(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：
【化１】
0004763623.tif 000016
[式中、Ｒは以下：
【化２】
0004763623.tif 000017
からなる群より選ばれる。]
で表される化合物、又は上記化合物の医薬として許容される塩。
【請求項２】
３−［２−（２−メトキシ−エトキシ）−エトキシ]−プロピオン酸  ３−［４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−３−イル]−インドール−１−イルメチル・エステル；
Ｏ−［２−[[２，５−ジヒドロ−３−[４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−３−イル]−インドール−１−イル]メトキシカルボニル]エチル]−Ｏ’−メチルポリエチレン・グリコール  ２０００；
２，３−ジメトキシ−安息香酸  ３−［４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−３−イル]−インドール−１−イルメチル・エステル；及び
３−ジエチルアミノメチル−安息香酸  ３−［４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−３−イル]−インドール−１−イルメチル・エステル塩酸塩
からなる群より選ばれる化合物。
【請求項３】
トリフルオロ酢酸  ３−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−４−［１−（ピペリジン−４−カルボニル）−１Ｈ−インドール−３−イル]−ピロール−２，５−ジオン；
３−（１−アミノアセチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロール−２，５−ジオン塩酸塩；
酢酸  ３−［４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−３−イル］−インドール−１−イルメチル・エステル；
ペンタン二酸  モノ−｛３−[４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−３−イル］−インドール−１−イルメチル｝エステル；
２，３−ジメトキシ安息香酸  １−｛３−[４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−３−イル］−インドール−１−イル｝−エチル・エステル；及び
３−ジエチルアミノメチル安息香酸  １−｛３−[４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−３−イル］−インドール−１−イル｝−エチル・エステル塩酸塩
からなる群より選ばれる化合物。
【請求項４】
活性成分としての請求項１〜３のいずれか１項記載の化合物の有効量及び医薬として許容される担体又は賦形剤を含む医薬組成物。
【請求項５】
非経口投与に好適である、請求項４記載の医薬組成物。
【請求項６】
請求項１〜３のいずれか１項記載の化合物の製造法であって、以下のステップ：
ａ）式ＩのＲが以下：
【化３】
0004763623.tif 000018
であるとき、当該基を与える薬剤の処理によって、当該基を以下
【化４】
0004763623.tif 000019
の出発化合物に導入し；
ｂ）式ＩのＲが上記ａ）の基以外の基であるとき、当該基を与える薬剤の処理によって、当該基を下記一般式：
【化５】
0004763623.tif 000020
[式中、Ｒ３は水素又はメチルである。]
の出発物質に導入し；又は
ｃ）式Ｉの化合物をその医薬として許容される塩に変換すること
を含む、前記方法。
【請求項７】
請求項６記載の方法によって製造される、請求項１〜３のいずれか１項記載の化合物。
【請求項８】
細胞増殖疾患の処置用医薬の製造のための、請求項１〜３のいずれか１項記載の化合物の使用。
【請求項９】
癌の処置用医薬の製造のための、請求項１〜３のいずれか１項記載の化合物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明の背景
本発明は抗増殖性薬剤である特定の置換型ピロールに向けられる。これらの化合物及びそれらの医薬として許容しうる塩は、細胞増殖障害、特に癌の治療又は制御に有用である。本発明は前記化合物を含む医薬組成物、及び癌の治療、及び／又は予防、特に固形腫瘍の治療又は制御方法にも向けられる。
【背景技術】
【０００２】
制御されていない細胞増殖が癌の特徴である。癌性腫瘍細胞は、細胞分裂周期を直接的又は間接的に調節する遺伝子に多少の損傷形成を典型的に有する。多くの研究能力が抗増殖性薬剤の研究に費やされた。所望の抗増殖性活性をもつ多くの薬剤が同定される一方で、これらの薬剤の多くは、ヒトの患者に対する治療的な使用にそれらを好適でなくする又は不便にする、乏しい溶解性、分子の複雑性等を含むさまざまな欠点をもつ。容易に合成することができ、癌治療薬剤として有効な、そして患者に対する継続的な注入に好適である低分子化合物に対する必要性が相変わらず存在する。したがって、前述の化合物、並びに前述の化合物を含む医薬組成物を提供することがこの発明の目的である。
【発明の開示】
【０００３】
定義
本明細書中で使用されるとき、以下の用語は以下の定義をもつこととする。
「アルケニル」は、１〜１５の炭素原子、好ましくは１〜１０の炭素原子、最も好ましくは１〜６の炭素原子を有する直鎖又は分枝脂肪族不飽和炭化水素を意味する。
「アルコキシ」は、酸素が分子の残部に付着したアルキル又はアルケニル基を意味する（例えばＲＯ−、例えばメトキシ、エトキシ等）。
「アリール」は、５〜１０の原子を有し、そして同じ又は異なる１以上のヘテロ原子を場合により含みうる１又は２の環から成る芳香族環を意味する。この定義の意図として、アリールはヘテロアリールを含む。好ましいヘテロ原子は、１以上の炭素位置における、単独又はあらゆる組合せの窒素、硫黄又は酸素を含む。この定義の中にあるアリール基の例は、フェニル、ピリジン、イミダゾール、ピロール、トリアゾール、フラン、ピリミジンである。
「シクロアルキル」は、非芳香族であり、３〜８の原子を有する部分的に又は完全に飽和された環状脂肪族炭化水素基を意味する。シクロアルキル基の例は、シクロプロピル、シクロペンチル、及びシクロヘキシルを含む。
【０００４】
「有効量」は、ヒト腫瘍細胞株を含むヒト腫瘍細胞の増殖を有意に阻害する、及び／又は異化を予防する少なくとも１の式（Ｉ）の化合物又は医薬として許容しうるその塩の量を意味する。
【０００５】
「ヘテロ原子」は、窒素、硫黄又は酸素から選ばれる原子を意味する。ヘテロ原子は独立して選ばれ、そして１以上の炭素と置き換わりうる。
「ヘテロ環」は、３〜１０員非芳香族であり、少なくとも１のヘテロ原子を含む部分的に又は完全に飽和された炭化水素基を意味する。前述の環系は、モルホリン、ピロリジン、ピペラジンを含む。
【０００６】
「ＩＣ50」は、特異的に計測される活性の５０％を阻害するために必要とされる本発明による特定の化合物の濃度に関する。ＩＣ50は、とりわけ実施例１５以下に記載のとおり計測されうる。
【０００７】
「低級アルキル」は、１〜６、好ましくは１〜４の炭素原子を有する直鎖又は分枝飽和脂肪族炭化水素を意味する。低級アルキルは、以下に具体的に提供したとおり置換されうる。さらにアルキル鎖は、１以上の炭素原子の代わりに１以上のヘテロ原子を含みうる。典型的な低級アルキルは、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｔ−ブチル、２−ブチル、ペンチル、ヘキシル等を含む。
【０００８】
「医薬として許容しうる塩」は、式（Ｉ）の化合物の生物学的有効性、及び特性を維持する、慣例の酸付加塩又は塩基付加塩に関し、そして好適な無毒性有機若しくは無機酸又は有機若しくは無機塩基で形成される。酸付加塩の例は、無機酸、例えば塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、リン酸、及び硝酸由来のもの、及び有機酸、例えば酢酸、酒石酸、サリチル酸、メタンスルホン酸、コハク酸、クエン酸、リンゴ酸、乳酸、フマル酸等由来のものを含む。塩基付加塩の例は、アンモニウム塩基、カリウム、ナトリウム、及び第４水酸化アンモニウム、例えばテトラメチルアンモニウム・ヒドロキシド由来のものを含む。
【０００９】
「医薬として許容しうる」、例えば医薬として許容しうる担体、賦形剤等は、薬理学的に許容しうる、そしてその特定の化合物が投与される患者に対して実質的に無毒性であることを意味する。
【００１０】
「医薬として活性な代謝産物」は、医薬として許容しうる、そして有効である式（Ｉ）の化合物の代謝産物を意味する。
【００１１】
「ポリエチレン・グリコール」又は［ＰＥＧ」基は、一般式−Ｒ9 （ＯＣＨ2 ＣＨ2 ）n ＯＨ、ここでｎは平均して２〜１５００、好ましくは１５〜１５０であり、５００〜５０００ダルトンの平均分子量をもち、そして式中のＲ9 がカルボキシ又は低級アルキル、好ましくはメチル若しくはエチルである構造を表す。
【００１２】
「プロドラッグ」は、生理学的条件下又は加溶媒分解により医薬活性化合物に変換されうる化合物に関する。プロドラッグは患者に投与された時は不活性であるが、インビボにおいて活性な化合物に変換される。
【００１３】
置換型アルキルのときの「置換型」は、置換が１以上の位置で起こりうること、及び特に指示されない限り、各置換部位の置換基が指定された選択肢から独立して選ばれることを意味する。
【００１４】
「置換型アミノ」は、他の基、好ましくは低級アルキル（例えばメチル又はエチル）により単基置換又は二基置換されるアミノ基を意味する。
【００１５】
本発明の詳細な説明
具体的には、本発明は、以下の式：
【００１６】
【化１】
0004763623.tif 000002
【００１７】
｛式中、
Ｒは、−ＰＯ3 Ｒ1 Ｒ2 ，−ＣＨＲ3 ＯＣＯＲ4 ，−ＣＨＲ3 ＯＣＯ2 Ｒ4 ，−ＣＨＲ3 ＯＣＯＮＨＲ4 、及び−ＣＯＲ4 から成る群から選ばれ；
Ｒ1 及びＲ2 は、Ｈ，Ｎａ、及びＮＨ4 から成る群から選ばれ、そしてＲ1 又はＲ2 は、その場合にはもう一方が別のものでなくてはならない、いずれかがＨである場合を除いて同じであるか、あるいは、Ｒ1 とＲ2 は一緒にＣａを表し；
Ｒ3 は、Ｈ又はメチルから成る群から選ばれ；
Ｒ4 は以下の
低級アルキル、ここで−ＣＯ2 Ｒ5 ，−ＮＲ6 Ｒ7 、ポリエチレン・グリコール、−ＯＰＯ3 Ｒ1 Ｒ2 、ヒドロキシ、アルコキシ、及びアリールから成る群から選ばれる１以上の置換基によって場合により置換されうる、
アルケニル、ここで−ＣＯ2 Ｒ5 ，−ＮＲ6 Ｒ7 、ポリエチレン・グリコール、−ＯＰＯ3 Ｒ1 Ｒ2 、ヒドロキシ、アルコキシ、及びアリールから成る群から選ばれる１以上の置換基によって場合により置換されうる、
シクロアルキル、ここで−ＣＯ2 Ｒ5 ，−ＮＲ6 Ｒ7 、ポリエチレン・グリコール、−ＯＰＯ3 Ｒ1 Ｒ2 、ヒドロキシ、アルコキシ、及びアリールから成る群から選ばれる１以上の置換基によって場合により置換されうる、
複素環、ここでヘテロ原子としてＮを含む場合、そのＮが−ＣＯＲ8 によって場合により置換されうる、並びに
アリール、ここで−ＣＯ2 Ｒ5 、ヒドロキシ、アルコキシ、ポリエチレン・グリコール、−ＯＰＯ3 Ｒ1 Ｒ2 、並びにそれ自体がヒドロキシ、カルボキシ、及び置換型アミノにより置換されうるアルキルから成る群から選ばれる１以上の置換基によって場合により置換されうる、
から成る群から選ばれ；
Ｒ5 は、Ｈ，Ｎａ又は低級アルキルから成る群から選ばれ；
Ｒ6 及びＲ7 は、Ｈ、低級アルキル、及び−ＣＯＲ8 から選ばれるか、又はあるいは−ＮＲ6 Ｒ7 基が５又は６員複素環の環を形成し；そして
Ｒ8 は、ポリエチレン・グリコールによって場合により置換されうる低級アルキルである。｝により表される置換型ピロール及び上述の化合物の医薬として許容しうる塩に関する。
【００１８】
この発明の化合物は抗増殖性活性をもち、特にそれらは細胞周期のＧ２／Ｍ期の細胞分裂を阻害し、そして一般的に「Ｇ２／Ｍ期細胞周期」阻害剤と呼ばれる。これらは、米国特許第５，０５７，６１４号（Ｄａｖｉｓ  ｅｔ  ａｌ．）の中の抗癌治療薬の活性代謝産物の可溶性プロドラッグであり、そしてそのため継続的な注入デリバリーに好適である。
【００１９】
本発明は、医薬としての有効量のいずれか１以上の前記化合物、及び医薬として許容しうる担体又は賦形剤を含む医薬組成物にさらに向けられる。
【００２０】
本発明は、細胞増殖障害、特に癌、例えば固形腫瘍、乳癌、結腸癌又は肺癌の治療用薬物の成分としてのいずれか１以上の前記化合物の使用にさらに向けられる。
【００２１】
本発明は、このような治療を必要とするヒトの患者に有効量の式（Ｉ）の化合物及び／又はその医薬として許容しうる塩を投与することによる固形腫瘍、特に乳癌又は結腸癌を治療するための方法にも向けられる。
【００２２】
式（Ｉ）の化合物の好ましい態様において、Ｒは−ＣＨＲ3 ＯＣＯＲ4 である。最も好ましくは、Ｒ3 はＨであり、そしてＲ4 はポリエチレン・グリコールにより置換される低級アルキルである。
【００２３】
式（Ｉ）の化合物の他の好ましい態様において、Ｒは−ＣＯＲ4 である。最も好ましくは、Ｒ4 は、複素環及び低級アルキルから成る群から選ばれ、最も好ましくは、低級アルキルが−ＮＲ6 Ｒ7 により置換される。
【００２４】
式（Ｉ）の化合物の他の好ましい態様において、ポリエチレン・グリコールは、約７５０〜約５０００ダルトン、最も好ましくは約２０００ダルトンの分子量をもつ。
【００２５】
以下の化合物：
【００２６】
【化２】
0004763623.tif 000003
【００２７】
は式（Ｉ）の好ましい化合物の例である。
【００２８】
本明細書中に記載され、そして前記の式により包含される化合物は、互変異性又は構造異性を示しうる。本発明がこれらの化合物のあらゆる互変異性体又は構造異性体又は上記形態の混合物を包含し、そして先に描かれた式の中で利用されるいずれか１種の互変異性体又は構造異性体に制限されない。
【００２９】
本発明による化合物の合成
本発明の化合物を、本技術分野で知られる工程により製造する。これらの化合物を合成するために好適な工程を実施例中に与える。一般的に、これらの化合物を請求項１８に示したとおり製造しうる。
【００３０】
より具体的に言うと、Ｒが−ＰＯ3 Ｒ1 Ｒ2 を示し、そしてＲ1 及びＲ2 が前記のとおりである式（Ｉ）の化合物を、以下のスキーム（Ｉ）に示すとおり製造しうる。
【００３１】
スキームＩ
【００３２】
【化３】
0004763623.tif 000004
【００３３】
スキームＩに示されるとおり、３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロール−２，５−ジオン（１）（同時係属のＵＳＳＮ  ０９／２６８，８８７中に記載のとおり製造し、ＵＳＳＮ  ０９／２６８，８８７の関連部分を本明細書中に援用した）を適当な溶媒、例えばＴＨＦ中、強塩基、例えばリチウム・ビス（トリメチルシリル）アミドの存在する中で好適に保護したクロロホスホネートにより処理して、Ｘが当業者の知る好適な保護基、例えばベンジルを表す保護されたホスホン酸誘導体（２）を得た。保護基の除去を当業者によって知られるいずれかの標準的方法により達成し、ホスホン酸（３）を得た。特に、Ｘがベンジル基を表す場合、その保護基をシクロヘキサジエン及び触媒としてのパラジウム担持炭素（ｐａｌｌａｄｉｕｍ  ｏｎ  ｃａｒｂｏｎ）を用いることで除去する。次に化合物（３）をこれも当業者に知られる標準的方法によりその塩（４）、例えばモノナトリウム塩に変換する。Ｒが−ＣＯＲ4 を示す式（Ｉ）の化合物を以下のスキームIIにより製造する。
【００３４】
スキームII
【００３５】
【化４】
0004763623.tif 000005
【００３６】
典型的には、３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロール−２，５−ジオン（化合物（１）、スキームＩに前記のとおり製造される）を非プロトン性溶媒、例えばＴＨＦ中、−６０℃で強塩基、例えばリチウム・ビス（トリメチルシリル）アミドを用いて脱保護する。次に得られたアニオンを既知の酸性塩化物又は既知の方法により製造される酸性塩化物により処理する。あるいは、化合物（１）を既知のカルボン酸又は既知の方法により製造されたカルボン酸と、標準的なアミド結合形成手順、例えばジイソプロピルカルボジイミド及びＨＯＢｔを用いて結合させる。Ｒ4 が好適に保護されたカルボキシル、ヒドロキシアルキル、アミノ又はモノアルキルアミノである化合物（５）を既知の方法により保護基を除去することでさらに修飾し、そして次に得られたカルボキシル、ヒドロキシ又はアミノ基を当業者に知られた方法により所望のアミドに場合により修飾する。
【００３７】
Ｒが−ＣＨＲ3 ＯＣＯＲ4 を示す一般式（Ｉ）の化合物を以下のスキームIII により製造する。
【００３８】
スキームIII
【００３９】
【化５】
0004763623.tif 000006
【００４０】
上記スキームIII に示されるとおり、ヒドロキシ・アルキル誘導体（６）を既知の手順を用いてエステル化する。典型的には、化合物（６）を室温で数時間、ＥＤＣ及びジメチルアミノピリジンの存在する溶媒、例えばメチレン・クロライド中で既知のカルボン酸又は既知の方法により調製されたカルボン酸により処理する。あるいは、ヒドロキシ中間体６を既知のクロライド又は既知の方法により調製された酸クロライドにより処理しうる。あるいは、ヒドロキシ中間体６を既知の酸無水物又は既知の方法により調製された酸無水物により処理しうる。
【００４１】
Ｒ4 がヘテロ芳香族環を含む化合物７を調製するために、ヘテロ原子、例えばＮを、溶媒、例えばアセトニトリル中でのヨウ化アルキル、例えば−ＣＨ3 Ｉとの反応によりさらに修飾しうる。
【００４２】
あるいは、Ｒ4 が好適に保護されたカルボキシル、ヒドロキシアルキル、アミノ又はモノアルキルアミノを含む化合物７を、既知の方法により保護基を除去し、そして次にその得られたカルボキシル、ヒドロキシ又はアミノ基を当業者の知る方法により所望のアミド又はエステルに場合により修飾することによりさらに修飾しうる。
【００４３】
Ｒ3 がＨを示す出発物質６を米国特許出願第０９／２６８，８８７に記載のとおりにも調製されることができ（化合物（II））、そして上記米国特許出願の関連部分を本明細書中に援用する。
【００４４】
Ｒ3 がメチルを示す出発物質６を以下のスキームIVに従って調製しうる。
【００４５】
スキームIV
【００４６】
【化６】
0004763623.tif 000007
【００４７】
化合物８は市販されている（例えばＡｌｄｒｉｃｈから）。
Ｒが−ＣＨＲ3 ＯＣＯ2 Ｒ4 を示し、そしてＲ3 及びＲ4 が前記のとおりである一般式（Ｉ）の化合物を以下のスキームＶに従って調製しうる。
【００４８】
スキームＶ
【００４９】
【化７】
0004763623.tif 000008
【００５０】
典型的には、ヒドロキシ・アルキル誘導体６を−７８〜２０℃の温度でジメチルアミノピリジンの存在する溶媒、例えばジクロロメタン中での既知のクロロホルメート又は既知の手順を用いて調製されたクロロホルメートにより処理されて、所望のカーボネート１４を得る。
【００５１】
Ｒが−ＣＨＲ3 ＯＣＯＮＨＲ4 を示し、そしてＲ3 及びＲ4 が前記のとおりである一般式（Ｉ）の化合物を以下のスキームVIにより調製しうる。
【００５２】
スキームVI
【００５３】
【化８】
0004763623.tif 000009
【００５４】
典型的には、ヒドロキシメチル中間体６を０℃で溶媒、例えばＴＨＦ中、強塩基、例えばリチウム・ビス（トリメチルシリル）アミドを用いて脱プロトンする。次に生じたアニオンを同じ溶媒中でビス（ｐ−ニトロフェニル）カーボネートにより、これに引き続き既知のアミン又は既知の手順を用いて調製したアミンにより処理する。
【００５５】
式（Ｉ）の酸性化合物を当業者に知られる方法により好適な塩基により処理することによって医薬として許容しうる塩に変換しうる。好適な塩は無機塩基由来のもの、例えばナトリウム、カリウム又はカルシウム塩だけでなく、有機塩基由来のもの、例えばエチレンジアミン、モノエタノールアミン又はジエタノールアミンでもある。式（Ｉ）の塩基性化合物の医薬として許容しうる塩への変換を、既知のやり方で好適な酸により処理することで実施しうる。好適な塩は、無機酸由来のもの、例えばハイドロクロライド、ハイドロブロマイド、ホスフェート又はスルフェートだけでなく、有機酸由来のもの、例えばアセテート、サイトレート、フマレート、タルトレート、マレエート、メタンスルホネート又はｐ−トルエンスルホネートでもある。
【００５６】
組成物／製剤
選択しうる態様において、本発明は少なくとも１の式（Ｉ）の化合物又は医薬として許容しうるその塩を含む医薬組成物に向けられる。
【００５７】
これらの医薬組成物は経口的に、例えば錠剤、被覆錠剤、糖衣錠、ハード又はソフト・ゼラチン・カプセル、溶液、エマルジョン又は懸濁液の形態で投与されうる。それらは直腸的に、例えば座剤の形態で投与されることもできる。しかしながら、特に本発明の化合物は非経口投与、例えば注射溶液の形態に好適である。
【００５８】
式（Ｉ）の化合物、その化合物のプロドラッグ又はそれらの塩を含む本発明の医薬組成物は、本技術分野で知られる方法、例えば慣例的な混合、カプセル封入、溶解、粒状化、乳化、封じ込め、糖衣作製又は凍結乾燥処理の利用により製造されうる。これらの医薬組成物は治療として不活性な、無機又は有機担体と一緒に処方されうる。ラクトース、コーンスターチ又はそれらの誘導体、タルク、ステアリン酸又はその塩が錠剤、被覆錠剤、糖衣錠、及びハード・ゼラチン・カプセルの担体として使用されうる。ソフト・ゼラチン・カプセルに好適な担体は、植物油、ワックス、及び脂肪を含む。活性物質の性質により、ソフト・ゼラチン・カプセルの場合、担体を一般的に必要としない。液剤及びシロップの製造に好適な担体は、水、ポリオール、サッカロース、転化糖、及びグルコースである。注射に好適な担体は、水、アルコール、ポリオール、グリセリン、植物油、ホスホリピド、及び界面活性剤である。坐剤に好適な担体は天然又は硬化油、ワックス、脂肪、及び半流動体ポリオールである。
【００５９】
前記医薬製剤は、防腐剤、可溶化剤、安定化剤、湿潤剤、乳化剤、甘味剤、着色剤、香料添加剤、浸透圧を変えるための塩、緩衝剤、コーティング剤又は抗酸化剤を含むこともできる。それらは、式（Ｉ）の化合物の他のさらなる活性成分を含む他の治療として有益な物質を含むこともできる。
【００６０】
投与量
先に触れたとおり、本発明の化合物は細胞の増殖障害、特に腫瘍学的障害の治療又は制御に有用である。前述の化合物を含むこれらの化合物及び製剤は特に固形腫瘍、例えば乳癌及び結腸癌の治療又は制御に有用である。
【００６１】
治療として有効量のこの発明による化合物は、疾患の予防、緩和又は症状の改善、あるいは治療をうけている患者の延命に有効な化合物の量を意味する。治療としての有効量の決定は本技術分野の中にある。
【００６２】
この発明による化合物の治療としての有効量又は投与量は、広い制限の中で変えることができ、そしてそれぞれ特有の場合において個々の要望に適合させられるであろう。一般的に、体重約７０kgの成人への経口又は非経口投与の場合、指示された時に上限を上回ったとしても、約１０mg〜約１０，０００mg、好ましくは約２００mg〜約１，０００mgの日用量が適切である。前記日用量は単回服用又は分割服用又は継続的な注入として与えられうる非経口投与として投与されうる。
【実施例】
【００６３】
本発明の化合物は既知の技術、例えば先に示した一般的スキームより合成されうる。以下の実施例は本発明の化合物及び製剤の合成のための好ましい方法を説明する。
【００６４】
実施例１：３−［２−（２−メトキシ−エトキシ）−エトキシ］−プロピオン酸３−［４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−３−イル］−インドール−１−イルメチル・エステル
無水ＴＨＦ（１２ml）中、懸濁液の１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド・ＨＣｌ（「ＥＤＣ・ＨＣＬ」；Ａｌｄｒｉｃｈ、７７mg、０．４０mmol）をＤＭＡＰ（Ａｌｄｒｉｃｈ）（５５mg、０．４５mmol）により２２℃で２分間処理した。これに３−（１−ヒドロキシメチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロール−２，５−ジオン（１１０mg、０．２６mmol）（以下で調製される）を加えた。前記混合物を２０分間撹拌し、そしてこれに２−（２−メトキシ−エトキシ）−エトキシ］−プロピオン酸（ＣＡＳ：２０９５４２−４９−４）（１２０mg、０．６２mmol）を加えた。撹拌を２２℃で４時間くり返した。全溶媒を蒸発させ、そしてその産物をシリカ・ゲル・クロマトグラフィーにより精製して、１３０mgの３−［２−（２−メトキシ−エトキシ）−エトキシ］−プロピオン酸３−［４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−３−イル］−インドール−１−イルメチル・エステルを得た（収率８０％）。
【００６５】
３−（１−ヒドロキシメチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロール−２，５−ジオンをＵＳＳＮ  ０９／２６８，８８７（化合物II）に記載のとおり調製した。なお、その関連部分を本明細書中に援用する。
【００６６】
実施例２：Ｏ−［２−［［２，５−ジヒドロ−３−［４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−ピロール−３−イル］−インドール−１−イル］メトキシカルボニル］エチル］−Ｏ′−メチルポリエチレン・グリコール２０００
ジクロロメタン中、３−（１−ヒドロキシメチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロール−２，５−ジオン（２００mg、０．５mmol）（実施例１に前記のとおり調製した）の溶液に−７８℃でトリエチルアミン（０．６mmol）、それに続いてＯ−（２−カルボキシエチル）−Ｏ′−メチル・ポリエチレン・グリコール２０００酸クロライド（０．６mmol）（モノ−メチル・ポリエチレン・グリコール２０００プロパン酸から標準的方法により調製した）を加えた。その溶液を室温で３時間撹拌し、そして溶媒を蒸発させた。残渣をシリカ・ゲル・クロマトグラフィーにより精製して、収量１mgのＯ−［２−［［２，５−ジヒドロ−３−［４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−ピロール−３−イル］−インドール−１−イル］メトキシカルボニル］エチル］−Ｏ′−メチルポリエチレン・グリコール２０００を得た（収率８０％）。
【００６７】
実施例３：実施例２と同様の手順を用いることで以下の化合物を製造した：
ａ）２，３−ジメトキシ−安息香酸３−［４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−３−イル］−インドール−１−イルメチル・エステル；
ｂ）３−ジエチルアミノメチル−安息香酸３−［４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−３−イル］−インドール−１−イルメチル・エステル・ハイドロクロライド。
【００６８】
実施例４：３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−１−オクタデカ−９−エノイル−ピロール−２，５−ジオン
ＵＳＳＮ  ０９／２６８，８８７に記載のとおり調製した３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロール−２，５−ジオン（２５０mg、０．６５mmol）の溶液をＴＨＦ（１５ml）中に溶解し、そして−６０℃まで冷却した。この溶液にリチウム・ビス（トリメチルシリル）アミド（０．７mmol、０．７ml、ＴＨＦ中１．０Ｍ）、続いてＴＨＦ（５ml）中、オレイル・クロライド（Ａｌｄｒｉｃｈ）（０．３００ｇ、１．０mmol）を加えた。得られた混合物を０℃で１時間撹拌した。全溶媒を蒸発させ、そして未処理物質をシリカ・ゲル・クロマトグラフィーにより予備精製した。得られた産物を酢酸とヘキサンのグラジエントを用いたシリカ・ゲル・クロマトグラフィーを用いて分離した。これで３１０mgの３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−１−オクタデカ−９−エノイル−ピロール−２，５−ジオンを得た（収率７０％）。
【００６９】
実施例５：｛３−［４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−３−イル］−インドール−１−イル｝−ホスホン酸
ａ）３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロール−２，５−ジオン（２１０mg、０．５５mmol）の溶液をＴＨＦ（１５０ml）中に、ＵＳＳＮ  ０９／２６８，８８７に記載のとおり調製し、そして−７０℃まで冷却した。この溶液にリチウム・ビス（トリエチルリシル）アミド（１．５mmol、１．５ml、２．５当量、ＴＨＦ中、１．０Ｍ）を加えた。これにＴＨＦ（５ml）中、ジベンジル・クロロホスフェート（ＣＡＳ：５３８−３７−４）（５００mg、１．６mmol）を加えた。冷却浴を取り外し、そしてその溶液の温度が−４０℃に達した時、その溶液を水に注ぎ、そして酢酸エチル／ヘキサン（１：４）により抽出した。前記有機溶媒を水により洗浄し、水分を除き、そして蒸発させた。残渣を精製し、そして酢酸エチル／ヘキサンのグラジエントを用いたシリカ・ゲル・クロマトグラフィーにより成分産物に分離した。これで１５０mgの｛３−［４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−３−イル］−インドール−１−イル｝−ホスホン酸ジベンジル・エステルを得た（収率４３％）。
【００７０】
ｂ）ＴＨＦ／エタノール（３ml／６ml）の混合液中、｛３−［４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−３−イル］−インドール−１−イル｝−ホスホン酸ジベンジル・エステル（５０mg、０．０８mmol）（前記ステップａ）から）を１０％Ｐｄ／Ｃ（７５mg）及び１，４−シクロヘキサジエン（０．５ml）により処理し、そして３５〜４０℃で２時間加温した。その反応物を冷却し、セライトを通してろ過し、そして蒸発させて乾燥させた。結晶をＴＨＦ／ヘキサンから得て２０mgの｛３−［４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−３−イル］−インドール−１−イル｝−ホスホン酸を得た（収率５５％）。
【００７１】
実施例６：３−（１−アセチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロール−２，５−ジオン
ＴＨＦ（２０ml）中、ＵＳＳＮ  ０９／２６８，８８７に記載のとおり３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロール−２，５−ジオン（５１mg、０．１３mmol）の溶液を調製し、そして−７０℃まで冷やした。この溶液にリチウム・ビス（トリメチルシリル）アミド（０．５mmol、０．５ml、３．８等量、ＴＨＦ中、１．０Ｍ）、続いて過剰のアセチル・クロライド（０．１ml）を加えた。得られた溶液を−４５℃に達するまで撹拌した。反応物を蒸発させ、そしてシリカ・ゲル・クロマトグラフィーにより精製して３３mgの３−（１−アセチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロール−２，５−ジオンを得た（収率６５％）。
【００７２】
実施例７：トリフルオロ−酢酸３−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−４−［１−（ピペリジン−４−カルボニル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−ピロール−２，５−ジオン
１．５等量のＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−ピペリジン−４−カルボン酸（Ｂａｃｈｅｍ，ＣＡ）をＴＨＦ中、３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロール−２，５−ジオン（ＵＳＳＮ  ０９／２６８，８８７に記載のとおり調節した（化合物１）、そしてこの関連部分を本明細書中に援用する）の溶液に加えた。各１．３等量のジイソプロピル・カルボジイミド及びＮ−ヒドロキシベンズトリアゾールを加えた。この溶液を室温で６．５時間撹拌した。少量のセシウム・カーボネート及び０．５ml  ＤＭＦを加えた。この反応物を２０分間撹拌した。次に反応混合物をＣＨ2 Ｃｌ2 により希釈し、そして飽和ＮＨ4 Ｃｌ及び水により洗浄した。その産物をフラッシュ・クロマトグラフィーにより精製した（収率９２％）。得られたＢＯＣ保護アミンをＣＨ2 Ｃｌ2 中に希釈し、そしてトリフルオロ酢酸により室温で１時間処理した。溶媒を蒸発させ、そして残渣をＨＰＬＣにより精製してトリフルオロ−酢酸；３−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−４−［１−（ピペリジン−４−カルボニル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−ピロール−２，５−ジオンを得た（収率５４％）。
【００７３】
実施例８：３−（１−アミノアセチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロール−２，５−ジオン・ハイドロクロライド
１．０５等量のＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グリシン（Ｂａｃｈｅｍ，ＣＡ）、及び１等量の３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロール−２，５−ジオン（前記のとおり調製）をＴＨＦ中に溶解した。各１．３等量のＮ−ヒドロキシベンゾトリアゾール及びジイソプロピルカルボジイミドを加え、そしてその反応液を５時間撹拌した。少量のセシウム・カーボネート及びＤＭＦを加えた。この反応液を３０分間撹拌した。反応混合物を酢酸エチル及びエーテルにより希釈し、水により洗浄し、そして硫酸ナトリウム上で水分を除いた。得られた３−［Ｎ−ブチルオキシカルボニル−（１−アミノアセチル−１Ｈ−インドール−３−イル）］−４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロール−２，５−ジオンを前処理ＴＬＣプレートにより精製した（収率５３％）。ＢＯＣ保護産物をＴＨＦ中に溶解し、そして１２Ｎ  ＨＣｌを滴下して加えた。その反応物を室温で２時間撹拌した。その反応物をＮ2 流下で濃縮し、そしてＨＰＬＣにより精製して０．０２６ｇの３−（１−アミノアセチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロール−２，５−ジオンを得た（収率９５％）。
【００７４】
実施例９：酢酸３−［４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−３−イル］−インドール−１−イルメチル・エステル
３mlの無水酢酸（Ａｌｄｒｉｃｈ）中、３−（１−ヒドロキシメチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロール−２，５−ジオン（１２０mg、０．２８８mmol）（ＵＳＳＮ  ０９／２６８，８８７に記載のとおり調製（化合物II））のスラリーを室温で１９時間、そして１００℃で２．５時間撹拌した。得られた溶液を冷やし、水により希釈し、硫酸マグネシウム上で水分を除き、そして蒸発させた。残渣をＦｔＯＡｃ／ヘキサンを用いたフラッシュ・クロマトグラフィーにより精製して７７．１mgの酢酸３−［４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−３−イル］−インドール−１−イルメチル・エステルを得た（収率５３％）。
【００７５】
実施例１０：ペンタン二酸モノ−｛３−［４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−３−イル］−インドール−１−イルメチル｝エステル
５mlのＥｔＯＡｃ中、３−（１−ヒドロキシメチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロール−２，５−ジオン（１０３mg、０．２４８mmol）、（実施例１の中に前記のとおり調製した）、無水グルタリル（３５．１mg、０．３０８mmol)（Ａｌｄｒｉｃｈ）、及びトリエチルアミン（０．０３ml、０．９２４mmol）の溶液を還流しながら６時間加熱した。その溶液を冷やし、ＥｔＯＡｃにより希釈し、０．５Ｎ  ＨＣｌ、水、食塩水により洗浄し、硫酸マグネシウム上で水分を除き、そして蒸発させた。残渣をＥｔＯＡｃ／アセトンを用いたフラッシュ・クロマトグラフィーにより精製して３５mgのペンタン二酸モノ−｛３−［４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−３−イル］−インドール−１−イルメチル｝エステルを得た（収率２７％）。
【００７６】
実施例１１：２，３−ジメトキシ−安息香酸１−｛３−［４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−３−イル］−インドール−１−イル｝エチル・エステル
ａ）７５mlのＤＭＦ中、ＮａＨ（１．９２ｇの油中６０％分散液）の懸濁液にインドール（４．６８ｇ、４０mmol）（Ａｌｄｒｉｃｈ）を加えた。この混合物を０℃で１５分間撹拌し、そして１−クロロエチル・メチルエーテル（４ml）を滴下して加えた。得られた混合物を０℃で１時間撹拌し、そして氷／水上に注ぎ、そしてトルエンにより抽出した。その有機層を硫酸マグネシウム上で水分を除き、そして蒸発させた。残渣をＥｔＯＡｃ／ヘキサンを用いたフラッシュ・クロマトグラフィーにより精製して４ｇの１−［１−メトキシエチル］インドールを得た（収率５８％）。
【００７７】
ｂ）０℃で無水ジエチル・エーテル中、１−（１−エトキシエチル）インドール（４ｇ、２３mmol）（先のステップａ）に記載のとおり調製した）の溶液にオキサリル・クロライド（４．２ml、４８mmol）を５分間かけて加えた。得られたスラリーを０℃で５時間撹拌し、そしてろ過して１．９ｇの［１−（１−メトキシ−エチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−オキソ−アセチル・クロライドを得た（収率３１％）。この物質をさらなる精製なしに用いた。
【００７８】
ｃ）０℃で７５mlのＣＨ2 Ｃｌ2 中、［１−（１−メトキシ−エチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−オキソ−アセチル・クロライド（１．９ｇ、７．１５mmol）（先のステップｂ）から）、及び［１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール］−３−エテンイミド酸−１−メチルエチル・エステル・ハイドロクロライド（２．３ｇ、７．３mmol）（ＵＳＳＮ  ０９／２６８，８８７のスキーム２中の化合物１５）のスラリーにトリエチルアミン（３．６ml、２５．８mmol）を３分間かけて加えた。この混合物を０℃で４時間撹拌し、そして０．５Ｎ  ＨＣｌにより抽出した。水層をＣＨ2 Ｃｌ2 により抽出し、そして組合わせたＣＨ2 Ｃｌ2 層を水、食塩水により洗浄し、硫酸マグネシウム上で水分を除き、そして蒸発させた。残渣を７０mlのトルエン中に溶解し、そして得られた溶液を０℃まで冷やした。ｐ−トルエンスルホン酸ハイドレート（１．４ｇ、７．３６mmol）を加え、そしてその混合物を０℃で１時間撹拌した。そのスラリーを飽和ＮａＨＣＯ3 により洗浄し、そして２回、５０mlのＥｔＯＡｃにより抽出した。組合わせたＥｔＯＡｃ層を硫酸マグネシウム上で水分を除き、そして蒸発させて、赤い粘着性の固体として４．１ｇ（収率１００％）の３−［１−（１−メトキシ−エチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロール−２，５−ジオンを得て、そしてこれを精製なしに用いた。
【００７９】
ｄ）１００mlのＴＨＦ中、３−［１−（１−メトキシ−エチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロール−２，５−ジオン（３．７５ｇ）（先のステップｃ）より）の溶液に２Ｎ  ＨＣｌ（７５ml）を加えた。その溶液を室温で３時間撹拌し、そしてＥｔＯＡｃ及び食塩水中に注いだ。層を分離し、そして水層をＥｔＯＡｃにより抽出した。組合わせたＥｔＯＡｃ層を硫酸マグネシウム上で水分を除き、そして蒸発させた。残渣をＥｔＯＡｃ／ヘキサンを用いたフラッシュ・クロマトグラフィーにより精製して、１．１ｇ（収率３３％）の３−［１−（１−ヒドロキシ−エチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロール−２，５−ジオンを得た。
【００８０】
ｅ）２０mlのＣＨ2 Ｃｌ2 中、３−［１−（１−ヒドロキシ−エチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロール−２，５−ジオン（１６５．３mg、０．６７８mmol）（先のステップｄ）より）、ＥＤＣ・ＨＣｌ（２８４．５mg、１．４８４mmol）、及びジメチルアミノピリジン（１８５．５mg、１．５８mmol）の溶液に２，３−ジメトキシ安息香酸（２８７．４mg、０．６６８mmol）を加えた。その溶液を室温で０．５時間撹拌し、飽和ＮａＨＣＯ3 、食塩水により洗浄し、硫酸マグネシウム上で水分を除き、そして蒸発させた。残渣をＥｔＯＡｃ／ヘキサンを用いたフラッシュ・クロマトグラフィーにより精製して２０３mgの２，３−ジメトキシ−安息香酸１−｛３−［４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−３−イル］−インドール−１−イル｝−エチル・エステルを得た（収率５０％）。
【００８１】
実施例１２：３−ジエチルアミノメチル−安息香酸１−｛３−［４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−３−イル］−インドール−１−イル｝−エチル・エステル・ハイドロクロライド
３−ジエチルアミノメチル−安息香酸１−｛３−［４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−３−イル］−インドール−１−イル｝−エチル・エステル・ハイドロクロライドを出発物質として３−ジエチルアミノメチル安息香酸（ＣＡＳ：１３７６０５−７７−７）を用いた先の実施例１１ｅ）の手順により製造した（収率５０％）。
【００８２】
実施例１３：カルボン酸モノ−メチルポリエチレングリコール２０００エステル、３−［４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−３−イル］−インドール−１−イルメチルエステル
モノメチルポリエチレングリコール（平均分子量＝２０００）（１ｇ、０．５mmol）を過剰のトルエン溶液の２０％ホスゲンにより室温で２４時間処理し、そして蒸発させた。得られたジクロロメタン中のクロロホルメートを、ドライ・アイス／アセトン冷却した、ジクロロメタン中、３−（１−ヒドロキシメチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロール−２，５−ジオン（２０８mg、０．５mmol）（実施例１中に前記したとおり調製した）及び４−ジメチルアミノピリジン（２４４mg、２mmol）に加えた。冷却浴を取り外し、そして前記混合物を室温で１時間撹拌した。その反応混合物をメタノール／ジクロロメタンを用いたフラッシュ・クロマトグラフィー、続いてＴＨＦ／エチル・エーテルからの産物画分の結晶化により精製して、オレンジ色の固体として０．８ｇの炭酸モノ−メチルポリエチレングリコール２０００エステル、３−［４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−３−イル］−インドール−１−イルメチルエステル、融点４６〜４８を得た（収率６５％）。
【００８３】
実施例１４：モノ−メチルポリエチレングリコール２０００−カルバミン酸、３−［４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−３−イル］−インドール−１−イルメチル・エステル
リチウム・ビス（トリメチルシリル）アミド（０．２５ml、０．２５mmol、ＴＨＦ中１Ｍ）を０℃でＴＨＦ（５ml）中、３−（１−ヒドロキシメチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロール−２，５−ジオン（１０４mg、０．２５mmol）（実施例１中に前記したとおり調製した）の溶液に滴下して加えた。１０分後、ビス（ｐ−ニトロフェニル）カーボネート（８４mg、０．２７５mmol）を加え、そしてその溶液を０℃で１０分間撹拌した。メトキシ−ＰＥＧ２０００−アミン（０．６ｇ、０．３mmol）（Ｓｈｅａｒｗａｔｅｒ  Ｐｏｌｙｍｅｒｓ，Ｉｎｃ．）を加え、そしてその混合物を固体を溶かすために４０℃未満まで加温した。得られた溶液を室温で２時間撹拌し、そして蒸発させて溶媒を除去した。残渣をメタノール／ジクロロメタンを用いたシリカ・ゲルによるクロマトグラフィーにより分離し、続いてＴＨＦ／エチル・エーテルからの産物画分の結晶化によって、オレンジ色の固体として、０．４２５ｇのモノ−メチルポリエチレングリコール２０００−カルバミン酸、３−［４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インド−３−イル）−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−３−イル］インドール−１−イルメチル・エステル、融点４９〜５１℃を得た（収率７０％）。
【００８４】
実施例１５：抗増殖性活性
本発明の化合物の抗増殖性活性を以下に証明する。これらの結果は、本発明の化合物が癌、特に固形腫瘍、例えば乳及び結腸の腫瘍の治療に有用であることを示す。
【００８５】
ＭＤＡＭＢ−４３５細胞に基づいたアッセイ
上皮乳癌細胞株（ＭＤＡＭＢ−４３５）をＡＴＣＣ（アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション）から購入し、そしてＡＴＣＣにより推奨された培地中での培養により育てた。これらの細胞の増殖に対する式（Ｉ）のさまざまな化合物の効果の分析のために、前記細胞を９６ウェル組織培養プレート（「テスト・プレート」）に１５００細胞／ウェルの濃度で蒔いた。細胞を蒔いた翌日、観察されるべき化合物を１００％ＤＭＳＯ（ジメチル・スルフォキシド）に溶かし１０mMの保存溶液を得た。各化合物をＨ2 Ｏにより１mMに希釈し、そして培地を含む９６ウェル・マスター・プレートの最初の列の３のウェルに加えて４０μＭの終濃度を得た。次にその化合物を「マスター・プレート」の培地により連続的に希釈した。次に希釈した化合物を細胞を含むテスト・プレートに移した。「対照細胞」容器の列にはＤＭＳＯを入れた。各ウェル中のＤＭＳＯの終濃度は０．１％であった。薬剤添加５日後、前記を下記のとおり分析した。
【００８６】
ＭＴＴ（３−（４−５メチル・チアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニル・テトラゾリウム・ブロマイド；チアゾールイル・ブルー）を各ウェルに加えて１mg／mlの終濃度を得た。次にそのプレートを３７℃で２ 2／1 〜３時間インキュベートした。次にＭＴＴ含有培地を除き、そして各ウェルに５０μｌの１００％エタノールを加えてホルマザンを溶解した。次に吸光度を自動化プレート・リーダー（Ｂｉｏｔｅｋ  ｍｉｃｒｏｐｌａｔｅ  ｒｅａｄｅｒ）を用いて読んだ。ＩＣ50尺度をＲｅｅｄ及びＭｕｎｓｃｈの方程式を用いて計算した。Ａｍ．Ｊ．Ｈｙｇｉｅｎｅ  Ｖｏｌ．２７ｐｇｓ．４９３−４９７，１９３８を参照のこと。
【００８７】
前記のインビトロにおける実験の結果を以下の表Ｉに示す。
表Ｉの各化合物はＩＣ50＜０．３μＭである。
【００８８】
【表１】
0004763623.tif 000010
【００８９】
【表２】
0004763623.tif 000011
【００９０】
これらの化合物は、継続的な注入による患者への投与に好適である。
【００９１】
実施例１６：錠剤製剤
【００９２】
【表３】
0004763623.tif 000012
【００９３】
製造手順：
１．品目１，２、及び３を好適なミキサーにより１５分間混合する。
２．ステップ１からの粉末混合物を２０％  Ｐｏｖｉｄｏｎｅ  Ｋ３０溶液（品目４）により粒状にする。
３．ステップ２からの顆粒を５０℃で乾かす。
４．ステップ３からの顆粒に好適な製粉装置を通過させる。
５．品目５をステップ４の製粉した顆粒に加え、そして３分間混合する。
６．ステップ５からの顆粒を好適な圧縮機により圧縮する。
【００９４】
実施例１７：カプセル製剤
【００９５】
【表４】
0004763623.tif 000013
【００９６】
製造手順：
１．品目１，２、及び３を好適なミキサーにより１５分間混合する。
２．品目４及び５を加え、そして３分間混合する。
３．好適なカプセルに詰める。
実施例１８：注射液／乳液製剤
【００９７】
【表５】
0004763623.tif 000014
【００９８】
製造手順：
１．品目１を品目２の中に溶かす。
２．品目３，４、及び５を品目６に加え、そして分散するまで混合した後に均質化する。
３．ステップ１からの溶液をステップ２からの混合物に加え、そしてその分散液が半透明になるまで均質化する。
４．０．２μｍフィルターを通してろ過滅菌し、そしてバイアルに詰める。
【００９９】
実施例１９：注射液／乳液製剤
【０１００】
【表６】
0004763623.tif 000015
【０１０１】
製造手順：
１．品目１を品目２の中に溶かす。
２．品目３，４、及び５を品目６に加え、そして分散するまで混合した後に均質化する。
３．ステップ１からの溶液をステップ２からの混合物に加え、そしてその分散液が半透明になるまで均質化する。
４．０．２μｍフィルターを通してろ過滅菌し、そしてバイアルに詰める。
本発明が特有の、及び好ましい態様の言及により説明される一方で、当業者は、変異型及び改良型が慣例の実験及び本発明の実施を通して作られうることを理解するであろう。したがって、本発明は、先の記載により制限されず、添付された請求項及びそれらの同等物により定められることを意図する。