(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
水不溶性多孔質担体にｌｏｇＰ（Ｐはオクタノール−水系での分配係数）値が６以上の化合物を固定してなり、
前記水不溶性多孔質担体の球状タンパク質の排除限界分子量が１０万以下である、ジギタリス中毒治療に用いられる体液中のジギタリスの吸着材。
【請求項２】
液の入口および出口を有しかつ、吸着材の容器外への流出防止手段を備えた容器内に、水不溶性多孔質担体にｌｏｇＰ値が６以上の化合物を固定してなる体液中のジギタリスの吸着材を充填してなり、
前記水不溶性多孔質担体の球状タンパク質の排除限界分子量が１０万以下である、ジギタリス中毒治療に用いられるジギタリスの吸着器。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は体液より強心配糖体を吸着除去するための吸着材、これを用いた強心配糖体の吸着除去方法および強心配糖体の吸着器に関する。
【背景技術】
【０００２】
心臓に作用して機能を促進する効果を有し、共通の化学構造上の特徴をもつ一連のステロイド配糖体を強心配糖体といい、ユリ科、ゴマノハグサ科、キョウチクトウ科などの植物に広く分布する。強心配糖体は直接心筋の収縮力を高める作用を持ち、強心剤として広く用いられている。繁用されるものとしては、ジギトキシン、ジゴキシン、メチルジゴキシン、デスラノシド、ジギラニド、ウアバイン、プロスチラリジンなどがあげられる。なかでもジギトキシン、ジゴキシン、メチルジゴキシン、デスラノシド、ジギラニドなどのゴマノハグサ科から得られる成分はジギタリスと呼ばれ、強心剤としてとくに広く用いられており、ジギタリスという名称が広義に強心配糖体の総称として用いられることもある。
【０００３】
強心配糖体は強心剤として広く用いられているが、過量に投与するとジギタリス中毒とよばれる種々の中毒症状が生じることがある。ジゴキシンなど主要排泄経路が腎である強心配糖体を用いた場合には、腎機能に障害がある患者では、とくにジギタリス中毒を生じやすい。その症状としては、食欲不振、悪心・嘔吐、下痢などの消化器系症状、黄視、緑視、複視などの視覚異常、めまい、頭痛、失見当識、錯乱などの精神神経系症状があげられる。それに加え、重篤な場合は高度の徐脈、二段脈、多源性心室性期外収縮、発作性心房性頻脈などの症状が現れることがあり、さらに重篤な房室ブロック、心室性頻脈症あるいは心室細動に移行することもある。
【０００４】
中毒症状が現れた場合には投薬の減量または休薬を行なうとともにその症状を緩和する処置が必要となる。また、中毒症状が重篤な場合には、速やかに体液中の強心配糖体濃度を低下させる処置が望まれる。体液中の強心配糖体濃度を速やかに低下させる処置としては、種々の血液浄化療法が考えられるが、血液透析は一般に無効であるとされており、最も効果的とされている活性炭による血液吸着法でも十分な治療効果がえられない場合がある。このため、より多くの強心配糖体を吸着除去する方法が望まれている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は前記のごとき問題点を解決するためになされたものである。
【０００６】
本発明の目的は、体液中の強心配糖体を効率よく吸着除去しうる吸着材、前記吸着材を用いた体液中の強心配糖体の吸着除去方法および強心配糖体吸着器を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
体液中の強心配糖体を効率よく吸着除去しうる吸着材について鋭意検討した結果、水不溶性担体にｌｏｇＰ（Ｐはオクタノール−水系の分配係数）値が６以上の化合物を固定してなる吸着材が、体液中の強心配糖体を効率よく吸着除去しうることを見いだし、本発明を完成した。
【０００８】
すなわち、本発明は水不溶性担体にｌｏｇＰ値が６以上の化合物を固定してなる、体液中の強心配糖体の吸着材に関する。
【０００９】
好適な実施態様においては、前記水不溶性担体は水不溶性多孔質担体である。
【００１０】
好適な実施態様においては、前記水不溶性多孔質担体の球状タンパク質の排除限界分子量は６０万以下である。
【００１１】
好適な実施態様においては、前記強心配糖体はジギタリスである。
【００１２】
さらに本発明は、水不溶性担体にｌｏｇＰ値が６以上の化合物を固定してなる、強心配糖体の吸着材に体液を接触させることを特徴とする、体液中の強心配糖体の吸着除去方法に関する。
【００１３】
さらに本発明は、液の入口および出口を有しかつ、吸着材の容器外への流出防止手段を備えた容器内に、水不溶性担体にｌｏｇＰ値が６以上の化合物を固定してなる、体液中の強心配糖体の吸着材を充填してなる強心配糖体の吸着器に関する。
【発明の効果】
【００１４】
本発明の方法による水不溶性担体にｌｏｇＰ値６以上の化合物を固定化した吸着材を用いることで体液中の強心配糖体を効率よく吸着除去することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】本発明の強心配糖体吸着器の一実施態様の概略断面図である。
【図２】３種類の材料を用いて流速と圧力損失との関係を調べた結果を示すグラフである。
【図３】一般的な血液浄化器を組み込んだ体外循環回路を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
本発明における強心配糖体とは、心臓に作用して機能を促進する効果を有し、共通の化学構造上の特徴をもった一連のステロイド配糖体をいう。本発明はこれらのなかでもとくに広く用いられているジギタリスにより好適に使用することができる。ジギタリスとは、ジギトキシン、ジゴキシン、メチルジゴキシン、デスラノシド、ジギラニドなどのゴマノハグサ科の植物から得られる強心配糖体成分をいう。
【００１７】
本発明における体液とは、血液、血漿、血清、腹水、リンパ液、関節内液、髄液ならびにこれらの分画成分、およびそのほかの生体由来の液体成分をいう。
【００１８】
本発明の吸着材は、ｌｏｇＰ値が６以上の化合物を水不溶性担体に固定化してなる。ｌｏｇＰ値とは、化合物の疎水性のパラメータであり、代表的なオクタノール−水系での分配係数Ｐは以下のように求められる。
【００１９】
まず、化合物をオクタノール（または水）に溶解し、これに等量の水（またはオクタノール）を加え、グリッフィン・フラスク・シェイカー（Ｇｒｉｆｆｉｎ  ｆｌａｓｋ  ｓｈａｋｅｒ）（グリッフィン・アンド・ジョージ・リミテッド（Ｇｒｉｆｆｉｎ  ＆  Ｇｅｏｒｇｅ  Ｌｔｄ．）製）で３０分間振盪する。そののち２０００ｒｐｍで１〜２時間遠心分離し、オクタノール層および水層中の化合物の各濃度を分光学的またはＧＬＣなどの種々の方法で測定する。これらの値を次式に代入することにより、Ｐが求められる。
Ｐ＝Ｃｏｃｔ／Ｃｗ
Ｃｏｃｔ：オクタノール層中の化合物濃度
Ｃｗ    ：水層中の化合物濃度
【００２０】
これまでに多くの研究者らにより種々の化合物のｌｏｇＰ値が実測されているが、それらの実測値はシー・ハンシュ（Ｃ．Ｈａｎｓｃｈ）らによって整理されている（「パーティション・コーフィシエンツ・アンド・ゼア・ユージズ；ケミカル・レビューズ（ＰＡＲＴＩＴＩＯＮ  ＣＯＥＦＦＩＣＩＥＮＴＳ  ＡＮＤ  ＴＨＥＩＲ  ＵＳＥＳ；Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｒｅｖｉｅｗｓ）、７１巻、５２５頁、１９７１年」参照）。
【００２１】
また実測値の知られていない化合物についてはアール・エフ・レッカー（Ｒ．Ｆ．Ｒｅｋｋｅｒ）がその著書「ザ・ハイドロフォビック・フラグメンタル・コンスタント（ＴＨＥ  ＨＹＤＲＯＰＨＯＢＩＣ  ＦＲＡＧＭＥＮＴＡＬ  ＣＯＮＳＴＡＮＴ）」，エルセビア・サイエンティフィック・パブリッシング・カンパニー・アムステルダム（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ  Ｓｃｉ．Ｐｕｂ．Ｃｏｍ．，Ａｍｓｔｅｒｄａｍ）（１９７７）中に示している疎水性フラグメント定数ｆを用いて計算した値（Σｆ）が参考となる。疎水性フラグメント定数は数多くのｌｏｇＰ実測値をもとに、統計学的処理を行ない決定された種々のフラグメントの疎水性を示す値であり、化合物を構成するおのおののフラグメントのｆ値の和はｌｏｇＰ値とほぼ一致すると報告されている。本発明においては、ｌｏｇＰとはΣｆをも包含するものである。
【００２２】
強心配糖体の吸着に有効な化合物の探索にあたり種々のｌｏｇＰ値を有する化合物を、担体に固定し検討した結果、ｌｏｇＰ値が大きくなるに従って、強心配糖体の吸着能が高くなること、すなわちｌｏｇＰ値が６未満の化合物では強心配糖体の吸着能は不十分であるが、ｌｏｇＰ値が６以上、好ましくは７以上の化合物が強心配糖体の吸着に有効であることがわかった。これらの結果より、本発明の吸着材による強心配糖体に対する吸着能は、ｌｏｇＰ値が６以上の化合物の固定により担体上に導入された原子団と強心配糖体との間の疎水性相互作用によるものと考えられる。
【００２３】
本発明において、水不溶性担体に固定化される化合物としては、ｌｏｇＰ値が６以上の化合物であれば特別な制限なしに用いることができる。ただし、担体上に化合物を化学結合法によって結合する場合には化合物の一部が脱離することが多いが、この脱離基が化合物の疎水性に大きく寄与している場合、すなわち脱離により担体上に固定される原子団の疎水性がΣｆ＝６より小さくなるような場合には本発明の主旨から考えて、本発明に用いる化合物としては不適当である。
【００２４】
ｌｏｇＰ値が６以上の化合物の中でも不飽和炭化水素、アルコール、アミン、チオール、カルボン酸およびその誘導体、ハロゲン化物、アルデヒド、ヒドラジド、イソシアナート、グリシジルエーテルなどのオキシラン環含有化合物、ハロゲン化シランなどのように担体への結合に利用できる官能基を有する化合物が好ましい。このような化合物の代表例としては、ヘキサデシルアミン、オクタデシルアミンなどのアミン類；ヘキサデシルアルコールなどのアルコール類ならびにこれらのアルコールのグリシジルエーテル類；ステアリン酸、オレイン酸などのカルボン酸類ならびにこれらの酸ハロゲン化物、エステル、アミドなどのカルボン酸誘導体；塩化ドデシルなどのハロゲン化物；ドデカンチオールなどのチオール類などがあげられる。
【００２５】
これらの他にも、前記例示化合物の炭化水素部分の水素原子がハロゲン、チッ素、酸素、イオウなどのヘテロ原子を含有する置換基またはほかのアルキル基などで置換された化合物のうち、ｌｏｇＰ値が６以上の化合物、前述のシー・ハンシュ（Ｃ．Ｈａｎｓｃｈ）らの総説「パーティション・コーフィシエンツ・アンド・ゼア・ユージズ；ケミカル・レビューズ（ＰＡＲＴＩＴＩＯＮ  ＣＯＥＦＦＩＣＩＥＮＴＳ  ＡＮＤ  ＴＨＥＩＲ  ＵＳＥＳ；Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｒｅｖｉｅｗｓ）、７１巻、５２５頁、１９７１年」中の５５５〜６１３頁の表に示されているｌｏｇＰ値が６以上の化合物などを用いることができるが、本発明においてはこれらのみに限定されるものではない。
【００２６】
なお、これらの化合物はそれぞれ単独で用いてもよく、任意の２種類以上を組み合わせで用いてもよい。さらにはこれらの化合物はｌｏｇＰ値が６未満の化合物との組み合わせで用いてもよい。
【００２７】
本発明の吸着材における水不溶性担体とは、常温常圧で固体であり水不溶性であることを意味する。また、本発明における水不溶性担体は粒状、板状、繊維状、中空糸状などがあげられるが形状は問わず、その大きさもとくに限定されないが、本発明の吸着材をカラムに充填して使用する場合、体液に含まれる細胞が充分に通過し得る間隔を作ることができるものでなければならない。
【００２８】
たとえば、本発明の吸着材が粒状である場合、平均粒子径は５〜１０００μｍであることが好ましい。５μｍより小さいと体液に細胞が含まれる場合に充分に通過し得る間隔を得られないおそれがあり、１０００μｍより大きいと体積あたりの吸着能が充分得られないおそれがある。本発明の吸着材が粒状である場合の平均粒子径は、さらに好ましくは２５〜１０００μｍ、最も好ましくは５０〜６００μｍである。その中でも、圧力損失の増大を引き起こさないなどの理由から、粒径分布は狭い方が好ましい。また、体液が血液である場合には、平均粒径は２００μｍ以上であることが好ましい。
【００２９】
また、本発明の吸着材が繊維状でかつ中空である場合、その内径は１μｍ以上であることが好ましい。さらに好ましくは内径が２〜５００μｍ、最も好ましくは５〜２００μｍである。内径が１μｍより小さいと体液に細胞が含まれる場合に充分に通過しないおそれがあり、５００μｍより大きいと体積あたりの吸着能が充分得られないおそれがある。
【００３０】
本発明の吸着材における水不溶性担体としては、ガラスビーズ、シリカゲルなどの無機担体；架橋ポリビニルアルコール、架橋ポリアクリレート、架橋ポリアクリルアミド、架橋ポリスチレンなどの合成高分子や結晶性セルロース、架橋セルロース、架橋アガロース、架橋デキストリンなどの多糖類からなる有機担体；さらにはこれらの組み合わせによってえられる有機−有機、有機−無機などの複合担体などが代表例としてあげられる。
【００３１】
なかでも、非特異吸着が比較的少なく、強心配糖体の吸着選択性が良好であるため親水性担体が好ましい。ここでいう親水性担体とは、担体を構成する化合物を平板状にしたときの水の接触角が６０度以下の担体を指す。水の接触角の測定方法は種々知られているが、たとえば池田がその著書（実験化学選書・コロイド化学，第４章，界面の熱力学，７５〜１０４頁，裳華房（１９８６））に示しているごとく、化合物の平板上に水滴を置き測定する方法が最も一般的である。前記の方法で測定した水の接触角が６０度以下である化合物としては、セルロース、ポリビニルアルコール、エチレン−酢酸ビニル共重合体ケン化物、ポリアクリルアミド、ポリアクリル酸、ポリメタクリル酸、ポリメタクリル酸メチル、ポリアクリル酸グラフト化ポリエチレン、ポリアクリルアミドグラフト化ポリエチレン、ガラスなどが代表例としてあげられる。
【００３２】
これらの水不溶性担体は、適当な大きさの細孔を多数有する、すなわち多孔構造を有する担体であることがより好ましい。多孔構造を有する担体とは、基礎高分子母体が微小球の凝集により１個の球状粒子を形成する際に微小球の集塊によって形成される空間（マクロポアー）を有する担体のみならず、基礎高分子母体を構成する１個の微小球内の核と核との集塊の間に形成される細孔を有する担体、あるいは三次元構造（高分子網目）を有する共重合体が親和性のある有機溶媒で膨潤された状態の時に存在する細孔（ミクロポアー）を有する担体も含まれる。
【００３３】
また吸着材の単位体積あたりの吸着能から考えて、多孔構造を有する水不溶性担体は、表面多孔性よりも全多孔性であることが好ましい。また空孔容積および比表面積は、吸着性が損なわれない程度に大きいことが好ましい。
【００３４】
これらの好ましい要件を満たす担体としては、多孔質セルロース担体があげられる。多孔質セルロース担体は、以下の優れた利点を有している。
（１）機械的強度が比較的高く、強靭であるため撹拌などの操作により破壊されたり微粉を生じたりすることが少なく、カラムに充填した場合体液を高速で流しても圧密化したりしないので高流速で流すことが可能となり、また細孔構造が高圧蒸気滅菌などによって変化を受けにくい。
（２）担体がセルロースで構成されているため親水性であり、リガンドの結合に利用しうる水酸基が多数存在し、非特異的吸着も少ない。
（３）空孔容積を大きくしても比較的強度が高いため軟質担体に劣らない吸着容量がえられる。
（４）安全性が合成高分子担体などに比べて高い。
したがって、本発明に最も適した担体の１つである。しかしながら本発明における担体はこれらのみに限定されるものではない。さらに前述の担体はそれぞれ単独で用いてもよいし、任意の２種類以上を混合して用いてもよい。
【００３５】
またこのような多孔構造を有する水不溶性担体は、分子量数百から千程度のステロイド配糖体である強心配糖体の吸着の点から、分子量１０００以上の物質が侵入できるポアを有することが好ましい。一方、安全性の点からは、体液中のタンパク質ができる限り侵入しない特徴を有することが好ましい。細孔内に侵入可能な物質の分子量の目安としては、排除限界分子量が一般に用いられている。排除限界分子量とは、成書（たとえば、波多野博行、花井俊彦著、実験高速液体クロマトグラフ、化学同人）などに述べられているごとく、ゲル浸透クロマトグラフィーにおいて細孔内に侵入できない（排除される）分子の内最も小さい分子量をもつものの分子量をいう。排除限界分子量は一般に球状タンパク質、デキストラン、ポリエチレングリコールなどについてよく調べられているが、本発明に用いる担体の上限の排除限界分子量に関しては、球状タンパク質を用いてえられた値を用いるのが適当である。
【００３６】
排除限界分子量が６０万を超えるものでは、体液中のタンパク質（主としてアルブミン）の吸着が大きくなり、安全性の点でその実用性が低下する。したがって本発明に用いる担体の球状タンパク質の排除限界分子量の好ましい範囲は６０万以下、さらに好ましくは３０万以下、とくに好ましくは１０万以下である。
【００３７】
さらに、担体はリガンドの固定化反応に用いうる官能基を有していることが好ましい。これらの官能基の代表例としては水酸基、アミノ基、アルデヒド基、カルボキシル基、チオール基、シラノール基、アミド基、エポキシ基、ハロゲン基、スクシニルイミド基、酸無水物基などがあげられるが、これらに限定されるわけではない。
【００３８】
本発明に用いる担体としては硬質担体、軟質担体のいずれも用いることができる。体外循環用の吸着材として使用する場合には、カラムに充填し、通液する際などに目詰まりを生じないことが重要であり、そのためには充分な機械的強度が要求される。したがって、本発明に用いる担体は硬質担体であることがより好ましい。ここでいう硬質担体とは、たとえば粒状担体の場合、後記参考例に示すごとく、担体を円筒状カラムに均一に充填し、水性流体を流した際の圧力損失ΔＰと流量の関係が０．３ｋｇ／ｃｍ2までの直線関係にあるものをいう。
【００３９】
本発明の吸着材はｌｏｇＰ値が６以上の化合物を水不溶性多孔質担体に固定してえられるが、その固定化方法としては公知の種々の方法を特別な制限なしに用いることができる。しかしながら、本発明の吸着材を体外循環治療に供する場合には、滅菌時あるいは治療時においてのリガンドの脱離溶出を極力抑えることが安全上重要であり、そのためには共有結合法により固定化することが好ましい。
【００４０】
また、本発明の吸着材における化合物の固定量は、固定量が少なすぎると強心配糖体の吸着が充分でなく、多すぎると体液として血液を用いた場合に血小板などの粘付着が起こり得ることから、好ましくは１〜５０００μｍｏｌ／ｇ−湿重量であり、さらに好ましくは１０〜３０００μｍｏｌ／ｇ−湿重量である。
【００４１】
本発明による吸着材を用いて体液中より強心配糖体を吸着除去する方法には種々の方法がある。最も簡便な方法としては体液を取り出してバッグなどに貯留し、これに吸着材を混合して強心配糖体を吸着除去した後、吸着材を濾別して強心配糖体が除去された体液を得る方法がある。次の方法は、体液の入口と出口を有し、出口には体液は通過するが吸着材は通過しないフィルターを装着した容器に吸着材を充填し、これに体液を流す方法がある。いずれの方法も用いることができるが、後者の方法は操作も簡便であり、また体外循環回路に組み込むことにより患者の体液、とくに血液から効率よくオンラインで強心配糖体を除去することが可能であり、本発明の吸着材はこの方法に適している。
【００４２】
図３は、一般的な血液浄化器を組み込んだ体外循環回路を示す図であり、８は動脈回路、９は血液ポンプ、１０は血液浄化器、１１はドリップチャンバを示す。ここで、血液浄化器としては、本願発明の強心配糖体吸着器をもちいることができる。
【００４３】
ここでいう体外循環回路では本発明の吸着材を単独で用いることもできるが、他の体外循環治療システムとの併用も可能である。併用の例としては、透析療法との組み合わせで用いることなどがあげられる。
【００４４】
つぎに、前記強心配糖体吸着材を用いた本発明の強心配糖体吸着器を、一実態様の概略断面図である図１に基づき説明する。図１中、１は体液の流入口、２は体液の流出口、３は本発明の強心配糖体吸着材、４および５は体液および体液に含まれる成分は通過できるが前記強心配糖体吸着材は通過できないフィルター、６はカラム、７は強心配糖体吸着器である。しかしながら、強心配糖体吸着器はこのような具体例に限定されるものではなく、液の入口、出口を有し、かつ強心配糖体吸着材の容器外への流出防止具を備えた容器内に前記吸着材を充填したものであれば、どのようなものでもよい。
【００４５】
前記流出防止具には、メッシュ、不織布、綿栓などのフィルターがあげられる。また、容器の形状、材質、大きさにはとくに限定はないが、形状としては筒状容器が好ましい。容器の材質として好ましいのは耐滅菌性を有する素材であるが、具体的にはシリコンコートされたガラス、ポリプロピレン、塩化ビニール、ポリカーボネート、ポリサルフォン、ポリメチルペンテンなどがあげられる。容器の容量は５０〜１５００ｍＬで直径は２〜２０ｃｍが好ましく、さらに容量は１００〜８００ｍＬで直径は３〜１５ｃｍが好ましく、とくに容量は１００〜４００ｍＬで直径は４〜１０ｃｍが好ましい。容器の容量が５０ｍＬより小さいと吸着量が充分でなく、１５００ｍＬより大きいと体外循環量が多くなるので好ましくない。容器の直径が２ｃｍより小さいと線速が大きくなるため圧力損失が大きくなり好ましくない。２０ｃｍより大きいと取り扱いにくくなるうえ線速が小さくなるため凝固の危険性があり好ましくない。
【００４６】
以下、実施例において本発明についてさらに詳細に述べるが、本発明は以下の実施例のみに限定されるものではない。
【００４７】
参考例
両端に孔径１５μｍのフィルターを装着したガラス製円筒カラム（内径９ｍｍ、カラム長１５０ｍｍ）にアガロース材料（バイオラッド(Ｂｉｏ−ｒａｄ）社製のＢｉｏｇｅｌＡ−５ｍ、粒径５０〜１００メッシュ）、ビニル系高分子材料（東ソー（株）製のトヨパールＨＷ−６５、粒径５０〜１００μｍ）およびセルロース材料（チッソ（株）製のセルロファインＧＣ−７００ｍ、粒径４５〜１０５μｍ）をそれぞれ均一に充填した。これにペリスタティックポンプにより水を流し、流量と圧力損失ΔＰとの関係を求めた。その結果を図２に示す。
【００４８】
図２に示すごとく、トヨパールＨＷ−６５およびセルロファインＧＣ−７００ｍが圧力の増加にほぼ比例して流量が増加するのに対し、ＢｉｏｇｅｌＡ−５ｍは圧密化を引き起こし、圧力を増加させても流量が増加しないことがわかる。本発明においては前者のごとく、圧力損失ΔＰと流量の関係が０.３ｋｇ／ｃｍ2までの直線関係にあるものを硬質材料という。
【００４９】
実施例１
市販の酢酸セルロース１.４ｋｇをジメチルスルホキシド４.３Ｌとプロピレングリコール４.３Ｌの混合溶剤に溶解し、この溶液を特開昭６３−１１７０３９号公報に記載された方法（振動法）により液滴化し、凝固させて、酢酸セルロースの球形のヒドロゲル粒子１４Ｌを得た。
【００５０】
このヒドロゲル粒子１Ｌに水酸化ナトリウム水溶液を０.１４Ｎとなるように加えてと混和し、加水分解反応を行ない、セルロースのヒドロゲル粒子（平均粒子径４６０μｍ、球状タンパク質の排除限界分子量３万）を得た。つぎに、０.４Ｎの水酸化ナトリウム水溶液中でエピクロルヒドリン１０８ｇを反応させ、ついでアルコール水溶液中でｎ−ヘキサデシルアミン（Σｆ＝７．２２）８ｇを反応させてｎ−ヘキサデシルアミンを固定したセルロースの球状ヒドロゲル粒子（ｎ−ヘキサデシルアミン固定量：２９μｍｏｌ／ｇ−湿重量）６００ｍＬを得た。
【００５１】
この吸着材０．４ｍＬにジゴキシンを濃度５ｎｇ／ｍＬとなるように添加した健常人血清２．４ｍＬを加えた。これを３７℃で２時間インキュベートした後、上澄液中のジゴキシンの濃度を蛍光偏光免疫測定法（鍵本雄次ら、広島県立病院医誌、第１７巻、８７〜９２頁、１９８５年参照）を用いて測定した。その結果を表１に示す。
【００５２】
比較例１
ｎ−ヘキサデシルアミンをｎ−ドデシルアミン（Σｆ＝５．１２）１１ｇに変えた他は実施例１と同様にしてｎ−ドデシルアミン固定化ゲル（ｎ−ドデシルアミン固定量：２７μｍｏｌ／ｇ−湿重量）６００ｍＬを得た。この吸着材を用いて実施例１と全く同様にして吸着実験を行った。結果を表１に示す。
【００５３】
比較例２
ｎ−ヘキサデシルアミンをｎ−オクチルアミン（ｌｏｇＰ＝２．９０）９ｍＬに変えた他は実施例１と同様にしてｎ−オクチルアミン固定化ゲル（ｎ−オクチルアミン固定量：２８μｍｏｌ／ｇ−湿重量）６００ｍＬを得た。この吸着材を用いて実施例１と全く同様にして吸着実験を行った。結果を表１に示す。
【００５４】
比較例３
ｎ−ヘキサデシルアミンをｎ−ブチルアミン（ｌｏｇＰ＝０．９７）５．５ｍＬに変えた他は実施例１と同様にしてｎ−ブチルアミン固定化ゲル（ｎ−ブチルアミン固定量：３２μｍｏｌ／ｇ−湿重量）６００ｍＬを得た。この吸着材を用いて実施例１と全く同様にして吸着実験を行った。結果を表１に示す。
【００５５】
比較例４
吸着材をＤＨＰ−１（商品名、クラレ（株）製、活性炭吸着材）に変えた他は実施例１と全く同様にして吸着実験を行った。結果を表１に示す。
【００５６】
【表１】
0004837221.tif 000002
【００５７】
表１から、ｌｏｇＰ（Σｆ）値が高くなるに従って血清中のジゴキシンが減少するのがわかる。ｌｏｇＰ値が６以上であるｎ−ヘキサデシルアミンを固定化した吸着材のジゴキシン吸着能が優れており、この吸着材のジゴキシン吸着能は、活性炭吸着材であるＤＨＰ−１と比較しても高いことがわかる。
【００５８】
実施例２
実施例１で作成したｎ−ヘキサデシルアミンを固定したセルロースの球状ヒドロゲル粒子を血液の入口側、出口側いずれにも１５０μｍの目開きのメッシュ（材質：ポリエステル）を装着した直径５ｃｍ、容量１５０ｍＬの容器（材質：ポリプロピレン）に充填し、充填液としてｐＨ６から６．５に調整した６００ｐｐｍのクエン酸とクエン酸ナトリウムとからなる緩衝液を充填し、１２１℃、２０分間の高圧蒸気滅菌処理を行い強心配糖体吸着器を作製した。
【００５９】
０．０３ｍｇ／ｋｇのジゴキシンを１２時間毎に５回筋肉注射で投与したイヌを用い、作製した強心配糖体吸着器をヘパリン１Ｕ／ｍＬを添加した生理食塩水５００ｍＬで洗浄した後、図３の血液浄化器１０として図に示すごとく５０ｍＬ／ｍｉｎで血液の体外循環を施行した。なお、体外循環に際しては、ヘパリンを開始時に１０００Ｕのワンショットで、また１０００Ｕ／ｈｒで静脈内持続投与した。体外循環前と体外循環３時間経過時の血液中のジゴキシン濃度を実施例１と同様に測定した。なお、３時間経過時の血液は図３において強心配糖体吸着器の上流側より採取した。体外循環前には５．２７ｎｇ／ｍＬであったものが、３時間後には１．０３ｎｇ／ｍＬまで低下した。
【００６０】
比較例５
血液浄化器をＤＨＰ−１（商品名、クラレ（株）製、活性炭吸着材、カートリッジ内容積２００ｍＬ）に変えたほかは実施例２と同様にしてイヌ血液の体外循環を施行した。血液中のジゴキシン濃度は、体外循環前には５．２８ｎｇ／ｍＬであったが、３時間後には２．６６ｎｇ／ｍＬであり、ｌｏｇＰ値が６以上であるｎ−ヘキサデシルアミンを固定化した吸着材を充填した吸着器（実施例２）と比較して、循環後の血中のジゴキシン濃度が高値であることがわかる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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