【手続補正書】
【提出日】平成25年11月12日(2013.11.12)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８８】
【表１】
2013536841.tif 000001
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１１５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１１５】
【表２】
2013536841.tif 000002
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１１６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１１６】
【表３】
2013536841.tif 000003
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１１７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１１７】
【表４】
2013536841.tif 000004
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１１８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１１８】
【表５】
2013536841.tif 000005
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１１９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１１９】
実施例２−ウマ血液から作製されたインターロイキン−ｌ受容体アンタゴニストに富む溶液
インターロイキン−Ｉ受容体アンタゴニストに富む溶液をウマ血液から調製した。血小板に富む血漿（ＰＲＰ）は、ＧＰＳ  ＩＩＩ血小板濃度システム（８００１００３Ａ、Biomet Biologics, Warsaw, IN)を使用説明書に従って用いて作製した。この溶液は、１グラムのポリアクリルアミドビーズ(Biomet Biologics, Warsaw, IN)を含有する改変型Ｐｌａｓｍａｘデバイスに６ｍＬのＰＲＰを加えることによって生成した。ＩＬ−Ｉｒａ溶液をＰｌａｓｍａｘデバイスから取り出し、ＥＬＩＳＡアッセイ（Ｅｑｕｉｎｅ  ＤｕｏＳｅｔ  ＥＬＩＳＡキット、R&D Systems, Minneapolis, MN）のために−５０℃で冷凍した。基準の全血、ＰＲＰ、およびＩＬ−Ｉｒａ溶液でウマＩＬ−ｌｒａを測定した。用いたデバイスはインターロイキン−Ｉ受容体アンタゴニストに富む溶液を生成することができた（図１２）。
【手続補正７】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
インターロイキン−１受容体アンタゴニストに富む溶液を生成する方法であって、
白血球を含んでなる液体を固相抽出剤と、好ましくは３０秒〜２４時間接触させること；および
インターロイキン−１受容体アンタゴニストを含んでなる溶液を前記固相抽出剤から分離すること（前記溶液中のインターロイキン−１受容体アンタゴニストの濃度は、液体を固相抽出剤と接触させる前の液体中のインターロイキン−１受容体アンタゴニストの濃度よりも高い）；
を含んでなり、
前記固相抽出剤は、鋼玉、石英、チタン、デキストラン、アガロース、ポリスチレン、ポリエチレン、ポリ塩化ビニル、ポリプロピレン、ポリアクリルアミド、およびそれらの組合せからなる群から選択される部材を含んでなる、方法。
【請求項２】
インターロイキン−１受容体アンタゴニストに富む溶液を生成する方法であって、
白血球を含んでなる液体を固相抽出剤と接触させること；
前記液体に電磁場をかけること；および
前記液体を前記固相抽出剤から分離して、インターロイキン−１受容体アンタゴニストに富む溶液を取得すること（前記溶液中のインターロイキン−１受容体アンタゴニストの濃度は、液体を固相抽出剤と接触させる前の液体中のインターロイキン−１受容体アンタゴニストの濃度よりも高い）
を含んでなり、
電磁場は、好ましくはパルス電磁場または容量結合型電磁場を含んでなり、かつ、白血球を含んでなる液体を固相抽出剤と接触させることおよび前記液体に電磁場をかけることが約１時間未満で行われる、方法。
【請求項３】
白血球を含んでなる液体が、
白血球を含む組織を遠心分離して、白血球の濃度を高めることを含んでなるプロセス、場合により
組織を、チューブ内に配置された浮標を含んでなるチューブに装入すること（前記浮標は、チューブ内で組織を遠心分離した際に、浮標が一定の平衡の位置に達するように機能し得るような密度を有し、この平衡の位置は白血球を含んでなる第１の画分と第２の画分の間であり、第２の画分は第１の画分の白血球濃度よりも高い白血球濃度を有する）；
前記浮標が第１の画分と第２の画分の間の境界を画定するように前記チューブを遠心分離すること；および
前記白血球画分を取り出すこと
を含んでなるプロセスにより調製される、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
被験体において炎症性障害を治療するためのインターロイキン−１受容体アンタゴニストに富む溶液を生成するための請求項３に記載の方法であって、
（１）前記被験体から全血、骨髄穿刺液、またはその双方を含んでなる組織を取得すること；
（２）前記組織および抗凝固剤を、チューブ内に配置された浮標を含んでなるチューブに装入すること（前記浮標は、チューブ内で組織を遠心分離した際に、浮標が一定の平衡の位置に達するような密度を有し、この平衡の位置は白血球を含んでなる第１の画分と第２の画分の間であり、第２の画分は第１の画分の白血球濃度よりも高い白血球濃度を有する）；
（３）前記浮標が第１の画分と第２の画分の間の境界を画定するように前記チューブを遠心分離すること；
（４）第２の画分を回収すること；
（５）前記第２の画分を、固相抽出剤を含んでなる濃縮装置アセンブリに装入し、前記第２の画分を前記固相抽出剤と接触した状態でインキュベートすること；および
（６）前記濃縮装置アセンブリを、前記固相抽出剤から、全血のインターロイキン−１受容体アンタゴニスト濃度よりも高いインターロイキン−１受容体アンタゴニスト濃度を有するインターロイキン−１受容体アンタゴニストに富む溶液を分離するための遠心速度で回転させること
を含んでなる、方法。
【請求項５】
インターロイキン−１受容体アンタゴニストに富む溶液を生成する方法であって、
濃縮白血球を含んでなる液体を固相抽出剤と接触させること；および
インターロイキン−１受容体アンタゴニストに富む溶液を前記固相抽出剤から分離すること（前記溶液中のインターロイキン−１受容体アンタゴニストの濃度は、液体を固相抽出剤と接触させる前の液体中のインターロイキン−１受容体アンタゴニストの濃度よりも高い）
を含んでなり；
前記濃縮白血球を含んでなる液体が、
白血球を含んでなる組織または組織画分と、単核白血球と結合するように機能し得る抗体に結合された磁性ビーズとを混合すること；および
濃縮白血球を含んでなる液体として使用するために、前記抗体が結合した単核白血球を回収すること
を含んでなる方法により生成される、方法。
【請求項６】
インターロイキン−１受容体アンタゴニストに富む溶液を生成する方法であって、
濃縮白血球を含んでなる液体を固相抽出剤と接触させること；
前記液体を前記固相抽出剤から分離して、インターロイキン−１受容体アンタゴニストに富む溶液を取得すること（前記溶液中のインターロイキン−１受容体アンタゴニストの濃度は、液体を固相抽出剤と接触させる前の液体中のインターロイキン−１受容体アンタゴニストの濃度よりも高い）
を含んでなり；
前記濃縮白血球を含んでなる前記液体が、白血球を含んでなる組織または組織画分をサイズ排除フィルターに通すことにより調製される、方法。
【請求項７】
前記固相抽出剤が、無機質、ポリマー、金属、多糖類、およびそれらの組合せからなる群から選択される部材を含んでなる、請求項５または６に記載の方法。
【請求項８】
前記固相抽出剤が、鋼玉、石英、チタン、デキストラン、アガロース、ポリスチレン、ポリエチレン、ポリ塩化ビニル、ポリプロピレン、ポリアクリルアミド、およびそれらの混合物からなる群から選択される部材を含んでなり、好ましくはポリアクリルアミドを含んでなる、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記固相抽出剤が、ビーズ、繊維、粉末、多孔質材、およびそれらの組合せからなる群から選択される形態を含んでなり、場合により前記固相抽出物の表面がその表面積を増すためにエッチングされている、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
白血球を含んでなる液体が、全血、骨髄穿刺液、脂肪組織、それらの画分、およびそれらの混合物を含んでなり、好ましくは前記液体が血小板に富む血漿を含んでなる、請求項１〜９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
溶液中の可溶性腫瘍壊死因子受容体の濃度が、固相抽出剤に接触させる前の白血球を含んでなる液体中に存在する可溶性腫瘍壊死因子受容体の濃度よりも高い濃度である、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
炎症の治療に用いるための、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の方法に従って生成されたインターロイキン−１受容体アンタゴニストに富む溶液を含んでなる組成物であって、組成物を炎症部位に投与することを含んでなる、組成物。
【請求項１３】
炎症が骨溶解または骨関節炎に関連する、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１４】
白血球を含んでなる液体が、治療される被験体から取得されるか、または治療される被験体に由来する、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１５】
フィブリノーゲン、トロンビン、カルシウム、またはそれらの組合せをさらに含んでなる、請求項１２に記載の組成物。