(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
マイタケ乾燥粉末、及び／又は、生マイタケ、乾燥マイタケ及びマイタケ乾燥粉末からなる群から選ばれる少なくとも１種を加圧下１００〜１２０℃で熱水抽出して得られた抽出液を濃縮して得られたマイタケ抽出物を、含有することを特徴とする、歯肉の炎症を改善するための練歯磨剤、粉歯磨剤及び液状歯磨剤から選ばれる歯磨剤。
【請求項２】
マイタケ抽出物が、生マイタケ、乾燥マイタケ及びマイタケ乾燥粉末からなる群から選ばれる少なくとも１種を加圧下１２０℃で熱水抽出して得られた抽出液にエタノールを加えて１０℃以下で放置し、液面、液中に浮遊又は壁面に付着する物質を除去し、その後、濃縮して得られた抽出物である、請求項１記載の歯磨剤。
【請求項３】
マイタケ乾燥粉末及び／又はマイタケ抽出物を０．０１質量％以上含有することを特徴とする請求項１又は２記載の歯磨剤。
【請求項４】
マイタケ乾燥粉末及び／又はマイタケ抽出物を０．０１質量％〜２０質量％含有することを特徴とする請求項１又は２記載の歯磨剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、マイタケ乾燥粉末もしくはマイタケ抽出物を含有する口腔用組成物に関し、詳しくは歯肉の炎症を予防・改善する効果、及び優れた口臭防止効果を有する口腔用組成物に関する。
【０００２】
【従来の技術】
歯周病はう蝕と並ぶ口腔内の２大疾患であり、歯牙の喪失原因の約半分を占める疾患である。歯周病の発症と病変の進行には、プラーク（歯垢）細菌とこれに対する宿主の生体防御機構が関与している。なかでも炎症性因子であるプラークは主たる病変因子であり、プラーク中の細菌数およびその病原性の増加によって侵襲が大きくなる。また、何らかの原因で全身状態が悪化し歯周組織修復能や生体の防御機能が低下すると宿主と細菌の平衡状態は破られ、歯周疾患が発症する。現在、歯周組織における生体防御には、白血球（特に多核白血球）および単球マクロファージ系が重要な役割を果たすことが示唆されている。
【０００３】
生体内における白血球の機能には遊走能、貧食能および殺菌能などがあり、歯肉結合組織の血管から歯肉溝へ遊走した白血球は細菌などの異物を貧食し、歯周組織における生体防御機構のなかで重要な役割を果たしている。しかしながら、同時に炎症局所において、白血球は組織損傷の重要な因子としても作用していると考えられており、特に慢性的な炎症においては細胞成分の漏出、過剰な活性酸素の産出により歯周組織が破壊されるという報告もある。従って、活性酸素を消去する成分を用いることによって、活性酸素による歯周組織破壊を防止することは有用である。
【０００４】
一方、口臭には生理的な口臭と病的な口臭がある。生理的な口臭とは起床時の口臭、空腹時の口臭、極度の緊張時の口臭、月経時の口臭、喫煙や特殊な臭気物質（ニンニクなど）の摂取による口臭を指す。病的な口臭には、全身的因子によるもの（気管支炎，糖尿病，胃腸疾患など）と口腔局所に原因があるもの（歯周病，う蝕など）に分けられる。特に歯周病やう蝕由来の口臭は、症例の８０〜９０％を占めており、本人の悩みはもとより、歯科学的にも決して軽んずることができない問題となっている。口腔内（特に炎症局所）の口臭は，嫌気性菌が食物残渣や歯茎の歯肉溝滲出液などを分解して発生する。その成分は、硫黄化合物、低級脂肪酸、アルコール、アルデヒドと様々であるが、このうち口臭の程度と関係する成分は、メチルメルカプタンなどの揮発性硫黄化合物と考えられている。
このような背景から、従来より口腔用組成物には様々な活性酸素消去成分が用いられ、歯肉の炎症や口臭を予防・改善する手段が数多く提案されているが、いずれも未だ十分に満足できるものはない。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、上記事情に応えたもので、歯肉の炎症を予防・改善し、かつ口臭予防効果を与える優れた口腔用組成物を提供することを目的とする。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、上記の目的を達成するために鋭意研究を重ねた結果、マイタケ乾燥粉末及び／又はマイタケ抽出物を口腔用組成物に含有させることにより、歯肉の炎症を予防・改善し、且つ口臭予防効果を与える効果に優れた口腔用組成物が得られることを見出し、本発明を完成するに至った。
従って本発明は、マイタケ乾燥粉末及び／又はマイタケ抽出物を含有することを特徴とする口腔用組成物に関する。具体的に、そのマイタケ抽出物は、生マイタケ、乾燥マイタケ及びマイタケ乾燥粉末からなる群から選ばれる少なくとも１種の水及び／又は親水性有機溶媒による抽出物である。
【０００７】
【発明の実施の形態】
以下、本発明をより詳細に説明する。
本明細書中でいう口腔用組成物は、練歯磨剤、粉歯磨剤、液状歯磨剤などの歯磨剤類、トローチ剤、錠剤、クリーム剤、軟膏剤、貼付剤、マウスウォッシュ、口中清涼剤、洗口剤、チューインガム又はうがい液などである。
原料の生マイタケには、マイタケ（Grifola frondosa）、白マイタケ（Grifola albicans）、チョレイマイタケ（Grifola umbellata）、トンビマイタケ（Grifola gigantea）等があり、これらマイタケ類の子実体および菌糸体のいずれも用いることができる。また、近年ではマイタケ（Grifola frondosa）の子実体の人工栽培が可能となり、安定した原料確保の面から該マイタケ子実体の使用が好ましい。
【０００８】
乾燥マイタケとしては，天日、熱風乾燥、あるいは凍結乾燥したもののいずれも用いることができる。乾燥マイタケとしては、製粉機で乾燥品を粉末化したマイタケ乾燥粉末を用いてもよい。乾燥マイタケを直接口腔用組成物に用いる場合は、だいたい１００メッシュ以上の粒度にして用いるのが好ましい。
マイタケ乾燥粉末は市場で入手することができ、本発明では市販品を使用することもできる。
【０００９】
抽出材料としては、生マイタケ、乾燥マイタケ及びマイタケ乾燥粉末からなる群から選ばれる少なくとも１種を選択することができ、生マイタケあるいは乾燥マイタケはある程度細かくしたほうが抽出効率がよい。好ましくはマイタケ乾燥粉末が使用できる。
マイタケの抽出物を得るための抽出溶媒として水、親水性有機溶媒、及び水と親水性有機溶媒の混液を使用することができる。水としては、蒸留水、精製水、イオン交換水、水道水、天然水のいずれも使用できる。親水性有機溶媒としてはアルコール、例えばメタノール、エタノールなどのアルコール、グリセリン、１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコールなどの多価アルコールが使用できる。
抽出溶媒として水と親水性有機溶媒の混液を用いる場合、その比率は質量比で一般に水：親水性有機溶媒＝１：９〜９：１が適当である。
例えば抽出溶媒として水を使用する場合、抽出材料と水の比率は、生マイタケ１質量に対して２質量以上適宜量、好ましくは５〜１０質量の水を使用し、乾燥マイタケもしくは乾燥マイタケ粉末を使用する場合は、これら１質量に対して４質量以上適宜量、好ましくは１０〜２０質量の水を使用する。
【００１０】
抽出方法は特に制限はなく、常法に従って例えば還流下で、あるいは浸漬にて行えばよい。例えば水抽出を行う場合は常温から加熱下で５分〜３時間の範囲で、短時間で行う場合は圧力下、１００℃以上の条件とし、圧力釜などを用いて加圧下、１２０℃前後で５分〜１時間の範囲で抽出を行う。
上記のようにして得られた抽出液はそのまま用いてもよいが、濃縮した流動エキスあるいは濃縮乾燥、噴霧乾燥、真空乾燥もしくは凍結乾燥等常套の乾燥手段により、乾燥抽出エキス末として用いることもできる。また抽出液中にはβ−グルカンなどの多糖体あるいは多糖体と蛋白との結合体が含まれており、精製物を得るには、沈殿法あるいはクロマトグラフ法、ゲル濾過法、その他の手段で生成した精製物を使用することも出来る。特に精製物を用いた場合は優れた効果が期待できる。
乾燥抽出エキス末や精製物は、市場で入手することができ、本発明はそのような市販品を使用することもできる。
【００１１】
本発明の口腔用組成物において、マイタケ乾燥粉末もしくは上記のようにして得たマイタケ抽出物を配合することができ、その効果の観点から、口腔用組成物全量に対して0.０１質量％以上、好ましくは0.０１〜２０質量％、より好ましくは0.０５〜１０質量％の割合で配合される。
本発明の口腔用組成物は常法に従って、練歯磨剤、粉歯磨、液状歯磨などの歯磨類、トローチ、タブレット、クリーム、軟膏剤、貼付剤、マウスウォッシュ、口中清涼剤、洗口剤、チューインガム、うがい液などにすることができる。他の配合成分は特に限定するものでなく、通常、本発明の効果を損なわない範囲で各種口腔用組成物に用いられる成分を配合できる。
【００１２】
例えば歯磨類に用いられる場合、研磨剤、粘稠剤、甘味剤、防腐剤、色素、pH調整剤、各種有効成分、香料、溶剤などの成分を混合して製造することができる。
また練歯磨剤には、第二リン酸カルシウム、炭酸カルシウム、リン酸水素カルシウム等の研磨剤、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ヒドロキシエチルセルロース、カラギーナン、ポリビニルアルコール等の粘結剤、グリセリン、ソルビトール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、1,3−ブチレングリコール等の湿潤剤、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウロイルサルコシン塩等の発泡剤、さらに香味剤としてペパーミント、スペアミント、キシリトール等の精油、メントール等の香料、サッカリンナトリウム等の甘味剤、パラベン等の防腐剤が適宜配合され、これらの成分を用いて常法に従い製造できる。また粉歯磨、液状歯磨、トローチ、タブレット、クリーム、軟膏剤、貼付剤、洗口剤、口中清涼剤、マウスウォッシュ、チューインガム、うがい液などについても製品の性状に応じた成分を配合して常法に従い製造できる。なお，本発明の口腔組成物にはさらに各種の薬剤を配合してもよい。
【００１３】
【参考例、試験例、実施例】
以下、参考例、試験例及び実施例により本発明を具体的に説明するが，本発明は以下の実施例に制限されるものではない．
【参考例】
マイタケ乾燥粉末及びマイタケ抽出エキスの製造
(1)マイタケ乾燥粉末
人工栽培で作った生マイタケの枝部、傘部の棚型乾燥室の棚にならべ、約60℃〜約80℃の熱風を送り乾燥した。最初は60℃から段階的に温度を上げ最終的には80℃でほぼ1日かけて乾燥した。ついで乾燥マイタケを製粉機で粉砕し、微粉末を得た。
(2)マイタケ抽出物Ａ
生マイタケ５kgを適当なサイズにスライスし、２０リットルの湯浴中（90℃以上）に１時間浸漬して抽出を行った後、濾過して黒褐色の抽出液を得た。この抽出液を減圧〜常圧下濃縮してBrix値３０％の濃縮液を得、次いでスプレードライ装置を用いて噴霧乾燥し、灰茶褐色を呈するマイタケ抽出エキス乾燥粉末１２２ｇを得た。
【００１４】
(3)マイタケ抽出物Ｂ
マイタケ子実体乾燥粉末１kgをイオン交換水１０リットルで、加圧下、１２０℃で３０分間処理した後、濾過して黒褐色の抽出液6.２リットルを得た。該液を減圧下で２リットルまで濃縮して、室温で９５％エタノール２リットルを加え１０℃以下で約数時間放置すると、液面、液中に浮遊又は壁面に付着する茶褐色の物質が生成した。これらの物質を金網で掬って除去し、褐色の溶液を得た。該溶液を減圧下でアルコールを除き、さらに減圧下、Brix値約３０％になるまで濃縮して黒褐色の濃厚な液を得た。該溶液をスプレードライ装置を用いて噴霧乾燥し、マイタケ特有の甘い香りの微細な褐色粉末１８５ｇを得た。
【００１５】
【試験例１】
マイタケ抽出物の抗酸化（活性酸素消去）効果
(1)スーパーオキシドラジカル消去作用(ＳＯＤ様作用）
（実験材料）実験材のマイタケ抽出物として、粉末状のマイタケ抽出物Ｂを使用し、超純水で１００mg/mlに調製したものを試料溶液とした。
（実験方法)９６穴マイクロプレートにカルシウムイオン含有Hanks溶液（和光純薬工業（株）り購入)１１6.４μlを分注し、試料最終濃度が１０〜0.６２５mg/mlとなるように調製した試料溶液２０μlを加え、さらに２０μＭ ウミホタルルシフェリン誘導体（東京化成販売（株）り購入) ５μlおよび１ｍＭ ヒポキサンチン（和光純薬工業（株）より購入) 8.６μlを加えた。３７℃で２分間放置した後、１mU/ml キサンチンオキシダーゼ（和光純薬工業（株）より購入) ５０μlを加えて、１分間の総発光量を化学発光検出器で測定した。
【００１６】
(2)一重項酸素消去作用
（実験方法）９６穴マイクロプレートに１３３ｍＭ酢酸緩衝液(pH4.５)１３５μlを分注し、(1)と同じ試料溶液を２０μl加え、２０μＭ ウミホタルルシフェリン誘導体（東京化成販売（株）より購入) １０μlおよび４００ｍＭ過酸化水素水（和光純薬工業（株）より購入) １０μlを添加した。２５℃で１分間放置した後、６０μＭ 次亜塩素酸ナトリウム（和光純薬工業（株）より購入) ２５μlを添加し、１分間の総発光量を化学発光検出器で測定した。
【００１７】
抗酸化の効果は、試料を加えない場合の総発光量（Ａ）と試料を加えたときの総発光量（Ｂ）を求め、試料を加えない場合の総発光量に対する抑制率（％）で比較した。この場合、抑制率が高いほど活性酸素の消去作用が強いことを意味し、経験上、５０％抑制率を示す被験試料濃度（ＩＣ50）が、2.５mg/ml以下である場合に優れた抗酸化効果を有すると判断した。
抑制率（％）＝[１−（Ｂ）／（Ａ）]×１００
試験結果は以下のとおりである。
【００１８】
【表１】
各試料の抑制率（％）とＩＣ50値
0004730991.tif 000002
上記の結果から明らかなように、マイタケ抽出物はスーパオキシドラジカル及び一重項酸素に対する消去作用が強く、優れた抗酸化効果を有していた。
【００１９】
【試験例２】
メチルメルカプタンに対する消臭効果
（実験材料）実験材料にマイタケ抽出物Ｂを使用し、超純水で１００mg/mlに調製したものを試料溶液とした。これを最終濃度で１０、５、１mg/mlとなるように反応系に加えた。
（実験方法）内容量２０mlの試験管に0.１Ｍリン酸緩衝液 1.５mlと任意に調製した試料１ml（コントロールの場合は超純水１mlのみ）を加え，pH 7.５に調製した。メチルメルカプタン（和光純薬工業（株）より購入)の１μg/ml溶液を0.５ml添加し、ただちにシリコン栓をしてタッチミキサーで５秒間攪拌し、３７℃の水浴に保温した。６分後、ガスタイトシリンジで空気を５ml注入、５秒間攪拌しヘッドスペースガス５mlを抜き取りガスクロマトグラフィー(カラム温度：１００℃、キャリヤガス：Ｎ2、検出器：FPD)でメチルメルカプタンのピーク面積を測定した。同一サンプルで２回繰返し、その平均値から消臭率（％）を下記のように算出し、評価した。
消臭率（％）＝｛（Ｃ−Ｓ）／Ｃ｝×１００
Ｃ：コントロールのメチルメルカプタンピーク面積
Ｓ：試料添加時のメチルメルカプタンピーク面積
試験結果は次のとおりである。
【００２０】
【表２】
各試料のメチルメルカプタン消臭率（％）
0004730991.tif 000003
上記の結果から明らかなように、マイタケ抽出物は高いメチルメルカプタン消臭効果を有していた。
【００２１】
【試験例３】
マイタケ乾燥粉末又はマイタケ抽出物含有組成物の歯肉の炎症に対する改善効果（実験方法） 歯周疾患に影響するような全身疾患がない成人男性３名に各歯磨剤を１日３回、１０日間、市販歯ブラシに適量（約１ｇ）乗せて使用させ、試験前後の歯肉の状態をGingival index（以下GIと記す）にて測定した。観察部位は、上下顎側切歯、第一小臼歯、第一大臼歯の６本の４歯面（近心、遠心、頬側、舌側）とした。なお、各試験期間は1週間以上間隔をあけ、炎症を惹起させるため、試験開始前3日間は口腔清掃を中止した。また、各歯磨剤の使用順序はランダム化した。
使用した歯磨剤は、下記の共通組成１（質量％）に、表３に示すようにマイタケの乾燥粉末もしくはマイタケ抽出物Ｂを配合したものである。
【００２２】
0004730991.tif 000004
【００２３】
【表３】
各歯磨剤のマイタケ乾燥粉末またはマイタケ抽出物Ｂの配合
0004730991.tif 000005
○：配合  ×：無配合
評価は試験前のＧＩに対する試験後、ＧＩの減少値を改善度とし、（改善度／試験前ＧＩ）×１００を求め改善率(％)とした。表４に結果を示す。
【００２４】
【表４】
各歯磨剤使用による改善率
0004730991.tif 000006
表４に示したように、マイタケ乾燥粉末およびマイタケ抽出物Ｂを配合した口腔用組成物は、無配合の口腔用組成物よりも歯肉の炎症の改善効果が高く、歯肉の炎症に対する優れた改善効果を有することがわかった。
【００２５】
【試験例４】
口臭に対する消臭効果
（実験方法） 口腔内に重篤な疾患がなく正常な歯列を有する健康な成人男性３名（パネラーＡ〜Ｃ）を被験者とし、洗口液で含嗽前の自然流出唾液からのメチルメルカプタン発生量をコントロールとした。洗口液２０mlを３０秒間含嗽し、含嗽直後から5分間唾液を採集し、この唾液からのメチルメルカプタン発生量を測定した。メチルメルカプタン発生量は内容量３０mlのバイアルビン中で、２０ｍＭ L-メチオニンを含有する0.１Ｍリン酸緩衝液(pH 7.０)１mlに採集した唾液を１mlずつ加え、直ちに栓をして撹拌した。３７℃、２４時間インキュベートした後、ヘッドスペースガス３００μlをガスクロマトグラフに注入し、生成したメチルメルカプタンのピーク高を測定した。
使用した洗口液は下記の共通組成２（質量％）に、表５に示すようにマイタケの乾燥粉末もしくはマイタケ抽出物Ｂを配合したものである。
【００２６】
0004730991.tif 000007
【００２７】
【表５】
各洗口液のマイタケ乾燥粉末またはマイタケ抽出物Ｂの配合
0004730991.tif 000008
○：配合  ×：無配合洗口液による口臭防止効果は、洗口前の唾液からのメチルメルカプタン発生量を１００とし、洗口後の唾液のメチルメルカプタン発生量を残存率(％)で示した。
試験結果は以下のとおりである。
【００２８】
【表６】
各洗口液使用によるメチルメルカプタン残存率（％）
0004730991.tif 000009
表６に示したように、マイタケ乾燥粉末およびマイタケ抽出物Ｂを配合した口腔用組成物は、無配合の口腔用組成物よりも著しくメチルメルカプタンの残存率が低く、口臭防止効果に優れていることがわかった。
【００２９】
【実施例１】
練歯磨剤の製造
以下の処方（単位：質量％）に従って、常法により練歯磨剤を製造した。
0004730991.tif 000010
【００３０】
【実施例２】
練歯磨剤の製造
以下の処方（単位：質量％）に従って、常法により練歯磨剤を製造した。
0004730991.tif 000011
【００３１】
【実施例３】
練歯磨剤の製造
以下の処方（単位：質量％）に従って、常法により練歯磨剤を製造した。
0004730991.tif 000012
【００３２】
【実施例４】
以下の処方（単位：質量％）に従って、常法により練歯磨剤を製造した。
0004730991.tif 000013
【００３３】
【実施例５】
以下の処方（単位：質量％）に従って、常法により液状歯磨剤を製造した。
0004730991.tif 000014
【００３４】
【実施例６】
以下の処方（単位：質量％）に従って、常法によりマウスウォッシュを製造した。
0004730991.tif 000015
【００３５】
【発明の効果】
本発明の口腔用組成物は、マイタケの乾燥粉末またはマイタケ抽出物を配合することにより、歯肉の炎症の予防・改善に優れた効果があり、かつ口臭防止効果に優れたものである。