(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
0004679505.tif 000074
によって表されるピラジノイルグアニジン化合物であって、
式中
Ｘは、クロロであり；
Ｙは、ＮＨ２であり；
Ｒ１は、水素であり；
Ｒ２は、水素であり；
Ｒ３およびＲ４のうちの１つは水素であり、そしてＲ３およびＲ４のうちの１つは、式
（Ｃ）：
【化３−１】
0004679505.tif 000075
によって表され、
Ｒ５は、−（ＣＨ２）ｎ−ＮＲ１２Ｒ１２、−Ｏ−（ＣＨ２）ｍ−ＮＲ１２Ｒ１２、−Ｏ−（ＣＨ２）ｍ−（Ｚ）ｇＲ１２、−（ＣＨ２）ｎ−ＮＲ１１Ｒ１１、−Ｏ−（ＣＨ２）ｍＮＲ１１Ｒ１１、−（ＣＨ２）ｎ−Ｎ＋−（Ｒ１１）３、−Ｏ−（ＣＨ２）ｍ−Ｎ＋−（Ｒ１１）３、−（ＣＨ２）ｎ−（Ｚ）ｇ−（ＣＨ２）ｍ−ＮＲ１０Ｒ１０、−Ｏ−（ＣＨ２）ｍ−（Ｚ）ｇ−（ＣＨ２）ｍ−ＮＲ１０Ｒ１０、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｍ−ＣＨ２ＣＨ２ＮＲ１２Ｒ１２、−Ｏ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｍ−ＣＨ２ＣＨ２ＮＲ１２Ｒ１２、−（ＣＨ２）ｎ−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ１２Ｒ１２、−Ｏ−（ＣＨ２）ｍ−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ１２Ｒ１２、−Ｏ−（ＣＨ２）ｍ−（ＣＨＯＲ８）ｍＣＨ２ＮＲ１０−（Ｚ）ｇ−Ｒ１０、−（ＣＨ２）ｎ−（ＣＨＯＲ８）ｍＣＨ２−ＮＲ１０−（Ｚ）ｇ−Ｒ１０、−（ＣＨ２）ｎＮＲ１０−（ＣＨ２）ｍ（ＣＨＯＲ８）ｎＣＨ２ＮＲ１０−（Ｚ）ｇ−Ｒ１０、−Ｏ（ＣＨ２）ｍＮＲ１０−（ＣＨ２）ｍ（ＣＨＯＲ８）ｎＣＨ２ＮＲ１０−（Ｚ）ｇ−Ｒ１０、−（Ｈｅｔ）−（ＣＨ２）ｍ−ＯＲ８、−（Ｈｅｔ）−（ＣＨ２）ｍ−ＮＲ７Ｒ１０、−（Ｈｅｔ）−（ＣＨ２）２−７（ＣＨＯＲ８）（ＣＨＯＲ８）ｎ−ＣＨ２ＯＲ８、−（Ｈｅｔ）−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｍ−Ｒ８、−（Ｈｅｔ）−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｍ−ＣＨ２ＣＨ２ＮＲ７Ｒ１０、−（Ｈｅｔ）−（ＣＨ２）ｍ−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ７Ｒ１０、−（Ｈｅｔ）−（ＣＨ２）ｍ−（Ｚ）ｇ−Ｒ７、−（Ｈｅｔ）−（ＣＨ２）ｍ−ＮＲ１０−ＣＨ２（ＣＨＯＲ８）（ＣＨＯＲ８）ｎ−ＣＨ２ＯＲ８、−（Ｈｅｔ）−（ＣＨ２）ｍ−ＣＯ２Ｒ７、−（Ｈｅｔ）−（ＣＨ２）ｍ−ＮＲ１２Ｒ１２、−（Ｈｅｔ）−（ＣＨ２）ｎ−ＮＲ１２Ｒ１２、−（Ｈｅｔ）−（ＣＨ２）ｍ−（Ｚ）ｇＲ１２、−（Ｈｅｔ）−（ＣＨ２）ｍＮＲ１１Ｒ１１、−（Ｈｅｔ）−（ＣＨ２）ｍ−Ｎ＋−（Ｒ１１）３、−（Ｈｅｔ）−（ＣＨ２）ｍ−（Ｚ）ｇ−（ＣＨ２）ｍ−ＮＲ１０Ｒ１０、−（Ｈｅｔ）−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｍ−ＣＨ２ＣＨ２ＮＲ１２Ｒ１２、−（Ｈｅｔ）−（ＣＨ２）ｍ−（Ｃ＝Ｏ）ＮＲ１２Ｒ１２、−（Ｈｅｔ）−（ＣＨ２）ｍ−（ＣＨＯＲ８）ｍＣＨ２ＮＲ１０−（Ｚ）ｇ−Ｒ１０、−（Ｈｅｔ）−（ＣＨ２）ｍ−ＮＲ１０−（ＣＨ２）ｍ−（ＣＨＯＲ８）ｎＣＨ２ＮＲ１０−（Ｚ）ｇ−Ｒ１０、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−（ＣＨ２）ｍ−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−Ｎ（Ｒ７）２、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ２）ｍＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−Ｎ（Ｒ１０）２、−（ＣＨ２）ｎ−ＣＨＮＨ２ＣＯ２ＣＨ３、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−（ＣＨ２）ｍ−Ｎ（Ｒ７）２、−ＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ−Ｎ（Ｒ７）２、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ２）ｍＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−Ｎ（Ｒ７）２、−（ＣＨ２）ｎ−ＮＨ−Ｃ（＝Ｎ（ｔ−ブトキシカルボニル））−ＮＨ（ｔ−ブトキシカルボニル）、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨＯＨ−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｎ（ｔ−ブトキシカルボニル））−Ｎ（ｔ−ブトキシカルボニル）、−（ＣＨ２）ｎ−ＮＲ１０ＣＨ２（ＣＨＯＲ８）ｎ−（Ｚ）ｇ−Ｒ７、−Ｏ−（ＣＨ２）ｍ−ＮＲ１０ＣＨ２（ＣＨＯＲ８）ｎ−（Ｚ）ｇ−Ｒ７、−（ＣＨ２）ｎ−Ｎ（ＳＯ２Ｒ７）２、−Ｏ−（ＣＨ２）ｍ−Ｎ（ＳＯ２Ｒ７）２、−（ＣＨ２）ｎ−ＣＨＮＨ（ｔ−ブトキシカルボニル）ＣＯ２Ｒ７、−Ｏ−（ＣＨ２）ｍ−ＣＨＮＨ（ｔ−ブトキシカルボニル）ＣＯ２Ｒ７、または−（ＣＨ２）ｎ−ＣＨＮＨ２ＣＯ２Ｒ７であり、式中、２つの−ＣＨ２ＯＲ８基が、互いに関して１，２−位または１，３−位にある場合、Ｒ８基は、環式モノ−またはジ−置換１，３−ジオキサンまたは１，３−ジオキソランを形成するために結合されていてもよく、
少なくとも２つの−ＣＨ２ＯＲ８基が、互いに隣接して位置し、Ｒ８基は、環式モノ−またはジ−置換１，３−ジオキサンまたは１，３−ジオキソランを形成するために結合されているという条件で、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＯＲ８）（ＣＨＯＲ８）ｎ−ＣＨ２ＯＲ８であり、
少なくとも２つの−ＣＨ２ＯＲ８が、互いに隣接して位置し、Ｒ８基は、環式モノ−またはジ−置換１，３−ジオキサンまたは１，３−ジオキソランを形成するために結合されているという条件で、
−Ｏ−（ＣＨ２）ｍ−（ＣＨＯＲ８）（ＣＨＯＲ８）ｎ−ＣＨ２ＯＲ８であり、
少なくとも２つの−ＣＨ２ＯＲ８が、互いに隣接して位置し、Ｒ８基は、環式モノ−またはジ−置換１，３−ジオキサンまたは１，３−ジオキソランを形成するために結合されているという条件で、−（ＣＨ２）ｎ−ＮＲ１０−ＣＨ２（ＣＨＯＲ８）（ＣＨＯＲ８）ｎ−ＣＨ２ＯＲ８であり、または
少なくとも２つの−ＣＨ２ＯＲ８基が、互いに隣接して位置し、Ｒ８基は、環式モノ−またはジ−置換１，３−ジオキサンまたは１，３−ジオキソランを形成するために結合されているという条件で、−Ｏ−（ＣＨ２）ｍ−ＮＲ１０−ＣＨ２（ＣＨＯＲ８）（ＣＨＯＲ８）ｎ−ＣＨ２ＯＲ８であり、
Ｒ７の各々は、独立して水素または低級アルキルであり；
Ｒ８の各々は、独立して水素、低級アルキル、−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ１１、グルクロニド、２−テトラヒドロピラニル、または
【化６】
0004679505.tif 000076
であり、
Ｒ９の各々は、独立して−ＣＯ２Ｒ７、−ＣＯＮ（Ｒ７）２、−ＳＯ２ＣＨ３、または−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ７であり；
Ｒ１０の各々は、独立して−Ｈ、−ＳＯ２ＣＨ３、−ＣＯ２Ｒ７、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ７Ｒ９、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ７、または−ＣＨ２−（ＣＨＯＨ）ｎ−ＣＨ２ＯＨであり；
Ｚの各々は、独立してＣＨＯＨ、Ｃ（＝Ｏ）、ＣＨＮＲ７Ｒ１０、Ｃ＝ＮＲ１０、またはＮＲ１０であり；
Ｒ１１の各々は、独立して低級アルキルであり；
Ｒ１２の各々は、独立して−ＳＯ２ＣＨ３、−ＣＯ２Ｒ７、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ７Ｒ９、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ７、または−ＣＨ２−（ＣＨＯＨ）ｎ−ＣＨ２ＯＨであり；
Ｈｅｔの各々は、独立して−ＮＲ７、−ＮＲ１０、−Ｓ−、−ＳＯ−、または−ＳＯ２−であり；
ｇの各々は、独立して１から６の整数であり；
ｍの各々は、独立して１から７の整数であり；
ｎの各々は、独立して０から７の整数である化合物；
または、薬学的に許容できるその塩、およびすべての鏡像異性体、ジアステレオマー、そのラセミ混合物を含めた化合物。
【請求項２】
Ｒ５が、−（ＣＨ２）ｎ−ＣＨＮＨ２ＣＯ２ＣＨ３である請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ５が、−（Ｚ）ｇ−（ＣＨ２）ｍ−Ｎ（Ｒ１０）２である請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ５が、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−（ＣＨ２）ｍ−Ｎ（Ｒ７）２である請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ５が、−ＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ−Ｎ（Ｒ７）２である請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ５が、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−Ｎ（Ｒ７）２である請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ５が、−（ＣＨ２）ｎ−ＮＨ−Ｃ（＝Ｎ（ｔ−ブトキシカルボニル））−ＮＨ（ｔ−ブトキシカルボニル）である請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ５が、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨＯＨ−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｎ（ｔ−ブトキシカルボニル））−Ｎ（ｔ−ブトキシカルボニル）である請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ５が、−（ＣＨ２）ｎ−ＮＲ１０ＣＨ２（ＣＨＯＲ８）ｎ−（Ｚ）ｇ−Ｒ７である請求項１に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ５が、−Ｏ−（ＣＨ２）ｍ−ＮＲ１０ＣＨ２（ＣＨＯＲ８）ｎ−（Ｚ）ｇ−Ｒ７である請求項１に記載の化合物。
【請求項１１】
式：
【化７】
0004679505.tif 000077
により表される請求項１０に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｒ５が、−（ＣＨ２）ｎ−ＮＲ１２Ｒ１２である請求項１に記載の化合物。
【請求項１３】
Ｒ５が、−（ＣＨ２）ｎ−Ｎ（ＳＯ２Ｒ７）２である請求項１に記載の化合物。
【請求項１４】
式：
【化８】
0004679505.tif 000078
により表される請求項１３に記載の化合物。
【請求項１５】
Ｒ５が、−Ｏ−（ＣＨ２）ｍ−ＮＲ１２Ｒ１２である請求項１に記載の化合物。
【請求項１６】
Ｒ５が、−Ｏ−（ＣＨ２）ｍ−Ｎ（ＳＯ２Ｒ７）２である請求項１に記載の化合物。
【請求項１７】
Ｒ５が、−Ｏ−（ＣＨ２）ｍ−（Ｚ）ｇ−Ｒ１２である請求項１に記載の化合物。
【請求項１８】
式：
【化９】
0004679505.tif 000079
により表される請求項１７に記載の化合物。
【請求項１９】
式：
【化１０】
0004679505.tif 000080
により表される請求項１７に記載の化合物。
【請求項２０】
Ｒ５が、−（ＣＨ２）ｎ−ＣＨＮＨ（ｔ−ブトキシカルボニル）ＣＯ２Ｒ７である請求項１に記載の化合物。
【請求項２１】
Ｒ５が、−Ｏ−（ＣＨ２）ｍ−ＣＨＮＨ（ｔ−ブトキシカルボニル）ＣＯ２Ｒ７である請求項２０に記載の化合物。
【請求項２２】
式：
【化１１】
0004679505.tif 000081
により表される請求項２１に記載の化合物。
【請求項２３】
Ｒ５が、−（ＣＨ２）ｎ−Ｎ（Ｒ１１）２である請求項１に記載の化合物。
【請求項２４】
Ｒ５が、−Ｏ−（ＣＨ２）ｍ−Ｎ（Ｒ１１）２である請求項１に記載の化合物。
【請求項２５】
式：
【化１２】
0004679505.tif 000082
により表される請求項２４に記載の化合物。
【請求項２６】
Ｒ５が、−（ＣＨ２）ｎ−ＣＨＮＨ２ＣＯ２Ｒ７である請求項１に記載の化合物。
【請求項２７】
式：
【化１３】
0004679505.tif 000083
により表される請求項２６に記載の化合物。
【請求項２８】
式：
【化１４】
0004679505.tif 000084
により表される請求項２６に記載の化合物。
【請求項２９】
Ｒ５が、−Ｏ−（ＣＨ２）ｍ−ＣＨＮＨ２ＣＯ２Ｒ７である請求項１に記載の化合物。
【請求項３０】
式：
【化１５】
0004679505.tif 000085
により表される請求項２９に記載の化合物。
【請求項３１】
式：
【化１６】
0004679505.tif 000086
により表される請求項２９に記載の化合物。
【請求項３２】
Ｒ５が、−Ｏ−（ＣＨ２）ｍ−Ｎ＋（Ｒ１１）３である請求項１に記載の化合物。
【請求項３３】
式：
【化１７】
0004679505.tif 000087
により表される請求項３２に記載の化合物。
【請求項３４】
Ｒ５が、−（ＣＨ２）ｎ−（Ｚ）ｇ−（ＣＨ２）ｍ−ＮＲ１０Ｒ１０である請求項１に記載の化合物。
【請求項３５】
ｎが、０であり；ｇが、２であり；Ｚが、Ｃ（＝Ｏ）またはＮＲ１０であり；そして、ＺのＲ１０が、Ｈである、請求項３４に記載の化合物。
【請求項３６】
式：
【化１８】
0004679505.tif 000088
により表される請求項３５に記載の化合物。
【請求項３７】
式：
【化１９】
0004679505.tif 000089
により表される請求項３５に記載の化合物。
【請求項３８】
Ｒ５が、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−（ＣＨ２）ｍ−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−Ｎ（Ｒ７）２である請求項１に記載の化合物。
【請求項３９】
式：
【化２０】
0004679505.tif 000090
により表される請求項３８に記載の化合物。
【請求項４０】
Ｒ５が、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ２）ｍＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−Ｎ（Ｒ１０）２である請求項１に記載の化合物。
【請求項４１】
式：
【化２１】
0004679505.tif 000091
により表される請求項４０に記載の化合物。
【請求項４２】
Ｒ５が、−Ｏ−（ＣＨ２）ｍ−（ＣＨＯＲ８）ｍＣＨ２ＮＲ１０−（Ｚ）ｇ−Ｒ１０で
ある請求項１に記載の化合物。
【請求項４３】
式：
【化２２】
0004679505.tif 000092
により表される請求項４２に記載の化合物。
【請求項４４】
Ｒ５が、−（ＣＨ２）ｎ−（ＣＨＯＲ８）ｍＣＨ２−ＮＲ１０−（Ｚ）ｇ−Ｒ１０であ
る請求項１に記載の化合物。
【請求項４５】
Ｒ５が、−（ＣＨ２）ｎＮＲ１０−（ＣＨ２）ｍ（ＣＨＯＲ８）ｎＣＨ２ＮＲ１０−（
Ｚ）ｇ−Ｒ１０である請求項１に記載の化合物。
【請求項４６】
Ｒ５が、−Ｏ−（ＣＨ２）ｍ−ＮＲ１０−（ＣＨ２）ｍ−（ＣＨＯＲ８）ｎＣＨ２ＮＲ１０−（Ｚ）ｇ−Ｒ１０である請求項１に記載の化合物。
【請求項４７】
Ｒ５が、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｍ−ＣＨ２ＣＨ２ＮＲ１２Ｒ１２である請求項１に記載の化合物。
【請求項４８】
Ｒ５が、−Ｏ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｍ−ＣＨ２ＣＨ２ＮＲ１２Ｒ１２である請求項１に記載の化合物。
【請求項４９】
Ｒ５が、−（ＣＨ２）ｎ−（Ｃ＝Ｏ）ＮＲ１２Ｒ１２である請求項１に記載の化合物。
【請求項５０】
Ｒ５が、−Ｏ−（ＣＨ２）ｍ−（Ｃ＝Ｏ）ＮＲ１２Ｒ１２である請求項１に記載の化合物。
【請求項５１】
式：
【化２３】
0004679505.tif 000093
により表される請求項５０に記載の化合物。
【請求項５２】
Ｒ５が、−（Ｈｅｔ）−（ＣＨ２）ｍ−ＯＲ８である請求項１に記載の化合物。
【請求項５３】
Ｒ５が、−（Ｈｅｔ）−（ＣＨ２）ｍ−ＮＲ７Ｒ１０である請求項１に記載の化合物。
【請求項５４】
式：
【化２４】
0004679505.tif 000094
により表される請求項５３に記載の化合物。
【請求項５５】
Ｒ５が、−（Ｈｅｔ）−（ＣＨ２）２−７（ＣＨＯＲ８）（ＣＨＯＲ８）ｎ−ＣＨ２ＯＲ８である請求項１に記載の化合物。
【請求項５６】
Ｒ５が、−（Ｈｅｔ）−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｍ−Ｒ８である請求項１に記載の化合物。
【請求項５７】
Ｒ５が、−（Ｈｅｔ）−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｍ−ＣＨ２ＣＨ２ＮＲ７Ｒ１０である請求項１に記載の化合物。
【請求項５８】
Ｒ５が、−（Ｈｅｔ）−（ＣＨ２）ｍ−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ７Ｒ１０である請求項１に記載の化合物。
【請求項５９】
式：
【化２５】
0004679505.tif 000095
により表される請求項５８に記載の化合物。
【請求項６０】
式：
【化２６】
0004679505.tif 000096
により表される請求項５８に記載の化合物。
【請求項６１】
式：
【化２７】
0004679505.tif 000097
により表される請求項５８に記載の化合物。
【請求項６２】
式：
【化２８】
0004679505.tif 000098
により表される請求項５８に記載の化合物。
【請求項６３】
式：
【化２９】
0004679505.tif 000099
により表される請求項５８に記載の化合物。
【請求項６４】
式：
【化３０】
0004679505.tif 000100
により表される請求項５８に記載の化合物。
【請求項６５】
Ｒ５が、−（Ｈｅｔ）−（ＣＨ２）ｍ−（Ｚ）ｇ−Ｒ７である請求項１に記載の化合物。
【請求項６６】
式：
【化３１】
0004679505.tif 000101
により表される請求項６５に記載の化合物。
【請求項６７】
Ｒ５が、−（Ｈｅｔ）−（ＣＨ２）ｍ−ＮＲ１０−ＣＨ２（ＣＨＯＲ８）（ＣＨＯＲ８）ｎ−ＣＨ２ＯＲ８である請求項１に記載の化合物。
【請求項６８】
式：
【化３２】
0004679505.tif 000102
により表される請求項６７に記載の化合物。
【請求項６９】
式：
【化３３】
0004679505.tif 000103
により表される請求項６７に記載の化合物。
【請求項７０】
式：
【化３４】
0004679505.tif 000104
により表される請求項６７に記載の化合物。
【請求項７１】
式：
【化３５】
0004679505.tif 000105
により表される請求項６７に記載の化合物。
【請求項７２】
Ｒ５が、−（Ｈｅｔ）−（ＣＨ２）ｍ−ＣＯ２Ｒ７である請求項１に記載の化合物。
【請求項７３】
式：
【化３６】
0004679505.tif 000106
により表される請求項７２に記載の化合物。
【請求項７４】
Ｒ５が、−（Ｈｅｔ）−（ＣＨ２）ｍ−ＮＲ１２Ｒ１２である請求項１に記載の化合物。
【請求項７５】
Ｒ５が、−（Ｈｅｔ）−（ＣＨ２）ｎ−ＮＲ１２Ｒ１２である請求項１に記載の化合物。
【請求項７６】
Ｒ５が、−（Ｈｅｔ）−（ＣＨ２）ｍ−（Ｚ）ｇＲ１２である請求項１に記載の化合物。
【請求項７７】
Ｒ５が、−（Ｈｅｔ）−（ＣＨ２）ｍＮＲ１１Ｒ１１である請求項１に記載の化合物。
【請求項７８】
Ｒ５が、−（Ｈｅｔ）−（ＣＨ２）ｍ−Ｎ＋−（Ｒ１１）３である請求項１に記載の化合物。
【請求項７９】
Ｒ５が、−（Ｈｅｔ）−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｍ−ＣＨ２ＣＨ２ＮＲ１２Ｒ１２である請求項１に記載の化合物。
【請求項８０】
Ｒ５が、−（Ｈｅｔ）−（ＣＨ２）ｍ−（Ｃ＝Ｏ）ＮＲ１２Ｒ１２である請求項１に記載の化合物。
【請求項８１】
Ｒ５が、−（Ｈｅｔ）−（ＣＨ２）ｍ−（ＣＨＯＲ８）ｍＣＨ２ＮＲ１０−（Ｚ）ｇ−Ｒ１０である請求項１に記載の化合物。
【請求項８２】
Ｒ５が、−（Ｈｅｔ）−（ＣＨ２）ｍ−ＮＲ１０−（ＣＨ２）ｍ−（ＣＨＯＲ８）ｎＣＨ２ＮＲ１０−（Ｚ）ｇ−Ｒ１０である請求項１に記載の化合物。
【請求項８３】
少なくとも２つの−ＣＨ２ＯＲ８が、互いに隣接して位置し、Ｒ８基は、環式モノ−またはジ−置換１，３−ジオキサンまたは１，３−ジオキソランを形成するために結合されているという条件で、Ｒ５が、−（ＣＨ２）ｎ−（ＣＨＯＲ８）（ＣＨＯＲ８）ｎ−ＣＨ２ＯＲ８である請求項１に記載の化合物。
【請求項８４】
少なくとも２つの−ＣＨ２ＯＲ８が、互いに隣接して位置し、Ｒ８基は、環式モノ−またはジ−置換１，３−ジオキサンまたは１，３−ジオキソランを形成するために結合されているという条件で、Ｒ５が、−（ＣＨ２）ｎ−ＮＲ１０−ＣＨ２（ＣＨＯＲ８）（ＣＨＯＲ８）ｎ−ＣＨ２ＯＲ８である請求項１に記載の化合物。
【請求項８５】
少なくとも２つの−ＣＨ２ＯＲ８が、互いに隣接して位置し、Ｒ８基は、環式モノ−またはジ−置換１，３−ジオキサンまたは１，３−ジオキソランを形成するために結合されているという条件で、Ｒ５が、−Ｏ−（ＣＨ２）ｍ−ＮＲ１０−ＣＨ２（ＣＨＯＲ８）（ＣＨＯＲ８）ｎ−ＣＨ２ＯＲ８である請求項１に記載の化合物。
【請求項８６】
少なくとも２つの−ＣＨ２ＯＲ８が、互いに隣接して位置し、Ｒ８基は、環式モノ−またはジ−置換１，３−ジオキサンまたは１，３−ジオキソランを形成するために結合されているという条件で、Ｒ５が、−Ｏ−（ＣＨ２）ｍ（ＣＨＯＲ８）（ＣＨＯＲ８）ｎ−ＣＨ２ＯＲ８である請求項１に記載の化合物。
【請求項８７】
式：
【化３７】
0004679505.tif 000107
により表される請求項１に記載の化合物。
【請求項８８】
式：
【化３８】
0004679505.tif 000108
により表される請求項１に記載の化合物。
【請求項８９】
式：
【化３９】
0004679505.tif 000109
により表される請求項１に記載の化合物。
【請求項９０】
式：
【化４０】
0004679505.tif 000110
により表される請求項１に記載の化合物。
【請求項９１】
式：
【化４１】
0004679505.tif 000111
により表される請求項１に記載の化合物。
【請求項９２】
式：
【化４２】
0004679505.tif 000112
により表される請求項１に記載の化合物。
【請求項９３】
Ｒ５が、−（Ｈｅｔ）−（ＣＨ２）ｍ−（Ｚ）ｇ−（ＣＨ２）ｍ−ＮＲ１０Ｒ１０である請求項１に記載の化合物。
【請求項９４】
請求項１〜９３のいずれか一項に記載の化合物および薬学的に許容できる担体を含む医薬組成物。
【請求項９５】
請求項１〜９３のいずれか一項に記載の化合物およびＰ２Ｙ２受容体アゴニストを含む医薬組成物。
【請求項９６】
請求項１〜９３のいずれか一項に記載の化合物、およびエピネフリン、イソプロテレノール、フェノテロール、アルブテレオール、テルブタリン、ピルブテロール、ビトルテロール、メタプロテレノール、イオセタリン、キシナホ酸サルメテロール、臭化イプラトロピウム、テオフィリンおよびアミノフィリンからなる群から選択される気管支拡張剤を含む医薬組成物。
【請求項９７】
請求項１〜９３のいずれか一項に記載の化合物の有効量を含む、粘膜防御を回復させる必要のある対象において粘膜防御を回復させるための組成物であって、該対象の粘膜表面に局所投与されることを特徴とする、組成物。
【請求項９８】
請求項１〜９３のいずれか一項に記載の化合物の有効量を含む、ナトリウムチャネルを遮断するための組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ナトリウムチャネル遮断薬に関する。本発明はまた、これら本発明のナトリウムチャネル遮断薬を用いる種々の治療方法を含む。
【背景技術】
【０００２】
環境と身体との間の境界面における粘膜表面は、多くの「生得的防御」、すなわち、防御機構を導き出している。このような生得的防御の主要形態は、液体によりこれらの表面を清浄にすることである。典型的には、粘膜表面の液体層の量は、上皮液体分泌間のバランスを反映しており、水(およびカチオンカウンターイオン)と結合したアニオン(Cl-および/またはHCO3-)分泌を反映していることが多く、上皮液体吸収は、水およびカウンターアニオン(Cl-および/またはHCO3-)とで結合したNa+吸収を反映していることが多い。粘膜表面の多くの疾患は、分泌(少なすぎる)と吸収(相対的に多すぎる)との間の不均衡により生じるこれらの粘膜表面の保護的液体が少なすぎることによって引き起される。これらの粘膜機能不全を特徴とする不完全な塩輸送過程が、粘膜表面の上皮層に存在する。
【０００３】
粘膜表面の保護的液体層を補給する1つの方法は、Na+チャネルおよび液体吸収を遮断することによりその系を再均衡化させることである。Na+および液体吸収の律速段階を媒介する上皮蛋白質は、上皮Na+チャネル(ENaC)である。ENaCは、上皮の先端表面、すなわち、粘膜表面-環境境界面に配置されている。したがって、ENaCに媒介されたNa+および液体吸収を阻止するために、アミロライドクラス(ENaCの細胞外ドメインから遮断する)の ENaC遮断薬が、粘膜表面に送達されなければならず、この部位で維持されて治療上の有用性を達成する必要がある点が重要である。本発明は、粘膜表面上の液体が少なすぎることを特徴とする疾患、およびこれらの疾患の治療に必要な効力増強、粘膜吸収の減少、ENaCからの緩徐な解離(「遊離」または脱離)を示すようにデザインされた「局所的」ナトリウムチャネル遮断薬を記載する。
【０００４】
慢性気管支炎、嚢胞性線維症(CF)の最もよく見られる致命的な遺伝的形態を含む慢性気管支炎(CB)は、通常は、肺からの粘液を清浄化する身体的機能不全を反映する疾患であり、最終的には慢性的気道感染を引き起す。正常な肺においては、慢性的肺内気道感染(慢性気管支炎)に対する主要な防御は、気管支気道表面からの粘液の連続的クリアランスにより媒介される。健康状態においてはこの機能により、潜在的に有害な毒素および病原体は効果的に肺から除去される。最近のデータは、CBおよびCFの双方における初期問題、すなわち「基本的欠損」は、気道表面からの粘液清浄化の機能不全であることを示している。粘液清浄化の機能不全は、気道表面の液体量とムチン量との間の不均衡を反映している。この「気道表面の液体」(ASL)は、血漿(すなわち、等張性)と同様の比率の塩と水から主として構成されている。ムチン高分子類は、吸入された細菌を通常は捕捉し、「絨毛周囲の液体」(PCL)と呼ばれる水様の低粘性溶液中にたたき出す絨毛作用を経て肺から輸送される、十分に規定された「粘液層」に組織化される。疾患状態においては、気道表面のASLとしての粘液量における不均衡がある。このことは、粘液濃度となるASLにおける相対的減少、PCLの潤滑活性減少、絨毛活性による粘液の口腔への清浄化機能不全をもたらす。肺からの粘液の機械的クリアランスにおける減少により、気道表面に接着した粘液の慢性的細菌コロニー化に至る。これは、細菌の慢性的保持であり、局所的抗菌物質が慢性的基盤上の粘液捕捉細菌を殺す機能の不全であり、その結果、このタイプの表面感染に対する身体の慢性的炎症反応であり、CBおよびCFの症候群へと至る。
【０００５】
現在、米国における罹患人口は、1200万人の患者が慢性気管支炎の獲得形態(主としてタバコ煙曝露から)を有し、ほぼ3万人の患者が遺伝的形態の嚢胞性線維症を有する。ほぼ等しい数の双方の人口がヨーロッパに存在する。アジアにおいては、CFは小数ではあるが、CBの発生率が高く、世界の他の地域と同様に増加しつつある。
【０００６】
これらの疾患を引き起す基本的障害のレベルで現在、CBおよびCFを特異的に治療する製品に関する医療的上の必要性が大きいが、未だかなえられていない。慢性気管支炎および嚢胞性線維症に関する現在の療法は、これらの疾患の症状および/または後期作用を治療することに焦点を当てている。したがって、慢性気管支炎に関しては、β-アゴニスト類、吸入ステロイド類、抗コリン作動薬、経口テオフィリンおよびホスホジエステラーゼ阻害剤が開発されたすべてである。しかしながら、これらの薬物は、肺からの粘液清浄化機能不全の基本的問題を有効に治療していない。同様に、嚢胞性線維症においても、同じ薬理的薬剤のスペクトルが用いられている。これらの方策は、接着粘液塊において増殖する細菌を殺そうとして不首尾に終わった好中球により肺内に付着したDNAのCF肺を清浄化するためにデザインされたごく最近の方策(「Pulmozyme」;Genentech)により、また細菌の接着粘液プラークを除去するために肺自体のキリング機構を増強するためにデザインされた吸入抗生物質(「TOBI」)の使用により補足されている。身体の一般的原理として、初期病巣が治療されなければ、この場合、粘液保持/障害、細菌感染が慢性的になり、抗微生物療法に対する治療抵抗性が増してくる。したがって、CBおよびCF双方の肺疾患に対して未だかなえらえていない療法上の大きな必要性は、気道粘液の再水分補給(すなわち、ASL容量の回復/拡大)および肺から細菌のクリアランスを促進するための有効な手段である。
【０００７】
米国特許第6,264,975号においてR.C.Boucherは、粘膜表面に水分補給するためのピラジノイルグアニジンナトリウムチャネル遮断薬の使用を記載している。よく知られている利尿剤アミロライド、ベンザミル、およびフェナミルにより代表されるこれらの化合物は、有効である。しかしながら、これらの化合物は、(1)比較的効力が低い(肺に吸入できる薬物量が限定されていることから、これは重要なことである);(2)急速に吸収される(粘膜表面上の薬物半減期を限定する);(3)ENaCから自由に解離する、という重大な不利益をこうむる。これらのよく知られた利尿剤において具体化されたこれらの不利益のすべてが合わさって、効力および/または粘膜表面の水分補給に関して治療的利益を有するための粘膜表面上の有効半減期が不十分な化合物となる。
【特許文献１】米国特許第6,264,975号
【特許文献２】米国特許第5,656,256号
【特許文献３】米国特許第5,292,498号
【特許文献４】米国特許第5,789,391号
【特許文献５】米国特許第5,740,794号
【特許文献６】米国特許第5,654,007号
【特許文献７】米国特許第5,458,135号
【特許文献８】米国特許第5,775,320号
【特許文献９】米国特許第5,785,049号
【特許文献１０】米国特許第5,622,166号
【特許文献１１】米国特許第5,577,497号
【特許文献１２】米国特許第5,645,051号
【特許文献１３】米国特許第5,492,112号
【特許文献１４】米国特許第5,826,570号
【特許文献１５】米国特許第5,813,397号
【特許文献１６】米国特許第5,819,726号
【特許文献１７】米国特許第5,655,516号
【特許文献１８】米国特許第4,501,729号
【特許文献１９】米国特許第4,389,393号
【特許文献２０】米国特許第5,707,644号
【特許文献２１】米国特許第4,294,829号
【特許文献２２】米国特許第4,835,142号
【特許文献２３】米国特許第3,313,813号
【非特許文献１】Remington:The Science and Practice of Pharmacy、86章(第19版1995年)におけるJ.Nairn、Solutions,Emulsions,Suspensions and Extracts
【非特許文献２】E.J.Cragoe、Amiloride and Its Analogsにおける25〜36頁「The Synthesis of Amiloride and Its Analogs」(3章)
【非特許文献３】Sabaterら、Journal of Applied Physiology、1999年、2191〜2196頁
【非特許文献４】Rappoport,D.A.;Hassid,Z.;J.Amer.Chem.Soc.、1951年、73、5524〜5525頁
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
必要とされるものは、CB/CF患者の肺からの粘液クリアランスを回復させる点で有効な薬物であることは明らかである。これらの新規療法の価値は、CBおよびCF双方の集団に関して生活の質および生活期間における改善に反映されるであろう。
【０００９】
身体内および身体上の他の粘膜表面は、それらの表面上の保護的表面液体の通常の生理機能においてわずかな違いを示すが、疾患の病態生理学は、共通の主題、すなわち保護的表面液体が少なすぎることを反映している。例えば、口内乾燥症(乾燥口腔)においては、口腔からの連続的Na+(ENaC)輸送媒介液体吸収にもかかわらず、液体を分泌する耳下腺舌下腺および顎下腺の機能不全により口腔の液体が枯渇する。同様に、乾性角結膜炎(ドライアイ)は、結合表面上の連続的Na+依存液体吸収にもかかわらず液体を分泌する涙腺の機能不全により引き起される。鼻副鼻腔炎においては、CBでのようにムチン分泌と相対的ASL枯渇との間に不均衡がある。最後に、胃腸管において、末端回腸におけるNa+(および液体)吸収増加と合わせて近位小腸におけるCl-(および液体)の分泌不全は、遠位腸閉塞症候群(DIOS)に至る。高齢の患者においては、下行結腸における過剰のNa+(および容量)吸収は、便秘および憩室炎を引き起す。
【００１０】
5千万人のアメリカ人および世界中で他の地域の数億人の人々が、高血圧を患っており、それに引き続く結果として、うっ血性心不全となり、死亡率の増加に至る。これは、西欧世界の筆頭キラー因子であり、これらの疾患を治療するための新規な医薬品が必要である。したがって、さらに、本発明の幾つかの新規なナトリウムチャネル遮断薬は、腎臓を標的にしてデザインでき、このように高血圧、うっ血性心不全(CHF)および他の心血管疾患の治療用利尿剤として使用できる。これらの新規な薬剤は、単独でまたはベータ-遮断薬、ACE阻害剤、HMGCoAレダクターゼ阻害剤、カルシウムチャネル遮断薬および他の心血管剤と併用して使用できる。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
知られた化合物と比較して、より効力があり、および/または粘膜表面からの吸収がより遅く、および/または可逆性が低い化合物を提供することが本発明の目的である。
【００１２】
アミロルデ、ベンザミル、およびフェナミルなどの化合物と比較して、より効力があり、および/または吸収がより遅く、および/または低い可逆性を示す化合物を提供することが本発明の他の態様である。したがって、前記化合物は、知られた化合物と比較して、粘膜表面上の薬力学的半減期延長を提供する。
【００１３】
(1)知られた化合物と比較して、粘膜表面、特に気道表面からの吸収がより遅く;(2)粘膜表面に投与された後、粘膜表面から吸収された際に投与された親化合物と比較して、ナトリウムチャネルを遮断する有効性が減じたその代謝誘導体にインビボ変換される、化合物を提供することが本発明の他の目的である。
【００１４】
アミロライド、ベンザミル、およびフェナミルなどの化合物と比較して、より効力があり、かつ/または吸収がより遅く、および/または低い可逆性を示す化合物を提供することが本発明の他の目的である。したがって、このような化合物は、前記化合物と比較して、粘膜表面上の薬力学的半減期延長を提供する。
【００１５】
心血管疾患の治療に使用のため、腎臓を標的とする化合物を提供することが本発明の他の目的である。
【００１６】
上記化合物の薬理学的性質を利用するための治療方法を提供することが本発明の他の目的である。
【００１７】
特に、粘膜表面の再水分補給に頼る治療法を提供することが本発明の目的である。
【００１８】
特に、心血管疾患を治療する方法を提供することが本発明の目的である。
【００１９】
本発明の目的は、式(I):
【００２０】
【化１】
0004679505.tif 000002
【００２１】
によって表されるピラジノイルグアニジン化合物のクラスであって、
式中
Xは、水素、ハロゲン、トリフルオロメチル、低級アルキル、非置換または置換フェニル、低級アルキル-チオ、フェニル-低級アルキル-チオ、低級アルキル-スルホニル、またはフェニル-低級アルキル-スルホニルであり;
Yは、水素、ヒドロキシル、メルカプト、低級アルコキシ、低級アルキル-チオ、ハロゲン、低級アルキル、非置換または置換単核アリール、または-N(R2)2であり;
R1は、水素または低級アルキルであり;
R2の各々は独立して、-R7、-(CH2)m-OR8、-(CH2)m-NR7R10、-(CH2)n(CHOR8)(CHOR8)n-CH2OR8、-(CH2CH2O)m-R8、-(CH2CH2O)m-CH2CH2NR7R10、-(CH2)n-C(=O)NR7R10、-(CH2)n-Zg-R7、-(CH2)m-NR10-CH2(CHOR8)(CHOR8)n-CH2OR8、-(CH2)n-CO2R7、または
【００２２】
【化２】
0004679505.tif 000003
【００２３】
式中、2つの-CH2OR8基が、互いに関して1,2-位または1,3-位にある場合、R8基は、環式モノ-またはジ-置換1,3-ジオキサンまたは1,3-ジオキソランを形成するために結合されていてもよく;
R3およびR4は、各々独立して、水素、式(A)によって表される基、低級アルキル、ヒドロキシ低級アルキル、フェニル、フェニル-低級アルキル、(ハロフェニル)-低級アルキル、低級-(アルキルフェニルアルキル)、低級(アルコキシフェニル)-低級アルキル、ナフチル-低級アルキル、またはピリジル-低級アルキルであり、ただし、R3およびR4の少なくとも1つは、式(A):
【００２４】
【化３】
0004679505.tif 000004
【００２５】
によって表される基であるという条件であり、
式中
RLの各々は、独立して-R7、-(CH2)n-OR8、-O-(CH2)m-OR8、-(CH2)n-NR7R10、-O-(CH2)m-NR7R10、-(CH2)n(CHOR8)(CHOR8)n-CH2OR8、-O-(CH2)m(CHOR8)(CHOR8)n-CH2OR8、-(CH2CH2O)m-R8、-O-(CH2CH2O)m-R8、-(CH2CH2O)m-CH2CH2NR7R10、-O-(CH2CH2O)m-CH2CH2NR7R10、-(CH2)n-C(=O)NR7R10、-O-(CH2)m-C(=O)NR7R10、-(CH2)n-(Z)g-R7、-O-(CH2)m-(Z)g-R7、-(CH2)n-NR10-CH2(CHOR8)(CHOR8)n-CH2OR8、-O-(CH2)m-NR10-CH2(CHOR8)(CHOR8)n-CH2OR8、-(CH2)n-CO2R7、-O-(CH2)m-CO2R7、-OSO3H、-O-グルクロニド、-O-グルコース、
【００２６】
【化４】
0004679505.tif 000005
【００２７】
であり、
式中、2つの-CH2OR8基が、互いに関して1,2-位または1,3-位にある場合、R8基は、環式モノ-またはジ-置換1,3-ジオキサンまたは1,3-ジオキソランを形成するために結合されていてもよく;
各連続鎖におけるoおよびpの合計が、1から10であるという条件で、
oの各々は、独立して0から10の整数であり;
pの各々は、0から10の整数であり;
xの各々は、独立してO、NR10、C(=O)、CHOH、C(=N-R10)、CHR7R10であるか、または単結合を表し;
R5の各々は、独立して-(CH2)n-NR12R12、-O-(CH2)m-NR12R12、-O-(CH2)n-NR12R12、-O-(CH2)m-(Z)gR12、-(CH2)n-NR11R11、-O-(CH2)m-NR11R11、-(CH2)n-N+-(R11)3、-O-(CH2)m-N+-(R11)3、-(CH2)n-(Z)g-(CH2)m-NR10R10、-O-(CH2)m-(Z)g-(CH2)m-NR10R10、-(CH2CH2O)m-CH2CH2NR12R12、-O-(CH2CH2O)m-CH2CH2NR12R12、-(CH2)n-C(=O)NR12R12、-O-(CH2)m-C(=O)NR12R12、-O-(CH2)m-(CHOR8)mCH2NR10-(Z)g-R10、-(CH2)n-(CHOR8)mCH2-NR10-(Z)g-R10、-(CH2)nNR10-O(CH2)m(CHOR8)nCH2NR10-(Z)g-R10、-O(CH2)mNR10-(CH2)m-(CHOR8)nCH2NR10-(Z)g-R10、-(Het)-(CH2)mOR8、-(Het)-(CH2)m-NR7R10、-(Het)-(CH2)m(CHOR8)(CHOR8)n-CH2OR8、-(Het)-(CH2CH2O)m-R8、-(Het)-(CH2CH2O)m-CH2CH2NR7R10、-(Het)-(CH2)m-C(=O)NR7R10、-(Het)-(CH2)m-(Z)g-R7、-(Het)-(CH2)m-NR10-CH2(CHOR8)(CHOR8)n-CH2OR8、-(Het)-(CH2)m-CO2R7、-(Het)-(CH2)m-NR12R12、-(Het)-(CH2)n-NR12R12、-(Het)-(CH2)m-(Z)gR12、-(Het)-(CH2)mNR11R11、-(Het)-(CH2)m-N+-(R11)3、-(Het)-(CH2)m-(Z)g-(CH2)m-NR10R10、-(Het)-(CH2CH2O)m-CH2CH2NR12R12、-(Het)-(CH2)m-(C=O)NR12R12、-(Het)-(CH2)m-(CHOR8)mCH2NR10-(Z)g-R10、-(Het)-(CH2)m-NR10-(CH2)m-(CHOR8)nCH2NR10-(Z)g-R10であり、式中、2つの-CH2OR8基が、互いに関連して1,2-位置または1,3-位置にある場合、R8基は、環式モノ-またはジ-置換1,3-ジオキサンまたは1,3-ジオキソランを形成するために結合されていてもよく、
2つの-CH2OR8基が、互いに関して1,2-位または1,3-位位置し、R8基は、環式モノ-またはジ-置換1,3-ジオキサンまたは1,3-ジオキソランを形成するために結合されているという条件で-(CH2)n-(CHOR8)(CHOR8)n-CH2OR8であり、
2つの-CH2OR8基が、互いに関して1,2-位または1,3-位位置し、R8基は、環式モノ-またはジ-置換1,3-ジオキサンまたは1,3-ジオキソランを形成するために結合されているという条件で-O-(CH2)m(CHOR8)(CHOR8)n-CH2OR8であり、
2つの-CH2OR8基が、互いに関して1,2-位または1,3-位位置し、R8基は、環式モノ-またはジ-置換1,3-ジオキサンまたは1,3-ジオキソランを形成するために結合されているという条件で-(CH2)n-NR10-CH2(CHOR8)(CHOR8)n-CH2OR8であり、または
2つの-CH2OR8基が、互いに関して1,2-位または1,3-位位置し、R8基は、環式モノ-またはジ-置換1,3-ジオキサンまたは1,3-ジオキソランを形成するために結合されているという条件で-O-(CH2)m-NR10-CH2(CHOR8)(CHOR8)n-CH2OR8であり、
R6の各々は、独立して-R5、-R7、-OR8、-N(R7)2、-(CH2)m-OR8、-O-(CH2)m-OR8、-(CH2)n-NR7R10、-O-(CH2)m-NR7R10、-(CH2)n(CHOR8)(CHOR8)n-CH2OR8、-O-(CH2)m(CHOR8)(CHOR8)n-CH2OR8、-(CH2CH2O)m-R8、-O-(CH2CH2O)m-R8、-(CH2CH2O)m-CH2CH2NR7R10、-O-(CH2CH2O)m-CH2CH2NR7R10、-(CH2)n-C(=O)NR7R10、-O-(CH2)m-C(=O)NR7R10、-(CH2)n-(Z)g-R7、-O-(CH2)m-(Z)g-R7、-(CH2)n-NR10-CH2(CHOR8)(CHOR8)n-CH2OR8、-O-(CH2)m-NR10-CH2(CHOR8)(CHOR8)n-CH2OR8、-(CH2)n-CO2R7、-O-(CH2)m-CO2R7、-OSO3H、-O-グルクロニド、-O-グルコース、
【００２８】
【化５】
0004679505.tif 000006
【００２９】
であり、
式中、2つのR6は、-OR11であり、またフェニル環上に互いに隣接して位置する場合、2つのR6のアルキル部分は、メチレンジオキシ基を形成するために共に結合されていてもよく、
式中、2つの-CH2OR8基が、互いに関して1,2-位または1,3-位にある場合、R8基は、環式モノ-またはジ-置換1,3-ジオキサンまたは1,3-ジオキソランを形成するために結合されていてもよく;
R7の各々は、独立して水素または低級アルキルであり;
R8の各々は、独立して水素、低級アルキル、-(C=O)-R11、グルクロニド、2-テトラヒドロピラニル、または
【００３０】
【化６】
0004679505.tif 000007
【００３１】
であり、
R9の各々は、独立して-CO2R7、-CON(R7)2、-SO2CH3、または-C(=O)R7であり;
R10の各々は、独立して-H、-SO2CH3、-CO2R7、-C(=O)NR7R9、-C(=O)R7、または-CH2-(CHOH)n-CH2OHであり;
Zの各々は、独立してCHOH、C(=O)、CHNR7R10、C=NR10、またはNR10であり;
R11の各々は、独立して低級アルキルであり;
R12の各々は、独立して-SO2CH3、-CO2R7、-C(=O)NR7R9、-C(=O)R7、または-CH2-(CHOH)n-CH2OHであり;
Hetの各々は、独立して-NR7、-NR10、-S-、-SO-、または-SO2-であり;
gの各々は、独立して1から6の整数であり;
mの各々は、独立して1から7の整数であり;
nの各々は、独立して0から7の整数であり;
Qの各々は、独立してC-R5、C-R6、または窒素原子であり、環内において多くて3つのQが窒素原子である化合物;
または、薬学的に許容できるその塩およびすべての鏡像異性体、ジアステレオマー、そのラセミ混合物を含めた化合物によって達成できる。
【００３２】
本発明はまた、上記の化合物を含有する医薬組成物を提供する。
【００３３】
本発明はまた、
式(I)によって表される化合物の有効量を、対象の粘膜表面に投与することを含んでなる、粘膜表面の水分補給を促進する方法を提供する。
【００３４】
本発明はまた、
式(I)によって表される化合物の有効量を、それを必要とする対象の粘膜面に局所投与することを含んでなる、粘膜防御を回復する方法を提供する。
【００３５】
本発明はまた、
ナトリウムチャネルを式(I)によって表される化合物の有効量と接触させることを含むENaCを遮断する方法を提供する。
【００３６】
本発明はまた、
式(I)によって表される化合物の有効量を、対象の粘膜表面に投与することを含んでなる、粘膜表面における粘液クリアランスを促進する方法を提供する。
【００３７】
本発明はまた、
式(I)によって表される化合物の有効量を、それを必要とする対象に投与することを含んでなる、慢性気管支炎を治療する方法を提供する。
【００３８】
本発明はまた、
式(I)によって表される化合物の有効量を、それを必要とする対象に投与することを含んでなる、嚢胞性線維症を治療する方法を提供する。
【００３９】
本発明はまた、
式(I)によって表される化合物の有効量を、それを必要とする対象に投与することを含んでなる、鼻副鼻腔炎を治療する方法を提供する。
【００４０】
本発明はまた、
式(I)によって表される化合物の有効量を、それを必要とする対象の鼻腔通路に投与することを含んでなる、鼻腔乾燥を治療する方法を提供する。
【００４１】
より具体的な実施形態において、前記鼻腔乾燥は、乾燥酸素を対象に投与することことにより引き起される。
【００４２】
本発明はまた、
式(I)によって表される化合物の有効量を、それを必要とする対象に投与することを含んでなる、静脈洞炎を治療する方法を提供する。
【００４３】
本発明はまた、
式(I)によって表される化合物の有効量を、それを必要とする対象に投与することを含んでなる、肺炎を治療する方法を提供する。
【００４４】
本発明はまた、
式(I)によって表される有効な化合物を、人工呼吸器を用いて対象に投与することを含んでなる、人工呼吸器誘導肺炎を予防する方法を提供する。
【００４５】
本発明はまた、
式(I)によって表される化合物の有効量を、それを必要とする対象に投与することを含んでなる、喘息を治療する方法を提供する。
【００４６】
本発明はまた、
式(I)によって表される化合物の有効量を、それを必要とする対象に投与することを含んでなる、原発性絨毛運動障害を治療する方法を提供する。
【００４７】
本発明はまた、
式(I)によって表される化合物の有効量を、それを必要とする対象に投与することを含んでなる、中耳炎を治療する方法を提供する。
【００４８】
本発明はまた、
式(I)によって表される化合物の有効量を、それを必要とする対象に投与することを含んでなる、診断目的用痰を誘導する方法を提供する。
【００４９】
本発明はまた、
式(I)によって表される化合物の有効量を、それを必要とする対象に投与することを含んでなる、慢性閉塞性肺疾患を治療する方法を提供する。
【００５０】
本発明はまた、
式(I)によって表される化合物の有効量を、それを必要とする対象に投与することを含んでなる、肺気腫を治療する方法を提供する。
【００５１】
本発明はまた、
式(I)によって表される化合物の有効量を、それを必要とする対象に投与することを含んでなる、ドライアイを治療する方法を提供する。
【００５２】
本発明はまた、
式(I)によって表される化合物の有効量を、対象の眼に投与することを含んでなる、眼の水分補給を促進する方法を提供する。
【００５３】
本発明はまた、
式(I)によって表される化合物の有効量を、対象の眼に投与することを含んでなる、角膜の水分補給を促進する方法を提供する。
【００５４】
本発明はまた、
式(I)によって表される化合物の有効量を、それを必要とする対象に投与することを含んでなる、シェーグレン疾患を治療する方法を提供する。
【００５５】
本発明はまた、
式(I)によって表される化合物の有効量を、それを必要とする対象の膣路に投与することを含んでなる、膣乾燥を治療する方法を提供する。
【００５６】
本発明はまた、
式(I)によって表される化合物の有効量を、それを必要とする対象の皮膚に投与することを含んでなる、乾燥皮膚を治療する方法を提供する。
【００５７】
本発明はまた、
式(I)によって表される化合物の有効量を、それを必要とする対象の口腔に投与することを含んでなる、乾燥口腔(口内乾燥症)を治療する方法を提供する。
【００５８】
本発明はまた、
式(I)によって表される化合物の有効量を、それを必要とする対象に投与することを含んでなる、遠位腸閉塞症候群を治療する方法を提供する。
【００５９】
本発明はまた、
式(I)によって表される化合物の有効量を、それを必要とする対象に投与することを含んでなる、食道炎を治療する方法を提供する。
【００６０】
本発明はまた、
式(I)によって表される化合物の有効量を、それを必要とする対象に投与することを含んでなる、便秘を治療する方法を提供する。この方法の一実施形態において、前記化合物は、経口または坐薬もしくは浣腸により投与される。
【００６１】
本発明はまた、
式(I)によって表される化合物の有効量を、それを必要とする対象に投与することを含んでなる、慢性憩室炎を治療する方法を提供する。
【００６２】
本発明はまた、
式(I)によって表される化合物を、それを必要とする対象に投与することを含んでなる、高血圧を治療する方法を提供する。
【００６３】
本発明はまた、
式(I)によって表される化合物を、それを必要とする対象に投与することを含んでなる、血圧を低下させる方法を提供する。
【００６４】
本発明はまた、
式(I)によって表される化合物を、それを必要とする対象に投与することを含んでなる、浮腫を治療する方法を提供する。
【００６５】
本発明はまた、
式(I)によって表される化合物を、それを必要とする対象に投与することを含んでなる、利尿を促進する方法を提供する。
【００６６】
本発明はまた、
式(I)によって表される化合物を、それを必要とする対象に投与することを含んでなる、ナトリウム利尿を促進する方法を提供する。
【００６７】
本発明はまた、
式(I)によって表される化合物を、それを必要とする対象に投与することを含んでなる、塩排泄を促進する方法を提供する。
【００６８】
以下の詳細な説明を参照することにより、本発明のより完全な認識およびそれに付随する多くの利点が容易に得られであろうし、同じことがより良く理解される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００６９】
本発明は、アミロライド、ベンザミル、およびフェナミルなどの化合物と比較して、式(I)の化合物が、より効力があり、および/または粘膜表面、特に気道表面からの吸収がより遅く、および/またはENaCとの相互作用の低い可逆性を示すという発見に基づいている。したがって、式(I)の化合物は、これらの化合物と比較して、粘膜表面上により長い半減期を有する。本発明はまた、式(I)によって包含されたある一定の化合物が、投与後、粘膜表面から吸収された後、投与された親化合物と比較して、ナトリウムチャネルを遮断する有効性が減じたその代謝誘導体にインビボ変換されるという発見に基づいている。この重要な性質は、前記化合物が、レシピエントの身体、例えば腎臓において標的とされない位置に配置されているナトリウムチャネルを遮断することにより望ましくない副作用を引き起す傾向をより低下させることを意味する。
【００７０】
本発明はまた、式(I)によって包含されたある一定の化合物が、腎臓を標的とし、したがって心血管剤として使用できるという発見に基づいている。
【００７１】
式(I)によって表される化合物において、Xは、水素、ハロゲン、トリフルオロメチル、低級アルキル、低級シクロアルキル、非置換または置換フェニル、低級アルキル-チオ、フェニル-低級アルキル-チオ、低級アルキル-スルホニル、またはフェニル-低級アルキル-スルホニルであり得る。ハロゲンが好ましい。
【００７２】
ハロゲンの例としては、フッ素、塩素、臭素、およびヨウ素が挙げられる。塩素および臭素は好ましいハロゲンである。塩素が特に好ましい。この記載は、本開示を通して用いられる用語の「ハロゲン」に適用可能である。
【００７３】
本明細書に用いられる用語の「低級アルキル」とは、8個未満の炭素原子を有するアルキル基を意味する。この範囲は、1個、2個、3個、4個、5個、6個、および7個の炭素原子などの炭素原子およびその間の部分範囲すべての具体的な値を含む。用語のアルキル基は、すべてのタイプのこのような基、例えば、直鎖、分枝状、および環式アルキル基を含む。この記載は、本開示を通して用いられる用語の「低級アルキル」に適用可能である。好適な低級アルキル基の例としては、メチル、エチル、プロピル、シクロプロピル、ブチル、イソブチルなどが挙げられる。
【００７４】
フェニル基に関する置換基は、ハロゲン類を含む。特に好ましいハロゲン置換基は塩素および臭素である。
【００７５】
Yは、水素、ヒドロキシル、メルカプト、低級アルコキシ、低級アルキル-チオ、ハロゲン、低級アルキル、低級シクロアルキル、単核アリール、または-N(R2)2であり得る。低級アルコキシ基のアルキル部分は、上記と同じものである。単核アリールの例としては、フェニル基が挙げられる。フェニル基は、上記のとおり非置換であっても、または置換されていてもよい。Yの好ましい正体は-N(R2)2である。R2の各々が、水素であるような化合物が特に好ましい。
【００７６】
R1は、水素または低級アルキルであり得る。R1にとって、水素が好ましい。
【００７７】
R2の各々は独立して、-R7、-(CH2)m-OR8、-(CH2)m-NR7R10、-(CH2)n(CHOR8)(CHOR8)n-CH2OR8、-(CH2CH2O)m-R8、-(CH2CH2O)m-CH2CH2NR7R10、-(CH2)n-C(=O)NR7R10、-(CH2)n-Zg-R7、-(CH2)m-NR10-CH2(CHOR8)(CHOR8)n-CH2OR8、-(CH2)n-CO2R7、または
【００７８】
【化７】
0004679505.tif 000008
【００７９】
であり得る。
【００８０】
上記のR2の定義において、式中、2つの-CH2OR8基が、互いに関して1,2-位または1,3-位にある場合、R8基は、環式モノ-またはジ-置換1,3-ジオキサンまたは1,3-ジオキソランを形成するために結合されていてもよい。
【００８１】
R2にとって、水素および低級アルキル、特にC1〜C3アルキルが好ましい。水素が特に好ましい。
【００８２】
R3およびR4の少なくとも1つは、式(A)により表される基であるという条件で、R3およびR4は、独立して、水素、式(A)によって表される基、低級アルキル、ヒドロキシ低級アルキル、フェニル、フェニル-低級アルキル、(ハロフェニル)-低級アルキル、低級-(アルキルフェニルアルキル)、低級(アルコキシフェニル)-低級アルキル、ナフチル-低級アルキル、またはピリジル-低級アルキルであり得る。
【００８３】
好ましい化合物は、R3およびR4の1つが水素であり、他は、式(A)によって表されるものである。
【００８４】
式(A)において、部分-(C(RL)2)o-x-(C(RL)2)p-は、芳香族環に結合したアルキレン基を定義する。鎖内のoおよびpの合計が1から10であるという条件で、変数oおよびpの各々は、0から10の整数であり得る。したがって、oおよびpの各々は、0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、または10であり得る。好ましくは、oおよびpの合計は2から6である。特に好ましい実施形態において、oおよびpの合計は4である。
【００８５】
アルキレン鎖における結合基、xは、独立してO、NR10、C(=O)、CHOH、C(=N-R10)、CHNR7R10であり得るか、または単結合を表す;
【００８６】
したがって、xが単結合を表す場合、環に結合されたアルキレン鎖は、o+pの合計が1から10である式-(C(RL)2)o+p-によって表される。
【００８７】
RLの各々は、独立して-R7、-(CH2)n-OR8、-O-(CH2)m-OR8、-(CH2)n-NR7R10、-O-(CH2)m-NR7R10、-(CH2)n(CHOR8)(CHOR8)n-CH2OR8、-O-(CH2)m(CHOR8)(CHOR8)n-CH2OR8、-(CH2CH2O)m-R8、-O-(CH2CH2O)m-R8、-(CH2CH2O)m-CH2CH2NR7R10、-O-(CH2CH2O)m-CH2CH2NR7R10、-(CH2)n-C(=O)NR7R10、-O-(CH2)m-C(=O)NR7R10、-(CH2)n-(Z)g-R7、-O-(CH2)m-(Z)g-R7、-(CH2)n-NR10-CH2(CHOR8)(CHOR8)n-CH2OR8、-O-(CH2)m-NR10-CH2(CHOR8)(CHOR8)n-CH2OR8、-(CH2)n-CO2R7、-O-(CH2)m-CO2R7、-OSO3H、-O-グルクロニド、-O-グルコース、
【００８８】
【化８】
0004679505.tif 000009
【００８９】
である。
【００９０】
上記RLの定義において、2つの-CH2OR8基が、互いに関して1,2-位または1,3-位にある場合、R8基は、環式モノ-またはジ-置換1,3-ジオキサンまたは1,3-ジオキソランを形成するために結合されていてもよい。
【００９１】
好ましいRL基としては、-H、-OH、特にR7の各々が水素である-N(R7)2が挙げられる。
【００９２】
式(A)におけるアルキレン鎖において、炭素原子に結合した1つの RL基が、水素以外のものである場合、その炭素原子に結合した他のRLは、水素、すなわち、式-CHRL-であることが好ましい。また、アルキレン鎖における多くて2つの RL基が、水素以外のものであり、ここで前記鎖における他のRL基は水素であるであることが好ましい。アルキレン鎖における1つだけのRL基が、水素以外のものであり、ここで前記鎖における他のRL基は水素であることがさらにより好ましい。これらの実施形態において、xが単結合を表すことが好ましい。
【００９３】
本発明の他の特定の実施形態において、アルキレン鎖におけるRL基のすべてが水素である。これらの実施形態において、アルキレン鎖は、式-(CH2)o-x-(CH2)p-により表される。
【００９４】
R5の各々は、独立して-(CH2)n-NR12R12、-O-(CH2)m-NR12R12、-O-(CH2)n-NR12R12、-O-(CH2)m-(Z)gR12、-(CH2)n-NR11R11、-O-(CH2)m-NR11R11、-(CH2)n-N+-(R11)3、-O-(CH2)m-N+-(R11)3、-(CH2)n-(Z)g-(CH2)m-NR10R10、-O-(CH2)m-(Z)g-(CH2)m-NR10R10、-(CH2CH2O)m-CH2CH2NR12R12、-O-(CH2CH2O)m-CH2CH2NR12R12、-(CH2)n-C(=O)NR12R12、-O-(CH2)m-C(=O)NR12R12、-O-(CH2)m-(CHOR8)mCH2NR10-(Z)g-R10、-(CH2)n-(CHOR8)mCH2-NR10-(Z)g-R10、-(CH2)nNR10-O(CH2)m(CHOR8)nCH2NR10-(Z)g-R10、-O(CH2)mNR10-(CH2)m-(CHOR8)nCH2NR10-(Z)g-R10、-(Het)-(CH2)mOR8、-(Het)-(CH2)m-NR7R10、-(Het)-(CH2)m(CHOR8)(CHOR8)n-CH2OR8、-(Het)-(CH2CH2O)m-R8、-(Het)-(CH2CH2O)m-CH2CH2NR7R10、-(Het)-(CH2)m-C(=O)NR7R10、-(Het)-(CH2)m-(Z)g-R7、-(Het)-(CH2)m-NR10-CH2(CHOR8)(CHOR8)n-CH2OR8、-(Het)-(CH2)m-CO2R7、-(Het)-(CH2)m-NR12R12、-(Het)-(CH2)n-NR12R12、-(Het)-(CH2)m-(Z)gR12、-(Het)-(CH2)mNR11R11、-(Het)-(CH2)m-N+-(R11)3、-(Het)-(CH2)m-(Z)g-(CH2)m-NR10R10、-(Het)-(CH2CH2O)m-CH2CH2NR12R12、-(Het)-(CH2)m-(C=O)NR12R12、-(Het)-(CH2)m-(CHOR8)mCH2NR10-(Z)g-R10、-(Het)-(CH2)m-NR10-(CH2)m-(CHOR8)nCH2NR10-(Z)g-R10であり、式中、2つの-CH2OR8基が、互いに関連して1,2-位置または1,3-位置にある場合、R8基は、環式モノ-またはジ-置換1,3-ジオキサンまたは1,3-ジオキソランを形成するために結合されていてもよく、
2つの-CH2OR8基が、互いに関して1,2-位または1,3-位位置し、R8基は、環式モノ-またはジ-置換1,3-ジオキサンまたは1,3-ジオキソランを形成するために結合されているという条件で-(CH2)n-(CHOR8)(CHOR8)n-CH2OR8であり、
2つの-CH2OR8基が、互いに関して1,2-位または1,3-位位置し、R8基は、環式モノ-またはジ-置換1,3-ジオキサンまたは1,3-ジオキソランを形成するために結合されているという条件で-O-(CH2)m(CHOR8)(CHOR8)n-CH2OR8であり、
2つの-CH2OR8基が、互いに関して1,2-位または1,3-位位置し、R8基は、環式モノ-またはジ-置換1,3-ジオキサンまたは1,3-ジオキソランを形成するために結合されているという条件で-(CH2)n-NR10-CH2(CHOR8)(CHOR8)n-CH2OR8であり、または
2つの-CH2OR8基が、互いに関して1,2-位または1,3-位位置し、R8基は、環式モノ-またはジ-置換1,3-ジオキサンまたは1,3-ジオキソランを形成するために結合されているという条件で-O-(CH2)m-NR10-CH2(CHOR8)(CHOR8)n-CH2OR8である。
【００９５】
R5の好ましい例としては:
-N(SO2CH3)2、
-CH2-CHNHBocCO2CH3(α)、
-O-CH2-CHNH2CO2H(α)、
-O-CH2-CHNH2CO2CH3(α)、
-O-(CH2)2-N+(CH3)3、
-C(=O)NH-(CH2)2-NH2、
-C(=O)NH-(CH2)2-NH-C(=NH)-NH2、および
【００９６】
【化９】
0004679505.tif 000010
【００９７】
が挙げられる。
【００９８】
式(A)における環上に4つのR6が存在する。R6の各々は、上記のR5のように各々独立して-R7、-OR8、-N(R7)2、-(CH2)m-OR8、-O-(CH2)m-OR8、-(CH2)n-NR7R10、-O-(CH2)m-NR7R10、-(CH2)n(CHOR8)(CHOR8)n-CH2OR8、-O-(CH2)m(CHOR8)(CHOR8)n-CH2OR8、-(CH2CH2O)m-R8、-O-(CH2CH2O)m-R8、-(CH2CH2O)m-CH2CH2NR7R10、-O-(CH2CH2O)m-CH2CH2NR7R10、-(CH2)n-C(=O)NR7R10、-O-(CH2)m-C(=O)NR7R10、-(CH2)n-(Z)g-R7、-O-(CH2)m-(Z)g-R7、-(CH2)n-NR10-CH2(CHOR8)(CHOR8)n-CH2OR8、-O-(CH2)m-NR10-CH2(CHOR8)(CHOR8)n-CH2OR8、-(CH2)n-CO2R7、-O-(CH2)m-CO2R7、-OSO3H、-O-グルクロニド、-O-グルコース、または
【００９９】
【化１０】
0004679505.tif 000011
【０１００】
であり得る。
【０１０１】
2つのR6が、-OR11基であり、またフェニル環上に互いに隣接して位置する場合、2つのR6のアルキル部分は、メチレンジオキシ基、すなわち-O-CH2-O-の基を形成して共に結合されていてもよい。また、2つの-CH2OR8基が、互いに関して1,2-位または1,3-位にある場合、R8基は、環式モノ-またはジ-置換1,3-ジオキサンまたは1,3-ジオキソランを形成するために結合されていてもよい。
【０１０２】
上記で考察したように、R6は水素であり得る。したがって、1つ、2つ、3つ、または4つのR6基は、水素以外のものであり得る。R6基のうち多くて3つは、水素以外のものであることが好ましい。
【０１０３】
gの各々は、独立して1から6の整数である。したがって、gの各々は、1、2、3、4、5、または6であり得る。
【０１０４】
mの各々は、独立して1から7の整数である。したがって、mの各々は、1、2、3、4、5、6、または7であり得る。
【０１０５】
nの各々は、独立して0から7の整数である。したがって、nの各々は、0、1、2、3、4、5、6、または7であり得る。
【０１０６】
式(A)におけるQの各々は、C-R5、C-R6、または窒素原子であり、ここで、環内において多くて3つのQが窒素原子である。したがって、環内に1個、2個、または3個の窒素原子があり得る。多くて2つのQが、窒素原子であることが好ましい。多くて1つのQが、窒素原子であることがより好ましい。1つの特定の実施形態において、窒素原子は、環の3-位にある。本発明の他の実施形態において、Qの各々は、C-R5またはC-R6のいずれかであり、すなわち、環内に窒素原子はない。
【０１０７】
式(A)により表される好適な基のより具体的な例は、下式(B)-(F)に示され:
【０１０８】
【化１１】
0004679505.tif 000012
【０１０９】
式中o、x、p、R5、およびR6は、上記に定義されるとおりであり;
【０１１０】
【化１２】
0004679505.tif 000013
【０１１１】
式中nは、1から10の整数であり、R5は、上記に定義されるとおりであり;
【０１１２】
【化１３】
0004679505.tif 000014
【０１１３】
式中nは、1から10の整数であり、R5は、上記に定義されるとおりであり;
【０１１４】
【化１４】
0004679505.tif 000015
【０１１５】
式中o、x、p、およびR5は、上記に定義されるとおりである。
【０１１６】
本発明の好ましい実施形態において、Yは、-NH2である。
【０１１７】
他の好ましい実施形態において、R2は、水素である。
【０１１８】
他の好ましい実施形態において、R1は、水素である。
【０１１９】
他の好ましい実施形態において、Xは、塩素である。
【０１２０】
他の好ましい実施形態において、R3は、水素である。
【０１２１】
他の好ましい実施形態において、RLは、水素である。
【０１２２】
他の好ましい実施形態において、oは、4である。
【０１２３】
他の好ましい実施形態において、pは、0である。
【０１２４】
他の好ましい実施形態において、oおよびpの合計は、4である。
【０１２５】
他の好ましい実施形態において、xは、単結合を表す。
【０１２６】
他の好ましい実施形態において、R6は、水素である。
【０１２７】
他の好ましい実施形態において、多くて1つのQが、窒素原子である。
【０１２８】
他の好ましい実施形態において、Qは、窒素原子ではない。
【０１２９】
本発明の好ましい実施形態において:
Xは、ハロゲンであり;
Yは、-N(R7)2であり;
R1は、水素またはC1〜C3アルキルであり;
R2は、-R7、-OR7、CH2OR7、または-CO2R7であり;
R3は、式(A)により表される基であり;
R4は、水素、式(A)により表される基、または低級アルキルであり;
本発明の他の好ましい実施形態において:
Xは、クロロまたはブロモであり;
Yは、-N(R7)2であり;
R2は、水素またはC1〜C3アルキルであり;
多くて3つのR6は、上記のとおり水素以外のものであり;
多くて3つのRLは、上記のとおり水素以外のものであり;
多くて2つのQが、窒素原子である。
【０１３０】
本発明の他の好ましい実施形態において:
Yは、-NH2であり;
本発明の他の好ましい実施形態において:
R4は、水素であり;
多くて1つのRLが、上記のとおり水素以外のものであり;
多くて2つのR6が、上記のとおり水素以外のものであり;
多くて1つのQが、窒素原子である。
【０１３１】
上記の実施形態におけるR5の好ましい例としては:
-N(SO2CH3)2、
-CH2-CHNHBocCO2CH3(α)、
-O-CH2-CHNH2CO2H(α)、
-O-CH2-CHNH2CO2CH3(α)、
-O-(CH2)2-N+(CH3)3、
-C(=O)NH-(CH2)2-NH2、および
-C(=O)NH-(CH2)2-NH-C(=NH)-NH2、
が挙げられる。
【０１３２】
本発明の化合物の例としては、以下のものが挙げられる:
【０１３３】
【化１５】
0004679505.tif 000016
【０１３４】
式(I)の化合物を調製し、遊離塩基として使用し得る。あるいは、前記化合物を調製し、薬学的に許容できる塩類として使用し得る。薬学的に許容できる塩類は、親化合物の所望の生物学的活性を保持または拡張し、望まれない毒性学的作用を与えない塩類である。このような塩類の例としては、(a)無機酸、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、硝酸などによって形成される酸付加塩類;(b)有機酸、例えば、酢酸、蓚酸、酒石酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、グルコン酸、クエン酸、リンゴ酸、アスコルビン酸、安息香酸、タンニン酸、パルミチン酸、アルギニン酸、ポリグルタミン酸、ナフタレンスルホン酸、メタンスルホン酸、p-トルエンスルホン酸、ナフタレンジスルホン酸、ポリガラクツロン酸、マロン酸、スルホサリチル酸、グリコール酸、2-ヒドロキシ-3-ナフトエート、パモエート、サリチル酸、ステアリン酸、フタル酸、マンデリン酸、乳酸などによって形成される塩類;および(c)基本的アニオン、例えば、塩素、臭素およびヨウ素から形成される塩類がある。
【０１３５】
式(I)の範囲の化合物の鏡像異性体、ジアステレオマーおよびラセミ混合物はすべて、本発明に含まれることに注意すべきである。このような鏡像異性体およびジアステレオマーの混合物はすべて、本発明の範囲内にある。
【０１３６】
いずれの特定の理論にも限定されないが、式(I)の化合物は、インビボでナトリウムチャネル遮断薬として働くことが知られている。粘膜表面に存在する上皮のナトリウムチャネルを遮断することにより、式(I)の化合物は、粘膜表面による水の吸収を減少させる。この作用は、粘膜表面上の保護的液体の容量を増加させ、そのシステムの再均衡化を行い、したがって疾患を治療する。
【０１３７】
また、本発明は、上記で検討された式(I)の化合物の性質を利用する治療法を提供する。したがって、本発明の方法によって治療し得る対象としては、限定はしないが、嚢胞性線維症、原発性絨毛運動障害、慢性気管支炎、慢性閉塞性気道疾患の罹患患者、人工呼吸患者、急性肺炎患者が挙げられる。本発明は、前記有効化合物を、患者の少なくとも1つの肺に投与してから、その患者から痰サンプルを誘導または採取することにより、患者から痰サンプルを得るために用いることができる。典型的に本発明は、エアロゾル(液体またはドライパウダー)または潅注により、呼吸器粘膜表面に投与される。
【０１３８】
本発明の方法により治療し得る対象としては、また補足酸素を経鼻的に投与されている(気道表面を乾燥させる傾向のある療法)患者;鼻気道表面に影響を及ぼすアレルギー疾患またはアレルギー応答(例えば、花粉、ダスト、動物毛または粒子、昆虫または昆虫粒子などへのアレルギー応答)の罹患者;鼻気道表面の細菌感染、例えば、黄色ブドウ球菌などのブドウ球菌感染、ヘモフィルスインフルエンザ感染、肺炎連鎖球菌感染、緑膿菌感染などの罹患者;鼻気道表面に影響を及ぼす炎症性疾患の罹患者;または静脈洞炎(単数または複数の有効剤が、静脈洞内のうっ血した液体の排液を促進する上で有効な量を投与することにより、静脈洞内のうっ血した粘液分泌物の排液を促進するために投与される)または、組合せ鼻副鼻腔炎の罹患者が挙げられる。本発明は、エアロゾロおよび小滴などの局所送達により鼻腔洞炎に投与し得る。
【０１３９】
本発明は、気道表面以外の粘膜表面に水溶液を注入するために用いることができる。このような他の粘膜表面としては、胃腸管表面、口腔表面、尿生殖器表面、眼球表面または目の表面、内耳および中耳が挙げられる。例えば、本発明の有効化合物は、局所/局部、経口、または経直腸などの任意の好適な手段により、有効量において投与し得る。
【０１４０】
また、本発明の化合物は、血管系に関する種々の機能の治療にも有用である。したがって、本発明の化合物は、抗高血圧剤としての使用に有用である。また、前記化合物は、血圧を下げて、浮腫を治療するためにも使用し得る。さらに本発明の化合物は、利尿、ナトリウム利尿および塩利尿を促進するためにも有用である。前記化合物は、高血圧、うっ血性心不全を治療し、心血管性死亡率を下げるために、単独で、またはベータ遮断薬、ACE阻害剤、HMGCoA還元酵素阻害剤、カルシウムチャネル遮断薬、および他の心血管剤と組合わせて使用し得る。
【０１４１】
本発明は主に、ヒト対象の治療に関するが、獣医学的目的のためイヌやネコなどの他の哺乳動物対象の治療にも使用できる。
【０１４２】
上記で検討したように、本発明の組成物を調製するために使用される上記化合物は、薬学的に許容できる遊離塩基の形態であり得る。前記化合物の遊離塩基は、一般に、その塩よりも水溶液における溶解性が低いため、遊離塩基組成物は、肺に対する有効剤のより持続的な放出を提供するために用いられる。溶液に溶解しない特定の形態において、肺に存在する有効剤は、生理学的応答を誘導するために利用できるのではなく、溶液に徐々に溶解する生物利用可能な薬剤の補給所として役立つ。
【０１４３】
本発明の他の態様は、薬学的に許容できる担体(例えば、担体水溶液)内に式(I)の化合物を含む医薬組成物である。一般に、式(I)の化合物は、粘膜表面の水の再吸収を阻害するために有効な量で前記組成物内に含まれる。
【０１４４】
また、本発明の化合物は、P2Y2受容体アゴニスト、または薬学的に許容できるその塩(本明細書において時には「有効剤」とも称される)と関連させて使用できる。前記組成物は、P2Y2受容体アゴニスト、または薬学的に許容できるその塩(本明細書において時には「有効剤」とも称される)をさらに含み得る。前記P2Y2受容体アゴニストは、典型的には、気道表面、特に鼻気道表面による塩化物および水の分泌を刺激するために有効な量で含まれる。好適なP2Y2受容体アゴニストは、米国特許第6,264,975号、米国特許第5,656,256号および米国特許第5,292,498号の9〜10欄に記載されており、その各々は参照として本明細書に組み込まれている。
【０１４５】
気管支拡張剤もまた、本発明の化合物と組合わせて使用できる。これらの気管支拡張剤としては、限定はしないが、エピネフリン、イソプロテレノール、フェノテロール、アルブテレオール、テルブタリン、ピルブテロール、ビトルテロール、メタプロテレノール、イオセタリン、キシナホ酸サルメテロールなどのβ−アドレナリンアゴニストならびに限定はしないが、臭化イプラトロピウムなどの抗コリン剤また、テオフィリンおよびアミノフィリンなどの化合物が挙げられる。これらの化合物は、公知の方法に従って、本明細書に記載された有効化合物の前に、または同時に投与し得る。
【０１４６】
本発明の他の態様は、薬学的に許容できる担体(例えば、担体水溶液)内に上記の有効化合物を含む製薬薬剤である。一般に、前記有効化合物は、気道および他の表面などの粘膜表面の水の再吸収を阻害するなどの粘膜表面を治療するために有効な量で前記組成物中に含まれる。
【０１４７】
本明細書に開示された有効化合物は、局所的、経口、経直腸、経膣、経眼および経皮などの任意の好適な手段によって粘膜表面に投与し得る。例えば、便秘の治療のため、前記有効化合物を経口または経直腸で胃腸管粘膜表面に投与し得る。経口投与には、液滴剤、錠剤などとして、直腸または尿生殖器投与に坐薬としてなどの前記有効化合物は、滅菌生理的または希釈食塩水または局所用溶液などの任意の好適な形態における薬学的に許容できる担体と組合わせることができる。前記有効化合物の溶解度を望まれるように上げるために、前記製剤に賦形剤を含み得る。
【０１４８】
本明細書に開示された有効化合物は、生理的または希釈食塩水溶液または蒸留水などの薬学的に許容できる担体内の、有効化合物のスプレー、ミストまたは小滴などの任意の好適な手段により、患者の気道表面に投与し得る。例えば、前記有効化合物は、Jacobusに対する米国特許第5,789,391号(その開示は、参照としてその全体が本明細書に組み込まれている)に記載されているとおりの製剤として調製され、投与することができる。
【０１４９】
本発明を実施するために調製された固体または液体粒状有効剤は、上記のように吸入性サイズまたは非吸入性サイズの粒子を含み、吸入性粒子は、吸入時に、口腔および喉頭を通過し、気管支および肺の肺胞内へ達するために十分小さなサイズの粒子であり、非吸入性粒子は、喉頭を通過し、気管支および肺の肺胞内へ達するのではなく、鼻気道通路内に保持されるために十分大きな粒子である。一般に、サイズが約1ミクロンから5ミクロン(より具体的には、サイズが約4.7ミクロン未満)の範囲にある粒子は吸入可能である。非吸入可能サイズの粒子は、サイズが約5ミクロン超で、目に見える小滴のサイズまでである。したがって、経鼻投与では、鼻腔内保持するを確実にするため10μm〜500μmの範囲の粒子サイズが使用できる。
【０１５０】
本発明による製剤の製造において、有効剤または生理学的に許容できるその塩または遊離塩基は、典型的に、特に許容できる担体と混合される。もちろん、前記担体は、前記製剤中の他のいずれの成分とも適合性でなければならず、また、患者にとって有害であってはならない。前記担体は、固体もしくは液体または双方でなければならず、単位用量製剤、例えば、0.5重量%から99重量%の前記有効化合物を含有し得るカプセル剤として、前記化合物と共に製剤化されることが好ましい。1種以上の有効化合物を本発明の製剤に組み入れることができ、前記製剤は、本質的には、成分を混合することからなる任意のよく知られた薬学製法によって調製できる。
【０１５１】
微粉化有効剤の吸入性または非吸入性乾燥微粒子を含有する組成物は、乾燥有効剤を、乳鉢と乳棒で粉砕し、微粉化した組成物を400メッシュの篩いに通して、大型の凝集物を砕くか、または分離することによって調製できる。
【０１５２】
微粒子有効剤組成物は、エアロゾルの製剤化を促進するために役立つ分散剤を、場合によっては含有し得る。好適な分散剤は、任意の好適な割合で(例えば、1:1の重量比)、有効剤と混合し得る乳糖である。
【０１５３】
本明細書に開示された有効化合物は、鼻用液滴、ミストなどの当業界に知られた好適な手段により、対象の鼻通路、静脈洞、および肺などの気道表面に投与できる。本発明の一実施形態において、本発明の有効化合物は、経気管支鏡潅注によって投与される。本発明の好ましい実施形態において、本発明の有効化合物は、対象が吸入する有効化合物からなる吸入性粒子のエアゾル懸濁液を投与することにより、肺気道表面に付着させる。前記吸入性粒子は、液体または固体であり得る。エアロゾル粒子を、対象の肺に投与するための多数の吸入器が知られている。
【０１５４】
限定はされないが、参照としてそのすべてが本明細書に組み込まれている米国特許第5,740,794号;米国特許第5,654,007号;米国特許第5,458,135号;米国特許第5,775,320号;および米国特許第5,785,049号に開示されているものなど、Inhale Therapeutic Systems、米国カリフォルニア州パロアルト所在、によって開発されているような吸入器を使用し得る。本出願者は、本明細書に引用されたすべての特許文献の開示は、参照として本明細書にその全体が組み込まれていることを意図している。限定はされないが、参照としてそのすべてが本明細書に組み込まれている米国特許第5,622,166号;米国特許第5,577,497号;米国特許第5,645,051号;および米国特許第5,492,112号に開示されているものなど、Dura Pharmaceuticals社、米国カリフォルニア州サンディエゴ所在、によって開発されているような吸入器もまた使用し得る。さらに限定はされないが、参照としてそのすべてが本明細書に組み込まれている米国特許第5,826,570号;米国特許第5,813,397号;米国特許第5,819,726号;および米国特許第5,655,516号に開示されているものなど、Aradigm社、米国カリフォルニア州ヘイワード所在、によって開発されているような吸入器を使用し得る。これらの器具は、乾燥粒子吸入器として特に好適である。
【０１５５】
有効化合物を含む液体粒子のエアロゾルは、圧力駆動エアロゾルネブライザーまたは超音波ネブライザーによるなど、任意の好適な手段によって製造できる。例えば、参照としてその内容が本明細書に組み込まれている米国特許第4,501,729号を参照されたい。ネブライザーは、有効成分の溶液または懸濁液を、狭いベンチュリ開口を通して圧縮ガス、典型的には空気または酸素を加速することにより、または超音波攪拌によって、治療的なエアロゾルミストに変換する、商品として入手できる装置である。ネブライザーにおける使用に好適な製剤は、液体担体中の有効成分からなり、前記有効成分は、前記製剤の40%w/wまでを含むが、好ましくは20%w/w未満を含む。前記担体は、典型的には水(最も好ましくは、滅菌した発熱物質のない水)または、希釈アルコール水溶液である。過フルオロ炭素担体もまた使用できる。場合によって用いられる添加剤は、前記製剤が滅菌されていない場合、防腐剤、例えば、ヒドロキシ安息香酸メチル、抗酸化剤、芳香剤、揮発性油、緩衝剤、および界面活性剤を含む。
【０１５６】
有効化合物を含む固体粒子のエアロゾルもまた同様に、任意の固体粒子薬剤エアロゾル発生器によって生じ得る。固体粒子薬剤を、対象に投与するためのエアロゾル発生器は、上記に説明したとおり、吸入性の粒子を生じ、ヒト投与に好適な速度で、予め決められた計測された用量の薬剤を含有するある容量のエアロゾルを発生させる。固体粒子エアロゾル発生器の1つの例示的タイプは注入器である。注入による投与に好適な製剤は、注入器により送達され得る、または鼻呼吸により鼻腔に摂取し得る微粉末散剤を含む。前記注入器において、前記散剤(例えば、本明細書に記載された治療を実施するために有効な前記散剤の計測された用量)が、インサイチュで突き刺されるか、または穴を開けられる、典型的にはゼラチンまたはプラスチックから作製されたカプセルまたはカートリッジに含有され、前記散剤は、吸入時に前記装置を通して吸われる空気により、または手動操作ポンプにより送達される。注入器に使用される散剤は、有効成分単独から、または有効成分、乳糖などの好適な散剤希釈剤、および場合によっては界面活性剤を含む散剤混合物からなる。有効成分は典型的には、製剤の0.1%w/wから100%w/wからなる。例示としてのエアロゾル発生器の第2のタイプは、計量吸入器を含む。計量吸入器は、典型的には、液体噴射剤中に有効成分の懸濁液製剤または溶液製剤を含有する加圧エアロゾルディスペンサーである。使用時、これらの装置は、計測された容量、典型的には10μlから150μlを送達するために適合させたバルブを通して前記製剤を排出し、有効剤を含有する微粒子スプレーを生成させる。好適な噴射剤としては、ある一定のクロロフルオロカーボン化合物、例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタンおよびそれらの混合物が挙げられる。前記製剤はさらに、1種以上の助溶剤、例えば、エタノール、オレイン酸またはトリオレイン酸ソルビタンなどの界面活性剤、抗酸化剤および好適な芳香剤をさらに含有し得る。
【０１５７】
固体粒子または液体粒子のいずれから形成されたエアロゾルも、1分当たり約10リットルから150リットル、より好ましくは1分当たり約30リットルから150リットル、最も好ましくは1分当たり約60リットルの速度でエアロゾル発生器から生成し得る。より多量の薬剤を含有するエアロゾルはより高速で投与され得る。
【０１５８】
本明細書に開示された有効化合物の投与量は、治療されている病態および対象の状態に依存して変わり得るが、一般に約0.01、0.03、0.05、0.1から1、5、10または20mgの薬剤が気道表面に付着される。1日の投与量は、1回から複数回の単位用量投与に分割できる。目標は、肺気道表面に、10-9M〜104Mの前記薬剤濃度を達成することである。
【０１５９】
他の実施形態において、それらは、対象が鼻を通して吸入する有効化合物からなる吸入性または非吸入性粒子(好ましくは、非吸入性粒子)のエアロゾル懸濁液を投与することにより投与される。前記吸入性または非吸入性粒子は、液体または固体があり得る。含まれる有効剤の量は、対象の気道表面に約10-9、10-8または10-7モル/リットルから、約10-3、10-2、10-1モル/リットル、より好ましくは約10-9モル/リットルから約10-4ルモル/リットルの溶解有効剤濃度を達成するために十分な量であり得る。
【０１６０】
有効化合物の投与量は、治療されている病態および対象の状態に依存して変わり得るが、一般に対象の鼻腔通路表面上に約10-9、10-8または10-7モル/リットルから、約10-3、10-2、10-1モル/リットル、より好ましくは約10-7モル/リットルから約10-4モル/リットルの溶解有効化合物濃度を達成するために十分な量であり得る。投与される有効化合物の具体的製剤の溶解度に依存して、1日の投与量は、1回から数回の単位用量投与に分割できる。1日の投与重量は、ヒト対象に対して対象の年齢および病態に依存して、有効剤粒子の約0.01ミリグラム、0.03ミリグラム、0.1ミリグラム、0.5ミリグラムまたは1.0ミリグラムから10ミリグラムまたは20ミリグラムの範囲であり得る。現行の好ましい単位用量は、1日当たり2回〜10回の投与療法で与えられる有効剤の約0.5ミリグラムである。前記投与量は、任意の好適な手段(例えば、ゼラチンカプセルのカプセル化)により、予めパッケージ化された単位として提供され得る。
【０１６１】
本発明の一実施形態において、粒子状有効剤組成物は、鼻の粘液分泌物への溶解のため、有効剤の早期放出と持続放出の双方を提供する目的で、有効剤の遊離塩基および薬学的に許容できる塩の双方を含有し得る。このような組成物は、患者への早期放出と経時的な持続放出の双方を提供するために役立つ。持続放出は、必要とされる1日の投与回数を減らすことによって、有効剤治療コースでの患者のコンプライアンスを上げることが期待される。
【０１６２】
気道投与に好適な製薬製剤としては、溶液、乳液、懸濁液および抽出液の製剤が挙げられる。一般的には、参照として本明細書に組み込まれているRemington:The Science and Practice of Pharmacy、86章(第19版1995年)におけるJ.Nairn、Solutions,Emulsions,Suspensions and Extractsを参照されたい。鼻用投与に好適な製薬製剤は、その開示が、参照として本明細書に組み込まれているSchorに対する米国特許第4,389,393号;Illumに対する米国特許第5,707,644号;Suzukiに対する米国特許第4,294,829号;およびSuzukiに対する米国特許第4,835,142号に記載されているとおり調製できる。
【０１６３】
前記有効化合物を含む液体粒子のミストまたはエアロゾルは、滅菌生理食塩溶液または滅菌水などの薬学的に許容できる水性担体中に有効剤を有する簡便な鼻用スプレーなどによる好適な手段によって生成され得る。投与は、圧力駆動エアロゾルネブライザーまたは超音波ネブライザーによって行うことができる。例えば、各々が参照として本明細書に組み込まれている米国特許第4,501,729号および米国特許第5,656,256号を参照されたい。鼻用液滴またはスプレーのボトルまたはネブライザーにおける使用に好適な製剤は、液体担体中の有効成分からなり、前記有効成分は、前記製剤の40%w/wまでを含むが、好ましくは20%w/w未満を含む。前記担体は、典型的には水(最も好ましくは、滅菌した発熱物質のない水)または、希釈アルコール水溶液、好ましくは、0.12%から0.8%の塩化ナトリウム溶液中で作製されたものである。場合によって用いられる添加剤は、前記製剤が滅菌されていない場合、防腐剤、例えば、ヒドロキシ安息香酸メチル、抗酸化剤、芳香剤、揮発性油、緩衝剤、浸透圧的活性剤(例えば、マンニトール、キシリトール、エリトリトール)および界面活性剤を含む。
【０１６４】
微粉化有効剤の吸入性または非吸入性乾燥微粒子を含有する組成物は、乾燥有効剤を、乳鉢と乳棒で粉砕し、微粉化した組成物を400メッシュの篩いに通して、大型の凝集物を砕くか、または分離することによって調製できる。
【０１６５】
微粒子有効剤組成物は、エアロゾルの製剤化を促進するために役立つ分散剤を、場合によっては含有し得る。好適な分散剤は、任意の好適な割合で(例えば、1:1の重量比)、有効剤と混合し得る乳糖である。
【０１６６】
式(I)の化合物は、当業界に知られた方法によって合成できる。代表的な合成法は、下記の図式に示されている。
【０１６７】
【化１６】
0004679505.tif 000017
【０１６８】
これらの方法は、例えば、参照として本明細書に組み込まれている、E.J.Cragoe、Amiloride and Its Analogsにおける25〜36頁「The Synthesis of Amiloride and Its Analogs」(3章)に記載されている。前記化合物を調製する他の方法は、例えば、参照として本明細書に組み込まれている、米国特許第3,313,813号に記載されている。特に米国特許第3,313,813号に記載されている方法A、B、C、Dを参照されたい。
【０１６９】
本発明の化合物を特性化するために、幾つかのアッセイが使用できる。代表的なアッセイは以下に検討されている。
【０１７０】
ナトリウムチャネル遮断活性および可逆性のインビトロ測定
本発明の化合物の作用機構および/または効力を評価するために用いられる1つのアッセイは、ウッシング(Ussing)チャンバ内に置いた気道上皮単層を用いて、回路短絡電流(ISC)下で測定された気道上皮ナトリウム流のルーメン薬剤阻害の測定を含む。新鮮摘出されたヒト、イヌ、ヒツジまたはげっ歯類の気道から得られた細胞を、多孔性の0.4ミクロンSnapwell(商標)Inserts(CoStar)上へ播種し、ホルモン規定した培地内で、空気-液体界面(ALI)条件で培養し、ウッシング(Ussing)チャンバ内のKrebs Bicarbonate Ringer(KBR)に浸しながら、ナトリウム輸送活性(ISC)に関してアッセイする。すべての試験薬剤添加は、半ログ用量添加プロトコル(1×10-11Mから3×10-5M)により、ルーメン槽に対するもので、ISC(阻害)の累積変化を記録する。すべての薬剤は、貯蔵液としての1×10-2Mの濃度のジメチルスルホキシド中で調製され、-20℃に保持される。8つの調製物が典型的に並行して操作され、1操作当たり2つの調製物は、陽性対照としてアミロライドおよび/またはベンザミルを組み込む。最高濃度(5×10-5M)の投与後、ルーメン槽を、新鮮な薬剤を含まないKBR溶液で3回交換し、凡そ5分間続ける各洗浄後に生じたISCを測定する。可逆性は、3回目の洗浄後のナトリウム流に関して、ベースライン値に対する戻りのパーセントとして定義される。電圧固定からのすべてのデータは、コンピュータインターフェースを介して回収し、オフ-ラインで解析する。
【０１７１】
全化合物に関する用量-効果関連性を考察し、Prism 3.0プログラムによって解析する。IC50値、最大効果濃度および可逆性を計算し、陽性対照としてのアミロライドおよびベンザミルと比較する。
【０１７２】
吸収の薬理学的アッセイ
(1)先端消失アッセイ
多孔性Traswell-Colコラーゲン被覆膜上に気管支細胞(イヌ、ヒト、ヒツジまたはげっ歯類細胞)を、上皮分極化を促進するホルモン規定培地内の空気-液体界面で増殖した1.13cm2の増殖面積で0.25×106/ cm2の密度で播種する。空気-液体界面(ALI)の展開12日から20日後、培養物は>90%絨毛化すると考えられ、粘液が前記細胞上に蓄積する。第1の気道上皮細胞調製物の完全性を保証するために、培養物分極性の完全性の指標である経上皮抵抗(Rt)および経上皮電位差(PD)を測定する。先端表面からの吸収率試験にとって、ヒトの細胞系が好ましい。消失アッセイは、インビボ「薄」膜(約25μl)を模擬する条件下で行われ、先端表面に実験的ナトリウムチャネル遮断剤または陽性対照(アミロライド、ベンザミル、フェナミル)を、10μMの開始濃度で加えることにより開始される。一連のサンプル(1サンプル当たり5μlの容量)を、0、5、20、40、90および240分などの種々の時点で回収する。濃度は、Fluorocount Microplate FlourometerまたはHPLCを用いて、各ナトリウムチャネル遮断剤の固有の蛍光を測定することによって決定する。定量分析には、知られた濃度および純度の信頼できる基準標準物質から生成された標準曲線が用いられる。消失速度のデータ解析は、非線形回帰、一相指数関数的減衰(Prism V 3.0)を用いて行われる。
【０１７３】
2.アミロライド同類取り込みの共焦点顕微鏡アッセイ
実質的にすべてのアミロライド様分子は、紫外線領域に蛍光を発する。これらの分子のこの性質は、x-z共焦点顕微鏡を用いて、細胞取り込みを直接測定するために使用できる。等モル濃度の実験化合物およびアミロライドならびに細胞区画への迅速な取り込みを示す化合物(ベンザミルおよびフェナミル)などの陽性対照を、共焦点顕微鏡の載物台上の気道培養物の先端表面に置く。連続的なx-z像を経時的に得、細胞区画内に蓄積する蛍光の大きさを定量化し、蛍光対時間における変化としてプロットする。
【０１７４】
3.化合物代謝のインビトロアッセイ
気道上皮細胞は、経上皮吸収の過程中に、薬物を代謝する能力を有している。さらに、可能性は少ないが、薬物は、特異的な細胞外酵素活性によって、気道上皮表面で代謝されることが可能である。恐らく表面外事象としての可能性が高いが、化合物は、肺疾患、例えば、嚢胞性線維症患者の気道管腔を占める感染分泌物によって代謝され得る。したがって、試験化合物とヒト気道上皮および/またはヒト気道上皮管腔産物との相互作用からもたらされる化合物代謝を特性化するために、一連のアッセイが行われる。
【０１７５】
アッセイの第1のシリーズにおいて「ASL」刺激剤としてのKBR中、試験化合物を、T-Col挿入システム中で増殖させたヒト気道上皮細胞の先端表面に塗布する。多くの化合物では、これらの化合物の化学種および内因性蛍光特性を分析するために、高性能液体クロマトグラフィー(HPLC)を用いて代謝(新種の生成)を試験し、試験化合物と新規代謝物の相対量を予測する。典型的アッセイとしては、試験溶液(10μMの試験化合物を含有する25μl KBR)を上皮管腔表面上におく。(1)管腔から漿膜液へと浸透する試験化合物の質量および(2)親化合物からの代謝物形成の可能性をHPLC分析するために、管腔および漿膜区画より、5μlから10μlのサンプルを連続的に採取する。試験分子の蛍光特性が、このような特性化にとって不適切な場合は、これらのアッセイに放射標識化合物が用いられる。HPLCデータから、管腔表面上の新規代謝化合物の消失率および/または形成率ならびに基底外側溶液中の試験化合物および/または新規代謝物の発現を定量化する。また、親化合物について、可能な新規代謝物のクロマトグラフィー移動度に関するデータも定量化される。
【０１７６】
CF痰により試験化合物の可能な代謝を分析するために、10人のCF患者から得た(IRB承認の下で)喀出CF痰の「代表的」混合物を採取した。前記痰を、KBR溶液の1:5混合液に激しく渦巻かせながら溶解した後、この混合物を「正味の」痰アリコートへ分割し、「上澄み」アリコートが得られるように、アリコートを超遠心分離に供した（「正味の」＝細胞；「上澄み」＝液相）。CF痰による化合物代謝の典型的試験は、「正味の」CF痰へ知られた質量の試験化合物を添加することを含み、CF痰の「上澄み」アリコートを37℃で温置し、続いて上記のHPLC分析による化合物の安定性/代謝を特性化するため、各タイプの痰からアリコートを連続採取する。次に上記のとおり、化合物の消失、新規代謝物の形成率、および新規代謝物のHPLC移動度の解析を行う。
【０１７７】
4.動物における薬物作用の薬理学的効果および機構
参照として本明細書に組み込まれている、Sabaterら、Journal of Applied Physiology、1999年、2191〜2196頁によって記載されたインビボモデルを用いて、粘膜毛様体クリアランス(MCC)の増加に関する化合物の効果を測定することができる。
【０１７８】
［実施例］
本発明を一般的に説明してきたが、例示目的でのみでここに提供され、他に特記しない限り限定することは意図していないある一定の具体的実施例を参照することにより、さらなる理解を得ることができる。
【０１７９】
ナトリウムチャネル遮断剤の調製
材料と方法。すべての試剤および溶媒は、Aldrich Chemical社から購入され、さらに精製することなく用いた。NMRスペクトルは、Bruker WM 360(360MHzでの1H NMRおよび90MHzでの13C NMR)またはBruker AC 300(300MHzでの1H NMRおよび75MHzでの13C NMR)上で得られた。フラッシュクロマトグラフィーは、90gシリカゲルカートリッジ(40M FSO-0110-040155、32〜63μm)を20psi(N2)で充填したElution Solution Flash Elute(商標)システム(22905バージニア州チャーロッテスビレ、PO Box 5147)の溶出液の上で実施された。GC-分析は、Heliflexキャピラリカラム(Alltech);相:AT-1、長さ:10メートル、ID:0.53mm、フィルム:0.25マイクロメートルで具備されたShimadzu GC-17上で実施された。GCパラメータ:320℃でのインジェクタ、320℃での検出器、FIDガス流量:40ml/分のH2、400ml/分でのエア。担体ガス:スプリット比16:1、15ml/分のN2流量、18cm/秒のN2速度。温度プログラムは、70℃で0〜3分、70〜300℃で3〜10分、300℃で10〜15分である。
【０１８０】
HPLC分析は、Microsorb MV C8カラム、100 A、25cmで具備されたGilson 322ポンプ、360nmでの検出器UV/Vis-156で実施された。移動相:A=0.1% TFAを有するアセトニトリル、B=0.1% TFAを有する水。勾配プログラム:95:5 B:Aで1分、次に20:80 B:Aで7分以上、次に100% Aで1分以上、次いで100% Aで11分間洗い流し、流量:1ml/分。
【０１８１】
(実施例1)
4-{4-[N-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジノ]ブチル}-N-(2-アミノエチル)ベンズアミドハイドロクロライド(11698)
【０１８２】
【化１７】
0004679505.tif 000018
【０１８３】
4-(4-アミノブチル)安息香酸(30)
水酸化ナトリウム(0.69g、17.37mmol)の水(30mL)溶液を、24(1.2g、5.79mmol)のメタノール(30mL)溶液に加え、室温で48時間攪拌した。次に溶媒を減圧留去した。水(20mL)を加え、pHをHClで7に調整した。白色固体沈殿をろ取し、水で洗浄して真空乾燥した。粗製生成物30(1.39g)が白色固体として得られ、これをさらに精製することなく次のステップに用いた。
【０１８４】
4-(4-ベンジルオキシカルボニルアミノブチル)安息香酸(31)
炭酸水素ナトリウム(0.95g、11.32mmol)を、30のTHF(120mL)懸濁液に加え、続いて水(10mL)を加えて、透明溶液を得た。次いでクロロギ酸ベンジル(1.21mL、8.49mmol)を反応混合物に0℃で加えた。この反応混合物を室温で一晩攪拌した。その後、溶媒を減圧留去した。酢酸エチル(70mL)を残渣に加え、溶液を2N HCl(2×30mL)および水(2×50mL)で洗浄してから真空乾燥した。1.82g(98%)の31を白色固体として得た。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ1.11(m,2H)、1.28(m,2H)、2.33(m,2H)、3.02(m,2H)、5.01(m,2H)、7.15(m,7H)、7.93(d 2H)。
【０１８５】
4-[4-(2-tert-ブトキシカルボニルアミノエチルカルバモイル)フェニル]ブチル}カルバミン酸ベンジルエステル(32)
N,N'-ジシクロヘキシルカルボジイミド(DCC)(0.69g、3.36mmol)を、窒素雰囲気下、31(1g、3.05mmol)および1-ヒドロキシベンゾトリアゾール(HOBt)(0.41g、3.05mmol)の冷却(0℃)塩化メチレン溶液に加えた。次に反応混合物を室温で一晩攪拌した。白色沈殿物が形成された。溶媒を減圧留去し、残渣をFlash(商標)(BIOTAGE社)(90gシリカゲルカートリッジ40M、3:2塩化メチレン/酢酸メチル)により分離して32(0.9g、63%)を白色固体として得た。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ1.70(m,11H)、1.94(m,2H)、3.23(m,2H)、3.72(m,2H)、3.82(m,2H)、4.08(m,2H)、6.19(s,2H)、8.61(m,1H)、9.04(m,7H)、9.61(d,2H)。
【０１８６】
{2-[4-(4-アミノブチル)ベンゾイルアミノ]エチル}カルバミン酸tert-ブチルエステル(33)
10%パラジウム-炭素(0.30g、湿性)と共に32(0.9g、1.92mmol)のメタノール(50mL)懸濁液を、水素大気圧下、室温で2時間攪拌した。次に混合物をシリカゲルパッドを通してろ過した。溶媒を蒸発させ、残渣をFlash(商標)(BIOTAGE社)(90gシリカゲルカートリッジ40M、6:1:0.1クロロホルム/エタノール/濃水酸化アンモニウム)により精製して33(0.405g、63%)を白色固体として得た。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ1.08(m,2H)、1.37(s,9H)、1.58(m,2H)、2.52(m,2H)、3.28(m,2H)、6.91(m,1H)、7.27(d,2H)、7.74(d,2H)、8.39(m,1H)。
【０１８７】
[2-(4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジノ]ブチル}-ベンゾイルアミノ)エチル]カルバミン酸tert-ブチルエステル(34)
ヨウ化水素酸1-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジノイル)-2-メチルイソチオ尿素(0.32g、0.82mmol)およびトリエチルアミン(0.27mL、1.64mmol)を連続して33(0.39g、0.82mmol)の5mLのメタノール溶液に加えた。反応混合物を、沸騰溶媒中で2時間攪拌した。溶媒を蒸発させ、残渣をFlash(商標)(BIOTAGE社)(90gシリカゲルカートリッジ40M、6:1:0.1クロロホルム/エタノール/濃水酸化アンモニウム)により分離して34(0.39g、62%)を黄色固体として得た。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ1.07(t,2H)、1.38(s,9H)、1.52(m,2H)、1.65(m,2H)、2.66(m,2H)、3.10(m,2H)、3.28(m,2H)、4.39(m,1H)、6.65(br s,1H)、6.94(m,1H)、7.28(m,2H)、7.75(d,2H)、8.49(m,1H)。
m/z(APCI)=548[C24H34ClN9O4+H]+。
【０１８８】
N-(2-アミノエチル)-4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジノ]ブチル}-ベンズアミドハイドロクロライド(35(11698))
34(0.104g、0.19mmol)のメタノール/HCl(1:1、8mL)溶液を、室温で0.5時間攪拌し;次いで溶媒を完全に蒸発させて、0.099g(100%)の35を黄色固体として得た。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ1.60(m,4H)、2.69(m,2H)、2.98(m,2H)、3.33(m,2H)、3.52(m,2H)、7.32(d,2H)、7.90(d,2H)、8.23(br s,2H)、8.82(m,1H)、8.90(br s,1H)、9.02(br s,1H)、9.37(m,1H)、10.57(s,1H)。m/z(APCI)=448[C19H26ClN9O2+H]+。
【０１８９】
(実施例2)
4-{4-[N’-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジノ]ブチル}-N-(2-グアニジノエチル)ベンズアミドハイドロクロライド(11834)
【０１９０】
【化１８】
0004679505.tif 000019
【０１９１】
4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジノ]ブチル}-N-[2-N",N"'-ジ-(ブチルオキシカルボニルグアニジノ-エチル]ベンズアミド(36)
トリエチルアミン(0.34mL、2.44mmol)を、35のメタノール(25mL)懸濁液に加えた。反応混合物を室温で20分攪拌すると;その時間で懸濁液が透明溶液になった。N,N'-ジ-(tert-ブトキシカルボニル)-N"-トリフルオロメタンスルホニルグアニジン(Goodman試薬)(0.193g、0.489mmol)を反応液に加えた。反応混合物を室温でさらに6時間攪拌し、その後、溶媒を減圧留去し、残渣をFlash(商標)(BIOTAGE社)(90gシリカゲルカートリッジ40M、6:1:0.1クロロホルム/エタノール/濃水酸化アンモニウム)により精製して36(0.18g、80%)を黄色固体として得た。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ1.40(s,9H)、1.47(s,9H)、1.52(m,2H)、1.65(m,2H)、2.68(m,2H)、3.18(br s,2H)、3.40(m,2H)、3.49(m,2H)、6.77(br s,2H)、7.30(d,2H)、7.75(d,2H)、8.50(br s,2H)。
【０１９２】
4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジノ]ブチル}-N-(2-グアニジノエチル)ベンズアミドハイドロクロライド(37(11834))
36(0.155g、0.22mmol)のメタノール/HCl(1:1、4mL)混合溶液を、室温で2時間攪拌し、次に溶媒を蒸発させ、残渣を真空乾燥して0.126g(100%)の37を黄色固体として得た。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ1.54(m,2H)、1.65(m,2H)、2.68(m,2H)、3.35(br.s,4H)、7.32(d,2H)、7.90(d,2H)、8.79(m,1H)、8.92(br s,1H)、8.90(br s,1H)、9.02(br s,1H)、9.37(m,1H)、10.57(s,1H)。m/z(APCI)=490[C20H28ClN11O2+H]+。
【０１９３】
(実施例3)
N-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)-N’-{4-[4-(3-グアニジノ-2-ヒドロキシプロポキシ)フェニル]ブチル}グアニジンハイドロクロライド(11975)
【０１９４】
【化１９】
0004679505.tif 000020
【０１９５】
[4-(4-アリルオキシフェニル)ブチル]カルバミン酸ベンジルエステル(38)の合成は、先に提供した実験詳細(化合物30として)に記載した。
【０１９６】
[4-(4-オキシラニルメトキシフェニル)ブチル]カルバミン酸ベンジルエステル(39)
3-クロロ-過安息香酸(2.46g、14.25mmol)を、38(1.86g、5.48mmol)の塩化メチレン(100mL)溶液に加え、反応液を室温で一晩攪拌した。その後、溶媒を減圧留去し、残渣をフラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、8:1:1塩化メチレン/ヘキサン/酢酸エチル)により精製した。安息香酸の混合物を除去するために、生成物の塩化メチレン溶液を、炭酸水素ナトリウムの飽和水溶液と水とで洗浄し、次いで無水硫酸ナトリウムで乾燥し、蒸発させて1.4g(72%)の39を黄色固体として得た。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ1.57(m,4H)、2.56(m,2H)、2.78(m,1H)、2.91(m,1H)、3.21(m,2H)、3.36(m,1H)、3.97(m,1H)、4.19(m,1H)、5.08(s,2H)、6.82(d,2H)、7.06(d,2H)、7.72(s,5H)。
【０１９７】
{4-[4-(3-アミノ-2-ヒドロキシプロポキシ)フェニル]ブチル}カルバミン酸ベンジルエステル(40)
39(0.86g、2.42mmol)のエタノール溶液を、アンモニアで飽和し、室温で一晩攪拌した。溶媒を蒸発し、残渣をFlash(商標)(BIOTAGE社)(90gシリカゲルカートリッジ40M、6:1:0.1クロロホルム/エタノール/濃水酸化アンモニウム)により精製して40(0.74g、87%)を白色固体として得た。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ1.40(m,2H)、1.51(m,2H)、2.50(m,2H)、2.58(m,1H)、2.68(m,1H)、3.00(m,2H)、3.69(m,1H)、3.80(m,1H)、3.90(m,1H)、5.08(s,2H)、6.82(d,2H)、7.06(d,2H)、7.35(br s,5H)。
【０１９８】
{4-[4-(3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-2-ヒドロキシプロポキシ)-フェニル]ブチル}カルバミン酸tert-ブチルエステル(41)
化合物41を、化合物40(0.75g、2.03mmol)から出発して化合物25の合成と同様の様式で調製した。それを、Flash(商標)(BIOTAGE社)(90gシリカゲルカートリッジ40M、2:1へキサン/酢酸エチル)により精製してを白色固体(0.8g、83%)として得た。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ1.45(s,9H)、1.57(m,4H)、2.58(m,2H)、3.20(m,2H)、3.31(m,2H)、3.94(m,2H)、4.10(m,1H)、4.73(br s,1H)、5.00(br s,1H)、5.10(s,2H)、6.81(d,2H)、7.06(d,2H)、7.35(br s,5H)。
【０１９９】
{3-[4-(4-アミノブチル)フェノキシ]-2-ヒドロキシプロピル}カルバミン酸tert-ブチルエステル(42)
10%パラジウム-炭素(0.40g、湿性)と共に41(0.8g、1.69mmol)のメタノール(30mL)の懸濁液を、水素の大気圧下、室温で3時間攪拌した。この混合物を、シリカゲルパッドを通してろ過し;溶媒を蒸発させて42(0.705g、99%)を白色固体として得た。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ1.45(s,9H)、1.55(m,4H)、2.58(m,4H)、2.71(m,2H)、3.29(m,1H)、3.45(m,2H)、3.92(m,2H)、4.10(br s,1H)、5.10(br s,1H)、6.81(d,2H)、7.08(d,2H)。
【０２００】
[3-(4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジノ]ブチル}フェノキシ)-2-ヒドロキシプロピル]カルバミン酸tert-ブチルエステル(43)
化合物43を、化合物42(0.46g、1.36mmol)から出発して化合物29の合成と同様の様式で調製した。それを、Flash(商標)(BIOTAGE社)(90gシリカゲルカートリッジ40M、6:1:0.1クロロホルム/エタノール/濃水酸化アンモニウム)により精製してを黄色固体(0.37g、57%)として得た。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ1.38(s,9H)、1.58(br s,4H)、2.55(m,2H)、3.00(m,2H)、3.08(m,2H)、3.33(m,2H)、3.82(m,3H)、5.13(br s,1H)、6.85(d,2H)、7.10(d,2H)、7.46(br s,2H)。
【０２０１】
N-{4-[4-(4-アミノ-2-ヒドロキシプロポキシ)フェニル]ブチル}-N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジン(44)
化合物44の遊離塩基を、化合物43(0.18g、0.33mmol)から出発して化合物28の合成と同様の様式で調製し、Flash(商標)(BIOTAGE社)(90gシリカゲルカートリッジ40M、2:1:0.1クロロホルム/エタノール/濃水酸化アンモニウム)により精製してを黄色固体として生成物の遊離塩基を得た。次にそれを3% HClで処理した。溶媒を蒸発させ、残渣を真空乾燥して0.125g(73%)の化合物44を得た。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ1.58(br s,4H)、2.55(m,2H)、2.84(br s,1H)、3.03(br s,1H)、3.34(br s,2H)、3.94(m,2H)、5.13(br s,1H)、6.85(d,2H)、7.13(d,2H)、8.13(br s,2H)、8.90(br s,1H)、9.00(br s,1H)、9.34(br s,1H)、10.56(s,1H)。
【０２０２】
N-(3,5-ジアミノ-6-クロロ-ピラジン-2-カルボニル)-N'-{4-[4-(3-(N",N"'-ジ-tert-ブチル-オキシカルボニル)-グアニジノ)-2-ヒドロキシ-プロポキシ)フェニル]-ブチル}-グアニジン(45)
トリエチルアミン(0.30mL、2.14mmol)を、44のメタノール(10mL)溶液に加え、次いでN,N'-ジ-(tert-ブトキシカルボニル)-N"-トリフルオロメタンスルホニルグアニジン(Goodman試薬)(0.169g、0.4295mmol)を添加した。反応混合物を室温でさらに2時間攪拌した。その後、溶媒を減圧留去し、残渣をFlash(商標)(BIOTAGE社)(90gシリカゲルカートリッジ40M、6:1:0.1クロロホルム/エタノール/濃水酸化アンモニウム)により精製して45(0.154g、78%)を黄色固体として得た。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ1.47(s,9H)、1.52(s,9H)、1.66(br s,4H)、2.58(m,2H)、3.23(br s,2H)、3.48(m,1H)、3.70(m,1H)、3.95(m,2H)、4.09(m,1H)、6.88(d,2H)、7.10(d,2H)。
【０２０３】
N-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)-N'-{4-[4-(3-グアニジノ-2-ヒドロキシ-プロポキシ)フェニル]-ブチル}-グアニジンハイドロクロライド(46)
45(0.134g、0.19mmol)の濃塩酸溶液を室温で0.5時間攪拌した。次いで溶媒を蒸発させ、残渣を真空乾燥して0.108g(99%)の46を黄色固体として得た。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ1.60(br s,4H)、2.52(br s,1H)、3.28(m,1H)、3.36(m,2H)、4.91(s,2H)、6.88(d,2H)、7.12(d,2H)、7.79(m,1H)、8.92(br s,1H)、9.03(br s,1H)、9.37(m,1H)、10.57(s,1H)。m/z(APCI)=493[C20H29ClN10O3+H]+。
【０２０４】
(実施例4)
N-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)-N’-[4-(4-ビス(メタンスルホニル)アミノフェニル)ブチル]グアニジン(10316)
【０２０５】
【化２０】
0004679505.tif 000021
【０２０６】
[4-(4-ニトロフェニル)ブタ-3-インイル]カルバミン酸tert-ブチルエステル(51)
無水THFおよびトリエチルアミン(20mL、1/1)の混合物に、連続して1-ヨード-4-ニトロベンゼン(2.0g、8.032mmol)およびヨウ化銅(I)(0.31g、1.606mmol)を加えた。混合物を室温で15分間攪拌した。フラスコを排気し、アルゴンで4回再充填して酸素が残っていないことを確認した。触媒ジクロロビス(トリフェニルホスフィン)-パラジウム(II)(0.56g、0.803mmol)を、アルゴン保護下、混合物に加え、次いでブト-3-イニル-カルバミン酸tert-ブチルエステル(1.62g、9.638mmol)を滴下により加えた。新たに形成された反応混合物を、さらに室温で一晩攪拌した。反応混合物の固体を吸引ろ過した。ろ液を濃縮した。残渣を塩化メチレンに再度溶解し、酢酸エチル(0〜10%)およびヘキサン類(100〜90%)の混液により溶出するカラムクロマトグラフィにより精製して、2.08g(89%)の生成物51を橙色固体として得た。1H NMR(CDCl3)δ1.46(s,9H)、2.66(t,J=6.5Hz,2H)、3.36〜3.43(m,2H)、4.86(br s,1H)、7.53(d,J=8.7Hz,2H)、8.16(d,J=8.7Hz,2H)。m/z(APCI)=291[C15H18N2O4+H]+、191[C15H18N2O4-Boc+H]+。
【０２０７】
[4-(4-アミノフェニル)ブチル]カルバミン酸tert-ブチルエステル(52)
化合物51(2.01g、6.923mmol)のエタノール(50mL)溶液に、アルゴン保護下、10%パラジウム-炭素(737mg、湿性)を一度に加えた。フラスコを排気し、アルゴンで3回再充填し(酸素を除去するため)、混合物を水素の1気圧下、室温で一晩攪拌した。反応系を窒素で掃流し、触媒を吸引ろ過し、エタノールで(2×5mL)で洗浄した。ろ液および洗液を合わせて減圧濃縮した。残渣を、酢酸エチル(0〜25%)およびヘキサン類(100〜75%)の混液により溶出する、シリカゲル上でクロトグラフィを行って、1.75g(96%)の生成物52を無色粘稠性オイルとして得た。1H NMR(CDCl3)δ1.44(s,9H)、1.47〜1.64(m,4H)、2.50(t,J=7.1Hz,2H)、3.08〜3.14(m,2H)、3.57(br s,2H)、4.55(br s,1H)、6.62(d,J=8.2Hz,2H)、6.95(d,J=8.2Hz,2H)。m/z(APCI)=265[C15H24N2O2+H]+。
【０２０８】
4-{4-[ビス(メタンスルホニル)アミノ]フェニル}ブチルカルバミン酸tert-ブチルエステル(53)
化合物52(0.16g、0.605mmol)を無水THF(5mL)に溶解した。この透明溶液に、連続してトリエチルアミン(0.18mL、1.21mmol)と4-ジメチルアミノピリジン(15mg、0.121mmol)とを加えた。この混合物を、メタノール-氷浴により約-10℃に15分間冷却した。この冷却溶液に、塩化メタンスルホニル(51μL)を徐々に加えた。この溶液をさらに、温度(-10℃)でさらに30分間攪拌してから、冷却浴を取り外して室温に徐々に温めた。反応混合物を減圧濃縮した。残渣を、酢酸エチル(0〜35%)およびヘキサン類(100〜65%)の混液により溶出する、シリカゲル上でクロトグラフィを行って、0.212g(83%)の生成物53を白色固体として得た。1H NMR(CDCl3)δ1.44(s,9H)、1.52〜1.70(m,4H)、2.68(t,J=7.4Hz,2H)、3.13〜3.18(m,2H)、3.40(s,6H)、4.53(br s,1H)、7.27(s,4H)。m/z(APCI)=321[C17H28N2O6S2-Boc.+H]+。
【０２０９】
4-[4-ビス(メタンスルホニル)アミノ)フェニル]ブチルアミン(54)
塩化メチレン(10mL)に溶解させた化合物53(0.21g、0.499mmol)の溶液を、トリフルオロ酢酸(1mL)により室温で2時間処理してから、減圧濃縮した。残渣をメタノール(2mL)に溶解し、再度減圧濃縮した。この手法を3回繰り返して残存するトリフルオロ酢酸が残っていないことを確認した。生成物を、完全に真空乾燥し、さらに精製しないで直接次の反応に用いた。0.196g(100%)の化合物54を無色粘稠性オイルとして得た。1H NMR(DMSO-d6)δ1.50〜1.72(m,4H)、2.65(t,J=7.4Hz,2H)、2.84〜2.89(m,2H)、3.51(s,6H)、7.33(d,J=8.3Hz,2H)、7.42(d,J=8.3Hz,2H)。m/z(APCI)=321[C12H20N2O4S2+H]+。
【０２１０】
N-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)-N'-[4-(4-ビス(メタンスルホニル)アミノフェニル)ブチル]グアニジン(55、10316)
化合物54(0.095g、0.296mmol)をエタノール(5mL)と混合した。この混合物を65℃で15分間加熱して、完全な溶解を達成させた。この透明溶液に、ジイソプロピルエチルアミン(0.26mL、1.48mmol)およびヨウ化水素酸1-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジノイル)-2-メチルイソチオ尿素(0.127g、0.326mmol)を連続して加えた。この混合物を、同じ温度でさらに1.5時間加熱し、引き続き減圧濃縮した。残渣を、濃水酸化アンモニウム(0〜1%)、メタノール(0〜10%)および塩化メチレン(100〜89%)の混液により溶出するシリカゲル上でクロトグラフィを行って、0.113g(72%)の生成物55を淡黄色固体として得た。mp 174〜176℃(分解)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.48〜1.68(m,4H)、2.64〜2.69(m,2H)、3.12〜3.25(m,2H)、3.51(s,6H)、6.65〜6.78(br s,3H)、7.31(d,J=8.2Hz,2H)、7.41(d,J=8.2Hz,2H)、9.05(br s,2H)。m/z(APCI)=533[C18H25ClN8O5S2+H]+。
【０２１１】
(実施例5)
N-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)-N’-{4-[4-(2-クロロトリメチルアンモニウム)エトキシフェニル]ブチル}グアニジンハイドロクロライド(11223)
【０２１２】
【化２１】
0004679505.tif 000022
【０２１３】
{4-[4-(2-ジメチルアミノエトキシ)フェニル]ブチル}カルバミン酸ベンジルエステル(62)
[4-(4-ヒドロキシフェニル)ブチル]カルバミン酸ベンジルエステル(1.5g、5mmol)、ヨウ化水素酸2-ジメチルアミノクロロエタン(1.4g、10mmol)、炭酸カリウム(2.76g、20mmol)および18-クラウン-6エーテル(154mg、0.58mmol)の混合物を、80℃(油浴)で18時間攪拌した。この時間後、溶媒を減圧留去し、残渣をFlash(商標)(BIOTAGE社)(90gシリカゲルカートリッジ40M、10:1:0.1クロロホルム/エタノール/濃水酸化アンモニウム)により精製して62(1.1g、61%)を白色固体として得た。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ1.56(m,4H)、2.32(s,6H)、2.56(m,2H)、2.71(t,2H)、3.18(m,2H)、4.04(t,2H)、4.78(br s,1H)、5.08(s,2H)、6.83(d,2H)、7.06(d,2H)、7.35(m,5H)
【０２１４】
4-[4-(2-ジメチルアミノエトキシ)フェニル]ブチルアミン(63)
保護アミン62(0.552g、1.5mmol)を、メタノール(50mL)中、10%パラジウム-炭素(0.127g、湿性)と共に水素下(1気圧)、室温で3.5時間攪拌した。この時間後、触媒をろ取し、溶媒を減圧留去して遊離アミン63(0.27g、77%)を白色粉末として得た。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ1.55(m,4H)、2.32(s,6H)、2.54(m,2H)、2.75(m,2H)、4.02(m,2H)、6.78(d,2H)、7.08(d,2H)。
【０２１５】
1-tert-ブチルオキシカルボニル-3-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)-2-メチル-イソチオ尿素(64)
4-ジメチルアミノピリジン(87mg、0.7mmol)を、ジ-tert-ブチルジカーボネート(0.8g、3.6mmol)およびヨウ化水素酸1-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジノイル)-2-メチルイソチオ尿素(1.14g、0.5mmol)のTHF/トリエチルアミン(62mL、30/1)中の攪拌溶液に加えた。次に反応混合物を室温で48時間攪拌した。この時間後、溶媒を減圧留去した。残渣をフラッシュクロマトグラフィ(シリカゲル、1:1酢酸エチル/ヘキサン類)により精製して、保護イソチオ尿素64(0.34g、32%)を黄色粉末として得た。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ1.51(s,9H)、2.30(s,3H)、7.40(br s,4H)。
【０２１６】
N-tert-ブチルオキシカルボニル-N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)-N"-{4-[4-(2-ジメチルアミノエトキシ)フェニル]ブチル}グアニジン(65)
化合物63(0.22g、0.93mmol)および64(0.33g、0.92mmol)のTHF/トリエチルアミン(11mL、10/1)懸濁液を、室温で48時間攪拌した。この時間後、透明溶液が形成された。溶媒を減圧留去し、残渣を フラッシュクロマトグラフィ(シリカゲル、10:1:0.1クロロホルム/メタノール/濃水酸化アンモニウム)により精製してグアニジン65(0.3g、60%)を黄色固体として得た。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ1.42(s,9H)、1.55(m,4H)、2.19(s,6H)、2.58(m,4H)、3.99(m,2H)、6.83(d,2H)、7.12(d,2H)、7.40(br s,2H)、9.02(m,2H)。
【０２１７】
N-tert-ブチルオキシカルボニル-N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)-N"-{4-[4-(2-ヨードトリメチルアンモニウムエトキシ)フェニル]ブチル}グアニジン(66)
ヨードメタン(30μL、0.49mmol)を、65(0.29g、0.52mmol)のTHF(50mL)懸濁液に加えた。混合物を室温で一晩攪拌した。この時間後、さらにTHF(7mL)を加え、攪拌を2日間続けて、透明溶液を得た。生じた溶液の溶媒を減圧留去した。残渣をTHF(2×5mL)で洗浄し、乾燥して塩66(0.22g、32%)を黄色粉末として得た。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ1.42(s,9H)、1.56(m,4H)、2.58(m,2H)、3.15(s,9H)、3.75(m,2H)、4.42(m,2H)、6.92(d,2H)、7.18(d,2H)、7.36(br s,2H)、9.02 m,(1H)。
【０２１８】
[2-(4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジノ]ブチル}フェノキシ)エチル]-トリメチルアンモニウムクロリド(67、11223)
トリフルオロ酢酸(2mL)を、保護グアニジン66(0.092g、0.13mmol)に加えた。反応混合物を、室温で15分間攪拌した。溶媒を減圧留去し、残渣を酢酸エチル(2×1mL)で洗浄し、真空乾燥した。得られた乾燥固体を、水酸化アンモニウムの水溶液(15%、1mL)で処理した。形成された沈殿物を、遠心分離により採取し、冷水(1mL)で洗浄した。残りの固体を、10%塩酸に溶解し、次いで溶媒を減圧留去した。生じた黄色固体を真空乾燥して化合物67(0.055g、82%)を得た。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ1.68(br s,4H)、2.65(m,2H)、3.35(m,2H)、3.83(m,2H)、4.46(m,2H)、4.95(s,9H)、6.96(d,2H)、7.18(d,2H)、9.25(br s,1H)。m/z(APCI)=499[C21H32Cl2N8O2+H]+。
【０２１９】
ナトリウムチャネル遮断活性
下表に示された化合物を、上記のインビトロアッセイを用いてイヌの気管支上皮の効力に関して試験した。アミロライドもまた、陽性対照としてこのアッセイで試験した。本発明の化合物に関する結果は、アミロライドに比した増強倍値として報告されている。
【０２２０】
(実施例6)
【０２２１】
【化２２】
0004679505.tif 000023
【０２２２】
【表１】
0004679505.tif 000024
【０２２３】
(実施例7)
【０２２４】
【化２３】
0004679505.tif 000025
【０２２５】
【表２】
0004679505.tif 000026
【０２２６】
(実施例8)
【０２２７】
【化２４】
0004679505.tif 000027
【０２２８】
【表３】
0004679505.tif 000028
【０２２９】
【表４】
0004679505.tif 000029
【０２３０】
(実施例9)
スキーム1.PSA 11041の合成
【０２３１】
【化２５】
0004679505.tif 000030
【０２３２】
2-アミノ-3-(4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)-グアニジノ]ブチル}フェノキシ)プロピオン酸メチルエステル(PSA 11041)の合成
【０２３３】
【化２６】
0004679505.tif 000031
【０２３４】
3-[4-(4-ベンジルオキシカルボニルアミノブチル)フェノキシ]-2-(トリチルアミノ)プロピオン酸メチルエステル(1)
商品として入手できるN-トリチル-L-セリンメチルエステル(1.60g、5.34mmol)を、ベンゼン(40mL)中、トリフェニルホスフィン(1.28g、4.88mmol)および[4-(4-ヒドロキシフェニル)ブチル]カルバミン酸ベンジルエステル(2.0g、6.68mmol)と室温で合わせた。ジイソプロピルアゾジカルボキシレート(0.958mL、4.86mmol)を滴下により加え、反応液を14日間攪拌した。溶媒を減圧留去し、残渣を、カラムクロマトグラフィー(シリカゲル、溶出液:6:1、v/vジクロロメタン/酢酸エチル)により精製して化合物101(2.22g、51%)を得た。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.52(m,6H)、7.39〜7.14(m,14H)、7.06(d,2H)、6.79(d,2H)、5.09(s,2H)、4.72(m,1H)、4.24(m,1H)、4.01(m,1H)、3.72(m,1H)、3.22(s,3H)、3.18(m,2H)、2.88(d,1H)、2.57(m,2H)、1.66〜1.48(m,4H)。Rf=0.91(5:1 v/vジクロロメタン/エチルアセテート)。
【０２３５】
3-[4-(4-ベンジルオキシカルボニルアミノブチル)フェノキシ]-2-tert-ブトキシカルボニルアミノ-プロピオン酸メチルエステル(102)
化合物101(2.22g、3.45mmol)を、ジクロロメタン/水(25mL/0.5mL)の混液に溶解してから、トリフルオロ酢酸(0.75mL、10.0mmol)を加え、反応液を2時間攪拌した。溶媒を減圧留去し、残渣をジクロロメタン(25mL)に溶解し、トリエチルアミン(0.72mL、5.12mmol)とジ-tert-ブチルジカーボネート(0.829g、3.79mmol)とで72時間処理した。溶媒の減圧留去に次いでカラムクロマトグラフィー(シリカゲル、溶出液:9:1、v/vジクロロメタン/酢酸エチル)により、化合物102(0.90g、52%)を得た。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.34(m,5H)、7.07(d,2H)、6.79(d,2H)、5.50(d,1H)、5.10(s,2H)、4.68(m,2H)、4.38(m,1H)、4.17(m,1H)、3.77(s,3H)、3.20(m,2H)、2.57(m,2H)、1.67〜1.48(m,4H)、1.45(s,9H)。m/z(APCI)401[C27H36N2O7-Boc+H]+。
【０２３６】
3-[4-(4-アミノブチル)フェノキシ]-2-tert-ブトキシカルボニルアミノプロピオン酸メチルエステル(103)
化合物102(505mg、1.00mmol)を、メタノール(20mL)に溶解し、10%パラジウム-炭素(100mg)を加えた。フラスコを排気し、風船圧下、水素ガスにより充填し、一晩攪拌した。触媒を除くためにセライトを通してろ過し、次いで溶媒の減圧留去により、化合物103(366mg、98%)を得た。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.08(d,2H)、6.80(d,2H)、5.51(d,1H)、4.66(m,1H)、4.38(m,1H)、4.17(m,1H)、3.78(s,3H)、2.73(m,2H)、2.58(m,2H)、1.90(br s,2H)、1.62(m,2H)、1.50(m,2H)、1.48(s,9H)。
【０２３７】
2-tert-ブトキシカルボニルアミノ-3-(4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)-グアニジノ]ブチル}フェノキシ)プロピオン酸メチルエステル(104)
化合物103(366mg、0.99mmol)を、エタノール(8mL)に溶解してから、ジイソプロピルエチルアミン(0.86mL、4.9mmol)とヨウ化水素酸1-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-メチルイソチオ尿素(407mg、1.04mmol)とを加え、反応液を、65℃で1.5時間加熱した。溶媒を減圧留去して、残渣をカラムクロマトグラフィー(シリカゲル、溶出液:90:10:1、v/vジクロロメタン/メタノール/濃水酸化アンモニウム)により精製して、化合物104(215mg、37%)を得た。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.13(m,1H)、8.89(m,1H)、8.70(m,1H)、7.45(m,4H)、7.13(d,2H)、6.85(d,2H)、4.43(m,1H)、4.17(m,2H)、3.68(s,3H)、3.30(m,2H)、2.90(m,1H)、2.56(m,2H)、1.58(m,4H)、1.40(s,9H)。m/z(APCI)579[C25H35ClN8O6+H]+。Rf=0.65(85:15:1ジクロロメタン/メタノール/濃水酸化アンモニウム)。
【０２３８】
2-アミノ-3-(4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)-グアニジノ]ブチル}フェノキシ)プロピオン酸メチルエステル(105、PSA 11041)
化合物104(40mg、0.069mmol)を、ジクロロメタン(3mL)に溶解し、トリフルオロ酢酸(1.5mL)で30分間処理した。溶媒の減圧留去に次いでカラムクロマトグラフィー(シリカゲル、溶出液:85:15:1、v/vジクロロメタン/メタノール/濃水酸化アンモニウム)により、化合物105(28mg、84%)を得た。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.06(m,1H)、7.11(d,2H)、6.82(m,4H)、4.06(m,2H)、3.74(m,1H)、3.65(br s,3H)、3.17(m,2H)、2.55(m,2H)、1.55(m,4H)。m/z(APCI)479[C20H27ClN8O4+H]+。Rf=0.46(85:15:1ジクロロメタン/メタノール/濃水酸化アンモニウム)。
【０２３９】
(実施例10)
スキーム2.PSA 10941の合成
【０２４０】
【化２７】
0004679505.tif 000032
【０２４１】
2-アミノ-3-(4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)-グアニジノ]ブチル}フェノキシ)プロピオン酸(60、PSA 10941)の合成
【０２４２】
【化２８】
0004679505.tif 000033
【０２４３】
化合物105(175mg、0.302mmol)を、テトラヒドロフラン/水(5mL/2.5mL)の混液に溶解し、1N NaOH(0.75mL、0.75mmol)で1時間処理した。溶媒を減圧留去し、残渣を最少量の水に溶解し、2N HClで処理すると沈殿物を生成し、次いでろ過して生成物を採取した。この固体をジクロロメタン(3mL)に懸濁し、トリフルオロ酢酸(3mL)で1時間処理した。溶媒の減圧留去に次いでカラムクロマトグラフィー(シリカゲル、溶出液:80:20:1、v/vジクロロメタン/メタノール/濃水酸化アンモニウムで開始し、次に6:3:1、v/vに変えて生成物を得た)により、化合物106(70mg、49%)を得た。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.78(br m,4H)、7.13(d,2H)、6.88(d,2H)、6.67(m,2H)、4.28(m,1H)、4.11(m,1H)、3.53(m,1H)、3.16(m,2H)、2.56(m,2H)、1.55(m,4H)。m/z(APCI)465[C19H25ClN8O4+H]+。
【０２４４】
(実施例11)
スキーム3.PSA 17587およびPSA 17588の合成
【０２４５】
【化２９】
0004679505.tif 000034
【０２４６】
2-アミノ-4-(4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)-グアニジノ]ブチル}フェノキシ)酪酸メチルエステルハイドロクロライド(PSA 17587)の合成
【０２４７】
【化３０】
0004679505.tif 000035
【０２４８】
2-アミノ-4-ヒドロキシ酪酸メチルエステルハイドロクロライド(70)
DL-ホモセリン(1.00g、8.39mmol)のメタノール(40mL)懸濁液を氷浴中に入れた。塩化トリメチルシリル(2.34mL、18.5mmol)をシリンジを介して滴下により加えた。反応混合物は、徐々に均一となったが、さらに室温で14時間攪拌し、ロータリー蒸発により濃縮し、さらに高度真空乾燥した。このようにして得られた粗製オイルを、さらに精製することなく次のステップに用いた。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ2.00〜2.24(m,2H)、3.70〜3.80(m,2H)、3.85(s,3H)、4.12〜4.22(m,1H)。m/z(ESI)134[C5H11NO3+H]+。
【０２４９】
2-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-ヒドロキシ酪酸メチルエステル(80)
2-アミノ-4-ヒドロキシ酪酸メチルエステルハイドロクロライド(70)を、無水THF(15mL)に懸濁させ、氷浴中に入れた。ジイソプロピルエチルアミン(2.92mL、16.8mmol)をシリンジを介して加え、次いでDMAP(205mg、1.68mmol)およびBoc2O(3.85g、17.6mmol)を加えた。この混合物を0℃で10分間、室温で14時間攪拌した。溶媒を減圧留去し、残渣を酢酸エチル(100mL)に溶かし、水(30mL×2)とブライン(40mL)とで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮した。無色オイル(1.96g)は、さらに精製することなく次のステップに用いた。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ1.45(s,9H)、2.05〜2.28(m,2H)、3.68〜3.75(m,2H)、3.80(s,3H)、4.08〜4.15(m,1H)、5.30〜5.41(m,1H)。m/z(ESI)234[C10H19NO5+H]+。
【０２５０】
4-ブロモ-2-tert-ブトキシカルボニルアミノ酪酸メチルエステル(90)
トリフェニルホスフィン(2.20g、8.39mmol)の乾燥CH2Cl2(20mL)溶液を、N-Bocホモセリンメチルエステル80(8.39mmol)および四臭化炭素(4.18g、12.60mmol)の乾燥CH2Cl2(20mL)溶液にシリンジを介して滴下により加えた。生じた暗色溶液を室温で16時間攪拌した。ヘキサン類を加え、沈殿物を吸引ろ過により除いた。ろ液を減圧濃縮し、酢酸エチル/へキサン類(1:10、v/vに次いで1:6、v/v)を用いてフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィーに供して、所望の生成物90を黄色オイル(501mg、ホモセリンから20%の全収率)として得た。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ1.45(s,9H)、2.12〜2.48(m,2H)、3.39〜3.47(m,2H)、3.78(s,3H)、4.33〜4.48(m,1H)、5.10〜5.22(m,1H)。m/z(ESI)296[C10H18BrNO4+H]+。
【０２５１】
4-[4-(4-ベンジルオキシカルボニルアミノブチル)フェノキシ]-2-tert-ブトキシカルボニルアミノ-酪酸メチルエステル(100)
炭酸カリウム(935mg、6.77mmol)を、4-[4-(ベンジルオキシカルボニルアミノ)ブチル]フェノール(506mg、1.69mmol)および臭化N-Boc 90(501mg、1.69mmol)の無水DMF(10mL)溶液に一度に加えた。反応混合物を、70℃(油浴)で14時間攪拌し、室温に冷却し、酢酸エチル(100mL)とヘキサン類(20mL)とで希釈した。この混合物を、水(4×20mL)とブライン(40mL)とで洗浄し、減圧濃縮した。酢酸エチル/CH2Cl2(1:25、1:20、v/v)を用いるフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、所望の生成物100を粘稠性黄色オイル(718mg、83%収率)として得た。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ1.44(s,9H)、1.48〜1.68(m,4H)、2.12〜2.38(m,2H)、2.48〜2.60(m,2H)、3.10〜3.24(m,2H)、3.75(s,3H)、3.97〜4.06(m,2H)、4.41〜4.52(m,1H)、4.70(br s,1H)、5.09(s,2H)、5.25〜5.37(m,1H)、6.70〜6.80(m,2H)、6.95〜7.09(m,2H)、7.30〜7.38(m,5H)。m/z(ESI)515[C28H38N2O7+H]+。
【０２５２】
{4-[4-(3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-3-カルバモイルプロポキシ)フェニル]-ブチル}カルバミン酸ベンジルエステル(110)
アンモニア(メタノール中7M、20mL)を、N-Bocメチルエステル100(718mg、1.40mmol)のメタノール(5mL)溶液に加え、この混合物を、封管中室温で40時間攪拌した。混合物を、ロータリー蒸発により濃縮し、メタノール/ジクロロメタン(1:30、1:20、v/v)を用いるフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、所望のアミド110を白色固体(436mg、63%収率)として得た。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ1.45(s,9H)、1.48〜1.68(m,4H)、2.09〜2.32(m,2H)、2.48〜2.61(m,2H)、3.08〜3.25(m,2H)、3.97〜4.20(m,2H)、4.30〜4.45(m,1H)、4.75(br s,1H)、5.09(s,2H)、5.48〜5.58(m,1H)、5.62(br s,1H)、6.38(br s,1H)、6.75〜6.85(m,2H)、6.99〜7.10(m,2H)、7.28〜7.40(m,5H)。m/z(ESI)500[C27H37N3O6+H]+。
【０２５３】
{3-[4-(4-アミノブチル)フェノキシ]-1-カルバモイルプロピル}カルバミン酸tert-ブチルエステル(120)
メタノール(10mL)およびジクロロメタン(10mL)中、N-Cbzアミド110(436mg、0.873mmol)およびPearlman触媒(100mg)の混合物を、1気圧水素下、18時間攪拌した。触媒を、セライト上で吸引ろ過により除き、ろ液を濃縮して無色オイル(318mg、粗製収率100%)を得た。粗製物120を、さらに精製することなく次のステップに使用した。m/z(ESI)366[C19H31N3O4+H]+。
【０２５４】
[1-カルバモイル-3-(4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジノ]-ブチル}フェノキシ)プロピル]カルバミン酸tert-ブチルエステル(130)
N-Bocアミン120(318mg、0.873mmol)およびジイソプロピルエチルアミン(0.30mL、1.75mmol)の無水エタノール(8mL)溶液を70℃で5分間攪拌し、その後、ヨウ化水素酸1-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)-2-メチルイソチオ尿素(441mg、1.13mmol)を一度に加えた。反応混合物を、その温度で2.5時間攪拌し、室温に冷却した。これをロータリー蒸発により濃縮し、ジクロロメタン/メタノール/濃水酸化アンモニウム(200:10:0、200:10:1、150:10:1、および100:10:1、v/v)を用いるフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、所望の生成物130を黄色固体(470mg、93%収率)として得た。m/z(ESI)578[C25H36ClN9O5+H]+。
【０２５５】
2-アミノ-4-(4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジノ]ブチル}-フェノキシ)酪酸メチルエステルジハイドロクロライド(140、PSA 17587)および2-アミノ-4-(4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジノ]ブチル}フェノキシ)-ブチルアミドジハイドロクロライド(150、PSA 17588)
N-Bocアミド130およびHCl(ジオキサン中4M、3mL)のメタノール(6mL)溶液を、室温で14時間攪拌し、次いで蒸発させて真空乾燥した。ジクロロメタン/メタノール/濃水酸化アンモニウム(200:10:0、200:10:1、150:10:1、100:10:1、および100:10:2、v/v)を用いるフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、2-アミノ-4-(4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジノ]ブチル}-フェノキシ)酪酸メチルエステル(高速溶出、313mg、78%収率)および2-アミノ-4-(4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)-グアニジノ]ブチル}フェノキシ)ブチルアミド(低速溶出、70mg、18%収率)を得た。
【０２５６】
2-アミノ-4-(4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジノ]ブチル}-フェノキシ)酪酸メチルエステルを、メタノールに溶解し、3滴の4N水性HClで処理し、次いで混合物を直ちに減圧濃縮した。さらにこれを、水と共蒸発し、高度真空下、40℃で16時間乾燥して140を得た。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ1.62〜1.78(m,4H)、2.35〜2.45(m,2H)、2.59〜2.69(m,2H)、3.33〜3.40(m,2H)、3.84(s,3H)、4.09〜4.18(m,2H)、4.24〜4.32(m,1H)、6.80(d,J=8.6Hz,2H)、7.08(d,J=8.6Hz,2H)。m/z(ESI)493[C21H29ClN8O4+H]+。融点88〜90℃。
【０２５７】
2-アミノ-4-(4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)-グアニジノ]ブチル}-フェノキシ)ブチルアミドを、メタノールに溶解し、3滴の4N水性HClで処理し、次いで混合物を直ちに減圧濃縮した。さらにこれを、水と共蒸発し、高度真空下、40℃で16時間乾燥して150を得た。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ1.60〜1.78(m,4H)、2.00〜2.30(m,2H)、2.55〜2.65(m,2H)、3.31〜3.38(m,2H)、3.70〜3.78(m,1H)、4.05〜4.12(m,2H)、6.86(d,J=8.6Hz,2H)、7.12(d,J=8.6Hz,2H)。m/z(ESI)478[C20H28ClN9O3+H]+。融点128〜130℃。
【０２５８】
(実施例12)
スキーム4.PSA17666の合成
【０２５９】
【化３１】
0004679505.tif 000036
【０２６０】
2-アミノ-4-(4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジノ]ブチル}フェノキシ)酪酸(PSA 17666)の合成
【０２６１】
【化３２】
0004679505.tif 000037
【０２６２】
2-アミノ-4-(4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジノ]ブチル}-フェノキシ)酪酸メチルエステル(140)(110mg、0.223mmol)を、メタノール(1mL)/THF(1mL)/水(1mL)の混液に溶解した。水酸化リチウム一水和物(14mg、0.334mmol)を加え、反応混合物を室温で16時間攪拌してから減圧濃縮した。生じた残渣を水(1mL)で希釈し、1N水性HClによりpH 2に酸性化し、10%水性水酸化アンモニウムで溶出するDOWEX 50WX 8-200イオン交換樹脂を通して精製した。所望の生成物を、黄色固体(75mg、70%収率)として得た。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ1.55〜1.78(m,4H)、2.10〜2.45(m,2H)、2.52〜2.65(m,2H)、3.30〜3.35(m,2H)、3.65〜3.75(m,1H)、4.05〜4.15(m,2H)、6.85(d,J=8.5Hz,2H)、7.10(d,J=8.5Hz,2H)。m/z(ESI)479[C20H27ClN8O4+H]+。融点178〜180℃。
【０２６３】
(実施例13)
スキーム5.PSA18704の合成
【０２６４】
【化３３】
0004679505.tif 000038
【０２６５】
2-アミノ-3-[2-(4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジノ]ブチル}フェノキシ)エチルアミノ]プロピオンアミドトリハイドロクロライド(PSA 18704)の合成
【０２６６】
【化３４】
0004679505.tif 000039
【０２６７】
3-{2-[4-(4-ベンジルオキシカルボニルアミノブチル)フェノキシ]エチルアミノ}-2-N,N'-ジ-(tert-ブトキシカルボニル)アミノプロピオン酸メチルエステル(160)
メタノール(3mL)中、{4-[4-(2-アミノエトキシ)フェニル]ブチル}カルバミン酸ベンジルエステルハイドロクロライド(141mg、0.372mmol)、2-[N.N'-ジ(tert-ブトキシカルボニル)]アミノアクリル酸メチルエステル(102mg、0.338mmol)、およびトリエチルアミン(0.16mL、1.11mmol)の混合物を、55℃(油浴)で16時間攪拌した。次にそれを室温に冷却した。溶媒をロータリー蒸発により除去した。残渣を酢酸エチルに溶かし、飽和重炭酸ナトリウム溶液とブラインで洗浄した。有機層を減圧濃縮し、酢酸エチル/へキサン類(勾配1:10、1:6、1:4、および1:2、v/v)を用いるフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、所望のMichael付加体160(110mg、51%収率)を得た。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ1.42(s,9H)、1.43〜1.50(m,9H)、1.50〜1.65(m,4H)、2.50〜2.60(m,2H)、3.12〜3.25(m,2H)、3.49〜3.72(m,4H)、3.75(s,3H)、3.98〜4.10(m,2H)、4.45〜4.65(m,1H)、4.79(br s,1H)、5.09(s,2H)、5.50(m,1H)、6.81(d,J=8.5Hz,2H)、7.06(d,J=8.5Hz,2H)、7.28〜7.38(m,5H)。m/z(ESI)644[C34H49N3O9+H]+。
【０２６８】
(4-{4-[2-(2-ジ-(tert-ブトキシカルボニル)アミノ-2-カルバモイルエチルアミノ)エトキシ]フェニル}ブチル)カルバミン酸ベンジルエステル(170)
メタノール性アンモニア(7M、10mL、70mmol)を、メチルエステル160(110mg、0.171mmol)のメタノール(3mL)溶液に加えた。この混合物を封管中、室温で3日間攪拌し、減圧濃縮し、さらに16時間高度真空乾燥した。粗製の固体生成物170(94mg、87%粗製収率)は、さらに精製することなく次のステップに用いられた。m/z(ESI)629[C33H48N4O8+H]+。
【０２６９】
(2-{2-[4-(4-アミノブチル)フェノキシ]エチルアミノ}-1-カルバモイルエチル)ジカルバミン酸ジ-tert-ブチルエステル(180)
N-Cbzアミド170(94mg、0.150mmol)をメタノール(5mL)とジクロロメタン(5mL)に溶解し、溶液を窒素で掃流した。Pearlman触媒(水酸化パラジウム-炭素、26mg)を加え、反応混合物を水素雰囲気下、室温で16時間攪拌した。触媒を、セライト上でろ取し、ろ液を濃縮して所望の生成物180を白色固体(73mg、99%粗製収率)として得て、さらに精製することなく次のステップに用いた。m/z(ESI)495[C25H42N4O6+H]+。
【０２７０】
2-(N,N'-ジ-tert-ブトキシカルボニル)アミノ-3-{4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジノ]ブチル}フェノキシ)エチルアミノ}プロピオンアミド(190)
第一級アミン180(73mg、0.15mmol)およびジイソプロピルエチルアミン(52μL、0.298mmol)の無水エタノール(3mL)溶液を70℃で5分間攪拌し、その後、ヨウ化水素酸1-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)-2-メチルイソチオ尿素(69mg、0.18mmol)を一度に加えた。反応混合物を、その温度で2時間攪拌し、室温に冷却し、ロータリー蒸発により濃縮した。残渣を、ジクロロメタン/メタノール/濃水酸化アンモニウム(200:10:1、150:10:1、および100:10:1、v/v)を用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、所望の生成物190 を黄色固体(68mg、65%収率)として得た。m/z(ESI)707[C31H47ClN10O7+H]+。
【０２７１】
2-アミノ-3-[2-(4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジノ]ブチル}-フェノキシ)エチルアミノ]プロピオンアミドトリハイドロクロライド(200、PSA 18704)
N,N'-ビス(Boc)アミド190およびジオキサン中HCl(4M、3mL)の溶液を、室温で14時間攪拌してから、ロータリー蒸発により濃縮した。残渣を、メタノールに再度溶解し、蒸発乾固し、さらに高度真空下、40℃で16時間乾燥した。生成物200を黄色固体(58mg、98%収率)として得た。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ1.65〜1.75(m,4H)、2.60〜2.69(m,2H)、3.31〜3.37(m,2H)、3.55〜3.68(m,4H)、3.71〜3.76(m,1H)、4.32〜4.35(m,2H)、4.45〜4.48(m,1H)、6.98(d,J=8.5Hz,2H)、7.18(d,J=8.5Hz,2H)。m/z(ESI)507[C21H31ClN10O3+H]+。融点160〜160℃。
【０２７２】
(実施例14)
スキーム6.PSA 19603の合成
【０２７３】
【化３５】
0004679505.tif 000040
【０２７４】
スキーム6.PSA 19603の合成(続き)
【０２７５】
【化３６】
0004679505.tif 000041
【０２７６】
2-(R)-アミノ-5-(4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)-グアニジノ]ブチル}フェニル)ペンタン酸メチルエステル(PSA 19603)の合成
【０２７７】
【化３７】
0004679505.tif 000042
【０２７８】
[4-(4-ヨードフェニル)ブタ-3-インイル]カルバミン酸ベンジルエステル(210)
無水THFおよびトリエチルアミン(24mL、2/1、v/v)の混合物に、連続して1-4-ジヨードベンゼン(2.03g、6.15mmol)およびヨウ化銅(I)(0.094g、0.246mmol)を加えた。混合物を室温で15分間攪拌した。次にフラスコを排気し、アルゴンで再充填した。この手法をさらに3回繰り返して酸素が残っていないことを確認した。触媒のジクロロビス(トリフェニルホスフィン)-パラジウム(II)(0.173g、0.246mmol)を、アルゴン保護下、混合物に加えた。他の出発物質、THF(8mL)に溶かしたブト-3-イニルカルバミン酸ベンジルエステル(0.50g、2.46mmol)を、6時間かけて滴下により加えた。新たに形成された反応混合物を、さらに室温で一晩攪拌した。反応混合物の固体を吸引ろ過した。ろ液を濃縮した。残渣をジクロロメタンに再度溶解し、酢酸エチル(0〜12%)およびヘキサン類(100〜88%)の混液により溶出するカラムクロマトグラフィーにより精製して、生成物210(0.852g、86%)を灰白色固体として得た。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ2.61(t,J=6.4Hz,2H)、3.44(t,J=6.4Hz,2H)、5.07(br s,1H)、5.12(s,2H)、7.10(d,J=8.3Hz,2H)、7.35(m,5H)、7.63(d,J=8.3Hz,2H)。m/z(APCI)405[C18H16NO2+H]+。
【０２７９】
2-(R)-tert-ブトキシカルボニルアミノペンタ-4-イン酸メチルエステル(220)
商品として入手できる化合物、2-(R)-tert-ブトキシカルボニルアミノペンタ-4-イン酸(0.321g、1.50mmol)を、無水DMF(5mL)に溶かした。この溶液に、炭酸セシウム(0.54g、1.65mmol)を一度に加えた。この混合物を室温で45分間攪拌してから、ヨウ化メチル(0.20mL、3.00mmol)を加え、さらに3時間攪拌した。反応液を水(10mL)でクエンチした。有機物をジクロロメタン(2×30mL)で抽出し、水(3×50mL)で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を完全に減圧留去した。さらに残渣を高度真空下で一晩乾燥し、さらに精製することなく次の反応に用いた。生成物220を、無色粘稠性オイル(0.326g、95%収率)として得た。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ1.48(s,9H)、2.08(t,J=2.6Hz,1H)、2.75(t,J=6.3Hz,2H)、3.78(s,3H)、4.46(m,1H)、5.32(br s,5H)。
【０２８０】
5-[4-(4-ベンジルオキシカルボニルアミノブタ-1-インイル)フェニル]-2-(R)-tert-ブトキシカルボニルアミノペンタ-4-イン酸メチルエステル(230)
化合物210、[4-(4-ヨードフェニル)-ブト-3-イニル]カルバミン酸ベンジルエステル(0.52g、1.283mmol)を、無水THFおよびトリエチルアミンの混液(8mL、1/1、v/v)に溶解した。この溶液にヨウ化銅(I)(0.025g、0.128mmol)を加えた。混合物を室温で15分間攪拌した。次にフラスコを排気し、アルゴンで再充填した。この手法をさらに3回繰り返して酸素が残っていないことを確認した。触媒のジクロロビス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(II)(0.09g、0.128mmol)を、アルゴン保護下、混合物に加えた。この混合物を室温でさらに30分間攪拌した。他の出発物質220、THF(4mL)に溶かした2-tert-ブトキシカルボニルアミノ-ペンタ-4-イン酸メチルルエステル(0.32g、1.412mmol)を、15分かけて滴下により加えた。新たに形成された反応混合物を、さらに室温で一晩攪拌した。反応混合物の固体を吸引ろ過した。ろ液を濃縮した。残渣をジクロロメタンに再度溶解し、酢酸エチル(0〜25%)およびヘキサン類(100〜75%)の混液により溶出するカラムクロマトグラフィーにより精製して、生成物230(0.64g、99%)をガム状黄色がかった固体として得た。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ1.46(s,9H)、2.64(t,J=6.3Hz,2H)、2.95(t,J=4.1Hz,2H)、3.42(m,2H)、3.79(s,3H)、4.56(m,1H)、5.12(s,2H)、5.38(br s,1H)、7.29(s,4H)、7.35(m,5H)。m/z(APCI)502[C29H32N2O6-H]+。
【０２８１】
5-[4-(4-アミノブチル)フェニル]-2-(R)-tert-ブトキシカルボニルアミノペンチン酸メチルエステル(240)
化合物230、5-[4-(4-ベンジルオキシカルボニルアミノブト-1-イニル)フェニル]-2-(R)-tert-ブトキシカルボニルアミノペンタ-4-イン酸メチルエステル(0.36g、0.713mmol)を、エタノールとメタノールの混液(50mL、1/1、v/v)に溶解し、Parrシェーカボトルに入れた。この溶液に、アルゴン保護下、10%パラジウム-炭素(0.20g、湿性)を一度に加えた。フラスコを排気し、アルゴンで再充填した。この手法をさらに3回繰り返した。次に、混合物を、35 psiの水素雰囲気下、室温で一晩攪拌した。次にフラスコを排気し、窒素で再充填した。この手法を3回繰り返した。次いで触媒を吸引ろ過し、エタノール(2×5mL)で洗浄した。ろ液と洗液とを合わせて、減圧濃縮した。残渣を、メタノール(0〜12%)、水酸化アンモニウム(0〜1.2%)およびジクロロメタン(100〜86.8%)の混液で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーを行って、2つの生成物、所望の生成物240(0.045g、17%、無色ガラス様固体)およびその保護体250(0.218m、60%、黄色がかった固体)を得た。1H NMR(300MHz,CD3OD)化合物240:δ1.43(s,9H)、1.63〜1.76(m,8H)、2.58〜2.64(m,4H)、2.79(t,J=7.0Hz,2H)、3.69(s,3H)、4.10(m,1H)、7.09(s,4H)。m/z(APCI)化合物7:379[C12H34N2O4+H]+。
1H NMR(300MHz,CD3OD)化合物250:δ1.42(s,9H)、1.61〜1.78(m,8H)、2.54〜2.68(m,4H)、2.92(t,J=7.0Hz,2H)、3.14(t,J=6.9Hz,2H)、3.70(s,3H)、4.13(m,1H)、5.18(s,2H)、7.08(s,4H)、7.35(m,5H)。
【０２８２】
化合物250を、再度水素化に供してベンジルオキシカルボニル保護基を除去した。この手法は以下のとおり実施した:化合物250(0.218g、0.425mmol)をエタノール(10mL)に溶解した。この溶液を、パラジウム触媒(0.10g、10%-活性炭、50%湿性)を加える前と加えた後の双方で窒素で掃流し、水素雰囲気下、2時間水素化に供した。触媒を吸引ろ過し、エタノール(2×5mL)で洗浄した。ろ液と洗液とを合わせて、減圧濃縮した。残渣を、メタノール(0〜14%)、水酸化アンモニウム(0〜1.4%)およびジクロロメタン(100〜84.6%)の混液で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーを行って、化合物240(0.131g、81%)を得た。
【０２８３】
2-(R)-tert-ブトキシカルボニルアミノ-5-(4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)-グアニジノ]ブチル}フェニル)ペンタン酸メチルエステル(270、PSA 19603)
化合物240(0.127g、0.336mmol)をエタノール(4mL)と混合した。この混合物を65℃で30分間加熱して、完全な溶解を達成させた。この透明溶液に、ジイソプロピルエチルアミン(0.29mL、1.68mmol)およびヨウ化水素酸1-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジノイル)-2-メチルイソチオ尿素(0.157g、0.403mmol)を連続して加えた。この混合物を、同じ温度でさらに3時間加熱し、引き続き減圧濃縮した。残渣を、濃水酸化アンモニウム(0〜1.5%)、メタノール(0〜15%)およびジクロロメタン(100〜83.5%)の混液により溶出するシリカゲルクロトグラフィを行って、生成物260(0.169g、85%)を淡黄色固体として得た。生成物260の一部(0.06g)を、メタノール(10mL)に溶解し、濃塩酸(2mL)で1時間処理した。すべての液体を完全に減圧留去し、残渣を再度、濃水酸化アンモニウム(0〜1.1%)、メタノール(0〜11%)およびジクロロメタン(100〜87.9%)の混液により溶出するシリカゲルクロマトグラフィーを行って、所望の生成物270(0.043g、86%)を黄色固体として得た。融点76〜79℃。[α]25D-5.6℃(c 0.31,MeOH)。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ1.54〜1.78(m,8H)、2.58〜2.68(m,4H)、3.26(t,J=6.8Hz,2H)、3.46(t,J=6.4Hz,1H)、3.70(s,3H)、7.10(s,4H)。m/z(APCI)491[C22H31ClN8O3+H]+。
【０２８４】
(実施例15)
スキーム7.PSA 23184の合成
【０２８５】
【化３８】
0004679505.tif 000043
【０２８６】
2-(R)-アミノ-5-(4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)-グアニジノ]ブチル}フェニル)ペンタン酸(PSA 23184)の合成
【０２８７】
【化３９】
0004679505.tif 000044
【０２８８】
5-[4-(4-アミノブチル)フェニル]-2-(R)-tert-ブトキシカルボニルアミノペンタン酸(280)
化合物240(0.40g、0.780mmol)を、メタノールとTHFの混液(10mL、1/1、v/v)に溶解した。この溶液に、水(1mL)に溶かした水酸化リチウム一水和物(0.063g、1.561mmol)を加えた。反応混合物を、室温で2時間攪拌してから、2N水性HCl溶液によりpH 5に中和した。次に混合物を減圧濃縮した。残渣をエタノール(3mL)に溶かし、生じた溶液を再度減圧濃縮した。この手法をさらに2回繰り返して、水性溶媒が残っていないことを確認した。残渣を、濃水酸化アンモニウム(0〜10%)、メタノール(0〜30%)およびジクロロメタン(100〜60%)の混液により溶出するシリカゲルクロマトグラフィーを行って、生成物280(0.29g、75%)を白色固体として得た。1H NMR(300MHz,CD3OD):δ1.46(s,9H)、1.58〜1.78(m,8H)、2.54〜2.68(m,4H)、2.85(t,J=6.6Hz,2H)、3.98(t,J=6.5Hz,1H)、7.08(s,4H)、8.50(s,1H)。m/z(APCI)365[C20H32N2O4+H]+。
【０２８９】
2-(R)-tert-ブトキシカルボニルアミノ-5-(4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジノ]ブチル}フェニル)ペンタン酸(290)
化合物280(0.077g、0.211mmol)をエタノール(5mL)と混合した。この混合物を65℃で15分間加熱して、完全な溶解を達成させた。この透明溶液に、ジイソプロピルエチルアミン(0.184mL、1.056mmol)およびヨウ化水素酸1-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジノイル)-2-メチルイソチオ尿素(0.99g、0.254mmol)を連続して加えた。この混合物を、65℃でさらに3時間加熱した。次にそれは減圧濃縮した。残渣を、濃水酸化アンモニウム(0〜2.2%)、メタノール(0〜22%)およびジクロロメタン(100〜75.8%)の混液により溶出するシリカゲルクロマトグラフィーを行って、生成物290(0.091g、75%)を黄色固体として得た。1H NMR(300MHz,CD6OD):δ1.44(s,9H)、1.58〜1.84(m,8H)、2.54〜2.68(m,4H)、3.34〜3.42(m,2H)、4.02(m,1H)、7.08(s,4H)。m/z(APCI)577[C26H37ClN8O5+H]+。
【０２９０】
2-(R)-アミノ-5-(4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジノ]ブチル}フェニル)ペンタン酸(300、PSA 23184)
化合物290(0.031g、0.0538mmol)を、メタノール(3mL)に溶解し、濃塩酸(0.5mL)で1時間処理した。すべての液体を完全に減圧留去し、残渣を、濃水酸化アンモニウム(0〜8%)、メタノール(0〜30%)およびジクロロメタン(100〜62%)の混液により溶出するシリカゲルクロマトグラフィーを行って、所望の生成物300(0.024g、94%)を黄色固体として得た。融点190〜192℃(分解)。[α]25D-4.3℃(c 0.25,MeOH)。1H NMR(300MHz,CD3OD):δ1.68〜1.83(m,8H)、2.52〜2.62(m,4H)、3.27(t,J=6.8Hz,2H)、3.47(t,J=6.4Hz,1H)、7.09(s,4H)。m/z(APCI)477[C21H29ClN8O3+H]+。
【０２９１】
(実施例16)
スキーム8.PSA 14568の合成
【０２９２】
【化４０】
0004679505.tif 000045
【０２９３】
スキーム8.PSA 14568の合成(続き)
【０２９４】
【化４１】
0004679505.tif 000046
【０２９５】
3-(4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジノ]ブチル}フェニルアミノ)プロピオンアミドジハイドロクロライド(PSA 14568)の合成
【０２９６】
【化４２】
0004679505.tif 000047
【０２９７】
[2-(4-ヨードフェニルカルバモイル)エチル]カルバミン酸tert-ブチルエステル(310)
4-ヨードアニリン(2.0g、9.17mmol)、3-tert-ブトキシカルボニルアミノプロピオン酸(1.61g、8.49mmol)、1-(3-ジメチルアミノプロピル)-3-エチルカルボジイミドハイドロクロライド(1.95g、10.19mmol)、1-ヒドロキシ-7-アザベンゾトリアゾール(0.12g、0.85mmol)、およびDMF(20mL)の混合物を、室温で72時間攪拌した。溶媒を減圧蒸発させた。残渣を、メチレンクロリド(100mL)に溶解し、10%クエン酸(2×50mL)、次いで10%水性K2CO3(2×50mL)で洗浄した。有機層を、硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧蒸発した。フラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、3:1、v/vヘキサン類/酢酸エチル、次いで1:1ヘキサン類/酢酸エチル)により精製して310(2.44g、69%)を得た。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ1.44(s,9H)、2.60(t,2H)、3.49(q,2H)、7.36(d,2H)、7.60(d,2H)。
【０２９８】
{4-[4-(3-tert-ブトキシカルボニルアミノプロピオニルアミノ)フェニル]-ブタ-3-インイル}カルバミン酸ベンジルエステル(320)
[2-(4-ヨードフェニルカルバモイル)エチル]カルバミン酸tert-ブチルエステル310(1.5g、3.84mmol)およびトリエチルアミン(40mL)の溶液に、トランス-ジクロロビス-(トリフェニルホスフィン)パラジウム(II)(Ph3P、PdCl2、0.27g、0.38mmol)を加えた。反応混合物を、20分間攪拌すると透明溶液になった。次に、ブト-3-イニル-カルバミン酸ベンジルエステル(0.94g、4.6mmol)およびヨウ化銅(0.14g、0.768mmol)を加え、反応液を、室温でさらに18時間攪拌した。溶媒を減圧蒸発させた。残渣を、ジクロロメタン(100mL)に溶解し、水(3×150mL)で洗浄した。有機層を、硫酸ナトリウムで乾燥してから、減圧濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、1:1、v/vヘキサン類/酢酸エチル)により精製して320 を得た(1.91g、依然として混合物であるが、これをさらに精製することなく用いた)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ1.44(s,9H)、2.60(m,4H)、3.47(m,4H)、5.12(s,2H)、7.37(m,7H)、7.49(d,2H)。
【０２９９】
{4-[4-(3-tert-ブトキシカルボニルアミノプロピオニルアミノ)フェニル]ブチル}カルバミン酸ベンジルエステル(330)
{4-[4-(3-tert-ブトキシカルボニルアミノプロピオニルアミノ)フェニル]-ブト-3-イニル}カルバミン酸ベンジルエステル320(1.91g、4.1mmol)および1,2-ジメトキシエタン(DME、35mL)の脱気溶液に、10%パラジウム-活性炭(0.5g、50%湿性)を加えた。この混合物を50psiで一晩水素化した。触媒を、セライトのパッドを通してろ過し、溶媒を減圧蒸発させて330(1.78g、99%)を得た。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ1.42(s,9H)、1.58(m,4H)、2.59(t,4H)、3.17(q,2H)、3.47(q,2H)、5.18(m,3H)、5.58(m,1H)、5.70(m,1H)、7.07(d,2H)、7.33(m,5H)、7.49(d,2H)。
【０３００】
{2-[4-(4-アミノブチル)フェニルカルバモイル]エチル}カルバミン酸tert-ブチルエステル(340)
{4-[4-(3-tert-ブトキシカルボニルアミノプロピオニルアミノ)フェニル]ブチル}カルバミン酸ベンジルエステル330(1.78g、3.79mmol)およびメタノール(50mL)の脱気溶液に、10%パラジウム-活性炭(0.5g、50%湿性)を加えた。この混合物を、水素雰囲気で4時間水素化した。触媒を、セライトのパッドを通してろ過し、溶媒を減圧蒸発させた。残渣を、フラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、6:1:0.1、v/vクロロホルム/メタノール/濃水酸化アンモニウム)により精製して、340(0.74g、58%)を得た。1H NMR(300MHz,CH3OD)δ1.44(s,9H)、1.50(m,2H)、1.66(m,2H)、2.60(m,6H)、3.38(m,2H)、7.14(d,2H)、7.44(d,2H)。
【０３０１】
[2-(4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジノ]ブチル}-フェニルカルバモイル)エチル]カルバミン酸tert-ブチルエステル(350)
ヨウ化水素酸1-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)-2-メチルイソチオ尿素(0.32g、0.82mmol)およびトリエチルアミン(0.42mL)を、{2-[4-(4-アミノブチル)フェニルカルバモイル]エチル}カルバミン酸tert-ブチルエステル 340(0.25g、0.74mmol)のエタノール(6mL)溶液に加えた。この反応混合物を、65℃で3時間攪拌し、室温に冷却した。溶媒を減圧蒸発させた。残渣を、フラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、10:1:0.1から5:1:0.1、v/vクロロホルム/メタノール/濃水酸化アンモニウム)により精製した。生成物を水(2×25mL)で洗浄し、真空オーブン中で一晩乾燥して350(0.32g、78%)を黄色固体として得た。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ1.44(s,9H)、1.69(m,4H)、2.57(t,2H)、2.66(t,2H)、3.27(t,2H)、3.40(m,2H)、7.15(d,2H)、7.47(d,2H)。
【０３０２】
(4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジノ]ブチル}フェニルアミノ)プロピオンアミドジハイドロクロライド(360、PSA 14568)
[2-(4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジノ]ブチル}-フェニルカルバモイル)エチル]カルバミン酸tert-ブチルエステル350(0.32g、0.58mmol)のメタノール(5mL)溶液に、濃HCl(7mL)を滴下により加えた。反応液を30分間攪拌した。溶媒を減圧蒸発させて360(0.30g、99%)を黄色固体として得た。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ1.57(m,4H)、2.58(t,2H)、2.75(t,2H)、3.04(m,2H)、3.34(m,2H)、7.15(d,2H)、7.42(m,1H)、7.52(d,2H)、8.11(s,2H)、8.89(s,1H)、9.00(s,1H)、9.32(s,1H)、10.33(s,1H)、10.55(s,1H)。
【０３０３】
(実施例17)
スキーム9.PSA 14984の合成
【０３０４】
【化４３】
0004679505.tif 000048
【０３０５】
N-(4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジノ]ブチル}フェニル)-3-グアニジノプロピオンアミドジハイドロクロライド(PSA 14984)の合成
【０３０６】
【化４４】
0004679505.tif 000049
【０３０７】
N-(4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジノ]ブチル}フェニル)-3-[N",N"'-ビス-(tert-ブトキシカルボニル)グアニジノ]プロピオンアミド(370)
3-アミノ-N-(4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジノ]ブチル}フェニル)プロピオンアミドジハイドロクロライド360(0.2g、0.36mmol)のメタノール(10mL)溶液に、1,3-ジ-(tert-ブトキシカルボニル)-2-(トリフルオロメタンスルホニル)グアニジン(0.22g、0.58mmol)およびトリエチルアミン(0.4mL、2.88mmol)を加えた。この反応混合物を室温で18時間攪拌した。溶媒を減圧蒸発させた。残渣を、フラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、10:1:0.1クロロホルム/メタノール/濃水酸化アンモニウム、v/v)により精製した。生成物を水で洗浄し、音波処理して370(0.20g、77%)を黄色固体として得た。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ1.46(s,9H)、1.49(s,9H)、1.67(m,4H)、2.63(m,4H)、3.25(m,2H)、3.71(t,2H)、7.13(d,2H)、7.42(d,2H)。
【０３０８】
N-(4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジノ]ブチル}フェニル)-3-グアニジノプロピオンアミドジハイドロクロライド(380、PSA 14984)
N-(4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジノ]ブチル}フェニル)-3-[N",N"'-ビス-(tert-ブトキシカルボニル)グアニジノ]プロピオンアミド370(0.20g、0.29mmol)のメタノール(4mL)溶液に、濃HCl(4mL)を滴下により加えた。反応液を室温で4時間攪拌した。溶媒を減圧蒸発させた。残渣を、フラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、2:1:0.15から1:1:0.4、クロロホルム/メタノール/濃水酸化アンモニウム、v/v)により精製した。生成物の純度は84%であった。生成物を、分取HPLCによりさらに精製して、所望の生成物を遊離塩基(0.05g、35%)として得た。ジハイドロクロライド塩は、生成物のメタノール(1mL)溶液に12N HCl(40μL)を加えることにより調製し、引き続き酢酸エチル(10mL)に注いだ。生じた沈殿物をろ過し、真空乾燥して380を黄色固体として得た。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ1.71(m,4H)、2.69(m,4H)、3.32(m,2H)、3.53(m,2H)、7.16(d,2H)、7.48(d,2H)。
【０３０９】
(実施例18)
スキーム10.PSA 15104の合成
【０３１０】
【化４５】
0004679505.tif 000050
【０３１１】
2-(4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジノ]ブチル}フェニルアミノ)アセトアミドジハイドロクロライド(PSA 15104)の合成
【０３１２】
【化４６】
0004679505.tif 000051
【０３１３】
{4-[4-(カルバモイルメチルアミノ)フェニル]ブチル}カルバミン酸tert-ブチルエステル(390)
[4-(4-アミノフェニル)ブチル]カルバミン酸tert-ブチルエステル(0.8g、3.03mmol)、2-ブロモアセトアミド(0.46g、3.33mmol)、トリエチルアミン(0.2mL、3.33mmol)、およびDMF(30mL)の混合物を80℃で20時間攪拌した。TLCは、反応が完了していないことを示した。したがって炭酸銀(0.92g、3.33mmol)を加えた。さらに反応液を80℃で24時間攪拌した。反応混合物はシリカプラグを通過させた。溶媒を減圧蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、3:1酢酸エチル/ジクロロメタン、v/v)により精製して390(0.20g、22%)を白色固体として得た。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ1.42(s,9H)、1.55(m,4H)、2.50(t,2H)、3.03(t,2H)、3.70(s,2H)、6.52(d,2H)、7.00(d,2H)。
【０３１４】
2-[4-(4-アミノブチル)フェニルアミノ]アセトアミド(400)
12N HCl(5mL)を、{4-[4-(カルバモイルメチルアミノ)フェニル]ブチル}カルバミン酸tert-ブチルエステル390(0.2g、0.62mmol)に加えた。反応液を室温で1時間攪拌した。溶媒を減圧蒸発させた。残渣を、フラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、4:1:0.1クロロホルム/メタノール/濃水酸化アンモニウム、v/v)により精製して400(0.10g、70%)を白色固体として得た。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ1.55(m,4H)、2.50(t,2H)、2.68(t,2H)、3.70(s,2H)、6.52(d,2H)、6.97(d,2H)。
【０３１５】
2-(4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジノ]ブチル}フェニルアミノ)アセトアミドジハイドロクロライド(410、PSA 15104)
2-[4-(4-アミノブチル)フェニルアミノ]アセトアミド400(0.19g、0.86mmol)、ヨウ化水素酸1-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)-2-メチルイソチオ尿素(0.33g、0.86mmol)およびトリエチルアミン(0.50mL)を、エタノール(10mL)に合わせた。この混合物を、72℃で5時間攪拌した。溶媒を減圧蒸発させた。残渣を、フラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、4:1:0.1クロロホルム/メタノール/濃水酸化アンモニウム、v/v)により精製した。クロマトグラフィーを繰り返して遊離塩基(0.12g、32%)を黄色固体として得た。この塩は、2-(4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジノ]ブチル}フェニルアミノ)アセトアミド(40mg)のメタノール(0.5mL)溶液に1滴の濃HClを添加することにより調製された。次に、この溶液を酢酸エチル(20mL)に注いだ。生じた沈殿物をろ過し、次いで水に溶かし、蒸発させて410(0.031g)を黄色固体として得た。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ1.71(m,4H)、2.75(t,2H)、3.38(t,2H)、4.19(s,2H)、7.47(s,4H)。
【０３１６】
(実施例19)
スキーム11.PSA 18150の合成
【０３１７】
【化４７】
0004679505.tif 000052
【０３１８】
4-(4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジノ]ブチル}フェニルアミノ)ブチルアミドジハイドロクロライド(PSA 18150)の合成
【０３１９】
【化４８】
0004679505.tif 000053
【０３２０】
4-[4-(4-tert-ブトキシカルボニルアミノブチル)フェニルアミノ]酪酸エチルエステル(420)
[4-(4-アミノフェニル)ブチル]カルバミン酸tert-ブチルエステル(1.7g、6.43mmol)、4-ブロモ-n-酪酸エチルエステル(1.88g、9.64mmol)、4-メチルモルホリン(1.0mL、9.64mmol)、およびDMF(10mL)の溶液を、窒素雰囲気下、85℃で3時間攪拌した。溶媒を減圧蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、4:1、ヘキサン類/酢酸エチル、v/v)により精製して420(0.44g、18%)を無色オイルとして得た。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ1.23(t,3H)、1.47(s,9H)、1.55(m,4H)、1.96(m,2H)、2.43(t,2H)、2.51(t,2H)、3.19(m,4H)、4.14(q,2H)、6.54(d,2H)、7.00(d,2H)。m/z(ESI)379。
【０３２１】
{4-[4-(3-カルバモイルプロピルアミノ)フェニル]ブチル}カルバミン酸tert-ブチルエステル(430)
4-[4-(4-tert-ブトキシカルボニルアミノブチル)フェニルアミノ]酪酸エチルエステル420(0.44g、1.16mmol)をメタノール(40mL)中7N NH3に加えた。反応液を30℃で18時間、45℃で25時間、最後に50℃で84時間攪拌した。溶媒を減圧蒸発させた。残渣を、フラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、20:1:0.1、クロロホルム/メタノール/濃水酸化アンモニウム、v/v)により精製して、430(0.23g、56%)を白色固体として得た。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ1.47(s,9H)、1.55(m,4H)、1.96(m 2H)、2.37(t,2H)、2.50(t,2H)、3.11(m,4H)、6.52(d,2H)、6.97(d,2H)。m/z(ESI)350。
【０３２２】
{4-[4-(4-アミノブチル)フェニルアミノ]ブチルアミド(440)
{4-[4-(3-カルバモイルプロピルアミノ)フェニル]ブチル}カルバミン酸tert-ブチルエステル430(0.23g、0.66mmol)を氷浴中で0℃に冷却した。TFA/ジクロロメタン(10mL)の冷却溶液を加えた。反応液を、徐々に室温まで温めてから30分間攪拌した。溶媒を減圧蒸発させて440を得た。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ1.69(m,4H)、1.95(m,2H)、2.47(m,2H)、2.71(m,2H)、2.93(m,2H)、3.39(m,2H)、7.39(s,4H)。m/z(ESI)250。
【０３２３】
4-(4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジノ]ブチル}フェニルアミノ)ブチルアミドジハイドロクロライド(450、PSA 18150)
{4-[4-(4-アミノブチル)フェニルアミノ]ブチルアミド440(0.16g、0.64mmol)、ヨウ化水素酸1-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)-2-メチルイソチオ尿素(0.27g、0.71mmol)およびトリエチルアミン(0.90mL)を、エタノール(5mL)に合わせた。この反応液を、50℃で2時間攪拌した。溶媒を減圧蒸発させた。残渣を、連続してジエチルエーテル(2×5mL)と水(5mL)とで洗浄し、次にフラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、8:1:0.1クロロホルム/メタノール/濃水酸化アンモニウム、v/v)により精製した。得られた生成物を、さらにエタノール(5mL)で洗浄して純粋な遊離塩基450(0.15g、51%)を得た。この塩は、4-(4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジノ]ブチル}フェニルアミノ)ブチルアミド(50mg)のメタノール(1.0mL)溶液に12N HCl(18.4μL)を添加することにより調製され、次に、これをジエチルエーテルに注いだ。透明液をデカントすることにより固体を分離し、次いで水に溶かした。減圧下ですべての液体を除去することにより、450(0.05g)を黄色固体として得た。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ1.55(m,4H)、1.91(t,2H)、2.15(t,2H)、2.71(m,2H)、3.33(m,2H)、6.92(s,1H)、7.35(s,2H)、7.49(s,2H)、8.93(m,2H)、9.31(s,1H)、10.45(s,1H)。m/z(EST)462。
【０３２４】
(実施例20)
スキーム12.PSA 18345の合成
【０３２５】
【化４９】
0004679505.tif 000054
【０３２６】
4-(4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジノ]ブチル}フェニルアミノ)酪酸(PSA 18345)の合成
【０３２７】
【化５０】
0004679505.tif 000055
【０３２８】
4-[4-(4-アミノブチル)フェニルアミノ]酪酸(460)
2.5N水性NaOH(1.2mL)を、水(25mL)とTHF(30mL)との混液に溶解された4-[4-(4-tert-ブトキシカルボニルアミノブチル)フェニルアミノ]酪酸エチルエステル420(0.45g、1.18mmol)の溶液に加えた。反応液を2時間攪拌した。12N HClを、pH 3になるまで滴下により加えた。溶媒を減圧蒸発させた。残渣を、0℃に冷却し、TFA/ジクロロメタン(10mL)の溶液を加えた。反応液を30分間攪拌した。溶媒を減圧蒸させた。残渣を、フラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、4:1:0.1クロロホルム/メタノール/濃水酸化アンモニウム、v/v)により精製して460(0.38g、100%)を得た。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ1.61(m,4H)、1.82(m,2H)、2.29(t,2H)、2.50(m,2H)、2.88(m,2H)、3.09(t,2H)、6.58(d,2H)、6.92(d,2H)。m/z(ESI)251。
【０３２９】
4-(4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジノ]ブチル}フェニルアミノ)酪酸(470、PSA 18345)
4-[4-(4-アミノブチル)フェニルアミノ]酪酸460(0.24g、0.94mmol)、ヨウ化水素酸1-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)-2-メチルイソチオ尿素(0.37g、0.94mmol)およびトリエチルアミン(1.0mL)を、エタノール(5mL)に合わせた。この反応液を、50℃で4時間攪拌した。溶媒を減圧蒸発させた。残渣を、フラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、4:1:0.1、2:1:0.1クロロホルム/メタノール/濃水酸化アンモニウム、v/v)により2度精製して470(0.12g、27%)を黄色固体として得た。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ1.67(m,4H)、1.89(m,2H)、2.30(t,2H)、2.59(m,2H)、3.09(t,2H)、3.30(m,2H)、6.58(d,2H)、6.92(d,2H)。m/z(ESI)463。
【０３３０】
(実施例21)
スキーム13.PSA 16826の合成
【０３３１】
【化５１】
0004679505.tif 000056
【０３３２】
2-(4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジノ]ブチル}フェノキシ)-N,N-ビス-(2-ヒドロキシエチル)アセトアミド(PSA 16826)の合成
【０３３３】
【化５２】
0004679505.tif 000057
【０３３４】
[4-(4-ベンジルオキシカルボニルアミノブチル)フェノキシ]酢酸エチルエステル(480)
[4-(4-ヒドロキシフェニル)ブチル]カルバミン酸ベンジルエステル(2.0g、6.7mmol)、炭酸カリウム(1.0g、7.3mmol)、ヨウ化ナトリウム(0.4g、2.7mmol)、およびDMF(10mL)の溶液を、30分間攪拌した。この反応液にブロモ酢酸エチル(0.8mL、7.4mmol)のDMF(10mL)溶液を、滴下により加えた。反応液をさらに室温で3日間攪拌してから、水(200mL)に注いだ。生成物を酢酸エチルで抽出した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧濃縮した。残渣を、フラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、1:5酢酸エチル/ヘキサン類、v/v)により精製して所望の生成物480(2.3g、89%)を白色固体として得た。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ1.34(t,3H)、1.57(m,4H)、2.56(t,2H)、3.20(q,2H)、4.25(q,2H)、4.59(s,2H)、5.10(s,2H)、6.85(d,2H)、7.06(d,2H)、7.38(m,5H)。
【０３３５】
[4-(4-{[N.N-ビス-(2-ヒドロキシエチル)カルバモイル]メトキシ}フェニル)ブチル]カルバミン酸ベンジルエステル(490)
[4-(4-ベンジルオキシカルボニルアミノブチル)フェノキシ]酢酸エチルエステル480(0.3g、0.78mmol)、2-(2-ヒドロキシエチルアミノ)エタノール(0.15mL、1.6mmol)、およびエタノール(20mL)の溶液を、70℃で72時間加熱した。溶媒を減圧蒸発した。残渣を、フラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、ジクロロメタン/メタノール、100:5〜1、v/v)により精製して、490(0.19g、回収した出発物質(0.13g)を基準にして100%)を淡黄色固体として得た。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ1.55(m,4H)、2.56(t,2H)、3.20(q,2H)、3.60(m,4H)、3.90(m,2H)、3.96(m,2H)、4.85(s,2H)、5.09(s,2H)、6.85(d,2H)、7.06(d,2H)、7.40(m,5H)。m/z(ESI)445。
【０３３６】
2-[4-(4-アミノブチル)フェノキシ]-N,N-ビス-(2-ヒドロキシエチル)アセトアミド(500)
[4-(4-{[N.N-ビス-(2-ヒドロキシエチル)カルバモイル]メトキシ}フェニル)ブチル]カルバミン酸ベンジルエステル490(0.19g、0.43mmol)のエタノール(4mL)脱気溶液に、10%パラジウム-活性炭(0.1g、50%湿性)を加えた。この混合物を水素雰囲気下で一晩水素化した。触媒を、セライトのパッドを通してろ過し、溶媒を減圧蒸発させた。残渣を、フラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、20〜5:1:0.1〜1ジクロロメタン/メタノール/濃水酸化アンモニウム、v/v)により精製して500(0.09g、72%)を無色オイルとして得た。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ1.56(m,4H)、2.56(t,2H)、2.65(t,1H)、3.29(m,1H)、3.55(m,4H)、3.72(m,4H)、4.90(s,2H)、6.86(d,2H)、7.09(d,2H)。m/z(ESI)311。
【０３３７】
2-(4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジノ]ブチル}フェノキシ)-N,N-ビス-(2-ヒドロキシエチル)アセトアミド(510、PSA 16826)
ヨウ化水素酸1-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)-2-メチルイソチオ尿素(0.13g、0.33mmol)を、2-[4-(4-アミノブチル)フェノキシ]-N,N-ビス-(2-ヒドロキシエチル)アセトアミド500(0.09g、0.3mmol)、トリエチルアミン(0.12mL)とエタノール(1.7mL)の溶液に加えた。この反応混合物を、60℃で3時間攪拌した。溶媒を減圧蒸発した。残渣を水で洗浄し、次にフラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、20〜10:1:0〜0.2ジクロロメタン/メタノール/濃水酸化アンモニウム、v/v)により精製して、510(0.1g、64%)を黄色固体として得た。このジハイドロクロライド塩は、生成物(40mg)のメタノール(2mL)溶液に、4N HCl(3滴)を添加することにより調製した。いくらかの分解がHPLCにより見られた。したがって、生成物を、分取TLCプレート(10:2:0.2ジクロロメタン/メタノール/濃水酸化アンモニウム、v/vにより展開)により再度精製して、510(20mg)を黄色固体として得た。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ1.65(m,4H)、2.58(t,2H)、3.33(m,2H)、3.54(m,4H)、3.72(m,4H)、4.89(s,2H)、6.86(d,2H)、7.09(d,2H)。m/z(ESI)523。
【０３３８】
(実施例22)
スキーム14.PSA 19605の合成
【０３３９】
【化５３】
0004679505.tif 000058
【０３４０】
スキーム14.PSA 19605の合成(続き)
【０３４１】
【化５４】
0004679505.tif 000059
【０３４２】
3-(4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジノ]ブチル}フェニルチオ)プロピオンアミド(PSA 19605)の合成
【０３４３】
【化５５】
0004679505.tif 000060
【０３４４】
N-{4-[4-(ジメチルチオカルバモイルオキシ)フェニル]ブチル}フタルイミド(520)
鉱油中の水素化ナトリウム(60%の0.44g)の無水DMF(10mL)懸濁液を0℃に冷却した。乾燥DMF(15mL)に溶解させたN-[4-(4-ヒドロキシフェニル)ブチル]フタルイミド(2.95g、10mmol)を前記混合物に加え、次いで0℃で30分間攪拌し、1時間かけて室温に温めた。この混合物に、DMF(10mL)に溶解させた塩化N,N-ジメチルチオカルバモイル(1.35g、11mmol)を少量ずつ加えた。新たに形成された混合物を室温で一晩、次いで50℃で1時間攪拌し、室温まで冷却して、この時点でメタノール(10mL)を混合物に加えた。溶媒を減圧留去した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー(ジクロロメタン/ヘキサン/酢酸エチル、10:1:0.2、v/v)により精製して、N-{4-[4-(ジメチルチオカルバモイルオキシ)フェニル]ブチル}フタルイミド520(2.27g、59%)をわずかに黄色の固体として得た。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ1.72(m,4H)、2.66(m,2H)、3.33(s,3H)、3.45(s,3H)、3.70(m,2H)、6.96(d,2H)、7.18(d,2H)、7.71(m,2H)、7.84(m,2H)。m/z(ESI)383[C21H22N2O3S+H]+。
【０３４５】
N-{4-[4-(ジメチルカルバモイルチオ)フェニル]ブチル}フタルイミド(530)
N-{4-[4-(ジメチルチオカルバモイルオキシ)フェニル]ブチル}フタルイミド520(2.1g、5.4mmol)を、230℃に予め加熱された砂浴中に入れた。温度を280℃に上昇させて、溶融化合物をアルゴン雰囲気下、この温度で2時間維持した。混合物を冷却し、残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー(ジクロロメタン/ヘキサン/酢酸エチル、10:1:0.2、v/v)により精製して、530(1.2g、57%)を白色粉末として得た。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ1.70(m,4H)、2.66(t,2H)、3.05(br s,3H)、3.71(t,2H)、6.96(d,2H),7.19(d,2H)、7.38(d,2H)、7.70(m,2H)、7.83(m,2H)。m/z(ESI)383[C21H22N2O3S+H]+。
【０３４６】
{4-[4-(ジメチルカルバモイルチオ)フェニル]ブチルアミン(540)
フタルイミド530(1.1g、2.8mmol)を、エタノール(100mL)中6.6%メチルアミンを含有する溶液中に溶解し、室温で一晩攪拌した。溶媒を減圧留去し、残渣をフラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、クロロホルム/メタノール/水酸化アンモニウム、10:1:0.1、v/v)により精製して、遊離アミン540(0.31g、42%)を白色粉末として得た。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ1.51(m,2H)、1.65(m,2H)、2.66(m,4H)、3.02(m,6H)、7.23(d,2H)、7.35(d,2H)。
【０３４７】
N-tert-ブトキシカルボニル-{4-[4-(ジメチルカルバモイルチオ)フェニル]ブチルアミン(550)
ジ-tert-ブチルジカーボネート(0.35g、1.6mmol)を、540(0.31g、1.22mmol)、4-ジメチルアミノピリジン(DMAP)、およびジクロロメタン(50mL)の溶液に加えた。混合物を室温で26時間攪拌した。溶媒を減圧留去し、残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー(ヘキサン/酢酸エチル、3:1、v/v)により精製して、540(0.36g、83%)を白色粉末として得た。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ1,44(s,9H)、1.51(m,2H)1.64(m,2H)、3.08(m,8H)、4.48(br s,1H)、7.18(d,2H)、7.39(d,2H)。
【０３４８】
N-[4-(4-メルカプトフェニル)ブチル]カルバミン酸tert-ブチルエステル(560)
N-tert-ブトキシカルボニル-{4-[4-(ジメチルカルバモイルチオ)フェニル]ブチルアミン550(0.35g、1.02mmol)を、MeOH(8mL)に溶解させた。水(2mL)に溶解させたKOH(0.19g、3.4mmol)を加えた。混合物を6時間還流攪拌し、室温に冷却した。溶媒を減圧留去した。残渣を水に溶解して、5%水性HClにより約pH5の酸性にした。溶媒を再度減圧留去し、残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー(ヘキサン/酢酸エチル、3:1、v/v)により精製して、所望のチオフェノール560(0.13g、45%)を透明オイルとして得た。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ1.43(s,9H)、1.49(m,2H)1.59(m,2H)、2.57(t,2H)、3.12(m,2H)、3.38(s,1H)、4.47(br s,1H)、7.04(d,2H)、7.19(d,2H)。
【０３４９】
{4-[4-(2-カルバモイルエチルチオ)フェニル]ブチル}カルバミン酸tert-ブチルエステル(570)
3-ブロモプロピオン酸アミド(0.075g、0.5mmol)のTHF(5mL)溶液を、THF(15mL)に溶解させた[4-(4-メルカプトフェニル)ブチル]カルバミン酸tert-ブチルエステル560(0.13g、0.46mmol)および4-メチルモルホリン(NMM)(0.3mL)の溶液に加えた。反応混合物を、50℃で4時間攪拌してから、室温に冷却した。2当量以上の3-ブロモプリオン酸アミド(0.15g、1mmol)を加えた。この混合物をさらに、室温で2日間攪拌した。溶媒を再度減圧留去し、残渣をフラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、クロロホルム/メタノール/水酸化アンモニウム、15:1:0.1、v/v)により精製して、所望の生成物{4-[4-(2-カルバモイルエチルスルファニル)フェニル]ブチル}カルバミン酸tert-ブチルエステル570(0.13g、80%)を白色粉末として得た。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ1.42(s,9H)、1.48(m,2H)1.60(m,2H)、2.46(m,2H)、2.58(t,2H)、3.09(t,2H)、3.13(m,2H)、7.14(d,2H)、7.29(d,2H)。m/z(ESI)353[C18H28N2O3S+H]+。
【０３５０】
3-[4-(4-アミノブチル)フェニルチオ]プロピオンアミドジハイドロクロライド(580)
保護アミン570をTHF(5mL)に溶解し、ジオキサン(5mL)中の4N HClを加えた。混合物を室温で6時間攪拌した。溶媒を減圧留去し、残渣を真空乾燥してジハイドロクロライド塩580(0.11g、100%)を白色粉末として得た。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ1.56(m,4H)、2.35(t,2H)、2.56(t,2H)、2.47(m,2H)、3.08(t,2H)、6.68(br s,1H)、7.15(d,2H)、7.27(d,2H)、7.37(br s,1H)、7.78(br s,3H)。m/z(ESI)253[C13H20N2OS+H]+。
【０３５１】
3-(4-{4-[N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジノ]ブチル}フェニルチオ)プロピオンアミド(590、PSA 19605)
ジイソプロピルエチルアミン(0.4mL、2.2mmol)およびヨウ化水素酸[1-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン)-2-メチルイソチオ尿素(0.17g、0.44mmol)を、580(0.11g、0.31mmol)のエタノール(8mL)溶液に連続して加えた。この反応混合液を、60℃で6時間攪拌した。溶媒を減圧留去し、残渣を水(10mL)で処理した。形成された沈殿物を遠心分離により採取した。生成物の一部をフラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、クロロホルム/メタノール/水酸化アンモニウム、15:1:0.1、v/v)により精製して、標的化合物590(0.027g、18%)を黄色粉末として得た。(300MHz,CD3OD)δ1.6(m,4H)、2.47(m,2H)、2.62(t,2H)、3.12(t,2H)、3.23(m,2H)、7.14(d,2H)、7.29(d,2H)。m/z(APCI)465[C19H25ClN8O2S+H]+。
【０３５２】
(実施例23)
スキーム15.PSA 16436の合成
【０３５３】
【化５６】
0004679505.tif 000061
【０３５４】
N-{4-[4-(2-アミノエチルアミノ)フェニル]ブチル}-N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジン(PSA 16436)の合成
【０３５５】
【化５７】
0004679505.tif 000062
【０３５６】
N-{4-[4-(2-tert-ブトキシカルボニルアミノエチルアミノ)フェニル]ブチル}カルバミン酸ベンジルエステル(600)
N-tert-ブトキシカルボニルアミノアセトアルデヒド(0.28g、1.76mmol)の1,2-ジクロロエタン(DCE、5mL)溶液を、[4-(4-アミノフェニル)ブチル]カルバミン酸ベンジルエステル(0.48g、1.6mmol)のDCE(10mL)溶液および酢酸(0.108mL、1.6mmol)に加えた。混合物を室温で20分間攪拌した。次にNaB(OAc)3H(0.48g、2.26mmol)を前記混合物に加えて、さらに室温で一晩攪拌した。水(10mL)を加え、この混合物を10%水性HClによりpH 7の酸性にした。有機フラクションを分離し、硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、残渣をFlash(商標)(BIOTAGE社)(90gシリカゲルカートリッジ40M、酢酸エチル/へキサン、1:2、v/v)により精製して保護ジアミン600(0.33g、47%)を白色粉末として得た。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ1.45(s,9H)、1.54(m,2H)、2.51(m,2H)、3.18(m,4H)、3.36(m,2H)、3.89(br s,1H)、4.69(br s,1H)、4.78(br s,1H)、5.51(s,2H)、6.54(d,2H)、6.96(d,2H)、7.33(m,5H)。m/z(ESI)442[C25H35N3O4+H]+。
【０３５７】
N-{2-[4-(4-アミノブチル)フェニルアミノ]エチル}カルバミン酸tert-ブチルエステル(610)
保護ジアミン600(0.315g、0.71mmol)を、メタノール(25mL)中、水素雰囲気下で10% Pd/C(137mg、50%湿性)と共に室温で4時間攪拌した。触媒をろ取し、溶媒を減圧留去してアミン610(0.21g、96%)を透明オイルとして得た。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ1.46(m,11H),1.56(m,2H)、2.51(m,2H)、2.68(m,2H)、3.22(m,2H)、3.54(m,2H)、3.82(br s,1H)、4.80(br s,1H)、6.54(d,2H)、6.98(d,2H)。
【０３５８】
[2-(4-{4-[N'-3,5-ジアミノ-6-クロロ-ピラジン-2-カルボニルグアニジノ]ブチル}フェニルアミノ)エチル]カルバミン酸tert-ブチルエステル(620)
ジイソプロピルエチルアミン(0.3mL、1.65mmol)およびヨウ化水素酸[1-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン)-2-メチルイソチオ尿素(0.254g、0.67mmol)を、610(0.20g、0.67mmol)のエタノール(10mL)溶液に連続して加えた。この反応混合液を、60℃で4時間攪拌した。溶媒を減圧留去し、残渣を酢酸エチルと水とで洗浄し、減圧乾燥した。残渣の一部をFlash(商標)(BIOTAGE社)(90gシリカゲルカートリッジ40M、クロロホルム/メタノール/水酸化アンモニウム、10:1:0.1、v/v)により精製して620(0.206g、60%)を黄色粉末として得た。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ1.42(s,9H)、1.62(m,4H)、2.52(m,2H)、3.15(m,2H)、3.22(m,4H)、6.57(d,2H)、6.95(d,2H)。m/z(ESI)520[C23H34ClN9O3+H]+。
【０３５９】
N-{4-[4-(2-アミノエチルアミノ)フェニル]ブチル}-N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジントリハイドロクロライド(630、PSA 16346)
保護グアニジン620をメタノール(7mL)とジオキサン(12mL)中4N HClの混液に溶解した。混合物を室温で2.5時間攪拌した。形成された沈殿物を、遠心分離により採取し、減圧乾燥した。乾燥黄色粉末を水性HCl(5%)に溶解し、溶媒を蒸発させて、ジハイドロクロライド塩630(0.14g、75%)を黄色粉末として得た。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ1.74(m,4H)、2.77(m,2H)、3.39(m,4H)、3.73(m,2H)、7.47(d,2H)、7.58(d,2H)。m/z(ESI)420[C18H26ClN9O+H]+。
【０３６０】
(実施例24)
スキーム16.PSA 17339の合成
【０３６１】
【化５８】
0004679505.tif 000063
【０３６２】
N-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)-N'-{4-[(2-グアニジノエチルアミノ)フェニル]ブチル}グアニジントリハイドロクロライド(PSA 17339)の合成
【０３６３】
【化５９】
0004679505.tif 000064
【０３６４】
N-(4-{4-[2-(N',N"-ジ-tert-ブトキシカルボニルグアニジノ)エチルアミノ]フェニル}ブチル)-N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジン(640)
メタノール(3mL)中、ジイソプロピルエチルアミン(0.12mL、0.6mmol)およびN,N'-ジ-(tert-ブトキシカルボニル)-N"-トリフルオロメタンスルホニルグアニジン(Goodman試薬)(0.12g、0.30mmol)を、630のメタノール(5mL)懸濁液に連続して加えた。この反応混合液を、室温で2日間攪拌した。溶媒を減圧留去し、残渣をフラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、クロロホルム/メタノール/水酸化アンモニウム、10:1:0.1、v/v)により精製した。得られた黄色固体を水洗し、真空乾燥して640(0.076g、57%)を黄色粉末として得た。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ1.48(s,9H)、1.50(s,9H)、1.67(m,4H)、2.57(m,2H)、3.26(m,4H)、3.55(m,2H)、6.63(d,2H)、6.95(d,2H)。m/z(ESI)662[C29H44ClN11O5+H]+。
【０３６５】
N-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)-N'-{4-[(2-グアニジノエチルアミノ)フェニル]ブチル}グアニジントリハイドロクロライド(650、PSA 17339)
化合物640(0.072g、0.11mmol)を、33%水性HCl(10mL)中、室温で3時間攪拌した。溶媒を減圧留去した。残渣を0.1%水性TFAに溶かし、分取HPLC(C 8 SpherosorbカラムS5C8、定組成法、0.1% TFA水/アセトニトリル、75%:25%、v/v)により精製した。標的化合物を含有するフラクションを合わせて、溶媒を減圧留去した。残渣を5% HClに溶解し、溶媒を再度減圧留去した。この操作を2回繰り返した。得られた化合物を水に溶解し、凍結乾燥して650(0.012g、20%)を黄色固体として得た。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ1.74(m,4H)、2.77(m,2H)、3.37(m,2H)、3.63(m,4H)、7.40〜7.56(m,4H)。m/z(ESI)462[C19H28ClN11O5+H]+。
【０３６６】
(実施例25)
スキーム17.PSA 16311の合成
【０３６７】
【化６０】
0004679505.tif 000065
【０３６８】
N-(4-{4-[{2-(N,N-ビス-((2S)-2,3-ジヒドロキシプロピル)アミノ]エチル}-N-((2S)-2,3-ジヒドロキシプロピル)アミノ]フェニル}ブチル)-N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジン(PSA 16311)の合成
【０３６９】
【化６１】
0004679505.tif 000066
【０３７０】
N-{4-[4-(2-アミノエチル)アミノフェニル]ブチル}カルバミン酸tert-ブチルエステル(660)
トルエン中、N-[4-(4-アミノフェニル)ブチル]カルバミン酸tert-ブチルエステル(4.5g、17mmol)および臭化水素2-ブロモエチルアミン(1.75g、8.5mmol)の混合物を、100℃で3日間攪拌した。溶媒を減圧留去し、残渣をフラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、クロロホルム/メタノール/水酸化アンモニウム、8:1:0.1、v/v)により精製して、660(1.47g、56%)を白色粉末として得た。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ1.42(s,9H)、1.51(m,4H)、2.48(t,2H)、2.85(t,2H)、3.03(t,2H)、3.17(m,2H)、6.59(d,2H)、6.94(d,2H)。m/z(ESI)308[C17H29lN3O2+H]+。
【０３７１】
N-tert-ブトキシカルボニル-4-{4-[{2-(N,N-ビス-((2S)-2,3-ジヒドロキシプロピル)アミノ]エチル}-N-((2S)-2,3-ジヒドロキシプロピル)アミノ]フェニル}ブチルアミン(670)
エタノール(6mL)中、(R)-(+)-グリシドール(0.22g、3mmol)およびアミン660の混合物を、70℃(油浴)で一晩攪拌した。溶媒を減圧留去し、残渣をFlash(商標)(BIOTAGE社)(90gシリカゲルカートリッジ40M、クロロホルム/メタノール/水酸化アンモニウム、7:1:0.1、v/v)により精製して670(0.27g、60%)を透明オイルとして得た。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ1.42(s,9H)、1.44(m,2H)、1.56(m,2H)、2.45〜2.78(br m,6H)、3.0(m,2H)、3.32(m,8H)、3.52(m,8H)、3.72(m,2H)、3.85(m,1H)、6.70(d,2H)、6.98(d,2H)。
【０３７２】
4-{4-[{2-(N,N-ビス-((2S)-2,3-ジヒドロキシプロピル)アミノ]エチル}-N-((2S)-2,3-ジヒドロキシプロピル)アミノ]フェニル}ブチルアミンビス-(トリフルオロアセテート)(680)
ジクロロメタン(2mL)を、保護アミン670(0.27g、0.5mmol)に加え、次いでTFA(5mL)を加えた。混合物を、室温で25分間攪拌した。溶媒を減圧留去し、残渣をメタノールに溶解し、溶媒を再度減圧留去した。残渣を、一晩真空乾燥して、化合物680(0.31g、80%)を透明オイルとして得た。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ1.66(m,4H)、2.59(m,2H)、2.92(m,2H)、3.15〜4.10(m,20H)、6.78(d,2H)、6.98(d,2H)。
【０３７３】
N-(4-{4-[{2-(N,N-ビス-((2S)-2,3-ジヒドロキシプロピル)アミノ]エチル}-N-((2S)-2,3-ジヒドロキシプロピル)アミノ]フェニル}ブチル)-N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジン(690、PSA 16311)
トリエチルアミン(0.5mL、3.6mmol)およびヨウ化水素酸[1-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン)-2-メチルイソチオ尿素(0.20g、0.52mmol)を、680(0.31g、0.40mmol)のエタノール(10mL)溶液に連続して加えた。この反応液を、70℃(油浴)で2.5時間攪拌してから、室温で一晩攪拌した。溶媒を減圧留去し、残渣をFlash(商標)(BIOTAGE社)(90gシリカゲルカートリッジ40M、クロロホルム/メタノール/水酸化アンモニウム、3:1:0.3、v/v)により精製して690(0.127g、17%)を黄色粉末として得た。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ1.64(m,4H)、2.49〜2.81(m,8H)、3.25(m,4H)、3.51(m,9H)、3.70(m,2H)、3.85(m,1H)、6.71(d,2H)、7.00(d,2H)。m/z(ESI)642[C27H44ClN9O7+H]+。768[C27H44ClN9O7+I]-。[α]25D=-23.4°(c=0.5,MeOH)。
【０３７４】
(実施例26)
スキーム18.PSA 16722の合成
【０３７５】
【化６２】
0004679505.tif 000067
【０３７６】
N-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)-N'-{4-[4-((2R)-2,3-ジヒドロキシプロピルアミノ)フェニル]ブチル}グアニジン(PSA 16722)の合成
【０３７７】
【化６３】
0004679505.tif 000068
【０３７８】
{4-[4-((2R)-2,3-ジヒドロキシプロピルアミノ)フェニル]ブチル}カルバミン酸ベンジルエステル(700)
(S)-(-)-グリシドール(0.16mL、2.3mmol)のエタノール(5mL)溶液を、N-[4-(4-アミノフェニル)ブチル]カルバミン酸ベンジルエステル(0.59g、1.97mmol)のエタノール(15mL)攪拌溶液に70℃で滴下により加えた。反応混合物を、70℃(油浴)で一晩攪拌した。溶媒を減圧留去し、残渣をFlash(商標)(BIOTAGE社)(90gシリカゲルカートリッジ40M、クロロホルム/メタノール/水酸化アンモニウム、15:1:0.1、v/v)により精製して700(0.29g、40%)を白色固体として得た。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ1.51(m,4H)、2.48(t,2H)、3.07(m,1H)、3.26(t,2H)、3.30(m,1H)、3.57(m,2H)、3.80(m,1H)、5.00(s,2H)、6.59(d,2H)、6.99(d,2H)、7.33(m,5H)。m/z(ESI)373[C21H28N2O4+H]+。
【０３７９】
4-[4-((2R)-2,3-ジヒドロキシプロピルアミノ)フェニル]ブチルアミン(710)
メタノール(20mL)中、保護アミン700(0.29g、0.77mmol)を、水素(1気圧)下で10% Pd/C(129mg、50%湿性)と共に室温で6時間攪拌した。触媒をろ取し、溶媒を減圧留去してアミン710(0.165g、90%)を透明オイルとして得た。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ1.56(m,4H)、2.51(t,2H)、2.71(t,2H)、3.02(m,1H)、3.27(m,1H)、3.30(m,2H)、3.56(m,2H)、3.80(m,1H)、6.60(d,2H)、6.95(d,2H)。m/z(ESI)239[C13H22N2O2+H]+。
【０３８０】
N-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)-N'-{4-[4-((2R)-2,3-ジヒドロキシプロピルアミノ)フェニル]ブチル}グアニジン(720、PSA 16722)
ジイソプロピルエチルアミン(0.5mL、2.75mmol)およびヨウ化水素酸[1-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジノイル)-2-メチルイソチオ尿素(0.272g、0.70mmol)を、710(0.165g、0.70mmol)のエタノール(10mL)溶液に連続して加えた。この反応混合液を、70℃(油浴)で4時間攪拌した。溶媒を減圧留去し、残渣を、酢酸エチルと水(5mL、各回一度だけ)とで連続して洗浄し、減圧乾燥した。乾燥粗製物を、フラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、クロロホルム/メタノール/水酸化アンモニウム、4:1:0.15、v/v)により精製して標的化合物720(0.168g、54%)を黄色粉末として得た。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ1.63(m,4H)、2.53(t,2H)、3.02(m,1H)、3.22(m,2H)、3.27(m,1H)、3.57(m,2H)、3.81(m,1H)、6.60(d,2H)、6.96(d,2H)。m/z(ESI)=451[C19H27ClN8O3+H]+。[α]25D=+6.9°(c=0.5,MeOH)。
【０３８１】
(実施例27)
スキーム19.PSA 16721の合成
【０３８２】
【化６４】
0004679505.tif 000069
【０３８３】
N-(4-{4-[{2-[((2R)-2,3-ジヒドロキシプロピル)アミノ]エチルアミノ}フェニル)ブチル-N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジントリハイドロクロライド(PSA 16721)の合成
【０３８４】
【化６５】
0004679505.tif 000070
【０３８５】
N-tert-ブトキシカルボニル-4-{4-[{2-((2R)-2,3-ジヒドロキシプロピル)アミノ]エチルアミノ]フェニル}ブチルアミン(730)
エタノール(5mL)中、(S)-(-)-グリシドール(0.30g、4mmol)およびトリエチルアミン(0.5mL、3.6mmol)の混合物を、アミン660(0.61g、2mmol)のエタノール(15mL)溶液に室温で30分かけて少量ずつ加えた。反応混合液を室温で一夜攪拌した。10mLのエタノール中、(S)-(-)-グリシドール(0.080g、1mmol)を滴下して加え、混合液をさらに18時間攪拌した。溶媒を減圧留去し、残渣をFlash(商標)(BIOTAGE社)(90gシリカゲルカートリッジ40M、クロロホルム/メタノール/水酸化アンモニウム、8:1:0.1、v/v)により精製して粗製化合物730(0.176g)を得た。
【０３８６】
同じ反応の第2のバッチは、(S)-(-)-グリシドール(0.090g、1.2mmol)のエタノール(5mL)溶液を、アミン660(0.36g、1.17mmol)のエタノール(10mL)溶液に、70℃で3時間かけて滴下により加えることによって行った。この反応混合液を70℃で攪拌した。溶媒を減圧留去し、残渣をFlash(商標)(BIOTAGE社)(90gシリカゲルカートリッジ40M、クロロホルム/メタノール/水酸化アンモニウム、7:1:0.1、v/v)により精製して粗製化合物730(0.22g)を得た。
【０３８７】
双方のバッチからの粗製生成物を合わせてFlash(商標)(BIOTAGE社)(90gシリカゲルカートリッジ40M、クロロホルム/メタノール/水酸化アンモニウム、9:1:0.1、v/v)により精製して純粋な730(0.206g、全収率11%)を白色パラフィンとして得た。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ1.44(s,9H)、1.47(m,2H)、1.54(m,2H)、2.48(t,2H)、2.61(m,1H)、2.75(m,1H)、2.83(m,2H)、3.02(t,2H)、3.22(t,2H)、3.49(t,2H)、3.72(m,1H)、6.59(d,2H)、6.93(d,2H)。
【０３８８】
4-{4-[{2-[((2R)-2,3-ジヒドロキシプロピル)アミノ]エチルアミノ}フェニル)ブチルアミンジハイドロクロライド(740)
ジオキサン(10mL)中の4N HClを、保護アミン730に加えた。この混合物を室温で3時間攪拌した。溶媒を減圧乾燥した。生じた白色固体にジクロロメタン(15mL)を加え、続いて蒸発させた。この操作を3回繰り返した。得られた固体をさらに真空乾燥し、ジハイドロクロライド塩740(0.209g、96%)を白色粉末として得た。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ1.43(m,4H)、2.72(m,2H)、2.93(m,2H)、3.12(m,1H)、3.49(m,2H)、3.58(m,2H)、3.75(m,2H)、3.97(m,1H)、6.70(m,4H)。m/z(ESI)282[C15H27N3O2+H]+。
【０３８９】
N-(4-{4-[{2-[((2R)-2,3-ジヒドロキシプロピル)アミノ]エチルアミノ}フェニル)ブチル-N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジントリハイドロクロライド(750、PSA 16721)
ジイソプロピルエチルアミン(0.5mL、2.75mmol)およびヨウ化水素酸[1-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン)-2-メチルイソチオ尿素(0.230g、0.60mmol)を、740(0.165g、0.70mmol)のエタノール(10mL)溶液に連続して加えた。この反応液を、70℃(油浴)で2.5時間攪拌し、室温で一晩攪拌した。溶媒を減圧留去し、残渣を、Flash(商標)(BIOTAGE社)(90gシリカゲルカートリッジ40M、クロロホルム/メタノール/水酸化アンモニウム、3:1:0.1、v/v)により精製し、粗製遊離塩基N-(4-{4-[{2-[((2R)-2,3-ジヒドロキシプロピル)アミノ]エチルアミノ}フェニル)ブチル-N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジン(0.176g、58%、HPLCにより80%純度)を黄色固体として得た。次に、これをメタノール(5mL)に溶解した。この溶液にジオキサン(10mL)中の4N HClを加えた。溶媒を減圧留去し、残渣を、再びメタノール(5mL)に溶解した。この溶液を2-プロパノール(20mL)に注いだ。生じた沈殿を採取し、フラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、クロロホルム/メタノール/水酸化アンモニウム、3:1:0.3、v/v)により精製して遊離塩基750(0.042g、12%)を得た。この化合物750を3%水性HClに溶解した。溶媒を減圧留去し、最終化合物をトリハイドロクロライド塩(0.050g、9.3%、黄色粉末)として得た。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ1.74(m,4H)、2.76(t,2H)、3.13(m,1H)、3.37(m,2H)、3.56(m,4H)、3.80(m,1H)、7.44(d,2H)、7.53(d,2H)。m/z(ESI)494[C21H32ClN9O3+H]+。[α]25D=+6.7°(c=0.5,MeOH)。
【０３９０】
(実施例28)
スキーム20.PSA 17218の合成
【０３９１】
【化６６】
0004679505.tif 000071
【０３９２】
N-(4-{4-{2-[ビス-((2S,3R)-2,3,4-トリヒドロキシブチル)アミノ]エチルアミノ}フェニル)ブチル-N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジントリハイドロクロライド(PSA 17218)の合成
【０３９３】
【化６７】
0004679505.tif 000072
【０３９４】
N-tert-ブトキシカルボニル-4-{2-[N,N-ビス-((2S,3R)-2,3,4-トリヒドロキシブチル)アミノ]エチルアミノ}フェニルブチルアミン(760)
酢酸(0.09mL、1.4mmol)およびD-(-)-エリトロース(0.52g、4.2mmol)のメタノール(2.5mL)溶液を、アミン660(0.44g、4.2mmol)のメタノール(20mL)溶液に連続して加えた。この反応混合物を、窒素保護下、室温で20分攪拌した。反応液を、-78℃に冷却した。次いで、この混合液に、シアノホウ化水素ナトリウム(0.39g、6.16mmol)を加えた。反応液を室温まで温めてから、18時間攪拌した。溶媒を留去し、残渣をFlash(商標)(BIOTAGE社)(90gシリカゲルカートリッジ40M、クロロホルム/メタノール/水酸化アンモニウム、4:1:0.1、v/v)により精製して760(0.12g、16%)を白色固体として得た。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ1.42(s,9H)、1.45(m,2H)、1.47(m,2H)、2.49(m,2H)、2.61〜2.98(m,4H)、3.02(m,2H)、3.22(m,2H)、3.45〜3.85(m,10H)、6.64(d,2H)、6.94(d,2H)。m/z(APCI)516[C25H45N3O8+H]+。
【０３９５】
4-{2-[N,N-ビス-((2S,3R)-2,3,4-トリヒドロキシブチル)アミノ]エチルアミノ}フェニルブチルアミントリフルオロアセテート(770)
保護アミン760(0.12g、0.22mmol)を、ジクロロメタン/TFA(10mL、1:1)の混合液中で2時間攪拌した。溶媒を留去し、残渣をフラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、クロロホルム/メタノール/水酸化アンモニウム、3:1:0.3、v/v)により精製して770(0.12g、98%)を無色オイルとして得た。(300MHz,CD3OD)δδ1.64(m,4H)、2.55(m,2H)、2.90(m,2H)、3.45(m,4H)、3.60(m,10H)、3.97(m,2H)、6.67(d,2H)、7.00(d,2H)。m/z(APCI)416[C20H37N3O6+H]+。
【０３９６】
N-(4-{4-{2-[ビス-((2S,3R)-2,3,4-トリヒドロキシブチル)アミノ]エチルアミノ}フェニル)ブチル-N'-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン-2-カルボニル)グアニジントリハイドロクロライド(780、PSA 17218)
ヨウ化水素酸[1-(3,5-ジアミノ-6-クロロピラジン)-2-メチルイソチオ尿素(0.121g、0.31mmol)およびジイソプロピルエチルアミン(0.20mL、1.2mmol)を、770(0.12g、0.22mmol)のエタノール(10mL)溶液に連続して加えた。この反応液を、70℃で3.5時間、次いで室温で一晩攪拌した。溶媒を蒸発させた。残渣を、フラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、クロロホルム/メタノール/水酸化アンモニウム、3:1:0.3、v/v)により精製して、粗製遊離塩基(0.070g)を、黄色固体として得た。この遊離塩基を、3%水性HCl(2mL)に溶解した。溶解しなかった固体をろ取し、ろ液中の溶媒を減圧留去した。生成物を真空乾燥し、トリハイドロクロライド塩780(0.057g、34%)を黄色粉末として得た。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ1.72(m,4H)、2.74(m,2H)、3.36(m,2H)、3.49(m,2H)、3.65(m,8H)、3.89(m,4H)、4.07(m,2H)、7.41(d,2H)。m/z(APCI)629[C26H42ClN9O7+H]+。[α]25D=-13.8°(c=0.5,MeOH)。
【０３９７】
ナトリウムチャネル遮断活性
下表に掲載された化合物を、上記のインビトロアッセイを用いて、イヌ気管支上皮における効力に関して試験した。陽性対照としてPSA 4022もまた、各アッセイにおいて試験した。本発明の化合物に関する結果は、PSA 4022=100×アミロライドに比した増強倍値として報告している。
【０３９８】
(実施例29)
【０３９９】
【表５】
0004679505.tif 000073
【０４００】
引用文献1.Rappoport,D.A.;Hassid,Z.;J.Amer.Chem.Soc.、1951年、73、5524〜5525頁
【０４０１】
上記の教示を考慮して、本発明の多くの修飾および変更が可能であることが明らかである。したがって、添付の請求項の範囲内で、本発明は、本明細書に具体的に記載された以外の方法で実施できる。