【手続補正書】
【提出日】平成23年8月3日(2011.8.3)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項３】
該インフルエンザウイルスＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼサブユニットＰＢ２が、インフルエンザＡウイルス、インフルエンザＢウイルス若しくはインフルエンザＣウイルス由来である、請求項１又は２に記載のポリペプチド断片。
【手続補正２】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項２７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項２７】
（ｆ）前記化合物、請求項１〜４のいずれか一項に記載のポリペプチド断片、又は請求項１３に記載の組換え宿主細胞と、ＲＮＡキャップ又はその類似体とを接触させるさらなる工程であって、前記ＰＢ２ポリペプチド断片と前記ＲＮＡキャップ又はその類似体との間の結合を阻害する前記化合物の能力を確定する、接触させるさらなる工程を含む、請求項２６に記載の方法。
【手続補正３】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項４３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項４３】
マイナスセンス一本鎖ＲＮＡウイルスでのウイルス感染により引き起こされる疾患状態を治療、改善又は予防する薬物の製造のための、請求項２８、２９、３９若しくは４０に記載の化合物、請求項３８に記載の薬学的組成物、又は請求項４１若しくは４２に記載の抗体の使用。
【手続補正４】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項４６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項４６】
前記疾患状態が、ボルナ病ウイルス、マールブルグウイルス、エボラウイルス、センダイウイルス、ムンプスウイルス、麻疹ウイルス、ヒト呼吸器多核体ウイルス、七面鳥鼻気管炎ウイルス、水疱性口内炎インディアナウイルス、ニパーウイルス、ヘンダラウイルス、狂犬病ウイルス、ウシ流行熱ウイルス、伝染性造血器壊死症ウイルス、トゴトウイルス、インフルエンザＡウイルス、インフルエンザＢウイルス、インフルエンザＣウイルス、ハンタンウイルス、クリミア・コンゴ出血熱ウイルス、リフトバレー熱ウイルス及びラクロスウイルスから成る群から選択されるウイルスにより引き起こされる、請求項４３に記載の使用。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２４】
【図１】インフルエンザポリメラーゼのＰＢ１サブユニットに対する有望な結合部位と、従来技術により予測された有望なＲＮＡキャップ結合部位とを有する全長ＰＢ２を例示する図である（Ｃａｐ−Ｎ／Ｃａｐ−Ｃは非特許文献１３を参照されたい。Ｃａｐ−Ｃ（Ｔｒｐ５５２）は非特許文献１４を参照されたい。Ｃａｐ−Ｍは非特許文献１５を参照されたい）。加えて、様々なＰＢ２断片が細菌発現に関して生成されたことが示される。これらの構築物の全てが、高レベルで発現され、且つ可溶性である。最上部から最下部までに、１３種類の単離クローンによりコードされるＰＢ２断片の長さを示す（これらにより７個の特有のＰＢ２断片がコードされていた）。単離クローンは、配列番号２５の、以下のヌクレオチドに及ぶ：クローン６８：８８６〜１４４９、クローン１６：８７１〜１４５２、クローン１５：８７１〜１４５２、クローン５７：８４４〜１４４９、クローン１３：８４４〜１４４９、クローン１０：８３２〜１４４３、クローン２８：８０５〜１４５２、クローン２３：８０５〜１４５２、クローン１２：７２３〜１４２５、クローン４：７０６〜１４９１、クローン３０：７０６〜１４９１、クローン０７：７０６〜１４９１及びクローン０５：７０６〜１４９１。Clone:  クローンPB1  binding:  ＰＢ１結合部位
【図２】図２Ａは、Ｓｕｐｅｒｄｅｘ７５ゲル濾過カラムでのＰＢ２ポリペプチド断片（アミノ酸位置３１８〜４８３）の精製を示すグラフである。任意の単位での２８０ｎｍでの吸光が、溶出時間及び画分番号に対してプロットされる。Absorption  at  280nm  in  arbitrary  unit:  任意の単位での２８０ｎｍでの吸光Fractions  :  画分100.0%  Buffer  B  :１００．０％緩衝液ＢHrs:min:sec  :  時間：分：秒            図２Ｂは、ゲル濾過後の、ＰＢ２ポリペプチド断片（アミノ酸位置３１８〜４８３）の画分２４〜画分３４の、クーマシー染色したＳＤＳ  ＰＡＧＥゲルを示す図である。分子量マーカーは、１１６ｋＤa、６６．２ｋＤa、４５ｋＤa、３５ｋＤa、２５ｋＤa、１８．４ｋＤa及び１４．４ｋＤaのサイズを有する。
【図３】図３Ａは、沈殿剤溶液１．６Ｍギ酸ナトリウム、０．１Ｍクエン酸（ｐＨ４．６）で形成したｍ７ＧＴＰ（５ｍＭ）との複合体での、ＰＢ２ポリペプチド断片（アミノ酸位置３１８〜４８３）の未変性の（native）結晶を示す図である。            図３Ｂは、沈殿剤溶液１．６Ｍギ酸ナトリウム、０．１Ｍクエン酸（ｐＨ４．６）で形成したｍ７ＧＴＰ（５ｍＭ）との複合体での、部分的にセレノ−メチオニル化した（seleno-methionylated）ＰＢ２ポリペプチド断片（アミノ酸位置３１８〜４８３）の結晶を示す図である。
【図４】Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｓｙｎｃｈｒｏｔｒｏｎ  Ｒａｄｉａｔｉｏｎ  ＦａｃｉｌｉｔｙでのビームラインＢＭ１４で未変性の結晶に関して得られたＸ線回折パターンを示す図である。回折パターンは格子寸法ａ＝９２．２Å、ｂ＝９４．４Å、ｃ＝２２０．４Åの、空間群Ｃ２２２１での指標となる（indexes）。右上の挿入図は、分解能２．４Åに及ぶ回折を示す。右下の挿入図は、データ収集のために使用した凍結結晶を示し、該結晶のおよそのサイズは１５×１５×５０μｍ３である。Influenza  polymerase  PB2  subunit  cap-binding  domain(native  protein  BM14)  :  インフルエンザポリメラーゼＰＢ２サブユニットキャップ結合ドメイン（未変性のタンパク質）ＢＭ１４2.4Å  resolution  :  ２．４Å  分解能50  microns  :  ５０ミクロン
【図５】ｍ７ＧＴＰとの複合体でのＰＢ２ポリペプチド断片（アミノ酸位置３１８〜４８３）の構造のリボン図である。二次構造要素を、ＤＳＳＰにより算出した（Holm, L. and Sander, C., 1993）ように表示し、αヘリックスを濃い灰色で、β鎖（beta-strands）を薄い灰色で示す。ＧＴＰを、Ｐｈｅ３２３、Ｐｈｅ４０４及びＨｉｓ３５７の側鎖と共に、球棒モデルとして示す。残基３４８及び残基４２０を中心とする重要なループを、構造において可視的なＮ末端及びＣ末端の残基（それぞれ、３２０及び４８３）と共に、表示する。420-loop  :  ４２０ループ348-loop  :  ３４８ループ
【図６】４２０ループが溶媒中に突き出ていることを明らかにする、ｍ７ＧＴＰとの複合体でのＰＢ２ポリペプチド断片（アミノ酸位置３１８〜４８３）の構造の代替図である。420-loop  :  ４２０ループ348-loop  :  ３４８ループCommunication  loop  to  PB1  :  ＰＢ１に対するコミュニケーションループ
【図７】ＰＢ２内のＲＮＡキャップ結合ポケットを形成する幾つかのアミノ酸により取り囲まれるｍ７ＧＴＰの立体構造及び不偏（unbiased）実験電子密度を示す図である。電子密度は、実験位相（phase）及び０．９５シグマで作成した（contoured）非結晶学的対称平均化を使用して、ＲＥＳＯＬＶＥにより得られたマップに対応する。
【図８】ＰＢ２内のＲＮＡキャップ結合ポケットに埋め込まれたキャップ類似体ｍ７ＧＴＰを、有望な相互作用する原子と共に示す図である。推定水素結合を、点線により示す。
【図９】インフルエンザＡ（Ａ／Ｖｉｃｔｏｒｉａ／３／１９７５株）及びインフルエンザＢ（Ｂ／Ｌｅｅ／４０株）由来のＰＢ２のＲＮＡキャップ結合ドメインのアミノ酸配列アライメントを示す図である。Ａ／Ｖｉｃｔｏｒｉａ／３／１９７５の二次構造（ＤＳＳＰで算出した（Holm and Sander, 1993））を、配列アライメントの上に表示する。構造基準の配列アライメントをＥＳＰＲＩＰＴ（http://espript.ibcp.fr/ESPript/cgi-bin/ESPript.cgi）でプロットした。背景がベタ塗りの黒色である残基は、２つの配列の間で同一である。三角形は、キャップ類似体ｍ７ＧＴＰと相互作用する主残基を示す。
【図１０】インフルエンザＡ（Ａ／Ｖｉｃｔｏｒｉａ／３／１９７５株）、インフルエンザＢ（Ｂ／Ｌｅｅ／４０株）及びインフルエンザＣ（Ａｎｎ  Ａｒｂｏｒ／１／５０株）由来のＰＢ２のＲＮＡキャップ結合ドメインのアミノ酸配列アライメントを示す図である。注釈は図９に関するものと同様である。
【図１１】ＲＮＡキャップ類似体ｍ７ＧＴＰとＰＢ２内のＲＮＡキャップ結合ポケットとの間の相互作用を概略的に示す図である。キャップ類似体ｍ７ＧＴＰ（Ｍ７Ｇと表示する）を濃い灰色の結合で、タンパク質残基を中位の灰色の結合で、水分子を薄い灰色の球で、描く。水素結合を、ドナーとアクセプタとの間における単位Åの距離を有する点線として示す。濃い灰色の球の斜線を付した部分は、リガンドとファンデルワールス接触状態にある残基を示す。図は、座標ファイルにおいて鎖記号（designation）Ｂを有する分子に対応する。非対称単位（鎖Ａ、鎖Ｂ、鎖Ｄ及び鎖Ｆ）の４つの他の分子は、距離と水の位置とに微小な差異を有する同様の図をもたらす。図を、ＬＩＧＰＬＯＴを使用して作成した（Wallaceet al., 1995）。
【図１２】４℃でｍ７ＧＴＰ  Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ  ４Ｂ樹脂と結合した後での、表示した野生型及び単一点突然変異体のＰＢ２のキャップ結合ドメインの溶出の結果の、クーマシー染色したＳＤＳ  ＰＡＧＥゲルを示す図である。突然変異体Ｅ３６１Ａ、Ｆ４０４Ａ、Ｈ３５７Ａ及びＫ３７６Ａは、野生型タンパク質が結合する条件下でｍ７ＧＴＰ  Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ  ４Ｂ樹脂と結合することができなかったが、Ｆ３２３Ａは弱い結合活性が残っており、Ｆ３２５Ａは野生型とほぼ同様に樹脂と結合した。しかし、この結合活性は、３７℃で劇的に低減する（表３を参照されたい）。Ｈ３５７Ｗ突然変異体も、インフルエンザＢ及びインフルエンザＣがこの残基をこの位置に有するので、作製した。この突然変異体を、可溶性のものとして（solubly）精製し、野生型と比較してｍ７ＧＴＰ  Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ  ４Ｂ樹脂との結合がわずかに増強していることが見出された。突然変異体ΔＶＱが、残基Ｖａｌ４２１〜Ｇｌｎ４２６（４２０ループ）を３つのグリシンで置換することにより生成され、キャップ結合活性を示す。L=Loaded  fractions  :  Ｌ＝装荷した画分E=Eluted  fractions  :  Ｅ＝溶出した画分
【図１３】野生型又は突然変異体の組換えポリメラーゼ複合体のキャップ結合活性を示す図である。ＨＥＫ２９３Ｔ細胞の培養物を、ＰＢ１及びＰＡを発現するプラスミドで同時トランスフェクトする（Φ）か、又はＰＢ１、ＰＢ２−Ｈｉｓ若しくはその突然変異体及びＰＡを発現するプラスミドで同時トランスフェクトした。細胞抽出物を、４℃でｍ７ＧＴＰ−Ｓｅｐｈａｒｏｓｅを用いるプルダウン法により分析した。ｍ７ＧＴＰで保持及び溶出したポリメラーゼ複合体を、ＰＡ特異的抗体を用いるウェスタンブロット法により明らかにした。ＩＮ及びＥは、それぞれ、投入した細胞抽出物、及び溶出したタンパク質を示す。ＰＡ特異的バンドの位置を右に表示し、分子量マーカーの移動度を左に示す。突然変異体ΔＶＱは、残基Ｖａｌ４２１〜Ｇｌｎ４２６（４２０ループ）を３つのグリシンで置換することにより生成された。
【図１４】野生型又は突然変異体のポリメラーゼの複製活性を示すグラフである。野生型及び突然変異体ｍｉｎｉ−ＲＮＰをｉｎ  ｖｉｖｏで再構築し、Ｎｉ２＋−ＮＴＡ−アガロースを用いるアフィニティクロマトグラフィにより精製した。子孫ＲＮＰの蓄積を、抗ＰＡ抗体及び抗ＮＰ抗体を使用するウェスタンブロット法により確定した。データは、野生型の値の百分率として示し、２つの実験の平均及び範囲である。突然変異体ΔＶＱは、残基Ｖａｌ４２１〜Ｇｌｎ４２６（４２０ループ）を３つのグリシンで置換することにより生成された。RNP  accumulation(%  of  WT  value)  :  ＲＮＰ蓄積（ＷＴの値の％）Mutant  :  突然変異体
【図１５】プライマーとしてＡｐＧを使用する、精製した野生型又は突然変異体のＲＮＰのｉｎ  ｖｉｔｒｏ転写活性を示すグラフである。示したデータは、２つの実験の平均及び範囲である。突然変異体ΔＶＱが、残基Ｖａｌ４２１〜Ｇｌｎ４２６（４２０ループ）を３つのグリシンで置換することにより生成された。ApG-Dependent  Transcription(%  of  WT  value)  :  ＡｐＧ依存性転写（ＷＴの値の％）Mutant  :  突然変異体
【図１６】β−グロブリンのｍＲＮＡをプライマーとして使用する、精製した野生型又は突然変異体のＲＮＰのｉｎ  ｖｉｔｒｏでの転写活性を示すグラフである。示したデータは、２つの実験の平均及び範囲である。突然変異体ΔＶＱが、残基Ｖａｌ４２１〜Ｇｌｎ４２６（４２０ループ）を３つのグリシンで置換することにより生成された。β-Globin-Dependent  Transcription(%  of  WT  value)  :  β−グロブリン依存性転写（ＷＴの値の％）Mutant  :  突然変異体
【図１７】精製した野生型又は突然変異体のＲＮＰのＡｐＧ対β−グロブリンのｍＲＮＡ依存性ｉｎ  ｖｉｔｒｏ転写活性の比を示すグラフである。示したデータは、２つの実験の平均及び範囲である。突然変異体ΔＶＱが、残基Ｖａｌ４２１〜Ｇｌｎ４２６（４２０ループ）を３つのグリシンで置換することにより生成された。Ratio  β-Globin/ApG-Dependent  Transcription  β−グロブリン依存性転写／ＡｐＧ依存性転写の比Mutant  :  突然変異体
【図１８】Ｌｙｓ３８９を有する配列番号１のＰＢ２ポリペプチド断片のアミノ酸３１８〜４８３に関する精密な原子構造座標のリストである。断片は、ＲＮＡキャップ類似体７−メチル−グアノシン三リン酸（ｍ７ＧＴＰ）との複合体での配列番号１１によるアミノ酸配列を有する。非対称単位に鎖Ａ、鎖Ｂ、鎖Ｄ、鎖Ｅ、鎖Ｆを有する５つの分子が存在する。ＲＮＡキャップ類似体ｍ７ＧＴＰは、各鎖の残基番号１である。２９３個の水分子が存在する。ファイルヘッダは、構造精密化に関する情報を与える。「Ａｔｏｍ」は、座標が測定される元素を表す。そのカラム中の最初の文字は、元素を規定する。それぞれのアミノ酸の３文字コードが与えられ、アミノ酸配列位置が与えられる。「Ａｔｏｍ」のラインにおける最初の３つの値は、測定された元素の原子位置を規定する。４つ目の値は占有率に相当し、５つ目（最後）の値は温度因子（Ｂ因子）である。占有率因子は、各原子が座標により特定される位置を占有する分子の割合（fraction）を表す。値「１」は、各原子が結晶の全ての分子において同じ立体構造、すなわち同じ位置を有することを示す。Ｂは、その原子中心の周りの原子の動きの尺度となる熱的因子である。異方性温度因子は、「ＡＮＩＳＯＵ」と記したラインにおいて与えられる。この命名は、ＰＤＢファイル形式に対応する。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３９】
好ましい一実施形態では、ＰＢ２ポリペプチド断片変異体は、インフルエンザＣウイルスＰＢ２の３３５位〜４１６位（配列番号３由来）のアミノ酸残基に対応するアミノ酸残基を少なくとも含むか、又はそれから成り、且つ配列番号３に示したアミノ酸配列と、断片の全長にわたり、少なくとも８０％、より好ましくは８５％、より好ましくは９０％、最も好ましくは９５％の配列類似性を有し、より好ましくはＰＢ２ポリペプチド断片変異体は、インフルエンザＣウイルスＰＢ２の３３０位〜５０１位（配列番号３由来）のアミノ酸残基に対応するアミノ酸残基を少なくとも含み、且つ配列番号３に示したアミノ酸配列と、断片の全長にわたり、少なくとも７０％、より好ましくは７５％、より好ましくは８０％、より好ましくは８５％、最も好ましくは９０％の配列類似性を有し、より好ましくはＰＢ２ポリペプチド断片変異体は、インフルエンザＣウイルスＰＢ２の２４２位〜５１４位（配列番号３由来）のアミノ酸残基に対応するアミノ酸残基を少なくとも含み、且つ配列番号３に示したアミノ酸配列と、断片の全長にわたり、少なくとも６０％、より好ましくは６５％、より好ましくは７０％、より好ましくは７５％、より好ましくは８０％、より好ましくは８５％、最も好ましくは９０％の配列類似性を有し、より好ましくはＰＢ２ポリペプチド断片変異体は、インフルエンザＣウイルスＰＢ２の２２７位〜５２８位（配列番号３由来）のアミノ酸残基に対応するアミノ酸残基を少なくとも含み、且つ配列番号３に示したアミノ酸配列と、断片の全長にわたり、少なくとも６０％、より好ましくは６５％、より好ましくは７０％、より好ましくは７５％、より好ましくは８０％、より好ましくは８５％、最も好ましくは９０％の配列類似性を有する。好ましい実施形態では、本発明のインフルエンザＣウイルスＰＢ２ポリペプチド断片変異体は、配列番号３と比較して以下のアミノ酸残基：Ｌｅｕ３１１、Ｐｒｏ３３０及び／又はＳｅｒ４３６の１つ又は複数における突然変異等の、突然変異、好ましくは天然の突然変異を含む。好ましい一実施形態では、上記断片変異体は、以下の突然変異：Ｌｅｕ３１１Ｐｒｏ、Ｐｒｏ３３０Ｇｌｎ及び／又はＳｅｒ４３６Ｔｈｒの１つ又は複数を含む。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６６】
別の好ましい実施形態では、
（ｉ）上記ポリペプチド断片のＮ末端は、配列番号１によるＰＢ２のアミノ酸配列の、アミノ酸位置２２０以上、例えば２２５、２３０、２３５、２４０、２４５、２５０、２５５、２６０、２６５、２７０、２７５、２８０、２８５、２９０、２９５、３００、３０５、３１０、３１５、３２０若しくは３２３と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５１０以下、例えば５０５、５００、４９５、４９０、４８９、４８８、４８７、４８６、４８５、４８４若しくは４８３と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置２２０と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５１０、５０５、５００、４９５、４９０、４８９、４８８、４８７、４８６、４８５、４８４若しくは４８３と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置２２５以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５１０以下、特に５０５、５００、４９５、４９０、４８９、４８８、４８７、４８６、４８５、４８４若しくは４８３と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置２３０以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５１０以下、特に５０５、５００、４９５、４９０、４８９、４８８、４８７、４８６、４８５、４８４若しくは４８３と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置２３５以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５１０以下、特に５０５、５００、４９５、４９０、４８９、４８８、４８７、４８６、４８５、４８４若しくは４８３と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置２４０以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５１０以下、特に５０５、５００、４９５、４９０、４８９、４８８、４８７、４８６、４８５、４８４若しくは４８３と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置２４５以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５１０以下、特に５０５、５００、４９５、４９０、４８９、４８８、４８７、４８６、４８５、４８４若しくは４８３と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置２５０以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５１０以下、特に５０５、５００、４９５、４９０、４８９、４８８、４８７、４８６、４８５、４８４若しくは４８３と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置２５５以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５１０以下、特に５０５、５００、４９５、４９０、４８９、４８８、４８７、４８６、４８５、４８４若しくは４８３と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置２６０以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５１０以下、特に５０５、５００、４９５、４９０、４８９、４８８、４８７、４８６、４８５、４８４若しくは４８３と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置２６５以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５１０以下、特に５０５、５００、４９５、４９０、４８９、４８８、４８７、４８６、４８５、４８４若しくは４８３と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置２７０以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５１０以下、特に５０５、５００、４９５、４９０、４８９、４８８、４８７、４８６、４８５、４８４若しくは４８３と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置２７５以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５１０以下、特に５０５、５００、４９５、４９０、４８９、４８８、４８７、４８６、４８５、４８４若しくは４８３と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置２８０以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５１０以下、特に５０５、５００、４９５、４９０、４８９、４８８、４８７、４８６、４８５、４８４若しくは４８３と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置２８０以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５１０以下、特に５０５、５００、４９５、４９０、４８９、４８８、４８７、４８６、４８５、４８４若しくは４８３と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置２８５以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５１０以下、特に５０５、５００、４９５、４９０、４８９、４８８、４８７、４８６、４８５、４８４若しくは４８３と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置２９０以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５１０以下、特に５０５、５００、４９５、４９０、４８９、４８８、４８７、４８６、４８５、４８４若しくは４８３と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置２９５以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５１０以下、特に５０５、５００、４９５、４９０、４８９、４８８、４８７、４８６、４８５、４８４若しくは４８３と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置３００以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５１０以下、特に５０５、５００、４９５、４９０、４８９、４８８、４８７、４８６、４８５、４８４若しくは４８３と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置３０５以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５１０以下、特に５０５、５００、４９５、４９０、４８９、４８８、４８７、４８６、４８５、４８４若しくは４８３と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置３１０以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５１０以下、特に５０５、５００、４９５、４９０、４８９、４８８、４８７、４８６、４８５、４８４若しくは４８３と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置３１５以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５１０以下、特に５０５、５００、４９５、４９０、４８９、４８８、４８７、４８６、４８５、４８４若しくは４８３と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置３２０以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５１０以下、特に５０５、５００、４９５、４９０、４８９、４８８、４８７、４８６、４８５、４８４若しくは４８３と同一であるか若しくはそれに対応し；又はより好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置３２３以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５１０以下、特に５０５、５００、４９５、４９０、４８９、４８８、４８７、４８６、４８５、４８４若しくは４８３と同一であるか若しくはそれに対応し；
（ｉｉ）上記ポリペプチド断片のＮ末端は、配列番号２によるＰＢ２のアミノ酸配列の、アミノ酸位置２２２以上、例えば２２５、２３０、２３５、２４０、２４５、２５０、２５５、２６０、２６５、２７０、２７５、２８０、２８５、２９０、２９５、３００、３０５、３１０、３１５、３２０、３２５と同一であるか若しくはそれに対応し（orresponds）、Ｃ末端は、アミノ酸位置５１１以下、例えば５１０、５０５、５００、４９９、４９８、４９７、４９６、４９５、４９４、４９３、４９２、４９１、４９０、４８９、４８８、４８７、４８６、４８５若しくは４８４と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置２２２以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５１１以下、例えば５１０、５０５、５００、４９９、４９８、４９７、４９６、４９５、４９４、４９３、４９２、４９１、４９０、４８９、４８８、４８７、４８６、４８５若しくは４８４と同一であるか若しくはそれに（to to）対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置２２５以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５１１以下、例えば５１０、５０５、５００、４９９、４９８、４９７、４９６、４９５、４９４、４９３、４９２、４９１、４９０、４８９、４８８、４８７、４８６、４８５若しくは４８４と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置２３０以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５１１以下、例えば５１０、５０５、５００、４９９、４９８、４９７、４９６、４９５、４９４、４９３、４９２、４９１、４９０、４８９、４８８、４８７、４８６、４８５若しくは４８４と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置２３５以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５１１以下、例えば５１０、５０５、５００、４９９、４９８、４９７、４９６、４９５、４９４、４９３、４９２、４９１、４９０、４８９、４８８、４８７、４８６、４８５若しくは４８４と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置２４０以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５１１以下、例えば５１０、５０５、５００、４９９、４９８、４９７、４９６、４９５、４９４、４９３、４９２、４９１、４９０、４８９、４８８、４８７、４８６、４８５若しくは４８４と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置２４５以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５１１以下、例えば５１０、５０５、５００、４９９、４９８、４９７、４９６、４９５、４９４、４９３、４９２、４９１、４９０、４８９、４８８、４８７、４８６、４８５若しくは４８４と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置２５０以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５１１以下、例えば５１０、５０５、５００、４９９、４９８、４９７、４９６、４９５、４９４、４９３、４９２、４９１、４９０、４８９、４８８、４８７、４８６、４８５若しくは４８４と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置２５５以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５１１以下、例えば５１０、５０５、５００、４９９、４９８、４９７、４９６、４９５、４９４、４９３、４９２、４９１、４９０、４８９、４８８、４８７、４８６、４８５若しくは４８４と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置２６０以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５１１以下、例えば５１０、５０５、５００、４９９、４９８、４９７、４９６、４９５、４９４、４９３、４９２、４９１、４９０、４８９、４８８、４８７、４８６、４８５若しくは４８４と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置２６５以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５１１以下、例えば５１０、５０５、５００、４９９、４９８、４９７、４９６、４９５、４９４、４９３、４９２、４９１、４９０、４８９、４８８、４８７、４８６、４８５若しくは４８４と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置２７０以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５１１以下、例えば５１０、５０５、５００、４９９、４９８、４９７、４９６、４９５、４９４、４９３、４９２、４９１、４９０、４８９、４８８、４８７、４８６、４８５若しくは４８４と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置２７５以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５１１以下、例えば５１０、５０５、５００、４９９、４９８、４９７、４９６、４９５、４９４、４９３、４９２、４９１、４９０、４８９、４８８、４８７、４８６、４８５若しくは４８４と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置２８０以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５１１以下、例えば５１０、５０５、５００、４９９、４９８、４９７、４９６、４９５、４９４、４９３、４９２、４９１、４９０、４８９、４８８、４８７、４８６、４８５若しくは４８４と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置２８５以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５１１以下、例えば５１０、５０５、５００、４９９、４９８、４９７、４９６、４９５、４９４、４９３、４９２、４９１、４９０、４８９、４８８、４８７、４８６、４８５若しくは４８４と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置２９０以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５１１以下、例えば５１０、５０５、５００、４９９、４９８、４９７、４９６、４９５、４９４、４９３、４９２、４９１、４９０、４８９、４８８、４８７、４８６、４８５若しくは４８４と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置２９５以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５１１以下、例えば５１０、５０５、５００、４９９、４９８、４９７、４９６、４９５、４９４、４９３、４９２、４９１、４９０、４８９、４８８、４８７、４８６、４８５若しくは４８４と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置３００以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５１１以下、例えば５１０、５０５、５００、４９９、４９８、４９７、４９６、４９５、４９４、４９３、４９２、４９１、４９０、４８９、４８８、４８７、４８６、４８５若しくは４８４と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置３０５以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５１１以下、例えば５１０、５０５、５００、４９９、４９８、４９７、４９６、４９５、４９４、４９３、４９２、４９１、４９０、４８９、４８８、４８７、４８６、４８５若しくは４８４と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置３１０以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５１１以下、例えば５１０、５０５、５００、４９９、４９８、４９７、４９６、４９５、４９４、４９３、４９２、４９１、４９０、４８９、４８８、４８７、４８６、４８５若しくは４８４と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置３１５以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５１１以下、例えば５１０、５０５、５００、４９９、４９８、４９７、４９６、４９５、４９４、４９３、４９２、４９１、４９０、４８９、４８８、４８７、４８６、４８５若しくは４８４と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置３２０以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５１１以下、例えば５１０、５０５、５００、４９９、４９８、４９７、４９６、４９５、４９４、４９３、４９２、４９１、４９０、４８９、４８８、４８７、４８６、４８５若しくは４８４と同一であるか若しくはそれに対応し；又はより好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置３２５以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５１１以下、例えば５１０、５０５、５００、４９９、４９８、４９７、４９６、４９５、４９４、４９３、４９２、４９１、４９０、４８９、４８８、４８７、４８６、４８５若しくは４８４と同一であるか若しくはそれに対応し；又は
（ｉｉｉ）上記ポリペプチド断片のＮ末端は、配列番号３によるＰＢ２のアミノ酸配列の、アミノ酸位置２２７以上、例えば２３０、２３５、２４０、２４５、２５０、２５５、２６０、２６５、２７０、２７５、２８０、２８５、２９０、２９５、３００、３０５、３１０、３１５、３２０、３２５、３３０若しくは３３５と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５２８以下、例えば５２５、５２０、５１９、５１８、５１７、５１６、５１５、５１４、５１３、５１２、５１１、５１０、５０９、５０８、５０７、５０６、５０５、５０４、５０３、５０２若しくは５０１と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置２２７以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５２８以下、例えば５２５、５２０、５１９、５１８、５１７、５１６、５１５、５１４、５１３、５１２、５１１、５１０、５０９、５０８、５０７、５０６、５０５、５０４、５０３、５０２若しくは５０１と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置２３０以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５２８以下、例えば５２５、５２０、５１９、５１８、５１７、５１６、５１５、５１４、５１３、５１２、５１１、５１０、５０９、５０８、５０７、５０６、５０５、５０４、５０３、５０２若しくは５０１と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置２３５以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５２８以下、例えば５２５、５２０、５１９、５１８、５１７、５１６、５１５、５１４、５１３、５１２、５１１、５１０、５０９、５０８、５０７、５０６、５０５、５０４、５０３、５０２若しくは５０１と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置２４０以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５２８以下、例えば５２５、５２０、５１９、５１８、５１７、５１６、５１５、５１４、５１３、５１２、５１１、５１０、５０９、５０８、５０７、５０６、５０５、５０４、５０３、５０２若しくは５０１と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置２４５以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５２８以下、例えば５２５、５２０、５１９、５１８、５１７、５１６、５１５、５１４、５１３、５１２、５１１、５１０、５０９、５０８、５０７、５０６、５０５、５０４、５０３、５０２若しくは５０１と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置２５０以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５２８以下、例えば５２５、５２０、５１９、５１８、５１７、５１６、５１５、５１４、５１３、５１２、５１１、５１０、５０９、５０８、５０７、５０６、５０５、５０４、５０３、５０２若しくは５０１と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置２５５以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５２８以下、例えば５２５、５２０、５１９、５１８、５１７、５１６、５１５、５１４、５１３、５１２、５１１、５１０、５０９、５０８、５０７、５０６、５０５、５０４、５０３、５０２若しくは５０１と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置２６０以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５２８以下、例えば５２５、５２０、５１９、５１８、５１７、５１６、５１５、５１４、５１３、５１２、５１１、５１０、５０９、５０８、５０７、５０６、５０５、５０４、５０３、５０２若しくは５０１と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置２６５以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５２８以下、例えば５２５、５２０、５１９、５１８、５１７、５１６、５１５、５１４、５１３、５１２、５１１、５１０、５０９、５０８、５０７、５０６、５０５、５０４、５０３、５０２若しくは５０１と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置２７０以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５２８以下、例えば５２５、５２０、５１９、５１８、５１７、５１６、５１５、５１４、５１３、５１２、５１１、５１０、５０９、５０８、５０７、５０６、５０５、５０４、５０３、５０２若しくは５０１と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置２７５以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５２８以下、例えば５２５、５２０、５１９、５１８、５１７、５１６、５１５、５１４、５１３、５１２、５１１、５１０、５０９、５０８、５０７、５０６、５０５、５０４、５０３、５０２若しくは５０１と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置２８０以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５２８以下、例えば５２５、５２０、５１９、５１８、５１７、５１６、５１５、５１４、５１３、５１２、５１１、５１０、５０９、５０８、５０７、５０６、５０５、５０４、５０３、５０２若しくは５０１と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置２８５以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５２８以下、例えば５２５、５２０、５１９、５１８、５１７、５１６、５１５、５１４、５１３、５１２、５１１、５１０、５０９、５０８、５０７、５０６、５０５、５０４、５０３、５０２若しくは５０１と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置２９０以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５２８以下、例えば５２５、５２０、５１９、５１８、５１７、５１６、５１５、５１４、５１３、５１２、５１１、５１０、５０９、５０８、５０７、５０６、５０５、５０４、５０３、５０２若しくは５０１と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置２９５以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５２８以下、例えば５２５、５２０、５１９、５１８、５１７、５１６、５１５、５１４、５１３、５１２、５１１、５１０、５０９、５０８、５０７、５０６、５０５、５０４、５０３、５０２若しくは５０１と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置３００以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５２８以下、例えば５２５、５２０、５１９、５１８、５１７、５１６、５１５、５１４、５１３、５１２、５１１、５１０、５０９、５０８、５０７、５０６、５０５、５０４、５０３、５０２若しくは５０１と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置３０５以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５２８以下、例えば５２５、５２０、５１９、５１８、５１７、５１６、５１５、５１４、５１３、５１２、５１１、５１０、５０９、５０８、５０７、５０６、５０５、５０４、５０３、５０２若しくは５０１と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置３１０以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５２８以下、例えば５２５、５２０、５１９、５１８、５１７、５１６、５１５、５１４、５１３、５１２、５１１、５１０、５０９、５０８、５０７、５０６、５０５、５０４、５０３、５０２若しくは５０１と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置３１５以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５２８以下、例えば５２５、５２０、５１９、５１８、５１７、５１６、５１５、５１４、５１３、５１２、５１１、５１０、５０９、５０８、５０７、５０６、５０５、５０４、５０３、５０２若しくは５０１と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置３２０以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５２８以下、例えば５２５、５２０、５１９、５１８、５１７、５１６、５１５、５１４、５１３、５１２、５１１、５１０、５０９、５０８、５０７、５０６、５０５、５０４、５０３、５０２若しくは５０１と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置３２５以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５２８以下、例えば５２５、５２０、５１９、５１８、５１７、５１６、５１５、５１４、５１３、５１２、５１１、５１０、５０９、５０８、５０７、５０６、５０５、５０４、５０３、５０２若しくは５０１と同一であるか若しくはそれに対応し；より好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置３３０以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５２８以下、例えば５２５、５２０、５１９、５１８、５１７、５１６、５１５、５１４、５１３、５１２、５１１、５１０、５０９、５０８、５０７、５０６、５０５、５０４、５０３、５０２若しくは５０１と同一であるか若しくはそれに対応し；又はより好ましくは上記ポリペプチド断片のＮ末端は、アミノ酸位置３３５以上と同一であるか若しくはそれに対応し、Ｃ末端は、アミノ酸位置５２８以下、例えば５２５、５２０、５１９、５１８、５１７、５１６、５１５、５１４、５１３、５１２、５１１、５１０、５０９、５０８、５０７、５０６、５０５、５０４、５０３、５０２若しくは５０１と同一であるか若しくはそれに対応する。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７０】
結晶は、ハンギング−シッティングドロップ（hanging and sitting drop）法と、サンドイッチドロップ法と、透析法と、マイクロバッチ又はマイクロチューブバッチデバイスとを含む（がこれらに限定されない）当業者に既知の任意の方法により成長させることができる。単独での又は化合物との複合体での、本発明のＰＢ２ポリペプチド断片又はその変異体の結晶を作製する他の結晶化条件を特定するために、上で開示した結晶化条件を変更することが、当業者には容易に明らかであろう。このような変更は、ｐＨ、タンパク質濃度及び／又は結晶化温度を調整すること、使用する塩及び／又は沈殿剤の特性又は濃度を変化させること、結晶化のための様々な方法を使用すること、又は結晶化に役立つ洗浄剤（例えば、ＴＷＥＥＮ２０（モノラウリル酸塩）、ＬＤＯＡ、Ｂｒｉｊ  ３０（４ラウリルエーテル：４はエーテル結合の数））、糖（例えば、グルコース、マルトース）、有機化合物（例えば、ジオキサン、ジメチルホルムアミド）、ランタニドイオン若しくは多価イオン性（poly-ionic）化合物等の添加剤を導入することを含むがこれらに限定されない。ハイスループット結晶化アッセイが、結晶化条件を見出すか、又は最適化するのを支援するために使用されることもある。
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７３】
上で言及したＰＢ２ポリペプチド断片及びその変異体をコードする単離ポリヌクレオチドを提供することは、本発明の別の態様である。このような単離ヌクレオチド断片を取得するために適用される分子生物学的方法は、概して当業者に既知である（標準的な分子生物学的方法に関しては、Sambrook et al., Eds., "Molecular Cloning: A LaboratoryManual", Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, New York（1989）（これは参照により本明細書に援用される）を参照されたい）。例えば、ＲＮＡを、インフルエンザウイルスに感染した細胞から単離することができ、ランダムプライマー（例えば、ランダムな六量体若しくは十量体）、又は対象の断片の生成に特異的なプライマーを使用する逆転写ポリメラーゼ連鎖反応（ＲＴ−ＰＣＲ）を適用して、ｃＤＮＡを生成することができる。その後対象の断片を、断片特異的プライマーを使用する標準的なＰＣＲにより増幅することができる。