【手続補正書】
【提出日】平成25年12月20日(2013.12.20)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも約９０質量％の総ＢＢＩタンパク質濃度を有するＢＢＩ生成物を精製する方法であって、
（ａ）大豆タンパク質および不純物を含んでなる大豆加工ストリームにクロマトグラフ分離を施すステップと；
（ｂ）任意選択的に、大豆タンパク質および不純物を含んでなる大豆加工ストリームに１つまたは複数の分離技術を施すステップと、
を含み、少なくとも約９０質量％の総ＢＢＩタンパク質濃度を有するＢＢＩ生成物が得られる方法。
【請求項２】
少なくとも約９０質量％の総ＢＢＩタンパク質濃度を有するＢＢＩ生成物を精製する方法であって、
（ａ）大豆タンパク質および不純物を含んでなる大豆加工ストリームに１つまたは複数の分離技術を施すステップと；
（ｂ）大豆タンパク質および不純物を含んでなる大豆加工ストリームにクロマトグラフ分離を施すステップと
を含み、少なくとも約９０質量％の総ＢＢＩタンパク質濃度を有するＢＢＩ生成物が得られる、方法。
【請求項３】
少なくとも約９０質量％の総ＢＢＩタンパク質濃度を有するＢＢＩ生成物を精製する方法であって、
（ａ）大豆タンパク質および不純物を含んでなる大豆加工ストリームに少なくとも１つの分離技術を施して、前記大豆タンパク質を含んでなる第１の透過液と、前記不純物を含んでなる第１の残余分を形成するステップと；
（ｂ）前記第１の透過液に少なくとも１つの分離技術を施して、不純物を含んでなる第２の透過液と、大量のタンパク質留分を含んでなる第２の残余分を形成するステップと；
（ｃ）少なくとも１つのクロマトグラフ分離に通過させるために、前記第２の残余分をキャリアストリームと合わせて、前記加工ストリーム中の他のタンパク質からＢＢＩタンパク質ストリームを単離するステップと；
（ｄ）前記ＢＢＩタンパク質ストリームを液体沈殿媒体と合わせ、それに少なくとも１つの分離技術を施して、沈殿ＢＢＩタンパク質画分を形成するステップと；
（ｅ）前記沈殿ＢＢＩタンパク質画分を液体洗浄剤と合わせて、可溶化ＢＢＩタンパク質画分を形成するステップと；
（ｆ）前記可溶化タンパク質画分に少なくとも１つの分離技術を施して、精製可溶化ＢＢＩタンパク質画分を形成するステップと；
（ｇ）前記精製可溶化タンパク質画分に少なくとも１つの分離操作を施して、精製ＢＢＩ生成物を形成するステップと
を含み、少なくとも約９０質量％の総ＢＢＩタンパク質濃度を有するＢＢＩ生成物が得られる、方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１９４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１９４】
本発明の例示的実施態様を以下に列挙する。
（１）少なくとも約９０質量％の総ＢＢＩタンパク質濃度を有するＢＢＩ生成物を精製する方法であって、
（ａ）大豆タンパク質および不純物を含んでなる大豆加工ストリームにクロマトグラフ分離を施すステップと；
（ｂ）任意選択的に、大豆タンパク質および不純物を含んでなる大豆加工ストリームに１つまたは複数の分離技術を施すステップと、
を含み、少なくとも約９０質量％の総ＢＢＩタンパク質濃度を有するＢＢＩ生成物が得られる方法。
（２）クロマトグラフ分離が、イオン交換クロマトグラフィー、吸着クロマトグラフィー、サイズ排除クロマトグラフィー、逆相クロマトグラフィー、および親和性クロマトグラフィーからなる群から選択される、（１）に記載の方法。
（３）クロマトグラフ分離が、イオン交換カラムを含んでなるイオン交換クロマトグラフィーである、（２）に記載の方法。
（４）イオン交換カラムが、アニオン交換樹脂、カチオン交換樹脂、またはその組み合わせを含んでなる、（３）に記載の方法。
（５）イオン交換カラムが前記ＢＢＩ生成物を保持する、（３）に記載の方法。
（６）イオン交換カラムが前記ＢＢＩ生成物を保持しない、（３）に記載の方法。
（７）１つまたは複数の分離技術が、膜分離、電気泳動、透析、微粒子濾過、沈殿、遠心分離、結晶化、重力分離、および任意のその組み合わせからなる群から選択される、（１）に記載の方法。
（８）１つまたは複数の分離技術が膜分離である、（７）に記載の方法。
（９）大豆加工ストリームが、少なくとも約１リットル流体／時間−ｍ２の体積流量で膜を通過する、（８）に記載の方法。
（１０）体積流量が、約１〜約４００リットルの流体／時間-ｍ２である、（９）に記載の方法。
（１１）大豆加工ストリームが、約０℃〜約１００℃の温度で膜を通過する、（８）に記載の方法。
（１２）大豆加工ストリームが、約２５℃〜約７５℃の温度で膜を通過する、（８）に記載の方法。
（１３）膜が、精密濾過膜、限外濾過膜、またはその組み合わせを含んでなる、（８）に記載の方法。
（１４）ｐＨを調節してＢＢＩタンパク質の等電点未満に保ち、前記イオン交換樹脂によるＢＢＩタンパク質の保持を提供するステップをさらに含む、（３）に記載の方法。
（１５）ＢＢＩタンパク質が前記イオン交換樹脂によって保持されないように、ｐＨを調節してＢＢＩタンパク質の等電点よりも高く保つステップをさらに含む、（３）に記載の方法。
（１６）１つまたは複数の分離技術が、前記クロマトグラフ分離に先だって実施される、（１）に記載の方法。
（１７）１つまたは複数の分離技術が、前記クロマトグラフ分離の後に実施される、（１）に記載の方法。
（１８）精製ＢＢＩ生成物が、少なくとも約９５質量％の総ＢＢＩタンパク質濃度を有する、（１）に記載の方法。
（１９）精製ＢＢＩ生成物が、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、および任意のその組み合わせと少なくとも９０％の同一性を有する、少なくとも１つのアミノ酸配列を含んでなる、（１）に記載の方法。
（２０）精製ＢＢＩ生成物が、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、および任意のその組み合わせと少なくとも９５％の同一性を有する、少なくとも１つのアミノ酸配列を含んでなる、（１）に記載の方法。
（２１）少なくとも約９０質量％の総ＢＢＩタンパク質濃度を有するＢＢＩ生成物を精製する方法であって、
（ａ）大豆タンパク質および不純物を含んでなる大豆加工ストリームに１つまたは複数の分離技術を施すステップと；
（ｂ）大豆タンパク質および不純物を含んでなる大豆加工ストリームにクロマトグラフ分離を施すステップと
を含み、少なくとも約９０質量％の総ＢＢＩタンパク質濃度を有するＢＢＩ生成物が得られる、方法。
（２２）少なくとも約９０質量％の総ＢＢＩタンパク質濃度を有するＢＢＩ生成物を精製する方法であって、
（ａ）大豆タンパク質および不純物を含んでなる大豆加工ストリームに少なくとも１つの分離技術を施して、前記大豆タンパク質を含んでなる第１の透過液と、前記不純物を含んでなる第１の残余分を形成するステップと；
（ｂ）前記第１の透過液に少なくとも１つの分離技術を施して、不純物を含んでなる第２の透過液と、大量のタンパク質留分を含んでなる第２の残余分を形成するステップと；
（ｃ）少なくとも１つのクロマトグラフ分離に通過させるために、前記第２の残余分をキャリアストリームと合わせて、前記加工ストリーム中の他のタンパク質からＢＢＩタンパク質ストリームを単離するステップと；
（ｄ）前記ＢＢＩタンパク質ストリームを液体沈殿媒体と合わせ、それに少なくとも１つの分離技術を施して、沈殿ＢＢＩタンパク質画分を形成するステップと；
（ｅ）前記沈殿ＢＢＩタンパク質画分を液体洗浄剤と合わせて、可溶化ＢＢＩタンパク質画分を形成するステップと；
（ｆ）前記可溶化タンパク質画分に少なくとも１つの分離技術を施して、精製可溶化ＢＢＩタンパク質画分を形成するステップと；
（ｇ）前記精製可溶化タンパク質画分に少なくとも１つの分離操作を施して、精製ＢＢＩ生成物を形成するステップと
を含み、少なくとも約９０質量％の総ＢＢＩタンパク質濃度を有するＢＢＩ生成物が得られる、方法。
本明細書に例証的に記載される本開示は、適切には、本明細書で具体的に開示されないあらゆる要素または要素群、制限または制限群の不在下で実施されてもよい。したがって例えば本明細書の各場合において、「ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ」、「ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ」、および「ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｏｆ」の何れかは、他の２つのどちらかの用語で置き換えてもよい。用いられた用語および表現は、限定でなく説明の用語として使用され、このような用語および表現の使用において、示され記載される徴群のいかなる同等物もまたはその一部も排除することは意図されず、本開示が特許請求する範囲内で、様々な修正が可能であることが認識される。したがって本開示は、好ましい実施形態と任意の徴群によって具体的に開示されているが、本明細書で開示される概念の修正形態およびバリエーションが、当業者によって用いられてもよいものと理解すべきである。このような修正および変更は、添付の特許請求の範囲によって定義される、本発明の範囲内であると見なされる。