(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｎ−（３，５−ジクロロピリド−４−イル）−３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシベンズアミドおよび／またはその薬理学的に許容可能な塩および肺表面活性物質を含有する、乳児呼吸困難症候群および成人呼吸困難症候群の治療のための組成物。
【請求項２】
天然の肺表面活性物質中に存在するリン脂質が含有されている、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
肺表面活性物質として、１，２−ジパルミトイル−３−ｓｎ−ホスファチジルコリン及び１−パルミトイル−２−オレオイル−３−ｓｎ−ホスファチジルグリセロールアンモニウムが含有されている請求項１または２に記載の組成物。
【請求項４】
肺表面活性タンパク質が付加的に含有されている、請求項２または３に記載の組成物。
【請求項５】
ＳＰ−Ｂおよび／またはＳＰ−Ｃおよび／またはそれらの修飾された誘導体が含有されている、請求項４に記載の組成物。
【請求項６】
肺洗浄により得られた肺表面活性物質が含有されている、請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
乳児呼吸困難症候群および成人呼吸困難症候群を抑制するための医薬品を製造するための、有効成分としての、Ｎ−（３，５−ジクロロピリド−４−イル）−３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシベンズアミドおよび／またはその薬理学的に許容可能な塩および肺表面活性物質の使用。
【発明の詳細な説明】
技術分野
本発明は、乳児呼吸困難症候群（ＩＲＤＳ）及び、急性または成人呼吸困難症候群（ＡＲＤＳ）と呼ばれている疾病の症状の治療のための新しい組成物に関する。
背景技術
成人呼吸困難症候群（ＡＲＤＳ）は、それが、高度のガス交換異常（特に動脈低酸素症）を伴うものであれば、様々な病因からなる多くの急性、慢性、浸潤性の肺疾患に適合することを開示された表現である。ＡＲＤＳという表現は、乳児呼吸困難症候群（ＩＲＤＳ）と多くの臨床及び病理学的に特徴のある共通点をもつことから用いられる。また、ＩＲＤＳの場合には、早産によって引き起こされる肺表面活性物質の欠損が主因であり、さらにＡＲＤＳの場合には、様々な病因がもとである肺の状態により、肺表面活性物質の機能不全が生じる。
ＡＲＤＳが生ずるきっかけは、例えば、（cited in accordance with Harrison’s principles of Internal Medicine 10th Ed.1983 McGraw-Hill Int.Book Comp.）慢性的な肺の感染症（例えば、ウイルス、バクテリア、カビによる）、例えば胃液または溺れた場合の吸引、毒物または刺激物の吸入（例えば、塩素ガス、窒素酸化物、煙）、直接または間接的な外傷（多発性骨折または肺の打撲）、全身性疾患による肺表面の炎症（例えば、出血性膵炎、グラム陰性菌敗血症）、血液の多量の輸注または二者択一的に心肺バイパスによる多量の輸血である。
死亡率が５０〜６０％である（survey in Schuster Chest 1995,107：1721-26）、ＡＲＤＳ患者の予後は、いまだ不良であるとされている。
ＡＲＤＳの治療法は、主に膜型人工肺による酸素化（ＥＣＭＯ；Zapol and Lemaire Adult Respiratory Distress Syndorome,Marcel Dekker Inc.1991）に至るまでの、様々な換気形態［例えば、ＰＥＥＰ（終末呼気陽圧）、呼吸気の酸素濃度を上昇させること、ＳＩＭＶ（同調間欠的強制呼吸；Harrisons Principles of Internal Medicine 10th Ed 1983 McGraw-Hill Int.Book Comp）］の最も早期に可能な使用から成り立っている。
種々の換気技術の特殊な使用は、単に死亡率のわずかな減少を導くだけであり、かつ悪循環の作用が起こる危険をも含む。圧力と高いＦｉＯ２（吸入された酸素画分；呼吸気中の酸素の割合）の換気によって、肺自体は損傷を受けかねず、結果として血液の適度な酸素供給を得るために、より高い圧力及び高いＦｉＯ２が必要とされる。
今日では、その問題を解決する種々の薬理学的方法も追求されている。それは、例えば、プロスタグランジンＥ１（PGE1：Abraham et al.Crit Care Med 1996,24:10-15）または糖質コルチコステロイド（Bernard et al.N Engl Med 1987,317：1565-70）を用いた単なる抗炎症的な治療に適した肺表面活性物質の代用物［概説、例えばB.Lachmann,D.Gommers and E.P.Eijking：Exogenous surfactant therapy in adults,Atemw.-Lungenkrkh. 1993, 19：581-91；T.J,Gregory et al：Survanta supplementation in patients with acute respiratory distress syndrome(ARDS),Am.J.Respir.Crot.Care Med.1994,149：A567］を含む。しかしながら、特異的な成功は、肺表面活性物質の投与（e.g. Walmrath et al.Am J Resp Crit Care Med 1996,154：57-62）によって達成されたが、単なる抗炎症的な治療は、殆ど成功しなかった。これは、ＡＲＤＳの病理学的または組織病理学的な発見とはまさに対照的なものであった。それゆえ、塊状多形核白血球の浸潤を、ＡＲＤＳ患者の肺及び洗浄部位より発見し、かつ多数の炎症性化学伝達物質を検出することができた。試験において、ＰＧＥ１は、付加的にリポゾームの静脈内投与形態（Abraham et al.Crit Care Med 1996,24：10-15）中ならびにホスファジン酸の抑制を意図した物質、または組換え体ヒトインターロイキン１（IL-1）受容体拮抗物質（Fischer/他、JAMA 1994,271；1836-1843）中に存在する。しかし、ＰＧＥ１及びＩＬ−１受容体拮抗物質のどちらにしても、その治療の有用性は副作用により制限されている。
ＷＯ９６／０９８３１には、糖質コルチコステロイド及び肺表面活性物質を含むＡＲＤＳ及びＩＲＤＳの治療のための組成物が記載されている。欧州特許第０４５１２１５号明細書には、肺を経由した製薬学的活性をもつ化合物の投与のための組成物が記載されている。この組成物は、製薬学的活性をもつ化合物及び肺表面活性タンパク質を含むリポソームを有する。また、この系に、ＡＲＤＳ及びＩＲＤＳの治療法が提案されている。欧州特許第００５５０４１号明細書には、呼吸器官障害の治療のための吸入製剤または注入製剤が記載されており、この場合これらの製剤は、呼吸器官障害に対して活性の化合物及び天然の肺表面活性物質を含有する。ＡＲＤＳ及びＩＲＤＳの治療のための組成物は、開示されていない。
発明の開示
ところで、意外なことに、Ｎ−（３，５−ジクロロピリド−４−イル）−３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシベンズアミド及び肺表面活性物質を組み合わせた物の投与により、ＩＲＤＳ及びＡＲＤＳの治療において相乗効果を達成することができることが見い出された。
それゆえ本発明は、Ｎ−（３，５−ジクロロピリド−４−イル）−３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシベンズアミド及び／またはその薬理学的に許容可能な塩及び肺表面活性物質を有するＩＲＤＳ及びＡＲＤＳの治療のための組成物に関する。
さらに、本発明の実施態様は特許請求の範囲の記載に従う。
Ｎ−（３，５−ジクロロピリド−４−イル）−３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシベンズアミドの製造及びホスホジエステラーゼ（ＰＤＥ）ＩＶ抑制剤としての使用はＷＯ９５／０１３３８に記載されている。挙げられてもよいＮ−（３，５−ジクロロピリド−４−イル）−３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシベンズアミドの薬理学的に許容される塩は、例えば塩酸、臭化水素酸、リン酸、硝酸、硫酸、酢酸、クエン酸、Ｄ−グルコン酸、安息香酸、２−（４−ヒドロキシベンゾイル）安息香酸、酪酸、スルホサリチル酸、マレイン酸、ラウリン酸、リンゴ酸、フマル酸、コハク酸、シュウ酸、酒石酸、エンボン酸、ステアリン酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸または３−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸のような酸との水溶性の酸付加塩または水不溶性の酸付加塩であり、この場合酸は、一塩基性酸かまたは多塩基性酸かによって、および、どちらの塩が望ましいかによって、等モル量の割合または異なった割合で、塩の製造に使用される。
肺表面活性物質は、本発明によれば、公知の多くの組成物および天然の肺表面活性物質の機能を有するその修飾物を意味するものと解釈されている。天然の肺表面活性物質は、表面活性の性質を有し、肺の肺胞領域において表面張力を減少させる。表面活性製剤の表面活性を測定するための簡便かつ迅速で定量的な生体外検定は、例えばウィルヘルミーバランス（Wilhelmy balance）［Goerke,J Biochim Biophys Acta,344：241-261(1974)；King R.J. and Clements J.A.,Am J Physiol 223：715-726(1972）］である。この検定は表面張力をほぼゼロｍＮ／ｍに近づける能力といった点で、表面活性物質の品質の一つの尺度を与える。さらに、リン脂質の定義された濃度で表面活性物質懸濁液を水和溶液中へ導入することにより実施した。リン脂質は、いわゆる単層を形成する空気液体層に拡散する。この単層は、水和溶液の表面張力を減少させる。白金板を注意深く溶液中に浸漬する。この時、白金板を引き降ろす力は高感度変換器を用いて計測されてもよい。この力は、表面張力に比例し、白金板の寸法に依存する。表面活性製剤の表面活性を記載するための他の一つの方法は、脈動性気泡界面活性計測器［Possmayer F.,YuS.and Weber M.,Prog Resp Res,Ed.V.Wichert,Vol.18：112-120(1984)］である。また、表面活性製剤の活性は、例えば、下記の薬理学の章で記載されているように生体内検定によって評価されてもよい。肺の圧縮性、血中ガス及び人口呼吸器の圧力の測定は、活性の指標を提供するであろう。
肺表面活性剤は、本発明によれば、このような検定で活性を示す組成物として有利に認識されるべきである。このような検定において天然の、特にヒトの肺表面活性物質と同等またはそれ以上の活性を示すであろう組成物について、特に言及してもよい。
特に、肺表面活性物質の組成物は、リン脂質を有し、特に付加的に肺表面活性タンパク質を含有することができる。挙げることができる商業的に入手可能な製品は、ホモジナイズされたブタの肺からの高度に純化された天然活性物質であるクロサーフ（Curosurf▲Ｒ▼）（Serono,Pharma,GmbH,Unterschleissheim）、子牛の肺の抽出物のサーバンタ（Survanta▲Ｒ▼）（Abbott GmbH,Wiesbanden）およびアルベオファクト（Alveofact▲Ｒ▼）（Dr.Karl Thomae GmbH,Biberach）、ならびに、助剤を有する合成リン脂質のエクソサーフ（Exosurf▲Ｒ▼）（Deutsche wellcome GmbH, Burgwedel）である。可能性のある肺表面活性タンパク質は双方とも、例えば、肺の洗浄物または羊水からの抽出物のような天然源から得られたタンパク質であり、さらに遺伝工学的につくられたタンパク質である。本発明によれば、ＳＰ−Ｂ及びＳＰ−Ｃと称される肺表面活性タンパク質ならびにその修飾された誘導体は特に重要である。この肺表面活性タンパク質のアミノ酸塩基配列、それらの遺伝子工学技術による単離または製造は公知である（例えば、WO-86/03408、EP-A-0251,449、WO-89/04326、WO-87/06943、WO-88/03170、EP-A 0368 823及びEP-A-0348 967）。一定のアミノ酸の置換によりヒトＳＰ−Ｃと異なるＳＰ−Ｃの修飾された誘導体は、例えば、ＷＯ９１／１８０１５及びＷＯ９５／３２９９２に開示されている。ＷＯ９５／２９９２に開示されているＳＰ−Ｃ誘導体は、特に挙げられてもよい。本発明によれば、特に好ましい組み換えＳＰ−Ｃ誘導体［以下、r-SP-C（FF/l）と呼ぶ］は、４位及び５位のフェニルアラニンによる２つのシステインの置き換え、およびイソロイシンによる３２位のメチオニンへの置き換えによりヒトＳＰ−Ｃとは異なっている。欧州特許第０１００９１０号、同特許出願公開第０１１０４９８号、欧州特許第０１１９０５６号、同１４５００５号および同０２８６０１１号明細書には、例えば本発明による製剤の成分として適している、肺表面活性タンパク質を含むおよび含まないリン脂質組成物が、記載されている。
さらに本発明は、本発明によるＩＲＤＳおよびＡＲＤＳの治療および/または予防に使用される医薬品を製造するための組成物の使用に関する。
また、本発明は、言及される疾病の治療および/または予防のための医薬品に関し、この場合これは本発明による組成物を含む。
本発明による組成物は、気管内または気管支内投与のために液状の形でかまたは吸入投与のために粉末形で有用であるようにされる。組成物は、必要に応じて、他の適切な製薬学的助剤を使用することにより、当業者によく知られた方法によって製造される。粉末形を例えば水性懸濁液のような液状肺表面活性製剤をＮ−（３，５−ジクロロピリド−４−イル）−３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシベンズアミドの水性懸濁液と混合し、次いでそれを凍結乾燥および微細化することにより得られる。また、肺表面活性物質の溶液およびＮ−（３，５−ジクロロピリド−４−イル）−３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシベンズアミドは、例えば、第３級ブタノールのような適切な溶剤中で凍結乾燥されてもよく、その後微細化されてもよい。また、水性肺表面活性物質懸濁液とＮ−（３，５−ジクロロピリド−４−イル）−３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシベンズアミドの水性懸濁液との混合物、および水性肺面活性物質の溶液および、場合によっては不可的に水を含有してもよい適切な溶剤、例えばアルコール（例えば、メタノール、エタノール、２−プロパノール）、クロロホルム、ジクロロメタン、アセトン及びそれらの混合物中のＮ−（３，５−ジクロロピリド−４−イル）−３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシベンズアミドの溶液の噴霧乾燥により、粉末状製剤が導かれる。また、吸入による投与は、本発明による組成物を含有する懸濁液を霧状化することによって実施されてもよい。本発明による組成物は、有利にはＮ−（３，５−ジクロロピリド−４−イル）−３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシベンズアミド１〜３０重量％を含有する。
下記に、噴霧乾燥による粉末状製剤の製造は、実施例によって記載されている。
例１
１，２−ジパルミトイル−３−ｓｎ−ホスファチジルコリン８．２ｇ、１−パルミトイル−２−オレオイル−３−ｓｎ−ホスファチジルグリセロールアンモニウム３．４６ｇ、Ｎ−（３，５−ジクロロピリド−４−イル）−３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシベンズアミド２．７ｇ、パルミチン酸０．５６ｇ、塩化カルシウム０．３ｇおよびｒ−ＳＰ−Ｃ（ＦＦ／ｌ）０．２ｇを、２−プロパノール／水７００ｍｌ（９０：１０）中に溶解し、ビッヒ（Buechi）Ｂ１９１の実験室用噴霧乾燥器中で噴霧乾燥する。噴霧条件：乾燥ガス窒素、入口温度１１０℃、出口温度５９〜６１℃。微粒子でクリーム色の粉末が得られる。
例２
１，２−ジパルミトイル−３−ｓｎ−ホスファチジルコリン８．２ｇ、１−パルミトイル−２−オレオイル−３−ｓｎ−ホスファチジルグリセロールアンモニウム３．４６ｇ、Ｎ−（３，５−ジクロロピリド−４−イル）−３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシベンズアミド０．２７ｇ、パルミチン酸０．５６ｇ、塩化カルシウム０．３ｇおよびｒ−ＳＰ−Ｃ（ＦＦ／ｌ）０．２ｇを例１の記載と同様に噴霧乾燥する。
例３
１，２−ジパルミトイル−３−ｓｎ−ホスファチジルコリン８．２ｇ、１−パルミトイル−２−オレオイル−３−ｓｎ−ホスファチジルグリセロールアンモニウム３．４６ｇ、Ｎ−（３，５−ジクロロピリド−４−イル）−３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシベンズアミド０．０２７ｇ、パルミチン酸０．５６ｇ、塩化カルシウム０．３ｇおよびｒ−ＳＰ−Ｃ（ＦＦ／ｌ）０．２ｇを例１の記載と同様に噴霧乾燥する。
例４
１，２−ジパルミトイル−３−ｓｎ−ホスファチジルコリン１０．０ｇ、Ｎ−（３，５−ジクロロピリド−４−イル）−３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシベンズアミド２．６ｇ、チロキサポール０．７４ｇ及び１−ヘキサデカノール１．１ｇを２−プロパノール／水５００ｍｌ（９０：１０）に溶解し、かつビッヒ（Buechi）Ｂ１９１の実験室用噴霧乾燥器中で噴霧乾燥する。噴霧条件：乾燥ガス窒素、入口温度１１０℃、出口温度５８〜６０℃。白色から灰白色の粉末が得られる。
凍結乾燥組成物の製造法を下記の実施例に記載した。
例５
牛の肺からの精製された肺表面活性物質８．０ｇおよびＮ−（３，５−ジクロロピリド−４−イル）−３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシベンズアミド２．０ｇを水９０ｍｌに添加する。得られた懸濁液を−２５℃で凍結乾燥し、灰白色の軽い飛散性物質を生じる。
さらに本発明は、ＩＲＤＳおよびＡＲＤＳを患うヒトを含む哺乳類の治療法に関する。この方法は、治療的に活性で、薬理学的に許容可能な量の本発明による組成物を、疾患をもつほ乳類へ投与することにに特徴づけられている。
また本発明は、ＩＲＤＳおよびＡＲＤＳの治療に使用される本発明による組成物に関する。
本発明による製剤は、１日に３〜４回、２〜４日間投与させる。例えば、Ｎ−（３，５−ジクロロピリド−４−イル）−３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシベンズアミド４ｇおよびリン脂質５０ｍｇを含む製剤を、６時間おきに６回の吸入によって投与されるか、または気管内又は気管支内へ投与される。
薬理学
スプレイグドーリー（spragur Dawley）の成体ラットを、純粋な酸素および終末呼気陽圧（ＰＥＥＰ；ラットへの酸素投与を補償するために）を用いて人工的に呼吸させ、かつその内在性肺表面活性物質が洗浄除去されるまで洗浄する（D.Haefner,U.Kilian and R.Beume：Comparison of four lung surfactant preparation in an animal model of adult respiratory distress syndrome(ARDS).Am.Rev.Respir.Dis.1993,147：A719；D.Haefner,P.-G.Germann,D.Hauschke,Pulmonary Pharmacology(1994)7,319-332）。これは、動物の動脈酸素分圧（ＰａＯ２）の前値５００〜５５０ｍｍＨｇ（ＰＥＥＰで純粋な酸素の呼吸の場合）が、５０〜１１０ｍｍＨｇの値に減少するという事実により明らかである。肺表面活性物質で処理していない対照群の動物のＰａＯ２は、観察時間中を通して前記の低い値のままである。ＰａＯ２が前記の値に減少してから６０分後、肺表面活性物質およびＮ−（３，５−ジクロロピリド−４−イル）−３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシベンズアミドと一緒の肺表面活性物質を、気管内に導入する。導入してから３０〜１２０分後、血液ガスを測定する。
次の第１表および第２表の中で、Ａ列において、ＰａＯ２の平均値（±標準偏差）は、気管内導入後３０分間（Ｈ２Ｏ８ｃｍの一定のＰＥＥＰ）ｍｍＨｇで示され、Ｂ列において気管導入後１２０分間、ｍｍＨｇで示される。Ｎ−（３，５−ジクロロピリド−４−イル）−３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシベンズアミドの単独投与は、ＰａＯ２に影響を及ぼさないことが第１表から認識できる。次いで未処理の対照動物による比較である。肺表面活性物質（２５または１００ｍｇ/ｋｇ）の投与は、ＰａＯ２の上昇を導く（使用される肺表面活性物質は、Ｎ−（３，５−ジクロロピリド−４−イル）−３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシベンズアミドを含まない例１による組成物に相当する）。各肺表面活性物質投与量へのＮ−（３，５−ジクロロピリド−４−イル）−３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシベンズアミド６００μｇ／ｋｇまたは６．０ｍｇ／ｋｇの添加は、各肺表面活性物質投与量と比較してＰａＯ２値を改善する。これに続いて、Ｎ−（３，５−ジクロロピリド−４−イル）−３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシベンズアミドおよび肺表面活性物質の混合投与は、予期しない過剰の添加作用を導く。それゆえ、非常に高価な肺表面活性物質の一部の節約、または、それぞれの個々の成分の増大した作用を得ることが可能である。
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これら動物肺の組織病理学的後処理は、急性呼吸困難症候群の展開を表すものとしてのいわゆるヒアリン膜（ＨＭ）の強力な形成及び炎症性細胞の強力な流入（例えば、多形核好中性白血球（ＰＭＮＬ））を示す試験と関連して実施された。
このモデルにおいて界面活性タンパク質を含むかまたは含まない、Ｎ−（３，５−ジクロロピリド−４−イル）−３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシベンズアミドおよび肺表面活性物質（リン脂質混合物）を有する本発明による製剤の研究において、酸素投与および組織病理学的変化（ＨＭ形成の抑制およびＰＭＮＬ流入の抑制）は、肺表面活性物質またはＮ−（３，５−ジクロロピリド−４−イル）−３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシベンズアミドの単独投与と比較して、付加的に改善されることが見い出された。これに続いて、この予期しない相乗効果の結果として、ＩＲＤＳおよびＡＲＤＳの治療は短縮可能であり、かつこれら症候群に付随する高い死亡率を減少させることができる。