(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（１）
【化１】
0004716672.tif 000006
［式中、Ｒ1は、水酸基を示す。
Ｒ2は、
炭素数１〜２０の直鎖もしくは分岐鎖状アルキル基、または炭素数１〜２０の直鎖もしくは分岐鎖状アルコキシ基で置換されていてもよいフェニル基； 
炭素数１〜２０の直鎖もしくは分岐鎖状アルキル基、またはフェニル基（炭素数１〜２０の直鎖もしくは分岐鎖状アルコキシ基、またはハロゲン原子で置換されていてもよい）で置換されていてもよいピリミジル基；または
１〜３個の炭素数１〜２０の直鎖もしくは分岐鎖状アルキル基で置換されていてもよいピリジル基、もしくはキノリル基
を示し、かつ
Ｒ1のパラ位に位置する。
A1，A2は、同一または異なってN、またはCHを示す。］
で表される化合物又はその塩を有効成分とする巨核球産生誘導剤。
【請求項２】
一般式（１）に記載の芳香族化合物が、4-（5-オクチルピリミジン-2-イル）フェノール、 4-[2-（4-ブトキシフェニル）ピリミジン-5-イル]フェノール、2-（4-オクチルフェニル）ピリミジン-5-オール、4-（5-オクチルピリジン-2-イル）フェノール、4-（6-ペンチルキノリン-2-イル）フェノール、 4-[2-[4-(ジサイロキシ)-2, 3-ジフルオロフェニル]ピリミジン-5-イル]フェノールのいずれかである請求項１に記載の巨核球産生誘導剤。
【請求項３】
血小板減少状態における血小板数の改善及び／又はその治療用薬剤である請求項１及び２に記載の巨核球産生誘導剤。
【請求項４】
血小板減少状態が再生不良性貧血、急性白血病、巨赤芽球性貧血、血小板性紫斑病、全身性エリテマトーデス(SLE)、DIC、敗血症、悪性腫瘍、骨髄性白血病、遺伝性血小板減少症又は生体損傷の出血のいずれかに起因する場合である請求項３に記載の巨核球産生誘導剤。
【請求項５】
一般式（１）
【化２】
0004716672.tif 000007
［式中、Ｒ1、Ｒ2、A1、及びA2は、請求項１に定義されるとおりである。］で表される化合物又はその塩を有効成分とする血小板減少症治療薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、造血幹細胞の巨核球への増殖分化を促進することによる血小板の産生増加を促す医薬に関する。
【背景技術】
【０００２】
血小板は、出血時の止血に関わる重要な生体成分である。血液中には、血液1 μL当たり約15万〜40万個の血小板が常時生産、分解のバランスのもとに維持されている。しかしながら、種々の原因により血液中の血小板数が1〜5万個程度に減少する場合がある。この場合、全身的に出血傾向となり、歯肉出血、鼻血、血尿、脳出血、内臓出血などに注意を払わなければならない。このように血小板の減少状態は、臨床上極めて重大な問題であり、患者は速やかに血液中の血小板量を正常範囲に回復させる処置が必要である。血小板の減少をきたす例としては、がん治療における化学療法剤の投与、血小板減少を伴う疾患、手術、事故などの出血時などが挙げられる。また、血小板減少に対する処置方法としては、体外から血小板を補充する方法（血小板輸血）が、通常用いられている。しかし、血小板輸血は、当然のことながら人的支援に依存しており、またウイルス感染などの危険性をはらんでいる。
【０００３】
一方、血小板は造血幹細胞から分化した巨核球が胞体突起形成という劇的な形態変化の後放出される。このため、血小板の産生を促すには成熟巨核球に作用し直接血小板放出を促す方策があるが、当然のことながら血小板数は巨核球数に依存するため造血幹細胞から成熟巨核球の増殖・分化を促進する物質もより有効な治療手段と成り得る。このような造血幹細胞から巨核球への増殖分化に係わる生体内物質として、種々のサイトカインと呼ばれる生理活性タンパク質が知られているが、その1つにトロンボポエチン（TPO）を上げることができる。実際、TPOは上記血小板減少状態を改善するための治療方法として臨床応用の試みがなされ、有意に血小板数を増加させることが実証されている。しかしながら、該物質が前述の如くタンパク性の物質であることから生産コスト、長期投与による自己抗体の産生或いは投与ルートの制約など種々の問題点も指摘されていた。
【０００４】
２環以上の芳香環が連結された化合物は、液晶性を有する化合物またはその中間体として知られていたが（特許文献１〜5および非特許文献1）、これらの薬理作用については検討されていなかった。
【特許文献１】特許第2750914号
【特許文献２】特許第2999736号
【特許文献３】特公平6-99392号公報
【特許文献４】特開昭56-53661号公報
【特許文献５】特開平7-10847号公報
【非特許文献１】Ferroelectrics, 1993, 148, 139-145
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、上記血小板減少時における諸問題点を解消するために、血小板増加作用を有する低分子化合物を提供することを目的としている。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者らは、斯かる実情に鑑み、鋭意研究を行った結果、一般式（１）に記載の構造を有する化合物が造血幹細胞の巨核球への増殖分化誘導活性を有することを見出すに至った。本発明は、該知見を基に完成されたものである。
【０００７】
本発明は、以下の巨核球産生誘導剤および血小板減少症治療薬を提供するものである。
１．一般式（１）
【０００８】
【化１】
0004716672.tif 000002
［式中、Ｒ1は、水酸基、チオール基、アルキル基又はアルコキシ基を示す。
Ｒ2は、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基を示す。
Ｒ3は、水素原子、ハロゲン原子、アルキル基、トリフルオロメチル基、水酸基、アルコキシ基、シアノ基、ニトロ基、アミノ基、Ｃ1〜Ｃ4の直鎖又は分枝を有するアルキル基でモノ置換またはジ置換されたアミノ基を示す。隣接するＲ3はそれらが結合している炭素原子と一緒になって５員または６員の芳香族または脂肪族の環状基を形成してもよい。
A1，A2は、同一または異なってN、CHまたはC(Ｒ3)を示す。
ｎは、A1＝A2＝C(Ｒ3)のとき４、A1とA2のいずれか一方のみがC(Ｒ3)のとき３，A1とA2がともにC(Ｒ3)ではないとき２を示す。］で表される化合物又はその塩を有効成分とする巨核球産生誘導剤。
2．  一般式（１）に記載の芳香族化合物が、4-（5-オクチルピリミジン-2-イル）フェノール、 4-[2-（4-ブトキシフェニル）ピリミジン-5-イル]フェノール、2-（4-オクチルフェニル）ピリミジン-5-オール、4-（5-オクチルピリジン-2-イル）フェノール、4-（6-ペンチルキノリン-2-イル）フェノール、 4-[2-[4-(ジサイロキシ)-2, 3-ジフルオロフェニル]ピリミジン-5-イル]フェノールのいずれかである請求項１に記載の巨核球産生誘導剤。
3．  血小板減少状態における血小板数の改善及び／又はその治療用薬剤である請求項１及び２に記載の巨核球産生誘導剤。
4．  血小板減少状態が再生不良性貧血、急性白血病、巨赤芽球性貧血、血小板性紫斑病、全身性エリテマトーデス(SLE)、DIC、敗血症、悪性腫瘍、骨髄性白血病、遺伝性血小板減少症又は生体損傷の出血のいずれかに起因する場合である請求項３に記載の巨核球産生誘導剤。
５．一般式（１）
【０００９】
【化２】
0004716672.tif 000003
［式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、A1，A2及びｎは、前記に定義されるとおりである。］で表される化合物又はその塩を有効成分とする血小板減少症治療薬。
以下、本発明をより詳細に説明する。
本明細書において、Ｒ1〜Ｒ3、A1及びA2で示される各基は、具体的に次の通りである。
ハロゲン原子としては、フッ素原子、塩素原子、臭素原子及びヨウ素原子を示す。
【００１０】
アルキル基とは、炭素原子が１〜２０、好ましくは１〜１０から構成される直鎖状又は分岐鎖状のアルキル基であって、例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基，イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｎ−ペンチル基、ネオペンチル基、ｎ−ヘキシル基、イソヘキシル基、３−メチルペンチル基、ヘプチル基、オクチル基、ノニル基、デシル基、ドデシル基、テトラデシル基、ヘキサデシル基、オクタデシル基、イコシル基、５，５−ジメチルペンチル基、４，４，４−トリメチルブチル基、６，６−ジメチルヘキシル基、５，５，５−トリメチルペンチル基等を挙げることができる。
【００１１】
アルコキシ基とは、上記定義されたＣ１〜２０アルキル基と酸素原子で構成される基であって、例えば、メトキシ基、エトキシ基、ｎ−プロポキシ基、イソプロポキシ基、ｎ−ブトキシ基、イソブトキシ基、ｔｅｒｔ−ブトキシ基、ｓｅｃ−ブトキシ基、ｎ−ペントキシ基、ネオペントキシ基、ｎ−ヘキシルオキシ基、イソヘキシルオキシ基、３−メチルペントキシ基、ヘプチルオキシ基、オクチルオキシ基、ノニルオキシ基、デシルオキシ基、ドデシルオキシ基、テトラデシルオキシ基、ヘキサデシルオキシ基、オクタデシルオキシ基、イコシルオキシ基、５，５−ジメチルペンチルオキシ基、４，４，４−トリメチルブトキシ基、６，６−ジメチルヘキシルオキシ基、５，５，５−トリメチルペンチルオキシ基等を挙げることができる。
【００１２】
置換されていてもよいアリール基としては、置換されていてもよいフェニル基、置換されていてもよいナフチル基が挙げられ、置換されていてもよいヘテロアリール基としては、置換されていてもよいピリジル基（特にアルキル基で置換されていてもよいピリジル基）、置換されていてもよいピリミジル基（特にアルキル基で置換されていてもよいピリミジル基）、置換されていてもよいキノリル基（特にアルキル基で置換されていてもよいキノリル基）、置換されていてもよいイソキノリル基（特にアルキル基で置換されていてもよいキノリル基）が挙げられる。
【００１３】
置換されていてもよいフェニル基（特にフェニル環上に置換基として、１〜４個、好ましくは１〜３個のアルキル基、アルコキシ基及びハロゲン原子からなる群より選ばれた基で置換されていてもよい）としては、例えば、フェニル基、２−フルオロフェニル基、３−フルオロフェニル基、４−フルオロフェニル基、２−クロロフェニル基、３−クロロフェニル基、４−クロロフェニル基、２−ブロモフェニル基、３−ブロモフェニル基、４−ブロモフェニル基、２−ヨードフェニル基、３−ヨードフェニル基、４−ヨードフェニル基、２，３−ジフルオロフェニル基、３，４−ジフルオロフェニル基、３，５−ジフルオロフェニル基、２，４−ジフルオロフェニル基、２，６−ジフルオロフェニル基、２，３−ジクロロフェニル基、３，４−ジクロロフェニル基、３，５−ジクロロフェニル基、２，４−ジクロロフェニル基、２，６−ジクロロフェニル基、３，４，５−トリフルオロフェニル基、３，４，５−トリクロロフェニル基、２，４，６−トリフルオロフェニル基、２，４，６−トリクロロフェニル基、２−フルオロ−４−ブロモフェニル基、４−クロロ−３−フルオロフェニル基、２，３，４−トリクロロフェニル基、２，４，６−トリメチルフェニル基、４−ｎ−ブチルフェニル基、２，４−ジメチルフェニル基、２，３−ジメチルフェニル基、２，６−ジメチルフェニル基、３，５−ジメチルフェニル基、２，５−ジメチルフェニル基、４−ｎ−ブトキシフェニル基、２，４−ジメトキシフェニル基、２，３−ジメトキシフェニル基、２，６−ジメトキシフェニル基、３，５−ジメトキシフェニル基、２，５−ジメトキシフェニル基、２，４，６−トリメトキシフェニル基、３−クロロ−４−メトキシフェニル基、３−メチル−４−フルオロフェニル基、２−メチルフェニル基、３−メチルフェニル基、４−メチルフェニル基、２−メチル−３−クロロフェニル基、３−メチル−４−クロロフェニル基、２−クロロ−４−メチルフェニル基、２−メチル−３−フルオロフェニル基、２−イソプロピルフェニル基、３−イソプロピルフェニル基、４−イソプロピルフェニル基、２−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル基、３−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル基、４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル基、２−ｓｅｃ−ブチルフェニル基、３−ｓｅｃ−ブチルフェニル基、４−ｓｅｃ−ブチルフェニル基、４−ｎ−ペンチルフェニル基、４−ｎ−ヘキシルフェニル基、４−ｎ−ヘプチルフェニル基、４−ｎ−オクチルフェニル基、４−ｎ−ノニルフェニル基、４−ｎ−デシルフェニル基、４−ｎ−デシルオキシ−２，３−ジフルオロフェニル基、２−メトキシフェニル基、３−メトキシフェニル基、４−メトキシフェニル基、３−クロロ−２−メトキシフェニル基、２−フルオロ−３−メトキシフェニル基、２−フルオロ−４−メトキシフェニル基、２，６−ジメトキシフェニル基、２，３，４−トリフルオロフェニル基、２−イソプロポキシフェニル基、３−イソプロポキシフェニル基、４−イソプロポキシフェニル基、２−ｔｅｒｔ−ブトキシフェニル基、３−ｔｅｒｔ−ブトキシフェニル基、４−ｔｅｒｔ−ブトキシフェニル基、２−ｓｅｃ−ブトキシフェニル基、３−ｓｅｃ−ブトキシフェニル基、４−ｓｅｃ−ブトキシフェニル基、４−ｎ−ペンチルオキシフェニル基、４−ｎ−ヘキシルオキシフェニル基、４−ｎ−ヘプチルオキシフェニル基、４−ｎ−オクチルオキシフェニル基、４−ｎ−ノニルオキシフェニル基、４−ｎ−デシルオキシフェニル基等のフェニル基（フェニル環上に置換基として、炭素数１〜２０の直鎖又は分枝鎖状アルキル基、炭素数１〜２０の直鎖又は分枝鎖状アルコキシ基及びハロゲン原子からなる群より選ばれた基が１〜３個置換していてもよいを挙げることができる。
【００１４】
置換されていてもよいナフチル基（特にナフチル環上に置換基として、１〜４個、好ましくは１〜３個のアルキル基、アルコキシ基及びハロゲン原子からなる群より選ばれた基で置換されていてもよい）としては、上記の置換されていてもよいフェニル基と同様な置換基（例えば、炭素数１〜２０の直鎖又は分枝鎖状アルキル基、炭素数１〜２０の直鎖又は分枝鎖状アルコキシ基及びハロゲン原子からなる群より選ばれた基）をナフチル環上に有していてもよい基が挙げられる。
【００１５】
置換されていてもよいピリミジル基としては、例えば、（２−、４−、５−又は６−）ピリミジル基、５−ｎ−オクチル−２−ピリミジル基、２−（４−ｎ−ブトキシフェニル）−５−ピリミジル基、５−ヒドロキシ−２−ピリミジル基、４−メチル−２−ピリミジル基、５−エチル−２−ピリミジル基、２−ｎ−プロピル−５−ピリミジル基、６−ｎ−ブチル−２−ピリミジル基、４−ｎ−ペンチル−２−ピリミジル基、５−ｎ−ヘキシル−４−ピリミジル基、５−ｎ−ノニル−２−ピリミジル基、２−ｎ−デシル−５−ピリミジル基、２，４−ジメチル−５−ピリミジル基、４，５，６−トリメチル−２−ピリミジル基、４−メチル−２−ピリミジル基、５−エトキシ−２−ピリミジル基、２−ｎ−プロポキシ−５−ピリミジル基、６−ｎ−ブトキシ−２−ピリミジル基、４−ｎ−ペンチルオキシ−２−ピリミジル基、５−ｎ−ヘキシルオキシ−４−ピリミジル基、５−ｎ−ノニルオキシ−２−ピリミジル基、２−ｎ−デシルオキシ−５−ピリミジル基、２，４−ジメメトキシ−５−ピリミジル基、４，５，６−トリメトキシ−２−ピリミジル基、４，５−ジヒドロキシ−２−ピリミジル基、４，５、６−トリヒドロキシ−２−ピリミジル基、２−（４−ｎ−デシルオキシ−２，３−ジフルオロフェニル）−５−ピリミジル基、２−（４−ｎ−ブトキシシ−２−フルオロフェニル）−５−ピリミジル基、５−フェニル−２−ピリミジル基、２−（２−フルオロフェニル）−５−ピリミジル基、５−（３−クロロフェニル）−２−ピリミジル基、２−（４−ブロモフェニル）−５−ピリミジル基、５−（２−ヨードフェニル）−２−ピリミジル基、２−（２，３−ジフルオロフェニル）−５−ピリミジル基、５−（３，４−ジクロロフェニル）−２−ピリミジル基、２−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−５−ピリミジル基、５−（２，４，６−トリフルオロフェニル）−２−ピリミジル基、２−（２，４，６−トリメチルフェニル）−５−ピリミジル基、５−（２，４−ジメチルフェニル）−２−ピリミジル基、５−（２，４−ジメトキシフェニル）−２−ピリミジル基、２−（２，４，６−トリメトキシフェニル）−５−ピリミジル基、２−（３−クロロ−４−メトキシフェニル）−５−ピリミジル基、５−（３−メチル−４−フルオロフェニル）−２−ピリミジル基、２−（２−メチルフェニル）−５−ピリミジル基、５−（３−イソプロピルフェニル）−２−ピリミジル基、２−（４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−５−ピリミジル基、５−（２−ｓｅｃ−ブチルフェニル）−２−ピリミジル基、５−（４−ｎ−ペンチルフェニル）−２−ピリミジル基、５−（４−ｎ−ヘキシルフェニル）−２−ピリミジル基、２−（４−ｎ−ヘプチルフェニル）−５−ピリミジル基、２−（４−ｎ−オクチルフェニル）−５−ピリミジル基、５−（４−ｎ−ノニルフェニル）−２−ピリミジル基、２−（４−ｎ−デシルフェニル）−５−ピリミジル基、５−（４−ｎ−デシルオキシ−２，３−ジフルオロフェニル）−２−ピリミジル基、５−（２−メトキシフェニル）−２−ピリミジル基、４−（３−メトキシフェニル）−２−ピリミジル基、６−（４−メトキシフェニル）−２−ピリミジル基、２−（３−クロロ−２−メトキシフェニル）−５−ピリミジル基、２−（２−フルオロ−３−メトキシフェニル）−４−ピリミジル基、２−（２−フルオロ−４−メトキシフェニル）−６−ピリミジル基、２−（２，６−ジメトキシフェニル）−５−ピリミジル基、５−（２，３，４−トリフルオロフェニル）−２−ピリミジル基、５−（２−イソプロポキシフェニル）−４−ピリミジル基、５−（３−イソプロポキシフェニル）−６−ピリミジル基、４−（４−イソプロポキシフェニル）−２−ピリミジル基、４−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシフェニル）−５−ピリミジル基、４−（３−ｔｅｒｔ−ブトキシフェニル）−６−ピリミジル基、６−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシフェニル）−２−ピリミジル基、６−（２−ｓｅｃ−ブトキシフェニル）−４−ピリミジル基、６−（３−ｓｅｃ−ブトキシフェニル）−５−ピリミジル基、２−（４−ｓｅｃ−ブトキシフェニル）−５−ピリミジル基、５−（４−ｎ−ペンチルオキシフェニル）−２−ピリミジル基、２−（４−ｎ−ヘキシルオキシフェニル）−５−ピリミジル基、５−（４−ｎ−ヘプチルオキシフェニル）−２−ピリミジル基、２−（４−ｎ−オクチルオキシフェニル）−５−ピリミジル基、５−（４−ｎ−ノニルオキシフェニル）−２−ピリミジル基、２−（４−ｎ−デシルオキシフェニル）−５−ピリミジル基、５−ｎ−オクチル−６−ヒドロキシ−２−ピリミジル基、５−ｎ−ブトキシ−６−（２−フルオロ−４−ｎ−ブトキシフェニル）−４−ヒドロキシ−２−ピリミジル基等のピリミジン環上に置換基として、炭素数１〜２０の直鎖又は分枝鎖状アルキル基、水酸基、フェニル基（フェニル環上に置換基として、炭素数１〜２０の直鎖又は分枝鎖状アルキル基、炭素数１〜２０の直鎖又は分枝鎖状アルコキシ基及びハロゲン原子からなる群より選ばれた基が１〜３個置換していてもよい）からなる群より選ばれた基が１〜３個置換していてもよいピリミジル基を挙げることができる。
【００１６】
ピリジン環上に置換基としてアルキル基を少なくとも１個有することのあるピリジル基としては、例えば、（２−、３−又は４−）ピリジル基、３−ｎ−オクチル−６−ピリジル基、２−メチル−６−ピリジル基、３−エチル−５−ピリジル基、４−ｎ−プロピル−２−ピリジル基、３−ｎ−ブチル−４−ピリジル基、２−ｎ−ペンチル−３−ピリジル基、３−ｎ−ヘキシル−４−ピリジル基、４−ｎ−ヘプチル−２−ピリジル基、３−ｎ−ノニル−２−ピリジル基、２−ｎ−デシル−６−ピリジル基、２−メチル−３−ｎ−オクチル−６−ピリジル基、２，４−、５−トリメチル−６−ピリジル基等のピリジン環上に置換基として炭素数１〜２０の直鎖又は分枝鎖状アルキル基を１〜３個有することのあるピリジル基を挙げることができる。
【００１７】
キノリン環上に置換基としてアルキル基を少なくとも１個有することのあるよいキノリル基としては、例えば、（２−、３−、４−、５−、６−、７−又は８−）キノリル基、６−ｎ−ペンチル−２−キノリル基、４−メチル−２−キノリル基、５−エチル−２−キノリル基、６−ｎ−ブチル−２−キノリル基、７−ｎ−ヘキシル−３−キノリル基、８−ｎ−ヘプチル−４−キノリル基、２−ｎ−オクチル−５−キノリル基、３−ｎ−ノニル−６−キノリル基、６−ｎ−デシル−７−キノリル基、４−メチル−６−ｎ−ペンチル−２−キノリル基、４，５，６−トリメチル−２−キノリル基等のキノリン環上に置換基として炭素数１〜２０の直鎖又は分枝鎖状アルキル基を１〜３個有することのあるキノリル基を挙げることができる。
【００１８】
イソキノリン環上に置換基としてアルキル基を少なくとも１個有することのあるよいイソキノリル基としては、例えば、（２−、３−、４−、５−、６−、７−又は８−）イソキノリル基、６−ｎ−ペンチル−２−イソキノリル基、４−メチル−２−イソキノリル基、５−エチル−２−イソキノリル基、６−ｎ−ブチル−２−イソキノリル基、７−ｎ−ヘキシル−３−イソキノリル基、８−ｎ−ヘプチル−４−イソキノリル基、２−ｎ−オクチル−５−イソキノリル基、３−ｎ−ノニル−６−イソキノリル基、６−ｎ−デシル−７−イソキノリル基、４−メチル−６−ｎ−ペンチル−２−イソキノリル基、４，５，６−トリメチル−２−イソキノリル基等のイソキノリン環上に置換基として炭素数１〜２０の直鎖又は分枝鎖状アルキル基を１〜３個有することのあるイソキノリル基を挙げることができる。
Ｃ1〜Ｃ4の直鎖又は分枝を有するアルキル基でモノ置換またはジ置換されたアミノ基としては、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基，イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ｓｅｃ−ブチル基でモノ置換またはジ置換されたアミノ基が例示される。
【００１９】
５員または６員の芳香族基としては、上記の炭素数１〜２０の直鎖又は分枝鎖状アルキル基、炭素数１〜２０の直鎖又は分枝鎖状アルコキシ基及びハロゲン原子からなる群より選ばれた基が１〜３個置換していてもよいフェニル基またはナフチル基が例示され、５員または６員の脂肪族環状基としては、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、メチレンジオキシ基が例示される。
【００２０】
なお、本発明医薬組成物である巨核球産生誘導剤において有効成分とする一般式（１）の化合物を以下単に本発明化合物という。
【００２１】
本発明化合物は、特許第2750914号、特許第2999736号、特公平6-99392、特開昭56-53661、特開平7-10847或いはFerroelectrics, 1993, 148, 139-145、或いはこれらを含む公知の製造法に準じて製造することができ、4-（5-オクチルピリミジン-2-イル）フェノール（♯１）、 4-[2-（4-ブトキシフェニル）ピリミジン-5-イル]フェノール（♯２）、2-（4-オクチルフェニル）ピリミジン-5-オール（♯３）、4-（5-オクチルピリジン-2-イル）フェノール（♯４）、4-（6-ペンチルキノリン-2-イル）フェノール（♯５）、 4-[2-[4-(ジサイロキシ)-2, 3-ジフルオロフェニル]ピリミジン-5-イル]フェノール（♯６）等を好適な化合物の例として挙げることができる。
【００２２】
【化３】
0004716672.tif 000004
ところで、本発明化合物の活性は、巨核球又は巨核球前駆細胞の増加総数としてもとらえることができる。この点で種々のインビトロの試験において本発明化合物の活性を評価することが可能である。  例えば、骨髄細胞、臍帯血或いは末梢血などから造血幹細胞（CD34陽性細胞に代表される）或いは巨核球前駆細胞を単離し、本発明化合物存在下培養し、得られた巨核球前駆細胞数又は巨核球数を測定することにより対照群と比較し活性を評価することができる（YAKUGAKU ZASSHI 121(9)691-699 (2001)）。  また、同様に成熟巨核球の最終産物が血小板であり、血小板量の増加という形で本化合物の活性を確認できる。
【００２３】
本発明医薬組成物は、本発明化合物の有する造血幹細胞から巨核球への増殖分化促進活性に基づいて、血小板の減少を伴う種々の疾患に対して有用である。例えば、再生不良性貧血、急性白血病、巨赤芽球性貧血、血小板性紫斑病、全身性エリテマトーデス(SLE)、DIC、敗血症、悪性腫瘍、骨髄性白血病、遺伝性血小板減少症を例示することができるが、もちろんこれらに限定されない。
【００２４】
また、疾患以外の血小板が不足した状態に対する処置にも利用することができる。更に、事故その他生体損傷時における多量出血によって緊急的に血小板の補充を必要とする場合において、血小板輸血と併用するか、又は単独で利用でき、また処置後血小板産生機構の速やかな再構築即ち巨核球の補充に対しても有効である。
【００２５】
本発明医薬組成物は、本発明化合物からなる群から選ばれる少なくとも1種の化合物を有効成分とする。該有効成分とする化合物には、その医薬的に許容される塩も含まれる。該塩には、当業界で周知の方法により調製される、例えばナトリウム、カリウム、リチウム、カルシウム、マグネシウム、バリウム、四級アンモニウムなどの無毒性アルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩、四級アンモニウム塩などが含まれる。更に上記塩には、本発明化合物と適当な有機酸乃至無機酸との反応による無毒性酸付加塩も包含される。代表的無毒性酸付加塩としては、例えば塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、亜硫酸塩、酢酸塩、蓚酸塩、吉草酸塩、オレイン酸塩、ラウリン酸塩、硼酸塩、安息香酸塩、乳酸塩、リン酸塩、p-トルエンスルホン酸塩(トシレート)、クエン酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、メタンスルホン酸塩、グリコール酸塩、マレイン酸塩、アスコルビン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩などが例示される。
【００２６】
本発明医薬組成物は、本発明化合物およびそれらの塩からなる群から選ばれる少なくとも1種を活性成分として、それらの薬学的有効量を、適当な医薬担体乃至希釈剤と共に含有させて医薬製剤形態に調製される。
【００２７】
該医薬製剤の調製に利用される医薬担体としては、製剤形態に応じて通常使用される、充填剤、増量剤、結合剤、付湿剤、崩壊剤、表面活性剤、滑沢剤などの希釈剤或は賦形剤を例示できる。これらは得られる製剤の投与単位形態に応じて適宜選択使用される。特に好ましい医薬製剤は、通常の低分子有機化合物などに使用される各種の成分、例えば安定化剤、殺菌剤、緩衝剤、等張化剤、キレート剤、pH調製剤、界面活性剤などを適宜使用して調製される。
【００２８】
上記において安定化剤としては、例えばヒト血清アルブミンや通常のL-アミノ酸、糖類、セルロース誘導体などを例示できる。これらは単独でまたは界面活性剤などと組合せて使用できる。特にこの組合せによれば、有効成分の安定性をより向上させ得る場合がある。
【００２９】
L-アミノ酸としては、特に限定はなく、例えばグリシン、システイン、グルタミン酸などのいずれでもよい。
【００３０】
糖類としても、特に限定はなく、例えばグルコース、マンノース、ガラクトース、果糖などの単糖類；マンニトール、イノシトール、キシリトールなどの糖アルコール；ショ糖、マルトース、乳糖などの二糖類；デキストラン、ヒドロキシプロピルスターチ、コンドロイチン硫酸、ヒアルロン酸などの多糖類などおよびそれらの誘導体などを使用できる。
【００３１】
界面活性剤としても、特に限定はなく、イオン性および非イオン性界面活性剤のいずれも使用できる。その具体例としては、例えばポリオキシエチレングリコールソルビタンアルキルエステル系、ポリオキシエチレンアルキルエーテル系、ソルビタンモノアシルエステル系、脂肪酸グリセリド系などを使用できる。
【００３２】
セルロース誘導体としても、特に限定はなく、メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウムなどを使用できる。
【００３３】
上記糖類の添加量は、有効成分1μg当り約0.0001mg程度以上、好ましくは約0.01-10mg程度の範囲とするのが適当である。界面活性剤の添加量は、有効成分1μg当り約0.00001mg程度以上、好ましくは約0.0001-0.01mg程度の範囲とするのが適当である。ヒト血清アルブミンの添加量は、有効成分1μg当り約0.0001mg程度以上、好ましくは約0.001-0.1mg程度の範囲とするのが適当である。L-アミノ酸の添加量は、有効成分1μg当り約0.001-10mg程度とするのが適当である。また、セルロース誘導体の添加量は、有効成分1μg当り約0.00001mg程度以上、好ましくは約0.001-0.1mg程度の範囲とするのが適当である。
【００３４】
本発明医薬製剤中に含まれる有効成分の量は、広範囲から適宜選択される。通常、製剤中に約0.00001-70重量％、好ましくは0.0001-5重量％程度が含まれる量とするのが適当である。
【００３５】
本発明医薬製剤中には、また各種の添加剤、例えば緩衝剤、等張化剤、キレート剤などをも添加することができる。緩衝剤としては、ホウ酸、リン酸、酢酸、クエン酸、ε-アミノカプロン酸、グルタミン酸および／またはそれらに対応する塩(例えばそれらのナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩などのアルカリ金属塩やアルカリ土類金属塩)などを例示できる。等張化剤としては、例えば塩化ナトリウム、塩化カリウム、糖類、グリセリンなどを例示できる。またキレート剤としては、例えばエデト酸ナトリウム、クエン酸などを例示できる。
【００３６】
本発明医薬製剤は、溶液製剤として調製できる他に、これを凍結乾燥し保存し得る状態にした後、用時水、生理的食塩水などを含む緩衝液などで溶解して適当な濃度に調製される凍結乾燥剤形態とすることも可能である。
【００３７】
本発明医薬製剤の投与単位形態は、医療目的に応じて適宜選択できる。その代表例には、錠剤、丸剤、散剤、粉末剤、顆粒剤、カプセル剤などの固体投与形態および溶液、懸濁剤、乳剤、シロップ、エリキシルなどの液剤投与形態が含まれる。これらは更に投与経路に応じて経口剤、非経口剤、経鼻剤、経膣剤、坐剤、舌下剤、軟膏剤、経肺投与剤などに分類され、それぞれ通常の方法に従い、調合、成形乃至調製することができる。
【００３８】
例えば、錠剤の形態に成形するに際しては、上記製剤担体として例えば乳糖、白糖、塩化ナトリウム、ブドウ糖、尿素、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、結晶セルロース、ケイ酸、リン酸カリウムなどの賦形剤；水、エタノール、プロパノール、単シロップ、ブドウ糖液、デンプン液、ゼラチン溶液、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、メチルセルロース、ポリビニルピロリドンなどの結合剤；カルボキシメチルセルロースナトリウム、カルボキシメチルセルロースカルシウム、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、乾燥デンプン、アルギン酸ナトリウム、カンテン末、ラミナラン末、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウムなどの崩壊剤；ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリドなどの界面活性剤；白糖、ステアリン、カカオバター、水素添加油などの崩壊抑制剤；第4級アンモニウム塩基、ラウリル硫酸ナトリウムなどの吸収促進剤；グリセリン、デンプンなどの保湿剤、デンプン、乳糖、カオリン、ベントナイト、コロイド状ケイ酸などの吸着剤；精製タルク、ステアリン酸塩、ホウ酸末、ポリエチレングリコールなどの滑沢剤などを使用できる。
【００３９】
更に錠剤は必要に応じ通常の剤皮を施した錠剤、例えば糖衣錠、ゼラチン被包錠、腸溶被錠、フィルムコーティング錠とすることができ、また二重錠ないしは多層錠とすることもできる。
【００４０】
丸剤の形態に成形するに際しては、製剤担体として例えばブドウ糖、乳糖、デンプン、カカオ脂、硬化植物油、カオリン、タルクなどの賦形剤；アラビアゴム末、トラガント末、ゼラチン、エタノールなどの結合剤；ラミナラン、カンテンなどの崩壊剤などを使用できる。
【００４１】
カプセル剤は、常法に従い通常活性成分を上記で例示した各種の製剤担体と混合して硬質ゼラチンカプセル、軟質カプセルなどに充填して調製される。
【００４２】
経口投与用液体投与形態は、慣用される不活性希釈剤、例えば水、を含む医薬的に許容される溶液、エマルジョン、懸濁液、シロップ、エリキシルなどを包含し、更に湿潤剤、乳剤、懸濁剤などの助剤を含ませることができ、これらは常法に従い調製される。
【００４３】
非経口投与用の液体投与投与形態、例えば滅菌水性乃至非水性溶液、エマルジョン、懸濁液などへの調製に際しては、希釈剤として例えば水、エチルアルコール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、エトキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルおよびオリーブ油などの植物油などを使用でき、また注入可能な有機エステル類、例えばオレイン酸エチルなどを配合できる。これらには更に通常の溶解補助剤、緩衝剤、湿潤剤、乳化剤、懸濁剤、保存剤、分散剤などを添加することもできる。滅菌は、例えばバクテリア保留フィルターを通過させる濾過操作、殺菌剤の配合、照射処理および加熱処理などにより実施できる。また、これらは使用直前に滅菌水や適当な滅菌可能媒体に溶解することのできる滅菌固体組成物形態に調製することもできる。
【００４４】
坐剤や膣投与用製剤の形態に成形するに際しては、製剤担体として、例えばポリエチレングリコール、カカオ脂、高級アルコール、高級アルコールのエステル類、ゼラチンおよび半合成グリセライドなどを使用できる。
【００４５】
ペースト、クリーム、ゲルなどの軟膏剤の形態に成形するに際しては、希釈剤として、例えば白色ワセリン、パラフイン、グリセリン、セルロース誘導体、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、シリコン、ベントナイトおよびオリーブ油などの植物油などを使用できる。
【００４６】
経鼻または舌下投与用組成物は、周知の標準賦形剤を用いて、常法に従い調製することができる。
【００４７】
経肺投与剤は、前述した各種液剤形態の本発明医薬製剤を凍結乾燥により粉末化するか、該工程において必要に応じてアミノ酸、糖などの安定化剤、吸入時の粒子系などを考慮した安定化剤を利用して、通常のこの種経肺投与剤と同様にして調製することができる。
【００４８】
尚、本発明薬剤中には、必要に応じて着色剤、保存剤、香料、風味剤、甘味剤などや他の医薬品などを含有させることもできる。
【００４９】
上記医薬製剤の投与方法は、特に制限がなく、各種製剤形態、患者の年齢、性別その他の条件、疾患の程度などに応じて決定される。例えば錠剤、丸剤、液剤、懸濁剤、乳剤、顆粒剤およびカプセル剤は経口投与され、注射剤は単独でまたはブドウ糖やアミノ酸などの通常の補液と混合して静脈内投与され、更に必要に応じ単独で筋肉内、皮内、皮下もしくは腹腔内投与され、坐剤は直腸内投与され、経膣剤は膣内投与され、経鼻剤は鼻腔内投与され、舌下剤は口腔内投与され、経肺投与剤は気管支ないし肺胞内にネブライザーなどを用いて投与され、軟膏剤は経皮的に局所投与される。
【００５０】
上記医薬製剤中に含有されるべき有効成分の量およびその投与量は、特に限定されず、所望の治療効果、投与法、治療期間、患者の年齢、性別その他の条件などに応じて広範囲より適宜選択される。一般的には、1日当り体重1kg当り、約0.01μg-10mg程度、好ましくは約0.1μg-1mg程度をヒトに投与するのがよく、該製剤は1日に1−数回に分けて投与することができる。
【発明の効果】
【００５１】
以上実施例から明らかなように、本発明化合物を有効成分とする医薬組成物は巨核球産生誘導にかかる極めて優れた薬理効果を有する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００５２】
以上の本発明を更に詳しく説明するため実施例を挙げる。なお、これらの実施例は、単なる例示目的として記載されており、本発明を限定するものではない。
【００５３】
また、実施例には次に示す６化合物を使用した。
【００５４】
(#1)4-（5-オクチルピリミジン-2-イル）フェノール（みどり化学株式会社より購入）、
(#2) 4-[2-（4-ブトキシフェニル）ピリミジン-5-イル]フェノール（みどり化学株式会社より購入）、
(#3)  2-（4-オクチルフェニル）ピリミジン-5-オール（みどり化学株式会社より購入）、
(#4)  4-（5-オクチルピリジン-2-イル）フェノール（みどり化学株式会社より購入）、
(#5) 4-（6-ペンチルキノリン-2-イル）フェノール（Ferroelectrics, 1993, 148, 139-145に従い製造）、
(#6) 4-[2-[4-(ジサイロキシ)-2, 3-ジフルオロフェニル]ピリミジン-5-イル]フェノール（特開平7-10847に従い製造）
実施例1
CD34陽性細胞の単離
CD34陽性細胞は以下に示す操作に従って単離した。
【００５５】
母親からインフォームド・コンセントが得られた正期産、正常妊娠分娩を対象とした。東京臍帯血バンクにて採取した移植対象外サンプル（採取量40 ml未満）、若しくは同ガイドラインに基づく方法で福士助産所（五所川原市）にて分娩後の胎盤及び臍帯から、抗凝固剤citrate-phosphate-dextrose液入りの採血バッグ(CBC-20,  ニッショー、大阪)を用いて採取した。
【００５６】
採取後48時間以内の臍帯血を5 mM EDTA-PBSを用いて約２倍に希釈後、Ficoll-Paque(Amersham Pharmacia Biotech AB, Uppsala, Sweden) 15 ml上に希釈試料20 mlを積層し、遠心分離(300 g, 30 min)した。Buffy coatを回収し、5 mM EDTA-PBSを用いて２回洗浄遠心(４℃, 250 g, 10 min)し、血小板を除去した。得られたlight-density細胞より、MACS磁気ビーズカラム法(Miltenyi Biotec, Germany)によりCD34陽性細胞を分離・精製した。Light-density細胞懸濁液にブロッキング試薬、抗CD34抗体を添加し、４℃、15分間インキュベートした。0.5% BSA-5 mM EDTA-PBSを用いて洗浄遠心(４℃、250 g, 10min)、  再懸濁後、マイクロビーズを添加し４℃、15分間インキュベートした。終了後、同様に洗浄、再懸濁し磁気ビーズカラムにかけ非吸着細胞を溶出した。プランジャーを用いて吸着細胞を回収し、別のカラムを用いて同様の操作を繰り返し、CD34陽性細胞とした。生細胞数は、トリパンブルーを用い血球算定版にて計数した。CD34細胞陽性率は、フローサイトメーターを用いた測定した。陽性率は、85−95%であった。
実施例2 
本発明化合物の巨核球前駆細胞の増殖促進作用の測定
イスコフ改変ダルベッコ培地（IMDM, Gibco BRL）に100 U/ml  ペニシリン(Gibco BRL, NY)、100μg/ml  ストレプトマイシン(Gibco BRL)、1 mM MEMピルビン酸ナトリウム(Gibco BRL)、1% MEMビタミン混合液(Gibco BRL)、1% MEM nonessential アミノ酸(Sigma, MO)、1x10-3 Mチオグリセロール(Sigma)、0.2 g/ml L-アスパラギン（和光純薬, 東京）、7.4μg/ml 塩化カルシウム(和光純薬)、0.2% ウシ血清アルブミン(bovin serum albumin, BSA, Sigma)を加えたIMDM混液に、造血因子として遺伝子組換えヒトトロンボポエチン50ng/ml（Biosource, ）、アプロチニン(Trasyol, バイエル薬品, 大阪) 2%、ヒト血漿15％及び被化合物をそれぞれ加えた培地を調製し、CD34陽性細胞を1×103 個/mlになるように懸濁した。この混合液を、24 wellsのプレート(Falcon, Becton Dickinson Labware, NJ)に300μl/wellになるように播き、37℃、5%CO2存在下 11−12日間培養した。
【００５７】
被検化合物は、DMSOに溶解し培地1 mlへの添加液量は1μlとし、各種濃度（10 nM〜100μM）を添加した。培養後アセトン・メタノール混液(2:1)で固定、乾燥後、コロニー数を測定した（図1）。
【００５８】
以上の結果から、本化合物はCD34陽性巨核球前駆細胞の増殖を促進することが判明した。
実施例3
液体培養法における本発明化合物の造血幹細胞に対する効果
CD34陽性細胞5×103個/mlを、TPO 50 ng/mlを含むBIT9500-IMDM無血清培地に懸濁し、24 wellsのプレート(Falcon)に500μl/wellになるように播いた。化合物（＃１，＃３，＃４，＃５）は、実施例1と同様に培養開始時DMSO添加量1μlとして10 nMになるように添加し、37℃、5%存在下14日間培養した。培養後細胞を回収し、有核生細胞数、フローサイトメーターによる表面抗原並びに実施例2同様に巨核球前駆細胞数の解析をそれぞれ行った（表1、図2、および図3）。なお、免疫学的表面抗原の測定には、FITC-CD34, PE-CD41, PC5-CD45を用いた。
【００５９】
その結果、本化合物は造血幹細胞から巨核球前駆細胞、巨核球への分化増殖を有意に増加させた。
【００６０】
【表１】
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【図面の簡単な説明】
【００６１】
【図１】図１は、本発明化合物の造血幹細胞から巨核球前駆細胞への増殖分化作用を示した図である。
【図２】図２は、液体培養法における本発明化合物の造血幹細胞に対する効果を検討し、巨核球の総細胞数を表したものである。
【図３】図３は、液体培養法における本発明化合物の造血幹細胞に対する効果を検討し、巨核球前駆細胞数を表したものである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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