【誤訳訂正書】
【提出日】平成23年12月28日(2011.12.28)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
酵母宿主細胞中で、１つの必須シャペロンをコードする1または２以上の遺伝子を欠失するか、あるいは不活性化するとき、該宿主細胞が培養において生存不能であり、そして培地への添加または改変により欠陥が補足することができないという意味において、酵母宿主細胞の生存可能性に対して必須であるシャペロンをコードする遺伝子を、唯一の酵母選択可能なマーカーとして、含んでなる、プラスミド。
【請求項２】
必須シャペロンをコードする遺伝子がプラスミドによりコードされる唯一の選択可能なマーカーである、請求項１に記載のプラスミド。
【請求項３】
必須シャペロンが酵母シャペロンである、請求項２に記載のプラスミド。
【請求項４】
必須シャペロンがサッカロミセス・セレビシエ由来のシャペロンであり、該シャペロンがCCT2、CCT3、CCT4、CCT5、CCT6、CCT7、CCT8、CNS1、ERO1、HSP10、HSP60、PDI1、CDC37、KAR2、MGE1、MRS11、NOB1、SSC1、PSE1、TIM9、PAM18およびTCP1から選択される遺伝子によりコードされるタンパク質またはこれらの任意の1つの変異型（この変異型はアミノ酸の保存的置換により得られるものである）の配列を含んでなる、請求項２に記載のプラスミド。
【請求項５】
必須シャペロンがタンパク質ジサルファイドイソメラーゼまたはPse1pである、請求項２に記載のプラスミド。
【請求項６】
所望の異種タンパク質をコードする遺伝子をさらに含んでなる、請求項１〜５のいずれか１項に記載のプラスミド。
【請求項７】
２μｍファミリープラスミドである、請求項１〜６のいずれか１項に記載のプラスミド。
【請求項８】
２μｍファミリープラスミドでない、請求項１〜６のいずれか１項に記載のプラスミド。
【請求項９】
第１シャペロンタンパク質の配列を含んでなるタンパク質をコードする第１組換え遺伝子（該第１組換え遺伝子は唯一の酵母選択可能なマーカーである）と、第２シャペロンタンパク質の配列を含んでなるタンパク質をコードする第２組換え遺伝子とを含んでなるプラスミドである、請求項１〜８のいずれか一項に記載のプラスミド。
【請求項１０】
（ｉ）第１シャペロンが、CCT2、CCT3、CCT4、CCT5、CCT6、CCT7、CCT8、CNS1、ERO1、HSP10、HSP60、PDI1、CDC37、KAR2、MGE1、MRS11、NOB1、SSC1、PSE1、TIM9、PAM18またはTCP1のいずれか１つによりコードされるタンパク質、またはこれらの任意の1つの変異型（この変異型はアミノ酸の保存的置換により得られるものである）から選択され；そして／又は
（ii）第２シャペロンが、AHA1、CPR3、CPR6、EPS1、EUG1、FMO1、HCH1、HSP12、HSP104、HSP26、HSP30、HSP42、HSP78、HSP82、JEM1、MDJ1、MDJ2、MPD1、MPD2、PFD1、ABC1、APJ1、ATP11、ATP12、BTT1、CPR7、HSC82、LHS1、ECM10、SSA1、SSA2、SSA3、SSA4、SSE2、SIL1、SLS1、UBI4、ORM1、ORM2、PER1、PTC2、HAC1またはトランケーテッド無イントロンHAC1のいずれか１つによりコードされるタンパク質、またはこれらの任意の1つの変異型（この変異型はアミノ酸の保存的置換により得られるものである）の配列を含んでなり；そして／又は
（iii）第１シャペロンが、タンパク質ジスルフィドイソメラーゼであり；そして／又は
（iv）第２シャペロンが、Orm2p又はその変異型（この変異型はアミノ酸の保存的置換により得られるものである）である、
請求項９に記載のプラスミド。
【請求項１１】
第３組換え遺伝子をさらに含んでなり、前記第３組換え遺伝子が所望の異種タンパク質をコードする、請求項９または１０に記載のプラスミド。
【請求項１２】
プラスミドが壊変ベクターである、請求項９〜１１のいずれか１項に記載のプラスミド。
【請求項１３】
プラスミドを含んでなる宿主細胞であって、前記プラスミドは必須シャペロンをコードする遺伝子を含んでなり、ここで前記プラスミドの非存在下に、宿主細胞はそのシャペロンを発現することができず、前記プラスミドは所望の異種タンパク質をコードする組換え遺伝子をさらに含んでなる、宿主細胞。
【請求項１４】
所望の異種タンパク質が、当該宿主に天然に存在する１又は複数の他の遺伝子によってコードされるタンパク質とは異なる配列を有するタンパク質である、請求項１３に記載の宿主細胞。
【請求項１５】
所望の異種タンパク質が、非−酵母タンパク質である、請求項１４に記載の宿主細胞。
【請求項１６】
必須シャペロンがサッカロミセス・セレビシエ由来のシャペロンである、請求項１３に記載の宿主細胞。
【請求項１７】
必須シャペロンがサッカロミセス・セレビシエ由来のシャペロンであり、該シャペロンがCCT2、CCT3、CCT4、CCT5、CCT6、CCT7、CCT8、CNS1、ERO1、HSP10、HSP60、PDI1、CDC37、KAR2、MGE1、MRS11、NOB1、SSC1、PSE1、TIM9、PAM18またはTCP1から選択される遺伝子によりコードされるタンパク質、またはこれらの任意の1つの変異型（この変異型はアミノ酸の保存的置換により得られるものである）の配列を含んでなる、請求項１６に記載の宿主細胞。
【請求項１８】
必須シャペロンがタンパク質ジサルファイドイソメラーゼである、請求項１６に記載の宿主細胞。
【請求項１９】
プラスミドの非存在下に、宿主細胞が生存不能である、請求項１３〜１８のいずれか一項に記載の宿主細胞。
【請求項２０】
プラスミドの非存在下に、宿主細胞が生存不能であり、成長培地中で宿主細胞を増殖させ、前記成長培地に栄養を添加するか、あるいは前記培地を改変することによって生存可能とすることができない、請求項１９に記載の宿主細胞。
【請求項２１】
成長培地中で宿主細胞を増殖させ、前記成長培地にいかなる添加を行っても、あるいは前記培地を改変することによっても生存可能とすることができない、請求項２０に記載の宿主細胞。
【請求項２２】
請求項１〜１２のいずれか１項に記載のプラスミドを含んでなる、請求項１３〜２１のいずれか１項に記載の宿主細胞。
【請求項２３】
第１シャペロンタンパク質の配列を含んでなるタンパク質をコードする第１組換え遺伝子と、第２シャペロンタンパク質の配列を含んでなるタンパク質をコードする第２組換え遺伝子とを含んでなるプラスミドを含んでなる宿主細胞であって、ここで第１シャペロンが必須シャペロンであり、プラスミドの非存在下に、宿主細胞が前記シャペロンを産生しない、宿主細胞。
【請求項２４】
所望の異種タンパク質の製造方法において、
（ａ）第１シャペロンタンパク質の配列を含んでなるタンパク質をコードする第１組換え遺伝子、第２シャペロンタンパク質の配列を含んでなるタンパク質をコードする第２組換え遺伝子、及び所望の異種タンパク質をコードする第３組換え遺伝子、を含んでなる宿主細胞を用意し、ここで、前記第１シャペロンと第２シャペロンは異なるものであり；そして
（ｂ）前記宿主細胞を培地中で培養して前記第１遺伝子、第２遺伝子及び第３遺伝子の発現を得る；
ことを含んでなり、前記宿主細胞が請求項２３に記載の宿主細胞である、方法。
【請求項２５】
所望の組換えタンパク質を製造する方法において、
プラスミドを含んでなる宿主細胞を準備し、前記プラスミドは宿主細胞の生存のために必須であるシャペロン（「必須シャペロン」）をコードする第１組換え遺伝子を含んでなり、そしてここで、前記プラスミドの非存在下には、宿主細胞はその必須シャペロンを産生することができず、そしてさらに、宿主細胞は所望のタンパク質をコードする遺伝子を含んでなり；
前記必須シャペロンおよび所望のタンパク質の発現を可能とする条件下に宿主細胞を培地中で培養する；
ことを含んでなる、方法。
【請求項２６】
発現された所望のタンパク質を、培養した宿主細胞または培地から単離し；そして／または
こうして単離された所望のタンパク質を商業的に許容される純度に精製し；そして／または
こうして精製されたタンパク質を凍結乾燥するか、あるいは精製された所望のタンパク質を薬学上許容される担体または希釈剤と配合し；そして／または
こうして配合された所望のタンパク質を単位投与形態で提供する；
ことをさらに含んでなる、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記宿主細胞が、請求項１３〜２３のいずれか１項に記載の宿主細胞である、請求項２５または２６に記載の方法。
【請求項２８】
所望の異種タンパク質の製造方法において、
（ａ）請求項１３〜２１のいずれか１項に記載の宿主細胞を準備し、そして
（ｂ）必須シャペロンおよび所望のタンパク質の発現を可能とする条件下に宿主細胞を培地中で培養する、
工程を含んでなる、方法。
【請求項２９】
前記宿主細胞が、請求項１〜１２のいずれか１項に記載のプラスミドを含んでなる、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
ポリヌクレオチドをプラスミド中に組込んで修飾されたプラスミドを産生することによって宿主細胞中のプラスミドの安定性を増加させるための、宿主細胞の生存可能性に対して必須であるシャペロン（「必須シャペロン」）をコードする配列を含んでなるポリヌクレオチドの使用であって、ここで宿主細胞はプラスミドの非存在下に前記必須シャペロンを産生することができない、使用。
【請求項３１】
前記プラスミドが2μｍファミリープラスミドである、請求項３０に記載の使用。
【請求項３２】
前記プラスミドが所望の異種タンパク質をコードする遺伝子をさらに含んでなる、請求項３０または３１に記載の使用。
【請求項３３】
前記必須シャペロンがサッカロミセス・セレビシエ由来のシャペロンである、請求項３０〜３２のいずれか１項に記載の使用。
【請求項３４】
前記必須シャペロンがサッカロミセス・セレビシエ由来のシャペロンであり、該シャペロンがCCT2、CCT3、CCT4、CCT5、CCT6、CCT7、CCT8、CNS1、ERO1、HSP10、HSP60、PDI1、CDC37、KAR2、MGE1、MRS11、NOB1、SSC1、PSE1、TIM9、PAM18およびTCP1から選択される遺伝子によりコードされるタンパク質またはこれらの任意の1つの変異型（この変異型はアミノ酸の保存的置換により得られるものである）の配列を含んでなる、請求項３０〜３２のいずれか１項に記載の使用。
【請求項３５】
同時に、宿主細胞中のプラスミドの安定性を増加させ、かつ、タンパク質産物を産生する宿主細胞の能力を増加させるための、請求項３０〜３４のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３６】
前記タンパク質産物が、内因性タンパク質または異種タンパク質である、請求項３５に記載の使用。
【請求項３７】
前記タンパク質産物が、宿主細胞の染色体中に組込まれた組換え遺伝子によりコードされる異種タンパク質である、請求項３５に記載の使用。
【請求項３８】
前記タンパク質産物が、宿主細胞中のプラスミド上に存在する組換え遺伝子によりコードされる異種タンパク質である、請求項３５に記載の使用。
【請求項３９】
異種タンパク質をコードする組換え遺伝子を含んでなるプラスミドが、必須シャペロンをコードするポリヌクレオチドを含んでなる修飾されたプラスミドと同一である、請求項３８に記載の使用。
【請求項４０】
前記宿主細胞が、非選択培地において培養される、請求項２４〜３９のいずれか１項に記載の方法又は使用。
【請求項４１】
非選択培地が、富培地または複合培地である、請求項４０に記載の方法又は使用。
【請求項４２】
請求項６〜１２のいずれか１項に記載のプラスミドにおいて、異種タンパク質が、
（ｉ）宿主細胞からの分泌を生じさせるのに有効なリーダー配列を含んでなり；そして／又は
（ii）真核生物タンパク質、そのフラグメントまたは変異型であり；そして／又は
（iii）治療的、診断的、工業的、家庭的または栄養的に有用なタンパク質であり；そして／又は
（iv）アルブミン、モノクローナル抗体、エトポシド、血清タンパク質、アンチスタシン、ダニ抗凝固ペプチド、トランスフェリン、ラクトフェリン、エンドスタチン、アンギオスタチン、コラーゲン、免疫グロブリン、dAb、Fab’F(ab’)2、scAb、scFv、クニッツ型ドメインタンパク質、インターフェロン、インターロイキン、IL10、IL11、IL12、インターフェロンα種、インターフェロンβ種、インターフェロンγ種、レプチン、CNTF、CNTFAX15 (AxokineTM) 、IL1-レセプターアンタゴニスト、エリトロポイエチン (EPO) およびEPO模倣物、トロンボポイエチン (TPO) およびTPO模倣物、プロサプチド、シノビリン-N、5-ヘリックス、T20ペプチド、T1249ペプチド、HIV gp41、HIV gp120、ウロキナーゼ、プロウロキナーゼ、tPA、ヒルジン、血小板由来増殖因子、副甲状腺ホルモン、プロインスリン、インスリン、グルカゴン、グルカゴン様ペプチド、インスリン様増殖因子、カルシトニン、成長ホルモン、トランスフォーミング増殖因子β、腫瘍壊死因子、G-CSF、GM-CSF、M-CSF、FGF、前形態および活性形態の両方の凝固因子、プラスミノーゲン、フィブリノゲン、トロンビン、プレトロンビン、プロトロンビン、フォン・ウィルブランド因子、α1-抗トリプシン、プラスミノーゲンアクチベーター、神経増殖因子、LACI、血小板由来内皮細胞増殖因子 (PD-ECGF) 、グルコースオキシダーゼ、血清コリンエステラーゼ、アプロチニン、アミロイド前駆体タンパク質、インターαトリプシンインヒビター、アンチトロンビンIII、アポリポタンパク質種、タンパク質C、タンパク質S、代謝物、抗生物質、または上記のいずれかの変異型またはフラグメント、から選択される配列を含んでなり；そして／又は
（ｖ）アルブミンまたはその変異型またはフラグメントの配列を含んでなり；そして／または
（vi）トランスフェリンファミリーのメンバーまたはそれらの変異型またはフラグメントの配列を含んでなり；そして／又は
（vii）他のタンパク質の配列に直接的または間接的に融合した融合タンパク質を含んでなる；
前記プラスミド。
【請求項４３】
宿主細胞が酵母である、請求項４２に記載のプラスミド。
【請求項４４】
真核生物タンパク質が脊椎動物タンパク質である、請求項４２または４３に記載のプラスミド。
【請求項４５】
血清タンパク質が血液凝固因子である、請求項４２〜４４のいずれか一項に記載のプラスミド。
【請求項４６】
血液凝固因子が、因子VII、因子VIII、因子IX、因子Xまたは因子XIIIである、請求項４５に記載のプラスミド。
【請求項４７】
トランスフェリンファミリーのメンバーが、トランスフェリンまたはラクトフェリンである、請求項４２〜４６のいずれか一項に記載のプラスミド。
【請求項４８】
融合タンパク質が、アルブミンまたはトランスフェリンファミリーのメンバーまたはそれらの変異型またはフラグメントの融合タンパク質である、請求項４２〜４７のいずれか一項に記載のプラスミド。
【請求項４９】
前記宿主細胞が細菌または酵母の宿主細胞である、請求項１〜２３および４２〜４８のいずれか一項に記載の宿主細胞またはプラスミド。
【請求項５０】
酵母宿主細胞が、下記のメンバーである請求項４２〜４８のいずれか一項に記載の宿主細胞またはプラスミド: サッカロマイセス (Saccharomyces) 、クライベロマイセス (Kluyveromayces) 、アルクスラ (Arxula) 、ヤロウィア (Yarrowia) 、カンジダ (Candida) 、シゾサッカロマイセス (Schizosaccharomyces) 、デバリオマイセス (Debaryomyces) 、キサントフィロマイセス (Xanthophyllomyces) 、ゲオトリクム (Geotrichum) 、アシュブヤ (Ashbya) 、ホルテア (Hortaea) 、シュワンニオマイセス (Schwanniomyces) 、トリコスポロン (Trichosporon) 、キサントフィロマイセス (Xanthophyllomyces) 、またはピキア (Pichia) 属。
【請求項５１】
宿主細胞が、サッカロマイセス・セレビシエ (Saccharomyces cerevisiae) 、 クライベロマイセス・ラクチス (Kluyveromyces lactis) 、ピキア・パストリス (Pichia pastoris) 、ピキア・メンブラネファシエンス (Pichia membranaefaciens) 、ジゴサッカロマイセス・ロウキシ (Zygosaccharomyces rouxii) 、ジゴサッカロマイセス・バイリイ (Zygosaccharomyces bailii) 、ジゴサッカロマイセス・フェルメンタチ (Zygosaccharomyces fermentati) 、クライベロマイセス・ドロスフィラルム (Kluyveromayces drosphilarum) 、ピキア・メタノリカ (Pichia methanolica) 、ハンゼヌラ・ポリモルファ (Hansenula polymorpha) (また、ピキア・アウグスタ (Pichia augusta) として知られている) 、アルクスラ・アデニニボランス (Arxula adeninivorans) 、ヤロウィア・リポリチカ (Yarrowia lipolytica) 、カンジダ・ボイディニイ (Candida boidinii) 、カンジダ・ウチリス (Candida utilis) またはシゾサッカロマイセス・ポンベ (Schizosaccharomyces pombe)である、請求項５０に記載の宿主細胞またはプラスミド。
【請求項５２】
前記プラスミドが2μmファミリープラスミドであり、そして下記の条件：
（ａ）プラスミドはpSR1、pSB3またはpSB4であり、そして宿主細胞はジゴサッカロマイセス・ロウキシ (Zygosaccharomyces rouxii) であり、
（ｂ）プラスミドはpSB1またはpSB2であり、そして宿主細胞はジゴサッカロマイセス・バイリイ (Zygosaccharomyces bailii) であり、
（ｃ）プラスミドがpSM1であり、そして宿主細胞はジゴサッカロマイセス・フェルメンタチ (Zygosaccharomyces fermentati) であり、
（ｄ）プラスミドがpKD1であり、そして宿主細胞はクライベロマイセス・ドロスフィラルム (Kluyveromayces drosphilarum) であり、
（ｅ）プラスミドがpPM1であり、そして宿主細胞はピキア・メンブラネファシエンス (Pichia membranaefaciens) であるか、あるいは
（ｆ）プラスミドが2μmプラスミドであり、そして宿主細胞はサッカロマイセス・セレビシエ (Saccharomyces cerevisiae) またはストレプトマイセス・カールスバーゲンシス (Streptomyces carlsbergensis) である、
を満足する、請求項５０または５１に記載の宿主細胞またはプラスミド。
【請求項５３】
前記プラスミドが2μmプラスミドであり、そして宿主細胞がサッカロマイセス・セレビシエ (Saccharomyces cerevisiae) またはストレプトマイセス・カールスバーゲンシス (Streptomyces carlsbergensis) である、請求項５２に記載の宿主細胞またはプラスミド。
【請求項５４】
請求項２４〜４１のいずれか１項に記載の方法または使用において、異種タンパク質が、
（ｉ）宿主細胞からの分泌を生じさせるのに有効なリーダー配列を含んでなり；そして／又は
（ii）真核生物タンパク質、そのフラグメントまたは変異型であり；そして／又は
（iii）治療的、診断的、工業的、家庭的または栄養的に有用なタンパク質であり；そして／又は
（iv）アルブミン、モノクローナル抗体、エトポシド、血清タンパク質、アンチスタシン、ダニ抗凝固ペプチド、トランスフェリン、ラクトフェリン、エンドスタチン、アンギオスタチン、コラーゲン、免疫グロブリン、dAb、Fab’F(ab’)2、scAb、scFv、クニッツ型ドメインタンパク質、インターフェロン、インターロイキン、IL10、IL11、IL12、インターフェロンα種、インターフェロンβ種、インターフェロンγ種、レプチン、CNTF、CNTFAX15 (AxokineTM) 、IL1-レセプターアンタゴニスト、エリトロポイエチン (EPO) およびEPO模倣物、トロンボポイエチン (TPO) およびTPO模倣物、プロサプチド、シノビリン-N、5-ヘリックス、T20ペプチド、T1249ペプチド、HIV gp41、HIV gp120、ウロキナーゼ、プロウロキナーゼ、tPA、ヒルジン、血小板由来増殖因子、副甲状腺ホルモン、プロインスリン、インスリン、グルカゴン、グルカゴン様ペプチド、インスリン様増殖因子、カルシトニン、成長ホルモン、トランスフォーミング増殖因子β、腫瘍壊死因子、G-CSF、GM-CSF、M-CSF、FGF、前形態および活性形態の両方の凝固因子、プラスミノーゲン、フィブリノゲン、トロンビン、プレトロンビン、プロトロンビン、フォン・ウィルブランド因子、α1-抗トリプシン、プラスミノーゲンアクチベーター、神経増殖因子、LACI、血小板由来内皮細胞増殖因子 (PD-ECGF) 、グルコースオキシダーゼ、血清コリンエステラーゼ、アプロチニン、アミロイド前駆体タンパク質、インターαトリプシンインヒビター、アンチトロンビンIII、アポリポタンパク質種、タンパク質C、タンパク質S、代謝物、抗生物質、または上記のいずれかの変異型またはフラグメント、から選択される配列を含んでなり；そして／又は
（ｖ）アルブミンまたはその変異型またはフラグメントの配列を含んでなり；そして／または
（vi）トランスフェリンファミリーのメンバーまたはそれらの変異型またはフラグメントの配列を含んでなり；そして／又は
（vii）他のタンパク質の配列に直接的または間接的に融合した融合タンパク質を含んでなる；
前記方法または使用。
【請求項５５】
宿主細胞が酵母である、請求項５４に記載の方法または使用。
【請求項５６】
真核生物タンパク質が脊椎動物タンパク質である、請求項５４または５５に記載の方法または使用。
【請求項５７】
血清タンパク質が血液凝固因子である、請求項５４〜５６のいずれか一項に記載の方法または使用。
【請求項５８】
血液凝固因子が、因子VII、因子VIII、因子IX、因子Xまたは因子XIIIである、請求項５７に記載の方法または使用。
【請求項５９】
トランスフェリンファミリーのメンバーが、トランスフェリンまたはラクトフェリンである、請求項５４〜５８のいずれか一項に記載の方法または使用。
【請求項６０】
融合タンパク質が、アルブミンまたはトランスフェリンファミリーのメンバーまたはそれらの変異型またはフラグメントの融合タンパク質である、請求項５４〜５９のいずれか一項に記載の方法または使用。
【請求項６１】
前記宿主細胞が細菌または酵母の宿主細胞である、請求項２４〜４１および５４〜６０のいずれか一項に記載の方法または使用。
【請求項６２】
酵母宿主細胞が、下記のメンバーである請求項６１に記載の方法または使用: サッカロマイセス (Saccharomyces) 、クライベロマイセス (Kluyveromayces) 、アルクスラ (Arxula) 、ヤロウィア (Yarrowia) 、カンジダ (Candida) 、シゾサッカロマイセス (Schizosaccharomyces) 、デバリオマイセス (Debaryomyces) 、キサントフィロマイセス (Xanthophyllomyces) 、ゲオトリクム (Geotrichum) 、アシュブヤ (Ashbya) 、ホルテア (Hortaea) 、シュワンニオマイセス (Schwanniomyces) 、トリコスポロン (Trichosporon) 、キサントフィロマイセス (Xanthophyllomyces) 、またはピキア (Pichia) 属。
【請求項６３】
宿主細胞が、サッカロマイセス・セレビシエ (Saccharomyces cerevisiae) 、 クライベロマイセス・ラクチス (Kluyveromyces lactis) 、ピキア・パストリス (Pichia pastoris) 、ピキア・メンブラネファシエンス (Pichia membranaefaciens) 、ジゴサッカロマイセス・ロウキシ (Zygosaccharomyces rouxii) 、ジゴサッカロマイセス・バイリイ (Zygosaccharomyces bailii) 、ジゴサッカロマイセス・フェルメンタチ (Zygosaccharomyces fermentati) 、クライベロマイセス・ドロスフィラルム (Kluyveromayces drosphilarum) 、ピキア・メタノリカ (Pichia methanolica) 、ハンゼヌラ・ポリモルファ (Hansenula polymorpha) (また、ピキア・アウグスタ (Pichia augusta) として知られている) 、アルクスラ・アデニニボランス (Arxula adeninivorans) 、ヤロウィア・リポリチカ (Yarrowia lipolytica) 、カンジダ・ボイディニイ (Candida boidinii) 、カンジダ・ウチリス (Candida utilis) またはシゾサッカロマイセス・ポンベ (Schizosaccharomyces pombe)である、請求項６２に記載の方法または使用。
【請求項６４】
前記プラスミドが2μmファミリープラスミドであり、そして下記の条件：
（ａ）プラスミドはpSR1、pSB3またはpSB4であり、そして宿主細胞はジゴサッカロマイセス・ロウキシ (Zygosaccharomyces rouxii) であり、
（ｂ）プラスミドはpSB1またはpSB2であり、そして宿主細胞はジゴサッカロマイセス・バイリイ (Zygosaccharomyces bailii) であり、
（ｃ）プラスミドがpSM1であり、そして宿主細胞はジゴサッカロマイセス・フェルメンタチ (Zygosaccharomyces fermentati) であり、
（ｄ）プラスミドがpKD1であり、そして宿主細胞はクライベロマイセス・ドロスフィラルム (Kluyveromayces drosphilarum) であり、
（ｅ）プラスミドがpPM1であり、そして宿主細胞はピキア・メンブラネファシエンス (Pichia membranaefaciens) であるか、あるいは
（ｆ）プラスミドが2μmプラスミドであり、そして宿主細胞はサッカロマイセス・セレビシエ (Saccharomyces cerevisiae) またはストレプトマイセス・カールスバーゲンシス (Streptomyces carlsbergensis) である、
を満足する、請求項６２または６３に記載の方法または使用。
【請求項６５】
前記プラスミドが2μmプラスミドであり、そして宿主細胞がサッカロマイセス・セレビシエ (Saccharomyces cerevisiae) またはストレプトマイセス・カールスバーゲンシス (Streptomyces carlsbergensis) である、請求項６４に記載の方法または使用。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０２７０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０２７０】
「栄養要求的 (生合成的) 必要条件」とは、栄養および成長培地への他の添加または改変により補足することができる欠陥を包含する。しかしながら、機能的Pgk1pまたはFba1pを発現するすることができない細胞は成長培地へのある種の添加により補足することができ、そしてこのような遺伝子産物は本発明による好ましい「必須タンパク質」ではない。したがって、本発明の関係において「必須マーカー遺伝子」は、宿主細胞において欠失または不活性化されるとき、成長培地への添加または改変により補足することができない欠陥を生じ、ここで添加または改変が、例えば、ポリヌクレオチドであることが期待され、このポリヌクレオチドは「必須」マーカー遺伝子の産物、または「必須」マーカー遺伝子それ自体の産物を発現する宿主細胞の能力を回復することができる。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０２９７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０２９７】
「必須タンパク質」 は、宿主細胞中のそれをコードする1または2以上の遺伝子が欠失または不活性化されるとき、栄養要求性 (生合成) 必要条件を発生する宿主細胞を生じないタンパク質であることが好ましい。「栄養要求性 (生合成) 必要条件」 とは、成長培地に対する添加または改変、特に成長培地の栄養成分添加、またはそれに対する改変により、補足できる欠陥を包含する。こうして、「必須タンパク質」 は、それをコードする遺伝子が宿主細胞において不活性化される場合、栄養要求性突然変異体、すなわち、突然変異体生物を産生する栄養要求性マーカータンパク質であり、ここで栄養要求性生物は、増殖しかつ生存するために、正常 (非突然変異) の菌株が要求しない特定の追加の栄養を要求する - 「必須タンパク質」 は栄養要求性マーカータンパク質ではないことが好ましい。
【誤訳訂正４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０２９８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０２９８】
したがって、「必須タンパク質」 をコードする 「必須マーカー遺伝子」 は、本発明の関係において、宿主細胞中で欠失または不活性化されるとき、成長培地に対する添加または改変、典型的には栄養の添加または改変により補足することができない欠陥を生ずる遺伝子であり、ただしそれらの添加または改変は、例えば、ポリヌクレオチドであり、ここでこのポリヌクレオチドは 「必須」マーカー遺伝子の産物または「必須」マーカー遺伝子それ自体の産物を発現する宿主細胞の能力を回復することができる。換言すると、「必須タンパク質」は、事実、宿主細胞による栄養の代謝転化に関係するタンパク質ではないことが好ましいか、あるいはそうでないことがある。この系の利点は、「必須マーカー遺伝子」を宿主細胞中のプラスミド上で使用できるということであり、ここで宿主細胞は、プラスミドの非存在下に、その遺伝子産物を産生することができず、細胞を特定の選択的 (例えば、選択的栄養) 条件下に培養するという欠点なしに、プラスミドの安定性を増加させることができない。