(57)【要約】【課題】抗生物質代替が可能であり、飼料への配合量が少なくて済むので家畜や家禽が摂取しやすく、家畜や家禽の成長に悪影響を及ぼすことがなく、家畜と家禽に共用できる上、現場でハンドリングしやすく、家畜や家禽のクロストリジウム・パーフリンゲンス症、大腸菌症及びサルモネラ菌症の予防に有効である新しい抗菌性組成物及びそれを用いた、これら細菌性疾病の予防に有用である家畜又は家禽用の飼料並びにその飼料の有効な給与方法を提供する。【解決手段】クエン酸４６〜６６％、ギ酸５〜１５％、乳酸及び／又はプロピオン酸２〜１２％、担体２７〜３３％からなる抗菌性組成物。その抗菌性組成物を０．０５〜０．３％含有する家畜又は家禽用飼料。その飼料を７日間以上家畜又は家禽に給与して上記細菌性疾病を予防する方法。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
クエン酸４６〜６６％、ギ酸５〜１５％、乳酸及び／又はプロピオン酸２〜１２％、担体２７〜３３％からなり、家畜又は家禽のクロストリジウム・パーフリンゲンス症、大腸菌症及びサルモネラ菌症の予防に有効な抗菌性組成物。
【請求項２】
請求項１に記載の抗菌性組成物を０．０５〜０．３％含有する家畜又は家禽用飼料。
【請求項３】
請求項２に記載の家畜又は家禽用飼料を７日間以上家畜又は家禽に給与して、家畜又は家禽のクロストリジウム・パーフリンゲンス症、大腸菌症及びサルモネラ菌症を予防する方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、抗菌性組成物及びそれを用いた家畜又は家禽用飼料並びにその給与方法に関する。詳しくは、家畜又は家禽に共通する主要な細菌性疾病の予防に有効な抗菌性組成物とその抗菌性組成物を用いた摂取しやすい家畜又は家禽用飼料並びにその飼料を家畜又は家禽に給与する好適な方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
【特許文献１】特開２００１−２３８６０９号公報
【特許文献２】特開２００２−１２５０５号公報
【特許文献３】特開平１０−２１５７９０号公報
【０００３】
従来から、細菌由来の家畜及び家禽の疾病の予防には、抗生物質に依存する傾向があり、抗生物質の飼料添加が耐性菌の発現を誘発し、人体を危機に晒しているとの懸念から問題視されている。そのため、畜産業界においては、抗生物質に代わり得る抗菌性素材の開発が求められている。
【０００４】
一方、家畜及び家禽の細菌性疾病の対策に有機酸を用いることは、従来から広く論じられている手法であり、いくつかの特許出願が見られる。例えば、特開２００１−２３８６０９号公報には、マンノース含有コプラミール及び有機酸を添加したサルモネラ菌対策用飼料について開示されていて、有機酸として、酢酸、ギ酸、プロピオン酸、乳酸、フマル酸又はクエン酸が挙げられている。また、特開２００２−１２５０５号公報には、含水二酸化ケイ素、バーミキュライト等の無機物に担持させた固形化ギ酸を飼料に配合したサルモネラ菌及び／又は大腸菌汚染防止飼料について開示されている。さらに、特開平１０−２１５７９０号公報には、サルモネラ菌等の細菌感染を軽減するためのオリゴ糖及び酸性化材を添加した養鶏用飼料について開示されていて、酸性化材として、プロピオン酸、ギ酸又はクエン酸が挙げられている。このように、プロピオン酸、ギ酸、酢酸、乳酸、フマル酸、クエン酸等の有機酸は、細菌性感染症の予防ないし治療剤として家畜又は家禽用飼料に用いることが知られているが、これらの有機酸を用いた細菌性感染症の予防剤は、いずれも、上記公報開示のとおり、その構成が複雑である上、予防効果を上げるためには飼料に対する有機酸の添加量を多くする必要があるため、家畜や家禽の嗜好に合致せず、摂取させにくいものとなっている。
【０００５】
このような状況に鑑み、本発明者らは、有機酸を主材として、抗生物質代替が可能であり、かつ、安価な抗菌性素材について研究を続け、有機酸を特定配合割合に組み合わせることによって有機酸どうしの相乗作用が生じ、サルモネラ菌や大腸菌はもとより、激症の腸炎の原因として知られるクロストリジウム・パーフリンゲンス対策にも有効であり、しかも、家畜と家禽に共用できるとともに、飼料への配合量が少なくて済むので家畜や家禽が摂取しやすい抗菌性組成物を開発できることを見いだし、さらに、家畜用飼料及び家禽用飼料としての確認試験をおこなって、本発明を完成するに至った。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
すなわち、本発明は、有機酸を主材として構成し、抗生物質に代替することが可能であり、飼料への配合量が少なくて済むので家畜や家禽が摂取しやすく、また、家畜や家禽の成長に悪い影響を及ぼすことがなく、家畜と家禽に共用できる上、現場でハンドリングしやすく、家畜や家禽のクロストリジウム・パーフリンゲンス症、大腸菌症及びサルモネラ菌症の予防に有効である新しい抗菌性組成物及びそれを用いた、これら細菌性疾病の予防に有用である家畜又は家禽用の飼料並びにその家畜又は家禽用飼料の有効な給与方法を提供することを課題とする。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
上記の課題を解決するための本発明のうち、請求項１に記載する発明は、クエン酸４６〜６６％、ギ酸５〜１５％、乳酸及び／又はプロピオン酸２〜１２％、担体２７〜３３％からなり、家畜又は家禽のクロストリジウム・パーフリンゲンス症、大腸菌症及びサルモネラ菌症の予防に有効な抗菌性組成物である。
【０００８】
また、本発明のうち請求項２に記載する発明は、請求項１に記載の抗菌性組成物を０．０５〜０．３％含有する家畜又は家禽用飼料である。
【０００９】
また、本発明のうち請求項３に記載する発明は、請求項２に記載の家畜又は家禽用飼料を７日間以上家畜又は家禽に給与して、家畜又は家禽のクロストリジウム・パーフリンゲンス症、大腸菌症、サルモネラ菌症を予防する方法である。
【００１０】
以下、本発明について、さらに詳細に説明する。
なお、本発明において、「％」の表示は、特に断らないかぎり、「重量％」を表す。また、本発明において、有機酸の混合物に担体を添加したものか又は有機酸の混合物を担体に添加したものを「合剤」と称し、合剤を構成する各有機酸を「酸剤」とも称する。
また、本発明において、「家畜又は家禽」という意味は、家畜か家禽の一方及びその両方のことである。例えば、「家畜又は家禽用飼料」という意味は、家畜用飼料又は家禽用飼料のどちらかであると共に、家畜と家禽の両方に給与できる飼料のことでもある。
【００１１】
本発明に係る抗菌性組成物は、クエン酸、ギ酸、乳酸及び／又はプロピオン酸からなる有機酸を特定割合で組み合わせて、これを粉末状か又は液状の担体に添加したものであり、担体に添加することによって飼料中に均一に混合しやすい状態にしてある。
【００１２】
本発明において、上記各酸剤の担体としては、二酸化ケイ素、小麦粉等の粉末を用いるのが好ましい。なお、本発明で使用する担体は、上記の各酸剤を添加して飼料に均一に混合できるものであれば、家畜又は家禽に有害なものでないかぎり、特に制約はない。
【００１３】
本発明に係る抗菌性組成物は、特定配合の有機酸を粉末状の担体に噴霧し均一に吸着させ、粉末状の合剤として製したものを用いるのが好ましい。
本発明に係る抗菌性組成物は、家畜又は家禽用飼料に少量添加するだけで効果がある。また、本発明に係る抗菌性組成物は、同じ組成の合剤を家畜用飼料にも家禽用飼料にも共用できる。一般的には、通常の家畜用飼料又は通常の家禽用飼料に対して０．０５％〜０．３％添加するのが好ましい。
【００１４】
すなわち、本発明に係る家畜又は家禽用飼料は、以下の試験例に示すとおり、抗菌性組成物の添加量が少なくても主要な細菌性疾病に対して十分な予防効果を示すことができる。したがって、本発明に係る家畜又は家禽用飼料は、抗菌性組成物の添加量が少なくて済むので、家畜や家禽の嗜好を損なうおそれがなく、きわめて給与しやすい。また、飼料工場や畜産の現場におけるハンドリングも容易である。さらに、本発明に係る家畜又は家禽用飼料は、体力が十分でなく細菌性疾病にかかりやすい幼畜又は幼鶏に給与すると予防効果が大きいが、これに限るものではなく、成畜や成鶏の細菌性疾病についても十分に予防効果を奏する。
【００１５】
本発明に係る家畜又は家禽用飼料は、概ね７日間程度、家禽又は家畜に給餌すれば、上記主要な細菌性疾病に対する予防効果を挙げることができる。なお、その給与方法は、不断給餌でも制限給餌でも何ら差し支えない。
【００１６】
以下、本発明を試験例をもってさらに詳細に説明する。
なお、以下の各試験例において、試験に供するる合剤を「合剤１」などと記すが、同じ「合剤１」でも、それぞれ担体が異なる。すなわち、試験例１における「合剤１」は、表１の「合剤１」の欄に示す液状の合剤（クエン酸６６％，ギ酸５％、乳酸２％を主材とし、担体として水を添加して混合したもの）である。また、試験例２〜試験例５の「合剤１」は、試験例２に示す「合剤の製法」の《合剤１》の項にしたがって製した粉末状の合剤（クエン酸６６％、ギ酸５％、乳酸２％を主材とし、担体として二酸化ケイ素を使用したもの）である。また、試験例６及び試験例７の「合剤１」は、試験例２〜試験例５の合剤１について、担体として、二酸化ケイ素に代えて小麦粉を用いた粉末状の合剤（クエン酸６６％、ギ酸５％、乳酸２％を主材とし、担体として小麦粉を使用したもの）である。
【００１７】
【試験例１】
＜ｉｎ  ｖｉｔｒｏでの抗菌力試験＞
（１）供試菌：
Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ，  Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ，  Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｅｎｔｅｒｉｔｉｄｉｓ
（２）接種菌数：  各１０８  個
【００１８】
（３）供試した抗菌性組成物（合剤）の構成は表１に示すとおりである。
【表１】（単位：％）
2004236597.tif 000002
【００１９】
なお、表１の各酸剤の割合は、いずれも１００％純度で示してあるが、試験に用いた各酸剤の純度と性状は、クエン酸＝９９％の粉体、ギ酸＝９９％の液体、乳酸＝９０％の液体、プロピオン酸＝９９％の液体であり、各々の純度差（クエン酸＝１％、ギ酸＝１％、乳酸＝１０％、プロピオン酸＝１％）は、それぞれ、担体である水に含めてある。
【００２０】
（４）試験方法：
上記３種の供試菌のうち、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉとＳａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｅｎｔｅｒｉｔｉｄｉｓについては、表１の各合剤（合剤１〜合剤６）を濃度を変えて添加したハートインヒュージョン培地にそれぞれ接種し、３５℃で２０時間好気培養して最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）を調べた。また、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｐｅｒｆｒｉｎｈｅｎｓ  については、表１の各合剤を濃度を変えて添加したＧＡＭ培地に接種し、３５℃で２０時間嫌気培養してＭＩＣを調べた。
【００２１】
（５）試験結果：
合剤１から合剤６について、各菌に対するＭＩＣは表２に示すとおりである。
【表２】（単位：％）
2004236597.tif 000003
【００２２】
（６）考察と官能評価：
表２に示すとおり、合剤１から合剤６についてｉｎ  ｖｉｔｒｏでおこなった抗菌力試験では、いずれの合剤も同等の抗菌効果があることが確認された。しかし、合剤６については、揮発性が高く、酸臭の強いギ酸とプロピオン酸が併せて２７％も含まれていることから、採用がためらわれた。そのため、合剤１〜合剤６の各サンプルを飼料工場の担当者１０名に提示し、官能評価を依頼した。その結果、やはり、１０名中の９名が合剤６について不採用の意向を示した。この官能評価の結果を考えると、合剤６は、現場でハンドリングに携わる人間への影響が強いので、飼料用の抗菌性組成物としては実用上好ましくないように考えられる。
【００２３】
【試験例２】
＜子豚を用いた選択摂取試験＞
（１）試験方法：
下記の「合剤の製法」にしたがって製した６種の合剤（合剤１〜合剤６）と抗菌力の強さが確認されているギ酸単独の製剤を、それぞれ生後３０日齢の子豚３０頭に３日間給与して選択摂取試験をおこない、家畜の嗜好性への影響を確認した。すなわち、本試験例で供試する合剤１から合剤６は、試験例１の合剤１〜合剤６に対して、水の代わりに同量の二酸化ケイ素を担体として用いた粉末状の合剤である。また、ギ酸単独の製剤は、ギ酸７０％を二酸化ケイ素３０％に噴霧して吸着させたものである。この７種類の合剤又は製剤をそれぞれ０．２％宛、表４に示す子豚用市販飼料に添加したものを、自由に選択して摂取できる状態にして子豚に給与した。
【００２４】
（２）合剤の製法：
各合剤は、以下の方法によって製した。
《合剤１》
クエン酸６６７ｇ、ギ酸５１ｇ、乳酸２２ｇ、二酸化ケイ素２６０ｇを正確に秤量し、最初にクエン酸と二酸化ケイ素の均一な粉末を作り、これにギ酸と乳酸の均一な混合液を噴霧し、性状が安定するまで静置した後、攪拌して均一な粉末状の合剤１０００ｋｇを得た。
《合剤２》
クエン酸６６７ｇ、ギ酸５１ｇ、プロピオン酸２０ｇ、二酸化ケイ素２６２ｇを正確に秤量し、最初にクエン酸と二酸化ケイ素の均一な粉末を作り、これにギ酸とプロピオン酸の均一な混合液を噴霧し、性状が安定するまで静置した後、攪拌して均一な粉末状の合剤１０００ｋｇを得た。
《合剤３》
クエン酸４６５ｇ、ギ酸１５２ｇ、乳酸１３３ｇ、二酸化ケイ素２５０ｇを正確に秤量し、最初にクエン酸と二酸化ケイ素の均一な粉末を作り、これにギ酸と乳酸の混合液を噴霧し、性状が安定するまで静置した後、攪拌して均一な粉末状の合剤１０００ｋｇを得た。
《合剤４》
クエン酸５０５ｇ、ギ酸５１ｇ、プロピオン酸１２１ｇ、二酸化ケイ素３２３ｇを正確に秤量し、最初にクエン酸と二酸化ケイ素の均一な粉末を作り、これにギ酸とプロピオン酸の均一な混合液を噴霧し、性状が安定するまで静置した後、攪拌して均一な粉末状の合剤１０００ｋｇを得た。
《合剤５》
クエン酸４６５ｇ、ギ酸１０１ｇ、乳酸６７ｇ、プロピオン酸６１ｇ、二酸化ケイ素３０６ｇを正確に秤量し、最初にクエン酸と二酸化ケイ素の均一な粉末を作り、これにギ酸と乳酸とプロピオン酸の均一な混合液を噴霧し、性状が安定するまで静置した後、攪拌して均一な粉末状の合剤１０００ｋｇを得た。
《合剤６》
クエン酸４６５ｇ、ギ酸１５２ｇ、プロピオン酸１２１ｇ、二酸化ケイ素２６２ｇを正確に秤量し、最初にクエン酸と二酸化ケイ素の均一な粉末を作り、これにギ酸とプロピオン酸の均一な混合液を噴霧して、性状が安定するまで静置した後、攪拌して均一な粉末状の合剤１０００ｋｇを得た。
【００２５】
（３）試験結果：
試験の結果、表３に示す成績が得られた。
【表３】
2004236597.tif 000004
【００２６】
（４）考察：
表３から、子豚の嗜好について、合剤１〜合剤５の間には、極端な差異は見られなかった。なお、合剤１〜合剤５の抗菌力は、先のｉｎ  ｖｉｔｒｏでの試験（試験例１）でも同等であることが確認されている。しかし、ギ酸単独の製剤と合剤６については、やはり、子豚の嗜好に適していないことが確認された。ギ酸やプロピオン酸の抗菌力の強さは広く知られているところであるが、家畜にも明確な拒絶反応が確認されたので、先の官能評価と併せて、合剤６は、家畜又は家禽用の抗菌性組成物としては限界を越えていると判断し、以降は、合剤１から合剤５までにしぼってさらに動物試験を続けることにした。
なお、供試した市販飼料の配合は表４に示すとおりである。
【００２７】
【表４】
2004236597.tif 000005
【００２８】
【試験例３】
＜合剤の保存試験＞
（１）試験方法：
試験例２の製法で作成した合剤１〜合剤６をそれぞれ２か月間常温で保管し、保存劣化の有無を確認した。
（２）試験結果と考察：
２か月の常温保管後、合剤３と合剤６には、若干の固まりが発見された。この固まりは手で砕ける程度の軽微なもので、使用上、実質的に問題が生じることはなかった。しかし、その原因は、合剤３と合剤６は、ギ酸、乳酸、プロピオン酸といった液状の酸剤の含量が多いので、そのことに起因するものと推察された。
（３）合剤７の試験：
そこで、さらに、クエン酸４０４ｇ（４０％）、ギ酸１０１ｇ（１０％）、乳酸１１１ｇ（１０％）、プロピオン酸１０１ｇ（１０％）、担体として二酸化ケイ素２８３ｇを用い、試験例２と同じ製法で「合剤７」を作成し、この合剤７を２か月間常温で保管して保存劣化の有無を確認した。
その結果、合剤７には、手では砕けない大きな固まりが発見された。このことから、合剤７（液状の酸剤の合計量が３１．３％）は、抗菌力はともかく、製剤化には不適であり、合剤３（液状の酸剤の合計量が２８．５％）と合剤６（液状の酸剤の合計量は２７．３％）が、実用上、抗菌性組成物として用いる限界であると判断された。なお、合剤７は、試験例２の結果を考慮すると、子豚の嗜好に適さない上、飼料工場や畜産現場でのハンドリングに耐え得るものではない。また、先記のとおり、合剤６も同様に判断された。
以上のことから、結論として「合剤１から合剤５までの酸剤の組み合わせが」が抗菌性組成物として実用性のある範囲であると判断された。
【００２９】
【試験例４】
＜採卵鶏と子牛の糞中排菌測定＞
（１）試験方法と試験結果：
試験例２の製法で作成した合剤２を０．０５％添加した市販飼料を３００日齢の採卵鶏３０羽と４３日齢の子牛１５頭にそれぞれ連続して７日間給与した。その結果、どちらも、飼料摂取量に特段の差異は見られなかった。しかし、この試験区と同区域で飼育されていた採卵鶏と子牛の「合剤無添加飼料給与群」では、どちらも、数羽ないし数頭が大腸菌に起因する下痢を発症した。一方、「合剤２添加飼料給与群」では、採卵鶏も子牛も、下痢の発生自体が圧倒的に少なく、細菌性の下痢を発症したものは全く観察されなかった。そして、試験終了直後に採取した「合剤２添加飼料給与群」の採卵鶏と子牛の新鮮糞を検査したところ、
Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ  、Ｅｎｔｅｒｏｔｏｘｉｇｅｎｉｃ  、Ｅｎｔｅｒｏｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ  Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ  、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｅｎｔｅｒｉｔｉｄｉｓ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｉｎｆａｎｔｉｓ  は、いずれも全く検出されなかった。
供試した市販飼料の配合割合は、表５と表６に示すとおりである。
【００３０】
（２）採卵鶏用市販飼料の配合割合：
【表５】
2004236597.tif 000006
【００３１】
（３）子牛用市販飼料の配合割合：
【表６】
2004236597.tif 000007
【００３２】
【試験例５】
＜肥育豚の糞中排菌測定＞
（１）試験方法と試験結果：
試験例２の製法で作成した合剤１を０．０５％添加した市販飼料を８２日齢の肥育豚３０頭に連続して７日間給与した。その結果、飼料摂取量に特段の差異は見られなかった。しかし、この試験区と同区域で飼育されていた肥育豚の「合剤無添加飼料給与群」では、数頭が大腸菌に起因する下痢を発症した。一方、「合剤１添加飼料給与群」の肥育豚では、下痢の発生自体が圧倒的に少なく、細菌性の下痢を発症したものは全く観察されなかった。そして、試験終了直後に採取した「合剤２添加飼料給与群」の肥育豚の新鮮糞を検査したところ、クロストリジウム・パーフリンゲンス、大腸菌、サルモネラ菌は、いずれも全く検出されなかった。供試した市販飼料の配合割合は、表７に示すとおりである。
【００３３】
（２）肥育豚用市販飼料（子豚育成用配合飼料）の配合割合：
【表７】
2004236597.tif 000008
【００３４】
試験例１〜試験例５によって、家畜又は家禽の嗜好を損なわず、しかも主要な細菌性疾病の予防に有効な抗菌性組成物として好ましい合剤の組成が確認されたので、次に、試験例６と試験例７をもって、これらの抗菌性組成物（合剤）を添加した飼料の家畜や家禽の発育に対する影響を確認することにした。
【００３５】
【試験例６】
＜ブロイラー発育試験＞
（１）試験方法：
２１日齢のブロイラー１５０羽を５つの試験区と１つの対照区に分けて、試験区のブロイラーにはそれぞれ表８に示す試験区飼料（ブロイラー用配合飼料に合剤１〜合剤５を各０．３％添加した５通りの飼料）を、また、対照区のブロイラーには、表８に示す対照区飼料（合剤無添加のブロイラー用配合飼料）を、いずれも２８日間給与して、それぞれの発育への影響を確認した。
【００３６】
（２）試験区飼料と対照区飼料：
試験区飼料に添加した５通りの合剤（合剤１〜合剤５）は、いずれも、試験例２の「合剤の製法」において、二酸化ケイ素の代わりに小麦粉を用いて製したものである。（例えば、合剤１であれば、クエン酸６６７ｇと小麦粉２６０ｇの均一な粉末を作り、これにギ酸５１ｇと乳酸２２ｇの均一な混合液を噴霧し、性状が安定するまで静置した後、攪拌して均一化した粉末状の合剤である。）
本試験例で用いる５通りの飼料には、表８に示すとおり、上記の製法で作成した合剤１〜合剤５を各０．３％添加してある。
また、本試験例で用いる対照区飼料は、表８に示すように、これら合剤は添加していないが、その他の原料の配合を試験区飼料とほとんど同じ割合にした飼料である。
【００３７】
（３）供試したブロイラー用配合飼料：
【表８】
2004236597.tif 000009
【００３８】
（４）ブロイラーの発育成績
【表９】
2004236597.tif 000010
【００３９】
（５）考察：
表９によれば、合剤１〜合剤５をそれぞれ０．３％添加した試験区飼料では、５通りの試験区飼料の全てが対照区飼料に比べて、ブロイラーの飼料摂取量がわずかに向上しており、また、日増体も試験区飼料給与の方が高くなっている。したがって、本発明に係る抗菌性組成物は、合剤１〜合剤５のいずれについても細菌性疾病の予防剤として有効な量を飼料に添加して給与したにもかかわらず、ブロイラーの嗜好や発育には何も悪い影響が生じないことが確認された。
【００４０】
【試験例７】
＜離乳子豚の発育試験＞
（１）試験方法：
試験例６と同様の試験を離乳子豚についても実施した。すなわち、２１日齢の離乳子豚３０頭を５つの試験区と１つの対照区に分けて、試験区の子豚にはそれぞれ表１０に示す試験区飼料（子豚用配合飼料に合剤１〜合剤５を各０．３％添加した５通りの飼料）を、また、対照区の子豚には表１０に示す対照区飼料（合剤無添加の子豚用配合飼料）を、いずれも１４日間給与して、それぞれの発育への影響を確認した。
【００４１】
（２）試験区飼料と対照区飼料：
試験区飼料に添加した５通りの合剤（合剤１〜合剤５）は、いずれも、試験例２の「合剤の製法」において、二酸化ケイ素の代わりに小麦粉を用いて製したものである。（例えば、合剤２であれば、クエン酸６６７ｇと小麦粉２６２ｇの均一な粉末を作り、この粉末にギ酸５１ｇとプロピオン酸２０ｇの均一な混合液を噴霧し、性状が安定するまで静置した後、攪拌して均一化した粉末状の合剤である。）
本試験例で用いる５通りの飼料には、表１０に示すとおり、上記の製法で作成した合剤１〜合剤５を各０．３％添加してある。
また、本試験例で用いる対照区飼料は、表１０に示すように、これら合剤は添加していないが、その他の原料の配合を試験区飼料とほとんど同じ割合にした飼料である。
【００４２】
（３）供試した子豚用配合飼料：
【表１０】
2004236597.tif 000011
【００４３】
（４）離乳子豚の発育成績
【表１１】
2004236597.tif 000012
【００４４】
（５）考察：
表１１によれば、合剤１〜合剤５をそれぞれ０．３％添加した試験区飼料において、５通りの試験区飼料の全てが対照区飼料に比べて、子豚の飼料摂取量が向上しており、また、日増体も試験区飼料給与の方が高くなっている。さらに、試験区飼料では軟便の発生率が大幅に減少している。したがって、本発明に係る抗菌性組成物は、合剤１〜合剤５のいずれについても細菌性疾病の予防剤として有効な量を飼料に添加して給与したにもかかわらず、離乳子豚の嗜好や発育には何も悪い影響が生じないことが確認された。
【００４５】
以上の試験結果から、家畜及び家禽の主要な細菌性疾病の予防に有効であり、かつ、家畜及び家禽の嗜好を損なわず、発育を阻害することがない抗菌性組成物は「表１に示す合剤１〜合剤の各酸剤の組み合わせ」であることが確認された。したがって、本発明に係る抗菌性組成物としては、「クエン酸４６〜６６％、ギ酸５〜１５％、乳酸及び／又はプロピオン酸２〜１２％を主材とする合剤」が最適であることが理解される。また、本発明に係る家畜又は家禽用飼料としては、上記の合剤１〜合剤５を抗菌性組成物として０．０５％（試験例４）から０．２％（試験例２）ないし０．３％（試験例６及び試験例７）を含有させることが適切であることが理解される。
【００４６】
【発明の効果】
以上、詳しく説明のとおり、本発明に係る家畜又は家禽用の抗菌性組成物は、特定配合量のクエン酸、ギ酸、乳酸及び／又はプロピオン酸を担体に添加したものであるから、抗生物質のような耐性菌発現のおそれがない。それでいて、クロストリジウム・パーフリンゲンス症、大腸菌症及びサルモネラ菌症のいずれに対しても十分な予防力を有する上、家畜や家禽の成長に悪い影響を与えるおそれがない。しかも、家畜にも家禽にも効果があるので、両者共用の予防剤として用いることができる。
【００４７】
また、本発明に係る家畜又は家禽用飼料は、上記の抗菌性組成物を通常の飼料へ少量だけ添加したものであるから、現場においてハンドリングしやすく、しかも、有機酸を添加しただけであるから家畜又は家禽の成長や嗜好に悪い影響を与えるおそれがない。その上、家畜又は家禽にとってきわめて摂取しやすいものである。
本発明に係る家畜又は家禽用飼料は、それでいて、抗生物質を添加した飼料と同等に、クロストリジウム・パーフリンゲンス症、大腸菌症及びサルモネラ菌症のいずれに対しても十分な予防力を有する。しかも、同じ飼料を家畜及び家禽に共用できる。また、本発明に係る家畜又は家禽用飼料の給与方法は、きわめて簡単であり、家畜又は家禽の嗜好に影響を与えないので、きわめて給与しやすい。以上のとおり、本発明は、家畜及び家禽に共通の主要な細菌性疾病に対して、きわめて有用な予防手段を提供するものであり、飼料業界にとっても、また畜産業界にとっても大いに有意義なものである。
【手続補正書】
【提出日】平成15年5月7日(2003.5.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１６】
以下、本発明を試験例をもってさらに詳細に説明する。
なお、以下の各試験例において、試験に供する各合剤を「合剤１」などと記すが、同じ「合剤１」でも、それぞれ担体が異なる。すなわち、試験例１における「合剤１」は、表１の「合剤１」の欄に示す液状の合剤（クエン酸６６％、ギ酸５％、乳酸２％を主材とし、担体として水を添加して混合したもの）である。また、試験例２〜試験例５の「合剤１」は、試験例２に示す「合剤の製法」の《合剤１》の項にしたがって製した粉末状の合剤（クエン酸６６％、ギ酸５％、乳酸２％を主材とし、担体として二酸化ケイ素を使用したもの）である。また、試験例６及び試験例７の「合剤１」は、試験例２〜試験例５の合剤１について、担体として、二酸化ケイ素に代えて小麦粉を用いた粉末状の合剤（クエン酸６６％、ギ酸５％、乳酸２％を主材とし、担体として小麦粉を使用したもの）である。


【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２０】
（４）試験方法：
上記３種の供試菌のうち、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉとＳａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｅｎｔｅｒｉｔｉｄｉｓについては、表１の各合剤（合剤１〜合剤６）を濃度を変えて添加したハートインヒュージョン培地にそれぞれ接種し、３５℃で２０時間好気培養して最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）を調べた。また、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ  については、表１の各合剤を濃度を変えて添加したＧＡＭ培地に接種し、３５℃で２０時間嫌気培養してＭＩＣを調べた。


【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４５】
以上の試験結果から、家畜及び家禽の主要な細菌性疾病の予防に有効であり、かつ家畜及び家禽の嗜好を損なわず、発育を阻害することがない抗菌性組成物は「表１に示す合剤１〜合剤５の各酸剤の組み合わせ」であることが確認された。したがって、本発明に係る抗菌性組成物としては、「クエン酸４６〜６６％、ギ酸５〜１５％、乳酸及び／又はプロピオン酸２〜１２％を主材とする合剤」が最適であることが理解される。また、本発明に係る家畜又は家禽用飼料としては、上記の合剤１〜合剤５を抗菌性組成物として０．０５％（試験例４）から０．２％（試験例２）ないし０．３％（試験例６及び試験例７）を含有させることが適切であることが理解される。