【手続補正書】
【提出日】平成24年7月23日(2012.7.23)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
キメラ抗ＣＤ２０抗体、ヒト化抗ＣＤ２０抗体もしくはヒト抗ＣＤ２０抗体またはその抗原結合フラグメントを改善する方法であって、キメラ抗ＣＤ２０抗体、ヒト化抗ＣＤ２０抗体もしくはヒト抗ＣＤ２０抗体またはその抗原結合フラグメントの重鎖の第３の相補性決定領域（ＣＤＲ）において少なくとも１つのアミノ酸置換を行なって、置換された抗体または抗原結合フラグメントを作製することを含み、前記置換された抗体またはその抗原結合フラグメントが、より遅い解離速度と、より遅い抗原解離率と、より高いＣＤＣ活性と、より高いＡＤＣＣ活性と、より高いアポトーシス活性と、架橋結合の非存在下で、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで細胞死を誘発するより大きな能力と、ＣＤ２０陽性細胞を有する被験者に投与されると、ＣＤ２０陽性細胞の増殖をｉｎ  ｖｉｖｏで殺滅または抑制するより大きな能力とからなる群から選択される少なくとも１つの改善された特性を有する前記方法。
【請求項２】
前記ＣＤ２０陽性細胞がＢ細胞である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記置換が抗体の重鎖ＣＤＲ３（ＣＤＲＨ３）のカバット１０１位にある、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
前記置換が、カバット１０１位でのアスパラギン残基をアスパラギン酸残基と置換すること含む、請求項１から３までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
前記置換された抗体が、カバット９４位でアルギニン残基を含み、カバット１０１位のアスパラギン酸残基がカバット９４位でアルギニン残基とイオン結合を形成する、請求項１から４までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
前記置換された抗体またはそのフラグメントが、リツキシマブのＣＤ２０に結合することを抑制する、請求項１から５までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
前記置換された抗体がベルツズマブである、請求項１から６までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
カバット１０１位でのアスパラギンのアスパラギン酸への置換が、ＣＤ２０から抗ＣＤ２０抗体が解離する速度を少なくとも２倍遅くする、請求項１から７までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
前記非置換抗体のＣＤＲ配列が、マウス抗ＣＤ２０抗体のＣＤＲ配列と同一である、請求項１から８までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
前記マウス抗ＣＤ２０抗体が、軽鎖ＣＤＲ配列ＣＤＲＬ１（ＲＡＳＳＳＶＳＹＩＨ）、ＣＤＲＬ２（ＡＴＳＮＬＡＳ）およびＣＤＲＬ３（ＱＱＷＴＳＮＰＰＴ）ならびに重鎖ＣＤＲ配列ＣＤＲＨ１（ＳＹＮＭＨ）、ＣＤＲＨ２（ＡＩＹＰＧＮＧＤＴＳＹＮＱＫＦＫＧ）およびＣＤＲＨ３（ＳＴＹＹＧＧＤＷＹＦＮＶ）を含む、請求項１から９までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
前記置換された抗ＣＤ２０抗体またはそのフラグメントが、軽鎖ＣＤＲ配列  ＣＤＲＬ１（ＲＡＳＳＳＶＳＹＩＨ）、ＣＤＲＬ２（ＡＴＳＮＬＡＳ）およびＣＤＲＬ３（ＱＱＷＴＳＮＰＰＴ）ならびに重鎖ＣＤＲ配列ＣＤＲＨ１（ＳＹＮＭＨ）、ＣＤＲＨ２（ＡＩＹＰＧＮＧＤＴＳＹＮＱＫＦＫＧ）およびＣＤＲＨ３（ＳＴＹＹＧＧＤＷＹＦＤＶ）を含む、請求項１から１０までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
前記ヒト化抗ＣＤ２０抗体が、ヒト化抗ＣＤ２２抗体であるエプラツズマブのフレームワーク領域配列、またはヒト化抗ＣＤ２０抗体であるベルツズマブのフレームワーク領域配列、を含む、請求項１から１１までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
カバット１０１位でのアスパラギンのアスパラギン酸残基への置換が、抗体に曝されたＤａｕｄｉ細胞の補体依存性細胞傷害の増加をもたらす、請求項１から１２までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
カバット１０１位でのアスパラギンのアスパラギン酸残基への置換が、抗体に曝されたＤａｕｄｉ細胞の補体依存性細胞傷害のＥＣ50において３０〜４０％の減少をもたらす、請求項１から１３までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
疾患治療用の、請求項２に記載の方法によって作製された置換されたキメラ抗ＣＤ２０抗体、ヒト化抗ＣＤ２０抗体もしくはヒト抗ＣＤ２０抗体またはその抗原結合フラグメントであって、
前記疾患がＢ細胞媒介免疫疾患、自己免疫疾患、Ｂ細胞性リンパ腫と白血病、移植片対宿主疾患、臓器移植拒絶反応、免疫性溶血性貧血、同種感作、およびクリオグロブリン血症からなる群から選択される、前記置換された抗ＣＤ２０抗体またはそのフラグメント。
【請求項１６】
前記疾患が、免疫性血小板減少性紫斑病、全身性エリテマトーデス、シェーグレン症候群、エバンス症候群、関節炎、動脈炎、尋常天疱瘡、腎臓移植片拒絶、心臓移植片拒絶、関節リウマチ、バーキットリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、濾胞性リンパ腫、小リンパ球性リンパ腫、びまん性Ｂ細胞性リンパ腫、周辺帯リンパ腫、慢性リンパ性白血病、急性リンパ性白血病と多発性骨髄腫である、請求項１５に記載の置換された抗ＣＤ２０抗体またはそのフラグメント。
【請求項１７】
裸の抗体またはそのフラグメントである、請求項１５又は１６に記載の置換された抗ＣＤ２０抗体またはそのフラグメント。
【請求項１８】
前記置換された抗体またはそのフラグメントの投与の前、同時に、または投与後に、少なくとも１つの治療薬を被験者に投与するための、請求項１５から１７までのいずれか１項に記載の置換された抗ＣＤ２０抗体またはそのフラグメント。
【請求項１９】
少なくとも１つの治療薬に複合されている、請求項１５から１８までのいずれか１項に記載の置換された抗ＣＤ２０抗体またはそのフラグメント。
【請求項２０】
２００ｍｇ以下、より好ましくは１００ｍｇ以下、より好ましくは８０ｍｇ以下、より好ましくは５０ｍｇ以下、最も好ましくは３０ｍｇ以下の投与量で前記被験者に非経口的に投与され、前記投与がＢ細胞媒介免疫疾患、自己免疫疾患、他のＢ細胞関連免疫疾患、Ｂ細胞性リンパ腫または白血病を治療するために使用される、請求項１５から１９までのいずれか１項に記載の置換された抗ＣＤ２０抗体またはそのフラグメント。
【請求項２１】
１〜３週間の間隔で２回以上前記被験者に投与するための、請求項１５から２０までのいずれか１項に記載の置換された抗ＣＤ２０抗体またはそのフラグメント。
【請求項２２】
前記投与が静脈内投与または皮下投与である、請求項１５から２１までのいずれか１項に記載の置換された抗ＣＤ２０抗体またはそのフラグメント。
【請求項２３】
前記投与が皮下投与であり、ＣＤ２０陽性細胞を有する被験者に投与されるとき、ｉｎ  ｖｉｖｏでＣＤ２０陽性細胞の増殖を死滅させるまたは抑制するのに皮下投与が、静脈内投与よりもより効果的である、請求項１５から２２までのいずれか１項に記載の置換された抗ＣＤ２０抗体またはそのフラグメント。
【請求項２４】
前記被験者の末梢Ｂ細胞レベルを減少させるための、請求項１５から２３までのいずれか１項に記載の置換された抗ＣＤ２０抗体またはそのフラグメント。
【請求項２５】
８０ｍｇ／ｍ2ｉ．ｖ．または８０ｍｇｓ．ｃ．の単回投与によって前記被験者の末梢Ｂ細胞を減少させるための、請求項１５から２４までのいずれか１項に記載の置換された抗ＣＤ２０抗体またはそのフラグメント。
【請求項２６】
前記被験者に少なくとも１回投与されるとき、好ましくは２〜４回投与されるとき、８０ｍｇ／ｍ2未満のｉ．ｖ．または８０ｍｇ未満のｓ．ｃ．投与量で前記被験者の末梢Ｂ細胞を減少させるための、請求項１５から２５までのいずれか１項に記載の置換された抗ＣＤ２０抗体またはそのフラグメント。
【請求項２７】
必要に応じて前記被験者の再発を阻止するまたは治療するために、前記投与を繰り返すための、請求項１５から２６までのいずれか１項に記載の置換された抗ＣＤ２０抗体またはそのフラグメント。
【請求項２８】
前記置換された抗体がベルツズマブであり、リツキシマブに対して抵抗性である被験者へのベルツズマブの投与が前記疾患を治療するための、請求項１５から２７までのいずれか１項に記載の置換された抗ＣＤ２０抗体またはそのフラグメント。
【請求項２９】
前記治療薬が、放射性核種、ホウ素、免疫刺激剤、サイトカイン、ホルモン、ホルモン拮抗物質、酵素、酵素阻害剤、光活性治療薬、細胞傷害性薬物、毒素、血管新生阻害薬、オリゴヌクレオチド、干渉ＲＮＡ、第２の抗体またはそのフラグメントおよびそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１５から２８までのいずれか１項に記載の置換された抗ＣＤ２０抗体またはそのフラグメント。
【請求項３０】
前記治療薬が、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１０、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２、ＩＬ−１３、ＩＬ−１４、ＩＬ−１５、ＩＬ−１６、ＩＬ−１７、ＩＬ−１８、ＩＬ−２１、ＩＬ−２５、インターフェロン−α、インターフェロン‐β、インターフェロン−γ、ＴＮＦ−αおよび「Ｓ１因子」と命名された幹細胞増殖因子からなる群から選択される、請求項１５から２９までのいずれか１項に記載の置換された抗ＣＤ２０抗体またはそのフラグメント。