(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
電解質と非電解質とを含有する海洋深層水を、荷電モザイク膜を介して該海洋深層水よりも電解質濃度の低い水と接触させて、該海洋深層水中の電解質を、海洋深層水よりも電解質濃度の低い水に選択的に移動させて、電解質と非電解質とを分離することを特徴とする、繊維芽細胞活性深層水の製造方法。
【請求項２】
上記荷電モザイク膜の厚さが０．１〜３０μmの範囲内にあることを特徴とする請求項第１項記載の繊維芽細胞活性深層水の製造方法。
【請求項３】
上記荷電モザイク膜中において、カチオン性ポリマーとアニオン性ポリマーとがそれぞれ独立にミクロ分離したドメインを形成していると共に、各ドメインが荷電膜の表裏面を貫通していることを特徴とする請求項第１項記載の繊維芽細胞活性深層水の製造方法。
【請求項４】
上記荷電モザイク膜を形成するそれぞれのポリマードメインの大きさが１μm以下であり、かつカチオン性ポリマーからなるドメインとアニオン性ポリマーからなるドメインとが互いに隣接していることを特徴とする請求項第１項記載の繊維芽細胞活性深層水の製造方法。
【請求項５】
上記荷電モザイク膜を介して海洋深層水中に含有される電解質の５０重量%以上を、該海洋深層水よりも電解質濃度の低い水中に移行させることを特徴とする請求項第１項記載の繊維芽細胞活性深層水の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の分野】
本発明は、海洋水、特に海洋深層水中に含有されている細胞活性物質を、効率よく、かつその活性を低下させることなく無機塩などの電解質から分離する方法に関する。
【０００２】
【従来技術】
海洋水、特に海洋深層水中には種々の物質が含有されており、このような物質の中には繊維芽細胞など皮膚細胞を活性化する成分、好酸球、マクロファージなど免疫担当細胞を活性化する有益な物質が多数含まれている。
しかしながら、海洋水には数％の塩化ナトリウムが溶存しており、さらにこの塩化ナトリウム以外にも多種多様な無機塩化物が溶存している。これらの無機塩化物は、細胞を活性化する作用は殆どないので、海洋水中の有効成分を得ようとする場合には、上記のような無機塩化物を除去する必要がある。
【０００３】
塩化ナトリウムなどの無機塩化物の除去には、海洋水を濃縮して析出した無機塩化物を濾過する方法、電気透析膜脱塩法、逆浸透脱塩法、限外濾過脱塩法などの方法が利用可能である。これらの方法は、脱塩速度、脱塩コスト、脱塩効率などの点で優劣はあるが、それぞれの分野における目的等に鑑み、最も生産性が良い方法が採用されている。すなわち、上記いずれの方法を採用しても、分離される無機塩化物の純度、無機塩化物を除去するのに要するコストなどを別にすれば、塩化ナトリウム等の分離される無機塩化物の種類には変わりはなく、また、こうした無機塩化物が分離された海洋水にも特段の差はないと考えられている。
【０００４】
従って、海洋水から塩分を分離する方法としては、海洋水を濃縮し、析出した無機塩化物を除去する方法が、最もコスト的に有利であり、また、海洋水を濃縮する際に減圧にすれば、水の沸点が低下して効率的に海洋水を濃縮することができるので、海洋水を、特に減圧下で濃縮する方法が用いられることが多い。
ところが、上記種々の方法で脱塩した海洋水について、細胞に対する活性を測定してみると、脱塩方法によって、海洋水に含有されている成分の細胞に対する活性が著しく異なることが判明した。
【０００５】
【発明の目的】
本発明は、海洋水、特に海洋深層水から脱塩する際に細胞活性物質の活性が低下することのない脱塩方法を提供することを目的としている。
【０００６】
【発明の概要】
本発明の海洋水からの細胞活性化物質の分離方法は、電解質と非電解質とを含有する海洋水を、荷電モザイク膜を介して該海洋水よりも電解質濃度の低い水と接触させて、該海洋水中の電解質を、海洋水よりも電解質濃度の低い水に選択的に移動させて、電解質と非電解質とを分離することを特徴としている。
【０００７】
すなわち、本発明の分離方法によれば、荷電モザイク膜を介して海洋水と真水とを接触させることにより、海洋水中に含まれる無機塩化物などの無機塩を選択的に真水中に拡散させることができる。一方、海洋水中に含まれる非電解質は、荷電モザイク膜を透過することはできないので、海洋水中に残存する。その結果、海洋水は脱塩されると共に、非電解質は海洋水中に残存する。しかも、海洋水中に残存する非電解質の細胞に対する活性度は変動することがない。
【０００８】
すなわち、荷電モザイク膜を用いて脱塩を行う際には、海洋水に熱をかける必要もなく、さらに電流を流すことも必要とせず、電解質は、電解質の有するイオン性によって荷電モザイク膜のドメインを透過する。従って、荷電モザイク膜を使用した脱塩では、熱、電流などの外的なエネルギーの供給を必要とすることがなく、海洋水中に含有される成分が外部から供給されるエネルギーによって変性することがほとんどない。
【０００９】
特に本発明者は、従来から提唱されている海洋水に含有される細胞活性物質は稀少ミネラルであるとの説とは異なり、海洋水、特に海洋深層水に含有される細胞活性成分は、有機化合物であることを見いだして既に出願している。細胞活性物が有機化合物であるとする本発明者の知見に基づけば、有機物質を加熱すると、熱変性を起こす可能性があり、また、電流、圧力などの外部エネルギーによってもこうした有機化合物は変性することがある。
【００１０】
従って、本発明におけるように電解質のイオン拡散力に基づいて脱塩する荷電モザイク膜を用いることにより海洋水、特に海洋深層水中に含有される細胞活性物質の特性を損なうことなく、効率よく脱塩をすることができる。
【００１１】
【発明の具体的な説明】
次に本発明の海洋水から細胞活性化物質を分離する方法について、具体的に説明する。なお、以下の説明は海洋水として海洋深層水を使用した場合を例にして説明するが、この海洋深層水は、海洋水の例であり、例えば水深２００ｍ程度までの温暖層の海洋水を用いた場合であっても同様の操作を行うことにより、含有される細胞活性化物質の活性を低下させることなく、効率よく脱塩を行うことができる。
【００１２】
本発明で使用する海洋深層水は、太陽光が到達する水深２００ｍ以下の海底を非常にゆっくりと流れる海流であり、海面近くにある温暖層の海水と比較すると、稀少ミネラル分が豊富であると共に、太陽光が到達しない深海を流れることから、藻などによる光合成は行われず、従ってこれまでは海洋深層水中には有機物質はほとんど含有されていないと考えられていた。
【００１３】
しかしながら、本発明者は、海洋深層水中には比較的多量の有機物質が含有されていることを確認しており、これらの有機物質が、繊維芽細胞、好酸球などの細胞に対して高い活性を有することを見いだして既にこうした細胞活性物質に関する出願をしている（特願2000-398809号明細書、特願2001-242139号明細書など参照）。
【００１４】
このような海洋深層水に含有される有機物質を利用するためには、最初に、海洋深層水中に溶存している塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化マグネシウムなどの無機塩化物を除去する必要がある。
本発明では、海洋深層水の脱塩に、荷電モザイク膜を使用する。荷電モザイク膜による脱塩とは、海洋深層水中に含有される電解質と非電解質とを、膜透過速度の差を利用して分離する方法である。
【００１５】
図１に、本発明で使用する荷電モザイク膜の断面構造を模式的に示す。また、図２は、図１における膜左面（Side I）から右面(Side II)に向かってカチオン性の基が固定されている領域Ｂ（ドメインＢ）とアニオン性の基が固定されている領域Ａ（ドメインＡ）とを部分的に拡大し、模式的に表わした図である。さらに図３は、このドメインＡおよびドメインＢを分子レベルで説明するための模式図である。
【００１６】
本発明で使用する荷電モザイク膜は、その機能を発現させるために膜の内部構造が以下のような基本的要件を満たしているものである。
(1)  ミクロドメイン構造を有すること：すなわちカチオン性ポリマーとアニオン性ポリマーとがミクロ分離したドメインを形成していること。
(2)  チャンネル構造を有すること：同種のイオンのポリマードメインが連続していて膜表面から裏面に貫通しており、かつ両ドメインが互いに隣接していること。
(3)微小性：各ドメインサイズがサブミクロンオーダーであること。すなわち、各ドメインサイズが、約１μｍ以下、好ましくは０．５μｍ以下であることが望ましい。
【００１７】
(4)膜に孔があいていないこと。
(5)強い電解性型イオン交換基で、高い固定電荷密度を有すること。
本発明で使用する荷電モザイク膜１０は、図１、図２に示すように、膜左側(Side I)から右側(Side II)に向かってカチオン性の基が固定されている領域Ｂ（ドメインＢ）とアニオン性の基が固定されている領域Ａ（ドメインＡ）が貫通し、両領域が相接している。この膜の左側、すなわちSide Iが海洋深層水であり、右側(Side II) がイオン交換水であるとする。膜のアニオン性ドメイン（ドメインB）の中にはカチオンが、カチオン性ドメイン(ドメインA)の中にはアニオンが、対イオンとして存在し、この両イオンは自由に移動できるようにされている。膜の左右部の液面に濃度差、圧力差があった時に自由に移動できる対イオンは膜の右部(Side II)に移動する。そして、新たに膜左面に塩溶液のイオンが吸着される。ここで、左部(Side I)にある海洋深層水の塩濃度よりも膜中のイオン濃度が高ければ、膜右部(Side II)に押し出され、塩は結果として透過したことになる。ここでドメインA,Bの幅が小さいほどイオンの移動距離が短くなりイオンの透過が早くなる。すなわち、膜左部(Side I)での両イオンの分離→膜透過→両イオンの会合の機構を考慮すると、ドメインサイズと連結性が透過速度を決定する。
【００１８】
本発明で使用する荷電モザイク膜としては、球状微粒子橋かけポリマー（ミクロゲル）の特性である等方連続性を利用してミクロゲルを集積することで得られるポリマーアロイ類似構造を有する膜であることが好ましい。図３において、「○」はカチオン性球状粒子であり橋かけ構造によりカチオン性ミクロゲルを形成している状態が示されており、「●」はアニオン性球状粒子であり橋かけ構造によりアニオン性ミクロゲルを形成している状態が示されており、これらのポリマー粒子の間隙にはマトリックスポリマーが充填されている。
【００１９】
本発明で使用する荷電モザイク膜は上記のような構成を有するものであり、その厚さは、通常は０．１〜３０μm、好ましくは０．５〜２５μm、さらに好ましくは５〜２０μmの範囲内にある。
このような荷電モザイク膜を形成するカチオン性ポリマーまたはアニオン性ポリマーは、１〜３級のアミノ基又は４級アンモニウム基、スルホン酸基、カルボン酸基、またはこれらのイオン性基が塩を形成している基を有するポリマーである。塩を形成している基の場合には、カチオン性基に対しては、例えば、硫酸、塩酸、リン酸、有機酸などのアニオン残基が使用され、またアニオン性基に対しては例えばアルカリ金属イオンなどのカチオンが使用される。
【００２０】
イオン性ポリマーの具体的な例としては、アニオン性ポリマーとして、ポリスチレンスルホン酸またはその塩、ポリエステルのスルホン化物またはその塩、ポリ2-（メタ）アクリロイルアミノ-2-メチル-1-プロパンスルホン酸またはその塩、ポリ2-(メタ)アクリルアミド-2-プロパンスルホン酸またはその塩、ポリ（メタ）アクロイルオキシプロピルスルホン酸またはその塩、ポリスルホンプロピル（メタ）アクリレートまたはその塩、ポリ2-スルホエチル（メタ）アクリレートまたはその塩、ポリスルホエチル（メタ）アクリレートまたはその塩、ポリビニルスルホン酸またはその塩、ポリ(メタ)アクリル酸またはその塩、ポリスチレンマレイン酸共重合体またはその塩、あるいは、これらのポリマーを構成するモノマーの共重合体、他のモノマーとの共重合体を挙げることができる。また、カチオン性ポリマーの具体的な例としては、ポリビニルピリジンおよびその４級化合物、ポリ2-ヒドロキシ-3-（メタ）アクリロキシプロピルトリメチルアンモニウムクロライド、ポリ（メタ）アクリル酸ジエチルアミノエチルまたはその塩、ポリ（メタ）アクリル酸ジメチルアミノエチルまたはその塩、あるいは、これらのポリマーを形成するモノマーの共重合体、他のモノマーとの共重合体を挙げることができる。
【００２１】
上記のようなポリマーから球状体を形成する方法としては、例えば、モノマーを含有する反応媒体から球状体を析出させる方法を挙げることができ、具体的には、ソープフリー重合、エマルジョン重合、懸濁重合、逆相重合、シード重合などの重合方法を挙げることができる。このような球状体は、架橋されていることが好ましい。ここで使用される架橋剤としては、例えば、ジビニルベンゼン、メチレンビス（メタ）アクリルアミド、ジ（メタ）アクリル酸エチレングリコール、ジ（メタ）アクリル酸-1,3-ブチレングリコール、その他、３〜４官能性の（メタ）アクリレートを挙げることができる。これらの架橋剤はポリマーを構成するモノマー１００重量部に対して通常は２０重量部以下であり、好ましくは０．５〜１０重量部の量で使用される。本発明では上記のような架橋剤で架橋された球状体と架橋されていない球状体とを併用することが好ましい。本発明で使用する球状体の直径は、通常は０．０１〜１０μm、好ましくは０．２〜１μmである。
【００２２】
本発明で使用される荷電モザイク膜は、上記のような球状体を使用して形成されるが、形成される膜を補強するために透液性支持体を用いることが好ましい。ここで使用される透液性支持体としては、織布、不織布、多孔質樹脂シート、多孔性セラミック焼結体、金属メッシュなどの多孔質体を用いることが好ましい。これらの多孔質体は、通常は０．０１〜５００μm、好ましくは０．１〜１００μmの厚さを有している。本発明で使用する荷電モザイク膜を製造するに際しては、使用するアニオン性ポリマーまたはカチオン性ポリマーの少なくとも一方が球状体であれば良い。
【００２３】
本発明で使用する荷電モザイク膜は、（A）一方のイオン性のポリマー球状体を透液性支持体に固定した後、固定された球状体の間隙に他のイオン性を有するモノマーを充填して重合させる方法、（B）一方のイオン性のポリマー球状体と他のイオン性を有する直鎖状重合体溶液とを混合してキャスト成膜する方法、（C）異種のイオン性を有するポリマー球状体の分散液をそれぞれ個別に調製し、これらの分散液を混合してキャスト成膜する方法、（D）一方のイオン性を有するポリマー球状体の表面に、他方のイオン性を有する直鎖状重合体を化学的に結合させてコア-シェル型ポリマーとし、これをキャスト成膜しコアを破壊してコア同士を結合させる方法、（E）異種のイオン性を有するポリマー球状体の分散液をそれぞれ調製し、これらを混合してキャスト成膜した後、その間隙に一方のイオン性ポリマーあるいはモノマーを充填し、モノマーを使用した場合には、この充填されたモノマーを重合させる方法、さらに上記（A）〜（D）の方法を適宜組み合わせる方法などにより製造することができる。
【００２４】
こうした2種類のポリマー球状体を有する架橋モザイク膜は、好ましくは架橋球状体と未架橋球状体とを組み合わせて使用し、これらを混在させてキャスト成膜後、溶剤あるいは圧力などを用いて膜中のポリマー球状体を破壊または変形させることにより同種のイオンの連結を確実にすると共に、膜の機械的強度を向上させることが好ましい。
上記のような荷電モザイク膜１０は、図４に示すように、Side I容器１１とSide II容器１２との間に、Side I容器１１に充填される液体とSide II容器１２に充填される液体とがこの荷電モザイク膜１０を介して接触するように配置する。
【００２５】
このSide I容器１１とSide II容器１２とには、それぞれ撹拌装置１４，１５が配置されている。
また、Side I容器１１には、温度計１６が、Side II容器１２には、電導率計１７が備えられている。
Side I容器１１には電解質が溶解された溶液が充填され、Side II容器１２には、電解質濃度が、Side I容器１１に含有される電解質の濃度よりも低い液体が充填されており、両者は、荷電モザイク膜１０を介して接触している。具体的には、Side I容器１１には、海洋深層水が充填され、Side II容器１２には、イオン交換水、純水など、通常は電解質を実質的に含有していない水が充填される。このようにSide I容器１１に充填された海洋深層水、Side II容器１２に充填された電解質を含有しない水は、攪拌装置１４，１５によって攪拌される。
【００２６】
Side I容器１１に充填される海洋深層水中には、塩化ナトリウム、塩化カリウムなどの電解質が溶解されていると共に、本発明者の検討によれば、有機物質も溶解されている。Side I容器１１に充填されている海洋深層水中に含有される塩化ナトリウム、塩化カリウムなどの電解質は、荷電モザイク膜１０を選択的に透過して、Side II容器１２に充填された電解質が溶解されていない水中に移行するが、有機物質は、この荷電モザイク膜１０を透過することはできない。
例えば、塩化カリウム（KCl）、塩化ナトリウム（NaCl）、およびサッカロースを含有する溶液を例にして荷電モザイク膜１０の選択透過性を下記表１に示す。
【００２７】
【表１】
0004679773.tif 000002
【００２８】
上記表１に示すように、荷電モザイク膜を透過する塩化カリウムの流束を１．００とすると、塩化ナトリウムの流束は０．７０であり、電解質は荷電モザイク膜を良好に透過することがわかる。一方、電解質ではないサッカロースの流束は、０．０２であり、塩化カリウムの１／５０程度である。このような非電解質の荷電モザイク膜を透過する量は、海洋深層水を濃縮して電解質を析出させて濾過する際に析出した無機塩に吸着して持ち出される非電解質の量よりも著しく少ない。
【００２９】
従って、電解質と非電解質とが混在する海洋深層水をSide I容器１１に充填し、Side II容器１２にイオン交換水を充填することにより、Side I容器１１からは電解質が選択的に荷電モザイク膜１０を透過してSide II容器１２に移行するが、海洋深層水１１中に含有される非電解質、例えば有機化合物は、荷電モザイク膜を透過することはできず、Side I容器１１内に充填されている海洋深層水中に留まり、時間の経過と共に、Side I容器１１内に充填されている海洋深層水中における電解質と非電解質の溶存比率が変化し、電解質の溶存比率が低くなる。
【００３０】
すなわち、本発明の荷電モザイク膜によれば、海洋水（特に海洋深層水）中に含有される電解質の５０重量％以上、好ましくは７５重量％以上、さらに好ましくは９８重量％以上を、海洋水よりも電解質濃度の低い水中に移行させることができる。
また、このように荷電モザイク膜を用いることにより、電解質を熱、応力、電気などの外部エネルギーを付与することなく、電解質の有するイオン性によって分離することができることから、この荷電モザイク膜によって分離されない非電解質には、何のエネルギーも付与されず、したがって、非電解質が電解質の分離に伴う操作によって変性する虞を著しく低減させることができる。
【００３１】
従って、上記のような荷電モザイク膜を用いて電解質を分離した海洋深層水から得られた皮膚細胞活性成分例えば繊維芽細胞の活性成分、免疫担当細胞、例えば好酸球の活性成分などの有機物質は、加熱濃縮濾過、電気透析膜脱塩法、逆浸透脱塩法、限外濾過脱塩法などにより脱塩した海洋深層水から得られる有機物質と比較すると、細胞に対する相対的な活性化度が高い値を示す。
【００３２】
なお、上記においては、海洋深層水から初期の段階で脱塩する際に荷電モザイク膜を使用した例を示して、このように脱塩された海洋深層水中に含有される細胞活性物質の活性を比較したが、海洋深層水から無機塩を分離する工程は、このような初期の段階以外例えば有機活性成分の濃縮などにも存在することがあり、こうした場合においても荷電モザイク膜を使用することにより、より高い細胞活性を有する物質を得ることができる。
【００３３】
【発明の効果】
本発明では、海洋深層水の脱塩に荷電モザイク膜を用いており、このようにして荷電モザイク膜を使用して脱塩を行うことにより、脱塩された海洋深層水は細胞に対して高い活性を示した。
【００３４】
【実施例】
次に、本発明の実施例および比較例を示して、荷電モザイク膜を用いて脱塩した海洋深層水の細胞に対する活性が高いことを示すが、本発明はこれら実施例および比較例によって限定的に解釈されるべきではない。
なお、以下に示す本発明の実施例および比較例において使用した海洋深層水は、図５に示すように、海洋深層水を濾過して減圧蒸留濃縮し析出物を濾過した濾液を濃縮したものを分割してそれぞれの脱塩法に用いたものであり、脱塩後の濃縮率［濃縮率（％）＝（テスト時の海洋深層水脱塩濃縮液量／脱塩濃縮実施前の海洋深層水量）×１００］が実施例１および比較例１，２では最終的に５％になるように操作し、実施例２および比較例３，４では最終的に濃縮率が０．５％になるように操作した。
【００３５】
【実施例１】
図４に示すようにSide I容器１１とSide II容器１２を用意し、両容器の間に荷電モザイク膜を配置した。この荷電モザイク膜は、その厚さ５μmであり、海洋深層水およびイオン交換水に対する接触面積を１１３cm2に設定した。なお、この荷電モザイク膜のKClに対して流束、４．０×10-2mol/ｍ2ｈｒの分離能力を有している。
【００３６】
Side I容器１１に海洋深層水１．０リットルを充填し、Side II容器１２にイオン交換蒸留水１．０リットルを充填した。それぞれの容器にはマグネチックスターラーが配置されており、海洋深層水およびイオン交換水を攪拌した。
Side I容器１１に充填した海洋深層水とSide II容器１２に充填したイオン交換水とを荷電モザイク膜を介して１０℃で接触させ、１２時間毎にSide II容器１２にイオン交換蒸留水を入れ替える。最後にSide I容器１１に充填した海洋深層水の電導率を測定して残りの電解質量を求め、海洋深層中の電解質濃度が０．０２重量%になるまで脱塩した。
【００３７】
こうして脱塩された海洋深層水を、元の海洋深層水の容積の５％まで濃縮し、初期の細胞活性物質を得た。
この細胞活性物質を用いて繊維芽細胞活性を測定した。なお、この細胞活性試験の際の塩分濃度はリン酸バッファー生理食塩水（PBS−）の塩組成成分でリン酸バッファー生理食塩水（PBS−）の塩分濃度の０．９重量％に調整した。また、その結果、減圧蒸留濃縮により脱塩した海洋深層水から得られた細胞活性物質についてリン酸バッファー生理食塩水（PBS−）を用いて測定したコントロールの細胞活性を１００とすると１９１．３０の細胞活性を示した。
【００３８】
結果を表２および図６に示す。
【００３９】
【比較例１および２】
実施例１において、荷電モザイク膜を用いた脱塩の代わりに電気透析膜（旭化成（株）製AC-110膜、透析装置マイクロアナライザーS1）を用いて海洋深層中の電解質濃度を０．０６重量％（比較例１）および０．０２重量%（比較例２）になるまで脱塩した以外は実施例１と同様にして細胞活性物質を得た。なお、脱塩には電気透析装置を使用した。
【００４０】
得られた細胞活性物質を用いて繊維芽細胞活性を測定した。なお、これらの細胞活性試験の際の塩分濃度はリン酸バッファー生理食塩水（PBS−）の塩組成成分でリン酸バッファー生理食塩水（PBS−）の塩分濃度の０．９重量％に調整した。
その結果、電気透析により脱塩した海洋深層水から得られた細胞活性物質についてリン酸バッファー生理食塩水（PBS−）を用いて測定したコントロールの細胞活性を１００とすると電解質濃度が０．６重量％まで脱塩した深層水細胞活性物質が１３４．７８の細胞活性を示し（比較例１）、電解質濃度が０．０２重量％まで脱塩した深層水細胞活性物質が１０９．５７の細胞活性を示した（比較例２）。
【００４１】
これらの値は、コントロールよりも高い値であるが、荷電モザイク膜を用いて脱塩して得られた細胞活性物質よりも低い値であった。
結果を表２および図６に示す。
【００４２】
【表２】
0004679773.tif 000003
【００４３】
【実施例２】
実施例１において、脱塩された海洋深層水の濃縮率を元の海洋深層水の容積に対して５％から０．５％に変えた以外は同様にして初期の細胞活性物質を得た。この細胞活性物質を用いて繊維芽細胞活性を測定した。なお、この細胞活性試験の際の塩分濃度はリン酸バッファー生理食塩水（PBS−）の塩組成成分でリン酸バッファー生理食塩水（PBS−）の塩分濃度の０．９重量％に調整した。
【００４４】
その結果、減圧蒸留により脱塩した海洋深層水から得られた細胞活性物質についてリン酸バッファー生理食塩水（PBS−）を用いて測定したコントロールの細胞活性を１００とすると２３３細胞活性を示した。
結果を表２および図７に示す。
【００４５】
【比較例３および４】
実施例２において、荷電モザイク膜を用いた脱塩の代わりに限外濾過脱塩装置（東ソー（株）製ULTRACENT膜）を用いて海洋深層中に含有される成分の平均分子量サイズ10000以下（比較例３）、平均分子量サイズ30000以下（比較例４）をそれぞれ分離した以外は実施例１と同様にして細胞活性物質を得た。
【００４６】
得られた細胞活性物質を用いて繊維芽細胞活性を測定した。なお、これらの細胞活性試験の際の塩分濃度はリン酸バッファー生理食塩水（PBS−）の塩組成成分でリン酸バッファー生理食塩水（PBS−）の塩分濃度の０．９重量％に調整した。
その結果、限外濾過により脱塩した海洋深層水から得られた細胞活性物質についてリン酸バッファー生理食塩水（PBS−）を用いて測定したコントロールの細胞活性を１００とすると平均分子量サイズ10000以下を分離した深層水細胞活性物質は２１３の細胞活性を示し（比較例３）、平均分子量サイズ30000以下を分離した深層水細胞活性物質が２０２細胞活性を示した（比較例４）。
【００４７】
これらの値は、コントロールよりも高い値であるが、荷電モザイク膜を用いて脱塩して得られた細胞活性物質よりも低い値であった。
結果を表３および図７に示す。
【００４８】
【表３】
0004679773.tif 000004
【００４９】
これらの結果から、荷電モザイク膜を用いて脱塩することにより得られる細胞活性物質は、他の方法で脱塩した海洋深層水よりも著しく優れた細胞活性を有していることがわかる。
【図面の簡単な説明】
【図１】  図１は、本発明で使用される荷電モザイク膜を模式的に示す断面図である。
【図２】  図２は、図１に示した荷電モザイク膜の部分拡大図である。
【図３】  図３は、図１に示した荷電モザイク膜を分子レベルで説明するための模式図である。
【図４】  図４は、荷電モザイク膜を用いた脱塩装置の例を模式的に示す図である。
【図５】  図５は、本発明の実施例および比較例で脱塩する際の操作を示すフローチャートである。
【図６】  図６は、荷電モザイク膜を用いた実施例１で得られた物質の細胞活性と電気透析脱塩法を用いた比較例１，２で得られた物質の細胞活性を示すグラフである。
【図７】  図７は、荷電モザイク膜を用いた実施例１で得られた物質の細胞活性と限外濾過装置を用いた脱塩法で採用した比較例１，２で得られた物質の細胞活性を示すグラフである。
【図１】
0004679773.tif 000005
【図２】
0004679773.tif 000006
【図３】
0004679773.tif 000007
【図４】
0004679773.tif 000008
【図５】
0004679773.tif 000009
【図６】
0004679773.tif 000010
【図７】
0004679773.tif 000011