(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（１）
【化１】
0004782922.tif 000013
（式中、Ｒ1乃至Ｒ３は水素原子又は同一或いは異なる炭素数１乃至４のアルキル基又はフェニル基を、Ｘは水酸基、Ｏ−低級アルキル基、アミノ基又はＯＹで表される塩［Ｙはナトリウム、カリウム等の金属又はリゾチーム、塩基性アミノ酸を示す。］をそれぞれ示す。）
で表される有機ゲルマニウム化合物を有効成分とすることを特徴とする熱傷治療外用剤。
【請求項２】
式（１）において、Ｒ1乃至Ｒ３が水素原子、Ｘが水酸基である有機ゲルマニウム化合物を有効成分とする請求項１に記載の熱傷治療外用剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は熱傷治療剤に関するものであり、更に詳しくは、特定の有機ゲルマニウム化合物を有効成分とし、優れた効果を示す熱傷治療剤に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
人体の表面は、皮膚という薄い層で覆われており、この皮膚によって保護されている。従って、この皮膚が日焼け等を含むいわゆる火傷によって損傷すると、皮膚部分ばかりでなく人体全体の生理機能に影響が及ぶ。
【０００３】
例えば、体表面積の５％以上のIII度の火傷の場合は植皮が必要となり、更に体表面積の１５％以上のII度或いはIII度の火傷の場合は、急速なショック状態に陥るとされている。
【０００４】
又、火傷に関してはその続発症として、感染症がよく見られることも知られている。
【０００５】
一方、式（１）
【化２】
0004782922.tif 000002
で表される化合物に代表される有機ゲルマニウム化合物については、例えばインターフェロン誘導作用（特開昭５５−１２２７１７号公報参照）や鎮痛作用（特開昭６２−９３２９３号公報参照）等々の人体に対する様々な生理活性を有することが知られている。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
ところが、有機ゲルマニウム化合物を外用した場合の生理活性、特に火傷に対する効果については、あまり知られていない。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明は、上記のような事情を背景としてなされたもので、式（１）
【化３】
0004782922.tif 000003
（式中、Ｒ1乃至Ｒ３は水素原子又は同一或いは異なる炭素数１乃至４のアルキル基又はフェニル基を、Ｘは水酸基、Ｏ−低級アルキル基、アミノ基又はＯＹで表される塩［Ｙはナトリウム、カリウム等の金属又はリゾチーム、塩基性アミノ酸を示す。］をそれぞれ示す。）
で表される有機ゲルマニウム化合物を有効成分とすることを特徴とする熱傷治療外用剤を提供するものである。
【０００８】
【発明の実施の態様】
以下に本発明を詳細に説明する。
【０００９】
本発明の熱傷治療剤は、上記の式（１）で表わされる特定の有機ゲルマニウム化合物［以下、有機ゲルマニウム化合物（１）のように表すこともある。］を有効成分としているので、まずこの化合物について説明すると、これは置換基Ｒ1乃至Ｒ3と酸素官能基ＯＸとを有するプロピオン酸誘導体とゲルマニウム原子とが結合したゲルミルプロピオン酸を基本骨格とし、当該基本骨格におけるゲルマニウム原子と酸素原子とが２：３の割合で結合したものである。
【００１０】
上記置換基Ｒ1乃至Ｒ３は、同一或いは異なっており、それぞれ水素原子や、メチル基，エチル基，プロピル基，ブチル基よりなるいわゆる低級アルキル基又はフェニル基を、置換基Ｘは水酸基，Ｏ−低級アルキル基，アミノ基又はＯＹで表わされるカルボン酸の塩をそれぞれ示している。尚、Ｙはナトリウム、カリウム等の金属（但し、一価のものに限られない）、又は、リゾチーム、或いはリジン等の塩基性アミノ酸を示している。
【００１１】
而して、上記構造の有機ゲルマニウム化合物（１）はすでに公知の化合物であり、様々な方法により製造することができるが、その一例を置換基Ｒ1乃至Ｒ3が水素原子、置換基Ｘは水酸基の化合物について示せば、下記反応式に示すように、トリクロルゲルミルプロピオン酸等のトリハロゲルミルプロピオン酸を加水分解すれば良いのである。
【化４】
0004782922.tif 000004
【００１２】
尚、上記有機ゲルマニウム化合物を表わす式（１）は、それを結晶として単離した状態に相当するもので、水溶液中ではゲルマニウム−酸素結合が加水分解を受け、例えば置換基Ｒ1乃至Ｒ3が水素原子、置換基Ｘは水酸基の化合物では、
【化５】
0004782922.tif 000005
なる構造をとることがわかっており、更に、上記有機ゲルマニウム化合物(１)は以下の式で表すこともできる。
【化６】
0004782922.tif 000006
【００１３】
本発明の熱傷治療剤は、上記有機ゲルマニウム化合物（１）を有効成分としているものであるが、その投与方法については特に制限を受けることはなく、経口的、非経口的或いは局所的に投与することができる。
【００１４】
剤形についても特に制限を受けることはなく、必要に応じ公知の担体等を併用して、錠剤、散剤或いはカプセル剤等の経口投与剤、又は、注射剤、軟膏やローション等の非経口剤に製剤されるものである。
【００１５】
又、本発明の熱傷治療剤における有機ゲルマニウム化合物（１）の含有量は必要に応じ、例えば１〜３０００ｍｇ／ｌ投与単位程度とすればよく、投与量としては、症状等に応じ、例えば１〜１００ｍｇ／Ｋｇ／日程度とすればよい。
【００１６】
【実施例】
以下に本発明を実施例に基づいて詳細に説明するが、これは本発明をなんら制限するものではない。
【００１７】
有機ゲルマニウム化合物の合成
アクリル酸（ＣＨ2ＣＨＣＯＯＨ）に対しトリクロルゲルマン（Ｃｌ3ＧｅＨ）を付加させてトリクロルゲルミルプロピオン酸（Ｃｌ3ＧｅＣＨ2ＣＨ2ＣＯＯＨを得、これを加水分解することにより、有機ゲルマニウム化合物（１−１）［式（１）において、Ｒ1乃至Ｒ3が水素原子、Ｘが水酸基の化合物］を合成した。
【００１８】
実施例１
１．正常細胞培養系
ヒト皮膚正常２倍体線維芽細胞を理研細胞銀行より入手し、増殖継代培養して実験に用いるための凍結保存サンプルを作成した。細胞は凍結サンプルをおこして培養し、継代を行って適量になるようにボトルで培養し、トリプシン処理してから均一に懸濁した細胞を各培養容器に定量的に播いて継代したものを各実験に供した。培養は基本的に１０％ＦＢＳ添加のＲＩＴＣ８０−７(極東製薬）培地にＦＧＦｂ  １０ｎｇ／ｍＬ(線維芽細胞増殖因子）を添加したものを用い、５％ＣＯ2、  ９５％ａｉｒ３７℃下で培養を行った。
【００１９】
２．熱処理前増殖と熱処理
継代培養しているヒト皮膚由来の正常２倍体線維芽細胞ＮＢＩＲＧＢ（理研細胞銀行より分与）を、トリプシン処理して均一に懸濁した細胞（２．０×１０4ｃｅｌｌｓ／ｍＬ）を各培養容器（６穴プレート；ＦＡＬＣＯＮ）に定量的（４．０×１０4ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌ）に接種して群分けを行った（トリプレットで実施）。
【００２０】
それぞれ４８時間培養を行った後、各群の培地を取り除きＰＢＳ溶液２ｍＬで洗浄後、再度ＰＢＳ溶液（熱処理液）１ｍＬを添加した。培養容器を密閉して、４５℃の恒温槽に３０ｍｉｎ浸漬して熱処理を施した後、熱処理面を２ｍｉｎ冷却して反応を停止し、ＰＢＳ溶液を捨てて本発明剤としての有機ゲルマニウム化合物［式（１）において、Ｒ1乃至Ｒ3が水素原子、Ｘが水酸基の化合物］濃度を変えた各培地を２ｍＬ／ｗｅｌｌ添加して培養を行った。
【００２１】
３．熱処理後の培養と生細胞数の計測
熱処理後の培地交換直後と、その後は２４時間ごとに経時的に２日間(４８時間〕それぞれの群について倒立顕微鏡で形態観察した後、細胞をトリプシン処理することにより剥がし、トリパンブルー染色法にて生細胞数をカウントした。結果を以下の表１及び表２に示す。
【００２２】
【表１】
0004782922.tif 000007
【００２３】
表１から明らかなように、熱処理後２４ｈｒにおいて１０及び１００μｇ／ｍＬ、添加群はコントロール群（０μｇ／ｍｌ）と比較して生細胞数が有意に多くなっていた。
【００２４】
【表２】
0004782922.tif 000008
【００２５】
表２から明らかなように、５０μｇ／ｍＬ群において同様に２４ｈｒ後の細胞数が有意に多くなる結果が得られた。
【００２６】
実施例２
ある大学の基礎化学実習で、ガラス細具の際、ピペット等を作制中に火傷をおった学生４人（男２人、女子１人、補助員１人）に対する本発明剤の効果を検討した。判定項目として火傷をおった学生３人に対してはその直後、６時間後、１８時間後、２４時間後に、本発明剤としての有機ゲルマニウム化合物（１−１）の１％水溶液を患部に塗布し、１人にはオロナイン軟膏（商品名）をぬり、時間の経過による血圧（最高、最低）の変化、痛みの尺度（ペインスコア）、火ぶくれ（浮腫）の状態の変化を観察した。
【００２７】
火傷の部位は親指又は人差し指で、火ぶくれの大きさは１〜０．５ｃｍの範囲であった。ペインスコアとしてビジュアルアナログスケールを用いた。すなわち、まったく痛くない状態を０点として、もうこれ以上はとても耐えられないほど痛い状態を１０とし、０〜１０点の間１０等分し、本人が適当に目盛に○印を記載した。浮腫は火傷をおった際の状態を１００とし、それからはれのひく状態を百分率で表した。結果を表３乃至表６に示す。
【００２８】
本発明剤を塗布した群では２４時間前後で血圧がおおむね正常となり、又、痛みがかなりやわらぐとともに、浮腫もひいていく傾向にあった。
【００２９】
更に、４８時間以内にほぼ表皮はかたくなり、浮腫内のリンパ液がまったくみえず、かたくなった表皮を１部はがすと新しい表皮の再生が見られた。また一週間後の観察でも化膿した症例はみられなかった。
【００３０】
一方、オロナイン軟膏を塗った場合では、４８時間近くで血圧は平常近くになるも痛みは残り、又、浮腫は徐々にひいていくものの、まだリンパ液が出ていることが観察された。
【００３１】
以上のように火傷に対する本発明剤の効果が、血圧、ペインスコア、浮腫の程度から明らかになった。
【００３２】
【表３】
0004782922.tif 000009
【００３３】
【表４】
0004782922.tif 000010
【００３４】
【表５】
0004782922.tif 000011
【００３５】
【表６】
0004782922.tif 000012
【００３６】
実施例３
エタノールで濡れている手に引火した。数十秒燃焼したが、濡れタオル等で窒息消火した。直ちに流水で冷やしたが、冷却中も痛みがあり、疼痛が強くなっていった。本発明剤としての有機ゲルマニウム化合物（１−１）のナトリウム塩の５％水溶液を患部にかけた。この後約１分以内に疼痛が弱まり、５〜１０分程度で殆ど痛みを感じなくなった。翌日以降、有機ゲルマニウム化合物（１−１）溶液のかからなかったと思われる指の間に水泡ができた（この位置は特に強く燃えたわけではない）が、他は全く通常と変化が無く、本発明剤を使用しない時とは異なり痛みはなく、水泡はできなかった。（２７歳・男性）
【００３７】
実施例４
調理中、グラタンをオーブンより出した際に、手が滑ってひっくり返してグラタンが足にかかった。かなりの量が付着したが、拭き取った後、有機ゲルマニウム化合物（１−１）の粉末を患部に乗せて、水をかけて粉末を患部上で溶かした。皮膚深部より痛みが生じてきたが、有機ゲルマニウム化合物（１−１）の溶解とともに痛みは軽減した。痛みは１時間から２時間まで時折生じたが、そのつど、本発明剤による同様の処理をしたことで治まった。水泡や痛み等はこの後生じなかった。（２８歳・男性）
【００３８】
実施例５
熱いラーメンの入った丼を台所からテーブルまで運ぶ際に、軽い火傷をし、すぐ水道水で冷やした。しかし、多少痛みが残っていたので、本発明剤の軟膏を塗った。数分後、痛みが無くなり、水疱が生じることは無かった。（３２歳・男性）
【００３９】
【発明の効果】
上記実施例から明らかなように、本発明の熱傷治療剤は、有機ゲルマニウム化合物を主剤とし、火傷に対して迅速且つ優れた効果を発揮するものであり、更に疼痛の消失、表皮の再生、感染症の発生抑制等、従来の熱傷治療剤が持たない有用性を併せもつ極めて有用な熱傷治療剤である。
【００４０】
又、有機ゲルマニウム化合物は合成品であるので、生薬等と異なって安定に供給することができる。