(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
遊離形または塩形における、式Ｉ
【化１】
0004681732.tif 000134
〔式中、
Ｒ２は酸素であり；“ａ”は単結合であり；“ｂ”は単結合であり；そして、“ｃ”は単結合であり；
Ｒ３はメチルであり；
Ｒ４およびＲ５は水素であり；そして
Ｒ１は以下：
【化２】
0004681732.tif 000135
で示される基である〕
で示される化合物。
【請求項２】
請求項１に記載の化合物と薬学的に許容される担体を含む、医薬製剤。
【請求項３】
増殖性疾患の処置に使用するための請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
増殖性疾患の処置用医薬の製造における、請求項１に記載の化合物の使用。
【請求項５】
活性成分として増殖性疾患の処置に有効である量の請求項１に記載の化合物を、少なくとも一つの薬学的に許容される担体と共に含む、増殖性疾患の処置のために温血動物への投与に適した医薬組成物。
【請求項６】
式II
【化３】
0004681732.tif 000136
〔式中、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、ａ、ｂおよびｃおよび波線は請求項１の式Ｉで定義の意味を有する〕
で示されるヨウ化物と、式III
Ｒ１−Ｓｎ(Ｒ)３                                          (III)
〔式中、Ｒ１は請求項１の式Ｉで定義の意味を有し、ＲはＣ１−Ｃ７アルキルである〕
で示されるスズ化合物をカップリングさせることを特徴とする、請求項１に記載の化合物の合成法。
【請求項７】
式IV
【化４】
0004681732.tif 000137
〔式中、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、ａ、ｂおよびｃおよび波線は請求項１の式Ｉで定義の意味を有する〕
で示されるスズ化合物と、式Ｖ
Ｒ１−Ｉ                                (Ｖ)
〔式中、Ｒ１は請求項１の式Ｉで定義の意味を有する〕
で示されるヨウ化物をカップリングさせることを特徴とする、請求項１に記載の化合物の合成法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
発明の要約
本発明は、側鎖修飾を有するエポシロン誘導体およびこのような化合物を製造する方法、疾病の治療におけるまたは疾病の処置用医薬製剤の製造のためのその使用、およびこのようなアナログの合成に使用する新規中間体および新規合成法に関する。
【０００２】
政府の権限
本発明は、国立衛生研究所により授与される承認ＣＡ４６４４６の下、政府の支持により成された。米国政府は本発明に一定の権限を有する。
【０００３】
発明の背景
エポシロン(１−５)は、天然物質であり、α−およびβ−チューブリンサブユニットの重合化の促進および得られる微小管集合体の安定化により、パクリタキセル耐性腫瘍細胞に対してさえ、細胞毒性を示す。エポシロンは、その微小管結合部位からパクリタキセル(TAXOL(登録商標)の活性本体)を離し、微小管の安定化に関してパクリタキセルよりも、より強力であると報告されている。
【０００４】
【化３１】
0004681732.tif 000002
【０００５】
必要なのは、優れた薬学的性質、特に以下の特性の一つまたはそれ以上を示すエポシロンＡおよびＢである：促進された治療指数(例えば、増殖性疾患に対する正常細胞への毒性無しの、例えば、広い範囲の細胞毒性投与量)、良好な薬物動態特性、良好な薬力学的特性、良好な水への溶解性、他の化学療法剤の１つまたはそれ以上に耐性であるか、耐性となる腫瘍タイプに対する良好な効果、製剤の製造を容易にする良好な特性、例えば、特に水を含む、極性溶媒への良好な溶解度、化合物それ自体の簡便な製造、細胞レベルでの増殖の改善された阻害、高いレベルの微小管安定化効果、および／または特異的薬理学的プロフィール。
【０００６】
発明の詳細な説明：
本発明は、驚くべきことに１個またはそれ以上の上記の利点を有する新規化合物に関する。
【０００７】
本発明の一つの主要な態様は、式Ｉ
【化３２】
0004681732.tif 000003
〔式中、
波線は結合“ａ”がcisまたはtrans形で存在することを示す；
(ｉ)Ｒ2は不存在または酸素である；“ａ”は１重または２重結合であり得る；“ｂ”は不存在または１重結合であり得る；および“ｃ”は不存在または１重結合であり得るが、ただしＲ2が酸素の場合、“ｂ”および“ｃ”の両方は１重結合であり、“ａ”は１重結合である；Ｒ2が不存在である場合、“ｂ”および“ｃ”は不存在であり、“ａ”は２重結合である；および“ａ”が２重結合である場合、Ｒ2、“ｂ”および“ｃ”は不存在である；
Ｒ3は水素；低級アルキル、特にメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、tert−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル；−ＣＨ＝ＣＨ2；−Ｃ＝ＣＨ；−ＣＨ2Ｆ；−ＣＨ2Ｃｌ；−ＣＨ2−ＯＨ；−ＣＨ2−Ｏ−(Ｃ1−Ｃ6−アルキル)、特に−ＣＨ2−Ｏ−ＣＨ3；および−ＣＨ2−Ｓ−(Ｃ1−Ｃ6−アルキル)、特に−ＣＨ2−Ｓ−ＣＨ3からなる群から選択される基；
Ｒ4およびＲ5は、独立して水素、メチルまたは保護基から選択され、好ましくは水素である；そして
Ｒ1は以下の構造式から選択される基である：
【化３３】
0004681732.tif 000004
または本発明の広い態様において、式
【化３４】
0004681732.tif 000005
(式中、ＲおよびＲ'は低級アルキル、特にメチル、または、本発明の広い態様において、更にＲ'はヒドロキシメチルまたはフルオロメチルおよびＲは水素またはメチルである)；
(ii)および、Ｒ3が低級アルキル、特にメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、tert−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル；−ＣＨ＝ＣＨ2；−Ｃ＝ＣＨ；−ＣＨ2Ｆ；−ＣＨ2Ｃｌ；−ＣＨ2−ＯＨ；−ＣＨ2−Ｏ−(Ｃ1−Ｃ6−アルキル)、特に−ＣＨ2−Ｏ−ＣＨ3；または−ＣＨ2−Ｓ−(Ｃ1−Ｃ6−アルキル)、特に−ＣＨ2−Ｓ−ＣＨ3であり、Ｒ1以外の他の記号が上記で定義の意味である場合、Ｒ1はまた以下の構造式から選択される基であり得る：
【化３５】
0004681732.tif 000006
または、Ｒ3が、メチル以外の上記(ii)におけるＲ3で定義の意味である場合、Ｒ1はまた式
【化３６】
0004681732.tif 000007
の基でもあり得る
(iii)および、Ｒ3が水素、低級アルキル、特にメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、tert−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル；−ＣＨ＝ＣＨ2；−Ｃ＝ＣＨ；−ＣＨ2Ｆ；−ＣＨ2Ｃｌ；−ＣＨ2−ＯＨ；−ＣＨ2−Ｏ−(Ｃ1−Ｃ6−アルキル)、特に−ＣＨ2−Ｏ−ＣＨ3；または−ＣＨ2−Ｓ−(Ｃ1−Ｃ6−アルキル)、特に−ＣＨ2−Ｓ−ＣＨ3であり、Ｒ2が酸素、“ｂ”および“ｃ”が各々１重結合および“ａ”が１重結合である場合、
Ｒ1はまた以下の部分式：
【化３７】
0004681732.tif 000008
であり得る；
(iv)および、Ｒ3がメチル以外の低級アルキル、特にエチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、tert−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル；または好ましくは−ＣＨ＝ＣＨ2；−Ｃ＝ＣＨ；−ＣＨ2Ｆ；−ＣＨ2Ｃｌ；−ＣＨ2−ＯＨ；−ＣＨ2−Ｏ−(Ｃ1−Ｃ6−アルキル)、特に−ＣＨ2−Ｏ−ＣＨ3；または−ＣＨ2−Ｓ−(Ｃ1−Ｃ6−アルキル)、特に−ＣＨ2−Ｓ−ＣＨ3；および、Ｒ1以外の他の記号が上記(ｉ)で定義のものである場合、
Ｒ1はまた式
【化３８】
0004681732.tif 000009
の部分であり得る〕
により示されるエポシロンアナログ化合物、または塩形成基が存在する場合、式Ｉの化合物の塩に関する。
【０００８】
本発明の他の態様は、式
【化３９】
0004681732.tif 000010
(式中、Ｑは水素または好ましくはメチルである)
の化合物の合成法および／または式
【化４０】
0004681732.tif 000011
の化合物の合成法に関する。
【０００９】
上記および下記で使用する一般的用語は、本明細書の内容において、特記しない限り以下の意味を有する：
用語“低級”は、各々の基が、好ましくは７個まで(７個を含む)、より好ましくは４個まで(４個を含む)の炭素原子を有することを意味する。
【００１０】
低級アルキルは直鎖または分枝鎖であり得、７個まで(７個を含む)、より好ましくは４個まで(４個を含む)の炭素原子を有する。好ましくは、低級アルキルはメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、tert−ブチルまたは更にｎ−ペンチルまたはｎ−ヘキシルである。
【００１１】
保護基は、好ましくは標準保護基である。式Ｉの化合物中の他の１個またはそれ以上の官能基、例えば、カルボキシ、ヒドロキシ、アミノ、またはメルカプトは、それらが反応に関与すべきでないため、保護されているか、保護される必要がある場合、これらはペプチド化合物、およびまたセファロスポリンおよびペニシリン、ならびに核酸誘導体および糖の合成に通常使用される基である。
【００１２】
保護基は既に前駆体で存在し得、アシル化、エーテル化、エステル化、酸化、加溶媒分解、および類似の反応のような望ましくない２次反応に対して関連する官能基を保護する。それ自体容易に、即ち、望ましくない２次反応なしに、典型的に、加溶媒分解、還元、光分解、または酵素活性により、例えば、生理学的条件と類似の条件下で除去されるのに向いており、最終生産物に存在しないのが保護基の特徴である。専門家は、どの保護基が上記および下記の反応に適しているか既知であるか、容易に確立できる。
【００１３】
このような保護基によるこのような官能基の保護、保護基それ自体、およびその除去反応は、例えば、J. F. W. McOmie,“Protective Groups in Organic Chemistry”, Plenum Press, London and New York 1973, T. W. Greene,“Protective Groups in Organic Synthesis”, Wiley, New York 1981, “The Peptides”;Volume 3 (編集者:E. Gross and J. Meienhofer), Academic Press, London and New York 1981,“Methoden der organischen Chemie”(Methods of organic chemistry), Houben Weyl, 4th edition, Volume 15/1, Georg Thieme Verlag, Stuttgart 1974, H.-D. Jakubke and H. Jescheit,“aminosaeuren, Peptide, Proteine”(amino acids, peptides, proteins), Verlag Chemie, Weinheim, Deerfield Beach, and Basel 1982,およびJochen Lehmann,“Chemie der Kohlenhydrate: Monosaccharide und Derivate”(Chemistry of carbohydrates:monosaccharides and derivatives), Georg Thieme Verlag, Stuttgart 1974のような標準引用文献に記載されている。特に好ましい保護基は、tert−ブチルジメチルシリルまたはトリチルのようなヒドロキシ保護基である。
【００１４】
Ｒ4およびＲ5は好ましくは水素である。
Ｒ3を担持する炭素原子から開始する波線は、結合“ａ”がtrans−または好ましくはcis−形で存在することを意味する。
塩は、特に式Ｉの化合物の薬学的に許容される塩である。
【００１５】
このような塩は、例えば、酸付加塩として、好ましくは、式Ｉの化合物からの有機酸または無機酸と、塩基性窒素原子から形成され、特に薬学的に許容される塩である。適当な無機酸は、例えば、塩酸のようなハロゲン酸、硫酸、またはリン酸である。適当な有機酸は、例えば、カルボン酸、ホスホン酸、スルホン酸またはスルファミン酸、例えば、酢酸、プロピオン酸、オクタン酸、デカン酸、ドデカン酸、グリコール酸、乳酸、フマル酸、コハク酸、アジピン酸、ピメリン酸、スベリン酸、アゼライン酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、グルタミン酸またはアスパラギン酸のようなアミノ酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、メチルマレイン酸、シクロヘキサンカルボン酸、アダマンタンカルボン酸、安息香酸、サリチル酸、４−アミノサリチル酸、フタル酸、フェニル酢酸、マンデル酸、桂皮酸、メタン−またはエタン−スルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、エタン−１,２−ジスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、２−ナフタレンスルホン酸、１,５−ナフタレンジスルホン酸、２−、３−または４−メチルベンゼンスルホン酸、メチル硫酸、エチル硫酸、ドデシル硫酸、Ｎ−シクロヘキシルスルファミン酸、Ｎ−メチル−、Ｎ−エチル−またはＮ−プロピル−スルファミン酸、またはアスコルビン酸のような他の有機プロトン性酸である。
【００１６】
単離または精製目的で、薬学的に許容されない塩、例えば、ピクリン酸塩または過塩素酸の使用も可能である。治療的使用のために、薬学的に許容される塩または遊離化合物のみが用いられ(医薬製剤の形で適当であるところで)、これらが従って好ましい。
【００１７】
新規化合物の遊離の形と、中間体として、例えば、新規化合物の精製または同定において使用できる塩を含むその塩の形の間の密接な関係の観点から、上記および下記の遊離化合物に関する言及は、また適当であり、好都合である限り、対応する塩もまた言及すると理解される。
【００１８】
数字と付随した用語“約”、例えば、“約２倍モル過剰”等は、好ましくは、記載の数字が±１０％まで、好ましくは±３％まで分散し得ることを意味することを意図する；最も好ましくは、数字は正確に記載のものである。
【００１９】
本発明の好ましい態様において、上記(iv)で記載の化合物Ｉ(Ｒ1＝
【化４１】
0004681732.tif 000012
）は、本発明の範囲から除かれる。
【００２０】
また、Ｒ1が式
【化４２】
0004681732.tif 000013
の一つの部分である式Ｉの化合物ではない式Ｉの化合物のグループが好ましい(残りの記号は、式Ｉの化合物で定義の意味を有する)。
【００２１】
特に好ましいのは、式Ｉの遊離化合物またはその塩である。
【００２２】
生物活性：本発明の化合物は、増殖性疾患、例えば、特に多剤耐性(例えば、ｐ−糖タンパク質＝Ｐ−ｇｐの発現のため)および／またはパクリタキセル(例えば、TAXOLの形)の処置に対して難治性のものを含む肺の癌、特に非小細胞性肺癌、前立腺の癌、腸の癌、例えば、結腸直腸癌、類表皮癌、頭および／または頸部腫瘍、または乳癌のような癌、または膀胱、膵臓または脳の癌またはメラノーマのような他の癌の処置に使用できる。
【００２３】
生物学的評価：
本発明の化合物が微小管の解重合を阻害する能力は、以下のアッセイで示すことができる：
微小管アッセイは、文献の方法に従って行い、合成化合物を、微小管の形成および安定化の能力に関して評価する。細胞毒性実験を同様に行う。
【００２４】
式Ｉの化合物を、チューブリン集合に関して、精製チューブリンを、タキソールよりも活性の化合物の間の差を増幅するために開発したアッセイで試験する。式Ｉの化合物は、エポシロンＡおよびＢと比較して高レベルの細胞毒性およびチューブリン重合化活性を有することが判明した。(Lin et al. Cancer Chemother. Pharmacol. 38, 136-140(1996);Rogan et al. Science 244,994-996(1984))。
【００２５】
濾過比色アッセイ
微小管タンパク質(１mg／mlの０.２５ml)を試験管に入れ、２.５μlの試験化合物を添加する。サンプルを混合し、３７℃で３０分インキュベートする。サンプル(１５０μl)を、先に２００μlのＭＥＭ緩衝液で真空下洗浄してある９６−ウェルMillipore Multiscreen Durapore親水性０.２２μm孔サイズ濾過プレートに移す。次いで、ウェルを２００μlのＭＥＭ緩衝液で洗浄する。プレート上にトラップされたタンパク質を染色するために、５０μlアミドブラック溶液[０.１％ナフトールブルーブラック(Sigma)／４５％メタノール／１０％酢酸]を、２分間フィルターに添加する；次いで、再び真空を適用する。更に２回の２００μlアミドブラックデスタイン溶液(９０％メタノール／２％酢酸)を添加し、非結合色素を除去する。シグナルをSchaffner and Weissmann et al. Anal. Biochem., 56:502-514, 1973の方法により下記のように定量する：２００μlの溶出溶液(２５mM  ＮａＯＨ−０.０５mM  ＥＤＴＡ−５０％エタノール)をウェルに添加し、溶液を５分後にピペットで混合する。１０分の室温でのインキュベーション後、１５０μlの溶出溶液を９６ウェルプレートのウェルに移し、吸光度をmolecular Devices Microplate Readerで測定する。
【００２６】
1A9、1A9PTX10(α−チューブリン変異体)および1A9PTX22(α−チューブリン変異体)細胞系での細胞毒性試験は、式Ｉの化合物の細胞毒性活性を示すことができる。天然に存在するエポシロン１および２と同様に、式Ｉの化合物は変更α−チューブリン細胞系1A9PTX10および1A9PTX22に対して有意な活性を示す。式Ｉの化合物に関して、好ましいＩＣ５０値(式Ｉの阻害剤なしのコントロールと比較して、腫瘍細胞の最大の半分の成長阻害が見られる濃度)は、１から１０００nM、好ましくは１から２００nMの範囲である。
【００２７】
本発明の化合物が腫瘍生育を阻害する能力は、以下の細胞系による以下のアッセイで示すことができる：
抗癌剤スクリーニングのための比色細胞毒性アッセイ
使用する比色細胞毒性アッセイはSkehan et al (Journal of National Cancer Inst 82:1107-1112, 1991)を適合させる。本方法は、９６ウェルマイクロタイタープレートの付着および懸濁培養の細胞性タンパク質の測定のための速い、感受性の、そして安価な方法を提供する。本方法は、National Cancer Instituteの疾病指向性インビトロ抗癌剤発見スクリーンに適している。
【００２８】
特に、トリクロロ酢酸で固定した培養を３０分、１％酢酸に溶解した０.４％(wt/vol)スルホローダミンＢ(ＳＲＢ)で染色する。非結合色素を１％酢酸での４回の洗浄により除去し、タンパク質結合色素を１０mM非緩衝化トリス塩基[トリス(ヒドロキシメチル)アミノメタン]で、コンピューターインターフェース、９６ウェルマイクロタイタープレートリーダーでの光学密度測定のために抽出する。ＳＲＢアッセイ結果は、細胞の数およびLowry and Bradfordアッセイの両方で測定した細胞性タンパク質の値と、まばらなサブコンフルエンスから重層超コンフルエンスの範囲の密度で直線である。５６４nmでのシグナル対ノイズ比は、１,０００細胞／ウェルで約１.５である。
【００２９】
ＳＲＢアッセイは、非破壊的な、いつまでも安定な、そして裸眼で可視の熱量測定終点を提供する。これは、医薬誘導細胞毒性の感受性の測定を提供する。ＳＲＢは４８８nmのレーザー励起で強く蛍光し、静的蛍光血球計算により１細胞レベルで定量的に測定できる(Skehan et al (Journal of National Cancer Inst 82:1107-1112, 19901))。
【００３０】
あるいは、式Ｉの化合物の微小管解重合の阻害剤としての効果は、以下のように証明できる：
【００３１】
試験化合物の貯蔵溶液をＤＭＳＯ中に作り、−２０℃で貯蔵する。微小管タンパク質を、ブタ脳から、記載のような２サイクルの温度依存的解重合化／重合化により得る(Weingarten et al., Biochemistry 1974; 13:5529-37参照)。微小管タンパク質の試験用貯蔵溶液(チューブリンと微小管関連タンパク質を意味する)を、−７０℃で貯蔵する。試験化合物により誘導される微小管タンパク質重合化の程度を、本質的に文献から既知のように測定する(Lin et al., Cancer Chem. Pharm. 1996; 38:136-140参照)。簡単に、試験化合物の５μl貯蔵溶液を所望の最終濃度の２０倍で４５μlの水と室温で混合し、次いで混合物を氷上に置く。ブタ脳微小管タンパク質の試験用貯蔵溶液のアリコートを急いで融解し、２mg／mlに氷冷２×ＭＥＭ緩衝液(２００ml  ＭＥＳ、２mM  ＥＧＴＡ、２mM  ＭｇＣｌ2、ｐＨ６.７)(ＭＥＳ＝２−モルホリノエタンスルホン酸、ＥＧＴＡ＝エチレングリコール−ビス−(２(２−アミノエチル)−四酢酸)で希釈する。次いで、重合化反応を各時間に５０μlの希釈微小管タンパク質を試験化合物に添加することにより開始させ、続いてサンプルを室温の水浴でインキュベーションする。次いで、反応混合物をエッペンドルフ微小遠心器に入れ、更に１５分室温でインキュベートする。次いで、重合化したものを非重合化微小管タンパク質から分離するために、サンプルを２０分、１４０００rpmで室温で遠沈する。チューブリン重合化の間接的測定として、上清のタンパク質濃度(非重合化、可溶性微小管タンパク質の残りを含む)を、Lowry法(DC Assay Kit, Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA)により測定し、着色反応物の光学密度(ＯＤ)を７５０nmでスペクトロメーターで測定する(SpectraMax 340, Molecular Devices, Sunnyvale, CA)。試験化合物で処理したサンプルと媒体処理コントロールの間のＯＤの差を、２５μMエポシロンＢ(陽性コントロール)を含む試験インキュベーションのものと比較する。試験化合物により誘導される重合化の程度は、陽性コントロール(１００％)の割合として示す。数個の濃度での比較によりＥＣ５０(最大重合化の５０％が見られる濃度)を決定できる。式Ｉの化合物に関して、ＥＣ５０は好ましくは１から２００、好ましくは１から５０μMの間にある。５μM濃度での式Ｉの化合物の試験化合物のチューブリン重合化の誘導は、２５μMエポシロンＢと比較した割合で、好ましくは５０から１００％、特に８０から１００％の範囲にある。
【００３２】
腫瘍細胞に対する効果は、以下の方法でまた示すことができる：
ＤＭＳＯ中式Ｉの試験化合物の貯蔵溶液(１０mM)を調製し、−２０℃で貯蔵する。ヒトKB-31および(多剤耐性、P-gp 170過発現)KB-8511類表皮癌細胞はDr. M. Baker, Roswell Park Memorial Institute(Buffalo, NY, USA)からである(記載に関してはまたAkiyama et al., Somat. Cell. mol. Genetics 11, 117-126(1985)およびFojo A., et al., Cancer Res. 45, 3002-3007(1985)参照  −  KB-31およびKB-8511、両方ともＫＢ−細胞系の誘導株(American Type Culture Collection)であり、ヒト類表皮癌細胞である。KB-31細胞は、ウシ血清(M. A. Bioproducts)、Ｌ−グルタミン(Flow)、ペニシリン(５０単位／ml)およびストレプトマイシン(５０μｇ／ml(Flow)を使用して単層培養できる；次いで、それらを約２２時間の倍増速度で生育させ、相対的平板効率は約６０％である。KB-8511は、KB-31細胞系から由来する変異体であり、コルヒチンでの処理サイクルにより得られ、これはKB-31細胞と比較してコルヒチンに約４０倍の相対的耐性を有する)。細胞を、３７℃で５％ｖ／ｖ  ＣＯ２および８０％相対的湿度のインキュベーター中、１０IUペニシリン、１０μｇ／mlストレプトマイシンおよび５％ウシ胎児血清添加、リボヌクレオシドおよびデオキシリボヌクレオシド含有ＭＥＭ  Alpha−培地中(Gibco BRL)でインキュベートする。細胞を１.５×１０３細胞／ウェルに９６ウェルマイクロタイタープレートに広げ、一晩インキュベートする。培養培地中の試験化合物の連続希釈を１日目に添加する。次いで、プレートを更に４日間インキュベートし、その後、３.３％ｖ／ｖグルタールアルデヒドを使用して固定して水で洗浄し、最後に０.０５％ｗ／ｖメチレンブルーで染色する。再び洗浄後、染色を３％ＨＣｌで溶出し、６６５nmの光学密度をSpectraMax 340(Molecular Devices, Sunnyvale, CA)で測定する。ＩＣ５０値をデータを数学的にSoftPro2.0プログラム(Molecular Devices, Sunnyvale, CA)および式
[(ＯＤ処理)−(ＯＤ開始)]／[(ＯＤコントロール)−(ＯＤ開始)]×１００
に適合させて計算する。ＩＣ５０を、インキュベーション時間の最後の、試験化合物なしのコントロールと比較して、５０％の細胞の数をもたらす試験化合物の濃度として定義する(細胞生育の最大半分阻害の濃度)。式Ｉの化合物は、好ましくは、ここでは０.１×１０−９から５００×１０−９Ｍ、好ましくは、０.１から６０nMの間の範囲のＩＣ５０を示す。
【００３３】
比較試験はまたA459(肺；ATCC CCL 185)、NCIH460(肺)、Colo 205(大腸；ATCC No. CCL 222)(HCT-15(大腸；ATCC CCL 225-ATCC=American Type Culture Collection (Rockville, MD, USA))、HCT116(大腸)、Du145(前立腺；ATCC No. HTB 81; またCancer Res. 37, 4049-58 [1978]も参照)、PC-3M(Dr. I. J. Fidlerから得た前立腺ホルモン非感受性誘導体(MD Anderson Cancer Center, Houston, TX, USA)およびATCC(ATCC CRL 1435)から入手可能なPC-3由来)、MCF-7(胸部；ATCC HTB 22)またはMCF-7/ADR(胸部、多剤耐性；記載に関してはBlobe G. C. et al., J. Biol. Chem.(1983), 658-664を参照；本細胞は、ドキソルビシンおよびビンカアルカロイドにMDR-7“野生型”細胞と比較して非常に(３６０から２４００倍)耐性である))のような他の腫瘍細胞で成し、KB-31およびKB-8511細胞と類似の結果が得られる。式Ｉの化合物は、好ましくは、ここで、０.１×１０-9から５００×１０-9Ｍ、好ましくは０.１および６０nMの間の範囲のＩＣ５０を有する。
【００３４】
これらの特性に基づいて、式Ｉの化合物(その塩もまた意味する)は、肺癌、乳ガン、結腸直腸癌、前立腺癌、メラノーマ、脳腫瘍、膵臓癌、頭頸部腫瘍、膀胱癌、神経芽腫、咽頭癌のような、例えば、固体腫瘍のような、また存在する場合、転移も含む特に腫瘍疾患のような増殖性疾患の、または白血病のような血液細胞の増殖性疾患の処置；また更に乾癬のような微小管解重合化阻害剤での処理に反応する他の疾患の処置に適している。式Ｉの化合物、またはその塩は、また医学的インプラントのカバーに適している(再狭窄の予防に有用である)(ＷＯ９９／１６４１６、優先権主張日１９９７年９月２９日参照)。
【００３５】
本発明の化合物のインビボ活性は、以下の動物モデルで証明できる：
雌または雄BALB/c nu/nu(ヌード)マウスを滅菌条件下に(Type IIIケージ当たり１０匹から１２匹のマウス)、餌および水を自由に摂取させて入れた。マウスの体重は、腫瘍移植時点で２０から２５グラムの間である。腫瘍をキャリアーマウス(細胞系当たり４−８匹のマウス)の細胞(１００μl  ＰＢＳまたは培地中、最小２×１０6細胞)の皮下注射により確立する。得られる腫瘍を、処置の開始前に最少３回の連続移植をして連続的に継代する。腫瘍フラグメント(約２５mg)を、動物の左脇腹に１３ゲージトロカール針でｓ.ｃ.移植し、その間マウスをForene(Abbott, Switzerland)麻酔する。
【００３６】
腫瘍生育および体重を週に１回または２回モニターする。全ての処置は、静脈内投与(i.v.)し、腫瘍タイプに依存して約１００から２５０mm3の平均腫瘍容量が達成されたときに開始する。腫瘍容量は、式(Ｌ×Ｄ×π)／６(Cancer Chemother. Pharmacol. 24:148-154, [1989]参照)を使用して決定する。式Ｉのエポシロンでの処理は、投与量および投与の頻度を変える。比較剤は、先に決定された最適投与レジメに従って投与する。腫瘍容量の処置中の存在する変化に加えて、抗腫瘍活性をＴ／Ｃ％(コントロール動物の腫瘍容量の平均増加で割った処置動物の腫瘍容量の平均増加を１００倍したもの)で現す。腫瘍抑制(％)は、数式  回帰(％)＝(１−Ｖ最終／Ｖ開始)×１００(Ｖ最終＝最終平均腫瘍容量、Ｖ開始＝処置開始時の平均腫瘍容量)にしたがって、処置の開始時の平均腫瘍容量と比較した最小平均腫瘍容量として示す。
【００３７】
このモデルで、本発明の化合物の、例えば、以下の細胞系由来の腫瘍の生育の阻害効果を試験できる：
ヒト結腸直腸腺癌HCT-15(ATCC CCL 225)は、American Type Culture Collection(Rockville, MD, USA)由来であり、細胞をインビトロで供給者の推奨に従い培養する。HCT-15は、Ｐ−糖タンパク質(Ｐ−ｇｐ、ｇｐ１７０、MDR-1; Anticancer Res. 11:1309-12 [1991]; J. Biol. Chem. 264: 18031-40 [1989]; Int. J. Cancer 1991, 49;:696-703[1991])の過剰発現およびグルタチオン依存的耐性機構(Int. J. Cancer 1991; 49:688-95 [1991])の力で多剤耐性である、表皮様細胞系(Cancer Res. 39: 1020-25 [1979])である。Colo 205細胞系はまた、患者の腹水から単離され、上皮様形態を示し、一般に医薬感受性と考えられるヒト大腸癌細胞系である(ATCC No. CCL 222; またCancer Res. 38, 1345-55 [1978]参照)。ヒトアンドロゲン非依存的前立腺癌細胞系を、マウスにおける皮下および同所モデルの確立に使用する。ヒト転移前立腺癌PC-3Mは、Dr. I. J. Fidler(MD Anderson Cancer Center, Houston, TX, USA)から得、７％ｖ／ｖ  ＦＢＳ添加Ham's F12K培地で培養する。PC-3M細胞系は、PC-3細胞[ATCC CRL 1435; American Type Culture Collection(Rockville, MD, USA)]の脾臓内注射に続いてヌードマウスで産生される肝臓転移癌から単離し、それらは、１０％ウシ胎児血清、ピルビン酸ナトリウム、非必須アミノ酸、Ｌ−グルタミン、２倍ビタミン溶液(Gibco Laboratories, Long Island, N. Y.)およびペニシリン−ストレプトマイシン(Flow Laboratories, Rockville, Md.)添加Eagle's MEMで生育できる。PC-3M細胞系はホルモン非感受性である(即ち、アンドロゲンの非存在下で生育する)。PC-3細胞系は、恐らく由来するPC-3M細胞系でもそうであるように、アンドロゲンレセプターネガティブである。PC-3はATCC(ATCC CRL 1435)から利用可能な細胞系であり、６２歳白人男性から単離したグレートIV前立腺腺癌に対応する；細胞は低酸性ホスファターゼおよびテストステロン−５−ａ−レダクターゼ活性を示す。細胞は、形態６２の染色体の数でほぼ三倍体である。正常Ｙ染色体は、Ｑ−バンド分析で測定できない。
【００３８】
ヒト肺腺癌A549(ATCC CCL 185；５８歳白人男性の肺癌組織から単離)；上皮形態を示し、シチジンジホスホコリン経路を利用して、高いパーセントの不飽和脂肪酸を有するレシチンを合成できる；染色体６および染色体１の長腕を含むサブテロセントリック(subtelocentric)マーカー染色体が、全ての中期で見られる。ヒト乳癌ZR-75-1(ATCC CRL 1500；浸潤管癌の６３歳白人女性の転移腹水滲出液から単離)；は、乳上皮起源である；細胞はエストロゲンおよび他のステロイドホルモンの受容体を有し、超三倍体(hypertriloid)染色体数を有する。ヒト上皮(口)癌細胞系KB-8511(上皮(口)KB-31癌細胞系由来Ｐ−ｇｐ過発現細胞系)をDr. R. M. Baker, Roswell Park Memorial Institute(Buffalo, N. Y., USA)(記載に関しては、Akiyama et al., Somat. Cell. mol. Genetics 11, 117-126(1985)および Fojo A., et al., Cancer Res. 45, 3002-3007(1985)参照)から得、先に記載のように培養する(Meyer, T., et al., Int. J. Cancer 43, 851-856(1989))。KB-8511細胞は、KB-31と同様に、ＫＢ細胞系(ATCC)由来であり、それらはヒト上皮癌細胞である；KB-31細胞は、１０％ウシ胎児血清(M. A. Bioproducts)、Ｌ−グルタミン(Flow)、ペニシリン(５０単位／ml)およびストレプトマイシン(５０mg／ml(Flow)添加ダルベッコ修飾イーグル培地(D-MEM)で生育できる；それらは、２２時間の倍増時間で生育し、相対的平板効率は約６０％である。KB-8511は、コルヒチン処理サイクルの使用によりKB-31細胞系から由来する細胞系である；それらは、KB-31細胞系と比較した場合、約４０倍の相対的耐性をコルヒチンに対して示す；それは、KB-31と同様の条件下で生育できる。
【００３９】
溶解性：水溶性は、例えば、以下の通り測定する：式Ｉの化合物またはその塩を、室温で水と、もやは化合物が溶解しなくなるまで撹拌する(約１時間)。見られる溶解度は、好ましくは０.０１から１重量％の間である。
【００４０】
以後に記載する式Ｉの好ましい化合物のグループ中で、前記の一般的定義からの置換基の定義を理論的には、例えば、より具体的な定義または特に好ましいとして特徴付けられる定義に、より一般的な定義を置き換えるために使用し得る。
【００４１】
本発明は、好ましくは、式中、
Ｒ2が不存在または酸素である；“ａ”が１重または２重結合のいずれかであり得る；“ｂ”が不存在または１重結合のいずれかであり得る；および“ｃ”が不存在または１重結合であり得るが、ただしＲ2が酸素であるならば、“ｂ”および“ｃ”は両方とも１重結合であり、そして“ａ”は１重結合である；Ｒ2が不存在である場合、“ｂ”および“ｃ”は不存在であり、“ａ”は２重結合である；および“ａ”が２重結合ならＲ2、“ｂ”および“ｃ”は不存在である；
Ｒ3が、水素；低級アルキル、特にメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、tert−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル；−ＣＨ＝ＣＨ2；−Ｃ＝ＣＨ；−ＣＨ2Ｆ；−ＣＨ2Ｃｌ；−ＣＨ2−ＯＨ；−ＣＨ2−Ｏ−(Ｃ1−Ｃ6−アルキル)、特に−ＣＨ2−Ｏ−ＣＨ3；および−ＣＨ2−Ｓ(Ｃ1−Ｃ6−アルキル)、特に−ＣＨ2−Ｓ−ＣＨ3からなる群から選択される基である；
Ｒ4およびＲ5は、水素、メチルまたは保護基から独立して選択され、好ましくは水素である；そして
Ｒ1は以下の構造を有する基から選択される：
【化４３】
0004681732.tif 000014
式中、ＲおよびＲ'は低級アルキル、特にメチルである
式Ｉの化合物；または塩形成基が存在する場合、その塩に関する。
【００４２】
本発明は、好ましくはまた、式中、
Ｒ2が不存在または酸素である；“ａ”が１重または２重結合のいずれかであり得る；“ｂ”が不存在または１重結合のいずれかであり得る；および“ｃ”が不存在または１重結合であり得るが、ただし、Ｒ2が酸素であるならば、“ｂ”および“ｃ”は両方とも１重結合および“ａ”は１重結合である；Ｒ2が不存在である場合、“ｂ”および“ｃ”は不存在、および“ａ”は２重結合である；および“ａ”が２重結合である場合、Ｒ2、“ｂ”および“ｃ”は不存在である；
Ｒ3が水素；低級アルキル、特にメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、tert−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル；−ＣＨ＝ＣＨ2；−Ｃ＝ＣＨ；−ＣＨ2Ｆ；−ＣＨ2Ｃｌ；−ＣＨ2−ＯＨ；−ＣＨ2−Ｏ−(Ｃ1−Ｃ6−アルキル)、特に−ＣＨ2−Ｏ−ＣＨ3；および−ＣＨ2−Ｓ(Ｃ1−Ｃ6−アルキル)、特に−ＣＨ2−Ｓ−ＣＨ3からなる群から選択される基である；
Ｒ4およびＲ5が、水素、メチルまたは保護基から独立して選択され、好ましくは水素である；そして
Ｒ1が以下の式から選択される基である：
【化４４】
0004681732.tif 000015
式中、Ｒ'はヒドロキシメチルまたはフルオロメチルおよびＲは水素またはメチルである
式Ｉの化合物；または塩形成基が存在する場合、その塩に関する。
【００４３】
本発明は、好ましくはまた、式中、
Ｒ2が不存在または酸素である；“ａ”が１重または２重結合のいずれかであり得る；“ｂ”が不存在または１重結合である；および“ｃ”が不存在または１重結合であるが、ただしＲ2が酸素であるならば、“ｂ”および“ｃ”は両方とも１重結合および“ａ”は１重結合である；Ｒ2が不存在である場合、“ｂ”および“ｃ”は不存在および“ａ”は２重結合である；および“ａ”が２重結合である場合、Ｒ2、“ｂ”および“ｃ”は不存在である；
Ｒ3が低級アルキル、特にメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、tert−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル；−ＣＨ＝ＣＨ2；−Ｃ＝ＣＨ；−ＣＨ2Ｆ；ＣＨ2Ｃｌ；−ＣＨ2−ＯＨ；−ＣＨ2−Ｏ−(Ｃ1−Ｃ6−アルキル)、特に−ＣＨ2−Ｏ−ＣＨ3；および−ＣＨ2−Ｓ−(Ｃ1−Ｃ6−アルキル)、特に−ＣＨ2−Ｓ−ＣＨ3からなる群から選択される基である；
Ｒ4およびＲ5は水素、メチルまたは保護基から独立して選択され、好ましくは水素である；そして
Ｒ1が以下の式から選択される基である：
【化４５】
0004681732.tif 000016
ものである
式Ｉの化合物；または１個またはそれ以上の塩形成基が存在する場合、その塩に関する。
【００４４】
本発明は、また好ましくは、式中、
Ｒ2が不存在または酸素である；“ａ”が１重または２重結合のいずれかであり得る；“ｂ”が不存在または１重結合である；および“ｃ”が不存在または１重結合であるが、ただしＲ2が酸素であるならば、“ｂ”および“ｃ”は両方とも１重結合および“ａ”は１重結合である；Ｒ2が不存在なら、“ｂ”および“ｃ”は不存在、そして“ａ”は２重結合である；および“ａ”が２重結合である場合、Ｒ2、“ｂ”および“ｃ”は不存在である；
Ｒ3はメチル以外の低級アルキル、特にエチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、tert−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル；−ＣＨ＝ＣＨ2；−Ｃ＝ＣＨ；−ＣＨ2Ｆ；−ＣＨ2Ｃｌ；−ＣＨ2−ＯＨ；−ＣＨ2−Ｏ−(Ｃ1−Ｃ6−アルキル)、特に−ＣＨ2−Ｏ−ＣＨ3；および−ＣＨ2−Ｓ−(Ｃ1−Ｃ6−アルキル)、特に−ＣＨ2−Ｓ−ＣＨ3からなる群から選択される基であり、
Ｒ4およびＲ5は水素、メチルまたは保護基から独立して選択され、好ましくは水素である；そして
Ｒ1が式
【化４６】
0004681732.tif 000017
の基である：
ものである
式Ｉの化合物；または１個またはそれ以上の塩形成基が存在する場合、その塩に関する。
【００４５】
本発明は、好ましくはまた、式中、
Ｒ2が酸素であり、“ｂ”および“ｃ”が各々１重結合および“ａ”が１重結合であり、
Ｒ3が低級アルキル、特にメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、tert−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル；−ＣＨ＝ＣＨ2；−Ｃ＝ＣＨ；−ＣＨ2Ｆ；ＣＨ2Ｃｌ；−ＣＨ2−ＯＨ；−ＣＨ2−Ｏ−(Ｃ1−Ｃ6−アルキル)、特に−ＣＨ2−Ｏ−ＣＨ3；および−ＣＨ2−Ｓ−(Ｃ1−Ｃ6−アルキル)、特に−ＣＨ2−Ｓ−ＣＨ3からなる群から選択される基であり、
Ｒ4およびＲ5は水素、メチルまたは保護基から独立して選択され、好ましくは水素である；そして
Ｒ1は以下の構造式を有する基から選択される：
【化４７】
0004681732.tif 000018
ものである
式Ｉの化合物；または１個またはそれ以上の塩形成基が存在する場合、その塩に関する。
【００４６】
本発明は、好ましくはまた、式中、
Ｒ2が不存在または酸素である；“ａ”が１重または２重結合のいずれかであり得る；“ｂ”が不存在または１重結合である；および“ｃ”が不存在または１重結合であるが、ただしＲ2が酸素であるならば、“ｂ”および“ｃ”は両方とも１重結合および“ａ”は１重結合である；Ｒ2が不存在なら、“ｂ”および“ｃ”は不存在、そして“ａ”は２重結合である；“ａ”が２重結合である場合、Ｒ2、“ｂ”および“ｃ”は不存在である；
Ｒ3はメチル以外の低級アルキル、特にエチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、tert−ブチル、ｎ−ペンチルまたはＮ−ヘキシル；−ＣＨ＝ＣＨ2；−Ｃ＝ＣＨ；−ＣＨ2Ｆ；−ＣＨ2Ｃｌ；−ＣＨ2−ＯＨ；−ＣＨ2−Ｏ−(Ｃ1−Ｃ6−アルキル)、特に−ＣＨ2−Ｏ−ＣＨ3；および−ＣＨ2−Ｓ−(Ｃ1−Ｃ6−アルキル)、特に−ＣＨ2−Ｓ−ＣＨ3からなる群から選択される基であり、
Ｒ4およびＲ5は水素、メチルまたは保護基から独立して選択され、好ましくは水素である；そして
Ｒ1は式
【化４８】
0004681732.tif 000019
の基である；
ものである
式Ｉの化合物；または塩形成基が存在する場合、その塩に関する。
【００４７】
より好ましくは、本発明は式Ｉａ
【化４９】
0004681732.tif 000020
〔式中、互いに独立して、Ｒ部分は水素またはメチルである〕
の化合物、またはその塩に関する。
【００４８】
より好ましくは、本発明はまた式Ｉｂ
【化５０】
0004681732.tif 000021
〔式中、互いに独立して、Ｒ部分は水素またはメチルである〕
の化合物、またはその塩に関する。
【００４９】
本発明は、最も特別にはまた式Ｉｃ
【化５１】
0004681732.tif 000022
〔式中、Ｒ*はメチルである〕
の化合物に関する。
【００５０】
本発明は、最も特別にはまた式Ｉｄ
【化５２】
0004681732.tif 000023
〔式中、Ａはエチル、フルオロメチル、メトキシ、メチルチオまたはエテニル(−ＣＨ＝ＣＨ2)、そして
Ｄは水素、フルオロ、ヒドロキシまたはメチル、特に水素である〕
の化合物に関する。
【００５１】
本発明は、最も特別にはまた式Ｉｅ
【化５３】
0004681732.tif 000024
〔式中、Ａはエチル、フルオロメチル、メトキシ、メチルチオまたはエテニル(−ＣＨ＝ＣＨ2)、そして
Ｄは水素、フルオロ、ヒドロキシまたはメチルである〕
の化合物に関する。
【００５２】
本発明は、最も特別には、実施例に示す式Ｉの化合物、または１個またはそれ以上の塩形成基が存在する場合、薬学的に許容されるその塩に関する。
【００５３】
最も好ましくは、本発明は、化合物Ｄ(実施例１)、実施例２Ａ)の化合物、実施例２Ｃの化合物、化合物１８ｂ(実施例４参照)、化合物１９ｂ(実施例４参照)、化合物４６(実施例４参照)、化合物５０(実施例４参照)、化合物５２(実施例４参照)、化合物５３(実施例４参照)、化合物５８(実施例４参照)、化合物５９(実施例４参照)、化合物６６(実施例４参照)、化合物６７(実施例４参照)および化合物６８(実施例４参照)、または１個またはそれ以上の塩形成基が存在する場合、薬学的に許容されるその塩に関する。
【００５４】
本発明の化合物は、当分野で既知の方法と同様にして、好ましくは、
ａ)式II
【化５４】
0004681732.tif 000025
〔式中、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、ａ、ｂおよびｃおよび波線は式Ｉで定義の意味を有する〕
のヨウ化物と、式III
Ｒ1−Ｓｎ(Ｒ)3                                          (III)
〔式中、Ｒ1は式Ｉで定義の意味を有し、Ｒは低級アルキル、特にメチルまたはｎ−ブチルである〕
のスズ化合物と反応させる、または
【００５５】
ｂ)式IV
【化５５】
0004681732.tif 000026
〔式中、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、ａ、ｂおよびｃおよび波線は式Ｉで定義の意味を有する〕
のスズ化合物を、式Ｖ
Ｒ1−Ｉ                                (Ｖ)
〔式中、Ｒ1は式Ｉで定義の意味を有する〕
のヨウ化物と反応させる；
そして、所望により、得られる式Ｉの化合物を異なる式Ｉの化合物に変換し、得られる式Ｉの遊離化合物を式Ｉの化合物の塩に変換し、および／または得られる式Ｉの化合物の塩を式Ｉの遊離化合物に変換するか、または式Ｉの化合物の異なる塩に変換し、および／または式Ｉの化合物の立体異性体混合物を対応する異性体に分割する
ことを特徴とする方法により合成できる。
【００５６】
好ましい工程条件の詳細な記載：
全ての出発物質において、必要な場合、反応に関与すべきでない官能基は、保護基、特に、標準保護基により保護する。保護基、その導入およびその開裂は当分野で既知であり、例えば、それらは上記の標準引用文献に記載されている。
【００５７】
反応ａ)：反応((好ましくは改善された)シュティレ結合)は、好ましくは標準条件下で行う；より好ましくは、反応は
(ｉ)適当な溶媒、例えばトルエン中、上昇した温度、特に約９０から約１００℃で、好ましくは過剰の、好ましくは１.１−から３−、例えば、１.５−から２−倍モル過剰式IIIの化合物；および、触媒量、好ましくは約１から３０％、好ましくは５から１０％のＰｄ(ＰＰｈ3)4と；または
(ii)適当な溶媒、例えばジメチルホルムアミド(ＤＭＦ)中、１０から４０℃、特に２５℃で、好ましくは１.１−から３−、例えば１.５−から２.３−倍モル過剰式IIIの化合物と；触媒量、好ましくは１０から５０％、特に２０から３０％のＰｄ(ＭｅＣＮ)2Ｃｌ2の存在下で
で行う。
【００５８】
あるいは、この結合の条件はまた以下の試薬および／または条件の使用も含む：
(iii)銅(Ｉ)２−チオフェンカルボキシレート、ｎ−メチル−２−ピロリジン。(iv)ＰｄＣｌ2(ＭｅＣＮ)2(触媒)、ＤＭＦ、５０−１５０°(３級塩基の添加有りまたは無しで)。
(ｖ)Ｐｄ(ＰＰｈ3)4／ＣｕＩ(触媒)、ＤＭＦ、５０−１５０°(３級塩基の添加有りまたは無しで)。
【００５９】
反応ｂ)：反応(改善されたシュティレ結合)は、好ましくは標準条件下で行う；より好ましくは、反応を、適当な溶媒、特にＤＭＦ中、５０から１００、好ましくは８０から８５℃の温度で、好ましくは過剰の式Ｖのヨウ素化合物と、触媒量、好ましくは約０.４当量のＡｓＰｈ3、好ましくは約０.１当量のＣｕＩ、および好ましくは約０.２当量のＰｄＣｌ2(ＭｅＣＮ)2の存在下で行う。
特に好ましいのは、実施例に記載の反応条件である。
【００６０】
化合物／塩の変換：
式Ｉの化合物は、式Ｉの異なる化合物に、標準のまたは新規の方法により変換できる。
例えば、式中、Ｒ２が不存在、ｂおよびｃが不存在およびａが２重結合であり、他の部分は式Ｉの化合物で記載の通りである式Ｉの化合物は、式中、Ｒ２がＯならびにｂおよびｃが存在し、ａが１重結合である対応するエポキシドに変換できる。好ましくは、エポキシド化は、(＋)−ジエチル−Ｄ−酒石酸((＋)−ＤＥＴ)(好ましくは約０.５当量)、Ｔｉ(ｉ−ＰｒＯ)４(好ましくは約０.５当量)、tert−ブチルヒドロペルオキシド(好ましくは約２.２当量)およびモレキュラーシーブ、特に４Åモレキュラーシーブの存在下、適当な溶媒、例えば、塩化メチレン、および所望により、デカンのようなアルカン中、低温、好ましくは−７８から０℃、特に約−４０℃で行う；または過酸化水素(好ましくは約３０当量)、アセトニトリル(好ましくは約６０当量)、塩基、特にＫＨＣＯ３(好ましくは約１０当量)の存在下、適当な溶媒、例えば、アルコール、好ましくはメタノール中、１０および４０℃の間の好ましい温度、例えば、約２５℃で行う。
【００６１】
式中、Ｒ3がヒドロキシメチルである式Ｉの化合物は、式中、Ｒ3がフルオロメチルである式Ｉの化合物に、例えば、ＤＡＳＴ(好ましくは１.０５から１.４当量)での、適当な溶媒、例えば、塩化メチレン中、低温、好ましくは−９５から０℃、特に約−７８℃での処理により変換できる。ＤＡＳＴはジエチルアミノ−硫黄トリフルオリドである。
【００６２】
式中、Ｒ3がヨードメチルである式Ｉの化合物は、式中Ｒ3がメチルである化合物に、例えば、シアノボロヒドリド(好ましくは約１０当量)のＨＭＰＡ(ヘキサメチルホスホリックトリアミド)溶液により、上昇した温度、例えば、４０から４５℃で変換できる。
【００６３】
他の変換は、既知の方法、例えば、引用して本明細書に包含させるＰＣＴ出願ＷＯ９８／２５９２９に記載のものに従って成すことができる。
塩形成基を有する式Ｉの化合物の塩は、それ自体既知の方法で製造し得る。式Ｉの酸付加塩は、したがって、酸または適当なアニオン交換試薬との処理により得られ得る。
【００６４】
塩は、通常、遊離化合物に、例えば、適当な塩基試薬、例えば、アルカリ金属炭酸塩、アルカリ金属炭酸水素塩、またはアルカリ金属水酸化物、典型的に炭酸カリウムまたは水酸化ナトリウムでの処理により変換できる。
得られる遊離化合物を、次いで、所望により、遊離化合物からの塩の形成で記載のように異なる塩に変換できる。
【００６５】
立体異性体混合物、例えば、ジアステレオマーの混合物は、それ自体既知の方法で、適当な分離法により、対応する異性体に分割できる。例えば、ジアステレオ混合物は、個々のジアステレオマーに、分画結晶化、クロマトグラフィー、溶媒分配、および類似の方法の手段により分割し得る。この分割は、出発化合物または式Ｉの化合物それ自体のいずれかのレベルで行い得る。エナンチオマーは、ジアステレオマー塩の形成を介して、例えば、エナンチオマー純粋なキラル酸との塩形成により、またはキラルリガンドのクロマトグラフィー支持体を使用したクロマトグラフィー、例えば、ＨＰＬＣにより分割できる。
【００６６】
出発物質：
出発物質および中間体は、当分野で既知であり、商品として入手可能であり、および／または同分野で既知の方法またはそれに類似の方法に従って製造する。
式IIの化合物および式IIIの化合物は、例えば、本明細書に引用して包含させるＰＣＴ出願ＷＯ９８／２５９２９に記載のように、または本実施例の方法により、またはそれと類似の方法で合成できる。
【００６７】
式IVの化合物は、各々の式IIの化合物の反応により、例えば、式IIの化合物と(Ｒ)6Ｓｎ2(式中、Ｒは低級アルキル、特にメチルまたはｎ−ブチル)を、適当な窒素塩基、例えば、ヒューニッヒ塩基の存在下、および触媒量(好ましくは約０.１当量)のＰｄ(ＰＰｈ3)4の存在下、適当な溶媒中、例えば、トルエン中、上昇した温度、例えば、３０から９０℃、特に８０から８５℃で行う。
【００６８】
式Ｖのヨウ化物は既知であり、文献の方法で得ることができ、またはそれらは商品として入手可能である。例えば、２−ヨード−６−メチルピリジンは、Klei, E.; Teuben, J. H.J. Organomet. Chem. 1981, 214, 53-64に従って；２−ヨード−５−メチルピリジンはTalik, T.;Talik, Z. Rocz. Chem. 1968, 42, 2061-76に従って；および２−ヨード−４−メチルピリジンはTalik, T.;Talik, Z. Rocz. Chem. 1968, 42, 2061-76, Yamamoto, Y.;Yanagi, A. Heterocycles 1981,16,1161-4またはKatritzky, A. R.; Eweiss, N. F.; Nie, P.-L. JCS, Perkin trans I 1979, 433-5に従って得ることができる。式Ｖの対応するヒドロキシメチル置換体は、例えば、上記のヨウ素のメチル基のＳｅＯ２による酸化、続くアルデヒドの、例えば、ＮａＢＨ４またはＤＩＢＡＬＨの還元、またはメチル基の酸化による酸基の形成(例えば、ＫＭｎＯ４での)および、例えば、ＤＩＢＡＬによるエステルの還元により利用可能となる。
【００６９】
好ましくは、新規または既知でもある出発物質および中間体は、本実施例に記載の方法で、またはそれと同様に製造でき、各々の反応の量、温度等は、例えば、±９９％、好ましくは±２５％の範囲で変化させて修飾でき、他の適当な溶媒および試薬を使用できる。
本発明はまた全ての新規な中間体、特に、実施例に記載のものにも関する。
【００７０】
本発明はまた式VI
【化５６】
0004681732.tif 000027
の化合物の合成法にも関し、それは
式VII
【化５７】
0004681732.tif 000028
〔式中、Ｒ3は低級アルキル、特にメチルまたはｎ−ブチルである〕
の化合物を、式VIII
【化５８】
0004681732.tif 000029
のヨウ化物(例えば、TCI, USAから商品として入手可能)と、特に、シュティレおよび類似／修飾条件下；特に適当な溶媒、特にジ−低級アルキル−低級アルカノイルアミド、好ましくはジメチルホルムアミドまたはアセトアミド中；式VIIIの化合物は、好ましくは、式VIIの化合物よりわずかにモル過剰、例えば、１.１−から５−倍、特に１.５から２.５−倍過剰、例えば、２.１−倍過剰である；触媒量のＡｓＰｈ3(特に約０.４当量)、ＰｄＣｌ2(ＭｅＣＮ)2(特に約０.２当量)およびＣｕＩ(特に約０.１当量)；例えば、５０から９０℃、好ましくは約８０から約８５℃の上昇した温度で結合させることを特徴とする。更なる反応条件に関して、式Ｉの化合物の合成に関する上記方法変法(ａ)(“反応ａ)”)の詳細な記載を参照。反応条件は、具体的な基質に関して、当分野の技術を有する者のノウハウにしたがって最適化できる。
【００７１】
本発明はまた式VIIの化合物の代わりにアナログが使用され、Ｓｎ(Ｒ)3部分の代わりにヨウ素が存在し、式VIIIの化合物の代わりに、ヨウ素の代わりに部分Ｓｎ(Ｒ)3を有するアナログを使用する逆の方法に関する。反応条件は、この場合、式Ｉの化合物の合成に関して上記の方法ａ)のものと類似である。
【００７２】
本発明は、式IX
【化５９】
0004681732.tif 000030
〔式中、Ｑは水素(エポシロンＥ)またはメチル(エポシロンＦ)である〕
のエポシロンＥおよび特にＦの合成法に関し、式Ｘ
【化６０】
0004681732.tif 000031
の化合物を、過酸化物の存在下、式IXの化合物に好ましくはエポキシド化の標準反応条件により、より好ましくはＨ2Ｏ2、塩基、特にＫＨＣＯ3、アセトニトリルおよび適当な溶媒、特にアルコール、例えば、メタノール中、好ましくは０から５０℃、特に約２５℃の範囲の温度で(メチルペルオキシカルボキシイミド酸の場合、その場での形成)；または(＋)−ジエチル−Ｄ−酒石酸およびチタニウムイソプロポキシド存在下、ｔ−ブチル過酸化物を、適当な溶媒、例えば、塩化メチレン中、および所望によりデカン中、低温、例えば、−７８から０℃、特に約−４０℃でエポキシド化することを特徴とする。
【００７３】
これらの反応は、とりわけ、高収率で良好な異性体純度で最終生産物を提供する利点を有する。
【００７４】
医薬製剤：
本発明はまた、上記で定義の増殖性疾患に対して使用するための医薬製剤の使用のための式Ｉの化合物の使用；または本発明の化合物および薬学的に許容される担体を含む該増殖性疾患の処置用医薬製剤に関する。
式Ｉの化合物を、以後、活性成分と呼ぶ。
【００７５】
本発明はまた上記の活性剤を含む、特に上記で定義の、増殖性疾患の処置のための医薬組成物、および該処置用医薬製剤の製造に関する。
【００７６】
本発明はまた、該増殖性疾患の処置に有効な一定量の活性剤を、少なくとも一つの薬学的に許容される担体と共に含む、温血動物、特にヒトに、前記で定義の増殖性疾患の処置のために投与することが適した医薬組成物に関する。有効量の薬学的活性成分を、単独でまたは明白な量の薬学的に許容される担体と共に含む、本発明の医薬組成物は、温血動物(ヒトまたは動物)への経鼻、経直腸または経口のような経腸、または、筋肉内または静脈内のような非経腸投与のためのものである。活性成分の投与量は、温血動物の種類、体重、年齢および個々の状態、個々の薬物動態データ、処置する疾病および投与形態に依存する；好ましくは、投与量は下記で定義のような好ましい投与量であり、小児科処置が意図される場合、適当に適合させる。
【００７７】
医薬組成物は、約０.００００２から約９５％、特に(例えば、使える状態である輸液希釈物の場合)０.０００１から０.０２％、または(例えば、輸液濃縮物の場合)約０.１％から約９５％、好ましくは約２０％から約９０％の活性成分を含む(いずれの場合も重量／重量で)。本発明の医薬組成物は、例えば、アンプル、バイアル、坐薬、糖衣錠、錠剤またはカプセルの形のような単位投与形であり得る。
【００７８】
本発明の医薬組成物は、それ自体既知の方法で、例えば、慣用の溶解、凍結乾燥、混合、造粒または糖衣工程の手段により製剤する。
【００７９】
活性成分の溶液、およびまた懸濁液、および特に等張性水溶液または懸濁液を好ましくは使用し、例えば、活性成分を単独でまたは薬学的に許容される担体、例えば、マンニトールと共に含む凍結乾燥組成物の場合、このような溶液または懸濁液を使用前に調剤することが可能である。医薬組成物は滅菌し得および／または賦形剤、例えば、防腐剤、安定化剤、湿潤剤および／または乳化剤、可溶化剤、浸透圧調製用塩および／または緩衝剤を含み得、それ自体既知の方法で、例えば、慣用の溶解または凍結乾燥法の手段で製剤する。該溶液または懸濁液は、カルボキシメチルセルロースナトリウム、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、ポリビニルピロリドンまたはゼラチンのような粘性増加物質を含み得る。
【００８０】
油中の懸濁液は、油成分として、注射目的で習慣的な植物、合成または半合成油を含む。それらは、それ自体、酸成分として８から２２、特に１２から２２炭素原子を有する長鎖脂肪酸を含む液体脂肪酸エステル、例えば、ラウリン酸、トリデシル酸、ミリスチン酸、ペンタデシル酸、パルミチン酸、マルガリン酸、ステアリン酸、アラキドン酸、ベヘン酸または対応する不飽和酸、例えば、オレイン酸、エライジン酸、エルカ酸、ブラシジン酸(brasidic acid)またはリノレン酸を特記でき、所望により、抗酸化剤、例えば、ビタミンＥ、βカロテンまたは３,５−ジ−tert−ブチル−４−ヒドロキシトルエンの添加をする。これらの脂肪酸エステルのアルコール成分は最大６炭素原子を有し、モノ−またはポリヒドロキシ、例えば、モノ−、ジ−またはトリ−ヒドロキシ、アルコール、例えばメタノール、エタノール、プロパノール、ブタノールまたはペンタノールまたはそれらの異性体であるが、特にグリコールおよびグリセロールである。
【００８１】
注射または輸液組成物は、慣用的方法で、滅菌条件下製剤する；同じことが、アンプルまたはバイアルへの組成物の挿入および容器の密封にも当てはまる。
好ましいのは、活性成分と薬学的に許容される有機溶媒を含む輸液製剤である。
【００８２】
本発明の製剤に使用する薬学的に許容される有機溶媒は、当分野で既知のこのような有機溶媒から選択し得る。好ましくは、溶媒はアルコール、例えば、無水エタノールまたはエタノール／水混合物、より好ましくは７０％エタノール、ポリエチレングリコール３００、ポリエチレングリコール４００、ポリプロピレングリコールまたはｎ−メチルピロリドンから選択され、最も好ましくはポリプロピレングリコールまたは７０％エタノールまたはポリエチレングリコール３００である。
【００８３】
活性成分は、好ましくは製剤中に、約０.０１から約１００mg／ml、より好ましくは約０.１から約１００mg／ml、更により好ましくは約１から約１０mg／mlの濃度で存在する(特に輸液濃縮物の場合)。
【００８４】
活性成分は、純粋物質または他の活性成分との混合物として使用し得る。その純粋形で使用するとき、好ましくは、０.０１から１００、より好ましくは０.０５から５０、更により好ましくは１から１０mg／mlの活性剤の濃度を用いる(この数値は、特に、処置前に、適宜希釈する輸液濃縮物を言及する、下記参照)。
【００８５】
このような製剤は、簡便にはバイアルまたはアンプルに貯蔵する。典型的に、バイアルまたはアンプルは、ガラス、例えば、ホウ珪酸またはソーダ石灰ガラスから製造する。バイアルまたはアンプルは、当分野で慣用の容量であり得、好ましくは、それらは０.５から５mlの製剤を収容するのに十分なサイズである。製剤は、１２から２４ヶ月までの、少なくとも２から８℃の温度での貯蔵期間、安定である。
【００８６】
製剤は、活性成分の製剤を患者に投与する前に、静脈内投与に適した水性媒体で希釈しなければならない。
輸液溶液は、好ましくは、体液と同じまたは実質的に同じ浸透圧を有しなければならない。従って、水性媒体は、好ましくは、輸液の浸透圧を体液と同じまたは実質的に同じにする効果を有する等張剤を含む。
【００８７】
等張剤は、当分野で既知のもの、例えば、マンニトール、デキストロース、グルコースおよび塩化ナトリウムから選択し得る。好ましくは、等張剤はグルコースまたは塩化ナトリウムである。等張剤は、輸液に体液と同じまたは実質的に同じ浸透圧を付与する量で使用し得る。必要な正確な量は、日常の実験により決定でき、輸液の組成および等張剤の性質に依存する。特定の等張剤の選択は、活性剤の性質を考慮して行う。
【００８８】
水性媒体中の等張剤の濃度は、使用する特定の等張剤の性質に依存する。グルコースを使用するとき、好ましくは１から５％ｗ／ｖ、より具体的には５％ｗ／ｖの濃度で使用する。等張剤が塩化ナトリウムである場合、好ましくは１％ｗ／ｖ、特に０.９％ｗ／ｖまでの量で用いる。
【００８９】
輸液製剤は、水性媒体で希釈し得る。希釈剤として用いる水性媒体の量は、輸液中の活性成分の所望の濃度にしたがって選択する。好ましくは、輸液溶液は、上記の輸液濃縮物のバイアルまたはアンプルを水性媒体と混合して製造し、水性媒体により２０mlから２００ml、好ましくは約５０から約１００mlの間までの量とする。
【００９０】
輸液溶液は、静脈内投与する製剤で一般に用いられる他の賦形剤を含み得る。賦形剤は抗酸化剤を含む。輸液は、製剤のアンプルまたはバイアルを、適当な容器、例えば輸液袋またはビン中、水性媒体、例えば、ＷＦＩ中の５％ｗ／ｖグルコース溶液または特に０.９％塩化ナトリウム溶液と混合する。作った輸液は、好ましくは、作ってから直ぐに、または短時間、例えば、６時間以内に使用する。輸液を入れる容器は、輸液と非反応性の慣用の容器から選択し得る。前記のガラスのタイプから製造したガラス容器が好ましいが、プラスチック容器、例えば、プラスチック輸液袋の使用も好ましいことがある。
【００９１】
本発明はまた、式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩を、温血動物、特にヒトに処置に十分な量、特に、該増殖性疾患に有効な量で投与することを含む、処置、特に、増殖性疾患の処置を必要とする温血動物、特にヒトの処置法にも関する。
【００９２】
投与形態は、簡便には０.０１mgから１００mg／ｍ2の活性成分、好ましくは０.１から２０mg／ｍ2の活性成分の投与量で静脈内投与する。正確な必要な投与量および投与期間は、病気の重症度、患者の状態および投与割合に依存する。投薬は、毎日または好ましくは数日または数週間の間隔、例えば、週１回または３週間毎の間隔で投与する。投薬が静脈内で送達されるため、投与された投与量および血液濃度は、既知のインビボおよびインビトロ方法を基にして正確に決定できる。
【００９３】
経口投与用の医薬組成物は、活性剤を固体担体と合わせ、所望により得られる混合物を造粒し、混合物を、所望によりまたは必要に応じて適当な賦形剤の添加後に錠剤、糖衣錠コアまたはカプセルに加工することにより得ることができる。活性剤を分散させるか、測定した量で放出させることができるプラスチック担体にそれらを包含させることも可能である。
【００９４】
本発明の化合物は、単独で、または他の薬学的活性物質、例えば、伝統的細胞増殖抑制剤のような他の化学療法剤との組合わせで、使用できる。他の化学療法剤との組合わせの場合、二つまたはそれ以上の成分の固定した組合わせ、または二つまたはそれ以上の独立した製剤(例えば、キット製剤)を、上記のように製剤でき、または、他の化学療法剤を、市販され、当業者に既知の標準製剤で使用し、本発明の化合物および他の化学療法剤を腫瘍処置の一般の、相加、または好ましくは相乗効果を可能にする間隔で投与する。
【００９５】
以下の実施例は、本発明を、本発明の範囲を限定する意図なく説明することを意図する。
【００９６】
実施例１：エポシロンＢの５−メチルピリジンアナログＤ：
−スキーム１Ｂ
【化６１】
0004681732.tif 000032
Ｂ(２０mg、０.０３５mmol)の脱気ジメチルホルムアミド(＝ＤＭＦ；３５０μl、０.１Ｍ)溶液に、Ｃ(１７mg、０.０７７mmol、２.１当量)、続いてＡｓＰｈ3(４mg、０.４当量)、ＰｄＣｌ2(ＭｅＣＮ)2(２mg、０.２当量)およびＣｕＩ(１mg、０.１当量)を添加し、得られるスラリーを、油浴中に８０−８５℃で、２５分置く。反応混合物を次いで室温に冷却し、ＤＭＦを蒸留により除去する。得られる残渣を酢酸エチルに取りこみ、シリカの小プラグを通して濾過し、ヘキサン／酢酸エチル(１／１、ｖ／ｖ)で溶出する。次いで、溶液を真空で濃縮し、分取ＴＬＣ(ヘキサン／酢酸エチル１／２)で精製して、化合物Ｄを得る：ＭＳ(エレクトロスプレー)：予測値：(Ｍ＋Ｈ)+＝５０２、実測値：５０２。1H-NMR(600MHz, CDCl3): 8.37(s, 1H, ピリジンH); 7.50(d, I=7,5 Hz, 1H, ピリジンH); 7.19(d, I=7.5 Hz, 1H, ピリジンH), 6.59(s, 1H, =CHピリジン)。
【００９７】
出発物質：
−スキーム１Ａ：
【化６２】
0004681732.tif 000033
７００２(下記スキーム１１参照)(５５mg、０.１mmol)のトルエン(１ml、０.１Ｍ)溶液に、ヒューニッヒの塩基(４μl、０.２当量)ならびにＰｄ(ＰＰｈ3)4(１２mg、０.１当量)および(Ｍｅ6)Ｓｎ2(９１μl、５当量)を添加する。次いで、この溶液を８０−８５℃に１５分温め、次いで室温に冷却する。次いで、黄色溶液をシリカの小プラグを通して濾過し、ヘキサン／酢酸エチル(１／１、ｖ／ｖ)で溶出する。溶液を次いで真空で濃縮し、残渣をフラッシュクロマトグラフィー(ヘキサン／ジエチルエーテル１／１からヘキサン／酢酸エチル１／１)で精製して、Ｂ(２０.２mg、３４.４％)を蝋状固体として得る。Ｂのデータ：ＨＲＭＳ(ＦＡＢ  Ｃｓ)：予測値：Ｍ＋Ｃｓ＝７０３／７０５／７０７.１２７６、実測値：７０３／７０５／７０７.１４０２。1H-NMR(600MHz, CDCl3):5.88(t, JH-Sn=40.6 Hz, 1 H,=CH-SnMe3)および0.18(t, JH-Sn=40.6 Hz, 9H, SnMe3)。
【００９８】
実施例２：実施例１と同様にして、以下の実施例を製造する：
【化６３】
0004681732.tif 000034
【表１】
0004681732.tif 000035
【００９９】
実施例３：エポシロンＥおよび関連側鎖修飾アナログの、シュティレ結合に基づく方法を介した全合成
エポシロンＥ(３)の最初の全合成は、重要段階が、ヨウ化ビニル７とチアゾール部分(８ｈ、スキーム２ａ)の間のシュティレ結合(Stille et al. Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 1986, 25,508-524;Farina et al. J. Org. React. 1997,50,1-65)である方法により達成される。閉環オレフィン複分解(ＲＣＭ)を介して製造するマクロラクトンコアフラグメント７を、続いて、生物学的評価のための様々な側鎖修飾エポシロンアナログ(９)(スキーム２ｂ)への簡便なそして柔軟性のある接近を提供するために使用する。７へ近づくために使用するＲＣＭ反応はまたtrans−マクロラクトン(１１、スキーム２ｂ)を提供し、これはシュティレ結合法への別の鋳型として働き、アナログ１０の更なるアレイを提供する。
【０１００】
−スキーム２：
ａ)エポシロンＥのレトロ合成的分析および全合成の方法
【化６４】
0004681732.tif 000036
【０１０１】
ｂ)エポシロンＣの側鎖アナログ(９)およびそのΔ12,13trans−異性体(１０)
【化６５】
0004681732.tif 000037
【０１０２】
必須のヨウ化ビニル７および１１の化学合成は、ＰＣＴ出願ＷＯ９８／２５９２９に詳述されている。
シュティレ反応に使用するスタナン結合パートナーは、スキーム３に示す。
【０１０３】
−スキーム３：
【化６６】
0004681732.tif 000038
【０１０４】
シュティレ結合：方法Ａ：２.０当量の８、５−１０mol％Ｐｄ(ＰＰｈ3)4、トルエン、９０−１００℃、１５４０分、３９−８８％；方法Ｂ：２.０−２.２当量の８、２０−３０mol％Ｐｄ(ＭｅＣＮ)2Ｃｌ2、ＤＭＦ、２５℃、１２−３３時間、４９−９４％。
結合パートナー８ｂ、８ｄ、８ｈおよび８ｊおよび更なるスタナン８ｐ−ｒは、容易に入手できる２,４−ジブロモチアゾール(２０)から、モノブロミド２１を介して、スキーム４および５に概説のように製造する。
【０１０５】
−−スキーム４：
【化６７】
0004681732.tif 000039
Ａ)スタナン８ｂ、８ｄおよび８ｐの製造。試薬および条件：(ｂ)３.０当量のＮａＳＭｅ、ＥｔＯＨ、２５℃、２時間、９２％；(ｄ)１３当量  ＮａＯＨ、ＥｔＯＨ、２５℃、３０時間、９１％；(ｅ)１３当量  ＮａＯＨ、ＭｅＯＨ、２５℃、１６ｈ、８２％；(ｆ)５−１０当量のＭｅ3ＳｎＳｎＭｅ3、５−１０mol％のＰｄ(ＰＰｈ3)4、トルエン、８０−１００℃、０.５−３時間、８１−１００％；(ｇ)１.１当量のｎ−ＢｕＬｉ、１.２当量のＮ−Ｂｕ3ＳｎＣｌ、−７８から２５℃、３０分、９８％；
【０１０６】
−スキーム５：
【化６８】
0004681732.tif 000040
スタナン８ｈ、８ｊおよび８ｑ−ｓの製造。試薬および条件：(ａ)１.０５当量  ｎ−Ｂｕ3ＳｎＣＨ＝ＣＨ2、トルエン、１００℃、２１時間、８３％；(ｂ)１.１−１.２当量のＮ−ＢｕＬｉ、１.２−１.２５当量のｎ−Ｂｕ3ＳｎＣｌ、−７８から２５℃、１時間、２８−８５％；(ｃ)Ｈ2、０.１５当量のＰｔＯ2、ＥｔＯＨ、２５℃、４時間；８４％；(ｄ)１.２当量のＮ−ＢｕＬｉ、２.０当量のＤＭＦ、−７８から２５℃、２時間；(ｅ)１.９当量のＮａＢＨ4、ＭｅＯＨ、２５℃、３０分、２段階で６３％；(ｆ)１.３当量のＴＢＳＣｌ、２.０当量のイミダゾール、ＣＨ2Ｃｌ2、２５℃、０.５時間、９６％；(ｈ)１.２当量のＴＢＡＦ、ＴＨＦ、２５℃、２０分、９５％；(ｊ)１.１当量のＤＡＳＴ、ＣＨ2Ｃｌ2、−７８から２５℃、１０分、５７％。ＤＡＳＴ＝ジエチルアミノスルフトリフルオリド。
【０１０７】
スルフィド２１ｂを、９２％収率で、２０の２−ブロモ置換基のチオメチル部分のチオメトキシドナトリウム(ＥｔＯＨ、２５℃)を使用した置換により得る。エトキシおよびメトキシチアゾール２１ｄおよび２１ｐを、ジブロミド２０をＮａＯＨのエタノールおよびメタノール溶液で各々処理することにより製造する。ブロミド(２１ｂ、２１ｄおよび２１ｐ)を、次いで、所望のトリメチルスタナン(８ｂ、ｐ)に、ヘキサメチルジスズによりパラジウム触媒条件下[Ｐｄ(ＰＰｈ3)4、トルエン、８０−１００℃]で変換させ、トリ−ｎ−ブチルスタナン８ｄを、エトキシブロミド２１ｄから、ハロゲン−金属交換(ｎ−ＢｕＬｉ、Ｅｔ2Ｏ、−７８℃)および続くトリ−ｎ−ブチルスズ塩化物での捕獲により、９８％収率で得る。
【０１０８】
スタナン(８ｈ、８ｊ、８ｑ−ｒ)の合成をまた共通前駆体２０から達成する(スキーム５)。このように、２,４−ジブロモチアゾール２０のパラジウム触媒アルケニル化[ｎ−Ｂｕ３ＳｎＣＨ＝ＣＨ２、Ｐｄ(ＰＰｈ３)４、トルエン、１００℃]は、モノブロミド２１ｑを得、これはハロゲン−金属交換(ｎ−ＢｕＬｉ、Ｅｔ２Ｏ、−７８℃)に付し、続いてトリ−ｎ−ブチルスズ塩化物でクエンチし所望のスタナン８ｑを供給する。中間体ビニルブロミド２１ｑの還元(Ｈ２、ＰｔＯ２、ＥｔＯＨ、２５℃)は、エチルチアゾール２１ｒへの到達を提供し、これをスタナン８ｒに、８ｑに関して記載したのと同じ方法で変換する。スタナン８ｈおよび８ｊの合成は、重要なヒドロキシメチルチアゾール２１ｈを介して達成される。
【０１０９】
スキーム５に示されるように、このアルコールは、それ自体、ジブロミド２０から、リチウム化(ｎ−ＢｕＬｉ、Ｅｔ２Ｏ、−７８℃)および続くＤＭＦでの停止を含む２段階で得、中間体アルデヒド２２を得、それを還元(ＮａＢＨ４、ＭｅＯＨ、２５℃)し、所望のアルコール２１ｈを６３％の全体的収率で供給する。２１ｈのスタナン８ｈへの変換は、ヒドロキシル基(ＴＢＳＣｌ、イミダゾール、ＣＨ２Ｃｌ２、９６％)、スズ化(ｉ．ｎ−ＢｕＬｉ、Ｅｔ２Ｏ、−７８℃；ii．ｎ−Ｂｕ３ＳｎＣｌ、８５％)および続く脱保護(ＴＢＡＦ、ＴＨＦ、２５℃、９５％)を含む３段階シークエンスを必要とする。得られるスタナン８ｈの(ＤＡＳＴ、ＣＨ２Ｃｌ２、−７８℃)のフッ素化は、スタナン８ｊへの直接の到達を５７％収率で提供する。
【０１１０】
所有している必要な成分で、重要なシュティレ結合を試験する。二つの別の反応条件の設定を適切に証明する(スキーム３)。方法Ａは、所望のヨウ化ビニル(７または１１)のトルエン溶液と、適当なスタナン８の触媒量のＰｄ(ＰＰｈ３)４存在下の８０−１００℃での１５から４０分の加熱を含む。このプロトコールは、スタナン８ｂと８ｈの結合に使用される。残りのスタナン８ｄおよび８ｊを、別の穏やかな方法である方法Ｂを使用して結合し、ヨウ化ビニル(７または１１)およびスタナン８の混合物のＤＭＦ溶液を、ＰｄＣｌ２(ＭｅＣＮ)２と２５℃で処理する。ヨウ化ビニル７およびスタナン８ｈの結合は、マクロラクトン１８ｈを提供し、これは天然エポシロンＥ(３)(スキーム６ａ)の前駆体として働く。
【０１１１】
−スキーム６ａ：
【化６９】
0004681732.tif 000041
エポキシド３の製造。試薬および条件：(ａ)３０当量のＨ2Ｏ2、６０当量のＣＨ3ＣＮ、１０当量のＫＨＣＯ3、ＭｅＯＨ、２５℃、６時間、６６％(５０％変換を基にしている)。
【０１１２】
全合成は、その場で産生したメチルペルオキシカルボキシイミド酸(Ｈ2Ｏ2、ＫＨＣＯ3、ＭｅＣＮ、ＭｅＯＨ、２５℃；Chaudhuri et al. J. J. Org. Chem. 1982,47, 5196-5198)でのエポキシド化により終了し、エポシロンＥ(３)(５０％変換を基にして６６％)を提供し、これは文献に公開のものと同一の物理的特徴(1Ｈ  ＮＭＲ、[α]D)を示す。
【０１１３】
次いで、シュティレ結合実験を、エポシロンＢ(２)の種々の側鎖修飾アナログへの、Ｃ２６および側鎖の両方での容易な接近の提供に拡大する。これらの二つの修飾を有するエポシロンアナログのレトロ合成分析は、スキーム６ｂに示し、ヨウ化ビニルコアフラグメント２４の合成を必要とする。我々のエポシロンＢおよび種々のエポシロンアナログの合成に使用したのと同じマクロラクトン化方法が、この課題に最も適していると考えられる。
【０１１４】
−スキーム６ｂ：
【化７０】
0004681732.tif 000042
修飾Ｃ２６および側鎖を有するエポシロンアナログのレトロ合成分析の説明。
本合成は、エポシロンＥおよび関連アナログ(スキーム３)の合成に使用したヨウ化ビニル１３(スキーム７)から開始する。
【０１１５】
−スキーム７：
【化７１】
0004681732.tif 000043
【０１１６】
アルデヒド３５の立体選択的合成。試薬および条件：(ａ)１.７当量  ＴＢＳＣｌ、２.８当量  イミダゾール、ＤＭＦ、０から２５℃、７時間、８４％；(ｂ)ｉ．１.０mol％ＯｓＯ4、１.１当量  ＮＭＯ,  ＴＨＦ：ｔ−ＢｕＯＨ：Ｈ2Ｏ(５：５：１)、０から２５℃、１３時間、８９％；ii．６.０当量  ＮａＩＯ4、ＭｅＯＨ：Ｈ2Ｏ(２：１)、０℃、３０分、９２％；(ｃ)２.４当量  ２７、ベンゼン、還流、１.２時間、９８％；(ｄ)３.０当量  ＤＩＢＡＬ、ＴＨＦ、−７８℃、２.５時間、１００％(ｅ)１.４当量のＴｒＣｌ、１.７当量の４−ＤＭＡＰ、ＤＭＦ、８０℃、２１時間、９５％；(ｆ)１.４当量の９−ＢＢＮ、ＴＨＦ、０℃、９時間；次いで、３Ｎ水性ＮａＯＨおよび３０％Ｈ2Ｏ2、０℃、１時間、９５％；(ｇ)２.６当量のＩ2、５.０当量のイミダゾール、２.５当量のＰｈ3Ｐ、Ｅｔ2Ｏ：ＭｅＣＮ(３：１)、０℃、４５分、９７％；(ｈ)１.３当量のプロピオンアルデヒドのＳＡＭＰヒドラゾン、１.４当量のＬＤＡ、ＴＨＦ、０℃、１６時間；次いで、−１００℃および１.０当量の３２のＴＨＦ溶液の添加、−１００から−２０℃、２０時間、７１％；(ｉ)２.５当量のＭＭＰＰ、ＭｅＯＨ：リン酸緩衝液ｐＨ７(１：１)、０℃、３.５時間、８９％；(ｊ)３.０当量のＤＩＢＡＬ、トルエン、−７８℃、１時間、８８％。９−ＢＢＮ＝９−ボラビシクロ[３.３.１]ノナン；ＤＩＢＡＬ＝ジイソブチルアルミニウムハイドライド；４−ＤＭＡＰ＝４−ジメチルアミノピリジン；ＬＤＡ＝リチウムジイソプロピルアミド；ＮＭＯ＝４−メチルモルホリンＮ−オキサイド；ＳＡＭＰ＝(Ｓ)−(−)−１−アミノ−２−(メトキシメチル)ピロリジン；ＭＭＰＰ＝モノペルオキシフタル酸、マグネシウム塩。
【０１１７】
アリルヒドロキシル基(ＴＢＳＣｌ、イミダゾール、ＤＭＦ、０から２５℃)の保護は、シリルエーテル２５(８４％)を提供し、それをアルデヒド２６に２段階ジヒドロキシル化−グリコール開裂シークエンス(ＯｓＯ４、ＮＭＯ、ＴＨＦ／ｔ−ＢｕＯＨ／Ｈ２Ｏ、０から２５℃；次いで、ＮａＩＯ４、ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ、０℃、２段階で８２％)で変換する。安定化イリド２７(ベンゼン、環流；Marshall et al. J. Org. Chem. 1986, 51, 1735-1741; Bestmann et al. Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 1965, 4, 645-660)での立体制御ウィッティッヒ反応は、エステル２８を単一幾何学異性体として、９８％収率で提供する。後者の化合物の還元(ＤＩＢＡＬ、ＴＨＦ、−７８℃)は、アルコール２９を提供し、それをトリフェニルメチル(トリチル)誘導体３０として保護する(ＴｒＣｌ、４−ＤＭＡＰ、ＤＭＦ、７０℃、９５％)。
【０１１８】
最終オレフィンの同化を、次いで選択的ヒドロホウ素化−酸化により達成し、アルコール３１(９−ＢＢＮ、ＴＨＦ、０℃；次いで、ＮａＯＨ、Ｈ２Ｏ２、０℃)を得、それを更に、ジヨウジド３２(Ｉ２、イミダゾール、Ｐｈ３Ｐ、０℃)に全体の収率９２％で変換する。Ｃ８立体中心の導入を、次いで、エンダーのアルキル化プロトコール(プロピオンアルデヒド、ＬＤＡ、ＴＨＦのＳＡＭＰヒドラゾン、０℃；次いで、−１００℃およびＴＨＦ中の３２の添加；Ender's et al. Asymmetric Synthesis 1984; Morrison, J. D., Ed.; Academic Press, Orlando, Vol. 3, p. 275-339; SAMPの贈与に関して、Prof. Endersに感謝する)を使用して達成し、ＳＡＭＰヒドラゾン３３の形成を、７１％収率でもたらす。ニトリル３４(ＭＭＰＰ、ＭｅＯＨ／リン酸緩衝液ｐＨ７、０℃、８９％)および続く還元(ＤＩＢＡＬ、トルエン、−７８℃)は、所望のアルデヒド３５を８８％収率で提供する。
【０１１９】
アルデヒド３５の所望のエポシロン大環状コア２４への変換をスキーム８に要約する。
【０１２０】
−−−スキーム８：
【化７２】
0004681732.tif 000044
【０１２１】
ヨウ化ビニル２４の立体選択的合成。試薬および条件：(ａ)１.４５当量のＬＤＡ、ＴＨＦ、−７８℃、次いで、１.４当量の３６のＴＨＦ溶液、−７８℃、１.５時間、次いで；−４０℃、０.５時間；次いで、１.０当量の３５のＴＨＦ溶液、−７８℃(６６％の合わせた収率、約１.５：１の３７：３８の比率)；(ｂ)３.２当量のＴＢＳＯＴｆ、４.３当量の２,６−ルチジン、ＣＨ2Ｃｌ2、−２０から０℃、２.５時間、９０％；(ｃ)ＨＦ・ｐｙｒ.のピリジン溶液、ＴＨＦ、０℃、３時間、８４％；(ｄ)２.０当量の(ＣＯＣｌ)2、４.０当量のＤＭＳＯ、６.０当量のＥｔ3Ｎ、ＣＨ2Ｃｌ2、−７８から０℃、１.５時間、９８％；(ｅ)５.０当量のＮａＣｌＯ2、７５当量の２−メチル−２−ブテン、２.５当量のＮａＨ2ＰＯ4、ｔ−ＢｕＯＨ：Ｈ2Ｏ(４.５：１)、２５℃、４０分、１００％；(ｆ)６.０当量のＴＢＡＦ、ＴＨＦ、０から２５℃、１９時間、９５％；(ｇ)６.０当量のＥｔ3Ｎ、２.４当量の２,４,６−トリクロロベンゾイルクロライド、ＴＨＦ、０℃、１.５時間；次いで、２.２当量の４−ＤＭＡＰのトルエン(４３をベースにして０.００５Ｍ)溶液に添加７５℃、２.５時間、８４％；(ｈ)２５％ｖ／ｖ  ＨＦ・ｐｙｒ.のＴＨＦ溶液、０から２５℃、１５時間、８６％。ＴＢＡＦ＝テトラｎ−ブチルアンモニウムフルオリド。
【０１２２】
先に、我々のエポシロンＢおよび関連アナログ(ＬＤＡ、ＴＨＦ、−７８から−４０℃)およびアルデヒド３５の合成に使用した、ケトン３６のアドール反応は、アルコール３７および３８を６６％の全体的収率で提供し、所望の６Ｒ,７Ｓジアステレオ異性体(３７)は中程度の選択性である。回収したアルドール生産物３７の分離およびシリル化(ＴＢＳＯＴｆ、２,６−ルチジン、ＣＨ２Ｃｌ２、−２０から０℃)は、トリス−シリルエーテル３９を９０％収率で提供する。１級シリルエーテル保護基(ＨＦ・ｐｙｒ.ピリジン／ＴＨＦ溶液、０℃)の選択的除去は、アルコール４０(８４％)を提供し、それを酸４２に、アルデヒド４１から、２段階方法により酸化する[Swern；次いで、ＮａＣｌＯ２、２−メチル−２−ブテン、ＮａＨ２ＰＯ４、ｔ−ＢｕＯＨ／Ｈ２Ｏ、２５℃、２段階で９８％)。Ｃ１５シリコン保護基(ＴＢＡＦ、ＴＨＦ、０から２５℃)の除去は、ヒドロキシ−酸４３(９５％)を提供し、マクロラクトン工程の基礎を成す。この重要な段階は、ヤマグチ条件下(２,４,６−トリクロロベンゾイルクロライド、Ｅｔ３Ｎ、ＴＨＦ；次いで、４−ＤＭＡＰのトルエン溶液に添加、０.００５Ｍ、７５℃；Inanaga et al. Bull. Chem. Soc. Jpn. 1979, 52, 1989; Mulzer et al. Synthesis 1992, 215-228; Nicolaou et al. Chem. Eur. J. 1996, 2, 847-868)で達成され、保護エポシロンコア４４を８４％の収率で得る。全体的脱保護(ＨＦ・ｐｙｒ.、ＴＨＦ、０から２５℃、８６％)は、重要なヨウ化ビニル中間体２４の合成を完了させる。
【０１２３】
中間体２４を有して、シュティレ結合プロトコールを、次いで、所望のヘテロ環状部分の結合に使用する。ＰｄＣｌ2(ＭｅＣＮ)2を用いる緩和な方法Ｂは、元々最も実際的であり、優れた工程であると考えられ、Ｃ２６ヒドロキシエポシロン４５−４８(スキーム９)の、ヨウ化ビニル２４および適当なスタナン８からの製造に用いる(スキーム４および５参照)。
【０１２４】
−スキーム９：
【化７３】
0004681732.tif 000045
エポシロンアナログ５４−５６および５８、５９およびデスオキシエポシロン４５−４９および５０−５３の合成。試薬および条件：(ａ)方法Ａ：１.７当量の８、１３mol％Ｐｄ(ＰＰｈ３)４、トルエン、１００℃、２時間、１５％；方法Ｂ：１.５−２.０当量の８、１０−２０mol％Ｐｄ(ＭｅＣＮ)２Ｃｌ２、ＤＭＦ、２５℃、１５−３３時間、４１−５６％；(ｂ)１.０５−１.４当量のＤＡＳＴ、ＣＨ２Ｃｌ２、−７８℃、１０分、２６−５８％；(ｃ)０.５当量  (＋)−ＤＥＴ、０.５当量  Ｔｉ(ｉ−ＰｒＯ)４、２.２当量のｔ−ＢｕＯＯＨ、−４０℃、ＣＨ２Ｃｌ２、４Åモレキュラーシーブ、１−２時間、５２−８９％、ＤＥＴ＝酒石酸ジエチル。
【０１２５】
不運なことに、これらの条件は２４とビニルスタナン８ｑ(スキーム５参照)の結合に適していない。別の方法Ａを頼りにして、所望のエポシロン４９に、低い収率であるが、接近する。
【０１２６】
Ｃ２６ヒドロキシ官能性の存在は、エポシロン生産物の更なる合成の簡便な取り扱いを提供する。例えば、Ｃ２６アルコール４５−４７および４９をＤＡＳＴ(ＣＨ２Ｃｌ２、−７８℃)で処理し、フッ素化エポシロンアナログ５０−５３を中程度の収率で、スキーム９に記載のように得る。あるいは、基質４５および４６の、カツキ−シャープレス条件下[(＋)−ＤＥＴ、Ｔｉ(ｉ−ＰｒＯ)４、ｔ−ＢｕＯＯＨ、４Åモレキュラーシーブ、ＣＨ２Ｃｌ２、−４０℃；Katsuki, T.;Sharpless, K. B. J. Am. Chem. Soc. 1980, 102, 5976-5978]での非対称エポキシド化は、各々エポシロン５４および５５をもたらす。続く、ＤＡＳＴ処理(ＣＨ２Ｃｌ２、−７８℃)は、更なるアナログ５８および５９を、また中程度の収率で提供する。この際、５４および５５のようなエポキシドを試験し、ヨウ化ビニル２４の非対称エポキシド化を達成し、共通中間体を得、次いで、それはシュティレ結合の基質として働く。エポキシド官能性とシュティレ条件の適合性の最初の保留にもかかわらず、この実験で必要なエポキシド５７は、４５および４６の合成の記載のように、オレフィン２４から、８１％収率で製造する。我々のうれしい驚きとして、スタナン８ｒを使用した標準結合法の適用は、エポシロンアナログ５６の十分な製造をもたらす(７０％変換に基づいて７３％)。
【０１２７】
シュティレ結合利用の、エポキシド部分を有する基質での成功は、エポシロン６６−６８に、中間体６５から、スキーム１０に概説のように到達できることを示す。
【０１２８】
−スキーム１０：
【化７４】
0004681732.tif 000046
【０１２９】
Ｃ２６置換エポシロン６６−６８の合成。試薬および条件：(ａ)１５当量のＥｔ３Ｎ、８.０当量  ＴＭＳＣｌ、ＤＭＦ、２５℃、１２時間；(ｂ)シリカゲル、ＣＨ２Ｃｌ２、２５℃、１２時間、２段階で９８％；(ｃ)３.０当量のＮＭＯ、１０mol％ＴＰＡＰ、ＣＨ２Ｃｌ２、２５℃、４０分、９０％；(ｄ)９.７当量のＰｈ３Ｐ＋ＣＨ３Ｂｒ−のＮａＮＨ２との混合物)、ＴＨＦ、−５℃、６５％(ｅ)２５当量のＨ２ＮＮＨ２、１６当量のＨ２Ｏ２、ＥｔＯＨ、０℃、３時間；(ｆ)ＨＦ・ｐｙｒ.ピリジンのＴＨＦ溶液、０から２５℃、２時間、２段階で７５％；(ｇ)１.７−２.３当量の８、０.２−０.３mol％Ｐｄ(ＭｅＣＮ)２Ｃｌ２、ＤＭＦ、２５℃、１５−２３時間、５２−７９％。ＴＰＡＰ＝テトラプロピルアンモニウム過ルテニウム酸。
【０１３０】
所望の鋳型(６５)の製造は、５段階シークエンスで達成し、それはトリオール５７(ＴＭＳＣｌ、Ｅｔ3Ｎ、ＤＭＦ、２５℃)の全般的保護で開始する。シリカゲルを使用した選択的脱保護(ＣＨ2Ｃｌ2、２５℃、２段階で９８％)は、Ｃ２６の１級ヒドロキシル官能性を明らかにし、次いで、酸化(ＴＰＡＰ、ＮＭＯ、４Åモレキュラーシーブ、ＣＨ2Ｃｌ2、２５℃)し、アルデヒド６２を９０％収率で得る。メチルトリフェニルホスホニウムブロミド(Schlosserの“インスタントイリド”混合物、ＴＨＦ、−５℃；Schlosser, M.; Schaub, B. Chimia 1982, 36, 3965)を使用したメチレン化は、オレフィン６３(６５％)を提供し、それはその場で産生されたジイミド(Ｈ2ＮＮＨ2、Ｈ2Ｏ2、ＥｔＯＨ、０℃)での還元に付され、中間体６４を得る。残りのシリルエーテル(ＨＦピリジン(＝ｐｙｒ.)のピリジン／ＴＨＦ溶液、０℃)の脱保護は、所望のヨウ化ビニル６５を７５％収率で、２段階で提供する。上記のシュティレ結合方法Ｂを次いで使用して、エポシロン６６−６８に中程度の収率で近づく(スキーム１０)。
【０１３１】
本実施例に記載の化学は、側鎖または側鎖とＣ２６部分の両方で共通大環状中間体と相違を有する一連のエポシロオンアナログの構築に、シュティレ結合法を利用する。
【０１３２】
実施例４：本発明の化合物の式
表：本発明の化合物の式：
【表２】
0004681732.tif 000047
【表３】
0004681732.tif 000048
【表４】
0004681732.tif 000049
【表５】
0004681732.tif 000050
【０１３３】
実施例５：生物学的結果
上記の方法(式Ｉの化合物によるチューブリン解重合化の阻害を、ブタ脳微小管で測定し、２５μlエポシロンＢと比較する；細胞性アッセイは、上記でKB-31細胞に関して記載したものと同じである)にしたがって、以下の表に示す結果が、式Ｉの化合物で得られる：
【表６】
0004681732.tif 000051
ａ)試験化合物５μM濃度対エポシロンＢ２５μMのチューブリン重合化の導入(％で)
ｂ)類表皮
ｃ)類表皮(Ｐ−ｇｐ過発現)
ｄ)肺
ｅ)大腸
【０１３４】
【表７】
0004681732.tif 000052
ｆ)前立腺
ｇ)胸部
ｈ)胸部(多剤耐性)
【０１３５】
実施例６：更なる式Ｉの化合物
上記および下記の方法と同様にして、以下の式Ｉに入る化合物が製造され、以下の式を有する：
実施例６(ｉ)
【化７５】
0004681732.tif 000053
実施例６(ii)
【化７６】
0004681732.tif 000054
実施例６(iii)
【化７７】
0004681732.tif 000055
実施例６(iv)
【化７８】
0004681732.tif 000056
実施例６(ｖ)
【化７９】
0004681732.tif 000057
実施例６(ｖｉ)
【化８０】
0004681732.tif 000058
実施例６(ｖii)
【化８１】
0004681732.tif 000059
実施例６(ｖiii)
【化８２】
0004681732.tif 000060
実施例６(ｉｘ)
【化８３】
0004681732.tif 000061
実施例６(ｘ)
【化８４】
0004681732.tif 000062
実施例６(ｘｉ)
【化８５】
0004681732.tif 000063
【０１３６】
実施例６：医薬製剤：
エポシロンアナログＤ(実施例１)または実施例２  Ｃ)のエポシロンアナログ(１５mg)を、９８−１００％プロピレングリコール(１.０ml)に溶解する。得られる溶液を、０.２２ミクロンのポアサイズのフィルターを通して滅菌濾過し、１mlのアンプルに充填する。充填したアンプルを貯蔵および輸送に使用する。静脈内投与前に、アンプルの中身を２５０から１０００mlの注射用水中の５％グルコース溶液に添加する。
【０１３７】
実施例７：スキーム１１および１２に説明のような、側鎖修飾エポシロンアナログの合成のための更なるスタナンの使用
−スキーム１１：
【化８６】
0004681732.tif 000064
ピリジンおよびイミダゾール修飾を有する種々の側鎖修飾エポシロンＢアナログの合成の一般的経路
ａ：先に記載のように(Nicolaou et al. Tetrahedron 54,7127-7166(1998)参照)；ｂ、ｄ、ｅ：先に記載の条件(上記またはNicolaou et al. Tetrahedron 54, 7127-7166)参照；ｃ：ＮａＢＨ3ＣＮ、ＨＭＰＡ、４０−４５℃。
【０１３８】
保護基は当分野で既知のもの、特に上記の標準引用文献に記載のもの、およびそれらの導入および除去法は、該標準引用文献に記載されている。
好ましくは、７００６において、Ｒ*はＨまたはメチルである。７００４において、Ｒは好ましくはメチルである。
【０１３９】
共通前駆体５７、ならびに８ｈ、８ｘ、８ｙおよび８ｚから多くの側鎖修飾エポシロンアナログを製造するためのシュティレ結合法の使用は、スキーム１１および１２に記載する。ヨウ化ビニル７００２の合成は、先に報告のＣ２６−ヒドロキシ化合物から達成され、５７のジヨウジド７００１への変換およびＮａＢＨ3ＣＮを使用した続く還元を含む：ジヨウジド７００１(１当量；５７から)およびシアノホウ化水素ナトリウム(１０当量)を無水ＨＭＰＡ(０.２Ｍ)に溶解し、得られる混合物を４５−５０℃で４８時間加熱する。室温に冷却後、水を添加し、水性相を４回酢酸エチルで抽出する。合わせた有機相を乾燥させ(Ｎａ2ＳＯ4)、シリカゲルの短プラグを通し、微量のＨＭＰＡ(５０％酢酸エチルのヘキサン溶液で溶出)を除去する。溶媒の蒸発に続き、残渣を薄層クロマトグラフィーで精製(５０％酢酸エチルのヘキサン溶液で溶出)し、純粋ヨウ化ビニル７００２(８４％)を得る。エポシロンＥ側鎖への結合を達成し、多くのピリジンおよびイミダゾールの結合は、スキーム１１および１２に示すように、本明細書に概説の標準法を使用して、芳香族スタナンによる多くの別の側鎖の結合を介して達成する。
【０１４０】
−スキーム１２：
【化８７】
0004681732.tif 000065
【０１４１】
複分解またはマクロラクトン化実験のいずれか由来の示したアリールスタナン(ＡｒＳｎＲ3)を使用した、Ｒがｎ−ブチルまたはメチルである、ある側鎖修飾エポシロンアナログの説明。スタナンは、当分野で既知の標準条件を使用して合成する。Ｘは水素；低級アルキル、特にメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、tert−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル；−ＣＨ＝ＣＨ2；−Ｃ＝ＣＨ；−ＣＨ2Ｆ；−ＣＨ2Ｃｌ；−ＣＨ2−ＯＨ；−ＣＨ2−Ｏ−(Ｃ1−Ｃ6−アルキル)、特に−ＣＨ2−Ｏ−ＣＨ3；および−ＣＨ2−Ｓ−(Ｃ1−Ｃ6アルキル)、特に−ＣＨ2−Ｓ−ＣＨ3；およびＲはメチルまたはｎ−ブチルからなる群から選択される。
【０１４２】
合成プロトコール
全般：全ての反応は、特記しない限り、アルゴン雰囲気下、乾燥した、新たに蒸留した溶媒で、無水条件下で行う。テトラヒドロフラン(ＴＨＦ)およびジエチルエーテル(エーテル)を、ナトリウム−ベンゾフェノンから、ジクロロメタン(ＣＨ２Ｃｌ２)、ベンゼン(ＰｈＨ)およびトルエンを水素化カルシウムから蒸留する。無水溶媒はまた商品として入手可能な活性化アルミナカラムを通すことにより得る。収率は、特記しない限り、クロマトグラフィーおよび分光学的(１Ｈ  ＮＭＲ)で均質な材料を言及する。全ての製造工程で使用する溶液は、特記し無い限り飽和である。全ての試薬は、最高品質の商品を購入し、特記しない限り、更に精製することなく使用する。全ての反応は、０.２５mm  E.  Merckシリカゲルプレート(６０Ｆ−２５４)で、可視化剤としてのＵＶ光、展開剤として７％エタノール性リンモリブデン酸またはｐ−アニスアルデヒド溶液および加熱を使用して行われる薄層クロマトグラフィーでモニターする。E. Merckシリカゲル(６０、粒子サイズ０.０４０−０.０６３mm)をフラッシュカラムクロマトグラフィーに使用する。分取薄層クロマトグラフィー分離は、０.２５、０.５０または１mm  E. Merckシリカゲルプレート(６０Ｆ−２５４)で行う。ＮＭＲスペクトルは、Bruker DRX-600、AMX-500、AMX-400またはAC-250装置を使用して記録し、残りの非重水素化溶媒を内部対象として換算する。以下の略語を多重性の説明に使用する：ｓ、１重；ｄ、２重；ｔ、３重；ｑ、４重；ｍ、多重；バンド、数個の重複シグナル；ｂ、広い。ＩＲスペクトルをPerkin-Elmer 1600シリーズFT-IRスペクトロメーターで記録する。光学回転をPerkin-Elmer 241偏光計で記録する。高解像度マススペクトル(ＨＲＭＳ)を、VG ZAB-ZSEマススペクトロメーターで、高速原子衝撃(ＦＡＢ)条件下で記録する。
【０１４３】
スキーム３に説明のcis−マクロラクトンジオール７。ヨウ化物１６(３０５mg、０.４９１mmol)のＴＨＦ(８.２mL、０.０６Ｍ)溶液に、２５℃で、ＨＦ・ｐｙｒ.(２.７mL)を添加し、得られる溶液を同じ温度で２７時間撹拌する。次いで、反応を飽和水性ＮａＨＣＯ３(１００mL)およびＥｔＯＡｃ(１００mL)の注意深い添加により停止させ、得られる２相混合物を２５℃で２時間撹拌する。次いで、抽出物を分離し、有機相を飽和水性ＮａＨＣＯ３(１００mL)および食塩水(１００mL)で洗浄し、次いで、乾燥させる(ＭｇＳＯ４)。フラッシュクロマトグラフィーによる精製(シリカゲル、２０から５０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)により、ジオール７(２０８mg、８４％)を得る。Ｒｆ＝０.２１(シリカゲル、２５％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)；[α]２２Ｄ−５３.１(ｃ  １.３７、ＣＨＣｌ３)；ＩＲ(薄フィルム)
【表８】
0004681732.tif 000066
Ｃ２２Ｈ３５ＩＯ５の計算値(Ｍ＋Ｃｓ＋)６３９.０５８４、実測値６３９.０５５７。
【０１４４】
スキーム３に説明のtrans−マクロラクトンジオール１１。ヨウ化物１７(１９４mg、０.３１３mmol)のＴＨＦ(５.２mL、０.０６Ｍ)溶液をＨＦ・ｐｙｒ.(１.７mLで、ジオール７の製造に関して記載の方法にしたがって処理し、フラッシュカラムクロマトグラフィー (シリカゲル、２０から５０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)後、ジオール１１(１３４mg、８５％)を得る。Ｒf＝０.１６(シリカゲル、２５％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)；[α]22D−２０.０(ｃ  １.１５、ＣＨＣｌ3)；ＩＲ(フィルム)
【表９】
0004681732.tif 000067
Ｃ22Ｈ35ＩＯ5の計算値(Ｍ＋Ｃｓ+)６３９.０５８４、実測値６３９.０６０６。
【０１４５】
スキーム４に説明のような２−チオメチル−４−ブロモチアゾール２１ｂ。２,４−ジブロモチアゾール２０(８２mg、０.３４mmol、１.０当量)をエタノール(２.３mL、０.１５Ｍ)に溶解し、ナトリウムチオメトキシド(７５mg、１.０２mmol、３.０当量)で処理する。反応混合物を２５℃で２時間撹拌し、その時間の後、反応の完了が１Ｈ  ＮＭＲにより確立する。混合物を水(５mL)に注ぎ、エーテル(２×５mL)で抽出する。合わせた有機相を乾燥し(ＭｇＳＯ４)、溶媒を蒸発して残渣をフラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、５％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)で精製し、２−チオメチル−４−ブロモチアゾール２１ｂを得る。Ｒｆ＝０.５８(シリカゲル、１０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)；ＩＲ(フィルム)
【表１０】
0004681732.tif 000068
Ｃ４Ｈ４ＢｒＮＳ２の計算値(Ｍ＋)２０９／２１１、実測値２０９／２１１。
【０１４６】
スキーム４に説明のような２−エトキシ−４−ブロモチアゾール２１ｄ。２,４−ジブロモ−チアゾール２０(５８mg、０.２３９mmol、１.０当量)のＥｔＯＨ(２.４mL、０.１Ｍ)溶液に、ＮａＯＨ(１２２mg、３.０５mmol、１２.８当量)を添加し、得られる溶液を２５℃でＴＬＣがジブロミドの消滅を示すまで撹拌する(約３０時間)。次いで、得られる黄色溶液をエーテル(１０mL)と飽和水性ＮＨ4Ｃｌ(１０mL)の間で分配し、相を分離する。水性相をエーテル(１０mL)で抽出し、合わせた有機抽出物を食塩水(２０mL)で洗浄し、乾燥し(ＭｇＳＯ4)、注意深く減圧下で濃縮する。フラッシュカラムクロマトグラフィー(シリカゲル、１７％エーテルのヘキサン溶液)により、２−エトキシ−４−ブロモチアゾール２１ｄを揮発性油状物(４５mg、９１％)として得る。Ｒf＝０.５８(シリカゲル、１７％エーテルのヘキサン溶液)；ＩＲ(フィルム)
【表１１】
0004681732.tif 000069
Ｃ4Ｈ4ＢｒＮＳＯの計算値(Ｍ+)１９３／１９５、実測値１９３／１９５。
【０１４７】
スキーム４に説明のような２−メトキシ−４−ブロモチアゾール２１ｐ。２,４−ジブロモチアゾール２０(２５３mg、１.０４mmol、１.０当量)のＭｅＯＨ(１０.５mL、０.１Ｍ)溶液に、ＮａＯＨ(５５５mg、１３.９mmol、１３.３当量)を添加し、得られる溶液を２５℃でＴＬＣがジブロミドの消滅を示すまで撹拌する(約１６時間)。次いで、得られる黄色溶液をエーテル(１０mL)と飽和水性ＮＨ４Ｃｌ(１０mL)の間で分配し、相を分離する。水性相をエーテル（１０mL)で抽出し、合わせた有機抽出物を乾燥し(ＭｇＳＯ４)、注意深く減圧下で濃縮する。フラッシュカラムクロマトグラフィー(シリカゲル、１０％エーテルのヘキサン溶液)により、２−メトキシ−４−ブロモチアゾール２１ｐを揮発性油状物として得る(１３８mg、８２％)。Ｒｆ＝０.５６(シリカゲル、１７％エーテルのヘキサン溶液)；ＩＲ(フィルム)
【表１２】
0004681732.tif 000070
Ｃ５Ｈ６ＢｒＮＳＯの計算値(Ｍ＋)２０７／２０９、実測値２０７／２０９。
【０１４８】
スキーム４に説明のような２−ヒドロキシメチル−４−ブロモチアゾール２１ｈ。２,４−ジブロモチアゾール２０(５０mg、０.２０６mmol、１.０当量)の無水エーテル(２.０mL、０.１Ｍ)溶液を、−７８℃で、Ｎ−ＢｕＬｉ(１５４μL、ヘキサン中１.６Ｍ、０.２４７mmol、１.２当量)に添加し、得られる溶液を同じ温度で３０分撹拌する。ＤＭＦ(３２μL、０.４１２mmol、２.０当量)を次いで−７８℃で添加し、−７８℃で３０分撹拌後、反応混合物をゆっくり２５℃まで２時間にわたり温める。ヘキサン(２.０mL)を添加し、得られる混合物を短シリカゲルケーキを通し、３０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液で溶出する。溶媒を蒸発し、粗アルデヒド２２(５０mg)を得、それを直接次ぎの段階に使用する。
【０１４９】
アルデヒド２２(５０mg)のメタノール(２.０mL)溶液に、２５℃で、水素化ホウ素ナトリウム(１５mg、０.３９７mmol、１.９当量)を添加し、得られる混合物を同じ温度で３０分撹拌する。ＥｔＯＡｃ(１.０mL)およびヘキサン(２.０mL)を添加し、混合物を短シリカゲルケーキを通し、ＥｔＯＡｃで溶出する。次いで、溶媒を蒸発させ、粗生産物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(シリカゲル、２０から５０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)で精製し、２−ヒドロキシメチル−４−ブロモチアゾール２１ｈを得る(２５mg、２段階で６３％)。Ｒf＝０.１６(シリカゲル、１８％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)；ＩＲ(フィルム)
【表１３】
0004681732.tif 000071
Ｃ4Ｈ4ＢｒＮＯＳの計算値(Ｍ＋Ｈ+)１９３.９２７５、実測値１９３.９２８３。
【０１５０】
スキーム５に説明のような２−(tert−ブチルジメチルシリルオキシメチル)−４−ブロモチアゾール２１ｓ。アルコール２１ｈ(５９mg、０.３０４mmol、１.０当量)のＣＨ2Ｃｌ2(１.０mL、０.３Ｍ)溶液に、イミダゾール(６２mg、０.６０８mmol、２.０当量)、続いてtert−ブチルジメチルクロロシラン(６９mg、０.４５６mmol、１.３当量)を２５℃で添加する。３０分、２５℃の後、反応混合物をメタノール(１００mL)で停止し、次いで、シリカゲルを通し、ＣＨ2Ｃｌ2で溶出する。溶媒の蒸発により、所望のシリルエーテル２１ｓ(９０mg、９６％)を得る。Ｒf＝６０(シリカゲル、１０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)；ＩＲ(フィルム)
【表１４】
0004681732.tif 000072
Ｃ10Ｈ18ＢｒＮＯＳＳｉの計算値(Ｍ＋Ｈ+)３０８.０１４０、実測値３０８.０１５１。
【０１５１】
スキーム５に説明のような２−ビニル−４−ブロモチアゾール２１ｑ。２,４−ジブロモチアゾール２０(４３７mg、１.８０mmol、１.０当量)のトルエン溶液に、トリ−ｎ−ブチル(ビニル)スズ(５５２μL、１.８９mmol、１.０５当量)、続いてＰｄ(ＰＰｈ3)4(２０８mg、０.１８０mmol、０.１当量)を添加し、得られる混合物を１００℃で加熱する。２１時間後、混合物を冷却し、直接フラッシュカラムクロマトグラフィー(シリカゲル、０から９％エーテルのヘキサン溶液)で精製し、２−ビニル−４−ブロモチアゾール２１ｑを油状物として得る(２８５mg、８３％)。Ｒf＝０.５０(シリカゲル、１７％エーテルのヘキサン溶液)；ＩＲ(フィルム)
【表１５】
0004681732.tif 000073
Ｃ5Ｈ4ＢｒＮＳの計算値(Ｍ+)１８９／１９１、実測値１８９／１９１。
【０１５２】
スキーム５に説明のような２−エチル−４−ブロモチアゾール２１ｒ。２−ビニル−４−ブロモチアゾール２１ｑ(２７９mg、１.４７mmol、１.０当量)のエタノール(１５mL、０.１Ｍ)溶液に、ＰｔＯ2(５０mg、０.２２０mmol、０.１５当量)を添加し、得られる混合物を水素雰囲気下、２５℃で４時間撹拌する。続くシリカゲルの短プラグを通した濾過、ＥｔＯＡｃでの溶出、および注意深い減圧下の濃縮により、２−エチル−４−ブロモチアゾール２１ｒ(２３８mg、８４％)を得る。Ｒf＝０.６３(シリカゲル、ＣＨ2Ｃｌ2)；ＩＲ(フィルム)
【表１６】
0004681732.tif 000074
Ｃ5Ｈ6ＢｒＮＳの計算値(Ｍ+)１９１／１９３、実測値１９１／１９３。
【０１５３】
スキーム３に説明のような２−チオメチル−４−トリメチルスタニルチアゾール８ｂ。ブロモチアゾール２１ｂ(５１mg、０.２４mmol、１.０当量)の脱気トルエン(４.９mL、０.１Ｍ)溶液に、ヘキサメチルジスズ(４９８μL、２.４mmol、１０当量)およびＰｄ(ＰＰｈ3)4(１４mg、０.０１２mmol、０.０５当量)を添加し、反応混合物を８０℃で３時間加熱する。次いで反応混合物を２５℃に冷却し、フラッシュカラムクロマトグラフィー(シリカゲル、５％Ｅｔ3Ｎのヘキサン溶液)後、スタナン８ｂ(７１mg、１００％)を得る。Ｒf＝０.６７(シリカゲル；Ｅｔ3Ｎで前処理、１０％ＥｔＯＡｃ)；ＩＲ(フィルム)
【表１７】
0004681732.tif 000075
Ｃ7Ｈ13ＮＳ2Ｓｎの計算値(Ｍ＋Ｈ+)２９５.９５８８、実測値２９５.９５７６。
【０１５４】
スキーム４に説明のような２−メトキシ−４−トリメチルスタニルチアゾール８ｐ。ブロモチアゾール２１ｐ(１４７mg、０.７５８mmol、１.０当量)の脱気トルエン(７.６mL、０.１Ｍ)溶液に、ヘキサメチルジスズ(７８５μL、３.７９mmol、５.０当量)およびＰｄ(ＰＰｈ3)4(８８mg、０.０７６mmol、０.１当量)を添加し、反応混合物を１００℃で３０分、スタナン８ｂの合成に関して記載の方法にしたがって加熱し、フラッシュカラムクロマトグラフィー(シリカゲル、５％Ｅｔ3Ｎのヘキサン溶液)後、スタナン８ｐ(１７０mg、８１％)を得る。Ｒf＝０.４９(シリカゲル；Ｅｔ3Ｎで前処理、１７％エーテルのヘキサン溶液)；ＩＲ(フィルム)
【表１８】
0004681732.tif 000076
Ｃ7Ｈ13ＮＯＳＳｎの計算値(Ｍ＋Ｈ+)２７９.９８１８、実測値２７９.９８１０。
【０１５５】
スキーム５に説明のような２−(tert−ブチルジメチルシリルオキシメチル)−４−トリ−ｎ−ブチルスタニルチアゾール８ｓ。ブロモチアゾール２１ｓ(２０mg、０.０６５mmol、１.０当量)のエーテル(１.０mL、０.０７Ｍ)溶液に、−７８℃で、ｎ−ＢｕＬｉ(４９μL、ヘキサン中１.６Ｍ、０.０７８mmol、１.２当量)を添加し、得られる混合物を−７８℃で１０分撹拌する。トリ−ｎ−ブチルスズ塩化物(２３μL、０.０７８mmol、１.２当量)を次いで添加し、溶液を−７８℃で１０分撹拌し、次いで、ゆっくり２５℃に１時間にわたり温める。反応混合物をヘキサン(２.０mL)で希釈し、シリカゲルを通し、２０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液で溶出する。フラッシュカラムクロマトグラフィー(シリカゲル；Ｅｔ3Ｎで前処理、５％エーテルのヘキサン溶液)により、所望のスタナン８ｓ(３５mg、８５％)を得る。Ｒf＝０.３６(シリカゲル、５％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)；ＩＲ(フィルム)
【表１９】
0004681732.tif 000077
Ｃ22Ｈ45ＮＯＳＳｉＳｎの計算値(Ｍ＋Ｈ+)５２０.２０９３、実測値５２０.２０７４。
【０１５６】
スキーム５に説明のような２−ヒドロキシメチル−４−トリ−ｎ−ブチルスタニルチアゾール８ｈ。シリルエーテル８ｓ(２０mg、０.０３９mmol、１.０当量)のＴＨＦ(１.０mL、０.０４Ｍ)溶液に、ＴＢＡＦ(４６μL、ＴＨＦ中１.０Ｍ、０.０４６mmol、１.２当量)を添加し、反応混合物を２５℃で２０分撹拌する。ヘキサン(２.０mL)を添加し、混合物をシリカゲルを通し、ＥｔＯＡｃで溶出する。溶媒の蒸発により、所望のアルコール８ｈ(１５mg、９５％)を得る。Ｒf＝０.０９(シリカゲル、２０％エーテルのヘキサン溶液)；ＩＲ(フィルム)
【表２０】
0004681732.tif 000078
Ｃ16Ｈ31ＮＯＳＳｎの計算値(Ｍ＋Ｈ+)４０６.１２２８、実測値４０６.１２３７。
【０１５７】
スキーム５に説明のような２−フルオロメチル−４−トリ−ｎ−ブチルスタニルチアゾール８ｊ。アルコール８ｈ(９０mg、０.２２３mmol、１.０当量)のＣＨ2Ｃｌ2(２.２mL、０.１Ｍ)溶液に、−７８℃で、ＤＡＳＴ(３２μL、０.２４２mmol、１.１当量)を添加し、溶液をその温度で１０分撹拌する。飽和水性ＮａＨＣＯ3(２mL)で停止後、混合物を２５℃に温め、次いで、ＣＨ2Ｃｌ2(１５mL)と飽和水性ＮａＨＣＯ3(１５mL)に分配する。相を分離し、水性相をＣＨ2Ｃｌ2(２×１５mL)で抽出する。合わせた有機抽出物を食塩水(４０mL)で洗浄し、乾燥し(ＭｇＳＯ4)、減圧下で濃縮する。フラッシュカラムクロマトグラフィー(シリカゲル；Ｅｔ3Ｎで前処理、１７％エーテルのヘキサン溶液)により、スタナン８ｊ(５２mg、５７％)を得る。Ｒf＝０.５９(シリカゲル、１７％エーテルのヘキサン溶液)；ＩＲ(フィルム)
【表２１】
0004681732.tif 000079
Ｃ16Ｈ30ＦＮＳＳｎの計算値(Ｍ＋Ｈ+)４０８.１１８３、実測値４０８.１１６９。
【０１５８】
スキーム４に説明のような２−エトキシ−４−トリ−ｎ−ブチルスタニルチアゾール８ｄ。ブロモチアゾール２１ｄ(８２mg、０.３９４mmol、１.０当量)のエーテル(３.９mL、０.１Ｍ)溶液を、ｎ−ＢｕＬｉ(２８９μL,ヘキサン中１.５Ｍ、０.４３３mmol、１.１当量)およびトリ−ｎ−ブチルスズ塩化物(１２８μL、０.４７３mmol、１.２当量)でスタナン８ｓの合成に関して記載の方法にしたがって処理し、カラムクロマトグラフィー(シリカゲル；Ｅｔ3Ｎで前処理、ヘキサン)後、スタナン８ｄ(１６１mg、９８％)を得る。ＩＲ(フィルム)
【表２２】
0004681732.tif 000080
Ｃ17Ｈ33ＮＯＳＳｎの計算値(Ｍ＋Ｈ+)４１８.１３８０、実測値４１８.１３９６。
【０１５９】
スキーム５に説明のような２−ビニル−４−トリ−ｎ−ブチルスタニルチアゾール８ｑ。ブロモチアゾール２１ｑ(１９１mg、１.００mmol、１.０当量)のエーテル(１４.０mL、０.０７Ｍ)溶液を、ｎ−ＢｕＬｉ(８０４μL、ヘキサン中１.５Ｍ、１.２０mmol、１.２当量)およびトリ−ｎ−ブチルスズ塩化物(３４１μL、１.２６mmol、１.２５当量)で、スタナン８ｓの合成に関して記載の方法にしたがって処理し、カラムクロマトグラフィー(シリカゲル；Ｅｔ3Ｎで前処理、ヘキサン)後、スタナン８ｑ(１１２mg、２８％)を得る。Ｒf＝０.６３(シリカゲル、１７％エーテルのヘキサン溶液)；ＩＲ(フィルム)
【表２３】
0004681732.tif 000081
Ｃ17Ｈ31ＮＳＳｎの計算値(Ｍ＋Ｈ+)の計算値４０２.１２７９、実測値４０２.１２９０。
【０１６０】
スキーム５に説明のような２−エチル−４−トリ−ｎ−ブチルスタニルチアゾール８ｒ。ブロモチアゾール２１ｒ(２３８mg、１.２４mmol、１.０当量)のエーテル(１２.０mL、０.１Ｍ)溶液を、−７８℃で、ｎ−ＢｕＬｉ(９０９μL、ヘキサン中１.５Ｍ、１.３６mmol、１.１当量)およびトリ−ｎ−ブチルスズ塩化物(４０３μL、１.４９mmol、１.２当量)でスタナン８ｓの合成に関して記載の方法にしたがって処理し、カラムクロマトグラフィー(シリカゲル；Ｅｔ3Ｎで前処理、ヘキサン)後、スタナン８ｒ(３５７mg、７２％)を得る。Ｒf＝０.６４(シリカゲル、ＣＨ2Ｃｌ2)；ＩＲ(フィルム)
【表２４】
0004681732.tif 000082
Ｃ17Ｈ33ＮＳＳｎの計算値(Ｍ＋Ｈ+)４０４.１４３４、実測値４０４.１４１６。
【０１６１】
スキーム３に説明のようなcis−マクロラクトン１８ｈ。ヨウ化ビニル７(１０.０mg、０.０２０mmol、１.０当量)、スタナン８ｈ(１６.０mg、０.０４０mmol、２.０当量)およびＰｄ(ＰＰｈ3)4(２.１mg、０.００２mmol、０.１当量)の脱気トルエン(２００μL、０.１Ｍ)溶液を１００℃で２０分加熱する。反応混合物を飽和水性ＮａＨＣＯ3−ＮａＣｌ(５mL)に注ぐ。ＥｔＯＡｃ(２×５mL)で抽出する。合わせた有機フラクションを乾燥後(Ｎａ2ＳＯ4)、溶媒の蒸発および分取薄層クロマトグラフィー(５００mmシリカゲルプレート、５０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)での精製により、マクロラクトン１８ｈを得る(７.５mg、７６％)。Ｒf＝０.２９(シリカゲル、５０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)；[α]22D−４４.２(ｃ  ０.６０、ＣＨＣｌ3)；ＩＲ(薄フィルム)
【表２５】
0004681732.tif 000083
Ｃ26Ｈ39ＮＯ6Ｓの計算値(Ｍ＋Ｃｓ+)６２６.１５５２、実測値６２６.１５３０。
【０１６２】
スキーム２および３に説明のようなエポシロンＥ(３)。ラクトン１８ｈ(１０.０mg、０.０２０mmol、１.０当量)のメタノール(６００μL、０.０３Ｍ)溶液に、アセトニトリル(３２μL、０.６０６mmol、３０当量)、ＫＨＣＯ３(１０mg、０.１０２mmol、５当量)および過酸化水素(２７μL、３５％ｗ／ｗ水溶液、０.３０３mmol、１５当量)を添加し、反応混合物を２５℃で３時間撹拌する。更なるアセトニトリル(３２μL、０.６０６mmol、３０当量)、ＫＨＣＯ３(１０mg、０.１０２mmol、５当量)および過酸化水素(２７μL、３５％ｗ／ｗ水溶液、０.３０３mmol、１５当量)を次いで添加し、更に３時間撹拌を続ける。反応混合物を次いで直接シリカゲルの短プラグを通して濾過をし、エーテルで溶出し、濾液を減圧下で濃縮する。分取薄層クロマトグラフィー(２５０mmシリカゲルプレート、５０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)により、未反応出発物質１８ｈ(５.０mg、５０％)およびエポシロンＥ(３)(３.４mg、３３％)を得る。Ｒｆ＝０.５６(シリカゲル、６６％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)；[α]２２Ｄ＝−２７.５(ｃ  ０.２０、ＣＨＣｌ３)；ＩＲ(フィルム)
【表２６】
0004681732.tif 000084
Ｃ２６Ｈ３９ＮＯ７Ｓの計算値(Ｍ＋Ｈ＋)５１０.２５２５、実測値５１０.２５３９。
【０１６３】
スキーム３に説明のようなcis−マクロラクトン１８ｂ。ヨウ化ビニル７(９.２mg、０.０１８mmol、１.０当量)、スタナン８ｂ(１０.７mg、０.０３６mmol、２.０当量)およびＰｄ(ＰＰｈ3)4(２.１mg、０.００１８mmol、０.１当量)の脱気トルエン(１８０μL、０.１Ｍ)溶液を１００℃で４０分、ラクトン１８ｈの合成に関して記載の方法にしたがって加熱し、分取薄層クロマトグラフィー(２５０mmシリカゲルプレート、７５％エーテルのヘキサン溶液)後、マクロラクトン１８ｂ(４.１mg、４４％)を得る。Ｒf＝０.５０(シリカゲル、５０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)；[α]22D−３８.６(ｃ  ０.２１、ＣＨＣｌ3)；ＩＲ(薄フィルム)
【表２７】
0004681732.tif 000085
Ｃ26Ｈ39ＮＯ5Ｓ2の計算値(Ｍ＋Ｃｓ+)６４２.１３２４、実測値６４２.１３４５。
【０１６４】
スキーム３に説明のようなtrans−マクロラクトン１９ｂ。ヨウ化ビニル１１(６.９mg、０.０１４mmol、１.０当量)、スタナン８ｂ(８.２mg、０.０２８mmol、２.０当量)およびＰｄ(ＰＰｈ3)4(１.６mg、０.００１４mmol、０.１当量)の脱気トルエン(１４０μL、０.１Ｍ)溶液を、１００℃で４０分、ラクトン１８ｈの合成に関して記載の方法にしたがって加熱し、分取薄層クロマトグラフィー(２５０mmシリカゲルプレート、７５％エーテルのヘキサン溶液)の後、マクロラクトン１９ｂ(５.０mg、７２％)を得る。Ｒf＝０.４７(シリカゲル、５０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)；[α]22D−３２.９(ｃ  ０.３５、ＣＨＣｌ3)；ＩＲ(フィルム)
【表２８】
0004681732.tif 000086
Ｃ26Ｈ39ＮＯ5Ｓ2の計算値(Ｍ＋Ｃｓ+)６４２.１３２４、実測値６４２.１２９８。
【０１６５】
スキーム３に説明のようなcis−マクロラクトン１８ｄ。ヨウ化ビニル７(１４mg、０.０２８mmol、１.０当量)、スタナン８ｄ(１４mg、０.０５５mmol、２.０当量)およびＰｄＣｌ2(ＭｅＣＮ)2(２.０mg、０.００８mmol、０.３当量)の脱気ＤＭＦ(２７０μL、０.１Ｍ)溶液を、２５℃で２０時間撹拌する。次いで、得られる混合物を減圧下濃縮し、シリカを通して濾過し、ＥｔＯＡｃで溶出し、分取薄層クロマトグラフィー(２５０mmシリカゲルプレート、５０％エーテルのヘキサン溶液)で精製してマクロラクトン１８ｄ(１２.５mg、８９％)を得る。Ｒf＝０.３０(シリカゲル、６６％エーテルのヘキサン溶液)；[α]22D−７０.２(ｃ  ０.６３、ＣＨＣｌ3)；ＩＲ(薄フィルム)
【表２９】
0004681732.tif 000087
Ｃ27Ｈ41ＮＯ6Ｓの計算値(Ｍ＋Ｃｓ+)６４０.１７０９、実測値６４０.１７３２。
【０１６６】
スキーム３に説明のようなtrans−マクロラクトン１９ｄ。ヨウ化ビニル１１(１４mg、０.０２８mmol、１.０当量)、スタナン８ｄ(２３mg、０.０５５mmol、２.０当量)およびＰｄＣｌ２(ＭｅＣＮ)２(２.０mg、０.００８mmol、０.３当量)の脱気ＤＭＦ(２８０μL、０.１Ｍ)の溶液を２５℃で２０時間、マクロラクトン１８ｄの製造に関して記載の方法にしたがって撹拌し、分取薄層クロマトグラフィー(２５０mmシリカゲルプレート、５０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)の後、マクロラクトン１９ｄ(１２mg、８６％)を得る。Ｒｆ＝０.２７(シリカゲル、６６％エーテルのヘキサン溶液)；[α]２２Ｄ−２８.０(ｃ  ０.４８、ＣＨＣｌ３)；ＩＲ(薄フィルム)
【表３０】
0004681732.tif 000088
Ｃ２７Ｈ４１ＮＯ６Ｓの計算値(Ｍ＋Ｃｓ＋)６４０.１７０９、実測値６４０.１７３１。
【０１６７】
スキーム３に説明のようなtrans−マクロラクトン１９ｈ。ヨウ化ビニル１１(５.１mg、０.０１０mmol、１.０当量)、スタナン８ｈ(８.０mg、０.０２０mmol、２.０当量)およびＰｄ(ＰＰｈ3)4(１.１mg、０.００１mmol、０.１当量)の脱気トルエン(１００μL、０.１Ｍ)溶液を、１００℃で２０分、マクロラクトン１８ｈの製造に関して記載の方法にしたがって加熱し、分取薄層クロマトグラフィー(２５０mmシリカゲルプレート、５０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)の後、マクロラクトン１９ｈ(４.３mg、８８％)を得る。Ｒf＝０.２０(シリカゲル、５０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)；[α]22D−３１.５(ｃ  ０.６０、ＣＨＣｌ3)；ＩＲ(薄フィルム)
【表３１】
0004681732.tif 000089
Ｃ26Ｈ39ＮＯ6Ｓの計算値(Ｍ＋Ｃｓ+)６２６.１５５２、実測値６２６.１５３６。
【０１６８】
スキーム３に説明のようなcis−マクロラクトン１８ｊ。ヨウ化ビニル７(１２.５mg、０.０２５mmol、１.０当量)、スタナン８ｊ(２０mg、０.０４９mmol、２.０当量)およびＰｄＣｌ2(ＭｅＣＮ)2(１.５mg、０.００６mmol、０.２当量)の脱気ＤＭＦ(２５０μL、０.１Ｍ)溶液を、２５℃で２０時間、マクロラクトン１８ｄの製造に関して記載の方法により撹拌し、分取薄層クロマトグラフィー(２５０mmシリカゲルプレート、６７％エーテルのヘキサン溶液)の後、マクロラクトン１８ｊ(９mg、７４％)を得る。Ｒf＝０.３２(シリカゲル、５０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)；[α]22D−６５.３(ｃ  ０.４５、ＣＨＣｌ3)；ＩＲ(薄フィルム)
【表３２】
0004681732.tif 000090
Ｃ26Ｈ38ＦＮＯ5Ｓの計算値(Ｍ＋Ｃｓ+)６２８.１５０９、実測値６２８.１５３０。
【０１６９】
スキーム３に説明のようなtrans−マクロラクトン１９ｊ。ヨウ化ビニル１１(１５mg、０.０３０mmol、１.０当量)、スタナン８ｊ(２７mg、０.０６６mmol、２.２当量)およびＰｄＣｌ2(ＭｅＣＮ)2(１.５mg、０.００６mmol、０.２当量)の脱気ＤＭＦ(３００μL、０.１Ｍ)溶液を、２５℃で２０時間、マクロラクトン１８ｄの製造に関して記載の方法にしたがって撹拌し、分取薄層クロマトグラフィー(２５０mmシリカゲルプレート、５０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)の後、マクロラクトン１９ｊ(１１mg、７５％)を得る。Ｒf＝０.１７(シリカゲル、３３％エーテルのヘキサン溶液)；[α]22D−３７.１(ｃ  ０.５５、ＣＨＣｌ3)；ＩＲ(薄フィルム)
【表３３】
0004681732.tif 000091
Ｃ26Ｈ38ＦＮＯ5Ｓの計算値(Ｍ＋Ｃｓ+)６２８.１５０９、実測値６２８.１４８７。
【０１７０】
スキーム７に説明のようなシリルエーテル２５。アルコール１３(１２.９６ｇ、５４.４mmol、１.０当量)のＤＭＦ(１８０mL、０.３Ｍ)溶液に、０℃で、イミダゾール(１０.２ｇ、１５０.０mmol、２.８当量)、続いてtert−ブチルジメチルクロロシラン(１３.５ｇ、８９.８mmol、１.７当量)を添加する。２５℃で７時間の加温後、溶媒を減圧下除去し、得られる油状物をエーテル(２００mL)と飽和水性ＮＨ4Ｃｌ(２００mL)に分配する。水性相をエーテル(２００mL)で抽出し、合わせた有機抽出物を食塩水(５５０mL)で洗浄し、乾燥し(ＭｇＳＯ4)、減圧下で濃縮する。フラッシュカラムクロマトグラフィー(シリカゲル、０から５％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)により、シリルエーテル２５を油状物として得る(１６.０３ｇ、８４％)。Ｒf＝０.４８(ヘキサン)；[α]22D−１７.５(ｃ  １.６５、ＣＨＣｌ3)；ＩＲ(薄フィルム)
【表３４】
0004681732.tif 000092
【０１７１】
スキーム７に説明のようなアルデヒド２６。オレフィン２５(１６.０ｇ、４５.３mmol、１.０当量)のＴＨＦ(２０６mL)、ｔ−ＢｕＯＨ(２０６mL)およびＨ2Ｏ(４１mL)の混合物中の溶液に、０℃で、４−メチルモルホリンＮ−オキサイド(ＮＭＯ)(５.８４ｇ、４９.８mmol、１.１当量)、続いてＯｓＯ4(５.２mL、２.５％ｗ／ｖのｔ−ＢｕＯＨ溶液、０.４５３mmol、０.０１当量)を添加する。混合物を激しく１３時間２５℃で撹拌し、次いで、飽和水性Ｎａ2ＳＯ3(１２５mL)で停止させる。得られる溶液を２時間撹拌し、次いで、ＥｔＯＡｃ(１５０mL)および水(１５０mL)に分配する。有機相を分離し、水性相をＥｔＯＡｃ(２×２００mL)で抽出する。合わせた有機抽出物を乾燥し(ＭｇＳＯ4)、濾過し、溶媒を減圧下除去する。フラッシュカラムクロマトグラフィー(シリカゲル、５０から９０％エーテルのヘキサン溶液)により、非処理出発物質(１.０ｇ、６％)および所望のジオールを約１：１のジアステレオ異性体(１５.５ｇ、８９％)で得る。Ｒf＝０.４４(シリカゲル、５０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)；ＩＲ(薄フィルム)
【表３５】
0004681732.tif 000093
Ｃ13Ｈ27ＩＯ3Ｓｉの計算値(Ｍ＋Ｎａ+)４０９.０６７２、実測値４０９.０６６２。
【０１７２】
ジオール(上記のように得る)(２３.３ｇ、６０.２mmol、１.０当量)をＭｅＯＨ(４００mL)および水(２００mL)の混合物に溶解し、溶液を０℃に冷却する。ＮａＩＯ4(７７.２ｇ、３６１.１mmol、６.０当量)を次いで少しずつ５分にわたり添加し、得られるスラリーを３０分２５℃で激しく撹拌する。反応の完了後、混合物をＣＨ2Ｃｌ2(５００mL)および水(５００mL)に分配し、有機相を分離する。水性相をＣＨ2Ｃｌ2(５００mL)で抽出し、合わせた有機抽出物を食塩水(１Ｌ)で洗浄し、乾燥し(ＭｇＳＯ4)、減圧下で濃縮する。フラッシュカラムクロマトグラフィー(シリカゲル、１７から５０％エーテルのヘキサン溶液)により、油状物としてのアルデヒド２６(１９.６ｇ、９２％)を得る。Ｒf＝０.３５(シリカゲル、２０％エーテルのヘキサン溶液)；[α]22D−３４.１(ｃ  ２.８、ＣＨＣｌ3)；ＩＲ(薄フィルム)
【表３６】
0004681732.tif 000094
Ｃ12Ｈ23ＩＯ2Ｓｉの計算値(Ｍ＋Ｎａ+)３７７.０４１０、実測値３７７.０４０２。
【０１７３】
スキーム７に説明のようなメチルエステル２８。アルデヒド２６(１９.６ｇ、５５.２mmol、１.０当量)および安定化イリド２７(５０.２ｇ、１３４.０mmol、２.４当量)[４−ブロモ−１−ブテンから：(ｉ)ホスホニウム塩形成；(ii)ＫＨＭＤＳによるアニオン形成；および(iii)ＭｅＯＣ(Ｏ)Ｃｌ)での停止により製造](Marshall, J. A., et al., J. Org. Chem. 51, 1735-1741 (1986)およびBestmann, H. J., Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 1965, 645-60参照)のベンゼン(５５０mL、０.１Ｍ)溶液を、１.５時間加熱還流する。２５℃に冷却後、混合物を濾過し、その溶媒を減圧下除去する。フラッシュカラムクロマトグラフィー(シリカゲル、９から１７％エーテルのヘキサン溶液)により、メチルエステル２８(２４.５ｇ、９８％)を得る。Ｒｆ＝０.３７(シリカゲル、２０％エーテルのヘキサン溶液)；[α]２２Ｄ−７.２５(ｃ  １.６、ＣＨＣｌ３)；ＩＲ(薄フィルム)
【表３７】
0004681732.tif 000095
Ｃ１８Ｈ３１ＩＯ３Ｓｉの計算値(Ｍ＋Ｃｓ＋)５８３.０１４２、実測値５８３.０１５９。
【０１７４】
スキーム７に説明のようなアリルアルコール２９。メチルエステル２８(２４.５ｇ、５４.３mmol、１.０当量)をＴＨＦ(２８０mL)に溶解し、溶液を−７８℃に冷却する。ＤＩＢＡＬ(１６３.０mL、ＣＨ2Ｃｌ2中１Ｍ、１６３.０mmol、３.０当量)を、−７８℃で５０分にわたり滴下し、反応混合物を更に８０分撹拌する。反応混合物を飽和水性ナトリウム−カリウム酒石酸(１５０mL)で停止し、得られる混合物を２５℃に１６時間にわたり温める。有機相を分離し、水性相をエーテル(３×２５０mL)で抽出する。合わせた有機抽出物を食塩水(６５０mL)で洗浄し、乾燥し(ＭｇＳＯ4)、減圧下で濃縮する。フラッシュカラムクロマトグラフィー(シリカゲル、１７から５０％エーテルのヘキサン溶液)により、アルコール２９(２２.９ｇ、１００％)を得る。Ｒf＝０.１１(シリカゲル、２０％エーテルのヘキサン溶液)；[α]22D−７.２５(ｃ  １.６、ＣＨＣｌ3)；ＩＲ(薄フィルム)
【表３８】
0004681732.tif 000096
Ｃ17Ｈ31ＩＯ2Ｓｉの計算値(Ｍ＋Ｃｓ+)５５５.０１９２、実測値５５５.０１７７。
【０１７５】
スキーム７に説明のようなトリフェニルメチルエーテル３０。アルコール２９(２３.５ｇ、５５.７mmol、１.０当量)をＤＭＦ(３００mL、０.１５Ｍ)に溶解し、４−ＤＭＡＰ(１１.３ｇ、９２.５mmol、１.７当量)および塩化トリチル(２２.１ｇ、７９.３mmol、１.４当量)を添加する。反応混合物を８０℃で２１時間撹拌し、室温に冷却し、溶媒を減圧下除去する。得られる残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製し、目的のエーテル３０を油状物として得る(３５.３ｇ、９５％)。Ｒｆ＝０.８８(シリカゲル、２０％エーテルのヘキサン溶液)；[α]２２Ｄ−０.７４(ｃ  ０.３、ＣＨＣｌ３)；ＩＲ(薄フィルム)
【表３９】
0004681732.tif 000097
Ｃ３６Ｈ４５ＩＯ２Ｓｉの計算値(Ｍ＋Ｃｅ＋)７９７.１２８８、実測値７９７.１３０９。
【０１７６】
スキーム７に記載のようなアルコール３１。オレフィン３０(３５.３ｇ、５３.１mmol、１.０当量)をＴＨＦ(５３mL、１.０Ｍ)に溶解し、溶液を０℃に冷却する。９−ＢＢＮ(１４９mL、ＴＨＦ中０.５Ｍ、７４.５mmol、１.４当量)を１.５時間にわたり滴下し、得られる混合物を９時間、０℃で撹拌する。水性ＮａＯＨ(１０６mLの３Ｎ溶液、３１９.０mmol、６.０当量)、続いて水性Ｈ２Ｏ２(３２mL、水中３０％ｗ／ｗ、３１９.０mmol、６.０当量)を添加する。撹拌を１時間、０℃で続け、その後反応混合物をエーテル(５００mL)および水(５００mL)で希釈する。有機相を分離し、水性相をエーテル(２×５００mL)で抽出する。合わせた有機抽出物を食塩水(１Ｌ)で洗浄し、乾燥し(ＭｇＳＯ４)、減圧下で濃縮する。フラッシュカラムクロマトグラフィー(シリカゲル、９から５０％エーテルのヘキサン溶液)により、１級アルコール３１(３４.６ｇ、９５％)を得る。Ｒｆ＝０.５４(シリカゲル、６０％エーテルのヘキサン溶液)；[α]２２Ｄ−３.５(ｃ  ０.２、ＣＨＣｌ３)；ＩＲ(薄フィルム)
【表４０】
0004681732.tif 000098
Ｃ３６Ｈ４７ＩＯ３Ｓｉの計算値(Ｍ＋Ｃｓ＋)８１５.１３９４、実測値８１５.１４３０。
【０１７７】
スキーム７に説明のようなヨウ化物３２。アルコール３１(３４.６ｇ、５０.７３mmol、１.０当量)のエーテル(３８０mL)およびＭｅＣＮ(１２７mL)溶液を、０℃に冷却する。イミダゾール(１７.３ｇ、２５３.７mmol、５.０当量)およびＰＰｈ3(３３.３ｇ、１２６.８mmol、２.５当量)を次いで添加し、混合物を全ての固体が溶解するまで撹拌する。ヨウ素(３３.５ｇ、１３１.９mmol、２.６当量)を添加し、混合物を４５分、０℃で撹拌する。反応を飽和水性Ｎａ2Ｓ2Ｏ3(１５０mL)の添加により停止し、相を分離する。次いで、水性相をエーテル(２×２５０mL)で抽出し、合わせた有機抽出物を食塩水(７５０mL)で洗浄し、乾燥し(ＭｇＳＯ4)、減圧下濃縮する。フラッシュカラムクロマトグラフィー(シリカゲル、５から９％エーテルのヘキサン溶液)により、ヨウ化物３２(３９.２ｇ、９７％)を得る。Ｒf＝０.８８(シリカゲル、６０％エーテルのヘキサン溶液)；[α]22D−２.９(ｃ  ２.６、ＣＨＣｌ3)；ＩＲ(薄フィルム)
【表４１】
0004681732.tif 000099
Ｃ36Ｈ46Ｉ2Ｏ2Ｓｉの計算値(Ｍ＋Ｃｓ+)９２５.０４１１、実測値９２５.０４５０。
【０１７８】
スキーム７に説明のようなヒドラゾン３３。ジイソプロピルアミン(５.０mL、３５.２８mmol、１.４当量)をＮ−ＢｕＬｉ(２２.０mL、ヘキサン中１.６Ｍ、３５.２８mmol、１.４当量)の３２mLのＴＨＦ溶液に０℃で添加し、１時間撹拌する。プロピオンアルデヒドのＳＡＭＰヒドラゾン(５.６ｇ、３２.７６mmol、１.３当量)のＴＨＦ(１６mL)溶液を、この新たに調製したＬＤＡの溶液に０℃で添加する。その温度で１６時間撹拌後、得られる黄色溶液を−１００℃に冷却し、ヨウ化物３２(２０.０ｇ、２５.２３mmol、１.０当量)のＴＨＦ(３２mL)溶液を２時間にわたり滴下する。混合物を−２０℃に２０時間にわたり温め、次いで、飽和水性ＮＨ4Ｃｌ(５０mL)に注ぎ、エーテル(３×１００mL)で抽出する。合わせた有機相を乾燥(ＭｇＳＯ4)させ、濾過し、蒸発させる。シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー(５から５０％エーテルのヘキサン溶液)による精製により、ヒドラゾン３３(１５.０ｇ、７１％)を黄色油状物として得る。Ｒf＝０.６３(シリカゲル、４０％エーテルのヘキサン溶液)；[α]22D−２２.７(ｃ０.２、ＣＨＣｌ3)；ＩＲ(薄フィルム)
【表４２】
0004681732.tif 000100
Ｃ45Ｈ63ＩＮ2Ｏ3Ｓｉの計算値(Ｍ＋Ｃｓ+)９６７.２７０７、実測値９６７.２７４０。
【０１７９】
スキーム７に説明のようなニトリル３４。モノペルオキシフタル酸マグネシウム塩(ＭＭＰＰ・６Ｈ2Ｏ、８０％、５２.４ｇ、８４.８mmol、２.５当量)を１０分にわたり、速く撹拌しているヒドラゾン３３(２８.３ｇ、３３.９mmol、１.０当量)のＭｅＯＨ(２８３mL)、ＴＨＦ(１００mL)およびｐＨ７リン酸緩衝液(２８３mL)の混合物の溶液に０℃で滴下する。混合物を０℃で１.５時間撹拌し、次いで、更にＴＨＦ(１２０mL)を２回、３０分にわたり添加し、出発物質の溶解を助ける。更に１.５時間撹拌後、反応混合物をＮａＨＣＯ3の飽和水性溶液(７５０mL)に注ぎ、生産物をエーテル(７５０mL)、次いでＥｔＯＡｃ(２×７５０mL)で抽出する。合わせた有機抽出物を食塩水(１Ｌ)で洗浄し、乾燥し(ＭｇＳＯ4)、減圧下で濃縮する。フラッシュカラムクロマトグラフィー(シリカゲル、９から２０％エーテルのヘキサン溶液)により、ニトリル３４を無色油状物として得る(２１.８ｇ、８９％)。Ｒf＝０.４４(シリカゲル、２０％エーテルのヘキサン溶液)；[α]22D＋２.９(ｃ  １.２、ＣＨＣｌ3)；ＩＲ(薄フィルム)
【表４３】
0004681732.tif 000101
Ｃ39Ｈ50ＩＮＯ2Ｓｉの計算値(Ｍ＋Ｃｓ+)８５２.１７１０、実測値８５２.１７３８。
【０１８０】
スキーム７に説明したようなアルデヒド３５。ニトリル３４(７.０１ｇ、９.７４mmol、１.０当量)をトルエン(１９５mL、０.０５Ｍ)に溶解し、−７８℃に冷却する。ＤＩＢＡＬ(２９.２mL、トルエン中１.０Ｍ、２９.２mmol、３.０当量)を−７８℃で、１０分にわたり滴下する。反応混合物を−７８℃で、ＴＬＣにより完了が確認されるまで撹拌する(１時間)。メタノール(１０mL)およびＨＣｌ(１０mL、水中１.０Ｎ)を連続して添加し、得られる混合物を１時間にわたり０℃にする。エーテル(２５０mL)および水(２５０mL)を添加し、相を分離する。水性相をエーテル(２×２５０mL)で抽出し、合わせた有機抽出物を食塩水(５００mL)で洗浄し、乾燥し(ＭｇＳＯ4)、減圧下濃縮する。フラッシュカラムクロマトグラフィー(シリカゲル、１７から３３％エーテルのヘキサン溶液)により、アルデヒド３５を油状物として得る(６.１８ｇ、８８％)。Ｒf＝０.５１(シリカゲル、２０％エーテルのヘキサン溶液)；[α]22D＋２.０(ｃ  ０.３、ＣＨＣｌ3)；ＩＲ(薄フィルム)
【表４４】
0004681732.tif 000102
Ｃ39Ｈ51ＩＯ3Ｓｉの計算値(Ｍ＋Ｃｓ+)８５５.１７０７、実測値８５５.１６７２。
【０１８１】
スキーム８に説明のようなトリス−(シリルエーテル)３７および３８。ケトン３６(Nicolaou, K. C., et al., J. Am. Chem. Soc. 119, 7974-91 (1997)参照)(１.２０ｇ、２.９９mmol、１.４当量)のＴＨＦ(４.３mL)溶液に、５分にわたり新たに調製したＬＤＡ[ジイソプロピルアミン(４２４μL、３.０３mmol、１.４５当量)をｎ−ＢｕＬｉ(２.００mL、ヘキサン中１.５２Ｍ、３.０４mmol、１.４５当量)に０℃で添加し、５分後、ＴＨＦ(４.３mL)を添加して調製]に−７８℃で滴下する。１.５時間、−７８℃で撹拌後、溶液を−４０℃に３０分にわたり温める。反応混合物を次いで、−７８℃に冷却し、アルデヒド３５(１.５１ｇ、２.０９mmol、１.０当量)のＴＨＦ(１２.５mL)溶液を１５分にわたり滴下する。得られる混合物を１時間、−７８℃で撹拌し、次いで、飽和水性ＡｃＯＨ(ＴＨＦ中１Ｍ溶液３.１mL、３.１０mmol、１.５当量)の滴下により停止させる。混合物を次いで、２５℃に温め、エーテル(２５mL)および飽和水性ＮＨ４Ｃ１(２５mL)の間で分配する。水性相をエーテル(３×２５mL)で抽出し、合わせた有機抽出物を乾燥し(ＭｇＳＯ４)、減圧下で濃縮する。フラッシュカラムクロマトグラフィー(シリカゲル、４から２０％エーテルのヘキサン溶液)により、未反応ケトン(５０２mg、４２％)、望ましくないアルドール生産物３８(７０５mg、２７％)および望ましいアルドール生産物３７および未反応アルデヒド３５の混合物を得る[１.１３６ｇ、(１Ｈ  ＮＭＲにより約９：１の比率の３７：３５)](即ち、３７の３９％収率)。この混合物を、直接、次段階に使用する。３７：(主要)(３５を含む混合物から無色油状物として、フラッシュカラムクロマトグラフィーシリカゲル(１０から１７％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)により得る。Ｒｆ＝０.２２(シリカゲル、１０％エーテルのヘキサン溶液)；[α]２２Ｄ−２０.０(ｃ  ０.３、ＣＨＣｌ３)；ＩＲ(薄フィルム)
【表４５】
0004681732.tif 000103
Ｃ６０Ｈ９７ＩＯ６Ｓｉの計算値３(Ｍ＋Ｃｓ＋)１２５７.４６９２、実測値１２５７.４６３９.３８：(少量)無色油状物；Ｒｆ＝０.３８(シリカゲル、２０％エーテルのヘキサン溶液)；[α]２２Ｄ−１１.９(ｃ２.９、ＣＨＣｌ３)；ＩＲ(薄フィルム)
【表４６】
0004681732.tif 000104
Ｃ６０Ｈ９７ＩＯ６Ｓｉ３の計算値(Ｍ＋Ｃｓ＋)１２５７.４６９２、実測値１２５７.４７４９。
【０１８２】
スキーム８に説明のようなテトラ−(シリルエーテル)３９。アルコール３７(アルデヒド３５と９：１の混合物１.１３６ｇ,０.９３３mmol、１.０当量)をＣＨ2Ｃｌ2(５.０mL)に溶解し、−２０℃に冷却し、２,６−ルチジン(４７０μL、４.０４mmol、４.３当量)およびtert−ブチルジメチルシリルトリフルオロ−メタンスルホネート(６９５μL、３.０３mmol、３.２当量)で処理する。混合物を次いで、２.５時間、ゆっくり０℃に温めながら撹拌する。次いで、反応を飽和水性ＮａＨＣＯ3(２５mL)で停止させ、水性相をエーテル(３×２５mL)で抽出する。合わせた有機抽出物を食塩水(２５０mL)で洗浄し、乾燥し(ＭｇＳＯ4)、減圧下で濃縮する。フラッシュカラムクロマトグラフィー(シリカゲル、４から９％エーテルのヘキサン溶液)により、テトラ−(シリルエーテル)３９を無色油状物として得る(１.０４ｇ、９０％)。Ｒf＝０.９１(シリカゲル、２０％エーテルのヘキサン溶液)；[α]22D−１６.８(ｃ  ０.７、ＣＨＣｌ3)；ＩＲ(薄フィルム)
【表４７】
0004681732.tif 000105
Ｃ66Ｈ111ＩＯ6Ｓｉ4の計算値(Ｍ＋Ｃｅ+)１３７１.５５５７、実測値１３７１.５５２３。
【０１８３】
スキーム８に説明のようなアルコール４０。テトラ−シリルエーテル３９(１８０mg、０.１４５mmol)のＴＨＦ(１.５mL)溶液に、０℃でＨＦｐｙｒ.ピリジン／ＴＨＦ混合物溶液(４２０μL  ＨＦピリジン、１.１４mLピリジンおよび２.００mL  ＴＨＦを含む貯蔵溶液から調製)(１.５mL)を添加し、得られる溶液を２時間０℃で撹拌する。更なるＨＦｐｙｒ.ピリジン／ＴＨＦ混合物溶液(０.５mL)を次いで添加し、撹拌を更に１時間、０℃で続ける。反応を飽和水性ＮａＨＣＯ3の注意深い添加により停止させ、生産物をＥｔＯＡｃ(３×２５mL)で抽出する。合わせた有機抽出物を次いで乾燥し(ＭｇＳＯ4)、減圧下で濃縮する。フラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、３０％エーテルのヘキサン溶液)により、アルコール４０を薄黄色油状物として得る(１３７mg、８４％)。Ｒf＝０.３６(シリカゲル、４０％エーテルのヘキサン溶液)；[α]22D−２６.０(ｃ  ０.３、ＣＨＣｌ3)；ＩＲ(薄フィルム)
【表４８】
0004681732.tif 000106
Ｃ60Ｈ97ＩＯ6Ｓｉ3の計算値(Ｍ＋Ｃｓ+)１２５７.４６９２、実測値１２５７.４７８０。
【０１８４】
スキーム８に説明のようなアルデヒド４１。塩化オキザリル(１５０μL、１.７２mmol、２.０当量)のＣＨ2Ｃｌ2(１０mL)溶液に、−７８℃でＤＭＳＯ(２４７μL、３.４８mmol、４.０当量)を滴下する。１０分、−７８℃で撹拌後、アルコール４０(９６０mg、０.８５３mmol、１.０当量)のＣＨ2Ｃｌ2(１０mL)溶液を滴下する。得られる溶液を−７８℃で１時間撹拌し、次いで、Ｅｔ3Ｎ(７１４μL、５.１２mmol、６.０当量)を添加し、反応混合物を２５℃に３０分にわたり温める。水(３０mL)を添加し、生産物をエーテル(３×４０mL)で抽出する。合わせた有機抽出物を乾燥し(ＭｇＳＯ4)、次いで、減圧下で濃縮する。フラッシュカラムクロマトグラフィー(シリカゲル、１７から５０％エーテルのヘキサン溶液)により、アルデヒド４１を無色油状物として得る(９４３mg、９８％)。Ｒf＝０.７４(シリカゲル、４０％エーテルのヘキサン溶液)；[α]22D−１０.８(ｃ  ０.１、ＣＨＣｌ3)；ＩＲ(薄フィルム)
【表４９】
0004681732.tif 000107
Ｃ60Ｈ95ＩＯ6Ｓｉ3の計算値(Ｍ＋Ｃｓ+)１２５５.４５３６、実測値１２５５.４５６１。
【０１８５】
スキーム８に説明のようなカルボン酸４２。アルデヒド４１(９４３mg、０.８３９mmol、１.０当量)のｔ−ＢｕＯＨ(３８.５mL)およびＨ2Ｏ(８.４mL)溶液に、２−メチル−２−ブテン(３１.５mL、ＴＨＦ中２Ｍ、６３.０mmol、７５当量)およびＮａＨ2ＰＯ4(２５０mg、２.０８mmol、２.５当量)、続いてＮａＣｌＯ2(３８０mg、４.２０mmol、５.０当量)を添加し、得られる混合物を２５℃で４０分撹拌する。揮発物を次いで減圧下除去し、残渣をＥｔＯＡｃ(４０mL)および食塩水(４０mL)の間で分配し、相を分離する。次いで、水性相をＥｔＯＡｃ(３×４０mL)で抽出し、合わせた有機抽出物を乾燥し(ＭｇＳＯ4)、次いで、減圧下で濃縮する。フラッシュカラムクロマトグラフィー(シリカゲル、６０％エーテルのヘキサン溶液)によりカルボン酸４２を油状物として得る(９５６mg、１００％)。Ｒf＝０.４７(シリカゲル、４０％エーテルのヘキサン溶液)；[α]22D−１９.６(ｃ  ０.２、ＣＨＣｌ3)；ＩＲ(薄フィルム)
【表５０】
0004681732.tif 000108
Ｃ60Ｈ95ＩＯ7Ｓｉ3の計算値(Ｍ＋Ｃｓ+)１２７１.４４８５、実測値１２７１.４５５０。
【０１８６】
スキーム８に説明のようなヒドロキシ酸４３。カルボン酸４２(９５６mg、０.８３９mmol、１.０当量)のＴＨＦ(１７mL)溶液を、０℃でＴＢＡＦ(５.０mL、ＴＨＦ中１.０Ｍ、５.００mmol、６.０当量)で処理し、混合物を２５℃に１９時間にわたり温める。次いで、反応を飽和水性ＮＨ４Ｃｌ(４０mL)の添加により停止し、生産物をＥｔＯＡｃ(３×４０mL)で抽出する。合わせた有機抽出物を乾燥し(ＭｇＳＯ４)、減圧下で濃縮する。フラッシュカラムクロマトグラフィー(シリカゲル、ＣＨ２Ｃｌ２中５％ＭｅＯＨ)により、ヒドロキシ酸４３を黄色油状物として得る(８１７mg、９５％)。Ｒｆ＝０.２７(シリカゲル、ＣＨ２Ｃｌ２中５％ＭｅＯＨ)；[α]２２Ｄ−１１.４(ｃ  ０.２、ＣＨＣｌ３)；ＩＲ(薄フィルム)
【表５１】
0004681732.tif 000109
Ｃ５４Ｈ８１ＩＯ７Ｓｉ２の計算値(Ｍ＋Ｃｓ＋)１１５７.３６２０、実測値１１５７.３６６９。
【０１８７】
スキーム８に説明のようなマクロラクトン４４。ヒドロキシ酸４３(１.０６ｇ、１.０４mmol、１.０当量)のＴＨＦ(１５mL,０.０７Ｍ)溶液に、Ｅｔ３Ｎ(８７０μL、０.２４mmol、６.０当量)および２,４,６−トりクロロベンゾイルクロライド(３９０μL、２.５０mmol、２.４当量)を添加する。反応混合物を０℃で１．５時間撹拌し、次いで、ゆっくり２時間にわたりシリンジポンプを介して４−ＤＭＡＰ(２８０mg、２.２９mmol、２.２当量)のトルエン(２０８mL、４３を基本にして０.００５Ｍ)溶液を７５℃で添加する。混合物をその温度で更に０.５時間撹拌し、次いで減圧下濃縮する。得られる残渣をシリカゲルのプラグを通して濾過し、５０％エーテルのヘキサン溶液で溶出する。フラッシュカラムクロマトグラフィー(シリカゲル、１７％エーテルのヘキサン溶液)により、マクロラクトン４４を無色泡状物として得る(８７７mg、８４％)。Ｒｆ＝０.１９(１０％エーテルのヘキサン溶液)；[α]２２Ｄ−７.４(ｃ  ０.２、ＣＨＣｌ３)；ＩＲ(薄フィルム)
【表５２】
0004681732.tif 000110
Ｃ５４Ｈ７９ＩＯ６Ｓｉ２の計算値(Ｍ＋Ｃｓ＋)１１３９.３５１４、実測値１１３９.３４５９。
【０１８８】
スキーム８に説明のようなトリオール２４。マクロラクトン４４(６０８mg、０.６０４mmol、１.０当量)のＴＨＦ(４５mL)に、０℃でＨＦｐｙｒ.(１５mL)を添加する。得られる混合物を２５℃に１５時間にわたり温め、次いで、０℃に冷却して飽和水性ＮａＨＣＯ３(５０mL)の注意深い添加により停止させる。生産物を次いで、ＥｔＯＡｃ(３×５０mL)で抽出し、合わせた有機抽出物を乾燥し(ＭｇＳＯ４)、次いで、減圧下で濃縮する。フラッシュカラムクロマトグラフィー(シリカゲル、６０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)により、トリオール２４を無色泡状物として得る(２８０mg、８６％)。Ｒｆ＝０.３２(シリカゲル、６０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)；[α]２２Ｄ−３２.１(ｃ  ０.２、ＣＨＣｌ３)；ＩＲ(薄フィルム)
【表５３】
0004681732.tif 000111
Ｃ２３Ｈ３７ＩＯ６の計算値(Ｍ＋Ｃｓ＋)６６９.０６８９、実測値６６９.０７１１。
【０１８９】
スキーム９に説明のようなマクロラクトン４５。ヨウ化ビニル２４(５５mg、０.１０３mmol、１.０当量)、スタナン８ｊ(８４mg、０.２０７mmol、２.０当量)およびＰｄＣｌ2(ＭｅＣＮ)2(４mg、０.０１５mmol、０.１５当量)の脱気ＤＭＦ(１mL、０.１Ｍ)溶液を、２５℃で３３時間、マクロラクトン１８ｄの製造に関して記載の方法にしたがって撹拌し、分取薄層クロマトグラフィー(２５０mmシリカゲルプレート、８０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)後、出発ヨウ化ビニル２４(２１mg、３９％)およびマクロラクトン４５(３０mg、５６％)を得る。Ｒf＝０.４８(シリカゲル、８０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)；[α]22D−４８.３(ｃ  ０.２、ＣＨＣｌ3)；ＩＲ(薄フィルム)
【表５４】
0004681732.tif 000112
Ｃ22Ｈ40ＦＮＯ6Ｓ(Ｍ＋Ｃｓ+)の計算値(Ｍ＋Ｃｓ+)６５８.１６１５、実測値６５８.１６４４。
【０１９０】
スキーム９に説明のようなマクロラクトン４６。ヨウ化ビニル２４(３２mg、０.０６０mmol、１.０当量)、スタナン８ｐ(２８mg、０.１０１mmol、１.７当量)およびＰｄＣｌ2(ＭｅＣＮ)2(１.７mg、０.０７mmol、０.１当量)の脱気ＤＭＦ(６５０μL、０.１Ｍ)の溶液を、２５℃で２０時間、マクロラクトン１８ｄの製造に関して記載の方法にしたがって撹拌し、分取薄層クロマトグラフィー(２５０mmシリカゲルプレート、８０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)後、出発ヨウ化ビニル２４(６mg、１９％)およびマクロラクトン４６(１７mg、５４％)を得る。Ｒf＝０.３７(シリカゲル、８０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)；[α]22D−４８.７(ｃ  ０.１５、ＣＨＣｌ3)；ＩＲ(薄フィルム)
【表５５】
0004681732.tif 000113
Ｃ27Ｈ41ＮＯ7Ｓの計算値(Ｍ＋Ｃｓ+)６５６.１６５８、実測値６５６.１６７５。
【０１９１】
スキーム９に説明のようなマクロラクトン４７。ヨウ化ビニル２４(４１mg、０.０７６mmol、１.０当量)、スタナン８ｒ(６１mg、０.１５１mmol、２.０当量)およびＰｄＣｌ2(ＭｅＣＮ)2(４mg、０.０１５mmol、０.２当量)の脱気ＤＭＦ(７６０μL、０.１Ｍ)溶液を、２５℃で２１時間、マクロラクトン１８ｄの製造に関して記載の方法にしたがって撹拌し、分取薄層クロマトグラフィー(２５０mmシリカゲルプレート、８０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)後、出発ヨウ化ビニル２４(６mg、１５％)およびマクロラクトン４７(２０.５mg、５１％)を得る。Ｒf＝０.４１(シリカゲル、８０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)；[α]22D−８６.０(ｃ  ０.２５、ＣＨＣｌ3)；ＩＲ(薄フィルム)
【表５６】
0004681732.tif 000114
Ｃ28Ｈ43ＮＯ6Ｓの計算値(Ｍ＋Ｎａ+)５４４.２７０９、実測値５４４.２７２４。
【０１９２】
スキーム９に説明のようなマクロラクトン４８。ヨウ化ビニル２４(２６mg、０.０４８mmol、１.０当量)、スタナン８ｈ(２９mg、０.０７２mmol、１.５当量)およびＰｄＣｌ2(ＭｅＣＮ)2(１.５mg、０.００６mmol、０.１当量)の脱気ＤＭＦ(４８０μL、０.１Ｍ)溶液を２５℃で１５時間、マクロラクトン１８ｄの製造に関して記載の方法にしたがって撹拌し、分取薄層クロマトグラフィー(２５０mmシリカゲルプレート、ＥｔＯＡｃ)後、出発ヨウ化ビニル２４(１０.５mg、４０％)およびマクロラクトン４８(１０.５mg、４１％)を得る。Ｒf＝０.２７(シリカゲル、ＥｔＯＡｃ)；[α]22D−４３.０(ｃ  ０.１４、ＣＨＣｌ3)；ＩＲ(薄フィルム)
【表５７】
0004681732.tif 000115
Ｃ27Ｈ41ＮＯ7Ｓの計算値(Ｍ＋Ｃｓ+)６５６.１６５８、実測値６５６.１６７７。
【０１９３】
スキーム９に説明のようなマクロラクトン４９。ヨウ化ビニル２４(３７mg、０.０６９mmol、１.０当量)、スタナン８ｑ(４７mg、０.１１７mmol、１.７当量)およびＰｄ(ＰＰｈ3)4(１０mg、０.００９mmol、０.１３当量)の脱気トルエン(７８０μL、０.１Ｍ)溶液を、１００℃で２時間、マクロラクトン１８ｈの合成に関して記載の方法に従って加熱し、分取薄層クロマトグラフィー(２５０mmシリカゲルプレート、８０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)後、マクロラクトン４９(５.５mg、１５％)を得る。Ｒf＝０.３５(シリカゲル、８０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)；[α]22D−４８.１(ｃ  ０.２７、ＣＨＣｌ3)；ＩＲ(薄フィルム)
【表５８】
0004681732.tif 000116
Ｃ28Ｈ41ＮＯ6Ｓの計算値(Ｍ＋Ｃｓ+)６５２.１７０９、実測値６５２.１６９３。
【０１９４】
スキーム９に説明のようなフッ化物５０。トリオール４５(３.６mg、０.００７mmol、１.０当量)のＣＨ2Ｃｌ2(０.１mL、０.０７Ｍ)溶液を、−７８℃でＤＡＳＴ(ＣＨ2Ｃｌ2中１１μLの０.７Ｍ溶液、０.００８mmol、１.１当量)で処理し、混合物を−７８℃で１０分撹拌する。次いで、反応を飽和水性ＮａＨＣＯ3(５００μL)の添加により停止させ、混合物を２５℃に温める。生産物を次いで飽和水性ＮａＨＣＯ3(５mL)およびＣＨ2Ｃｌ2(５mL)の間で分配し、相を分離する。水性相をＣＨ2Ｃｌ2(２×５mL)で抽出し、合わせた有機抽出物を乾燥し(ＭｇＳＯ4)、次いで、減圧下で濃縮する。分取薄層クロマトグラフィー(２５０mmシリカゲルプレート、４０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)によりフッ化物５０(２.１mg、５８％)を得る。Ｒf＝０.３９(シリカゲル、５０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)；[α]22D−３４.４(ｃ  ０.０９、ＣＨＣｌ3)；ＩＲ(薄フィルム)
【表５９】
0004681732.tif 000117
Ｃ27Ｈ39Ｆ2ＮＯ5Ｓの計算値(Ｍ＋Ｈ+)５２８.２５９５、実測値５２８.２６１０。
【０１９５】
スキーム９に説明のようなフッ化物５１。トリオール４６(８.２mg、０.０１６mmol、１.０当量)のＣＨ2Ｃｌ2(２００μL、０.０８Ｍ)溶液を、−７８℃でＤＡＳＴ(０.０２５mL、０.０１９mmol、１.２当量)で処理し、得られる混合物を−７８℃で１０分、フッ化物５０の製造に関して記載の方法にしたがって撹拌し、分取薄層クロマトグラフィー(２５０mmシリカゲルプレート、３０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)後、フッ化物５１(３.５mg、４３％)を得る。Ｒf＝０.５７(シリカゲル、６０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)；[α]22D−４１.７(ｃ  ０.１１、ＣＨＣｌ3)；ＩＲ(薄フィルム)
【表６０】
0004681732.tif 000118
Ｃ27Ｈ40ＦＮＯ6Ｓの計算値(Ｍ＋Ｈ+)５２６.２６３９、実測値５２６.２６２５。
【０１９６】
スキーム９に説明のようなフッ化物５２。トリオール４７(１２.５mg、０.０２４mmol、１.０当量)のＣＨ2Ｃｌ2(５００μL、０.０５Ｍ)溶液を、−７８℃でＤＡＳＴ(２５０μL、ＣＨ2Ｃｌ2中０.１Ｍ、０.０２５mmol、１.０５当量)で処理し、得られる混合物を−７８℃で１０分、フッ化物５０の合成に関して記載の方法にしたがって撹拌し、分取薄層クロマトグラフィー(２５０mmシリカゲルプレート、６０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)後、フッ化物５２(５.１mg、４１％)を得る。Ｒf＝０.１９(シリカゲル、５０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)；[α]22D−６８.６(ｃ  ０.２２、ＣＨＣｌ3)；ＩＲ(薄フィルム)
【表６１】
0004681732.tif 000119
Ｃ28Ｈ42ＦＮＯ5Ｓの計算値(Ｍ＋Ｃｓ+)６５６.１８２２、実測値６５６.１８４３。
【０１９７】
スキーム９に説明のようなフッ化物５３。トリオール４９(６.０mg、０.０１５１mmol、１.０当量)のＣＨ2Ｃｌ2(１.５mL、０.０１Ｍ)溶液を、−７８℃でＤＡＳＴ(０.２０mL、ＣＨ2Ｃｌ2中０.０８Ｍ、０.０１６mmol、１.１当量)で処理し、得られる混合物を−７８℃で１０分、フッ化物５０の合成に関して記載の方法にしたがって撹拌し、分取薄層クロマトグラフィー(２５０mmシリカゲルプレート、５０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)後、フッ化物５３(３.０mg、５０％)を得る。Ｒf＝０.５０(シリカゲル、５０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)；[α]22D−１２.４(ｃ  ０.２、ＣＨＣｌ3)；ＩＲ(薄フィルム)
【表６２】
0004681732.tif 000120
Ｃ28Ｈ40ＦＮＯ5Ｓの計算値(Ｍ＋Ｈ+)５２２.２６８９、実測値５２２.２７０４。
【０１９８】
スキーム９に説明のようなエポキシド５４。アリルアルコール４５(２５.４mg、０.０４９mmol、１.０当量)および４ÅモレキュラーシーブのＣＨ２Ｃｌ２(０.５０mL)溶液に、−４０℃で(＋)−ジエチル−Ｄ−酒石酸(４１μL、ＣＨ２Ｃｌ２中０.５９Ｍ、０.０２４mmol、０.５当量)、続いてチタニウムイソプロポキシド(５５μL、ＣＨ２Ｃｌ２中０.３５Ｍ、０.０１９mmol、０.４当量)を滴下する。１時間、その温度の後、ｔ−ブチルヒドロキシペルオキサイド(デカン中２２μLの５Ｍ溶液、０.１１０mmol、２.２当量)を添加し、反応混合物を−３０℃で２時間撹拌する。反応混合物をセライトを通して飽和水性Ｎａ２ＳＯ４(１０mL)に濾過し、ＥｔＯＡｃ(１０mL)で溶出する。得られる２相性混合物を次いで１時間撹拌し、相を分離する。水性相をＥｔＯＡｃ(３×１０mL)で抽出し、合わせた有機抽出物を乾燥し(ＭｇＳＯ４)、減圧下濃縮する。分取薄層クロマトグラフィー(２５０mmシリカゲルプレート、８０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)により、エポキシド５４(１３.５mg、５２％)を得る。Ｒｆ＝０.２３(シリカゲル、８０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)：[α]２２Ｄ−５５.４(ｃ  ０.０６、ＣＨＣｌ３)；ＩＲ(薄フィルム)
【表６３】
0004681732.tif 000121
Ｃ２７Ｈ４０ＦＮＯ７Ｓの計算値(Ｍ＋Ｈ＋)５４２.２５８８、実測値５４２.２５７５。
【０１９９】
スキーム９に説明のようなエポキシド５５。アリルアルコール４６(２２mg、０.０４２mmol、１.０当量)および４ÅモレキュラーシーブのＣＨ２Ｃｌ２(４２０μL)溶液に、−４０℃で(＋)−ジエチル−Ｄ−酒石酸(４μL、０.０２１mmol、０.５当量)、続いてチタニウムイソプロポキシド(５μL、０.０１６mmol、０.４当量)を滴下し、１時間その温度の後、ｔ−ブチルヒドロペルオキサイド(１８μLデカン中５Ｍ溶液、０.０９２mmol、２.２当量)を、エポキシド５４の合成に関して記載の方法に従って滴下し、分取薄層クロマトグラフィー(２５０mmシリカゲルプレート、８０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)の後、エポキシド５５(１６mg、７０％)を得る。Ｒｆ＝０.２５(シリカゲル、８０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)；[α]２２Ｄ−４４.８(ｃ  １.４、ＣＨＣｌ３)；ＩＲ(薄フィルム)
【表６４】
0004681732.tif 000122
Ｃ２７Ｈ４１ＮＯ８Ｓの計算値(Ｍ＋Ｃｓ＋)６７２.１６０７、実測値６７２.１５８４。
【０２００】
スキーム９に説明のようなフッ化物５８。トリオール５４(５.０mg、０.００９mmol、１.０当量)のＣＨ２Ｃｌ２(１mL、０.０１Ｍ)溶液を、−７８℃でＤＡＳＴ(ＣＨ２Ｃｌ２中０.２５mLの０.１Ｍ溶液、０.０２５mmol、１.０５当量)で、フッ化物５０の合成に関して記載の方法にしたがって処理し、分取薄層クロマトグラフィー(２５０mmシリカゲルプレート、６０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)後、フッ化物５８(２.０mg、４１％)を得る。Ｒｆ＝０.２２(シリカゲル、５０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)；ＩＲ(薄フィルム)
【表６５】
0004681732.tif 000123
ＭＳ(エレクトロスプレー)、Ｃ２７Ｈ３９Ｆ２ＮＯ６Ｓの計算値(Ｍ＋Ｈ＋)５４４、実測値５４４。
【０２０１】
スキーム９に説明のようなフッ化物５９。トリオール５５(１５mg、０.０２８mmol、１.０当量)のＣＨ2Ｃｌ2(２８０μL、０.１Ｍ)の溶液を、−７８℃でＤＡＳＴ(５μL、０.０３８mmol、１.４当量)で、フッ化物５０の合成に関して記載の方法にしたがって処理し、分取薄層クロマトグラフィー(２５０mmシリカゲルプレート、５０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)の後、フッ化物５９(４.０mg、２６％)を得る。Ｒf＝０.４２(シリカゲル、８０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)；[α]22D−２９.４(ｃ  ０.３３、ＣＨＣｌ3)；ＩＲ(薄フィルム)
【表６６】
0004681732.tif 000124
Ｃ27Ｈ40ＦＮＯ7Ｓの計算値(Ｍ＋Ｃｓ+)６７４.１５６４、実測値６７４.１５９４。
【０２０２】
スキーム１０に示すようなエポキシド５７。アリルアルコール２４(８１mg、０.１５１mmol、１.０当量)および４ÅモレキュラーシーブのＣＨ2Ｃｌ2(１.２５mL)溶液に、−４０℃で(＋)−ジエチル−Ｄ−酒石酸(１３μL、０.０７６mmol、０.５当量)、続いてチタニウムイソプロポキシド(１８μL、０.０６０mmol、０.４当量)を、１時間その温度の後、ｔ−ブチルヒドロペルオキサイド(デカン中６６μLの５Ｍ溶液、０.３３０mmol、２.２当量)を滴下し、エポキシド５４の合成に関して記載の方法にしたがって反応を続け、フラッシュカラムクロマトグラフィー(シリカゲル、８０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)後、エポキシド５７(７４mg、８９％)を得る。Ｒf＝０.３４(シリカゲル、８０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)；[α]22D−３２.５(ｃ  ０.３、ＣＨＣｌ3)；ＩＲ(薄フィルム)
【表６７】
0004681732.tif 000125
Ｃ23Ｈ37ＩＯ7の計算値(Ｍ＋Ｎａ+)５７５.１４８３、実測値５７５.１４６２。
【０２０３】
スキーム９に説明のようなエポキシド５６。ヨウ化ビニル５７(２０mg、０.０３６mmol、１.０当量)、スタナン８ｒ(２９mg、０.０７２mmol、１.５当量)およびＰｄＣｌ2(ＭｅＣＮ)2(２.０mg、０.００４mmol、０.１当量)の脱気ＤＭＦ(３６０μL、０.１Ｍ)溶液を、２５℃で２０時間、ラクトン１８ｄの合成に関して記載の方法にしたがって撹拌し、分取薄層クロマトグラフィー(２５０mmシリカゲルプレート、ＥｔＯＡｃ)後、出発ヨウ化ビニル５７(６mg、３０％)およびマクロラクトン５６(１０mg、５１％)を得る。Ｒf＝０.２３(シリカゲル、８０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)；[α]22D−６０.０(ｃ  ０.１４、ＣＨＣｌ3)；ＩＲ(薄フィルム)
【表６８】
0004681732.tif 000126
Ｃ28Ｈ43ＮＯ7Ｓの計算値(Ｍ＋Ｎａ+)５６０.２６５８、実測値５６０.２６４０。
【０２０４】
スキーム１０に説明のようなビス−シリルエーテル６１。トリオール５７(８３mg、０.１５０mmol、１.０当量)のＤＭＦ(１.５mL、０.１Ｍ)溶液に、Ｅｔ3Ｎ(３１５μL、２.２６mmol、１５当量)、続いてＴＭＳＣｌ(１５２μL、１.２０mmol、８当量)を添加し、混合物を２５℃で１２時間撹拌する。混合物を次いで、減圧下濃縮し、得られる油状物をエーテル(１０mL)および水(１０mL)の間で分配し、相を分離する。水性相をエーテル(３×１０mL)で抽出し、合わせた抽出物を乾燥し(ＭｇＳＯ4)、減圧下濃縮し、次いで、シリカゲルの短プラグを通して濾過する。得られる濾液を濃縮し、ＣＨ2Ｃｌ2(５ml)に溶解し、シリカゲル(１ｇ)を添加する。得られるスラリーを２５℃で１２時間撹拌し、濾過し、濃縮して最後にシリカゲルの短プラグを通し、ビス−シリルエーテル６１を泡状物として得る(１０３mg、９８％)。Ｒf＝０.４８(シリカゲル、６０％Ｅｔ2Ｏのヘキサン溶液)；[α]22D−１９.１(ｃ  ０.２３、ＣＨＣｌ3)；ＩＲ(薄フィルム)
【表６９】
0004681732.tif 000127
Ｃ29Ｈ53ＩＯ7Ｓｉ2の計算値(Ｍ＋Ｃｓ+)８２９.１４２９、実測値８２９.１４５９。
【０２０５】
スキーム１０に説明のようなアルデヒド６２。アルコール６１(２０mg、０.０２９mmol、１.０当量)および４ÅモレキュラーシーブのＣＨ２Ｃｌ２(０.２５mL)懸濁液に、ＮＭＯ(１０mg、０.０８５mmol、３.０当量)、続いてＴＰＡＰ(１mg、０.００３mmol、０.１当量)を添加する。得られるスラリーを２５℃で４０分撹拌し、次いで、シリカの短プラグを通して濾過し、アルデヒド６２(１８mg、９０％)を得る。Ｒｆ＝０.６６(シリカゲル、６０％Ｅｔ２Ｏのヘキサン溶液)；ＩＲ(薄フィルム)
【表７０】
0004681732.tif 000128
Ｃ２９Ｈ５１ＩＯ７Ｓｉ２の計算値(Ｍ＋Ｃｓ＋)８２７.１２７２、実測値８２７.１３０４。
【０２０６】
スキーム１０に説明のようなオレフィン６３。メチルトリフェニルホスホニウムブロミド(ナトリウムアミド(Aldrich)との１０４mg混合物、０.２５０mmol、９.７当量)のＴＨＦ(２.０mL)溶液を、少しずつアルデヒド６２(１８.０mg、０.０２６mmol、１.０当量)のＴＨＦ(０.５mL)溶液に、５℃で反応の完了がＴＬＣで確認されるまで添加する。飽和水性ＮＨ4Ｃｌ(１mL)を添加し、生産物をエーテル(３×２mL)で抽出し、乾燥し(ＭｇＳＯ4)、次いで、減圧下で濃縮する。フラッシュカラムクロマトグラフィー(シリカゲル、１５％エーテルのヘキサン溶液)により、オレフィン６３(１１.７mg、６５％)を得る。Ｒf＝０.５０(シリカゲル、２０％Ｅｔ2Ｏのヘキサン溶液)；[α]22D−１７.９(ｃ  ０.２、ＣＨＣｌ3)；ＩＲ(薄フィルム)
【表７１】
0004681732.tif 000129
Ｃ30Ｈ53ＩＯ6Ｓｉ2の計算値(Ｍ＋Ｃｓ+)８２５.１４８０、実測値８２５.１４５０。
【０２０７】
スキーム１０に説明のようなマロラクトン６５。オレフィン６３(１５mg、０.０２２mmol、１.０当量)のＥｔＯＨ(１.０mL)溶液をヒドラジン(１７μL、０.５００mmol、２５.０当量)およびＨ2Ｏ2(２５μL、水中３０％ｗ／ｗ、０.３７０mmol、１６.０当量)で処理し、得られる混合物を０℃で３時間撹拌する。混合物を次いで、エーテル(４mL)および水(２mL)の間で分配し、相を分離する。水性相をエーテル(３×４mL)で抽出し、合わせた有機抽出物を乾燥し(ＭｇＳＯ4)、減圧下濃縮して泡状物(１５.０mg)を得、それをＴＨＦ(１.５mL)に溶解し、ＨＦｐｙｒ.ピリジン／ＴＨＦ(６００mL)溶液で処理し、混合物を０℃で２時間撹拌する。反応混合物を次いで飽和水性ＮａＨＣＯ3(５mL)で停止させ、ＥｔＯＡｃ(３×３mL)で抽出する。合わせた有機抽出物を乾燥し(ＭｇＳＯ4)、減圧下で濃縮する。フラッシュカラムクロマトグラフィー(シリカゲル、８０％エーテルのヘキサン溶液)により、マクロラクトン６５(９.４mg、７５％)を得る。Ｒf＝０.０６(シリカゲル、６０％Ｅｔ2Ｏのヘキサン溶液)；[α]22D−１９.３(ｃ  ０.３３、ＣＨＣｌ3)；
【表７２】
0004681732.tif 000130
Ｃ24Ｈ39ＩＯ6の計算値(Ｍ＋Ｃｓ+)６８３.０８４６、実測値６８３.０８７０。
【０２０８】
スキーム１０に説明のようなマクロラクトン６６。ヨウ化ビニル６５(９.４mg、０.０１７mmol、１.０当量)、スタナン８ｊ(１０mg、０.０３６mmol、２.１当量)およびＰｄＣｌ2(ＭｅＣＮ)2(１.０mg、０.００４mmol、０.２当量)の脱気ＤＭＦ(２５０μL、０.０７Ｍ)溶液を、２５℃で１５時間、マクロラクトン１８ｄの製造に関して記載の方法にしたがって撹拌し、分取薄層クロマトグラフィー(２５０mmシリカゲルプレート、ＥｔＯＡｃ)後、マクロラクトン６６(４.６mg、５２％)を得る。Ｒf＝０.４０(シリカゲル、８０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)；[α]22D−３０.０(ｃ  ０.１７、ＣＨＣｌ3)；ＩＲ(薄フィルム)
【表７３】
0004681732.tif 000131
Ｃ28Ｈ42ＦＮＯ6Ｓの計算値(Ｍ＋Ｃｓ+)６７２.１７７１、実測値６７２.１７９３。
【０２０９】
スキーム１０に説明のようなマクロラクトン６７。ヨウ化ビニル６５(１１mg、０.０２０mmol、１.０当量)、スタナン８ｐ(１４mg、０.０３４mmol、１.７当量)およびＰｄＣｌ2(ＭｅＣＮ)2(１.０mg、０.００４mmol、０.２当量)の脱気ＤＭＦ(２５０μL、０.０８Ｍ)溶液を、２５℃で２０時間、マクロラクトン１８ｄの製造に関して記載の方法にしたがって撹拌し、分取薄層クロマトグラフィー(２５０mmシリカゲルプレート、ＥｔＯＡｃ)後、マクロラクトン６７(８.５mg、７９％)を得る。Ｒf＝０.６８(シリカゲル、Ｅｔ2Ｏ)；[α]22D−４４.７(ｃ  ０.０８、ＣＨＣｌ3)；ＩＲ(薄フィルム)
【表７４】
0004681732.tif 000132
Ｃ28Ｈ43ＮＯ7Ｓの計算値(Ｍ＋Ｃｓ+)６７０.１８１５、実測値６７０.１８３７。
【０２１０】
スキーム１０に説明のようなマクロラクトン６８。ヨウ化ビニル６５(５.８mg、０.０１１mmol、１.０当量)、スタナン８ｒ(１０mg、０.０２５mmol、２.３当量)およびＰｄＣｌ2(ＭｅＣＮ)2(１.０mg、０.００４mmol、０.３当量)の脱気ＤＭＦ(１００μL、０.１Ｍ)溶液を、２５℃で２３時間、マクロラクトン１８ｄの製造に関して記載の方法にしたがって撹拌し、分取薄層クロマトグラフィー(２５０mmシリカゲルプレート、ＥｔＯＡｃ)後、マクロラクトン６８(３.７mg、６５％)を得る。Ｒf＝０.４５(シリカゲル、Ｅｔ2Ｏ)；[α]22D−３３.３(ｃ  ０.０９、ＣＨＣｌ3)；ＩＲ(薄フィルム)
【表７５】
0004681732.tif 000133
Ｃ29Ｈ45ＮＯ6Ｓの計算値(Ｍ＋Ｃｓ+)６６８.２０２２、実測値６６８.２０４２。
【０２１１】
チューブリン重合化および細胞毒性アッセイ
チューブリン重合化を、Bollag et Cancer Res. 1995, 55, 2325-2333により開発された濾過比色法により測定する。精製チューブリン(１mg／mL)を３７℃で３０分、各化合物(２０mM)のＭＥＭ緩衝液[(１００mM  ２−(Ｎ−モルホリノ)エタンスルホン酸、ｐＨ６.７５、１mMエチレングリコールビス(β−アミノエチルエーテル)、Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'−テトラ酢酸、および１mM  ＭｇＣｌ２]溶液の存在下、インキュベートする；次いで、混合物を、非重合化チューブリンを除去するために９６ウェルMillipore Multiscreen Durapore親水性０.２２μmポアサイズ濾過プレートで濾過する；回収した重合化チューブリンをアミドブラック溶液で染色し、Milecular Devices Microplate Readerでの色素溶液の吸光度の測定により定量する。全ての細胞系の成長を先に記載にように９６ウェルプレートでのタンパク質の定量により評価する。簡単に、５００個の細胞をプレートの各ウェルに蒔き、種々の濃度のエポシロンと３７℃で加湿した５％ＣＯ２中、４日間インキュベートする。細胞の５０％トリクロロ酢酸での固定後、タンパク質の量に対応する光学密度を２５mM  ＮａＯＨ溶液(５０％メタノール：５０％水)中で、５４６nmの波長で測定する。ＩＣ５０を細胞成長を５０％阻害するのに必要な医薬の投与量として定義する。
【０２１２】
スキーム１１は、Nicolaou et al. J. Am. Chem. Soc., 1997, 119, 7974-7991に記載の、および上記のスキーム１１の記載に示すような条件を使用して示す。
【０２１３】
スキーム１１に説明するようなヨウ化ビニル７００２。ジヨウジド７００１(１当量；５７から)およびシアノホウ化水素ナトリウム(１０当量)を無水ＨＭＰＡ(０.２Ｍ)に溶解し、得られる混合物を４５−５０℃に４８時間加熱する。室温に冷却後、水を添加し、水性相を４回酢酸エーテルで抽出する。合わせた有機フラクションを乾燥し(Ｎａ2ＳＯ4)、シリカゲルの短プラグを通して濾過し、痕跡量のＨＭＰＡ(５０％酢酸エチルのヘキサン溶液で溶出)を除去する。溶媒の蒸発に続き、残渣を分取薄層クロマトグラフィー(５０％酢酸エチルのヘキサン溶液で溶出)で精製し、純粋ヨウ化ビニル７００２(８４％)を得る。