【手続補正書】
【提出日】平成24年10月5日(2012.10.5)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
インビトロで神経細胞の興奮性を調節する方法であって、
前記神経細胞で、キメラ受容体をコードしている遺伝子構築物を発現する工程であって、前記キメラ受容体は、リガンド開口型イオンチャネル蛋白質由来の膜貫通ドメインと融合したα７ニコチン性アセチルコリン受容体由来のリガンド結合ドメインを含み、前記リガンド結合ドメインは、化合物への選択的結合を与える少なくとも１つの変異を含む、工程と、
前記神経細胞を前記化合物に暴露する工程と
を含む方法。
【請求項２】
前記リガンド開口型イオンチャネル蛋白質が、イオンチャネル型ニコチン性アセチルコリン受容体、イオンチャネル型セロトニン受容体、イオンチャネル型グリシン受容体、およびイオンチャネル型ＧＡＢＡ受容体からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記リガンド開口型イオンチャネル蛋白質が、カチオン選択的である、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記リガンド開口型イオンチャネル蛋白質が、５ＨＴ３受容体である、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記ニューロンの興奮性が増強される、請求項３に記載の方法。
【請求項６】
前記リガンド開口型イオンチャネル蛋白質が、アニオン選択的である、請求項２に記載の方法。
【請求項７】
前記リガンド開口型イオンチャネル蛋白質が、グリシン受容体またはＧＡＢＡ受容体である、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記ニューロンの興奮性が減少する、請求項６に記載の方法。
【請求項９】
前記リガンド結合ドメインにおける前記少なくとも１つの変異が、配列番号１におけるＱ７９Ａ、Ｑ７９Ｇ、Ｌ１４１Ａ、Ｌ１４１Ｆ、Ｌ１４１Ｐ、Ｗ７７Ｆ、Ｗ７７Ｙ、およびＷ７７Ｍからなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記リガンド結合ドメインにおける前記少なくとも１つの変異が、配列番号６におけるＱ７９Ａ、Ｑ７９Ｇ、Ｌ１４１Ａ、Ｌ１４１Ｆ、Ｌ１４１Ｐ、Ｗ７７Ｆ、Ｗ７７Ｙ、およびＷ７７Ｍからなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
前記リガンド結合ドメインにおける前記少なくとも１つの変異が、配列番号１０におけるＱ７９Ａ、Ｑ７９Ｇ、Ｌ１４１Ａ、Ｌ１４１Ｆ、Ｌ１４１Ｐ、Ｗ７７Ｆ、Ｗ７７Ｙ、およびＷ７７Ｍからなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
前記化合物が、野生型α７ニコチン性アセチルコリン受容体を活性化しない、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
前記化合物が、９Ｓ、１６Ｓ、１９Ｓ、２２Ｓ、２８Ｓ、３４Ｓ、３８Ｒ、８５Ｓ、８６Ｓ、８８Ｓ、８９Ｓ、９０Ｓ、９１Ｓ、９６Ｒ、９７Ｒ、１１５Ｓ、１１７Ｓ、１１８Ｓ、１１９Ｓ、１２０Ｓ、１２１Ｓ、１２７Ｓ、１３１Ｓ、１３２Ｓ、１３４Ｓ、１４８Ｓ、１４９Ｓ、１５４Ｓ、１５６Ｓ、１５７Ｓ、１５８Ｓ、１６３Ｓ、１６４Ｓ、１６５Ｓ、１７０Ｒ、２０８Ｓ、２１２、２４１、２４２、２４５、２５３、２５４、２５５、２７８Ｓ、２７９Ｓ、２８１Ｓ、２９２Ｒ、２９４Ｓ、２９５Ｓ、および２９６Ｓからなる群から選択される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
リガンド開口型イオンチャネル蛋白質由来の膜貫通ドメインと融合したα７ニコチン性アセチルコリン受容体由来のリガンド結合ドメインを含むキメラ受容体であって、前記リガンド結合ドメインが、化合物への選択的結合を与える少なくとも１つの変異を含む、キメラ受容体。
【請求項１５】
前記膜貫通ドメインが、イオンチャネル型ニコチン性アセチルコリン受容体、イオンチャネル型セロトニン受容体、イオンチャネル型グリシン受容体、およびイオンチャネル型ＧＡＢＡ受容体からなる群から選択されるリガンド開口型イオンチャネル蛋白質の膜貫通ドメインである、請求項１４に記載のキメラ受容体。
【請求項１６】
前記膜貫通ドメインが、５ＨＴ３受容体由来の膜貫通ドメイン、グリシン受容体の膜貫通ドメイン、またはＧＡＢＡ  Ｃ受容体の膜貫通ドメインである、請求項１５に記載のキメラ受容体。
【請求項１７】
前記リガンド結合ドメインにおける前記少なくとも１つの変異が、配列番号１、配列番号６、または配列番号１０におけるＷ７７Ｆである、請求項１６に記載のキメラ受容体。
【請求項１８】
前記キメラ受容体が、２８Ｓ、３４Ｓ、９６Ｒ、９７Ｒ、１３１Ｓ、１３２Ｓ、２７８Ｓ、２７９Ｓ、および２８１Ｓからなる群から選択される化合物を選択的に結合する、請求項１７に記載のキメラ受容体。
【請求項１９】
前記リガンド結合ドメインにおける前記少なくとも１つの変異が、配列番号１、配列番号６、または配列番号１０におけるＱ７９ＡまたはＱ７９Ｇである、請求項１６に記載のキメラ受容体。
【請求項２０】
前記キメラ受容体が、９Ｓ、１６Ｓ、２２Ｓ、３８Ｒ、１１５Ｓ、１１７Ｓ、１３４Ｓ、１４８Ｓ、１４９Ｓ、１５４Ｓ、１５６Ｓ、１５７Ｓ、１５８Ｓ、１６３Ｓ、１６４Ｓ、１６５Ｓ、１７０Ｒ、２９２Ｒ、２９５Ｓ、および２９６Ｓからなる群から選択される化合物を選択的に結合する、請求項１９に記載のキメラ受容体。
【請求項２１】
前記リガンド結合ドメインにおける前記少なくとも１つの変異が、配列番号１、配列番号６、または配列番号１０におけるＬ１４１ＦまたはＬ１４１Ｐである、請求項１６に記載のキメラ受容体。
【請求項２２】
前記キメラ受容体が、１９Ｓ、８５Ｓ、８６Ｓ、８８Ｓ、８９Ｓ、９０Ｓ、９１Ｓ、１１８Ｓ、１１９Ｓ、１２０Ｓ、１２１Ｓ、１２７Ｓ、２０８Ｓ、２１２、２４１、２４２、２４５、２５３、２５４、２５５、および２９４Ｓからなる群から選択される化合物を選択的に結合する、請求項２１に記載のキメラ受容体。
【請求項２３】
前記キメラ受容体が、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１１、配列番号１２、または配列番号１３のアミノ酸配列を有する、請求項１６に記載のキメラ受容体。
【請求項２４】
請求項１４に記載のキメラ受容体および少なくとも１つの化合物を含むキット。
【請求項２５】
前記キメラ受容体のリガンド結合ドメインにおける前記少なくとも１つの変異が、配列番号１、配列番号６、または配列番号１０におけるＷ７７Ｆである、請求項２４に記載のキット。
【請求項２６】
前記化合物が、２８Ｓ、３４Ｓ、９６Ｒ、９７Ｒ、１３１Ｓ、１３２Ｓ、２７８Ｓ、２７９Ｓ、および／または２８１Ｓである、請求項２５に記載のキット。
【請求項２７】
前記キメラ受容体のリガンド結合ドメインにおける前記少なくとも１つの変異が、配列番号１、配列番号６、または配列番号１０におけるＱ７９ＡまたはＱ７９Ｇである、請求項２４に記載のキット。
【請求項２８】
前記化合物が、９Ｓ、１６Ｓ、２２Ｓ、３８Ｒ、１１５Ｓ、１１７Ｓ、１３４Ｓ、１４８Ｓ、１４９Ｓ、１５４Ｓ、１５６Ｓ、１５７Ｓ、１５８Ｓ、１６３Ｓ、１６４Ｓ、１６５Ｓ、１７０Ｒ、２９２Ｒ、２９５Ｓ、および／または２９６Ｓである、請求項２７に記載のキット。
【請求項２９】
前記キメラ受容体のリガンド結合ドメインにおける前記少なくとも１つの変異が、配列番号１、配列番号６、または配列番号１０におけるＬ１４１ＦまたはＬ１４１Ｐである、請求項２４に記載のキット。
【請求項３０】
前記化合物が、１９Ｓ、８５Ｓ、８６Ｓ、８８Ｓ、８９Ｓ、９０Ｓ、９１Ｓ、１１８Ｓ、１１９Ｓ、１２０Ｓ、１２１Ｓ、１２７Ｓ、２０８Ｓ、２１２、２４１、２４２、２４５、２５３、２５４、２５５、および／または２９４Ｓである、請求項２９に記載のキット。
【請求項３１】
治療を必要としている対象における、神経系と関連した疾患または障害を治療するための医薬組成物であって、
キメラ受容体をコードする遺伝子構築物を含み、前記キメラ受容体は、リガンド開口型イオンチャネル蛋白質由来の膜貫通ドメインと融合したα７ニコチン性アセチルコリン受容体由来のリガンド結合ドメインを含み、前記リガンド結合ドメインは、化合物への選択的結合を与える少なくとも１つの変異を含む、医薬組成物。
【請求項３２】
前記化合物が、血管脳関門を通過することができる、請求項３１に記載の医薬組成物。
【請求項３３】
前記対象への前記化合物の投与後、前記ニューロン集団の活動が増強される、請求項３１に記載の医薬組成物。
【請求項３４】
前記対象への前記化合物の投与後、前記ニューロン集団の活動が減少する、請求項３１に記載の医薬組成物。
【請求項３５】
前記障害が癲癇であり、前記ニューロン集団が発作主患部におけるニューロンを含む、請求項３１に記載の医薬組成物。
【請求項３６】
前記障害が慢性疼痛であり、前記ニューロン集団が後根神経節におけるＣ線維ニューロンである、請求項３１に記載の医薬組成物。
【請求項３７】
治療を必要としている対象における、神経系と関連した疾患または障害を治療するための医薬組成物であって、
キメラ受容体をコードする遺伝子構築物であって、前記キメラ受容体は、リガンド開口型イオンチャネル蛋白質由来の膜貫通ドメインに融合したα７ニコチン性アセチルコリン受容体由来のリガンド結合ドメインを含み、前記リガンド結合ドメインは、式Ｉの化合物への選択的結合を与える少なくとも１つの変異を含む、遺伝子構築物と、
式Ｉの化合物と、
を含み、前記式Ｉの化合物は、以下の構造：
【化１】
2012504966.tif 000001
（式中、
Ａは、
【化２】
2012504966.tif 000002
の１つであり、式中、
Ｒ１、Ｒ４およびＲ５は、各々、独立して、水素、ハロ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６チオアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６チオハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アルキルスルホニル、アリールおよびヘテロアリールの群より選択され、ここで、前記アリールおよびヘテロアリールは、ハロ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６チオアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６チオハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノまたはアルキルスルホニルで任意選択により置換され；
Ｒ２およびＲ３は、各々、独立して、水素、ハロ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６チオアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６チオハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アルキルスルホニル、アリールおよびヘテロアリールの群より選択され、ここで、前記アリールおよびヘテロアリールは、ハロ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６チオアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６チオハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノまたはアルキルスルホニルで任意選択により置換されているか、
または、
Ｒ２およびＲ３は、それらが結合している炭素原子と一緒に、ハロ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６チオアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６チオハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アルキルスルホニルで任意選択により置換された５員または６員の炭素環または複素環を形成し、
但し：（ａ）Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５の少なくとも１つは水素ではなく；また（ｂ）Ｒ１およびＲ５がいずれもＣ１〜Ｃ６アルコキシでない場合、Ｒ３が存在し、かつ水素ではない）
で表されるか、またはその薬学的に許容される塩である、
医薬組成物。
【請求項３８】
前記式Ｉの化合物が、（Ｓ）−エナンチオマーである、請求項３７に記載の医薬組成物。
【請求項３９】
前記リガンド結合ドメインにおける前記少なくとも１つの変異が、配列番号１、配列番号６または配列番号１０におけるＷ７７Ｆである、請求項３７に記載の医薬組成物。
【請求項４０】
前記リガンド結合ドメインにおける前記少なくとも１つの変異が、配列番号１、配列番号６または配列番号１０におけるＱ７９ＧまたはＱ７９Ａである、請求項３７に記載の医薬組成物。
【請求項４１】
前記リガンド結合ドメインにおける前記少なくとも１つの変異が、配列番号１、配列番号６または配列番号１０におけるＬ１４１ＦまたはＬ１４１Ｐである、請求項３７に記載の医薬組成物。
【請求項４２】
Ａが、
【化３】
2012504966.tif 000003
（式中、Ｒ３は、ハロ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシまたはＣ１〜Ｃ６ハロアルキルで任意選択により置換されているフェニルである）
である、請求項３７に記載の医薬組成物。
【請求項４３】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４およびＲ５が、各々、水素である、請求項４２に記載の医薬組成物。
【請求項４４】
前記リガンド結合ドメインにおける前記少なくとも１つの変異が、配列番号１、配列番号６または配列番号１０におけるＷ７７Ｆである、請求項４３に記載の医薬組成物。
【請求項４５】
Ａが、
【化４】
2012504966.tif 000004
（式中、Ｒ３は、Ｃ３〜Ｃ６アルキル、Ｃ５〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ２ハロアルコキシ、Ｃ１〜Ｃ２チオハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ２パーハロアルキル、ジアルキルアミノまたはアルキルスルホニルである）
である、請求項３７に記載の医薬組成物。
【請求項４６】
Ａが、
【化５】
2012504966.tif 000005
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４およびＲ５は、水素である）
である、請求項４５に記載の医薬組成物。
【請求項４７】
前記リガンド結合ドメインにおける前記少なくとも１つの変異が、配列番号１、配列番号６または配列番号１０におけるＱ７９ＧまたはＱ７９Ａである、請求項４６に記載の医薬組成物。
【請求項４８】
Ａが、
【化６】
2012504966.tif 000006
（式中、Ｒ３はＣ１〜Ｃ２パーハロアルキルまたはＣ３〜Ｃ６アルキルである）
である、請求項４５に記載の医薬組成物。
【請求項４９】
Ｒ４およびＲ５は、各々、水素であり；
Ｒ１は、存在する場合、水素であり；
Ｒ２は、存在する場合、水素である、
請求項４８に記載の医薬組成物。
【請求項５０】
前記リガンド結合ドメインにおける前記少なくとも１つの変異が、配列番号１、配列番号６または配列番号１０におけるＱ７９ＧまたはＱ７９Ａである、請求項４８に記載の医薬組成物。
【請求項５１】
Ｒ１およびＲ５の少なくとも１つが、メトキシ、エトキシまたはフェノキシである、請求項３７に記載の医薬組成物。
【請求項５２】
Ａが、
【化７】
2012504966.tif 000007
である、請求項５１に記載の医薬組成物。
【請求項５３】
Ｒ１が、メトキシ、エトキシまたはフェノキシであり；
Ｒ２、Ｒ３およびＲ４が、各々、独立して、水素、クロロ、フルオロ、メトキシ、エトキシ、メチルまたはエチルであり；
Ｒ５が、水素である、
請求項５２に記載の医薬組成物。
【請求項５４】
前記リガンド結合ドメインにおける前記少なくとも１つの変異が、配列番号１、配列番号６または配列番号１０におけるＬ１４１ＦまたはＬ１４１Ｐである、請求項５１に記載の医薬組成物。
【請求項５５】
治療を必要とする対象における、神経系と関連した疾患または障害を治療するための医薬組成物であって、
キメラ受容体をコードする遺伝子構築物であって、前記キメラ受容体は、リガンド開口型イオンチャネル蛋白質由来の膜貫通ドメインと融合したα７ニコチン性アセチルコリン受容体由来のリガンド結合ドメインを含み、前記リガンド結合ドメインは、式ＩＩの化合物への選択的結合を与える少なくとも１つの変異を含む、遺伝子構築物と、
式ＩＩの化合物と、
を含み、前記式ＩＩの化合物は、以下の構造：
【化８】
2012504966.tif 000008
（式中、
Ａは、ハロ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６チオアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、フラニルまたはチオフェニルで任意選択により置換されたアリールまたはヘテロアリールであり、前記フラニルおよびチオフェニルは、ハロ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６チオアルキルまたはＣ１〜Ｃ６ハロアルキルで任意選択により置換され；
ＲＡおよびＲＢは、各々、水素またはＣ１〜Ｃ６アルキルであるか；または
ＲＡおよびＲＢは、まとめて＝Ｏであり； 
ｎは、０または１である）
で表されるか、またはその薬学的に許容される塩である、
医薬組成物。
【請求項５６】
Ａは、フェニル、ピリジル、ピラジニルまたはキノキサリニルであり、前記フェニル、ピリジル、ピラジニルまたはキノキサリニルは、ハロ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６チオアルキルまたはＣ１〜Ｃ６ハロアルキルで置換されている、請求項５５に記載の医薬組成物。
【請求項５７】
前記リガンド結合ドメインにおける前記少なくとも１つの変異は、配列番号１、配列番号６または配列番号１０におけるＬ１４１ＦまたはＬ１４１Ｐである、請求項５５に記載の医薬組成物。
【請求項５８】
式ＩＩＩ：
【化９】
2012504966.tif 000009
（式中、
‐‐‐は、各々、単結合または二重結合であり；
ＲＡおよびＲＢは、各々、水素であるか、またはＲＡおよびＲＢは、まとめて＝Ｏであり；
Ｅは、−Ｎ、−ＮＨ、ＣＲＣ、または−ＣＲＣＲＤであり；
ＲＣおよびＲＤは、各々、水素であるか、またはＲＣおよびＲＤは、まとめて＝Ｏである）
の化合物、またはその薬学的に許容される塩であって、前記化合物は隣接した二重結合を含まない、化合物。
【請求項５９】
前記化合物は、
【化１０】
2012504966.tif 000010
からなる群から選択される、請求項５８に記載の化合物。
【請求項６０】
以下の構造：
【化１１】
2012504966.tif 000011
またはその薬学的に許容される塩である、請求項５９に記載の化合物。