(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｄ−マンノース、Ｌ−アラビノース、Ｌ−フコース、イソマルトース、ラミナリビオース、セロビオース、ソホロース、コージビオース、ゲンチオビオース、１−Ｏ−β−Ｄ−フルクトピラノシル−Ｄ−フルクトース、ジ−β−Ｄ−フルクトフラノース１，２'：２，１'ジアンヒドリド、α−Ｄ−フルクトフラノースβ−Ｄ−フルクトフラノース１，２'：２，１'ジアンヒドリド、ジヘテロレブロサンＩＩ、アラビノガラクタン、アラビノキシラン、エチル−β−ラクトシド、およびグリセロイル−β−Ｎ−アセチルラクトサミニドからなる群より選択される少なくとも１種の糖類および乳酸菌を有効成分として含有する、免疫賦活剤。
【請求項２】
前記乳酸菌がラクトバチルス・ガセリである、請求項１に記載の免疫賦活剤。
【請求項３】
インターロイキン１２の産生量を上昇させる作用を有する、請求項１または２に記載の免疫賦活剤。
【請求項４】
インターフェロンγの産生量を上昇させる作用を有する、請求項１または２に記載の免疫賦活剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、糖類を有効成分とする免疫賦活剤に関する。さらに詳しくは、本発明は、従来免疫賦活作用が知られていなかった糖類、例えば、Ｄ−マンノース、イソマルトース、ラミナリビオース、セロビオースなどを有効成分として含有する、マクロファージのインターロイキン１２（以下、ＩＬ−１２）産生能増強作用または腸管上皮細胞間リンパ球におけるインターフェロンγ（以下、ＩＦＮ−γ）産生能増強作用を有する免疫賦活剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
ヒトを初めとする生体は、侵入してくる外来微生物、ならびに内因性の腫瘍細胞のような異物的自己物質などに絶えずさらされている。これらに起因する各種の疾病に対抗するための生体防御機構として、免疫系を備えている。免疫反応の様式を大きく分類すると、免疫細胞自身が異物を攻撃排除する細胞性免疫と、免疫細胞が産生する抗体によって異物を排除する液性免疫とがある。
【０００３】
免疫応答の初期の段階で重要な役割を果たす免疫系細胞の一つに、マクロファージが挙げられる。マクロファージは、侵入した微生物、ならびに個体の形態形成過程あるいは生体の体内に生じた不要なアポトーシス細胞や壊死細胞を、選択的に捕食し、消化分解して、これらを抗原としてリンパ球に提示する。また、マクロファージの表面には、Toll-like receptorと呼ばれる糖鎖をパターン認識して刺激を伝える受容体が存在している。マクロファージは、これらの過程で、種々のサイトカインやケモカインを産生し、生体防御応答に関与する他の細胞機能を制御する。例えば、マクロファージが産生するインターロイキン１２（ＩＬ−１２）は、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞を活性化するほか、抗原未感作のナイーブＴ細胞をＴｈ１に分化させ、Ｔｈ１／Ｔｈ２バランスをＴｈ１優位にし、免疫様式を細胞性免疫主体に導く作用があることが知られている。さらに、Ｔｈ１細胞が産生するＩＦＮ−γは、ＮＫ細胞やキラーＴ細胞を活性化する作用、マクロファージの殺菌活性を誘導する作用などを有していることが知られている。従って、マクロファージにより産生されるＩＬ−１２が引き金となって、Ｔｈ１細胞によるＩＦＮ−γの産生を介して、細胞性免疫系の免疫細胞が賦活化される。
【０００４】
近年日本では、加速度的に高齢化社会を迎えつつあり、加齢による免疫力低下により高齢者がウイルス・微生物感染により死に至るケースが少なくない。また、多忙な現代社会およびストレスを受けやすい環境の中での食事の不規則な摂取も免疫力低下の原因となることが知られており、その対策が強く望まれている。その対処法として新規な抗腫瘍剤やワクチン、抗生物質の開発が精力的に行われている。しかし、これら治療剤は副作用が生じることが問題点であり、また最近は医療費が急増しており、食事の改善による医療費の低減が強く求められている。
【０００５】
糖類は、古くから食経験があるため、何らかの生理活性を有するならば、比較的安全な治療剤になり得る。例えば、Ｄ−マンノースは生体内において、高マンノース型糖鎖に見られるように糖鎖の構成成分として存在しており、生命活動を維持している上で重要な役割を担っていることが認識されつつある。また、Ｄ−マンノースはサルモネラ菌のニワトリ腸管上皮細胞への定着を阻害する作用を有することが知られており（非特許文献１）、畜産分野において有害菌の感染を予防する飼料添加剤としての利用が提案されている（特許文献１および２）。
【０００６】
しかし、病原性微生物やウイルスの感染防御、腫瘍細胞の破壊などの働きを担う細胞性免疫系の免疫細胞（マクロファージ、キラーＴ細胞、ＮＫ細胞など）を活性化するサイトカインであるＩＬ−１２やＩＦＮ−γの産生が、これらの糖質により増強されることは、従来知られていなかった。これまでに、このような機能を有する糖鎖としては、ニゲロオリゴ糖（非特許文献２、特許文献３）、ラフィノース（特許文献４および５）、ネオアガロオリゴ糖（特許文献６）、およびβ１，３グルカン（特許文献７）について報告されているに過ぎない。なお、イソマルトオリゴ糖の混合物については、Ｔリンパ球およびＢリンパ球を増加させる作用が確認されているが、ＩＬ−１２およびＩＦＮ−γの産生増強については全く知られていない（特許文献８）。
【特許文献１】特開２００１−２１３７８１号公報
【特許文献２】特開平８−３８０６４号公報
【特許文献３】特開２００２−８０３６４号公報
【特許文献４】特開２００１−２８８０９３号公報
【特許文献５】特開２００１−２８８０９４号公報
【特許文献６】特開２００２−１９３８２８号公報
【特許文献７】特開平１１−２４６４３５号公報
【特許文献８】特許第２７２９８２０号公報
【特許文献９】特許第２８３２０３７号公報
【非特許文献１】Poultry、Science, 68巻, 1351-1360頁, 1989年
【非特許文献２】Murosakiら、Biosci. Biotechnol. Biochem., 63巻, 373頁, 1999年
【非特許文献３】讃井ら、日本栄養食料学会誌、50巻、133頁，1997年
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、免疫賦活作用を有し、食品素材としても利用可能な安全な免疫賦活剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、食品素材、特に糖類が免疫系に与える影響に関して鋭意研究を行った結果、Ｄ−マンノース、イソマルトース、ラミナリビオース、セロビオースなどの特定の糖類に免疫賦活作用があることを見出し、本発明を完成した。
【０００９】
すなわち、本発明は、Ｄ−マンノース、Ｌ−アラビノース、Ｌ−フコース、イソマルトース、ラミナリビオース、セロビオース、ソホロース、コージビオース、ゲンチオビオース、１−Ｏ−β−Ｄ−フルクトピラノシル−Ｄ−フルクトース、ジ−β−Ｄ−フルクトフラノース１，２'：２，１'ジアンヒドリド、α−Ｄ−フルクトフラノースβ−Ｄ−フルクトフラノース１，２'：２，１'ジアンヒドリド、ジヘテロレブロサンＩＩ、アラビノガラクタン、アラビノキシラン、エチル−β−ラクトシド、およびグリセロイル−β−Ｎ−アセチルラクトサミニドからなる群より選択される少なくとも１種の糖類を有効成分として含有する、免疫賦活剤を提供する。
【００１０】
好適な実施態様では、上記免疫賦活剤は、さらに乳酸菌を有効成分として含有する。
【００１１】
さらに好適な実施態様では、上記免疫賦活剤は、インターロイキン１２（ＩＬ−１２）の産生量を上昇させる作用を有する。
【００１２】
さらに好適な実施態様では、上記免疫賦活剤は、インターフェロンγ（ＩＦＮ−γ）の産生量を上昇させる作用を有する。
【発明の効果】
【００１３】
本発明の免疫賦活剤は、ＩＬ−１２の産生またはＩＦＮ−γの産生を増強するため、細胞性免疫賦活作用を有する。そのため、癌の免疫療法や癌の予防への利用が期待される。また、本発明の免疫賦活剤の有効成分は、従来から食品として用いられている糖および／または乳酸菌であり、安全であることが知られているため、医薬品としてだけでなく、健康食品としても利用可能である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１４】
本発明の免疫賦活剤は、有効成分として、Ｄ−マンノース、Ｌ−アラビノース、Ｌ−フコース、イソマルトース、ラミナリビオース、セロビオース、ソホロース、コージビオース、ゲンチオビオース、１−Ｏ−β−Ｄ−フルクトピラノシル−Ｄ−フルクトース、ジ−β−Ｄ−フルクトフラノース１，２'：２，１'ジアンヒドリド、α−Ｄ−フルクトフラノースβ−Ｄ−フルクトフラノース１，２'：２，１'ジアンヒドリド、ジヘテロレブロサンＩＩ、アラビノガラクタン、アラビノキシラン、エチル−β−ラクトシド、およびグリセロイル−β−Ｎ−アセチルラクトサミニドからなる群より選択される少なくとも１種の糖類を含有する。
【００１５】
Ｄ−マンノースは、Ｄ−グルコースの２−エピマーの単糖であり、上述のように、生体内において、高マンノース型糖鎖に見られるように糖鎖の構成成分として存在しており、生命活動を維持していく上で重要な役割を担っていることが認識されつつある。その生理作用としては、サルモネラ菌のニワトリ腸管上皮細胞への定着を阻害する作用を有することが知られているのみである（非特許文献１）。
【００１６】
Ｌ−アラビノースは、一般に、植物細胞が細胞外マトリクスとして合成分泌するヘテロ多糖に含まれる単糖である。その生理機能としては、スクロースとともに摂取した場合、スクロースの消化吸収を抑制し、そのエネルギー利用を低減することが報告されている（非特許文献３）。
【００１７】
Ｌ−フコースは、種々の糖質の主として非還元末端糖として広く分布している単糖である。生体での役割は、ヒト血液型の型決定基、肝臓への血清糖タンパク質の取込み、マクロファージ遊走阻止因子の受容体などに関与していることが知られている。
【００１８】
イソマルトースは、２分子のグルコースがα１，６結合した還元性二糖であり、発酵食品中に微量に存在している。イソマルトースを主成分とするシロップ状の製品が、昭和産業株式会社から市販されている。その生理機能としては、ビフィズス菌生育活性化作用が知られている。
【００１９】
ラミナリビオースは、２分子のグルコースがβ１，３結合した還元性二糖であり、制癌作用を有することで知られるβ１，３グルカンの構成単位である。その生理機能は、ほとんど知られていない。
【００２０】
セロビオースは、２分子のグルコースがβ１，４結合した還元性二糖で、食物繊維であるセルロースの構成単位であるが、その生理作用についてはほとんど知られていない。その生理機能は、ほとんど知られていない。
【００２１】
ソホロースは、２分子のグルコースがβ１，２結合した還元性二糖であり、マメ科植物のエンジュのさやの色素の成分である。その生理機能は、ほとんど知られていない。
【００２２】
コージビオースは、２分子のグルコースがα１，２結合した還元性二糖であり、清酒やこうじ汁中に存在する。その生理機能としては、難う蝕性、ビフィズス菌生育活性化作用などを有することが報告されている（特許文献９）。
【００２３】
ゲンチオビオースは、２分子のグルコースがβ１，６結合した還元性二糖であり、配糖体の糖成分として存在する。これは、ビフィズス菌増殖活性を有することが知られている。
【００２４】
１−Ｏ−β−Ｄ−フルクトピラノシル−Ｄ−フルクトースは、２分子のＤ−フラクトースが１ヵ所でβ−フラクトピラノシド結合したホモ二量体で、その生理機能はほとんど知られていない。
【００２５】
ジ−β−Ｄ−フルクトフラノース１，２'：２，１'ジアンヒドリドは、Ｄ−フラノース形の２分子が互いに１，２結合で縮合した１，２'：２，１'アンヒドロ糖である。その生理機能についてはほとんど知られていない。
【００２６】
α−Ｄ−フルクトフラノースβ−Ｄ−フルクトフラノース１，２'：２，１'ジアンヒドリドは、Ｄ−フルクトースのフラノース形の２分子が互いに１，２結合で縮合した１，２'：２，１'アンヒドロ糖である。その生理機能についてはほとんど知られていない。
【００２７】
ジヘテロレブロサンＩＩは、Ｄ−フルクトースのピラノース形およびフラノース形の各１分子ずつが互いに１，２結合で縮合した１，２'：２，１'アンヒドロ糖である。その生理機能はほとんど知られていない。
【００２８】
アラビノガラクタンは、Ｌ−アラビノースとガラクトースとからなる多糖であり、β１，３結合したガラクトース主鎖にガラクトースまたはＬ−アラビノースの側鎖がついている。アラビノガラクタンは、食品分野において、乳化安定剤、増粘剤などとして利用されているが、その生理機能はほとんど知られていない。
【００２９】
アラビノキシランは、β１，４結合したキシロース主鎖にＬ−アラビノースの側鎖がついている多糖である。その生理機能はほとんど知られていない。
【００３０】
エチル−β−ラクトシドは、β１，４グルコシル結合切断活性を有する酵素を用い、ｐ−ニトロフェニル−β−Ｄ−ラクトシドをラクトース供与体とし、そしてエタノールをラクトース受容体とするラクトシル転移反応より生成するラクトース配糖体の１種である。その生理機能はほとんど知られていない。
【００３１】
グリセロイル−β−Ｎ−アセチルラクトサミニドは、β１，４グルコシル結合切断活性を有する酵素を用い、Ｎ−アセチルラクトサミンをＮ−アセチルラクトサミニル供与体とし、そしてグリセロールをＮ−アセチルラクトサミニル受容体とするＮ−アセチルラクトサミニル転移反応により生成するＮ−アセチルラクトサミニル配糖体の１種である。その生理機能はほとんど知られていない。
【００３２】
これらの糖類は、単独で用いても、あるいは２種以上を混合して用いてもよい。
【００３３】
本発明の免疫賦活剤は、さらに乳酸菌を有効成分として含有することが好ましい。乳酸菌としては、食品の加工などに通常用いられる乳酸菌類が用いられ、特に、ヒトの腸内に棲んでいる腸内乳酸菌類が好適である。代表的には、ラクトバチルス・ガセリ、ラクトバチルス・カゼイ、ラクトバチルス・アシドフィルス、ビフィドバクテリウム・ロンガム、ビフィドバクテリウム・インファンティス、ビフィドバクテリウム・ビフィダム、ビフィドバクテリウム・ブレーべ、ビフィドバクテリウム・アドレッセンテス、ストレプトコッカス・フェカリスなどが挙げられる。これらは、単独で用いてもよく、あるいは２種以上を組み合わせて用いてもよい。
【００３４】
本発明の免疫賦活剤は、上記糖類を単独でまたは組み合わせて、あるいは上記乳酸菌との混合物として用いることにより、マクロファージのＩＬ−１２の産生能または腸管上皮細胞間リンパ球のＩＦＮ−γ産生能を増強することができる。
【００３５】
本発明の免疫賦活剤は、上記の有効成分を、通常用いられる食品あるいは食品成分、医薬担体または賦形剤と、通常用いられる方法で混合して、免疫力を高める食品や医薬品とすることができる。用いる食品あるいは食品成分、医薬担体または賦形剤は特に限定するものではなく、目的とする免疫賦活剤の具体的用途に応じて適宜選択できる。また、免疫賦活剤の形態も特に限定するものではなく、具体的用途に応じて、種々の固体や液体の形態とすることができる。
【００３６】
本発明の免疫賦活剤を食品として用いる場合、調味料、畜肉加工品、農産加工品、菓子などの形態で提供することも可能である。
【実施例】
【００３７】
（調製例）
乳酸菌培養培地であるＭＲＳ培地（商品名「Lactobacilli MRS Broth」、Difco社製）５ｍｌにラクトバチルス／ガセリ  ＡＴＣＣ  ３３３２３を接種し、３２℃で２４時間静置培養した。この培養液を１００ｍｌのＭＲＳ培地に１％になるように接種し、３２℃で２４時間静置培養した。得られた培養液を１０，０００×ｇで２０分間遠心分離し、菌体を回収した。この菌体を生理食塩水に懸濁し、１０，０００×ｇで２０分間遠心分離し、菌体を回収した。この操作を３回繰り返した後、菌体を蒸留水に懸濁した。この懸濁液を７０℃に１０分間置いて殺菌した後、ドライアイス−エタノール中で急速凍結した。これを凍結乾燥し、ラクトバチルス・ガセリ乾燥死菌体０．２５ｇを得た。
【００３８】
（実施例１）
マウス由来のマクロファージの細胞株であるＪ７７４細胞株（理化学研究所より入手可能）を、細胞数が５×１０６／ｍｌとなるように、１０％ＦＢＳ（ウシ胎児血清）を含むＤＭＥＭ培地（以下、単に培地という）で希釈した。これを９６穴組織培養プレートに１穴当たり１００μｌを播種し、３７℃の５％炭酸ガス培養器内で２時間培養した。これに上記調製例で得たラクトバチルス・ガセリ乾燥死菌体を４μｇ／ｍｌの濃度で培地に分散させた懸濁液を１穴当たり５０μｌ加え、さらに、表１に記載の糖をそれぞれ４μｇ／ｍｌの濃度で培地に含む溶液を１穴当たり５０μｌ加えた（最終濃度１μｇ／ｍｌ）。比較としてラクトバチルス・ガセリ乾燥死菌体を２μｇ／ｍｌの濃度で培地に分散させた懸濁液またはラクトバチルス・ガセリ乾燥死菌体およびニゲロースを含む懸濁液を、あるいは対照として培地のみを、１穴当たり１００μｌ加えた。これらを５％炭酸ガス培養器内で３７℃にて２４時間培養後、培養上清のＩＬ−１２をエンザイムイムノアッセイで測定した。
【００３９】
ＩＬ−１２のエンザイムイムノアッセイは以下のように行った。一次抗体としてラット抗マウスＩＬ−１２ｐ４０抗体（Genzyme社製）をＰＢＳで４μｇ／ｍｌに調製し、この一次抗体溶液を、９６穴組織培養プレートに１穴当たり５０μｌ加え、室温で一晩放置して、ラット抗マウスＩＬ−１２ｐ４０抗体を各穴に付着させた。ＰＢＳで洗浄後、１％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）を含むＰＢＳを１穴当たり１００μｌ加え、室温で１時間放置した。洗浄後、上記培養上清を１穴当たり５０μｌ加え、室温で２時間放置し、培養上清中のＩＬ−１２をプレートに付着したラット抗マウスＩＬ−１２ｐ４０抗体と結合させた。洗浄後、二次抗体（検出抗体）のペルオキシダーゼ標識抗マウスＩＬ−１２ｐ４０抗体（Genzyme社製）を５０μｌ加え、プレートに結合させたＩＬ−１２に結合させた。洗浄後、テトラメチルベンジジン（Dako Cytomation社製）を１穴当たり５０μｌ加え、室温で２０分間反応させた後、２Ｎ硫酸を１穴当たり５０μｌ加えて反応を停止させた。マイクロプレートリーダーで４５０ｎｍでの吸光度を測定し、リコンビナントマウスＩＬ−１２（Genzyme社製）を用いて作成した標準曲線から、培養上清中のＩＬ−１２の濃度を求めた。表１にその結果を示す。
【００４０】
【表１】
0004782385.tif 000002
【００４１】
表１からわかるように、実験に用いたいずれの糖においても、ＩＬ−１２産生能を増強することが知られているニゲロースを用いた場合と同等またはそれ以上のＩＬ−１２濃度を示した。さらに、乳酸菌（ラクトバチルス・ガセリ）だけを用いた場合も、ＩＬ−１２の産生量は増加したが、糖を同時に用いることによって、ＩＬ−１２の産生量がさらに増加した。このことから、本実験に用いた糖は、特に乳酸菌と組み合わせて用いることにより、マクロファージのＩＬ−１２産生能を増強することがわかった。
【００４２】
（実施例２）
上記実施例１で用いた糖のうち、表２に記載のＩＬ−２産生能が高い糖を選択して培養したこと以外は、上記実施例１と同様にしてＪ７７４細胞株を培養し、培養上清中のＩＬ−１２の濃度を測定した。なお、対照としては培養液のみで、比較としてはラクトバチルス・ガセリを単独で用いて培養した。結果を表２に示す。
【００４３】
【表２】
0004782385.tif 000003
【００４４】
表２からわかるように、上記実施例１の場合と同様に、乳酸菌だけを用いた場合も、ＩＬ−１２の産生量が増加したが、糖を同時に用いることによって、ＩＬ−１２の産生量がさらに増加するという再現性が確認できた。なお、ＩＬ−１２の産生量は、実施例１と比較していずれも高い値となっているが、これは、用いたマクロファージ細胞株自体のＩＬ−１２産生能の差によるものと思われる。
【００４５】
（実施例３）
イソマルトオリゴ糖による腸管上皮細胞間リンパ球（ＩＥＬ）におけるインターフェロンγ（ＩＦＮ−γ）産生誘導を検討した。マウス１０匹（Ｃ５７ＢＬ／６、雌、４週齢）を基本飼料AIN-93G（オリエンタル酵母（株））の自由摂取群（対照群）、基本飼料のうちコーンスターチ２０％を昭和産業（株）製イソマルトオリゴ糖（商品名：IMO900P、固形分中の分岐オリゴ糖含有率が８５％以上）で置き換えた飼料の自由摂取群（試験群）の２群に分け、飼育した。飼育１４日目にマウスをエーテル麻酔下で屠殺して小腸を摘出し、腸管内容物をHBSS（GIBCO社製）で洗い流した。パイエル板を除去後、小腸片を１ｃｍ以下になるように切り刻み、Medium199（GIBCO社製）を加え、３７℃にて２０分間、振盪培養した。遠心分離後、上清を取り除き、RPMI1640（SIGMA社製）を加え、再度３７℃にて２０分間、振盪培養した。組織塊や異物を濾過により取り除き、遠心分離後に細胞ペレットを４４％Percoll（Pharmacia社製）に懸濁し、６７％Percollに重層した。さらに遠心分離を行い、４４％と６７％のPercollの境界に集積した腸管上皮細胞間リンパ球（ＩＥＬ）を含む層を採取し、RPMI1640で２度洗浄した。これをＩＥＬ懸濁液として、以降の実験に使用した。
【００４６】
他方で、１０μｇ／ｍｌの抗ＣＤ３抗体を９６穴平底プレートに０．１ｍｌずつ分注し、４℃で一晩静置した。このプレートをＨＢＳＳで２回、RPMI1640で１回洗浄し、２．５×１０６cells/mlに調整したＩＥＬ懸濁液を０．２ｍｌずつ分注した。これを３７℃にて４８時間培養した後、培養上清中に含まれるＩＦＮ−γをELISA Development Kit IFN-γ（ＧＴ社製）を用いて、附属の取扱説明書に従い、以下のようにして、測定した。PBS（Phosphate-buffered Saline）で１８０倍に希釈したCapture antibodyを９６穴平底プレートに分注し、室温で一晩静置した。Capture antibodyを取り除き、Wash buffer（0.05％ Tween20（登録商標）を含むＰＢＳ）で３回洗浄後、Block Buffer（1%BSA、5%Sucroseを含むＰＢＳ）を０．１ｍｌ加え、室温で１時間放置した。Block Bufferを取り除き、Wash bufferで３回洗浄後、培養上清を０．０５ｍｌ加え、室温で２時間放置した。同時に、Reagent Diluent（0.1% BSA、0.05% Tween20（登録商標）を含むTris-buffered Saline（20mM Trizma base、150mM NaCl））で２倍系列希釈を７点調整したマウスＩＦＮ−γ標準液を０．０５ｍｌずつ加え、定量のための標準曲線を作成した。培養上清および標準液を取り除き、Wash bufferで３回洗浄後、Reagent Diluentで２００倍に希釈したDetection Reagentを０．０５ｍｌ加え、室温で２０分間放置した。Detection Reagentを取り除き、Wash bufferで３回洗浄後、ＴＭＢ（DAKO社製）を０．０５ｍｌ加え、室温で２０分間放置した。２ＮのＨ２ＳＯ４を０．０５ｍｌ加えて反応を停止し、４５０ｎｍの吸光度を測定した。マウスＩＦＮ−γ標準液を用いて作成した標準曲線から、培養上清中のＩＦＮ−γ量を算出した。結果を表３に示す。
【００４７】
【表３】
0004782385.tif 000004
【００４８】
表３からわかるように、イソマルトオリゴ糖を含有する飼料で飼育した試験群では、対照群と比較して、ＩＦＮ−γ産生量が有意に増加した。
【００４９】
（実施例４）
イソマルトオリゴ糖の摂取による日和見感染モデルマウスの延命効果について、実際の病態モデル系を用いて、検討した。マウス１０匹（Ｃ５７ＢＬ／６、雌、４週齢）を基本飼料AIN-93G（オリエンタル酵母（株））の自由摂取群（対照群）、基本飼料のうちコーンスターチ２０％を昭和産業（株）製イソマルトオリゴ糖（商品名：IMO900P）で置き換えた飼料の自由摂取群（試験群）の２群に分け、飼育した。飼育１４日目にガンマ線を９Ｇｙ照射し、日和見感染を誘導し、その後の生死を観察した。その結果、図１に示すように、試験群では、対照群と比較して、生存期間が延長する傾向が認められた。
【産業上の利用可能性】
【００５０】
本発明の免疫賦活剤は、ＩＬ−１２の産生またはＩＦＮ−γの産生を増強するため、細胞性免疫賦活作用を有する。そのため、癌の免疫療法や癌の予防への利用が期待される。さらに、本発明の免疫賦活剤は、医薬品としてだけでなく、健康食品としても利用可能である。
【図面の簡単な説明】
【００５１】
【図１】イソマルトオリゴ糖による免疫賦活効果を示す図である。
【図１】
0004782385.tif 000005