【手続補正書】
【提出日】平成25年11月26日(2013.11.26)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
試料流路を含む毛管であって、音響放射圧による粒子の音響的集中よりも下流で流体試料ストリームの周囲にシース流体を流して、音響的に集中させた粒子を流体試料ストリーム内で流体力学的に集中させるように構成されたシース流路を含む、毛管、
該毛管に結合された少なくとも一つの振動生成トランスデューサであって、試料流路内で音響放射圧を誘導する音響信号を生成し、試料流路中の流体試料ストリーム内を流れる粒子を音響的に集中させるように構成されている、少なくとも一つの振動生成トランスデューサ、および
音響的に集中させた粒子の少なくともいくつかと相互作用して出力信号を生成するように構成されている紫色レーザおよび青色レーザを含むインテロゲーション光源、
を含む、フローサイトメータ。
【請求項２】
前記少なくとも一つの振動生成トランスデューサが圧電素子を含み、紫色レーザが約405ナノメートルの波長を有し、かつ青色レーザが約488ナノメートルの波長を有する、請求項1記載のフローサイトメータ。
【請求項３】
粒子を含む流体試料を毛管中の試料流路の中に毎分約200マイクロリットル〜毎分約1000マイクロリットルの試料流体入力速度で流すように構成された第一のポンプと、シース流体を毛管中のシース流路の中に毎分約2200マイクロリットル〜毎分約1400マイクロリットルのシース流体入力速度で流すように構成された第二のポンプとを含み、第一および第二のポンプが、毛管中を流れる試料流体およびシース流体の合計入力速度を一定に維持して、紫色および青色レーザを通過する音響的に集中させた粒子の少なくともいくつかのインテロゲーション時間が試料流体入力速度にかかわらず一定のままであることを保証するように構成されている、請求項1記載のフローサイトメータ。
【請求項４】
インテロゲーション光源から出力信号を収集するための光学モジュール、
光学モジュールの出力信号を検出するための検出器モジュール、および
検出器モジュールの出力を処理するためのデータ取得モジュール、
を含む、請求項1記載のフローサイトメータ。
【請求項５】
前記少なくとも一つの振動生成トランスデューサ、検出器モジュール、およびデータ取得モジュールの少なくとも一つを制御するように構成されたプロセッサを含む、請求項4記載のフローサイトメータ。
【請求項６】
毛管と光学モジュールとの間にブロッカーバーを含む、請求項4記載のフローサイトメータ。
【請求項７】
ブロッカーバーを配置するため、およびインテロゲーション光源の出力信号の出力アパーチャを調節するために回転可能である実質的に円柱形のペグに、ブロッカーバーが取り付けられている、請求項6記載のフローサイトメータ。
【請求項８】
インテロゲーション光源の出力信号の出力アパーチャが約17°〜約21°である、請求項7記載のフローサイトメータ。
【請求項９】
光学モジュールが、インテロゲーション光源から出力信号を収集するための集光レンズを含み、該集光レンズの出力が、空間フィルタリングピンホール装置によって二つのビームに分割され、第一のビームが紫色レーザから出力され、かつ第二のビームが青色レーザから出力される、請求項4記載のフローサイトメータ。
【請求項１０】
検出器モジュールが、紫色レーザによって出力される第一のビームから順方向散乱信号および側方散乱信号を検出するための検出器を含む、請求項9記載のフローサイトメータ。
【請求項１１】
粒子を含む試料流体をその中に流れさせるように構成された毛管、
試料流体中の粒子の少なくともいくつかを毛管内の第一の領域において音響的に集束させるように構成された第一の集束機構、
該少なくともいくつかの音響的に集束させた粒子を含む試料流体を第一の領域よりも下流の毛管内の第二の領域において流体力学的に集束させるように構成された第二の集束機構、
音響的かつ流体力学的に集束させた粒子の少なくともいくつかが通過することができる、毛管の中または毛管よりも下流のインテロゲーションゾーン、および
音響的かつ流体力学的に集束させた粒子の少なくともいくつかに関してインテロゲーションゾーンにおいて得られた少なくとも一つの信号を検出するように構成された少なくとも一つの検出器、
を含む、フローサイトメータ。
【請求項１２】
試料流体を毛管の中に毎分約25マイクロリットル〜毎分約1000マイクロリットルの試料流量で流すように構成された試料流体ポンプと、シース流体を該毛管の中に毎分約2375マイクロリットル〜毎分約1400マイクロリットルのシース流量で流すように構成されたシース流体ポンプとを含む、請求項11記載のフローサイトメータ。
【請求項１３】
第一の集束機構が、第一の領域における音響的に集束させた粒子の少なくともいくつかを第一の領域から第二の領域に流れる縦一列の線へと集束させるように構成されており、試料流体ポンプおよびシース流体ポンプが、毛管中を流れる試料流体およびシース流体の合計速度を一定に維持して、インテロゲーションゾーンを通過する音響的かつ流体力学的に集束させた粒子の少なくともいくつかのインテロゲーション時間が試料流量にかかわらず一定のままであることを保証するように構成されている、請求項12記載のフローサイトメータ。
【請求項１４】
試料流体を毛管の中に毎分約200マイクロリットル〜毎分約1000マイクロリットルの試料流量で流すように構成された試料流体ポンプと、シース流体を該毛管の中に毎分約2200マイクロリットル〜毎分約1400マイクロリットルのシース流量で流すように構成されたシース流体ポンプとを含む、請求項11記載のフローサイトメータ。
【請求項１５】
フローサイトメータを使用して希事象を検出する方法であって、
粒子を含む試料流体を流路の中に流す工程、
流路内に含まれる第一の領域に音響放射圧を加えることによって試料流体中の粒子の少なくともいくつかを第一の領域において音響的に集束させる工程、
第一の領域よりも下流の第二の領域において試料流体の周囲にシース流体を流すことによって少なくともいくつかの音響的に集束させた粒子を含む試料流体を流体力学的に集束させる工程、
第二の領域の中またはそれよりも下流のインテロゲーションゾーンにおいて実質的に一定の全粒子速度を維持するために、シース流体：試料流体の体積比を調節する工程、
インテロゲーションゾーンにおいて音響的かつ流体力学的に集束させた粒子の少なくともいくつかを分析する工程、ならびに
インテロゲーションゾーンにおいて検出された少なくとも一つの信号に基づいて、一つまたは複数の希な蛍光事象、一つまたは複数の希な細胞型、および一つまたは複数の死細胞からなる群より選択される一つまたは複数の希事象を検出する工程、
を含む、方法。
【請求項１６】
試料流体を毎分少なくとも200マイクロリットルの試料流量で流し、シース流体を毎分多くとも2200マイクロリットルのシース流体流量で流す工程を含み、かつシース流体：試料流体の体積比を調節する工程が、シース流体：試料流体の体積比を約11：1〜約1.4：1の比に調節することを含む、請求項15記載の方法。
【請求項１７】
試料流体を毎分少なくとも500マイクロリットルの試料流量で流し、シース流体を毎分多くとも1900マイクロリットルのシース流体流量で流す工程を含み、かつシース流体：試料流体の体積比を調節する工程が、シース流体：試料流体の体積比を約3.8：1〜約1.4：1の比に調節することを含む、請求項15記載の方法。
【請求項１８】
インテロゲーションゾーンを通過する音響的かつ流体力学的に集束させた粒子の通過時間が約20マイクロ秒を超えることを保証する工程を含む、請求項15記載の方法。
【請求項１９】
インテロゲーションゾーンを通過する音響的かつ流体力学的に集束させた粒子の通過時間が約40マイクロ秒を超えることを保証する工程を含む、請求項15記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００９】
[本発明1001]
試料流路を含む毛管、
該毛管に結合された少なくとも一つの振動生成トランスデューサであって、試料流路内で音響放射圧を誘導する音響信号を生成し、試料流路中の流体試料ストリーム内を流れる粒子を音響的に集中させるように構成されている、少なくとも一つの振動生成トランスデューサ、および
音響的に集中させた粒子の少なくともいくつかと相互作用して出力信号を生成するように構成されている紫色レーザおよび青色レーザを含むインテロゲーション光源、
を含む、フローサイトメータ。
[本発明1002]
前記少なくとも一つの振動生成トランスデューサが圧電素子を含み、紫色レーザが約405ナノメートルの波長を有し、かつ青色レーザが約488ナノメートルの波長を有する、本発明1001のフローサイトメータ。
[本発明1003]
音響放射圧による粒子の音響的集中よりも下流で流体試料ストリームの周囲にシース流体を流して、音響的に集中させた粒子を流体試料ストリーム内で流体力学的に集中させるように構成されたシース流路を毛管がさらに含む、本発明1001のフローサイトメータ。
[本発明1004]
粒子を含む流体試料を毛管中の試料流路の中に毎分約200マイクロリットル〜毎分約1000マイクロリットルの試料流体入力速度で流すように構成された第一のポンプと、シース流体を毛管中のシース流路の中に毎分約2200マイクロリットル〜毎分約1400マイクロリットルのシース流体入力速度で流すように構成された第二のポンプとを含み、第一および第二のポンプが、毛管中を流れる試料流体およびシース流体の合計入力速度を一定に維持して、紫色および青色レーザを通過する音響的に集中させた粒子の少なくともいくつかのインテロゲーション時間が試料流体入力速度にかかわらず一定のままであることを保証するように構成されている、本発明1003のフローサイトメータ。
[本発明1005]
インテロゲーション光源から出力信号を収集するための光学モジュール、
光学モジュールの出力信号を検出するための検出器モジュール、および
検出器モジュールの出力を処理するためのデータ取得モジュール、
を含む、本発明1003のフローサイトメータ。
[本発明1006]
前記少なくとも一つの振動生成トランスデューサ、検出器モジュール、およびデータ取得モジュールの少なくとも一つを制御するように構成されたプロセッサを含む、本発明1005のフローサイトメータ。
[本発明1007]
毛管と光学モジュールとの間にブロッカーバーを含む、本発明1005のフローサイトメータ。
[本発明1008]
ブロッカーバーを配置するため、およびインテロゲーション光源の出力信号の出力アパーチャを調節するために回転可能である実質的に円柱形のペグに、ブロッカーバーが取り付けられている、本発明1007のフローサイトメータ。
[本発明1009]
インテロゲーション光源の出力信号の出力アパーチャが約17°〜約21°である、本発明1008のフローサイトメータ。
[本発明1010]
光学モジュールが、インテロゲーション光源から出力信号を収集するための集光レンズを含み、該集光レンズの出力が、空間フィルタリングピンホール装置によって二つのビームに分割され、第一のビームが紫色レーザから出力され、かつ第二のビームが青色レーザから出力される、本発明1005のフローサイトメータ。
[本発明1011]
検出器モジュールが、紫色レーザによって出力される第一のビームから順方向散乱信号および側方散乱信号を検出するための検出器を含む、本発明1010のフローサイトメータ。
[本発明1012]
粒子を含む試料流体をその中に流れさせるように構成された毛管、
試料流体中の粒子の少なくともいくつかを毛管内の第一の領域において音響的に集束させるように構成された第一の集束機構、
該少なくともいくつかの音響的に集束させた粒子を含む試料流体を第一の領域よりも下流の毛管内の第二の領域において流体力学的に集束させるように構成された第二の集束機構、
音響的かつ流体力学的に集束させた粒子の少なくともいくつかが通過することができる、毛管の中または毛管よりも下流のインテロゲーションゾーン、および
音響的かつ流体力学的に集束させた粒子の少なくともいくつかに関してインテロゲーションゾーンにおいて得られた少なくとも一つの信号を検出するように構成された少なくとも一つの検出器、
を含む、フローサイトメータ。
[本発明1013]
試料流体を毛管の中に毎分約25マイクロリットル〜毎分約1000マイクロリットルの試料流量で流すように構成された試料流体ポンプと、シース流体を該毛管の中に毎分約2375マイクロリットル〜毎分約1400マイクロリットルのシース流量で流すように構成されたシース流体ポンプとを含む、本発明1012のフローサイトメータ。
[本発明1014]
第一の集束機構が、第一の領域における音響的に集束させた粒子の少なくともいくつかを第一の領域から第二の領域に流れる縦一列の線へと集束させるように構成されており、試料流体ポンプおよびシース流体ポンプが、毛管中を流れる試料流体およびシース流体の合計速度を一定に維持して、インテロゲーションゾーンを通過する音響的かつ流体力学的に集束させた粒子の少なくともいくつかのインテロゲーション時間が試料流量にかかわらず一定のままであることを保証するように構成されている、本発明1013のフローサイトメータ。
[本発明1015]
試料流体を毛管の中に毎分約200マイクロリットル〜毎分約1000マイクロリットルの試料流量で流すように構成された試料流体ポンプと、シース流体を該毛管の中に毎分約2200マイクロリットル〜毎分約1400マイクロリットルのシース流量で流すように構成されたシース流体ポンプとを含む、本発明1012のフローサイトメータ。
[本発明1016]
フローサイトメータを使用して希事象を検出する方法であって、
粒子を含む試料流体を流路の中に流す工程、
流路内に含まれる第一の領域に音響放射圧を加えることによって試料流体中の粒子の少なくともいくつかを第一の領域において音響的に集束させる工程、
第一の領域よりも下流の第二の領域において試料流体の周囲にシース流体を流すことによって少なくともいくつかの音響的に集束させた粒子を含む試料流体を流体力学的に集束させる工程、
第二の領域の中またはそれよりも下流のインテロゲーションゾーンにおいて実質的に一定の全粒子速度を維持するために、シース流体：試料流体の体積比を調節する工程、
インテロゲーションゾーンにおいて音響的かつ流体力学的に集束させた粒子の少なくともいくつかを分析する工程、ならびに
インテロゲーションゾーンにおいて検出された少なくとも一つの信号に基づいて、一つまたは複数の希な蛍光事象、一つまたは複数の希な細胞型、および一つまたは複数の死細胞からなる群より選択される一つまたは複数の希事象を検出する工程、
を含む、方法。
[本発明1017]
試料流体を毎分少なくとも200マイクロリットルの試料流量で流し、シース流体を毎分多くとも2200マイクロリットルのシース流体流量で流す工程を含み、かつシース流体：試料流体の体積比を調節する工程が、シース流体：試料流体の体積比を約11：1〜約1.4：1の比に調節することを含む、本発明1016の方法。
[本発明1018]
試料流体を毎分少なくとも500マイクロリットルの試料流量で流し、シース流体を毎分多くとも1900マイクロリットルのシース流体流量で流す工程を含み、かつシース流体：試料流体の体積比を調節する工程が、シース流体：試料流体の体積比を約3.8：1〜約1.4：1の比に調節することを含む、本発明1016の方法。
[本発明1019]
インテロゲーションゾーンを通過する音響的かつ流体力学的に集束させた粒子の通過時間が約20マイクロ秒を超えることを保証する工程を含む、本発明1016の方法。
[本発明1020]
インテロゲーションゾーンを通過する音響的かつ流体力学的に集束させた粒子の通過時間が約40マイクロ秒を超えることを保証する工程を含む、本発明1016の方法。
本発明のこれらおよび他の態様のさらなる詳細が、例示的かつ説明的であり、本発明をいかなるふうにも限定しない添付図面および以下の詳細な説明に記載される。本発明の他の態様、特徴、目的および利点が詳細な説明および図面ならびに特許請求の範囲から明らかになるであろう。