(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
虚血性心臓障害の治療に有効である治療用組成物であって、一般式：
【化１】
0004714139.tif 000017
（式中：
Ｚは、
Ｒ９およびＲ１０が、同じであっても、または異なっていてもよく、水素またはＣ１〜Ｃ６アルキルである、式ＣＨ２ＮＲ９Ｒ１０のアミノメチル；
Ｒ９およびＲ１０が、上記と同じである式ＣＯＮＲ９Ｒ１０のカルボキサミド類；および
Ｒ９およびＲ１０が、上記と同じである式ＳＯ２ＮＲ９Ｒ１０のスルホンアミド類；
からなる群から選択され；
Ｘは、水素、ヒドロキシル、ハロゲンおよびアルコキシよりなる群から選択される）
のジアリールメチルピペラジン化合物、
または薬学的に許容できるその塩の有効量を含む組成物。
【請求項２】
前記組成物は、心疾患の治療に使用される第２の化合物の有効量を、さらに含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記第２の化合物は、硝酸塩類、ベータアドレナリン遮断剤、カルシウムチャンネルアンタゴニスト、ＡＣＥ阻害剤、非ペプチドアンジオテンシンＩＩアンタゴニスト、ＩＩｂ／ＩＩＩａアンタゴニストおよびアスピリンからなる群から選択される、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
前記第２の化合物は、ジアリールメチルピペラジン化合物と同時期に投与される、請求項２に記載の組成物。
【請求項５】
前記ジアリールメチルピペラジン化合物は、非鎮痛性化合物である、請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
前記ジアリールメチルピペラジン化合物は、主として末梢デルタオピオイド受容体に作用する、請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
前記ジアリールメチルピペラジン化合物は、虚血性心事象の発症と同時に；心臓虚血発症前に；術前に；または虚血性心事象の発症後に投与される、請求項１に記載の組成物。
【請求項８】
虚血性心臓障害の治療に有効である治療用組成物であって、式：
【化２】
0004714139.tif 000018
の非鎮痛性ジアリールメチルピペラジン化合物、
または薬学的に許容できるその塩の有効量を含む組成物。
【請求項９】
前記組成物は、予防的または矯正的心応答または心活動を媒介するために使用される第２の化合物をさらに含む、請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
前記第２の化合物は、硝酸塩類、ベータアドレナリン遮断剤、カルシウムチャンネルアンタゴニスト、ＡＣＥ阻害剤、非ペプチドアンジオテンシンＩＩアンタゴニスト、ＩＩｂ／ＩＩＩａアンタゴニストおよびアスピリンからなる群から選択される請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】
前記第２の化合物は、ジアリールメチルピペラジン化合物と同時期に投与される、請求項９に記載の組成物。
【請求項１２】
前記非鎮痛性ジアリールメチルピペラジン化合物は、虚血性心事象の発症と同時に；心臓虚血発症前に；術前に；または虚血性心事象の発症後に投与される、請求項８に記載の組成物。
【請求項１３】
虚血性心臓障害の治療に有効である治療用組成物であって、式：
【化３】
0004714139.tif 000019
の非鎮痛性ジアリールメチルピペラジン化合物、
または薬学的に許容できるその塩の有効量を含む組成物。
【請求項１４】
前記組成物は、予防的または矯正的心応答または心活動を媒介するために使用される第２の化合物をさらに含む、請求項１３に記載の組成物。
【請求項１５】
前記第２の化合物は、硝酸塩類、ベータアドレナリン遮断剤、カルシウムチャンネルアンタゴニスト、ＡＣＥ阻害剤、非ペプチドアンジオテンシンＩＩアンタゴニスト、ＩＩｂ／ＩＩＩａアンタゴニストおよびアスピリンからなる群から選択される請求項１４に記載の組成物。
【請求項１６】
前記組成物は、薬学的に許容できる担体をさらに含む、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１７】
前記ジアリールメチルピペラジン化合物は、虚血性心事象の発症と同時に；心臓虚血発症前に；術前に；または虚血性心事象の発症後に投与される、請求項１３に記載の組成物。
【請求項１８】
心臓組織の虚血性障害を減少するための医薬の製造におけるジアリールメチルピペラジン化合物の使用であって、前記ジアリールメチルピペラジン化合物が、式：
【化４】
0004714139.tif 000020
の化合物、または薬学的に許容できるその塩である使用。
【請求項１９】
前記医薬は、非経口投与、非腸管外投与、経口投与、経直腸投与、局所投与、経鼻投与、経眼投与、皮下投与、筋肉内投与、静脈内投与、経皮投与、経脊髄投与、鞘内投与、関節内投与、動脈内投与、くも膜下投与、舌下投与、口腔粘膜投与、経気管支投与、経リンパ投与および子宮内投与からなる群から選択される投与のために調製される、請求項１８に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は、心臓保護のための組成物および治療法に関するものであり、より詳細には、虚血前調整の心臓保護的効果を媒介する非ペプチドデルタオピオイド受容体アゴニスト化合物類に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
関連技術の説明
血液と酸素を与えられない組織は、非可逆的な臓器損傷の可能性を伴う虚血性壊死または梗塞を受ける。心筋梗塞を経て生存している患者では、虚血性障害により、生存可能な心筋の減少が示されている。しかし、心臓発作の前に、心筋への酸素流量の減少によるアンギナを有する人は、アンギナを有さない人に較べて、心筋の組織損傷が少ないことが示されている。このように、虚血の短いエピソードは、虚血性障害から心筋を保護する効果を有する。
【０００３】
虚血前調整（ＰＣ）は、ヒトを含む多くの種において広く示されている現象であり、これによって心筋は、虚血または酸素欠乏症の短い先行期とそれに続く再灌流または酸素再付加による重大な虚血事象から保護される。引き続いてより延長化する虚血事象からの損傷に対して保護するための、短時間の一時的虚血の利用は、ムリー（Ｍｕｒｒｙ）ら、（Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ、１９８６年：７４：ｐ．１１２４−１１３６）により証明されている。試験結果は、重大な長期事象前の短時間虚血によって、前処置を施されたイヌの心臓における凡そ３０％の組織壊死の減少を示している。虚血前調整の現象は、虚血性心疾患を有する患者の治療にとって、大きな臨床的利益となった。
【０００４】
虚血前調整には、血液供給の物理的減少が必要であるが、これは多くの患者にとって困難であるか、実行不可能であり得る。運動は、虚血前調整を凡そ２４時間持続させる効果を有していることが判っているが、多くの患者は、その虚血前調整の利益を受けるために要する心臓出力のレベルに到達することが、身体的に不可能である。虚血前調整の臨床的適用として、冠状動脈バイパス術前に動脈クロスクランピングにより誘導される断続的虚血が用いられてきた。心筋前調整を受けた患者においては、手術操作後、心臓出力が有意に高かったことが判っている。また、前調整患者は、前調整なしの患者に較べて術後の血液動態に改善を示した。しかし、心筋に対する血液供給の減少を引き起すための動脈クロスクランピングには、複数の潜在的問題が関連し得るため、薬理学的手段によって虚血前調整を可能にする治療を有することが望ましい。
【０００５】
オピオイド受容体を含む多数の膜受容体が、前調整に関与していることが確認されている。３つの主要なオピオイド受容体のサブタイプは、μ、κおよびδである。デルタオピオイド受容体刺激は、非冬眠動物でも、自然の冬眠を模擬しているもので、組織への酸素供給が最少の時に、組織の生存率を高めることが報告されている。このように、デルタオピオイド受容体刺激は、虚血前調整に関与していることが示されている。虚血前調整の効果を誘導するために、ペプチドおよび非ペプチドのデルタオピオイド受容体アゴニストを用いて多くの研究が行われた。シュルツ（Ｓｃｈｕｌｚ）およびグロス（Ｇｒｏｓｓ）（米国特許第６，１０３，７２２号明細書）は、虚血前調整効果を示す（−）−２−メチル−４ａ．α−（３−ヒドロキシフェニル）−１，２，３，４，４ａ，５，１２，１２ａ．β−オクタヒドロキノリノ［２，３］イソキノリン（ＴＡＮ６７（−））；（±）−４−（（αＲ＊）−α−（（２Ｓ＊，５Ｒ＊）−４−アリル−２，５−ジメチル−１−ピペラジニル）−３−ヒドロキシベンジル）−Ｎ，Ｎ  ジメチルベンズアミド（ＢＷ３７３Ｕ８６）；および（＋）−４−［（αＲ）−α−（（２Ｓ，５Ｒ）−４−アリル−２，５−ジメチル−１−ピペラジニル）−３−メトキシベンジル］−Ｎ，Ｎ−ジメチルベンズアミド（ＳＮＣ８０）などの多数の非ペプチドデルタオピオイド受容体化合物を試験した。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
しかし、これらの非ペプチド化合物は、問題がないわけではない。特に、これらの化合物は、鎮痛薬と考えられているが、これらの化合物の幾つかは、血液脳関門を通過することにより、投与された被験体に発作を引き起すことが知られているからである。
【０００７】
このように、心筋への血液供給減少に関連する問題および幾つかのデルタオピオイド受容体アゴニスト化合物の投与によって生じる発作の可能性を回避する薬理学的手段によって、虚血前調整を可能にする治療を有することが望ましい。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
発明の概要
本発明は、一態様において、虚血性障害の治療に有効である、および／または虚血前調整を達成するための治療用組成物に関するものであり、前記組成物は、式：
【化１】
0004714139.tif 000002
（式中、
Ｚは、
水素；
ハロゲン；
Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル；
Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル；
Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ；
Ｃ３〜Ｃ６シクロアルコキシ；
Ｒ８が、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、Ｃ５〜Ｃ１０アリール部分およびＣ１〜Ｃ６アルキル部分を有するアリールアルキル、またはＣ５〜Ｃ１０アリールである式ＳＲ８のスルフィド類；
Ｒ８が、上記と同じものである式ＳＯＲ８のスルホキシド類；
Ｒ８が、上記と同じものである式ＳＯ２Ｒ８のスルホン類；
ニトリル；
Ｃ１〜Ｃ６アシル；
Ｒ８が、上記と同じものである式ＮＨＣＯ２Ｒ８のアルコキシカルボニルアミノ（カルバモイル）；
カルボン酸、またはエステル、アミド、またはその塩；
Ｒ９およびＲ１０が、同じであっても、または異なっていてもよく、また、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ２〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ２〜Ｃ６メトキシアルキル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、もしくはＣ５〜Ｃ１０アリール、または、Ｒ９およびＲ１０は一緒になって、５個または６個の原子の環を形成でき、前記環原子はＮおよびＣよりなる群から選択される、式ＣＨ２ＮＲ９Ｒ１０のアミノメチル；
Ｒ９およびＲ１０が、上記と同じであるか、またはそれらのＣ２〜Ｃ３０ペプチド共役体である式ＣＯＮＲ９Ｒ１０のカルボキサミド類；および
Ｒ９およびＲ１０が、上記と同じである式ＳＯ２ＮＲ９Ｒ１０のスルホンアミド類；
よりなる群から選択され；
Ｘは、水素、ヒドロキシル、ハロゲンおよびアルコキシよりなる群から選択される）
のジアリールメチルピペラジン化合物、
または薬学的に許容できるエステルまたはその塩の有効量を含む。
【０００９】
本発明の他の態様は、式：
【化２】
0004714139.tif 000003
のジアリールメチルピペラジン化合物または薬学的に許容できるその塩またはエステルを含む治療用組成物の有効量を投与することを含んでなる、被験体における虚血性障害を減少させる方法に関する。
【００１０】
本発明のさらに他の態様は、式：
【化３】
0004714139.tif 000004
のデルタオピオイド受容体または薬学的に許容できるその塩またはエステルの有効量を、前記被験体に投与することを含んでなる、被験体において虚血性損傷を減少させ、および／または虚血前調整を達成する方法に関する。
【００１１】
本発明のジアリールメチルピペラジン化合物は、末梢のデルタオピオイド受容体に主として作用する非鎮痛性化合物であることが好ましい。前記ジアリールメチルピペラジン化合物は、虚血事象の発症と同時に；虚血性心疾患の症候期にある個体における疾患進行を防止するために予防的療法として、虚血発症の前に；血餅または他のタイプの心臓虚血の危険にあり得る患者における術前に；または虚血事象の発症後などの種々の有効な時間枠に投与され得る。
【００１２】
本発明の化合物の有効性は、影響を受けた領域の磁気共鳴画像（ＭＲＩ）などの非侵襲的臨床画像法を用いて、損傷領域のサイズを測定することによって評価できる。
【００１３】
他の態様において、本発明は、臓器を虚血性損傷から保護するために有効な濃度における式：
【化４】
0004714139.tif 000005
の化合物、または薬学的に許容できるその塩またはエステルを含む、摘出臓器の生存力を保存する溶液に関する。摘出臓器としては、限定はしないが、心臓、肝臓、腎臓、角膜および／または肺臓を挙げることができる。
【００１４】
前記治療用組成物は、たとえば、経口投与、経直腸投与、局所投与、舌下投与、経膜投与、経鼻投与、経眼投与、皮下投与、筋肉内投与、静脈内投与、経皮投与、経脊髄投与、鞘内投与、関節内投与、動脈内投与、くも膜下投与、経気管支投与、経リンパ投与および子宮内投与を含む群から選択される投与様式など、任意の好適な投与様式で投与できる。
【００１５】
本発明のさらなる態様は、式：
【化５】
0004714139.tif 000006
のデルタオピオイド受容体アゴニストまたは薬学的に許容できるそのエステルまたは塩の有効量および虚血事象後の心臓機能の低下を和らげるために使用される塩酸アルギニンなどの抗虚血効果を有する第２の化合物および同様な目的に役立つ酸化窒素の他の潜伏性供給源を投与することを含んでなる、哺乳動物における虚血発作の延長化と再灌流損傷に対する保護の方法に関する。
【００１６】
本発明の種々の他の態様、特徴および実施形態は、開示および添付された請求の範囲を確認することから、より十分に明らかとなろう。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１７】
発明およびその好ましい実施形態の詳細な説明
本発明の広汎な一の態様において、以下のより十分に記述されているジアリールメチルピペラジン化合物は、それによって虚血前調整を媒介し、組織壊死の減少、虚血後の収縮機能の改善および虚血後の律動異常発生の減少を提供するために被験体に投与される。本発明による治療は、本発明の化合物が、治療用組成物中の単独の治療薬として投与される単独療法治療、または本発明による化合物が、中和的または保護的な心臓応答を媒介するために投与される他の心臓治療薬と同時期に、たとえば、同時にまたは連続的に投与される併用療法治療を含むことで有利であり得る。他の心臓治療薬としては、限定はしないが、硝酸塩類、ベータアドレナリン遮断剤、カルシウムチャンネルアンタゴニスト、ＡＣＥ阻害剤、非ペプチドアンジオテンシンＩＩアンタゴニスト、ＩＩｂ／ＩＩＩａアンタゴニストおよびアスピリンを挙げることができる。
【００１８】
本発明に関して、本明細書に用いられる用語の「アルキル」は、以下を包含するものとして幅広く解釈されることが意図されている。（ｉ）直鎖ならびに分枝鎖の特徴を有するアルキル基；（ｉｉ）非置換アルキル基ならびに置換アルキル基であって、置換アルキル基の置換基が、このようなアルキル基と適合性があり、ジアリールメチルピペラジン化合物の意図された使用に関して、その有効性を妨げることのない任意の立体的に許容できる置換基を含むことのできるもの（置換アルキル基に関する置換基の例としては、ハロゲン（たとえば、フルオロ、クロロ、ブロモおよびヨード）、アミノ、アミド、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシ、ニトロ、ヒドロキシなどが挙げられる）；（ｉｉｉ）飽和アルキル基ならびに不飽和アルキル基であって、後者には、アルケニル置換アルキル基（例えば、アリル、メタリル、プロパリル、ブテニルメチルなど）、アルキニル置換アルキル基およびこのようなアルキル基と適合性があり、ジアリールメチルピペラジン化合物の意図された使用に関して、その有効性を妨げることのない任意の立体的に許容できる不飽和を含有する任意の他のアルキル基などが挙げられる；および（ｉｖ）結合部分または架橋部分、例えば窒素、酸素、硫黄などのヘテロ原子を含むアルキル基。
【００１９】
本発明に関して、本明細書に用いられる用語の「アリール」は、炭素環式芳香族基（例えば、フェニル、ナフチル）ならびにヘテロ環式芳香族基（たとえば、ピリジル、チエニル、フラニルなど）を言うものとして幅広く解釈されることが意図されており、非置換ならびに置換アリール基を包含し、置換アリール基の置換基は、このようなアリール基と適合性があり、ジアリールメチルピペラジンデルタオピオイド受容体アゴニストの意図された使用に関して、その有効性を妨げることのない任意の立体的に許容できる置換基を含むことができるものである。置換アリール基の置換基の例としては、水素、１種以上のハロゲン（たとえば、フルオロ、クロロ、ブロモおよびヨード）、アミノ、アミド、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシ、ニトロ、トリフルオロメチル、ヒドロキシ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル部分を含有するヒドロキシアルキルなどが挙げられる。
【００２０】
式（１）、（２）および（３）の化合物の薬学的に許容できるエステルの例としては、式（１）でＸ＝ＯＨの化合物および式（２）と（３）で、エステル基のカルボン酸部分のうちの非カルボニル部分が、直鎖または分枝鎖のアルキル（たとえば、ｎ−プロピル、ｔ−ブチル、ｎ−ブチル）、アルコキシアルキル（たとえば、メトキシメチル）、アリールアルキル（たとえば、ベンジル）、アリールオキシアルキル（たとえば、フェノキシメチル）およびアリール（たとえば、フェニル）；アルキル−、アリール−またはアリールアルキルスルホニル（たとえば、メタンスルホニル）；アミノ酸エステル類（たとえば、Ｌ−バリルまたはＬ−イソロイシル）；ジカルボン酸エステル類（たとえば、ヘミコハク酸エステル（ｈｅｍｉｓｕｃｃｉｎａｔｅ））；カルボネートエステル類（たとえば、エトキシカルボニル）；カルバメートエステル類（たとえば、ジメチルアミノカルボニル、（２−アミノエチル）アミノカルボニル）；および無機エステル類（たとえば、モノ−、ジ−またはトリホスフェート）から選択される化合物におけるヒドロキシル基のカルボン酸エステル類が挙げられる。
【００２１】
式（１）、（２）および（３）の化合物の薬学的に許容できる塩類の例としては、アルカリ金属（たとえば、ナトリウム、カリウム）、アルカリ土類金属（たとえば、カルシウム、マグネシウム）、アンモニウムおよびＮＲ’４＋（式中、Ｒ’はＣ１〜Ｃ４アルキル）などの適切な塩基から誘導される塩類が挙げられる。アミノ基の薬学的に許容できる塩類の例としては、酢酸、乳酸、酒石酸、リンゴ酸、ラクトビオン酸（ｌａｃｔｏｂｉｏｎｉｃ  ａｃｉｄ）、フマル酸およびコハク酸などの有機カルボン酸；メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、イセチオン酸、ベンゼンスルホン酸およびｐ−トルエンスルホン酸などの有機スルホン酸；および塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸およびスルファミン酸などの無機酸の塩類が挙げられる。ヒドロキシル基を有する化合物の薬学的に許容できる塩類は、Ｎａ＋、ＮＨ４＋またはＮＲ’４＋（式中、Ｒ’は、たとえばＣ１〜Ｃ４アルキル基である）などの好適なカチオンと組合わせた前記化合物のアニオンからなる。
【００２２】
また、本発明は、有効剤として本発明の１種以上のジアリールメチルピペラジン化合物を含んでなる、獣医学およびヒト医学の双方に利用するための製薬製剤も考慮している。
【００２３】
このような製薬製剤において、有効剤は、そのための１種以上の薬学的に許容できる担体および場合によっては、他の任意の治療成分と一緒に利用されることが好ましい。前記担体は、前記製剤の他の成分と適合性であり、そのレシピエントにとって、過度に有害でないという意味で、薬学的に許容されなければならない。ジアリールメチルピペラジン化合物は、上記の所望の薬理学的効果を達成するために有効な量で、また、所望の１日投与量を達成するために適切な量で提供される。
【００２４】
前記製剤には、非経口投与ならびに経口投与に好適なものが含まれ、特定の投与形式としては、経口、経直腸、局所、舌下、経膜、経鼻、経眼、皮下、筋肉内、静脈内、経皮、経脊髄、鞘内、関節内、動脈内、くも膜下、経気管支、経リンパおよび子宮内投与が挙げられる。
【００２５】
前記ジアリールメチルピペラジン化合物は、液体溶液を含んでなる製剤である場合、前記製剤は、非経口的に投与されることが有利であり得る。前記ジアリールメチルピペラジン化合物が、液体懸濁液製剤中で、または生体適合性担体中の粉末製剤として使用される場合、前記製剤は、経口、経直腸または経気管支投与されることが有利であり得る。
【００２６】
前記ジアリールメチルピペラジン化合物は、粉末固体の形態で直接使用される場合、経口投与されることが有利であり得る。あるいは、それは好適なネブライザー装置を含んでなる吸入回路から患者によって吸い込まれる粉末のガス状分散物を形成するための担体ガス中粉末の噴霧法によって経気管支投与され得る。
【００２７】
幾つかの適用において、前記ジアリールメチルピペラジン化合物は、リポソームまたは他の封入媒体中の有効剤封入化、または蛋白質、リポ蛋白質、糖蛋白質および多糖類から選択されたものなどの好適な生体分子上への有効剤の、例えば、共有結合、キレート化、または結合性配位による固定によるなどの「ベクトル化」形態において使用することが有利であり得る。
【００２８】
本発明のジアリールメチルピペラジン化合物を含んでなる製剤は、単位投与量形態において都合よく提供でき、また製薬業界で周知の任意の方法によって調製できる。このような方法は一般に、ジアリールメチルピペラジン化合物を、１種以上の副次的成分を構成する担体と結合させる工程を含む。典型的には、前記製剤は、前記ジアリールメチルピペラジン化合物を、液体担体、微分固体担体または双方に均一、密に結合させ、次いで必要ならば、この生成物を、所望の製剤の投与形態へと形状化することにより調製される。
【００２９】
経口投与に好適な本発明の製剤は、各々が予め決められた量のジアリールメチルピペラジン化合物を、粉末または顆粒として含有するカプセル剤、カシェ剤、錠剤または舐剤などの個別的単位として、またはシロップ、エリキシル、乳剤またはドラフトなど、水性液体または非水性液体における懸濁液として提供できる。
【００３０】
錠剤は、任意に１種以上の副次的成分と共に、圧縮または成形によって作製できる。圧縮錠剤は、ジアリールメチルピペラジン化合物と任意に結合剤、崩壊剤、潤滑剤、不活性希釈剤、界面活性剤または放出剤とを混合させた粉末または顆粒などの自動流動形態で好適な機械における圧縮によって調製できる。粉末化したジアリールメチルピペラジン化合物と好適な担体との混合物からなる成形錠剤は、好適な機械における成形によって作製できる。
【００３１】
シロップは、本発明の化合物を糖、たとえば、スクロースの濃縮水性溶液に加えることによって作製でき、それに任意の副次的成分を加えることもできる。このような副次的成分としては、芳香剤、好適な防腐剤、糖の結晶化を妨げる試剤、および他の成分の溶解度を高めるポリヒドロキシアルコールなどの試剤、たとえば、グリセロールまたはソルビトールを挙げることができる。
【００３２】
非経口投与に好適な製剤は、本発明の化合物の滅菌水性調製液を含むことが都合よく、これは、レシピエントの血液と等張（例えば、生理食塩溶液）であることが好ましい。このような製剤は、懸濁剤ならびに増粘剤および前記化合物に血液成分または１つ以上の臓器を標的化させるためにデザインされるリポソームまたは他の微粒子系を含み得る。前記製剤は、単位用量形態、または多用量形態において提供できる。
【００３３】
鼻用スプレー製剤は、防腐剤および等張剤と共に、本発明の化合物の精製水溶液を含んでなる。このような製剤は、鼻粘膜に適合性のｐＨおよび等張状態に調整されていることが好ましい。
【００３４】
直腸投与製剤は、カカオ脂、水素添加脂肪または水素添加脂肪族カルボン酸などの好適な担体と共に坐剤として提供できる。
【００３５】
眼用製剤は、そのｐＨと等張因子を眼のそれに合うように調整されることが好ましいということ以外には、鼻用スプレーと同様の方法によって調製される。
【００３６】
局所用製剤は、鉱油、石油、ポリヒドロキシアルコール類、または局所用製薬製剤に使用される他の塩基などの１種以上の媒体に溶解または懸濁させた本発明の少なくとも１種の化合物を含んでなる。
【００３７】
経皮製剤は、セルロース系媒体などの揺変性またはゼラチン様担体、たとえば、メチルセルロースまたはヒドロキシエチルセルロース中に、本発明の化合物を組み込むことによって調製でき、次いで得られた製剤は、装着者の皮膚への皮膚接触を確保するために適合させた経皮装置内に詰められる。
【００３８】
前述の成分に加えて、本発明の製剤は、希釈剤、緩衝剤、芳香剤、結合剤、崩壊剤、界面活性剤、増粘剤、潤滑剤、防腐剤（抗酸化剤を含む）などから選択される１種以上の副次的成分をさらに含み得る。
【００３９】
幾つかの場合において、本発明のジアリールメチルピペラジン化合物の効果を延長させるために、皮下または筋肉内注射からのジアリールメチルピペラジン化合物の吸収を遅延化することが望ましい。これは、水に難溶性の結晶物質または非晶質物質の液体懸濁液を使用することによって達成できる。次いでジアリールメチルピペラジン化合物の吸収率は、その溶解率に依存し、この溶解率は、次に結晶のサイズおよび結晶形態に依存し得る。あるいは、非経口的に投与されたジアリールメチルピペラジン化合物の吸収遅延化は、前記薬剤を油媒体中に溶解または懸濁させることによって達成される。
【００４０】
注射用蓄積形態は、ポリアクチド−ポリグリコリドなどの生分解性ポリマー中、本発明の少なくとも１種の化合物のミクロ被包マトリクスの形成により調製できる。ポリマーに対する有効成分の割合および使用される具体的なポリマーの性質に依って、有効成分の放出速度を制御できる。他の生分解性ポリマーの例としては、ポリ（オルトエステル類）およびポリ（無水物）が挙げられる。注射用蓄積製剤はまた、身体組織に適合性であるリポソーム類またはミクロ乳濁液中に有効成分を捕捉することによっても調製される。注射用材料は、例えば、細菌保持フィルタを通すろ過によって滅菌できる。
【００４１】
治療される特定の条件に依って、動物被験体は、当業界で容易に決定でき、過度の実験なしで好適な任意の治療的に有効かつ安全な投与量で、本発明の化合物を投与され得る。
【００４２】
一般に、治療に使用される本発明の化合物の有効用量は、当業界内で容易に決定できるように、関係する特定の条件に依って本発明の広汎な実践において広範囲にわたって変化し得るが、本明細書に記載された各関連化合物について、本明細書に記載された各状態の治療における治療利益達成のための本発明の化合物の好適な治療用量は、レシピエントの体重１キログラム当たり、１日１０マイクログラム（μｇ）から１００ミリグラム（ｍｇ）の範囲、好ましくは体重１キログラム当たり、１日５０μｇから７５ｍｇの範囲、最も好ましくは体重１キログラム当たり、１日１００μｇから５０ｍｇの範囲となる。所望の投与量は、特に手術が差し迫っている場合、１日を通して適切な間隔で投与される２、３、４、５、６回またはそれ以上のサブ投与量として提供できる。なお、単回投与の時機は、虚血性発作の発症４時間後までが好ましい。引き続くより長い虚血性発作に対して、心筋をより抵抗性にするため、所望の投与量は、複数回反復できる。
【００４３】
以下の実施例は、本発明の化合物を合成するために有利に利用できる合成操作を例示するものである。
【実施例】
【００４４】
実施例１
４−｛（２Ｒ，５Ｓ）−４−［（Ｒ）−（４−ジエチルカルバモイルフェニル）（３−ヒドロキシフェニル）メチル］−２，５−ジメチル−１−ピペラジニルメチル｝安息香酸
【化６】
0004714139.tif 000007
【００４５】
５０００ｍＬのジクロロメタン中、３−ブロモフェノール（４００ｇ、２．３１ｍｏｌ）、ｔ−ブチルクロロジメチルシラン（３９１ｇ、２．５４ｍｏｌ）およびイミダゾール（３４６ｇ、５．０８ｍｏｌ）の溶液を、室温で一晩攪拌した。この反応液を２０００ｍＬの水に注ぐと層分離した。有機層を１Ｎ水性水酸化ナトリウム溶液（３×１５００ｍＬ）および水（２×１５００ｍＬ）で洗浄してから、シリカゲルパッド（４００ｇのシリカ６０、２３０〜４００メッシュ）を通過させる。このシリカゲルを、ジクロロメタン（２×５００ｍＬ）で洗浄し、ろ液を合わせて、減圧下、溶媒を除くと、６６９ｇ（９８．４％）の３−ブロモフェノキシ−ｔ−ブチルジメチルシランが、透明な淡黄色液体として得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）：δ７．１（ｍ、２Ｈ）；７．０（ｂｒ  ｓ、１Ｈ）；６．７５（ｍ、１Ｈ）；１．０（ｓ、９Ｈ）；０．２（ｓ、６Ｈ）。
【００４６】
臭化３−ｔ−ブチルジメチルシロキシフェニルマグネシウムは、１５０ｍＬの阻害剤のない無水テトラヒドロフラン中、３−ブロモフェノキシ−ｔ−ブチルジメチルシラン（４５．９７ｇ、１６０ｍｍｏｌ）と１，２−ジブロモエタン（６．０１ｇ、３２ｍｍｏｌ）混合物を４００ｍＬの阻害剤のない無水テトラヒドロフラン中、マグネシウムターニング（４．２８ｇ、１７６ｍｍｏｌ）混合物に、還流下、ゆっくりと添加することによって形成された。還流下、１時間の攪拌後、透明な淡褐色溶液を室温まで冷却した。
【００４７】
４−カルボキシベンズアルデヒド（１００．３ｇ、０．６７ｍｏｌ）をトルエン（１２００ｍＬ）中に溶解／懸濁し、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．１５ｍＬ）を加え、塩化チオニル（５３．５ｍＬ、８７．２ｇ、０．７３ｍｏｌ）を滴下して加えながら、前記懸濁液を攪拌した。この反応混合物を窒素下、加熱還流し、２時間攪拌し、その間に、アルデヒド−酸の全てではないが大部分を溶液に通した。塩化チオニルのさらなる量（２０ｍＬ、３２．６ｇ、０．２７ｍｏｌ）を加えて、一晩還流を続けた。透明な反応混合物を蒸発させ、残渣を無水テトラヒドロフラン（１５００ｍＬ）に溶解した。この溶液を氷／水浴中で冷却し、ジエチルアミン（１７３ｍＬ、１２２ｇ、１．６７ｍｏｌ（２．５当量））を、攪拌溶液に滴下して加えた。氷浴を取り外し、攪拌を２．５時間続けた。この反応混合液をろ過して、白色結晶質の塩酸ジエチルアミン副産物を除去した。前記結晶を酢酸エチル（２×６００ｍＬ）で洗浄し、洗浄液は取っておいた。テトラヒドロフランのろ液を蒸発させ、残渣を酢酸エチル洗浄液に溶解させた。この溶液を、１Ｍ塩酸（２×６００ｍＬ）、水（２×３００ｍＬ）、希釈炭酸ナトリウム溶液（飽和：Ｈ２Ｏ／１：１、２×６００ｍＬ）、水（２×３００ｍＬ）および飽和塩化ナトリウム溶液（３００ｍＬ）で連続的に洗浄した。有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、蒸発させると、淡褐色油として４−ホルミル−Ｎ，Ｎ−ジエチルベンズアミドが得られ、これをさらに精製することなく使用した（収率：１１５．７ｇ、８４％）。
【００４８】
冷却器およびＤｅａｎ−Ｓｔａｒｋトラップを備え付けた３Ｌの丸底フラスコ内で、４−ホルミル−Ｎ，Ｎ−ジエチルベンズアミド（２０．５３ｇ、１００ｍｍｏｌ）、ベンゾトリアゾール（１１．９１ｇ、１００ｍｍｏｌ）、および（２Ｒ，５Ｓ）−１−アリル−２，５−ジメチルピペラジン（１５．４３ｇ、１００ｍｍｏｌ、Ｃｈｉｒｏｔｅｃｈ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ社、英国ケンブリッジ所在）を１０００ｍＬのトルエンと合わせた。トラップ内にさらなる水が見られなくなるまで（約３時間）、前記反応液を窒素下、加熱還流した。反応液を室温まで冷却し、減圧濃縮して、凡そ３００ｍＬの容量を残した。無水テトラヒドロフラン（５００ｍＬ）を窒素下、前記ベンゾトリアゾール付加体に加え、攪拌して完全溶液を得た。この溶液を室温で、両頭針により臭化３−ｔ−ブチルジメチルシリルオキシフェニルマグネシウム溶液（上記）に加えた。１．５時間攪拌後、前記反応液を、飽和塩化アンモニウム水溶液（５０ｍＬ）の添加によってクエンチし、１５分間攪拌した。無水硫酸マグネシウム（５０ｇ）を加えて１．５時間攪拌し、反応液をろ過した。減圧下、溶媒を除去し、残渣を酢酸エチル（１０００ｍＬ）に溶解させた。前記酢酸エチル溶液を、１Ｍ水酸化ナトリウム（５×４００ｍＬ）、水（４×４００ｍＬ）および飽和塩化ナトリウム水溶液（４００ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒を除去すると、暗色油が得られた。この油を、５００ｍＬのテトラヒドロフランおよび３００ｍＬの３Ｍ塩酸に溶解し、室温で１．５時間攪拌した。この反応液を水（３００ｍＬ）に希釈し、元の容積の約半分まで減圧濃縮した。この溶液を、ペンタン（２×５００ｍＬ）で抽出した。水層を５Ｍ水酸化ナトリウムでｐＨ８〜９に調製し、酢酸エチル（２５０ｍＬ）で抽出した。層を分離し、水性部分を、さらに酢酸エチル（２５０ｍＬ）で抽出した。有機抽出物を合わせて飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧除去すると、褐色油が得られた。この残渣を、酢酸エチル（２５ｍＬ）に溶解し、標準化合物の結晶種を入れて、一晩、結晶化させた（マイケル・ジェー・ビショップ（Ｍｉｃｈａｅｌ  Ｊ．Ｂｉｓｈｏｐ）およびロバート・ダブリュー・マクナット（Ｒｏｂｅｒｔ  Ｗ．ＭｃＮｕｔｔ）、「Ｓｅｅｄ  Ｃｒｙｓｔａｌｓ  Ｏｂｔａｉｎｅｄ  Ｆｒｏｍ  Ｈｏｔ  ２−ｐｒｏｐａｎｏｌ  Ｗｉｔｈ  Ａｄｄｉｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｗａｔｅｒ」、Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．（１９９５）、５、ｐ．１３１１−１４）。結晶をろ過し、少量の冷酢酸エチルで洗浄した。室温で５ｍｍＨｇ下で乾燥すると、４−［（Ｒ）−（（２Ｓ，５Ｒ）−４−アリル−２，５−ジメチル−１−ピペラジニル）（３−ヒドロキシフェニル）メチル］−Ｎ，Ｎ−ジエチルベンズアミドが、白色結晶として得られた（４−ホルミル−Ｎ，Ｎ−ジエチルベンズアミドから、１４．１５ｇ、３２．５％）。この生成物は、ＨＰＬＣ（Ｚｏｒｂａｘ  ＲＸ  Ｃ８、４．６ｍｍ  ×  ２５ｃｍ、無勾配ＭｅＯＨ中４０％  ０．０１Ｍ  ＮＨ４ＯＡｃ、３分；直線勾配から１００％ＭｅＯＨ、４５分；無勾配ＭｅＯＨ、５分；１．０ｍＬ／分；λｏｂｓ＝２１０ｎｍ、Ｒｔ＝��２．２１分）上に単一ピークを示した。Ｃ２７Ｈ３７Ｎ３Ｏ２に関する計算値：％Ｃ，７４．４５；Ｈ，８．５６；Ｎ，９．６５。実測値：％Ｃ，７４．４８；Ｈ，８．６０；Ｎ，９．６２。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）：δ７．４２（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、２Ｈ）；７．２８（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、２Ｈ）；７．０８（ｔ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、１Ｈ）；６．６４〜６．５７（ｍ、３Ｈ）；５．９４〜５．８３（ｍ、１Ｈ）；５．２２（ｄ、Ｊ＝８．７Ｈｚ、１Ｈ）；５．１８（ｓ、１Ｈ）；５．１４（ｂｒ  ｓ、１Ｈ）；３．６０〜３．４７（ｍ，２Ｈ）；３．４２（ｄｄ，Ｊ＝５．２、１３．７Ｈｚ、１Ｈ）；３．３７〜３．２０（ｂｒ  ｍ、２Ｈ）；２．９１（ｄｄ，Ｊ＝８．１、１３．５Ｈｚ、１Ｈ）；２．８５（ｄｄ，Ｊ＝２．６、１１．４Ｈｚ、１Ｈ）；２．７０〜２．４７（ｍ、３Ｈ）；２．１７（ｔ、Ｊ＝１０．７Ｈｚ、１Ｈ）；１．９８（ｔ、Ｊ＝１１．１Ｈｚ、１Ｈ）；１．２３（ｍ、３Ｈ）；１．１４（ｄ、Ｊ＝６．１Ｈｚ、ｍと重なる３Ｈ、３Ｈ）；１．０２（ｄ、Ｊ＝６．２Ｈｚ、３Ｈ）。
【００４９】
４−［（Ｒ）−（（２Ｓ，５Ｒ）−４−アリル−２，５−ジメチル−１−ピペラジニル）（３−ヒドロキシフェニル）メチル］−Ｎ，Ｎ−ジエチルベンズアミド（１０．８９ｇ、２５ｍｍｏｌ）およびチオサリチル酸（４．６３ｇ、３０ｍｍｏｌ）の無水テトラヒドロフラン（５０ｍＬ）溶液を、テトラヒドロフラン（１０ｍＬ）中、ビス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（０．７１８ｇ、１．２５ｍｍｏｌ）と１，４−ビス（ジフェニルホスフィノ）ブタン（０．５３３ｇ、１．２５ｍｍｏｌ）を溶解することによって調製された触媒溶液と共に、窒素下、室温で１．５時間攪拌した。（ジェイ・ピー・ジェネット（Ｊ．Ｐ．Ｇｅｎｅｔ）、エス・レメーレ−オードーレ（Ｓ．Ｌｅｍａｉｒｅ−Ａｕｄｏｉｒｅ）、エム・サビグナック（Ｍ．Ｓａｖｉｇｎａｃ）、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ、３６、ｐ．１２６７−１２７０（１９９５））。この反応混合物を減圧濃縮し、残渣を酢酸エチル（１５０ｍＬ）と炭酸ナトリウム水溶液との間で分配した。層分離をしたら、ジエチルエーテル（２５０ｍＬ）を有機層に加えた。これを、５％炭酸ナトリウム溶液（２×１５０ｍＬ）で抽出した。有機層をペンタン（５００ｍＬ）で希釈し、３Ｍ塩酸（６×３０ｍＬ）で抽出した。前記水溶液を、飽和炭酸ナトリウム水溶液でｐＨ９〜１０に調整し、塩化メチレン（３×１００ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧除去し、４−［（Ｒ）−（（２Ｓ，５Ｒ）−２，５−ジメチル−１−ピペラジニル）（３−ヒドロキシフェニル）メチル］−Ｎ，Ｎ−ジエチルベンズアミドを、脆性淡黄色泡状物（１０．２４ｇ）として得た。この生成物は、ＨＰＬＣ（Ｚｏｒｂａｘ  Ｃ８、無勾配ＭｅＯＨ中４０％  ０．０１Ｍ  ＮＨ４ＯＡｃ、３分；直線勾配から１００％ＭｅＯＨ、４５分；無勾配ＭｅＯＨ、５分；１．０ｍＬ／分；λｏｂｓ＝２１０ｎｍ、Ｒｔ＝１９．２４分）上に単一ピークを示した。Ｃ２４Ｈ３３Ｎ３Ｏ２  ０．１ＥｔＯＡｃ  ０．４ＣＨ２Ｃｌ２に関する計算値：％Ｃ，６７．９６；Ｈ，７．９６；Ｎ，９．５９。実測値：％Ｃ，６７．９０；Ｈ，８．０３；Ｎ，９．５４。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）：δ７．４２（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、２Ｈ）；７．２６（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、２Ｈ）；７．１１（ｔ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、１Ｈ）；６．７２（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、１Ｈ）；６．６５（ｓ、１Ｈ）；６．５９（ｄ、Ｊ＝７．６Ｈｚ、１Ｈ）；５．１６（ｓ、１Ｈ）；４．９３（ｖ  ｂｒ  ｓ、２Ｈ）；３．５１（ｂｒ  ｍ，２Ｈ）；３．２７（ｂｒ  ｍ、２Ｈ）；３．０２〜２．９７（ｍ、１Ｈ）；２．９２（ｄ，Ｊ＝１０．５Ｈｚ、１Ｈ）；２．６６（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ、２Ｈ）；２．６０〜２．４５（ｍ、１Ｈ）；１．８４（ｄｄ、Ｊ＝１１．３、８．３Ｈｚ、１Ｈ）；１．２７〜１．１５（ｍ、３Ｈ）；１．１０（ｄ、Ｊ＝６．１Ｈｚ、ｍと重なりる３Ｈ、３Ｈ）；１．０２（ｄ、Ｊ＝６．１Ｈｚ、３Ｈ）。
【００５０】
４−｛（２Ｒ，５Ｓ）−４−［（Ｒ）−（４−ジエチルカルバモイルフェニル）（３−ヒドロキシフェニル）メチル］−２，５−ジメチル−１−ピペラジニルメチル｝安息香酸
方法Ａ：還元的アルキル化
４−［（Ｒ）−（（２Ｓ，５Ｒ）−２，５−ジメチル−１−ピペラジニル）−（３−ヒドロキシフェニル）メチル］−Ｎ，Ｎ−ジエチルベンズアミド（１．９８ｇ、５ｍｍｏｌ）および４−カルボキシベンズアルデヒド（１．５０ｇ、１０ｍｍｏｌ）の無水テトラヒドロフラン（３５ｍＬ）溶液に、氷酢酸（０．６３５ｍＬ、１１．１ｍｍｏｌ）を加えた。激しく攪拌しながら、水素化トリアセトキシホウ素ナトリウム（２．１２ｇ、１０ｍｍｏｌ）を、５０〜１００ｍｇづつ添加し、各添加後に泡立ちの静まりを待った。この反応を、出発物質の不在に関して、ＨＰＬＣによりモニターした。室温で１６時間攪拌後、さらなる４−カルボキシベンズアルデヒド（０．７５ｇ、５ｍｍｏｌ）、酢酸（０．３１８ｍＬ、５ｍｍｏｌ）および水素化トリアセトキシホウ素ナトリウム（１．０６ｇ、５ｍｍｏｌ）を加えた。さらに４時間攪拌後、反応混合物を減圧濃縮し、残渣を酢酸エチル（５０ｍＬ）と３Ｍ塩酸（１０ｍＬ）との間で分配した。層分離をしたら、有機層を再度、３Ｍ塩酸（５×１０ｍＬ）で抽出した。前記水溶液を、飽和炭酸ナトリウム水溶液でｐＨ４．５〜５に調整し、塩化メチレン（３×５０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧留去し、４−｛（２Ｒ，５Ｓ）−４−［（Ｒ）−（４−ジエチルカルバモイルフェニル）（３−ヒドロキシフェニル）メチル］−２，５−ジメチル−１−ピペラジニルメチル｝安息香酸を、脆性白色泡状物（２．３４ｇ）として得た。この生成物は、ＨＰＬＣ（Ｚｏｒｂａｘ  ＲＸ−Ｃ８、４．６ｍｍ  ×  ２５ｃｍ、無勾配ＭｅＯＨ中４０％  ０．０１Ｍ  ＮＨ４ＯＡｃ、３分；直線勾配から１００％ＭｅＯＨ、４５分；無勾配ＭｅＯＨ、５分；１．０ｍＬ／分；λｏｂｓ＝２１０ｎｍ、Ｒｔ＝１３．７５分）上に単一ピークを示した。
【００５１】
４−｛（２Ｒ，５Ｓ）−４−［（Ｒ）−（４−ジエチルカルバモイルフェニル）（３−ヒドロキシフェニル）メチル］−２，５−ジメチル−１−ピペラジニルメチル｝安息香酸（２．０９ｇ、３．５ｍｍｏｌ）をエタノール（６ｍＬ）に溶解し、０．９８６Ｎ塩酸（３．６０ｍＬ）を加えた。この溶液を蒸留水（３０ｍＬ）で希釈し、ろ過、急速凍結、凍結乾燥して白色固体（２．１７ｇ）を得た。Ｃ３２Ｈ３９Ｎ３Ｏ４  １．６ＨＣｌ  １．６Ｈ２Ｏに関する計算値：％Ｃ，６２．３１；Ｈ，７．１６；Ｎ，６．８１；Ｃｌ，９．２０。実測値：％Ｃ，６２．３２；Ｈ，７．１９；Ｎ，６．７４；Ｃｌ，９．２８。１Ｈ  ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ  ＋５０％  ｖ／ｖ  Ｄ２Ｏ中１−Ｍ  ＮａＯＤ、３００ＭＨｚ）：δ７．５７（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、２Ｈ）；７．１７（ｄ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、２Ｈ）；７．１１（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、２Ｈ）；６．９９（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、２Ｈ）；６．８１（ｔ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、１Ｈ）；６．３０（ｓ、３Ｈ）；６．２９（部分的に重なったｄ、Ｊ＝７．５、１Ｈ）；６．１３（ｄ、Ｊ＝７．５Ｈｚ、１Ｈ）；４．８９（ｓ、１Ｈ）；３．７８（ｄ、Ｊ＝１２．７Ｈｚ、１Ｈ）；３．２２（ｑ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、２Ｈ）；３．０５（ｄ、Ｊ＝１２．９Ｈｚ、１Ｈ）；２．９５（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ、２Ｈ）；２．６０（ｄ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ、１Ｈ）；２．３５（ｄ，Ｊ＝１１．４Ｈｚ、１Ｈ）；２．３１〜２．１９（ｍ、２Ｈ）；１．８７〜１．７４（ｍ、２Ｈ）；０．９４（ｔ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、３Ｈ）；０．８７（ｔ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、３Ｈ）；０．７７（ｄ、Ｊ＝６．３Ｈｚ、３Ｈ）；０．７５（ｄ、Ｊ＝６．３Ｈｚ、３Ｈ；両ダブレットとは重なる）。
【００５２】
方法Ｂ：直接アルキル化
アセトニトリル（１５ｍＬ）中、４−［（Ｒ）−（（２Ｓ，５Ｒ）−２，５−ジメチル−１−ピペラジニル）（３−ヒドロキシフェニル）メチル］−Ｎ，Ｎ−ジエチルベンズアミド（１．４１ｇ、３．５６ｍｍｏｌ）を、ヨウ化ナトリウム（８０ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）に加え、トリエチルアミン（２．０ｍＬ、１４．３ｍｍｏｌ）、続いて４−（ブロモメチル）安息香酸メチル（１．６３ｇ、７．１２ｍｍｏｌ）を添加しながら攪拌した。この反応混合物を窒素下、密封し、周囲温度で２０時間攪拌した。反応混合物を減圧濃縮し、残渣を酢酸エチル（５０ｍＬ）と水（２５ｍＬ）との間で分配した。この有機層を分離し、水層を酢酸エチル（３×２０ｍＬ）で抽出した。有機抽出を合わせて、５％炭酸ナトリウム溶液（２×５０ｍＬ）に次いで水（５０ｍＬ）で抽出した。有機層をペンタン（１００ｍＬ）で希釈し、１Ｍ塩酸（５×３０ｍＬ）で抽出した。前記水溶液を、飽和炭酸ナトリウム水溶液で、ｐＨ８．５〜９に調整し、塩化メチレン（３×５０ｍＬ）で抽出した。有機抽出液を合わせて、無水硫酸ナトリウムおよび硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を減圧除去して、淡黄色固体（１．９０ｇ）を得た。残渣を塩化メチレン（５ｍＬ）に溶解し、予め充填した（４×７ｃｍ）Ｂｉｏｔａｇｅシリカゲルカラムにかけ、Ｂ中Ａ［Ａ＝２％ＮＨ４ＯＨを有する酢酸エチル、Ｂ＝塩化メチレン］の２０％から６０％勾配で溶出した。前記生成物を含有する所望のフラクション［シリカｔ．ｌ．ｃ．（２％ＮＨ４ＯＨを有するＥｔＯＡｃ：ＣＨ２Ｃｌ２／１：１）Ｒｆ＝０．３９］を減圧濃縮し、２ｍｍＨｇ下、室温でさらに乾燥し、メチル４−｛（２Ｒ，５Ｓ）−４−［（Ｒ）−（４−ジエチルカルバモイルフェニル）（３−ヒドロキシフェニル）メチル］−２，５−ジメチル−１−ピペラジニルメチル｝ベンゾエート（１．３４ｇ）を、灰白色固体として得た。Ｃ３３Ｈ４１Ｎ３Ｏ４に関する計算値：％Ｃ，７２．９０；Ｈ，７．６０；Ｎ，７．７３。実測値：％Ｃ，７２．６８；Ｈ，７．５７；Ｎ，７．６４。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）：δ７．９５（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、２Ｈ）；７．４４（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、２Ｈ）；７．３７（ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、２Ｈ）；７．２８（ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、２Ｈ）；７．１４（ｔ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、１Ｈ）；６．７３〜６．６９（ｍ、２Ｈ）；６．６４（ｓ、１Ｈ）；６．０５（ｂｒ  ｓ、１Ｈ）；５．００（ｓ、１Ｈ）；３．９４（ｄ，Ｊ＝１４Ｈｚ、ｓと部分的に重なる１Ｈ、３Ｈ）；３．８９（ｓ、３Ｈ）；３．５４（ｂｒ  ｍ、２Ｈ）；３．２９（ｂｒ  ｍ、２Ｈ）；３．２４（ｄ，Ｊ＝１４Ｈｚ、１Ｈ）；２．６８〜２．５３（ｍ、４Ｈ）；２．０５〜１．９４（ｍ、２Ｈ）；１．２６（ｂｒ  ｍ、３Ｈ）；１．２３（ｂｒ  ｍ、３Ｈ）；１．０６（ｄの重なり、Ｊ＝５．９Ｈｚ、３Ｈ）；１．０４（ｄの重なり、Ｊ＝５．９Ｈｚ、３Ｈ）。
【００５３】
この固体（０．８８ｇ、１．６２ｍｍｏｌ）をエタノール（１０ｍＬ）に溶解し、２．５Ｍ水酸化ナトリウム溶液（６．４ｍＬ、１６ｍｍｏｌ）を、凡そ１ｍＬの分割量で加えた。わずかに濁った反応混合液は、最後の添加５分後に澄明になり、黄色溶液が得られたが、これを周囲温度で１６時間攪拌した。この溶液を等容量の水で希釈し、エタノールを５０％の推定水性容量と共に蒸発により除去した。３Ｍ塩酸を用いて、前記溶液をｐＨ４に調整した。得られた羊毛状白色固体をろ過により回収し、少量の冷水で洗浄した。前記固体を風乾後、５ｍｍＨｇの真空下、室温でさらに乾燥し、標題化合物を得た（０．９０ｇ、８５．９％）。この物質は、ＨＰＬＣによると、方法Ａによって作製された化合物と同一であった。Ｃ３２Ｈ３９Ｎ３Ｏ４  １．５ＮａＣｌ  １．６Ｈ２Ｏに関する計算値：％Ｃ，５９．４８；Ｈ，６．５８；Ｎ，６．５０。実測値：％Ｃ，５９．５０；Ｈ，６．４５；Ｎ，６．３２。１Ｈ  ＮＭＲ（（ｄ６−ＤＭＳＯ＋２０％  ｖ／ｖ  Ｄ２Ｏ中１−Ｍ  ＮａＯＤ、３００ＭＨｚ）；δ０．９３（ｄ、Ｊ＝６．０Ｈｚ、３Ｈ）；０．９８（ｄ、Ｊ＝５．９Ｈｚ、３Ｈ；両ダブレットが重なるｂｒ  ｍ、６Ｈ）；１．９０（ｍ、２Ｈ）；２．５４（ｍ，２Ｈ、ＤＭＳＯにより部分的に重なる）；３．１３（ｂｒ  ｍ、２Ｈ）；３．２２（ｄ，Ｊ＝１４．２Ｈｚ、１Ｈ）；３．３４（ｂｒ  ｍ、２Ｈ）；３．７１（ｄ，Ｊ＝１４．０Ｈｚ、１Ｈ）；４．６６（ｓ、１Ｈ）；５．９７（ｄ、Ｊ＝６．９Ｈｚ、１Ｈ）；６．１６（ｄ、Ｊ＝７．９Ｈｚ、１Ｈ）；６．２３（ｓ、１Ｈ）；６．７２（ｔ、Ｊ＝７．７Ｈｚ、１Ｈ）；７．１６（ｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、４Ｈ）；７．３８（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、２Ｈ）；７．７２（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、２Ｈ）。質量スペクトル：（ＥＳＩ−、ＤＰ−１２０Ｖ、ＭｅＯＨ）；ｍ／ｚ；５２９．０、（Ｍ＋、１００％）；５２８、（（Ｍ−１）＋、５７％）；５１２．６、（（Ｍ−１７）＋、９５％）。
【００５４】
実施例２
４−｛（２Ｒ，５Ｓ）−４−［（Ｓ）−（４−ジエチルカルバモイルフェニル）（３−ヒドロキシフェニル）メチル］−２，５−ジメチル−１−ピペラジニルメチル｝安息香酸
【化７】
0004714139.tif 000008
２０００ｍＬの三口丸底フラスコ内に、４−カルボキシベンズアルデヒド（１００ｇ、６６６ｍｍｏｌ）を秤量し、窒素下、１２００ｍＬのトルエン中で攪拌した。塩化チオニル（５３．５ｍＬ、７３３ｍｍｏｌ）を前記混合液に加え、続いて０．１５ｍＬのジメチルホルムアミドを加えた。塩化カルシウム乾燥管を備え付けた還流冷却器をフラスコに配置した。前記反応液を油浴に入れ、油浴温度を１２０℃未満に維持して加熱した。透明な溶液が得られた後、混合液を１時間還流し、次いで室温に冷却した。この溶液を無水トルエンで希釈し、全ての揮発物を減圧除去した。
【００５５】
前記粗製酸クロリドを、１５００ｍＬの乾燥テトラヒドロフランに溶解し、氷／水浴中で冷却した。添加ロートにより、ジエチルアミン（１７３ｍＬ、１．６７ｍｏｌ、２．５当量）を、滴下して加えた。前記混濁溶液を１時間かけて室温まで温め、一晩攪拌した。この反応混合液をろ過して、白色結晶質の塩酸ジエチルアミン副産物を除去した。この結晶を酢酸エチル（２×６００ｍＬ）で洗浄した。前記テトラヒドロフランろ液を蒸発させ、残渣を酢酸エチル洗浄液に溶解した。この溶液を、１Ｍ塩酸（２×６００ｍＬ）、水（２×３００ｍＬ）、希釈炭酸ナトリウム溶液（飽和：Ｈ２Ｏ、１：１、２×６００ｍＬ）、水（２×３００ｍＬ）および飽和塩化ナトリウム溶液（３００ｍＬ）により連続的に洗浄した。有機層を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧除去した。４−ホルミル−Ｎ，Ｎ−ジエチルベンズアミド（１１７．１４ｇ）が、淡黄色油として得られ、これをさらに精製することなく用いた（未クロマトグラフィ収率８５％）。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）：δ１．０９〜１．２５（ｍ、６Ｈ）；３．１９〜３．３１（ｄ、Ｊ＝６．４Ｈｚ、２Ｈ）；３．５４〜３．５６（ｄ、Ｊ＝６．６Ｈｚ、２Ｈ）；７．４９〜７．５２（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、２Ｈ）；７．８９〜７．９２（ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、２Ｈ）；９．９８（ｓ、１Ｈ）。
【００５６】
１１５０ｍＬの乾燥ジクロロメタン中、３−ヨードフェノール（１１０ｇ、５００ｍｍｏｌ）およびイミダゾール（９３．６ｇ、１７３５ｍｍｏｌ、２．７５当量）を、２０００ｍＬのフラスコに入れ、窒素下、氷／水浴で１５℃に冷却した。２００ｍＬの乾燥ジクロロメタン中、塩化ｔ−ブチルジメチルシリル（８２．９ｇ、５５０ｍｍｏｌ）を添加ロートにより、前記反応液に滴下しながら加えた。この反応混合液を、窒素下、一晩攪拌し、ろ過、ジクロロメタンで洗浄した。抽出液を合わせて、水（４００ｍＬ）、０．５Ｎ  ＮａＯＨ溶液（６００ｍＬ）および水（２×３００ｍＬ）で洗浄した。有機層を、Ｎａ２ＳＯ４／ＮａＣｌで乾燥し、蒸発させて淡黄色油（１６６ｇ）を得た。
【００５７】
２５０ｍＬフラスコに、３−ヨードフェノキシ−ｔ−ブチルジメチルシラン（４８．８５ｇ、１４６ｍｍｏｌ）を、１８０ｍＬの乾燥テトラヒドロフランと共に、窒素下、室温で入れ、添加ロートにより、塩化イソプロピルマグネシウム（７３ｍＬ、１４６ｍｍｏｌ、テトラヒドロフラン中２．０Ｍ溶液）を加えると、淡黄色溶液が形成した。前記反応液を室温で１時間攪拌した。その間に、他の１０００ｍＬフラスコ内で、３０ｇの４−ホルミル−Ｎ，Ｎ−ジエチルベンズアミドを３００ｍＬの乾燥テトラヒドロフランに溶解し、窒素下、−７２℃に冷却した。新たに調製した塩化３−フェノキシ−ｔ−ブチル−ジメチルシランマグネシウムを１０００ｍＬフラスコにゆっくりと加えた。反応温度を−７０℃未満に維持するように、移す速度をモニターした。前記反応液を一晩攪拌しながら室温まで温めた。この混合液を、２４ｍＬの飽和水性塩化アンモニウムでクエンチし、６００ｍＬのジエチルエーテルで希釈し、６００ｍＬの水、続いて１５０ｍＬの飽和塩化ナトリウムで洗浄した。前記エーテル性溶液を、硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を除去し、粗製４−｛［３−（ｔ−ブチルジメチルシラニルオキシ）フェニル］ヒドロキシメチル｝−Ｎ，Ｎ−ジエチルベンズアミドを黄色油として得た。粗製収率は、約１００％であった。前記粗製生成物をペンタン中２０％酢酸エチル溶液にスラリー化した。得られた白色沈殿物をろ過により回収し、ペンタンで洗浄し、一晩乾燥した（３０ｍｍＨｇ、４０℃）。
【００５８】
８００ｍＬのジクロロメタン中、４−｛［３−（ｔ−ブチルジメチルシラニルオキシ）フェニル］ヒドロキシメチル｝−Ｎ，Ｎ−ジエチルベンズアミド（５０ｇ、１２０．９ｍｍｏｌ）を溶解し、１３．２３ｍＬ（１８１．３ｍｍｏｌ）の塩化チオニルを滴下して加えた。前記反応溶液を、室温で５時間攪拌し、溶媒を減圧除去した。残渣の黄色油をシリカゲルクロマトグラフィ（ペンタン中１７％ＥｔＯＡｃ、次いでペンタン中３０％ＥｔＯＡｃ）で精製し、２２．５８ｇ（５２．２６ｍｍｏｌ）の所望生成物を黄色油として得た。
【００５９】
純粋な４−｛［３−（ｔ−ブチルジメチルシラニルオキシ）フェニル］クロロメチル｝−Ｎ，Ｎ−ジエチルベンズアミド（２２．５８ｇ、５２．２６ｍｍｏｌ）を、３５０ｍＬの乾燥アセトニトリル中に溶解した。ヨウ化ナトリウム（７．８３ｇ、５２．２６ｍｍｏｌ）、ジイソプロピルエチルアミン（１３．６９ｍＬ、７８．３９ｍｍｏｌ）および（２Ｒ，５Ｓ）−１−アリル−２，５−ジメチルピペラジン（８．０６ｇ、５２．２６ｍｍｏｌ）を加えた。前記混合物を窒素下、３時間還流下攪拌した。アセトニトリルを減圧除去し、反応混合物を酢酸エチル（４００ｍＬ）と炭酸カリウム溶液（１５０ｍＬの２Ｍ水性溶液）内へ注いだ。有機層を分離し、水およびブラインで洗浄し、固体炭酸カリウムで乾燥し、減圧濃縮した。粗製生成物（３０ｇ）が、暗褐色油として、粗製収率約１００％で得られた。
【００６０】
前記粗製生成物を、シリカゲルクロマトグラフィにより精製して、２種のベンズヒドリルエピマーを得た。溶出は先ず、ペンタン中２０％ＥｔＯＡｃで実施し、続いてペンタン中３０％、４０％、５０％および８０％ＥｔＡｃの段階的割合で実施して、１１．００ｇ（２０．００ｍｍｏｌ）の４−｛（Ｒ）−（（２Ｓ，５Ｒ）−４−アリル−２，５−ジメチルピペラジン−１−イル）［３−（ｔ−ブチル−ジメチルシラニルオキシ）フェニル］メチル｝−Ｎ，Ｎ−ジエチルベンズアミドを黄色油として、および９．２７ｇの４−｛（Ｓ）−（（２Ｓ，５Ｒ）−４−アリル−２，５−ジメチルピペラジン−１−イル）［３−（ｔ−ブチル−ジメチルシラニルオキシ）−フェニル］メチル｝−Ｎ，Ｎ−ジエチルベンズアミド（１６．８６ｍｍｏｌ、黄色油）を得た。これらの異性体は、実施例１に記載した公知の純粋異性体とのＴＬＣ比較によって同定した。
【００６１】
４−｛（Ｓ）−（２Ｓ，５Ｒ）−４−アリル−２，５−ジメチルピペラジン−１−イル）［３−（ｔ−ブチルジメチルシラニルオキシ）フェニル］メチル｝−Ｎ，Ｎ−ジエチルベンズアミド（９．２７ｇ、１６．８６ｍｍｏｌ）を、３５ｍＬの乾燥アセトニトリルに続いて、フッ化テトラエチルアンモニウム二水和物（４．６９ｇ、２５．２９ｍｍｏｌ）に溶解し、一晩攪拌した。前記反応溶液を濃縮乾固し、残渣を４０ｍＬの酢酸エチルに溶解し、２％ＮａＨＣＯ３水溶液（３×４０ｍＬ）および水（４０ｍＬ）で抽出した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、蒸発させ、８．５５ｇの４−｛（Ｓ）−（２Ｓ，５Ｒ）−４−アリル−２，５−ジメチルピペラジン−１−イル）［３−ヒドロキシフェニル］メチル｝−Ｎ，Ｎ−ジエチルベンズアミドを赤色非晶質固体として得た。
【００６２】
実施例１に記載したジェネット（Ｇｅｎｅｔ）の方法により、チオサリチル酸存在下、Ｐｄ（ｄｂａ）２／ＤＰＰＢを用いて、前記アリル基を除去した。反応液を濃縮して、残渣を２００ｍＬの酢酸エチルと３００ｍＬのジエチルエーテル中へ注いだ。３４０ｍＬの水で洗浄後、有機溶液を、１０％クエン酸（５×８０ｍＬ）で抽出した。酸抽出液を合わせて、少量の懸濁固体を除去するためにろ過し、１５％ＮａＯＨ溶液を用いて、ｐＨを８〜８．５に調整した。得られた油状懸濁液を、ジクロロメタン（３×３００ｍＬ）で抽出した。有機溶液を合わせて乾燥（Ｎａ２ＳＯ４／ＭｇＳＯ４）し、減圧濃縮した。残渣は、淡橙色固体であった。
【００６３】
４−［（Ｓ）−（（２Ｓ，５Ｒ）−２，５−ジメチルピペラジン−１−イル）（３−ヒドロキシフェニル）メチル］−Ｎ，Ｎ−ジエチル−ベンズアミド（０．５１ｇ、１．２９ｍｍｏｌ）を、１０ｍＬの乾燥アセトニトリルに溶解した。ヨウ化ナトリウム（２０ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）を加え、反応液を窒素下、室温で攪拌しながら、トリエチルアミン（０．７２ｍＬ、５．１６ｍｍｏｌ）、続いてメチル４−（ブロメチル）ベンゾエート（０．５９ｇ、２．５８ｍｍｏｌ）を加えた。前記反応混合物を窒素下、一晩攪拌した。溶媒を蒸発により除去し、残渣を酢酸エチルと飽和炭酸水素ナトリウム溶液との間で分配した。有機層を水洗し、Ｎａ２ＳＯ４／ＭｇＳＯ４で乾燥し、減圧濃縮した。残渣の淡黄色油を、シリカゲルクロマトグラフィ（ＣＨ２Ｃｌ２中５０％ＥｔＯＡｃ）により精製し、０．４５ｇ（０．８３ｍｍｏｌ）のメチル４−｛（２Ｒ，５Ｓ）−４−［（Ｓ）−（４−ジエチルカルバモイルフェニル）（３−ヒドロキシフェニル）メチル］−２，５−ジメチル−１−ピペラジニルメチル｝−ベンゾエートを白色非晶質固体として得た。
【００６４】
上記エステルの加水分解を、３ｍＬのエタノール中１ｍＬの１０％ＮａＯＨ溶液によって行った。前記反応混合液を蒸発乾固し、２ｍＬの水を加えた。前記溶液を、２ｍＬのＥｔＯＡｃ／Ｅｔ２Ｏで２回抽出して、不純物を除去し、次いで１Ｍ  ＨＣｌを、ｐＨ４〜４．５の沈殿点まで滴下して加えた。形成された白色ゲルをろ過により回収し、少量の冷水で洗浄した。４−｛（２Ｒ，５Ｓ）−４−［（Ｓ）−（４−ジエチルカルバモイルフェニル）（３−ヒドロキシフェニル）メチル］−２，５−ジメチルピペラジン−１−イルメチル｝安息香酸を真空オーブン（３０ｍｍＨｇ、４０℃）で乾燥し、１８０ｍｇの白色固体を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ｄ６−ＤＭＳＯ）；δ０．９８〜１．１６（ｍ、１２Ｈ）；１．８９〜２．０５（ｍ、２Ｈ）；２．４８〜２．６５（ｍ、５Ｈ）；３．１０〜３．５０（ｍ、５Ｈ）；３．７６〜３．８０（ｄ、Ｊ＝１３．９Ｈｚ、１Ｈ）；４．９４（ｓ、１Ｈ）；６．５３〜６．９５（ｄ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、１Ｈ）；６．７５〜６．８５（ｍ、２Ｈ）；７．０２〜７．０９（ｔ、１Ｈ）；７．２９〜７．４０（ｍ、６Ｈ）；７．８０〜７．８４（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、２Ｈ）；９．２９（ｓ、１Ｈ）。
【００６５】
実施例３
３−｛（２Ｒ，５Ｓ）−４−［（Ｒ）−（４−ジエチルカルバモイルフェニル）（３−ヒドロキシフェニル）メチル］−２，５−ジメチル−１−ピペラジニルメチル｝安息香酸
【化８】
0004714139.tif 000009
４−｛（Ｒ）−（２Ｓ，５Ｒ）−４−アリル−２，５−ジメチル−ピペラジン−１−イル）−［３−（ｔ−ブチルジメチルシラニルオキシ）−フェニル］メチル｝−Ｎ，Ｎ−ジエチルベンズアミド（１１．０ｇ、２０．０ｍｍｏｌ、実施例２）を、４０ｍＬの乾燥アセトニトリルに溶解し、フッ化テトラエチルアンモニウム二水和物（５．５６ｇ、３０．００ｍｍｏｌ）を加えて、一晩攪拌した。前記反応溶液を濃縮乾固し、残渣を４０ｍＬの酢酸エチルに溶解し、２％ＮａＨＣＯ３水溶液（３×４０ｍＬ）および水（４０ｍＬ）で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、蒸発させ、４−｛（Ｒ）−（２Ｓ，５Ｒ）−４−アリル−２，５−ジメチル−ピペラジン−１−イル）［３−ヒドロキシフェニル］メチル｝−Ｎ，Ｎ−ジエチルベンズアミド（１０．３０ｇ）を黄色非晶質固体として得た。
【００６６】
実施例１に記載したジェネット（Ｇｅｎｅｔ）の方法により、チオサリチル酸存在下、Ｐｄ（ｄｂａ）２／ＤＰＰＢを用いて、前記アリル基を除去した。反応液を濃縮して、残渣を２００ｍＬの酢酸エチルと３００ｍＬのジエチルエーテル中へ注いだ。３４０ｍＬの水で洗浄後、有機抽出液を、１０％クエン酸（５×８０ｍＬ）で抽出した。水性抽出液を合わせて、少量の懸濁固体を除去するためにろ過し、１５％ＮａＯＨ溶液を用いて、ｐＨを８〜８．５に調整した。得られた油状懸濁液を、ジクロロメタン（３×３００ｍＬ）で抽出した。有機抽出液を合わせて乾燥（Ｎａ２ＳＯ４／ＭｇＳＯ４）し、減圧濃縮した。残渣は、淡橙色固体であった。
【００６７】
４−［（Ｒ）−（（２Ｓ，５Ｒ）−２，５−ジメチルピペラジン−１−イル）（３−ヒドロキシフェニル）メチル］−Ｎ，Ｎ−ジエチル−ベンズアミド（２．５０ｇ、６．３２ｍｍｏｌ）および３−カルボキシベンズアルデヒド（１．９０ｇ、１２．６４ｍｍｏｌ）を、６０ｍＬのテトラヒドロフランおよび０．８０ｍＬ（１３．９１ｍｍｏｌ）の酢酸と共に、２５０ｍＬフラスコに入れた。前記反応液を室温で２０分間攪拌し、水素化トリアセトキシホウ素ナトリウム（２．６８ｇ、１２．６４ｍｍｏｌ）を少しずつ加えた。前記反応液は非常に混濁したが、これを窒素下で密封し、一晩攪拌した。前記反応混合液を蒸発乾固し、酢酸エチル（６０ｍＬ）と３Ｍ  ＨＣｌ（１２ｍＬ）との間に分配した。有機層はさらに、５×１２ｍＬの３Ｍ  ＨＣｌにより抽出した。水性抽出液を合わせ、０．５Ｍ  ＮａＯＨ溶液と固体Ｎａ２ＣＯ３によりｐＨ４．５〜５に調整した。得られたゲルをろ過により回収し、３０ｍＬの０．５Ｍ  ＮａＯＨ溶液に溶解し、２０ｍＬのＥｔＯＡｃ／Ｅｔ２Ｏで２回抽出して、不純物を除去した。１Ｍ  ＨＣｌを前記水溶液に、ｐＨ４〜４．５の沈殿点まで滴下して加えた。得られた白色ゲルをろ過により回収し、少量の冷水で洗浄した。３−｛（２Ｒ，５Ｓ）−４−［（Ｒ）−（４−ジエチルカルバモイルフェニル）（３−ヒドロキシフェニル）メチル］−２，５−ジメチルピペラジン−１−イルメチル｝安息香酸を真空オーブン（３０ｍｍＨｇ、４０℃）で乾燥し、１．５５ｇの白色固体を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ｄ６−ＤＭＳＯ）；δ０．９９〜１．２０（ｍ、１２Ｈ）；１．８９〜２．０５（ｍ、２Ｈ）；２．４８〜２．６５（ｍ、５Ｈ）；３．０６〜３．５７（ｍ、５Ｈ）；３．７８〜３．８３（ｄ、Ｊ＝１２．５Ｈｚ、１Ｈ）；４．９４（ｓ、１Ｈ）；６．６３〜６．８４（ｍ、３Ｈ）；７．０９〜７．９１（ｍ、９Ｈ）；９．３６（ｓ、１Ｈ）。
【００６８】
実施例４
マウス輸精管受容体系におけるインビトロオピオイド受容体活性（マウス輸精管ＥＤ５０）に関して、上記で同定した式（３）の化合物（以後、化合物１）を評価した。受容体活性のこのような決定に用いられるアッセイ操作は、以下に記載されている。
【００６９】
インビトロバイオアッセイ：輸精管（ＭＶＤ）、ＣＤ−１株（ハーラン（Ｈａｒｌａｎ）、ノースカロライナ州ラレイ（Ｒａｌｅｉｇｈ）所在）をマウスから取り、以下の組成（ミリモル）：ＮａＣｌ、１１７．５；ＫＣｌ、４．７５；ＣａＣｌ２、２．６；ＫＨ２ＰＯ４、１．２０；ＮａＨＣＯ３、２４．５；およびグルコース、１１の修飾Ｍｇ＋＋なしクレブス緩衝液を含有する臓器浴チャンバに、０．５ｇの張力で白金電極間に吊るした。前記緩衝液を、９５％Ｏ２／５％ＣＯ２で飽和し、３７℃に維持した。組織を、超極大電圧において４００ミリ秒間の１０−Ｈｚパルス列；１０秒の列間隔；および最大電圧時１．０ミリ秒のパルス持続で刺激した。デルタ受容体活性は、１μＭのＣＴＯＰ（高選択的ミューアンタゴニスト；ケイ・グリヤ（Ｋ．Ｇｕｌｙａ）、ジェイ・ティー・ペルトン（Ｊ．Ｔ．Ｐｅｌｔｏｎ）、ヴィー・ジェイ・ハルビー（Ｖ．Ｊ．Ｈｒｕｂｙ）およびエイチ・アイ・ヤマムラ（Ｈ．Ｉ．Ｙａｍａｍｕｒａ）、Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ．３８：ｐ．２２２１−２２２９、（１９８６））および１５ｎＭのｎｏｒ−ＢＮＩ（選択的カッパアンタゴニスト；ピー・エス・ポルトギース（Ｐ．Ｓ．Ｐｏｒｔｏｇｈｅｓｅ）、エイ・ダブリュー・リプコウスキー（Ａ．Ｗ．Ｌｉｐｋｏｗｓｋｉ）、およびエイ・イー・タケモリ（Ａ．Ｅ．Ｔａｋｅｍｏｒｉ）、Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ．４０：ｐ．１２８７（１９８７））の存在下、適切な濃度の試験化合物を、臓器浴に加え、次のより高濃度添加前に、最大応答させることによって決定した。ミュー受容体活性は、同様の様式で決定したが、３μＭのＴＩＰＰ（高選択的デルタアンタゴニスト；ピー・ダブリュー・シラー（Ｐ．Ｗ．Ｓｃｈｉｌｌｅｒ）、ティー・エム・−ディー・ヌイェン（Ｔ．Ｍ．−Ｄ．Ｎｇｕｙｅｎ）、ジー・ウェルトロウスカ（Ｇ．Ｗｅｌｔｒｏｗｓｋａ）、ビー・シー・ウィルケス（Ｂ．Ｃ．Ｗｉｌｋｅｓ）、ビー・ジェイ・マースデン（Ｂ．Ｊ．Ｍａｒｓｄｅｎ）、シー・レミュー（Ｃ．Ｌｅｍｉｅｕｘ）、およびエヌ・エヌ・チャング（Ｎ．Ｎ．Ｃｈｕｎｇ）、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．８９、ｐ．１１８７１（１９９２））および１５ｎＭの選択的カッパアンタゴニストであるｎｏｒ−ＢＮＩの存在下で行った。
【００７０】
カッパ受容体活性は、１μＭの高選択的ミューアンタゴニストであるＣＴＯＰおよび３μＭの高選択的デルタアンタゴニストであるＴＩＰＰの存在下で決定した。
【００７１】
電気誘導された筋収縮の阻害パーセンテージを種々の蓄積濃度における化合物に関して決定した。ＥＤ５０値は、応答に対してプロットされた用量濃度を示している曲線から外挿した（ジェイ・エイ・エイチ・ロード（Ｊ．Ａ．Ｈ．Ｌｏｒｄ）、エイ・エイ・ウォーターフィールド（Ａ．Ａ．Ｗａｔｅｒｆｉｅｌｄ）、ジェイ・ヒューズ（Ｊ．Ｈｕｇｈｅｓ）、エイチ・ダブリュ−・コステルリッツ（Ｈ．Ｗ．Ｋｏｓｔｅｒｌｉｔｚ）、ネイチャー（Ｎａｔｕｒｅ）、２６７、ｐ．４９５、（１９７７））。結果は、下表１に記載している。
【００７２】
【表１】
0004714139.tif 000010
【００７３】
実施例５
また、化合物１は、ラットの脳膜（μおよびδオピオイド）およびモルモットの小脳（κオピオイド受容体）におけるインビトロオピオイド受容体親和性に関しても評価された。放射性リガンド結合のための膜は、ペル−フリーズ・バイオロジカル社（Ｐｅｌ−Ｆｒｅｅｚｅ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｃ．）（アリゾナ州ロジャーズ所在）により供給されたラットの全脳、またはモルモットの小脳のいずれかから調製された。５０μｇ／ｍｌの大豆トリプシン阻害剤、１ｍＭ  ＥＤＴＡ（エチレンジアミンテトラ酢酸）および１００μＭ  ＰＭＳＦ（フッ化フェニルメチルスルホニル）を含有する５０ｍＭ  ＴＲＩＳ（トリス）（トリス［ヒドロキシメチル］アミノメタン）緩衝液（ｐＨ７．４）中で組織を均一化した。均一化した脳組織を５００  ｘ  ｇで３０分間（４℃）遠心分離して、大きな破片を除去した。上澄みを、１０秒間ポリトロン音波処理をした（Ｐ．Ｅ．２の設定、４℃）。次に、１０ｍＭトリス−スクロース緩衝液（ｐＨ７．４）を用いて、スクロース溶液を、０．３５Ｍの最終濃度まで加えてから、脳膜を、４０，０００  ｘ  ｇで３０分間（４℃）遠心分離した。次に、膜ペレットを、５０μｇ／ｍｌの大豆トリプシン阻害剤、１ｍＭ  ＥＤＴＡおよび１００μＭ  ＰＭＳＦを含有する１０ｍＭトリス緩衝液（ｐＨ７．４）中で２回洗浄した。
【００７４】
放射性リガンド結合アッセイは、５０μｇ／ｍｌの大豆トリプシン阻害剤、１ｍＭ  ＥＤＴＡ、５ｍＭ  ＭｇＣｌ２および１００μＭ  ＰＭＳＦを含有する１０ｍＭトリス緩衝液（ｐＨ７．４）中で実施した。ニューイングランド・ニュークリア（Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｎｕｃｌｅａｒ）により購入したトリチウム標識のＤＡＭＧＯ（μ）、Ｄｅｌｔｏｒｐｈｉｎ  ＩＩ（δ）、またはＵ６９５９３（κ）を、０．５×１０−６Ｍ  Ｎａｌｏｘｏｎｅ（シグマ・ケミカル社（ＳＩＧＭＡ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．）より購入）により規定された非特異的結合との競合実験（最終濃度、２〜３×１０−１０  Ｍ）におけるリガンドとして用いた。結合アッセイは全て、室温で９０分間行ってから、Ｂｒａｎｄｅｌ  Ｓｅｍｉ−ａｕｔｏｍａｔｉｃ  Ｃｅｌｌ  Ｈａｒｖｅｓｔｅｒ（Ｍｏｄｅｌ  Ｍ４８、ブランデル（Ｂｒａｎｄｅｌ）、メリーランド州ゲイサーズバーグ所在）を使用して、５０ｍＭトリス緩衝液（４℃、ｐＨ７．４）と共に、ＧＦ／Ｃガラス繊維フィルタ（ワットマン（Ｗｈａｔｍａｎ）、オレゴン州ヒルズボロ所在）上での急速ろ過により終了した。前記フィルタを、５０ｍＭトリス緩衝液（４℃、ｐＨ７．４）によって２回洗浄し、これらのフィルタを、液体シンチレーションカクテルに入れ、結合放射活性を、ベックマン（Ｂｅｃｋｍａｎ）ＬＳ  ６５００シンチレーションカウンターでカウントした。放射標識されたＤＡＭＧＯ（μ）、Ｄｅｌｔｏｒｐｈｉｎ  ＩＩ（δ）、またはＵ６９５９３（κ）の結合阻害における式（３）の化合物（１）の効力は、完全濃度−効果曲線から決定された。コンピュータプログラムＰｒｉｓｍ（グラフパッド・ソフトウェア社（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｉｎｃ．）、カリフォルニア州サンディエゴ所在）により、放射性リガンド結合データのワンサイト非線形回帰解析を用いてＩＣ５０値を決定した。次に、チェング−プルソフ（Ｃｈｅｎｇ−Ｐｒｕｓｏｆｆ）等式を用いて、ＩＣ５０値をＫｉ値へ変換させた（チェング  ワイ（Ｃｈｅｎｇ  Ｙ）およびプルソフ  ダブリュー・エイチ（Ｐｒｕｓｏｆｆ  ＷＨ）（１９７３）、「Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ  ｂｅｔｗｅｅｎ  ｔｈｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｃｏｎｓｔａｎｔ  （Ｋｉ）  ａｎｄ  ｔｈｅ  ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｗｈｉｃｈ  ｃａｕｓｅｓ  ５０  ｐｅｒｃｅｎｔ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  （Ｉ５０）  ｏｆ  ａ  ｅｎｚｙｍａｔｉｃ  ｒｅａｃｔｉｏｎ」；Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｐｈａｒｍ．２２：ｐ．３０９９−３１０８）。
【００７５】
放射性結合アッセイの結果は、下表２に記載されている。
【００７６】
【表２】
0004714139.tif 000011
【００７７】
結果：式（３）の化合物（１）は、種々のタイプの被験受容体に対して、別個の異なった結合親和性を示すことが明らかである。デルタ受容体に対する前記化合物の強い親和性は、標識化合物の結合を阻害するために必要とされる極めて低い濃度によって示されている。
【００７８】
実施例６
痛覚脱失をラットにおいて、尾部ピンチ試験を用いてアッセイした。化合物１を静脈内投与した。１〜２時間の侵害受容応答値を得た。逃走応答（すなわち、尾のぴくつきまたは発声）が生じるまでの短い間、動脈クランプを尾の上に置いた（尾の先端から１インチ）。逃走応答の潜伏期間をストップウォッチにより記録した。不必要な組織損傷を防ぐため、２０秒の限界時間（ｃｕｔｏｆｆ  ｔｉｍｅ）を用いた。発声または、痛みの身体運動という侵害受動応答に関して、ラットを観察した。痛み応答を引き出す経過時間を、秒における尾部ピンチ潜伏時間として記録した。
【００７９】
痛覚脱失効力に関するＥＤ５０値（半最大有効用量、ＥＤ５０）は、半数の動物が動脈クランプ圧に対して２０秒以内に侵害受容応答を示さなかった用量によって決定した。表３に示されているように、化合物１は、痛覚脱失活性を示さなかったことから、被験化合物は、血液脳関門を通過しないことを示しており、非痛覚脱失化合物であると考えられる。さらに、前記化合物は、主に末梢のデルタオピオイド受容体に作用する。さらに５０ｍｇ／ｋｇの高用量でも、試験動物のいずれにも、発作が見られなかったことは重要であり、化合物（１）が、本質的に末梢のデルタ受容体に限定されることを示している。
【００８０】
【表３】
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【００８１】
実施例７
Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットから摘出した心臓における左前下行枝（ＬＡＤ）冠動脈の閉鎖約１５分前に、１ｎＭ、２ｎＭおよび１０ｎＭの濃度の化合物１を投与した。摘出心臓は、ランゲンドルフ様式で大動脈を介し、酸素付加クレブズ−ヘンセレイト緩衝液により逆に灌流した。３５分の局所的虚血に続いて、１２０分の再灌流によって梗塞を誘導した。６−０縫合糸を（ＬＡＤ）冠動脈の主枝の周囲に通して、スネアを作製した。  
【００８２】
ＬＡＤ周囲のスネアを締め付けることによって局所的虚血を誘導した。３５分の虚血時間後、スネアを緩め、酸素付加生理的緩衝液で１２０分、心臓に再灌流した。再灌流終了時にＬＡＤ閉鎖器を再び締め、非虚血領域を視覚化するため、０．１２５％生理食塩水中エバンス（Ｅｖａｎｓ）ブルーを、大動脈を介して心臓内へ注入した。前記心臓組織を薄切りし、生理的緩衝液中１．５％塩化トリフェニルテトラゾリウム（ＴＴＣ）による１５分の染色後、梗塞のサイズを評価した。１０％緩衝化ホルマリン中に固定後、前記薄切りをガラススライド間に乗せ、スキャナーを用いて画像をデジタルで得た。前記画像をＡｄｏｂｅ  Ｐｈｏｔｏｓｈｏｐ  ５．０を用いて処理した。Ｏｐｔｉｍａｓ  ６．２画像解析ソフトウェアを用いて、非虚血領域、危険領域および梗塞を、コンピュータ化面積計を用いて定量化した。
【００８３】
このような一群の結果が図１に示されているが、これは、１ｎＭの化合物１による急性処置後、対照動物と処置動物から切除した心臓組織における梗塞サイズの組織学的染色スライドを示している。前処置により、梗塞のサイズが、対照群のそれに比して７１％減少したことが判明した。
【００８４】
表４は、本調製物中の化合物１により生じた虚血性損傷の減少を、危険領域のパーセント（％ＩＳ／ＡＡＲ）として示している。
【００８５】
【表４】
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【００８６】
３５分の対照条件下、局所的虚血は、危険領域の５４．７±１．２％に細胞損傷を誘導する。最大保護は、２ｎＭの化合物１により生じ、対照群に存在する損傷のほぼ９０％に対して保護した。
【００８７】
３５分の局所的虚血および１２０分の再灌流後に測定された血液動態学的パラメータは、下表５に記載されている。
【００８８】
【表５】
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【００８９】
血液動態学的パラメータの結果は、薬学的前処置なしではＨＲＸＤＰパラメータにおける６１．８％の阻害および冠動脈流の減少を伴う収縮弛緩圧における少なくとも５０％の阻害を示している。これとは対照的に動物が、本発明の化合物１により前処置された場合、心臓パラメータは大いに改善した。平均して、前記心臓組織は、正常の少なくとも７５％の範囲で、また、幾つかのパラメータにおいては、９０％まで機能している。これらの結果により、化合物１の投与は、虚血事象の前に投与される場合、心臓保護を与えることができることが示されている。
【００９０】
実施例８
試験動物（ラット）において、ペントバルビタールナトリウムの腹腔内注射により、感覚脱失が生じた。胸骨中央線から皮膚の鏡映を用いて中央線切開を行った。換気は、酸素と混合した室内空気を用い、げっ歯動物用換気装置（Ｈａｒｖａｒｄげっ歯動物用換気装置）により提供された。意識のあるラットに見られるような正常な胸部拡張が認められた。繊細な切開が必要であり、胸骨の左側に沿って、胸骨切除鋏により、ほぼ中央胸骨まで側方切断によって、胸部を開いた。胸骨頭においては、両側静脈の大きな合流点を避けるために、繊細な切開が必要とされた。５−０絹糸または単繊維縫合糸の使用により、胸部を引っ込めた。正常に位置した左心耳の先端から１〜３ｍｍの冠動脈の左前枝下方に、先細り針により通した７−０縫合絹糸によって結紮を進めた。ＰＥ−１０管の１ｍｍ切断部分を、血管最上部に置き、前記管の最上部に結紮を作り、冠動脈を塞いだ。３５分の閉鎖後、ＰＥ−１０管最上部の結紮を、１１番手術刀によって切断することにより再灌流が生じた。化合物１は、ＬＡＤ冠動脈の結紮１５分前に、０．１ｍｇ／ｋｇまたは１．０ｍｇ／ｋｇで静脈内投与した。梗塞のサイズは、虚血と再灌流の２時間後、２４時間後および１６７時間後に、エバンスブルーおよびＴＴＣの染色によって決定した。
【００９１】
化合物１を、０．９％生理食塩水に溶解し、試験動物に注射した。ＬＡＤ冠動脈を再閉鎖し、パテントブルー染料を静脈カテーテルに注入し、心臓の正常に灌流された領域を染色した。心臓を切除し、左心室を取り出し、切断面切片へと薄切りにした。この操作は、正常の非虚血領域、危険領域および梗塞サイズの視覚化を可能にした。生存可能な組織と生存不可能な組織とを区別する指標としてＴＴＣを用いた（クライン、エイチ・エイチ（Ｋｌｅｉｎ，Ｈ．Ｈ．）ら、Ｖｉｒｃｈｏｗｓ  Ａｒｃｈ（１９８１）３９３：ｐ．２８７−２９７）。前記組織を１０％ホルムアルデヒド溶液中に一晩貯蔵した。翌日、実施例７に記載されたデジタル画像化法を用いて、梗塞のサイズ（ＩＳ）を危険領域のパーセンテージ（％）として算出した。
【００９２】
表６に示されるように、化合物１によって前処置されたラットにおける梗塞のサイズは、対照群に較べて有意に小さいことが判明した。
【００９３】
【表６】
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【００９４】
化合物１による前処置により、急性投与後、対照群に較べて梗塞サイズの４８％減少が示された。最初の処置の凡そ７日後に、非処置対照群に較べて梗塞サイズの４３％減少が依然として示された。
【００９５】
実施例９
オスラットを、イナクチン（Ｉｎａｃｔｉｎ）（チオブタバルビタールナトリウム塩、１７８ｍｇ／ｋｇ、腹腔内注射）またはウレタン（１．２ｇ／ｋｇ、腹腔内注射）により麻酔にかけた。手術水準に達したら、気管切開術を実施し（ｐｅ−２４０管）、前記動物の頚静脈（化合物および染料の静脈内投与のため）および頚動脈（血圧測定のため）内に、ｐｅ−５０管によりカテーテル挿入を行い、次いで前記動物をＯ２源に接続した換気装置（Ｈａｒｖａｒｄ、モデル６８３）に置き、３６〜４２ｂｐｍで呼吸させた。動脈血圧および心拍数の測定のため、頚動脈カテーテルを、３方向シリンジバルブによりＰＴ３００圧変換器に接続した。前記動物が安定化した後、血液ガス分析のため、頚動脈カテーテルから、少量の血液サンプル（１５０マイクロリッター）を採取した。
【００９６】
第５肋間腔において左の開胸術、続いて心嚢切開術を実施し、左心耳を調整して左冠動脈の位置を明らかにした。左心耳の下から左心室の右部分まで、結紮（６−０プロレン（ｐｒｏｌｅｎｅ））を通した。一端にフランジを付けてあるポリエチレン管に縫合糸の両端を通し（フランジの付いた端が、心室壁に近位となるように）、スネアを形成した。ぴんと張った縫合糸を引っ張り、血管鉗子によりスネアを心外膜表面上に締め付けることによって、冠動脈を閉鎖した。冠動脈の閉鎖は、心外膜のチアノーゼおよび血圧低下によって確認された。閉鎖を３０分間保持した。再灌流は、スネアの締め付け解除により開始し、心外膜の充血応答を視覚化することにより確認した。再灌流の時間は、１．５〜２時間あった。再灌流時間終了時に、冠動脈を、スネアを用いて再び閉鎖し、パテントブルー染料（生理食塩水中１０％ｗ／ｖの．４ｍｌ）を、静脈内カテーテルを介して注入した。前記染料が循環により拡散したら、直ちに心臓を取り出した。前記心房と右心室を速やかに取り出し、残りの左心室を４〜５枚の薄切りに切断した。正常と規定された領域（青色染色）を危険領域（ＡＡＲ、非青色染色）から分離し、１００ｍＭ  ＫＨ２ＰＯ４および０．１８７％の塩化２，３，５−トリフェニルテトラゾリウム（ＴＴＣ）を含有する別個の２０ｍｌバイアルに前記組織を入れ、３７℃で５〜１０分温置した。次に、固定のため１０％緩衝化ホルムアルデヒド溶液を含有する別個のバイアルに組織を一晩入れた。次に、非梗塞領域から梗塞領域を切開した。正常組織；ＡＡＲ、非梗塞組織；および梗塞組織の重量を測定した。
【００９７】
ＬＡＤ閉鎖の５分前、静脈内カテーテルにより化合物１を、０．０１ｍｇ／ｋｇから１．０ｍｇ／ｋｇの範囲の用量で注入した（前虚血投与）。
【００９８】
２つの別個の試験結果は、下表７に示している。
【００９９】
【表７】
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【０１００】
１．０ｍｇ／ｋｇ用量まで試験された双方の試験において、化合物１の投与により、明らかな保護効果が生じた。対照群は、危険領域（ＡＡＲ）の凡そ５０〜５５％の虚血性損傷を示した。０．１より高用量で投与された化合物１は、双方の試験にわたり、この損傷の約３０％から４０％の間に対して保護を行った。
【０１０１】
実施例１０
ＬＡＤを閉鎖している結紮を緩める直前に（すなわち、最初の虚血性損傷後で再灌流前）、化合物１を投与した以外は、実施例９に記載されたものと同じ実験法が用いられた。このモデルでは、化合物１は、０．３ｍｇ／ｋｇで試験し、明らかな保護効果が証明された。
【０１０２】
対照の虚血性障害は、実施例９における対照群でのように、危険領域の約５０％であった。しかし、実施例９に記載された虚血損傷前とは対比的に、再灌流損傷時に投与された場合、化合物１はこの損傷の３０〜４０％に対して保護した。
【０１０３】
本明細書において、本発明の特定の態様、特徴および例示的実施形態に関連して、本発明を記載したが、本発明の有用性は、そのように限定されておらず、多数の他の態様、特徴および実施形態に拡張し、それらを包含することは、理解されるであろう。したがって、本明細書に記載される請求の範囲は、全てそのような態様、特徴および実施形態を、それらの精神と範囲内で含むものとして、同様に幅広く解釈されるように意図されている。
【図面の簡単な説明】
【０１０４】
【図１】対照動物および処置動物における梗塞サイズの組織学的サンプルを示す図である。
【図１】
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