(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記の一般化学式（Ｉ）に対応するイソソルビドモノニトレートの誘導体である化合物又はその薬学的に許容された塩であり、
【化１】
0004659214.tif 000020
化学式（Ｉ）においてＡとＢとは個々に下記の任意の基を現すものであり、
【化２】
0004659214.tif 000021
この基においてＺは硫黄原子であり、そしてＲは炭素数１から４のアルキル基、アリール基又はアラルキル基、又は下記の基であり、
【化３】
0004659214.tif 000022
この中においてＲ１は水素又は炭素数１から４のアルキル基、アリール基又はアラルキル基であるが、但し：
（ａ）Ａ又はＢの一つは常に−ＯＮＯ２であり、しかし両者が同時に−ＯＮＯ２であることは決してなく、
（ｂ）Ｚが硫黄原子である時には、Ｒは炭素数１から４のアルキル基、アリール基又はアラルキル基である、
イソソルビドモノニトレートの誘導体である化合物又はその薬学的に許容された塩。
【請求項２】
Ｚが硫黄原子であるときにはＲは炭素数１から４の短鎖のアルキル基であることを特徴とする、請求項１記載の化合物。
【請求項３】
Ｂが−ＯＮＯ２基であることを特徴とする、請求項１又は２記載の化合物。
【請求項４】
２−アセチルメルカプトイソソルビド５−モノニトレートである化合物又はその薬学的に許容された塩。
【請求項５】
循環器系の機能不全を治療する目的で血管拡張作用を有する薬剤を製造するための、請求項１から４のいずれかの請求項記載の化合物の使用。
【請求項６】
心血管及び冠血管の機能不全を治療する目的の薬剤を製造するための、請求項１から４のいずれかの請求項記載の化合物の、請求項５記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、強力な血管拡張活性を有して同時に耐性の形成が顕著に低下した、新規なイソソルビドモノニトレートの誘導体に関する。
【０００２】
【従来の技術】
硝酸化された有機化合物として一般的に知られている有機化合物の硝酸エステルは、血管拡張剤として知られておりかつ使用されている。これらの中で、一硝酸化及び二硝酸化されたイソソルビドの有用性は良く知られており、そして更に、イソソルビドモノニトレートの遊離ヒドロキシル基の置換反応に基づいて、血管及び冠動脈に活性を有する化合物について述べられている。例えば、US-A-4891373の特許は、下記の化学式
【化５】
0004659214.tif 000002
に対応するアミンプロパノールの誘導体を、狭心症及び全身性高血圧症及び肺性高血圧症の治療に使用することについて述べている。
【０００３】
US-A-5665766の特許は、下記の化学式
【化６】
0004659214.tif 000003
のイソソルビド５−モノニトレート２−アセチルサリチル酸、ならびにその血小板抗凝集活性について述べている。
【０００４】
上記の硝酸化された有機化合物の基本的な問題の一つに、それらはタキフィラキシー又は耐性形成として知られている現象に関して非常に感受性が高いという事実があり、その現象は長期治療の間に生体への効果が減少することに関連しており、そのために感受性を上昇させるために投与用量を段階的に上昇させるか、そうでなければ薬物を除去することが必要となる。
【０００５】
硝酸化された有機化合物の耐性形成を減少させる方法の一つは、例えば含イオンアミノ酸を用いることにより該分子にチオール基を導入する事によりなる。欧州特許EP-B-0362575は、システイン分子及び主としてメチオニン分子を導入した、硝酸化有機化合物について述べている。
【０００６】
特許出願WO-A-92/04337 は、血管拡張活性を有しかつ耐性形成が低下した、有機性硝酸化化合物のチアゾリジン環の誘導体について述べている。
【０００７】
特許出願WO-A-93/03037 は、可変性の高い構造を有し、耐性形成が低下した、硝酸化の態様が異なる有機性の血管拡張化合物を多数述べている。単一の特定物質を特定するものでも述べているものでもないが、これらの中には下記の構造を有するイソソルビドモノニトレートの広い誘導体が含まれており、
【化７】
0004659214.tif 000004
この中でＲ5 は水素原子、炭素数１から６のアルキル基、フェニル基等を表す。
【０００８】
【発明が解決しようとする課題】
上記の文献中で述べられた硝酸化された有機化合物は、それ自身は硝酸化された有機化合物の耐性形成から生じる問題を解決する物ではない。なぜならば、それらは血管拡張活性の低さや耐性形成の高さ等と関連した問題を、まだ有しているからである。従って、耐性形成のレベルを持続的により低く維持すると共に、高い血管拡張活性を有する、新規な硝酸化された有機化合物を開発する必要がまだある。
【０００９】
本発明の目的は、強力な血管拡張効果を提供することが可能であり、かつ同時に耐性形成が小さいか又は耐性が形成されない、イソソルビドモノニトレートの誘導体である新規な型の化合物である。
本発明の更なる目的は、イソソルビドモノニトレートの新規な誘導体を、特に冠動脈系レベルの、循環系の機能障害に関連する疾患の治療薬を製造するための、使用に関する。
【００１０】
【課題を解決するための手段】
本発明の目的である、イソソルビドモノニトレートの新規な誘導体又はその薬学的に許容される塩は、下記の一般式（Ｉ）に対応し、
【化８】
0004659214.tif 000005
その中でＡとＢは別々に下記の任意の基を現し、
【化９】
0004659214.tif 000006
この中でＺは硫黄原子であり、Ｒは置換された炭素数１から４のアルキル基、アリール基又はアラルキル基、又は下記の基であり
【化１０】
0004659214.tif 000007
この中でＲ１は水素又は置換された炭素数１から４のアルキル基、アリール基又はアラルキル基である。
これの全ては、以下の：
（ａ）Ａ又はＢの一つは常に−ＯＮＯ２であり、しかし両者が同時に−ＯＮＯ２であることは決してなく、
（ｂ）Ｚが硫黄原子である時には、Ｒは置換された炭素数１から４のアルキル基、アリール基又はアラルキル基である。
【００１１】
本発明の新規な誘導体において、Ｚが硫黄原子である時にはＲは炭素数１から４の短鎖のアルキル基であることが好ましい。上記の基準内で、Ｂが−ＯＮＯ２基であること、即ち硝酸エステルがイソソルビドの環状構造において５位の位置にあることはより好ましい。
【００１２】
上記の好適態様はどの様な意味においても、本発明の対象の範囲を限定するものと解されるべきではない。
【００１３】
Ｒ1 が水素である場合、本発明の化合物は２つの互変体の任意の化合物として現され、
【化１２】
0004659214.tif 000008
その互変体構造は両者とも、本発明の対象の範囲内であると見做されるべきである。
【００１４】
本発明の目的の範囲内にある、特定の化合物の例は下記の様な化合物：
下記の化学式の、アセチルメルカプトイソソルビド５−モノニトレート
【化１３】
0004659214.tif 000009
又は、特に塩酸塩であるこれらの薬学的に許容された塩である。
【００１５】
【発明の実施の形態】
本発明の化合物は、当業者に知られている基本的な有機化学文献に記載されている、既知または入手可能な出発物質を用いて、エステル化の手法により本発明の化合物を得ることが可能であり、上記の有機化学文献の例には、ケミカルアブストラクトサービスの出版物、有機物質のバイルシュタイン百科事典、又は大学図書館において手に入る任意の他の適切な出版物がある。
【００１７】
Ｒ1 が水素である時、これらの化合物はチオール基を有し、そのチオール基を故意に酸化してジスルフィド二量体を生成することができる。この場合、二量体をトリフェニルフォスフィンと水中で反応させて対応するモノマーに戻すことが可能であり、その方法はＲ．Ｈｕｍｐｈｒｅｙ（１９６４）、Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｃｈｅｍ、３６、１８１２と、Ｌ．Ｅ．Ｏｖａｅｍａｎ（１９７４）、Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、５９に述べられている。
【００１８】
Ｚが硫黄原子である時、その状況は非常に類似している。なぜならば、上記のカルボン酸の代わりに対応するチオカルボン酸から出発して、熟練者に良く知られた方法を用いてチオエステル結合を生成するこれば十分であるからである。一方、いずれかの反応にキラル中心のエピマー化が含まれているならば、例えばイソマンニドの様な、イソソルビドの適切なエナンチオマーを出発物質として用いることができる。
【００１９】
行なわれた試験により、本発明の新規なイソソルビドモノニトレートの誘導体は、少なくとも、イソソルビドモノニトレート自身と匹敵する血管拡張活性を示し、いくつかの場合には血管拡張活性がずっと勝っていることが示された。更に、それらは前記化合物において見られるのと比較して耐性形成が顕著に低く、いくつかの場合には実質的に耐性を示さないという状態に近いものであった。
【００２０】
その結果、本発明の化合物は、特に心血管系や冠動脈のレベルの循環器系の機能障害の治療に用いる、血管拡張作用を有する医薬の製造を行うために使用するのに非常に有効である。
【００２１】
従って、一般化学式（Ｉ）の化合物、又はそれらの薬学的に許容された塩もまた、通常の薬学的技術を用いて、異なった経路により投与されるであろう医薬の製造に使用することができる。
【００２２】
例えば、錠剤、カプセル、シロップ及び懸濁剤のような薬学的調製物の形態で、経口的に投与されるであろう。それらは、クリーム、ポマード、バルサム等により局所的に、例えばパッチや包帯を用いることにより経皮的に投与することもできる。それらは座薬として、直腸から直接的に投与することもできる。調製物は薬学的に許容される担体、賦形剤、活性化剤、キレート剤、安定化剤等も含むことがある。注射剤の場合には、生理学的に許容される緩衝液、可溶化剤又は等張剤を投入することもある。１日の投与量は、患者の特定の症状、年齢、体重、特定の投与方法等により変動し、大人に対する通常の１日の投与量は、１から５００ｍｇであり、１つの用量としてだけで投与することも、１日の間に幾つかの用量に分けて投与する事も可能である。
【００２３】
ここでの作動態様において（下をみよ）、一般化学式（Ｉ）の種々の化合物を得るために適切なプロセスを述べる。これらの実施例に鑑み、ここで明らかに例示されていない化合物を、ここでの作動態様を適切に改変して得ることは、当業者の通常の知識の範囲内である。
【００２４】
その結果、ここにおける作動態様は、本発明の範囲を限定するものと解釈されるべきではなく、等業者が本発明をより深く理解できる様に導くように加えられた詳細な説明としてのみ解釈されるべきであろう。
【００２５】
【実施例】
下記の実施例において得られた化合物を、その化合物の赤外線スペクトル（ＩＲ）、及び／又はプロトン（ 1Ｈ−ＮＭＲ）及び炭素１３（13Ｃ−ＮＭＲ）の核磁気共鳴スペクトルのデータより同定した。
【００２６】
ＩＲスペクトルは、ＣＨＣｌ3 によりエバポレートされたフィルム中又はＫＢｒ錠剤中で、ＰＥＲＫＩＮ−ＥＬＭＥＲ  ＦＴＩＲモデル１７００装置により得た。最も顕著なピークの位置を、ｃｍ-1で示す。
【００２７】
核磁気共鳴スペクトルは、Ｖａｒｉａｎ  Ｇｅｍｉｎｉ−２００装置により得た。
【００２８】
1Ｈ−ＮＭＲのスペクトルにおいて、作動頻度とスペクトルを作製するにあたり用いられた溶媒を示す。シグナルの位置は、溶媒のプロトンのシグナルを対照として、δ（ｐｐｍ）で示す。対照の値は、重水素化したクロロフォルムについては７．２４ｐｐｍであり、重水素化したジメチルスルフォキシドについては２．４９ｐｐｍである。ブラケットの中に、電子的積算により測定した各シグナルに対応しするプロトンの数を示し、シグナルの型は下記の略語を用いて示した。
Ｄ2 Ｏ（重水を数滴添加した後に、スペクトルを作製している間に消失した）のｓ（シングレット）、ｄ（ダブレット）、ｔ（トリプレット）、ｄｄ（ダブレットのダブレット）、ｓｂ（幅広いシグナル）、ｓｃ（複合的シグナル）。
【００２９】
13Ｃ−ＮＭＲのスペクトルにおいて、各スペクトルにおける作動頻度と溶媒を示した。溶媒のプロトンをシグナルの対照として、シグナルの位置をδ（ｐｐｍ）で示した。対照値は、重水素化したクロロフォルムについては７７．００ｐｐｍであり、重水素化したジメチルスルフォキシドについては３９．５０ｐｐｍである。
【００３０】
更に、添付プロトン試験（Ａｔｔａｃｈｅｄ  Ｐｒｏｔｏｎ  Ｔｅｓｔ：ＡＰＴ）を用いて、核磁気共鳴実験を行った。
実施例の実験項において、下記の略語を使用した。
ＡｃＯＥｔ      酢酸エチル
ＤＭＳＯ−ｄ6   ジメチルスルフォキシド６重水素
ＥｔＯＥｔ      ジエチルエーテル
【００３１】
実施例１  イソソルビド２−（２’−エチルチオ）ニコチン酸５−モノニトレートハイドロクロライドの獲得
【化２０】
0004659214.tif 000010
段階１．
ＣａＣｌ2 チューブで密封した還流冷却機と磁気攪拌機を備えた５０ｍｌのガラスフラスコ内で、４．２５ｇの（２３．２ｍｍｏｌ）２−エチルチオニコチン酸を、２０ｍｌのチオニルクロライド（１．６４ｇ／ｍｌ、２７５．６ｍｍｏｌ）に溶解した。反応混合液を３．５時間還流した。この後反応混合液を冷却し、トルエンの一部分を添加しながら、過剰量のチオニルクロライドを減圧下で除去した。減圧下で乾燥した後、興味の対象の酸クロライドにあたる、４．６７ｇの固体の黄色っぽい生成物が得られた。収率：１００％
【００３２】
段階２．
磁気攪拌機と還流冷却機を備えた５０ｍｌのガラスフラスコの中に、上記の段階で得られた４．６７ｇ（２３．２ｍｍｏｌ）の酸クロライドを、Ａｒ雰囲気下で２５ｍｌのピリジンに溶解した。溶液を氷浴中で冷却し、４．４４ｇ（２３．２ｍｍｏｌ）のイソソルビド５−モノニトレートをを添加した。反応混合液を、Ａｒ雰囲気下で１９時間、室温で攪拌した。この間に、溶媒を減圧下で除去した。残査を５０ｍｌのＣＨＣｌ3 に溶解し、最初に５０ｍＬの水で、次に５０ｍｌの５％ＨＣｌ水溶液で、そしてもう一度５０ｍｌの水で洗浄した。有機層を無水ＭｇＳＯ4 で乾燥し、濾過し、そして溶媒を減圧下で除去した。減圧下で乾燥した後、興味の対象である生成物が７．２５ｇ得られた。収率：８８％
【００３３】
段階３．
ＣａＣｌ2 チューブで密封した還流冷却機、磁気攪拌機と圧力を補填した添加漏斗を備えた２５０ｍｌの３首ガラスフラスコ中で、前の段階で得られた６．０ｇの（１６．８５ｍｍｏｌ）の生成物を、１５０ｍｌのＥｔＯＥｔに溶解した。溶液を室温で攪拌し、ＨＣｌで飽和した３０ｍｌのＥｔＯＥｔ溶液（ＨＣｌのガスを、飽和するまで直接ＥｔＯＥｔにバブリングすることにより、予め調製しておいた溶液）を一滴ずつ添加し、白い固体沈殿物を得た。固体を濾過して過剰量のＥｔＯＥｔで洗浄し、減圧下で乾燥した。興味の対象である生成物が、６．５５ｇ得られた。収量：９９％
1H-NMR (200 MHz, DMSO-d6): 10.26 (1H, s, d.e. D2O, HCl), 8.60 (1H, dd, J=5 Hz, J=1.8 Hz,CHar), 8.20 (1H, dd, J=7.7 Hz, J=2 Hz,CHar ), 7.22 (1H,dd, J=3 Hz, J=8 Hz, CHar ), 5.43 (1H, sc, CH-ONO2), 5.30 (1H, d, J=3 Hz, CH-O-CO), 5.05 (1H, t, J=5.6 Hz, CH), 4.65 (1H, d, J=5 Hz, CH), 4.20-3.80 (4H, sc, CH2), 3.17 (2H, q, J=7.6 Hz, CH2-S), 1.23 (3H, t, J=7.6 Hz CH3).
13C-NMR (50 MHz, DMSO-d6): 164.06 (C=O), 161.34 (Car-COO), 152.88(CHar),139.63 (CHar), 122.48 (Car-S), 119.13(CHar), 86.19 (CH-ONO2), 82.64 (CH), 81.78 (CH), 78.10 (CH-O-CO), 72.90 (CH2), 69.33 (CH2), 23.84 (CH2-S),14.31 (CH3).
【００３４】
実施例２  イソソルビド５−（２’−エチルチオ）ニコチン酸２−モノニトレートハイドロクロライドの獲得
【化２１】
0004659214.tif 000011
段階１
出発物質としてイソソルビド２−モノニトレートを適用して、実施例１の段階２と同様の方法が用いられた。興味の対象である化合物は、化学的収率８８％で得られた。
【００３５】
段階２
ＣａＣｌ2 チューブで密封した還流冷却機、磁気攪拌機と圧力を補填した添加漏斗を備えた、５００ｍｌの３首フラスコの中で、前の段階で得られた７．０ｇ（１９．６６ｍｍｏｌ）の生成物を２００ｍｌのＥｔＯＥｔ＋１００ｍｌのＣＨ2 Ｃｌ2 の混合液に溶解した。その溶液を室温で攪拌し、ＨＣｌで飽和した３０ｍｌのＥｔＯＥｔ溶液（ＨＣｌのガスを、飽和するまで直接にＥｔＯＥｔにバブリングすることにより、予め調製しておいた溶液）を一滴ずつ添加し、白い固体沈殿を生成した。その固体を濾過し、過剰のＥｔＯＥｔで洗浄し、減圧下で乾燥した。興味の対象である化合物の７．０５ｇを得た。収量：９１％
1H-NMR (200 MHz, DMSO-d6): 8.63 (1H, dd, J=5 Hz, J=1.8 Hz,CHar), 8.33 (1H, sd, d.e. D2O, HCl), 8.23 (1H, dd, J=8 Hz, J=1.8 Hz,CHar), 7.24 (1H, dd, J=3 Hz, J=7,8 Hz,CHar), 5.44 (1H, d, J=3.2 Hz, CH-O-CO), 5.33 (1H, sc,CHONO), 4.91 (1H, t, J=5.6 Hz, CH), 4.67 (1H, d, J=5.4 Hz, CH), 4.20-3.80 (4H, sc, CH2), 3.08 (2H, q, J=7.2 Hz, CH2-S), 1.20 (3H, t, J=7.2 Hz CH3)
13C-NMR (50 MHz, DMSO-d6): 163.74 (C=O), 161.53 (Car-COO), 152.77(CHar),139.24 (CHar), 122.05 (Car-S), 119.01(CHar), 86.65 (CH-ONO2), 84.13 (CH), 80.79 (CH), 74.48 (CH-O-CO), 70.78 (CH2-O), 70.70  (CH2-O), 23.67 (CH2), 14.14 (CH3).
【００３６】
実施例３  イソソルビド２−（２’−メルカプト）ニコチン酸５−モノニトレート（３）の獲得
【化２２】
0004659214.tif 000012
段階１
ＣａＣｌ2 チューブで密封した還流冷却機と磁気攪拌機を備えた１００ｍｌのガラスフラスコ内で、３．０ｇ（１９．３５ｍｍｏｌ）の２−メルカプトニコチン酸を、３０ｍｌのチオニルクロライド（１．６４ｇ／ｍｌ；４３１．４ｍｍｏｌ）に懸濁した。固体の溶解を観察しながら、その混合液を２時間還流したままにした。その混合液を冷却し、トルエンの一部を添加しながら過剰量のチオニルクロライドを取り除いた。減圧下で乾燥した後、興味の対象である酸クロライドである、黄色からオレンジ色の固体が３．３５ｇ得られた。収率：１００％
【００３７】
段階２
還流冷却機と磁気攪拌機を備えた２５０ｍｌのガラスフラスコ内で、前の段階で得られた３．０ｇ（１７．２９ｍｍｏｌ）の酸クロライドを、Ａｒ雰囲気下７５ｍｌのピリジン中に懸濁した。懸濁液を氷浴中で冷却し、３．３０ｇ（１７．２９ｍｍｏｌ）のイソソルビド５−モノニトレートを添加した。反応混合液を、室温でＡｒ雰囲気下１９時間攪拌しながら放置し、その間に混合液は黒っぽくなっていった。反応が終了するとすぐに減圧下で溶媒を除去した。残査を２５０ｍｌのＣＨＣｌ3 に溶解し、最初は２５０ｍｌの水で、次に２５０ｍｌの５％ＨＣｌ水溶液で、そしてもう一度２５０ｍｌの水で洗浄した。有機層を無水ＭｇＳＯ4 で乾燥し、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。減圧下で乾燥した後、５．４５ｇの黄色い固体が得られ、黄色い固体をイソプロパノール中で再結晶化して４．８３ｇの白い固体を得た。白い固体を、１０％の水を含むメタノールに溶解したトリフェニルフォスフィン（１：１．２５ｍｏｌ／ｍｏｌ）と、酸溶媒中で２０分間反応した。溶媒を減圧下で除去し、残査をＡｃＯＥｔに溶解し、その溶液をいくらかの水で洗浄した。有機層を乾燥し、そして溶媒を減圧下で除去し、用意しておいたクロマトグラフィーで興味の対象である生成物を回収した。収量：３５．７％
1H-NMR (200 MHz, Cd3COCd3): 7.90 (1H, dd, J=6.1 Hz, J=1.6 Hz, CHar ), 7.70 (1H, dd, J=7.2 Hz, J=1.6 Hz, CHar), 6.97 (1H, dd, J=6.4 Hz, J=7,2 Hz,CHar ), 5.63-5.55 (1H, sc, CH-ONO2), 5.38 (1H, d, J=3.4 Hz, CH-O-CO), 5.09 (1H, t, J=5.1 Hz, CH), 4.75 (1H, d, J=4.8 Hz, CH), 4.20-3.85 (4H, sc,t, CH2).
IR (p.KBr) : 3438, 2925, 1735, 1639, 1571, 1281, 1095.
【００３８】
実施例４  イソソルビド５−（２’−メルカプト）ニコチン酸２−モノニトレート（４）の獲得
【化２３】
0004659214.tif 000013
還流冷却機と磁気攪拌機を備えた２５０ｍｌのガラスフラスコ内で、実施例３の段階１で得られた３．０ｇ（１７．２９ｍｍｏｌ）の酸クロライドを、Ａｒ雰囲気下で５０ｍｌのピリジンと２５ｍｌのＣＨＣｌ3 の混合液中に懸濁した。その懸濁液を氷浴中で冷却し、３．３０ｇ（１７．２９ｍｍｏｌ）のイソソルビド２−モノニトレートを添加した。その反応混合液を、室温でＡｒ雰囲気下１９時間攪拌したままにし、その間に該混合液は黒っぽくなっていった。反応が終了するとすぐに、溶媒を減圧下で除去した。残査を３００ｍｌのＣＨＣｌ3 に溶解し、最初は３００ｍｌの水で、次に３００ｍｌの５％ＨＣｌ水溶液で、そしてもう一度３００ｍｌの水で洗浄した。有機層を無水ＭｇＳＯ4 で乾燥し、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。減圧下で乾燥した後、５．１０ｇの白黄色の固体が得られ、その固体をイソプロパノール中で再結晶化して４．５５ｇの白い固体を得た。その白い固体を、１０％の水を含むメタノールに溶解したトリフェニルフォスフィン（１：１．２５ｍｏｌ／ｍｏｌ）と、酸溶媒中で２０分間反応した。溶媒を減圧下で除去し、残査をＡｃＯＥｔに溶解し、その溶液をいくらかの水で洗浄した。有機層を乾燥し、溶媒を減圧下で除去し、既製のクロマトグラフィーで興味の対象である生成物を回収した。収量：３７．６％
1H-NMR (200 MHz, Cd3COCd3): 7.98 (1H, dd, J=4.2 Hz, J=1.0 Hz, CHar ), 7.76 (1H, dd, J=4.9 Hz, J=1.0 Hz, CHar), 7.34 (1H, dd, J=4.5 Hz, J=4.8 Hz,CHar ), 5.50-5.36 (2H, sc, CH-ONO2+CH-O-CO), 5.02 (1H, t, J=3.7 Hz, CH),4.74 (1H, d, J=3.4 Hz, CH), 4.20-3.90 (4H, sc, CH2).
IR (p.KBr) : 3395, 2876, 1727, 1653, 1631, 1593, 1291, 1276.
【００３９】
実施例５  ２−アセチルメルカプトイソソルビド５−モノニトレート（５）の獲得
【化２４】
0004659214.tif 000014
段階１
還流冷却機、圧力を補填した添加漏斗と磁気攪拌機を備えた１Ｌのガラスフラスコ内で、６０ｇ（４１１ｍｍｏｌ）のイソマンニド、８８ｇ（４６１ｍｍｏｌ）のパラトルエンスルフォニルクロライド、２９６ｍｌのＣＣｌ4 、３３ｍｌのＣＨ2 Ｃｌ2 と２４７ｍｌの水を混合した。Ａｒ雰囲気を作り、反応温度を５℃に保ちながら、２９．９ｇ（４５３ｍｍｏｌ）の８５％ＫＯＨを一滴ずつ添加した。添加時間は１時間２０分であった。得られた混合液を５℃で７時間攪拌した。固体を濾過し、更に１２５ｍｌの水でも２回濾過し、減圧下で乾燥した。
得られた固体を、１２００ｍｌのＣＣｌ4 の中で再結晶化して熱濾過し、その濾液を冷却した。得られた結晶を濾過して洗浄し、興味の対象である生成物であるイソマンニドのモノトシレートの画分Ａを５４．５ｇ得た。
熱濾過の後、得られた固体を１０００ｍｌのＣＣｌ4 中で再結晶化し、興味の対象である画分Ｂを、２９．５ｇ得た。
【００４０】
段階２
還流冷却機と磁気攪拌機を備えた５００ｍｌのガラスフラスコ内で、２２．７ｇ（７６ｍｍｏｌ）のイソマンニドのモノトシレートと、１３．０ｇ（１１３ｍｍｏｌ）のカリウムチオアセテートを、１１３ｍｌのｎ−ブタノール中で混合した。Ａｒ雰囲気を作り、反応混合液を１時間還流した。混合液を冷却し、濾過し、２００ｍｌのエタノールで洗浄し、溶媒を減圧下で除去した。２０ｇの固体が得られた。
【００４１】
個々のサンプルを薄層クロマトグラフィーで解析したところ、興味の対象である生成物は、粗生成物（クルード）において主成分ではないことが示された。
【００４２】
得られた粗生成物を、３０００ｍｌのｎ−ブタノールと４０ｍｌのチオ酢酸で処理し、１時間還流した。混合液を冷却し、ＳｉＯ2 層を通じて濾過した。濾液の溶媒を減圧下で蒸発させ、得られた粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーにかけた。
【００４３】
クロマトグラフィー分離では、ＣＨＣｌ3 ／ＡｃＯＥｔが４：１の混合液を溶離剤として用いた。４．１４ｇの２−アセチルメルカプトイソソルビドの画分が得られ、それは合成の次の過程において使用できる程高純度であった。興味の対象である生成物の画分が数多く得られたが、それには多くの不純物が含まれていた。欲しい生成物の精製を行うために、これらの最後の画分を既製の逆層クロマトグラフィーにかけた。
【００４４】
段階３
１０ｍｌの無水酢酸と１０ｍｌの酢酸の混合液中に、２．４ｍｌの６０％ＨＮＯ3 をゆっくりと注意深く添加して、硝酸化混合液を調製した。その混合液は０℃で調製した。
【００４５】
還流冷却機と磁気攪拌機を備えた１００ｍｌのガラスフラスコ内で、前記の段階で得られた生成物の２．５１ｇ（１２．３ｍｍｏｌ）を１４．５ｍｌの酢酸に０℃で溶解し、しばらく攪拌した後に、温度を０℃に保ちながら一滴ずつ２０分かけて先に調製した硝酸化混合液を添加した。反応混合液を０℃で２時間攪拌し、粗生成物を２００ｍｌの水に注ぎ入れ、得られた混合液を２００ｍｌのＡｃＯＥｔで３回抽出した。３つの抽出液を別々に、２２０ｍｌの飽和ＮａＨＣＯ3 で２回、そして２００ｍｌの水で洗浄した。得られた溶液をＮａ2 ＳＯ4 で乾燥し、濾過し、そして溶媒を減圧下で除去した。２．４ｇの粗生成物が得られ、その粗生成物をＣＨＣｌ3 ／ＡｃＯＥｔが２５：１の混合液を溶媒として用いて、フラッシュクロマトグラフィーを行った。興味の対象である生成物が２．０８ｇ得られた。収率：６８％
1H-NMR (200 MHz, CDCl3): 5.36-5.24 (1H, sc, CH-ONO2), 4.90-4.80 (1H, sc,CH), 4.44-4.37 (1H, sc, CH), 4.22-4.10 (1H, sc, CH), 4.10-3.98 (2H, sc,CH2), 3.92-3.78 (2H, sc, CH2), 2.33 (3H, s, CH3).
13C-NMR (50 MHz, CDCl3): 194.48 (C=O), 86.50 (CH-ONO2), 81.44 (CH), 81.22 (CH), 78.48 (CH2), 69.25 (CH2), 45.92 (CH-S), 30.48 (CH3).
IR(cm-1): 300-2800, 1700, 1650, 1630, 1280, 1080, 960.
【００４６】
実施例６  ２−（２’−メチルチオ）ニコチン酸５−モノニトレートクロロハイドレート（６）の獲得
【化２５】
0004659214.tif 000015
磁気攪拌機と還流冷却機を備えた５０ｍｌのガラスフラスコ内で、２．００ｇ（１０．７ｍｍｏｌ）の２−メチルチオニコチン酸クロライドを、Ａｒ雰囲気下で１２ｍｌのピリジンに懸濁した。混合液を氷浴中で冷却し、２．０４ｇ（１０．７ｍｍｏｌ）のイソソルビド５−モノニトレートを添加した。反応混合液をＡｒ雰囲気下、室温で１５時間攪拌した。この後、減圧下で溶媒を除去した。残査を５０ｍｌのＣＨＣｌ3 に溶解し、最初は５０ｍｌの水で、次に５０ｍｌの５％ＨＣｌ水溶液で、そしてもう一度５０ｍｌの水で洗浄した。有機層を無水ＭｇＳＯ4 で乾燥し、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。減圧下で乾燥した後、興味の対象である生成物が２．８０ｇ得られた。収量：７７％
1H-NMR (200 MHz, DMSO-d6): 8.68 (1H, dd, J=5 Hz, J=1.8 Hz,CHar ), 8.22 (1H, dd, J=7.7 Hz, J=2 Hz, CHar ), 7.26 (1H, dd, J=3 Hz, J=8 Hz, CHar ),5.54 (1H, td, J=2 Hz, J=6 Hz, CH-ONO2), 5.34 (1H, d, J=3 Hz, CH-O-CO), 5.06 (1H, t, J=5.5 Hz, CH), 4.58 (1H, d, J=5 Hz, CH), 4.18-3.82 (4H, sc,CH2), 2.45 (3H, s, CH3-S).
13C-NMR (50 MHz, DMSO-d6): 163.91 (C=O), 161.64 (Car-COO), 152.80(CHar),139.27 (CHar), 122.20 (Car-S), 118.83(CHar), 85.97 (CH-ONO2), 82.41 (CH), 81.53 (CH), 77.87 (CH-O-CO), 72.67 (CH2), 69.07 (CH2), 13.34 (CH3).
【００４７】
実施例７  ５−（２’−メチルチオ）ニコチン酸２−モノニトレート（７）の獲得
【化２６】
0004659214.tif 000016
磁気攪拌機と還流冷却機を備えた５０ｍｌのガラスフラスコ内で、２．００ｇ（１０．７ｍｍｏｌ）の２−メチルチオニコチン酸クロライドを、Ａｒ雰囲気下で１２ｍｌのピリジン中に懸濁した。混合液を氷浴中で冷却し、２．０４ｇ（１０．７ｍｍｏｌ）のイソソルビド２−モノニトレートを添加した。Ａｒ雰囲気下、反応溶液を室温で１５時間攪拌した。この後、減圧下で溶媒を除去した。残査を５０ｍｌのＣＨＣｌ3 に溶解し、最初は５０ｍｌの水で、次に５０ｍｌの５％ＨＣｌ水溶液で、そしてもう一度５０ｍｌの水で洗浄した。有機層を無水ＭｇＳＯ4 で乾燥し、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。減圧下で乾燥した後、興味の対象である生成物が２．７５ｇ得られた。収量：７５％
1H-NMR (200 MHz, DMSO-d6): 8.90 (1H, dd, J=5 Hz, J=1.8 Hz,CHar ), 8.27(1H, dd, J=7.7 Hz, J=2 Hz,CHar ), 7.27 (1H, dd, J=3 Hz, J=7.8 Hz, CHar) ,5.42-5.31 (1H, sc, J=2 Hz, J=6 Hz, CH-ONO2), 5.60 (1H, d, J=3.2 Hz, CH-O-CO), 5.06 (1H, t, J=5.5 Hz, CH), 4.92 (1H, d, J=5.6 Hz, CH), 4.10-3.88(4H, sc, CH2), 1.24 (3H, s, CH3-S).
13C-NMR (50 MHz, DMSO-d6): 163.71 (C=O), 161.89 (Car-COO), 152.77(CHar),139.04 (CHar), 121.92 (Car-S), 118.87(CHar), 86.56 (CH-ONO2), 84.05 (CH), 80.69 (CH), 74.41 (CH-O-CO), 70.69 (CH2), 70.61 (CH2), 13.37 (CH3).
【００４８】
実施例８  血管拡張試験
このアッセイにおいて用いられた方法は、本質的には下記の参考文献で述べられた方法と同じである：
＊Ｆｕｒｃｈｇｏｔ，Ｒ．Ｆ．”Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  ｎｉｔｒｉｃ  ｏｘｉｄｅ  ｒｅｓｅａｒｃｈ”．Ｆｒｅｅｌｉｓｃｈ＆Ｓｔａｍｌｅｒ  ｅｄｓ．Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｃｈｉｃｈｅｓｔｅｒ，Ｅｎｇｌａｎｄ，ｐｐ５６７−５８１．
＊Ｔｒｏｎｇｖａｎｉｃｈｎａｍ，Ｋ，ｅｔ  ａｌ．Ｊｐｎ  Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１９９６；７１：１６７−１７３
＊Ｓａｌａｓ，Ｅ．，ｅｔ  ａｌ．Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１９９４；２５８：４７−５５
【００４９】
６個から９個の動脈血管を各化合物に使用して、種々の化合物につき、０．００１から１０ｍＭの範囲内の濃度の５つの異なった濃度で試験した。得られた結果を、対照物質として使用したイソソルビド５−モノニトレートから得られた結果と比較した。
【００５０】
結果を下記の表１において、ＣＥ50（ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ  ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ  ５０）として現した。ＣＥ50は試験した各化合物において、１μＭのノルエピネフリンで予め収縮させておいた動脈血管の５０％が拡張する濃度である。
【００５１】
【表１】
0004659214.tif 000017
【００５２】
見られる様に、試験した２つの化合物は少なくとも対照と同程度の強力な血管拡張活性を有しており、そして化合物１は対照化合物以上に優れた血管拡張活性を有していた。
【００５３】
実施例９  耐性試験
試験する種々の化合物を、８時間毎に、１０ｍｇ／ｋｇの用量で３日間ラットに皮下投与し、化合物を皮下投与した後にｅｘ  ｖｉｖｏでアッセイを行って、ラットの血管断片を拡張する能力を試験した。
下記の方法は、本質的には下記の参考文献で述べられた方法と同じである：
＊Ｄｅ  Ｇａｒａｖｉｌｌａ，Ｌ．，ｅｔ  ａｌ．Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１９９６；３１３：８９−９６
＊Ｋｅｉｔｈ，Ｒ．Ａ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．１９８２；２２１：５２５−５３１
【００５４】
６個から９個の動脈血管を各化合物に使用して、種々の化合物につき、０．００１から１０ｍＭの範囲内の濃度の５つの異なった濃度で試験した。得られた結果を、対照物質として使用したイソソルビド５−モノニトレートから得られた結果及びどの化合物も投与していない動物から得られた結果と比較した。
やはりＣＥ50として得られた結果を、表２に示す。
【００５５】
【表２】
0004659214.tif 000018
【００５６】
上記で示した様に、化合物を投与された動物の動脈血管におけるＣＥ50が、化合物を投与されなかったた動物の動脈血管におけるＣＥ50より大きい時に、ある化合物に耐性が形成されていることを理解するべきである。
【００５７】
イソソルビド５−モノシトレートを投与した動物の群におけるイソソルビド５−モノシトレートのＣＥ50は、処置しなかった動物におけるＣＥ50と比較して７倍大きかった。
【数１】
0004659214.tif 000019
【００５８】
上記の式は、対照物質にいて強い耐性が形成されたことを示す。一方、試験した２つの化合物であり本発明の目的の一部である１と５については、それらにつき得られたＣＥ50はずっと小さく、その結果は、対象物質と比較して耐性の形成はずっと低いことを示している。更に、これらの試験条件においては、化合物５では実質的には耐性は形成されなかった。