【手続補正書】
【提出日】平成23年11月11日(2011.11.11)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００９４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００９４】
製剤化された生体高分子は、大量生産された生体高分子の評価について実施されるように、重要な品質パラメーター、特に分子量、濃度、粘性、重量オスモル濃度、純度、内毒素含有量、吸光度、ｐＨ、およびバイオバーデンについて評価されるべきである。注入性およびパッケージ完全性などの最終製剤化製品と関連するさらなるパラメーターもまた評価される。
次に、本発明の好ましい態様を示す。
１  可溶性粘弾性生体高分子を製剤化するためのプロセスであって、
（ｉ）大量生産された可溶性生体高分子を、滅菌濾過に適した膜を通過させることによって滅菌濾過するステップ、および
（ｉｉ）生体高分子を限外濾過によって所望の最終濃度に濃縮するステップ
を含むプロセス。
２  生体高分子が、ホモ多糖、ヘテロ多糖、およびその混合物から成る群から選択される、上記１に記載のプロセス。
３  ホモ多糖が、カルボキシメチルセルロース、キチン、ポリマンヌロン酸、カードランガム、およびデキストランから成る群から選択される、上記２に記載のプロセス。
４  ヘテロ多糖が、ヒアルロン酸、コンドロイチン硫酸、デルマタン硫酸、ケラタン硫酸、ヘパリン、ヘパラン硫酸、寒天、アルギン酸、カラギーナン、ゲラン、グアーガム、ローカストビーンガム、およびキサンタンガムから成る群から選択される、上記２に記載のプロセス。
５  生体高分子が、生物源、インビトロ酵素合成、化学合成、および２つ以上のそのような供給源の組み合わせから成る群から選択される供給源から得られる、上記１に記載のプロセス。
６  生物源が、細菌、酵母、植物、両生動物、鳥類、および哺乳動物から成る群から選択される、上記５に記載のプロセス。
７  生物源から得られる生体高分子が、化学修飾をさらに含む、上記５に記載のプロセス。
８  化学修飾が、硫酸基の追加、カルボキシル基の追加、ヒドロキシル基の追加、アセチル基の追加、エステル化、および架橋から成る群から選択される修飾を含む、上記７に記載のプロセス。
９  粘弾性生体高分子が、１×１０4〜１×１０7ダルトンの範囲の平均分子量を有する、上記１に記載のプロセス。
１０  粘弾性生体高分子が、３×１０6±０．６×１０6ダルトンの平均分子量を有する、上記９に記載のプロセス。
１１  細菌が、ストレプトコッカス属の株である、上記６に記載のプロセス。
１２  細菌が、ストレプトコッカス  エクイ、ストレプトコッカス  パイロージェン、ストレプトコッカス  エクイシミリス、ストレプトコッカス  ディスガラクティエ、およびストレプトコッカス  ズーエピデミカスから成る群から選択されるストレプトコッカス種である、上記１１に記載のプロセス。
１３  ストレプトコッカス株が、非溶血性であり、非病原性である、上記１１に記載のプロセス。
１４  大量生産された生体高分子が、ストレプトコッカス株を発酵させた培養ブロスから単離される、上記１に記載のプロセス。
１５  大量生産された生体高分子が、ヒアルロン酸である、上記１４に記載のプロセス。
１６  大量生産されたヒアルロン酸が、不純物を実質的に含まない、上記１５に記載のプロセス。
１７  大量生産されたヒアルロン酸が、細菌内毒素を実質的に含まない、上記１６に記載のプロセス。
１８  細菌内毒素のレベルが、＜０．２５ＥＵ／ｍｌである、上記１７に記載のプロセス。
１９  大量生産されたヒアルロン酸が、細菌細胞を実質的に含まない、上記１６に記載のプロセス。
２０  細菌細胞の生菌数が、＜１００ＣＦＵ／ｇである、上記１９に記載のプロセス。
２１  細菌細胞の生菌数が、＜５０ＣＦＵ／ｇである、上記２０に記載のプロセス。
２２  細菌細胞の生菌数が、＜１０ＣＦＵ／ｇである、上記２１に記載のプロセス。
２３  大量生産されたヒアルロン酸が、タンパク質を実質的に含まない、上記１６に記載のプロセス。
２４  タンパク質のレベルが、＜１ｍｇ／ｇである、上記２３に記載のプロセス。
２５  ステップ（ｉ）における大量生産された可溶性生体高分子の濃度が、＜０．２％である、上記１に記載のプロセス。
２６  濃度が、０．１０〜０．１３％である、上記２５に記載のプロセス。
２７  濃縮が、限外濾過によって実施される、上記１に記載のプロセス。
２８  限外濾過が、セラミック膜を使用して実施される、上記２７に記載のプロセス。
２９  所望の最終濃度が、０．８〜３．０％ｗ／ｖの範囲にある、上記１に記載のプロセス。
３０  所望の最終濃度が、約１．０％ｗ／ｖである、上記２９に記載のプロセス。
３１  所望の最終濃度が、約１．２％ｗ／ｖである、上記２９に記載のプロセス。
３２  所望の最終濃度が、約２．０％ｗ／ｖである、上記２９に記載のプロセス。
３３  生体高分子を、適切なパッケージング器具に無菌充填するステップをさらに含む、上記１に記載のプロセス。
３４  パッケージング器具が、注射器、バイアル、カテーテル、およびネブライザーから成る群から選択される、上記３３に記載のプロセス。
３５  製剤化された粘弾性生体高分子が、５００〜４０００の範囲の擬塑性指数（pseudoplasticity index）を有する、上記１に記載のプロセス。
３６  擬塑性指数が、６００〜１２００の範囲にある、上記３５に記載のプロセス。
３７  擬塑性指数が、６００〜８００の範囲にある、上記３６に記載のプロセス。
３８  滅菌濾過が、実寸孔径０．２ミクロンの膜を使用して実施される、上記１に記載のプロセス。
３９  粘弾性生体高分子を製剤化するためのプロセスであって、
（ｉ）滅菌濾過のための希釈濃度を達成するために、大量生産された生体高分子を適切な緩衝培地中に溶解するステップ、
（ｉｉ）生体高分子を、滅菌濾過に適した膜を通過させることによって滅菌濾過するステップ、および
（ｉｉｉ）生体高分子を限外濾過によって所望の最終濃度に濃縮するステップ
を含むプロセス。
４０  生体高分子が、ホモ多糖、ヘテロ多糖、およびその混合物から成る群から選択される、上記３９に記載のプロセス。
４１  ホモ多糖が、カルボキシメチルセルロース、キチン、ポリマンヌロン酸、カードランガム、およびデキストランから成る群から選択される、上記４０に記載のプロセス。
４２  ヘテロ多糖が、ヒアルロン酸、コンドロイチン硫酸、デルマタン硫酸、ケラタン硫酸、ヘパリン、ヘパラン硫酸、寒天、アルギン酸、カラギーナン、ゲラン、グアーガム、ローカストビーンガム、およびキサンタンガムから成る群から選択される、上記４０に記載のプロセス。
４３  生体高分子が、生物源、インビトロ酵素合成、化学合成、および２つ以上のそのような供給源の組み合わせから成る群から選択される供給源から得られる、上記３９に記載のプロセス。
４４  生物源が、細菌、植物、両生動物、鳥類、および哺乳動物から成る群から選択される、上記４３に記載のプロセス。
４５  生物源から得られる生体高分子が、化学修飾をさらに含む、上記４３に記載のプロセス。
４６  化学修飾が、硫酸基の追加、カルボキシル基の追加、ヒドロキシル基の追加、アセチル基の追加、エステル化、および架橋から成る群から選択される修飾を含む、上記４５に記載のプロセス。
４７  粘弾性生体高分子が、１×１０4〜１×１０7ダルトンの範囲の平均分子量を有する、上記３９に記載のプロセス。
４８  粘弾性生体高分子が、３×１０6±０．６×１０6ダルトンの平均分子量を有する、上記４７に記載のプロセス。
４９  細菌が、ストレプトコッカス属の株である、上記４４に記載のプロセス。
５０  細菌が、ストレプトコッカス  エクイ、ストレプトコッカス  パイロージェン、ストレプトコッカス  エクイシミリス、ストレプトコッカス  ディスガラクティエ、およびストレプトコッカス  ズーエピデミカスから成る群から選択されるストレプトコッカス種である、上記４９に記載のプロセス。
５１  ストレプトコッカス株が、非溶血性であり、非病原性である、上記４９に記載のプロセス。
５２  大量生産された生体高分子が、ストレプトコッカス株を発酵させた培養ブロスから単離される、上記３９に記載のプロセス。
５３  大量生産された生体高分子が、ヒアルロン酸である、上記５２に記載のプロセス。
５４  大量生産されたヒアルロン酸が、不純物を実質的に含まない、上記５３に記載のプロセス。
５５  大量生産されたヒアルロン酸が、細菌内毒素を実質的に含まない、上記５４に記載のプロセス。
５６  細菌内毒素のレベルが、＜０．２５ＥＵ／ｍｌである、上記５５に記載のプロセス。
５７  大量生産されたヒアルロン酸が、細菌細胞を実質的に含まない、上記５３に記載のプロセス。
５８  細菌細胞の生菌数が、＜１００ＣＦＵ／ｇである、上記５７に記載のプロセス。
５９  細菌細胞の生菌数が、＜５０ＣＦＵ／ｇである、上記５８に記載のプロセス。
６０  細菌細胞の生菌数が、＜１０ＣＦＵ／ｇである、上記５９に記載のプロセス。
６１  大量生産されたヒアルロン酸が、タンパク質を実質的に含まない、上記５４に記載のプロセス。
６２  タンパク質のレベルが、＜１ｍｇ／ｇである、上記６１に記載のプロセス。
６３  ステップ（ｉ）における溶解は、＜０．２％の濃度で大量生産された可溶性生体高分子を産生する、上記３９に記載のプロセス。
６４  濃度が、０．１０〜０．１３％の範囲にある、上記６３に記載のプロセス。
６５  ステップ（ｉｉ）における濃縮が、限外濾過によって実施される、上記３９に記載のプロセス。
６６  限外濾過が、セラミック膜を使用して実施される、上記６５に記載のプロセス。
６７  ステップ（ｉｉｉ）における所望の最終濃度が、０．８〜３．０％ｗ／ｖの範囲にある、上記１に記載のプロセス。
６８  所望の最終濃度が、約１．０％ｗ／ｖである、上記６７に記載のプロセス。
６９  所望の最終濃度が、約１．２％ｗ／ｖである、上記６７に記載のプロセス。
７０  所望の最終濃度が、約２．０％ｗ／ｖである、上記６７に記載のプロセス。
７１  生体高分子を、適切なパッケージング器具に無菌充填するステップをさらに含む、上記３９に記載のプロセス。
７２  パッケージング器具は、注射器、バイアル、カテーテル、およびネブライザーから成る群から選択される、上記３３に記載のプロセス。
７３  製剤化された粘弾性生体高分子が、５００〜４０００の範囲の擬塑性指数を有する、上記３９に記載のプロセス。
７４  擬塑性指数が、６００〜１２００の範囲にある、上記３９に記載のプロセス。
７５  擬塑性指数が、６００〜８００の範囲にある、上記３９に記載のプロセス。
７６  滅菌濾過が、実寸孔径０．２ミクロンの膜を使用して実施される、上記３９に記載のプロセス。
７７  緩衝培地が、金属塩を含む、上記３９に記載のプロセス。
７８  ヒアルロン酸の粘弾性調製物を製剤化するためのプロセスであって、
（ｉ）滅菌濾過のための希釈濃度を達成するために、大量生産されたヒアルロン酸を適切な緩衝培地中に溶解するステップ、
（ｉｉ）溶解されたヒアルロン酸を、０．２ミクロン無水膜を通過させることによって滅菌濾過するステップ、および
（ｉｉｉ）ヒアルロン酸を限外濾過によって所望の最終濃度に濃縮するステップ
を含むプロセス。
７９  大量生産されたヒアルロン酸が、生物源、インビトロ酵素合成、化学合成、および２つ以上のそのような供給源の組み合わせから成る群から選択される供給源から得られる、上記７８に記載のプロセス。
８０  生物源が、細菌、酵母、植物、両生動物、鳥類、および哺乳動物から成る群から選択される、上記７９に記載のプロセス。
８１  生物源から得られる、大量生産されたヒアルロン酸が、化学修飾をさらに含む、上記８０に記載のプロセス。
８２  化学修飾が、硫酸基の追加、カルボキシル基の追加、ヒドロキシル基の追加、アセチル基の追加、エステル化、および架橋から成る群から選択される修飾を含む、上記８１に記載のプロセス。
８３  大量生産されたヒアルロン酸が、１×１０4〜１×１０7ダルトンの範囲の平均分子量を有する、上記７８に記載のプロセス。
８４  大量生産されたヒアルロン酸が、３×１０6±０．６×１０6ダルトンの平均分子量を有する、上記８３に記載のプロセス。
８５  細菌が、ストレプトコッカス属の種である、上記８０に記載のプロセス。
８６  細菌が、ストレプトコッカス  エクイ、ストレプトコッカス  パイロージェン、ストレプトコッカス  エクイシミリス、ストレプトコッカス  ディスガラクティエ、およびストレプトコッカス  ズーエピデミカスから成る群から選択されるストレプトコッカス種である、上記８５に記載のプロセス。
８７  ストレプトコッカス株が、非溶血性であり、非病原性である、上記８５に記載のプロセス。
８８  大量生産されたヒアルロン酸が、ストレプトコッカス株を発酵させた培養ブロスから単離される、上記７９に記載のプロセス。
８９  大量生産されたヒアルロン酸が、不純物を実質的に含まない、上記７８に記載のプロセス。
９０  大量生産されたヒアルロン酸が、細菌内毒素を実質的に含まない、上記８９に記載のプロセス。
９１  細菌内毒素のレベルが、＜０．２５ＥＵ／ｍｌである、上記９０に記載のプロセス。
９２  大量生産されたヒアルロン酸が、細菌細胞を実質的に含まない、上記８９に記載のプロセス。
９３  細菌細胞の生菌数が、＜１００ＣＦＵ／ｇである、上記９２に記載のプロセス。
９４  細菌細胞の生菌数が、＜５０ＣＦＵ／ｇである、上記９３に記載のプロセス。
９５  細菌細胞の生菌数が、＜１０ＣＦＵ／ｇである、上記９４に記載のプロセス。
９６  大量生産されたヒアルロン酸が、タンパク質を実質的に含まない、上記８９に記載のプロセス。
９７  タンパク質のレベルが、＜１ｍｇ／ｇである、上記９６に記載のプロセス。
９８  ステップ（ｉ）において得られる、溶解された、大量生産された生体高分子の濃度が、＜０．２％である、上記７８に記載のプロセス。
９９  濃度が、０．１０〜０．１３％である、上記９８に記載のプロセス。
１００  濃縮が、限外濾過によって実施される、上記７８に記載のプロセス。
１０１  限外濾過が、セラミック膜を使用して実施される、上記１００に記載のプロセス。
１０２  所望の最終濃度が、０．８〜３．０％ｗ／ｖの範囲にある、上記７８に記載のプロセス。
１０３  所望の最終濃度が、約１．０％ｗ／ｖである、上記１０２に記載のプロセス。
１０４  所望の最終濃度が、約１．２％ｗ／ｖである、上記１０２に記載のプロセス。
１０５  所望の最終濃度が、約２．０％ｗ／ｖである、上記１０２に記載のプロセス。
１０６  生体高分子を、適切なパッケージング器具に無菌充填するステップをさらに含む、上記７８に記載のプロセス。
１０７  パッケージング器具が、注射器、バイアル、カテーテル、およびネブライザーから成る群から選択される、上記１０６に記載のプロセス。
１０８  製剤化されたヒアルロン酸が、５００〜４０００の範囲の擬塑性指数（pseudoplasticity index）を有する、上記７８に記載のプロセス。
１０９  擬塑性指数が、６００〜１２００の範囲にある、上記１０８に記載のプロセス。
１１０  擬塑性指数が、６００〜８００の範囲にある、上記１０９に記載のプロセス。
１１１  滅菌濾過が、実寸孔径０．２ミクロンの膜を使用して実施される、上記７８に記載のプロセス。
１１２  すべてのステップが、クリーンルーム条件下で実施される、上記７８に記載のプロセス。
１１３  大量生産されたヒアルロン酸が、
（ｉ）エタノールを用いて、非溶血性非病原性のヒアルロン酸産生発酵ストレプトコッカス株の培養ブロスを沈殿させるステップ、
（ｉｉ）ステップ（ｉ）において得られる沈殿物を塩化ナトリウム／エタノール／木炭中に溶解するステップ、
（ｉｉｉ）塩化セチルピリジニウムを用いて、ステップ（ｉｉ）において得られる、溶解された物質を沈殿させるステップ、
（ｉｖ）ステップ（ｉｉｉ）において得られる沈殿物を塩化ナトリウム／エタノール中に溶解するステップ、
（ｖ）ケイ酸マグネシウムを用いて、ステップ（ｉｖ）において得られる、溶解された物質を処理するステップ、
（ｖｉ）ステップ（ｖ）において得られる、処理された物質を０．６５ミクロン無水膜によって濾過するステップ、および
（ｖｉｉ）エタノールを用いて、ステップ（ｖｉ）において得られる濾液を沈殿させるステップを含むプロセスによって得られる
上記７８に記載のプロセス。
１１４  上記７８に記載のプロセスによって得られる、哺乳動物への手術中の注射に適した粘弾性ヒアルロン酸の製剤。
１１５  不純物が実質的になく、６００よりも大きな擬塑性指数（pseudoplasticity index）を有する、上記１１４に記載の製剤。
１１６  ３×１０6±０．６×１０6ダルトンの平均分子量を有する、上記１１５に記載の製剤。
１１７  薬剤をさらに含む、上記１１４に記載の製剤。
１１８  ヒアルロン酸が、化学的に架橋されている、上記１１４に記載の製剤。
１１９  ヒアルロン酸が、金属と複合体を形成される、上記１１４に記載の製剤。
１２０  生成する粘弾性生体高分子が、少なくとも約１年間安定であり、滅菌されている、上記１、３９、または７８のいずれか一項に記載のプロセス。
１２１  生成する粘弾性生体高分子が、少なくとも約２年間安定であり、滅菌されている、上記１２０に記載のプロセス。
１２２  生成する粘弾性生体高分子が、少なくとも約５年間安定であり、滅菌されている、上記１２０に記載のプロセス。
１２３  粘弾性生体高分子の防腐剤が、使用されない、上記１、３９、または７８のいずれか一項に記載のプロセス。
【手続補正２】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
可溶性粘弾性生体高分子を製剤化するためのプロセスであって、
（ｉ）大量生産された可溶性生体高分子を、滅菌濾過に適した膜を通過させることによって滅菌濾過するステップ、および
（ｉｉ）生体高分子を限外濾過によって所望の最終濃度に濃縮するステップ
を含むプロセス。
【請求項２】
粘弾性生体高分子を製剤化するためのプロセスであって、
（ｉ）滅菌濾過のための希釈濃度を達成するために、大量生産された生体高分子を適切な緩衝培地中に溶解するステップ、
（ｉｉ）生体高分子を、滅菌濾過に適した膜を通過させることによって滅菌濾過するステップ、および
（ｉｉｉ）生体高分子を限外濾過によって所望の最終濃度に濃縮するステップ
を含むプロセス。
【請求項３】
ヒアルロン酸の粘弾性調製物を製剤化するためのプロセスであって、
（ｉ）滅菌濾過のための希釈濃度を達成するために、大量生産されたヒアルロン酸を適切な緩衝培地中に溶解するステップ、
（ｉｉ）溶解されたヒアルロン酸を、０．２ミクロン無水膜を通過させることによって滅菌濾過するステップ、および
（ｉｉｉ）ヒアルロン酸を限外濾過によって所望の最終濃度に濃縮するステップ
を含むプロセス。
【請求項４】
生体高分子が、ホモ多糖、ヘテロ多糖、およびその混合物から成る群から選択される、請求項１又は２に記載のプロセス。
【請求項５】
生体高分子又は大量生産されたヒアルロン酸が、生物源、インビトロ酵素合成、化学合成、および２つ以上のそのような供給源の組み合わせから成る群から選択される供給源から得られる、請求項１〜３のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項６】
生物源が、細菌、酵母、植物、両生動物、鳥類、および哺乳動物から成る群から選択される、又は生物源から得られる生体高分子又は大量生産されたヒアルロン酸が、化学修飾をさらに含む、請求項５に記載のプロセス。
【請求項７】
粘弾性生体高分子又は大量生産されたヒアルロン酸が、１×１０4〜１×１０7ダルトンの範囲の平均分子量を有する、請求項１〜３のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項８】
大量生産された生体高分子が、ストレプトコッカス株を発酵させた培養ブロスから単離される、又は大量生産されたヒアルロン酸が、ストレプトコッカス株を発酵させた培養ブロスから単離される、請求項１〜３のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項９】
大量生産されたヒアルロン酸が、不純物を実質的に含まない、請求項３又は８に記載のプロセス。
【請求項１０】
ステップ（ｉ）における大量生産された可溶性生体高分子の濃度が、＜０．２％である；又は濃縮が、限外濾過によって実施される；又は所望の最終濃度が、０．８〜３．０％ｗ／ｖの範囲にある、請求項１〜３のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項１１】
生体高分子を、適切なパッケージング器具に無菌充填するステップをさらに含み、パッケージング器具が、注射器、バイアル、カテーテル、およびネブライザーから成る群から選択されてもよい、請求項１〜３のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項１２】
製剤化された粘弾性生体高分子が、５００〜４０００の範囲の擬塑性指数（pseudoplasticity index）を有する、請求項１〜３のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項１３】
滅菌濾過が、実寸孔径０．２ミクロンの膜を使用して実施される、請求項１〜３のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項１４】
緩衝培地が、金属塩を含む、請求項２に記載のプロセス。
【請求項１５】
すべてのステップが、クリーンルーム条件下で実施される、及び／又は大量生産されたヒアルロン酸が、
（ｉ）エタノールを用いて、非溶血性非病原性のヒアルロン酸産生発酵ストレプトコッカス株の培養ブロスを沈殿させるステップ、
（ｉｉ）ステップ（ｉ）において得られる沈殿物を塩化ナトリウム／エタノール／木炭中に溶解するステップ、
（ｉｉｉ）塩化セチルピリジニウムを用いて、ステップ（ｉｉ）において得られる、溶解された物質を沈殿させるステップ、
（ｉｖ）ステップ（ｉｉｉ）において得られる沈殿物を塩化ナトリウム／エタノール中に溶解するステップ、
（ｖ）ケイ酸マグネシウムを用いて、ステップ（ｉｖ）において得られる、溶解された物質を処理するステップ、
（ｖｉ）ステップ（ｖ）において得られる、処理された物質を０．６５ミクロン無水膜によって濾過するステップ、および
（ｖｉｉ）エタノールを用いて、ステップ（ｖｉ）において得られる濾液を沈殿させるステップを含むプロセスによって得られる、請求項３に記載のプロセス。
【請求項１６】
請求項３に記載のプロセスによって得られる、哺乳動物への手術中の注射に適した粘弾性ヒアルロン酸の製剤。
【請求項１７】
不純物が実質的になく、６００よりも大きな擬塑性指数（pseudoplasticity index）を有する、及び／又は３×１０6±０．６×１０6ダルトンの平均分子量を有する、及び／又は薬剤をさらに含む、及び／又はヒアルロン酸が、化学的に架橋されている、及び／又はヒアルロン酸が、金属と複合体を形成する、請求項１６に記載の製剤。
【請求項１８】
生成する粘弾性生体高分子が、少なくとも約１年間安定であり、滅菌されている、及び／又は粘弾性生体高分子の防腐剤が、使用されない、請求項１〜３のいずれか一項に記載のプロセス。