(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
【化１】
0004637365.tif 000010
及びそれらの塩からなる群から選択される化合物。
【請求項２】
（Ａ）活性剤；及び、
（Ｂ）少なくとも１つの請求項１記載の化合物
を含む組成物であって、
前記活性剤が、タンパク質、ポリペプチド、ペプチド、ホルモン、多糖、ムコ多糖、炭水化物、脂質、成長ホルモン、ヒト成長ホルモン（hGH）、組換えヒト成長ホルモン（rhGH）、ウシ成長ホルモン、ブタ成長ホルモン、成長ホルモン放出ホルモン、インターフェロン、ａ−インターフェロン、ｂ−インターフェロン、ｃ−インターフェロン、インターロイキン−１、インターロイキン−２、インスリン、ブタインスリン、ウシインスリン、ヒトインスリン、ヒト組換えインスリン、インスリン様成長因子（IGF）、IGF-1、ヘパリン、未分別ヘパリン、ヘパリノイド、デルマタン類、コンドロイチン類、低分子量ヘパリン、極低分子量ヘパリン、超低分子量ヘパリン、カルシトニン、サーモンカルシトニン、ウナギカルシトニン、ヒトカルシトニン；エリトロポエチン（EPO）、心房性ナトリウム排泄増加因子、抗原、モノクローナル抗体、ソマトスタチン、プロテアーゼ阻害剤、副腎皮質刺激ホルモン、性腺刺激ホルモン放出ホルモン、オキシトシン、黄体形成ホルモン放出ホルモン、卵胞刺激ホルモン、グルコセレブロシダーゼ、トロンボポエチン、フィルグラスティム、プロスタグランジン、シクロスポリン、バソプレシン、クロモリンナトリウム、クロモグリク酸ナトリウム、クロモグリク酸二ナトリウム、バンコマイシン、デフェロキサミン（DFO）、上皮小体ホルモン（PTH）、PTHのフラグメント、抗菌剤、抗真菌剤、ビタミン；これらの化合物のポリエチレングリコール（PEG）修飾誘導体；及び、それらのあらゆる組み合わせからなる群から選択される、組成物。
【請求項３】
前記活性剤が、組換えヒト成長ホルモン又はサーモンカルシトニンを含む、請求項２記載の組成物。
【請求項４】
（Ａ）請求項２記載の組成物；及び、
（Ｂ）賦形剤、希釈剤、崩壊剤、潤沢剤、可塑剤、着色剤、投与ビヒクル、またはそれらのあらゆる組み合わせ
からなる投与単位製剤。
【請求項５】
錠剤、カプセル剤、散剤、又は液体の形態である、請求項４記載の投与単位製剤。
【請求項６】
前記投与ビヒクルが、水、２５％水性プロピレングリコール、リン酸バッファー、１，２−プロパンジオール、エタノール及びそれらの組み合わせからなる群から選択される液体である、請求項４記載の投与単位製剤。
【請求項７】
前記活性剤を必要とする動物に経口投与するための、請求項２記載の組成物。
【請求項８】
化合物１２及びその塩を含む、請求項２に記載の組成物。
【請求項９】
化合物１３及びその塩を含む、請求項２に記載の組成物。
【請求項１０】
前記活性剤が組換えヒト成長ホルモンを含む、請求項２に記載の組成物。
【請求項１１】
前記活性剤がインスリンを含む、請求項２に記載の組成物。
【請求項１２】
前記活性剤がヘパリンを含む、請求項２に記載の組成物。
【請求項１３】
前記活性剤がカルシトニンを含む、請求項２に記載の組成物。
【請求項１４】
前記活性剤がインターフェロンを含む、請求項２に記載の組成物。
【請求項１５】
前記活性剤がクロモリンナトリウムを含む、請求項２に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、生物学的又は化学的活性剤等の活性剤を、標的にデリバリーするための化合物に関する。これらの化合物は、経口又は結腸内又は他の経路で動物に投与するための活性剤とともに非共有結合性の混合物を形成するのに申し分なく適している。そのような組成物の調製及び投与方法も開示する。
【０００２】
【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】
活性剤をデリバリーするための通常の手法は、しばしば、生物的、化学的又は物理的障壁によって厳しく制限される。典型的には、これらの障壁は、デリバリーが生じる環境、デリバリーの標的の環境、及び／又は、標的そのものによって課される。生物学的及び化学的活性剤は特にそのような障壁に弱い。
【０００３】
生物学的に活性及び化学的に活性な薬剤及び治療剤の動物への投与においては、その身体によって障壁が課される。物理的障壁の例は、皮膚、脂質二重膜及び様々な器官の膜であり、それらは、ある種の活性剤に対して比較的不浸透性であるが、循環系等の標的に到達する前に通過しなければならない。化学的障壁には、それらに限定されないが、胃腸（GI）管内のｐＨ変化、及び、分解酵素が含まれる。
【０００４】
これらの障壁は、経口デリバリーシステムの設計において特に重要である。多数の生物学的又は化学的活性剤の経口デリバリーは、生物的、化学的及び物理的障壁がなければ、動物への投与にとって、選択すべき経路であろう。典型的には経口投与になじみにくい多数の薬剤は、生物学的又は化学的に活性な、カルシトニン及びインスリン等のペプチド；多糖、特に、それに限定されないが、ヘパリン；ヘパリノイド；殺菌剤；及び、その他の物質である。これらの薬剤は、酸加水分解、酵素等によって、胃腸管内で、急速に無効にされるか又は破壊されるかもしれない。さらに、巨大分子の薬剤のサイズと構造は、吸収を妨げるかもしれない。
【０００５】
傷つきやすい薬剤を経口投与するための初期の方法は、腸管壁の透過性を人為的に増加させるための、アジュバント（例えば、レゾルシノール類、及び、ポリオキシエチレンオレイルエーテル及びｎ−ヘキサデシルポリエチレンエーテル等の非イオン性界面活性剤）の共投与、並びに、酵素分解を抑制するための、酵素阻害剤（例えば、膵臓酵素のトリプシン阻害剤、ジイソプロピルフルオロホスフェート（DFF）及びトラシロール）の共投与に頼っていた。リポソームも、インスリン及びヘパリンのドラッグデリバリーシステムとして記載されている。しかしながら、そのようなドラッグデリバリーシステムの広範なスペクトルでの使用は不可能である。なぜならば：（１）該システムが毒性のある量のアジュバント又は阻害剤を必要とし；（２）適当な低分子量カーゴ、すなわち活性剤が有効でない；（３）該システムが、低い安定性と不十分な貯蔵寿命を示し；（４）該システムが、製造困難であるか；（５）該システムが、該活性剤（カーゴ）を保護できない；（６）該システムが、該活性剤を不利に変えてしまうか；又は、（７）該システムが該活性剤の吸収を可能にするか又は促進するからである。
【０００６】
さらに近年では、プロテイノイド微小球が薬剤のデリバリーに用いられている。例えばUS 5,401,516、US 5,443,841及びUS RE35,862を参照。加えて、ある種のアミノ酸が、薬剤のデリバリーに用いられている。例えばUS 5,629,020；US 5,643,957；US 5,766,633；US 50776,888及びUS 5,866,536を参照。
【０００７】
しかしながら、いまだに、容易に調製され、且つ、多様な経路で広範な活性剤をデリバリーすることができる、単純で、高価でないデリバリーシステムに対する要求がある。
【０００８】
【課題を解決するための手段】
活性剤のデリバリーに有用な化合物及び組成物が提供される。本発明は、以下の式を有する化合物又はそれらの塩、又はそれらの混合物を包含する。
【化７】
0004637365.tif 000002
上記式中、
Arは、フェニル又はナフチルであり；
Arは、任意に、C1-C4アルキル、C1-C4アルコキシ、C2-C4アルケニル、C2-C4アルキニル、アリール、アリールオキシ、複素環、C5-C7炭素環式環、ハロゲン、-OH、-SH、-CO2R6、-NR7R8又は-N+R7R8R9Y-で置換され；
（ａ）R1が、C1-C16アルキレン、C2-C16アルケニレン、C2-C16アルキニレン、C6-C16アリーレン（arylene）、（C1-C16アルキル）アリーレン又はアリール（C1-C16アルキレン）であり；
R2が、-NR3R4又は-N+R3R4R5Y-であり；
R3及びR4が、独立して、水素；酸素；ヒドロキシ；置換又は非置換C1-C16アルキル；置換又は非置換C2-C16アルケニル；置換又は非置換C2-C16アルキニル；置換又は非置換アリール；置換又は非置換アルキルカルボニル；置換又は非置換アリールカルボニル；置換又は非置換アルカンスルフィニル；置換又は非置換アリールスルフィニル；置換又は非置換アルカンスルホニル；置換又は非置換アリールスルホニル；置換又は非置換アルコキシカルボニル；又は、置換又は非置換アリールオキシカルボニルであり；また、
R5が、独立して、水素；置換又は非置換C1-C16アルキル；置換又は非置換C2-C16アルケニル；置換又は非置換C2-C16アルキニル；置換又は非置換アリール；置換又は非置換アルキルカルボニル；置換又は非置換アリールカルボニル；置換又は非置換アルカンスルフィニル；置換又は非置換アリールスルフィニル；置換又は非置換アルカンスルホニル；置換又は非置換アリールスルホニル；置換又は非置換アルコキシカルボニル；又は、置換又は非置換アリールオキシカルボニルであるか；
（ｂ）R1、R2及びR5が、上記のとおりであり；また、
R3及びR4が、結合して、５、６又は７員複素環、又は、C1-C6アルキル、C1-C6アルコキシ、アリール、アリールオキシ、オキソ基又は炭素環式環で置換された５、６又は７員複素環を形成するか；あるいは、
（ｃ）R2及びR5が、上記のとおりであり；
R1及びR3が、結合して、５、６又は７員複素環、又は、C1-C6アルキル、アルコキシ、アリール、アリールオキシ、オキソ基又は炭素環式環で置換された５、６又は７員複素環を形成し；また、
R4が、独立して、水素；酸素；ヒドロキシ；置換又は非置換C1-C16アルキル；置換又は非置換C2-C16アルケニル；置換又は非置換C2-C16アルキニル；置換又は非置換アリール；置換又は非置換アルキルカルボニル；置換又は非置換アリールカルボニル；置換又は非置換アルカンスルフィニル；置換又は非置換アリールスルフィニル；置換又は非置換アルカンスルホニル；置換又は非置換アリールスルホニル；置換又は非置換アルコキシカルボニル；又は、置換又は非置換アリールオキシカルボニルであり；
R6は、水素；C1-C4アルキル；ハロゲン又は-OHで置換されたC1-C4アルキル；C2-C4アルケニル；又は、ハロゲン又は-OHで置換されたC2-C4アルケニルであり；
R7、R8及びR9は、独立して、水素；酸素；C1-C4アルキル；ハロゲン又は-OHで置換されたC1-C4アルキル；C2-C4アルケニル；又は、ハロゲン又は-OHで置換されたC2-C4アルケニルであり；また、
Y-は、ハロゲン、ヒドロキシド、スルフェート、ニトレート、ホスフェート、アルコキシ、ペルクロレート、テトラフルオロボレート又はカルボキシレートである。適切なカルボキシレートの例には、それに制限されないが、アセテートが含まれる。
【０００９】
好ましくは、R3及びR4の少なくとも１つは水素ではない。
【００１０】
好ましい実施態様では、Arは、任意にメチル；メトキシ；ヒドロキシ；又はハロゲンで置換されたフェニルである。さらに好ましくは、Arは、非置換フェニル、又は、塩素で置換されたフェニル、さらに好ましくは５位で置換されたフェニルである。
【００１１】
他の実施態様では、R1は、置換又は非置換C1-C12アルキレンである。好ましくは、R1は、非置換C3-C8アルキレンである。さらに好ましくは、R1は、非置換C6アルキレンである。
【００１２】
他の実施態様では、R2は、-NR3R4であり；そして、（ｉ）R3がフェニル又はシクロヘキシルであり且つR4が水素であるか；（ｉｉ）R3及びR4が両方ともメチルであるか；又は（ｉｉｉ）R3及びR4が結合して、窒素を含有する５又は６員複素環、好ましくはピロリジノン、モルフォリン及びイミダゾール等、を形成する。
【００１３】
さらに別の実施態様では、R2は、-N+R3R4R5Y-である。
【００１４】
好ましい実施態様では、前記化合物は、以下の式
【化８】
0004637365.tif 000003
［式中、
R11、R12、R13及びR14は、独立して、水素、-OH、ハロゲン、C1-C4アルキル、C1-C4ハロアルキル、C1-C4アルコキシ又はC1-C4ハロアルコキシであり；
R15は置換又は非置換C1-C12アルキレンであり；また、
R16及びR17が、独立して、水素、C1-C4アルキル、C5-C7シクロアルキル又はフェニルであるか；又は、
R16及びR17が、結合して、５又は６員複素環を形成する］
及びそれらの塩を有する。好ましくは、R11、R12、R13及びR14は、独立して、水素；-OH；又はハロゲンであり、さらに好ましくは塩素である。好ましくは、R15は非置換C3-C8アルキレンである。
【００１５】
１つの実施態様では、R16及びR17はメチルである。他の実施態様では、R16及びR17は、結合して、ピロリジノン、モルフォリン又はイミダゾール環を形成する。
【００１６】
本発明の好ましい化合物には、それらに限定されないが：
【化９】
0004637365.tif 000004
【化１０】
0004637365.tif 000005
【化１１】
0004637365.tif 000006
が含まれる。
【００１７】
本発明の組成物は、少なくとも１つの活性剤、好ましくは生物学的又は化学的活性剤、及び、少なくとも１つの、本発明の化合物又はそれらの塩を含む。そのような組成物の調製及び投与方法も提供する。
【００１８】
さらに、前記組成物を含む投与単位形も提供する。その投与ビヒクルは、固体（錠剤、散剤又はカプセル剤）でも液体でもよい。
【００１９】
生物学的活性剤を、本発明の組成物とともに、該剤を必要とする動物に投与する、特に経口又は結腸内経路で投与する方法も提供する。
【００２０】
【発明の実施の形態】
ここで用いられる用語「置換（substituted）」は、それらに限定されないが、以下の置換基：ハロゲン及び-OHを含む。
【００２１】
アルキル、アルケニル、アルキニル部分等の、化合物Ａ及びＢの式に記載される炭素含有置換基はすべて、線状又は分枝状であってよい。
【００２２】
前記化合物は、アミン塩の形であってよい。塩には、それらに限定されないが、有機及び無機塩、例えばアンモニウム塩及び塩酸塩、が含まれる。
【００２３】
通常、本発明のアミン化合物、すなわちR2が-NR3R4である化合物は、適切なＯ−アセチルサリチロイルクロライドと適切なアミンとを、トリエチルアミン等の塩基の存在下で反応させることによって調製することができる。対応する、R2が-NR3R4R5（式中、R3、R4及びR5は水素ではない）である第４級アンモニウム塩を得るために、該アミン化合物のアミン基が、当該技術分野において既知の方法によってアルキル化される。
【００２４】
前記化合物は、再結晶化によって、又は、１つ以上のクロマトグラフィー用固体支持体を単独又は適当に組み合わせての分別（fractionation）によって、精製することができる。適切な再結晶化溶媒系には、それらに限定されないが、アセトニトリル、メタノール及びテトラヒドロフランが含まれる。分別は、移動相としてメタノール／ｎ−プロパノール；移動相としてトリフルオロ酢酸／アセトニトリル混合物を用いる逆相クロマトグラフィー；及び、移動相として適切なバッファーを用いるイオン交換クロマトグラフィーを用いて、アルミナ等の適切なクロマトグラフィー用支持体で行うことができる。アニオン交換クロマトグラフィーを行うときは、好ましくは、０〜５００mM塩化ナトリウムのグラジェントが用いられる。
【００２５】
活性剤
本発明での使用に適した活性剤には、それらに限定されないが、殺虫剤、薬理学的薬剤及び治療剤を含む、生物学的活性剤と化学的活性剤とが含まれる。
【００２６】
例えば、本発明での使用に適した生物学的又は化学的活性剤には、それらに制限されないが、タンパク質；ポリペプチド；ペプチド；ホルモン；多糖、特にムコ多糖の混合物；炭水化物；脂質；他の有機化合物；及び、胃腸粘膜を通過しない（又は、投与量のうちのごく１部だけが通過する）、及び／又は、胃腸管内の酸及び酵素によって化学的開裂を受けやすい特定の化合物；又は、それらのあらゆる組み合わせが含まれる。
【００２７】
さらなる例には、それらに制限されないが、合成、天然又は組み換え由来のものを含む以下のもの：ヒト成長ホルモン（hGH）、組換えヒト成長ホルモン（rhGH）、ウシ成長ホルモン及びブタ成長ホルモンを含む、成長ホルモン；成長ホルモン放出ホルモン；ａ、ｂを含む、インターフェロン、及び（；インターロイキン−１；インターロイキン−２；任意にナトリウム、亜鉛、カルシウム及びアンモニウムを含む対イオンを有する、ブタ、ウシ、ヒト及びヒト組換えインスリンを含む、インスリン；IGF-1を含む、インスリン様成長因子；未分別ヘパリン、ヘパリノイド、デルマタン類、コンドロイチン類、低分子量ヘパリン、極低分子量ヘパリン及び超低分子量ヘパリンを含む、ヘパリン；サーモン、ウナギ及びヒトカルシトニンを含む、カルシトニン；エリトロポエチン；心房性ナトリウム排泄増加因子；抗原；モノクローナル抗体；ソマトスタチン；プロテアーゼ阻害剤；副腎皮質刺激ホルモン、性腺刺激ホルモン放出ホルモン；オキシトシン；黄体形成ホルモン放出ホルモン；卵胞刺激ホルモン；グルコセレブロシダーゼ；トロンボポエチン；フィルグラスティム（filgrastim）、プロスタグランジン類；シクロスポリン；バソプレシン；クロモリンナトリウム（クロモグリク酸ナトリウム又はクロモグリク酸二ナトリウム）；バンコマイシン；デフェロキサミン（desferrioxamine, DFO）；そのフラグメントを含む、上皮小体ホルモン（PTH）；抗真菌剤を含む、抗菌剤；ビタミン類；これらの化合物の類似体、フラグメント、疑似体（mimetics）、及び、ポリエチレングリコール（PEG）修飾誘導体；及び、それらのあらゆる組み合わせが含まれる。
【００２８】
デリバリーシステム
本発明の組成物は、デリバリー剤と１つ以上の活性剤とを含む。１つの実施態様では、１つ以上のデリバリー剤化合物又はそれらの化合物の塩は、投与前に活性剤と混合することによって、デリバリー剤として用いることができる。
【００２９】
投与組成物は液体の形態であってよい。その溶液媒体は、（例えば、サーモンカルシトニン、上皮小体ホルモン及びエリトロポエチンには）水、（例えばヘパリンには）２５％水性プロピレングリコール、及び、（例えばrhGHには）リン酸バッファーであってよい。他の投与ビヒクルは、ポリエチレングリコール類、ソルビトール、マルチトール及びスクロースを含む。投与溶液は、投与の直前に、デリバリー剤化合物の溶液と活性剤の溶液とを混合することによって調製することができる。また、デリバリー剤（又は活性剤）の溶液を、固形体の活性剤（又はデリバリー剤）と混合することができる。デリバリー剤と活性剤とは、乾燥粉末として混合してもよい。デリバリー剤と活性剤とは、その製造過程で混合してもよい。
【００３０】
前記投与溶液は、任意に、リン酸バッファー塩、クエン酸、グリコール類又は他の分散剤等の添加物を含むことができる。安定化添加物を、好ましくは、約０．１から２０％（w/v）の間の範囲の濃度で、該溶液に取り込むことができる。
【００３１】
前記投与組成物は、錠剤、カプセル剤又は散剤等の固体の形態であってもよい。固体の投与形態は、前記化合物の固形体と、活性剤の固形体とを混合することによって調製することができる。また、固体は、化合物と活性剤の溶液から、凍結乾燥、沈殿、結晶化及び固体分散等の、当該技術分野において既知の方法によって得ることもできる。
【００３２】
本発明の投与組成物は、さらに、１つ以上の酵素阻害剤を含むことができる。そのような酵素阻害剤には、それらに限定されないが、アクチノニン又はエピアクチノニン等の化合物及びそれらの誘導体が含まれる。他の酵素阻害剤では、それらに限定されないが、アプロチニン（Trasylol）及びBowman-Birk阻害剤が含まれる。
【００３３】
本発明の投与組成物で用いられる活性剤の量は、特定の活性剤の、その標的とする適応症に対する目的を達成するのに有効な量である。該組成物中の活性剤の量は、典型的には、薬理学的、生物学的、治療的又は化学的に有効な量である。しかしながら、その量は、該組成物が投与単位形において用いられるときの量よりも少ない。なぜならば、該投与単位形は、複数の、化合物／活性剤組成物を含むことができ、又は、薬理学的、生物学的、治療的又は化学的に有効な量を分割して含むことができるからである。つまり、全有効量は、トータルで該活性剤の有効量を含む、累積的な単位で投与することができる。
【００３４】
用いられる活性剤の全量は、当業者に既知の方法によって決定することができる。しかしながら、前記組成物は、先行技術の組成物よりも効果的に活性剤をデリバリーすることができるので、先行技術の投与単位形又はデリバリーシステムで用いられるよりも少ない量の生物学的又は化学的活性剤を、同様の血中濃度及び／又は治療効果を達成しながらも、患者に投与することができる。
【００３５】
現在開示している化合物は、生物学的及び化学的活性剤を、血液−脳関門を通過させ、また、特に、経口、鼻内、舌下、十二指腸内、皮下、頬、結腸内、直腸、膣、粘膜、肺、経皮、皮内、非経口、静脈内、筋肉内及び目の系で、デリバリーする。
【００３６】
投与単位形は、さらに、賦形剤、希釈剤、崩壊剤、潤沢剤、可塑剤、着色剤、香料、テーストマスキング剤、糖類、甘味料、塩類、及び、それらに限定されないが水、１，２−プロパンジオール、エタノール、オリーブ油又はそれらのあらゆる組み合わせを含む投与ビヒクルの、いずれか１つ又はそれらのあらゆる組み合わせを含むことができる。
【００３７】
課題である発明の化合物と組成物は、あらゆる動物、例えば、それらに限定されないが、ニワトリ等の鳥類；齧歯類、ウシ、ブタ、イヌ、ネコ、霊長類、特にヒト等のほ乳類；及び昆虫類を含む動物に対し、生物学的又は化学的活性剤を投与するのに有用である。
【００３８】
前記システムは、他の場合であればその標的領域（すなわち該デリバリー組成物の活性剤が放出されるべき領域）に該活性剤が到達する前に遭遇するコンディションによって、又はそれらが投与される動物の体内で破壊されるか又は効果を低下させられるであろう化学的又は生物学的活性剤のデリバリーに有用である。特に、本発明の化合物及び組成物は、活性剤の経口投与、特に、一般的には経口が望ましくないもの又はデリバリーの改善が求められているものの経口投与に有用である。
【００３９】
前記化合物と活性剤とを含む組成物は、デリバリー剤なしでの該活性剤の投与と比較すると、選択した生物系への該活性剤のデリバリーにおいて、及び、該活性剤の、増大又は改善されたバイオアベイラビリティーにおいて有用性がある。デリバリーは、一定時間にわたってさらなる活性剤をデリバリーすることによって、又は、（より速い又は延長されたデリバリーをもたらすような）特定の時間における活性剤デリバリー又は（持続的デリバリー等の）一定時間にわたっての活性剤のデリバリーにおいて、改善することができる。
【００４０】
投与に続いて、当該組成物又は投与単位形中に存在する活性剤が循環内に取り込まれる。該剤のバイオアベイラビリティーは、例えば、ヘパリンによって引き起こされる、血液凝固時間の増大、又は、カルシトニンによって引き起こされる、循環カルシトニンレベルの減少等の、血中の既知の薬理活性を測定することによって容易に評価することができる。また、活性剤の循環レベルそのものを直接測定することもできる。
【００４１】
【実施例】
以下の実施例は、本発明を、制限することなく例示する。すべての部（parts）は、特に示さない限り、重量あたりで示される。
【００４２】
実施例１
化合物１の調製
マグネチックスターラーと還流冷却器とを備えた250ml三頚丸底フラスコに、７０mlのジクロロメタン中７．１１g（５０mmol）の１−（３−アミノプロピル）−２−ピロリジノンを入れた。クロロトリメチルシラン（６．３４ml、５０mmol）を一度に加えた。混合物を約１時間還流させた。反応物をおよそ５℃にまで冷却した。トリエチルアミン（１０．４５ml、７５mmol）を滴下し、続いて、２０mlのジクロロメタン中９．９３g（５０mmol）のo−アセチルサリチロイルクロライドの溶液を滴下した。滴下が完了した後、その混合物を室温にまで温め、さらに１時間撹拌した。混合物を真空下で濃縮し、オイルとした。2M水酸化ナトリウムの氷冷溶液（１００ml、２００mmol）を添加し、その混合物を約２時間撹拌した。その塩基性溶液を、１０％塩酸溶液で酸性化した。有機生成物を酢酸エチルで抽出した。その有機層を、中性状態まで水で洗浄し、真空下で乾燥させて濃縮し、得られた残留物をフラッシュカラムクロマトグラフによって精製し、７．９g（６１％）の白色固体を得た。分光分学的データと燃焼分析は、前記の特定構造を示した。
【００４３】
化合物２もこの方法によって調製した。化合物３〜１１もこの方法によって調製できる。
【００４４】
化合物１２の調製
１８．０２g（１１０mmol）のカルサラム（carsalam）、１８．０ml（１５．８４g、１０９mmol）の６−ジメチルアミノ−１−ヘキサノール、２９．１２g（１１１mmol）のトリフェニルホスフィン、及び１５０mlのテトラヒドロフランのスラリーを、２１．８ml（２２．３９g、１１１mmol）のジソプロピルアゾジカルボキシレートと４０mlのテトラヒドロフランとの溶液で、２０分かけて滴下して処理し、これが、そのスラリーの温度の、約６７℃までの上昇を生じさせた。反応混合物を約２５℃にまで冷却し、約２０時間撹拌した。その溶液を、１５０ml（３００mmol）の水性2N水酸化ナトリウムで処理し、約９０分間、約６０℃に温めた。反応混合物を酢酸エチル（２×６０ml）で洗浄した。水性相を、４％水性塩酸で、約０よりわずかに小さいpHにまで酸性化し、酢酸エチル（２×６０ml）で洗浄した。水性相を、固体の重炭酸ナトリウムで処理し、酢酸エチル（１４×６０ml）で抽出した。１４の酢酸エチル抽出物をあわせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、粘性の液体にまで濃縮した。その液体を最小限の量の酢酸エチルに取り込ませ、１００mlのヘキサンで希釈し、氷浴中で、１５０mlのヘキサンを、白色固体が得られるまで滴下処理した。ろ過によって、全部で１３．６５gのN−（６−ジメチルアミノヘキシル）サリチルアミドが単離された。
【００４５】
化合物１３の調製
５．７９g（２９．３mmol）の６−クロロカルサラム（carsalam）、４．８０ml（４．２２g、２９．１mmol）の６−ジメチルアミノ−１−ヘキサノール、７．７１g（２９．４mmol）のトリフェニルホスフィン、及び５０mlのテトラヒドロフランのスラリーを、５．８ml（５．９６g、２９．５mmol）のジソプロピルアゾジカルボキシレートと２０mlのテトラヒドロフランとの溶液で、２０分かけて滴下して処理し、これが、そのスラリーの温度の、約６７℃までの上昇を生じさせた。反応混合物を約２５℃にまで冷却し、約２０時間撹拌した。その溶液を、５０ml（１００mmol）の水性2N水酸化ナトリウムで処理し、約１２０分間、約６０℃に温めた。反応混合物を酢酸エチル（２×４０ml）で洗浄した。水性相を、４％水性塩酸で、約１のpHにまで酸性化し、酢酸エチル（２×４０ml）で洗浄した。水性相のpHを、５０％水性炭酸カリウムで、約５．５に上昇するまで滴下処理し、これによって白色固体が生じた。ろ過によって、全部で５．２５ｇのN−（６−ジメチルアミノヘキシル）−５−クロロサリチルアミドが単離された。
【００４６】
実施例２
サーモンカルシトニン（sCT）の経口デリバリー
水中の、デリバリー剤化合物とサーモンカルシトニン（sCT）との経口投与（PO）組成物を調製した。典型的には、４５０mgの化合物を２．０mlの水に添加した。該化合物のナトリウム塩を用いるか、あるいは、得られた溶液を撹拌し、１当量の水酸化ナトリウム（１．０N）を加え、水で希釈することによってその遊離酸をナトリウム塩に転換した。その溶液をボルテックスし、加熱して（約３７℃）、超音波をかけた。pHを、水酸化ナトリウム又は塩酸で、約７（６．５から８．５）に調節した。貯蔵溶液からの９０mg sCTをその溶液に加えた。それから、水を加えて、全容量を約３．０mlとし（デリバリー剤化合物の溶解度に応じて変化）、ボルテックスした。最終的なデリバリー剤化合物投与量、sCT投与量、及び容量投与量は、下記の表１に示す。
【００４７】
典型的な投与とサンプリングのプロトコルは以下のとおりであった。２００〜２５０gの雄Sprague-Dawleyラットを２４時間絶食させ、投与の１５分前に、ケタミン（４４mg/kg）及びクロロプロマジン（１．５mg/kg）を投与した。５匹の投与群１つに、１つの投与溶液を投与した。経口投与については、１１cm Rusch 8 Frenchカテーテルを、ピペットチップを備えた1mlシリンジに取り付けた。そのシリンジを、該カテーテルを通して投与溶液を吸い取ることによって該溶液で満たし、それから、それをぬぐった。該カテーテルは、そのチューブを門歯から１cm残して、食道内に降ろした。シリンジのプランジャーを押して、溶液を投与した。
【００４８】
尾動脈から、典型的には投与前と投与の１０、２０、３０、６０、及び９０分後に、血液試料を連続的に回収した。血清sCTを、EIAキット（San Carlos, CAのPeninsula Laboratories, Inc.からのKit # EIAS-6003）を用いて試験することによって測定した。数値は、投与前に得られたベースラインの値に従って調節した。各投与群の５匹のラットから得られた結果は、各時点ごとに平均した。その最大値は以下の表１に示す。
【００４９】
【表１】
0004637365.tif 000007
【００５０】
実施例４
低分子量ヘパリン（LMWH）の経口デリバリー
２５％水性プロピレングリコール中に、デリバリー剤化合物と低分子量ヘパリン（LMWH）とを含む結腸内投与（IC）組成物を調製した。該化合物のナトリウム塩を用いるか、あるいは、１当量の水酸化ナトリウム（１．０N）でその遊離酸をナトリウム塩に転換した。典型的には、デリバリー剤化合物とLMWH（９１IU/mg、平均分子量約５，０００）を、乾燥粉末としてボルテックスした。この乾燥粉末を２５％v/v水性プロピレングリコールに溶解させ、ボルテックスし、ソニケーター（３７℃）内に置いた。pHを、2N水性水酸化ナトリウムで、約７（６．５から８．５）に調節した。その投与溶液に超音波をかけ、清澄な溶液を得た。最終的な容量を約３．０mlとした。最終的なデリバリー剤化合物投与量、LMWH投与量、及び容量投与量は、下記の表２に示す。
【００５１】
典型的な投与とサンプリングのプロトコルは以下のとおりであった。２７５〜３５０gの雄Sprague-Dawleyラットを２４時間絶食させ、投与の直前に、ケタミン（８８mg/kg）を筋肉内投与して麻酔した。５匹の投与群１つに、１つの投与溶液を投与した。結腸内（IC）投与については、７．５cm 8 fr Ruschカテーテルを、ピペットチップを備えた1mlシリンジに取り付けた。その投与カテーテルを、肛門を通して、チューブが見えなくなるまで結腸内に挿入した。シリンジのプランジャーを押し、溶液を結腸内にゆっくり出した。
【００５２】
クエン酸添加（citrated）試料を、ケタミン（８８mg/kg）投与前と、典型的には投与の０．５、１．０、２．０、３．０及び４．０時間後に、心臓穿刺（puncture）によって回収した。LMWH活性を、Durham, NCのOrganon Teknika Corporationから入手可能な、抗Xa因子アッセイCHROMOSTRATE（登録商標）ヘパリン抗Xaアッセイを用いて測定した。ベースラインの値は約０IU/mlである。各投与群の５匹のラットから得られた結果は、各時点ごとに平均した。その平均ピーク血漿濃度は以下の表２に示す。
【００５３】
【表２】
0004637365.tif 000008
【００５４】
実施例５
組換えヒト成長ホルモン（rhGH）
水リン酸バッファー中の、デリバリー剤化合物とrhGHとの経口投与（PO）組成物を調製した。典型的には、４５０mgの化合物を２．０mlの水に添加した。該化合物のナトリウム塩を用いるか、あるいは、その遊離酸をナトリウム塩に転換することによって、該化合物の溶液を作成した。典型的には、該化合物の溶液は、リン酸バッファー中で調製し、撹拌し、ナトリウム塩を作るときは１当量の水酸化ナトリウム（１．０N）を加えた。最終的な投与溶液は、その化合物溶液とrhGH貯蔵溶液（１５mg rhGH、７５mg D−マンニトール、１５mgグリシン及び３．３９mg二塩基性リン酸ナトリウムを粉末として混合し、２％グリセロールで希釈することによって調製した１５mg rhGH/ml）とを混合し、望ましい容量（通常、３．０ml）にまで希釈した。化合物とrhGHの投与量は、下記の表３に示す。
【００５５】
典型的な投与とサンプリングのプロトコルは以下のとおりであった。２００〜２５０gの雄Sprague-Dawleyラットを２４時間絶食させ、投与の１５分前に、ケタミン（４４mg/kg）及びクロロプロマジン（１．５mg/kg）を投与した。５匹の投与群１つに、１つの投与溶液を投与した。経口投与（PO）については、１１cm Rusch 8 Frenchカテーテルを、ピペットチップを備えた1mlシリンジに取り付けた。そのシリンジを、該カテーテルを通して投与溶液を吸い取ることによって該溶液で満たし、それから、それをぬぐった。該カテーテルは、そのチューブを、ラットの門歯から１cm残して、食道内に降ろした。シリンジのプランジャーを押して、溶液を投与した。
【００５６】
尾動脈から、典型的には１５、３０及び４５分に、血液試料を連続的に回収した。各時点の５つの試料をプールした。血清rhGH濃度を、rhGH試験キット（Cambridge, MAのGenzyme Corporation Inc.からのKit #K1F4015）によって定量した。予備研究は、約０のベースライン値を示した。
【００５７】
各投与群の最大濃度と曲線下面積（AUC）は以下の表３に示す。
【００５８】
【表３】
0004637365.tif 000009
【００５９】
上述した特許、出願、試験方法及び出版物は、それらすべてが、参照としてここに取り込まれる。
【００６０】
本発明の様々な変形は、上記詳細な記載の見地において、当業者にそれらを示唆するであろう。そのような明白な変形はすべて、完全に、特許請求の範囲の範囲内であると意図される。