(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
セリシンの加水分解物であって、重量平均分子量が３００００であるものを含有することを特徴とする皮膚癌予防剤。
【請求項２】
前記セリシンの加水分解が煮沸により行われることを特徴とする請求項１に記載の皮膚癌予防剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
この発明は、天然のセリシンを原料に用い、安全性、安定性が高く、副作用がなく、医薬品、医薬部外品、健康食品、化粧品、化粧水などの分野で使用できる皮膚癌予防剤に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
癌は死亡原因の第一位を占める病気であり、癌患者数は今後ますます増え続けることが予測されている。従って、癌を防ぐ予防法を見いだすことは極めて重要な課題である。癌予防には多種多様な方法が提案されているが、最近、癌の化学予防が注目されるようになってきた。
【０００３】
癌の化学予防とは、癌の発生および進展を化学物質の投与により防止し予防しようとする癌の一次予防である。動物実験で効果が確かめられている化学物質または疫学的成績により効果があるものについて、ヒトでの介入試験が行われつつある。癌の化学予防物質は動物実験から検出されるが、動物による化学予防の研究は化学発癌モデルを用いて行われている。癌の発生には多段階の遺伝子変異が関与しているが、発癌はイニシエーションとプロモーションの２段階プロセスがある。従って、癌の化学予防剤には、癌の化学予防物質を動物化学発癌モデルのイニシエーション期に投与して発癌のイニシエーションを抑制するものと、プロモーション期に投与して発癌のプロモーションを抑制するものとがある。なお、癌予防剤は安全性に問題がなく、副作用がないことが条件になっていて、長期投与されることが通常である。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、上記の点に鑑みなされたもので、安全性および安定性が高く、副作用がない皮膚癌予防剤の提供を目的とするものである。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
本発明者は、天然の繭タンパク質セリシンに注目し、セリシンが、低濃度で皮膚発癌プロモーションの抑制作用を示すことを見出し、本発明をするに至ったのである。すなわち、請求項１の発明は、セリシンの加水分解物であって、重量平均分子量が３００００であるものを含有することを特徴とする皮膚癌予防剤に係る。
【０００６】
また、請求項２の発明は、前記セリシンの加水分解が煮沸により行われることを特徴とする請求項１に記載の皮膚癌予防剤に係る。
【０００７】
【発明の実施の形態】
この発明は、セリシンの加水分解物を有効成分とする天然の皮膚癌の予防剤である。本発明で用いるセリシンとしては通常、蚕が吐出する繭または生糸から溶媒によって抽出したもの、あるいは、物理的に剥離したものが用いられる。
【０００８】
本発明で使用する蚕としては、人間に飼育されて生育する家蚕、および自然環境のなかで生育する野蚕等いずれでも使用可能であり、特別な種類に限定されない。繭は蛹が入っている状態のもの、または繭の一部を切開して蛹を取り出した状態のもの、若しくは粉砕処理したもの、または生糸についても製糸したもの、製織したもの、縫製したもの若しくは粉砕処理したものなどいずれも使用できる。
【０００９】
上記材料からセリシンの加水分解物を得るための抽出溶媒としては、冷水、熱水、含水アルコール等の親水性溶媒が挙げられる。本発明においては、家蚕繭をその２０〜３０倍量の熱水で数分間煮沸処理した後、ろ過、遠心分離などにより固形物を除去することにより行われる。抽出のための手段については特に限定されず、従来公知のものをはじめとして適宜のものが採用される。
【００１０】
さらに得られた抽出液を分離精製することにより、重量平均分子量５０００から１０００００である、特に優れた皮膚発癌プロモーション抑制作用を有するセリシンの加水分解物を得ることができる。その重量平均分子量が５０００未満では、皮膚発癌プロモーション抑制作用が低下し、１０００００よりも大きい場合は、適宜用いられる製剤用担体、賦形剤、稀釈剤等他の薬剤との混合性が良好ではないため、重量平均分子量５０００から１０００００、特には重量平均分子量３００００を有するセリシンの加水分解物が好ましく用いられる。
【００１１】
ここで用いられる分離精製方法は、特に限定されたものでなく、例えば塩析、有機溶媒沈殿、ゲルろ過クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、逆相クロマトグラフィー、逆浸透、限外ろ過、超遠心分離、電気透析等の公知の方法を単独で、あるいは組み合わせで用いることができる。さらに、凍結乾燥、噴霧乾燥等により乾燥してもよい。
【００１２】
このようにして得られた、優れた皮膚発癌プロモーション抑制作用を有するセリシンの加水分解物は高分子量であるが親水性が高く、冷水に易溶で他の薬剤との混合性が良く、かつ水溶液がゲル化せず、低粘度で取り扱いが容易であるなどの特徴をもつ。
【００１３】
本発明の皮膚発癌予防剤は、そのままあるいは適宜製剤用担体、賦形剤、稀釈剤等と混合し、粉末、顆粒、錠剤、カプセル、注射剤、ゲル状、スティック状、溶液状等の形態で、経口投与、腹空内投与、または静脈投与することができる。また、皮膚外用剤としての用途が可能である。皮膚外用剤の剤型としては、特に限定されるものではないが、例えば、クリーム、乳液、パック、化粧水、パウダーオイル、軟膏等が挙げられ、通常用いられる化粧料、医薬品等の原料からなる基剤に配合して使用することができる。食品に混合し、食品形態で所要量を摂取することも可能である。
【００１４】
セリシンの加水分解物は天然物由来であり、人体への安全性が高く、医薬品、医薬部外品、化粧品等、食品、健康食品、特定保険用食品などの特別用途食品等に添加することができるため、日常の生活において無理なく摂取することができる。その添加量は通常０．１〜５０重量％、好ましくは０．５〜５重量％である。少量であっても、十分な効果を示すが、毒性が無く、水溶性にも優れるため多量に添加および摂取しても特段の問題は生じない。
【００１５】
【実施例】
以下本発明の具体的な実施例を説明する。
繭１００ｇを、沸騰した蒸留水５００ｍｌに加え、１時間煮沸した。室温で放置、冷却した後、ろ過して抽出液を得た。これをゲルろ過クロマトグラフィーにかけて、分子量１００００から５００００までの分画を分取し、凍結乾燥して、重量平均分子量３００００のセリシン固体（セリシンの加水分解物）を得た。さらに、このセリシン固体を蒸留水に２．５％濃度になるように溶解したもの（本発明の第１実施例）、および蒸留水に５％濃度になるように溶解したもの（本発明の第２実施例）を得た。
【００１６】
このようにして得た前記第１実施例および第２実施例のセリシン溶液（セリシンの加水分解物溶液）を用いて、皮膚癌発生プロモーションの抑制作用を調べるために、以下の実験を行った。
【００１７】
（実験）
ＤＤＹ系の８週令の雄マウスを５匹ずつからなる３組の群に分け、それぞれ対照群、実験群Ａ、実験群Ｂとし、室温２３℃、１２時間間隔の明暗所で、水と飼料を与えて飼育した。対照群のマウスに対し、該マウスの背部皮膚の毛を剃ってから、皮膚発癌のイニシエーター（誘発剤）である７，１２−ｄｉｍｅｔｈｙｌｂｅｎｚｅｎ〔α〕ａｎｔｈｒａｃｅｎｅ（ＤＭＢＡ）をアセトンで溶かして、１匹あたり０．２μｍｏｌのＤＭＢＡを前記マウスの背部皮膚に塗布した。２週間後に発癌プロモーターである１２−Ｏ―ｔｅｔｒａｄｅｃａｎｏｙｌ−ｐｈｏｒｂｏｌ−１３−ａｃｅｔａｔｅ（ＴＰＡ）をアセトンで溶かして、１匹あたり１０ｎｍｏｌのＴＰＡを週に３回、２０週間、マウス皮膚の同部位に塗布して、マウス皮膚癌を発生させた（対照群）。
【００１８】
前記対照群の実験と並行し、実験群Ａのマウスと、実験群Ｂのマウスに対し、対照群と同様にしてＤＭＢＡ、ＴＰＡを塗布し、さらにＴＰＡの塗布毎に、ＴＰＡの塗布に続き実験群Ａのマウス皮膚に対しては第１実施例の２．５％セリシン溶液を、実験群Ｂのマウス皮膚に対しては第２実施例の５％セリシン溶液を、それぞれ合計１００μｌとなるよう、１週に３回、２０週間に渡って塗布した。セリシン（セリシンの加水分解物）の合計塗布量は、実験群Ａのマウスで２．５ｍｇ、実験群Ｂのマウスで５ｍｇである。
【００１９】
前記実験群Ａについては、対照群と比較し、皮膚発癌プロモーションに対する本発明品（セリシンの加水分解物）によるマウス皮膚発癌の時間依存的抑制作用を調べた。マウス皮膚癌の発癌抑制率はマウスの皮膚に生じた直径２ｍｍ以上のパピローマの数を測定して求めた。その結果を示す図１から明らかなように、ＤＭＢＡおよびＴＰＡのアセトン溶液のみを塗布した対照群では、最初のパピローマが第８週目に発生したが、第１実施例のセリシンを塗布した実験群Ａでは第１４週目になるまで最初のパピローマが発生しなかった。また、２０週目におけるパピローマの数を比較した結果、実験群Ａでは、対照群に比べてパピローマの発生が８０％抑制されているのがわかる。このように、第１実施例の皮膚癌予防剤は、マウス皮膚のパピローマ発生予防効果があることが判明した。
【００２０】
また、マウス皮膚のパピローマ数に対するセリシンの加水分解物の濃度依存的な抑制作用を調べるため、２０週目における前記第１実施群と第２実施群におけるパピローマの数を測定したところ、全途布量５ｍｇとなる実験群Ｂの方が全塗布量２．５ｍｇとなる実験群Ａよりもパピローマの数が少なかった。また、２０週目における実験群Ｂを対照群と比較したところ、実験群Ｂでは１００％抑制されていた。このことから、セリシン加水分解物濃度（塗布量）が大になれば、マウス皮膚パピローマの発生予防効果がより高くなるのがわかる。
【００２１】
以上のことから、本発明の皮膚癌予防剤の塗布により、マウス皮膚の発癌プロモーションを抑制できることが確認でき、本発明の皮膚癌予防剤が皮膚癌の発生を防ぐ機能があることが判明した。
【００２２】
【発明の効果】
以上説明したように、本発明の皮膚癌予防剤によれば、セリシンの加水分解物であって、重量平均分子量が３００００であるものを用いることにより、安全性と安定性が高く、副作用なく皮膚癌の発生を抑えることができ、しかも、長期間使用も可能である。
【００２３】
また、本発明の皮膚癌予防剤は、医薬品、皮膚外用剤、医薬部外品、化粧品、化粧水などの広い分野で皮膚癌を予防する機能性素材として使用することができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】  本件発明の一実施例によるマウス皮膚パピローマ数の時間依存的な抑制作用を示すグラフである。
【図１】
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