【手続補正書】
【提出日】平成26年7月9日(2014.7.9)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
主要組織適合性複合体（ＭＨＣ）クラスＩＩと、Ｉ型糖尿病関連自己抗原性ペプチドとを含む、単離された複合体であって、前記ＭＨＣクラスＩＩと、前記Ｉ型糖尿病関連自己抗原性ペプチドとから構成される複合体の天然型立体配座に特異的に結合することができる抗原結合ドメインを含む高親和性実体の単離を可能にする構造的立体配座を有し、前記糖尿病関連自己抗原性ペプチドはそのＣ末端において前記ＭＨＣクラスＩＩのベータ鎖の細胞外ドメインのＮ末端に共有結合により結合される、単離された複合体。
【請求項２】
主要組織適合性複合体（ＭＨＣ）クラスＩＩと、Ｉ型糖尿病関連自己抗原性ペプチドとから構成される複合体と特異的に結合することができる抗原結合ドメインを含む、単離された高親和性実体であって、前記糖尿病関連自己抗原性ペプチドの非存在下での前記ＭＨＣクラスＩＩには結合せず、かつ、前記ＭＨＣクラスＩＩの非存在下での前記糖尿病関連自己抗原性ペプチドには結合しない、単離された高親和性実体。
【請求項３】
前記糖尿病関連自己抗原性ペプチドは前記ＭＨＣクラスＩＩのベータ鎖の細胞外ドメインのアミノ酸１〜６の間に共有結合により埋め込まれる、請求項１に記載の単離された複合体。
【請求項４】
前記糖尿病関連自己抗原性ペプチドはそのＣ末端にリンカーペプチドが配置される、請求項３に記載の単離された複合体。
【請求項５】
糖尿病関連自己抗原性ペプチドは前記細胞外ドメインに翻訳融合される、請求項４に記載の単離された複合体。
【請求項６】
前記ＭＨＣクラスＩＩの前記ベータ鎖は、真核生物細胞における発現のとき、前記ＭＨＣクラスＩＩのアルファ鎖に含まれる結合対の第２のメンバーに結合する結合対の第１のメンバーを含み、ただし、前記ベータ鎖および前記アルファ鎖により、前記ＭＨＣクラスＩＩが形成される、請求項５に記載の単離された複合体。
【請求項７】
前記抗原結合ドメインは、前記ＭＨＣクラスＩＩと、前記Ｉ型糖尿病関連自己抗原性ペプチドとから構成される前記複合体の天然型立体配座に特異的に結合することができる、請求項２に記載の単離された高親和性実体。
【請求項８】
請求項１及び３〜６のいずれかに記載の複合体によって単離可能である、抗原結合ドメインを含む単離された高親和性実体。
【請求項９】
請求項１及び３〜６のいずれかに記載の単離された複合体に特異的に結合することができる、抗原結合ドメインを含む単離された高親和性実体。
【請求項１０】
単離された高親和性実体の前記抗原結合ドメインは、前記ＭＨＣクラスＩＩと、前記Ｉ型糖尿病関連自己抗原性ペプチドとから構成される複合体の天然型立体配座に特異的に結合することができる、請求項８に記載の単離された高親和性実体。
【請求項１１】
単離された高親和性実体の前記抗原結合ドメインはさらに、請求項１及び３〜６のいずれかに記載の単離された複合体に特異的に結合することができる、請求項１０に記載の単離された高親和性実体。
【請求項１２】
配列番号１７１〜配列番号１７３および配列番号１７７〜配列番号１７９によって示される相補性決定領域（ＣＤＲ）（Ｇ３Ｈ８の軽鎖および重鎖のＣＤＲ１〜ＣＤＲ３）、または、配列番号１８３〜配列番号１８５および配列番号１８９〜配列番号１９１によって示される相補性決定領域（ＣＤＲ）（Ｇ１Ｈ１２の軽鎖および重鎖のＣＤＲ１〜ＣＤＲ３）を含む、単離された高親和性実体。
【請求項１３】
主要組織適合性複合体（ＭＨＣ）クラスＩＩと、Ｉ型糖尿病関連自己抗原性ペプチドとから構成される複合体に特異的に結合する高親和性実体を単離する方法であって、
（ａ）複数の高親和性実体を含むライブラリーを請求項１及び３〜６のいずれかに記載の単離された複合体によりスクリーニングすること、および
（ｂ）請求項１及び３〜６のいずれかに記載の単離された複合体に特異的に結合し、かつ、前記Ｉ型糖尿病関連自己抗原性ペプチドの非存在下での前記ＭＨＣクラスＩＩ、または、前記ＭＨＣクラスＩＩの非存在下での前記Ｉ型糖尿病関連自己抗原性ペプチドには結合しない少なくとも１つの高親和性実体を単離し、
それにより、前記ＭＨＣクラスＩＩと前記Ｉ型糖尿病関連自己抗原性ペプチドとの前記複合体に特異的に結合する前記高親和性実体を単離すること
を含む方法。
【請求項１４】
前記高親和性実体は抗体または抗体フラグメントである、請求項１に記載の単離された複合体。
【請求項１５】
前記糖尿病関連自己抗原性ペプチドは、プレプロインスリン（配列番号２１３）、プロインスリン（配列番号２２３）、グルタミン酸デカルボキシラーゼ（ＧＡＤ；配列番号２１４）、インスリノーマ関連タンパク質２（ＩＡ−２；配列番号２１５）、ＩＡ−２β（配列番号２２１）、膵島特異的グルコース−６−ホスファターゼ触媒サブユニット関連タンパク質（ＩＧＲＰイソ型１；配列番号２１６）および膵島特異的グルコース−６−ホスファターゼ触媒サブユニット関連タンパク質（ＩＧＲＰイソ型２；配列番号２１７）、クロモグラニンＡ（ＣｈｇＡ）（配列番号２１８）、亜鉛トランスポーター８（ＺｎＴ８；配列番号２１９）、熱ショックタンパク質−６０（ＨＳＰ−６０；配列番号２２０）、熱ショックタンパク質−７０（ＨＳＰ−７０；配列番号２７１および配列番号２２４）からなる群から選択されるポリペプチドに由来する、請求項１に記載の単離された複合体。
【請求項１６】
前記糖尿病関連自己抗原性ペプチドは、配列番号１〜配列番号１５７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、かつ、長さにおいて最大でも３０個のアミノ酸を含む、請求項１に記載の単離された複合体。
【請求項１７】
前記糖尿病関連自己抗原性ペプチドは、配列番号１〜配列番号１５７、配列番号２６０および配列番号２６７〜配列番号２６８からなる群から選択される、請求項１または１５に記載の単離された複合体。
【請求項１８】
前記糖尿病関連自己抗原性ペプチドはグルタミン酸デカルボキシラーゼ（ＧＡＤ）の自己抗原性ペプチドである、請求項１または１５に記載の単離された複合体。
【請求項１９】
前記抗原結合ドメインは、配列番号１７１〜配列番号１７３および配列番号１７７〜配列番号１７９によって示される相補性決定領域（ＣＤＲ）（Ｇ３Ｈ８の軽鎖および重鎖のＣＤＲ１〜ＣＤＲ３）、または、配列番号１８３〜配列番号１８５および配列番号１８９〜配列番号１９１によって示される相補性決定領域（ＣＤＲ）（Ｇ１Ｈ１２の軽鎖および重鎖のＣＤＲ１〜ＣＤＲ３）を含む、請求項２に記載の単離された高親和性実体。
【請求項２０】
請求項２に記載の単離された高親和性実体を含む分子であって、治療成分にコンジュゲートされる分子。
【請求項２１】
請求項２に記載の単離された高親和性実体を含む分子であって、検出可能成分にコンジュゲートされる分子。
【請求項２２】
請求項２に記載の単離された高親和性実体を有効成分として含み、かつ、医薬的に許容されるキャリアを含む医薬組成物。
【請求項２３】
１型糖尿病（Ｔ１Ｄ）を対象において診断する方法であって、前記対象の細胞を、免疫複合体の形成を許す条件のもと、請求項２に記載の高親和性実体と接触させることを含み、ただし、前記免疫複合体の所定の閾値を超える前記細胞の内部または表面での存在またはレベルが前記対象における前記１型糖尿病を示している方法。
【請求項２４】
１型糖尿病（Ｔ１Ｄ）を処置するために同定される医薬の製造における請求項２に記載の高親和性実体の使用。
【請求項２５】
主要組織適合性複合体（ＭＨＣ）クラスＩＩと、Ｉ型糖尿病関連自己抗原性ペプチドとを含む複合体の存在および／またはレベルを検出するためのキットであって、請求項２に記載の高親和性実体を含むキット。
【請求項２６】
ＭＨＣクラスＩＩのベータ鎖の細胞外ドメインをコードする第１の核酸配列と、糖尿病関連自己抗原性ペプチドをコードする第２の核酸配列とを含む、単離されたポリヌクレオチドであって、前記第２の核酸配列が前記第１の核酸配列の上流に翻訳融合されるか、または、前記細胞外ドメインのアミノ酸１〜６をコードする核酸配列の間に翻訳融合される、単離されたポリヌクレオチド。
【請求項２７】
前記糖尿病関連自己抗原性ペプチドは、前記ＭＨＣクラスＩＩのベータ鎖の成熟型ポリペプチドの３番目のアミノ酸と４番目のアミノ酸との間においてベータ鎖に共有結合により結合する、請求項３に記載の単離された複合体。