ヘキサヒドロ−１，４，６，７−テトラゾシン−２，５−ジオン（ＤＨＴＤ）等が挙げられ、特にアゾジカルボン酸ジエチルが好ましい。【００４８】  反応溶媒としては、ＤＭＦ、ＴＨＦ、ジオキサン、アセトニトリル、ニトロメタン、アセトン、酢酸エチル、ベンゼン、クロロベンゼン、トルエン、クロロホルム、塩化メチレン等を用いることができ、中でもＤＭＦ、ＴＨＦ、ジオキサン、アセトニトリルが好ましく、特にＤＭＦ、ＴＨＦが好ましい。【００４９】＜Ｂ法＞
Ｂ法は、化合物（８）、チオール誘導体（１０ａ）及びホスホニウムイリド試薬を反応溶媒に溶解し、アルゴン又は窒素雰囲気下、室温〜１２０℃、好ましくは、８０℃〜１００℃で、２時間〜１２時間反応させることにより行うことができる。【００５０】  本反応で用いられるホスホニウムイリド試薬としては、アルカノイルメチレントリアルキルホスホラン、アルカノイルメチレントリアリールホスホラン、アルコキシカルボニルメチレントリアルキルホスホラン、アルコキシカルボニルメチレントリアリールホスホラン、シアノメチレントリアルキルホスホラン、シアノメチレントリアリールホスホラン等が挙げられる。ここで、トリアルキルとしては、トリメチル、トリエチル、トリプロピル、トリイソプロピル、トリブチル、トリイソブチル、トリシクロヘキシル等が挙げられ、トリアリールとしては、トリフェニル、ジフェニルポリスチレン等が挙げられる。【００５１】  また、本反応は、反応溶媒に、化合物（８）、チオール誘導体（１０ａ）、塩基及びホスホニウムハライド試薬を加え、反応系中でホスホニウムイリド試薬を生成させる方法を用いてもよい。【００５２】  この場合に用いられるホスホニウムハライド試薬としては、例えば（シアノメチル）トリアルキルホスホニウムハライド、（シアノメチル）トリアリールホスホニウムハライド、（アルキルカルボニルメチル）トリアルキルホスホニウムハライド、（アルキルカルボニルメチル）トリアリールホスホニウムハライド、（アルコキシカルボニルメチル）トリアルキルホスホニウムハライド、（アルコキシカルボニルメチル）トリアリールホスホニウムハライド等が挙げられる。【００５３】  尚、上記ホスホニウムハライド試薬のうち、（シアノメチル）トリアルキルホスホニウムハライド、（シアノメチル）トリアリールホスホニウムハライドは、対応するハロゲン化アセトニトリルと対応するトリアルキルホスフィン又はトリアリールホスフィンを反応させることにより調製でき（テトラヘドロン、５７巻、５４５１−５４５４頁、２００１年）、その他については、対応するアルカノイルハロメチル、アルコキシカルボニルハロメチルを対応するトリアルキルホスフィン又はトリアリールホスフィンとを同様に反応させることにより調製できる。【００５４】  ここで用いられるトリアルキルホスフィン及びトリアリールホスフィンとしては、Ａ法で示したものと同様のものが挙げられ、中でもトリメチルホスフィン、トリブチルホスフィン、トリフェニルホスフィンが好ましく、特にトリメチルホスフィンが好ましい。【００５５】  上記アルカノイルハロメチルのアルカノイルとしては、ホルミル、アセチル、プロピオニル、ブチリル等が挙げられ、これらのうち、アセチル、プロピオニルが好ましく、アルコキシカルボニルハロメチルのアルコキシとしては、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ等が挙げられ、これらのうち、メトキシ、エトキシ、ブトキシが好ましい。【００５６】  またハロゲン原子としては、塩素、臭素、ヨウ素が好ましい。【００５７】  塩基としては、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、１，４−ジアザビシクロ［２，２，２］オクタン（ＤＡＢＣＯ）、１，８−ジアザビ��クロ［５，４，０］ウンデカ−７−エン（ＤＢＵ）、１，５−ジアザビシクロ［４，３，０］ノナ−５−エン（ＤＢＮ）等の有機塩基や、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸セシウム、炭酸リチウム、リチウムジイソプロピルアミド、カリウムヘキサメチルジシラジド等の無機塩基が挙げられ、中でもＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、炭酸カリウム、リチウムジイソプロピルアミド、カリウムヘキサメチルジシラジドが好ましく、特にＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、炭酸カリウムが好ましい。【００５８】  反応溶媒としては、ジオキサン、ＴＨＦ、トルエン、ベンゼン、ＤＭＦ、ＤＭＳＯ、アセトニトリル、プロピオニトリル等が好ましく、特にプロピオニトリルが好ましい。【００５９】＜Ｃ法＞
Ｃ法は、化合物（８）、チオール誘導体（１０ｂ）及びホスフィン試薬をＡ法と同様の反応溶媒に溶解し、アルゴン又は窒素雰囲気下、室温〜１００℃、好ましくは、６０℃〜１００℃で、２時間〜４８時間反応させることにより行うことができる。【００６０】  本反応において用いられるホスフィン試薬は、Ａ法で示したものと同様のトリアルキルホスフィン及びトリアリールホスフィン、具体的にはトリメチルホスフィン、トリエチルホスフィン、トリプロピルホスフィン、トリイソプロピルホスフィン、トリブチルホスフィン、トリイソブチルホスフィン、トリシクロヘキシルホスフィン、トリフェニルホスフィン、ジフェニルホスフィノポリスチレン等が挙げられ、このうちトリメチルホスフィン、トリブチルホスフィン、トリフェニルホスフィンが好ましく、特にトリメチルホスフィン、トリフェニルホスフィンが好ましい。【００６１】  尚、チオール誘導体（１０ａ）は、前記した特許文献１に記載の方法又はこれに準じた方法により製造することができる。チオール誘導体（１０ｂ）は、当該チオール誘導体（１０ａ）から容易に製造できる。【００６２】  化合物（１１）の脱保護反応は、保護基に応じた既知の方法、例えば加水分解、還元反応等により行なわれる。【００６３】  かくして得られた化合物（２）と化合物（３）との反応は、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素カリウム、炭酸水素ナトリウム等の塩基の存在下、ＤＭＦ、ＴＨＦ、アセトニトリル単一又はそれらの含水溶媒中、室温〜５０℃にて５時間〜３０時間、好ましくは室温にて１０〜２０時間反応させることにより行なわれる。【００６４】  また、本発明化合物（１）は、下記反応式で示される方法、すなわち１−（２−ヒドロキエチル）ピペラジン（１２）にハロゲノアセトアミド化合物（３）を反応させて化合物（１３）を得、リン化合物存在下、チオール誘導体（１０ａ）又は（１０ｂ）を反応させることによっても得られる。【００６５】
【化１０】
0004676883.tif 000011
【００６６】（式中、Ｘ１は前記と同じ）【００６７】  化合物（１２）と化合物（３）の反応は、化合物（２）から化合物（１）を合成する方法に準じて行なわれる。
化合物（１３）とチオール誘導体（１０ａ）又は（１０ｂ）との反応は、化合物（８）とチオール誘導体（１０ａ）又は（１０ｂ）との反応に準じて行われる。
従って、上記化合物（Ｎ−［２，４−ビス（２，２，２−トリフルオロエトキシ）−６−メチルピリジン−３−イル］−２−［４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−１−イル］アセトアミド（１３））は、本発明化合物（１）の製造中間体として有用である。【００６８】  得られた本発明化合物（１）の単離精製手段は、洗浄、抽出、再結晶、各種クロマトグラフィー等を適宜組み合せて行なうことができる。また、前記酸付加塩への変換も常法によって行なうことができる。【００６９】  ｉｎ  ｖｉｔｒｏでヒト肝臓ミクロソームに対する代謝を検討したところ、図１に示すように、３０分後の未変化体の残存率は、化合物（Ｂ）塩酸塩が１６％に対して、化合物（１ａ）が２７％であり、化合物（１ｂ）においては６２％の高い値を示した。このことから、本発明化合物（１）のヒト肝臓ミクロソームに対する代謝抵抗性は大幅に改善されたことが理解できる。
また、水に対する溶解度を検討したこところ、表３に示すように、本発明化合物（１）は、化合物（Ｂ）塩酸塩に対して溶解度が大きく低下した。このことから、経口投与における本発明化合物（１）の低い吸収性が懸念された。
しかしながら、ラット雄雌を用いた経口投与実験を行なったところ、化合物（Ｂ）塩酸塩に対して本発明化合物（１）はまったく予想外に、血中濃度（Ｃｍａｘ）では、２〜３倍、血中濃度時間曲線下総面積（ＡＵＣ）値では、２〜４倍の高い値を示した。このことから、本発明化合物（１）は、化合物（Ｂ）塩酸塩に比べ、高い経口吸収性を示すことが確認された。
更に、ｉｎ  ｖｉｔｒｏおけるＡＣＡＴ阻害活性は、表１に示すように、本発明化合物（１）は化合物（Ｂ）塩酸塩と同等の強い阻害活性を示した。
以上の結果から、本発明化合物（１）は、化合物（Ｂ）と同等の強いＡＣＡＴ阻害活性を示し、化合物（Ｂ）に比べ、高いヒト肝臓ミクロソーム抵抗性を示し、更に高い経口吸収性を示すことから、本発明化合物（１）は高脂血症及び動脈硬化症の予防・治療剤として有用である。【００７０】  本発明化合物（１）は、その優れたＡＣＡＴ阻害作用により、高脂血症、動脈硬化症、頸部及び脳動脈硬化症、脳血管障害、虚血性心疾患、虚血性腸疾患、冠状動脈硬化症、腎硬化症、動脈硬化性腎硬化症、悪性腎硬化症、急性腸管膜血管閉塞症、慢性腸管アンギーナ、虚血性大腸炎、大動脈瘤、閉塞性動脈硬化症（ＡＳＯ）などの予防及び治療薬として有用である。【００７１】  本発明化合物（１）を医薬として用いる場合には、本発明化合物（１）又はその塩を単独で又は薬学的に許容される賦形剤、結合剤、希釈剤などの担体を用いて、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、粉末剤、注射剤、坐剤等の剤型とすることができる。これらの製剤は公知の方法で製造することができる。例えば経口投与用製剤とする場合には、本発明化合物（１）を澱粉、マンニトール、乳糖等の賦形剤：カルボキシメチルセルロースナトリウム、ヒドロキシプロピルセルロース等の結合剤：結晶セルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム等の崩壊剤：タルク、ステアリン酸マグネシウム等の滑沢剤：軽質無水ケイ酸等の流動性向上剤などを適宜組み合せて処方することにより製造することができる。
本発明の医薬は、経口投与又は非経口投与により投与されるが、経口投与により投与するのが好ましい。
本発明の医薬の投与量は、患者の体重、年齢、性別、症状等によって異なるが、本発明化合物（１）として、通常成人の場合、１日１〜５００ｍｇ、好ましくは５〜２００ｍｇを１〜３回に分けて投与するのが好ましい。
【実施例】
【００７２】  以下に、実施例を挙げてこの発明を更に具体的に説明するが、この発明の技術的範囲はこれらの実施例に限定されるものではない。【００７３】製造例１
５，６−ジフルオロ−２−メルカプトベンズイミダゾールの製造：
４，５−ジフルオロ−２−ニトロアニリン（５．７５ｇ，３３．０３ｍｍｏｌ）を酢酸（１００ｍＬ）及び濃塩酸（２．３ｍＬ）に溶解し、氷浴中にて激しく攪拌しつつ亜鉛末（６．９１ｇ，１０５．６ｍｍｏｌ）を１０分かけて加えた。同温にて２０分間攪拌の後、室温にて１３０分間攪拌した。更に、同温にて亜鉛末（１．２０ｇ，１８．３５ｍｍｏｌ）を５分間かけて加え、同温にて３０分間攪拌した。反応液を減圧濃縮し、得られた残渣を飽和重曹水にて中和し、セライト濾過した。濾液をクロロホルムにて抽出し、有機層を飽和食塩水にて洗浄した。無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮し、褐色油状物質（４．７３ｇ）を得た。
この褐色油状物質をエタノール（２００ｍＬ）に溶解し、Ｏ−エチルキサントゲン酸カリウム（１５．７５ｇ，９８．２５ｍｍｏｌ）を加え、１４時間加熱還流した。反応液を減圧濃縮し、得られた残渣を酢酸エチル−１ｍｏｌ／Ｌ塩酸にて抽出し、有機層を飽和食塩水にて洗浄した。無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮し得られた残渣をクロロホルム−ヘキサンより結晶化し、５，６−ジフルオロ−２−メルカプトベンズイミダゾール（５．５８ｇ，通算収率９１％）を淡褐色粉末として得た。【００７４】製造例２
１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−４−［２−（５，６−ジフルオロベンズイミダゾール−２−イルチオ）エチル］ピペラジンの製造：
１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン（７．４０ｇ，３２．１３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１００ｍＬ）溶液に、氷冷攪拌下、トリエチルアミン（４．３６ｇ，４３．０９ｍｍｏｌ）、４−ジメチルアミノピリジン（２００ｍｇ，１．６４ｍｍｏｌ）及びメタンスルホニルクロリド（７．４０ｇ，３８．７６ｍｍｏｌ）を順次加えた。室温に戻し５０分間攪拌した。反応液を濾過し、濾液を減圧濃縮し得られた残渣をＤＭＦ（２００ｍＬ）に溶解し、室温にて、５，６−ジフルオロ−２−メルカプトベンズイミダゾール（５．００ｇ，２６．８６ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（８．６４ｇ，６２．５１ｍｍｏｌ）及び１８−クラウン−６（５００ｍｇ，１．９２ｍｍｏｌ）を順次加え、８０℃にて９０分間攪拌した。反応液を減圧濃縮し得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカゲル２００ｇ，ヘキサン：アセトン＝８：１〜１：１）にて精製した。アセトン−エーテル−ヘキサンより結晶化し、１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−４−［２−（５，６−ジフルオロベンズイミダゾール−２−イルチオ）エチル］ピペラジン（７．２６ｇ，収率６８％）を無色結晶として得た。
ｍｐ  １９２．３−１９３．０℃
ＩＲ（ＫＢｒ）：３０６１，２９７６，２８３６，１６７２，１４７５，１４２７（ｃｍ−１）．
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．５０（９Ｈ，ｓ），２．５１−２．６８（４Ｈ，ｍ），２．９４（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ），３．２８（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ），３．４５−３．６５（４Ｈ，ｍ），６．８５−７．６２（２Ｈ，ｍ）．【００７５】実施例１
１−［２−（５，６−ジフルオロベンズイミダゾール−２−イルチオ）エチル］ピペラジン・３トリフルオロ酢酸塩の製造：
１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−４−［２−（５，６−ジフルオロベンズイミダゾール−２−イルチオ）エチル］ピペラジン（７．２６ｇ，１８．２２ｍｍｏｌ）を氷冷下、トリフルオロ酢酸（５０ｍＬ）に攪拌下、１５分間かけて加え、溶解した。氷冷下１０分間攪拌後、反応液にエーテル（１００ｍＬ）及びヘキサン（１００ｍＬ）を加え、生じた結晶を濾取した。得られた結晶をエタノール−エーテルより再結晶し、１−［２−（５，６−ジフルオロベンズイミダゾール−２−イルチオ）エチル］ピペラジン・３トリフルオロ酢酸塩（９．５８ｇ，収率８２％）を淡黄色粉末として得た。
ｍｐ  １４１．２−１４２．９℃
ＩＲ（ＫＢｒ）：３４１７，３０２６，２７４９，２４８３，１６７１，１４８４（ｃｍ−１）．
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：２．７８−３．２６（１０Ｈ，ｍ），３．４９（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），７．５１（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝９．０Ｈｚ），８．７６（２Ｈ，ｍ）．【００７６】製造例３
１−［２−（５，６−ジフルオロベンズイミダゾール−２−イルチオ）エチル］−４−ホルミルピペラジンの製造：
１−ホルミル−４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン（１．１１ｇ，７．０ｍｍｏｌ）、５，６−ジフルオロ−２−メルカプトベンズイミダゾール（１．３０ｇ，７．０ｍｍｏｌ）、ジイソプロピルエチルアミン（３．６２ｇ，２８．０ｍｍｏｌ）をプロピオニトリル（５０ｍＬ）に溶解し、シアノメチルトリメチルホスホニウムヨージド（６．８０ｇ，２８．０ｍｍｏｌ）を加え、アルゴン雰囲気下９２℃で１時間攪拌した。放冷後、水（１００ｍＬ）に注ぎ、クロロホルム（１００ｍＬ×３）で抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧下濃縮した。得られた粗生成物をアセトン−エーテルから結晶化し、１−［２−（５，６−ジフルオロベンズイミダゾール−２−イルチオ）エチル］−４−ホルミルピペラジン１．７８ｇ（収率７８％）を黄色結晶性粉末として得た。
ｍｐ  １９７．０−１９８．０℃
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：３４４１，２８２５，１６４８，１４７６，１４３１，１３６３．
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ２．３８（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．１Ｈｚ），２．４４（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ），２．６９（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），３．２３−３．３８（４Ｈ，ｍ），３．４１（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），７．３８−７．５８（２Ｈ，ｍ），７．９７（１Ｈ，ｓ），１２．８（１Ｈ  ｓ）．
ＭＳ（ｍ／ｚ）：３２６（Ｍ＋），１４０（１００）．【００７７】実施例２
１−［２−（５，６−ジフルオロベンズイミダゾール−２−イルチオ）エチル］ピペラジンの製造：
１−［２−（５，６−ジフルオロベンズイミダゾール−２−イルチオ）エチル］−４−ホルミルピペラジン（１．７０ｇ，５．２ｍｍｏｌ）をメタノール（２０ｍＬ）に溶解し、１２Ｎ塩酸（２ｍＬ）を加え、室温で１８時間攪拌した。反応液を減圧濃縮し、飽和アンモニア−メタノール溶液を加え室温にて５分間攪拌した。溶媒を減圧濃縮し得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：飽和アンモニア−メタノール＝１００：３）を用いて精製し、１−［２−（５，６−ジフルオロベンズイミダゾール−２−イルチオ）エチル］ピペラジン１．４０ｇ（収率９０％）を褐色油状物として得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：２９２５，２８５３，１６６４，１６０２，１４７８，１４３５，１３６４．
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ２．６１−２．８２（４Ｈ，ｍ），３．００（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ），３．１０（４Ｈ，ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ），３．１６（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ），７．１６−７．４２（２Ｈ，ｍ）．
ＭＳ（ｍ／ｚ）：２９８（Ｍ＋），７０（１００）．【００７８】製造例４
２，４−ビス（２，２，２−トリフルオロエトキシ）−６−メチル−３−ニトロピリジンの製造：
２，４−ジクロロ−６−メチル−３−ニトロピリジン（３０ｇ，１４４．９ｍｍｏｌ）を２，２，２−トリフルオロエタノール（２５０ｍＬ）に溶解し、炭酸カリウム（５０ｇ，３６１．８ｍｍｏｌ）を加えて２１時間加熱還流した。反応液を水で希釈し、クロロホルムで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮し２，４−ビス（２，２，２−トリフルオロエトキシ）−６−メチル−３−ニトロピリジン（４５．４０ｇ，収率９４％）を淡黄色固体として得た。
ｍｐ  ７２．８−７３．２℃
ＩＲ（ＫＢｒ）：３４３２，３１１１，２９７５，１６１０，１５８５，１５３５（ｃｍ−１）．
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：２．５０（３Ｈ，ｓ），４．４９（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．７Ｈｚ），４．８５（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），６．５３（１Ｈ，ｓ）．
元素分析Ｃ１０Ｈ８Ｆ６Ｎ２Ｏ４として
計算値：Ｃ，３５．９４；Ｈ，２．４１；Ｎ，８．３８，
実測値：Ｃ，３５．９４；Ｈ，２．４５；Ｎ，８．４９．【００７９】実施例３
３−アミノ−２，４−ビス（２，２，２−トリフルオロエトキシ）−６−メチルピリジンの製造：
２，４−ビス（２，２，２−トリフルオロエトキシ）−６−メチル−３−ニトロピリジン（４５．００ｇ，１３４．７ｍｍｏｌ）のイソプロパノール（３００ｍＬ）溶液に、攪拌下、８０℃にて、亜二チオン酸ナトリウム（７８．００ｇ，４４８．０ｍｍｏｌ）の水（３００ｍＬ）溶液を加え、反応開始１５分後に亜二チオン酸ナトリウム（１６．５０ｇ，９４．８ｍｍｏｌ）の水（５１ｍＬ）溶液を加え、更に反応開始２５分後に亜二チオン酸ナトリウム（１１．１０ｇ，６３．８ｍｍｏｌ）の水（５１ｍＬ）溶液を加え、更に１０分間攪拌した。反応完結後、反応液に４ｍｏｌ／Ｌ硫酸水溶液（２０１ｍＬ）を加え、９０℃にて３０分間攪拌した。放冷後、氷冷下、２８％アンモニア水（３６０ｍＬ）を加え、３０分間攪拌した。反応液を水で希釈し、クロロホルムで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮した。得られた結晶をヘキサンより再結晶し、３−アミノ−２，４−ビス（２，２，２−トリフルオロエトキシ）−６−メチルピリジン（３２．９１ｇ，収率８０％）を淡黄色針状晶として得た。
ｍｐ  ５３．５−５３．８℃
ＩＲ（ＫＢｒ）：３４５３，３３１４，２９６８，１６０３，１５０５，１４５６（ｃｍ−１）．
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：２．３４（３Ｈ，ｓ），３．６６（２Ｈ，ｂｒ．ｓ），４．３９（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），４．７９（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝８．６Ｈｚ），６．３５（１Ｈ，ｓ）．
元素分析Ｃ１０Ｈ１０Ｆ６Ｎ２Ｏ２・０．５５Ｈ２Ｏとして
計算値：Ｃ，３８．２４；Ｈ，３．５６；Ｎ，８．９２，
実測値：Ｃ，３７．９６；Ｈ，３．１９；Ｎ，８．９４【００８０】実施例４
２−ブロモ−Ｎ−［２，４−ビス（２，２，２−トリフルオロエトキシ）−６−メチルピリジン−３−イル］アセトアミドの製造：
３−アミノ−２，４−ビス（２，２，２−トリフルオロエトキシ）−６−メチルピリジン（４２．２９ｇ，１３９．０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（６００ｍＬ）溶液にＮ，Ｎ−ジメチルアニリン（２０．４６ｇ，１６８．８ｍｍｏｌ）を加え、氷冷下、攪拌下、ブロモアセチルブロミド（２８．７３ｇ，１４２．３ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１００ｍＬ）溶液を加えて１０分間攪拌した。反応液を水で希釈し、クロロホルムで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮した。得られた結晶をクロロホルム−ヘキサンより再結晶し、２−ブロモ−Ｎ−［２，４−ビス（２，２，２−トリフルオロエトキシ）−６−メチルピリジン−３−イル］アセトアミド（５０．２５ｇ，収率８５％）を無色針状晶として得た。
ｍｐ  １５２．８−１５４．０℃
ＩＲ（ＫＢｒ）：３２５０，３０５３，１６７７，１５９７，１５４１，１４５６（ｃｍ−１）．
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：２．４３（３Ｈ，ｓ），４．０２（２Ｈ，ｓ），４．４２（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．９Ｈｚ），４．７８（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝８．５Ｈｚ），６．４７（１Ｈ，ｓ），７．４９（１Ｈ，ｂｒ  ｓ）．
元素分析Ｃ１２Ｈ１１ＢｒＦ６Ｎ２Ｏ３として
計算値：Ｃ，３３．９０；Ｈ，２．６１；Ｎ，６．５９，
実測値：Ｃ，３４．１３；Ｈ，２．６６；Ｎ，６．６５．【００８１】実施例５
２−［４−［２−（５，６−ジフルオロベンズイミダゾール−２−イルチオ）エチル］ピペラジン−１−イル］−Ｎ−［２，４−ビス（２，２，２−トリフルオロエトキシ）−６−メチルピリジン−３−イル］アセトアミド（化合物１ｂ）の製造：
１−［２−（５，６−ジフルオロベンズイミダゾール−２−イルチオ）エチル］ピペラジン・３トリフルオロ酢酸塩（４．００ｇ，６．２５ｍｍｏｌ）及び炭酸カリウム（３１．２６ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（１００ｍＬ）及び水（３０ｍＬ）の混合溶液に氷冷下、攪拌下、２−ブロモ−Ｎ−［２，４−ビス（２，２，２−トリフルオロエトキシ）−６−メチルピリジン−３−イル］アセトアミド（２．２０ｇ，５．２２ｍｍｏｌ）を１５分間かけて加えた。室温に戻し１５時間攪拌後、反応液を水で希釈し、クロロホルムで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカゲル１５０ｇ，ヘキサン：アセトン＝４：１〜２：１〜１：１）にて精製した。得られた結晶をクロロホルム−ヘキサンより再結晶し、２−［４−［２−（５，６−ジフルオロベンズイミダゾール−２−イルチオ）エチル］ピペラジン−１−イル］−Ｎ−［２，４−ビス（２，２，２−トリフルオロエトキシ）−６−メチルピリジン−３−イル］アセトアミド（３．０４ｇ，収率９１％）を無色結晶として得た。
ｍｐ  １９１−１９２℃
ＩＲ（ＫＢｒ）：３２７５，１６８６，１６０４，１５９１，１５０９（ｃｍ−１）．
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：２．３８（３Ｈ，ｓ），２．４２−２．６２（８Ｈ，ｍ），２．６７（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．７Ｈｚ），３．３０（２Ｈ，ｓ），３．４０（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．７Ｈｚ），４．８２（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），４．９０（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），６．９１（１Ｈ，ｓ），７．４７（２Ｈ，ｍ），８．７７（１Ｈ，ｓ），１２．８２（１Ｈ，ｂｒ．ｓ）
元素分析Ｃ２５Ｈ２６Ｆ８Ｎ６Ｏ３Ｓとして
計算値：Ｃ，４６．７３；Ｈ，４．０８；Ｎ，１３．０８
実測値：Ｃ，４６．５５；Ｈ，４．１２；Ｎ，１２．９４【００８２】製造例５
５−フルオロ−２−メルカプトベンズイミダゾールの製造：
４−フルオロ−２−ニトロアニリン（８．００ｇ，５１．２２ｍｍｏｌ）をメタノール（１００ｍＬ）に溶解し、１０％パラジウム−炭素粉末（０．８０ｇ）を加え、水素雰囲気下、室温にて４時間攪拌した。反応溶液を濾過し、濾液を減圧濃縮し得られた残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル１５０ｇ，ヘキサン：酢酸エチル＝１：４）にて精製し、褐色油状物質（５．６７ｇ，収率８８％）を得た。
この褐色油状物質（５．６４ｇ，４４．７２ｍｍｏｌ）をエタノール（１５０ｍＬ）に溶解し、Ｏ−エチルキサントゲン酸カリウム（８．６０ｇ，５３．６５ｍｍｏｌ）を加え、３時間加熱還した。さらにＯ−エチルキサントゲン酸カリウム（１．４３ｇ，８．９２ｍｍｏｌ）を加え、２時間加熱還流した。反応液を減圧濃縮し得られた残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル１５０ｇ，ヘキサン：酢酸エチル＝２：１）にて精製し、５−フルオロ−２−メルカプトベンズイミダゾール（５．９３ｇ，収率７９％）を褐色粉末として得た。【００８３】製造例６
１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−４−［２−（５−フルオロベンズイミダゾール−２−イルチオ）エチル］ピペラジンの製造：
１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン（６．００ｇ，２６．０５ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（３６ｍＬ）に溶解し、トリエチルアミン（３．４３ｇ，３３．９０ｍｍｏｌ）、４−ジメチルアミノピリジン（１５９ｍｇ，１．３０ｍｍｏｌ）を加えた後、氷冷下、メタンスルホニルクロリド（３．５８ｇ，３１．２５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（９ｍＬ）溶液を滴下した。１時間攪拌後、反応液を濾過し、濾液を減圧濃縮し得られた残渣をＤＭＦ（９０ｍＬ）に溶解した。室温にて攪拌しつつ、５−フルオロ−２−メルカプトベンズイミダゾール（４．８２ｇ，２８．６６ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（５．４０ｇ，３９．０７ｍｍｏｌ）及び１８−クラウン−６（６８８ｍｇ，２．６０ｍｍｏｌ）を順次加え、８０℃にて２時間攪拌した。反応液を減圧濃縮し得られた残渣に水を加え、酢酸エチルで抽出し、有機層を水、飽和食塩水で洗浄した。無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮し得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカゲル１５０ｇ，ヘキサン：酢酸エチル＝２：１〜１：１〜１：２）にて精製し、１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−４−［２−（５−フルオロベンズイミダゾール−２−イルチオ）エチル］ピペラジン（７．２８ｇ，収率７３％）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．４９（９Ｈ，ｓ），２．６３（４Ｈ，ｔ，Ｊ＝４．９Ｈｚ），２．９４（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ），３．２９（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ），３．５８（４Ｈ，ｔ，Ｊ＝４．９Ｈｚ），６．９３（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝９．２，２．５Ｈｚ），７．１９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．２，２．５Ｈｚ），７．４０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．２，４．９Ｈｚ）．【００８４】実施例６
１−［２−（５−フルオロベンズイミダゾール−２−イルチオ）エチル］ピペラジン・３トリフルオロ酢酸塩の製造：
１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−４−［２−（５−フルオロベンズイミダゾール−２−イルチオ）エチル］ピペラジン（６．５０ｇ，１７．０８ｍｍｏｌ）を氷冷下、トリフルオロ酢酸（１７ｍＬ）に攪拌下、３０分間かけて加え、溶解した。室温に戻し３０分間攪拌後、エーテル及びヘキサンを加え、生じた固形物を濾取した。これをエーテルで洗浄し、１−［２−（５−フルオロベンズイミダゾール−２−イルチオ）エチル］ピペラジン・３トリフルオロ酢酸塩（１０．５０ｇ，収率９９％）を褐色粉末として得た。
ｍｐ  １２７．７−１２９．３℃
ＩＲ（ＫＢｒ）：３１４３，３０３２，２７３１，１７８９，１７４７，１６６０（ｃｍ−１）．
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：３．２９−３．４７（８Ｈ，ｍ），３．４８（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），３．６２（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），７．０３（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝９．０Ｈｚ），７．３２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ），７．４８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．０，４．４Ｈｚ），９．３６（２Ｈ，ｂｒ），１３．７６（３Ｈ，ｂｒ）．【００８５】製造例７
１−［２−（５−フルオロベンズイミダゾール−２−イルチオ）エチル］−４−ホルミルピペラジンの製造：
１−ホルミル−４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン（１．２０ｇ，７．６ｍｍｏｌ）、５−フルオロ−２−メルカプトベンズイミダゾール（１．２８ｇ，７．６ｍｍｏｌ）、ジイソプロピルエチルアミン（３．９３ｇ，３０．４ｍｍｏｌ）をプロピオニトリル（５０ｍＬ）に溶解し、シアノメチルトリメチルホスホニウムヨージド（７．３９ｇ，３０．４ｍｍｏｌ）を加え、アルゴン雰囲気下、９２℃で１時間攪拌した。放冷後、水（１００ｍＬ）に注ぎ、クロロホルム（１００ｍＬ×３）で抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧下濃縮した。得られた粗生成物をアセトン−エーテルから結晶化し、１−［２−（５−フルオロベンズイミダゾール−２−イルチオ）エチル］−４−ホルミルピペラジン１．８７ｇ（収率８０％）を褐色結晶性粉末として得た。
ｍｐ  １７３．０−１７５．０℃
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：３４３５，３０５１，２９５３，２８２５，１６４８，１５０３，１４４６．
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ２．３８（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ），２．４４（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ），２．７０（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），３．２２−３．３８（４Ｈ，ｍ），３．４２（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），６．８７−６．９８（１Ｈ，ｍ），７．２３（１Ｈ，ｂｒ  ｓ），７．３９（１Ｈ，ｂｒ  ｓ），７．９７（１Ｈ，ｓ），１２．６（１Ｈ  ｓ）．
ＭＳ（ｍ／ｚ）：３０８（Ｍ＋），１４０（１００）．【００８６】実施例７
１−［２−（５−フルオロベンズイミダゾール−２−イルチオ）エチル］ピペラジンの製造：
１−［２−（５−フルオロベンズイミダゾール−２−イルチオ）エチル］−４−ホルミルピペラジン（１．８０ｇ，５．８ｍｍｏｌ）をメタノール（２０ｍＬ）に溶解し、１２Ｎ塩酸（２ｍＬ）を加え、室温で１８時間攪拌した。反応液を減圧下濃縮し、飽和アンモニア−メタノール溶液を加え室温にて５分間攪拌した。溶媒を減圧下留去し得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：飽和アンモニア−メタノール＝１００：３）を用いて精製し、１−［２−（５−フルオロベンズイミダゾール−２−イルチオ）エチル］ピペラジン１．３３ｇ（収率８１％）を褐色油状物として得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：３０５９，２９４７，２８１５，１６２６，１６０２，１４８２，１４４４，１４０８．
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ２．３０−２．４５（４Ｈ，ｍ），２．６２（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），２．６７（４Ｈ，ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ），３．３９（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），６．９０−６．９８（１Ｈ，ｍ），７．２３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．５，２．５Ｈｚ），７．３９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．８，４．９Ｈｚ）．
ＭＳ（ｍ／ｚ）：２８０（Ｍ＋），７０（１００）．【００８７】実施例８
２−［４−［２−（５−フルオロベンズイミダゾール−２−イルチオ）エチル］ピペラジン−１−イル］−Ｎ−［２，４−ビス（２，２，２−トリフルオロエトキシ）−６−メチルピリジン−３−イル］アセトアミド（化合物１ａ）の製造：
１−［２−（５−フルオロベンズイミダゾール−２−イルチオ）エチル］ピペラジン・３トリフルオロ酢酸塩（６．９２ｇ，１１．１２ｍｍｏｌ）及び２−ブロモ−Ｎ−［２，４−ビス（２，２，２−トリフルオロエトキシ）−６−メチルピリジン−３−イル］アセトアミド（４．５０ｇ，１０．５９ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（９０ｍＬ）懸濁液に、炭酸カリウム（５．８５ｇ，４２．３３ｍｍｏｌ）を徐々に加えた。室温にて５時間攪拌後、反応液に水（１００ｍＬ）を加え酢酸エチルで抽出し、有機層を飽和食塩水にて洗浄した。無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮し得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝５０：１）にて精製した。得られた結晶をアセトン−エーテルより再結晶し、２−［４−［２−（５−フルオロベンズイミダゾール−２−イルチオ）エチル］ピペラジン−１−イル］−Ｎ−［２，４−ビス（２，２，２−トリフルオロエトキシ）−６−メチルピリジン−３−イル］アセトアミド（４．７２ｇ，収率７１％）を淡褐色プリズム晶として得た。
ｍｐ  １８２．０−１８２．７℃
ＩＲ（ＫＢｒ）：３２８２，２８２４，１５０９，１４１３，１２７２，１１６６（ｃｍ−１）．
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：２．４１（３Ｈ，ｓ），２．６６−２．９１（８Ｈ，ｍ），２．９７（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．１Ｈｚ），３．２５（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．１Ｈｚ），３．２９（２Ｈ，ｓ），４．４１（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），４．７５（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝８．５Ｈｚ），６．４５（１Ｈ，ｓ），６．９３（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝９．０，２．３Ｈｚ），７．１０−７．５６（２Ｈ，ｍ），
８．２８（１Ｈ，ｓ），１３．１４（１Ｈ，ｂｒ．ｓ）
元素分析Ｃ２５Ｈ２７Ｆ７Ｎ６Ｏ３Ｓとして
計算値：Ｃ，４８．０８；Ｈ，４．３６；Ｎ，１３．４６
実測値：Ｃ，４７．９８；Ｈ，４．３８；Ｎ，１３．３１【００８８】実施例９
Ｎ−［２，４−ビス（２，２，２−トリフルオロエトキシ）−６−メチルピリジン−３−イル］−２−［４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−１−イル］アセトアミドの製造
１−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン（１．９５ｇ，１５．０ｍｍｏｌ）と２−ブロモ−Ｎ−［２，４−ビス（２，２，２−トリフルオロエトキシ）−６−メチル−３−ピリジン−３−イル］アセトアミド（５．００ｇ，１２．５ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（３０ｍｌ）溶液に炭酸カリウム（２．２５ｇ，１６．３ｍｍｏｌ）を加え、室温で５時間撹拌した。反応液を水で希釈し酢酸エチルで抽出した。有機層を水、飽和食塩水で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：アンモニア飽和メタノール／クロロホルム＝１／２０）で精製し、Ｎ−［２，４−ビス（２，２，２−トリフルオロエトキシ）−６−メチルピリジン−３−イル］−２−［４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−１−イル］アセトアミド５．４０ｇ（収率９１％）を無色結晶として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：２．４２（３Ｈ，ｓ），２．４８−２．８２（８Ｈ，ｍ），２．５７（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．３Ｈｚ），３．１７（２Ｈ，ｓ），３．６３（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．３Ｈｚ），４．４１（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），４．７５（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝８．５Ｈｚ），６．４７（１Ｈ，ｓ），８．３８（１Ｈ，ｂｒ  ｓ）．【００８９】実施例１０
２−［４−［２−（５，６−ジフルオロベンズイミダゾール−２−イルチオ）エチル］ピペラジン−１−イル］−Ｎ−［２，４−ビス（２，２，２−トリフルオロエトキシ）−６−メチルピリジン−３−イル］アセトアミド（化合物１ｂ）の製造：
アルゴン雰囲気下、Ｎ−［２，４−ビス（２，２，２−トリフルオロエトキシ）−６−メチルピリジン−３−イル］−２−［４−［２−（５，６−ジフルオロベンズイミダゾール−２−イルチオ）エチル］ピペラジン−１−イル］アセタミド（４．０ｇ，８．４３ｍｍｏｌ）、５，６−ジフルオロ−２−メルカプトベンズイミダゾール（５．８ｇ，３１．２ｍｍｏｌ）及びトリフェニルホスフィン（７．８ｇ，２９．７ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１７０ｍＬ）溶液に、氷冷下、アゾジカルボン酸ジエチル（４０％  ｗ／ｖ  トルエン溶液，１１．０ｍＬ，２５．３ｍｍｏｌ）を滴下し、同温度で１．５時間攪拌した。反応液に、酢酸エチル及び１ｍｏｌ／Ｌ塩酸を加え、水層を分離し、有機層を更に１ｍｏｌ／Ｌ塩酸で抽出した。水層を合わせ、１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム水溶液でアルカリ性とし、酢酸エチルで抽出した。有機層を、水及び飽和食塩水で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧留去した。得られた残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒；クロロホルム：アンモニア飽和メタノール＝１００：３）で精製し、２−［４−［２−（５，６−ジフルオロベンズイミダゾール−２−イルチオ）エチル］ピペラジン−１−イル］−Ｎ−［２，４−ビス（２，２，２−トリフルオロエトキシ）−６−メチルピリジン−３−イル］アセトアミド（４．９ｇ、収率９０．１％）を無色結晶として得た。【００９０】試験例１  Ｊ７７４Ａ細胞におけるＡＣＡＴ阻害活性試験
２４ｗｅｌｌプレートにＪ７７４細胞（２×１０５ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌ）を播種し、５００μＬのＤＭＥＭ（１０％ＦＢＳ）で２４時間培養した。培地を交換後、２５−ヒドロキシコレステロール（１０μｇ／ｍＬ）及びＡＣＡＴ阻害剤（終濃度０，１０−９〜１０−５ｍｏｌ／Ｌ）を添加し１８時間培養した。０．９％  塩化ナトリウムで洗浄後、ヘキサン−イソプロパノール（３：２）２５０μＬで脂質を抽出した。ヘキサン−イソプロパノール（３：２）２５０μＬで再度脂質を抽出し、抽出溶媒を留去後、コレステロールエステル（ＣＥ）を蛍光酵素法により定量した。また、脂質抽出後の細胞についてタンパク定量（ｍｉｃｒｏ  ＢＣＡ法）を実施し、１ｍｇタンパク質当たりのＣＥ量を求めた。コントロールに対する被験物質のＣＥ生成比からＩＣ５０（ＣＥ生成を５０％抑制する薬剤濃度）を算出した。Ｎ＝４で実施した。
その結果表１に示すように、化合物（１ａ）及び（１ｂ）は強いＡＣＡＴ阻害活性を有することが確認された。【００９１】
【表１】
0004676883.tif 000012
【００９２】  試験例２  ヒト肝臓ミクロソーム代謝安定性試験
下記表２に従って、０．１ｍｏｌ／Ｌ  リン酸緩衝液（ｐＨ７．４）にＮＲＳ（ＮＡＤＰＨ生成系）試液、１６％ヒト血清アルブミンを加え、そこに供試化合物（１００μＭ）のアセトニトリル（０．０１ｍＬ）溶液を加えた。３７℃温浴中で５分間プレインキュベーション後、ヒト肝臓ミクロソーム（ＰＯＯＬＥＤ  ＨＵＭＡＮ  ＬＩＶＥＲ  ＭＩＣＲＯＳＯＭＥＳ、Ｌｏｔ．Ｎｏ．２０  ＧＥＮＴＥＳＴ社）を添加し、３７℃温浴中で３０分間反応を行った。反応開始０及び３０分後に反応液を０．２５ｍＬ分取し、抽出操作＊を打い、ＨＰＬＣを用いて検体量を測定した。３０分後の検体の残存率は（３０分後のピーク面積／０分のピーク面積）×１００で算出した。
その結果図１に示すように化合物（１ａ）及び化合物（１ｂ）は化合物（Ｂ）塩酸塩と比べ、ヒト肝臓ミクロソームの代謝に対する安定性が大幅に向上したことが確認された。【００９３】
【表２】
0004676883.tif 000013
【００９４】＊抽出操作
各サンプルにグリシン緩衝液（ｐＨ１０）１．０ｍＬ、内標準物質０．１ｍＬ及びｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル５．０ｍＬを添加し、１０分間振盪し、２５００回転で１０分間遠心分離を行い、有機層を分取した。【００９５】試験例３  溶解性試験（日局Ｉ液）
各供試化合物をアセトニトリルに溶解し１００μＭの溶液を作り、この溶液を日局Ｉ液に加え１０００ｎｇ／ｍＬの溶液を作った。その溶液を１０分間攪拌後、１ｍＬを注射筒に取り、孔径０．２μｍのフィルター（ＨＬＣ−ＤＩＳＫ  １３  水系・溶媒系  関東化学株式会社）を通した。濾液０．５ｍＬを用いて、抽出操作＊を行い検体量をＨＰＬＣにて測定した。
この結果表３に示すように化合物（１ａ）及び化合物（１ｂ）の溶解度は化合物（Ｂ）塩酸塩に比較すると低かった。溶解度に基づく本発明化合物の経口吸収性は低いと予想された。【００９６】
【表３】
0004676883.tif 000014
【００９７】＊抽出操作
ヒト肝臓ミクロソーム代謝安定性試験と同様に行った。【００９８】  試験例４  ラットにおける経口投与試験
供試化合物を０．０１Ｎ  塩酸溶液に溶解し、１０ｍｇ／５ｍＬ／ｋｇ／雄性又は雌性ＳＤラットに経口投与した。投与後３０、６０、１２０、１８０、２４０、３６０分に、０．２５ｍＬずつ採血した。採血した血液は、４℃、９，０００ｇの条件下、５分間遠心分離を行い、血漿を得た。得られた血漿は測定時まで−３０℃で保存し、抽出操作＊を行い、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ法を用いて化合物中の血漿中濃度を測定した。この結果表４に示すように、化合物（１ａ）及び化合物（１ｂ）は化合物（Ｂ）塩酸塩に比べ高いＣｍａｘと、高い時間曲線下ＡＵＣ値を示し、このことから化合物（Ｂ）塩酸塩に比べ良好な経口吸収性が確認された。【００９９】
【表４】
0004676883.tif 000015
【０１００】＊抽出操作
ヒト肝臓ミクロソーム代謝安定性試験と同様に行なった。【０１０１】  特許文献１記載の化合物（Ｂ）に比べ、本発明化合物（１）は、優れたヒト肝臓ミクロソーム代謝安定性を示し、強力なＡＣＡＴ阻害活性を保持した。化合物（Ｂ）塩酸塩との比較では本発明化合物（１）は、水に対する溶解性は劣るが、ラット雄雌による経口投与試験では良好な経口吸収性を示した。このことから、ヒトにおいて良好な生物学的利用率が期待される。
【図１】
0004676883.tif 000021