(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
グルコース・ペンタスルフェートまたは薬剤的に許容しうるその塩を含有する、アルツハイマー病（AD）を治療するための医薬品。
【請求項２】
薬剤的に許容しうるその塩がカリウム塩である、請求項1記載の医薬品。
【請求項３】
グルコース・ペンタスルフェートが市販品から得られる、請求項1記載の医薬品。
【請求項４】
グルコース・ペンタスルフェートの供給源となる市販品がピル、錠剤、カプレット、軟質および硬質ゼラチンカプセル、トローチ剤、サシェ剤、カシェ剤、ベジキャップ（vegicaps）、液体ドロップ、エリキシル、懸濁液、乳濁液、溶液、シロップ、ティーバッグ、エアロゾル（固体として、または液体媒体に混合して）、坐薬、無菌注射液、または無菌包装粉末からなる群から選択される、請求項3記載の医薬品。
【請求項５】
グルコース・ペンタスルフェートの量が5〜10,000 mg／kg体重／日の範囲の投与量を含む、請求項1記載の医薬品。
【請求項６】
グルコース・ペンタスルフェートの量が5〜500 mg／kg体重／日の範囲の投与量を含む、請求項1記載の医薬品。
【請求項７】
薬剤的に許容しうるキャリアー、希釈剤、または賦形剤を更に含有する、請求項1記載の医薬品。
【請求項８】
40％より高いアミロイド・フィブリル生成阻害活性を有する、請求項1記載の医薬品。
【請求項９】
経口で投与する、請求項1〜8のいずれか1項に記載の医薬品。
【請求項１０】
エアロゾルスプレーによって投与する、請求項1〜8のいずれか1項に記載の医薬品。
【請求項１１】
非経口の注射または輸液可能な形態で投与する、請求項1〜8のいずれか1項に記載の医薬品。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
発明の分野
本発明はアルツハイマー病および他のアミロイド症を治療するための特定の糖組成物および方法に関する；より明確には、アルツハイマー病および他のアミロイド症に治療介入するための組成物および方法に関し、これは単糖類および多糖類、または薬剤的に許容しうるその塩中のアニオン置換基（substituted anion group）の使用を含む。
【０００２】
発明の背景
アルツハイマー病の特徴は、ベータ−アミロイドタンパク質またはＡβと呼ばれる３９〜４３アミノ酸ペプチドがフィブリルを形成して蓄積し、細胞外のアミロイド斑および脳血管壁内のアミロイドとして存在することである。アルツハイマー病におけるフィブリル性Ａβアミロイドの沈着は、患者に有害であり、結果的にアルツハイマー病の特徴である毒性および神経細胞死を引き起こすと信じられている。蓄積の形跡により、アミロイドはアルツハイマー病の発病を引き起こす主要な因子として関係づけられる。
【０００３】
また、種々の他のヒトの疾病もアミロイド沈着を示し、通常、全身の器官（すなわち中枢神経系の外側にある器官または組織）にアミロイドが蓄積し、器官の機能障害または不全を引き起こす。アルツハイマー病および“全身性”アミロイド性疾患においては、現在のところ治療法または効果的な処置はなく、患者は通常、疾病の発症から３〜１０年以内に死亡する。
【０００４】
アルツハイマー病に関する多くの研究が行われてきているが、アルツハイマー病および他のアミロイド症で起こるアミロイドの生成、沈着、蓄積、および／または残留を阻止する治療法のための化合物または薬剤については、これまで（conventually）ほとんど知られていない。
【０００５】
従って、アルツハイマー病および他のアミロイド症で起こるアミロイドの生成、沈着、蓄積、および／もしくは残留を阻止または逆転する治療法のための新規の化合物もしくは薬剤が非常に必要とされている。
【０００６】
発明の開示
本発明の主要な目的は、アミロイド性疾患の治療に有用な新規の方法および組成物を確立することである。アミロイド性疾患には、それらに限定されるものではないが、以下のものがある：アルツハイマー病、ダウン症候群、およびダッチタイプのアミロイド症を伴う遺伝性脳出血に伴うアミロイド（特有のアミロイドはベータ−アミロイドタンパク質またはＡβと呼ばれる）；慢性炎症、種々の型の悪性病変、および家族性地中海熱に伴うアミロイド（特有のアミロイドはＡＡアミロイドまたは炎症関連アミロイド症と呼ばれる）；多発性骨髄腫および他のＢ細胞疾患に伴うアミロイド（特有のアミロイドはＡＬアミロイドと呼ばれる）；ＩＩ型糖尿病に伴うアミロイド（特有のアミロイドはアミリンまたは島アミロイドと呼ばれる）；プリオン病（クロイツフェルト−ヤコブ病、ゲルストマン−ストラウスラー症候群、クールー、および動物スクラピーを含む）に伴うアミロイド（特有のアミロイドはＰｒＰアミロイドと呼ばれる）；長期間にわたる血液透析および手根管症候群に伴うアミロイド（特有のアミロイドはベータ2−ミクログロブリン・アミロイドと呼ばれる）；老人性心臓アミロイドおよび家族性アミロイド性多発性神経炎に伴うアミロイド（特有のアミロイドはtransthyretinまたはプレアルブミンと呼ばれる）；そして甲状腺髄様癌のような内分泌腫瘍に伴うアミロイド（特有のアミロイドはプロカルシトニンの変種と呼ばれる）。
【０００７】
本発明の方法は、被験体への治療化合物グルコース・ペンタスルフェートおよび薬剤的に許容しうるその塩もしくはその誘導体の投与を含むが、これはアミロイドの生成、沈着、蓄積、そして／もしくは残留を阻害し、さらに／または既存のアミロイドの溶解／分解を誘引する。従って、本発明の組成物および方法は、アミロイド沈着が起こる疾患におけるアミロイド症の阻害に有用である。本発明の方法を治療的に使用してアミロイド症を治療するか、またはアミロイド症に罹患しやすい被験体において予防的に使用することができる。本発明の方法により、少なくともある程度までは、特定のアミロイドタンパク質（例えば、それらに限定されるわけではないが、アルツハイマー病のベータ−アミロイドタンパク質（Ａβ）およびＩＩ型糖尿病の島アミロイド・ポリペプチド（すなわちアミリン）がある）のβプリーツ・シート二次構造が直接阻害されるか、または減少が誘引される。
【０００８】
本出願の目的でのグルコース・ペンタスルフェートの“誘導体”、“関連する誘導体”、“その誘導体”、または“近い関係にある化合物”には、それらに限定されるわけではないが、グルコース・モノスルフェート、グルコース・ジスルフェート、グルコース・トリスルフェート、グルコース・テトラスルフェート、およびグルコース・ペンタスルフェートの単糖、二糖、三糖、四糖、五糖、六糖、七糖、六糖、九糖、十糖、または他のそれより長い多糖として存在するものがある。更に、グルコース・ペンタスルフェートの“誘導体”には、それらに限定されるわけではないが、グルコース・ペンタスルフェート、薬剤的に許容しうるその塩、およびスルフェート含有位置が他のアニオン基で置換された誘導体（上記参照）がある。好ましい置換には、それらに限定されるわけではないが、スルフェートの、ホスフェート、ホスホネート、カルボキシレート、スルホネート、および／または環状化合物（すなわち脂環基もしくは複素環基）でアニオン基を含むものでの置換がある。更に、複数のアニオン基が同一の構造基に属することができ（すなわち全てカルボキシレート）、あるいはまた、異なるアニオン基の組み合わせを使用することもできる（すなわちカルボキシレートおよびホスフェート）。
【０００９】
本発明の治療化合物の“アニオン基”は負に帯電した部分である。本発明の目的では、アニオン基は生理学的ｐＨで負に帯電する。
【００１０】
ここで使用する“単糖”とは、通常は式Ｃ6Ｈ12Ｏ6で表される単一の糖であり、これを結合させてオリゴ糖または多糖を生成することができる。単糖には、単糖の鏡像異性体と、ＤおよびＬ立体異性体がある。炭水化物（置換型および非置換型の単糖、オリゴ糖、および多糖を含む）はそれぞれの単糖部分に結合する複数のアニオン基を有することができる。
【００１１】
本発明の別の目的は、糖であるグルコース・ペンタスルフェートおよび関連する誘導体を使用して、アルツハイマー病、ＩＩ型糖尿病、および他のアミロイド症におけるアミロイドの生成、沈着、蓄積、および／または残留を治療することである。しかしながら、グルコース・ペンタスルフェートは単糖として存在してもよく、またはそれより長い糖（すなわち多糖）、例えば（それに限定されるわけではないが）二糖、三糖、四糖、五糖、六糖、七糖、八糖、九糖、もしくは十糖であってもよい。
【００１２】
本発明の別の目的は、グルコース・ペンタスルフェートおよび関連する誘導体を使用して、アルツハイマー病、ＩＩ型糖尿病、および他のアミロイド症におけるアミロイドの生成、沈着、蓄積、および／または残留を治療することである。
【００１３】
本発明の別の目的は、グルコース・ペンタスルフェートまたは関連する誘導体を含有する市販のピル、錠剤、カプレット、軟質および硬質ゼラチンカプセル、トローチ剤、サシェ剤、カシェ剤、ベジキャップ（vegicaps）、液体ドロップ、エリキシル、懸濁液、乳濁液、溶液、シロップ、ティーバッグ、エアロゾル（固体として、または液体媒体に混合して）、坐薬、無菌注射液、および／もしくは無菌包装粉末を使用するか、または合成してアルツハイマー病、ＩＩ型糖尿病、および他のアミロイド症に罹患した患者を治療することである。
【００１４】
本発明の更に別の目的は、グルコース・ペンタスルフェートまたは関連する誘導体をアルツハイマー病、ＩＩ型糖尿病、および他のアミロイド症におけるアミロイド生成、アミロイド沈着、アミロイド蓄積、アミロイド残留、アミロイド−プロテオグリカン／グリコサミノグリカン（ＰＧ／ＧＡＧ）相互作用を阻害し、そして／または既成の、もしくは既に沈着しているアミロイド・フィブリルの溶解を誘引する効力のある薬剤として使用することである。
【００１５】
本発明の更に別の目的は、グルコース・ペンタスルフェートもしくは関連する誘導体（どのような市販品から得るかに関わらず）の、アミロイドの生成、沈着、蓄積、および／または残留を、その臨床的な状況と無関係に、阻害するための使用法を提供することである。
【００１６】
本発明の更に別の目的は、被験体にアミロイド沈着を阻害するグルコース・ペンタスルフェートまたは関連する誘導体を治療量投与することを伴う組成物および方法を提供することである。従って、本発明の組成物および方法は、アミロイドの沈着が起こる疾患におけるアミロイド症の阻害に有用である。本発明の化合物を治療的に使用してアミロイド症を治療するか、またはアミロイド症に罹患しやすい被験体に予防的に使用することができる。本発明の方法により、少なくともある程度までは、アミロイド・フィブリルの生成が直接阻害され、そして／または既成のアミロイド・フィブリルの溶解が誘引される。グルコース・ペンタスルフェートの作用機構は、特定のアミロイドタンパク質（すなわち独自のアミノ酸配列を有する）、例えば（それらに限定されるわけではないが）アルツハイマー病のベータ−アミロイドタンパク質（Ａβ）およびＩＩ型糖尿病の島アミロイド・ポリペプチド（すなわちアミリン）のβ−プリーツ・シート二次構造の折りたたみを直接阻害することによるものであると信じられている。
【００１７】
本発明の更に別の目的は、アミロイド症を治療するための薬剤組成物を提供することである。薬剤組成物は、アミロイド沈着を阻害するのに有効な量の本発明の治療化合物、および薬剤的に許容しうる担体を含有する。
【００１８】
本発明の更に別の目的は、いずれかの、および全ての合成化合物をグルコース・ペンタスルフェートまたは関連する誘導体に使用して、アルツハイマー病、ＩＩ型糖尿病、および他のアミロイド症において、アミロイド生成、アミロイド沈着、アミロイド蓄積、アミロイド残留、アミロイド−ＰＧ／ＧＡＧ相互作用を阻害し、そして／または既成の、もしくは既に沈着しているアミロイド・フィブリルの溶解を誘引する効力のある薬剤として使用することである。
【００１９】
本発明の更に別の目的は、グルコース・ペンタスルフェートおよび／またはその誘導体［どのような市販品から得たか、そしてヒトが摂取する最終的な形態（すなわちピル、錠剤、カプレット、軟質および硬質ゼラチンカプセル、トローチ剤、サシェ剤、ベジキャップ、液体ドロップ、エリキシル、懸濁液、乳濁液、溶液、シロップ、ティーバッグ、エアロゾル（固体として、または液体媒体に混合して）、坐薬、無菌注射液、および／もしくは無菌包装粉末）に関わらず］の、アミロイドの生成、沈着、蓄積、および／または残留を、その臨床的な状況と無関係に、阻害するための使用法を提供することである。
【００２０】
本発明の更に別の目的は、天然の化合物（すなわち植物、動物、または鉱物）のいずれか、および全てをグルコース・ペンタスルフェートまたは関連する誘導体に使用して、アルツハイマー病、ＩＩ型糖尿病、および他のアミロイド症において、アミロイド生成、アミロイド沈着、アミロイド蓄積、アミロイド残留、アミロイド−ＰＧ／ＧＡＧ相互作用を阻害し、そして／または既成の、もしくは既に沈着しているアミロイド・フィブリルの溶解を誘引する効力のある薬剤として使用することである。
【００２１】
本発明の更に別の目的は、上に概説した必要性のいずれか、または全てを満たすものである。
【００２２】
本発明のこれらの目的および他の目的は、以下の開示から明白となるように、ここに開示する本発明によって満たされる。
【００２３】
本発明のある観点は、患者のアミロイド性疾患を治療するための医薬品であり、ここで医薬品は少なくとも１個のアニオン置換基を含有する糖、または１個以上のアニオン置換基を含有する糖の薬剤的に許容しうる塩を、治療的有効量含有する。薬剤は必要により薬剤的に許容しうるキャリアー、希釈剤、または賦形剤を含有してもよい。糖は好ましくは全ての単糖、二糖、三糖、四糖、五糖、六糖、七糖、八糖、九糖、および十糖からなる群から選択された糖である。糖の好ましい態様は単糖であり、より好ましくは単糖はグルコースである。治療的有効量は好ましくは、４０％以上のアミロイド阻害活性または有効性を有する。
【００２４】
糖は好ましくは、全てのスルフェート、スルホネート、ホスフェート、ホスホネート、カルボキシレートからなる群から選択されるアニオン置換基を少なくとも１個含有する。好ましいアニオン置換基はスルフェートである。
【００２５】
薬剤は好ましくはグルコース・モノスルフェート、グルコース・ジスルフェート、グルコース・トリスルフェート、グルコース・テトラスルフェート、グルコース・ペンタスルフェートからなる群から選択され、より好ましくはグルコース・ペンタスルフェートまたは薬剤的に許容しうるその塩（例えばカリウム塩）である。
【００２６】
治療的有効量のグルコース・ペンタスルフェートは市販品（例えばピル、錠剤、カプレット、軟質および硬質ゼラチンカプセル、トローチ剤、サシェ剤、カシェ剤、ベジキャップ、液体ドロップ、エリキシル、懸濁液、乳濁液、溶液、シロップ、ティーバッグ、エアロゾル（固体として、または液体媒体に混合して）、坐薬、無菌注射液、もしくは無菌包装粉末）から得るか、またはそのような剤形にできるように合成してもよい。
【００２７】
本発明の別の観点は患者のアミロイド性疾患を治療する方法であり、患者に治療的有効量のグルコース・ペンタスルフェート、薬剤的に許容しうるその塩、または関連するその誘導体を投与する段階を含む。治療的有効量のグルコース・ペンタスルフェートは好ましくは経口、エアロゾルスプレー、または非経口の注射もしくは輸液可能な剤形で投与する。
【００２８】
本発明は特に、糖であるグルコース・ペンタスルフェートがアルツハイマー病のアミロイド生成の優れた阻害剤として作用し、また、アルツハイマー病のベータ−アミロイドタンパク質（Ａβ）を含有する既成のアミロイド・フィブリル、およびそれより程度は低いがＩＩ型糖尿病のアミロイド・フィブリル（すなわち島アミロイド・ポリペプチドまたはアミリン）の溶解を誘引するのに有効な薬剤として作用するということの同定および驚くべき発見に関係する。
【００２９】
市販のグルコース・ペンタスルフェートがＡβアミロイド・フィブリルの生成を著しく阻害することが、チオフラビンＴ蛍光アッセイを使用した測定によって明らかになっている。直接比較したところ、同数のスルフェート（すなわち５個）を含有する他の化合物（例えばマンノース・ペンタスルフェート）、そして他の糖および／またはスルフェート含有化合物（例えばスクロース・オクタスルフェート、スクロース・ヘキサスルフェート、スクロース・ヘプタスルフェート、メチルアルファ−Ｄ−マンノピラノシド２，３，４，６−テトラスルフェート、およびメチルアルファ−Ｄ−グルコピラノシド２，３，４，６−テトラスルフェート）は全てＡβアミロイド・フィブリルの生成阻害剤としての効力はなく、グルコース・ペンタスルフェートで観察された特異性を示した。グルコース・ペンタスルフェートによるＡβアミロイド・フィブリルの生成阻害は用量に依存していた。更に、グルコース・ペンタスルフェートは既成のアルツハイマーのＡβアミロイド・フィブリルの有効な溶解剤であることが、チオフラビンＴ蛍光アッセイを使用した測定で明らかとなった。この後者の効果は用量に依存して４日間のインキュベーション期間内に生じた。またグルコース・ペンタスルフェートは、島アミロイド・ポリペプチド（すなわちアミリン）を含有するフィブリルの溶解を１週間のインキュベーションの間に誘引した。最後に、グルコース・ペンタスルフェートはＡβ−ＰＧ／ＧＡＧ相互作用を阻害する効果もあることが固相結合イムノアッセイを使用して測定された。グルコース・ペンタスルフェートによるＡβ−ＰＧ／ＧＡＧ相互作用に対する後者の阻害は用量依存的であった。
【００３０】
グルコース・ペンタスルフェートの考えられる作用機構は、特定のアミロイドタンパク質（すなわち独自のアミノ酸配列を有する）、例えば（それらに限定されるわけではないが）アルツハイマー病のベータ−アミロイドタンパク質（Ａβ）のβ−プリーツ・シート二次構造の折りたたみを直接阻害することによるものであると信じられている。上記の試験の全てで有効であったグルコース・ペンタスルフェートは、市販のグルコース・ペンタスルフェートから水溶性の形態に誘導し、ヒトにおける経口での使用に容易に適合できるようにした。本発明の特定の観点は、市販品由来のグルコース・ペンタスルフェート（または関連する誘導体）（ピル、錠剤、または液体）の、アルツハイマー病におけるアミロイド症および他のアミロイド症の治療のための使用である。グルコース・ペンタスルフェートの使用はアルツハイマー病の全段階においてヒト患者に有益であると考えられるが、これはグルコース・ペンタスルフェートに内在する能力、すなわちＡβアミロイド・フィブリルの生成を阻害し（アルツハイマー病の初期から中期）、既成のアミロイド・フィブリルの溶解を誘引し（アルツハイマー病の中期から後期）、そしてアミロイド−ＰＧ／ＧＡＧ相互作用を阻害する（アルツハイマー病の全段階）能力によるものである。
【００３１】
本発明のこれらおよび他の特徴と利点は、以下の本発明の詳細な説明を付帯の図面と合わせて読めば、より十分に明白となる。
【００３２】
本発明の他の観点では、患者におけるアミロイド性疾患を治療するための医薬品について開示するが、医薬品は治療的有効量のグルコース・ペンタスルフェートまたはその誘導体を含有する。医薬品は、好ましくは治療的有効量のグルコース・ペンタスルフェートまたはその誘導体を約５〜１０，０００ｍｇ／ｋｇ患者体重／日の範囲、より好ましくは約５〜５００ｍｇ／ｋｇ患者体重／日の範囲の投与量で含有する。
【００３３】
医薬品で治療するアミロイド性疾患は以下からなる群から選択される：アルツハイマー病、ダウン症候群、およびダッチタイプのアミロイド症を伴う遺伝性脳出血に伴うアミロイド（特有のアミロイドはベータ−アミロイドタンパク質またはＡβと呼ばれる）；慢性炎症、種々の型の悪性病変、および家族性地中海熱に伴うアミロイド（特有のアミロイドはＡＡアミロイドまたは炎症関連アミロイド症と呼ばれる）；多発性骨髄腫および他のＢ細胞疾患に伴うアミロイド（特有のアミロイドはＡＬアミロイドと呼ばれる）；ＩＩ型糖尿病に伴うアミロイド（特有のアミロイドはアミリンまたは島アミロイドと呼ばれる）；プリオン病（クロイツフェルト−ヤコブ病、ゲルストマン−ストラウスラー症候群、クールー、および動物スクラピーを含む）に伴うアミロイド（特有のアミロイドはＰｒＰアミロイドと呼ばれる）；長期間にわたる血液透析および手根管症候群に伴うアミロイド（特有のアミロイドはベータ2−ミクログロブリン・アミロイドと呼ばれる）；老人性心臓アミロイドおよび家族性アミロイド性多発性神経炎に伴うアミロイド（特有のアミロイドはtransthyretinまたはプレアルブミンと呼ばれる）；そして甲状腺髄様癌のような内分泌腫瘍に伴うアミロイド（特有のアミロイドはプロカルシトニンの変種と呼ばれる）。
【００３４】
活性化合物を、被験体におけるアミロイドの生成、沈着、蓄積、または残留の阻害に十分な、治療的有効量で投与する。治療的有効量により、好ましくはアミロイドの生成、沈着、蓄積、または残留が少なくとも２０％まで、より好ましくは少なくとも４０％まで、更に好ましくは少なくとも６０％まで、そして更により好ましくは少なくとも８０％まで、未処理の被験体に比較して阻害される。
【００３５】
発明の最適な実施形態
アミロイドおよびアミロイド症
アミロイドは一群の多様な、しかし特定の細胞外タンパク質沈着を指す包括名称であり、それらは全て共通した形態学的特性、染色特性、およびＸ線回折スペクトルを有する。沈着したアミロイドタンパク質の性質に関係なく、全てのアミロイドは以下の特性を有する：１）光学顕微鏡レベルで無定形の外観を有し、ヘマトキシリン−エオシン染色でエオシン好性を示す；２）全てコンゴーレッドで染色され、偏光下の観察で赤色／緑色複屈折を示す（Puchtlerら, J. Histochem. Cytochem. 10:355-364, 1962）；３）全て主たるベータ−プリーツシート二次構造を含有する；そして、４）超微細構造的にはアミロイドは通常、不定長で直径７〜１０ｎｍの非分枝フィブリルからなる。
【００３６】
現在、アミロイドは沈着する特有のアミロイドタンパク質に従って分類されている。アミロイド性疾患には、それらに限定されるわけではないが、以下のもの：アルツハイマー病、ダウン症候群、およびダッチタイプのアミロイド症を伴う遺伝性脳出血に伴うアミロイド（特有のアミロイドはベータ−アミロイドタンパク質またはＡβと呼ばれる）；慢性炎症、種々の型の悪性病変、および家族性地中海熱に伴うアミロイド（特有のアミロイドはＡＡアミロイドまたは炎症関連アミロイド症と呼ばれる）；多発性骨髄腫および他のＢ細胞疾患に伴うアミロイド（特有のアミロイドはＡＬアミロイドと呼ばれる）；ＩＩ型糖尿病に伴うアミロイド（特有のアミロイドはアミリンまたは島アミロイドと呼ばれる）；クロイツフェルト−ヤコブ病、ゲルストマン−ストラウスラー症候群、クールー、および動物スクラピーを含む、プリオン病に伴うアミロイド（特有のアミロイドはＰｒＰアミロイドと呼ばれる）；長期間にわたる血液透析および手根管症候群に伴うアミロイド（特有のアミロイドはベータ2−ミクログロブリン・アミロイドと呼ばれる）；老人性心臓アミロイドおよび家族性アミロイド性多発性神経炎に伴うアミロイド（特有のアミロイドはプレアルブミンまたはトランスチレチン（transthyretin）アミロイドと呼ばれる）；そして甲状腺髄様癌のような内分泌腫瘍に伴うアミロイド（特有のアミロイドはプロカルシトニンの変種と呼ばれる）がある。
【００３７】
臨床条件におけるアミロイド沈着はベータ−プリーツシート立体構造の存在に関係する共通の物理的特性を有するが、現在明らかになっているところによれば、多くの異なる化学種が存在し、更なるものが将来的に記述されると考えられる。現在考えられているところによれば、一般にアミロイド症に作用しうるいくつかの共通した発病の機構が存在する。多くの場合、循環している前駆タンパク質は無傷の分子もしくは異常な分子のいずれかの過剰生成（例えばプラズマ細胞疾患）、分解もしくは排出の低下（続発性アミロイド症候群における血清アミロイドＡおよび長期血液透析におけるベータ2−ミクログロブリン）、または変異型タンパク質に関連する遺伝的異常（例えば家族性アミロイド性多発性神経炎）によって生じうる。より大型のタンパク質前駆体分子のタンパク質分解は多くの型のアミロイド症で起こり、より低分子量のフラグメントが生成され、それが重合してベータプリーツシート立体構造をなし、（通常は細胞外の位置に）組織沈着する。関与する正確な機構は何か、そしてタンパク質分解の過程および／または翻訳修飾に変化を起こす異常の原因は、ほとんどのアミロイドにおいて知られていない。
【００３８】
全身性アミロイドには慢性炎症、種々の型の悪性病変、および家族性地中海熱に伴うアミロイド（すなわちＡＡアミロイドまたは炎症関連アミロイド症）（BensonおよびCohen, Arth. Rheum. 22:36-42, 1979；Kameiら, Acta Path. Jpn. 32:123-133, 1982；McAdamら, Lancet 2:572-573, 1975；Metaxas, Kidney Int. 20:676-685, 1981）、そして多発性骨髄腫および他のＢ細胞疾患に伴うアミロイド（すなわちＡＬアミロイド）（Haradaら, J. Histochem. Cytochem. 19:1-15, 1971）が例としてあるが、これらは、一般に中枢神経系の外側にある種々の異なる器官および組織におけるアミロイド沈着に関与することが知られている。これらの疾病におけるアミロイド沈着は、例えば肝臓、心臓、脾臓、胃腸管、腎臓、皮膚、および／または肺に起こりうる（Johnsonら, N. Engl. J. Med. 321:513-518, 1989）。これらのアミロイド症のほとんどでは、明確な治療または効果的な処置が無く、アミロイド沈着の結果は患者に有害でありうる。例えば、腎臓におけるアミロイド沈着は腎不全を引き起こす可能性があり、心臓におけるアミロイド沈着は心不全を誘引しうる。これらの患者では、全身の器官におけるアミロイドの蓄積により、やがては一般に３〜５年以内に死に至る。他のアミロイド症は単一の器官または組織に罹患し、例えば以下のもの：アルツハイマー病およびダウン症候群の患者の脳に見られるＡβアミロイド沈着；クロイツフェルト−ヤコブ病、ゲルストマン−ストラウスラー症候群、およびクールーの患者の脳に見られるＰｒＰアミロイド沈着；ＩＩ型糖尿病患者の９０％の膵臓のランゲルハンス島に見られる島アミロイド（アミリン）沈着（Johnsonら, N. Engl. J. Med. 321:513-518, 1989；Lab. Invest. 66:522-535, 1992）；長期的血液透析を行っている患者に見られる手根管症候群を起こす内側神経におけるベータ2−ミクログロブリン・アミロイド沈着（Geyjoら, Biochem. Biophys. Res. Comm. 129:701-706, 1985；Kidney Int. 30:385-390, 1986）；老人性心臓アミロイドの患者の心臓に観察されるプレアルブミン／トランスチレチンアミロイド；そして、家族性アミロイド性多発性神経炎を有する患者の末梢神経に観察されるプレアルブミン／トランスチレチンアミロイド（SkinnerおよびCohen, Biochem. Biophys. Res. Comm. 99;1326-1332, 1981；Saraivaら, J. Lab. Clin. Med. 102:590-603, 1983；J. Clin. Invest. 74:104-119, 1984；Tawaraら, J. Lab. Clin. Med. 98:811-822, 1989）で観察される。
【００３９】
アルツハイマー病と高齢化人口
アルツハイマー病は年配者の痴呆の主要な原因であり、６５歳を越える人口の５〜１０％が罹患している（アルツハイマー病および関連する障害の理解のためのガイド（A Guide to Understanding Alzheimer's Disease and Related Disorders）, Jorm編, New York University Press, New York, 1987）。アルツハイマー病では、認識過程、例えば記憶、注意、言語、および理論に必須の脳の部分が変性し、被害者は、独立心を含む、我々が人間であるための多くのものを奪われる。いくつかの遺伝型のアルツハイマー病は中年期に発症するが、より一般的には症状は６０代中頃以降に現れる。今日、４００〜５００万人のアメリカ人がアルツハイマー病に罹患しており、これらの人々のうち半分よりやや多い人々が自宅で介護を受けており、それ以外の人は多くの異なる健康管理機関にいる。アルツハイマー病および他の痴呆の罹患率は、６５歳を５歳越える毎に倍増し、最近の研究は、８５歳以上の全ての人々の５０％近くがアルツハイマー病の症状を有することを示している（１９９７年  アルツハイマー病に関する経過報告（1997 Progress Report on Alzheimer's Disease）、国立老化研究所／国立衛生研究所）。アメリカ合衆国の総人口の１３％（３３００万人）が６５歳以上であり、この％は２０２５年までに２０％に上昇する（１９９７年  アルツハイマー病に関する経過報告、国立老化研究所／国立衛生研究所）。
【００４０】
アルツハイマー病はまた、社会において経済的に重い負担ともなってもいる。最近の研究では、重度の認識障害を有するアルツハイマー病患者１人を自宅または療養所で看護するための費用は、年間＄４７，０００より高いと推定されている（アルツハイマー病および関連する障害の理解のためのガイド，Jorm編，New York University Press, New York, 1987）。２〜２０年に及ぶ病気では、家族及び社会にかかるアルツハイマー病の総費用は驚異的なものである。合衆国におけるアルツハイマー病による年間の経済的損失は、健康管理の費用および患者とその看護人の両方の賃金の損失に関して算定すると＄８００〜１０００億である（１９９７年  アルツハイマー病に関する経過報告、国立老化研究所／国立衛生研究所）。
【００４１】
塩酸タクリン（“コグネックス”）はＦＤＡが最初に認可したアルツハイマー病のための薬剤であるが、アセチルコリンエステラーゼ阻害剤である（CutlerおよびSramek, N. Engl. J. Med. 328:808-810, 1993）。しかしながら、この薬剤ではアルツハイマー病患者における認識の改善は限定的に成功しており、初期には肝臓毒性のような多くの副作用を有する。より最近、ＦＤＡが２番目に認可した薬剤、ドンペジル（“アリセプト”としても知られる）もアセチルコリンエステラーゼ阻害剤であるが、タクリンより効果的であり、アルツハイマー病患者において認識のわずかな改善が示されているが（BarnerおよびGray, Ann. Pharmacotherapy 32:70-77, 1998；RogersおよびFriedhoff, Eur. Neuropsych. 8:67-75, 1998）、治癒はしない様である。従って、より効果的なアルツハイマー病患者の治療が必要とされているのは明らかである。
【００４２】
アルツハイマー病の治療標的としてのアミロイド
アルツハイマー病は、ベータ−アミロイドタンパク質、Ａβ、またはβ／Ａ４と呼ばれる３９〜４３アミノ酸ペプチドの沈着および蓄積を特徴とする（GlennerおよびWong, Biochem. Biophys. Res. Comm. 120:885-890, 1984；Mastersら, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 82:4245-4249, 1985；Husbyら, Bull WHO 71:105-108, 1993）。Ａβは、ベータ−アミロイド前駆タンパク質（またはβＰＰ）と呼ばれるより大型の前駆タンパク質から誘導されるが、選択的スプライシングをされたいくつかのその変異体がある。最も多く存在するβＰＰの型には６９５、７５１、および７７０個のアミノ酸からなるタンパク質がある（Tanziら, Nature 331:528-530, 1988；Kitaguchiら, Nature 331:530-532, 1988；Ponteら, Nature 331:525-527, 1988）。
【００４３】
小型のＡβペプチドはアルツハイマー病患者の脳における“プラーク”のアミロイド沈着を構成する主要な成分である。更に、アルツハイマー病は多くの神経フィブリルの“もつれ”が存在することを特徴とし、これは神経細胞質に異常に蓄積するペアのらせん状フィラメントからなる（Grundke-Iqbalら, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 83:4913-4917, 1986；Kosikら, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 83:4044-4048, 1986；Leeら, Science 251:675-678, 1991）。従ってアルツハイマー病の病理学的認証は、“プラーク”および“もつれ”の存在であり、アミロイドがプラークの中心核に沈着する。アルツハイマー病の脳に見られる他の主要な病変のタイプは、脳実質内、および脳の外側に位置する髄膜の血管壁の両方の血管壁におけるアミロイドの蓄積である。血管壁に局在するアミロイド沈着は脳血管性アミロイドまたはコンゴー好性血管障害と呼ばれる（Mandybur, J. Neuropath. Exp. Neurol. 45:79-90, 1986；Pardridgeら, J. Neurochem. 49:1394-1401, 1987）。
【００４４】
長年の間、アルツハイマー病における“アミロイド”の重要性、そしてこの病気に特有の“プラーク”および“もつれ”が病気の原因なのか、それとも単にその結果にすぎないのかについて、科学的な論争が行われてきた。ここ数年の研究は、アミロイドは実際にアルツハイマー病の原因となる因子であり、単なる無害な共在物とみなすべきではないことを示している。アルツハイマーのＡβタンパク質は細胞培養液中で神経細胞の変性を短時間で引き起こすことが明らかになっている（Pikeら, Br. Res. 563:311-314, 1991；J. Neurochem, 64:253-265, 1995）。研究が示唆するところによると、全てのアミロイドに特有なものであるフィブリルの構造（優勢なβ−プリーツシート二次構造からなる）こそが、神経毒性作用に関与している。Ａβはまた、海馬の切片の培養物においても神経毒性を有し（Harriganら, Neurobiol. Aging 16:779-789, 1995）、トランスジェニックマウスにおいて神経細胞死を誘導することが明らかとなっている（Gamesら, Nature 373:523-527, 1995；Hsiaoら, Science 274:99-102, 1996）。アルツハイマーのＡβをラットの脳に注射しても記憶障害および神経機能障害を起こす（Floodら, Proc. Natl. Acad. Sci.88:3363-3366, 1991；Br. Res. 663:271-276, 1994）。おそらく、Ａβアミロイドがアルツハイマー病の病因に直接関与するという最も説得力のある証拠は遺伝学的研究から得られる。Ａβの生成は、その前駆体であるベータ−アミロイド前駆タンパク質をコードする遺伝子中の変異を起こしうることが発見されている（Van Broeckhovenら, Science 248:1120-1122, 1990；Murrellら, Science 254:97-99, 1991；Haassら, Nature Med. 1:1291-1296, 1995）。早期発病型家族性アルツハイマー病の原因となるベータ−アミロイド前駆タンパク質遺伝子の突然変異の同定は、アミロイドがこの病気の根本である発病過程の中心であるという最も強い論拠である。報告されている病気の原因となる４つの変異が発見されており、家族性アルツハイマー病が引き起こされる際のＡβの重要性を示している（Hardy, Nature Genet. 1:233-234, 1992に報告されている）。これらの試験は全て、ヒト患者の脳におけるフィブリルＡβの生成、沈着、蓄積、および／または残留を低減、除去、または予防するための薬剤の提供により効果的な治療が行えると考えられることを示唆している。
【００４５】
本発明は、グルコース・ペンタスルフェートおよびその誘導体の、以下のもの：１）アルツハイマーのＡβアミロイド・フィブリルの生成の阻害（アルツハイマー病の初期から中期の患者に重要である）、２）アルツハイマーのアミロイド−ＰＧ／ＧＡＧ相互作用の阻害（アルツハイマー病の全期の患者に重要である）、そして３）既成のアルツハイマー病のアミロイド・フィブリルの溶解／分解の誘引：に対する有効性を明白に証明する。更に本発明は、グルコース・ペンタスルフェートが島アミロイド・ポリペプチド（すなわちアミリン）含有フィブリルの溶解／分解の誘引に効果があり、従って、島アミロイドが膵臓に蓄積したＩＩ型糖尿病患者の〜９０％の治療に有効でありうることを証明する。作用機構は全てのアミロイドの一部をなすβ−プリーツシート構造の分解に関係し、関与する根本的なアミロイドタンパク質の性質または臨床的状況に無関係であるため、グルコース・ペンタスルフェートもしくはその誘導体を使用する本発明は、ここに記載するように全てのアミロイド性疾患の治療に有用であると考えられる。
【００４６】
ここで図面に転じ、本発明の好ましい態様について記載する。
【００４７】
【実施例】
以下の実施例により当業者に、アミロイド・フィブリルの生成を阻害し、アミロイド−ＰＧ／ＧＡＧ相互作用を阻害し、そして既成のアミロイド・フィブリルの溶解を誘引するための、市販されているグルコース・ペンタスルフェートまたは近い関係にある誘導体の同定および使用について開示および説明する。しかしながら本発明がこれらの特定の実施例に制限されると解釈するべきではない。
【００４８】
実施例１  グルコース・ペンタスルフェートはアルツハイマーのＡβ（１−４０）アミロイド・フィブリル生成の有効な阻害剤である
既に記載されている、チオフラビンＴ蛍光光度法を利用するアミロイド・フィブリル生成の測定法（H Naikiら, Lab. Invest. 65:104-110, 1991；H Levine III, Protein Sci. 2:404-410, 1993；H Levine III, Amyloid; Int. J. Exp. Clin. Invest. 2:1-6, 1995；H NaikiおよびK. Nakakuki, Lab. Invest. 74:374-383, 1996）を最初に使用して、Ａβアミロイド・フィブリル生成を阻害する能力を有する可能性のある治療化合物の同定を行った。この感度の高いアッセイを使用して、蛍光の減少または増加がアミロイド・フィブリルの量の減少または増加と相関関係があることは既に示されており（H Naikiら, Lab. Invest. 65:104-110, 1991；H Levine III, Protein Sci. 2:404-410, 1993；H Levine III, Amyloid; Int. J. Exp. Clin. Invest. 2:1-6, 1995；H NaikiおよびK. Nakakuki, Lab. Invest. 74:374-383, 1996）、これによって、可能性のあるアミロイド・フィブリル生成の阻害剤および／または促進剤の同定および程度を測定することができる。
【００４９】
最初の実験では、Ａβ（１−４０）フィブリル新生に対する種々の化合物の効果を評価した。これらの初期実験には、２５μＭのＡβ（１−４０）（Bachem社, Torrance, CA, USA；ロット＃WM365）を遠心チューブ内で、単独か、または１．２５ｍＭ（すなわち１：５０Ｍ比のＡβ：試験化合物）の種々の市販の化合物（以下に記載）の１５０ｍＭ  トリスＨＣｌ、１０ｍＭ  ＮａＣｌ、ｐＨ７．０（ＴＢＳ）中溶液の存在下で、３７℃で１週間インキュベートを行った（３部について）。試験した化合物は以下のものがあった：グルコース・ペンタスルフェート（ＰＴＩ−４８５７９、カリウム塩；分子量＝７７１）、マンノース・ペンタスルフェート（ＰＴＩ−０７４９９、カリウム塩；分子量＝７７１）、メチルアルファ−Ｄ−グルコピラノシド２，３，４，６−テトラスルフェート（ＰＴＩ−２００４９、カリウム塩；分子量＝６６７）、メチル−アルファ−Ｄ−マンノピラノシド２，３，４，６−テトラスルフェート（ＰＴＩ−２０８１４、カリウム塩；分子量＝６６７）、スクロース・ヘプタスルフェート（ＰＴＩ−７０９３６、カリウム塩；分子量＝１１６９）、スクロース・ヘキサスルフェート（ＰＴＩ−７０９４６、カリウム塩；分子量＝１０５２）、およびスクロース・オクタスルフェート（ＰＴＩ−７００１１、カリウム塩；分子量＝１２８８）。グルコース・ペンタスルフェートとマンノース・ペンタスルフェートの化学構造の比較を図１に示す。
【００５０】
それぞれの化合物のＡβ（１−４０）フィブリル生成に対する影響を評価するために、５０μｌアリコートをそれぞれのチューブから採取して、１時間、１日、３日、および１週間での分析を行った。上記の測定のそれぞれで、それぞれのインキュベーション時間の後に５０μｌのＡβ＋／−試験化合物を、１．２ｍｌの１００μＭ  チオフラビンＴ（Sigma Chemical社, St. Louis, MO）の５０ｍＭ  ＮａＰＯ4（ｐＨ６．０）中溶液に添加した。最初の試験により、１００μＭ  チオフラビンＴの存在下でＡβの濃度が増加すると蛍光も比例して増加することが示されたが、この試験では比例しない内部フィルター効果の存在は除外した。４８２ｎｍでの蛍光発光をTurner instrument−モデル４５０蛍光光度計で、励起波長４５０ｎｍで測定した。それぞれの測定では、チオフラビンＴ試薬のみの存在下で蛍光光度計を０点調整し、５０ｎｇ／ｍｌのリボフラビン（Sigma Chemical社, St Louis, MO）のチオフラビンＴ試薬中溶液を１８００蛍光ユニットに調整した。蛍光測定は全てこれらの対照に基づいて行い、チオフラビンＴ試薬の存在下でいずれの化合物から放出されるいずれの蛍光も、常に全ての関連する示数から差し引いた。
【００５１】
チオフラビンＴ蛍光光度法を利用する全てのフィブリル発生の研究には、試験化合物の存在下または非存在下でのＡβの比較をペアにしたｔ検定で行い、データを平均値＋／−標準偏差で示した。有意性は９５％（ｐ＜０．０５）、９９％（ｐ＜０．０１）、および９９．９９９％（ｐ＜０．００１）の信頼レベルで報告した。
【００５２】
図２に示すように、最初のセットの試験で、種々の試験化合物のＡβ（１−４０）アミロイド・フィブリル生成に対する影響を、１週間のインキュベーション期間にわたって評価した。新たに懸濁した単独のＡβ（１−４０）は、３７℃で１時間のインキュベーションの後、７５＋／−９蛍光ユニットの初期蛍光を示した。１週間のインキュベーション期間の間、単独Ａβ（１−４０）の蛍光は徐々に増加し、１時間から１週間までに６．１倍に増加し、４５９＋／−１８蛍光ユニットのピークの蛍光が１週間目に観察された（図２）。グルコース・ペンタスルフェート（ＰＴＩ−４８５７９）のみがＡβ（１−４０）アミロイド・フィブリル生成を阻害した。グルコース・ペンタスルフェートによるＡβアミロイド・フィブリル生成の有意な阻害はインキュベーション後、３日で最初に観察された。グルコース・ペンタスルフェート（ＰＴＩ−４８５７９）によるＡβアミロイド・フィブリル生成の有意な阻害（ｐ＜０．００１）は、３日および１週間で観察された。１週間で、グルコース・ペンタスルフェートはアミロイド・フィブリル生成を８０％まで有意に（ｐ＜０．００１）阻害する効果があった。この初期データは、グルコース・ペンタスルフェートが明らかにアルツハイマーのアミロイド・フィブリル生成の有効な阻害剤であることを示唆している。マンノース・ペンタスルフェート（ＰＴＩ−０７４９９）はグルコース・ペンタスルフェートと同一の化学構造および分子量からなるが（すなわちＣ6Ｈ7Ｏ21Ｓ5Ｋ5、分子量＝７７１；図１参照）、Ａβ（１−４０）フィブリル生成を阻害しなかったことに留意されたい。グルコース・ペンタスルフェートおよびマンノース・ペンタスルフェートはいずれも同数の硫酸基（すなわち５個）を含有し、グルコース・ペンタスルフェートのみがアルツハイマーのアミロイド・フィブリル生成の阻害に有効であるため、この試験は、特定のグルコースの単糖バックボーンの観点が作用機構において重要な役割を果たすことを意味している。
【００５３】
実施例２  グルコース・ペンタスルフェートによるアルツハイマーのＡβ（１−４０）アミロイド・フィブリル生成の用量依存的阻害
この試験では、グルコース・ペンタスルフェート（ＰＴＩ−４８５７９）のＡβ（１−４０）フィブリル新生に対する用量依存的効果を、チオフラビンＴ蛍光光度アッセイを使用して測定した。２５μＭのＡβ（１−４０）（Bachem社, Torrance, CA, USA；ロット＃WM365）を遠心チューブ内で、単独か、または１．２５ｍＭ（すなわち１：５０Ｍ比のＡβ：ＰＴＩ−４８５７９）、０．４１ｍＭ、０．１３８ｍＭ、および０．０４６ｍＭのグルコース・ペンタスルフェートの１５０ｍＭ  トリスＨＣｌ、１０ｍＭ  ＮａＣｌ、ｐＨ７．０（ＴＢＳ）中溶液の存在下で、３７℃で１週間インキュベートを行った（３部について）。５０μｌアリコートをそれぞれのチューブから採取して、１時間、１日、３日、および１週間での分析をチオフラビンＴ蛍光光度法を使用して４．１節に記載するように行った。図３に示すように、新たに懸濁した単独のＡβ（１−４０）は、３７℃で１時間のインキュベーションの後、１１３＋／−７蛍光ユニットの初期蛍光を示した。１週間のインキュベーション期間の間、単独Ａβ（１−４０）の蛍光は徐々に増加し、１時間から１週間までに２．２倍に増加し、２５０＋／−５０蛍光ユニットのピークの蛍光が１週間目に観察された。グルコース・ペンタスルフェート（ＰＴＩ−４８５７９）は３日および１週間でＡβアミロイド・フィブリル生成を用量依存的に阻害した（図３）。３日目で０．０４６ｍＭ、０．１３８ｍＭ、および０．４１ｍＭのＰＴＩ−４８５７９はＡβフィブリル生成を有意に阻害しなかったが、１．２５ｍＭのＰＴＩ−４８５７９はＡβフィブリル生成の有意な（ｐ＜０．００１）３９％の阻害を誘引した。１週間で、グルコース・ペンタスルフェートによるＡβ（１−４０）フィブリル新生の用量依存的阻害が観察された。１．２５ｍＭおよび０．４１ｍＭのＰＴＩ−４８５７９は、それぞれ７２％および４７％の有意な（ｐ＜０．００１）Ａβ（１−４０）フィブリル新生阻害を誘引した。従ってこの試験により、Ａβ（１−４０）アミロイド・フィブリル生成の阻害に対するグルコース・ペンタスルフェートの効果は、特にインキュベーション後１週間で、用量依存的に生じることが証明された。
【００５４】
実施例３  グルコース・ペンタスルフェートは既成のアルツハイマー病アミロイド・フィブリルの溶解を用量依存的に誘引する
次の試験を実施して、グルコース・ペンタスルフェートが既成のアルツハイマー病Ａβ（１−４０）アミロイド・フィブリルの用量依存的溶解／分解を誘引する能力があるかどうかを確認した。この種の活性は、すでにかなりのアミロイド沈着を器官および／または組織に有する患者に使用できる可能性のある抗−アミロイド剤に重要である。例えば、中−後期のアルツハイマー病患者は、神経プラークおよび脳血管性アミロイド沈着の両部分として脳に多くのアミロイド沈着を有する。既成のアミロイドの溶解を誘引する能力のある天然の治療薬は、病気の経過の後期にあるこれらの患者への使用に有益である。
【００５５】
この試験のために、１ｍｇのＡβ（１−４０）（Bachem社, Torrance, CA, USA；ロット＃WM365）を１．０ｍｌの二重蒸留水に溶解し（１ｍｇ／ｍｌ溶液）、その後３７℃で１週間インキュベートした。次いで２５μＭのフィブリル化したＡβを、１．２５ｍＭ、０．６３ｍＭ、０．３１ｍＭ、および０．１６ｍＭの濃度のグルコース・ペンタスルフェートを含有する１５０ｍＭ  トリスＨＣｌ、１０ｍＭ  ＮａＣｌ2（ｐＨ７．０）の存在下または非存在下で、３７℃でインキュベートした。４日間のインキュベーションの後、５０μｌアリコートを１．２ｍｌの１００μＭ  チオフラビンＴ（Sigma Chemical社, St. Louis, MO）の５０ｍＭ  ＮａＰＯ4（ｐＨ６．０）中溶液に添加して、４．１節に記載したように蛍光光度計で測定した。
【００５６】
図４に示すように、既成のアルツハイマー病Ａβアミロイド・フィブリルのグルコース・ペンタスルフェート（ＰＴＩ−４８５７９）による溶解／分解は用量依存的に生じる。有意な（ｐ＜０．００１）６０％の既成のＡβアミロイド・フィブリルの溶解が１．２５ｍＭのＰＴＩ−４８５７９で観察され、０．６３ｍＭのＰＴＩ−４８５７９では有意な（ｐ＜０．００１）４７％の溶解が誘引された。更に、０．３１ｍＭおよび０．１６ｍＭのＰＴＩ−４８５７９でも有意な（ｐ＜０．０１）３１％および２３％の既成のＡβアミロイド・フィブリルの溶解が誘引された。これらのデータにより、グルコース・ペンタスルフェートが既成のアルツハイマー病アミロイド・フィブリルの溶解／分解を用量依存的に誘引することが証明された。
【００５７】
実施例４  グルコース・ペンタスルフェート（ＰＴＩ−４８５７９）はＡβプロテオグリカン／グリコサミノグリカン相互作用を用量依存的に阻害する
次の試験を実施して、グルコース・ペンタスルフェートがＡβ−ＰＧ／ＧＡＧ相互作用の効果的な阻害剤であるかどうか、そしてこの阻害が用量依存的に生じるかどうかを確認した。特定のＰＧ類／ＧＡＧ類はアミロイド沈着に蓄積することが発見されており、また好ましくない“アミロイド”を除去する身体の生来の能力を阻害すると考えられるので（Snow and Wight, Neurobiology Aging 10:481-497, 1989に評論されている）、Ａβ−ＰＧ／ＧＡＧ相互作用の阻害剤はアミロイド治療に好適な更なる標的であるべきである。この試験では、固相結合イムノアッセイを利用して、グルコース・ペンタスルフェートがＡβ−ＰＧ／ＧＡＧ相互作用の有効な阻害剤でもあるかどうかを確認した。
【００５８】
１２μｇのヘパリン（分子量＝５，０００；Sigma Chemical社, St. Louis, MO, USAから入手）またはヘパラン硫酸（分子量＝〜７０，０００；Seikagaku America, Rockville, Marylandから入手）／８０μｌのトリスバッファー（１００ｍＭ  トリス−ＨＣｌ、５０ｍＭ  ＮａＣｌ、３ｍＭ  ＮａＮ3を含有。ｐＨ９．０）（ＴＢＳ）中溶液を、４℃で一晩、マイクロタイターウェル（Nunc plates, Maxisorb）に結合させた。翌日、３００μｌの０．０５％  Ｔｗｅｅｎ−２０含有ＴＢＳ （ＴＴＢＳ）に１％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）（Sigma Chemical Company, St. Louis, MO, USAから入手）を添加したものと共に２時間インキュベートすることにより、全てのマイクロタイターウェルをブロックした。次いで、１００μｌの５μＭ  Ａβ１−４０（Bachem社, Torrance, CA, USA；ロット＃WM365）の０．０５％アルブミン含有ＴＴＢＳ中溶液を、２．５ｍＭ、０．８３ｍＭ、０．２８ｍＭ、および０．０９３ｍＭの濃度のグルコース・ペンタスルフェートの存在下または非存在下で、基質が結合したパールカン（perlecan）を含有するかまたはブランクのウェルに注入し（３部について）、４℃で一晩結合させた。翌日、ウェルをＴＴＢＳで１回洗浄し、次いで１００μｌの抗−６Ｅ１０（Senetek, Maryland Heights, Missouri）（Ａβ１−１７を認識） をＴＴＢＳで１：１０００に希釈したもので４５分間標識した。これに続いてＴＴＢＳで１回洗浄し、ストレプトアビジン−ペルオキシダーゼまたは抗−ビオチン−ペルオキシダーゼ（２μｇ／ｍｌ溶液の１：５００希釈液）（Sigma社 Company, St. Louis, MO, USA）を含有するビオチン化したヤギ−抗マウス（１：１０００に希釈）の０．１％ＢＳＡ含有ＴＴＢＳ中で４５分間標識した。次いでウェルをＴＴＢＳで３回洗浄し、１００μｌの基質溶液（OPD-Sigma Fast、Sigma Chemical社 St. Louis, MOから入手）をそれぞれのウェルに添加し、５分間、または有意な色調変化が観察されるまで発色させた。５０μｌの４Ｎ  Ｈ2ＳＯ4で反応を停止し、Model 450マイクロプレート・リーダー（Biorad, Hercules, CA, USA）を使用して４９０ｎｍで測定した。
【００５９】
図５に示すように、グルコース・ペンタスルフェート（ＰＴＩ−４８５７９）は基質が結合したヘパリンへのＡβの結合を有意に（ｐ＜０．００１）用量依存的に低下させた。有意な（ｐ＜０．００１）７８％の阻害が２．５ｍＭのＰＴＩ−４８５７９で観察され、０．８３ｍＭのＰＴＩ−４８５７９は有意な（ｐ＜０．００１）９２％の阻害を誘引した（図５）。０．２８ｍＭおよび０．０９３ｍＭのＰＴＩ−４８５７９でもＡβ−ヘパリン結合の有意な阻害の誘引が見られた（それぞれ７４％および４５％）。 ＰＴＩ−４８５７９はＡβ−ヘパラン硫酸結合の有意な用量依存的阻害も同様に誘引した（示していない）。これらのデータにより、グルコース・ペンタスルフェートがＡβ−ＰＧ／ＧＡＧ相互作用を用量依存的に阻害する能力もあることが証明された。
【００６０】
実施例５  島アミロイド・ポリペプチド含有フィブリルはグルコース・ペンタスルフェートによって溶解されるがマンノース・ペンタスルフェートでは溶解されない
９０％のＩＩ型糖尿病患者は膵臓のランゲルハンス島にアミロイド・フィブリルの沈着および蓄積を示す。このアミロイドは“島アミロイド”として知られ、島アミロイド・ポリペプチドまたはアミリンとして知られる３７アミノ酸タンパク質からなる。島アミロイドは膵臓のベータ細胞の破壊に関与すると信じられており、これによってやがては多くの患者がインシュリン依存性（すなわちＩ型糖尿病）となる。島アミロイド・ポリペプチドは、溶液中に入れると即時にかなりのアミロイド・フィブリルを生成する異常なほどの能力も有する。従って次の試験は、グルコース・ペンタスルフェートが別の型のアミロイド症の溶解も誘引するかどうか、また、この影響も長期的に持続するかどうかを確認するために行った。
【００６１】
この試験のために、上に記載したようなチオフラビンＴ蛍光光度法を使用した。簡単にいえば、２５μＭのヒト島アミロイド・ポリペプチド（Bachem社, Torrance, CA, USA；ロット＃WL934）をマイクロ遠心チューブ内で、単独で、または１．２５ｍＭ  グルコース・ペンタスルフェート（ＰＴＩ−４８５７９；分子量＝７７１）もしくはマンノース・ペンタスルフェート（ＰＴＩ−０７４９９；分子量＝７７１）の存在下で、３７℃で１週間インキュベートした（３部について）。グルコース・ペンタスルフェートおよびマンノース・ペンタスルフェートの島アミロイド・ポリペプチド・フィブリル新生に対する効果を評価するため、５０μｌアリコートをそれぞれのチューブから採取し、１時間、１日、２日、３日、４日、および１週間目に分析した。上記のそれぞれの測定のために、それぞれのインキュベーション期間の後、５０μｌアリコートの島アミロイド・ポリペプチド＋／−グルコース・ペンタスルフェートまたはマンノース・ペンタスルフェートを、１．２ｍｌの１００μＭチオフラビンＴ（Sigma Chemical社, St. Louis, MO）の５０ｍＭ  ＮａＰＯ4（ｐＨ６．０）中溶液に添加し、４．１節に記載したように蛍光測定した。
【００６２】
図６に示すように、新たに懸濁した単独の島アミロイド・ポリペプチドは、３７℃で１時間のインキュベーション後、初期の蛍光が１２８１＋／−９蛍光ユニットであった。１週間のインキュベーション期間の間、島アミロイド・ポリペプチド含有フィブリルのレベルは、チオフラビンＴ蛍光光度法で測定したところ、ほぼ同程度のままであった（図６）。グルコース・ペンタスルフェート（ＰＴＩ−４８５７９）は既成のアミリン・フィブリルをわずか１週間で５７％まで、有意に溶解することが見出された。島アミロイド・ポリペプチド含有フィブリルのグルコース・ペンタスルフェートによる明白な溶解は、より早い時点（すなわち１時間、１日、および２日）で島アミロイド・ポリペプチド・フィブリル新生が初めに増加した後にのみ観察された（図６）。他方、マンノース・ペンタスルフェートは全ての時点で島アミロイド・ポリペプチド・フィブリルの新生を有意に増加させた（図６）。従ってこの試験により、グルコース・ペンタスルフェートは他の形態のアミロイド（例えば島アミロイド・ポリペプチド含有フィブリル；ＩＩ型糖尿病に重要）の有意な溶解を誘引する能力も有するが、しかしマンノース・ペンタスルフェートはそうではなく、またこれは長期のインキュベーション（すなわち１週間）後だけであることが証明された。
【００６３】
本発明の更なる観点と利用
治療的適用
本発明の一態様は、１つ以上の薬剤的に許容しうるキャリアー、希釈剤、または賦形剤中のグルコース・ペンタスルフェート、薬剤的に許容しうるその塩、または関連するその誘導体を含有する医薬製剤を、患者への投与の前に調製することである。好ましい態様では、アルツハイマー病または他のアミロイド性疾患を有する患者がグルコース・ペンタスルフェート、薬剤的に許容しうるその塩、および／または関連するその誘導体を、ピル、錠剤、カプレット、軟質および硬質ゼラチンカプセル、トローチ剤、ベジキャップ、液体ドロップ、溶液、シロップ、ティーバック、および／または粉末の形態で、経口的に摂取する。
【００６４】
別の好ましい態様では、ラクトース、デキストロース、スクロース、ソルビトール、マンニトール、デンプン、アカシアゴム、リン酸カルシウム、アルギン酸、トラガカント、ゼラチン、ケイ酸カルシウム、微結晶セルロース、ポリビニルピロリドン、セルロース、水シロップ、メチルセルロース、メチルおよびプロピルヒドロキシベンゾエート、タルク、ステアリン酸マグネシウム、および鉱油を含む好適なキャリアー、賦形剤、および希釈剤を使用して、いずれかの形態で得たグルコース・ペンタスルフェート、薬剤的に許容しうるその塩、または関連するその誘導体を更に調節することができた。製剤は更に潤滑剤、湿潤剤、乳化および懸濁剤、保存剤、甘味料、または香料を含有してもよい。本発明の組成物は、患者への投与後の活性成分の反応を迅速に、持続的に、または遅延させるように調製してもよい。組成物は単位用量剤形に調製するのが好ましく、それぞれの投薬量は約５〜約１０，０００ｍｇのグルコース・ペンタスルフェート（または近い関係にある誘導体）、より一般的には約４００〜約７５０ｍｇのグルコース・ペンタスルフェート（または関連する誘導体）を含有する。しかしながら理解されるように、治療のための投与量は、治療する病状、アミロイドが蓄積している、または蓄積している疑いのある器官または組織、そして選択する投与経路を含む関係する状況を考慮して、医師によって決定される。従って、上記の投与量の範囲は本発明の範囲をいかなる様にも制限することを意図するものではない。“単位用量剤形”とは、ヒト患者または他の哺乳類への単位投与量として好適な物理的に分離した単位をいい、それぞれの単位は、所望の治療効果を得るために算定した、あらかじめ決定した量の活性物質を好適な薬剤キャリアーと共に含有する。
【００６５】
以下の製剤の例は単に例証であり、本発明の範囲をいかなる様にも制限することを意図しない。例として挙げるそれぞれの製剤を得るには、グルコース・ペンタスルフェート；薬剤的に許容しうるその塩；または関連するその誘導体；の濃度を低下または増加した場合、記載する他の成分をそれに比例して低下または増加させる。硬質ゼラチンカプセルを調製するには５００ｍｇのグルコース・ペンタスルフェート、薬剤的に許容しうるその塩（または関連するその誘導体）、４００ｍｇのデンプン、および２０ｍｇのステアリン酸マグネシウムを使用してもよい。上記の成分を混合し、硬質ゼラチンカプセルに９２０ｍｇの量を充填する。
【００６６】
錠剤の調製には、５００ｍｇのグルコース・ペンタスルフェート、薬剤的に許容しうるその塩、または関連するその誘導体、８００ｍｇの微結晶セルロース、２０ｍｇの燻煙（fumed）二酸化ケイ素、および１０ｍｇのステアリン酸を使用する。成分を混合し、圧縮して錠剤を調製するが、それぞれの重量は１２３０ｍｇである。
【００６７】
エアロゾル溶液の調製には、０．２５のグルコース・ペンタスルフェート、薬剤的に許容しうるその塩、または関連するその誘導体、２９．７５のエタノール、および７０のプロペレント２２（クロロジフルオロメタン）を使用する。グルコース・ペンタスルフェート、薬剤的に許容しうるその塩、または関連するその誘導体をエタノールと混合する。混合液をプロペレント２２の一部に添加し、−３０℃に冷却し、充填装置に移す。次いで必要量をステンレス容器に注入し、残りのプロペレントで希釈する。次いでユニット値（上記）を容器に合わせて調整する。それらのグルコース・ペンタスルフェート（またはその関連する誘導体）のエアロゾル剤は、エアロゾルまたは鼻スプレーを使用することにより、脳に関与するアミロイド（アルツハイマー病、ダウン症候群、プリオン疾患など）の治療に有用である。これまでの研究で、これらの中枢神経系アミロイド症では、病因において役割を果たす可能性のある環境要因の侵入の初期形態は、鼻経路で外界から誘導されうることが示されている。
【００６８】
錠剤の調製には、１２０ｍｇのグルコース・ペンタスルフェート、薬剤的に許容しうるその塩、または関連するその誘導体、９０ｍｇのデンプン、７０ｍｇの微結晶セルロース、８ｍｇのポリビニルピロリドン（１０％水溶液で）、９ｍｇのカルボキシメチルデンプンナトリウム、１ｍｇのステアリン酸マグネシウム、および１ｍｇのタルク（総量＝３００ｍｇ）を使用する。グルコース・ペンタスルフェート、薬剤的に許容しうるその塩、または関連するその誘導体、デンプン、およびセルロースをＮｏ．４５メッシュ（U.S.）のふるいを通過させ、完全に混合する。ポリビニルピロリドンの溶液を得られた粉末と混合し、次いでこれをＮo．１４メッシュ（U.S.）のふるいを通過させる。そのようにして生成した顆粒を５０℃で乾燥し、Ｎo．１８メッシュ（U.S.）のふるいを通過させる。カルボキシメチルデンプンナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、およびタルクはあらかじめＮo．６０メッシュ（U.S.）のふるいを通過させ、これを顆粒に添加し、混合後、打錠機で圧縮して、それぞれの重量が３００ｍｇである錠剤を得る。
【００６９】
それぞれ１６０ｍｇの医薬物質を含有するカプセルは、１６０ｍｇのグルコース・ペンタスルフェート、薬剤的に許容しうるその塩、または関連するその誘導体、１１８ｍｇのデンプン、１１８ｍｇの微結晶セルロース、および４ｍｇのステアリン酸マグネシウム（総量＝４００ｍｇ）を使用して調製する。グルコース・ペンタスルフェート、薬剤的に許容しうるその塩、または関連するその誘導体、セルロース、デンプン、およびステアリン酸マグネシウムを混合し、Ｎo．４５メッシュ（U.S.）のふるいを通過させ、硬質ゼラチンカプセルに４００ｍｇを充填する。
【００７０】
それぞれ２２５ｍｇのグルコース・ペンタスルフェート、薬剤的に許容しうるその塩、または関連するその誘導体を含有する坐薬は、２２５ｍｇのグルコース・ペンタスルフェート、薬剤的に許容しうるその塩、または関連するその誘導体、２，０００ｍｇの飽和脂肪酸グリセリド（総量＝２，２２５ｍｇ）を使用して調製する。グルコース・ペンタスルフェート、薬剤的に許容しうるその塩、または関連するその誘導体をＮo．６０メッシュ（U.S.）のふるいを通過させ、飽和脂肪酸グリセリド（必要により最小限に加熱してあらかじめ融解する）に懸濁する。次いで混合液を公称容量２ｇの坐薬鋳型に注入して放冷する。
【００７１】
それぞれ５ｍｌの投与量につき５０ｍｇの医薬物質を含有する懸濁液は、５０ｍｇのグルコース・ペンタスルフェート、薬剤的に許容しうるその塩、または関連するその誘導体、５０ｍｇのカルボキシメチルセルロースナトリウム、１．２５ｍｌのシロップ、０．１０ｍｌの安息香酸溶液、香料、色素、および精製水を使用して調製し、総量５ｍｌとする。医薬物質をＮo．４５メッシュ（U.S.）のふるいを通過させ、カルボキシメチルセルロースナトリウムおよびシロップと混合し、なめらかなペーストとする。安息香酸溶液、香料、および色素を水で希釈し、撹拌しながら添加する。次いで十分量の水を添加して必要な容量とする。
【００７２】
静脈内製剤は、２５０ｍｇのグルコース・ペンタスルフェート、薬剤的に許容しうるその塩、または関連するその誘導体、および１０００ｍｇの等張食塩水を使用して調製する。上記成分の溶液を毎分１ｍｌの速度で治療を必要とする被験体に静脈内投与する。
【００７３】
好ましい態様では、本発明の治療化合物を薬剤的に許容しうるビヒクル中で投与することができる。ここで使用する“薬剤的に許容しうるビヒクル”には、全てのあらゆる溶媒、無菌の液体（例えば水や油で、鉱物、動物、野菜、または合成由来のもの（ピーナツ油、ダイズ油、鉱油、ゴマ油などのような）を含む）、分散媒、コーティング、抗菌剤および抗真菌剤、等張性吸着遅延剤などで、化合物の活性と適合性があり、被験体にとって生理学的に許容できるものがあるが、それらに限定されるものではない。薬剤的に許容しうるビヒクルの一例は緩衝正常食塩水（０．１５モルＮａＣｌ）である。そのような媒体および薬剤を薬剤的に活性な物質に使用することは当該分野で周知である。補助的な活性化合物を組成物に取り入れることもできる。好適な賦形剤にはデンプン、グルコース、ラクトース、スクロース、ゼラチン、麦芽、米、小麦、チョーク、シリカゲル、炭酸マグネシウム、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸ナトリウム、グリセロールモノステアリン酸、タルク、塩化ナトリウム、乾燥スキムミルク、グリセロール、プロピレングリコール、水、エタノールなどがある。これらの組成物は、溶液、懸濁液、錠剤、ピル、カプセル、粉末、徐放性製剤などの剤形をとることができる。
【００７４】
本発明の方法では、被験体におけるアミロイドの生成、沈着、蓄積、および／または残存を、グルコース・ペンタスルフェート、薬剤的に許容しうるその塩、または関連するその誘導体を治療のための投与量で被験体に投与することにより阻害する。被験体は、アミロイド症が起こりうる生きた生体を含むことを意図する。被験体の例にはヒト、サル、ウシ、イヌ、ヒツジ、ネコ、マウス、ラット、およびそれらのトランスジェニック種がある。本発明の組成物の治療すべき被験体への投与は、被験体におけるアミロイド症の阻害に有効な既知の方法、投与量および期間で実施できる。治療効果を得るために必要な治療化合物の有効量は、被験体における器官または組織部位に既に沈着したアミロイドの量、被験体の年齢、性別、および体重、そして被験体におけるアミロイドの生成、沈着、蓄積、残存を阻害し、そして／または既成のアミロイドを溶解する治療化合物の能力の様な因子によって変化しうる。従って投与計画は最適な治療反応が得られるように調整できる。例えば、数回の分割した投与を毎日行ってもよく、または投与は、治療条件によって必要とされるのに合わせて低減してもよい。グルコース・ペンタスルフェート、薬剤的に許容しうるその塩、または関連するその誘導体の有効投与量の範囲は、非限定的な例として、５〜５００ｍｇ／ｋｇ体重／日の間である。
【００７５】
グルコース・ペンタスルフェート、薬剤的に許容しうるその塩、または関連するその誘導体の種々の送達様式を使用してもよい。従って、好ましい投与経路は経口投与である。あるいはまた、グルコース・ペンタスルフェート、薬剤的に許容しうるその塩、または関連するその誘導体を皮下、静脈内、腹膜内、注射によって投与される全ての経路のような、他の好適な経路によって投与してもよい。投与経路によって、酸の作用および化合物を不活性化しうる他の自然条件から化合物を保護する物質で活性化合物を被覆してもよい。
【００７６】
グルコース・ペンタスルフェート、薬剤的に許容しうるその塩、または関連するその誘導体を投与するために、化合物をその活性化を防ぐ物質で被覆するか、またはその活性化を防ぐ物質と共投与する必要がありうる。例えば、治療化合物を好適なキャリアー（例えばリポソーム）または希釈剤中で被験体に投与してもよい。薬剤的に許容しうる希釈剤には生理食塩水および緩衝水溶液がある。リポソームには水中油中水型ＣＧＦエマルジョン並びに一般的なリポソームがある。
【００７７】
グルコース・ペンタスルフェート、薬剤的に許容しうるその塩、もしくは関連するその誘導体を非経口で、または腹膜内に投与してもよい。グリセロール、液体ポリエチレングリコール、およびそれらの混合物中、そして油中に分散させることができる。通常の貯蔵および使用条件下では、これらの製剤は微生物の増殖を防ぐ保存剤を含有してもよい。
【００７８】
注射への使用に好適な薬剤組成物には無菌の水溶液または分散液、および無菌の注射液または分散液を調製するための無菌の粉末がある。いずれの場合も、組成物は無菌でなければならず、また注射器からの射出（exists）に容易に使用できる程度の流動性を有する必要がある。製造および保存条件下で安定でなければならず、また細菌や真菌のような微生物の汚染作用から保存されなければならない。ビヒクルは、例えば水、エタノール、ポリオール（例えばグリセロール、プロピレングリコール、および液体ポリエチレングリコールなど）、それらの好適な混合物、および植物油を含有する、溶媒または分散媒であってもよい。例えば、レシチンのようなコーティングの使用、分散媒の場合には必要な粒子サイズの保持、および界面活性剤の使用をすることにより、適切な流動性を維持することができる。微生物の作用の防止は、種々の抗菌剤および抗真菌剤（例えばプラベン（prabens）、クロロブタノール、フェノール、アスコルビン酸、チメロサールなど）により行うことができる。多くの場合、等張試薬（例えば砂糖、塩化ナトリウム、またはマンニトールおよびソルビトールのようなポリアルコール）を組成物中に含有するのが好ましい。注射用組成物を持続的に吸収させるために、組成物中に吸収を遅延させる物質（例えばモノステアリン酸アルミニウムまたはゼラチン）を含有させてもよい。
【００７９】
無菌注射液は、必要量の治療化合物を好適な溶媒中に上記の成分の一つまたは組み合わせたものを必要により混合し、濾過滅菌して調製することができる。一般に、分散液は、治療化合物を基本的な分散媒および上記の中から必要とされる他の成分を含有する無菌ビヒクルに混合して調製することができる。無菌注射液を調製するための無菌粉末の場合、好ましい調製法は真空乾燥および凍結乾燥して、あらかじめ無菌濾過した溶液から治療薬および所望の成分の粉末を得るものである。
【００８０】
グルコース・ペンタスルフェート、薬剤的に許容しうるその塩、または関連するその誘導体は、アルツハイマー病および他の中枢神経系アミロイド症のために、血液−脳関門を通過するのに最適化してもよい。導入方法には、それらに限定されるものではないが、全身投与、非経口投与、すなわち腹膜内、静脈内、口周囲、皮下、筋肉内、動脈内、皮膚内、筋肉内、鼻腔内、硬膜外、および経口経路がある。好ましい態様では、グルコース・ペンタスルフェート、薬剤的に許容しうるその塩（または関連するその誘導体）を脳室内注射によって脳脊髄液に直接投与してもよい。特定の態様では、グルコース・ペンタスルフェート、薬剤的に許容しうるその塩、または関連するその誘導体を治療の必要な部位または組織に局所的に投与してもよい；これは例えば（限定としてではなく）手術中の局所注入、局所適用、注射、浸透圧ポンプを接続したカニューレを使用する注入、カテーテル、坐薬、またはインプラントによって行ってもよい。
【００８１】
更に別の態様では、グルコース・ペンタスルフェート、薬剤的に許容しうるその塩、または関連するその誘導体を浸透圧ポンプのような徐放システムで送達してもよい。更に別の態様では、徐放システムを治療標的（すなわち脳）の付近に配することができ、従って全身投与の画分だけを必要とする。
【００８２】
更に別の態様では、本発明の治療化合物を血液−脳関門を通過するように、例えばリポソームに調製することができる。リポソームの製造方法には、例えば米国特許第4,522,811号；第5,374,548号；および5,399,331号を参照されたい。リポソームは、特定の細胞または器官に選択的に輸送される部分を１つ以上含有して、それによって標的化された薬剤送達を提供してもよい（例えばRanade, J. Clin. Pharmacol. 29:685, 1989を参照されたい）。代表的なターゲッティング部分にはフォレートまたはビオチン（例えば米国特許第5,416,016号）、マンノシド（Umezawaら, Biochem. Biophys. Res. Comm. 153, 1038, 1988）、抗体（Bloemanら, FEBS Lett. 357:140, 1995；Owaisら, Antimicrob. Agents Chemother. 39:180, 1995）、界面活性タンパク質Ａレセプター（Briscoeら, Am. J. Physiol. 1233:134, 1995）、ｇｐ１２０（Schreierら, J. Biol. Chem. 269:9090, 1994；KillionおよびFidler, Immunomethods 4:273, 1994）がある。好ましい態様では、本発明の治療化合物を調製してリポソームとする。
【００８３】
上述のシステムおよび成分に関しては、本明細書中で詳しく特定または記載していない限り、このようなシステムおよび構成要素の作用および仕様、並びにこれらが製造、組立、あるいは使用される態様は、互いに共同的であり、そしてここに開示する目的に影響する本明細書中で記載した本発明の別の要素とあわせて用いる場合もともに、全て当業者の知識の範囲内にあるものと信じられる。従って、当業者に一般的に知られる事柄について一斉に反復を繰り返すような試みはしなかった。
【００８４】
産業上の利用可能性
グルコース・ペンタスルフェート、薬剤的に許容しうるその塩、または関連するその誘導体の使用は、アルツハイマー病および他のアミロイド症に罹患したヒト患者にとって有益であると予想されるが、これはグルコース・ペンタスルフェートの新たに発見されたアミロイド・フィブリル生成の阻害、アミロイド−プロテオグリカン相互作用の阻害、アミロイド−グリコサミノグリカン相互作用の阻害、そして既成のアミロイド・フィブリルの溶解および／または分解の誘引をする能力によるものである。
【００８５】
法令に従って、本発明は構造に関して多かれ少なかれ特定的な用語で記載した。しかしながら、それはここに示す方法および解釈が本発明を実施するための好ましい型を含むものであるため、本発明がここに示す特定の特徴に制限されるものではないことは理解される。従って本発明は、添付の請求の範囲の論理的かつ有効な範囲内のいずれの型または修飾として請求され、同等の理論に従って好適に解釈される。
【図面の簡単な説明】
【図１】  グルコース・ペンタスルフェート（ＰＴＩ−４８５７９と記載）とマンノース・ペンタスルフェート（ＰＴＩ−０７４９９と記載）の化学構造の比較を示す。両者は同一の化学式および同数の硫酸基を有するにもかかわらず、グルコース・ペンタスルフェートはＡβアミロイド・フィブリルの生成の阻害に有効であり、マンノース・ペンタスルフェートは有効ではないことが明らかとなった。
【図２】  Ａβ（１−４０）アミロイド・フィブリルの生成阻害剤を同定するために使用した１週間のチオフラビンＴ蛍光アッセイの白黒グラフである。グルコース・ペンタスルフェート（ＰＴＩ−４８５７９）はインキュベーション後３および７日でＡβ（１−４０）アミロイド・フィブリルの生成の有効な阻害剤であることが示されている。
【図３】  Ａβアミロイド・フィブリルの生成阻害に対するグルコース・ペンタスルフェート（ＰＴＩ−４８５７９）の考えられる用量依存的効果を測定するために使用した、１週間のチオフラビンＴ蛍光アッセイの白黒グラフである。 Ａβ（１−４０）アミロイド・フィブリル生成の顕著な用量依存的阻害が、グルコース・ペンタスルフェートを用いた治療の１週間目で観察された。
【図４】  ４日のインキュベーション期間内における既成のＡβ（１−４０）アミロイド・フィブリルの溶解に対するグルコース・ペンタスルフェート（ＰＴＩ−４８５７９）の考えられる用量依存的効果を測定するために使用した、チオフラビンＴ蛍光アッセイの白黒グラフである。グルコース・ペンタスルフェートは既成のＡβアミロイド・フィブリルの溶解を用量依存的に誘引する。
【図５】  Ａβ−ＰＧ／ＧＡＧ相互作用の阻害に対するグルコース・ペンタスルフェート（ＰＴＩ−４８５７９）の考えられる用量依存的効果を測定するために使用した、固相結合アッセイの白黒グラフである。Ａβ−ヘパラン硫酸／ヘパリン相互作用の顕著な用量依存的阻害がグルコース・ペンタスルフェートによる処理で観察されている。
【図６】  グルコース・ペンタスルフェート（ＰＴＩ−４８５７９）およびマンノース・ペンタスルフェート（ＰＴＩ−０７４９９）の島アミロイド・ポリペプチド（すなわちアミリン）のフィブリル発生に対する効果を測定するために使用した、１週間のチオフラビンＴ蛍光アッセイの白黒グラフである。グルコース・ペンタスルフェートは１週間のインキュベーションで、そしてより早い時点（すなわち１時間、１日、および２日）における島アミロイド・ポリペプチド・フィブリル新生での初期の増加の後でのみ、島アミロイド・ポリペプチド含有フィブリルの有意な溶解を誘引した。一方、マンノース・ペンタスルフェートは、全ての時点において島アミロイド・ポリペプチドのフィブリル発生の増加を誘引した。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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