(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
連続フルオロカーボン（ＦＣ）不混和性親水性液相；及び連続相内に液体粒子として懸濁されたＦＣを含む分散相を含むＦＣエマルジョンであって、エマルジョンが、更に、乳化剤及び安定化剤を含み、安定化剤により、ＦＣ液体粒子が連続相内を移動する能力が低減されており、
安定化剤が、セチルアルコール、ステアリルアルコール、ベヘニルアルコール、ステアリン酸グリセリル、ＰＥＧ−７５ステアレート、セチルアルコールのポリエチレングリコールエーテル、ステアリルアルコールのポリエチレングリコールエーテル及びそれらの混合物からなる群より選ばれ、
ＦＣエマルジョンが、ガスで飽和されており、エマルジョンに含まれるガスの分圧が７６０mmHgより高いことを特徴とするＦＣエマルジョン。
【請求項２】
ＦＣ不混和性親水性液体が、水溶液である請求項１に記載のＦＣエマルジョン。
【請求項３】
ＦＣの量が、２〜９０％（ｗｔ／ｗｔ）の範囲内にある請求項１又は２に記載のＦＣエマルジョン。
【請求項４】
ＦＣが、直鎖状、分枝状又は環状のフッ化炭化水素化合物、それらの誘導体及び混合物からなる群より選ばれる請求項１〜３のいずれか１項に記載のＦＣエマルジョン。
【請求項５】
ＦＣが、フッ素に加えて、ハロゲンにより置換されている請求項４に記載のＦＣエマルジョン。
【請求項６】
ハロゲンが、Ｂｒ、Ｃｌ及びＩからなる群より選ばれる請求項５に記載のＦＣエマルジョン。
【請求項７】
ＦＣが、臭化ペルフルオロオクチル又はヨウ化ペルフルオロオクチルである請求項６に記載のＦＣエマルジョン。
【請求項８】
ＦＣが、ペルフルオロ化フルオロカーボン（ＰＦＣ）である請求項４に記載のＦＣエマルジョン。
【請求項９】
ＰＦＣが、Ｃ6-9ペルフルオロアルカン、ペルフルオロペルヒドロフルオラントレン、ペルフルオロデカリン、ペルフルオロペルヒドロフェナントレン、ビス（ペルフルオル−ヘキシル）−１，２−エテン、ペルフルオロ−１，３−ジメチルシクロヘキサン、ペルフルオロメチルデカリン、ペルフルオロイソプロピルデカリン、ペルフルオロジキシリルメタンとペルフルオロジキシリルエタンとの混合物、及びペルフルオロペルヒドロフェナントレンとペルフルオロｎ−ブチルデカリンとの混合物からなる群より選ばれる請求項８に記載のＦＣエマルジョン。
【請求項１０】
乳化剤が、非フッ化化合物である請求項１〜９のいずれか１項に記載のＦＣエマルジョン。
【請求項１１】
乳化剤が、エチレンオキシドとプロピレンオキシドとのブロックコポリマー、リン脂質、及びソルビタンの脂肪酸エステルのポリオキシエチレン誘導体からなる群より選ばれる請求項１０に記載のＦＣエマルジョン。
【請求項１２】
リン脂質が、水素化されている請求項１１に記載のＦＣエマルジョン。
【請求項１３】
水素化リン脂質が、水素化ホスファチジルコリン、リゾホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール、ホスファノリピド、ホスファチジン酸及びそれらの混合物からなる群より選ばれる請求項１２に記載のＦＣエマルジョン。
【請求項１４】
乳化剤が、ポリオキシエチレン２０ソルビタンモノステアレートである請求項１１に記載のＦＣエマルジョン。
【請求項１５】
エチレンオキシドとプロピレンオキシドとのブロックコポリマーが、平均分子量が７６８０〜９５１０であり、及び、オキシエチレンの質量％が８１％である、エチレンとプロピレンオキシドとのトリブロックコポリマーである請求項１１に記載のＦＣエマルジョン。
【請求項１６】
乳化剤の量が、１〜１５％（ｗｔ／ｗｔ）の範囲内にある請求項１〜１５のいずれか１項に記載のＦＣエマルジョン。
【請求項１７】
安定化剤の量が、０．０５〜２０％（ｗｔ／ｗｔ）の範囲内にある請求項１に記載のＦＣエマルジョン。
【請求項１８】
連続相が、更に、増粘剤を含む請求項１〜１７のいずれか１項に記載のＦＣエマルジョン。
【請求項１９】
増粘剤が、カルボン酸ポリマー、ポリアクリルアミド、ポリサッカライド及びガムからなる群より選ばれる請求項１８に記載のＦＣエマルジョン。
【請求項２０】
カルボン酸ポリマーが、スクロース又はペンタエリトリトールのアリルエーテルで架橋された、アクリル酸のホモポリマー（カルボマー）又はスクロース又はペンタエリトリトールのアリルエーテルで架橋された、アクリル酸又はメタクリル酸のモノマー１種又は２種以上とＣ10-30アルキルアクリレートとのコポリマー（アクリレート／Ｃ10-30アルキルアクリレートクロスポリマー）である請求項１９に記載のＦＣエマルジョン。
【請求項２１】
ポリサッカライドが、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルヒドロキシエチルセルロース、微結晶性セルロース、セチルヒドロキシエチルセルロース、ヒアルロン酸、キトサン、デキストラン及びそれらの誘導体からなる群より選ばれる請求項１９に記載のＦＣエマルジョン。
【請求項２２】
ガムが、寒天、ゼラチン、グアーガム及びアルギンからなる群より選ばれる請求項１９に記載のＦＣエマルジョン。
【請求項２３】
ガスが酸素である請求項１に記載のＦＣエマルジョン。
【請求項２４】
エマルジョン中の酸素濃度が、ＦＣエマルジョン１ｍｌあたりの酸素（ＳＴＰ）で少なくとも０．３ｍｌである請求項２３に記載のＦＣエマルジョン。
【請求項２５】
エマルジョン中の酸素濃度が、ＦＣエマルジョン１ｍｌあたりの酸素（ＳＴＰ）で少なくとも２ｍｌである請求項２３に記載のＦＣエマルジョン。
【請求項２６】
エマルジョン中の酸素分圧が、１０，０００ｍｍＨｇである請求項２３に記載のＦＣエマルジョン。
【請求項２７】
ＦＣエマルジョンからのガスの分離を防止する加圧容器に入れられた、請求項１〜２６のいずれか１項に記載のＦＣエマルジョンを含む化粧品又は治療薬。
【請求項２８】
ＦＣエマルジョンを製造する方法であって、
（ａ）ＦＣ不混和性親水性液体及び乳化剤を混合して、第１混合物を形成する工程；
（ｂ）安定化剤を第１混合物と混合して、第２混合物を形成する工程；ここで、安定化剤が、セチルアルコール、ステアリルアルコール、ベヘニルアルコール、ステアリン酸グリセリル、ＰＥＧ−７５ステアレート、セチルアルコールのポリエチレングリコールエーテル、ステアリルアルコールのポリエチレングリコールエーテル及びそれらの混合物からなる群より選ばれ、及び
（ｃ）ＦＣを第２混合物と混合して、ＦＣの液体粒子をＦＣ不混和性親水性液体中に分散させるための第３混合物を形成し、及び、ＦＣエマルジョンを形成する工程
を含み、安定化剤により、液体粒子がＦＣエマルジョンの連続相内を移動する能力が低減されており、かつＦＣエマルジョンが、ガスで飽和されており、エマルジョンに含まれるガスの分圧が７６０mmHgより高いことを特徴とする上記方法。
【請求項２９】
工程（ｃ）が、更に、配合物添加剤をＦＣ不混和性親水性液体中に混合することを含む請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
配合物添加剤が、増粘剤、防腐剤、保湿剤、皮膚軟化剤、着色剤、ｐＨ調整剤、緩衝剤、テクスチャー強化化合物、日焼け防止剤、酸化防止剤、キレート化剤、香料、香味料、加工助剤、及び他の生物活性又は不活性化粧及び医薬成分からなる群より選ばれる請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
ガスが酸素である請求項２８に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、一般に、ガス過飽和可能な安定性エマルジョン、それらの製造方法及び使用に関する。具体的には、本発明は、非フッ化乳化剤及び安定化剤を用いて製造される安定性フルオロカーボンエマルジョン及び従来の混合装置を利用するそれらの製造方法に関する。
フルオロカーボン（フッ素置換炭化水素）及びペルフルオロカーボン（全ての水素原子がフッ素で置換されているフルオロカーボン）には、生物医学的分野において多くの用途があり、これは、それらのユニークな化学的及び生物学的特性による。これらの化合物は、透明無色で、臭気が少なく、不燃性で、生物適合性であり、及び反応性が低い。また、それらは、単位容量あたりで、酸素、二酸化炭素及び空気を含むガスをそれらの中に多量に溶解し得る（WO 96/40057）。従って、フルオロカーボン（ＦＣ）及びペルフルオロカーボン（ＰＦＣ）は、酸素が器官及び組織に供給されなければならない用途においてキャリヤとして首尾良く使用されている。
例えば、ＰＦＣでの液体循環(ventilation)により、急速に及び効率的に、呼吸窮迫症候群に罹患した子羊において、動脈血の酸素及び二酸化炭素ガス圧が、通常の物理的値まで戻されることが証明されている（H.-J. Lehmler et al., Chemtech, 1999, v. 29, No. 10, 7-12）。ＰＦＣの水性エマルジョンは、人工血液代用物質として又は移植されるべき臓器の保護用還流液体として研究されている（GB 1,549,038）。いくつかのＦＣ血液代用物質、例えばＦＬＵＯＳＯＬ（登録商標）（グリーンクロス社、大阪、日本）及びＯＸＹＧＥＮＴ（登録商標）（Alliance Pharmaceutical Corp., San Diego, CA）が臨床的に評価されている。酸素化ＦＣエマルジョンを含む合成脳脊髄液を使用して、酸素を虚血性神経組織へデリバリーしている（US-A-4,758,431）。
【０００２】
ＦＣの組成物は、また、創傷、例えば火傷の治療に使用することができ、US-A-4,366,169に記載されているとおりである。その特許明細書には、創傷を、直接的に、又はドレッシング、例えばスポンジ、ガーゼ、気泡、分散体又はゲルを介して間接的に、液体フルオロカーボンと接触させることが教示されている。近年、化粧品及び皮膚学においてＦＣエマルジョンを適用することが提案されている。酸素を皮膚へデリバリーすることにより、ＦＣエマルジョンが、皮膚の新陳代謝を改善し得、皮膚の老化を遅らせ得、及び皮膚を有害な環境作用から保護し得るとされる（Oxynoid, O. E. et al., Art. Cells, Blood Subs., and Immob. Biotech., 1994, 22(4), 1331-1336）。
フルオロカーボンは、疎水性が非常に高く、及び湿潤器官又は水性系に混和性でない。従って、典型的には、ＦＣ及びＰＦＣは、水性エマルジョン、分散体及びゲルの形態で使用される。ＦＣエマルジョン、分散体及びゲルの安定性は、それらの生物医学的用途において重要な点である（US-A-6,133,919）。
フルオロカーボンエマルジョンの分散相は、生物医学的用途に適する安定性粒子サイズを有している必要がある。現在のエマルジョンの欠点の１つは、それらの安定性が低いことである。商業的に入手可能なフルオロカーボンエマルジョン、例えばＦＬＵＯＳＯＬの粒子サイズは、例えば、それが、凍結状態で運搬及び貯蔵される場合にのみ保持することができる。凍結エマルジョンは、その後、解凍され、及び使用前に別の溶液と混合される。これらの貯蔵要件により、そのようなフルオロカーボンエマルジョンの適用の分野が非常に制限される。より安定性の高いフルオロカーボンエマルジョンが開発されているが、冷凍なしに及びその用途のための種々の包装形態、例えば局所用物質(topical)、スプレー及び軟膏で長期的に貯蔵するのに十分安定性であるフルオロカーボンエマルジョンが望まれる。
【０００３】
フルオロカーボンは、水と不混和性の油状物質であり、及び従って、水中フルオロカーボンエマルジョンが、一般に、乳化剤、例えばレシチン及び／又はポロキサマー、例えばPluronic-F-68を用いて、フルオロカーボンを分散させ及びエマルジョンを安定化させることにより製造される。しかしながら、最も一般的な乳化剤は、フルオロカーボンに対する親和性が低い。
安定性ＦＣエマルジョンを製造する数種の方法が、研究者により研究されている。１つのアプローチには、連続相内に、直径０．３μｍ未満、好ましくは直径２０〜２００ｎｍの非常に小さなＦＣ液体粒子(droplet)を分散させることが包含される。このアプローチは、血液代用用途において特に有利であり、なぜなら、大きな液体粒子サイズを有するエマルジョンは、静脈内で使用するには危険を伴い得るからである（GB 1,549,038; US-A-4,865,836）。しかしながら、より大きな液体粒子中に溶解されるガスは、より延長された時間にわたり放出され得るので、より大きなＦＣ液体粒子を含む安定性エマルジョンが、局所適用における最大治療効果を達成するために望まれる。
界面活性剤（又は乳化剤）を使用して、各分散ＰＦＣ又はＦＣ液体粒子を囲む界面活性剤分子の静電及び立体反発力により分散された液体粒子を安定化させることが可能である。例えば、US-A-4,569,784及びUS-A-4,879,062には、１０％（ｗ／ｗ）までの乳化剤を含むＦＣの安定性ゲルが記載されている。ＦＣゲルは、ＦＣエマルジョンを製造する工程、ＦＣエマルジョンを高速遠心分離により濃縮する工程及び過剰な液体を分離処理により除去する工程を含む多段階手段により製造される。この方法においては、使用される界面活性剤のタイプ及び量が、それが有効な乳化を提供する限り厳格なものとされていない。しかしながら、この方法には、複合多段階手段が包含され、及び水中にフルオロカーボンを効率的に分散するための高圧均質化又は音波誘導キャビテーションが必要とされる。
【０００４】
フルオロカーボンエマルジョンの安定性を改善する他のアプローチは、より効率的な界面活性剤、例えばフッ素親和性(fluorophilic)であるものを開発することである。フッ化界面活性剤は、ＦＣエマルジョンの安定性を改善することが示されている（US-A-6,113,919）。しかしながら、このクラスの界面活性剤は、環境的な影響が負であり、それにより、数種の先の商業的に入手可能なフッ化界面活性剤が使用中止となる。
US-A-5,573,757及びUS-A-6,113,919では、入手可能な界面活性剤系の更なる改善に焦点が向けられている。安定性ＦＣエマルジョンは、分散液体粒子を囲むことによるエマルジョンの安定化に関連して一緒に作用する界面活性剤とフッ素親和性／脂肪親和性化合物との組み合わせを利用すること、及びそれらの一体化(coalescence)を防止することにより製造される。しかしながら、そのようなフッ化化合物に関連する環境的見地から、近年においては、それらの使用及び入手性が非常に制限されている。
他の方法は、マイクロエマルジョンを製造すること、即ち、それら自身が自発的に分散系へとなる化合物の製造である（US-A-3,778,381; FR A 2 515 198）。マイクロエマルジョンは、熱力学的に安定性であるが、それらの配合物中に相当な量の界面活性剤を必要とし、それにより、医薬用途に対する生物不適合性がもたらされ得る。Cecutti et al., Eur. J. Med. Chem., 24, 485-492 (1989)に記載されるマイクロエマルジョンの例においては、分散相が、それ自体、全体的に、混合炭化水素／フルオロカーボン分子で構成される。熱力学的に安定性のマイクロエマルジョンは、破壊されると、マイルドな攪拌により元の状態となり得る。US-A-4,722,904には、２種の界面活性剤の系を含むＰＦＣマイクロエマルジョンが教示されており、その第１界面活性剤は、非イオン性及び水溶性であり、及び第２界面活性剤は、屈折性であり及び水−第１界面活性剤ゲルを無秩序にするのに十分な量で存在する。しかしながら、そのようなマイクロエマルジョンが生物医学的及び化粧用途に適するか否かは不明である。現在まで、ＰＦＣマイクロエマルジョンは、血液ガス分析の質制御及び／又はキャリブレーションのための関連液体(reference liquid)としてのみ使用されており（US-A-4,151,108及びUS-A-4,722,904）及びそれらの静脈内使用についての安全性に疑問が残る（US-A-6,113,919）。
【０００５】
US-A-5,637,318には、少なくとも３つのリン脂質分子層により囲まれたＦＣを含む非対称薄板状会合体のエマルジョンを含む外皮用剤が記載されている。外皮用剤は、超音波破砕機を用いて製造され、及び、エマルジョンの安定性は、薄板状会合体のサイズを５０〜１０００ｎｍに制限し、平均直径を２４４ｎｍとすることにより達成される。
従って、多くの従来のＦＣエマルジョン、分散体及びゲルは、高圧装置又は超音波を利用して、エマルジョンを形成し、及び遠心分離による更なる濃縮が必要とされる多段階複合方法により製造される。他のＦＣエマルジョンは、数種の環境問題を引き起こすフッ化界面活性剤を用いて又は今日まで生物医学用途において使用されてきていないマイクロエマルジョンを形成することにより安定化される。更に他のグループのＦＣエマルジョンでは、ＦＣ液体粒子のサイズが制限され、及び、局所適用において最適の治療効果が得られない。
従来のＦＣエマルジョン及びそれらの製造方法における上記欠点の観点から、本発明の目的は、非フッ化乳化剤を用いて安定性ＦＣエマルジョンを提供することである。本発明の目的は、また、従来の混合装置を利用することにより安定性ＦＣエマルジョン及びゲルを製造するための単純で低エネルギーの方法を提供することである。本発明の更なる目的は、広範な範囲のＦＣ液体粒子サイズを有する安定性ＦＣエマルジョンの製造を可能にする方法を提供することである。
【０００６】
これらの及び他の目的は、本発明において、ＦＣ液体粒子が連続相内を移動する能力を低減する安定化剤を用いることにより達成される。従来どおり、ＦＣエマルジョンの安定化は、分散ＦＣ液体粒子のサイズを低減することにより及び／又は表面張力を低減するフルオロカーボン液体粒子を囲む界面活性剤を選択し、及び液体粒子間の静電又は立体反発力を引き起こし、それらの一体化を抑制することによるいずれかにより行われる。本発明は、一方で、ＦＣエマルジョンを安定化するが、これは、更に、分散ＦＣ液体粒子が連続相内を移動する能力を低減することによる。この結果は、連続相の物理的特性を変化させる安定化剤、乳化剤を用いることを含む数種の手段、及び高度に安定化されたフルオロカーボンエマルジョンを生じるエマルジョンの製造方法により達成される。
従って、本発明のある態様は、連続フルオロカーボン（ＦＣ）不混和性親水性液相；及び連続相内に液体粒子として懸濁されたＦＣを含む分散相を含むＦＣエマルジョンであって、エマルジョンが、更に、乳化剤及び安定化剤を含み、安定化剤により、ＦＣ液体粒子が連続相内を移動する能力が低減されているＦＣエマルジョンに関する。
ＦＣは、線状、分枝状又は環状フッ化炭化水素化合物、それらの誘導体及び混合物からなる群より選ばれ得る。ＦＣは、ＰＦＣであってもよい。ある実施態様においては、ＰＦＣは、ペルフルオロデカリンである。ＰＦＣは、また、例えば、臭素又はヨウ素で置換されていてもよい。置換されている場合、ペルフルオロカーボンは、臭化ペルフルオロオクチル又はヨウ化ペルフルオロオクチルであってもよい。
【０００７】
安定化剤は、セチルアルコール、ステアリルアルコール、ベヘニルアルコール、ステアリン酸グリセリル、ポリオキシエチル化脂肪酸（ＰＥＧ−７５ステアレート）、セチルアルコールのポリエチレングリコールエーテル（セテス−２０）、ステアリルアルコールのポリエチレングリコールエーテル（ステアレス−２０）、水素化ホスホチジルコリン及びそれらの混合物からなる群より選ばれ得る。安定化剤の量は、約０．０５〜約１０％（ｗ／ｗ）の範囲内にあってもよい。他の実施態様においては、安定化剤及び乳化剤の双方が、水素化ホスホチジルコリンである。
本発明の連続ＦＣ不混和性親水性液体相は、更に、エマルジョンの粘度を増加させるための増粘剤を含んでいてもよい。ある実施態様においては、増粘剤は、カルボン酸ポリマー、ポリアクリルアミド、ポリサッカライド及びガムからなる群より選ばれる。
本発明の他の態様は、ＦＣエマルジョンの製造方法に関する。その方法は、
（ａ）ＦＣ不混和性親水性液体及び固形乳化剤の混合を、乳化剤の相転移温度より高く、及び、ＦＣ不混和性親水性液体の沸点より低い温度での攪拌により行う工程；及び
（ｂ）ＦＣを工程（ａ）の混合物に添加し、及び、高温で攪拌して、ＦＣの液体粒子をＦＣ不混和性親水性液体中に分散させ、及び、ＦＣエマルジョンを形成する工程
を含む。
【０００８】
本発明のＦＣ不混和性親水性液体は、グリセリン、水溶液、又は親水性であり及びＦＣと混和性でない他の液体であってもよい。水溶液は、安定化剤、保湿剤又は最終エマルジョンに所望の特性を提供し得る他の添加剤を含む、水中に溶解性又は分散性の成分及び水を含む溶液又は水である。
好ましくは、乳化剤は、非フッ化化合物である。ある実施態様では、非フッ化乳化剤は、水素化リン脂質である。水素化リン脂質は、水素化ホスファチジルコリン、リゾホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール、ホスファノリピド(phosphanolipid)、ホスファチジン酸及びそれらの混合物からなる群より選ばれ得る。
高温は、約４０〜約９０℃の範囲内にある。上記方法は、更に、得られたエマルジョンを冷却して、粘性溶液又はゲルを形成する工程を含んでいてもよい。
本発明は、また、ＦＣエマルジョンを製造するための他の方法を提供し、その方法は、固形乳化剤を必要としない。その方法は、
（ａ）ＦＣ不混和性親水性液体及び乳化剤を混合して、第１混合物を形成する工程；
（ｂ）安定化剤を第１混合物と混合して、第２混合物を形成する工程；及び
（ｃ）ＦＣを第２混合物と混合して、ＦＣの液体粒子をＦＣ不混和性親水性液体中に分散させるための第３混合物を形成し、及び、ＦＣエマルジョンを形成する工程
を含み、安定化剤により、液体粒子がＦＣエマルジョンの連続相内を移動する能力が低減されている。
【０００９】
本発明の更なる態様は、酸素を酸素消耗環境にデリバリーするための酸素デリバリー剤(oxygen delivery agent)に関する。その剤は、上記ＦＣエマルジョンを含み、ここで、ＦＣエマルジョンは、酸素で飽和又は過飽和される。ある実施態様においては、酸素デリバリー剤は、ＦＣエマルジョン１ｍｌあたりで標準温度及び圧力（ＳＴＰ）で、少なくとも１ｍｌの酸素を含む。
本発明は、また、酸素デリバリー剤を製造する方法を提供する。その方法は、
（ａ）上記ＦＣエマルジョンを提供する工程；及び
（ｂ）ＦＣエマルジョンを、エマルジョンを所定の程度まで酸素化するのに十分な条件下で酸素に暴露する工程
を含む。
エマルジョンは、それを、酸素ガスに対して、大気圧下で又は高圧（大気圧より高い圧力）条件で暴露することにより酸素化することができる。ある実施態様では、１０，０００ｍｍＨｇまでのｐＯ2を有する酸素化エマルジョンは、エマルジョンを酸素ガスに対して１８０ｐｓｉｇで１時間暴露することにより得ることができる。
【００１０】
本発明により、従来の方法より優れる多くの経済的及び技術的利点が提供される。本発明により、非フッ化乳化剤及び従来の混合装置を使用する、ＦＣ含量及び液滴サイズを変動する、安定性のＦＣエマルジョン、分散剤及びゲルが提供される。本発明のＦＣ製品の粘弾特性は、低粘度エマルジョン／分散剤から高粘度及び半固形ゲルにまで及ぶ。また、本発明のＦＣエマルジョンは、多量のガス、例えば酸素及び二酸化炭素を溶解可能である。つまり、開示されるＦＣエマルジョンの製造方法には、従来の混合工程が含まれ、及び更なる濃縮工程が必要とされない。従って、本発明の方法は、早く、単純で及び安価である。単に標準実験装置を利用するのみであるので、実験者の特別な訓練が必要とされない。
本発明の酸素化エマルジョンは、酸素の局所デリバリーが望ましい用途において使用するのに十分適合性である。例えば、それらは、創傷、火傷及び打撲の治療のための局所適用において使用することができる。酸素化エマルジョンは、また、抗生物質、栄養素、水和剤及び最適治療及び治癒効果を得るための他の有益な及び治療的物質を含む医薬品へ導入することができる。また、本発明の酸素化エマルジョンは、種々の化粧品、例えばクリーム、軟膏、マスク、剥離物(exfoliate)の数例が挙げられるものの中へ導入することができる。
【００１１】
本発明の上述した及び他の特徴及びそれらの製造手段は、以下の実施例を図と共に参照することにより、より明らかとなり及び最良に理解されるであろう。これらの図は、本発明の典型的な実施態様を示すのみであり、従って、本発明の範囲を制限するものではない。
図１は、本発明のある実施態様に従った酸素デリバリー剤の製造方法の概略を示す。
図２は、本発明の実施態様に従って製造された酸素デリバリー剤の概略を示す。
図３は、インビトロでのモデルにおける時間の関数としてのブタ皮膚の酸素分圧（ｐＯ2）を示す。
本発明の目的のため、以下の用語は、次のとおり定義される：
フルオロカーボンは、少なくとも１つの水素原子がフッ素原子で置換されたフッ化炭化水素である。
ペルフルオロカーボン−実質的にフッ素化された又は完全にフッ素化された材料であり、それは、一般に、周囲温度及び圧力で液体であるが、かならずしもそうとは限らず、及びそれは、ガス、例えば酸素及び二酸化炭素を移送する能力を有する。本願明細書における“実質的にフッ素化された”は、化合物のほとんどの水素原子がフッ素原子により置換されていることを意味し、更なる置換は、材料のガス移送能力を実質的に高めない。このレベルは、少なくとも約８０〜９０％の水素原子がフッ素原子で置換された場合に達成されるとされる（US-A-4,569,784）。
【００１２】
エマルジョン−安定性（非一体化）液体粒子又はマイクロ粒子の形態で不混和性液体中に乳化剤を用いて又は用いずに分散された液体からなる系。
連続相−エマルジョンのキャリヤ相、その中において、液体要素は、連続的接触状態にあり、及び互いに分離していない。
分散相−エマルジョンの相、その中において、液体要素は、液体粒子又はマイクロ粒子の形態として互いに別々で分離しているか、又はミセル内に含まれる。
増粘剤−液体混合物に添加された場合に、その粘度を上昇させ又は流れ抵抗性を上昇させる特性を有する化学薬剤。
粘性溶液−約５０ｃｐより高い粘度を有する溶液、及びそれは、適用される剪断力及び／又は温度に依存してもしなくてもよい。
ゲル−静止時に固体の振舞いをする半固形物。ゲルは、高い剪断速度で流れ得るが、これは、それらの剪断貧弱特性による。ゲルの粘度は、濃縮注入性液体ゲルからソフトな固体スティックにまで及んでいてもよい。
【００１３】
液体結晶−界面活性剤の相により分離された水及び油の規則的プレーン(orderl plane)。ある条件下では、油、水及び界面活性剤の組み合わせは、ミセルを形成する代わりに、そのような液体結晶を形成する。液体結晶は、規則的エマルジョンと共存し得る。液体結晶の存在により、エマルジョンの安定性が強化され、これは、液体粒子周辺の“膜(skin)”のカバーの形成、及び連続相にわたる３次元ネットワークの形成による。“膜”カバーにより、液体粒子の一体化が防止される。層状構造は、また、液体粒子間のファン・デル・ワールス力を低減し、一体化を抑制する。３次元ネットワークにより、液体粒子が連続相内を移動する能力が低減される（更なる情報として、“Liquid Crystals and Emulsions” in Emulsions and Solubilization, Shinoda K and Friberg S, Jhon Wiley & Sons, Inc. (1986)及びJansson, P. and Friberg, S.; Molecular Crystals and Liquid Crystals, 34:75 (1976)を参照されたい）。
第１の実施態様において、本発明は、連続フルオロカーボン（ＦＣ）不混和性親水性液相；及び連続相内に液体粒子として懸濁されたＦＣを含む分散相を含むＦＣエマルジョンであって、エマルジョンが、更に、乳化剤及び安定化剤を含み、安定化剤により、ＦＣ液体粒子が連続相内で移動又は一体化する能力が低減されているＦＣエマルジョンを提供する。
【００１４】
本発明のＦＣエマルジョンの連続ＦＣ不混和性親水性液体相は、水性相及び他の水混和性物質、例えばグリセリン、プロピレングリコール、短鎖アルコール及び他の親水性液体を含んでいてもよい。そのような親水性液体は、水と容易に混合し、及び個々に又は連続相との組み合わせで添加することができる。
ＦＣエマルジョンの水不混和性分散相は、ＦＣ又はそれらの誘導体からなる。ＦＣは、それらの不活性化学及び高酸素溶解性について選ばれる（水のものより約２０倍高い）。実質的には、いずれのＦＣを使用してもよい。適切なＦＣとしては、線状、分枝状又は環状フッ化炭化水素、それらの誘導体及び混合物が挙げられるが、これらに限定される訳ではない。ある実施態様においては、ＦＣは、ペルフルオロカーボン（ＰＦＣ）であってもよい。許容可能なＰＦＣの例としては、Ｃ6-9ペルフルオロアルカン、ペルフルオロペルヒドロフルオラントレン、ペルフルオロデカリン、ペルフルオロペルヒドロフェナントレン、ビス（ペルフルオル−ヘキシル）−１，２−エテン、ペルフルオロ−１，３−ジメチルシクロヘキサン、ペルフルオロメチルデカリン、ペルフルオロイソプロピルデカリン、ペルフルオロジキシリルメタンとペルフルオロジキシリルエタンとの混合物、及びペルフルオロペルヒドロフェナントレンとペルフルオロｎ−ブチルデカリンとの混合物が挙げられるが、これらに限定される訳ではない。
【００１５】
ＦＣの水素原子は、フッ素に加えて、ハロゲン、例えばＢｒ、Ｃｌ又はＩにより置換されていてもよい。ある実施態様においては、ＰＦＣは、臭化ペルフルオロクチル又はヨウ化ペルフルオロオクチルである。別の実施態様においては、商業的製品ＰＦＣ５０８０（３Ｍ製品、St. Paul, MN）を使用する。ＰＦＣ５０８０は、主にペルフルオロクタンを含むペルフルオロカーボンの混合物である。
本発明のＦＣエマルジョンは、ＦＣを、約２〜約９０％（ｗｔ／ｗｔ）、好ましくは約１０〜約７０％（ｗｔ／ｗｔ）の量で含んでいてもよい。しかしながら、上記の範囲外のＦＣ濃度が、また、使用されてもよい。
ＦＣは、水と不混和性の油状化合物であるので、乳化剤が、典型的には、使用されて、水中ＦＣエマルジョンを製造する。乳化剤は、ＦＣの分散及びエマルジョンの安定化を助長する。ＦＣを分散可能な乳化剤を使用することができる。しかしながら、環境問題から、好ましくは、乳化剤は、非フッ化化合物である。生物医薬及び化粧適用においては、また、乳化剤は、好ましくは、生物適合性（非刺激性）であり、及び十分な寿命を有するエマルジョンを生じるべきである。少なくとも６ヶ月、好ましくは１年を越える寿命が、一般には十分であると考えられる。
【００１６】
そのような生物適合性の非フッ化化合物の例としては、エチレンオキシドとプロピレンオキシドとのブロックコポリマー、リン脂質、及びソルビタンの脂肪酸エステルのポリオキシエチレン誘導体が挙げられるが、これらに限定される訳ではない。ある実施態様においては、エチレンオキシドとプロピレンオキシドとのブロックコポリマーが、平均分子量が７６８０〜９５１０であり、及び、オキシエチレンの質量％が８１％である、エチレンとプロピレンオキシドとのトリブロックコポリマー（ポロキサマー１８８）又はプルロニック（登録商標）Ｆ６８（BASF Corporation, Mount Olive, NJ）である。他の実施態様においては、乳化剤は、ポリオキシエチレン２０ソルビタンモノステアレート（ポリソルベート６０）である。
更に別の実施態様においては、水素化リン脂質が使用される。水素化リン脂質は、水素化ホスファチジルコリン、リゾホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール、ホスファノリピド、ホスファチジン酸及びそれらの混合物からなる群より選ばれ得る。ポリソルベート６０及びプルロニック（登録商標）Ｆ−６８のものと類似する親水性・親油性バランス（ＨＬＢ）又は組み合わせＨＬＢ値を有する他の乳化剤が、本発明のＦＣエマルジョンの製造において使用することが可能であることが期待される。好ましい実施態様においては、水素化リン脂質が、水素化ホスファチジルコリンである。
【００１７】
典型的には、乳化剤は、約１〜約１５％（ｗｔ／ｗｔ）の範囲内の量で使用する。ある実施態様においては、乳化剤の量は、約３〜約７％（ｗｔ／ｗｔ）の範囲内にある。しかしながら、所望の場合には、より多い量を使用してもよい。
序文において説明したように、従来のＦＣエマルジョンの安定化は、分散ＦＣ液体粒子のサイズを低減することにより及び／又はフルオロカーボン液体粒子を囲み及び表面張力を低減する界面活性剤を選択し、及び液体粒子間の静電及び立体反発力を引き起こさせ、それらの一体化を抑制することによるいずれかにより行われる。
界面活性剤は、疎水性尾領域及び親水性頭領域を有する、通常両親媒性の分子である。しかしながら、ＦＣは、親水性又は脂肪親和性のいずれでもない水不混和性物質である。従って、ＦＣ及びＦＣ不混和性親水性液相の間の表面張力は、従来の界面活性剤のみによっては効率的に低減することができない。従って、US-A-6,113,919には、従来の界面活性剤とフッ素親和性／脂肪親和性分子との組み合わせの使用が教示されており、それは、表面張力を低減し及びエマルジョンを安定化することに関連して一緒に作用する。
本発明では、フッ素親和性／脂肪親和性化合物の使用を必要としない別のアプローチをとる。代わりに、本発明においては、ＦＣエマルジョンは、予期せぬことに、分散されたＦＣ液体粒子及びミセルが連続相内を移動する能力を低減することにより安定化される。結果として、ＦＣ液体粒子は、互いに組み合せられず、及びエマルジョンを不安定化しない。本発明の知見によれば、ＦＣ液体粒子の移動性は、安定化剤を連続相に添加して、該相の物理的特性を変化させることにより低減することができる。
【００１８】
本発明の安定化剤は、ＦＣ液体粒子が連続相内を移動する能力を低減する化合物である。安定化剤は、セチルアルコール、ステアリルアルコール、ベヘニルアルコール、ステアリン酸グリセリル、ポリオキシエチル化脂肪酸（ＰＥＧ−７５ステアレート）、セチルアルコールのポリエチレングリコールエーテル（セテス−２０）、ステアリルアルコールのポリエチレングリコールエーテル（ステアレス−２０）、水素化ホスホチジルコリン及びそれらの混合物からなる群より選ぶことができる。
典型的には、安定化剤の量は、約０．０５〜約２０％（ｗｔ／ｗｔ）の範囲内にある。好ましくは、安定化剤の量は、約０．５〜約５％（ｗｔ／ｗｔ）の範囲内にある。
ある実施態様においては、水素化ホスホチジルコリンを、安定化剤及び乳化剤の双方として使用する。
本発明のＦＣ乳化剤は、粘性溶液、液体結晶又はゲルの形態にあってもよい。ある実施態様においては、連続水性相は、更に、エマルジョンの粘度を高めるための増粘剤を含む。好ましくは、増粘剤は、ＦＣエマルジョンの粘度が通常条件下で少なくとも約５０センチポアズとなるような量で添加される。
増粘剤は、請求項２４に記載のＦＣエマルジョンからなる群より選ぶことができ、その中において、増粘剤は、カルボン酸ポリマー、ポリアクリルアミド、ポリサッカライド及びガムからなる群より選ばれる。カルボン酸ポリマーは、スクロース又はペンタエリトリトールのアリルエーテルで架橋された、アクリル酸のホモポリマー（カルボマー）又はスクロース又はペンタエリトリトールのアリルエーテルで架橋された、アクリル酸又はメタクリル酸のモノマー１種又は２種以上とＣ10-30アルキルアクリレートとのコポリマー（アクリレート／Ｃ10-30アルキルアクリレートクロスポリマー）であってもよい。
【００１９】
ポリサッカライドは、セルロース及びセルロース誘導体であってもよい。ある実施態様においては、ポリサッカライドは、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルヒドロキシエチルセルロース、微結晶性セルロース、セチルヒドロキシエチルセルロース、ヒアルロン酸、キトサン、デキストラン及びそれらの誘導体からなる群より選ばれる。
ガムは、寒天、ゼラチン、グアーガム及びアルギンからなる群より選ばれ得る。
上記に説明したとおり、本発明の予期せぬ発見は、ＦＣ粒子の連続相内の移動性が、低減され得ること、及びＦＣエマルジョンが、安定化剤を連続相に添加することにより安定化され得ることである。従って、本発明の別の態様は、ＦＣエマルジョンの製造方法に関する。その方法は、
（ａ）ＦＣ不混和性親水性液体及び乳化剤を混合して、第１混合物を形成する工程；
（ｂ）安定化剤を第１混合物と混合して、第２混合物を形成する工程；及び
（ｃ）ＦＣを第２混合物と混合して、ＦＣの液体粒子をＦＣ不混和性親水性液体中に分散させるための第３混合物を形成し、及び、ＦＣエマルジョンを形成する工程
を含み、安定化剤により、液体粒子がＦＣエマルジョンの連続相内を移動する能力が低減されている。
【００２０】
また、本発明の予期せぬ発見は、固形乳化剤を含む加熱成分の機械的攪拌により、連続相内にＦＣ液体粒子の安定サスペンションが形成されることである。上記方法に従って得られるＦＣエマルジョンは、熱的に及び機械的に安定であり、及び極端な条件に付されない限り、その成分相に分離しないであろう。
従って、本発明は、また、ＦＣエマルジョンを製造する他の方法を提供する。その方法は、
（ａ）ＦＣ不混和性親水性液体及び固形乳化剤の混合を、乳化剤の相転移温度より高く、及び、ＦＣ不混和性親水性液体の沸点より低い温度での攪拌により行う工程；及び
（ｂ）ＦＣを工程（ａ）の混合物に添加し、及び、高温で攪拌して、ＦＣの液体粒子をＦＣ不混和性親水性液体中に分散させ、及び、ＦＣエマルジョンを形成する工程
を含む。
混合及び攪拌は、従来の手段、例えば手による攪拌、エアレーション、プロペラ攪拌、タービン攪拌、コロイドミリング、均質化、高周波又は超音波振動（超音波処理）、マイクロ流動化などにより行うことができる。ある実施態様においては、均質化が使用される。
環境問題から、いずれかの方法において使用する乳化剤は、好ましくは、非フッ化化合物である。乳化剤は、エチレンオキシドとプロピレンオキシドとのブロックコポリマー、リン脂質、及びソルビタンの脂肪酸エステルのポリオキシエチレン誘導体からなる群より選ばれ得る。ある実施態様においては、エチレンオキシドとプロピレンオキシドとのブロックコポリマーが、平均分子量が７６８０〜９５１０であり、及び、オキシエチレンの質量％が８１％である、エチレンとプロピレンオキシドとのトリブロックコポリマー（ポロキサマー１８８又はプルロニック（登録商標）Ｆ６８）である。別の実施態様においては、乳化剤は、ポリオキシエチレン２０ソルビタンモノステアレート（ポリソルベート６０）である。
【００２１】
固形乳化剤が必要な場合には、それが、好ましくは、水素化リン脂質である。水素化リン脂質は、水素化ホスファチジルコリン、リゾホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール、ホスファノリピド、ホスファチジン酸及びそれらの混合物からなる群より選ばれ得る。ある実施態様においては、水素化リン脂質は、水素化ホスホチジルコリンである。
典型的には、乳化剤の量は、約１〜約１５％（ｗｔ／ｗｔ）の範囲内、好ましくは、約３〜約７％（ｗｔ／ｗｔ）の範囲内にある。
典型的には、高温は、約４０〜約９０℃の範囲内にある。この方法は、更に、得られたエマルジョンを冷却して、粘性溶液又はゲルを得る工程を含んでいてもよい。ある実施態様においては、粘性溶液の粘度は、１〜６センチポアズの範囲内にある血清及び血液の粘度より高い。別の実施態様においては、粘度は、少なくとも約５０センチポアズである。
別の実施態様においては、ＦＣエマルジョンは、少なくとも約４０℃まで冷却する。
ＦＣエマルジョンを製造する上記方法は、更に、ＦＣ液体粒子のサイズを低減するための粘性溶液を処理する工程を含んでいてもよい。そのような処理工程は、当該技術分野における当業者に知られる均質化又は他の適切な方法により行うことができる。
【００２２】
本発明のＦＣエマルジョンの意図される使用のタイプに依存して、上記方法の工程（ａ）は、更に、配合物添加剤を水へ混合することを含んでいてもよい。そのような配合物添加剤は、当該技術分野における当業者によく知られており、及び、増粘剤、防腐剤、保湿剤、皮膚軟化剤、着色剤、ｐＨ調整剤、緩衝剤、テクスチャー強化化合物、日焼け防止剤、酸化防止剤、キレート化剤、香料、香味料、加工助剤、及び他の生物活性又は不活性化粧及び医薬成分からなる群より選ばれ得る。
例えば、安定化剤は、セチルアルコール、ステアリルアルコール、ベヘニルアルコール、ステアリン酸グリセリル、ポリオキシエチル化脂肪酸（ＰＥＧ−７５ステアレート）、セチルアルコールのポリエチレングリコールエーテル（セテス−２０）、ステアリルアルコールのポリエチレングリコールエーテル（ステアレス−２０）、水素化ホスホチジルコリン及びそれらの混合物からなる群より選ばれ得る。安定化剤の量は、約０．０５〜約２０％（ｗｔ／ｗｔ）の範囲内、好ましくは、約０．５〜約５％（ｗｔ／ｗｔ）の範囲内にあってもよい。ある実施態様においては、安定化剤及び乳化剤の双方が、水素化ホスホチジルコリンである。保湿剤は、それらが添加される材料の水分量を保持し、蒸発を遅延させ及び加湿を強化するために配合物へ添加される物質である。保湿剤は、当該技術分野においてよく知られており、及び、グリセリン、プロピレングリコール、ブチレングリコール、ソルビトール及びその他のものからなる群より選ばれ得る。他の添加剤は、当該技術分野においてよく知られており、及び、チキソトロープ剤、白色化剤及び加工助剤からなる群より選ばれ得る。チキソトロープ剤は、一般に、エマルジョンの流動特性、すなわちレオロジーを変化させるために添加される。
【００２３】
本発明の他の態様においては、エマルジョンは、通常の状況下での結果より多くのガス、好ましくは酸素を含むように処理されてもよい。従って、本発明は、ガスをガス消耗環境へデリバリーするためのガスデリバリー剤を提供する。その剤は、上記ＦＣエマルジョンを含み、その中において、ＦＣエマルジョンは、ガスで飽和されている。ガスが酸素である場合には、本発明のＦＣエマルジョンにおける酸素濃度は、１気圧でＦＣエマルジョン１ｍｌあたりの酸素（ＳＴＰ）で少なくとも約０．３ｍｌである。エマルジョン中の酸素分圧、すなわちｐＯ2は、一般に、これらの実施態様において、７６０ｍｍＨｇより高い。
本発明のガスデリバリー剤は、ガスで過飽和されていてもよい。例えば、ガスが酸素である実施態様においては、エマルジョン中における酸素濃度は、ＦＣエマルジョン１ｍｌあたりの酸素（ＳＴＰ）で少なくとも約１ｍｌである。他の実施態様においては、エマルジョン中における酸素濃度は、ＦＣエマルジョン１ｍｌあたりの酸素（ＳＴＰ）で少なくとも約２ｍｌである。エマルジョン中における酸素分圧、すなわちｐＯ2は、一般に、これらの実施例において、１０，０００ｍｍＨｇより高く、及び１１，０００ｍｍＨｇと同程度又はそれより高くてもよい。
【００２４】
本発明は、また、ガスデリバリー剤を製造する方法を提供する。その方法は、
（ａ）本発明のＦＣエマルジョンを提供する工程；及び
（ｂ）ＦＣエマルジョンを、該エマルジョンを所定の程度までガス化するのに十分な条件下でガスに暴露する工程
を含む。
ＦＣエマルジョンは、大気圧下で、又は大気圧より高い圧力下でガスに暴露することができる。例えば、ガスが酸素である場合には、エマルジョンは、酸素に対して、エマルジョン中において少なくとも約１０，０００ｍｍＨｇのｐＯ2を達成するのに十分な時間１８０ｐｓｉ下で暴露することができる。
ある実施態様においては、図１に記載するように、ＦＣエマルジョンの成分を加熱して、ミキサー１において混合し、得られたエマルジョンをポンプ２により加圧酸化容器３へポンプする。機械的攪拌をこのユニット中において２傾斜ブレード(dual pitched blade)を用いて行って、酸素に対する急速な平衡を確実なものとして、酸素デリバリー剤を生成する。最後に、酸化容器３の内部圧により、ボトリング用充填ステーション４へ酸素デリバリー剤を移動させる。
【００２５】
本発明の酸素デリバリー剤は酸素を高濃度で皮膚組織にデリバリー可能であるため、それには、多くの生物医薬及び化粧品用途がある。例えば、それは、創傷、火傷及び打撲の治療のための局所適用に用いることができる。酸素デリバリー剤は、また、抗生物質、栄養素、水和剤及び最適治療及び治癒効果を得るための他の有益な及び治療的物質を含む医薬品へ導入することができる。酸素デリバリー剤は、皮膚に直接的に適用することができ、又は皮膚へ適用するためのドレッシング(dressing)へ導入することができる。そのようなドレッシングの例としては、ガーゼ、バンデージ及び皮膚と接触して酸素デリバリー剤を保持するのに適する他の材料が挙げられるが、これらに限定される訳ではない。閉塞的創傷ドレッシングの適用により、周囲環境への酸素の拡散性移送が抑制され、及び治療部位への酸素の最大移送が確実なものとなるであろう。
酸素デリバリー剤は、また、種々の化粧品、例えばクリーム、軟膏、マスク、剥離物の数例が挙げられるものの中へ導入することができる。ある実施態様においては、本発明の酸素デリバリー剤は、酸素を化粧適用において無傷の皮膚へデリバリーして、皮膚のテクスチャー及び調子を改善することができる。例えば、酸素デリバリー剤は、皮膚ケアクリーム又は化粧マスク中へ導入することができる。そのような製品は、オフィスで又は消費者が自宅で熟練した皮膚ケアで適用可能である。
【００２６】
本発明のＦＣエマルジョン又はガスデリバリー剤は、好ましくは、圧力下に分配ボトル中に貯蔵されて、ＦＣエマルジョン中の可溶化ガス及び加圧ガスの間の相平衡を維持し、及びガスの分離(dissolution)及びエマルジョンからの漏れを防止する。ガスが酸素である場合には、酸素ガスは、また、そのようなデリバリー系においてビヒクルプロペラント(propellant)、又は間接的プロペラント、例えば、分配ボトルないにおけるバリアの外側へ適用される他のガス、例えば窒素として機能する。
好ましくは、ガスデリバリー剤を保持する加圧容器は、最小で、等しく溶解されたガス分圧に等しいか又はそれより高いままである内部圧を保持すべきである。また、好ましい実施態様においては、加圧容器は、ガスデリバリー剤の十分な分散を可能にする（全体的な分散充填質量の９５％より高い）。
以下の実施例は、本発明を説明することを意図するものであって、本発明の範囲を制限するものではない。そのような実施例は、使用可能なものの典型例であるが、当該技術分野における当業者に知られる他の手段を代わりに用いてもよい。確かに、当該技術分野における当業者は、過度の努力なしに、本願明細書における教示に基づいて、更なる実施態様を容易に想到及び作り出すことが可能である。
【００２７】
実施例
実施例１：
0004611741.tif 000002
ＡをＢと混合した。混合物を反応容器中において攪拌を伴って７０℃に加熱した。温度が７０℃に達した時に、Ｃを混合物に７０℃で攪拌を伴って添加した。オーバーヘッド攪拌機を用いてこの工程を行った。Ｃを混合物中に均質に分散した後、Ｄ、Ｅ及びＦを連続的な攪拌を伴って添加した。上記成分の全てが均質に分散された時に、Ｇを、ゆっくりと、制御された速度で、攪拌を伴って添加した。全てのＧを添加した時に、Ｈを、温度を７０℃に保持しながら添加した。混合物を、ゆっくりと、室温まで冷却した。あるいは冷却前に、混合物を均質化に付し、及び次いで、ゆっくりと、室温まで冷却した。
【００２８】
実施例２：
0004611741.tif 000003
【００２９】
ＡをＢと混合した。混合物を反応容器中において攪拌を伴って７０℃に加熱した。温度が７０℃に達した時に、Ｃを混合物に７０℃で攪拌を伴って添加した。オーバーヘッド攪拌機を用いてこの工程を行った。Ｃを混合物中に均質に分散した後、Ｄ、Ｅ、Ｆ及びＧを連続的な攪拌を伴って添加した。上記成分の全てが均質に分散された時に、Ｈを、ゆっくりと、制御された速度で、攪拌を伴って添加した。全てのＨを添加した時に、Ｉ及びＪを、温度を７０℃に保持しながら添加した。混合物を、ゆっくりと、室温まで冷却した。混合物を冷却しながら、Ｋ、Ｌ、Ｍ及びＮを添加した。あるいは冷却前に、混合物を均質化に付し、及び次いで、ゆっくりと、室温まで冷却した。
【００３０】
実施例３：
0004611741.tif 000004
【００３１】
ＡをＢと混合した。混合物を反応容器中において攪拌を伴って７０℃に加熱した。温度が７０℃に達した時に、Ｃを混合物に７０℃で攪拌を伴って添加した。オーバーヘッド攪拌機を用いてこの工程を行った。Ｃを混合物中に均質に分散した後、Ｄ、Ｅ、Ｆ及びＧを連続的な攪拌を伴って添加した。上記成分の全てが均質に分散された時に、Ｈを、ゆっくりと、制御された速度で、攪拌を伴って添加した。全てのＨを添加した時に、Ｉ及びＪを、温度を７０℃に保持しながら添加した。混合物を、ゆっくりと、室温まで冷却した。混合物を冷却しながら、Ｋ、Ｌ及びＭを添加した。あるいは冷却前に、混合物を均質化に付し、及び次いで、ゆっくりと、室温まで冷却した。
【００３２】
実施例４：
酸素デリバリー剤の製造
実施例１〜３のいずれか１項に従って製造したＦＣエマルジョンを、１８０ｐｓｉの酸素で、加圧ミキサー中において、９０分間で充填した。得られた酸素デリバリー剤を、ＦＣ１ｍｌあたりでの酸素（ＳＴＰ）で約１．８ｍｌを含む、加圧キャニスター中において包装した。酸素デリバリー剤の略図を図２に示す。
実施例５：
新鮮な採取ブタ皮膚組織における酸素移動
温度目盛り付きニードル酸素測定装置（FO2TON, Measuring System, Ocean Optics, Inc.）を使用して、ベンチ上において約１ｍｍ厚のブタ皮膚片に浸透した組織酸素レベルを測定した。
新鮮な採取ブタ皮膚を、薄片にカットして、約１ｍｍ厚で、無傷表皮を残すものとした。実施例２の酸素デリバリー剤を、２つの皮膚片（サンプル１及びサンプル２）の外面へ適用した一方、直接接触ｐＯ2プローブを反対側へ適用した。
図３は、約９０分間にわたる時間の関数としてのブタ皮膚の酸素分圧（ｐＯ2）を示す。連続的測定により、約２００ｍｍＨｇまでの経皮酸素レベルの上昇が３０分を越えて生じ、及び少なくとも１時間維持された。しかしながら、一般に酸素吸収／交換を遅延させる皮膚の食肉処理（ブランチング）のために、より優秀な酸素移送が、新鮮な皮膚片において期待される。
【図面の簡単な説明】
【００３３】
【図１】本発明の実施態様に従った酸素デリバリー剤の製造方法の概略を示す
【図２】本発明の実施態様に従って製造された酸素デリバリー剤の略図を示す。
【図３】インビトロでのモデルにおける時間の関数としてのブタ皮膚の酸素分圧（ｐＯ2）を示す。
【図１】
0004611741.tif 000005
【図２】
0004611741.tif 000006
【図３】
0004611741.tif 000007