(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
鶏の腸内細菌と青色系色素とを含有することを特徴とする鶏の雛用生菌剤。
【請求項２】
ゲル状であることを特徴とする請求項１記載の鶏の雛用生菌剤。
【請求項３】
鶏の腸内細菌と青色系色素とを含有することを特徴とする鶏の雛用飼料。
【請求項４】
ゲル状であることを特徴とする請求項３記載の鶏の雛用飼料。
【請求項５】
請求項１もしくは２記載の鶏の雛用生菌剤または請求項３もしくは４記載の鶏の雛用飼料を鶏の雛に摂取させることを特徴とする鶏の雛のサルモネラ菌汚染予防法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、雛用生菌剤および雛用飼料、並びに雛のサルモネラ菌汚染予防法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
サルモネラ菌による食中毒の主要原因の一つとして、鶏卵へのサルモネラ菌（例えば、Salmonella Enteritidis (SE)）の感染が挙げられる。
採卵鶏がサルモネラ菌に感染すると鶏体内の卵巣や卵管に分布し、鶏卵に入り込む。従って、鶏が卵を産んだ段階で既に卵内部はサルモネラ菌に汚染されている。サルモネラ菌による汚染の有無は、鶏卵の外観からでは鑑別できず、ＧＰセンター（Grading AND Packaging Center；鶏卵を洗浄し大きさ別に選別しパックする工場）での洗浄工程でも鶏卵内部の汚染は除去できない。
【０００３】
たとえ鶏がサルモネラ菌に感染していても、サルモネラ菌に汚染された鶏卵が産出される率は０．０１〜１％程度と低いが、鶏卵を調理する際の加熱が不十分であるとサルモネラ菌が生存し続け、食品中で増殖して食中毒を起こすほどの菌数まで増加する場合がある。特に抵抗性の低い幼児、老人又は病人では健康成人に比して少ない菌数でも食中毒が起こる。
【０００４】
鶏卵の衛生的品質を確保し、サルモネラ菌による食中毒を減少させるためには、農場から食卓までの生産流通の全ての段階での対策が必要であるが、特に、鶏群におけるサルモネラ菌の汚染率を減少させることが必要となる。
【０００５】
しかしながら、現代の養鶏において、雛の生産は孵化場で行われているため、雛は親鶏と接触する機会を持っておらず、しかも種鶏からの病気の伝播を防ぐために各段階で徹底的消毒が行われている。このため、雛は腸管系病原菌の感染防御に必要な有用腸内細菌叢を親鶏から受け継ぐことができず、鶏は特に若齢期においてサルモネラ菌に対する感受性が極めて高い。そして、このような雛を野外で普通に飼育した場合には、サルモネラ菌の感染防御に必要な腸内細菌叢が成立するのに６週間以上の長い時間が必要である。
【０００６】
したがって、腸内細菌叢が未熟な若齢期の雛に対するサルモネラ菌の感染が、その後の鶏群におけるサルモネラ菌の汚染率に影響するものと考えられ、鶏群におけるサルモネラ菌の汚染率を減少させるためには、雛におけるサルモネラ菌汚染を予防する必要があると考えられる。
【０００７】
これまでに、サルモネラ菌の感染防御に有効な方法として、成鶏の腸内細菌叢を雛に強制的に定着させる方法が開発されている（E.Nurmi and M.Rantala, ; New aspects of Salmonella infection in broilerindustry., Nature 241:210-211 (1973)）。この方法によれば、その後にサルモネラ菌が経口的に感染しても雛の体内でのサルモネラ菌増殖が抑制され、野外で通常見られるような高度な排菌が起こらない。この方法は、競合排除法、ＣＥ（Competitive Exclusion）法またはヌルミ法と呼ばれている。
【０００８】
雛に投与する腸内細菌叢としては、一般的に、成鶏の盲腸内容物、腸管粘膜または糞便を嫌気培養したものが用いられ、これらは含まれている菌種と菌数が完全に明らかにできないために未同定菌製剤（Undefined Culture）と呼ばれている。また、未同定菌製剤を長期間連続培養して含まれている菌種と菌数が一定になったものも製造されており、さらに、未同定菌製剤から単離し純培養した菌を多種類混合したものも用いられている。これらは含まれている菌種と菌数が判明しているため同定菌製剤（Defined Culture）と呼ばれている。そして、未同定菌製剤と同定菌製剤は総称して「競合排除培養物（ＣＥ培養物）」と呼ばれている。
【０００９】
この競合排除培養物を用いて雛のサルモネラ菌汚染を予防するためには、雛の孵化後できるだけ早期に必要量の競合排除培養物を投与することが必要である。
したがって、実験室内で行われているように１羽ずつ経口投与するのが最良であるが、野外で実施する場合、この方法では手間と時間、すなわちコストがかかりすぎて現実的でない。そこで、野外では、孵化場での種卵に対するスプレーと雛に対する散霧、農場での飲水添加投与などが行われている。
しかしながら、これらの方法では、雛の孵化後できるだけ早期に必要量の競合排除培養物を投与することは困難である。特に、飲水量および飼料摂取量の少ない概ね０〜７日令の雛に短時間に必要量の競合排除培養物を投与することは困難である。
【００１０】
このような状況の下、本発明者らは、先に、雛の孵化後できるだけ早期に必要量の競合排除培養物を投与するのに適したタイプの雛用生菌剤として、競合排除培養物を水媒体中でゲル化能を有する多糖類を用いてゲル状に固形した雛用生菌剤を開発している（特開平11-302185号公報）。この雛用生菌剤によれば、床面の固形物を嘴で突いて摂取しようとする雛の遺伝的プログラム（習性）を利用して、飲水量および飼料摂取量の少ない概ね０〜７日令の雛に短時間に必要量の競合排除培養物を摂取させることができ、これによって雛のサルモネラ菌汚染を予防することができる。
【００１１】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、第一に、雛の腸内細菌叢の形成に必要な鳥類の腸内細菌を効率よく雛に摂取させることができる雛用生菌剤を提供することを目的とする。
また、本発明は、第二に、雛の腸内細菌叢の形成に必要な鳥類の腸内細菌に加え、雛の成長に必要な水分、栄養素等を効率よく雛に摂取させることができる雛用飼料を提供することを目的とする。
さらに、本発明は、第三に、雛のサルモネラ菌汚染を効率よく予防することができる方法を提供することを目的とする。
【００１２】
【課題を解決するための手段】
上記課題を解決するために、本発明は、第一に、鳥類の腸内細菌と青色系色素とを含有することを特徴とする雛用生菌剤を提供し、第二に、鳥類の腸内細菌と青色系色素とを含有することを特徴とするおよび雛用飼料を提供し、第三に、前記雛用生菌剤または前記雛用飼料を雛に摂取させることを特徴とする雛のサルモネラ菌汚染予防法を提供する。
【００１３】
【発明の実施の形態】
以下、本発明について詳細に説明する。
【００１４】
本発明の雛用生菌剤および雛用飼料は、鳥類の腸内細菌と青色系色素とを含有することを特徴とする。
【００１５】
本発明の雛用生菌剤および雛用飼料に含有し得る青色系色素の種類は、本発明の雛用生菌剤および雛用飼料をそれぞれ青色に着色し得る限り特に限定されない。青色系色素の具体例としては、青色４号、青色１号、青色２号等を例示でき、これらの１種を単独で使用してもよいし、２種以上を組み合わせて使用してもよい。
【００１６】
青色とは、スペクトル波長が約４００〜５００ｎｍ、好ましくは約４５０〜５００ｎｍの色である。例えば、青色系色素として青色４号を使用する場合、０．０３〜０．１％（ｗ／ｖ）の青色４号溶液に相当する色が好ましく、０．０３〜０．０４％（ｗ／ｖ）の青色４号溶液に相当する色がさらに好ましい。
【００１７】
本発明の雛用生菌剤および雛用飼料における青色系色素の含有量は、本発明の雛用生菌剤および雛用飼料を青色に着色し得る限り特に限定されず、青色系色素の種類、雛用生菌剤や雛用飼料の性状等に応じて適宜調整することができるが、本発明の雛用生菌剤および雛用飼料の全体が青色に着色し得るように青色系色素の含有量を調整することが好ましい。例えば、雛用生菌剤および雛用飼料の性状が液状またはゲル状であって、青色系色素として青色４号を使用する場合、雛用生菌剤および雛用飼料における青色４号の濃度が、０．０１〜０．５％（ｗ／ｖ）、好ましくは０．０３〜０．１％（ｗ／ｖ）、さらに好ましくは０．０３〜０．０４％（ｗ／ｖ）となるように青色４号の含有量を調整すればよい。
【００１８】
本発明の雛用生菌剤および雛用飼料に含有し得る鳥類の腸内細菌は、鳥類の腸内に存在し定着している細菌である限り特に限定されない。鳥類の腸内細菌の具体例としては、ラクトバチルス属、ビフィドバクテリウム属、バクテロイデス属、ユウバクテリウム属、ベイヨネラ属、ストレプトコッカス属、エンテロコッカス属、クロストリジウム属、バチルス属、腸内細菌科等に属する細菌を例示でき、これらのうち１種を単独で使用してもよいし、２種以上を組み合わせて使用してもよいが、好ましくは、鳥類の腸内細菌叢を使用する。腸内細菌叢は、腸内に存在し定着している多種多様の細菌から構成されているものである。
【００１９】
鳥類の腸内細菌叢としては、例えば、競合排除培養物（ＣＥ培養物）を使用することができる。競合排除培養物の具体例としては、鳥類の盲腸内容物、腸管粘膜または糞便を嫌気培養したもの（未同定菌製剤（Undefined Culture））、未同定菌製剤を長期間連続培養して含まれている菌種と菌数が一定になったもの（同定菌製剤（Defined Culture））、未同定菌製剤から単離し純培養した菌を多種類混合したもの（同定菌製剤（Defined Culture））等を例示することができ、これらを単独で、または２種類以上を組み合わせて使用することができる。
【００２０】
腸内細菌が由来する鳥類の種類は特に限定されないが、本発明の雛用生菌剤および雛用飼料を投与する雛の種類と同一であることが好ましい。例えば、本発明の雛用生菌剤を投与する雛が鶏の雛である場合には、腸内細菌が由来する鳥類が鶏であることが好ましい。この際、鶏の腸内細菌または腸内細菌叢としては、鶏の盲腸内容物培養飼料として市販されている製品を使用することができる。その代表的な製品としては、未同定菌製剤については、インテクリーン（商品名）（販売元：伊藤忠飼料（株））、アヴィガード（商品名）（販売元：バイエル（株））、ブロイラクト（商品名）（販売元：藤沢薬品工業（株））を例示することができ、同定菌製剤については、デローチ２９（商品名）（販売元：共立商事（株））を例示することができる。
【００２１】
本発明の雛用飼料は、鳥類の腸内細菌と青色系色素以外の成分として、水分、栄養素等を含有する。栄養素としては、糖類等の炭水化物、スキムミルク等のタンパク質、ビタミン、ミネラル等を例示でき、糖類としては、グルコース、マンノース、フラクトース等の単糖類またはこれらのオリゴ体、シュークロース等の二糖類等を例示でき、これらの栄養素のうち１種または２種以上を本発明の雛用飼料に配合することができる。また、本発明の雛用飼料には、生菌剤、ワクチン、各種薬剤等を配合することもでき、例えば、生菌剤として本発明の雛用生菌剤を配合することができる。
本発明の雛用生菌剤は、鳥類の腸内細菌と青色系色素以外の成分として、水分、栄養素、ワクチン、薬剤等を含有していてもよい。
【００２２】
本発明の雛用生菌剤および雛用飼料の性状は特に限定されず、粉末状、粒状、液状、ゲル状等のいずれの性状であってもよいが、ゲル状であることが好ましい。本発明の雛用生菌剤および雛用飼料をゲル状とすることにより、床面の固形物を嘴で突いて摂取しようとする雛の遺伝的プログラム（習性）を利用して、雛に短時間に必要量の腸内細菌を摂取させることができる。
【００２３】
ゲル状の雛用生菌剤および雛用飼料は、例えば、本発明の雛用生菌剤および雛用飼料にゲル化剤を配合し、ゲル化させることにより得ることができる。この際、ゲル化剤としては、例えば、ゲル化能を有する水溶性多糖類を使用することができる。ゲル化能を有する水溶性多糖類の具体例としては、寒天、カラギーナン、カルボキシメチルセルロース、澱粉、マンナン、ゼラチン、アルギン酸ナトリウム、アラビヤガム、ロウストビーンガム、キサンタンガム、キトサン、グアーガム、ペクチン、アルギン酸プロピルグリコールエステル、アラビノガラクタン、ガティガム、タマリンドシードガム、プルラン、モルホリン脂肪酸塩、カードラン、トラガントガム等を例示することができる。これらの多糖類のうち、安価且つ容易に入手し得る点から、特に寒天、澱粉、マンナン、ゼラチンを好ましいものとして例示することができる。
【００２４】
ゲル状の雛用生菌剤は、具体的には、鳥類の腸内細菌、青色系色素、水およびゲル化能を有する水溶性多糖類を添加混合し、攪拌して均一な溶液とした後、常温で放置するか、あるいは冷所（例えば冷蔵庫等）に保管することにより得ることができる。また、腸内細菌として競合排除培養物を使用する場合には、競合排除培養物を調製するための培地に予めゲル化能を有する水溶性多糖類を加えておき、該培地を高圧蒸気殺菌後冷却してゲル化直前に種菌を接種し、３７℃で嫌気培養後、青色系色素を加え、これを常温で放置するか、あるいは冷所（例えば冷蔵庫等）に保管することにより得ることもできる。
ゲル状の雛用飼料も上記と同様にして得ることができる。
【００２５】
雛用生菌剤および雛用飼料にゲル化能を有する水溶性多糖類を配合するが、雛に投与する前は水を加えずに、雛用生菌剤および雛用飼料を粉末状または粒状にしておき、雛に投与する際に水を加えてゲル化し、雛用生菌剤および雛用飼料をゲル状とすることもできる。
【００２６】
ゲル状の雛用生菌剤および雛用飼料におけるゲル強度は、概ね２００〜２０００ｇ／ｃｍ２であることが好ましく、このゲル強度は、ゲル化剤として寒天を使用する場合、寒天の種類によっても異なるが寒天の濃度を概ね０．５〜３．０％とすることにより得ることができる。
【００２７】
本発明の雛用生菌剤および雛用飼料の対象となる雛の種類は特に限定されないが、鶏等の家禽類の雛、特に概ね０〜７日令の若令期の雛を対象とすることが好ましい。一般に、鶏等の家禽類の雛は親鳥と完全に離し、清浄な環境で孵化させるため、病原性細菌（例えばサルモネラ菌）の感染防御に必要な腸内細菌叢の形成が遅れ、病原性細菌（例えばサルモネラ菌）の定着・増殖に対して抵抗力が低くなっているからである。
【００２８】
従来から雛は赤色を好むと考えられてきたが、後述する実施例に示されるように、雛は青色を好み、青色系色素を含有する雛用生菌剤および雛用飼料を好んで摂取する。したがって、本発明の雛用生菌剤によれば、雛に腸内細菌叢を形成させるために必要な量の腸内細菌を効率よく摂取させることができる。また、本発明の雛用飼料によれば、腸内細菌に加え、雛の成長に必要な水分や栄養素を効率よく摂取させることができる。そして、雛に本発明の雛用生菌剤または雛用飼料を摂取させることにより、雛に腸内細菌叢を早期に形成させることができ、これによって、雛の腸管、卵巣、卵管等の器官への病原性細菌（例えばサルモネラ菌）の定着・増殖を抑制でき、病原性細菌（例えばサルモネラ菌）による雛の汚染を予防することができる。
【００２９】
【実施例】
以下に実施例を挙げて本発明を具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
【００３０】
〔実施例１〕
（１）無着色および有着色のゲル状生菌剤の調製
変法ＶＬ液体培地プレミックス（５００ｍｌ分当たりの組成：トリプトン（Ｏｘｏｉｄ）５ｇ、塩化ナトリウム２．５ｇ、ラブレムコパウダー（Ｏｘｏｉｄ）１．２ｇ、酵母エキス（Ｄｉｆｃｏ）２．５ｇ、塩酸システイン０．２ｇ、グルコース１．３ｇ、寒天０．３ｇ）５００ｍｌ分を純水に溶解した後、伊那寒天（ＵＭ−１１）４ｇを加え（寒天の最終濃度：０．８％（ｗ／ｖ））、１２１℃で１５分間高圧蒸気滅菌した後、４３℃に保持した。
これに、鶏の盲腸内容物培養飼料として市販されているインテクリーン（商品名）（販売元：伊藤忠飼料（株））の種菌０．５ｍｌを接種しガスパック法により４０℃で嫌気培養し、寒天含有ＣＥ培養物を得た。この際、インテクリーンの種菌としては、およそ３００日令の採卵鶏の盲腸内容物を取り出し、１０％（ｖ／ｖ）グリセリン添加ＧＡＭ培地（日水製薬）で１０％（ｗ／ｖ）乳剤を調製し、凍結保存しておいたものを使用した。また、ガスパック法は、米国ＢＢＬ社の嫌気培養システムを使用して行なった。なお、ガスパック法においては、専用容器に培養物、水素発生袋および触媒を入れて密閉するので、発生した水素は触媒の作用により残留酸素と結合して水となり、酸素が消費されて嫌気状態となる。
滅菌ビンに上記ＣＥ培養物４９．５ｍｌを取り、これに１０％（ｗ／ｖ）赤色１号溶液または１０％（ｗ／ｖ）青色４号溶液を０．５ｍｌ添加した（赤色１号の最終濃度：０．１％（ｗ／ｖ）、青色４号の最終濃度：０．１％（ｗ／ｖ））。
上記ＣＥ培養物に赤色１号および青色４号のいずれも加えていない試料（以下「無着色試料」という。）、上記ＣＥ培養物に赤色１号を加えた試料（以下「赤色試料」という。）および上記ＣＥ培養物に青色４号を加えた試料（以下「青色試料」という。）をそれぞれシャーレ等の容器に２５．０ｍｌずつ分注、固化し、使用するまで密閉容器で冷蔵保存しておいた。
【００３１】
（２）無着色および有着色のゲル状生菌剤の摂食試験
無着色試料、赤色試料および青色試料を、雛箱の床面に設置するか、あるいは床面から約８０ｍｍ上方（起立した状態における雛の嘴の高さに相当する）に位置するように雛箱から吊し下げ、当日雛（０日令）および翌日雛（１日令）に自由に摂取させた。なお、雛としては鶏の雛を使用した。
この際、雛箱を４つに仕切り、そのうち２つには雛を１０羽ずつ入れ、無着色試料を床面に設置し、雛に自由に摂取させた（以下「試験区１」という。）。残りの２つには雛を２５羽ずつ入れ、無着色試料を床面から約８０ｍｍ上方に位置するように雛箱から吊し下げ、雛に自由に摂取させた（以下「試験区２」という。）。
【００３２】
また、別の雛箱を４つに仕切り、そのうち２つには雛を２５羽ずつ入れ、赤色試料を床面から約８０ｍｍ上方に位置するように雛箱から吊し下げ、雛に赤色試料を摂取させた（以下「試験区３」という。）。残りの２つには雛を２５羽ずつ入れ、青色試料を床面から約８０ｍｍ上方に位置するように雛箱から吊し下げ、雛に青色試料を摂取させた（以下「試験区４」という。）。
雛に摂取させる前に各試料の重量を測定しておくとともに、摂取後一定時間毎に各試料の重量を測定し、各試料の消費量から１羽あたりの摂食量を計算した。
当日雛の摂食量を以下の表１に、翌日雛の摂食量を以下の表２に示す。
【００３３】
0004731663.tif 000002
【００３４】
0004731663.tif 000003
【００３５】
無着色試料を床面に設置して雛に摂食させる従来の方法（試験区１）では、当日雛の摂食状況は良好であったが（表１参照）、翌日雛の摂食状況は良好ではなかった（表２参照）。これは、当日雛では未だ起立姿勢が安定しておらず座っていることが多いため、床面に置かれた試料を認識し摂食しやすいのに対して、翌日雛では起立していることが多いため、床面の上方に位置した試料を認識し摂取しやすいからであるものと推測される。
当日雛は、上述のように、床面の上方に設置された試料よりも床面に設置された試料の方を認識し摂取しやすいにも関わらず、床面の上方に設置された青色試料（試験区４）は、床面に設置された無着色試料（試験区１）とほぼ同等の摂取量であった（表１参照）。これに対して、床面の上方に設置された無着色試料（試験区２）および床面の上方に設置された赤色試料（試験区３）は、床面に設置された無着色試料（試験区１）よりも摂取量が少なかった（表１参照）。
翌日雛は、上述のように、床面の上方に設置された試料の方を認識し摂取しやすいが、床面の上方に設置された無着色試料、赤色試料および青色試料（試験区２、３および４）の中で、青色試料の摂取量が最も多かった（表２参照）。
以上の結果から、雛は、無着色のものや赤色に着色されたものよりも青色に着色されたものを好んで摂食することが判明した。
【００３６】
〔実施例２〕
（１）無着色および有着色のゲル状生菌剤の調製
実施例１と同様にして寒天含有ＣＥ培養物を得、このＣＥ培養物を滅菌ビンに４９．５ｍｌを取り、これに１０％（ｗ／ｖ）青色４号溶液を０．５ｍｌ添加し（青色４号の最終濃度：０．１％（ｗ／ｖ））、これを青色試料とした。
また別の滅菌ビンに上記ＣＥ培養物４８．９ｍｌを取り、１０％（ｗ／ｖ）青色４号溶液０．１ｍｌおよび０．５％（ｗ／ｖ）フェノールレッド溶液１．０ｍｌを加えた後、１Ｎ塩酸０．５ｍｌを加えたものを、緑色試料とした。
無着色の上記ＣＥ培養物（以下「無着色試料」という。）、青色試料および緑色試料をそれぞれシャーレ等の容器に２５．０ｍｌずつ分注、固化し、使用するまで密閉容器で冷蔵保存しておいた。
【００３７】
（２）無着色および有着色のゲル状生菌剤の摂取試験
無着色試料、青色試料および緑色試料を、雛箱の床面に設置するか、あるいは床面から約８０ｍｍ上方（雛が起立したときの頭の高さに相当する）に位置するように雛箱から吊し下げ、当日雛（０日令）に自由に摂取させた。なお、雛としては鶏の雛を使用した。
この際、雛箱を４つに仕切り、そのうち２つには雛を１０羽ずつ入れ、無着色試料を床面に設置し、雛に自由に摂取させた（以下「試験区１」という。）。残りの２つには雛を２５羽ずつ入れ、無着色試料を床面から約８０ｍｍ上方に位置するように雛箱から吊し下げ、雛に自由に摂取させた（以下「試験区２」という。）。
【００３８】
また、別の雛箱を４つに仕切り、そのうち２つには雛を２５羽ずつ入れ、青色試料を床面から約８０ｍｍ上方に位置するように雛箱から吊し下げ、雛に青色試料を摂取させた（以下「試験区３」という。）。残りの２つには雛を２５羽ずつ入れ、緑色試料を床面から約８０ｍｍ上方に位置するように雛箱から吊し下げ、雛に緑色試料を摂取させた（以下「試験区４」という。）。
雛に摂取させる前に各試料の重量を測定しておくとともに、摂取後一定時間毎に各試料の重量を測定し、各試料の消費量から１羽あたりの摂食量を計算した。
当日雛の摂取量を以下の表３に示す。
【００３９】
0004731663.tif 000004
【００４０】
当日雛は、床面の上方に設置された青色試料（試験区３）は、床面に設置された無着色試料（試験区１）とほぼ同等の摂取量であった。これに対して、床面の上方に設置された無着色試料（試験区２）および床面の上方に設置された緑色試料（試験区４）は、床面に設置された無着色試料（試験区１）および床面の上方に設置された青色試料（試験区３）よりも摂取量が少なかった。
この結果から、雛は、緑色に着色されたものよりも青色に着色されたものを好んで摂取することが判明した。
【００４１】
〔実施例３〕
（１）無着色および有着色のゲル状生菌剤の調製
実施例１と同様にして寒天含有ＣＥ培養物を得、このＣＥ培養物を４本の滅菌ビンにそれぞれ５０ｍｌずつ取り、各滅菌ビンに１０％（ｗ／ｖ）青色４号溶液を０．５ｍｌ、０．２ｍｌ、０．１ｍｌまたは０．０５ｍｌ添加し、それぞれ青色４号の最終濃度を０．１％（ｗ／ｖ）、０．０４％（ｗ／ｖ）、０．０３％（ｗ／ｖ）、０．０２％（ｗ／ｖ）とした。
各試料をそれぞれ容器に２５．０ｍｌずつ分注固化し、使用するまで密閉容器で冷蔵保存しておいた。
【００４２】
（２）無着色および有着色のゲル状生菌剤の摂食試験
各試料を、床面から約８０ｍｍ上方（雛が起立したときの頭の高さに相当する）に位置するように雛箱から吊し下げ、当日雛（０日令）に自由に摂取させた。なお、雛としては鶏の雛を使用した。
この際、雛箱を４つに仕切り、各々に雛を２５羽ずつ入れ、各試料を床面から約８０ｍｍ上方に位置するように雛箱から吊し下げ、雛に自由に摂取させた。
雛に摂取させる前に各試料の重量を測定しておくとともに、摂取後一定時間毎に各試料の重量を測定し、各試料の消費量から１羽あたりの摂食量を計算した。
当日雛の摂取量を以下の表４に示す。
【００４３】
0004731663.tif 000005
【００４４】
雛の摂食状況は青色４号の濃度によってあまり変化しなかったが、緑色に近い０．０２％ではやや摂食量が少なく、０．０３％〜０．０４％では摂食量がやや多かった。
この結果から、雛は、青色系色素の濃度に関係なく、青色に着色されているものを好んで摂食することが判明した。
【００４５】
【発明の効果】
本発明の雛用生菌剤によれば、雛の腸内細菌叢の形成に必要な鳥類の腸内細菌を効率的に雛に摂取させることができる。また、本発明の雛用試料によれば、雛の腸内細菌叢の形成に必要な鳥類の腸内細菌に加え、雛の成長に必要な水分、栄養素等を効率的に雛に摂取させることができる。さらに、本発明の雛のサルモネラ菌汚染予防法によれば、雛の腸内細菌叢を早期に形成させ、雛のサルモネラ菌汚染を効率よく予防することができる。