(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
柑橘類の全果（果皮を含む果実）の搾汁液から抽出し、分画された親油性ポリアルコキシフラボノイドをさらに親油性溶剤で溶出処理することにより得られる溶出液を原材料とし、タンゲリチンとノビレチンとを含む高親油性ポリアルコキシフラボノイドを含有することを特徴とする抗ヒスタミン剤やステロイド製剤では抑制し得ない難治性掻痒の痒み並びに炎症を抑制・緩和するための薬剤。
【請求項２】
前記柑橘類が、ミカン区に属するタチバナ（C.tachibana）、チチュウカイマンダリン（C.deliciosa）、キシュウ（C.kinokuni）、コベニミカン（C.erythrosa）、ダンシータンジェリン（C.tangerina）、スンキ（C.sunki）、シークワーサー（Citrus depressa）、ギリミカン（C.tardiva）、ポンカン（C.retuculata）、ユズ区に属するハナユ（C.hanayu）、及び東南アジアにて栽培される矮性柑橘類のカラマンシー（C.calamondin）からなる群から選択されることを特徴とする請求項１に記載の難治性掻痒の痒み並びに炎症を抑制・緩和するための薬剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、痒み並びに炎症を抑制・緩和するための薬剤、および医療用医薬品と併用することで副作用を伴わずに治療効果を高めることのできる機能性食品に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
皮膚疾患の殆どは、痒みを伴うことが一般的であり、例えばアトピー性皮膚炎などは、痒みを抑制できさえすれば皮膚症状を悪化させることはない、と皮膚科医の間では言われているくらいに、この痒みの抑制・緩和が今日の医療現場における大きな課題の一つとなっている。【０００３】
この痒みには、湿疹や蕁麻疹などのように、抗ヒスタミン剤に代表される市販の鎮痒剤で抑制し得る痒み（一般掻痒）と、血液透析患者の皮膚掻痒症、老人性の皮膚掻痒症、並びにアトピー性皮膚炎などのように、抗ヒスタミン剤やステロイド製剤では抑制し得ない痒み（難治性掻痒）とがあるが、抗ヒスタミン剤などが主体の一般的な市販の鎮痒剤は、難治性掻痒に無力であるばかりでなく、内服薬として用いると、眠気など（中枢抑制）の副作用を生ずるといった欠点がある。【０００４】
また、近年、免疫抑制剤のタクロリムス水和物軟膏がアトピー性皮膚炎の治療に有効であることが報告されているが（特許文献１等を参照されたい）、これは皮膚癌を誘発したり、糜爛部位から多量に体内吸収された際には腎臓障害を誘発したりすることが懸念されており、安全性の面についての解明が不十分であるというのが実情である。
【特許文献１】特開２００２−３３８５３７号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、このような従来技術の問題点を解消すべく案出されたものであり、その主な目的は、一般掻痒および難治性掻痒の全ての痒みを安全に抑制・緩和し得ることはもとより、炎症をも抑制・緩和することが可能な薬剤および機能性食品を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
このような目的を果たすために本発明は、柑橘類の全果（果皮を含む果実）の搾汁液から抽出した高親油性ポリアルコキシフラボノイドを含有することを特徴とする薬剤を提供することとした。特に、前記柑橘類は、ミカン区に属するタチバナ（C.tachibana）、チチュウカイマンダリン（C.deliciosa）、キシュウ（C.kinokuni）、コベニミカン（C.erythrosa）、ダンシータンジェリン（C.tangerina）、スンキ（C.sunki）、シークワーサー（Citrus depressa）、ギリミカン（C.tardiva）、ポンカン（C.retuculata）、ユズ区に属するハナユ（C.hanayu）、及び東南アジアにて栽培される矮性柑橘類のカラマンシー（C.calamondin）からなる群から選択すると良く、さらに、これらの薬剤を、機能性食品に含ませると良い。
【発明の効果】
【０００７】
このような本発明によれば、一般掻痒のみならず、難治性掻痒をも、眠気などの副作用を伴うことなく安全に抑制・緩和することができ、しかも炎症をも抑制し得るので、皮膚症状を伴う疾患を有効に予防、改善或いは治療する上に多大な効果を奏することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
以下に添付の図面を参照して本発明について詳細に説明する。【０００９】
本発明による鎮痒作用並びに消炎作用を示す物質は、柑橘類の全果（果皮を含む果実）の搾汁液に含有される高親油性ポリアルコキシフラボノイドである。この物質は、ミカン区に属するタチバナ（C.tachibana）、チチュウカイマンダリン（C.deliciosa）、キシュウ（C.kinokuni）、コベニミカン（C.erythrosa）、ダンシータンジェリン（C.tangerina）、スンキ（C.sunki）、シークワーサー（Citrus depressa）、ギリミカン（C.tardiva）、ポンカン（C.retuculata）、ユズ区に属するハナユ（C.hanayu）、及び東南アジアにて栽培される矮性柑橘類のカラマンシー（C.calamondin）からなる群から選択される柑橘類の果皮を含む果実に含まれており、これらの全果の搾汁液から比較的容易に抽出することができる。【００１０】
本発明に関わる高親油性ポリアルコキシフラボノイドは、柑橘類の果皮に多く含まれることから、全果を圧搾または遠心分離して得た果汁に、搾汁後の残渣を微粉砕して粉末化したものを混合し、この液から公知の精製法を適用して抽出することができる。なお、抽出法の詳細について必要ならば、Polymethoxylated Flavonoids from the Peels of Citrus depressa（Yoshihiro Mimaki et al. Natural Medicines 54（６）,351（2000））を参照されたい。【００１１】
分画された親油性ポリアルコキシフラボノイドをさらに親油性溶剤で溶出処理することにより、高親油性ポリアルコキシフラボノイド（タンゲリチン、ノビレチン）を含有した溶出液を得ることができる。さらにこの濃縮液を噴霧乾燥あるいは凍結乾燥することにより、粉末製剤を得ることができる。
〔外用による鎮痒作用の検証〕【００１２】
次に、上述のようにして抽出した本発明物質（高親油性ポリアルコキシフラボノイド）の外用による鎮痒作用の検証結果について説明する。【００１３】
先ず、一般掻痒並びに難治性掻痒を誘発する発痒動物モデルを、モルモットで作成する。具体的には、ハートレー系雄性モルモット（８週齢）の右脇腹の体毛を、バリカン及びシェーバーで実験前日に刈り取り、一般掻痒モデルはヒスタミン塩酸塩（０．３mg/ml）を、難治性掻痒モデルはブタ脾臓由来カリクレイン（２５単位を０．０５ml）を、それぞれ皮内投与して発痒させた。これにより、従来の鎮痒剤で抑えられる一般掻痒と、従来の鎮痒剤では抑えられない難治性掻痒とに対する鎮痒作用を同様に判定できる発痒動物モデルが得られる（2002年発行The Journal of Tokyo Medical University Vol.60 No.2 123〜129頁『Evalation of antipruritic effect of apple polyphenols using a new animal model of pruritus.』を参照されたい ）。【００１４】
これらの発痒動物モデルを適宜な頭数（例えば１２頭）で２群に分け、第１群（対照群）には、１０％グリセリン溶液を、第２群（被験物質塗布群）には、１０％グリセリン溶液に溶解した１％濃度の本発明物質を、それぞれ発痒部位に１００μｌを均一に塗布（外用）し、時間表示付きのビデオカメラにて所定時間（２時間）について各群の掻痒行動（発痒部位を口または後肢で掻く）を真上から撮影しつつ観察し、掻痒行動を起こしていた時間を累積した（秒／１２０分）。この累積時間に基づき、掻痒行動の有意差検定によって鎮痒作用の有無を判定した。尚、試験結果は、各測定毎に平均値±標準偏差で表し、有意差検定は、Dunnett's t-testを用いた。【００１５】
その結果、図１に示す通り、ヒスタミン発痒（一般掻痒）させた直後の対照群の累積掻痒行動時間が２５．５０±５．１１（秒／１２０分）であったのに対し、本発明物質塗布群は、１７．０８±５．２６（秒／１２０分）であり、有意な抑制作用を示した。【００１６】
また、図２に示す通り、カリクレイン発痒（難治性掻痒）させた直後の対照群の累積掻痒行動時間が５２．００±７．０８（秒／１２０分）であったのに対し、本発明物質塗布群は、３９．３３±６．３９（秒／１２０分）であり、これも有意な抑制作用を示した。【００１７】
以上により、抗ヒスタミン剤では全く抑制し得なかったカリクレイン発痒に対しても、１％以上の十分な濃度の本発明物質により、ヒスタミン掻痒に対するのと略同等の十分な鎮痒作用が得られることが実証された。
〔内用による炎症抑制作用の検証〕【００１８】
次に、本発明物質の内用による炎症抑制作用について検証する。【００１９】
ICR系雌性マウス（５週齢）を、１群１２匹として２つの群に分け、第１群（対照群）には、０．３％カルボキシセルロース（CMC）懸濁液を、第２群（被験物質投与群）には、０．３％CMC懸濁液に対する本発明物質の溶解液を、各個体の体重に対して１００mg/kg相当量を、それぞれ１週間に亘って胃ゾンデにて連続的に強制経口投与（内服）した。なお、給餌、給水は自由摂取とした。そして投与１週間後の翌日に、抗原物質として、monoclonal anti-DNP IgE antibodiesを０．５ml尾静脈内投与にて受動感作してIgE抗体による皮膚反応の誘発を行った上で、DNFB（dinitrofluorobenzene；半井化学工業製）をアセトン−オリーブ油（４：１）混液に溶解して調製した０．１５％DNFB液を、誘発１時間後にマウスの耳介に塗布して皮膚炎症を惹起させた後、１、４、２４、及び４８時間経過毎に、各群について耳介の肥厚（炎症度合い）をダイアルシックネスゲージ（ミツトヨ製）で測定した。【００２０】
その結果、図３に示す通り、対照群の１、２４時間後の二峰性の炎症反応が、それぞれ６．３３±０．４１（×１０−２mm）、４．４９±０．４５（×１０−２mm）であったのに対し、被験物質投与群は、それぞれ４．８７±０．５０（×１０−２mm）、３．４７±０．５５（×１０−２mm）であり、有意な炎症抑制作用を呈した。
〔内用による鎮痒作用の検証〕【００２１】
耳介の肥厚測定と並行して、前述の時間表示付きのビデオカメラによる掻痒行動観察を所定時間（１時間）行ったところ、その累積時間の推移は、図４に示す通り、対照群の１、２４時間後の掻痒行動が、それぞれ２０２．１７±２１．３１（秒／６０分）、９５．９２±２４．５４（秒／６０分）であったのに対し、被験物質投与群は、それぞれ１７３．５０±２２．３９（秒／６０分）、７２．８３±１２．８３（秒／６０分）であり、本発明物質を内用した場合の鎮痒作用についても、有意な抑制作用を示した。【００２２】
IgE抗体で受動感作したマウスでの皮膚反応で、I型アレルギーの即時型と好酸球浸潤（IV型アレルギー性疾患）の遅発型の二峰性の炎症が観られ、即時型は鼻炎、花粉症、喘息などに対応し、遅発型はアトピー性皮膚炎などに対応している。つまり、本発明物質を予め投与したマウス群は、対照群、つまり本発明物質を投与しなかったマウス群に比して、IgE抗体を受動感作してDNFB液の塗布によって誘発した炎症、並びに炎症に伴う痒みが、２４時間経過するまで顕著に抑制されていた。これは即ち、１時間後にピークを迎えるＩ型アレルギー性疾患の症状と、２４時間後にピークを迎えるIV型アレルギー性疾患の症状との双方が、本発明物質によって抑制・緩和されたことを示している。【００２３】
即ち、本発明によると、鼻炎、花粉症、及び喘息などの免疫グロブリンE（IgE抗体）が関与するI型アレルギ疾患の症状と、アトピー性皮膚炎などのハウスダスト、花粉、微の胞子などの吸入、食餌性および食物性アレルゲン等、種々の抗原物質により発症するIV型アレルギー性疾患の症状とを、共に抑制・緩和するのに有効であることが分かった。また発痒についても、即時型（１時間後）と遅発型（２４時間後）との二峰性を呈しているが、これらは、即時型発痒がヒスタミン発痒（一般掻痒）に対応し、遅発型発痒がカリクレイン発痒（難治性掻痒）に対応している。【００２４】
上述の評価試験法は、IgE抗体が関与するI型アレルギー性疾患群について各症状を同時に抑制・緩和する効果物質をスクリーニングできる簡便な方法である。なお、この試験法の詳細について必要ならば、2005年10月1日発行の応用薬理Vol．69 No.1/2 47〜51頁『アトピー性皮膚炎等アレルギー性疾患の改善効果の評価法の開発とその機能性食品開発への応用』を参照されたい。【００２５】
本発明に関わる高親油性ポリアルコキシフラボノイドを医薬品として用いる際には、予防や治療に有効な量の高親油性ポリアルコキシフラボノイドが製薬学的に許容できる担体または希釈剤と共に製剤化されると良い。その他にも、結合剤、吸収促進剤、滑沢剤、乳化剤、界面活性剤、酸化防止剤、防腐剤、着色剤、香料、甘味料などを添加しても良い。【００２６】
このような製剤において、有効成分である高親油性ポリアルコキシフラボノイドの担体成分に対する配合割合は、０．０５〜３０．０重量％の範囲であり、特に０．１〜５．０重量％の範囲が好ましい。【００２７】
医薬製剤の剤形としては、巴布剤、噴霧剤、液剤、懸濁液剤、軟膏剤、ゲル剤、ペースト剤、クリーム剤、顆粒剤、細粒剤、錠剤、丸剤、カプセル剤などを挙げることができ、その投与経路としては、貼付、塗布、経口、静脈内、筋肉内、皮下、関節腔など、種々の投与経路を挙げることができるが、特に外用剤が良好である。本発明の物質を皮膚外用剤として用いる場合は、一般の皮膚外用剤に配合される通常の成分を必要に応じて適宜に配合すれば良い。また、有効成分の投与量および投与頻度は、病状、年齢、性別、投与経路などに応じて適宜に変更することができる。【００２８】
本発明に関わる高親油性ポリアルコキシフラボノイドを含有する薬剤は、痒み並びに炎症を抑制・緩和するための機能性食品として、菓子類、清涼飲料など、あらゆる飲食物に添加して用いることができる。なお、機能性食品は、栄養素を一種以上含む天然物およびその加工物からなり、生体機能の調節など、生理面での働き（３次機能）を十分に発揮するように製造された食品として定義されている（平成１５年７月３０日、第一出版株式会社発行、健康・栄養食品アドバイザリー・スタッフ・テキストブック、第９２、９３頁を参照されたい）。
【図面の簡単な説明】
【００２９】
【図１】ヒスタミン発痒における対照群と本発明物質塗布（外用）群との掻痒時間の比較グラフである。
【図２】カリクレイン発痒における対照群と本発明物質塗布（外用）群との掻痒時間の比較グラフである。
【図３】対照群と本発明物質投与（内用）群との耳介肥厚比較グラフである。
【図４】対照群と本発明物質投与（内用）群との掻痒時間の比較グラフである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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