(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式
【化１】
0004652520.tif 000085
〔式中、Ｒ１はＣ１−４アルコキシ基またはＣ１−４アルキル基を、
Ｒ２は水素原子を、
Ｒ３は水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシ基または置換基を有していてもよいＣ１−４アルコキシ基を示すか、または
隣接する２つのＲ３が連結してＣ１−４アルキレンジオキシ基を形成してもよく、
Ｒ４は水素原子またはＣ１−４アルキル基を、
Ｒ６は置換基を有していてもよいＣ１−４アルキル基または式
【化２】
0004652520.tif 000086
（式中、Ｒ５は水素原子を示すか、またはＲ４とＲ５とが連結して複素環を形成してもよい）で表される基を、および
ｎは０〜５の整数を示す〕で表される化合物またはその塩（ただし、５−（Ｎ−ベンジル−Ｎ−メチルアミノメチル）−１−（２,６−ジフルオロベンジル）−６−［４−（３−メトキシウレイド）フェニル］−３−フェニルチエノ〔２,３−ｄ〕ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオンまたはその塩を除く）。
【請求項２】
式
【化３】
0004652520.tif 000087
〔式中、Ｒ１はＣ１−４アルコキシ基またはＣ１−４アルキル基を、
Ｒ２は水素原子を、
Ｒ３は水素原子、ハロゲン原子またはＣ1-4アルコキシ基を、
Ｒ４はＣ１−４アルキル基を、
Ｒ５は請求項１記載と同意義を示す〕で表される請求項１記載の化合物またはその塩。
【請求項３】
Ｒ１がＣ１−３アルコキシ基である請求項１記載の化合物またはその塩。
【請求項４】
Ｒ３が水素原子である請求項１記載の化合物またはその塩。
【請求項５】
Ｒ６が式
【化４】
0004652520.tif 000088
〔式中、Ｒ５は請求項１記載と同意義を示す〕で表される基である請求項１記載の化合物またはその塩。
【請求項６】
Ｒ４がＣ１−３アルキル基およびＲ５が水素原子である請求項２記載の化合物またはその塩。
【請求項７】
ｎが１または２である請求項１記載の化合物またはその塩。
【請求項８】
Ｒ１がＣ１−４アルキル基；
Ｒ３が水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシ基またはＣ１−４アルコキシ−Ｃ１−４アルコキシ基、または隣接する２つのＲ３が連結してＣ１−３アルキレンジオキシ基；
Ｒ４が水素原子またはＣ１−３アルキル基；
Ｒ６がＣ１−４アルコキシ−Ｃ１−４アルキル基または式
【化５】
0004652520.tif 000089
〔式中、Ｒ５は水素原子を示すか、またはＲ４とＲ５とが連結して５または６員複素環を形成する〕で表される基；および
ｎが１または２である請求項１記載の化合物またはその塩。
【請求項９】
Ｒ１がメトキシ基またはＣ１−３アルキル基；
Ｒ4がＣ１−３アルキル基；
Ｒ６がベンジル基；および
ｎが０である請求項１記載の化合物またはその塩。
【請求項１０】
式
【化６】
0004652520.tif 000090
〔式中、Ｒ３は水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシ基または置換基を有していてもよいＣ１−４アルコキシ基を示すか、または
隣接する２つのＲ３が連結してＣ１−４アルキレンジオキシ基を形成してもよく、
Ｒ４は水素原子またはＣ１−４アルキル基を、
Ｒ６は置換基を有していてもよいＣ１−４アルキル基または式
【化７】
0004652520.tif 000091
（式中、Ｒ５は水素原子を示すか、またはＲ４とＲ５とが連結して複素環を形成してもよい）で表される基を、および
ｎは０〜５の整数を示す〕で表される化合物またはその塩とカルボニルジイミダゾールまたはホスゲンとを反応させ、次いで式
【化８】
0004652520.tif 000092
〔式中、Ｒ１はＣ１−４アルコキシ基またはＣ１−４アルキル基を、
Ｒ2は水素原子を示す〕で表される化合物またはその塩を反応させることを特徴とする式
【化９】
0004652520.tif 000093
〔式中、各記号は前記と同意義を示す〕で表される化合物またはその塩の製造法。
【請求項１１】
式
【化１０】
0004652520.tif 000094
〔式中、Ｒ１はＣ１−４アルコキシ基またはＣ１−４アルキル基を、
Ｒ２は水素原子を、
Ｒ３は水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシ基または置換基を有していてもよいＣ１−４アルコキシ基を示すか、または
隣接する２つのＲ３が連結してＣ１−４アルキレンジオキシ基を形成してもよく、
Ｒ４は水素原子またはＣ１−４アルキル基を、
Ｒ６は置換基を有していてもよいＣ１−４アルキル基または式
【化１１】
0004652520.tif 000095
（式中、Ｒ５は水素原子を示すか、またはＲ４とＲ５とが連結して複素環を形成してもよい）で表される基を、および
ｎは０〜５の整数を示す〕で表される化合物またはその塩を含有する医薬組成物。
【請求項１２】
性腺刺激ホルモン放出ホルモン拮抗剤である請求項１１記載の医薬組成物。
【請求項１３】
性ホルモン依存性疾患予防・治療剤である請求項１２記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、性腺刺激ホルモン放出ホルモン（ＧｎＲＨ（Gonadotropin releasing hormone））拮抗作用を示すチエノ〔２，３−ｄ〕ピリミジン化合物、その製造法および用途に関する。
【０００２】
【従来の技術】
下垂体前葉ホルモンの分泌は、それぞれのホルモンの標的臓器から分泌される末梢ホルモンおよび下垂体前葉の上位中枢である視床下部から分泌される分泌促進あるいは分泌抑制ホルモン(以下、本明細書においては、これらホルモン群を視床下部ホルモンと総称する。)の調節を受けている。現在までのところ、視床下部ホルモンとして例えば甲状腺刺激ホルモン放出ホルモン(ＴＲＨ)あるいは性腺刺激ホルモン放出ホルモン｛ＧｎＲＨ（Gonadotropin releasing hormone）：黄体形成ホルモン放出ホルモン〔ＬＨ−ＲＨ（Luteinizing hormone releasing hormone）〕とも呼ばれる｝など９種の存在が確認されている。これら視床下部ホルモンは下垂体前葉に存在すると考えられている受容体を介して、そのホルモン作用等を現すと推定されており、ヒトの場合も含め、これらに特異的な受容体遺伝子の解析が進められている。従って、これら受容体に対する特異的かつ選択的な拮抗薬あるいは作動薬は、視床下部ホルモンの作用を調節し下垂体前葉ホルモンの分泌を制御することになる。この結果として、こうした下垂体前葉ホルモン依存性の疾患に対してその予防あるいは治療を期待することが出来る。
ＧｎＲＨ拮抗作用を有する化合物としては、ＧｎＲＨの誘導体である直鎖状ペプチド（USP 5,140,009，USP 5,171,835）、環状ヘキサペプチド誘導体（特開昭61-191698号公報）、２環性ペプチド誘導体〔ジャーナル・オブ・メディシナル・ケミストリー(Journal of Medicinal Chemistry), 36巻, 3265-3273頁, 1993年〕などが知られている。ＧｎＲＨ拮抗作用を有する非ペプチド性の化合物としては、ＷＯ ９５／２８４０５号公報（特開平８−２９５６９３）、ＷＯ ９７／１４６９７号公報（特開平９−１６９７６７）、ＷＯ ９７／１４６８２号公報（特開平９−１６９７３５）、ＷＯ ９６／２４５９７号公報（特開平９−１６９７６８）などに記載の化合物が挙げられる。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】
ペプチド性化合物は、経口吸収性、投与形態、投与量、薬剤の安定性、作用の持続性、代謝に対する安定性等の多くの面で問題点が残されている。ホルモン依存性の癌、例えば前立腺癌、子宮内膜症、思春期早発症などに優れた治療効果を有し、しかも、一過性の下垂体−性腺刺激作用（急性作用）を起こさない経口吸収性に優れたＧｎＲＨ拮抗薬、特に非ペプチド性の拮抗薬が強く要望されている。
【０００４】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、鋭意探索した結果、チエノ〔２，３−ｄ〕ピリミジン骨格の６位のフェニル基のパラ位が、式 −ＮＨ−ＣＯ−ＮＲ1Ｒ2（式中の各記号は下記と同意義）で表される置換基で置換されていることに化学構造上の特徴を有する式
0004652520.tif 000002
〔式中、Ｒ1およびＲ2は、それぞれ水素原子、ヒドロキシ基、Ｃ1-4アルコキシ基、Ｃ1-4アルコキシ−カルボニル基または置換基を有していてもよいＣ1-4アルキル基を、
Ｒ3は水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシ基または置換基を有していてもよいＣ1-4アルコキシ基を示すか、または
隣接する２つのＲ3が連結してＣ1-4アルキレンジオキシ基を形成してもよく、
Ｒ4は水素原子またはＣ1-4アルキル基を、
Ｒ6は置換基を有していてもよいＣ1-4アルキル基または式
0004652520.tif 000003
（式中、Ｒ5は水素原子を示すか、またはＲ4とＲ5とが連結して複素環を形成してもよい）で表される基を、および
ｎは０〜５の整数を示す〕で表される新規化合物またはその塩〔以下、化合物（Ｉ）と略記することもある〕を初めて合成し、化合物（Ｉ）が上記置換基 式 −ＮＨ−ＣＯ−ＮＲ1Ｒ2の特異な化学構造に基づいて予想外にも優れたＧｎＲＨ拮抗作用、特に強力なアンタゴニスト活性を有すること、かつ、これらの化合物が毒性も極めて低く、ＧｎＲＨ拮抗作用を有する医薬として十分満足できるものであることを初めて見出し、これらの知見に基づいて、本発明を完成した。
【０００５】
すなわち、本発明は、
（１）化合物（Ｉ）；
（２）式
0004652520.tif 000004
〔式中、Ｒ1およびＲ2は、それぞれ水素原子、ヒドロキシ基、Ｃ1-4アルコキシ基または置換基を有していてもよいＣ1-4アルキル基を、
Ｒ3は水素原子、ハロゲン原子またはＣ1-4アルコキシ基を、
Ｒ4はＣ1-4アルキル基を、
Ｒ5は前記と同意義を示す〕で表される前記（１）記載の化合物またはその塩〔以下、化合物（Ia）と略記することもある〕；
（３）Ｒ1がＣ1-3アルコキシ基である前記（１）記載の化合物またはその塩；
（４）Ｒ2が水素原子である前記（３）記載の化合物またはその塩；
（５）Ｒ3が水素原子である前記（１）記載の化合物またはその塩；
（６）Ｒ6が式
0004652520.tif 000005
〔式中、Ｒ5は前記と同意義を示す〕で表される基である前記（１）記載の化合物またはその塩；
（７）Ｒ4がＣ1-3アルキル基およびＲ5が水素原子である前記（２）記載の化合物またはその塩；
（８）ｎが１または２である前記（１）記載の化合物またはその塩；
（９）Ｒ1が（i）ヒドロキシ基、（ii）Ｃ1-4アルコキシ基、または（iii）ヒドロキシもしくはＣ1-4アルキル−カルボニルオキシを有していてもよいＣ1-4アルキル基；
Ｒ2が水素原子、Ｃ1-4アルキル基またはＣ1-4アルコキシ−カルボニル基；
Ｒ3が水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシ基またはＣ1-4アルコキシ−Ｃ1-4アルコキシ基、または隣接する２つのＲ3が連結してＣ1-3アルキレンジオキシ基；
Ｒ4が水素原子またはＣ1-3アルキル基；
Ｒ6がＣ1-4アルコキシ−Ｃ1-4アルキル基または式
0004652520.tif 000006
〔式中、Ｒ5は水素原子を示すか、またはＲ4とＲ5とが連結して５または６員複素環を形成する〕で表される基；および
ｎが１または２である前記（１）記載の化合物またはその塩；
（１０）Ｒ1がヒドロキシ基、メトキシ基またはＣ1-3アルキル基；
Ｒ2が水素原子またはＣ1-3アルキル基；
Ｒ4がＣ1-3アルキル基；
Ｒ6がベンジル基；および
ｎが０である前記（１）記載の化合物またはその塩；
（１１）５−（Ｎ−ベンジル−Ｎ−メチルアミノメチル）−１−（２,６−ジフルオロベンジル）−６−［４−（３−メトキシウレイド）フェニル］−３−フェニルチエノ〔２,３−ｄ〕ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオンまたはその塩；
（１２）式
0004652520.tif 000007
〔式中、各記号は前記と同意義を示す〕で表される化合物またはその塩〔以下、化合物（II）と略記することもある〕とカルボニルジイミダゾールまたはホスゲンとを反応させ、次いで式
0004652520.tif 000008
〔式中、各記号は前記と同意義を示す〕で表される化合物またはその塩〔以下、化合物（III）と略記することもある〕を反応させることを特徴とする化合物（Ｉ）の製造法；
（１３）化合物（Ｉ）を含有する医薬組成物；
（１４）性腺刺激ホルモン放出ホルモン拮抗剤である前記（１３）記載の医薬組成物；
（１５）性ホルモン依存性疾患予防・治療剤である前記（１４）記載の医薬組成物などに関する。
【０００６】
上記式中の各置換基の定義を以下に記す。
Ｒ1またはＲ2で示される「Ｃ1-4アルコキシ基」としては、例えば、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、ｔ−ブトキシなどが挙げられる。このうち、Ｃ1-3アルコキシ基が好ましい。さらに好ましくはメトキシである。
Ｒ1またはＲ2で示される「Ｃ1-4アルコキシ−カルボニル基」としては、例えば、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、プロポキシカルボニル、イソプロポキシカルボニル、ブトキシカルボニル、ｔ−ブトキシカルボニルなどが挙げられる。このうち、Ｃ1-3アルコキシ−カルボニル基が好ましい。さらに好ましくはメトキシカルボニルである。
Ｒ1またはＲ2で示される「置換基を有していてもよいＣ1-4アルキル基」の「Ｃ1-4アルキル基」としては、例えば直鎖状Ｃ1-4アルキル基（例、メチル、エチル、プロピル、ブチルなど）、分岐状Ｃ3-4アルキル基（例、イソプロピル、イソブチル、sec-ブチル、tert-ブチルなど）などが挙げられる。このうち、Ｃ1-3アルキル基が好ましい。とりわけ、エチルが好ましい。
【０００７】
Ｒ1またはＲ2で示される「置換基を有していてもよいＣ1-4アルキル基」の「置換基」としては、例えば（i）ヒドロキシ、（ii）Ｃ1-7アシルオキシ（例、アセトキシ、プロピオニルオキシなどのＣ1-6アルキル−カルボニルオキシ）、（iii）ベンゾイルオキシ、（iv）Ｃ1-6アルコキシ−カルボニル（例、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、tert−ブトキシカルボニルなど）、ベンジルオキシカルボニル、Ｃ1-4アシル（例、アセチル、プロピオニルなどのＣ1-3アルキル−カルボニルなど）、Ｃ1-4アルキル（例、メチル、エチル、プロピル、ブチルなど）およびＣ1-3アルキルスルホニル（例、メタンスルホニルなど）などから選ばれる置換基を１または２個有していてもよいアミノ基（例、アミノ、ジメチルアミノ、メトキシカルボニルアミノ、エトキシカルボニルアミノ、tert−ブトキシカルボニルアミノ、ベンジルオキシカルボニルアミノ、アセチルアミノ、メタンスルホニルアミノなど）、（v）Ｃ1-10アルコキシ（例、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、tert−ブトキシなど）、（vi）Ｃ3-7シクロアルキルオキシカルボニル−Ｃ1-3アルコキシ（例、シクロヘキシルオキシカルボニルオキシ−１−エトキシなど）、（vii）Ｃ1-3アルコキシ−Ｃ1-3アルコキシ（例、メトキシメトキシ、メトキシエトキシなど）などが挙げられる。このうち、ヒドロキシが好ましい。
Ｒ1またはＲ2で示される「置換基を有していてもよいＣ1-4アルキル基」の「Ｃ1-4アルキル基」は、例えば上記置換基を、置換可能な位置に１ないし５個、好ましくは１ないし３個有していてもよく、置換基数が２個以上の場合、各置換基は同一または異なっていてもよい。
Ｒ1およびＲ2は、どちらか一方が水素原子、他方がＣ1-3アルコキシ基が好ましい。
【０００８】
Ｒ3で示される「ハロゲン原子」としては、例えば、フッ素、塩素、臭素、よう素が挙げられる。このうち塩素が好ましい。
Ｒ3で示される「置換基を有していてもよいＣ1-4アルコキシ基」の「Ｃ1-4アルコキシ基」としては、例えば、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、ｔ−ブトキシなどが挙げられる。このうち、メトキシが好ましい。
Ｒ3で示される「置換基を有していてもよいＣ1-4アルコキシ基」の「置換基」としては、前記Ｒ1またはＲ2で示される「置換基を有していてもよいＣ1-4アルキル基」の「置換基」と同様のものが挙げられる。このうちＣ1-4アルコキシ基が好ましい。
該Ｃ1-4アルコキシ基は、例えば上記置換基を、置換可能な位置に１ないし５個、好ましくは１ないし３個有していてもよく、置換基数が２個以上の場合、各置換基は同一または異なっていてもよい。
隣接する２つのＲ3が連結して形成する「Ｃ1-4アルキレンジオキシ基」としては、例えばメチレンジオキシ、エチレンジオキシなどが挙げられる。
Ｒ3は、水素原子が好ましい。
【０００９】
Ｒ4で示される「Ｃ1-4アルキル基」としては、例えば直鎖状Ｃ1-4アルキル基（例、メチル、エチル、プロピル、ブチルなど）、分岐状Ｃ3-4アルキル基（例、イソプロピル、イソブチル、sec-ブチル、tert-ブチルなど）などが挙げられる。このうちＣ1-3アルキル基が好ましい。とりわけ、メチルが好ましい。
Ｒ6で示される「置換基を有していてもよいＣ1-4アルキル基」としては、Ｒ1またはＲ2で示される「置換基を有していてもよいＣ1-4アルキル基」が挙げられる。
【００１０】
Ｒ4とＲ5とが連結して形成される「複素環」としては、５または６員含窒素複素環基があげられる。Ｒ4とＲ5とが連結するとき、式
0004652520.tif 000009
で表される基としては、例えば、式
0004652520.tif 000010
で表される基などが挙げられる。このうち、式
0004652520.tif 000011
で表される基が好ましい。
【００１１】
Ｒ6は、式
0004652520.tif 000012
〔式中、Ｒ5は前記と同意義を示す〕で表される基が好ましい。
Ｒ4はＣ1-3アルキル基およびＲ5は水素原子が好ましい。
ｎは０〜２の整数が好ましい。
【００１２】
化合物（Ｉ）中、好ましい化合物としては、化合物（Ia）などが挙げられる。
さらに好ましくは、Ｒ1がヒドロキシ基、メトキシ基またはＣ1-3アルキル基；Ｒ2が水素原子またはＣ1-3アルキル基；Ｒ4がＣ1-3アルキル基；Ｒ6がベンジル基；およびｎが０である化合物またはその塩などが挙げられる。
中でも好ましくは、Ｒ1がＣ1-3アルコキシ基；Ｒ2およびＲ5がそれぞれ水素原子；Ｒ4がＣ1-3アルキル基；Ｒ6がベンジル基；およびｎが０である化合物またはその塩などが挙げられる。
【００１３】
また、Ｒ1が（i）ヒドロキシ基、（ii）Ｃ1-4アルコキシ基、または（iii）ヒドロキシもしくはＣ1-4アルキル−カルボニルオキシを有していてもよいＣ1-4アルキル基；Ｒ2が水素原子、Ｃ1-4アルキル基またはＣ1-4アルコキシ−カルボニル基；Ｒ3が水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシ基またはＣ1-4アルコキシ−Ｃ1-4アルコキシ基、または隣接する２つのＲ3が連結してＣ1-3アルキレンジオキシ基；Ｒ4が水素原子またはＣ1-3アルキル基；Ｒ6がＣ1-4アルコキシ−Ｃ1-4アルキル基または式
0004652520.tif 000013
〔式中、Ｒ5は水素原子を示すか、またはＲ4とＲ5とが連結して５または６員複素環を形成する〕で表される基；およびｎが１または２である化合物またはその塩も好ましい。
【００１４】
化合物（Ｉ）の具体例としては、
５−（Ｎ−ベンジル−Ｎ−メチルアミノメチル）−１−（２,６−ジフルオロベンジル）−６−［４−（３−メトキシウレイド）フェニル］−３−フェニルチエノ〔２,３−ｄ〕ピリミジン−２,４（１Ｈ,３Ｈ）−ジオン、
５−（Ｎ−ベンジル−Ｎ−メチルアミノメチル）−１−（２,６−ジフルオロベンジル）−６−［４−（３−ヒドロキシウレイド）フェニル］−３−フェニルチエノ〔２,３−ｄ〕ピリミジン−２,４（１Ｈ,３Ｈ）−ジオン、
５−（Ｎ−ベンジル−Ｎ−メチルアミノメチル）−１−（２,６−ジフルオロベンジル）−６−［４−（３−メチルウレイド）フェニル］−３−フェニルチエノ〔２,３−ｄ〕ピリミジン−２,４（１Ｈ,３Ｈ）−ジオン、
５−（Ｎ−ベンジル−Ｎ−メチルアミノメチル）−１−（２,６−ジフルオロベンジル）−６−［４−（３−エチルウレイド）フェニル］−３−フェニルチエノ〔２,３−ｄ〕ピリミジン−２,４（１Ｈ,３Ｈ）−ジオンまたはこれらの塩が挙げられる。
なかでも、５−（Ｎ−ベンジル−Ｎ−メチルアミノメチル）−１−（２,６−ジフルオロベンジル）−６−［４−（３−メトキシウレイド）フェニル］−３−フェニルチエノ〔２,３−ｄ〕ピリミジン−２,４（１Ｈ,３Ｈ）−ジオンまたはその塩が好ましい。
【００１５】
化合物（Ｉ）の塩としては、生理学的に許容される酸付加塩が好ましい。このような塩としては、例えば無機酸（例、塩酸、臭化水素酸、硝酸、硫酸、リン酸など）との塩、または有機酸（例、ギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、フマール酸、シュウ酸、酒石酸、マレイン酸、クエン酸、コハク酸、リンゴ酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、p-トルエンスルホン酸など）との塩などが用いられる。化合物（Ｉ）が酸性基を有している場合は、無機塩基（例、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムなどのアルカリ金属塩またはアルカリ土類金属、アンモニアなど）または有機塩基（例、トリメチルアミン、トリエチルアミン、ピリジン、ピコリン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、ジシクロヘキシルアミン、Ｎ,Ｎ'-ジベンジルエチレンジアミンなど）と生理学的に許容される塩を形成してもよい。
【００１６】
化合物（Ｉ）は、自体公知の方法、例えば、特開平９−１６９７６８号公報、ＷＯ ９６／２４５９７号公報に記載の方法またはこれらに準ずる方法により製造することができる。具体例として、以下の製造法１および製造法２が挙げられる。反応式中の化合物は塩を形成している場合も含み、該塩としては、例えば化合物（Ｉ）の塩と同様のものなどが挙げられる。
（製造法１）
0004652520.tif 000014
上記式中、Ｌは脱離基を、その他の各記号は前記と同意義を示す。
Ｌで示される「脱離基」としては、例えば１−イミダゾリル、ハロゲン原子、置換基を有していてもよいアルコキシ基などが挙げられる。該「置換基を有していてもよいアルコキシ基」としては、１ないし３個のハロゲン原子（例、塩素、臭素等）を有していてもよいＣ1-4アルコキシ基（例、２，２，２−トリクロロエトキシ基）などが挙げられる。
【００１７】
化合物（II）は、特開平９−１６９７６８号公報に記載の方法またはこれに準ずる方法により得られる。
化合物（II）とカルボニルジイミダゾール（Ｎ,Ｎ'−カルボニルジイミダゾール；ＣＤＩ）またはホスゲン（二量体および三量体も含む）等とを反応させ、化合物（IV）を得、次いで化合物（III）を反応させ、化合物（Ｉ）を得る。化合物（IV）は単離せずに反応を続けてもよく、また、単離して次工程に使用してもよい。
また、化合物（IV）は、化合物（II）とクロロぎ酸エステル化合物（例、クロロぎ酸２，２，２−トリクロロエチル、クロロぎ酸１−クロロエチル等）などとを反応させても得られる。
【００１８】
化合物（II）とカルボニルジイミダゾールまたはホスゲン等との反応において、カルボニルジイミダゾールまたはホスゲン等の使用量は、化合物（II）１モルに対し、それぞれ約１〜３モルである。
本反応は、通常反応に悪影響を及ぼさない適当な溶媒中で行われる。
該溶媒としては、例えば、エーテル類（例、エチルエーテル、ジオキサン、ジメトキシエタン、テトラヒドロフランなど）、芳香族炭化水素類（例、ベンゼン、トルエンなど）、アミド類（例、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミドなど）、ハロゲン化炭化水素類（例、クロロホルム、ジクロロメタンなど）等が用いられる。
反応温度は、通常、約０〜約１５０℃、好ましくは、室温下（約１５〜約２５℃）である。反応時間は通常約１〜約３６時間である。
本反応は、必要に応じ、塩基の存在下に行われる。
該「塩基」としては、例えば、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸水素カリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化タリウムなどの無機塩基、あるいはトリエチルアミン、ピリジンなどの有機塩基が用いられる。
該「塩基」の使用量は、化合物（II）１モルに対し、約２モル〜２０モル、好ましくは、約５モル〜１２モルである。
次いで行われる化合物（III）との反応条件は、化合物（II）とカルボニルジイミダゾールまたはホスゲンとを反応させる条件と同様に行えばよい。化合物（III）の使用量は、化合物（II）または化合物（IV）１モルに対し、約２〜２０モル、好ましくは、約５〜１０モルである。反応温度は、通常、約０〜１５０℃であり、好ましくは室温下（約１５〜２５℃）である。反応時間は、通常約１〜６時間である。
また、カルボニルジイミダゾールまたはホスゲンと化合物（III）とは、同時に化合物（II）と反応させてもよい。
【００１９】
（製造法２）
0004652520.tif 000015
上記式中、Ｒ7は水素原子またはアルキル基を、Ｒ8はアルキル基を、その他の各記号は前記と同意義を示す。
Ｒ7またはＲ8で示される「アルキル基」としては、Ｒ1またはＲ2で示される「置換基を有していてもよいＣ1-4アルキル基」の「Ｃ1-4アルキル基」と同様のものが挙げられる。
【００２０】
化合物（V）は、自体公知の方法、例えばｐ−ニトロフェニルアセトン、シアノ酢酸エステル誘導体および硫黄を反応させ（例、Chem. Ber., 99巻，94-100頁，1966年等）、得られる２−アミノ−４−メチル−５−（４−ニトロフェニル）チオフェンを、特開平９−１６９７６８号、ＷＯ ９６／２４５９７号公報等に記載の方法またはこれに準ずる方法に付すことにより得られる。
【００２１】
▲１▼Ｒ7が水素原子の場合、化合物（V）を、縮合試薬の存在下、式
0004652520.tif 000016
〔式中、各記号は前記と同意義を示す〕で表される化合物またはその塩（以下、化合物（VI）と略記する）と反応させ、化合物（VII）を得、次いで閉環反応に付し、化合物（I）を得る。
該「縮合試薬」としては、例えば、ベンゾトリアゾ−ル−１−イルオキシトリピロリジノホスフォニウム  ヘキサフルオロホスフェート（benzotriazol-1-yloxytripyrrolidinophosphonium hexafluorophosphate：PyBOP）などが挙げられる。
該「縮合試薬」の使用量は、化合物（V）１モルに対し、約１〜３モルである。
本反応は、通常反応に悪影響を及ぼさない適当な溶媒中で行われる。
該溶媒としては、例えば、アルコール類（例、エタノール、メタノールなど）、芳香族炭化水素類（例、ベンゼン、トルエンなど）、アミド類（例、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミドなど）、ハロゲン化炭化水素類（例、クロロホルム、ジクロロメタンなど）等が用いられる。
反応温度は、通常、約０〜約１５０℃、好ましくは、室温下（約１５〜約２５℃）である。反応時間は通常約１〜約３６時間である。
生成物は反応液のまま、あるいは粗製物として次の反応に用いることもできるが、常法に従って反応混合物から単離することもできる。
【００２２】
化合物（VII）を塩基の存在下、閉環反応に付す。
該「塩基」としては、例えば、ナトリウムメトキシド、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸水素カリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化タリウムなどの無機塩基、あるいはトリエチルアミン、ピリジンなどの有機塩基が用いられる。
該「塩基」の使用量は、化合物（VII）１モルに対し、約２モル〜２０モル、好ましくは、約５モル〜１２モルである。
本反応は、通常反応に悪影響を及ぼさない適当な溶媒中で行われる。
該溶媒としては、例えば、アルコール類（例、エタノール、メタノールなど）、芳香族炭化水素類（例、ベンゼン、トルエンなど）、アミド類（例、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミドなど）、ハロゲン化炭化水素類（例、クロロホルム、ジクロロメタンなど）等が用いられる。
反応温度は、通常、約０〜約１５０℃、好ましくは、室温下（約１５〜約２５℃）である。反応時間は通常約１〜約３６時間である。
【００２３】
▲２▼Ｒ7がアルキル基の場合、化合物（V）を活性化された化合物（VI）と反応させ、化合物（I）を得る。
活性化された化合物（VI）は、自体公知の方法に従い製造でき、例えば、反応に悪影響を与えない適当な溶媒中、有機アルミニウム試薬と化合物（VI）とを反応させることにより得られる。
該「有機アルミニウム試薬」としては、例えば、トリメチルアルミニウム、ジメチルアルミニウムクロライドなど、またはこれらを含有する溶液などが挙げられる。
該「有機アルミニウム試薬」の使用量は、化合物（VI）１モルに対し、１〜５モル、好ましくは１モルである。
該溶媒としては、例えばハロゲン化炭化水素類（例、クロロホルム、ジクロロメタンなど）が好ましい。
反応温度は、通常、約０〜１５０℃、好ましくは室温下（約１５〜２５℃）である。反応時間は、通常約１〜６時間である。
化合物（V）を活性化された化合物（VI）と反応させることにより、閉環反応が行われ、化合物（Ｉ）が得られる。
該「化合物（V）」の使用量は、化合物（VI）および有機アルミニウム試薬の混合物に対し、約１／５量が好ましい。
本反応は、通常反応に悪影響を及ぼさない適当な溶媒中で行われる。
該溶媒としては、活性化された化合物（VI）を得る反応に用いられた溶媒が好ましい。
反応温度は、通常、約０〜１５０℃、好ましくは室温下（約１５〜２５℃）である。反応時間は、通常約１〜４８時間である。
【００２４】
化合物（Ｉ）は、自体公知の分離手段、例えば再結晶、蒸留、クロマトグラフィーなどにより単離、精製することができる。
化合物（Ｉ）が遊離体で得られた場合には、自体公知の方法あるいはそれに準じる方法によって目的とする塩に変換することができ、逆に塩で得られた場合には、自体公知の方法あるいはそれに準ずる方法により、遊離体または、目的とする他の塩に変換することができる。
化合物（Ｉ）は、水和物であってもよく、非水和物であってもよい。該水和物としては、例えば、１水和物、１.５水和物および２水和物などが挙げられる。
化合物（Ｉ）が光学活性体の混合物として得られる場合には、自体公知の光学分割手段により目的とする（Ｒ）体または（Ｓ）体に分離することができる。
化合物（Ｉ）は同位元素（例、3Ｈ、14Ｃ、35Ｓ）などで標識されていてもよい。
【００２５】
本発明の化合物（Ｉ）およびその塩（以下、「本発明化合物」と略記することもある）は、優れたＧｎＲＨ拮抗作用を有し、毒性は低い。しかも、経口吸収性や作用持続性に優れ、また、安定性や薬物動態の面でも優れている。さらに、製造も簡便である。哺乳動物（例えば、ヒト、サル、ウシ、ウマ、イヌ、ネコ、ウサギ、ラット、マウスなど）において、ＧｎＲＨ受容体拮抗作用により性腺刺激ホルモンの分泌を抑制し、血中の性ホルモン濃度を制御することによって、雄性ホルモンまたは雌性ホルモン依存性の疾病の予防・治療、およびこれらホルモンの過剰に起因する疾病の予防・治療に安全に用い得る。
例えば、本発明化合物は、性ホルモン依存性ガン（例、前立腺ガン、子宮ガン、乳ガン、下垂体腫瘍等）、前立腺肥大症、子宮筋腫、子宮内膜症、思春期早発症、無月経症、月経前症候群、多房性卵巣症候群、ニキビなどの予防および（または）治療に有用である。また、本発明化合物は、雄性および雌性における生殖の調節（例、妊娠調節剤、月経周期調節剤等）にも有用である。本発明化合物は、さらに男性および女性の避妊薬として、さらに女性の排卵誘発剤として使用することができる。本発明化合物は、その休薬後のリバウンド効果を利用して、不妊症の治療に使用することができる。
さらに、本発明化合物は畜産分野において動物の発情の調節、食肉用の肉質の改善、動物の成長促進などにも有用である。本発明化合物は、また魚類の産卵促進剤としても有用である。
【００２６】
本発明化合物は、酢酸リュープロレリンなどのＧｎＲＨ超作動薬の投与時に認められる、一過性の血中テストステロン濃度の上昇（フレアー現象）を抑制するために用いることができる。本発明化合物は、酢酸リュープロレリン（Ｌｅｕｐｒｏｒｅｌｉｎ）、ゴナドレリン（Ｇｏｎａｄｒｅｌｉｎ）、ブセレリン（Ｂｕｓｅｒｅｌｉｎ）、トリプトレリン（Ｔｒｉｐｔｏｒｅｌｉｎ）、ゴセレリン（Ｇｏｓｅｒｅｌｉｎ）、ナファレリン（Ｎａｆａｒｅｌｉｎ）、ヒストレリン（Ｈｉｓｔｒｅｌｉｎ）、デスロレリン（Ｄｅｓｌｏｒｅｌｉｎ）、メテレリン（Ｍｅｔｅｒｅｌｉｎ）、レシレリン（Ｌｅｃｉｒｅｌｉｎ）などのＧｎＲＨ超作動薬（好ましくは酢酸リュープロレリン）と併用して用いることができる。また、本発明化合物は、ステロイド性または非ステロイド性の抗アンドロゲン剤または抗エストロゲン剤、化学療法剤、ペプチド性ＧｎＲＨ拮抗薬、α−レダクターゼ阻害薬、α−受容体阻害薬、アロマターゼ阻害薬、１７β−ヒドロキシステロイド脱水素酵素阻害薬、副腎系アンドロゲン産生阻害薬、りん酸化酵素阻害薬、ホルモン療法剤、細胞増殖因子またはその受容体の作用を阻害する薬剤などの少なくとも一種と併用することも有効である。該「化学療法剤」としては、イホスファミド（Ｉｆｏｓｆａｍｉｄｅ）、アドリアマイシン（Ａｄｒｉａｍｙｃｉｎ）、ペプロマイシン（Ｐｅｐｌｏｍｙｃｉｎ）、シスプラチン（Ｃｉｓｐｌａｔｉｎ）、シクロフォスファミド（Ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ）、５−ＦＵ、ＵＦＴ、メトレキセート（Ｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｅ）、マイトマイシンＣ（Ｍｉｔｏｍｙｃｉｎ  Ｃ）、マイトキサントロン（Ｍｉｔｏｘａｎｔｒｏｎｅ）などがあげられる。該「ペプチド性ＧｎＲＨ拮抗薬」としては、セトロレリクス（Ｃｅｔｒｏｒｅｌｉｘ）、ガニレリクス（Ｇａｎｉｒｅｌｉｘ）、アバレリクス（Ａｂａｒｅｌｉｘ）などの非経口投与ペプチド性ＧｎＲＨ拮抗薬があげられる。該「副腎系アンドロゲン産生阻害薬」としては、例えばリアーゼ（Ｃ１７，２０−ｌｙａｓｅ）阻害薬などがあげられる。該「りん酸化酵素阻害薬」としては、例えばチロシンりん酸化酵素などがあげられる。該「ホルモン療法剤」としては、抗エストロゲン剤、黄体ホルモン剤（例、ＭＰＡなど）、アンドロゲン剤、エストロゲン剤、抗アンドロゲン剤などがあげられる。
【００２７】
該「細胞増殖因子（growth factors）」とは、細胞の増殖を促進する物質であればどのようなものでもよく、通常、分子量が２０,０００以下のペプチドで、受容体との結合により低濃度で作用が発揮される因子が挙げられ、具体的には、（1）ＥＧＦ（epidermal growth factor）またはそれと実質的に同一の活性を有する物質（例、ＥＧＦ、ハレグリン（ＨＥＲ２リガンド）など）、（2）インシュリンまたはそれと実質的に同一の活性を有する物質（例、インシュリン、IＧＦ（insulin-like growth factor）−１、IＧＦ−２など）、（3）ＦＧＦ（fibroblast growth factor）またはそれと実質的に同一の活性を有する物質（例、aＦＧＦ、bＦＧＦ、ＫＧＦ（Keratindcyte Growth Factor）、ＨＧＦ（Hepatocyte Growth Factor）、ＦＧＦ-１０など）、（4）その他の細胞増殖因子（例、ＣＳＦ（colony stimulating factor）、ＥＰＯ（erythropoietin)、ＩＬ−２（interleukin-2）、ＮＧＦ(nerve growth factor)、ＰＤＧＦ（platelet-derived growth factor）、ＴＧＦβ（transforming growth factorβ）など）などがあげられる。
該「細胞増殖因子の受容体」としては、上記の細胞増殖因子と結合能を有する受容体であればいかなるものであってもよく、具体的には、ＥＧＦ受容体、ハレグリン受容体（ＨＥＲ２）、インシュリン受容体−１、インシュリン受容体−２、 IＧＦ受容体、ＦＧＦ受容体−１またはＦＧＦ受容体−２などがあげられる。
上記細胞増殖因子の作用を阻害する薬剤としては、ハーセプチン（ＨＥＲ２レセプター抗体）などがあげられる。
上記細胞増殖因子またはその受容体の作用を阻害する薬剤としては、例えば、ハービマイシン、ＰＤ１５３０３５（Science 265 (5175) p1093, (1994)）などがあげられる。
【００２８】
また、細胞増殖因子またはその受容体の作用を阻害する薬剤としてＨＥＲ２阻害剤もあげられる。ＨＥＲ２阻害剤としては、ＨＥＲ２の活性（例、リン酸化活性）を阻害する物質であれば、抗体、低分子化合物（合成化合物、天然物）、アンチセンス、ＨＥＲ２リガンド、ハレグリンまたはこれらの構造を一部修飾、改変したものの何れであってもよい。また、ＨＥＲ２レセプターを阻害することによりＨＥＲ２活性を阻害する物質（例、ＨＥＲ２レセプター抗体）であってもよい。ＨＥＲ２阻害作用を有する低分子化合物としては、例えば、ＷＯ９８／０３５０５号に記載の化合物、具体的には１−［３−［４−［２−（（Ｅ）−２−フェニルエテニル）−４−オキサゾリルメトキシ］フェニル］プロピル］−１，２，４−トリアゾールなどがあげられる。
前立腺肥大症に対しては、ＧｎＲＨ超作動薬、抗アンドロゲン剤、抗エストロゲン剤、ペプチド性ＧｎＲＨ拮抗薬、α−レダクターゼ阻害薬、α−受容体阻害薬、アロマターゼ阻害薬、１７β−ヒドロキシステロイド脱水素酵素阻害薬、副腎系アンドロゲン産生阻害薬、りん酸化酵素阻害薬などの薬剤と本発明の化合物との併用が挙げられる。
【００２９】
前立腺癌に対しては、ＧｎＲＨ超作動薬、抗アンドロゲン剤、抗エストロゲン剤、化学療法剤〔例、イホスファミド（Ｉｆｏｓｆａｍｉｄｅ）、ＵＦＴ、アドリアマイシン（Ａｄｒｉａｍｙｃｉｎ）、ペプロマイシン（Ｐｅｐｌｏｍｙｃｉｎ）、シスプラチン（Ｃｉｓｐｌａｔｉｎ）など〕、ペプチド性ＧｎＲＨ拮抗薬、アロマターゼ阻害薬、１７β−ヒドロキシステロイド脱水素酵素阻害薬、副腎系アンドロゲン産生阻害薬、りん酸化酵素阻害薬、ホルモン療法剤〔例、エストロゲン剤（例、ＤＳＢ、ＥＭＰなど）、抗アンドロゲン剤（例、ＣＭＡなど）など〕、細胞増殖因子またはその受容体の作用を阻害する薬剤などの薬剤と本発明の化合物との併用が挙げられる。乳癌に対しては、ＧｎＲＨ超作動薬、抗エストロゲン剤、化学療法剤〔例、シクロフォスファミド（Ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ）、５−ＦＵ、ＵＦＴ、メトレキセート（Ｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｅ）、アドリアマイシン（Ａｄｒｉａｍｙｃｉｎ）、マイトマイシンＣ（Ｍｉｔｏｍｙｃｉｎ  Ｃ）、マイトキサントロン（Ｍｉｔｏｘａｎｔｒｏｎｅ）など〕、ペプチド性ＧｎＲＨ拮抗薬、アロマターゼ阻害薬、副腎系アンドロゲン産生阻害薬、りん酸化酵素阻害薬、ホルモン療法剤〔例、抗エストロゲン剤（例、Ｔａｍｏｘｉｆｅｎなど）、黄体ホルモン剤（例、ＭＰＡなど）、アンドロゲン剤、エストロゲン剤など〕、細胞増殖因子またはその受容体の作用を阻害する薬剤などの薬剤と本発明の化合物との併用が挙げられる。
【００３０】
本発明化合物を上記の疾病に対して予防および（または）治療剤として、または畜産もしくは水産分野で使用する場合は、自体公知の方法に従い、経口投与または非経口投与のいずれも可能であり、薬学的に許容される担体と混合し、通常、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤など固形製剤として経口投与されるか、静脈内、皮下、筋肉内などに注射剤、坐薬若しくは舌下錠などとして非経口投与される。また、舌下錠、マイクロカプセル等の徐放製剤として、舌下、皮下および筋肉内などに投与してもよい。一日の投与量は、症状の程度；投与対象の年齢、性別、体重、感受性差；投与の時期、間隔、医薬製剤の性質、調剤、種類；有効成分の種類などによって異なり、特に限定されないが、前述の性ホルモン依存性ガン（例、前立腺ガン、子宮ガン、乳ガン、下垂体腫瘍等）、前立腺肥大症、子宮筋腫、子宮内膜症、思春期早発症などの治療に用いる場合は、通常、哺乳動物１ｋｇ体重あたり約０.０１〜３０ｍｇ、好ましくは約０.０２〜１０ｍｇ、更に好ましくは０.１〜１０ｍｇ、最も好ましくは０.１〜５ｍｇを、通常１日１〜４回に分けて投与する。
畜産または水産分野で使用する場合の投与量も上記に準ずるが、投与対象生物１ｋｇ体重あたり約０．０１〜３０ｍｇ、好ましくは約０．１〜１０ｍｇを、通常一日１〜３回に分けて投与する。
化合物（Ｉ）の本発明の医薬組成物中の含有量は、組成物全体の約０．０１ないし１００重量％である。
【００３１】
上記薬学的に許容される担体としては、製剤素材として慣用の各種有機あるいは無機担体物質が用いられ、固形製剤における賦形剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤；液状製剤における溶剤、溶解補助剤、懸濁化剤、等張化剤、緩衝剤、無痛化剤などとして配合される。また必要に応じて、防腐剤、抗酸化剤、着色剤、甘味剤などの製剤添加物を用いることもできる。
上記賦形剤の好適な例としては、例えば乳糖、白糖、Ｄ-マンニトール、デンプン、結晶セルロース、軽質無水ケイ酸などが挙げられる。上記滑沢剤の好適な例としては、例えばステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、タルク、コロイドシリカなどが挙げられる。上記結合剤の好適な例としては、例えば結晶セルロース、白糖、Ｄ-マンニトール、デキストリン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドンなどが挙げられる。上記崩壊剤の好適な例としては、例えばデンプン、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、クロスカルメロースナトリウム、カルボキシメチルスターチナトリウムなどが挙げられる。上記溶剤の好適な例としては、例えば注射用水、アルコール、プロピレングリコール、マクロゴール、ゴマ油、トウモロコシ油などが挙げられる。上記溶解補助剤の好適な例としては、例えばポリエチレングリコール、プロピレングリコール、Ｄ-マンニトール、安息香酸ベンジル、エタノール、トリスアミノメタン、コレステロール、トリエタノールアミン、炭酸ナトリウム、クエン酸ナトリウムなどが挙げられる。上記懸濁化剤の好適な例としては、例えばステアリルトリエタノールアミン、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリルアミノプロピオン酸、レシチン、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、モノステアリン酸グリセリンなどの界面活性剤；例えばポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロースなどの親水性高分子などが挙げられる。上記等張化剤の好適な例としては、例えば塩化ナトリウム、グリセリン、Ｄ-マンニトールなどが挙げられる。上記緩衝剤の好適な例としては、例えばリン酸塩、酢酸塩、炭酸塩、クエン酸塩などの緩衝液などが挙げられる。無痛化剤の好適な例としては、例えばベンジルアルコールなどが挙げられる。上記防腐剤の好適な例としては、例えばパラオキシ安息香酸エステル類、クロロブタノール、ベンジルアルコール、フェネチルアルコール、デヒドロ酢酸、ソルビン酸などが挙げられる。上記抗酸化剤の好適な例としては、例えば亜硫酸塩、アスコルビン酸などが挙げられる。
【００３２】
本発明化合物に、懸濁化剤、溶解補助剤、安定化剤、等脹化剤、保存剤などを添加し、自体公知の方法により静脈、皮下、筋肉内注射剤とすることができる。その際必要により自体公知の方法により凍結乾燥物とすることも可能である。 本発明化合物を例えばヒトに投与する場合は、それ自体あるいは適宜の薬理学的に許容される担体、賦形剤、希釈剤と混合し、医薬組成物として経口的または非経口的に安全に投与することができる。
上記医薬組成物としては、経口剤（例、散剤、顆粒剤、カプセル剤、錠剤）、非経口剤〔例、注射剤、点滴剤、外用剤（例、経鼻投与製剤、経皮製剤など）、坐剤（例、直腸坐剤、膣坐剤など）など〕が挙げられる。
これらの製剤は、製剤工程において通常一般に用いられる自体公知の方法により製造することができる。
【００３３】
本発明化合物は分散剤（例、ツイーン（Tween）８０（アトラスパウダー社製、米国）、ＨＣＯ６０（日光ケミカルズ製）ポリエチレングリコール、カルボキシメチルセルロース、アルギン酸ナトリウムなど）、保存剤（例、メチルパラベン、プロピルパラベン、ベンジルアルコールなど）、等張化剤（例、塩化ナトリウム、マンニトール、ソルビトール、ブドウ糖など）などと共に水性注射剤に、あるいはオリーブ油、ゴマ油、綿実油、コーン油などの植物油、プロピレングリコールなどに溶解、懸濁あるいは乳化して油性注射剤に成形し、注射剤とすることができる。
経口剤とするには、自体公知の方法に従い、本発明化合物を例えば賦形剤（例、乳糖、白糖、デンプンなど）、崩壊剤（例、デンプン、炭酸カルシウムなど）、結合剤（例、デンプン、アラビアゴム、カルボキシメチルセルロース、ポリビニールピロリドン、ヒドロキシプロピルセルロースなど）または滑沢剤（例、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ポリエチレングリコール ６０００など）などを添加して圧縮成形し、次いで必要により、味のマスキング、腸溶性あるいは持続性の目的のため自体公知の方法でコーティングすることにより経口投与製剤とすることができる。そのコーティング剤としては、例えばヒドロキシプロピルメチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリオキシエチレングリコール、ツイーン ８０、プルロニック Ｆ６８、セルロースアセテートフタレート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、ヒドロキシメチルセルロースアセテートサクシネート、オイドラギット（ローム社製、ドイツ，メタアクリル酸・アクリル酸共重合）および色素（例、ベンガラ、二酸化チタン等）などが用いられる。腸溶性製剤とする場合、腸溶相と薬剤含有相との間に両相の分離を目的として、自体公知の方法により中間相を設けることもできる。
【００３４】
外用剤とするには、自体公知の方法に従い、本発明化合物を固状、半固状または液状の外用投与剤とすることができる。例えば、上記固状のものとしては、本発明化合物をそのまま、あるいは賦形剤（例、グリコール、マンニトール、デンプン、微結晶セルロースなど）、増粘剤（例、天然ガム類、セルロース誘導体、アクリル酸重合体など）などを添加、混合して粉状の組成物とする。上記液状のものとしては、注射剤の場合とほとんど同様に油性または水性懸濁剤とする。半固状の場合は、水性または油性のゲル剤、あるいは軟膏状のものがよい。また、これらはいずれも、ｐＨ調節剤（例、炭酸、リン酸、クエン酸、塩酸、水酸化ナトリウムなど）、防腐剤（例、パラオキシ安息香酸エステル類、クロロブタノール、塩化ベンザルコニウムなど）などを加えてもよい。
例えば坐剤とするには、自体公知の方法に従い、本発明化合物を油性または水性の固状、半固状あるいは液状の坐剤とすることができる。上記組成物に用いる油性基剤としては、例えば高級脂肪酸のグリセリド〔例、カカオ脂、ウイテプゾル類（ダイナマイトノーベル社製，ドイツ）など〕、中級脂肪酸〔例、ミグリオール類（ダイナマイトノーベル社製，ドイツ）など〕、あるいは植物油（例、ゴマ油、大豆油、綿実油など）などが挙げられる。また、水性基剤としては、例えばポリエチレングリコール類、プロピレングリコール、水性ゲル基剤としては、例えば天然ガム類、セルロース誘導体、ビニール重合体、アクリル酸重合体などが挙げられる。
【００３５】
【発明の実施の形態】
以下に参考例、実施例、製剤例および試験例を挙げて、本発明を更に具体的に説明するが、これによって本発明が限定されるものではない。
1Ｈ-ＮＭＲスペクトルは内部基準としてテトラメチルシランを用いてバリアンＧＥＭＩＮＩ  ２００（２００ＭＨｚ）型スペクトルメーター、日本電子（ＪＥＯＬ）ＬＡＭＢＤＡ３００（３００ＭＨｚ）型スペクトルメーターあるいはブルッカ ＡＭ  ５００（５００ＭＨｚ）型スペクトルメーターで測定し、全δ値をｐｐｍで示す。「％」は特記しない限り重量パーセントを示す。ただし、収率は mol/mol％を示す。その他の、本明細書中で記号は以下の意味を示す。
ｓ    ：シングレット
ｄ    ：ダブレット
ｔ    ：トリプレット
ｄｔ  ：ダブルトリプレット
ｍ    ：マルチプレット
ｂｒ  ：幅広い
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
Ｍｅ  ：メチル基
Ｅｔ  ：エチル基
室温とは、約１５〜２５℃の範囲を示すが、特に厳密に限定されるものではない。
【実施例】
参考例１
２−アミノ−４−メチル−５−（４−ニトロフェニル）チオフェン−３−カルボン酸エチルエステル
0004652520.tif 000017
４−ニトロフェニルアセトン（３５．０ｇ，１９５ｍｍｏｌ）、シアノ酢酸エチル（２３．８ｇ，１９５ｍｍｏｌ）、酢酸アンモニウム（３．１ｇ，４０ｍｍｏｌ）および酢酸（９．１ｍｌ，１５９ｍｍｏｌ）の混合物を、ディーンスターク装置で生成する水を除きながら、２４時間加熱還流した。冷後、反応液を減圧下濃縮し、残さをジクロルメタンと重曹水で分配した。有機層を食塩水で洗浄し乾燥（ＭｇＳＯ4）後、溶媒を減圧下に留去した。残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製した。得られた油状物をエタノールに溶解させ、硫黄（５．０ｇ，１６０ｍｍｏｌ）およびジエチルアミン（１６．０ｍｌ，１６０ｍｍｏｌ）を加え６０−７０℃で２時間かくはんした。冷後、反応液を減圧下濃縮し、残さをジクロルメタンと重曹水で分配した。有機層を食塩水で洗浄し乾燥（ＭｇＳＯ4）後、溶媒を減圧下に留去した。残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、エーテル−へキサンから結晶化させて赤色板状晶の標題化合物（２２．２ｇ，５２％）を得た。
ｍｐ：１６８−１７０℃  （エーテル−へキサンより再結晶）．
元素分析値  Ｃ14Ｈ14Ｎ2Ｏ4Ｓとして
0004652520.tif 000018
1Ｈ−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ：１．３９（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），２．４０（３Ｈ，ｓ），４．３４（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），６．２７（２Ｈ，ｂｒ），７．４８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ），８．２３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ）．
ＩＲ（ＫＢｒ）：３４４６，３３２４，１６６７，１５８０，１５４５，１５０６，１４９１，１４７５，１４１０，１３３２ｃｍ-1．
【００３６】
参考例２
５−メチル−６−（４−ニトロフェニル）−３−フェニルチエノ〔２，３−ｄ〕ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン
0004652520.tif 000019
参考例１で得られた化合物（５．００ｇ，１６．３２ｍｍｏｌ）のピリジン（３０ｍｌ）溶液に、フェニルイソシアネート（２．６６ｍｌ，２４．４８ｍｍｏｌ）を加え、４５℃で６時間かくはん後、反応液を減圧下濃縮して得られた残さをエタノール（６ｍｌ）溶液とした。この溶液に２８％ナトリウムメトキシド（７．８６ｇ，４０．８０ｍｍｏｌ）を加え、反応液を室温で２時間かくはんした後、２Ｎ塩酸（２５ｍｌ，５０ｍｍｏｌ）を加えエタノール溶媒を減圧下に留去した。得られた残さをろ過して水−エタノールで洗浄し、減圧下に乾燥後エタノールから再結晶して、黄色粉末の標題化合物（６．０９ｇ，９８％）を得た。
ｍｐ：＞３００℃．
元素分析値  Ｃ19Ｈ13Ｎ3Ｏ4Ｓ・０．３Ｈ2Ｏとして
0004652520.tif 000020
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ：２．５０（３Ｈ，ｓ），７．３１−７．４６（５Ｈ，ｍ），７．７８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），８．３２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），１２．５０（１Ｈ，ｓ）．
ＩＲ（ＫＢｒ）：１７１５，１６５７，１５９３，１５１０ｃｍ-1．
【００３７】
参考例３
１−（２，６−ジフルオロベンジル）−５−メチル−６−（４−ニトロフェニル）−３−フェニルチエノ〔２，３−ｄ〕ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン
0004652520.tif 000021
参考例２で得られた化合物（５２．５４ｇ，０．１３１ｍｏｌ）のジメチルホルムアミド（１．０ｌ）溶液に、炭酸カリウム（１９．００ｇ，０．１３８ｍｏｌ）、ヨウ化カリウム（２２．９０ｇ，０．１３８ｍｏｌ）、２，６−ジフルオロベンジルクロリド（２２．４０ｇ，０．１３８ｍｏｌ）を加え室温で２時間かくはんした。反応液を濃縮して得られた残渣をクロロホルムと食塩水で分配した。水層をクロロホルムで抽出し、抽出液をあわせて食塩水で洗浄し乾燥（ＭｇＳＯ4）後、溶媒を減圧下に留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して淡黄色結晶の標題化合物（６１．５０ｇ，９３％）を得た。
ｍｐ：２８０−２８２℃．
元素分析値    Ｃ26Ｈ17Ｎ3Ｏ4ＳＦ2として
0004652520.tif 000022
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ：２．５７（３Ｈ，ｓ），５．３８（２Ｈ，ｓ），６．９４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ），７．４２−７．５８（８Ｈ，ｍ），８．２９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ）．
ＩＲ（ＫＢｒ）：１７１９，１６６９，１５２４，１４７３ｃｍ-1．
【００３８】
参考例４
５−ブロモメチル−１−（２，６−ジフルオロベンジル）−６−（４−ニトロフェニル）−３−フェニルチエノ〔２，３−ｄ〕ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン
0004652520.tif 000023
参考例３で得られた化合物（３０．３４ｇ，０．０６０ｍｏｌ）、Ｎ−ブロモこはく酸イミド（１２．８１ｇ，０．０７２ｍｏｌ）、α，α’−アゾビスイソブチロニトリル（１．１５ｇ，０．００７ｍｏｌ）およびクロロベンゼン（４５０ｍｌ）の混合物を８５℃で３時間かくはんした。冷後反応液を食塩水で洗浄し乾燥（ＭｇＳＯ4）後、溶媒を減圧下に留去した。得られた残さを酢酸エチルから再結晶して黄色針状晶の標題化合物（８０．２１ｇ，１００％）を得た。
ｍｐ：２２８−２２９℃．
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ：４．７７（２Ｈ，ｓ），５．３８（２Ｈ，ｓ），６．９６（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．１Ｈｚ），７．２９−７．５８（６Ｈ，ｍ），７．７９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ），８．３５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ）．
ＩＲ（ＫＢｒ）：１７２１，１６８０，１５２４，１４７３，１３４８ｃｍ-1．ＦＡＢ−Ｍａｓｓ  ｍ／ｚ  ５８４（ＭＨ）+
【００３９】
参考例５
５−（Ｎ−ベンジル−Ｎ−メチルアミノメチル）−１−（２，６−ジフルオロベンジル）−６−（４−ニトロフェニル）−３−フェニルチエノ〔２，３−ｄ〕ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン
0004652520.tif 000024
参考例４で得られた化合物（８０．００ｇ，０．１１９ｍｏｌ）のジメチルホルムアミド（６００ｍｌ）溶液に、氷冷下、エチルジイソプロピルアミン（２７．００ｍｌ，０．１５５ｍｏｌ）およびベンジルメチルアミン（１８．４５ｍｌ，０．１４３ｍｏｌ）を加えた。室温で２時間かくはんした後、反応液を濃縮して得られる残渣を酢酸エチルと飽和重曹水で分配した。水層を酢酸エチルで抽出し、有機層をあわせて乾燥（ＭｇＳＯ4）後、溶媒を減圧下に留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、黄色油状物（７４．９０ｇ，１００％）を得、酢酸エチルから再結晶して黄色針状晶の標題化合物を得た。
ｍｐ：１７３−１７４℃．
元素分析値  Ｃ34Ｈ26Ｎ4Ｏ4ＳＦ2・０．５Ｈ2Ｏとして
0004652520.tif 000025
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）［フリーアミン］δ：１．３１（３Ｈ，ｓ），３．６０（２Ｈ，ｓ），３．９６（２Ｈ，ｓ），５．３９（２Ｈ，ｓ），６．９５（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），７．１８−７．５５（１１Ｈ，ｍ），８．０２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ），８．２６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ）．ＩＲ（ＫＢｒ）［塩酸塩］：１７１９，１６７８，１５９７，１５２０ｃｍ-1．
【００４０】
参考例６
６−（４−アミノフェニル）−５−（Ｎ−ベンジル−Ｎ−メチルアミノメチル）−１−（２，６−ジフルオロベンジル）−３−フェニルチエノ〔２，３−ｄ〕ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン
0004652520.tif 000026
参考例５で得られた化合物（３．００ｇ，４．８０ｍｍｏｌ）のギ酸（３０ｍｌ）溶液に、氷冷下、１Ｍ塩化水素−エーテル（１４．４ｍｌ，１４．４ｍｍｏｌ）および１０％パラジウム炭素粉末（３００ｍｇ）を加え、常温常圧で２時間にわたりかくはんし水素添加した。反応液をセライトろ過し、ろ液を減圧濃縮して得られた残渣をジクロルメタンおよび飽和重曹水で分配した。水層をジクロルメタンで抽出し、有機層をあわせて乾燥（ＭｇＳＯ4）後、溶媒を減圧下に留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して白色結晶の標題化合物（２．４１ｇ，８４％）を得た。
ｍｐ：２０５−２０７℃．
元素分析値  Ｃ34Ｈ28Ｎ4Ｏ2ＳＦ2・０．１ＡｃＯＥｔ・１．２Ｈ2Ｏとして
0004652520.tif 000027
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ：２．０５（３Ｈ，ｓ），３．５６（２Ｈ，ｓ），３．８３（２Ｈ，ｂｒ），３．８８（２Ｈ，ｓ），５．３６（２Ｈ，ｓ），６．７０（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），６．８８−６．９４（２Ｈ，ｍ），７．２１−７．３１（８Ｈ，ｍ），７．４１−７．５３（５Ｈ，ｍ）．ＩＲ（ＫＢｒ）：１７１５，１６５７，１６２８，１５３７ｃｍ-1．
【００４１】
参考例７
５−クロロメチル−１−（２，６−ジフルオロベンジル）−６−［４−（３−メトキシウレイド）フェニル］−３−フェニルチエノ〔２，３−ｄ〕ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン
0004652520.tif 000028
後述の実施例化合物１（２．００ｇ，３．００ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（９０ｍｌ）溶液に、−７８℃でクロロぎ酸１−クロロエチル（０．４２ｍｌ，３．８９ｍｍｏｌ）を加え、徐々に室温まで上げて２時間かくはん後、反応液をクロロホルムと食塩水で分配した。水層をクロロホルムで抽出し、抽出液をあわせて食塩水で洗浄し乾燥（ＭｇＳＯ4）後、溶媒を減圧下に留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して白色粉末の標題化合物（１．６８ｇ，９６％）を得た。
ｍｐ：２１７−２１９℃．
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ：３．８３（３Ｈ，ｓ），４．８４（２Ｈ，ｓ），５．３７（２Ｈ，ｓ），６．９４（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），７．１５（１Ｈ，ｓ），７．２８−７．６５（１１Ｈ，ｍ）．
ＩＲ（ＫＢｒ）：１７１７，１６７１，１６２８，１５４１，１５０８，１４７３ｃｍ-1．
ＦＡＢ−Ｍａｓｓ  ｍ／ｚ  ５８３（ＭＨ）+
【００４２】
参考例８
参考例６で得られた化合物を原料として、  後述の実施例１および２に記載の方法と同様の方法で、参考例化合物８−１〜８−３を得た。
参考例化合物８−１：
0004652520.tif 000029
収率：６４％
ｍｐ：１９０−１９４℃．
参考例化合物８−２：
0004652520.tif 000030
収率：９１％
ｍｐ：２１０−２１５℃．
参考例化合物８−３：
0004652520.tif 000031
収率：８２％
ｍｐ：２５４−２５７℃．
【００４３】
参考例９
２−エトキシカルボニルアミノ−４−メチル−５−（４−ニトロフェニル）チオフェン−３−カルボン酸エチルエステル
0004652520.tif 000032
参考例１で得られた化合物（５００ｍｇ，１．６３ｍｍｏｌ）をトルエン（９ｍｌ）に溶解させ、クロルぎ酸エチル（０．１９ｍｌ，１．９６ｍｍｏｌ）を加えて５時間加熱還流した。冷後、反応液を減圧下濃縮した。残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、黄色粉末の標題化合物を得た（９０ｍｇ，７９％）。
ｍｐ：１３０−１３１℃  （酢酸エチル−へキサンより再結晶）．
1Ｈ−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ：１．３５（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），１．４２（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），２．４２（３Ｈ，ｓ），４．３１（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），４．３９（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），７．５９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ），８．２７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ），１０．６６（１Ｈ，ｓ）．
ＩＲ（ＫＢｒ）：１７４０，１６６５，１５９７，１５５７，１５３３，１５１６，１３５２，１２５７ｃｍ-1．
【００４４】
参考例１０
２−［Ｎ−（２，６−ジフルオロベンジル）−Ｎ−エトキシカルボニル］アミノ−４−メチル−５−（４−ニトロフェニル）チオフェン−３−カルボン酸エチルエステル
0004652520.tif 000033
参考例９で得られた化合物（４９０ｍｇ，１．３０ｍｏｌ）のジメチルホルムアミド（２０ｍｌ）溶液に、炭酸カリウム（１９６ｍｇ，１．４２ｍｏｌ）、ヨウ化カリウム（２３６ｍｇ，１. ４２ｍｏｌ）、２，６−ジフルオロベンジルクロリド（２３２ｍｇ，１．４２ｍｍｏｌ）を加え室温で５時間かくはんした。反応液を濃縮して得られた残渣をクロロホルムと食塩水で分配した。水層をクロロホルムで抽出し、抽出液をあわせて食塩水で洗浄し乾燥（ＭｇＳＯ４）後、溶媒を減圧下に留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製してアモルファス結晶を得、メタノールから再結晶して黄色粉末状結晶（５２０ｍｇ，７９％）の標題化合物を得た。
ｍｐ：９１−９２℃．
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．１５−１．３５（６Ｈ，ｍ），２．４０（３Ｈ，ｓ），４．１５−４．２９（４Ｈ，ｍ），４．９７（２Ｈ，ｓ），６．８６（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），７．２５−７．３２（１Ｈ，ｍ），７．５１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），８．２５（２Ｈ，ｄ）．
ＩＲ（ＫＢｒ）：１７１７，１５９７，１５２４，１４７５，１３９２，１３４８ｃｍ−１．
【００４５】
参考例１１
４−ブロモメチル−２−［Ｎ−（２，６−ジフルオロベンジル）−Ｎ−エトキシカルボニル］アミノ−５−（４−ニトロフェニル）チオフェン−３−カルボン酸エチルエステル
0004652520.tif 000034
参考例１０で得られた化合物（２０ｇ，３９．６４ｍｏｌ）、Ｎ−ブロモこはく酸イミド（７．７６ｇ，４３．６０ｍｏｌ）、α，α’−アゾビスイソブチロニトリル（０．７２ｇ，４．３６ｍｏｌ）および四塩化炭素（３００ｍｌ）の混合物を１００℃で２時間かくはんした。冷後反応液を食塩水で洗浄し乾燥（ＭｇＳＯ4）後、溶媒を減圧下に留去した。得られた残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製してアモルファス結晶（２３ｇ，１００％）の標題化合物を得た。
ｍｐ：１０５−１０８℃．
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ：１．１５−１．３９（６Ｈ，ｍ），４．０９−４．３９（４Ｈ，ｍ），４．７１（２Ｈ，ｓ），４．９９（２Ｈ，ｓ），６．８６（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），７．２２−７．３２（１Ｈ，ｍ），７．７２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），８．３２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）．
ＩＲ（ＫＢｒ）：１７２５，１６２８，１５２２，１４７５，１３７９，１３４８ｃｍ-1．
ＦＡＢ−Ｍａｓｓ  ｍ／ｚ  ５８２  （ＭＨ+）．
【００４６】
参考例１２
４−（Ｎ−ベンジル−Ｎ−メチルアミノメチル）−２−［Ｎ−（２，６−ジフルオロベンジル）−Ｎ−エトキシカルボニル］アミノ−５−（４−ニトロフェニル）チオフェン−３−カルボン酸エチルエステル
0004652520.tif 000035
参考例１１で得られた化合物（２．０ｇ，３．４３ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド（２０ｍｌ）溶液に、氷冷下、エチルジイソプロピルアミン（０．９０ｍｌ，５．１５ｍｍｏｌ）およびベンジルメチルアミン（０．５３ｍｌ，４．１１ｍｍｏｌ）を加えた。室温で３時間かくはんした後、反応液を濃縮して得られる残渣を酢酸エチルと飽和重曹水で分配した。水層を酢酸エチルで抽出し、有機層をあわせて乾燥（ＭｇＳＯ4）後、溶媒を減圧下に留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、黄色油状物（２．１ｇ，４８％）の標題化合物を得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ：１．１８−１．４４（６Ｈ，ｍ），１．９５（３Ｈ，ｓ），３．２７（２Ｈ，ｓ），３．７０（２Ｈ，ｓ），４．２０−４．３２（４Ｈ，ｍ），５．０３（２Ｈ，ｓ），６．８０（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），７．１０−７．２７（６Ｈ，ｍ），７．５２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），８．２４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）．
ＩＲ（ＫＢｒ）：１７１９，１６２８，１５９７，１５２２，１４７３，１４０２，１３７７，１３４８ｃｍ-1．
【００４７】
参考例１３
５−（４−アミノフェニル）−４−（Ｎ−ベンジル−Ｎ−メチルアミノメチル）−２−［Ｎ−（２，６−ジフルオロベンジル）−Ｎ−エトキシカルボニル］アミノチオフェン−３−カルボン酸エチルエステル
0004652520.tif 000036
参考例１２で得られた化合物（１０．０ｇ，１６．０３ｍｍｏｌ）のギ酸（１００ｍｌ）溶液に、氷冷下、１Ｍ塩化水素−エーテル（４８ｍｌ，４８ｍｍｏｌ）および１０％パラジウム炭素粉末（１０００ｍｇ）を加え、常温常圧で５時間にわたりかくはんし水素添加した。反応液をセライトろ過し、ろ液を減圧濃縮して得られた残渣をジクロルメタンおよび飽和重曹水で分配した。水層をジクロルメタンで抽出し、有機層をあわせて乾燥（ＭｇＳＯ4）後、溶媒を減圧下に留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して白色アモルファス晶の標題化合物（７．９ｇ，８３％）を得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ：１．１５−１．３１（６Ｈ，ｍ），１．９０（３Ｈ，ｓ），３．２１（２Ｈ，ｓ），３．６５（２Ｈ，ｓ），３．７９（２Ｈ，ｓ），４．０９−４．２４（４Ｈ，ｍ），５．０１（２Ｈ，ｓ），６．６７−６．８０（４Ｈ，ｍ），７．１２−７．２６（８Ｈ，ｍ）．
ＩＲ（ＫＢｒ）：１７１７，１６２８，１４９３，１４０６，１３７９ｃｍ-1．
【００４８】
参考例１４
４−（Ｎ−ベンジル−Ｎ−メチルアミノメチル）−２−［Ｎ−（２，６−ジフルオロベンジル）−Ｎ−エトキシカルボニル］アミノ−５−［４−（３−メトキシウレイド）フェニル］チオフェン−３−カルボン酸エチルエステル
0004652520.tif 000037
参考例１３で得られた化合物（０．９ｇ，１．５２ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２０ｍｌ）溶液に、氷冷下、トリエチルアミン（０．４３ｍｌ，３．０９ｍｍｏｌ）を加えかくはんした。この反応液に、氷冷下、Ｎ，Ｎ’−カルボニルジイミダゾール（０．４９２ｇ，３．０３ｍｍｏｌ）を加え、氷冷下から室温に戻して４８時間かくはんした。再度氷冷下に戻し、Ｏ−メチルヒドロキシルアミン塩酸塩（１．２７ｇ，１５．２ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（２．２ｍｌ，１５．８ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（５ｍｌ）を加えた。反応液は氷冷下から室温に戻して３時間かくはんした。反応液をクロロホルムと飽和重曹水で分配した。水層をクロロホルムで抽出し、抽出液をあわせて食塩水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ4）後、溶媒を減圧下に留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して淡黄色アモルファス晶（０．９３ｇ，９２％）の標題化合物を得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ：１．１６（３Ｈ，ｂｒ  ｓ），１．２９（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），１．９１（３Ｈ，ｓ），３．２２（２Ｈ，ｓ），３．６７（２Ｈ，ｓ），３．８２（３Ｈ，ｓ），４．１７（２Ｈ，ｂｒｓ），４．２１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），５．０２（２Ｈ，ｓ），６．７８（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），７．１２−７．３２（６Ｈ，ｍ），７．４０（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ），７．５３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ），７．６２（１Ｈ，ｓ）．
ＩＲ（ＫＢｒ）：３３００，２９８２，１７１９，１６２８，１５９１，１５２８，１４７３，１４０８ｃｍ-1．
【００４９】
参考例１５
４−（Ｎ−ベンジル−Ｎ−メチルアミノメチル）−２−［Ｎ−（２，６−ジフルオロベンジル）−Ｎ−エトキシカルボニル］アミノ−５−［４−（３−メトキシウレイド）フェニル］チオフェン−３−カルボン酸
0004652520.tif 000038
参考例１４で得られた化合物（０．１ｇ，０．１５ｍｍｏｌ）のエタノール溶液（２．５ｍｌ）に、２Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（０．３７ｍｌ，０．７４ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を室温下１時間かくはん後、５５℃で更に１８時間かくはんした。冷後、２Ｎ塩酸水溶液で中和し、酢酸エチルと飽和重曹水で分配した。水層を酢酸エチルで抽出し、抽出液をあわせて食塩水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ4）後、溶媒を減圧下に留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して無色アモルファス晶（０．０７８ｇ，８１％）の標題化合物を得た。
元素分析値  Ｃ32Ｈ32Ｎ4Ｏ6ＳＦ2として
0004652520.tif 000039
1Ｈ−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ：１．０−１．３５（３Ｈ，ｂｒ  ｓ），２．１６（３Ｈ，ｓ），３．８４（３Ｈ，ｓ），３．８４（２Ｈ，ｓ），３．８８（２Ｈ，ｓ），４．１０−４．３０（２Ｈ，ｂｒ  ｓ），６．７７（２Ｈ，ｔ），６．７０−６．８５（１Ｈ，ｂｒ  ｓ），７．１５−７．３５（８Ｈ，ｍ），７．５８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．５０−７．６５（１Ｈ，ｂｒ  ｓ），７．９０−８．００（１Ｈ，ｂｒ  ｓ）．
【００５０】
参考例１６
４−（Ｎ−ベンジル−Ｎ−メチルアミノメチル）−２−［Ｎ−（２，６−ジフルオロベンジル）−Ｎ−エトキシカルボニル］アミノ−３−［４−（メトキシメトキシ）フェニル］アミノカルボニル−５−［４−（３−メトキシウレイド）フェニル］チオフェン
0004652520.tif 000040
氷冷下、参考例１５で得られた化合物（０．８０ｇ，１．２３ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（０．８８ｍｌ，６．３１ｍｍｏｌ）および４−メトキシメトキシアニリン（０．９６ｇ，６．２７ｍｍｏｌ）を含むジクロルメタン溶液（２５ｍｌ）にベンゾトリアゾ−ル−１−イルオキシトリピロリジノホスフォニウム  ヘキサフルオロホスフェート（ｂｅｎｚｏｔｒｉａｚｏｌ−１−ｙｌｏｘｙｔｒｉｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｏｐｈｏｓｐｈｏｎｉｕｍ  ｈｅｘａｆｌｕｏｒｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ：ＰｙＢＯＰ）（０．７２ｇ，１．３８ｍｍｏｌ）を加えた。氷冷下から室温に戻しながら１４時間かくはんした。反応液をクロロホルムと飽和重曹水で分配した。水層をクロロホルムで抽出し、抽出液をあわせて食塩水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ4）後、溶媒を減圧下に留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して淡黄色アモルファス晶（０．８２ｇ，９３％）の標題化合物を得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ：１．２１（３Ｈ，ｂｒ  ｓ），２．０７（３Ｈ，ｂｒ  ｓ），３．２０（２Ｈ，ｓ），３．４７（３Ｈ，ｓ），３．６８（２Ｈ，ｓ），３．８３（３Ｈ，ｓ），４．２４（２Ｈ，ｂｒ  ｓ），５．０７（２Ｈ，ｂｒ  ｓ），５．１３（２Ｈ，ｓ），６．７５（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ），６．９３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ），７．１２−７．１８（３Ｈ，ｍ），７．２３−７．２５（４Ｈ，ｍ），７．４３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ），７．５４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ），７．６５（１Ｈ，ｓ）．
ＩＲ（ＫＢｒ）：３２８８，２９４０，１７１７，１６７２，１６２８，１５９８，１５６４，１５２８，１５１０，１４７３ｃｍ-1．
【００５１】
参考例１７
２−［Ｎ−（２，６−ジフルオロベンジル）−Ｎ−エトキシカルボニル］アミノ−４−［Ｎ−（２−メトキシエチル）−Ｎ−メチルアミノメチル］−５−（４−ニトロフェニル）チオフェン−３−カルボン酸エチルエステル
0004652520.tif 000041
参考例１１で得られた化合物（１２．８２ｇ，２２．０ｍｍｏｌ）の酢酸エチル溶液（１２０ｍｌ）に、エチルジイソプロピルアミン（７．７ｍｌ，４４．２ｍｍｏｌ）およびＮ−（２−メトキシエチル）メチルアミン（３．５ｍｌ，３２．６ｍｍｏｌ）を加えた。室温で２０時間かくはんした後、反応液を濃縮して得られる残渣を酢酸エチルと飽和重曹水で分配した。水層を酢酸エチルで抽出し、抽出液をあわせて食塩水で洗浄し、乾燥（Ｎａ2ＳＯ4）後、溶媒を減圧下に留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、褐色油状物（１０．２７ｇ，７９％）の標題化合物を得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）［フリーアミン］δ：１．１６−１．３８（６Ｈ，ｍ），２．０８（３Ｈ，ｓ），２．４６（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ），３．２８（３Ｈ，ｓ），３．３６（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ），３．６３（２Ｈ，ｓ），４．０９−４．３２（４Ｈ，ｍ），５．０１（２Ｈ，ｓ），６．８６（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．１Ｈｚ），７．２１−７．３２（１Ｈ，ｍ），７．７０（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ），８．２３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ）．ＩＲ（ＫＢｒ）：２９８４，１７２５，１６２８，１５９７，１５２０，１４７３ｃｍ-1．
ＦＡＢ−Ｍａｓｓ  ｍ／ｚ  ５９２  （ＭＨ+）．
【００５２】
参考例１８
１−（２，６−ジフルオロベンジル）−５−［Ｎ−（２−メトキシエチル）−Ｎ−メチルアミノメチル］−３−（３，４−メチレンジオキシフェニル）−６−（４−ニトロフェニル）チエノ〔２，３−ｄ〕ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン
0004652520.tif 000042
３，４−メチレンジオキシアニリン（３．３０ｇ，２４．３ｍｍｏｌ）のトルエン溶液（８０ｍｌ）に、氷冷下、１．０１Ｍジメチルアルミニウムクロリド溶液（２２．０ｍｌ，２２．０ｍｍｏｌ）を加えた。氷冷下１時間かくはんした後、参考例１７で得られた化合物（２．２０ｇ，３．７０ｍｍｏｌ）を含むトルエン溶液（３０ｍｌ）を加え、更に室温下２０時間かくはんした。この反応液を氷水にあけ、酢酸エチルおよび飽和重曹水で分配した。水層を酢酸エチルで抽出し、抽出液をあわせて食塩水で洗浄し、乾燥（Ｎａ2ＳＯ4）後、溶媒を減圧下に留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、さらに酢酸エチル−ヘキサンにより再結晶して褐色結晶（１．６０ｇ，６８％）の標題化合物を得た。
ｍｐ：１９０−１９２℃．
元素分析値  Ｃ31Ｈ26Ｎ4Ｏ7ＳＦ2として
0004652520.tif 000043
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）［フリーアミン］δ：２．２１（３Ｈ，ｓ），２．６８（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ），３．３１（３Ｈ，ｓ），３．４４（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ），３．８７（２Ｈ，ｓ），５．３８（２Ｈ，ｓ），６．０３（２Ｈ，ｓ），６．７３−６．７６（２Ｈ，ｍ），６．９０−６．９７（３Ｈ，ｍ），７．２８−７．３８（１Ｈ，ｍ），８．００（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ），８．２６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ）．
ＩＲ（ＫＢｒ）：２８９４，１７１９，１６７１，１６２８，１５９７，１５４７，１５２０，１４８７，１４６２，１３４８，１２４３ｃｍ-1．
【００５３】
参考例１９
６−（４−アミノフェニル）−１−（２，６−ジフルオロベンジル）−５−［Ｎ−（２−メトキシエチル）−Ｎ−メチルアミノメチル］−３−（３，４−メチレンジオキシフェニル）チエノ〔２，３−ｄ〕ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン
0004652520.tif 000044
参考例１８で得られた化合物（１．５６ｇ，２．５０ｍｍｏｌ）のギ酸（３０ｍｌ）溶液に、氷冷下１Ｍ塩化水素−エーテル（７．４ｍｌ，７．４ｍｍｏｌ）および１０％パラジウム炭素粉末（２００ｍｇ）を加え、常温常圧で２時間にわたりかくはんし水素添加した。反応液をセライトろ過し、ろ液を減圧濃縮して得られた残渣をクロロホルムおよび飽和重曹水で分配した。水層をクロロホルムで抽出し、抽出液をあわせて食塩水で洗浄し、乾燥（Ｎａ2ＳＯ4）後、溶媒を減圧下に留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、さらに酢酸エチル−ヘキサンにより再結晶して褐色結晶（１．４６ｇ，９６％）の標題化合物を得た。
ｍｐ：２００−２０２℃．
元素分析値  Ｃ31Ｈ28Ｎ4Ｏ5ＳＦ2・１．０Ｈ2Ｏとして
0004652520.tif 000045
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）［フリーアミン］δ：２．１３（３Ｈ，ｓ），２．６３（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ），３．２６（３Ｈ，ｓ），３．４１（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ），３．８０（２Ｈ，ｓ），５．３４（２Ｈ，ｓ），６．０１（２Ｈ，ｓ），６．６８−６．７６（４Ｈ，ｍ），６．８９−６．９３（３Ｈ，ｍ），７．２４−７．３９（３Ｈ，ｍ）．
ＩＲ（ＫＢｒ）：２９２６，１７１５，１６６７，１６２８，１５３３，１５０６，１４６４ｃｍ-1．
【００５４】
参考例２０
５−クロロメチル−１−（２，６−ジフルオロベンジル）−３−（３，４−エチレンジオキシ）フェニル−６−［４−（３−メトキシウレイド）フェニル］チエノ〔２，３−ｄ〕ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン
0004652520.tif 000046
後述の実施例８で得られた化合物を原料として、参考例７に記載の方法と同様の方法で標題化合物を得た。
収率：６３％
ｍｐ：２０４−２０９℃．
【００５５】
実施例１
５−（Ｎ−ベンジル−Ｎ−メチルアミノメチル）−１−（２，６−ジフルオロベンジル）−６−［４−（３−メトキシウレイド）フェニル］−３−フェニルチエノ〔２，３−ｄ〕ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン（実施例化合物１）
0004652520.tif 000047
参考例６で得られた化合物（５．０ｇ，８．４１ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１２０ｍｌ）溶液に、氷冷下、トリエチルアミン（２．３４ｍｌ，１６．８２ｍｍｏｌ）を加えかくはんした。この反応液に、氷冷下、Ｎ，Ｎ’−カルボニルジイミダゾール（２．７３ｇ，１６．８２ｍｍｏｌ）を加え、氷冷下から室温に戻して４２時間かくはんした。再度氷冷下に戻し、Ｏ−メチルヒドロキシルアミン塩酸塩（７．０２ｇ，８４．０８ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１１．７ｍｌ，８４．０８ｍｍｏｌ）を加えた。反応液は氷冷下から室温に戻して３時間かくはんした。反応液をクロロホルムと飽和重曹水で分配した。水層をクロロホルムで抽出し、抽出液をあわせて食塩水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ4）後、溶媒を減圧下に留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して淡黄色固体を得、クロロホルム−エーテルから再結晶して白色結晶（４．５２ｇ，８０％）の標題化合物を得た。
ｍｐ：２０４−２０５℃．
元素分析値  Ｃ36Ｈ31Ｎ5Ｏ4ＳＦ2として
0004652520.tif 000048
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ：２．０５（３Ｈ，ｓ），３．５７（２Ｈ，ｓ），３．８２（３Ｈ，ｓ），３．９０（２Ｈ，ｓ），５．３７（２Ｈ，ｓ），６．９２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），７．１６−７．３１（９Ｈ，ｍ），７．４２−７．５７（５Ｈ，ｍ），７．６３（１Ｈ，ｓ），７．７３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ）．
ＩＲ（ＫＢｒ）：３３３８，３０６４，１７１７，１６６９，１６２８，１５９１，１５３１，１４７０ｃｍ-1．
【００５６】
実施例２
５−（Ｎ−ベンジル−Ｎ−メチルアミノメチル）−１−（２，６−ジフルオロベンジル）−６−［４−（３−メトキシウレイド）フェニル］−３−フェニルチエノ〔２，３−ｄ〕ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン  塩酸塩（実施例化合物２）
0004652520.tif 000049
実施例１で得られた白色結晶（３８．３４ｇ，５７．４２ｍｍｏｌ）のジクロルメタン（８００ｍｌ）溶液に、氷冷下、１Ｍエーテル性塩化水素（１００ｍｌ）を加え、同温で１０分間かくはんした。反応液を減圧下濃縮して得られた残さをメタノール−エーテルから再結晶させて、白色粉末状晶（４０．０ｇ，９９％）の標題化合物を得た。
ｍｐ：１８２−１８５℃．
元素分析値  Ｃ36Ｈ31Ｎ5Ｏ4ＳＦ2・ＨＣｌ・０．５Ｈ2Ｏとして
0004652520.tif 000050
ＩＲ（ＫＢｒ）：３４４０，３０４２，１７１３，１６６５，１６２８，１５９３，１５３９，１４７３ｃｍ-1．
ＦＡＢ−Ｍａｓｓ  ｍ／ｚ  ６６８（ＭＨ）+
【００５７】
実施例３
参考例６で得られた化合物を原料として、実施例１および２に記載の方法と同様の方法で、実施例化合物３−１〜３−９を得た。
実施例化合物３−１：
0004652520.tif 000051
収率：９１％
ｍｐ：１７５−１８０℃．
実施例化合物３−２：
0004652520.tif 000052
収率：８１％
ｍｐ：１７９−１８２℃．
実施例化合物３−３：
0004652520.tif 000053
収率：８０％
ｍｐ：１７２−１７７℃．
【００５８】
実施例化合物３−４：
0004652520.tif 000054
収率：９９％
ｍｐ：１９３−１９７℃．
実施例化合物３−５：
0004652520.tif 000055
収率：９１％
ｍｐ：２０１−２０４℃．
実施例化合物３−６：
0004652520.tif 000056
収率：８９％
ｍｐ：２１０−２１５℃．
【００５９】
実施例化合物３−７：
0004652520.tif 000057
収率：８９％
ｍｐ：１９９−２００℃．
実施例化合物３−８：
0004652520.tif 000058
収率：９３％
ｍｐ：１９５−１９８℃．
実施例化合物３−９：
0004652520.tif 000059
収率：９５％
ｍｐ：１６５−１７０℃．
【００６０】
実施例４
参考例７で得られた化合物を原料として、参考例５に記載の方法と同様の方法で、実施例化合物４−１〜４−５を得た。
実施例化合物４−１：
0004652520.tif 000060
収率：８０％
ｍｐ：１７７−１８０℃．
実施例化合物４−２：
0004652520.tif 000061
収率：７７％
ｍｐ：２０５−２１０℃．
実施例化合物４−３：
0004652520.tif 000062
収率：７７％
ｍｐ：１８２−１８５℃．
【００６１】
実施例化合物４−４：
0004652520.tif 000063
収率：１４％
ｍｐ：２７０℃（ｄｅｃ）．
実施例化合物４−５：
0004652520.tif 000064
収率：２６％
ｍｐ：２６０℃（ｄｅｃ）．
【００６２】
実施例５
５−（Ｎ−ベンジル−Ｎ−メチルアミノメチル）−１−（２，６−ジフルオロベンジル）−６−［４−（３−ヒドロキシウレイド）フェニル］−３−フェニルチエノ〔２，３−ｄ〕ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン
0004652520.tif 000065
参考例６で得られた化合物（２．０ｇ，３．３６ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（４０ｍｌ）溶液に、氷冷下、トリエチルアミン（０．９４ｍｌ，６．７３ｍｍｏｌ）を加えかくはんした。この反応液に、氷冷下、Ｎ，Ｎ’−カルボニルジイミダゾール（１．０９ｇ，６．７３ｍｍｏｌ）を加え、氷冷下から室温に戻して２４時間かくはんした。再度氷冷下に戻し、Ｏ−（２，４−ジメトキシベンジル）ヒドロキシルアミン（３．１１ｇ，１６．９８ｍｍｏｌ）を加えた。反応液は氷冷下から室温に戻して１９時間かくはんした。反応液をクロロホルムと飽和重曹水で分配した。水層をクロロホルムで抽出し、抽出液をあわせて食塩水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ4）後、溶媒を減圧下に留去した。得られた残渣のジクロロメタン（５０ｍｌ）溶液にトリフルオロ酢酸（５ｍｌ）を加え、室温で２０分かくはんした。この反応液をクロロホルムと飽和重曹水で分配した。水層をクロロホルムで抽出し、抽出液をあわせて食塩水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ4）後、溶媒を減圧下に留去した。シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して白色無晶体を得、クロロホルム−エーテルから再結晶して白色結晶（２．２ｇ，１００％）の標題化合物を得た。
ｍｐ：１６４−１６５℃．
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ：２．０５（３Ｈ，ｓ），３．４６（２Ｈ，ｓ），３．９２（２Ｈ，ｓ），５．３５（２Ｈ，ｓ），６．６５（１Ｈ，ｂｒ），６．９０（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．２８−７．６５（１５Ｈ，ｍ），８．０４（１Ｈ，ｓ），９．７３（１Ｈ，ｂｒ）．
ＩＲ（ＫＢｒ）：３３２６，２８５６，１７１５，１６６５，１６２８，１５９１，１５３１，１４６８ｃｍ-1．
ＦＡＢ−Ｍａｓｓ  ｍ／ｚ  ６５４（ＭＨ）+
【００６３】
実施例６
５−（Ｎ−ベンジル−Ｎ−メチルアミノメチル）−１−（２，６−ジフルオロベンジル）−６−［４−（３−ヒドロキシウレイド）フェニル］−３−フェニルチエノ〔２，３−ｄ〕ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン  塩酸塩
0004652520.tif 000066
実施例５で得られた白色結晶（６０ｍｇ，０．０９４ｍｍｏｌ）のジクロルメタン（５ｍｌ）溶液に、氷冷下、１Ｍエーテル性塩化水素（０．２ｍｌ）を加え、同温で１０分間かくはんした。反応液を減圧下濃縮して得られた残さをメタノール−エーテルから再結晶させて、白色粉末状晶（７２ｍｇ，１００％）の標題化合物を得た。
ｍｐ：１８０−１８６℃．
元素分析値  Ｃ35Ｈ29Ｎ5Ｏ4ＳＦ2・０．１ＨＣｌ・１．０Ｈ2Ｏとして
0004652520.tif 000067
ＩＲ（ＫＢｒ）：３３８８，３０６６，１７１３，１６６３，１６２８，１５９３，１５３７，１４７３ｃｍ-1．
【００６４】
実施例７
５−（Ｎ−ベンジル−Ｎ−メチルアミノメチル）−１−（２，６−ジフルオロベンジル）−６−［４−［３−（２−ヒドロキシエチル）ウレイド］フェニル］−３−フェニルチエノ〔２，３−ｄ〕ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン
0004652520.tif 000068
実施例化合物３−７（９００ｍｇ，１．２４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２０ｍｌ）溶液に、氷冷下、５Ｎ水酸化カリウム水溶液（７ｍｌ）を加え６０℃で１時間かくはんした。反応液を酢酸エチルと飽和食塩水で分配した。水層を酢酸エチルで抽出し、抽出液をあわせて食塩水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ4）後、溶媒を減圧下に留去した。シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して白色無晶体を得、クロロホルム−メタノール−エーテルから再結晶して白色結晶（８５０ｍｇ，８８％）の標題化合物を得た。
ｍｐ：２２０−２２２℃．
元素分析値  Ｃ37Ｈ33Ｎ5Ｏ4ＳＦ2として
0004652520.tif 000069
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ：１．９３（３Ｈ，ｓ），３．１７（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝４．８Ｈｚ），３．４５−３．４７（４Ｈ，ｍ），３．８１（２Ｈ，ｓ），４．７６（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．１Ｈｚ），５．２８（２Ｈ，ｓ），６．２８（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ），７．１２−７．２８（９Ｈ，ｍ），７．４４−７．５８（８Ｈ，ｍ），８．７９（１Ｈ，ｓ）．
ＩＲ（ＫＢｒ）：３５３０，３３６４，３０６６，２９５８，２８８４，１７１５，１６６７，１５９５，１５３１，１４７０ｃｍ-1．
ＦＡＢ−Ｍａｓｓ  ｍ／ｚ  ６８２（ＭＨ）+
【００６５】
実施例８
５−（Ｎ−ベンジル−Ｎ−メチルアミノメチル）−１−（２，６−ジフルオロベンジル）−３−（３，４−エチレンジオキシ）フェニル−６−［４−（３−メトキシウレイド）フェニル］チエノ〔２，３−ｄ〕ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン
0004652520.tif 000070
３，４−エチレンジオキシアニリン（３．９０ｇ，２５．８ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液（１００ｍｌ）に氷冷下１．０１Ｍジメチルアルミニウムクロリド溶液（２５．５ｍｌ，２５．８ｍｍｏｌ）を加えた。同温度から室温まで戻しながら１時間かくはんした。参考例１４で得られた化合物（３．４４ｇ，５．１６ｍｍｏｌ）を含むジクロロメタン溶液（６０ｍｌ）を加え、更に室温下１日かくはんした。この反応液をクロロホルムと飽和食塩水で分配した。水層をクロロホルムで抽出し、抽出液をあわせて食塩水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ4）後、溶媒を減圧下に留去した。シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して白色アモルファス晶（３．２ｇ，８５％）の標題化合物を得た。
ｍｐ：１８５−１８７℃．
元素分析値  Ｃ38Ｈ34Ｎ5Ｏ6ＳＦ2Ｃｌ・Ｈ2Ｏとして
0004652520.tif 000071
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ：２．０５（３Ｈ，ｓ），３．５７（２Ｈ，ｓ），３．８３（３Ｈ，ｓ），３．９０（２Ｈ，ｓ），４．２９（４Ｈ，ｓ），５．３５（２Ｈ，ｓ），６．７５−７．０１（５Ｈ，ｍ），７．１２−７．３３（７Ｈ，ｍ），７．５５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．６３（１Ｈ，ｓ），７．７２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）．
ＩＲ（ＫＢｒ）：１７１７，１７０２，１６８６，１６５７，１６３６，１６２６，１５６０，１５４３，１５２２，１５１０，１４７５ｃｍ-1．
【００６６】
実施例９
参考例１４で得られた化合物を原料として、実施例８に記載の方法と同様の方法で、実施例化合物９−１〜９−２を得た。
実施例化合物９−１：
0004652520.tif 000072
収率：６０％
ｍｐ：１４８−１５１℃（フリー体）．
実施例化合物９−２：
0004652520.tif 000073
収率：５４％
ｍｐ：１６９−１７０℃（塩酸塩）．
【００６７】
実施例１０
５−（Ｎ−ベンジル−Ｎ−メチルアミノメチル）−１−（２，６−ジフルオロベンジル）−３−［４−（メトキシメトキシ）フェニル］−６−［４−（３−メトキシウレイド）フェニル］チエノ〔２，３−ｄ〕ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン（実施例化合物１０）
0004652520.tif 000074
氷冷下、参考例１６で得られた化合物（０．８４ｇ，１．０９ｍｍｏｌ）の無水メタノール溶液（５０ｍｌ）に、ナトリウムメトキシド（２．１０ｇ，１０．４ｍｍｏｌ）を含む無水メタノール溶液（２０ｍｌ）を加えた。同温度から室温にかけて２．５時間かくはんした。１Ｎ塩酸（１０．９ｍｌ，１０．９ｍｍｏｌ）で中和後、溶媒を減圧留去した。得られた残さをクロロホルムと飽和食塩水で分配した。水層をクロロホルムで抽出し、抽出液をあわせて食塩水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ4）後、溶媒を減圧下に留去し、酢酸エチル−イソプロピルエーテルから再結晶して白色結晶（０．６３２ｇ，８０％）の標題化合物を得た。
ｍｐ：１８９−１９１℃．
元素分析値  Ｃ38Ｈ35Ｎ5Ｏ6ＳＦ2として
0004652520.tif 000075
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ：２．０５（３Ｈ，ｓ），３．４９（３Ｈ，ｓ），３．５７（２Ｈ，ｓ），３．８２（３Ｈ，ｓ），３．９１（２Ｈ，ｓ），５．２１（２Ｈ，ｓ），５．３６（２Ｈ，ｓ），６．９２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．１４−７．３５（１１Ｈ，ｍ），７．５５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ），７．６３（１Ｈ，ｓ），７．７２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ）．
ＩＲ（ＫＢｒ）：３３８０，２９４０，２８３０，１７１７，１７０３，１６６９，１６２８，１５８９，１５２４，１４６４ｃｍ-1．
【００６８】
実施例１１
５−（Ｎ−ベンジル−Ｎ−メチルアミノメチル）−１−（２，６−ジフルオロベンジル）−３−（４−ヒドロキシフェニル）−６−［４−（３−メトキシウレイド）フェニル］チエノ〔２，３−ｄ〕ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン
0004652520.tif 000076
実施例化合物１０（０．３５ｇ，０．４８ｍｍｏｌ）をアセトン（１０ｍｌ）に溶解させ、６Ｎ塩酸（１．０ｍｌ，６．０ｍｍｏｌ）を加えた。室温下６時間かくはんし、氷冷下２Ｎ水酸化ナトリウム（３ｍｌ，６ｍｍｏｌ）を加えて中和した後、溶媒を減圧留去した。得られた残さをクロロホルムと飽和食塩水で分配した。水層をクロロホルムで抽出し、抽出液をあわせて食塩水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ4）後、溶媒を減圧下に留去し、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して無色アモルファス晶（０．１８ｇ，５５％）を得、クロロホルム−メタノールから再結晶して白色結晶（０．０６７ｇ）の標題化合物を得た。
ｍｐ：１７８−１８２℃．
元素分析値  Ｃ36Ｈ31Ｎ5Ｏ5ＳＦ2 ・０．４Ｈ2Ｏとして
0004652520.tif 000077
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ：２．０４（３Ｈ，ｓ），３．５６（２Ｈ，ｓ），３．８０（３Ｈ，ｓ），３．９０（２Ｈ，ｓ），５．３５（２Ｈ，ｓ），６．８９−６．９８（４Ｈ，ｍ），７．０８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），７．１５−７．３１（６Ｈ，ｍ），７．５７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ），７．６９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ），７．８７（１Ｈ，ｓ），８．２７（１Ｈ，ｓ），８．８８（１Ｈ，ｓ）．
ＩＲ（ＫＢｒ）：３４４６，１７１７，１６６３，１６３０，１６０１，１５３４，１５２０，１４７３ｃｍ-1．
【００６９】
実施例１２
５−（Ｎ−ベンジル−Ｎ−メチルアミノメチル）−１−（２，６−ジフルオロベンジル）−６−｛４−［（３−メトキシ−３−メトキシカルボニル）ウレイド］フェニル｝−３−フェニルチエノ〔２，３−ｄ〕ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン
0004652520.tif 000078
実施例化合物１（０．３３４ｇ，０．５ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（１０ｍｌ）溶液に、氷冷下トリエチルアミン（０．０８ｍｌ，０．６ｍｍｏｌ）およびクロルぎ酸メチル（０．０４２５ｍｌ，０．５５ｍｍｏｌ）を加え同温度で１時間、室温で１時間かくはんした。更にトリエチルアミン（０．０８ｍｌ，０．６ｍｍｏｌ）およびクロルぎ酸メチル（０．０４２５ｍｌ，０．５５ｍｍｏｌ）を追加して、４０℃で２時間かくはん後、室温で更に１２時間かくはんした。反応液に食塩水を加え、酢酸エチルで抽出し、抽出液をあわせて食塩水で洗浄し乾燥（ＭｇＳＯ4）後、溶媒を減圧下に留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、酢酸エチル−ジエチルエーテルから再結晶して無色結晶（０．２０４ｇ，５６％）の標題化合物を得た。
ｍｐ：１５０−１５２℃．
元素分析値  Ｃ38Ｈ33Ｎ5Ｏ6ＳＦ2として
0004652520.tif 000079
1Ｈ−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ：２．０６（３Ｈ，ｓ），３．５７（２Ｈ，ｓ），３．９１（２Ｈ，ｓ），３．９３（３Ｈ，ｓ），３．９８（３Ｈ，ｓ），５．３７（２Ｈ，ｓ），６．９２（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），７．１５−７．６０（１１Ｈ，ｍ），７．５７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ），７．７３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ），１０．０６（１Ｈ，ｓ）．
ＩＲ（ＫＢｒ）：１７４６，１７１３，１６６３，１５３７，１４６０，１３３９，１２００，１０３４，７３７ｃｍ-1．
【００７０】
実施例１３
１−（２，６−ジフルオロベンジル）−５−［Ｎ−（２−メトキシエチル）−Ｎ−メチルアミノメチル］−６−［４−（３−メトキシウレイド）フェニル］−３−フェニルチエノ〔２，３−ｄ〕ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン
0004652520.tif 000080
参考例７で得られた化合物（０．８６ｇ，１．４８ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド（１５ｍｌ）溶液に、エチルジイソプロピルアミン（０．３４ｍｌ，１．９２ｍｍｏｌ）、ヨウ化カリウム（２４５ｍｇ，１．４８ｍｍｏｌ）およびＮ−（２−メトキシエチル）メチルアミン（０．１９ｍｌ，１．７８ｍｍｏｌ）を加えた。室温で２時間かくはんした後、反応液を濃縮して得られる残渣を酢酸エチルと飽和重曹水で分配した。水層を酢酸エチルで抽出し、抽出液をあわせて食塩水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ4）後、溶媒を減圧下に留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、白色結晶（８４０ｍｇ，８９％）の標題化合物を得た。
ｍｐ：１６１−１６３℃．
元素分析値  Ｃ32Ｈ31Ｎ5Ｏ5ＳＦ2・０．５Ｈ2Ｏとして
0004652520.tif 000081
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）［フリーアミン］δ：２．１４（３Ｈ，ｓ），２．６４（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ），３．２７（３Ｈ，ｓ），３．４１（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ），３．８３（５Ｈ，ｓ），５．３７（２Ｈ，ｓ），６．９３（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），７．１２−７．６３（１２Ｈ，ｍ）．
ＩＲ（ＫＢｒ）：１７０９，１６６３，１５６０，１５２２ｃｍ-1．
【００７１】
実施例１４
１−（２，６−ジフルオロベンジル）−３−（３，４−エチレンジオキシフェニル）−５−［Ｎ−（２−メトキシエチル）−Ｎ−メチルアミノメチル］−６−［４−（３−メトキシウレイド）フェニル］チエノ〔２，３−ｄ〕ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン
0004652520.tif 000082
参考例２０で得られた化合物を原料として、実施例１３に記載の方法と同様の方法で標題化合物を得た。
収率：７９％
ｍｐ：１５５−１５６℃．
【００７２】
実施例１５
１−（２，６−ジフルオロベンジル）−５−［Ｎ−（２−メトキシエチル）−Ｎ−メチルアミノメチル］−６−［４−（３−メトキシウレイド）フェニル］−３−（３，４−メチレンジオキシフェニル）チエノ〔２，３−ｄ〕ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン
0004652520.tif 000083
参考例１９で得られた化合物を原料として、実施例１に記載の方法と同様の方法で標題化合物を得た。
収率：７２％
ｍｐ：１５０−１５２℃．
【００７３】
製剤例１
実施例化合物１（１００ｍｇ）、ラクトース（１６５ｍｇ）、コーンスターチ（２５ｍｇ）、ポリビニールアルコール（４ｍｇ）およびステアリン酸マグネシウム（１ｍｇ）を用いて、常法により錠剤を製造する。
製剤例２
実施例化合物２（５ｇ）を注射用蒸留水に溶かし、全量１００ｍｌとした。この液を０．２２μｍのメンブランフィルター（住友電気工業（株）又はザルトリウス社製）を用いて無菌ろ過し、洗浄滅菌済バイアルに２ｍｌずつ分注し、これを常法により凍結乾燥し、１００ｍｇ／バイアルの凍結乾燥注射剤を製造する。
製剤例３
実施例化合物４−２（１００ｍｇ）、ラクトース（１６５ｍｇ）、コーンスターチ（２５ｍｇ）、ポリビニールアルコール（４ｍｇ）およびステアリン酸マグネシウム（１ｍｇ）を用いて、常法により錠剤を製造する。
製剤例４
実施例化合物４−２（５ｇ）を注射用蒸留水に溶かし、全量１００ｍｌとした。この液を０．２２μｍのメンブランフィルター（住友電気工業（株）又はザルトリウス社製）を用いて無菌ろ過し、洗浄滅菌済バイアルに２ｍｌずつ分注し、これを常法により凍結乾燥し、１００ｍｇ／バイアルの凍結乾燥注射剤を製造する。
【００７４】
製剤例５
（１）実施例化合物１または実施例化合物４−２                  ５ｇ
（２）乳糖・結晶セルロース（粒）                          ３３０ｇ
（３）Ｄ−マンニトール                                      ２９ｇ
（４）低置換度ヒドロキシプロピルセルロース                  ２０ｇ
（５）タルク                                                ２５ｇ
（６）ヒドロキシプロピルセルロース                          ５０ｇ
（７）アスパルテーム                                          ３ｇ
（８）グリチルリチン酸二カリウム                              ３ｇ
（９）ヒドロキシプロピルメチルセルロース２９１０            ３０ｇ
（１０）酸化チタン                                            ３．５ｇ
（１１）黄色三二酸化鉄                                        ０．５ｇ
（１２）軽質無水ケイ酸                                        １ｇ
（１）、（３）、（４）、（５）、（６）、（７）および（８）を精製水に懸濁または溶解し、（２）の核粒にコーティングし素細粒を作製する。この素細粒上に（９）〜（１１）をコーティングしコーティング細粒を作り、（１２）と混合して化合物ＫＭ０５２８３細粒１％、５００ｇを作製する。これを５００ｍｇずつ分包する。
【００７５】
試験例１
（１）１２５Ｉ−リュープロレリンの調製
３×１０−４Ｍ  リュープロレリン水溶液１０μｌ、および０．０１ｍｇ／ｍｌラクトパーオキシダーゼ１０μｌをチューブにとり、Ｎａ１２５Ｉ溶液を１０μｌ（３７ＭＢｑ）加え、かくはん後、０．００１％Ｈ２Ｏ２  １０μｌを加えて、室温で２０分間反応させた。０．０５％ＴＦＡ溶液を７００μｌ加えて反応を停止し、逆相ＨＰＬＣにより精製した。ＨＰＬＣの条件を以下に示す。１２５Ｉ−リュープロレリンは保持時間２６〜２７分で溶出された。カラム：ＴＳＫｇｅｌ  ＯＤＳ−８０ＴＭ（ＴＭは登録商標であることを示す。以下同様。）
ＣＴＲ（４．６ｍｍｘ１０ｃｍ）溶離液：
溶媒Ａ（０．０５％ＴＦＡ）
溶媒Ｂ（４０％ＣＨ３ＣＮ−０．０５％ＴＦＡ）
０分（１００％溶媒Ａ）−３分（１００％溶媒Ａ）−７分（５０％溶媒Ａ＋５０％溶媒Ｂ）−４０分（１００％溶媒Ｂ）
溶出温度：室温
溶出速度：１ｍｌ／ｍｉｎ
【００７６】
（２）ラットＧｎＲＨレセプターを含有する下垂体前葉膜画分の調製
ウイスターラット（８週令、雄性）４０匹から下垂体前葉を摘出し、氷冷したホモジネートバッファー｛２５ｍＭ  Ｔｒｉｓ〔トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン〕−ＨＣｌ｝、０．３Ｍ  サッカロース、１ｍＭ  ＥＧＴＡ（グリコールエーテルジアミン四酢酸）、０．２５ｍＭ  ＰＭＳＦ（フッ化フェニルメチルスルホニル）、１０Ｕ／ｍｌ  アプロチニン、１μｇ／ｍｌ  ペプスタチン、２０μｇ／ｍｌ  ロイペプチン、１００μｇ／ｍｌ  フォスフォラミドン、０．０３％  アジ化ナトリウム、ｐＨ７．５）で洗浄した。ホモジネートバッファー２ｍｌに下垂体を浮遊させ、ポリトロンホモジナイザーを用いてホモジネートした。７００ｘｇで１５分遠心し、上清を超遠心管に採取し１００，０００ｘｇで１時間遠心し、膜画分の沈澱物を得た。この沈澱物に２ｍｌのアッセイバッファー（２５ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、１ｍＭ  ＥＤＴＡ（エチレンジアミン四酢酸）、０．１％  ＢＳＡ（ウシ血清アルブミン）、０．２５ｍＭ  ＰＭＳＦ、１μｇ／ｍｌ  ペプスタチン、２０μｇ／ｍｌ  ロイペプチン、１００μｇ／ｍｌ  フォスフォラミドン、０．０３％  アジ化ナトリウム、ｐＨ７．５）を加えて懸濁し、１００，０００ｘｇで１時間遠心した。沈澱物として回収された膜画分を再び１０ｍｌのアッセイバッファーに懸濁し、分注して、−８０℃で保存し、使用の都度解凍して用いた。
【００７７】
（３）ヒトＧｎＲＨレセプターを含有するＣＨＯ（チャイニーズハムスター卵巣）細胞膜画分の調製
ヒトＧｎＲＨレセプター発現ＣＨＯ細胞（１０9個）を５ｍＭ  ＥＤＴＡを添加したリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ−ＥＤＴＡ）に浮遊させ、１００ｘｇで５分間遠心した。細胞のペレットに細胞用ホモジネートバッファー（１０ｍＭ  ＮａＨＣＯ3、５ｍＭ  ＥＤＴＡ、ｐＨ７．５）を１０ｍｌ加え、ポリトロンホモジナイザーを用いてホモジネートした。４００ｘｇで１５分遠心し、上清を超遠心管に取り１００，０００ｘｇで１時間遠心し、膜画分の沈澱物を得た。この沈澱物を２ｍｌのアッセイバッファーに懸濁し、１００，０００ｘｇで１時間遠心した。沈澱物として回収された膜画分を再び２０ｍｌのアッセイバッファーに懸濁し、分注して、−８０℃で保存し、使用の都度解凍して用いた。
【００７８】
（４）１２５Ｉ−リュープロレリン結合阻害率の測定
上記（２）および（３）で調製したラットおよびヒトの膜画分をアッセイバッファーで希釈して、２００μｇ／ｍｌとし、チューブに１８８μｌずつ分注した。ラット下垂体前葉膜画分を使用した場合には、６０％のＤＭＳＯ（ジメチルスルホキシド）に溶解した０．１ｍＭの化合物２μｌと、３８ｎＭの１２５Ｉ−リュープロレリン１０μｌとを同時に添加した。ヒトＧｎＲＨレセプター発現ＣＨＯ細胞膜画分を使用した場合には、６０％のＤＭＳＯに溶解した２ｍＭの化合物２μｌと、３８ｎＭの１２５Ｉ−リュープロレリン１０μｌとを同時に添加した。最大結合量を測定するために、６０％のＤＭＳＯ２μｌと、３８ｎＭの１２５Ｉ−リュープロレリン１０μｌとを添加した反応液を調製した。また、非特異的結合量を測定するために、６０％のＤＭＳＯに溶解した１００μＭのリュープロレリン２μｌと、３８ｎＭの１２５Ｉ−リュープロレリン１０μｌとを添加した反応液も同時に調製した。ラット下垂体前葉膜画分を使用した場合には４℃で９０分反応させ、ヒトＧｎＲＨレセプター発現ＣＨＯ細胞膜画分を使用した場合には２５℃で６０分反応させた。反応後、ポリエチレンイミン処理したワットマングラスフィルター（ＧＦ−Ｆ）を用いて反応液を吸引ろ過した。ろ過後、γ−カウンターを用いてろ紙上に残った１２５Ｉ−リュープロレリンの放射活性を測定した。
（ＴＢ−ＳＢ）／（ＴＢ−ＮＳＢ）×１００（ＳＢ：化合物を加えたときの放射活性、ＴＢ：最大結合放射活性、ＮＳＢ：非特異結合放射活性）を計算して、各被検物質の結合阻害率（％）を求めた。また、被検物質の濃度を変化させて阻害率を求め、５０％結合を阻害する被検物質の濃度（ＩＣ５０値）をＨｉｌｌプロットより算出した。結果を以下に示す。
0004652520.tif 000084
【００７９】
試験例２
去勢サルの血中ＬＨの抑制
実施例化合物２を雄性去勢カニクイザルに経口投与し血中ＬＨを測定した。雄性カニクイザルは、実験時の年齢４歳９ヶ月から６歳３ヶ月を用い、少なくとも実験３ヶ月前に去勢したものを用いた。被験動物（ｎ＝３）に、０．５％メチルセルロースで終濃度１％に分散させた実施例化合物２を３０ｍｇ／ｋｇ（３ｍｌ／ｋｇ）経口投与し、対照被験動物（ｎ＝２）には分散媒として用いた０．５％メチルセルロースのみを３ｍｌ／ｋｇ経口投与した。投与２４時間前、投与直前、投与後２、４、６、８、２４および４８時間後に血液をヘパリン血漿試料として大腿静脈より採取し、速やかに冷凍保存した。
血漿中のＬＨ濃度は、マウス精巣細胞を用いるバイオアッセイにより測定した。雄性ＢＡＬＢ／ｃマウス（８−９週齢）より精巣細胞を採取し、精巣１個あたり１ｍｌの２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳと０．２％  ＢＳＡを含むダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ−Ｈ）で３回洗浄した。３７℃で１時間インキュベートしたのち、ナイロンメッシュ（７０μｍ）を通し、８ｘ１０5ｃｅｌｌｓ／ｔｕｂｅになるよう分注した。ＤＭＥＭ−Ｈ、０．４  ｍｌで２回洗浄したのち、標準ＬＨとして、ウマＬＨ（Ｓｉｇｍａ  社）を、また被験試料として、最終３００倍に希釈したサル血漿を含むＤＭＥＭ−Ｈ溶液  ０．４ｍｌを加え、３７℃で２時間反応させた。培養上清中のテストステロン濃度をラジオイムノアッセイ（ＣＩＳ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ社）で測定し、標準ウマＬＨの標準曲線から、被験サル血漿中のＬＨ濃度を求めた。
結果を〔図１〕にまとめ示す。
ＬＨ濃度は、被験カニクイザル各個体の投与直前のＬＨ濃度に対する割合（％表示）で表わし、投与時間を０（矢印で表示）とし、投与前をマイナス、投与後をプラスの時間経過で示す。対照群−１（−▲−）および対照群−２（−◆−）に対しては、０．５％メチルセルロース分散媒（３ｍｌ／ｋｇ）のみを経口投与し、化合物投与群−１（−△−）、化合物投与群−２（−□−）および化合物投与群−３（−○−）に対しては、０．５％メチルセルロースに分散させた実施例化合物２（３０ｍｇ／ｋｇ、３ｍｌ／ｋｇ）を経口投与した。
対照群においては、投与後もほとんど血中ＬＨ濃度に変動は認められなかった。一方、化合物投与群においては、投与直後から、血中ＬＨ濃度の速やかな低下が観測され、投与２４時間後には、投与直前値の２０％以下まで低下した。その後、投与４８時間後においては、血中ＬＨ濃度が上昇した。
以上の結果から、実施例化合物２が、経口投与において顕著な血中ＬＨ濃度低下作用を有することが示された。
この結果より、本発明の化合物が、下垂体にあるＬＨ−ＲＨ受容体に拮抗することにより視床下部からのＬＨ−ＲＨ刺激を遮断し、ＬＨの放出を阻害することは明らかである。
【００８０】
【発明の効果】
本発明の化合物は、優れた性腺刺激ホルモン放出ホルモン拮抗作用を有する。さらに、経口吸収性がよく、安定性、薬物動態の面でも優れている。また、毒性も低く安全性の面でも優れている。従って、例えばホルモン依存性疾患の予防または治療剤として用いることができる。具体的には、例えば医薬として性ホルモン依存性ガン（例、前立腺ガン、子宮ガン、乳ガン、下垂体腫瘍等）、前立腺肥大症、子宮筋腫、子宮内膜症、思春期早発症、無月経症候群、多房性卵巣症候群、ニキビなどの予防または治療剤として、あるいは妊娠調節剤（例、避妊剤等）、不妊症治療剤、月経調節剤として有効であり、さらに、畜産分野で、動物の発情の調節、食肉用の肉質の改善、動物の成長調節、水産分野において魚類の産卵促進剤としても有効である。
【００８１】
【図面の簡単な説明】
【図１】被検サル血漿中の％ＬＨ濃度を示すグラフ。
図中、−▲−は対照群−１、−◆−は対照群−２、−△−は化合物投与群−１、−□−は化合物投与群−２および−○−は化合物投与群−３をそれぞれ示す。
【図１】
0004652520.tif 000096