(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
イリノテカン硫酸付加塩又はイリノテカンメタンスルホン酸付加塩。
【請求項２】
イリノテカンを低級アルコールに懸濁し、次いで硫酸を加え、次いでアセトニトリル、アセトン又はアセトニトリル・アセトン混合溶媒を加えて晶出させることを特徴とするイリノテカン硫酸付加塩の製造方法。
【請求項３】
イリノテカンを水又は低級アルコールに懸濁し、次いでメタンスルホン酸を加え、次いでアセトンを加えて晶出させることを特徴とするイリノテカンメタンスルホン酸付加塩の製造方法。
【請求項４】
イリノテカン硫酸付加塩又はイリノテカンメタンスルホン酸付加塩、並びに薬学的に許容される担体を含有する医薬組成物。
【請求項５】
注射用水溶液である請求項４記載の医薬組成物。
【請求項６】
経口投与用製剤である請求項４記載の医薬組成物。
【請求項７】
悪性腫瘍治療用医薬組成物である請求項４〜６のいずれか１項記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、溶解性に優れ、安定な水溶液製剤が得られ、経口吸収性も良好な新規なイリノテカン酸付加塩に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
カンプトテシン（ｃａｍｐｔｏｔｈｅｃｉｎ、ＣＰＴ）は、中国原産の喜樹（ｃａｍｐｔｏｔｈｅｃａ  ａｃｕｍｉｎａｔａ）の葉や樹皮などに含有されるアルカロイドである。またカンプトテシンの半合成誘導体であるイリノテカン（７−エチル−１０−［４−（１−ピペリジノ）−１−ピペリジノ］カルボキシオキシカンプトテシン）塩酸塩（ＣＰＴ−１１）（特許文献１）は、カンプトテシンの高い抗腫瘍活性を維持し、かつ毒性が軽減された化合物として特に重要な物質である。このＣＰＴ−１１は、生体内で代謝され、半合成誘導体である７−エチル−１０−ヒドロキシカンプトテシン（ＳＮ−３８）（特許文献２）となり、活性が現れるとされている。【０００３】
ＣＰＴ−１１等のカンプトテシン類の患者への投与は、主に静脈内投与により行なわれる。このため、ソルビトール等により等張化した注射製剤として上市され、流通し使用されている。この製剤化についてはこれまで種々の試みがなされており、例えば、カンプトテシン誘導体をコラーゲンと２−ヒドロキシエチルメタクリレートのコポリマーに含有させた徐放性製剤（特許文献３）やカンプトテシン又はその誘導体をポリ乳酸−グリコール酸共重合体からなる担体に含有せしめた徐放性製剤（特許文献４）が知られている。
しかしながら、ＣＰＴ−１１は水に対する溶解性が十分でなく、加熱して水溶液製剤を調製しなくてはならない問題がある。従って、水に対する溶解性に優れ、更に製剤製造工程の簡略化のために加熱を要しないで水溶液製剤の製造可能な新規なイリノテカン誘導体の開発が望まれている。
【特許文献１】特公平３−４０７７号公報
【特許文献２】特公昭６２−４７１９３号公報
【特許文献３】特開平７−２７７９８１号公報
【特許文献４】特開平１０−１７４７２号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明の目的は、水溶液製剤の製造時に加熱する必要がなく、安定に水に溶解している製剤が得られるイリノテカン誘導体を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者らは、上記課題に鑑み鋭意研究を行なった結果、イリノテカンに特定の酸を付加させた酸付加塩が、水に対する溶解性が優れ、該イリノテカン酸付加塩を用いると加熱せずに水溶液製剤が調製できることを見出した。また、該イリノテカン酸付加塩は経口吸収性も優れており、経口投与用製剤としても有用であることを見出した。【０００６】
すなわち、本発明は、イリノテカンに硫酸、硝酸、リン酸、メタンスルホン酸、クエン酸、マレイン酸及びコハク酸の群より選ばれる酸を付加させたイリノテカン酸付加塩を提供するものである。
また、本発明は、イリノテカンを低級アルコール、水又は水性低級アルコールに懸濁し、次いで硫酸、硝酸、リン酸、メタンスルホン酸、クエン酸、マレイン酸及びコハク酸の群より選ばれる酸を加えた後、アセトニトリル、アセトン又はアセトニトリル・アセトン混合溶媒を加えて晶出させるか又は凍結乾燥させるイリノテカン酸付加塩の製造方法を提供するものである。
更に、本発明は、イリノテカンに硫酸、硝酸、リン酸、メタンスルホン酸、クエン酸、マレイン酸及びコハク酸の群より選ばれる酸を付加させたイリノテカン酸付加塩、並びに薬学的に許容される担体を含有する医薬組成物を提供するものである。
【発明の効果】
【０００７】
本発明のイリノテカン酸付加塩は、水に対する溶解性が優れており、水溶液製剤の製造時に加熱する必要がなく、イリノテカンを高濃度に水に溶解でき、安定な高濃度イリノテカン水溶液製剤を製造することができる。また、本発明のイリノテカン酸付加塩は経口吸収性に優れ、経口投与製剤とすることもできる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
本発明のイリノテカン酸付加塩は、イリノテカン硫酸塩、イリノテカン硝酸塩、イリノテカンリン酸塩、イリノテカンメタンスルホン酸塩、イリノテカンクエン酸塩、イリノテカンマレイン酸塩又はイリノテカンコハク酸塩である。これらのイリノテカン酸付加塩のうち、特にイリノテカン硫酸塩、イリノテカンメタンスルホン酸塩が結晶として得られ、かつ水溶性に優れており好ましい。【０００９】
本発明のイリノテカン酸付加塩は、例えば、イリノテカンを低級アルコール、水又は水性低級アルコールに懸濁し、次いで硫酸、硝酸、リン酸、メタンスルホン酸、クエン酸、マレイン酸及びコハク酸の群から選ばれる酸を加えた後、アセトニトリル、アセトン又はアセトニトリル・アセトン混合溶媒を加えて晶出させるか又は凍結乾燥させて製造することができる。【００１０】
ここで使用する低級アルコールとしては、炭素数１〜５、更に炭素数１〜３のアルコ−ルが好ましく、特にメタノールが好ましい。水性低級アルコールの低級アルコールと水との混合比率は特に制限ないが、低級アルコール：水の混合重量比が１：４、更に１：１であるのが好ましい。低級アルコール、水又は水性低級アルコールの酸付加塩生成溶媒は、イリノテカン１ｇに対し、０．０５〜５０ｍＬ、更に０．１〜１０ｍＬ使用するのが好ましい。【００１１】
酸の添加量は、イリノテカンに対し理論上等モルになるようにしてやればよいが、収率等の理由から、１．０〜１．２当量、更に１．０〜１．０５当量であるのが好ましい。
イリノテカンと酸の混合の条件は、特に制限されないが、温度が０〜４０℃、更に５〜３０℃で、溶媒中のイリノテカンが溶解するまで撹拌すればよい。例えばイリノテカン１ｇに対し理論上等モルの酸を添加した場合であれば、５〜３０℃の条件で、２時間以内、更に１時間以内で行うのが好ましい。【００１２】
イリノテカンと上記酸との混合に次いで、晶出溶媒を加えてイリノテカン酸付加塩を晶出させるか又は塩化反応液を凍結乾燥することにより、イリノテカン酸付加塩が得られる。【００１３】
イリノテカンに酸を付加させた後に加える晶出溶媒であるアセトニトリル、アセトン又はアセトニトリル・アセトン混合液の量は、イリノテカン１ｇに対し、１〜３００ｍＬ、更に１５〜１７０ｍＬであるのが好ましい。また、アセトニトリルとアセトンの混合比率は、特に制限はないが、アセトニトリル：アセトンの混合重量比が１：１、更に１：２であるのが好ましい。
この晶出は、２０〜３０℃で２０〜３０時間、更に２５℃で２４時間撹拌して行うのが好ましい。また、晶出を促進するために種結晶として、それぞれのイリノテカン酸付加塩を加えてもよい。具体的には、例えばイリノテカン硫酸塩を晶出させる場合には、イリノテカン硫酸塩を種結晶として溶液中に混合してやればよい。得られたイリノテカン酸付加塩は、ろ紙、メンブランフィルター等でろ過し、次いで、必要により１５〜２５℃下、更に室温下で真空ポンプ等によって乾燥させてもよい。乾燥条件としては特に限定されるものではないが、例えば室温下で、２〜６ｍｍＨｇ、更に４ｍｍＨｇの減圧条件で行えばよい。【００１４】
凍結乾燥は、通常行われる方法であれば特に限定されず、凍結させた溶液を、１５〜２５℃下、更に室温下で凍結乾燥機を用いて行われるのが好ましい。具体的には、例えば室温下、０．０５Ｔｏｒｒ（約０．０５ｍｍＨｇ）の減圧条件で行えばよい。【００１５】
イリノテカン硫酸塩は、イリノテカンを低級アルコールに懸濁し、次いで硫酸を加え、次いでアセトニトリル又はアセトンを加えて晶出させて製造するのが好ましい。
また、イリノテカンメタンスルホン酸塩は、イリノテカンを水又は低級アルコールに懸濁し、次いでメタンスルホン酸を加え、次いでアセトンを加えて晶出させて製造するのが好ましい。【００１６】
得られた本発明のイリノテカン酸付加塩は、水に対する溶解性が高く、また、経口吸収性も優れている。従って、前記イリノテカン酸付加塩と薬学的に許容される担体とを含有する医薬組成物は、注射用水溶液製剤、経口投与用製剤等として有用である。ここで、薬学的に許容される担体としては、水溶液製剤を調製する場合には、精製水、生理食塩水等の他、ｐＨ調整剤、等張化剤、安定化剤、緩衝剤等が用いられる。また、経口投与用製剤とする場合には、賦形剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤、着色剤、矯味剤、矯臭剤等を用い、錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤等とすることができる。【００１７】
イリノテカンが優れた悪性腫瘍治療効果を有することから、本発明のイリノテカン酸付加塩を含有する医薬組成物は、悪性腫瘍治療用委託組成物とすることができる。対象悪性腫瘍としては、肺がん、子宮がん、卵巣がん、胃がん、結腸・直腸がん、乳がん、リンパ腫、膵臓がん等が挙げられる。【００１８】
本発明のイリノテカン酸付加塩を用いて水溶液製剤とする場合、水溶液製剤のｐＨは、室温（２５℃）において３．０〜４．０、更に３．４〜３．６とするのが好ましい。ｐＨ調整は、硫酸、リン酸、メタンスルホン酸、クエン酸等の酸成分、水酸化ナトリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム等のナトリウムを含有するアルカリ成分を用いて行うのが好ましい。【００１９】
また、本発明のイリノテカン酸付加塩を水溶液製剤とした場合、高濃度イリノテカン酸付加塩水溶液製剤を製造し、使用時に希釈して使用することができる。水溶液製剤としては、注射用製剤、特に静脈内投与用製剤が好ましい。当該注射用製剤とするにあたって、上記成分以外に注射用蒸留水、グルコース、マンノース、乳糖に代表される糖類、食塩、リン酸塩等に代表される無機塩類、ＨＥＰＥＳ、ＰＩＰＥＳ等の有機アミン、その他通常注射剤に用いる安定剤、賦形剤、緩衝剤等の成分を用いてもよい。使用時の注射用製剤中にイリノテカン酸付加塩は、イリノテカンとして１〜５０ｍｇ／ｍＬ、特に１０〜３０ｍｇ／ｍＬ含有するのが好ましい。
【実施例】
【００２０】
以下、実施例を挙げて本発明を更に詳細に説明するが、本発明は何らこれらに限定されるものではない。【００２１】
実施例１
特許文献１に記載の方法で製造したイリノテカン（７−エチル−１０−［４−（１−ピペリジノ）−１−ピペリジノ］カルボニルオキシカンプトテシン）の水懸濁液に各種酸を加えてイリノテカン酸付加塩を生成させ、該イリノテカン酸付加塩濃度が１００ｍｇ／ｍＬとなるように調製した。その結果、硫酸、リン酸、メタンスルホン酸、クエン酸、マレイン酸、コハク酸を用いた場合は室温で水に溶解し、酸付加塩の水溶液が得られた。一方、塩酸、硝酸、臭化水素酸、酢酸、フマル酸については室温では水に溶解せず、懸濁液のままであった。硫酸、リン酸、メタンスルホン酸、クエン酸、マレイン酸、コハク酸の水溶液については、更にメンブランフィルターろ過し、ろ液を室温（２５℃）で撹拌した。撹拌を６日間継続して行った後、肉眼観察による水溶液の状態を判定した結果を表１に示す。【００２２】
【表１】
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【００２３】
実施例２
実施例１と同様にしてイリノテカン硝酸付加塩、イリノテカン臭化水素酸付加塩及びイリノテカン酢酸付加塩が、各々１００ｍｇ／ｍＬとなるように調製した。各調製液を加熱昇温したところ、イリノテカン硝酸付加塩は７０℃で３分間の撹拌で完全に溶解したが、イリノテカン臭化水素酸付加塩及びイリノテカン酢酸付加塩の調製液は、１００℃で３０分間撹拌しても溶解しなかった。得られたイリノテカン硝酸付加塩の溶解液を、その後、２５℃下で撹拌することにより、約４２時間でイリノテカン硝酸付加塩結晶が析出した。【００２４】
実施例３
イリノテカンのメタノール懸濁液に１ｍｏｌ／Ｌ硫酸１当量を加え溶解した後、晶出溶媒としてアセトニトリル又はアセトンを添加した。室温で２０時間静置した後、ろ別してイリノテカン硫酸付加塩を得た。表２に結果を示す。【００２５】
【表２】
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【００２６】
Ｎｏ．４のイリノテカン硫酸付加塩を元素分析した結果、炭素５６．２３２％（計算値：５６．３９９％）、水素６.００３（計算値：６．０２４％）、窒素７．６１２％（計算値：７．９７２％）の測定値を得た。【００２７】
得られたイリノテカン硫酸付加塩の１００ｍｇ／ｍＬ水溶液は、室温（２５℃）で３ヶ月間安定で、保存後も澄明な水溶液であった。【００２８】
実施例４
実施例３と同様にして、イリノテカンメタンスルホン酸付加塩を製造した。表３に結果を示す。【００２９】
【表３】
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【００３０】
得られたイリノテカンメタンスルホン酸付加塩の１００ｍｇ／ｍＬ水溶液は、室温（２５℃）で１ヶ月間安定で、保存後も澄明な水溶液であった。【００３１】
実施例５
イリノテカン酸付加塩の２０、３０及び４０ｍｇ／ｍＬ水溶液を、メンブランフィルターでろ過し、ろ液をガラス容器に入れて、室温下で３ヶ月静置保存した後の水溶液の状態を肉眼観察した。結果を表４に示す。【００３２】
【表４】
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【００３３】
注：製造法（１）；実施例２と同一方法で製造した。
製造法（２）；イリノテカンの水懸濁液に１．０当量の酸を加えた後、凍結乾燥して製造した。
凡例：−；結晶の析出を認めなかった。
＋；調製時に完全には溶解しなかった。【００３４】
本発明のイリノテカン酸付加塩は何れも長期間安定であった。凍結乾燥により製造したイリノテカン酸付加塩の方が、水溶液中で安定であった。【００３５】
実施例６
製造したイリノテカン酸付加塩の経口吸収性を、次の方法で評価した。
（１）イリノテカン酸付加塩；本発明  イリノテカン硫酸付加塩
イリノテカンメタンスルホン酸付加塩
比較例  イリノテカン塩酸付加塩
（２）動物；雄性ビーグル犬（馴化開始時８〜９ヶ月齢、体重１１．２〜１３．２ｋｇ）を１週間の馴化期間後使用した。初回投与前日から最終６回目投与前日時の体重は１１．５〜１５．８ｋｇであった。固形飼料約３５０ｇを１日１回午後３時前後に与え、翌日の午前９時前後に残った餌を除去した。但し、投与前日は、給餌後約２時間に残った餌を除去した。投与日は投与後３時間の採血終了後に給餌し、投与翌日の午前９時に残った餌を除去した。【００３６】
（３）投与；２週間の休薬期間をはさむクロスオーバー法で、１／２オンスゼラチンカプセルにイリノテカン酸付加塩を入れ経口投与した。各動物あたり５回経口投与した。投与量は、イリノテカンとして１０ｍｇ／ｋｇとした。
各投与日の投与前の体重に基づき、イリノテカンの含量が１０ｍｇ／ｋｇとなるように個体ごとに必要量をゼラチンカプセルに充填した。なお、カンプト注及びイリノテカン塩酸付加塩の場合の必要量はイリノテカン塩酸付加塩含量を１００％として、その他のイリノテカン酸付加塩についてはその純度を１００％として算出した。イリノテカン酸付加塩を充填したカプセルを強制経口投与し、投与後注射用シリンジを用いて約２０ｍＬの水道水を口に含ませた。【００３７】
（４）採血；前腕撓側皮静脈からヘパリンナトリウム溶液で抗凝固処理した注射器を用いて採血した。得られた血液を、あらかじめヘパリンナトリウム２０μＬ（２０単位）を分注後、窒素ガス気流下で乾固した（但し１回目投与は乾固せず使用）１．５ｍＬチューブに分注し、遠心分離（４℃、約１３０００ｘｇ、１分間）して血漿を得た。得られた血漿のうち約０．３ｍＬを保存容器に採取し、直ちに等容量の０．１４６ｍｏｌ／Ｌリン酸（リン酸を注射用水で１００倍希釈したもの）を加えて攪拌した。【００３８】
（５）イリノテカン濃度測定；Ｋｕｒｉｔａらの蛍光ＨＰＬＣ法（Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ．Ｂ．７２４，３３５−３４４，１９９９）を用いた。定量下限は５ｎｇ／ｍＬ血漿であった。【００３９】
（６）イリノテカンの動態解析
得られた結果を、ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ  Ｖｅｒ４．１を用いＮｏｎ−ｃｏｍｐａｒｔｍｅｎｔａｌ  ａｎａｌｙｓｉｓを行った。
動態パラメータとして、次の値を求めた。
＊最終相半減期（Ｔ１/２）
＊最高血漿中濃度到達時間（Ｔｍａｘ）
＊最高血漿中濃度（Ｃｍａｘ）
＊無限時間までの時間−濃度曲線下面積（ＡＵＣ０−ｉｎｆ）
＊生物学的利用能（ＢＡ）
ＢＡ（％）＝（経口投与後のイリノテカンＡＵＣ０−ｉｎｆ／静注後のイリノテカンＡＵＣ０−ｉｎｆ）×１００
＊平均吸収時間（ＭＡＴ）
ＭＡＴ（ｈ）＝経口投与後の平均滞留時間（ＭＲＴ０−ｉｎｆ）−静注後の平均滞留時間（ＭＲＴ０−ｉｎｆ）【００４０】
イリノテカン酸付加塩投与後の血漿中のイリノテカン濃度変化を表５に、動態解析を表６に示す。なお、６匹の平均値±標準偏差として示す。また、１群６匹のうち４匹以上で定量下限以上の濃度が認められた場合のみ、定量下限未満の濃度を０として平均値、標準偏差を算出した。【００４１】
【表５】
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【００４２】
【表６】
0004829120.tif 000007
【００４３】
経口投与群において、イリノテカン硫酸付加塩は、個体差が大きいものの、投与後速やかに血漿中のイリノテカン濃度が上昇し、投与後１０分ですでに濃度が測定でき、投与後２０分では１.５６μｇ／ｍＬ、１〜３時間にかけて３μｇ／ｍＬ以上の濃度を維持した。イリノテカンメタンスルホン酸付加塩も、血漿中の濃度の立ち上がりも良好で、投与２時間で最高血漿中濃度に達し、その後はイリノテカン硫酸付加塩と同様に減衰した。
また、最高血漿中濃度は、イリノテカン塩酸付加塩が２．０３μｇ／ｍＬであったのに対し、イリノテカン硫酸付加塩が３．６７μｇ／ｍＬ、イリノテカンメタンスルホン酸付加塩が３．４７μｇ／ｍＬと危険率０．１％で有意差が認められた
無限時間までの時間−濃度曲線下面積（ＡＵＣ０−ｉｎｆ）は、イリノテカン塩酸付加塩が１１．２３μｇ・ｈ／ｍＬであったのに対し、イリノテカン硫酸付加塩が１８．５４μｇ・ｈ／ｍＬ、イリノテカンメタンスルホン酸付加塩が１７．６８μｇ・ｈ／ｍＬと危険率０．１％で有意差が認められた。
生物学的利用能（ＢＡ）は、イリノテカン塩酸付加塩が４８．８０％であったのに対し、イリノテカン硫酸付加塩が７０．１４％と危険率１％で有意差を認めた。
更に、平均吸収時間（ＭＡＴ）は、イリノテカン塩酸付加塩が２.１２時間であったのに対し、イリノテカン硫酸付加塩が０．７８時間、イリノテカンメタンスルホン酸付加塩が１．０１時間であって、それぞれ危険率１％、５％で有意差を認めた。