(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ウィザニア・ソムニフェラ（Ｗｉｔｈａｎｉａ  ｓｏｍｎｉｆｅｒａ  Ｄｕｎａｌ．）又はその抽出エキスを含有することを特徴とする、ダイオキシン類、ビスフェノールＡ、フタル酸ジブチル、ビンクロゾリン、ポリ塩化ビフェニル類、エチニルエストラジオール又はノニルフェノールにより減退した生殖機能を回復するための組成物。
【発明の詳細な説明】
技  術  分  野
本発明は、薬用植物として知られているウィザニア・ソムニフェラ（Ｗｉｔｈａｎｉａ  ｓｏｍｎｉｆｅｒａ  Ｄｕｎａｌ．）に関するものである。
ウィザニア・ソムニフェラは、別名、アシュアガンダ、セキトメホオズキ、ウィンターチェリー、アスガンド、アスンダ、アサーナ、ファタルフォダ、アサガンダ、アチュバガンディ、アムクラング・カラング、アムキラ、キルザングなどとも呼ばれる。
背  景  技  術
生活環境中に存在する、ダイオキシン類をはじめ、ビスフェノールＡ、フタル酸ジブチル、ビンクロゾリン、ポリ塩化ビフェニル類、エチニルエストラジオール、ノニルフェノール等といった内分泌攪乱化学物質（環境ホルモン）が、動物の生殖機能に影響を及ぼし、その結果、生殖機能を可逆的、ときには不可逆的に減退させ、特に男性生殖器官を退縮させ、精子数を減少させることが知られはじめた。これら内分泌攪乱化学物質は、環境中に存在し低濃度で作用するため社会問題となってきている。
このような内分泌攪乱化学物質による汚染から個体を守ることは現状では難しく、例えば、食物中の内分泌攪乱化学物質の濃度を測定し、許容以上の濃度に汚染された食物は摂取しないようにするといった消極的な方法や、食物繊維、キチン、キトサンなどを食し、内分泌攪乱化学物質をそれらに吸着させて、そのまま排泄させる方法等が知られているに過ぎない。
一方、ウィザニア・ソムニフェラは、インドや南アフリカに分布するナス科、ウィザニア属の樹木である。古来より民間薬や治療食として、強壮、抗リウマチ、老化防止、小児の衰弱防止等に有効であることが知られ（例：Ｋａｌｐａｎａ  Ｓｈａｒｍａ  ａｎｄ  Ｐ．Ｃ．Ｄａｎｄｉｙａ；ＩＮＤＩＡＮ  ＤＲＵＧＳ，２９（６），２４７−２５０）、広く用いられてきた。
ウィザニア・ソムニフェラに含まれる成分としては、ｃｕｓｃｏｈｙｇｒｉｎｅ，ａｎａｈｙｇｒｉｎｅ，ｔｒｏｐｉｎｅ，ｐｓｅｕｄｏｔｒｏｐｉｎｅ，ａｎａｆｅｒｉｎｅ，ｄｌ−ｉｓｏｐｅｌｌａｔｉｅｒｉｎｅ，３−ｔｒｏｐｙｌｔｉｇｌｏａｔｅ，ｗｉｔｈａｓｏｍｉｎｅ，ｖｉｓａｍｉｎｅ，ｗｉｔｈａｎｉｎｉｎｅ，ｗｉｔｈａｎｉｎｅ，ｐｓｅｕｄｏｗｉｔｈａｎｉｎｉｎｅ，３−ａｌｐｈａ−ｔｉｇｌｏｙｌｏｘｙｔｒｏｐａｎｅ，ｃｈｏｌｉｎｅ等のアルカロイド類、ｗｉｔｈａｆｅｒｉｎ  Ａ，ｓｉｔｏｉｎｄｏｓｉｄｅｓ  Ｉ−Ｘ，ｗｉｔｈａｎｏｌｉｄｅ  Ｎ，ｗｉｔｈａｎｏｌｉｄｅ  Ｏ，ｗｉｔｈａｎｏｌｉｄｅ  Ｄ，ｗｉｔｈａｎｏｌｉｄｅ  Ｅ，ｗｉｔｈａｎｏｌｉｄｅ  Ｐ，ｗｉｔｈａｎｏｌｉｄｅ  Ｓ，ｗｉｔｈａｎｏｌｉｄｅ  Ｑ，ｗｉｔｈａｎｏｌｉｄｅ  Ｒ，ｗｉｔｈａｎｏｌｉｄｅ  Ｇ，ｗｉｔｈａｎｏｌｉｄｅ  Ｈ，ｗｉｔｈａｎｏｌｉｄｅ  Ｉ，ｗｉｔｈａｎｏｌｉｄｅ  Ｊ，ｗｉｔｈａｎｏｌｉｄｅ  Ｋ，ｗｉｔｈａｎｏｌｉｄｅ  Ｕ，ｗｉｔｈａｎｏｌｉｄｅ  Ｙ等のウィタノライド類などが知られている。
発明の開示
本発明の目的は、内分泌攪乱化学物質による体内汚染の影響を少しでも修復又は脱却すべく、当該化学物質によって減退した生殖機能の回復を促進するための組成物あるいは食品を提供することにある。
本発明者らは、鋭意検討の結果、ウィザニア・ソムニフェラに減退した生殖機能の回復を促進する作用があることを見出し、本発明を完成した。
従って、本発明として、ウィザニア・ソムニフェラを含有することを特徴とする減退生殖機能回復用組成物ないしは減退生殖器官回復用組成物や、ウィザニア・ソムニフェラの抽出エキスを含有することを特徴とする減退生殖機能回復用組成物ないしは減退生殖器官回復用組成物を挙げることができる。また、内分泌攪乱化学物質により減退した生殖機能を回復するための、これら減退生殖機能回復用組成物ないしは減退生殖器官回復用組成物も挙げることができる。
これら本発明は、減退した生殖機能を回復するため有効成分としてウィザニア・ソムニフェラを含有する組成物を製造するためのウィザニア・ソムニフェラの使用や、減退した生殖機能を回復するため有効成分としてウィザニア・ソムニフェラの抽出エキスを含有する組成物を製造するためのウィザニア・ソムニフェラの使用、ウィザニア・ソムニフェラを含有する組成物を生体に与えることにより減退した生殖機能を回復する方法、ウィザニア・ソムニフェラの抽出エキスを含有する組成物を生体に与えることにより減退した生殖機能を回復する方法などと換言することができる。
本発明において、ウィザニア・ソムニフェラは、乾燥した、又は未乾燥のものを用いることができる。そして、その根、葉、全木等の粗切りや粉末をそのまま、又は水、湯、ジュース、ミルク等の飲料と一緒に服用又は摂取することができる他、常法により、例えば熱湯又はアルコールで適宜抽出し、その抽出液を服用又は摂取することができる。
ウィザニア・ソムニフェラの抽出エキスは、ウィザニア・ソムニフェラの根、葉、全木等の細片を、水（熱水）やアルコール等適当な媒体で常法により抽出し、そして濃縮、また所望によりその後乾固することにより得ることができる。当該抽出エキスは、アルカロイド類を１．０重量％以上、ウィタノライド類を１．０重量％以上含むものが適当であり、アルカロイド類を１．２重量％以上、ウィタノライド類を１．４重量％以上含むものが好ましい。当該抽出エキスは、抽出エキスをそのまま、又は水、湯、ジュース、茶、ミルク等の飲料に懸濁又は溶解して服用又は摂取することができる。
減退した生殖機能を回復するためのウィザニア・ソムニフェラの服用量若しくは摂取量、又は煎じ量（煎じ液を服用・摂取する場合）は、服用者の性別や年齢、症状、用いる部位等によって異なるが、成人１日当たり、通常、乾燥したウィザニア・ソムニフェラ１ｇ〜１００ｇの範囲内が適当であり、好ましくは２〜２０ｇの範囲内である。抽出エキスの場合には、成人１日当たり、通常、０．１〜１０ｇの範囲内が適当であり、好ましくは０．２〜５ｇの範囲内である。いずれも１日１回、又は１日２〜４回に分割して服用又は摂取することができる。服用又は摂取は、食前、食間、食後、就寝前等でよく、特に制限されない。食事と一緒に服用又は摂取することもできる。
本発明に係る減退生殖機能回復用組成物（以下「本発明組成物」という）は、ウィザニア・ソムニフェラやその抽出エキスをそのまま又は生理的に許容しうる無毒性かつ不活性な担体中に、例えば０．０１％〜９９．５％の範囲内で、好ましくは０．５％〜９０％の範囲内で含有することができる。
上記担体としては、固形、半固形、又は液状の希釈剤、充填剤、及びその他の処方用の助剤一種以上を用いることができる。本発明組成物は、末剤、カプセル剤、錠剤、糖衣剤、顆粒剤、散剤、懸濁剤、液剤、シロップ剤、ドロップ剤等、あらゆる形態をとることができる。場合によっては注射剤の形態をとることもできる。
本発明組成物は、ヒトを含む動物の減退した生殖機能、特に減退した男性生殖機能の回復を促進するのに有用である。さらに本発明組成物は、萎縮した男性生殖器官の回復を促進するのに好ましい。従って、本発明組成物は、医薬としてそのような治療剤又は予防剤として用いることができる。
また、本発明組成物は、食品、例えば、カレー、ピラフ、惣菜等の一般食品やドリンク、菓子等の食品に添加して、又はタブレットやカプセル、顆粒等の形態で、即ち、いわゆる栄養補助食品ないし健康食品として用いることができる。従って、ウィザニア・ソムニフェラを含有することを特徴とする減退生殖機能回復用食品ないしは減退生殖器官回復用食品や、ウィザニア・ソムニフェラの抽出エキスを含有することを特徴とする減退生殖機能回復用食品ないしは減退生殖器官回復用食品、また、内分泌攪乱化学物質により減退した生殖機能を回復するための、これら減退生殖機能回復用食品ないしは減退生殖器官回復用食品も本発明として挙げることができる。
これら本発明は、減退した生殖機能を回復するため有効成分としてウィザニア・ソムニフェラを含有する食品を製造するためのウィザニア・ソムニフェラの使用や、減退した生殖機能を回復するため有効成分としてウィザニア・ソムニフェラの抽出エキスを含有する食品を製造するためのウィザニア・ソムニフェラの使用、ウィザニア・ソムニフェラを含有する食品を生体に与えることにより減退した生殖機能を回復する方法、ウィザニア・ソムニフェラの抽出エキスを含有する食品を生体に与えることにより減退した生殖機能を回復する方法などと換言することができる。
発明を実施するための最良の形態
以下に、実施例、試験例を示して本発明を更に詳述する。
実施例１  抽出エキスの調製
ウィザニア・ソムニフェラの乾燥根１０ｋｇをよく水洗し、乾燥後、直径約２〜５ｍｍの細片に砕いた。それに１０倍容の５０％エタノール液を加え、６０℃で４時間還流しながら抽出し、抽出液を減圧下で乾固して、ウィザニア・ソムニフェラの乾燥エキス５０ｇを得た。このエキスの成分を文献（ＢＨＡＴＴＡＣＨＡＲＹＡ  Ｓ．Ｋ．ら、ＰＨＹＴＯＴＨＥＲＡＰＹ  ＲＥＳＥＡＲＣＨ，９，１１０−１１３（１９９５））に従いＨＰＴＬＣ（ＣＡＭＡＧ、ＡＳＳＥＭＢＬＹ）で分析した結果、総アルカロイド類の含量は１．７０重量％、ウィタノライド類の含量は１．９８重量％であった。
試験例１  減退生殖機能回復効果（１）
１１週齢のＳＤラット（１群８匹）に、０．５％カルボキシメチルセルロース・ナトリウム（ＣＭＣ）溶液に懸濁させた内分泌攪乱化学物質の一つであるエチニルエストラジオールを３ｍｇ／ｋｇ（エチニルエストラジオール０．６ｍｇ／ｍＬ）、又はコントロールとして０．５％ＣＭＣ溶液を５ｍＬ／ｋｇ毎日１回午前中に２週間経口投与し、投薬後の精巣、精巣上体、前立腺、精嚢腺の重量を測定した。その結果を表１に示す。
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表１に示すように、内分泌攪乱化学物質の作用によりラットの生殖器官が萎縮した。
次に、内分泌攪乱化学物質により生殖機能が減退した上記ラット（１群８匹）に対して２％アラビアゴム溶液を５ｍＬ／ｋｇ又は２％アラビアゴム溶液に懸濁させた実施例１に係るウィザニア・ソムニフェラの乾燥エキスを１００ｍｇ／ｋｇ（ウィザニア・ソムニフェラ２０ｍｇ／ｍＬ）若しくは５００ｍｇ／ｋｇ（ウィザニア・ソムニフェラ１００ｍｇ／ｍＬ）を毎日１回午前中に２週間経口投与し、ウィザニア・ソムニフェラによる生殖機能の回復度合いを調べた。その結果を表２に示す。
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表２から明らかなように、ウィザニア・ソムニフェラ投与群に、内分泌攪乱化学物質の作用により萎縮した生殖器官、特に精嚢腺、前立腺の回復促進効果が見られた。
ラットの飼育条件：室温２１〜２５℃、湿度４５〜６０％、人工照明１２時間（午前７時〜午後７時）、換気回数１５回／時間、固型飼料（ＣＢ−２，日本クレア株式会社製）、飲料水は自由摂取。
試験例２  減退生殖機能回復効果（２）
１０週齢のＳｌｃ：ＳＤラット（１群１０匹）に、０．５％カルボキシメチルセルロース・ナトリウム（ＣＭＣ）溶液に懸濁させた内分泌攪乱化学物質の一つであるエチニルエストラジオールを３ｍｇ／ｋｇ（エチニルエストラジオール０．３ｍｇ／ｍＬ）、又はコントロールとして０．５％ＣＭＣ溶液を１０ｍＬ／ｋｇ毎日１回午前中に１０日間経口投与し、投薬終了１週間後の精巣、精巣上体、前立腺、精嚢腺の重量を測定した。その結果を表３に示す。
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表３に示すように、内分泌攪乱化学物質の作用によりラットの生殖器官が萎縮した。
次に、内分泌攪乱化学物質により生殖機能が減退した上記ラット（１群１０匹）に対して２％アラビアゴム溶液を１０ｍＬ／ｋｇ又は２％アラビアゴム溶液に懸濁させた実施例１に係るウィザニア・ソムニフェラの乾燥エキスを１００ｍｇ／ｋｇ（ウィザニア・ソムニフェラ１０ｍｇ／ｍＬ）を毎日１回午前中に４週間経口投与し、ウィザニア・ソムニフェラによる生殖機能の回復度合いを調べた。その結果を表４に示す。
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表４から明らかなように、ウィザニア・ソムニフェラ投与群は、コントロール群（アラビアゴム投与群）と比べ、内分泌攪乱化学物質の作用により萎縮した生殖器官の回復速度を早めた。精巣上体については有意な差を得た。
ラットの飼育条件：室温２１〜２５℃、湿度４５〜６０％、人工照明１２時間（午前７時〜午後７時）、換気回数１５回／時間、固型飼料（ＣＥ−２，日本クレア株式会社製）、飲料水は自由摂取。
試験例３  精子数と運動精子率
試験例２と同様にしてエチニルエストラジオールで生殖器官にダメージを与えたラットの精子数と運動精子率とを求めた。その結果を表５に示す。
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次に、内分泌攪乱化学物質により生殖機能が減退した上記ラット（１群１０匹）に対して２％アラビアゴム溶液を１０ｍＬ／ｋｇ又は２％アラビアゴム溶液に懸濁させた実施例１に係るウィザニア・ソムニフェラの乾燥エキスを１００ｍｇ／ｋｇ（ウィザニア・ソムニフェラ１０ｍｇ／ｍＬ）を毎日１回午前中に４週間経口投与し、投与後のラットの精子数と運動精子率を次のようにして求めた。
▲１▼運動精子率の測定方法
右側精巣上体から尾部を切り取り、ザルトリウム電子天秤ＬＣ６２０−Ｓ型を用いて重量を測定後、ＢＳＡ−Ｈａｎｋｓ液５ｍＬを入れた精子泳出用バイアルに精巣上体尾部を入れ、３回切断して精子を泳出させた。そこから０．０５ｍＬを採取し、ＢＳＡ−Ｈａｎｋｓ液０．９５ｍＬで希釈して、精子希釈液とした。精子希釈液中の非運動精子数をトーマの血球計算盤を用いて測定した。非運動精子数の測定後、精子希釈液の容器を熱湯に浸け、室温に戻してから精子数を血球計算盤を用いて測定した。なお、肉眼的に精子泳出液の精子が少ない（濁度が薄い）と認められた場合は、その液を少量分注し、運動精子数測定用液として上記の測定を実施した。測定した値を用いて運動精子率を次式〔１〕に従って算出した。
運動精子率（％）＝（精子数−非運動精子数）／精子数×１００  〔１〕
▲２▼精子数の測定方法
上記▲１▼の精子泳出用バイアル中の精巣上体尾部をさらに切断し、精子を泳出させた後、バイアル内の液をナイロンメッシュで濾過し、濾過液を精子原液０．１ｍＬをホルマリン生理食塩水１．９ｍＬで希釈し、精子数をトーマの血球計算盤を用いて測定した。なお、肉眼的に精子泳出液の精子が少ない（濁度が薄い）と認められた場合は、精子原液を希釈せずに容器を直接熱湯に浸け、室温に戻してから精子数を測定した。また、次式に従い、測定した精子数及び希釈率から精巣上体尾部あたりの精子数を算出し（精子数）、精巣上体尾部重量（ｇ）あたりに換算したものを精子数／尾部とし、精巣上体あたりに換算したものを精子数／精巣上体として算出した。
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本試験結果を表６に示す。
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表６から明らかなように、内分泌攪乱化学物質により減少した精子数や運動精子率の割合も、コントロールに比べて回復が早まった。