(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下式を有する化合物：
【化１】
0004615712.tif 000011
Ｒ１は、Ｈ、ＯＨ又はＯＣＨ３であり、
Ｒ２及びＲ３は、それぞれ独立してＨ又はＯＨであり、
Ｒ４は
【化２】
0004615712.tif 000012
からなる群より選択される糖残基である。
【請求項２】
請求項１記載の化合物を少なくとも１つ含んでなる医薬組成物。
【請求項３】
請求項１記載の化合物の調製方法であって、前記方法が以下の工程を含んでなる：
無水メタノール中、ｐ−トルエンスルホン酸及び水素化シアノホウ素ナトリウムを用いて、アントラサイクリン１３−トシルヒドラゾンの還元溶液を形成すること；
窒素下で当該溶液を穏やかに還流すること；
当該溶液を冷却すること；
当該溶液に水とクロロホルムを添加すること；
無水硫酸ナトリウムを添加すること；
沈澱を濾過すること；
シリカゲルカラム上で濾液を単離すること；
分解の結果生じる疎水性不純物を、クロロホルムとメタノールの混合溶液で溶出すること；
生成物をメタノールで溶出すること；
さらにプレパラティブＨＰＬＣでメタノール溶出液を精製すること；
精製された生成物の、メチレンクロライド及び水での溶液を形成すること；
炭酸水素カリウム及び炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルを添加すること；
Ｎ−Ｂｏｃで保護された生成物を単離すること；
３’−Ｎ−Ｂｏｃ−１３−デオキシアントラサイクリンを無水メタノール中で溶解させること；
当該溶液を冷却すること；
３’−Ｎ−Ｂｏｃ−１３−デオキシアントラサイクリンのアミノ化を行うために、当該溶液をアンモニアで飽和させること；
溶媒とアンモニアを除去すること；
無水メタノール中で残渣を溶解させること；
３’−Ｎ−Ｂｏｃ基を除去するために、塩化水素を添加し、反応させること；
当該溶液を濃縮すること；
プレパラティブＨＰＬＣで生成物を単離すること；
当該生成物を、請求項１記載の化合物の塩酸塩に変換すること。
【請求項４】
前記還元溶液が７．０以下のｐＨを有する、請求項３記載の方法。
【請求項５】
前記還流が６８℃〜７２℃の温度で行われる、請求項４記載の方法。
【請求項６】
前記還流が６５℃〜７５℃の温度で行われる、請求項４記載の方法。
【請求項７】
前記還流が７５℃までの温度で行われる、請求項３記載の方法。
【請求項８】
前記還流が酸素の非存在下で行われる、請求項３記載の方法。
【請求項９】
前記還流が水の非存在下で行われる、請求項３記載の方法。
【請求項１０】
前記還流が窒素雰囲気下で行われる、請求項３記載の方法。
【請求項１１】
前記還流が不活性ガス雰囲気下で行われる、請求項３記載の方法。
【請求項１２】
前記アミノ化が０〜４℃で行われる、請求項３記載の方法。
【請求項１３】
前記アミノ化が水の非存在下で行われる、請求項３記載の方法。
【請求項１４】
前記方法による請求項１記載の化合物の収率が４０％〜５０％である、請求項３記載の方法。
【請求項１５】
請求項１記載の化合物の調製方法であって、前記方法が以下の工程を含んでなる：
水素化シアノホウ素を用いて、アントラサイクリン１３−トシルヒドラゾンの酸性溶液を形成すること；
当該溶液を穏やかに還流すること；
当該反応混合物を冷却すること；
当該反応混合物に水を添加すること；
当該反応混合物にハロゲン化炭素溶媒を添加すること；
無水硫酸ナトリウムを添加すること；
当該反応混合物を濾過すること；
濾液を酸性化すること；
生成物を単離するために、当該濾液をプレパラティブクロマトグラフィーに付すること；
無機塩を除去するために、ＨＰＬＣで精製されたフラクションを、ＨＰＬＣに付すること；
二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルを用いて、生成物の塩基性溶液を形成すること；
室温で当該溶液を反応させること；
Ｂｏｃで保護された誘導体を抽出すること；
Ｂｏｃで保護された誘導体の溶液を形成すること；
室温でアンモニアを用いて当該溶液を処理すること；
溶媒とアンモニアを留去すること；
酸性溶液で残渣を処理すること；
当該溶液を留去すること；
請求項１記載の化合物を単離するために、当該溶液をプレパラティブＨＰＬＣに付すること；
無機塩を除去するために、ＨＰＬＣで精製されたフラクションを、ＨＰＬＣに付すること；及び
請求項１記載の化合物を溶出し、単離すること。
【請求項１６】
請求項１記載の化合物の調製方法であって、前記方法が以下の工程を含んでなる：
無水メタノール５０ｍＬ中に、ドキソルビシン１３−トシルヒドラゾン塩酸塩１ｇとｐ−トルエンスルホン酸２．４ｇを溶解させて、溶液を形成すること；
当該溶液に水素化シアノホウ素ナトリウム０．８ｇを添加すること；
６８℃〜７２℃の温度になるまで、当該溶液を加熱すること；
窒素雰囲気下、１時間、当該溶液を穏やかに還流すること；
当該反応混合物を２０ｍｌになるまで濃縮すること；
０℃〜４℃の温度になるまで、当該反応混合物を冷凍庫中で冷却すること；
当該反応混合物に水０．５ｍｌを添加すること；
当該反応混合物にクロロホルム２００ｍｌを添加すること；
当該反応混合物に無水硫酸ナトリウムを添加すること；
当該反応混合物から塩を濾過すること；
シリカゲルカラムに当該溶液を流すこと；
溶出液が無色になるまで、クロロホルム／メタノールでそのカラムをさらに洗浄すること；
生成物を含有するフラクションをメタノールで溶出すること；
メタノール溶出液を留去すること；
留去により得られた残渣を、３０％アセトニトリル−ギ酸アンモニウム緩衝液中に溶解させること；
フェニルカラムを用いてプレパラティブＨＰＬＣで生成物を単離すること；
アセトニトリル／ギ酸アンモニウムグラディエントを用いて、他の不純物から当該生成物を分離すること；
ＨＰＬＣで精製されたフラクションを水で希釈すること；
フェニルＨＰＬＣカラムに当該溶液を流すこと；
当該カラムを水で溶出すること；
当該生成物をメタノールで溶出すること；
当該溶液を５ｍｌになるまで濃縮すること；
ジエチルエーテル１０ｍｌを用いて、当該生成物を沈澱させること；
当該沈澱を濾過して、固体の生成物６００ｍｇを得ること；
メチレンクロライド６０ｍｌ及び水１０ｍｌ中で、炭酸水素カリウム１８０ｍｇ及び二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル１８０ｍｇを用いて、生成物６００ｍｇの溶液を形成すること；
室温で２時間、当該溶液を反応させること；
当該有機溶液を分離すること；
当該有機溶液を水で洗浄すること；
当該溶液を無水硫酸ナトリウムで乾燥すること；
当該溶媒を留去すること；
無水メタノール１００ｍｌ中に、当該残渣を溶解させること；
０〜４℃で４８時間、当該溶液を飽和アンモニア下で保持すること；
当該溶液を留去すること；
０．１Ｍ塩化水素を含有する無水メタノール６０ｍｌ中に、当該残渣を溶解させること；
室温で２時間、当該溶液を反応させること；
当該溶液を５ｍｌになるまで濃縮すること；
フェニルカラムを用いてプレパラティブＨＰＬＣで生成物を単離すること；
アセトニトリル／ギ酸アンモニウムグラディエントを用いて、他の不純物から当該生成物を分離すること；
ＨＰＬＣで精製されたフラクションを水で希釈すること；
フェニルＨＰＬＣカラムに当該溶液を流すこと；
ギ酸アンモニウムを水で溶出すること；
当該生成物をメタノールで溶出すること；
当該溶液を５ｍｌになるまで濃縮すること；
当該生成物を塩酸塩に変換すること；
当該生成物をジエチルエーテル１０ｍｌで沈澱させること；及び
当該沈澱を濾過して、固体の請求項１記載の化合物の塩酸塩３６０ｍｇを得ること。
【請求項１７】
Ｒ１がＯＣＨ３、Ｒ２がＯＨ、Ｒ３がＯＨ、Ｒ４が
【化３】
0004615712.tif 000013
である請求項１記載の化合物。
【請求項１８】
Ｒ１がＯＣＨ３、Ｒ２がＯＨ、Ｒ３がＨ、Ｒ４が
【化４】
0004615712.tif 000014
である請求項１記載の化合物。
【請求項１９】
Ｒ１がＯＨ、Ｒ２がＯＨ、Ｒ３がＨ、Ｒ４が
【化５】
0004615712.tif 000015
である請求項１記載の化合物。
【請求項２０】
Ｒ１がＯＣＨ３、Ｒ２がＯＨ、Ｒ３がＯＨ、Ｒ４が
【化６】
0004615712.tif 000016
である請求項１記載の化合物。
【請求項２１】
Ｒ１がＨ、Ｒ２がＯＨ、Ｒ３がＨ、Ｒ４が
【化７】
0004615712.tif 000017
である請求項１記載の化合物。
【請求項２２】
Ｒ１がＨ、Ｒ２がＯＨ、Ｒ３がＯＨ、Ｒ４が
【化８】
0004615712.tif 000018
である請求項１記載の化合物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
発明分野
本発明は、５−イミノ−１３−デオキシアントラサイクリン誘導体、５−イミノ−１３−デオキシアントラサイクリンの医薬用途、及び、５−イミノ−１３−デオキシアントラサイクリン誘導体の調製方法に関する。
【０００２】
発明の背景
最もよく知られたアントラサイクリン抗癌薬は、ドキソルビシンとダウノルビシンであり、これらは１３−ケト基及び５−ケト基を含有する。ドキソルビシンは、米国特許３，５９０，０２８に開示されているが、これは、広い範囲の抗癌効果を有し、白血病、リンパ腫及び固体腫瘍の治療に用いられる。ダウノルビシンは、米国特許３，６１６，２４２に開示されているが、これは急性白血病の治療に有用である。しかしながら、これら薬物の有用性は、心臓毒性という重篤な副作用によって制限されるので、患者に投与可能な総薬物量は５５０ｍｇ／Ｍ2 を超えることはできない（Ｅ．Ａ．Ｌｅｆｒａｋら、Ｃａｎｃｅｒ，３２：３０２，１９７３）。推奨される最大総累積投与量（４３０〜６５０ｍｇ／Ｍ2 ）又はこれに近い量を用いてでさえ、患者の６０％に、著しい持続性の心機能障害が生じ、患者の１４％は、うっ血性心不全を発現した（Ａ．Ｄｒｅｓｄａｌｅら、Ｃａｎｃｅｒ，５２：５１，１９８３）。このように、これら薬物は癌腫瘍の成長を阻止するために有用であるが、患者は、当該薬物の重度の心臓毒性の副作用のために、うっ血性心不全で死ぬかもしれない。
【０００３】
アントラサイクリン分子のキノン部分によってフリーラジカルが発生した結果、心臓毒性が起こると信じている研究者もいる（Ｊ．Ｄｏｒｏｗｓｈｏｗら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．，６８：１０５３，１９８１；Ｄ．Ｖ．Ｕｎｖｅｒｆｅｒｔｈら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｒｅａｔ．Ｒｅｖ．，９：１４９，１９８２；Ｊ．Ｇｏｏｄｍａｎら、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．，７７：７９７，１９７７；Ｊ．Ｌ．Ｚｗｅｉｅｒ，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２５９：６０５６，１９８４）。一方、フリーラジカルの発生が心臓毒性の唯一のメカニズムではないかもしれないという良い証拠がある。なぜならば、フリーラジカルスカベンジャーの存在下でも、当該薬物はまだ心臓に損傷を与えるからである（Ｊ．Ｆ．ＶａｎＶｌｅｅｔら、Ａｍ．Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．，９９：１３，１９８０；Ｄ．Ｖ．Ｕｎｖｅｒｆｅｒｔｈら、Ａｍ．Ｊ．Ｃａｒｄｉｏｌ．，５６：１５７，１９８５；Ｃ．Ｍｙｅｒｓら、Ｓｅｍｉｎａｒｓ  ｉｎ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，１０：５３，１９８３；Ｒ．Ｈ．Ｍ．Ｊｕｌｉｃｈｅｒら、Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，３８：２７７，１９８６；Ｅ．Ａ．Ｐｏｒｔａら、Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍ．Ｃｈｅｍ．Ｐａｔｈｏｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，４１：１２５，１９８３）。
【０００４】
フリーラジカルの発生を阻止しても、これらアントラサイクリンの心臓毒性は除去されないということも見出されている（Ｐ．Ｓ．Ｍｕｓｈｌｉｎら、Ｆｅｄ．Ｐｒｏｃ．，４５：８０９，１９８６）。その代わりとして、心筋収縮性の低下によって明らかにされるように、ドキソルビシンとダウノルビシンの心臓毒性は、１３−ケト部分の１３−ジヒドロ代謝物への代謝的還元にも依存していることを、この研究は示す。感知されるほどには、ドキソルビシンが１３−ジヒドロ化合物に代謝されない試験系においては、心臓毒性効果は、極めて高濃度（２００〜４００μｇ／ｍｌ）においてのみ観察される（Ｐ．Ｓ．Ｍｕｓｈｌｉｎら、Ｆｅｄ．Ｐｒｏｃ．，４４：１２７４，１９８５；Ｒ．Ｄ．Ｏｌｓｏｎら、Ｆｅｄ．Ｐｒｏｃ．，４５：８０９，１９８６）。これに対して、１３−ジヒドロ代謝物であるドキソルビシノールとダウノルビシノールは、これら同じ試験系において、比較的低濃度（１〜２μｇ／ｍｌ）で心臓毒性を生じる（Ｒ．Ｄ．Ｏｌｓｏｎら、Ｐｒｏｃｅｅｄ．Ａｍ．Ａｓｓｏｃ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，２６：２２７，１９８５；Ｒ．Ｄ．Ｏｌｓｏｎら、Ｐｒｏｃｅｅｄ．Ａｍ．Ａｓｓｏｃ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，２８：４４１，１９８７）。
【０００５】
もしドキソルビシンが、短時間でも当該試験系に留まるのであれば、いくつかの代謝的変換が起こり、十分な量の１３−ジヒドロ代謝物が形成されるので、心臓毒性が発現し始める（Ｌ．Ｒｏｓｓｉｎｉら、Ａｒｃｈ．Ｔｏｘｉｃｏｌ．ｓｕｐｐｌ．，９：４７４，１９８６；Ｍ．Ｄｅｌ  Ｔｏｃｃａら、Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．，１７：１０７３，１９８５）。このように、ドキソルビシンやダウノルビシンのような薬物の心臓毒性は、それらの１３−ジヒドロ代謝物によって得られる有効な心臓毒性効果から生じるという実質的な証拠が集まってきている（Ｐ．Ｍｕｓｈｌｉｎら、Ｒａｔｉｏｎａｌ  Ｄｒｕｇ  Ｔｈｅｒａｐｙ，２２：１，１９８８；Ｓ．Ｋｕｙｐｅｒら、ＦＡＳＥＰ  Ｊｏｕｒｎａｌ，２：Ａ１１３３，１９８８；Ｒ．Ｂｏｕｃｅｋら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２６２：１５８５１，１９８７；及び、Ｒ．Ｏｌｓｏｎら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，８５：３５８５，１９８８）。
【０００６】
ドキソルビシン、ダウノルビシン又は他の同様なアントラサイクリンの１３−デオキシ体は、心臓毒性の１３−ジヒドロ体に代謝的に変換されないという事実、及び、５−ケト基はフリーラジカルを発生させる傾向がより少ない形態に修飾されるという事実を、本発明は利用する。このように、本発明の化合物を、総累積投与量の制限なく、心臓毒性の発現しない量で投与するための手段を提供する。
【０００７】
発明の概要
本発明は、殆ど副作用を有さない、新規な５−イミノ−１３−デオキシアントラサイクリン誘導体を提供することを目的とする。
【０００８】
従って、本発明の目的は、５−イミノ−１３−デオキシアントラサイクリン誘導体の調製方法を提供することにある。
【０００９】
これら及び他の目的及び利点によれば、本発明の好ましい観点から、５−イミノ−１３−デオキシアントラサイクリン誘導体の調製方法を提供する。
【００１０】
一般に、式Ｉのアントラサイクリン
【００１１】
【化２】
0004615712.tif 000002
【００１２】
（式中、Ｒ1 、Ｒ2 及びＲ3 は、Ｈ、ＯＨ又はＯＣＨ3 であり、Ｒ4 はモルホリニルで置換された糖残基以外の糖残基である。）
は、公知の方法により、１３−トシルヒドラゾンに容易に変換される。アントラサイクリン１３−トシルヒドラゾンは、酸性条件下で、水素化シアノホウ素ナトリウムを用いて、１３−デオキシアントラサイクリン誘導体に還元される。もちろん、モルホリニルは、置換されたモルホリニル部分を含むことが理解される。次いで、当該生成物は、抽出工程を行わずに、プレパラティブクロマトグラフィーで精製される。当該精製された１３−デオキシアントラサイクリン誘導体はＮ−Ｂｏｃ誘導体に変換され、次に、ＮＨ3 で処理して、Ｎ−Ｂｏｃ−５−イミノ−１３−デオキシアントラサイクリンを得る。酸性条件下でＮ−Ｂｏｃの除去を行い、５−イミノ−１３−デオキシアントラサイクリン誘導体を得る。当該方法は約５０％〜約６０％の収率を有することが見出された。
【００１３】
本発明のさらなる好ましい観点から、５−イミノ−１３−デオキシデオキシアントラサイクリン誘導体の調製方法を提供する。当該方法は、水素化シアノホウ素を用いて、アントラサイクリン１３−トシルヒドラゾンの酸性溶液を形成することを含む。当該溶液を穏やかに還流する。当該反応混合物を冷却する。少量の水を当該溶液に添加した後、ハロゲン化炭素溶媒を添加する。当該混合物を濾過する。当該濾液をプレパラティブクロマトグラフィーに付し、１３−デオキシアントラサイクリン誘導体を単離する。精製された誘導体をｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基で保護して、３’−Ｎ−Ｂｏｃ誘導体を形成する。次いで、当該誘導体をアンモニアで処理し、３’−Ｎ−Ｂｏｃ−５−イミノ−１３−デオキシアントラサイクリンを形成する。酸性条件下でアミノ保護基を除去し、５−イミノ−１３−デオキシアントラサイクリンを得、次に、これをクロマトグラフィーで精製する。
【００１４】
本発明のさらに好ましい観点から、５−イミノ−１３−デオキシアントラサイクリン誘導体の調製方法を提供する。当該方法は、ドキソルビシン１３−トシルヒドラゾン塩酸塩約１ｇとｐ−トルエンスルホン酸約２．４ｇとを、無水メタノール約５０ｍＬに溶解させることによって溶液を形成することを含む。水素化シアノホウ素ナトリウム約０．８ｇを当該溶液に添加する。
【００１５】
当該溶液を、約６８℃〜約７２℃の温度になるまで加熱する。当該溶液を、窒素雰囲気下で約１時間、穏やかに還流する。
【００１６】
当該反応混合物を約２０ｍｌになるまで濃縮する。当該反応混合物を約０℃〜約４℃の温度になるまで冷凍庫中で冷却する。
【００１７】
水約０．５ｍｌを当該反応混合物に添加する。クロロホルム約２００ｍｌを当該反応混合物に添加する。無水硫酸ナトリウムを当該反応混合物に添加する。塩を濾去する。
【００１８】
濾液をシリカゲルカラムに流す。溶出液が無色になるまで、当該カラムをさらにクロロホルム／メタノールで洗浄する。
【００１９】
当該生成物を含有するフラクションをメタノールで溶出する。メタノール溶出液を留去する。当該留去により得られた残渣を３０％アセトニトリル−ギ酸アンモニウム緩衝液に溶解させる。
【００２０】
当該生成物をフェニルカラムを用いてプレパラティブＨＰＬＣで単離する。アセトニトリル／ギ酸アンモニウムグラディエントを用いて、他の不純物から当該生成物を分離する。次いで、ＨＰＬＣで精製されたフラクションを、これと約同体積の水で希釈し、この溶液をプレパラティブフェニルＨＰＬＣカラムに流す。当該カラムを水で溶出し、その塩を除去する。生成物をメタノールで溶出する。メタノール溶出液を濃縮し、エチルエーテルを添加して、同じ生成物を沈澱させる。濾過により固体生成物を回収し、１３−デオキシドキソルビシン約６００ｍｇを得る。
【００２１】
精製された１３−デオキシドキソルビシン約６００ｍｇを、メチレンクロライド約６０ｍｌと水約１０ｍｌに溶解させ、室温で約２時間、炭酸水素カリウム約１８０ｍｇと二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル約１８０ｍｇで処理する。有機溶液を分離し、水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥する。当該溶液を留去し、乾燥する。残渣を無水メタノール約１００ｍｌに溶解させる。約０℃〜約４℃で約４８時間、当該溶液をアンモニアで飽和させる。真空下、当該溶媒とアンモニアを除去し、３’−Ｎ−Ｂｏｃ−５−イミノ−１３−デオキシドキソルビシンを得る。上記で得られた３’−Ｎ−Ｂｏｃ−５−イミノ−１３−デオキシドキソルビシンを、室温で約２時間、約０．１Ｍ塩化水素を含有する無水メタノール約６０ｍｌを用いて処理し、３’−Ｎ−Ｂｏｃ基を除去する。得られた溶液を約５ｍｌになるまで濃縮する。
【００２２】
当該濃縮された溶液を、フェニルカラムを用いたプレパラティブＨＰＬＣで単離する。アセトニトリル／ギ酸アンモニウムグラディエントを用いて、他の不純物から当該生成物を分離する。ＨＰＬＣで精製されたフラクションを、ほぼ同体積の水で希釈し、プレパラティブＨＰＬＣフェニルカラムに注入し、水で洗浄し、塩を除去する。次いで、当該生成物をメタノールで溶出する。
【００２３】
塩化水素約０．５ｍｌを含むエチルエーテルを用いて、メタノール溶出液を酸性化する。次に、当該溶液を約５ｍｌになるまで濃縮する。エチルエーテル約１０ｍｌを添加し、生成物を沈澱させる。当該沈澱を濾過し、５−イミノ−１３−デオキシドキソルビシン塩酸塩約３６０ｍｇを得る。
【００２４】
本発明は、下式を有する化合物も提供する：
【００２５】
【化３】
0004615712.tif 000003
【００２６】
式中、Ｒ1 、Ｒ2 及びＲ3 は、Ｈ、ＯＨ又はＯＭｅであり、Ｒ4 はモルホリニルで置換された糖残基以外の糖残基である。もちろん、モルホリニルは、置換されたモルホリニル部分を含むことが理解される。モルホリニルで置換された糖残基を含む化合物は、著しく増加した毒性を示す。
【００２７】
さらに、本発明は、少なくともひとつの５−イミノ−１３−デオキシアントラサイクリン誘導体を含む医薬組成物を提供する。
【００２８】
さらにまた、本発明は、白血病、リンパ腫及び固体腫瘍を含む癌の治療方法を提供し、少なくともひとつの５−イミノ−１３−デオキシアントラサイクリン誘導体の有効量を投与する工程を含む方法を提供する。
【００２９】
本発明のさらに他の目的及び利点は、以下の記載から、当業者にとって容易に明白なものとなろう。詳細な記載においては、本発明を行うために熟考されたベストモードを説明するために、本発明の好ましい態様のみを示して記載する。当業者が理解するので、本発明は、他の態様及び異なった態様を含む。本発明の詳細は、本発明からはずれることなく、様々な点で修飾されうる。従って、図と記載は、事実上説明としてみなされるべきであり、限定としてみなされるべきではない。
【００３０】
本発明の詳細な説明
本発明は、５−イミノ−１３−デオキシアントラサイクリン誘導体、その使用、及び、５−イミノ−１３−デオキシアントラサイクリン誘導体の形成方法を提供する。本発明によって合成されうる５−イミノ−１３−デオキシアントラサイクリン誘導体の例を以下に示す。上述のように、以下に示されるような化合物は、抗腫瘍性質を有することが公知である。当該化合物も殆ど副作用を有さない。
【００３１】
本発明の方法は、約０℃〜約７５℃の温度で行われうる。好ましくは、当該方法は、約６５℃〜約７５℃の温度で行われる。より好ましくは、当該方法は、約６８℃〜約７２℃の温度で行われる。約７２℃を超える温度では、その反応物及び生成物の分解が一般的に起こりやすい。
【００３２】
本発明の方法は、いくつかの一般的条件を含む。例えば、還元反応は、好ましくは酸性条件下で行われる。言い換えれば、そのｐＨは約７．０以下であるべきである。反応混合物において塩基性条件を用いる、上記化合物の公知の調製方法では、その反応物及び生成物の分解が起こることが見出されている。
【００３３】
さらに、酸素も水も両方とも、当該還元反応から排除されるべきである。好ましくは、当該反応は、無水溶媒を用い、窒素又は不活性ガス雰囲気下で行われる。
【００３４】
さらに、アミノ化反応は約０〜４℃で行われるべきである。温度がより高くなると、反応物及び生成物の分解が起こりうる。
【００３５】
さらに、水は、当該アミノ化反応から排除されるべきである。好ましくは、当該反応は無水溶媒中で行われる。
【００３６】
さらに、水は、加水分解反応から排除されるべきである。好ましくは、当該反応は無水溶媒中で行われる。
【００３７】
上記に従い、本発明は、上記一般式Ｉの化合物の調製方法を提供する。
【００３８】
以下に、当該方法を通して進行する際の、分子の変化の例を示す。
【００３９】
【化４】
0004615712.tif 000004
【００４０】
0004615712.tif 000005
【００４１】
以下のフローチャートは、１３−デオキシアントラサイクリン誘導体である、５−イミノ−１３−デオキシドキソルビシンを製造するための本発明の方法のある態様の例を説明する。
【００４２】
【表１】
0004615712.tif 000006
【００４３】
以下に、アントラサイクリン誘導体の例、ここで開示されたものの合成を示す。
【００４４】
【表２】
0004615712.tif 000007
【００４５】
当該化合物中、Ｒ4 は、異なるアントラサイクリン類似物の修飾されたものであってもよい。また、Ｄリングも、ハロゲン又は水酸基で置換されていてもよい。例えば、Ｄリングは、フッ素、ヨウ素、又は、他のハロゲンで置換されうる。
【００４６】
一般に、本発明の方法は、５−イミノ−１３−デオキシアントラサイクリンの酸性溶液の形成を含む。当該溶液を穏やかに還流する。次いで、当該反応混合物を冷却してもよい。１つの例によると、当該反応混合物は、約０℃〜約４℃の温度になるまで冷却する。次いで、少量の水を添加し、当該生成物を加水分解しうる。ハロゲン化炭素溶媒を当該反応混合物に添加してもよい。当該ハロゲン化炭素溶媒は冷たくてもよい。例えば、当該ハロゲン化炭素溶媒は約０℃〜約４℃の温度でありうる。用いられうるハロゲン化炭素溶媒の例としては、クロロホルムがある。次に、当該反応混合物に無水硫酸ナトリウムを添加した後、濾過しうる。当該濾過は、低い温度でも行われうる。例えば、約４℃〜約１５℃の温度で、当該濾過は行われうる。
【００４７】
上述の水の添加は、好ましくは加水分解を引き起こす。どんな過剰の水も、無水硫酸ナトリウムの添加によって除去されうる。次いで、無機塩を反応混合物から濾去するのが好ましい。濾液をシリカゲル上のカラムクロマトグラフィーに付すことができる。より低極性の溶媒で溶出することにより、疎水性不純物を単離しうる。次に、１３−デオキシアントラサイクリン生成物を溶出し、その溶出液をさらに精製しうる。
【００４８】
精製された１３−デオキシアントラサイクリン誘導体は、塩基と二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルを含有する、メチレンクロライドと水との混合溶液中で溶解されうる。約室温で約２時間、当該溶液を攪拌しうる。当該有機溶液を単離し、水で洗浄しうる。次いで、当該溶媒を除去し、残渣をアルコール溶媒に溶解しうる。当該アルコール溶液は、約０℃〜約４℃で約２４時間、アンモニアで飽和されうる。当該溶媒を除去し、約室温で約２時間、酸性アルコール溶媒を用いて、乾燥残渣を処理しうる。得られた溶液を濃縮し、さらに精製し、次いで、酸性化し、エーテル中で沈澱させ、５−イミノ−１３−デオキシアントラサイクリンの塩酸塩を得る。
【００４９】
好ましくは、本発明の方法は、無水メタノール中、ｐ−トルエンスルホン酸及び水素化シアノホウ素ナトリウムを用いて、アントラサイクリン１３−トシルヒドラゾンの溶液を形成することを含む。当該溶液を、窒素下で穏やかに還流し、次いで冷却する。水を添加した後、クロロホルムを添加する。沈澱した塩を濾過し、その濾液をシリカゲルカラム上で単離する。分解の結果生じる疎水性不純物を、クロロホルムとメタノールの混合溶液で溶出する。当該生成物である、１３−デオキシアントラサイクリンをメタノールで溶出する。メタノール溶出液をさらにプレパラティブＨＰＬＣで精製する。
【００５０】
精製された１３−デオキシアントラサイクリンを、メチレンクロライドと水との混合物中に溶解させ、炭酸水素カリウムと二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルを用いて処理する。約室温で約２時間、当該溶液を攪拌する。有機層を単離し、水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥する。次いで、真空下、溶媒を除去する。残渣を無水メタノールに溶解させ、約０℃〜約４℃で約４８時間、アンモニアで飽和する。当該メタノールとアンモニアを、反応生成物から除去し、約室温で約２時間、アルコール中に希釈された酸を用いて処理し、化合物５−イミノ−１３−デオキシアントラサイクリンを得る。溶液中でその化合物を濃縮し、次に、プレパラティブＨＰＬＣで精製し、不純物、次いで塩を除去する。生成物をメタノールで溶出し、酸性化し、沈澱させ、５−イミノ−１３−デオキシアントラサイクリン塩酸塩を得る。
【００５１】
以下に、本発明の方法の例を示す。
【００５２】
実施例
５−イミノ−１３−デオキシドキソルビシン塩酸塩の調製
ドキソルビシン１３−トシルヒドラゾン塩酸塩約１ｇとｐ−トルエンスルホン酸約２．４ｇを、無水メタノール約５０ｍＬ中に溶解させた。この溶液に、水素化シアノホウ素ナトリウム約０．８ｇを添加した。得られた溶液を約６８〜７２℃になるまで加熱し、窒素雰囲気下で１時間、穏やかに還流した。
【００５３】
次いで、反応混合物を約２０ｍｌになるまで濃縮し、冷凍庫中で約０〜４℃になるまで冷却した。水約０．５ｍｌを添加した後、クロロホルム約２００ｍｌを添加した。無水硫酸ナトリウムを添加し、振盪後、その塩を濾過した。
【００５４】
次に、当該溶液をシリカゲルカラム（２．５×５ｃｍ）に流した。溶出液が無色になるまで、クロロホルム／メタノール（１０／１）で当該カラムをさらに洗浄した。生成物を含有する結合したフラクションを、メタノールで溶出した。メタノール溶出液を留去し、３０％アセトニトリル−ギ酸アンモニウム緩衝液（ｐＨ＝４．０、０．５％）中に残渣を溶解させ、プレパラティブＨＰＬＣで単離した。フェニルカラムを用い、アセトニトリル／ギ酸アンモニウムグラディエント（２７％〜３０％のアセトニトリルを約３０分間）を用いて、他の不純物から当該生成物を分離した。
【００５５】
ＨＰＬＣで精製されたフラクションを、約同体積の水で希釈した。当該溶液を、プレパラティブＨＰＬＣフェニルカラムに流した。当該カラムを水で溶出し、塩を除去した。次いで、当該生成物をメタノールで溶出した。当該メタノールを濃縮し、塩化水素含有エチルエーテルの添加により、当該生成物を沈澱させ、濾過により回収し、１３−デオキシドキソルビシン塩酸塩６００ｍｇを得た。収率は８０％であった。
【００５６】
ＴＬＣ：Ｒf ＝０．３８    ＣＨ3 Ｃｌ：ＭｅＯＨ：Ｈ2 Ｏ＝３０：１０：１
Ｕ．Ｖ．：λmax ＝２３３，２５２，２９３，４８５ｎｍ
【００５７】
【化５】
0004615712.tif 000008
【００５８】
1ＨＮＭＲ（メタノール  ｄ4 ）：（以下参照）
δ  １．３０（ｄ，３Ｈ，６’−ＣＨ3 ），
１．８５（ｍ，２Ｈ，１３−Ｈ2 ），
２．０５（ｍ，２Ｈ，１０−Ｈ2 ），
２．６０（ｄ，１Ｈ，１２−Ｈ），
３．０５（ｄ，１Ｈ，１２−Ｈ），
３．５５（ｍ，１Ｈ，５’−Ｈ），
３．９０（ｍ，２Ｈ，１４−Ｈ2 ），
４．０５（ｓ，３Ｈ，Ｏ−ＣＨ3 ），
４．２５（ｍ，１Ｈ，４’−Ｈ），
４．９５（ｍ，１Ｈ，３’−Ｈ），
５．４０（ｍ，１Ｈ，１’−Ｈ），
７．５５（ｄ，１Ｈ，３−Ｈ），
７．８５（ｄ，１Ｈ，２−Ｈ），及び
７．９５（ｄ，Ｈ，１−Ｈ）．
【００５９】
精製された１３−デオキシドキソルビシン約６００ｍｇを、メチレンクロライド約６０ｍｌ及び水約１０ｍｌに溶解させ、炭酸水素カリウム約１８０ｍｇと二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル約１８０ｍｇを用いて、約室温で約２時間で処理した。有機溶液を分離し、水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。当該溶液を留去し、乾燥し、残渣を無水メタノール約１００ｍｌに溶解させた。当該溶液を、約０℃〜約４℃で約４８時間、アンモニアで飽和した。溶媒とアンモニアを真空下で除去し、３’−Ｎ−Ｂｏｃ−５−イミノ−１３−デオキシドキソルビシンを得、これを０．１Ｍ塩化水素含有無水メタノール約６０ｍｌを用い、約室温で約２時間で処理し、３’−Ｎ−Ｂｏｃ基を除去した。得られた溶液を濃縮し、生成物をプレパラティブＨＰＬＣで単離した。ＨＰＬＣで精製されたフラクションを、同体積の水で希釈した。当該溶液をプレパラティブフェニルＨＰＬＣカラムに添加し、水で溶出し、塩を除去した。生成物をメタノールで溶出した。メタノール溶出液を、塩化水素を含むエチルエーテル中で酸性化し、当該溶液を濃縮した。エチルエーテルを添加し、得られた沈澱を濾過し、５−イミノ−１３−デオキシドキソルビシン塩酸塩約３６０ｍｇを得た。
【００６０】
ＴＬＣ：Ｒf ＝０．３５
ＵＶ：λmax ＝２２２，２５１，３１０，５４４，５８５ｎｍ
1ＨＮＭＲ（ＭｅＯＨ−ｄａ）
δ  １．３０（ｄ，３Ｈ，６’−ＣＨ3 ）
１．８５（ｍ，２Ｈ，１３−Ｈ2 ）
２．１０（ｍ，２Ｈ，１０−Ｈ2 ）
２．６０（ｄ，１Ｈ，１２−Ｈ）
２．７５（ｄ，１Ｈ，１２−Ｈ）
２．９５（ｄ，１Ｈ，１２−Ｈ）
３．５０（ｍ，Ｈ，５’−Ｈ）
３．９０（ｍ，２Ｈ，１４−Ｈ2 ）
４．１５（ｓ，３Ｈ，Ｏ−ＣＨ3 ）
４．２５（ｍ，１Ｈ，４’−Ｈ）
５．１０（ｍ，１Ｈ，３’Ｈ）
５．６０（ｍ，１Ｈ，１’−Ｈ）
７．５０（ｄ，１Ｈ，３−Ｈ）
７．８０（ｄ，１Ｈ，２−Ｈ）
８．０５（ｄ，１Ｈ，１−Ｈ）
【００６１】
【化６】
0004615712.tif 000009
【００６２】
本発明は、下式を有する化合物も提供する：
【００６３】
【化７】
0004615712.tif 000010
【００６４】
さらに、本発明は、少なくともひとつの５−イミノ−１３−デオキシアントラサイクリン誘導体を含む医薬組成物を提供する。
【００６５】
さらにまた、本発明は、白血病、リンパ腫及び固体腫瘍を含む癌を治療する方法を提供する。当該方法は、少なくともひとつの５−イミノ−１３−デオキシアントラサイクリン誘導体の有効量を投与する工程を含む。当該投与量は、公知化合物のものと同様である。公知化合物との同様性のために、当業者は過度の実験をすることなく、同様の効果をもたらす治療法を決定することができる。しかしながら、上述したように、本発明は、心臓毒性の減少を含む、副作用を顕著に減少させるために提供される。
【００６６】
本発明は、また、エイズのような、自己免疫疾患又は免疫不全疾患の治療方法も提供する。当該方法は、少なくともひとつの５−イミノ−１３−デオキシアントラサイクリン誘導体の有効量を投与する工程を含む。
【００６７】
本発明の上記記述は、本発明を説明し、記載する。さらに、当該開示においては、本発明の好ましい態様のみを示して記載したが、上述のように、本発明は様々な他の組み合わせ、修飾、環境において使用されることができること、及び、ここで説明し、上記教示及び／又は関連技術のスキル若しくは知識と同じように、本発明の概念の範囲内で変更又は修飾することができることが、理解されるべきである。上述した態様は、さらに、本発明を実施する知られたベストモードを説明することを意図し、このような又は他の態様において、及び、本発明の特別な応用又は使用によって要求される様々な修飾を用いて、当業者が本発明を利用できることを意図する。従って、当該記載により、ここに記載された形態の発明に限定されることを意図するものではない。また、添付のクレームは、選択的な態様を含むと解釈されることを意図する。