(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ナトリウム塩の状態において、下記の理化学的性質を有するＭＢ５７４７物質又はその塩。
（１）  色及び形状：白色粉末
（２）  分子式：Ｃ25Ｈ33Ｏ6Ｎａ
（３）  比旋光度：[α]D22= +122.6°(c = 0.31、 MeOH)
0004619570.tif 000006
（５）  紫外部吸収スペクトル：λmax(MeOH)nm = 257
（６）  赤外部吸収スペクトル：νmax(KBr)cm-1 = 3400、2930、1650、1570、1405、1255
（７）  溶解性：メタノールに易溶、酢酸エチル、クロロホルム、水に難溶で、ヘキサンに不溶。
（８）  塩基性、酸性、中性の区別：塩基性物質
（９）  呈色反応：モリブデン酸試薬、ヨウ素蒸気に陽性、ニンヒドリンに陰性
（１０）シリカゲル薄層クロマトグラフィー：クロロホルム：メタノール：酢酸（１０：１：０．５）の展開溶媒条件下でのＲｆ値は０．５９である。
【請求項２】
ニグロスポラ属に属し、請求項１記載のＭＢ５７４７物質を生産する能力を有する微生物を培養し、その培養物からＭＢ５７４７物質を採取することを特徴とするＭＢ５７４７物質又はその塩の製造法。
【請求項３】
前記微生物がニグロスポラ  オリゼに属する微生物であることを特徴とする請求項２記載のＭＢ５７４７物質又はその塩の製造法。
【請求項４】
前記微生物が生産したＭＢ５７４７物質を前記培養物から塩の状態で取り出すことを特徴とする請求項２記載のＭＢ５７４７物質又はその塩の製造法。
【請求項５】
請求項１記載のＭＢ５７４７物質又はその塩の少なくともいずれかを有効成分として含有する農園芸用殺菌剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、新規なＭＢ５７４７物質及びその塩、その製造法並びにＭＢ５７４７物質又はその塩の少なくともいずれかを有効成分とする農園芸用殺菌剤に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
従来、抗生物質としては微生物が生産する各種の抗生物質が知られており、これらの抗生物質は医薬品、化粧料、動物薬、農薬等の分野で実用化されている。
【０００３】
また、農園芸分野では病害防除に各種殺菌剤が使用されているが、耐性菌が出現するなどで既存薬剤の使用が制限され、防除上重要な問題が生じている。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
したがって、これらの分野では殺菌剤の有効成分としての新規物質の出現が常に要望されている。本発明は農園芸分野において新規な殺菌剤の有効成分及びこれを含む新規な農園芸用殺菌剤の提供を課題とする。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、ニグロスポラ属に属する微生物の培養物中に、キュウリ灰色かび病をはじめとする植物病原糸状菌に対して抗菌作用を有する物質が生産されていることを見出し、当該有効成分を単離し、その理化学的性状を確定することにより、本発明を完成した。
【０００６】
すなわち本発明は、ナトリウム塩の状態において、下記の理化学的性質を有するＭＢ５７４７物質又はその塩、その製造法及びＭＢ５７４７物質又はその塩の少なくともいずれかを有効成分とする農園芸用殺菌剤である。
（１）  色及び形状：白色粉末
（２）  分子式：Ｃ25Ｈ33Ｏ6Ｎａ
（３）  比旋光度：[α]D22= +122.6°(c = 0.31、 MeOH)
0004619570.tif 000002
（５）  紫外部吸収スペクトル：λmax(MeOH)nm = 257
（６）  赤外部吸収スペクトル：νmax(KBr)cm-1 = 3400、2930、1650、1570、1405、1255
（７）  溶解性：メタノールに易溶、酢酸エチル、クロロホルム、水に難溶で、ヘキサンに不溶。
（８）  塩基性、酸性、中性の区別：塩基性物質
（９）  呈色反応：モリブデン酸試薬、ヨウ素蒸気に陽性、ニンヒドリンに陰性
（１０）シリカゲル薄層クロマトグラフィー：クロロホルム：メタノール：酢酸（１０：１：０．５）の展開溶媒条件下でのＲｆ値は０．５９である。
以下、本発明につき詳細を説明する。
【０００７】
【発明の実施の形態】
本発明のＭＢ５７４７物質又はその塩は、ナトリウム塩の状態において上記の理化学的性質を有する。上記ナトリウム塩、すなわちＭＢ５７４７物質のナトリウム塩の理化学的性質は公知の方法によって測定することができる。なお先に示した理化学的性質については、測定対象となるＭＢ５７４７物質ナトリウム塩の状態や精製条件、測定に使用される試薬の状態、採用する測定方法、測定環境、使用される測定機器等の条件によっては若干異なる数値を示す場合があるが、このような数値は測定に関する誤差として本発明で特定する上記理化学的性質に含まれる。
【０００８】
また本発明のＭＢ５７４７物質は種々の塩を形成することができ、ＭＢ５７４７物質の塩としては例えばリチウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩、カルシウム塩等の金属塩、又はアンモニウム塩、メチルアンモニウム塩、ジメチルアンモニウム塩、トリメチルアンモニウム塩、ジシクロヘキシルアンモニウム塩等のアンモニウム塩等を例示することができる。
【０００９】
またナトリウム塩の状態とするには、水酸化ナトリウムのような塩基や炭酸ナトリウムのような塩基性の塩とＭＢ５７４７物質とからナトリウム塩を形成することができる。またＭＢ５７４７物質のアンモニウム塩のようにＭＢ５７４７物質と弱塩基との塩を形成し、この塩から通常用いられる塩交換反応によってナトリウム塩を形成することもできる。
【００１０】
本発明によればＭＢ５７４７物質又はその塩は、ＭＢ５７４７物質の生産能を有する微生物を培養し、得られた培養物から該化合物を採取することによって得ることができる。
【００１１】
ＭＢ５７４７物質の生産能を有する微生物としては、例えば不完全菌門糸状不完全菌網モニリア目デマチウム科に分類されるカビ類が挙げられ、このうち好ましくは不完全菌門糸状不完全菌網モニリア目デマチウム科ニグロスポラ属に属する微生物であり、さらに好ましくはニグロスポラ  オリゼ（Nigrospora oryzae）に属する微生物であり、特に好ましくはニグロスポラ  オリゼ（Nigrospora oryzae）Ｄ７８８６株である。
【００１２】
本発明の化合物ＭＢ５７４７物質の生産に用いられるニグロスポラ  オリゼ（Nigrospora oryzae）Ｄ７８８６株（以下、「Ｄ７８８６株」と略記することがある）は、天然の土壌より分離された不完全菌門糸状不完全菌網モニリア目に属する菌株である。ニグロスポラ  オリゼ（Nigrospora oryzae）Ｄ７８８６株は、２００１年３月２２日に産業技術総合研究所生命工学工業技術研究所に寄託され、ＦＥＲＭ  Ｐ−１８２７０の受託番号が付与されている。
【００１３】
以下に、ニグロスポラ  オリゼ（Nigrospora oryzae）Ｄ７８８６株についての詳細を示す。
【００１４】
［形態学的性状］
コロニー成長は迅速で、ポテトデキストロース寒天培地（ＰＤＡ）上、２５℃、３日間培養で直径９４ｍｍに達する。コロニーは綿毛状、薄褐白色である。コロニー裏面は暗オリーブ色を呈し、上記寒天培地を用いる場合では可溶性色素を培地中に生産し寒天がオリーブ色を呈する。また三浦培地寒天培地（ＬＣＡ）上２５℃、３日間培養ではコロニーは直径７２ｍｍに達し、綿毛状で薄く広がり、無色〜薄オリーブ緑色を呈する。上記寒天培地を用いる場合では可溶性色素の生産は認められない。
【００１５】
基底菌糸は暗オリーブ緑色を呈する。分生子柄は気生菌糸より側生ないし先端に形成され、その形状はつぼ型であり、無色〜淡緑色を呈し、表面は滑面である。分生子柄のサイズは１０〜２８×４〜９μｍである。
【００１６】
分生子形成は培養１４日目より観察される。分生子形成様式はアレウロ型であり、分生子は亜球形〜楕円形であり、隔壁はなく単細胞性であり、黒褐色〜黒色を呈し、表面は平滑である。分生子のサイズは１１〜１４×９〜１２μｍである。なおテレオモルフは観察されなかった。
【００１７】
［生理学的性状］
生育温度範囲  １０〜３５℃
最適生育温度  ２５℃  （三浦寒天培地、３日間培養）
生育ｐＨ範囲  ３〜１０
最適生育ｐＨ  ６  （三浦液体培地、２５℃、３日間培養）
【００１８】
［分類学的考察］
本菌株（Ｄ７８８６株）は、１）黒色で亜球形〜楕円形の単細胞性分生子を形成する、２）分生子形成様式はアレウロ型である、３）分生子柄は短くつぼ型である、等の特徴を有する。
【００１９】
以上の特徴に基づきH. L. Barnett and B. B. Hunter 著`Illustrated genera of imperfect fungi' (1972) ３５〜４９ページの検索表を用いて属の検索を行った結果、本菌株は不完全菌門（Deuteromycota）不完全糸状菌網（Hyphomycetes）モニリア目（Moniliales）デマチウム科（Dematiaceae）ニグロスポラ（Nigrospora）属であることが判明した。そこで、M. B. Ellis著`Dematiaceous Hyphomycetes'３１９〜３２０ページの本属の種の検索表を用いて種の検索を行った結果、本菌株（Ｄ７８８６）をニグロスポラ  オリゼ（Nigrospora oryzae）と同定した。
【００２０】
不完全菌門糸状不完全菌網に分類され、本発明の化合物の産生能を有する微生物は、通常の微生物が利用しうる炭素源や窒素源等の栄養物を含有する培地で培養することができる。上記炭素源としては、米、グルコース、水あめ、デキストリン、シュークロース、デンプン、糖蜜、動・植物油等を使用できる。
【００２１】
また上記窒素源としては、大豆粉、小麦胚芽、コーンスチープリカー、綿実粕、肉エキス、ペプトン、酵母エキス、硫酸アンモニウム、硝酸ソーダ、尿素等を使用できる。その他、必要に応じてナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、コバルト、塩素、リン酸、硝酸及びその他のイオンを形成することのできる無機塩類を培地に添加することが有効な場合がある。また、菌の生育を助け、本発明の化合物の生産を促進するような適宜の有機物又は無機物を培地に適宜添加することができる。
【００２２】
上記微生物の培養法としては、好気的条件下での培養法、特に寒天培地や米培地等を用いた固体表面培養法、及び液体培地を用いた深部培養法がもっとも適している。
【００２３】
培養に適当な温度は１５〜３０℃であるが、好ましくは２０〜２７℃付近である。本発明の化合物の生産は培地や培養条件により異なるが、フラスコ内の固体表面培養法では通常１０〜１５日の間にその蓄積が最大となる。培養物中の該化合物の蓄積が最大となったときに培養を停止し、培養物から化合物を分離・精製することが好ましい。
【００２４】
本発明によって得られるＭＢ５７４７物質は、ＭＢ５７４７物質生産菌の培養物から、その性状を利用した通常の分離手段、例えば、溶剤抽出法、イオン交換樹脂法、吸着又は分配カラムクロマト法、ゲルろ過法、透析法、沈殿法等を単独で又は適宜組み合わせて抽出精製することができる。
【００２５】
例えば、ＭＢ５７４７物質は、培養菌体中からはアセトン水、メタノール水等の有機溶剤により抽出される。この抽出液に含まれるアセトン、メタノール等の有機溶媒成分を留去した後、水層をダイヤイオンＨＰ−２０（三菱化学製）等の合成吸着剤などに吸着させ、５０％アセトン溶液で洗浄後、８０％アセトン溶液で溶出し、さらに、アセトン等の有機溶媒成分を留去した水層のｐＨをＮａＯＨ等のアルカリやアルカリ土類金属塩、あるいは炭酸アンモニウム等のアンモニウム塩等を用いて塩基性に調整後、酢酸エチル等の低極性有機溶剤で洗浄し、ｎ−ブタノール等の中極性溶剤で抽出する。こうして得られたサンプルをシリカゲルカラムクロマトグラフィー、次いで分取薄層クロマトグラフィーを行うことにより、ＭＢ５７４７物質を塩として精製し、取り出すことができる。
【００２６】
また、本発明のＭＢ５７４７物質は酸性物質であることから、リチウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩、カルシウム塩等の金属塩、又はアンモニウム塩、メチルアンモニウム塩、ジメチルアンモニウム塩、トリメチルアンモニウム塩、ジシクロヘキシルアンモニウム塩等のアンモニウム塩を形成することができる。
【００２７】
これらは、上記精製・取り出し方法において用いる塩基性物質の種類を変更して得てもよいし、上記精製・取り出し方法によって得られたＭＢ５７４７物質の塩から、通常用いられる塩交換反応によって、別の塩を製造してもよい。またＭＢ５７４７物質の塩を酸性の系内に導入することでＭＢ５７４７物質として得ても良い。
【００２８】
本発明の農園芸用殺菌剤は、上記新規なＭＢ５７４７物質又はその塩の少なくともいずれかを有効成分として含有するものであり、顕著な植物病害防除効果を有するものである。
【００２９】
本発明の農園芸用殺菌剤としては、農園芸用薬剤、特に殺菌剤として採用しうる任意の形態ないし使用形態をとることができる。
【００３０】
具体的には、例えば本発明のＭＢ５７４７物質又はその塩の少なくともいずれかをそのまま、又は液体担体、固体担体、気体担体、その他の適当な担体を用いて希釈し、必要に応じて展着剤などの補助剤を加えて使用するか、あるいは農薬製造に一般的に使用されている方法によって各種の液体、固体又は気体担体と混合し、必要ならば湿展剤、展着剤、分散剤、乳化剤、固着剤、滑沢剤などの補助剤を加えて水和剤、液剤、乳剤、粉剤、粒剤、微粒剤、エアゾールなど種々の製剤形態にして使用することができる。
【００３１】
これらの製剤を製造するに当たって、液体担体としては、本発明のＭＢ５７４７物質又はその塩の少なくともいずれかに対して溶剤となるもの、又は補助剤によって分散若しくは溶解させ得るものが用いられる。例えば、水、芳香族炭化水素類、脂肪族炭化水素類、塩素化炭化水素類、アルコール類、エーテル類、エステル類、ケトン類、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシドなどの極性溶媒類などがあげられる。固体担体としては、例えば粘土、カオリン、タルク、珪藻土、ベントナイト、炭酸カルシウム、シリカ、バーミキュライト、ホワイトカーボンなどの鉱物質粉末類、砂礫類、木粉その他の有機質粉末及び微粒末、尿素、硫安などが用いられる。例えば気体担体としては、空気、炭酸ガス、フロンガス、窒素ガスなどが用いられる。
【００３２】
前記補助剤は薬剤の分散、乳化、展着性の向上、植物への付着、吸収、移行の向上などのさらなる特性向上のために使用することができ、このような補助剤の例としては、非イオン、陽イオン、陰イオン、両性の各界面活性剤、リグニンスルホン酸あるいはその塩、ガム類、脂肪酸塩類、メチルセルロースなどの糊料等が挙げられる。
【００３３】
本発明の農園芸用殺菌剤の製造に当たっては、上述の担体、補助剤などをそれぞれの目的に応じてそれぞれ単独であるいは適当に組み合わせて用いることができる。本発明のＭＢ５７４７物質又はその塩の少なくともいずれかを農園芸用殺菌剤として製剤化する場合の有効成分濃度は、乳剤では通常１〜９０重量％、水和剤では通常１〜９０％、フロアブル剤では通常１〜５０重量％、粉剤では通常０．１〜５０重量％、粒剤では通常０．１〜５０重量％、油剤で通常０．１〜５０重量％、エアゾールでは通常０．１〜３０重量％にするのが、有効な殺菌力を発揮し、かつ安定した剤型を維持する上で望ましい。好ましくは、乳剤で１０〜５０重量％、水和剤で１０〜５０重量％である。
【００３４】
本発明の農園芸用殺菌剤は、目的に応じて植物の茎葉に散布して用いることができる他、水面や水中あるいは土壌表面や土壌中に施用して用いることもできる。また、種子や果実に直接施用して用いることもできる。その場合に、本発明の農園芸用殺菌剤には含有するＭＢ５７４７物質又はその塩の少なくともいずれかによる効能を阻害しない両立性の農園芸用薬剤や肥料等の他の添加物を混用することができる。そのような農園芸用薬剤には例えば殺菌剤、殺虫剤、除草剤、植物生育調節剤などがある。
【００３５】
本発明の農園芸用殺菌剤の施用量は、対象病害の種類及び発病程度、対象作物の種類及び対象部位、施用形態、その他によって変化するが、植物の茎葉に施用する場合の例をあげれば、１０アール当たり乳剤ならば例えば５０〜５００リットル、水和剤ならば例えば５０〜５００リットル、粉剤ならば例えば２〜６ｋｇ程度の施用量が望ましい。また、土壌に粒剤を施用する場合の例をあげれば、１０アール当たり例えば１〜６ｋｇの施用量が望ましい。
【００３６】
以下に本発明の実施例を示すが、ＭＢ５７４７物質の性状が本発明により明らかにされたので、それらの性状に基づきＭＢ５７４７物質又はその塩、及びこれらのうちの少なくともいずれかを有効成分として含有する農園芸用殺菌剤の製造法を種々考案することができる。
【００３７】
したがって本発明は以下の実施例に限定されるものではなく、実施例の修飾手段は勿論、本発明によって明らかにされたＭＢ５７４７物質の性状に基づいて公知の手段を施してＭＢ５７４７物質等を生産、濃縮、抽出、精製する方法、及びＭＢ５７４７物質等を有効成分として含有する農園芸用殺菌剤に関する全てを包括する。
【００３８】
【実施例】
実施例１＜ＭＢ５７４７物質のナトリウム塩の製造例＞
１．Ｄ７８８６株の培養
５００ｍＬ容の三角フラスコを２０本用意し、各フラスコに米６０ｇと水道水２０ｍＬを分注・軽く攪拌したのち、１２１℃において２０分間高圧蒸気滅菌した。これにＤ７８８６株を３白金耳ずつ植菌し、２７℃において１４日間静置培養した。
【００３９】
２．培養により製造したＭＢ５７４７物質の精製
培養を終了した三角フラスコにフラスコ１本あたり１６０ｍＬの５０％アセトン水溶液を添加・攪拌し、一昼夜４℃において放置した。このアセトン水溶液を濾過し、濾液約２．２Ｌを菌体抽出液として得た。
【００４０】
この菌体抽出液中のアセトンを留去した水層をダイヤイオンＨＰ−２０（三菱化学製）に吸着させ、５０％アセトン溶液で洗浄後、８０％アセトン溶液で吸着成分を溶出させた。さらに、アセトンを留去した水層のｐＨをＮａＯＨで塩基性に調整し、酢酸エチルで洗浄し、ｎ−ブタノールで抽出した。こうして得られたサンプルをシリカゲル（silica gel 60、 Merck製）カラムクロマトグラフィー、次いで分取薄層クロマトグラフィー（silica gel 60 F254、Merck製）を行い、ＭＢ５７４７物質のナトリウム塩を１０６ｍｇ得た。
【００４１】
こうして得られたＭＢ５７４７物質のナトリウム塩の理化学的性質を示す。
（１）  色及び形状：白色粉末
（２）  分子式：Ｃ25Ｈ33Ｏ6Ｎａ
（３）  比旋光度：[α]D22= +122.6°(c = 0.31、 MeOH)
0004619570.tif 000003
（５）  紫外部吸収スペクトル：λmax(MeOH)nm = 257
（６）  赤外部吸収スペクトル：νmax(KBr)cm-1 = 3400、2930、1650、1570、1405、1255
（７）  溶解性：メタノールに易溶、酢酸エチル、クロロホルム、水に難溶で、ヘキサンに不溶。
（８）  塩基性、酸性、中性の区別：塩基性物質
（９）  呈色反応：モリブデン酸試薬、ヨウ素蒸気に陽性、ニンヒドリンに陰性
（１０）シリカゲル薄層クロマトグラフィー：クロロホルム：メタノール：酢酸（１０：１：０．５）の展開溶媒条件下でのＲｆ値は０．５９である。
【００４２】
なお本実施例においては、上記理化学的性質は以下のように測定した。
（１）色及び形状については、得られたＭＢ５７４７物質のナトリウム塩の外観から判断した。
【００４３】
（２）分子式については、ＨＲ−ＭＳの分子量から計算した。
【００４４】
（３）比旋光度については、日本分光  ＤＩＰ−３７０型旋光計を用いて測定した。
【００４５】
（４）マススペクトルのＴＳＰ−ＭＳ（Thermospray mass spectrometry）についてはＨＥＷＬＥＴＴ  ＰＡＣＫＥＲＤ製  ＨＰ−５９８９Ａを用い、ＦＡＢ−ＭＳ（fast atom bombardment mass spectrometry：高速原子衝突質量分析）についてはＪＥＯＬ製  ＪＭＳ−７００を用い、ＨＲ−ＭＳ（high resolution mass spectrometry：高分解能質量分析）についてはＪＥＯＬ製  ＪＭＳ−７００を用いて測定した。
【００４６】
（５）紫外部吸収スペクトルについては、島津自記分光光度計  ＵＶ−２６０を用いて測定した。なお得られたスペクトルを図１に示す。
【００４７】
（６）赤外部吸収スペクトルについては、島津フーリエ変換赤外分光光度計  ＦＴＩＲ−８１００を用いて測定した。なお得られたスペクトルを図２に示す。
【００４８】
（７）溶解性については、ＭＢ５７４７物質ナトリウム塩を各種溶媒に懸濁し完全に溶解するまでに必要な溶媒量から判断した。
【００４９】
（８）塩基性、酸性、中性の区別については、ｐＨメーター及びｐＨ試験紙を用いて測定して判断した。
【００５０】
（９）呈色反応については、モリブデン酸試薬としては１２．１ｇのＮａ2ＭｏＯ4・２Ｈ2Ｏ、７．５ｍＬのＨ3ＰＯ4（８５％）、及び２５ｍＬのＨ2ＳＯ4をＨ2Ｏで５００ｍＬに定容して調製した試薬を用い、モリブデン酸試薬を用いる呈色反応は上記試薬を試料にスプレーした後１１０℃で１５分間加熱することにより行った。またヨウ素蒸気を用いた呈色反応は、ヨウ素蒸気を封入した容器中に試料を１５分間暴露することにより行った。またニンヒドリンを用いた呈色反応は、東京化成製  ニンヒドリンスプレーを試料にスプレーし、１１０℃で１５分間加熱することにより行った。
【００５１】
（１０）シリカゲル薄層クロマトグラフィーについては、シリカゲルの薄層にはＭｅｒｃｋ製  Ｓｉｌｉｃａｇｅｌ６０Ｆ254（厚さ０．２５ｍｍ）を用い、クロロホルム、メタノール、酢酸にはそれぞれ特級試薬を用い、上記の体積割合に混合して脱水処理したものを展開溶媒とし、常法に従ってＲｆ値を測定した。
【００５２】
またＭＢ５７４７物質のナトリウム塩の重メタノール中での４００ＭＨｚ 1Ｈ−ＮＭＲ（図３）の化学シフト値と結合定数の値、及び１００ＭＨｚ 13Ｃ−ＮＭＲ（図４）の化学シフト値を以下に示す。なお、重メタノールのピークを基準ピークとした。
【００５３】
1H‐NMR δ(ppm):7.13(1H, d, J=16.1 Hz), 6.54(1H, s), 6.24(1H, s),5.90(1H, s), 5.73(1H, d, J=16.1 Hz), 4.72(1H, d, J=12.3 Hz), 4.66(1H, d, J=12.3 Hz), 4.40(1H, dd, J=6.8, 7.1 Hz), 3.84(1H, dd, J=2.2, 8.3 Hz), 3.52(1H, d, J=10.5), 2.87(1H, brs), 1.93〜1.77(5H, m), 1.56〜1.19(11H, m), 0.90(1H, m), 0.76(3H, d, J=6.6 Hz)
【００５４】
13C‐NMR δ(ppm):208.5,175.1,157.6,142.9,138.9,137.7,133.6,132.4,129.6,121.8,95.0,76.1,75.1,74.2,44.1,43.1,34.6,32.8,31.6,30.9,23.5,20.8,20.5,19.9,19.8
【００５５】
以上の理化学的性質に関して、既知の抗生物質と比較したが、一致する物質を見出せず、本抗生物質は新規であると結論された。
【００５６】
実施例２＜製剤の調製＞
１．乳剤の調製
ＭＢ５７４７物質ナトリウム塩をＭＢ５７４７物質本体換算で２０重量％、シクロヘキサノン２０重量％、キシレン４５重量％、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル１２重量％、アルキルベンゼンスルホン酸カルシウム３重量％を均一に混合し、溶解して乳剤を得た。
【００５７】
２．水和剤の調製
ＭＢ５７４７物質ナトリウム塩をＭＢ５７４７物質本体換算で２０重量％、クレー２０重量％、硅藻土５５重量％、リグニンスルホン酸３重量％、ポリオキシエチレンアルキルアリルエーテル２重量％を均一に粉砕、混合して水和剤を得た。
【００５８】
実施例３＜植物病原糸状菌に対する抗菌試験＞
ＭＢ５７４７物質ナトリウム塩を１、１０、あるいは１００ｐｐｍを含むジャガイモ煎汁寒天培地上に、あらかじめ別に培養しておいた表１に示す植物病原菌の菌糸片を置いた。２８℃で５日間培養した後、生じた菌糸コロニー直径の大きさを測定し、ＭＢ５７４７物質ナトリウム塩を含まない無処理区と比較して下記式に表される生育阻害率を求めた。試験結果を表１に示す。
【００５９】
【数１】
生育阻害率＝（１−処理区の菌糸コロニー直径／無処理区の菌糸コロニー直径）×１００
【００６０】
【表１】
0004619570.tif 000004
【００６１】
実施例４＜効力試験＞
１．キュウリ灰色かび病防除試験
培養土を入れたプラスチック製ポットに播種した後、１０日程度育苗し子葉が完全に展開したキュウリ苗（品種：四葉）を供試植物とした。このキュウリ苗に所定の濃度に調製した薬液をスプレーガンを用いて３ポットあたり５ｍＬ散布処理し、風乾させた後、子葉中央に径５ｍｍのペーパーディスクを置いた。一方で灰色かび病菌をあらかじめ培養しておいたシャーレより採集し、ジャガイモ煎汁培地を用いて調製した分生胞子懸濁液（１〜５×１０5／ｍＬ）を、子葉上に置いたペーパーディスクに３０μＬ滴下した後、２１℃の湿室内に静置して発病させ、接種３日後に病斑径を測定し、下記の式によって防除価を算出した。試験結果を表２に示す。
【００６２】
【数２】
防除価＝（１−処理区の平均病斑径／無処理区の平均病斑径）×１００
【００６３】
【表２】
0004619570.tif 000005
【００６４】
【発明の効果】
本発明のＭＢ５７４７物質又はその塩は、農園芸用殺菌剤としての用途が期待される。
【００６５】
より詳しくは本発明によれば、農園芸用殺菌剤としての用途が期待される新規物質であるＭＢ５７４７物質又はその塩、及びこれらの少なくともいずれかを有効成分として含有する新規の農園芸用殺菌剤を提供することができる。
【００６６】
また本発明によれば、上記ＭＢ５７４７物質を生産するニグロスポラ属の微生物を培養し、その培養物からＭＢ５７４７物質を採取することでＭＢ５７４７物質又はその塩を製造することができる。また上記物質の製造ではニグロスポラ  オリゼに属する微生物を用いることが、上記物質を製造する上でより一層効果的である。
【図面の簡単な説明】
【図１】ＭＢ５７４７物質のナトリウム塩のメタノール中でのＵＶスペクトルを表す図面である。
【図２】ＭＢ５７４７物質のナトリウム塩のＫＢｒ法によるＩＲスペクトルを表す図面である。
【図３】ＭＢ５７４７物質のナトリウム塩の重メタノール中での４００ＭＨｚ1Ｈ−ＮＭＲスペクトルを表す図面である。
【図４】ＭＢ５７４７物質のナトリウム塩の重メタノール中での１００ＭＨｚ13Ｃ−ＮＭＲスペクトルを表す図面である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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