【手続補正書】
【提出日】平成25年12月16日(2013.12.16)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
内因性マウス低親和性ＦｃγＲ  α鎖遺伝子と置き換わった少なくとも２つの低親和性ヒトＦｃγＲ  α鎖遺伝子をそのゲノムに含むトランスジェニックマウスであって、ここで、該マウスが機能的内因性ＦｃＲ  γ鎖を含み、該少なくとも２つの低親和性ヒトＦｃγＲ  α鎖遺伝子を機能的に発現する、トランスジェニックマウス。
【請求項２】
前記少なくとも２つの低親和性ヒトＦｃγＲ  α鎖遺伝子が、ヒトＦｃγＲＩＩＡ  α鎖遺伝子、ヒトＦｃγＲＩＩＢ  α鎖遺伝子、ヒトＦｃγＲＩＩＣ  α鎖遺伝子、ヒトＦｃγＲＩＩＩＡ  α鎖遺伝子、およびヒトＦｃγＲＩＩＩＢ  α鎖遺伝子からなる群より選択される、請求項１に記載のトランスジェニックマウス。
【請求項３】
前記少なくとも２つの低親和性ヒトＦｃγＲ遺伝子が、ヒトＦｃγＲＩＩＡ  α鎖遺伝子およびヒトＦｃγＲＩＩＩＡ  α鎖遺伝子である、請求項１に記載のトランスジェニックマウス。
【請求項４】
前記ヒトＦｃγＲＩＩＩＡ  α鎖のタンパク質が、前記マウスのＮＫ細胞上に発現される、請求項３に記載のトランスジェニックマウス。
【請求項５】
前記マウスの前記ゲノムが、ヒトＦｃγＲＩＩＢ  α鎖遺伝子、ヒトＦｃγＲＩＩＣ  α鎖遺伝子、およびヒトＦｃγＲＩＩＩＢ  α鎖遺伝子を含む、請求項１に記載のトランスジェニックマウス。
【請求項６】
内因性マウスＦｃγＲＩＩＢ、ＦｃγＲＩＩＩ、およびＦｃγＲＩＶのα鎖遺伝子と置き換わったヒトＦｃγＲＩＩＩＡ  α鎖遺伝子をそのゲノムに含むトランスジェニックマウスであって、ここで、該マウスが、該ヒトＦｃγＲＩＩＩＡ  α鎖遺伝子を、マウスＦｃＲ  γ鎖とともにマウスＮＫ細胞の表面上に機能的に発現する、マウス。
【請求項７】
ヒト抗体のＦｃ領域を含む作用物質のスクリーニング方法であって、
（ａ）ヒト抗体のＦｃ領域を含む作用物質を請求項１に記載のトランスジェニックマウスに投与するステップであって、ここで、該作用物質が該マウス中の標的細胞に結合する、ステップと、
（ｂ）該標的細胞に対するナチュラルキラー（ＮＫ）細胞の抗体依存性細胞媒介性細胞殺傷（ＡＤＣＣ）を測定するステップと、
（ｃ）ステップｂ）のＡＤＣＣの量を対照と比較するステップであって、ここで、標的細胞殺傷の増加は、該作用物質がＡＤＣＣを媒介する能力の増大を有することを示す、ステップと
を包含する、方法。
【請求項８】
前記トランスジェニックマウスが、
（ａ）前記内因性ＦｃγＲＩＩＢ、ＦｃγＲＩＩＩ、およびＦｃγＲＩＶのα鎖遺伝子と置き換わったヒトＦｃγＲＩＩＡ  α鎖遺伝子およびヒトＦｃγＲＩＩＩＡ  α鎖遺伝子を；または
（ｂ）前記内因性ＦｃγＲＩＩＢ、ＦｃγＲＩＩＩ、およびＦｃγＲＩＶのα鎖遺伝子と置き換わったヒトＦｃγＲＩＩＡ  α鎖遺伝子、ヒトＦｃγＲＩＩＢ  α鎖遺伝子、ヒトＦｃγＲＩＩＣ  α鎖遺伝子、ヒトＦｃγＲＩＩＩＡ  α鎖遺伝子およびヒトＦｃγＲＩＩＩＢ  α鎖遺伝子を含む、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記標的細胞が腫瘍細胞であり、前記作用物質が、該腫瘍細胞のエピトープに結合する、請求項７に記載の方法。
【請求項１０】
前記標的細胞が、ヒト病原体が感染しているマウス細胞であり、前記作用物質が、該ヒト病原体のエピトープに結合する、請求項７に記載の方法。
【請求項１１】
前記標的細胞が、ヒト病原体が感染しているヒト細胞であり、前記作用物質が、該ヒト病原体のエピトープに結合する、請求項７に記載の方法。
【請求項１２】
前記標的細胞が、ヒト腫瘍細胞であり、前記作用物質が、該ヒト腫瘍細胞のエピトープに結合する、請求項７に記載の方法。
【請求項１３】
前記標的細胞に対するＮＫ細胞の前記ＡＤＣＣが前記マウスの血液試料において測定される、請求項７に記載の方法。
【請求項１４】
前記作用物質が抗体である、請求項７に記載の方法。
【請求項１５】
前記抗体がヒト抗体である、請求項１４に記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６０】
一実施形態では、治療薬依存性の血栓形成における決定された差異は、ヒトへの治療薬の投与と関連する危険性を同定するために用いられる。一実施形態では、決定された差異は、その必要性のあるヒト患者への治療薬の投与の変化をもたらす。
特定の実施形態では、例えば以下が提供される：
（項目１）
遺伝子改変を含むマウスであって、該遺伝子改変が、内因性低親和性ＦｃγＲ遺伝子の、該内因性マウス低親和性ＦｃγＲ遺伝子の遺伝子座に配置される、少なくとも２つの低親和性ヒトＦｃγＲ遺伝子による置き換えを含み、該マウスが機能的ＦｃＲ  γ鎖を含む、マウス。
（項目２）
前記少なくとも２つの低親和性ヒトＦｃγＲ遺伝子が、ＦｃγＲＩＩＡ、ＦｃγＲＩＩＢ、ＦｃγＲＩＩＣ、ＦｃγＲＩＩＩＡ、およびＦｃγＲＩＩＩＢから選択される、項目１に記載のマウス。
（項目３）
前記少なくとも２つの低親和性ヒトＦｃγＲ遺伝子が、ＦｃγＲＩＩＡおよびＦｃγＲＩＩＩＡである、項目１に記載のマウス。
（項目４）
前記ヒトＦｃγＲＩＩＩＡが、前記マウスのＮＫ細胞上に発現される、項目３に記載のマウス。
（項目５）
前記少なくとも２つの低親和性ヒトＦｃγＲ遺伝子が、ＦｃγＲＩＩＢ、ＦｃγＲＩＩＣ、およびＦｃγＲＩＩＩＢである、項目１に記載のマウス。
（項目６）
前記ＦｃγＲＩＩＡおよびＦｃγＲＩＩＩＡの遺伝子が、対立遺伝子変異体または多型を含む、項目３に記載のマウス。
（項目７）
ヒト低親和性ＦｃγＲ対立遺伝子変異体を含み、前記対立遺伝子変異体が、（ａ）ＦｃγＲＩＩＡ対立遺伝子変異体１３１Ｈ、（ｂ）ＦｃγＲＩＩＩＡ対立遺伝子変異体１５８Ｖ、（ｃ）ＦｃγＲＩＩＢ対立遺伝子変異体２３２Ｉ、（ｄ）好中球抗原２（ＮＡ２）対立遺伝子によって特徴付けられるＦｃγＲＩＩＩＢ対立遺伝子変異体、および（ｅ）それらの組合せから成る群から選択される、項目５に記載のマウス。
（項目８）
遺伝子改変されたマウスであって、該遺伝子改変が、ＦｃγＲＩＩＢ、ＦｃγＲＩＩＩ、およびＦｃγＲＩＶのαサブユニットをコードする内因性マウス遺伝子の、ヒトＦｃγＲＩＩＩＡ  αサブユニットをコードする遺伝子による置き換えを含み、該マウスが、内因性マウスＦｃＲ  γサブユニットを伴うヒトＦｃγＲＩＩＩＡタンパク質を発現し、該ヒトＦｃγＲＩＩＩＡタンパク質がマウスＮＫ細胞の表面上に発現される、マウス。
（項目９）
マウスＮＫ細胞が、前記マウスの血中で循環するＮＫ細胞であり、該マウスＮＫ細胞の表面上に発現される該ＦｃγＲＩＩＩＡタンパク質が、ヒトＦｃまたは改変ヒトＦｃを含むイムノアドヘシンまたは抗体に結合し、該イムノアドヘシンまたは抗体が、該マウスにおける標的細胞に特異的に結合し、該ＮＫ細胞の該ＦｃγＲＩＩＩＡへの、該イムノアドヘシンまたは該抗体の結合が、該標的細胞のＮＫ細胞殺傷を媒介する、項目８に記載の遺伝子改変されたマウス。
（項目１０）
前記標的細胞にヒト病原体が感染しており、前記イムノアドヘシンまたは抗体が該ヒト病原体のエピトープに特異的に結合する、項目９に記載の遺伝子改変されたマウス。
（項目１１）
前記標的細胞が腫瘍細胞であり、前記イムノアドヘシンまたは抗体が該腫瘍細胞のエピトープに特異的に結合する、項目９に記載の遺伝子改変されたマウス。
（項目１２）
治療薬依存性の細胞殺傷を測定するための方法であって、
（ａ）遺伝子改変されたマウスに、該マウスにおけるＮＫ細胞でない標的細胞に特異的に
結合する治療剤を投与するステップであって、該治療剤がヒトＦｃを含む、ステップと、（ｂ）該マウスまたは該マウスの組織試料におけるＮＫ媒介性の標的細胞殺傷のレベルを測定するステップと、
（ｃ）前記治療剤によって媒介される標的細胞殺傷の量を決定し、それによって、治療薬依存性の細胞殺傷を測定するステップと
を含み、該遺伝子改変が、マウスＦｃγＲＩＩＢのαサブユニットをコードする遺伝子の欠失、マウスＦｃγＲＩＩＩのαサブユニットをコードする遺伝子の欠失、およびマウスＦｃγＲＩＶのαサブユニットをコードする遺伝子の欠失を含み、前記マウスが、ヒトＦｃγＲＩＩＩＡのαサブユニットをコードする遺伝子を、内因性マウスαサブユニットの遺伝子座に含み、該マウスが機能的ＦｃＲ  γ鎖サブユニットを発現する、方法。
（項目１３）
前記マウスが、前記内因性マウスαサブユニットの遺伝子座に、ＦｃγＲＩＩＡ  αサブユニット、ＦｃγＲＩＩＢ  αサブユニット、ＦｃγＲＩＩＣ  αサブユニット、ＦｃγＲＩＩＩＢ  αサブユニット、およびそれらの組合せから選択されるヒトＦｃγＲ  αサブユニットをコードする遺伝子をさらに含む、項目１２に記載の方法。
（項目１４）
前記標的細胞がヒト病原体であり、前記治療薬が、該ヒト病原体のエピトープに特異的に結合する、項目１２に記載の方法。
（項目１５）
前記標的細胞が、ヒト病原体が感染しているマウス細胞であり、前記治療薬が、該ヒト病原体のエピトープに特異的に結合する、項目１２に記載の方法。
（項目１６）
前記標的細胞が、ヒト病原体が感染しているヒト細胞であり、前記治療薬が、該ヒト病原体のエピトープに特異的に結合する、項目１２に記載の方法。
（項目１７）
前記標的細胞が、ヒト腫瘍細胞であり、前記治療薬が、該ヒト腫瘍細胞のエピトープに特異的に結合する、項目１２に記載の方法。
（項目１８）
前記組織試料が血液試料である、項目１２に記載の方法。
（項目１９）
前記治療薬が抗体である、項目１２に記載の方法。
（項目２０）
前記抗体がヒト抗体である、項目１７に記載の方法。