(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ニューロン障害の進行またはニューロン障害の予防用医薬を調製するための２−アミノ−６−ｎ−プロピルアミノ−４,５,６,７−テトラヒドロベンゾチアゾールおよびその薬理学上許容される酸付加塩から選択される化合物の使用。
【請求項２】
該化合物が（＋）エナンチオマー形である請求項１記載の使用。
【請求項３】
該化合物が（−）エナンチオマー形である請求項１記載の使用。
【請求項４】
該化合物が二塩酸塩である請求項１〜３いずれか１記載の使用。
【請求項５】
該ニューロン障害が、パーキンソン病、一次神経変性病、ハンチントン舞踏病、発作および他の低酸素症または虚血症の過程、神経外傷、代謝的に誘導された神経系障害、脳性発作由来の続発症、出血発作、二次神経変性病（代謝的または毒性）、アルツハイマー病、他の記憶の障害、または、血管痴呆、多種梗塞痴呆、レヴィー小体痴呆、または神経変性痴呆に由来する請求項１〜４いずれか１記載の使用。
【請求項６】
該ニューロン障害がパーキンソン病に由来する請求項５記載の使用。
【請求項７】
用量が０.１−６ｍｇ／日である請求項１〜６いずれか１記載の使用。
【請求項８】
用量が経口にて０.５−２０ｍｇ／ｋｇ／日である請求項１〜６いずれか１記載の使用。
【請求項９】
用量が経口にて１−２ｍｇ／ｋｇ／日である請求項１〜６いずれか１記載の使用。
【請求項１０】
２−アミノ−６−ｎ−プロピルアミノ−４,５,６,７−テトラヒドロベンゾチアゾールおよびその薬理学上許容される酸付加塩から選択される化合物の有効量を含むことを特徴とする、ニューロン障害をわずらっているか、またはそれに感受性である患者においてニューロン障害の進行またはニューロン障害を予防するための医薬組成物。
【請求項１１】
該ニューロン障害が、パーキンソン病、一次神経変性病、ハンチントン舞踏病、発作および他の低酸素症または虚血症の過程、神経外傷、代謝的に誘導された神経系障害、脳性発作由来の続発症、出血発作、二次神経変性病（代謝的または毒性）、アルツハイマー病、他の記憶の障害、血管痴呆、多種梗塞痴呆、レヴィー小体痴呆、または神経変性痴呆に由来する請求項１０記載の医薬組成物。
【請求項１２】
該ニューロン障害がパーキンソン病に由来する請求項１１記載の医薬組成物。
【請求項１３】
該化合物の全用量が０.１−６ｍｇ／日である請求項１２記載の医薬組成物。
【請求項１４】
該化合物が（＋）エナンチオマー形である請求項１０〜１３いずれか１記載の医薬組成物。
【請求項１５】
該化合物が（−）エナンチオマー形である請求項１０〜１３いずれか１記載の医薬組成物。
【請求項１６】
該化合物が二塩酸塩である請求項１０〜１５いずれか１記載の医薬組成物。
【請求項１７】
ドーパミンニューロンを虚血症後損失から、またはＬ−ドーパ媒介毒性から保護するための医薬の調製のための、２−アミノ−６−ｎ−プロピルアミノ−４,５,６,７−テトラヒドロベンゾチアゾールまたはそのエナンチオマーまたはその薬理学上許容される酸付加塩の使用。
【請求項１８】
該ドーパミンニューロンが黒質線条体ドーパミンニューロンである請求項１７記載の使用。
【請求項１９】
該化合物が（＋）エナンチオマー形である請求項１７または１８記載の使用。
【請求項２０】
該化合物が（−）エナンチオマー形である請求項１７または１８記載の使用。
【請求項２１】
該化合物が二塩酸塩である請求項１７〜２０いずれか１記載の使用。
【請求項２２】
用量が０.１−６ｍｇ／日である請求項１７〜２１いずれか１記載の使用。
【請求項２３】
用量が経口にて０.５−２０ｍｇ／ｋｇ／日である請求項１７〜２１いずれか１記載の使用。
【請求項２４】
用量が経口にて１−２ｍｇ／ｋｇ／日である請求項１７〜２１いずれか１記載の使用。
【請求項２５】
２−アミノ−６−ｎ−プロピルアミノ−４,５,６,７−テトラヒドロベンゾチアゾールまたはそのエナンチオマーまたはその薬理学上許容される酸付加塩を含むことを特徴とする、ドーパミンニューロンを虚血症後損失から、またはＬ−ドーパ媒介毒性から保護するための医薬組成物。
【請求項２６】
該ドーパミンニューロンが黒質線条体ドーパミンニューロンである請求項２５記載の医薬組成物。
【請求項２７】
該化合物の全用量が０.１−６ｍｇ／日である請求項２５または２６記載の医薬組成物。
【請求項２８】
該化合物が（＋）エナンチオマー形である請求項２５〜２７いずれか１記載の医薬組成物。
【請求項２９】
該化合物が（−）エナンチオマー形である請求項２５〜２７いずれか１記載の医薬組成物。
【請求項３０】
該化合物が二塩酸塩である請求項２５〜２９いずれか１記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
発明の分野
本発明は、神経保護剤としてのプラミペキソールまたは２−アミノ−６−ｎ−プロピルアミノ−４,５,６,７−テトラヒドロベンゾ−チアゾール、またはその（＋）−もしくは（−）−エナンチオマー、およびそれらの薬理学上許容される塩に関する。
発明の背景
多数の中枢神経系の病気および状態がニューロンの障害という結果を引き起こす。これらの状態は、一次神経変性病；ハンチントン舞踏病；発作および他の低酸素症または虚血症の過程；神経外傷；代謝的に誘導された神経系障害；脳性発作由来の続発症；出血発作；二次神経変性病（代謝的または毒性）；パーキンソン病；アルツハイマー病；アルツハイマーのタイプの老年痴呆（ＳＤＡＴ）；加齢関連認識的機能不全；または血管痴呆、多種梗塞痴呆、レヴィー小体痴呆、または神経変性痴呆を含む神経障害につながる。
プラミペキソールは、欧州特許第１８６  ０８７号およびその対応出願である米国特許第４,８８６,８１２号にその合成が記載されるドーパミン−Ｄ3／Ｄ2アゴニストである。それは精神分裂病およびパーキンソン病の治療につき主に知られている。ドイツ国特許出願ＤＥ３８  ４３  ２２７から、プラミペキソールがプロラクチンの血漿レベルを下げることが公知である。また、この欧州特許出願には薬物依存の治療におけるプラミペキソールの使用が開示されている。さらに、プラミペキソールが、甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）の異常に高いレベルを減少させるために用いることができることが、ドイツ国特許出願ＤＥ  ３９  ３３  ７３８から公知である。米国特許第５,１１２,８４２号には、該化合物の経皮投与およびこれらの活性化合物を含む経皮システムが開示されている。ＷＯ特許出願ＰＣＴ／ＥＰ９３／０３３８９には、抗鬱剤としてのプラミペキソールの使用が記載されている。
現在まで、効力が証明された発作の治療的処置のための商業的に入手可能な薬剤はない。
驚くべきことに、かつ、予期せぬことに、プラミペキソールおよびその（＋）−エナンチオマーが共に神経保護効力を有することが判明した。
情報の開示
ドーパミンレセプターを含めた多くのレセプターに結合する血管拡張薬であるピリベジルは、全体の脳虚血症のアレチネズミモデルの機能的および生物化学的パラメーターに対する影響を有することが報告されてきた。ソサイアティ・フォーア・ニューロサイエンス・アブストラクツ（Society for Neuroscience Abstracts）、１９：６７３（１９９３）；同書、１６４５。
リスリドはドーパミンＤ2および５−ＨＴ１ａレセプターを含めたいくつかの異なるレセプターに結合する。リスリドは、事の前に投与されると、脳梗塞のラットモデルにおける減少した脳浮腫および生存時間の延長を起こすことが報告されている。ミヤザワ（Miyazawa）ら、日本薬理学雑誌９８（６）：４４９−５６１、（１９９１）。
発明の要約
本発明は２−アミノ−６−ｎ−プロピルアミノ−４,５,６,７−テトラヒドロベンゾチアゾール、その（−）−エナンチオマーまたは（＋）−エナンチオマーおよびその医薬上許容される塩の有効量、特に、２−アミノ−６−ｎ−プロピルアミノ−４,５,６,７−テトラヒドロベンゾチアゾール−二塩酸塩の（−）−エナンチオマーまたは２−アミノ−６−ｎ−プロピルアミノ−４,５,６,７−テトラヒドロベンゾチアゾール二塩酸塩の（＋）−エナンチオマーの有効量を投与することからなるこのようなニューロン障害をわずらっている、またはこれらに感受性である患者においてニューロン障害を予防するための方法を提供する。
ニューロン障害を引き起こす状態は、通常の技量の神経学者または類似の内科医によく知られており、
一次神経変性病；
ハンチントン舞踏病；
発作および他の低酸素症または虚血症の過程；
神経外傷；
代謝的に誘導された神経系障害；
脳性発作由来の続発症；
出血発作；
二次神経変性病（代謝的または毒性）；
パーキンソン病；
アルツハイマー病、他の記憶障害；または、
血管痴呆、多種梗塞痴呆、レヴィー小体痴呆、または神経変性痴呆を含む。
本発明の状況において、プラミペキソールのための好ましい適応症は、黒質線条体のドーパミンニューロンによって特徴付けられるパーキンソン病である。この意味で、パーキンソン病という用語は、パーキンソン症候群という用語も含む。プラミペキソールの一時緩和の作用（すなわち、失われたドーパミン神経伝達物質機能の置換）に加え、該化合物は、生き残ったドーパミンニューロンの変性を遅らせ、それにより病気の進行を遅らせるであろう。
本発明の化合物の予防的使用は、パーキンソン病の初期または前兆候的段階におけるモノテラピーとしての、および虚血症に基づく神経変性異常の予防としての使用を含む。
プラミペキソールの合成、処方および投与が、ここに引用して本明細書の一部とみなす米国特許第４,８４３,０８６号；４,８８６,８１２号；および５,１１２,８４２号に記載されている。
２−アミノ−６−ｎ−プロピル−アミノ−４,５,６,７−テトラヒドロベンゾチアゾール、特にその（−）−エナンチオマー、およびその薬理学上許容される酸付加塩は、神経障害を予防するために与えることができる。通常のガレン製剤の剤型は、実質的に不活性な医薬担体および有効量の活性物質よりなる；例えば、そのまままたはコートした錠剤、カプセル剤、ロゼンジ剤、粉剤、溶液、懸濁液、乳液、シロップ、坐薬などである。
Ｌ−ドーパは、培養中の小脳顆粒細胞に対し毒性であることが示されている。プラミペキソールおよび（＋）−エナンチオマーはＬ−ドーパ毒性を阻害する。双方に対するＥＣ50は０.３および１μＭならびに１０μＭの間であり、但し、生存率測定ではＬ−ドーパに暴露されない対照細胞と同等であった。保護のメカニズムは、（＋）エナンチオマーがモノアミンレセプター結合アッセイにおいて活性でないとすると、レセプター活性化に関係するとは思えない。２−アミノ−６−ｎ−プロピルアミノ−４,５,６,７−テトラヒドロベンゾチアゾール、その（＋）および（−）エナンチオマーならびにその薬理学上許容される酸付加塩、特にプラミペキソールおよび（＋）エナンチオマーが、Ｌ−ドーパのインキュベーションから生じたことが公知である反応性酸素種に対する抗酸化剤として作用するという可能性が存在する。
有効な用量範囲は０.０１ないし２.０ｍｇ／ｋｇである。より好ましいのは、経口で１−２ｍｇ／ｋｇである。神経保護のための好ましい全体用量レベルは、経口で０.５−２０ｍｇ／ｋｇ／日である。好ましいヒト用量は、２または３投与に分けた全体用量０.１−６.０ｍｇ／日である。経口または静脈内の経路によって投与される以外に、プラミペキソールは経皮的に投与されてよい。
好ましい具体例の記載
本発明は以下に与えられる実施例によってより十分に理解される。
実施例１：
本発明者らは両側頚動脈閉塞を介した１０分間の前脳虚血症に付したアレチネズミにおける２８日にわたるドーパミン黒質線条体（ＮＳ）管の逆行性変性を組織学的に試験した。該期間にわたり、（チロキシンヒドロキシラーゼ免疫細胞化学によって判断して）、緻密帯におけるＮＳ細胞体の３９％の損失が対照動物中に存在した。虚血後毎日の、プラミキソールでの経口用量（損傷後１時間で開始する１ｍｇ／ｋｇ経口  ＢＩＤ）により、ＮＳ  ＤＡニューロンの虚血後２８日の３６％（ｐ＜０.０１対ビヒクル処理）だけの損失を減じた。
実施例２：
本発明者らは、実施例１で見いだされたこと、すなわち、プラミペキソールが、１０分間の両側頚動脈梗塞誘導前脳虚血症および２８日の虚血後の生存のアレチネズミモデルにおける黒質線条体ドーパミンニューロンを保護しうることの発見を首尾よく繰り返した。プラミペキソールの投与は、虚血後６０分間の１ｍｇ／ｋｇ経口の初期用量を経て、第一日の終わりに再度、次いで次の２６日間は一日につき２回であった。０.３ｍｇ／ｋｇの用量を一日二回行うことにより、閾値効果（ビヒクルと比較して黒質線条体ドーパミンニューロンにおいて１４％の増加）が得られた。１ｍｇ／ｋｇの用量を１日２回行うことにより、虚血から２８日後のドーパミンニューロン生存において有意な３８％の改良があった（ｐ＜０.０００１対ビヒクル処理）。この作用は、ドーパミンニューロンに特異的であると思われる。なぜなら、海馬のＣＡ１領域内の非ドーパミン作動性ニューロンの虚血後の損失は有意には影響されなかったからである。
実施例３：
小脳顆粒細胞の初代培養
小脳顆粒細胞の初代培養を、以前記載されたように（１）、８日齢のスプラーグ・ドーリー・ラット（Sprague Dawley rat）、チャールズ・リバー、ポーテージ、マサチューセッツ州（Charles River, Portage, MI）から調製した。ニューロンを、８−９日間、２ｍｌ／ウェルで、１×１０6細胞／ｍｌの密度で、６ウェルの３５ｍｍ培養皿で増殖させた。グリア細胞の増殖は、平板培養後１９時間で、終濃度１０μＭにて、シトシン−アラビノフラノシド−一リン酸（シグマ、セイント・ルイス、ミズーリ州（Sigma, St. Louis, MO）の添加によって防いだ。この方法によって生じた培養を、特徴付け、９０％以上の顆粒細胞を含むことが示された（２）。
細胞毒性モデル
実験は、細胞を試験管内に８日間置いた後に開始した（８ＤＩＶ）。細胞を２ｍｌの無血清成長培地で洗浄した。無血清成長培地中のＰＰＸおよび（＋）エナンチオマーの１００倍濃度の保存溶液を作成した。これらを、成長培地中の細胞にウェルあたり２０μｌを添加することにより細胞に与えた。薬剤の終濃度は、１ｎＭから１０μＭの範囲であった。５分後、無血清成長培地におけるＬ−ドーパの１０×保存溶液２０μＬを各々のウェルに添加し、終濃度が１００μＭとなった。細胞を上記の状態で２４時間インキュベートした。生存率の測定のために、細胞を次いで２回洗浄し、１μＣｉ／ｍｌのα−（メチル）−14Ｃ）アミノイソ酪酸（ニュー・イングランド・ニュークリアー（New England Nuclear）で、ロックの緩衝液中、１時間パルスした。細胞を可溶化し、次いで、０.５％  トリトン  Ｘ−１００で洗浄した。可溶化した細胞を次いでシンチレーションカウンターで放射能を計測した。データを、それぞれの点に対して三連の±Ｓ.Ｄ.の平均として表した。
表からの結果により、プラミペキソールが、Ｌ−ドーパと関連した毒性に対し神経保護的であることが示された（６４.８％）。１０μＭのプラミペキソールでは、Ｌ−ドーパ処理細胞は、対照と異ならなかった。プラミペキソールは、小脳顆粒細胞におけるｃＡＭＰレベルを、わずかであるが、有意に減少させることが示されてきた（３）。このことは、神経保護の仕組みにおけるドーパミンレセプター（Ｄ2ファミリー）の関与が有り得ることを示唆する。この仮定を検定するため、（＋）エナンチオマーを、プラミペキソールと平行した実験において試験した。（＋）エナンチオマーは、アドレナリン作動性およびセロトニン作動性のレセプターが関与する一連の結合アッセイにおいて不活性で、ドーパミン作動性レセプターにおいてはより活性が低いことが示された。この結果は、（＋）エナンチオマーが、このアッセイにおいて神経保護剤としてのプラミペキソールと比較して、同等に能力があり、有効であることを示す。
小脳顆粒細胞においてＬ−ドーパ媒介毒性におけるプラミペキソールの神経保護効果は、ドーパミンレセプターの活性化に関与するように思われない。
プラミペキソールの（＋）エナンチオマーは、それがモノアミンレセプターに結合する能力をほとんど有さないという事実にかかわらず、神経保護剤としての有用性を示す。
プラミペキソールおよびその（＋）エナンチオマーが、反応性酸素種の発生に関与することが公知であるＬ−ドーパ毒性に対して抗酸化剤として作用しうるという可能性が存在する。
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