(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
検体と、i)コレステロールエステル加水分解酵素およびコレステロール酸化酵素、または、ii)コレステロールエステル加水分解酵素、酸化型補酵素およびコレステロール脱水素酵素とを、アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物を含有する水性媒体中で反応させ過酸化水素または還元型補酵素を生成させること、および、生成した過酸化水素または還元型補酵素を測定することを含む検体中の高密度リポ蛋白中のコレステロールの測定方法。
【請求項２】
水性媒体が、さらに、ポリアニオン、胆汁酸誘導体、エチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン、ポリオキシエチレンアルキルアミンおよびポリオキシエチレンアルケニルアミンからなる群より選ばれる少なくとも一つの物質を含有する請求項１記載の方法。
【請求項３】
ポリアニオンが、デキストラン硫酸またはその塩である請求項２記載の方法。
【請求項４】
胆汁酸誘導体が、コール酸もしくはその塩、タウロコール酸もしくはその塩、グリココール酸もしくはその塩、リトコール酸もしくはその塩、デオキシコール酸もしくはその塩、ケノデオキシコール酸もしくはその塩、ウルソデオキシコール酸もしくはその塩、７−オキソリトコール酸もしくはその塩、１２−オキソリトコール酸もしくはその塩、１２−オキソケノデオキシコール酸もしくはその塩、７−オキソデオキシコール酸もしくはその塩、ヒオコール酸もしくはその塩、ヒオデオキシコール酸もしくはその塩、デヒドロコール酸もしくはその塩、一般式（Ｉ）
【化１】
0004796489.tif 000023
［式中、Ｒ１は、３−（３−コラミドプロピル）ジメチルアンモニオ基であり、Ｒ２は、水素原子または水酸基である］で表される化合物、および一般式（ＩＩ）
【化２】
0004796489.tif 000024
（Ｘは、水素原子または水酸基を表し、Ｒ３およびＲ４は、同一または異なって、置換もしくは非置換のアルキル基、または、置換もしくは非置換のアルカノイル基を表す）で表される化合物からなる群より選ばれる少なくとも一つの物質である請求項２または３記載の方法。
【請求項５】
水性媒体が、さらに、アルブミンを含有する請求項２〜４のいずれかに記載の方法。
【請求項６】
アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素ならびに過酸化水素測定用試薬を含有することを特徴とする高密度リポ蛋白中のコレステロール測定用試薬。
【請求項７】
アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素ならびに酸化型補酵素を含有することを特徴とする高密度リポ蛋白中のコレステロール測定用試薬。
【請求項８】
さらに、還元型補酵素測定用試薬を含有する請求項７記載の試薬。
【請求項９】
さらに、ポリアニオン、胆汁酸誘導体、エチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン、ポリオキシエチレンアルキルアミンおよびポリオキシエチレンアルケニルアミンからなる群より選ばれる少なくとも一つの物質を含有する請求項６〜８のいずれかに記載の試薬。
【請求項１０】
ポリアニオンが、デキストラン硫酸またはその塩である請求項９記載の試薬。
【請求項１１】
胆汁酸誘導体が、コール酸もしくはその塩、タウロコール酸もしくはその塩、グリココール酸もしくはその塩、リトコール酸もしくはその塩、デオキシコール酸もしくはその塩、ケノデオキシコール酸もしくはその塩、ウルソデオキシコール酸もしくはその塩、７−オキソリトコール酸もしくはその塩、１２−オキソリトコール酸もしくはその塩、１２−オキソケノデオキシコール酸もしくはその塩、７−オキソデオキシコール酸もしくはその塩、ヒオコール酸もしくはその塩、ヒオデオキシコール酸もしくはその塩、デヒドロコール酸もしくはその塩、一般式（Ｉ）
【化３】
0004796489.tif 000025
［式中、Ｒ１は、３−（３−コラミドプロピル）ジメチルアンモニオ基であり、Ｒ２は、水素原子または水酸基である］で表される化合物、および一般式（ＩＩ）
【化４】
0004796489.tif 000026
（Ｘは、水素原子または水酸基を表し、Ｒ３およびＲ４は、同一または異なって、置換もしくは非置換のアルキル基、または、置換もしくは非置換のアルカノイル基を表す）で表される化合物からなる群より選ばれる少なくとも一つの物質である請求項９または１０記載の試薬。
【請求項１２】
さらに、アルブミンを含有する請求項９〜１１のいずれかに記載の試薬。
【請求項１３】
第一試薬および第二試薬を含有するキットであって、過酸化水素測定用試薬を第一試薬および第二試薬に含有し、コレステロール酸化酵素を第二試薬に含有し、アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、および、コレステロールエステル加水分解酵素を、第一試薬、第二試薬のいずれかまたは両方に含有することを特徴とする高密度リポ蛋白中のコレステロール測定用キット。
【請求項１４】
第一試薬および第二試薬を含有するキットであって、酸化型補酵素を第一試薬に含有し、コレステロール脱水素酵素を第二試薬に含有し、アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、および、コレステロールエステル加水分解酵素を、第一試薬、第二試薬のいずれかまたは両方に含有することを特徴とする高密度リポ蛋白中のコレステロール測定用キット。
【請求項１５】
さらに、還元型補酵素測定用試薬を、第一試薬、第二試薬のいずれかまたは両方に含有する請求項１４記載のキット。
【請求項１６】
さらに、ポリアニオン、胆汁酸誘導体、エチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン、ポリオキシエチレンアルキルアミンおよびポリオキシエチレンアルケニルアミンからなる群より選ばれる少なくとも一つの物質を、第一試薬、第二試薬のいずれかまたは両方に含有する請求項１３〜１５のいずれかに記載のキット。
【請求項１７】
ポリアニオンが、デキストラン硫酸またはその塩である請求項１６記載のキット。
【請求項１８】
胆汁酸誘導体が、コール酸もしくはその塩、タウロコール酸もしくはその塩、グリココール酸もしくはその塩、リトコール酸もしくはその塩、デオキコール酸もしくはその塩、ケノデオキシコール酸もしくはその塩、ウルソデオキシコール酸もしくはその塩、７−オキソリトコール酸もしくはその塩、１２−オキソリトコール酸もしくはその塩、１２−オキソケノデオキシコール酸もしくはその塩、７−オキソデオキシコール酸もしくはその塩、ヒオコール酸もしくはその塩、ヒオデオキシコール酸もしくはその塩、デヒドロコール
酸もしくはその塩、一般式（Ｉ）
【化５】
0004796489.tif 000027
［式中、Ｒ１は、３−（３−コラミドプロピル）ジメチルアンモニオ基であり、Ｒ２は、水素原子または水酸基である］で表される化合物、および一般式（ＩＩ）
【化６】
0004796489.tif 000028
（Ｘは、水素原子または水酸基を表し、Ｒ３およびＲ４は、同一または異なって、置換もしくは非置換のアルキル基、または、置換もしくは非置換のアルカノイル基を表す）で表される化合物からなる群より選ばれる少なくとも一つの物質である請求項１６または１７記載のキット。
【請求項１９】
さらに、アルブミンを第一試薬、第二試薬のいずれかまたは両方に含有する請求項１６〜１８のいずれかに記載のキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】  本発明は、検体中の高密度リポ蛋白中のコレステロールの測定方法、測定用試薬および測定用キットに関する。
【背景技術】
【０００２】  生体中リポ蛋白は、その比重により高密度リポ蛋白（以下、ＨＤＬと略記する）、低密度リポ蛋白（以下、ＬＤＬと略記する）、超低密度リポ蛋白（以下、ＶＬＤＬと略記する）、カイロミクロン（以下、ＣＭと略記する）に分類されており、それぞれ主にアポ蛋白の種類の違いによって生体中での働きが大きく異なっており、脂質組成もさまざまである。その中で、ＨＤＬは、動脈壁を含めた各組織からコレステロールを受け取るために細胞内に蓄積したコレステロールの除去作用に関係し、冠動脈硬化症をはじめとする各種動脈硬化症の危険予防因子であり、その血中レベルは動脈硬化性疾患の発症予知の有用な指針となることが知られている。【０００３】  従来のＨＤＬ中のコレステロール（以下、ＨＤＬコレステロールと略記する）の測定法は、超遠心法、免疫化学的方法、電気泳動法、沈殿法等による分画操作とコレステロール定量操作の２段階からなる。しかしながら、分画操作は、操作が煩雑であり、長時間を要するものであり、また、安全性の点でも問題があった。従って、これらの分離操作を伴う測定法は極めて効率が悪く、実用化に適さない方法であった。【０００４】  近年、上記の問題を解決するために、種々の測定法が報告されている。例えば、血清または血漿を、コレステロールエステラーゼ、コレステロールオキシダーゼ、および、胆汁酸塩または胆汁酸誘導体またはジオクチルスルホサクシネートを含有する緩衝液中で当該酵素と反応させ、ＶＬＤＬおよびＬＤＬ中のコレステロールをＨＤＬコレステロールに先駆けて反応させ、生成した過酸化水素を測定した後、非イオン系のポリオキシエチレンオキシド基含有界面活性剤を反応液に添加し、ＨＤＬコレステロールと当該酵素とを反応させ、ＨＤＬコレステロールを特異的に分別定量する方法（特許文献１参照）、血清を、特定のｐＨおよび特定の温度の下、膵臓由来のコレステロールエステラーゼ、コレステロールオキシダーゼ、胆汁酸群の界面活性剤、および、非イオン系界面活性剤を含有する緩衝液中で当該酵素と反応させることによりＨＤＬコレステロールを測定する方法（特許文献２参照）が知られている。特許文献２に記載の測定法では、まず、ＬＤＬコレステロールと当該酵素との反応が進行し、次いで、ＨＤＬコレステロールと当該酵素との反応が進行し、ＨＤＬコレステロールの測定が可能となる。しかしながら、これらの測定法は、測定に長時間を要し、また、必ずしも、ＨＤＬコレステロールに特異的な測定法ではなかった。【０００５】  ＨＤＬ以外のリポ蛋白を凝集させてＨＤＬコレステロールを測定する方法としては、例えばデキストラン硫酸等のＨＤＬ以外のリポ蛋白を凝集させる試薬、２価の金属塩、および、化学的に修飾された酵素を用いる測定法（特許文献３参照）、ポリアニオン等のＨＤＬ以外のリポ蛋白と複合体を形成する試薬と、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレン縮合物等のリポ蛋白を溶解しない界面活性剤とを用いる測定法（特許文献４参照）、デキストラン硫酸等のポリアニオン、２価の金属塩、特定の非イオン性界面活性剤および試料由来のアルブミンとは別異のアルブミンとを用いる測定法（特許文献５参照）、血清または血漿を、リポ蛋白分画剤（デキストラン���酸等のポリアニオンとマグネシウムイオン等の２価陽イオンとの組み合わせ）を含む溶液で処理し、得られた混合液を固体および液体の分離処理することなく、アニオン性界面活性剤（アルキルスルホン酸または胆汁酸もしくはその誘導体）の存在下に、コレステロールエステラーゼおよびコレステロールオキシダーゼと反応させ、生成した過酸化水素を測定することを特徴とする血清または血漿中のＨＤＬコレステロールを測定する方法（特許文献６参照）等が知られている。【０００６】  しかしながら、これらのＨＤＬ以外のリポ蛋白を凝集させるＨＤＬコレステロール測定法においては、従来の基準法と良好な相関性があるものの、反応で生成する凝集物による濁りに起因する不正確性、反応セルのアルカリ洗浄の際に、反応液中の金属塩との反応で生成する金属水酸化物の析出による自動分析装置への過度の負荷等の問題がある。
ＨＤＬ以外のリポ蛋白を凝集させずにＨＤＬコレステロールを測定する方法としては、例えば生体試料と、膵臓由来のコレステロールエステラーゼおよびコレステロールオキシダーゼとを、胆汁酸もしくはその塩およびアルブミン存在下に反応させ、当該酵素反応により消費または生成する化合物を測定することによる生体試料中のＨＤＬコレステロールの測定方法（特許文献７参照）、ＨＤＬ画分に対して反応選択性をもつＨＬＢ値が１６以上の非イオン性界面活性剤の存在下に、検体と、ＨＤＬ画分に優先的に作用するリポプロテインリパーゼおよび／またはコレステロールエステラーゼならびにコレステロール酸化酵素とを反応させて、検体中のＨＤＬコレステロールを測定する方法（特許文献８参照）等が知られている。また、アシルポリオキシエチレンソルビタンエステルによりＨＤＬ以外のリポ蛋白中のコレステロールを優先的に過酸化水素へ変換し、生成した過酸化水素を消去した後、ポリオキシエチレンアルキルエーテルの添加により、ＨＤＬコレステロールを酵素的に測定する方法（特許文献９参照）も知られている。【０００７】  しかしながら、これらのＨＤＬ以外のリポ蛋白を凝集させないＨＤＬコレステロールの測定法においては、ＨＤＬ以外のリポ蛋白中コレステロールの不完全な消去や、ＨＤＬ以外のリポ蛋白中のコレステロールに対する非特異反応に起因する測定値の不正確性が問題となる場合がある。
【特許文献１】特開昭６２−６９９９９号公報
【特許文献２】特開昭６３−１２６４９８号公報
【特許文献３】特開平８−１３１１９７号公報
【特許文献４】特開平８−２０１３９３号公報
【特許文献５】特開平９−２８５２９８号公報
【特許文献６】特開平８−１１６９９６号公報
【特許文献７】国際公開第９７／４０３７６号パンフレット
【特許文献８】国際公開第００／５２４８０号パンフレット
【特許文献９】特開平９−２９９号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】  本発明の目的は、簡便で、かつ、正確な測定ができるＨＤＬコレステロールの測定方法、測定用試薬および測定用キットを提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明は、下記［１］〜［１９］に関する。
［１］検体と、i)コレステロールエステル加水分解酵素およびコレステロール酸化酵素、または、ii)コレステロールエステル加水分解酵素、酸化型補酵素およびコレステロール脱水素酵素とを、アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェート、ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩、ポリオキシエチレン酸アミド、アルキルアミンオキシドおよびアルキルプロピレンジアミン誘導体からなる群より選ばれる少なくとも一つの物質を含有する水性媒体中で反応させ過酸化水素または還元型補酵素を生成させること、および、生成した過酸化水素または還元型補酵素を測定することを含む検体中の高密度リポ蛋白中のコレステロールの測定方法。
【００１０】  ［２］水性媒体が、さらに、ポリアニオン、胆汁酸誘導体、エチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン、ポリオキシエチレンアルキルアミンおよびポリオキシエチレンアルケニルアミンからなる群より選ばれる少なくとも一つの物質を含有する［１］記載の方法。
［３］ポリアニオンが、デキストラン硫酸またはその塩である［２］記載の方法。【００１１】  ［４］胆汁酸誘導体が、コール酸もしくはその塩、タウロコール酸もしくはその塩、グリココール酸もしくはその塩、リトコール酸もしくはその塩、デオキシコール酸もしくはその塩、ケノデオキシコール酸もしくはその塩、ウルソデオキシコール酸もしくはその塩、７−オキソリトコール酸もしくはその塩、１２−オキソリトコール酸もしくはその塩、１２−オキソケノデオキシコール酸もしくはその塩、７−オキソデオキシコール酸もしくはその塩、ヒオコール酸もしくはその塩、ヒオデオキシコール酸もしくはその塩、デヒドロコール酸もしくはその塩、一般式（Ｉ）【００１２】
【化１】
0004796489.tif 000002
【００１３】［式中、Ｒ１は、３−（３−コラミドプロピル）ジメチルアンモニオ基であり、Ｒ２は、水素原子または水酸基である］で表される化合物、および一般式（ＩＩ）【００１４】
【化２】
0004796489.tif 000003
【００１５】（Ｘは、水素原子または水酸基を表し、Ｒ３およびＲ４は、同一または異なって、置換もしくは非置換のアルキル基、または、置換もしくは非置換のアルカノイル基を表す）で表される化合物からなる群より選ばれる少なくとも一つの物質である［２］または［３］記載の方法。
［５］水性媒体が、さらに、アルブミンを含有する［２］〜［４］のいずれかに記載の方法。【００１６】  ［６］アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェート、ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩、ポリオキシエチレン酸アミド、アルキルアミンオキシドおよびアルキルプロピレンジアミン誘導体からなる群より選ばれる少なくとも一つの物質、コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素ならびに過酸化水素測定用試薬を含有することを特徴とする高密度リポ蛋白中のコレステロール測定用試薬。【００１７】  ［７］アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェート、ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩、ポリオキシエチレン酸アミド、アルキルアミンオキシドおよびアルキルプロピレンジアミン誘導体からなる群より選ばれる少なくとも一つの物質、コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素ならびに酸化型補酵素を含有することを特徴とする高密度リポ蛋白中のコレステロール測定用試薬。【００１８】  ［８］さらに、還元型補酵素測定用試薬を含有する［７］記載の試薬。
［９］さらに、ポリアニオン、胆汁酸誘導体、エチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン、ポリオキシエチレンアルキルアミンおよびポリオキシエチレンアルケニルアミンからなる群より選ばれる物質を少なくとも一つ含有す［６］〜［８］のいずれかに記載の試薬。【００１９】  ［１０］ポリアニオンが、デキストラン硫酸またはその塩である［９］記載の試薬。
［１１］胆汁酸誘導体が、コール酸もしくはその塩、タウロコール酸もしくはその塩、グリココール酸もしくはその塩、リトコール酸もしくはその塩、デオキシコール酸もしくはその塩、ケノデオキシコール酸もしくはその塩、ウルソデオキシコール酸もしくはその塩、７−オキソリトコール酸もしくはその塩、１２−オキソリトコール酸もしくはその塩、１２−オキソケノデオキシコール酸もしくはその塩、７−オキソデオキシコール酸もしくはその塩、ヒオコール酸もしくはその塩、ヒオデオキシコール酸もしくはその塩、デヒドロコール酸もしくはその塩、一般式（Ｉ）【００２０】
【化３】
0004796489.tif 000004
【００２１】［式中、Ｒ１は、３−（３−コラミドプロピル）ジメチルアンモニオ基であり、Ｒ２は、水素原子または水酸基である］で表される化合物、および一般式（ＩＩ）【００２２】
【化４】
0004796489.tif 000005
【００２３】（Ｘは、水素原子または水酸基を表し、Ｒ３およびＲ４は、同一または異なって、置換もしくは非置換のアルキル基、または、置換もしくは非置換のアルカノイル基を表す）で表される化合物からなる群より選ばれる少なくとも一つの物質である［９］または［１０］記載の試薬。
［１２］さらに、アルブミンを含有する［９］〜［１１］のいずれかに記載の試薬。【００２４】  ［１３］第一試薬および第二試薬を含有するキットであって、過酸化水素測定用試薬を第一試薬および第二試薬に含有し、コレステロール酸化酵素を第二試薬に含有し、アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェート、ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩、ポリオキシエチレン酸アミド、アルキルアミンオキシドおよびアルキルプロピレンジアミン誘導体からなる群より選ばれる少なくとも一つの物質、および、コレステロールエステル加水分解酵素を、第一試薬、第二試薬のいずれかまたは両方に含有することを特徴とする高密度リポ蛋白中のコレステロール測定用キット。【００２５】
［１４］第一試薬および第二試薬を含有するキットであって、酸化型補酵素を第一試薬に含有し、コレステロール脱水素酵素を第二試薬に含有し、アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェート、ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩、ポリオキシエチレン酸アミド、アルキルアミンオキシドおよびアルキルプロピレンジアミン誘導体からなる群より選ばれる少なくとも一つの物質、および、コレステロールエステル加水分解酵素を、第一試薬、第二試薬のいずれかまたは両方に含有することを特徴とする高密度リポ蛋白中のコレステロール測定用キット。
［１５］さらに、還元型補酵素測定用試薬を、第一試薬、第二試薬のいずれかまたは両方に含有する［１４］記載のキット。
［１６］さらに、ポリアニオン、胆汁酸誘導体、エチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン、ポリオキシエチレンアルキルアミンおよびポリオキシエチレンアルケニルアミンからなる群より選ばれる少なくとも一つの物質を、第一試薬、第二試薬のいずれかまたは両方に含有する［１３］〜［１５］のいずれかに記載のキット。
【００２６】  ［１７］ポリアニオンが、デキストラン硫酸またはその塩である［１６］記載のキット。
［１８］胆汁酸誘導体が、コール酸もしくはその塩、タウロコール酸もしくはその塩、グリココール酸もしくはその塩、リトコール酸もしくはその塩、デオキシコール酸もしくはその塩、ケノデオキシコール酸もしくはその塩、ウルソデオキシコール酸もしくはその塩、７−オキソリトコール酸もしくはその塩、１２−オキソリトコール酸もしくはその塩、１２−オキソケノデオキシコール酸もしくはその塩、７−オキソデオキシコール酸もしくはその塩、ヒオコール酸もしくはその塩、ヒオデオキシコール酸もしくはその塩、デヒドロコール酸もしくはその塩、一般式（Ｉ）【００２７】
【化５】
0004796489.tif 000006
【００２８】［式中、Ｒ１は、３−（３−コラミドプロピル）ジメチルアンモニオ基であり、Ｒ２は、水素原子または水酸基である］で表される化合物、および一般式（ＩＩ）【００２９】
【化６】
0004796489.tif 000007
【００３０】（Ｘは、水素原子または水酸基を表し、Ｒ３およびＲ４は、同一または異なって、置換もしくは非置換のアルキル基、または、置換もしくは非置換のアルカノイル基を表す）で表される化合物からなる群より選ばれる少なくとも一つの物質である［１６］または［１７］記載のキット。
［１９］さらに、アルブミンを第一試薬、第二試薬のいずれかまたは両方に含有する［１６］〜［１８］のいずれかに記載のキット。
【発明の効果】
【００３１】本発明により、簡便で、かつ、正確なＨＤＬコレステロールの測定方法、測定用試薬、および、測定用キットが提供される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３２】  本発明のＨＤＬコレステロールの測定方法は、ＨＤＬ以外のリポ蛋白中のコレステロールを消去することなく、ＨＤＬコレステロールを測定する方法である。
本発明の測定方法において用いられる検体としては、例えば全血、血漿、血清、髄液、唾液、羊水、尿、汗、膵液等が挙げられるが、血漿および血清が好ましい。【００３３】  本発明におけるコレステロールエステル加水分解酵素としては、コレステロールエステルを加水分解する能力を有する酵素であれば特に限定はなく、例えば動物、植物または微生物由来のコレステロールエステラーゼ、リポプロテインリパーゼの他、遺伝子工学的な手法により製造されるコレステロールエステラーゼ、リポプロテインリパーゼ等も用いることができる。【００３４】  コレステロールエステル加水分解酵素としては、無修飾のコレステロールエステル加水分解酵素も、化学的に修飾されたコレステロールエステル加水分解酵素も使用することができる。また、コレステロールエステル加水分解酵素としては市販品を使用することもできる。
市販されているコレステロールエステル加水分解酵素としては、コレステロールエステラーゼ“Ａｍａｎｏ”２（ＣＨＥ２；天野エンザイム社製）、コレステロールエステラーゼ“Ａｍａｎｏ”３（ＣＨＥ３；天野エンザイム社製）、リポプロテインリパーゼ（ＬＰＬ３１１；東洋紡製社製）、リポプロテインリパーゼ“Ａｍａｎｏ”６（ＬＰＬ６；天野エンザイム社製）、４３ｋＤａエステラーゼ（天野エンザイム社製）、コレステロールエステラーゼ［ＣＯＥ３１３（化学的に修飾されたコレステロールエステラーゼ）；東洋紡績社製］等が挙げられる。また、本発明においては、２種類以上のコレステロールエステル加水分解酵素を組み合わせて用いることもできる。【００３５】  コレステロールエステル加水分解酵素の化学修飾において当該酵素を修飾する基（化学修飾基）としては、例えばポリエチレングリコールを主成分とする基、ポリプロピレングリコールを主成分とする基、ポリプロピレングリコールとポリエチレングリコールの共重合体を有する基、水溶性多糖類を含有する基、スルホプロピル基、スルホブチル基、ポリウレタン基、キレート機能を有する基等が挙げられるが、ポリエチレングリコールを主成分とする基が好ましい。水溶性多糖類としては、例えばデキストラン、プルラン、可溶性デンプン等が挙げられる。【００３６】  コレステロールエステル加水分解酵素を化学的に修飾するための試薬（化学修飾剤）としては、上記の化学修飾基と、酵素のアミノ基、カルボキシル基、スルフヒドリル基等と反応し得る官能基または構造とを併せ持つ化合物等が挙げられる。酵素中のアミノ基と反応し得る官能基または構造としては、例えばカルボキシル基、活性エステル基（Ｎ−ヒドロキシサクシンイミド基等）、酸無水物、酸塩化物、アルデヒド、エポキシド基、１，３−プロパンスルトン、１，４−ブタンスルトン等が挙げられる。酵素中のカルボキシル基と反応し得る官能基または構造としては、例えばアミノ基等が挙げられる。酵素中のスルフヒドリル基と反応性がある基または構造としては、例えばマレイミド基、ジスルフィド、α−ハロエステル（α−ヨードエステル等）等が挙げられる。【００３７】  化学修飾剤として、市販品を使用することもできる。市販されている化学修飾剤としては、ポリエチレングリコールを主成分とする基とＮ−ヒドロキシサクシンイミド基とを有するサンブライトＶＦＭ−４１０１、サンブライトＭＥ−０５０ＡＳ、サンブライトＤＥ−０３０ＡＳ（いずれも日本油脂社製）、ポリアルキレングリコールを主成分とする基と酸無水物構造とを有するサンブライトＡＫＭシリーズ（例えば、サンブライトＡＫＭ−１５１０等）、サンブライトＡＤＭシリーズ、サンブライトＡＣＭシリーズ（いずれも日本油脂社製）、ポリエチレングリコールを主成分とする基とエポキシド基とを有するＥＰＯＸ−３４００、Ｍ−ＥＰＯＸ−５０００（いずれもＳｈｅａｗａｔｅｒ  Ｐｏｌｙｍｅｒｓ社製）、キレート機能を有する基と酸無水物構造とを有するジエチレントリアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’’，Ｎ’’−ペンタ無水二酢酸（ＤＴＰＡ  ａｎｈｙｄｒｉｄｅ；同仁化学社製）等が挙げられる。【００３８】  コレステロールエステル加水分解酵素の化学修飾は、例��ば以下の方法で行うことができるが、本方法に限定されるものではない。まず、コレステロールエステル加水分解酵素をｐＨ８．０以上の緩衝液（例えばＨＥＰＥＳ緩衝液）に溶解し、０〜５５℃で０．０１〜５００倍モル量の化学修飾剤を添加し、５分間〜５時間攪拌する。実際の酵素反応においては、化学的に修飾されたコレステロールエステル加水分解酵素として、この反応液そのもののみならず、必要に応じて限外濾過膜等により未反応の化学修飾剤等を除去したものも、使用することもできる。【００３９】  本反応の方法に用いられるコレステロールエステル加水分解酵素の濃度としては、本発明のＨＤＬコレステロールの測定を可能とする濃度であれば特に制限はないが、反応液中で０．０１〜４００Ｕ／ｍＬの濃度であることが好ましく、０．０２〜２００Ｕ／ｍＬであることがより好ましい。
本発明におけるコレステロール酸化酵素としては、コレステロールを酸化して過酸化水素を生成する能力を有する酵素であれば特に制限はなく、例えば動物、植物または微生物由来のコレステロールオキシダーゼの他、遺伝子工学的な手法により製造されるコレステロールオキシダーゼ等も用いることができ、コレステロールオキシダーゼ“Ａｍａｎｏ”１（ＣＨＯＤ１；天野エンザイム社製）、コレステロールオキシダーゼ（ＣＯ−ＰＥ；キッコーマン社製）、コレステロールオキシダーゼ（ＣＯＯ３２１；東洋紡績社製）、コレステロールオキシダーゼ協和（協和醗酵社製）等の市販品を用いることもできる。また、本発明においては、２種類以上のコレステロール酸化酵素を組み合わせて用いることもできる。【００４０】  コレステロール酸化酵素は、無修飾の酵素であっても、化学的に修飾された酵素であってもよい。化学的に修飾されたコレステロール酸化酵素は、例えば前述の化学修飾剤を用いて、前述の化学修飾方法により作製することができる。
本反応の方法に用いられるコレステロール酸化酵素の濃度としては、本発明のＨＤＬコレステロールの測定を可能とする濃度であれば特に制限はないが、反応液中で０．０１〜４００Ｕ／ｍＬの濃度であることが好ましく、０．０２〜２００Ｕ／ｍＬの濃度であることがより好ましい。【００４１】  本発明におけるコレステロール脱水素酵素としては、酸化型補酵素の存在下にコレステロールを酸化して還元型補酵素を生成する能力を有する酵素であれば特に制限はなく、例えば動物、植物または微生物由来のコレステロールデヒドロゲナーゼの他、遺伝子工学的な手法により製造されるコレステロールデヒドロゲナーゼ等も用いることができる。コレステロールデヒドロゲナーゼ“Ａｍａｎｏ”５（ＣＨＤＨ５；天野エンザイム社製）等の市販品を用いることもできる。また、本発明においては、２種類以上のコレステロール脱水素酵素を組み合わせて用いることもできる。コレステロール脱水素酵素は、無修飾の酵素であっても、化学的に修飾された酵素であってもよい。化学的に修飾されたコレステロール脱水素酵素は、例えば前述の化学修飾剤を用いて、前述の化学修飾方法により作製することができる。【００４２】  本反応の方法に用いられるコレステロール脱水素酵素の濃度としては、本発明のＨＤＬコレステロールの測定を可能とする濃度であれば特に制限はないが、反応液中で０．０１〜４００Ｕ／ｍＬの濃度であることが好ましく、０．０２〜２００Ｕ／ｍＬの濃度であることがより好ましい。
本発明のコレステロール脱水素酵素を用いた測定法においては、酸化型補酵素が使用される。酸化型補酵素としては、例えばＮＡＤ、ＮＡＤＰ、ｔｈｉｏ−ＮＡＤ、ｔｈｉｏ−ＮＡＤＰ等が挙げられる。【００４３】  本発明において用いられるアルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェート、ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩、ポリオキシエチレン酸アミド、アルキルアミンオキシド、アルキルプロピレンジアミン誘導体としては、本発明のＨＤＬコレステロールの測定を可能とするものであれば特に制限はない。【００４４】  アルキルアミンオキシドとしては、例えばアルキルジメチルアミンオキシド、ジヒドロキシエチルアルキルアミンオキシド、ポリオキシエチレンジメチルアミンオキシド等が挙げられる。アルキルプロピレンジアミン誘導体としては、アルキルプロピレンジアミン、ポリオキシエチレンアルキルプロピレンジアミン等が挙げられる。
アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェート、ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩、ポリオキシエチレン酸アミド、アルキルアミンオキシドおよびアルキルプロピレンジアミン誘導体におけるアルキルとしては、直鎖または分枝状の炭素数６〜３０の、例えばヘキシル、ヘプチル、オクチル、イソオクチル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシル（ラウリル）、トリデシル、テトラデシル（ミリスチル）、ペンタデシル、ヘキサデシル（セチル）、ヘプタデシル、オクタデシル（ステアリル）、ノナデシル、イコシル、ヘネイコシル、ドコシル（ベヘニル）、トリコシル、テトラコシル、ペンタコシル、ヘキサコシル、ヘプタコシル、オクタコシル、ノナコシル、トリアコンシル等が挙げられる。【００４５】  アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェート、ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩、ポリオキシエチレン酸アミド、ポリオキシエチレンジメチルアミンオキシドおよびポリオキシエチレンアルキルプロピレンジアミンにおけるオキシエチレン鎖の重合度としては、好ましくは１〜１００、より好ましくは１〜５０である。【００４６】  アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物の具体例（製品を含む）としては、ＢＬＡＵＮＯＮ  ＳＡＰ３００４、ＢＬＡＵＮＯＮ  ＳＡＰ３０１０（牛脂アミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物；いずれも青木油脂社製）、Ｃ１６ＥＯ３０ＰＯ１０［セチルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物（オキシエチレン鎖の重合度：３０；オキシプロピレン鎖の重合度：１０）日本油脂社製］、Ｃ１６ＥＯ３０ＰＯ２０［セチルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物（オキシエチレン鎖の重合度：３０；オキシプロピレン鎖の重合度：２０）日本油脂社製］、Ｃ１６ＥＯ４０ＰＯ１０［セチルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物（オキシエチレン鎖の重合度：４０；オキシプロピレン鎖の重合度：１０）日本油脂社製］、Ｃ１６ＥＯ２０ＰＯ１０［セチルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物（オキシエチレン鎖の重合度：２０；オキシプロピレン鎖の重合度：１０）日本油脂社製］等が挙げられる。【００４７】  ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェートの具体例（製品）としては、例えばレベロンＡ−６２５Ｘ（一方社油脂社製）、ミグノールＰＡ−３０（一方社油脂社製）、ニューポールＰＥ−６１（三洋化成社製）等が挙げられる。
ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩の具体例（製品）としては、ビスノールＳＫ（一方社油脂社製）等が挙げられる。【００４８】  ポリオキシエチレン酸アミドの具体例（製品）としては、例えばニッコールＴＡＭＤＳ１５（日光ケミカルズ社製）、ナイミッドＭＴ−２１５（日本油脂社製）等が挙げられる。
アルキルアミンオキシドの具体例（製品）としては、例えばユニセーフＡ−ＬＥ（ジヒドロキシエチルラウリルアミンオキシド；日本油脂社製）、ユニセーフＡ−ＬＭ（アルキルジメチルアミンオキシド；日本油脂社製）、ユニセーフＡ−ＬＹ（ポリオキシエチレンヤシ油アルキルジメチルアミンオキシド；日本油脂社製）等が挙げられる。【００４９】  アルキルプロピレンジアミン誘導体の具体例（製品）としては、例えばＢＬＡＵＮＯＮ  ＤＴ０３、ＢＬＡＵＮＯＮ  ＤＴ１５（アルキルプロピレンジアミン；いずれも青木油脂社製）、アスファゾール＃１０（ポリオキシエチレン牛脂プロピレンジアミン；日本油脂社製）等が挙げられる。
また、本発明においては、アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェート、ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩、ポリオキシエチレン酸アミド、アルキルアミンオキシドおよびアルキルプロピレンジアミン誘導体からなる群より選ばれる少なくとも一つの物質を使用すればよいが、任意に組み合わせて複数使用することもできる。本発明のＨＤＬコレステロールの測定方法における、アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェート、ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩、ポリオキシエチレン酸アミド、アルキルアミンオキシドおよびアルキルプロピレンジアミン誘導体からなる群から選ばれる少なくとも一つの物質の濃度としては、本発明のＨＤＬコレステロールの測定を可能とする濃度であれば特に制限はないが、反応液中の濃度が０．０００１〜１％であることが好ましく、０．００１〜０．１％がより好ましい。【００５０】  本発明において用いられるポリアニオンとしては、本発明のＨＤＬコレステロールの測定を可能とするポリアニオンであれば特に制限はなく、例えばデキストラン硫酸もしくはその塩、ヘパリンもしくはその塩、リンタングステン酸またはその塩、硫酸化シクロデキストリンまたはその塩、硫酸化オリゴ糖またはその塩等が挙げられるが、デキストラン硫酸もしくはその塩が好ましい。デキストラン硫酸としては、例えば分子量が４万、８万、２０万、５０万、１００万、２００万等のデキストラン硫酸が挙げられる。硫酸化オリゴ糖としては、例えば硫酸化アガロース、硫酸化トレハロース、コンドロイチン硫酸等が挙げられる。塩としては、例えばナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩、アンモニウム塩、マグネシウム塩等が挙げられる。また、本発明においては、ポリアニオンを２種以上用いてもよい。本発明のＨＤＬコレステロールの測定におけるポリアニオンの濃度としては、本発明のＨＤＬコレステロールの測定を可能とする濃度であれば特に制限はないが、反応液中の濃度が０．００１〜１０％であることが好ましく、０．０１〜１％がより好ましい。【００５１】  本発明における胆汁酸誘導体としては、本発明のＨＤＬコレステロールの測定を可能とする胆汁酸誘導体であれば特に制限はないが、例えば陰イオン性界面活性作用を有する胆汁酸誘導体、両性界面活性作用を有する胆汁酸誘導体、非イオン性界面活性作用を有する胆汁酸誘導体等が挙げられる。
陰イオン性界面活性作用を有する胆汁酸誘導体としては、例えばコール酸もしくはその塩、タウロコール酸もしくはその塩、グリココール酸もしくはその塩、リトコール酸もしくはその塩、デオキシコール酸もしくはその塩、ケノデオキシコール酸もしくはその塩、ウルソデオキシコール酸もしくはその塩、７−オキソリトコール酸もしくはその塩、１２−オキソリトコール酸もしくはその塩、１２−オキソケノデオキシコール酸もしくはその塩、７−オキソデオキシコール酸もしくはその塩、ヒオコール酸もしくはその塩、ヒオデオキシコール酸もしくはその塩、デヒドロコール酸もしくはその塩等が挙げられる。塩としては、例えばアンモニウム塩、リチウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩、カルシウム塩等が挙げられる。陰イオン性界面活性作用を有する胆汁酸誘導体の濃度としては、本発明のＨＤＬコレステロールの測定を可能とする濃度であれば特に制限はないが、反応液中の濃度が０．００１〜１０％であることが好ましく、０．０１〜１％がより好ましい。【００５２】  両性界面活性作用を有する胆汁酸誘導体としては、例えば一般式（Ｉ）【００５３】
【化７】
0004796489.tif 000008
【００５４】［式中、Ｒ１は、３−（３−コラミドプロピル）ジメチルアンモニオ基であり、Ｒ２は、水素原子または水酸基である］で表される化合物［以下、化合物（Ｉ）という］等が挙げられる。以下、Ｒ２が水素原子である化合物（Ｉ）をＣＨＡＰＳと、Ｒ２が水酸基である化合物（Ｉ）をＣＨＡＰＳＯとよぶ。両性界面活性作用を有する胆汁酸誘導体の濃度としては、本発明のＨＤＬコレステロールの測定を可能とする濃度であれば特に制限はないが、反応液中の濃度が０．００１〜１０％であることが好ましく、０．０１〜１％がより好ましい。【００５５】  非イオン性界面活性作用を有する胆汁酸誘導体としては、例えば一般式（ＩＩ）【００５６】
【化８】
0004796489.tif 000009
【００５７】（Ｘは、水素原子または水酸基を表し、Ｒ３およびＲ４は、同一または異なって、置換もしくは非置換のアルキル、または、置換もしくは非置換のアルカノイルを表す）で表される化合物［以下、化合物（ＩＩ）という］等が挙げられる。アルキル、アルカノイルにおけるアルキルとしては、直鎖または分枝状の炭素数１〜１０の、例えばメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル等が挙げられる。置換アルキルおよび置換アルカノイルにおける置換基としては、例えば水酸基、ハロゲン原子等が挙げられる。ハロゲン原子は、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素の各原子を意味する。化合物（ＩＩ）のうち、Ｒ３およびＲ４が共に、【００５８】
【化９】
0004796489.tif 000010
【００５９】（以下、置換基Ａという）である化合物が好ましい。以下、Ｘ、Ｒ３およびＲ４がそれぞれ、水素原子、置換基Ａおよび置換基Ａである化合物をｄｅｏｘｙ−ＢＩＧＣＨＡＰ、水酸基、置換基Ａおよび置換基Ａである化合物をＢＩＧＣＨＡＰという。非イオン性界面活性を有する胆汁酸誘導体の濃度としては、本発明のＨＤＬコレステロールの測定を可能とする濃度であれば特に制限はないが、反応液中の濃度が０．００１〜１０％であることが好ましく、０．０１〜１％がより好ましい。本発明においては、胆汁酸誘導体を２種類以上用いても良い。【００６０】  エチレンジアミンテトラポリオキシアルキレンとしては、例えばエチレンジアミンポリオキシプロピレンポリオキシエチレン縮合物、エチレンジアミンテトラポリオキシエチレン、エチレンジアミンポリオキシプロピレンなどが挙げられる。エチレンジアミンテトラポリオキシアルキレンの具体例（製品を含む）としては、例えばアデカプルロニックＴＲ７０４、アデカプルロニックＴＲ７０１、アデカプルロニックＴＲ９１３Ｒ（いずれもエチレンジアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物；旭電化社製）、ユニルーブ３２ＴＹ−６５ＢＩ（エチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン；日本油脂社製）、エチレンジアミンＰＯ５２ＥＯ６０（オキシエチレン鎖の重合度の総和：６０；オキシプロピレン鎖の重合度の総和：５２；日本油脂社製）等が挙げられる。エチレンジアミンテトラポリオキシアルキレンの重合数は、好ましくは１〜１００、より好ましくは１〜６０である。本発明においては、エチレンジアミンテトラポリオキシアルキレンを２種以上用いてもよい。エチレンジアミンテトラポリオキシアルキレンの濃度としては、本発明のＨＤＬコレステロールの測定を可能とする濃度であれば特に制限はないが、反応液中の濃度が０．００１〜１０％であることが好ましく、０．０１〜１％がより好ましい。ポリオキシエチレンアルキルアミンおよびポリオキシエチレンアルケニルアミンとしては、例えば一般式（ＩＩＩ）【００６１】
【化１０】
0004796489.tif 000011
【００６２】［式中、Ｒは直鎖または分岐状のアルキル基またはアルケニル基を表し、Ｘは水素原子または（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＨを表し、ｍおよびｎは同一または異なって、１〜１００の整数を表し、ｍ＋ｎは２〜２００の整数である］で表される化合物［以下、化合物（ＩＩＩ）という］が挙げられ、化合物（ＩＩＩ）におけるアルキルとしては、直鎖または分枝状の炭素数６〜３０の、例えばヘキシル、ヘプチル、オクチル、イソオクチル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシル（ラウリル）、トリデシル、テトラデシル（ミリスチル）、ペンタデシル、ヘキサデシル（セチル）、ヘプタデシル、オクタデシル（ステアリル）、ノナデシル、イコシル、ヘネイコシル、ドコシル（ベヘニル）、トリコシル、テトラコシル、ペンタコシル、ヘキサコシル、ヘプタコシル、オクタコシル、ノナコシル、トリアコンシル等が挙げられ、化合物（ＩＩＩ）におけるアルケニルとしては、直鎖または分枝上の炭素数６〜３０の、例えばヘキセニル、ヘプテニル、オクテニル、ノネニル、デセニル、シトロネリル、ウンデセニル、ドデセニル、トリデセニル、テトラデセニル、ペンタデセニル、ヘキサデセニル、ヘプタデセニル、オレイル、ノナデセニル、エイコセニル、ヘンエイコセニル、ドコセニル、トリコセニル、テトラコセニル、ペンタコセニル、ヘキサコセニル、ヘプタコセニル、オクタコセニル、ノナコセニル、トリアコンテニル等が挙げられる。【００６３】  ポリオキシエチレンアルキルアミンまたはポリオキシエチレンアルケニルアミンの具体例（製品）としては、例えばナイミーンＬ２０１（オキシエチレンドデシルアミン；日本油脂社製）、ナイミーンＬ２０７（ポリオキシエチレンドデシルアミン；日本油脂社製）、ナイミーンＳ２０４、ナイミーンＳ２１０（ポリオキシエチレンオクタデシルアミン；日本油脂社製）、ニューコールＯＤ４２０（ポリオキシエチレンオクタデシルアミン；日本乳化剤社製）、パイオニンＤ３１０４（ポリオキシエチレンラウリルアミン；竹本油脂社製）、パイオニンＤ３１１０（ポリオキシエチレンラウリルアミン；竹本油脂社製）、パイオニンＤ３６０５［ポリオキシエチレンアルキル（大豆）アミン；竹本油脂社製］、パイオニンＤ３６１５Ｔ［ポリオキシエチレンアルキル（牛脂）アミン；竹本油脂社製］、ＢＬＡＵＮＯＮ  Ｏ２０９（ポリオキシエチレンオレイルアミノエーテル；青木油脂社製）等が挙げられる。ポリオキシエチレンアルキルアミンおよびポリオキシエチレンアルキレンアミンにおけるオキシエチレン鎖の重合度は、好ましくは１〜１００、より好ましくは１〜６０である。本発明においては、ポリオキシエチレンアルキルアミンおよびポリオキシエチレンアルキレンアミンを２種類以上用いても良い。ポリオキシエチレンアルキルアミンおよびポリオキシエチレンアルキレンアミンの濃度としては、本発明のＨＤＬコレステロールの測定を可能とする濃度であれば特に制限はないが、反応液中の濃度が０．０００１〜１％であることが好ましく、０．００１〜０．１％がより好ましい。【００６４】  本発明において用いられるアルブミンとしては、本発明のＨＤＬコレステロールの測定を可能とするアルブミンであれば特に限定はなく、例えばウシ、ウマ、ヒツジ、ヒト由来のアルブミン等が挙げられるが、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）が好ましい。また、遺伝子工学的な手法により製造されたアルブミンも用いることができる。本発明においては、２種類以上のアルブミンを組み合わせて使用することもできる。本発明のＨＤＬコレステロールの測定におけるアルブミンの濃度としては、本発明のＨＤＬコレステロールの測定を可能とする濃度であれば特に制限はないが、反応液中の濃度が０．００１〜１０％であることが好ましく、０．０１〜１％がより好ましい。【００６５】  本発明のＨＤＬコレステロール測定方法において使用される水性媒体としては、例えば脱イオン水、蒸留水、緩衝液等が挙げられるが、緩衝液が好ましい。緩衝液に用いる緩衝剤としては、例えばトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン緩衝剤、リン酸緩衝剤、ホウ酸緩衝剤、グッドの緩衝剤等が挙げられる。グッドの緩衝剤としては、例えば２−モルホリノエタンスルホン酸（ＭＥＳ）、ビス（２−ヒドロキシエチル）イミノトリス（ヒドロキシメチル）メタン（Ｂｉｓ−Ｔｒｉｓ）、Ｎ−（２−アセトアミド）イミノ二酢酸（ＡＤＡ）、ピペラジン−Ｎ，Ｎ’−ビス（２−エタンスルホン酸）（ＰＩＰＥＳ）、Ｎ−（２−アセトアミド）−２−アミノエタンスルホン酸（ＡＣＥＳ）、３−モルホリノ−２−ヒドロキシプロパンスルホン酸（ＭＯＰＳＯ）、Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）−２−アミノエタンスルホン酸（ＢＥＳ）、３−モルホリノプロパンスルホン酸（ＭＯＰＳ）、Ｎ−〔トリス（ヒドロキシメチル）メチル〕−２−アミノエタンスルホン酸（ＴＥＳ）、２−〔４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジニル〕エタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）、３−〔Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）アミノ〕−２−ヒドロキシプロパンスルホン酸（ＤＩＰＳＯ）、Ｎ−〔トリス（ヒドロキシメチル）メチル〕−２−ヒドロキシ−３−アミノプロパンスルホン酸（ＴＡＰＳＯ）、ピペラジン−Ｎ，Ｎ’−ビス（２−ヒドロキシプロパンスルホン酸）（ＰＯＰＳＯ）、３−〔４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジニル〕−２−ヒドロキシプロパンスルホン酸（ＨＥＰＰＳＯ）、３−〔４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジニル〕プロパンスルホン酸〔（Ｈ）ＥＰＰＳ〕、Ｎ−〔トリス（ヒドロキシメチル）メチル〕グリシン（Ｔｒｉｃｉｎｅ）、Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）グリシン（Ｂｉｃｉｎｅ）、Ｎ−トリス（ヒドロキシメチル）メチル−３−アミノプロパンスルホン酸（ＴＡＰＳ）、Ｎ−シクロヘキシル−２−アミノエタンスルホン酸（ＣＨＥＳ）、Ｎ−シクロヘキシル−３−アミノ−２−ヒドロキシプロパンスルホン酸（ＣＡＰＳＯ）、Ｎ−シクロヘキシル−３−アミノプロパンスルホン酸（ＣＡＰＳ）等が挙げられる。緩衝液の濃度は測定に適した濃度であれば特に制限はされないが、０．００１〜２．０ｍｏｌ／Ｌが好ましく、０．００５〜１．０ｍｏｌ／Ｌがより好ましい。【００６６】  以下に、本発明のＨＤＬコレステロールの測定方法、測定用試薬および測定用キットを具体的に説明する。
（ＨＤＬコレステロールの測定方法）
本発明のＨＤＬコレステロールの測定方法としては、例えば以下の態様の方法が挙げられる。【００６７】 測定方法
（１）検体と、コレステロールエステル加水分解酵素およびコレステロール酸化酵素、または、コレステロールエステル加水分解酵素、酸化型補酵素およびコレステロール脱水素酵素とを、アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェート、ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩、ポリオキシエチレン酸アミド、アルキルアミンオキシドおよびアルキルプロピレンジアミン誘導体からなる群より選ばれる少なくとも一つの物質を含有し、必要に応じ、ポリアニオン、胆汁酸誘導体、エチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン、ポリオキシエチレンアルキルアミン、ポリオキシエチレンアルケニルアミンおよびアルブミンからなる群より選ばれる少なくとも一つの物質を含有する水性媒体中で反応させ過酸化水素または還元型補酵素を生成させ、
（２）生成した過酸化水素または還元型補酵素を測定し、
（３）（２）で測定した値と、予め作成した検量線とから、検体中のＨＤＬコレステロール濃度を算出することにより、検体中のＨＤＬコレステロールを測定することができる。
本測定法においては、（１）の反応は、例えば１０〜５０℃で、好ましくは２０〜４０℃で、１〜６０分間、好ましくは２〜３０分間行う。【００６８】  生成した過酸化水素の量は、例えば過酸化水素測定用試薬により測定することができる。過酸化水素測定用試薬は、生成した過酸化水素を検出可能な物質へ変換するための試薬である。検出可能な物質としては、例えば色素、発光等が挙げられるが、色素が好ましい。検出可能な物質が色素の場合には、過酸化水素測定用試薬は、酸化発色型色原体およびペルオキシダーゼ等の過酸化活性物質を含有する。酸化発色型色原体としては、例えば後述の酸化発色型色原体が挙げられる。検出可能な物質が発光の場合には、過酸化水素測定用試薬は、化学発光物質を含有する。化学発光物質としては、例えばルミノール、イソルミノール、ルシゲニン、アクリジニウムエステル等があげられる。【００６９】  過酸化水素測定用試薬として、酸化発色型色原体およびペルオキシダーゼ等の過酸化活性物質を含有する試薬を用いる場合には、過酸化水素は、過酸化活性物質の存在下に酸化発色型色原体と反応して色素を生成し、生成した色素を定量することにより、過酸化水素を定量することができる。また、化学発光物質を含有する過酸化水素測定用試薬を用いる場合には、過酸化水素は、化学発光物質と反応してフォトンを生じ、生じたフォトンを定量することにより、過酸化水素を定量することができる。【００７０】  酸化発色型色原体としては、例えばロイコ型色原体、酸化カップリング発色型色原体等が挙げられる。ロイコ型色原体は、過酸化水素およびペルオキシダーゼ等の過酸化活性物質の存在下、単独で色素へ変換される物質である。具体的には、１０−Ｎ−カルボキシメチルカルバモイル−３，７−ビス（ジメチルアミノ）−１０Ｈ−フェノチアジン（ＣＣＡＰ）、１０−Ｎ−メチルカルバモイル−３，７−ビス（ジメチルアミノ）−１０Ｈ−フェノチアジン（ＭＣＤＰ）、Ｎ−（カルボキシメチルアミノカルボニル）−４，４’−ビス（ジメチルアミノ）ジフェニルアミンナトリウム塩（ＤＡ−６４）、４，４’−ビス（ジメチルアミノ）ジフェニルアミン、ビス〔３−ビス（４−クロロフェニル）メチル−４−ジメチルアミノフェニル〕アミン（ＢＣＭＡ）等が挙げられる。【００７１】  酸化カップリング発色型色原体は、過酸化水素およびペルオキシダーゼ等の過酸化活性物質の存在下、２つの化合物が酸化的カップリングして色素を生成する物質である。２つの化合物の組み合わせとしては、カプラーとアニリン類との組み合わせ、カプラーとフェノール類との組み合わせ等が挙げられる。カプラーとしては、例えば４−アミノアンチピリン（４−ＡＡ）、３−メチル−２−ベンゾチアゾリノンヒドラジン等が挙げられる。アニリン類としては、Ｎ−（３−スルホプロピル）アニリン、Ｎ−エチル−Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）−３−メチルアニリン（ＴＯＯＳ）、Ｎ−エチル−Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）−３，５−ジメチルアニリン（ＭＡＯＳ）、Ｎ−エチル−Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）−３，５−ジメトキシアニリン（ＤＡＯＳ）、Ｎ−エチル−Ｎ−（３−スルホプロピル）−３−メチルアニリ���（ＴＯＰＳ）、Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）−３，５−ジメトキシアニリン（ＨＤＡＯＳ）、Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−メチルアニリン、Ｎ，Ｎ−ジ（３−スルホプロピル）−３，５−ジメトキシアニリン、Ｎ−エチル−Ｎ−（３−スルホプロピル）−３−メトキシアニリン、Ｎ−エチル−Ｎ−（３−スルホプロピル）アニリン、Ｎ−エチル−Ｎ−（３−スルホプロピル）−３，５−ジメトキシアニリン、Ｎ−（３−スルホプロピル）−３，５−ジメトキシアニリン、Ｎ−エチル−Ｎ−（３−スルホプロピル）−３，５−ジメチルアニリン、Ｎ−エチル−Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）−３−メトキシアニリン、Ｎ−エチル−Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）アニリン、Ｎ−エチル−Ｎ−（３−メチルフェニル）−Ｎ’−サクシニルエチレンジアミン（ＥＭＳＥ）、Ｎ−エチル−Ｎ−（３−メチルフェニル）−Ｎ’−アセチルエチレンジアミン、Ｎ−エチル−Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）−４−フルオロ−３，５−ジメトキシアニリン（Ｆ−ＤＡＯＳ）等が挙げられる。フェノール類としては、フェノール、４−クロロフェノール、３−メチルフェノール、３−ヒドロキシ−２，４，６−トリヨード安息香酸（ＨＴＩＢ）等が挙げられる。【００７２】  過酸化水素の測定において、過酸化活性物質の濃度は、測定に適した濃度であれば特に制限はないが、過酸化活性物質としてペルオキシダーゼを用いる場合は、１〜１００ｋＵ／Ｌが好ましい。また、酸化発色型色原体の濃度は、測定に適した濃度であれば特に制限はないが、０．０１〜１０ｇ／Ｌが好ましい。
還元型補酵素の測定方法としては、例えば生成した還元型補酵素の吸光度を測定する方法、還元型補酵素測定用試薬を用いる方法等が挙げられる。還元型補酵素の吸光度を測定する方法における吸光度としては、３００〜５００ｎｍが好ましく、３３０〜４００ｎｍがより好ましく、３４０ｎｍ付近が特に好ましい。還元型補酵素測定用試薬は、生成した還元型補酵素を検出可能な物質へ変換するための試薬である。検出可能な物質としては、例えば色素等が挙げられる。検出可能な物質が色素の場合の還元型補酵素測定用試薬としては、例えばジアホラーゼ、電子キャリアーおよび還元発色型色原体を含有する試薬が挙げられる。電子キャリアーとしては、例えば１−メトキシ−５−メチルフェナジウムメチルサルフェート等が挙げられる。還元型補酵素測定用試薬として、ジアホラーゼ、電子キャリアーおよび還元発色型色原体を含有する試薬を用いる場合には、還元発色型色原体が変換されて生成した色素を定量することにより、還元型補酵素を定量することができる。【００７３】  還元発色型色原体としては、例えば３−（４，５−ジメチル−２−チアゾリル）−２，５−ジフェニル−２Ｈ−テトラゾリウム  ブロミド（ＭＴＴ）、２−（４−ヨードフェニル）−３−（４−ニトロフェニル）−５−（２，４−ジスルホフェニル）−２Ｈ−テトラゾリウム  モノナトリウム塩（ＷＳＴ−１）、２−（４−ヨードフェニル）−３−（２，４−ジニトロフェニル）−５−（２，４−ジスルホフェニル）−２Ｈ−テトラゾリウム  モノナトリウム塩（ＷＳＴ−３）等が挙げられる。【００７４】  （ＨＤＬコレステロール測定用試薬）
本発明のＨＤＬコレステロール測定用試薬は、アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェート、ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩、ポリオキシエチレン酸アミド、アルキルアミンオキシドおよびアルキルプロピレンジアミン誘導体からなる群より選ばれる少なくとも一つの物質、コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素ならびに過酸化水素測定用試薬を含有し、必要に応じてポリアニオン、胆汁酸誘導体、エチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン、ポリオキシエチレンアルキルアミンおよびポリオキシエチレンアルケニルアミンからなる群より選ばれる少なくとも一つの物質を含有する
また、本発明のＨＤＬコレステロール測定用試薬は、アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェート、ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩、ポリオキシエチレン酸アミド、アルキルアミンオキシドおよびアルキルプロピレンジアミン誘導体からなる群より選ばれる少なくとも一つの物質、コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素ならびに酸化型補酵素を含有し、必要に応じて、ポリアニオン、胆汁酸誘導体、エチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン、ポリオキシエチレンアルキルアミンおよびポリオキシエチレンアルケニルアミンからなる群より選ばれる少なくとも一つの物質または還元型補酵素測定用試薬を含有する。【００７５】  本発明のＨＤＬコレステロール測定用試薬としては、例えば以下の態様の試薬が挙げられるがこれらは本発明の範囲を何ら限定するものではない。
なお、アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェート、ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩、ポリオキシエチレン酸アミド、アルキルアミンオキシドおよびアルキルプロピレンジアミン誘導体からなる群から選ばれる少なくとも一つの物質を以下「化合物Ａ」という。【００７６】  また、ポリアニオン、胆汁酸誘導体、エチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン、ポリオキシエチレンアルキルアミンおよびポリオキシエチレンアルケニルアミンからなる群から選ばれる少なくとも一つの物質を以下「化合物Ｂ」という。本発明の測定用試薬においては、化合物Ａを１つまたは複数用いることができ、化合物Ｂを１つまたは複数用いることができる。【００７７】 試薬１
化合物Ａ、コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素および過酸化水素測定用試薬を含有する試薬。【００７８】 試薬２
化合物Ａ、化合物Ｂ、コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素および過酸化水素測定用試薬を含有する試薬。【００７９】 試薬３
化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン、コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素および過酸化水素測定用試薬を含有する試薬。【００８０】 試薬４
化合物Ａ、コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素および酸化型補酵素を含有する試薬。【００８１】 試薬５
化合物Ａ、化合物Ｂ、コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素および酸化型補酵素を含有する試薬。【００８２】 試薬６
化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン、コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素および酸化型補酵素を含有する試薬。【００８３】 試薬７
化合物Ａ、コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、酸化型補酵素および還元型補酵素測定用試薬を含有する試薬。【００８４】 試薬８
化合物Ａ、化合物Ｂ、コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、酸化型補酵素および還元型補酵素測定用試薬を含有する試薬。【００８５】 試薬９
化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン、コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、酸化型補酵素および還元型補酵素測定用試薬を含有する試薬。【００８６】  本発明のＨＤＬコレステロール測定用試薬においては、前述の本発明のＨＤＬコレステロールの測定方法において挙げられた、アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェート、ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩、ポリオキシエチレン酸アミド、アルキルアミンオキシド、アルキルプロピレンジアミン誘導体、コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、コレステロール脱水素酵素、ポリアニオン、胆汁酸誘導体、エチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン、ポリオキシエチレンアルキルアミン、ポリオキシエチレンアルケニルアミン、アルブミン、過酸化水素測定用試薬、酸化型補酵素、還元型補酵素測定用試薬を用いることができる。【００８７】  （ＨＤＬコレステロール測定用キット）
本発明のＨＤＬコレステロール測定用試薬は、キットの形態で保存、流通および使用されてもよい。キットの形態としては、特に制限はなく、２試薬系、３試薬系等のいずれであってもよいが、２試薬系が好ましい。
第一試薬と第二試薬とからなる２試薬系のＨＤＬコレステロール測定用キットにおいては、コレステロールエステル加水分解酵素と、コレステロール酸化酵素またはコレステロール脱水素酵素とは、第一試薬と第二試薬に別々に含有されても、第二試薬に一緒に含有されてもよいが、第一試薬と第二試薬に別々に含有される場合には、コレステロールエステル加水分解酵素が第一試薬に、コレステロール酸化酵素またはコレステロール脱水素酵素が第二試薬に含有される態様が好ましい。アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェート、ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩、ポリオキシエチレン酸アミド、アルキルアミンオキシド、アルキルプロピレンジアミン誘導体、胆汁酸誘導体、エチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン、ポリオキシエチレンアルキルアミン、ポリオキシエチレンアルケニルアミンおよびアルブミンは、第一試薬、第二試薬のいずれかまたは両方に含有されてもよい。コレステロール脱水素酵素を用いた測定法において使用される酸化型補酵素は、第一試薬、第二試薬のいずれかまたは両方に含有されてもよい。【００８８】  過酸化水素測定用試薬は、第一試薬、第二試薬のいずれかまたは両方に含有されてもよいが、当該試薬が酸化カップリング型色原体を含有する場合には、酸化カップリング型色原体のそれぞれの化合物は別々の試薬に含有される態様が好ましい。還元性補酵素測定用試薬は、第一試薬、第二試薬のいずれかまたは両方に含有されてもよいが、第一試薬、第二試薬の両方に含有されることが好ましい。【００８９】  本発明のＨＤＬコレステロール測定用キットとしては、例えば以下の態様のキットが挙げられるがこれらは本発明の範囲を何ら限定するものではない。【００９０】 キット１
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ【００９１】 キット２
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ【００９２】 キット３
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン【００９３】 キット４
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ｂ
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ【００９４】 キット５
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ【００９５】 キット６
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ｂ
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ【００９６】 キット７
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ【００９７】 キット８
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ａ
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬【００９８】 キット９
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ａ
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ｂ【００９９】 キット１０
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ａ
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ｂ、アルブミン【０１００】 キット１１
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬【０１０１】 キット１２
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬【０１０２】 キット１３
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ｂ【０１０３】 キット１４
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ｂ【０１０４】 キット１５
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ａ
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ【０１０５】 キット１６
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ａ
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ【０１０６】 キット１７
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ａ
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン【０１０７】 キット１８
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ【０１０８】 キット１９
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ａ、アルブミン、化合物Ｂ
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ【０１０９】 キット２０
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ【０１１０】 キット２１
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ【０１１１】 キット２２
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、過酸化水素測定用試薬
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ【０１１２】 キット２３
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、過酸化水素測定用試薬
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ【０１１３】 キット２４
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、過酸化水素測定用試薬
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン【０１１４】 キット２５
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ｂ
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ【０１１５】 キット２６
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ【０１１６】 キット２７
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ｂ
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ【０１１７】 キット２８
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ【０１１８】 キット２９
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬【０１１９】 キット３０
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ｂ【０１２０】 キット３１
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ｂ、アルブミン【０１２１】 キット３２
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬【０１２２】 キット３３
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬【０１２３】 キット３４
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ｂ【０１２４】 キット３５
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ｂ【０１２５】 キット３６
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ【０１２６】 キット３７
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ【０１２７】 キット３８
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン【０１２８】 キット３９
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ【０１２９】 キット４０
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ｂ、アルブミン、化合物Ａ
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ【０１３０】 キット４１
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ【０１３１】 キット４２
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ【０１３２】 キット４３
第一試薬
化合物Ｂ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ【０１３３】 キット４４
第一試薬
化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ【０１３４】 キット４５
第一試薬
化合物Ｂ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ【０１３５】 キット４６
第一試薬
化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ【０１３６】 キット４７
第一試薬
化合物Ａ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬【０１３７】 キット４８
第一試薬
化合物Ａ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ｂ【０１３８】 キット４９
第一試薬
化合物Ａ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ｂ、アルブミン【０１３９】 キット５０
第一試薬
化合物Ａ、化合物Ｂ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬【０１４０】 キット５１
第一試薬
化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬【０１４１】 キット５２
第一試薬
化合物Ａ、化合物Ｂ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ｂ【０１４２】 キット５３
第一試薬
化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ｂ【０１４３】 キット５４
第一試薬
化合物Ａ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ【０１４４】 キット５５
第一試薬
化合物Ａ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ【０１４５】 キット５６
第一試薬
化合物Ａ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン【０１４６】 キット５７
第一試薬
化合物Ａ、化合物Ｂ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ【０１４７】 キット５８
第一試薬
化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ【０１４８】 キット５９
第一試薬
化合物Ａ、化合物Ｂ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ【０１４９】 キット６０
第一試薬
化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ【０１５０】 キット６１
第一試薬
過酸化水素測定用試薬
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ【０１５１】 キット６２
第一試薬
過酸化水素測定用試薬
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ【０１５２】 キット６３
第一試薬
過酸化水素測定用試薬
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン【０１５３】 キット６４
第一試薬
過酸化水素測定用試薬、化合物Ｂ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ【０１５４】 キット６５
第一試薬
過酸化水素測定用試薬、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ【０１５５】 キット６６
第一試薬
過酸化水素測定用試薬、化合物Ｂ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ【０１５６】 キット６７
第一試薬
過酸化水素測定用試薬、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ【０１５７】 キット６８
第一試薬
過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬【０１５８】 キット６９
第一試薬
過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ｂ【０１５９】 キット７０
第一試薬
過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ｂ、アルブミン【０１６０】 キット７１
第一試薬
過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬【０１６１】 キット７２
第一試薬
過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬【０１６２】 キット７３
第一試薬
過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ｂ【０１６３】 キット７４
第一試薬
過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ｂ【０１６４】 キット７５
第一試薬
過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ【０１６５】 キット７６
第一試薬
過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ【０１６６】 キット７７
第一試薬
過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン【０１６７】 キット７８
第一試薬
過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ【０１６８】 キット７９
第一試薬
過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ【０１６９】 キット８０
第一試薬
過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ【０１７０】 キット８１
第一試薬
過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ【０１７１】 キット８２
第一試薬
酸化型補酵素
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物Ａ【０１７２】 キット８３
第一試薬
酸化型補酵素
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ【０１７３】 キット８４
第一試薬
酸化型補酵素
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン【０１７４】 キット８５
第一試薬
酸化型補酵素、化合物Ｂ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物Ａ【０１７５】 キット８６
第一試薬
酸化型補酵素、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物Ａ【０１７６】 キット８７
第一試薬
酸化型補酵素、化合物Ｂ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ【０１７７】 キット８８
第一試薬
酸化型補酵素、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ【０１７８】 キット８９
第一試薬
酸化型補酵素、化合物Ａ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素【０１７９】 キット９０
第一試薬
酸化型補酵素、化合物Ａ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物Ｂ【０１８０】 キット９１
第一試薬
酸化型補酵素、化合物Ａ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物Ｂ、アルブミン【０１８１】 キット９２
第一試薬
酸化型補酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素【０１８２】 キット９３
第一試薬
酸化型補酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素【０１８３】 キット９４
第一試薬
酸化型補酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物Ｂ【０１８４】 キット９５
第一試薬
酸化型補酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物Ｂ【０１８５】 キット９６
第一試薬
酸化型補酵素、化合物Ａ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物Ａ【０１８６】 キット９７
第一試薬
酸化型補酵素、化合物Ａ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ【０１８７】 キット９８
第一試薬
酸化型補酵素、化合物Ａ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン【０１８８】 キット９９
第一試薬
酸化型補酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物Ａ【０１８９】 キット１００
第一試薬
酸化型補酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物Ａ【０１９０】 キット１０１
第一試薬
酸化型補酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ【０１９１】 キット１０２
第一試薬
酸化型補酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ【０１９２】 キット１０３
第一試薬
酸化型補酵素、還元型補酵素測定用試薬
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物Ａ【０１９３】 キット１０４
第一試薬
酸化型補酵素、還元型補酵素測定用試薬
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ【０１９４】 キット１０５
第一試薬
酸化型補酵素、還元型補酵素測定用試薬
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン【０１９５】 キット１０６
第一試薬
酸化型補酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ｂ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ【０１９６】 キット１０７
第一試薬
酸化型補酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ【０１９７】 キット１０８
第一試薬
酸化型補酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ｂ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ【０１９８】 キット１０９
第一試薬
酸化型補酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ【０１９９】 キット１１０
第一試薬
酸化型補酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素【０２００】 キット１１１
第一試薬
酸化型補酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ｂ【０２０１】 キット１１２
第一試薬
酸化型補酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ｂ、アルブミン【０２０２】 キット１１３
第一試薬
酸化型補酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬【０２０３】 キット１１４
第一試薬
酸化型補酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬【０２０４】 キット１１５
第一試薬
酸化型補酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ｂ【０２０５】 キット１１６
第一試薬
酸化型補酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ｂ【０２０６】 キット１１７
第一試薬
酸化型補酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物Ｂ【０２０７】 キット１１８
第一試薬
酸化型補酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ【０２０８】 キット１１９
第一試薬
酸化型補酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン【０２０９】 キット１２０
第一試薬
酸化型補酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ【０２１０】 キット１２１
第一試薬
酸化型補酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ【０２１１】 キット１２２
第一試薬
酸化型補酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ【０２１２】 キット１２３
第一試薬
酸化型補酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ【０２１３】 キット１２４
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、化合物Ａ【０２１４】 キット１２５
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ【０２１５】 キット１２６
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン【０２１６】 キット１２７
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ｂ
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、化合物Ａ【０２１７】 キット１２８
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、化合物Ａ【０２１８】 キット１２９
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ｂ
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ【０２１９】 キット１３０
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ【０２２０】 キット１３１
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ａ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素【０２２１】 キット１３２
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ａ
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、化合物Ｂ【０２２２】 キット１３３
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ａ
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、化合物Ｂ、アルブミン【０２２３】 キット１３４
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ
第二試薬
コレステロール脱水素酵素【０２２４】 キット１３５
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
コレステロール脱水素酵素【０２２５】 キット１３６
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、化合物Ｂ【０２２６】 キット１３７
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、化合物Ｂ【０２２７】 キット１３８
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ａ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物Ａ【０２２８】 キット１３９
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ａ
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ【０２２９】 キット１４０
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ａ
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン【０２３０】 キット１４１
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、化合物Ａ【０２３１】 キット１４２
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、化合物Ａ【０２３２】 キット１４３
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ【０２３３】 キット１４４
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ【０２３４】 キット１４５
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ【０２３５】 キット１４６
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ【０２３６】 キット１４７
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン【０２３７】 キット１４８
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ｂ
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ【０２３８】 キット１４９
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ【０２３９】 キット１５０
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ｂ
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ【０２４０】 キット１５１
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ【０２４１】 キット１５２
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬【０２４２】 キット１５３
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ｂ【０２４３】 キット１５４
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ｂ、アルブミン【０２４４】 キット１５５
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬【０２４５】 キット１５６
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬【０２４６】 キット１５７
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ｂ【０２４７】 キット１５８
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ｂ【０２４８】 キット１５９
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ【０２４９】 キット１６０
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ【０２５０】 キット１６１
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン【０２５１】 キット１６２
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ【０２５２】 キット１６３
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ【０２５３】 キット１６４
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ【０２５４】 キット１６５
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ【０２５５】 キット１６６
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物Ａ【０２５６】 キット１６７
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ【０２５７】 キット１６８
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン【０２５８】 キット１６９
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ｂ
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物Ａ【０２５９】 キット１７０
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物Ａ【０２６０】 キット１７１
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ｂ
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ【０２６１】 キット１７２
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ【０２６２】 キット１７３
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ａ
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素【０２６３】 キット１７４
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ａ
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物Ｂ【０２６４】 キット１７５
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ａ
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物Ｂ、アルブミン【０２６５】 キット１７６
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素【０２６６】 キット１７７
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、【０２６７】 キット１７８
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物Ｂ【０２６８】 キット１７９
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物Ｂ【０２６９】 キット１８０
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ａ
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物Ａ【０２７０】 キット１８１
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ａ
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ【０２７１】 キット１８２
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ａ
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン【０２７２】 キット１８３
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物Ａ【０２７３】 キット１８４
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物Ａ【０２７４】 キット１８５
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ【０２７５】 キット１８６
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物Ａ、化合物Ｂ【０２７６】 キット１８７
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ【０２７７】 キット１８８
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ【０２７８】 キット１８９
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン【０２７９】 キット１９０
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ｂ
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ【０２８０】 キット１９１
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ【０２８１】 キット１９２
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ｂ
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ【０２８２】 キット１９３
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ【０２８３】 キット１９４
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬【０２８４】 キット１９５
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ｂ【０２８５】 キット１９６
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ｂ、アルブミン【０２８６】 キット１９７
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬【０２８７】 キット１９８
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬【０２８８】 キット１９９
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ｂ【０２８９】 キット２００
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ｂ【０２９０】 キット２０１
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ【０２９１】 キット２０２
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ【０２９２】 キット２０３
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン【０２９３】 キット２０４
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ【０２９４】 キット２０５
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ【０２９５】 キット２０６
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ【０２９６】 キット２０７
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ、アルブミン
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物Ａ、化合物Ｂ【０２９７】  本発明のＨＤＬコレステロール測定用キットにおいては、前述の本発明のＨＤＬコレステロールの測定方法において挙げられたコレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、コレステロール脱水素酵素、アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェート、ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩、ポリオキシエチレン酸アミド、アルキルアミンオキシド、アルキルプロピレンジアミン誘導体、ポリアニオン、胆汁酸誘導体、エチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン、ポリオキシエチレンアルキルアミン、ポリオキシエチレンアルケニルアミン、アルブミン、過酸化水素測定用試薬、酸化型補酵素、還元型補酵素測定用試薬を用いることができる。【０２９８】  本発明のＨＤＬコレステロール測定用試薬および測定用キットには、必要に応じて、水性媒体、安定化剤、防腐剤、影響物質消去剤、反応促進剤等が含有されてもよい。水性媒体としては、例えば前述の水性媒体等が挙げられる。安定化剤としては、例えばエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、シュークロース、塩化カルシウム等が挙げられる。防腐剤としては、例えばアジ化ナトリウム、抗生物質等が挙げられる。影響物質消去剤としては、例えばアスコルビン酸の影響を消去するためのアスコルビン酸オキシダーゼ等が挙げられる。反応促進剤としては、例えばコリパーゼ、ホスホリパーゼ等の酵素、硫酸ナトリウム、塩化ナトリウム等の塩類等が挙げられる。【０２９９】  本発明のＨＤＬコレステロール測定用試薬および測定用キットは、凍結乾燥された状態でも、水性媒体に溶解された状態でもよい。凍結乾燥された状態の試薬を用いて検体中のＨＤＬコレステロールを測定する場合には、当該試薬は水性媒体に溶解して使用される。
本発明のＨＤＬコレステロール測定用試薬および測定用キットにおけるコレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、コレステロール脱水素酵素の含量としては、水性媒体で溶解された状態での濃度が０．０１〜１２００Ｕ／ｍＬとなる含量が好ましく、０．０２〜６００Ｕ／ｍＬとなる含量がより好ましい。本発明のＨＤＬコレステロール測定用試薬および測定用キットにおけるアルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェート、ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩、ポリオキシエチレン酸アミド、アルキルアミンオキシド、アルキルプロピレンジアミン誘導体の含量としては、水性媒体で溶解された状態での濃度が０．０００１〜３％となる含量が好ましく、０．００１〜０．３％となる含量がより好ましい。本発明のＨＤＬコレステロール測定用試薬および測定用キットにおけるポリアニオンの含量としては、水性媒体で溶解された状態での濃度が０．００１〜３０％となる含量が好ましく、０．０１〜３％となる含量がより好ましい。【０３００】  本発明のＨＤＬコレステロール測定用試薬および測定用キットにおける胆汁酸誘導体の含量としては、水性媒体で溶解された状態での濃度が０．００１〜３０％となる含量が好ましく、０．０１〜３％となる含量がより好ましい。
本発明のＨＤＬコレステロール測定用試薬および測定用キットにおけるエチレンジアミンテトラポリオキシアルキレンの含量としては、水性媒体で溶解された状態での濃度が０．００１〜３０％となる含量が好ましく、０．０１〜３％となる含量がより好ましい。【０３０１】  本発明のＨＤＬコレステロール測定用試薬および測定用キットにおけるポリオキシアルキルアミンまたはポリオキシエチレンアルケニルアミンの含量としては、水性媒体で溶解された状態での濃度が０．０００１〜３％となる含量が好ましく、０．００１〜０．３％となる含量がより好ましい。
本発明のＨＤＬコレステロール測定用試薬および測定用キットにおけるアルブミンの含量としては、水性媒体で溶解された状態での濃度が０．００１〜３０％となる含量が好ましく、０．０１〜３％となる含量がより好ましい。【０３０２】
以下、実施例により本発明をより詳細に説明するが、これらは本発明の範囲を何ら限定するものではない。尚、本実施例においては、下記メーカーの試薬および酵素を使用した。
ＨＥＰＥＳ（ＢＤＨ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ社製）、ＥＭＳＥ（ダイトーケミックス社製）、デキストラン硫酸ナトリウム（分子量５０万）（ファルマシア社製）、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ；プロライアント社製）、４−アミノアンチピリン（埼京化成社製）、ペルオキシダーゼ（東洋紡績社製）、ＣＯＯ３２１（コレステロール酸化酵素；東洋紡績社製）、ＣＨＯＤＩ（コレステロール酸化酵素；天野エンザイム社製）、ＣＨＯＤ協和（コレステロール酸化酵素；協和醗酵社製）、ＬＰＬ３１１（コレステロールエステル加水分解酵素；東洋紡績社製）、ＬＰＬ６（コレステロールエステル加水分解酵素；天野エンザイム社製）、４３ｋＤａエステラーゼ（コレステロールエステル加水分解酵素；天野エンザイム社製）、ＢＬＡＵＮＯＮ  ＳＡＰ３０１０、ＢＬＡＵＮＯＮ  ＳＡＰ３００４（いずれも牛脂アミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物；青木油脂社製）、Ｃ１６ＥＯ３０ＰＯ１０、Ｃ１６ＥＯ３０ＰＯ２０、Ｃ１６ＥＯ４０ＰＯ１０、Ｃ１６ＥＯ２０ＰＯ１０（いずれもセチルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物；日本油脂社製）、ビスノールＳＫ（ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩；一方社油脂社製）、ミグノールＰＡ−３０（ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェート；一方社油脂社製）、ニッコールＴＡＭＤＳ１５（ポリオキシエチレンステアリン酸アミド；日光ケミカルズ社製）、ナイミッドＭＴ−２１５（ポリオキシエチレン酸アミド；日本油脂社製）、ＢＬＡＵＮＯＮ  ＤＴ０３、ＢＬＡＵＮＯＮ  ＤＴ１５（いずれもアルキルプロピレンジアミン誘導体；青木油脂社製）、ユニセーフＡ−ＬＭ（アルキルジメチルアミンオキシド；日本油脂社製）、ユニセーフＡ−ＬＹ（ポリオキシエチレンヤシ油アルキルジメチルアミンオキシド；日本油脂社製）、アスファゾール＃１０（ポリオキシエチレン牛脂プロピレンジアミン；日本油脂社製）、エチレンジアミンＰＯ５２ＥＯ６０（エチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン；日本油脂社製）、アデカプルロニックＴＲ７０４（エチレンジアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物；旭電化社製）、ナイミーンＬ２０７（ポリオキシエチレンドデシルアミン；日本油脂社製）、コール酸ナトリウム（陰イオン性胆汁酸誘導体；ＡＣＲＯＳ社製）、ＣＨＡＰＳ（両性胆汁酸誘導体；同仁化学社製）、ＢＩＧＣＨＡＰ（非イオン性胆汁酸誘導体；同仁化学社製）。
【０３０３】参考例１  化学修飾ＬＰＬ３１１（化学的に修飾されたＬＰＬ３１１）の調製
ＨＥＰＥＳ緩衝液（ｐＨ８．５，０．１５ｍｏｌ／Ｌ）に、ＬＰＬ３１１を３３ｇ／Ｌとなるように加え５℃に冷却した後、サンブライトＶＦＭ−４１０１（日本油脂社製）を３３０ｇ／Ｌとなるよう加え、さらに３時間反応させた。得られた修飾酵素溶液を精製分離せずそのまま化学修飾ＬＰＬ３１１として使用した。
（化合物Ａを用いた測定用キット）
【実施例１】
【０３０４】  以下の第一試薬（試薬Ａ）および第二試薬（試薬ａ１）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ａ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ａ１）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．２ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
ＢＬＡＵＮＯＮ  ＳＡＰ３００４                  ０．１ｇ／Ｌ
【実施例２】
【０３０５】  以下の第一試薬（試薬Ａ）および第二試薬（試薬ａ２）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ａ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ａ２）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．２ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
ＢＬＡＵＮＯＮ  ＳＡＰ３０１０                  ０．５ｇ／Ｌ
【実施例３】
【０３０６】  以下の第一試薬（試薬Ａ）および第二試薬（試薬ａ３）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ａ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ａ３）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．２ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
Ｃ１６ＥＯ３０ＰＯ１０                          ０．５ｇ／Ｌ
【実施例４】
【０３０７】  以下の第一試薬（試薬Ａ）および第二試薬（試薬ａ４）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ａ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ａ４）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．２ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
Ｃ１６ＥＯ４０ＰＯ１０                          １．０ｇ／Ｌ
【実施例５】
【０３０８】  以下の第一試薬（試薬Ａ）および第二試薬（試薬ａ５）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ａ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ａ５）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．２ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
Ｃ１６ＥＯ３０ＰＯ２０                          ０．５ｇ／Ｌ
【実施例６】
【０３０９】  以下の第一試薬（試薬Ａ）および第二試薬（試薬ａ６）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ａ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ａ６）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．２ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
Ｃ１６ＥＯ２０ＰＯ１０                          ０．５ｇ／Ｌ
【実施例７】
【０３１０】  以下の第一試薬（試薬Ａ）および第二試薬（試薬ａ７）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ａ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ａ７）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．２ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
ビスノールＳＫ                                  ０．３ｇ／Ｌ
【実施例８】
【０３１１】  以下の第一試薬（試薬Ａ）および第二試薬（試薬ａ８）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ａ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ａ８）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．２ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
ミグノールＰＡ−３０                            ０．５ｇ／Ｌ
【実施例９】
【０３１２】  以下の第一試薬（試薬Ａ）および第二試薬（試薬ａ９）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ａ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ａ９）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．２ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
ニッコールＴＡＭＤＳ１５                        ０．１ｇ／Ｌ
【実施例１０】
【０３１３】  以下の第一試薬（試薬Ａ）および第二試薬（試薬ａ１０）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ａ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ａ１０）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．２ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
ＢＬＡＵＮＯＮ  ＤＴ０３                        ０．５ｇ／Ｌ
【実施例１１】
【０３１４】  以下の第一試薬（試薬Ａ）および第二試薬（試薬ａ１１）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ａ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ａ１１）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．２ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
ＢＬＡＵＮＯＮ  ＤＴ１５                        ０．１ｇ／Ｌ
【実施例１２】
【０３１５】  以下の第一試薬（試薬Ａ）および第二試薬（試薬ａ１２）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ａ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ａ１２）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．２ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
アスファゾール＃１０                            ０．１ｇ／Ｌ【０３１６】比較例１
以下の第一試薬（試薬Ａ）および第二試薬（試薬ａ）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ａ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ａ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．２ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
【実施例１３】
【０３１７】  実施例１のキットを用いて、ヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。
（１）検量線の作成
標準液として、生理食塩水（ＨＤＬコレステロール濃度：０．０ｍｇ／ｄＬ）および血清（ＨＤＬコレステロール濃度：８０．０ｍｇ／ｄＬ）を、実施例１のキットを用いて、日立７１７０Ｓ形自動分析装置により、ＨＤＬコレステロール濃度と「吸光度」との間の関係を示す検量線を作成した。【０３１８】  ここでの「吸光度」とは、以下の反応で測定された２つの吸光度（Ｅ１およびＥ２）を基に、Ｅ２からＥ１を差し引くことにより得られた値を表す。
反応セルへ標準液（２μＬ）と第一試薬（０．１５ｍＬ）とを添加し３７℃で５分間加温し、反応液の吸光度（Ｅ１）を主波長６００ｎｍ、副波長７００ｎｍで測定し、次いで、この反応液に第二試薬（０．０５ｍＬ）を添加しさらに３７℃で５分間加温し、反応液の吸光度（Ｅ２）を主波長６００ｎｍ、副波長７００ｎｍで測定した。
（２）ヒト血清検体と実施例１または比較例１のキットとの反応による当該検体における「吸光度」の算出
（１）の検量線の作成において用いた標準液の代わりにヒト血清検体を用いる以外は、（１）の「吸光度」の算出方法と同様の方法により、当該検体における「吸光度」を算出した。
（３）ヒト血清検体中のＨＤＬコレステロール濃度の測定
（２）で算出した「吸光度」と、（１）で作成した検量線とから、各検体中のＨＤＬコレステロール濃度を測定した。
【実施例１４】
【０３１９】  実施例１のキットの代わりに実施例２のキットを用いる以外は実施例１３の測定法と同様にして、日立７１７０形自動分析装置によりヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。
【実施例１５】
【０３２０】  実施例１のキットの代わりに実施例３のキットを用いる以外は実施例１３の測定法と同様にして、日立７１７０形自動分析装置によりヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。
【実施例１６】
【０３２１】  実施例１のキットの代わりに実施例４のキットを用いる以外は実施例１３の測定法と同様にして、日立７１７０形自動分析装置によりヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。
【実施例１７】
【０３２２】  実施例１のキットの代わりに実施例５のキットを用いる以外は実施例１３の測定法と同様にして、日立７１７０形自動分析装置によりヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。
【実施例１８】
【０３２３】  実施例１のキットの代わりに実施例６のキットを用いる以外は実施例１３の測定法と同様にして、日立７１７０形自動分析装置によりヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。
【実施例１９】
【０３２４】  実施例１のキットの代わりに実施例７のキットを用いる以外は実施例１３の測定法と同様にして、日立７１７０形自動分析装置によりヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。
【実施例２０】
【０３２５】  実施例１のキットの代わりに実施例８のキットを用いる以外は実施例１３の測定法と同様にして、日立７１７０形自動分析装置によりヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。
【実施例２１】
【０３２６】  実施例１のキットの代わりに実施例９のキットを用いる以外は実施例１３の測定法と同様にして、日立７１７０形自動分析装置によりヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。
【実施例２２】
【０３２７】  実施例１のキットの代わりに実施例１０のキットを用いる以外は実施例１３の測定法と同様にして、日立７１７０形自動分析装置によりヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。
【実施例２３】
【０３２８】  実施例１のキットの代わりに実施例１１のキットを用いる以外は実施例１３の測定法と同様にして、日立７１７０形自動分析装置によりヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。
【実施例２４】
【０３２９】  実施例１のキットの代わりに実施例１２のキットを用いる以外は実施例１３の測定法と同様にして、日立７１７０形自動分析装置によりヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。【０３３０】比較例２
実施例１のキットの代わりに比較例１のキットを用いる以外は実施例１３の測定法と同様にして、日立７１７０形自動分析装置によりヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。【０３３１】  次に、実施例１３〜２４および比較例２の測定において用いたヒト血清３０検体を用いて、クリニカルケミストリー第４５巻、１０号（１９９９年）に記載されたＤＣＭ法（Ｄｅｓｉｇｎａｔｅｄ  Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ  Ｍｅｔｈｏｄ）により当該検体中のＨＤＬコレステロールを測定し、各実施例および比較例での値と比較した。各実施例および比較例それぞれの測定と、ＤＣＭ法による測定との相関係数を第１表に示す。【０３３２】
【表１】
0004796489.tif 000012
【０３３３】  実施例１３〜２４と比較例２との比較から、化合物Ａ（特に、アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェート、ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩、ポリオキシエチレン酸アミドまたはアルキルプロピレンジアミン誘導体）を用いたキットにおいて、ＤＣＭ法による測定と良い相関係数が得られることが判明した。
［化合物Ａと化合物Ｂ（ポリアニオン）との併用例］
以下の組成からなる第一試薬（試薬Ｂ）を調製した。
【実施例２５】
【０３３４】  以下の第一試薬（試薬Ｂ）および第二試薬（試薬ａ２）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ｂ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
デキストラン硫酸ナトリウム                      １．０ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ａ２）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．２ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
ＢＬＡＵＮＯＮ  ＳＡＰ３０１０                  ０．５ｇ／Ｌ
【実施例２６】
【０３３５】  以下の第一試薬（試薬Ｂ）および第二試薬（試薬ａ５）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ｂ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
デキストラン硫酸ナトリウム                      １．０ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ａ５）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．２ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
Ｃ１６ＥＯ３０ＰＯ２０                          ０．５ｇ／Ｌ
【実施例２７】
【０３３６】  以下の第一試薬（試薬Ｂ）および第二試薬（試薬ａ７）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ｂ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
デキストラン硫酸ナトリウム                      １．０ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ａ７）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．２ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
ビスノールＳＫ                                  ０．３ｇ／Ｌ
【実施例２８】
【０３３７】  以下の第一試薬（試薬Ｂ）および第二試薬（試薬ａ９）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ｂ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
デキストラン硫酸ナトリウム                      １．０ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ａ９）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．２ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
ニッコールＴＡＭＤＳ１５                        ０．１ｇ／Ｌ
【実施例２９】
【０３３８】  以下の第一試薬（試薬Ｂ）および第二試薬（試薬ａ１３）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ｂ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
デキストラン硫酸ナトリウム                      １．０ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ａ１３）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．２ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
ユニセーフＡ−ＬＭ                              ０．５ｇ／Ｌ
【実施例３０】
【０３３９】  以下の第一試薬（試薬Ｂ）および第二試薬（試薬ａ１０）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ｂ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
デキストラン硫酸ナトリウム                      １．０ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ａ１０）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．２ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
ＢＬＡＵＮＯＮ  ＤＴ０３                        ０．５ｇ／Ｌ【０３４０】比較例３
以下の第一試薬（試薬Ｂ）および第二試薬（試薬ａ）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ｂ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
デキストラン硫酸ナトリウム                      １．０ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ａ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．２ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
【実施例３１】
【０３４１】  実施例１のキットの代わりに実施例２５のキットを用いる以外は実施例１３の測定法と同様にして、日立７１７０形自動分析装置によりヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。
【実施例３２】
【０３４２】  実施例１のキットの代わりに実施例２６のキットを用いる以外は実施例１３の測定法と同様にして、日立７１７０形自動分析装置によりヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。
【実施例３３】
【０３４３】  実施例１のキットの代わりに実施例２７のキットを用いる以外は実施例１３の測定法と同様にして、日立７１７０形自動分析装置によりヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。
【実施例３４】
【０３４４】  実施例１のキットの代わりに実施例２８のキットを用いる以外は実施例１３の測定法と同様にして、日立７１７０形自動分析装置によりヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。
【実施例３５】
【０３４５】  実施例１のキットの代わりに実施例２９のキットを用いる以外は実施例１３の測定法と同様にして、日立７１７０形自動分析装置によりヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。
【実施例３６】
【０３４６】  実施例１のキットの代わりに実施例３０のキットを用いる以外は実施例１３の測定法と同様にして、日立７１７０形自動分析装置によりヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。【０３４７】比較例４
実施例１のキットの代わりに比較例３のキットを用いる以外は実施例１３の測定法と同様にして、日立７１７０形自動分析装置によりヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。【０３４８】  実施例３１〜３６および比較例４のそれぞれの測定と、ＤＣＭ法による測定との相関係数を表２に示す。【０３４９】
【表２】
0004796489.tif 000013
【０３５０】  第２表から、化合物Ａを含有するキットを用いた測定においては、化合物Ｂ（ポリアニオン）を共存させてもＤＣＭとの相関関係が認められない。また、第２表から、化合物Ａ（特に、アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩、ポリオキシエチレン酸アミド、アルキルアミンオキシドまたはアルキルプロピレンジアミン誘導体）および化合物Ｂ（ポリアニオン）を用いたキットにおいて、ＤＣＭ法による測定と良い相関係数が得られることが判明した。また、実施例３１と実施例１４との比較、実施例３２と実施例１７との比較、実施例３３と実施例１９との比較、実施例３４と実施例２１との比較、および、実施例３６と実施例２２との比較から、化合物Ａと化合物Ｂ（ポリアニオン）とを用いることにより、ＤＣＭ法による測定との相関係数が向上することが判明した。
［化合物Ａと化合物Ｂ（非イオン性胆汁酸誘導体）との併用例］
【実施例３７】
【０３５１】  以下の第一試薬（試薬Ａ）および第二試薬（試薬ｂ１）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ａ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ｂ１）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
ＢＩＧＣＨＡＰ                                  ３．０ｇ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．２ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
Ｃ１６ＥＯ３０ＰＯ２０                          ０．２４ｇ／Ｌ【０３５２】比較例５
以下の第一試薬（試薬Ａ）および第二試薬（試薬ｂ）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ａ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ｂ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
ＢＩＧＣＨＡＰ                                  ３．０ｇ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．２ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
【実施例３８】
【０３５３】  実施例１のキットの代わりに実施例３７のキットを用いる以外は実施例１３の測定法と同様にして、日立７１７０形自動分析装置によりヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。【０３５４】比較例６
実施例１のキットの代わりに比較例５のキットを用いる以外は実施例１３の測定法と同様にして、日立７１７０形自動分析装置によりヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。
比較例６および実施例３８それぞれの測定と、前述のＤＣＭ法による測定との相関係数を第３表に示す。【０３５５】
【表３】
0004796489.tif 000014
【０３５６】  第３表から、化合物Ｂ（非イオン性胆汁酸誘導体）を含有するキットを用いた測定において、化合物Ａを共存させることにより、ＤＣＭとの相関関係がより良好となることが判明した。また、実施例１７と実施例３８との比較から、アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物（化合物Ａ）に非イオン性胆汁酸誘導体（化合物Ｂ）を共存させることにより、ＤＣＭによる測定との相関関係がより良好となることが判明した。
［化合物Ａと化合物Ｂ（陰イオン性胆汁酸誘導体）との併用例］
【実施例３９】
【０３５７】  以下の第一試薬（試薬Ａ）および第二試薬（試薬ｃ１）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ａ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ｃ１）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
コール酸ナトリウム                              ６．０ｇ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．２ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
Ｃ１６ＥＯ３０ＰＯ２０                          ０．２ｇ／Ｌ【０３５８】比較例７
以下の第一試薬（試薬Ａ）および第二試薬（試薬ｃ）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ａ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ｃ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
コール酸ナトリウム                              ６．０ｇ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．２ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
【実施例４０】
【０３５９】  実施例１のキットの代わりに実施例３９のキットを用いる以外は実施例１３の測定法と同様にして、日立７１７０形自動分析装置によりヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。【０３６０】比較例８
実施例１のキットの代わりに比較例７のキットを用いる以外は実施例１３の測定法と同様にして、日立７１７０形自動分析装置によりヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。【０３６１】  比較例６
および実施例４０それぞれの測定と、前述のＤＣＭ法による測定との相関係数を第４表に示す。【０３６２】
【表４】
0004796489.tif 000015
【０３６３】  第４表から、化合物Ｂ（陰イオン性胆汁酸誘導体）を含有するキットを用いた測定において、化合物Ａを共存させることにより、ＤＣＭとの相関関係がより良好となることが判明した。また、実施例１７と実施例４０との比較から、アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物（化合物Ａ）に陰イオン性胆汁酸誘導体（化合物Ｂ）を共存させることにより、ＤＣＭによる測定との相関関係がより良好となることが判明した。
［化合物Ａと化合物Ｂ（両性胆汁酸誘導体）との併用例］
【実施例４１】
【０３６４】  以下の第一試薬（試薬Ａ）および第二試薬（試薬ｄ１）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ａ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ｄ１）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
ＣＨＡＰＳ                                      ６．０ｇ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．２ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
Ｃ１６ＥＯ３０ＰＯ２０                          ０．２ｇ／Ｌ【０３６５】比較例９
以下の第一試薬（試薬Ａ）および第二試薬（試薬ｄ）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ａ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ｄ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
ＣＨＡＰＳ                                      ６．０ｇ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．２ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
【実施例４２】
【０３６６】  実施例１のキットの代わりに実施例４１のキットを用いる以外は実施例１３の測定法と同様にして、日立７１７０形自動分析装置によりヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。【０３６７】比較例１０
実施例１のキットの代わりに比較例９のキットを用いる以外は実施例１３の測定法と同様にして、日立７１７０形自動分析装置によりヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。【０３６８】  比較例１０
および実施例４２それぞれの測定と、前述のＤＣＭ法による測定との相関係数を第５表に示す。【０３６９】
【表５】
0004796489.tif 000016
【０３７０】  第５表から、化合物Ｂ（両性胆汁酸誘導体）を含有するキットを用いた測定において、化合物Ａを共存させることにより、ＤＣＭとの相関関係がより良好となることが判明した。また、実施例１７と実施例４２との比較から、アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物（化合物Ａ）に両性胆汁酸誘導体（化合物Ｂ）を共存させることにより、ＤＣＭによる測定との相関関係がより良好となることが判明した。
［化合物Ａと２つの化合物Ｂ（ポリアニオンおよび陰イオン性胆汁酸誘導体）との併用例］
【実施例４３】
【０３７１】  以下の第一試薬（試薬Ｂ）および第二試薬（試薬ｃ１）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ｂ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
デキストラン硫酸                                １．０ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ｃ１）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
コール酸ナトリウム                              ６．０ｇ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．２ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
Ｃ１６ＥＯ３０ＰＯ２０                          ０．２ｇ／Ｌ
【実施例４４】
【０３７２】  以下の第一試薬（試薬Ｂ）および第二試薬（試薬ｃ２）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ｂ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
デキストラン硫酸                                １．０ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ｃ２）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
コール酸ナトリウム                              ６．０ｇ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．２ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
ビスノールＳＫ                                  ０．３ｇ／Ｌ【０３７３】比較例１１
以下の第一試薬（試薬Ｂ）および第二試薬（試薬ｃ）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ｂ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
デキストラン硫酸ナトリウム                      １．０ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ｃ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
コール酸ナトリウム                              ６．０ｇ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．２ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
【実施例４５】
【０３７４】  実施例１のキットの代わりに実施例４３のキットを用いる以外は実施例１３の測定法と同様にして、日立７１７０形自動分析装置によりヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。
【実施例４６】
【０３７５】  実施例１のキットの代わりに実施例４４のキットを用いる以外は実施例１３の測定法と同様にして、日立７１７０形自動分析装置によりヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。【０３７６】比較例１２
実施例１のキットの代わりに比較例１１のキットを用いる以外は実施例１３の測定法と同様にして、日立７１７０形自動分析装置によりヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。【０３７７】  比較例１２、実施例４５および実施例４６
それぞれの測定と、前述のＤＣＭ法による測定との相関係数を第６表に示す。【０３７８】
【表６】
0004796489.tif 000017
【０３７９】  第６表から、ポリアニオンおよび陰イオン性胆汁酸誘導体（ともに化合物Ｂ）を含有するキットを用いた測定において、化合物Ａを共存させることにより、ＤＣＭとの相関関係がより良好となることが判明した。また、実施例１７と実施例４５との比較、および、実施例１９と実施例４６との比較から、アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物（化合物Ａ）にポリアニオンおよび陰イオン性胆汁酸誘導体（２つの化合物Ｂ）を共存させることにより、また、ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩（化合物Ａ）にポリアニオンおよび陰イオン性胆汁酸誘導体（２つの化合物Ｂ）を共存させることにより、ＤＣＭ法による測定との相関関係がより良好となることが判明した。
［化合物Ａ、２つの化合物Ｂ（ポリアニオンおよび陰イオン性胆汁酸誘導体）およびアルブミンの併用例］
【実施例４７】
【０３８０】  以下の第一試薬（試薬Ｃ）および第二試薬（試薬ｃ１）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ｃ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
デキストラン硫酸                                １．０ｇ／Ｌ
ＢＳＡ                                          １．０ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ｃ１）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
コール酸ナトリウム                              ６．０ｇ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．２ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
Ｃ１６ＥＯ３０ＰＯ２０                          ０．２ｇ／Ｌ【０３８１】比較例１３
以下の第一試薬（試薬Ｃ）および第二試薬（試薬ｃ）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ｃ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
デキストラン硫酸                                １．０ｇ／Ｌ
ＢＳＡ                                          １．０ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ｃ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
コール酸ナトリウム                              ６．０ｇ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．２ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
【実施例４８】
【０３８２】  実施例１のキットの代わりに実施例４７のキットを用いる以外は実施例１３の測定法と同様にして、日立７１７０形自動分析装置によりヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。【０３８３】比較例１４
実施例１のキットの代わりに比較例１３のキットを用いる以外は実施例１３の測定法と同様にして、日立７１７０形自動分析装置によりヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。【０３８４】  比較例１４および実施例４８それぞれの測定と、前述のＤＣＭ法による測定との相関係数を第７表に示す。【０３８５】
【表７】
0004796489.tif 000018
【０３８６】  第７表から、ポリアニオン、陰イオン性胆汁酸誘導体およびアルブミン（いずれも化合物Ｂ）を含有するキットを用いた測定において、化合物Ａ（アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物）を共存させることにより、ＤＣＭとの相関関係がより良好となることが判明した。また、実施例１７と実施例４８との比較から、アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物（化合物Ａ）にポリアニオン、陰イオン性胆汁酸誘導体（２つの化合物Ｂ）およびアルブミンを共存させることにより、ＤＣＭ法による測定との相関関係がより良好となることが判明した。
［化合物Ａおよび化合物Ｂ（エチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン）の併用例］
【実施例４９】
【０３８７】  以下の第一試薬（試薬Ａ）および第二試薬（試薬ｅ１）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ａ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ｅ１）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
アデカプルロニックＴＲ７０４                    ５．０ｇ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．２ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
ＢＬＡＵＮＯＮ  ＳＡＰ３０１０                  ０．５ｇ／Ｌ
【実施例５０】
【０３８８】  以下の第一試薬（試薬Ａ）および第二試薬（試薬ｅ２）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ａ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ｅ２）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
アデカプルロニックＴＲ７０４                    ５．０ｇ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．２ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
ミグノールＰＡ−３０                            ０．５ｇ／Ｌ
【実施例５１】
【０３８９】  以下の第一試薬（試薬Ａ）および第二試薬（試薬ｅ３）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ａ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ｅ３）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
アデカプルロニックＴＲ７０４                    ５．０ｇ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．２ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
ユニセーフＡ−ＬＹ                              ０．５ｇ／Ｌ【０３９０】比較例１５
以下の第一試薬（試薬Ａ）および第二試薬（試薬ｅ）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ａ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ｅ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
アデカプルロニックＴＲ７０４                    ５．０ｇ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．２ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
【実施例５２】
【０３９１】  実施例１のキットの代わりに実施例４９のキットを用いる以外は実施例１３の測定法と同様にして、日立７１７０形自動分析装置によりヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。
【実施例５３】
【０３９２】  実施例１のキットの代わりに実施例５０のキットを用いる以外は実施例１３の測定法と同様にして、日立７１７０形自動分析装置によりヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。
【実施例５４】
【０３９３】  実施例１のキットの代わりに実施例５１のキットを用いる以外は実施例１３の測定法と同様にして、日立７１７０形自動分析装置によりヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。【０３９４】比較例１６
実施例１のキットの代わりに比較例１５のキットを用いる以外は実施例１３の測定法と同様にして、日立７１７０形自動分析装置によりヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。【０３９５】  比較例１６、実施例５２、実施例５３
および実施例５４それぞれの測定と、前述のＤＣＭ法による測定との相関係数を第８表に示す。【０３９６】
【表８】
0004796489.tif 000019
【０３９７】  第８表から、エチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン（化合物Ｂ）を含有するキットを用いた測定において、化合物Ａ（アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェートまたはアルキルアミンオキシド）を共存させることにより、ＤＣＭとの相関関係がより良好となることが判明した。また、実施例１４と実施例５２との比較から、アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物（化合物Ａ）にエチレンジアミンテトラポリオキシアルキレンを共存させることにより、ＤＣＭ法による測定との相関係数が向上することが判明した。実施例２０と実施例５３との比較から、ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェート（化合物Ａ）にエチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン（化合物Ｂ）を共存させることにより、ＤＣＭ法による測定との相関係数が向上することが判明した。また、実施例５３と実施例５４との比較から、ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェートの代わりにアルキルアミンオキシド（化合物Ａ）を用いて、エチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン（化合物Ｂ）を共存させることにより、ＤＣＭ法による測定との相関関係がより良好となることが判明した。
［化合物Ａおよび２つの化合物Ｂ（ポリアニオンおよびエチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン）の併用例］
【実施例５５】
【０３９８】  以下の第一試薬（試薬Ｂ）および第二試薬（試薬ｅ１）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ｂ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
デキストラン硫酸ナトリウム                      １．０ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ｅ１）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
アデカプルロニックＴＲ７０４                    ５．０ｇ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．２ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
ＢＬＡＵＮＯＮ  ＳＡＰ３０１０                  ０．５ｇ／Ｌ
【実施例５６】
【０３９９】  以下の第一試薬（試薬Ｂ）および第二試薬（試薬ｅ２）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ｂ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
デキストラン硫酸ナトリウム                      １．０ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ｅ２）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
アデカプルロニックＴＲ７０４                    ５．０ｇ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．２ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
ミグノールＰＡ−３０                            ０．５ｇ／Ｌ
【実施例５７】
【０４００】  以下の第一試薬（試薬Ｂ）および第二試薬（試薬ｅ３）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ｂ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
デキストラン硫酸ナトリウム                      １．０ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ｅ３）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
アデカプルロニックＴＲ７０４                    ５．０ｇ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．２ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
ユニセーフＡ−ＬＹ                              ０．５ｇ／Ｌ
【実施例５８】
【０４０１】  以下の第一試薬（試薬Ｂ）および第二試薬（試薬ｅ４）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ｂ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
デキストラン硫酸ナトリウム                      １．０ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ｅ４）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
アデカプルロニックＴＲ７０４                    ５．０ｇ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．２ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
ビスノールＳＫ                                  ０．３ｇ／Ｌ
【実施例５９】
【０４０２】  以下の第一試薬（試薬Ｂ）および第二試薬（試薬ｅ５）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ｂ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
デキストラン硫酸ナトリウム                      １．０ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ｅ５）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
アデカプルロニックＴＲ７０４                    ５．０ｇ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．２ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
ナイミッドＭＴ−２１５                          ０．３ｇ／Ｌ【０４０３】比較例１７
以下の第一試薬（試薬Ｂ）および第二試薬（試薬ｅ）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ｂ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
デキストラン硫酸ナトリウム                      １．０ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ｅ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
アデカプルロニックＴＲ７０４                    ５．０ｇ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．２ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
【実施例６０】
【０４０４】  実施例１のキットの代わりに実施例５５のキットを用いる以外は実施例１３の測定法と同様にして、日立７１７０形自動分析装置によりヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。
【実施例６１】
【０４０５】  実施例１のキットの代わりに実施例５６のキットを用いる以外は実施例１３の測定法と同様にして、日立７１７０形自動分析装置によりヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。
【実施例６２】
【０４０６】  実施例１のキットの代わりに実施例５７のキットを用いる以外は実施例１３の測定法と同様にして、日立７１７０形自動分析装置によりヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。
【実施例６３】
【０４０７】  実施例１のキットの代わりに実施例５８のキットを用いる以外は実施例１３の測定法と同様にして、日立７１７０形自動分析装置によりヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。
【実施例６４】
【０４０８】  実施例１のキットの代わりに実施例５９のキットを用いる以外は実施例１３の測定法と同様にして、日立７１７０形自動分析装置によりヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。【０４０９】比較例１８
実施例１のキットの代わりに比較例１７のキットを用いる以外は実施例１３の測定法と同様にして、日立７１７０形自動分析装置によりヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。【０４１０】  比較例１８および実施例６０〜６４
それぞれの測定と前述のＤＣＭ法による測定との相関係数を第９表に示す。【０４１１】
【表９】
0004796489.tif 000020
【０４１２】  第９表から、ポリアニオンとエチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン（ともに化合物Ｂ）とを含有するキットを用いた測定において、化合物Ａ（アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェート、アルキルアミンオキシド、ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩またはポリオキシエチレン酸アミド）を共存させることにより、ＤＣＭとの相関関係がより良好となることが判明した。また、実施例１４と実施例６０との比較から、アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物（化合物Ａ）にポリアニオンおよびエチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン（２つの化合物Ｂ）を共存させることにより、ＤＣＭ法による測定との相関関係がより良好となることが判明した。実施例２０と実施例６１との比較から、ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェート（化合物Ａ）にポリアニオンおよびエチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン（２つの化合物Ｂ）を共存させることにより、ＤＣＭ法による測定との相関関係がより良好となることが判明した。実施例６１と実施例６２との比較から、化合物Ａとしてポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェートの代わりにアルキルアミンオキシドを用いた場合でも、ＤＣＭ法による測定との相関関係がより良好となることが判明した。【０４１３】  さらに、実施例１９と実施例６３との比較から、ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩（化合物Ａ）にポリアニオンおよびエチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン（２つの化合物Ｂ）を共存させることにより、ＤＣＭ法による測定との相関関係がより良好となることが判明した。また、実施例６３と実施例６４との比較から、化合物Ａとしてポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩の代わりにポリオキシエチレン酸アミドを用いた場合でも、ＤＣＭ法による測定との相関関係がより良好となることが判明した。
［化合物Ａ、３つの化合物Ｂ（ポリアニオン、ポリオキシエチレンアルキルアミンおよび胆汁酸誘導体）およびアルブミンの併用例］
【実施例６５】
【０４１４】  以下の第一試薬（試薬Ｄ）および第二試薬（試薬ｆ１）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ｄ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
硫酸ナトリウム                                  ５．０ｇ／Ｌ
デキストラン硫酸ナトリウム                      １．０ｇ／Ｌ
ＢＳＡ                                          ２．０ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ｆ１）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
ナイミーンＬ２０７                              ０．３ｇ／Ｌ
コール酸ナトリウム                              １．５ｇ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．１ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
ＢＬＡＵＮＯＮ  ＳＡＰ３００４                  ０．１５ｇ／Ｌ
【実施例６６】
【０４１５】  以下の第一試薬（試薬Ｄ）および第二試薬（試薬ｆ２）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ｄ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
硫酸ナトリウム                                  ５．０ｇ／Ｌ
デキストラン硫酸ナトリウム                      １．０ｇ／Ｌ
ＢＳＡ                                          ２．０ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ｆ２）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
ナイミーンＬ２０７                              ０．３ｇ／Ｌ
コール酸ナトリウム                              １．５ｇ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．１ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
Ｃ１６ＥＯ３０ＰＯ１０                          ０．３ｇ／Ｌ【０４１６】比較例１９
以下の第一試薬（試薬Ｄ）および第二試薬（試薬ｆ）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ｄ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
硫酸ナトリウム                                  ５．０ｇ／Ｌ
デキストラン硫酸ナトリウム                      １．０ｇ／Ｌ
ＢＳＡ                                          ２．０ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ｆ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
ナイミーンＬ２０７                              ０．３ｇ／Ｌ
コール酸ナトリウム                              １．５ｇ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．１ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
【実施例６７】
【０４１７】  実施例１のキットの代わりに実施例６５のキットを用いる以外は実施例１３の測定法と同様にして、日立７１７０形自動分析装置によりヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。
【実施例６８】
【０４１８】  実施例１のキットの代わりに実施例６６のキットを用いる以外は実施例１３の測定法と同様にして、日立７１７０形自動分析装置によりヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。【０４１９】比較例２０
実施例１のキットの代わりに比較例１９のキットを用いる以外は実施例１３の測定法と同様にして、日立７１７０形自動分析装置によりヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。【０４２０】  比較例２０、実施例６７および６８それぞれの測定と、前述のＤＣＭ法による測定との相関係数を第１０表に示す。【０４２１】
【表１０】
0004796489.tif 000021
【０４２２】  第１０表から、ポリアニオン、ポリオキシエチレンアルキルアミンおよび胆汁酸誘導体（いずれも化合物Ｂ）ならびにアルブミンを含有するキットを用いた測定において、化合物Ａ（アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物）を共存させることにより、ＤＣＭとの相関関係がより良好となることが判明した。
［化合物Ａ、３つの化合物Ｂ（ポリアニオン、ポリオキシエチレンアルキルアミンおよびエチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン）およびアルブミンの併用例］
【実施例６９】
【０４２３】  以下の第一試薬（試薬Ｄ）および第二試薬（試薬ｇ１）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ｄ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
硫酸ナトリウム                                  ５．０ｇ／Ｌ
デキストラン硫酸ナトリウム                      １．０ｇ／Ｌ
ＢＳＡ                                          ２．０ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ｇ１）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
ナイミーンＬ２０７                              ０．３ｇ／Ｌ
エチレンジアミンＰＯ５２ＥＯ６０                １．０ｇ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．１ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
ＢＬＡＵＮＯＮ  ＳＡＰ３００４                  ０．０５ｇ／Ｌ
【実施例７０】
【０４２４】  以下の第一試薬（試薬Ｄ）および第二試薬（試薬ｇ２）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ｄ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
硫酸ナトリウム                                  ５．０ｇ／Ｌ
デキストラン硫酸ナトリウム                      １．０ｇ／Ｌ
ＢＳＡ                                          ２．０ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ｇ２）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
ナイミーンＬ２０７                              ０．３ｇ／Ｌ
エチレンジアミンＰＯ５２ＥＯ６０                １．０ｇ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．１ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
Ｃ１６ＥＯ３０ＰＯ１０                          ０．２ｇ／Ｌ
【実施例７１】
【０４２５】  以下の第一試薬（試薬Ｄ）および第二試薬（試薬ｇ３）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ｄ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
硫酸ナトリウム                                  ５．０ｇ／Ｌ
デキストラン硫酸ナトリウム                      １．０ｇ／Ｌ
ＢＳＡ                                          ２．０ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ｇ３）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
ナイミーンＬ２０７                              ０．３ｇ／Ｌ
エチレンジアミンＰＯ５２ＥＯ６０                １．０ｇ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．１ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
ナイミッドＭＴ−２１５                          ０．０６ｇ／Ｌ
【実施例７２】
【０４２６】  以下の第一試薬（試薬Ｄ）および第二試薬（試薬ｇ４）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ｄ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
硫酸ナトリウム                                  ５．０ｇ／Ｌ
デキストラン硫酸ナトリウム                      １．０ｇ／Ｌ
ＢＳＡ                                          ２．０ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ｇ４）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
ナイミーンＬ２０７                              ０．３ｇ／Ｌ
エチレンジアミンＰＯ５２ＥＯ６０                １．０ｇ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．１ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
ビスノールＳＫ                                  ０．１ｇ／Ｌ【０４２７】比較例２１
以下の第一試薬（試薬Ｄ）および第二試薬（試薬ｇ）からなるＨＤＬコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬（試薬Ｄ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＭＳＥ                                        ０．３ｇ／Ｌ
硫酸ナトリウム                                  ５．０ｇ／Ｌ
デキストラン硫酸ナトリウム                      １．０ｇ／Ｌ
ＢＳＡ                                          ２．０ｇ／Ｌ
第二試薬（試薬ｇ）
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）                      １０ｍｍｏｌ／Ｌ
４−アミノアンチピリン                          ０．３ｇ／Ｌ
ペルオキシダーゼ                              ２０ｋＵ／Ｌ
ナイミーンＬ２０７                              ０．３ｇ／Ｌ
エチレンジアミンＰＯ５２ＥＯ６０                １．０ｇ／Ｌ
化学修飾ＬＰＬ３１１                            ０．１ｋＵ／Ｌ
ＣＯＯ３２１                                    ５．０ｋＵ／Ｌ
【実施例７３】
【０４２８】  実施例１のキットの代わりに実施例６９のキットを用いる以外は実施例１３の測定法と同様にして、日立７１７０形自動分析装置によりヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。
【実施例７４】
【０４２９】  実施例１のキットの代わりに実施例７０のキットを用いる以外は実施例１３の測定法と同様にして、日立７１７０形自動分析装置によりヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。
【実施例７５】
【０４３０】  実施例１のキットの代わりに実施例７１のキットを用いる以外は実施例１３の測定法と同様にして、日立７１７０形自動分析装置によりヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。
【実施例７６】
【０４３１】  実施例１のキットの代わりに実施例７２のキットを用いる以外は実施例１３の測定法と同様にして、日立７１７０形自動分析装置によりヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。【０４３２】比較例２２
実施例１のキットの代わりに比較例２１のキットを用いる以外は実施例１３の測定法と同様にして、日立７１７０形自動分析装置によりヒト血清３０検体中のＨＤＬコレステロールを測定した。【０４３３】  比較例２２および実施例７３〜７６それぞれの測定と、前述のＤＣＭ法による測定との相関係数を第１１表に示す。【０４３４】
【表１１】
0004796489.tif 000022
【０４３５】  第１１表から、ポリアニオン、ポリオキシエチレンアルキルアミンおよび胆汁酸誘導体（いずれも化合物Ｂ）ならびにアルブミンを含有するキットを用いた測定において、化合物Ａ（アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩またはポリオキシエチレン酸アミド）を共存させることにより、ＤＣＭとの相関関係がより良好となることが判明した。
【産業上の利用可能性】
【０４３６】本発明により、動脈硬化などの疾患の診断に有用なＨＤＬコレステロールの簡便で、かつ、正確な測定方法、測定用試薬および測定用キットが提供される。