(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）
【化１】
0004801335.tif 000059
(I)
（式中、Ｑ１はフェニルであり、Ｑ２はフェニルまたはピリジルより選択され；そしてＱ１およびＱ２の一方が、Ｎ，Ｎ−ジ−（Ｃ１−２アルキル）アミノ、複素環式基、複素環式基−Ｏ−、置換Ｃ１−２アルキル、置換Ｃ１−２アルコキシ、置換Ｃ１−２アルコキシカルボニル、置換Ｎ−（Ｃ１−２アルキル）アミノ、置換Ｃ１−２アルコキシＣ１−２アルキル、置換Ｃ２−４アルケニルおよび置換Ｃ２−４アルキニルより選択される１個の置換基で環炭素上に置換されていて；ここにおいて、Ｃ１−２アルキル、Ｃ１−２アルコキシ、Ｃ１−２アルコキシカルボニル、Ｃ１−２アルコキシＣ１−２アルキル、Ｃ２−４アルケニルおよびＣ２−４アルキニルの該置換基は、ヒドロキシ、カルボキシ、シアノ、アミノ、複素環式基、複素環式基−Ｃ（Ｏ）−、Ｎ−Ｃ１−４アルキルアミノ、Ｎ，Ｎ−ジ−（Ｃ１−４アルキル）アミノより選択され；そしてここにおいて、いずれかの複素環式基が−ＮＨ−部分を含有する場合、その窒素は、Ｒｂより選択される基で置換されていてもよく；
Ｇは、−ＮＨ-であり；
Ｒ１は、水素またはハロより選択され；
Ｑ１は、１〜４個のシアノで環炭素上に置換されていてよく；
Ｑ２は、ハロ、シアノ、Ｃ１−４アルキルまたはＣ１−４アルコキシより独立して選択される１〜４個の置換基で環炭素上に置換されていてよく、ここにおいて、該Ｃ１−４アルキルおよびＣ１−４アルコキシは、Ｒｇより選択される１個またはそれより多い基で置換されていてよく；
Ｒｇは、シアノであり；そして
Ｒｂは、Ｃ１−４アルキルである）
を有する化合物；またはその薬学的に許容しうる塩。
【請求項２】
Ｑ１およびＱ２の一方が、ジメチルアミノ、４−メチルピペラジノ、アミノメチル、２−ヒドロキシエトキシメチル、スクシンイミド−１−イルメチル、２−ピロリジン−１−イルエチル、２−アミノエチル、ピペリド−４−イルオキシ、１−メチルピペリド−４−イルオキシ、１−メチルピペリド−３−イルオキシ、カルボキシメトキシ、１−メチルピペリド−２−イルメトキシ、１−メチルピペリド−３−イルメトキシ、ピペリド−４−イルメトキシ、４−イソプロピルピペラジノカルボニルメトキシ、２−フタルイミド−１−イルエトキシ、２−モルホリノエトキシ、２−ジメチルアミノエトキシ、２−ジエチルアミノエトキシ、２−（４−メチルピペラジノ）エトキシ、２−イミダゾール−１−イルエトキシ、２−ピロリジン−１−イルエトキシ、２−アミノエチニル、２−ジメチルアミノエチニル、２−メチルアミノエチニル、２−（３−ヒドロキシキヌクリジン−３−イル）エチニル、２−モルホリノエトキシメチル、２−ジエチルアミノエトキシメチル、２−ピロリジン−１−イルエトキシメチル、２−（４−メチルピペラジノ）エトキシメチル、２−ジエチルアミノエトキシカルボニル、２−ピペリジノエチルアミノまたは２−イソプロピルアミノエチルアミノより選択される１個の置換基で環炭素上に置換されている請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容しうる塩。
【請求項３】
Ｑ１が、−ＮＨ−に相対してパラ位またはメタ位に置換されている請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容しうる塩。
【請求項４】
Ｒ１が、水素、クロロまたはブロモである請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容しうる塩。
【請求項５】
Ｑ２が、置換されていない、またはフルオロ、ブロモ、メチル、メトキシおよびシアノより選択される１個の基で置換されている請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容しうる塩。
【請求項６】
４−アニリノ−５−ブロモ−２−［４−（２−ジメチルアミノエトキシ）アニリノ］ピリミジン；
４−アニリノ−５−ブロモ−２−［４−（カルボキシメトキシ）アニリノ］ピリミジン；
４−アニリノ−５−ブロモ−２−［４−（１−メチルピペリド−４−イルオキシ）アニリノ］ピリミジン；
４−（６−メチルピリド−２−イル）−５−ブロモ−２−［４−（２−ピペリド−１−イルエチルアミノ）アニリノ］ピリミジン；
４−アニリノ−５−ブロモ−２−［４−（２−イソプロピルアミノエチルアミノ）アニリノ］ピリミジン；または
４−アニリノ−５−ブロモ−２−［４−（３−メチルアミノ−１−プロピニル）アニリノ］ピリミジン
より選択される請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容しうる塩。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物を製造する方法であって、
（ａ）式（II）
【化２】
0004801335.tif 000060
（ＩＩ）
（式中、Ｌは、脱離基である）
を有するピリミジンと、式（III）
【化３】
0004801335.tif 000061
（ＩＩＩ）
（式中、Ｇは−ＮＨ−である）
を有する化合物とを反応させること；または
（ｂ）式（IV）
【化４】
0004801335.tif 000062
（ＩＶ）
（式中、Ｌは、脱離基である）
を有するピリミジンと、式（Ｖ）
【化５】
0004801335.tif 000063
（Ｖ）
の化合物との反応
より選択され、その後、必要ならば、
（ｉ）式（Ｉ）の化合物を式（Ｉ）の別の化合物に変換し；
（ii）保護基を全て除去し；
（iii）薬学的に許容しうる塩を形成する方法。
【請求項８】
請求項１〜６のいずれか１項に記載の式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容しうる塩を薬学的に許容しうる希釈剤または担体と一緒に含む医薬組成物。
【請求項９】
温血動物の抗癌作用、細胞周期阻害作用および／またはＦＡＫ阻害作用をもたらすために使用される薬剤の製造における請求項１〜６のいずれか１項に記載の式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容しうる塩の使用。
【請求項１０】
温血動物がヒトである、請求項９に記載の使用。
【請求項１１】
抗癌作用をもたらすために使用される、請求項８に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、細胞周期阻害活性を有し、したがって、それらの抗癌（抗細胞増殖、抗細胞移動および／またはアポトーシスのような）活性について有用であり、したがって、ヒトなどの温血動物の処置方法において有用であるピリミジン誘導体、またはその薬学的に許容しうる塩または in vivo 加水分解性（hydrolysable）エステルに関する。本発明は、更に、これらピリミジン誘導体の製造方法、それらを含有する医薬組成物、および薬剤の製造におけるそれらの使用またはヒトなどの温血動物での抗癌（抗細胞増殖／移動および／またはアポトーシス）作用の産生における使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
サイクリンと称される細胞内タンパク質ファミリーは、細胞周期において中心的役割を果たしている。サイクリンの合成および分解は、それらの発現レベルが細胞周期中に変動するように厳密に制御される。サイクリンは、サイクリン依存性セリン／トレオニンキナーゼ（ＣＤＫ）に結合し、この結合は、細胞中のＣＤＫ（ＣＤＫ１、ＣＤＫ２、ＣＤＫ４および／またはＣＤＫ６など）活性に不可欠である。これら因子の各々が一緒になってＣＤＫ活性を調節する方法の正確な詳細はまだ充分に理解されていないが、二つの因子間のバランスが、細胞周期中に細胞が進行するか否かを指示している。
【０００３】
癌遺伝子および腫瘍サプレッサー遺伝子研究の最近の集束点は、腫瘍における有糸分裂誘発の主要な制御点として細胞周期中へのエントリーの調節を識別している。更に、ＣＤＫは、多数の癌遺伝子シグナリング経路の下流にあると考えられる。サイクリンのアップレギュレーションおよび／または内因性阻害剤の欠失によるＣＤＫ活性の無調節は、マイトジェンシグナリング経路と腫瘍細胞の増殖との間の重要な軸であると考えられる。
【０００４】
したがって、細胞周期キナーゼの阻害剤、具体的には、ＣＤＫ２、ＣＤＫ４および／またはＣＤＫ６（それぞれ、Ｓ期、Ｇ１−Ｓ期およびＧ１−Ｓ期で機能する）の阻害剤は、哺乳動物癌細胞の成長のような細胞増殖の選択的阻害剤として価値があるはずであると認識されている。
【０００５】
更に、フォーカルアドヒージョンキナーゼ（ＦＡＫ）の阻害は、シグナル伝達経路に関与しているが、アポトーシス（細胞死）を誘発するおよび／または細胞移動を阻害すると考えられるので、ＦＡＫの阻害剤は、抗癌剤として価値があるかもしれない。
【発明の開示】
【０００６】
本発明は、ある２，４−ピリミジン化合物が、驚くべきことに、ＣＤＫ２、ＣＤＫ４およびＣＤＫ６に選択性を示す細胞周期キナーゼの作用を阻害し、そして更に、ＦＡＫを阻害し、したがって、抗癌（抗細胞移動／増殖および／またはアポトーシス）性を有するという発見に基づいている。このような性質は、癌（充実性腫瘍および白血病）、線維増殖性および分化性障害、乾癬、慢性関節リウマチ、カポージ肉腫、血管腫、急性および慢性腎症、アテローム、アテローム性動脈硬化症、動脈再狭窄、自己免疫疾患、急性および慢性炎症、骨疾患、および網膜血管増殖を伴う眼疾患のような、異常な細胞周期および細胞増殖に関連した疾患状態の処置において価値があると考えられる。
【０００７】
本発明により、式（Ｉ）
【０００８】
【化１】
0004801335.tif 000002
【０００９】
（式中、Ｑ１およびＱ２は、独立して、アリール、または炭素に連結したヘテロアリールより選択され；そしてＱ１およびＱ２の一方またはＱ１およびＱ２の両方が、Ｎ−（Ｃ１−２アルキル）アミノ、Ｎ，Ｎ−ジ−（Ｃ１−２アルキル）アミノ、フェニル、複素環式基、フェノキシ、複素環式基−Ｏ−、置換Ｃ１−２アルキル、置換Ｃ１−２アルコキシ、置換Ｃ１−２アルコキシカルボニル、置換Ｎ−（Ｃ１−２アルキル）アミノ、置換Ｃ１−２アルコキシＣ１−２アルキル、置換Ｃ２−４アルケニルおよび置換Ｃ２−４アルキニルより選択される１個の置換基で環炭素上に置換されていて；ここにおいて、このＣ１−２アルキル、Ｃ１−２アルコキシ、Ｃ１−２アルコキシカルボニル、Ｎ−（Ｃ１−２アルキル）アミノ、Ｃ１−２アルコキシＣ１−２アルキル、Ｃ２−４アルケニルおよびＣ２−４アルキニルの置換基は、ハロ、ヒドロキシ、メルカプト、ニトロ、ホルミル、ホルムアミド、カルボキシ、シアノ、アミノ、ウレイド、カルバモイル、スルファモイル、Ｃ１−４アルカノイル、Ｃ１−４アルコキシカルボニル、フェニル、複素環式基、ベンゾイル、複素環式基−Ｃ（Ｏ）−、Ｃ１−４アルキルＳ（Ｏ）ａ（式中、ａは０〜２である）、Ｎ’−（Ｃ１−４アルキル）ウレイド、Ｎ’，Ｎ’−ジ−（Ｃ１−４アルキル）ウレイド、Ｎ’−（Ｃ１−４アルキル）−Ｎ−（Ｃ１−４アルキル）ウレイド、Ｎ’，Ｎ’−ジ−（Ｃ１−４アルキル）−Ｎ−（Ｃ１−４アルキル）ウレイド、Ｎ−Ｃ１−４アルキルアミノ、Ｎ，Ｎ−ジ−（Ｃ１−４アルキル）アミノ、Ｎ−（Ｃ１−４アルキル）スルファモイル、Ｎ，Ｎ−ジ−（Ｃ１−４アルキル）スルファモイル、Ｎ−Ｃ１−４アルキルカルバモイル、Ｎ，Ｎ−ジ−（Ｃ１−４アルキル）カルバモイルおよびＣ１−４アルカノイルアミノより選択され；ここにおいて、いずれのフェニル、ベンジル、ベンゾイルまたは複素環式基も、Ｒａより選択される１個またはそれより多い基で環炭素上に置換されていてよく；そしてここにおいて、いずれかの複素環式基が−ＮＨ−部分を含有する場合、その窒素は、Ｒｂより選択される基で置換されていてもよく；
Ｇは、−Ｏ−または−ＮＲ２−であり；
Ｒ２は、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−６アルケニルおよびＣ３−６アルキニルより選択され；ここにおいて、このＣ１−６アルキル、Ｃ３−６アルケニルおよびＣ３−６アルキニルは、Ｒｃより選択される１個またはそれより多い基で置換されていてよく；
Ｒ１は、水素、ハロ、ヒドロキシ、ニトロ、アミノ、Ｎ−（Ｃ１−３アルキル）アミノ、Ｎ，Ｎ−ジ−（Ｃ１−３アルキル）アミノ、シアノ、トリフルオロメチル、トリクロロメチル、Ｃ１−３アルキル［ハロ、シアノ、アミノ、Ｎ−（Ｃ１−３アルキル）アミノ、Ｎ，Ｎ−ジ−（Ｃ１−３アルキル）アミノ、ヒドロキシおよびトリフルオロメチルより独立して選択される１個または２個の置換基で置換されていてよい］、Ｃ３−５アルケニル［３個までのハロ置換基または１個のトリフルオロメチル置換基で置換されていてよい］、Ｃ３−５アルキニル、Ｃ１−３アルコキシ、メルカプト、Ｃ１−３アルキルスルファニル、カルボキシおよびＣ１−３アルコキシカルボニルより選択され；
Ｑ１は、ハロ、メルカプト、ニトロ、ホルミル、ホルムアミド、カルボキシ、シアノ、アミノ、ウレイド、カルバモイル、スルファモイル、Ｃ１−４アルキル、Ｃ２−４アルケニル、Ｃ２−４アルキニル［ここにおいて、このＣ１−４アルキル、Ｃ２−４アルケニルおよびＣ２−４アルキニルは、Ｒｄより選択される１個またはそれより多い基で置換されていてよい］、Ｃ１−４アルカノイル、Ｃ１−４アルコキシカルボニル、複素環式基、Ｃ１−４アルキルＳ（Ｏ）ａ（式中、ａは０〜２である）［ヒドロキシで置換されていてよい］、Ｎ’−（Ｃ１−４アルキル）ウレイド、Ｎ’，Ｎ’−ジ−（Ｃ１−４アルキル）ウレイド、Ｎ’−（Ｃ１−４アルキル）−Ｎ−（Ｃ１−４アルキル）ウレイド、Ｎ’，Ｎ’−ジ−（Ｃ１−４アルキル）−Ｎ−（Ｃ１−４アルキル）ウレイド、Ｎ−Ｃ１−４アルキルアミノ、Ｎ，Ｎ−ジ−（Ｃ１−４アルキル）アミノ、Ｎ−（Ｃ１−４アルキル）スルファモイル、Ｎ，Ｎ−ジ−（Ｃ１−４アルキル）スルファモイル、Ｎ−Ｃ１−４アルキルカルバモイル、Ｎ，Ｎ−ジ−（Ｃ１−４アルキル）カルバモイルおよびＣ１−４アルカノイルアミノより独立して選択される１〜４個の置換基で環炭素上に置換されていてよく；そして更に独立して、または上の置換基に加えて、
Ｑ１は、アリール、Ｃ３−８シクロアルキルおよび複素環式基より独立して選択される１〜２個の置換基で置換されていてもよく；ここにおいて、このアリール、Ｃ３−８シクロアルキルまたは複素環式基は、Ｒｅより選択される１個またはそれより多い基で環炭素上に置換されていてもよく；そしてここにおいて、この複素環式基が−ＮＨ−部分を含有する場合、その窒素は、Ｒｆより選択される基で置換されていてもよく；
Ｑ２は、ハロ、ヒドロキシ、メルカプト、ニトロ、ホルミル、ホルムアミド、カルボキシ、シアノ、アミノ、ウレイド、カルバモイル、スルファモイル、Ｃ１−４アルキル、Ｃ２−４アルケニル、Ｃ２−４アルキニル、Ｃ１−４アルコキシ［ここにおいて、このＣ１−４アルキル、Ｃ２−４アルケニル、Ｃ２−４アルキニルおよびＣ１−４アルコキシは、Ｒｇより選択される１個またはそれより多い基で置換されていてよい］、Ｃ１−４アルカノイル、Ｃ１−４アルコキシカルボニル、複素環式基、Ｃ１−４アルキルＳ（Ｏ）ａ（式中、ａは０〜２である）［ヒドロキシで置換されていてよい］、Ｎ’−（Ｃ１−４アルキル）ウレイド、Ｎ’，Ｎ’−ジ−（Ｃ１−４アルキル）ウレイド、Ｎ’−（Ｃ１−４アルキル）−Ｎ−（Ｃ１−４アルキル）ウレイド、Ｎ’，Ｎ’−ジ−（Ｃ１−４アルキル）−Ｎ−（Ｃ１−４アルキル）ウレイド、Ｎ−Ｃ１−４アルキルアミノ、Ｎ，Ｎ−ジ−（Ｃ１−４アルキル）アミノ、Ｎ−（Ｃ１−４アルキル）スルファモイル、Ｎ，Ｎ−ジ−（Ｃ１−４アルキル）スルファモイル、Ｎ−Ｃ１−４アルキルカルバモイル、Ｎ，Ｎ−ジ−（Ｃ１−４アルキル）カルバモイル、Ｃ２−４アルケニルオキシ、Ｃ２−４アルキニルオキシ、Ｃ１−４アルカノイルアミノより独立して選択される１〜４個の置換基で環炭素上に置換されていてよく；そして更に独立して、または上の置換基に加えて、
Ｑ２は、アリール、Ｃ３−８シクロアルキルまたは複素環式基より独立して選択される１〜２個の置換基で置換されていてもよく；ここにおいて、このアリール、Ｃ３−８シクロアルキルまたは複素環式基は、Ｒｈより選択される１個またはそれより多い基で環炭素上に置換されていてもよく；そしてここにおいて、この複素環式基が−ＮＨ−部分を含有する場合、その窒素は、Ｒｉより選択される基で置換されていてもよく；
Ｒｃ、ＲｄおよびＲｇは、独立して、ヒドロキシ、ハロ、アミノ、シアノ、ホルミル、ホルムアミド、カルボキシ、ニトロ、メルカプト、カルバモイル、スルファモイル、Ｎ−Ｃ１−４アルキルアミノ、Ｎ，Ｎ−ジ−（Ｃ１−４アルキル）アミノ、Ｃ１−４アルカノイル、Ｃ１−４アルカノイルオキシ、Ｃ１−４アルコキシ、Ｃ１−４アルコキシカルボニル、Ｎ−Ｃ１−４アルキルカルバモイル、Ｎ，Ｎ−ジ−（Ｃ１−４アルキル）カルバモイル、Ｃ１−４アルカノイルアミノ、Ｃ１−４アルキルＳ（Ｏ）ａ（式中、ａは０〜２である）、Ｃ１−４アルキルスルホニルアミノ、Ｎ−（Ｃ１−４アルキル）スルファモイル、Ｎ−（Ｃ１−４アルキル）２スルファモイル、Ｎ−（Ｃ１−４アルキル）カルバモイル、Ｎ−（Ｃ１−４アルキル）２カルバモイル、フェニル、フェニルチオ、フェノキシ、Ｃ３−８シクロアルキルおよび複素環式基より選択され；ここにおいて、このフェニル、フェニルチオ、フェノキシ、Ｃ３−８シクロアルキルまたは複素環式基は、Ｒｊより選択される１個またはそれより多い基で環炭素上に置換されていてもよく；そしてここにおいて、この複素環式基が−ＮＨ−部分を含有する場合、その窒素は、Ｒｋより選択される基で置換されていてもよく；
Ｒａ、Ｒｅ、ＲｈおよびＲｊは、独立して、ヒドロキシ、ハロ、アミノ、シアノ、ホルミル、ホルムアミド、カルボキシ、ニトロ、メルカプト、カルバモイル、スルファモイル、Ｃ１−４アルキル［ハロ、シアノ、アミノ、Ｎ−Ｃ１−４アルキルアミノ、Ｎ，Ｎ−ジ−（Ｃ１−４アルキル）アミノまたはヒドロキシより選択される１個またはそれより多い基で置換されていてよい］、Ｃ２−４アルケニル［ハロより選択される１個またはそれより多い基で置換されていてよい］、Ｃ２−４アルキニル、Ｎ−Ｃ１−４アルキルアミノ、Ｎ，Ｎ−ジ−（Ｃ１−４アルキル）アミノ、Ｃ１−４アルカノイル、Ｃ１−４アルカノイルオキシ、Ｃ１−４アルコキシ［ハロより選択される１個またはそれより多い基で置換されていてよい］、Ｃ１−４アルコキシカルボニル、Ｎ−Ｃ１−４アルキルカルバモイル、Ｎ，Ｎ−ジ−（Ｃ１−４アルキル）カルバモイル、Ｃ１−４アルカノイルアミノ、Ｃ１−４アルキルＳ（Ｏ）ａ（式中、ａは０〜２である）、Ｃ１−４アルキルスルホニルアミノ、Ｎ−（Ｃ１−４アルキル）スルファモイル、Ｎ−（Ｃ１−４アルキル）２スルファモイル、フェニル、Ｃ３−８シクロアルキルおよび複素環式基より選択され；そして
Ｒｂ、Ｒｆ、ＲｉおよびＲｋは、独立して、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルカノイル、Ｃ１−４アルキルスルホニル、カルバモイル、Ｎ−（Ｃ１−４アルキル）カルバモイル、Ｎ，Ｎ−（Ｃ１−４アルキル）カルバモイル、ベンジル、ベンジルオキシカルボニル、ベンゾイルおよびフェニルスルホニルより選択される）
を有するピリミジン誘導体；またはその薬学的に許容しうる塩または in vivo 加水分解性エステルを提供する。
【００１０】
“アリール”は、４〜１２個の原子を含有する完全または部分不飽和の単環式または二環式炭素環である。好ましくは、“アリール”は、５個または６個の原子を含有する単環式環、または９個または１０個の原子を含有する二環式環である。より好ましくは、“アリール”は、フェニル、ナフチル、テトラリニルまたはインダニルである。具体的には、“アリール”は、フェニル、ナフチルまたはインダニルである。より具体的には、“アリール”はフェニルである。
【００１１】
“炭素に連結したヘテロアリール”は、少なくとも１個の原子が窒素、硫黄または酸素より選択される、完全不飽和の５員または６員単環式環または９員または１０員二環式環である。この環は、炭素原子によって−ＮＨ−（Ｑ１について）またはＧ（Ｑ２について）に連結している。好ましくは、“炭素に連結したヘテロアリール”は、フラニル、チエニル、ピロリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、イミダゾリル、ピラゾリル、フラザニル、トリアゾリル、チアジアゾリル、ピリジル、ピリミジル、ピラジニル、ピリダジニル、トリアジニル、インドリル、キノリルまたはベンズイミダゾリルである。より好ましくは、“炭素に連結したヘテロアリール”は、ピリジル、チアゾリルまたはピラゾリルである。具体的には、“炭素に連結したヘテロアリール”はピリジルである。
【００１２】
“複素環式基”は、少なくとも１個の原子が窒素、硫黄または酸素より選択される４〜１２個の原子を含有する、特に断らない限り、炭素または窒素に結合していてよい、飽和、部分飽和または不飽和の単環式または二環式環であり、ここにおいて、−ＣＨ２−基は、場合により、−Ｃ（Ｏ）−で置き換えることができるし、そして環硫黄原子は、場合により、Ｓ−オキシドを形成するように酸化されていてよい。好ましくは、“複素環式基”は、ピロリジニル、モルホリノ、ピペリジル、キヌクリジニル、ピリジル、ピラニル、ピロリル、イソチアゾリル、インドリル、キノリル、チエニル、フリル、１，３−ベンゾジオキソリル、チアジアゾリル、ピペラジニル、チアゾリジニル、ピロリジニル、スクシンイミジル、チオモルホリノ、ピラゾリル、ピロリニル、ホモピペラジニル、テトラヒドロピラニル、イミダゾリル、ピリミジル、ピラジニル、ピリダジニル、イソオキサゾリル、フタルイミジル、４−ピリドン、１−イソキノロン、２−ピロリドン、４−チアゾリドン、イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンまたは３−アザ−８−オキサビシクロ［３，２，１］ヘキサンである。より好ましくは、“複素環式基”は、ピロリジニル、モルホリノ、ピペリジル、キヌクリジニル、ピペラジニル、スクシンイミジル、イミダゾリルまたはフタルイミジルである。
【００１３】
本明細書中、“アルキル”には、直鎖および分岐状鎖両方のアルキル基が含まれるが、“プロピル”のような個々のアルキル基の意味は、直鎖型についてだけ特定する。類似した慣例が他の包括的用語に当てはまる。“ハロ”は、フルオロ、クロロ、ブロモおよびヨードである。
【００１４】
Ｃ２−４アルケニルの例は、ビニルおよびアリルであり；Ｃ２−６アルケニルの例は、Ｃ３−５アルケニル、ビニルおよびアリルであり；Ｃ３−６アルケニルの例はアリルであり；Ｃ３−６アルキニルの例は、Ｃ３−５アルキニルおよびプロピン−２−イルであり；Ｃ２−４アルキニルの例は、エチニルおよびプロピン−２−イルであり；Ｃ２−６アルキニルの例は、エチニルおよびプロピン−２−イルであり；Ｃ１−４アルカノイルの例は、アセチルおよびプロピオニルであり；Ｃ１−４アルコキシカルボニルの例は、Ｃ１−３アルコキシカルボニル、Ｃ１−２アルコキシカルボニル、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、プロポキシカルボニルおよび tert−ブトキシカルボニルであり；Ｃ１−４アルキレンの例は、メチレン、エチレンおよびプロピレンであり；Ｃ１−４アルキルの例は、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−２アルキル、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、sec−ブチルおよび tert−ブチルであり；Ｃ１−６アルキルの例は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、sec−ブチル、tert−ブチルおよび３−メチルブチルであり；Ｃ１−４アルコキシの例は、Ｃ１−３アルコキシ、Ｃ１−２アルコキシ、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシおよびブトキシであり；Ｃ２−４アルケニルオキシの例はアリルオキシであり；Ｃ２−４アルキニルオキシの例はプロピニルオキシであり；Ｃ１−４アルキルＳ（Ｏ）ａ（式中、ａは０〜２である）の例は、Ｃ１−３アルキルスルファニル、メチルチオ、エチルチオ、プロピルチオ、メチルスルフィニル、エチルスルフィニル、プロピルスルフィニル、メシル、エチルスルホニルおよびプロピルスルホニルであり；Ｎ−Ｃ１−４アルキルカルバモイルの例は、Ｎ−メチルカルバモイル、Ｎ−エチルカルバモイルおよびＮ−プロピルカルバモイルであり；Ｎ，Ｎ−ジ−（Ｃ１−４アルキル）−カルバモイルの例は、Ｎ，Ｎ−ジメチルカルバモイル、Ｎ−エチル−Ｎ−メチルカルバモイルおよびＮ，Ｎ−ジエチルカルバモイルであり；Ｎ−Ｃ１−４アルキルアミノの例は、Ｎ−（Ｃ１−３アルキル）アミノ、Ｎ−（Ｃ１−２アルキル）アミノ、メチルアミノ、エチルアミノおよびプロピルアミノであり；Ｎ，Ｎ−ジ−（Ｃ１−４アルキル）アミノの例は、Ｎ，Ｎ−ジ−（Ｃ１−３アルキル）アミノ、Ｎ，Ｎ−ジ−（Ｃ１−２アルキル）アミノ、ジメチルアミノ、Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ、ジエチルアミノ、Ｎ−メチル−Ｎ−プロピルアミノおよびジプロピルアミノであり；Ｃ１−４アルカノイルアミノの例は、アセトアミド、プロピオンアミドおよびブチルアミドであり；Ｃ３−８シクロアルキルの例は、シクロプロピル、シクロペンチルおよびシクロヘキシルであり；Ｃ１−４アルカノイルの例は、アセチルおよびプロピオニルであり；Ｃ１−４アルカノイルオキシの例は、アセチルオキシおよびプロピオニルオキシであり；Ｎ’−（Ｃ１−４アルキル）ウレイドの例は、Ｎ’−メチルウレイドおよびＮ’−エチルウレイドであり；Ｎ’，Ｎ’−ジ−（Ｃ１−４アルキル）ウレイドの例は、Ｎ’，Ｎ’−ジメチルウレイド、Ｎ’，Ｎ’−ジイソプロピルウレイドおよびＮ’−メチル−Ｎ’−プロピルウレイドで���り；Ｎ’−（Ｃ１−４アルキル）−Ｎ−（Ｃ１−４アルキル）ウレイドの例は、Ｎ’−メチル−Ｎ−エチルウレイドおよびＮ’−メチル−Ｎ−メチルウレイドであり；Ｎ’，Ｎ’−ジ−（Ｃ１−４アルキル）−Ｎ−（Ｃ１−４アルキル）ウレイドの例は、Ｎ’，Ｎ’−ジメチル−Ｎ−エチルウレイドおよびＮ’−メチル−Ｎ’−プロピル−Ｎ−ブチルウレイドであり；Ｎ−（Ｃ１−４アルキル）スルファモイルの例は、Ｎ−メチルスルファモイルおよびＮ−イソプロピルスルファモイルであり；Ｎ，Ｎ−ジ−（Ｃ１−４アルキル）スルファモイルの例は、Ｎ−メチル−Ｎ−エチルスルファモイルおよびＮ，Ｎ−ジプロピルスルファモイルであり；Ｃ１−４アルキルスルホニルアミノの例は、メシルアミノ、エチルスルホニルアミノおよびプロピルスルホニルアミノであり；複素環式基−Ｏ−の例は、ピペリジニルオキシ、ピリジルオキシおよびピリミジニルオキシであり；Ｃ１−２アルコキシＣ１−２アルキルの例は、メトキシメチルおよびエトキシエチルであり；複素環式基−Ｃ（Ｏ）−の例は、ピペラジニルカルボニル、ピリジルカルボニルおよびピリミジニルカルボニルである。
【００１５】
本発明のピリミジン誘導体の適当な薬学的に許容しうる塩は、例えば、充分に塩基性である本発明のピリミジン誘導体の酸付加塩、例えば、無機酸または有機酸、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、トリフルオロ酢酸、クエン酸またはマレイン酸との酸付加塩である。更に、充分に酸性である本発明のピリミジン誘導体の適当な薬学的に許容しうる塩は、アルカリ金属塩、例えば、ナトリウム塩またはカリウム塩、アルカリ土類金属塩、例えば、カルシウム塩またはマグネシウム塩、アンモニウム塩、または生理学的に許容しうる陽イオンを与える有機塩基との塩、例えば、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、ピペリジン、モルホリンまたはトリス−（２−ヒドロキシエチル）アミンとの塩である。
【００１６】
式（Ｉ）の化合物は、ヒトまたは動物体内で分解されて式（Ｉ）の化合物を生じるプロドラッグの形で投与することができる。プロドラッグの例には、式（Ｉ）の化合物の in vivo 加水分解性エステルが含まれる。
【００１７】
カルボキシ基またはヒドロキシ基を含有する式（Ｉ）の化合物の in vivo 加水分解性エステルは、例えば、ヒトまたは動物体内で加水分解されて親酸またはアルコールを生じる薬学的に許容しうるエステルである。カルボキシについて適当な薬学的に許容しうるエステルには、Ｃ１−６アルコキシメチルエステル、例えば、メトキシメチル；Ｃ１−６アルカノイルオキシメチルエステル、例えば、ピバロイルオキシメチル；フタリジルエステル；Ｃ３−８シクロアルコキシカルボニルオキシＣ１−６アルキルエステル、例えば、１−シクロヘキシルカルボニルオキシエチル；１，３−ジオキソレン−２−オニルメチルエステル、例えば、５−メチル−１，３−ジオキソレン−２−オニルメチル；およびＣ１−６アルコキシカルボニルオキシエチルエステル、例えば、１−メトキシカルボニルオキシエチルが含まれ、これらは、本発明の化合物中のいずれかのカルボキシ基で形成されてもよい。
【００１８】
ヒドロキシ基を含有する式（Ｉ）の化合物の in vivo 加水分解性エステルには、リン酸エステルのような無機酸エステルおよびα−アシルオキシアルキルエーテル、およびエステル分解の in vivo 加水分解の結果として親ヒドロキシ基を生じる関連化合物が含まれる。α−アシルオキシアルキルエーテルの例には、アセトキシメトキシおよび２，２−ジメチルプロピオニルオキシメトキシが含まれる。ヒドロキシについての in vivo 加水分解性エステル形成性基の選択には、アルカノイル、ベンゾイル、フェニルアセチル、および置換ベンゾイルおよびフェニルアセチル、アルコキシカルボニル（アルキル炭酸エステルを生じる）、ジアルキルカルバモイルおよびＮ−（ジアルキルアミノエチル）−Ｎ−アルキルカルバモイル（カルバメートを生じる）、ジアルキルアミノアセチルおよびカルボキシアセチルが含まれる。ベンゾイル上の置換基の例には、環窒素原子からメチレン基によってベンゾイル環の３位または４位に連結したモルホリノおよびピペラジノが含まれる。
【００１９】
式（Ｉ）の若干の化合物は、キラル中心および／または幾何異性中心を有することがありうるので（Ｅ−およびＺ異性体）、本発明が、ＣＤＫおよび／またはＦＡＫ阻害活性を有するこのような光学異性体、ジアステレオ異性体および幾何異性体を全て包含するということは理解されるはずである。
【００２０】
本発明は、ＣＤＫおよび／またはＦＡＫ阻害活性を有する式（Ｉ）の化合物のいずれかのおよび全ての互変異性体に関する。
式（Ｉ）のある種の化合物が、例えば、水和した形のような溶媒和の形で、更には、非溶媒和の形で存在しうるということも理解されるはずである。本発明が、ＣＤＫおよび／またはＦＡＫ阻害活性を有するこのような溶媒和の形を全て包含するということは理解されるはずである。
【００２１】
本発明の具体的な好ましい化合物は、Ｒ１、Ｑ１、Ｑ２およびＧが、本明細書中の前に定義の意味のいずれかまたは次の意味のいずれかを有する式（Ｉ）のピリミジン誘導体、またはその薬学的に許容しうる塩または in vivo 加水分解性エステルを含む。このような意味は、当てはまる場合、本明細書中の前にまたは以下に記載の定義、請求項または態様のいずれかと一緒に用いることができる。
【００２２】
好ましくは、Ｑ１およびＱ２は、独立して、フェニルおよびピリジルより選択される。
好ましくは、Ｑ１はフェニルである。
好ましくは、Ｑ２は、フェニルまたはピリジルである。
【００２３】
好ましくは、Ｑ１はフェニルであり、Ｑ２は、フェニルおよびピリジルより選択される。
好ましくは、Ｑ１およびＱ２の一方またはＱ１およびＱ２の両方は、Ｎ，Ｎ−ジ−（Ｃ１−２アルキル）アミノ、複素環式基、複素環式基−Ｏ−、置換Ｃ１−２アルキル、置換Ｃ１−２アルコキシ、置換Ｃ１−２アルコキシカルボニル、置換Ｎ−（Ｃ１−２アルキル）アミノ、置換Ｃ１−２アルコキシＣ１−２アルキルおよび置換Ｃ２−４アルキニルより選択される１個の置換基で環炭素上に置換されていて；ここにおいて、Ｃ１−２アルキル、Ｃ１−２アルコキシ、Ｃ１−２アルコキシカルボニル、Ｎ−（Ｃ１−２アルキル）アミノ、Ｃ１−２アルコキシＣ１−２アルキルおよびＣ２−４アルキニルのこれら置換基は、ヒドロキシ、カルボキシ、アミノ、複素環式基、複素環式基−Ｃ（Ｏ）−、Ｎ−Ｃ１−４アルキルアミノおよびＮ，Ｎ−ジ−（Ｃ１−４アルキル）アミノより選択され；ここにおいて、いずれの複素環式基も、Ｒａより選択される１個またはそれより多い基で環炭素上に置換されていてよく；そしてここにおいて、いずれかの複素環式基が−ＮＨ−部分を含有する場合、その窒素は、Ｒｂより選択される基で置換されていてもよい。
【００２４】
より好ましくは、Ｑ１およびＱ２の一方またはＱ１およびＱ２の両方は、Ｎ，Ｎ−ジ−（Ｃ１−２アルキル）アミノ、ピペラジノ（４−窒素上にメチルで置換されていてよい）、ピペリジン−３−イルオキシ（窒素上にメチルで置換されていてよい）、ピペリジン−４−イルオキシ（窒素上にメチルで置換されていてよい）、置換Ｃ１−２アルキル、置換Ｃ１−２アルコキシ、置換Ｃ１−２アルコキシカルボニル、置換Ｎ−（Ｃ１−２アルキル）アミノ、置換Ｃ１−２アルコキシＣ１−２アルキルおよび置換Ｃ２−４アルキニルより選択される１個の置換基で環炭素上に置換されていて；ここにおいて、Ｃ１−２アルキル、Ｃ１−２アルコキシ、Ｃ１−２アルコキシカルボニル、Ｎ−（Ｃ１−２アルキル）アミノ、Ｃ１−２アルコキシＣ１−２アルキルおよびＣ２−４アルキニルのこれら置換基は、ヒドロキシ、カルボキシ、アミノ、スクシンイミド−１−イル、ピペリジン−３−イル（窒素上にメチルで置換されていてよい）、フタルイミド−１−イル、モルホリノ、キヌクリジン−３−イル（ヒドロキシで置換されていてよい）、ピペリジン−４−イル、ピロリジン−１−イル、ピペラジノ（窒素上にメチルで置換されていてよい）、イミダゾール−１−イル、ピペリジノ、ピペラジノカルボニル（窒素上にイソプロピルで置換されていてよい）、Ｎ−Ｃ１−４アルキルアミノおよびＮ，Ｎ−ジ−（Ｃ１−４アルキル）アミノより選択される。
【００２５】
具体的には、Ｑ１およびＱ２の一方またはＱ１およびＱ２の両方は、ジメチルアミノ、４−メチルピペラジノ、アミノメチル、２−ヒドロキシエトキシメチル、スクシンイミド−１−イルメチル、２−ピロリジン−１−イルエチル、２−アミノエチル、ピペリド−４−イルオキシ、１−メチルピペリド−４−イルオキシ、１−メチルピペリド−３−イルオキシ、カルボキシメトキシ、１−メチルピペリド−２−イルメトキシ、１−メチルピペリド−３−イルメトキシ、ピペリド−４−イルメトキシ、４−イソプロピルピペラジノカルボニルメトキシ、２−フタルイミド−１−イルエトキシ、２−モルホリノエトキシ、２−ジメチルアミノエトキシ、２−ジエチルアミノエトキシ、２−（４−メチルピペラジノ）エトキシ、２−イミダゾール−１−イルエトキシ、２−ピロリジン−１−イルエトキシ、２−アミノエチニル、２−ジメチルアミノエチニル、２−メチルアミノエチニル、２−（３−ヒドロキシキヌクリジン−３−イル）エチニル、２−モルホリノエトキシメチル、２−ジエチルアミノエトキシメチル、２−ピロリジン−１−イルエトキシメチル、２−（４−メチルピペラジノ）エトキシメチル、２−ジエチルアミノエトキシカルボニル、２−ピペリジノエチルアミノまたは２−イソプロピルアミノエチルアミノより選択される１個の置換基で環炭素上に置換されている。
【００２６】
より具体的には、Ｑ１およびＱ２の一方またはＱ１およびＱ２の両方は、１−メチルピペリド−４−イルオキシ、カルボキシメトキシ、２−ジメチルアミノエトキシ、２−メチルアミノエチニル、２−ピペリジノエチルアミノまたは２−イソプロピルアミノエチルアミノより選択される１個の置換基で環炭素上に置換されている。
【００２７】
好ましくは、Ｑ１が、Ｎ−（Ｃ１−２アルキル）アミノ、Ｎ，Ｎ−ジ−（Ｃ１−２アルキル）アミノ、フェニル、複素環式基、フェノキシ、複素環式基−Ｏ−、置換Ｃ１−２アルキル、置換Ｃ１−２アルコキシ、置換Ｃ１−２アルコキシカルボニル、置換Ｎ−（Ｃ１−２アルキル）アミノ、置換Ｃ１−２アルコキシＣ１−２アルキル、置換Ｃ２−４アルケニルおよび置換Ｃ２−４アルキニルより選択される１個の置換基で環炭素上に置換されていて；ここにおいて、Ｃ１−２アルキル、Ｃ１−２アルコキシ、Ｃ１−２アルコキシカルボニル、Ｎ−（Ｃ１−２アルキル）アミノ、Ｃ１−２アルコキシＣ１−２アルキル、Ｃ２−４アルケニルおよびＣ２−４アルキニルのこれら置換基は、ハロ、ヒドロキシ、メルカプト、ニトロ、ホルミル、ホルムアミド、カルボキシ、シアノ、アミノ、ウレイド、カルバモイル、スルファモイル、Ｃ１−４アルカノイル、Ｃ１−４アルコキシカルボニル、フェニル、複素環式基、ベンゾイル、複素環式基−Ｃ（Ｏ）−、Ｃ１−４アルキルＳ（Ｏ）ａ（式中、ａは０〜２である）、Ｎ’−（Ｃ１−４アルキル）ウレイド、Ｎ’，Ｎ’−ジ−（Ｃ１−４アルキル）ウレイド、Ｎ’−（Ｃ１−４アルキル）−Ｎ−（Ｃ１−４アルキル）ウレイド、Ｎ’，Ｎ’−ジ−（Ｃ１−４アルキル）−Ｎ−（Ｃ１−４アルキル）ウレイド、Ｎ−Ｃ１−４アルキルアミノ、Ｎ，Ｎ−ジ−（Ｃ１−４アルキル）アミノ、Ｎ−（Ｃ１−４アルキル）スルファモイル、Ｎ，Ｎ−ジ−（Ｃ１−４アルキル）スルファモイル、Ｎ−Ｃ１−４アルキルカルバモイル、Ｎ，Ｎ−ジ−（Ｃ１−４アルキル）カルバモイルおよびＣ１−４アルカノイルアミノより選択され；ここにおいて、いずれのフェニル、ベンジル、ベンゾイルまたは複素環式基も、Ｒａより選択される１個またはそれより多い基で環炭素上に置換されていてよく；そしてここにおいて、いずれかの複素環式基が−ＮＨ−部分を含有する場合、その窒素は、Ｒｂより選択される基で置換されていてもよく、そしてより好ましくは、Ｑ１は、このリストより選択される１個の置換基は別として、置換されていない。
【００２８】
より好ましくは、Ｑ１は、−ＮＨ−に相対してパラ位またはメタ位に置換されている。
具体的には、Ｑ１は、−ＮＨ−に相対してパラ位に置換されている。
本発明の一つの側面において、好ましくは、Ｇは−Ｏ−である。
【００２９】
本発明のもう一つの側面において、好ましくは、Ｇは−ＮＲ２−である。
本発明の一つの側面において、Ｇが−ＮＲ２−である場合、好ましくは、Ｒ２は水素である。
【００３０】
本発明のもう一つの側面において、Ｇが−ＮＲ２−である場合、好ましくは、Ｒ２は水素ではない。
好ましくは、Ｒ１は、水素、クロロまたはブロモである。
【００３１】
より好ましくは、Ｒ１はブロモである。
好ましくは、Ｑ２は、置換されていない、またはフルオロ、ブロモ、メチル、メトキシおよびシアノより選択される１個の基で置換されている。
【００３２】
より好ましくは、Ｑ２は、置換されていない、または１個のメチル基で置換されている。
好ましくは、Ｑ２は、フェニル、２−シアノフェニル、３−メチルフェニル、４−フルオロフェニル、４−ブロモフェニル、４−メトキシフェニルまたは６−メチルピリド−２−イルである。
【００３３】
より好ましくは、Ｑ２は、フェニルまたは６−メチルピリド−２−イルである。
したがって、本発明の好ましい側面において、上に示される式（Ｉ）
［式中、Ｑ１およびＱ２は、独立して、フェニルおよびピリジルより選択され；そしてＱ１は、Ｎ，Ｎ−ジ−（Ｃ１−２アルキル）アミノ、複素環式基、複素環式基−Ｏ−、置換Ｃ１−２アルキル、置換Ｃ１−２アルコキシ、置換Ｃ１−２アルコキシカルボニル、置換Ｎ−（Ｃ１−２アルキル）アミノ、置換Ｃ１−２アルコキシＣ１−２アルキルおよび置換Ｃ２−４アルキニルより選択される１個の置換基で環炭素上に置換されていて；ここにおいて、Ｃ１−２アルキル、Ｃ１−２アルコキシ、Ｃ１−２アルコキシカルボニル、Ｎ−（Ｃ１−２アルキル）アミノ、Ｃ１−２アルコキシＣ１−２アルキルおよびＣ２−４アルキニルのこれら置換基は、ヒドロキシ、カルボキシ、アミノ、複素環式基、複素環式基−Ｃ（Ｏ）−、Ｎ−Ｃ１−４アルキルアミノおよびＮ，Ｎ−ジ−（Ｃ１−４アルキル）アミノより選択され；ここにおいて、いずれの複素環式基も、Ｒａより選択される１個またはそれより多い基で環炭素上に置換されていてよく；そしてここにおいて、いずれかの複素環式基が−ＮＨ−部分を含有する場合、その窒素は、Ｒｂより選択される基で置換されていてもよく；そしてＱ２は、置換されていない、またはフルオロ、ブロモ、メチル、メトキシおよびシアノより選択される１個の基で置換されていて；
Ｇは−ＮＨ−であり；そして
Ｒ１は、水素、クロロまたはブロモである］
を有するピリミジン誘導体；またはその薬学的に許容しうる塩または in vivo 加水分解性エステルを提供する。
【００３４】
したがって、本発明のより好ましい側面において、上に示される式（Ｉ）
［式中、Ｑ１はフェニルであり、Ｑ２は、フェニルおよびピリジルより選択され；Ｑ１は、ジメチルアミノ、４−メチルピペラジノ、アミノメチル、２−ヒドロキシエトキシメチル、スクシンイミド−１−イルメチル、２−ピロリジン−１−イルエチル、２−アミノエチル、ピペリド−４−イルオキシ、１−メチルピペリド−４−イルオキシ、１−メチルピペリド−３−イルオキシ、カルボキシメトキシ、１−メチルピペリド−２−イルメトキシ、１−メチルピペリド−３−イルメトキシ、ピペリド−４−イルメトキシ、４−イソプロピルピペラジノカルボニルメトキシ、２−フタルイミド−１−イルエトキシ、２−モルホリノエトキシ、２−ジメチルアミノエトキシ、２−ジエチルアミノエトキシ、２−（４−メチルピペラジノ）エトキシ、２−イミダゾール−１−イルエトキシ、２−ピロリジン−１−イルエトキシ、２−アミノエチニル、２−ジメチルアミノエチニル、２−メチルアミノエチニル、２−（３−ヒドロキシキヌクリジン−３−イル）エチニル、２−モルホリノエトキシメチル、２−ジエチルアミノエトキシメチル、２−ピロリジン−１−イルエトキシメチル、２−（４−メチルピペラジノ）エトキシメチル、２−ジエチルアミノエトキシカルボニル、２−ピペリジノエチルアミノまたは２−イソプロピルアミノエチルアミノより選択される１個の置換基で、−ＮＨ−に相対してパラ位またはメタ位に置換されていて；そしてＱ２は、置換されていない、またはフルオロ、ブロモ、メチル、メトキシおよびシアノより選択される１個の基で置換されていて；
Ｇは−ＮＨ−であり；そして
Ｒ１は、水素、クロロまたはブロモである］
を有するピリミジン誘導体；またはその薬学的に許容しうる塩または in vivo 加水分解性エステルを提供する。
【００３５】
本発明の一つの側面において、本発明の好ましい化合物は、実施例２、１２、２１、２８、３０または３８の化合物、またはそれらの薬学的に許容しうる塩または in vivo 加水分解性エステルである。
【００３６】
本発明のもう一つの側面において、本発明の好ましい化合物には、これら実施例のいずれか一つ、またはその薬学的に許容しうる塩または in vivo 加水分解性エステルが含まれる。
本発明の好ましい側面は、この化合物またはその薬学的に許容しうる塩に関するものである。
【００３７】
式（Ｉ）のピリミジン誘導体、またはその薬学的に許容しうる塩または in vivo 加水分解性エステルは、化学的に関連した化合物の製造に応用可能であることが知られているいずれの方法によっても製造することができる。このような方法は、式（Ｉ）のピリミジン誘導体、またはその薬学的に許容しうる塩または in vivo 加水分解性エステルを製造するのに用いられる場合、本発明のもう一つの特徴として提供され、次の代表的な実施例によって詳しく説明されるが、ここにおいて、特に断らない限り、Ｒ１、Ｑ１、Ｑ２およびＧは、式（Ｉ）のピリミジン誘導体について本明細書中の前に定義のいずれかの意味を有し、そして環Ｑ１またはＱ２上に別の置換基が示されていなければ、その環は、本明細書中の前に記載のいずれかの置換基（必要に応じて保護されていてよい）を有していてよい。環Ｑ１上に置換基が示されている場合、これは、（特に断らない限り）環Ｑ１上にある置換基に加えて、またはの代わりに、環Ｑ２上に置換基がある可能性を含む。必要な出発物質は、有機化学の標準法によって得ることができる（例えば、反応条件および試薬の一般的な指針についても有用な Advanced Organic Chemistry (Wiley-Interscience), Jerry March を参照されたい）。このような出発物質の製造は、添付の非制限法および実施例中に記載されている。或いは、必要な出発物質は、有機化学者の技術の範囲内である例示された方法に類似した方法によって入手可能である。
【００３８】
したがって、本発明のもう一つの特徴として、次の、
（ａ）Ｇが−ＮＲ２−である式（Ｉ）の化合物について、式（II）
【００３９】
【化２】
0004801335.tif 000003
【００４０】
（式中、Ｌは、下に定義の置換可能な基である）
を有するピリミジンと、式（III）
【００４１】
【化３】
0004801335.tif 000004
【００４２】
（式中、Ｇは−ＮＲ２−である）
を有する化合物とを反応させること；
（ｂ）式（IV）
【００４３】
【化４】
0004801335.tif 000005
【００４４】
（式中、Ｌは、下に定義の置換可能な基である）
を有するピリミジンと、式（Ｖ）
【００４５】
【化５】
0004801335.tif 000006
【００４６】
の化合物との反応、そしてその後、必要ならば、
（ｉ）式（Ｉ）の化合物を式（Ｉ）の別の化合物に変換し；
（ii）保護基を全て除去し；
（iii）薬学的に許容しうる塩または in vivo 加水分解性エステルを形成することを含んで成る方法を提供する。
【００４７】
Ｌは置換可能な基であり、Ｌに適当な意味は、例えば、ハロ、スルホニルオキシまたは硫黄基、例えば、クロロ、ブロモ、メタンスルホニルオキシ、トルエン−４−スルホニルオキシ、メシル、メチルチオおよびメチルスルフィニルである。
上の反応の具体的な反応条件は、次の通りである。
【００４８】
プロセス（ａ）
式（II）のピリミジンおよび式（III）の化合物は、次の場合に互いに反応することができる。
（ｉ）場合により、適当な酸、例えば、塩酸または硫酸のような無機酸、または酢酸またはギ酸のような有機酸の存在下において。この反応は、好ましくは、適当な不活性溶媒または希釈剤、例えば、ジクロロメタン（ＤＣＭ）、アセトニトリル、ブタノール、テトラメチレンスルホン、テトラヒドロフラン、１，２−ジメトキシエタン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミドまたはＮ−メチルピロリジン−２−オン中において、例えば、０℃〜１５０℃の範囲内の温度で、好都合には、還流温度またはその付近の温度で行われる；または
（ii）標準的な Buchwald 条件（例えば、J. Am. Chem. Soc., 118, 7215; J. Am. Chem. Soc., 119, 8451; J. Org. Chem., 62, 1568 and 6066 を参照されたい）下において、例えば、酢酸パラジウムの存在下、適当な溶媒、例えば、トルエン、ベンゼンまたはキシレンのような芳香族溶媒中において、適当な塩基、例えば、炭酸セシウムのような無機塩基またはカリウム−ｔ−ブトキシドのような有機塩基と一緒に、２，２’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−１，１’−ビナフチルのような適当なリガンドの存在下および２５〜８０℃の範囲内の温度で。
【００４９】
式（II）のピリミジンは、次のスキームによって製造することができる。
【００５０】
【化６】
0004801335.tif 000007
【００５１】
式中、Ｒａは、置換されていてよいアルキルまたはアリール基であり、Ｌは、上に定義の置換可能な基である。好ましくは、Ｒａは、メチル、エチルまたはｐ−トリルである。
式（III）の化合物は、商業的に入手可能であるしまたは当該技術分野において知られている方法によって製造される。
【００５２】
プロセス（ｂ）
式（IV）のピリミジンおよび式（Ｖ）のアニリンは、
（ｉ）適当な溶媒、例えば、アセトンのようなケトン、またはエタノールまたはブタノールのようなアルコール、またはトルエンまたはＮ−メチルピロリジンのような芳香族炭化水素の存在下において、場合により、上に定義されたような適当な酸（または適当なルイス酸）の存在下において、０℃〜還流の範囲内の温度、好ましくは、還流温度で；または
（ii）上記のような標準的な Buchwald 条件下において、
互いに反応させることができる。
【００５３】
式（IV）のピリミジンは、次のスキームによって製造される。
【００５４】
【化７】
0004801335.tif 000008
【００５５】
式中、Ｌは、上に定義の置換可能な基である。
式（Ｖ）のアニリンは、商業的に入手可能であるしまたは当該技術分野において知られている方法によって製造される。
【００５６】
式（IVＡ）のピリミジンは、商業的に入手可能であるし、または例えば、Ｌが−ＯＨである式（IVＡ）の化合物（すなわち、ウラシル）をＰＯＣｌ３と反応させて、Ｌが−Ｃｌである式（IVＡ）の化合物を生じることによって製造することができる。
【００５７】
式（Ｉ）の化合物の式（Ｉ）の別の化合物への変換の例は、次である。
（ｉ）Ｇが−ＮＲ２−である場合；水素としてのＲ２の他のＲ２への変換、例えば、
【００５８】
【化８】
0004801335.tif 000009
【００５９】
（式中、Ｌは置換可能な基である）；
（ii）Ｇが−ＮＲ２−である場合；置換側鎖としてのＲ２の別の置換側鎖への変換、例えば、
【００６０】
【化９】
0004801335.tif 000010
【００６１】
（式中、Ｍｓはメタンスルホニルであり、Ｎｕは、式（Ｉ）に定義されるＲ２の任意の置換基である置換基を導入する求核基である）（ヒドロキシル部分は、必ずしも、上に示されるように末端炭素上にある必要はないことに注意されたい）；
（iii）標準的な技法、例えば、ヒドロキシとしてのＲ１のＣ１−４アルコキシへの変換を用いた、Ｒ１の一つの意味のＲ１のもう一つの意味への変換。
【００６２】
本発明の好ましい方法は、プロセス（ｂ）である。
本発明の化合物中の種々の環置換基のあるものは、標準的な芳香族置換反応によって導入することができるしまたは上述の方法の前かまたは直後の慣用的な官能基修飾によって生じることができるということは理解されるであろうし、そのまま、本発明の方法側面に包含される。このような反応および修飾には、例えば、芳香族置換反応による置換基の導入、置換基の還元、置換基のアルキル化、および置換基の酸化が含まれる。このような方法のための試薬および反応条件は、当化学技術分野において周知である。芳香族置換反応の具体的な例には、濃硝酸を用いたニトロ基の導入、フリーデル・クラフツ条件下における、例えば、アシルハライドおよびルイス酸（三塩化アルミニウムなど）を用いたアシル基の導入；フリーデル・クラフツ条件下における、アルキルハライドおよびルイス酸（三塩化アルミニウムなど）を用いたアルキル基の導入；およびハロ基の導入が含まれる。修飾の具体的な例には、例えば、ニッケル触媒での接触水素添加または加熱を伴う塩酸の存在下における鉄での処理によるニトロ基のアミノ基への還元；アルキルチオのアルキルスルフィニルまたはアルキルスルホニルへの酸化が含まれる。
【００６３】
本明細書中に述べられる反応のいくつかのおいて、化合物中の鋭敏な基を保護することは必要でありうる／望まれることがありうるということも理解されるであろう。保護が必要であるまたは望まれる状況、および保護に適当な方法は、当業者に知られている。慣用的な保護基は、標準的な慣例にしたがって用いることができる（実例については、T.W. Green, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley and Sons, 1991 を参照されたい）。したがって、反応物が、アミノ、カルボキシまたはヒドロキシのような基を含む場合、本明細書中に述べられる反応のいくつかにおいてその基を保護することが望まれることがありうる。
【００６４】
アミノ基またはアルキルアミノ基に適当な保護基は、例えば、アシル基、例えば、アセチルのようなアルカノイル基、アルコキシカルボニル基、例えば、メトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基またはｔ−ブトキシカルボニル基、アリールメトキシカルボニル基、例えば、ベンジルオキシカルボニル、またはアロイル基、例えば、ベンゾイルである。上の保護基の脱保護条件は、保護基の選択に伴って必然的に異なる。したがって、例えば、アルカノイルまたはアルコキシカルボニル基のようなアシル基またはアロイル基は、例えば、アルカリ金属水酸化物、例えば、水酸化リチウムまたはナトリウムのような適当な塩基での加水分解によって除去することができる。或いは、ｔ−ブトキシカルボニル基のようなアシル基は、例えば、塩酸、硫酸またはリン酸、またはトリフルオロ酢酸のような適当な酸での処理によって除去することができ、ベンジルオキシカルボニル基のようなアリールメトキシカルボニル基は、例えば、炭素上パラジウムのような触媒上での水素化によって、またはルイス酸、例えば、トリス（トリフルオロ酢酸）ホウ素での処理によって除去することができる。第一級アミノ基に適当な別の保護基は、例えば、アルキルアミン、例えば、ジメチルアミノプロピルアミンでのまたはヒドラジンでの処理によって除去することができるフタロイル基である。
【００６５】
ヒドロキシ基に適当な保護基は、例えば、アシル基、例えば、アセチルのようなアルカノイル基、アロイル基、例えば、ベンゾイル、またはアリールメチル基、例えば、ベンジルである。上の保護基の脱保護条件は、保護基の選択に伴って必然的に異なるであろう。したがって、例えば、アルカノイルのようなアシル基またはアロイル基は、例えば、アルカリ金属水酸化物、例えば、水酸化リチウムまたはナトリウムのような適当な塩基での加水分解によって除去することができる。或いは、ベンジル基のようなアリールメチル基は、例えば、炭素上パラジウムのような触媒上での水素化によって除去することができる。
【００６６】
カルボキシ基に適当な保護基は、例えばエステル形成基、例えば水酸化ナトリウムのような塩基での加水分解によって除去することができる、例えばメチル基またはエチル基、または、例えば酸（例えば、トリフルオロ酢酸のような有機酸）での処理によって除去することができる、例えばｔ−ブチル基、または、例えば炭素上パラジウムのような触媒上での水素化によって除去することができる、例えばベンジル基である。
【００６７】
これら保護基は、当化学技術分野において周知の慣用的な技法を用いて、合成中のいずれの好都合な段階でも除去することができる。
本明細書中に定義の中間体の多く、例えば、式IIおよびIVの中間体は新規であり、これらを、本発明のもう一つの特徴として提供する。
【００６８】
検定
本明細書中の前に述べられているように、本発明に定義のピリミジン誘導体は、その化合物のＣＤＫおよび／またはＦＡＫ阻害活性によって生じると考えられる抗癌活性のような抗細胞増殖活性を有する。これら性質は、例えば、下記の手順を用いて評価することができる。
【００６９】
ＣＤＫ４阻害活性
次の略語を用いている。
ＨＥＰＥＳは、Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−Ｎ’−（２−エタンスルホン酸）である。
ＤＴＴは、ジチオトレイトールである。
ＰＭＳＦは、フェニルメチルスルホニルフルオリドである。
化合物を、９６ウェルフォーマットでの in vitro キナーゼ検定において、試験基質（ＧＳＴ−網膜芽細胞腫）中への［γ−３３−Ｐ］−アデノシン三リン酸の取り込みを測定するための Scintillation Proximity Assay（ＳＰＡ−Amersham より入手される）を用いて試験した。各ウェル中に、試験される化合物（濃度を補正するためにＤＭＳＯおよび水で希釈される）を入れ、対照ウェル中には阻害剤の対照としてのｐ１６かまたは陽性対照としてのＤＭＳＯを入れた。
【００７０】
２５μｌのインキュベーション用緩衝液中で希釈したＣＤＫ４／サイクリンＤ１部分精製酵素（酵素活性に依存した量）約０．５μｌを、各ウェルに加えた後、２０μｌのＧＳＴ−Ｒｂ／ＡＴＰ／ＡＴＰ３３混合物（０．５μｇ  ＧＳＴ−Ｒｂおよび０．２μＭ  ＡＴＰおよび０．１４μＣｉ［γ−３３−Ｐ］−アデノシン三リン酸を含有する）を加え、そして得られた混合物を静かに振とう後、室温で６０分間インキュベートした。
【００７１】
次に、各ウェルに、（０．８ｍｇ／ウェルのプロテインＡ−ＰＶＴ  ＳＰＡビーズ（Amersham））、２０ｐＭ／ウェルの抗グルタチオントランスフェラーゼ、ウサギＩｇＧ（Molecular Probes より入手される）、６１ｍＭ  ＥＤＴＡ、および０．０５％アジ化ナトリウム含有５０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ  ｐＨ７．５を含有する１５０μＬの停止溶液を加えた。
【００７２】
それらプレートを、Topseal−Ｓプレートシーラーで密封し、２時間放置後、２５００ｒｐｍ、１１２４ｘｇで５分間回転させた。プレートを、Topcount で各ウェルにつき３０秒間読み取った。
【００７３】
酵素および基質配合物を希釈するのに用いらたインキュベーション緩衝液は、５０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ  ｐＨ７．５、１０ｍＭ  ＭｎＣｌ２、１ｍＭ  ＤＴＴ、１００μＭバナジン酸ナトリウム、１００μＭ  ＮａＦ、１０ｍＭ  グリセロリン酸ナトリウム、ＢＳＡ（１ｍｇ／ｍｌ最終）を含有していた。
対照として、ｐ１６の代わりに別の既知のＣＤＫ４阻害剤を用いてもよい。
【００７４】
試験基質
この検定では、網膜芽細胞腫（Science 1987 Mar13;235(4794):1394-1399; Lee W.H., Bookstein R., Hong F., Young L.J., Shew J.Y., Lee E.Y.）の一部分だけを用い、ＧＳＴタグに融合させた。網膜芽細胞腫アミノ酸３７９〜９２８（網膜芽細胞腫プラスミドＡＴＣＣ  ｐＬＲｂＲＮＬより入手）のＰＣＲを行い、その配列を、ｐＧＥＸ  ２Ｔ融合ベクター（Smith D.B. and Johnson, K.S. Gene 67, 31 (1988)；これは、誘導発現のためのｔａｃプロモーター、大腸菌宿主で用いるための内部ｌａｃＩｑ遺伝子、およびトロンビン開裂のためのコーディング領域を含有− Pharmacia Biotech より入手）中にクローン化し、これを用いて、アミノ酸７９２〜９２８を増幅させた。この配列を、再度ｐＧＥＸ  ２Ｔ中にクローン化した。
【００７５】
そのようにして得られた網膜芽細胞腫７９２〜９２８配列を、大腸菌（Ｅ．coli）（ＢＬ２１（ＤＥ３）ｐＬｙｓＳ細胞）中において、標準的な誘導発現技術を用いて発現させ、次のように精製した。
【００７６】
Ｅ．coli ペーストを、１０ｍｌ／ｇのＮＥＴＮ緩衝液（５０ｍＭトリスｐＨ７．５、１２０ｍＭ  ＮａＣｌ、１ｍＭ  ＥＤＴＡ、０．５％ｖ／ｖ  ＮＰ−４０、１ｍＭ  ＰＭＳＦ、１μｇ／ｍｌロイペプチン、１μｇ／ｍｌアプロチニンおよび１μｇ／ｍｌペプスタチン）中に再懸濁させ、１００ｍｌホモジネートにつき２ｘ４５秒間音波処理した。遠心分離後、上澄みを、１０ｍｌグルタチオンセファロースカラム（Pharmacia Biotech, Herts, UK）上に加え、ＮＥＴＮ緩衝液で洗浄した。キナーゼ緩衝液（５０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ  ｐＨ７．５、１０ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１ｍＭ  ＤＴＴ、１ｍＭ  ＰＭＳＦ、１μｇ／ｍｌロイペプチン、１μｇ／ｍｌアプロチニンおよび１μｇ／ｍｌペプスタチン）で洗浄後、キナーゼ緩衝液中の５０ｍＭ還元グルタチオンでタンパク質を溶離した。ＧＳＴ−Ｒｂ（７９２〜９２７）を含有する画分をプールし、キナーゼ緩衝液に対して一晩透析した。最終生成物を、ドデカ硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）ＰＡＧＥ（ポリアクリルアミドゲル）により、８〜１６％トリス−グリシンゲル（Novex, San Diego, USA）を用いて分析した。
【００７７】
ＣＤＫ４およびサイクリンＤ１
ＣＤＫ４およびサイクリンＤ１を、ＭＣＦ−７細胞系（ＡＴＣＣ番号：ＨＴＢ２２，乳腺癌系より入手される）からのＲＮＡから次のようにクローン化した。このＲＮＡは、ＭＣＦ−７細胞から調製後、オリゴｄＴプライマーを用いて逆転写させた。ＰＣＲを用いて、各々の遺伝子の完全なコーディング配列を増幅させた［ＣＤＫ４アミノ酸１〜３０３；Ref. Cell 1992 Oct 16; 71(2): 323-334; Matsushime H., Ewen M.E., Stron D.K., Kato J.Y., Hanks S.K., Roussel M.F., Sherr C.J. およびサイクリンＤ１アミノ酸１〜２９６；Ref. Cold Spring Harb. Symp. Quant. Biol., 1991; 56:93-97; Arnold A., Motokura T., Bloom T., Kronenburg, Ruderman J., Juppner H., Kim H.G.］。
【００７８】
配列決定後、それらＰＣＲ産物を、標準的な技法を用いて、昆虫発現ベクターｐＶＬ１３９３（Invitrogen 1995 カタログ番号：Ｖ１３９２−２０より入手される）中にクローン化した。次に、それらＰＣＲ産物を、昆虫ＳＦ２１細胞系（Fall Army Worm の卵巣組織に由来する Spodoptera Frugiperda 細胞−商業的に入手可能）中に［標準的なウイルス Baculogold 同時感染法を用いて］二重に発現させた。
【００７９】
次の実施例は、サイクリンＤ１およびＣＤＫ４の各ウイルスについてＭＯＩ３の二重感染を有するＳＦ２１細胞（ＴＣ１００＋１０％ＦＢＳ（ＴＣＳ）＋０．２％ Pluronic 中）中でのサイクリンＤ１／ＣＤＫ４の産生の詳細を提供する。
【００８０】
サイクリンＤ１／ＣＤＫ４の産生例
ローラーボトル培養中で２．３３ｘ１０６個細胞／ｍｌまで増殖させたＳＦ２１細胞を用いて、１０ｘ５００ｍｌローラーボトルに０．２ｘ１０Ｅ６細胞／ｍｌで接種した。それらローラーボトルを、ローラー装置上において２８℃でインキュベートした。
【００８１】
３日（７２時間）後、細胞を計数し、二つのボトルからの平均は、１．８６ｘ１０Ｅ６細胞／ｍｌ（９９％生存可能）であることが判明した。次に、それら培養物に、二重のウイルスを各ウイルスについてＭＯＩ３で感染させた。
【００８２】
１０ｘ５００ｍｌに、ＪＳ３０３サイクリンＤ１ウイルス力価−９ｘ１０Ｅ７ｐｆｕ／ｍｌ、ＪＳ３０４  ＣＤＫ４ウイルス力価−１ｘ１０Ｅ８ｐｆｕ／ｍｌを感染させた。
【００８３】
【数１】
0004801335.tif 000011
【００８４】
それらウイルスを互いに混合後、培養物に加え、そしてそれら培養物をローラー装置に２８℃で戻した。
感染後の３日（７２時間）後、５リットルの培養物を採取した。採取時の全細胞計数は、１．５８ｘ１０Ｅ６細胞／ｍｌ（９９％生存可能）であった。それら細胞を、Heraeus Omnifuge ２．０ＲＳ中の２５０ｍｌロット中、４℃において２５００ｒｐｍで３０分間回転させた。上澄みを棄てた。約４ｘ１０Ｅ８細胞／ペレットの２０個のペレットを、ＬＮ２中で急速凍結させ、ＣＣＲＦ冷蔵室中において−８０℃で貯蔵した。次に、ＳＦ２１細胞を、溶解用緩衝液（５０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ  ｐＨ７．５、１０ｍＭ塩化マグネシウム、１ｍＭ  ＤＴＴ、１０ｍＭグリセロリン酸塩、０．１ｍＭ  ＰＭＳＦ、０．１ｍＭフッ化ナトリウム、０．１ｍＭオルトバナジン酸ナトリウム、５μｇ／ｍｌアプロチニン、５μｇ／ｍｌロイペプチンおよび２０％ｗ／ｖスクロース）中に再懸濁させ、氷冷脱イオン水を加えることによって低浸透圧で溶解させた。遠心分離後、上澄みを、Poros ＨＱ／Ｍ  １．４／１００陰イオン交換カラム（ＰＥ Biosystems, Hertford, UK）上に加えた。ＣＤＫ４およびサイクリンＤ１を、溶解用緩衝液中の３７５ｍＭ  ＮａＣｌで同時溶離させたが、それらの存在は、ウェスタンブロットにより、適当な抗ＣＤＫ４および抗サイクリンＤ１抗体（Santa Cruz Biotechnology, California, US より入手される）を用いて検査した。
【００８５】
ｐ１６対照（Nature 366,:704-707; 1993; Serrano M, Hannon GJ, Beach D）
ｐ１６（ＣＤＫ４／サイクリンＤ１の天然の阻害剤）を、ＨｅＬａ  ｃＤＮＡ（子宮頸部からのヒト類上皮癌ＡＴＣＣ  ＣＣＬ２から得られるＨｅＬａ細胞；Cancer Res. 12: 264, 1952）から増幅させ、５’Ｈｉｓタグを有するｐＴＢ３７５  ＮＢＳＥ中にクローン化し、そして標準的な技法を用いてＢＬ２１（ＤＥ３）ｐＬｙｓＳ細胞（Promega から入手される；Ref. Studier F.W. and Moffat B.A., J. Mol. Biol., 189, 113, 1986）中へ形質転換させた。１リットル培養物を適当なＯＤまで成長させた後、ｐ１６を発現するようにＩＰＴＧで一晩誘導した。次に、それら細胞を、５０ｍＭリン酸ナトリウム、０．５Ｍ塩化ナトリウム、ＰＭＳＦ、０．５μｇ／ｍｌロイペプチンおよび０．５μｇ／ｍｌアプロチニン中において音波処理によって溶解させた。その混合物を回転沈降させ、上澄みをニッケルキレートビーズに加え、１と１／２時間混合した。それらビーズを、リン酸ナトリウム、ＮａＣｌ  ｐＨ６．０中で洗浄し、そしてｐ１６産物を、２００ｍＭイミダゾールを含むリン酸ナトリウム、ＮａＣｌ  ｐＨ７．４中で溶離した。
ｐＴＢ  ＮＢＳＥは、ｐＴＢ３７５  ＮＢＰＥから次のように構築した。
【００８６】
ｐＴＢ３７５
ｐＴＢ３７５の生成に用いられたバッグラウンドベクターは、ｐＺＥＮ００４２（英国特許第２２５３８５２号を参照されたい）であり、ｐＡＴ１５３由来バッグラウンド中のプラスミドＲＰ４からのｔｅｔＡ／ｔｅｔＲ誘導テトラサイクリン耐性配列およびプラスミドｐＫＳ４９２からのｃｅｒ安定性配列を含有した。Ｔ７遺伝子１０プロモーター、多重クローニング部位およびＴ７遺伝子１０終結配列から成る発現カセットの追加によりｐＴＢ３７５を産生した。更に、この発現カセットの上流には、バッグラウンドベクターからの転写リードスルーを抑制させるように設計されたターミネーター配列が含まれていた。
【００８７】
ｐＴＢ３７５  ＮＢＰＥ
ｐＴＢ３７５中に存在するユニークＥｃｏＲＩ制限部位を除去した。制限酵素ＮｄｅＩ、ＢａｍＨＩ、ＰｓｔＩおよびＥｃｏＲＩの認識配列を含有する新しい多重クローニング部位を、ｐＴＢ３７５中のＮｄｅＩ部位とＢａｍＨＩ部位との間に導入して、ｐＴＢ３７５中に存在する元のＢａｍＨＩ部位を破壊した。
【００８８】
ｐＴＢ３７５  ＮＢＳＥ
制限酵素ＮｄｅＩ、ＢａｍＨＩ、ＳｍａＩおよびＥｃｏＲＩの認識配列を含有する新しい多重クローニング部位を、ｐＴＢ３７５  ＮＢＰＥ中のＮｄｅＩ部位とＥｃｏＲＩ部位との間に導入した。これら制限部位を含有するオリゴヌクレオチドは、ＮｄｅＩ部位中に存在する開始コドン（ＡＴＧ）と同じ読み枠中でＮｄｅＩ部位とＢａｍＨＩ部位との間に位置する６個のヒスチジンコドンも含有した。
【００８９】
上記と同じようにして、ＣＤＫ２およびＣＤＫ６の阻害を評価するように設計された検定を構築してもよい。ＣＤＫ２（ＥＭＢＬ受託番号Ｘ６２０７１）は、サイクリンＡまたはサイクリンＥ（ＥＭＢＬ受託番号Ｍ７３８１２を参照されたい）と一緒に用いてもよく、このような検定についてのさらなる詳細は、本明細書中に援用されるＰＣＴ国際公開第ＷＯ９９／２１８４５号、the relevant Biochemical & Biological Evaluation の項に含まれている。
【００９０】
ＣＤＫ２をサイクリンＥと一緒に用いる場合、部分同時精製は、次のように行ってもよい。Ｓｆ２１細胞を、溶解用緩衝液（５０ｍＭトリス  ｐＨ８．２、１０ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１ｍＭ  ＤＴＴ、１０ｍＭグリセロリン酸塩、０．１ｍＭオルトバナジン酸ナトリウム、０．１ｍＭ  ＮａＦ、０．１ｍＭ  ＰＭＳＦ、１μｇ／ｍｌロイペプチンおよび１μｇ／ｍｌアプロチニン）中に再懸濁させ、１０ｍｌ Dounce ホモジナイザー中で２分間均一化させる。遠心分離後、その上澄みを、Poros ＨＱ／Ｍ  １．４／１００陰イオン交換カラム（ＰＥ Biosystems, Hertford, UK）上に加える。ＣＤＫ２およびサイクリンＥを、２０カラム容量にわたる０〜１Ｍ  ＮａＣｌ勾配（プロテアーゼ阻害剤を欠いた溶解用緩衝液中で行う）の始めに、同時溶離する。同時溶離は、ウェスタンブロットにより、抗ＣＤＫ２および抗サイクリンＥ抗体（Santa Cruz Biotechnology, California, US）を用いて検査する。
【００９１】
ＦＡＫ３キナーゼ阻害検定
この検定は、ヒトフォーカルアドヒージョンキナーゼ（ＦＡＫ）のチロシンキナーゼ活性を阻害する試験化合物の能力を決定する。
ＦＡＫをコードしているＤＮＡは、全遺伝子合成（Edwards M, International Biotechnology Lab 5(3), 19-25, 1987）によってまたはクローニングによって得られる。次に、これらを適当な発現系で発現させて、チロシンキナーゼ活性を有するポリペプチドを得る。例えば、昆虫細胞中での組換えタンパク質の発現によって得られたＦＡＫは、内因性チロシンキナーゼ活性を示すことが判明した。
【００９２】
ＦＡＫ（Andre et al（Biochemical and Biophysical Research Communications, 1993, 190 (1): 140-147; EMBL/GenBank Accession Number L05186）によって記載の完全長さヒトｃＤＮＡ）を修飾し、翻訳された場合に得られるタンパク質が開始メチオニンの直前のＮ末端に６−ヒスチジンタグを有するようにした。活性ＦＡＫタンパク質は、バキュロウイルス系において、同様のＮ末端６−ヒスチジンタグ（Protein Expression And Purification, 1996, 7: 12-18）を用いて以前発現されたことがある。ヒトＦＡＫ  ｃＤＮＡを、バキュロウイルス転座（transplacement）ベクターｐＦａｓｔｂａｃ１（Life Technologies）中にクローン化し、その組換え構築物を、昆虫細胞（例えば、Spodoptera frugiperda ２１（Ｓｆ２１））中にウイルスＤＮＡと一緒に同時トランスフェクションさせて、組換えバキュロウイルスを調製した（組換えＤＮＡ分子の組み立ておよび組換えバキュロウイルスの製造および使用の方法についての詳細は、標準的な教本、例えば、Sambrook et al, 1989, Molecular cloning - A Laboratory Manual, 2nd edition, Cold Spring Harbour Laboratory Press and O'Reilly et al, 1992, Baculovirus Expression Vectors - A Laboratory Manual, W. H. Freeman and Co, New York 中で見出されうる。ｐＦａｓｔｂａｃ（‘Ｂａｃ−Ｂａｃ’）系の使用に特有の詳細は、Anderson et al., 1995, FOCUS (Life Technologies Bulletin Magazine), 17, p53 に与えられる）。
【００９３】
生物学的に活性なヒトＦＡＫタンパク質の発現については、Ｓｆ２１細胞に、プラークピュアな（plaque-pure）ＦＡＫ組換えウイルスを感染多重度３で感染させ、４８時間後に採取した。採取された細胞を、氷冷リン酸緩衝化生理食塩水溶液（ＰＢＳ）（１０ｍＭリン酸ナトリウムｐＨ７．４，１３８ｍＭ塩化ナトリウム，２．７ｍＭ塩化カリウム）で洗浄後、氷冷溶解用緩衝液（５０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ  ｐＨ７．５、１ｍＭジチオトレイトール、１００ｕＭフッ化ナトリウム、１００ｕＭオルトバナジン酸ナトリウム、１０ｍＭグリセロリン酸塩、１００ｕＭフェニルメチルスルホニルフルオリド（ＰＭＳＦ）、５μｇ／ｍｌアプロチニン、５μｇ／ｍｌロイペプチン、１％ Tween；ＰＭＳＦは、使用直前に、新たに調製されたメタノール中１００ｍＭ溶液から加えられる）中に、１０００万個細胞につき２５０μｌの溶解用緩衝液を用いて再懸濁させた。次に、その懸濁液を氷上で１５分間インキュベートし、４℃において１３，０００ｒｐｍで１０分間遠心分離した。上澄み（酵素原液）を取り出し、アリコートを作成したが、それらは、液体窒素中で急速凍結させた後、−７０℃で貯蔵した。典型的なバッチには、原液酵素を酵素希釈液（１００ｍＭ  ＨＥＰＥＳ  ｐＨ７．４、０．２ｍＭジチオトレイトール、２００ｕＭオルトバナジン酸ナトリウム、０．１％トリトンＸ−１００）で２５０中の１に希釈し、そして５０ｍｌの新たに希釈された酵素を各検定ウェルに用いた（下のＦＡＫ３プロトコールを参照されたい）。
【００９４】
ＦＡＫ３：in vitro 酵素検定プロトコール
基質溶液の原液は、チロシンを含有するランダムコポリマー、例えば、ポリ（Ｇｌｕ，Ａｌａ，Ｔｙｒ）６：３：１（Sigma Ｐ３８９９）から調製し、−２０℃においてＰＢＳ中の１ｍｇ／ｍｌ原液として貯蔵し、プレートコーティング用にＰＢＳで５００中の１に希釈した。
【００９５】
検定前日に、１００μｌの希釈基質溶液を、検定プレート（Maxisorp ９６ウェルプレート，Life technologies，カタログ番号４３９４５４Ａ）の全ウェル中に分配し、これらをプレートシーラーで密封し、４℃で一晩放置した。
【００９６】
検定当日に、その基質溶液を棄て、検定プレートウェルを、２００μｌのＰＢＳＴ（０．０５％ｖ／ｖ Tween ２０を含有するＰＢＳ）で１回および２００μｌの５０ｍＭ  Hepes ｐＨ７．４で１回洗浄した。
【００９７】
試験化合物は、ＤＭＳＯ中で１０ｍＭまたは３０ｍＭ原液として調製後、希釈されたガラス蒸留水中で最終検定濃度より１０倍高濃度に更に希釈した。１０μｌの希釈化合物を、洗浄された検定プレート中のウェルに移した。“化合物不含”対照ウェルには、化合物の代わりに１０μｌのガラス蒸留水を入れた。
【００９８】
６．２５μＭアデノシン−５’−三リン酸（ＡＴＰ）を含有する２５ｍＭ塩化マグネシウム４０マイクロリットルを、全試験ウェルに加えた。反応を開始するために、５０μｌの新たに希釈された酵素を各ウェルに加え、それらプレートを２３℃で９０分間インキュベートした。次に、２０ｍＭ  ＥＤＴＡを含有するＰＢＳを１００μｌ加えることによって反応を停止した。次に、その液体を棄て、ウェルをＰＢＳＴで２回洗浄した。
【００９９】
０．５％ｗ／ｖウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）を含有するＰＢＳＴで１５００中の１に希釈されたマウスＨＲＰ結合抗ホスホチロシン抗体（Santa Cruz, Product ＳＣ７０２０−ＨＲＰ）１００マイクロリットルを、各ウェルに加え、そしてプレートを室温で１時間インキュベート後、液体を棄て、それらウェルを２００μｌのＰＢＳＴで２回洗浄した。１００マイクロリットルの２，２’−アジノビス（３−エチルベンゾチアゾリン−６−スルホン酸）（ＡＢＴＳ）溶液を、５０ｍｌの新たに調製された５０ｍＭリン酸クエン酸緩衝液ｐＨ５．０＋０．０３％過ホウ酸ナトリウム（１００ｍｌの蒸留水につき、過ホウ酸ナトリウム（ＰＣＳＢ）カプセル（Sigma Ｐ４９２２）を含むリン酸クエン酸緩衝液を１用いて製造される）中に１個の５０ｍｇ  ＡＢＴＳ錠剤（Boehringer １２０４  ５２１）を用いて新たに調製し、各ウェルに加えた。次に、プレートを室温において、プレート読み取り分光光度計を用いて４０５ｎｍで測定される“化合物不含”対照ウェルの吸光度値が約１．０になるまで、２０〜６０分間インキュベートした。
【０１００】
それら吸光度読みから、Origin Software を用いて用量反応曲線を作成した。Origin Software 分析によって規定される阻止濃度５０（ＩＣ５０）を用いて、化合物を力価について格付けした。
【０１０１】
式（Ｉ）の化合物の薬理学的性質は、構造変化に伴って異なるが、概して、上の検定において式（Ｉ）の化合物が有する活性は、２５０μＭ〜１ｎＭの範囲内の用量またはＩＣ５０濃度で示すことができる。
【０１０２】
上のin vitro 検定で試験された場合、実施例３１のＣＤＫ４阻害活性は、ＩＣ５０＝０．６７９μＭとして測定された。上の in vitro 検定で試験された場合、実施例２５のＦＡＫ阻害活性は、ＩＣ５０＝０．２１８μＭとして測定された。
【０１０３】
本発明の化合物の in vivo 活性は、標準的な技法によって、例えば、細胞成長の阻害を測定し且つ細胞障害性を評価することによって評価することができる。例えば、追加の詳細は、次の参考文献で見出されうる。
【０１０４】
（ａ）Attenution of the Expression of the Focal Adhesion Kinase induces Apoptosis in Tumor Cells. Xu L-h et al. Cell Growth & Differentiation (1996) 7, p413-418；
（ｂ）The COOH-Terminal Domain of the Focal Adhesion Kinase Induces Loss of Adhesion and Cell Death in Human Tumour Cells. Xu L-h et al. Cell Growth & Differentiation (1998) 9, p999-1005；
（ｃ）Inhibition of pp125-FAK in Cultured Fibroblasts Results in Apoptosis. Hungerford J.E et al. The Journal of Cell Biology (1996) 135, p1383-1390；
（ｄ）Inhibition of Focal Adhesion Kinase (FAK) Signalling in Focal Adhesions Decreases Cell Motility and Proliferation. Gilmore A.P and Romer L.H. Molecular Biology of the Cell (1996) 7, p1209-1224。
【０１０５】
細胞成長の阻害は、タンパク質を染色する蛍光染料であるスルホローダミンＢ（ＳＲＢ）で細胞を染色することによって測定することができるので、ウェル中のタンパク質（すなわち、細胞）の量を推定し得る（Boyd, M. R. (1989) Status of the NCI preclinical antitumour drug discovery screen. Prin. Prac Oncol 10:1-12 を参照されたい）。したがって、以下の詳細説明は、細胞成長の阻害を測定するために提供される。
【０１０６】
細胞を、９６ウェルプレート中において１００μｌの容量の適当な培地中で平板培養した。培地は、ＭＣＦ−７、ＳＫ−ＵＴ−１ＢおよびＳＫ−ＵＴ−１用のダルベッコ修飾イーグル培地であった。それら細胞を一晩接着させた後、阻害化合物を、最大濃度を１％ＤＭＳＯとするいろいろな濃度（ｖ／ｖ）で加えた。対照プレートを検定して、投薬前の細胞についての数値を得た。細胞を３７℃（５％ＣＯ２）で３日間インキュベートした。
【０１０７】
３日間の最後に、それらプレートにＴＣＡを１６％（ｖ／ｖ）の最終濃度で加えた。次に、プレートを４℃で１時間インキュベートし、上澄みを除去し、プレートを水道水で洗浄した。乾燥後、１００μｌのＳＲＢ染料（１％酢酸中に０．４％ＳＲＢ）を３７℃で３０分間加えた。過剰のＳＲＢを除去し、プレートを１％酢酸中で洗浄した。タンパク質に結合したＳＲＢを、１０ｍＭトリスｐＨ７．５中に溶解させ、室温で３０分間振とうさせた。ＯＤを５４０ｎｍで読み取り、増殖の５０％阻害を引き起こす阻害剤の濃度を、阻害剤濃度対吸光度の半対数プロットから決定した。実験の開始時に細胞を平板培養した時よりも吸光度を減少させる化合物の濃度を毒性値とした。
【０１０８】
ＳＲＢ検定で試験された場合の本発明の化合物の典型的なＩＣ５０値は、１ｍＭ〜１ｎＭの範囲内である。
本発明のもう一つの側面により、本明細書中の前に定義の式（Ｉ）のピリミジン誘導体、またはその薬学的に許容しうる塩または in vivo 加水分解性エステルを薬学的に許容しうる希釈剤または担体と一緒に含む医薬組成物を提供する。
【０１０９】
この組成物は、経口投与用に、例えば、錠剤またはカプセル剤として、非経口注射用に（静脈内、皮下、筋肉内、血管内または注入を含めた）滅菌液剤、懸濁剤または乳剤として、局所投与用に軟膏剤またはクリーム剤として、または直腸投与用に坐剤として適当な形であってよい。
【０１１０】
概して、上の組成物は、慣用的な賦形剤を用いて慣用法で製造することができる。
ピリミジンは、通常は、温血動物にその動物の体表面積１平方メートルにつき５〜５０００ｍｇ、すなわち、約０．１〜１００ｍｇ／ｋｇの範囲内の単位用量で投与されるであろうが、これは、通常は、治療的有効量を与える。錠剤またはカプセル剤のような単位剤形は、通常は、例えば、１〜２５０ｍｇの活性成分を含有するであろう。好ましくは、１〜５０ｍｇ／ｋｇの範囲内の１日用量を用いる。しかしながら、その１日用量は、処置される宿主、具体的な投与経路および処置される疾患の重症度によって必然的に異なるであろう。したがって、最適投薬量は、いずれか特定の患者を処置している医療の実務家によって決定されてよい。
【０１１１】
本発明のもう一つの側面により、ヒトなどの温血動物の予防的または治療的処置の方法で用いるための、本明細書中の前に定義の式（Ｉ）のピリミジン誘導体、またはその薬学的に許容しうる塩または in vivo 加水分解性エステルを提供する。
【０１１２】
本発明者は、本発明において定義されるピリミジン誘導体、またはそれらの薬学的に許容しうる塩または in vivo 加水分解性エステルが、有効な細胞周期阻害剤（抗細胞増殖薬）であるということを発見したが、この性質は（理論によって拘束されることなく）、それらのＣＤＫ阻害活性によって生じると考えられる。これら化合物は、有効なＦＡＫ阻害剤でもある。したがって、本発明の化合物は、ＣＤＫおよび／またはＦＡＫ酵素によって単独でまたは部分的に媒介される疾患または医学的状態の処置において有用であると考えられる、すなわち、これら化合物は、ＣＤＫおよび／またはＦＡＫ阻害作用を生じる処置を必要としている温血動物においてこのような作用を生じるのに用いることができる。したがって、本発明の化合物は、ＣＤＫおよび／またはＦＡＫ酵素の阻害を特徴とする悪性細胞の増殖および／または移動を処置する方法を提供する、すなわち、これら化合物は、ＣＤＫおよび／またはＦＡＫの阻害によって単独でまたは部分的に媒介される抗増殖／移動作用を生じるのに用いることができる。これら化合物は、細胞死（アポトーシス）を誘発することによってＦＡＫ阻害剤としても有用でありうる。ＣＤＫおよび／またはＦＡＫは、白血病、および乳癌、肺癌、結腸癌、直腸癌、胃癌、前立腺癌、膀胱癌、膵臓癌および卵巣癌のような多数の一般的なヒト癌に関与しているので、本発明のこのようなピリミジン誘導体は、広範囲の抗癌性を有すると考えられる。したがって、本発明のピリミジン誘導体は、これら癌に対して抗癌活性を有するであろうと考えられる。更に、本発明のピリミジン誘導体は、一定範囲の白血病、リンパ性悪性疾患、および肝、腎臓、前立腺および膵臓のような組織での癌および肉腫のような充実性腫瘍に対して活性を有するであろうと考えられる。具体的には、本発明のこのような化合物は、例えば、結腸、乳房、前立腺、肺および皮膚の原発性および再発性の充実性腫瘍の成長を好都合に遅らせると考えられる。より具体的には、本発明のこのような化合物、またはそれらの薬学的に許容しうる塩または in vivo 加水分解性エステルは、ＣＤＫおよび／またはＦＡＫに関連したそれら原発性および再発性の充実性腫瘍、特に、それらの成長および拡散についてＣＤＫおよび／またはＦＡＫに有意に依存している、例えば、結腸、乳房、前立腺、肺、外陰部および皮膚の若干の腫瘍を含めたそれら腫瘍の成長を阻害すると考えられる。
【０１１３】
更に、本発明のピリミジン誘導体は、白血病、線維増殖性および分化性障害、乾癬、慢性関節リウマチ、カポージ肉腫、血管腫、急性および慢性腎症、アテローム、アテローム性動脈硬化症、動脈再狭窄、自己免疫疾患、急性および慢性炎症、骨疾患、および網膜血管増殖を伴う眼疾患を含めた広範囲の他の疾患状態における他の細胞増殖／移動疾患に対して活性を有するであろうと考えられる。
【０１１４】
したがって、本発明のこの側面により、薬剤として用いるための本明細書中の前に定義の式（Ｉ）のピリミジン誘導体、またはその薬学的に許容しうる塩または in vivo 加水分解性エステル；およびヒトなどの温血動物の抗癌細胞周期阻害（抗細胞増殖）作用および／またはＦＡＫ阻害（抗細胞移動および／またはアポトーシス誘発）作用の産生で用いるための薬剤の製造における、本明細書中の前に定義の式（Ｉ）のピリミジン誘導体、またはその薬学的に許容しうる塩または in vivo 加水分解性エステルの使用を提供する。具体的には、細胞周期阻害作用は、ＣＤＫ２、ＣＤＫ４および／またはＣＤＫ６、特に、ＣＤＫ４およびＣＤＫ６の阻害によってＳ期またはＧ１−Ｓ期において生じる。
【０１１５】
本発明のこの側面のもう一つの特徴により、抗癌細胞周期阻害（抗細胞増殖）作用および／またはＦＡＫ阻害（抗細胞移動および／またはアポトーシス誘発）作用を生じる処置を必要としているヒトなどの温血動物においてこのような作用を生じる方法であって、この動物に、有効量のすぐ上に定義のピリミジン誘導体を投与することを含む方法を提供する。具体的には、阻害作用は、ＣＤＫ２、ＣＤＫ４および／またはＣＤＫ６、特に、ＣＤＫ４およびＣＤＫ６の阻害によってＳ期またはＧ１−Ｓ期において生じる。
【０１１６】
上述のように、具体的な細胞増殖疾患の治療的または予防的処置に必要な用量のサイズは、処置される宿主、投与経路および処置される疾患の重症度によって必然的に異なるであろう。例えば、１〜１００ｍｇ／ｋｇ、好ましくは、１〜５０ｍｇ／ｋｇの範囲内の単位用量が考えられる。
【０１１７】
本明細書中の前に定義のＣＤＫおよび／またはＦＡＫ阻害活性は、単独の療法として用いることができるし、または本発明の化合物に加えて、１種類またはそれより多い他の物質および／または処置を必要とすることがありうる。このような共同処置は、その処置の個々の成分の同時の、逐次的または別々の投与によって行うことができる。医学腫瘍学の分野において、癌を有する各々の患者を処置する異なった形の処置の組合せを用いることは、通常の慣例である。医学腫瘍学において、本明細書中の前に定義の細胞周期阻害処置に加えたこのような併用療法の１種類または複数の他の成分は、外科手術、放射線療法または化学療法であってよい。このような化学療法は、３種類の主な治療薬カテゴリーにわたっていてよい。
【０１１８】
（ｉ）本明細書中の前に定義されたのと同じまたは異なった機構によって作用する他の細胞周期阻害薬；
（ii）抗エストロゲン（例えば、タモキシフェン、トレミフェン（toremifene）、ラロキシフェン（raloxifene）、ドロロキシフェン（droloxifene）、ヨードキシフェン（iodoxyfene））、プロゲストゲン（例えば、酢酸メゲストロール）、アロマターゼ阻害剤（例えば、アナストロゾール（anastrozole）、レトラゾール（letrazole）、ボラゾール（vorazole）、エクセメスタン（exemestane））、抗プロゲストゲン、抗アンドロゲン（例えば、フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、酢酸シプロテロン）、ＬＨＲＨアゴニストおよびアンタゴニスト（例えば、酢酸ゴセレリン、ルプロリド（luprolide））、テストステロン５α−ジヒドロレダクターゼの阻害剤（例えば、フィナステリド）、抗浸潤薬（例えば、マリマスタト（marimastat）のようなメタロプロテイナーゼ阻害剤およびウロキナーゼプラスミノーゲンアクチベーター受容体機能の阻害剤）および成長因子機能の阻害剤（このような成長因子は、例えば、血小板由来成長因子および肝細胞成長因子を含み、このような阻害剤は、成長因子抗体、成長因子受容体抗体、チロシンキナーゼ阻害剤およびセリン／トレオニンキナーゼ阻害剤を含む）のような細胞増殖抑制薬；および
（iii）代謝拮抗物質（例えば、メトトレキセートのような葉酸代謝拮抗薬、５−フルオロウラシル、プリンおよびアデノシン類似体のようなフルオロピリミジン類、シトシンアラビノシド）のような医学腫瘍学において用いられる抗増殖／抗新生物薬およびそれらの組合せ；抗腫瘍抗生物質（例えば、ドキソルビシン、ダウノマイシン、エピルビシン（epirubicin）およびイダルビシン（idarubicin）のようなアントラサイクリン類、マイトマイシンＣ、ダクチノマイシン、ミトラマイシン）；白金誘導体（例えば、シスプラチン、カルボプラチン）；アルキル化剤（例えば、ナイトロジェンマスタード、メルファラン、クロラムブシル、ブスルファン、シクロホスファミド、イホスファミド、ニトロソ尿素、チオテパ）；抗有糸分裂薬（例えば、ビンクリスチンのようなビンカアルカロイド類、およびタキソール、タキソテールのようなタキソイド類）；トポイソメラーゼ阻害剤（例えば、エトポシドおよびテニポシドのようなエピポドフィロトキシン、アムサクリン（amsacrine）、トポテカン（topotecan））。本発明のこの側面により、癌の共同処置のための、本明細書中の前に定義の式（Ｉ）のピリミジン誘導体、またはその薬学的に許容しうる塩または in vivo 加水分解性エステル、および本明細書中の前に定義の追加の抗腫瘍物質を含む医薬製品を提供する。抗嘔吐薬は、例えば、上記のような共同処置を用いる場合、有効に投与することもできる。
【０１１９】
治療薬中でのそれらの使用に加えて、式（Ｉ）の化合物およびそれらの薬学的に許容しうる塩は、新しい治療薬の探求の一部分として、ネコ、イヌ、ウサギ、サル、ラットおよびマウスのような実験動物での細胞周期活性の阻害剤の作用の評価のための in vitro および in vivo 試験システムの開発および規格化における薬理学的手段としても有用である。
【０１２０】
上の他の医薬組成物、プロセス、方法、使用および薬剤製造の特徴において、本明細書中に記載の本発明の化合物の別のおよび好ましい態様も当てはまる。
【実施例】
【０１２１】
ここで、本発明を次の非制限実施例で詳しく説明するが、ここにおいて、熟練した化学者に知られている標準的な技法およびこれら実施例に記載されたのと類似した技法は、当てはまる場合に用いることができるし、そしてここにおいて、特に断らない限り、
（ｉ）蒸発は、ロータリーエバポレーターによって真空中で行われ、処理手順は、濾過による乾燥剤などの残留固体の除去後に行われた；
（ii）作業は、周囲温度で、典型的には、１８〜２５℃の範囲内で、そして特に断らない限り、または当業者がアルゴンのような不活性ガスの雰囲気下で他に作業しなければ、空気中で行われた；
（iii）カラムクロマトグラフィー（フラッシュ法による）および中圧液体クロマトグラフィー（ＭＰＬＣ）は、E. Merck, Darmstadt, Germany より入手される Merck Kieselgel シリカ（製品９３８５）または Merck Lichroprep ＲＰ−１８（製品９３０３）逆相シリカ上で行われ；ボンドエルートクロマトグラフィーは、Varian Sample Preparation Products, California, USA より入手される Varian Mega Bond Elut カートリッジ（１０ｇ，注文コード１２２５−６０３４）を用いて行われた；
（iv）収率は、単に例示のために与えられ、必ずしも達成しうる最大値ではない；
（ｖ）式（Ｉ）の最終生成物の構造は、概して、核（一般的にはプロトン）磁気共鳴（ＮＭＲ）および質量スペクトル技術によって確認された；プロトン磁気共鳴化学シフト値は、３００ＭＨｚの磁場強さで操作する Varian Gemini ２０００分光計、または２５０ＭＨｚの磁場強さで操作する Bruker ＡＭ２５０分光計を用いて、重水素置換ＤＭＳＯｄ６（特に断らない限り）中においてδスケール（テトラメチルシランからのｐｐｍダウンフィールド）で測定された；そしてピーク多重性は、次の、ｓ，一重線；ｄ，二重線；ｄｄ，二重の二重線；ｔ，三重線；ｔｔ，三重の三重線；ｑ，四重線；ｔｑ，三重の四重線；ｍ，多重線；ｂｒ，幅広のように示される；質量分析法（ＭＳ）は、ＶＧプラットフォームでのエレクトロスプレイによって行われた；
（vi）本文中に更に詳しく明記されていない限り、分析用高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）は、Waters Spherisorb ＯＤＳ１  ２５ｃｍカラム上において２ｍｌ／分の流速で、アセトニトリル／水／トリフルオロ酢酸（６０：４０：０．１ｖ／ｖ）を溶離剤として用いて行われ、検出は、２５４ｎｍの波長であったが、データは、分での保持時間（ＲＴ）として引用される；
（vii）ロボット合成は、Zymate ＸＰロボットを用いて、Zymate Master Laboratory Station によって溶液を加え、Stem ＲＳ５０００ Reacto-Station によって２５℃で撹拌して行われた；
（viii）ロボット合成からの反応混合物の処理および精製は、次のように行われた；蒸発は、真空中において Savant ＡＥＳ２０００を用いて行われた；カラムクロマトグラフィーは、Varian Mega Bond Elut カートリッジを用いたシリカ上の Anachem Sympur ＭＰＬＣかまたは Jones Flashmaster ＭＰＬＣシステムを用いて行った；最終生成物の構造は、次を用いた Micromass OpenLynx システムでのＬＣＭＳによって確認されたが、分での保持時間（ＲＴ）として引用される。
カラム：    ４．６ｍｍｘ１０ｃｍ Hichrom ＲＰＢ  １００Å
（システムＡ）
２．１ｍｍｘ３ｃｍ Waters Symmetry Ｃ１８  ３．５μｍ
（システムＢ）
溶媒：      Ｉ＝水＋０．１％ギ酸
II＝アセトニトリル＋０．１％ギ酸
運転時間：  ５〜９５％のIIの６分間勾配を含む１０分間（システムＡ）
５〜９５％のIIの４．５分間勾配を含む５分間（システムＢ）
波長：      ２５４ｎｍ，バンド幅１０ｎｍ
質量検出器：Platform ＬＣ
（xi）中間体は、必ずしも完全には特性決定をせず、純度は、薄層クロマトグラフィー（ＬＴＣ）、ＨＰＬＣ、赤外（ＩＲ）、ＭＳまたはＮＭＲ分析によって評価された；
（ｘ）溶液を乾燥させる場合、硫酸マグネシウムが乾燥剤であった；
（xi）次の略語を、本明細書中の前にまたは以下で用いることができる。
ＤＣＭ    ジクロロメタン；
ＤＭＦ    Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド；
ＤＭＳＯ  ジメチルスルホキシド；
ＮＭＰ    Ｎ−メチルピロリジン−２−オン；
ＴＨＦ    テトラヒドロフラン
【０１２２】
実施例１
４−アニリノ−５−ブロモ−２−［４−（４−メチルピペラジノ）アニリノ］ピリミジン
４−（４−メチルピペラジノ）アニリン塩酸塩（J. Med. Chem. 1993, 36, 2716-25 に記載のように得られる；１５６ｍｇ，０．５６ｍｍｏｌ）のメタノール（１ｍｌ）中溶液を、４−アニリノ−５−ブロモ−２−クロロピリミジン（方法例１，２５０ｍｇ，０．９０ｍｍｏｌ）のｎ−ブタノール（２ｍｌ）中溶液に加えた。その混合物を１００℃で５時間加熱し、不溶性固体を集め、ｎ−ブタノール（５ｍｌ）およびジエチルエーテル（５ｍｌ）で洗浄して、生成物を塩酸塩（５０ｍｇ，１４％）として生じた。
【０１２３】
【化１０】
0004801335.tif 000012
【０１２４】
実施例２〜６
次の化合物を、実施例１に記載されたのに類似した方法により、４−アニリノ−５−ブロモ−２−クロロピリミジン（方法例１）および適当なアニリン塩酸塩（J. Med. Chem., 1993, 36, 2716-25；欧州特許出願ＥＰ４８７２５２号；欧州特許出願ＥＰ４０１３５８号；J. Med. Chem., 1972, 15, 523-9; J. Med. Chem., 1985, 28, 1427 に記載のように得られる）から出発して製造した。
【０１２５】
【化１１】
0004801335.tif 000013
【０１２６】
【表１】
0004801335.tif 000014
【０１２７】
実施例７〜９
次の化合物を、実施例１に記載されたのに類似した方法により、適当な４−アニリノ−２−クロロ−５−ハロピリミジン（方法例２〜３、またはＰＣＴ国際出願ＷＯ９７１９０６５号に記載のように得られる）および適当なアニリン塩酸塩（欧州特許出願ＥＰ４０１３５８号；J. Med. Chem., 1985, 28, 1427；ドイツ公開ＤＥ２３１５７９１号に記載のように得られる）から出発し、そしてＤＣＭ中０〜４％の２．０Ｍメタノール性アンモニア溶液で溶離するボンドエルートクロマトグラフィーによって生成物を遊離塩基として単離して製造した。
【０１２８】
【化１２】
0004801335.tif 000015
【０１２９】
【表２】
0004801335.tif 000016
【０１３０】
実施例１０〜１２
次の化合物を、実施例１に記載されたのに類似した方法により、適当な４−アニリノ−５−ブロモ−２−クロロピリミジン（方法例１）および適当なアニリン塩酸塩（商業的に入手可能、または Bioorg. Med. Chem. Lett., 1997, 7, 1921-1926; J. Med. Chem., 1984, 27, 967-78 に記載のように得られる）から出発し、そしてＤＣＭ中０〜４％の２．０Ｍメタノール性アンモニア溶液で溶離するボンドエルートクロマトグラフィーによって生成物を遊離塩基として単離して製造した。
【０１３１】
【化１３】
0004801335.tif 000017
【０１３２】
【表３】
0004801335.tif 000018
【０１３３】
実施例１３
４−アニリノ−５−ブロモ−２−［４−（アミノメチル）アニリノ］ピリミジン
４−アミノベンジルアミン（１２２ｍｇ，１．０ｍｍｏｌ）およびエーテル性塩化水素（１．０Ｍ；１．０ｍｌ，１．０ｍｍｏｌ）を、４−アニリノ−５−ブロモ−２−クロロピリミジン（２５６ｍｇ，０．９ｍｍｏｌ）のｎ−ブタノール（４ｍｌ）中溶液に加え、その混合物を１００℃で１６時間加熱した。不溶性固体を濾去し、メタノール（５ｍｌ）中に溶解させた。シリカ（２ｇ）を加え、揮発性物質を蒸発によって除去した。残留物を、ＤＣＭ中０〜４％の２．０Ｍメタノール性アンモニア溶液で溶離するボンドエルートクロマトグラフィーによって精製して、生成物（１６３ｍｇ，４９％）を生じた。
ＬＣＭＳ（ＭＨ＋）：３７０，３７２；ＨＰＬＣ（ＲＴ，システムＡ）：２．０４。
【０１３４】
実施例１４〜１５
次の化合物を、Zymate ＸＰロボットを用いて、実施例１３に記載されたのに類似した方法により、４−アニリノ−５−ブロモ−２−クロロピリミジン（方法例１）および適当なアニリンから出発して製造した。
【０１３５】
【化１４】
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【０１３６】
【表４】
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【０１３７】
実施例１６〜１７
次の化合物を、実施例１に記載されたのに類似した方法により、４−アニリノ−５−ブロモ−２−クロロピリミジン（方法例１）および適当なアニリン塩酸塩（J. Med. Chem., 1971, 14, 836-42；ＰＣＴ国際出願ＷＯ９９２１８４６号に記載のように得られる）から出発し、そしてＤＣＭ中０〜４％の２．０Ｍメタノール性アンモニア溶液で溶離するボンドエルートクロマトグラフィーによって生成物を遊離塩基として単離して製造した。
【０１３８】
【化１５】
0004801335.tif 000021
【０１３９】
【表５】
0004801335.tif 000022
【０１４０】
実施例１８〜１９
次の化合物を、実施例１に記載されたのに類似した方法により、適当な４−アニリノ−５−ブロモ−２−クロロピリミジン（方法例１、４）および４−（４−イソプロピルピペラジノ）カルボメトキシアニリン塩酸塩（方法例１３）から出発し、そしてＤＣＭ中０〜４％の２．０Ｍメタノール性アンモニア溶液で溶離するボンドエルートクロマトグラフィーによって生成物を遊離塩基として単離して製造した。
【０１４１】
【化１６】
0004801335.tif 000023
【０１４２】
【表６】
0004801335.tif 000024
【０１４３】
実施例２０〜２３
次の化合物を、実施例１３に記載されたのに類似した方法により、４−アニリノ−５−ブロモ−２−クロロピリミジン（方法例１）および適当なアニリン（方法例１５〜１７）から出発して製造した。
【０１４４】
【化１７】
0004801335.tif 000025
【０１４５】
【表７】
0004801335.tif 000026
【０１４６】
実施例２４
４−アニリノ−５−ブロモ−２−［３−（１−メチルピペリジン−３−イル）メトキシアニリノ］ピリミジン
炭酸カリウム（１６０ｍｇ，１．２ｍｍｏｌ）、４−アニリノ−５−ブロモ−２−（３−ヒドロキシアニリノ）ピリミジン（方法例１０，２００ｍｇ，０．６ｍｍｏｌ）および３−クロロメチル−１−メチルピペリジン（Eur. J. Med. Chem. 1994, 29, 967-73 に記載のように得られる；０．１１ｍｌ，０．６２ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（２ｍｌ）中混合物を、１００℃で１８時間加熱した。シリカ（１ｇ）を加え、揮発性物質を蒸発によって除去した。残留物を、Varian Mega Bond Elut カラム上に載せ、そのカラムを、０〜１０％の２．０Ｍメタノール性アンモニア溶液で溶離して、生成物を褐色固体（４０ｍｇ，１５％）として生じた。
【０１４７】
【化１８】
0004801335.tif 000027
【０１４８】
実施例２５〜２６
次の化合物を、実施例２４に記載されたのに類似した方法により、４−アニリノ−５−ブロモ−２−（４−ヒドロキシアニリノ）ピリミジン（方法例９）および適当な２−（ジアルキルアミノ）エチルクロリドから出発して製造した。
【０１４９】
【化１９】
0004801335.tif 000028
【０１５０】
【表８】
0004801335.tif 000029
【０１５１】
実施例２７〜３０
次の化合物を、実施例１に記載されたのに類似した方法により、適当な４−置換５−ブロモ−２−クロロピリミジン（方法例１、５〜７）および適当なアニリン塩酸塩（方法例２１〜２２）から出発し、そしてＤＣＭ中０〜４％の２．０Ｍメタノール性アンモニア溶液で溶離するボンドエルートクロマトグラフィーによって生成物を遊離塩基として単離して製造した。
【０１５２】
【化２０】
0004801335.tif 000030
【０１５３】
【表９】
0004801335.tif 000031
【０１５４】
実施例３１
４−アニリノ−５−ブロモ−２−［４−（２−ヒドロキシエトキシ）メチルアニリノ］ピリミジン
４−アニリノ−５−ブロモ−２−クロロピリミジン（方法例１，２．０ｇ，７．０３ｍｍｏｌ）を、ｎ−ブタノール（４０ｍｌ）およびメタノール（１０ｍｌ）中に溶解させた。４−アミノベンジルアルコール（７７８ｍｇ，６．２３ｍｍｏｌ）およびエーテル性塩化水素（１．０Ｍ；６．３３ｍｌ，６．３３ｍｍｏｌ）を加え、その溶液を１００℃で２０時間加熱した。揮発性物質を蒸発によって除去し、残留物をエチレングリコール（２０ｍｌ）中に溶解させた。その溶液を１００℃で６時間加熱し、揮発性物質を蒸発によって除去した。残留物を、カラムクロマトグラフィーにより、０．５％アンモニア水溶液を含有するＤＣＭ中０〜４％メタノール溶液で溶離して精製して、生成物を白色固体（５５０ｍｇ，１９％）として生じた。
【０１５５】
【化２１】
0004801335.tif 000032
【０１５６】
実施例３２
４−アニリノ−５−ブロモ−２−｛４−［２−（ジエチルアミノ）エトキシ］メチルアニリノ｝ピリミジン
トリエチルアミン（３３ｍｌ，０．２４１ｍｍｏｌ）およびメタンスルホニルクロリド（１９ｍｌ，０．２４１ｍｍｏｌ）を、４−アニリノ−５−ブロモ−２−［４−（２−ヒドロキシエトキシ）メチルアニリノ］ピリミジン（実施例３１；１００ｍｇ，０．２４１ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５ｍｌ）中０℃溶液に加えた。その溶液を周囲温度まで加温し、１時間放置した。ジエチルアミン（２ｍｌ）を加え、その混合物を５０℃で３時間加熱した。溶媒を蒸発によって除去し、残留物を、カラムクロマトグラフィーにより、０．５％アンモニア水溶液を含有するＤＣＭ中０〜２％メタノール溶液で溶離して精製して、生成物をクリーム色固体（３８ｍｇ，３４％）として生じた。
【０１５７】
【化２２】
0004801335.tif 000033
【０１５８】
実施例３３〜３５
次の化合物を、実施例３２に記載されたのに類似した方法により、４−アニリノ−５−ブロモ−２−［４−（２−ヒドロキシエトキシ）メチルアニリノ］ピリミジン（実施例３１）および適当なアミンから出発し、そして生成物を二または三塩酸塩として単離して製造した。
【０１５９】
【化２３】
0004801335.tif 000034
【０１６０】
【表１０】
0004801335.tif 000035
【０１６１】
実施例３６
４−アニリノ−５−ブロモ−２−［４−（２−ピロリジン−１−イルエチル）アニリノ］ピリミジン
実施例３２に記載されたのに類似した方法を用いるが、４−アニリノ−５−ブロモ−２−［４−（２−ヒドロキシエチル）アニリノ］ピリミジン（方法例１１）およびピロリジンから出発して、生成物を得た。
ＭＳ（ＭＨ＋）：４３８．１，４４０．１；ＨＰＬＣ（ＲＴ）：５．６４。
【０１６２】
実施例３７
４−アニリノ−５−ブロモ−２−［４−（３−ジメチルアミノ−１−プロピニル）アニリノ］ピリミジン
４−アニリノ−５−ブロモ−２−（４−ヨードアニリノ）ピリミジン（方法例１２；２００ｍｇ，０．４０ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルプロパルギルアミン（０．０９ｍｌ，０．８５ｍｍｏｌ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（２５ｍｇ，０．０２ｍｍｏｌ）のピロリジン（３ｍｌ）中溶液を、６０時間撹拌後、８０℃で２時間加熱した。その混合物をＤＣＭ（１０ｍｌ）で希釈し、シリカ（２ｇ）を加えた。揮発性物質を蒸発によって除去し、残留物を、Varian Mega Bond Elut カラム上に載せた。ＤＣＭ中０〜１０％の２．０Ｍメタノール性アンモニア溶液での溶離により、生成物（３０ｍｇ，１７％）を生じた。
【０１６３】
【化２４】
0004801335.tif 000036
【０１６４】
実施例３８〜３９
次の化合物を、実施例３７に記載されたのに類似した方法により、４−アニリノ−５−ブロモ−２−（４−ヨードアニリノ）ピリミジン（方法例１２）および適当なアルキン（商業的に入手可能またはＰＣＴ国際出願ＷＯ９４２５４５９号に記載のように得られる）から出発して製造した。
【０１６５】
【化２５】
0004801335.tif 000037
【０１６６】
【表１１】
0004801335.tif 000038
【０１６７】
実施例４０
４−アニリノ−５−ブロモ−２−［４−（３−アミノ−１−プロピニル）アニリノ］ピリミジン
トリフルオロ酢酸（０．２５ｍｌ）を、４−アニリノ−５−ブロモ−２−｛４−［３−（ｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−１−プロピニル］アニリノ｝ピリミジン（方法例２５；３０ｍｇ，０．０６ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１ｍｌ）中溶液に加えた。その溶液を３時間放置し、揮発性物質を蒸発によって除去した。残留物をジエチルエーテルで研和して、生成物をトリフルオロ酢酸塩（２５ｍｇ，８１％）として生じた。
【０１６８】
【化２６】
0004801335.tif 000039
【０１６９】
実施例４１
４−アニリノ−５−ブロモ−２−［４−（ピペリジン−４−イル）メトキシアニリノ］ピリミジン
実施例４０に記載されたのに類似した方法を用いるが、４−アニリノ−５−ブロモ−２−｛４−［１−（ｔ−ブトキシカルボニル）ピペリジン−４−イル］メトキシアニリノ｝ピリミジン（方法例２６）から出発して、生成物を得た。
【０１７０】
【化２７】
0004801335.tif 000040
【０１７１】
出発物質の製造例：
上の実施例の出発物質は、商業的に入手可能であるかまたは標準法によって既知の物質から容易に製造される。例えば、次の反応は、上の反応で用いられる出発物質のいくつかの一例であるが、制限するものではない。
【０１７２】
方法例１
４−アニリノ−５−ブロモ−２−クロロピリミジン
５−ブロモ−２，４−ジクロロピリミジン（６．８４ｇ，３０．０ｍｍｏｌ）、アニリン（２．７９ｇ，３０．０ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（３．８７ｇ，３０．０ｍｍｏｌ）のｎ−ブタノール（７５ｍｌ）中溶液を、還流下で４時間加熱した。揮発性物質を蒸発によって除去し、残留物をＤＣＭ（１００ｍｌ）中に溶解させた。その溶液を、水（３ｘ１００ｍｌ）および飽和ブライン（１００ｍｌ）で洗浄し、乾燥させた。揮発性物質を蒸発によって除去し、残留物をカラムクロマトグラフィーにより、１５％酢酸エチル／イソヘキサンで溶離して精製して、放置すると凝固する油状物として生成物を生じた（５．１２ｇ，６０％）。
【０１７３】
【化２８】
0004801335.tif 000041
【０１７４】
方法例２〜７
次の中間体を、方法例１に記載されたのに類似した方法により、適当な置換アニリンまたはアミノピリジンおよび５−ブロモ−２，４−ジクロロピリミジンまたは２，４，５−トリクロロピリミジン（方法例８）を用いて製造した。
【０１７５】
【化２９】
0004801335.tif 000042
【０１７６】
【表１２】
0004801335.tif 000043
【０１７７】
方法例８
２，４，５−トリクロロピリミジン
５−クロロウラシル（１０．０ｇ，６８．５ｍｍｏｌ）を、オキシ塩化リン（６０ｍｌ）中に溶解させ、五塩化リン（１６．０ｇ，７７．０ｍｍｏｌ）を加えた。その混合物を還流下で１６時間加熱し、冷却させた後、水（２００ｍｌ）中に激しく撹拌しながら徐々に注入した。混合物を１．５時間撹拌後、酢酸エチル（２５０ｍｌ）を加えた。有機層を分離し、水性層を、さらなる酢酸エチル（２５０ｍｌ）で抽出した。合わせた抽出物を、飽和重炭酸ナトリウム（２００ｍｌ）および飽和塩化ナトリウム（２００ｍｌ）で洗浄後、乾燥させた。揮発性物質を蒸発によって除去し、残留物をカラムクロマトグラフィーによりＤＣＭで溶離して精製して、生成物を黄色液体（６．３７ｇ，５１％）として生じた。
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：８．６２（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＭＨ＋）：１８２，１８４，１８６。
【０１７８】
方法例９
４−アニリノ−５−ブロモ−２−（４−ヒドロキシアニリノ）ピリミジン
４−アミノフェノール（０．７３ｇ，７．８ｍｍｏｌ）および濃塩酸（１．３０ｍｌ，７．１ｍｍｏｌ）を、ｎ−ブタノール（３０ｍｌ）中の４−アニリノ−５−ブロモ−２−クロロピリミジン（方法例１；３．０ｇ，７．１ｍｍｏｌ）に加え、その混合物を１００℃で１２時間加熱した。冷却して沈澱した固体を濾去し、ｎ−ブタノールおよびジエチルエーテルで洗浄して、生成物（０．８０ｇ，３２％）を生じた。
ＭＳ（ＭＨ＋）：３５７，３５９。
【０１７９】
方法例１０〜１２
次の中間体を、方法例９に記載されたのに類似した方法により、４−アニリノ−５−ブロモ−２−クロロピリミジン（方法例１）および適当な置換アニリンから出発して製造した。
【０１８０】
【化３０】
0004801335.tif 000044
【０１８１】
【表１３】
0004801335.tif 000045
【０１８２】
方法例１３
４−（４−イソプロピルピペラジノ）カルボメトキシアニリン
４−［（４−イソプロピルピペラジノ）カルボメトキシ］ニトロベンゼン（方法例１４，８３０ｍｇ，２．７０ｍｍｏｌ）のエタノール（２５ｍｌ）中溶液を、１０％炭素上パラジウム（６０ｍｇ）上で２時間接触水素添加した。その触媒を、珪藻土を介する濾過によって除去し、濾液を５ｍｌの容量まで濃縮した。エーテル性塩化水素（１．０Ｍ，３ｍｌ）を加え、沈澱した固体を濾過によって集めて、生成物を塩酸塩（６１３ｍｇ，８２％）として生じた。
【０１８３】
【化３１】
0004801335.tif 000046
【０１８４】
方法例１４
４−［（４−イソプロピルピペラジノ）カルボメトキシ］ニトロベンゼン
１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（２．１４ｇ，１１．０ｍｍｏｌ）を、４−ニトロフェノキシ酢酸（J. Med. Chem., 1984, 27, 967-78 に記載のように得られる；２．０ｇ，１０．０ｍｍｏｌ）、４−イソプロピルピペラジン（２．５６ｇ，２０．０ｍｍｏｌ）および１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（２．０６ｇ，１５．０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５０ｍｌ）中０℃溶液に加えた。その混合物を１６時間撹拌し、揮発性物質を蒸発によって除去した。水（５０ｍｌ）を加え、混合物を酢酸エチル（３ｘ１００ｍｌ）で抽出した。その抽出物を乾燥させ、蒸発によって濃縮して、生成物を黄色固体（６００ｍｇ，２２％）として生じた。
【０１８５】
【化３２】
0004801335.tif 000047
【０１８６】
方法例１５〜１７
次の中間体を、方法例１３に記載されたのに類似した方法により、適当な置換ニトロベンゼン（方法例１８〜２０）から出発して製造した。
【０１８７】
【化３３】
0004801335.tif 000048
【０１８８】
【表１４】
0004801335.tif 000049
【０１８９】
方法例１８
４−（１−メチルピペリジン−４−イルオキシ）ニトロベンゼン
トリフェニルホスフィン（７．９ｇ，３０．０ｍｍｏｌ）を、４−ニトロフェノール（１．３９ｇ，１０．０ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１００ｍｌ）中撹拌溶液に加え、その溶液を３０分間撹拌した。４−ヒドロキシ−１−メチルピペリジン（１．１５ｇ，１１．０ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５ｍｌ）中溶液を加え、その溶液を２分間撹拌した。アゾジカルボン酸ジエチル（４．９ｍｌ，３０．０ｍｍｏｌ）を滴加し、混合物を４時間撹拌した。揮発性物質を蒸発によって除去し、残留物を酢酸エチル（２００ｍｌ）中に溶解させた。その溶液を水（２ｘ１００ｍｌ）で洗浄後、２Ｍ塩酸（２ｘ５０ｍｌ）で抽出した。合わせた酸性抽出物をエーテル（２ｘ１００ｍｌ）で洗浄後、０．８８アンモニア溶液の添加によって塩基性にした。その塩基性にされた溶液をエーテル（２ｘ１００ｍｌ）で抽出し、その抽出物を、水（２ｘ１００ｍｌ）および飽和塩化ナトリウム（１００ｍｌ）で洗浄し、乾燥させた。揮発性物質を蒸発によって除去し、塩化水素のメタノール中飽和溶液をその残留物に加えた。揮発性物質を蒸発によって除去し、残留物をエタノールおよびエーテルの混合物から再結晶させて、生成物を塩酸塩（３５０ｍｇ）として生じた。
【０１９０】
【化３４】
0004801335.tif 000050
【０１９１】
方法例１９
４−［（１−メチルピペリジン−２−イル）メトキシ］ニトロベンゼン
水素化ナトリウム（油中６０％分散液；４００ｍｇ，１０．０ｍｍｏｌ）を、２−ヒドロキシメチル−１−メチルピペリジン（１．２９ｇ，１０．０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２０ｍｌ）中溶液に加え、その混合物を２時間撹拌した。４−フルオロニトロベンゼン（１．４ｇ，１０．０ｍｍｏｌ）を加え、その混合物を８０℃で１７時間加熱した。その混合物を水（１００ｍｌ）中に注ぎ、酢酸エチル（２ｘ１００ｍｌ）で抽出した。抽出物を水（２ｘ１００ｍｌ）で洗浄後、２Ｍ塩酸（２ｘ５０ｍｌ）で抽出した。合わせた酸性抽出物をエーテル（２ｘ１００ｍｌ）で洗浄後、０．８８アンモニア溶液の添加によって塩基性にした。その塩基性にされた溶液をエーテル（２ｘ１００ｍｌ）で抽出し、その抽出物を、水（２ｘ１００ｍｌ）および飽和塩化ナトリウム（１００ｍｌ）で洗浄し、乾燥させた。揮発性物質を蒸発によって除去し、塩化水素のメタノール中飽和溶液をその残留物に加えた。蒸発により、生成物の塩酸塩を油状物（２．４ｇ）として生じた。
【０１９２】
【化３５】
0004801335.tif 000051
【０１９３】
方法例２０
４−（１−メチルピペリジン−３−イルオキシ）ニトロベンゼン
方法例１８に記載されたのに類似した方法を用いるが、４−ニトロフェノールおよび３−ヒドロキシ−１−メチルピペリジンから出発して、生成物を得た。
ＭＳ（ＭＨ＋）：２３７。
【０１９４】
方法例２１〜２２
次の中間体を、方法例１３に記載されたのに類似した方法により、適当なニトロベンゼン（方法例２３〜２４）から出発して製造した。
【０１９５】
【化３６】
0004801335.tif 000052
【０１９６】
【表１５】
0004801335.tif 000053
【０１９７】
方法例２３
４−［２−（イソプロピルアミノ）エチルアミノ］ニトロベンゼン
Ｎ−イソプロピルエチレンジアミン（４．８７ｍｌ，３９．０ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（６．３７ｇ，４６．０ｍｍｏｌ）を、４−フルオロニトロベンゼン（５．０ｇ，３５．０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５０ｍｌ）中溶液に加え、その混合物を窒素雰囲気下において７０℃で３時間加熱した。不溶性物質を濾過によって除去し、濾液を濃縮した。残留物を酢酸エチル（３００ｍｌ）中に溶解させ、その溶液を水（３ｘ１００ｍｌ）および飽和塩化ナトリウム（５０ｍｌ）で洗浄し、乾燥させた。溶媒を蒸発によって除去して、生成物を、放置すると結晶化する橙色油状物（７．５５ｇ，９５％）として生じた。
【０１９８】
【化３７】
0004801335.tif 000054
【０１９９】
方法例２４
４−［２−（ピペリジノ）エチルアミノ］ニトロベンゼン
方法例２３に記載されたのに類似した方法を用いるが、４−フルオロニトロベンゼンおよび１−（２−アミノエチル）ピペリジンから出発して、生成物を得た。
【０２００】
【化３８】
0004801335.tif 000055
【０２０１】
方法例２５
４−アニリノ−５−ブロモ−２−｛４−［３−（ｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−１−プロピニル］アニリノ｝ピリミジン
実施例３７に記載されたのに類似した方法を用い、４−アニリノ−５−ブロモ−２−（４−ヨードアニリノ）ピリミジン（方法例１２）および３−（ｔ−ブトキシカルボニルアミノ）プロピンから出発して、生成物を得た。
【０２０２】
【化３９】
0004801335.tif 000056
【０２０３】
方法例２６
４−アニリノ−５−ブロモ−２−｛４−［１−（ｔ−ブトキシカルボニル）ピペリジン−４−イル］メトキシアニリノ｝ピリミジン
実施例２４に記載されたのに類似した方法を用い、４−アニリノ−５−ブロモ−２−（４−ヒドロキシアニリノ）ピリミジン（方法例９）および１−（ｔ−ブトキシカルボニル）−４−（４−トルエンスルホニルオキシ）メチルピペリジン（ＰＣＴ国際出願ＷＯ９４２７９６５号に記載のように得られる）から出発して、生成物を得、特性決定することなく次の段階で用いた。
【０２０４】
実施例４２
次は、ヒトにおける治療的または予防的使用のための、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容しうる塩または in vivo 加水分解性エステル（以下、化合物Ｘ）を含有する代表的な医薬剤形を詳しく説明する。
【０２０５】
【表１６】
0004801335.tif 000057
【０２０６】
【表１７】
0004801335.tif 000058
【０２０７】
注記
上の製剤は、当薬学技術分野において周知の慣用法によって得ることができる。錠剤（ａ）〜（ｃ）は、慣用的な手段によって腸溶コーティングされて、例えば、酢酸フタル酸セルロースのコーティングを与えることができる。