(57)【要約】【課題】リパーゼ酵素を不斉アシル化により得られるアシル体とヒドロキシ体の分離を容易に行わせることにより光学活性なγ−或はδ−ラクトンを工業的に製造する。【解決手段】ヒドロキシアミドをリパーゼ酵素を用いて不斉アシル化して得られたアシル体と未反応のヒドロキシ体の混合物をｎ−ヘキセンのような無極性溶媒により抽出分離し、分離されたアシル体とヒドロキシ体を夫々加水分解して光学活性なγ−或はδ−ラクトン等のラクトン類を製造する方法。【選択図】        なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
光学活性なヒドロキシアミドをリパーゼ酵素を用いて不斉アシル化して得られたアシル体と未反応のヒドロキシ体の混合物を無極性溶媒により抽出分離し、分離されたアシル体とヒドロキシ体を夫々加水分解して光学活性なラクトン類を製造することを特徴とする光学活性なラクトン類の製造方法。
【請求項２】
光学活性なヒドロキシアミドが下記構造式で表される請求項１の方法。
【化１】
2004236619.tif 000009
式中、ｎ＝２又は３、Ｒ１＝Ｃ３Ｈ７、Ｃ４Ｈ９、Ｃ５Ｈ１１、Ｃ６Ｈ１３、Ｃ７Ｈ１５、Ｃ８Ｈ１７、ｃｉｓ−Ｃ２Ｈ４ＣＨ＝ＣＨＣ２Ｈ５、ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣ２Ｈ５−ｃｉｓから選ばれた基、Ｒ２＝Ｈ、ＣＨ３、Ｃ２Ｈ５、Ｃ３Ｈ７、（ＣＨ２）３ＣＨ３、ＣＨ２Ｃ６Ｈ５から選ばれた基
【請求項３】
無極性溶媒がｎ−ヘキセンである請求項１の方法。
【請求項４】
リパーゼ酵素としてリパーゼＮｏｖｏｚｙｍ４３５を用いてエナンチオ過剰率の高い光学活性なラクトン類を製造する請求項１の方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明が属する技術分野】
この発明は、リパーゼ酵素を用いた光学活性なγ−或はδ−ラクトン類の製造方法に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
γ−及びδ−ラクトン類はピーチ、ストロベリー、ラズベリー、バター、ココナツミルクなどの食品中に広く存在し、それらは光学活性なラクトン類として含まれる場合が多い。
【０００３】
光学異性体間には香味に差があることが知られており、天然にかおりを再現するには天然の光学異性体存在比に近い割合で調合する必要がある。
【０００４】
そのため、合成フェレーバーを作るためには、両鏡像体ラクトン類が要求され、このようなことから光学活性化合物の合成研究が盛んに行われている（香料、Ｎｏ．１８４，５７−７２（１９９４））。
【０００５】
光学活性なラクトンを合成する方法としては光学活性な化学触媒を用いて合成する方法と生体触媒を用いて合成する方法が知られている（ファインケミカル、光活性ラクトンの開発と応用，２８，５−１２，１９９９）。
【０００６】
光学活性な化学触媒を用いる場合光学活性な配位子を有する触媒を必要とし、このため高価なものとなり、工業的に使用する場合の弊害となっている。
【０００７】
一方菌類や酵素などの生体触媒を用いる方法では、比較的容易に触媒となる酵素類が入手でき、例えば光学活性なヒドロキシ体はリパーゼを用いて不斉アシル化することが知られている。
【０００８】
【発明が解決しようとする課題】
しかし、リパーゼを用いて不斉アシル化する方法において、原料としてヒドロキシエステルを用いてそのラセミ体を酢酸ビニルで不斉アシル化した場合半量のみが光学活性なアセテート体となり、半量の光学活性なアルコールが未反応で残るが、これらの分離は主にカラムクロマトグラフィーで行われており（Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，１２５３（１９９３））、したがって実験室的なスケールでは行われるが、工業的なスケールには不向きである。
【０００９】
一方、酢酸ビニルの代わりに無水コハク酸を用いてヒドロキシエステルのラセミ体を不斉アシル化する方法も行われており、この場合その半量は光学活性のハーフエステルカルボン酸となるが、これはアルカリ溶液下で抽出することでヒドロキシ体との分離が容易に行える（Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．，４８，３０４−３０５（２０００））。
【００１０】
しかし、この方法ではアルカリ溶液下でハーフエステルカルボン酸の抽出を行い、更にアルカリ溶液で抽出されたハーフエステルカルボン酸を中和しなければならない等工程が複雑で、工業的には問題がある。
【００１１】
これに対して、本願発明者等の研究によればヒドロキシアミドを原料としてそのラセミ体をリパーゼを用いて不斉アシル化した際に生ずるアセチルアミドと未反応のヒドロキシアミドの混合物について各種溶媒による溶解度の差を調べたところ無極性溶媒で溶解度の差が大きく、例えばｎ−ヘキサンではヒドロキシアミドは不溶であり、アセチルアミドは可溶性であることが分かった。
【００１２】
このため、無極性溶媒であるｎ−ヘキサンを用いて光学活性なヒドロキシアミドとアセチルアミドの分離を容易に行うことができ、これらをそれぞれ加水分解して光学活性なラクトンを合成することができることを見出した。
【００１３】
【課題を解決するための手段】
この発明は、上記知見に基づいて光学活性なヒドロキシアミドをリパーゼ酵素を用いて不斉アシル化して得られたアシル体と未反応のヒドロキシ体の混合物を無極性溶媒で抽出分離し、分離されたアシル体とヒドロキシ体を夫々加水分解して光学活性なγ−或はδ−ラクトンなどのラクトン類を製造する方法を提案するものである。
【００１４】
【発明の実施の形態】
この発明において光学活性なヒドロキシアミドをリパーゼ酵素で選択的な不斉アシル化を行うと、基質の半量がアシル化して光学活性なアシルアミドとなり、半量の光学活性なヒドロキシアミドは未反応で残る。
【００１５】
これらの混合物は無極性溶媒を用いて抽出すると、アシルアミドのみが抽出され、ヒドロキシアミドは抽出されずに残り、したがって光学活性なアシルアミドとヒドロキシアミドを分離してそれぞれを加水分解すると、光学活性なラクトンを合成することができる。
【００１６】
即ち、この発明によればリパーゼ酵素による不斉アシル化法を使用した光学活性なラクトンの製造する方法において工業化の障害となるアシル体とヒドロキシ体の分離をカラムクロマトグラフィーのような実験室的な分離法を使用せず、またアルカリ洗浄、中和等の複雑な工程を必要とせず、無極性溶媒による抽出分離により行うことができるため、光学活性なγ−或はδ−ラクトンなどのラクトン類を工業的に製造することができる。
【００１７】
この発明においてリパーゼはリパーゼＮｏｖｏｚｙｍ４３５等の市販の酵素を使用できるが、これに限定されるものではない。
【００１８】
また、この発明においてアシル化剤としては、酢酸ビニル等公知のアシル化剤を使用することができる。
【００１９】
更に、この発明において無極性溶媒としては、ｎ−ヘキセン、ｎ−オクタン等のｎ−炭化水素を溶媒として使用することができるが、この中ｎ−ヘキセンが溶媒として最も使用し易い。
【００２０】
また、この発明において光学活性なヒドロキシアミドとしては下記構造式で表されるものを使用することができる。
【化２】
2004236619.tif 000002
【００２１】
式中、ｎ＝２又は３、Ｒ１＝Ｃ３Ｈ７、Ｃ４Ｈ９、Ｃ５Ｈ１１、Ｃ６Ｈ１３、Ｃ７Ｈ１５、Ｃ８Ｈ１７、ｃｉｓ−Ｃ２Ｈ４ＣＨ＝ＣＨＣ２Ｈ５、ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣ２Ｈ５−ｃｉｓから選ばれた基、Ｒ２＝Ｈ、ＣＨ３、Ｃ２Ｈ５、Ｃ３Ｈ７、（ＣＨ２）３ＣＨ３、ＣＨ２Ｃ６Ｈ５から選ばれた基
【００２２】
このヒドロキシアミドは、（１）グリニャール反応を利用した化学合成によりケトアミドを合成し、これを水素化ホウ素ナトリウムで還元する方法、（２）市販のラクトンをアミンを用いて開環する方法で合成することができる。
【００２３】
（１）の方法としては、具体的には▲１▼コハク酸イミドと２倍モルのＣ６−或はＣ８−Ｇｒｉｇｎａｒｄ（グリニヤール）試薬の反応によりケトアミド類を合成し、水素化ホウ素ナトリウムで還元することによりγ−ヒドロキシアミドを合成する方法、▲２▼Ｎ−メチルコハク酸イミドとＣ６−或はＣ８−Ｇｒｉｇｎａｒｄ（グリニヤール）試薬の反応によりケトアミド類を合成し、水素化ホウ素ナトリウムで還元することによりγ−ヒドロキシアミドを合成する方法、▲３▼グルタル酸イミドと２倍モルのＣ５−或はＣ７−Ｇｒｉｇｎａｒｄ（グリニヤール）試薬の反応によりδ−ケトアミド類を合成し、水素化ホウ素ナトリウムで還元することによりδ−ヒドロキシアミドを合成する方法、▲４▼Ｎ−メチルグルタル酸イミドとＣ５−或はＣ７−Ｇｒｉｇｎａｒｄ（グリニヤール）試薬の反応によりδ−ケトアミド類を合成し、水素化ホウ素ナトリウムで還元することによりδ−ヒドロキシアミドを合成する方法等を挙げることができる。
【００２４】
（２）の方法としては、具体的には▲１▼市販のγ−ラクトンとベンジルアミンを加熱攪拌させてＮ−ベンジルヒドロキシアミドを合成する方法、▲２▼ベンジルアミンの代わりにプロピルアミンを用いても同様にＮ−プロピルヒドロキシアミドを合成する方法、▲３▼市販のδ−ラクトンとベンジルアミンを加熱攪拌させてＮ−ベンジルヒドロキシアミドを合成する方法、▲４▼ベンジルアミンの代わりにプロピルアミンを用いても同様にＮ−プロピルヒドロキシアミドを合成する方法等を挙げることができる。
【００２５】
以下、この発明の実施例を示す。
（Ａ）ヒドロキシアミドの製造
製造例１
ＴＨＦ溶媒中臭化ヘキシル２５ｍｍｏｌと金属マグネシウム２５ｍｍｏｌからＧｒｉｇｎａｒｄ（グリニヤール）試薬を調製し、コハク酸イミド１０ｍｍｏｌのＴＨＦ溶液と反応させた。加水分解を行うと、４−ヒドロキシデカン−４−ラクタムと４−オキソデカンアミドの混合物が得られた（収率９０％）。
【００２６】
４−ヒドロキシデカン−４−ラクタムと４−オキソデカンアミドの混合物１５ｍｍｏｌをメタノール２０ｍｌ溶かし、水素化ホウ素ナトリウム１５ｍｍｏｌで還元した。反応後水を加え、酢酸エチルで抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒溜去後結晶である４−ヒドロキシデカンアミドを得た。収率８５％、Ｒｆ値０．２０（クロロホルム：メタノール＝１０：１）、融点９３．６℃。
【００２７】
４−ヒドロキシデカンアミドの同定
ＩＲ（ｃｍ−１）：３３６０，３２００（ＮＨ，ＯＨ），１６９０（Ｃ＝Ｏ），ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：０．８８（ｔ，３Ｈ，ＣＨ３），１．３〜１．５（ｂｒ，Ｓ，８Ｈ，ＣＨ２），１．６５（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２），１．７５（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２），２．４０（ｔ，２Ｈ，ＣＨ２ＣＯ），３．６５（ｂｒ，Ｓ，１Ｈ，ＣＨ−Ｏ），５．４５（ｂｒ，Ｓ，１Ｈ，ＮＨ），５．６５（ｂｒ，Ｓ，１Ｈ，ＮＨ）
【００２８】
製造例２
ＴＨＦ溶媒中臭化オクチル１５ｍｍｏｌと金属マグネシウム１５ｍｍｏｌからＧｒｉｇｎａｒｄ（グリニヤール）試薬を調製し、コハク酸イミド１０ｍｍｏｌのＴＨＦ溶液と反応させた。加水分解を行うと、４−ヒドロキシドデカン−４−ラクタムと４−オキソドデカンアミドの混合物が得られた（収率９０％）。
【００２９】
４−ヒドロキシドデカン−４−ラクタムと４−オキソドデカンアミドの混合物１５ｍｍｏｌをメタノール２０ｍｌ溶かし、水素化ホウ素ナトリウム１５ｍｍｏｌで還元した。反応後水を加え、酢酸エチルで抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒溜去後結晶である４−ヒドロキシドデカンアミドを得た。収率９０％、Ｒｆ値０．２８（クロロホルム：メタノール＝１０：１）、融点１０２．１℃。
【００３０】
４−ヒドロキシデカンアミドの同定
ＩＲ（ｃｍ−１）：３３６０，３２００（ＮＨ，ＯＨ），１６９０（Ｃ＝Ｏ），ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：０．８８（ｔ，３Ｈ，ＣＨ３），１．３〜１．５（ｂｒ，Ｓ，１２Ｈ，ＣＨ２），１．６５（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２），１．７５（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２），２．４０（ｔ，２Ｈ，ＣＨ２ＣＯ），３．６５（ｂｒ，Ｓ，１Ｈ，ＣＨ−Ｏ），５．４５（ｂｒ，Ｓ，１Ｈ，ＮＨ），５．６５（ｂｒ，Ｓ，１Ｈ，ＮＨ）
【００３１】
製造例３
ＴＨＦ溶液中塩化１−クロロ−ｃｉｓ−３−ヘキセン２５ｍｍｏｌと金属マグネシウム２５ｍｍｏｌからＧｒｉｇｎａｒｄ（グリニヤール）試薬を調製し、コハク酸イミド１０ｍｍｏｌのＴＨＦ溶液と反応させた。加水分解を行うと、４−ヒドロキシ−ｃｉｓ−７−デセン−４−ラクタムと４−オキソ−ｃｉｓ−７−デセンアミドの混合物が得られた（収率８５％）。
【００３２】
４−ヒドロキシ−ｃｉｓ−７−デセン−４−ラクタムと４−オキソ−ｃｉｓ−７−デセンアミドの混合物１５ｍｍｏｌをメタノール２０ｍｌ溶かし、水素化ホウ素ナトリウム１５ｍｍｏｌで還元した。反応後水を加え、酢酸エチルで抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒溜去後４−ヒドロキシｃｉｓ−７−デセンアミドを得た。収率９０％、Ｒｆ値０．１０（クロロホルム：メタノール＝１０：１）。融点５４．９℃
【００３３】
４−ヒドロキシｃｉｓ−７−デセンアミドの同定
ＩＲ（ｃｍ−１）：３３６０，３２００（ＮＨ，ＯＨ），１６９０（Ｃ＝Ｏ），ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：０．９６（ｔ，３Ｈ，ＣＨ３），１．５３（ｑ，２Ｈ，ＣＨ２），１．６５（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２），１．７５（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２），２．４３（ｔ，２Ｈ，ＣＨ２ＣＯ），３．６７（ｂｒ，Ｓ，１Ｈ，ＣＨ−Ｏ），５．３６（ｍ，２Ｈ，ＣＨ＝ＣＨ），５．３８（ｂｒ，Ｓ，１Ｈ，ＮＨ），５．４５（ｂｒ，Ｓ），１Ｈ，ＮＨ）
【００３４】
製造例４
ＴＨＦ溶媒中臭化ペンチル１５ｍｍｏｌと金属マグネシウム１５ｍｍｏｌからＧｒｉｇｎａｒｄ（グリニヤール）試薬を調製し、グルタル酸イミド１０ｍｍｏｌのＴＨＦ溶液と反応させた。加水分解を行うと、５−ヒドロキシデカン−５−ラクタムと５−オキソデカンアミドの混合物が得られた（収率９６％）。
【００３５】
５−ヒドロキシデカン−５−ラクタムと５−オキソデカンアミドの混合物１５ｍｍｏｌをメタノール２０ｍｌ溶かし、水素化ホウ素ナトリウム１５ｍｍｏｌで還元した。反応後水を加え、酢酸エチルで抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒留去後結晶である５−ヒドロキシデカンアミドを得た。収率８５％、Ｒｆ値０．１０（クロロホルム：メタノール＝１０：１）、融点６６℃。
【００３６】
５−ヒドロキシデカンアミドの同定
ＩＲ（ｃｍ−１）：３３６０，３２００（ＮＨ，ＯＨ），１６９０（Ｃ＝Ｏ），ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：０．９０（ｔ，３Ｈ，ＣＨ３），１．３〜１．４（ｂｒ，Ｓ，６Ｈ，ＣＨ２），１．４〜１．５（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２），１．７５（ｑｕｉｎｔ，２Ｈ，ＣＨ２），２．２０（ｔ，２Ｈ，ＣＨ２ＣＯ），３．６６（ｂｒ，Ｓ，１Ｈ，ＣＨ−Ｏ），５．４５（ｂｒ，Ｓ，１Ｈ，ＮＨ），５．６５（ｂｒ，Ｓ，１Ｈ，ＮＨ）
【００３７】
製造例５
ＴＨＦ溶媒中臭化ヘプチル１５ｍｍｏｌと金属マグネシウム１５ｍｍｏｌからＧｒｉｇｎａｒｄ（グリニヤール）試薬を調製し、グルタル酸イミド１０ｍｍｏｌのＴＨＦ溶液と反応させた。加水分解を行うと、５−ヒドロキシドデカン−５−ラクタムと５−オキソドデカンアミドの混合物が得られた（収率９５％）。
【００３８】
５−ヒドロキシドデカン−５−ラクタムと５−オキソドデカンアミドの混合物１５ｍｍｏｌをメタノール２０ｍｌ溶かし、水素化ホウ素ナトリウム１５ｍｍｏｌで還元した。反応後水を加え、酢酸エチルで抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒溜去後結晶である５−ヒドロキシドデカンアミドを得た。収率９０％、Ｒｆ値０．４０（クロロホルム：メタノール＝１０：１）、融点７１℃。
【００３９】
５−ヒドロキシデカンアミドの同定
ＩＲ（ｃｍ−１）：３３６０，３２００（ＮＨ，ＯＨ），１６９０（Ｃ＝Ｏ），ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：０．９０（ｔ，３Ｈ，ＣＨ３），１．３〜１．４（ｂｒ，Ｓ，１０Ｈ，ＣＨ２），１．４〜１．５（ｍ，４Ｈ，ＣＨ２），１．７５（ｑｕｉｎｔ，２Ｈ，ＣＨ２），２．２０（ｔ，２Ｈ，ＣＨ２ＣＯ），３．６６（ｂｒ，Ｓ，１Ｈ，ＣＨ−Ｏ），５．４６（ｂｒ，Ｓ，１Ｈ，ＮＨ），５．６６（ｂｒ，Ｓ，１Ｈ，ＮＨ）
【００４０】
製造例６
γ−デカラクトン５ｍｍｏｌにベンジルアミン６ｍｍｏｌを加え室温で７２時間反応を行った。Ｎ−ベンジル−４−ヒドロキシデカンアミドが収率７６％で得られた。
【００４１】
一方、この反応を６０℃で４８時間加熱を行うと、Ｎ−ベンジル−４−ヒドロキシデカンアミドが収率８５％で得られた。またこの反応をオートクレーブ中で８０℃、６時間反応を行うと、Ｎ−ベンジル−４−ヒドロキシデカンアミドが収率９５％で得られた。
【００４２】
製造例７
同様にγ−ウンデカラクトン５ｍｍｏｌにベンジルアミン６ｍｍｏｌを加え超音波照射下５０℃で１５時間反応を行った。Ｎ−ベンジル−４−ヒドロキシウンデカンアミドが収率８０％で得られた。
【００４３】
Ｎ−ベンジル−４−ヒドロキシウンデカンアミドの同定
ＩＲ（ｃｍ−１）：３３１０（ＮＨ，ＯＨ），１６４５（Ｃ＝Ｏ），ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：０．９０（ｔ，３Ｈ，ＣＨ３），１．２〜１．４（ｍ，８Ｈ，ＣＨ２），１．６〜１．８（ｍ，４Ｈ，ＣＨ２），２．４０（ｔ，２Ｈ，ＣＨ２ＣＯ），３．５８（ｂｒ，Ｓ，１Ｈ，ＣＨ−Ｏ），４．４５（ｍ，２Ｈ，ＡｒＣＨ２Ｎ），５．７０（ｂｒ，Ｓ，１Ｈ，ＣＯＮＨ），７．３０（Ｓ，５Ｈ，Ｃ６Ｈ５）
【００４４】
製造例８
またγ−ドデカラクトン５ｍｍｏｌにベンジルアミン６ｍｍｏｌを加え６０℃で４８時間反応を行った。Ｎ−ベンジル−４−ヒドロキシドデカンアミドが収率８０％で得られた。
【００４５】
Ｎ−ベンジル−４−ヒドロキシドデカンアミドの同定
ＩＲ（ｃｍ−１）：３３１０（ＮＨ，ＯＨ），１６４５（Ｃ＝Ｏ），ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：０．９０（ｔ，３Ｈ，ＣＨ３），１．２〜１．４（ｍ，１０Ｈ，ＣＨ２），１．６〜１．８（ｍ，４Ｈ，ＣＨ２），２．４０（ｔ，２Ｈ，ＣＨ２ＣＯ），３．５８（ｂｒ，Ｓ，１Ｈ，ＣＨ−Ｏ），４．４５（ｍ，２Ｈ，ＡｒＣＨ２Ｎ），５．７０（ｂｒ，Ｓ，１Ｈ，ＣＯＮＨ），７．３０（Ｓ，５Ｈ，Ｃ６Ｈ５）
【００４６】
製造例９
γ−デカラクトン５ｍｍｏｌにプロピルアミン６ｍｍｏｌを加え室温で７２時間反応を行った。Ｎ−プロピル−４−ヒドロキシデカンアミドが収率７０％で得られた。この反応をオートクレーブ中で８０℃、６時間反応を行うとＮ−プロピル−４−ヒドロキシデカンアミドが収率９５％で得られた。
【００４７】
Ｎ−プロピル−４−ヒドロキシデカンアミドの同定
ＩＲ（ｃｍ−１）：３３００（ＮＨ，ＯＨ），１６４５（Ｃ＝Ｏ），ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：０．９０（ｔ，３Ｈ，ＣＨ３），１．２〜１．４（ｍ，６Ｈ，ＣＨ２），１．５（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２），１．６〜１．８（ｍ，４Ｈ，ＣＨ２），２．３８（Ａ，２Ｈ，ＣＨ２ＣＯ），３．５５（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２Ｎ），３．６０（ｂｒＳ，１Ｈ，ＣＨ−Ｏ），５．７０（ｍ，１Ｈ，ＣＯＮＨ）
【００４８】
製造例１０
δ−デカラクトン５ｍｍｏｌにベンジルアミン６ｍｍｏｌを加え室温で１２時間反応を行った。Ｎ−ベンジル−５−ヒドロキシデカンアミドが収率９８％で得られた。またこの反応をオートクレーブ中で８０℃５時間反応を行うとＮ−ベンジル−５−ヒドロキシデカンアミドが収率９５％で得られた。
【００４９】
製造例１１
δ−ドデカラクトン５ｍｍｏｌにベンジルアミン６ｍｍｏｌを加え室温で１２時間反応を行った。Ｎ−ベンジル−５−ヒドロキシドデカンアミドが収率９８％で得られる。
【００５０】
以上のようにして得られたヒドロキシアミドのラクトン化を、γ−ヒドロキシデカンアミドを例に採ると、下記のように模式することができるが、次にγ−ヒドロキシアミドとδ−ヒドロキシアミドのラクトン化の実施例を以下に示す。
【００５１】
【数１】
2004236619.tif 000003
【００５２】
実施例１
γ−ヒドロキシデカアミドのラクトン化
（Ａ）γ−ヒドロキシデカンアミド１  ｍｍｏｌ、酢酸ビニル２  ｍｍｏｌ、ジエチルエーテル溶媒２０ｍｌ溶液にＮｏｖｏｚｙｍ４３５  ０．４ｇを加え、４０℃で攪拌した。ガスクロマトグラフィーで約５０％アシル体が生成したところで反応を止めた。反応溶液をろ過し、エバポレーターで濃縮した。残留物にｎ−ヘキサン４０ｍｌを加えて氷水でよく冷やしながらよくかき混ぜた。ｎ−ヘキサン溶液と不溶分を分離した。
【００５３】
（Ｂ）ｎ−ヘキサンを用いて分離した光学活性なアセタート体とヒドロキシ体を、アルカリ加水分解、塩酸で処理して夫々（Ｓ）−γ−ラクトンと（Ｒ）−γ−ラクトンを得ることができた。その結果を下記表１、表２に示す。
【００５４】
【表１】
2004236619.tif 000004
【００５５】
【表２】
2004236619.tif 000005
【００５６】
表２より明らかなように、４−ヒドロキシデカアミドに対してリパーゼＮｏｖｏｚｙｍ４３５を用いたリパーゼの不斉エステル化反応を利用してエナンチオ過剰率の高い（Ｓ）−γ−デカラクトン（＞９９％ｅｅ）及び（Ｒ）−γ−デカラクトン（７６％ｅｅ）を得ることができた。
【００５７】
実施例２
Ｎ−メチル−γ−ヒドロキシデカアミドのラクトン化
（Ａ）Ｎ−メチル−４−ヒドロキシデカンアミド１ｍｍｏｌ、酢酸ビニル２ｍｍｏｌエチルエーテル２０ｍｌ溶液にＮｏｖｏｚｙｍ４３５  ０．２ｇを加え、４０℃で攪拌した。ガスクロマトグラフィーで約５０％アシル体が生成したところで反応を止めた。反応溶液をろ過し、エバポレーターで濃縮した。残留物にｎ−ヘキサン４０ｍｌを加えて氷水でよく冷やしながらよくかき混ぜた。ｎ−ヘキサン溶液と不溶分を分離した。
【００５８】
（Ｂ）ｎ−ヘキサンを用いて分離した光学活性なアセタート体とヒドロキシ体を、アルカリ加水分解、塩酸で処理して夫々（Ｓ）−γ−ラクトンと（Ｒ）−γ−ラクトンを得ることができた。その結果を下記表３に示す。
【００５９】
【表３】
2004236619.tif 000006
【００６０】
表３より明らかなように、Ｎ−メチル−４−ヒドロキシデカアミドに対してリパーゼＮｏｖｏｚｙｍ４３５を用いたリパーゼの不斉エステル化反応を利用してエナンチオ過剰率の高い（Ｓ）−γ−デカラクトン（９８％ｅｅ）及び（Ｒ）−γ−デカラクトン（＞９９％ｅｅ）を得ることができた。
【００６１】
実施例３
γ−ヒドロキシドデカンミドのラクトン化
Ａ）γ−ヒドロキシドデカアミド１ｍｍｏｌ、酢酸ビニル２ｍｍｏｌ、ジエチルエーテル溶媒２０ｍｌ溶液にＮｏｖｏｚｙｍ４３５  ０．４ｇを加え、４０℃で攪拌した。ガスクロマトグラフィーで約５０％アシル体が生成したところで反応を止めた。反応溶液をろ過し、エバポレーターで濃縮した。残留物にｎ−ヘキサン４０ｍｌを加えて氷水でよく冷やしながらよくかき混ぜた。ｎ−ヘキサン溶液と不溶分を分離した。
【００６２】
（Ｂ）ｎ−ヘキサンを用いて分離した光学活性なアセタート体とヒドロキシ体を、アルカリ加水分解、塩酸で処理して夫々（Ｓ）−γ−ラクトンと（Ｒ）−γ−ラクトンを得ることができた。その結果を下記表４に示す。
【００６３】
【表４】
2004236619.tif 000007
【００６４】
表４より明らかなように、４−ヒドロキシドデカアミドに対してリパーゼＮｏｖｏｚｙｍｅ４３５を用いたリパーゼの不斉エステル化反応を利用して（Ｓ）−γ−ドデカラクトン（８２％ｅｅ）及び（Ｒ）−γ−ドデカラクトン（７５％ｅｅ）を得ることができた。
【００６５】
実施例４
Ｎ−メチル−γ−ヒドロキシドデカアミドのラクトン化
（Ａ）Ｎ−メチル−４−ヒドロキシドデカンアミド１ｍｍｏｌ、酢酸ビニル２ｍｍｏｌ、ジエチルエーテル２０ｍｌ溶液にＮｏｖｏｚｙｍ４３５  ０．２ｇを加え、室温で攪拌した。ガスクロマトグラフィーで約５０％アシル体が生成したところで反応を止めた。反応溶液をろ過し、乾燥後、エバポレーターで濃縮した。残留物にｎ−ヘキサン１００ｍｌを加えて氷水でよく冷やしながらよくかき混ぜた。ｎ−ヘキサン溶液と不溶分を分離した。
【００６６】
（Ｂ）ｎ−ヘキサンを用いて分離した光学活性なアセタート体とヒドロキシ体を、アルカリ加水分解、塩酸で処理して夫々（Ｒ）−γ−ラクトンと（Ｓ）−γ−ラクトンを得ることができた。その結果を下記表５に示す。
【００６７】
【表５】
2004236619.tif 000008
【００６８】
表５より明らかなように、Ｎ−メチル−４−ヒドロキシドデカアミドに対してリパーゼＮｏｖｏｚｙｍ４３５を用いたリパーゼの不斉エステル化反応を利用して（Ｓ）−γ−ドデカラクトン（＞９９％ｅｅ）及び（Ｒ）−γ−ドデカラクトン（＞９９％ｅｅ）を得ることができた。
【００６９】
実施例５
δ−ヒドロキシデカアミドのラクトン化
（Ａ）５−ヒドロキシデカアミド１．２ｍｍｏｌ、酢酸ビニル２．４ｍｍｏｌ、ジエチルエーテル２４ｍｌにＮｏｖｏｚｙｍ４３５  ０．３ｇを加え、４０℃で攪拌した。ガスクロマトグラフィーで約５０％アシル体が生成したところで反応を止めた。反応溶液をろ過し、エバポレーターで濃縮した。残留物にｎ−ヘキサン４０ｍｌを加えて氷水でよく冷やしながらよくかき混ぜた。ｎ−ヘキサン溶液と不溶分を分離した。
【００７０】
（Ｂ）ｎ−ヘキサンを用いて分離した光学活性なアセタート体とヒドロキシ体を、アルカリ加水分解、塩酸で処理して各々（Ｓ）−δ−デカラクトン（９８％ｅｅ）と（Ｒ）−δ−デカラクトン（９９％ｅｅ）を得ることができた。
【００７１】
【発明の効果】
以上要するに、この発明によればリパーゼ酵素を不斉アシル化により得られるアシル体と未反応のヒドロキシ体の分離がｎ−ヘキセンのような無極性溶媒による抽出分離により容易に行うことができるため、光学活性なγ−或はδ−ラクトンの製造を工業的に行うことができる。