【手続補正書】
【提出日】平成23年5月10日(2011.5.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の式Ｉのコンジュゲートを含んでなるイメージング剤。
【化１】
2010526859.tif 000001
式中、
Ｚ１はｃＭＢＰのＮ末端に結合していて、Ｈ又はＭＩＧであり、
Ｚ２はｃＭＢＰのＣ末端に結合していて、ＯＨ、ＯＢｃ（式中、Ｂｃは生体適合性陽イオンである。）又はＭＩＧであり、
ｃＭＢＰは、下記のアミノ酸配列（配列番号１）を含む１７〜３０のアミノ酸のｃＭｅｔ結合環状ペプチドであり、
Ｃｙｓａ−Ｘ１−Ｃｙｓｃ−Ｘ２−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｘ３−Ｐｈｅ−Ｇｌｕ−
Ｃｙｓｄ−Ｔｒｐ−Ｃｙｓｂ−Ｔｙｒ−Ｘ４−Ｘ５−Ｘ６
（式中、Ｘ１はＡｓｎ、Ｈｉｓ又はＴｙｒであり、Ｘ２はＧｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ又はＡｓｎであり、Ｘ３はＴｈｒ又はＡｒｇであり、Ｘ４はＡｌａ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ又はＳｅｒであり、Ｘ５はＳｅｒ又はＴｈｒであり、Ｘ６はＡｓｐ又はＧｌｕであり、Ｃｙｓａ−ｄの各々はシステイン残基であって、残基ａ及びｂ並びに残部ｃ及びｄは環化して２つの独立したジスルフィド結合を形成している。）
ＭＩＧは、ペプチドのインビボ代謝を阻害又は抑制する生体適合性基からなる代謝阻害基であり、
Ｌは式−（Ａ）ｍ−（式中、Ａは独立に−ＣＲ２−、−ＣＲ＝ＣＲ−、−Ｃ≡Ｃ−、−ＣＲ２ＣＯ２−、−ＣＯ２ＣＲ２−、−ＮＲＣＯ−、−ＣＯＮＲ−、−ＮＲ（Ｃ＝Ｏ）ＮＲ−、−ＮＲ（Ｃ＝Ｓ）ＮＲ−、−ＳＯ２ＮＲ−、−ＮＲＳＯ２−、−ＣＲ２ＯＣＲ２−、−ＣＲ２ＳＣＲ２−、−ＣＲ２ＮＲＣＲ２−、Ｃ４−８シクロヘテロアルキレン基、Ｃ４−８シクロアルキレン基、Ｃ５−１２アリーレン基又はＣ３−１２ヘテロアリーレン基、或いはアミノ酸、糖又は単分散ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）構成単位であり、各Ｒは独立にＨ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ２−４アルケニル、Ｃ２−４アルキニル、Ｃ１−４アルコキシアルキル及びＣ１−４ヒドロキシアルキルから選択され、ｍは１〜２０の値を有する整数である。）の合成リンカー基であり、
ｎは０又は１の値を有する整数であり、
ＩＭは、６００〜１２００ｎｍの緑色乃至近赤外波長を有する光を用いて哺乳動物体のインビボイメージングを行うために適した光学レポーターイメージング成分である。
【請求項２】
配列番号１に加えて、ｃＭＢＰがさらにＣ−又はＮ−ｃＭＢＰペプチド末端の４アミノ酸残基中にＡｓｐ又はＧｌｕ残基を含み、−（Ｌ）ｎＩＭが前記Ａｓｐ又はＧｌｕ残基のカルボキシル側鎖に結合してアミド結合を与えるアミン基で官能化されている、請求項１記載のイメージング剤。
【請求項３】
配列番号１に加えて、ｃＭＢＰがさらにＣ−又はＮ−ｃＭＢＰペプチド末端の４アミノ酸残基中にＬｙｓ残基を含み、−（Ｌ）ｎＩＭが前記Ｌｙｓ残基のε−アミン側鎖に結合してアミド結合を与えるカルボキシル基で官能化されている、請求項１又は請求項２記載のイメージング剤。
【請求項４】
ｃＭＢＰが下記配列番号２又は配列番号３のアミノ酸配列を含む、請求項１乃至請求項３のいずれか１項に記載のイメージング剤。
Ｓｅｒ−Ｃｙｓａ−Ｘ１−Ｃｙｓｃ−Ｘ２−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｘ３−Ｐｈｅ−
Ｇｌｕ−Ｃｙｓｄ−Ｔｒｐ−Ｃｙｓｂ−Ｔｙｒ−Ｘ４−Ｘ５−Ｘ６（配列番号２）
Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓａ−Ｘ１−Ｃｙｓｃ−Ｘ２−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−
Ｘ３−Ｐｈｅ−Ｇｌｕ−Ｃｙｓｄ−Ｔｒｐ−Ｃｙｓｂ−Ｔｙｒ−Ｘ４−Ｘ５−Ｘ６−
Ｇｌｙ−Ｔｈｒ（配列番号３）
【請求項５】
配列番号１、配列番号２又は配列番号３に加えて、ｃＭＢＰがさらに−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−（配列番号４）、−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−（配列番号５）及び−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｌｙｓ−（配列番号６）から選択されるリンカーペプチドをＮ末端又はＣ末端に含む、請求項１乃至請求項４のいずれか１項に記載のイメージング剤。
【請求項６】
ｃＭＢＰが下記のアミノ酸配列（配列番号７）を有する、請求項５記載のイメージング剤。
Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓａ−Ｔｙｒ−Ｃｙｓｃ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−
Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｇｌｕ−Ｃｙｓｄ−Ｔｒｐ−Ｃｙｓｂ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−
Ｔｈｒ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ
【請求項７】
ＩＭが６００〜１０００ｎｍの範囲内に吸収極大を有する色素である、請求項１乃至請求項６のいずれか１項に記載のイメージング剤。
【請求項８】
ＩＭがシアニン色素である、請求項７記載のイメージング剤。
【請求項９】
シアニン色素が次の式ＩＩＩを有する、請求項８記載のイメージング剤。
【化２】
2010526859.tif 000002
式中、
Ｒ１及びＲ２は独立にＨ又はＳＯ３Ｍ１（式中、Ｍ１はＨ又はＢｃである。）であって、Ｒ１及びＲ２の少なくとも一方はＳＯ３Ｍ１であり、
Ｒ３及びＲ４独立にＣ１−４アルキル又はＣ１−６カルボキシアルキルであり、
Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７及びＲ８は独立にＲａ基（式中、ＲａはＣ１−４アルキル、Ｃ１−６カルボキシアルキル又は−（ＣＨ２）ｋＳＯ３Ｍ１であり、ｋは３又は４の値を有する整数である。）であるが、
シアニン色素がＲ１、Ｒ２及びＲａ基に合計１〜４個のＳＯ３Ｍ１置換基を有することを条件とする。
【請求項１０】
ｃＭＢＰが請求項６で定義した通りであり、Ｚ１がアセチルであり、Ｚ２が第一アミドであり、ＩＭが請求項３及び請求項９で定義した通りである、請求項１乃至請求項１３のいずれか１項に記載のイメージング剤。
【請求項１１】
請求項１乃至請求項１０のいずれか１項に記載のイメージング剤を、哺乳動物への投与に適した形態で生体適合性キャリヤーと共に含んでなる医薬品組成物。
【請求項１２】
請求項１乃至請求項１０のいずれか１項に記載のイメージング剤の製造方法であって、
（ｉ）Ｚ１がＨでありかつＺ２がＭＩＧである式Ｚ１−［ｃＭＢＰ］−Ｚ２のｃＭＢＰペプチドを式Ｙ１−（Ｌ）ｎ−［ＩＭ］の化合物と反応させることで、［ＩＭ］がＺ１位置に結合した式Ｉのイメージング剤を得る段階、
（ii）Ｚ１＝Ｚ２＝ＭＩＧであり、ｃＭＢＰがＣ−又はＮ−ｃＭＢＰペプチド末端の４アミノ酸残基中にＡｓｐ又はＧｌｕ残基を含み、かつｃＭＢＰペプチドの他のＡｓｐ／Ｇｌｕ残基のすべてが保護されている式Ｚ１−［ｃＭＢＰ］−Ｚ２のｃＭＢＰペプチドを式Ｙ１−（Ｌ）ｎ−［ＩＭ］の化合物と反応させることで、［ＩＭ］がｃＭＢＰペプチドの前記Ａｓｐ又はＧｌｕ残基の位置に結合した式Ｉのイメージング剤を得る段階、
（iii）Ｚ１がＭＩＧであり、Ｚ３がＺ２基又は活性化エステルであり、かつｃＭＢＰペプチドの他のＡｓｐ／Ｇｌｕ残基のすべてが保護されている式Ｚ１−［ｃＭＢＰ］−Ｚ３のｃＭＢＰペプチドを式Ｙ２−（Ｌ）ｎ−［ＩＭ］の化合物と反応させることで、［ＩＭ］がＺ２位置に結合した式Ｉのイメージング剤を得る段階、及び
（iv）Ｚ１＝Ｚ２＝ＭＩＧであり、かつｃＭＢＰがＣ−又はＮ−ｃＭＢＰペプチド末端の４アミノ酸残基中にＬｙｓを含む式Ｚ１−［ｃＭＢＰ］−Ｚ２のｃＭＢＰペプチドを式Ｙ１−（Ｌ）ｎ−［ＩＭ］の化合物と反応させることで、［ＩＭ］がｃＭＢＰペプチドのＬｙｓ残基の位置に結合した式Ｉのイメージング剤を得る段階
の１つを含んでなり、式中のＺ１、ｃＭＢＰ、Ｚ２、ＭＩＧ、Ｌ、ｎ及びＩＭは請求項１で定義した通りであり、Ｚ３はＺ２基又は活性化エステルであり、Ｙ１はカルボン酸、活性化エステル、イソチオシアネート基又はチオシアネート基であり、Ｙ２はアミン基である、方法。
【請求項１３】
請求項１１記載の医薬品組成物を製造するためのキットであって、当該キットは請求項１乃至請求項１０のいずれか１項に記載のイメージング剤を無菌固体形態で含んでいて、請求項１１記載の生体適合性キャリヤーの無菌供給物で再構成すれば溶解が起こって所望の医薬品組成物が得られる、キット。
【請求項１４】
哺乳動物の身体のインビボ光学イメージング方法に用いられる医薬品組成物の製造に用いられる請求項１乃至請求項１０のいずれか１項に記載のイメージング剤であって、インビボでのｃＭｅｔの過剰発現又は局在の画像化部位を含むイメージング剤。
【請求項１５】
前記インビボ光学イメージングが、病気進行の検出、ステージング、診断、モニタリング又は結腸直腸癌（ＣＲＣ）の治療のモニタリングの方法を含む、請求項１４記載のイメージング剤。