【手続補正書】
【提出日】平成24年10月18日(2012.10.18)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
魚用飼料に含まれ、その処方が以下：
ａ．配列番号２の７２５ｂｐのフラグメントを有するプラスミド構築物ｐｃＤＮＡ−ＶＰ２、
ｂ．１，２−ｄｉ−（９Ｚ−ｏｃｔａｄｅｃｅｎｏｙｌ）−３−ｔｒｉｍｅｔｈｙｌａｍｍｏｎｉｕｍ−ｐｒｏｐａｎｅリポソーム、及び
ｃ．飼料ベース
を含むことを特徴とする、魚用ＤＮＡワクチン。
【請求項２】
前記飼料ベースが、
ａ．４５０〜６００ｇ／Ｋｇの粗タンパク質、
ｂ．１５０〜２５０ｇ／Ｋｇの脂質、
ｃ．８０〜１２０ｇ／Ｋｇの灰分、
ｄ．６〜１０ｇ／Ｋｇの粗線維、及び
ｅ．７０〜８０ｇ／Ｋｇの窒素以外の抽出物
を含む、請求項１に記載のＤＮＡワクチン。
【請求項３】
前記飼料ベースが、
ａ．魚粉、
ｂ．魚油及び／又は植物油、
ｃ．小麦及びトウモロコシの副産物、
ｄ．ペプトン濃縮物、
ｅ．小麦及びトウモロコシのグルテン、
ｆ．オキアミ粉、
ｇ．ビタミン及びミネラル塩分のプレミックス、
ｈ．大豆ミネラル塩分、
ｉ．小麦、
ｊ．ベタイン、及び
ｋ．ヌクレオチド
を含み、経口投与用である、請求項１に記載のＤＮＡワクチン。
【請求項４】
以下の段階：
ａ．配列番号２のＤＮＡを含むＤＮＡワクチンである、プラスミドｐｃＤＮＡ−ＶＰ２の構築、
ｂ．適切な宿主細胞のｐｃＤＮＡ−ＶＰ２による形質転換、
ｃ．前記宿主細胞からの前記ｐｃＤＮＡ−ＶＰ２の増幅及び精製、
ｄ．ｐｃＤＮＡ−ＶＰ２及び１，２−ｄｉ−（９Ｚ−ｏｃｔａｄｅｃｅｎｏｙｌ）−３−ｔｒｉｍｅｔｈｙｌａｍｍｏｎｉｕｍ−ｐｒｏｐａｎｅリポソームを含むｌｉｐｏｐｌｅｘの形成、
ｅ．経口ワクチン又は調合ワクチンを構成する、飼料ベースへのｌｉｐｏｐｌｅｘの散布、混合及び統合、並びに
ｆ．前記経口ワクチン又は前記調合ワクチンの包装
の段階を含むことを特徴とする、魚用飼料に含まれた、魚用ＤＮＡワクチンを得る手順。
【請求項５】
前記段階ｂ及びｃの前記適切な宿主細胞が、ベルギー微生物保存機関（ＢＣＣＭ）にＬＭＢＰ  ５３３３の寄託番号で寄託された大腸菌ＪＭ−１０９株である、請求項４に記載の手順。
【請求項６】
前記段階ｃの前記宿主細胞からのｐｃＤＮＡ−ＶＰ２の増幅及び精製の段階が、遠心、濾過及び限外濾過の連続する段階を含むアルカリ溶菌法により実施される、請求項４に記載の手順。
【請求項７】
前記段階ｅの、前記ｌｉｐｏｐｌｅｘを飼料ベースに散布、混合及び統合し、経口ワクチン又は調合ワクチンを構成する段階が、パンコーティングシステムにより行われる、請求項４に記載の手順。
【請求項８】
前記段階ｅの、前記ｌｉｐｏｐｌｅｘを飼料ベースに散布、混合及び統合し、経口ワクチン又は調合ワクチンを構成する段階が、油分が既に存在する飼料を乾燥経路に投入するバッチ工程により真空状態下で行われる、請求項４に記載の手順。
【請求項９】
前記段階ｅの、前記ｌｉｐｏｐｌｅｘを飼料ベースに散布、混合及び統合し、経口ワクチン又は調合ワクチンを構成する段階が、液体経路を有するバッチ工程により真空状態下で行われる、請求項４に記載の手順。
【請求項１０】
液体経路を通したワクチンの添加が、乾燥経路と並行した稼働により行われ、サイズに応じてあらかじめ投入されたｌｉｐｏｐｌｅｘがデポジット内で保持される、請求項９に記載の手順。
【請求項１１】
ワクチンの添加が、液体経路を通して並行した２つの段階で行われ、第１段階では、真空状態下の微粒散布によりワクチンが添加され、第２段階では、通常の大気圧下において、あらかじめ秤量された魚油が散布される、請求項９に記載の手順。
【請求項１２】
乾燥経路を通したワクチンの添加が、あらかじめ定められた量の飼料ベース中で行われ、回転型混合機に組み込まれる、請求項９に記載の手順。
【請求項１３】
液体経路を通したワクチンの添加が、混合と並行して行われ、前記液体経路は、飼料ベースのサイズ及び量に応じてあらかじめプログラムされた分注機と接続された散布システムからなることを特徴とする、請求項９に記載の手順。
【請求項１４】
ａ．図１のプライマーの使用に由来し、配列番号２の配列を有する有効成分、
ｂ．媒体である１，２−ｄｉ−（９Ｚ−ｏｃｔａｄｅｃｅｎｏｙｌ）−３−ｔｒｉｍｅｔｈｙｌａｍｍｏｎｉｕｍ−ｐｒｏｐａｎｅ陽イオンリポソーム、
ｃ．栄養があり無害で薬学的に許容される、魚類に摂取可能な栄養のある賦形剤
を含む、ＤＮＡ魚ワクチンを含有する薬剤組成物。
【請求項１５】
前記ＤＮＡワクチンは経口投与用に調製されたものである、請求項１４に記載の薬剤組成物。
【請求項１６】
感染性膵臓壊死ウイルスに対して魚を免疫感作し、同時に魚に栄養分を与えるのに有用な、請求項１４に記載の薬剤組成物。
【請求項１７】
前記ＤＮＡワクチンは、経口投与のためのペレットとして調製されたものである、請求項１４に記載の薬剤組成物。
【請求項１８】
魚類の免疫に有用である、請求項１４に記載の薬剤組成物。
【請求項１９】
以下の段階：
ａ．配列番号２のＤＮＡを含むＤＮＡワクチンである、プラスミドｐｃＤＮＡ−ＶＰ２の構築、
ｂ．適切な宿主細胞のｐｃＤＮＡ−ＶＰ２による形質転換、
ｃ．前記宿主細胞からの前記ｐｃＤＮＡ−ＶＰ２の増幅及び精製、
ｄ．ｐｃＤＮＡ−ＶＰ２及び１，２−ｄｉ−（９Ｚ−ｏｃｔａｄｅｃｅｎｏｙｌ）−３−ｔｒｉｍｅｔｈｙｌａｍｍｏｎｉｕｍ−ｐｒｏｐａｎｅリポソームを含むｌｉｐｏｐｌｅｘの形成、
ｅ．経口ワクチン又は調合ワクチンを構成する、飼料ベースへのｌｉｐｏｐｌｅｘの散布、混合、及び統合、並びに
ｆ．前記経口ワクチン又は前記調合ワクチンの包装
を含む、ＤＮＡ魚ワクチンを含有する薬剤組成物を得る工程。
【請求項２０】
以下の段階：
ａ．配列番号２のＤＮＡを含むＤＮＡワクチンである、プラスミドｐｃＤＮＡ−ＶＰ２の構築、
ｂ．適切な宿主細胞のｐｃＤＮＡ−ＶＰ２による形質転換、
ｃ．前記宿主細胞からの前記ｐｃＤＮＡ−ＶＰ２の増幅及び精製、
ｄ．ｐｃＤＮＡ−ＶＰ２及び１，２−ｄｉ−（９Ｚ−ｏｃｔａｄｅｃｅｎｏｙｌ）−３−ｔｒｉｍｅｔｈｙｌａｍｍｏｎｉｕｍ−ｐｒｏｐａｎｅリポソームを含むｌｉｐｏｐｌｅｘの形成、
ｅ．前記ｌｉｐｏｐｌｅｘの動物用飼料内での散布、混合、及び統合、及び
ｆ．ＤＮＡワクチンを含有する前記動物用飼料の包装
を含む、ＤＮＡワクチンを含有する動物用栄養組成物を得る手順。
【請求項２１】
請求項１９に記載の手順により製造され、水生生物を免疫するのに有用な薬剤組成物。
【請求項２２】
請求項２０に記載の手順により製造され、水生生物を免疫するのに有用な栄養組成物。
【請求項２３】
前記水生生物は魚類である、請求項２１に記載の薬剤組成物又は請求項２２に記載の栄養組成物。
【請求項２４】
ａ．４５０〜６００ｇ／Ｋｇの粗タンパク質、
ｂ．１５０〜２５０ｇ／Ｋｇの脂質、
ｃ．８０〜１２０ｇ／Ｋｇの灰分、
ｄ．６〜１０ｇ／Ｋｇの粗線維、及び
ｅ．７０〜８０ｇ／Ｋｇの窒素以外の抽出物
を含有する栄養組成物。
【請求項２５】
ベルギー微生物保存機関（ＢＣＣＭ）にＬＭＢＰ  ５３３３の寄託番号で寄託され、プラスミドｐｃＤＮＡ−ＶＰ２の増幅に有用である、大腸菌ＪＭ−１０９の形質転換細胞。
【請求項２６】
ＣＨＳＥ−２１４細胞株に属し、魚類に免疫を賦与するのに有用である配列番号２のＤＮＡを含有することを特徴とする宿主細胞。
【請求項２７】
配列番号２に記載のポリヌクレオチドにコードされるポリペプチド。
【請求項２８】
ベルギー微生物保存機関（ＢＣＣＭ）にＬＭＢＰ  ５３３３の寄託番号で寄託された大腸菌ＪＭ−１０９の、魚類感染性膵臓壊死ウイルス（ＩＰＮ）の治療のための魚ワクチンの製造における使用。