(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
１３Ｃ、１４Ｃ、及び１８Ｏからなる群から選択されるいずれか少なくとも一種の同位元素で標識された炭酸若しくは炭酸水素のアルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩及びアンモニウム塩からなる群から選択される少なくとも１種の化合物であって、経口投与された後、生体内で溶解し、分解または代謝された後、呼気中に炭酸ガスとして排泄される化合物を含む組成物を、ｐＨ５以下で溶解する胃溶性基剤及びｐＨ５以上で溶解する腸溶性基剤からなる群から選択される少なくとも１種のｐＨ依存溶解性基剤で被覆してなる胃内ｐＨ測定用製剤。
【請求項２】
上記同位元素で標識された化合物が、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸カルシウム、炭酸マグネシウム、炭酸アンモニウム、炭酸水素カリウム、炭酸水素ナトリウム、および炭酸水素アンモニウムよりなる群から選択される少なくとも１種である請求項１記載の胃内ｐＨ測定用製剤。
【請求項３】
同位元素で標識された化合物を含む組成物が、上記同位元素で標識された化合物に加えて、さらにクエン酸、酒石酸、およびリンゴ酸よりなる群から選択される少なくとも１種の酸化合物を含有する請求項１または２に記載の胃内ｐＨ測定用製剤。
【請求項４】
１３Ｃ、１４Ｃ、及び１８Ｏからなる群から選択されるいずれか少なくとも一種の同位元素で標識されたアミノ酸、蛋白質、有機酸又はその塩、糖類、および脂質よりなる群から選択される少なくとも１種の化合物であって、経口投与された後、生体内で溶解し、分解または代謝された後、呼気中に炭酸ガスとして排泄される化合物を含む組成物を、ｐＨ５以下で溶解する胃溶性基剤及びｐＨ５以上で溶解する腸溶性基剤からなる群から選択される少なくとも１種のｐＨ依存溶解性基剤で被覆してなる胃内ｐＨ測定用製剤。
【請求項５】
ｐＨ依存溶解性基剤が、メタクリル酸メチル・メタクリル酸ブチル・メタクリル酸ジメチルアミノエチル共重合体、またはポリビニルアセタールジエチルアセテートのいずれかから選択される少なくとも１種の胃溶性基剤である請求項１乃至４のいずれかに記載の胃内ｐＨ測定用製剤。
【請求項６】
ｐＨ依存溶解性基剤が、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、メタクリル酸−メタクリル酸メチルコポリマー、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート、カルボキシメチルエチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、及びセルロースアセテートフタレートよりなる群から選択される少なくとも１種の腸溶性基剤である請求項１乃至４のいずれかに記載の胃内ｐＨ測定用製剤。
【請求項７】
請求項１乃至６のいずれかに記載の胃内ｐＨ測定用製剤が経口投与された被験者の呼気内に排泄される標識ＣＯ２の量またはその挙動を測定することを特徴とする胃内ｐＨの測定方法。
【請求項８】
腸溶性基剤で被覆してなる請求項１〜４及び６のいずれかに記載の胃内ｐＨ測定用製剤と、胃溶性基剤で被覆してなる請求項１〜５のいずれかに記載の胃内ｐＨ測定用製剤とを組み合わせて経口投与された被験者の呼気内に排泄される標識ＣＯ２の量またはその挙動を測定することを特徴とする、請求項７記載の胃内ｐＨの測定方法。
【請求項９】
上記被験者が胃内ｐＨの低下または上昇が疑われる被験者であって、当該被験者の呼気内に排泄される標識ＣＯ２の量またはその挙動を、胃内ｐＨが正常なヒトの呼気内に排泄される標識ＣＯ２の量またはその挙動と比較することからなる、請求項７または８に記載する胃内ｐＨの測定方法。
【発明の詳細な説明】
技術分野
本発明は胃内ｐＨを測定する技術、具体的には胃内ｐＨを測定するための製剤及びその製剤を用いた胃内ｐＨ測定法に関する。より詳細には、本発明は胃内ｐＨを呼気を用いて非侵襲的に測定するための製剤、及び該製剤を用いた胃内ｐＨ測定法に関する。
背景技術
医療用薬物の多くは有機酸及び有機塩基の形で合成されている。このような有機酸及び有機塩基の幾つかの化合物には胃内ｐＨの影響を受け、その結果バイオアベイラビリティーが大きく変動し、予想される薬理効果が現れなかったり、予期せぬ重篤な副作用が引き起こされることが知られている。また、高齢化社会を迎える現在では、低酸症、無酸症の患者数が急増していると言われている。
この場合、薬物治療前に予め患者の胃内ｐＨの傾向（胃酸過多症、正常、低酸症、無酸症の別）が測定できれば、その薬物の治療効果並びに副作用予測のために非常に有用な情報を得ることが可能になると思われる。
Ｈ２−アンタゴニスト及び胃酸分泌抑制剤（プロトンポンプインヒビター：ＰＰＩ（ｐｒｏｔｏｎ  ｐｕｍｐ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ））の出現は、胃潰瘍及び十二指腸潰瘍の治療に大きく貢献した。しかしながら、近年、治療後の再燃再発（特に逆流性食道炎）が問題となり、医療界において胃潰瘍及び十二指腸潰瘍の治療方法の見直しを含めて、その治療方法自体が大きくクローズアップされてきている。Ｈ２−アンタゴニストやＰＰＩを用いた治療は胃酸分泌を抑制することであり、その治療効果は胃内ｐＨの上昇を指標として評価される。また、逆流性食道炎の再発はＨ２−アンタゴニストやＰＰＩ等の投薬中止によるリバウンド現象であり、これは胃内ｐＨを測定することによってある程度予測可能であると考えられる。
このように胃内ｐＨを測定することにより、医薬品の治療効果や副作用をある程度予測することが可能になると思われる。さらに胃内ｐＨ測定は、治療効果の判定、並びに疾病の診断に幅広く利用できるものと考えられる。
現在知られている胃内ｐＨの測定方法としては、ビタミンＢ２を胃溶性カプセルに充填した製剤を被験者に投与し、その後尿中に排泄されるビタミンＢ２の濃度をＨＰＬＣで測定して胃内ｐＨを判定する方法（ＧＡ−Ｔｅｓｔ：Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｄｙｎ．，７，６５６−６６４（１９８４））、及びｐＨ測定用電極を先端に付けた内視鏡を被験者の胃に挿入して直接胃内のｐＨを測定する方法（Ｄｉｇｅｓｔｉｖｅ  Ｄｉｓｅａｓｅ  ａｎｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｖｏｌ．４２，Ｎｏ．１１（１９９７））等がある。しかしながら、前者の方法は代謝などの他の要因の影響を受けるため胃内ｐＨを精度よく測定できず、また後者の方法は直接胃内に内視鏡を挿入するため、被験者に苦痛を与えるという欠点がある。
このように、現在、被験者に苦痛や負担をかけずに、精度並びに再現性よく、簡便に胃内ｐＨを測定する方法は知られていないのが実情である。
発明の開示
本発明は、胃内ｐＨを簡便にしかも非侵襲的に測定することのできる製剤を提供することを目的とする。より具体的には、本発明は呼気を用いて胃内のｐＨを測定・評価することのできる製剤を提供することを目的とする。また本発明は、該製剤を用いた簡便な胃内ｐＨ測定方法を提供することを目的とする。
本発明者は、従来の現状に鑑み、上記問題を解消すべく鋭意研究を重ねたところ、１３Ｃ化合物をｐＨに依存して溶解する剤形に調製した製剤をヒトなどの被験者に経口投与することにより、胃内のｐＨに対応して生体外に放出される１３Ｃ化合物の挙動が変動し、胃内ｐＨと標識化合物の排泄挙動との間に一定の対応関係があることを見いだした。そして、該１３Ｃ化合物の体内及びその排泄挙動を測定することにより胃内ｐＨの傾向を測定し、評価することが可能であることを確認した。
本発明はかかる知見に基づき完成されたものである。
すなわち、本発明は下記１〜９に記載する胃内ｐＨ測定用製剤である：
１．  同位元素で標識された化合物を含む組成物をｐＨ依存溶解性基剤で被覆してなる胃内ｐＨ測定用製剤。
２．  同位元素が１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ及び１８Ｏからなる群から選択されるいずれか少なくとも一種である１記載の胃内ｐＨ測定用製剤。
３．  同位元素で標識された化合物が、炭酸若しくは炭酸水素のアルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩又はアンモニウム塩である１または２に記載の胃内ｐＨ測定用製剤。
４．  同位元素で標識された化合物が、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸カルシウム、炭酸マグネシウム、炭酸アンモニウム、炭酸水素カリウム、炭酸水素ナトリウム、および炭酸水素アンモニウムよりなる群から選択される少なくとも１種である３記載の胃内ｐＨ測定用製剤。
５．  同位元素で標識された化合物を含む組成物が、同位元素で標識された化合物に加えて、さらにクエン酸、酒石酸、およびリンゴ酸よりなる群から選択される少なくとも１種の酸化合物を含有する１乃至４のいずれかに記載の胃内ｐＨ測定用製剤。
６．  同位元素で標識された化合物が、アミノ酸、蛋白質、有機酸又はその塩、糖類、および脂質よりなる群から選択される少なくとも１種である１に記載の胃内ｐＨ測定用製剤。
７．  ｐＨ依存溶解性基剤が、腸溶性基剤または胃溶性基剤のいずれかである１乃至６のいずれかに記載の胃内ｐＨ測定用製剤。
８．  ｐＨ依存溶解性基剤が、メタクリル酸メチル・メタクリル酸ブチル・メタクリル酸ジメチルアミノエチル共重合体、またはポリビニルアセタールジエチルアセテートのいずれかから選択される少なくとも１種の胃溶性基剤である７記載の胃内ｐＨ測定用製剤。
９．  ｐＨ依存溶解性基剤が、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、メタクリル酸−メタクリル酸メチルコポリマー、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート、カルボキシメチルエチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、及びセルロースアセテートフタレートよりなる群から選択される少なくとも１種の腸溶性基剤である７に記載の胃内ｐＨ測定用製剤。
なお、これらの製剤は錠剤、カプセル剤、丸剤、粉末剤または顆粒剤等の経口投与用の製剤形態を有するものである。
また本発明は、上記のいずれかの胃内ｐＨ測定用製剤を用いる胃内ｐＨ測定法であり、具体的には下記１０〜１４に掲げる方法を挙げることができる：
１０．  上記１乃至９のいずれかに記載の胃内ｐＨ測定用製剤を用いる胃内ｐＨの測定方法。
１１．  上記１に記載の胃内ｐＨ測定用製剤を被験者に経口投与し、標識化合物の体外排出挙動を測定することを特徴とする胃内ｐＨの測定方法。
１２．  上記２に記載の胃内ｐＨ測定用製剤を被験者に経口投与し、呼気内に排泄される標識ＣＯ２の量またはその挙動を測定することを特徴とする胃内ｐＨの測定方法。
１３．  ｐＨ依存溶解性基剤が腸溶性基剤である上記１乃至７または９のいずれかに記載の胃内ｐＨ測定用製剤と、ｐＨ依存溶解性基剤が胃溶性基剤である上記１乃至８のいずれかに記載の胃内ｐＨ測定用製剤とを組み合わせて用いる１０記載の胃内ｐＨの測定方法。
１４．  上記１乃至９のいずれかに記載の胃内ｐＨ測定用製剤を胃内ｐＨの低下または上昇が疑われる被験者に経口投与し、所定後に得られる標識化合物の体外排出挙動を、標準コントロールと比較することからなる、前記被験者の胃内ｐＨの測定方法。
さらに本発明は、上記のいずれかの胃内ｐＨ測定用製剤の使用に関する；
１５．  胃内ｐＨの測定方法における１乃至９のいずれかに記載の胃内ｐＨ測定用製剤の使用。
１６．  胃内ｐＨの測定方法に用いる胃内ｐＨ測定用製剤の製造のための、ｐＨ依存溶解性基剤で被覆してなる同位元素標識化合物の使用。
１７．  同位元素で標識された化合物が、炭酸若しくは炭酸水素のアルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩又はアンモニウム塩である上記１６記載の使用。
なお、本発明でいう胃内ｐＨ測定とは、胃内の具体的なｐＨ値を測定するという意味に限定的に解釈されるものではなく、胃内のｐＨ傾向を測定し、例えば胃酸過多症、正常、低酸症及び無酸症といった胃内ｐＨに基づく各種の症例の別を判断するといった広範な意味を包含するものである。
発明を実施するための最良の形態
（１）胃内ｐＨ測定用製剤
本発明の胃内ｐＨ測定用製剤は、同位元素で標識された化合物を含む組成物をｐＨ依存溶解性基剤で被覆した形態を有することを特徴とするものである。
ここで同位元素で標識された化合物は、被験者に経口投与された後、該被験者の体内で溶解し、場合によってはその後分解又は代謝されて、呼気や体液（尿、血液、唾液、汗等）に排泄されるものであれば特に制限されない。
好ましくは、生体内で溶解後、場合によってはその後分解又は代謝された後、呼気中に炭酸ガス（ＣＯ２）として現れるものが例示される。
生体内で溶解後速やかに呼気中に炭酸ガスとして現れる化合物としては、溶解して炭酸イオン（ＣＯ３−２）又は重炭酸イオン（ＨＣＯ３−１）を生じる化合物を広く挙げることができ、例えば炭酸ナトリウム、炭酸カリウム等といった炭酸のアルカリ金属塩：炭酸カルシウム、炭酸マグネシウム等といった炭酸のアルカリ土類金属塩：炭酸アンモニウム；炭酸水素カリウム、炭酸水素ナトリウム等といった炭酸水素のアルカリ金属塩：炭酸水素アンモニウム等が例示できる。なお、これらの化合物は、クエン酸、酒石酸、リンゴ酸等の酸化合物と組み合わせて用いることによって、速やかに炭酸ガスとして呼気中に出現することができる。好ましくは、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸水素ナトリウム、または炭酸水素カリウムである。
また、生体内で溶解後、分解或いは代謝された後に呼気中に炭酸ガスとして現れる化合物としては、アミノ酸、蛋白質、有機酸又はその塩（例えば、Ｎａ等のアルカリ金属塩）、糖類、脂質等が挙げられる。これらはいずれも消化吸収された後、肝代謝によって炭酸ガスを呼気中に発するものである。ここでアミノ酸としては、グリシン、フェニルアラニン、トリプトファン、メチオニン、バリン及びヒスチジン等：有機酸としては酢酸、乳酸、ピルビン酸、酪酸、プロピオン酸、オクタン酸またはこれらのアルカリ金属塩等：糖類としてはグルコース、ガラクトース、キシロース、ラクトース等：脂質としてはトリオクタノイン等の中鎖トリグリセライド等が例示されるが、これらに限定されるものではない。好ましくは、グリシン等のアミノ酸並びに酢酸やオクタン酸等の有機酸及びそれらのアルカリ金属塩（ナトリウム塩、カリウム塩）を挙げることができる。
かかる化合物を標識する同位元素としては１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ及び１８Ｏ等が挙げられる。同位元素は放射性及び非放射性の別を問わないが、安全性の観点から好ましくは非放射性同位元素である。かかる同位元素としては１３Ｃ、１５Ｎ、１８Ｏ等が挙げられ、好適には１３Ｃを挙げることができる。
これらの同位元素による標識方法は、特に制限されず、通常使用される方法が広く採用され、またこれらの同位元素で標識された標識化合物としても公知のものや、商業的に入手可能なものが広く用いられる（佐々木、「５．１安定同位体の臨床診断への応用」：化学の領域１０７「安定同位体の医・薬学、生物学への応用」ｐｐ．１４９−１６３（１９７５）南江堂；梶原、ＲＡＤＩＯＩＳＯＴＯＰＥＳ，４１，４５−４８（１９９２）等）。
本発明の胃内ｐＨ測定用製剤は、上記の同位元素標識化合物又はそれを含む組成物をｐＨ依存溶解性の基剤で被覆することによって調製されるものである。
すなわち、ｐＨ依存溶解性基剤の内部に含まれる前述の化合物は、それ単体であってもよいし、またその他の成分として例えば乳糖，白糖，塩化ナトリウム，ブドウ糖，尿素，デンプン，炭酸カルシウム，カオリン，結晶セルロース，ケイ酸等の賦形剤；単シロップ，ブドウ糖液，デンプン液，ゼラチン溶液，カルボキシメチルセルロース，セラック，メチルセルロース，リン酸カリウム，ポリビニルピロリドン等の結合剤；乾燥デンプン，アルギン酸ナトリウム，カンテン末，ラミナラン末、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類，ラウリル硫酸ナトリウム，ステアリン酸モノグリセリド，デンプン，乳糖等の崩壊剤；第４級アンモニウム塩基，ラウリル硫酸ナトリウム等の吸収促進剤；グリセリン，デンプン等の保湿剤；精製タルク，ステアリン酸塩，ホウ酸末，ポリエチレングリコール等の滑沢剤；その他の添加剤（例えば、矯臭剤、矯味剤、安定化剤等）等を配合して調製される組成物であってもよい。
ｐＨ依存溶解性の基剤による被覆の態様は、胃内ｐＨ測定用製剤を被験者に経口投与した場合に、被験者の生体内ｐＨに依存してまず基剤が溶解し、次いでその溶解に伴って若しくは溶解後に、上記同位元素標識化合物が溶解するように設計されたものであれば、特に制限はされない。かかる被覆態様としては、例えば粉末状、顆粒状、錠剤形、丸剤形等の種々の形状に調製された同位体標識化合物またはそれを含有する組成物（以下、これらを総称して「標識化合物含有物」という）の各形状物の表面を基剤でコーティングしてなる皮膜剤の態様、粉末状、顆粒状、液状、半固体状等の任意形状の標識化合物含有物をｐＨ依存溶解性基剤で形成されたカプセル基剤に包含させたカプセル剤の態様等を例示することができる。なお、これらの被覆方法は、常法に従って行うことができる。
本発明で用いられるｐＨ依存溶解性基剤としては、胃溶性基剤及び腸溶性基剤が挙げられる。
胃溶性基剤とは、一般に健常者又は胃酸過多症の者の胃内ｐＨに認められる酸性状態、具体的にはｐＨ５以下で溶解する基剤をいい、具体的にはアミノアクリルメタクリレートコポリマーＥ（商品名：オイドラギットＥ１００、レームファルマ（株）製）等のメタクリル酸メチル・メタクリル酸ブチル・メタクリル酸ジメチルアミノエチル共重合体、ポリビニルアセタールジエチルアセテート（商品名：ＡＥＡ、三共（株）製）といった酸可溶性高分子を例示することができる。
また腸溶性基剤とは、一般に低酸症、無酸症の者の胃内ｐＨに認められる弱アルカリ性状態、具体的にはｐＨ５以上で溶解する基剤をいい、具体的にはヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート（商品名：ＨＰ−５５又はＨＰ−５０、信越化学（株）製）、メタクリル酸−メタクリル酸メチルコポリマー（商品名：オイドラギットＳ１００、レームファルマ（株）製）等のアクリル酸コポリマー又はメタクリル酸コポリマー、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート（商品名：ＡＱＯＡＴ、信越化学（株）製）、カルボキシメチルエチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、セルロースアセテートフタレート等の腸溶製高分子を例示することができる。
本発明の胃内ｐＨ測定用製剤は、目的用途に応じた溶解挙動を示すように設計される。例えば、胃酸過多症の診断・判定に使用する場合は、ｐＨ依存溶解性基剤としてｐＨ４以下で溶解する胃溶性基剤を用いて製剤化することが好ましい。かかる胃溶性基剤としては、好適にはアミノアクリルメタクリレートコポリマーＥを例示することができる。この製剤を被験者に投与した場合、健常者に投与した場合の標識ＣＯ２ガスの排泄挙動を基準とし、それよりも速やかに呼気中に標識ＣＯ２ガスが排泄され場合は、胃酸過多症と診断することができる。
また低酸症又は無酸症の診断・判定に使用する場合は、ｐＨ依存溶解性基剤としてｐＨ６以上で溶解する腸溶性基剤を用いて製剤化することが好ましい。かかる腸溶性基剤としては、好適にはヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート（商品名：ＨＰ−５５、信越化学（株）製）を例示することができる。この製剤を被験者に投与した場合、健常者に投与した場合の標識ＣＯ２ガスの排泄挙動を基準とし、それよりも速やかに呼気中に標識ＣＯ２ガスが出現する場合は、低酸症又は無酸症と診断することができる。
また、ｐＨ依存性の異なる２種類の基剤を用いて、各々異なる同位元素で標識された化合物を被覆して調製された２種類の製剤を組み合わせて用いることにより、より正確に胃内ｐＨを測定することができる。
例えば、１３Ｃで標識されたＣ化合物（例えばＮａＨ１３ＣＯ３）を主原料として含む組成物を胃溶性基剤で被覆した胃溶性製剤と、微量の１４Ｃ化合物（例えばＮａＨ１４ＣＯ３）を含むＣ化合物含有組成物を腸溶性基剤で被覆した腸溶性製剤を、組み合わせて同時に経口投与すると、ある一定時間後、胃内ｐＨが低酸症傾向にある場合には、１４Ｃ化合物のみが体外又は体液中に放出されて検出され、一方胃内ｐＨが高酸症傾向にある場合には、１３Ｃ化合物のみが体外又は体液中に放出されて検出される。また、胃内の酸度が中程度であれば、１３Ｃ化合物及び１４Ｃ化合物のいずれも検出されない。
このように、ｐＨ依存性の異なる２種類の基剤で各々異なる同位元素で標識された化合物またはその組成物を被覆してなる２種類の製剤を組み合わせて用いることによって、２種の同位元素標識化合物（例えば、上記の場合１３Ｃ化合物と１４Ｃ化合物）の呼気中への排出挙動の違いにより、胃内ｐＨが酸性傾向であるのかアルカリ性傾向であるのか、またその中間であるのかを具体的に測定することができる。
さらに、尿排泄試験と呼気試験とを組み合わせることによっても胃内ｐＨを測定することが可能である。すなわち、胃溶性ビタミンＢ２製剤と例えば本発明の腸溶性１３Ｃ化合物製剤を同時に経口投与することにより、尿中のビタミンＢ２濃度と呼気中の１３ＣＯ２の量を測定することにより、総合的に胃内ｐＨを評価することができる。
本発明のｐＨ測定用製剤の形態は、固形状であれば特に制限されず、錠剤、丸剤、顆粒剤、粉末剤、またはカプセル剤のいずれでもよい。また、カプセル剤の場合、カプセル基剤がｐＨ依存溶解性基剤からなるものであれば、内部に収容する医薬組成物の形態は特に制限されず、液状や半液状のものであっても、また顆粒や粉末などの固体状のものであってもよい。
本発明のｐＨ測定用製剤に含まれる標識化合物含有物の量は、特に制限されないが、服用のしやすさの観点から、通常単位投与あたり１〜５０００ｍｇ、好ましくは１０〜５００ｍｇの範囲から適宜選択することができる。
また、本発明のｐＨ測定用製剤に含まれる同位元素標識化合物の割合は、使用する同位元素の種類によっても異なるが、非放射性同位元素を用いる場合は通常１〜２０００ｍｇ、好ましくは１０〜２００ｍｇ；放射性同位元素を用いる場合は通常０．１〜１０μＣｉ、好ましくは０．５〜４μＣｉの範囲から適宜選択することが好ましい。
さらに標識化合物含有物の被覆に使用するｐＨ依存溶解性基剤の配合割合としては、標識化合物含有物１００重量部に対して５〜１００重量部、好ましくは３０〜５０重量部の割合を例示することができる。
（２）胃内ｐＨ測定法
本発明はまた、前述する胃内ｐＨ測定用製剤を用いる胃内ｐＨ測定法である。胃内ｐＨの測定は、同位体標識化合物を含む本発明の胃内ｐＨ測定用製剤を動物やヒトなどの被験者に経口投与し、呼気、尿、便、血液またはその他の体液、好ましくは呼気、尿、便等の生体サンプル、より好ましくは呼気を採取し、該採取した生体サンプルに排泄された標識物の量を投与前の生体サンプル中の量と比較してその体内若しくは排泄挙動を調べ、該挙動を標準コントロールと比較検討することによって行うことができる。なお、標準コントロールとしては、制限されないが、例えば従来公知の胃内ｐＨ測定法（ＧＡ−Ｔｅｓｔ：Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｄｙｎ．，７，６５６−６６４（１９８４）；Ｄｉｇｅｓｔｉｖｅ  Ｄｉｓｅａｓｅ  ａｎｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｖｏｌ．４２，Ｎｏ．１１（１９９７））で測定した胃内ｐＨと本発明の方法で測定した標識物の体内若しくは排泄挙動との間で一定の相関関係を調べて標準化したものを用いることができる。
例えば、採取生体サンプルとして呼気を用い、同位元素として１３Ｃを用いる場合は、常法の１３Ｃ呼気検査法（梶原、ＲＡＤＩＯＩＳＯＴＯＰＥＳ，４１，４５−４８（１９９２）；梶原ら、ＲＡＤＩＯＩＳＯＴＯＰＥＳ，４１，３３１−３３４（１９９２）など）に従って、本発明の胃内ｐＨ測定用製剤を被験者に経口投与した後、経時的に呼気を採取して、呼気中に排出される１３ＣＯ２量を１３ＣＯ２／１２ＣＯ２量（δ１３Ｃ値）として、それを投与前の基準１３ＣＯ２／１２ＣＯ２量（δ１３Ｃ値）と経時的に比較してその経時的な挙動を測定し、該挙動を標準コントロールと比較することによって、被験者の胃内ｐＨの傾向を評価することができる。
本発明の胃内ｐＨ測定用製剤は、同位元素標識化合物として炭酸若しくは炭酸水素の塩（アルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩、アンモニウム塩など）のように、溶解して炭酸イオン又は重炭酸イオンを生じる化合物を用いる場合は吸収や代謝などの生理的な要因を受けにくいため、胃内のｐＨを正確に反映して測定することができる。また、胃内ｐＨの評価は、本発明のｐＨ測定用製剤を１回のみならず数回繰り返して行うことにより、またｐＨ依存溶解性基剤としてｐＨ依存溶解性の異なる被覆基剤（胃溶性基剤、腸溶性基剤）を用いて調製した製剤を複数組み合わせて行い、両者の結果を比較することにより、より一層高い精度で正確に行うことができる。
採取生体サンプル中に含まれる標識物の測定・分析は、標識に使用する同位元素が放射性か非放射性かによって異なるが、液体シンチレーションカウンター法、質量分析法、赤外線分析法、発光分析法、磁気共鳴スペクトル法等といった一般に使用される分析手法を用いて行うことができる。好ましくは測定精度の点から赤外分光分析法及び質量分析法である。
本発明の胃内ｐＨ測定用製剤の投与方法並びに投与時期は特に制限はされない。好ましくは、食餌の影響を受けない空腹時での投与である。
本発明の胃内ｐＨ測定用製剤の投与単位形態中に配合されるべき同位元素標識化合物の量は、測定対象サンプル及び用いる同位元素や同位元素標識化合物の種類等によって異なり、一概に定めることができず、ケースに応じて適宜調節設定することができる。例えば、同位元素標識化合物として１３Ｃで標識されてなる炭酸水素ナトリウム（ＮａＨ１３ＣＯ２）を用い、呼気テストによって測定する場合、単位投与あたりの胃内ｐＨ測定用製剤には炭酸水素ナトリウム（ＮａＨ１３ＣＯ２）を１〜２０００ｍｇ、好ましくは１０〜２００ｍｇの範囲で含むことが望ましい。
生体に投与された製剤は、生体内のｐＨの影響によって、まず製剤表面の被覆基剤が溶解し、次いで内部の同位元素標識化合物が溶出し始める。ここで、例えば同位元素標識化合物として溶解後速やかに呼気中に標識炭酸ガスとして現れる、例えばＮａＨ１３ＣＯ３を用いて、それを一般に胃内ｐＨで溶解する胃溶性基剤で被覆してなる製剤を該被験者に投与した場合、胃内で胃溶性基剤が溶解するに伴って標識化合物ＮａＨ１３ＣＯ３が溶出し、その溶解に伴って順次呼気中に標識炭酸ガス１３ＣＯ２が排泄される。
呼気中の１３ＣＯ２ガスの排泄挙動（具体的には、例えば呼気中に排泄される炭酸ガス１２ＣＯ２あたりの１３ＣＯ２ガスの割合［１３ＣＯ２／１２ＣＯ２］として示される）は、被験者の胃内ｐＨに応じて特有の１３ＣＯ２ガス排泄挙動を示す。例えば、上記の胃溶性基剤で被覆した製剤を用いた場合、胃酸過多症の患者のように胃内ｐＨが低下している者は、この１３ＣＯ２ガス排泄挙動が胃内ｐＨが正常な人に比して速い傾向があり、一方、低酸症若しくは無酸症の患者のように胃内ｐＨが上昇している者は、この１３ＣＯ２ガス排泄挙動が胃内ｐＨが正常な人に比して遅い傾向がある。
また、腸溶性基剤で被覆した製剤を用いた場合、胃酸過多症患者のように胃内ｐＨが低下している者は、１３ＣＯ２ガス排泄挙動が胃内ｐＨが正常な人に比して遅い傾向があり、一方、低酸症若しくは無酸症患者のように胃内ｐＨが上昇している者は、この１３ＣＯ２ガス排泄挙動が速い傾向がある。
従って、本発明の胃内ｐＨ測定用製剤によれば、経口投与後、経時的に１３ＣＯ２ガス量、具体的には炭酸ガス△（‰）値（投与後の各採取時における呼気中１３ＣＯ２／１２ＣＯ２濃度比（δ１３Ｃ値）と投与前の呼気中のδ１３Ｃ値との差）を測定することにより、胃内ｐＨの低下または上昇の有無を評価することができる。すなわち、本発明の胃内ｐＨ測定方法は、胃内ｐＨの低下または上昇の有無を診断評価する方法と言い換えることができる。
また、標識化合物が、例えば酢酸等の有機酸やグリシン等のアミノ酸である場合は、胃から排出された後に腸内で溶解、吸収されて肝代謝された後に標識炭酸ガスとして呼気中に現れるため、その検出（標識炭酸ガス１３ＣＯ２の呼気排泄）は上記の場合に比較して遅くなるが、その律速段階は被覆基剤の溶解であるため、上記ＮａＨ１３ＣＯ３等の化合物と同様に、胃内ｐＨの低下／上昇の有無を評価することが可能である。この場合、例えば、標識化合物として酢酸（ＣＨ３１３ＣＯＯＨ）を用いて呼気テストによって測定する場合、単位投与あたりの製剤には酢酸を１〜２０００ｍｇ、好ましくは１０〜２００ｍｇの範囲で含むことが望ましい。
本発明の胃内ｐＨ測定法は、長時間にわたって被験者を拘束することなく数少ない呼気採取によって非侵襲的に、簡単に胃内ｐＨを評価診断できる方法である点で有用である。また、本発明の胃内ｐＨ測定方法を利用することによって、胃内ｐＨに関わる疾患に対する治療効果、または胃内ｐＨに関わる薬物についてその薬効若しくは治療効果を評価することが可能である。具体的には、当該評価は、被験者に薬物を投与する前と投与した後のそれぞれにおいて、本発明の胃内ｐＨ測定用製剤を用いて胃内ｐＨを測定し、両者を比較することによって実施することができる。これによって投与薬物の薬効を評価したり、被験者に対する個々の薬物の治療効果を評価することも可能であり、その結果、個々の被験者に適合した薬物を選別する手段としても利用することができる。なお、胃ｐＨに関わる薬物としては、プロトンポンプ阻害剤（ＰＰＩ）またはＨ２ブロッカーなどのように、胃内ｐＨを上昇させる作用を有する薬物を挙げることができる。
実施例
以下に実施例を掲げて、本発明をより一層明らかにする。ただし、本発明はこれらの実施例によって何ら制限されるものではない。
実施例１
（１）胃内ｐＨ測定用製剤（カプセル剤）の調製
ＮａＨ１３ＣＯ３（１００ｍｇ）を腸溶性カプセル基剤（日本薬局方１号カプセル（６０ｍｇ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、商品名：ＨＰ−５５、信越化学（株）製（ｐＨ５．５以上で溶解））に充填し、腸溶性の胃内ｐＨ測定用製剤（カプセル剤）を調製した。これを用いて、下記の実験を行った。
（２）動物実験
上記で調製した腸溶性カプセル剤を人為的に正常胃酸状態または低酸症状態に調整したビーグル犬に投与して、１３ＣＯ２の排泄挙動を調べた。実験は具体的には以下のようにして行った。
実験には絶食させたビーグル犬４頭を繰り返し用いた。
正常胃酸モデル動物は、本発明のカプセル剤を投与する前に予め呼気を採取しておき、その後、０．１Ｎ  ＨＣｌを２０ｍｌ強制投与することによって作成した。次いで、この正常胃酸モデル動物に、直ちにカプセル剤を強制的に経口投与し、経時的に呼気を採取した。
一方、低酸症モデル動物は、本発明のカプセル剤を投与する前に予め呼気を採取しておき、その後、Ｈ２アンタゴニスト（塩酸ファモチジン１０ｍｇ）を強制投与することによって作成した。次いで、Ｈ２アンタゴニスト投与１時間後に、この低酸症モデル動物に、本発明のカプセル剤を強制的に経口投与し、経時的に呼気を採取した。
（３）胃内ｐＨの測定
ＧＣ−ＭＳ（ＡＢＣＡ−Ｇ、Ｅｕｒｏｐａ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社製）を用い、本発明のカプセル剤投与前と、投与後の各呼気採取ポイントにおける呼気中１３ＣＯ２／１２ＣＯ２濃度比（δ１３Ｃ値）を測定し、製剤投与後の各採取ポイントにおけるδ１３Ｃ値と製剤投与前のδ１３Ｃ値の差からΔ値（‰）（製剤投与後のδ１３Ｃ値−製剤投与前のδ１３Ｃ値）を算出した。
（４）結果
図１に正常酸モデル動物（ｎ＝４、−■−）及び低酸症モデル動物（ｎ＝４、−◆−）のそれぞれの平均呼気排泄パターンを、投与後の経過時間（ｈ）を横軸に、またΔ値（‰）を縦軸として示す。図からわかるように、低酸症モデル動物の場合、１時間でピーク到達時間（Ｔｍａｘ）を迎えたのに対し、正常酸モデル動物の場合では２．７時間にＴｍａｘを迎え、低酸症モデル動物と正常酸モデル動物との間で１３ＣＯ２呼気排出挙動に大きな差があることがわかった。この結果から、本発明の胃内ｐＨ測定用製剤によれば、胃内のｐＨのモニタリングが可能であり、特に胃内における低酸傾向と正常酸傾向、ひいては胃酸過多傾向を有意な差をもって識別評価できることが判明した。
実施例２
（１）胃内ｐＨ測定用製剤（カプセル剤）の調製
ＮａＨ１３ＣＯ３（１００ｍｇ）を腸溶性カプセル基剤（日本薬局方１号カプセル（６０ｍｇ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、商品名：ＨＰ−５５、信越化学（株）製（ｐＨ５．５以上で溶解））に充填し、腸溶性の胃内ｐＨ測定用製剤（カプセル剤１）を調製した。またＮａＨ１３ＣＯ３（１００ｍｇ）を同様にして胃溶性カプセル基剤（日本薬局方１号カプセル（６０ｍｇ）、アミノアクリルメタクリレートコポリマーＥ、商品名：オイドラギッドＥ１００、レームファルマ（株）製（ｐＨ５以下で溶解））に充填し、胃溶性の胃内ｐＨ測定用製剤（カプセル剤２）を調製した。これらを用いて、下記の実験を行った。
（２）動物実験
実験には絶食させたビーグル犬４頭を胃内ｐＨを調整することなく用いた。上記で調製したカプセル剤１及びカプセル剤２をそれぞれ上記のビーグル犬（各ｎ＝４）に投与して、呼気中への１３ＣＯ２の排泄挙動を調べ、ビーグル犬４頭の胃内ｐＨを評価した。
具体的には、本発明の製剤を投与する前に予め呼気を採取し、次いでカプセル剤１を強制的に経口投与し、経時的に呼気を採取した。それから一週間の休薬期間を置いて、上記と同様にして本発明の製剤を投与する前に予め呼気を採取し、次いでカプセル剤２を強制的に経口投与し、経時的に呼気を採取した。
（３）胃内ｐＨの測定
ＧＣ−ＭＳ（ＡＢＣＡ−Ｇ、Ｅｕｒｏｐａ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社製）を用い、カプセル剤投与前と、投与後の各呼気採取ポイントにおける呼気中１３ＣＯ２／１２ＣＯ２濃度比（δ１３Ｃ値）を測定し、製剤投与後の各採取ポイントにおけるδ１３Ｃ値と製剤投与前のδ１３Ｃ値の差からΔ値（‰）（製剤投与後のδ１３Ｃ値−製剤投与前のδ１３Ｃ値）を算出した。
（４）結果
カプセル剤１投与後のビーグル犬４頭の呼気排泄パターンを図２に、カプセル剤２投与後のビーグル犬４頭の呼気排泄パターンを図３に示す。図２からわかるように、腸溶性カプセル剤を投与した場合、ビーグル犬Ｎｏ．２（─■─），３（─▲─）及び４（─●─）についてはピーク到達時間（Ｔｍａｘ）が１〜１．３時間と早かったが、ビーグル犬Ｎｏ．１（─◆─）のＴｍａｘは２．３時間と遅かった。このことから、ビーグル犬Ｎｏ．２，３及び４は胃内ｐＨが高く（低酸症傾向）、Ｎｏ．１のビーグル犬は胃内ｐＨが低いことが示唆された。
一方、図３からカプセル剤１投与においては、ビーグル犬Ｎｏ．１（─◆─）の呼気反応だけが認められ、ビーグル犬Ｎｏ．２，３及び４については呼気反応が認められなかった。このことから、Ｎｏ．１のビーグル犬は胃内ｐＨが低く、ビーグル犬Ｎｏ．２，３及び４は胃内ｐＨが高い（低酸症傾向）ことが示唆され、上記カプセル剤２投与によって得られた結果を裏付ける結果が得られた。
この結果から、本発明の胃内ｐＨ測定用製剤によれば、胃内のｐＨのモニタリングが可能であり、低酸症傾向と正常酸との別、ひいては胃酸過多症の別を識別判定することが可能であることが判明した。
処方例１  カプセル剤
＜標識化合物含有物＞
炭酸水素ナトリウム（ＮａＨ１３ＣＯ３）                １００ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム                                  １ｍｇ
＜胃溶性カプセル＞
アミノアクリルメタクリレートコポリマーＥ
（オイドラギッドＥ１００、レームファルマ（株）製）      ５０ｍｇ
上記標識化合物含有物を上記胃溶解性カプセルに充填して本発明のｐＨ測定用製剤を作成した。
処方例２    錠剤
＜標識化合物含有物＞
炭酸水素ナトリウム（ＮａＨ１３ＣＯ３）                １００ｍｇ
乳糖                                                    ４０ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム                                  ２ｍｇ
＜胃溶性基剤＞
アミノアクリルメタクリレートコポリマーＥ
（オイドラギッドＥ１００、レームファルマ（株）製）      ４０ｍｇ
上記標識化合物含有物を核錠子として、これを上記被覆胃溶解性基剤で常法に従ってコーティングすることによって本発明のｐＨ測定用製剤を作成した。
処方例３  顆粒剤
＜標識化合物含有物＞
炭酸水素ナトリウム（ＮａＨ１３ＣＯ３）                １００ｍｇ
精製白糖（粉末）                                      １５０ｍｇ
コーンスターチ                                        １００ｍｇ
結晶セルロース（アビセルＰＨ−３０１：旭化成）        １００ｍｇ
カルメロースカルシウム（ＥＣＧ−５０５：ニチリン化学）  ５０ｍｇ
ヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ−Ｌ：信越化学）  ７．５ｍｇ
精製水                                                  ７５ｍｇ
無水エタノール                                      ６７．５ｍｇ
固形分合計                                        ５０７．５ｍｇ
＜腸溶性基剤：コーティング液＞
ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート          ６．０ｍｇ
（ＨＰ−５５、信越化学製）
タルク                                                １．８ｍｇ
無水エタノール                                      ７３．８ｍｇ
精製水                                              １８．４ｍｇ
合  計                                            １００．０ｍｇ
標識化炭酸水素ナトリウム（ＮａＨ１３ＣＯ３）を主原料とし、上記＜標識化合物含有物＞の処方に従って各成分を配合し練合して、常法に従って顆粒を製造した。次いで、当該核顆粒に上記処方のコーティング液を噴霧被覆し、核顆粒１００重量部に対して、腸溶性基材であるヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートが４０重量部の割合で被覆されてなる顆粒を調製した。なお、この顆粒の平均粒径は１０００〜１４００μｍであった。
産業上の利用可能性
本発明の胃内ｐＨ測定用製剤によれば、簡単かつ精度良くヒトまたは動物の胃内のｐＨもしくｐＨの傾向（胃酸過多症、正常、低酸症、または無酸症の傾向）を測定し、評価することができる。特に呼気中に標識炭酸ガスとして排泄される標識化合物を用いて調製した胃内ｐＨ測定用製剤によれば、被験者に精神的または肉体的負担をかけず、呼気試験によって簡便に胃のｐＨまたはその傾向を測定することができる。
また、本発明の胃内ｐＨ測定用製剤及びこれを用いた胃内ｐＨ測定方法を用いることによって、被験者の胃内のｐＨの低下または上昇の有無を簡単に精度よく診断し評価することが可能である。さらに本発明の胃内ｐＨ測定用製剤及びこれを用いた胃内ｐＨ測定方法を用いることによって、胃ｐＨに関わる疾患の診断やその治療効果、また胃のｐＨに関わる薬物の薬効を直接的に簡単に評価判定することが可能である。
【図面の簡単な説明】
図１は、実施例１の結果を示す図である。すなわち本発明の腸溶性カプセルを低酸症モデル動物（図中、−◆−で示す。）及び正常酸モデル動物（図中、−■−で示す。）に投与した場合における呼気中の炭酸ガス１３ＣＯ２／１２ＣＯ２比の差（△（‰））を経時的に追跡した結果を示す。
図２は、実施例２の結果を示す図である。すなわち本発明の腸溶性カプセルを実験動物（ｎ＝４）に投与した場合において、各動物（Ｎｏ．１〜４）の呼気中の炭酸ガス１３ＣＯ２／１２ＣＯ２比の差（△（‰））を経時的に追跡した結果を示す。
図３は、実施例２の結果を示す図である。すなわち本発明の胃溶性カプセルを実験動物（ｎ＝４）に投与した場合において、各動物（Ｎｏ．１〜４）の呼気中の炭酸ガス１３ＣＯ２／１２ＣＯ２比の差（△（‰））を経時的に追跡した結果を示す。
【図１】
0004748917.tif 000002
【図２】
0004748917.tif 000003
【図３】
0004748917.tif 000004