(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式
【化１】
0004757491.tif 000034
式中、
Ｒ１は、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、シアノ、ヒドロキシ、ニトロおよびＣ１−Ｃ６−アルコキシの群から相互に独立して選択される１個ないし５個の置換基により置換されているフェニルであり、
Ｒ２は、ペンタン−３−イル、Ｃ４−Ｃ６−シクロアルキルであり、
Ｘは、酸素または硫黄である、
の化合物、またはそれらの塩、溶媒和物もしくは塩の溶媒和物。
【請求項２】
式中、
Ｒ１が、フッ素、塩素、臭素、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、シアノ、ヒドロキシ、ニトロおよびＣ１−Ｃ４−アルコキシの群から相互に独立して選択される１個ないし３個の置換基により置換されているフェニルであり、
Ｒ２が、ペンタン−３−イル、Ｃ５−Ｃ６−シクロアルキルであり、
Ｘが、酸素または硫黄である、
請求項１に記載の化合物、またはそれらの塩、溶媒和物もしくは塩の溶媒和物。
【請求項３】
式
【化２】
0004757491.tif 000035
式中、
Ｒ３は、水素または塩素であり、
Ｒ４は、フッ素、塩素、臭素、メチル、トリフルオロメチルであり、
Ｒ２は、ペンタン−３−イル、シクロペンチルであり、
Ｘは、酸素または硫黄である、
である、請求項１または請求項２に記載の化合物、またはそれらの塩、溶媒和物もしくは塩の溶媒和物。
【請求項４】
・６−（３−クロロベンジル）−１−シクロペンチル−１,５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｄ］ピリミジン−４−オン、
・６−（２−フルオロベンジル）−１−シクロペンチル−１,５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｄ］ピリミジン−４−オン、
・６−（３−ブロモベンジル）−１−シクロペンチル−１,５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｄ］ピリミジン−４−オン、
・６−（３,４−ジクロロベンジル）−１−シクロペンチル−１,５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｄ］ピリミジン−４−オン、
・６−（３,５−ジクロロベンジル）−１−シクロペンチル−１,５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｄ］ピリミジン−４−オン、
・６−（２,３−ジクロロベンジル）−１−シクロペンチル−１,５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｄ］ピリミジン−４−オン、
・６−（３−クロロベンジル）−１−（１−エチルプロピル）−１,５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｄ］ピリミジン−４−オン、
・６−（３−メチルベンジル）−１−シクロペンチル−１,５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｄ］ピリミジン−４−オン、
・６−（２,５−ジクロロベンジル）−１−（１−エチルプロピル）−１,５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｄ］ピリミジン−４−オン、
・６−（３−メチルベンジル）−１−（１−エチルプロピル）−１,５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｄ］ピリミジン−４−オン、
・１−（１−エチルプロピル）−６−［３−（トリフルオロメチル）ベンジル］−１,５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｄ］ピリミジン−４−オン、
・１−シクロペンチル−６−（３−ニトロベンジル）−１,５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｄ］ピリミジン−４−オン、
・６−（３−クロロベンジル）−１−シクロペンチル−１,５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｄ］ピリミジン−４−チオン、または、
・１−シクロペンチル−６−［２−（トリフルオロメトキシ）ベンジル］−１,５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｄ］ピリミジン−４−オン
である化合物、またはそれらの塩、溶媒和物もしくは塩の溶媒和物。
【請求項５】
以下を特徴とする、請求項１に記載の化合物の製造方法；
式
【化３】
0004757491.tif 000036
式中、Ｒ２は請求項１に記載の意味を有する、
の化合物を、式
Ｒ１−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｚ    （ＩＩＩａ）
式中、Ｒ１は請求項１に記載の意味を有し、そして、
Ｚは、塩素または臭素である、
の化合物と、最初に塩基の存在下で反応させることにより、式
【化４】
0004757491.tif 000037
式中、Ｒ１およびＲ２は、請求項１に記載の意味を有する、
の化合物に変換し、次いで、塩基の存在下で、式
【化５】
0004757491.tif 000038
式中、Ｒ１およびＲ２は、請求項１に記載の意味を有する、
の化合物に環化し、
次いで、式（Ｉｂ）の化合物を、硫化剤との反応により、式
【化６】
0004757491.tif 000039
式中、Ｒ１およびＲ２は請求項１に記載の意味を有する、
のチオノ誘導体に変換し、
そして、生じる式（Ｉ）の化合物を、適するならば適切な（ｉ）溶媒および／または（ｉｉ）塩基もしくは酸と反応させ、それらの溶媒和物、塩および／または塩の溶媒和物を得る。
【請求項６】
硫化剤が五硫化二リンである、請求項５に記載の製造方法。
【請求項７】
以下を特徴とする、請求項１に記載の化合物の製造方法；
式
【化７】
0004757491.tif 000040
式中、Ｒ２は請求項１に記載の意味を有する、
の化合物を、式
Ｒ１−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ５    （ＩＩＩｂ）
式中、Ｒ１は請求項１に記載の意味を有し、そして、
Ｒ５は、メチルまたはエチルである、
の化合物と、塩基の存在下、（Ｉｂ）
【化８】
0004757491.tif 000041
式中、Ｒ１およびＲ２は、請求項１に記載の意味を有する、
への直接的環化で反応させ、
次いで、式（Ｉｂ）の化合物を、硫化剤との反応により、式
【化９】
0004757491.tif 000042
式中、Ｒ１およびＲ２は請求項１に記載の意味を有する、
のチオノ誘導体に変換し、
そして、生じる式（Ｉ）の化合物を、適するならば適切な（ｉ）溶媒および／または（ｉｉ）塩基もしくは酸と反応させ、それらの溶媒和物、塩および／または塩の溶媒和物を得る。
【請求項８】
硫化剤が五硫化二リンである、請求項７に記載の製造方法。
【請求項９】
以下を特徴とする、請求項１に記載の化合物の製造方法；
式
【化１０】
0004757491.tif 000043
式中、Ｒ２は請求項１に記載の意味を有する、
の化合物を、最初に式（ＩＩＩａ）
Ｒ１−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｚ    （ＩＩＩａ）
式中、Ｒ１は請求項１に記載の意味を有し、そして、
Ｚは、塩素または臭素である、
の化合物と、塩基の存在下で反応させることにより、式
【化１１】
0004757491.tif 000044
式中、Ｒ１およびＲ２は請求項１に記載の意味を有する、
の化合物に変換し、後者を第２工程で、塩基および酸化剤の存在下で、（Ｉｂ）
【化１２】
0004757491.tif 000045
式中、Ｒ１およびＲ２は、請求項１に記載の意味を有する、
に環化する；
次いで、式（Ｉｂ）の化合物を、硫化剤との反応により、式
【化１３】
0004757491.tif 000046
式中、Ｒ１およびＲ２は請求項１に記載の意味を有する、
のチオノ誘導体に変換し、
そして、生じる式（Ｉ）の化合物を、適するならば適切な（ｉ）溶媒および／または（ｉｉ）塩基もしくは酸と反応させ、それらの溶媒和物、塩および／または塩の溶媒和物を得る。
【請求項１０】
硫化剤が五硫化二リンである、請求項９に記載の製造方法。
【請求項１１】
疾患の処置および／または予防用の医薬を製造するための、請求項１ないし請求項４のいずれかに記載の化合物の使用。
【請求項１２】
知覚力、集中力、学習力および／または記憶力の障害の処置および／または予防用の医薬を製造するための、請求項１ないし請求項４のいずれかに記載の化合物の使用。
【請求項１３】
障害がアルツハイマー病の結果である、請求項１２に記載の使用。
【請求項１４】
少なくとも１の請求項１ないし請求項４のいずれかに記載の化合物、および少なくとも１の医薬的に許容し得る本質的に非毒性の担体または賦形剤を含む、医薬。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、新規フェニル置換ピラゾロピリミジン類、それらの製造方法、並びに、知覚力、集中力、学習力および／または記憶力の改善用の医薬を製造するためのそれらの使用に関する。
【０００２】
アデニル酸シクラーゼおよびグアニル酸シクラーゼの細胞内活性化は、各々ＡＴＰおよびＧＴＰの５'−３'環状アデノシン一リン酸（ｃＡＭＰ）および５'−３'環状グアノシン一リン酸（ｃＧＭＰ）への環化をもたらす。これらの環状ヌクレオチド（ｃＡＭＰおよびｃＧＭＰ）は、重要な第２メッセンジャーであり、それ故に細胞のシグナル伝達カスケードにおいて重要な役割を果たす。それらの各々は、なかんずく、しかし排他的にではなく、タンパク質キナーゼを再活性化する。ｃＡＭＰにより活性化されるタンパク質キナーゼは、タンパク質キナーゼＡ（ＰＫＡ）と呼ばれ、ｃＧＭＰにより活性化されるタンパク質キナーゼは、タンパク質キナーゼＧ（ＰＫＧ）と呼ばれる。活性化されたＰＫＡおよびＰＫＧは、今度は数々の細胞内エフェクタータンパク質をリン酸化できる（例えば、イオンチャネル、Ｇタンパク質共役型受容体、構造タンパク質）。このようにして、第２メッセンジャーであるｃＡＭＰおよびｃＧＭＰは、幅広い器官の幅広い生理過程を制御することが可能である。しかしながら、これらの環状ヌクレオチドはまた、エフェクター分子に直接作用することもできる。このように、例えば、ｃＧＭＰがイオンチャネルに直接作用でき、かくして細胞内イオン濃度に影響を及ぼすことができると知られている（Wei et al., Prog. Neurobiol., 1998, 56: 37-64 に総説）。ホスホジエステラーゼ（ＰＤＥ）類は、ｃＡＭＰおよびｃＧＭＰの活性を、従って次いでこれらの生理過程を、制御するための制御メカニズムである。ＰＤＥは、これらの環状一リン酸を不活性な一リン酸であるＡＭＰおよびＧＭＰに加水分解する。少なくとも２１種のＰＤＥ遺伝子が現在までに記載されてきた（Exp. Opin. Investig. Drugs 2000, 9, 1354 3784）。これらの２１種のＰＤＥ遺伝子は、それらの配列相同性に基づいて１１個のＰＤＥファミリーに分けられる（提唱されている命名法について、http://depts.washington.edu/pde/Nomenclature.html.を参照）。ファミリー内の個々のＰＤＥ遺伝子は、文字により区別される（例えば、ＰＤＥ１ＡおよびＰＤＥ１Ｂ）。遺伝子内に異なるスプライシング変異体も生じる場合、これらは、文字の後に付加された番号により示される（例えば、ＰＤＥ１Ａ１）。
【０００３】
ヒトＰＤＥ９Ａは、１９９８年にクローニングされ、配列決定された。他のＰＤＥ類とのアミノ酸相同性は３４％（ＰＤＥ８Ａ）を超えず、２８％（ＰＤＥ５Ａ）より低くはない。ＰＤＥ９Ａは、ｃＧＭＰに高い親和性を有し、ミカエリス−メンテン定数（Ｋｍ）１７０ｎＭである。加えて、ＰＤＥ９Ａは、ｃＧＭＰに選択的である（ｃＡＭＰについてのＫｍ＝２３０μＭ）。ＰＤＥ９Ａは、ｃＧＭＰ結合ドメインを持たず、このことはｃＧＭＰによるアロステリック酵素調節を示唆している。ウエスタンブロット分析で、ＰＤＥ９Ａがヒトで、なかんずく精巣、脳、小腸、骨格筋、心臓、肺、甲状腺および脾臓において発現されていることが示された。最大の発現は、脳、小腸、心臓および脾臓で見出された（Fisher et al., J. Biol. Chem., 1998, 273 (25): 15559-15564）。ヒトＰＤＥ９Ａの遺伝子は、染色体２１ｑ２２.３に位置し、２１個のエクソンを含む。今日までに、４種のＰＤＥ９Ａの選択的スプライシング変異体が同定されている（Guipponi et al., Hum. Genet., 1998, 103: 386 392）。古典的なＰＤＥ阻害因子は、ヒトＰＤＥ９Ａを阻害しない。従って、ＩＢＭＸ、ジピリダモール、ＳＫＦ９４１２０、ロリプラムおよびビンポセチンは、１００μＭまでの濃度でこの単離された酵素に対する阻害を示さない。ザプリナストについて、ＩＣ５０３５μＭが立証された（Fisher et al., J. Biol. Chem., 1998, 273 (25): 15559-15564）。
【０００４】
マウスＰＤＥ９Ａは、１９９８年に、Soderling らによりクローニングされ、配列決定された（J. Biol. Chem., 1998, 273 (19): 15553-15558）。これは、ヒト型と同様に、ｃＧＭＰに高い親和性を有し、Ｋｍ７０ｎＭである。特に高い発現は、マウスの腎臓、脳、肺および心臓で見出された。マウスＰＤＥ９Ａもまた、ＩＢＭＸにより２００μＭより低い濃度では阻害されず；ザプリナストのＩＣ５０は２９μＭである（Soderling et al., J. Biol. Chem., 1998, 273 (19): 15553 15558）。ＰＤＥ９Ａは、ラットの脳のいくつかの領域で強く発現されることが見出された。これらには、嗅球、海馬、皮質、大脳基底核および前脳基底核が含まれる（Andreeva et al., J. Neurosci., 2001, 21 (22): 9068-9076）。海馬、皮質および前脳基底核は、特に、学習および記憶の過程において重要な役割を果たす。
【０００５】
既述の通り、ＰＤＥ９Ａは、ｃＧＭＰに対して特に高い親和性を有することにより際だっている。それ故に、ＰＤＥ９Ａは、ＰＤＥ２Ａ（Ｋｍ＝１０μＭ；Martins et al., J. Biol. Chem., 1982, 257: 1973-1979）、ＰＤＥ５Ａ（Ｋｍ＝４μＭ；Francis et al., J. Biol. Chem., 1980, 255: 620-626）、ＰＤＥ６Ａ（Ｋｍ＝１７μＭ；Gillespie and Beavo, J. Biol. Chem., 1988, 263 (17): 8133-8141）およびＰＤＥ１１Ａ（Ｋｍ＝０.５２μＭ；Fawcett et al., Proc. Nat. Acad. Sci., 2000, 97 (7): 3702-3707）と対照的に、低い生理的濃度であっても活性である。ＰＤＥ２Ａ（Murashima et al., Biochemistry, 1990, 29: 5285-5292）と対照的に、ＰＤＥ９Ａの触媒活性は、ｃＧＭＰにより増大しない。なぜなら、それはＧＡＦドメイン（それを介してＰＤＥ活性がアロステリックに増大するｃＧＭＰ結合ドメイン）を持たないからである（Beavo et al., Current Opinion in Cell Biology, 2000, 12: 174-179）。ＰＤＥ９Ａ阻害因子は、従って、ベースラインのｃＧＭＰ濃度の増大を導き得る。驚くべきことに、このベースラインのｃＧＭＰ濃度の増大は、社会的認識試験において学習力および記憶力の改善を導いた。
【０００６】
ＷＯ９８／４０３８４は、ＰＤＥ１、２および５の阻害因子であり、心血管および脳血管障害並びに泌尿生殖器系の障害の処置に用いることができるピラゾロピリミジン類を開示している。
【０００７】
ＣＨ３９６９２４、ＣＨ３９６９２５、ＣＨ３９６９２６、ＣＨ３９６９２７、ＤＥ１１４７２３４、ＤＥ１１４９０１３、ＧＢ９３７,７２６は、冠血管拡張効果を有し、心筋血流の障害の処置に用いることができるピラゾロピリミジン類を記載している。
【０００８】
ＵＳ３,７３２,２２５は、抗炎症および血糖低下効果を有するピラゾロピリミジン類を記載している。
ＤＥ２４０８９０６は、例えば浮腫の処置用の抗菌および抗炎症剤として用いることができるスチレンピラゾロピリミジン類を記載している。
【０００９】
本発明は、式
【化１】
0004757491.tif 000002
式中、
Ｒ１は、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、シアノ、ヒドロキシ、ニトロおよびＣ１−Ｃ６−アルコキシの群から相互に独立して選択される１個ないし５個の置換基により置換されているフェニルであり、
Ｒ２は、ペンタン−３−イル、Ｃ４−Ｃ６−シクロアルキルであり、
Ｘは、酸素または硫黄である、
の化合物、並びにそれらの塩、溶媒和物および／または塩の溶媒和物に関する。
【００１０】
本発明の化合物は、式（Ｉ）の化合物およびそれらの塩、溶媒和物および塩の溶媒和物；式（Ｉ）に包含され、後述の式を有する化合物、およびそれらの塩、溶媒和物および塩の溶媒和物；並びに式（Ｉ）に包含され、例示的実施態様として後述する化合物、およびそれらの塩、溶媒和物および塩の溶媒和物である（式（Ｉ）に包含され、後述される化合物は、まだ塩、溶媒和物および塩の溶媒和物ではない）。
【００１１】
本発明の化合物は、それらの構造に依存して、立体異性体（エナンチオマー、ジアステレオマー）で存在し得る。従って、本発明は、エナンチオマーまたはジアステレオマーおよびそれらの各々の混合物に関する。そのようなエナンチオマーおよび／またはジアステレオマーの混合物から、既知のやり方で立体異性的に均一な成分を単離することができる。
【００１２】
本発明のために好ましい塩は、本発明の化合物の生理的に許容し得る塩である。
化合物（Ｉ）の生理的に許容し得る塩には、無機酸、カルボン酸およびスルホン酸の酸付加塩、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ナフタレンジスルホン酸、酢酸、プロピオン酸、乳酸、酒石酸、リンゴ酸、クエン酸、フマル酸、マレイン酸および安息香酸の塩が含まれる。
【００１３】
化合物（Ｉ）の生理的に許容し得る塩には、また、常套の塩基の塩、例えば、そして好ましくは、アルカリ金属塩（例えば、ナトリウムおよびカリウム塩）、アルカリ土類金属塩（例えば、カルシウムおよびマグネシウム塩）およびアンモニアまたは１個ないし１６個のＣ原子を有する有機アミン（例えば、そして好ましくは、エチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、エチルジイソプロピルアミン、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、ジシクロヘキシルアミン、ジメチルアミノエタノール、プロカイン、ジベンジルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、ジヒドロアビエチルアミン、アルギニン、リジン、エチレンジアミンおよびメチルピペリジン）から誘導されるアンモニウム塩も含まれる。
【００１４】
本発明のために、溶媒和物は、固体または液体状態で溶媒分子との配位により錯体を形成する化合物の形態を表す。水和物は、配位が水と起こる、溶媒和物のある特別な形態である。
【００１５】
加えて、本発明はまた、本発明の化合物のプロドラッグも包含する。用語「プロドラッグ」は、それ自体は生物学的に活性であっても不活性であってもよいが、それらの体内残留時間中に本発明の化合物に変換される（例えば、代謝または加水分解により）化合物を包含する。
【００１６】
本発明のために、置換基は、断りのない限り以下の意味を有する：
Ｃ１−Ｃ６−アルコキシは、１個ないし６個、好ましくは１個ないし４個、特に好ましくは１個ないし３個の炭素原子を有する直鎖または分枝のアルコキシ基である。好ましい例は、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、ｎ−ペントキシおよびｎ−ヘキソキシである。
【００１７】
Ｃ１−Ｃ６−アルキルは、１個ないし６個、好ましくは１個ないし４個、特に好ましくは１個ないし３個の炭素原子を有する直鎖または分枝のアルキル基である。好ましい例は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチルおよびｎ−ヘキシルである。
【００１８】
Ｃ４−Ｃ６−およびＣ５−Ｃ６−シクロアルキルは、４個ないし６個、好ましくは５個ないし６個の炭素原子を有する飽和または部分不飽和のシクロアルキル基である。好ましい例は、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシルである。
【００１９】
ハロゲンは、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素である。フッ素、塩素、臭素が好ましく、フッ素および塩素が特に好ましい。
【００２０】
本発明の化合物中の基が置換されていることもある場合、断りのない限り、３個までの同一かまたは異なる置換基による置換が好ましい。
【００２１】
本発明の化合物は、例えば以下のように示される互変体の形態であってもよい：
【化２】
0004757491.tif 000003
【００２２】
本発明のさらなる実施態様は、式中、
Ｒ１が、フッ素、塩素、臭素、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、シアノ、ヒドロキシ、ニトロおよびＣ１−Ｃ４−アルコキシの群から相互に独立して選択される１個ないし３個の置換基により置換されているフェニルであり、
Ｒ２が、ペンタン−３−イル、Ｃ５−Ｃ６−シクロアルキルであり、
Ｘが、酸素または硫黄である、
式（Ｉ）の化合物、並びにそれらの塩、溶媒和物および／または塩の溶媒和物に関する。
【００２３】
本発明のさらなる実施態様は、式、
【化３】
0004757491.tif 000004
式中、
Ｒ３は、水素または塩素であり、
Ｒ４は、フッ素、塩素、臭素、メチル、トリフルオロメチルであり、
Ｒ２は、ペンタン−３−イル、シクロペンチルであり、
Ｘは、酸素または硫黄である、
の化合物、並びにそれらの塩、溶媒和物および／または塩の溶媒和物に関する。
【００２４】
本発明のさらなる実施態様は、式中、
Ｒ３が、水素または塩素であり、
Ｒ４が、フッ素、塩素、臭素、メチル、トリフルオロメチルであり、
Ｒ２が、ペンタン−３−イル、シクロペンチルであり、
Ｘが酸素である、
式（Ｉ）および（Ｉａ）の化合物、並びにそれらの塩、溶媒和物および／または塩の溶媒和物に関する。
【００２５】
さらに、本発明の化合物の製造方法も見出され、それは以下のいずれかを特徴とする；［Ａ］式
【化４】
0004757491.tif 000005
式中、Ｒ２は上記の意味を有する、
の化合物を、式
Ｒ１−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｚ    （ＩＩＩａ）
式中、Ｒ１は上記の意味を有し、
Ｚは、塩素または臭素である、
の化合物と、不活性溶媒中、塩基の存在下で反応させることにより、最初に式
【化５】
0004757491.tif 000006
式中、Ｒ１およびＲ２は、上記の意味を有する、
の化合物に変換し、次いで、不活性溶媒中、塩基の存在下で、式
【化６】
0004757491.tif 000007
式中、Ｒ１およびＲ２は、上記の意味を有する、
の化合物に環化する、
または、
［Ｂ］式（ＩＩ）の化合物を、式
Ｒ１−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ５    （ＩＩＩｂ）
式中、Ｒ１は上記の意味を有し、
Ｒ５は、メチルまたはエチルである、
の化合物と、不活性溶媒中、塩基の存在下、（Ｉｂ）への直接的環化で反応させる、
または、
［Ｃ］式
【化７】
0004757491.tif 000008
式中、Ｒ２は上記の意味を有する、
の化合物を、最初に式（ＩＩＩａ）の化合物と、不活性溶媒中、塩基の存在下で反応させることにより、式
【化８】
0004757491.tif 000009
式中、Ｒ１およびＲ２は、上記の意味を有する、
の化合物に変換し、後者を第２工程で、不活性溶媒中、塩基および酸化剤の存在下で、（Ｉｂ）に環化する；
次いで、式（Ｉｂ）の化合物を、適するならば例えば五硫化二リンなどの硫化剤との反応により、式
【化９】
0004757491.tif 000010
式中、Ｒ１およびＲ２は、上記の意味を有する、
のチオノ誘導体に変換し、
そして、生じる式（Ｉ）の化合物を、適するならば適切な（ｉ）溶媒および／または（ｉｉ）塩基もしくは酸と反応させ、それらの溶媒和物、塩および／または塩の溶媒和物を得る。
【００２６】
方法［Ａ］および方法［Ｃ］の第１工程に適するのは、反応条件下で変化しない不活性有機溶媒である。これらには、好ましくは、例えば、ジエチルエーテル、ジオキサン、テトラヒドロフランもしくはグリコールジメチルエーテルなどのエーテル類、または、トルエンまたはピリジンが含まれる。上述の溶媒の混合物を使用することも同様に可能である。テトラヒドロフラン、トルエンまたはピリジンが特に好ましい。
【００２７】
適する塩基は、一般に、例えば水素化ナトリウムなどのアルカリ金属水素化物、または、例えばピペリジン、ピリジン、ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）などの環状アミン類、または、例えば、トリエチルアミンなどのＣ１−Ｃ４−アルキルアミン類である。水素化ナトリウム、ピリジンおよび／またはジメチルアミノピリジンが好ましい。
【００２８】
塩基は、一般的に、各場合で式（ＩＩ）または（Ｖ）の合物１ｍｏｌをベースとして、１ｍｏｌないし４ｍｏｌ、好ましくは１.２ｍｏｌないし３ｍｏｌの量で用いる。
【００２９】
変法では、触媒量のＤＭＡＰを添加したピリジン中で反応を実行する。適するならばトルエンを添加することも可能である。
【００３０】
反応温度は、一般的に、比較的広い範囲で反動し得る。一般的に、−２０℃ないし＋２００℃、好ましくは０℃ないし＋１００℃の範囲内である。
【００３１】
方法［Ａ］および［Ｃ］の第２工程の環化に適する溶媒は、通常の有機溶媒である。これらには、好ましくは、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、ｎ−ブタノールもしくはｔｅｒｔ−ブタノールなどのアルコール類、またはテトラヒドロフランもしくはジオキサンなどのエーテル類、またはジメチルホルムアミドまたはジメチルスルホキシドが含まれる。メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノールまたはｔｅｒｔ−ブタノールなどのアルコール類が特に好ましく使用される。上述の溶媒の混合物を用いることが同様に可能である。
【００３２】
方法［Ａ］および［Ｃ］の第２工程の環化に適する塩基は、通常の無機塩基である。これらには、好ましくは、例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムもしくは水酸化バリウムなどのアルカリ金属水酸化物またはアルカリ土類金属水酸化物、または炭酸ナトリウムもしくはカリウム、もしくは重炭酸ナトリウムなどのアルカリ金属炭酸塩、またはナトリウムメタノラート、ナトリウムエタノラート、カリウムメタノラート、カリウムエタノラートもしくはカリウムｔｅｒｔ−ブタノラートなどのアルカリ金属アルコラート類が含まれる。炭酸カリウム、水酸化ナトリウムおよびカリウムｔｅｒｔ−ブタノラートが特に好ましい。
【００３３】
環化を実行するための塩基は、一般的に、式（ＩＶ）または（ＶＩ）の化合物１ｍｏｌをベースとして、２ｍｏｌないし６ｍｏｌ、好ましくは３ｍｏｌないし５ｍｏｌの量で用いる。
【００３４】
方法［Ｃ］の第２工程の環化に適する酸化剤は、例えば、過酸化水素またはナトリウムボレートである。過酸化水素が好ましい。
【００３５】
方法［Ａ］、［Ｂ］および［Ｃ］の環化は、一般的に、０℃ないし＋１６０℃の温度範囲で、好ましくは特定の各溶媒の沸点で実行する。
【００３６】
環化は、一般的に、大気圧下で実行する。しかしながら、この方法を加圧または減圧下で（例えば、０.５ないし５バールの範囲で）実行することも可能である。
【００３７】
方法［Ｂ］に適する溶媒は、方法［Ａ］および［Ｃ］の第２工程について上記列挙したアルコール類であり、エタノールが好ましい。
【００３８】
方法［Ｂ］に適する塩基は、アルカリ金属水素化物である。例えば、水素化ナトリウムもしくはカリウム、または例えば、ナトリウムメタノラート、エタノラート、イソプロポキシドまたはカリウムｔｅｒｔ−ブトキシドなどのアルカリ金属アルコラート類である。水素化ナトリウムが好ましい。
【００３９】
塩基は、各場合で式（ＩＩ）の化合物１ｍｏｌをベースとして、２ｍｏｌないし８ｍｏｌ、好ましくは３ｍｏｌないし６ｍｏｌの量で用いる。
【００４０】
式（ＩＩ）の化合物は、知られているか、または、例えば、最初にエトキシメチレンマロノニトリルを、式
Ｒ２−ＮＨ−ＮＨ２    （ＶＩＩ）
式中、Ｒ２は上記の意味を有する、
のヒドラジン誘導体と、不活性溶媒中で縮合させて式（Ｖ）のピラゾールニトリルを得、次いで、後者をアンモニアの存在下で、上記の酸化剤の１つ、好ましくは過酸化水素と反応させることにより製造できる［例えば、A. Miyashita et al., Heterocycles 1990, 31, 1309ff 参照］。
【００４１】
式（ＩＩＩａ）、（ＩＩＩｂ）および（ＶＩＩ）の化合物は、市販されているか、文献から知られているか、または文献からわかる方法と同様に製造できる。
【００４２】
本発明の方法は、以下の式のスキームにより例示的に図解説明できる：
スキーム
【化１０】
0004757491.tif 000011
【００４３】
ピラゾロ［３,４−ｄ］ピリミジン−４−オン類のさらなる製造方法が知られており、同様に本発明の化合物の合成に用いることができる（例えば：P. Schmidt et al., Helvetica Chimica Acta 1962, 189, 1620ff. 参照）。
【００４４】
本発明の化合物は、予想し得なかった価値ある範囲の薬理的および薬物動態的効果を示す。
従って、それらは、ヒトおよび動物における疾患の処置および／または予防用の医薬としての使用に適する。
本発明のために、用語「処置」は、予防を含む。
【００４５】
驚くべきことに、選択的ＰＤＥ９Ａ阻害因子は、知覚力、集中力、学習力または記憶力の改善用の医薬の製造に適することが判明した。
【００４６】
本発明の化合物は、それらの薬理的および薬物動態的特性のために、単独で、または知覚力、集中力、学習力および／または記憶力の改善用の他の医薬と組み合わせて、用いることができる。
【００４７】
本発明のためのＰＤＥ９Ａ阻害因子は、下記で示す条件下で、１０μＭより小さい、好ましくは１μＭより小さいＩＣ５０でヒトＰＤＥ９Ａを阻害する化合物である。
【００４８】
本発明のための選択的ＰＤＥ９Ａ阻害因子は、下記に示す条件下で、ヒトＰＤＥ９Ａを、ヒトＰＤＥ１Ｃ、ＰＤＥ２Ａ、ＰＤＥ３Ｂ、ＰＤＥ４Ｂ、ＰＤＥ５Ａ、ＰＤＥ７Ｂ、ＰＤＥ８Ａ、ＰＤＥ１０ＡおよびＰＤＥ１１よりも強く阻害する化合物である。好ましいＩＣ５０（ＰＤＥ９Ａ）／ＩＣ５０（ＰＤＥ１Ｃ、ＰＤＥ２Ａ、ＰＤＥ３Ｂ、ＰＤＥ４Ｂ、ＰＤＥ５Ａ、ＰＤＥ７ＢおよびＰＤＥ１０Ａ）比は、０.２より小さい。
【００４９】
選択的ＰＤＥ９Ａ阻害因子は、特に、軽度認識障害、加齢関連学習記憶障害、加齢関連記憶喪失、血管性痴呆、頭蓋大脳性外傷、卒中、卒中後に発生する痴呆（後卒中痴呆）、外傷後の痴呆、一般的集中障害、学習記憶に問題をもつ小児の集中障害、アルツハイマー病、レビー小体痴呆、ピック病を含む前頭葉変性を伴う痴呆、パーキンソン病、進行性核麻痺、皮質基質変性を伴う痴呆、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、ハンチントン病、多発性硬化症、視床変性、クロイツフェルト・ヤコブ病痴呆、ＨＩＶ痴呆、痴呆を伴う統合失調症またはコルサコフ精神病などの症状／疾患／症候群において生じるもののような認識障害後の、知覚力、集中力、学習力または記憶力の改善に特に適する。
【００５０】
本発明の化合物のインビトロでの効果は、以下の生物学的アッセイで示すことができる：
ＰＤＥ阻害
組換えＰＤＥ１Ｃ（GenBank/EMBL 受託番号: NM_005020, Loughney et al. J. Biol. Chem. 1996 271, 796-806）、ＰＤＥ２Ａ（GenBank/EMBL 受託番号: NM_002599, Rosman et al. Gene 1997 191, 89-95）、ＰＤＥ３Ｂ（GenBank/EMBL 受託番号: NM_000922, Miki et al. Genomics 1996, 36, 476-485）、ＰＤＥ４Ｂ（GenBank/EMBL 受託番号: NM_002600, Obernolte et al. Gene. 1993, 129, 239-247）、ＰＤＥ５Ａ（GenBank/EMBL 受託番号: NM_001083, Loughney et al. Gene 1998, 216, 139-147）、ＰＤＥ７Ｂ（GenBank/EMBL 受託番号: NM_018945, Hetman et al. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 2000, 97, 472-476）、ＰＤＥ８Ａ（GenBank/EMBL 受託番号: AF_056490, Fisher et al. Biochem. Biophys. Res. Commun. 1998 246, 570-577）、ＰＤＥ９Ａ（Fisher et al., J. Biol. Chem, 1998, 273 (25): 15559-15564）、ＰＤＥ１０Ａ（GenBank/EMBL 受託番号: NM_06661, Fujishige et al. J Biol Chem. 1999, 274, 18438-45）、ＰＤＥ１１Ａ（GenBank/EMBL 受託番号: NM_016953, Fawcett et al. Proc. Natl. Acad. Sci. 2000, 97, 3702-3707）を、Ｓｆ９細胞にｐＦＡＳＴＢＡＣバキュロウイルス発現系を利用して発現させた（GibcoBRL）。
【００５１】
試験物質を、それらのＰＤＥ９Ａに対するインビトロでの効果を測定するために、１００％ＤＭＳＯに溶解し、連続希釈する。典型的に、２００μＭないし１.６μＭの連続希釈物を調製する（結果的なアッセイ中の最終濃度：４μＭないし０.０３２μＭ）。希釈した物質溶液２μＬ分を、マイクロタイタープレートのウェルに導入する（Isoplate; Wallac Inc., Atlanta, GA）。次いで、上記のＰＤＥ９Ａ調製物５０μｌを添加する。ＰＤＥ９Ａ調製物の希釈は、７０％より少ない基質が後のインキュベーションの間に変換されるように選択する（典型的な希釈：１：１００００；希釈緩衝液：５０ｍＭ Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ ｐＨ７.５、８.３ｍＭ ＭｇＣｌ２、１.７ｍＭ ＥＤＴＡ、０.２％ＢＳＡ）。基質である［８−３Ｈ］グアノシン３',５'−環状リン酸（１μＣｉ／μＬ；Amersham Pharmacia Biotech., Piscataway, NJ）を、アッセイ緩衝液（５０ｍＭ Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ ｐＨ７.５、８.３ｍＭ ＭｇＣｌ２、１.７ｍＭ ＥＤＴＡ）で、１：２０００に、０.０００５μＣｉ／μＬの濃度まで希釈する。最後に、希釈基質５０μＬ（０.０２５μＣｉ）の添加により酵素反応を開始させる。アッセイ混合物を室温で６０分間インキュベートし、アッセイ緩衝液に溶解したＰＤＥ９Ａ阻害因子（例えば、製造実施例１由来の阻害因子、最終濃度１０μＭ）２５μｌの添加により反応を停止させる。その直後に、１８ｍｇ／ｍＬの Yttrium Scintillation Proximity Beads (Amersham Pharmacia Biotech., Piscataway, NJ）を含有する懸濁液２５μＬを添加する。マイクロタイタープレートをフィルムで密封し、室温で６０分間静置する。次いで、プレートを１ウェル当たり３０秒間、Microbeta scintillation counter (Wallac Inc., Atlanta, GA）で測定する。物質濃度対パーセント阻害のグラフのプロットから、ＩＣ５０値を決定する。
【００５２】
組換えＰＤＥ３Ｂ、ＰＤＥ４Ｂ、ＰＤＥ７Ｂ、ＰＤＥ８Ａ、ＰＤＥ１０ＡおよびＰＤＥ１１Ａに対する試験物質のインビトロでの効果は、以下の調節を加えて、ＰＤＥ９Ａについて上記したアッセイプロトコールに従って測定する：［５',８−３Ｈ］アデノシン３',５'−環状リン酸（１μＣｉ／μＬ；Amersham Pharmacia Biotech., Piscataway, NJ）を基質として使用する。反応を停止させるための阻害因子溶液の添加は不要である。代わりに、基質とＰＤＥのインキュベーションの後、続いて直ちにイットリウムシンチレーション近接（proximity）ビーズを添加し、かくして反応を停止させる。組換えＰＤＥ１Ｃ、ＰＤＥ２ＡおよびＰＤＥ５Ａの相応する効果を測定するために、プロトコールをさらに以下のように調節する：ＰＤＥ１Ｃには、さらに１０−７Ｍカルモジュリンおよび３ｍＭ ＣａＣｌ２を反応混合物に添加する。このアッセイにおいて、ＰＤＥ２Ａを１μＭ ｃＧＭＰの添加により刺激し、ＢＳＡ濃度０.０１％でアッセイする。ＰＤＥ１ＣおよびＰＤＥ２Ａに用いる基質は、［５',８３Ｈ］アデノシン３',５'−環状リン酸（１μＣｉ／μＬ；Amersham Pharmacia Biotech., Piscataway, NJ）であり、ＰＤＥ５Ａには、［８−３Ｈ］グアノシン３',５'−環状リン酸（１μＣｉ／μＬ；Amersham Pharmacia Biotech., Piscataway, NJ）である。
【００５３】
本発明の化合物のＰＤＥ９Ａ阻害効果は、以下の実施例を利用して示すことができる：
表１
【表１】
0004757491.tif 000012
【００５４】
細胞培養における細胞内ニューロン性ｃＧＭＰ濃度の増大
ＰＤＥ９Ａ阻害因子は、培養した初代大脳皮質ニューロンの細胞内ニューロン性ｃＧＭＰを増大させる。
ラットの胚（胚日齢（embryonic day）Ｅ１７−Ｅ１９）を断頭し、解剖培地（ＤＭＥＭ、ペニシリン／ストレプトマイシン；両方とも Gibco より）を満たした解剖皿に頭部を移した。頭皮および頭蓋頂部を除去し、露出した脳を解剖培地を有する別のペトリ皿に移した。双眼顕微鏡と２本のピンセットを使用して、大脳（大脳皮質）を単離し、氷を使用して４℃に冷却した。次いで、この大脳皮質ニューロンの解剖と単離を、標準的なプロトコールに従い、パパインキット（Worthington Biochemical Corporation, Lakewood, New Jersey 08701, USA）を使用して実行した（Huettner et al. J. Neurosci. 1986, 6, 3044-3060）。機械的に単離した大脳皮質のニューロンを、１５００００細胞／ウェルで、２００μｌ Neurobasal 培地／ウェル（Neurobasal; B27 Supplement；２ｍＭ Ｌ−グルタミン；ペニシリン／ストレプトマイシンの存在下；全試薬は、Gibco より）中、９６ウェルプレート（ポリ−Ｄ−リジン１００μｇ／ｍｌで３０分間予処理した）で、標準条件下（３７℃、５％ＣＯ２）、７日間培養した。７日後、培地を除去し、細胞をＨＢＳＳ緩衝液（ハンクス平衡塩溶液、Gibco/BRL）で洗浄した。次いで、ＨＢＳＳ緩衝液に溶解した本発明の化合物（予め１００％ＤＭＳＯに溶解した：１０ｍＭ）１００μｌを細胞に載せる。次いで、本発明の化合物の最終濃度が例えば２０ｎＭないし１０μＭの範囲になるように、さらに１００μｌのＨＢＳＳ緩衝液を添加し、３７℃で２０分間インキュベートする。次いで、アッセイ緩衝液を完全に除去する。次いで、細胞を２００μｌの溶解緩衝液（cGMP Kit コード RPN 226; Amersham Pharmacia Biotech.より）に溶解し、製造業者が定めた通りにｃＧＭＰ濃度を測定する。全測定は、３重に実行する。統計学的分析は、Prism Software バージョン 2.0 (GraphPad Software Inc., San Diego, CA USA）を使用して実行する。
【００５５】
本発明の化合物と共に初代ニューロンをインキュベートすると、ｃＧＭＰ含有量の増加が導かれる。
【００５６】
長期増強
長期増強は、学習および記憶の過程に対する細胞の相関現象と見なされる。以下の方法を使用して、ＰＤＥ９阻害が長期増強に影響を与えるか否かを判定できる：
ラットの海馬を切断刃（包丁）に対して約７０度の角度に置く。厚さ４００μｍの海馬切片を調製する。非常に柔らかい、入念に湿らせた刷毛（テンの毛）を使用して切片を刃から取り、９５％Ｏ２／５％ＣＯ２ガス供給した冷たい栄養溶液（１２４ｍＭ ＮａＣｌ、４.９ｍＭ ＫＣｌ、１.３ｍＭ ＭｇＳＯ４ｘ７Ｈ２Ｏ、２.５ｍＭ無水ＣａＣｌ２、１.２ｍＭ ＫＨ２ＰＯ４、２５.６ｍＭ ＮａＨＣＯ３、１０ｍＭグルコース、ｐＨ７.４）の入ったガラス容器に移した。測定の間、温度制御チャンバー中、高さ１−３ｍｍの液体レベルで切片を維持する。流速は２.５ｍｌ／分である。予備的なガス供給は、わずかな加圧下（約１ａｔｍ）で、微小針（microneedle）を通して、前チャンバー（prechamber）中で行う。切片用チャンバーは、小循環（minicirculation）を維持できるようなやり方で前チャンバーに連結する。小循環は、微小針を通って流れ出す９５％Ｏ２／５％ＣＯ２により押し進める。新たに製造した海馬切片を、切片用チャンバー中、３３℃で、少なくとも１時間順応させる。
【００５７】
刺激レベルは、局限（focal）興奮性シナプス後電位（ｆＥＰＳＰ）が、最大興奮性シナプス電位（ＥＰＳＰ）の３０％であるように選択する。シャファー側枝の局所的刺激のために、ラッカー塗装したステンレススチールからなる単極刺激電極および定電流二相性刺激生成機（AM Systems 2100）を使用する（電圧：１−５Ｖ、一極性のパルス幅０.１ｍｓ、総パルス０.２ｍｓ）。通常栄養液を満たしたガラス電極（フィラメントを有するホウケイ酸ガラス、１−５ＭＯｈｍ、直径：１.５ｍｍ、先端の直径：３−２０μｍ）を使用して、放線状層からの興奮性シナプス後電位（ｆＥＰＳＰ）を記録する。電場電位を、切片用チャンバーの端に位置する塩素処理した銀照合電極に対して、ＤＣ電圧増幅器を使用して測定する。電場電位を、低域通過フィルター（low-pass filter）（５ｋＨｚ）を通してフィルターがけする。ｆＥＰＳＰの勾配（ｆＥＰＳＰ勾配）を、実験の統計学的分析のために測定する。実験の記録、分析および制御は、神経生理学部門（the Department of Neurophysiology）で開発されたソフトウェアプログラム（ＰＷＩＮ）を利用して行う。各時点の平均ｆＥＰＳＰ勾配の生成および図表の構築は、適切なマクロによる自動データ記録を用い、ＥＸＣＥＬソフトウエアを利用して行う。
【００５８】
本発明の化合物の１０μＭ溶液による海馬切片の灌流は、有意なＬＴＰの増大を導く。
【００５９】
社会的認識試験
社会的認識試験は、学習力および記憶力の試験である。それは、ラットが同種の既知メンバーと未知メンバーを区別する能力を測定する。従って、この試験は、本発明の化合物の学習力または記憶力の改善効果を調べるのに適している。
【００６０】
社内飼育した成体のラットを、試験開始３０分前に、一匹ずつ試験ケージに入れる。試験開始４分前に、試験動物を観察箱に入れる。この適応時間の後、幼若動物を試験動物と共に入れ、成体動物が年少動物を調べる絶対的時間を２分間にわたり測定する（試行１）。明らかに年少動物に対して向けられた全行動、即ち、その間年長動物が年少動物から１ｃｍ以上離れずにした、肛門性器の調査、追跡および毛繕い、を測定する。その後幼若動物を取り出し、成体を本発明の化合物または媒体で処置し、その後それを自分のケージに戻す。２４時間の保留時間の後に、試験を繰り返す（試行２）。試行１と比較して短縮された社会的相互作用時間は、成体ラットが年少動物を覚えていることを示す。
【００６１】
成体動物は、試行１の直後に、媒体（１０％エタノール、２０％ Solutol、７０％生理塩水）、または、１０％エタノール、２０％ Solutol、７０％生理塩水に溶解した０.１ｍｇ／ｋｇ、０.３ｍｇ／ｋｇ、１.０ｍｇ／ｋｇもしくは３.０ｍｇ／ｋｇの本発明の化合物のいずれかの腹腔注射を受ける。媒体処置ラットは、試行１と比較して、試行２において社会的相互作用時間の減少を示さない。従って、それらは、年少動物と既に接触したことを忘れてしまっている。驚くべきことに、本発明の化合物で処置した後の二回目のランにおける社会的相互作用時間は、媒体で処置したものと比較して、有意に減少する。このことは、この物質で処置したラットが幼若動物を覚えており、従って本発明の化合物が学習力および記憶力の改善効果を発揮することを意味する。
【００６２】
さらに、本発明は、本発明の化合物の有効量を使用して、障害、特に上述の障害を処置および／または予防する方法に関する。
【００６３】
さらに、本発明は、特に上述の障害を処置および／または予防するための、少なくとも１の本発明の化合物および１またはそれ以上の他の有効成分を含む医薬に関する。
【００６４】
本発明の化合物は、全身的および／または局所的効果を有し得る。そのために、それらは、例えば、経口、非経腸、経肺、鼻腔、舌下、経舌、頬側、直腸、皮膚、経皮、結膜もしくは耳経路により、またはインプラントもしくはステントとしてなど、適するやり方で投与できる。
本発明の化合物は、これらの投与経路に適する投与形で投与できる。
【００６５】
経口投与に適する投与形は、当技術の現状に準じて機能し、本発明の化合物を迅速におよび／または修飾されたやり方で送達するものであり、本発明の化合物を結晶および／または無定形および／または溶解形態で含有するもの、例えば、錠剤（非被覆または被覆錠剤、例えば、胃液耐性であるか、またはゆっくりと溶解するか、もしくは不溶であり、そして本発明の化合物の放出を制御する被覆を有するもの）、口内で迅速に崩壊する錠剤、またはフィルム／ウェハース（wafers）、フィルム／凍結乾燥剤、カプセル剤（例えば、ハードまたはソフトゼラチンカプセル剤）、糖衣錠剤、顆粒剤、ペレット剤、粉末剤、乳剤、懸濁剤、エアゾル剤または液剤である。
【００６６】
非経腸投与は、吸収段階を回避して（例えば、静脈内、動脈内、心臓内、脊椎内または腰椎内）、または吸収を含めて（例えば、筋肉内、皮下、皮内、経皮または腹腔内）行うことができる。非経腸投与に適する投与形は、なかんずく、液剤、懸濁剤、乳剤、凍結乾燥剤または滅菌粉末剤の形態の注射および点滴用製剤である。
【００６７】
他の投与経路に適する例は、吸入用医薬形態（なかんずく、粉末吸入器、ネブライザー）、点鼻薬、液剤、スプレー；舌、舌下または頬側投与用錠剤、フィルム／ウェハースまたはカプセル剤、坐剤、耳または眼用製剤、膣カプセル剤、水性懸濁剤（ローション、震盪混合物）、親油性懸濁剤、軟膏、クリーム、経皮治療系（例えば、パッチなど）、ミルク、ペースト、フォーム、散剤、インプラントまたはステントが含まれる。
【００６８】
本発明の化合物は、上述の投与形に変換できる。これは、それ自体知られているやり方で、不活性、非毒性の医薬的に適する賦形剤と混合することにより行うことができる。これらの賦形剤には、なかんずく、担体（例えば、微晶性セルロース、ラクトース、マンニトール）、溶媒（例えば、液体ポリエチレングリコール）、乳化剤および分散剤または湿潤剤（例えば、ドデシル硫酸ナトリウム、ポリオキシソルビタンオレエート）、結合剤（例えば、ポリビニルピロリドン）、合成および天然ポリマー（例えば、アルブミン）、安定剤（例えば、アスコルビン酸などの抗酸化剤）、着色剤（例えば、酸化鉄などの無機色素）または風味および／または臭気隠蔽剤が含まれる。
【００６９】
本発明はさらに、少なくとも１の本発明の化合物を、通常１またはそれ以上の不活性、非毒性、医薬的に適する賦形剤と一緒に含む医薬、および上記目的のためのそれらの使用に関する。
【００７０】
一般的に、非経腸投与で１日当たり体重の約０.００１ないし１０ｍｇ／ｋｇの量を投与するのが、有効な結果を得るために有利であることが判明した。１日当たりの経口投与量は、体重の約０.００５ないし３ｍｇ／ｋｇである。
【００７１】
それでもやはり、特に体重、適用経路、有効成分に対する個体の挙動、製剤のタイプおよび投与を行う時間または間隔の関数として、上述の量から逸脱することが必要であり得る。従って、前述の最少量未満で十分な場合もあれば、前述の上限を超えなければならない場合もある。大量に投与する場合、それを１日かけて複数の単回用量に分割するのが望ましい。
【００７２】
以下の試験および実施例におけるパーセントのデータは、断りのない限り、重量によるパーセントであり、部は重量部である。液体／液状溶液の溶媒比、希釈率および濃度のデータは、各々容積をベースとする。
【００７３】
使用する略号：
【表２】
0004757491.tif 000013
【００７４】
出発化合物：
実施例１Ａ
５−アミノ−１−シクロヘキシル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル
【化１１】
0004757491.tif 000014
最初に、エトキシメチレンマロノニトリル（２.４３ｇ、１９.９ｍｍｏｌ）、次いでトリエチルアミン８ｍｌを、エタノール３６ｍｌ中のシクロヘキシルヒドラジン塩酸塩（３ｇ、１９.９ｍｍｏｌ）の溶液に室温で添加する。混合物を２０分間還流し、次いで冷却する。溶媒を回転エバポレーター中で除去し、残渣をＤＣＭに溶かし、水性重炭酸ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮する。粗生成物をシリカゲルでクロマトグラフィーする（移動相：ジクロロメタン／メタノール０−１０％）。
収量：１.９５ｇ（理論値の５１％）
ＭＳ（ＤＣＩ）：ｍ／ｚ＝１９１（Ｍ＋Ｈ）＋
1H NMR (200 MHz, DMSO-d6): δ = 7.5 (s, 1H), 6.5 (s, 2H), 4.0 (m, 1H), 1.95-1.05 (m, 10H) ppm.
【００７５】
実施例２Ａ
５−アミノ−１−シクロペンチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル
【化１２】
0004757491.tif 000015
実施例１Ａの方法と同様に製造を行う。
ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝１７７（Ｍ＋Ｈ）＋
1H NMR (200 MHz, CDCl3): δ = 7.5 (s, 1H), 4.45 (br. s, 2H), 4.35 (m, 1H), 2.2-1.55 (m, 6H) ppm.
【００７６】
実施例３Ａ
５−アミノ−１−（１−エチルプロピル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル
【化１３】
0004757491.tif 000016
実施例１Ａの方法と同様に製造を行う。
ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝１７９（Ｍ＋Ｈ）＋
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ = 7.55 (s, 1H), 6.45 (s, 2H), 4.0 (m, 1H), 1.8-1.55 (m, 4H), 0.65 (t, 6H) ppm.
【００７７】
実施例４Ａ
５−アミノ−１−シクロヘキシル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド
【化１４】
0004757491.tif 000017
３０％強度過酸化水素溶液１８ｍｌを、エタノール７３ｍｌと濃縮水性アンモニア溶液９０ｍｌの混合物中の５−アミノ−１−シクロヘキシル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル（１.８６ｇ、９.８１ｍｍｏｌ）の溶液に室温で添加し、混合物を室温で１時間撹拌する。次いで、非水性溶媒を回転エバポレーター中で除去する。残存している混合物から生成物が固体として沈殿し、それを吸引濾過し、少量の水で洗浄し、高真空下で乾燥させる。
収量：１.７７ｇ（理論値の８６％）
ＭＳ（ＤＣＩ）：ｍ／ｚ＝２０９（Ｍ＋Ｈ）＋
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ = 7.6 (s, 1H), 7.3-6.4 (broad, 2H), 6.1 (s, 2H), 3.95 (m, 1H), 1.95-1.05 (m, 10H) ppm.
【００７８】
実施例５Ａ
５−アミノ−１−シクロペンチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド
【化１５】
0004757491.tif 000018
実施例４Ａの方法と同様に製造を行う。
ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝１９５（Ｍ＋Ｈ）＋
1H NMR (200 MHz, CDCl3): δ = 7.5 (s, 1H), 5.6-4.8 (broad, 4H), 4.35 (m, 1H), 2.2 1.55 (m, 8H) ppm.
【００７９】
実施例６Ａ
５−アミノ−１−（１−エチルプロピル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド
【化１６】
0004757491.tif 000019
実施例４Ａの方法と同様に製造を行う。
ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝１９７（Ｍ＋Ｈ）＋
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ = 7.65 (s, 1H), 6.9 (br. s, 2H), 6.1 (s, 2H), 3.9 (m, 1H), 1.85-1.6 (m, 4H), 0.7 (t, 6H) ppm.
【００８０】
例示的実施態様：
実施例１
６−（３−クロロベンジル）−１−シクロペンチル−１,５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｄ］ピリミジン−４−オン
【化１７】
0004757491.tif 000020
アルゴン下で、５−アミノ−１−シクロペンチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド１８０ｍｇ（０.９１ｍｍｏｌ）およびエチル（３−クロロフェニル）アセテート５７５ｍｇ（２.７２ｍｍｏｌ；３当量）を、無水エタノール３.５ｍｌに導入する。０℃で、水素化ナトリウム１２７ｍｇ（鉱油中、６０％分散；３.１８ｍｍｏｌ；３.５当量）を、アルゴンの向流（countercurrent）中でゆっくりと添加する。生じる混合物をゆっくりと温め、還流下で１８時間撹拌する。水５０ｍｌの添加により混合物を後処理し、酢酸エチルで数回抽出する。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空で濃縮する。粗生成物を分取ＨＰＬＣにより精製する。
収量：２４４ｍｇ（理論値の８１％）
ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝３２９（Ｍ＋Ｈ）＋
ｍ.ｐ.：１５９℃
1H NMR (200 MHz, DMSO-d6): δ = 12.3 (s, 1H), 8.0 (s, 1H), 7.5-7.2 (m, 4H), 5.05 (m, 1H), 3.95 (s, 2H), 2.2-1.5 (m, 8H) ppm.
【００８１】
実施例２
６−（２−フルオロベンジル）−１−シクロペンチル−１,５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｄ］ピリミジン−４−オン
【化１８】
0004757491.tif 000021
実施例１と同様に、５−アミノ−１−シクロペンチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド１００ｍｇ（０.５ｍｍｏｌ）およびメチル（２−フルオロフェニル）アセテート２６０ｍｇ（１.５１ｍｍｏｌ）から出発して、生成物を得る。
収量：１００ｍｇ（理論値の６３％）
ＭＳ（ＤＣＩ）：ｍ／ｚ＝３１３（Ｍ＋Ｈ）＋
ｍ.ｐ.：１８０℃
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 12.25 (s, 1H), 8.0 (s, 1H), 7.4-7.3 (m, 2H), 7.2-7.1 (m, 2H), 4.95 (m, 1H), 4.05 (s, 2H), 2.05-1.55 (m, 8H) ppm.
【００８２】
実施例３
６−（３−ブロモベンジル）−１−シクロペンチル−１,５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｄ］ピリミジン−４−オン
【化１９】
0004757491.tif 000022
実施例１と同様に、５−アミノ−１−シクロペンチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド８０ｍｇ（０.４ｍｍｏｌ）およびメチル（３−ブロモフェニル）アセテート２７７ｍｇ（１.２１ｍｍｏｌ）から出発して、生成物を得る。
収量：９３ｍｇ（理論値の６２％）
ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝３７３（Ｍ＋Ｈ）＋
ｍ.ｐ.：１５９℃
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 12.2 (s, 1H), 8.0 (s, 1H), 7.6 (s, 1H), 7.5-7.35 (m, 3H), 5.05 (m, 1H), 4.0 (s, 2H), 2.1-1.6 (m, 8H) ppm.
【００８３】
実施例４
６−（３,４−ジクロロベンジル）−１−シクロペンチル−１,５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｄ］ピリミジン−４−オン
【化２０】
0004757491.tif 000023
実施例１と同様に、５−アミノ−１−シクロペンチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド７５ｍｇ（０.３８ｍｍｏｌ）およびメチル（３,４−ジクロロフェニル）アセテート２５４ｍｇ（１.１４ｍｍｏｌ）から出発して、生成物を得る。
収量：９４ｍｇ（理論値の６８％）
ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝３６３（Ｍ＋Ｈ）＋
ｍ.ｐ.：１９８℃
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 12.2 (s, 1H), 8.0 (s, 1H), 7.65 (d, 1H, J = 1 Hz), 7.55 (d, 1H, J = 7.5 Hz), 7.3 (dd, 1H, J = 7.5 Hz, 1 Hz), 5.05 (m, 1H), 4.0 (s, 2H), 2.1-1.6 (m, 8H) ppm.
【００８４】
実施例５
６−（３,５−ジクロロベンジル）−１−シクロペンチル−１,５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｄ］ピリミジン−４−オン
【化２１】
0004757491.tif 000024
実施例１と同様に、５−アミノ−１−シクロペンチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド１５０ｍｇ（０.７６ｍｍｏｌ）およびメチル（３,５−ジクロロフェニル）アセテート５０７ｍｇ（２.２７ｍｍｏｌ）から出発して、生成物を得る。
収量：１５９ｍｇ（理論値の５８％）
ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝３６３（Ｍ＋Ｈ）＋
ｍ.ｐ.：１７７℃
1H NMR (200 MHz, DMSO-d6): δ = 12.25 (s, 1H), 8.0 (s, 1H), 7.55 (t, 1H, J = 1 Hz), 7.45 (d, 2H, J = 1 Hz), 5.05 (m, 1H), 4.0 (s, 2H), 2.2-1.5 (m, 8H) ppm.
【００８５】
実施例６
６−（２,３−ジクロロベンジル）−１−シクロペンチル−１,５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｄ］ピリミジン−４−オン
【化２２】
0004757491.tif 000025
実施例１と同様に、５−アミノ−１−シクロペンチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド１５０ｍｇ（０.７６ｍｍｏｌ）およびメチル（２,３−ジクロロフェニル）アセテート４０６ｍｇ（１.８２ｍｍｏｌ）から出発して、生成物を得る。
収量：１１４ｍｇ（理論値の４１％）
ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝３６３（Ｍ＋Ｈ）＋
ｍ.ｐ.：１８１℃
1H NMR (200 MHz, DMSO-d6): δ = 12.35 (s, 1H), 8.0 (s, 1H), 7.6 (m, 1H), 7.4-7.3 (m, 2H), 4.9 (m, 1H), 4.2 (s, 2H), 2.1-1.5 (m, 8H) ppm.
【００８６】
実施例７
６−（３−クロロベンジル）−１−（１−エチルプロピル）−１,５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｄ］ピリミジン−４−オン
【化２３】
0004757491.tif 000026
実施例１と同様に、５−アミノ−１−（１−エチルプロピル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド１５０ｍｇ（０.７６ｍｍｏｌ）およびエチル（３−クロロフェニル）アセテート４８４ｍｇ（２.２９ｍｍｏｌ）から出発して、生成物を得る。
収量：２１０ｍｇ（理論値の８３％）
ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝３３１（Ｍ＋Ｈ）＋
ｍ.ｐ.：１３８℃
1H NMR (200 MHz, DMSO-d6): δ = 12.3 (s, 1H), 8.0 (s, 1H), 7.45-7.25 (m, 4H), 4.45 (m, 1H), 4.0 (s, 2H), 2.0-1.7 (m, 4H), 0.6 (t, 6H, J = 7.5 Hz) ppm.
【００８７】
実施例８
６−（３−メチルベンジル）−１−シクロペンチル−１,５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｄ］ピリミジン−４−オン
【化２４】
0004757491.tif 000027
実施例１と同様に、５−アミノ−１−シクロペンチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド２００ｍｇ（１.０１ｍｍｏｌ）およびエチル（３−メチルフェニル）アセテート５５０ｍｇ（３.０３ｍｍｏｌ）から出発して、生成物を得る。
収量：２２２ｍｇ（理論値の７１％）
ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝３０９（Ｍ＋Ｈ）＋
ｍ.ｐ.：１５２℃
1H NMR (200 MHz, DMSO-d6): δ = 12.2 (s, 1H), 8.0 (s, 1H), 7.3-7.0 (m, 4H), 5.1 (m, 1H), 3.95 (s, 2H), 2.3 (s, 3H), 2.2-1.55 (m, 8H) ppm.
【００８８】
実施例９
６−（２,５−ジクロロベンジル）−１−（１−エチルプロピル）−１,５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｄ］ピリミジン−４−オン
【化２５】
0004757491.tif 000028
実施例１と同様に、５−アミノ−１−（１−エチルプロピル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド２００ｍｇ（１.０ｍｍｏｌ）およびメチル（２,５−ジクロロフェニル）アセテート８０６ｍｇ（３.５ｍｍｏｌ）から出発して、生成物を得る。
収量：５１ｍｇ（理論値の１４％）
ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝３６５（Ｍ＋Ｈ）＋
ｍ.ｐ.：１３４℃
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ = 12.3 (s, 1H), 8.0 (s, 1H), 7.55-7.35 (m, 3H), 4.2 (m, 1H), 4.15 (s, 2H), 1.9-1.65 (m, 4H), 0.55 (t, 6H, J = 7.5 Hz) ppm.
【００８９】
実施例１０
６−（３−メチルベンジル）−１−（１−エチルプロピル）−１,５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｄ］ピリミジン−４−オン
【化２６】
0004757491.tif 000029
実施例１と同様に、５−アミノ−１−（１−エチルプロピル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド２００ｍｇ（１.０ｍｍｏｌ）およびエチル（３−メチルフェニル）アセテート５３４ｍｇ（３.０ｍｍｏｌ）から出発して、生成物を得る。
収量：１８７ｍｇ（理論値の６０％）
ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝３１１（Ｍ＋Ｈ）＋
ｍ.ｐ.：１２８℃
1H NMR (200 MHz, DMSO-d6): δ = 12.25 (s, 1H), 8.0 (s, 1H), 7.25-7.0 (m, 4H), 4.5 (m, 1H), 3.95 (s, 2H), 2.25 (s, 3H), 2.0-1.7 (m, 4H), 0.6 (t, 6H, J = 7.5 Hz) ppm.
【００９０】
実施例１１
１−（１−エチルプロピル）−６−［３−（トリフルオロメチル）ベンジル］−１,５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｄ］ピリミジン−４−オン
【化２７】
0004757491.tif 000030
実施例１と同様に、５−アミノ−１−（１−エチルプロピル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド１５０ｍｇ（０.７５ｍｍｏｌ）およびメチル（３−トリフルオロメチルフェニル）アセテート４９０ｍｇ（２.２５ｍｍｏｌ）から出発して、生成物を得る。
収量：１５９ｍｇ（理論値の５８％）
ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝３６５（Ｍ＋Ｈ）＋
ｍ.ｐ.：１２０℃
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 12.3 (s, 1H), 8.0 (s, 1H), 7.7 (s, 1H), 7.7-7.5 (m, 3H), 4.4 (m, 1H), 4.1 (s, 2H), 1.95-1.75 (m, 4H), 0.6 (t, 6H, J = 7.5 Hz) ppm.
【００９１】
実施例１２
１−シクロペンチル−６−（３−ニトロベンジル）−１,５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｄ］ピリミジン−４−オン
【化２８】
0004757491.tif 000031
実施例１と同様に、５−アミノ−１−シクロペンチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド６６８ｍｇ（３.４４ｍｍｏｌ）およびエチル３−ニトロフェニルアセテート３.５ｇ（１３.７ｍｍｏｌ）から出発して、生成物を得る。
収量：１０ｍｇ（理論値の１％）
ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝３４０（Ｍ＋Ｈ）＋
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ = 12.3 (s, 1H), 8.3 (s, 1H), 8.15 (m, 1H), 8.0 (s, 1H), 7.8 (d, 1H, J = 8 Hz), 7.6 (t, 1H, J = 8 Hz), 5.0 (m, 1H), 4.15 (s, 2H), 2.1-1.6 (m, 8H).
【００９２】
実施例１３
６−（３−クロロベンジル）−１−シクロペンチル−１,５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｄ］ピリミジン−４−チオン
【化２９】
0004757491.tif 000032
五硫化二リン５０ｍｇ（０.２３ｍｍｏｌ、１.５当量）を、ピリジン１ｍｌ中の６−（３−クロロベンジル）−１−シクロペンチル−１,５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｄ］ピリミジン−４−オン（実施例１）５０ｍｇ（０.１５ｍｍｏｌ）の溶液に室温で添加し、次いで混合物を還流下で終夜撹拌する。冷却後、反応溶液を氷冷２.５％強度重炭酸ナトリウム溶液１０ｍｌと混合し、酢酸エチルで３回抽出する。合わせた有機相を飽和塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空で濃縮する。粗生成物を分取ＨＰＬＣにより精製する。
収量：３６ｍｇ（理論値の６８％）
ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝３４５（Ｍ＋Ｈ）＋
ｍ.ｐ.：１５４℃
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ = 13.6 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.5 (s, 1H), 7.4-7.25 (m, 3H), 5.05 (m, 1H), 4.1 (s, 2H), 2.1-1.6 (m, 8H).
【００９３】
実施例１４
１−シクロペンチル−６−［２−（トリフルオロメトキシ）ベンジル］−１,５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｄ］ピリミジン−４−オン
【化３０】
0004757491.tif 000033
実施例１と同様に、５−アミノ−１−シクロペンチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド５０ｍｇ（０.２６ｍｍｏｌ）およびメチル［２−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アセテート３０１ｍｇ（１.２９ｍｍｏｌ）から出発して、生成物を得る。
収量：６４ｍｇ（理論値の６３％）
ＭＳ（ＤＣＩ）：ｍ／ｚ＝３７９（Ｍ＋Ｈ）＋
ｍ.ｐ.：１６１℃
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 12.25 (s, 1H), 8.0 (s, 1H), 7.5-7.3 (m, 4H), 4.9 (m, 1H), 4.1 (s, 2H), 2.05-1.5 (m, 8H) ppm.