(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
0004823456.tif 000014
で示される化合物。
【請求項２】
式（Ｉ）の化合物の製造方法であって、１３−（Ｎ−Ｂｏｃ−β−イソブチルイソセリニル）−１４β−ヒドロキシ−バッカチンIII  １，１４−カルボナートを、メタノール又はＴＨＦ中でＤＢＵ（ジアザビシクロ〔５，４，０〕−７−ウンデセン）で処理するか、あるいはメタノール、エタノール又はプロパノールから選択される脂肪族アルコールの存在下の塩化メチレン又は塩素化溶媒、及び塩基性アルミンにより１時間〜１４日間の範囲の時間溶解させておく方法。
【請求項３】
１３−（Ｎ−Ｂｏｃ−β−イソブチルイソセリニル）−１４β−ヒドロキシ−バッカチンＶ  １，１４−カルボナートの製造方法であって、下記工程：
ａ）１４β−ヒドロキシ−１０−デアセチルバッカチンＶの、７位のトリエチルシリル化誘導体への変換；
ｂ）工程（ａ）の生成物からの１，１４−カルボナート誘導体の調製；
ｃ）１０位のヒドロキシルの選択的アセチル化；
ｄ）工程（ｃ）の生成物と（４Ｓ，５Ｒ）−Ｎ−Ｂｏｃ−２−（２，４−ジメトキシフェニル）−４−イソブチル−１−オキサゾリジン−５−カルボン酸との反応；
ｅ）工程（ｄ）の生成物からのトリエチルシリル及びジメトキシベンジリデン保護基の開裂
を含む方法。
【請求項４】
工程（ａ）のシリル化剤が、トリエチルクロロシランであり；工程（ｂ）の１，１４−カルボナート誘導体が、塩化メチレン／ピリジン（３：１）溶液中でトルエン中ホスゲンを使用して窒素雰囲気下で調製され；工程（ｃ）の還元が、無水ＴＨＦ中のＬｉＨＭＤＳにより行われ、そして生じる１０−ヒドロキシ誘導体が、次に塩化アセチルによりアセチル化され；工程（ｄ）の縮合反応が、塩基及び縮合剤のジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）の存在下で、無水非極性有機溶媒中で行われ；工程（ｅ）のトリエチルシリル保護基が、アセトニトリル／ピリジン溶液中で窒素下でフッ化ピリジニウムにより脱離され、そしてジメトキシベンジリデン保護基が、メタノール中のＨＣｌを加え、続いてＮａＨＣＯ3を加えることにより塩化メチレン溶媒中で脱離される、請求項３記載の方法。
【請求項５】
１３−（Ｎ−Ｂｏｃ−β−イソブチルイソセリニル）−１４β−ヒドロキシ−バッカチンＶ  １，１４−カルボナートの製造方法であって、下記工程：
ａ′）１４β−ヒドロキシ−１０−デアセチルバッカチンＶのＣ−１０のヒドロキシルの選択的アセチル化；
ｂ′）工程（ａ′）の生成物からの１，１４−カルボナート誘導体の調製；
ｃ′）Ｃ−７のヒドロキシルのシリル化；
ｄ′）工程（ｃ′）の生成物と（４Ｓ，５Ｒ）−Ｎ−Ｂｏｃ−２−（２，４−ジメトキシフェニル）−４−イソブチル−１−オキサゾリジン−５−カルボン酸との反応；
ｅ′）工程（ｄ′）の生成物からのトリエチルシリル及びジメトキシベンジリデン保護基の開裂
を含む方法。
【請求項６】
工程（ａ′）の選択的アセチル化が、無水酢酸により、セリウム、スカンジウム、イッテルビウム塩の存在下で行われ、そして工程（ｂ′）〜（ｅ′）が、請求項４の工程（ｂ）、（ａ）、（ｄ）及び（ｅ）と同様に行われる、請求項５記載の方法。
【請求項７】
セリウム塩が、ＣｅＣｌ3・７Ｈ2Ｏである、請求項６記載の方法。
【請求項８】
化合物（Ｉ）を薬学的に許容しうる担体及び賦形剤と一緒に含む、医薬組成物。
【請求項９】
抗癌活性を持つ医薬の調製のための、化合物（Ｉ）の使用。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、化学療法剤として有用な新規なタクサン、これを含む医薬組成物並びに１３位がイソセリン残基により置換されている、１４−β−ヒドロキシ−１，１４−カルボナート−バッカチンIII及びＶ誘導体の製造方法に関する。
【０００２】
タクサン類は、近ごろ開発された最も重要な分類の抗癌薬の１つである。数種の腫瘍の治療におけるパクリタキセル及びその類似体のドセタキセルの著しい有効性によって、抗微小管活性を持つ物質に研究が集中している。しかしタクサン類は、微小管の組立を促進し、かつチューブリンの脱重合を阻害するという特定の作用機序を特徴とする。
【０００３】
現在使用されるタクサン類の主要な欠点は以下である：（ａ）水への不溶性（過感作反応を引き起こすことがある、特定の担体の使用を必須にする）、（ｂ）用量を制限する毒性、（ｃ）耐性機序の展開。タクサン類に対する細胞の耐性は、Ｐ−糖タンパク質輸送体、チューブリン変性、及びアポトーシス調節タンパク質の発現における変化により媒介される、ＭＤＲ表現型（「多剤耐性（multidrug resistance）」）に関係している。
【０００４】
高い溶解度と良好な許容度を有する新規な活性分子を見い出すために、１４β−ヒドロキシ−１０−デアセチルバッカチンIII及びＶタクサン誘導体を合成してきた。
【０００５】
１３位がイソセリン残基により置換されている１４−ヒドロキシ−バッカチンIIIの幾つかの誘導体は、その製造方法と共に、US 5,705,508に開示されている。
【０００６】
今や、式（Ｉ）：
【０００７】
【化２】
0004823456.tif 000002
【０００８】
で示される化合物である１４β−ヒドロキシ−１，１４−カルボナート−バッカチンＶ誘導体が、著しい細胞傷害及び抗癌活性を持ち、そしてＭＤＲ表現型を発現する細胞系の耐性を克服しうることが見い出された。
【０００９】
該化合物は、本件ではアルファ立体配置である７位のヒドロキシルのために、上述のアメリカ特許に記載されている誘導体とは異なる。US 5,705,508においてＳＢ−Ｔ−１０１１３１と呼ばれる誘導体に対応する、１３−（Ｎ−Ｂｏｃ−β−イソブチルイソセリニル）−１４β−ヒドロキシ−バッカチンIII  １，１４−カルボナートは、化合物（Ｉ）の調製のための出発生成物として使用することができる。この場合、該バッカチンIII誘導体は、メタノール又はＴＨＦ中でＤＢＵ（ジアザビシクロ〔５，４，０〕−７−ウンデセン）で処理するか、あるいは単にメタノール、エタノール又はプロパノールのような脂肪族アルコールの存在下の塩化メチレン又は塩素化溶媒、及び塩基性アルミン（allumine）により１時間〜１４日間の範囲の時間溶解させておく。Ｃ−７にベータ立体配置を有する化合物は、中性又はわずかに塩基性のｐＨでより安定なアルファ異性体（バッカチンＶ誘導体）に変換する。
【００１０】
あるいは、化合物（Ｉ）は、対応するＣ−７のベータエピマーをも調製することができる方法により調製することができる。
【００１１】
該方法（Ａ）は、下記工程：
ａ）１４β−ヒドロキシ−１０−デアセチルバッカチンIII又はＶの、７位でトリエチルシリル化された誘導体への変換；
ｂ）工程（ａ）の生成物からの１，１４−カルボナート誘導体の調製；
ｃ）１０−ヒドロキシルの選択的アセチル化；
ｄ）工程（ｃ）の生成物と（４Ｓ，５Ｒ）−Ｎ−Ｂｏｃ−２−（２，４−ジメトキシフェニル）−４−イソブチル−１−オキサゾリジン−５−カルボン酸との反応；
ｅ）工程（ｄ）の生成物からのトリエチルシリル及びジメトキシベンジリデン保護基の開裂
を含むことを特徴とする。
【００１２】
方法（Ａ）の好ましい実施態様では、トリエチルクロロシランが、工程（ａ）においてシリル化剤として使用され、そして工程（ｂ）における１，１４−カルボナート誘導体は、３：１の塩化メチレン／ピリジン溶液中でトルエン中ホスゲンを使用して窒素雰囲気下で調製される。続く工程（ｃ）では、１４−β−ヒドロキシ−１０−デアセチルバッカチンIII又はＶ  ７−Ｔｅｓ−１，１４−カルボナートが、無水ＴＨＦ中のＬｉＨＭＤＳと塩形成することにより、１０−ヒドロキシ誘導体リチウム塩が得られ、次にこれが塩化アセチルによりアセチル化される。１４−β−ヒドロキシ−７−Ｔｅｓ−１，１４−カルボナート−バッカチンIII又はＶと（４Ｓ，５Ｒ）−Ｎ−Ｂｏｃ−２−（２，４−ジメトキシフェニル）−４−イソブチル−１−オキサゾリジン−５−カルボン酸との間の縮合反応（工程（ｄ））は、塩基、及びジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）のような縮合剤の存在下で、無水非極性有機溶媒中で行われる。
【００１３】
最後に、工程（ｅ）においてトリエチルシリルは、アセトニトリル／ピリジン溶液中で窒素下でフッ化ピリジニウムにより脱離され、そしてジメトキシベンジリデン基は、メタノールＨＣｌを加え、続いてＮａＨＣＯ3を加えることにより塩化メチレン溶媒中で脱離される。
【００１４】
上述の方法の工程の順序は逆にしてもよく、すると最終生成物が等しく匹敵する収量で得られる。該代替法（Ｂ）は、下記工程：
ａ′）１４β−ヒドロキシ−１０−デアセチルバッカチンIII又はＶのＣ−１０のヒドロキシルの選択的アセチル化；
ｂ′）工程（ａ′）の生成物からの１，１４−カルボナート誘導体の調製；
ｃ′）Ｃ−７のヒドロキシルのシリル化；
ｄ′）工程（ｃ′）の生成物と（４Ｓ，５Ｒ）−Ｎ−Ｂｏｃ−２−（２，４−ジメトキシフェニル）−４−イソブチル−１−オキサゾリジン−５−カルボン酸との反応；
ｅ′）工程（ｄ′）の生成物からのトリエチルシリル及びジメトキシベンジリデン保護基の開裂
を含むことを特徴とする。
【００１５】
後者の方法は、所望のシントン（１，１４−カルボナート−７−Ｔｅｓ−バッカチンIII又はＶ）を、クロマトグラフィーによる精製をせず、単に結晶化だけで得られる可能性のような、幾つかの利点を伴う。
【００１６】
好ましい実施態様では、工程（ａ′）の選択的アセチル化は、無水酢酸により、セリウム、スカンジウム、イッテルビウム塩、好ましくはＣｅＣｌ3・７Ｈ2Ｏの存在下で行われ、そして残りの工程は、上述のように行われる。
【００１７】
本発明はまた、１４β−ヒドロキシ−１，１４−カルボナート−バッカチンIII又はＶの製造方法の中間体生成物として、以下の化合物を含む：１４β−ヒドロキシ−バッカチンIII又はＶ、１４β−ヒドロキシ−バッカチンIII又はＶ  １，１４−カルボナート、１４−β−ヒドロキシ−７−Ｔｅｓ−１０−デアセチルバッカチンIII又はＶ、１４−β−ヒドロキシ−７−Ｔｅｓ−バッカチンIII又はＶ、１４−β−ヒドロキシ−７−Ｔｅｓ−バッカチンIII又はＶ  １，１４−カルボナート。
【００１８】
本発明の更に別の側面は、下記スキームによる、（４Ｓ，５Ｒ）−Ｎ−Ｂｏｃ−２−（２，４−ジメトキシフェニル）−４−イソブチル−１−オキサゾリジン−５−カルボン酸の製造方法に関する：
【００１９】
【化３】
0004823456.tif 000003
【００２０】
該方法は、下記工程：
ａ）Ｂｏｃによるロイシノールのアミノ基の保護；
ｂ）Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−ロイシノールのＮ−Ｂｏｃ−Ｌ−ロイシナールへの変換；
ｃ）工程（ｂ）からの生成物のシアンヒドリンの調製；
ｄ）シアンヒドリンニトリルの対応するカルボン酸への変換；
ｅ）カルボン酸メチルエステルの生成；
ｆ）（２Ｒ，３Ｓ）−３−（Ｎ−Ｂｏｃ）アミノ−２−ヒドロキシ−５−メチルヘキサン酸メチルエステルの精製；
ｇ）工程（ｆ）の生成物と２，４−ジメトキシベンズアルデヒドジメチルアセタールとの縮合；
ｈ）（４Ｓ，５Ｒ）−Ｎ−Ｂｏｃ−２−（２，４−ジメトキシフェニル）−４−イソブチル−１−オキサゾリジン−５−カルボン酸メチルエステルの対応するカルボン酸への変換
を含むことを特徴とする。
【００２１】
好ましい実施態様では、工程（ａ）においてロイシノールを、Ｂｏｃ−無水物と反応させ、続いてＤＭＳＯ／ＣＨ2Ｃｌ2溶媒中で塩化オキサリルを使用して−６０℃未満の温度でアルデヒドに酸化させ、生成した酸をトリエチルアミンで中和するか、又はこれを次亜塩素酸ナトリウムで−２〜−５℃で酸化する。工程（ｃ）のシアンヒドリンは、中間体の１−ヒドロキシ−２−（Ｎ−Ｂｏｃ）アミノ−４−メチルペンタンスルホナートのスルホン酸基をシアン化物イオンにより置換することによって調製される。次にこのシアンヒドリンは、工程（ｄ）において、濃塩酸中で還流することにより、対応するカルボン酸に加水分解する。
【００２２】
工程（ｅ）において、（２Ｒ／Ｓ，３Ｓ）−３−（Ｎ−Ｂｏｃ）アミノ−２−ヒドロキシ−５−メチルヘキサン酸は、エーテル性溶液中のジアゾメタンとの反応により、対応するメチルエステルに変換される。工程（ｆ）では、ジアステレオマー（２Ｒ，３Ｓ）は、シクロヘキサン又はヘキサン／トルエン混合物からの結晶化により精製される。工程（ｇ）は、発生するメタノールを除去するｐ−トルエンスルホン酸ピリジニウムの存在下でＴＨＦ中で行われる；反応の終了後、ｐ−トルエンスルホン酸ピリジニウムは、重炭酸塩で中和される。工程（ｈ）では、このエステルは、メタノール／水混合物中で炭酸カリウムにより加水分解される。次に反応混合物を酸性にして、最終生成物を塩化メチレンで抽出する。
【００２３】
本発明はまた、１３位がＮ−Ｂｏｃ−β−イソブチルセリニル残基により置換されている、バッカチンIII及びＶ誘導体の合成の中間体としての、（４Ｓ，５Ｒ）−Ｎ−Ｂｏｃ−２−（２，４−ジメトキシフェニル）−４−イソブチル−１−オキサゾリジン−５−カルボン酸を含む。
【００２４】
本発明の新規なタクサンは、乳房、肺、卵巣、結腸、前立腺、腎臓、膵臓の癌細胞に対する、更にはまた、アドリアマイシン、ビンブラスチン及び白金誘導体のような既知の抗癌剤に耐性の細胞に対する強力な抗癌活性を示した。
【００２５】
したがって、本発明は有効量の本発明の化合物を、薬理学的に許容しうる担体及び賦形剤と一緒に含む、医薬処方物に関する。更に詳細には、本化合物は、錠剤、粉剤、顆粒剤、カプセル剤、注射剤、液剤、坐剤、乳剤、分散剤などの剤型に処方することができる。静脈内投与のためには、クレモホールＬ（Chremophor L）とエタノールの混合物、ポリソルベート及びエタノール、あるいは天然若しくは合成ホスファチジルコリン、又は天然リン脂質の混合物によりコレステロールの存在下で調製されるリポソーム処方物が主として使用される；経口投与には、場合によりリン脂質の存在下で、生成物がポリソルベート、ＰＥＧ又はその混合物に可溶化されている軟ゼラチンカプセル剤が、好ましくは調製される。化合物（Ｉ）は、５０〜５００mg/m2の濃度でヒトに投与することができる。
【００２６】
下記実施例により本発明を更に詳細に説明する。
【００２７】
実施例１：１３−（Ｎ−Ｂｏｃ−β−イソブチルセリニル）−１４β−ヒドロキシバッカチンIII、１，１４−カルボナートの合成
１４β−ヒドロキシ−デアセチルバッカチンIII  ４３．２６ｇをＮ−メチル−イミダゾール２２．３mlと一緒に、５００mlガラス丸底フラスコ中でＤＭＦ  ２３０mlに溶解した；この溶液に、激しく撹拌しながら室温で１時間でトリエチルクロロシラン１４mlを加えた。反応終了後、反応混合物を、激しく撹拌しながら水２Ｌ中に注ぎ入れた。豊富な沈殿物が生成したが、これを４℃で一晩放置した。次に沈殿物を濾過し、水で完全に洗浄し、続いてｎ−ヘキサンで洗浄した。真空下で乾燥後、下記の化学−物理性状を有する、低割合の７，１０−誘導体を含む７−Ｔｅｓ−１０−デアセチルバッカチンIII（XII）４８．１ｇを得た：
【００２８】
【化４】
0004823456.tif 000004
【００２９】
【表１】
0004823456.tif 000005
【００３０】
質量スペクトル（ＮＨ3、ＤＥＰ／ＣＩ、陽イオン）：（ｍ／ｚ）７１８〔（Ｍ＋ＮＨ4）+、１００％〕、７０１〔（Ｍ＋Ｈ）+、３９％〕。
【００３１】
生じた化合物は、塩化メチレン／ピリジン（３：１）混合物３００mlに窒素雰囲気下で溶解した；この溶液を撹拌しながら、−１０℃で前もって冷却したホスゲン溶液（トルエン中の１．９Ｍ溶液２１４ml）に加えた（添加の間、温度を−５〜−１０℃に保持した）。
【００３２】
反応混合物を３０分間撹拌し、次に温度を２℃以下に保持しながら、ＮａＨＣＯ3飽和溶液７００mlと共に振盪した。相を分離して、有機相を洗浄することによりピリジンを除去した。有機相をＭｇＳＯ4で脱水して、濃縮乾固した。１０−デアセチルバッカチンIII  ７−Ｔｅｓ−１，１４−カルボナート４６．６ｇを得たが、これは以下の反応に直接使用することができた。
【００３３】
この化合物３１ｇを厳密に無水のＴＨＦ  ２５０mlに溶解した；この溶液を−５０℃で冷却して、１Ｍ  ＬｉＨＭＤＳ溶液４８mlを２分で加え、同温度で２０分間撹拌した。塩化アセチル３．７ｇを、撹拌しながら４０分間で加えた。反応温度は、０℃まで上昇するにまかせ、２時間撹拌を続けた。反応の終了後、混合物をＮＨ4Ｃｌ飽和溶液で処理して、酢酸エチルで希釈した。相を分離して、水溶液を、生成物が涸渇するまで酢酸エチルで希釈した。合わせた有機相を水で洗浄し、次にＭｇＳＯ4で乾燥し、濃縮乾固した。前反応の化合物のために不純な、１４β−ヒドロキシ−７−Ｔｅｓ−１，１４−カルボナート−バッカチンIII  ３３ｇを得た。この化合物は、酢酸エチル／ＣＨ2Ｃｌ2（９：１）混合物で純粋な生成物を溶出するシリカゲルのクロマトグラフィーに付した。下記の性状を有する、所望の生成物（XIII）３０ｇを得た：
【００３４】
【化５】
0004823456.tif 000006
【００３５】
【表２】
0004823456.tif 000007
【００３６】
質量スペクトル（ＮＨ3、ＤＥＰ／ＣＩ、陽イオン）：（ｍ／ｚ）７５９〔（Ｍ＋ＮＨ4）+、１９％〕、７４３〔（Ｍ＋Ｈ）+、１００％〕。
【００３７】
１４β−ヒドロキシ−７−Ｔｅｓ−１，１４−カルボナート−バッカチンIII  ２０ｇを、厳密に無水のトルエン３００mlと一緒に、１Ｌ丸底フラスコに入れて、（４Ｓ，５Ｒ）−Ｎ−Ｂｏｃ−２−（２，４−ジメトキシフェニル）−４−イソブチル−１−オキサゾリジン−５−カルボン酸１０ｇ及びＮ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）２ｇ及びＣＨ2Ｃｌ2に溶解したジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）９．５ｇを加えた。反応混合物を３時間還流し、次に冷却して、尿素の生成物を沈殿させ、母液をＮａＨＣＯ3飽和溶液で洗浄することにより、未反応の酸を除去し、次に希塩酸で洗浄することにより、ＤＭＡＰを除去し、そして最後に再度ＮａＨＣＯ3で洗浄して中性にした。有機相を濃縮乾固することにより、生成物４１．５ｇを得たが、これは次の工程において直接使用することができた。
【００３８】
この化合物４０ｇを、最初にＴｅｓをそして次に２，４−ジメトキシベンズアルデヒドを脱離することにより、２工程で脱保護した。化合物４０ｇをアセトニトリル／ピリジン混合物（８０：１００）１００mlに窒素下で溶解して、０℃に冷却した；フッ化ピリジニウム１３mlを加え、全体を２４時間撹拌しながら放置した。この溶液を水２Ｌ中に注ぎ入れて、生成物を濾過して真空下で乾燥した。
【００３９】
残渣を塩化メチレン６０mlに溶解して、激しく撹拌しながら０℃で、この溶液にメタノール中の０．６Ｎ  ＨＣｌ  ４０mlを加えた。反応混合物を２時間撹拌しながら放置し、次に塩化メチレン１５０mlで希釈して、ＮａＨＣＯ3溶液と共に振盪してｐＨを６〜７に調整した。有機相を濃縮乾固して、残渣をアセトン−ヘキサンから結晶化した。乾燥後、下記の化学−物理及び分光学性状を有する、１３−（Ｎ−Ｂｏｃ−β−イソブチルイソセリニル）−１４β−ヒドロキシバッカチン−１，１４−カルボナート１６ｇを得た：
化学式：Ｃ44Ｈ57ＮＯ17
外観：白色の粉末
融点：２４５℃
【００４０】
【表３】
0004823456.tif 000008
【００４１】
【表４】
0004823456.tif 000009
【００４２】
質量スペクトル（ＮＨ3、ＤＥＰ／ＣＩ、陽イオン）：（ｍ／ｚ）８８９〔（ＭＮＨ4）+〕、８３２〔（ＭＮＨ4−（ＣＨ3）3Ｃ）+〕、７７２〔（ＭＮＨ4−ＢｏｃＮＨ2）+〕。
（ＮＨ3、ＤＥＰ／ＣＩ、陰イオン）：（ｍ／ｚ）８７１（Ｍ-）、２６０（側鎖）。
赤外吸収スペクトル（ＫＢｒディスク）：３５２１、３３２１、２９７１、２９５３、１８２６、１７６２、１７０６、１５２６、１３６６、１２３８、１１６５、１０７２、７２３cm-1。
ＵＶスペクトル（ＭｅＯＨ）：２３１、２７６及び２８４nm；
２３１nmの−Ｅ1%＝１８０．９９
２７６nmの−Ｅ1%＝１４．０９４
２８４nmの−Ｅ1%＝１２．１８２
【００４３】
実施例２：１３−（Ｎ−Ｂｏｃ−β−イソブチルセリニル）−１４β−ヒドロキシバッカチンＶ、１，１４−カルボナートの合成
１３−（Ｎ−Ｂｏｃ−β−イソブチルセリニル）−１４β−ヒドロキシバッカチンIII、１，１４−カルボナート５ｇをトルエン５００mlにアルゴン雰囲気下で溶解して、溶液を完全に脱酸素化した；ＤＢＵ（ジアザビシクロ〔５，４，０〕−７−ウンデセン）８０mgを加え、反応混合物をアルゴン雰囲気下で１時間還流した。溶液を酢酸エチル１００mlで希釈して、水で洗浄した。有機相を蒸発乾固することにより、下記の化学−物理及び分光学性状を有する、１３−（Ｎ−Ｂｏｃ−β−イソブチルセリニル）−１４β−ヒドロキシバッカチンＶ  １，１４−カルボナート４．５ｇを得た：
化学式：Ｃ44Ｈ57ＮＯ17
外観：白色の粉末
融点：２４５℃
【００４４】
【表５】
0004823456.tif 000010
【００４５】
【表６】
0004823456.tif 000011
0004823456.tif 000012
【００４６】
質量スペクトル（ＴＳＰ＋）：（ｍ／ｚ）８７２（ＭＨ+）；８１６（ＭＨ+−（ＣＨ3）2Ｃ＝ＣＨ2）；７７２（８１６−ＣＯ2）；７５６（８１６−ＡｃＯＨ）；７１２（７７２−ＡｃＯＨ）。
赤外吸収スペクトル（ＫＢｒディスク）：３４５０、２９６３、１８１３、１７４０、１７０２、１２４７、１０９１、７１０cm-1。
ＵＶスペクトル（ＭｅＯＨ）：２００及び２３０nm；
２００nmの−Ｅ1%＝３７０．９
２３０nmの−Ｅ1%＝１９３．２
【００４７】
実施例３：（４Ｓ，５Ｒ）−Ｎ−Ｂｏｃ−（２，４−ジメトキシフェニル）−４−イソブチル−１−オキサゾリジン−５−カルボン酸の調製
Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−ロイシノール（III）の調製：
Ｌ−ロイシノール（II）４６．８ｇ（４００mmol）を、メカニカルスターラー、温度計及び滴下ロートを取り付けた２ｌ三つ口丸底フラスコ中でＣＨ2Ｃｌ2  ３００mlに溶解した。次に撹拌溶液に室温でＣＨ2Ｃｌ2（１００mL）中のＢｏｃ無水物（８７．２ｇ、４００mmol）の溶液を９０分で滴下により加えた。Ｂｏｃ−無水物の最初の２５％の添加の間、反応は発熱性であり、２０〜３０℃に達してスラリーが生じ、そしてこれが室温で更に３時間撹拌後には透明になった。全体を室温で一晩放置した。溶媒を高真空下で留去することにより、所望の生成物を濃稠な油状物として定量的収量（８７ｇ）で得た。次にこの生成物を更に精製することなく処理した。
【００４８】
Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−ロイシナール（IV）の調製
−６０／−６５℃で前もって冷却した塩化メチレン１３０mL中の塩化オキサリル（２６．２７４mL、３００mmol）の溶液に、ＤＭＳＯ（２８．４mL、４００mmol）をゆっくり加えた。
【００４９】
ＤＭＳＯの添加が終了後、溶液は透明になった。同温度で２０分撹拌後、続いて反応混合物を、−６０℃未満の温度を保持しながら、ＣＨ2Ｃｌ2（２００mL）中のアルコール（III）（４３．７ｇ、２００mmol）の溶液で２５分間処理した。アルコールの添加の間に反応混合物は混濁して、白色の沈殿物が生成した。同温度で２０〜２５分の撹拌後、ＣＨ2Ｃｌ2（１００mL）中のトリエチルアミン（１１２mL、８００mmol）の溶液を、温度を−６８と−６２℃の間に保持しながら４０分で滴下により加えた。次に反応混合物を−６０と−６５℃の間で更に５０分間撹拌した。溶離液としてＣＨ2Ｃｌ2中の８％メタノールを使用して行った反応混合物のＴＬＣでは、出発生成物を検出しなかった。
【００５０】
次にこの冷溶液を、ＫＨＳＯ4  ６８ｇ（０．５mol）を含む氷冷溶液８００ml中に注ぎ入れた。有機層を分離して、水相をＣＨ2Ｃｌ2（１００mL）で抽出した。合わせた有機相をＫＨＳＯ4水溶液（５％、１×２００mL）、食塩水（１００mL、５０mL）で洗浄して、半分の容量（≒２５０mL）まで濃縮した。該物質を次の工程において直接使用した。
【００５１】
アルデヒド（Ｖ）重亜硫酸塩化合物誘導体
メカニカルスターラー、温度計及び滴下ロートを取り付けた２ｌ三つ口丸底フラスコ中のアルデヒド（IV）の塩化メチレン溶液を、１０分で−５℃で水（２００mL）中の重亜硫酸ナトリウム（４１．７ｇ、４００mmol）の溶液で処理し、続いてｎ−Ｂｕ4ＮＨＳＯ4（６７８mg、２mmol）で処理した。この溶液を−５℃に冷却した。反応混合物を−５℃〜−０℃で５〜６時間、続いて室温で一晩撹拌した。化合物（Ｖ）を含む水相を分離して、ＣＨ2Ｃｌ2（２×２０mL）で洗浄した。
【００５２】
（２−シアノ−３−（Ｎ−Ｂｏｃ）−アミノ−５−メチル−ヘキサノール（VI）  上記水溶液（≒２５０mL）にＣＨ2Ｃｌ2（１２０mL）を加え、反応混合物を氷浴で０〜５℃に冷却した。続いて固体ＫＣＮ（１５ｇ、２３０mmol）を反応混合物に加えて、この溶液を室温で一晩撹拌した。有機相を分離して、水相をＣＨ2Ｃｌ2で抽出した。合わせた有機相を食塩水（１×５０mL）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥して溶媒を留去することにより、無色の粘性液体として生成物を得た（４３ｇ）。この生成物は、〔α〕D５１．１１（ｃ＝２、ＭｅＯＨ）であり、そして（VI）の２（Ｒ），３（Ｓ）と２（Ｓ），３（Ｓ）誘導体の約２：１混合物であった。収率は、出発したＬ−ロイシノールに対照させて８９％であった。
【００５３】
（２ＲＳ，３Ｓ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−５−メチルヘキサン酸（VII）
上記粗ニトリル（VI）の混合物（４３ｇ）を濃ＨＣｌ（３７％）（１５０mL）で処理し、一晩還流することにより、粗酸（VII*）を得た。過剰の塩酸をロータリーエバポレーターにより除去して、残渣から水（１００mL）と共に留去することによりＨＣｌを除去した。次に残渣を水１５０mlに溶解して、アセトン１００mlを加え、次に６．２５Ｍ  ＮａＯＨ溶液３３mlで処理することにより、ｐＨを５に調整した。次に更なる量のアセトン（５００mL）を溶液に加え、これを４℃で一晩静置した。続いて沈殿した固体を濾過して、固体ケーキをアセトンで洗浄して、真空下で乾燥することにより、化合物（VI）の２（Ｒ），３（Ｓ）と２（Ｓ），３（Ｓ）誘導体の約３：１混合物を含む粗酸（VII）（６．５ｇ）を得た。
【００５４】
濾液から溶媒を留去して、水を加えることにより、溶液の容量を７５mLに調整した。
【００５５】
次にアセトン（１Ｌ）を溶液に加えて、これを冷蔵庫中４℃で一晩静置した。次に沈殿した固体を濾過して、固体ケーキをアセトンで洗浄し、真空下で乾燥することにより、（VII）の２（Ｒ），３（Ｓ）と２（Ｓ），３（Ｓ）誘導体の約１：１混合物と共に固体ＮａＣｌを含む第２の量の生成物（１８ｇ）を得た。
【００５６】
回収した第１の生成物（VII）（２２．５ｇ）は、完全に溶解することなく水（１２０mL）中で加熱し、次に氷中で冷却し、濾過することにより、酸（VII）１２．５ｇを得たが、なお約１０％の望ましくない（VII）の２（Ｒ），３（Ｓ）誘導体が混入していた。この生成物を乾燥して、上記第２産物の結晶の約１：１混合物と混合した（総量≒２７ｇ）。
【００５７】
（２ＲＳ，３Ｓ）−３−（Ｎ−Ｂｏｃ）アミノ−２−ヒドロキシ−５−メチルヘキサン酸（VIII）
（Ａ）純度約９０％の粗酸（VI）２（Ｒ），３（Ｓ）（２．５ｇ、７７．６mmol）を水−ＴＨＦの１：１混合物（８０mL）に溶解し、次にこの反応混合物にトリエチルアミン（１３．５mL）、続いてＢｏｃ無水物（１８．５ｇ、８５mmol）を加え、溶液全体を室温で４０時間撹拌した。ロータリーエバポレーターにより溶媒を留去し、全体を撹拌し続けながら、水６０ml及び酢酸エチル６０mlを加えた。水相を分離して、酢酸エチル（３０mL）で抽出した。合わせた有機相を１０％炭酸ナトリウム水溶液（３０mL、２０mL）で抽出した。次に塩基性抽出液を２Ｍ塩酸で酸性にした水相（≒５５mL）と合わせて、溶液のｐＨを２に調整した。次に酸（VIII）を酢酸エチル（３×４０mL）で水相から抽出して、ヘテロ酢酸抽出液を水（２０mL）で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ4）して溶媒を留去することにより、粗（VIII）Ｂｏｃ誘導体をシロップ状物として得た（２０ｇ、９９％）。
【００５８】
（Ｂ）ＮａＣｌが混入している約５０％の純度の粗酸（VII）２Ｒ，３Ｓ（２７ｇ）を水−ジオキサンの１：１混合物（１２０mL）に溶解した。次に反応混合物にトリエチルアミン（２０mL）を加え、次いでＢｏｃ無水物（２６．１６ｇ、１２０mmol）を加えた。溶液を室温で４０時間撹拌した。ロータリーエバポレーターにより溶媒を留去し、更に数分間撹拌を続けながら、水（１００mL）及び酢酸エチル（１００mL）を残渣に加えた。有機相を分離して、１０％炭酸ナトリウム水溶液（４５mL、３０mL）で抽出した。次に炭酸ナトリウム抽出液を水相と合わせて、１Ｍ塩酸（≒１６５mL）で酸性にして、酢酸エチル（３×６０mL）で抽出し、後に水（３０mL）で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ4）して溶媒を留去することにより、粗（VII）Ｂｏｃをシロップ状物として得た（１６ｇ）が、これは２Ｒ，３Ｓと２Ｓ，３Ｓ異性体の１：１混合物からなっていた。
【００５９】
（２Ｒ，３Ｓ）−３−（Ｎ−Ｂｏｃ）アミノ−２−ヒドロキシ−５−メチルヘキサン酸メチルエステル（IX）
ジアゾメタンは、T.H. Blackに報告された方法によりジアザルドから調製した〔Aldrichimica Acta, 16, 3 (1983)〕。
【００６０】
（Ａ）ＣＨ2Ｃｌ2（７５mL）中の粗酸（VIII）（２０ｇ、５６．６mmol）の溶液を、ジアゾメタンの冷エーテル溶液（≒７７mmol）にゆっくり加えて、混合物を氷浴に２時間放置した。この工程において溶液の色が白色に変わったが、これはほとんどのジアゾメタンが吸着されていることを示す。次に溶液を濃縮して、残渣をトルエン（２０mL）とヘキサン（７０mL）の混合物から結晶化した。冷蔵庫中４℃で一晩冷却後、純粋な（IXA）２Ｒ，３Ｓ誘導体の結晶を濾過により回収した。収量は１５ｇであった。母液から１：１異性体混合物約５ｇを得た。
【００６１】
（Ｂ）同じ手順を用いて、酸（VIII）の１：１混合物（１６ｇ）を（IXA）と（IXB）エステルの１：１混合物に変換した。母液からの物質（工程Ａからの５ｇ）を加え、この物質を合わせて、ヘキサン−酢酸エチルを溶離液（９：１〜７：３）として使用するカラムクロマトグラフィーにより分離した。ニンヒドリンを、ＴＬＣプレートの展開液として使用した。Ｒｆ０．７５（酢酸ヘキサノエチル：  ７：３）の非極性化合物を、所望のエステル（IXA）（２Ｒ，３Ｓ）として同定したが、これをシクロヘキサンから再結晶することにより、（IXA）を無色の針状物（８ｇ）として得た（融点９５〜９６℃、〔α〕D７２．４°（ｃ＝１、ＭｅＯＨ））。
【００６２】
Ｒｆ０．５（ヘキサン−酢酸エチル  ７：３）の極性化合物を（IXB）（２Ｓ，３Ｓ）として同定して、シクロヘキサンから再結晶することにより、（IXB）１０ｇを無色の針状物として得た。
【００６３】
２，４−ジメトキシベンズアルデヒドジメチルアセタール
２，４−ジメトキシベンズアルデヒド（４１．２５ｇ、０．２５mol）、無水オルトギ酸トリメチル（５０mL）及び硝酸アンモニウム（２ｇ、メタノール２０mLに溶解）の混合物を６時間還流した（反応混合物の1Ｈ−ＮＭＲが、６５〜７０％の変換を示した）。最初は、熱反応混合物は清澄な溶液であったが、反応が進行するにつれ固体が沈殿した。第２部の無水オルトギ酸トリメチル（２０mL）を加え、メタノールの一部を留去した。
【００６４】
反応混合物の温度が９５〜１００℃に達したら、全ての固体はフラスコ中で溶解した。溶液を室温に冷却して、無水Ｎａ2ＣＯ3（５ｇ）を加えて３０分間撹拌した。続いてこの溶液を濾過して、残渣を０．２５mmHgの真空下で分別蒸留により蒸留した。低温での第１の画分は、主として過剰のオルトギ酸トリメチルからなっており、そして１７５〜１８０℃で無色の油状物として蒸留した第２の画分は、所望のアセタールであった。収量：３７ｇ（７０％）。
【００６５】
（４Ｓ，５Ｒ）−Ｎ−Ｂｏｃ−２−（２，４−ジメトキシフェニル）−４−イソブチル−１−オキサゾリジン−５−カルボン酸メチルエステル（Ｘ）
無水ＴＨＦ（１５０ml）中の（２Ｒ，３Ｓ）−３−（Ｎ−Ｂｏｃ）アミノ−２−ヒドロキシ−５−メチルヘキサン酸メチルエステル（IXA）（３４．３７５ｇ、１２５mmol）の溶液に、蒸留２，４−ジメトキシベンズアルデヒドジメチルアセタール（３０ｇ、１４２mmol）、続いてｐ−トルエンスルホン酸ピリジニウム（Ｐｙ．Ｔｏｓ；４００mg）を加えた。
【００６６】
この溶液を、デーン−シュターク（Dean-Stark）セパレーターを取り付けた５００ml三つ口フラスコ中で穏やかに還流しながら加熱した。還流下で約６時間後、反応中に生成したメタノールを含むＴＨＦ  約６０mlを除去した。1Ｈ−ＮＭＲ分析（ＣＤＣｌ3中）のために試料をとった。δ＝１．４１ppmのピークは、消失（１）して、保護メチルエステルに関する新規なピークがδ＝１．２４ppmに出現（２）した。６時間の還流後、変換率は約７０〜７５％であった。
【００６７】
新たに一定量の無水ＴＨＦ（５０ml）を加え、次にある量の２，４−ジメトキシベンズアルデヒドアセタール（５．０ｇ；２４mmol）を加えた。反応混合物を更に２．５時間還流し、この間デーン−シュターク装置を使用してＴＨＦ約５０mlを除去した。続く1Ｈ−ＮＭＲ分析では、出発物質の完全な変換を示した。
【００６８】
反応混合物にＮａＨＣＯ3飽和水溶液（１５ml）を加え、混合物を１５分間撹拌することにより、Ｐｙ．Ｔｏｓを中和した。続いてｔ−ブチルメチルエーテル（８５ml）及び水（１５ml）を加え、有機相を分離した。水相をｔ−ブチルメチルエーテル（２０ml）で抽出して、合わせた有機相を水（３０ml）で洗浄して、溶媒を留去することにより、粗生成物（Ｘ）の残渣（６６ｇ）を得た。
【００６９】
酸（XI）へのエステル（Ｘ）の加水分解
粗エステル（Ｘ）（２２ｇ、４２mmol）をメタノール１００mlに溶解して、炭酸カリウム８．７ｇを含む水（５０ml）を加えた。室温で一晩撹拌後、ＴＬＣモニタリング（トルエン−酢酸エチル：  ４．５：１）により、反応は終了したと考えられた。ＴＬＣ分析は、1Ｈ−ＮＭＲ分析により確認して、メチルエステルピークの消失を照合した。
【００７０】
４０℃を上回らない温度で真空下メタノールを留去して（残渣約６０ｇ）、水（１５０ml）を残渣に加えた。この水性懸濁液を酢酸エチル（５×５０ml）で抽出することにより、ベンズアルデヒド及び過剰のベンズアルデヒドジメチルアセタールを除去した。塩化メチレン９０mlを水相に加え、混合物を氷浴で冷却して、激しく撹拌しながら、この二相系を１Ｍ  ＮａＨＳＯ4（ｐＨ＝３）約１２５mlで処理した。相を分離して、水相を塩化メチレン（７５ml）で抽出した。合わせた塩化メチレン抽出液を水（３０ml）、食塩水（３０ml）で洗浄して、ＭｇＳＯ4で乾燥した。次にこの溶液は次の使用まで−６０℃に保持した。無色の固体としての最終生成物の収量は１６ｇであり、出発物に基づいて約９３％であった。
【００７１】
実施例４：１４β−ヒドロキシ−７−Ｔｅｓ−バッカチンIII  １，４−カルボナートの調製
無水テトラヒドロフラン５０ml中の１０−デアセチル−１４−ヒドロキシバッカチンIII  １１．２ｇの溶液に、ＣｅＣｌ3・７Ｈ2Ｏ  ０．７２ｇ及び無水酢酸７．３mlを加えた。反応混合物を室温で５時間撹拌した；この間に混合物は均質になった。氷１０ｇを加え、全体を１時間撹拌した。テトラヒドロフランを真空下で留去して、残渣をＨ2Ｏ  ２００mlで希釈した。沈殿物を濾過して、真空下Ｐ2Ｏ5の存在下で乾燥した；生成物を酢酸エチルから結晶化することにより、下記の性状を有する１４−ヒドロキシバッカチンIII  １０ｇを得た：
【００７２】
融点：２３６〜８℃；ＩＲ（ＫＢｒ）：３４７４、１７３９、１４００、１２４０、１０９０、１０４９cm-1。
【００７３】
【表７】
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【００７４】
−１２℃に冷却した、スターラー、滴下ロート、温度計及び還流冷却器を取り付けた四つ口フラスコに、トルエン中のホスゲンの１．９Ｍ溶液５２．８mlを入れた。この溶液に、塩化メチレン５３ml及びピリジン１７．５mlに溶解した１４−ヒドロキシ−バッカチンIII  １１．６ｇを撹拌下３０分で滴下により加えた。温度を−６と−１０℃の間に保持した。３０分後、ＮａＨＣＯ3飽和溶液５０mlを、撹拌下、温度の厳重な制御を保持しながら加えた。室温まで加温後、相を分離した。水相を塩化メチレンで逆抽出して、有機相を２Ｎ  ＨＣｌ  ４５mlで洗浄してｐＨを約１に調整した。有機相を０．１Ｎ  ＨＣｌ、次にＮａＨＣＯ3で洗浄し、次いでＮａ2ＳＯ4で乾燥して蒸発乾固することにより、１４−ヒドロキシバッカチン−１，１４  カルボナート１１．５ｇを定量的に得た。
【００７５】
１４−ヒドロキシバッカチン−１，１４  カルボナート１１．５ｇをＤＭＦ  ５０mlに溶解して、クロロトリエチルシラン１．１当量及びＮ−メチル−イミダゾール３当量を室温で加えた。反応の終了後、混合物をＨ2Ｏ  ５００ml中に注ぎ入れ、沈殿物を濾過してＨ2Ｏで完全に洗浄し、次に乾燥することにより、実施例１に報告されたのと同じ性状を有する１４β−ヒドロキシ−７−Ｔｅｓ−バッカチンIII−１，１４  カルボナート１２．８ｇを得た。
【００７６】
実施例５：１３−（Ｎ−Ｂｏｃ−β−イソブチルセリニル）−１４β−ヒドロキシバッカチンIII、１，１４−カルボナートの合成
上記実施例に記載されるように得られた１４β−ヒドロキシ−７−Ｔｅｓ−バッカチンIII−１，１４  カルボナートから出発して、手順は以下のとおりとした。
【００７７】
１Ｌ丸底フラスコに、１４β−ヒドロキシ−７−Ｔｅｓ−１，１４−カルボナート−バッカチンIII  ２０ｇを、厳密に無水のトルエン３００mlと一緒に入れた；ＣＨ2Ｃｌ2に溶解した（４Ｓ，５Ｒ）−Ｎ−Ｂｏｃ−２−（２，４−ジメトキシフェニル）−４−イソブチル−１−オキサゾリジン−５−カルボン酸１０ｇ及びＮ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）２ｇを加え、そしてジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）９．５ｇを加えた。反応混合物を３時間還流し、次に冷却することにより、尿素生成物を沈殿させて、母液をＮａＨＣＯ3飽和溶液で洗浄することにより、未反応の酸を除去し、次いで希塩酸で洗浄することにより、ＤＭＡＰを除去し、そして最後に再度ＮａＨＣＯ3で洗浄して中性にした。有機相を濃縮乾固することにより、生成物４１．５ｇを得たが、これは次の工程において直接使用することができた。
【００７８】
この化合物４０ｇを、最初にＴｅｓを、次に２，４−ジメトキシベンズアルデヒドを開裂することにより、２工程で脱保護した。化合物４０ｇをアセトニトリル／ピリジン混合物（８０：１００）１００mlに窒素下で溶解して、混合物を０℃に冷却した；フッ化ピリジニウム１３mlを加え、全体を撹拌しながら２４時間放置した。この溶液を水２Ｌ中に注ぎ入れ、生成物を濾過して真空下で乾燥した。残渣を塩化メチレン６０mlに溶解して、激しく撹拌しながら０℃で、この溶液にメタノール−ＨＣｌ（０．６Ｎ）４０mlを加えた。反応混合物を撹拌しながら２時間放置し、次に塩化メチレン１５０mlで希釈して、ＮａＨＣＯ3溶液と共に振盪してｐＨを６〜７に調整した。有機相を濃縮乾固して、残渣をアセトン−ヘキサンから結晶化し、次に乾燥することにより、１３−（Ｎ−Ｂｏｃ−β−イソブチルイソセリニル）−１４β−ヒドロキシバッカチンIII  １，１４−カルボナート１６．５ｇを得た。