【手続補正書】
【提出日】平成15年11月18日(2003.11.18)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
リボソームの外壁の少なくとも一部がポリヒドロキシアルカノエートにより被覆されていることを特徴とする、ポリヒドロキシアルカノエート被覆リポソーム。
【請求項２】
前記ポリヒドロキシアルカノエートが、式[１]から式[10]に示すモノマーユニットからなる群より選択される少なくとも一つを含有する、請求項１に記載のポリヒドロキシアルカノエート被覆リポソーム。
【化１】
2003024767.tif 000001
(ただし、前記モノマーユニットは、式中Ｒ１およびａの組合せが下記のいずれかであるモノマーユニットからなる群より選択される少なくとも一つである。
Ｒ１が水素原子(Ｈ)であり、ａが０から10の整数のいずれかであるモノマーユニット、
Ｒ１がハロゲン原子であり、ａが１から10の整数のいずれかであるモノマーユニット、
Ｒ１が発色団であり、ａが１から10の整数のいずれかであるモノマーユニット、
Ｒ1がカルボキシル基あるいはその塩であり、ａが１から10の整数であるモノマーユニット、
Ｒ1が、
【化２】
2003024767.tif 000002
であり、ａが１から７の整数のいずれかであるモノマーユニット。)
【化３】
2003024767.tif 000003
(ただし、式中bは０から７の整数のいずれかを表し、Ｒ２は水素原子(Ｈ)、ハロゲン原子、-ＣＮ、-ＮＯ2、-ＣＦ3、-Ｃ2Ｆ5及び-Ｃ3Ｆ7からなる群から選ばれたいずれか１つを表す。)
【化４】
2003024767.tif 000004
(ただし、式中ｃは１から８の整数のいずれかを表し、Ｒ３は水素原子(Ｈ)、ハロゲン原子、-ＣＮ、-ＮＯ2、-ＣＦ3、-Ｃ2Ｆ5及び-Ｃ3Ｆ7からなる群から選ばれたいずれか１つを表す。)
【化５】
2003024767.tif 000005
(ただし、式中dは０から７の整数のいずれかを表し、Ｒ４は水素原子(Ｈ)、ハロゲン原子、-ＣＮ、-ＮＯ2、-ＣＦ3、-Ｃ2Ｆ及び-Ｃ3Ｆ7からなる群から選ばれたいずれか１つを表す。)
【化６】
2003024767.tif 000006
(ただし、式中ｅは１から８の整数のいずれかを表し、Ｒ５は水素原子(Ｈ)、ハロゲン原子、-ＣＮ、-ＮＯ2、-ＣＦ3、-Ｃ2Ｆ5、-Ｃ3Ｆ7、-ＣＨ3、-Ｃ2Ｈ5及び-Ｃ3Ｈ7からなる群から選ばれたいずれか１つを表す。)
【化７】
2003024767.tif 000007
(ただし、式中ｆは０から７の整数のいずれかを表す。)
【化８】
2003024767.tif 000008
(ただし、式中ｇは１から８の整数のいずれかを表す。)
【化９】
2003024767.tif 000009
(ただし、式中ｈは１から７の整数のいずれかを表し、Ｒ６は水素原子(Ｈ)、ハロゲン原子、-ＣＮ、-ＮＯ2、-ＣＯＯＲ'、-ＳＯ2Ｒ''、-ＣＨ3、-Ｃ2Ｈ5、-Ｃ3Ｈ7、-ＣＨ(ＣＨ3)2及び-Ｃ(ＣＨ3)3からなる群から選ばれたいずれか１つを表し、ここでＲ'は水素原子(Ｈ)、Ｎａ、Ｋ、-ＣＨ3、-Ｃ2Ｈ5のいずれかであり、Ｒ''は-ＯＨ、-ＯＮａ、-ＯＫ、ハロゲン原子、-ＯＣＨ3及び-ＯＣ2Ｈ5のいずれかである。)
【化１０】
2003024767.tif 000010
(ただし、式中ｉは１から７の整数のいずれかを表し、Ｒ７は水素原子(Ｈ)、ハロゲン原子、-ＣＮ、-ＮＯ2、-ＣＯＯＲ'及び-ＳＯ2Ｒ''からなる群から選ばれたいずれか１つを表し、ここでＲ'は水素原子(Ｈ)、Ｎａ、Ｋ、-ＣＨ3及び-Ｃ2Ｈ5のいずれかであり、Ｒ''は-ＯＨ、-ＯＮａ、-ＯＫ、ハロゲン原子、-ＯＣＨ3及び-ＯＣ2Ｈ5のいずれかである。)
【化１１】
2003024767.tif 000011
(ただし、式中ｊは１から９の整数のいずれかを表す。)
【請求項３】
前記ポリヒドロキシアルカノエートが親水性官能基を有する、請求項１に記載のポリヒドロキシアルカノエート被覆リポソーム。
【請求項４】
前記ポリヒドロキシアルカノエートのモノマーユニット組成が、前記リポソームの内側から外側に向かう方向において変化している請求項１から３の何れかに記載のポリヒドロキシアルカノエート被覆リポソーム。
【請求項５】
前記ポリヒドロキシアルカノエートの少なくとも一部が、特定の機能をもたせるために化学修飾されたポリヒドロキシアルカノエートである請求項１から４の何れかに記載のポリヒドロキシアルカノエート被覆リポソーム。
【請求項６】
前記化学修飾されたポリヒドロキシアルカノエートが、少なくともグラフト鎖を有する請求項５に記載のポリヒドロキシアルカノエート被覆リポソーム。
【請求項７】
前記グラフト鎖が、エポキシ基を有するモノマーユニットを少なくとも含むポリヒドロキシアルカノエートの化学修飾によるグラフト鎖である請求項６に記載のポリヒドロキシアルカノエート被覆リポソーム。
【請求項８】
前記グラフト鎖が、アミノ基を有する化合物のグラフト鎖である請求項６または７に記載のポリヒドロキシアルカノエート被覆リポソーム。
【請求項９】
前記ポリヒドロキシアルカノエートの少なくとも一部が、架橋化されたポリヒドロキシアルカノエートである請求項５に記載のポリヒドロキシアルカノエート被覆リポソーム。
【請求項１０】
リポソーム内に、顔料懸濁液、染料、農薬成分、ヘモグロビン、化粧料成分、肥料成分または医薬有効成分が内封されている請求項１から９の何れかに記載のポリヒドロキシアルカノエート被覆リポソーム。
【請求項１１】
ポリヒドロキシアルカノエートによって外壁の少なくとも一部を被覆したポリヒドロキシアルカノエート被覆リポソームの製造方法であって、
水性媒体に分散されたリポソームの表面にポリヒドロキシアルカノエート合成酵素を固定化する工程と、
基質である3-ヒドロキシアシル補酵素Ａを添加する工程と、
ポリヒドロキシアルカノエート合成反応を行うことで前記リポソーム表面の少なくとも一部をポリヒドロキシアルカノエートで被覆する工程と
を有することを特徴とするポリヒドロキシアルカノエート被覆リポソームの製造方法。
【請求項１２】
前記ポリヒドロキシアルカノエートが式[１]から式[10]に示すモノマーユニットからなる群より選択される少なくとも一つを含有し、前記式[１]から式[10]に対応する3-ヒドロキシアシル補酵素Ａが式[12]から式[21]のいずれかである、請求項１１に記載の製造方法。
【化１２】
2003024767.tif 000012
(ただし、前記モノマーユニットは、式中Ｒ１およびａの組合せが下記のいずれかであるモノマーユニットからなる群より選択される少なくとも一つである。
Ｒ１が水素原子(Ｈ)であり、ａが０から10の整数のいずれかであるモノマーユニット、
Ｒ１がハロゲン原子であり、ａが１から10の整数のいずれかであるモノマーユニット、
Ｒ１が発色団であり、ａが１から 10 の整数のいずれかであるモノマーユニット、
Ｒ1がカルボキシル基あるいはその塩であり、ａが１から10の整数であるモノマーユニット、
Ｒ1が、
【化１３】
2003024767.tif 000013
であり、ａが１から７の整数のいずれかであるモノマーユニット。)
【化１４】
2003024767.tif 000014
(ただし、式中ｂは０から７の整数のいずれかを表し、Ｒ２は水素原子(Ｈ)、ハロゲン原子、-ＣＮ、-ＮＯ2、-ＣＦ3、-Ｃ2Ｆ5及び-Ｃ3Ｆ7からなる群から選ばれたいずれか１つを表す。)
【化１５】
2003024767.tif 000015
(ただし、式中ｃは１から８の整数のいずれかを表し、Ｒ３は水素原子(Ｈ)、ハロゲン原子、-ＣＮ、-ＮＯ2、-ＣＦ3、-Ｃ2Ｆ5及び-Ｃ3Ｆ7からなる群から選ばれたいずれか１つを表す。)
【化１６】
2003024767.tif 000016
(ただし、式中ｄは０から７の整数のいずれかを表し、Ｒ４は水素原子(Ｈ)、ハロゲン原子、-ＣＮ、-ＮＯ2、-ＣＦ3、-Ｃ2Ｆ5及び-Ｃ3Ｆ7からなる群から選ばれたいずれか１つを表す。)
【化１７】
2003024767.tif 000017
(ただし、式中ｅは１から８の整数のいずれかを表し、Ｒ５は水素原子(Ｈ)、ハロゲン原子、-ＣＮ、-ＮＯ2、-ＣＦ3、-Ｃ2Ｆ5、-Ｃ3Ｆ7、-ＣＨ3、-Ｃ2Ｈ5及び-Ｃ3Ｈ7からなる群から選ばれたいずれか１つを表す。)
【化１８】
2003024767.tif 000018
(ただし、式中ｆは０から７の整数のいずれかを表す。)
【化１９】
2003024767.tif 000019
(ただし、式中ｇは１から８の整数のいずれかを表す。)
【化２０】
2003024767.tif 000020
(ただし、式中ｈは１から７の整数のいずれかを表し、Ｒ６は水素原子(Ｈ)、ハロゲン原子、-ＣＮ、-ＮＯ2、-ＣＯＯＲ'、-ＳＯ2Ｒ''、-ＣＨ3、-Ｃ2Ｈ5、-Ｃ3Ｈ7、-ＣＨ(ＣＨ3)2及び-Ｃ(ＣＨ3)3からなる群から選ばれたいずれか１つを表し、ここでＲ'は水素原子(Ｈ)、Ｎａ、Ｋ、-ＣＨ3及び-Ｃ2Ｈ5のいずれかであり、Ｒ''は-ＯＨ、-ＯＮａ、-ＯＫ、ハロゲン原子、-ＯＣＨ3及び-ＯＣ2Ｈ5のいずれかである。)
【化２１】
2003024767.tif 000021
(ただし、式中ｉは１から７の整数のいずれかを表し、Ｒ７は水素原子(Ｈ)、ハロゲン原子、-ＣＮ、-ＮＯ2、-ＣＯＯＲ'及び-ＳＯ2Ｒ''からなる群から選ばれたいずれか１つを表し、ここでＲ'は水素原子(Ｈ)、Ｎａ、Ｋ、-ＣＨ3及び-Ｃ2Ｈ5のいずれかであり、Ｒ''は-ＯＨ、-ＯＮａ、-ＯＫ、ハロゲン原子、-ＯＣＨ3及び-ＯＣ2Ｈ5のいずれかである。)
【化２２】
2003024767.tif 000022
(ただし、式中ｊは１から９の整数のいずれかを表す。)
【化２３】
2003024767.tif 000023
(ただし、前記化学式中-ＳＣoＡ はアルカン酸に結合した補酵素Ａを表し、式中Ｒ１およびａは前記化学式[１]と同様に定義される。)
【化２４】
2003024767.tif 000024
(ただし、式中-ＳＣoＡ はアルカン酸に結合した補酵素Ａを表し、ｂ及びＲ２は前記化学式[２]同様に定義される。)
【化２５】
2003024767.tif 000025
(ただし、式中-ＳＣoＡはアルカン酸に結合した補酵素Ａを表し、ｃ及びＲ３は前記化学式[３]と同様に定義される。)
【化２６】
2003024767.tif 000026
(ただし、式中-ＳＣoＡはアルカン酸に結合した補酵素Ａを表し、ｄ及びＲ４は前記化学式[４]同様に定義される。)
【化２７】
2003024767.tif 000027
(ただし、式中-ＳＣoＡはアルカン酸に結合した補酵素Ａを表し、ｅ及びＲ５は前記化学式[５]同様に定義される。)
【化２８】
2003024767.tif 000028
(ただし、式中-ＳＣoＡはアルカン酸に結合した補酵素Ａを表し、ｆは前記化学式[６]同様に定義される。)
【化２９】
2003024767.tif 000029
(ただし、式中-ＳＣoＡはアルカン酸に結合した補酵素Ａを表し、gは前記化学式[７]で表されるモノマーユニットにおけるgと対応する１から８の整数のいずれかを表す。)
【化３０】
2003024767.tif 000030
(ただし、式中-ＳＣoＡはアルカン酸に結合した補酵素Ａを表し、ｈ及びＲ６は前記化学式[８]同様に定義される。)
【化３１】
2003024767.tif 000031
(ただし、式中-ＳＣoＡはアルカン酸に結合した補酵素Ａを表し、ｉ及びＲ７は前記化学式[９]同様に定義される。)
【化３２】
2003024767.tif 000032
(ただし、式中-ＳＣoＡはアルカン酸に結合した補酵素Ａを表し、ｊは前記化学式[10]同様に定義される。)
【請求項１３】
前記3-ヒドロキシアシル補酵素Aの組成を経時的に変化させることにより、前記ポリヒドロキシアルカノエートの3-ヒドロキシアルカン酸ユニット組成を前記ポリヒドロキシアルカノエート被覆リポソームの内側から外側に向かう方向において変化させる請求項１１または１２に記載のポリヒドロキシアルカノエート被覆リポソームの製造方法。
【請求項１４】
ポリヒドロキシアルカノエート合成酵素が、前記酵素の生産能を有する微生物、または前記生産能に関与する遺伝子を宿主に導入した形質転換体により生産されるポリヒドロキシアルカノエート合成酵素である、請求１１から１３の何れかに記載の製造方法。
【請求項１５】
ポリヒドロキシアルカノエート合成酵素の生産能を有する微生物が、シュードモナス（Pseudomonas）属、バークホルデリア（Burkholderia）属、アルカリゲネス（Alcaligenes）属及びラルストーニャ（Ralstonia）属のいずれかに属する微生物である、請求項１４に記載の製法方法。
【請求項１６】
前記ポリヒドロキシアルカノエート合成酵素の生産能を有する形質転換体の宿主微生物が、大腸菌(Escheichia coli)である、請求項１４に記載の製造方法。