【手続補正書】
【提出日】平成24年5月11日(2012.5.11)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
(i) 以下の式Ｉを有する抗体−薬剤コンジュゲート化合物を提供すること：
Ａｂ−(Ｌ−Ｄ)ｐ          Ｉ
このとき、
Ａｂが抗体であり、
Ｄはメイタンシノイド又はモノメチルアウリスタチン薬剤部分であり、
Ｌは、共有結合でＡｂに付着し、共有結合でＤに付着したリンカーであり、そして、
ｐは、１、２、３、４、５、６、７又は８であり； 
(ii) 抗体−薬剤コンジュゲート化合物と、哺乳動物、組織、細胞培養物、血漿又は血清から選択される生物学的な供給源と接触させること；
(iii) 生物学的な供給源から、抗体−薬剤コンジュゲートと接触した生体試料を採取すること；
(iv) 処方し、固定し、遠心し、単離し、消化し、血液細胞凝集を誘導ないし予防し、加水分解し、又は精製することによって分析試料を生成するために生物学的試料を処理し、処理済みの分析試料を生成すること；
(v) 処理済みの分析試料を、抗体−薬剤コンジュゲートの抗体に特異的な抗原を含む免疫親和性ビーズに捕獲すること、このとき該抗原が標的レセプタータンパク質の細胞外ドメイン(ＥＣＤ)であり；
(vi) 処理した分析試料を溶出すること；
(vii) 分離培地に溶出した処理済みの分析試料を置き、１より多くの試料成分を分離すること、このとき分離した試料成分が抗体−薬剤コンジュゲート化合物を含み；そして、
(viii) 一又は複数の分離した試料成分の質量電荷比を質量分析によって確認すること、このときインタクトな抗体−薬剤コンジュゲート化合物が検出される、
という工程を含む、抗体−薬剤コンジュゲート化合物の検出方法。
【請求項２】
さらに、(iii)から(viii)の工程を１回又は複数回繰り返すことを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
生物学的試料が血液であり、この血液が処理されて血漿又は血清を形成する、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
分析試料が変性している、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
分析試料がホルムアミド、ジメチルホルムアミドおよびアセトニトリルから選択される変性試薬によって変性される、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
分析試料が還元剤で処理される、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
還元剤がＤＴＴ又はＴＣＥＰである、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
ＥＣＤがビオチン化されている、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
ビオチン化されたＥＣＤがストレプトアビジンコート常磁性免疫親和性ビーズに結合する、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
抗原が抗薬剤抗体である、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
免疫親和性ビーズが磁気ビーズである、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
免疫親和性ビーズが多孔質ポリマーモノリスを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
免疫親和性ビーズが、回収貯蔵部を有する流体連結内の流入チャネルに設置される、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
免疫親和性ビーズが流入管に設置され、このとき、生物源からの試料が一端又は開口部に導入され、試料が他端又は開口部から溶出される、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
免疫親和性ビーズが、それぞれ別々の回収貯蔵部に連結した複数の流入管に分配されている、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
管および貯蔵部が１２×８の段と列の９６マイクロタイターウェル様式、又は２４×１６の段と列の３８４マイクロタイターウェル様式に設置されている、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
さらに、分析試料を脱グリコシル化試薬で処理する工程を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１８】
脱グリコシル化試薬がＰＮＧａｓｅＦである、請求項１に記載の方法。
【請求項１９】
分離培地がクロマトグラフィ支持体である、請求項１に記載の方法。
【請求項２０】
クロマトグラフィ支持体が逆相吸着剤である、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
逆相がポリスチレン、又はポリスチレンのグラフトないしコポリマーである、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
クロマトグラフィ支持体からの溶出物が質量分析によって間欠的に分析され、１より多くの質量電荷比の被分離清浄成分を得る、請求項２０に記載の方法。
【請求項２３】
試料成分が重鎖又は軽鎖の抗体断片を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項２４】
重鎖又は軽鎖の抗体断片がさらに一又は複数の薬剤部分を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項２５】
式Ｉを有する抗体−薬剤コンジュゲート化合物が、生物学的な供給源の腫瘍関連抗原又は細胞表面レセプターに結合する、請求項１に記載の方法。
【請求項２６】
抗体−薬剤コンジュゲート化合物の抗体が、以下の(1)から(36)から選択される一又は複数の腫瘍関連抗原又は細胞表面レセプターに結合する、請求項２５に記載の方法：
(1) ＢＭＰＲ１Ｂ(骨形成タンパク質レセプター−タイプＩＢ)； 
(2) Ｅ１６(ＬＡＴ１、ＳＬＣ７Ａ５)；
(3) ＳＴＥＡＰ１(前立腺の６回膜貫通上皮抗原)；
(4) ０７７２Ｐ(ＣＡ１２５、ＭＵＣ１６)；
(5) ＭＰＦ(ＭＰＦ、ＭＳＬＮ、ＳＭＲ、巨核球増強因子、メソテリン)； 
(6) Ｎａｐｉ３ｂ(ＮＡＰＩ-３Ｂ、ＮＰＴＩＩｂ、ＳＬＣ３４Ａ２、溶質担体ファミリ３４(リン酸ナトリウム)、メンバー２、タイプＩＩナトリウム依存性リン酸輸送体３ｂ)；
(7) Ｓｅｍａ５ｂ(ＦＬＪ１０３７２、ＫＩＡＡ１４４５、Ｍｍ.４２０１５、ＳＥＭＡ５Ｂ、ＳＥＭＡＧ、セマフォリン５ｂ Ｈｌｏｇ、ｓｅｍａドメイン、７回トロンボスポンジンリピート(タイプ１およびタイプ１様)、膜貫通ドメイン(ＴＭ)および短い細胞質ドメイン、(セマフォリン)５Ｂ)；
(8) ＰＳＣＡ ｈｌｇ(２７０００５０Ｃ１２Ｒｉｋ、Ｃ５３０００８Ｏ１６Ｒｉｋ、ＲＩＫＥＮ ｃＤＮＡ ２７０００５０Ｃ１２、ＲＩＫＥＮ ｃＤＮＡ ２７０００５０Ｃ１２遺伝子)； 
(9) ＥｔＢｒ(エンドセリンＢ型レセプター)；
(10) ＭＳＧ７８３(ＲＮＦ１２４、仮定タンパク質ＦＬＪ２０３１５)；
(11) ＳＴＥＡＰ２(ＨＧＮＣ＿８６３９、ＩＰＣＡ-１、ＰＣＡＮＡＰ１、ＳＴＡＭＰ１、ＳＴＥＡＰ２、ＳＴＭＰ、前立腺癌関連遺伝子１、前立腺癌関連タンパク質１、前立腺の６回膜貫通上皮抗原２、６回膜貫通前立腺タンパク質)；
(12) ＴｒｐＭ４(ＢＲ２２４５０、ＦＬＪ２００４１、ＴＲＰＭ４、ＴＲＰＭ４Ｂ、一過性レセプター電位陽イオンチャネル、サブファミリＭ、メンバー４)；
(13) ＣＲＩＰＴＯ(ＣＲ、ＣＲ１、ＣＲＧＦ、ＣＲＩＰＴＯ、ＴＤＧＦ１、テラトカルシノーマ由来の増殖因子)；
(14) ＣＤ２１(ＣＲ２(補体レセプター２)又はＣ３ＤＲ(Ｃ３ｄ／エプスタイン・バーウイルスレセプター)又はＨｓ.７３７９２ Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号Ｍ２６００４)；
(15) ＣＤ７９ｂ(ＣＤ７９Ｂ、ＣＤ７９β、ＩＧｂ(免疫グロブリン関連β)、Ｂ２９)；
(16) ＦｃＲＨ２(ＩＦＧＰ４、ＩＲＴＡ４、ＳＰＡＰ１Ａ(ＳＨ２ドメイン含有ホスファターゼアンカータンパク質１ａ)、ＳＰＡＰ１Ｂ、ＳＰＡＰ１Ｃ)；
(17) ＨＥＲ２；
(18) ＮＣＡ；
(19) ＭＤＰ；
(20) ＩＬ２０Ｒα；
(21) ブレビカン；
(22) Ｅｐｈｂ２Ｒ；
(23) ＡＳＬＧ６５９；
(24) ＰＳＣＡ；
(25) ＧＥＤＡ；
(26) ＢＡＦＦ-Ｒ(Ｂ細胞活性化因子レセプター、ＢＬｙＳレセプター３、ＢＲ３)；
(27) ＣＤ２２(Ｂ細胞レセプターＣＤ２２-Ｂアイソフォーム)；
(28) ＣＤ７９ａ(ＣＤ７９Ａ、ＣＤ７９α、免疫グロブリン関連α)；
(29) ＣＸＣＲ５(バーキットリンパ腫レセプター１)；
(30) ＨＬＡ-ＤＯＢ(ＭＨＣクラスＩＩ分子(Ｉａ抗原)のβサブユニット)；
(31) Ｐ２Ｘ５(プリン作動性レセプターＰ２Ｘリガンドゲートイオンチャネル５)；
(32) ＣＤ７２(Ｂ細胞分化抗原ＣＤ７２、Ｌｙｂ-２)；
(33) ＬＹ６４(リンパ球抗原６４(ＲＰ１０５))；
(34) ＦＣＲＨ１(Ｆｃレセプター様タンパク質１)； 
(35) ＩＲＴＡ２(免疫グロブリンスーパーファミリレセプター転座関連２)；及び、
(36) ＴＥＮＢ２(推定膜貫通プロテオグリカン、増殖因子のＥＧＦ／ヘレグリンファミリおよびフォリスタチンに関連）。
【請求項２７】
抗体−薬剤コンジュゲート化合物が０．１〜１０ｍｇ／ｋｇ体重の用量で哺乳動物に投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項２８】
ＬがＡｂのアミノ、カルボキシル又はチオールに共有結合的に付着している、請求項１に記載の方法。
【請求項２９】
Ｌが、Ｎ-スクシンイミジル-４(２-ピリジルチオ)プロパノエート(ＳＰＤＰ)、スクシンイミジル-４-(Ｎ-マレイミドメチル)シクロヘキサン-１-カルボキシレート(ＳＭＣＣ)及びＮ-スクシンイミジル-４-(２-ピリジルチオ)ペンタノエート(ＳＰＰ)から選択されるリンカー試薬から形成される、請求項１に記載の方法。
【請求項３０】
Ｌが、マレイミドカプロイル(ＭＣ)、マレイミドプロパノイル(ＭＰ)、およびマレイミドカプロイル−バリン−シトルリン−パラ−アミノベンジルオキシカルボニル(ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ)から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項３１】
Ｄが以下の構造を有するＤＭ１である、請求項１に記載の方法。
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【請求項３２】
Ｄがモノメチルアウリスタチンである、請求項１に記載の方法。
【請求項３３】
Ｄが以下の構造を有するＭＭＡＥである、請求項３２に記載の方法。
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【請求項３４】
Ｄが以下の構造を有するＭＭＡＦである、請求項３２に記載の方法。
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