(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記の式（１）
【化１】
0004827739.tif 000003
（式中、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３はそれぞれ水素原子又はメチル基を示し、Ｘは炭素数１０〜２８の直鎖状又は分岐鎖状のアルキレン基を示す）
で表される化合物を有効成分として含有する抗腫瘍剤。
【請求項２】
前記式（１）において、Ｘが直鎖状アルキレン基であることを特徴とする請求項１記載の抗腫瘍剤。
【請求項３】
前記式（１）で表される化合物が、２，４，４−トリメチル−３（１５−ヒドロキシペンタデシル）−２−シクロヘキセン−１−オンであることを特徴とする請求項２記載の抗腫瘍剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】  本発明は、細胞の運命を決定する因子として働く非ペプチド性低分子化合物に関するものである。該化合物は、ＳＴＡＴ３のリン酸化を減少させ、Ｎｏｔｃｈ１受容体の発現を抑える事で、ＳＴＡＴシグナル及びＮｏｔｃｈシグナルで伝達系に作用する。その結果、該化合物は、未分化細胞（幹細胞）の分化誘導剤として作動する。これらの特質により、該化合物は、ＳＴＡＴシグナル及びＮｏｔｃｈシグナル伝達系の両方の機能障害により誘導される病態の予防・治療剤として有用である。
【背景技術】
【０００２】  Ｎｏｔｃｈシグナル伝達は、発育期及び成人期における細胞運命決定に関係しており、かつあまり変化することのないメカニズムである（非特許文献１）。Ｎｏｔｃｈシグナル伝達は多くの組織において、細胞運命の決定に関与している。Ｎｏｔｃｈの機能は、同じ機能を持つ隣接する細胞間に作用する。
多くの場合、それは、初期の分化運命に向かう分化を阻害する。そして、その代わりに第二の代替運命に細胞を分化させ、あるいは細胞を未分化の状態にとどまらせる。この機能は、細胞の多様性の起源である。この役割のほか、Ｎｏｔｃｈシグナルは様々な細胞のタイプの分化を積極的に促進する。例えば、神経系においてＮｏｔｃｈシグナルはアストロサイトへの分化を促進する。
分子的には、Ｎｏｔｃｈシグナルは、最初にショウジョウバエ、次に脊椎動物において確認された。これは、Ｎｏｔｃｈ遺伝子（非特許文献１〜３）によりコードされている膜貫通受容体に依存しており、それは（Ｄｅｌｔａのような遺伝子又はＪａｇｇｅｄによりコードされる）膜貫通リガンドにより賦活化される。この賦活化は一連のＮｏｔｃｈのタンパク質分解切断、及びＣＢＦタンパク質に結合する、分子内に存在するフラグメントの核への転写を制御しており、それらは併せてＨＥＳ遺伝子の転写を賦活化する転写複合体として作用する。そして、ＨＥＳはプロニューロン遺伝子であるＭＡＳＨ１の転写を阻害するので、Ｎｏｔｃｈの細胞内での賦活化により、その神経幹細胞が神経細胞へ分化するのを防ぐ。
その多機能により、Ｎｏｔｃｈシグナル伝達の機能障害は、腫瘍や癌、アルツハイマー病などの神経変性疾患等様々な疾患を招く（非特許文献２〜３）。Ｎｏｔｃｈシグナル伝達系に作用する細胞運命決定因子は、新しい医薬品のターゲットとなっている。これまで用いられてきた戦略は、Ｎｏｔｃｈシグナル系の下流にある因子を標的にしている（例えば、リガンドの結合を抑制する、受容体のタンパク質分解切断を阻害する、それの核への転写を抑制するなど）ことにより、Ｎｏｔｃｈ機能を調節することを目的としているため、これらはいずれもＮｏｔｃｈの発現を抑制しているのものではなかった。
【非特許文献１】Ｓ．Ａｒｔａｖａｎｉｓ−Ｔｓａｋｏｎｓａ，Ｍ．Ｒａｎｄ，Ｒ．Ｌａｋｅ，Ｎｏｔｃｈ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ：ＣｅｌｌＣｏｎｔｒｏｌ  ａｎｄ  Ｓｉｇｎａｌ  Ｉｎｔｅｇｒａｔｉｏｎ  ｉｎ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ．Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｖｏｌ．２８４  Ｐａｇｅ  ７７０−７７６（１９９９）
【非特許文献２】Ａ．Ｚｌｏｂｉｎ，Ｍ．Ｊａｎｇ，Ｌ．Ｍｉｅｌｅ，Ｔｏｗａｒｄ  ｔｈｅ  ｒａｔｉｏｎａｌ  ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  ｃｅｌｌ  ｆａｔｅ  ｍｏｄｉｆｉｅｒｓ：Ｎｏｔｃｈ  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ａｓ  ａ  ｔａｒｇｅｔｆｏｒ  ｎｏｖｅｌ  ｂｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ．  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｊｕｌｙ  １（１）Ｐａｇｅ  ８６−１０６（２０００）
【非特許文献３】Ｂ．Ｎｉｃｋｏｌｏｆｆ，Ｂ．Ｏｓｂｏｒｎｅ，Ｌ．Ｍｉｅｌｅ  Ｎｏｔｃｈ  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ａｓ  ａ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｔａｒｇｅｔ  ｉｎ  ｃａｎｃｅｒ：ａｎｅｗ  ａｐｐｒｏａｃｈ  ｔｏ  ｔｈｅ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  ｃｅｌｌ  ｆａｔｅ  ｍｏｄｉｆｙｉｎｇ  ａｇｅｎｔｓ．Ｏｎｃｏｇｅｎｅ  Ｖｏｌ  ２２（４２）Ｐａｇｅ６５９８−６６０８（２００３）
【０００３】  細胞運命の決定は、成人期と同様に、発育期において重大な事象である。それらは細胞の増殖、分化及びアポトーシスのようなプロセスを制御する。このようなプロセスの障害は、多くの病態の起源である。
したがって、細胞運命の決定因子の開発は、医薬品開発の主要な目的の一つとなっている。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】  本発明の目的は、Ｎｏｔｃｈ１遺伝子の発現に特異的に作用する低分子化合物を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００５】  シクロヘキセノン長鎖アルコールはこれまでに神経細胞の生存及び神経突起の伸展を促進する神経栄養作用を有することが既に報告されている（Ｇｏｎｚａｌｅｓ  ｄｅ  Ａｇｕｉｌａｒら、Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ（２００１）９２０，６５−７３）。
さらに、本発明者らは、該化合物が神経幹細胞のアストロサイトへの分化を抑制し、神経細胞への分化を促進することを、ニューロスフェアを用いた試験で証明した（ＰＣＴ：ＷＯ  ０２／２９０１４  Ａ２）。【０００６】  ＳＴＡＴ３は、多量のサイトカイン（成長因子及びホルモン）によってリン酸化されることで賦活化される。現在までに、７種のＳＴＡＴファミリーが特定されており、それらの内のいくつかはかなり特異的に賦活化されうる。ＳＴＡＴ３の生物学的役割は、ノックアウトマウスやＣｒｅ−ＬｏｘＰ組み換えによる研究により明らかになって来ており、ＳＴＡＴ３が細胞増殖、アポトーシスの抑制、及び細胞運動などの様々な生物学的機能において重要な役割を担っていることを示している。一方、ＥＳ（胚性幹細胞）細胞に対するＳＴＡＴ３の作用は、ＥＳ細胞の自己増殖を抑制し、分化を促進した。ＳＴＡＴ３シグナルの阻害は、血液癌、乳癌、頭部癌、頚部癌などの多くの癌細胞株と相関している（Ｂｒｏｍｂｅｒｇ及びＤａｒｎｅｌｌ  Ｏｎｃｏｇｅｎｅ（２０００）１９，２４６８−２４７３に概説）。【０００７】  本発明者らは上記課題を解決すべく鋭意検討を行った結果、下記の式（１）で表されるシクロヘキセノン長鎖アルコールにＳＴＡＴ３のリン酸化抑制及びＮｏｔｃｈ１の発現抑制作用を有していることを見出し、本発明を完成させた。【０００８】
すなわち本発明は、
（１）下記の式（１）
【化１】
0004827739.tif 000002
（式中、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３はそれぞれ水素原子又はメチル基を示し、Ｘは炭素数１０〜２８の直鎖状又は分岐鎖状のアルキレン基を示す）
で表される化合物を有効成分として含有する抗腫瘍剤、
（２）前記式（１）において、Ｘが直鎖状アルキレン基であることを特徴とする上記（１）記載の抗腫瘍剤、及び
（３）前記式（１）で表される化合物が、２，４，４−トリメチル−３（１５−ヒドロキシペンタデシル）−２−シクロヘキセン−１−オンであることを特徴とする上記（２）記載の抗腫瘍剤、
に関する。
【発明の効果】
【０００９】  式（１）で表される化合物は、優れたＳＴＡＴ３のリン酸化抑制効果及びＮｏｔｃｈ１発現抑制効果を示し、ＳＴＡＴシグナル及びＮｏｔｃｈシグナル伝達系機能障害治療剤として有用である。また、ＳＴＡＴシグナル及びＮｏｔｃｈシグナル伝達系機能障害により各種腫瘍や癌、アルツハイマー病等の神経変性疾患等の疾病が引き起こされることが明らかとなっており、式（１）で表される化合物は、各種腫瘍や癌および各種神経変性疾患の予防・治療薬としても有用である。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】本発明のシクロヘキセノン長鎖アルコール添加の有無による遺伝子発現の増減を示す図である。
【図２】本発明のシクロヘキセノン長鎖アルコール添加によるＳＴＡＴ３のリン酸化抑制作用を示す図である。
【図３】本発明のシクロヘキセノン長鎖アルコールのｉｎ  ｖｉｔｒｏにおける抗腫瘍活性を示す試験結果を示す図である。
【図４】本発明のシクロヘキセノン長鎖アルコールのｅｘ  ｖｉｖｏにおける抗腫瘍活性を示す試験結果を示す図である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】  上記式（１）中、Ｘは炭素数１０〜２８の直鎖状又は分岐状のアルキル、アルキレン又はアルケニレン基であるが、分岐状のアルキレン又はアルケニレン基の場合の側鎖としては炭素数１〜１０のアルキル基が挙げられる。当該側鎖アルキル基としては、例えば、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ペンチル基、イソペンチル基、ネオペンチル基、ｔｅｒｔ−ペンチル基、ヘキシル基、イソヘキシル基、ヘプチル基、オクチル基、ノニル基、デシル基、などが挙げられ、このうち特にメチル基が好ましい。また直鎖状のアルキレン基又はアルケニレン基（少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を有するアルケン構造を意味する）への側鎖の置換は、３及び／又は７位が好ましい。これらのＸのうち、炭素数１０〜２８の直鎖状アルキル基がより好ましく、炭素数１０〜１８の直鎖状アルキル基が特に好ましい。また、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３はそれぞれ水素原子又はメチル基を示すが、少なくとも１個がメチル基である場合がより好ましい。【００１２】  また、式（１）で表される化合物は、薬学的に許容される塩、又はその溶媒もしくは水和物の形態であってもよい。またこの化合物（１）には、各種の異性体が存在し得るが、これらの異性体も本発明に含まれる。【００１３】  この式（１）で表される化合物は、公知の方法で調製することができるが、例えば特開２０００−２９７０３４記載の製法に従って製造することができる。【００１４】  また、式（１）で表される化合物は、経口投与又は非経口投与（筋肉内、皮下又は静脈内注射、坐薬など）のいずれでも投与できる。【００１５】  経口用製剤を調製する場合、賦形剤、さらに必要に応じて、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味矯臭剤などを加えた後、常法により、錠剤、被服錠剤、顆粒剤、カプセル剤、溶液剤、シロップ剤、エリキシル剤、油性又は水性の懸濁液剤などとする。賦形剤としては、例えば、乳糖、コーンスターチ、白糖、ブドウ糖、ソルビット、結晶セルロースなどが挙げられる。結合剤としては、例えば、ポリビニルアルコール、ポリビニルエーテル、エチルセルロース、メチルセルロース、アラビアゴム、トラガント、ゼラチン、シェラック、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルスターチ、ポリビニルピロリドンなどが挙げられる。【００１６】  崩壊剤としては、例えば、デンプン、寒天、ゼラチン未、結晶セルロース、炭酸カルシウム、炭酸水素ナトリウム、クエン酸カルシウム、デキストラン、ペクチンなどが挙げられる。滑沢剤としては、例えば、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ポリエチレングリコール、シリカ、硬化植物油などが挙げられる。着色剤としては、医薬品に添加することが許可されているものが使用できる。矯味矯臭剤としては、ココア末、ハッカ脳、芳香酸、ハッカ油、竜脳、桂皮末などが使用できる。これらの錠剤や、顆粒剤には、糖衣、ゼラチン衣、その他必要により適宜コーティングしてもよい。
非経口投与の例として、注射剤を調製する場合、必要により、ｐＨ調整剤、緩衝剤、安定化剤、保存剤などを添加し、常法により、皮下、筋肉内、静脈内注射剤とする。注射剤は、溶液を容器に収納後、凍結乾燥などによって、固形製剤として、用時調製の製剤としてもよい。また、一投与量を容器に収納してもよく、また、多投与量を同一の容器に収納してもよい。
本発明の化合物の医薬としての投与量は、ヒトの場合、成人１日当たり通常０．０１〜１０００ｍｇ、好ましくは、０．１〜５００ｍｇの範囲で、１日量を１日１回、あるいは２〜４回に分けて投与する。
【実施例】
【００１７】  以下、実施例により本発明を説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
実施例１【００１８】遺伝子発現試験
２，４，４−トリメチル−３（１５−ヒドロキシペンタデシル）−２−シクロヘキセン−１−オンによる処理
特開２０００−２９７０３４に記載の方法で合成した２，４，４−トリメチル−３（１５−ヒドロキシペンタデシル）−２−シクロヘキセン−１−オンをエタノールに１０−２Ｍとなるように溶解し、望ましい濃度で培養液に加え、最終希釈が１μｌ／ｍｌとなるようにした。２，４，４−トリメチル−３（１５−ヒドロキシペンタデシル）−２−シクロヘキセン−１−オンは、細胞培養における異なる時間及び種々の期間加えた。コントロールは、１μｌ／ｍｌのエタノールとした（この希釈濃度において、エタノールは培養液の分化に全く影響を与えない）。各実験は、少なくとも３回繰り返した。【００１９】ニューロスフェアの生成、維持及び分化
プロトコルはＧｒａｎｄｂａｒｂｅら、Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ（２００３）１３０，１３９３−１４０２より採用した。簡単に説明すると、Ｔｒｏｐｅｐｅら、Ｄｅｖ．Ｂｉｏｌ．（１９９９）２０８、１６６−１８８に記述されているように、一次ニューロスフェアをワイルドタイプ胚（Ｅ１４．５）の終脳から調製し、１０ｎｇ／ｍｌのＥＧＦを含む、無血清培地（Ｒｅｙｎｏｌｄｓ及びＷｅｉｓｓ、Ｓｃｉｅｎｃｅ（１９９２）２５５、１７０７−１７７０）である「ニューロスフェア培地」での連続継代により、二次ニューロスフェアとして維持した。様々な時間の増殖後、５０〜１００個のニューロスフェアを２ｎｇ／ｍｌのＥＧＦ及び０．５％のＦＢＳの存在下、ポリオルニチン（シグマ）コーティングしたカバースリップに接種し、分化させた。【００２０】ＲＴ−ＰＣＲ解析
ニューロスフェアを１０ｎｇ／ｍｌのＥＧＦを含む「ニューロスフェア培地」中にて、様々な条件で、異なる時間（本文に記載されているように、ＲＮＡ抽出の前に３時間、１２時間又は２４時間）培養した。神経細胞（マウス１３−１４日胎児脳由来）、アストロサイト（Ｗｉｓｔａｒ系ラット新生児脳由来）及びオリゴデンドロサイト（Ｗｉｓｔａｒ系ラット新生児脳由来）を、２，４，４−トリメチル−３（１５−ヒドロキシペンタデシル）−２−シクロヘキセン−１−オン（又はエタノール）の存在下で２４時間培養した。ＲＮＡは培養細胞から精製し、逆転写を行った。３種の独立したＲＮＡサンプルをそれぞれの実験用に調製した。ｃＤＮＡを、ニューロスフェアについては３μｇの全ＲＮＡから、アストロサイト及びオリゴデンドロサイトについては２μｇ、神経細胞については１．５μｇより、２００ＵのＭ−ＭＬＶ逆転写酵素（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）、０．５ｍＭのｄＮＴＰ（ＱＢｉｏｇｅｎ）、５ｍＭのＤＴＴ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）、０．０１μｇ／μｌのランダムヘキサマー（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）、２０ＵのＲＮａｓｅＯＵＴ（登録商標）（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を含む２０μｌの反応混合液により３７℃で１時間合成した。１０分の１の全ｃＤＮＡは、１．２５ＵのＴａｑ  ＤＮＡ  Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）、０．５ｍＭのｄＮＴＰｓ（ＱＢｉｏｇｅｎ）及び０．５μｌの各プライマーを含む２０μｌの反応混合液で増幅した。ＰＣＲの条件は、研究対象のプライマー及び細胞の種類ごとに調整した。プライマーは、ラット及びマウス検体の両者に適するように以下のように設計した。
Ｎｏｔｃｈ１  Ｆ：５’−ＴＧＣＣＡＡＡＴＧＣＣＴＧＣＣＡＧＡＡＴ−３’（配列番号：１）
Ｎｏｔｃｈ１  Ｒ：５’−ＣＡＴＧＧＡＴＣＴＴＧＴＣＣＡＴＧＣＡＧ−３’（配列番号：２）
Ｎｏｔｃｈ２  Ｆ：５’−ＧＡＧＧＣＧＡＣＴＣＴＴＣＴＧＣＴＧＴＴＧＡＡＧＡ−３’（配列番号：３）
Ｎｏｔｃｈ２  Ｒ：５’−ＡＴＡＧＡＧＴＣＡＣＴＧＡＧＣＴＣＴＣＧＧＡＣＡＧ−３’（配列番号：４）
Ｎｏｔｃｈ３  Ｆ：５’−ＡＣＡＣＴＧＧＧＡＧＴＴＣＴＣＴＧＴＧＡＧ−３’（配列番号：５）
Ｎｏｔｃｈ３  Ｒ：５’−ＧＣＴＧＴＣＴＧＣＴＧＧＣＡＴＧＧＧＡＴＡ−３’（配列番号：６）
Ｎｏｔｃｈ４  Ｆ：５’−ＣＴＴＣＴＣＧＴＣＣＴＣＣＡＧＣＴＣＡＴ−３’（配列番号：７）
Ｎｏｔｃｈ４  Ｒ：５’−ＧＣＴＧＡＣＡＴＣＡＧＧＧＧＴＧＴＣＡＣ−３’（配列番号：８）
典型的なサイクル条件は、プログラムが９４℃で３０秒、６３℃で３０秒及び７２℃で２分であるＨＥＳ−５を除き、全ての研究対象の遺伝子について、９４℃で３０秒、５５℃で３０秒及び７２℃で３０秒だった。ＰＣＲ実験は、２度繰り返して行った。結果は、未処理細胞（ＧＡＰＤＨに対して正規化した後、１００％に調整したコントロール条件）に対する２，４，４−トリメチル−３（１５−ヒドロキシペンタデシル）−２−シクロヘキセン−１−オン処理済み細胞の遺伝子発現におけるパーセント表示である。ｍＲＮＡの相対量は、ＢａｂｙＩｍａｇｅｒ解析及びＮＩＨｉｍａｇｅ１．３６によって定量した。【００２１】  ＲＴ−ＰＣＲによる、Ｎｏｔｃｈ経路の鍵遺伝子発現の分子的な解析の結果、２，４，４−トリメチル−３（１５−ヒドロキシペンタデシル）−２−シクロヘキセン−１−オン処理により、他のＮｏｔｃｈ受容体（Ｎｏｔｃｈ２〜４）の発現レベルは変わらない一方で、Ｎｏｔｃｈ１のｍＲＮＡ、次いでＨＥＳ５のレベルが常に減少することが分かった。
実施例２【００２２】  ２，４，４−トリメチル−３（１５−ヒドロキシペンタデシル）−２−シクロヘキセン−１−オン溶液（１０−８Ｍ）を調製し、ＳＴＡＴ３とリン酸化ＳＴＡＴ３の抗体（ウサギ由来抗ＳＴＡＴ３抗体、Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ社製）を用いてＷｅｓｔｅｒｎ  Ｂｌｏｔを行い、ＳＴＡＴ３のリン酸化に対する２，４，４−トリメチル−３（１５−ヒドロキシペンタデシル）−２−シクロヘキセン−１−オン作用を確認した。【００２３】  その結果は、図２に示したとおり、２，４，４−トリメチル−３（１５−ヒドロキシペンタデシル）−２−シクロヘキセン−１−オン存在下ではＳＴＡＴ３のリン酸化物（Ｐ−ＳＴＡＴ３）のバンドがコントロール（化合物非添加）に比べうすく、ＳＴＡＴ３のリン酸化が抑制されていることが示された。
実施例３【００２４】ｉｎ  ｖｉｔｒｏ試験
３Ｔ３  Ｒａｓ形質転換線維芽細胞のための実験プロトコル
３Ｔ３  Ｒａｓ形質転換線維芽細胞を１０％ＦＢＳ含有ＤＭＥＭ培地で３日間培養すると、非形質転換細胞株との比較して「増殖巣（ｆｏｃｉ）」の出現が認められる。
３Ｔ３  Ｒａｓ形質転換線維芽細胞（マウス由来）又は３Ｔ３線維芽細胞（マウス由来）をそれぞれ１０，０００個／ｍｌの濃度で１０％ＦＢＳ含有ＤＭＥＭ培地で１日間培養する。
その後，それぞれの細胞に１０−５Ｍの２，４，４−トリメチル−３（１５−ヒドロキシペンタデシル）−２−シクロヘキセン−１−オン（又はコントロールとしてエタノール）を６日間処理する。
軟寒天アッセイ
３Ｔ３  Ｒａｓ形質転換線維芽細胞又は３Ｔ３線維芽細胞を、０．６２５％の寒天（ＤＩＦＣＯ）及び１０−６Ｍの２，４，４−トリメチル−３（１５−ヒドロキシペンタデシル）−２−シクロヘキセン−１−オンを含む、５％ＦＢＳ含有ＤＭＥＭ培地中に１０，０００個／ｍｌの濃度で培養する。【００２５】  近年、Ｎｏｔｃｈ１の活性が、Ｒａｓにより形質転換された細胞株の腫瘍性増殖巣を維持するのに必要であることが示された。このような観察は、Ｎｏｔｃｈシグナル伝達を、腫瘍形成Ｒａｓのキー下流エフェクター中へ位置づけ、さらに、Ｎｏｔｃｈが新たな治療上のターゲットになるかもしれないことを確かにするものである（Ｗｅｉｊｚｅｎら、Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄ．（２００２）８，９７９−９８６）。
Ｒａｓにより形質転換された繊維芽細胞を、２，４，４−トリメチル−３（１５−ヒドロキシペンタデシル）−２−シクロヘキセン−１−オン（１０−６Ｍ）により処理し、未処理細胞と比較した。非形質転換の細胞株（処理済み及び未処理）をコントロールとして用いた。
図３より２，４，４−トリメチル−３（１５−ヒドロキシペンタデシル）−２−シクロヘキセン−１−オンが、Ｒａｓによって形質転換された細胞株の腫瘍性増殖巣（ｆｏｃｉ）を減少させることが明らかとなった。この発見は、Ｎｏｔｃｈ１発現の分子的な減少を伴っていた。
実施例４【００２６】ｅｘ  ｖｉｖｏ試験
３Ｔ３  Ｒａｓ形質転換線維芽細胞（マウス由来）又は３Ｔ３線維芽細胞（マウス由来）を、５０μｌ（１０−３Ｍ）の２，４，４−トリメチル−３（１５−ヒドロキシペンタデシル）−２−シクロヘキセン−１−オンを適用して、試験管内で３日間処理する。２ｘ１０７個の細胞を４００μｌのＤＭＥＭ培地に再懸濁し、２００μｌを７週齢のＳｗｉｓｓ  Ｎｕ／Ｎｕマウス（雄）に左右対称に注射する。注射後２日目、８日目、及び１５日目に２，４，４−トリメチル−３（１５−ヒドロキシペンタデシル）−２−シクロヘキセン−１−オンを、マウスにＩＰ投与した。【００２７】  図４よりシクロヘキセノン長鎖アルコールの投与により腫瘍の大きさが減少したことが明らかとなった。【００２８】本発明を特定の態様を参照して詳細に説明したが、本発明の精神と範囲を離れることなく様々な変更および修正が可能であることは、当業者にとって明らかである。
なお、本出願は、２００４年１０月１３日付けで出願された日本特許出願（特願２００４−２９９４１５）に基づいており、その全体が引用により援用される。
【産業上の利用可能性】
【００２９】  式（１）で表される化合物は、優れたＳＴＡＴ３のリン酸化抑制効果及びＮｏｔｃｈ１発現抑制効果を示し、ＳＴＡＴシグナル及びＮｏｔｃｈシグナル伝達系機能障害治療剤として有用である。更には、各種腫瘍や癌および各種神経変性疾患の予防・治療薬として有用である。
【図１】
0004827739.tif 000004
【図２】
0004827739.tif 000005
【図３】
0004827739.tif 000006
【図４】
0004827739.tif 000007