【手続補正書】
【提出日】平成24年9月28日(2012.9.28)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
天然にコードされていないアミノ酸を含んでいる、修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドであって、
天然にコードされていない上記アミノ酸は、以下の構造：
【化１】
2010523084.tif 000001
を有しており、
Ｒ基は、通常のアミノ酸、ピロロリジンまたはセレノシステインのうちのいずれかに見られる側鎖以外の任意の置換基であり、
天然にコードされていない上記アミノ酸は、配列番号１の７２位、７７位、８６位、８７位、９１位、１０４位、１０８位、１１０位、１２６位、１３１位および１４６位、または他のヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドにおける対応するアミノ酸位置からなる群から選択される位置に置換されている、修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチド。
【請求項２】
天然にコードされていないアミノ酸を含んでいる、修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドであって、
天然にコードされていない上記アミノ酸はフェニルアラニン誘導体である、修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチド。
【請求項３】
天然にコードされていない上記アミノ酸は、カルボニル基、アミノオキシ基、ヒドラジド基、ヒドラジン基、セミカルバジド基、アジド基またはアルキン基を含んでいる、請求項１または２に記載の修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチド。
【請求項４】
天然にコードされていない上記アミノ酸はパラ−アセチルフェニルアラニンである、請求項１〜３のいずれか１項に記載の修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチド。
【請求項５】
天然にコードされていない上記アミノ酸は、配列番号１の７７位、９１位、１０８位および１３１位、または他のヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドにおける対応するアミノ酸位置からなる群から選択される位置に置換されている、請求項１〜４のいずれか１項に記載の修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチド。
【請求項６】
天然にコードされていない上記アミノ酸は、配列番号１の１０８位、または他のヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドにおける対応するアミノ酸位置からなる群から選択される位置に置換されている、請求項１〜５のいずれか１項に記載の修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチド。
【請求項７】
天然にコードされていないアミノ酸を用いたアミノ酸の置換を含有している配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６または配列番号７を含んでいる、請求項１〜６のいずれか１項に記載の修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチド。
【請求項８】
天然にコードされていないアミノ酸を用いたアミノ酸の置換を含有している配列番号１を含んでいる、請求項１〜７のいずれか１項に記載の修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチド。
【請求項９】
天然にコードされていないアミノ酸を含んでいるポリペプチドであって、
配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６または配列番号７と少なくとも９０％同一の配列を含んでおり、かつヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドの生理活性を維持しており、
天然にコードされていないアミノ酸は、以下の構造：
【化２】
2010523084.tif 000002
を有しており、
Ｒ基は、通常のアミノ酸、ピロロリジンまたはセレノシステインのうちのいずれかに見られる側鎖以外の任意の置換基である、ポリペプチド。
【請求項１０】
配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６または配列番号７と少なくとも９５％同一の配列を含んでいる、請求項９に記載のポリペプチド。
【請求項１１】
配列番号１からなるＦＧＦ−２１ポリペプチドの少なくとも５倍の血清半減期を有している、請求項９または１０に記載のポリペプチド。
【請求項１２】
配列番号１の７２位、７７位、８６位、８７位、９１位、１０４位、１０８位、１１０位、１２６位、１３１位および１４６位、または配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６もしくは配列番号７における対応するアミノ酸位置からなる群から選択される位置に天然にコードされない上記アミノ酸を用いたアミノ酸の置換を含んでいる、請求項９〜１１のいずれか１項に記載のポリペプチド。
【請求項１３】
天然にコードされない上記アミノ酸はフェニルアラニン誘導体である、請求項９〜１２のいずれか１項に記載のポリペプチド。
【請求項１４】
天然にコードされていない上記アミノ酸は、カルボニル基、アミノオキシ基、ヒドラジド基、ヒドラジン基、セミカルバジド基、アジド基またはアルキン基を含んでいる、請求項９〜１３のいずれか１項に記載のポリペプチド。
【請求項１５】
天然にコードされていない上記アミノ酸はパラ−アセチルフェニルアラニンである、請求項９〜１４のいずれか１項に記載のポリペプチド。
【請求項１６】
天然にコードされていない上記アミノ酸は、配列番号１の７７位、９１位、１０８位および１３１位、または配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６もしくは配列番号７における対応するアミノ酸位置からなる群から選択される位置に置換されている、請求項９〜１５のいずれか１項に記載のポリペプチド。
【請求項１７】
天然にコードされていない上記アミノ酸は、配列番号１の１０８位、または配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６もしくは配列番号７における対応するアミノ酸位置からなる群から選択される位置に置換されている、請求項９〜１６のいずれか１項に記載のポリペプチド。
【請求項１８】
天然にコードされていない上記アミノ酸は、リンカー、ポリマーまたは生物学的に活性な分子と連結されている、請求項１〜１７のいずれか１項に記載の修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドまたはポリペプチド。
【請求項１９】
上記ポリマーは水溶性ポリマーである、請求項１８に記載の修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドまたはポリペプチド。
【請求項２０】
上記ポリマーはポリ（エチレングリコール）を含んでいる、請求項１８または１９に記載の修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドまたはポリペプチド。
【請求項２１】
上記ポリマーは約０．１ｋＤａ〜約１００ｋＤａの平均分子量を有している、請求項１８〜２０のいずれか１項に記載の修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドまたはポリペプチド。
【請求項２２】
上記ポリマーは分枝鎖状またはマルチアームのポリマーである、請求項１８〜２１のいずれか１項に記載の修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドまたはポリペプチド。
【請求項２３】
上記ポリマーは約１ｋＤａ〜約１００ｋＤａの平均分子量を有している、請求項２２に記載の修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドまたはポリペプチド。
【請求項２４】
上記ポリマーは、約３０ｋＤａの平均分子量を有しているポリ（エチレングリコール）部分を含んでいる、請求項１８〜２１のいずれか１項に記載の修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドまたはポリペプチド。
【請求項２５】
上記ポリマーはオリゴ糖である、請求項１９に記載の修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドまたはポリペプチド。
【請求項２６】
配列番号１に示されている配列、および配列番号１の１０８位において置換されているパラ−アセチル−フェニルアラニンを有しており、
上記修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドまたはポリペプチドに存在している上記パラ−アセチル−フェニルアラニンに対して、３０ｋＤａの平均分子量を有しているポリ（エチレングリコール）部分が連結されている、請求項１８〜２１のいずれか１項に記載の修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドまたはポリペプチド。
【請求項２７】
天然にコードされていないアミノ酸を含んでいる上記修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドまたは上記ポリペプチドは、天然にコードされていないアミノ酸、およびリンカー、ポリマーもしくは生物学的に活性な分子なしの対応するヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドを超えるインビボ半減期を有している、請求項１８〜２６のいずれか１項に記載の修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドまたはポリペプチド。
【請求項２８】
天然にコードされていないアミノ酸を含んでいる上記修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドまたは上記ポリペプチドは、天然にコードされていないアミノ酸、およびリンカー、ポリマーもしくは生物学的に活性な分子なしの対応するヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドの少なくとも５倍の血清半減期を有している、請求項１８〜２６のいずれか１項に記載の修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドまたはポリペプチド。
【請求項２９】
天然にコードされていないアミノ酸を含んでいる上記修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドまたは上記ポリペプチドは、天然にコードされていないアミノ酸、およびリンカー、ポリマーもしくは生物学的に活性な分子なしの対応するヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドの約１０倍〜約４０倍の血清半減期を有している、請求項１８〜２６のいずれか１項に記載の修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドまたはポリペプチド。
【請求項３０】
天然にコードされていないアミノ酸を含んでいる上記修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドまたは上記ポリペプチドは、天然にコードされていないアミノ酸、およびリンカー、ポリマーもしくは生物学的に活性な分子なしの対応するヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドの約２０倍〜約３０倍の血清半減期を有している、請求項１８〜２６のいずれか１項に記載の修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドまたはポリペプチド。
【請求項３１】
天然にコードされていないアミノ酸を含んでいる上記修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドまたは上記ポリペプチドは、天然にコードされていないアミノ酸、およびリンカー、ポリマーもしくは生物学的に活性な分子なしの対応するヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドの約２３倍の血清半減期を有している、請求項１８〜２６のいずれか１項に記載の修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドまたはポリペプチド。
【請求項３２】
配列番号１の１１８位もしくは他のヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドにおける対応するアミノ酸位置におけるロイシン、および配列番号１の１３４位もしくは他のヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドにおける対応するアミノ酸位置におけるアラニンの、システインへの置換を含んでいる、請求項１〜３１のいずれか１項に記載の修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドまたはポリペプチド。
【請求項３３】
配列番号１の１７２位もしくは他のヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドにおける対応するアミノ酸位置におけるグリシン、および配列番号１の１７２位もしくは他のヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドにおける対応するアミノ酸位置におけるセリンの、天然にコードされているアミノ酸または天然にコードされていないアミノ酸を用いた置換を含んでいる、請求項１〜３２のいずれか１項に記載の修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドまたはポリペプチド。
【請求項３４】
（ｉ）組換え宿主細胞における上記修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドもしくはポリペプチド、またはインビトロにおいて合成されるときの上記修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドもしくはポリペプチドの発現を増加させるか；
（ｉｉ）上記修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドもしくはポリペプチドの安定性を増加させるか；
（ｉｉｉ）上記修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドもしくはポリペプチドのプロテアーゼ感受性を低下させるか、または（ｉ）〜（ｉｉｉ）の組合せの
さらなる１つ以上のアミノ酸置換、アミノ酸付加またはアミノ酸欠失を含んでいる、請求項１〜３３のいずれか１項に記載の修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドまたはポリペプチド。
【請求項３５】
請求項１〜３４のいずれか１項に記載の修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドまたはポリペプチドを含んでいる、抱合体または複合体。
【請求項３６】
請求項１〜３４のいずれか１項に記載の修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドもしくはポリペプチド、または請求項３５に記載の抱合体もしくは複合体、ならびに薬学的に受容可能な担体を含んでいる、組成物。
【請求項３７】
他の医薬品をさらに含んでいる、請求項３６に記載の組成物。
【請求項３８】
上記他の医薬品は、ビグアニド、チアゾリジンジオン、スルホニル尿素、安息香酸誘導体、グルコシダーゼ阻害剤、またはこれらの混合物からなる群から選択される、請求項３７に記載の組成物。
【請求項３９】
請求項１〜１７のいずれか１項に記載の修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドまたはポリペプチドを製造する方法であって、
天然にコードされていないアミノ酸を含んでいる修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドまたはポリペプチドをリボソームによって合成させることを包含している、方法。
【請求項４０】
請求項１８〜３４のいずれか１項に記載の修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドまたはポリペプチドを製造する方法であって、
請求項１〜１７のいずれか１項に記載の修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドまたはポリペプチドを、リボソームによって合成すること、および
請求項１〜１７のいずれか１項に記載の修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドまたはポリペプチドを、リンカー、ポリマーもしくは生物学的に活性な分子と接触させることを包含しており、
上記リンカー、ポリマーまたは生物学的に活性な分子は、天然にコードされていない上記アミノ酸と反応して請求項１８〜３４のいずれか１項に記載の修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドまたはポリペプチドをもたらす、方法。
【請求項４１】
上記リンカー、ポリマーまたは生物学的に活性な分子は、アルキン部分、アミノオキシ部分、アジド部分、ヒドラジン部分、ヒドラジド部分またはセミカルバジド部分を含んでいる、請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
上記アルキン部分、アミノオキシ部分、アジド部分、ヒドラジン部分、ヒドラジド部分またはセミカルバジド部分は、アミド結合を介して上記リンカー、ポリマーまたは生物学的に活性な分子と結合されている、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
ＦＧＦ−２１の投与によって処置可能または予防可能な障害の処置のための治療計画に使用するための薬剤の製造における請求項３６〜３８のいずれか１項に記載の組成物の使用であって、
上記薬剤は、予防または治療に有効な量の請求項３６〜３８のいずれか１項に記載の組成物を含んでいる、使用。
【請求項４４】
２型糖尿病、肥満症、インスリン耐性、高インスリン血症、グルコース過敏症、高血糖症、代謝症候群、グルコース代謝疾患、またはこれらの組合せの処置のための治療計画に使用するための薬剤の製造における請求項３６〜３８のいずれか１項に記載の組成物の使用であって、
上記薬剤は、予防または治療に有効な量の請求項３６〜３８のいずれか１項に記載の組成物を含んでいる、使用。
【請求項４５】
上記治療計画は、上記薬剤を投与すること、およびさらなる医薬品を含んでいる他の薬剤を投与することを包含しており、当該投与は、組み合わせてか、または別個に実施され、いずれかの順序において実施され得る、請求項４３または４４に記載の使用。
【請求項４６】
上記さらなる医薬品は、ビグアニド、チアゾリジンジオン、スルホニル尿素、安息香酸誘導体、グルコシダーゼ阻害剤、またはこれらの混合物からなる群から選択される、請求項４５に記載の使用。
【請求項４７】
直交性のｔＲＮＡ合成酵素、直交性のｔＲＮＡまたはこれらの両方の存在下におけるポリペプチドの発現を許容する条件において発現されるときに、請求項１〜１７のいずれか１項に記載の修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドまたはポリペプチドを生じる、少なくとも１つのセレクターコドンを含んでいる、核酸。
【請求項４８】
請求項４７に記載の核酸を含んでいる細胞であって、
直交性のｔＲＮＡ合成酵素または直交性のｔＲＮＡを含んでいる、細胞。
【請求項４９】
請求項１〜１７のいずれか１項に記載の修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドまたはポリペプチドを真核細胞において生成させる方法であって、
請求項４７に記載の核酸を含んでいる真核細胞を好適な培地において増殖させることを包含しており、
上記核酸は、直交性のｔＲＮＡ合成酵素、直交性のｔＲＮＡまたはこれらの両方を含んでいる真核生物において発現されるときに、請求項１〜１７のいずれか１項に記載の修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドまたはポリペプチドを生じる、方法。
【請求項５０】
請求項１８〜３４のいずれか１項に記載の修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドまたはポリペプチドを真核細胞において生成させる方法であって、
請求項４７に記載の核酸を含んでいる真核細胞を好適な培地において増殖させること、それから、請求項１〜１７のいずれか１項に記載の修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドまたはポリペプチドを、リンカー、ポリマーまたは生物学的に活性な分子と接触させることを包含しており、
上記リンカー、ポリマーまたは生物学的に活性な分子は、天然にコードされていない上記アミノ酸と反応して、請求項１８〜３４のいずれか１項に記載の修飾されているヒトＦＧＦ−２１ポリペプチドまたはポリペプチドをもたらす、方法。
【請求項５１】
上記リンカー、ポリマーまたは生物学的に活性な分子は、アルキン部分、アミノオキシ部分、アジド部分、ヒドラジン部分、ヒドラジド部分またはセミカルバジド部分を含んでいる、請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】
上記アルキン部分、アミノオキシ部分、アジド部分、ヒドラジン部分、ヒドラジド部分またはセミカルバジド部分は、アミド結合を介して上記リンカー、ポリマーまたは生物学的に活性な分子と結合されている、請求項５１に記載の方法。