【手続補正書】
【提出日】平成26年8月13日(2014.8.13)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
配列番号６８９，２５４，２８９，２９０，３７４，３７５，５０７，５３３，５８７，６０５，６２４，６４２，６５８，６９９，７０２，７０３，７０４，７１４，７３４，および７４２からなる群より選択されるアミノ酸配列と、少なくとも６０％同一のアミノ酸配列を含むペプチド模倣大環状分子。
【請求項２】
配列番号６８９，２５４，２８９，２９０，３７４，３７５，５０７，５３３，５８７，６０５，６２４，６４２，６５８，６９９，７０２，７０３，７０４，７１４，７３４，および７４２からなる群より選択されるアミノ酸配列と、少なくとも８０％同一のアミノ酸配列を含む、請求項１に記載のペプチド模倣大環状分子。
【請求項３】
配列番号６８９，２５４，２８９，２９０，３７４，３７５，５０７，５３３，５８７，６０５，６２４，６４２，６５８，６９９，７０２，７０３，７０４，７１４，７３４，および７４２からなる群より選択されるアミノ酸配列と、少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、請求項１に記載のペプチド模倣大環状分子。
【請求項４】
配列番号６８９，２５４，２８９，２９０，３７４，３７５，５０７，５３３，５８７，６０５，６２４，６４２，６５８，６９９，７０２，７０３，７０４，７１４，７３４，および７４２からなる群より選択されるアミノ酸配列と、少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む、請求項１に記載のペプチド模倣大環状分子。
【請求項５】
配列番号６８９，２５４，２８９，２９０，３７４，３７５，５０７，５３３，５８７，６０５，６２４，６４２，６５８，６９９，７０２，７０３，７０４，７１４，７３４，および７４２からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む、請求項１に記載のペプチド模倣大環状分子。
【請求項６】
該ペプチド模倣大環状分子がヘリックスを含む、請求項１のペプチド模倣大環状分子。
【請求項７】
該ペプチド模倣大環状分子がα−ヘリックスを含む、請求項１のペプチド模倣大環状分子。
【請求項８】
該ペプチド模倣大環状分子がα，α−二置換アミノ酸を含む、請求項１のペプチド模倣大環状分子。
【請求項９】
該ペプチド模倣大環状分子が少なくとも２つのアミノ酸のα位同士を連結する架橋剤を含む、請求項１のペプチド模倣大環状分子。
【請求項１０】
前記２つのアミノ酸の少なくとも１つがα，α−二置換アミノ酸である、請求項９のペプチド模倣大環状分子。
【請求項１１】
該ペプチド模倣大環状分子が式
【化１】
2013535514.tif 000001
を有し、
式中、
Ａ、Ｃ、Ｄ、及びＥはそれぞれ独立して、天然又は非天然のアミノ酸であり、かつ、Ｄ及びＥは独立してキャッピング基を含んでいてもよく；
Ｂは、天然若しくは非天然のアミノ酸、アミノ酸類似体、
【化２】
2013535514.tif 000002
、［−ＮＨ−Ｌ３−ＣＯ−］、［−ＮＨ−Ｌ３−ＳＯ２−］、又は［−ＮＨ−Ｌ３−］であり；
Ｒ１及びＲ２は独立して、非置換又はハロ置換されている、−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロアルキル、又はヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ３は、Ｒ５で置換されていてもよい、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアルキルアルキル、シクロアリール、又はヘテロシクロアリールであり；
Ｌは式−Ｌ１−Ｌ２−の大環状分子形成リンカーであり；
Ｌ１及びＬ２は独立してアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、シクロアリーレン、ヘテロシクロアリーレン、又は［−Ｒ４−Ｋ−Ｒ４−］ｎであり、それぞれはＲ５で置換されていてもよく；
Ｒ４はそれぞれアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、アリーレン、又はヘテロアリーレンであり；
Ｋはそれぞれ、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、ＣＯ、ＣＯ２、又はＣＯＮＲ３であり；
Ｒ５はそれぞれ独立して、ハロゲン、アルキル、−ＯＲ６、−Ｎ（Ｒ６）２、−ＳＲ６、−ＳＯＲ６、−ＳＯ２Ｒ６、−ＣＯ２Ｒ６、蛍光性部分、放射性同位元素又は治療薬であり；
Ｒ６はそれぞれ独立して、−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、蛍光性部分、放射性同位元素又は治療薬であり；
Ｒ７は、Ｒ５で置換されていてもよい、−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール若しくはヘテロシクロアリール、又はＤ残基を有する環状構造の一部であり；
Ｒ８は、Ｒ５で置換されていてもよい、−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール若しくはヘテロシクロアリール、又はＥ残基を有する環状構造の一部であり；
ｖ及びｗは独立して１〜１０００の整数であり；
ｕは１〜１０の整数であり；
ｘ、ｙ及びｚは独立して０〜１０の整数であり；並びに
ｎは１〜５の整数である、請求項１〜１０のいずれか１項に記載のペプチド模倣大環状分子。
【請求項１２】
Ｌがチオエーテル又はトリアゾールを含まない、請求項１１のペプチド模倣大環状分子。
【請求項１３】
該ペプチド模倣大環状分子が、該ペプチド模倣大環状分子内の第一のアミノ酸の主鎖のアミノ基と第二のアミノ酸を連結する架橋剤を含む、請求項１のペプチド模倣大環状分子。
【請求項１４】
該ペプチド模倣大環状分子が式（ＩＶ）又は（ＩＶａ）
【化３】
2013535514.tif 000003
【化４】
2013535514.tif 000004
を有し、
式中、
Ａ、Ｃ、Ｄ、及びＥはそれぞれ独立して天然又は非天然のアミノ酸であり、かつ、Ｄ及びＥは独立してキャッピング基を含んでいてもよく；
Ｂは天然若しくは非天然アミノ酸、アミノ酸類似体、
【化５】
2013535514.tif 000005
、［−ＮＨ−Ｌ３−ＣＯ−］、［−ＮＨ−Ｌ３−ＳＯ２−］、又は［−ＮＨ−Ｌ３−］であり；
Ｒ１及びＲ２は独立して、非置換又はハロ置換されている、−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロアルキル若しくはヘテロシクロアルキル、又はＥ残基を有する環状構造の一部であり；
Ｒ３は、Ｒ５で置換されていてもよい、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアルキルアルキル、シクロアリール、又はヘテロシクロアリールであり；
Ｌ１及びＬ２は独立して、アルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、シクロアリーレン、ヘテロシクロアリーレン、又は［−Ｒ４−Ｋ−Ｒ４−］ｎであり、それぞれはＲ５で置換されていてもよく；
Ｒ４はそれぞれ、アルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、アリーレン、又はヘテロアリーレンであり；
Ｋはそれぞれ、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、ＣＯ、ＣＯ２、又はＣＯＮＲ３であり；
Ｒ５はそれぞれ独立して、ハロゲン、アルキル、−ＯＲ６、−Ｎ（Ｒ６）２、−ＳＲ６、−ＳＯＲ６、−ＳＯ２Ｒ６、−ＣＯ２Ｒ６、蛍光性部分、放射性同位元素又は治療薬であり；
Ｒ６はそれぞれ独立して、−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、蛍光性部分、放射性同位元素又は治療薬であり；
Ｒ７は、Ｒ５で置換されていてもよい、−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、又はヘテロシクロアリールであり、
ｖ及びｗは独立して１〜１０００の整数であり；
ｕは１〜１０の整数であり；
ｘ、ｙ及びｚは独立して０〜１０の整数であり；並びに
ｎは１〜５の整数である、請求項１３のペプチド模倣大環状分子。
【請求項１５】
Ｌ１及びＬ２は、単独でも或いは組み合わせても、チオエーテル又はトリアゾールを含まない、請求項１４の式ＩＶまたはＩＶａのペプチド模倣大環状分子。
【請求項１６】
Ｌ１及びＬ２が独立してアルキレン、アルケニレン又はアルキニレンである、請求項１４の式ＩＶまたはＩＶａのペプチド模倣大環状分子。
【請求項１７】
Ｌ１及びＬ２が独立してＣ３−Ｃ１０アルキレン又はアルケニレンである、請求項１４の式ＩＶまたはＩＶａのペプチド模倣大環状分子。
【請求項１８】
Ｌ１及びＬ２が独立してＣ３−Ｃ６アルキレン又はアルケニレンである、請求項１４の式ＩＶまたはＩＶａのペプチド模倣大環状分子。
【請求項１９】
Ｒ１及びＲ２がＨである、請求項１４の式ＩＶまたはＩＶａのペプチド模倣大環状分子。
【請求項２０】
Ｒ１及びＲ２が独立してアルキルである、請求項１４の式ＩＶまたはＩＶａのペプチド模倣大環状分子。
【請求項２１】
Ｒ１及びＲ２がメチルである、請求項１４の式ＩＶまたはＩＶａのペプチド模倣大環状分子。
【請求項２２】
対象の癌の治療に使用される、請求項１〜２１のいずれか１項に記載のペプチド模倣大環状分子。
【請求項２３】
対象中のｐ５３及び／又はＨＤＭ２及び／又はＨＤＭＸの活性の調節に使用される、請求項１〜２１のいずれか１項に記載のペプチド模倣大環状分子。
【請求項２４】
対象中のｐ５３とＨＤＭ２及び／又はｐ５３とＨＤＭＸタンパク質間の相互作用を拮抗するために使用される、請求項１〜２１のいずれか１項に記載のペプチド模倣大環状分子。
【請求項２５】
配列番号６８９のアミノ酸配列を含む、請求項１〜５のいずれか１項に記載のペプチド模倣大環状分子。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２０】
［００１１］本発明の新規な特徴を添付の特許請求で具体的に説明する。本発明の特徴および利点は、本発明の原理を利用した例示的な態様について述べる詳細な説明、及び添付の図面を参照することにより、さらによく理解される。
［００１２］
【図１】図１はＦｍｏｃ−Ｍｅ−６−クロロ−トリプトファン及びＦｍｏｃ−６−クロロ−トリプトファンの合成を表している。
【図２】［００１３］図２はＭｅ−６−クロロ−（Ｂｏｃ）トリプトファン−Ｎｉ−Ｓ−ＢＰＢのＬＣ−ＭＳの結果を示している。
【図３】［００１４］図３はＭｅ−６−クロロ−（Ｂｏｃ）トリプトファン−Ｎｉ−Ｓ−ＢＰＢの１Ｈ−ＮＭＲのスペクトルを示している。
【図４】［００１５］図４はＦｍｏｃ−Ｍｅ−６−クロロ−（Ｂｏｃ）トリプトファンのＬＣ−ＭＳの結果を示している。
【図５】［００１６］図５はＦｍｏｃ−Ｍｅ−６−クロロ−（Ｂｏｃ）トリプトファンの１Ｈ−ＮＭＲのスペクトルを示している。
【図６ａ】［００１７］図６ａは、具体的な本発明のペプチド模倣大環状分子の細胞生死判別試験、競合的ＥＬＩＳＡ試験、ＧＲＩＰ試験、Ｋｄデータ、ｐ２１活性化試験、蛍光偏光競合結合の結果、及び環状らせん構造のデータを記述している。図６ａ−６ｆに示される配列は示される順に配列番号３８〜１７８に各々対応する。
【図６ｂ】図６ｂは、具体的な本発明のペプチド模倣大環状分子の細胞生死判別試験、競合的ＥＬＩＳＡ試験、ＧＲＩＰ試験、Ｋｄデータ、ｐ２１活性化試験、蛍光偏光競合結合の結果、及び環状らせん構造のデータを記述している。
【図６ｃ】図６ｃは、具体的な本発明のペプチド模倣大環状分子の細胞生死判別試験、競合的ＥＬＩＳＡ試験、ＧＲＩＰ試験、Ｋｄデータ、ｐ２１活性化試験、蛍光偏光競合結合の結果、及び環状らせん構造のデータを記述している。
【図６ｄ】図６ｄは、具体的な本発明のペプチド模倣大環状分子の細胞生死判別試験、競合的ＥＬＩＳＡ試験、ＧＲＩＰ試験、Ｋｄデータ、ｐ２１活性化試験、蛍光偏光競合結合の結果、及び環状らせん構造のデータを記述している。
【図６ｅ】図６ｅは、具体的な本発明のペプチド模倣大環状分子の細胞生死判別試験、競合的ＥＬＩＳＡ試験、ＧＲＩＰ試験、Ｋｄデータ、ｐ２１活性化試験、蛍光偏光競合結合の結果、及び環状らせん構造のデータを記述している。
【図６ｆ】図６ｆは、具体的な本発明のペプチド模倣大環状分子の細胞生死判別試験、競合的ＥＬＩＳＡ試験、ＧＲＩＰ試験、Ｋｄデータ、ｐ２１活性化試験、蛍光偏光競合結合の結果、及び環状らせん構造のデータを記述している。
【図７Ａ】［００１８］図７Ａは、様々な大環状分子のデータを提供している。図７Ａ−７Ｂに示される配列は示される順に配列番号４２，１６３，１７７，２１４，２１７，３４４，２８９〜２９０，３８３，５３３，５２９，５４３，６０１，５４４，５９４，２７９，３７４，および６６０に各々対応する。
【図７Ｂ】図７Ｂは、様々な大環状分子のデータを提供している。
【図７Ｃ】図７Ｃは、様々な大環状分子のデータを提供している。図７Ｃ−７Ｄに示される配列は示される順に配列番号７０２，６９９，７０４，７０６，６８９，５０７，６２４，７０３，７１６，６０６，６０５，６４２，６９１，７３１，３７５，７２７，６６２，５８７，および７１４に各々対応する。
【図７Ｄ】図７Ｄは、様々な大環状分子のデータを提供している。
【図８Ａ】［００１９］図８Ａは、様々な大環状分子のデータを提供している。
【図８Ｂ】図８Ｂは、様々な大環状分子のデータを提供している。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７４】
［００６１］いくつかの態様では、ペプチド配列はｐ５３タンパク質由来である。
［００６２］本発明で使用するのに適したｐ５３ペプチドの非限定的な例の一覧を以下に示す。下表（表１〜３）に示される配列は示される順に配列番号１〜３７に各々対応する。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１９５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１９５】
［０１４７］表４は、調製した本発明のペプチド模倣大環状分子の一覧を示している。表４に示される配列ＳＰ−１〜９８、１０１〜１４３、１４７、１５２〜１５６、１５９〜１８１、１８４〜２４１、２４３〜４１８、４２０〜４８９、４９１〜５８１、５８３〜６０８、６１０〜６６５、６６７〜７１１、７１３〜７７７は示される順に配列番号３８〜７９４に各々対応する。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２１８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２１８】
［０１４９］例えば、ＳＰ−７２、ＳＰ−５６及びＳＰ−１３８（配列番号１０９、９３、１７３にそれぞれ対応）と表されている化合物は以下の構造を有する。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２２０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２２０】
［０１５０］例えば、その他の化合物は以下の構造を有する（示される順に配列番号８３，１７７，３０３，１６３，２２５，２７３，３６６，２１７，２１４，３８７および１８４に各々対応する）。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２３２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２３２】
実施例３：競合結合ＥＬＩＳＡ（ＨＤＭ２及びＨＤＭＸ）
［０１５１］ｐ５３−Ｈｉｓ６（配列番号７９６）タンパク質（３０ｎＭ／ウェル）を、Ｉｍｍｕｌｏｎ９６ウェルプレート中、室温で一晩コーティングする。実験当日、自動ＥＬＩＳＡプレート洗浄機を使い、１×ＰＢＳ−ツイーン２０（０．０５％）でプレートを洗浄し、ELISA Micro well Blockingで３０分間、室温でブロッキングし、その後、プレートを１×ＰＢＳ−ツイーン２０（０．０５％）で洗浄して過剰のブロッキング剤を洗い流す。ペプチドを１０ｍＭのＤＭＳＯ貯蔵液から滅菌水で５００μＭの作業溶液に希釈し、ＤＭＳＯの濃度が全ての試料で０．５％に一定になるように、さらに希釈する。所望の濃度の２倍の濃度の５０μｌ容量のペプチドをウェルに加え、その後、希釈したＧＳＴ−ＨＤＭ２又はＧＳＴ−ＨＭＤＸタンパク質を加える（最終濃度：１０ｎＭ）。試料を室温で２時間インキュベートし、プレートをＰＢＳ−ツイーン２０（０．０５％）で洗浄し、その後、ＨＲＰ−安定化緩衝液で０．５μｇ／ｍｌに希釈したＨＲＰ−結合抗ＧＳＴ抗体［Hypromatrix, INC］を１００μｌ加える。検出抗体と共に３０分間インキュベートした後、プレートを洗浄し、１ウェル当たり１００μｌのＴＭＢ−Ｅ基質溶液を加えて最長３０分間インキュベートする。１ＭのＨＣＬで反応を停止させ、マイクロプレートリーダーで４５０ｎｍの吸収を測定する。Graph Pad PRISMソフトウェアでデータを解析する。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２３７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２３７】
実施例７：蛍光偏光（ＦＰ）を利用したｈＤＭ２の直接結合試験
［０１５６］試験は、以下の一般的な手順に従って実施した。
１．ｈＤＭ２（自家、４１ｋＤ）をＦＰ緩衝液（高塩緩衝液−２００ｍＭのＮａｃｌ、５ｍＭのＣＨＡＰＳ、ｐＨ７．５）で希釈し、１０μＭの作業溶液を準備する。
２．９６ウェルの黒色ＨＥマイクロプレート（Molecular Devices）のＡ１ウェル及びＢ１ウェルに１０μＭのタンパク質貯蔵液を３０μｌ加える。
３．Ａ２〜Ａ１２、Ｂ２〜Ｂ１２、Ｃ１〜Ｃ１２、及びＤ１〜Ｄ１２のカラムを３０μｌのＦＰ緩衝液で満たす。
４．希釈の最終点でタンパク質濃度が０〜９ｎＭになるまで、タンパク質の貯蔵液をＡ１、Ｂ１からＡ２、Ｂ２へ、Ａ２、Ｂ２からＡ３、Ｂ３へと２回或いは３回連続希釈する。
５．１ｍＭ（１００％ＤＭＳＯ溶液）のＦＡＭで標識した直鎖ペプチドをＤＭＳＯで１００μＭ（１：１０希釈）に希釈する。その後、水で１００μＭから１０μＭ（１：１０希釈）に希釈し、次いでＦＰ緩衝液で１０μＭから４０ｎＭ（１：２５０希釈）に希釈する。これが作業溶液となり（１：４希釈）、ウェル中での濃度は１０ｎＭである。ＦＡＭで標識したペプチドの希釈液は使用するまで暗所で保管する。
６．１０ｎＭのＦＡＭ標識ペプチド１０μｌを各ウェルに加え、インキュベートし、その後様々な時点で測定する。５−ＦＡＭ−ＢａＬＴＦＥＨＹＷＡＱＬＴＳ−ＮＨ２（配列番号７９５）のＫｄは約１３．３８ｎＭである。
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２３９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２３９】
実施例９：蛍光偏光（ＦＰ）を利用したｈＤＭＸの直接結合試験
［０１５８］試験は、以下の一般的な手順に従って実施した。
１．ｈＤＭＸ（自家、４０ｋＤ）をＦＰ緩衝液（高塩緩衝液−２００ｍＭのＮａｃｌ、５ｍＭのＣＨＡＰＳ、ｐＨ７．５）で希釈し、１０μＭの作業溶液を準備する。
２．９６ウェルの黒色ＨＥマイクロプレート（Molecular Devices）のＡ１ウェル及びＢ１ウェルに１０μＭのタンパク質貯蔵液を３０μｌ加える。
３．Ａ２〜Ａ１２、Ｂ２〜Ｂ１２、Ｃ１〜Ｃ１２、及びＤ１〜Ｄ１２のカラムを３０μｌのＦＰ緩衝液で満たす。
４．希釈の最終点でタンパク質濃度が０〜９ｎＭになるまで、タンパク質の貯蔵液をＡ１、Ｂ１からＡ２、Ｂ２；Ａ２、Ｂ２からＡ３、Ｂ３；へと２回或いは３回連続希釈する。
５．１ｍＭ（１００％ＤＭＳＯ溶液）のＦＡＭで標識した直鎖ペプチドをＤＭＳＯで１００μＭ（１：１０希釈）に希釈する。その後、水で１００μＭから１０μＭ（１：１０希釈）に希釈し、次いでＦＰ緩衝液で１０μＭから４０ｎＭ（１：２５０希釈）に希釈する。これが作業溶液となり（１：４希釈）、ウェル中での濃度は１０ｎＭである。ＦＡＭで標識したペプチドの希釈液は使用するまで暗所で保管する。
６．１０ｎＭのＦＡＭ標識ペプチド１０μｌを各ウェルに加え、インキュベートし、その後様々な時点で測定する。
５−ＦＡＭ−ＢａＬＴＦＥＨＹＷＡＱＬＴＳ−ＮＨ２（配列番号７９５）のＫｄはおよそ５１ｎＭである。
【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】図７Ａ
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図７Ａ】
2013535514.tif 000006
【手続補正１１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】図７Ｂ
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図７Ｂ】
2013535514.tif 000007
【手続補正１２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】図７Ｃ
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図７Ｃ】
2013535514.tif 000008
【手続補正１３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】図７Ｄ
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図７Ｄ】
2013535514.tif 000009