【手続補正書】
【提出日】平成23年10月24日(2011.10.24)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００６】
本発明は、免疫系を調整するための合成ナノキャリアを提供する。合成ナノキャリアは、１つまたは複数の表面を含む。いくつかの実施形態では、表面の少なくとも１つは、免疫特徴表面（ｉｍｍｕｎｏｆｅａｔｕｒｅ  ｓｕｒｆａｃｅ）を含む。任意選択で、本発明の合成ナノキャリアは、１つまたは複数の免疫調節作用物質、免疫刺激作用物質、およびターゲティング作用物質（本明細書において「ターゲティング成分（ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｍｏｉｅｔｙ）」とも呼ばれる）を含有する。免疫調節作用物質は、Ｂ細胞および／またはＴ細胞において免疫応答を誘導する。免疫刺激作用物質は、免疫系を刺激するのを助ける（免疫応答を最終的に、増強する、抑制する、指示する、または再指示することができる方法で）。免疫特徴表面（ｉｍｍｕｎｏｆｅａｔｕｒｅ  ｓｕｒｆａｃｅ）は、抗原提示細胞と関連する１つまたは複数の標的を認識する。任意選択のターゲティング作用物質は、特定の器官、組織、細胞、および／または細胞下の場所と関連する１つまたは複数の標的を認識する。いくつかの実施形態では、合成ナノキャリアは、成分に対して体液性応答をもたらすのに有効な量で複数のその成分を含む表面を含む。例えば、合成ナノキャリアが患者に投与される場合、体液性応答が得られる。ナノキャリアは、免疫系調節による治療に感受性である疾患、障害、または状態の予防および／または治療のための薬学的調製物およびキットにおいて有用である。そのような状態は、免疫応答を特異的にもしくは非特異的に増強すること、免疫応答を特異的にもしくは非特異的に抑制すること、または免疫応答を特異的にもしくは非特異的に指示する／再指示することによって改変される疾患、障害、または状態を含む。
本発明は、例えば以下の項目を提供する。
（項目１）
（１）少なくとも１つの表面を有する合成ナノキャリアであって、その第１の表面が免疫特徴表面を含む合成ナノキャリア、
（２）免疫刺激作用物質、
（３）ＭＨＣクラスＩ提示可能ポリペプチド、ＭＨＣクラスＩＩ提示可能ポリペプチド、またはＣＤ１提示可能ポリペプチド、および
（４）薬学的に許容される賦形剤
を含む組成物。
（項目２）
前記免疫刺激作用物質は、（ｉ）前記免疫特徴表面と結合している、（ｉｉ）前記ナノキャリアの第２の表面と結合している、または（ｉｉｉ）前記ナノキャリア内に封入されている、項目１に記載の組成物。
（項目３）
前記ＭＨＣクラスＩ提示可能ポリペプチド、ＭＨＣクラスＩＩ提示可能ポリペプチド、またはＣＤ−１提示可能ポリペプチドは、（ｉ）前記免疫特徴表面と結合している、（ｉｉ）前記ナノキャリアの第２の表面と結合している、または（ｉｉｉ）前記ナノキャリアのコア領域内に封入されている、項目１に記載の組成物。
（項目４）
前記免疫特徴表面は、抗原提示細胞（ＡＰＣ）結合アッセイでモノクローナル抗体（ＭＡｂ）について観察される最大固定化の、少なくとも１０％を得るために必要とされる密度以上の密度で存在する、複数の成分を含み、ただし、前記ＡＰＣ結合アッセイにおいて、前記免疫刺激作用物質についての最大半量の結合密度は、前記ＭＡｂについての最大半量の結合密度の少なくとも２倍である、項目１に記載の組成物。
（項目５）
前記免疫刺激作用物質は、ＡＰＣ結合アッセイでＭＡｂについて観察される前記最大固定化の、少なくとも２０％を得るために必要とされる密度以上の密度で存在する、項目４に記載の組成物。
（項目６）
前記免疫刺激作用物質についての前記最大半量の結合密度は、前記ＭＡｂについての前記最大半量の結合密度の少なくとも４倍である、項目４に記載の組成物。
（項目７）
前記ＡＰＣ結合アッセイは、
（ａ）機能成分のコーティングを一連の表面コーティング密度で有する、一連の基材を調製する工程であって、前記機能成分は樹状細胞（ＤＣ）または被膜下洞マクロファージ表面受容体に結合することができる、工程、
（ｂ）前記一連の基材をＤＣまたは被膜下洞マクロファージの単一細胞縣濁液に所定の期間、曝露する工程、
（ｃ）前記一連の基材から非接着ＡＰＣを除去し、前記一連の基材に接着したＡＰＣを固定する工程、
（ｄ）前記一連の基材のそれぞれの基材に関し、単位表面積当たりの接着したＡＰＣの数を定量する工程、
（ｅ）前記機能成分の前記コーティング密度に対して前記（ｄ）からの結果をプロットする工程、
（ｆ）前記一連の基材についての単位表面積当たりの接着したＡＰＣの最大数を決定することによって、前記最大固定化の値を得る工程、および
（ｇ）前記最大の５０％をもたらす前記表面コーティング密度を決定することによって、最大半量の結合密度の値を得る工程
を含む、項目４に記載の組成物。
（項目８）
前記ＭＡｂは、抗ＣＤ１ｃ（ＢＤＣＡ−１）クローンＡＤ５−８Ｅ７またはラット抗マウスＣＤ１６９、クローン３Ｄ６．１１２、アイソタイプＩｇＧ２ａである、項目４に記載の組成物。
（項目９）
免疫刺激作用物質は、Ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）アゴニストである、項目１に記載の組成物。
（項目１０）
前記ＴＬＲアゴニストは、ＴＬＲ−１アゴニスト、ＴＬＲ−２アゴニスト、ＴＬＲ−３アゴニスト、ＴＬＲ−４アゴニスト、ＴＬＲ−５アゴニスト、ＴＬＲ−６アゴニスト、ＴＬＲ−７アゴニスト、ＴＬＲ−８アゴニスト、ＴＬＲ−９アゴニスト、またはＴＬＲ−１０アゴニストである、項目１に記載の組成物。
（項目１１）
前記免疫刺激作用物質は、インターロイキン、インターフェロン、サイトカイン、およびアジュバントから選択される、項目１に記載の組成物。
（項目１２）
ヒト被験体においてＴ細胞増殖の増強をもたらすことができる、項目１に記載の組成物。
（項目１３）
ヒト被験体に投与された場合、樹状細胞成熟を引き出す、項目１に記載の組成物。
（項目１４）
前記ナノキャリアは、２つ以上の異なるＭＨＣクラスＩ提示可能ポリペプチド、ＭＨＣクラスＩＩ提示可能ポリペプチド、またはＣＤ１提示可能ポリペプチドを含む、項目１に記載の組成物。
（項目１５）
２つ以上の免疫刺激作用物質を含む、項目１に記載の組成物。
（項目１６）
２つ以上のＴｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）アゴニストを含む、項目１５に記載の組成物。
（項目１７）
１つのＴｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）アゴニストおよび１つの非ＴＬＲアゴニストを含む、項目１５に記載の組成物。
（項目１８）
前記非ＴＬＲアゴニストは、インフラマソーム、ＣＤ４０、またはサイトカイン受容体を介してシグナル伝達を誘導する成分である、項目１７に記載の組成物。
（項目１９）
前記ＭＨＣクラスＩ提示可能ペプチドは、抗原である、ＳＩＩＮＦＥＫＬ、ＧＰ３３、Ｃｏｒｅ１８〜２７、およびＭＡＧＥから選択される、項目１に記載の組成物。
（項目２０）
前記ＭＨＣクラスＩＩ提示可能ペプチドは、抗原である、ＯＶＡ３２３〜３３９、ＧＰ６１、ＭＡＧＥ−Ａ４  ２８０〜２９９、破傷風トキソイド、ジフテリアトキソイド、およびＰＡＤＲＥペプチドから選択される、項目１に記載の組成物。
（項目２１）
前記ＣＤ１提示可能ペプチドは、脂質抗原である、ミコール酸、スルホ脂質、リポホスホグリカン、ジアシルグリセロール、グリコスフィンゴ脂質（ｇｌｙｃｏｓｈｐｉｎｇｏｌｉｐｉｄ）、アルファ−ガラクトシルセラミド、イソグロボトリヘキソシルセラミド、およびガングリオシドＧＤ３から選択される、項目１に記載の組成物。
（項目２２）
Ｂ細胞抗原、Ｔ細胞抗原、タンパク質、ペプチド、炭水化物、糖タンパク質、糖ペプチド、プロテオグリカン、不活化生物および不活化ウイルス、死んだ生物および死んだウイルス、遺伝子改変生物または遺伝子改変ウイルス、真菌生物の抗原、原虫生物の抗原、および／または寄生虫生物の抗原、ならびに細胞抽出物から選択される免疫調節作用物質をさらに含む、項目１に記載の組成物。
（項目２３）
項目１に記載の組成物の初回用量を被験体に投与する工程および
前記初回用量の前記投与後のある期間に、項目１に記載の組成物の第１の継続用量を前記被験体に投与する工程
を含む方法。
（項目２４）
前記期間は、１日間から１年間の範囲の間隔である、項目２３に記載の方法。
（項目２５）
前記組成物の前記第１の用量は、前記被験体においてＴ細胞増殖を引き出す、項目２３に記載の方法。
（項目２６）
前記初回用量の投与の１週間後に、前記被験体における抗原特異的Ｔ細胞の血中濃度は、前記被験体が免疫学的記憶を有していない無関係の抗原を認識するＴ細胞の濃度よりも少なくとも１０倍高くなる、項目２３に記載の方法。
（項目２７）
前記無関係の抗原は、ウシ血清アルブミンである、項目２６に記載の方法。
（項目２８）
前記第１の継続用量の投与の１週間後に、前記被験体における抗原特異的Ｔ細胞の血中濃度は、前記被験体が免疫学的記憶を有していない無関係の抗原を認識するＴ細胞の濃度よりも少なくとも１０倍高くなる、項目２３に記載の方法。
（項目２９）
前記無関係の抗原は、ウシ血清アルブミンである、項目２８に記載の方法。
（項目３０）
（１）少なくとも１つの表面を有する合成ナノキャリアであって、その第１の表面が複数の成分を、前記成分に体液性応答をもたらすのに有効な量で含む、合成ナノキャリア、
（２）免疫刺激成分、
（３）ＭＨＣクラスＩ提示可能ポリペプチド、ＭＨＣクラスＩＩ提示可能ポリペプチド、またはＣＤ１提示可能ポリペプチド、および
（４）薬学的に許容される賦形剤
を含む組成物。
（項目３１）
前記成分は、哺乳動物抗原提示細胞に対するアビディティベースの結合をもたらすのに有効な量で存在する、項目３０に記載の組成物。
（項目３２）
前記ナノキャリアの直径は、１００ｎｍを超える、項目３０に記載の組成物。
（項目３３）
前記薬学的に許容される賦形剤は、溶媒、分散媒、希釈剤、または他の液体ビヒクル、分散補助剤または懸濁補助剤、表面活性剤、等張剤、増粘剤または乳化剤、保存剤、固体結合剤、および滑沢剤から選択される、項目３０に記載の組成物。
（項目３４）
樹状細胞を標的にする、項目３０に記載の組成物。
（項目３５）
補体を実質的に活性化しない、項目３０に記載の組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（１）少なくとも１つの表面を有する合成ナノキャリアであって、前記合成ナノキャリアの第１の表面が免疫特徴表面を含む合成ナノキャリア、
（２）免疫刺激作用物質、
（３）ＭＨＣクラスＩ提示可能ポリペプチド、ＭＨＣクラスＩＩ提示可能ポリペプチド、またはＣＤ１提示可能ポリペプチド、および
（４）薬学的に許容される賦形剤
を含む組成物。
【請求項２】
前記免疫刺激作用物質は、（ｉ）前記免疫特徴表面と結合している、（ｉｉ）前記ナノキャリアの第２の表面と結合している、または（ｉｉｉ）前記ナノキャリア内に封入されている、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記ＭＨＣクラスＩ提示可能ポリペプチド、ＭＨＣクラスＩＩ提示可能ポリペプチド、またはＣＤ−１提示可能ポリペプチドは、（ｉ）前記免疫特徴表面と結合している、（ｉｉ）前記ナノキャリアの第２の表面と結合している、または（ｉｉｉ）前記ナノキャリアのコア領域内に封入されている、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
前記免疫特徴表面は、抗原提示細胞（ＡＰＣ）結合アッセイでモノクローナル抗体（ＭＡｂ）について観察される最大固定化の、少なくとも１０％を得るために必要とされる密度以上の密度で存在する、複数の成分を含み、ただし、前記ＡＰＣ結合アッセイにおいて、前記免疫刺激作用物質についての最大半量の結合密度は、前記ＭＡｂについての最大半量の結合密度の少なくとも２倍である、請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
前記免疫刺激作用物質は、ＡＰＣ結合アッセイでＭＡｂについて観察される前記最大固定化の、少なくとも２０％を得るために必要とされる密度以上の密度で存在する、請求項４に記載の組成物。
【請求項６】
前記免疫刺激作用物質についての前記最大半量の結合密度は、前記ＭＡｂについての前記最大半量の結合密度の少なくとも４倍である、請求項４に記載の組成物。
【請求項７】
前記ＡＰＣ結合アッセイは、
（ａ）機能成分のコーティングを一連の表面コーティング密度で有する、一連の基材を調製する工程であって、前記機能成分は樹状細胞（ＤＣ）または被膜下洞マクロファージ表面受容体に結合することができる、工程、
（ｂ）前記一連の基材をＤＣまたは被膜下洞マクロファージの単一細胞懸濁液に所定の期間、曝露する工程、
（ｃ）前記一連の基材から非接着ＡＰＣを除去し、前記一連の基材に接着したＡＰＣを固定する工程、
（ｄ）前記一連の基材のそれぞれの基材に関し、単位表面積当たりの接着したＡＰＣの数を定量する工程、
（ｅ）前記機能成分の前記コーティング密度に対して前記（ｄ）からの結果をプロットする工程、
（ｆ）前記一連の基材についての単位表面積当たりの接着したＡＰＣの最大数を決定することによって、前記最大固定化の値を得る工程、および
（ｇ）最大の５０％をもたらす前記表面コーティング密度を決定することによって、前記最大半量の結合密度の値を得る工程
を含む、請求項４に記載の組成物。
【請求項８】
前記ＭＡｂは、抗ＣＤ１ｃ（ＢＤＣＡ−１）クローンＡＤ５−８Ｅ７またはラット抗マウスＣＤ１６９、クローン３Ｄ６．１１２、アイソタイプＩｇＧ２ａである、請求項４に記載の組成物。
【請求項９】
免疫刺激作用物質は、Ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）アゴニストである、請求項１に記載の組成物。
【請求項１０】
前記ＴＬＲアゴニストは、ＴＬＲ−１アゴニスト、ＴＬＲ−２アゴニスト、ＴＬＲ−３アゴニスト、ＴＬＲ−４アゴニスト、ＴＬＲ−５アゴニスト、ＴＬＲ−６アゴニスト、ＴＬＲ−７アゴニスト、ＴＬＲ−８アゴニスト、ＴＬＲ−９アゴニスト、またはＴＬＲ−１０アゴニストである、請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】
前記免疫刺激作用物質は、インターロイキン、インターフェロン、サイトカイン、およびアジュバントから選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項１２】
ヒト被験体においてＴ細胞増殖の増強をもたらすことができる、請求項１に記載の組成物。
【請求項１３】
ヒト被験体に投与された場合、樹状細胞成熟を引き出す、請求項１に記載の組成物。
【請求項１４】
前記ナノキャリアは、２つ以上の異なるＭＨＣクラスＩ提示可能ポリペプチド、ＭＨＣクラスＩＩ提示可能ポリペプチド、またはＣＤ１提示可能ポリペプチドを含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項１５】
２つ以上の免疫刺激作用物質を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項１６】
２つ以上のＴｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）アゴニストを含む、請求項１５に記載の組成物。
【請求項１７】
１つのＴｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）アゴニストおよび１つの非ＴＬＲアゴニストを含む、請求項１５に記載の組成物。
【請求項１８】
前記非ＴＬＲアゴニストは、インフラマソーム、ＣＤ４０、またはサイトカイン受容体を介してシグナル伝達を誘導する成分である、請求項１７に記載の組成物。
【請求項１９】
前記ＭＨＣクラスＩ提示可能ペプチドは、抗原、ＳＩＩＮＦＥＫＬ、ＧＰ３３、Ｃｏｒｅ１８〜２７、およびＭＡＧＥから選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項２０】
前記ＭＨＣクラスＩＩ提示可能ペプチドは、抗原、ＯＶＡ３２３〜３３９、ＧＰ６１、ＭＡＧＥ−Ａ４  ２８０〜２９９、破傷風トキソイド、ジフテリアトキソイド、およびＰＡＤＲＥペプチドから選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項２１】
前記ＣＤ１提示可能ペプチドは、脂質抗原、ミコール酸、スルホ脂質、リポホスホグリカン、ジアシルグリセロール、グリコスフィンゴ脂質（ｇｌｙｃｏｓｈｐｉｎｇｏｌｉｐｉｄ）、アルファ−ガラクトシルセラミド、イソグロボトリヘキソシルセラミド、およびガングリオシドＧＤ３から選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項２２】
Ｂ細胞抗原、Ｔ細胞抗原、タンパク質、ペプチド、炭水化物、糖タンパク質、糖ペプチド、プロテオグリカン、不活化生物および不活化ウイルス、死んだ生物および死んだウイルス、遺伝子改変生物または遺伝子改変ウイルス、真菌生物の抗原、原虫生物の抗原、および／または寄生虫生物の抗原、ならびに細胞抽出物から選択される免疫調節作用物質をさらに含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項２３】
請求項１に記載の組成物であって、前記組成物は、被験体に初回用量として投与されることを特徴とし、そして
請求項１に記載の前記組成物の第１の継続用量が、前記初回用量の投与後のある期間に投与されることを特徴とする、組成物。
【請求項２４】
前記期間は、１日間から１年間の範囲の間隔である、請求項２３に記載の組成物。
【請求項２５】
前記組成物の前記第１の用量は、前記被験体においてＴ細胞増殖を引き出す、請求項２３に記載の組成物。
【請求項２６】
前記初回用量の投与の１週間後に、前記被験体における抗原特異的Ｔ細胞の血中濃度は、前記被験体が免疫学的記憶を有していない無関係の抗原を認識するＴ細胞の濃度よりも少なくとも１０倍高くなる、請求項２３に記載の組成物。
【請求項２７】
前記無関係の抗原は、ウシ血清アルブミンである、請求項２６に記載の組成物。
【請求項２８】
前記第１の継続用量の投与の１週間後に、前記被験体における抗原特異的Ｔ細胞の血中濃度は、前記被験体が免疫学的記憶を有していない無関係の抗原を認識するＴ細胞の濃度よりも少なくとも１０倍高くなる、請求項２３に記載の組成物。
【請求項２９】
前記無関係の抗原は、ウシ血清アルブミンである、請求項２８に記載の組成物。
【請求項３０】
（１）少なくとも１つの表面を有する合成ナノキャリアであって、前記合成ナノキャリアの第１の表面が複数の成分を、前記複数の成分に体液性応答をもたらすのに有効な量で含む、合成ナノキャリア、
（２）免疫刺激成分、
（３）ＭＨＣクラスＩ提示可能ポリペプチド、ＭＨＣクラスＩＩ提示可能ポリペプチド、またはＣＤ１提示可能ポリペプチド、および
（４）薬学的に許容される賦形剤
を含む組成物。
【請求項３１】
前記複数の成分は、哺乳動物抗原提示細胞に対するアビディティベースの結合をもたらすのに有効な量で存在する、請求項３０に記載の組成物。
【請求項３２】
前記ナノキャリアの直径は、１００ｎｍを超える、請求項３０に記載の組成物。
【請求項３３】
前記薬学的に許容される賦形剤は、溶媒、分散媒、希釈剤、または他の液体ビヒクル、分散補助剤または懸濁補助剤、表面活性剤、等張剤、増粘剤または乳化剤、保存剤、固体結合剤、および滑沢剤から選択される、請求項３０に記載の組成物。
【請求項３４】
樹状細胞を標的にする、請求項３０に記載の組成物。
【請求項３５】
補体を実質的に活性化しない、請求項３０に記載の組成物。