(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式
【化１】
0004656798.tif 000010
〔式中、Ｒは、ホスホノアミノ基を示す。〕で表される化合物またはその塩と、ＨＣｌとを反応させることを特徴とする、
結晶である、式
【化２】
0004656798.tif 000011
〔式中、ｍは２を示す。〕で表される化合物の製造法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は優れた抗菌活性を有し、医薬として有用なセフェム化合物（特にその結晶）およびその製造法等に関する。
【０００２】
【従来の技術】
特開平９−１００２８３号公報には、優れた抗菌活性を有するセフェム化合物が記載されており、その具体例のひとつとして式
【化３】
0004656798.tif 000002
で表される7β-[2-(5-アミノ-1,2,4-チアジアゾール-3-イル)-2(Z)-エトキシイミノアセトアミド]-3-[4-(1-メチル-4-ピリジニオ)-2-チアゾリルチオ]-3-セフェム-4-カルボキシレートが記載されている。
【０００３】
また、特開平１１−２５５７７２号公報には前記式（III)で表される化合物の水溶性を高めた式
【化４】
0004656798.tif 000003
で表される3-[4-(1-メチル-4-ピリジニオ)-2-チアゾリルチオ]-7β-[2-(5-ホスホノアミノ-1,2,4-チアジアゾール-3-イル)-2(Z)-エトキシイミノアセトアミド]-3-セフェム-4-カルボキシレートが記載されている。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
医薬として用いる場合に、純度、安定性、保存性、取扱い易さ等の医薬品としての品質が優れている化合物がよく、医薬品として十分に満足できる抗菌剤を提供することに本発明の課題がある。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、前記事情に鑑み、鋭意種々研究を重ねた結果、式（III)で表される化合物は、分子内塩構造を有し、固体安定性および、品質的に十分でない非晶質として得られていたが、その塩酸塩（I)は、式（III)で表される化合物よりも優れた固体安定性を有する高品質の結晶として得られる事を見出し、これに基づき本発明を完成した。
【０００６】
すなわち、本発明は、
（１）一般式
【化５】
0004656798.tif 000004
〔式中、ｍは０ないし３を示す。但しｍ＝０の場合を除く。〕で表される化合物；
（２）ｍが２である前記（１）記載の化合物；
（３）水和物である前記（１）または（２）記載の化合物；
（４）結晶である前記（３）記載の化合物；
（５）ｍが２であり、二水和物である前記（４）記載の化合物；
（６）粉末Ｘ線回折において回折角５．９４、１４．１４、１７．９０、２１．３２、２３．６４°付近にピークを有する前記（４）記載の結晶；
【０００７】
（７）前記（１）記載の化合物を含有してなる医薬組成物；
（８）抗菌剤である前記（７）記載の医薬組成物；
（９）抗ＭＲＳＡ剤である前記（７）記載の医薬組成物；
（１０）一般式
【化６】
0004656798.tif 000005
〔式中、Ｒは、保護されていてもよいアミノ基を示す。〕で表される化合物またはその塩と、ＨＣｌとを反応させることを特徴とする前記（１）記載の化合物の製造法；
（１１）医薬の製造のための前記（１）記載の化合物の使用および
（１２）前記（１）記載の化合物の有効量を感染症患者に投与することを特徴とする感染症を治療する方法などに関する。
【０００８】
【発明の実施の形態】
前記化合物（I)は、前記化合物（III)１分子と、塩酸0ないし３分子とからなる化合物である（塩酸０分子の場合は本願発明に含まれないが、化合物(III)１分子に対して塩酸0.5分子などの場合も当然本願発明に含まれる）。また、化合物（I)は溶媒和物であってもよく、特に水を含んでいてもよく、その場合、当該水は、結晶水として取り込まれていても、単なる付着水であってもよい。さらに化合物（I）は、純度および固体安定性の点から結晶形態であることが好ましい。
化合物（I）は、▲１▼前記化合物(II)またはその塩、▲２▼親水性有機溶媒および▲３▼HCl（塩酸または塩化水素）を含む水から製造することができる。化合物（II）またはその塩としては、前記特開平１１−２５５７７２に記載の方法（例えば実施例１など）で合成された凍結乾燥品の前記化合物（IV）またはその塩を用いてもよく、または対応するジナトリウム塩、ジカリウム塩、ジアンモニウム塩を含む溶液、またはそれら溶液に例えば塩酸、硫酸、硝酸などを加えて得られる化合物（IV）を用いてもよい。さらに、化合物（II）の代わりに化合物（III）を用いても良いが、化合物（II）を用いる方がより好ましい。前記化合物（IV）のジナトリウム塩を含む溶液は、化合物（IV）のジナトリウム塩を合成する種々の反応の結果得られる化合物（IV）のジナトリウム塩を含む反応液であってもよいし、化合物（IV)のジナトリウム塩の結晶を溶解したものであってもよい。▲２▼の該親水性有機溶媒としては、例えば酢酸、乳酸、などの有機酸類、例えばアセトニトリルなどのニトリル類、例えばアセトンなどのケトン類、例えばメタノール、エタノールなどのアルコール類、例えばジオキサン、テトラヒドロフランなどのエーテル類など、およびこれらの混合溶媒などの親水性有機溶媒、ならびにこれらと水との混合溶媒が挙げられる。中でも、酢酸、メタノール、エタノール、およびこれらと水との混合溶媒が好ましく、特にエタノール、酢酸、およびこれらと水との混合溶媒が好ましい。▲３▼の塩酸を含む水の塩酸の濃度としては、濃塩酸に相当する12モル/Lから0.1モル/Lが利用でき、中でも１２モル/Lから６モル/Lが好ましい。
【０００９】
Ｒは保護されていてもよいアミノ基を表わす。β−ラクタムおよびペプチドの分野ではアミノ基の保護基は充分に研究されていてその保護法はすでに確立されており、本発明においてもアミノ基の保護基としてはそれら公知のものが適宜に採用されうる。アミノ基の保護基としてはたとえば、ホスホノ基（もしくはホスホノ基に変じ得る基であってもよい）、ホルミル基、置換オキシカルボニル基、置換されていてもよいＣ6-10アリール−メチル基、置換されていてもよいジＣ6-10アリール−メチル基、置換されていてもよいトリＣ6-10アリール−メチル基、置換されていてもよいＣ6-10アリール−メチレン基、置換シリル基、式ＭＯＣＯ−〔式中、Ｍはアルカリ金属を示す。〕で表される基などが用いられる。
【００１０】
ここで、ホスホノ基に変じ得る基とはたとえば加水分解、置換反応により、ホスホノ基に変換可能な基を意味し、保護されたホスホノ基の他、たとえばジクロロホスホリル等のジハロホスホリルなどが挙げられる。保護されたホスホノ基はホスホノ基の保護基によって保護されたものである。核酸化学の分野ではホスホノ基の保護基は充分に研究されていてその保護法はすでに確立されており、本発明においてもホスホノ基の保護基としてはそれら公知のものが適宜に採用されうる。保護されたホスホノ基としてはたとえば、ジクロロホスホリル等のジハロホスホリル、たとえばジメトキシホスホリル、ジエトキシホスホリル、ジプロポキシホスホリル等のジアルコキシホスホリル基、たとえばＯ−メチルホスホノ、Ｏ−エチルホスホノ等のＯ−アルキルホスホノ基等のようなモノ−またはジ−エステルホスホノ基等、たとえば、ジアミノホスホリル、（アミノ）（ヒドロキシ）ホスホリル等のモノまたはジアミド化ホスホノ基、たとえば、（メトキシ）（アミノ）ホスホリル、（エトキシ）（アミノ）ホスホリル等の（アルコキシ）（アミノ）ホスホリル基等、たとえば、（メトキシ）（モルホリノ）ホスホリル、（エトキシ）（モルホリノ）ホスホリル等の（アルコキシ）（モルホリノ）ホスホリル基等のようなモノエステル化モノアミド化ホスホノ基が挙げられる。アミノ基の保護基中、ホスホノ基もしくはホスホノ基に変じ得る基としてはホスホノ、ジアルコキシホスホリル、Ｏ−アルキルホスホノ、ジアミノホスホリル、(アミノ)(ヒドロキシ)ホスホリル、(アルコキシ)(モルホリノ)ホスホリルまたはジハロホスホリルが好ましく、特にホスホノが好ましい。
【００１１】
「置換オキシカルボニル基」としてはたとえば、Ｃ1-10アルコキシ−カルボニル基、Ｃ3-10シクロアルキルオキシ−カルボニル基、Ｃ5-10架橋環式炭化水素オキシ−カルボニル基、Ｃ2-10アルケニルオキシ−カルボニル基、Ｃ6-10アリールオキシ−カルボニル基またはＣ7-19アラルキルオキシ−カルボニル基のほか、それらがさらにＣ1-6アルコキシ、Ｃ1-6アルカノイル、Ｃ1-10アルカノイルオキシ、Ｃ1-10アルコキシ−カルボニルオキシ、Ｃ3-10シクロアルキルオキシ−カルボニルオキシ、置換シリル基（後記する置換シリル基、例、トリメチルシリル、tert−ブチルジメチルシリル等）、Ｃ1-6アルキルスルホニル、ハロゲン、シアノ、Ｃ1-6アルキル、ニトロ等から選ばれる置換基を１〜３個有しているものも含まれる。具体的には例えば２−トリメチルシリルエトキシカルボニル、２−メタンスルホニルエトキシカルボニル、２,２,２−トリクロロエトキシカルボニル、２−シアノエトキシカルボニル、アリルオキシカルボニル、tert-ブトキシカルボニル、ｐ−メトキシベンジルオキシカルボニルなどが用いられる。
【００１２】
「置換されていてもよいＣ6-10アリール−メチル基」としてはたとえば、ハロゲン、ニトロ、Ｃ1-6アルキル、Ｃ1-6アルコキシなどから選ばれた１〜３個の置換基で置換されていてもよいＣ6-10アリール−メチル基が用いられ、具体的にはたとえば、ベンジル、ナフチルメチル、ｐ−メチルベンジル、ｐ−メトキシベンジルなどが用いられる。「置換されていてもよいジＣ6-10アリール−メチル基」としてはたとえば、ハロゲン、ニトロ、Ｃ1-6アルキル、Ｃ1-6アルコキシなどから選ばれた１〜３個の置換基で置換されていてもよいジＣ6-10アリール−メチル基が用いられ、具体的にはたとえば、ベンズヒドリル、ジ（ｐ−トリル）メチルなどが用いられる。「置換されていてもよいトリＣ6-10アリール−メチル基」としてはたとえば、ハロゲン、ニトロ、Ｃ1-6アルキル、Ｃ1-6アルコキシなどから選ばれた１〜３個の置換基で置換されていてもよいトリＣ6-10アリール−メチル基が用いられ、具体的にはたとえば、トリチル、トリ（ｐ−トリル）メチルなどが用いられる。「置換されていてもよいＣ6-10アリール−メチレン基」としてはたとえば、ハロゲン、ニトロ、Ｃ1-6アルキル、Ｃ1-6アルコキシなどから選ばれた１〜３個の置換基で置換されていてもよいＣ6-10アリール−メチレン基が用いられ、具体的にはたとえば、ベンジリデン、ｐ−メチルベンジリデン、ｐ−クロロベンジリデンなどが用いられる。
【００１３】
「置換シリル基」は保護されるアミノ基といっしょになって式Ｒ1Ｒ2Ｒ3ＳiＮＨ−、(Ｒ1Ｒ2Ｒ3Ｓi)2Ｎ−または
【化７】
0004656798.tif 000006
〔式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ4aおよびＲ5aはそれぞれＣ1-6アルキル基またはＣ6-10アリール基を、QはＣ1-3アルキレン基（メチレン、エチレン、プロピレンなど）を示す〕で表わされる基を形成する。「置換シリル基」の好ましい例としてはたとえば、トリメチルシリル、tert−ブチルジメチルシリル、−Ｓi(ＣＨ3)2ＣＨ2ＣＨ2Ｓi(ＣＨ3)2−などが用いられる。Ｍで示される「アルカリ金属」としてはたとえば、ナトリウム、カリウムなどが好ましく、特にナトリウムなどが好ましい。Ｒとしてはホスノホノアミノ基、ホルミルアミノ基、アミノ基などが好ましい。
【００１４】
化合物（I)は前記▲１▼、▲２▼および▲３▼を混合して溶液とし、この溶液から晶出等通常の単離手段を用いて単離することによって製造することができる。▲１▼、▲２▼および▲３▼の混合順序はいずれの順序であってもよい。例えば、まず▲１▼と▲２▼とを混合しこれを▲３▼と混合してもよく、▲１▼と▲３▼とを混合しこれを▲２▼と混合してもよく、あるいは▲２▼と▲３▼とを混合しこれを▲１▼と混合してもよい。反応温度は、−４０℃から６０℃であり、好ましくは０℃から３０℃である。反応時間は、２０分から９６時間であり、好ましくは１２時間から３０時間である。
結晶化させる場合の溶媒▲２▼と水▲３▼との混合割合は、▲２▼と▲３▼との容量比が通常１：０．１ないし１０、好ましくは１：０．５ないし５、特に好ましくはおよそ１：１である。結晶化させる場合の▲１▼に対する▲２▼および▲３▼の使用量は、結晶化する範囲内であれば特に限定されないが、通常、▲１▼１重量部に対し▲２▼および▲３▼の総量が２ないし１００重量部であり、好ましくは５ないし１００重量部、さらに好ましくは１０ないし５０重量部である。結晶化は前記の溶液を冷却したり、減圧により▲２▼および▲３▼の量を減らしたりするなど、また種結晶を添加するなどの結晶化手段をとることにより行うことができる。
【００１５】
このようにして得られた化合物（I)は、通常の分離手段（例えば濾過、遠心分離など）により溶液から分離し、通常の精製手段（例えば溶媒などによる洗浄）により精製することができる。
このようにして得られる化合物（I)（特にその結晶）は例えば高純度であり、また固体安定性等に優れ長期間保存が可能であるため、医薬製剤に用いることができる。
化合物（I)の結晶は、乾燥の程度により、水の含有量を変えることができ、前記のように水を含まないものも本発明の範囲に含まれる。
化合物（I)は、優れた抗菌力を有しており、また、スペクトルの広い抗菌活性を有し、毒性が低いので人および哺乳動物（例、マウス、ラット、ウサギ、犬、ネコ、牛、豚等）における病原性細菌により生ずる種々の疾病、例えば気道感染、尿路感染の予防ならびに治療のため安全に使用されうる。抗菌剤として化合物（I)を使用する場合に対象となる菌は、化合物（I)が抗菌活性を示す菌であれば特に限定されず、広範囲のグラム陽性菌およびグラム陰性菌がその対象となるが、特に、ブドウ球菌、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）およびシュードモナス属の菌に優れた抗菌作用を示す。
また化合物（I)（特にその結晶）は、優れた安定性を有し、公知のペニシリン剤、セファロスポリン剤と同様に投与することができる。
なお、本発明の医薬組成物および抗菌組成物は、化合物（I)単独であってもよく、通常薬剤に用いられる担体（例えば注射剤の場合は、溶解液および溶解補助剤、ｐＨ調節剤）などが含まれていてもよい。
【００１６】
本発明化合物および組成物は、常法により医薬製剤に製剤化できる。
注射剤として投与する場合、その投与量は、例えば前記したような病原性細菌に感染した人および動物の体重１kgあたり化合物（I)として通常０.３〜８０mg／日、より好ましくは１〜４０mg／日であり、通常１日２〜３回に分割して投与される。
注射剤として用いる場合、通常、化合物（I）の結晶と溶解液（例えば、蒸留水、生理食塩水、5％ブドウ糖液など）とを別個に包装して提供し、用時に化合物（I）の結晶を溶解液に溶解して投与する。また、化合物（I）は補液等の医療用点滴剤と共に混合して投与することも可能である。このような注射剤としては、通常、ｐＨ調節剤（例えばアルカリ金属もしくはアルカリ土類金属の炭酸塩、リン酸塩、酢酸塩、クエン酸塩（例えば、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム、炭酸カルシウムなどの炭酸塩、リン酸三ナトリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素二カリウム、リン酸二水素カリウム、リン酸一水素カルシウム、リン酸二水素カルシウムなどのリン酸塩、酢酸ナトリウム、酢酸カリウム、酢酸カルシウムなどの酢酸塩、クエン酸二ナトリウム、クエン酸ナトリウム、クエン酸二水素ナトリウム、クエン酸カルシウムなどのクエン酸塩など）；塩基性アミノ酸類（例えばＬ−アルギニン、Ｌ−リジンなど）；またはＮ−メチルグルカミンなどが用いられ、中でも、アルカリ金属もしくはアルカリ土類金属の炭酸塩および塩基性アミノ酸類などが好ましい）を含有しているものが好ましい。これらのｐＨ調節剤は用時における注射溶液のｐＨが４から１０になるような量、好ましくは４．５から８．５になるような量、より好ましくは５．０から８．０になるような量、さらに好ましくは５．０から７．５になるような量で用いられる。これらのｐＨ調節剤は、通常、溶解液に溶かした状態で包装されるが、化合物（I)の結晶と混合して包装しておいてもよく、また化合物（I)の結晶および溶解液とは別に包装して提供し、用時三者を混合して用いてもよい。さらに、前記注射剤は、還元性を有する溶解補助剤を添加することにより、用時における注射剤溶液の安定性を高めることができる。還元性を有する溶解補助剤としては、例えば亜硫酸ナトリウム、ハイドロサルファイトナトリウム、亜硫酸水素ナトリウム、ピロ亜硫酸ナトリウム、Ｌ−システインなどが挙げられる。これらの還元剤は主薬に対し、通常０．００１当量〜２．０当量、好ましくは０．０１〜０．５当量、より好ましくは０．０５〜０．２当量用いられる。これらの還元性を有する溶解補助剤は、通常、溶解液に溶かした状態で包装されるが、化合物（I)の結晶と混合して包装しておいてもよく、ｐＨ調節剤と混合して包装しておいてもよく、また化合物（I)の結晶、ｐＨ調節剤および溶解液とは別に包装して提供し、用時これらを混合して用いてもよい。
注射剤製剤における、化合物（I)の結晶の含量は、８０から２０００ｍｇ、好ましくは１００から１０００ｍｇ、より好ましくは２００から８００ｍｇである。
注射剤における、溶解液の割合は、重量比で化合物（I)の結晶１に対し、１０〜５００、好ましくは２０〜３００である。またｐＨ調節剤の割合は化合物（I)１当量に対し通常１．０〜３．０当量である。
【００１７】
化合物（I)のうち、ｍが２である化合物ならびにその結晶が好ましい。より好ましくはｍが２であり、二水和物である化合物である。
粉末Ｘ線回折において、回折角５．９４、１４．１４、１７．９０、２１．３２、２３．６４°付近にピークを有する化合物が特に好ましい。前記回折角における「付近」とは、±０．２°を意味する。
また、本発明化合物（I)は前記のように抗菌剤として有用な化合物であるが、前記特開平１１−２５５７７２号公報記載の式
【化８】
0004656798.tif 000007
で表される3-[4-(1-メチル-4-ピリジニオ)-2-チアゾリルチオ]-7β-[2-(5-ホスホノアミノ-1,2,4-チアジアゾール-3-イル)-2(Z)-エトキシイミノアセトアミド]-3-セフェム-4-カルボキシレートの活性本体化合物として当該化合物の薬効評価に用いる標準品としても有用に使用することができる。
【００１８】
本発明方法で用いられる一般式
【化９】
0004656798.tif 000008
〔式中、Ｒは、保護されていてもよいアミノ基を示す。〕で表される化合物は、一般の有機合成手段を用いて合成することができるが、例えば前記特開平９−１００２８３号公報や前記特開平１１−２５５７７２号公報記載の方法で合成することができる。
【００１９】
【実施例】
本発明を下記の実施例でさらに詳しく説明するが、これらは単なる例示であって本発明を限定するものではなく、また本発明の範囲を逸脱しない範囲で変化させてもよい。
以下の参考例、実施例において、室温とは１０〜３０℃を意味する。
1H-NMRスペクトルはテトラメチルシラン(CDCl3,DMSO-d6)または3-(トリメチルシリル)プロピオン酸ナトリウム-2,2,3,3-d4(D2O)を内部標準とし、バリアン社Gemini-200(200MHz)を用いて測定し、全δ値を ppm で示した。
実施例中の記号は次のような意味である。
s      :シングレット(singlet)
d      :ダブレット(doublet)
t      :トリプレット(triplet)
q      :クワルテット(quartet)
ＡＢq   :ＡＢ型クワルテット(ＡＢ type quartet)
dd     :ダブル  ダブレット(doubledoublet)
m      :マルチプレット(multiplet)
Ｊ     :カップリング定数(coupling constant)
【００２０】
参考例１．  3-[4-(1-メチル-4-ピリジニオ)-2-チアゾリルチオ]-7β-[2-(5-ホスホノアミノ-1,2,4-チアジアゾール-3-イル)-2(Z)-エトキシイミノアセトアミド]-3-セフェム-4-カルボキシレート・一酢酸溶媒和物
3-[4-(1-メチル-4-ピリジニオ)-2-チアゾリルチオ]-7β-[2-(5-ホスホノアミノ-1,2,4-チアジアゾール-3-イル)-2(Z)-エトキシイミノアセトアミド]-3-セフェム-4-カルボキシレート100mg (0.151mmol) を注射用蒸留水 (0.5ml) と酢酸 (0.5ml) の混合液に懸濁し、超音波処理を行い溶解した。本溶液を室温で一夜静置した。析出した結晶をスパーテルで粉砕し、濾取した。注射用蒸留水 1.2ml で洗浄した。モレキュラーシーブズ3A (1/16) を乾燥剤として用いて、減圧下で恒量になるまで乾燥し、種結晶を得た。収量79mg(73%)。
融点：221〜223℃(分解)
AnalCalcd for C24H25N8O10S4P・1.0H2O: C 37.79, H 3.57, N 14.69,P 4.06. Found: C 37.97, H 3.30, N 14.37, P 3.88.
1H-NMR (DMSO-d6) δ: 1.24 (3H,t,J=7Hz), 1.91 (3H,s), 3.58,3.95 (2H,ABq,J=17Hz), 4.17 (2H,q,J=7Hz), 4.34 (3H,s), 5.32 (1H,d,J=5Hz), 5.92(1H,dd,J=5&8Hz), 8.51 (2H,d,J=6Hz), 8.99 (3H,m), 9.30 (1H,m), 9.70(1H,d,J=8Hz).
IR (KBr) cm-1: 3202, 1755, 1668,1645, 1537, 1392, 1273, 1039.
【００２１】
実施例１．  7β-[2-(5-アミノ-1,2,4-チアジアゾール-3-イル)-2(Z)-エトキシイミノアセトアミド]-3-[4-(1-メチル-4-ピリジニオ)-2-チアゾリルチオ]-3-セフェム-4-カルボキシレート・二塩酸
3-[4-(1-メチル-4-ピリジニオ)-2-チアゾリルチオ]-7β-[2-(5-ホスホノアミノ-1,2,4-チアジアゾール-3-イル)-2(Z)-エトキシイミノアセトアミド]-3-セフェム-4-カルボキシレート・一酢酸溶媒和物2.0 g (2.69 mmol) を6N塩酸 30 mlとエタノール 30 mlの混合液に溶解し、室温で20時間攪拌した。氷冷下で15分間攪拌した後、30分間静置した。析出した結晶を濾取し、エタノール20mlで洗浄後、減圧下で乾燥し、表記化合物を得た。収量 1.22 g (67%)。
Anal Calcd forC22H22N8O5S4Cl2・2.0H2O: C 37.03, H 3.67, N 15.70, Cl 9.94. Found: C 37.16, H 3.81, N15.70, Cl 9.70.
1H-NMR(DMSO-d6) δ: 1.24 (3H,t,J=7Hz), 3.60, 4.00 (2H,ABq,J=18Hz), 4.17 (2H,q,J=7Hz), 4.34 (3H,s), 5.35 (1H,d,J=5Hz),5.96 (1H,dd,J=5&8Hz), 8.20 (2H,brs), 8.57 (2H,d,J=7Hz), 9.02 (2H,d,J=7Hz), 9.08 (1H,s), 9.70 (1H,d, J=8Hz).
IR (KBr) cm-1:3264, 1755, 1674, 1645, 1556, 1537, 1456, 1373, 1300, 1045.
【００２２】
実施例２．  7β-[2-(5-アミノ-1,2,4-チアジアゾール-3-イル)-2(Z)-エトキシイミノアセトアミド]-3-[4-(1-メチル-4-ピリジニオ)-2-チアゾリルチオ]-3-セフェム-4-カルボキシレート・二塩酸
3-[4-(1-メチル-4-ピリジニオ)-2-チアゾリルチオ]-7β-[2-(5-ホスホノアミノ-1,2,4-チアジアゾール-3-イル)-2(Z)-エトキシイミノアセトアミド]-3-セフェム-4-カルボキシレート2.0 g (2.92 mmol) を6N塩酸 50 mlとエタノール 50 mlの混合液に溶解し、室温で20時間攪拌した。析出した結晶を濾取し、エタノール20mlで洗浄後、減圧下で乾燥し、表記化合物を得た。収量 1.09 g (55%)。実施例１と同様のスペクトルデータを与えた。
【００２３】
実施例３．  7β-[2-(5-アミノ-1,2,4-チアジアゾール-3-イル)-2(Z)-エトキシイミノアセトアミド]-3-[4-(1-メチル-4-ピリジニオ)-2-チアゾリルチオ]-3-セフェム-4-カルボキシレート・二塩酸
3-[4-(1-メチル-4-ピリジニオ)-2-チアゾリルチオ]-7β-[2-(5-ホスホノアミノ-1,2,4-チアジアゾール-3-イル)-2(Z)-エトキシイミノアセトアミド]-3-セフェム-4-カルボキシレート・一酢酸溶媒和物2.0 g (2.69 mmol) をエタノール 20 ml に懸濁し、氷冷下、濃塩酸 20 mlを加え溶解した。氷冷下で1時間、10℃で20時間攪拌した。氷冷下で1時間静置し、析出した結晶を濾取し、水6mlで洗浄後、減圧下で乾燥し、表記化合物を得た。収量 1.21 g (67%)。実施例１と同様のスペクトルデータを与えた。
【００２４】
試験例１．  安定性試験
実施例１で得られた7β-[2-(5-アミノ-1,2,4-チアジアゾール-3-イル)-2(Z)-エトキシイミノアセトアミド]-3-[4-(1-メチル-4-ピリジニオ)-2-チアゾリルチオ]-3-セフェム-4-カルボキシレート・二塩酸の結晶と、特開平９−１００２８３号公報の実施例１３に記載された方法で合成された無晶形の7β-[2-(5-アミノ-1,2,4-チアジアゾール-3-イル)-2(Z)-エトキシイミノアセトアミド]-3-[4-(1-メチル-4-ピリジニオ)-2-チアゾリルチオ]-3-セフェム-4-カルボキシレートの各試料10mgを無色ガラス瓶にとり，60℃下に保存したときの安定性について検討した（4週間まで）。各保存時点における含量は試料を移動相に溶かして10mLとした液を更に移動相で5倍に希釈することにより試料溶液とした。下記HPLC条件で分析し，イニシャル品（凍結保存）のピーク面積に対する試料のそれの比から求めた。
＊HPLC 条件
ディテクター:       UV254nm
カラム:             YMCProC18  150×4.6mm
移動層 A:           0.1mol/LAcONH4/MeCN (960:65)
移動層 B:           0.1mol/LAcONH4/MeCN (1:9)
グラジエント:       0→10min B:0%, 10→20min B;0→25%, 20→25min B: 25%
カラム温度:         40℃
流速:                       1mL/min
インジェクション量:           10μL
【００２５】
結果は下記の表１に示すとおり，無晶形は経時的に着色・分解傾向が認められたのに対し，2HCl結晶はほとんど分解は認められず安定であった。
【表１】
0004656798.tif 000009
【００２６】
【発明の効果】
本発明化合物は、優れた抗菌作用を有すとともに、純度、安定性（特に固体安定性）、保存性、取扱い易さ等の医薬品としての品質に優れており、抗菌剤として非常に有用である。
【図面の簡単な説明】
【図１】実施例１で得られた化合物の粉末X線回折スペクトル（Ｃｕ，４０ｋＶ、５０ｍＡ）である。横軸は回折角（２θ）、縦軸はピーク強度を示す。
【図１】
0004656798.tif 000012