【手続補正書】
【提出日】平成25年11月15日(2013.11.15)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
インフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物を含有する溶液を安定化させる方法であって、
（ａ）前記インフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子を含有する溶液を用意するステップと、
（ｂ）（１）安定化量の、単糖、ソルビトール、二糖、トレハロース、ジエタノールアミン、グリセロール、グリシン、および前出の安定化剤の組合せから選択される安定化剤を、インフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物に添加するステップ、（２）ｐＨを、約ｐＨ６．５〜約ｐＨ８．０、約ｐＨ６．５〜約ｐＨ７．５、または約ｐＨ７とするように、前記溶液を緩衝化するステップ、または（３）ステップ（１）およびステップ（２）の両方と
を含み、
ステップ（ｂ）の後の前記インフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物が、以下の特徴：（ｉ）光学濃度により測定した前記ウイルス様粒子の凝集が、ステップ（ｂ）の前の前記インフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物と比較して低減していること；（ｉｉ）円偏光二色性またはＡＮＳ結合により測定したインフルエンザ抗原が、ステップ（ｂ）の前の前記インフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物と比較して安定化していること；および（ｉｉｉ）ラウルダン蛍光により測定した、前記ウイルス様粒子の脂質二重層の、温度により誘導される水和が、ステップ（ｂ）の前の前記インフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物と比較して低減していること
のうちの少なくとも１つを呈示する、方法。
【請求項２】
前記緩衝化するステップを、リン酸バッファー、トリスバッファー、ＭＥＳバッファー、クエン酸バッファー、および他のＧＲＡＳバッファーからなる群から選択される緩衝剤を用いて実施する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記安定化剤が、トレハロース、ソルビトール、ジエタノールアミン、グリセロール、グリシン、および前出の安定化剤の組合せから選択され、そして前記特徴が（ｉ）である、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記安定化剤が、トレハロース、ソルビトール、および前出の安定化剤の組合せから選択され、そして前記特徴が（ｉｉ）である、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記安定化剤が、トレハロースおよびグリシンから選択され、そして前記特徴が（ｉｉｉ）である、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記安定化剤がトレハロースであり、そして３つの特徴すべてが存在する、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記インフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子が、赤血球凝集素ポリペプチドを含む、請求項１から６のうちのいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
前記インフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子が、ｇａｇポリペプチド、インフルエンザＭ１ポリペプチド、ニューカッスル病ウイルスマトリックスポリペプチド、エボラウイルスＶＰ４０ポリペプチド、およびマールブルグウイルスＶＰ４０ポリペプチドを含む群から選択される第２のポリペプチドを含む、請求項１から７のうちのいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
前記ｇａｇポリペプチドが、マウス白血病ウイルス、ヒト免疫不全ウイルス、アルファレトロウイルス、ベータレトロウイルス、ガンマレトロウイルス、デルタレトロウイルス、およびレンチウイルスからなる群から選択されるレトロウイルスに由来する、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記ｇａｇポリペプチドが、マウス白血病ウイルスに由来する、請求項８に記載の方法。
【請求項１１】
前記インフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子が、ノイラミニダーゼポリペプチドをさらに含む、請求項１から１０のうちのいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
前記安定化剤が、単糖、ソルビトール、二糖、およびトレハロースから選択され、そして前記安定化量が、１０％（ｗ／ｗ）を超えるか、または少なくとも約２０％（ｗ／ｗ）である、請求項１から１１のうちのいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
前記安定化剤が、スクロースではない、請求項１から１２のうちのいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
前記インフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物が、前記インフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子と混合させたアジュバントをさらに含む、請求項１から１３のうちのいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
（ｃ）前記溶液を、少なくとも２週間、少なくとも１カ月間、少なくとも２カ月間、少なくとも３カ月間、少なくとも４カ月間、少なくとも６カ月間、または少なくとも１年間にわたり液体形態で保存するステップをさらに含み、このような期間後の前記インフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物が、このような期間前の前記インフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物により誘導される免疫反応の少なくとも８０パーセント、少なくとも９０パーセント、または少な
くとも９５パーセントを誘導する、請求項１から１４のうちのいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
インフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子と、安定化量の、トレハロース、ソルビトール、ジエタノールアミン、グリセロール、グリシン、および前出の安定化剤の組合せから選択される、インフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物に対する安定化剤とを含み、以下の特徴：（ｉ）光学濃度により測定した前記ウイルス様粒子の凝集が、前記安定化剤を伴わない、インフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物と比較して低減していること；（ｉｉ）円偏光二色性またはＡＮＳ結合により測定したインフルエンザ抗原が、前記安定化剤を伴わない、インフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物と比較して安定化していること；および（ｉｉｉ）ラウルダン蛍光により測定した、前記ウイルス様粒子の脂質二重層の、温度により誘導される水和が、前記安定化剤を伴わない、インフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物と比較して低減していること
のうちの少なくとも１つを呈示する、インフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物。
【請求項１７】
請求項１から１５のうちのいずれか一項に記載の方法によって調製されたインフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物。
【請求項１８】
インフルエンザを治療または予防するための、免疫原性量の、請求項１６から１７のいずれか一項に記載のインフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物を含む組成物、または請求項１から１５のいずれか一項に記載の方法に従い安定化させた、免疫原性量の、インフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物を含有する溶液であって、該組成物または溶液は、対象に投与されることを特徴とする、組成物または溶液。
【請求項１９】
前記投与が、前記対象において防御的免疫反応を誘導することを特徴とする、請求項１８に記載の組成物または溶液。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１１】
本開示の別の態様は、インフルエンザを治療または予防する方法であって、対象に、免疫原性量の、前出の態様およびその多様な実施形態のうちのいずれかによる、インフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物、または前出の方法の態様およびその多様な実施形態のうちのいずれかに従い安定化させた、免疫原性量の、インフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物を含有する溶液を投与するステップを含む方法を提供する。ある実施形態では、投与するステップは、対象において防御的免疫反応を誘導する。前出の実施形態と組み合わせ得るある実施形態では、投与するステップは、皮下（ｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓ）送達、経皮送達、皮内送達、皮下送達（ｓｕｂｄｅｒｍａｌ）、筋肉内送達、経口（ｐｅｒｏｒａｌ）送達、経口（ｏｒａｌ）送達、鼻腔内送達、頬（ｂｕｃｃａｌ）送達、舌下送達、腹腔内送達、膣内（ｉｎｔｒａｖａｇｉｎａｌ）送達、肛門（ａｎａｌ）送達、および頭蓋内送達からなる群から選択される。
一実施形態において、例えば、以下の項目が提供される。
（項目１）
インフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物を含有する溶液を安定化させる方法であって、
（ａ）前記インフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子を含有する溶液を用意するステップと、
（ｂ）（１）安定化量の、単糖、ソルビトール、二糖、トレハロース、ジエタノールアミン、グリセロール、グリシン、および前出の安定化剤の組合せから選択される安定化剤を、インフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物に添加するステップ、（２）ｐＨを、約ｐＨ６．５〜約ｐＨ８．０、約ｐＨ６．５〜約ｐＨ７．５、または約ｐＨ７とするように、前記溶液を緩衝化するステップ、または（３）ステップ（１）およびステップ（２）の両方と
を含み、
ステップ（ｂ）の後の前記インフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物が、以下の特徴：（ｉ）光学濃度により測定した前記ウイルス様粒子の凝集が、ステップ（ｂ）の前の前記インフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物と比較して低減していること；（ｉｉ）円偏光二色性またはＡＮＳ結合により測定したインフルエンザ抗原が、ステップ（ｂ）の前の前記インフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物と比較して安定化していること；および（ｉｉｉ）ラウルダン蛍光により測定した、前記ウイルス様粒子の脂質二重層の、温度により誘導される水和が、ステップ（ｂ）の前の前記インフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物と比較して低減していること
のうちの少なくとも１つを呈示する、方法。
（項目２）
前記緩衝化するステップを、リン酸バッファー、トリスバッファー、ＭＥＳバッファー、クエン酸バッファー、および他のＧＲＡＳバッファーからなる群から選択される緩衝剤を用いて実施する、項目１に記載の方法。
（項目３）
前記安定化剤が、トレハロース、ソルビトール、ジエタノールアミン、グリセロール、グリシン、および前出の安定化剤の組合せから選択され、そして前記特徴が（ｉ）である、項目１に記載の方法。
（項目４）
前記安定化剤が、トレハロース、ソルビトール、および前出の安定化剤の組合せから選択され、そして前記特徴が（ｉｉ）である、項目１に記載の方法。
（項目５）
前記安定化剤が、トレハロースおよびグリシンから選択され、そして前記特徴が（ｉｉｉ）である、項目１に記載の方法。
（項目６）
前記安定化剤がトレハロースであり、そして３つの特徴すべてが存在する、項目１に記載の方法。
（項目７）
前記インフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子が、赤血球凝集素ポリペプチドを含む、項目１から６のうちのいずれか一項に記載の方法。
（項目８）
前記インフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子が、ｇａｇポリペプチド、インフルエンザＭ１ポリペプチド、ニューカッスル病ウイルスマトリックスポリペプチド、エボラウイルスＶＰ４０ポリペプチド、およびマールブルグウイルスＶＰ４０ポリペプチドを含む群から選択される第２のポリペプチドを含む、項目１から７のうちのいずれか一項に記載の方法。
（項目９）
前記ｇａｇポリペプチドが、マウス白血病ウイルス、ヒト免疫不全ウイルス、アルファレトロウイルス、ベータレトロウイルス、ガンマレトロウイルス、デルタレトロウイルス、およびレンチウイルスからなる群から選択されるレトロウイルスに由来する、項目８に記載の方法。
（項目１０）
前記ｇａｇポリペプチドが、マウス白血病ウイルスに由来する、項目８に記載の方法。
（項目１１）
前記インフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子が、ノイラミニダーゼポリペプチドをさらに含む、項目１から１０のうちのいずれか一項に記載の方法。
（項目１２）
前記安定化剤が、単糖、ソルビトール、二糖、およびトレハロースから選択され、そして前記安定化量が、１０％（ｗ／ｗ）を超えるか、または少なくとも約２０％（ｗ／ｗ）である、項目１から１１のうちのいずれか一項に記載の方法。
（項目１３）
前記安定化させるステップが、ガラス形成を必要としない、項目１から１２のうちのいずれか一項に記載の方法。
（項目１４）
前記安定化量が、凝固時のガラス形成に必要とされる量未満である、項目１から１３のうちのいずれか一項に記載の方法。
（項目１５）
前記安定化剤が、スクロースではない、項目１から１４のうちのいずれか一項に記載の方法。
（項目１６）
前記インフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物が、前記インフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子と混合させたアジュバントをさらに含む、項目１から１５のうちのいずれか一項に記載の方法。
（項目１７）
前記アジュバントが、前記ウイルス様粒子の内部に配置される、項目１６に記載の方法。
（項目１８）
前記アジュバントが、前記ウイルス様粒子の外部に配置される、項目１６に記載の方法。
（項目１９）
前記アジュバントを、前記第２のポリペプチドに共有結合させて、共有結合を形成させる、項目１６から１８のうちのいずれか一項に記載の方法。
（項目２０）
前記アジュバントを、前記赤血球凝集素ポリペプチドに共有結合させて、共有結合を形成させる、項目１６から１８のうちのいずれか一項に記載の方法。
（項目２１）
前記アジュバントが、フラジェリンのアジュバント活性断片を含む、項目１６から２０のうちのいずれか一項に記載の方法。
（項目２２）
（ｃ）前記溶液を、少なくとも２週間、少なくとも１カ月間、少なくとも２カ月間、少なくとも３カ月間、少なくとも４カ月間、少なくとも６カ月間、または少なくとも１年間にわたり液体形態で保存するステップをさらに含み、このような期間後の前記インフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物が、このような期間前の前記インフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物により誘導される免疫反応の少なくとも８０パーセント、少なくとも９０パーセント、または少な
くとも９５パーセントを誘導する、項目１から２１のうちのいずれか一項に記載の方法。
（項目２３）
インフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子と、安定化量の、トレハロース、ソルビトール、ジエタノールアミン、グリセロール、グリシン、および前出の安定化剤の組合せから選択される、インフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物に対する安定化剤とを含み、以下の特徴：（ｉ）光学濃度により測定した前記ウイルス様粒子の凝集が、前記安定化剤を伴わない、インフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物と比較して低減していること；（ｉｉ）円偏光二色性またはＡＮＳ結合により測定したインフルエンザ抗原が、前記安定化剤を伴わない、インフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物と比較して安定化していること；および（ｉｉｉ）ラウルダン蛍光により測定した、前記ウイルス様粒子の脂質二重層の、温度により誘導される水和が、前記安定化剤を伴わない、インフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物と比較して低減していること
のうちの少なくとも１つを呈示する、インフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物。
（項目２４）
前記緩衝化を、リン酸バッファー、トリスバッファー、ＭＥＳバッファー、クエン酸バッファー、および他のＧＲＡＳバッファーからなる群から選択される緩衝剤を用いて実施する、項目２３に記載のインフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物。
（項目２５）
前記安定化剤が、トレハロース、ソルビトール、ジエタノールアミン、グリセロール、グリシン、および前出の安定化剤の組合せから選択され、そして前記特徴が（ｉ）である、項目２３に記載のインフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物。
（項目２６）
前記安定化剤が、トレハロース、ソルビトール、および前出の安定化剤の組合せから選択され、そして前記特徴が（ｉｉ）である、項目２３に記載のインフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物。
（項目２７）
前記安定化剤が、トレハロースおよびグリシンから選択され、そして前記特徴が（ｉｉｉ）である、項目２３に記載のインフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物。
（項目２８）
前記安定化剤がトレハロースであり、そして３つの特徴すべてが存在する、項目２３に記載のインフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物。
（項目２９）
前記インフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子が、赤血球凝集素ポリペプチドを含む、項目２３から２８のいずれか一項に記載のインフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物。
（項目３０）
前記インフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子が、ｇａｇポリペプチド、インフルエンザＭ１ポリペプチド、ニューカッスル病ウイルスマトリックスポリペプチド、エボラウイルスＶＰ４０ポリペプチド、およびマールブルグウイルスＶＰ４０ポリペプチドを含む群から選択される第２のポリペプチドを含む、項目２３から２９のいずれか一項に記載のインフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物。
（項目３１）
前記ｇａｇポリペプチドが、マウス白血病ウイルス、ヒト免疫不全ウイルス、アルファレトロウイルス、ベータレトロウイルス、ガンマレトロウイルス、デルタレトロウイルス、およびレンチウイルスからなる群から選択されるレトロウイルスに由来する、項目３０に記載のインフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物。
（項目３２）
前記ｇａｇポリペプチドが、マウス白血病ウイルスに由来する、項目３０に記載のインフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物。
（項目３３）
前記インフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子が、ノイラミニダーゼポリペプチドをさらに含む、項目２３から３２のいずれか一項に記載のインフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物。
（項目３４）
前記安定化剤が、単糖、ソルビトール、二糖、およびトレハロースから選択され、そして前記安定化量が、１０％（ｗ／ｗ）を超えるか、または少なくとも約２０％（ｗ／ｗ）である、項目２３から３３のいずれか一項に記載のインフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物。
（項目３５）
前記安定化させるステップが、ガラス形成を必要としない、項目２３から３４のいずれか一項に記載のインフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物。
（項目３６）
前記安定化量が、凝固時のガラス形成に必要とされる量未満である、項目２３から３５のいずれか一項に記載のインフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物。
（項目３７）
前記安定化剤が、スクロースではない、項目２３から３６のいずれか一項に記載のインフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物。
（項目３８）
前記インフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子と混合させたアジュバントをさらに含む、項目２３から３７のいずれか一項に記載のインフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物。
（項目３９）
前記アジュバントが、前記ウイルス様粒子の内部に配置される、項目３８に記載のインフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物。
（項目４０）
前記アジュバントが、前記ウイルス様粒子の外部に配置される、項目３８に記載のインフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物。
（項目４１）
前記アジュバントを、前記第２のポリペプチドに共有結合させて、共有結合を形成させる、項目３８から４０のいずれか一項に記載のインフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物。
（項目４２）
前記アジュバントを、前記赤血球凝集素ポリペプチドに共有結合させて、共有結合を形成させる、項目３８から４０のいずれか一項に記載のインフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物。
（項目４３）
前記アジュバントが、フラジェリンのアジュバント活性断片を含む、項目３８から４２のいずれか一項に記載のインフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物。
（項目４４）
インフルエンザを治療または予防する方法であって、対象に、免疫原性量の、項目２３から４３のいずれか一項に記載のインフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物、または項目１から２１のいずれか一項に記載の方法に従い安定化させた、免疫原性量の、インフルエンザ抗原のエンベロープウイルスベースのウイルス様粒子調製物を含有する溶液を投与するステップを含む方法。
（項目４５）
前記投与するステップが、前記対象において防御的免疫反応を誘導する、項目４４に記載の方法。
（項目４６）
前記投与するステップが、皮下（ｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓ）送達、経皮送達、皮内送達、皮下（ｓｕｂｄｅｒｍａｌ）送達、筋肉内送達、経口（ｐｅｒｏｒａｌ）送達、経口（ｏｒａｌ）送達、鼻腔内送達、頬送達、舌下送達、腹腔内送達、膣内送達、肛門送達、および頭蓋内送達からなる群から選択される、項目４４に記載の方法。