(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の一般式Ｉ：
【化１】
0004825386.tif 000008
［式中、
点線は場合により結合を表し；
Ｙは、水素、ハロゲン、（Ｃ１−６）アルキル（該アルキルは、１つまたはそれ以上のハロゲンで置換されてもよい）、（Ｃ１−６）アルキルオキシ（該アルキルオキシは、１つまたはそれ以上のハロゲン、または、（Ｃ３−６）シクロアルキルで置換されていてもよい）、（Ｃ２−６）アルケニルオキシ、（Ｃ２−６）アルキニルオキシ、（Ｃ３−６）シクロアルキルオキシ、（Ｃ６−１２）アリールオキシ、アリールアルキルオキシ、ヘテロアリールオキシ、ヘテロアリールアルキルオキシ、ＳＲ３、ＮＲ３Ｒ４、ＯＳＯ２Ｒ５、及びＮＲ３ＳＯ２Ｒ４から独立に選択される１から４個の置換基を表し；
２つの置換基Ｙは、それらが一緒になって、Ｏ−（ＣＨ２）ｎ−Ｏ、または、Ｏ−（ＣＦ２）ｎ−Ｏ［式中、ｎは１または２である］を形成していてよく；または
Ｙは縮合（Ｃ５−６）アリール基を表し；
Ｘは、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、（Ｃ１−４）アルキルオキシ、ＳＲ３、ＮＲ３ＳＯ２Ｒ４、及び（Ｃ１−４）アルキルから独立に選択される１から３個の置換基を表し、前記置換基はハロゲンで置換されていてもよく；
Ｒ１は、水素、（Ｃ１−４）アルキル、または（Ｃ６−１２）アリールであり；
Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４は、独立に、水素または（Ｃ１−４）アルキルであり；
Ｒ５は、（Ｃ１−４）アルキル（該アルキルは、１つまたはそれ以上のハロゲンで置換されていてもよい）、または、（Ｃ６−１２）アリール（該アリールは、（Ｃ１−４）アルキルで置換されていてもよい）である］
で表されるスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］誘導体、あるいは、医薬的に許容可能なその塩。
【請求項２】
上記式中の点線が結合を表すことを特徴とする、請求項１に記載の一般式によるスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］誘導体。
【請求項３】
上記式中のＲ１及びＲ２が水素であることを特徴とする、請求項２に記載のスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］誘導体。
【請求項４】
上記式中のＹが、クロロ、ブロモ、（Ｃ１−４）アルキルオキシ、（Ｃ２−４）アルケニルオキシ、（Ｃ２−４）アルキニルオキシ、及びＮＲ３Ｒ４から選択される一つのパラ位の置換基、及び、ハロゲンの中から選択される１つまたは２つのメタ位の置換基を表すことを特徴とする、請求項３に記載のスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］誘導体。
【請求項５】
前記メタ位の置換基がフルオロであることを特徴とする、請求項４に記載のスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］誘導体。
【請求項６】
上記式中のＸが水素であることを特徴とする、請求項５に記載のスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］誘導体。
【請求項７】
治療に使用するための、請求項１から６のいずれか一項に記載のスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］誘導体。
【請求項８】
医薬的に許容可能な補助物質との混合物として、請求項１から６のいずれか一項に記載のスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］誘導体または医薬的に許容可能なその塩を含む薬剤組成物。
【請求項９】
中枢神経系におけるヒトＧｌｙ−Ｔ１輸送体によるグリシン輸送を選択的に抑制する活性を有する薬剤を製造するための、請求項１から６のいずれか一項に記載のスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］誘導体または医薬的に許容可能なその塩の使用。
【請求項１０】
精神分裂病、鬱病、痴呆、及び他の認識障害の治療または予防用の、または、アルツハイマー病、パーキンソン病、及びハンチントン病の神経変性疾患の治療または予防用の、または、痙縮、ミオクローヌス、及び癲癇と関わりを有する筋肉運動亢進症の治療または予防用の薬剤を製造するための、請求項１から６のいずれか一項に記載のスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］誘導体または医薬的に許容可能なその塩の使用。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］誘導体、それらの誘導体を含有する薬剤組成物、並びに、治療におけるこれらのスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］誘導体の使用に関するものである。
【０００２】
最も単純なα−アミノ酸であるグリシンは、哺乳類の中枢神経系（ＣＮＳ）において多くの重要な役割を担っている。アミノ酪酸（ＧＡＢＡ）と共に、グリシンは、リガンド依存性イオンチャンネルを通じて作用する、脊髄及び脳幹における主要なシナプス後部抑制性伝達物質である。グリシンとこれらの受容体との相互作用は、アルカロイドストリキニーネにより拮抗され得る。それ故、これらの受容体は、「ストリキニーネ感受性」グリシン受容体と呼ばれている。グリシン作動性の神経伝達は、視覚、聴覚、及び運動に関するシグナル伝達のプロセッシング及び制御において重要である。また、グリシンは、Ｎ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸（ＮＭＤＡ）受容体における、グルタミン酸塩と協同する必須の共アンタゴニストでもある。従って、グリシンは、ＣＮＳにおける主要な興奮性神経伝達物質であるグルタミン酸塩の作用を調節することにより、興奮性伝達で機能する。加えて、このアミノ酸は、一炭素原子単位（ｏｎｅ−ｃａｒｂｏｎ  ｕｎｉｔｓ）の交換を含む、ペプチド及びタンパク質の代謝においてある役割を演じている。
【０００３】
上述のいずれかのプロセスに対するグリシンの有効性の制御は、それらの機能に潜在的に影響を及ぼし、数多くの疾患及び病的状態を治療する手段を提供するであろう。代謝とは別に、ストリキニーネ感受性及びストリキニーネ非感受性グリシン受容体の近接領域における遊離グリシン濃度を制御する重要なプロセスの一つは、選択的高親和性グリシン輸送体の機能である。これらのタンパク質は、受容体のごく周辺のグリシン拡散を能動的に制限し、これにより、受容体活性化の空間的及び時間的な精度を維持することができる。その輸送体を介する神経細胞または神経膠細胞内への伝達物質の急速な封鎖は、次の放出に備えてグリシンを保存することにもなろう。
【０００４】
グリシン輸送体は、クローニングにより、２つの主要なクラス、ＧｌｙＴ−１とＧｌｙＴ−２があることが示されている。ＧｌｙＴ−１は比較的高いｍＲＮＡレベルを伴って脳で発現され、尾側領域で検出されており、グリア細胞内への局在が優勢的である。差別的なスプライシング及びエキソンの使用から生じるＧｌｙＴ−１の３種類のイソ型、１ａ、１ｂ、及び１ｃが、Ｋｉｍら（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｈａｒｍ．１９９４、４５、６０８−６１７）により同定されている。また、最近になって、さらにヒト・イソ型ＧｌｙＴ−１ｄのクローニング及び発現が、欧州特許出願第ＥＰ  ９５１５４３号（Ａｌｌｅｌｉｘ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，Ｉｎｃ．）で開示された。
【０００５】
免疫化学的研究に示されているように、ＧｌｙＴ−２の分布は、特に脊髄における抑制性「ストリキニーネ感受性」グリシン受容体の分布と密接に対応している。
【０００６】
グリシンのシナプスレベルを調節することにより、グリシン輸送体ＧｌｙＴ−１及びＧｌｙＴ−２は、それぞれ、ＮＭＤＡ受容体及びストリキニーネ−感受性グリシン受容体活性化に選択的に影響を及ぼすことが期待される。
【０００７】
それ故、グリシン輸送体の機能的活性を変化させる化合物は、組織のグリシンレベルに変化をもたらすものと考えられ、数多くの疾患状態の治療に有用であり得る。そのような疾患状態は、ＮＭＤＡ受容体の機能低下または機能過剰に関する症状、即ち、精神病、鬱病、痴呆、及び、注意不足障害等の他の形態における認識障害を含む。更に、ＮＭＤＡ受容体は、神経細胞死から生じる症状、及び、例えば卒中（頭部外傷）、アルツハイマー病、パーキンソン病、及びハンチントン病等の神経変性にも関している。ＧｌｙＴ−２またはＧｌｙＴ−１活性の抑制に由来する抑制性グリシン作動性伝達の増強は、痙縮、ミオクローヌス、及び癲癇と関わる筋肉の運動亢進症の治療に有用であると考えられる。また、脊髄のグリシンレベルを上昇させる化合物は、鎮痛特性も有しているものと考えられる。
【０００８】
Ｇｌｙ−Ｔ１またはＧｌｙ−Ｔ２輸送体を介するグリシン輸送を抑制する化合物は、上述で検討された神経学的及び神経精神科学的障害の治療に有用な化合物として、ＷＯ  ９７／４５１１５（ＴＲＯＰＨＩＸ  ＰＨＡＲＭ．ＩＮＣ．）、ＷＯ  ９７／４５４２３（ＴＲＯＰＨＩＸ  ＰＨＡＲＭ．ＩＮＣ．）、ＷＯ  ９９／３４７９０（ＡＬＬＥＬＩＸ  ＮＥＵＲＯＳＣＩＥＮＣＥ  ＩＮＣ．）、及びＷＯ  ００／０７９７８（ＡＫＺＯ  ＮＯＢＥＬ  Ｎ．Ｖ．）に開示されている。精神医学的及び神経学的障害の治療に適した更なる化合物に対するニーズ、特には選択的な薬理学的プロフィールを持った化合物に対するニーズが存在する。
【０００９】
今や、次の一般式Ｉ：
【００１０】
【化２】
0004825386.tif 000002
［式中、
点線は場合により結合を表しており；
Ｙは、水素、ハロゲン、（Ｃ１−６）アルキル（該アルキルは、１つまたはそれ以上のハロゲンで置換されていてもよく）、（Ｃ１−６）アルキルオキシ（該アルキルオキシは、１つまたはそれ以上のハロゲン、または、（Ｃ３−６）シクロアルキルで置換されていてもよく）、（Ｃ２−６）アルケニルオキシ、（Ｃ２−６）アルキニルオキシ、（Ｃ３−６）シクロアルキルオキシ、（Ｃ６−１２）アリールオキシ、（Ｃ７−１５）アリールアルキルオキシ、ヘテロアリールオキシ、ヘテロアリールアルキルオキシ、ＳＲ３、ＮＲ３Ｒ４、ＯＳＯ２Ｒ５、及びＮＲ３ＳＯ２Ｒ４から独立に選択される１から４個の置換基を表しており；
２つの置換基Ｙは、それらが一緒になって、Ｏ−（ＣＨ２）ｎ−Ｏ、または、Ｏ−（ＣＦ２）ｎ−Ｏ［式中、ｎは１または２である］を形成していてよく；または
Ｙは縮合（Ｃ５−６）アリール基を表しており；
Ｘは、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、（Ｃ１−４）アルキルオキシ、ＳＲ３、ＮＲ３ＳＯ２Ｒ４、及び（Ｃ１−４）アルキルから独立に選択される１から３個の置換基を表しており、その際前記の置換基はハロゲンで置換されていてもよく；
Ｒ１は、水素、（Ｃ１−４）アルキル、または（Ｃ６−１２）アリールであり；
Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４は、独立に、水素または（Ｃ１−４）アルキルであり；
Ｒ５は、（Ｃ１−４）アルキル（該アルキルは、１つまたはそれ以上のハロゲンで置換されていてもよく）、または、（Ｃ６−１２）アリール（該アリールは、（Ｃ１−４）アルキルで置換されていてもよい）である］
で表されるスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］誘導体、または、医薬的に許容可能なそれらの塩は、ヒトＧｌｙＴ−２輸送体と比べて、ヒトＧｌｙＴ−１輸送体によるグリシン輸送を選択的に抑制し、そして、精神分裂病、鬱病、痴呆、及び他の形態の認識障害、または、アルツハイマー病、パーキンソン病、及びハンチントン病等の神経変性疾患、または、痙縮、ミオクローヌス、及び癲癇と関わる筋肉の運動亢進症の治療または予防に使用し得ることが発見された。
【００１１】
化学式Ｉの定義において使用される場合、（Ｃ１−６）アルキルという用語は、ヘキシル、ペンチル、ネオペンチル（２，２−ジメチルプロピル）、ブチル、イソブチル、第三級ブチル、プロピル、イソプロピル、エチル、及びメチルのような１から６個の炭素原子を有する分枝鎖または直鎖状のアルキル基を意味している。同様に、（Ｃ１−４）アルキルという用語は、１から４個の炭素原子を有するアルキル基を指している。
【００１２】
（Ｃ１−６）アルキルオキシという用語における（Ｃ１−６）アルキルは、先に定義された通りの分枝状または非分枝状のアルキル基を意味している。この（Ｃ１−６）アルキルオキシ基は、１から３個のハロゲン、または、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、またはシクロヘキシルのような３から６個の炭素原子を有する環状アルキル基を意味する（Ｃ３−６）シクロアルキルで置換されていてよい。そのような置換（Ｃ１−６）アルキルオキシ基の例は、トリフルオロメチルオキシ、及びシクロプロピルメチルオキシである。
【００１３】
ハロゲンという用語は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩを意味している。ハロゲンがアルキル基における置換基である場合、Ｆが好適である。一つの好適なハロゲン置換アルキル基はトリフルオロメチルである。
【００１４】
（Ｃ２−６）アルケニルオキシという用語で使用されるもの等の（Ｃ２−６）アルケニルという用語は、エテニル（ビニル）、２−プロペニル（アリル）、イソプロペニル、及びブテニル等の２から６個の炭素原子を有する分枝鎖または直鎖状のアルケニル基を意味している。
【００１５】
（Ｃ２−６）アルキニルオキシという用語で使用されるもの等の（Ｃ２−６）アルキニルという用語は、プロパルギル等の２から６個の炭素原子を有する分枝鎖または直鎖状のアルキニル基を意味している。
【００１６】
化学式Ｉの定義において使用される場合、（Ｃ６−１２）アリールオキシという用語における（Ｃ６−１２）アリールは、フェニル、ナフチル、テトラヒドロナフチル、インデニル、またはビフェニル等の６から１２個の炭素原子を有する芳香族炭化水素基を意味している。これらの芳香族基は、ハロゲン、または、（Ｃ１−４）アルキルまたは（Ｃ１−４）アルキルオキシで置換されていてよく、ここで、（Ｃ１−４）アルキルは、先に与えられた意味を有しており、ハロゲンまたは（Ｃ１−４）アルキルオキシで置換されていてよい。
【００１７】
化学式Ｉの定義において使用される場合、（Ｃ７−１５）アリールアルキルという用語は、７個から１５個までの炭素原子を有するアリールアルキル基を意味しており、ここで、そのアルキル基及びアリール基は、それぞれ、先に定義された通りの（Ｃ１−６）アルキル基及び（Ｃ６−１２）アリール基である。ベンジル等のフェニル（Ｃ１−６）アルキル基は好適なアリールアルキル基である。
【００１８】
ヘテロアリールオキシという用語で用いられるもの等のヘテロアリールという用語は、例えばイミダゾリル、チエニル、ベンズチエニル、キノリニル、及びインドリルのような、Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される少なくとも一つのヘテロ原子を含み、６から１２個の炭素原子を有する置換または非置換芳香族基を意味している。そのヘテロアリール基は、アリール基に対してリストアップされたもの等の置換基を担持していてよい。
【００１９】
ヘテロアリールアルキル基は、Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される少なくとも一つのヘテロ原子を含む上述の（Ｃ７−１５）アリールアルキル基の類似体である。
【００２０】
化学式Ｉの定義において、Ｙは縮合（Ｃ５−６）アリール基を表すことができ、これは、Ｙが、そこにＸが付着されてナフタレン環またはインデン環のような（Ｃ１１−１２）芳香環系を形成するベンゼン環に縮合された５または６員の芳香環であることを意味している。
【００２１】
Ｒ１の定義に加え、化学式ＩにおけるＯ−Ｒ１基は、そこから遊離酸（Ｒ１は水素である）が発生（生体内で）され得る他のあらゆる基であってよい。更なるエステルまたはアミド誘導体等のそのような代替的な酸前駆物質またはプロドラッグは当技術分野において公知であり、それらも本発明の範囲内である。
【００２２】
化学式Ｉで表されるスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］誘導体、及びそれらの塩は、１つまたはそれ以上のステレオジェン中心を含んでいてよく、それ故、立体異性体として存在し得る。本発明は、これらの立体異性体をその範囲内に含み、その他、もう一方の鏡像異性体を実質的に含まない、即ち、もう一方の鏡像異性体の連合率が５％未満、好適には２％未満、特には１％未満の、化学式Ｉで表される化合物及びそれらの塩の鏡像異性体、及び、実質的に等量の２つの鏡像異性体を含有するラセミ混合物を含む、あらゆる割合におけるそのような立体異性体の混合物も本発明の範囲内に含まれる。
【００２３】
式中の点線がある結合を表す化学式Ｉのスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］誘導体が好適であり、更にＲ１及びＲ２が共に水素であるそれらの化合物がより好適である。
【００２４】
本発明の特に好適なスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］誘導体、及びそれらの塩は、式中の点線がある結合であり、Ｒ１及びＲ２が水素であって、更に、式中のＹが、クロロ、ブロモ、（Ｃ１−４）アルキルオキシ、（Ｃ１−４）アルケニルオキシ、（Ｃ１−４）アルキニルオキシ、及びＮＲ３Ｒ４から選択される一つのパラ位の置換基、及び、ハロゲンの中から選択され、その好適な選択がフルオロである１つまたは２つのメタ位の置換基を表す化学式Ｉの化合物に相当する。好適な置換パターンＹの特定の例は：３−フルオロ−４−メチル；３−フルオロ−４−クロロ；３−フルオロ−４−ジメチルアミノ；及び、３，５−ジフルオロ−４−ジメチルアミノ；である。特に好適なものは、式中のＹが、３−フルオロ−４−アルキルオキシ、特には３−フルオロ−４−ｎ−プロポキシ及び３−フルオロ−４−ｎ−ブトキシ、及び、３，５−ジフルオロ−４−アルキルオキシを表す化学式Ｉによる化合物である。
【００２５】
一般式Ｉで表されるスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］誘導体は、開始材料として、商業的に入手可能か、または、合成有機化学の当業者にとって公知の合成方法を利用して容易に得られる以下の化学式ＩＩ［式中のＸは先に定義された通りの意味を有している］の２’−ヒドロキシアセトフェノン誘導体を使用する、一連の反応を用いて調製することができる。この２’−ヒドロキシアセトフェノン誘導体ＩＩを、ピロリジンの存在下において、メタノール溶液中における１−メチル−４−ピペリドン［Ｒはメチルである；一つの代替的手段として、１−ベンジル−４−ピペリドン（Ｒはベンジルである）を使用することができ、このベンジル基は、上述のメチル基よりも容易に取り除かれることが多い（スキームＣ参照）］と縮合することにより、スキームＡに示されている通りの化学式ＩＩＩで表されるＮ−メチル−スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］−４（３Ｈ）−オン誘導体が生成される。
【００２６】
【化３】
0004825386.tif 000003
続いて、この化学式ＩＩＩのスピロ−ケト誘導体を、テトラヒドロフランのような適当な溶媒中において、スキームＢに示されているように、化学式ＩＶ［式中のＹは先に定義された通りの意味を有している］で表されるＧｒｉｇｎａｒｄ試薬で処理した後、酸で処理することにより、化学式Ｖの４−アリール−Ｎ−メチル−またはＮ−ベンジル−スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］誘導体が得られる。
【００２７】
【化４】
0004825386.tif 000004
代替的に、化学式Ｖによる化合物は、化学式ＩＩＩ［式中のＲは、Ｈ、メチル、またはベンジルである］のスピロ−ケト誘導体をエノールトリフラートＩＩＩ’’に転化し、続いて、フェニルボロン酸ＩＶ’’を用いるスズキカップリング反応を用いることにより調製することもできる（スキームＢ’’）。
【００２８】
【化５】
0004825386.tif 000005
１，３−ジクロロプロパンまたはジクロロメタン等の塩素化溶媒中におけるクロロギ酸１−クロロエチルを用いる化学式Ｖによる化合物のＮ−脱アルキル化により、化学式ＶＩの中間体４−アリール−スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］誘導体が生成され、続いて、この中間体を、ＨａｌＣＨ２Ｒ２−ＣＯＯＲ１［式中、Ｒ１は（Ｃ１−４）アルキルまたは（Ｃ６−１２）アリールであってよく、Ｒ２は先に定義された通りの意味を有しており、そして、Ｈａｌはハロゲンを意味していて、好適にはブロモである］との反応でアルキル化することにより、スキームＣに示されている通りの化学式Ｉで表される４−アリール−スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］誘導体が与えられ、そのエステル官能基を加水分解することにより、化学式Ｉ［Ｒ１は水素である］の化合物を得ることができる。
【００２９】
【化６】
0004825386.tif 000006
化学式ＩＶで表される必要なＧｒｉｇｎａｒｄ試薬を商業的に入手できない場合には、標準的な手順（Ｔｈｅ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｇｒｉｇｎａｒｄ  Ｒｅａｇｅｎｔｓ、Ｇ．Ｓ．Ｓｉｌｖｅｒｍａｎ及びＰ．Ｅ．Ｒａｋｉｔａ編集、１９９６年、Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ）を用いて、関連するブロモアレーンから調製することができる。
【００３０】
本発明の化合物は、精神分裂病、鬱病、痴呆、及び他の形態の認識障害の治療、卒中または頭部外傷後の神経変性の治療または予防、アルツハイマー病、パーキンソン病、及びハンチントン病のような神経変性疾患の治療、痙縮、ミオクローヌス、及び癲癇と関わりを有する筋肉の運動亢進症の治療、痛み、情緒異常症、または学習障害の治療または予防に使用することができる。
【００３１】
本発明の化合物は、１つまたはそれ以上の立体中心を持っていてよく、従って、純粋な立体異性体として、または、立体異性体の混合物として得られ得る。純粋な立体異性体が得られる不斉合成のための方法は、キラル導入、エナンチオ選択性の酵素的エステル加水分解、光学的に活性な酸とラセミ混合物から得られる塩の結晶化、キラル媒質でのクロマトグラフィー、または、順相または逆相クロマトグラフィー媒質でのクロマトグラフィーを用いる立体異性体または鏡像異性体の分離等、当技術分野で周知である。そのような方法は、例えば、Ｃｈｉｒａｌｉｔｙ  ｉｎ  Ｉｎｄｕｓｔｒｙ（Ａ．Ｎ．Ｃｏｌｌｉｎｓ、Ｇ．Ｎ．Ｓｈｅｌｄｒａｋｅ、及びＪ．Ｃｒｏｓｂｙ編集、１９９２年；Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ）で説明されている。
【００３２】
化学式Ｉで表される化合物の医薬的に許容可能な塩は、化学式Ｉによる化合物の遊離塩基を、塩酸、リン酸、硫酸等の鉱酸、好適には塩酸で処理するか、または、例えばアスコルビン酸、クエン酸、酒石酸、乳酸、マロン酸、フマル酸、グリコール酸、コハク酸、プロピオン酸、酢酸、及びメタンスルホン酸等の有機酸で処理することにより得ることができる。
【００３３】
式中のＲ１が水素である化学式Ｉで表される化合物の医薬的に許容可能な塩は、その酸または双性イオン形のそれらの化合物を、有機塩基、または、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、または水酸化リチウムのようなミネラル塩基で処理することにより得ることができる。
【００３４】
更なる態様では、本発明は、医薬的に許容可能な補助物質との混合物において、一般式Ｉで表されるスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］誘導体または医薬的に許容可能なその塩を含む薬剤組成物を提供する。
【００３５】
本発明に従って使用するための薬剤組成物は、医薬的に許容可能な補助物質、及び、場合により、他の治療薬との混合物において、化学式Ｉで表されるスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］誘導体または医薬的に許容可能なその塩を含んでいる。「許容可能な」という用語は、その組成物に含まれている他の成分と適合し、且つ、それの受納者にとって有害でないことを意味している。それらの組成物は、例えば、標準的な基準であるＧｅｎｎａｒｏらによるＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（第１８版、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ、１９９０年、特に第８部：薬剤調製物及びそれらの製造方法（Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  Ｔｈｅｉｒ  Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｅ）を参照のこと）に記載されているもの等の標準的な技術に従って調製することができる。
【００３６】
それらの組成物は、例えば、すべて一回量投与形態における、経口投与、舌下投与、鼻腔内投与、皮下投与、静脈内投与、筋肉内投与、局所投与、または直腸投与等に適した組成物を含む。
【００３７】
経口投与の場合、その活性成分は、錠剤、カプセル剤、粉末剤、顆粒剤、溶液剤、及び懸濁液剤等の個別的ユニットとして提供されてよい。
【００３８】
非経口投与の場合、本発明の薬剤組成物は、例えば密封されたバイアル及びアンプル等、予め定められた量の例えば注射液を含有する一回量または多回量容器に入った形態で提供されてよく、また、使用する前に例えば水等の無菌の液状担体を付加するだけでよい凍結乾燥状態で保管することもできる。
【００３９】
本発明の化合物は、体重１ｋｇ当たり０．００１から５０ｍｇの用量で、好適には体重１ｋｇ当たり０．０１から２０ｍｇの用量でヒトに投与されてよい。
【００４０】
本発明は、更に、上文にて説明した通りの薬剤組成物をその組成物に適した包装材料と組み合わせた態様をも含み、上述の包装材料は、上文にて説明した通りの使用法に関するその組成物の使用指示書を含んでいる。
【００４１】
次に、本発明を以下の実施例により例証する。
【００４２】
一般的事項：
すべての質量分析は、ＰＥ  ＳＣＩＥＸ  ＡＰＩ  １５０ＥＸ、またはＰＥ  ＳＣＩＥＸ  ＡＰＩ３６５装置のいずれかで実施された。融点は補正されておらず、Ｌｅｉｃａ  Ｇａｌｅｎ  ＩＩＩ装置、またはＬｅｉｃａ  ＶＭＨＢ  Ｓｙｓｔｅｍ  Ｋｏｆｌｅｒのいずれかを用いて決定された。
【００４３】
実施例１
１’−カルボキシメチル−７−メトキシ−４−フェニルスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩
ステップＡ：７−メトキシ−Ｎ−メチルスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］−４（３Ｈ）−オン
乾性窒素雰囲気下の無水メチルアルコール（６０ｃｍ３）中における２−ヒドロキシ−４−メトキシアセトフェノン（４．０８ｇ、２４．５８ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、１−メチル−４−ピペリジノン（３ｃｍ３、２４．５８ｍｍｏｌ）、続いて、ピロリジン（４ｃｍ３、４７．９２ｍｍｏｌ）を加え、その溶液を加熱して還流させた。７時間後、更なる部分の１−メチル−４−ピペリジノン（０．６ｃｍ３、４．７６ｍｍｏｌ）を加え、その混合物を加熱して更に４．５時間還流させた。次いで、室温にまで冷却した後、その揮発性フラクションを減圧下で除去した。結果として得られたオイルをジクロロメタン（１００ｃｍ３）で処理し、水（５×１００ｃｍ３）で洗い、無水硫酸ナトリウムで乾燥させることにより、暗色の粘性オイル（６．３３ｇ、２４．２５ｍｍｏｌ）が得られ、このオイルは、長時間放置しておくと部分的に結晶化した。
【００４４】
ステップＢ：７−メトキシ−Ｎ−メチル−４−フェニル−スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］
無水窒素雰囲気下の無水テトラヒドロフラン（８０ｃｍ３）中における７−メトキシ−Ｎ−メチルスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］−４（３Ｈ）−オン（６．１９ｇ、２３．７２ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、テトラヒドロフラン中における臭化フェニルマグネシウムの溶液（４０ｃｍ３、１．０Ｍ、４０ｍｍｏｌ）を、その反応温度を３０℃以下に維持しながら滴状にて加えた。上述の付加の終了後、その反応液を室温で２．５時間攪拌したが、その時点では反応が不完全であり、Ｇｒｉｇｎａｒｄ試薬は存在しなかった。その反応液に更なる部分の臭化フェニルマグネシウム（１３．３ｃｍ３）を慎重に加え、一晩攪拌した。水（３０ｃｍ３）を加え、続いて、飽和塩化アンモニウム水溶液（３０ｃｍ３）を加えた。真空下でそれらの揮発性フラクションを除去した後、結果として得られた材料をジエチルエーテル（１００ｃｍ３）及び水（１００ｃｍ３）で処理した。結果として生じた有機層を分離した後、その水性部分をジエチルエーテル（２×１００ｃｍ３）で更に抽出した。それらを合わせた抽出液を水（３×１００ｃｍ３）で洗い、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下でそのエーテルを除去した。得られた残分を少量のジエチルエーテルと共に粉砕し、結果として得られた結晶を真空濾過により単離した（４．５７ｇ、１２．１５ｍｍｏｌ、５１％）。次いで、この固形物をエチルアルコール（７５ｃｍ３）中に溶解し、塩酸（７５ｃｍ３、２Ｎ）で処理した後、加熱して１．５時間還流させた。その溶液を、固形物が結晶化し始めるまで、減圧下で濃縮した。次いで、その混合物を冷却し、その固形物を真空濾過により単離した。その後、これを、水（３００ｃｍ３）、飽和重炭酸カリウム水溶液（５０ｃｍ３）、及びジエチルエーテル（６５０ｃｍ３）の混合液で処理し、振とうした。結果として生じた水性層を分離し、ジエチルエーテル（２×１００ｃｍ３）で抽出した後、それらを合わせた抽出液を水（３×２５０ｃｍ３）で洗い、硫酸ナトリウムで乾燥させ、それらの揮発性フラクションを真空下で除去することにより、標記の化合物（３．９１ｇ、１２．１８ｍｍｏｌ、ケトンから５１％）を得た。
【００４５】
ステップＣ：７−メトキシ−４−フェニルスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］
無水１，２−ジクロロプロパン（１５０ｃｍ３）中における７−メトキシ−Ｎ−メチル−４−フェニルスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］（３．７６ｇ、１１．７１ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に炭酸カリウム（４．０４ｇ、２９．２３ｍｍｏｌ）を加え、結果として得られた懸濁液を氷浴中で冷却した後、クロロギ酸１−クロロエチル（１．５８ｃｍ３、１４．６４ｍｍｏｌ）を滴下させながら加えて処理した。その反応混合物を加熱して一晩還流させ、更なる部分のクロロギ酸１−クロロエチル（０．８ｃｍ３、７．４ｍｍｏｌ）を加えた後、それを加熱して更に２４時間還流させた。冷却直後、その反応混合物を綿毛で濾過し、続いて、ジクロロメタン（５０ｃｍ３）で洗浄後、それらの揮発性フラを真空下で除去した。結果として得られた中間体をメチルアルコール（２００ｃｍ３）で処理し、その混合物を加熱して一晩還流させた。冷却直後、それらの揮発性フラクションを真空下で除去後、結果の固形物を、ジクロロメタン（１５０ｃｍ３）と炭酸ナトリウム水溶液（５％、３０ｃｍ３）の混合液に溶解した。結果として生じた有機層を分離し、水（２×５０ｃｍ３）で洗い、硫酸ナトリウムで乾燥させ、その溶媒を真空下で除去することにより、ゴム状物質として標記化合物（３．９３ｇ）を得た。
【００４６】
ステップＤ：エチル７−メトキシ−４−フェニルスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］−１’−アセタート
無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（７５ｃｍ３）中における７−メトキシ−４−フェニルスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］（３．８５ｇ、１２．５４ｍｍｏｌ）の溶液に、炭酸カリウム（４．３２ｇ、３１．３０ｍｍｏｌ）、続いて、ブロモ酢酸エチル（１．３９ｃｍ３、１２．５３ｍｍｏｌ）を加え、その混合物を窒素下で２時間１００℃に加熱した。結果として得られた混合物を水（６００ｃｍ３）中に注ぎ、酢酸エチル（３×１５０ｃｍ３）で抽出した。それらを合わせた有機性抽出液を水（３×３００ｃｍ３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、それらの揮発性フラクションを真空下で除去した。この粗生成物をカラムクロマトグラフィー（シリカ、ジクロロメタン−酢酸エチル−９：１から４：１までで溶出）で精製することにより、標記の純粋なエチルエステルを得た（３．５１ｇ、７１％）。
【００４７】
ステップＥ：エチル７−メトキシ−４−フェニルスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］−１’−アセタート（３．３８ｇ、８．６０ｍｍｏｌ）、エチルアルコール（２５０ｃｍ３）、及び水酸化リチウム水溶液（２Ｎ、６．４４ｃｍ３、１２．８８ｍｍｏｌ）の混合物を加熱して３．５時間還流させた。冷却直後、その混合物を塩酸（５Ｎ、７０ｃｍ３）で処理し、そして、沈殿が始まるまで、幾分かのエチルアルコールを除去した。次いで、結晶化が完了するまで、上述の混合物を４℃に冷却した。その固形物を真空濾過で分離することにより、白色の固体として標記生成物を得た（融点１９５から２３０℃、陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋３６６．４）。
【００４８】
適切な化学式ＩＩ（スキームＡ）の２’−ヒドロキシアセトフェノン誘導体及び化学式ＩＶ（スキームＢ）のＧｒｉｇｎａｒｄ試薬を用いる同様な仕方で以下の化合物を調製した：
実施例２：
１’−カルボキシメチル−４−（４−クロロフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（融点２５９から２６５℃；陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋３７０．０）。
【００４９】
実施例３：
リチウム４−（４−フルオロフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］−１’−アセタート
このリチウム塩は、上述のエチルエステルの加水分解が１．０２モル当量の水酸化リチウム水溶液（２．０Ｎ）を用いて行われた点と、その反応が完了したときにそれらの揮発性フラクションを真空下で除去した点を除き、実施例１（ステップＥ）で説明された手順と類似の手順で調製された（融点２８５から２９１℃（分解）；陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋３５４．２）。
【００５０】
実施例４：
１’−カルボキシメチル−４−（４−メチルフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（融点２４７から２４９℃；陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）−３５２．２）。
【００５１】
実施例５：
リチウム６−フルオロ−４−フェニルスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］−１’−アセタート（融点２９３から２９８℃（分解）；陰イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋３５４．２）。
【００５２】
実施例６：
１’−カルボキシメチル−６−メチル−４−フェニルスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（融点２４０から２４４℃；陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋３５０．２）。
【００５３】
実施例７：
１’−カルボキシメチル−７−フルオロ−４−フェニルスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（融点２３７から２４２℃；陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋３５４．２）。
【００５４】
実施例８：
１’−カルボキシメチル−４−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（融点２６３から２７４℃；陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋３８８．２）。
【００５５】
実施例９：
１’−カルボキシメチル−４−（１−ナフチル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（融点２３７から２５２℃；陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋３８５．９）。
【００５６】
実施例１０：
１’−カルボキシメチル−４−（２−ナフチル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（融点２５３から２６４℃；陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋３８６．２）。
【００５７】
実施例１１：
１’−カルボキシメチル−４−（３−フルオロ−４−メトキシフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（融点２５２から２６１℃；陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋３８４．２）。
【００５８】
実施例１２：
１’−カルボキシメチル−４−（４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋３９２．２）。
【００５９】
実施例１３：
１’−カルボキシメチル−４−（３−フルオロフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋３５４．４）。
【００６０】
実施例１４：
４−（１，３−ベンゾジオキソロ）−１’−カルボキシメチルスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（融点２６０から２６５℃；陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋３８０．４）。
【００６１】
実施例１５：
１’−カルボキシメチル−４−（３，４−ジメチルフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（融点２２４から２３４℃；陽イオンＥＳＩ（Ｍ−Ｈ）−３６１．９）。
【００６２】
実施例１６：
１’−カルボキシメチル−４−（３，４−ジクロロフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋４０４．０）。
【００６３】
実施例１７：
１’−カルボキシメチル−４−（３，４−ジメトキシフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋３９６．２）。
【００６４】
実施例１８：
１’−カルボキシメチル−４−（３，４，５−トリフルオロフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（融点２４２から２５０℃；陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋３９０．１）。
【００６５】
実施例１９：
１’−カルボキシメチル−７−フルオロ−４−（４−メチルフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（融点１５３から１６３℃；陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋３６８．０）。
【００６６】
実施例２０：
１’−カルボキシメチル−４−（４−メトキシフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（陽イオンＥＳＩ（Ｍ−Ｈ）−３９９．６）。
【００６７】
実施例２１：
１’−カルボキシメチル−４−（３−クロロフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋３７０．２）。
【００６８】
実施例２２：
１’−カルボキシメチル−４−（３−メトキシフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋３６６．４）。
【００６９】
実施例２３：
１’−カルボキシメチル−４−（３−メチルフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋３５０．０）。
【００７０】
実施例２４：
１’−カルボキシメチル−４−［４−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）フェニル］スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩
この化合物は、最終ステップＥにおける上述の加水分解反応が１．５当量の水酸化ナトリウム水溶液（１Ｍ）を用いて実施された点を除き、実施例１で概説された方法に従って調製された。その反応が完了したときに、殆どのエチルアルコールを除去し、結果として生じた結晶を濾過により収集した。この固形物を、室温において、過剰量のメタノール性塩化水素で１時間処理した。そのメチルアルコールを真空下で除去し、得られた生成物を２−プロパノール−メタノール（１：１）で処理した後、その生成物が沈殿するまで、ジエチルエーテルを滴下させながら加えた。その沈殿物を濾過により単離し、乾燥させた（融点２３８から２５０℃；陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋３７９．４）。
【００７１】
実施例２５：
１’−カルボキシメチル−４−（４−エチルフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋３６４．４）。
【００７２】
実施例２６：
４−（４−ビフェニル）−１’−カルボキシメチルスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋４１２．２）。
【００７３】
実施例２７：
１’−カルボキシメチル−４−（４−フェノキシフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋４２８．２）。
【００７４】
実施例２８：
１’−カルボキシメチル−４−（３−フルオロ−４−メチルフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋３６８．２）。
【００７５】
実施例２９：
１’−カルボキシメチル−７−クロロ−４−フェニルスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋３７０．２）。
【００７６】
実施例３０：
１’−カルボキシメチル−６−クロロ−４−フェニルスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋３７０．２）。
【００７７】
実施例３１：
１’−カルボキシメチル−７−クロロ−４−（４−エチルフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋３９８．２）。
【００７８】
実施例３２：
１’−カルボキシメチル−７−クロロ−４−（４−プロピルフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋４１２．２）。
【００７９】
実施例３３：
１’−カルボキシメチル−４−（２，２−ジフルオロ−１，３−ベンゾジオキソロ）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（融点２４８から２５０℃；陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋４１６．２）。
【００８０】
実施例３４：
１’−カルボキシメチル−４−（２，３，５−トリフルオロフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（融点２０６から２１０℃；陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋３９０．４）。
【００８１】
実施例３５：
１’−カルボキシメチル−７−クロロ−４−（３−フルオロ−４−メチルフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋４０２．３）。
【００８２】
実施例３６：
１’−カルボキシメチル−４−（３，５−ジフルオロ−４−メトキシフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋４０２．２）
化学式ＩＶ（スキームＢ）によるＧｒｉｇｎａｒｄ試薬を調製するための開始材料である４−ブロモ−２，６−ジフルオロアニソールを、４−ブロモ−２，６−ジフルオロフェノールから調製した。無水アセトン（９８０ｃｍ３）中におけるそのフェノール（４９．０ｇ、２３４ｍｍｏｌ）の溶液に、ヨウ化メチル（２９．４ｃｍ３、４６８ｍｍｏｌ）、続いて、炭酸カリウム（８０．８５ｇ、５８５ｍｍｏｌ）を加えた。その攪拌混合物を加熱して２時間還流させた後、冷却させた。その固形物を濾過して取り除き、濾液を真空下で蒸発させた。得られた残分をジエチルエーテル（１０００ｃｍ３）中に溶解し、その溶液を水（３×３００ｃｍ３）で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）させ、そして、そのエーテルを真空下で除去することにより粗生成物が得られた。それ以上精製することなくその粗生成物を用いて所望のＧｒｉｇｎａｒｄ試薬を調製した（４９．４ｇ、２２２ｍｍｏｌ、９５％）。
【００８３】
実施例３７：
１’−カルボキシメチル−４−（４−ジメチルアミノ−３−フルオロフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（融点２３１から２３９℃；陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋３９７．４）。
【００８４】
実施例３８：
１’−カルボキシメチル−４−（３，５−ジフルオロ−４−ジメチルアミノフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（融点２３１から２４２℃；陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋４１５．０）。
【００８５】
実施例３９：
４−（４−ブロモ−３−フルオロフェニル）−１’−カルボキシメチルスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋４３２．５）。
【００８６】
実施例４０：
１’−カルボキシメチル−４−（３−ブロモ−４−メトキシフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋４４４．１）。
【００８７】
実施例４１：
１’−カルボキシメチル−４−（３，５−ジフルオロフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（融点２３０から２６４℃；陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋３７２．２）。
【００８８】
実施例４２：
１’−カルボキシメチル−４−（３，５−ジフルオロ−４−エトキシフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩：
ステップＡ：１’−カルボキシメチル−４−（３，５−ジフルオロ−４−ヒドロキシフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］臭化水素酸塩
酢酸（１５ｃｍ３）中におけるメチルエーテル（２．３５ｇ）と４７％臭化水素酸の混合物を１２０℃で４０時間攪拌した。結果として得られた懸濁液を氷浴中で冷却した後、水（３０ｃｍ３）を加えた。その固形物を濾過により取り除き、酢酸、続いて、水で洗った後、真空下で乾燥させた。
【００８９】
ステップＢ：エチル（３，５−ジフルオロ−４−ヒドロキシフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］−１’−アセタート
１’−カルボキシメチル−４−（３，５−ジフルオロ−４−ヒドロキシフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］臭化水素酸塩（１．７ｇ、上述のステップＡで説明されている通りに調製したもの）をエチルアルコール（１２０ｃｍ３）中における塩化水素の溶液に懸濁させ、その混合物を加熱して１６時間還流させた。冷却の直後、それらの揮発性材料を真空下で除去することにより固形の残分が得られ、これを、酢酸エチル（１００ｃｍ３）と水（１００ｃｍ３）及び飽和重炭酸カリウム水溶液（３０ｃｍ３）の化合物との間で分配した。その水性層を酢酸エチル（２×５０ｃｍ３）中に抽出した後、それらを合わせた抽出液を水（２×５０ｃｍ３）で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）させた。次いで、その粗材料を、溶離液として酢酸エチルを用いるシリカで濾過し、その後、その溶離液を蒸発させることにより固形の生成物（１．５４ｇ）を得た。
【００９０】
ステップＣ：エチル（３，５−ジフルオロ−４−エトキシフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］−１’−アセタート
エチル（３，５−ジフルオロ−４−ヒドロキシフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］−１’−アセタート（３５０ｍｇ）、炭酸セシウム（４１２ｍｇ）、及びヨウ化ナトリウム（１３ｍｇ）に、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（９ｃｍ３）、続いて、ヨードエタン（１．７モル当量）を加えた。結果として得られた混合物を攪拌しながら３時間６５℃に加熱した。冷却の直後、その反応液を酢酸エチル（９０ｃｍ３）で希釈した後、水（５×３５ｃｍ３）で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）させた。次いで、この粗材料の溶液をシリカパッドで濾過した後、その溶媒を真空下で除去することにより、均質な状態で標記生成物を得た。
【００９１】
ステップＤ：実施例１で説明されている手順に従って、エチル（３，５−ジフルオロ−４−エトキシフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］−１’−アセタートから１’−カルボキシメチル−４−（３，５−ジフルオロ−４−エトキシフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩を調製した（陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋４１６．５）。
【００９２】
また、この方法により、以下の化合物も調製した：
実施例４３：
１’−カルボキシメチル−４−（３，５−ジフルオロ−４−ｎ−プロポキシフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋４３０．３）。
【００９３】
実施例４４：
１’−カルボキシメチル−４−（３，５−ジフルオロ−４−ｎ−ブトキシフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋４４４．４）。
【００９４】
実施例４５：
１’−カルボキシメチル−４−（４−ベンジルオキシ−３，５−ジフルオロフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋４７８．０）。
【００９５】
実施例４６：
１’−カルボキシメチル−４−（３，５−ジフルオロ−４−イソ−ペンチルオキシフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（融点２１１から２１５℃；陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋４５８．５）。
【００９６】
実施例４７：
１’−カルボキシメチル−４−（４−エトキシ−３−フルオロフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋３９８．２）。
【００９７】
実施例４８：
１’−カルボキシメチル−４−（３−フルオロ−４−ｎ−プロポキシフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋４１２．０）。
【００９８】
実施例４９：
１’−カルボキシメチル−４−（３−フルオロ−４−ｎ−ブトキシフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋４２６．１）。
【００９９】
実施例５０：
１’−カルボキシメチル−４−（４−ベンジルオキシ−３−フルオロフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋４６０．３）。
【０１００】
実施例５１：
１’−カルボキシメチル−４−（３−フルオロ−４−イソ−ペンチルオキシフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋４４０．２）。
【０１０１】
実施例５２：
１’−カルボキシメチル−４−（３−フルオロ−４−メトキシエトキシフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋４２８．２）。
【０１０２】
実施例５３：
１’−カルボキシメチル−４−（３−フルオロ−４−イソ−ブチルオキシフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋４２５．８）。
【０１０３】
実施例５４：
１’−カルボキシメチル−４−［３−フルオロ−４−メトキシベンジルオキシ）フェニル］スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋４９０．０）。
【０１０４】
実施例５５：
４−（４−アリルオキシ−３，５−ジフルオロフェニル）−１’−カルボキシメチルスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩：
ステップＡ：Ｎ−ベンジル−４−（３，５−ジフルオロ−４−アリルオキシフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］
Ｎ−ベンジル−４−（３，５−ジフルオロ−４−ヒドロキシフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］（７５０ｍｇ、１．７９ｍｍｏｌ；実施例１及び４２で概要説明された手順に従って調製されたもの）、炭酸セシウム（１．１モル当量）、及び無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１５ｃｍ３）の混合物に臭化アリル（１．１モル当量）を滴下させながら加えた。室温で２時間攪拌すると、開始材料は残存していなかった。その反応混合物を酢酸エチル（５０ｃｍ３）で希釈し、水（１００ｃｍ３）で処理した後、その水性層を分離し、酢酸エチル（２×２５ｃｍ３）で再抽出した。それらを合わせた有機性抽出液を水（４×１００ｃｍ３）で洗浄した後、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）させ、それらの揮発性材料を真空下で除去することにより、標記の所望材料が高純度（６０％）で得られた。
【０１０５】
ステップＢ：４−（３，５−ジフルオロ−４−アリルオキシフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］
以下の点を除き、実施例１のステップＣに従って脱ベンジル化を実施した：溶媒としてジクロロメタン（特に乾燥されていない）を使用し、また、それらの反応は、不活性な雰囲気下では行われなかった。幾つかの実施例では、中間体カルバマートの分解は、メチルアルコールの存在下で加熱して還流させる方法では功を奏さなかった。そのようなケースでは、加熱して一晩還流させる方法と共に、過剰量の１０Ｎ水酸化カリウム水溶液の付加を必要とした。
【０１０６】
このポイント以降からは、実施例１で説明されている手順に従って、そのアミンを最終化合物に向けて順次転化した（融点２２１から２２５℃；陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋４２８．２）。
【０１０７】
実施例５６：
１’−カルボキシメチル−４−（３，５−ジフルオロ−４−イソ−プロピルオキシフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（融点２４１から２４３℃；陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋４３０．３）。
【０１０８】
実施例５７：
１’−カルボキシメチル−４−（３，５−ジフルオロ−４−プロパルギルオキシフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（融点２１１から２１７℃；陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋４２６．１）。
【０１０９】
実施例５８：
１’−カルボキシメチル−４−（３，５−ジフルオロ−４−シクロプロピルメトキシフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（融点２２５から２３１℃；陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋４４２．０）。
【０１１０】
実施例５９：
１’−カルボキシメチル−４−（３，５−ジフルオロ−４−トリフルオロエトキシフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（融点２４４から２５１℃；陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋４７０．２）。
【０１１１】
実施例６０：
１’−カルボキシメチル−４−（３−フルオロ−４−イソ−プロピルオキシフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（融点＞２６０℃；陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋４１２．４）。
【０１１２】
実施例６１：
１’−カルボキシメチル−４−（３−フルオロ−４−トリフルオロエトキシフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（融点２３０から２３５℃；陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋４５２．２）。
【０１１３】
実施例６２：
１’−カルボキシメチル−４−（３−フルオロ−４−フェノキシフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（融点１６０から１８０℃；陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋４４６．０）。
【０１１４】
実施例６３：
リチウム４−フェニルスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］−１’−アセタート（融点２８０から２８１℃；陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋３３６．２）。
【０１１５】
実施例６４：
リチウム４−（４−トリフルオロメチルフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］−１’−アセタート（陽イオンＥＳＩ（Ｍ−Ｌｉ＋２Ｈ）＋４０４．４）。
【０１１６】
実施例６５：
エチル４−（４−エチルフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］−１’−アセタート（融点１１９から１２１℃；陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋３９２．３）。
【０１１７】
実施例６６：
フェニル４−（４−エチルフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］−１’−アセタート（融点１０４から１０５℃；陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋４４０．３）。
【０１１８】
実施例６７：
１’−カルボキシメチル−４−（４−イソ−ペンチルオキシフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋４２２．０）。
【０１１９】
実施例６８：
ナトリウム［４−（２−ピリジノメチルオキシ）フェニル］スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］−１’−アセタート
塩化２−ピコリル塩酸塩を用いて、実施例４２に従って調製した。その最終的な加水分解は、水酸化ナトリウムを用いた点を除き、実施例１に従って実施された（陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋４４３．４）。
【０１２０】
実施例６９：
１’−カルボキシメチル−４−［４−（４−メチルフェニルスルホニルオキシ）フェニル］スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩
ステップＡ：１’−カルボキシメチル−４−［４−（４−メチルフェニルスルホニルオキシ）フェニル］スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］エチルエステル
エチル（４−ヒドロキシフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］−１’−アセタート（１８２ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ；実施例４２に従って調製されたもの）、ジクロロメタン（１３ｃｍ３）、及びピリジン（１５８ｍｇ、２．０ｃｍ３）の−５℃における攪拌混合物に、ジクロロメタン（１３ｃｍ３）中におけるｐ−トルエンスルホニルクロリド（２８８ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）の溶液を慎重に加えた。次いで、その反応液を周囲温度にまで上昇させ、更に２時間攪拌した後、その溶液を一晩放置した。その混合物に水（７ｃｍ３）を加え、１０分間攪拌した後、その溶媒を蒸発させることにより、ゴム状物質として生成物が得られ、このゴム状物質は、放置すると凝固した。これをスパチュラで破砕し、濾過して取り除き。水（２０ｃｍ３）で洗った。そのケークを吸引して殆ど乾燥させた後、６５℃において真空下で最終的に乾燥させることにより標記の生成物が得られた（３００ｍｇ）。（Ｍ＋Ｈ）＋＝５３４．２ｍ／ｚ。
【０１２１】
このエステルを、その加水分解がｎ−ブタノール中で実施される点を除き、実施例１で説明されている手順に従って加水分解した（陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋５０６．２）。
【０１２２】
実施例７０：
１’−カルボキシメチル−８−フルオロ−４−フェニルスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩
必要な開始材料である２’−ヒドロキシアセトフェノンを商業的に入手できない場合には、その開始材料を、以下で説明されているようにして調製することができよう：
ステップＡ：（２−フルオロフェニル）アセタート
２−フルオロフェノール（６０．０ｇ、５３５ｍｍｏｌ）と水酸化ナトリウム水溶液（４Ｎ、２１４ｃｍ３、８５６ｍｍｏｌ）の０℃における攪拌混合物に、無水酢酸（８１ｃｍ３、８５６ｍｍｏｌ）を滴下させながら加えた。その反応液を３０分間攪拌した後、その水性層を有機性部分から分離し、ジクロロメタン（１５０ｃｍ３）で洗った。それらを合わせた有機性抽出液を、水酸化ナトリウム水溶液（４Ｎ、１５０ｃｍ３）、続いて、ブライン（１００ｃｍ３）で洗浄した。その有機相を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）させ、溶媒を真空下で蒸発させることにより、標記の化合物を得た（８４．９ｇ、＞１００％）。
【０１２３】
ステップＢ：２’−ヒドロキシ−３’−フルオロアセトフェノン
微細に粉末化された三塩化アルミニウム（３２．０ｇ、２３９ｍｍｏｌ）を（２−フルオロフェニル）アセタート（２３．０ｇ、１４９ｍｍｏｌ）に加え、その混合物を１８０℃に１時間加熱した。室温にまで冷却した直後、得られた反応混合物を氷／水に慎重に注ぎ、その生成物をジクロロメタン（１５０ｃｍ３）中に抽出した。その有機層を分離し、ブライン（１５０ｃｍ３）で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）させ、溶媒を真空下で除去した。結果として生じた粗反応混合物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、ジクロロメタン−メチルアルコール９９：１）で精製することにより、標記化合物を得た（３．１ｇ、１４％）。
【０１２４】
このポイント以降からは、実施例１で説明されている手順に従って、そのアセトフェノンを最終化合物に向けて順次転化した（融点１８０から１８２℃；陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋３５４．０）。
【０１２５】
また、次の化合物もこの経路で調製された：
実施例７１：
１’−カルボキシメチル−７−クロロ−６−フルオロ−４−フェニルスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩（融点２７５から２９３℃；陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋３８７．７）。
【０１２６】
実施例７２：
１’−カルボキシメチル−５−フルオロ−４−フェニルスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩
必要な開始材料である２’−ヒドロキシアセトフェノンを商業的に入手することができなかったため、それを以下で説明されているようにして調製しなければならなかった：
ステップＡ：２’−フルオロ−６’−メトキシアセトフェノン
２−フルオロ−６−メトキシベンゾニトリル（１５．９４ｇ、１０５．５ｍｍｏｌ）及び、ジエチルエーテル中におけるヨウ化メチルマグネシウム（３Ｍ、４６．０ｃｍ３、１３７ｍｍｏｌ）の溶液の混合物を１００℃に１８時間加熱した。室温にまで冷却した直後、塩酸水溶液（３Ｍ、９４ｃｍ３）を加え、その混合物を加熱して４時間還流させた。得られた反応液を室温にまで冷却した後、その有機層を分離し、且つ、その水性相を酢酸エチル（１００ｃｍ３）で抽出した。それらを合わせた有機性抽出液をブライン（１００ｃｍ３）で洗浄した後、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）させた。その溶媒を真空下で除去することにより、オイルとして標記化合物を得た（１１７．７ｇ、１００％）。
【０１２７】
ステップＢ：２’−フルオロ−６’−ヒドロキシアセトフェノン
ジクロロメタン中における三臭化ホウ素（６９．０ｃｍ３、６９．６ｍｍｏｌ）の溶液を、ジクロロメタン（１５０ｃｍ３）中における２’−フルオロ−６’−メトキシアセトフェノン（１７．７２ｇ、１０５．５ｍｍｏｌ）の−７８℃の溶液に２５分間に渡って滴下させながら加えた。得られた反応液を０℃にまで温めた後、それを水（１００ｃｍ３）でクエンチし、その生成物をジクロロメタン（１００ｃｍ３）中に抽出した。その有機性溶液を水（１００ｃｍ３）及びブライン（１５０ｃｍ３）で洗浄した後、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）させた。真空下でその溶媒を蒸発させることにより標記の粗生成物が得られ、この粗生成物を未精製のまま以降の操作で使用した。
【０１２８】
このポイント以降からは、実施例１で説明されている手順に従って、そのアセトフェノンを最終化合物に向けて順次転化した（融点２５２から２５４℃；陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋３５４．２）。
【０１２９】
実施例７３：
１’−カルボキシメチル−４−［４−（２−エトキシモルホリノ）フェニル］スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩
適当なフェノールを４−（２−クロロエチル）モルホリン塩酸塩でアルキル化することにより、実施例４２で説明されている方法に従って調製した（陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋２Ｈ）＋４６５．２）。
【０１３０】
実施例７４：
１’−カルボキシメチル−６−ヒドロキシ−４−フェニルスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩
実施例１及び４２で説明されている方法に従って調製した（陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋３５２．２）。
【０１３１】
実施例７５：
１’−カルボキシメチル−７−メチルチオ−４−フェニルスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩
ステップＡ：７−フルオロ−Ｎ−メチルスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］−４（３Ｈ）−オン
メチルアルコール（２５０ｃｍ３）中における４’−フルオロ−２’−ヒドロキシアセトフェノン（１５．９７ｇ）、１−メチル−４−ピペリドン（１２．７４ｃｍ３）、及びピロリジン（４．３２５ｃｍ３）の攪拌溶液を窒素下で加熱して還流させた。０．５時間後、更なるピロリジン（４．３３ｃｍ３）を加え、更に０．５時間後、その溶液を冷却させた。次いで、その反応混合物を減圧下で蒸発させることによりオイルが得られ、そのオイルをジクロロメタン（４００ｃｍ３）中に溶解した。この溶液を水（３×４００ｃｍ３）で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）させ、蒸発させることにより、オイル（２５．７ｇ）を得た。シリカでのフラッシュクロマトグラフィー（ジクロロメタン−メチルアルコール−３３％アンモニア水溶液＝３８０：２０：１で溶出）により、オイルとして標記の精製された生成物が得られた（１４．４１ｇ）。
【０１３２】
ステップＢ：７−メチルチオ−Ｎ−メチルスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］−４（３Ｈ）−オン
窒素下でのジメチルホルムアミド（２０ｃｍ３）中における７−フルオロ−Ｎ−メチルスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］−４（３Ｈ）−オン（４．５４ｇ）の攪拌溶液にナトリウムチオメトキシド（１．４０ｇ）を加えた。その混合物を室温で１．２５時間、６０℃で４．５時間攪拌した後、冷却させ、室温で一晩放置した。それを攪拌し、１３０℃で２．５時間攪拌した後、冷却させ、室温で一晩放置し、その後、攪拌された水（１４０ｃｍ３）中に注いだ。その固形生成物を濾過して取り除き、水で洗い、ジクロロメタン中に溶解した。その溶液を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）させ、蒸発させることにより、ゴム状物質として標記生成物を得た（４．４４ｇ）。
【０１３３】
このポイント以降からは、以下の点を除き、実施例１で説明されている手順に従って、７−メチルチオ−Ｎ−メチルスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］−４（３Ｈ）−オンを最終化合物に向けて順次転化した：脱メチル化ステップの後処理で、上述の必要な第二級アミンが思いもかけず極性の低い化合物に転化されたため、その化合物を、還流下において、メチルアルコール中における水酸化カリウム水溶液（１０Ｎ）で処理し、上述の必要なアミンを再生した（（Ｍ＋Ｈ）＋＝３８２．０）。
【０１３４】
実施例７６：
１’−カルボキシメチル−４−（４−トリフルオロメトキシフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩
ステップＡ：トリフルオロメタンスルホン酸−４−［１’−フェニルメチル−スピロ（２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン）］エステル
乾性テトラヒドロフラン（４０ｃｍ３）中におけるＮ−ベンジルスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］−４（３Ｈ）−オン（１．５４ｇ、５ｍｍｏｌ；実施例１の如くにして調製されたもの）の冷却攪拌溶液（−７８℃）に、リチウムヘキサメチルジシラジド（ヘキサン中における１Ｍ溶液、７．５ｃｍ３、７．５ｍｍｏｌ）を約５分間に渡って滴下させながら加えた。その温度で１時間攪拌した後、Ｎ−フェニルトリフルオロメタンスルホンアミド（２．６８ｇ、７．５ｍｍｏｌ）を一度に加え、結果として得られたその反応混合物を攪拌したまま放置し、一晩ゆっくり温めた。その反応液を水（１０ｃｍ３）でクエンチし、酢酸エチル（２×５０ｃｍ３）中に抽出した。その有機性部分を飽和塩化アンモニウム水溶液（５０ｃｍ３）、飽和塩化ナトリウム水溶液（５０ｃｍ３）、及び水（５０ｃｍ３）で洗浄した後、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）させ、濃縮した。その生成物をシリカでのカラムクロマトグラフィー（３：１のヘプタン−酢酸エチル）で精製することにより所望の材料が得られ（１．７５ｇ、８０％）、これを直ちに使用するか、または、−２０℃における不活性雰囲気下で保管した。
【０１３５】
ステップＢ：Ｎ−ベンジル−４−（４−トリフルオロメトキシフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］−４（３Ｈ）−オン
｛Ｎ−ベンジルスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］｝−４−（フェニル−４−トリフルオロメチルスルホナート）（１．６９ｇ、３．８６ｍｍｏｌ）、４−トリフルオロメトキシベンゼンホウ酸（１．２５当量）、ジメトキシエタン（４０ｃｍ３）、塩化リチウム（２．５当量）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（２．５モル％）、及び２Ｎ炭酸ナトリウム水溶液（２当量）の混合物を加熱して１２時間還流させた。冷却の直後、その混合物を水（７５ｃｍ３）及び酢酸エチル（７５ｃｍ３）で処理した。振とう後、その有機層を分離し、水（２×１００ｃｍ３）で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）させ、その溶媒を除去することにより所望の生成物（９６％）が生じ、その生成物を、更に精製することなく、次のステップで使用した。
【０１３６】
このポイント以降からは、実施例１で説明されている手順に従って、Ｎ−ベンジル−４−（４−トリフルオロメトキシフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］−４（３Ｈ）−オンを最終化合物に向けて順次転化した（融点２３３から２３７℃；（Ｍ＋Ｈ）＋＝４２０．２）。
【０１３７】
実施例７７：
１’−カルボキシメチル−４−（４−メチルチオフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩
実施例（  ）及び７６で説明されている方法に従って調製した（陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋３５２．２）。
【０１３８】
実施例７８：
１’−カルボキシメチル−４−［４−（Ｎ−メチル−Ｎ−メチルスルホンアミド）フェニル］スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩
ステップＡ：エチル４−（４−ヒドロキシフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］−１’−アセタート
乾性Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２５ｃｍ３）中における１’−カルボキシメチル−４−（４−ヒドロキシフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］−１’−アセタート（４３２ｍｇ、１ｍｍｏｌ、実施例４２に従って調製したもの）及び炭酸水素ナトリウム（１７６ｍｇ、２．１ｍｍｏｌ）の混合物にヨウ化エチル（０．０８８ｃｍ３、１．１ｍｍｏｌ）を加え、その混合物を２時間８０℃に加熱した。冷却の直後、それを酢酸エチル（１００ｃｍ３）で希釈し、水（５×１００ｃｍ３）で洗浄した。次いで、その有機性溶液を硫酸ナトリウムで乾燥させた後、真空下でその溶媒を取り除いた。次いで、その粗材料を、初めにジクロロメタンと共にシリカの短いパッドでこれを処分し、その後、酢酸エチルと共にそのパッドに通した。その溶媒を除去することにより、所望の生成物を得た（１９４ｍｇ、５１％）。
【０１３９】
ステップＢ：トリフルオロメタンスルホン酸−｛１’−カルボキシメチル−４−フェニルスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］エチルエステル｝
不活性雰囲気下での無水ジクロロメタン（１０ｃｍ３）中におけるエチル４−（４−ヒドロキシフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］−１’−アセタート（１５８ｍｇ、４．１６×１０−４モル）の冷却（−２０℃）攪拌懸濁液にトリエチルアミン（０．０６５ｃｍ３、４．６×１０−４モル）を加えた。１０分後、ジクロロメタン（７．７ｃｍ３）中における無水トリフルオロメタンスルホン酸（０．０７７ｃｍ３、４．６×１０−４モル）の溶液を約５分間に渡って滴下させながら加えた。次の約２０分間の間にその固形材料は消失した。しかし、薄層クロマトグラフィーによる分析は、その反応が不完全であることを示したため、更なる部分の無水トリフルオロメタンスルホン酸を加えた（０．２５当量）。更に約２０分後、その反応混合物を酢酸エチル（６０ｃｍ３）で希釈し、次いで、水（３×６０ｃｍ３）で洗浄した後、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）させ、真空下でその溶媒を除去した。その粗生成物をシリカでのカラムクロマトグラフィー（３：１のジクロロメタン−酢酸エチル）で精製することにより、所望の材料を得た（１５４ｍｇ、７５％）。
【０１４０】
ステップＣ：４−［４−（ジフェニルイミノ）フェニル］スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］−１−酢酸エチルエステル
標記化合物を、Ｂｕｃｈｗａｌｄら（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ、１９９７年、３８、６３６７）の手順の変法により調製した。
【０１４１】
乾性窒素雰囲気下において室温で攪拌されている、乾性テトラヒドロフラン（２５ｃｍ３）中におけるトリフルオロメタンスルホン酸−｛１’−カルボキシメチル−４−フェニルスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］エチルエステル｝（４２１ｍｇ、８．４３×１０−４モル）の溶液にベンゾフェノンイミン（１．２当量、０．２８３ｃｍ３）を加えた。続いて、酢酸パラジウム（１．２５モル％）、（Ｒ）−（＋）−２，２’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−１，１’−ビナフチル（３．７５モル％）、及び炭酸セシウム（１．４０当量、３８５ｍｇ）を加えた。この混合物を加熱して２４時間還流させた後、室温にまで冷却した。次いで、それを（非乾性）ジエチルエーテル（２５０ｃｍ３）で希釈し、濾過用パッドを通じて濾過した後、真空下でそれらの揮発性フラクションを除去した。その残分をシリカでのカラムクロマトグラフィー（１：１のヘプタン−酢酸エチル）で精製することにより、所望の材料を得た（５４７ｍｇ；ベンゾフェノンイミン混入）。
【０１４２】
ステップＤ：エチル４−（４−アミノフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］−１’−アセタート
標記化合物を、Ｂｕｃｈｗａｌｄら（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ、１９９７年、３８、６３６７）の手順に従って調製した。
【０１４３】
メチルアルコール（２５ｃｍ３）中におけるエチル４−（４−ベンゾフェノンイミノフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］−１’−アセタート（５４２ｍｇ、１ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、酢酸ナトリウム（１９８ｍｇ、２．４ｍｍｏｌ）、続いて、塩酸ヒドロキシルアミン（１２５ｍｇ、１．８当量）を加え、その反応液を室温で３０分間攪拌した。真空下でそのメチルアルコールを除去した後、得られた残分をジクロロメタン（２５ｃｍ３）と水酸化ナトリウム水溶液（０．１Ｍ、２５ｃｍ３）との間で分配した。その有機層を単離し、真空下でそれらの揮発性画分を除去した後、その生成物をカラムクロマトグラフィー（シリカ、酢酸エチル）で精製した（２２０ｍｇ、トリフラートから６９％）。
【０１４４】
ステップＥ：エチル４−（メチル４−フェニルスルホンアミド）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］−１’−アセタート
標記化合物を、Ｒ．Ｊ．Ｓｕｎｄｂｅｒｇら（Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、１９８４年、４９、２４９）の手順に従って調製した。
【０１４５】
エチル４−（４−アミノフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］−１’−アセタート（２１４ｍｇ、０．５６６ｍｍｏｌ）、ピリジン（３当量、０．１３７ｃｍ３）、及び無水ジクロロメタン（１０ｃｍ３）の混合物を含有するフラスコを氷／メチルアルコール浴中で攪拌した。１０分後、この温度で、乾性ジクロロメタン（０．６６ｃｍ３）中における塩化メタンスルホニル（１．５当量、０．０６６ｃｍ３）の溶液を約５分間に渡って滴下させながら加えた。２時間攪拌した後、その反応混合物を炭酸水素カリウムの飽和水溶液（１０ｃｍ３）に注いだ。その有機層を水（３×５０ｃｍ３）で洗浄し、真空下でその溶媒を除去した。トルエン（３０ｃｍ３）を加えた後、除去し（ピリジン臭が消えるまで、この操作を繰り返した）、次いで、メチルアルコール（３０ｃｍ３）を加え、除去した。残存する材料は均質であった（２３４ｍｇ、９１％）。
【０１４６】
ステップＦ：エチル４−（メチル４−フェニル−Ｎ−メチルスルホンアミド）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］−１’−アセタート  メチルアルコール（１０ｃｍ３）中におけるエチル４−（メチル４−フェニルスルホンアミド）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］−１’−アセタート（１０８ｍｇ、０．２３６ｍｍｏｌ）の溶液に、トリメチルシリルジアゾメタン（ヘキサン中において２Ｍ、５ｃｍ３）の溶液を攪拌せずに加えた。付加すると直ちに窒素の放出が観察された。室温で１時間放置した後、真空下でそれらの揮発性画分を除去し、続いて、その残分をカラムクロマトグラフィー（シリカ、酢酸エチル）で精製することにより、均質な生成物（７４ｍｇ、６７％）が得られた。
【０１４７】
１’−カルボキシメチル４−（Ｎ−メチル４−フェニル−Ｎ−メチルスルホンアミド）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩
このポイント以降からは、実施例１で説明されている方法に従って合成を進行させた（陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４３．２）。
【０１４８】
実施例８０：
１’−カルボキシメチル−４−（４−アミノ−３，５−ジフルオロフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］二塩酸塩
（４−ブロモ−２，５−ジフルオロフェニル）−２，５−ジメチルピロールを、Ｂｒｕｅｋｅｌｍａｎｎら（Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，Ｐｅｒｋｉｎ  Ｔｒａｎｓ．１、１９８４年、２８０１）の手順に従って調製した。この材料を、対応するＧｒｉｇｎａｒｄ試薬に転化し、そして、上述のピロールと脱保護されたアニリンの非分解混合物が得られる点を除き、実施例１に従ってＮ−メチルスピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］−４（３Ｈ）−オンと反応させた。この混合物を（アニリン官能基の同時発生的な脱保護と共に）実施例１で説明されているようにしてＮ−脱アルキル化することにより、４−（４−アミノ−３，５−ジフルオロフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］を得た。次いで、結果として生じたこのアミンをブロモ酢酸エチルでアルキル化し、結果として得られたエステルを実施例１に従って加水分解した（陽イオンＥＳＩ（Ｍ＋Ｈ）＋３８７．１）。
【０１４９】
実施例８１：
１’−カルボキシメチル−３，４−ジヒドロ−４−（４−メチルフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］塩酸塩
ステップＡ：エチル３，４−ジヒドロ−４−（４−メチルフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］−１’−アセタート
エチルアルコール（１２５ｃｍ３）中におけるエチル４−（４−メチルフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］−１’−アセタート（７３０ｍｇ、０．１９４ｍｍｏｌ）の溶液にカーボン上の１０％パラジウムを加えた。この混合物を水素（４バール）雰囲気下において７時間４０℃に加熱し、次いで、それをまだ温かいうちに濾過し、その濾過ケークを熱いエチルアルコール（３×５０ｃｍ３）で洗った。真空下でその溶媒を除去し、結果として生じた化合物をエチルアルコール（６７％）から再結晶化させた。このエステルを実施例１の手順に従って加水分解した（融点２４７から２４９℃；（Ｍ＋Ｈ）＋＝３５２．２）。
【０１５０】
また、この方法により、次の化合物も調製した：
実施例８２：
リチウム３，４−ジヒドロ−４−（４−フルオロフェニル）スピロ［２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，４’−ピペリジン］−１’−アセタート（融点２７４から２７８℃（分解）；陰イオンＥＳＩ（Ｍ−Ｌｉ）−３５４．４０）。
【０１５１】
実施例８３
ヒトＧｌｙＴ−１ｂ輸送体を異型的に発現するＣＨＯ細胞におけるグリシン取り込みを決定するための方法
Ａ：クローニング：ｃＤＮＡを、Ｋｉｍ，Ｋ．−Ｍ．らによるＭｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１９９４年、４５、６０８−６１７に記載されている方法によるＰＣＲにより生成した。その配列を、ＡＬＦ  ＤＮＡ  ｓｅｑｕｅｎｃｅｒＴＭ（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）を用いるジデオキシ配列決定法により確認し、発現構造体ｐｃＤＮＡ３（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）にクローニングした。
【０１５２】
Ｂ：トランスフェクション：ＣＨＯ細胞内へのｈＧｌｙＴ−１ｂのトランスフェクションは、Ｓａｍｂｒｏｏｋ，Ｊ．ら（１９８９年）によるＭｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ（分子クローニング）：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ（試験検査室マニュアル）（Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ、Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ、ＮＹ）に記載されているような標準的なリン酸カルシウム法を用いて実施された。
【０１５３】
Ｃ：選択：１ｍｇ・ｃｍ−３のＧｅｎｅｔｉｃｉｎを含有する増殖培地において、１週間かけて、安定的に移入された細胞を選択した。更なる分析用、及び、以下で説明されているようなルーチン的に継代される陽性対照用に、個々のクローンを選んだ。
【０１５４】
Ｄ：培養条件：ｈＧｌｙＴ−１ｂ遺伝子を安定的に発現する細胞を、Ｇｅｎｅｔｉｃｉｎ（０．５ｍｇ・ｃｍ−３、Ｇｉｂｃｏ）を含有するＧｌｕｔａｍａｘ−１（Ｇｉｂｃｏ）を伴い、且つ、１０％Ｆｅｔａｌｃｌｏｎｅ  ＩＩ（Ｈｙｃｌｏｎｅ）が追加されたＤＭＥＭ−ＮＵＴ．ＭＩＸ．  Ｆ１２において、５％ＣＯ２雰囲気下で、３７℃で培養した。標準的な８０ｃｍ２の通気フラスコ（２×１０−６ｍフィルター、Ｎｕｎｃ）内で維持培養を実行し、密集したときには、トリプシン処理（Ｓｉｇｍａ）により、それらの細胞を継代培養した。
【０１５５】
Ｅ：検定手順：取り込み試験用の細胞を、Ｇｅｎｅｔｉｃｉｎの不在下における９６ウェル型プレート（１つのウェル当たり１７，０００個の細胞）に塗布し、使用する前に４８時間培養した。グリシン輸送を測定するため、それらの細胞を、予め３７℃に温められたＨａｎｋｓの平衡塩類溶液（ＨＢＳＳ）で２回洗浄し、過剰な液体を取り除いた後、０．２００ｃｍ３のＨＢＳＳに溶解した試験化合物を付加した。それらのプレートを３７℃で５分間インキュベートした後、［３Ｈ］グリシン（０．０５０ｃｍ３、１５０×１０−６Ｍ、２４８Ｂｑ．ｎｍｏｌ−１、ＮＥＮ）を加え、更に１０分間、インキュベーションを続けた。それらの細胞を氷冷ＨＢＳＳで洗浄することにより取り込みを終結させた後、過剰な液体を除去し、各ウェルに０．２００ｃｍ３のシンチレーションカクテルを加えた。それらのプレートを密着性フィルムで密封し、振とうしてそれらのサンプルを確実に均質化した後、プレートカウンターでシンチレーション計数を行った。
【０１５６】
Ｆ：データ解析：得られたデータを標準的な曲線当てはめ法を用いて解析し、活性な化合物に対するｐＩＣ５０値を算出した（ここで、ｐＩＣ５０は、取り込みの５０％抑制をもたらす試験化合物濃度の負の対数である）。
【０１５７】
Ｇ：結果：本発明の化合物は、ヒトＧｌｙＴ−２輸送体に比べ、ヒトＧｌｙＴ−１ｂ輸送体によるグリシン輸送を選択的に抑制する（ヒトＧｌｙＴ−２輸送体の分子クローニング及び機能発現については、Ｍｏｒｒｏｗ，Ｊ．Ａ．らによるＦＥＢＳ  ｌｅｔｔｅｒｓ  １９９８年、４３９、３３４−３４０で説明されている）。
【０１５８】
本発明の数多くの化合物に対するｐＩＣ５０値が表Ｉに与えられている。
【０１５９】
【表１】
0004825386.tif 000007