(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
粉末Ｘ線回折図形において、下記の特徴的ピーク；
0004667542.tif 000017
を有する式（Ｉ−ａ）：
0004667542.tif 000018
で示される（１−メチルシクロヘキサンカルボキシ）メチル  （１Ｒ，５Ｓ，６Ｒ）−２−［（１−（１，３−チアゾリン−２−イル）アゼチジン−３−イル）チオ］−６−［（Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−１−メチル−カルバペン−２−エム−３−カルボキシレートの結晶。
【発明の詳細な説明】
技術分野
本発明は経口投与可能なカルバペネム抗生物質に関し、更に詳細には、消化管を通して高度に吸収されうるカルバペネム−３−カルボン酸エステル誘導体に関する。
背景技術
これまでに、強力な抗菌活性を有する多くのカルバペネム化合物が提案されている。例えば、特開昭６０−２０２８８６号は、２位に（Ｎ−メチルアセトイミドイル−アゼチジン−３−イル）チオ基を有する、下記式（Ａ）：
0004667542.tif 000002
で示されるカルバペネム−３−カルボン酸誘導体を開示している。
本発明者らもまた、１位にβ−配置で導入されたメチル基を有し、そして２位側鎖に（１−ヘテロシクリル−アゼチジン−３−イル）チオ基を有する、下記式（Ｂ）で示されるカルバペネム誘導体であって、高度な抗菌活性と、強力なβ−ラクタマーゼ阻害作用ならびに腎デヒドロペプチダーゼに対する改善された耐性を示すカルバペネム誘導体を開示した（特開平８−５３４５３号）：
0004667542.tif 000003
しかしながら、消化管からの乏しい吸収性ゆえに、上記式（Ａ）及び（Ｂ）の化合物を含めて、これまでに提案されたカルバペネム化合物のほとんどは、臨床上、注射剤としてのみ投与可能と考えられている。
しかしながら臨床の現場においては、治療目的や患者サイドの事情に鑑み、適した投与経路をケースバイケースで選択し得ることが望ましい。注射剤と比較するに、経口剤は容易かつ簡便に投与でき、在宅投与が可能であることから、特に好ましく臨床上極めて有用である。したがって、幅広い抗菌スペクトラムと強力な抗菌活性を有する経口投与可能なカルバペネム化合物の開発が強く望まれている。
発明の開示
広範な研究により、本発明者らは、式（Ｂ）で示される化合物のひとつで、Ｒが水素原子でありＸが硫黄原子である下記式（ＩＩ）：
0004667542.tif 000004
で示される化合物の３位のカルボキシル基をエステル化することによって製造されるエステル誘導体が消化管を通して高度に吸収されうること、また当該エステル誘導体は体内で速やかに加水分解されることにより再び上記式（ＩＩ）の化合物に変換されることを見出した。その結果、本発明者らは、当該エステル誘導体が式（ＩＩ）の化合物のプロドラッグとして、経口的に投与しうる臨床上優れた抗生物質となり得ることを見出した。
したがって、本発明は下記式（Ｉ）：
0004667542.tif 000005
式中、Ｒ1は、水素原子又は低級アルキル基であり；
Ｒ2は、更に低級アルキル基で置換されていてもよい４個ないし７個の炭素原子を有するシクロアルキル基で置換されていてもよいアルキル基であり、または、低級アルキル基で置換されていてもよい４個ないし７個の炭素原子を有するシクロアルキル基であり；
ｎは０又は１である、
で示される（１Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−２−［（１−（１，３−チアゾリン−２−イル）アゼチジン−３−イル）チオ］−６−［（Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−１−メチル−カルバペン−２−エム−３−カルボン酸エステル誘導体を提供するものである。
より具体的には、本発明は式（Ｉ）の化合物であって、式中、
Ｒ1が水素原子である；
Ｒ1が低級アルキル基である；
Ｒ2がアルキル基である；
Ｒ2が更に低級アルキル基で置換されていてもよい４個ないし７個の炭素原子を有するシクロアルキル基で置換されているアルキル基である；
Ｒ2が低級アルキル基で置換されていてもよい４個ないし７個の炭素原子を有するシクロアルキル基である；
ｎが０である；  または、
ｎが１である、各化合物を提供する。
最も具体的には、本発明は、下記式（Ｉ−ａ）：
0004667542.tif 000006
で示される（１−メチルシクロヘキサンカルボキシ）メチル（１Ｒ，５Ｓ，６ｓ）−２−［（１−（１，３−チアゾリン−２−イル）アゼチジン−３−イル）チオ］−６−［（Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−１−メチル−カルバペン−２−エム−３−カルボキシレートを提供する。
式（Ｉ−ａ）の化合物は物理的安定性および化学的安定性に優れ、経口投与した際の消化管からの吸収性が高い。本化合物は体内で速やかに加水分解されて式（ＩＩ）の活性化合物に変換された結果、強力な抗菌活性を示す。したがってその有用性はこれまでに提案されてきた他のカルバペネム抗生物質に対し優れている。
以下に本発明を更に詳細に説明する。
本明細書および請求の範囲において、基または化合物を修飾すべく用いられる「低級」なる語は、この語が付された基または化合物が１個ないし７個の、好ましくは１個ないし４個の炭素原子を有することを意味する。
「アルキル基」なる語は、１個ないし２０個の炭素原子を有する直鎖状または分枝鎖状のアルキル基、例えばメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ｎ−ヘキシル、イソヘキシル、ｎ−ヘプチル、イソヘプチル、オクチル、イソオクチル、ノナニル、ドデカニル、ペンタデカニル、エイコサニル等を意味する。
「低級アルキル基」なる語は、１個ないし７個の、好ましくは１個ないし４個の炭素原子を有するアルキル基を意味する。その例には、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、およびｔｅｒｔ−ブチルが含まれる。
「４個ないし７個の炭素原子を有するシクロアルキル基」なる語は、４個ないし７個の環炭素原子を有する飽和単環式炭化水素基を意味する。その例には、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、およびシクロヘプチルが含まれ、その中でもシクロペンチルとシクロヘキシルが好ましい。これらのシクロアルキル基は、上述した低級アルキル基、例えばメチル、エチル等によって置換されていてもよい。
本発明の化合物がその３位側鎖に不斉炭素原子を有する場合には、光学的に活性な原料を用いることにより異性体を立体選択的に得ることができ、また、その立体異性体混合物から各異性体を通常の手段により単離することができる。したがって、これらの立体異性体混合物のみならず、各異性体それ自体もまた本発明の化合物に包含されるべきものである。
式（Ｉ）の化合物は、下記反応式：
0004667542.tif 000007
式中、Ｘはハロゲン原子であり、Ｒ1、Ｒ2及びｎは前記定義のとおりである、によって製造することができる。
「ハロゲン原子」としては、塩素、ヨウ素、臭素、フッ素原子等を挙げることができ、中でも塩素、ヨウ素、臭素原子が好ましい。
式（ＩＩ）の化合物と式（ＩＩＩ）の化合物との反応は、例えばジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン等のエーテル類；ベンゼン、トルエン、キシレン、シクロヘキサン等の炭化水素類；ジクロルメタン、クロロホルム等のハロゲン化炭化水素類；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、アセトニトリル、ジメチルスルホキシド等から選択される不活性な溶媒、好ましくはジメチルホルムアミド中で、適当な塩基及び第四級アンモニウム塩の存在下に実施することができる。
上記反応に用いられる塩基の例として、水素化リチウム、水素化ナトリウム等のアルカリ金属水素化物；水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等のアルカリ金属水酸化物；炭酸ナトリウム、炭酸カリウム等のアルカリ金属炭酸塩；炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム等のアルカリ金属炭酸水素塩；メチルリチウム、ｎ−ブチルリチウム等のアルカリ金属アルキル；トリメチルアミン、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピル−Ｎ−エチルアミン、ピリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン等の有機アミン等が挙げられる。第四級アンモニウム塩の例としては、トリエチルベンジルアンモニウムクロリド、テトラエチルアンモニウムクロリド、テトラブチルアンモニウムクロリド、テトラブチルアンモニウムブロミド等が挙げられる。
上記反応において使用されるべき式（ＩＩＩ）の化合物の量は特に限定されるものではない。一般には、該化合物は式（ＩＩ）の化合物１モルに対して約１ないし約３モル、好ましくは約１ないし約２モルの割合で使用することができる。塩基および第四級アンモニウム塩の量も特に限定されず、使用する塩基および第四級アンモニウム塩の種類によって適宜変更することができる。一般には、それらは式（ＩＩ）の化合物１モルに対してそれぞれ約１ないし約３モルの割合で使用することができる。反応温度は厳密に制限されるものでなく、広い範囲で変動させることができる。一般には約−２０℃ないし約７５℃の範囲とすることができる。反応は約１０分間ないし数時間で終了させることができる。
上記の反応により式（Ｉ）の化合物が提供される。必要に応じ反応混合物を、ろ過、デカンテーション、抽出、洗浄、溶媒留去、カラム又は薄層クロマトグラフィー、再結晶、蒸留、昇華といった通常の手段に付すことにより当該化合物を単離精製することができる。
また、式（Ｉ）の化合物は、有機酸又は無機酸を用いて薬剤学的に許容しうる酸付加塩とすることもできる。有機酸の例には、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、酪酸、トリフルオロ酢酸、トリクロロ酢酸等の低級脂肪酸；コハク酸、クエン酸、酒石酸等の多塩基酸；アスパラギン酸、グルタミン酸等のアミノ酸；安息香酸、ｐ−ニトロ安息香酸等の置換又は未置換の安息香酸；メタンスルホン酸、トリフルオロメタンスルホン酸等の（ハロ）低級アルキルスルホン酸；ベンゼンスルホン酸、ｐ−ニトロベンゼンスルホン酸、ｐ−ブロモベンゼンスルホン酸、トルエンスルホン酸、２，４，６−トリイソプロピルベンゼンスルホン酸等の置換又は未置換のアリールスルホン酸；ジフェニルリン酸等の有機リン酸が含まれる。無機酸の例には、塩酸、硫酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、ホウフッ化水素酸、過塩素酸、硝酸、リン酸が含まれる。
前記反応において出発原料として用いられる式（ＩＩ）の化合物は新規化合物であり、後記製造例６に記載される方法に従って製造することができる。式（ＩＩＩ）の化合物については、それ自体既知の化合物を使用することができ、あるいは、後記製造例１ないし５に記載した方法に従い、既知の化合物から容易に製造することができる。
前述のように、本発明の提供する式（Ｉ）のカルバペネム−３−カルボン酸エステル誘導体は、消化管からの吸収性が高いため経口投与が可能である。しかも、式（Ｉ）の化合物が体内において速やかに式（ＩＩ）の活性化合物に変換されることにより、その化合物が有する強力な抗菌活性を発揮することができる（後記抗菌試験結果参照）。したがって、式（Ｉ）の化合物は、式（ＩＩ）の化合物の経口投与を可能にするためのプロドラッグとして、臨床上極めて有用であることが期待される。
式（Ｉ）の化合物は、その抗菌的有効量を含有する経口投与用組成物の形態で、人間またはその他の哺乳類に投与することができる。その投与量は患者の年齢、体重、症状、医師の診断等に応じて広い範囲にわたり変動することができる。成人に対する一般的な投与量範囲は、１日当たり約１００ないし約３，０００ｍｇとすることができ、これを１日１回または数回に分けて投与することができる。
本発明の化合物を含有する経口投与用組成物は、医薬製剤、特に抗生物質製剤において慣用されている有機もしくは無機の担体又は希釈剤、例えば、でんぷん、乳糖、白糖、結晶セルロース、リン酸水素カルシウム等の賦形剤；アカシア、ヒドロキシプロピルセルロース、アルギン酸、ゼラチン、ポリビニルピロリドン等の結合剤；ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、タルク、水添植物油等の滑沢剤；加工でんぷん、カルシウムカルボキシメチルセルロース、低置換ヒドロキシプロピルセルロース等の崩壊剤；非イオン性界面活性剤、アニオン性界面活性剤等の溶解補助剤等を用いて調製することができる。その組成物の製剤例としては、錠剤、コーティング剤、カプセル剤、トローチ剤、散剤、細粒剤、顆粒剤、ドライシロップ剤等の固体製剤、あるいはシロッップ剤等の液体製剤が挙げられる。
本発明のカルバペネム化合物の製造につき、下記実施例によって更に詳細に説明する。しかしながら本発明は下記実施例に限定されるものではない。
実施例の記載において、以下の略号はそれぞれ個別の意味を有するべく使用される。
Ａｃ  ：アセチル基
ＰＮＢ：ｐ−ニトロベンジル基
製造例１：
0004667542.tif 000008
イソ吉草酸（１）１．５３２ｇ、ＮａＨＣＯ3５．０４ｇ及び硫酸水素テトラブチルアンモニウム０．５１８ｇを水５０ｍｌ及びジクロロメタン５０ｍｌの混合溶液に溶解し、この混合物を氷冷した。そしてこの混合物にクロロメチルクロロスルホネート３．０２５ｇを加え、反応混合物を同温度にて０．５時間、そして室温にて３時間攪拌した。反応後、有機層を分液して飽和食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧下溶媒を留去後、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：クロロホルム＝３：１）により精製して、イソバレリルオキシメチルクロライド［化合物（２）］１．３８ｇ（６０％）を得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：０．９８９（ｄ，６Ｈ，Ｊ＝６．５９Ｈｚ）、２．０９−２．１４（ｍ，１Ｈ）、２．２３５（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝６．６０Ｈｚ）、５．６９２（ｓ，２Ｈ）
製造例２：
製造例１と実質的に同様の方法により、以下の化合物を得た。
２−エチルブチリルオキシメチルクロライド［化合物（３）］
収率：３６％
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：０．９１６（ｔ，６Ｈ，Ｊ＝７．５９Ｈｚ）、１．５１−１．７３（ｍ，４Ｈ）、２．２３−２．３３（ｍ，１Ｈ）、５．７３０（ｓ，２Ｈ）
ｎ−オクタノイルオキシメチルクロライド［化合物（４）］
収率：８７％
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：０．７９−０．８３（ｍ，３Ｈ）、１．２１−１．２３（ｍ，８Ｈ）、１．５３−１．６１（ｍ，２Ｈ）、２．２９−２．３４（ｍ，２Ｈ）、５．６３６（ｓ，２Ｈ）
ｎ−デカノイルオキシメチルクロライド［化合物（５）］
収率：９１％
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：０．８３−０．８８（ｍ，３Ｈ）、１．１４−１．４０（ｍ，１２Ｈ）、１．５８−１．６８（ｍ，２Ｈ）、２．３６３（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．５９Ｈｚ）、５．６８１（ｓ，２Ｈ）
シクロヘキシルアセトキシメチルクロライド［化合物（６）］
収率：８３％
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：０．８４−１．００（ｍ，２Ｈ）、１．０６−１．２８（ｍ，３Ｈ）、１．５５−１．７９（ｍ，６Ｈ）、２．１９４（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝６．９２Ｈｚ）、５．６３２（ｓ，２Ｈ）
（１−メチルシクロヘキサンカルボキシ）メチルクロライド［化合物（７）］
収率：定量的
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：１．１４−１．６７（ｍ，８Ｈ）、１．１９８（ｓ，３Ｈ）、２．０２−２．０８（ｍ，２Ｈ）、５．７３６（ｓ，２Ｈ）
４−メチルシクロヘキサンカルボキシメチルクロライド［化合物（８）］
収率：定量的
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：０．８９５（ｄ，０．９Ｈ，Ｊ＝６．６０Ｈｚ）、０．９０５（ｄ，２．１Ｈ，Ｊ＝６．６０Ｈｚ）、１．４２−１．８０（ｍ，７Ｈ）、１．９６−２．０５（ｍ，２Ｈ）、２．２２−２．３７（ｍ，０．３Ｈ）、２．５３−２．６７（ｍ，０．７Ｈ）、５．７０１（ｓ，０．６Ｈ）、５．７３０（ｓ，１．４Ｈ）
製造例３：
１−シクロヘキサンカルボキシエチルクロライド［化合物（９）］
J. Antibiotics 39, 1329-1342（1986）（吉村ら）の方法に従って化合物（９）を得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：１．１９−１．７５（ｍ，８Ｈ）、１．７８２（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝５．９４Ｈｚ）、１．７９−１．９６（ｍ，２Ｈ）、２．２８−２．３９（ｍ，１Ｈ）、６．５４７（ｑ，１Ｈ，Ｊ＝５．９４Ｈｚ）
製造例４：
0004667542.tif 000009
ｎ−ヘキサノール［化合物（１０）］３．１３０ｇ及びピリジン２．４２ｇを無水ジクロロメタン３０ｍｌに溶解した混合溶液を−７８℃に冷却した。この混合溶液に１−クロロエチルクロロホルメート４．２８９ｇの無水ジクロロメタン１５ｍｌ溶液を１時間で滴下した。そして反応混合物を氷冷下で１．５時間、更に室温で１５時間攪拌した。反応後、反応混合物に酢酸エチルを添加した。有機層を１Ｎ塩酸、飽和重曹水及び飽和食塩水の各々で洗浄した後、硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を減圧下に留去して得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：クロロホルム＝３：１）により精製して、１−（ｎ−ヘキシルオキシカルボニルオキシ）エチルクロライド［化合物（１１）］５．６９７ｇ（９１％）を得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：０．８２３（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝６．６０Ｈｚ）、１．１６−１．４９（ｍ，６Ｈ）、１．５９−１．６７（ｍ，２Ｈ）、１．７６３（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝５．６１Ｈｚ）、４．１１−４．１６（ｍ，２Ｈ）、６．３６２（ｑ，１Ｈ，Ｊ＝５．６１Ｈｚ）
製造例５：
製造例４と実質的に同様の方法により、以下の化合物を得た。
１−（ｎ−オクチルオキシカルボニルオキシ）エチルクロライド［化合物（１２）］
収率：９４％
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：０．８１１（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝６．６０Ｈｚ）、１．２１−１．３３（ｍ，１０Ｈ）、１．５７−１．６７（ｍ，２Ｈ）、１．７６３（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝５．６１Ｈｚ）、４．１１−４．１６（ｍ，２Ｈ）、６．３６２（ｑ，１Ｈ，Ｊ＝５．６１Ｈｚ）
１−（ｎ−デシルオキシカルボニルオキシ）エチルクロライド［化合物（１３）］
収率：９２％
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：０．８１１（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝６．９３Ｈｚ）、１．０６−１．２５（ｍ，１４Ｈ）、１．５７−１．６７（ｍ，２Ｈ）、１．７６３（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝５．９４Ｈｚ）、４．１１９（ｑ，２Ｈ，Ｊ＝６．６０Ｈｚ）、６．３６２（ｑ，１Ｈ，Ｊ＝５．９４Ｈｚ）
１−（ｎ−ドデシルオキシカルボニルオキシ）エチルクロライド［化合物（１４）］
収率：９５％
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：０．７９−０．８４（ｍ，３Ｈ）、１．１９−１．４８（ｍ，１８Ｈ）、１．５７−１．６７（ｍ，２Ｈ）、１．７６４（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝５．６１Ｈｚ）、４．０９−４．１６（ｍ，２Ｈ）、６．３３−６．４０（ｍ，１Ｈ）
製造例６：
0004667542.tif 000010
（ａ）３−ヒドロキシアゼチジン・塩酸塩［化合物（１５）］１０９ｍｇのエタノール５ｍｌ溶液に２−メチルチオチアゾリン［化合物（１６）］１３３ｍｇとナトリウムメトキシド（０．９モル当量）との混合物を加え、その反応混合物を８時間還流した。溶媒を減圧下留去後、得られた残渣をクロロホルムに溶解し飽和食塩水で洗浄した。溶媒を減圧下留去後、得られた残渣をジエチルエーテルで洗浄して、３−ヒドロキシ−１−（チアゾリン−２−イル）アゼチジン［化合物（１７）］を結晶として１１９ｍｇ（８１．５％）得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：３．３５６（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．２６Ｈｚ）、３．７０−４．００（ｍ，４Ｈ）、４．２１１（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝８．２１Ｈｚ）、４．６２２−４．７０５（ｍ，１Ｈ）、４．９７１（ｓ，１Ｈ）
（ｂ）トリフェニルホスフィン（２モル当量）とジエチルアゾジカルボキシレート（２モル当量）との混合物のテトラヒドロフラン１０ｍｌ溶液に、工程（ａ）で得られた化合物（１７）１１９ｍｇとチオ酢酸（２モル当量）との混合物を氷冷下添加し、反応混合物を同温度にて１時間、更に室温にて１時間撹拌した。反応溶媒を減圧下留去した後、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：エタノール＝１９：１）により精製して、３−アセチルチオ−１−（チアゾリン−２−イル）アゼチジン［化合物（１８）］を１０７ｍｇ（６５％）得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：２．３３３（ｓ，３Ｈ）、３．３５２（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．２６Ｈｚ）、３．８８５（ｄｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．２５Ｈｚ，５．２８Ｈｚ）、４．０１２（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．２６Ｈｚ）、４．２５０−４．３７４（ｍ，１Ｈ）、４．４２６（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝８．２５Ｈｚ）
（ｃ）工程（ｂ）で得られた化合物（１８）８６２ｍｇの無水メタノール２０ｍｌ溶液に、窒素気流中氷冷下にて、２８％ナトリウムメトキシド−メタノール溶液７７０ｍｇを加えた。そしてその反応混合物を同条件下で１０分間撹拌した。反応後、反応混合物に２規定塩酸４ｍｌを加え溶媒を減圧下留去して、粗製の３−メルカプト−１−（チアゾリン−２−イル）アゼチジン［化合物（１９）］を得た。そして、その粗製の化合物（１９）を無水アセトニトリル及びクロロホルムの混合溶液１５ｍｌに溶解し、これにｐ−ニトロベンジル  （１Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（ジフェニルフォスフォリルオキシ）−６−［（Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−１−メチル−カルバペン−２−エム−３−カルボキシレート［化合物（２０）］２４３０ｍｇと、ジイソプロピルエチルアミン２．８ｍｌを窒素気流中氷冷下にて加えた。反応混合物を同条件下にて２時間撹拌した後、酢酸エチルを加え、分離した有機層を飽和重曹水及び飽和食塩水で洗浄した。溶媒を減圧下留去し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：アセトン＝１：２）により精製して、ｐ−ニトロベンジル  （１Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−２−［（１−（チアゾリン−２−イル）アゼチジン−３−イル）チオ］−６−［（Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−１−メチル−カルバペン−２−エム−３−カルボキシレート［化合物（２１）］を１３３９ｍｇ（化合物（１８）からの収率６５％）得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：１．２３５（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝７．２６Ｈｚ）、１．３４９（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．２７Ｈｚ）、３．１６０（ｑｕｉｎｔｅｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．２６Ｈｚ）、３．２６５（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，６．２６Ｈｚ）、３．３６７（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．２６Ｈｚ）、３．８９８−４．０３８（ｍ，４Ｈ）、４．０７１−４．１４７（ｍ，１Ｈ）、４．２１２−４．２７８（ｍ，２Ｈ）、４．３７２（２Ｈ，Ｊ＝７．９２Ｈｚ）、５．２５５及び５．５１７（ＡＢｄ，２Ｈ，Ｊ＝１３．８５Ｈｚ）、７．６６５（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．５８Ｈｚ）、８．２２６（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．５８Ｈｚ）
（ｄ）工程（ｃ）で得られた化合物（２１）１３３９ｍｇのテトラヒドロフラン２０ｍｌ溶液に、０．３８Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ６．０）６０ｍｌ及び亜鉛末１１．２ｇを加え、反応混合物を２時間激しく撹拌した。反応後、セライト（商品名）により不溶物を除去し、濾液を酢酸エチルで洗浄した。濾液のｐＨを５．５に調整した後濃縮し、得られた残渣をＤｉａｉｏｎ  ＨＰ−４０（三菱化成工業株式会社製）によるカラムクロマトグラフィー（５％イソプロピルアルコール−水）により精製して、（１Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−２−［（１−（チアゾリン−２−イル）アゼチジン−３−イル）チオ］−６−［（Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−１−メチル−カルバペン−２−エム−３−カルボン酸［化合物（２２）］を６３０ｍｇ（収率：６４％）得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）δ：１．０９３（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．９３Ｈｚ）、１．２０７（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．２７Ｈｚ）、３．０５−３．２０（ｍ，１Ｈ）、３．３５７（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，５．９４Ｈｚ）、３．５５８（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．２６Ｈｚ）、３．９２０（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．２６Ｈｚ）、４．００−４．２０（ｍ，５Ｈ）、４．２０−４．３０（ｍ，１Ｈ）、４．６０−４．７０（ｍ，１Ｈ）
ＩＲ（ＫＢｒ）：１７４０，１６４０，１５９０ｃｍ-1
実施例１：
シクロヘキシルアセトキシメチル  （１Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−２−［（１−（１，３−チアゾリン−２−イル）アゼチジン−３−イル）チオ］−６−［（Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−１−メチル−カルバペン−２−エム−３−カルボキシレート［化合物（２３）］
0004667542.tif 000011
製造例６の工程（ｄ）で得られた化合物（２２）１．９１７ｇ、トリエチルベンジルアンモニウム  クロリド２．２７８ｇ及び製造例２で得られたシクロヘキシルアセトキシメチルクロリド［化合物（６）］１．９０ｇの混合溶液にジメチルホルムアミド４．８ｍｌ及びトリエチルアミン１．４ｍｌを加え、反応混合物を４５℃で４時間攪拌した。反応後、反応混合物に酢酸エチルを加え、有機層を飽和重曹水及び水で洗浄した。溶媒を減圧下に留去し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン−アセトン）により精製して、化合物（２３）２．０４４ｇ（収率：７６％）を得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：０．８１−１．００（ｍ，２Ｈ）、１．００−１．２６（ｍ，３Ｈ）、１．１５０（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝７．２５Ｈｚ）、１．２４９（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．２７Ｈｚ）、１．５５−１．８０（ｍ，６Ｈ）、２．１８５（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝６．９３Ｈｚ）、３．０９９（ｑｕｉｎｔ．，１Ｈ，Ｊ＝７．２５Ｈｚ）、３．１４９（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．３１Ｈｚ，６．９３Ｈｚ）、３．７６（ｂｒｓ，１Ｈ）、３．３０５（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．５９Ｈｚ）、３．８７−３．９１（ｍ，２Ｈ）、３．９３６（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．５９Ｈｚ）、４．０４−４．１６（ｍ，３Ｈ）、４．３０−４．３７（ｍ，２Ｈ）、５．７９３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．６１Ｈｚ）、５．８４８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．６１Ｈｚ）
実施例２：
（１−メチルシクロヘキサンカルボキシ）メチル  （１Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−２−［（１−（１，３−チアゾリン−２−イル）アゼチジン−３−イル）チオ］−６−［（Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−１−メチル−カルバペン−２−エム−３−カルボキシレート［化合物（２４）］
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製造例６の工程（ｄ）で得られた化合物（２２）・４Ｈ2Ｏ  ４．４５ｇ、トリエチルベンジルアンモニウム  クロリド４．５６ｇ及び製造例２で得られた（１−メチル−シクロヘキサンカルボキシ）メチルクロリド［化合物（７）］３．８０ｇをジメチルホルムアミド９．４ｍｌに溶解した混合溶液にジイソプロピルエチルアミン４．４ｍｌを加え、反応混合物を４５℃で４時間攪拌した。反応後、反応混合物に氷冷下酢酸エチルを加え、そして１モルのクエン酸溶液を加えてｐＨを４に調整した。水層に酢酸エチルを加え、そしてＫＨＣＯ3を加えてｐＨを７．６に調整した。有機層を水及び飽和食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を減圧下に留去し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン−アセトン）により精製して、化合物（２４）９．４７ｇ（収率：８８％）をアモルファスとして得た。
結晶化合物（２４）：
上記方法により得られたアモルファス状の化合物（２４）１．０ｇにアセトニトリル５ｍｌを加え、得られた混合物を１時間撹拌した。撹拌するうち該混合物は均一になり、結晶が析出した。その結晶を収集して少量のアセトニトリルで洗浄し、そして室温にて真空乾燥することにより、結晶化合物（２４）０．５６ｇを得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：１．１３−１．５４（ｍ，８Ｈ）、１．１８６（ｓ，３Ｈ）、１．２２１（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝７．２６Ｈｚ）、１．３３３（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．２７Ｈｚ）、２．０２−２．１１（ｍ，２Ｈ）、２．４０５（ｂｒｓ，１Ｈ）、３．１３−３．２５（ｍ，２Ｈ）、３．３９２（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．５９Ｈｚ）、３．９７−４．０５（ｍ，４Ｈ）、４．１１−４．２６（ｍ，３Ｈ）、４．４２−４．４９（ｍ，２Ｈ）、５．８６９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．６１Ｈｚ）、５．９６６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．６１Ｈｚ）
この結晶化合物（２４）は偏光顕微鏡による観察で結晶であることが判明し、粉末Ｘ線回析図形において、表１に示すような特徴的ピークを示した。
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実施例３：安定性試験：
（１−メチルシクロヘキサンカルボキシ）メチル  （１Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−２−［（１−（１，３−チアゾリン−２−イル）アゼチジン−３−イル）チオ］−６−［（Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−１−メチル−カルバペン−２−エム−３−カルボキシレート［化合物（２４）］の保存安定性につき、該化合物のアモルファス形態のもの及びヨーロッパ特許公開第６３２，０３９Ａ１号公報に開示されている（シクロヘキサンカルボキシ）メチル  （１Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−２−［（１−（１，３−チアゾリン−２−イル）アゼチジン−３−イル）チオ］−６−［（Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−１−メチル−カルバペン−２−エム−３−カルボキシレート［化合物（Ｃ）］と比較し試験を行った。
各化合物２０ｍｇずつをガラス容器に入れ、４０℃、ならびに４０℃／湿度７５％の恒温室内に３か月間保存した。各化合物の活性をＨＰＬＣを用いて１か月後及び３か月後にそれぞれ測定した。当初（初日）の活性を１００％として、その減少を表２に残存率で示す。
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上記の結果から、アモルファス形態の化合物が急速に効力を喪失するのに対し、結晶形態の化合物（２４）は長期間効力を保持することが明らかである。
実施例４：
製造例１ないし５で得られた化合物を用いて実施例１に記載の方法と実質的に同様の方法により、以下の化合物を製造した。
イソバレリルオキシメチル  （１Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−２−［（１−（１，３−チアゾリン−２−イル）アゼチジン−３−イル）チオ］−６−［（Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−１−メチル−カルバペン−２−エム−３−カルボキシレート［化合物（２５）］
反応温度：６５℃／反応時間：２時間
収率：７２％
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：０．９３１（ｄ，６Ｈ，Ｊ＝６．６０Ｈｚ）、１．１９０（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝７．２６Ｈｚ）、１．２８７（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．２７Ｈｚ）、２．０１−２．１５（ｍ，１Ｈ）、２．２３１（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝６．６０Ｈｚ）、３．０９−３．１７（ｍ，１Ｈ）、３．１９２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．３１Ｈｚ、６．９３Ｈｚ）、３．３４８（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．５９Ｈｚ）、３．９１−３．９６（ｍ，２Ｈ）、３．９７７（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．５９Ｈｚ）、４．０８−４．２１（ｍ，３Ｈ）、４．３８７（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．５９Ｈｚ）、５．８３１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．６１Ｈｚ）、５．８９８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．６１Ｈｚ）
２−エチルブチリルオキシメチル  （１Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−２−［（１−（１，３−チアゾリン−２−イル）アゼチジン−３−イル）チオ］−６−［（Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−１−メチル−カルバペン−２−エム−３−カルボキシレート［化合物（２６）］
反応温度：６５℃／反応時間：２時間
収率：７５％
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：０．８５５（ｔ，６Ｈ，Ｊ＝７．５９Ｈｚ）、１．１７５（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝７．２６Ｈｚ）、１．２７５（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．２７Ｈｚ）、１．４２−１．７０（ｍ，４Ｈ）、２．１８−２．２９（ｍ，１Ｈ）、３．０７−３．１３（ｍ，１Ｈ）、３．１７６（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．３０Ｈｚ、６．５９Ｈｚ）、３．３３１（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．５９Ｈｚ）、３．８９−３．９９（ｍ，４Ｈ）、４．０９−４．１９（ｍ，３Ｈ）、４．３３−４．４０（ｍ，２Ｈ）、５．８４３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．６１Ｈｚ）、５．８９５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．６１Ｈｚ）
ｎ−オクタノイルオキシメチル  （１Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−２−［（１−（１，３−チアゾリン−２−イル）アゼチジン−３−イル）チオ］−６−［（Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−１−メチル−カルバペン−２−エム−３−カルボキシレート［化合物（２７）］
反応温度：６５℃／反応時間：２時間
収率：７５％
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：０．７８−０．８３（ｍ，３Ｈ）、１．１５２（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝７．２５Ｈｚ）、１．１７−１．２３（ｍ，８Ｈ）、１．２４６（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．２７Ｈｚ）、１．５１−１．５９（ｍ，２Ｈ）、２．２７−２．３３（ｍ，２Ｈ）、３．０５−３．１３（ｍ，１Ｈ）、３．１４９（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．３１Ｈｚ、６．６０Ｈｚ）、３．３０５（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．５９Ｈｚ）、３．５３２（ｂｒｓ，１Ｈ）、３．８７−３．９６（ｍ，４Ｈ）、４．０４−４．１７（ｍ，３Ｈ）、４．３１−４．３７（ｍ，２Ｈ）、５．７８７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．６０Ｈｚ）、５．８５９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．６０Ｈｚ）
ｎ−デカノイルオキシメチル  （１Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−２−［（１−（１，３−チアゾリン−２−イル）アゼチジン−３−イル）チオ］−６−［（Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−１−メチル−カルバペン−２−エム−３−カルボキシレート［化合物（２８）］
反応温度：６５℃／反応時間：２時間
収率：８０％
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：０．７８−０．８３（ｍ，３Ｈ）、１．１５０（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝７．２５Ｈｚ）、１．１６−１．２４（ｍ，１２Ｈ）、１．２４９（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．２７Ｈｚ）、１．５１−１．５９（ｍ，２Ｈ）、２．３００（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．５９Ｈｚ）  ３．０７−３．１４（ｍ，１Ｈ）、３．１４９（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．３１Ｈｚ、６．６０Ｈｚ）  ３．３０３（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．５９Ｈｚ）、３．５８８（ｂｒｓ，１Ｈ）、３．８７−３．９６（ｍ，４Ｈ）、４．０４−４．１７（ｍ，３Ｈ）、４．２２−４．３７（ｍ，２Ｈ）、５．７８５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．６０Ｈｚ）、５．８６０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．６０Ｈｚ）
４−メチルシクロヘキサンカルボキシメチル  （１Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−２−［（１−（１，３−チアゾリン−２−イル）アゼチジン−３−イル）チオ］−６−［（Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−１−メチル−カルバペン−２−エム−３−カルボキシレート［化合物（２９）］
反応温度：４５℃／反応時間：４時間
収率：８０％
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：０．８７８（ｄ，０．９Ｈ，Ｊ＝６．６０Ｈｚ）、０．８９４（ｄ，２．１Ｈ，Ｊ＝６．６０Ｈｚ），１．２２１（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝７．２６Ｈｚ）、１．３３５（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．２７Ｈｚ）、１．３４−１．８０（ｍ，７Ｈ）、１．９６−２．０５（ｍ，２Ｈ）、２．２３−２．２８（ｍ，０．３Ｈ）、２．４５０（ｂｒｓ，１Ｈ）、２．５７−２．５９（ｍ，０．７Ｈ）、３．１５−３．２１（ｍ，１Ｈ）、３．２３２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．３１Ｈｚ，６．６０Ｈｚ）、３．３９９（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．５９Ｈｚ）、４．００−４．０５（ｍ，４Ｈ）、４．１５−４．２７（ｍ，３Ｈ）、４．４３−４．５１（ｍ，２Ｈ）、５．８６１（ｄ，０．３Ｈ，Ｊ＝５．６１Ｈｚ）、５．８７４（ｄ，０．７Ｈ，Ｊ＝５．６１Ｈｚ）、５．９４０（ｄ，０．３Ｈ，Ｊ＝５．６１Ｈｚ）、５．９５３（ｄ，０．７Ｈ，Ｊ＝５．６１Ｈｚ）
１−シクロヘキサンカルボキシエチル  （１Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−２−［（１−（１，３−チアゾリン−２−イル）アゼチジン−３−イル）チオ］−６−［（Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−１−メチル−カルバペン−２−エム−３−カルボキシレート［化合物（３０）］
反応温度：４５℃／反応時間：４時間
収率：７４％
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：１．２０−１．７３（ｍ，１７Ｈ）、１．８９−１．９３（ｍ，２Ｈ）、２．２６−２．６３（ｍ，２Ｈ）、３．１３−３．２５（ｍ，２Ｈ）、３．３９−３．４６（ｍ，２Ｈ）、４．０２−４．１１（ｍ，４Ｈ）、４．１２−４．２７（ｍ，３Ｈ）、４．４９−４．５９（ｍ，２Ｈ）、６．９４−７．００（ｍ，１Ｈ）
１−（ｎ−ヘキシルオキシカルボニルオキシ）エチル  （１Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−２−［（１−（１，３−チアゾリン−２−イル）アゼチジン−３−イル）チオ］−６−［（Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−１−メチル−カルバペン−２−エム−３−カルボキシレート［化合物（３１）］
反応温度：６５℃／反応時間：２時間
収率：８２％
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：０．７９−０．８４（ｍ，３Ｈ）、１．１４８（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝７．２５Ｈｚ）、１．１６−１．２６（ｍ，９Ｈ）、１．５１−１．６２（ｍ，５Ｈ）、３．０４−３．１６（ｍ，２Ｈ）、３．３００（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．５９Ｈｚ）、３．８５−３．９６（ｍ，４Ｈ）、４．０５−４．１４（ｍ，５Ｈ）、４．３０−４．３７（ｍ，２Ｈ）、６．７７−６．８４（ｍ，１Ｈ）
１−（ｎ−オクチルオキシカルボニルオキシ）エチル  （１Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−２−［（１−（１，３−チアゾリン−２−イル）アゼチジン−３−イル）チオ］−６−［（Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−１−メチル−カルバペン−２−エム−３−カルボキシレート［化合物（３２）］
反応温度：６５℃／反応時間：２時間
収率：８３％
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：０．８１−０．８６（ｍ，３Ｈ）、１．１７９（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝７．２６Ｈｚ）、１．１９−１．２９（ｍ，１３Ｈ）、１．５５４（ｄ，１．５Ｈ，Ｊ＝４．９５Ｈｚ）、１．５７３（ｄ，１．５Ｈ，Ｊ＝４．９５Ｈｚ）、１．５８−１．６３（ｍ，２Ｈ）、３．０７−３．１９（ｍ，２Ｈ）、３．４３１（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．５９Ｈｚ）、３．８８−３．９９（ｍ，４Ｈ）、４．０４−４．１７（ｍ，５Ｈ）、４．３３−４．４０（ｍ，２Ｈ）、６．８０−６．８７（ｍ，１Ｈ）
１−（ｎ−デシルオキシカルボニルオキシ）エチル  （１Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−２−［（１−（１，３−チアゾリン−２−イル）アゼチジン−３−イル）チオ］−６−［（Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−１−メチル−カルバペン−２−エム−３−カルボキシレート［化合物（３３）］
反応温度：６５℃／反応時間：２時間
収率：８０％
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：０．８４６（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝６．９３Ｈｚ）、１．１８５（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝７．２６Ｈｚ）、１．２０−１．３０（ｍ，１７Ｈ）、１．５５−１．６４（ｍ，５Ｈ）、３．１１−３．２０（ｍ，２Ｈ）、３．３１−３．３６（ｍ，２Ｈ）、３．８９−４．００（ｍ，４Ｈ）、４．０６−４．１８（ｍ，５Ｈ）、４．３３−４．４１（ｍ，２Ｈ）、６．８１−６．８８（ｍ，１Ｈ）
１−（ｎ−ドデシルオキシカルボニルオキシ）エチル  （１Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−２−［（１−（１，３−チアゾリン−２−イル）アゼチジン−３−イル）チオ］−６−［（Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−１−メチル−カルバペン−２−エム−３−カルボキシレート［化合物（３４）］
反応温度：６５℃／反応時間：２時間
収率：８１％
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：０．８４９（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝６．９３Ｈｚ）、１．１７−１．３１（ｍ，２４Ｈ）、１．５５−１．６３（ｍ，５Ｈ）、３．０８−３．２０（ｍ，２Ｈ）、３．３１−３．３６（ｍ，２Ｈ）、３．８９−４．００（ｍ，４Ｈ）、４．０６−４．１８（ｍ，５Ｈ）、４．３４−４．４１（ｍ，２Ｈ）、６．８１−６．８８（ｍ，１Ｈ）
本発明の式（Ｉ）の化合物の特性を実証すべく、以下に述べるような抗菌試験、薬理試験および毒性試験を行った。
Ｉ．抗菌試験
試験方法
日本化学療法学会標準法［Chemothrapy, vol. ２９，７６〜７９（１９８１）］に準じた寒天平板希釈法により抗菌活性を試験した。
被検菌をMueller-Hinton（ＭＨ）寒天液体培地上３７℃にて一夜培養した後、培養液を被検菌約１０6cells/mlを含有するようBuffered saline gelatin（ＢＳＧ）溶液で希釈した。そして、希釈液約５μｌずつをミクロプランターを用いて試験化合物含有ＭＨ寒天培地に接種した。３７℃で１８時間培養後、被検菌の発育が認められない試験化合物の最小濃度をもって最小阻止濃度（ＭＩＣ）とした。
本試験においては、被検菌株はすべて標準菌株を使用した。ここでの試験化合物としては、製造例６で得られた化合物（２２）、すなわち式（Ｉ）の化合物の活性代謝物である式（ＩＩ）の化合物を用いた。
結果
結果を表３に示す。この結果は、本発明の式（Ｉ）の化合物の活性代謝物である式（ＩＩ）の化合物は、特にStaphylococcus属、Streptococcus属、Klebsiella属およびProteus属の菌に対して強力な抗菌活性を有することを示している。
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II．薬理試験
試験方法
一夜絶食後のｄｄＹ系５週齢雄性マウスを使用した。１％生理食塩水に溶解した試験化合物１００ｍｇ／ｋｇをマウスに経口投与し、投与後１５、３０、６０および１２０分において各マウスの頚静脈から０．４ｍｌ採血した。試験化合物の血中濃度を測定し、血中濃度曲線下面積（ＡＵＣ）を算出した。
ここでの試験化合物としては、上記実施例で得られた化合物（２３）ないし（３４）を用いた。
結果
最高血中濃度（Ｃｍａｘ）およびＡＵＣを表４に示す。マウスの血液中からは試験化合物は一切検出されず、これらの活性代謝物である式（ＩＩ）の化合物のみが検出されたため、表中に示されたデータは式（ＩＩ）の化合物のデータである。
試験結果は、本発明の化合物が消化管からの吸収が良好であることを示している。
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III．毒性試験
ウィスター系の７週齢雄性ラットを使用して毒性試験を行った。化合物（２３）ないし（３４）を３匹／群に経口投与し、ラットを１週間観察した。その結果、１ｇ／ｋｇの投与を受けたラットはすべて、何ら異常所見なく生存した。
以上のとおり、本発明の式（Ｉ）のカルバペネム化合物は、消化管から良好に吸収されて、強力な抗菌活性を発揮すべく直ちに体内で式（ＩＩ）の化合物に変換される。したがって、式（Ｉ）の化合物は式（ＩＩ）の化合物のプロドラッグとして使用することができる。
よって、本発明は、種々の病原菌による感染症の治療または予防において非常に有用な、経口投与可能なカルバペネム抗生物質を提供する。