(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（１）もしくは（２）：
【化１】
0004666861.tif 000024
［式中、Ｒ１は式２ａ、２ｂもしくは２ｃ
【化２】
0004666861.tif 000025
の基であり、
Ｒ２はＨもしくはＯＨであり、
Ｒ３はＨもしくはＣＨ3であり、
式１中のＲ４は１−ブテニル、１，３−ブタジエニル、ｎ−ブチル、３−ヒドロキシ−１−ブテニルもしくは１−プロペニルであり、式２中のＲ４はエチルであり、
そして
Ｒ５はＨもしくは下記式４ａから４ｉ
【化３】
0004666861.tif 000026
の中の１つを有する基である］
の化合物もしくはその塩。
【請求項２】
Ｒ５が下記式４ａから４ｉ
【化４】
0004666861.tif 000027
の中の１つを有する基である請求項１に記載の化合物もしくはその塩。
【請求項３】
植物学的にもしくは生理学的に許容し得る担体と組み合わせた状態で、昆虫、ダニもしくはマダニを不活性化する量の請求項２に記載の化合物を含んでなる殺虫もしくは殺ダニ組成物。
【請求項４】
昆虫、ダニもしくはマダニを不活性化する量の請求項２に記載の化合物を人体以外の昆虫、ダニもしくはマダニの活動場所に施用することを含んでなる、殺虫もしくは殺ダニ方法。
【請求項５】
昆虫、ダニもしくはマダニを不活性化する量の請求項２に記載の化合物を人体以外の昆虫、ダニもしくはマダニの活動場所に施用することを含んでなる、昆虫、ダニもしくはマダニの寄生から該活動場所を保護する方法。
【請求項６】
寄生虫を殺す量の請求項２に記載の化合物をヒト以外の宿主動物に投与することを含んでなる、ヒト以外の宿主動物に寄生する寄生動物集団の防除方法。
【請求項７】
請求項１に記載の化合物を産生する、サッカロポリスポラ・スペーシス（Ｓａｃｃｈａｒｏｐｏｌｙｓｐｏｒａ  ｓｐｅｃｉｅｓ）ＮＲＲＬ３０１４１もしくはそれらから派生した菌株を、適切な培地中で、水中の好気性発酵条件下に、回収可能な量の請求項１に記載の化合物が産生されるまで培養し、該培地から請求項１に記載の化合物を回収することを含んでなる、請求項１に記載の化合物の製造方法。
【請求項８】
請求項１に記載の化合物を産生する、サッカロポリスポラ・スペーシス（Ｓａｃｃｈａｒｏｐｏｌｙｓｐｏｒａ  ｓｐｅｃｉｅｓ）ＮＲＲＬ３０１４１の生物学的に純粋な培養菌もしくはそれらから派生した菌株。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、天然の有害生物防除性生成物の新しいグループ、及び該化合物を産生する新規なサッカロポリスポラ・スペーシス（Ｓａｃｃｈａｒｏｐｏｌｙｓｐｏｒａ  ｓｐｅｃｉｅｓ）に関する。
【０００２】
発酵産生物Ａ８３５４３は、サッカロポリスポラスピノサ（Ｓａｃｃｈａｒｏｐｏｌｙｓｐｏｒａ  ｓｐｉｎｏｓａ）のある種の菌株によって産生される、（スピノシン類（ｓｐｉｎｏｓｙｎｓ）と称される）一群の化合物である。以前に開示された天然産のスピノシン類は、１２の部分から成る大環状のラクトン、中性の糖［ラムノース（ｒｈａｍｎｏｓｅ）］及びアミノ糖［ホロサミン（ｆｏｒｏｓａｍｉｎｅ）］に縮合した５，６，５−三環性環系をもっている（Ｋｉｒｓｔ  ｅｔ  ａｌ．（１９９１）参照）。これらの知られているスピノシン類は、要素もしくは成分として称され、確認用の文字による名称、すなわちスピノシンＡ，Ｂ等をそれぞれ与えられた。これらの化合物は、クモガタ綱の動物、線虫類及び昆虫、特に鱗翅目（Ｌｅｐｉｄｏｐｔｅｒａ）及び双翅目（Ｄｉｐｔｅｒａ）の種族を防除するのに有用であり、これらの化合物は事実上環境に優しく、魅力的な毒物学上の輪郭を示す。
【０００３】
米国特許第５，３６２，６３４号及び対応するヨーロッパ特許出願第３７５３１６Ａ１はスピノシン類Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ及びＪを開示している。ＷＯ９３／０９１２６はスピノシン類Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ及びＴを開示している。ＷＯ９４／２０５１８及びＵＳ５，６７０４，４８６はスピノシン類Ｋ、Ｏ、Ｐ、Ｕ、Ｖ、Ｗ及びＹ、並びにそれらの誘導体を開示している。
【０００４】
ＷＯ９７／００２６５に開示されるようにスピノシン化合物に対する多数の合成的修飾が行われたけれども、Ｃ−１２位におけるスピノシン類の修飾は実行できなかった。これらの知られた化合物のＣ−２１はメチルもしくはエチルで置換される。分子の他の部分に不必要な変化を引き起こすことなしにメチル基もしくはエチル基の代わりに反応性官能基を導入する手段を見出すことができたならば、さらに多くのスピノシン化合物の合成方法が明らかにされたであろう。このことは、スピノシン合成の分野におけるそれらの活動に関して長期にわたって試みられ、且つ、以前には実現されない目標であった。
【０００５】
発明の概要
本発明は、ＬＷ１０７１２９（ＮＲＲＬ  ３０１４１）と呼ばれる新規なサッカロポリスポラ・スペーシス（Ｓａｃｃｈａｒｏｐｏｌｙｓｐｏｒａ  ｓｐｅｃｉｅｓ）の単離された菌株を提供する。
【０００６】
本発明は、適切な培地中でＬＷ１０７１２９を培養して産生され得ると共に、一般式１もしくは２：
【０００７】
【化５】
0004666861.tif 000002
【０００８】
［式中、Ｒ１は式２ａ、２ｂもしくは２ｃ
【０００９】
【化６】
0004666861.tif 000003
【００１０】
の基であり、
Ｒ２はＨもしくはＯＨであり、
Ｒ３はＨもしくはＣＨ3 であり、
式１中のＲ４は１−ブテニル、１，３−ブタジエニル、ｎ−ブチル、３−ヒドロキシ−１−ブテニルもしくは１−プロペニルであり、また、式２中のＲ４はエチルであり、
そしてＲ５はＨもしくは下記の式４ａから４ｉ
【００１１】
【化７】
0004666861.tif 000004
【００１２】
の中の１つを有する基である。］
を有する化合物をも提供する。
【００１３】
サッカロポリスポラ菌株ＬＷ１０７１２９を培養して製造単離された式１もしくは２の特定の化合物は表Ｉにおいて同定される。
【００１４】
【表１】
0004666861.tif 000005
【００１５】
基Ｒ４について、以前から知られているスピノシン化合物は、マクロライドのＣ−２１に１−ブテニル、３−ヒドロキシ−１−ブテニル、１，３−ブタジエニル、１−プロペニルもしくはｎ−ブチル基を有していないので、表Ｉに列挙した成分のすべては以前から知られているスピノシン類とは構造的に異なっている。さらに、基Ｒ５について、これらの化合物はマクロライド上のＣ−１７が酸素と結合した新しい基を有しているので、表Ｉの化合物の幾つかは以前から知られている全てのスピノシンとは相違する。知られているスピノシンではＲ２は常にＨであり、従ってこの位置に変化があることは新規である。さらに、化合物３１は、サッカロポリスポラ・スピノサ（Ｓ．ｓｐｉｎｏｓａ）について報告された化合物について以前には知られていない新しい１４−炭素のマクロライド環系を有している。
【００１６】
本発明の化合物は塩類を形成するように反応させることができる。生理学的に許容し得る塩類も、本発明の製剤、及び本発明の方法に有用である。この塩類は、塩製造用の標準的な手順を用いて製造する。例えば、本発明の化合物は、適切な酸を用いて中和すると酸付加塩を形成することができる。これらの酸付加塩類は特に有用である。代表的な適切な酸付加塩類としては、例えば硫酸、塩酸、リン酸、酢酸、コハク酸、クエン酸、乳酸、マレイン酸、フマル酸、コール酸、パモ酸（ｐａｍｏｉｃ  ａｃｉｄ）、粘液酸、グルタミン酸、ショウノウ酸、グルタル酸、グリコール酸、フタル酸、酒石酸、ギ酸、ラウリン酸、ステアリン酸、サリチル酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ソルビン酸、ピクリン酸、安息香酸、ケイ皮酸及び同効の酸類等の有機酸かまたは無機酸のいずれかとの反応により形成される塩類を挙げることができる。
【００１７】
本発明の別の局面は、適切な培地中でサッカロポリスポラ菌株ＬＷ１０７１２９（ＮＲＲＬ  ３０１４１）を培養することを含んで成る、式１及び２の化合物の製造方法である。式１及び式２の化合物は、極性有機溶媒を用いて発酵培養液及び菌糸体から抽出する。これらの化合物は、カラムクロマトグラフィー等の当業者に周知の技術でさらに精製される。
【００１８】
Ｒ５が式４ａから４ｉの中の一つを有する基である式１及び２の化合物は、ダニ、マダニ及び昆虫の防除用に有用である。従って、殺虫剤組成物と殺ダニ剤組成物及びこれらの化合物を用いて昆虫、ダニ及びマダニの集団を征服する方法も本発明の一部分である。
【００１９】
Ｒ５が水素である式１及び２の化合物（Ｃ１７−シュードアグリコン類）は、殺虫性及び殺ダニ性化合物の製造における中間体として有用である。例えば、これらの化合物はＣ−１７のヒドロキシル基がグリコシル化され得る。グリコシル化は、例えばＵＳ  ５，５３９，０８９に説明されている手順を用いて、化学的合成もしくは微生物による生物変換（ｂｉｏｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎ）により行うことができよう。
【００２０】
発明の詳細な記述
培養の説明
本発明の化合物を産生する新規な菌株は名称ＬＷ１０７１２９を与えられた。培養菌ＬＷ１０７１２９は多数の場所で収集された土壌から成る土壌試料から単離される。培養菌は、ブダペスト条約の条件に従って、ペオリア、ノースユニバーシティ  ８１５番街ＩＬ６１６０４の合衆国農業局、農業研究部、中西部地方研究センターに寄託された。この菌株は、１９９９年６月９日に寄託され、寄託番号ＮＲＲＬ  ３０１４１に指定された。
【００２１】
培養菌の特性
サッカロポリスポラ菌株ＬＷ１０７１２９は、下記培地：
ベンネット（Ｂｅｎｎｅｔｔ´ｓ）、ＩＳＰ２及びＩＳＰ５上で気中性の菌糸体と鮮明な白色の胞子を産生する。群落は色がクリーム乃至淡い黄褐色で、基質の菌糸体は、淡い褐色の上、特にＩＳＰ４及びＩＳＰ５上で根付くことができる。菌株ＬＷ１０７１２９はＩＳＰ３及びＩＳＰ４上では胞子を形成しない。テストしたいずれの培地上でも色素を全く産生しなかった。菌株ＬＷ１０７１２９の菌糸体は液体培養では無糸分裂を受ける。
【００２２】
形態学上の特性
菌株ＬＷ１０７１２９は、５０個までの胞子がつながって卵形の胞子を産生する。これらの胞子は胞子のさやに包み込まれており、胞子の表面にはとびとびのとげを伴ってでこぼこになっている。
【００２３】
生理学上の特性
サッカロポリスポラ菌株ＬＷ１０７１２９は下記の基質（ｓｕｂｓｔｒａｔｅｓ）から酸を産生することができる：Ｄ−アラビノース、ｍ−エリトリトール、Ｄ−フルクトース、Ｄ−グルコース、グリセリン、Ｄ−マンニトール、Ｄ−マンノース、Ｌ−ラムノース、Ｄ−リボース及びトレハロース。菌株ＬＷ１０７１２９はアドニトール、Ｌ−アラビノース、デキストリン、ズルシトール、エタノール、Ｄ−ガラクトース、グリコーゲン、イノシトール、ラクトース、マルトース、メレジトース、メリビオース、ラフィノース、サリシン、Ｄ−ソルビトール、Ｌ−ソルボース、スクロース、キシリトール及びＤ−キシロースからは酸を産生し得ない。菌株ＬＷ１０７１２９は、クエン酸エステル及びコハク酸エステルを含めて数個の有機酸を同化することができるけれども、酢酸エステル、安息香酸エステル、酪酸エステル、ギ酸エステル、シュウ酸エステルもしくは酒石酸エステルを同化し得ない。菌株ＬＷ１０７１２９は、チロシン及び尿素を加水分解することができるけれども、アデニン、カゼイン、エスクリン、馬尿酸エステル、ヒポキサンチン、デンプンもしくはキサンチンを加水分解し得ない。ＬＷ１０７１２９は抗生物質：カルベニシリン、セファロチン、シクロヘキシミド、ゲネチシン、リンコマイシン、ナリジクス酸、ノボビオシン、オキシテトラサイクリン、ポリミキシン  Ｂ、リファンピン及びスペクチノマイシンに対して耐性があり、バシトラシン、クロランフェニコール、エリスロマイシン、ヒグロマイシン  Ｂ、ストレプトマイシン、チオストレプトン、トリメトプリム及びバンコマイシンに対して敏感である。
【００２４】
代謝物質産生方法
式１及び２の代謝物質を、以下に説明するように、発酵培地中で菌株ＬＷ１０７１２９を培養して産生させる。ＬＷ１０７１２９の培養菌を栄養性培地中に接種し、２５０ｒｐｍで振とうさせながら３０℃で４８時間成長させる。この完全に発達した最初の段階の栄養性培養菌５０ミリリットルを、２リットルの培養フラスコ中の１リットルの栄養性培地について次の栄養性培養菌を接種するのに使用する。この培養菌を１９５ｒｐｍで振とうしながら３０℃で４８時間培養する。完全に発達した第２の段階の種母（ｓｅｅｄ）を、実施例１で説明するように、撹拌されたタンク式発酵容器中の培地７０リットルを接種するのに使用する。
【００２５】
培養液の抽出物をテストすることによって、式１及び２の化合物の産生を発酵中に追跡することができる。この産生を追跡するための好ましい方法は、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により培養液抽出物を分析することである。分析に適切なシステムを実施例２において説明する。
【００２６】
実施例１
発酵による代謝物質の製造
式１及び２の代謝物質は、後段で説明するように、発酵培地中で菌株ＬＷ１０７１２９を培養して製造する。ＬＷ１０７１２９の凍結栄養性培養菌１ｍＬを溶かし、５００ｍＬエルレンマイヤーフラスコ中の栄養性培地１００ｍＬ中に接種し、２５０ｒｐｍで振とうしながら３０℃で４８時間成長させた。
【００２７】
0004666861.tif 000006
この完全に発達した最初の段階の栄養性培養菌５０ミリリットルを、２リットルの培養フラスコ中の１リットルの栄養性培地について次の栄養性培養菌を接種するのに使用した。この培養菌を１９５ｒｐｍで振とうしながら３０℃で４８時間培養した。完全に発達した第２の段階の種を、撹拌タンク式発酵容器中の発酵培地７０リットルの接種に使用した。
【００２８】
0004666861.tif 000007
発酵を３０℃、４００ｒｐｍで７〜１２日間維持した。
【００２９】
熟成した発酵ビールを適切な溶媒で抽出することができ、また代謝物質を塩形成及び／又はクロマトグラフィー分離により回収することができる。
【００３０】
実施例２
高速液体クロマトグラフィーによる評価法
次に述べる高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）法は、式１及び２の化合物を産生させるための発酵を監視するのに有用である：
発酵培養液の分取容積に等しい容積の変成エタノールを加える。この混合物を振とうし、最低１時間静置させる。細胞の砕片全部を除去するために、試料を遠心分離機にかけ、次に１ｍＬの分取試料を微小遠心（ｍｉｃｒｏｆｕｇｅ）する。次に、透明になった抽出物を次に述べる高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）システムで分析する。
ＨＰＬＣシステム：
カラム固定相：２５０ｍｍ×４．６ｍｍカラム、塩基で不活性化したシリ
カゲル５μｍＣ８（Ｈｙｐｅｒｓｉｌ−Ｃ８−ＢＤＳ）．
移動相：下段に要約した、１０ｍＭ−酢酸アンモニウム−メタノール−アセトニトリルの線形傾斜
0004666861.tif 000008
その場合、溶媒Ａは１０ｍＭの酢酸アンモニウムであり、溶媒Ｂはメタノール―アセトニトリル（１：１）である。
【００３１】
流量：１ｍＬ／分
検出：２５０ｎｍの紫外線
下段に要約した通りの主要な物質の保持時間：
0004666861.tif 000009
実施例３
殺虫上活性な代謝物質の、培養菌培養液からの単離、
次に述べる実施例は、培養したＬＷ１０７１２９の代表的なバッチから式１の化合物が如何に多量に単離されたかを示す。この実施例は、化合物１、３、７、８、１２、１３、１４、１５、１７、１８、１９、２０及び２１を単離するのに用いる特定の手順を与える。上に列挙した化合物よりも低い量で生物によって産生された化合物２、４、５、６、９、１０、１１、１６、２２及び２３〜３１は、培養液抽出物の比較的大きなバッチに適用される、極めて類似の方法を用いて単離された。この方法は非常に似ており、また、当業者はこの方法に精通しているので、ここではこの方法について詳細に説明しない。
【００３２】
接種した培地５リットルの発酵からの全培養物、すなわち細胞に培養液を加えたものは、発酵完了後、ほぼ３．５リットルの全容量を示した。この試料と等容積の変成エタノールを用いて激しく振とうすることにより試料を抽出し、その後室温で２時間静置させた。細胞の砕片を遠心分離によって除去し、ジクロロメタンを用いて５０％水性エタノール抽出物に対する抽出を行った（ＤＣＭ：２×７リットル）。ＤＣＭ抽出物を濃縮して薄い黄色の油状物（３．３ｇ）を生じさせた。この油状物をメタノールに溶解し、等しい量の２つのアリコート（分取）に分割した。これらのそれぞれをシリカゲルを含むカラム（４×１５ｃｍ；３２〜６３μｍ；Ｂｉｏｔａｇｅ，Ｉｎｃ．，Ｕ．Ｓ．Ａ）上でクロマトグラフィーにかけた。次に述べる線形溶媒傾斜を用いて２０ｍＬ／分でそれぞれのカラムを溶離させ、その後、溶媒Ｇ（１００ｍＬ）の最後のアリコートを流して洗浄した：
【００３３】
【表２】
0004666861.tif 000010
【００３４】
その場合、溶媒の組成（容量％）は次の通りであった：
【００３５】
【表３】
0004666861.tif 000011
【００３６】
溶離中、画分（３０秒；それぞれ１０ｍＬ）を集めた。これらの画分を実施例２で説明した手順に従って高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）で分析し、次に類似する極性成分を含む各シリカゲルカラム断面からの画分をプールすると、次の通りであった。
【００３７】
0004666861.tif 000012
下段で説明するように、さらに分別を行う前に、これらのプールした画分を真空下で乾燥し、メタノールに再び溶解させる。
【００３８】
画分ＳＩ−１のアリコートをＣ−８逆相シリカゲル（Ｈｙｐｅｒｓｉｌ−ＢＤＳ−Ｃ８）のカラム（２５０×１０ｍｍ；粒径８μｍ）に加えた。カラムに加えた試料を酢酸アンモニウム（１０ｍＭ）−メタノール−アセトニトリル（３０：３５：３５）を用いてクロマトグラフィーにかけ、３ｍＬ／分で溶出させ、０．７５ｍＬの画分を集めた。化合物１７を含む画分をプールし、乾燥するまで濃縮し、１４．９ｍｇの純粋な化合物１７を得た。化合物１８を含む画分をプールし、乾燥するまで濃縮し、１．４ｍｇの純粋な化合物１８を得た。化合物１２を含む画分をプールし、乾燥するまで濃縮し、４．２ｍｇの純粋な化合物１２を得た。
画分ＳＩ−２のアリコートをＣ−８逆相シリカゲル（Ｈｙｐｅｒｓｉｌ−ＢＤＳ−Ｃ８）のカラム（２５０×１０ｍｍ，粒径８μｍ）に加えた。このカラムに加えた試料を後段で詳細に説明する、酢酸アンモニウム（１０ｍＭ）−メタノール−アセトニトリルの線形傾斜を用いてクロマトグラフィーにかけ、３ｍＬ／分で溶出させ、０．７５ｍＬの画分を集めた。
【００３９】
0004666861.tif 000013
Ａ＝１０ｍＭ酢酸アンモニウム
Ｂ＝メタノール−アセトニトリル（１：１）
化合物２０を含む画分をプールし、乾燥するまで濃縮して１１．５ｍｇの純粋な化合物２０を得た。化合物１９を含む画分をプールし、乾燥するまで濃縮して３．９ｍｇの純粋な化合物１９を得た。化合物１４を含む画分をプールし、乾燥するまで濃縮して２．０ｍｇの純粋な化合物１４を得た。化合物１３を含む画分をプールし、乾燥するまで濃縮して４．９ｍｇの純粋な化合物１３を得た。化合物１５を含む画分をプールし、乾燥するまで濃縮して、２．３ｍｇの純粋な化合物１５を得た。化合物２１の２個の２４−エピマー異性体を含む画分をプールし、乾燥するまで濃縮して、２個の異性体の混合物１５ｍｇを得た。この混合物をメタノールに溶解し、Ｃ−８逆相シリカゲル（Ｈｙｐｅｒｓｉｌ−ＢＤＳ−Ｃ８）のカラム（２５０×１０ｍｍ；粒径８μｍ）に加えた。このカラムに加えた試料を、酢酸アンモニウム（１０ｍＭ）−メタノール−アセトニトリル（８５：７．５：７．５）を用いてクロマトグラフィーにかけ、３ｍＬ／分で溶出させ３ｍＬの画分を集めた。化合物２１の一方の異性体（＃１）を含む画分をプールし、乾燥するまで濃縮して９．８ｍｇの純粋な化合物２１の一方の異性体（＃１）を得た。化合物２１の他方の異性体（＃２）を含む画分をプールし、乾燥するまで濃縮して４．７ｍｇの純粋な化合物２１の他方の異性体（＃２）を得た。
【００４０】
プールした画分ＳＩ−３をメタノールに溶解し、シリカゲルを含むカラム（４×７ｃｍ；３２−６３μｍ；Ｂｉｏｔａｇｅ，Ｉｎｃ．Ｕ．Ｓ．Ａ）上でクロマトグラフィーにかけた。下記の傾斜条件を用いて２０ｍＬ／分でこのカラムを溶出させた：
0004666861.tif 000014
Ａ＝ヘキサン−ジエチルアミン（９９．５：０．５）
Ｂ＝ヘキサン−イソプロパノール−ジエチルアミン（７５：２５：２）
画分（８０×０．５分；１０ｍＬ）を集め、４６−５０をプールし、乾燥するまで濃縮した。この乾燥した試料をメタノールに溶解し、Ｃ−８逆相シリカゲル（Ｈｙｐｅｒｓｉｌ−ＢＤＳ−Ｃ８）のカラム（２５０×１０ｍｍ；粒径８μｍ）に加えた。この加えた試料を酢酸アンモニウム（１０ｍＭ）−メタノール−アセトニトリル（２０：４０：４０）を用いてクロマトグラフィーにかけ３ｍＬ／分で溶出させ、０．７５ｍＬの画分を集めた。化合物１を含む画分をプールし、乾燥するまで濃縮して２４．３ｍｇの純粋な化合物１を得た。化合物７を含む画分をプールし、乾燥するまで濃縮して１．５ｍｇの純粋な化合物７を得た。
【００４１】
プールした画分ＳＩ−４をメタノールに溶解し、Ｃ−８逆相シリカゲル（Ｈｙｐｅｒｓｉｌ−ＢＤＳ−Ｃ８）のカラム（２５０×１０ｍｍ；粒径８μｍ）に加えた。このカラムに加えた試料を下記の線形傾斜溶出系において５ｍＬ／分の流量でクロマトグラフィーにかけ８８×１．２５ｍＬの画分を集めた：
0004666861.tif 000015
Ａ＝１０ｍＭ酢酸アンモニウム
Ｂ＝メタノール−アセトニトリル（１：１）
粗製化合物１を含む画分をプールし、乾燥するまで濃縮し、粗製化合物８を含む画分とした。上からのプールし且つ乾燥させた画分のそれぞれをメタノールに溶解し、Ｃ−８逆相シリカゲル（Ｈｙｐｅｒｓｉｌ−ＢＤＳ−ＣＢ）のカラム  （２５０×１０ｍｍ；粒径８μｍ）上で再度クロマトグラフィーにかけた。酢酸アンモニウム（１０ｍＭ）−メタノール−アセトニトリル（２０：４０：４０）を用い、３ｍＬ／分で溶出させ０．７５ｍＬの画分を集めた。化合物８を含む画分をプールし、乾燥するまで濃縮し、５．８ｍｇの純粋な化合物８を得た。化合物１を含む画分をプールし、乾燥するまで濃縮し、さらに７．３ｍｇの純粋な化合物１を得た。
【００４２】
乾燥させた、カラム洗い流し画分ＳＩ−５をメタノールに溶解し、Ｃ−８逆相シリカゲル（Ｈｙｐｅｒｓｉｌ−ＢＤＳ−Ｃ８）のカラム（２５０×１０ｍｍ；粒径８μｍ）に加え、この加えた試料を、酢酸アンモニウム（１０ｍＭ）−メタノール−アセトニトリル（２０：４０：４０）を用いてクロマトグラフィーにかけ３ｍＬ／分で溶出させ、０．７５ｍＬの画分を集めた。化合物７を含む画分をプールし、乾燥するまで濃縮して３．５ｍｇの純粋な化合物７を得た。
【００４３】
分光学的特性
核磁気共鳴分光法（ＮＭＲ）、質量分析法（ＭＳ）、紫外分光法（ＵＶ）を含む分光学的方法によると共にスピノシンＡ及びＤ並びに関連する類似体との比較により、新しい成分の化学的構造を決定した。次の段落において、上で説明した成分の分光学的性質を説明する。この討議において、化合物１の分光学的性質に関して詳細な検討を行う。これを行った後に、当業者が化合物１に関するデータと比較することにより化学構造に結論を下すことができるようにする、他の関連成分に関する分光学的特徴について討議を行う。読者の便宜上、化合物１の下記図式は、下に示した自然係数によってすべてのＮＭＲスペクトルデータに関する位置指定を与える：
【００４４】
【化８】
0004666861.tif 000016
【００４５】
化合物１は、下記の特性を示す：
分子量：７５７
分子式：Ｃ43Ｈ67ＮＯ10
ＵＶ［液体クロマトグラフィー分析中のダイオードアレイ検出（ｄｉｏｄｅ  ａｒｒａｙ  ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ）による；溶媒＝メタノール−アセトニトリル  （１：１］：２４４ｎｍ
エレクトロスプレイ質量分析：［Ｍ＋Ｎ］+ に対するｍ／ｚ＝７５８．５；ｍ／ｚ１４２．１におけるホロサミン糖（ｆｏｒｏｓａｍｉｎｅ  ｓｕｇａｒ）のフラグメントイオン、
精密なＥＳＩ−ＭＳ（エレクトロスプレーイオン化質量分析）：［Ｍ＋Ｈ］+ に対するｍ／ｚ＝７５８．４８４５＋／−０．０００７（理論値：７５８．４８４３）、
表ＩＩはＣＤＣｌ3中での化合物１に関する1Ｈ及び13Ｃ  ＮＭＲスペクトルデータを要約したものである。
【００４６】
【表４】
0004666861.tif 000017
【００４７】
化学シフトは０ｐｐｍにおけるＴＭＳ（テトラメチルシラン）を基準にした。
【００４８】
他の代謝物質の特色のあるＮＭＲ分光学的特徴は次の通りであった：
化合物７の基本的なマクロライド構造を有する化学構造に関するＮＭＲスペクトルは、５．８及び５．７ｐｐｍにプロトン信号が存在しないことと、５．５ｐｐｍに新しいオレフィン性共鳴が存在することによって実証された。さらに、１．７ｐｐｍにおけるメチル共鳴はオレフィン性メチル基の存在を示した。化合物８の基本的なマクロライド構造を有する化学構造のＮＭＲスペクトルは多数の特徴によって実証された。Ｈ−８は４．１５ｐｐｍに二重線として現れ、Ｈ−９は４．１ｐｐｍ（ｄｄ）に現れた。Ｈ−８とＨ−９の間には測定可能な結合定数は存在しなかった。Ｈ−１１に対する信号は１．５ｐｐｍまでの下方領域に移動した。これらの２１−ブテニル構造のいずれかにおけるＣ−２４でのヒドロキシル化はＨ−２４及びＨ−２５の両方の下方領域へのシフトによって示され、これらのシフトはそれぞれ多重線及び三重線として現れた。同時に、Ｈ−２３は重なった二重線に変化した。化合物１１の基本的なマクロライド構造をもつ化学構造のＮＭＲスペクトルは、末端のオレフィン基と一致する結合パターンに対する、５．１、５．２５及び５．６ｐｐｍにおけるオレフィン性共鳴の付加によって実証された。さらに、０．９〜１．０ｐｐｍにおける末端の脂肪族メチル基を示す信号は存在しなかった。化合物１６の基本的マクロライド構造を有する化合物のＮＭＲスペクトルは、Ｈ−２４の下方領域へのシフト及びほぼ１．４ｐｐｍにおける三重線構造の二重線への崩壊によって実証された。これらの場合に、Ｈ−２３は四重線を二重線に変化させ、また、２次元のＣＯＳＹスペクトルの分析はこの二重線の別のオレフィン性プロトンに対する結合を示し、プロペニル基の存在を示した。化合物２３の基本的なマクロライド構造を有する化合物のＮＭＲスペクトルは、ブテニルのオレフィン性プロトンの不存在によって実証され、また、２次元のＣＯＳＹ実験及びＴＯＣＳＹ実験を検討することによって、以前から知られているスピノシン類（ｓｐｉｎｏｓｙｎｓ）から識別された。Ｈ−２５に原因する結合通路に関する分析的検討は、Ｃ−２１に結合した４−炭素ブチル基を示した。いろいろな２次元のＮＭＲ試験を用いて、Ｃ−１７における酸素に結合した配糖体下部構造が確認された。
【００４９】
拡大した環状マクロライド３１のメチル三重線Ｈ−２５及びＨ−２４はスピノシンＡのエチル基に類似していた。さらに、Ｈ−２１は、化合物１におけるＨ−２１の位置に対して、４．８ｐｐｍまで上方の領域に移動していた。しかしながら、オレフィン性プロトン類は今まで通りに存在していた。２次元のＣＯＳＹスペクトルは、この化合物の二重結合が環の中にあることを示すＨ−２１にエチレン基及びオレフィンの双方が結合していることを示した。このことは、質量スペクトルから分子量が７５８であることに基づいて、この化合物が化合物１の異性体であることと一致する。
【００５０】
ＥＳＩ−ＭＳ（エレクトロスプレーイオン化質量分析）で観察した分子付加物イオンを伴う全ての代謝物質（これから分子量を推論した）のリストを表ＩＩＩに示す：
【００５１】
【表５】
0004666861.tif 000018
【００５２】
殺虫活性及び殺ダニ活性
本発明化合物（Ｒ５がＨである化合物以外の化合物）は、昆虫、ダニ及びマダニを防除するのに有用である。従って本発明のさらなる局面は、昆虫、ダニもしくはマダニを抑制する量の、式１もしくは２（式中、Ｒ５は式４ａ乃至４ｉの中の１つを有する基である。）の化合物を昆虫、ダニもしくはマダニの活動場所  （ｌｏｃｕｓ）に施用することを含んで成る、昆虫、ダニもしくはマダニを抑制する方法に向けられる。
【００５３】
昆虫、ダニもしくはマダニの“活動場所”（“ｌｏｃｕｓ”）とは、それらを取り巻く空気、それらが食べる食物もしくはそれらが接触する物体を含めて、昆虫ダニもしくはマダニが生活するか又はそれらの卵が存在する環境のことを指稱する。例えば、植物を摂取する昆虫もしくはダニは、それらが食べるか又は住む植物の部分、特に葉に活性化合物を施用することにより防除することができる。
【００５４】
用語“昆虫、ダニもしくはマダニを抑制する”は、生きている昆虫、ダニもしくはマダニの数の減少もしくは卵の数の減少が存在する事を意味する。化合物によって達成される減少の程度は、勿論、化合物の施用割合、用いる特定の化合物及び目標の昆虫、ダニもしくはマダニの種類に依存する。少なくとも、昆虫を不活発にする、ダニを不活発にするか、又はマダニを不活発にする量を使用すべきである。“不活発にする量”とは、処置される昆虫、ダニもしくはマダニの集団内に測定可能な減少を生じさせる量の化合物を用いる事を意味する。典型的には、約１ｐｐｍ乃至約１，０００ｐｐｍ（又は０．０１〜１ｋｇ／エーカー）の化合物を用いる。
【００５５】
本化合物は多くの昆虫、ダニ及びマダニに対して活性を示す。より特定的には、本化合物は、鱗翅目の昆虫、例えばシロイチモンジヨトウの幼虫、タバコガ（ｔｏｂａｃｃｏ  ｂｕｄｗｏｒｍ）、コドリンガ（ｃｏｄｌｉｎｇ  ｍｏｔｈ）及びイラクサキンウワバ（ｃａｂｂａｇｅ  ｌｏｏｐｅｒ）から成るメンバーに対して活性を示す。この目の他の代表的なメンバーとしては、南部アワヨトウ（ｓｏｕｔｈｅｒｎ  ａｒｍｙｗｏｒｍ）、ヨトウムシ（ｃｕｔｗｏｒｍ）、イガ  （ｃｌｏｔｈｅｓ  ｍｏｔｈｓ）、オオタバコガ（Ｉｎｄｉａｎ  ｍｅａｌ  ｍｏｔｈ）、ハマキガ（ｌｅａｆ  ｒｏｌｌｅｒｓ）、オオタバコガ（ｃｏｒｎ  ｅａｒｗｏｒｍ）、オオタバコガ（ｃｏｔｔｏｎ  ｂｏｌｌｗｏｒｍ）、アワノメイガ（Ｅｕｒｏｐｅａｎ  ｃｏｒｎ  ｂｏｒｅｒ）、モンシロチョウの幼虫  （ｉｍｐｏｒｔｅｄ  ｃａｂｂａｇｅ  ｗｏｒｍ）、ワタキバガの幼虫（ｐｉｎｋ  ｂｏｌｌｗｏｒｍ）、ミノムシ（ｂａｇｗｏｒｍｓ）、東部テンマクケムシ（Ｅａｓｔｅｒｎ  ｔｅｎｔ  ｃａｔｅｒｐｉｌｌａｒ）、ソドウエブワーム  （ｓｏｄ  ｗｅｂｗｏｒｍ）及びヨトウガの幼虫（ｆａｌｌ  ａｒｍｙｗｏｒｍ）が挙げられる。
【００５６】
本化合物は、また、鞘翅目（Ｃｏｌｅｏｐｔｅｒａ）［甲虫類及びゾウムシ類、例えばコロラドハムシ（Ｃｏｌｏｒａｄｏ  ｐｏｔａｔｏ  ｂｅｅｔｌｅ）、斑点のあるウリハムシ（ｓｐｏｔｔｅｄ  ｃｕｃｕｍｂｅｒ  ｂｅｅｔｌｅｓ）及び縞のあるウリハムシ（ｓｔｒｉｐｅｄ  ｃｕｃｕｍｂｅｒ  ｂｅｅｔｌｅｓ）、マメコガネ（Ｊａｐａｎｅｓｅ  ｂｅｅｔｌｅ）、及びワタミハナゾウムシ（ｂｏｌｌ  ｗｅｅｖｉｌ）］及び双翅目（Ｄｉｐｔｅｒａ）［典型的なハエ、例えばイエバエ（ｈｏｕｓｅ  ｆｌｙ）、カ（ｍｏｓｑｕｉｔｏｅｓ）、ミバエ（ｆｒｕｉｔ  ｆｌｉｅｓ）、サシバエ（ｓｔａｂｌｅ  ｆｌｉｅｓ）及びツノサシバエ（ｈｏｒｎｆｌｙ）、並びにハモグリムシ（ｌｅａｆ  ｍｉｎｅｒｓ）］からなるメンバーに対して、活性を示す。
【００５７】
また、本化合物は、半翅目（Ｈｅｍｐｉｔｅｒａ）［典型的なカメムシ、例えばメクラカメムシ（ｐｌａｎｔ  ｂｕｇ）、カメムシ（ｓｔｉｎｋ  ｂｕｇ）及びナガカメムシ（ｃｈｉｃｈ  ｂｕｇｓ）］、同翅目（Ｈｏｍｏｐｔｅｒａ）  ［例えばアブラムシ（ａｐｈｉｄｓ）、ヨコバイ（ｌｅａｆｈｏｐｐｅｒｓ）、ウンカ（ｐｌａｎｔｈｏｐｐｅｒｓ）、コナジラミ（ｗｈｉｔｅｆｌｉｅｓ）、カイガラムシ（ｓｃａｌｅｓ）、及びコナカイガラムシ（ｍｅａｌｙｂｕｇｓ）］、食毛目（Ｍａｌｌｏｐｈａｇａ）［ハジラミ（ｃｈｅｗｉｎｇ  ｌｉｃｅ）］、シラミ目（Ａｎｏｐｌｕｒａ）［シラミ（ｓｕｃｋｉｎｇ  ｌｉｃｅ）］、総翅目（Ｔｈｙｓａｎｏｐｔｅｒａ）［アザミウマ（ｔｈｒｉｐｓ）］、直翅目（Ｏｒｔｈｏｐｔｅｒａ）［例えばゴキブリ（ｃｏｃｋｒｏａｃｈｅｓ）、バッタ  （ｇｒａｓｓｈｏｐｐｅｒｓ）、及びコオロギ（ｃｒｉｃｋｅｔｓ）］、ノミ目（Ｓｉｐｈｏｎａｐｔｅｒａ）［ノミ類（ｆｌｅａｓ）］、等翅目（Ｉｓｏｐｔｅｒａ）［シロアリ（ｔｅｒｍｉｔｅｓ）］からなるメンバー、及び膜翅目（Ｈｙｍｅｎｏｐｔｅｒａ）のアリ科（Ｆｏｒｍｉｃｉｄａｅ）［アリ（ａｎｔｓ）］のメンバーに対して活性を示す。
【００５８】
また、本化合物は、ダニ目（Ａｃａｒｉ）のダニ及びマダニ、例えばナミハダニ（ｔｗｏ  ｓｐｏｔｔｅｄ  ｓｐｉｄｅｒ  ｍｉｔｅ）に対して活性を示す。この目の他の代表的なメンバーとしては、植物寄生虫、例えばミカンハダニ（ｃｉｔｒｕｓ  ｒｅｄ  ｍｉｔｅ）、リンゴハダニ（Ｅｕｒｏｐｅａｎ  ｒｅｄ  ｍｉｔｅ）、及びシトラスフラットマイト（ｃｉｔｒｕｓ  ｆｌａｔ  ｍｉｔｅ）、並びに動物寄生虫、例えばヒゼンダニ（ｍａｎｇｅ  ｍｉｔｅ）、キュウセンヒゼンダニ（ｓｃａｂ  ｍｉｔｅ）、ヒツジキュウセンヒゼンダニ（ｓｈｅｅｐ  ｓｃａｂ  ｍｉｔｅ）、ワクモ（ｃｈｉｃｋｅｎ  ｍｉｔｅ）、ニワトリアシカイセンダニ（ｓｃａｌｙｌｅｇ  ｍｉｔｅ）、ニワトリヒゼンダニ（ｄｅｐｌｕｍｉｎｇ  ｍｉｔｅ）及びイヌニキビダニ（ｄｏｇ  ｆｏｌｌｉｃｌｅ  ｍｉｔｅ）が挙げられる。
【００５９】
本化合物で防除できる、明確に代表的な物有害生物（節足動物）として、次のものが挙げられる：
アンブリオマ・アメリカナム［Ａｍｂｌｙｏｍａ  ａｍｅｒｉｃａｎｕｍ（Ｌｏｎｅ−ｓｔａｒ  ｔｉｃｋ）］、アンブリオマ・マクラツム［Ａｍｂｌｙｏｍａ  ｍａｃｕｌａｔｕｍ（Ｇｕｌｆ  ｃｏａｓｔ  ｔｉｃｋ）］、アルガス・ペルシクス［Ａｒｇａｓ  ｐｅｒｓｉｃｕｓ（ｆｏｗｌ  ｔｉｃｋ）］、ウシマダニ［Ｂｏｏｐｈｉｌｕｓ  ｍｉｃｒｏｐｌｕｓ（ｃａｔｔｌｅ  ｔｉｃｋ）］、ヒゼンダニ［Ｃｈｏｒｉｏｐｔｅｓ  ｓｐｐ．（ｍａｎｇｅ  ｍｉｔｅ）］、ウシニキビダニ［Ｄｅｍｏｄｅｘ  ｂｏｖｉｓ（ｃａｔｔｌｅ  ｆｏｌｌｉｃｌｅ  ｍｉｔｅ）］、イヌニキビダニ［Ｄｅｍｏｄｅｘ  ｃａｎｉｓ（ｄｏｇ  ｆｏｌｌｉｃｌｅ  ｍｉｔｅ）］、カクマダニ［Ｄｅｒｍａｃｅｎｔｏｒ  ａｎｄｅｒｓｏｎｉ（Ｒｏｃｋｙ  Ｍｏｕｎｔａｉｎ  ｓｐｏｔｔｅｄ  ｆｅｖｅｒ  ｔｉｃｋ）］、アメリカイヌダニ［Ｄｅｒｍａｃｅｎｔｏｒ  ｖａｒｉａｂｉｌｉｓ（Ａｍｅｒｉｃａｎ  ｄｏｇ  ｔｉｃｋ）］、ワクモ［Ｄｅｒｍａｎｙｓｓｕｓ  ｇａｌｌｉｎａｅ（ｃｈｉｃｋｅｎ  ｍｉｔｅ）］、イクソデス・リシヌス  ［ｉｘｏｄｅｓ  ｒｉｃｉｎｕｓ（Ｃｏｍｍｏｎ  ｓｈｅｅｐ  ｔｉｃｋ）］、ニワトリヒゼンダニ［Ｋｎｅｍｉｄｏｋｏｐｔｅｓ  ｇａｌｌｉｎａｅ（ｄｅｐｌｕｍｍｉｎｇ  ｍｉｔｅ）］、アシカイセンダニ［Ｋｎｅｍｉｄｏｋｏｐｔｅｓ  ｍｕｔａｎｓ（ｓｃａｌｙ−ｌｅｇ  ｍｉｔｅ）］、オトビウス・メグニニ［Ｏｔｏｂｉｕｓ  ｍｅｇｎｉｎｉ（ｅａｒ  ｔｉｃｋ）］、キュウセンヒゼンダニ［Ｐｓｏｒｏｐｔｅｓ  ｅｑｕｉ（ｓｃａｂ  ｍｉｔｅ）］、キュウセンヒゼンダニ［Ｐｓｏｒｏｐｔｅｓ  ｏｖｉｓ（ｓｃａｂ  ｍｉｔｅ）］、クリイロコイタマダニ［Ｒｈｉｐｉｃｅｐｈａｌｕｓ  ｓａｎｇｕｉｎｅｕｓ（ｂｒｏｗｎ  ｄｏｇ  ｔｉｃｋ）］、ヒゼンダニ［Ｓａｒｃｏｐｔｅｓ  ｓｃａｂｉｅｉ（ｍａｎｇｅ  ｍｉｔｅ）］、カ［Ａｅｄｅｓ（ｍｏｓｑｕｉｔｏｅｓ）］、カ［Ａｎｏｐｈｅｌｅｓ（ｍｏｓｑｕｉｔｏｅｓ）］、カ［Ｃｕｌｅｘ（ｍｏｓｑｕｉｔｏｅｓ）］、クリセタ［Ｃｕｌｉｓｅｔａ］、ウシハジラミ［Ｂｏｖｉｃｏｌａ  ｂｏｖｉｓ（ｃａｔｔｌｅ  ｂｉｔｉｎｇ  ｌｏｕｓｅ）］、クロバエ［Ｃａｌｌｉｔｒｏｇａ  ｈｏｍｎｉｖｏｒａｘ（ｂｌｏｗｆｌｙ）］、アブ  ［Ｃｈｒｙｓｏｐｓ  ｓｐｐ．（ｄｅｅｒ  ｆｌｙ）］、トコジラミ［Ｃｉｍｅｘ  ｌｅｃｔｕｌａｒｉｕｓ（ｂｅｄ  ｂｕｇ）］、螺旋虫［Ｃｏｃｈｌｉｏｍｙｉａ  ｓｐｐ．（ｓｃｒｅｗ  ｗｏｒｍ）］、イヌノミ［Ｃｔｅｎｏｃｅｐｈａｌｉｄｅｓ  ｃａｎｉｓ（ｄｏｇ  ｆｌｅａ）］、ネコノミ［Ｃｔｅｎｏｃｅｐｈａｌｉｄｅｓ  ｆｅｌｉｓ（ｃａｔ  ｆｌｅａ）］、クリコイデス属｛Ｃｕｌｉｃｏｉｄｅｓ  ｓｐｐ．［ユスリカ（ｍｉｄｇｅｓ）、スナバエ（ｓａｎｄｆｌｉｅｓ）、ヌカカ（ｐｕｎｋｉｅｓ）もしくはヌカカ（ｎｏ−ｓｅｅ−ｕｍｓ）］｝、ヒツジハジラミ［Ｄａｍａｌｉｎｉａ  ｏｖｉｓ（ｓｈｅｅｐ  ｂｉｔｉｎｇ  ｌｏｕｓｅ）］、ウシバエ［Ｄｅｒｍａｔｏｂｉａ  ｓｐｐ．（ｗａｒｂｌｅ  ｆｌｙ）］、アトアカウマバエ［Ｇａｓｔｅｒｏｐｈｉｌｕｓ  ｈａｅｍｏｒｒｈｏｉｄａｌｉｓ（ｎｏｓｅ  ｂｏｔ  ｆｌｙ）］、ウマバエ［Ｇａｓｔｅｒｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｔｅｓｔｉｎ��ｌｉｓ（ｃｏｍｍｏｎ  ｈｏｒｓｅ  ｂｏｔ  ｆｌｙ）］、ムネアカウマバエ［Ｇａｓｔｅｒｏｐｈｉｌｕｓ  ｎａｓａｌｉｓ（ｃｈｉｎ  ｆｌｙ）］、ツエツエバエ［Ｇｌｏｓｓｉｎａ  ｓｐｐ．（ｔｓｅｔｓｅ  ｆｌｙ）］、ツノサシバエ［Ｈａｅｍａｔｏｂｉａ  ｉｒｒｉｔａｎｓ（ｈｏｒｎ  ｆｌｙ，ｂｕｆｆａｌｏ  ｆｌｙ）］、ウマジラミ  ［Ｈａｅｍａｔｏｐｉｎｕｓ  ａｓｉｎｉ（ｈｏｒｓｅ  ｓｕｃｋｉｎｇ  ｌｏｕｓｅ）］、ウシジラミ［Ｈａｅｍａｔｏｐｉｎｕｓ  ｅｕｒｙｓｔｅｒｎｕｓ（ｓｈｏｒｔ  ｎｏｓｅｄ  ｃａｔｔｌｅ  ｌｏｕｓｅ）］、キモノジラミ［Ｈａｅｍａｔｏｐｉｎｕｓ  ｏｖｉｌｌｕｓ（ｂｏｄｙ  ｌｏｕｓｅ）］、ブタジラミ［Ｈａｅｍａｔｏｐｉｎｕｓ  ｓｕｉｓ（ｈｏｇ  ｌｏｕｓｅ）］、アタマジラミ［Ｈｙｄｒｏｔａｅａ  ｉｒｒｉｔａｎｓ（ｈｅａｄ  ｆｌｙ）］、ウシバエ［Ｈｙｐｏｄｅｒｍａ  ｂｏｖｉｓ（ｂｏｍｂ  ｆｌｙ）］、キスジウシバエ［Ｈｙｐｏｄｅｒｍａ  ｌｉｎｅａｔｕｍ（ｈｅｅｌ  ｆｌｙ）］、キモノジラミ［Ｌｉｎｏｇｎａｔｈｕｓ  ｏｖｉｌｌｕｓ（ｂｏｄｙ  ｌｏｕｓｅ）］、リノグナツス・ペダリス［Ｌｉｎｏｇｎａｔｈｕｓ  ｐｅｄａｌｉｓ（ｆｏｏｔ  ｌｏｕｓｅ）］、ウシホソジラミ［Ｌｉｎｏｇｎａｔｈｕｓ  ｖｉｔｕｌｉ  （ｌｏｎｇ  ｎｏｓｅｄ  ｃａｔｔｌｅ  ｌｏｕｓｅ）］、ルシリア［Ｌｕｃｉｌｉａ  ｓｐｐ．（ｍａｇｇｏｔ  ｆｌｙ）］、ヒツジシラミバエ［Ｍｅｌｏｐｈａｇｕｓ  ｏｖｉｎｕｓ（ｓｈｅｅｐ  ｋｅｄ）］、イエバエ［Ｍｕｓｃａ  ｓｐｐ．（ｈｏｕｓｅ  ｆｌｙ、ｆａｃｅ  ｆｌｙ）］、ヒツジバエ［Ｏｅｓｔｒｕｓ  ｏｖｉｓ（ｎｏｓｅ  ｂｏｔ  ｆｌｙ）］、シラミ［Ｐｅｄｉｃｕｌｕｓ  ｓｐｐ．（ｌｉｃｅ）］、サシチョウバエ［Ｐｈｌｅｂｏｔｏｍｕｓ  ｓｐｐ．（ｓａｎｄｆｌｙ）］、クロバエ［Ｐｈｏｒｍｉａ  ｒｅｇｉｎａ（ｂｌｏｗｆｌｙ）］、カ［Ｐｓｏｒｏｐｈｏｒａ  ｓｐｐ．（ｍｏｓｑｕｉｔｏ）］、シラミ［Ｐｔｈｉｒｕｓ  ｓｐｐ．（ｌｉｃｅ）］、サシガメ［Ｒｅｄｕｖｉｕｓ  ｓｐｐ．（ａｓｓａｓｓｉｎ  ｂｕｇ）］、ブユ［Ｓｉｍｕｌｉｕｍ  ｓｐｐ．（ｂｌａｃｋ  ｆｌｙ）］、ソレノポテス・キャピラツス［Ｓｏｌｅｎｏｐｏｔｅｓ  ｃａｐｉｌｌａｔｕｓ（ｌｉｔｔｌｅ  ｂｌｕｅ  ｃａｔｔｌｅ  ｌｏｕｓｅ）］、サシバエ［Ｓｔｏｍｏｘｙｓ  ｃａｌｃｉｔｒａｎｓ（ｓｔａｂｌｅ  ｆｌｙ）］、ウシアブ［Ｔａｂａｎｕｓ  ｓｐｐ．（ｈｏｒｓｅ  ｆｌｙ）］、コメノゴミムシダマシ［Ｔｅｎｅｂｒｉｏ  ｓｐｐ．（ｍｅａｌｗｏｒｍｓ）］、オオサシガメ［Ｔｒｉａｔｏｍａ  ｓｐｐ．（ｋｉｓｓｉｎｇ  ｂｕｇｓ）］。
【００６０】
本化合物は、昆虫、ダニ及びマダニの集団を減少させるのに有用であって、本発明の活性化合物の、昆虫、ダニもしくはマダニを不活発にする有効量を昆虫、ダニもしくはマダニの活動場所に施用することを含んで成る昆虫、ダニもしくはマダニ集団を抑制する方法に用いられる。１つの好ましい実施態様において、本発明は、本発明活性化合物の、昆虫を不活発にする有効量を植物に施用することを含んで成る、鱗翅目の感受性の強い昆虫を抑制する方法に向けられている。本発明の別の好ましい実施態様は、化合物の、有害生物を抑制する有効量をサシバエ（ｂｉｔｉｎｇ  ｆｌｙ）に経口的に、非経口的にもしくは局所的に投与することを含んで成る、動物における双翅目のサシバエ（ｂｉｔｉｎｇ  ｆｌｙ）を抑制する方法に向けられている。本発明の別の好ましい実施態様は本発明活性化合物の、ダニもしくはマダニを不活発にする量をダニもしくはマダニの活動場所に施用することを含んで成る、ダニ目のダニもしくはマダニを抑制する方法に向けられている。
【００６１】
本明細書中に開示される化合物は農産物を生産するのに有用なだけではなく、これらの化合物の酸付加塩類も、適切な場合には、有用な製品である。これらの塩類は、例えば、式１及び２の化合物を分離し精製する際に有用である。さらに、これらの塩類の幾つかは増大した水への溶解度を示すことができよう。酸付加塩類は、Ｒ５がホロサミン（ｆｏｒｏｓａｍｉｎｅ）等の塩基性窒素含有糖分子である式１で表される化合物から製造することができよう。この化合物の塩類は、塩類を製造するための、当業者にとって周知の標準的な技術を用いて製造される。特に有用な酸付加塩として非限定的に硫酸、塩酸、リン酸、酢酸、コハク酸、クエン酸、乳酸、マレイン酸、フマル酸、コール酸、パモ酸、（ｐａｍｏｉｃ  ａｃｉｄ）、粘液酸、グルタミン酸、ショウノウ酸、グルタル酸、グリコール酸、フタル酸、酒石酸、ギ酸、ラウリン酸、ステアリン酸、サリチル酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ソルビン酸、ピクリン酸、安息香酸、ケイ皮酸及び同効の酸類等の有機酸のみならず無機酸との標準的な反応によって形成される塩類が挙げられる。
【００６２】
実施例４
昆虫の選抜
Ａ．タバコガ［Ｔｏｂａｃｃｏ  Ｂｕｄｗｏｒｍ（Ｈｅｌｉｏｔｈｉｓ  ｖｉ ｒｅｓｃｅｎｓ）］の新生幼虫のびしょ濡れテスト
タバコガ（Ｈｅｌｉｏｔｈｉｓ  ｖｉｒｅｓｃｅｎｓ）の新生（孵化後６時間未満）の幼虫に対する式１の化合物の殺虫活性を比較するために、各代謝物質の１μｇ／μＬのアセトン溶液を最初に調製した。次にこのアセトン溶液を０．０２５％の界面活性剤Ｔｒｉｔｏｎ  ｘ−１００を含む、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｈ2 Ｏで希釈して２５もしくは５０ｐｐｍのトリートメント（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）にした。２０匹のタバコガ（ｔｏｂａｃｃｏ  ｂｕｄｗｏｒｍ）の新生幼虫が静かに載置された１００ｍｍ直径の円形＃１Ｗｈａｔｍａｎｎ定性濾紙上に、各濃度の各代謝物質１ｍＬをピペットから直接移す。次に、処理した濾紙それぞれと、関連する幼虫を２０ｍｍ×１００ｍｍの使い捨て式プラスチック性ペトリプレートに入れた。１時間後、寒天主体の鱗翅目用食物（ｍｏｄｉｆｉｅｄ  Ｓｈｏｒｅｙ  ｄｉｅｔ，Ｓｏｕｔｈｌａｎｄ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，Ｌａｋｅ  Ｖｉｌｌａｇｅ，ＡＲ）１ｃｍ3 を幼虫の食物源として各プレートに載置した。ペトリプレートを２７℃に２４時間維持し、その各処理における幼虫の％死亡率を決定した。結果を表ＩＶとして以下に示す。
【００６３】
Ｂ．シロイチモンジヨトウの幼虫［Ｂｅｅｔ  Ａｒｍｙｗｏｒｍ（Ｓｐｏｄｏ ｐｔｅｒａ  ｌｉｔｔｏｒａｌｉｓ）］の局所的テスト
式１の化合物の相対的な殺虫活性に関する追加的な測定が、実験室で育てたＳｐｏｄｏｐｔｅｒａ  ｌｉｔｔｏｒａｌｉｓの幼虫（平均重量４３ｍｇ）当たり１μＬで施用される各化合物１μｇ／μＬのメタノール溶液を用いて行われた。６匹の幼虫それぞれの背中に沿って各化合物を施用した。次に、処理した幼虫を６個の穴付のプラスチック製培養板中で、６日間２１℃、６０％の相対湿度に保持した。曝し後の期間５日の間中の生命維持用に寒天主体の鱗翅目用食物１ｃｍ3 をそれぞれの幼虫に供給した。５日の期間の終わりに％死亡率を決定した。結果を表ＩＶに示す。
【００６４】
【表６】
0004666861.tif 000019
【００６５】
殺虫剤組成物
本化合物は、本発明の一部分でもある組成物の形態で施用される。これらの組成物は、植物学的に許容される担体中に、昆虫もしくはダニもしくはマダニを不活発にする量の本発明化合物を含む。活性成分は、単一の化合物、２種以上の本発明化合物の混合物、本発明化合物が産生される発酵培地の乾燥部分と、１種以上の本発明化合物との混合物として存在させることができよう。
【００６６】
組成物は、農業技術もしくは有害生物防除技術においては慣習的な手順と処方に従って製造されるけれども、この組成物は、１種以上の本発明化合物が存在するために新規であると共に重要である。本組成物は、水中に分散した濃厚な製剤であるか、又は粉剤、毒餌（ｂａｉｔ）もしくはさらに処理を施すことなしに用いる粒状の製剤の形態であってもよい。
【００６７】
本化合物もしくは乾燥粗製材料が加えられる分散体は、概して、本化合物もしくは粗製材料から成る濃厚製剤から製造される水性懸濁液もしくは水性エマルジョンである。水に可溶性の製剤もしくは水に分散する製剤もしくは乳化可能な製剤は、固体、水和剤、もしくは乳化可能な濃厚液もしくは水性懸濁液として知られる液体のいずれかである。水和剤は凝集させるか又は固めて水に分散性の粒状物を形成してもよい。これらの粒状物は、化合物もしくは乾燥した粗製材料、不活性担体及び界面活性剤の混合物を含む。化合物もしくは乾燥した粗製材料は、典型的には、約０．１重量％〜約９０重量％である。不活性担体は、一般にアタパルジャイトクレー、モンモリロナイトクレー及びケイソウ土もしくは精製ケイ酸塩である。
【００６８】
界面活性剤は、一般に水和剤の約０．５％〜約１０％を構成し、その場合界面活性剤は、概してスルホン化リグニン類、縮合ナフタレン−スルホネート（ナフタレン−スルホネート、アルキル−ベンゼンスルホネート、アルキルスルホネート）もしくは非イオン界面活性剤、例えばアルキルフェノール類のエチレンオキサイド付加物又はそれらの混合物である。
【００６９】
特許請求される化合物の乳化可能な濃厚液は、典型的には、液体リットル当たり化合物約５０ｇから約５００ｇを含んでおり、この化合物は約１０％から約５０％に相当し、水に不混和性の溶媒と乳化剤の混合物である不活性担体に溶解される。有機溶媒としては、キシレン等の有機物、及び重質且つ芳香族のナフサを含む石油の高沸点ナフタレン及びオレフィン部分のような石油留分が挙げられる。テルペン性溶媒、ロジン誘導体、シクロヘキサンのような脂肪族ケトン類及び複合アルコール類等のその他の有機物も用いることができよう。乳化可能な濃厚物用の乳化剤は、代表的には、本明細書中で言及したような混合イオン界面活性剤及び／又は非イオン界面活性剤もしくはそれらの同等物である。
【００７０】
水性懸濁剤は、本発明の水に不溶性の化合物を用いて製造することができよう。その場合、一般に約５重量％〜約５０重量％の範囲の濃度で本化合物を水性基剤中に分散させる。この懸濁剤は、本化合物を微細に粉砕し、水、界面活性剤及び本文中で検討したような分散剤から成る基剤中に入れて激しく撹拌して製造する。水性基剤の密度及び／又は粘度を所望通りに増加させるために、無機塩及び合成もしくは天然のゴム等の不活性成分を用いることもできよう。
【００７１】
水に不混和性の溶媒及び界面活性剤もしくは表面活性の重合体中に活性分子を溶解して、沈降フローアブル剤を製造することもできよう。この製剤を水と混合すると、本活性化合物は生じた微晶質沈殿の大きさを制御する界面活性剤と共に沈降する。結晶に大きさは特定の重合体及び界面活性剤混合物を選択することによって制御することができる。
【００７２】
本化合物は、土壌に施用される粒状組成物として施用することもできよう。この粒状組成物は、典型的には、約０．５重量％〜約１０重量％の本化合物を含有する。一般にクレーもしくは同等の物質である不活性担体中に本化合物を分散させる。通常、粒状組成物は、適切な溶媒中に本化合物を溶解し、所望の粒径に前もって形成された粒状の担体にこの溶液を加えて製造する。粒径は、一般に約０．５ｍｍ〜３ｍｍである。粒状組成物は、担体と化合物から成る柔らかいかたまりもしくはペーストを形成し、この配合混合物を乾燥し、この柔らかいかたまりもしくはペーストを所望の粒径まで粉砕して製造することもできよう。
【００７３】
本化合物は、適切な有機溶媒と配合することもできよう。有機溶媒は、典型的には、農産工業において広く用いられる混合石油オイル（ｂｌａｎｄ  ｐｅｔｒｏｌｅｕｍ  ｏｉｌ）である。これらの配合物は、概して噴霧液として用いられる。より典型的には、本化合物は、液体担体中の分散物として施用される。その場合担体は水である。本化合物はエーロゾル組成物の形態で施用することもできよう。本化合物を不活性担体に溶解させる。この担体は圧力発生推進薬の混合物である。エーロゾル組成物は容器に入れられる。その場合混合物はアトマイジングバルブ（ａｔｏｍｉｚｉｎｇ  ｖａｌｖｅ）を介して分散させる。推進薬混合物は、有機溶媒と混合し得る低沸点の含ハロゲン炭素化合物又は不活性ガスもしくはガス状炭化水素類で加圧した水性懸濁液のいずれかを含有している。
【００７４】
昆虫、ダニ及びマダニの活動場所に施用する化合物の量は重要ではなく、当業者によって容易に決定することができる。通常、約１０ｐｐｍ〜約５，０００ｐｐｍの化合物を含む濃度が望ましい防除を提供する。ダイズ及びワタ等の作物については、施用割合は約０．０１〜約１ｋｇ／ヘクタールである。その場合、本化合物は５〜５０ガロン／エーカーの噴霧製剤として施用される。昆虫、ダニもしくはマダニが住むいずれかの活動場所に本化合物を施用することができよう。前述の活動場所は、典型的にはワタ、ダイズ及び野菜作物、果実及びナッツの木、ブドウのつる、家屋及び装飾植物である。
【００７５】
本発明の化合物は、動物に対する有害生物である節足動物、すなわち、昆虫及びクモガタ綱の動物を防除するために動物を処置するのにも有用である。これらの節足動物という有害生物は一般に“外部”表面にくっついて宿主を襲う。前述の有害生物を防除する薬剤は、“外部寄生虫防除剤”と指稱される。問題は背骨のある宿主の間で最も重大であるが、全ての動物が前述の有害生物の攻撃を受ける。人間は、多くの寄生虫にとって可能性のある宿主であり、熱帯地方及び公衆衛生が最低の地方では、寄生虫の感染は医療業務上通常の問題である。
【００７６】
また、多数の家畜動物、例えば牛、羊、豚、ヤギ、野牛、水牛、シカ、ウサギ、ひよこ、シチメンチョウ、アヒル、ガチョウ、ダチョウ及びこれらと同効動物は、寄生虫の攻撃を高度に受ける。毛皮用に育てられるミンク及びその他の動物、並びに実験室及び研究用の道具だてとして用いられるネズミ、ハツカネズミ及びその他の動物と同じように、馬及びその他の娯楽用動物は寄生虫の攻撃を受ける。イヌ及びネコ等のコンパニオン動物は寄生虫による攻撃を高度に受ける。また、コンパニオン動物のヒトとの親密な関係のために、前述の寄生状態は、コンパニオン動物が関係するヒトに対して問題を提起している。魚、甲殻綱の動物及びその他の水生の種族も寄生虫の攻撃を受ける。要するに、寄生状態は、宿主、本質的には動物の全範囲に影響を及ぼす。
【００７７】
外部寄生虫の感染から受ける経済的な犠牲は大きい。家畜の領域において、動物は給餌効率の減少及び生育率の減少に遭遇している。牛乳及び羊毛の生産は悪くなっており、羊毛、皮革及び毛皮に損害が出ている。動物は二次的な細菌の感染及びさらなる寄生虫の攻撃を受けやすくなっている。外部寄生虫が健康や生産にひどく不利益にならない時でさえ、外部寄生虫は可成りの不快さの原因になっている。
【００７８】
多くの寄生虫防除剤が使用されているけれども、それらは、限定された活性範囲、環境毒性、繰返処理の必要性、及び多くの場合外部寄生虫の抵抗力を含めて、いろいろな問題に遭遇している。従って、新しい外部寄生虫防除剤の必要性が存続している。
【００７９】
本発明化合物は、外部寄生虫を防除するための必需品として新しい手段を提供する。この実施態様において、本発明は有害生物を本発明化合物の有効量と接触させることを含む、節足動物という有害生物を宿主動物上で抑制もしくは殺害する方法に向けられている。
【００８０】
本化合物の外部寄生虫防除活性は、本化合物が有害生物と接触した際に達成される。接触は卵、幼虫、成虫もしくはそのほかの生存段階について起こり得る。“接触”には有害生物による化合物の摂取も含まれる。
【００８１】
実施例５
生体内でのハツカネズミ／成虫のサシバエ（ＡＳＦ）のテスト
調査０日に、処理グループごとに６匹の３０ｇの白い実験室用ハツカネズミ  （Ｍｕｓ  ｍｕｓｃｕｌｕｓ）（８−１０週齢、ＩＣＲ雌、Ｈａｒｌａｎ−Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ，Ｉｎｃ．Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ，ＩＮ．）にテスト品もしくは溶媒（９０％オレイン酸エチル／１０％ＤＭＳＯ）を経口的もしくは局所的のいずれかで投薬した。調査１日目に、４．５ｍＬの無菌水中に１．０ｍＬのｋｅｔａｍｉｎｅ（Ｆｏｒｔ  Ｄｏｄｇｅ，ＫｅｔａｓｅｔR ，ｋｅｔａｍｉｎｅ  ＨＣｌ注射液、１００ｍｇ／ｍＬ）と１．０ｍＬ  ｘｙｌａｚｉｎｅ（Ｂａｙｅｒ，ＲｏｍｐｕｍR 、２０ｍｇ／ｍＬ注射可能薬物）を含む配合物０．２５ｍＬを筋肉内に注射して各処理グループからの２匹のハツカネズミに麻酔をかけた。麻酔をかけられたハツカネズミを、３０匹のサシバエ（ｓｔａｂｌｅ  ｆｌｙ）の成虫を入れたハエ用の箱の中に置いた。麻酔をかけられたハツカネズミは６０分間箱内に残され、ハエは邪魔されず血粉を得ることができた。ハエ用の箱から取り出した後、ＣＯ2 を用いて意識不明のハツカネズミを即座に安楽死させた。ハエ用の箱は、全調査期間の間１２時間日中／１２時間夜間の反覆にさらされた。評価室内の温度は６８〜７２°Ｆであり、湿度は５０〜６０％であった。これらの手順は、残っている処置されたハツカネズミに対して、調査２日目、３日目に正確に繰り返された。毎日死亡したハエの数を記録し、ハエ用の箱を廃棄した。各処理グループについて全体のハエの％死亡率を決定し、連続的に供給されたＡＳＦのハエ死亡率及び溶媒で処理された対照のハツカネズミの上に供給されたＡＳＦのハエ死亡率と比較した。試験化合物１及び８の結果は次の通りである。
【００８２】
【表７】
0004666861.tif 000020
【００８３】
実施例６
生体外でのマダニ幼虫の小包テスト（ＬＰＴ）評価
滴定された段階（ｔｉｔｒａｔｅｄ  ｌｅｖｅｌｓ）の実験化合物を、オリーブ油とトリクロロエチレンの配合物中に溶解し、ピペットで正方形の実験室用濾紙上に移す。約１時間トリクロロエチレンを蒸発させた後、この濾紙を半分に折り、２つの側部をクリップで固定して小包を形成した。おおよそ１００匹の幼虫のマダニ（Ａｍｂｌｙｏｍｍａ  ａｍｅｒｉｃａｎｎｕｍ）をそれぞれの小包の内側に入れ、残りの開口側部をクランプで固定した。この小包をほぼ７０°Ｆで９５％の湿度で２４時間保育した。それぞれの小包を別々に開いて、生きている幼虫と死亡している幼虫の数を決定した。各化合物について％死亡率を決定した。テスト化合物１及び８の結果は次の通りである。
【００８４】
【表８】
0004666861.tif 000021
【００８５】
実施例７
生体外での成虫のサシバエのテスト
滴定された段階の実験化合物（１００ｐｐｍから始まる）を含む血清を歯科用ガーゼに十分に含ませる。この歯科用ガーゼを、取り扱いをより容易にするために予め冷却した１０匹の成虫のサシバエ（Ｓｔｏｍｏｘｙｓ  ｃａｌｃｉｔｒａｎｓ）と一緒にペトリ皿に入れる。ほぼ２５℃、７５〜８５％の湿度で２４時間と４８時間の保育を行った後に、対照の血清のみを伴うガーゼを入れた皿と比較して％死亡率を決定した。
テスト化合物１及び８の結果は次の通りである：
【００８６】
【表９】
0004666861.tif 000022
【００８７】
実施例８
生体外での幼虫のクロバエ（ｂｌｏｗｆｌｙ）のテスト
フィルター用インサート（ｉｎｓｅｒｔ）をプレート（９６−ｗｅｌｌ  ｍｉｃｒｏｔｉｔｅｒ  ｐｌａｔｅ）の中に個々別々に配置する。それぞれのインサートに、１００ｐｐｍで始まる滴定された段階の実験化合物を配合したウシ血清を十分に含ませた。ほぼ３０匹の幼虫のクロバエ［ｂｌｏｗｆｌｙ（Ｐｈｏｒｍｉａ  ｒｅｇｉｎａ）］をそれぞれの穴に入れ、プレート全体を密封する。このプレートをほぼ２５℃、７５〜８５％の湿度で４８時間保育し、その後、各穴の中の幼虫の動きを視覚で検査して効力を決定する。テスト化合物１及び８の結果は次の通りである（両方の化合物は５ｐｐｍ以上で活性であった。）：
【００８８】
【表１０】
0004666861.tif 000023
【００８９】
Ａは、幼虫の動きがないことで指摘される死亡率を表す。Ｎは幼虫の動きが認められることを示す。
【００９０】
外部寄生虫防除剤を伝達する技術は、当業者に周知されている。一般に本化合物は動物の外部表面に施用され、それによって本化合物は本化合物の効力期間内に宿主の体に達した有害生物のみならず宿主上に既に存在する有害生物にも接触する。典型的には、本化合物は動物の表面に噴霧するか、又は動物の表面に注ぐ液体製剤として調剤される。その他の慣習的な取り扱い方は“浸漬”であって、それによって牛は外部寄生虫防除剤の希薄溶液中に実質的に浸されて処置される。幾らかの宿主及び有害生物に対してはこの製剤は、宿主上に散布される粉剤、又は動物を入浴させる際に用いるシャンプーもしくはクリームであり得る。ネコ及び犬の首輪も、外部寄生虫防除剤を直接的に動物表面に伝達する方法として用いられる。
【００９１】
別の実施態様では、本発明化合物は、耳に付ける下げ札を用いて動物に伝達することができる（ＵＳ  ４，２６５，８７６に開示された伝達方法）。
【００９２】
別の技術では、外部寄生虫防除剤を動物が始終出入りする場所に施用する、その結果ちょうど宿主に直接施用した場合のように有害生物はそれによって本化合物と接触する。敷物類に施用するのと同じようにペットの寝わらへ施用することは周知である。牛については、振りかけバッグが周知である。これらのバッグは、牛が必然的にバッグをこすり、有害生物が本化合物と接触する戸口に位置決めされる。
【００９３】
さらに別の実施態様では、牛及びその他の動物の糞の中の有害生物である節足動物を防除するのに本化合物を用いることができる。この実施態様では本化合物は経口的に投与され、本化合物は腸管を通って進み、糞の中に現れる。糞中の有害生物を防除することによって、動物は有害生物から間接的に保護される。
【００９４】
本化合物は、外部寄生虫防除剤として用いるために、当業者に知られた方法で製剤化される。一般に、製剤は、本発明化合物と１種以上の生理学上許容される補助剤を含む。製剤には、活性剤が０．００１〜９８．０％の濃度で存在し、残りの内容物は生理学的に許容される担体である濃縮タイプが含まれる。このような製剤、とりわけ５０％以下の本化合物を含む製剤は、時には直接使用できるけれども、これらの製剤は別の生理学的に許容し得る担体で希釈して、比較的希薄な処置製剤を形成することもできる。これらの後者の製剤は、０．００１〜０．１％という比較的低い濃度で活性剤を含むことができる。
【００９５】
本発明の化合物は、寄生虫、例えばシラミを防除するために、人間用の薬としても有用である。本化合物は、例えばシラミ防除用製剤（ＷＯ  ００／０１３４７に開示されている。）中に用いることができる。
【００９６】
Ａｎｏｐｌｕｒａすなわちシラミ（ｓｕｃｋｉｎｇ  ｌｉｃｅ）は、哺乳動物のほとんど全ての群に発見される寄生虫である。Ａｎｏｐｌｕｒａの中の１５の認識された科のうち２つの科、ペディキュリド科（Ｐｅｄｉｃｕｌｉｄａｅ）とフチリド科（Ｐｔｈｉｒｉｄａｅ）は人間上に見られる種族を含んでいる。ペディクルス・ヒュマヌス（Ｐｅｄｉｃｕｌｕｓ  ｈｕｍａｎｕｓ）は人間に寄生するペディキュリド科（Ｐｅｄｉｃｕｌｉｄａｅ）の中の唯一の種族である。ペディクルス・ヒュマヌスとしては、アタマジラミ（ｈｅａｄ  ｌｏｕｓｅ，Ｐｅｄｉｃｕｌｕｓ  ｈｕｍａｎｕｓ  ｃａｐｉｔｉｓ）と、時折ペディクルス・コルポリス（Ｐｅｄｉｃｕｌｕｓ  ｃｏｒｐｏｒｉｓ）と呼ばれるキモノジラミ（ｂｏｄｙもしくはｃｌｏｔｈｉｎｇ  ｌｏｕｓｅ，Ｐｅｄｉｃｕｌｕｓ  ｈｕｍａｎｕｓ  ｈｕｍａｎｕｓ）とが挙げられる。ケジラミ（ｃｒａｂ  ｌｏｕｓｅ，Ｐｔｈｉｒｕｓ  ｐｕｂｉｓ）は独特な種族で、人間に寄生するフチリド科（Ｐｔｈｉｒｉｄａｅ）の中の唯一のメンバーである。本文中に用いられるとき、用語“ヒトジラミ（ｈｕｍａｎ  ｌｉｃｅもしくはｌｏｕｓｅ）”にはペディクルス・ヒュマヌス（Ｐｅｄｉｃｕｌｕｓ  ｈｕｍａｎｕｓ）もしくはフチルス・プビス（Ｐｔｈｉｒｕｓ  ｐｕｂｉｓ）のメンバーが含まれる。
【００９７】
従って、本発明の局面の一つにおいて、本発明は、活性成分としてスピノシン（ｓｐｉｎｏｓｙｎ）、又はその生理学上許容し得る誘導体もしくは塩、及び生理学上許容し得る担体を含む、人間におけるシラミ寄生を防除するシラミ防除性／殺卵性（抗シラミ）製剤を提供する。本発明の特に有用な製剤は、頭髪保護製剤である。とりわけ有用な頭髪保護製剤はシャンプー剤である。本発明は、ヒトジラミの種族を防除するためにこれらの製剤を用いる方法をも提供する。これらの製剤及び方法は、以前から知られている抗シラミ性製剤及び方法よりも安全且つ有効にシラミを防除する。
【００９８】
本発明の抗シラミ製剤は多くの方法で調剤することができよう。特に有用な製剤はＷＯ  ００／０１３４７に開示されたタイプのシャンプー剤、調節剤（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅｒ）及びローション剤である。
【００９９】
シャンプー製剤、毛髪調節製剤もしくはローション剤として用いる場合、スピノシン成分は約０．１％〜約３０％、好ましくは約１％〜約１０％のレベルで含まれる。
【０１００】
シラミに対する活性に関して、本発明の特定の実施態様としては、次のものが挙げられる：
Ａ．活性成分として、Ｒ５が式４ａ〜４ｉの中の１つを有する基である式１もしくは２の化合物、又はその生理学上許容し得る誘導体もしくは塩、及び生理学上許容し得る担体を含む、人間におけるシラミ寄生を防除するための製剤。
【０１０１】
Ｂ．毛髪保護製剤である、実施態様Ａの製剤。
【０１０２】
Ｃ．（ａ）Ｒ５が式４ａ〜４ｉの中の１つを有する基である式１もしくは２の化合物、又はその生理学上許容し得る誘導体もしくは塩、約０．１％〜約３０％；
（ｂ）約５％〜約３０％の合成界面活性剤；
（ｃ）約１％〜約７％のアミド；及び
（ｄ）水
を含むシラミ防除性シャンプー剤。
【０１０３】
Ｄ．合成界面活性剤が陰イオン性、両性、陽イオン性、双性もしくは非イオン性又はそれらの混合物である、実施態様Ｃのシャンプー剤。
【０１０４】
Ｅ．アミドがココナツモノエタノールアミド、ココナツジエタノールアミドもしくはそれらの混合物である、実施態様Ｄのシャンプー剤。
【０１０５】
Ｆ．非揮発性シリコーン物質約１％〜約１０％を追加的に含む、実施態様Ｄのシャンプー剤。
【０１０６】
Ｇ．非揮発性シリコーンは、粘度が２５℃で約１００センチポイズ〜約１５０，０００，０００センチポイズであるポリアルキルシロキサン、ポリアルキルアリールシロキサン、ポリエーテルシロキサン共重合体、もしくはそれらの混合物である、実施態様Ｆのシャンプー剤。
【０１０７】
Ｈ．針状もしくは血小板構造を有する結晶性の両親媒性物質、重合体物質、クレー、黒いぶしにした金属酸化物及びそれらの混合物から成る群から選択された懸濁剤約０．５〜約５％を追加的に含む実施態様Ｇのシャンプー剤。
【０１０８】
Ｉ．懸濁剤が長鎖のＣ16−Ｃ22アシル誘導体、脂肪酸の、長鎖のＣ16−Ｃ22アルカノールアミド、及びそれらの混合物から成る群から選択された結晶性の両親媒性物質である、実施態様Ｈのシャンプー剤。
【０１０９】
Ｊ．懸濁剤がエチレングリコールジエステルである実施態様Ｉのシャンプー剤。
【０１１０】
Ｋ．スピノシン又はその誘導体もしくは塩の量が約０２５％〜約１．５％の水準にある、実施態様Ｄのシャンプー剤。
【０１１１】
Ｌ．実施態様Ａの製剤を人間に局所的に投与することを含んで成る、人間におけるシラミの寄生を防除する方法。
【０１１２】
Ｍ．寄生するシラミがペディクルス・ヒュマナス・キャピチス（Ｐｅｄｉｃｕｌｕｓ  ｈｕｍａｎｕｓ  ｃａｐｉｔｉｓ）である実施態様Ｌの方法。
【０１１３】
Ｎ．寄生するシラミがペディクルス・ヒュマナス・ヒュマナス（Ｐｅｄｉｃｕｌｕｓ  ｈｕｍａｎｕｓ  ｈｕｍａｎｕｓ）である、実施態様Ｌの方法。
【０１１４】
Ｏ．寄生するシラミがフチルス・プビス（Ｐｔｈｉｒｕｓ  ｐｕｂｉｓ）である、実施態様Ｌの方法。
【０１１５】
Ｐ．（ａ）Ｒ５が式４ａ〜４ｉの中の１つを有する基である式１もしくは２の化合物又はその生理学的に許容し得る誘導体もしくは塩及び生理学的に許容し得る担体を含む製剤の約１０ｇ〜約３０ｇを施用して毛髪を湿らす段階；
（ｂ）製剤を毛髪と頭皮の至る所に使用する段階；
（ｃ）製剤を毛髪と頭皮上に約６〜１０分間そのままにしておく段階；
（ｄ）水ですすいで毛髪から製剤を取り除く段階；
を含んで成る、シラミ及びそれらの卵を殺害すると共にシラミ及びそれらの卵の除去を容易にするために人間の毛髪を処理する方法。
【０１１６】
Ｑ．人間におけるシラミ防除用の薬剤を製造するための、Ｒ５が式４ａ〜４ｉの中の１つを有する基である式１もしくは２の化合物又はその生理学的に許容し得る誘導体もしくは塩、又はこれらのいずれかを含む製剤の使用。