(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
溶解度パラメータδが１２（（ｃａｌ／ｃｍ3）1/2）以下のスチレン−ジビニルベンゼン共重合体を成分とする水不溶性材料からなる、内因性カンナビノイドの吸着材。
【請求項２】
内因性カンナビノイドがアナンダマイドであることを特徴とする請求項１記載の吸着材。
【請求項３】
内因性カンナビノイドが２−アラキドノイルグリセロールであることを特徴とする請求項１記載の吸着材。
【請求項４】
液の入口および出口を有しかつ、吸着材の容器外への流出防止手段を備えた容器内に、請求項１から３に記載の吸着材を充填してなる、内因性カンナビノイドの吸着器。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は体液より内因性カンナビノイドを吸着除去するための吸着材、これを用いた内因性カンナビノイドの吸着除去方法および内因性カンナビノイドの吸着器に関する。
【０００２】
【従来の技術】
マリファナ（大麻）の生理作用の本体であるカンナビノイド類は幻覚や多幸感などの精神作用を示すことが知られている。カンナビノイド受容体としては中枢神経系に発現している受容体（ＣＢ１）と末梢の免疫細胞に発現している受容体（ＣＢ２）が知られている。これらカンナビノイド受容体の内因性リガンド、すなわち生体内で生成されるリガンドのことを内因性カンナビノイドといい、内因性カンナビノイドとしてはアナンダマイドと２−アラキドノイルグリセロール（２−Ａｒａｃｈｉｄｏｎｏｙｌｇｌｙｃｅｒｏｌ：以下、２−ＡＧと記す）が知られている。
【０００３】
内因性カンナビノイドは種々の生理活性を有している。例えば（１）循環系に対して：血圧降下、徐脈（２）免疫系に対して：マクロファージにおけるＮＯ産生抑制（３）中枢神経系に対して：記憶障害、痛覚の抑制（４）凝固線溶系に対して：内皮細胞アポトーシス誘導−といった様々な活性を有している。
【０００４】
近年、リポポリサッカライド（Ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ：以下ＬＰＳと記す）刺激により、マクロファージでアナンダマイドが産生され、血小板において２−ＡＧが産生されることが明らかとなり、さらにこれら産生された内因性カンナビノイドにより血圧低下が惹起されることが観察されている。また、敗血症性ショックなどにおける血圧低下が、マクロファージや血小板により産生された内因性カンナビノイドの寄与により生じている可能性も指摘されている。実際、敗血症性ショック患者の血中から高濃度の内因性カンナビノイドが検出されたとの報告もある。
【０００５】
これらのことから、敗血症ショックなどにおける血圧低下に対し、患者体液中から内因性カンナビノイドを除去してやることによる治療法が期待されるが、内因性カンナビノイドを吸着除去する方法がこれまでなかったため、その方法が大いに望まれていた。Ｙｉｎ  Ｗａｎｇらは抗生物質であるポリミキシンＢを固定化した材料によりアナンダマイドの吸着が可能であることを報告している（ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔｅｒｓ、４７０巻、１５１頁−１５５頁、２０００年）。しかし、このような吸着材をえるためには多くの工程を経ねばならず、また抗生物質であるポリミキシンＢは非常に高価である。したがってより安価な材料での、内因性カンナビノイドを吸着除去する方法が望まれている。
【０００６】
本発明は前記のごとき問題点を解決するためになされたものである。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の目的は、体液中の内因性カンナビノイドを効率よく吸着除去しうる吸着材、前記吸着材を用いた体液中の内因性カンナビノイドの吸着除去方法および内因性カンナビノイド吸着器を提供することである。
【０００８】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、体液中の内因性カンナビノイドを効率よく吸着除去しうる吸着材について鋭意検討した。その結果、溶解度パラメータδが１２（（ｃａｌ／ｃｍ3）1/2）以下の物質を成分とする水不溶性材料からなる吸着材が体液中の内因性カンナビノイドを効率よく吸着除去しうることを見いだし、本発明を完成した。
【０００９】
すなわち、本発明は溶解度パラメータδが１２（（ｃａｌ／ｃｍ3）1/2）以下の物質を成分とする水不溶性材料からなる、内因性カンナビノイドの吸着材に関する。
【００１０】
好適な実施態様においては、前記溶解度パラメータδが１２（（ｃａｌ／ｃｍ3）1/2）以下の物質はスチレン−ジビニルベンゼン共重合体である。
【００１１】
好適な実施態様においては、前記内因性カンナビノイドはアナンダマイドである。
【００１２】
好適な実施態様においては、前記内因性カンナビノイドは２−ＡＧである。
【００１３】
さらに本発明は、内因性カンナビノイドの吸着材と、内因性カンナビノイドを含有する液体を接触させる工程を包含する、内因性カンナビノイドの吸着除去方法に関する。
【００１４】
好適な実施態様においては、前記液体は体液である。
【００１５】
さらに本発明は、液の入口および出口を有しかつ、吸着材の容器外への流出防止手段を備えた容器内に、内因性カンナビノイドの吸着材を充填してなる内因性カンナビノイドの吸着器に関する。
【００１６】
【発明の実施の形態】
本発明における内因性カンナビノイドとは、カンナビノイド受容体の内因性リガンド、すなわち生体内で生成されるリガンドのことをいい、アナンダマイドと２−ＡＧがその代表的なものである。アナンダマイドの化学式はＣ22Ｈ37ＮＯ2で表され、分子量は３４７．５であり、２−ＡＧの化学式はＣ23Ｈ38Ｏ4で表され、分子量は３７８．５である。
【００１７】
また本発明における体液とは、血液、血漿、血清、腹水、リンパ液、関節内液およびこれらからえられた分画成分、ならびにそのほかの生体由来の液体成分をいう。
【００１８】
本発明の吸着材は溶解度パラメータδが１２（（ｃａｌ／ｃｍ3）1/2）以下、好ましくは１１（（ｃａｌ／ｃｍ3）1/2）以下の水不溶性材料からなる。
【００１９】
ある物質の溶解度パラメーターδとは、（ΔＥV／Ｖ）1/2で定義される量である。ここで、ΔＥVはその物質のモル蒸発エネルギー、Ｖはその物質のモル体積である。ΔＥV／Ｖは物質の単位体積あたりの蒸発エネルギーで、凝集エネルギー密度とよばれる。高分子については、その繰り返し単位について求められるが、繰り返し単位についての分子構造が明確であるばあいは計算により溶解度パラメータδがえられる。溶質と溶媒の溶解度パラメータδが近いほど溶解抵抗は小さく、したがって溶解度パラメータδは溶解性の目安となる。また、溶解度パラメータδが小さいほど、その物質は非極性、疎水性であるといえる。種々の物質の溶解度パラメータについては、ジェイ・ブランドラップ（Ｊ．Ｂｒａｎｄｒｕｐ）ら編集、ポリマーハンドブック第４版（ＰＯＬＹＭＥＲ  ＨＡＮＤＢＯＯＫＦＯＵＲＴＨ  ＥＤＩＴＩＯＮ）中のＶＩＩ−６７５ページから７１４ページに示されている。また同文献中に記載されているごとく、市販の高分子、すなわち繰り返し単位についての分子構造が不明確である場合には実験的に溶解度パラメータを求めることができる。すなわち、古典的な方法としては、溶解度パラメーターが既知である種々の溶媒に目的の高分子を溶解する溶媒試験（Ｓｏｌｖｅｎｃｙ  ｔｅｓｔｉｎｇ）により求める方法が知られている。また、架橋した高分子については、溶解度パラメーターが既知である種々の溶媒に目的の高分子を浸した場合の膨潤の程度すなわち膨潤値（Ｓｗｅｌｌｉｎｇ  ｖａｌｕｅ）から求める方法が知られており、スチレンジビニルベンゼン共重合体などについてはこの方法が適している。しかし、溶解度パラメータを求める方法についてはこれらに限定されるわけではない。
【００２０】
溶解度パラメータδが１２（（ｃａｌ／ｃｍ3）1/2）以下の物質としてはポリエチレン、ポリプロピレン、ポリメタクリル酸エステル、ポリアクリル酸エステル、ポリビニルクロライド、ポリスチレン、スチレン−ジビニルベンゼン共重合体、ナイロン６、ナイロン６６、ポリテトラフルオロエチレン、ポリスルホン、ポリウレタンなどがあげられるが、これらに限定されるわけではない。
【００２１】
本発明の吸着材における水不溶性材料とは、常温常圧で固体であり水に対する溶解度が極めて小さい材料であることを意味する。また、本発明における水不溶性材料は粒状、板状、繊維状、中空糸状等があるが形状は問わず、その大きさもとくに限定されない。
【００２２】
これらの水不溶性材料は、適当な大きさの細孔を多数有する、すなわち多孔構造を有する材料であることがより好ましい。多孔構造を有する材料とは、基礎高分子母体が微小球の凝集により１個の球状粒子を形成する際に微小球の集塊によって形成される空間（マクロポアー）を有する材料のばあいは当然であるが、基礎高分子母体を構成する１個の微小球内の核と核との集塊の間に形成される細孔を有する材料のばあい、あるいは三次元構造（高分子網目）を有する共重合体が親和性のある有機溶媒で膨潤された状態の時に存在する細孔（ミクロポアー）を有する材料のばあいも含まれる。
【００２３】
また吸着材の単位体積あたりの吸着能から考えて、多孔構造を有する水不溶性材料は、表面多孔性よりも全多孔性が好ましく、また空孔容積および比表面積は、吸着性が損なわれない程度に大きいことが好ましい。
【００２４】
またこのような多孔構造を有する水不溶性材料は、吸着対象の物質はある程度大きな確率で細孔内に侵入できることが好ましい。しかし、本発明の吸着材の吸着対象である内因性カンナビノイドは分子量が３００〜４００程度と比較的小さいため多孔構造を有する水不溶性材料であれば充分侵入可能であるため制限無く用いることができる。
【００２５】
血液適合性向上等の目的で、内因性カンナビノイドの吸着能を損なわない程度に、これら材料への適当な側鎖やリガンドの導入、または親水性の材料による被覆などの処理をしても良い。側鎖やリガンドの例としては、水酸基、アミノ基を有するものがあげられ、親水性の材料の例としては、ヒドロキシエチルメタクリレートの重合体、セルロースなどがあげられるが、これらに限定されるものではない。
【００２６】
本発明による吸着材を用いて体液中より内因性カンナビノイドを吸着除去する方法には種々の方法がある。最も簡便な方法としては体液を取り出してバッグなどに貯留し、これに吸着材を混合して内因性カンナビノイドを吸着除去した後、吸着材を濾別して内因性カンナビノイドが除去された体液をえる方法がある。次の方法は体液の入口と出口を有し、出口には体液は通過するが吸着材は通過しないフィルターを装着した容器に吸着材を充填し、これに体液を流す方法がある。いずれの方法も用いることができるが、後者の方法は操作も簡便であり、また体外循環回路に組み込むことにより患者の体液、とくに血液から効率よくオンラインで内因性カンナビノイドを除去することが可能であり、本発明の吸着材はこの方法に適している。
【００２７】
ここでいう体外循環回路では本発明の吸着材を単独で用いることもできるが、他の体外循環治療システムとの併用も可能である。併用の例としては、人工透析回路などがあげられ、透析療法との組み合わせに用いることもできる。
【００２８】
つぎに、前記内因性カンナビノイド吸着材を用いた本発明の内因性カンナビノイド吸着器を、一実施例の概略断面図である図１に基づき説明する。図１中、１は液体の流入口、２は液体の流出口、３は本発明の内因性カンナビノイド吸着材、４および５は液体および液体に含まれる成分は通過できるが前記内因性カンナビノイド吸着材は通過できないフィルター、６はカラム、７は内因性カンナビノイド吸着器である。しかしながら、内因性カンナビノイド吸着器はこのような具体例に限定されるものではなく、液の入口、出口を有し、かつ内因性カンナビノイド吸着材の容器外への流出防止具を備えた容器内に前記吸着材を充填したものであれば、どのようなものでもよい。
【００２９】
前記流出防止具には、メッシュ、不織布、綿栓などのフィルターがあげられる。また、容器の形状、材質、大きさにはとくに限定はないが、形状としては筒状容器が好ましい。容器の材質として好ましいのは耐滅菌性を有する素材であるが、具体的にはシリコンコートされたガラス、ポリプロピレン、塩化ビニール、ポリカーボネート、ポリサルフォン、ポリメチルペンテンなどが挙げられる。容器の容量は５０〜１５００ｍｌで直径は２〜２０ｃｍが好ましく、さらに容量は１００〜８００ｍｌで直径は３〜１５ｃｍが好ましく、特に容量は１５０〜４００ｍｌで直径は４〜１０ｃｍが好ましい。
【００３０】
【実施例】
以下、実施例において本発明についてさらに詳細に述べるが、本発明は以下の実施例のみに限定されるものではない。
【００３１】
（実施例１）
溶解度パラメータδが約９（（ｃａｌ／ｃｍ3）1/2）の物質であるスチレン−ジビニルベンゼン共重合体を成分とする水不溶性材料（ダイヤイオン  ＨＰ−２０：三菱化学株式会社製）を０．２ｍｌとり、内因性カンナビノイドであるアナンダマイド（カルビオケム−ノバビオケム社製）を０．１ｍｇ／ｍｌの濃度になるよう添加した５０％エタノール／生理食塩液を１．２ｍｌ加え、３７℃で２時間振盪した。振盪後、上清を除いて生理食塩液で洗浄した後、９５％エタノールを１．２ｍｌ入れて吸着したアナンダマイドを溶出させた。その上清エタノールの２０８ｎｍ付近の紫外線吸収を測定することによりアナンダマイド濃度を求め、吸着量を算出した。
【００３２】
（実施例２）
溶解度パラメータδが約９（（ｃａｌ／ｃｍ3）1/2）の物質であるポリメタクリル酸エステルを成分とする水不溶性材料（アンバーライト  ＸＡＤ−８：オルガノ株式会社販売）を用い、実施例１と同様にアナンダマイド添加５０％エタノール／生理食塩液と振盪し、エタノールで溶出してアナンダマイド吸着量を算出した。
【００３３】
（実施例３）
溶解度パラメータδが約１０（（ｃａｌ／ｃｍ3）1/2）の物質であるポリスルホンを成分とする水不溶性材料（鐘淵化学工業株式会社製血漿分離器サルフラックスに用いられている中空糸材料）を用い、実施例１と同様にアナンダマイド添加５０％エタノール／生理食塩液と振盪し、エタノールで溶出してアナンダマイド吸着量を算出した。
【００３４】
（比較例１）
溶解度パラメータδ値が約１６（（ｃａｌ／ｃｍ3）1/2）の物質であるセルロースを成分とする水不溶性材料（セルロファインＧＣ−２００ｍ：チッソ株式会社製）を用い、実施例１と同様にアナンダマイド添加５０％エタノール／生理食塩液と振盪し、エタノールで溶出してアナンダマイド吸着量を算出した。
【００３５】
（実施例４）
溶解度パラメータδが約９（（ｃａｌ／ｃｍ3）1/2）の物質であるスチレン−ジビニルベンゼン共重合体を成分とする水不溶性材料（ダイヤイオン  ＨＰ−２０：三菱化学株式会社製）を０．２ｍｌとり、内因性カンナビノイドである２−ＡＧ（カルビオケム−ノバビオケム社製）を０．１ｍｇ／ｍｌの濃度になるよう添加した５０％エタノール／生理食塩液を１．２ｍｌ加え、３７℃で２時間振盪した。振盪後、上清中を除いて生理食塩液で洗浄した後、９５％エタノールを１．２ｍｌ入れて吸着した２−ＡＧを溶出させた。その上清エタノールの２０８ｎｍ付近の紫外線吸収を測定することにより２−ＡＧ濃度を求め、吸着量を算出した。
【００３６】
（実施例５）
溶解度パラメータδが約９（（ｃａｌ／ｃｍ3）1/2）の物質であるポリメタクリル酸エステルを成分とする水不溶性材料（アンバーライト  ＸＡＤ−８：オルガノ株式会社販売）を用いて、実施例４と同様にヒト２−ＡＧ添加５０％エタノール／生理食塩液と振盪し、エタノールで溶出して２−ＡＧ吸着量を算出した。
【００３７】
（実施例６）
溶解度パラメータδが約１０（（ｃａｌ／ｃｍ3）1/2）の物質であるポリスルホンを成分とする水不溶性材料（鐘淵化学工業株式会社製血漿分離器サルフラックスに用いられている中空糸材料）を用いて、実施例４と同様にヒト２−ＡＧ添加５０％エタノール／生理食塩液と振盪し、エタノールで溶出して２−ＡＧ吸着量を算出した。
【００３８】
（比較例２）
溶解度パラメータδ値が約１６（（ｃａｌ／ｃｍ3）1/2）の物質であるセルロースを成分とする水不溶性材料（セルロファインＧＣ−２００ｍ：チッソ株式会社製）を用いて、実施例４と同様にヒト２−ＡＧ添加５０％エタノール／生理食塩液と振盪し、エタノールで溶出して２−ＡＧ吸着量を算出した。
【００３９】
【表１】
0004707810.tif 000002
【００４０】
【表２】
0004707810.tif 000003
【００４１】
【発明の効果】
本発明の方法による溶解度パラメータδが１２（（ｃａｌ／ｃｍ3）1/2）以下の物質を成分とする水不溶性材料からなる吸着材を用いることで体液中の内因性カンナビノイドを効率よく吸着除去することができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明の内因性カンナビノイド吸着器の一実施例の概略断面図である。
【符号の説明】
１    液体の流入口
２    液体の流出口
３    内因性カンナビノイド吸着材
４、５    液体および液体に含まれる成分は通過できるが前記内因性カンナビノイド吸着材は通過できないフィルター
６    カラム
７    内因性カンナビノイド吸着器
【図１】
0004707810.tif 000004