(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式Ｉａの化合物：
【化１】
0004653950.tif 000539
[式中、
Ｒ１、Ｒ２、及びＲ５はそれぞれ独立に、Ｈ、Ｃ（＝Ｏ）Ｒ’、Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ’、Ｐ＝Ｏ（ＯＲ’）２、置換化または非置換化Ｃ１−Ｃ１８アルキル、置換化または非置換化Ｃ２−Ｃ１８アルケニル、置換化または非置換化Ｃ２−Ｃ１８アルキニル、或いは置換化または非置換化アリールから選択され；
Ｒ６及びＲ７は両方＝Ｏであり、点線はキノン環を示し、またはＲ６は−ＯＲ３であり、Ｒ３はＨ、Ｃ（＝Ｏ）Ｒ’、Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ’、置換化または非置換化Ｃ１−Ｃ１８アルキル、置換化または非置換化Ｃ２−Ｃ１８アルケニル、置換化または非置換化Ｃ２−Ｃ１８アルキニル、或いは置換化または非置換化アリールであり、Ｒ７はＨであり、点線はフェニル環を示し；
Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、Ｘ５、Ｘ６は独立に、Ｈ、ＯＨ、ＯＲ’、ＳＨ、ＳＲ’、ＳＯＲ’、ＳＯ２Ｒ’、Ｃ（＝Ｏ）Ｒ’、Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ’、ＮＯ２、ＮＨ２、ＮＨＲ’、Ｎ（Ｒ’）２、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ’、ＣＮ、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ２４アルキル、Ｃ２−Ｃ１８アルケニル、Ｃ２−Ｃ１８アルキニル、アリール、またはヘテロ芳香族から選択され；
Ｘ１は独立に、ＯＲ１、ＣＮ、（＝Ｏ）、またはＨから選択され；
Ｒ’基のそれぞれは独立に、Ｈ、ＯＨ、ＮＯ２、ＮＨ２、ＳＨ、ＣＮ、ハロゲン、Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ３、ＣＯ２Ｈ、置換化または非置換化Ｃ１−Ｃ１８アルキル、置換化または非置換化Ｃ２−Ｃ１８アルケニル、置換化または非置換化Ｃ２−Ｃ１８アルキニル、或いは置換化または非置換化アリールからなる群から選択され；
Ｒ４は、Ｃ（＝Ｏ）Ｒ’、Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ’、Ｐ＝Ｏ（ＯＲ’）２、置換化または非置換化Ｃ２−Ｃ１８アルキル、置換化または非置換化Ｃ２−Ｃ１８アルケニル、置換化または非置換化Ｃ２−Ｃ１８アルキニル、或いは置換化または非置換化アリールから選択され；
Ｒ４がＣ（＝Ｏ）Ｒ’、Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ’またはＰ＝Ｏ（ＯＲ’）２であるとき、Ｒ’はそれぞれ独立に、Ｈ、ＯＨ、ＮＯ２、ＮＨ２、ＳＨ、ＣＮ、ハロゲン、Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ３、ＣＯ２Ｈ、置換化または非置換化Ｃ２−Ｃ１８アルキル、置換化または非置換化Ｃ２−Ｃ１８アルケニル、置換化または非置換化Ｃ２−Ｃ１８アルキニル、或いは非置換化アリールからなる群から選択され；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５基が置換基を有するとき、当該置換基のそれぞれは独立に、ＯＨ、ＯＲ’、ＳＨ、ＳＲ’、ＳＯＲ’、ＳＯ２Ｒ’、Ｃ（＝Ｏ）Ｒ’、Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ’、ＮＯ２、ＮＨ２、ＮＨＲ’、Ｎ（Ｒ’）２、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ’、ＣＮ、ハロゲン、＝Ｏ、Ｃ１−Ｃ１８アルキル、Ｃ２−Ｃ１８アルケニル、Ｃ２−Ｃ１８アルキニル、アリール、または複素環から選択され；及び
Ｒ’基が置換基を有するとき、当該置換基はそれぞれ独立に、ハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、ニトロ、アジド、Ｃ１−Ｃ６アルカノイル、カルボキサミド、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１８アルキニル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、アリールオキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルキルチオ、Ｃ１−Ｃ１２アルキルスルフィニル、Ｃ１−Ｃ１２アルキルスルフォニル、Ｃ１−Ｃ１２アミノアルキル、炭環式アリール、アラルキル、及び複素環からなる群から選択される]。
【請求項２】
Ｒ６はＯＲ３であり；
Ｒ１及びＲ３は独立に、水素、Ｒ’、Ｃ（＝Ｏ）Ｒ’、またはＣ（=Ｏ）ＯＲ’から選択され、Ｒ’は、任意に置換化されたアルキルまたはアルケニルであり、任意の置換基は、ハロ、アリール、または複素環から選択され；
Ｒ２は水素、アルキル、またはＣ（＝Ｏ）ＯＲ’であり、Ｒ’はアルキルであり；
Ｒ５は水素、アルキル、またはＣ（＝Ｏ）ＯＲ’であり、Ｒ’はアルケニルであり；
Ｘ１は水素、ヒドロキシ、またはシアノであり；
Ｘ２、Ｘ４、及びＸ５は水素であり；
Ｘ３はＯＲ’であり、Ｒ’はアルキルであり；
Ｘ６は水素またはアルキルであり；
Ｒ７は水素であり；及び
点線はフェニル環を示す；
請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１は
水素；
アルキル；
Ｃ（＝Ｏ）Ｒ’[式中、Ｒ’はアルキル、ハロアルキル、複素環アルキル、アリールアルケニル、アルケニル、またはアラルキルである]；または
Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ’[式中、Ｒ’はアルキルまたはアルケニルである]
である、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ２は水素、メチル、またはアルコキシカルボニルである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ３は
水素；
アルキル；
Ｃ（＝Ｏ）Ｒ’[式中、Ｒ’はアルキル、ハロアルキル、アリールアルケニル、複素環アルキル、アルケニル、またはアラルキルである]；または
Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ’[式中、Ｒ’はアルキル、アルケニル、またはアラルキルである]
である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ４は
Ｃ（＝Ｏ）Ｒ’[式中、Ｒ’はアルキル、ハロアルキル、アラルキル、アリールアルケニル、複素環アルキルである]；または
Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ’[式中、Ｒ’はアルキル、アルケニル、アラルキルである]；
である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ５は
水素；
アルキル；または
（Ｃ＝Ｏ）ＯＲ’[式中、Ｒ’はアルケニルである]
である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８】
Ｘ１は水素、ヒドロキシ、またはシアノである、請求項１または３〜７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項９】
Ｘ２は水素である、請求項１または３〜８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｘ３はＯＲ’[式中、Ｒ’はアルキルである]である、請求項１または３〜９のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｘ４は水素である、請求項１または３〜１０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｘ５は水素である、請求項１または３〜１１のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１３】
Ｘ６は水素またはアルキルである、請求項１または３〜１２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１４】
Ｒ１はＣＯＲ’であり、Ｒ’は少なくとも４の炭素原子を有する任意に置換化されたアルキル、または任意に置換化されたアルケニルである、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１５】
Ｒ１の任意の置換基はアリールまたは複素環であり、またはＲ’は任意に保護化されたアミノ酸から由来する、請求項１４に記載の化合物。
【請求項１６】
Ｒ３は
水素；
Ｃ１−Ｃ６アルキル；
シンナモイル；
Ｃ（＝Ｏ）Ｒ’[式中、Ｒ’はＣ１−Ｃ１８アルキル、Ｃ１−Ｃ４パーフルオロアルキル、または炭素数１から６のアルキルを含むω−複素環置換アルキルである]；または
Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ’[式中、Ｒ’はＣ１−Ｃ６アルキル、ビニル、アリル、またはベンジルである]
である、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１７】
Ｒ４は
シンナモイル；
Ｃ（＝Ｏ）Ｒ’[式中、Ｒ’はＣ１２−Ｃ１８アルキル、ω−クロロもしくはパーフルオロＣ２−Ｃ４アルキル、フェネチル、または炭素数２から６のアルキルを含むω−複素環置換アルキルである]；または
Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ’[式中、Ｒ’はＣ２−Ｃ６アルキル、ビニル、またはアリルである]
である、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１８】
化学式：
【化２】
0004653950.tif 000540
【化３】
0004653950.tif 000541
【化４】
0004653950.tif 000542
【化５】
0004653950.tif 000543
で表される、請求項１に記載の化合物。
【請求項１９】
化学式：
【化６】
0004653950.tif 000544
【化７】
0004653950.tif 000545
【化８】
0004653950.tif 000546
で表される、化合物。
【請求項２０】
請求項１から１９のいずれか一項に記載の化合物と製薬学的キャリアーとを含む製薬組成物。
【請求項２１】
ガンの治療のための医薬の調製における、請求項１から１９のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、エクチナサイジン、特にエクチナサイジン７４３、ＥＴ−７４３の誘導体に関する
【背景技術】
【０００２】
Ｅｔ−７４３のようなエクチナサイジンは、海洋尾索類動物Ectinascidia turbinataから単離された非常に強力な抗腫瘍剤である。いくつかのエクチナサイジンは、特許文献及び科学文献において以前に報告されている。例えば以下のものを参照：
【０００３】
米国特許第５，２５６，６６３号は、熱帯海洋無脊椎動物、Ectinascidia turbinataから抽出され、エクチナサイジンと命名された物質を含む製薬組成物、及び哺乳動物における抗菌剤、抗ウイルス剤、及び／または抗腫瘍剤としてのそのような組成物の使用を記載している。
【０００４】
米国特許第５，０８９，２７３号は、熱帯海洋無脊椎動物、Ectinascidia turbinataから抽出され、エクチナサイジン７２９、７４３、７４５、７５９Ａ、７５９Ｂ、及び７７０と命名された物質の新規な組成物を記載している。これらの化合物は、哺乳動物における抗菌剤及び／または抗腫瘍剤として有用である。
【０００５】
米国特許第５，４７８，９３２号は、カリブ海尾索類動物Ectinascidia turbinataから単離されたエクチナサイジンを記載し、それはＰ３８８リンパ腫、Ｂ１６メラノーマ、Ｍ５０７６卵巣サルコーマ、ルイス肺カルシノーマ、並びにＬＸ−１ヒト肺及びＭＸ−１ヒト乳カルシノーマ移植片に対してin vivo保護を提供する。
【０００６】
米国特許第５，６５４，４２６号は、カリブ海尾索類動物Ectinascidia turbinataから単離されたいくつかのエクチナサイジンを記載し、それはＰ３８８リンパ腫、Ｂ１６メラノーマ、Ｍ５０７６卵巣サルコーマ、ルイス肺カルシノーマ、並びにＬＸ−１ヒト肺及びＭＸ−１ヒト乳カルシノーマ移植片に対してin vivo保護を提供する。
【０００７】
米国特許第５，７２１，３６２号は、エクチナサイジン化合物及び関連構造体の形成のための合成方法を記載している。
【０００８】
米国特許第６，１２４，２９３号は、半合成化エクチナサイジンに関する。
【０００９】
ＷＯ９８４６０８０は、求核置換化及びＮ−オキシドエクチナサイジンを提供する。
【００１０】
ＷＯ９９５８１２５は、エクチナサイジン代謝産物に関する。
【００１１】
ＷＯ００６９８６２は、シアノサフラシンＢからのエクチナサイジン化合物の合成を記載している。
【００１２】
ＷＯ０１７７１１５、ＷＯ０１８７８９４、及びＷＯ０１８７８９５は、エクチナサイジンシリーズの新規な合成化合物、それらの合成、及び生物学的特性を記載している。
【００１３】
さらに以下の文献を参照：
〔参考文献〕
0004653950.tif 000002
0004653950.tif 000003
【特許文献１】米国特許第５，２５６，６６３号
【特許文献２】米国特許第５，０８９，２７３号
【特許文献３】米国特許第５，４７８，９３２号
【特許文献４】米国特許第５，６５４，４２６号
【特許文献５】米国特許第５，７２１，３６２号
【特許文献６】米国特許第６，１２４，２９３号
【特許文献７】ＷＯ９８４６０８０
【特許文献８】ＷＯ００６９８６２
【特許文献９】ＷＯ０１７７１１５
【特許文献１０】ＷＯ０１８７８９４
【特許文献１１】ＷＯ０１８７８９５
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【００１４】
本発明は、一般式Ｉａの化合物に関する：
【化１】
0004653950.tif 000004
[式中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ５によって規定される置換基はそれぞれ独立に、Ｈ、Ｃ（＝Ｏ）Ｒ’、Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ’、置換化または非置換化Ｃ１−Ｃ１８アルキル、置換化または非置換化Ｃ２−Ｃ１８アルケニル、置換化または非置換化Ｃ２−Ｃ１８アルキニル、置換化または非置換化アリールから選択され；
Ｒ６及びＲ７は両方＝Ｏであり、点線はキノン環を示し、またはＲ６は−ＯＲ３であり、Ｒ３はＨ、Ｃ（＝Ｏ）Ｒ’、Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ’、置換化または非置換化Ｃ１−Ｃ１８アルキル、置換化または非置換化Ｃ２−Ｃ１８アルケニル、置換化または非置換化Ｃ２−Ｃ１８アルキニル、置換化または非置換化アリールであり、Ｒ７はＨであり、点線はフェニル環を示し；
Ｒ’基のそれぞれは独立に、Ｈ、ＯＨ、ＮＯ２、ＮＨ２、ＳＨ、ＣＮ、ハロゲン、＝Ｏ、Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ３、ＣＯ２Ｈ、置換化または非置換化Ｃ１−Ｃ１８アルキル、置換化または非置換化Ｃ２−Ｃ１８アルケニル、置換化または非置換化Ｃ２−Ｃ１８アルキニル、置換化または非置換化アリールからなる群から選択され；
Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、Ｘ５、Ｘ６についての置換基は独立に、Ｈ、ＯＨ、ＯＲ’、ＳＨ、ＳＲ’、ＳＯＲ’、ＳＯ２Ｒ’、Ｃ（＝Ｏ）Ｒ’、Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ’、ＮＯ２、ＮＨ２、ＮＨＲ’、Ｎ（Ｒ’）２、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ’、ＣＮ、ハロゲン、＝Ｏ、置換化または非置換化Ｃ１−Ｃ２４アルキル、置換化または非置換化Ｃ２−Ｃ１８アルケニル、置換化または非置換化Ｃ２−Ｃ１８アルキニル、置換化または非置換化アリール、置換化または非置換化へテロ芳香族から選択され；
Ｘ１は独立に、ＯＲ１、ＣＮ、（＝Ｏ）、またはＨから選択され；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５についての置換基はそれぞれ独立に、Ｈ、ＯＨ、ＯＲ’、ＳＨ、ＳＲ’、ＳＯＲ’、ＳＯ２Ｒ’、Ｃ（＝Ｏ）Ｒ’、Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ’、ＮＯ２、ＮＨ２、ＮＨＲ’、Ｎ（Ｒ’）２、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ’、ＣＮ、ハロゲン、＝Ｏ、’、置換化または非置換化Ｃ１−Ｃ１８アルキル、置換化または非置換化Ｃ２−Ｃ１８アルケニル、置換化または非置換化Ｃ２−Ｃ１８アルキニル、置換化または非置換化アリール、置換化または非置換化複素環からなる群から選択される]。
【００１５】
とりわけ本発明は、式（Ｉ）の化合物を提供する：
【化２】
0004653950.tif 000005
[式中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ５によって規定される置換基はそれぞれ独立に、Ｈ、Ｃ（＝Ｏ）Ｒ’、Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ’、置換化または非置換化Ｃ１−Ｃ１８アルキル、置換化または非置換化Ｃ２−Ｃ１８アルケニル、置換化または非置換化Ｃ２−Ｃ１８アルキニル、置換化または非置換化アリール、またはＰ＝Ｏ（ＯＲ’）２から選択され；
Ｒ３はＨ、Ｃ（＝Ｏ）Ｒ’、Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ’、置換化または非置換化Ｃ１−Ｃ１８アルキル、置換化または非置換化Ｃ２−Ｃ１８アルケニル、置換化または非置換化Ｃ２−Ｃ１８アルキニル、置換化または非置換化アリールであり、Ｒ７はＨであり、点線はフェニル環を示し；
Ｒ’基のそれぞれは独立に、Ｈ、ＯＨ、ＮＯ２、ＮＨ２、ＳＨ、ＣＮ、ハロゲン、＝Ｏ、Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ３、アルキルオキシカルボニル、ＣＯ２Ｈ、置換化または非置換化Ｃ１−Ｃ１８アルキル、置換化または非置換化Ｃ２−Ｃ１８アルケニル、置換化または非置換化Ｃ２−Ｃ１８アルキニル、置換化または非置換化アリールからなる群から選択され；
Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、Ｘ５、Ｘ６についての置換基は独立に、Ｈ，ＯＨ、ＯＲ’、ＳＨ、ＳＲ’、ＳＯＲ’、ＳＯ２Ｒ’、Ｃ（＝Ｏ）Ｒ’、Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ’、ＮＯ２、ＮＨ２、ＮＨＲ’、Ｎ（Ｒ’）２、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ’、ＣＮ、ハロゲン、＝Ｏ、’、置換化または非置換化Ｃ１−Ｃ１８アルキル、置換化または非置換化Ｃ２−Ｃ１８アルケニル、置換化または非置換化Ｃ２−Ｃ１８アルキニル、置換化または非置換化アリール、置換化または非置換化へテロ芳香族から選択され；
Ｘ１は独立に、ＯＲ１、ＣＮ、（＝Ｏ）、またはＨから選択され；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５についての置換基はそれぞれ独立に、Ｈ，ＯＨ、ＯＲ’、ＳＨ、ＳＲ’、ＳＯＲ’、ＳＯ２Ｒ’、Ｃ（＝Ｏ）Ｒ’、Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ’、ＮＯ２、ＮＨ２、ＮＨＲ’、Ｎ（Ｒ’）２、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ’、ＣＮ、ハロゲン、＝Ｏ、’、置換化または非置換化Ｃ１−Ｃ１８アルキル、置換化または非置換化Ｃ２−Ｃ１８アルケニル、置換化または非置換化Ｃ２−Ｃ１８アルキニル、置換化または非置換化アリール、置換化または非置換化へテロ芳香族からなる群から選択される]。
【００１６】
一つの特徴点では、本発明は、式（Ｉ）の化合物を提供する：
[式中、
Ｒ１、Ｒ３、及びＲ４は独立に、ハロゲン、Ｒ’、Ｃ＝ＯＲ’、またはＣＯＯＲ’から選択され、Ｒ’は、任意に置換化されたアルキルまたはアルケニルであり、任意の置換基は、ハロ、アミノ酸から由来するアミノを含むアミノ、アリール、または複素環から選択され；
Ｒ２は水素、アルキル、またはＣ（＝Ｏ）ＯＲ’であり、Ｒ’はアルキルであり；
Ｒ５は水素、アルキル、またはＣ（＝Ｏ）ＯＲ’であり、Ｒ’はアルキレンであり、
Ｘ１は水素、ヒドロキシ、またはシアノであり；
Ｘ２、Ｘ４、及びＸ５は水素であり；
Ｘ３はＯＲ’であり、Ｒ’はアルキルであり；及び
Ｘ６は水素またはアルキルである]。
【００１７】
本発明の化合物における適切なハロゲン置換基は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、及びＩを含む。
【００１８】
アルキル基は好ましくは、１から２４の炭素原子を有する、一つの特に好ましいクラスのアルキル基は、１から約１２の炭素原子を有し、またさらに好ましくは１から約８の炭素原子を有し、またより好ましくは１から約６の炭素原子を有し、最も好ましくは１、２、３、または４の炭素原子を有する。たのより好ましいクラスのアルキル基は、１２から約２４の炭素原子を有し、またより好ましくは１２から約１８の炭素原子を有し、最も好ましくは１３、１５、または１７の炭素原子を有する。メチル、エチル、及びイソプロピルを含むプロピルが、本発明の化合物における特に好ましいアルキル基である。ここで使用されるような、用語「アルキル」は、他に記載がなければ、環状及び非環状基の両者を指すが、環状基は少なくとも３の炭素環数を含むであろう。
【００１９】
本発明の化合物における好ましいアルケニル及びアルキニル基は、意図対状の不飽和結合を有し、２から約１２の炭素原子、より好ましくは２から約８の炭素原子、さらにより好ましくは２から約６の炭素原子、さらにより好ましくは１、２、３、または４の炭素原子を有する。ここで使用される用語「アルケニル」及び「アルキニル」は、環状及び非環状基の両者を指すが、直鎖状または分枝状非環状基が一般的により好ましい。
【００２０】
本発明の化合物における好ましいアルコキシ基は、一つ以上の酸素結合を有し、１から約１２の炭素原子、より好ましくは１から約８の炭素原子、さらにより好ましくは１から約６の炭素原子、最も好ましくは１、２、３、または４の炭素原子を有する基を含む。
【００２１】
本発明の化合物における好ましいアルキルチオ基は、一つ以上のチオエーテル結合を有し、１から約１２の炭素原子、より好ましくは１から約８の炭素原子、さらにより好ましくは１から約６の炭素原子を有する。１、２、３、または４の炭素原子を有するアルキルチオ基が特に好ましい。
【００２２】
本発明の化合物における好ましいアルキルスルフィニル基は、一つ以上のスルホキシド（ＳＯ）基を有し、１から約１２の炭素原子、より好ましくは１から約８の炭素原子、さらにより好ましくは１から約６の炭素原子を有するものを含む。１、２、３、または４の炭素原子を有するアルキルスルフィニル基が特に好ましい。
【００２３】
本発明の化合物における好ましいアルキルスルホニル基は、一つ以上のスルホニル（ＳＯ２）基を有し、１から約１２の炭素原子、より好ましくは１から約８の炭素原子、さらにより好ましくは１から約６の炭素原子を有するものを含む。１、２、３、または４の炭素原子を有するアルキルスルホニル基が特に好ましい。
【００２４】
好ましいアミノアルキル基は、一つ以上の第一級、第二級、及び／または第三級アミン基を有し、１から約１２の炭素原子、より好ましくは１から約８の炭素原子、さらにより好ましくは１から約６の炭素原子、さらにまたより好ましくは１、２、３、または４の炭素原子を有する基を含む。第二級及び第三級アミン基は、第一級アミン基より一般的に好ましい。
【００２５】
適切な複素環基は、ヘテロ芳香族基及びヘテロ脂環式基を含む。本発明の化合物における適切なヘテロ芳香族基は、Ｎ、Ｏ、またはＳ原子から選択される一つ、二つ、または三つのヘテロ原子を含み、例えば８−クマリニルを含むクマリニル、８−キノリニルを含むキノリニル、ピリジル、ピラジニル、ピリミジル、フリル、ピロリル、チエニル、チアゾリル、オキサゾリル、イミダゾリル、インドリル、ベンゾフラニル、及びベンゾチアゾールを含む。本発明の化合物における適切なヘテロ脂環式基は、Ｎ、Ｏ、及びＳ原子から選択される一つ、二つ、または三つのヘテロ原子を含み、例えばテトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、ピペリジニル、モルホリノ、及びピロリジニル基を含む。
【００２６】
本発明の化合物における適切な炭環式アリール基は、別個の及び／または融合したアリール基を含む複数の環化合物を含む、単一及び複数の環化合物を含む。典型的な炭環式アリール基は、１から３の別個のまたは融合した環を含み、６から約１８の炭素環原子を含む。特に好ましい炭環式アリール基は、２−置換化フェニル、３−置換化フェニル、２，３−置換化フェニル、２，５−置換化フェニル、２，３，５−置換化及び２，４，５−置換化フェニルのような置換化フェニルを含むフェニルを含み、一つ以上のフェニル置換基は、ハロゲン、シアノ、ニトロ、アルカノイル、スルフィニル、スルホニル等のような電子誘引性基であるものを含み、さらに、１−ナフチル及び２−ナフチルを含むナフチル；ビフェニル；フェナントリル；及びアントラシルを含む。
【００２７】
本発明の化合物における置換化Ｒ’基についての参考は、特定の基、典型的にアルキル、アルケニル、アルキニルまたはアリールを指し、それら特定の基は一つ以上の適切な基、例えばハロゲン、例えばフルオロ、クロロ、ブロモ、及びヨード；シアノ；ヒドロキシル；ニトロ；アジド；アルカノイル、例えばＣ１−６アルカノイル基、例えばアシル等；カルボキサミド；１から約１２の炭素原子、または１から約６の炭素原子、より好ましくは１−３の炭素原子を有する基を含むアルキル基；一つ以上の不飽和結合を含み、２から約１２の炭素原子、または２から約６の炭素原子を有する基を含むアルケニル及びアルキニル基；一つ以上の酸素結合を有し、１から約１２の炭素原子、または１から約６の炭素原子を有するアルコキシ基；アリールオキシ、例えばフェノキシ；一つ以上のチオエーテル結合を有し、１から約１２の炭素原子、または１から約６の炭素原子を有する基を含むアルキルチオ基；一つ以上のスルフィニル結合を有し、１から約１２の炭素原子、または１から約６の炭素原子を有する基を含むアルキルスルフィニル基；一つ以上のスルホニル結合を有し、１から約１２の炭素原子、または１から約６の炭素原子を有するアルキルスルホニル基；一つ以上のＮ原子を有し、１から約１２の炭素原子、または１から約６の炭素原子を有する基のようなアミノアルキル基；６以上の炭素を有する炭環式アリール基、特にフェニル（例えばＲが置換化または非置換化ビフェニル基である）；アラルキル、例えばベンジル；ヘテロ脂環式基及びヘテロ芳香族基を含む複素環、特に５から１０の環原子の１から４がヘテロ原子であるもの、より好ましくは５または６の環原子を有し１または２のヘテロ原子を有する、または１０の環原子を有し１から３のヘテロ原子を有する複素環基といった、一つ以上の適切な基によって一つ以上の利用可能な位置で置換されても良い。
【００２８】
好ましいＲ’基は、式Ｒ’、ＣＯＲ’、またはＯＣＯＲ’の群に存在し、アルキルまたはアルケニルを含む、それらは例えばハロゲン、例えばフルオロ、クロロ、ブロモ、及びヨード、特にω−クロロまたはパーフルオロ；アミノアルキル基、例えば一つ以上のＮ原子を有し、１から約１２の炭素原子、または１から約６の炭素原子を有する基、特にアミノ酸、とりわけグリシン、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン、グルタミン酸、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、またはバリン、特にそのようなアミノ酸の保護化形態；６以上の炭素を有する炭環式アリール、特にフェニル；及びアラルキル、例えばベンジル；ヘテロ脂環式基及びヘテロ芳香族基を含む複素環基、特に５から１０の環原子のうち１から４がヘテロ原子であるもの、とりわけ５または６の環原子と１または２のヘテロ原子を有する、または１０の環原子と１から３のヘテロ原子を有する複素環であって、複素環基は任意に、一つ以上のＲ’について許容される置換基で置換され、特にジメチルアミノのようなアミノまたはケトで置換される複素環といった、一つ以上の適切な基によって一つ以上の利用可能な位置で置換されても良い。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２９】
本発明の好ましい化合物の一つのクラスは、以下の置換基の一つ以上を有する本発明の化合物を含む：
Ｒ１は水素；アルキル、とりわけ１から６の炭素原子のアルキル；Ｃ（＝Ｏ）Ｒ’[式中、Ｒ’はアルキル、より好ましくは１から２４の炭素原子のアルキル、特に１から８または１２から１８の炭素原子を有する；ハロアルキル、より好ましくは１から４の炭素原子のω−クロロ−またはパーフルオロ−アルキル、特にω−クロロエチルまたはパーフルオロメチル、エチル、またはプロピル；複素環アルキル、より好ましくはビオチンのような３のヘテロ原子を有する融合複素脂環式を含む、５から１０の環原子と１から４のヘテロ原子を適宜有するω−複素環置換基を有する１から６の炭素原子をアルキル；アミノアルキル、より好ましくは（ＣＨ３）３Ｃ−Ｏ−Ｃ＝Ｏ−のような例えばアルコキシカルボニルまたは他の保護基で任意に保護されたω−アミノ基を有する、１から６の炭素原子、特に２の炭素原子のアルキル；アリールアルキレン、特にシンナモイル；アルキレン、特にビニルまたはアリル；アラルキル、例えばベンジルである]；またはＣ（＝Ｏ）ＯＲ’[式中、Ｒ’はアルキル、より好ましくは１から６の炭素原子のアルキル、特に分枝状アルキル；アルケニル、より好ましくはアリルである]であり；
Ｒ２は水素、メチル、または（ＣＨ３）３Ｃ−Ｏ−Ｃ＝Ｏ−のようなアルコキシカルボニルを含む保護基であり；
Ｒ３は水素；アルキル、とりわけ１から６の炭素原子のアルキル；Ｃ（＝Ｏ）Ｒ’[式中、Ｒ’はアルコキシ、特に１から６の炭素原子のアルキル基を有するもの；アルキル、より好ましくは１から２４の炭素原子のアルキル、特に１から８または１２から１８の炭素原子を有する；ハロアルキル、より好ましくは１から４の炭素原子のパーフルオロアルキル、特にパーフルオロメチル、エチル、またはプロピル；アリールアルキレン、特にシンナモイル；複素環アルキル、より好ましくはビオチンのような３のヘテロ原子を有する融合複素環を含む、５から１２の環原子と１から４のヘテロ原子を適宜有するω複素環置換基を有する１から６の炭素原子のアルキル；アルキル基に好ましくは１の炭素原子を有する複素環アルキル、より好ましくは５から１０の環原子と１から４の環原子を有するヘテロ脂環式メチル、特に１から４のヘテロ原子を有する融合複素環、例えばジメチルアミノクマリンまたはクマリン；アルキレン、特にアリル；アラルキル、例えばベンジルである]；またはＣ（＝Ｏ）ＯＲ’[式中、Ｒ’はアルキル、より好ましくは１から６の炭素原子のアルキル；アルキレン、特にビニルまたはアリル；アラルキル、例えばベンジルである]であり；
Ｒ４はＣ（＝Ｏ）Ｒ’[式中、Ｒ’はアルキル、より好ましくは１から２４の炭素原子のアルキル、特に１から８または１２から１８の炭素原子を有する；ハロアルキル、より好ましくは１から４の炭素原子のω−クロロ−またはパーフルオロアルキル、特にω−クロロエチルまたはパーフルオロメチル、エチル、またはプロピル；アラルキル、例えばベンジルまたはフェネチル；アリールアルキレン、特にシンナモイル；アミノアルキル、特にアミノ酸、とりわけ保護化アミノ酸、特に保護化システイン、特にＦｍ−Ｓ ＣＨ２ＣＨ（ＮＨＡｌｌｏｃ）−ｃｙｓ、または保護化アラニン、特に（ＣＨ３）３Ｃ−Ｏ−Ｃ＝Ｏ−ａｌａ；複素環アルキル、より好ましくはビオチンのような３の環原子を有する融合複素環を含む、５から１２の環原子と１から４のヘテロ原子を適宜有するω複素環置換基を有する１から６の炭素原子のアルキル；アルキル基に好ましくは１の炭素原子を有する複素環アルキル、より好ましくは５から１０の環原子と１から４の環原子を有するヘテロ脂環式メチル、特に１から４のヘテロ原子を有する融合複素環、例えばクマリンまたはジメチルアミノクマリンである]；またはＣ（＝Ｏ）ＯＲ’[式中、Ｒ’はアルキル、より好ましくは１から６の炭素原子のアルキル；アルキレン、特にビニルまたはアリル；アラルキル、例えばベンジルである]；Ｐ＝Ｏ（ＯＲ’）２[式中、Ｒ’はベンジルである]であり；
Ｒ５は水素；アルキル、より好ましくは１から６の炭素原子のアルキル；（Ｃ＝Ｏ）ＯＲ’[式中、Ｒ’はアルキレン、特にビニルである]であり；
Ｘ１は水素、ヒドロキシ、またはシアノであり；
Ｘ２は水素であり；
Ｘ３はＯＲ’[式中、Ｒ’は１から６の炭素原子のアルキル、特にメチルである]であり；
Ｘ４は水素であり；
Ｘ５は水素であり；
Ｘ６は水素またはアルキル、特に水素または１から６の炭素原子のアルキル、とりわけ水素である。
【００３０】
Ｒ３が水素ではない化合物は、好ましい化合物の一つのクラスである。Corey等, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1999, 96, 3496-3501の文献では、構造−活性の関係が、エクチナサイジンタイプの化合物について示されており、水素が必須であることを示している。3498頁では、「Ｅサブユニット状の他のフェノール製ヒドロキシル基の保護が、最小の活性を引き起こした」と述べられてている。我々は水素が必須ではないことを見出し、多くの他のものの中で化合物９６、９７及び９８を参照されたい。
【００３１】
Ｒ４がエステルまたはエーテルである化合物は、例えば化合物５７、６０、６１、６３、６５、６８、及び７６といった好ましい化合物である。一般的に、それらは改良された毒物学的特性を有し、より広い治療上の可能性を与える。
【００３２】
特にＲ３及びＲ４が水素でない化合物が好ましい。もちろん、これらの位置でエステルまたはエーテルを有する化合物が最も好ましく、特にエステル及びカルボナートを有する化合物が好ましい。化合物７８、８２、８３、８４、８６、８８、９２を参照。嵩高い基（長い脂肪族または芳香族残基）を有するエステルは、より優れた結果を与える。特に好ましい置換基の例は、オクタン酸、パルミチン酸、シンナモイル、ヒドロキシシンナモイルを含む。化合物８６、９２を参照。カルボナートの中では、tert-ブチルオキシカルボニル（ｔＢＯＣ）及びビニルオキシカルボニル（ＶＯＣ）が、これらの位置について最も好ましい置換基である。化合物８６及び９２を参照し、これらは活性及び毒性の点で最高である。これらの位置でのエーテル置換基については、エチルまたは嵩高い基が好ましい。
【００３３】
化合物が毒性を発揮するものより低い濃度で活性が存在するため、Ｒ５でエチル、Ｎ２’を有する化合物が好ましい。
【００３４】
Ｒ１で変化を有する化合物、特にエステル基、Ｒ１＝Ｒ’ＣＯ−[Ｒ’は長い脂肪族または芳香族基である]を有する化合物は、本発明の一部である。化合物１６１、１６２、１６４、１６５、１６８、１６９、１７０、１７１、１７２、１７４、１７５を参照。これらの化合物のあるものは、Ｒ１とＲ２の両者で置換基を有する。それらは、良好な活性／毒性特性を有する。例えば１７０は活性であり、心臓において脊髄非毒性である。化合物１７４は非常に活性であり（Ｅ−１０）、より高濃度（Ｅ−８）で毒性である。
【００３５】
薬物動力学の良好な指標である良好なＡＤＭＥ特性（吸収−分配−代謝−排出）を有する化合物が存在する。
【００３６】
前述のように、本発明の化合物、好ましくは嵩高い置換化基を有するものは、良好な治療上の可能性を有し、各種の酸及びカルボナートでのフェノールのエステル化は、製薬特性の一般的な増強を引き起こす：これらの誘導体は、さらにより高い代謝安定性を有するチトクローム阻害を示さないため、肝細胞毒性が有意に減少し、薬剤−薬剤相互作用の良好なプロフィールも存在する。
【００３７】
本発明の関連する特徴点では、化合物は以下の特徴の一つ以上を有する：
Ｒ１はアセチルではない。好ましくはそれは少なくとも４、５、または６の炭素原子、例えば１８または２４までの炭素原子を有する。適切な置換基はエステルＣＯＲ’[式中、Ｒ’はしばしば一つ以上の置換基を有するアルキル、アルケニルである]を含む。アリール、複素環を含む適切な置換基を有するアルキル、置換化アルキル、アルケニル、及びアリールアルケニルが好ましい。Ｒ１についての他の定義は、アミノ酸、任意に保護化アミノ酸から由来する式ＣＯＲ’のエステルを含む。
Ｒ３は水素ではない。好ましくはそれはＲ’、ＣＯＲ’、またはＣＯＯＲ’[式中、Ｒ’はある嵩を有する置換基である]である。そのような嵩高い置換基は、分枝鎖基、不飽和基、または芳香族基を含む環状基を有するものを含む。かくして、分枝状アルキル、シクロアルキル、分枝状アルケニル、アリール、ヘテロ芳香族、及び関連基が、置換基Ｒ３の構造の範囲内に含まれることを好ましい。好ましくは、Ｒ３における炭素原子の総数は、２から２４、より好ましくは６から１８の炭素原子である。典型的にＲ３は、エステル、エーテル、またはカルボナートであり、式ＣＯＲ’、Ｒ’、またはＣＯＯＲ’である。
Ｒ４は水素ではない。好ましくはそれは、Ｒ’、ＣＯＲ’、またはＣＯＯＲ’[式中、Ｒ’はある嵩を有する置換基である]である。そのような嵩高い置換基は、分枝鎖基、不飽和基、または芳香族基を含む環状基を有するものを含む。かくして、分枝状アルキル、シクロアルキル、分枝状アルケニル、アリール、ヘテロ芳香族、及び関連基が、置換基Ｒ４の構造の範囲内に含まれることを好ましい。好ましくは、Ｒ４における炭素原子の総数は、２から２４、より好ましくは６から１８の炭素原子である。典型的にＲ４は、エステル、エーテル、またはカルボナートであり、式ＣＯＲ’、Ｒ’、またはＣＯＯＲ’である。
【００３８】
アミノ及び他の置換基についての保護基の例はＷＯ００６９８６２に記載されており、この開示は明白に取り込まれる。
【００３９】
網羅的ではないが、本発明の好ましい化合物の別のクラスは、以下の定義の一つ以上を有する：
Ｘ１はＨ、−ＣＮ、または−ＯＨ、とりわけ−ＯＨまたは−ＣＮであり；
Ｘ２は水素であり；
Ｘ３はメトキシであり；
Ｘ４及びＸ５は水素であり；
Ｒ１は好ましくはＨまたはアセチル；アリールアルキル、特にベンジル；アルキル−ＣＯ−（アルキルは２５までの炭素原子、例えば１７、１９、または２１までの炭素原子であり、好ましくは偶数の炭素原子の脂肪酸カルボン酸に対応する奇数の炭素原子、または１から６のような低い数の炭素原子である）、特にＣＨ３−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯ−[式中、ｎは例えば１、２、４、６、１２、１４、または１６である]；ハロアルキル−ＣＯ−、特にトリフルオロメチルカルボニル；アリールアルキル−ＣＯ−、特にベンジル−ＣＯ−；アリールアルケニル−ＣＯ−、特にシンナモイル−ＣＯ−；とりわけＲ１はＨ、アセチル、またはシンナモイルであり；
Ｒ２はＨ；アルキル、特にメチル；アルキル−Ｏ−ＣＯ−、特にｔ−ブチル−Ｏ−ＣＯ−、またはアルケニル−Ｏ−ＣＯ−、特にアリル−Ｏ−ＣＯ−であり；
Ｒ３は好ましくはＨまたはアセチル；アルキル（アルキルは１から６の炭素原子である）、特にＣ１からＣ３アルキル；アルケニル、特にアリル；アリールアルキル、特にベンジル；アルキル−ＣＯ−（アルキルは２５までの炭素原子、例えば１７、１９、または２１までの炭素原子であり、好ましくは偶数の炭素原子の脂肪酸カルボン酸に対応する奇数の炭素原子、または１から６のような低い数の炭素原子である）、特にＣＨ３−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯ−[式中、ｎは例えば１、２、４、６、１２、１４、または１６である]及びそれらの誘導体、例えばビオチン−（ＣＨ２）４−ＣＯ−；アリールアルケニル−ＣＯ−、特にシンナモイル−ＣＯ−；アルキル−Ｏ−ＣＯ−、特にｔ−ブチル−Ｏ−ＣＯ−；アリールアルキル−Ｏ−ＣＯ−、特にベンジル−Ｏ−ＣＯ−；アルケニル−Ｏ−ＣＯ−，特にアリル−Ｏ−ＣＯ−であり；
Ｒ４は好ましくはＨ、アセチル、アルキル（アルキルは１から６の炭素原子である）、特にＣ１からＣ３アルキル；アルケニル、特にアリル；アリールアルキル、特にベンジル；アルキル−ＣＯ−（アルキルは２５までの炭素原子、例えば１７、１９、または２１までの炭素原子であり、好ましくは偶数の炭素原子の脂肪酸カルボン酸に対応する奇数の炭素原子、または１から６のような低い数の炭素原子である）、特にＣＨ３−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯ−[式中、ｎは例えば１、２、４、６、１２、１４、または１６である]及びそれらの誘導体、例えばビオチン−（ＣＨ２）４−ＣＯ−；ハロアルキル−ＣＯ−、特にトリフルオロメチルカルボニル；アミノ酸アシルまたはそれらの誘導体、例えばＦｍＳＣＨ２ＣＨ（ＮＨＡｌｌｏｃ）ＣＯ−；アリールアルケニル−ＣＯ−、特にシンナモイル−ＣＯ−；アルキル−Ｏ−ＣＯ−、特にtert-ブチル−Ｏ−ＣＯ−；アルケニル−Ｏ−ＣＯ−、特にアリル−Ｏ−ＣＯ−；アリールアルキル−Ｏ−ＣＯ−、特にベンジル−Ｏ−ＣＯ−；ＰＯ（ＯＢｎ）２のような保護基であり；とりわけＲ４はＨ、アシル、シンナモイルであり；
Ｒ５はＨまたはアルキル（アルキルは１から６の炭素原子である）であり、Ｒ５はとりわけＨまたはＣ１からＣ３のアルキルである。
【００４０】
本願は、英国特許出願の優先権を享受する。当該英国優先権主張出願の明細書に存在し、本願の明細書に存在しないいずれの開示も、参考として明白に取り込まれる。
【００４１】
さらに、本発明に置換基に対応する置換基の議論について、ＷＯ００６９８６２、ＷＯ０１７７１１５、ＷＯ０１８７８９４及びＷＯ０１８７８９５のそれぞれが参考として明白に取り込まれる。特定の置換基についてこれらの以前の出願のいずれかに与えられているいずれの定義も、本発明の化合物について採用できる。
【００４２】
さらに、以前の出願に開示されたいずれの化合物もクレームに記載されておらず、そのような化合物のいずれも明白にクレームから除外される。飽きたかに、必要であるいずれのクレームからの除外の記載について、以前の出願のそれぞれが参考として明白に取り込まれる。
【００４３】
一つの特徴点では、本発明は、以下の特徴点の一つ以上において異なるＥｔ−７４３またはＥｔ−７７０またはＥｔ−７２９の誘導体に関する：
Ｒ１はアセチルではなく、特にＣＯＲ’ではない基であり、ここでＲ’は水素、メチルまたはエチルであり、またはＣＯＲ’ではない基であり、ここでＲ’は水素、メチル、エチル、またはプロピルである。
Ｒ１はＲ’ではなく、ここでＲ’はメチルまたはエチルであり、またはＲ’はメチル、エチル、またはプロピルであり、またはＲ’はメチル、エチル、プロピル、またはブチルである。
Ｒ２はメチルではない。
Ｒ６はＲ３であり、水素ではない。
Ｒ４は水素ではない。
Ｒ５は水素ではない。
Ｒ６及びＲ７は＝Ｏである。
Ｘ１は水素またはシアノではない。
【００４４】
一つの特徴点では、本発明は以下の誘導体を提供する：
Ｒ１はアセチルではなく、特にＣＯＲ’ではない基であり、ここでＲ’は水素、メチル、またはエチルであり、またはＣＯＲ’ではない基であり、ここでＲ’は水素、メチル、エチル、またはプロピルであり；Ｒ１はＲ’ではなく、ここでＲ’はメチルまたはエチルであり、またはＲ’はメチル、エチル、またはプロピルであり、またはＲ’はメチル、エチル、プロピル、またはブチルであり；及びＲ６はＲ３であり、水素ではない。
【００４５】
更なる特徴点では、本発明は以下の誘導体を提供する：
Ｒ１はアセチルではなく、特にＣＯＲ’ではない基であり、ここでＲ’は水素、メチル、またはエチルであり、またはＣＯＲ’ではない基であり、ここでＲ’は水素、メチル、エチル、またはプロピルであり；Ｒ１はＲ’ではなく、ここでＲ’はメチルまたはエチルであり、またはＲ’はメチル、エチル、またはプロピルであり、またはＲ’はメチル、エチル、プロピル、またはブチルであり；及びＲ４は水素ではない。
【００４６】
関連する特徴点では、本発明は以下の誘導体を提供する：
Ｒ６はＲ３であり、水素ではなく；Ｒ４は水素ではない。
【００４７】
また更なる特徴点では、本発明は以下の誘導体を提供する：
Ｒ１はアセチルではなく、特にＣＯＲ’ではない基であり、ここでＲ’は水素、メチル、またはエチルであり、またはＣＯＲ’ではない基であり、ここでＲ’は水素、メチル、エチル、またはプロピルであり；Ｒ１はＲ’ではなく、ここでＲ’はメチルまたはエチルであり、またはＲ’はメチル、エチル、またはプロピルであり、またはＲ’はメチル、エチル、プロピル、またはブチルであり；Ｒ６はＲ３であり、水素ではなく；Ｒ４は水素ではない。
【００４８】
本発明の化合物、ＥＴ−７７０及びＥＴ−７２９は、米国特許代５，７２１，３６２号に記載された中間体化合物１５から合成的に調製できる。数多くの活性抗腫瘍性化合物がこの化合物から調製されており、多くの更なる化合物が、本開示の教示に従って形成できると解される。
【化３】
0004653950.tif 000006
【００４９】
これらの化合物の抗腫瘍性活性は、白血病、肺ガン、大腸ガン、腎臓ガン、前立腺ガン、卵巣ガン、乳ガン、サルコーマ、及びメラノーマを含む。
【００５０】
本発明の別の特に好ましい実施態様は、本発明の化合物（類）を活性成分として含む、抗腫瘍剤として有用な製薬組成物、並びにその調製方法である。
【００５１】
製薬組成物の例は、適切な組成を有し、経口、局所的、または全身性の投与のための、いずれかの固体（錠剤、丸薬、カプセル、顆粒等）、または液体（溶液、懸濁液、またはエマルション）を含む。
【００５２】
本発明の化合物または組成物の投与は、静脈点滴、経口調製物、腹膜内及び静脈内調製物のようないずれかの適切な方法であって良い。
【００５３】
本発明の化合物または組成物の投与は、静脈点滴、経口調製物、腹膜内及び静脈内調製物のようないずれかの適切な方法であって良い。２４時間までの点滴時間、より好ましくは２−１２時間、最も好ましくは２−６時間を使用することが好ましい。病院での一晩の滞在を要しないで治療を実施できる短い点滴時間が特に所望される。しかしながら点滴は、必要であれば１２から２４時間、またはそれ以上であっても良い。点滴は約２から４週間の適切な間隔で実施されて良い。本発明の化合物を含む製薬組成物は、持続放出製剤においてリポソームまたはナノスフェアカプセル化によって、または他の標準的な輸送手段によって輸送されて良い。
【００５４】
化合物の正確な投与量は、特定の製剤、適用の態様、並びに治療される特定の部位、宿主、及び腫瘍によって変化するであろう。年齢、体重、性別、食事、投与時間、排出速度、宿主の状態、薬剤の組合せ、反応感度、及び疾患のひどさのような他の因子も考慮されるであろう。投与は、最大の寛容投与量の範囲で継続的にまたは定期的に実施できる。
【００５５】
本発明の化合物及び組成物は、組合せ治療を提供するための他の薬剤と共に使用されて良い。他の薬剤は同じ組成物の一部を形成しても良く、または同時若しくは異時での投与のための物故の組成物として準備されても良い。他の薬剤の同定は特に制限されず、適切な候補は以下のものを含む：
ａ）抗有糸分裂効果を有する薬剤、特にタキサン薬剤（例えばタクソール、パクリタキセル、タクソテレ、ドセタキセル）、ポドフィロトキシン、またはビンカアルカノイド（ビンクリスチン、ビンブラスチン）のような微小管調節剤を含む細胞骨格エレメントを標的とするもの；
ｂ）代謝拮抗剤、例えば５−フルオロウラシル、シタラビン、ゲンシタラビン、プリン類似体、例えばペントスタチン、メトトレキサート；
ｃ）アルキル化剤、例えば窒素マスタード（例えばシクロホスファミドまたはイホスファミド）；
ｄ）アントラサイクリン薬剤アドリアマイシン、ドクソルビシン、ファルモルビシン、またはエピルビシンのようなＤＮＡを標的化する薬剤；
ｅ）エトポシドのようなトポイソメラーゼを標的化する薬剤；
ｆ）ホルモン及びホルモンアゴニスト若しくはアンタゴニスト、例えばエストロゲン、抗エストロゲン（タモキシフェン及び関連化合物）、及びアンドロゲン、フルタミド、ロイプロレリン、ゴセレリン、シプロトロン、またはオクトレオチド；
ｇ）ヘルセプチンのような抗体誘導体を含む腫瘍細胞におけるシグナル伝達を標的化する薬剤；
ｈ）アルキル化剤、例えば白金薬剤（シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン、パラプラチン）、またはニトロソウレア；
ｉ）マトリックスメタロプロテイナーゼインヒビターのような腫瘍の転移に強力に影響する薬剤；
ｊ）遺伝子治療剤及びアンチセンス薬剤；
ｋ）抗体治療剤；
ｌ）海洋起源の他の生体活性化合物、特にアプリジンのようなジデミン；
ｍ）ステロイド類似体、特にデキサメタゾン；
ｎ）抗炎症剤、特にデキサメタゾン；並びに
ｏ）抗嘔吐剤、特にデキサメタゾン。
【００５６】
本発明の化合物の生物学的活性の例は、本明細書の末尾の表Ｉ、ＩＩ及びＩＩＩに含まれる。
【００５７】
化合物を生産するための好ましい方法は、スキームＩ−ＶＩで以下に記載されている。
【００５８】
スキームＩ
【化４】
0004653950.tif 000007
スキームＩは、実施例において記載される各種の方法を通じたアシル化反応を含む。化合物１はＥｔ−７７０に対応する。この化合物から開始して、アシル化方法に引き続き標的化合物を得ることが可能である：Ａ（（ＲＣＯ）２Ｏ／塩基）、Ｂ（ＲＣＯＣｌ／塩基）、Ｃ（ＲＣＯＯＨ／ＤＭＡＰ／ＥＤＣ．ＨＣｌ）、及びＤ（ＲＯＣＯＣｌ／塩基）。他のアシル化反応は、式Ｉの構造のファミリーに属する化合物２５と、さらに記載される構造を有する化合物４７から実施されている。
化合物２９、３０、３１、３２、及び３３は、Ｒ１、Ｒ２、及びＲ３がビニル残基または水素原子である化合物である。
【００５９】
スキームＩＩ
【化５】
0004653950.tif 000008
スキームＩＩでは、方法Ｅはアルキル化の反応を含み（ＲＢｒ／Ｃｓ２ＣＯ３）、方法Ｇ（ＲＣＨＯ／ＮａＢＣＮＢＨ３／ＡｃＯＨ）はＮ−２’での還元アルキル化である。アルキル化反応がＭｅＩで実施される場合、化合物３４、３５、及び３６が得られる。これらの方法体系では、化合物１で開始してＮ及びＯ−アルキル誘導体が生産される。化合物５３では、ジベンジルホスファイトを使用してＣ−６’でホスファート基が導入される。
【００６０】
スキームＩＩＩ
【化６】
0004653950.tif 000009
スキームＩＩＩは、方法Ｆ（ＴＦＡ／Ｈ２Ｏ／ＣＨ２Ｃｌ２）を通じてＣ−６’においてtert-ブチルカルボナートの加水分解を含み、ＫＯＨ／Ｈ２Ｏ／ＴＨＦでの化合物４２からのＣ−５における、及びＴＥＡ／ＭｅＯＨ／ＴＨＦでの化合物６からのＣ−６’におけるアセチル基の加水分解を含む。さらに、右側の芳香環の酸化反応を通じた、化合物１から開始する化合物５２の形成も記載されている。
【００６１】
スキームＩＶ
【化７】
0004653950.tif 000010
Ｒ１、Ｒ２、及びＲ３がアシル、カルボナート、カルバマート、またはアルキル基であるＥｔ−７４３の各種の類似体が、Ｅｔ−７７０の誘導体から方法Ｈ（ＡｇＮＯ３／ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ）またはＩ（ＣｕＢｒ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ）に従って調製される（スキームＩＶ）。両者の場合では、反応は、Ｃ−２１におけるニトリル基のヒドロキシル基への変換を含む。化合物９６、９７、９８、９９、１００、１０１、及び１２０のような他の特定の誘導体は、Ｅｔ−７７０の対応する類似体、化合物５１、４７、３６、３１、３２、５２、及び４８から同じ方法体系に従って合成される。
【００６２】
スキームＶ
【化８】
0004653950.tif 000011
スキームＶでは、開始材料は、ＫＯＨ／ＴＨＦ／Ｈ２ＯでのＣ−５におけるアセチル基の加水分解による化合物４から得られた化合物１０５である。化合物１０６からエステル化とアルキル化反応によって、式Ｉの構造を有する誘導体が調製できる。次の工程は、tert-ブチルカルボナート基の加水分解（方法Ｆ：ＴＦＡ／Ｈ２Ｏ／ＣＨ２Ｃｌ２または方法Ｊ：ＴＭＳＣｌ、ＮａＩ；ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ）を含み、式ＩＩＩの構造の誘導体が得られ、それがＣ−２１におけるニトリル基のヒドロキシル基への変換によって最終化合物（式ＩＶの構造）に変換される。この最後の工程は、方法Ｈ（ＡｇＮＯ３／ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ）、方法Ｉ（ＣｕＢｒ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ）、または方法Ｋ（ＣｕＣｌ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ）に引き続き達成される。Ｒ１及びＲ２がＢｏｃであり、Ｒ１がＢｏｃ、ＡｌａＢｏｃ、及びＶｏｃ残基である式Ｉの構造の誘導体の場合、tert-ブチルカルボニルの加水分解は、これらのエステル官能性の加水分解をも含む。これらの化合物は、方法Ｈを通じて最終類似体に変換される。
【００６３】
スキームＶＩ
【化９】
0004653950.tif 000012
【化１０】
0004653950.tif 000013
Ｅｔ−７２９から、各種の実験条件を通じて標的化合物を得ることが可能である。化合物１８６を調製する試みでは、他の二つの化合物（１８４及び１８５）を、スキームＶＩに記載されているように単離した。Ａｌｌｏｃクロロホルミアート、ピリジン、及びＤＭＡＰでの化合物１８６の処理は、化合物１８７を与える。ＤＩＰＥＡを使用するまたは使用しないＢｏｃ無水物では、Ｂｏｃ誘導体（化合物１８８、１８９、及び１９０）を得ることが可能である。アルキル化反応（Ｃｓ２ＣＯ３、アリルブロミド）を通じて化合物１９０から、化合物１９９を調製し、それを方法Ｆに引き続くtert-ブチルカルボナート基の加水分解によって化合物２０１に変換する。
鍵となる化合物１８８から、エステル化反応を通じて、モノまたはジ置換化した式Ｉの構造の化合物を生産可能である。tert-ブチルカルボナート基の加水分解（方法Ｆ）及びＣ−２１におけるニトリル基のヒドロキシル基への変換（方法Ｈ）は、式ＩＩＩの構造の化合物を導く。さらに化合物１８８から還元メチル化によって、Ｎ−２’位でメチル基を有する化合物２００を得る。アミド結合の加水分解（方法Ｆ）及びニトリル基のヒドロキシル基への変換（方法Ｈ）は、化合物２１７を与える。
【００６４】
スキームＶＩＩ
【化１１】
0004653950.tif 000014
このスキームでは、化合物２２１が、化合物２１８から、特許ＷＯ０１／７７１１５Ａ１に記載されたように、化合物２４として得ることができ、トランスアミン化反応に引き続き２１９が得られ、Pictect-Splenger環状化により化合物２２１０が得られる。最終工程は、ＡｇＮＯ３を使用する通常の方法体系（方法Ｋ）でのＣ−２１におけるニトリル基のＯＨへの変換である。化合物２２４は、化合物２２２から、ＷＯ００／６９８６２に記載されたように化合物３６として得ることができ、Pictect-Splenger環状化により化合物２２３が得られる。最終工程は、通常の方法体系（方法Ｋ）でのＣ−２１におけるニトロリル基のＯＨへの変換である。
【実施例】
【００６５】
方法Ａ：アルゴン下でのＣＨ２Ｃｌ２（０．０３２Ｍ）における１当量のＥｔ−７７０（１）の溶液に対して、２当量の無水物と２当量のピリジンを加えた。反応をＴＬＣによって継続し、ＮａＨＣＯ３で停止し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出し、有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥した。フラッシュクロマトグラフィーにより純粋な化合物を与える。
【００６６】
実施例１
【化１２】
0004653950.tif 000015
【数１】
0004653950.tif 000016
【数２】
0004653950.tif 000017
【００６７】
実施例２
【化１３】
0004653950.tif 000018
【数３】
0004653950.tif 000019
【００６８】
実施例３
【化１４】
0004653950.tif 000020
【数４】
0004653950.tif 000021
【数５】
0004653950.tif 000022
【数６】
0004653950.tif 000023
【００６９】
実施例４
【化１５】
0004653950.tif 000024
化合物６を、４５当量のＡｃ２Ｏと１１３当量のピリジンと触媒量のＤＭＡＰで得る。
【数７】
0004653950.tif 000025
【００７０】
実施例５
方法Ｂ：室温でアルゴン下でのＣＨ２Ｃｌ２（０．０３２Ｍ）における１当量のＥｔ−７７０（１）の溶液に対して、２当量の塩基と２当量のピリジンを加えた。反応をＴＬＣによって継続し、ＮａＨＣＯ３で停止し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出し、有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥した。フラッシュクロマトグラフィーにより純粋な化合物を与える。
【化１６】
0004653950.tif 000026
クロマトグラフィー精製の後、２５％の開始材料が回収された。
【数８】
0004653950.tif 000027
【００７１】
実施例６
【化１７】
0004653950.tif 000028
クロマトグラフィー精製の後、２８％の開始材料が回収された。
【数９】
0004653950.tif 000029
【００７２】
実施例７
【化１８】
0004653950.tif 000030
１０当量のブチリルクロリド及び１０当量のＴＥＡを使用して、９が得られた。
【数１０】
0004653950.tif 000031
【００７３】
実施例８
【化１９】
0004653950.tif 000032
【数１１】
0004653950.tif 000033
【００７４】
実施例９
【化２０】
0004653950.tif 000034
４当量のヒドロシンナモイルクロリドと２当量のピリジンを使用して、反応を実施した。クロマトグラフィー精製の後、２５％の開始材料が回収された。
【数１２】
0004653950.tif 000035
【００７５】
実施例１０
【化２１】
0004653950.tif 000036
【数１３】
0004653950.tif 000037
【００７６】
実施例１１
【化２２】
0004653950.tif 000038
【数１４】
0004653950.tif 000039
【数１５】
0004653950.tif 000040
【００７７】
実施例１２
方法Ｂ：アルゴン下でのＣＨ２Ｃｌ２（０．０３２Ｍ）における１当量のＥｔ−７７０（１）の溶液に対して、２当量の酸と２当量のピリジンを加えた。反応を室温で２時間攪拌した。この時間の後、ＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、塩水で洗浄し、有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥した。フラッシュクロマトグラフィーにより純粋な化合物を与える。
【化２３】
0004653950.tif 000041
【数１６】
0004653950.tif 000042
【００７８】
実施例１３
【化２４】
0004653950.tif 000043
１０当量のオクタン酸と１０当量のＥＤＣ・ＨＣｌと１０当量のＤＭＡＰを使用して、方法Ｃに引き続き化合物１５を得る。
【数１７】
0004653950.tif 000044
【００７９】
実施例１４
【化２５】
0004653950.tif 000045
化合物１６及び１７を、方法Ｃを使用して得た。
【数１８】
0004653950.tif 000046
【数１９】
0004653950.tif 000047
【００８０】
実施例１５
【化２６】
0004653950.tif 000048
１．５当量の酸、２．５当量のＤＭＡＰ、及び２．５当量のＥＤＣ・ＨＣｌ（方法Ｃ）を使用して、化合物１８を得る。
【数２０】
0004653950.tif 000049
【００８１】
実施例１６
【化２７】
0004653950.tif 000050
化合物１９及び２０の混合物を、１．５当量のビオチン、２．５当量のＤＭＡＰ、及び２．５当量のＥＤＣ．ＨＣｌ（方法Ｃ）を使用して得た。
【数２１】
0004653950.tif 000051
【数２２】
0004653950.tif 000052
【００８２】
実施例１７
【化２８】
0004653950.tif 000053
２１を方法Ｃを使用して得た。
【数２３】
0004653950.tif 000054
【数２４】
0004653950.tif 000055
【００８３】
実施例１８
【化２９】
0004653950.tif 000056
化合物２２及び２３を、３：１の混合物として方法Ｃを使用して得、１Ｈ−ＲＭＮでともに記載した。
【数２５】
0004653950.tif 000057
【００８４】
実施例１９
【化３０】
0004653950.tif 000058
２４を方法Ｃを使用して得た。
【数２６】
0004653950.tif 000059
【００８５】
実施例２０
方法Ｄ：アルゴン下でのＣＨ２Ｃｌ２（０．０３２Ｍ）における１当量の開始材料の溶液に対して、２当量のクロロホルミアートと２当量の塩基を加え、混合物を室温で攪拌した。反応をＴＬＣによって継続し、ＮａＨＣＯ３で停止し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出し、有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥した。フラッシュクロマトグラフィーにより純粋な化合物を与える。
【化３１】
0004653950.tif 000060
反応を、３．３当量のＡｌｌｏｃクロリドと３．３当量のピリジンで実施する。
【数２７】
0004653950.tif 000061
【００８６】
実施例２１
【化３２】
0004653950.tif 000062
反応を、過剰量のＡｌｌｏｃクロリドとピリジンと触媒ＤＭＡＰ（方法Ｄ）で実施した。ある量の開始材料が、クロマトグラフィー精製の後に回収された。
【数２８】
0004653950.tif 000063
【００８７】
実施例２２
【化３３】
0004653950.tif 000064
反応を３．０当量のピリジン（方法Ｄ）で実施した。
【数２９】
0004653950.tif 000065
【数３０】
0004653950.tif 000066
【００８８】
実施例２３
【化３４】
0004653950.tif 000067
２８は、塩基としてＴＥＡを使用して方法Ｃに引き続き得られた。
【数３１】
0004653950.tif 000068
【００８９】
実施例２４
【化３５】
0004653950.tif 000069
２９は、方法Ｄを使用して得られた。
【数３２】
0004653950.tif 000070
【００９０】
実施例２５
【化３６】
0004653950.tif 000071
反応を、５．０当量のＴＥＡと１０当量のビニルクロロホルミアート（方法Ｄ）で実施した。
【数３３】
0004653950.tif 000072
【数３４】
0004653950.tif 000073
【００９１】
実施例２６
【化３７】
0004653950.tif 000074
【数３５】
0004653950.tif 000075
【数３６】
0004653950.tif 000076
【数３７】
0004653950.tif 000077
【００９２】
実施例２７
方法Ｅ：室温でアルゴン下でのＤＭＦ（０．０３２Ｍ）における１当量のＥｔ−７７０（１）または化合物４の溶液に対して、２当量のＣｓ２ＣＯ３と２当量のアルキルハライドを加えた。反応をＴＬＣによって継続し、ＮａＨＣＯ３で停止し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出し、有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥した。フラッシュクロマトグラフィーにより純粋な化合物を与える。
【化３８】
0004653950.tif 000078
化合物の混合物を、１．５当量のＭｅＩと１．０当量のＣｓ２ＣＯ３で得る。クロマトグラフィー精製の後、２１％の開始材料が回収され、三つの化合物の混合物の分画が回収される。
【数３８】
0004653950.tif 000079
【数３９】
0004653950.tif 000080
【数４０】
0004653950.tif 000081
【数４１】
0004653950.tif 000082
【００９３】
実施例２８
【化３９】
0004653950.tif 000083
【数４２】
0004653950.tif 000084
【数４３】
0004653950.tif 000085
【数４４】
0004653950.tif 000086
【００９４】
実施例２９
【化４０】
0004653950.tif 000087
【数４５】
0004653950.tif 000088
【数４６】
0004653950.tif 000089
【００９５】
実施例３０
【化４１】
0004653950.tif 000090
化合物４１及び４２は、方法Ｅを使用して得られた。
【数４７】
0004653950.tif 000091
【数４８】
0004653950.tif 000092
【数４９】
0004653950.tif 000093
【００９６】
実施例３１
【化４２】
0004653950.tif 000094
化合物４３及び４４は、方法Ｅを使用して得られた。
【数５０】
0004653950.tif 000095
【数５１】
0004653950.tif 000096
【数５２】
0004653950.tif 000097
【００９７】
実施例３２
【化４３】
0004653950.tif 000098
反応を、１．０当量のＭｅＩと１．０当量のＣｓ２ＣＯ３（方法Ｅ）を使用して実施した。クロマトグラフィー精製の後、開始材料（１６％）が回収された。
【数５３】
0004653950.tif 000099
【数５４】
0004653950.tif 000100
【００９８】
実施例３３
【化４４】
0004653950.tif 000101
化合物４６は、１５当量のイソプロピルブロミドと１５当量のＣｓ２ＣＯ３（方法Ｅ）を使用して得られた。
【数５５】
0004653950.tif 000102
【００９９】
実施例３４
方法Ｅ：ＣＨ２Ｃｌ２／Ｈ２Ｏ／ＴＦＡ２：１：３．３（０．０１３Ｍ）における１当量の開始材料の溶液を、室温で１５分間攪拌した。反応をＴＬＣによって継続し、ＮａＨＣＯ３で停止し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出し、有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥した。フラッシュクロマトグラフィーにより純粋な化合物を与える。
【化４５】
0004653950.tif 000103
４７は、方法Ｆを使用して得られた。
【数５６】
0004653950.tif 000104
【０１００】
実施例３５
【化４６】
0004653950.tif 000105
４８は、方法Ｆを使用して得られた。
【数５７】
0004653950.tif 000106
【０１０１】
実施例３６
【化４７】
0004653950.tif 000107
クロマトグラフィー精製の後、開始材料（３３％）が回収された。化合物３６は以前に記載されている。
他の化学的変換：
【０１０２】
実施例３７
化合物４７は、方法Ｂに引き続きアシル化された。
【化４８】
0004653950.tif 000108
【数５８】
0004653950.tif 000109
【０１０３】
実施例３８
【化４９】
0004653950.tif 000110
ＴＨＦ／ＭｅＯＨ１．１における化合物４２の溶液に対して、２当量のＫＯＨを加えた。反応混合物を室温で５時間攪拌した。この時間の後、反応をＮａＣｌで停止し、またはＨＣｌの水溶液で希釈し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥した。クロマトグラフィーは純粋な化合物５０（７９％）を与える。
【数５９】
0004653950.tif 000111
【０１０４】
実施例３９
【化５０】
0004653950.tif 000112
室温でＭｅＯＨ／ＴＨＦ３：４（０．０１１Ｍ）における化合物６の溶液に対して、１５０当量のＥｔ３Ｎを加えた。７日後、溶媒を蒸発した。フラッシュクロマトグラフィーにより、純粋な化合物５１を得る。
【数６０】
0004653950.tif 000113
【０１０５】
実施例４０
【化５１】
0004653950.tif 000114
室温でアルゴン下でのＭｅＯＨ（０．０３２Ｍ）におけるＥｔ−７７０（１）（１．０当量）の溶液に対して、ＲｕＣｌ２（ＰＰｈ３）３（０．１当量）及びＨ２Ｏ２（８当量）を加えた。反応混合物を室温で４時間攪拌した。この時間の後、それをＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、塩水で洗浄し、有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥した。フラッシュクロマトグラフィーにより化合物５２を得る。
【数６１】
0004653950.tif 000115
【数６２】
0004653950.tif 000116
【０１０６】
実施例４１
【化５２】
0004653950.tif 000117
アルゴン下でのＣＨ３ＣＮ（０．０３Ｍ）において、無水トルエンで二度共蒸発された１の懸濁液を、−１０℃に冷却した。この温度で、５当量のＣＣｌ４、２．１当量のｉＰｒ２ＮＥｔ、０．１当量のＤＭＡＰ、及び１．４５当量のジベンジルホスファイトを加えた。１時間後、反応を１．２当量のＫＨ２ＰＯ４（０．５Ｍ）で停止した。反応混合物を室温まで温め、５分間攪拌し、ＥｔＯＡｃで希釈し、水で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥した。フラッシュクロマトグラフィーにより、純粋な化合物５３（７５％）が得られる。
【数６３】
0004653950.tif 000118
【数６４】
0004653950.tif 000119
【０１０７】
実施例４２
方法Ｇ：室温でアルゴン下でのＣＨ３ＣＮ（０．０１６Ｍ）におけるＥｔ−７７０（１）の溶液に対して、２００当量のアルデヒド（水中に３７重量％）と１０当量のＮａＣＮＢＨ３を加えた。１時間１０分後、４０当量の酢酸を加えた。反応混合物を２時間以上攪拌した。この時間の後、それをＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、ＮａＨＣＯ３で中和し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥した。フラッシュクロマトグラフィーにより純粋な化合物を与える。
【化５３】
0004653950.tif 000120
５４は方法Ｇに引き続き得られた。
【数６５】
0004653950.tif 000121
【０１０８】
実施例４３
【化５４】
0004653950.tif 000122
５５は方法Ｇに引き続き得られた。
【数６６】
0004653950.tif 000123
【０１０９】
実施例４４
【化５５】
0004653950.tif 000124
５６は方法Ｇに引き続き得られた。
【数６７】
0004653950.tif 000125
【０１１０】
実施例４５
方法Ｈ：ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ３：２（０．００９Ｍ）における１当量の開始材料の溶液に対して、３０当量のＡｇＮＯ３を加えた。２４時間後、塩水の飽和溶液とＮａＨＣＯ３の１．１の混合物で停止し、１０分間攪拌し、希釈し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥した。フラッシュクロマトグラフィーにより純粋な化合物を与える。
【化５６】
0004653950.tif 000126
５７を方法Ｈを使用して得た。
【数６８】
0004653950.tif 000127
【０１１１】
実施例４６
【化５７】
0004653950.tif 000128
５８を方法Ｈを使用して得た。
【数６９】
0004653950.tif 000129
【０１１２】
実施例４７
【化５８】
0004653950.tif 000130
５９を方法Ｈを使用して得た。
【数７０】
0004653950.tif 000131
【０１１３】
実施例４８
【化５９】
0004653950.tif 000132
６０を方法Ｈを使用して得た。
【数７１】
0004653950.tif 000133
【０１１４】
実施例４９
【化６０】
0004653950.tif 000134
６１を方法Ｈを使用して得た。
【数７２】
0004653950.tif 000135
【０１１５】
実施例５０
【化６１】
0004653950.tif 000136
６２を方法Ｈを使用して得た。
【数７３】
0004653950.tif 000137
【０１１６】
実施例５１
【化６２】
0004653950.tif 000138
６３を方法Ｈを使用して得た。
【数７４】
0004653950.tif 000139
【０１１７】
実施例５２
【化６３】
0004653950.tif 000140
６４を方法Ｈを使用して得た。
【数７５】
0004653950.tif 000141
【０１１８】
実施例５３
【化６４】
0004653950.tif 000142
６５を方法Ｈを使用して得た。
【数７６】
0004653950.tif 000143
【０１１９】
実施例５４
【化６５】
0004653950.tif 000144
６６を方法Ｈを使用して得た。
【数７７】
0004653950.tif 000145
【数７８】
0004653950.tif 000146
【０１２０】
実施例５５
【化６６】
0004653950.tif 000147
６７を方法Ｈを使用して得た。
【数７９】
0004653950.tif 000148
【０１２１】
実施例５６
【化６７】
0004653950.tif 000149
６８を方法Ｈを使用して得た。
【数８０】
0004653950.tif 000150
【０１２２】
実施例５７
【化６８】
0004653950.tif 000151
６９を方法Ｈを使用して得た。
【数８１】
0004653950.tif 000152
【０１２３】
実施例５８
【化６９】
0004653950.tif 000153
７０を方法Ｈを使用して得た。
【数８２】
0004653950.tif 000154
【０１２４】
実施例５９
【化７０】
0004653950.tif 000155
７１を方法Ｈを使用して得た。
【数８３】
0004653950.tif 000156
【０１２５】
実施例６０
【化７１】
0004653950.tif 000157
化合物１１（３１％）を、クロマトグラフィー精製の後に回収した。
７２を方法Ｈを使用して得た。
【数８４】
0004653950.tif 000158
【０１２６】
実施例６１
【化７２】
0004653950.tif 000159
７３を方法Ｈを使用して得た。
【数８５】
0004653950.tif 000160
【０１２７】
実施例６２
【化７３】
0004653950.tif 000161
７４を方法Ｈを使用して得た。
【数８６】
0004653950.tif 000162
【０１２８】
実施例６３
【化７４】
0004653950.tif 000163
７５を方法Ｈを使用して得た。
【数８７】
0004653950.tif 000164
【数８８】
0004653950.tif 000165
【０１２９】
実施例６４
【化７５】
0004653950.tif 000166
化合物２１（１７％）を、クロマトグラフィー精製の後に回収した。  
７６を方法Ｈを使用して得た。
【数８９】
0004653950.tif 000167
【数９０】
0004653950.tif 000168
【０１３０】
実施例６５
【化７６】
0004653950.tif 000169
反応を、方法Ｈを使用して化合物２２及び２３（３：１）の混合物で実施し、かくして化合物７７及び７８を、純粋な化合物としてクロマトグラフィーの後に単離した。
【数９１】
0004653950.tif 000170
【数９２】
0004653950.tif 000171
【０１３１】
実施例６６
【化７７】
0004653950.tif 000172
７９を方法Ｈを使用して得た。
【数９３】
0004653950.tif 000173
【０１３２】
実施例６７
【化７８】
0004653950.tif 000174
化合物６（４２％）を、クロマトグラフィー精製の後に回収した。  
８０を方法Ｈを使用して得た。
【数９４】
0004653950.tif 000175
【０１３３】
実施例６８
【化７９】
0004653950.tif 000176
化合物９（２５％）を、クロマトグラフィー精製の後に回収した。  
８１を方法Ｈを使用して得た。
【数９５】
0004653950.tif 000177
【０１３４】
実施例６９
【化８０】
0004653950.tif 000178
８２を方法Ｈを使用して得た。
【数９６】
0004653950.tif 000179
【数９７】
0004653950.tif 000180
【０１３５】
実施例７０
【化８１】
0004653950.tif 000181
８３を方法Ｈを使用して得た。
【数９８】
0004653950.tif 000182
【０１３６】
実施例７１
【化８２】
0004653950.tif 000183
８４を方法Ｈを使用して得た。
【数９９】
0004653950.tif 000184
【数１００】
0004653950.tif 000185
【０１３７】
実施例７２
【化８３】
0004653950.tif 000186
８５を方法Ｈを使用して得た。
【数１０１】
0004653950.tif 000187
【数１０２】
0004653950.tif 000188
【０１３８】
実施例７３
【化８４】
0004653950.tif 000189
８６を方法Ｈを使用して得た。
【数１０３】
0004653950.tif 000190
【数１０４】
0004653950.tif 000191
【０１３９】
実施例７４
【化８５】
0004653950.tif 000192
８７を方法Ｈを使用して得た。
【数１０５】
0004653950.tif 000193
【０１４０】
実施例７５
【化８６】
0004653950.tif 000194
８８を方法Ｈを使用して得た。
【数１０６】
0004653950.tif 000195
【０１４１】
実施例７６
【化８７】
0004653950.tif 000196
８９を方法Ｈを使用して得た。
【数１０７】
0004653950.tif 000197
【０１４２】
実施例７７
【化８８】
0004653950.tif 000198
９０を方法Ｈを使用して得た。
【数１０８】
0004653950.tif 000199
【数１０９】
0004653950.tif 000200
【０１４３】
実施例７８
【化８９】
0004653950.tif 000201
９１を方法Ｈを使用して得た。
【数１１０】
0004653950.tif 000202
【数１１１】
0004653950.tif 000203
【０１４４】
実施例７９
【化９０】
0004653950.tif 000204
化合物３０（１５％）を、クロマトグラフィー精製の後に回収した。  
９２を方法Ｈを使用して得た。
【数１１２】
0004653950.tif 000205
【数１１３】
0004653950.tif 000206
【０１４５】
実施例８０
【化９１】
0004653950.tif 000207
９３を方法Ｈを使用して得た。
【数１１４】
0004653950.tif 000208
【０１４６】
実施例８１
【化９２】
0004653950.tif 000209
９４を方法Ｈを使用して得た。
【数１１５】
0004653950.tif 000210
【数１１６】
0004653950.tif 000211
【０１４７】
実施例８２
【化９３】
0004653950.tif 000212
化合物３２（１５％）を、クロマトグラフィー精製の後に回収した。  
９５を方法Ｈを使用して得た。
【数１１７】
0004653950.tif 000213
【０１４８】
実施例８３
【化９４】
0004653950.tif 000214
９６を方法Ｈを使用して得た。
【数１１８】
0004653950.tif 000215
【０１４９】
実施例８４
【化９５】
0004653950.tif 000216
９７を方法Ｈを使用して得た。
【数１１９】
0004653950.tif 000217
【数１２０】
0004653950.tif 000218
【０１５０】
実施例８５
【化９６】
0004653950.tif 000219
化合物３６（１１％）を、クロマトグラフィー精製の後に回収した。  
９８を方法Ｈを使用して得た。
【数１２１】
0004653950.tif 000220
【０１５１】
実施例８６
【化９７】
0004653950.tif 000221
９９を方法Ｈを使用して得た。
【数１２２】
0004653950.tif 000222
【０１５２】
実施例８７
【化９８】
0004653950.tif 000223
１００を方法Ｈを使用して得た。
【数１２３】
0004653950.tif 000224
【０１５３】
実施例８８
【化９９】
0004653950.tif 000225
化合物５２（１９％）を、クロマトグラフィー精製の後に回収した。  
１０１を方法Ｈを使用して得た。
【数１２４】
0004653950.tif 000226
【数１２５】
0004653950.tif 000227
【０１５４】
実施例８９
【化１００】
0004653950.tif 000228
１０２を方法Ｈを使用して得た。
【数１２６】
0004653950.tif 000229
【０１５５】
実施例９０
方法Ｉ：ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ４．５：０．５（０．００５２Ｍ）における１当量の化合物３の溶液に対して、５当量のＣｕＢｒを加えた。２４時間後、反応をＮａＨＣＯ３で停止し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥した。フラッシュクロマトグラフィーにより純粋な化合物１０４を与える（５０％）。
【化１０１】
0004653950.tif 000230
１０４を方法Ｉを使用して得た。
【数１２７】
0004653950.tif 000231
【０１５６】
実施例９１
【化１０２】
0004653950.tif 000232
ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ３：１（０．０２７Ｍ）における化合物４の溶液に対して、１５当量のＫＯＨを加えた。反応混合物を室温で５時間攪拌した。この時間の後、反応をＮａＣｌで停止し、ＨＣｌの水溶液で希釈し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥した。フラッシュクロマトグラフィーにより純粋な化合物１０６を与える。
【数１２８】
0004653950.tif 000233
【０１５７】
実施例９２
方法Ａ：アルゴン下でＣＨ２Ｃｌ２（０．０３２Ｍ）における１当量の化合物１０６の溶液に対して、２当量の無水物と２当量のピリジンを加えた。反応をＴＬＣによって継続し、ＮａＨＣＯ３で停止し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥した。フラッシュクロマトグラフィーにより純粋な化合物を与える。
【化１０３】
0004653950.tif 000234
１０７を方法Ａを使用して得た。
【数１２９】
0004653950.tif 000235
【０１５８】
実施例９３
【化１０４】
0004653950.tif 000236
１０８を方法Ａを使用して得た。
【数１３０】
0004653950.tif 000237
【０１５９】
実施例９４
【化１０５】
0004653950.tif 000238
もし化合物１０６のアシル化反応を、塩基としてピリジンの代わりにＴＥＡ（１０当量）で実施したならば、化合物１０９が得られる（方法Ａ）。
【数１３１】
0004653950.tif 000239
【数１３２】
0004653950.tif 000240
【０１６０】
実施例９５
【化１０６】
0004653950.tif 000241
反応を、６当量の無水物と９当量の塩基で実施する（方法Ａ）。微量の化合物１１０もまた、アシル化反応をピリジンで実施した場合に得られ、化合物１０８が主たる産物である。
【数１３３】
0004653950.tif 000242
【０１６１】
実施例９６
方法Ｂ：室温でアルゴン下でＣＨ２Ｃｌ２（０．０３２Ｍ）における１当量の化合物１０６の溶液に対して、２当量の塩基と２当量の酸塩化物を加えた。反応をＴＬＣによって継続し、ＮａＨＣＯ３で停止し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出し、有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥した。フラッシュクロマトグラフィーにより純粋な化合物を与える。
【化１０７】
0004653950.tif 000243
１１１を方法Ｂを使用して得た。
【数１３４】
0004653950.tif 000244
【０１６２】
実施例９７
【化１０８】
0004653950.tif 000245
化合物１１１もまた、これらの反応条件（１０当量のブチリルクロリドと１０当量のＴＥＡ）においてマイナー化合物として単離される。
１１２を方法Ｂを使用して得た。
【数１３５】
0004653950.tif 000246
【０１６３】
実施例９８
【化１０９】
0004653950.tif 000247
１１３を方法Ｂを使用して得た。
【数１３６】
0004653950.tif 000248
【数１３７】
0004653950.tif 000249
【０１６４】
実施例９９
【化１１０】
0004653950.tif 000250
１１４を方法Ｂを使用して得た。
【数１３８】
0004653950.tif 000251
【数１３９】
0004653950.tif 000252
【０１６５】
実施例１００
【化１１１】
0004653950.tif 000253
１１５を方法Ｂを使用して得た。
【数１４０】
0004653950.tif 000254
【数１４１】
0004653950.tif 000255
【０１６６】
実施例１０１
【化１１２】
0004653950.tif 000256
１１６を方法Ｂを使用して得た。
【数１４２】
0004653950.tif 000257
【０１６７】
実施例１０２
【化１１３】
0004653950.tif 000258
１１７を方法Ｂを使用して得た。
【数１４３】
0004653950.tif 000259
【数１４４】
0004653950.tif 000260
【０１６８】
実施例１０３
【化１１４】
0004653950.tif 000261
１１８を方法Ｂを使用して得た。
【数１４５】
0004653950.tif 000262
【０１６９】
実施例１０４
方法Ｃ：アルゴン下でＣＨ２Ｃｌ２（０．０３２Ｍ）における１当量の化合物１０６の溶液に対して、２当量の酸、２当量のＤＭＡＰ、及び２当量のＥＤＣ．ＨＣｌを加えた。反応を室温で２時間攪拌した。この時間の後、ＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、塩水で洗浄し、有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥した。フラッシュクロマトグラフィーにより純粋な化合物を与える。
【化１１５】
0004653950.tif 000263
１１９を方法Ｃを使用して得た。
【数１４６】
0004653950.tif 000264
【０１７０】
実施例１０５
【化１１６】
0004653950.tif 000265
１２０を１０当量の各試薬で得た（方法Ｃ）。
【数１４７】
0004653950.tif 000266
【０１７１】
実施例１０６
【化１１７】
0004653950.tif 000267
１当量のパルミチン酸を使用した（方法Ｃ）。
【数１４８】
0004653950.tif 000268
【数１４９】
0004653950.tif 000269
【０１７２】
実施例１０７
【化１１８】
0004653950.tif 000270
化合物１２４を、ＤＭＡＰで不純状態で単離した。
１２３を方法Ｃを使用して得た。
【数１５０】
0004653950.tif 000271
１２４を方法Ｃを使用して得た。
【数１５１】
0004653950.tif 000272
【０１７３】
実施例１０８
【化１１９】
0004653950.tif 000273
１２５を方法Ｃを使用して得た。
【数１５２】
0004653950.tif 000274
【数１５３】
0004653950.tif 000275
【０１７４】
実施例１０９
方法Ｅ：室温でアルゴン下でＤＭＦ（０．０３２Ｍ）における１当量の化合物１０６の溶液に対して、２当量のＣｓ２ＣＯ３及び２当量のアルキルブロミドを加えた。反応をＴＬＣによって継続し、ＮａＨＣＯ３で停止し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出し、有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥した。フラッシュクロマトグラフィーにより純粋な化合物を与える。
【化１２０】
0004653950.tif 000276
１２６を方法Ｅを使用して得た。
【数１５４】
0004653950.tif 000277
１２７を方法Ｅを使用して得た。
【数１５５】
0004653950.tif 000278
【０１７５】
実施例１１０
【化１２１】
0004653950.tif 000279
化合物１０６（１５％）を、クロマトグラフィー精製の後に回収する。
１２８を方法Ｅを使用して得た。
【数１５６】
0004653950.tif 000280
化合物１０６（１５％）を、クロマトグラフィー精製の後に回収する。
１２９を方法Ｅを使用して得た。
【数１５７】
0004653950.tif 000281
【数１５８】
0004653950.tif 000282
【０１７６】
実施例１１１
【化１２２】
0004653950.tif 000283
化合物１０６（３３％）を、クロマトグラフィー精製の後に回収する。
１３０を方法Ｅを使用して得た。
【数１５９】
0004653950.tif 000284
１３１を方法Ｅを使用して得た。
【数１６０】
0004653950.tif 000285
【０１７７】
実施例１１２
【化１２３】
0004653950.tif 000286
１当量のアリルブロミド及び１当量のセシウムカルボナートで反応を完成させ、他の分画をクロマトグラフィー精製の後に単離し、それは化合物１３１と化合物１３２の混合物である（方法Ｅ）。
【数１６１】
0004653950.tif 000287
【数１６２】
0004653950.tif 000288
【数１６３】
0004653950.tif 000289
【０１７８】
実施例１１３
【化１２４】
0004653950.tif 000290
１３４を方法Ｅを使用して得た。
【数１６４】
0004653950.tif 000291
１３５を方法Ｅを使用して得た。
【数１６５】
0004653950.tif 000292
【０１７９】
実施例１１４
ＣＨ２Ｃｌ２／Ｈ２Ｏ／ＴＦＡ２：１：３．３（０．０１３Ｍ）における１当量の開始材料の溶液を、室温で１５分間攪拌した。反応をＴＬＣによって継続し、ＮａＨＣＯ３で中和し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出し、有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥した。フラッシュクロマトグラフィーで純粋な化合物を得る。
【化１２５】
0004653950.tif 000293
１３６は方法Ｆを使用して得た。
【数１６６】
0004653950.tif 000294
【０１８０】
実施例１１５
【化１２６】
0004653950.tif 000295
１３７は方法Ｆを使用して得た。
【数１６７】
0004653950.tif 000296
【０１８１】
実施例１１６
【化１２７】
0004653950.tif 000297
１３８は方法Ｆを使用して得た。
【数１６８】
0004653950.tif 000298
【０１８２】
実施例１１７
【化１２８】
0004653950.tif 000299
１３９は方法Ｆを使用して得た。
【数１６９】
0004653950.tif 000300
【数１７０】
0004653950.tif 000301
【０１８３】
実施例１１８
【化１２９】
0004653950.tif 000302
１４０は方法Ｆを使用して得た。
【数１７１】
0004653950.tif 000303
【０１８４】
実施例１１９
【化１３０】
0004653950.tif 000304
１４１は方法Ｆを使用して得た。
【数１７２】
0004653950.tif 000305
【０１８５】
実施例１２０
【化１３１】
0004653950.tif 000306
【数１７３】
0004653950.tif 000307
【数１７４】
0004653950.tif 000308
【０１８６】
実施例１２１
【化１３２】
0004653950.tif 000309
１４３は方法Ｆを使用して得た。
【数１７５】
0004653950.tif 000310
【０１８７】
実施例１２２
【化１３３】
0004653950.tif 000311
１４４は方法Ｆを使用して得た。
【数１７６】
0004653950.tif 000312
【０１８８】
実施例１２３
【化１３４】
0004653950.tif 000313
１４５は方法Ｆを使用して得た。
【数１７７】
0004653950.tif 000314
【数１７８】
0004653950.tif 000315
【０１８９】
実施例１２４
【化１３５】
0004653950.tif 000316
１４６は方法Ｆを使用して得た。
【数１７９】
0004653950.tif 000317
【数１８０】
0004653950.tif 000318
【０１９０】
実施例１２５
【化１３６】
0004653950.tif 000319
１４７は方法Ｆを使用して得た。
【数１８１】
0004653950.tif 000320
【０１９１】
実施例１２６
【化１３７】
0004653950.tif 000321
【数１８２】
0004653950.tif 000322
【０１９２】
実施例１２７
【化１３８】
0004653950.tif 000323
１４９は方法Ｆを使用して得た。
【数１８３】
0004653950.tif 000324
【０１９３】
実施例１２８
【化１３９】
0004653950.tif 000325
１５０は方法Ｆを使用して得た。
【数１８４】
0004653950.tif 000326
【数１８５】
0004653950.tif 000327
【０１９４】
実施例１２９
【化１４０】
0004653950.tif 000328
１５１は方法Ｆを使用して得た。
【数１８６】
0004653950.tif 000329
【０１９５】
実施例１３０
【化１４１】
0004653950.tif 000330
１５２は方法Ｆを使用して得た。
【数１８７】
0004653950.tif 000331
【０１９６】
実施例１３１
【化１４２】
0004653950.tif 000332
１５３は方法Ｆを使用して得た。
【数１８８】
0004653950.tif 000333
【０１９７】
実施例１３２
【化１４３】
0004653950.tif 000334
１５４は方法Ｆを使用して得た。
【数１８９】
0004653950.tif 000335
【０１９８】
実施例１３３
【化１４４】
0004653950.tif 000336
１５５は方法Ｆを使用して得た。
【数１９０】
0004653950.tif 000337
【数１９１】
0004653950.tif 000338
【０１９９】
実施例１３４
【化１４５】
0004653950.tif 000339
１５６は方法Ｆを使用して得た。
【数１９２】
0004653950.tif 000340
【０２００】
実施例１３５
【化１４６】
0004653950.tif 000341
１５７は方法Ｆを使用して得た。
【数１９３】
0004653950.tif 000342
【０２０１】
実施例１３６
【化１４７】
0004653950.tif 000343
１５８は方法Ｆを使用して得た。
【数１９４】
0004653950.tif 000344
【０２０２】
実施例１３７
方法Ｊ：ＣＨ３ＣＮ／ＣＨ２Ｃｌ２１．２：１における１当量の開始材料の溶液に対して、ＮａＩ（６当量）及びＴＭＳＣｌ（６当量）を加えた。１時間後、反応を塩水で停止し、水性相をＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥した。フラッシュクロマトグラフィーで純粋な化合物を得る。
【化１４８】
0004653950.tif 000345
１５９を方法Ｊを使用して得た。
【数１９５】
0004653950.tif 000346
【０２０３】
実施例１３８
【化１４９】
0004653950.tif 000347
１６０を方法Ｊを使用して得た。
【数１９６】
0004653950.tif 000348
【０２０４】
実施例１３９
方法Ｈ：ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ３：２（０．００９Ｍ）における１当量の開始材料の溶液に対して、３０当量のＡｇＮＯ３を加えた。２４時間後、反応を塩水の飽和溶液とＮａＨＣＯ３の１：１混合物で停止し、１０分間攪拌し、希釈し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥した。フラッシュクロマトグラフィーで純粋な化合物を得る。
【化１５０】
0004653950.tif 000349
１６１を方法Ｈを使用して得た。
【数１９７】
0004653950.tif 000350
【０２０５】
実施例１４０
【化１５１】
0004653950.tif 000351
１６２を方法Ｈを使用して得た。
【数１９８】
0004653950.tif 000352
【０２０６】
実施例１４１
【化１５２】
0004653950.tif 000353
１６３を方法Ｈを使用して得た。
【数１９９】
0004653950.tif 000354
【０２０７】
実施例１４２
【化１５３】
0004653950.tif 000355
１６４を方法Ｈを使用して得た。
【数２００】
0004653950.tif 000356
【０２０８】
実施例１４３
【化１５４】
0004653950.tif 000357
１６５を方法Ｈを使用して得た。
【数２０１】
0004653950.tif 000358
【０２０９】
実施例１４４
【化１５５】
0004653950.tif 000359
１６６を方法Ｈを使用して得た。
【数２０２】
0004653950.tif 000360
【数２０３】
0004653950.tif 000361
【０２１０】
実施例１４５
【化１５６】
0004653950.tif 000362
１６７を方法Ｈを使用して得た。
【数２０４】
0004653950.tif 000363
【０２１１】
実施例１４６
【化１５７】
0004653950.tif 000364
１６８を方法Ｈを使用して得た。
【数２０５】
0004653950.tif 000365
【数２０６】
0004653950.tif 000366
【０２１２】
実施例１４７
【化１５８】
0004653950.tif 000367
１６９を方法Ｈを使用して得た。
【数２０７】
0004653950.tif 000368
【０２１３】
実施例１４８
【化１５９】
0004653950.tif 000369
１７０を方法Ｈを使用して得た。
【数２０８】
0004653950.tif 000370
【０２１４】
実施例１４９
【化１６０】
0004653950.tif 000371
１７１を方法Ｈを使用して得た。
【数２０９】
0004653950.tif 000372
【０２１５】
実施例１５０
【化１６１】
0004653950.tif 000373
１７２を方法Ｈを使用して得た。
【数２１０】
0004653950.tif 000374
【数２１１】
0004653950.tif 000375
【０２１６】
実施例１５１
【化１６２】
0004653950.tif 000376
１７３を方法Ｈを使用して得た。
【数２１２】
0004653950.tif 000377
【数２１３】
0004653950.tif 000378
【０２１７】
実施例１５２
【化１６３】
0004653950.tif 000379
１７４を方法Ｈを使用して得た。
【数２１４】
0004653950.tif 000380
【０２１８】
実施例１５３
【化１６４】
0004653950.tif 000381
１７５を方法Ｈを使用して得た。
【数２１５】
0004653950.tif 000382
【０２１９】
実施例１５４
【化１６５】
0004653950.tif 000383
１７６を方法Ｈを使用して得た。
【数２１６】
0004653950.tif 000384
【０２２０】
実施例１５５
方法Ｉ：ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ４：１（０．００９Ｍ）における１当量の開始材料の溶液に対して、５当量のＢｒＣｕを加えた。２４時間後、反応をＮＨ４Ｃｌで停止し、ＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、塩水とＮａＨＣＯ３で洗浄し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥した。フラッシュクロマトグラフィーで純粋な化合物を得る。
【化１６６】
0004653950.tif 000385
１７７を方法Ｉを使用して得た。
【数２１７】
0004653950.tif 000386
【０２２１】
実施例１５６
【化１６７】
0004653950.tif 000387
１７８を方法Ｉを使用して得た。
【数２１８】
0004653950.tif 000388
【０２２２】
実施例１５７
【化１６８】
0004653950.tif 000389
１７９を方法Ｉを使用して得た。
【数２１９】
0004653950.tif 000390
【数２２０】
0004653950.tif 000391
【０２２３】
実施例１５８
【化１６９】
0004653950.tif 000392
１８０を方法Ｉを使用して得た。
【数２２１】
0004653950.tif 000393
【０２２４】
実施例１５９
【化１７０】
0004653950.tif 000394
１８１を方法Ｉを使用して得た。
【数２２２】
0004653950.tif 000395
【０２２５】
実施例１６０
方法Ｋ：ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ４：１（０．００９Ｍ）における１当量の開始材料の溶液に対して、５当量のＣｌＣｕを加えた。２４時間後、反応をＮＨ４Ｃｌで停止し、ＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、塩水とＮａＨＣＯ３で洗浄し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥した。フラッシュクロマトグラフィーで純粋な化合物を得る。
【化１７１】
0004653950.tif 000396
１８２を方法Ｉを使用して得た。
【数２２３】
0004653950.tif 000397
【０２２６】
実施例１６１
【化１７２】
0004653950.tif 000398
１８３を方法Ｉを使用して得た。
【数２２４】
0004653950.tif 000399
【０２２７】
実施例１６２
【化１７３】
0004653950.tif 000400
ＭｅＯＨ（０．１９Ｍ）におけるＥｔ−７４３の溶液に対して、１５当量のＫＯＨを加えた。反応混合物を室温で１時間３０分攪拌した。この時間の後、反応をＮＨ４Ｃｌで停止し、希釈し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥した。クロマトグラフィーにより純粋なＥｔ−７０１を得る。
【数２２５】
0004653950.tif 000401
【０２２８】
実施例１６３
【化１７４】
0004653950.tif 000402
室温でアルゴン下でＭｅＯＨ（０．００５Ｍ）におけるＥｔ−７２９の溶液に対して、３０当量のＫＣＮを加えた。反応混合物を６時間攪拌した。この時間の後、反応をＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、ＮａＣｌで洗浄し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥した。フラッシュクロマトグラフィーにより純粋な化合物１８４を得る（２０％）。
【数２２６】
0004653950.tif 000403
【数２２７】
0004653950.tif 000404
【０２２９】
実施例１６４
【化１７５】
0004653950.tif 000405
室温でアルゴン下でアセトニトリル（０．０１６Ｍ）におけるＥｔ−７２９の溶液に対して、２００当量のホルマリンと１０当量のＮａＢＨ３ＣＮを加えた。反応混合物を１時間攪拌し、次いで酢酸（４０当量）を加え、反応を１時間以上放置した。この時間の後、反応をＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、ＮａＨＣＯ３の飽和水溶液を加え、水性相をＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥した。フラッシュクロマトグラフィーにより純粋な化合物１８５を得る（６０％）。
【数２２８】
0004653950.tif 000406
【０２３０】
実施例１６５
【化１７６】
0004653950.tif 000407
室温でアルゴン下でＭｅＯＨ（０．００５Ｍ）におけるＥｔ−７２９の溶液に対して、４．２当量のＫＣＮと４．２当量の酢酸を加えた。反応混合物を１時間３０分攪拌した。この時間の後、反応をＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、ＮａＨＣＯ３で停止し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥した。フラッシュクロマトグラフィーにより純粋な化合物１８６を得る（９３％）。
【数２２９】
0004653950.tif 000408
【０２３１】
実施例１６６
【化１７７】
0004653950.tif 000409
室温でアルゴン下でＣＨ２Ｃｌ２（０．０３６Ｍ）における１当量の化合物１８６の溶液に対して、４０当量のＰｙｒ、２０当量のアリルクロロホルマート、及び触媒量のＤＭＡＰを、２６時間の間で短い期間で加えた。次いで反応を水／氷で停止した。水性相をＣＨ２Ｃｌ２で抽出し、有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥した。フラッシュクロマトグラフィーにより純粋な化合物１８７を得る（８８％）。
【数２３０】
0004653950.tif 000410
【０２３２】
実施例１６７
方法Ａ：アルゴン下でＣＨ２Ｃｌ２（０．０３２Ｍ）における１当量の開始材料の溶液に対して、２当量の無水物と２当量の塩基を加えた。反応をＴＬＣによって継続し、ＮａＨＣＯ３で停止し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出し、有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥した。フラッシュクロマトグラフィーにより純粋な化合物を得る。
【化１７８】
0004653950.tif 000411
化合物１８８を、ＣＨ３ＣＮにおいて塩基の存在しない１．５当量の（（ＣＨ３）３ＣＯＣＯ）２Ｏで得る。化合物１８９及び１９０を、ＣＨ３ＣＮにおける１当量の（（ＣＨ３）３ＣＯＣＯ）２Ｏと４当量のｉＰｒ２ＮＥｔで得る。これらの二つの化合物の割合は、他の実験条件（反応時間と試薬の当量）を使用して変更できる；反応を７当量の（（ＣＨ３）３ＣＯＣＯ）２Ｏと２１当量のｉＰｒ２ＮＥｔで実施すると、化合物１９０が５日後に得られる（７８％）。
【数２３１】
0004653950.tif 000412
【数２３２】
0004653950.tif 000413
【数２３３】
0004653950.tif 000414
【数２３４】
0004653950.tif 000415
【０２３３】
実施例１６８
【化１７９】
0004653950.tif 000416
化合物１９１は、３当量の無水物としての無水酢酸と５当量の塩基としてのｐｙｒを使用して得られる（方法Ａ）。
【数２３５】
0004653950.tif 000417
【０２３４】
実施例１６９
方法Ｂ：室温でアルゴン下でＣＨ２Ｃｌ２（０．０３２Ｍ）における１当量の開始材料の溶液に対して、２当量の塩基と２当量の酸塩化物を加えた。反応をＴＬＣによって継続し、ＮａＨＣＯ３で停止し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出し、有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥した。フラッシュクロマトグラフィーにより純粋な化合物を得る。
【化１８０】
0004653950.tif 000418
化合物１９２を、２．５当量のブチリルクロリドと３．５当量のピリジンで得る。一定量の開始材料（１１％）が、クロマトグラフィー精製の後に回収された（方法Ｂ）。
【数２３６】
0004653950.tif 000419
【０２３５】
実施例１７０
【化１８１】
0004653950.tif 000420
化合物１９３は、１０当量の酸塩化物としてのブチリルクロリドと、１０当量の塩基としてのＥｔ３Ｎを使用して得られる（方法Ｂ）。化合物１９２（１３％）が、クロマトグラフィー精製の後に回収される。
【数２３７】
0004653950.tif 000421
【０２３６】
実施例１７１
【化１８２】
0004653950.tif 000422
化合物１９４は、２．５当量の酸塩化物としてのシンナモイルクロリドと、３．５当量の塩基としてのｐｙｒを使用して得られる（方法Ｂ）。化合物１８８（８％）が、クロマトグラフィー精製の後に回収される。
【数２３８】
0004653950.tif 000423
【０２３７】
実施例１７２
方法Ｃ：アルゴン下でＣＨ２Ｃｌ２（０．０３２Ｍ）における１当量の開始材料の溶液に対して、２当量の酸、２当量のＤＭＡＰ、及び２当量のＥＤＣ．ＨＣｌを加えた。反応を室温で２時間攪拌した。この時間の後、ＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、塩水で洗浄し、有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥した。フラッシュクロマトグラフィーにより純粋な化合物を得る。
【化１８３】
0004653950.tif 000424
１．５当量の酸としてのオクタン酸を使用して、化合物１９５と１９６の混合物を得る。
【数２３９】
0004653950.tif 000425
【数２４０】
0004653950.tif 000426
【数２４１】
0004653950.tif 000427
【０２３８】
実施例１７３
【化１８４】
0004653950.tif 000428
１．５当量の酸としてのパルミチン酸を使用して、化合物１９７と１９８の混合物を得る（方法Ｃ）。
【数２４２】
0004653950.tif 000429
【数２４３】
0004653950.tif 000430
【数２４４】
0004653950.tif 000431
【０２３９】
実施例１７４
【化１８５】
0004653950.tif 000432
室温でアルゴン下でＤＭＦ（０．０２Ｍ）における１当量の化合物１９０の溶液に対して、０．７当量のＣｓ２ＣＯ３と２当量のアリルブロミドを加えた。反応を７２時間攪拌し、次いでＡｃＯＨで停止した。粗物をＨｅｘ／ＥｔＯＡｃ１：３で希釈し、ＮａＣｌの飽和溶液で洗浄し、水性相をＨｅｘ／ＥｔＯＡｃ１：３で希釈で抽出し、有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥した。フラッシュクロマトグラフィーにより純粋な化合物１９９を得る（６６％）。
【数２４５】
0004653950.tif 000433
【０２４０】
実施例１７５
【化１８６】
0004653950.tif 000434
室温でアルゴン下でＣＨ３ＣＮ（０．０１６Ｍ）における化合物１８８の溶液に対して、１００当量のホルマリン（水中に３７重量％）と５当量のＮａＣＮＢＨ３を加えた。１時間後、２０当量の酢酸を加えた。反応混合物を２時間以上攪拌した。この時間の後、ＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、ＮａＨＣＯ３で中和し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥した。フラッシュクロマトグラフィーにより純粋な化合物を得る（８６％）。
【数２４６】
0004653950.tif 000435
【０２４１】
実施例１７６
方法Ｆ：ＣＨ２Ｃｌ２／Ｈ２Ｏ／ＴＦＡ２：１：３．３（０．０１３Ｍ）における１当量の開始材料の溶液を、室温で１５分間攪拌した。反応をＴＬＣによって継続し、ＮａＨＣＯ３で中和し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出し、有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥した。フラッシュクロマトグラフィーにより純粋な化合物を得る。
【化１８７】
0004653950.tif 000436
２０１を方法Ｆを使用して得た。
【数２４７】
0004653950.tif 000437
【０２４２】
実施例１７７
【化１８８】
0004653950.tif 000438
２０２１を方法Ｆを使用して得た。
【数２４８】
0004653950.tif 000439
【数２４９】
0004653950.tif 000440
【０２４３】
実施例１７８
【化１８９】
0004653950.tif 000441
２０３を方法Ｆを使用して得た。
【数２５０】
0004653950.tif 000442
【０２４４】
実施例１７９
【化１９０】
0004653950.tif 000443
２０４を方法Ｆを使用して得た。
【数２５１】
0004653950.tif 000444
【０２４５】
実施例１８０
【化１９１】
0004653950.tif 000445
２０５を方法Ｆを使用して得た。
【数２５２】
0004653950.tif 000446
【０２４６】
実施例１８１
【化１９２】
0004653950.tif 000447
２０６を方法Ｆを使用して得た。
【数２５３】
0004653950.tif 000448
【０２４７】
実施例１８２
【化１９３】
0004653950.tif 000449
２０７を方法Ｆを使用して得た。
【数２５４】
0004653950.tif 000450
【数２５５】
0004653950.tif 000451
【０２４８】
実施例１８３
【化１９４】
0004653950.tif 000452
２０８を方法Ｆを使用して得た。
【数２５６】
0004653950.tif 000453
【数２５７】
0004653950.tif 000454
【０２４９】
実施例１８４
【化１９５】
0004653950.tif 000455
２０９を方法Ｆを使用して得た。
【数２５８】
0004653950.tif 000456
【０２５０】
実施例１８５
方法Ｈ：ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ３：２（０．００９Ｍ）における１当量の開始材料の溶液に対して、３０当量のＡｇＮＯ３を加えた。２４時間後、反応を、塩水の飽和溶液とＮａＨＣＯ３の１：１混合物で停止し、１０分攪拌し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥した。クロマトグラフィーにより純粋な化合物を得る。
【化１９６】
0004653950.tif 000457
２１０を方法Ｈを使用して得た。
【数２５９】
0004653950.tif 000458
【０２５１】
実施例１８６
【化１９７】
0004653950.tif 000459
２１１を方法Ｆを使用して得た。
【数２６０】
0004653950.tif 000460
【数２６１】
0004653950.tif 000461
【０２５２】
実施例１８７
【化１９８】
0004653950.tif 000462
２１２を方法Ｆを使用して得た。
【数２６２】
0004653950.tif 000463
【０２５３】
実施例１８８
【化１９９】
0004653950.tif 000464
２１３を方法Ｆを使用して得た。
【数２６３】
0004653950.tif 000465
【数２６４】
0004653950.tif 000466
【０２５４】
実施例１８９
【化２００】
0004653950.tif 000467
２１４を方法Ｆを使用して得た。
【数２６５】
0004653950.tif 000468
【０２５５】
実施例１９０
【化２０１】
0004653950.tif 000469
２１５を方法Ｆを使用して得た。
【数２６６】
0004653950.tif 000470
【０２５６】
実施例１９１
【化２０２】
0004653950.tif 000471
２１６を方法Ｆを使用して得た。
【数２６７】
0004653950.tif 000472
【０２５７】
実施例１９２
【化２０３】
0004653950.tif 000473
２１７を方法Ｆを使用して得た。
【数２６８】
0004653950.tif 000474
【０２５８】
実施例１９３
無水ＤＭＦ（０．２６Ｍ）におけるＮ−メチルピリジン−４−カルボキシアルデヒドイオディドの溶液を、無水トルエン（２×５ｍＬ）で処理した。無水ＣＨ２Ｃｌ２（０．０３Ｍ）における化合物２１８（１１８．７ｍｇ、１当量）（無水トルエン２×５ｍＬで以前に処理された）の溶液を、Ｎ−メチルピリジン−４−カルボキシアルデヒドイオディドの溶液に２３℃で漏斗を介して加えた。反応混合物を２３℃で４時間攪拌した。この時間の後、ＤＢＵ（１．０当量）を２３℃で滴下し、２３℃で１５分攪拌した。新鮮なシュウ酸の飽和水溶液（５．４ｍＬ）を反応混合物に加え、２３℃で３０分攪拌した。次いで反応混合物を０℃に冷却し、ＮａＨＣＯ３を少しずつ加え、引き続きＮａＨＣＯ３の水性飽和溶液を加えた。混合物をＥｔ２Ｏで抽出した。組み合わせた有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。フラッシュクロマトグラフィーにより純粋な化合物２１９（５４％）を得る。
【化２０４】
0004653950.tif 000475
【数２６９】
0004653950.tif 000476
【０２５９】
実施例１９４
ＥｔＯＨ（０．０３Ｍ）における１当量の化合物２１９の溶液に対して、５当量のＡｃＯＨと３．５当量の２−[３−ヒドロキシ−４−メトキシフェニル]エチルアミンを加えた。反応を一晩攪拌した。次いで溶媒を減圧下で除去した。フラッシュクロマトグラフィーにより純粋な化合物（６２％）を得る。
【化２０５】
0004653950.tif 000477
【数２７０】
0004653950.tif 000478
【０２６０】
実施例１９５
ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ３：２（０．０１５Ｍ）における１当量の化合物２２０の溶液に対して、３０当量のＡｇＮＯ３を加えた。反応を光から保護して２４時間攪拌した。この時間の後、２ｍＬのＮａＣｌの飽和溶液と２ｍＬのＮａＨＣＯ３の飽和溶液を加え、粗物を１０分間攪拌した。次いでＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、１５ｍＬの塩水で洗浄し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。予備的クロマトグラフィーにより、純粋な化合物（１１％）を得る。
【化２０６】
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【数２７１】
0004653950.tif 000480
【０２６１】
実施例１９６
室温でアルゴン下でＥｔＯＨ（０．０６４Ｍ）における１当量の化合物２２２の溶液に対して、３．５当量のａ−エチル−３−ヒドロキシ−４−メチルフェネチルアミンクロルヒドラートと、２当量のＫ２ＣＯ３と、シリカゲルを加えた。反応を室温で７時間攪拌した。次いで溶媒を減圧下で除去した。フラッシュクロマトグラフィーにより純粋な化合物（６８％）を得る。化合物２２３を、二つの異性体の混合物として単離する。これらの化合物はまた、反応を溶媒として酢酸を使用して実施し、５０℃で２４時間加熱した際に得ることができる（９９％）。
【化２０７】
0004653950.tif 000481
【数２７２】
0004653950.tif 000482
【数２７３】
0004653950.tif 000483
【０２６２】
実施例１９７
ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ３：２（０．０１Ｍ）における１当量の化合物２２３の溶液に対して、３０当量のＡｇＮＯ３を加えた。反応を光から保護して室温で２４時間攪拌した。この時間の後、反応をＮａＣｌとＮａＨＣＯ３の飽和水溶液の１：１の混合物で停止し、１０分間攪拌し、希釈し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。クロマトグラフィーにより、二つの異性体化合物２２４の混合物を得る（７２％）。
【化２０８】
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【数２７４】
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【数２７５】
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【０２６３】
抗腫瘍スクリーニングのためのバイオアッセイ
これらのアッセイの結果は、治療されるサンプルに対する細胞の継続的な曝露による"in vitro"の腫瘍細胞培養物の増殖を阻害することである。
細胞系     
名称       ATCC No. 種     組織       特徴
P-388      CCL-46   マウス 腹水液     リンパ性新生物
K-562      CCL-243  ヒト   白血病     赤白血病（胸膜滲出液）
A-549      CCL-185  ヒト   肺         肺カルシノーマ”ＮＳＣＬ”
SK-MEL-28  HTB-72   ヒト   メラノーマ 悪性メラノーマ
HT-29      HTB-38   ヒト   大腸       大腸アデノカルシノーマ
LoVo       CCL-229  ヒト   大腸       大腸アデノカルシノーマ
LoVo-Dox            ヒト   大腸       大腸アデノカルシノーマ（ＭＤＲ）
SW620      CCL-228  ヒト   大腸       大腸アデノカルシノーマ（リンパ節転移）
DU-145     HTB-81   ヒト   前立腺     前立腺カルシノーマ、アンドロゲンレセプ
ター前立腺アデノカルシノーマではない
LNCaP      CRL-1740 ヒト   前立腺     アンドロゲンレセプター乳アデノカルシノ
ーマを有する
SK-BR-3    HTB-30   ヒト   乳房       Ｈｅｒ２／ｎｅｕ＋（胸膜滲出液）
乳アデノカルシノーマ
MCF-7      HTB-22   ヒト   乳房       （胸膜滲出液）
乳アデノカルシノーマ
MDA-MB-231 HTB-26   ヒト   乳房       Ｈｅｒ２／ｎｅｕ＋（胸膜滲出液）
IGROV-1             ヒト   卵巣       卵巣アデノカルシノーマ
IGROV-ET            ヒト   卵巣       卵巣アデノカルシノーマ、ＥＴ−７４３
耐性細胞の特徴を有する
SK-OV-3    HTB-77   ヒト   卵巣       卵巣アデノカルシノーマ
（悪性腹水）  
OVCAR-3    HTB-161  ヒト   卵巣       卵巣アデノカルシノーマ
HeLa       CCL-2    ヒト   子宮頸     子宮頚類上皮カルシノーマ
HeLa-APL   CCL-3    ヒト   子宮頚     子宮頚類上皮カルシノーマ
アプリジン耐性細胞の特徴を有する
A-498      HTB-44   ヒト   腎臓       腎臓カルシノーマ
PANC-1     CRL-1469 ヒト   膵臓       膵臓類上皮カルシノーマ
HMEC1               ヒト   内皮
【０２６４】
１°−細胞のカウントによる細胞増殖の阻害
このアッセイの形態は、１６ｍｍの直径の２４穴マルチ皿を使用する(Bergeron, 1984; Schroeder, 1981)。使用される腫瘍細胞系は、Ｐ−３８８(ATCC CCL 46)、ＤＢＡ−２マウス由来のリンパ性新生物の懸濁培養物；Ａ−５４９(ATCC CCL 185)、ヒト肺カルシノーマの単一層培養物；ＨＴ−２９(ATCC HTB-38)、ヒト大腸カルシノーマの単一層培養物；ＭＥＬ−２８(ATCC HTB-72)、ヒトメラノーマの単一層培養物、及びＤＵ−１４５(ATCC HTB-81)、ヒト前立腺カルシノーマの単一層培養物である。
【０２６５】
細胞を、エールバランス塩、非必須アミノ酸、２．０ｍＭ Ｌ−グルタミンを含み、二炭酸ナトリウムを含まず、１０％胎児ウシ血清（ＦＣＳ）、１０−２Ｍ、二炭酸ナトリウム、及び０．１Ｕ／ｌペニシリンＧ＋０．１ｇ／ｌ硫酸ストレプトマイシンを補ったイーグルス最小必須培地（ＥＭＥＭ／ｎｅａａ）で対数増殖期に維持した。実験のため、細胞をトリプシンを使用して飽和前培養物から回収し、プレーティングの前に新鮮な培地で再懸濁した。
【０２６６】
Ｐ−３８８細胞を、各種の濃度の試験サンプルを含むＥＭＥＭ５％ＦＣＳの１ｍｌの等量物でウェル当たり１×１０４細胞で１６ｍｍ直径のウェルに蒔いた。薬剤を含まない別個のセットの培養物を、増殖のコントロールとして蒔き、細胞が対数増殖期で維持されていることを確認した。全ての測定を二重に実施する。３７℃、５％ＣＯ２、９８％の相対湿度でインキュベートした３日後、コントロールウェルにおける増殖に対する薬剤と、ウェルにおける増殖を比較することによっておよそのＩＣ５０を測定した。
【０２６７】
Ａ−５４９、ＨＴ−３９、ＭＥＬ−２８、及びＤＵ−１４５細胞を、各種の濃度の試験サンプルを含むＥＭＥＭ５％ＦＣＳの１ｍｌ等量物にウェル当たり１×１０４細胞で１６ｍｍの直径のウェルに蒔いた。薬剤を含まない別個のセットの培養物を、増殖のコントロールとして蒔き、細胞が対数増殖期で維持されていることを確認した。全ての測定を二重で実施する。３７℃、５％ＣＯ２、９８％の相対湿度でインキュベートした３日後、細胞を０．１％クリスタルバイオレットで染色する。コントロールウェルにおける増殖に対する薬剤と、ウェルにおける増殖を比較することによっておよそのＩＣ５０を測定した。
【０２６８】
活性の定量化のため、インキュベーション時間の後、細胞をトリプシン処理し、Coulter Counter ZMでカウントした。全てのカウント（ウェル当たりの全細胞）は、二重のウェルの平均値を表す。％Ｇは薬剤を含まない培養物に対する細胞色のパーセンテージである。これらのアッセイの結果を使用して、投与量応答曲線を生産し、それはより正確なＩＣ５０を決定する（５０％細胞増殖阻害を生産するサンプル濃度）。
【０２６９】
得られた結果は、潜在的なガンの治療としての特定の薬剤の有用性を示すであろう。この方法のため、１μｇ／ｍｌより小さいＩＣ５０値を示す化合物を選択し、更なる研究を継続する。ＩＣ５０のデータは、薬剤が細胞静止性であることだけでなく、腫瘍の減少の観点で可能性を有することを予測させる。
【０２７０】
２°−発色アッセイによる細胞増殖の阻害
スルホホダミンＢ（ＳＲＢ）反応を使用する発色測定タイプのアッセイが、細胞増殖と生存可能性の定量的測定のために測定されている(Philip Shehan等, (1990), New colorimetric cytotoxicity assay for anticancer drug screening, J. Natl. Cancer Inst., 82: 1107-1112に記載された方法による)。
【０２７１】
このアッセイ形態は、９ｍｍの直径の９６穴細胞培養ミクロプレートを使用する(Faircloth, 1988; Mosmann, 1983)。ほとんどの細胞系を、各種のヒトガンタイプから由来するAmerican Type Culture Collection (ATCC)から得る。
【０２７２】
細胞を、０．１ｇ／ｌのペニシリン及び０．１ｇ／ｌの硫酸ストレプトマイシンで補ったＲＰＭＩ１６４０ １０％ＦＢＳで維持し、次いで３７℃、５％ＣＯ２、９８％の相対湿度でインキュベートする。実験のため、トリプシンを使用して細胞を飽和前の培養物から回収し、プレーティングの前に新鮮な培地に再懸濁した。
【０２７３】
細胞を、１９５μｌの培地の等量物においてウェル当たり５×１０３細胞で９６穴ミクロタイタープレートに蒔き、１８時間薬剤を含まない培地で増殖させることによって、細胞をプレートの表面に結合させる。その後、ＤＭＳＯ／ＥｔＯＨ／ＰＢＳ（０．５：０．５：９９）に溶解した、１０から１０−８μｇ／ｍｌの範囲で５μｌの等量物においてサンプルを加える。４８時間の曝露の後、ＳＲＢ方法体系によって抗腫瘍効果を測定する：冷却５０％（ｗｅ／ｖｏｌ）トリクロロ酢酸（ＴＣＡ）の５０μｌを加え、４℃で６０分間インキュベートすることによって細胞を固定する。プレートを脱イオン水で洗浄し、乾燥する。１００μｌのＳＲＢ溶液（１％酢酸において０．４％ｗｔ／ｖｏｌ）を各ミクロタイターウェルに加え、室温で１０分間インキュベートする。非結合ＳＲＢを１％酢酸で洗浄することによって除去する。プレートを風乾し、結合染料をトリスバッファーで溶解する。４９０ｎｍの単一の波長で自動化分光光度プレートリーダーで、光学密度を読み取る。
【０２７４】
三重のウェルから得られたデータの平均＋／−ＳＤの値を計算する。細胞応答のためのいくつかのパラメーターは以下のように計算できる：ＧＩ＝増殖阻害、ＴＧＩ＝全増殖阻害（細胞静止効果）、及びＬＣ＝細胞殺傷（細胞毒性効果）。
【０２７５】
得られた結果は、潜在的なガンの治療としての特定の薬剤の有用性を示すであろう。この方法のため、１０μｇ／ｍｌより小さいＧＩ５０値を示す化合物を選択し、更なる研究を継続する。ＧＩＩＣ５０のデータは、薬剤が細胞静止性であることだけでなく、腫瘍の減少の観点で可能性を有することを予測させる。
【０２７６】
活性データ
【表１】
0004653950.tif 000487
【表２】
0004653950.tif 000488
【表３】
0004653950.tif 000489
【表４】
0004653950.tif 000490
【表５】
0004653950.tif 000491
【表６】
0004653950.tif 000492
【表７】
0004653950.tif 000493
【表８】
0004653950.tif 000494
【表９】
0004653950.tif 000495
【表１０】
0004653950.tif 000496
【表１１】
0004653950.tif 000497
【表１２】
0004653950.tif 000498
【表１３】
0004653950.tif 000499
【表１４】
0004653950.tif 000500
【表１５】
0004653950.tif 000501
【表１６】
0004653950.tif 000502
【表１７】
0004653950.tif 000503
【表１８】
0004653950.tif 000504
【表１９】
0004653950.tif 000505
【表２０】
0004653950.tif 000506
【表２１】
0004653950.tif 000507
【表２２】
0004653950.tif 000508
【表２３】
0004653950.tif 000509
【表２４】
0004653950.tif 000510
【表２５】
0004653950.tif 000511
【表２６】
0004653950.tif 000512
【表２７】
0004653950.tif 000513
【表２８】
0004653950.tif 000514
【表２９】
0004653950.tif 000515
【表３０】
0004653950.tif 000516
【表３１】
0004653950.tif 000517
【表３２】
0004653950.tif 000518
【表３３】
0004653950.tif 000519
【表３４】
0004653950.tif 000520
【表３５】
0004653950.tif 000521
【表３６】
0004653950.tif 000522
【表３７】
0004653950.tif 000523
【表３８】
0004653950.tif 000524
【表３９】
0004653950.tif 000525
【表４０】
0004653950.tif 000526
【表４１】
0004653950.tif 000527
【表４２】
0004653950.tif 000528
【表４３】
0004653950.tif 000529
【表４４】
0004653950.tif 000530
【表４５】
0004653950.tif 000531
【表４６】
0004653950.tif 000532
【表４７】
0004653950.tif 000533
【表４８】
0004653950.tif 000534
【表４９】
0004653950.tif 000535
【表５０】
0004653950.tif 000536
【０２７７】
毒性データ
毒性を、Toxicology in Vitro, 15 (2001) 571-577, J. Luber Narod等："Evaluation of the use of in vitro methodologies as tools for screening new compounds for potential in vivo toxicity"に報告された方法によって評価した。
【表５１】
0004653950.tif 000537
【表５２】
0004653950.tif 000538