(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の構造を有する化合物から選択され、アルブミン上におけるグルコース付加物の形成を阻害する化合物。
【化１】
0004833468.tif 000015
［式中、Ｘは水素、ナトリウム、カリウムまたはリチウムである］
【請求項２】
細胞株ＡＴＣＣ  ＨＢ９５９６によって産生されるモノクローナル抗体Ａ７１７によって識別されるアルブミンの１つ以上の残基上におけるグルコース付加物の形成を阻害する請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
請求項１または２に記載の化合物の調製方法であって、
中和剤および銅触媒存在下で、下記式のフェニルアミンを
【化２】
0004833468.tif 000016
下記式のフェニル酢酸と反応させる工程を含む方法。
【化３】
0004833468.tif 000017
［式中、Ｙは塩素、臭素、またはヨウ素である］
【請求項４】
前記フェニルアミン及び前記フェニル酢酸のモル等量は前記化合物を生成するように選択されることと、
中和剤のモル等量は生成する酸を中和するように選択されることと、
メチルピロリジンが促進剤として存在することとによって、酸化生成物がほぼまたは全く生成しない、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
請求項１に記載の化合物および医薬として許容される担体を含む、糖化に関連する病気に関する腎臓機能不全の治療用の治療組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（発明の技術分野）
本発明は、アルブミンへのグルコースの非酵素的結合を阻害して、糖化アルブミンの形成を防止する化合物の発見に関する。その化合物は、糖化アルブミンの悪影響によって生じる腎臓および他の臓器の障害の予防および治療において有用である。
【０００２】
（背景技術）
反応性タンパクアミノ基とグルコースとの縮合によって形成される糖化アルブミンは、毛細血管の機能、構造および代謝に悪影響を与える。実験研究から、その糖化タンパク質は、非糖化相当物が持たないめざましい生理的効果を有することが明らかになっている。その効果には、腎臓における毛細血管濾過障壁を通る輸送および精密濾過の促進、一酸化窒素シンターゼおよび一酸化窒素産生の刺激、細胞外基質タンパクの合成の増加、腎臓および血管組織におけるサイトカインおよび成長因子系の活性化などがある。糖化アルブミンのこれらおよび他の生理効果は、多くの科学刊行物に記載されている（例えば、Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ、第４２巻、８７５−８８１頁、１９９２年；Ｌａｂ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ、第５１巻、２７−３５頁、１９９７年；Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ、第４５巻、４７５−４８４頁、１９９４年；Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ＆  Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、第１２５巻、１９−２５頁、１９９３年；Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ＆  Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、第１５１巻、６１−６７頁、１９９５年；Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ、第５３巻、６３１−６３８頁、１９９８年）。
【０００３】
既報の生理活性は、ヒト被験者からの臨床検体において認められる糖化アルブミンの濃度で監視されており、有効な高グルコース濃度に依存しないものである。ヒトでのアルブミンの循環半減期は約１７日であることから、それが形成された後の糖化タンパク質への血管床の曝露は長い。
【０００４】
糖化アルブミンの効果を遮断して血管の病気を改善する薬剤の使用については、いくつかの科学研究で検討されてきた（Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ、第４５巻、１６７３−１６７９頁、１９９４年；Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ、第９５巻、２３３８−２３４５頁、１９９５年；Ｄｉａｂｅｔｏｌｏｇｉａ、第３９巻、２７０−２７４頁、１９９６年；Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｄｉａｂｅｔｉｃ  Ｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ、第１２巻、２８−３３頁、１９９８年）。そのような薬剤は、糖化アルブミン上に存在するが非糖化アルブミン上には存在しないフルクトシルリジン残基と特異的に反応するモノクローナル抗体またはその他の分子であり得、それは米国特許第５２２３３９２号および米国特許第５５１８７２０号に開示されている。そのような療法は特に、腎臓および網膜の微小血管疾患に特徴的な構造的および機能的変化を防止することが明らかになっている。
【０００５】
従って、抗糖化アルブミン療法が、血管の病気の治療形態として提案されている。
糖化アルブミンの生理効果に関係する病気を予防するための新規なアプローチは、糖化タンパク質形成を低減し、循環におけるその濃度を低下させることであろう。それは、アルブミンの特定の部位に結合することで、生理的に重要なリジンアミノ基へのグルコースの結合を阻害することができる化合物を投与することによって行うことが可能であると考えられる。その化合物は、反応性リジンアミノ基を不活性化し、かつ／またはアルブミン分子の３次構造において配座変化を起こすことによって、重要な糖化可能部位を使用できなくすることにより、所望の効果を発揮するものと考えられる。
【０００６】
生理的に重要な部位での糖化を防止する化合物を確認することは容易ではなく、当業界でその報告はない。イン・ビトロでの糖化はイン・ビボでの糖化とは明らかに異なっている。過剰濃度のグルコースまたは炭水化物減少を用いて、糖化を受ける部位の数を、イン・ビボで糖化を受ける部位と比較してかなり増やす。生理的に重要な部位は、部位総数のうちのごくわずかな小群であり、当業界で既報の方法に従ってイン・ビトロで糖化した後に重要でない部位と区別することはできない。
【０００７】
アルブミンへの結合は、化合物がアルブミンの糖化を防止する上での必要条件であると考えられ、多様な種類の構造を有する多くの化合物が、各種部位でアルブミンに結合することが明らかになっている。例を挙げると、ビタミンＣ、ビタミンＥ、ビタミンＢ6、ジクロフェナク、アセチルサリチル酸、ワーファリン、ビリルビン、ヨード安息香酸類、ジアゼパム、ジギトキシン、クロフィブレート、メトトレキセート、リチウム、フェノバルビタール、シクロスポリン・ベンゾジアゼピン、パラセタモール、イブプロフェン、スプロフェン、アミノダロン（ａｍｉｎｏｄａｒｏｎｅ）、プロパノロール、グリセオフルビン（ｇｒｉｓｅｏｆｕｌｖａｎ）などがある。しかし、アルブミンへの結合は抗糖化活性には不十分である。イン・ビトロで反応性タンパクアミノ基と炭水化物との縮合に影響することが報告されている化合物はごくわずかであり、その中でイン・ビボで生理的に重要であるリジンアミノ基に影響を与えるか、あるいは糖化に関連する病気に関してイン・ビボで投与した場合に治療効果を有することが示されているものはない（Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ＆  Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ、第１６５巻、９９１−９９６頁、１９８８年；Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、第４３巻、１７２５−１７３１頁、１９８８年；Ｄｉａｂｅｔｅ  ＆  Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍｅ、第１４巻、４０−４２頁、１９８８年；Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａ  ｅｔ  Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａ  Ａｃｔａ、第１１２０巻、２０１−２０４頁、１９９２年；Ｄｉａｂｅｔｅｓ、第４１号、１６７−１７３頁、１９９２年）。さらに、そのようなイン・ビトロ試験で用いられる条件は、糖化の程度、用いられる還元糖及び濃度、ならびに被験化合物濃度に関して、イン・ビボでの条件と大きく異なる。アルブミンへの結合およびイン・ビトロでの糖化の阻害は、生理的に重要な部位での糖化の防止とは同義ではない。
【０００８】
本発明における成果は、多くの化合物がアルブミンに結合し、重要性の低い部位で糖化を阻害するが、生理的に重要な部位では糖化を阻害しないということである。
【０００９】
本発明の別の成果は、アルブミン上のフルクトシルリジン残基に結合することで、糖化アルブミンの生理効果を防止する薬剤は、アルブミン結合性リガンドが病態生理的に重要な糖化部位の形成を防止する上で重要である可能性があることを解明する上での有用な手段を提供するということである。
【００１０】
本発明は、糖化された場合に血管の病気を生じる生理的に重要な部位の非酵素的糖化を遮断するアルブミン結合性化合物の発見に関するものである。本発明はさらに、糖化に関連する病気の治療用の医薬組成物の調製用のこれら新規薬剤の使用に関するものでもある。
【００１１】
（発明の概要）
本発明は、生理的に関連する部位でアルブミンの非酵素的糖化を阻害する新規な化合物を提供する。
【００１２】
本発明はさらに、糖化によって誘発される病気の予防および治療のための新規医薬組成物をも提供する。
本発明の上記および他の目的は、イン・ビボで非酵素的糖化を受けるヒトアルブミンにおいてドメインに対して反応性であって、アルブミンの構造における部位に結合することにより、そのタンパクをグルコースへの結合から保護する化合物を発見することによって達成される。
【００１３】
（発明の詳細な説明）
本発明は、アルブミンの特異的な糖化部位に結合するリガンド化合物によって、糖化に関連する病気を改善することができるという成果から導き出されたものである。本発明の新規な成果は、これらのリガンドを用いて、イン・ビボで選択的に糖化を受け、糖化されると関連する組織において有害な生理効果を生じるアルブミン分子における病態生理的に重要な部位の糖化を防止する他の化合物を確認することができるということである。本発明ではさらに、それらの化合物は、アルブミンへの結合において糖化に関連する病気に関与することが知られているフルクロシル−リジン残基に対して部位選択的であるモノクローナル抗体によって識別される糖化アルブミンにおけるフルクトシルリジンエピトープの形成を防止する能力によって確認することができるという成果も得られている。
【００１４】
本発明の成果には、ヒトアルブミンへの結合ならびに病態生理的に重要な部位での非酵素的糖化からの前記タンパクの保護によって、糖化に関連する病気の治療に関して治療上有用である化合物が確認されるということがある。
【００１５】
本発明の化合物は、イン・ビボでの非酵素的糖化の優先部位であるリジン残基を有するアルブミンの一次構造における部位に結合することができ、かつ／またはそのタンパクの３次構造における配座変化を引き起こすことで、糖化可能部位でグルコース結合ができないようにする。
【００１６】
有用であると考えられる化合物は、アルブミンに結合する能力を有する化合物であり、ビタミンＣ、ビタミンＥ、ビタミンＢ6、ジクロフェナク、アセチルサリチル酸、ワーファリン、ビリルビン、ヨード安息香酸類、ジアゼパム、ジギトキシン、クロフィブレート、メトトレキセート、リチウム、フェノバルビタール、シクロスポリンベンゾジアゼピン、パラセタモール、イブプロフェン、スプロフェン、アミノダロン、プロパノロール、グリセオフルビンなどがあるが、これらに限定されるものではない。
【００１７】
治療上有用な化合物の小群は、アルブミン上のフルクトシル−リジン残基に結合することで、血管の病気に対する糖化アルブミンの効果を遮断するモノクローナル抗体Ａ７１７によって識別される。Ａ７１７によって識別される糖化部位の形成を防止する化合物は治療上有用であろう。
【００１８】
この活性を有する本発明の化合物は、以下の構造式のものである。
【化１０】
0004833468.tif 000002
【００１９】
式中、Ｘは水素、ナトリウム、リチウムまたはカリウムであり；Ｒ′3、Ｒ′4、Ｒ′5、Ｒ′6、Ｒ2、Ｒ３、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6は同一であるか、または異なっており、水素、塩素、臭素、フッ素、ヨウ素、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ペンチル、ブチルオキシ、ペンチルオキシ、シアノ、チオ、メトキシ、エトキシ、水酸基、ホスフェート、サルフェート、ナイトレートまたはアミノである。
【００２０】
この種類の構造の化合物の中には、シクロオキシゲナーゼ阻害活性に関連していたものもあることから、本発明の化合物について、低シクロオキシゲナーゼ阻害活性および高抗糖化活性の試験および選択を行うことができる。本発明の成果として、イン・ビボで投与した場合に、アルブミン糖化を強力に阻害し、シクロオキシゲナーゼ阻害の望ましくない副作用を軽減することで、この特性は治療上有利であるということがある。
【００２１】
本発明の化合物は、循環に存在する糖化アルブミンによって誘発される細胞および組織の損傷を防止することができる。本発明の化合物の治療濃度は、抗糖化活性のシクロオキシゲナーゼ阻害活性に対する高いＩＣ50（５０％阻害を与える濃度）比で、糖化アルブミンの形成を阻害することができることから、本発明は、糖化に関連する病気の新規かつ改良された治療方法を提供するものである。
【００２２】
この種類の構造を有する化合物（２−（フェニルアミノ）フェニル酢酸類）は、図式１〜６に示した方法に従って製造することができる。図式１には、置換ジフェニルアミン類の合成ならびにその後における還流クロロアセチルクロライドと適切なジフェニルアミン類との縮合による置換２−クロロ−Ｎ−フェニルアセトアニリド類の製造を示してある。環化は、ＡｌＣｌ3との溶融物の状態で１６０℃で加熱することにより行う。還流メタノール溶液中でのＮａＯＨによる置換Ｎ−アリールオキシインドール類の加水分解と、それに続く酸性化によって、２−（フェニルアミノ）フェニル酢酸が得られる。
【化１１】
0004833468.tif 000003
【００２３】
アルキルの移動およびアルコキシ基の分離が上記環化反応時に生じる場合があることから、一定の場合に図式２は有用である。この図式では、置換ジフェニルアミン類を、ベンゼン中オキサリルクロライドで処理し、次にテトラクロロエチレン中ＡｌＣｌ3でＮ−フェニルオキサミン酸クロライドを環化させて、Ｎ−アリールイサチン類を得る。加水分解および酸性化によって相当するフェニルグリオキシル酸を得て、それを次に還元および酸性化して、２−（フェニルアミノ）フェニル酢酸類を調製する。
【化１２】
0004833468.tif 000004
【００２４】
図式１および２は、２−（フェニルアミノ）フェニル酢酸類を得るための一般的経路である。ただし、ジフェニルアミン類の一方のフェニル環の両方のオルト位が占有されていて、中間体のオキシインドール類およびイサチン類の位置異性体形成を回避するようにする。図式３および４は、異性体形成を回避する合成経路である。図式３において、２−ヨードフェニル酢酸カリウムを、炭酸カリウムおよび活性化銅粉末存在下で熱Ｎ−メチル−２−ピロリドン中にて置換アニリン類と反応させる。酸性化および結晶化によって、２−（フェニルアミノ）フェニル酢酸類を得る。
【化１３】
0004833468.tif 000005
【００２５】
図式４では、還流トルエン中にて無水炭酸カリウム、銅およびヨウ化第一銅存在下で、Ｎ，Ｎ−ジメチル−２−ヨードフェニルアセトアミドとアニリン類の縮合を行って、置換Ｎ，Ｎ−ジメチル−２−（フェニルアミノ）フェニルアセトアミド類を得る。還流エタノール中でのＫＯＨによる加水分解とそれに続く酸性化によって、２−（フェニルアミノ）フェニル酢酸類を得る。
【化１４】
0004833468.tif 000006
【００２６】
ヒドロキシル化２−（フェニルアミノ）フェニル酢酸類は、適切に置換されたメトキシ−２−（フェニルアミノ）フェニル酢酸類（図式２および４によって調製）から合成される。図式５において、メトキシ誘導体を１７０℃でピリジン塩酸塩で処理して、ヒドロキシ置換Ｎ−フェニルオキシインドール類を得る。還流Ｎ−ブタノール中ＮａＯＨによって加水分解することで、合成を完了する。
【化１５】
0004833468.tif 000007
【００２７】
さらにメトキシ基を有するヒドロキシル化化合物は、相当するベンジルオキシ類縁体をテトラヒドロフランおよび１，２−ジクロロベンゼン中Ｐｄ−Ｃで水素化することによって調製される（図式６）。
【化１６】
0004833468.tif 000008
【００２８】
本発明は、改良された２−（フェニルアミノ）フェニル酢酸類の合成方法を提供する。図式３および図式４と同様に、図式７では、フェニル酢酸化合物とアニリン化合物の直接縮合から２−（フェニルアミノ）フェニル酢酸を調製する。この図式では、フェニル酢酸化合物は反応性臭素を有しており、アニリンが減量され、反応時間を短縮し、炭酸カリウムを低減して、反応生成物の酸化を防止し、Ｎ−メチルピロリドンを低減して、二分子反応を促進し、調製したばかりの活性化銅の使用量が低減される。この方法によって、オキシインドール類または酸化生成物をほとんど形成することなく、所望の生成物の収率が向上した。
【００２９】
本発明はさらに、上記化合物及び医薬として許容される担体を含む治療組成物も提供する。
【００３０】
当該組成物はヒトに対して、経口投与、直腸投与、非経口投与（静脈投与、筋肉投与または皮下投与）、槽内投与、経膣投与、腹腔内投与、膀胱内投与、局所投与（粉剤、軟膏または滴剤）するか、または口腔噴霧または鼻噴霧し得る。
【００３１】
非経口注射に好適な組成物には、生理的に許容される無菌の水系もしくは非水系の液剤、分散液、懸濁液または乳濁液、ならびに無菌の注射液もしくは分散液中で再生する無菌粉末などがあり得る。好適な水系および非水系の担体、希釈剤、溶媒または媒体には、水、エタノール、多価アルコール類（プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、グリセリンなど）、それらの好適な混合物、植物油（オリーブ油など）ならびにオレイン酸エチルなどの注射用有機エステル類などがある。例えば、レシチンなどのコーティング剤を用いたり、分散液の場合には必要な粒径を維持したり、さらには界面活性剤を用いることで、適切な流動性を維持することができる。
【００３２】
これらの組成物はさらに、保存剤、湿展剤、乳化剤および分散剤などのアジュバントを含有することも可能である。各種抗菌剤および抗真菌剤、例えばパラベン類、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸などによって、微生物の活動を防止することができる。例えば糖類、塩化ナトリウムなどの等張剤を含有させることが望ましい場合もある。例えばモノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンなどの吸収を遅延させる薬剤を用いることで、注射用医薬製剤の吸収を持続させることができる。
【００３３】
経口投与用の固体剤形には、カプセル、錠剤、丸薬、粉剤および粒剤などがある。そのような固体剤形では、クエン酸ナトリウムもしくはリン酸二カルシウム、あるいは（ａ）例えばデンプン類、乳糖、ショ糖、グルコース、マニトールおよびケイ酸などの充填剤もしくは増量剤、（ｂ）例えばカルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩類、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、ショ糖およびアカシアなどの結合剤、（ｃ）例えばグリセリンなどの湿潤剤、（ｄ）例えば寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモもしくはタピオカデンプン、アルギン酸、ある種の複雑なケイ酸塩類および炭酸ナトリウムなどの崩壊剤、（ｅ）例えばパラフィンなどの溶解遅延剤、（ｆ）例えば４級アンモニウム化合物などの吸収促進剤、（ｇ）例えばセチルアルコールおよびモノステアリン酸グリセリンなどの湿展剤、（ｈ）例えばカオリンおよびベントナイトなどの吸収剤、（ｉ）例えばタルク、ステアリン酸カルしイウム、固体ポリエチレングリコール類、ラウリル硫酸ナトリウムまたはそれらの混合物などの潤滑剤のような１つ以上の不活性な通常の医薬として許容される賦形剤（または担体）と活性化合物を混合する。カプセル、錠剤および丸薬の場合、製剤には緩衝剤を含有させてもよい。
【００３４】
同様の種類の固体組成物を、ラクトースすなわち乳糖ならびに高分子量ポリエチレングリコール類などの賦形剤を用いて、軟質および硬質充填ゼラチンカプセルにおける充填剤として用いることも可能である。錠剤、カプセル、丸薬および粒剤などの固体剤形は、腸溶コーティング剤および他の当業界で公知のものなどのコーティング剤およびシェル剤を用いて調製することができる。それには乳白剤を含有させることができ、遅延的に腸管の一定の部分で活性化合物を放出するような組成のものとすることも可能である。使用可能な包埋組成物の例としては、ポリマー物質およびロウなどがあり得る。
【００３５】
活性化合物はまた、適切であれば１つ以上の上記賦形剤を用いてマイクロカプセル製剤とすることも可能である。
経口投与用の液体製剤には、医薬として許容される乳濁液、液剤、懸濁液、シロップおよびエリキシル剤などがある。活性化合物以外に液体製剤には、水あるいは他の溶媒、可溶化剤および乳化剤、例えばエチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド、油類、特に綿実油、落花生油、トウモロコシ胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油およびゴマ油、グリセリン、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレングリコール類およびソルビタンの脂肪酸エステル類またはそれら物質の混合物などの当業界で通常使用される不活性希釈剤を含有させることができる。
【００３６】
そのような不活性希釈剤以外に組成物には、湿展剤、乳化剤および懸濁剤、甘味剤、香味剤および芳香剤などのアジュバントを含有させることも可能である。  懸濁液には、活性化合物以外に、例えばエトキシ化イソステアリルアルコール類、ポリエチレンソルビトールおよびソルビタンエステル類、微結晶セルロース、メタ水酸化アルミニウム、ベントナイト、寒天およびトラガカントまたはそれらの物質の混合物などの懸濁剤を含有させることができる。
【００３７】
直腸投与または経膣投与用の組成物は好ましくは、常温では固体であるが体温では液体であることから、直腸または膣腔内では溶融して、活性成分を放出するカカオバター、ポリエチレングリコールまたは坐剤ロウなどの好適な非刺激性の賦形剤もしくは担体と本発明の化合物とを混合することにより調製することができる坐剤である。
【００３８】
本発明の化合物の局所投与用の製剤には、軟膏、粉剤、噴霧剤および吸入剤などがある。活性成分は、必要とされ得る生理的に許容される担体および保存剤、緩衝剤もしくは推進剤とともに、無菌条件下に混合される。眼科製剤、眼球軟膏、粉剤および液剤も、本発明の範囲に含まれることが想到される。
【００３９】
本発明の組成物における有効成分の実際の用量レベルを変動させて、特定の組成物および投与方法において所望の治療応答を得る上で有効な有効成分量を得ることができる。従って、選択される用量レベルは、所望の治療効果、投与経路、所望の治療期間ならびに他の要素によって決まる。
【００４０】
単回用量または分割用量で宿主に投与される本発明の化合物の１日の総用量は、例えば体重１キログラム当たり約１ｎｍｏｌ〜約１００μｍｏｌの量であり得る。単位用量組成物には、このような量または１日の用量をなすのに使用され得るその整数分の１の量を含有させることができる。しかしながら、特定の患者における具体的な用量レベルは、体重、全身の健康、性別、食事、投与の時刻および経路、吸収および排泄の速度、他薬剤の併用および治療対象の特定の疾患の重篤度などの多様な要素によって決まることは明らかであろう。用量レベルはさらに、投与後の好適な間隔ごとに循環において糖化アルブミン濃度を測定することにより求められる患者応答によっても決まる。
【００４１】
上記の開示内容は本発明について全般的に説明するものである。以下の具体的な実施例を参照することにより理解を深めることができるが、これら実施例は本明細書においては例示のみを目的とするものであって、本発明の範囲を限定するものではない。
【００４２】
実施例１
イン・ビボで糖化を受ける病態生理的に重要な部位の糖化を防止する化合物の確認
被験化合物（１〜１０００μＭ）を加えた場合と加えない場合とで、０または４０ｍＭグルコース存在下で、緩衝生理食塩水中でヒトアルブミン（１０ｍｇ／ｍＬ）を４日間インキュベートした。透析によって遊離のグルコースおよび化合物を除去した後、糖化アルブミンにおけるアマドリ（Amadori ）−グルコース付加物と特異的に反応し、非糖化タンパク質とは反応しないことが知られているモノクローナル抗体（ＡＴＣＣ  ＨＢ９５９６、米国特許５２２３３９２号）を用いる酵素結合抗体免疫アッセイによって、生成した糖化アルブミンの量を求めた。この抗糖化アルブミン抗体のイン・ビボ投与は、糖化アルブミンの有害な生理効果を防止することも知られている。対応するインキュベーションを行うことにより、対照条件下（０ｍＭグルコース）、刺激条件下（４０ｍＭグルコース）および阻害条件下（被験化合物＋グルコース）で形成された糖化アルブミンの量を比較することができた。これらのデータから、イン・ビボで糖化を受け、糖化アルブミンの生理活性において重要であるリジンアミノ部位でのアルブミンのフルクトシルリジンエピトープの形成を阻害する化合物を確認した。各種種類の構造からの被験化合物の個々のサンプルを表１に示してある。
【表１】
0004833468.tif 000009
【００４３】
他の化合物の中では、２−［（２，６−ジクロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸が、非酵素的糖化の結果としてイン・ビボで形成されるフルクロシルリジン残基と反応性の部位特異抗体によって識別される生理的に重要な部位の糖化を防止する能力が最も高かった。
【００４４】
実施例２：２−（フェニルアミノ）フェニル酢酸の改良された合成
１モル当量のブロモフェニル酢酸またはそれのカチオン塩、２当量の適切に置換されたアニリンおよび２当量の無水炭酸カリウムをＮ−メチルピロリジン３ｍＬと混合し、その混合物に、調製したばかりの活性化銅７モル％を加えた。反応混合物を１１５〜１２０℃で４時間加熱した。得られた若干灰色がかった混合物をセライト床で熱濾過し、該セライトを水（２００ｍＬ）およびヘキサン（２００ｍＬ）で洗浄した。濾液を分液漏斗に移し入れ、ヘキサンで抽出した。水層を冷却して５℃とし、やはり５℃に維持した希塩酸（１：３）で中和した。沈殿生成物を濾過し、水で十分に洗浄し、吸引濾過した（ブロモフェニル酢酸基準で収率３０％）。
【００４５】
所望の化合物を良好に合成するためのこの実験計画案は、既報の手順から逸脱しており、置換アニリン類の改善された合成方法を提供するものである。当業界で既報の実験計画案では、１当量のブロモフェニル酢酸、５当量のアニリン、４当量の無水炭酸カリウムおよび１当量の銅粉末を用い、それらをメチルピロリジン３０ｍＬ中で混合し、１２０℃で２０時間加熱し、次に熱水および次にクロロホルムで処理して、アニリノフェニル酢酸のカリウム塩を沈殿させる。先行技術の方法を利用すると、タール状反応生成物が生じて沈殿が形成されず、それは数種類の化合物を含有し、所望の化合物はごく微量しか示されていなかった。前記改良された合成方法では、ａ）反応時間を短縮して４時間とし、ｂ）反応温度を１１５〜１２０℃に維持し、ｃ）アニリンの量をブロモフェニル酢酸１当量当たり２当量まで減らし、ｄ）過剰の炭酸カリウムが反応生成物の塩基触媒酸化を引き起こしていたことから、炭酸カリウムを２当量まで減らし（１当量はブロモ酸の中和に、１当量は反応で生じる臭化水素酸の中和用に）、ｅ）Ｎ−メチルピロリジンの量を１０倍減らして、二分子反応を促進し、最終生成物を単離できるようにし、ｆ）銅粉末に代えて調製したばかりの活性化銅を使用し、使用するブロモフェニル酢酸の７モル％まで量を減らすものである。
【００４６】
実施例３：２−［（フェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
アニリン５０ｍｍｏｌ、無水炭酸カリウム５０ｍｍｏｌ、活性化銅粉末（７％）ｍｍｏｌおよびＮ−メチルピロリドン３ｍＬの混合物に１２０℃で、２−ブロモフェニル酢酸（２．５ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を撹拌しながら１２０℃で４時間維持した。得られた若干灰色がかった混合物をセライト床で熱濾過し、セライトを水（２００ｍＬ）およびヘキサン（２００ｍＬ）で洗浄した。濾液を分液漏斗に移し入れ、ヘキサンで抽出し、冷却して室温とした。水層を除去し、冷却して５℃とし、やはり５℃に維持した希塩酸（１：３）で中和した。沈殿した２−［（フェニル）アミノ］フェニル酢酸を濾取し、水で十分に洗浄し、吸引濾過した。
【００４７】
実施例４：２−［（２−クロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を２−クロロアニリンと縮合させて、２−［（２−クロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【００４８】
実施例５：２−［（３−クロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を３−クロロアニリンと縮合させて、２−［（３−クロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【００４９】
ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）：３．７ｐｐｍでＣＨ2の一重線；適切な化学シフトを有する該当する芳香族プロトン；１３ｐｐｍの酸プロトン。
元素分析：Ｃ14Ｈ21ＣｌＮＯ2（酸）；Ｃ14Ｈ11ＣｌＮＯ2Ｎａ（塩）。
ＴＬＣ：単一スポット。
融点：１０２〜１０３℃。
【００５０】
実施例６：２−［（４−クロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を４−クロロアニリンと縮合させて、２−［（４−クロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【００５１】
実施例７：２−［（２，３−ジクロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成  実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を２，３−ジクロロアニリンと縮合させて、２−［（２，３−ジクロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【００５２】
実施例８：２−［（２，４−ジクロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成  実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を２，４−ジクロロアニリンと縮合させて、２−［（２，４−ジクロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【００５３】
実施例９：２−［（２，５−ジクロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成  実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を２，５−ジクロロアニリンと縮合させて、２−［（２，５−ジクロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【００５４】
実施例１０：２−［（２，６−ジクロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を２，６−ジクロロアニリンと縮合させて、２−［（２，６−ジクロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【００５５】
実施例１１：２−［（３，４−ジクロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を３，４−ジクロロアニリンと縮合させて、２−［（３，４−ジクロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【００５６】
実施例１２：２−［（３，５−ジクロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を３，５−ジクロロアニリンと縮合させて、２−［（３，５−ジクロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【００５７】
実施例１３：２−［（２，６−ジメチルフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を２，６−ジメチルアニリンと縮合させて、２−［（２，６−ジメチルフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【００５８】
実施例１４：２−［（２，３−ジメチルフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を２，３−ジメチルアニリンと縮合させて、２−［（２，３−ジメチルフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【００５９】
実施例１５：２−［（２，４−ジメチルフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を２，４−ジメチルアニリンと縮合させて、２−［（２，４−ジメチルフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【００６０】
実施例１６：２−［（２，５−ジメチルフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を２，５−ジメチルアニリンと縮合させて、２−［（２，５−ジメチルフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【００６１】
実施例１７：２−［（３，４−ジメチルフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を３，４−ジメチルアニリンと縮合させて、２−［（３，４−ジメチルフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【００６２】
実施例１８：２−［（３，５−ジメチルフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を３，５−ジメチルアニリンと縮合させて、２−［（３，５−ジメチルフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【００６３】
実施例１９：２−［（２−メチルフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸をｏ−トルイジンと縮合させて、２−［（２−メチルフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
実施例２０：２−［（３−メチルフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸をｍ−トルイジンと縮合させて、２−［（３−メチルフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【００６４】
実施例２１：２−［（４−メチルフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸をｐ−トルイジンと縮合させて、２−［（４−メチルフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
実施例２２：２−［（２，４，６−トリクロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
【００６５】
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を２，４，６−トリクロロアニリンと縮合させて、２−［（２，４，６−トリクロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【００６６】
実施例２３：２−［（２，６−ジクロロ−４−メトキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
２，６−ジクロロ−４−メトキシジフェニルアミン（０．２５ｍｏｌ）のベンゼン（３７５ｍＬ）溶液に、オキサリルクロライド（０．５ｍｏｌ）を５℃で滴下した。混合物を室温で２時間撹拌し、溶媒留去した。残留物をベンゼン４００ｍＬに溶かし、溶液を再度溶媒留去して乾固させて、Ｎ−（２，６−ジクロロ−４−メトキシフェニル）オキサニロイルクロライドを得た。この中間体をテトラクロロエタン６００ｍＬに溶かし、ＡｌＣｌ3（４０ｇ）をゆっくり加え、混合物を室温で２０時間撹拌した。混合物を、氷８００ｇの入った２Ｎ  ＨＣｌ  ２００ｍＬに投入した。有機相を水、２Ｎ  ＫＨＣＯ3、再度水で洗浄し、溶媒留去した。エーテルからの結晶化によって、１−（２，６−ジクロロ−４−メトキシフェニル）イサチンを得た。この中間体を１Ｎ  ＮａＯＨ  ２１５ｍＬおよびエタノール２１００ｍＬに溶かし、１０分間加熱還流した。溶液を冷却し、溶媒留去した。残留物を水２０００ｍＬに溶かし、エーテルで洗浄し、２Ｎ  ＨＣｌで酸性とした。沈殿をエーテルで抽出した。水での洗浄、溶媒留去およびエーテルからの結晶化後に、有機抽出液から生成物である２−［２，６−ジクロロ−４−メトキシフェニル）アミノ］グリオキシル酸を得た。この中間体（０．２２ｍｏｌ）を２−メトキシエタノール９００ｍＬに溶かした。ヒドラジン水和物（１ｍｏｌ）を加え、混合物を昇温させて６０℃とした。ＮａＯＣＨ3（２．３ｍｏｌ）をゆっくり加え、混合物を緩やかに昇温させて１５０℃とすることにより、メタノール、水、ヒドラジンおよび溶媒の一部を留去した。混合物を１５０℃で１時間維持し、回収し、砕いた氷８ｋｇに投入した。水相をエーテル８００ｍＬで抽出し、０℃にて濃ＨＣｌで酸性とした。沈殿油状物をエーテルで抽出した。エーテル抽出液を水で洗浄し、溶媒留去した。残留物をエーテル−石油エーテルから結晶化して、２−［２，６−ジクロロ−４−メトキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【００６７】
実施例２４：２−［（２，６−ジクロロ−４−ヒドロキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例２３からの２−［（２，６−ジクロロ−４−メトキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸（０．１ｍｏｌ）を、１７０℃としたピリジン塩酸塩２００ｇ（１．７５ｍｏｌ）の溶融物に少量ずつ加えた。混合物を１８０℃で３時間加熱し、高温の間に氷水２０００ｍＬに投入した。沈殿生成物を濾過し、水で洗浄し、酢酸エチル１０００ｍＬに溶かした。有機相を１Ｎ  ＨＣｌの水溶液２００ｍＬ（１００ｍＬで２回）で洗浄し、溶媒留去して、Ｎ−（２，６−ジクロロ−４−ヒドロキシフェニル）オキシインドールを得た。Ｎ−（２，６−ジクロロ−４−ヒドロキシフェニル）−オキシインドール８ｇのｎ−ブタノール（２００ｍＬ）溶液に、ＮａＯＨ  ７ｇおよびＫＯＨ  １ｍｇを加え、反応混合物を２４時間還流し、減圧下で溶媒留去した。残留物を水７００ｍＬに溶かし、水溶液をエーテルで抽出し（２００ｍＬで２回）、冷却して０℃とし、濃ＨＣｌで酸性とした。沈殿をエーテル３００ｍＬ内に採集した。有機相を水３０ｍＬ、０．５Ｎ  ＮａＨＣＯ3（８０ｍＬで５回）、および２Ｎ  ＫＨＣＯ3溶液８０ｍＬで洗浄した。合わせたＮａＨＣＯ3抽出液を冷却して０℃とし、２Ｎ  ＨＣｌで酸性とし、沈殿をエーテル２００ｍＬに溶かした。有機層を水３０ｍＬで洗浄し、溶媒留去して、２−［（２，６−ジクロロ−４−ヒドロキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【００６８】
実施例２５：２−［（２，６−ジクロロ−３−メトキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例２３に記載の方法と同様にして、２，６−ジクロロ−３−メトキシジフェニルアミンを用いて、２−［（２，６−ジクロロ−３−メトキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸を調製した。
【００６９】
実施例２６：２−［（２，６−ジクロロ−３−ヒドロキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例２４に記載の方法と同様にして、２−［（２，６−ジクロロ−３−メトキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸を２−［（２，６−ジクロロ−３−ヒドロキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸に変換した。
【００７０】
実施例２７：２−［（２，６−ジクロロ−３−メチルフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
２，６−ジクロロ−３−メチルジフェニルアミン（０．１７ｍｏｌ）およびクロロアセチルクロライド（０．５ｍｏｌ）の混合物を１６時間還流し、冷却し、溶媒留去した。残留物をクロロホルム−エーテル（１：２）５００ｍＬに溶かした。有機相を２Ｎ  ＫＨＣＯ3  １００ｍＬおよび水１００ｍＬで洗浄し、溶媒留去した。残留物をＭｅＯＨから再結晶して、２−クロロ−Ｎ−（２′，６′−ジクロロ−３′−メチルフェニル）−Ｎ−フェニルアセトアミドを得た。この中間体（０．１ｍｏｌ）およびＡｌＣｌ3３０ｇを混合し、混合物を１６０℃で２時間（１００℃で溶融が起こる）加熱した。溶融塊を冷却し、混合物を撹拌しながら砕いた氷３００ｇに投入した。沈殿油状物をクロロホルム３００ｍＬに溶かした。有機相を２Ｎ  ＫＨＣＯ3  ５０ｍＬおよび水５０ｍＬに溶かし、溶媒留去した。ＭｅＯＨからの再結晶によって、１−（２，６−ジクロロ−３−メチルフェニル）オキシインドールを得た。この中間体１８．６ｇ、２Ｎ  ＮａＯＨ  ６６ｍＬおよびＥｔＯＨ  ６６ｍＬの溶液を４時間還流させた。透明溶液を氷浴で４時間冷却した。沈殿結晶を濾過し、水８０ｍＬから再結晶して、２−［（２，６−ジクロロ−３−メチルフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【００７１】
実施例２８：２−［（２，６−ジクロロフェニル）アミノ］５′−メトキシフェニル酢酸の合成
実施例２３に記載の方法と同様にして、４′−メトキシ−２，６−ジクロロジフェニルアミンを用いて、２−［（２，６−ジクロロフェニル）アミノ］５′−メトキシフェニル酢酸を調製した。
【００７２】
実施例２９：２−［（２，６−ジクロロフェニル）アミノ］５′−ヒドロキシフェニル酢酸の合成
実施例２４に記載の方法と同様にして、２−［（２，６−ジクロロフェニル）アミノ］５′−メトキシフェニル酢酸を２−［（２，６−ジクロロフェニル）アミノ］５′−ヒドロキシフェニル酢酸に変換した。
【００７３】
実施例３０：２−［（２−メチル−３−クロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を２−メチル−３−クロロアニリンと縮合させて、２−［（２−メチル−３−クロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【００７４】
実施例３１：２−［（２，６−ジクロロフェニル）アミノ］６′−ブロモフェニル酢酸の合成
実施例２７に記載の方法と同様にして、５−ブロモ−２′，６′−ジクロロジフェニルアミンを用いて、２−［（２，６−ジクロロフェニル）アミノ］６′−ブロモフェニル酢酸を得た。
【００７５】
実施例３２：２−［（２−クロロ−３−メチルフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を２−クロロ−３−メチルアニリンと縮合させて、２−［（２−クロロ−３−メチルフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【００７６】
実施例３３：２−［（２−クロロ−６−フルオロフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例２７に記載の方法と同様にして、２−クロロ−６−フルオロジフェニルアミンを用いて、２−［（２−クロロ−６−フルオロフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【００７７】
実施例３４：２−［（２，３，５，６−テトラメチルフェニル）アミノ］５′−クロロフェニル酢酸の合成
実施例２３に記載の方法と同様にして、４−クロロ−２′，３′，５′，６′−テトラメチルジフェニルアミンを用いて、２−［（２，３，５，６−テトラメチルフェニル）アミノ］５′−クロロフェニル酢酸を調製した。
【００７８】
実施例３５：２−［（２，６−ジエチルフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を２，６−ジエチルアニリンと縮合させて、２−［（２，６−ジエチルフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【００７９】
実施例３６：２−［（２，４−ジフルオロフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を２，４−ジフルオロアニリンと縮合させて、２−［（２，４−ジフルオロフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【００８０】
実施例３７：２−［（２，６−ジフルオロフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を２，６−ジフルオロアニリンと縮合させて、２−［（２，６−ジフルオロフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【００８１】
実施例３８：２−［（２，６−ジクロロ−３−メトキシ−４−ベンジルオキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例２３に記載の方法と同様にして、２，６−ジクロロ−３−メトキシ−４−ベンジルオキシジフェニルアミンを用いて、２−［（２，６−ジクロロ−３−メトキシ−４−ベンジルオキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸を調製した。
【００８２】
実施例３９：２−［（２，６−ジクロロ−３−メトキシ−４−ヒドロキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３８からの２−［（２，６−ジクロロ−３−メトキシ−４−ベンジルオキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸（１０ｇ）を、室温で２５分間にわたり、常圧でテトラヒドロフラン（１００ｍＬ）および１，２−ジクロロベンゼン（１０ｍＬ）中、Ｐｄ−Ｃ（１ｇ、５％）によって水素化した。触媒を濾去し、濾液を溶媒留去して、最終生成物である２−［（２，６−ジクロロ−３−メトキシ−４−ヒドロキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【００８３】
実施例４０：２−［（２，６−ジクロロフェニル）アミノ］６′−メトキシフェニル酢酸の合成
実施例２３に記載の方法と同様にして、５−メトキシ−２′，６′−ジクロロジフェニルアミンを用いて、２−［（２，６−ジクロロフェニル）アミノ］６′−メトキシフェニル酢酸を調製した。
【００８４】
実施例４１：２−［（２，６−ジクロロフェニル）アミノ］６′−ヒドロキシフェニル酢酸の合成
実施例２４に記載の方法と同様にして、２−［（２，６−ジクロロフェニル）アミノ］６′−メトキシフェニル酢酸を２−［（２，６−ジクロロフェニル）アミノ］６′−ヒドロキシフェニル酢酸に変換した。
【００８５】
実施例４２：２−［（２，６−ジクロロ−３−ベンジルオキシ−４−メトキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例２３に記載の方法と同様にして、２，６−ジクロロ−３−ベンジルオキシ−４−メトキシジフェニルアミンを用いて、２−［（２，６−ジクロロ−３−ベンジルオキシ−４−メトキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸を調製した。
【００８６】
実施例４３：２−［（２，６−ジクロロ−３−ヒドロキシ−４−メトキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例２４に記載の方法と同様にして、２−［（２，６−ジクロロ−３−ベンジルオキシ−４−メトキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸を２−［（２，６−ジクロロ−３−ヒドロキシ−４−メトキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸に変換した。
【００８７】
実施例４４：２−［（２，６−ジクロロ−４−メトキシフェニル）アミノ］５′−メトキシフェニル酢酸の合成
実施例２３に記載の方法と同様にして、４−メトキシ−２′，６′−ジクロロ−４′−メトキシジフェニルアミンを用いて、２−［（２，６−ジクロロ−４−メトキシフェニル）アミノ］５′−メトキシフェニル酢酸を調製した。
【００８８】
実施例４５：２−［（２，６−ジクロロ−４−ヒドロキシフェニル）アミノ］５′−ヒドロキシフェニル酢酸の合成
実施例２４に記載の方法と同様にして、２−［（２，６−ジクロロ−４−メトキシフェニル）アミノ］５′−メトキシフェニル酢酸を２−［（２，６−ジクロロ−４−ヒドロキシフェニル）アミノ］５′−ヒドロキシフェニル酢酸に変換した。
【００８９】
実施例４６：２−［（２−メトキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸をｏ−アニシジンと縮合させて、２−［（２−メトキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【００９０】
実施例４７：２−［（３−メトキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸をｍ−アニシジンと縮合させて、２−［（３−メトキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【００９１】
実施例４８：２−［（４−メトキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸をｐ−アニシジンと縮合させて、２−［（４−メトキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【００９２】
実施例４９：２−［（２−ヒドロキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例２４に記載の方法と同様にして、２−［（２−メトキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸を２−［（２−ヒドロキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸に変換した。
【００９３】
実施例５０：２−［（３−ヒドロキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例２４に記載の方法と同様にして、２−［（３−メトキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸を２−［（３−ヒドロキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸に変換した。
【００９４】
実施例５１：２−［（４−ヒドロキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例２４に記載の方法と同様にして、２−［（４−メトキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸を２−［（４−ヒドロキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸に変換した。
【００９５】
実施例５２：２−［（３−クロロ−４−メトキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を３−クロロ−４−メトキシアニリンと縮合させて、２−［（３−クロロ−４−メトキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【００９６】
実施例５３：２−［（３−クロロ−４−ヒドロキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例２４に記載の方法と同様にして、２−［（３−クロロ−４−メトキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸を２−［（３−クロロ−４−ヒドロキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸に変換した。
【００９７】
実施例５４：２−［（２−メトキシ−５−クロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を２−メトキシ−５−クロロアニリンと縮合させて、２−［（２−メトキシ−５−クロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【００９８】
実施例５５：２−［（２−ヒドロキシ−５−クロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例２４に記載の方法と同様にして、２−［（２−メトキシ−５−クロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸を２−［（２−ヒドロキシ−５−クロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸に変換した。
【００９９】
実施例５６：２−［（３−メトキシ−６−クロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を３−メトキシ−６−クロロアニリンと縮合させて、２−［（３−メトキシ−６−クロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１００】
実施例５７：２−［（３−ヒドロキシ−６−クロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例２４に記載の方法と同様にして、２−［（３−メトキシ−６−クロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸を２−［（３−ヒドロキシ−６−クロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸に変換した。
【０１０１】
実施例５８：２−［（２−メトキシ−３−フルオロフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を２−メトキシ−３−フルオロアニリンと縮合させて、２−［（２−メトキシ−３−フルオロフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１０２】
実施例５９：２−［（２−ヒドロキシ−３−フルオロフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例２４に記載の方法と同様にして、２−［（２−メトキシ−３−フルオロフェニル）アミノ］フェニル酢酸を２−［（２−ヒドロキシ−３−フルオロフェニル）アミノ］フェニル酢酸に変換した。
【０１０３】
実施例６０：２−［（３−フルオロ−４−メトキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を３−フルオロ−４−メトキシアニリンと縮合させて、２−［（３−フルオロ−４−メトキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１０４】
実施例６１：２−［（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例２４に記載の方法と同様にして、２−［（３−フルオロ−４−メトキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸を２−［（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸に変換した。
【０１０５】
実施例６２：２−［（２−メトキシ−４−ニトロフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を２−メトキシ−４−ニトロアニリンと縮合させて、２−［（２−メトキシ−４−ニトロフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１０６】
実施例６３：２−［（２−ヒドロキシ−４−ニトロフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例２４に記載の方法と同様にして、２−［（２−メトキシ−４−ニトロフェニル）アミノ］フェニル酢酸を２−［（２−ヒドロキシ−４−ニトロフェニル）アミノ］フェニル酢酸に変換した。
【０１０７】
実施例６４：２−［（２−メトキシ−５−ニトロフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を２−メトキシ−５−ニトロアニリンと縮合させて、２−［（２−メトキシ−５−ニトロフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１０８】
実施例６５：２−［（２−ヒドロキシ−５−ニトロフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例２４に記載の方法と同様にして、２−［（２−メトキシ−５−ニトロフェニル）アミノ］フェニル酢酸を２−［（２−ヒドロキシ−５−ニトロフェニル）アミノ］フェニル酢酸に変換した。
【０１０９】
実施例６６：２−［（２−ニトロ−４−メトキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を２−ニトロ−４−メトキシアニリンと縮合させて、２−［（２−ニトロ−４−メトキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１１０】
実施例６７：２−［（２−ニトロ−４−ヒドロキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例２４に記載の方法と同様にして、２−［（２−ニトロ−４−メトキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸を２−［（２−ニトロ−４−ヒドロキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸に変換した。
【０１１１】
実施例６８：２−［（２−ニトロ−４−エトキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を２−ニトロ−４−エトキシアニリンと縮合させて、２−［（２−ニトロ−４−エトキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１１２】
実施例６９：２−［（３−メトキシ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を３−メトキシ−５−（トリフルオロメチル）アニリンと縮合させて、２−［（３−メトキシ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１１３】
実施例７０：２−［（３−ヒドロキシ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例２４に記載の方法と同様にして、２−［（３−メトキシ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ］フェニル酢酸を２−［（３−ヒドロキシ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ］フェニル酢酸に変換した。
【０１１４】
実施例７１：２−［（２−エチルフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を２−エチルアニリンと縮合させて、２−［（２−エチルフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１１５】
実施例７２：２−［（３−エチルフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を３−エチルアニリンと縮合させて、２−［（３−エチルフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１１６】
実施例７３：２−［（４−エチルフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を４−エチルアニリンと縮合させて、２−［（４−エチルフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１１７】
実施例７４：２−［（２−ブロモフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を２−ブロモアニリンと縮合させて、２−［（２−ブロモフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１１８】
実施例７５：２−［（３−ブロモフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を３−ブロモアニリンと縮合させて、２−［（３−ブロモフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１１９】
実施例７６：２−［（４−ブロモフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を４−ブロモアニリンと縮合させて、２−［（４−ブロモフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１２０】
実施例７７：２−［（２−フルオロフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を２−フルオロアニリンと縮合させて、２−［（２−フルオロフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１２１】
実施例７８：２−［（３−フルオロフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を３−フルオロアニリンと縮合させて、２−［（３−フルオロフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１２２】
実施例７９：２−［（４−フルオロフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を４−フルオロアニリンと縮合させて、２−［（４−フルオロフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１２３】
実施例８０：２−［（２−ヨードフェニル  アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を２−ヨードアニリンと縮合させて、２−［（２−ヨードフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１２４】
実施例８１：２−［（３−ヨードフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を３−ヨードアニリンと縮合させて、２−［（３−ヨードフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１２５】
実施例８２：２−［（４−ヨードフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を４−ヨードアニリンと縮合させて、２−［（４−ヨードフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１２６】
実施例８３：２−［（２−ニトロフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を２−ニトロアニリンと縮合させて、２−［（２−ニトロフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１２７】
実施例８４：２−［（３−ニトロフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を３−ニトロアニリンと縮合させて、２−［（３−ニトロフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１２８】
実施例８５：２−［（４−ニトロフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を４−ニトロアニリンと縮合させて、２−［（４−ニトロフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１２９】
実施例８６：２−［（３，４−ジフルオロフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を３，４−ジフルオロアニリンと縮合させて、２−［（３，４−ジフルオロフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１３０】
実施例８７：２−［（３，５−ジフルオロフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を３，５−ジフルオロアニリンと縮合させて、２−［（３，５−ジフルオロフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１３１】
実施例８８：２−［（２，５−ジフルオロフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を２，５−ジフルオロアニリンと縮合させて、２−［（２，５−ジフルオロフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１３２】
実施例８９：２−［（２，３−ジフルオロフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を２，３−ジフルオロアニリンと縮合させて、２−［（２，３−ジフルオロフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１３３】
実施例９０：２−［（２，４−ジブロモフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を２，４−ジブロモアニリンと縮合させて、２−［（２，４−ジブロモフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１３４】
実施例９１：２−［（２，５−ジブロモフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を２，５−ジブロモアニリンと縮合させて、２−［（２，５−ジブロモフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１３５】
実施例９２：２−［（２，６−ジブロモフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を２，６−ジブロモアニリンと縮合させて、２−［（２，６−ジブロモフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１３６】
実施例９３：２−［（３−クロロ−４−フルオロフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を３−クロロ−４−フルオロアニリンと縮合させて、２−［（３−クロロ−４−フルオロフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１３７】
実施例９４：２−［（２−フルオロ−４−クロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を２−フルオロ−４−クロロアニリンと縮合させて、２−［（２−フルオロ−４−クロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１３８】
実施例９５：２−［（３−ニトロ−４−クロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を３−ニトロ−４−クロロアニリンと縮合させて、２−［（３−ニトロ−４−クロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１３９】
実施例９６：２−［（２−フルオロ−５−ニトロフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を２−フルオロ−５−ニトロアニリンと縮合させて、２−［（２−フルオロ−５−ニトロフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１４０】
実施例９７：２−［（３−ニトロ−４−フルオロフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を３−ニトロ−４−フルオロアニリンと縮合させて、２−［（３−ニトロ−４−フルオロフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１４１】
実施例９８：２−［（２−フルオロ−４−ヨードフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を２−フルオロ−４−ヨードアニリンと縮合させて、２−［（２−フルオロ−４−ヨードフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１４２】
実施例９９：２−［（３，５−ジニトロフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を３，５−ジニトロアニリンと縮合させて、２−［（３，５−ジニトロフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１４３】
実施例１００：２−［（２−フルオロ−４−ブロモフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を２−フルオロ−４−ブロモアニリンと縮合させて、２−［（２−フルオロ−４−ブロモフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１４４】
実施例１０１：２−［（２，３，４−トリフルオロフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を２，３，４−トリフルオロアニリンと縮合させて、２−［（２，３，４−トリフルオロフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１４５】
実施例１０２：２−［（３，４，５−トリクロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を３，４，５−トリクロロアニリンと縮合させて、２−［（３，４，５−トリクロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１４６】
実施例１０３：２−［（２，４，５−トリフルオロフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を２，４，５−トリフルオロアニリンと縮合させて、２−［（２，４，５−トリフルオロフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１４７】
実施例１０４：２−［（２，３，４，６−テトラフルオロフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を２，３，４，６−テトラフルオロアニリンと縮合させて、２−［（２，３，４，６−テトラフルオロフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１４８】
実施例１０５：２−［（３−メチル−４−ブロモフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を３−メチル−４−ブロモアニリンと縮合させて、２−［（３−メチル−４−ブロモフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１４９】
実施例１０６：２−［（３−ブロモ−４−メチルフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を３−ブロモ−４−メチルアニリンと縮合させて、２−［（３−ブロモ−４−メチルフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１５０】
実施例１０７：２−［（３−フルオロ−４−メチルフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を３−フルオロ−４−メチルアニリンと縮合させて、２−［（３−フルオロ−４−メチルフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１５１】
実施例１０８：２−［（３−メチルメルカプトフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を３−メチルメルカプトアニリンと縮合させて、２−［（３−メチルメルカプトフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１５２】
実施例１０９：２−［（４−メチルメルカプトフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を４−メチルメルカプトアニリンと縮合させて、２−［（４−メチルメルカプトフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１５３】
実施例１１０：２−［（３−ニトロ−４−メチルフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を３−ニトロ−４−メチルアニリンと縮合させて、２−［（３−ニトロ−４−メチルフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１５４】
実施例１１１：２−［（３，５−メトキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を３，５−メトキシアニリンと縮合させて、２−［（３，５−メトキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１５５】
実施例１１２：２−［（３，５−ヒドロキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例２４に記載の方法と同様にして、２−［（３，５−メトキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸を２−［（３，５−ヒドロキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸に変換した。
【０１５６】
実施例１１３：２−［（４−プロピルフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を４−プロピルアニリンと縮合させて、２−［（４−プロピルフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１５７】
実施例１１４：２−［（４−イソプロピルフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を４−イソプロピルアニリンと縮合させて、２−［（４−イソプロピルフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１５８】
実施例１１５：２−［（３，４，５−トリメトキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を３，４，５−トリメトキシアニリンと縮合させて、２−［（３，４，５−トリメトキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１５９】
実施例１１６：２−［（３，４，５−トリヒドロキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例２４に記載の方法と同様にして、２−［（３，４，５−トリメトキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸を２−［（３，４，５−トリヒドロキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸に変換した。
【０１６０】
実施例１１７：２−［（４−ブチルフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を４−ブチルアニリンと縮合させて、２−［（４−ブチルフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１６１】
実施例１１８：２−［（４−ブトキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を４−ブトキシアニリンと縮合させて、２−［（４−ブトキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１６２】
実施例１１９：２−［（４−ペンチルフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を４−ペンチルアニリンと縮合させて、２−［（４−ペンチルフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１６３】
実施例１２０：２−［（４−ペンチルオキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸の合成
実施例３に記載の方法と同様にして、２−ブロモフェニル酢酸を４−ペンチルオキシアニリンと縮合させて、２−［（４−ペンチルオキシフェニル）アミノ］フェニル酢酸を得た。
【０１６４】
実施例１２１：２−（フェニルアミノ）フェニル酢酸類の抗糖化活性
被験化合物を加えずに、あるいは各種濃度（１〜１０００μＭ）で被験化合物とともに、緩衝生理食塩水中０〜５０ｍＭグルコース存在下で３７℃にて、ヒトアルブミン（１０ｍｇ／ｍＬ）をあるいは４８〜１４４時間インキュベートした。透析によって遊離のグルコースおよび化合物を除去した後、糖化アルブミンにおけるアマドリ−グルコース付加物と特異的に反応し、非糖化タンパク質とは反応しないことが知られているモノクローナル抗体を用いる酵素結合抗体免疫アッセイによって、生成した糖化アルブミンの量を求めた。インキュベーションにおいてグルコースを存在させることにより、アルブミンの非酵素的糖化が促進され、組をなすインキュベーションを行うことにより、対照条件下（０ｍＭグルコース）、刺激条件下（２５〜５０ｍＭグルコース）および阻害条件下（化合物＋グルコース）で形成された糖化アルブミンの量を比較することができる。これらのデータから、糖化阻害におけるＩＣ50（５０％阻害に必要な濃度）を計算した。２−（フェニルアミノ）フェニル酢酸化合物の代表的サンプルによる糖化阻害のＩＣ50（μＭ）を表２に示してある。
【表２】
0004833468.tif 000010
【０１６５】
実施例１２２：２−（フェニルアミノ）フェニル酢酸のシクロオキシゲナーゼ阻害活性
【０１６６】
ウシ精嚢の細胞ホモジネートをアラキドン酸とともにインキュベートし、プロスタグランジン類の産生をモニタリングした。アラキドン酸のプロスタグランジンＥ2への変換に対する被験化合物の効果を、補因子ヘマチンおよびフェノール
を含む緩衝液中で１〜３０分間インキュベーションした後に測定した。濃度（１〜１０００μＭ）を変化させて化合物を試験し、データを用いてシクロオキシゲナーゼ阻害のＩＣ50を計算した。代表的な２−（フェニルアミノ）フェニル酢酸類のシクロオキシゲナーゼ阻害活性を表３に示してある。
【表３】
0004833468.tif 000011
【０１６７】
実施例１２３：相対的な抗糖化とシクロオキシゲナーゼ阻害活性
２−（２，６−ジクロロフェニルアミノ）フェニル酢酸のシクロオキシゲナーゼ阻害活性に対する糖化阻害活性のＩＣ50の比６．３から、抗糖化：シクロオキシゲナーゼ阻害ＩＣ50比が２未満であれば、有意な抗糖化活性を与える治療濃度がシクロオキシゲナーゼ阻害活性をほとんど持たない好ましい治療プロファイルが得られるだろうことが確認された。代表的な２−（フェニルアミノ）フェニル酢酸類の抗糖化：シクロオキシゲナーゼ阻害の比を表４に示してある。
【表４】
0004833468.tif 000012
【０１６８】
実施例１２４：２−（フェニルアミノ）フェニル酢酸類の投与によるイン・ビボでのアルブミン糖化の防止
【０１６９】
マウスに、腹腔内注射による分割投与で５日間にわたり、２−（２−クロロフェニルアミノ）フェニル酢酸、２−（３−クロロフェニルアミノ）フェニル酢酸、または２−（２，６−ジクロロフェニルアミノ）フェニル酢酸を３〜１０ｍｇ／ｋｇ投与した。投与開始前および投与終了時の最終投与から４時間後に採血を行った。遠心分離によって赤血球から血漿を分離した後、糖化アルブミンの血漿濃度を、実施例１に記載のモノクローナル抗体を用いる酵素結合抗体免疫アッセイによって求めた。以下に示すように、いずれの被験２−（フェニルアミノ）フェニル酢酸類も、結晶糖化アルブミン濃度において用量に関連する低下を生じた。
【表５】
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【０１７０】
実施例１２５：２−（フェニルアミノ）フェニル酢酸化合物による糖化アルブミン低下による糖化に関連する病気の改善
【０１７１】
マウスに対して８週間にわたり、分割用量で２−（２，６−ジクロロフェニルアミノ）フェニル酢酸を６ｍｇ／ｋｇ／日にて投与した。糖化に関連する病気に関する血管機能不全を測定するタンパク排泄検査のため、投与開始時および終了後に採尿を行った。以下に示すように、糖化アルブミンの低下は、尿タンパク排泄低減に関連していた。
【表６】
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【０１７２】
実施例１２６：治療組成物／治療
Ａ．錠剤
代表的な錠剤には、２−［（３−クロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸（１００ｍｇ）、アルファデンプンＵＳＰ（８２ｍｇ）、微結晶セルロース（８２ｍｇ）およびステアリン酸マグネシウム（１ｍｇ）を含有する。同様にして、例えば、２−［（３−クロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸に代えて、２−［（２−クロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸を製剤することが可能である。
【０１７３】
Ｂ．液体
代表的な液体は、２−［（３−クロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸（５０ｍｇ）、リン酸二ナトリウム（５０ｍｇ）、エチルアルコール（１．５ｍＬ）、水（５ｍＬ）および甘味剤および／または香味剤を含有する。同様に、例えば２−［（３−クロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸に代えて、２−［（２−クロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸を用いることにより、他の製剤を調製することが可能である。
【０１７４】
Ｃ．注射剤
代表的な注射製剤は、２−［（３−クロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸（２５ｍｇ）、リン酸二ナトリウム（１１．４ｍｇ）、ベンジルアルコール（０．０１ｍＬ）および注射用水（１ｍＬ）を含有する。同様に、例えば２−［（３−クロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸に代えて、２−［（２−クロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸を用いて、その製剤を調製することが可能である。
【０１７５】
Ｄ．坐剤
代表的な坐剤製剤は、２−［（３−クロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸（５０ｍｇ）、ブチル化ヒドロキシアニソール（０．１〜１．０ｍｇ）、エデト酸二ナトリウム・カルシウム（０．２５〜０．５０ｍｇ）およびポリエチレングリコール（７７５〜１６００ｍｇ）を含有し得る。２−［（３−クロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸に代えて例えば２−［（２−クロロフェニル）アミノ］フェニル酢酸を用い、エデト酸二ナトリウム・カルシウムに代えて例えばブチル化ヒドロキシトルエン（０．０４〜０．０８ｍｇ）を用い、ポリエチレングリコールに代えてサポシア（Ｓｕｐｐｏｃｉｒｅ）Ｌ、ウェコビー（Ｗｅｃｏｂｅｅ）Ｍ、ウィテプゾル類（Ｗｉｔｅｐｓｏｌｓ）などの硬化植物油（６７８〜１４００ｍｇ）を用いることにより、他の坐剤製剤を調製することが可能である。