【誤訳訂正書】
【提出日】平成26年6月6日(2014.6.6)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
リンカーによって固体担体に結合した保護された、以下の式Ｉ：
【化１】
2011521930.tif 000001
（式中、
Ｘ1はＨ、又はジメトキシトリチル基、モノメトキシトリチル基及びピキシル基から選択されるヒドロキシル保護基であり、
Ｘ2はＨ、又はリン酸基の保護基であって、β脱離により除去可能な基であり、
Ｘ3は、以下の式Ａ：
【化２】
2011521930.tif 000002
（式中、ＸはＯ又はＳであり、Ｒ'はＨ又はＣＨ3であり、Ｒは直鎖又は分岐Ｃ1〜Ｃ4アルキル基及び基Ｒ1−Ｏ−Ｒ2（ここで、Ｒ1はＣ1〜Ｃ2アルキル基であり、Ｒ2はＣＨ3又はＣＨ2ＣＨ2−Ｏ−ＣＨ3又はアリール基である）から選択される）のリボースの２'位のヒドロキシルを保護する塩基不安定の基であり、
Ｘ4はリンカー−担体アセンブリを表し、
Ｘ6はＨ、又は基ＯＸ3若しくはＯＡｃであり、
Ｂｐは、Ｘ6がＨである場合に天然若しくは修飾チミン核酸塩基であり、又はＸ6がＯＸ3若しくはＯＡｃである場合に天然若しくは修飾ウラシルであり、又はＸ6にかかわらず保護された天然若しくは修飾アデニン、又は保護された天然若しくは修飾シトシン、又は保護された天然若しくは修飾グアニンであり、
ｎは０以上の整数である）の一本鎖ＲＮＡから出発して、一本鎖ＲＮＡを放出させる方法であって、
ａ）Ｘ2がＨと異なる場合、担体に結合した、保護された前記式Ｉの一本鎖ＲＮＡを、ピペリジン、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン（ＤＢＵ）、リエチルアミンから選択される塩基を用いて室温で処理して、３'−５'ヌクレオシド間リンカーのリン酸を脱保護する工程、
続いて、ｂ）Ｘ2がＨである前記式Ｉの一本鎖ＲＮＡ、又は、工程ａ）において得られる部分的に脱保護された前記ＲＮＡを、濃縮アンモニア、メチルアミン、炭酸カリウムから選択される塩基を用いて室温で処理する工程を含むことを特徴とし、
前記式Ｉにおいて、Ｘ1、Ｘ2、Ｘ3、及びＸ4がＨであり、Ｘ6がＨ又はＯＨであり、Ｂｐが前記定義されるようなものである一本鎖ＲＮＡが得られる、方法。
【請求項２】
式Ｉにおいて、Ｘ1がジメトキシトリチル基である、及び／又は、Ｘ2がシアノエチル基である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
式Ｉにおいて、Ｘ3がピバロイルオキシメチル基、又はイソブチリルオキシメチル基、
又はブチリルオキシメチル基、又はプロピオニルオキシメチル基、又はアセチルオキシメ
チル基であることを特徴とする、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
式Ｉにおいて、前記Ｂｐが天然又は修飾ウラシルであることを特徴とする、請
求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
式Ｉにおいて、前記４つの天然又は修飾核酸塩基ウラシル、アデニン、シトシン及びグアニンが存在し、工程ｂ）において、前記保護基Ｘ3の除去を、アンモニアで処理した後、総容量に対してアンモニアの１５容量％のイソプロピルアミンを添加し、次いで減圧下で脱保護媒体を蒸発させることによって行うことを特徴とする、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
式Ｉにおいて、Ｘ4が塩基不安定のリンカーと固体担体とのアセンブリであることを特徴とする、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
一本鎖ＲＮＡを合成する方法であって、
ａ）固体担体に、以下の式ＩＩ：
【化３】
2011521930.tif 000003
（式中、
Ｘ1はジメトキシトリチル基であり、
Ｘ6はＨ、又は基ＯＡｃ若しくはＯＸ3（ここで、Ｘ3は以下の式Ａ：
【化４】
2011521930.tif 000004
（式中、ＸはＯ又はＳであり、Ｒ'はＨ又はＣＨ3であり、Ｒは直鎖又は分岐Ｃ1〜Ｃ4アルキル基及び基Ｒ1−Ｏ−Ｒ2（ここで、Ｒ1はＣ1〜Ｃ2アルキル基であり、Ｒ2はＣＨ3又はＣＨ2ＣＨ2−Ｏ−ＣＨ3又はアリール基である）から選択される）の基である）であり、
Ｂｐは、Ｘ6がＨである場合に天然若しくは修飾チミン核酸塩基であり、又はＸ6がＯＡｃ若しくはＯＸ3である場合に天然若しくは修飾ウラシル核酸塩基であり、又はＸ6にかかわらず保護された天然若しくは修飾アデニン核酸塩基、又は保護された天然若しくは修飾シトシン核酸塩基、又は保護された天然若しくは修飾グアニン核酸塩基である）のモノマーを結合させる工程であって、式ＩＩのモノマーにおいてリボース糖の３'位のＯをリンカーによって固体担体に結合させる工程、
ｂ）工程ａ）において得られる、その担体に結合した前記式ＩＩのモノマーと、少なくとも１つの以下の式ＩＩＩ：
【化５】
2011521930.tif 000005
（式中、Ｘ1、Ｂｐ、Ｘ3は式ＩＩについて定義されるようなものであり、Ｘ5は２−シアノエチル−Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルホスホロアミダイト基である）のモノマーとを結合させ、それにより担体に結合した、保護された以下の式Ｉ：
【化６】
2011521930.tif 000006
（式中、
Ｘ1はＨ、又はジメトキシトリチル基、モノメトキシトリチル基及びピキシル基から選択されるヒドロキシル保護基であり、
Ｘ2はシアノエチル基であり、
Ｘ3は、以下の式Ａ：
【化７】
2011521930.tif 000007
（式中、ＸはＯ又はＳであり、Ｒ'はＨ又はＣＨ3であり、Ｒは直鎖又は分岐Ｃ1〜Ｃ4アルキル基及び基Ｒ1−Ｏ−Ｒ2（ここで、Ｒ1はＣ1〜Ｃ2アルキル基であり、Ｒ2はＣＨ3又はＣＨ2ＣＨ2−Ｏ−ＣＨ3又はアリール基である）から選択される）のリボースの２'位のヒドロキシルを保護する塩基不安定の基であり、
Ｘ4はリンカー−担体アセンブリを表し、
Ｘ6はＨ、又は基ＯＸ3若しくはＯＡｃであり、
Ｂｐは、Ｘ6がＨである場合に天然若しくは修飾チミン核酸塩基であり、又はＸ6がＯＸ3若しくはＯＡｃである場合に天然若しくは修飾ウラシルであり、又はＸ6にかかわらず保護された天然若しくは修飾アデニン、又は保護された天然若しくは修飾シトシン、又は保護された天然若しくは修飾グアニンであり、
ｎは０以上の整数である）の一本鎖ＲＮＡを得る工程であって、
式ＩＩのモノマーと式ＩＩＩのモノマーとの間に、式ＩＩのモノマーのリボース糖の５’位と式ＩＩＩのモノマーのリボース糖の３’位との間、及び、２以上の式ＩＩＩのモノマーが存在する場合は、２つの式ＩＩＩのモノマーの間に、１の式ＩＩＩのモノマーのリボース糖の５’位と別の式ＩＩＩのモノマーのリボース糖の３’位との間の３’−５’ヌクレオシド間リンカーを形成する工程、及び
ｃ）前工程において得られる担体に結合した、保護された前記一本鎖ＲＮＡを、下記工程c-1）及びc-2）を含む放出させる方法によって放出させる工程：
c-1）担体に結合した、保護された前記式Ｉの一本鎖ＲＮＡを、ピペリジン、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン（ＤＢＵ）、リエチルアミンから選択される塩基を用いて室温で処理して、３'−５'ヌクレオシド間リンカーのリン酸を脱保護し、式Ｉにおいて、Ｘ1及びＸ2がＨであり、Ｘ3、Ｘ4、Ｘ6及びＢｐが前記定義されるようなものである一本鎖ＲＮＡを得る工程、及び
c-2）工程c-1）において得られる部分的に脱保護された前記ＲＮＡを、濃縮アンモニア、メチルアミン、炭酸カリウムから選択される塩基を用いて室温で処理し、式Ｉにおいて、Ｘ1、Ｘ2、Ｘ3、及びＸ4がＨであり、Ｘ6がＨ又はＯＨであり、Ｂｐが前記定義されるようなものである一本鎖ＲＮＡを得る工程、
を含むことを特徴とする、方法。
【請求項８】
下記の工程ｂ’）をさらに含む、請求項７に記載の方法：
ｂ’）工程ｂ）の後、かつ、工程ｃ）の前に、工程ｂ）において得られるアセンブリを酸性媒体で処理し、式Ｉにおいて、Ｘ1がＨであり、Ｘ2がシアノエチル基であり、Ｘ3、Ｘ4、Ｘ6及びＢｐが前記定義されるようなものである一本鎖ＲＮＡを得る工程、
【請求項９】
工程ｂ）の前に、下記工程a'-1）〜a'-4）を含む、ａ'）式ＩＩＩのモノマーを合成する工程をさらに含むことを特徴とする、請求項７又は８に記載の一本鎖ＲＮＡを合成する方法：
a'-1）前記核酸塩基Ｂｐが天然若しくは修飾ウラシルと異なる場合、該核酸塩基Ｂｐの環外アミンを保護する工程、
a'-2）リボース糖の５'位のヒドロキシルを保護する工程、
a'-3）リボース糖の２'位のヒドロキシルを式Ａの基で保護する工程、及び
a'-4）リボース糖の３'位のヒドロキシルを２−シアノエチル−Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルホスホロアミダイト基で官能基化する工程。
【請求項１０】
二本鎖ＲＮＡを合成する方法であって、
ａ）固体担体に、以下の式ＩＩ：
【化８】
2011521930.tif 000008
（式中、
Ｘ1はジメトキシトリチル基であり、
Ｘ6はＨ、又は基ＯＡｃ若しくはＯＸ3（ここで、Ｘ3は以下の式Ａ：
【化９】
2011521930.tif 000009
（式中、ＸはＯ又はＳであり、Ｒ'はＨ又はＣＨ3であり、Ｒは直鎖又は分岐Ｃ1〜Ｃ4アルキル基及び基Ｒ1−Ｏ−Ｒ2（ここで、Ｒ1はＣ1〜Ｃ2アルキル基であり、Ｒ2はＣＨ3又はＣＨ2ＣＨ2−Ｏ−ＣＨ3又はアリール基である）から選択される）の基である）であり、
Ｂｐは、Ｘ6がＨである場合に天然若しくは修飾チミン核酸塩基であり、又はＸ6がＯＡｃ若しくはＯＸ3である場合に天然若しくは修飾ウラシル核酸塩基であり、又はＸ6にかかわらず保護された天然若しくは修飾アデニン核酸塩基、又は保護された天然若しくは修飾シトシン核酸塩基、又は保護された天然若しくは修飾グアニン核酸塩基である）のモノマーを結合させる工程であって、式ＩＩのモノマーにおいてリボース糖の３'位のＯをリンカーによって固体担体に結合させる工程、
ｂ）工程ａ）において得られる、その担体に結合した前記式ＩＩのモノマーと、少なく
とも１つの以下の式ＩＩＩ：
【化１０】
2011521930.tif 000010
（式中、Ｘ1、Ｂｐ、Ｘ3は式ＩＩについて定義されるようなものであり、Ｘ5は２−シアノエチル−Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルホスホロアミダイト基である）のモノマーとを結合させ、それにより担体に結合した、保護された以下の式Ｉ：
【化１１】
2011521930.tif 000011
（式中、
Ｘ1はＨ、又はジメトキシトリチル基、モノメトキシトリチル基及びピキシル基から選択されるヒドロキシル保護基であり、
Ｘ2はシアノエチル基であり、
Ｘ3は、以下の式Ａ：
【化１２】
2011521930.tif 000012
（式中、ＸはＯ又はＳであり、Ｒ'はＨ又はＣＨ3であり、Ｒは直鎖又は分岐Ｃ1〜Ｃ4アルキル基及び基Ｒ1−Ｏ−Ｒ2（ここで、Ｒ1はＣ1〜Ｃ2アルキル基であり、Ｒ2はＣＨ3又はＣＨ2ＣＨ2−Ｏ−ＣＨ3又はアリール基である）から選択される）のリボースの２'位のヒドロキシルを保護する塩基不安定の基であり、
Ｘ4はリンカー−担体アセンブリを表し、
Ｘ6はＨ、又は基ＯＸ3若しくはＯＡｃであり、
Ｂｐは、Ｘ6がＨである場合に天然若しくは修飾チミン核酸塩基であり、又はＸ6がＯＸ3若しくはＯＡｃである場合に天然若しくは修飾ウラシルであり、又はＸ6にかかわらず保護された天然若しくは修飾アデニン、又は保護された天然若しくは修飾シトシン、又は保護された天然若しくは修飾グアニンであり、
ｎは０以上の整数である）の一本鎖ＲＮＡを得る工程であって、
式ＩＩのモノマーと式ＩＩＩのモノマーとの間に、式ＩＩのモノマーのリボース糖の５’位と式ＩＩＩのモノマーのリボース糖の３’位との間、及び、２以上の式ＩＩＩのモノマーが存在する場合は、２つの式ＩＩＩのモノマーの間に、１の式ＩＩＩのモノマーのリボース糖の５’位と別の式ＩＩＩのモノマーのリボース糖の３’位との間の３’−５’ヌクレオシド間リンカーを形成する工程、及び
ｃ）前工程において得られる、担体に結合した、保護された一本鎖ＲＮＡを、下記工程c-1）及びc-2）を含む放出させる方法によって放出させる工程：
c-1）担体に結合した、保護された式Ｉの一本鎖ＲＮＡを、ピペリジン、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン（ＤＢＵ）、リエチルアミンから選択される塩基を用いて室温で処理して、３'−５'ヌクレオシド間リンカーのリン酸を脱保護し、式Ｉにおいて、Ｘ1、Ｘ2、Ｘ3、及びＸ4がＨであり、Ｘ6がＨ又はＯＨであり、Ｂｐが前記定義されるようなものである一本鎖ＲＮＡを得る工程、及び
c-2）工程c-1）において得られる部分的に脱保護された前記ＲＮＡを、濃縮アンモニア、メチルアミン、炭酸カリウムから選択される塩基を用いて室温で処理し、前記式Ｉにおいて、Ｘ1、Ｘ2、Ｘ3、及びＸ4がＨであり、Ｘ6がＨ又はＯＨであり、Ｂｐが前記定義されるようなものである一本鎖ＲＮＡを得る工程、及び
ｄ）工程ａ）〜ｃ）により合成される一本鎖ＲＮＡを、相補配列を有する一本鎖ＲＮＡとハイブリダイズさせる工程
を含むことを特徴とする、方法。
【請求項１１】
工程ｂ）の後、かつ、工程ｃ）の前に、工程ｂ）において得られるアセンブリを酸性媒体で処理する工程ｂ’）をさらに含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
工程ｂ）の前に、下記工程a'-1）〜a'-4）を含む、ａ'）式ＩＩＩのモノマーを合成する工程をさらに含むことを特徴とする、請求項１０又は１１に記載の方法：
a'-1）前記核酸塩基Ｂｐが天然若しくは修飾ウラシルと異なる場合、該核酸塩基Ｂｐの環外アミンを保護する工程、
a'-2）リボース糖の５'位のヒドロキシルを保護する工程、
a'-3）リボース糖の２'位のヒドロキシルを式Ａの基で保護する工程、及び
a'-4）リボース糖の３'位のヒドロキシルを２−シアノエチル−Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルホスホロアミダイト基で官能基化する工程。
【請求項１３】
前記二本鎖ＲＮＡがｓｉＲＮＡであることを特徴とする、請求項１０〜１２のいずれか１項に記載の合成する方法。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１９】
（式中、ＸはＯ又はＳであり、Ｒ'はＨ又はＣＨ3であり、Ｒは直鎖又は分岐Ｃ1〜Ｃ4アルキル基及び基Ｒ1−Ｏ−Ｒ2（ここで、Ｒ1はＣ1〜Ｃ2アルキル基であり、Ｒ2はＣＨ3又はＣＨ2ＣＨ2−Ｏ−ＣＨ3又はアリール基である）から選択される）のリボースの２'位のヒドロキシルを保護する、塩基不安定の基であり、
Ｘ4はリンカー−固体担体アセンブリを表し、
Ｘ6はＨ又はＯＸ3又はＯＡｃであり、
Ｂｐは核酸塩基：Ｘ6がＨである場合に天然若しくは修飾チミン、又はＸ6がＯＸ3若しくはＯＡｃである場合に天然若しくは修飾ウラシル、又はＸ6にかかわらず保護された天然若しくは修飾アデニン、又は保護された天然若しくは修飾シトシン、又は保護された天然若しくは修飾グアニンであり、
ｎは０以上の整数である）の一本鎖ＲＮＡから、一本鎖ＲＮＡを放出させる方法であって、ａ）Ｘ2がＨと異なる場合、３'−５'ヌクレオチド間リンカーのリン酸を放出させるために、担体に結合した、保護された式Ｉの一本鎖ＲＮＡを、ピペリジン、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン（ＤＢＵ）及びトリエチルアミンから選択される塩基を用いて室温で処理する工程、続いて、ｂ）工程ａ）において得られる部分的に遊離したＲＮＡを、濃縮アンモニア、メチルアミン、炭酸カリウムから選択される塩基を用いて室温で処理する工程を含むことを特徴とする、方法を提案する。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１９２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１９２】
さらに、上述の記載及び添付の特許請求の範囲において、保護基Ｘ１が酸不安定基から
選択されると記載されているが、当業者に既知の好適なフッ素不安定又は塩基不安定の基
を同様にリボースの５’位のヒドロキシルを保護するために使用してもよいことは当業者
に明らかである。
［本発明の態様］
本発明は、下記の態様を包含する。
項１、リンカーによって固体担体に結合した保護された、以下の式Ｉ：
【化１７】
2011521930.tif 000013
（式中、
Ｘ1はＨ、又はジメトキシトリチル基、モノメトキシトリチル基及びピキシル基から選択されるヒドロキシル保護基、好ましくはジメトキシトリチル基であり、
Ｘ2はＨ、又はβ−脱離可能なリン酸を保護する基、好ましくはシアノエチル基であり、
Ｘ3は、以下の式Ａ：
【化１８】
2011521930.tif 000014
（式中、ＸはＯ又はＳであり、Ｒ'はＨ又はＣＨ3であり、Ｒは直鎖又は分岐Ｃ1〜Ｃ4アルキル基及び基Ｒ1−Ｏ−Ｒ2（ここで、Ｒ1はＣ1〜Ｃ2アルキル基であり、Ｒ2はＣＨ3又はＣＨ2ＣＨ2−Ｏ−ＣＨ3又はアリール基である）から選択される）のリボースの２'位のヒドロキシルを保護する塩基不安定の基であり、
Ｘ4はリンカー−担体アセンブリを表し、
Ｘ6はＨ、又は基ＯＸ3若しくはＯＡｃであり、
Ｂｐは、Ｘ6がＨである場合に天然若しくは修飾チミン核酸塩基であり、又はＸ6がＯＸ3若しくはＯＡｃである場合に天然若しくは修飾ウラシルであり、又はＸ6にかかわらず保護された天然若しくは修飾アデニン、又は保護された天然若しくは修飾シトシン、又は保護された天然若しくは修飾グアニンであり、
ｎは０以上の整数である）の一本鎖ＲＮＡから出発して、一本鎖ＲＮＡを放出させる方法であって、
ａ）Ｘ2がＨと異なる場合、担体に結合した、保護された前記式Ｉの一本鎖ＲＮＡを、ピペリジン、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン（ＤＢＵ）、トリエチルアミンから選択される塩基を用いて室温で処理して、３'−５'ヌクレオシド間リンカーのリン酸を放出させる工程、
続いて、ｂ）工程ａ）において得られる部分的に放出された前記ＲＮＡを、濃縮アンモニア、メチルアミン、炭酸カリウムから選択される塩基を用いて室温で処理する工程を含むことを特徴とする、方法。
項２、式Ｉにおいて、Ｘ3が式Ａの基であることを特徴とする、項１に記載の方法。
項３、式Ｉにおいて、Ｘ3がピバロイルオキシメチル基、又はイソブチリルオキシメチル基、又はブチリルオキシメチル基、又はプロピオニルオキシメチル基、又はアセチルオキシメチル基であることを特徴とする、項１又は２に記載の方法。
項４、式Ｉにおいて、前記核酸塩基Ｂｐが天然又は修飾ウラシルであることを特徴とする、項１〜３のいずれ１項に記載の方法。
項５、式Ｉにおいて、前記４つの天然又は修飾核酸塩基ウラシル、アデニン、シトシン及びグアニンが存在し、工程ｂ）において、前記保護基Ｘ3の除去を、アンモニアで処理した後、総容量に対してアンモニアの１５容量％のイソプロピルアミンを添加し、次いで減圧下で脱保護媒体を蒸発させることによって行うことを特徴とする、項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
項６、担体に結合した、保護された前記式ＩのＲＮＡが、塩基不安定のリンカーによって固体担体に結合されていることを特徴とする、項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
項７、一本鎖ＲＮＡを合成する方法であって、
ａ）固体担体に、以下の式ＩＩ：
【化１９】
2011521930.tif 000015
（式中、
Ｘ1はジメトキシトリチル基であり、
Ｘ6はＨ、又は基ＯＡｃ若しくはＯＸ3（ここで、Ｘ3は以下の式Ａ：
【化２０】
2011521930.tif 000016
（式中、ＸはＯ又はＳであり、Ｒ'はＨ又はＣＨ3であり、Ｒは直鎖又は分岐Ｃ1〜Ｃ4アルキル基及び基Ｒ1−Ｏ−Ｒ2（ここで、Ｒ1はＣ1〜Ｃ2アルキル基であり、Ｒ2はＣＨ3又はＣＨ2ＣＨ2−Ｏ−ＣＨ3又はアリール基である）から選択される）の基である）であり、
Ｂｐは、Ｘ6がＨである場合に天然若しくは修飾チミン核酸塩基であり、又はＸ6がＯＡｃ若しくはＯＸ3である場合に天然若しくは修飾ウラシル核酸塩基であり、又はＸ6にかかわらず保護された天然若しくは修飾アデニン核酸塩基、又は保護された天然若しくは修飾シトシン核酸塩基、又は保護された天然若しくは修飾グアニン核酸塩基である）のモノマーを結合させる工程、
ｂ）工程ａ）において得られる、その担体に結合した前記式ＩＩのモノマーと、少なくとも１つの以下の式ＩＩＩ：
【化２１】
2011521930.tif 000017
（式中、Ｘ1、Ｂｐ、Ｘ3は式ＩＩについて定義されるようなものであり、Ｘ5は水素ホスホネートモノエステル基又はホスホロアミダイト、好ましくは２−シアノエチル−Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルホスホロアミダイト基である）のモノマーとを結合させ、それにより担体に結合した、保護された式Ｉの一本鎖ＲＮＡを得る工程、
ｃ）必要に応じて、工程ｂ）において得られるアセンブリを酸性媒体で処理する工程、
及び
ｄ）工程ｂ）又は工程ｃ）において得られる担体に結合した、保護された前記一本鎖ＲＮＡを、項１〜６のいずれか１項に記載の放出させる方法によって放出させる工程を含むことを特徴とする、方法。
項８、工程ｂ）の前に、
ａ）前記核酸塩基Ｂｐが天然若しくは修飾ウラシルと異なる場合、該核酸塩基Ｂｐの環外アミンを保護する工程、
ｂ）リボース糖の５'位のヒドロキシルを保護する工程、
ｃ）リボース糖の２'位のヒドロキシルを式Ａの基で保護する工程、及び
ｄ）リボース糖の３'位のヒドロキシルを、水素ホスホネートモノエステル基又はホスホロアミダイト、好ましくは２−シアノエチル−Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルホスホロアミダイト基で官能基化する工程を含む、ａ'）式ＩＩＩのモノマーを合成する工程をさらに含むことを特徴とする、項７に記載の一本鎖ＲＮＡを合成する方法。
項９、二本鎖ＲＮＡを合成する方法であって、項７に記載の方法に従って一本鎖ＲＮＡを合成すること、及びそれにより合成される一本鎖ＲＮＡを、相補配列を有する一本鎖ＲＮＡとハイブリダイズさせることを含むことを特徴とする、方法。
項１０、前記二本鎖ＲＮＡがｓｉＲＮＡであることを特徴とする、項８又は９に記載の合成する方法。
項１１、以下の式ＩＩＩ：
【化２２】
2011521930.tif 000018
（式中、
Ｂｐは天然若しくは修飾ウラシル核酸塩基、又は保護された天然若しくは修飾アデニン核酸塩基、又は保護された天然若しくは修飾シトシン核酸塩基、又は保護された天然若しくは修飾グアニン核酸塩基であり、
Ｘ1はジメトキシトリチル基であり、
Ｘ3は以下の式Ａ：
【化２３】
2011521930.tif 000019
（式中、ＸはＯ又はＳであり、Ｒ'はＨ又はＣＨ3であり、Ｒは直鎖又は分岐Ｃ1〜Ｃ4アルキル基及び基Ｒ1−Ｏ−Ｒ2（ここで、Ｒ1はＣ1〜Ｃ2アルキル基であり、Ｒ2はＣＨ3又はＣＨ2ＣＨ2−Ｏ−ＣＨ3又はアリール基である）から選択される）の塩基不安定の基であり、
Ｘ5は水素ホスホネート基又はホスホロアミダイト基、好ましくは２−シアノエチル−Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルホスホロアミダイト基である）のモノマーを、以下の式ＩＶ：
【化２４】
2011521930.tif 000020
（式中、Ｂｐは天然又は修飾ウラシル、アデニン、シトシン又はグアニン核酸塩基である）のリボヌクレオシドモノマーから合成する方法であって、
ａ）前記核酸塩基Ｂｐが天然又は修飾ウラシルと異なる場合、該核酸塩基Ｂｐの環外アミンを保護する工程、
ｂ）リボース糖の５'位のヒドロキシルを保護する工程、
ｃ）リボース糖の２'位のヒドロキシルを式Ａの保護基で保護する工程、及び
ｄ）リボース糖の３'位のヒドロキシルを、水素ホスホネートモノエステル基又はホスホロアミダイト、好ましくは２−シアノエチル−Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルホスホロアミダイト基で官能基化する工程から成ることを特徴とする、方法。
項１２、工程ｃ）において、前記保護基がピバロイルオキシメチル基、イソブチリルオキシメチル基、ブチリルオキシメチル基、プロピオニルオキシメチル基及びアセチルオキシメチル基から選択される式Ａの基であることを特徴とする、項１１に記載の方法。
項１３、工程ｃ）において、前記式Ａの基がピバロイルオキシメチル基であることを特徴とする、項１１又は１２に記載の方法。
項１４、工程ｂ）において、前記保護基がジメトキシトリチル基であることを特徴とする、項１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
項１５、工程ｄ）において、前記基Ｘ5が２−シアノエチル−Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルホスホロアミダイト基であることを特徴とする、項１〜１４のいずれか１項に記載の方法。
項１６、前記核酸塩基が天然又は修飾シトシンであり、工程ａ）における前記保護基がアセチル基であることを特徴とする、項１〜１５のいずれか１項に記載の方法。
項１７、前記核酸塩基が天然又は修飾アデニンであり、工程ａ）における前記保護基がフェノキシアセチル基であることを特徴とする、項１〜１６のいずれか１項に記載の方法。
項１８、前記核酸塩基が天然又は修飾グアニンであり、工程ａ）における前記保護基がｔｅｒｔ−ブチルフェノキシアセチル基又はイソプロピルフェノキシアセチル基であることを特徴とする、項１２〜１５のいずれか１項に記載の方法。