(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）
【化１】
0004614608.tif 000004
（式中、
ｎは、０〜８の整数であり、
Ｙは、ＣＨ2基であるか、ｎが１であるとき、式ＮＨの基であることもできる）
の化合物。
【請求項２】
ＹがＣＨ2である、請求項１記載の化合物。
【請求項３】
ＹがＮＨである、請求項１記載の化合物。
【請求項４】
請求項１〜３の化合物を含有する医薬組成物。
【請求項５】
腫瘍及び慢性関節リウマチの処置のための医薬を調製するための、請求項１〜３の化合物の使用。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、式（Ｉ）
【０００２】
【化２】
0004614608.tif 000002
【０００３】
（式中、
ｎは、０〜８の整数であり、
Ｙは、ＣＨ2基であるか、ｎが１であるとき、式ＮＨの基であることもできる）
のＮ−デアセチルチオコルヒチン又はその等価構造体の誘導体に関する。
【０００４】
コルヒチン及びチオコルヒチンは、チューブリンとの相互作用を介して微小管を不安定化することができる公知の細菌発育抑制化合物である。
【０００５】
コルヒチンは現在、痛風及び関連の炎症の治療に使用されているが、その高い胃腸毒性のため、その使用は急性段階に限定されている。
【０００６】
多数のコルヒチン又はチオコルヒチン誘導体が抗腫瘍薬としてのその使用の可能性を考慮して研究されてきたが、そのような化合物のしばしば非常に狭い治療指数のせいで、研究者たちの努力はこれまで不成功である。
【０００７】
唯一、１種のコルヒチン誘導体であるデメコルチン（demecolcine）が過去において白血病の治療のために臨床使用されたことがあるが、成果は不十分であった。
【０００８】
今、式（Ｉ）の化合物が、特にＭＤＲ（多剤耐性）表現型を発現する細胞に対し、感受性細胞に対する活性と耐性細胞に対する活性との比が約１：１で、抗増殖活性を有することがわかった。
【０００９】
本発明の化合物は実際、強力な抗有糸分裂活性を有し、種々の形態の腫瘍ならびに変性性慢性関節リウマチ、白血球の過剰な増殖及び異常な移動を特徴とする疾患の治療に適合させる好ましい治療指数を特徴とする。
【００１０】
化合物（Ｉ）は、もっとも効果的な抗腫瘍薬の細胞毒性に匹敵しうる細胞毒性を有しながらも、特に公知の薬に対して耐性を有する細胞に対して著しく広い作用スペクトルを有する。
【００１１】
ＹがＣＨ2である化合物（Ｉ）は、Ｎ−デアセチルチオコルヒチンを乾燥溶媒中でジカルボン酸反応性誘導体と反応させることによって調製される。適切なジカルボン酸反応性誘導体の例は、塩化物、反応性無水物又はエステル、特に前記酸をＮ−ヒドロキシスクシンイミドと反応させることによって得ることができるＮ−ヒドロキシスクシニルジエステルを含む。反応は、溶媒、たとえばエチルエーテル、ジオキサン又はテトラヒドロフラン中、塩基、たとえばトリエチルアミンの存在で実施することが好ましい。
【００１２】
他方、ＹがＮＨであり、ｎが１である化合物（Ｉ）は、Ｎ−デアセチルチオコルヒチンを、適切な非プロトン性溶媒、好ましくは塩素化炭化水素（塩化メチレン、クロロホルム）中、アミン及び縮合剤、たとえばジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）の存在で、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドと反応させることによって調製され得る。前記化合物はまた、ジカルボン酸Ｎ−ヒドロキシスクシニルジエステルとＮ−デアセチルチオコルヒチンとの反応から副生成物として得ることもできる。
【００１３】
ＭＤＲ表現型を発現する多数の耐性腫瘍細胞に対してこれらの化合物の活性を評価した。これらの化合物は、ＭＤＲを発現する種々の感受性結腸系に対して特に活性であることがわかった。
【００１４】
以下の表は、これら２種の化合物の活性を、それらの生物学的活性を参照分子としてのチオコルヒチン及びタキソールと比較しながら例として報告する。
【００１５】
【表１】
0004614608.tif 000003
【００１６】
細胞毒活性を、M.  C.  AlleyらのCancer  Research,  48,  589-601,  1998にしたがって評価した。
【００１７】
上記で報告したデータは、感受性細胞系及び種々の薬物耐性細胞系に対する本発明の化合物の高い細胞毒活性を種々の抗腫瘍薬に照らしながら証明する。
【００１８】
したがって、本発明の化合物は、増殖性疾病、特に種々の起源の腫瘍、慢性関節リウマチ又は抗増殖作用及び抗炎症性作用が示される他の変性性疾病の治療に有用である。
【００１９】
この目的のため、化合物（Ｉ）は、経口、非経口、上皮又は経皮投与に適した医薬組成物の形態で投与される。化合物（Ｉ）の用量は、投与経路に依存して、体表面積１ｍ2あたり１〜１００mgの範囲である。化合物を、経口投与することが好ましい。
【００２０】
組成物の例は、カプセル、錠剤、バイアル、クリーム、溶液、顆粒を含む。
【００２１】
以下の例が本発明をさらに詳細に例示する。
【００２２】
例１
ＹがＣＨ2であり、ｎが２である化合物（Ｉ）（Tiocol  39）の調製
Ｎ−デアセチルチオコルヒチン１００mg（ＭＷ＝３７３g/mol、０．２７mmol）を、窒素雰囲気下、室温で乾燥ジオキサン６mlに溶解した。Ｎ−ヒドロキシスクシニルジエステルとして活性化されたアジピン酸４６mg（ＭＷ＝３４０g/mol、０．１３５mmol）及び乾燥トリエチルアミン４０μl（ＭＷ＝１０１g/mol、ｄ＝０．７２６g/ml、０．２７mmol）を加えた。混合物を、窒素雰囲気下、室温で４８時間攪拌した（ＴＬＣコントロール：ＣＨＣｌ3：ＭｅＯＨ＝９５：５）。溶媒を蒸発させ、シリカでのフラッシュクロマトグラフィー（溶離剤：ＣＨＣｌ3：ＭｅＯＨ＝７５：１）によって生成物を回収した。収率：８５％
【００２３】
例２
ＹがＮＨであり、ｎが１である化合物（Ｉ）（Tiocol  54）の調製
デアセチルチオコルヒチン１gの乾燥ＣＨ2Ｃｌ2４０ml溶液に、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド１５４mg、ＤＣＣ２７６mg及びジイソプロピルエチルアミン４７６μlを加えた。混合物を窒素下で少なくとも２日間還流させた。反応の進行をＴＬＣ（ＣＨ2Ｃｌ2−ＥｔＯＨ＝９５／５）によってモニターした。混合物を少量まで濃縮し、残渣を酢酸エチルに溶解した。放置して生成物を結晶化させたのち、フラッシュクロマトグラフィー（溶離剤ＡｃＯＥｔ−ヘキサン７／３又はＣＨ2Ｃｌ2−ＥｔＯＨ＝９５／５）によってさらに精製した。生成物５００mgを得た。
【００２４】
1H-NMR(DMSO-d6-300Mhz): 8.80 d; 7.82 br s; 7.75-7.60 S; 7.37; 7.18; 6.59; 4.90 m; 4.66 m; 4.52 dd; 3.96 s ppm
13C-NMR(CDCl3): 182.5; 181.9; 172.2; 158.0; 175.5; 157.1; 153.8; 153.7; 153; 152.3; 151.3; 151.2; 141.6; 141.5; 139.4; 139.3; 135.5; 135.5 d, 134.8; 134.7; 129.0; 128.4(d)
MS(m/z)866.4[(M+Na)+]
【００２５】
例３
ＹがＣＨ2であり、ｎが６である化合物（Ｉ）（Tiocol  33）の調製
Ｎ−デアセチルチオコルヒチン２００mg（ＭＷ＝３７３g/mol、０．５４mmol）を、窒素雰囲気下、室温で乾燥ジオキサン１２mlに溶解した。Ｎ−ヒドロキシスクシニルジエステルとして活性化されたセバシン酸９１．８mg（ＭＷ＝３９６g/mol、０．２７mmol）及び乾燥トリエチルアミン７５μl（ＭＷ＝１０１g/mol、ｄ＝０．７２６g/ml、０．５４mmol）を加えた。混合物を、窒素雰囲気下、室温で４８時間攪拌し（ＴＬＣコントロール：ＣＨＣｌ3：ＭｅＯＨ＝９５：５）、２０時間後、５０℃に加熱し、溶媒を蒸発させた。粗反応生成物をシリカでのフラッシュクロマトグラフィー（溶離剤：ＣＨＣｌ3：ＭｅＯＨ＝４０：１）によって精製して、標記化合物（Ｒｆ：＝０．３）と例２の化合物との混合物３０mgを得た。
【００２６】
例４
ＹがＣＨ2であり、ｎが０である化合物（Ｉ）（Tiocol  43）の調製
手順Ａ
Ｎ−デアセチルチオコルヒチン１９０mg（ＭＷ＝３７３g/mol、０．５１２mmol）を、窒素雰囲気下、室温で乾燥ジオキサン６mlに溶解した。Ｎ−ヒドロキシスクシニルジエステルとして活性化されたコハク酸８０mg（ＭＷ＝３１２g/mol、０．２５６mmol）及び乾燥トリエチルアミン７０μl（ＭＷ＝１０１g/mol、ｄ＝０．７２６g/ml、０．５１２mmol）を加えた。混合物を、窒素雰囲気下、室温で４８時間攪拌した（ＴＬＣコントロール：ＣＨＣｌ3：ＭｅＯＨ＝９５：５）。溶媒を蒸発させ、残渣をＡｃＯＥｔに採り、残余のＮ−デアセチルチオコルヒチン及びトリエチルアミンを除去した（生成物は不溶性であった）。収率：４５％
【００２７】
手順Ｂ
Ｎ−デアセチル−Ｎ−スクシニルチオコルヒチン１００mg（ＭＷ＝４７３g/mol、０．２１mmol）を、窒素雰囲気下、室温で乾燥ＣＨ2Ｃｌ2８mlに溶解した。ＢＯＰ９３mg（ＭＷ＝４４２，３g/mol、０．２１mmol）及び乾燥トリエチルアミン６０μl（ＭＷ＝１０１g/mol、ｄ＝０．７２６g/ml、０．４２mmol）を加えた。１０分後、Ｎ−デアセチルチオコルヒチン８０mg（ＭＷ＝１０１g/mol、ｄ＝０．７２６g/ml、０．４２mmol）を混合物に加え、その混合物を、窒素雰囲気下、室温で４８時間攪拌した（ＴＬＣコントロール：ＣＨＣｌ3：ＭｅＯＨ＝９５：５）。溶媒を蒸発させ、残渣をＡｃＯＥｔに採り、残余のＮ−デアセチルチオコルヒチン及びトリエチルアミンを除去した（生成物は不溶性であった）。収率：４５％