【手続補正書】
【提出日】平成24年10月5日(2012.10.5)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１９】
別の態様において、本開示は、ＴＣＲ複合体またはその構成要素に特異的に結合する結合ドメインを含むタンパク質によって誘導されたＴ細胞活性化を検出するための方法を提供し、その方法は：（ａ）マイトジェンで刺激されたＴ細胞を準備する工程、（ｂ）工程（ａ）の刺激されたＴ細胞を、ＴＣＲ複合体またはその構成要素に特異的に結合する結合ドメインを含むタンパク質（例えば、融合タンパク質および抗体）で処理する工程、および（ｃ）工程（ｂ）において処理された刺激されたＴ細胞の活性化を検出する工程を包含する。
したがって、本発明は、以下の項目を提供する：
（項目１）
アミノ末端からカルボキシ末端に向かって：
（ａ）ＴＣＲ複合体またはその構成要素に特異的に結合する結合ドメイン、
（ｂ）リンカーポリペプチド、
（ｃ）必要に応じて、
（ｉ）２９７位のアスパラギンにおけるアミノ酸置換、および２３４から２３８位における１つ以上の置換または欠失；
（ｉｉ）２３４から２３８位における１つ以上の置換または欠失、および２５３、３１０、３１８、３２０、３２２または３３１位における少なくとも１つの置換；または
（ｉｉｉ）２９７位のアスパラギンにおけるアミノ酸置換、２３４から２３８位における１つ以上の置換または欠失、および２５３、３１０、３１８、３２０、３２２または３３１位における少なくとも１つの置換
を含む免疫グロブリンＣＨ２領域ポリペプチド、および
（ｄ）免疫グロブリンＣＨ３領域ポリペプチド
を含む一本鎖融合タンパク質であって、ここで、該融合タンパク質は、サイトカイン放出を誘導しないか、または最小限の検出可能なサイトカイン放出を誘導し、該免疫グロブリンＣＨ２領域内のアミノ酸残基は、ＥＵナンバリングシステムによってナンバリングされる、一本鎖融合タンパク質。
（項目２）
上記結合ドメインが、上記ＴＣＲ複合体またはその構成要素に特異的に結合する一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である、項目１に記載の融合タンパク質。
（項目３）
上記ＴＣＲ複合体またはその構成要素が、ＴＣＲα、ＴＣＲβまたはＣＤ３εである、項目２に記載の融合タンパク質。
（項目４）
上記ｓｃＦｖが、配列番号２５８〜２６４に示されているアミノ酸配列のいずれか１つを含む、項目２に記載の融合タンパク質。
（項目５）
上記リンカーが、免疫グロブリンヒンジ領域ポリペプチドである、項目１〜４のいずれか１項に記載の融合タンパク質。
（項目６）
上記免疫グロブリンヒンジ領域ポリペプチドが、野生型ヒトＩｇＧ１ヒンジ、少なくとも１つのシステインが変異したヒトＩｇＧ１ヒンジ、または野生型マウスＩＧＨＧ２ｃヒンジである、項目５に記載の融合タンパク質。
（項目７）
上記免疫グロブリンヒンジ領域ポリペプチドが、（ａ）配列番号２１２〜２１８、３００および３７９〜４３４または（ｂ）配列番号１０のアミノ酸３〜１７に示されているアミノ酸配列のいずれか１つを含む、項目５に記載の融合タンパク質。
（項目８）
２９７位のアスパラギンにおけるアミノ酸置換、および２３４から２３８位における１つ以上の置換または欠失を含む免疫グロブリンＣＨ２領域ポリペプチドを含む、項目１〜７のいずれか１項に記載の融合タンパク質。
（項目９）
２３４〜２３８位における１つ以上の置換または欠失、および２５３、３１０、３１８、３２０、３２２または３３１位における少なくとも１つの置換を含む免疫グロブリンＣＨ２領域ポリペプチドを含む、項目１〜７のいずれか１項に記載の融合タンパク質。
（項目１０）
上記免疫グロブリンＣＨ２領域ポリペプチドが、２９７位のアスパラギンにおけるアミノ酸置換、２３４から２３８位における１つ以上の置換または欠失、および２５３、３１０、３１８、３２０、３２２または３３１位における少なくとも１つの置換を含む、項目８に記載の融合タンパク質。
（項目１１）
２９７位における上記アミノ酸置換が、ＡｓｎからＡｌａへの置換である、項目１〜８および１０のいずれか１項に記載の融合タンパク質。
（項目１２）
上記免疫グロブリンＣＨ２領域ポリペプチドが：
（ｉ）２９７位のアスパラギンにおけるアミノ酸置換、および２３４、２３５、２３６または２３７位における１つのアミノ酸置換；
（ｉｉ）２９７位のアスパラギンにおけるアミノ酸置換、および２３４〜２３７位の２つにおけるアミノ酸置換；
（ｉｉｉ）２９７位のアスパラギンにおけるアミノ酸置換、および２３４〜２３７位の３つにおけるアミノ酸置換；
（ｉｖ）２９７位のアスパラギンにおけるアミノ酸置換、２３４、２３５および２３７位におけるアミノ酸置換、ならびに２３６位におけるアミノ酸欠失；
（ｖ）２３４〜２３７位の３つにおけるアミノ酸置換、ならびに３１８、３２０および３２２位におけるアミノ酸置換；または
（ｖｉ）２３４〜２３７位の３つにおけるアミノ酸置換、２３６位におけるアミノ酸欠失、ならびに３１８、３２０および３２２位におけるアミノ酸置換
を含む、項目１〜１１のいずれか１項に記載の融合タンパク質。
（項目１３）
配列番号１０２〜１０４  ７５および３７５〜３７８のいずれか１つに示されているような免疫グロブリンＣＨ２領域ポリペプチドを含む、項目１〜７のいずれか１項に記載の融合タンパク質。
（項目１４）
上記免疫グロブリンＣＨ２領域ポリペプチドが、ヒトＩｇＧ２  ＣＨ２領域ポリペプチドであり、上記免疫グロブリンＣＨ３領域ポリペプチドが、ヒトＩｇＧ２  ＣＨ３領域ポリペプチドである、項目１〜７のいずれか１項に記載の融合タンパク質。
（項目１５）
上記免疫グロブリンＣＨ２領域ポリペプチドが、ヒトＩｇＧ４  ＣＨ２領域ポリペプチドであり、上記免疫グロブリンＣＨ３領域ポリペプチドが、ヒトＩｇＧ４  ＣＨ３領域ポリペプチドである、項目１〜７のいずれか１項に記載の融合タンパク質。
（項目１６）
上記融合タンパク質が、免疫グロブリンＣＨ２領域ポリペプチドを含まない、項目１〜７のいずれか１項に記載の融合タンパク質。
（項目１７）
配列番号１１〜１６、７４、１０１および３０７〜３０９のいずれか１つに示されているような配列を含む、項目１〜７のいずれか１項に記載の融合タンパク質。
（項目１８）
配列番号８０〜９７、２６５〜２９９、３０４および３０６のいずれか１つ、最初の２２アミノ酸のリーダー配列を有しない配列番号２３４、２３６、２３８、２４０のいずれか１つ、または最初の２０アミノ酸のリーダー配列を有しない配列番号３１１、３１３、３１５、３１７、３１９、３２１、３２３、３２５および３２７のいずれか１つに示されているような配列を含む、項目１に記載の融合タンパク質。
（項目１９）
上記融合タンパク質がさらに、Ｔ細胞を活性化させないか、または最小限に活性化させる、項目１〜１８のいずれか１項に記載の融合タンパク質。
（項目２０）
上記融合タンパク質がさらに、カルシウム流動の誘導、Ｔ細胞レセプターシグナル伝達経路内の分子のリン酸化の誘導、同種抗原に対するＴ細胞応答の阻止、抗原に対するメモリーＴ細胞応答の阻止および上記ＴＣＲ複合体の下方調節から選択される活性のうちの少なくとも１つを有する、項目１〜１９のいずれか１項に記載の融合タンパク質。
（項目２１）
項目１〜２０のいずれか１項に記載の融合タンパク質、および薬学的に許容可能なキャリア、希釈剤または賦形剤を含む、組成物。
（項目２２）
項目２１に記載の薬学的組成物を含む、単位用量形態。
（項目２３）
項目１〜２０のいずれか１項に記載の融合タンパク質をコードする、ポリヌクレオチド。
（項目２４）
発現制御配列に作動可能に連結された項目２３に記載のポリヌクレオチドを含む、発現ベクター。
（項目２５）
固形臓器移植片の拒絶を減少させる方法であって、固形臓器移植レシピエントに、有効量の、項目１〜２０のいずれか１項に記載の融合タンパク質、項目２１に記載の組成物および項目２２に記載の単位用量形態を投与する工程を包含する、方法。
（項目２６）
自己免疫疾患を処置するための方法であって、その必要のある患者に、有効量の、項目１〜２０のいずれか１項に記載の融合タンパク質、項目２１に記載の組成物および項目２２に記載の単位用量形態を投与する工程を包含する、方法。
（項目２７）
上記自己免疫疾患が、炎症性腸疾患である、項目２６に記載の方法。
（項目２８）
上記炎症性腸疾患が、クローン病または潰瘍性大腸炎である、項目２７に記載の方法。
（項目２９）
上記自己免疫疾患が、真性糖尿病、喘息または関節炎である、項目２６に記載の方法。
（項目３０）
ＴＣＲ複合体またはその構成要素に特異的に結合する結合ドメインを含むタンパク質によって誘導されたサイトカイン放出を検出するための方法であって：
（ａ）マイトジェンで刺激されたＴ細胞を準備する工程、
（ｂ）工程（ａ）の刺激されたＴ細胞を、ＴＣＲ複合体またはその構成要素に特異的に結合する結合ドメインを含む該タンパク質で処理する工程、および
（ｃ）工程（ｂ）において処理された、該刺激されたＴ細胞からのサイトカインの放出を検出する工程
を包含する、方法。
（項目３１）
ＴＣＲ複合体またはその構成要素に特異的に結合する結合ドメインを含むタンパク質によって誘導されたＴ細胞活性化を検出するための方法であって：
（ａ）マイトジェンで刺激されたＴ細胞を準備する工程、
（ｂ）工程（ａ）の刺激されたＴ細胞を、ＴＣＲ複合体またはその構成要素に特異的に結合する結合ドメインを含む該タンパク質で処理する工程、および
（ｃ）工程（ｂ）において処理された、該刺激されたＴ細胞の活性化を検出する工程
を包含する、方法。
（項目３２）
ＴＣＲ複合体またはその構成要素に特異的に結合する結合ドメインを含む上記タンパク質が、項目１〜２０のいずれか１項に記載の融合タンパク質である、項目３０または項目３１に記載の方法。
（項目３３）
ＴＣＲ複合体またはその構成要素に特異的に結合する結合ドメインを含む上記タンパク質が、抗体である、項目３０または項目３１に記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２０】
【図１】図１は、ＰＨＡで刺激されたヒトＴ細胞を様々な抗体および小モジュール免疫薬（ｓｍａｌｌ  ｍｏｄｕｌａｒ  ｉｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ（ＳＭＩＰＴＭ））製品で処理したことに起因する、活性化されたＴ細胞のパーセンテージを示している。「Ｒｘなし」とは、ネガティブコントロールとして使用された、処理無しのことを指す。
【図２】図２は、混合リンパ球反応アッセイにおいて、応答物（responder）細胞を様々な抗体およびＳＭＩＰ融合タンパク質で処理したことに起因する、活性化されたＴ細胞のパーセンテージを示している。「ＭＬＲ」とは、いかなる追加の処理も行わなかった混合リンパ球反応のことを指す。「応答物のみ」とは、応答物細胞だけが存在した反応のことを指す。「ＩｇＧ２ａ」とは、１０μｇ／ｍｌ  ＩｇＧ２ａ  ｍＡｂで処理された応答物細胞のことを指す。
【図３】図３は、混合リンパ球反応アッセイにおいて、応答物細胞を様々な抗体およびＳＭＩＰ融合タンパク質で処理したことに起因する、活性化されたＴ細胞のパーセンテージを示している。「ＭＬＲ」とは、いかなる追加の処理も行わなかった混合リンパ球反応のことを指す。「応答物のみ」とは、応答物細胞だけが存在した反応のことを指す。
【図４】図４は、メモリーＴ細胞をモノクローナル抗体および様々なＳＭＩＰ融合タンパク質で処理したことに起因する、活性化されたＴ細胞のパーセンテージを示している。「応答物（ＴＴなし）」とは、破傷風トキソイドの非存在下における反応のことを指す。
【図５】図５Ａおよび５Ｂは、（Ａ）単離の直後（０日目）または（ｂ）ＯＫＴ３モノクローナル抗体または様々なＯＫＴ３  ＳＭＩＰ融合タンパク質で処理した４日後に染色されたヒトＴ細胞上のＴＣＲおよびＣＤ３のＦＡＣＳ分析のドットプロットである。
【図６】図６Ａおよび６Ｂは、（Ａ）単離の直後（０日目）または（Ｂ）ＯＫＴ３  ＩｇＧ１ＡＡまたはＯＫＴ３  ＨＭ１  ＳＭＩＰ融合タンパク質で処理した４日後に染色されたヒトＴ細胞上のＴＣＲおよびＣＤ３のＦＡＣＳ分析のドットプロットである。
【図７】図７は、精製ヒトＴ細胞をモノクローナル抗体、抗体の組み合わせまたは様々なＯＫＴ３  ＳＭＩＰ融合タンパク質で処理したことに起因する、経時的なカルシウム流動指示色素の蛍光の変化を示している。
【図８】図８Ａおよび８Ｂは、ＣｏｎＡで刺激されたマウスＴ細胞をモノクローナル抗体（２Ｃ１１ｍＡｂおよびＨ５７ｍＡｂ）またはＳＭＩＰ融合タンパク質（２Ｃ１１  Ｎｕｌｌ２およびＨ５７  Ｎｕｌｌ２）で処理した後の、（Ａ）ＩＦＮγまたは（Ｂ）ＩＰ−１０の放出を示している。
【図９】図９は、混合リンパ球反応アッセイにおいて、応答物細胞を様々な抗体またはＳＭＩＰ融合タンパク質で処理したことに起因する、活性化されたＴ細胞のパーセンテージを示している。「Ｒのみ」とは、応答物細胞だけが存在する反応のことを指し；「Ｓのみ」とは、刺激物（ｓｔｉｍｕｌａｔｏｒ）細胞だけが存在する反応のことを指し；「Ｒ：Ｓ」とは、応答物細胞と刺激物細胞の両方が存在する反応のことを指す。
【図１０】図１０Ａおよび１０Ｂは、様々な濃度の抗体（Ｈ５７ｍＡｂ）およびＨ５７  Ｎｕｌｌ２  ＳＭＩＰ融合タンパク質を静脈内投与した後の経時的な（Ａ）体重および（Ｂ）臨床スコアの変化を示している。ＰＢＳおよびＩｇＧ２ａをネガティブコントロールとして使用した。
【図１１Ａ】図１１Ａおよび１１Ｂは、正常ＢＡＬＢ／ｃマウスに抗ＴＣＲ抗体（Ｈ５７ｍＡｂ）または様々な濃度の抗ＴＣＲ  ＳＭＩＰ融合タンパク質（Ｈ５７  Ｎｕｌｌ２）を静脈内投与した２時間後、２４時間後、７２時間後の血清中の（Ａ）ＩＬ−６および（Ｂ）ＩＬ−４の濃度を示している。マウスＩｇＧ２ａ抗体およびＰＢＳ（希釈剤）をネガティブコントロールとして使用した。
【図１１Ｂ】図１１Ａおよび１１Ｂは、正常ＢＡＬＢ／ｃマウスに抗ＴＣＲ抗体（Ｈ５７ｍＡｂ）または様々な濃度の抗ＴＣＲ  ＳＭＩＰ融合タンパク質（Ｈ５７  Ｎｕｌｌ２）を静脈内投与した２時間後、２４時間後、７２時間後の血清中の（Ａ）ＩＬ−６および（Ｂ）ＩＬ−４の濃度を示している。マウスＩｇＧ２ａ抗体およびＰＢＳ（希釈剤）をネガティブコントロールとして使用した。
【図１２】図１２は、様々な濃度の抗ＴＣＲ  ＳＭＩＰ融合タンパク質（Ｈ５７  Ｎｕｌｌ２）を静脈内投与した後の１日目または３日目のマウス脾臓に見られたＨ５７  Ｎｕｌｌ２  ＳＭＩＰで覆われたＴ細胞のパーセンテージを示している。ＰＢＳおよびＩｇＧ２ａをネガティブコントロールとして使用した。
【図１３】図１３は、急性移植片対宿主病（ａＧＶＨＤ）のモデルにおいてドナー細胞を移入した後の１４日間にわたるレシピエントマウスの開始体重からの変化のパーセンテージを示している。「ナイーブレシピエント」は、ネガティブコントロールとしてドナー細胞移入を受けなかったマウスのことを示す。レシピエントマウスを、Ｈ５７  Ｎｕｌｌ２  ＳＭＩＰ融合タンパク質、デキサメタゾン（ＤＥＸ）またはコントロール（ＰＢＳまたはＩｇＧ２ａ）で処置した。
【図１４】図１４Ａ〜１４Ｃは、ドナー細胞移入後のそれぞれ１４日目、１４日目または７日目における（Ａ）Ｇ−ＣＳＦ、（Ｂ）ＫＣまたは（Ｃ）ＩＦＮγの血清濃度を示している。
【図１５】図１５は、ドナー細胞移入後の１４日目におけるドナー：宿主リンパ球比を示している。「細胞移入なし」は、ドナー細胞を投与されなかったネガティブコントロールマウスのことを示す。ＰＢＳおよびＩｇＧ２ａをコントロール処置として使用した。
【図１６】図１６は、ヒトＩｇＧ１、ヒトＩｇＧ２、ヒトＩｇＧ４およびマウスＩＧＨＧ２ｃのＣＨ２領域（それぞれ配列番号６４、６６、６８および７３）間の配列アラインメントを示している。これらのアラインメントは、ＤＮＡＳＴＡＲ５．０３（ＤＮＡＳＴＡＲ  Ｉｎｃ．）のＭｅｇＡｌｉｇｎプログラムのデフォルトパラメータを使用したＣｌｕｓｔａｌ  Ｗ法を用いて行った。ヒトＩｇＧ１  ＣＨ２のアミノ酸の位置は、Ｋａｂａｔに従うＥＵナンバリングに基づいている（Ｋａｂａｔ，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ  ｅｄ．Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ：Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ（１９９１）を参照のこと）。すなわち、ヒトＩｇＧ１の重鎖可変領域は、１２８アミノ酸長であると考えられるので、ヒトＩｇＧ１の定常領域における最もアミノ末端のアミノ酸残基は、１２９位である。他のＣＨ２領域のアミノ酸の位置は、それらとアラインメントされるヒトＩｇＧ１におけるアミノ酸残基の位置に基づいて示される。２９７位のＡｓｎ残基（Ｎ２９７）は、下線が引かれ、太字で示されている。
【図１７】図１７は、混合リンパ球反応（ＭＬＲ）アッセイにおいて、応答物細胞を抗体またはＳＭＩＰ融合タンパク質で処理したことに起因する、活性化されたＴ細胞のパーセンテージを示している。「Ｒ」とは、応答物細胞だけが存在した反応のことを指し、「Ｓ」とは、刺激物細胞だけが存在した反応のことを指し、「Ｒ＋Ｓ」とは、いかなる追加の処理も行わなかった混合リンパ球反応のことを指し、「ｍｕＩｇＧ２ｂ」とは、１０μｇ／ｍｌマウスＩｇＧ２ｂで処理された応答物細胞のことを指す。「コントロールＳＭＩＰ」は、Ｔ細胞に結合しないｓｃＦｖ結合ドメインを有するＳＭＩＰ融合タンパク質である。Ｃｒｉｓ−７  ＩｇＧ１  Ｎ２９７Ａ（配列番号２６５）を用いて、これらの細胞を試験した。
【図１８】図１８は、単離の直後に染色されたヒトＴ細胞上のＴＣＲおよびＣＤ３のＦＡＣＳ分析のドットプロットを示している。上の２枚のパネルは、Ｃｒｉｓ−７モノクローナル抗体で処理されたヒトＴ細胞を示しており、下の２枚のパネルは、Ｃｒｉｓ−７  ＩｇＧ１  Ｎ２９７Ａ（配列番号２６５）による処理を示している。左のパネルは、処理当日（０日目）の細胞の分布を示しており、右のパネルは、処理の２日後（２日目）の細胞の分布を示している。
【図１９】図１９は、ヒトＴ細胞をＢＣ３  ＩｇＧ１−Ｎ２９７Ａ（配列番号８０，ｓｃＦｖとＣＨ２ＣＨ３ドメインとの間にヒンジとしてリンカー８７を有する）で処理したことに起因する経時的なカルシウム流動指示色素の蛍光の変化を、ヒンジリンカー８７を様々な長さの他のヒンジ（特に、配列番号２１２〜２１８に対応する、それぞれリンカー１１５〜１２０および１２２）と交換した同じ融合タンパク質と比較して示している。
【図２０】図２０は、ＭＬＲアッセイにおいて、応答物細胞を抗体またはＳＭＩＰ融合タンパク質で処理したことに起因する、活性化されたＴ細胞のパーセンテージを示している。「コントロールＳＭＩＰ」とは、Ｔ細胞に結合しないｓｃＦｖ結合ドメインを有するＳＭＩＰ融合タンパク質のことを指す。「応答物のみ」とは、応答物細胞だけが存在した反応のことを指す。角括弧内の数字は、ＳＭＩＰ融合タンパク質の配列識別番号である。
【図２１】図２１は、ＭＬＲアッセイにおいて、応答物細胞を、様々なヒンジリンカーを含むＢＣ３  ＩｇＧ１−Ｎ２９７Ａ  ＳＭＩＰ融合タンパク質で処理したことに起因する、活性化されたＴ細胞のパーセンテージを示している。
【図２２】図２２は、ＭＬＲアッセイにおいて、応答物細胞をモノクローナル抗体Ｃｒｉｓ７、キメラもしくはヒト化Ｃｒｉｓ７  ＳＭＩＰ融合タンパク質またはキメラＢＣ３  ＳＭＩＰ融合タンパク質（配列番号８０）で処理したことに起因する、活性化されたＴ細胞のパーセンテージを示している。「コントロールＳＭＩＰ」とは、Ｔ細胞に結合しないｓｃＦｖ結合ドメインを有するＳＭＩＰ融合タンパク質のことを指し、「応答物のみ」とは、応答物細胞だけが存在した反応のことを指す。角括弧内の数字は、ＳＭＩＰ融合タンパク質の配列識別番号である。
【図２３】図２３は、ＭＬＲアッセイにおいて、応答物細胞をヒト化Ｃｒｉｓ７  ＩｇＧ１−Ｎ２９７、ＩｇＧ２−ＡＡ−Ｎ２９７ＡおよびＩｇＧ４−ＡＡ−Ｎ２９７Ａ、ならびにＨＭ１  ＳＭＩＰ融合タンパク質またはキメラＣｒｉｓ７  ＩｇＧ１−Ｎ２９７ＡおよびＨＭ１  ＳＭＩＰ融合タンパク質で処理したことに起因する、活性化されたＴ細胞のパーセンテージを示している。「親ｍＡｂ」とは、Ｃｒｉｓ７ｍＡｂのことを指し、「コントロールＳＭＩＰ」とは、Ｔ細胞に結合しないｓｃＦｖ結合ドメインを有するＳＭＩＰ融合タンパク質のことを指す。
【図２４】図２４は、ＰＨＡで刺激されたヒトＴ細胞をヒト化Ｃｒｉｓ７（ＶＨ３−ＶＬ１）ＩｇＧ１−Ｎ２９７Ａまたはヒト化Ｃｒｉｓ７（ＶＨ３−ＶＬ２）ＩｇＧ１−Ｎ２９７Ａ  ＳＭＩＰ融合タンパク質で処理した後の、活性化されたＴ細胞のパーセンテージを示している。「コントロールＳＭＩＰ」は、Ｔ細胞に結合しないＳＭＩＰ融合タンパク質である。
【図２５Ａ】図２５Ａおよび２５Ｂは、ＰＨＡで刺激されたＴ細胞を様々なヒト化およびキメラＣｒｉｓ７  ＳＭＩＰ融合タンパク質、ＢＣ３  ＳＭＩＰ融合タンパク質（配列番号８０）、ならびに様々な抗体（ＢＣ３ｍＡｂ、親Ｃｒｉｓ７ｍＡｂおよびＮｕｖｉｏｎ  ＦＬ）で再刺激した２４時間後（１日目）および７２時間後（３日目）における血清中の（Ａ）ＩＦＮγおよび（Ｂ）ＩＬ−１７の濃度を示している。角括弧内の数字は、ＳＭＩＰ融合タンパク質の配列識別番号である。
【図２５Ｂ】図２５Ａおよび２５Ｂは、ＰＨＡで刺激されたＴ細胞を様々なヒト化およびキメラＣｒｉｓ７  ＳＭＩＰ融合タンパク質、ＢＣ３  ＳＭＩＰ融合タンパク質（配列番号８０）、ならびに様々な抗体（ＢＣ３ｍＡｂ、親Ｃｒｉｓ７ｍＡｂおよびＮｕｖｉｏｎ  ＦＬ）で再刺激した２４時間後（１日目）および７２時間後（３日目）における血清中の（Ａ）ＩＦＮγおよび（Ｂ）ＩＬ−１７の濃度を示している。角括弧内の数字は、ＳＭＩＰ融合タンパク質の配列識別番号である。
【図２６Ａ】図２６Ａ〜２６Ｈは、ヒト化Ｃｒｉｓ７（ＶＨ３−ＶＬ１）ＩｇＧ４−ＡＡ−Ｎ２９７Ａ  ＳＭＩＰ融合タンパク質、ヒト化Ｃｒｉｓ７（ＶＨ３−ＶＬ２）ＩｇＧ４−ＡＡ−Ｎ２９７Ａ  ＳＭＩＰ融合タンパク質またはＣｒｉｓ７ｍＡｂで２４時間（ｄ１）、４８時間（ｄ２）または７２時間（ｄ３）処理された初期のＰＢＭＣにおける、（Ａ）ＩＦＮγ、（Ｂ）ＩＬ−１０、（Ｃ）ＩＬ−１Ｂ、（Ｄ）ＩＬ−１７、（Ｅ）ＩＬ−４、（Ｆ）ＴＮＦ−α、（Ｇ）ＩＬ−６および（Ｈ）ＩＬ−２のレベルを示している。
【図２６Ｂ】図２６Ａ〜２６Ｈは、ヒト化Ｃｒｉｓ７（ＶＨ３−ＶＬ１）ＩｇＧ４−ＡＡ−Ｎ２９７Ａ  ＳＭＩＰ融合タンパク質、ヒト化Ｃｒｉｓ７（ＶＨ３−ＶＬ２）ＩｇＧ４−ＡＡ−Ｎ２９７Ａ  ＳＭＩＰ融合タンパク質またはＣｒｉｓ７ｍＡｂで２４時間（ｄ１）、４８時間（ｄ２）または７２時間（ｄ３）処理された初期のＰＢＭＣにおける、（Ａ）ＩＦＮγ、（Ｂ）ＩＬ−１０、（Ｃ）ＩＬ−１Ｂ、（Ｄ）ＩＬ−１７、（Ｅ）ＩＬ−４、（Ｆ）ＴＮＦ−α、（Ｇ）ＩＬ−６および（Ｈ）ＩＬ−２のレベルを示している。
【図２６Ｃ】図２６Ａ〜２６Ｈは、ヒト化Ｃｒｉｓ７（ＶＨ３−ＶＬ１）ＩｇＧ４−ＡＡ−Ｎ２９７Ａ  ＳＭＩＰ融合タンパク質、ヒト化Ｃｒｉｓ７（ＶＨ３−ＶＬ２）ＩｇＧ４−ＡＡ−Ｎ２９７Ａ  ＳＭＩＰ融合タンパク質またはＣｒｉｓ７ｍＡｂで２４時間（ｄ１）、４８時間（ｄ２）または７２時間（ｄ３）処理された初期のＰＢＭＣにおける、（Ａ）ＩＦＮγ、（Ｂ）ＩＬ−１０、（Ｃ）ＩＬ−１Ｂ、（Ｄ）ＩＬ−１７、（Ｅ）ＩＬ−４、（Ｆ）ＴＮＦ−α、（Ｇ）ＩＬ−６および（Ｈ）ＩＬ−２のレベルを示している。
【図２６Ｄ】図２６Ａ〜２６Ｈは、ヒト化Ｃｒｉｓ７（ＶＨ３−ＶＬ１）ＩｇＧ４−ＡＡ−Ｎ２９７Ａ  ＳＭＩＰ融合タンパク質、ヒト化Ｃｒｉｓ７（ＶＨ３−ＶＬ２）ＩｇＧ４−ＡＡ−Ｎ２９７Ａ  ＳＭＩＰ融合タンパク質またはＣｒｉｓ７ｍＡｂで２４時間（ｄ１）、４８時間（ｄ２）または７２時間（ｄ３）処理された初期のＰＢＭＣにおける、（Ａ）ＩＦＮγ、（Ｂ）ＩＬ−１０、（Ｃ）ＩＬ−１Ｂ、（Ｄ）ＩＬ−１７、（Ｅ）ＩＬ−４、（Ｆ）ＴＮＦ−α、（Ｇ）ＩＬ−６および（Ｈ）ＩＬ−２のレベルを示している。
【図２６Ｅ】図２６Ａ〜２６Ｈは、ヒト化Ｃｒｉｓ７（ＶＨ３−ＶＬ１）ＩｇＧ４−ＡＡ−Ｎ２９７Ａ  ＳＭＩＰ融合タンパク質、ヒト化Ｃｒｉｓ７（ＶＨ３−ＶＬ２）ＩｇＧ４−ＡＡ−Ｎ２９７Ａ  ＳＭＩＰ融合タンパク質またはＣｒｉｓ７ｍＡｂで２４時間（ｄ１）、４８時間（ｄ２）または７２時間（ｄ３）処理された初期のＰＢＭＣにおける、（Ａ）ＩＦＮγ、（Ｂ）ＩＬ−１０、（Ｃ）ＩＬ−１Ｂ、（Ｄ）ＩＬ−１７、（Ｅ）ＩＬ−４、（Ｆ）ＴＮＦ−α、（Ｇ）ＩＬ−６および（Ｈ）ＩＬ−２のレベルを示している。
【図２６Ｆ】図２６Ａ〜２６Ｈは、ヒト化Ｃｒｉｓ７（ＶＨ３−ＶＬ１）ＩｇＧ４−ＡＡ−Ｎ２９７Ａ  ＳＭＩＰ融合タンパク質、ヒト化Ｃｒｉｓ７（ＶＨ３−ＶＬ２）ＩｇＧ４−ＡＡ−Ｎ２９７Ａ  ＳＭＩＰ融合タンパク質またはＣｒｉｓ７ｍＡｂで２４時間（ｄ１）、４８時間（ｄ２）または７２時間（ｄ３）処理された初期のＰＢＭＣにおける、（Ａ）ＩＦＮγ、（Ｂ）ＩＬ−１０、（Ｃ）ＩＬ−１Ｂ、（Ｄ）ＩＬ−１７、（Ｅ）ＩＬ−４、（Ｆ）ＴＮＦ−α、（Ｇ）ＩＬ−６および（Ｈ）ＩＬ−２のレベルを示している。
【図２６Ｇ】図２６Ａ〜２６Ｈは、ヒト化Ｃｒｉｓ７（ＶＨ３−ＶＬ１）ＩｇＧ４−ＡＡ−Ｎ２９７Ａ  ＳＭＩＰ融合タンパク質、ヒト化Ｃｒｉｓ７（ＶＨ３−ＶＬ２）ＩｇＧ４−ＡＡ−Ｎ２９７Ａ  ＳＭＩＰ融合タンパク質またはＣｒｉｓ７ｍＡｂで２４時間（ｄ１）、４８時間（ｄ２）または７２時間（ｄ３）処理された初期のＰＢＭＣにおける、（Ａ）ＩＦＮγ、（Ｂ）ＩＬ−１０、（Ｃ）ＩＬ−１Ｂ、（Ｄ）ＩＬ−１７、（Ｅ）ＩＬ−４、（Ｆ）ＴＮＦ−α、（Ｇ）ＩＬ−６および（Ｈ）ＩＬ−２のレベルを示している。
【図２６Ｈ】図２６Ａ〜２６Ｈは、ヒト化Ｃｒｉｓ７（ＶＨ３−ＶＬ１）ＩｇＧ４−ＡＡ−Ｎ２９７Ａ  ＳＭＩＰ融合タンパク質、ヒト化Ｃｒｉｓ７（ＶＨ３−ＶＬ２）ＩｇＧ４−ＡＡ−Ｎ２９７Ａ  ＳＭＩＰ融合タンパク質またはＣｒｉｓ７ｍＡｂで２４時間（ｄ１）、４８時間（ｄ２）または７２時間（ｄ３）処理された初期のＰＢＭＣにおける、（Ａ）ＩＦＮγ、（Ｂ）ＩＬ−１０、（Ｃ）ＩＬ−１Ｂ、（Ｄ）ＩＬ−１７、（Ｅ）ＩＬ−４、（Ｆ）ＴＮＦ−α、（Ｇ）ＩＬ−６および（Ｈ）ＩＬ−２のレベルを示している。
【図２７】図２７は、ＩｇＧ２ａ  ｍＡｂ（４１１μｇ）、Ｈ５７ｍＡｂ（５μｇ）、Ｈ５７  Ｎｕｌｌ２  ＳＭＩＰ融合タンパク質（３００μｇ）、Ｈ５７  ｈａｌｆ  ｎｕｌｌ  ＳＭＩＰ融合タンパク質（３００μｇ）またはＨ５７  ＨＭ２  ＳＭＩＰ融合タンパク質（３００μｇ）を静脈内投与した後の経時的な体重の変化を示している。
【図２８】図２８は、図２７で投薬されたようにＩｇＧ２ａ  ｍＡｂ、Ｈ５７ｍＡｂ、Ｈ５７  Ｎｕｌｌ２、Ｈ５７  ｈａｌｆ  ｎｕｌｌまたはＨ５７  ＨＭ２を静脈内投与した２時間後の末梢血Ｔ細胞の濃度を示している。
【図２９】図２９は、図２７で投薬されたようにＩｇＧ２ａ  ｍＡｂ、Ｈ５７ｍＡｂ、Ｈ５７  Ｎｕｌｌ２、Ｈ５７  ｈａｌｆ  ｎｕｌｌまたはＨ５７  ＨＭ２を静脈内投与した７２時間後の末梢Ｔ細胞の濃度を示している。
【図３０Ａ】図３０Ａ〜３０Ｃは、図２７で投薬されたようにＩｇＧ２ａ  ｍＡｂ、Ｈ５７ｍＡｂ、Ｈ５７  Ｎｕｌｌ２、Ｈ５７  ｈａｌｆ  ｎｕｌｌまたはＨ５７  ＨＭ２を静脈内投与した（Ａ）２時間後、（Ｂ）２４時間後および（Ｃ）７２時間後の血清中のＩＬ−２の濃度を示している。
【図３０Ｂ】図３０Ａ〜３０Ｃは、図２７で投薬されたようにＩｇＧ２ａ  ｍＡｂ、Ｈ５７ｍＡｂ、Ｈ５７  Ｎｕｌｌ２、Ｈ５７  ｈａｌｆ  ｎｕｌｌまたはＨ５７  ＨＭ２を静脈内投与した（Ａ）２時間後、（Ｂ）２４時間後および（Ｃ）７２時間後の血清中のＩＬ−２の濃度を示している。
【図３０Ｃ】図３０Ａ〜３０Ｃは、図２７で投薬されたようにＩｇＧ２ａ  ｍＡｂ、Ｈ５７ｍＡｂ、Ｈ５７  Ｎｕｌｌ２、Ｈ５７  ｈａｌｆ  ｎｕｌｌまたはＨ５７  ＨＭ２を静脈内投与した（Ａ）２時間後、（Ｂ）２４時間後および（Ｃ）７２時間後の血清中のＩＬ−２の濃度を示している。
【図３１Ａ】図３１Ａ〜３１Ｃは、図２７で投薬されたようにＩｇＧ２ａ  ｍＡｂ、Ｈ５７ｍＡｂ、Ｈ５７  Ｎｕｌｌ２、Ｈ５７  ｈａｌｆ  ｎｕｌｌまたはＨ５７  ＨＭ２を静脈内投与した（Ａ）２時間後、（Ｂ）２４時間後および（Ｃ）７２時間後の血清中のＩＬ−１０の濃度を示している。
【図３１Ｂ】図３１Ａ〜３１Ｃは、図２７で投薬されたようにＩｇＧ２ａ  ｍＡｂ、Ｈ５７ｍＡｂ、Ｈ５７  Ｎｕｌｌ２、Ｈ５７  ｈａｌｆ  ｎｕｌｌまたはＨ５７  ＨＭ２を静脈内投与した（Ａ）２時間後、（Ｂ）２４時間後および（Ｃ）７２時間後の血清中のＩＬ−１０の濃度を示している。
【図３１Ｃ】図３１Ａ〜３１Ｃは、図２７で投薬されたようにＩｇＧ２ａ  ｍＡｂ、Ｈ５７ｍＡｂ、Ｈ５７  Ｎｕｌｌ２、Ｈ５７  ｈａｌｆ  ｎｕｌｌまたはＨ５７  ＨＭ２を静脈内投与した（Ａ）２時間後、（Ｂ）２４時間後および（Ｃ）７２時間後の血清中のＩＬ−１０の濃度を示している。
【図３２Ａ】図３２Ａ〜３２Ｃは、図２７で投薬されたようにＩｇＧ２ａ  ｍＡｂ、Ｈ５７ｍＡｂ、Ｈ５７  Ｎｕｌｌ２、Ｈ５７  ｈａｌｆ  ｎｕｌｌまたはＨ５７  ＨＭ２を静脈内投与した（Ａ）２時間後、（Ｂ）２４時間後および（Ｃ）７２時間後の血清中のＩＰ−１０の濃度を示している。
【図３２Ｂ】図３２Ａ〜３２Ｃは、図２７で投薬されたようにＩｇＧ２ａ  ｍＡｂ、Ｈ５７ｍＡｂ、Ｈ５７  Ｎｕｌｌ２、Ｈ５７  ｈａｌｆ  ｎｕｌｌまたはＨ５７  ＨＭ２を静脈内投与した（Ａ）２時間後、（Ｂ）２４時間後および（Ｃ）７２時間後の血清中のＩＰ−１０の濃度を示している。
【図３２Ｃ】図３２Ａ〜３２Ｃは、図２７で投薬されたようにＩｇＧ２ａ  ｍＡｂ、Ｈ５７ｍＡｂ、Ｈ５７  Ｎｕｌｌ２、Ｈ５７  ｈａｌｆ  ｎｕｌｌまたはＨ５７  ＨＭ２を静脈内投与した（Ａ）２時間後、（Ｂ）２４時間後および（Ｃ）７２時間後の血清中のＩＰ−１０の濃度を示している。
【図３３Ａ】図３３Ａ〜３３Ｃは、図２７で投薬されたようにＩｇＧ２ａ  ｍＡｂ、Ｈ５７ｍＡｂ、Ｈ５７  Ｎｕｌｌ２、Ｈ５７  ｈａｌｆ  ｎｕｌｌまたはＨ５７  ＨＭ２を静脈内投与した（Ａ）２時間後、（Ｂ）２４時間後および（Ｃ）７２時間後の血清中のＴＮＦαの濃度を示している。
【図３３Ｂ】図３３Ａ〜３３Ｃは、図２７で投薬されたようにＩｇＧ２ａ  ｍＡｂ、Ｈ５７ｍＡｂ、Ｈ５７  Ｎｕｌｌ２、Ｈ５７  ｈａｌｆ  ｎｕｌｌまたはＨ５７  ＨＭ２を静脈内投与した（Ａ）２時間後、（Ｂ）２４時間後および（Ｃ）７２時間後の血清中のＴＮＦαの濃度を示している。
【図３３Ｃ】図３３Ａ〜３３Ｃは、図２７で投薬されたようにＩｇＧ２ａ  ｍＡｂ、Ｈ５７ｍＡｂ、Ｈ５７  Ｎｕｌｌ２、Ｈ５７  ｈａｌｆ  ｎｕｌｌまたはＨ５７  ＨＭ２を静脈内投与した（Ａ）２時間後、（Ｂ）２４時間後および（Ｃ）７２時間後の血清中のＴＮＦαの濃度を示している。
【図３４Ａ】図３４Ａ〜３４Ｃは、図２７で投薬されたようにＩｇＧ２ａ  ｍＡｂ、Ｈ５７ｍＡｂ、Ｈ５７  Ｎｕｌｌ２、Ｈ５７  ｈａｌｆ  ｎｕｌｌまたはＨ５７  ＨＭ２を静脈内投与した（Ａ）２時間後、（Ｂ）２４時間後および（Ｃ）７２時間後の血清中のＩＬ−４の濃度を示している。
【図３４Ｂ】図３４Ａ〜３４Ｃは、図２７で投薬されたようにＩｇＧ２ａ  ｍＡｂ、Ｈ５７ｍＡｂ、Ｈ５７  Ｎｕｌｌ２、Ｈ５７  ｈａｌｆ  ｎｕｌｌまたはＨ５７  ＨＭ２を静脈内投与した（Ａ）２時間後、（Ｂ）２４時間後および（Ｃ）７２時間後の血清中のＩＬ−４の濃度を示している。
【図３４Ｃ】図３４Ａ〜３４Ｃは、図２７で投薬されたようにＩｇＧ２ａ  ｍＡｂ、Ｈ５７ｍＡｂ、Ｈ５７  Ｎｕｌｌ２、Ｈ５７  ｈａｌｆ  ｎｕｌｌまたはＨ５７  ＨＭ２を静脈内投与した（Ａ）２時間後、（Ｂ）２４時間後および（Ｃ）７２時間後の血清中のＩＬ−４の濃度を示している。
【図３５Ａ】図３５Ａ〜３５Ｃは、図２７で投薬されたようにＩｇＧ２ａ  ｍＡｂ、Ｈ５７ｍＡｂ、Ｈ５７  Ｎｕｌｌ２、Ｈ５７  ｈａｌｆ  ｎｕｌｌまたはＨ５７  ＨＭ２を静脈内投与した（Ａ）２時間後、（Ｂ）２４時間後および（Ｃ）７２時間後の血清中のＭＣＰ−１の濃度を示している。
【図３５Ｂ】図３５Ａ〜３５Ｃは、図２７で投薬されたようにＩｇＧ２ａ  ｍＡｂ、Ｈ５７ｍＡｂ、Ｈ５７  Ｎｕｌｌ２、Ｈ５７  ｈａｌｆ  ｎｕｌｌまたはＨ５７  ＨＭ２を静脈内投与した（Ａ）２時間後、（Ｂ）２４時間後および（Ｃ）７２時間後の血清中のＭＣＰ−１の濃度を示している。
【図３５Ｃ】図３５Ａ〜３５Ｃは、図２７で投薬されたようにＩｇＧ２ａ  ｍＡｂ、Ｈ５７ｍＡｂ、Ｈ５７  Ｎｕｌｌ２、Ｈ５７  ｈａｌｆ  ｎｕｌｌまたはＨ５７  ＨＭ２を静脈内投与した（Ａ）２時間後、（Ｂ）２４時間後および（Ｃ）７２時間後の血清中のＭＣＰ−１の濃度を示している。
【図３６Ａ】図３６Ａ〜３６Ｃは、図２７で投薬されたようにＩｇＧ２ａ  ｍＡｂ、Ｈ５７ｍＡｂ、Ｈ５７  Ｎｕｌｌ２、Ｈ５７  ｈａｌｆ  ｎｕｌｌまたはＨ５７  ＨＭ２を静脈内投与した（Ａ）２時間後、（Ｂ）２４時間後および（Ｃ）７２時間後の血清中のＫＣの濃度を示している。
【図３６Ｂ】図３６Ａ〜３６Ｃは、図２７で投薬されたようにＩｇＧ２ａ  ｍＡｂ、Ｈ５７ｍＡｂ、Ｈ５７  Ｎｕｌｌ２、Ｈ５７  ｈａｌｆ  ｎｕｌｌまたはＨ５７  ＨＭ２を静脈内投与した（Ａ）２時間後、（Ｂ）２４時間後および（Ｃ）７２時間後の血清中のＫＣの濃度を示している。
【図３６Ｃ】図３６Ａ〜３６Ｃは、図２７で投薬されたようにＩｇＧ２ａ  ｍＡｂ、Ｈ５７ｍＡｂ、Ｈ５７  Ｎｕｌｌ２、Ｈ５７  ｈａｌｆ  ｎｕｌｌまたはＨ５７  ＨＭ２を静脈内投与した（Ａ）２時間後、（Ｂ）２４時間後および（Ｃ）７２時間後の血清中のＫＣの濃度を示している。
【図３７Ａ】図３７Ａ〜３７Ｃは、ＩｇＧ２ａ、Ｈ５７ｍＡｂおよびＨ５７  Ｎｕｌｌ２、ｈａｌｆ  ｎｕｌｌおよびＨＭ２  ＳＭＩＰを静脈内投与した２時間後（Ａ）、２４時間後（Ｂ）および７２時間後（Ｃ）のＩＬ−１７の濃度を示している。
【図３７Ｂ】図３７Ａ〜３７Ｃは、ＩｇＧ２ａ、Ｈ５７ｍＡｂおよびＨ５７  Ｎｕｌｌ２、ｈａｌｆ  ｎｕｌｌおよびＨＭ２  ＳＭＩＰを静脈内投与した２時間後（Ａ）、２４時間後（Ｂ）および７２時間後（Ｃ）のＩＬ−１７の濃度を示している。
【図３７Ｃ】図３７Ａ〜３７Ｃは、ＩｇＧ２ａ、Ｈ５７ｍＡｂおよびＨ５７  Ｎｕｌｌ２、ｈａｌｆ  ｎｕｌｌおよびＨＭ２  ＳＭＩＰを静脈内投与した２時間後（Ａ）、２４時間後（Ｂ）および７２時間後（Ｃ）のＩＬ−１７の濃度を示している。
【図３８Ａ】図３８Ａ〜３８Ｃは、図２７で投薬されたようにＩｇＧ２ａ  ｍＡｂ、Ｈ５７ｍＡｂ、Ｈ５７  Ｎｕｌｌ２、Ｈ５７  ｈａｌｆ  ｎｕｌｌまたはＨ５７  ＨＭ２を静脈内投与した（Ａ）２時間後、（Ｂ）２４時間後および（Ｃ）７２時間後の血清中のＩＬ−５の濃度を示している。
【図３８Ｂ】図３８Ａ〜３８Ｃは、図２７で投薬されたようにＩｇＧ２ａ  ｍＡｂ、Ｈ５７ｍＡｂ、Ｈ５７  Ｎｕｌｌ２、Ｈ５７  ｈａｌｆ  ｎｕｌｌまたはＨ５７  ＨＭ２を静脈内投与した（Ａ）２時間後、（Ｂ）２４時間後および（Ｃ）７２時間後の血清中のＩＬ−５の濃度を示している。
【図３８Ｃ】図３８Ａ〜３８Ｃは、図２７で投薬されたようにＩｇＧ２ａ  ｍＡｂ、Ｈ５７ｍＡｂ、Ｈ５７  Ｎｕｌｌ２、Ｈ５７  ｈａｌｆ  ｎｕｌｌまたはＨ５７  ＨＭ２を静脈内投与した（Ａ）２時間後、（Ｂ）２４時間後および（Ｃ）７２時間後の血清中のＩＬ−５の濃度を示している。
【図３９Ａ】図３９Ａおよび３９Ｂは、Ｈ５７−ＨＭ２およびＨ５７  ｈａｌｆ  ｎｕｌｌについての時間に対する平均血清濃度のグラフである。結果は、観察されたデータセットおよびＷｉｎＮｏｎＬｉｎＴＭソフトウェアによって計算された予測値として表されている。Ｒｓｑ値およびＲｓｑ調整値は、ＨＬ＿Ｌａｍｂｄａ  ｚの推定において使用された時点（６．６および４０．７時間）の数値に対する調整の前および後の、末期排泄相（ｔｅｒｍｉｎａｌ  ｅｌｉｍｉｎａｔｉｏｎ  ｐｈａｓｅ）についての適合度統計量である。
【図３９Ｂ】図３９Ａおよび３９Ｂは、Ｈ５７−ＨＭ２およびＨ５７  ｈａｌｆ  ｎｕｌｌについての時間に対する平均血清濃度のグラフである。結果は、観察されたデータセットおよびＷｉｎＮｏｎＬｉｎＴＭソフトウェアによって計算された予測値として表されている。Ｒｓｑ値およびＲｓｑ調整値は、ＨＬ＿Ｌａｍｂｄａ  ｚの推定において使用された時点（６．６および４０．７時間）の数値に対する調整の前および後の、末期排泄相（ｔｅｒｍｉｎａｌ  ｅｌｉｍｉｎａｔｉｏｎ  ｐｈａｓｅ）についての適合度統計量である。
【図４０】図４０は、Ｈ５７−ＨＭ２またはＨ５７  Ｎｕｌｌ２（各２００μｇ）を静脈内投与した１５分後、２時間後、６時間後、２４時間後および４８時間後の血清中のＧ−ＣＳＦの濃度を示している。
【図４１】図４１は、Ｈ５７−ＨＭ２またはＨ５７  Ｎｕｌｌ２（各２００μｇ）を静脈内投与した１５分後、２時間後、６時間後、２４時間後および４８時間後の血清中のＩＦＮ−γの濃度を示している。
【図４２】図４２は、Ｈ５７−ＨＭ２またはＨ５７  Ｎｕｌｌ２（各２００μｇ）を静脈内投与した１５分後、２時間後、６時間後、２４時間後および４８時間後の血清中のＩＬ−２の濃度を示している。
【図４３】図４３は、Ｈ５７−ＨＭ２またはＨ５７  Ｎｕｌｌ２（各２００μｇ）を静脈内投与した１５分後、２時間後、６時間後、２４時間後および４８時間後の血清中のＩＬ−５の濃度を示している。
【図４４】図４４は、Ｈ５７−ＨＭ２またはＨ５７  Ｎｕｌｌ２（各２００μｇ）を静脈内投与した１５分後、２時間後、６時間後、２４時間後および４８時間後の血清中のＩＬ−６の濃度を示している。
【図４５】図４５は、Ｈ５７−ＨＭ２またはＨ５７  Ｎｕｌｌ２（各２００μｇ）を静脈内投与した１５分後、２時間後、６時間後、２４時間後および４８時間後の血清中のＩＬ−１０の濃度を示している。
【図４６】図４６は、Ｈ５７−ＨＭ２またはＨ５７  Ｎｕｌｌ２（各２００μｇ）を静脈内投与した１５分後、２時間後、６時間後、２４時間後および４８時間後の血清中のＩＬ−１７の濃度を示している。
【図４７】図４７は、Ｈ５７−ＨＭ２またはＨ５７  Ｎｕｌｌ２（各２００μｇ）を静脈内投与した１５分後、２時間後、６時間後、２４時間後および４８時間後の血清中のＩＰ−１０の濃度を示している。
【図４８】図４８は、Ｈ５７−ＨＭ２またはＨ５７  Ｎｕｌｌ２（各２００μｇ）を静脈内投与した１５分後、２時間後、６時間後、２４時間後および４８時間後の血清中のＫＣの濃度を示している。
【図４９】図４９は、Ｈ５７−ＨＭ２またはＨ５７  Ｎｕｌｌ２（各２００μｇ）を静脈内投与した１５分後、２時間後、６時間後、２４時間後および４８時間後の血清中のＭＣＰ−１の濃度を示している。
【図５０】図５０は、応答物細胞をＨ５７  Ｎｕｌｌ２、Ｈ５７  ｈａｌｆ  ｎｕｌｌ、Ｈ５７−ＨＭ２、マウスＩｇＧ２ａ  ｍＡｂまたはＨ５７ｍＡｂで処理したことに起因する、活性化されたＴ細胞のパーセンテージを示している。
【図５１】図５１は、応答物細胞をＨ５７  Ｎｕｌｌ２、Ｈ５７  ｈａｌｆ  ｎｕｌｌ、Ｈ５７−ＨＭ２またはＨ５７ｍＡｂで処理したことに起因する、活性化されたＴ細胞のパーセンテージ（（Ｒ＋Ｓ）−無処理＝１００％に正規化されたパーセンテージ）を示している。
【図５２】図５２は、Ｈ５７  Ｎｕｌｌ２、Ｈ５７  ｈａｌｆ  ｎｕｌｌ、Ｈ５７−ＨＭ２、マウスＩｇＧ２ａ  ｍＡｂ、Ｈ５７ｍＡｂまたは２Ｃ１１ｍＡｂの処理によって活性化された、ＣｏｎＡで刺激されたＴ細胞のパーセンテージを示している。
【手続補正３】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
アミノ末端からカルボキシ末端に向かって：
（ａ）ＴＣＲ複合体またはその構成要素に特異的に結合する結合ドメイン、
（ｂ）リンカーポリペプチド、および
（ｃ）免疫グロブリンＣＨ３領域ポリペプチド
を含む一本鎖融合タンパク質であって、ここで、該融合タンパク質は、サイトカイン放出を誘導しないか、または最小限の検出可能なサイトカイン放出を誘導する、一本鎖融合タンパク質。
【請求項２】
前記リンカーポリペプチドに対してカルボキシ末端側に、かつ前記免疫グロブリンＣＨ３領域ポリペプチドに対してアミノ末端側に位置する免疫グロブリンＣＨ２領域ポリペプチドをさらに含む、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項３】
前記免疫グロブリンＣＨ２領域ポリペプチドが：
（ｉ）２９７位のアスパラギンにおけるアミノ酸置換、および２３４から２３８位における１つ以上の置換または欠失；
（ｉｉ）２３４から２３８位における１つ以上の置換または欠失、および２５３、３１０、３１８、３２０、３２２または３３１位における少なくとも１つの置換；または
（ｉｉｉ）２９７位のアスパラギンにおけるアミノ酸置換、２３４から２３８位における１つ以上の置換または欠失、および２５３、３１０、３１８、３２０、３２２または３３１位における少なくとも１つの置換
を含み、ここで、
該ＣＨ２領域は、ヒトＩｇＧ、ヒトＩｇＤまたはマウスＩｇＧ２ａに由来する、請求項２に記載の融合タンパク質。
【請求項４】
前記ＴＣＲ複合体またはその構成要素が、ＴＣＲα、ＴＣＲβまたはＣＤ３εである、請求項１〜３に記載の融合タンパク質。
【請求項５】
前記結合ドメインが、前記ＴＣＲ複合体またはその構成要素に特異的に結合し、かつ配列番号２５８〜２６４からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の融合タンパク質。
【請求項６】
前記リンカーが、野生型ヒトＩｇＧ１ヒンジ、少なくとも１つのシステインが変異したヒトＩｇＧ１ヒンジ、および野生型マウスＩＧＨＧ２ｃヒンジからなる群より選択される免疫グロブリンヒンジ領域ポリペプチドである、請求項１〜５のいずれか一項に記載の融合タンパク質。
【請求項７】
前記免疫グロブリンヒンジ領域ポリペプチドが、配列番号２１２〜２１８、３００、３７９〜４３４、および配列番号１０のアミノ酸３〜１７からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む、請求項６に記載の融合タンパク質。
【請求項８】
２９７位のアスパラギンが、アラニンに置換される、請求項３〜７のいずれか１項に記載の融合タンパク質。
【請求項９】
前記免疫グロブリンＣＨ２領域ポリペプチドが：
（ｉ）２９７位のアスパラギンにおけるアミノ酸置換、および２３４、２３５、２３６または２３７位における１つのアミノ酸置換；
（ｉｉ）２９７位のアスパラギンにおけるアミノ酸置換、および２３４〜２３７位の２つにおけるアミノ酸置換；
（ｉｉｉ）２９７位のアスパラギンにおけるアミノ酸置換、および２３４〜２３７位の３つにおけるアミノ酸置換；
（ｉｖ）２９７位のアスパラギンにおけるアミノ酸置換、２３４、２３５および２３７位におけるアミノ酸置換、ならびに２３６位におけるアミノ酸欠失；
（ｖ）２３４〜２３７位の３つにおけるアミノ酸置換、ならびに３１８、３２０および３２２位におけるアミノ酸置換；または
（ｖｉ）２３４〜２３７位の３つにおけるアミノ酸置換、２３６位におけるアミノ酸欠失、ならびに３１８、３２０および３２２位におけるアミノ酸置換
を含む、請求項３〜８のいずれか１項に記載の融合タンパク質。
【請求項１０】
前記免疫グロブリンＣＨ２領域ポリペプチドが、配列番号１０２〜１０４、７５および３７５〜３７８からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む、請求項２〜９のいずれか１項に記載の融合タンパク質。
【請求項１１】
前記免疫グロブリンＣＨ２領域ポリペプチドおよび前記免疫グロブリンＣＨ３領域ポリペプチドが、ヒトＩｇＧ２  ＣＨ２領域ポリペプチドおよびヒトＩｇＧ２  ＣＨ３領域ポリペプチド、またはヒトＩｇＧ４  ＣＨ２領域ポリペプチドおよびヒトＩｇＧ４  ＣＨ３領域ポリペプチドである、請求項２〜８のいずれか１項に記載の融合タンパク質。
【請求項１２】
前記融合タンパク質が、免疫グロブリンＣＨ２領域ポリペプチドを含まない、請求項１、４〜７のいずれか１項に記載の融合タンパク質。
【請求項１３】
配列番号１１〜１６、７４、１０１および３０７〜３０９からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む、請求項１〜７のいずれか１項に記載の融合タンパク質。
【請求項１４】
配列番号８０〜９７、２６５〜２９９、３１１、３１３、３１５、３１７、３１９、３２１、３２３、３２５および３２７からなる群より選択されるアミノ酸配列；または、各々最初の２２アミノ酸のリーダー配列を有しない配列番号２３４、２３６、２３８、２４０、３０４および３０６からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項１５】
前記融合タンパク質がさらに、Ｔ細胞を活性化させないか、または最小限に活性化させる、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の融合タンパク質。
【請求項１６】
前記融合タンパク質がさらに、カルシウム流動の誘導、Ｔ細胞レセプターシグナル伝達経路内の分子のリン酸化の誘導、同種抗原に対するＴ細胞応答の阻止、抗原に対するメモリーＴ細胞応答の阻止および前記ＴＣＲ複合体の下方調節からなる群より選択される活性のうちの少なくとも１つを有する、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の融合タンパク質。
【請求項１７】
アミノ末端からカルボキシ末端に向かって：
（ａ）配列番号２６３のアミノ酸配列を含む一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）結合ドメインポリペプチド；
（ｂ）配列番号１０のアミノ酸３〜１７を含む免疫グロブリンヒンジ領域ポリペプチド；および
（ｃ）免疫グロブリンＣＨ３領域ポリペプチド
を含む、一本鎖融合タンパク質。
【請求項１８】
前記ヒンジ領域ポリペプチドに対してカルボキシ末端側に、かつ前記免疫グロブリンＣＨ３領域ポリペプチドに対してアミノ末端側に位置する免疫グロブリンＣＨ２をさらに含み、ここで、該免疫グロブリンＣＨ２領域ポリペプチドは、２３６位におけるアミノ酸欠失、およびアラニンによるアミノ酸Ｆ２３４、Ｌ２３５、Ｇ２３７、Ｅ３１８、Ｋ３２０およびＫ３２２の置換を除いてほかは、配列番号６８のアミノ酸配列を含む、請求項１７に記載の融合タンパク質。
【請求項１９】
前記免疫グロブリンＣＨ３領域ポリペプチドが、配列番号６９のアミノ酸配列を含む、請求項１７または１８に記載の融合タンパク質。
【請求項２０】
前記ヒンジ領域ポリペプチドに対してカルボキシ末端側に、かつ前記免疫グロブリンＣＨ３領域ポリペプチドに対してアミノ末端側に位置する免疫グロブリンＣＨ２をさらに含み、ここで、該免疫グロブリンＣＨ２領域ポリペプチドは、２３６位におけるアミノ酸欠失、およびアラニンによるアミノ酸Ｆ２３４、Ｌ２３５、Ｇ２３７およびＮ２９７の置換を除いてほかは、配列番号６８のアミノ酸配列を含む、請求項１７に記載の融合タンパク質。
【請求項２１】
前記ＣＨ２領域ポリペプチドおよび前記ＣＨ３領域ポリペプチドが、配列番号１４のアミノ酸配列を含む、請求項１７または２０に記載の融合タンパク質。
【請求項２２】
請求項１〜２１のいずれか１項に記載の融合タンパク質をコードする、ポリヌクレオチド。
【請求項２３】
発現制御配列に作動可能に連結された請求項２２に記載のポリヌクレオチドを含む、発現ベクター。
【請求項２４】
請求項１〜２１のいずれか１項に記載の融合タンパク質、請求項２２に記載のポリヌクレオチド、または請求項２３に記載のベクター、および薬学的に許容可能なキャリア、希釈剤または賦形剤を含む、組成物。
【請求項２５】
請求項２４に記載の薬学的組成物を含む、単位用量形態。
【請求項２６】
固形臓器移植レシピエントにおける固形臓器移植片の拒絶を減少させるための、請求項２４に記載の組成物。
【請求項２７】
クローン病、潰瘍性大腸炎、真性糖尿病、喘息および関節炎からなる群より選択される自己免疫疾患を処置するための、請求項２４に記載の組成物。
【請求項２８】
ＴＣＲ複合体またはその構成要素に特異的に結合する結合ドメインを含むタンパク質によって誘導されたサイトカイン放出をインビトロで検出するための方法であって：
（ａ）マイトジェンで刺激されたＴ細胞を準備する工程、
（ｂ）工程（ａ）の刺激されたＴ細胞を、ＴＣＲ複合体またはその構成要素に特異的に結合する結合ドメインを含む該タンパク質で処理する工程、および
（ｃ）工程（ｂ）において処理された、該刺激されたＴ細胞からのサイトカインの放出を検出する工程
を包含する、方法。
【請求項２９】
ＴＣＲ複合体またはその構成要素に特異的に結合する結合ドメインを含むタンパク質によって誘導されたＴ細胞活性化をインビトロで検出するための方法であって：
（ａ）マイトジェンで刺激されたＴ細胞を準備する工程、
（ｂ）工程（ａ）の刺激されたＴ細胞を、ＴＣＲ複合体またはその構成要素に特異的に結合する結合ドメインを含む該タンパク質で処理する工程、および
（ｃ）工程（ｂ）において処理された、該刺激されたＴ細胞の活性化を検出する工程
を包含する、方法。
【請求項３０】
ＴＣＲ複合体またはその構成要素に特異的に結合する結合ドメインを含む前記タンパク質が、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の融合タンパク質、または抗体である、請求項２８または２９に記載の方法。
【手続補正４】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】全図
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１Ａ】
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【図１１Ｂ】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５Ａ】
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【図２５Ｂ】
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【図２６Ａ】
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【図２６Ｂ】
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【図２６Ｃ】
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【図２６Ｄ】
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【図２６Ｅ】
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【図２６Ｆ】
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【図２６Ｇ】
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【図２６Ｈ】
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【図２７】
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【図２８】
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【図２９】
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【図３０Ａ】
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【図３０Ｂ】
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【図３０Ｃ】
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【図３１Ａ】
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【図３１Ｂ】
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【図３１Ｃ】
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【図３２Ａ】
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【図３２Ｂ】
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【図３２Ｃ】
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【図３３Ａ】
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【図３３Ｂ】
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【図３３Ｃ】
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【図３４Ａ】
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【図３４Ｂ】
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【図３４Ｃ】
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【図３５Ａ】
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【図３５Ｂ】
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【図３５Ｃ】
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【図３８Ａ】
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【図３８Ｂ】
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【図３８Ｃ】
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【図３９Ａ】
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【図３９Ｂ】
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【図４０】
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【図４１】
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【図４２】
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【図４３】
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【図４４】
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【図４５】
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【図４６】
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【図４７】
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【図４８】
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【図４９】
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【図５０】
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【図５１】
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【図５２】
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【図３６Ａ】
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【図３６Ｂ】
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【図３６Ｃ】
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【図３７Ａ】
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【図３７Ｂ】
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【図３７Ｃ】
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