【手続補正書】
【提出日】平成15年12月12日(2003.12.12)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
アミン反応性の検出可能な標識が結合しているペンダントアミン基を有する少なくとも一つの部位を有する、比色分析法又は蛍光分析法によって検出することのできるポリマー。
【請求項２】
ペンダントアミン基を有する部位が末端基である請求項１に記載のポリマー。
【請求項３】
ペンダントアミン基を有する部位が、そのアミノ部分が好ましくは第１級アミンであるアミン−スルフィド部位である請求項１又は２に記載のポリマー。
【請求項４】
アミン−スルフィド部位が、１以上のアミン及び１以上のチオールを含むアミノ酸；１以上のアミン及び１以上のチオールを含むアミノ酸の誘導体、ペプチド又はポリペプチド；１以上のチオール及び保護基が除去することのできるものである１以上の保護アミンを含むアミノ酸の誘導体、ペプチド又はポリペプチド；又はアミノアルキルチオール；を含むアミン−チオールから誘導されるものである請求項３に記載のポリマー。
【請求項５】
標識を結合させる前のポリマー中におけるペンダントアミン基を有する部位対他のモノマーのモル比が１：３〜１：３００、好ましくは１：５〜１：１００である請求項１に記載のポリマー。
【請求項６】
アミン反応性の検出可能な標識が、１−（ジメチルアミノ）−５−ナフタレンスルホン酸（ダンシル）、ダンシルクロリド、４−ジメチルアミノアゾベンゼン−４−スルホン酸（ダブシル）、ダブシルクロリド、３−ベンゾイルキノリン−２−カルボキシアルデヒド、３−（４−カルボキシベンゾイル）キノリン−２−カルボキシアルデヒド、３−（２−フルホイル）キノリン−２−カルボキシアルデヒド、２，４，６−トリニトロベンゼンスルホン酸、２，４−ジニトロフルオロベンゼン及びニンヒドリンを含む請求項１に記載のポリマー。
【請求項７】
（ｉ）水性系に加える前にポリマーを反応させて、ペンダントアミン基を有する少なくとも一つの部位を含むようにし；
（ｉｉ）ポリマーを含む水性系の試料を採取し、アミンと反応性の検出可能な標識を加え；
（ｉｉｉ）検出可能な標識がペンダントアミン基と反応してポリマーに結合するようになるような条件下で試料を保持し；
（ｉｖ）標識を検出する；
工程を含むことを特徴とする、水性系中でポリマーを検出する方法。
【請求項８】
ポリマーから試料を採取した後にポリマー試料上のペンダントアミン基に結合されたアミン反応性の検出可能な標識の、比色分析又は蛍光分析法検出性をポリマーに与えるための使用。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３４】
最も好ましいアミン反応性標識は、以下の構造式を有するダンシルクロリド：
【化１】
1997249713.tif 000001
及び以下の構造式を有するダブシルクロリド：
【化２】
1997249713.tif 000002
である。
本発明は以下の態様を包含する。
１）  アミン反応性の検出可能な標識が結合しているペンダントアミン基を有する少なくとも一つの部位を有する、比色分析法又は蛍光分析法によって検出することのできるポリマー。
２）  ペンダントアミン基を有する部位が末端基である項１）に記載のポリマー。
３）  ペンダントアミン基を有する部位が、そのアミノ部分が好ましくは第１級アミンであるアミン−スルフィド部位である項１）又は２）に記載のポリマー。
４）  アミン−スルフィド部位が、１以上のアミン及び１以上のチオールを含むアミノ酸；１以上のアミン及び１以上のチオールを含むアミノ酸の誘導体、ペプチド又はポリペプチド；１以上のチオール及び保護基が除去することのできるものである１以上の保護アミンを含むアミノ酸の誘導体、ペプチド又はポリペプチド；又はアミノアルキルチオール；を含むアミン−チオールから誘導されるものである項３）に記載のポリマー。
５）  アミノ−チオールが、システイン、グルタチオン、Ｎ−アシルシステイン、アミノエタンチオール、Ｎ−ブチルアミノエタンチオール、Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノエタンチオール又はそれらの塩を含む項４）に記載のポリマー。
６）  標識を結合させる前のポリマー中におけるペンダントアミン基を有する部位対他のモノマーのモル比が１：３〜１：３００、好ましくは１：５〜１：１００である項１）に記載のポリマー。
７）  アミン反応性の検出可能な標識が、１−（ジメチルアミノ）−５−ナフタレンスルホン酸（ダンシル）、ダンシルクロリド、４−ジメチルアミノアゾベンゼン−４−スルホン酸（ダブシル）、ダブシルクロリド、３−ベンゾイルキノリン−２−カルボキシアルデヒド、３−（４−カルボキシベンゾイル）キノリン−２−カルボキシアルデヒド、３−（２−フルホイル）キノリン−２−カルボキシアルデヒド、２，４，６−トリニトロベンゼンスルホン酸、２，４−ジニトロフルオロベンゼン及びニンヒドリンを含む項１）に記載のポリマー。
８）  重合単位として、アクリル酸、メタクリル酸、クロトン酸、ビニル酢酸、マレイン酸、無水マレイン酸、１，２，３，６−テトラヒドロフタル酸無水物、３，６−エポキシ−１，２，３，６−テトラヒドロフタル酸無水物、５−ノルボルネン−２，３−ジカルボン酸無水物、ビシクロ［２．２．２］−５−オクテン−２，３−ジカルボン酸無水物、３−メチル−１，２，６−テトラヒドロフタル酸無水物、２−メチル−１，３，６−テトラヒドロフタル酸無水物、イタコン酸、メサコン酸、フマル酸、シトラコン酸、２−アクリルアミド−２−メチルプロパンスルホン酸、アリルスルホン酸、アリルホスホン酸、アリルオキシベンゼンスルホン酸、２−ヒドロキシ−３−（２−プロペニルオキシ）プロパンスルホン酸、イソプロペニルスルホン酸、イソプロペニルホスホン酸、ビニルホスホン酸、スチレンスルホン酸、ビニルスルホン酸及びこれらのアルカリ金属塩又はアンモニウム塩の１以上から選択されるモノエチレン性不飽和酸を更に含む項１）に記載のポリマー。
９）  重合単位として、エチルアクリレート、ブチルアクリレート、メチルメタクリレート、ブチルメタクリレート、イソブチルメタクリレート、ヒドロキシエチルアクリレート、ヒドロキシプロピルアクリレート、ヒドロキシエチルメタクリレート、アクリルアミド、メタクリルアミド、Ｎ−ｔ−ブチルアクリルアミド、ホスホエチルメタクリレート、ビニルアセテート及びスチレンの一つ又はそれ以上から選択される酸を含まないモノエチレン性不飽和モノマーを更に含む項１）に記載のポリマー。
１０）  （ｉ）水性系に加える前にポリマーを反応させて、ペンダントアミン基を有する少なくとも一つの部位を含むようにし；
（ｉｉ）ポリマーを含む水性系の試料を採取し、アミンと反応性の検出可能な標識を加え；
（ｉｉｉ）検出可能な標識がペンダントアミン基と反応してポリマーに結合するようになるような条件下で試料を保持し；
（ｉｖ）標識を検出する；
工程を含むことを特徴とする、水性系中でポリマーを検出する方法。
１１）  ペンダントアミン基を含む部位が末端基である項１０）に記載の方法。
１２）  ペンダントアミン基を有する部位が、そのアミノ部分が好ましくは第１級アミンであるアミン−スルフィド部位である項１０）又は１１）に記載の方法。
１３）  アミン−スルフィド部位が、１以上のアミン及び１以上のチオールを含むアミノ酸；１以上のアミン及び１以上のチオールを含むアミノ酸の誘導体、ペプチド又はポリペプチド；１以上のチオール及び保護基が除去することのできるものである１以上の保護アミンを含むアミノ酸の誘導体、ペプチド又はポリペプチド；又はアミノアルキルチオール；を含むアミン−チオールから誘導されるものである項１２）に記載の方法。
１４）  アミノ−チオールが、システイン、グルタチオン、Ｎ−アシルシステイン、アミノエタンチオール、Ｎ−ブチルアミノエタンチオール、Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノエタンチオール又はそれらの塩を含む項１３）に記載の方法。
１５）  標識を結合させる前のポリマー中におけるペンダントアミン基を有する部位対他のモノマーのモル比が１：３〜１：３００、好ましくは１：５〜１：１００である項１０）に記載の方法。
１６）  アミン反応性の検出可能な標識が、１−（ジメチルアミノ）−５−ナフタレンスルホン酸（ダンシル）、ダンシルクロリド、４−ジメチルアミノアゾベンゼン−４−スルホン酸（ダブシル）、ダブシルクロリド、３−ベンゾイルキノリン−２−カルボキシアルデヒド、３−（４−カルボキシベンゾイル）キノリン−２−カルボキシアルデヒド、３−（２−フルホイル）キノリン−２−カルボキシアルデヒド、２，４，６−トリニトロベンゼンスルホン酸、２，４−ジニトロフルオロベンゼン及びニンヒドリンを含む項１０）に記載の方法。
１７）  重合単位として、アクリル酸、メタクリル酸、クロトン酸、ビニル酢酸、マレイン酸、無水マレイン酸、１，２，３，６−テトラヒドロフタル酸無水物、３，６−エポキシ−１，２，３，６−テトラヒドロフタル酸無水物、５−ノルボルネン−２，３−ジカルボン酸無水物、ビシクロ［２．２．２］−５−オクテン−２，３−ジカルボン酸無水物、３−メチル−１，２，６−テトラヒドロフタル酸無水物、２−メチル−１，３，６−テトラヒドロフタル酸無水物、イタコン酸、メサコン酸、フマル酸、シトラコン酸、２−アクリルアミド−２−メチルプロパンスルホン酸、アリルスルホン酸、アリルホスホン酸、アリルオキシベンゼンスルホン酸、２−ヒドロキシ−３−（２−プロペニルオキシ）プロパンスルホン酸、イソプロペニルスルホン酸、イソプロペニルホスホン酸、ビニルホスホン酸、スチレンスルホン酸、ビニルスルホン酸及びこれらのアルカリ金属塩又はアンモニウム塩の１以上から選択されるモノエチレン性不飽和酸を更に含む項１０）に記載の方法。
１８）  重合単位として、エチルアクリレート、ブチルアクリレート、メチルメタクリレート、ブチルメタクリレート、イソブチルメタクリレート、ヒドロキシエチルアクリレート、ヒドロキシプロピルアクリレート、ヒドロキシエチルメタクリレート、アクリルアミド、メタクリルアミド、Ｎ−ｔ−ブチルアクリルアミド、ホスホエチルメタクリレート、ビニルアセテート及びスチレンの１以上から選択される酸を含まないモノエチレン性不飽和モノマーを更に含む項１０）に記載の方法。
１９）  ポリマーから試料を採取した後にポリマー試料上のペンダントアミン基に結合されたアミン反応性の検出可能な標識の、比色分析又は蛍光分析法検出性をポリマーに与えるための使用。