(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
治療上有効量のエキセンジン−４［配列番号：２］、エキセンジン−４（１−３０）［配列番号：６］、エキセンジン−４（１−３０）アミド［配列番号：７］、エキセンジン−４（１−２８）アミド［配列番号：４０］、14Ｌｅｕ，25Ｐｈｅ エキセンジン−４アミド［配列番号：９］、14Ｌｅｕ，25Ｐｈｅ エキセンジン−４（１−２８）アミド［配列番号：４１］、および14Ｌｅｕ，22Ａｌａ，25Ｐｈｅ エキセンジン−４（１−２８）アミド［配列番号：８］よりなる群から選択される化合物を含む、対象の食物摂取を低減することによって緩和し得る症状または疾患を治療するための注射剤（但し、２型糖尿病を治療するための注射剤は除く）。
【請求項２】
治療上有効量が、１日当たり、１０μｇ−５ｍｇであることを特徴とする請求項１記載の注射剤。
【請求項３】
治療上有効量が、１日当たり、１０μｇ−２ｍｇであることを特徴とする請求項１記載の注射剤。
【請求項４】
治療上有効量が、１日当たり、３０μｇ−５００μｇであることを特徴とする請求項１記載の注射剤。
【請求項５】
該症状または疾患が肥満症であることを特徴とする請求項１記載の注射剤。
【請求項６】
該対象がヒトであることを特徴とする請求項１記載の注射剤。
【請求項７】
該症状または疾患が摂食障害であることを特徴とする請求項１記載の注射剤。
【請求項８】
該症状または疾患がインスリン抵抗性症候群であることを特徴とする請求項１記載の注射剤。
【請求項９】
食欲低下量のエキセンジン−４［配列番号：２］、エキセンジン−４（１−３０）［配列番号：６］、エキセンジン−４（１−３０）アミド［配列番号：７］、エキセンジン−４（１−２８）アミド［配列番号：４０］、14Ｌｅｕ，25Ｐｈｅ エキセンジン−４アミド［配列番号：９］、14Ｌｅｕ，25Ｐｈｅ エキセンジン−４（１−２８）アミド［配列番号：４１］、および14Ｌｅｕ，22Ａｌａ，25Ｐｈｅ エキセンジン−４（１−２８）アミド［配列番号：８］よりなる群から選択される化合物を含む、対象の食欲を低下させるための注射剤。
【請求項１０】
治療上有効量のエキセンジン−４［配列番号：２］、エキセンジン−４（１−３０）［配列番号：６］、エキセンジン−４（１−３０）アミド［配列番号：７］、エキセンジン−４（１−２８）アミド［配列番号：４０］、14Ｌｅｕ，25Ｐｈｅ エキセンジン−４アミド［配列番号：９］、14Ｌｅｕ，25Ｐｈｅ エキセンジン−４（１−２８）アミド［配列番号：４１］、および14Ｌｅｕ，22Ａｌａ，25Ｐｈｅ エキセンジン−４（１−２８）アミド［配列番号：８］よりなる群から選択される化合物を含む、対象の体重を低下させるための注射剤。
【請求項１１】
該化合物がエキセンジン−４［配列番号：２］であることを特徴とする請求項１−８のいずれか１項に記載の注射剤。
【請求項１２】
さらに、アミリン・アゴニスト、レプチンおよびＣＣＫよりなる群から選択される１またはそれを超える化合物を治療上有効量含む、請求項１−８のいずれか１項に記載の注射剤。
【請求項１３】
医薬上許容し得る担体と共に治療上有効量のエキセンジン−４［配列番号：２］、エキセンジン−４（１−３０）［配列番号：６］、エキセンジン−４（１−３０）アミド［配列番号：７］、エキセンジン−４（１−２８）アミド［配列番号：４０］、14Ｌｅｕ，25Ｐｈｅ エキセンジン−４アミド［配列番号：９］、14Ｌｅｕ，25Ｐｈｅ エキセンジン−４（１−２８）アミド［配列番号：４１］、および14Ｌｅｕ，22Ａｌａ，25Ｐｈｅ エキセンジン−４（１−２８）アミド［配列番号：８］よりなる群から選択される化合物を含む、過栄養と関連する症状または疾患を治療するための注射剤（但し、１型又は２型糖尿病を治療するための注射剤は除く）。
【請求項１４】
該化合物がエキセンジン−４［配列番号：２］であることを特徴とする請求項１３記載の注射剤。
【請求項１５】
該治療上有効量が、ヒト対象についての治療上有効量であることを特徴とする請求項１３記載の注射剤。
【請求項１６】
医薬上許容し得る担体と共に治療上有効量のエキセンジン−４［配列番号：２］、エキセンジン−４（１−３０）［配列番号：６］、エキセンジン−４（１−３０）アミド［配列番号：７］、エキセンジン−４（１−２８）アミド［配列番号：４０］、14Ｌｅｕ，25Ｐｈｅ エキセンジン−４アミド［配列番号：９］、14Ｌｅｕ，25Ｐｈｅ エキセンジン−４（１−２８）アミド［配列番号：４１］、および14Ｌｅｕ，22Ａｌａ，25Ｐｈｅ エキセンジン−４（１−２８）アミド［配列番号：８］よりなる群から選択される化合物を含む、対象の食欲を低減させるための注射剤。
【請求項１７】
医薬上許容し得る担体と共に治療上有効量のエキセンジン−４［配列番号：２］、エキセンジン−４（１−３０）［配列番号：６］、エキセンジン−４（１−３０）アミド［配列番号：７］、エキセンジン−４（１−２８）アミド［配列番号：４０］、14Ｌｅｕ，25Ｐｈｅ エキセンジン−４アミド［配列番号：９］、14Ｌｅｕ，25Ｐｈｅ エキセンジン−４（１−２８）アミド［配列番号：４１］、および14Ｌｅｕ，22Ａｌａ，25Ｐｈｅ エキセンジン−４（１−２８）アミド［配列番号：８］よりなる群から選択される化合物を含む、対象の体重を低下させるための注射剤。
【請求項１８】
さらに、アミリン・アゴニスト、レプチンおよびＣＣＫよりなる群から選択される１またはそれを超える化合物を治療上有効量含むことを特徴とする、請求項１３−１５のいずれか１項に記載の注射剤。
【請求項１９】
治療上有効量のエキセンジン−４（１−３０）［配列番号：６］、エキセンジン−４（１−３０）アミド［配列番号：７］、エキセンジン−４（１−２８）アミド［配列番号：４０］、14Ｌｅｕ，25Ｐｈｅ エキセンジン−４アミド［配列番号：９］、14Ｌｅｕ，25Ｐｈｅ エキセンジン−４（１−２８）アミド［配列番号：４１］、および14Ｌｅｕ，22Ａｌａ，25Ｐｈｅ エキセンジン−４（１−２８）アミド［配列番号：８］よりなる群から選択される化合物を含む、対象の食物摂取を低減することによって緩和し得る症状または疾患を治療するための注射剤。
【請求項２０】
治療上有効量が、１日当たり、１０μｇ−５ｍｇであることを特徴とする請求項１９記載の注射剤。
【請求項２１】
治療上有効量が、１日当たり、１０μｇ−２ｍｇであることを特徴とする請求項１９記載の注射剤。
【請求項２２】
治療上有効量が、１日当たり、３０μｇ−５００μｇであることを特徴とする請求項１９記載の注射剤。
【請求項２３】
該症状または疾患が肥満症であることを特徴とする請求項１９記載の医薬組成物。
【請求項２４】
該症状または疾患が２型糖尿病であることを特徴とする請求項１９記載の医薬組成物。
【請求項２５】
該対象がヒトであることを特徴とする請求項１９記載の医薬組成物。
【請求項２６】
該症状または疾患が摂食障害であることを特徴とする請求項１９記載の医薬組成物。
【請求項２７】
該症状または疾患がインスリン抵抗性症候群であることを特徴とする請求項１９記載の医薬組成物。
【請求項２８】
食欲低下量のエキセンジン−４（１−３０）［配列番号：６］、エキセンジン−４（１−３０）アミド［配列番号：７］、エキセンジン−４（１−２８）アミド［配列番号：４０］、14Ｌｅｕ，25Ｐｈｅ エキセンジン−４アミド［配列番号：９］、14Ｌｅｕ，25Ｐｈｅ エキセンジン−４（１−２８）アミド［配列番号：４１］、および14Ｌｅｕ，22Ａｌａ，25Ｐｈｅ エキセンジン−４（１−２８）アミド［配列番号：８］よりなる群から選択される化合物を含む、対象の食欲を低下させるための注射剤。
【請求項２９】
治療上有効量のエキセンジン−４（１−３０）［配列番号：６］、エキセンジン−４（１−３０）アミド［配列番号：７］、エキセンジン−４（１−２８）アミド［配列番号：４０］、14Ｌｅｕ，25Ｐｈｅ エキセンジン−４アミド［配列番号：９］、14Ｌｅｕ，25Ｐｈｅ エキセンジン−４（１−２８）アミド［配列番号：４１］、および14Ｌｅｕ，22Ａｌａ，25Ｐｈｅ エキセンジン−４（１−２８）アミド［配列番号：８］よりなる群から選択される化合物を含む、対象の体重を低下させるための注射剤。
【請求項３０】
さらに、アミリン・アゴニスト、レプチンおよびＣＣＫよりなる群から選択される１またはそれを超える化合物を治療上有効量含む、請求項１９−２７のいずれか１項に記載の注射剤。
【請求項３１】
医薬上許容し得る担体と共に治療上有効量のエキセンジン−４（１−３０）［配列番号：６］、エキセンジン−４（１−３０）アミド［配列番号：７］、エキセンジン−４（１−２８）アミド［配列番号：４０］、14Ｌｅｕ，25Ｐｈｅ エキセンジン−４アミド［配列番号：９］、14Ｌｅｕ，25Ｐｈｅ エキセンジン−４（１−２８）アミド［配列番号：４１］、および14Ｌｅｕ，22Ａｌａ，25Ｐｈｅ エキセンジン−４（１−２８）アミド［配列番号：８］よりなる群から選択される化合物を含む、過栄養と関連する症状または疾患を治療するための注射剤。
【請求項３２】
該治療上有効量が、ヒト対象についての治療上有効量であることを特徴とする請求項３１記載の注射剤。
【請求項３３】
医薬上許容し得る担体と共に治療上有効量のエキセンジン−４（１−３０）［配列番号：６］、エキセンジン−４（１−３０）アミド［配列番号：７］、エキセンジン−４（１−２８）アミド［配列番号：４０］、14Ｌｅｕ，25Ｐｈｅ エキセンジン−４アミド［配列番号：９］、14Ｌｅｕ，25Ｐｈｅ エキセンジン−４（１−２８）アミド［配列番号：４１］、および14Ｌｅｕ，22Ａｌａ，25Ｐｈｅ エキセンジン−４（１−２８）アミド［配列番号：８］よりなる群から選択される化合物を含む、対象の食欲を低減させるための注射剤。
【請求項３４】
医薬上許容し得る担体と共に治療上有効量のエキセンジン−４（１−３０）［配列番号：６］、エキセンジン−４（１−３０）アミド［配列番号：７］、エキセンジン−４（１−２８）アミド［配列番号：４０］、14Ｌｅｕ，25Ｐｈｅ エキセンジン−４アミド［配列番号：９］、14Ｌｅｕ，25Ｐｈｅ エキセンジン−４（１−２８）アミド［配列番号：４１］、および14Ｌｅｕ，22Ａｌａ，25Ｐｈｅ エキセンジン−４（１−２８）アミド［配列番号：８］よりなる群から選択される化合物を含む、対象の体重を低下させるための注射剤。
【請求項３５】
さらに、アミリン・アゴニスト、レプチンおよびＣＣＫよりなる群から選択される１またはそれを超える化合物を治療上有効量含むことを特徴とする、請求項３１または３２記載の注射剤。
【発明の詳細な説明】
本出願は、１９９７年１月７日に出願した米国仮出願番号６０／０３４,９０５号、１９９７年８月８日に出願した米国仮出願番号６０／０５５,４０４号、１９９７年１１月１４日に出願した米国仮出願番号６０／０６６,０２９号、および１９９７年１１月１４日に出願した米国仮出願番号６０／０６５,４４２号の利益を主張する。
発明の分野
本発明は、有効量のエキセンジン（exendin）またはエキセンジン・アゴニストを単独で、またはレプチン（leptin）もしくはアミリン・アゴニストのごとき満腹に影響する他の化合物または組成物と共に投与することを特徴とする、食物摂取を低減することによって緩和することができる症状または疾患を治療する方法に関する。該方法は、肥満症、２型糖尿病、摂食障害、インスリン抵抗性症候群を包含する、食物摂取の低減が価値のある症状または疾患を治療するのに有用である。該方法は、血漿脂質レベルを低下し、心臓病の危険性を低下し、食欲を低下させ、かつ対象の体重を低下するのにも有用である。本発明の方法で用いるための医薬組成物も開示する。
背景
以下の説明は、本発明に関する情報を要約している。本明細書中に供するいずれかの情報がここに特許請求する発明に対して先行技術となることも、具体的または黙示的に参照したいずれかの刊行物が本発明に対して先行技術となることも容認されない。
エキセンジン
エキセンジンは、アリゾナで見られるトカゲであるアメリカドクトカゲ、およびメキシコドクトカゲの毒液中に見出されるペプチドである。エキセンジン−３は、ヘロデルマ・ホリダム（Heloderma horridum）の毒液中に存在し、エキセンジン−４はヘロデルマ・サスペクタム（Heloderma suspectum）の毒液中に存在する（Eng,J.らによるJ.Biol.Chem.,265：20259−62,1990；Eng.,J.らによるJ.Biol.Chem.,267：7402−05,1992）。エキセンジンは、ＧＬＰ−１［７−３６］ＮＨ2にあっては５３％の最高ホモロジーを有し、グルカゴン−様ペプチド・ファミリーの幾つかのメンバーと幾分かの配列類似性を有する（GokeらによるJ.Biol.Chem.,268：19650−55,1993）。プログルカゴン［７８−１０７］としても知られているＧＬＰ−１［７−３６］ＮＨ2は、膵臓β−細胞からのインスリン分泌を刺激するインスリン親和効果を有し；ＧＬＰも膵臓α−細胞からのグルカゴン分泌を阻害する（OrskovらによるDiabetes,42：658−61,1993；D’AlessioらによるJ.Clin.Invest.,97：133−38,1996）。ＧＬＰ−１は胃内容排出を阻害し（Williams B.らによるJ.Clin.Endocrinol.Metab.,81（1）：327−32,1996；Wettergren A.らによるDig.Dis.Sci.,38（4）：665−73,1993）、および胃酸分泌を阻害する（Schjoldager BTらによるDig.Dis.Sci.,34（5）：703−8,1989；O’Halloran DJらによるJ.Endocrinol.,126（1）：169−73,1990；Wettergren AらによるDig.Dis.Sci.,38（4）：665−73,1993）と報告されている。そのカルボキシ末端にさらなるグリシン残基を有するＧＬＰ−１［７−３７］も、ヒトにおいてインスリン分泌を刺激する（OrskovらによるDiabetes,42：658−61,1993）。ＧＬＰ−１のインスリン親和効果に寄与すると考えられる貫膜Ｇ−タンパク質アデニル酸シクラーゼ−結合受容体がβ−細胞系統からクローン化されたことが報告されている（ThorensによるProc.Natl.Acad.Sci.USA,89：8641−45（1992））。
エキセンジン−４は、インスリン−分泌βＴＣ１細胞上のＧＬＰ−１受容体に、モルモット膵臓からの分散腺房細胞に、および胃からの壁細胞に強力に結合し；該ペプチドは、単離した胃においてソマトスタチン放出を刺激し、ガストリン放出を阻害するともいわれている（GokeらによるJ.Biol.Chem.,268：19650−55,1993；ScheppらによるEur.J.Pharmacol.,69：183−91,1994；EisseleらによるLife Sci.,55：629−34,1994）。エキセンジン−３およびエキセンジン−４は、膵臓腺房細胞におけるｃＡＭＰ産生を刺激し、膵臓腺房細胞からのアミラーゼ放出を刺激することが報告されている（Malhotra,R.らによるRegulatory Peptides,41：149−56,1992；RaufmanらによるJ.Biol.Chem.,267：21432−37,1992；SinghらによるRegul.Pept.,53：47−59,1994）。真性糖尿病の治療用および高血糖症の予防用のインスリン親和性剤としてのエキセンジン−３およびエキセンジン−４の使用が提唱されている（Engによる米国特許第５,４２４,２８６号）。
エキセンジン［９−３９］のごときＣ−末端を切頭したエキセンジン・ペプチド、カルボキシアミド化分子、および９−３９をスルーするフラグメント３−３９が効力のある選択的なＧＬＰ−１のアンタゴニストであることが報告されている（GokeらによるJ.Biol.Chem.,268：19650−55,1993；Raufman,J.P.らによるJ.Biol.Chem.,266：2897−902,1991；Schepp,W.らによるEur.J.Pharm.,269：183−91,1994;Montrose−RafizadehらによるDiabetes,45（増刊2）：152A,1996）。エキセンジン［９−３９］はイン・ビボ（in vivo）で内因性ＧＬＰ−１をブロックし、その結果、インスリン分泌を低下させるといわれている（WangらによるJ.Clin.Invest.,95：417−21,1995;D’AlessioらによるJ.Clin.Invest.,97：133−38,1996）。伝えるところによれば、ＧＬＰ−１のインスリン親和性効果に明らかに寄与する受容体がラットの膵島細胞からクローン化された（Thorens,B.によるProc.Natl.Acad.Sci.USA 89：8641−8645,1992）。エキセンジンおよびエキセンジン［９−３９］は、クローン化ＧＬＰ−１受容体（ラット膵臓β−細胞ＧＬＰ−１受容体）（Fehmann HCらによるPeptides,15（3）：453−6,1994）およびヒトＧＬＰ−１受容体（Thorens BらによるDiabetes,42（11）：1678−82,1993）に結合するといわれている。クローン化ＧＬＰ−１受容体でトランスフェクトした細胞においては、伝えるところによれば、エキセンジン−４はアゴニストであり、すなわちそれはｃＡＭＰを上昇させ、一方エキセンジン［９−３９］はアンタゴニストとして、すなわち、それはエキセンジン−４およびＧＬＰ−１の刺激作用をブロックする、同定されている。同著。
エキセンジン［９−３９］も、エキセンジン−３およびエキセンジン−４による膵臓腺房細胞の刺激を阻害する、完全長エキセンジンのアンタゴニストとして作用することが報告されている（RaufmanらによるJ.Biol.Chem.,266：2897−902,1991；RaufmanらによるJ.Biol.Chem.,266：21432−37,1992）。また、エキセンジン［９−３９］は、エキセンジン−４による血漿インスリンレベルの刺激を阻害し、エキセンジン−４およびＧＬＰ−１のソマトスタチン放出−刺激およびガストリン放出−阻害活性を阻害することも報告されている（Kolligs,F.らによるDiabetes,44：16−19,1995；EisseleらによるLife Sciences,55：629−34,1994）。
最近、エキセンジンが胃内容排出を阻害することが判明した（本発明と共通の所有権を享受する、１９９６年８月８日に出願され、出典明示して本明細書の一部とみなすＵ.Ｓ.Ｓ.Ｎ.０８／６９４，９５４号）。
エキセンジン［９−３９］は、食物摂取の制御における中枢ＧＬＰ−１の生理学的関連性を調べるために用いられている（Turton,M.D.らによるNature,379：69−72,1996）。脳室内注射によって投与したＧＬＰ−１はラットにおける食物摂取を阻害する。このＩＣＶでデリバリーされたＧＬＰ−１の満腹−誘導効果は、エキセンジン［９−３９］のＩＣＶ注射によって阻害されることが報告されている（Turtonによる前掲）。しかしながら、ＧＬＰ−１は末梢注射によって投与した場合にはマウスにおける食物摂取を阻害しないことが報告されている（Turton,M.D.によるNature,379:69−72,1996;Bhavsar,S.P.によるSoc.Neurosci.Abstr.21：460（188.8）,1995）。
肥満症および過栄養
肥満症、過剰な脂肪組織は、発達した社会においてますます一般的になりつつある。例えば、合衆国における成人のほぼ３０％は望ましい体重を２０％超えていると概算されている−−健康の危険性に悪い影響を与えるのに十分な肥満症の容認された測定値（Harrison’s Principles of Internal Medicine 12th Edition,McGraw Hill,Inc.社（1991）p.411）。肥満症の病因は、多因性であると考えられているが、基本的な問題点は、過剰な脂肪組織が存在するまで、肥満症対象においては食物摂取とエネルギー消費との釣合いが取られないことである。食物摂取または過栄養を低減する試行は、通常、中期に実を結ばない。なぜならば、食事療法によって誘導したるい痩は食欲を増大させ、かつエネルギー消費を低下させてしまうからである（Leibelらによる（1995）New England Journal of Medicine 322: 621-628）。脂肪塊を有形的に損失させるために十分なエネルギーを消費するために必要な身体運動の強度は、大部分の人々にとって大きすぎて、十分に頻繁な基準で行うことができない。したがって、最近では、肥満症は治療可能性に乏しく、慢性的であり、実質的には難治性の代謝疾患である。肥満症自体を美容的な理由で望ましくないと考える人がいるばかりでなく、肥満症は、２型糖尿病、心臓病の危険性の増大、高血圧症、アテローム性動脈硬化症、変形性関節症を包含する同時発病の重大な危険性、ならびに一般的な麻酔を含む外科手術の合併症の発生率の増大もはらんでいる。過栄養に起因する肥満症は、インスリン抵抗性症候群、または“症候群Ｘ”と呼ばれる一群の症状に対する危険因子でもある。“症候群Ｘ”においては、インスリン抵抗性と高血圧症との間に連鎖が存在することが報告されている（Watson N.およびSandler M.によるCurr.Med.Res.Opin.,12（6）：374−378（1991）；Kodama J.らによるDiabetes Care,13（11）：1109−1111（1990）；LithellらによるJ.Cardiovasc.Pharmacol.,15増刊 5：S46−S52（1990））。
前述した理由につき多くの患者において比較的効果がないこともあるが、約１０％の体重の損失に実際に成功した対象が少しでもいる場合には、同時発病的症状、最も詳細には食事療法およびるい痩が第一の治療モダリティーである２型糖尿病における劇的な改善が存在し得る。肥満症対象において食物摂取を低減すると、これらの対象における血漿グルコースレベル、血漿脂質レベルおよび心臓病の危険性が低下するであろう。過栄養は、多くの摂食障害の結果でもあり、多くの摂食障害の精神的な原因でもある。食物摂取を低減すれば、かかる疾患の治療にも有利であろう。
かくして、食物摂取を低減するための有効な手段が主な攻撃であって、優れた治療の方法が非常に有益なものであろうことは理解し得る。かかる方法、ならびにそれに有用な化合物および組成物を発明し、本明細書中で説明し、特許請求する。
発明の概要
本発明は、エキセンジンおよびエキセンジン・アゴニストが食物摂取を阻害することに対して十分かつ持続した効果を有するという驚くべき発見に関わる。
本発明は、エキセンジン、例えばエキセンジン−３［配列番号：１：His Ser Asp Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser］、またはエキセンジン−４［配列番号：２：His Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser］、またはエキセンジンが食物摂取の低減に対してその作用を発揮する受容体に有効に結合する他の化合物の投与を特徴とする、過栄養と関連する症状または疾患を治療するための新規の方法に指向される。これらの方法は、例えば、肥満症、２型糖尿病または非インスリン依存性糖尿病を含む糖尿病、摂食障害およびインスリン抵抗性症候群の治療に有用であろう。
第１の態様において、本発明は、治療上有効量のエキセンジンまたはエキセンジン・アゴニストを対象に投与することを特徴とする、該対象における食物摂取を低減することによって緩和し得る症状または疾患を治療する方法をその要旨とする。“エキセンジン・アゴニスト”とは、エキセンジンがこの効果を引起す受容体または受容体群に結合することにより食物摂取の低減に対するエキセンジンの効果を模倣する化合物を意味する。好ましいエキセンジン・アゴニスト化合物には、１９９７年８月８日に“Novel Exendin Agonist Compounds”なる表題で出願された米国仮特許出願番号６０／０５５,４０４号；１９９７年１１月１４日に“Novel Exendin Agonist Compounds”なる表題で出願された米国仮特許出願番号６０／０６５,４４２号；および１９９７年１１月１４日に“Novel Exendin Agonist Compounds”なる表題で出願された米国仮特許出願番号６０／０６６,０２９号に記載されているものが含まれ；これらすべては本出願と共通の所有権を享受し、すべて出典明示して本明細書の一部とみなす。“食物摂取を低減することによって緩和し得る症状または疾患”とは、比較的高い食物摂取によって引起されるか、悪化されるか、もしくは重くさせられる、または食物摂取を低減することにより緩和し得る、対象におけるいずれもの症状または疾患を意味する。かかる症状または疾患には、限定されるものではないが、肥満症、２型糖尿病を含む糖尿病、摂食障害、およびインスリン抵抗性症候群が含まれる。
かくして、第１の態様において、本発明は、治療上有効量のエキセンジンまたはエキセンジン・アゴニストを対象に投与することを特徴とする、該対象における食物摂取を低減することにより緩和し得る症状または疾患を治療するための方法を提供する。好ましいエキセンジン・アゴニスト化合物には、米国仮特許出願番号６０／０５５,４０４号；６０／０６５,４４２号；および６０／０６６,０２９号に記載されているものが含まれ；これらは出典明示して本明細書の一部とみなす。好ましくは、対象は脊椎動物であり、より好ましくは哺乳動物であり、最も好ましくはヒトである。好ましい態様において、エキセンジンまたはエキセンジン・アゴニストは、非経口的に、より好ましくは注射によって投与する。最も好ましい態様において、該注射は末梢注射である。好ましくは、約１０μｇ−３０μｇないし約５ｍｇのエキセンジンまたはエキセンジン・アゴニストを一日当たりに投与する。より好ましくは、約１０−３０μｇないし２ｍｇ、または約１０−３０μｇないし約１ｍｇのエキセンジンまたはエキセンジン・アゴニストを一日当たりに投与する。最も好ましくは、約３０μｇないし約５００μｇのエキセンジンまたはエキセンジン・アゴニストを一日当たりに投与する。
本発明の種々の好ましい態様において、該症状または疾患は、肥満症、糖尿病、好ましくは２型糖尿病、摂食障害、またはインスリン抵抗性症候群である。
本発明のほかの好ましい態様において、食欲低下量のエキセンジンまたはエキセンジン・アゴニストを対象に投与することを特徴とする、該対象の食欲を低下させるための方法を提供する。
なおほかの好ましい態様において、治療上有効量のエキセンジンまたはエキセンジン・アゴニストを対象に投与することを特徴とする、血漿脂質を低下するための方法を提供する。
本発明の方法は、治療上有効量のエキセンジンまたはエキセンジン・アゴニストを対象に投与することを含む、該対象の心臓病の危険性を低下するためにも用いることができる。１つの好ましい態様において、本発明の方法で用いるエキセンジンまたはエキセンジン・アゴニストはエキセンジン−３である。もう１つの好ましい態様において、該エキセンジンはエキセンジン−４である。ほかの好ましいエキセンジン・アゴニストには、エキセンジン−４（１−３０）［配列番号:６：His Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly］、エキセンジン−４（１−３０）アミド［配列番号：７：His Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly-NH2］、エキセンジン−４（１−２８）アミド［配列番号：４０：His Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn-NH2］、14Leu,25Phe エキセンジン−４アミド［配列番号：９：His Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Leu Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Phe Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser-NH2］、14Leu,25Phe エキセンジン−４（１−２８）アミド［配列番号：４１：His Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Leu Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Phe Leu Lys Asn−NH2］、および14Leu,22Ala,25Phe エキセンジン−４（１−２８）アミド［配列番号：８：His Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Leu Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Ala Ile Glu Phe Leu Lys Asn−NH2］が含まれる。
本発明の方法においては、エキセンジンおよびエキセンジン・アゴニストは、限定されるものではないが、アミリン・アゴニスト、コレシストキニン（ＣＣＫ）またはレプチン（obタンパク質）を含むほかの化合物および組成物を包含する、長期または短期の満腹作用を示す１またはそれを超えるほかの化合物および組成物と別々または一緒に投与することができる。好適なアミリン・アゴニストには、例えば１９９７年１１月１１日に発行された“Amylin Agonist Peptides and Uses Therefor”なる米国特許第５,６８６,５１１号中に記載されている（“プラムリンチド（pramlintide）”としても知られ、以前は“AC−137”と呼ばれていた）［25,28,29Pro−］−ヒト・アミリン、ならびにサケ・カルシトニンが含まれる。用いるＣＣＫは、好ましくはＣＣＫオクトペプチド（ＣＣＫ−８）である。レプチンは、例えばPelleymounter,M.A.らによるScience,269：540−43（1995）；Halaas,J.L.らによるScience,269：543−46（1995）；およびCampfield,L.A.らによるEur.J.Pharmac.,262：133−41（1994）で論じられている。
本発明のほかの態様において、医薬上許容される担体と共に治療上有効量のエキセンジンまたはエキセンジン・アゴニストを含む、食物摂取を低減することにより緩和し得る症状または疾患の治療に使用するための医薬組成物を提供する。好ましくは、該医薬組成物は、ヒト対象に対する治療上有効量を含む。
該医薬組成物は、好ましくは、対象の食欲を低減するために、対象の体重を低下するために、対象の血漿脂質レベルを低下するために、あるいは対象の心臓病の危険性を低下するために用いることができる。当業者であれば、該医薬組成物が、好ましくは対象において目的の効果を達成するための治療上有効量のエキセンジンまたはエキセンジン・アゴニストを含むであろうことは理解されるであろう。
該医薬組成物には、さらに、限定されるものではないが、アミリン・アゴニスト、ＣＣＫ、好ましくはＣＣＫ−８、またはレプチンを含むほかの化合物および組成物を含む、長期または短期の満腹作用を示す１またはそれを超える他の化合物および組成物が含まれ得る。好適なアミリン・アゴニストには、例えば［25,28,29Pro］−ヒト・アミリンおよびサケ・カルシトニンが含まれる。
１つの好ましい態様において、該医薬組成物はエキセンジン−３を含む。もう１つの好ましい態様において、該医薬組成物はエキセンジン−４を含む。ほかの好ましい態様において、該医薬組成物は、エキセンジン−４（１−３０）、エキセンジン−４（１−３０）アミド、エキセンジン−４（１−２８）アミド、14Leu,25Phe エキセンジン−４アミド、14Leu,25Phe エキセンジン−４（１−２８）アミド、および14Leu,22Ala,25Phe エキセンジン−４（１−２８）アミドから選択されるペプチドを含む。
【図面の簡単な説明】
図１は、エキセンジン−４およびＧＬＰ−１を腹膜内注射した後の正常マウスにおける食物摂取の変化を示すグラフである。
図２は、エキセンジン−４を腹膜内注射した後の肥満症マウスにおける食物摂取の変化を示すグラフである。
図３は、エキセンジン−４を脳室内注射した後のラットにおける食物摂取の変化を示すグラフである。
図４は、エキセンジン−４（１−３０）（“化合物１”）を腹膜内注射した後の正常マウスにおける食物摂取の変化を示すグラフである。
図５は、エキセンジン−４（１−３０）アミド（“化合物２”）を腹膜内注射した後の正常マウスにおける食物摂取の変化を示すグラフである。
図６は、エキセンジン−４（１−２８）アミド（“化合物３”）を腹膜内注射した後の正常マウスにおける食物摂取の変化を示すグラフである。
図７は、14Leu,25Phe エキセンジン−４アミド（“化合物４”）を腹膜内注射した後の正常マウスにおける食物摂取の変化を示すグラフである。
図８は、14Leu,25Phe  エキセンジン−４（１−２８）アミド（“化合物５”）を腹膜内注射した後の正常マウスにおける食物摂取の変化を示すグラフである。
図９は、14Leu,22Ala,25Phe エキセンジン−４（１−２８）アミド（“化合物６”）を腹膜内注射した後の正常マウスにおける食物摂取の変化を示すグラフである。
図１０は、本発明において有用なある種のエキセンジン・アゴニスト化合物のアミノ酸配列を示す［配列番号：９−３９］。
発明の詳細な説明
エキセンジンおよびエキセンジン・アゴニストは、それらの薬理学的特性を考慮して本明細書中で説明するごとく有用である。エキセンジン・アゴニストとしての活性は、後記するアッセイにおける活性によって示し得る。食物摂取を低減することに対するエキセンジンまたはエキセンジン・アゴニストの効果は、後記する実施例で説明する方法、または食物摂取もしくは食欲に対する効果を判定する当該技術分野で知られているほかの方法を用いて、同定し、評価し、またはスクリーニングすることができる。
エキセンジン・アゴニスト化合物
エキセンジン・アゴニスト化合物は、式（Ｉ）［配列番号：３］：
0004798814.tif 000002
［式中、Xaa1はHis、ArgまたはTyrであり；Xaa2はSer、Gly、AlaまたはThrであり；Xaa3はAspまたはGluであり；Xaa4はPhe、Tyrまたはナフチルアラニンであり；Xaa5はThrまたはSerであり；Xaa6はSerまたはThrであり；Xaa7はAspまたはGluであり；Xaa8はLeu、Ile、Val、ペンチルグリシンまたはMetであり；Xaa9はLeu、Ile、ペンチルグリシン、ValまたはMetであり；Xaa10はPhe、Tyrまたはナフチルアラニンであり；Xaa11はIle、Val、Leu、ペンチルグリシン、tert−ブチルグリシンまたはMetであり；Xaa12はGluまたはAspであり；Xaa13はTrp、Phe、Tyrまたはナフチルアラニンであり；Xaa14、Xaa15、Xaa16およびXaa17は独立してPro、ホモプロリン、3Hyp、4Hyp、チオプロリン、Ｎ−アルキルグリシン、Ｎ−アルキルペンチルグリシンまたはＮ−アルキルアラニンであり；Xaa18はSer、ThrまたはTyrであって；Ｚは−ＯＨまたは−ＮＨ2であり；但し、当該化合物はエキセンジン−３またはエキセンジン−４ではない］
で示される化合物を含む、米国仮出願番号６０／０５５,４０４号に記載されているものである。
Ｎ−アルキルグリシン、Ｎ−アルキルペンチルグリシンおよびＮ−アルキルアラニンの好ましいＮ−アルキル基には、好ましくは１ないし約６個の炭素原子の、より好ましくは１ないし４個の炭素原子の低級アルキル基が含まれる。好適な化合物には、配列番号：９ないし３９のアミノ酸配列を有する図１０に掲載するものが含まれる。
好ましいエキセンジン・アゴニスト化合物には、式中、Xaa1がHisまたはTyrであるものが含まれる。より好ましくは、Xaa1はHisである。
好ましくは、式中、Xaa2がGlyである化合物である。
好ましくは、式中、Xaa9がLeu、ペンチルグリシンまたはMetである化合物である。
好ましい化合物には、式中、Xaa13がTrpまたはPheであるものが含まれる。
また好ましくは、式中、Xaa4がPheまたはナフチルアラニンであり；Xaa11がIleまたはValであって、Xaa14、Xaa15、Xaa16およびXaa17が独立して、Pro、ホモプロリン、チオプロリンまたはＮ−アルキルアラニンから選択される、化合物である。好ましくは、Ｎ−アルキルアラニンは、１ないし約６個の炭素原子のＮ−アルキル基を有する。
特に好ましい態様によれば、Xaa15、Xaa16およびXaa17は同一のアミノ酸残基である。
好ましくは、式中、Xaa18がSerまたはTyr、より好ましくはSerである化合物である。
好ましいＺは−ＮＨ2である。
１つの態様によれば、好ましくは、式中、Xaa1がHisまたはTyr、より好ましくはHisであり；Xaa2がGlyであり；Xaa4がPheまたはナフチルアラニンであり；Xaa9がLeu、ペンチルグリシンまたはMetであり；Xaa10がPheまたはナフチルアラニンであり；Xaa11がIleまたはValであり；Xaa14、Xaa15、Xaa16およびXaa17が独立して、Pro、ホモプロリン、チオプロリンまたはＮ−アルキルアラニンから選択され；Xaa18がSerまたはTyr、より好ましくはSerである式（Ｉ）で示される化合物である。より好ましくは、Ｚは−ＮＨ2である。
特に好ましい態様によれば、特に好ましい化合物には、式中、Xaa1がHisまたはArgであり；Xaa2がGlyであり；Xaa3がAspまたはGluであり；Xaa4がPheまたはナフチルアラニンであり；Xaa5がThrまたはSerであり；Xaa6がSerまたはThrであり；Xaa7がAspまたはGluであり；Xaa8がLueまたはペンチルグリシンであり；Xaa9がLeuまたはペンチルグリシンであり；Xaa10がPheまたはナフチルアラニンであり；Xaa11がIle、Valまたはｔ−ブチルチルグリシンであり；Xaa12がGluまたはAspであり；Xaa13がTrpまたはPheであり、Xaa14、Xaa15、Xaa16およびXaa17が独立して、Pro、ホモプロリン、チオプロリンまたはＮ−メチルアラニンであり；Xaa18がSerまたはTyrであって；Ｚが−ＯＨまたは−ＮＨ2であり；但し、当該化合物は配列番号：１または２のいずれかで示される式を有さない、式（Ｉ）で示されるものが含まれる。より好ましくは、Ｚは−ＮＨ2である。特に好ましい化合物には、配列番号：９、１０、２１、２２、２３、２６、２８、３４、３５および３９で示されるアミノ酸配列を有するものが含まれる。
特に好ましい態様によれば、式中、Xaa9がLeu、Ile、Valまたはペンチルグリシン、より好ましくはLeuまたはペンチルグリシンであって、Xaa13がPhe、Tyrまたはナフチルアラニン、より好ましくはPheまたはナフチルアラニンである化合物を提供する。これらの化合物は、イン・ビトロ（in vitro）およびイン・ビボ（in vivo）の両方で、ならびに当該化合物の合成の間、有利な作用期間を示し、酸化的分解により付されないであろう。
エキセンジン・アゴニストには、式（ＩＩ）［配列番号：４］：
0004798814.tif 000003
［式中、Xaa1はHis、ArgまたはTyrであり；
Xaa2はSer、Gly、AlaまたはThrであり；
Xaa3はAspまたはGluであり；
Xaa5はAlaまたはThrであり；
Xaa6はAla、Phe、Tyrまたはナフチルアラニンであり；
Xaa7はThrまたはSerであり；
Xaa8はAla、SerまたはThrであり；
Xaa9はAspまたはGluであり；
Xaa10はAla、Leu、Ile、Val、ペンチルグリシンまたはMetであり；
Xaa11はAlaまたはSerであり；
Xaa12はAlaまたはLysであり；
Xaa13はAlaまたはGlnであり；
Xaa14はAla、Leu、Ile、ペンチルグリシン、ValまたはMetであり；
Xaa15はAlaまたはGluであり；
Xaa16はAlaまたはGluであり；
Xaa17はAlaまたはGluであり；
Xaa19はAlaまたはValであり；
Xaa20はAlaまたはArgであり；
Xaa21はAlaまたはLeuであり；
Xaa22はAla、Phe、Tyrまたはナフチルアラニンであり；
Xaa23はIle、Val、Leu、ペンチルグリシン、tert−ブチルグリシンまたはMetであり；
Xaa24はAla、GluまたはAspであり；
Xaa25はAla、Trp、Phe、Tyrまたはナフチルアラニンであり；
Xaa26はAlaまたはLeuであり；
Xaa27はAlaまたはLysであり；
Xaa28はAlaまたはAsnであり；
Z1は−ＯＨ、
−ＮＨ2、
Gly−Z2、
Gly Gly−Z2、
Gly Gly Xaa31−Z2、
Gly Gly Xaa31 Ser−Z2、
Gly Gly Xaa31 Ser Ser−Z2、
Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly−Z2、
Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala−Z2、
Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36−Z2、
Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37−Z2、または
Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37 Xaa38−Z2であり；
Xaa31、Xaa36、Xaa37およびXaa38は独立して、Pro、ホモプロリン、3Hyp、4Hyp、チオプロリン、Ｎ−アルキルグリシン、Ｎ−アルキルペンチルグリシン、またはＮ−アルキルアラニンであって；
Z2は−ＯＨまたは−ＮＨ2であり；
但し、Xaa3、Xaa5、Xaa6、Xaa8、Xaa10、Xaa11、Xaa12、Xaa13、Xaa14、Xaa15、Xaa16、Xaa17、Xaa19、Xaa20、Xaa21、Xaa24、Xaa25、Xaa26、Xaa27およびXaa28のうちの３個以下はAlaである］
で示される化合物を含む米国仮出願番号６０／０６５,４４２号に記載されているものも含まれる。Ｎ−アルキルグリシン、Ｎ−アルキルペンチルグリシンおよびＮ−アルキルアラニンの好ましいＮ−アルキル基には、好ましくは１ないし約６個の炭素原子の、より好ましくは１ないし４個の炭素原子の低級アルキル基が含まれる。
好ましいエキセンジン・アゴニスト化合物には、式中、Xaa1がHisまたはTyrであるものが含まれる。より好ましくは、Xaa1はHisである。
好ましくは、式中、Xaa2がGlyである化合物である。
好ましくは、式中、Xaa14がLeu、ペンチルグリシンまたはMetである化合物である。
好ましい化合物は、式中、Xaa25がTrpまたはPheであるものである。
好ましい化合物は、式中、Xaa6がPheまたはナフチルアラニンであり；Xaa22がPheまたはナフチルアラニンであって、Xaa23がIleまたはValであるものである。
好ましくは、式中、Xaa31、Xaa36、Xaa37およびXaa38が独立して、Pro、ホモプロリン、チオプロリンおよびＮ−アルキルアラニンから選択される化合物である。
好ましいZ1は−ＮＨ2である。
好ましいZ2は−ＮＨ2である。
１つの態様によれば、好ましくは、式（Ｉ）：式中、Xaa1はHisまたはTyr、より好ましくはHisであり；Xaa2はGlyであり；Xaa6はPheまたはナフチルアラニンであり；Xaa14はLeu、ペンチルグリシンまたはMetであり；Xaa22はPheまたはナフチルアラニンであり；Xaa23はIleまたはValであり；Xaa31、Xaa36、Xaa37およびXaa38は独立して、Pro、ホモプロリン、チオプロリンまたはＮ−アルキルアラニンから選択される、で示される化合物である。より好ましくは、Z1は−ＮＨ2である。
特に好ましい態様によれば、特に好ましい化合物には、式（Ｉ）：式中、Xaa1はHisまたはArgであり；Xaa2はGlyまたはAlaであり；Xaa3はAspまたはGluであり；Xaa5はAlaまたはThrであり；Xaa6はAla、Pheまたはナフチルアラニンであり；Xaa7はThrまたはSerであり；Xaa8はAla、SerまたはThrであり；Xaa9はAspまたはGluであり；Xaa10はAla、Leuまたはペンチルグリシンであり；Xaa11はAlaまたはSerであり；Xaa12はAlaまたはLysであり；Xaa13はAlaまたはGlnであり；Xaa14はAla、Leuまたはペンチルグリシンであり；Xaa15はAlaまたはGluであり；Xaa16はAlaまたはGluであり；Xaa17はAlaまたはGluであり；Xaa19はAlaまたはValであり；Xaa20はAlaまたはArgであり；Xaa21はAlaまたはLeuであり；Xaa22はPheまたはナフチルアラニンであり；Xaa23はIle、Valまたはtert−ブチルグリシンであり；Xaa24はAla、GluまたはAspであり；Xaa25はAla、TrpまたはPheであり；Xaa26はAlaまたはLeuであり；Xaa27はAlaまたはLysであり；Xaa28はAlaまたはAsnであり；Z1は-OH、−NH2、Gly−Z2、Gly Gly−Z2、Gly Gly Xaa31−Z2、Gly Gly Xaa31 Ser−Z2、Gly Gly Xaa31 Ser Ser−Z2、Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly−Z2、Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala−Z2、Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36−Z2、Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37−Z2、Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37 Xaa38−Z2であり；Xaa31、Xaa36、Xaa37およびXaa38は独立して、Pro  ホモプロリン、チオプロリンまたはＮ−メチルアラニンであって；Z2は−ＯＨまたは−ＮＨ2であり；但し、Xaa3、Xaa5、Xaa6、Xaa8、Xaa10、Xaa11、Xaa12、Xaa13、Xaa14、Xaa15、Xaa16、Xaa17、Xaa19、Xaa20、Xaa21、Xaa24、Xaa25、Xaa26、Xaa27およびXaa28のうちの３個以下はAlaである、で示されるものが含まれる。特に好ましい化合物には、配列番号：４０−６１で示されるアミノ酸配列を有するものが含まれる。
特に好ましい態様によれば、式中、Xaa14がLeu、Ile、Valまたはペンチルグリシン、より好ましくはLeuまたはペンチルグリシンであって、Xaa25がPhe、Tyrまたはナフチルアラニン、より好ましくはPheまたはナフチルアラニンである化合物を提供する。これらの化合物は、イン・ビトロ（in vitro）およびイン・ビボ（in vivo）の両方において、ならびに当該化合物の合成の間において酸化的分解に対してより影響を受けないであろう。
エキセンジン・アゴニスト化合物には、式（ＩＩＩ）［配列番号：５］：
0004798814.tif 000004
［式中、Xaa1はHis、Arg、Tyr、Ala、Norval、ValまたはNorleuであり；
Xaa2はSer、Gly、AlaまたはThrであり；
Xaa3はAla、AspまたはGluであり；
Xaa4はAla、Norval、Val、NorleuまたはGlyであり；
Xaa5はAlaまたはThrであり；
Xaa6はPhe、Tyrまたはナフチルアラニンであり；
Xaa7はThrまたはSerであり；
Xaa8はAla、SerまたはThrであり；
Xaa9はAla、Norval、Val、Norleu、AspまたはGluであり；
Xaa10はAla、Leu、Ile、Val、ペンチルグリシンまたはMetであり；
Xaa11はAlaまたはSerであり；
Xaa12はAlaまたはLysであり；
Xaa13はAlaまたはGlnであり；
Xaa14はAla、Leu、Ile、ペンチルグリシン、ValまたはMetであり；
Xaa15はAlaまたはGluであり；
Xaa16はAlaまたはGluであり；
Xaa17はAlaまたはGluであり；
Xaa19はAlaまたはValであり；
Xaa20はAlaまたはArgであり；
Xaa21はAlaまたはLeuであり；
Xaa22はPhe、Tyrまたはナフチルアラニンであり；
Xaa23はIle、Val、Leu、ペンチルグリシン、tert−ブチルグリシンまたはMetであり；
Xaa24はAla、GluまたはAspであり；
Xaa25はAla、Trp、Phe、Tyrまたはナフチルアラニンであり；
Xaa26はAlaまたはLeuであり；
Xaa27はAlaまたはLysであり；
Xaa28はAlaまたはAsnであり；
Z1は−ＯＨ、
−ＮＨ2、
Gly−Z2、
Gly Gly−Z2、
Gly Gly Xaa31−Z2、
Gly Gly Xaa31 Ser−Z2、
Gly Gly Xaa31 Ser Ser−Z2、
Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly−Z2、
Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala−Z2、
Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36−Z2、
Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37−Z2、
Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37 Xaa38−Z2または
Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37 Xaa38 Xaa39−Z2であり；ここに
Xaa31、Xaa36、Xaa37およびXaa38は独立して、Pro、ホモプロリン、3Hyp、４Hyp、チオプロリン、Ｎ−アルキルグリシン、Ｎ−アルキルペンチルグリシン、またはＮ−アルキルアラニンであって；
Z2は−ＯＨまたは−ＮＨ2であり；
但し、Xaa3、Xaa4、Xaa5、Xaa6、Xaa8、Xaa9、Xaa10、Xaa11、Xaa12、Xaa13、Xaa14、Xaa15、Xaa16、Xaa17、Xaa19、Xaa20、Xaa21、Xaa24、Xaa25、Xaa26、Xaa27およびXaa28のうちの３個以下はAlaであり；但し、またXaa1がHis、ArgまたはTyrである場合、Xaa3、Xaa4およびXaa9のうちの少なくとも１個はAlaである］
で示される化合物を含む米国仮出願番号６０／０６６,０２９号に記載されているものも含まれる。
定義
本発明によれば、また本明細書中に用いられている場合には、別段明確に指摘しない限り、以下の語は以下の意味を有すると定義される。
“アミノ酸”なる語は、天然アミノ酸、非天然アミノ酸およびアミノ酸・アナログをいい、それらの構造がかかる立体異性体形を許容する場合にはそのＤおよびＬ立体異性体のすべてをいう。天然アミノ酸にはアラニン（Ala）、アルギニン（Arg）、アスパラギン（Asn）、アスパラギン酸（Asp）、システイン（Cys）、グルタミン（Gln）、グルタミン酸（Glu）、グリシン（Gly）、ヒスチジン（His）、イソロイシン（Ile）、ロイシン（Leu）、リジン（Lys）、メチオニン（Met）、フェニルアラニン（Phe）、プロリン（Pro）、セリン（Ser）、スレオニン（Thr）、トリプトファン（Trp）、チロシン（Tyr）およびバリン（Val）が含まれる。非天然アミノ酸には、限定されるものではないが、アゼチジンカルボン酸、２−アミノアジピン酸、３−アミノアジピン酸、β−アラニン、アミノプロピオン酸、２−アミノ酪酸、４−アミノ酪酸、６−アミノカプロン酸、２−アミノヘプタン酸、２−アミノイソ酪酸、３−アミノイソ酪酸、２−アミノピメリン酸、tert−ブチルグリシン、２,４−ジアミノイソ酪酸、デスモシン、２,２’−ジアミノピメリン酸、２,３−ジアミノプロピオン酸、Ｎ−エチルグリシン、Ｎ−エチルアスパラギン、ホモプロリン、ヒドロキシリジン、アロ−ヒドロキシリジン、３−ヒドロキシプロリン、４−ヒドロキシプロリン、イソデスモシン、アロ−イソロイシン、Ｎ−メチルアラニン、Ｎ−メチルグリシン、Ｎ−メチルイソロイシン、Ｎ−メチルペンチルグリシン、Ｎ−メチルバリン、ナフトアラニン（naphthalanine）、ノルバリン、ノルロイシン、オルニチン、ペンチルグリシン、ピペコリン酸およびチオプロリンが含まれる。アミノ酸アナログには、可逆的または不可逆的に化学的にブロックされたか、またはそのＮ−末端アミノ基またはその側鎖基上で修飾された、例えば、メチオニンスルホキシド、メチオニンスルホン、Ｓ−（カルボキシメチル）−システイン、Ｓ−（カルボキシメチル）−システインスルホキシドおよびＳ−（カルボキシメチル）−システインスルホンのごときである。
“アミノ酸アナログ”なる語は、Ｃ−末端カルボキシ基、Ｎ−末端アミノ基または側鎖官能基のいずれかがほかの官能基に化学的に編集されたアミノ酸をいう。例えば、アスパラギン酸−（β−メチルエステル）はアスパラギン酸のアミノ酸アナログであり；Ｎ−エチルグリシンはグリシンのアミノ酸アナログであり；またはアラニンカルボキサミドはアラニンのアミノ酸アナログである。
“アミノ酸残基”なる語は、構造：（１）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ−ＮＨ−［式中、Ｒは典型的には−ＣＨ（Ｒ’）−であり、ここにＲ’はアミノ酸側鎖、典型的にはＨまたは炭素含有置換基である］；または（２）
0004798814.tif 000005
［式中、ｐは１、２または３であり、各々、アゼチジンカルボン酸、プロリンまたはピペコリン酸残基を表す］を有する基をいう。
“低級”なる語は、約６個までの、または好ましくは４個までの、有利には１または２個の炭素原子を含むかかる基を定義するアルキル基のごとき有機基と結合して本明細書中でいう。かかる基は直鎖または分枝鎖であってもよい。
“医薬上許容される塩”には、本明細書中に記載する化合物と有機または無機酸との結合から由来するかかる化合物の塩が含まれる。実際問題としては、塩形態の使用は塩基形態の使用に等しい。該化合物は遊離塩基形態および塩形態の両方で有用である。
加えて、以下の略語は以下のことを表す：
“ＡＣＮ”または“ＣＨ3ＣＮ”とは、アセトニトリルをいう。
“Ｂｏｃ”、“ｔＢｏｃ”または“Ｔｂｏｃ”とは、ｔ−ブトキシカルボニルをいう。
“ＤＣＣ”とは、Ｎ,Ｎ’−ジクロロヘキシルカルボジイミドをいう。
“Ｆｍｏｃ”とは、フルオレニルメトキシカルボニルをいう。
“ＨＢＴＵ”とは、２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１,１,３,３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェートをいう。
“ＨＯＢｔとは、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール一水和物をいう。
“ｈｏｍｏＰ”または“ｈＰｒｏ”とは、ホモプロリンをいう。
“ＭｅＡｌａ”または“Ｎｍｅ“とは、Ｎ−メチルアラニンをいう。
“ｎａｐｈ”とは、ナフチルアラニンをいう。
“ｐＧ”または“ｐＧｌｙ”とはペンチルグリシンをいう。
“ｔＢｕＧ”とは、第三級ブチルグリシンをいう。
“ＴｈｏＰ”または“ｔＰｒｏ”とはチオプロリンをいう。
“３Ｈｙｐ”とは３−ヒドロキシプロリンをいう。
“４Ｈｙｐ”とは４−ヒドロキシプロリンをいう。
“ＮＡＧ”とはＮ−アルキルグリシンをいう。
“ＮＡＰＧ”とはＮ−アルキルペンチルグリシンをいう。
“Ｎｏｒｖａｌ”とはノルバリンをいう。
“Ｎｏｒｌｅｕ”とはノルロイシンをいう。
化合物の調製
本明細書中に記載するエキセンジンおよびエキセンジン・アゴニストは、標準的な固相ペプチド合成技術、好ましくは自動または半自動ペプチド合成機を用いて調製することができる。典型的には、かかる技術を用いて、α−Ｎ−カルバモイル保護アミノ酸および樹脂上の伸長しつつあるペプチド鎖に結合したアミノ酸を、ジイソプロピルエチルアミンのごとき塩基を入れたジシクロヘキシルカルボジイミドおよび１−ヒドロキシベンゾトリアゾールのごときカップリング剤存在下にて、ジメチルホルムアミド、Ｎ−メチルピロリジノンまたは塩化メチレンのごとき不活性溶媒中、室温にてカップリングさせる。α−Ｎ−カルバモイル保護基は、トリフルオロ酢酸またはピペリジンのごとき試薬を用いて、得られたペプチド−樹脂基から除去し、該ペプチド鎖に付加すべき次の目的のＮ−保護アミノ基を用いてカップリング反応を繰り返す。好適なＮ−保護基は当該技術分野でよく知られているが、ｔ−ブチルオキシカルボニル（ｔＢｏｃ）およびフルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）が本明細書中では好ましい。
ペプチド合成機で用いる溶媒、アミノ酸誘導体および４−メチルベンズヒドリル−アミン樹脂は、Applied Biosystems Inc.社（Foster City,CA）から購入し得る。以下の側鎖保護アミノ酸はApplied Biosystems,Inc.社から購入し得る：Boc−Arg（Mts）、Fmoc−Arg（Pmc）、Boc−Thr（Bzl）、Fmoc−Thr（ｔ−Bu）、Boc−Ser（Bzl）、Fmoc−Ser（ｔ−Bu）、Boc−Tyr（BrZ）、Fmoc−Tyr（ｔ−Bu）、Boc−Lys（Cl−Z）、Fmoc−Lys（Boc）、Boc−Glu（Bzl）、Fmoc−Glu（ｔ−Bu）、Fmoc−His（Trt）、Fmoc−Asn（Trt）およびFmoc−Gln（Trt）。Boc−His（BOM）は、Applied Biosystems,Inc.社またはBachem,Inc.社（Torrance,CA）から購入し得る。アニソール、ジメチルスルフィド、フェノール、エタンジオールおよびチオアニソールは、Aldrich Chemical Company社（Milwaukee,WI）から購入し得る。Air Products and Chemicals社（Allentown,PA）はHFを供給する。エチルエーテル、酢酸およびメタノールは、Fisher Scientific社（Pittsburgh,PA）から購入し得る。
固相ペプチド合成は、キャッピングでのＮＭＰ／ＨＯＢｔ（オプション１）システムおよびｔＢｏｃまたはＦｍｏｃ化学（ABI 430A Peptide Synthesizer用Applied Biosysystems社使用者マニュアル，１.３B版,1988年７月１日、６章,pp.49−70,Applied Biosystems,Inc.社,Foster City,CA）を用いて、自動ペプチド合成機（Model 430A,Applied Biosystems Inc.社製,Foster City,CA）で行うことができる。Boc−ペプチド−樹脂は、（−５℃ないし０℃にて１時間）HFで切断し得る。該ペプチドは、水および酢酸を交互に用いつつ樹脂から抽出し、その濾液を凍結乾燥させ得る。Fmoc−ペプチド樹脂は標準的な方法に従って切断することができる（Introduction to Cleavage Techniques,Applied Biosystems,Inc.社,1990,pp.6-12）。ペプチドは、Advanced Chem Tech Synthesizer（Model MPS 350,Louisville,Kentucky）を用いてもアセンブリすることができる。
ペプチドは、Waters Delta Prep 3000 systemを用いて（分取用または分析用）ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製することができる。Ｃ４、Ｃ８またはＣ１８分取用カラム（１０μ、２.２×２５ｃｍ；Vydac社製,Hesperia,CA）を用いてペプチドを単離することができ、純度はＣ４、Ｃ８またはＣ１８分析用カラム（５μ、０．４６×２５ｃｍ；Vydac社製）を用いて判定することができる。溶媒（Ａ＝０．１％のＴＦＡ／水およびＢ＝０.１％のＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）は、該分析カラムには１.０ｍｌ／分の流速で、および該分取用カラムには１５ｍｌ／分で送液することができる。アミノ酸分析はWaters Pico Tagシステム上で行い、Maxima programを用いて処理することができる。ペプチドは、蒸気相酸加水分解（１１５℃にて２０-２４時間）によって加水分解することができる。加水分解物は標準的な方法によって誘導化および分析することができる（CohenらによるThe Pico Tag Method: A Manual of Advanced Techniques for Amino Acid Analysis,pp.11-52,Millipore Corporation社製,Milford,MA（1989））。高速原子衝突分析は、M-Scan,Incorporated社（West Chester,PA）によって行うことができる。質量較正は、ヨウ化セシウムまたはヨウ化セシウム／グリセリンを用いて行うことができる。飛行検出の時間を用いるプラズマ脱着イオン化分析（plasma desorption ionization analysis）は、Applied Biosystems社製Bio-Ion 20質量分析器上で行うことができる。エレクトロスプレー質量分析は、VG-Trio機上で行うことができる。
本発明において有用なペプチド化合物は、当該技術分野で現在知られている方法を用いる、組換えＤＮＡ技術を用いても調製することができる。例えば、SambrookらによるMolecular Cloning:A Laboratory Manual,第２版,Cold Spring Harbor（1989）を参照されたし。本発明において有用な非ペプチド化合物は、当該技術分野で知られている方法によって調製することができる。例えば、アミノ酸を含有するリン酸およびかかるアミノ酸を含有するペプチドは、当該技術分野で知られている方法を用いて調製することができる。例えば、BartlettおよびLandenによるBiorg.Chem.14：356-377（1986）を参照されたし。
前記の化合物は、それらの薬理学的特性の見地から有用である。詳細には、本発明の化合物は、食物摂取を低減する薬剤のごとき活性を有する。それらを用いて、食物摂取を低減することにより緩和し得る症状または疾病を治療することができる。
本発明で有用な組成物は、（静脈内、筋肉内および皮下を含む）非経口または鼻腔あるいは経口投与に好適な処方の形態で簡便に提供することができる。ある場合においては、エキセンジンまたはエキセンジン・アゴニストと、アミリン、アミリン・アゴニスト、ＣＣＫまたはレプチンのごときほかの食物摂取低減剤、血漿グルコース低下剤または血漿脂質低下剤とを、一緒に投与するための単一の組成物または溶液で提供するのが簡便であろう。ほかの場合においては、該エキセンジンまたはエキセンジン・アゴニストとさらなる剤とを別々に投与することがより有利となり得る。好適な投与様式は、個別に、各患者の医学的実践者によって判定されるのが最良であろう。好適な医学上許容し得る担体およびその処方は標準的な処方学術論文、例えばE.W.MartinによるRemington’s Pharmaceuticl Sciencesに記載されている。Wang,Y.J.およびHanson,M.A.による“Parentreal Formulations of Proteins and Peptides：Stability and Stabilizers”Journal of Parenteral Science and Tehnology,Technical Report No.10,増刊42：2S（1988）も参照されたし。
本発明において有用な化合物は、注射または点滴用の非経口組成物として提供することができる。それらは、例えば、不活性油、好適にはゴマ油、落花生油、オリーブ油のごとき植物油、または他の許容し得る担体中に懸濁することができる。好ましくは、それらは、水性担体中に懸濁し、例えば、約３.０ないし８.０のｐＨ、好ましくは約３.５ないし５.０のｐＨの等張緩衝液中に懸濁する。これらの組成物は慣用的な滅菌技術によって滅菌することができ、あるいは濾過滅菌することができる。該組成物は、ｐＨ緩衝化剤のごとき生理学的条件に近づけるために必要な医薬上許容される補助物質を含んでいてもよい。有用な緩衝液には、例えば、酢酸ナトリウム／酢酸緩衝液が含まれる。治療上有効量の調製物が皮内注射またはデリバリーの後数時間または数日間にわたって血流にデリバリーされるように、容器形態または“デポー製剤”徐放調製物を用いることができる。
目的の等浸透圧は、塩化ナトリウム、またはデキストロース、ホウ酸、酒石酸ナトリウム、プロピレングリコール、（マンニトールおよびソルビトールのごとき）ポリオール、または他の無機および有機溶質のごとき他の医薬上許容される剤を用いてなし得る。塩化ナトリウムが、ナトリウムイオン含有緩衝液に特に好ましい。
特許請求する組成物は、その医薬上許容される塩（例えば、酸付加塩）および／または錯体として処方化することもできる。医薬上許容される塩は、それを投与する濃度で非毒性の塩である。かかる塩の調製物は、組成物がその生理学的効果を発揮するのを妨げることなく組成物の物理−化学的特性を変えることにより薬理学的使用を促進することができる。物理的特性における有用な変化の例には、融点を低下させて皮内投与を促進すること、および溶解度を高めてより高濃度の薬剤の投与を促進することが含まれる。
医薬上許容される塩には、硫酸塩、塩酸、リン酸塩、スルファミン酸塩、酢酸塩、クエン酸塩、乳酸塩、酒石酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、シクロヘキシルスルファミン酸塩およびキニン酸塩を含有するもののごとき酸付加塩が含まれる。医薬上許容される塩は、塩酸、硫酸、リン酸、スルファミン酸、酢酸、クエン酸、乳酸、酒石酸、マロン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、シクロヘキシルスルファミン酸、およびキノン酸のごとき酸から得ることができる。かかる塩は、例えば、塩が不溶性である溶媒または媒質中、または水のごとき溶媒中にて、遊離酸または塩基形態の生成物と、１またはそれを超える当量の適当な塩基または酸とを反応させ、ついでそれを真空下または凍結乾燥によって除去することによってか、または好適なイオン交換樹脂上でもう１つのイオンに存在する塩のイオンを交換することによって調製することができる。
また、担体または賦形剤を用いて、化合物の投与を促進することもできる。担体および賦形剤の例には、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、またはラクトース、グルコースもしくはスクロースのごとき種々の糖、またはデンプンのタイプ、セルロース誘導体、ゼラチン、植物油、ポリエチレングリコールおよび生理学的に和合性の溶媒が含まれる。該組成物または医薬組成物は、静脈内、腹膜内、皮下および筋肉内、経口、局所、粘膜内を包含する種々の経路によって、あるいは肺吸入によって投与することができる。
望むなら、上記組成物の溶液は、メチルセルロースのごとき粘結剤で増粘することができる。それは、油中水型または水中油型のいずれかの乳化形態で調製することができる。例えば、アカシア粉、（ツイーン（Tween）のごとき）非イオン性界面活性剤、または（硫酸またはスルホン酸のアルカリポリエーテルアルコール、例えば、トリトン（Triton）のごとき）イオン性界面活性剤を含む、広範な種々の医薬上許容される乳化剤を用いることができる。
本発明で有用な組成物は、一般的に容認されている手法に従って成分を混合することによって調製する。例えば、選択したコンポーネントを、ブレンダーまたはほかの標準的装置中で単純に混合して濃縮混合物を製造し、ついでこれに水または粘結剤を添加することによって最終濃度および最終粘度に調整し、およびおそらくは緩衝剤を添加してｐＨを制御するか、またはさらなる溶質を添加して張性を制御する。
医師による使用には、該組成物は、ほかの食物摂取低減剤、血漿グルコース低下剤、または血漿脂質低下剤と共にまたはそれなしに、一定量のエキセンジンまたはエキセンジン・アゴニスト、例えばエキセンジン−３および／またはエキセンジン−４を含有する投与単位形態で提供されるであろう。食物摂取を低減させることにおいて使用する治療上有効量のエキセンジンまたはエキセンジン・アゴニストとは、食欲を望ましいレベルで抑えるものである。当業者によって認識されるごとく、有効量の治療剤は、患者の年齢および体重、患者の身体的状態、血糖レベルおよび他の因子を含む種々の因子で変動するであろう。
該化合物の有効日食欲−抑制用量は、典型的には、７０ｋｇの患者に対して、単一または分割した用量で投与する約１０−３０μｇないし約５ｍｇ／日、好ましくは約１０−３０μｇないし約２ｍｇ／日、より好ましくは約１０−１００μｇないし約１ｍｇ／日、最も好ましくは約３０μｇないし約５００μｇ／日の範囲であろう。投与すべき正確な用量は、臨床医の立会いによって決定され、特定の化合物が上記に引用した範囲内のどこにあるかに依存し、ならびに個人の年齢、体重および症状に依存する。投与は、食物摂取の抑制または体重低下が望まれる場合であればいつでも開始すべきであり、例えば、症状の最初の徴候時、または肥満症、真性糖尿病またはインスリン抵抗性症候群の診断のすぐ後に開始すべきである。投与は注射、好ましくは皮下または筋肉内注射によることができる。経口活性な化合物は経口的に摂取することができるが、投与量は５−１０倍増加しなければならない。
本出願の化合物の患者に対する最適処方および投与様式は、特定の疾病または疾患、所望の効果および患者のタイプのごとき当該技術分野で知られている因子に依存する。該化合物は典型的にはヒト対象を治療するために用いられるであろうが、それは、他の霊長類、ブタ、ウシおよび家禽のごとき農場動物、ならびにウマ、イヌおよびネコのごときスポーツ動物およびペットのごとき他の脊椎動物における同様または同一の疾病を治療するためにも用いることができる。
本発明の理解を助けるために、以下の実施例を含める。本発明に関する実験は、勿論、本発明を特に限定することを意図するものではなく、当業者の範囲内であろう現在知られているまたは後に開発される本発明のかかる変形は、本明細書に記載し、後記に特許請求する本発明の範囲内に入ると考える。
実施例１：エキセンジン注射により正常マウスの食事摂取が低減された
すべてのマウス（ＮＩＨ：Swissマウス）は２２（±２）℃、６０（±１０）％湿度および０６００に点燈する１２：１２の明所：暗所サイクルの安定な環境下で飼育した。マウスは、特記しないかぎり、実験前少なくとも２週間は、餌（Teklad社製：ＬＭ４８５；Madison,WI）および水に自由に近づける標準的なカゴ内にて、４匹の群で飼育した。
すべての実験は、０７００と０９００との間の時間に行った。マウスは、（実験前日に他の動物から１６００時に食餌を除いて）絶食させて、個別に飼育した。すべてのマウスに、０.１、１.０、１０および１００μｇ／ｋｇの用量の塩類溶液またはエキセンジン−４のいずれかの腹膜内注射（５μｇ／ｋｇ）を受けさせ、ついで、直ちに予め検量した食餌ペレット（Teklad LM 485）を与えた。食物ペレットは、３０分、１時間、２時間および６時間間隔で検量して、摂取した食餌の量を判定した。
図１は、塩類溶液、２用量のＧＬＰ−１、または４用量のエキセンジン−４をｉｐ注射した後の、一晩拘束した正常ＮＩＨ：Swissマウスにおける０.５、１、２および６時間の期間にわたる累積的食餌摂取を図示している。１００μｇ／ｋｇまでの用量においては、ＧＬＰ−１はいずれの期間にわたって測定した食餌摂取に対して何ら効果を有しておらず、この結果は以前に報告されているものと一致する（Bhavsar,S.P.らによるSoc.Neurosic.Abstr.21：460（188.8）（1995）；およびTurton,M.D.,Nature,379：69−72（1996））。
それに対して、エキセンジン−４注射は食餌摂取を強力かつ用量−依存的に阻害した。３０分間にわたる食餌摂取の阻害に対するＥＤ50は１μｇ／ｋｇであり、これはこの調製物で測定したアミリン（ＥＤ50  ３.６μｇ／ｋｇ）または基本型の末梢満腹剤、ＣＣＫ（ＥＤ50  ０.９７μｇ／ｋｇ）とほぼ同じ効力のレベルである。しかしながら、１−２時間後に衰えるアミリンまたはＣＣＫの効果とは反対に、エキセンジン−４を用いた食餌摂取の阻害は注射後少なくとも６時間後でもなお示された。
実施例２：エキセンジンは肥満症マウスの食餌摂取を低減させた
すべてのマウス（雌性ob／obマウス）は２２（±２）℃、６０（±１０）％湿度および０６００に点燈する１２：１２の明所：暗所サイクルの安定した環境下で飼育した。マウスは、特記しないかぎり、実験前少なくとも２週間は、餌（Teklad社製：ＬＭ４８５）および水に自由に近づける標準的なカゴ内に、４匹の群で飼育した。
すべての実験は、０７００と０９００との間の時間に行った。マウスは、（餌は実験前日に他の動物から１６００時に除いた）絶食させて、個別に飼育した。すべてのマウスに、０.１、１.０および１０μｇ／ｋｇ（雌性ob／obマウス）の用量の塩類溶液またはエキセンジン−４のいずれかの腹膜内注射（５μｌ／ｋｇ）を受けさせ、ついで、直ちに予め検量した食餌ペレット（Teklad LM 485）を与えた。食餌ペレットは、３０分、１時間、２時間および６時間間隔で検量して、摂取した食餌の量を判定した。
図２は、肥満症のob／obマウスモデルにおけるエキセンジン-４の効果を示す。肥満症マウスは、正常マウスと同様のエキセンジンに対する食餌摂取−関連応答を有していた。さらに、該肥満症マウスは、アミリンおよびレプチンで観察されたごとき（1996年６月12−15日にサンフランシスコで開催された10th International Congress of Endocrinology,Young,A.A.らによるProgram and Abstracts,pg419（P5−58））、エキセンジンに対して過敏性でなかった。
実施例３：エキセンジンの脳室内注射はラットにおいて食餌摂取を阻害した
すべてのラット（Harlan Sprague−Dawley）は２２（±２）℃、６０（±１０）％湿度および０６００に点燈する１２：１２の明所：暗所サイクルの安定した環境下で飼育した。ラットは、（動物の実際の体重によって決定し、Paxinos,G.およびWatson,C.による“The Rat Brain in stereotaxic coordinates”第２版Academic Press社に参照して調整した）埋め込んだ脳室内カニューレ（ＩＣＶカニューレ）と共にZivic Miller社から得、実験前少なくとも１週間は、餌（Teklad社製：ＬＭ４８５）および水に自由に近づける標準的なカゴ内で個別に飼育した。
すべての注射は、１７００と１８００との間の時間に投与した。ラットは、化合物をＩＣＶ投与する前に少なくとも１回、ＩＣＶ注射工程に慣らした。すべてのラットに、０.０１、０.０３、０.１、０.３および１.０μｇの用量の塩類溶液またはエキセンジン−４のいずれかのＩＣＶ注射（２μｌ／３０秒）を受けさせた。ついで、すべての動物に、直ちに予め検量した食餌ペレット（Teklad LM 485）を１８００時に与え、その時に消燈した。２−時間、１２−時間および２４−時間間隔で残った食餌の量を検量して、各動物によって摂取された食餌の量を決定した。
図３は、０.１μｇ／ラットよりも多い用量を受けたラットにおける食餌摂取の用量−依存性阻害を示す。ＥＤ50は≒０.１μｇであり、したがってエキセンジン−４はTurton,M.D.らにより報告されたＧＬＰ−１の脳室内注射（Nature 379：69−72（1996））よりも≒１００倍効力がある。
実施例４：エキセンジン・アゴニストはマウスにおいて食物摂取を低減させた
すべてのマウス（ＮＩＨ：Swissマウス）は２２（±２）℃、６０（±１０）％湿度および０６００に点燈する１２：１２の明所：暗所サイクルの安定した環境下で飼育した。マウスは、特記しないかぎり、実験前少なくとも２週間は、餌（Teklad社製：ＬＭ485；Madison,WI）および水に自由に近づける標準的なカゴ内に、４匹の群で飼育した。
すべての実験は、０７００と０９００との間の時間に行った。マウスは、（実験前日に他の動物から１６００時に食餌を除去して）絶食させて、個別に飼育した。すべてのマウスに、１、１０および１００μｇ／ｋｇの用量の塩類溶液または試験化合物のいずれかの腹膜内注射（５μｌ／ｋｇ）を受けさせ、ついで、直ちに食餌ペレット（Teklad LM 485）を与えた。食餌ペレットは、３０分、１時間、２時間および６時間間隔で検量して、摂取した食餌の量を判定した。
図４は、１、１０および１００μｇ／ｋｇの用量で塩類溶液またはエキセンジン−４（１−３０）（“化合物１”）のいずれかをｉｐ注射した後の一晩拘束正常なＮＩＨ：Swissマウスにおける０.５、１、２および６時間にわたる累積的食餌摂取を示す。
図５は、１、１０および１００μｇ／ｋｇの用量で塩類溶液またはエキセンジン−４（１−３０）アミド（“化合物２”）をｉｐ注射した後の、一晩拘束正常ＮＩＨ：Swissマウスにおける０.５、１、２および６時間の期間にわたる累積的食餌摂取を示している。
図６は、１、１０および１００μｇ／ｋｇの用量で塩類溶液またはエキセンジン−４（１−２８）アミド（“化合物３”）をｉｐ注射した後の、一晩拘束正常ＮＩＨ：Swissマウスにおける０.５、１、２および６時間の期間にわたる累積的食餌摂取を示している。
図７は、１、１０および１００μｇ／ｋｇの用量で塩類溶液または14Leu,25Pheエキセンジン−４アミド（“化合物４”）をｉｐ注射した後の、一晩拘束正常ＮＩＨ：Swissマウスにおける０.５、１、２および６時間の期間にわたる累積的食餌摂取を示している。
図８は、１、１０および１００μｇ／ｋｇの用量で塩類溶液または14Leu,25Pheエキセンジン−４（１−２８）アミド（“化合物５”）をｉｐ注射した後の、一晩拘束正常ＮＩＨ：Swissマウスにおける０.５、１、２および６時間の期間にわたる累積的食餌摂取を示している。
図９は、１、１０および１００μｇ／ｋｇの用量で塩類溶液または14Leu,22Ala,25Pheエキセンジン−４（１−２８）アミド（“化合物６”）をｉｐ注射した後の、一晩拘束正常ＮＩＨ：Swissマウスにおける０.５、１、２および６時間の期間にわたる累積的食餌摂取を示している。
実施例５
配列番号：９を有するアミド化ペプチドの調製
上記定義のペプチドを、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて、４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせた。一般的には、合成を通して単一カップリングサイクルおよびFast Moc（HBTU活性化）化学を用いた。しかしながら、あるポジションのカップリングにおいては、予想していたものよりも効率が低く、二重カップリングを要した。詳細には、残基Asp9、Thr7およびPhe6はすべて二重カップリングを要した。ピペリジンを用いた伸長しつつあるペプチド鎖の脱保護（Fmoc基除去）は常に効率的というわけではなかった。ポジションArg20、Val19およびLeu14においては、二重脱保護を要した。完成したペプチド鎖の最後の脱保護は、標準的な方法（Introduction to Cleavage Techniques,Applied Biosystems,Inc.社）に従って、トリエチルシラン（０.２ｍＬ）、エタンジオール（０.２ｍＬ）、アニソール（０.２ｍＬ）、水（０.２ｍＬ）およびトリフルオロ酢酸（１５ｍＬ）の混合物を用いて達成した。該ペプチドをエーテル／水（５０ｍＬ）中で沈殿させ、遠心した。その沈殿物を氷酢酸中で復元し、凍結乾燥した。その凍結乾燥したペプチドは、水に溶解した。粗製物純度は約５５％であった。
精製工程および分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。
ペプチドを含有する溶液を、分取用Ｃ−１８カラムに付し、精製した（４０分間にわたる溶媒Ａ中の１０％から４０％の溶媒Ｂ）。画分の純度は、Ｃ−１８分析カラムを用いてアイソクラチック的に決定した。純粋な画分を保存し、前記定義のペプチドを供給した。凍結乾燥ペプチドの分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）により、１４.５分の観察された保持時間を有する生成ペプチドを得た。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）：
計算値：４１３１.７
実測値：４１２９.３
実施例６
配列番号：１０を有するペプチドの調製
上記定義のペプチドは、実施例５と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の２５％から７５％の溶媒Ｂの勾配）に付して、２１.５分の観察された保持時間を有する生成ペプチドが得られた。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：４１６８.６
実測値：４１７１.２
実施例７
配列番号：１１を有するペプチドの調製
上記定義のペプチドは、実施例５と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結した乾燥ペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して、１７.９分の観察された保持時間を有する生成ペプチドが得られた。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：４１４７.６
実測値：４１５０.２
実施例８
配列番号：１２を有するペプチドの調製
上記定義のペプチドは、実施例５と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結した乾燥ペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３５％から６５％の溶媒Ｂの勾配）に付して、１９.７分の観察された保持時間を有する生成ペプチドが得られた。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：４２１２.６
実測値：４２１３.２
実施例９
配列番号：１３を有するペプチドの調製
上記定義のペプチドは、実施例５と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から５０％の溶媒Ｂの勾配）に付して、１６.３分の観察された保持時間を有する生成ペプチドが得られた。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：４２６２.７
実測値：４２６２.４
実施例１０
配列番号：１４を有するペプチドの調製
上記定義のペプチドは、実施例５と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結した乾燥ペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：４１７２.６
実施例１１
配列番号：１５を有するペプチドの調製
上記定義のペプチドは、実施例５と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：４２２４.７
実施例１２
配列番号：１６を有するペプチドの調製
上記定義のペプチドは、実施例５と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：４１７２.６
実施例１３
配列番号：１７を有するペプチドの調製
上記定義のペプチドは、実施例５と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：４１８６.６
実施例１４
配列番号：１８を有するペプチドの調製
上記定義のペプチドは、実施例５と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：４２００.７
実施例１５
配列番号：１９を有するペプチドの調製
上記定義のペプチドは、実施例５と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：４２００.７
実施例１６
配列番号：２０を有するペプチドの調製
上記定義のペプチドは、実施例５と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：４２０２.７
実施例１７
配列番号：２１を有するペプチドの調製
上記定義のペプチドは、実施例５と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：４１４５.６
実施例１８
配列番号：２２を有するペプチドの調製
上記定義のペプチドは、実施例５と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：４１８４.６
実施例１９
配列番号：２３を有するペプチドの調製
上記定義のペプチドは、実施例５と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：４１４５.６
実施例２０
配列番号：２４を有するペプチドの調製
上記定義のペプチドは、実施例５と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：４２２４.７
実施例２１
配列番号：２５を有するペプチドの調製
上記定義のペプチドは、実施例５と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：４１７２.６
実施例２２
配列番号：２６を有するペプチドの調製
上記定義のペプチドは、実施例５と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：４１１５.５
実施例２３
配列番号：２７を有するペプチドの調製
上記定義のペプチドは、実施例５と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：４１８８.６
実施例２４
配列番号：２８を有するペプチドの調製
上記定義のペプチドは、実施例５と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：４１３１.６
実施例２５
配列番号：２９を有するペプチドの調製
上記定義のペプチドは、実施例５と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：４１７２.６
実施例２６
配列番号：３０を有するペプチドの調製
上記定義のペプチドは、実施例５と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：４１４５.６
実施例２７
配列番号：３１を有するペプチドの調製
上記定義のペプチドは、実施例５と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。ポジション３８、３７、３６および３１のチオプロリンではさらなる二重カップリングを要した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：４２６６.８
実施例２８
配列番号：３２を有するペプチドの調製
上記定義のペプチドは、実施例５と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。ポジション３８、３７および３６のチオプロリンではさらなる二重カップリングを要した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：４２４６.８
実施例２９
配列番号：３３を有するペプチドの調製
上記定義のペプチドは、実施例５と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。ポジション３８、３７、３６および３１のホモプロリンではさらなる二重カップリングを要した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：４２５０.８
実施例３０
配列番号：３４を有するペプチドの調製
上記定義のペプチドは、実施例５と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。ポジション３８、３７および３６のホモプロリンではさらなる二重カップリングを要した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：４２３４.８
実施例３１
配列番号：３５を有するペプチドの調製
上記定義のペプチドは、実施例５と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。ポジション３８、３７、３６および３１のチオプロリンではさらなる二重カップリングを要した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）により、生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：４２０９.８
実施例３２
配列番号：３６をするペプチドの調製
上記定義のペプチドは、実施例５と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。ポジション３８、３７、３６および３１のホモプロリンではさらなる二重カップリングを要した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：４１９３.７
実施例３３
配列番号：３７を有するペプチドの調製
上記定義のペプチドは、実施例５と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。ポジション３８、３７、３６および３１のＮ−メチルアラニンではさらなる二重カップリングを要した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３８５８.２
実施例３４
配列番号：３８を有するペプチドの調製
上記定義のペプチドは、実施例５と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。ポジション３８、３７および３６のＮ−メチルアラニンではさらなる二重カップリングを要した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３９４０.３
実施例３５
配列番号：３９を有するペプチドの調製
上記定義のペプチドは、実施例５と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。ポジション３８、３７、３６および３１のＮ−メチルアラニンではさらなる二重カップリングを要した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３８０１.１
実施例３６
前記Ｃ−末端アミド配列に対応するＣ−末端カルボン酸ペプチドの調製
実施例５ないし３５の前記ペプチドは、実施例５と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いていわゆるワン樹脂（Wang resin）（ｐ−アルコキシベンジルアラコール樹脂）（Bachem社製、０.５４ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析により、（Ｍ）を実験的に決定した（Ｍ）を得た。
実施例３７
配列番号：７を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000006
上記アミド化ペプチドは、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせた。一般的には、合成をとおして単一−カップリングサイクルを用い、Fast Moc（ＨＢＴＵ活性化）化学を利用した。伸長しつつるペプチド鎖の脱保護（Fmoc基除去）はピペリジンを用いて達成した。完成したペプチド樹脂の最後の脱保護は、標準的な方法（Introduction to Cleavege Techniques,Applied Biosystems,Inc.社製）に従って、トリエチルシラン（０.２ｍＬ）、エタンジチオール（０.２ｍＬ）、アニソール（０.２ｍＬ）、水（０.２ｍＬ）およびトリフルオロ酢酸（１５ｍＬ）の混合物を用いて達成した。該ペプチドをエーテル／水（５０ｍＬ）中に沈殿させ、遠心した。その沈殿物を氷酢酸中で復元し、凍結乾燥した。その凍結乾燥したペプチドを水に溶解した。粗製物純度は約７５％であった。
精製工程および分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ペプチドを含有する溶液を、分取用Ｃ−１８カラムに付して精製した（４０分間にわたる溶媒Ａ中の１０％から４０％の溶媒Ｂ）。画分の純度は、Ｃ−１８分析用カラムを用いてアイソクラチック的に決定した。純粋な画分を保存して、前記定義のペプチドを供給した。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から５０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、１８．９分の観察された保持時間を有する生成ペプチドを得た。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３４０８.０
実測値：３４０８.９
実施例３８
配列番号：４０を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000007
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から４０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、１７.９分の観察された保持時間を有する生成ペプチドを得た。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３２９４.７
実測値：３２９４.８
実施例３９
配列番号：４１を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000008
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の２９％から３６％の溶媒Ｂの勾配）に付し、２０.７分の観察された保持時間を有する生成ペプチドを得た。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３２３７.６
実測値：３２４０
実施例４０
配列番号：４２を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000009
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３６％から４６％の溶媒Ｂの勾配）に付し、１５.２分の観察された保持時間を有する生成ペプチドを得た。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３２５１.６
実測値：３２５１.５
実施例４１
配列番号：４３を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000010
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３６％から４６％の溶媒Ｂの勾配）に付し、１３.１分の観察された保持時間を有する生成ペプチドを得た。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３２０７.６
実測値：３２０８.３
実施例４２
配列番号：４４を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000011
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３５％から４５％の溶媒Ｂの勾配）に付し、１２.８分の観察された保持時間を有する生成ペプチドを得た。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１６１.５
実測値：３１６３
実施例４３
配列番号：４５を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000012
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３６％から４６％の溶媒Ｂの勾配）に付し、１５.２分の観察された保持時間を有する生成ペプチドを得た。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３２２１.６
実測値：３２２２.７
実施例４４
配列番号：４６を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000013
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３４％から４４％の溶媒Ｂの勾配）に付し、１４.３分の観察された保持時間を有する生成ペプチドを得た。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１９５.５
実測値：３１９９.４
実施例４５
配列番号：４７を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000014
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３８％から４８％の溶媒Ｂの勾配）に付し、１５.７分の観察された保持時間を有する生成ペプチドを得た。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３２２１.６
実測値：３２２１.６
実施例４６
配列番号：４８を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000015
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３８％から４８％の溶媒Ｂの勾配）に付し、１８.１分の観察された保持時間を有する生成ペプチドを得た。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１８０.５
実測値：３１８０.９
実施例４７
配列番号：４９を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000016
上記定義のアミド化ペプチドは、化合物１と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３６％から４６％の溶媒Ｂの勾配）に付し、１７.０分の観察された保持時間を有する生成ペプチドを得た。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１８０.６
実測値：３１８２.８
実施例４８
配列番号：５０を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000017
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３２％から４２％の溶媒Ｂの勾配）に付し、１４.９分の観察された保持時間を有する生成ペプチドを得た。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１９５.５
実測値：３１９５.９
実施例４９
配列番号：５１を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000018
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３７％から４７％の溶媒Ｂの勾配）に付し、１７.９分の観察された保持時間を有する生成ペプチドを得た。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１７９.６
実測値：３１７９.０
実施例５０
配列番号：５２を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000019
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３７％から４７％の溶媒Ｂの勾配）に付し、１４.３分の観察された保持時間を有する生成ペプチドを得た。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１７９.６
実測値：３１８０.０
実施例５１
配列番号：５３を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000020
上記定義のペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３７％から４７％の溶媒Ｂの勾配）に付し、１３.７分の観察された保持時間を有する生成ペプチドを得た。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１７９.６
実測値：３１７９.０
実施例５２
配列番号：５４を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000021
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３５％から４５％の溶媒Ｂの勾配）に付し、１４.０分の観察された保持時間を有する生成ペプチドを得た。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３２０９.６
実測値：３２１２.８
実施例５３
配列番号：５５を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000022
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３８％から４８％の溶媒Ｂの勾配）に付し、１４.３分の観察された保持時間を有する生成ペプチドを得た。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１５２.５
実測値：３１５３.５
実施例５４
配列番号：５６を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000023
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３５％から４５％の溶媒Ｂの勾配）に付し、１２.１分の観察された保持時間を有する生成ペプチドを得た。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１９５.５
実測値：３１９７.７
実施例５５
配列番号：５７を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000024
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３８％から４８％の溶媒Ｂの勾配）に付し、１０.９分の観察された保持時間を有する生成ペプチドを得た。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１７９.６
実測値：３１８０.５
実施例５６
配列番号：５８を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000025
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３２％から４２％の溶媒Ｂの勾配）に付し、１７.５分の観察された保持時間を有する生成ペプチドを得た。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１６１.５
実測値：３１６３.０
実施例５７
配列番号：５９を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000026
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３２％から４２％の溶媒Ｂの勾配）に付し、１９.５分の観察された保持時間を有する生成ペプチドを得た。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１９５.５
実測値：３１９９
実施例５８
配列番号：６０を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000027
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３８％から４８％の溶媒Ｂの勾配）に付し、１４.５分の観察された保持時間を有する生成ペプチドを得た。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１８０.５
実測値：３１８３.７
実施例５９
配列番号：６１を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000028
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３４％から４４％の溶媒Ｂの勾配）に付し、２２.８分の観察された保持時間を有する生成ペプチドを得た。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１９４.６
実測値：３１９７.６
実施例６０
配列番号：６２を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000029
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：４０９９.６
実施例６１
配列番号：６３を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000030
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：４０４２．５
実施例６２
配列番号：６４を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000031
上記定義のペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：４００２.４
実施例６３
配列番号：６５を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000032
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３９４５.４
実施例６４
配列番号：６６を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000033
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３９０５.３
実施例６５
配列番号：６７を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000034
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３８４８.２
実施例６６
配列番号：６８を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000035
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３８０８.２
実施例６７
配列番号：６９を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000036
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３７５１.１
実施例６８
配列番号：７０を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000037
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３７３７.１
実施例６９
配列番号：７１を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000038
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３６８０.１
実施例７０
配列番号：７２を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000039
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３６８０.１
実施例７１
配列番号：７３を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000040
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３６２３.０
実施例７２
配列番号：７４を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000041
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３５９３.０
実施例７３
配列番号：７５を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000042
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３５３５.９
実施例７４
配列番号：７６を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000043
上記定義のペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３５０５.９
実施例７５
配列番号：７７を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000044
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３４４８.８
実施例７６
配列番号：７８を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000045
上記定義のペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３３５１.７
実施例７７
配列番号：７９を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000046
上記定義のペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３３５１.８
実施例７８
配列番号：８０を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000047
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３２９４.７
実施例７９
配列番号：８１を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000048
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：４１９７.１
実施例８０
配列番号：８２を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000049
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。残基３７、３６および３１では二重カップリングを要した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：４１７９.１
実施例８１
配列番号：８３を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000050
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。残基３６および３１では二重カップリングを要した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３９４８.３
実施例８２
配列番号：８４を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000051
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。残基３６および３１では二重カップリングを要した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３８４０.１
実施例８３
配列番号：８５を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000052
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。残基３６および３１では二重カップリングを要した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：４０５０.１
実施例８４
配列番号：８６を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000053
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。残基３１では二重カップリングを要した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３９３７.１
実施例８５
配列番号：８７を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000054
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３８２７.２
実施例８６
配列番号：８８を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000055
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３３９４.８
実施例８７
配列番号：８９を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000056
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３２８９.５
実施例８８
配列番号：９０を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000057
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３２８０.７
実施例８９
配列番号：９１を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000058
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３２９４.７
実施例９０
配列番号：９２を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000059
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３２５０.７
実施例９１
配列番号：９３を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000060
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３２５３.５
実施例９２
配列番号：９４を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000061
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３２８９.５
実施例９３
配列番号：９５を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000062
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１８３.４
実施例９４
配列番号：９６を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000063
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３２３７.６
実施例９５
配列番号：９７を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000064
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３６３７.９
実施例９６
配列番号：９８を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000065
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３３０９.７
実施例９７
配列番号：９９を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000066
上記定義のアミド化ペプチドは、実施例３７と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。残基３６および３１では二重カップリングを要した。分析に用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥ペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３７１１.１
実施例９８
配列番号：７、４０-６１、６８-７５、７８-８０および８７-９６についての前記Ｃ-末端アミド配列に対応するＣ-末端カルボン酸ペプチドの調製
配列番号：７、４０-６１、６８-７５、７８-８０および８７-９６の配列を有するペプチドを、実施例３７と同様の方法で、Fmoc-保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて、いわゆるワン樹脂（Wang resin）（ｐ−アルコキシベンジルアルコール樹脂）（Bachem社製，０.５４ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。エレクトロスプレー質量分析によって、実験的に決定した（Ｍ）を得た。
実施例９９
配列番号：６２−６７、７６、７７および８１−８６についての前記Ｃ−末端アミド配列に対応するＣ−末端カルボン酸ペプチドの調製
配列番号：６２−６７、７６、７７および８１−８６の配列を有するペプチドを、実施例３７と同様の方法で、Fmoc-保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて、クロロトリチルクロリド樹脂（２００−４００メッシュ）、２％のＤＶＢ（Novabiochem社製、０.４−１.０ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して、生成ペプチドの保持時間を決定した。エレクトロスプレー質量分析によって、実験的に決定した（Ｍ）を得た。
実施例１００
配列番号：１００を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000067
Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて、上記アミド化ペプチドを４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせた。一般的には、合成を通して単一カップリングサイクルを用い、Fast Moc（ＨＢＴＵ活性化）化学を利用した。伸長しつつあるペプチド鎖の脱保護（Fmoc基除去）はピペリジンを用いて達成した。完成ペプチド樹脂の最後の脱保護は、標準的な方法（Introduction to Cleavage Techniques,Applied Biosystems,Inc.社製）に従いトリエチルシラン（０.２ｍＬ）、エタンジチオール（０.２ｍＬ）、アニソール（０.２ｍＬ）、水（０.２ｍＬ）およびトリフルオロ酢酸（１５ｍＬ）の混合物を用いて達成した。そのペプチドをエーテル／水（５０ｍＬ）中に沈殿させて遠心した。その沈殿物を氷酢酸中で復元して凍結乾燥した。その凍結乾燥したペプチドを水に溶解した。粗製物純度は約７５％であった。
精製工程および分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。
ペプチドを含有する溶液を、分取用Ｃ−１８カラムに付して精製した（４０分間にわたる溶媒Ａ中の１０％から４０％の溶媒Ｂ）。画分の純度は、Ｃ−１８分析用カラムを用いてアイソクラチック的に決定した。純粋な画分を保存して上記定義のペプチドを供給した。その凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して、１９．２分の観察された保持時間を有する生成ペプチドを得た。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）：
計算値：３１７１.６
実測値：３１７２
実施例１０１
配列番号：１０１を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000068
上記のアミド化ペプチドは、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３６％から４６％の溶媒Ｂの勾配）に付して、１４.９分の観察された保持時間を有する生成ペプチドを得た。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１７９.６
実測値：３１８０
実施例１０２
配列番号：１０２を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000069
上記のアミド化ペプチドは、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３７％から４７％の溶媒Ｂの勾配）に付して、１２.２分の観察された保持時間を有する生成ペプチドを得た。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３２５１.６
実測値：３２５３.３
実施例１０３
配列番号：１０３を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000070
実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて、上記アミド化ペプチドを４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３５％から４５％の溶媒Ｂの勾配）に付して、１６.３分の観察された保持時間を有する生成ペプチドを得た。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１９３.６
実測値：３１９７
実施例１０４
配列番号：１０４を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000071
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３２２８.６
実施例１０５
配列番号：１０５を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000072
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３２３４.７
実施例１０６
配列番号：１０６を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000073
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３３０８.７
実施例１０７
配列番号：１０７を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000074
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３２５０.７
実施例１０８
配列番号：１０８を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000075
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３２５２.６
実施例１０９
配列番号：１０９を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000076
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３２００.６
実施例１１０
配列番号：１１０を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000077
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１４３.５
実施例１１１
配列番号：１１１を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000078
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３２１４.６
実施例１１２
配列番号：１１２を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000079
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１５７.５
実施例１１３
配列番号：１１３を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000080
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１８４.６
実施例１１４
配列番号：１１４を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000081
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１２７.５
実施例１１５
配列番号：１１５を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000082
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３２６６.４
実施例１１６
配列番号：１１６を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000083
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３２０９.４
実施例１１７
配列番号：１１７を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000084
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３２００.６
実施例１１８
配列番号：１１８を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000085
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１４３.５
実施例１１９
配列番号：１１９を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000086
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１９８.６
実施例１２０
配列番号：１２０を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000087
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１４１.５
実施例１２１
配列番号：１２１を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000088
上記定義のペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１７０.６
実施例１２２
配列番号：１２２を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000089
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１１３.５
実施例１２３
配列番号：１２３を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000090
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３２２８.６
実施例１２４
配列番号：１２４を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000091
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１７１.６
実施例１２５
配列番号：１２５を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000092
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１７２.５
実施例１２６
配列番号：１２６を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000093
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１１５.４
実施例１２７
配列番号：１２７を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000094
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３２３０.４
実施例１２８
配列番号：１２８を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000095
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１９８.６
実施例１２９
配列番号：１２９を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000096
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１４１.５
実施例１３０
配列番号：１３０を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000097
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１５７.５
実施例１３１
配列番号：１３１を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000098
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１００.４
実施例１３２
配列番号：１３２を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000099
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付し、ついで生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１５７.６
実施例１３３
配列番号：１３３を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000100
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１００.５
実施例１３４
配列番号：１３４を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000101
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１００.５
実施例１３５
配列番号：１３５を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000102
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１５４.５
実施例１３６
配列番号：１３６を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000103
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１１５.５
実施例１３７
配列番号：１３７を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000104
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３２１２.４
実施例１３８
配列番号：１３８を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000105
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１７３.４
実施例１３９
配列番号：１３９を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000106
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１５６.６
実施例１４０
配列番号：１４０を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000107
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３０９９.５
実施例１４１
配列番号：１４１を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000108
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１５６.６
実施例１４２
配列番号：１４２を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000109
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３０９９.５
実施例１４３
配列番号：１４３を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000110
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１５６.６
実施例１４４
配列番号：１４４を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000111
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３０９９.５
実施例１４５
配列番号：１４５を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000112
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１８６.６
実施例１４６
配列番号：１４６を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000113
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１２９.５
実施例１４７
配列番号：１４７を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000114
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１２９.５
実施例１４８
配列番号：１４８を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000115
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３０７２.４
実施例１４９
配列番号：１４９を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000116
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１７２.５
実施例１５０
配列番号：１５０を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000117
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１１５.５
実施例１５１
配列番号：１５１を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000118
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３２６６.４
実施例１５２
配列番号：１５２を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000119
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３２０９.４
実施例１５３
配列番号：１５３を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000120
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３２００.６
実施例１５４
配列番号：１５４を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000121
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１４３.５
実施例１５５
配列番号：１５５を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000122
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３２１６.５
実施例１５６
配列番号：１５６を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000123
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１５９.４
実施例１５７
配列番号：１５７を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000124
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３２００.６
実施例１５８
配列番号：１５８を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000125
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１４３.５
実施例１５９
配列番号：１５９を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000126
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３０９９.５
実施例１６０
配列番号：１６０を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000127
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３０８１.４
実施例１６１
配列番号：１６１を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000128
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１７２.５
実施例１６２
配列番号：１６２を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000129
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１１５.５
実施例１６３
配列番号：１６３を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000130
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１５７.５
実施例１６４
配列番号：１６４を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000131
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１００.４
実施例１６５
配列番号：１６５を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000132
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１７１.６
実施例１６６
配列番号：１６６を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000133
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１１４.５
実施例１６７
配列番号：１６７を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000134
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：４０３３.５
実施例１６８
配列番号：１６８を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000135
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３９８４.４
実施例１６９
配列番号：１６９を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000136
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：４０１６.５
実施例１７０
配列番号：１７０を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000137
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３８６１.３
実施例１７１
配列番号：１７１を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000138
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３７４６.１
実施例１７２
配列番号：１７２を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000139
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３７４２.１
実施例１７３
配列番号：１７３を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000140
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３６９３.１
実施例１７４
配列番号：１７４を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000141
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３７５１.２
実施例１７５
配列番号：１７５を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000142
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３６３４.１
実施例１７６
配列番号：１７６を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000143
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３５２６.９
実施例１７７
配列番号：１７７を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000144
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３４７７.９
実施例１７８
配列番号：１７８を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000145
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３５１９.９
実施例１７９
配列番号：１７９を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000146
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３３０７.７
実施例１８０
配列番号：１８０を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000147
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３１８６.５
実施例１８１
配列番号：１８１を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000148
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。残基３７、３６および３１では二重カップリングを要した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：４１２１.１
実施例１８２
配列番号：１８２を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000149
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。残基３７、３６および３１では二重カップリングを要した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：４１７３.２
実施例１８３
配列番号：１８３を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000150
上記定義のアミド化ペプチドを、化合物１と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。残基３６および３１では二重カップリングを要した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３７９６.１
実施例１８４
配列番号：１８４を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000151
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。残基３１では二重カップリングを要した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３８７１.１
実施例１８５
配列番号：１８５を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000152
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３７５０.２
実施例１８６
配列番号：１８６を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000153
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：３４０８.８
実施例１８７
配列番号：１８７を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000154
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：４１２０.６
実施例１８８
配列番号：１８８を有するペプチドの調製
0004798814.tif 000155
上記定義のアミド化ペプチドを、実施例１００と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて４−（２’−４’−ジメトキシフェニル）−FmocアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂（Novabiochem社製、０.５５ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは、溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して生成ペプチドの保持時間を決定した。
エレクトロスプレー質量分析（Ｍ）
計算値：４００５.５
実施例１８９
配列番号：１００−１６６、１７２−１７７、１７９−１８０および１８５−１８８を有するペプチドについての前記Ｃ−末端アミド配列に対応するＣ−末端カルボン酸ペプチドの調製
配列番号：１００−１６６、１７２−１７７、１７９−１８０および１８５−１８８を有するアミド化に対応するＣ−末端カルボン酸ペプチドは、実施例１００の方法と同様にして、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて、いわゆるワン樹脂（ｐ−アルコキシベンジルアルコール樹脂（Bachem社製、０.５４ミリモル／ｇ））上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析に用いたのは溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して、生成ペプチドの保持時間を決定した。エレクトロスプレー質量分析により、実験的に決定した（Ｍ）を得た。
実施例１９０
配列番号：１６７−１７１、１７８および１８１−１８４を有するペプチドについての前記Ｃ−末端アミド配列に対応するＣ−末端カルボン酸ペプチドの調製
アミド化された配列番号：１６７−１７１、１７８および１８１−１８４に対応するＣ−末端カルボン酸ペプチドは、実施例１００に記載の方法と同様の方法で、Fmoc−保護アミノ酸（Applied Biosystems,Inc.社製）を用いて、２−クロロトリチルクロリド樹脂（２００−４００メッシュ）、２％のＤＶＢ（Novabiochem社製、０.４−１.０ミリモル／ｇ）上でアセンブリさせ、該樹脂から切断し、脱保護して精製した。分析で用いたのは溶媒Ａ（水中の０.１％のＴＦＡ）および溶媒Ｂ（ＡＣＮ中の０.１％のＴＦＡ）であった。ついで、凍結乾燥したペプチドを分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（３０分間にわたる溶媒Ａ中の３０％から６０％の溶媒Ｂの勾配）に付して、生成ペプチドの保持時間を決定した。エレクトロスプレー質量分析により実験的に決定した（Ｍ）を得た。
本明細書中に示しおよび記載したものに加えての本発明の種々の変形が、前の記載から当業者に明らかとなるであろう、そしてこれらは以下の請求の範囲に入る。
【図１】
0004798814.tif 000156
【図２】
0004798814.tif 000157
【図３】
0004798814.tif 000158
【図４】
0004798814.tif 000159
【図５】
0004798814.tif 000160
【図６】
0004798814.tif 000161
【図７】
0004798814.tif 000162
【図８】
0004798814.tif 000163
【図９】
0004798814.tif 000164
【図１０】
0004798814.tif 000165
0004798814.tif 000166