(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
メソ−２，３−ビス（ベンジルアミノ）コハク酸ジアルカリ金属塩から出発する、それぞれ２−オキソ−１，３−ジベンジル−４，５−イミダゾリジン−ジカルボン酸及び２−オキソ−１，３−ジベンジル−４，５−イミダゾリジンジカルボン酸無水物の製造方法であって、メソ−２，３−ビス（ベンジルアミノ）コハク酸ジアルカリ金属塩とクロロギ酸フェニルとを水混和性エーテルとアルカリ金属水酸化物水溶液との２：１〜１：１混合物よりなる単相溶媒系中で４０℃を超えない温度で反応させ、生じる２−オキソ−１，３−ジベンジル−cis−４，５−イミダゾリジンジカルボン酸ジアルカリ金属塩を酸性化により所望の２−オキソ−１，３−ジベンジル−cis−４，５−イミダゾリジンジカルボン酸に変換してこれを単離するか、又は生じる２−オキソ−１，３−ジベンジル−４，５−イミダゾリジンジカルボン酸を有機溶媒としての芳香族炭化水素中で無水酢酸と一緒に加熱することにより所望の２−オキソ−１，３−ジベンジル−cis−４，５−イミダゾリジンジカルボン酸無水物に変換してこれを単離することを特徴とする方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、シクロ酸（環式酸）（cyclo acid）、即ちそれぞれ２−オキソ−１，３−ジベンジル−cis−４，５−イミダゾリジンジカルボン酸及び対応する無水物の製造方法に関するものであり、これらの化合物は、例えば、Chem. Rev. 97, 1755-1792 (1997)にあるPierre J. de Clercqの総説に記述されている、ビオチン（ビタミンＨ）の製造のための多段階プロセスにおける重要な中間体である。
【０００２】
【従来の技術】
そのジアルカリ金属塩の形のメソ−２，３−ビス（ベンジルアミノ）コハク酸から出発する上述のシクロ酸の製造法は知られている。即ち、例えば、１９９２年の米国特許第5,151,525号は、環形成が起こる、カルボニル基を介する２つの第２級窒素原子の結合のため、アルカリ性水性／有機２相溶媒系中の試薬としてホスゲンが使用される、このようなプロセスを記述している。このケースでは、反応のための本質的に水不混和性溶媒としてアニソールが利用される。
【０００３】
しかしながら知られているように試薬のホスゲンは、非常に毒性が高く、更に他の気体の影響又はある種の反応液の下では爆発可能性があるため、不注意に取り扱うか又は管理すると、その使用は極めて危険であり、その輸送、貯蔵及び使用には特別な予防措置、例えば、装置中に安全装置を用いるなどが必要とされる。
【０００４】
またそのジアルカリ金属塩の形のメソ−２，３−ビス（ベンジルアミノ）コハク酸から出発するが、環形成のためにホスゲンの代わりにクロロギ酸アルキル、ハロアルキル又はアリールを使用する上述のシクロ酸の製造方法は、既にかなり古い特開昭51-8270号に記載されている。これによって上に略述したホスゲンの不都合な点は実際に回避できるが、このプロセスは、なお他の同様に重大な不都合を有し、このことが、これまでクロロギ酸エステルの使用が採用されてこなかった理由であろう。即ち、シクロ酸は、実施例による最も好ましい試薬であるクロロギ酸フェニルによってのみ、所望の収量で生成しうる。しかしクロロギ酸フェニルの使用には、高コストに加えて別の不都合がある。即ち、一方で、炭酸ジフェニルとフェノールが不可避的副産物として発生し、もう一方で、炭酸ジフェニルが、水性反応溶液から粘性塊として分離して、反応器部品、更にはpHプローブを目詰まりさせる。この理由から、pH値を正確に導くことができないが、このことは、反応の制御された実施には決定的に重要である。
【０００５】
クロロギ酸フェニルは、第１の反応工程において、メソ−２，３−ビス（ベンジルアミノ）コハク酸ジアルカリ金属塩と共に塩酸の開裂によってモノウレタン中間体を形成し、次にこれが更に反応してシクロ酸になる。生じるアルカリフェノラートは、次にクロロギ酸フェニルと反応することにより、副産物の炭酸ジフェニルを形成する。生じる塩酸は、アルカリ金属水酸化物溶液の添加により中和することができ、これによってpH値は高すぎず低すぎずを保つ。pHが低すぎると、メソ−２，３−ビス（ベンジルアミノ）コハク酸が、沈殿して反応できない。更には、メソ−２，３−ビス（ベンジルアミノ）コハク酸は、分離した炭酸ジフェニルと一緒に粘性塊になり、そしてこれがスターラーを含む反応器部品の更なる目詰まりをもたらす。高すぎるpH値では、クロロギ酸フェニルの加水分解が急速すぎて、無用な消費をもたらす。
【０００６】
更には、強酸の添加によるシクロ酸の沈殿は、これがしばしば粘性塊（これは、前述の日本特許公報の詳細と一致しており、そしてスターラーを含む反応器部品を更に目詰まりさせうる）として分離するため、成就するのは困難である。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の目的は、一方で、上でより詳細に説明された環形成の試薬としてのホスゲンの使用を回避し、そしてもう一方で、前述の日本特許公報によるプロセスを実施することの少なからぬ不都合を回避しながら、同様にそのジアルカリ金属塩の形のメソ−２，３−ビス（ベンジルアミノ）コハク酸から出発する、２−オキソ−１，３−ジベンジル−cis−４，５−イミダゾリジンジカルボン酸の製造方法を提供することである。
【０００８】
【課題を解決するための手段】
この目的は、そのジアルカリ金属塩の形のメソ−２，３−ビス（ベンジルアミノ）コハク酸とクロロギ酸フェニルとの反応を、水混和性エーテルと水との混合物中でアルカリ性条件下で行う（この方法により、反応において形成される炭酸ジフェニルを溶液中に保持することができる）ことにより、驚くほど単純かつ充分に達成される。したがって、本反応は、固形の副生成物を生成せずに、単相溶媒系において行うことができ、これによりスターラーを含む反応器部品の目詰まりを避けることができる。
【０００９】
よって本発明のプロセスは、メソ−２，３−ビス（ベンジルアミノ）コハク酸ジアルカリ金属塩から出発する２−オキソ−１，３−ジベンジル−cis−４，５−イミダゾリジンジカルボン酸の製造方法であって、メソ−２，３−ビス（ベンジルアミノ）コハク酸ジアルカリ金属塩とクロロギ酸フェニルとを水混和性エーテルとアルカリ金属水酸化物水溶液との約２：１〜１：１混合物（容量部）よりなる単相溶媒系中で約４０℃を超えない温度で反応させ、そして生じる２−オキソ−１，３−ジベンジル−cis−４，５−イミダゾリジンジカルボン酸ジアルカリ金属塩を酸性化により所望の２−オキソ−１，３−ジベンジル−cis−４，５−イミダゾリジンジカルボン酸に変換してこれを単離することを特徴とする方法である。
【００１０】
【発明の実施の形態】
水混和性エーテルの例は、テトラヒドロフラン及びエチレングリコールエーテル、例えばグリム及びジグリム、好ましくはテトラヒドロフランである。
【００１１】
以下の反応スキームは、本発明の方法の構造的表現である：
【００１２】
【化１】
0004833419.tif 000002
【００１３】
上記反応スキームにおいて、アルカリ金属イオンＭ+は、便利にはリチウム、ナトリウム又はカリウムイオン、好ましくはカリウムイオンであるため、二リチウム、二ナトリウム又は二カリウム塩、好ましくは最後に挙げたものが、本発明の方法の出発物質として便利に使用される。
【００１４】
メソ−２，３−ビス（ベンジルアミノ）コハク酸ジアルカリ金属塩の製造には、この酸自体を便利には水、好ましくは脱イオン水に懸濁し、生じる懸濁液をアルカリ金属水酸化物溶液、即ち便利には水酸化リチウム、ナトリウム又はカリウム溶液、好ましくは水酸化カリウム溶液で、一般に約９〜約１４のpH値、好ましくは約１２〜約１３のpH値で処理する。これによって、所望のジアルカリ金属塩のアルカリ性水溶液が得られる。添加すべきアルカリ金属水酸化物溶液の濃度は、決定的に重要ではないが、市販のアルカリ金属水酸化物溶液、例えば水酸化カリウム溶液を使用するとき、約４０〜５０重量パーセントになる。水及びアルカリ金属水酸化物溶液の適切な量を使用することにより、形成されるメソ−２，３−ビス（ベンジルアミノ）コハク酸ジアルカリ金属塩の濃度が、pH約９〜約１４で生じる清澄なアルカリ性水溶液の総量に基づき、便利には約５〜約２０重量パーセント、好ましくは約１０〜約１５重量パーセントになる。所望であれば、水混和性エーテルを前もってメソ−２，３−ビス（ベンジルアミノ）コハク酸の懸濁液に入れておくことによって、この酸を水性エーテル中に有効に懸濁することができるか、又はジアルカリ金属塩水溶液の調製後に初めて加えることによって、本発明の方法において必要とされるアルカリ性エーテル水溶液を最終的に生成させることができる。
【００１５】
メソ−２，３−ビス（ベンジルアミノ）コハク酸ジアルカリ金属塩のアルカリ性エーテル水溶液とクロロギ酸フェニルとの配合は、所望の順序で行うことができるが、好ましくはジアルカリ金属塩溶液を準備して、ここにクロロギ酸フェニルを加える。この場合に、クロロギ酸フェニルは、ゆっくりと連続的に、即ち、流れのように続々と加えることが有利であることが見い出された。添加中、反応混合物のpH値は、アルカリ金属水酸化物溶液の添加により、可能な限り一定に維持する。添加中、良好な混合を達成するために、混合物は便利には撹拌するか、又は別な方法で混合する。更に、この配合は、便利にはおよそ室温で行われる。しかし所望であれば、溶液だけでなくクロロギ酸フェニルも前もって約３０〜４０℃、特に約３０〜３５℃の微高温に加温しておいてもよい。
【００１６】
メソ−２，３−ビス（ベンジルアミノ）コハク酸ジアルカリ金属塩とクロロギ酸フェニルの相対量に関して、ジアルカリ金属塩：クロロギ酸フェニルのモル比は、適切には約１：１〜約１：４、好ましくは約１：２〜約１：３になる。
【００１７】
クロロギ酸フェニルとメソ−２，３−ビス（ベンジルアミノ）コハク酸ジアルカリ金属塩との反応中、反応混合物のpH値は、便利には約８〜約１４の範囲、好ましくは約９〜約１１の範囲に保持される。既に言及されたように、このpH範囲を維持するために、水酸化リチウム、ナトリウム又はカリウム水溶液を、反応物を配合すると同時に加える。加えるべき水酸化リチウム、ナトリウム又はカリウム溶液の濃度は、決定的に重要ではないが、適切には約２０〜約５０重量パーセントになる。この目的のためには、メソ−２，３−ビス（ベンジルアミノ）コハク酸ジアルカリ金属塩の製造に使用したものと同じ水酸化リチウム、ナトリウム又はカリウム溶液を使用することが特に適している。
【００１８】
反応は、約４０℃を超えない温度で、一般には約２５℃〜約３５℃の範囲の温度で、好ましくは約３０℃で行う。圧力は決定的に重要ではない；反応は通常大気圧又は微高圧下で行われる。
【００１９】
本発明の方法の実施は、便利には不活性ガス雰囲気下で行われる。不活性ガス雰囲気を使用する場合は、不活性ガスとして、窒素又はアルゴンが適切には使用され、工業的規模では窒素が好ましい。
【００２０】
添加（通常約２〜５時間かかる）を行った後、反応も普通には終結する。生じる単相混合物は、生成物として２−オキソ−１，３−ジベンジル−cis−４，５−イミダゾリジンジカルボン酸ジアルカリ金属塩を含むが、酸の添加により反応混合物を微アルカリ性、特にpH約７〜８にし、そして芳香族炭化水素、好ましくはトルエン又はキシレンで抽出することにより処理することができる。鉱酸、例えば塩酸、臭化水素酸又は硫酸、好ましくは塩酸は、酸性化のために使用する酸として特に適している。所望の生成物は、なおもジアルカリ金属塩として水相に存在する。次に適切にはテトラヒドロフランを、分離した水相に加え、そしてジアルカリ金属塩を酸性化により遊離酸に変換して、そのまま有機相にとる。酸性化のための酸として、便利には鉱酸、特に塩酸、臭化水素酸又は硫酸、好ましくは塩酸が使用され、それぞれの濃度と量は、水相が最終的に＜３、好ましくは約１のpH値になるように選択するのが好都合である。所望の生成物を遊離酸として含み、水相から分離した有機相を、次に溶媒として芳香族炭化水素、例えばトルエン又はキシレンの添加後、減圧蒸留に付すことによって、主としてテトラヒドロフラン、少量の芳香族溶媒、更には残留水を除去することができる。次に２−オキソ−１，３−ジベンジル−cis−４，５−イミダゾリジンジカルボン酸が、生じる無水芳香族溶媒中の所望生成物の過飽和溶液から、場合により種晶添加及び／又は冷却により、結晶として沈殿する。
【００２１】
こうして単離された２−オキソ−１，３−ジベンジル−cis−４，５−イミダゾリジンジカルボン酸は、それ自体既知の方法で、便利には水で洗浄し、乾燥して、所望であれば更に精製することができる。
【００２２】
単相系での反応の実施及び芳香族炭化水素からの結晶化は、以下の利点を与える：
・炭酸ジフェニル又はメソ−２，３−ビス（ベンジルアミノ）コハク酸の沈殿のない、反応のより安全な実施
・スターラーを含む反応器部品の目詰まりのないこと
・反応継続中のpH値の適切な制御
・標準法に比較したクロロギ酸フェニルの量の削減
・微粒子固体としての２−オキソ−１，３−ジベンジル−cis−４，５−イミダゾリジンジカルボン酸の再現性ある沈殿
・収量の改善
【００２３】
本発明の範囲において、上述の処理の最後に近い手順の単純な修飾により、初めて２−オキソ−１，３−ジベンジル−cis−４，５−イミダゾリジンジカルボン酸の単離なしに、ビオチンの合成における次の工程の生成物である２−オキソ−１，３−ジベンジル−４，５−イミダゾリジンジカルボン酸無水物へと進むことが可能であることが確立された。
【００２４】
上述の処理の最後に近く、即ち有機溶媒の蒸留直後に、２−オキソ−１，３−ジベンジル−cis−４，５−イミダゾリジンジカルボン酸が晶析し、同時に単離されるのであるが、修飾された方法の実施態様では、追加の芳香族溶媒、好ましくはトルエン、及び無水酢酸の添加を伴う。この目的には、出発物質として使用したメソ−２，３−ビス（ベンジルアミノ）コハク酸ジアルカリ金属塩１mol当たり少なくとも１molの無水酢酸、好ましくは出発物質１mol当たり約１．０５mol〜約１．３molの無水酢酸が適切には使用される。次いで７０℃〜１３０℃、好ましくは約７５℃〜約９５℃、特に約８０℃に加熱すると、２−オキソ−１，３−ジベンジル−cis−４，５−イミダゾリジンジカルボン酸が、以下に記載される化学式スキームにより反応して、２−オキソ−１，３−ジベンジル−４，５−イミダゾリジンジカルボン酸無水物が得られるが、これは溶液から沈殿して、それ自体既知の方法、例えば濾過により単離することができる。
【００２５】
【化２】
0004833419.tif 000003
【００２６】
したがって本発明はまた、２−オキソ−１，３−ジベンジル−４，５−イミダゾリジンジカルボン酸無水物の製造方法を含むが、この方法において、メソ−２，３−ビス（ベンジルアミノ）コハク酸ジアルカリ金属塩から出発する２−オキソ−１，３−ジベンジル−４，５−イミダゾリジンジカルボン酸の製造のための上述の方法の実施後、かつ生じる２−オキソ−１，３−ジベンジル−４，５−イミダゾリジンジカルボン酸の単離前に、有機溶媒として芳香族炭化水素、好ましくはトルエン中で無水酢酸と一緒にこれを加熱することにより、所望の２−オキソ−１，３−ジベンジル−４，５−イミダゾリジンジカルボン酸無水物に変換し、これを単離する。
【００２７】
単離された２−オキソ−１，３−ジベンジル−４，５−イミダゾリジンジカルボン酸無水物は、それ自体既知の方法で、便利にはトルエンで洗浄し、乾燥し、所望であれば更に精製することができる。
【００２８】
よって溶媒として例えばトルエン中での２−オキソ−１，３−ジベンジル−４，５−イミダゾリジンジカルボン酸無水物への変換は、従来使用されてきた１つの方法である、酢酸と無水酢酸との混合物中での２−オキソ−１，３−ジベンジル−４，５−イミダゾリジンジカルボン酸の無水物への脱水とまさに同じものである。
【００２９】
２−オキソ−１，３−ジベンジル−４，５−イミダゾリジンジカルボン酸の単離をしない方法の実施態様の利点は以下である：
・２−オキソ−１，３−ジベンジル−４，５−イミダゾリジンジカルボン酸の単離がないこと
・２−オキソ−１，３−ジベンジル−４，５−イミダゾリジンジカルボン酸無水物の完全かつ容易な結晶化
・より純粋な生成物
・装置や人手に関する経費削減
・トルエンによる酢酸の置き換え
・２−オキソ−１，３−ジベンジル−４，５−イミダゾリジンジカルボン酸を乾燥、排出及び再度装填する必要がない
・酢酸／無水酢酸の混合物を調整及び蒸留する必要のないこと
・無水酢酸の量の少なくとも３０％の削減
・２つの個々の工程の完了後生じる収量に比較した収量の改善
【００３０】
【実施例】
本発明の方法は、以下の実施例により例証される：
【００３１】
実施例１
メソ−２，３−ビス（ベンジルアミノ）コハク酸２２０g（０．６７mol）を窒素雰囲気下、２つの滴下ロート、pH電極及びスターラーを取り付けた２ｌフラスコに入れた。次にメソ−２，３−ビス（ベンジルアミノ）コハク酸を撹拌しながらテトラヒドロフラン８００ml及び脱イオン水４００ml中に懸濁して、５０％水酸化カリウム溶液１０８mlの添加により溶解させた。２．４mol当量クロロギ酸フェニル２００mlを、得られた溶液に３．５時間以内に滴下により加えた。pHは、クロロギ酸フェニルの添加の間、５０％水酸化カリウム溶液の連続添加により９〜１１の間に保持して、内部温度を３０℃〜３５℃の間に保持した。添加の終了後、混合物を約３０℃で更に２時間撹拌し、次に濃塩酸でpH値を約７〜８に調整した。この水溶液をトルエンで２回抽出した。テトラヒドロフラン５００mlを水相全体に加えた。次に、３７％塩酸で混合物を１．０のpH値に調整し、水相を分離した。トルエン４００mlをテトラヒドロフラン相に加え、減圧下でテトラヒドロフランを留去した。次いで、なお残存する水をトルエンとの共沸により除去した。残りの帯褐色の油状溶液に種晶添加して、結晶性固体を濾過し、トルエンで２回洗浄した。減圧下で一定重量まで乾燥後、２−オキソ−１，３−ジベンジル−cis−４，５−イミダゾリジンジカルボン酸（融点１７２．８℃）１８１．５g（収率７６％）を得た。
【００３２】
実施例２
メソ−２，３−ビス（ベンジルアミノ）コハク酸２２０g（０．６７mol）を窒素雰囲気下、２つの滴下ロート、pH電極及びスターラーを取り付けた２ｌフラスコに入れた。次にメソ−２，３−ビス（ベンジルアミノ）コハク酸を撹拌しながらテトラヒドロフラン８００ml及び脱イオン水４００ml中に懸濁して、５０％水酸化カリウム溶液１０８mlの添加により溶解させた。２．４mol当量クロロギ酸フェニル２００mlを、得られた溶液に３．５時間以内に滴下により加えた。pHは、クロロギ酸フェニルの添加の間、５０％水酸化カリウム溶液の連続添加により９〜１１の間に保持して、内部温度を３０℃〜３５℃の間に保持した。添加の終了後、混合物を約３０℃で更に２時間撹拌し、次に濃塩酸でpH値を約７〜８に調整した。この水溶液をトルエンで２回抽出した。テトラヒドロフラン５００mlを水相全体に加えた。次に、３７％塩酸で混合物を１．０のpH値に調整し、水相を分離した。トルエン４００mlをテトラヒドロフラン相に加え、減圧下でテトラヒドロフランを留去した。次いで、なお残存する水をトルエンとの共沸により除去した。トルエン７００ml及び無水酢酸１３０mlの添加後、混合物を８０℃に加熱した。２−オキソ−１，３−ジベンジル−４，５−イミダゾリジンジカルボン酸無水物が晶析後、結晶化の完了のため得られた懸濁液を２時間以内に１０℃に冷却して、次いで結晶性２−オキソ−１，３−ジベンジル−４，５−イミダゾリジンジカルボン酸無水物を濾過して、トルエンで２回洗浄した。減圧下で一定重量まで乾燥後、２−オキソ−１，３−ジベンジル−４，５−イミダゾリジンジカルボン酸無水物１７３．６g（収率７８％）を、分析的に純粋な無色の固体（融点２４０．２℃）の形で得た。母液の蒸発により２−オキソ−１，３−ジベンジル−４，５−イミダゾリジンジカルボン酸無水物の結晶更に３．０gを得た。
【００３３】
本発明の実施態様は以下のとおりである。
１．  メソ−２，３−ビス（ベンジルアミノ）コハク酸ジアルカリ金属塩から出発する、それぞれ２−オキソ−１，３−ジベンジル−４，５−イミダゾリジン−ジカルボン酸及び２−オキソ−１，３−ジベンジル−４，５−イミダゾリジンジカルボン酸無水物の製造方法であって、メソ−２，３−ビス（ベンジルアミノ）コハク酸ジアルカリ金属塩とクロロギ酸フェニルとを水混和性エーテルとアルカリ金属水酸化物水溶液との約２：１〜１：１混合物よりなる単相溶媒系中で約４０℃を超えない温度で反応させ、生じる２−オキソ−１，３−ジベンジル−cis−４，５−イミダゾリジンジカルボン酸ジアルカリ金属塩を酸性化により所望の２−オキソ−１，３−ジベンジル−cis−４，５−イミダゾリジンジカルボン酸に変換してこれを単離するか、又は生じる２−オキソ−１，３−ジベンジル−４，５−イミダゾリジンジカルボン酸を有機溶媒としての芳香族炭化水素中で無水酢酸と一緒に加熱することにより所望の２−オキソ−１，３−ジベンジル−cis−４，５−イミダゾリジンジカルボン酸無水物に変換してこれを単離することを特徴とする方法。
２．  ２−オキソ−１，３−ジベンジル−cis−４，５−イミダゾリジンジカルボン酸無水物の製造において、トルエンを、芳香族炭化水素として使用する、上記１の方法。
３．  テトラヒドロフラン又はグリム若しくはジグリムのようなエチレングリコールエーテル、好ましくはテトラヒドロフランを、水混和性エーテルとして使用する、上記１又は２の方法。
４．  メソ−２，３−ビス（ベンジルアミノ）コハク酸の二リチウム塩、二ナトリウム塩又は二カリウム塩、好ましくは最後に挙げたものを、出発物質として使用する、上記１〜３のいずれか１の方法。
５．  所望のジアルカリ金属塩のアルカリ性水溶液を得るために、メソ−２，３−ビス（ベンジルアミノ）コハク酸ジアルカリ金属塩を、この酸自体を水に懸濁して、生じる懸濁液をアルカリ金属水酸化物溶液、好ましくは水酸化カリウム溶液で処理することにより製造する、上記１〜４のいずれか１の方法。
６．  水混和性エーテルを、ジアルカリ金属塩水溶液の製造の前又は後に加える、上記１〜５のいずれか１の方法。
７．  アルカリ性エーテル水溶液及び／又はクロロギ酸フェニルを、反応の前に約３０〜４０℃の高温に加温する、上記１〜６のいずれか１の方法。
８．  メソ−２，３−ビス（ベンジルアミノ）コハク酸ジアルカリ金属塩：クロロギ酸フェニルのモル比が、約１：１〜約１：４、好ましくは約１：２〜約１：３である、上記１〜７のいずれか１の方法。
９．  メソ−２，３−ビス（ベンジルアミノ）コハク酸ジアルカリ金属塩とクロロギ酸フェニルとの反応中、反応混合物のpH値を、約８〜約１４の範囲、好ましくは約９〜約１１の範囲に保持する、上記１〜８のいずれか１の方法。
１０．  反応を、約２５℃〜約３５℃の範囲の温度、好ましくは約３０℃で行う、上記１〜９のいずれか１の方法。
１１．  得られる２−オキソ−１，３−ジベンジル−cis−４，５−イミダゾリジン−ジカルボン酸ジアルカリ金属塩の酸性化のために、鉱酸、特に塩酸、臭化水素酸又は硫酸、好ましくは塩酸を使用する、上記１〜１０のいずれか１の方法。
１２．  得られる２−オキソ−１，３−ジベンジル−cis−４，５−イミダゾリジンジカルボン酸を、単離することなく、芳香族炭化水素、好ましくはトルエン、及び無水酢酸で処理して、反応混合物を約７０℃〜約１３０℃、好ましくは約７５℃〜約９５℃、特に約８０℃に加熱する、上記１〜１１のいずれか１の方法。
１３．  ２−オキソ−１，３−ジベンジル−４，５−イミダゾリジンジカルボン酸又は２−オキソ−１，３−ジベンジル−４，５−イミダゾリジン−ジカルボン酸無水物を、芳香族炭化水素中の溶液からの結晶化により単離する、上記１〜１２のいずれか１の方法。
１４．  ビオチンの製造のための、上記１〜１２のいずれか１により生成する２−オキソ−１，３−ジベンジル−４，５−イミダゾリジンジカルボン酸無水物の使用。