【誤訳訂正書】
【提出日】平成24年2月10日(2012.2.10)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
アマドリアーゼの酵素活性を有する単離されたキメラタンパク質であって、該キメラタンパク質は、Ｎ末端からＣ末端に向かって：
ａ）配列番号１に示されるアミノ酸配列を含む、第１のペプチジル断片；
ｂ）アマドリアーゼを含む、第２のペプチジル断片であって、該アマドリアーゼが、配列番号３：
【化１】
2007531499.tif 000001
に示されるアミノ酸に対して少なくとも９０％の同一性を有し、該同一性のパーセントは、配列番号３に示されるアミノ酸配列に対して同じ大きさのアミノ酸配列の全体に関して決定される、第２のペプチジル断片；および
ｃ）配列番号４に示されるアミノ酸配列を含む、第３のペプチジル断片
を含む、単離されたキメラタンパク質。
【請求項２】
前記第１のペプチジル断片が、２０個のアミノ酸残基を含む、請求項１に記載の単離されたキメラタンパク質。
【請求項３】
前記アマドリアーゼが、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｓｐ．起源である、請求項１に記載の単離されたキメラタンパク質。
【請求項４】
前記アマドリアーゼが補因子としてＦＡＤを使用する、請求項３に記載の単離されたキメラタンパク質。
【請求項５】
前記アマドリアーゼが、ＦＡＤ補因子結合コンセンサス配列Ｇｌｙ−Ｘ−Ｇｌｙ−Ｘ−Ｘ−Ｇｌｙ（配列番号２）を有し、Ｘは任意のアミノ酸残基である、請求項４に記載の単離されたキメラタンパク質。
【請求項６】
前記アマドリアーゼが、アマドリアーゼＩＩからなる群より選択される、請求項３に記載の単離されたキメラタンパク質。
【請求項７】
前記アマドリアーゼが、配列番号３に示されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の同一性を有する、請求項１に記載の単離されたキメラタンパク質。
【請求項８】
前記アマドリアーゼが、配列番号３に示されるアミノ酸配列に対して少なくとも９９％の同一性を有する、請求項１に記載の単離されたキメラタンパク質。
【請求項９】
前記アマドリアーゼが、配列番号３に示されるアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の単離されたキメラタンパク質。
【請求項１０】
前記第１のペプチジル断片と第２のペプチジル断片とが、切断可能な連結によって連結されている、請求項１に記載の単離されたキメラタンパク質。
【請求項１１】
前記第３のペプチジル断片が２０個のアミノ酸残基を含む、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の単離されたキメラタンパク質。
【請求項１２】
さらに、そのＣ末端に、ペプチドタグを含む第４のペプチジル断片を含む、請求項１に記載の単離されたキメラタンパク質。
【請求項１３】
前記ペプチドタグが、ＦＬＡＧタグ、ＨＡタグ、ＨＡ１タグ、ｃ−Ｍｙｃタグ、６−Ｈｉｓタグ、ＡＵ１タグ、ＥＥタグ、Ｔ７タグ、４Ａ６タグ、εタグ、Ｂタグ、ｇＥタグおよびＴｙ１タグからなる群より選択される、請求項１２に記載の単離されたキメラタンパク質。
【請求項１４】
単離されたキメラタンパク質であって、配列番号５：
【化２】
2007531499.tif 000002
に示されるアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の単離されたキメラタンパク質。
【請求項１５】
請求項１〜１４のいずれか１項に記載のキメラタンパク質をコードするヌクレオチド配列を含む、単離された核酸。
【請求項１６】
請求項１４に記載のキメラタンパク質をコードするヌクレオチド配列を含む、単離された核酸。
【請求項１７】
請求項１５に記載の核酸であって、配列番号６：
【化３−１】
2007531499.tif 000003
【化３−２】
2007531499.tif 000004
に示されるヌクレオチド配列を含む、核酸。
【請求項１８】
請求項１５に記載のヌクレオチド配列に相補的なヌクレオチド配列を含む、単離された核酸。
【請求項１９】
請求項１５〜１８のいずれか１項に記載の核酸を含む、組み換え細胞。
【請求項２０】
キメラタンパク質を生成する方法であって、請求項１５〜１８のいずれか１項に記載の核酸を含む組み換え細胞を増殖させて、前記コードされたキメラタンパク質を該細胞によって発現させる工程、および発現されたキメラタンパク質を回収する工程を含む、方法。
【請求項２１】
請求項２０に記載の方法によって生成されるキメラタンパク質。
【請求項２２】
試料中の糖化タンパク質に関してアッセイするための方法であって：
ａ）アッセイされるべき試料をプロテアーゼと接触させて、糖化タンパク質が該試料中に含まれている場合、該糖化タンパク質から糖化ペプチドまたは糖化アミノ酸を生成する工程；
ｂ）該生成した糖化ペプチドまたは糖化アミノ酸を、請求項１〜１４および２１のいずれか１項に記載のキメラタンパク質と接触させて、該糖化ペプチドまたは糖化アミノ酸を酸化させる工程；ならびに、
ｃ）該キメラタンパク質による該糖化ペプチドまたは糖化アミノ酸の酸化を評価して、該試料中における該糖化タンパク質の存在および／または量を決定する工程、
を含む、方法。
【請求項２３】
前記試料が血液試料である、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記血液試料が、血漿試料、血清試料、赤血球試料または全血試料である、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記アッセイされるべき糖化タンパク質が、グリコアルブミンまたはグリコヘモグロビンである、請求項２２に記載の方法。
【請求項２６】
前記プロテアーゼが、エンド型プロテアーゼまたはエキソ型プロテアーゼである、請求項２２に記載の方法。
【請求項２７】
前記エンド型プロテアーゼが、トリプシン、α−キモトリプシン、スブチリシン、プロテイナーゼＫ、パパイン、カテプシンＢ、ペプシン、サーモリシン、プロテアーゼＸＶＩＩ、プロテアーゼＸＸＩ、リシル−エンドペプチダーゼ、プロレターおよびブロメラインＦからなる群より選択される、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記エキソ型プロテアーゼがアミノペプチダーゼまたはカルボキシペプチダーゼである、請求項２６に記載の方法。
【請求項２９】
前記プロテアーゼが、プロテイナーゼＫ、プロナーゼＥ、アナニン、サーモリシン、スブチリシン、およびウシ膵臓プロテアーゼからなる群より選択される、請求項２２に記載の方法。
【請求項３０】
前記プロテアーゼが、２個から３０個のアミノ酸残基の糖化ペプチドを生成する、請求項２２に記載の方法。
【請求項３１】
前記プロテアーゼが、糖化グリシン残基、糖化バリン残基、または糖化リジン残基、あるいは糖化グリシン残基、糖化バリン残基もしくは糖化リジン残基を含む糖化ペプチドを生成する、請求項２２に記載の方法。
【請求項３２】
前記キメラタンパク質が、配列番号５に示されるアミノ酸配列を含む、請求項２２に記載の方法。
【請求項３３】
前記キメラタンパク質が配列番号６に示されるヌクレオチド配列によってコードされる、請求項２２に記載の方法。
【請求項３４】
前記糖化ペプチドまたは糖化アミノ酸の酸化が、酸化反応における糖化ペプチドもしくは糖化アミノ酸、Ｈ２Ｏ、またはＯ２の消費、あるいは酸化反応における酸化されたグルコース（グルコソン）、Ｈ２Ｏ２、またはアミノ酸の形成を評価することによって評価される、請求項２２に記載の方法。
【請求項３５】
前記Ｏ２の消費が酸素電極によって評価される、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
前記Ｈ２Ｏ２の形成がペルオキシダーゼによって評価される、請求項３４に記載の方法。
【請求項３７】
前記ペルオキシダーゼが西洋ワサビペルオキシダーゼである、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記Ｈ２Ｏ２の形成が、ペルオキシダーゼとトリンダー反応とによって評価される、請求項３６に記載の方法。
【請求項３９】
前記糖化ペプチドまたは糖化アミノ酸が、キメラタンパク質およびペルオキシダーゼと、順次または同時に接触させられる、請求項３６に記載の方法。
【請求項４０】
前記グルコソンの形成が、グルコースオキシダーゼによって評価される、請求項３４に記載の方法。
【請求項４１】
前記グルコソンの形成が、グルコース６−リン酸デヒドロゲナーゼとヘキソキナーゼとの組み合わせによって評価される、請求項３４に記載の方法。
【請求項４２】
前記プロテアーゼが、前記糖化ペプチドまたは糖化アミノ酸と前記キメラタンパク質との間での接触の前、または該接触と同時に不活化される、請求項２２に記載の方法。
【請求項４３】
前記プロテアーゼが熱処理または該プロテアーゼの阻害因子によって不活化される、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
アスコルビン酸塩による妨害が、銅（ＩＩ）化合物、コール酸もしくはジスルホン酸バソフェナントロリン、またはそれらの混合物を使用して阻止される、請求項２２に記載の方法。
【請求項４５】
ビリルビンによる妨害が、フェロシアン化物塩を使用して阻止される、請求項２２に記載の方法。
【請求項４６】
疾患または障害の予後診断または診断を補助するために使用される、請求項２２に記載の方法。
【請求項４７】
前記疾患または障害が糖尿病である、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
試料中の糖化タンパク質に関してアッセイするためのキットであって、該キットは、以下：
ａ）糖化タンパク質が試料中に含まれている場合に該糖化タンパク質から糖化ペプチドまたは糖化アミノ酸を生成するための、プロテアーゼ；
ｂ）該糖化ペプチドまたは糖化アミノ酸を酸化するための、請求項１〜１４および２１のいずれか１項に記載のキメラタンパク質；ならびに、
ｃ）該キメラタンパク質による該糖化ペプチドまたは糖化アミノ酸の酸化を評価して、該試料中における該糖化タンパク質の存在および／または量を決定するための手段
を含む、キット。
【請求項４９】
前記キメラタンパク質による前記糖化ペプチドまたは糖化アミノ酸の酸化を評価するための手段が、ペルオキシダーゼを含む、請求項４８に記載のキット。
【請求項５０】
前記キメラタンパク質とペルオキシダーゼとが単一の組成物中に処方されている、請求項４９に記載のキット。
【請求項５１】
試料中の糖化タンパク質に関してアッセイするための方法であって、該方法は、以下：
ａ）アッセイされるべき試料をプロテイナーゼＫと接触させて、糖化タンパク質が該試料中に含まれている場合、該糖化タンパク質から糖化ペプチドまたは糖化アミノ酸を生成する工程；
ｂ）該生成された糖化ペプチドまたは糖化アミノ酸を、アマドリアーゼと接触させて、該糖化ペプチドまたは糖化アミノ酸を酸化させる工程であって、該アマドリアーゼはキメラタンパク質を含み、該キメラタンパク質は、Ｎ末端からＣ末端に向かって：
ｉ）配列番号１に示されるアミノ酸配列を含む、第１のペプチジル断片；
ｉｉ）アマドリアーゼを含む、第２のペプチジル断片であって、該アマドリアーゼが、配列番号３：
【化４】
2007531499.tif 000005
に示されるアミノ酸に対して少なくとも９０％の同一性を有し、該同一性のパーセントは、配列番号３に示されるアミノ酸配列に対して同じ大きさのアミノ酸配列の全体に関して決定される、第２のペプチジル断片；および
ｉｉｉ）配列番号４に示されるアミノ酸配列を含む、第３のペプチジル断片
を含む、工程；ならびに、
ｃ）該アマドリアーゼによる該糖化ペプチドまたは糖化アミノ酸の酸化を評価して、該試料中における該糖化タンパク質の存在および／または量を決定する工程
を含む、方法。
【請求項５２】
前記試料が血液試料である、請求項５１に記載の方法。
【請求項５３】
前記血液試料が、血漿試料、血清試料、赤血球試料、または全血試料である、請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】
前記アッセイされるべき糖化タンパク質が、グリコアルブミンまたはグリコヘモグロビンである、請求項５１に記載の方法。
【請求項５５】
前記キメラタンパク質が、配列番号５に示されるアミノ酸配列を含む、請求項５１に記載の方法。
【請求項５６】
前記キメラタンパク質が、配列番号６に示されるヌクレオチド配列によってコードされる、請求項５１に記載の方法。
【請求項５７】
前記糖化ペプチドまたは糖化アミノ酸の酸化が、酸化反応における該糖化ペプチドもしくは糖化アミノ酸、Ｈ２Ｏ、またはＯ２の消費、あるいは酸化反応における酸化されたグルコース（グルコソン）、Ｈ２Ｏ２、またはアミノ酸の形成を評価することによって評価される、請求項５１に記載の方法。
【請求項５８】
前記Ｏ２の消費が酸素電極によって評価される、請求項５７に記載の方法。
【請求項５９】
前記Ｈ２Ｏ２の形成がペルオキシダーゼによって評価される、請求項５７に記載の方法。
【請求項６０】
前記ペルオキシダーゼが西洋ワサビペルオキシダーゼである、請求項５９に記載の方法。
【請求項６１】
前記Ｈ２Ｏ２の形成がペルオキシダーゼとトリンダー反応とによって評価される、請求項５９に記載の方法。
【請求項６２】
前記糖化ペプチドまたは糖化アミノ酸が、前記アマドリアーゼおよびペルオキシダーゼと、順次または同時に接触させられる、請求項５９に記載の方法。
【請求項６３】
前記グルコソンの形成が、グルコースオキシダーゼによって評価される、請求項５７に記載の方法。
【請求項６４】
前記グルコソンの形成が、グルコース６−リン酸デヒドロゲナーゼとヘキソキナーゼとの組み合わせによって評価される、請求項５７に記載の方法。
【請求項６５】
前記プロテイナーゼＫが、前記糖化ペプチドまたは糖化アミノ酸と前記アマドリアーゼとの間での接触の前、または該接触と同時に不活化される、請求項５１に記載の方法。
【請求項６６】
前記プロテイナーゼＫが熱処理または該プロテイナーゼＫの阻害因子によって不活化される、請求項６５に記載の方法。
【請求項６７】
アスコルビン酸塩による妨害が、銅（ＩＩ）化合物、コール酸もしくはジスルホン酸バソフェナントロリン、またはそれらの混合物を使用して阻止される、請求項５１に記載の方法。
【請求項６８】
ビリルビンによる妨害が、フェロシアン化物塩を使用して阻止される、請求項５１に記載の方法。
【請求項６９】
疾患または障害の予後診断または診断を補助するために使用される、請求項５１に記載の方法。
【請求項７０】
前記疾患または障害が糖尿病である、請求項６９に記載の方法。
【請求項７１】
試料中の糖化タンパク質に関してアッセイするためのキットであって、該キットは、以下：
ａ）糖化タンパク質が該試料中に含まれている場合に該糖化タンパク質から糖化ペプチドまたは糖化アミノ酸を生成するための、プロテイナーゼＫ；
ｂ）該糖化ペプチドまたは糖化アミノ酸を酸化させるための、アマドリアーゼであって、該アマドリアーゼはキメラタンパク質を含み、該キメラタンパク質は、Ｎ末端からＣ末端に向かって：
ｉ）配列番号１に示されるアミノ酸配列を含む、第１のペプチジル断片；
ｉｉ）アマドリアーゼを含む、第２のペプチジル断片であって、該アマドリアーゼが、配列番号３：
【化５】
2007531499.tif 000006
に示されるアミノ酸に対して少なくとも９０％の同一性を有し、該同一性のパーセントは、配列番号３に示されるアミノ酸配列に対して同じ大きさのアミノ酸配列の全体に関して決定される、第２のペプチジル断片；および
ｉｉｉ）配列番号４に示されるアミノ酸配列を含む、第３のペプチジル断片
を含む、アマドリアーゼ；ならびに、
ｃ）該アマドリアーゼによる該糖化ペプチドまたは糖化アミノ酸の酸化を評価して、該試料中における該糖化タンパク質の存在および／または量を決定するための手段
を含む、キット。
【請求項７２】
前記アマドリアーゼによる前記糖化ペプチドまたは糖化アミノ酸の酸化を評価するための手段が、ペルオキシダーゼを含む、請求項７１に記載のキット。
【請求項７３】
前記アマドリアーゼとペルオキシダーゼとが単一の組成物中に処方されている、請求項７２に記載のキット。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００８０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００８０】
所望される場合は、アッセイの妨害を計測することができる。例えば、アスコルビン酸塩による妨害を、銅（ＩＩ）化合物、コール酸、もしくはジスルホン酸バソフェナントロリン、またはそれらの混合物を使用して阻止することができる。ビリルビンによる妨害は、フェロシアン化物塩を使用して阻止することができる。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００９５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００９５】
所望される場合は、アッセイの妨害を計測することができる。例えば、アスコルビン酸
塩による妨害を、銅（ＩＩ）化合物、コール酸、またはジスルホン酸バソフェナントロリン、またはそれらの混合物を使用して阻止することができる。ビリルビンによる妨害は、フェロシアン化物塩を使用して阻止することができる。