(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
塩化ベンザルコニウム０．０５〜１０重量／体積（ｗ／ｖ）％とエタノール６０〜９９体積／体積（ｖ／ｖ）％を含有してなるアレルゲンのＩｇＥ結合能低下剤。
【請求項２】
アレルゲンが、ダニ、スギ花粉、ゴキブリ及びカビからなる群より選ばれた少なくとも１種である、請求項１記載のアレルゲンのＩｇＥ結合能低下剤。
【請求項３】
請求項１または２記載のアレルゲンのＩｇＥ結合能低下剤とアレルゲンとを接触させることを特徴とするアレルゲン除去方法。
【請求項４】
請求項１または２記載のアレルゲンのＩｇＥ結合能低下剤を環境に適用して、環境中のアレルゲンを変性させる、アレルゲン除去方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、喘息、アトピー、花粉症等のアレルギー予防技術に関する。より詳しくは、アレルギーの発症を予防でき、副作用が少なく、環境中に有害物を残留させず、かつ広範囲なアレルゲンに利用できる、アレルゲン除去製剤及びアレルゲン除去方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
アレルギー患者数は年々増加傾向にあり、国内の患者は３０００万人ともいわれ、現在非常に大きな問題となっている。アレルギー患者に対する対策は、アレルギー患者の治療と、環境からアレルゲンそのものを除去する方法とに分けられる。
【０００３】
アレルギー患者の治療法としては、ステロイド剤や抗ヒスタミン剤の投与が挙げられるが、治療効果、副作用等の点から、十分に満足できるレベルではないのが現状である。また、前記治療法として、体質を改善する治療法も検討されているが、その手法が確立されるに至っていないのが現状である。
【０００４】
一方、環境中からアレルゲンを除去することはアレルギー発症の予防に大変有効であるとの報告がある〔アレルギー，41, 1405〜1412(1992)、THELANCET 336,895 〜897 〕。環境中のアレルゲン密度を低下させるために、殺ダニ剤、殺菌剤、及び殺ダニ効果を謳った掃除機、ふとん乾燥器等が市販されている。また、特開昭６１−４４８２１号公報や、特開平６−２７９２７３号公報には、タンニン酸や類似構造を有する物質で環境を処理することにより、アレルゲンを除去する方法が示されている。
【０００５】
しかしながら、前記に挙げた商品及び方法は、ダニやカビそのものの増殖の抑制には有効であるが、アレルゲンは、カビ本体やダニの死骸ならびに排泄物に多く含まれているため、単に、カビやダニを殺すだけでは室内のアレルゲン量は低下しないという欠点を有する。そのため、アレルギー発症を抑制するために、これらのアレルゲンを除去する必要がある。アレルゲンを除去する目的には、掃除器による吸引やふとんたたき、クリーニング等を行なう方法が一般的である。しかしながら、前記の方法は、通常通り行なってアレルゲンを除去することが非常に困難であり、最も効果の高いクリーニングにおいても手間やコストがかかる〔アレルギー，40, 439 〜443 (1991)〕という欠点を有する。また、タンニン酸等の物質で環境を処理する方法は、多価フェノール基が金属イオンとキレートを形成し、特異的な呈色反応が起こるため、壁や敷物等が着色するという欠点を有し、実使用に至るまでには、多くの課題がある。したがって、安価で簡便なアレルゲン除去方法が望まれている。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、前記従来技術の欠点を改善・解決するものであり、アレルギーの発症を予防することができ、副作用を抑え、環境中に有害物を残留させず、しかも広範囲なアレルゲンに利用できる新規技術、具体的にはアレルゲン除去製剤及びアレルゲン除去方法を提供することを目的とする。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
即ち、本発明の要旨は、
〔１〕  塩化ベンザルコニウム０．０５〜１０重量／体積（ｗ／ｖ）％とエタノール６０〜９９体積／体積（ｖ／ｖ）％を含有してなるアレルゲンのＩｇＥ結合能低下剤、
〔２〕  前記〔１〕記載のアレルゲンのＩｇＥ結合能低下剤とアレルゲンとを接触させることを特徴とするアレルゲン除去方法、並びに
〔３〕  前記〔１〕記載のアレルゲンのＩｇＥ結合能低下剤を環境に適用して、環境中のアレルゲンを変性させる、アレルゲン除去方法、
に関する。
【０００８】
【発明の実施の形態】
本発明は、タンパク質で構成されているアレルゲンに塩化ベンザルコニウム水溶液を接触させることで、その生理活性が変化（変性）し、特に塩化ベンザルコニウムを含有する有機溶剤を前記アレルゲンに接触させることにより、その生理活性が更に大きく変化するという驚くべく知見に基づく。すなわち、本発明のアレルゲン除去製剤によれば、アレルゲン活性を低下させること、具体的には、アレルゲンと個体由来ＩｇＥとの結合価を低下させることができるという優れた効果を発揮する。
【０００９】
また、本発明のアレルゲン除去製剤は、塩化ベンザルコニウムを有効成分として含有するため、アレルゲンを変性させうるため、アレルギーの発症を予防でき、副作用が少なく、環境中に有害物を残留させず、かつ広範囲なアレルゲンに利用できるという優れた性質を発揮する。
【００１０】
本発明のアレルゲン除去製剤を適用しうるアレルゲンとしては、タンパク質またはペプチドが挙げられ、具体的には、例えば、ダニ、スギ花粉、ゴキブリ、カビなどが挙げられ、これらは、その抽出物であってもよい。また、ダニ、ゴキブリなどの生物の場合、該生物の排泄物であってもよい。前記抽出物としては、例えば、スギ花粉内部に含まれる原形質などの構成成分などが挙げられる。本発明のアレルゲン除去製剤は、特にダニ、スギ花粉、ゴキブリ及びカビからなる群より選ばれた少なくとも１種に特に好適である。
【００１１】
アレルゲンの生理活性の変化（変性）は、例えば、ＥＬＩＳＡ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ法〔Lab. Ani. Sci, 39, 63 〜66 (1989);J. Immunol., 144, 1353〜1360 (1990) 〕でアレルゲンとＩｇＥ（免疫グロブリンＥ）との結合能を指標とする方法、皮膚反応による評価方法〔大阪府立公衛研所報  労働衛生編，23, 39〜43 (1985) 〕などにより評価することができる。また、前記アレルゲンとＩｇＥとの結合能は、アレルギー患者におけるアレルギー罹患の指標となる〔アレルギー，35(4), 233〜237 (1986)〕。
【００１２】
アレルゲン除去製剤中における塩化ベンザルコニウムの含有量は、アレルゲンに対する変性効果を十分に発揮させる観点から、０．００１ｗ／ｖ％以上であることが好ましく、０．０５ｗ／ｖ％以上であることがより好ましく、発疹、掻痒などの過敏症状を抑制する観点から、１０ｗ／ｖ％以下であることが好ましい。かかるアレルゲン除去製剤は、例えば、調製時に、該除去製剤の最終量を１００ｗ／ｖ％として、塩化ベンザルコニウム０．００１〜１０ｗ／ｖ％となるように水に配合して得られる。
【００１３】
また、塩化ベンザルコニウムを有効成分として含有し、かつ有機溶剤をさらに含有してなるアレルゲン除去製剤も本発明の範囲に含まれる。本発明のアレルゲン除去製剤によれば、有機溶剤をさらに含有することにより、塩化ベンザルコニウムを単独で用いる場合に比べて、より高いアレルゲンの変性効果を得ることができる。
【００１４】
有機溶剤としては、塩化ベンサルコニウムを溶解しうる溶剤であればよく、炭素数１〜５のアルコール、炭素数１〜１２の炭化水素化合物、炭素数６〜１０のフェノール化合物、炭素数１〜１８のカルボン酸化合物、炭素数３〜１４のエステル化合物、炭素数３〜６のケトン化合物、含窒素有機化合物、含硫黄有機化合物などが挙げられる。本発明においては、前記有機溶剤として、前記化合物からなる群より選ばれた少なくとも１種を用いることができる。
【００１５】
炭素数１〜５のアルコールとしては、例えば、エタノール、メタノール、プロパノール、ブタノール、ペンタノール等が挙げられる。炭素数１〜１２の炭化水素化合物は、飽和または不飽和のいずれでもよく、直鎖状化合物であっても環状化合物であってもよい。また、前記炭化水素化合物は、ハロゲン化炭化水素化合物をも含む。前記炭素数１〜１２の炭化水素化合物としては、例えば、トルエン、キシレン、クロロホルム、ジクロロベンゼン、ナフタレン等が挙げられる。炭素数６〜１０のフェノール化合物としては、例えば、フェノール、クレゾール、ナフトール等が挙げられる。炭素数１〜１８のカルボン酸化合物としては、例えば、酢酸、オレイン酸、酪酸等が挙げられる。炭素数３〜１４のエステル化合物としては、例えば、酢酸エチルなどが挙げられる。炭素数３〜６のケトン化合物としては、例えば、アセトン、メチルエチルケトン等が挙げられる。含窒素有機化合物としては、アセトニトリル、アニリン等が挙げられる。含硫黄有機化合物としては、ジメチルスルホキシド等が挙げられる。なかでも、特にエタノールを利用した場合に極めて良好な効果があらわれる。
【００１６】
また、アレルゲン除去製剤中における前記有機溶剤の含有量は、アレルゲンに対する変性効果をより増強させる観点から、好ましくは２０ｖ／ｖ％以上であり、より好ましくは５０ｖ／ｖ％以上であり、前記塩化ベンザルコニウムを除く残部であることが望ましい。具体的には、アレルゲン除去製剤中における有機溶剤の含有量は、２０ｖ／ｖ％〜残部であることが望ましい。
【００１７】
アレルゲン除去製剤の剤型としては、噴霧剤、塗布剤、浸漬剤、蒸散剤などが挙げられる。
【００１８】
また、本発明のアレルゲン除去製剤には、アレルゲン変性効果を妨げない物質であれば、種々の助剤を添加してもよい。
【００１９】
本発明のアレルゲン除去方法は、塩化ベンザルコニウムをアレルゲンに接触させることに１つの特徴がある。これにより、アレルゲンを変性させることができる。前記塩化ベンザルコニウムは、該塩化ベンザルコニウムを有効成分として含有したアレルゲン除去製剤として使用することができる。
【００２０】
さらに、本発明のアレルゲン除去方法において、塩化ベンザルコニウムと有機溶剤とをアレルゲンに接触させることにより、より高いアレルゲン変性効果を得ることができる。本発明のアレルゲン除去方法には、前記アレルゲン除去製剤を使用することができる。したがって、本発明のアレルゲン除去方法によれば、前記アレルゲン除去製剤が、アレルゲンに作用することによりアレルゲンが変性し失活してしまうため、アレルギー発症を防ぐことができるという優れた効果を発揮する。
【００２１】
すなわち、本発明のアレルゲン除去方法は、前記アレルゲン除去製剤とアレルゲンとを接触させることを特徴とする。本発明のアレルゲン除去方法によれば、前記アレルゲン除去製剤を環境に適用して、環境中のアレルゲンを変性させることができ、アレルゲン活性を低下させること、具体的には、アレルゲンと個体由来ＩｇＥとの結合価を低下させることができるという優れた効果を発揮する。
【００２２】
本明細書において「環境」とは、家屋内の居住空間を形成するもの、身につけるものなどが挙げられ、例えば、壁、敷物、室内大気、空気清浄機、室内温度調節機、ソファー、ふとん、衣類、マスク、メガネ等をいう。
【００２３】
前記アレルゲン除去製剤のアレルゲンへの接触形態としては、噴霧、塗布、浸漬、蒸散などが挙げられる。
【００２４】
本発明のアレルゲン除去方法において、前記アレルゲン除去製剤は、塩化ベンザルコニウムの量が、塩化ベンザルコニウム／アレルゲン（重量比）として、１／４０以上の割合となるように接触させれば効果的である。
【００２５】
【実施例】
以下に実施例を挙げて本発明を説明するが、本発明は実施例に限定されるものではない。
【００２６】
実施例１
ダニ培養物からダニ排泄物を分離し、その抽出液を凍結乾燥し、凍結乾燥ダニ排泄物抗原を得た。凍結乾燥ダニ排泄物２０μｇを０．００１〜１０ｗ／ｖ％塩化ベンザルコニウム水溶液（アレルゲン除去製剤）１ｍｌに２時間浸潰した。得られたダニ排泄物を阻害物質として、以下に示すＥＬＩＳＡ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ法に用い、ダニ排出物抗原とアレルギー患者ＩｇＥ（免疫グロブリンＥ）との結合能を評価した。前記ＥＬＩＳＡ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ法は、次の通りである。
【００２７】
すなわち、重曹緩衝液（０．１Ｍ、ｐＨ９．６）で１０μｇ／ｍｌに希釈したダニ排泄物抗原液を９６穴マイクロタイタープレート（Ｎｕｎｃ）の各ウェルに５０μ１ずつ加え、４℃で一晩静置した。各ウェルをＰＢＳで３回洗浄後、ブロッキング液〔終濃度２重量％スキムミルク添加ＰＢＳ（リン酸塩緩衝液）〕を２００μｌずつ加え、室温で１時間静置した。各ウェルをＰＢＳＴ（終濃度０．０５ｗ／ｖ％  Ｔｗｅｅｎ  ２０含有ＰＢＳ）で３回洗浄後、阻害物質を加えた。ついで、各ウェルに３７℃で３０分間保温したダニアレルギー患者の血清（１００倍希釈）を５０μｌずつ加え、室温で１．５時間振とうした。各ウェルをＰＢＳＴで３回洗浄後、ＰＢＳで１０００倍希釈したビオチン結合−抗ヒトＩｇＥ体（ＢＩＯＳＯＵＲＣＥ）を５０μｌずつ加え、室温で１．５時間振とうした。ついで、各ウェルをＰＢＳＴで３回洗浄後、ＰＢＳで１０００倍希釈したアルカリフォスファターゼ標識−ストレプトアビジン（ＣＥＤＡＲＬＡＮＥ社製）を５０μｌずつ加え、室温で１．５時間振とうした。各ウェルをＰＢＳＴで３回洗浄後、アトファースTM試薬（ＢＯＥＨＲＩＮＧＥＲ  ＭＡＮＮＨＥＩＭ）を５０μｌずつ加え、室温、遮光条件下に１〜２時間反応させ、酵素反応によって生じた蛍光物質を自動蛍光光度測定器で測定した。
【００２８】
結果を表１に示す。尚、イオン交換水により処理したダニ排泄物抗原とアレルギー患者ＩｇＥ（免疫グロブリンＥ）との結合率を１００％とした（水処理区）。
【００２９】
【表１】
0004659177.tif 000002
【００３０】
表１から明らかなように、塩化ベンザルコニウム水溶液によってダニ排泄物抗原のアレルギー患者ＩｇＥとの結合率が低下した。本結果は、塩化ベンザルコニウムがアレルゲンに作用し、アレルギー患者ＩｇＥとの結合価を低下させたことを示している。
【００３１】
実施例２
ダニ培養物からダニ排泄物を分離し、その抽出液を凍結乾燥し、凍結乾燥ダニ排泄物抗原を得た。ついで、終濃度１ｗ／ｖ％となるように塩化ベンザルコニウムを０〜１００ｖ／ｖ％エタノール溶液に添加して、アレルゲン除去製剤（エタノール含有量：０〜約９９ｖ／ｖ％）を得た。それぞれ１ｍｌの前記アレルゲン除去製剤に凍結乾燥ダニ排泄物抗原２０μｇを２時間浸漬し、実施例１に示したＥＬＩＳＡ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ法によってアレルギー患者ＩｇＥとの結合能を評価した。
【００３２】
結果を表２に示す。尚、イオン交換水により処理したダニ排泄物抗原とアレルギー患者ＩｇＥ（免疫グロブリンＥ）との結合率を１００％とした（水処理区）。
【００３３】
【表２】
0004659177.tif 000003
【００３４】
表２から明らかなように、塩化ベンザルコニウム水溶液に比べ、塩化ベンザルコニウムを含有するエタノール溶液によって更に結合率が低下した。本結果は、塩化ベンザルコニウムおよびエタノールがアレルゲンに相乗的に作用し、アレルギー患者ＩｇＥとの結合価を更に低下させたことを示している。
【００３５】
【発明の効果】
本発明のアレルゲン除去製剤及びアレルゲン除去方法によれば、塩化ベンザルコニウム、または該塩化ベンザルコニウムと有機溶剤とを有効成分として作用させるため、副作用を伴わない、環境中に有害物質を残さず、アレルゲンを効果的に変性して失活させることができる。しかも、本発明は非常に簡便で汎用性に富み、安価に環境中のアレルゲン量を低下させ、ひいてはアレルギーの発症予防に有効である。