【手続補正書】
【提出日】平成24年9月25日(2012.9.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
配列番号４の熱安定化ポリペプチドをコードするヒトコドン最適化ポリヌクレオチドを含み、該ポリペプチドがシトシンデアミナーゼ(CD)活性を含む、単離されたポリヌクレオチド。
【請求項２】
CD活性を有するポリペプチドに作動可能に連結されたＵＰＲＴまたはＯＰＲＴ活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチドをさらに含む、請求項１の単離されたポリヌクレオチド。
【請求項３】
請求項１または２のポリヌクレオチドを含むベクター。
【請求項４】
プラスミド、発現ベクターおよびウイルスベクターからなる群から選択される、請求項３のベクター。
【請求項５】
ウイルスベクターが複製適合性レトロウイルスを含む、請求項４のベクター。
【請求項６】
請求項４または５のベクターを含む宿主細胞。
【請求項７】
請求項１または２のポリヌクレオチドを含む哺乳動物宿主細胞。
【請求項８】
安定に形質転換されたヒト細胞を含む、請求項７の宿主細胞。
【請求項９】
癌細胞を含む、請求項８の宿主細胞。
【請求項１０】
多形性グリア芽細胞腫を含む、請求項９の宿主細胞。
【請求項１１】
in vivoで形質転換される、請求項７の宿主細胞。
【請求項１２】
以下のもの:
レトロウイルスGAGタンパク質;
レトロウイルスPOLタンパク質;
レトロウイルスエンベロープ;
レトロウイルスポリヌクレオチドであって、該レトロウイルスポリヌクレオチド配列の3'末端の長末端反復(LTR)配列、該レトロウイルスポリヌクレオチドの5'末端の哺乳類細胞での発現に好適なプロモーター配列、gag核酸ドメイン、pol核酸ドメインおよびenv核酸ドメインを含むレトロウイルスポリヌクレオチド;
請求項１のポリヌクレオチドを含む異種核酸に作動可能に連結されている内部リボソーム侵入部位(IRES)を含むカセットであって、3' LTRの5'側でかつ、レトロウイルスエンベロープをコードするenv核酸ドメインの3'側に位置する、カセット; および
標的細胞での逆転写、パッケージングおよび組み込みに必要なシス作用配列
を含む、組み換え複製適合性レトロウイルス(RCR)。
【請求項１３】
レトロウイルスポリヌクレオチド配列が、マウス白血病ウイルス(MLV)、モロニーマウス白血病ウイルス(MoMLV)、ネコ白血病ウイルスまたはテナガザル白血病ウイルス(GALV)由来である、請求項１２のレトロウイルス。
【請求項１４】
MLVが両種性MLVである、請求項１３のレトロウイルス。
【請求項１５】
ガンマレトロウイルスである、請求項１２のレトロウイルス。
【請求項１６】
標的細胞が、細胞増殖性障害を有する細胞または新生物細胞である、請求項１２のレトロウイルス。
【請求項１７】
細胞増殖性障害が、肺癌、結腸直腸癌、乳癌、前立腺癌、尿路癌、子宮癌、脳腫瘍、頭頸部癌、膵癌、黒色腫、胃癌および卵巣癌、関節リウマチまたは他の自己免疫疾患からなる群から選択される、請求項１６のレトロウイルス。
【請求項１８】
プロモーター配列が増殖調節遺伝子に由来するプロモーターである、請求項１２のレトロウイルス。
【請求項１９】
プロモーター配列が組織特異的プロモーター配列を含む、請求項１２に記載のレトロウイルス。
【請求項２０】
組織特異的プロモーター配列が少なくとも1つのアンドロゲン応答要素(ARE)を含む、請求項１９に記載のレトロウイルス。
【請求項２１】
アンドロゲン応答要素がプロバシンプロモーター由来である、請求項２０に記載のレトロウイルス。
【請求項２２】
組織特異的プロモーター配列がプロバシンプロモーターを含む、請求項１９に記載のレトロウイルス。
【請求項２３】
プロモーターが、配列番号１９または２０のヌクレオチド1位〜ヌクレオチド約582位に記載の配列を含む、請求項１２のレトロウイルス。
【請求項２４】
プロモーターがCMV-R-U5ドメインポリヌクレオチドを含む、請求項１２のレトロウイルス。
【請求項２５】
CMV-R-U5ドメインが、MLV R-U5領域に連結されているヒトサイトメガロウイルス由来の前初期プロモーターを含む、請求項２４のレトロウイルス。
【請求項２６】
CMV-R-U5ドメインポリヌクレオチドが、配列番号１９、２０、または２２のヌクレオチド約1位〜ヌクレオチド約1202位に記載の配列、または配列番号１９、２０、または２２に記載の配列と少なくとも95%同一である配列を含み、ここで該ポリヌクレオチドが、それに作動可能に連結されている核酸分子の転写を促進する、請求項２５のレトロウイルス。
【請求項２７】
gag核酸ドメインがガンマレトロウイルス由来である、請求項１２のレトロウイルス。
【請求項２８】
gag核酸ドメインが、配列番号１９のヌクレオチド番号約1203位〜ヌクレオチド約2819位の配列、またはそれに対して少なくとも95%、98%、99%または99.8%の同一性を有する配列を含む、請求項２７のレトロウイルス。
【請求項２９】
polドメインがガンマレトロウイルス由来である、請求項１２のレトロウイルス。
【請求項３０】
polドメインが、配列番号１９のヌクレオチド番号約2820位〜ヌクレオチド約6358位の配列、またはそれに対して少なくとも95%、98%、99%または99.9%の同一性を有する配列を含む、請求項２９のレトロウイルス。
【請求項３１】
envドメインが、配列番号１９のヌクレオチド番号約6359位〜ヌクレオチド約8323位の配列、またはそれに対して少なくとも95%、98%、99%または99.8%の同一性を有する配列を含む、請求項１２のレトロウイルス。
【請求項３２】
IRESが脳心筋炎ウイルス由来である、請求項１２のレトロウイルス。
【請求項３３】
IRESが、配列番号１９のヌクレオチド番号約8327位〜ヌクレオチド約8876位の配列、またはそれに対して少なくとも95%、98%、または99%の同一性を有する配列を含む、請求項３２のレトロウイルス。
【請求項３４】
異種核酸が、配列番号３、５、１１、１３、１５または１７に記載の配列を有するポリヌクレオチドを含む、請求項１２のレトロウイルス。
【請求項３５】
異種核酸が、配列番号１９のヌクレオチド番号約8877位〜約9353位に記載の配列を含む、請求項１２のレトロウイルス。
【請求項３６】
3' LTRがガンマレトロウイルス由来である、請求項１２のレトロウイルス。
【請求項３７】
3' LTRがU3-R-U5ドメインを含む、請求項３６のレトロウイルス。
【請求項３８】
3' LTRが、配列番号１９のヌクレオチド約9405位〜約9998位に記載の配列、またはそれに対して少なくとも95%、98%または99.5%同一の配列を含む、請求項３６のレトロウイルス。
【請求項３９】
レトロウイルスポリヌクレオチドが、配列番号１９、２０、または２２に記載の配列を含む、請求項１２のレトロウイルス。
【請求項４０】
5'から3'方向に以下のもの:
ヒトサイトメガロウイルス由来の前初期プロモーターとMLV R-U5領域のCMV-R-U5融合物;
逆転写酵素のPBS（プライマー結合部位）;
5'スプライス部位;
Ψパッケージングシグナル;
MLV群特異的抗原に関するgagコード配列;
MLVポリメラーゼポリプロテインに関するpolコード配列;
3'スプライス部位;
MLV 4070A系統のエンベロープタンパク質に関する4070A envコード配列;
脳心筋炎ウイルス由来の内部リボソーム侵入部位(IRES);
配列番号４のポリペプチドをコードする改変シトシンデアミナーゼコード配列;
ポリプリントラクト; および
U3-R-U5 MLV長末端反復配列
を含む、単離されたポリヌクレオチド。
【請求項４１】
レトロウイルスポリヌクレオチドが、配列番号１９、２０、または２２に記載の配列を含む、請求項４０のポリヌクレオチド。
【請求項４２】
レトロウイルスポリヌクレオチド配列が、マウス白血病ウイルス(MLV)、モロニーマウス白血病ウイルス(MoMLV)、ネコ白血病ウイルスまたはテナガザル白血病ウイルス(GALV)由来である、請求項４０のポリヌクレオチド。
【請求項４３】
MoMLVが両種性MoMLVである、請求項４２のポリヌクレオチド。
【請求項４４】
細胞増殖性障害を有する被験体の治療方法であって、被験体を請求項１または４０のポリヌクレオチドと該ポリヌクレオチドが発現されるような条件下で接触させるステップおよび該被験体を5-フルオロシトシンと接触させるステップを含む、方法。
【請求項４５】
前記ポリヌクレオチドが被験体の細胞に組み込まれる、請求項４４の方法。
【請求項４６】
前記ポリヌクレオチドがレトロウイルスベクターによって送達される、請求項４４の方法。
【請求項４７】
レトロウイルスベクターが、配列番号１９、２０、または２２に記載の配列を含む、請求項４６の方法。
【請求項４８】
細胞増殖性障害が多形性グリア芽細胞腫である、請求項４４の方法。
【請求項４９】
細胞増殖性障害が、肺癌、結腸直腸癌、乳癌、前立腺癌、尿路癌、子宮癌、脳腫瘍、頭頸部癌、膵癌、黒色腫、胃癌および卵巣癌、関節リウマチまたは他の自己免疫疾患からなる群から選択される、請求項４４の方法。
【請求項５０】
被験体の細胞増殖性障害の治療方法であって、被験体を請求項１２のレトロウイルスと接触させるステップ、および該被験体を5-フルオロシトシンと接触させるステップを含む、方法。
【請求項５１】
異種核酸が、配列番号４、１２、１４、１６、または１８に記載の配列を含むポリペプチドをコードする、請求項５０の方法。
【請求項５２】
レトロウイルスポリヌクレオチドが、配列番号１９、２０、または２２に記載の配列を含む、請求項５０の方法。