【手続補正書】
【提出日】平成26年5月19日(2014.5.19)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
出口および入口を有するチャンバーを画定する少なくとも１つの壁、
湿潤バリアと出口との間にある分離媒体空間と、湿潤バリアと入口との間にある試料受入領域とを画定するように、出口と入口との間に配置される湿潤バリア、および
湿潤バリアに近接して配置され、リン脂質に対して特異的親和性を有する分離媒体
を含み、
湿潤バリアが、（ｉ）第１の力の下で、試料受入領域において、液体試料およびタンパク質沈殿剤を保持し、これにより、タンパク質沈殿物および処理された試料の形成を容易にし、（ｉｉ）第１の力よりも大きい第２の力の下で、処理された試料を湿潤バリアおよび分離媒体に流し、これにより、試料受入領域においてタンパク質沈殿物を保持し、分離媒体においてリン脂質を保持し、小分子を溶出するように適合される、
１種以上のタンパク質、リン脂質および小分子を潜在的に含む液体試料を分離するための機器。
【請求項２】
第２の力が、チャンバーにわたる４”Ｈｇより大きい流体差圧またはこれに事実上等しい遠心力である、請求項１に記載の機器。
【請求項３】
湿潤バリアと一体化したまたは分離媒体と入口との間に配置される、第１フリットをさらに含み、第１フリットが、第２の力よりも大きい第３の力の下で、試料受入領域においてタンパク質沈殿薬を保持するように適合された複数の開口部を含む、請求項１に記載の機器。
【請求項４】
第３の力が、チャンバーにわたる少なくとも２０”Ｈｇの流体差圧またはこれに事実上等しい遠心力である、請求項１に記載の機器。
【請求項５】
リン脂質を保持することが、分離媒体において、リン脂質の少なくとも８５％を保持することを含む、請求項１に記載の機器。
【請求項６】
リン脂質を保持することが、分離媒体において、リン脂質の少なくとも９０％を保持することを含む、請求項１に記載の機器。
【請求項７】
リン脂質を保持することが、分離媒体において、リン脂質の少なくとも９５％を保持することを含む、請求項１に記載の機器。
【請求項８】
（ｉ）出口および入口を有するチャンバーを画定する少なくとも１つの壁、（ｉｉ）湿潤バリアと出口との間にある分離媒体空間と、湿潤バリアと入口との間にある試料受入領域とを画定するように、出口と入口との間に配置される湿潤バリア、および（ｉｉｉ）湿潤バリアに近接して配置され、リン脂質に対して特異的親和性を有する分離媒体を提供するステップ、
第１の力の下で、試料受入領域において、液体試料およびタンパク質沈殿剤を接触させ、これにより、タンパク質沈殿物および処理された試料を形成するステップ、および
第１の力よりも大きい第２の力の下で、処理された試料を湿潤バリアおよび分離媒体に流し、これにより、試料受入領域において、タンパク質沈殿物の少なくとも一部を保持し、分離媒体においてリン脂質を保持し、小分子を溶出するステップ
を含む、
１種以上のタンパク質、リン脂質および小分子を潜在的に含む液体試料を分離するための方法。
【請求項９】
第２の力が、チャンバーにわたる４”Ｈｇより大きい流体差圧またはこれに事実上等しい遠心力である、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
湿潤バリアと一体化したまたは分離媒体と入口との間に配置される、第１フリット（ｉｖ）を提供することさらに含み、第１フリットが、第２の力よりも大きい第３の力の下で、試料受入領域においてタンパク質沈殿薬を保持するように適合された複数の開口部を含む、請求項８に記載の方法。
【請求項１１】
第３の力が、チャンバーにわたる少なくとも２０”Ｈｇの流体差圧またはこれに事実上等しい遠心力である、請求項８に記載の方法。
【請求項１２】
リン脂質を保持することが、分離媒体において、リン脂質の少なくとも８５％を保持することを含む、請求項８に記載の方法。
【請求項１３】
リン脂質を保持することが、分離媒体において、リン脂質の少なくとも９０％を保持することを含む、請求項８に記載の方法。
【請求項１４】
リン脂質を保持することが、分離媒体において、リン脂質の少なくとも９５％を保持することを含む、請求項８に記載の方法。
【請求項１５】
前記分離媒体が、下式１に表すコア組成物および表面組成物
Ｗ−［Ｘ］−Ｑ
式１
（上で使用する、Ｘは、コア組成物を表し、ＷおよびＱは、Ｘではないコアまたは表面組成物の自由原子価を占有する；ＷおよびＱが前記表面組成物を形成するように、Ｗは、水素またはヒドロキシル基であり、Ｑは、水素、ヒドロキシルおよび脂肪族シラン基の群から選択される。）
を有する、請求項１に記載の機器。
【請求項１６】
Ｑが、脂肪族シラン基であり、前記脂肪族基が、６から３０個の炭素を含む、請求項１５に記載の機器。
【請求項１７】
Ｑが、Ｚ−Ｒ１およびＺ−Ｒ２から選択され、式中、Ｒ１が、高級アルキルであり、Ｒ２が、低級アルキルであり、Ｚが、コア材料Ｘに結合したシリコン、シロキサン、金属または金属酸化物を表し、および前記Ｚの開放原子価が、水素またはヒドロキシル、Ｒ１またはＲ２である、請求項１６に記載の機器。
【請求項１８】
Ｗが、少なくとも１つの極性基を有するように選択され、Ｑが、少なくとも１つの疎水性基を有するように選択され、前記極性基および疎水性基が３．５−１３．６の比率を定義する、請求項１６に記載の機器。
【請求項１９】
前記分離媒体が、０．００１−０．５ｍｍの直径を有する粒子形態をとる、請求項１に記載の機器。
【請求項２０】
少なくとも一部分のＷが、ヒドロキシルであり、およびＱが、脂肪族基であり、前記ヒドロキシルおよび脂肪族基が、濃度比率を形成する、前記表面上の濃度を有し、Ｓｉ−Ｒ１に対するヒドロキシルの前記比率が、３．５−１３．６である、請求項１５に記載の機器。
【請求項２１】
前記分離媒体が、０．５から１．７ｃｍ３／ｇの細孔容積を有する多孔質モノリス材料である、請求項１に記載の機器。
【請求項２２】
前記分離媒体が、下式１に表すコア組成物および表面組成物
Ｗ−［Ｘ］−Ｑ
式１
（上で使用する、Ｘは、コア組成物を表し、ＷおよびＱは、Ｘではないコアまたは表面組成物の自由原子価を占有する；ＷおよびＱが前記表面組成物を形成するように、Ｗは、水素またはヒドロキシル基であり、Ｑは、水素、ヒドロキシルおよび脂肪族シラン基の群から選択される。）
を有する、請求項８に記載の方法。
【請求項２３】
Ｑが、脂肪族シラン基であり、前記脂肪族基が、６から３０個の炭素を含む、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
Ｑが、Ｚ−Ｒ１およびＺ−Ｒ２から選択され、式中、Ｒ１が、高級アルキルであり、Ｒ２が、低級アルキルであり、Ｚが、コア材料Ｘに結合したシリコン、シロキサン、金属または金属酸化物を表し、および前記Ｚの開放原子価が、水素またはヒドロキシル、Ｒ１またはＲ２である、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
Ｗが、少なくとも１つの極性基を有するように選択され、Ｑが、少なくとも１つの疎水性基を有するように選択され、前記極性基および疎水性基が３．５−１３．６の比率を定義する、請求項２３に記載の方法。
【請求項２６】
前記分離媒体が、０．００１−０．５ｍｍの直径を有する粒子形態をとる、請求項８に記載の方法。
【請求項２７】
少なくとも一部分のＷが、ヒドロキシルであり、およびＱが、脂肪族基であり、前記ヒドロキシルおよび脂肪族基が、濃度比率を形成する、前記表面上の濃度を有し、Ｓｉ−Ｒ１に対するヒドロキシルの前記比率が、３．５−１３．６である、請求項２２に記載の方法。
【請求項２８】
前記分離媒体が、０．５から１．７ｃｍ３／ｇの細孔容積を有する多孔質モノリス材料である、請求項８に記載の方法。