【手続補正書】
【提出日】平成24年1月6日(2012.1.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一又は複数の遊離システインアミノ酸と
2011515069.tif 000001
から選択される配列を含むキメラシステイン改変抗ＣＤ７９ｂ抗体。
【請求項２】
システイン改変抗ＣＤ７９ｂ抗体がＣＤ７９ｂポリペプチドに結合する請求項１のシステイン改変抗ＣＤ７９ｂ抗体。
【請求項３】
親抗ＣＤ７９ｂ抗体の一又は複数のアミノ酸残基をシステインで置換することを含む工程によって調製される請求項１又は請求項２のシステイン改変抗ＣＤ７９ｂ抗体。
【請求項４】
一又は複数の遊離システインアミノ酸残基が重鎖に位置している、請求項１から３の何れか一項のシステイン改変抗ＣＤ７９ｂ抗体。
【請求項５】
更に
2011515069.tif 000002
から選択される一又は複数の配列を含む請求項４のシステイン改変抗ＣＤ７９ｂ抗体。
【請求項６】
一又は複数の遊離システインアミノ酸残基が軽鎖に位置している、請求項１から３の何れか一項のシステイン改変抗ＣＤ７９ｂ抗体。
【請求項７】
2011515069.tif 000003
から選択される一又は複数の配列を含む請求項６のシステイン改変抗ＣＤ７９ｂ抗体。
【請求項８】
配列番号：１２を含む重鎖配列及び／又は配列番号：１０を含む軽鎖を含む以下の請求項の何れか一項に記載のシステイン改変抗ＣＤ７９ｂ抗体。
【請求項９】
細菌又はＣＨＯ細胞において産生される、請求項１から８の何れか一項に記載のシステイン改変抗ＣＤ７９ｂ抗体。
【請求項１０】
抗体がアウリスタチン薬剤部分に共有結合しており、それによって抗体薬剤コンジュゲートが形成される、請求項１から９の何れか一項に記載のシステイン改変抗ＣＤ７９ｂ抗体。
【請求項１１】
システイン改変抗ＣＤ７９ｂ抗体抗体(Ａｂ)とアウリスタチン薬剤部分(Ｄ)とを含み、ここで、システイン改変抗ＣＤ７９ｂ抗体がリンカー部分(Ｌ)によって一又は複数の遊離システインアミノ酸を介してＤに結合しており、化合物が式Ｉ：
2011515069.tif 000004
を有し、ここで、ｐが１、２、３、４又は好ましくは２である、請求項１０に記載の抗体−薬剤コンジュゲート。
【請求項１２】
Ｌが式：
2011515069.tif 000005
を有し、
ここで：
Ａがシステイン改変抗体(Ａｂ)のシステインチオールに共有結合したストレッチャー単位であり、
ａが０又は１であり、
各々のＷが独立してアミノ酸単位であり、
ｗが０から１２までの整数であり、
Ｙが、薬剤部分に共有結合したスペーサー単位であり、ｙが０、１又は２である、請求項１１に記載の抗体−薬剤コンジュゲート。
【請求項１３】
式：
2011515069.tif 000006
を有し、ここで、ＰＡＢがパラ-アミノベンジルカルバモイルであり、Ｒ１７が、(ＣＨ２)ｒ、Ｃ３−Ｃ８カルボシクリル、Ｏ-(ＣＨ２)ｒ、アリーレン、(ＣＨ２)ｒ-アリーレン、-アリーレン-(ＣＨ２)ｒ-、(ＣＨ２)ｒ-(Ｃ３−Ｃ８-カルボシクリル)、(Ｃ３−Ｃ８カルボシクリル)-(ＣＨ２)ｒ、Ｃ３−Ｃ８ヘテロシクリル、(ＣＨ２)ｒ-(Ｃ３−Ｃ８ヘテロシクリル)、(Ｃ３−Ｃ８ヘテロシクリル)-(ＣＨ２)ｒ-、-(ＣＨ２)ｒＣ(Ｏ)ＮＲｂ(ＣＨ２)ｒ-、-(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｒ-、-(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｒ-ＣＨ２-、-(ＣＨ２)ｒＣ(Ｏ)ＮＲｂ(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｒ-、-(ＣＨ２)ｒＣ(Ｏ)ＮＲｂ(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｒ-ＣＨ２-、-(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｒＣ(Ｏ)ＮＲｂ(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｒ-、-(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｒＣ(Ｏ)ＮＲｂ(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｒ-ＣＨ２-、及び-(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｒＣ(Ｏ)ＮＲｂ(ＣＨ２)ｒ-から選択される二価の基であり、このときＲｂがＨ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、フェニル又はベンジルであり、そして、ｒがそれぞれ１から１０までの整数である、請求項１２に記載の抗体−薬剤コンジュゲート化合物。
【請求項１４】
Ｗｗがバリン-シトルリンである、請求項１２に記載の抗体-薬剤コンジュゲート化合物。
【請求項１５】
式：
2011515069.tif 000007
を有する、請求項１２に記載の抗体-薬剤コンジュゲート化合物。
【請求項１６】
Ｒ１７が(ＣＨ２)５又は(ＣＨ２)２である、請求項１３又は１５に記載の抗体-薬剤コンジュゲート化合物。
【請求項１７】
式：
2011515069.tif 000008
を有する、請求項１２に記載の抗体-薬剤コンジュゲート化合物。
【請求項１８】
ＬがＳＭＣＣ又はＢＭＰＥＯである、請求項１２に記載の抗体-薬剤コンジュゲート化合物。
【請求項１９】
Ｄが好ましくは、波形の線がリンカーＬへの結合部位を示す構造：
2011515069.tif 000009
を有する、ＭＭＡＥであるか、
又は好ましくは、波形の線がリンカーＬへの結合部位を示す構造：
2011515069.tif 000010
を有する、ＭＭＡＦである、請求項１２に記載の抗体−薬剤コンジュゲート化合物。
【請求項２０】
請求項１から９の何れか一項に記載のシステイン改変抗ＣＤ７９ｂ抗体又は親抗ＣＤ７９ｂ抗体が、モノクローナル抗体、二重特異性抗体、キメラ抗体、ヒト抗体、及びヒト化抗体から選択される、請求項１０から１９の何れか一項に記載の抗体-薬剤コンジュゲート化合物。
【請求項２１】
請求項１から９の何れか一項に記載のシステイン改変抗ＣＤ７９ｂ抗体又は親抗ＣＤ７９ｂ抗体が、抗体断片、好ましくはＦａｂ断片である、請求項１０から１９の何れか一項に記載の抗体-薬剤コンジュゲート化合物。
【請求項２２】
ＬがＭＣ−ｖａｌ−ｃｉｔ−ＰＡＢ又はＭＣ、ＳＭＣＣ、ＳＰＰ、又はＢＭＰＥＯである、請求項１０に記載の抗体-薬剤コンジュゲート。
【請求項２３】
構造：
2011515069.tif 000011
から選択され、
このとき、Ｖａｌがバリンであり、Ｃｉｔがシトルリンであり、ｐが１、２、３又は４であり、Ａｂが請求項１に記載のシステイン改変抗ＣＤ７９ｂ抗体である、抗体−薬剤コンジュゲート化合物。
【請求項２４】
Ａｂが配列番号：１０及び／又は配列番号：１２を含む請求項２３の抗体薬剤コンジュゲート。
【請求項２５】
請求項１に記載のシステイン改変抗ＣＤ７９ｂ抗体又は請求項１０に記載の抗体薬剤コンジュゲートと、薬学的に許容可能な希釈液、担体又は賦形剤とを含有する、薬学的製剤。
【請求項２６】
更に治療的有効量の化学療法剤を更に含む、請求項２５に記載の抗体薬剤コンジュゲートを含有する、薬学的製剤。
【請求項２７】
請求項２５に記載抗体薬剤コンジュゲートを含む薬学的製剤と、
容器と、
化合物がＣＤ７９ｂポリペプチドの過剰発現に特徴がある癌の治療に用いられることを示すパッケージ挿入物又はラベルと
を具備し、癌が、好ましくは、リンパ腫、非ホジキンリンパ腫(ＮＨＬ)、高悪性度ＮＨＬ、再発性高悪性度ＮＨＬ、再発性低悪性度ＮＨＬ、難治性ＮＨＬ、難治性低悪性度ＮＨＬ、慢性リンパ球性白血病(ＣＬＬ)、小リンパ球性リンパ腫、白血病、毛様細胞白血病(ＨＣＬ)、急性リンパ球性白血病(ＡＬＬ)、及びマントル細胞リンパ腫からなる群から選択される、製品。
【請求項２８】
ＣＤ７９ｂタンパク質を含むことが疑われる試料においてＣＤ７９ｂタンパク質の存在を決定する方法であって、該試料を請求項１に記載のシステイン改変抗ＣＤ７９ｂ抗体にさらし、該試料中の該ＣＤ７９ｂタンパク質への該抗体の結合を決定することを含み、ここで、該タンパク質に対する抗体の結合が該試料中の該タンパク質の存在を示し、前記抗体が、蛍光色素、放射性同位体、ビオチン、又は金属錯体リガンドから選択される標識に共有結合していてもよい、方法。
【請求項２９】
前記試料が前記ＣＤ７９ｂタンパク質を発現することが疑われる細胞を含み、前記細胞が好ましくは造血性腫瘍細胞である、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
（ａ）細胞を請求項１０の抗体-薬剤コンジュゲート化合物に曝し；
（ｂ）抗体-薬剤コンジュゲート化合物の細胞への結合量を決定することを含む癌細胞を検出するためのアッセイであって、好ましくは細胞が造血性腫瘍細胞であるアッセイ。
【請求項３１】
請求項１０の抗体-薬剤コンジュゲート化合物を用いた細胞培養培地中の哺乳類腫瘍細胞の治療を含む細胞増殖の阻害方法であって、これによって、腫瘍細胞の増殖が阻害され、ここで、哺乳類腫瘍細胞が好ましくは造血性腫瘍細胞である方法。
【請求項３２】
癌の治療方法における請求項２５に記載の薬学的組成物であって、癌が、好ましくは、リンパ腫、非ホジキンリンパ腫(ＮＨＬ)、高悪性度ＮＨＬ、再発性高悪性度ＮＨＬ、再発性低悪性度ＮＨＬ、難治性ＮＨＬ、難治性低悪性度ＮＨＬ、慢性リンパ球性白血病(ＣＬＬ)、小リンパ球性リンパ腫、白血病、毛様細胞白血病(ＨＣＬ)、急性リンパ球性白血病(ＡＬＬ)、及びマントル細胞リンパ腫からなる群から選択される薬学的組成物。
【請求項３３】
方法が抗体-薬剤コンジュゲート化合物と組み合わせて患者に化学療法剤を投与することを含む、請求項３２に記載の薬学的組成物。
【請求項３４】
請求項１に記載のシステイン改変抗抗ＣＤ７９ｂ抗体(Ａｂ)とアウリスタチン薬剤部分(Ｄ)とを含む抗体薬剤コンジュゲート化合物の生産方法であって、ここで、該システイン改変抗体がリンカー部分(Ｌ)によって一又は複数の改変システインアミノ酸によってＤに結合しており、該化合物が式Ｉ：
Ａｂ−(Ｌ−Ｄ）ｐ        Ｉ
を有し、ここで、ｐが１、２、３又は４であり、
（ａ）  システイン改変抗体の改変システイン基をリンカー試薬と反応させ、抗体−リンカー中間生成物Ａｂ−Ｌを形成させ、そして、
（ｂ）  活性化された薬剤部分ＤとＡｂ−Ｌを反応させ、これによって、抗体−薬剤コンジュゲートが形成される
工程を含むか、又は、
（ｃ）  薬剤部分の求核基をリンカー試薬と反応させ、薬剤−リンカー中間生成物Ｄ−Ｌを形成させ、
（ｄ）  Ｄ−Ｌをシステイン改変抗体の改変システイン基と反応させ、これによって、抗体−薬剤コンジュゲートが形成される
工程を含み、
ここで、該方法がチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞におけるシステイン改変抗体の発現の工程を含んでもよい方法。
【請求項３５】
更に発現されたシステイン改変抗体を還元剤で処理する工程を含む請求項３４に記載の方法であって、ここで、還元剤が好ましくはＴＣＥＰ及びＤＴＴから選択される方法。
【請求項３６】
還元剤で処理した後に、更に発現されたシステイン改変抗体を酸化剤で処理する工程を含む請求項３４に記載の方法であって、ここで、酸化剤が好ましくは硫酸銅、デヒドロアスコルビン酸及び空気から選択される方法。