(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
水；水混和性溶剤、または上記溶剤と水不混和性溶剤との混合物；式Ｉの化合物；およびＮ−（４−トリフルオロメチルフェニル）−２−シアノ−３−ヒドロキシクロトンアミドを含有する溶液から式Ｉ
【化１】
0004625187.tif 000010
の化合物を得る方法であって、
ａ) 上記溶液中のＮ−（４−トリフルオロメチルフェニル）−２−シアノ−３−ヒドロキシクロトンアミド量を定量的に測定し、
ｂ) 無機塩基を、工程ａ）において測定したＮ−（４−トリフルオロメチルフェニル）−２−シアノ−３−ヒドロキシクロトンアミド量の５０モル％〜１５０モル％に相当する量で添加し、
ｃ) 式Ｉの化合物を結晶化させ、そして
ｄ) 得られた式Ｉの化合物の結晶を上記溶液から分離する
ことを含む、上記方法。
【請求項２】
使用する無機塩基が炭酸水素ナトリウムである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
使用する水混和性溶剤がイソプロパノールである、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
結晶化を４１℃〜８０℃の温度で行う、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
工程ｂ）による有機溶剤と水の混合物を４０℃〜８５℃の温度に加熱する、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
工程ａ）における有機溶剤／水の比が１：１〜８：１である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
工程ｃ）における有機溶剤／水の比が４：１〜０.３：１である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、本質的に副生成物を含まないＮ−（４−トリフルオロメチルフェニル）−５−メチルイソキサゾール−４−カルボキサミドを結晶形態で得る方法に関する。
【０００２】
式Ｉ
【化２】
0004625187.tif 000002
の化合物は本来公知であり、Ｎ−（４−トリフルオロメチルフェニル）−５−メチルイソキサゾール−４−カルボキサミドまたはレフルノミド (leflunomide)(HWA 486) とも呼ばれる。式Ｉの化合物は欧州特許EP 0 013 376 B1または同等の米国特許US 4,284,786に記載の方法により得ることができる。これらの特許には、トルエンからの結晶化方法も記載されている。
【０００３】
式Ｉの化合物を得るためのこれら公知方法の欠点は、Ｎ−（４−トリフルオロメチルフェニル）−２−シアノ−３−ヒドロキシクロトンアミド（以下、化合物２）のような副生成物を、式Ｉの化合物および化合物２を含有する溶液から結晶化により本質的に分離できないことである。化合物２は例えば欧州特許EP 0 217 206 B1および同等の米国特許US 4,965,276に記載されている。
【０００４】
本発明の目的は、方法条件を変更することにより、本質的にＮ−（４−トリフルオロメチルフェニル）−２−シアノ−３−ヒドロキシクロトンアミドを含まない式Ｉの化合物を高い収率で提供することである。
【０００５】
この目的は、化合物２を副生成物として含有する式Ｉの化合物を、有機溶剤または有機溶剤／水の混合物中に移行させ、この溶液中の化合物２の量を適切な分析方法により決定し、ほぼ等モル量の塩基、例えばＮａＨＣＯ3またはＫＨＣＯ3を添加し、そして得られた溶液から式Ｉの化合物を結晶化により分離することによって達成される。
【０００６】
従って本発明は、水、少なくとも１種の有機溶剤、式Ｉの化合物およびＮ−（４−トリフルオロメチルフェニル）−２−シアノ−３−ヒドロキシクロトンアミドを含有する溶液から式Ｉ
【化３】
0004625187.tif 000003
の化合物を得る方法に関し、この方法は、
ａ) 上記溶液中のＮ−（４−トリフルオロメチルフェニル）−２−シアノ−３−ヒドロキシクロトンアミド量を定量的に測定し、
ｂ)  工程ａ）において測定したＮ−（４−トリフルオロメチルフェニル）−２−シアノ−３−ヒドロキシクロトンアミド量の５０モル％〜１５０モル％に相当する量の塩基を添加し、
ｃ) 式Ｉの化合物を結晶化させ、そして
ｄ) 得られた式Ｉの化合物の結晶を上記溶液から分離する
ことを含む。
【０００７】
塩基を添加する結果として、Ｎ−（４−トリフルオロメチルフェニル）−２−シアノ−３−ヒドロキシクロトンアミドは溶液中に残り、結晶化中に式Ｉの化合物と一緒に分離されることがない。ｂ）において定義した塩基の添加量よりも少量または多量は、副生成物形成の増加および式Ｉの化合物の収率低下に導く。式Ｉの化合物を得るために、例えば式Ｉの化合物を溶剤に溶解する。好適な溶剤は、例えば水混和性溶剤（例えば（Ｃ1〜Ｃ4）−アルコール、例えばメタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、ブタノールまたはイソブタノールだけでなく、ケトン、例えばアセトンまたはメチルエチルケトン、またはこれらの混合物）、または上記溶剤と水不混和性溶剤（例えば酢酸エチル、トルエンまたはジクロロメタン）との混合物である。次いで水を添加する。水と有機溶剤、例えば約４０％〜９０％のイソプロパノールとの混合物が有用であることも証明された。溶解工程は好ましくは個々の溶剤の沸点までの高められた温度で行われる。
【０００８】
得られた溶液中のＮ−（４−トリフルオロメチルフェニル）−２−シアノ−３−ヒドロキシクロトンアミド量を測定する。好適な測定方法は、慣用の定量的測定方法、例えば高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）またはアルカリ滴定である。溶液からサンプルを採取し、化合物２の量を標準的装置で決定する。次いで塩基を溶液に添加する。Ｎ−（４−トリフルオロメチルフェニル）−２−シアノ−３−ヒドロキシクロトンアミド（化合物２）の測定量に基づき、７０モル％〜１３０モル％を添加すると、良好な結果がＨＰＬＣにより得られる。化合物２の量をアルカリ滴定により決定する場合、９５モル％〜１０５モル％の量が有利である。定量的に決定した化合物２の量を各場合に１００％と見なし、各場合に添加する塩基の相当モル量を決定する。８５モル％〜１２０モル％、特に好ましくは１００モル％〜１１５モル％、実に特に好ましくは１０８モル％〜１１２モル％を添加することが好ましい。塩基は溶解形態または固体形態で添加することができ；溶解形態での添加が好ましい。
【０００９】
また、成分である水、溶剤、式Ｉの化合物および塩基を溶解する順序は、上記の順序と異なる。例えば、塩基を溶剤の添加前に、水を溶剤の添加前に添加することもでき、または溶液を加熱してしまうまで塩基を添加しない。
【００１０】
好適な塩基は、例えば有機塩基、例えばモノ−、ジ−またはトリアルキルアミン、例えばトリメチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、トリブチルアミン、トリイソブチルアミン、トリペンチルアミン、トリヘキシルアミン、ジブチルメチルアミン、ジメチルアミンまたはジエチルアミン（これらのアルキルアミンは非置換であるか、またはフェニルもしくはベンジルでモノ置換ないしトリ置換されている）、芳香族アミン、例えばアニリンおよび置換アニリン、非置換および置換ヘテロ環式アミン、例えばピリジン、ピペリジン、ピロール、インドール、ピラジン、ピリミジン、モルホリン、ピラゾールまたはイミダゾール、例えば（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキルピリジンである。さらなる好適な塩基は、無機塩基、例えば炭酸水素ナトリウム（ＮａＨＣＯ3）、炭酸ナトリウム（Ｎａ2ＣＯ3）、炭酸水素カリウム（ＫＨＣＯ3）、炭酸カリウム（Ｋ2ＣＯ3）、リン水素ナトリウム（Ｎａ2ＨＰＯ4）、リン酸二水素ナトリウム（ＮａＨ2ＰＯ4）、リン酸トリナトリウム（Ｎａ3ＰＯ4）、リン酸水素カリウム（Ｋ2ＨＰＯ4）、リン酸二水素カリウム（ＫＨ2ＰＯ4）またはリン酸トリカリウム（Ｋ3ＰＯ4）、好ましくはＮａＨＣＯ3である。
【００１１】
得られた溶液または懸濁液を加熱し、式Ｉの化合物の完全な溶解を確実にするために、ある時間沸点に保持する。その後、場合により濾過した溶液を、式Ｉの化合物の結晶が生成するほどにゆっくりと冷却する。冷却は、好ましくは２０℃〜−１０℃の最終温度、特に１０℃〜−５℃の温度、実に特に好ましくは１０℃〜５℃の温度になるまで行われる。結晶を単離し、場合によりイソプロパノールおよび次いで水で洗浄する。この物質を高められた温度、好ましくは６０℃で、減圧または大気圧下に乾燥する。他の結晶化方法、例えば蒸発結晶化または置換結晶化も可能である。
【００１２】
好ましい方法は、式Ｉの化合物を濃度８０％のイソプロパノール中に、イソプロパノールの沸点において大気圧または減圧下に溶解し、Ｎ−（４−トリフルオロメチルフェニル）−２−シアノ−３−ヒドロキシクロトンアミド量の決定をＨＰＬＣにより行い、等モル量の塩基を添加し、次いで結晶化が４０℃を越える温度、好ましくは４０℃〜８５℃、特に好ましくは４５℃〜８０℃、特に５０℃〜７０℃の温度で起こるように、ゆっくりと熱溶液を冷却することを含む。次いで分離した結晶をイソプロパノールで数回洗浄し、減圧乾燥する。結晶化は式Ｉの化合物の結晶を播種しないで、または好ましくは式Ｉの化合物の結晶の存在下に行うことができ、これらの結晶は播種により溶液に導入する。播種は種々の温度で数回行うこともできる。種材料の量は溶液の量に依存し、当業者により容易に決定することができる。
【００１３】
水、少なくとも１種の有機溶剤、式Ｉの化合物およびＮ−（４−トリフルオロメチルフェニル）−２−シアノ−３−ヒドロキシクロトンアミドを含有する溶液から式Ｉの化合物を得るための特に好ましい方法は、
ａ) 溶液中のＮ−（４−トリフルオロメチルフェニル）−２−シアノ−３−ヒドロキシクロトンアミド量をアルカリ滴定により測定し、
ｂ) ほぼ等モル量の塩基を添加し、
ｃ) 得られた溶液を４１℃からその有機溶剤の沸点までの温度に加熱し、
ｄ) 有機溶剤および水が好ましくは４：１〜０.３：１の比で存在するように、得られた溶液を水で希釈するか、または有機溶剤を留去し、そして
ｅ) 結晶化を４０℃を越える温度で行う
ことを含む。
好ましくは、方法工程ｂ）の後に得られた溶液を濾過する。
【００１４】
上記の塩基が好適であり、炭酸水素ナトリウム、炭酸ナトリウムおよび炭酸水素カリウムが特に好ましい。良好な結果は、アルカリ滴定により測定した化合物２の決定量に基づき、９０モル％〜１１０モル％の塩基を添加することにより得られる。定量的に決定した化合物２の量を各場合に１００％と見なし、次いで各場合に添加する塩基の相当モル量を測定する。９５モル％〜１０５モル％、特に好ましくは９８モル％〜１０２モル％を添加することが好ましい。
【００１５】
有利な混合物は、有機溶剤および水を１：１〜８：１、好ましくは２：１〜６：１、特に３：１〜５：１の比で含有する。
【００１６】
溶液の製造は、好ましくは高められた温度、特に４１℃から個々の溶剤の沸点までの温度で行われる。この加熱した溶液を、例えば、式Ｉの化合物の完全な溶解を確実にするために、ある時間沸点に保持する。溶解工程は過圧で行うこともできる。次いで溶液を濾過する。使用するフィルターは約０.１μm〜２００μmの孔径を有する。次いで水（これは有利には濾過した溶液と同じ温度を有する）を濾過した溶液に添加するか、または有機溶剤を留去する。得られた溶液は、有利には有機溶剤および水を４：１〜０.３：１、好ましくは２：１〜０.６：１、特に好ましくは１.６：１〜０.８：１の比で含有する。次いで冷却を４０℃の最低温度になるまでゆっくりと行う。結晶を単離し、イソプロパノールおよび次いで水で洗浄する。この物質の乾燥を、有利には高められた温度、好ましくは６０℃で、減圧または大気圧下に行う。
【００１７】
特に好ましい方法は、式Ｉの化合物をイソプロパノールおよび水の４：１〜５：１の比の混合物中にイソプロパノールの沸点において大気圧または減圧下に溶解し、この溶液を濾過することを含む。次いでこの熱い溶液と同じ温度の水を、イソプロパノールと水とが２：１〜０.８：１の比で存在するように、この溶液に添加する。次いで４０℃を越える温度、好ましくは４０℃〜８５℃、特に好ましくは４５℃〜８０℃、特に５０℃〜７０℃の温度で結晶化を行う。次いで分離した結晶をイソプロパノールで数回洗浄し、減圧乾燥する。
【００１８】
高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により決定された、９９.９％より良好な純度および０.０５％未満のＮ−（４−トリフルオロメチルフェニル）−２−シアノ−３−ヒドロキシクロトンアミドの残留含有量が、本発明により式Ｉの化合物を回収するのに有利である。
【００１９】
実施例１
炭酸水素ナトリウムに対するレフルノミド (leflunomide) の安定性
実験ａ）において、式Ｉの化合物４０ｇをイソプロパノール８０mlおよび水６３ml（イソプロパノール／水の比１.２７：１）に溶解し、８４℃で１時間攪拌した。その後、サンプルを採取し、ＨＰＬＣにより定量分析した。次いでＮａＨＣＯ3 ０.６２ｇ（式Ｉの化合物に基づき、５モル％）を加え、撹拌を８４℃で５時間続けた。
【００２０】
実験ｂ）において、４：１のイソプロパノール／水の比を用い、温度を８０℃とした以外は、ａ）と同様にして実験を行った。Ｎ−（４−トリフルオロメチルフェニル）−２−シアノ−３−ヒドロキシクロトンアミド（化合物２）の形成を、ＨＰＬＣ測定により時間の関数としてモニターした。
ＨＰＬＣ測定の結果およびｐＨの各測定値を表１および２にまとめて示す。表１は炭酸水素ナトリウムの非存在下での化合物２の形成を示す一方で、表２は炭酸水素ナトリウムの存在下での化合物２の形成を示す。
【００２１】
【表１】
0004625187.tif 000004
【００２２】
実験ａ）において（表１）、出発溶液中でｐＨ４.０が測定され、この値は１時間後にも変化しなかった。化合物２の量は、この時間中に０.０２６％（面積による）（％面積）から０.０８２％（面積による）に増加した。実験ｂ）において（表１）、ｐＨまたは化合物２の量の測定は行わなかった。
【００２３】
【表２】
0004625187.tif 000005
【００２４】
実験ａ）において（表２）、炭酸水素ナトリウムの添加直後の溶液中でｐＨ８.５が測定され、このｐＨは５時間の間に４.３に低下した。炭酸水素ナトリウムの添加後に化合物２の形成が極めて急速に起こった。炭酸水素ナトリウムの添加直後に３.４面積％の化合物２を検出することができ、３０分後に６.６面積％程度にも多くなった。５時間後に７.２％（面積による）の量に達した。実験ｂ）において（表２）、該化合物の形成は比較的急速であった。５時間後に５.６％（面積による）の化合物２の量に達した。
【００２５】
これらの結果は、過剰量の炭酸水素ナトリウムが本質的に化合物２の形成に導くことを明確に示している。化合物Ｉを製造するためのバッチに応じて、化合物２の含有量は変動することがあるので、化合物２の量を予め定量分析することにより、炭酸水素ナトリウムの必要量を決定することが重要である。これは例えばＨＰＬＣまたはアルカリ滴定により行われる。
【００２６】
定量的ＨＰＬＣ決定
装置：    液体クロマトグラフ (PDA 検出器 996 を装備した Waters 2690)
カラム：  材料：  ステンレススチール
長さ：  １２５mm
内径：  ４mm
固定相：  エンドキャップした Lichrospher(R) 100 RP、粒径５μm
移動相：  アセトニトリル  ３５０容量部
水              ６５０容量部
トリエチルアミン    ５容量部
８５％リン酸でｐＨを４.０に調節した。
注入体積：１０μl
流速：    １.０ml／分
検出：    ＵＶ／Ｖｉｓ、２１０nm
運転時間：４０分
試験溶液：
調査すべき物質約２０.０mgをアセトニトリル４mlに溶解し、移動相で２０.０mlにした。
【００２７】
計算：    全注入物の算術平均を計算して化合物２の含有量を計算した。
【数１】
0004625187.tif 000006
Ａ＝ 試験溶液のクロマトグラムにおける化合物２のピーク面積。
Ｂ＝ 試験溶液のクロマトグラムにおけるピーク面積の合計。
【００２８】
システム試験：
システム試験溶液：
２０mgの４−トリフルオロメチルアニリン（４−ＴＦＭＡ）を移動相で１０.０mlに希釈した（ＳＳ１）。
化合物２を３０mgおよび３−ＴＦＭＰ異性体１０mgを秤量して入れ、ＳＳ１溶液１.０mlおよびアセトニトリル５mlを加えた。得られた混合物を移動相で１００.０mlにし（ＳＳ２）、溶液が透明になるまで振り混ぜた。
式Ｉの化合物（レフルノミド参照標準）１００mgをアセトニトリル２mlに溶解し、ＳＳ２ １.０mlを加え、この溶液を移動相で１００.０mlにした(ＳＳ３)。  ＳＳ３は次の組成を有する：１mg／mlのレフルノミド；０.００３mg／mlの化合物２；０.０００１mg／mlの３−ＴＦＭＰ異性体；０.０００２mg／mlの４−ＴＦＭＡ。
【００２９】
選択性：
標準溶液ＳＳ３のクロマトグラムは下記の要件を満たすべきであった。
化合物２        相対保持時間：約０.１３〜０.２３
４−ＴＦＭＡ    相対保持時間：約０.３６〜０.４４
レフルノミド    絶対保持時間：約２２〜３５
【００３０】
略語：
４−ＴＦＭＡ：４−トリフルオロメチルアニリン
３−ＴＦＭＰ：Ｎ−（３′−トリフルオロメチルフェニル）−５−メチルイソキサゾール-4-カルボキサミド
【００３１】
アルカリ滴定：
装置：
自動終点検出器を装備した滴定装置（例えばMetrohm Titroprosessor 716）
電極：
組み合わせガラス電極（例えば Mettler Toledo DG 112-SC）
標準溶液の係数：
０.０５ｇのコハク酸を５０mlの水に溶解し、０.１Ｎ水酸化ナトリウム溶液で滴定した。
手順：
１.０ｇの試験すべき物質を５０mlのメタノールに溶解し、直ちに０.１Ｎ 水酸化ナトリウム溶液で滴定した。
【００３２】
計算（０.１Ｎ 水酸化ナトリウム溶液の係数）：
【数２】
0004625187.tif 000007
Ｃ＝ ０.１Ｎ 水酸化ナトリウム溶液の消費量（１mlの０.１Ｎ 水酸化ナトリウム溶液は５９.０５mgのコハク酸と等価である）
Ｗ＝ 加えたコハク酸の重量（ｇ）
【００３３】
計算：
【数３】
0004625187.tif 000008
Ｃ＝ ０.１Ｎ 水酸化ナトリウム溶液の消費量（ml）
Ｆ＝ １Ｎ 塩酸の係数
Ｗ＝ 試験すべき物質の重量（ｇ）
【００３４】
実施例２
ＮａＨＣＯ3の存在下の結晶化
式Ｉの化合物（レフルノミド）１６kgをイソプロパノール２８リットル（Ｌ）および水に、水の全量が９Ｌになるように溶解した。次いで得られた溶液中の化合物２の量をアルカリ滴定により決定した。等モル量の炭酸水素ナトリウムを計算し、この溶液に固体形態で加えた（表３参照）。その後、７８℃〜８２℃まで加熱を行い、撹拌をこの温度で２５分間行い、次いで同様に同じ温度に予熱した容器中に吸引フィルターを通して濾過を行った。次いでこの吸引フィルターを、使用したイソプロパノールと一緒にして４：１のイソプロパノール／水の比を与える量のイソプロパノール（この場合は約４Ｌ）ですすいだ。次いで同様に７８℃〜８２℃に予熱した水３２Ｌを加えた（０.８：１のイソプロパノール／水の比を与えた）。この溶液は混濁し、次いで２０分間に約６５℃まで冷却、この温度に約４０分間保持した後、７０分間に４０℃まで冷却、さらに２０分間撹拌した。結晶性の式Ｉの化合物を遠心により単離した。
表３に三つの異なる結晶化の結果をまとめて示す。
【００３５】
【表３】
0004625187.tif 000009
【００３６】
各バッチ間の極めて小さい偏差のみにおいて、理論値の７９.４％の平均収率を達成し（±０.６％）、平均で９９.９３％の純度（ＨＰＬＣ、面積％）を得た。ＨＰＬＣ測定による各バッチ中の化合物２の量は０.０２％〜０.０４％（面積による）であった。
【００３７】
実施例３
ＮａＨＣＯ3の存在下の結晶化
０.４６％の化合物２を含有する−化合物２の量の決定はＨＰＬＣ測定により行った−式Ｉの化合物５０ｇをイソプロパノール２５mlおよび水２５mlに加え；次いでＮａＨＣＯ3 ２８.６５mgを加え、得られた懸濁液を約２１℃の室温で１５〜３０分間撹拌した。その後、イソプロパノール７６mlおよび活性炭１ｇを加え、８０℃に加熱し、吸引フィルターを通して濾過を行った。得られた濾液を６０℃に冷却し、少量の式Ｉの化合物の結晶を播種し、次いで０℃〜５℃に冷却した。得られた結晶を吸引濾過し、イソプロパノール３７.５mlおよび１２５mlの水で３回洗浄した。収量は式Ｉの化合物７７％であり、純度はＨＰＬＣ測定によれば９９.９％よりも高かった。ＨＰＬＣ測定による化合物２の含有量は、１００％としての式Ｉの化合物に基づき、０.０１％よりも低かった。
【００３８】
実施例４
炭酸水素ナトリウムを用いない結晶化に関する比較例
１.７％の化合物２を含有する−化合物２の量の決定はＨＰＬＣ測定により行った−式Ｉの化合物５０ｇをイソプロパノール９３.７５mlおよび水２５mlに懸濁させた。活性炭１ｇを加えた後、得られた懸濁液を８４℃に加熱し、吸引フィルターを通して濾過した。濾過した溶液をイソプロパノール６.２５mlで洗浄した。この溶液を２時間かけて約２１℃の室温に冷却した。その後、この溶液を３０分かけて０℃に冷却し、この溶液を吸引フィルターを通して濾過するまでこの温度を維持した。得られたフィルターケーキを水６.２５mlで２回洗浄した。式Ｉの化合物の結晶を５０℃で減圧乾燥した。収量：式Ｉの化合物４１.８ｇ、ＨＰＬＣ測定による純度９９.１％。化合物２の含有量はＨＰＬＣ測定により、１００％としての式Ｉの化合物に基づき、０.８６％と測定された。