【手続補正書】
【提出日】平成26年10月29日(2014.10.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象由来の体液中のヘプシジンレベルを低下させる方法であって、
ａ）ヘプシジンと結合可能な核酸分子を準備することと、
ｂ）ヘプシジンと前記核酸分子との結合が可能な条件下で前記核酸分子と体液とを接触させて、ヘプシジンと前記核酸分子との複合体を形成させることと、
ｃ）前記体液から前記複合体を除去すること、または前記体液から前記ヘプシジンを除去することと
を含む方法。
【請求項２】
前記核酸分子が、５’→３’方向に第一の末端ヌクレオチドストレッチと、中央部のヌクレオチドストレッチと、第二の末端ヌクレオチドストレッチとを含み、または第二の末端ヌクレオチドストレッチと、中央部のヌクレオチドストレッチと、第一の末端ヌクレオチドストレッチとを含み、前記中央部のヌクレオチドストレッチが３２〜４０個のヌクレオチド、好ましくは３２〜３５個のヌクレオチドを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記中央部のヌクレオチドストレッチが、ヌクレオチド配列５’ＲＫＡＵＧＧＧＡＫＵＡＡＧＵＡＡＡＵＧＡＧＧＲＧＵＷＧＧＡＧＧＡＡＲ３’（配列番号１８２）または５’ＲＫＡＵＧＧＧＡＫＡＡＧＵＡＡＡＵＧＡＧＧＲＧＵＷＧＧＡＧＧＡＡＲ３’（配列番号１８３）を含む、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記第一の末端ヌクレオチドストレッチが５〜８個のヌクレオチドを含み、前記第二の末端ヌクレオチドストレッチが５〜８個のヌクレオチドを含む、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記第一の末端ヌクレオチドストレッチがヌクレオチド配列５’Ｘ１Ｘ２Ｘ３ＳＢＳＢＣ３’を含み、前記第二の末端ヌクレオチドストレッチがヌクレオチド配列５’ＧＶＢＶＹＸ４Ｘ５Ｘ６３’を含む、請求項３または４に記載の方法であって、
Ｘ１がＡであるかまたは存在せず、Ｘ２がＧであるかまたは存在せず、Ｘ３がＢであるかまたは存在せず、Ｘ４がＳであるかまたは存在せず、Ｘ５がＣであるかまたは存在せず、Ｘ６がＵであるかまたは存在しない方法。
【請求項６】
前記核酸が、配列番号１１５〜１１９、配列番号１２１、配列番号１４２、配列番号１４４、配列番号１４６、配列番号１４８、配列番号１５１、配列番号１５２、配列番号１７５または配列番号１７６のいずれか１つによる核酸配列を含む、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
前記中央部のヌクレオチドストレッチが、ヌクレオチド配列５’ＧＲＣＲＧＣＣＧＧＶＧＧＡＣＡＣＣＡＵＡＵＡＣＡＧＡＣＵＡＣＫＡＵＡ３’（配列番号１８５）または５’ＧＲＣＲＧＣＣＧＧＶＡＧＧＡＣＡＣＣＡＵＡＵＡＣＡＧＡＣＵＡＣＫＡＵＡ３’（配列番号１８６）を含む、請求項２に記載の方法。
【請求項８】
前記第一の末端ヌクレオチドストレッチが４〜７個のヌクレオチドを含み、前記第二の末端ヌクレオチドストレッチが４〜７個のヌクレオチドを含む、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記第一の末端ヌクレオチドストレッチがヌクレオチド配列５’Ｘ１Ｘ２Ｘ３ＳＢＳＮ３’を含み、前記第二の末端ヌクレオチドストレッチがヌクレオチド配列５’ＮＳＶＳＸ４Ｘ５Ｘ６３’を含む、請求項７または８に記載の方法であって、
Ｘ１がＡであるかまたは存在せず、Ｘ２がＧであるかまたは存在せず、Ｘ３がＲであるかまたは存在せず、Ｘ４がＹであるかまたは存在せず、Ｘ５がＣであるかまたは存在せず、Ｘ６がＵであるかまたは存在しない方法。
【請求項１０】
前記核酸分子が、配列番号１２２〜１２６、配列番号１５４、配列番号１５９、配列番号１６３または配列番号１７４のいずれか１つによる核酸配列を含む、請求項１〜２および７〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
前記中央部のヌクレオチドストレッチが、５’→３’方向にボックスＡと連結ヌクレオチドストレッチとボックスＢとを含むか、または５’→３’方向にボックスＢと連結ヌクレオチドストレッチとボックスＡとを含む、請求項２に記載の方法であって、
前記ボックスＡがヌクレオチド配列５’ＷＡＡＡＧＵＷＧＡＲ３’（配列番号１８８）を含み、前記連結ヌクレオチドストレッチが１０〜１８個のヌクレオチドを含み、前記ボックスＢがヌクレオチド配列５’ＲＧＭＧＵＧＷＫＡＧＵＫＣ３’（配列番号１８９）を含む方法。
【請求項１２】
前記連結ヌクレオチドストレッチが、５’→３’方向に第一の連結ヌクレオチドサブストレッチと、第二の連結ヌクレオチドサブストレッチと、第三の連結ヌクレオチドサブストレッチとを含み、前記第一の連結ヌクレオチドサブストレッチと前記第三の連結ヌクレオチドサブストレッチが、それぞれ互いに独立して３〜６個のヌクレオチドを含み、前記第二の連結ヌクレオチドサブストレッチが３〜５個のヌクレオチドを含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
請求項１２に記載の方法であって、
ａ）前記第一の連結ヌクレオチドサブストレッチが、５’ＧＧＡＣ３’、５’ＧＧＡＵ３’および５’ＧＧＡ３’の群から選択されるヌクレオチド配列を含み、かつ前記第三の連結ヌクレオチドサブストレッチがヌクレオチド配列５’ＧＵＣＣ３’を含むか、
ｂ）前記第一の連結ヌクレオチドサブストレッチがヌクレオチド配列５’ＧＣＡＧ３’を含み、かつ前記第三の連結ヌクレオチドサブストレッチがヌクレオチド配列５’ＣＵＧＣ３’を含むか、
ｃ）前記第一の連結ヌクレオチドサブストレッチがヌクレオチド配列５’ＧＧＧＣ３’を含み、かつ前記第三の連結ヌクレオチドサブストレッチがヌクレオチド配列５’ＧＣＣＣ３’を含むか、
ｄ）前記第一の連結ヌクレオチドサブストレッチがヌクレオチド配列５’ＧＡＣ３’を含み、かつ前記第三の連結ヌクレオチドサブストレッチがヌクレオチド配列５’ＧＵＣ３’を含むか、
ｅ）前記第一の連結ヌクレオチドサブストレッチがヌクレオチド配列５’ＡＣＵＵＧＵ３’を含み、かつ前記第三の連結ヌクレオチドサブストレッチが、５’ＧＣＡＡＧＵ３’および５’ＧＣＡＡＧＣ３’の群から選択されるヌクレオチド配列を含むか、または
ｆ）前記第一の連結ヌクレオチドサブストレッチがヌクレオチド配列５’ＵＣＣＡＧ３’を含み、かつ前記第三の連結ヌクレオチドサブストレッチがヌクレオチド配列５’ＣＵＧＧＡ３’を含み、
好ましくは前記第一の連結ヌクレオチドサブストレッチがヌクレオチド配列５’ＧＡＣ３’を含み、かつ前記第三の連結ヌクレオチドサブストレッチがヌクレオチド配列５’ＧＵＣ３’を含む方法。
【請求項１４】
前記第二の連結ヌクレオチドサブストレッチが、５’ＶＢＡＡＷ３’、５’ＡＡＵＷ３’および５’ＮＢＷ３’の群から選択されるヌクレオチド配列を含む、請求項１２または１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記第一の末端ヌクレオチドストレッチが４〜７個のヌクレオチドを含み、前記第二の末端ヌクレオチドストレッチが４〜７個のヌクレオチドを含む、請求項１１〜１４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
前記第一の末端ヌクレオチドストレッチがヌクレオチド配列５’Ｘ１Ｘ２Ｘ３ＢＫＢＫ３’を含み、前記第二の末端ヌクレオチドストレッチがヌクレオチド配列５’ＭＶＶＶＸ４Ｘ５Ｘ６３’を含む、請求項１１〜１５のいずれか１項に記載の方法であって、
Ｘ１がＧであるかまたは存在せず、Ｘ２がＳであるかまたは存在せず、Ｘ３がＶであるかまたは存在せず、Ｘ４がＢであるかまたは存在せず、Ｘ５がＳであるかまたは存在せず、Ｘ６がＣであるかまたは存在しない方法。
【請求項１７】
前記核酸分子が、配列番号２９、配列番号３３、配列番号３４、配列番号３９〜４１、配列番号４３、配列番号４６、配列番号１３７〜１４１または配列番号１７３のいずれか１つによる核酸配列を含む、請求項１〜２および１１〜１６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１８】
前記核酸分子が、配列番号１２７〜１３１のいずれか１つによる核酸配列を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１９】
前記核酸分子が修飾基を含み、好ましくは、前記修飾基を含む前記核酸分子の生物体からの排泄速度が、ヘプシジンと結合可能で前記修飾基を含まない核酸分子に比べて減少している、請求項１〜１８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】
前記核酸分子が修飾基を含み、好ましくは、前記修飾基を含む前記核酸分子の生物体内での滞留時間が、ヘプシジンと結合可能で前記修飾基を含まない核酸分子に比べて増加している、請求項１〜１８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２１】
前記修飾基が、生分解性および非生分解性の修飾を含む群から選択され、好ましくは前記修飾基が、直鎖ポリ（エチレン）グリコール、分岐ポリ（エチレン）グリコール、ヒドロキシエチルデンプン、ペプチド、タンパク質、多糖、ステロール、ポリオキシプロピレン、ポリオキシアミダート、ポリ（２−ヒドロキシエチル）−Ｌ−グルタミンおよびポリエチレングリコールを含む群から選択される、請求項１９または２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記核酸分子がＬ−核酸である、請求項１〜２１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２３】
前記核酸分子が担体に固定化されている、請求項１〜２２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２４】
前記体液が前記体液と透析液とを隔てる半透膜と接触し、ヘプシジンおよび／またはヘプシジンと前記核酸分子との複合体が前記半透膜を介して前記体液から前記透析液に拡散することにより、前記体液中のヘプシジンレベルが低下する、請求項１〜２２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２５】
担体に固定化された核酸分子を調製する方法であって、
前記核酸分子がヘプシジンと結合可能であり、
ヘプシジンと結合可能な核酸分子と、活性化された担体とを反応させて、前記核酸分子の３’末端、５’末端またはその両方と前記担体との間で結合を形成させることを含む方法。
【請求項２６】
担体に固定化された核酸分子であって、ヘプシジンと結合可能な核酸分子。
【請求項２７】
請求項１〜２４のいずれか１項に記載の方法で使用する、医療装置。
【請求項２８】
対象、好ましくは哺乳動物、より好ましくはヒトの体液中のヘプシジンレベルを低下させる方法で使用する核酸分子であって、前記核酸が、ヘプシジンと結合可能な核酸分子である核酸分子。
【請求項２９】
対象の体液からヘプシジンを除去する方法で使用する核酸分子であって、請求項１〜２４のいずれか１項に定義される核酸分子である核酸分子。
【請求項３０】
貧血患者を治療する方法で使用する核酸分子であって、請求項１〜２４のいずれか１項に定義される核酸分子である核酸分子。