(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
粉末Ｘ線回折による回折パターンが回折角度（２θ）＝６．０、６．５、１２．６、１３．６および１５．４（度）に主要なピークを有する、式（Ｉ）：
【化１】
0004707115.tif 000016
で示される化合物の結晶。
【請求項２】
粉末Ｘ線回折による回折パターンが回折角度（２θ）＝４．６、７．７、１２．７、１６．７、１９．１および２１．１（度）に主要なピークを有する、式（Ｉ）：
【化２】
0004707115.tif 000017
で示される化合物の結晶をアセトニトリルに懸濁または溶解し、結晶型を転移させることを特徴とする請求項１記載の結晶の製造方法。
【請求項３】
請求項１記載の結晶、溶媒および水酸化ナトリウムを混合し、乾燥させることを特徴とする医薬製剤の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はトリテルペン誘導体の新規結晶、その製造方法および当該結晶を用いて得られる医薬製剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
式：
【化１】
0004707115.tif 000002
で示される化合物（以下、化合物Ａとする）はエンドセリン受容体拮抗薬であり、種々の循環器系疾患（高血圧、虚血性疾患、脳循環障害、腎障害、諸臓器の循環不全、喘息、脳卒中、脳梗塞、脳浮腫等）の治療薬として有用であることが知られている（特許文献１および２参照）。
また、化合物Ａの遊離体である式（Ｉ）：
【化２】
0004707115.tif 000003
で示される化合物（以下、化合物（Ｉ）とする）は、酢酸エチルを再結晶溶媒として用い、淡黄色針状晶として既に単離されている（非特許文献１参照）。
特許文献３には、化合物Ａまたは化合物（Ｉ）に塩基性物質を添加して溶液または懸濁液とし、これを凍結乾燥した医薬製剤が記載されている。
特許文献４には、化合物（Ｉ）を含む反応液に有機溶媒と水を加え、化合物（Ｉ）を結晶として単離することができる旨記載されている。しかし、有機溶媒としては具体的には酢酸エチルが記載されているのみであり、本発明のＩＩ型晶については全く示唆されていない。
【非特許文献１】オーガニック・プロセス・リサーチ・アンド・デベロップメント（Organic Process Research & Development）１９９９年、第３巻、ｐ．３４７−３５１
【特許文献１】特開平７−５３４８４号公報
【特許文献２】特開平７−３１６１８８号公報
【特許文献３】国際公開第０３／００７９６７号パンフレット
【特許文献４】国際公開第０３／０８０６４３号パンフレット
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
一般に医薬品原薬は極めて高品質のものが要求され、経時的な品質低下は可能な限り防止することが求められる。本発明の目的は、保存安定性に優れた化合物（Ｉ）の新規結晶を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
本発明は、
（１）粉末Ｘ線回折による回折パターンが回折角度（２θ）＝６．０、６．５、１２．６、１３．６および１５．４（度）に主要なピークを有する、式（Ｉ）：
【化３】
0004707115.tif 000004
で示される化合物の結晶（以下、ＩＩ型晶とする）、
（２）粉末Ｘ線回折による回折パターンが回折角度（２θ）＝４．６、７．７、１２．７、１６．７、１９．１および２１．１（度）に主要なピークを有する、式（Ｉ）：
【化４】
0004707115.tif 000005
で示される化合物の結晶をアセトニトリルに懸濁または溶解し、結晶型を転移させることを特徴とする（１）記載の結晶の製造方法および
（３）上記（１）記載の結晶、溶媒および水酸化ナトリウムを混合し、乾燥させることを特徴とする医薬製剤の製造方法
を提供する。
さらに、
（４）（工程１）式（Ｉ）：
【化５】
0004707115.tif 000006
で示される化合物を含む溶液に酢酸エチルを添加し、結晶を得る工程、および
（工程２）得られた結晶をアセトニトリルに懸濁または溶解し、結晶形を転移させる工程
を含むことを特徴とする、（１）記載の結晶の製造方法、
（５）上記（４）の化合物（Ｉ）が、式（ＩＩ）：
【化６】
0004707115.tif 000007
で示される化合物を酸で処理することにより得られるものである、（１）記載の結晶の製造方法、
（６）上記（５）の化合物（ＩＩ）が、式（ＩＩＩ）：
【化７】
0004707115.tif 000008
（式中、Ｒ１は低級アルキル）
で示される化合物および式（ＩＶ）：
【化８】
0004707115.tif 000009
（式中、Ｒ２は水素または低級アルキル）
で示される化合物を塩基、有機溶媒および水の存在下に反応させて得られるものである、（１）記載の結晶の製造方法、および
（７）急性期の脳血管障害の治療および／または予防のための医薬製剤を製造するための、（１）記載の結晶の使用
を提供する。
【発明の効果】
【０００５】
本発明の化合物（Ｉ）のＩＩ型晶は他の結晶型と比較して保存安定性に優れており、保存時の含量低下が抑制されることから、医薬品原薬としての品質を保持することが可能である。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００６】
上記ＩＩ型晶の製造方法は特に限定されないが、好ましくは以下に示す方法に準じて製造すればよい。
（工程１  Ａ法）
非特許文献１等に記載の上述の化合物（ＩＩ）を適当な有機溶媒に溶解または懸濁し、酸で処理して化合物（Ｉ）とする。
有機溶媒は特に限定されず、例えばＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、エチレングリコールジメチルエーテル等が挙げられる。
酸としては、化合物（ＩＩ）のエチレンジオキシ部分を脱保護し得るものであれば特に限定されず、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、ギ酸、トリフルオロ酢酸、マレイン酸、シュウ酸等が例示されるが、好ましくは塩酸である。酸の使用量は、化合物（ＩＩ）１モル当量に対して約０．１〜１５．０モル当量、好ましくは約１．０〜３．０モル当量である。
処理温度は、通常、約０〜８０℃、好ましくは約４０〜５０℃である。
処理時間は、通常、０．１時間から２０時間、好ましくは約３０分〜２時間である。
得られた化合物（Ｉ）は単離することなく工程２に進めればよい。【０００７】
（工程１  Ｂ法）
別法として、化合物（ＩＩＩ）および化合物（ＩＶ）を反応させ、化合物（Ｉ）を得ることもできる。具体的には、特許文献４に記載の方法に従って製造すればよい。
【化９】
0004707115.tif 000010
（式中、Ｒ１は低級アルキルであり、Ｒ２は水素または低級アルキル）
化合物（ＩＩＩ）および化合物（ＩＶ）を塩基、有機溶媒および水の存在下に反応させて化合物（ＩＩ）を含む溶液を得、化合物（ＩＩ）を単離することなく、該溶液に酸を加えることにより化合物（Ｉ）を製造する。
ここで用いる塩基としては水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等が挙げられ、好ましくは水酸化リチウムである。塩基の使用量は、化合物（Ｉ）に対して約３．０〜１０．０モル当量、好ましくは約２．０〜５．０モル当量である。
有機溶媒としては、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、エチレングリコールジメチルエーテル等が例示されるが、好ましくはＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドである。
添加する水の量は特に限定されないが、例えば塩基を０．１％（ｗ／ｗ）〜３０％（ｗ／ｗ）、好ましくは１％（ｗ／ｗ）〜１０％（ｗ／ｗ）の濃度の水溶液として反応に用いればよい。
反応温度は、通常、約−４０℃〜６０℃、好ましくは約−１０℃〜０℃である。反応時間は、通常、約１５分〜１０時間、好ましくは約３０分〜４時間である。
使用できる酸、酸の使用量、反応温度、反応時間は上記工程１Ａ法と同様である。
得られた化合物（Ｉ）は単離することなく工程２に進めればよい。【０００８】
Ｒ１またはＲ２で示される低級アルキルは、炭素数１〜８の直鎖状および分枝状のアルキルを包含し、例えばメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、イソヘキシル、ｎ−へプチル、イソヘプチルおよびｎ−オクチル、イソオクチル等が挙げられる。Ｒ１として好ましくはメチルまたはエチルであり、特に好ましくはエチルである。Ｒ２として好ましくはメチルである。
上記（４）（工程１）における「式（Ｉ）で示される化合物を含む溶液」とは、工程１Ａ法または工程１Ｂ法により得られた反応液を包含する。すなわち、「Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミドまたはエチレングリコールジメチルエーテル中に式（Ｉ）で示される化合物を含有する溶液」であり、好ましくは「Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドおよび式（Ｉ）で示される化合物を含有する溶液」である。【０００９】
（工程２）
化合物（Ｉ）を含む溶液を室温付近まで冷却し、酢酸エチルおよび必要に応じて水を適量加える。塩基によりｐＨを約５〜６に調整してもよい。
酢酸エチルおよび水の量は特に限定されないが、好ましくは化合物（Ｉ）１ｇに対し、酢酸エチルおよび水がそれぞれ５ｍＬ〜２０ｍＬである。
用いる塩基は通常使用されるものであれば特に限定されないが、例えば水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化リチウム等が挙げられる。
続いて有機層から減圧濃縮等により水分を除去し、約４０〜８０℃、好ましくは約６５℃〜７５℃晶析させる。
必要であれば、さらにアセトニトリルを添加して約−１０℃〜０℃まで冷却し、約３０分〜２時間程度撹拌して析出させることにより、次工程において処理しやすい結晶を得てもよい。
ここで得られた結晶を十分に乾燥させた結晶は非特許文献１に記載の化合物７の淡黄色針状晶と同一結晶である（Ｉ型乾燥結晶）。乾燥結晶を次工程に付してもよいが、溶媒を含有した結晶（Ｉ型未乾結晶）のまま次工程に進めることも可能である。ここで「溶媒を含有した結晶」とは溶媒和物結晶および溶媒が付着した結晶のいずれも包含する。【００１０】
（工程３）
工程２で得られたＩ型晶を適量のアセトニトリルに懸濁または溶解させ、室温〜約８０℃、好ましくは約４０〜５０℃で約１５分〜１０時間、好ましくは約３０分〜２時間処理することにより結晶型を転移させる。
ここで用いるアセトニトリルの量は特に限定されないが、好ましくはＩ型乾燥結晶またはＩ型未乾結晶１モル当量に対して１０モル当量〜５０モル当量である。
その後、約−１０℃〜室温付近まで冷却して約１５分〜５時間、好ましくは約１５分〜１時間撹拌して結晶を得る。より純度の高い結晶を得るためにはさらに適量のアセトニトリルで洗浄すればよい。得られた結晶を十分に乾燥させて溶媒を除去すればＩＩ型晶が得られる。
本法ではＩ型晶として結晶化し、さらにＩＩ型晶として結晶化を行うため、得られた結晶は精製度の高いものとなる。【００１１】
得られたＩＩ型晶は、粉末Ｘ線回折による回折パターンが回折角度（２θ）＝６．０、６．５、１２．６、１３．６および１５．４（度）に主要なピークを示す。
ここで示す粉末Ｘ線回折値は、結晶のＸ線ピークのうち代表的なピークを選択したものであり、結晶構造は必ずしもこれらの値だけによって限定されるものではない。即ち、これら以外のピークが含まれていてもよい。また一般に結晶をＸ線回折により測定した場合、そのピークは、測定機器、測定条件、付着溶媒の存在等により、多少の測定誤差を生じることがある。よって、実質的に上記同様のＸ線パターンによって特徴付けられる結晶はすべて本発明の範囲内である。
ＩＩ型晶は、後述の試験例からも明らかな通り、Ｉ型晶と比較して保存安定性が向上しており、保存中の品質低下を防止することができる。Ｉ型晶を長期保存する際には冷所保管が必要であったが、本発明のＩＩ型晶ではその必要性はなく、保存や輸送が非常に簡便になるというメリットも有する。【００１２】
また、ＩＩ型晶は光に対する安定性も向上しており、曝光保存後、Ｉ型晶では総類縁物量は増加するが、ＩＩ型晶ではほとんど変化が見られない。【００１３】
本発明はＩＩ型晶を使用して製造した医薬製剤および医薬製剤を製造するためのＩＩ型晶の使用方法も提供する。ここで医薬製剤とは、化合物（Ｉ）を有効成分として含有するものであってもよいが、好ましくは化合物（Ｉ）のナトリウム塩である化合物Ａを医薬活性成分として含有するものである。
医薬製剤の剤形としては、錠剤、顆粒剤、カプセル剤、注射剤等が例示されるが、好ましくは注射剤である。
化合物（Ｉ）のナトリウム塩である化合物Ａを活性成分とする注射用医薬製剤を製造する場合、本発明のＩＩ型晶を用い、特許文献３記載の方法により塩への変換および製剤化を同時に行うことができる。
具体的には、本発明のＩＩ型晶に溶媒および水酸化ナトリウムを混合し、ｐＨが８．５以上、好ましくは９．５付近になるように水酸化ナトリウムをさらに添加し、溶液を調製する。水酸化ナトリウムの添加量はＩＩ型晶１００ｍｇに対して５〜２０ｍｇ、好ましくは１０〜２０ｍｇ、さらに好ましくは１２〜１８ｍｇが好ましい。
溶媒としては水、輸液、緩衝液、注射用水等が挙げられ、好ましくは注射用水または輸液である。
溶液にはさらに糖（例えばグルコース、マルトース、ラクトース、シュークロース、フルクトース、マンニトール、好ましくはマンニトール）またはアミノ酸（好ましくは中性アミノ酸、さらに好ましくはグリシンまたはアラニン、最も好ましくはアラニン）を含有していてもよい。糖またはアミノ酸は化合物Ａの２５％（ｗ／ｗ）以上が好ましく、より好ましくは４０％〜６０％（ｗ／ｗ）、最も好ましくは５０％（ｗ／ｗ）である。
必要であればさらに溶媒を加えて適当な溶液濃度に調整した後、無菌濾過等により無菌液とする。得られた無菌液を凍結乾燥、噴霧乾燥または減圧乾固等により乾燥すれば、化合物Ａを含有する用時溶解注射剤を得るとができる。【００１４】
無菌液を噴霧乾燥する場合には、滅菌した乾燥装置（スプレードライヤー、流動層造粒機等）を用い、滅菌したバイアルに乾燥粉末を充填して用時溶解注射剤とすればよい。
噴霧乾燥する際、乾燥粉末が帯電性を帯びて器具や容器へ付着し、著しく操作性を損なうことがある。帯電性を軽減し、操作性を向上させるためには、溶液に予めポリエチレングリコールを添加しておけばよい。
ポリエチレングリコールはポリエチレングリコール４００、ポリエチレングリコール６００、ポリエチレングリコール４０００等またはそれらから選択される１種または２種以上の混合物を用いることができる。好ましくはＰＥＧ４０００である。添加量はＩＩ型晶１ｍｇに対し、下限は０．０１ｍｇ、好ましくは０．０３ｍｇであり、上限は０．５ｍｇ、好ましくは０．４ｍｇ、さらに好ましくは０．２ｍｇである。【００１５】
以下に実施例および試験例を示すが、これらは本発明の範囲を限定するものではない。
Ｘ線測定条件はＣｕＫα線（波長λ＝１．５４Å）、管電圧４０ｋＶ、管電流４０ｍＡ、スキャンスピード２．０００°／分、サンプリング幅０．０２０°である。
【実施例１】
【００１６】
【化１０】
0004707115.tif 000011
（式中、Ｅｔはエチル、ＤＭＦはＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド）
化合物（ＩＩＩ−１）（９．３ｇ）および化合物（ＩＶ−１）（４．０ｇ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（６５ｍＬ）に懸濁させ−５℃以下に冷却した。５．６％水酸化リチウム水溶液（２８．８ｇ）を滴下して３．５時間反応させて化合物（ＩＩ）を含むＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド溶液を得た。次に５ーＣまで昇温後、３５％塩酸（９．１ｇ）を加えて４５℃で１．５時間攪拌した。反応終了後、室温まで冷却し、酢酸エチル（１０５ｍＬ）と水（９３ｇ）を加え１０％水酸化ナトリウム水溶液でｐＨを５．５付近に調整した後、有機層を分取した。水層を酢酸エチルで抽出し、それぞれの有機層を水で洗浄後合併した。合併液を減圧濃縮して水分を除去した後、７０℃で晶析させる。その後、アセトニトリル（５１ｍＬ）を加え、室温まで徐々に冷却した後、０℃まで冷却して１時間攪拌した。析出した黄色の固体をろ取し、アセトニトリルで洗浄して化合物（Ｉ）のＩ型晶（未乾結晶）を１５．８ｇ得た。次に得られたＩ型晶（未乾結晶）のうち１５．５ｇを続く晶型変換工程へ導いた。ここで得られた未乾結晶を十分に乾燥するとＩ型乾燥結晶が得られる。
Ｉ型晶（未乾結晶）（７．８ｇ）をアセトニトリル２１６ｍＬに懸濁させ４５℃まで加熱した。１時間程度で黄色のスラリーから白色スラリーへと変換し、さらに３０分攪拌後、粗生成物（Ｉ）（７．７ｇ）を投入した。変換終了後、室温まで冷却し、さらに−５℃で３０分攪拌した。白色固体をろ取し、アセトニトリルで洗浄して化合物（Ｉ）のＩＩ型晶を得た。収量６．９ｇ（７３％）。
粉末X線回析： 
Ｉ型晶（乾燥結晶）回折角度（２θ）＝４．７、８．０、１２．０および１２．７、１５．９（度）
Ｉ型晶（未乾結晶）回折角度（２θ）＝４．６、７．７、１２．７、１６．７、１９．１および２１．１（度）
ＩＩ型晶  回折角度（２θ）＝６．０、６．５、１２．６、１３．６および１５．４（度）【００１７】
試験例１  保存安定性
化合物（Ｉ）のＩ型乾燥結晶およびＩＩ型晶を試料として用いた。試料約３ｇをポリエチレン二重袋およびアルミ缶に入れた後、４０℃、相対湿度７５％保存、６ヶ月の条件下で保存した。ＨＰＬＣ法により含量および総類縁物質量を測定した。表１の通り、Ｉ型乾燥結晶の総類縁物質量は増加したが、ＩＩ型晶の総類縁物質量はほとんど変化がなく、安定であった。特に、下記式： 
【化１１】
0004707115.tif 000012
で示される類縁物質ＢはＩ型晶では大きく増加していた。
【表１】
0004707115.tif 000013
試験例２  光に対する安定性
化合物（Ｉ）のＩ型乾燥晶およびＩＩ型晶を試料として用いた。試料約３ｇをシャーレに入れた後、平均気温３０±２℃、１２０万Ｌｕｘ・ｈｒまたは３６０万Ｌｕｘ・ｈｒ曝光下で保存した。ＨＰＬＣ法により含量および総類縁物質量を測定した。表２の通り、Ｉ型乾燥晶の総類縁物質量は増加したが、ＩＩ型晶の総類縁物質量はほとんど変化がなく、光に対して安定であった。
【表２】
0004707115.tif 000014
【００１８】
参考例１
【化１２】
0004707115.tif 000015
化合物１（６．０ｇ）と１０％Ｐｄ−Ｃ（１．２ｇ）をアセトニトリル（１２０ｍＬ）に懸濁させて０℃以下に冷却した。水素供給しながら５℃以下を保ち１時間以上攪拌した。その後Ｐｄ−Ｃをろ別し、アセトニトリルで洗浄して化合物２を含むアセトニトリル溶液を得た。得られた溶液３分の１を次反応へ導いた。得られた溶液にＮ，Ｎ−ジメチルアニリン（１．３ｇ）を加え、−５℃に冷却した化合物３（２．１ｇ）を含むアセトニトリル溶液（８ｍＬ）へ滴下した。反応液を１時間攪拌し、水（２０ｍＬ）を添加して室温まで加温して化合物４を含むアセトニトリル溶液を得た。減圧濃縮後、０℃に冷却し、８．８％水酸化ナトリウム水溶液（２７．３ｇ）を滴下した。３０分攪拌後、３５％塩酸（６．１ｇ）を滴下し、さらに、氷冷下１時間攪拌した後、析出した黄色結晶をろ取し、３．５％塩酸および水で洗浄して粗製の化合物（ＩＶ）を得た。次に得られた粗生成物をジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）に溶解し、水３０ｍＬを４５℃で滴下して黄色の化合物（ＩＶ）を析出させた。３０分攪拌した後氷冷下で１時間攪拌した。析出した結晶をろ取し、水で洗浄して化合物（ＩＶ）を得た。収量２．０ｇ（７０％）
元素分析（％）：Ｃ１１Ｈ９ＮＯ５・４Ｈ2Ｏとして
計算値：Ｃ，５４．５１；Ｈ，４．０８；Ｎ，５．７７
実測値：Ｃ，５４．３１；Ｈ，３．９４；Ｎ，５．７９
水分値（ＫＦ）（％）：Ｃ１１Ｈ９ＮＯ５・４Ｈ2Ｏとして
計算値：Ｈ２Ｏ，２．９７
実測値：Ｈ２Ｏ，３．１５
ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）δ：６．６６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１５．３Ｈｚ），７．０７（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．０Ｈｚ，９．０Ｈｚ），７．１３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１５．３Ｈｚ），７．１９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．０Ｈｚ），７．６１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．０Ｈｚ）
ＩＲ（ｃｍ−１）：３４２０（ｂｒ）、１７１３、１６７８、１６６６、１６２１、１５４１、１５４１、１３０２、１１６０【００１９】
製剤例１
化合物（Ｉ）のＩＩ型晶３．８１ｇに２．００ｇのｄ−マンニトールおよび０．１６ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム水溶液６４ｇを加えて溶解する。これに１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム水溶液を加えて溶液のｐＨを９．５に調製（水溶液としての添加量４．７９ｇ）する。全量が８０．０ｇとなるように注射用水を加え、溶液濃度を５０．０ｍｇ／ｇに調製する。調製液を無菌濾過した後、２．００ｇずつ分注し、凍結乾燥する。得られる凍結乾燥製剤には化合物Ａが１００ｍｇ（２Ｎａ塩含量換算）含まれる。
【産業上の利用可能性】
【００２０】
本発明の化合物（Ｉ）のＩＩ型晶は安定性が高く、高品質な医薬品を提供することができる。