(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
分子内塩または医薬上許容される塩の形態の、Ｌ−カルニチン、アセチルＬ−カルニチンおよびプロピオニルＬ−カルニチンを含む、精子減少・無力・奇形症の治療用医薬組成物。
【請求項２】
精子減少症の治療用の請求項１の医薬組成物。
【請求項３】
精子無力症の治療用の請求項１の医薬組成物。
【請求項４】
精子奇形症の治療用の請求項１の医薬組成物。
【請求項５】
医薬上許容される塩が、塩化物、臭化物、オロチン酸塩、アスパラギン酸塩、酸アスパラギン酸塩、クエン酸塩、酸クエン酸塩、クエン酸マグネシウム塩、リン酸塩、酸リン酸塩、フマル酸塩、酸フマル酸塩、フマル酸マグネシウム塩、グリセロリン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩および酸マレイン酸塩、ムケート、シュウ酸塩、酸シュウ酸塩、パモ酸塩、酸パモ酸塩、硫酸塩、酸硫酸塩、グルコースリン酸塩、酒石酸塩、酸酒石酸塩、酒石酸マグネシウム塩、２−アミノエタンスルホン酸塩、２−アミノエタンスルホン酸マグネシウム塩、メタンスルホン酸塩、コリン酒石酸塩、トリクロロ酢酸塩およびトリフルオロ酢酸塩からなる群から選択される請求項１の医薬組成物。
【請求項６】
分子内塩または医薬上許容される塩の形態の、Ｌ−カルニチン、アセチルＬ−カルニチンおよびプロピオニルＬ−カルニチンが、混合物として存在しているか、または別々に包装されている、請求項１から５のいずれかの医薬組成物。
【請求項７】
分子内塩または医薬上許容される塩の形態の、Ｌ−カルニチンおよびアセチルＬ−カルニチンおよびプロピオニルＬ−カルニチンのモル比が2.48:0.098:0.092〜0.186:0.98:0.92の範囲である請求項６の医薬組成物。
【請求項８】
分子内塩または医薬上許容される塩の形態の、Ｌ−カルニチンおよびアセチルＬ−カルニチンおよびプロピオニルＬ−カルニチンのモル比が2.48:0.49:0.46〜0.62:0.49:0.46の範囲である請求項６の医薬組成物。
【請求項９】
単位用量形態において、Ｌ−カルニチン分子内塩を4.0 g〜0.30 gの範囲の量、アセチルＬ−カルニチン分子内塩を0.20〜2.0 gの範囲の量、そしてプロピオニルＬ−カルニチン分子内塩を0.20 g〜2.0 gの範囲の量、あるいは等モル量のそれらの医薬上許容される塩を含む、請求項７の医薬組成物。
【請求項１０】
単位用量形態が2 gのＬ−カルニチン分子内塩、1 gのアセチルＬ−カルニチン分子内塩および0.5 gのプロピオニルＬ−カルニチン分子内塩または等モル量のそれらの医薬上許容される塩を含む、請求項９の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本明細書に記載する本発明は、あらゆる原因（炎症性、特発性、ホルモン性、または精索静脈瘤に関連する）の精子減少・無力・奇形症（oligoasthenoteratospermia）の治療用医薬の調製のための、Ｌ−カルニチン、アセチルＬ−カルニチンおよびプロピオニルＬ−カルニチンの組み合わせての使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
これらの不妊のすべての形態に共通する最終経路は酸素フリーラジカルの局所的な蓄積である (Pasqualotto F.F. et al.、Fertil. Steril. 73:459-464、1999)。かかる蓄積に打ち勝つために抗酸化薬を利用することができる。
【０００３】
現在医薬市場で入手できる抗酸化薬のほとんど（ビタミンＥ、グルタチオン、ＮＡＤＨ）はクレブス回路とは関係なく作用し、それゆえ薬剤投与量にのみ関連し、細胞の代謝には関係なく作用する。
【０００４】
ヒトの精子形成は(同じ精巣のなかでも)非常に組織分布的および時間的に不均一であるため(Silber S. J.、Clin. Obstet. Gynaecol. 43:843-888、1999)、抗酸化薬の「固定された」用量を確立することができない。というのは、固定された用量によって用量過剰や用量不足ということになるからである。
【０００５】
酸素フリーラジカルを低下させすぎると精子の先体および受精能獲得反応が阻害されるが(Ochendorf F.R.、Hum. Reprod. Update. 5:399-402,1999)、酸素フリーラジカルが高濃度にすぎると精子自体の形態異常が起こる(Gattuccio F.、et. al.、Varicocele 2000、Cofese Editore、Palermo 2000)。
【０００６】
Human Reprod. 13:3090-3093、1998では、半定量的スコア付けシステムがUS Dopplerに基づいて提案されており、その結果閉塞性および非閉塞性の無精子症の区別ができる。
【０００７】
Human. Reprod. 15:2554-2558、2000では、中央線縦隔（transmediastinic）精巣動脈の抵抗性インデックスは非閉塞性無精子症対象の方が対照及び精子減少無力症（oligoasthenospermic）の対象よりも有意に高いことが報告されている。
【０００８】
Fertil. Steril. 75:1088-1094、2001では、精巣動脈の拍動性インデックスは閉塞性無精子症における方が非閉塞性無精子症におけるよりも高いことが報告されている。
【０００９】
J. Urol. 163:135、2000では、精巣内の血流および血液流速は精子形成の成熟が止まっている対象、即ち生殖細胞の発育不全における場合の方が有意に低いことが報告されている。
【００１０】
精子は精巣で産生され、受精能力を獲得するために精巣上体において性腺後の成熟を経る。
【００１１】
血漿においては、高分子量タンパク質および遊離のカルニチンなどの低分子が配偶子の能力のある機能性細胞への成熟を助ける。
【００１２】
血漿から送られる精巣上体のＬ−カルニチンは精子に対して有益な効果をもたらす。Ｌ−カルニチンは受動拡散によって精子に入り、成熟した精子においてのみアセチル化される。
【００１３】
遊離およびアセチル化カルニチンの内在プールと精子運動の割合の向上の関係は、鞭毛運動のより重要な代謝機能を示す。
【００１４】
したがって、精巣上体における精子運動の開始はおそらくカルニチン系に依存していないが、アセチルＬ−カルニチンのエネルギー特性は「エネルギー危機」状況に関係がある。
【００１５】
成熟した精子の細胞質における遊離のカルニチンの蓄積は、このような単離細胞の生存に有用なミトコンドリア代謝の保護形態であるとみなすべきである。
【００１６】
Ｌ−カルニチン、アセチルＬ−カルニチンおよびプロピオニルＬ−カルニチンの組み合わせての使用は既に知られている。
【００１７】
欧州特許第０９７３４１５号には、Ｌ−カルニチン、アセチルＬ−カルニチンおよびプロピオニルＬ−カルニチンからなる食用組成物であって、激しい運動を行う運動選手または無力症の対象に有用な組成物が記載されている。
【００１８】
特許出願第ＷＯ９９／１７６２３号には、アルコール禁断症候群の治療のためのＬ−カルニチン、アセチルＬ−カルニチンおよびプロピオニルＬ−カルニチンからなる食用組成物が記載されている。
【００１９】
男性不妊の治療のためのＬ−カルニチンおよびアルカノイルＬ−カルニチンの使用も知られている。
【００２０】
Drugs Exptl. Clin. Res. XXI(4):157-159、1995では、Ｌ−カルニチンの、特発性精子無力症の患者群への投与により、精子運動性が向上し、治療された４７名の患者のうち３７名において精子数が増加したことが報告されている。
【００２１】
Dermatol. Monatschr. 169:572-575、1983では、同じ結果が確認されている。
【００２２】
Andrologia、26:155-159、1994では、不妊患者へのＬ−カルニチンの投与により精子運動性において定性的および定量的に有意な向上がもたらされたことが報告されている。
【００２３】
Fertilitat 4:1-4、1988では、不妊患者のＬ−カルニチンによる治療により精子中のカルニチンレベルの上昇とともに精子運動性と精子数の上昇がもたらされたことが報告されている。
【００２４】
Loumbakis P.、et al. (12th Congress of the European Asso-ciation of Urology、Paris、1-4 September、1996)は、Ｌ−カルニチンの投与は精子の質に対して良好な効果を有するであろうことを示す予備的データを報告している。
【００２５】
Acta Eur. Fertil. 23(5):221-224、1992では、特発性精子減少無力症(oligoastheno-spermia)患者へのアセチルＬ−カルニチンの使用は精子密度には影響が無いが、精子運動性の上昇を誘導することが報告されている。
【００２６】
米国特許第６０９０８４８号では、Ｌ−カルニチンとアセチルＬ−カルニチンの組み合わせが精子減少・無力・奇形症(oligoasthenoteratospermia)の治療に有用であることが報告されている。
【００２７】
上記の公知の化合物は確かに良好な治療薬であるとみなされているが、しかし多くの欠点を有する。
【００２８】
実際、上記のように、Drugs Exptl. Clin. Res. XXI (4):157-159、1995では、特発性精子減少・無力・奇形症患者群へのＬ−カルニチンの投与により治療された４７名の患者のうち３７名において精子数と精子運動性が向上することが報告されているが、Acta Eur. Fertil. 23(5):221-224、1992では、特発性精子減少無力症患者におけるアセチルＬ−カルニチンの使用は精子密度に対して効果を有さないことが報告されている。
【００２９】
今日まで最良のものであると考えられていた米国特許第６０９０８４８号に記載の組み合わせを本発明による組成物の活性の研究において標準化合物として用いた。得られた結果は、以下に報告するように、米国特許第６０９０８４８号に記載の組成物の活性を確認したが、以下に示すように驚くべきことに、また予期せぬことに、本発明による組み合わせは米国特許第６０９０８４８号に記載の組成物よりも活性が高いことが確認された。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００３０】
医薬分野において、上記公知化合物の欠点を示さず、今日まで最良として知られていた組成物からえられる結果を向上させるような精子減少・無力・奇形症の治療に有用な組成物の必要性が強く認識されている。
【課題を解決するための手段】
【００３１】
このたび、Ｌ−カルニチン、アセチルＬ−カルニチンおよびプロピオニルＬ−カルニチンまたはその医薬上許容される塩の１つの組み合わせての使用によりあらゆる形態の精子減少・無力・奇形症の治療において驚くべき相乗効果が発揮されることが見いだされた。
【００３２】
それゆえ本発明の１つの目的は、Ｌ−カルニチン、アセチルＬ−カルニチンおよびプロピオニルＬ−カルニチン分子内塩またはそれらの医薬上許容される塩の精子減少・無力・奇形症の治療用医薬の調製のための使用である。
【００３３】
本発明のさらなる目的は、Ｌ−カルニチン、アセチルＬ−カルニチンおよびプロピオニルＬ−カルニチン分子内塩またはそれらの医薬上許容される塩の精子減少症の治療用医薬の調製のための使用である。
【００３４】
本発明のさらなる目的は、Ｌ−カルニチン、アセチルＬ−カルニチンおよびプロピオニルＬ−カルニチン分子内塩またはそれらの医薬上許容される塩の精子無力症の治療用医薬の調製のための使用である。
【００３５】
本発明のさらなる目的は、Ｌ−カルニチン、アセチルＬ−カルニチンおよびプロピオニルＬ−カルニチン分子内塩またはそれらの医薬上許容される塩の精子奇形症（teratospermia）の治療用医薬の調製のための使用である。
【００３６】
本発明のさらなる目的は、Ｌ−カルニチン、アセチルＬ−カルニチンおよびプロピオニルＬ−カルニチンまたはそれらの医薬上許容される塩の精子減少・無力・奇形症の治療用栄養組成物の調製のための使用である。
【００３７】
本発明のさらなる目的は、Ｌ−カルニチン、アセチルＬ−カルニチンおよびプロピオニルＬ−カルニチンまたはそれらの医薬上許容される塩の精子減少症の治療用栄養組成物の調製のための使用である。
【００３８】
本発明のさらなる目的は、Ｌ−カルニチン、アセチルＬ−カルニチンおよびプロピオニルＬ−カルニチンまたはそれらの医薬上許容される塩の精子無力症の治療用栄養組成物の調製のための使用である。
【００３９】
本発明のさらなる目的は、Ｌ−カルニチン、アセチルＬ−カルニチンおよびプロピオニルＬ−カルニチンまたはそれらの医薬上許容される塩の精子奇形症の治療用栄養組成物の調製のための使用である。
【００４０】
このたび、男性の精子数と精子運動性の向上において、上記のＬ−カルニチンとアセチルＬ−カルニチンの組み合わせと比較して本発明による組み合わせの方が活性が高いことを見いだした。
【００４１】
Ｌ−カルニチン、アセチルＬ−カルニチンおよびプロピオニルＬ−カルニチンは男性における経口または非経口投与に好適であればいかなる形態であってもよい。
【００４２】
Ｌ−カルニチン、アセチルＬ−カルニチンおよびプロピオニルＬ−カルニチンは、公知の方法を用いて、混合物としてともに製剤してもよいし、別々に製剤(別々に包装)してもよい。Ｌ−カルニチン、アセチルＬ−カルニチンおよびプロピオニルＬ−カルニチンは、個人に、混合物として製剤して投与してもよいし、別々の包装中に製剤して投与してもよい。
【００４３】
様々な因子、例えば、活性成分の濃度や患者の症状に基づいて、本発明による組み合わせは健康食品サプリメント、栄養補助食、または市販の治療薬（処方箋の必要なものでも不要なものでもよい）として上市することができる。
【００４４】
本発明によると、Ｌ−カルニチンおよびアセチルＬ−カルニチンおよびプロピオニルＬ−カルニチンまたはその医薬上許容される塩の１つのモル比は、2.48:0.098:0.092〜0.186:0.98:0.92の範囲である。
【００４５】
あるいはモル比には2.48:0.49:0.46〜0.62:0.49:0.46の範囲のモル比が含まれる。
【００４６】
あるいはモル比には2.48:0.98:0.92 〜1.24:0.49:0.23の範囲のモル比が含まれる。
【００４７】
本発明による組み合わせ調製物は、単位用量形態における場合、4.0 g 〜 0.30 gのＬ−カルニチン分子内塩、0.20〜2.0 gのアセチルＬ−カルニチン分子内塩および0.20 g 〜 2.0 gのプロピオニルＬ−カルニチン分子内塩、または等モル量のそれらの医薬上許容される塩の１つを含む。
【００４８】
好ましい組み合わせ調製物は、単位用量形態における場合、2 gのＬ−カルニチン分子内塩、1 gのアセチルＬ−カルニチン分子内塩および0.5 gのプロピオニルＬ−カルニチン分子内塩、または等モル量のそれらの医薬上許容される塩の１つを含む。
【００４９】
しかしこのたび、投与すべき上記活性成分の１日用量は、専門家の経験により患者の年齢、体重および症状に応じて変動するが、一般に１日用量は単一用量または複数用量において、およそ0.3〜4.0 g/日のＬ−カルニチン、およそ0.20〜2.0 g/日のアセチルＬ−カルニチン、そしておよそ0.20〜2.0 g/日のプロピオニルＬ−カルニチン、または等モル量のそれらの医薬上許容される塩の１つを投与することが推奨されるということが見いだされた。
【００５０】
該活性成分は非常に毒性が低いため、より多い用量を投与してもよい。
【００５１】
以下にＬ−カルニチンとアセチルＬ−カルニチンとの併用療法と比較して本発明による組み合わせが精子運動性を改善させるか否かを評価するために行った臨床試験を報告する。
【００５２】
募集した患者は以下の包含/排除基準を満たさなければならない。
【００５３】
包含基準: 少なくとも以前２年以上不妊の唯一の原因として精子無力症であるとされた若い不妊男性;少なくとも２つのサンプルにおいて満たさなければならない精液基準:精子濃度(M/ml)、10〜20、運動性(%)、２時間目にて >20 <40、迅速な直線進行(%)、２時間目にて <20。問診、両側陰嚢のエコーカラードップラー（echo-colour Doppler）、理学的検査、ホルモンアッセイ (遊離および総テストステロン、FSH、LH、17βエストラジオール、プロゲステロン、プロラクチン)、およびスペルミオグラム（spermiogram）(WHO 1999)を患者に対して行った。
【００５４】
排除基準:急性生殖期炎症、精子濃度、<5,000,000/ ml。すべての患者にこの公開実験への参加についてのインフォームドコンセントを行った。全部で調査した患者は、精索静脈瘤の８名の患者 (６名はグレードII、２名はグレードIII)、性腺慢性炎症の１２名の患者、精索静脈瘤(８名はグレードII、４名はグレードIII)に加えて性腺慢性炎症である１２名の患者、特発性精子減少無力症の２５名の患者、低ゴナドトロピン性生殖機能不全の２名の患者、高プロラクチン症の１名の患者、手術歴のある４名(３名は片側停留睾丸（cryptorchidia）、１名は両側停留睾丸)および両側睾丸外傷の２名であった。
【００５５】
少なくとも４日間の性的禁断の後にオナニーにより精液を得た。精液サンプルをすべてのパラメーターについてWHO (1987)によって推奨されている標準方法を用いて射精の１時間以内に分析した。精子運動性は、コンピュータによる運動性分析機を用いて少なくとも２つのサンプルに対して調べた。
【００５６】
精液の分析と運動性評価は被験化合物による処置前と被験化合物による処置の４ヶ月後に行った。
【００５７】
Ｌ−カルニチンは 2 g/日(2 x 500 mg 錠剤、１日２回、食後)の用量で４ヶ月間投与した; アセチルＬ−カルニチンは1 g/日の用量で４ヶ月間投与し、プロピオニルＬ−カルニチンは500 mg/日の用量で４ヶ月間投与した。
【００５８】
本発明による組み合わせは、精子減少・無力・奇形症の原因にかかわらず、ホルモン異常の患者においても、精子の濃度および運動性ならびに迅速な直線進行を行う精子の割合を、Ｌ−カルニチンとアセチルＬ−カルニチンとの組み合わせによる処置と比較して有意に上昇させた。
【００５９】
後者において、本発明による組み合わせにより、文献に今日まで報告されているのと比較して、性腺刺激ホルモンおよび抗プロラクチン症（antiprolactinaemia)薬の薬量を低減させることが可能となった。
【００６０】
本明細書に記載する本発明による医薬は、活性成分(Ｌ−カルニチン分子内塩、アセチルＬ−カルニチン分子内塩およびプロピオニルＬ−カルニチン分子内塩またはそれらの医薬上許容される塩の１つ)と経腸(特に経口)または非経口(特に筋肉内、静脈内)投与用組成物の製剤に好適な賦形剤を混合することによって調製できる。医薬分野の専門家はかかる賦形剤に精通している。
【００６１】
上記活性成分の医薬上許容される塩にはＬ−カルニチン、アセチルＬ−カルニチンおよびプロピオニルＬ−カルニチン分子内塩に酸を付加して調製され、望ましくない毒性または副作用を引き起こさないあらゆる医薬上許容される塩が含まれる。酸の付加による塩の形成は医薬分野で周知である。
【００６２】
かかる塩の例としては、これらに限定されないが以下のものが挙げられる: 塩化物、臭化物、オロチン酸塩、アスパラギン酸塩、酸アスパラギン酸塩、クエン酸塩、酸クエン酸塩、クエン酸マグネシウム塩、リン酸塩、酸リン酸塩、フマル酸塩、酸フマル酸塩、フマル酸マグネシウム塩、グリセロリン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩および酸マレイン酸塩、ムケート（mucate）、シュウ酸塩、酸シュウ酸塩、パモ酸塩、酸パモ酸塩、硫酸塩、酸硫酸塩、グルコースリン酸塩、酒石酸塩、酸酒石酸塩、 酒石酸マグネシウム塩、２−アミノエタンスルホン酸塩、 ２−アミノエタンスルホン酸マグネシウム塩、メタンスルホン酸塩、コリン酒石酸塩、トリクロロ酢酸塩およびトリフルオロ酢酸塩。