【誤訳訂正書】
【提出日】平成24年9月18日(2012.9.18)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度を、患者における急性腎損傷（ＡＫＩ）の可能性の指標とする方法であって、該方法は、
ａ．該患者の尿中のＳＤＦ−１の正常なレベル、量もしくは濃度を提供する工程；および
ｂ．該患者から得た尿サンプル中のＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度を測定する工程、
を包含し、ここで、該ＳＤＦ−１の正常なレベル、量もしくは濃度よりも高い、該尿サンプルにおけるＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度は、該患者がＡＫＩを有する可能性があることを示す、
方法。
【請求項２】
前記患者の尿における前記ＳＤＦ−１の正常なレベル、量もしくは濃度は、該患者がＡＫＩに罹患する前の時点で、該患者の尿におけるＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度を測定することによって決定される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記ＳＤＦ−１の正常な量、レベルもしくは濃度を、数名の被験体に由来する尿中で測定して、該ＳＤＦ−１の正常な量、レベルもしくは濃度を決定する、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
酵素結合イムノソルベントアッセイ（ＥＬＩＳＡ）が、前記ＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度を検出するために使用される、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記尿中のＳＤＦ−１は、尿中クレアチニンに対して正規化される、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
ＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度を、患者における多臓器不全（ＭＯＦ）の可能性の指標とする方法であって、該方法は、
ａ．該患者の尿におけるＳＤＦ−１の正常なレベル、量もしくは濃度を提供する工程；
ｂ．該患者の血清におけるＳＤＦ−１の正常なレベル、量もしくは濃度を提供する工程；および
ｃ．該患者から得た尿サンプルおよび血清サンプルにおけるＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度を測定する工程；
を包含し、
ここで、尿もしくは血清における該ＳＤＦ−１の正常なレベル、量もしくは濃度よりも高い、該尿サンプルおよび該血清サンプルにおけるＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度は、該患者がＭＯＦを有する可能性があることを示す、
方法。
【請求項７】
前記患者の尿もしくは血清における前記ＳＤＦ−１の正常なレベル、量もしくは濃度は、該患者がＭＯＦに罹患する前の時点で、該患者の尿もしくは血清におけるＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度を測定することによって決定される、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記ＳＤＦ−１の正常な量、レベルもしくは濃度を、数名の被験体に由来する尿もしくは血清中で測定して、該ＳＤＦ−１の正常な量、レベルもしくは濃度を決定する、請求項６に記載の方法。
【請求項９】
酵素結合イムノソルベントアッセイ（ＥＬＩＳＡ）が、前記ＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度を検出するために使用される、請求項６に記載の方法。
【請求項１０】
前記尿中ＳＤＦ−１は、尿中クレアチニンに対して正規化される、請求項６に記載の方法。
【請求項１１】
ＡＫＩの処置を必要とする患者においてＡＫＩを処置するための組成物であって、該組成物は、治療上有効な量の間葉系幹細胞（ＭＳＣ）を含み、該組成物は、該患者から得た尿サンプルもしくは血清サンプルにおけるＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度が該患者の尿もしくは血清におけるＳＤＦ−１の正常なレベル、量もしくは濃度よりも高い場合に該患者に投与されるものであることを特徴とする、組成物。
【請求項１２】
前記患者の尿もしくは血清における前記ＳＤＦ−１の正常なレベル、量もしくは濃度は、該患者がＡＫＩに罹患する前の時点で、該患者の尿もしくは血清におけるＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度を測定することによって決定される、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１３】
前記ＳＤＦ−１の正常な量、レベルもしくは濃度を、数名の被験体に由来する尿もしくは血清において測定して、該ＳＤＦ−１の正常な量、レベルもしくは濃度を決定する、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１４】
酵素結合イムノソルベントアッセイ（ＥＬＩＳＡ）は、前記ＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度を検出するために使用される、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１５】
前記尿中ＳＤＦ−１は、尿中クレアチニンに対して正規化される、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１６】
前記ＭＳＣの治療上の用量は、約１×１０５〜１．５×１０６細胞の間である、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１７】
前記ＭＳＣは、密度勾配から単離され、該ＭＳＣが単離される該勾配の密度は、１．０５０〜１．０７０ｇ／ｍｌの間である、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１８】
前記ＭＳＣは、投与する前に、血小板溶解物（ＰＬ）中で培養される、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１９】
ＡＫＩの処置を必要とする患者においてＡＫＩを処置するための組成物であって、該組成物は、治療上有効な量の間葉系幹細胞（ＭＳＣ）を含み、該組成物は、ＣＤ２６により測定された、該患者から得た尿サンプルもしくは血清サンプルにおけるＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度が、該患者の尿もしくは血清におけるＳＤＦ−１の正常なレベル、量もしくは濃度よりも高い場合に該患者に投与されるものであることを特徴とする、組成物。
【請求項２０】
前記患者の尿もしくは血清における前記ＳＤＦ−１の正常なレベル、量もしくは濃度は、該患者がＡＫＩに罹患する前の時点で、該患者の尿もしくは血清におけるＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度を測定することによって決定される、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２１】
前記ＳＤＦ−１の正常な量、レベルもしくは濃度を、数名の被験体に由来する尿もしくは血清において測定して、該ＳＤＦ−１の正常な量、レベルもしくは濃度を決定する、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２２】
酵素結合イムノソルベントアッセイ（ＥＬＩＳＡ）が、前記ＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度を検出するために使用される、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２３】
前記尿中ＳＤＦ−１は、尿中クレアチニンに対して正規化される、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２４】
前記治療上の用量のＭＳＣは、約１×１０５〜１．５×１０６細胞の間である、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２５】
前記ＭＳＣは、密度勾配から単離され、該ＭＳＣが単離される該勾配の密度は、１．０５０〜１．０７０ｇ／ｍｌの間である、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２６】
前記ＭＳＣは、投与する前に、血小板溶解物（ＰＬ）中で培養される、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２７】
ドナーから患者へ腎臓を移植する間に使用するための組成物であって、該組成物は、治療上有効な量の間葉系幹細胞（ＭＳＣ）を含み、該組成物は、該ドナーから得た尿サンプルもしくは血清サンプルにおけるＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度が、該ドナーの尿もしくは血清におけるＳＤＦ−１の正常なレベル、量もしくは濃度よりも高い場合、該腎臓が該ドナーから該患者に移植されるときに該患者に投与されるものであることを特徴とする、組成物。
【請求項２８】
前記ドナーの尿もしくは血清における前記ＳＤＦ−１の正常なレベル、量もしくは濃度は、該患者がＡＫＩに罹患する前の時点で、該患者の尿もしくは血清におけるＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度を測定することによって決定される、請求項２７に記載の組成物。
【請求項２９】
前記ＳＤＦ−１の正常な量、レベルもしくは濃度を、数名の被験体に由来する尿もしくは血清において測定して、該ＳＤＦ−１の正常な量、レベルもしくは濃度を決定する、請求項２７に記載の組成物。
【請求項３０】
酵素結合イムノソルベントアッセイ（ＥＬＩＳＡ）が、前記ＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度を検出するために使用される、請求項２７に記載の組成物。
【請求項３１】
前記尿中ＳＤＦ−１は、尿中クレアチニンに対して正規化される、請求項２７に記載の組成物。
【請求項３２】
前記治療上の用量のＭＳＣは、約１×１０５〜１．５×１０６細胞の間である、請求項２７に記載の組成物。
【請求項３３】
前記ＭＳＣは、密度勾配から単離され、該ＭＳＣが単離される勾配の密度は、１．０５０〜１．０７０ｇ／ｍｌの間である、請求項２７に記載の組成物。
【請求項３４】
前記ＭＳＣは、投与する前に、血小板溶解物（ＰＬ）中で培養される、請求項２７に記載の組成物。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【発明の詳細な説明】
【発明の名称】腎損傷および他の主要な器官を処置するための、診断用および間葉系幹細胞（多能性間質細胞）特異的な治療用のバイオマーカーとしてのＳＤＦ−１（ＣＸＣＬ１２）を使用する方法
【技術分野】
【０００１】
（関連出願）
この出願は、２００８年１０月２２日に出願された米国仮出願第６１／１０７，４６８号（この内容は、その全体が参考として本明細書に援用される）に対する優先権を主張する。
【０００２】
（発明の分野）
本願は、患者の尿および血清におけるバイオマーカーとしてのＳＤＦ−１もしくはＣＸＣＬ１２の量の変化を検出することによって、急性腎損傷（ａｃｕｔｅ  ｋｉｄｎｅｙ  ｉｎｊｕｒｙ）を含む、腎疾患および他の主要な器官（例えば、肝臓、心臓、脳、膵臓、肺）の疾患の検出、診断および処置に関する。
【背景技術】
【０００３】
（背景）
急性腎損傷（ＡＫＩ）は、「尿毒症性毒素」の蓄積、および重要なことには、カリウム、水素および他のイオンの血中レベルでの上昇を生じ、それらの全ては、生命を脅かす多系にわたる合併症（例えば、出血、発作（ｓｅｉｚｕｒｅ）、心不整脈もしくは心停止、ならびに肺欝血および不十分な酸素取り込みによる考えられる容量過負荷）の一因となる、数時間もしくは数日内の腎臓の排出機能の急激な悪化として定義される。ＡＫＩの最も一般的な原因は、腎の虚血傷害（これは、腎尿細管および糸球体後性血管内皮細胞の損傷を生じる）である。ＡＫＩのこの虚血形態についての主な病因としては、血管内容積縮小が挙げられ、これは、出血、血栓症事象、ショック、敗血症、主要な心血管の手術、動脈狭窄などから生じる。ＡＫＩの腎毒性形態は、放射線造影剤、かなりの数の頻繁に使用される医薬（例えば、化学療法剤、抗生物質、ならびにｃｉｓ−白金およびシクロスポリンのような特定の免疫抑制剤）によって引き起こされ得る。ＡＫＩの全ての形態に関するリスクが最もある患者としては、糖尿病、腎臓、肝臓、心血管疾患が根底にある患者、高齢者、骨髄移植のレシピエント、および癌または他の衰弱性の障害がある患者が挙げられる。
【０００４】
ＡＫＩの虚血性形態および腎毒性形態の両方が、尿細管および微小血管内皮細胞の機能不全および死滅を生じる。致死に近い損傷した尿細管細胞は、脱分化し、それらの極性を失い、ビメンチン（間葉細胞マーカー）およびＰａｘ−２（胚性腎における間葉性−上皮分化転換のプロセスにおいてのみ通常は発現される転写因子）を発現する。損傷した内皮細胞はまた、特徴的な変化を示す。
【０００５】
腎臓は、重篤な急性発作（ｉｎｓｕｌｔ）の後すら、自己再生の顕著な能力および結果として生じるほぼ正常な機能の再確立を有する。損傷したネフロンセグメントの再生は、生き残った尿細管細胞および内皮細胞の移動、増殖および再分化の結果であると考えられている。しかし、重篤なＡＫＩでは、上記生き残った尿細管細胞および血管内皮細胞の自己再生能を上回る可能性がある。何れの原因からも区別されたＡＫＩ（すなわち、多臓器不全（ＭＯＦ）なしで起こるＡＫＩ）を有する患者は、５０％より高い死亡率を有し続けている。このひどい予後は、集中治療支援、血液透析、ならびに心房性ナトリウム利尿ペプチド、インスリン様増殖因子−Ｉ（ＩＧＦ−Ｉ）、より生体適合性の透析膜、持続的血液透析、および他の介入の最近の使用にも関わらず、改善されてこなかった。腎臓の自己防御および重篤な損傷後の自己再生能を高めることが急務である。
【０００６】
ＡＫＩの別の急性の形態（移植関連急性腎不全（ＴＡ−ＡＲＦ））はまた、早期移植片機能不全（ＥＧＤ）といわれ、一般に、腎移植の際に、死体ドナーから移植片を受けている患者において主に発症するが、ＴＡ−ＡＲＦは、生体の血縁のあるドナー腎を受けている患者においても生じ得る。現在行われている腎移植のうちの最大５０％までが、死体ドナーを利用する。重大なＴＡ−ＡＲＦを発症している腎臓のレシピエントは、移植片機能が回復するまで、血液透析による処置を必要とする。ＴＡ−ＡＲＦのリスクは、高齢のドナーおよびレシピエント、限界の移植片品質、ならびに上記レシピエントにおける顕著な併存疾患の罹病率（ｃｏｍｏｒｂｉｄｉｔｙ）および以前の移植、ならびに死体ドナーからのドナー腎臓の採取と、上記レシピエントへのその移植との間にある長い時間（「冷虚血時間」として公知）で増大する。早期移植片機能不全もしくはＴＡ−ＡＲＦは、深刻な長期間の成り行き（ｃｏｎｓｅｑｕｅｎｃｅ）を有する。それらとしては、ＴＡ−ＡＲＦにより開始される進行性の不可逆的な腎機能喪失に起因する移植片喪失の加速、および上記腎移植片の早期の喪失をもたらす急性拒絶エピソードの発生率の増大が挙げられる。従って、ＴＡ−ＡＲＦもしくはＥＧＤに起因する早期移植片機能不全の処置を提供する必要性は大きい。
【０００７】
慢性腎不全（ＣＲＦ）もしくは慢性腎疾患（ＣＫＤ）は、ネフロンの進行性の喪失および結果として腎機能の喪失であり、末期腎疾患（ＥＳＲＤ）を生じる。この時点で、患者の生存は、透析支援もしくは腎移植に依存する。上記ネフロン（すなわち、糸球体、細管および毛細血管）の進行性の喪失は、自分で延長する（ｓｅｌｆ−ｐｅｒｐｅｔｕａｔｉｎｇ）線維症、炎症性および硬化のプロセス（糸球体および腎間質において最も顕著に発現される）から生じるようである。ネフロンの喪失は、糖尿病性腎症、糸球体腎炎、多くのたんぱく尿障害、高血圧症、腎臓に対する脈管炎性、炎症性、および他の傷害によって最も一般的に開始される。現在利用可能な形態の治療（例えば、アンジオテンシン転換酵素インヒビター、アンジオテンシンレセプターブロッカー、他の降圧薬および抗炎症薬（例えば、ステロイド、シクロスポリンなど）の投与、脂質低下剤、ω−３脂肪酸、低タンパク質食餌、最適な体重、血圧および血糖のコントロール（特に、糖尿病において）は、上記の状態において腎機能の慢性的な喪失を顕著に遅らせ得かつときおり停止させ得る。ＥＳＲＤの発症は、いくらかの従順な患者および遅延した他の患者において予防され得る。これらの成功にも拘わらず、長期にわたる透析もしくは移植を要するＥＳＲＤを有する患者数の年間増加は、６％のままであり、このことは、引き続き増大している医療負担および経済的負担を表している。従来の治療に応答できない患者（すなわち、腎機能が悪化し続けている患者）を処置するために、ＣＲＦもしくはＣＫＤおよびそれによるＥＳＲＤの有効な処置の新たな介入の開発が急務である。幹細胞処置は、腎臓における線維症プロセスを停止する／改善する（ｒｅｖｅｒｓｅ）ために提供される。
【０００８】
臨床上の急性腎損傷（ＡＫＩ）を診断するために、血清クレアチニン（ＳＣｒ）および血中尿素窒素（ＢＵＮ）の濃度を測定する、現在使用されている実験的試験は、所定の腎臓傷害（ショック、外傷、敗血症、大手術、薬物）の２４〜４８時間後にのみ、ＡＫＩを同定することができることは、現在十分に認識されている。ＡＫＩのこの診断の遅れは、治療的介入もしくは予防的介入の開始の遅れに繋がる。それによって、高死亡率（５０％を超える）、長期の入院生活、一過性の透析の必要性、腎機能の不可逆的な損失（長期の透析処置もしくは腎移植を要する）、および上昇する医療費によって特徴付けられる、不十分な結果しか生じない。
【０００９】
実験的ＡＫＩは、マウス腎臓において上記ケモカインＳＤＦ−１（ＣＸＣＬ１２）の顕著なアップレギュレーションを引き起こし、ＳＤＦ−１の同族レセプターであるＣＸＣＲ４を発現する細胞のホーミングを媒介することが、以前（非特許文献１）報告された。造血幹細胞（ＨＳＣ）、内皮前駆細胞（ＥＰＣ）、および間葉系幹細胞もしくは多能性間質
細胞（Ｍｕｌｔｉｐｏｔｅｎｔ  Ｓｔｒｏｍａｌ  Ｃｅｌｌ）（ＭＳＣ）はともに、ＣＸＣＲ４を発現し、損傷した腎へのそれら細胞の増加は、ＣＸＣＲ４もしくはＡＭＤ３１００（ＣＸＣＲ４の特異的ブロッカー）に対する中和抗体によってブロックされ得る。生理学的に、ＳＤＦ−１レベルは、骨髄ニッチにおいて最高であり、それによって、骨髄移植物の補充（ｒｅｃｒｕｉｔｍｅｎｔ）および生着（ｅｎｇｒａｆｔｍｅｎｔ）を促進する。実験的ＡＫＩにおいて、ＳＤＦ−１の腎でのレベルは、骨髄中のものより大きく、このことは、ＡＫＩの予防および処置のために与えられるＭＳＣの増加を促進する。
【００１０】
ＡＫＩの早期診断のための他の新規なバイオマーカーは、ヒトにおいて既に試験されてきた。これらとしては、ＮＧＡＬ、ＩＬ−１８、ＫＩＭ−１、およびＬ型脂肪酸結合タンパク質（非特許文献２；非特許文献３；および非特許文献４）が挙げられる。これらバイオマーカーはまた、実験的および臨床上の急性腎不全において診断的およびいくらか予後予測的（ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ）な有用性を有することが示された。しかし、上記バイオマーカーとは異なって、ＡＫＩを有する腎臓におけるＳＤＦ−１の強力なアップレギュレーション、および尿へのその初期の放出（損傷後２時間以内）は、ＡＫＩを特異的に診断し、重要なことには、そして同時に、ＭＳＣベースの治療が最も有効かつ示された時点で同定する。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００１１】
【非特許文献１】Ｆ．Ｔｏｅｇｅｌら  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ（２００５）６２：１７７２〜１７８４
【非特許文献２】ＪＭ  Ｔｈｕｒｍａｎら  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ（２００８）７３：３７９〜８１
【非特許文献３】ＣＲ  Ｐａｒｉｋｈら  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ（２００８）７３：８０１〜３
【非特許文献４】ＷＨ  Ｈａｎら  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ（２００８）７３：８６３〜９
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１２】
（発明の要旨）
いくつかの実施形態によれば、本発明は、患者における急性腎損傷（ＡＫＩ）の可能性を検出するか、またはＡＫＩを診断するための方法を提供し、上記方法は、上記患者の尿中のＳＤＦ−１の正常なレベル、量もしくは濃度を提供する工程、上記患者から得た尿サンプル中のＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度を測定する工程によるものであり、ここで上記ＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度が、上記尿サンプルにおいて、上記ＳＤＦ−１の正常なレベル、量もしくは濃度より高い場合、上記患者は、ＡＫＩを有する可能性がある。いくつかの実施形態によれば、上記患者の尿中のＳＤＦ−１の正常なレベル、量もしくは濃度は、上記患者がＡＫＩに罹患する前の時点で、上記患者におけるＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度を測定することによって、決定される。いくつかの実施形態において、上記ＳＤＦ−１の正常な量、レベルもしくは濃度は、数名の被験体に由来する尿中で測定して、上記ＳＤＦ−１の正常な量、レベルもしくは濃度が決定される。いくつかの実施形態において、酵素結合イムノソルベントアッセイ（ＥＬＩＳＡ）は、上記ＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度を検出するために使用される。いくつかの実施形態において、上記尿中ＳＤＦ−１は、尿中クレアチニンに対して正規化される。
【００１３】
本発明はまた、患者における多臓器不全（ＭＯＦ）の可能性を検出するか、またはＭＯＦを診断するための方法を提供し、上記方法は、上記患者の尿中のＳＤＦ−１の正常なレベル、量もしくは濃度を提供する工程、上記患者の血清中のＳＤＦ−１の正常なレベル、
量もしくは濃度を提供する工程、上記患者から得られた尿サンプルおよび血清サンプル中のＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度を測定する工程によるものであり、ここで上記ＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度が、上記尿サンプルおよび上記血清サンプルにおいて、上記尿もしくは血清中のＳＤＦ−１の正常なレベル、量もしくは濃度より高い場合、上記患者は、ＭＯＦを有する可能性がある。いくつかの実施形態によれば、上記患者の尿もしくは血清中のＳＤＦ−１の正常なレベル、量もしくは濃度は、上記患者がＭＯＦに罹患する前の時点で、上記患者におけるＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度を測定することによって決定される。いくつかの実施形態において、上記ＳＤＦ−１の正常な量、レベルもしくは濃度は、数名の被験体に由来する尿もしくは血清中で測定して、上記ＳＤＦ−１の正常な量、レベルもしくは濃度が決定される。いくつかの実施形態において、酵素結合イムノソルベントアッセイ（ＥＬＩＳＡ）は、上記ＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度を検出するために使用される。いくつかの実施形態において、上記尿中ＳＤＦ−１は、尿中クレアチニンに対して正規化される。
【００１４】
本発明はまた、患者におけるＡＫＩを処置するための方法を提供し、上記方法は、上記患者の尿中のＳＤＦ−１の正常なレベル、量もしくは濃度を提供する工程、上記患者から得た尿サンプル中のＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度を測定する工程によるものであり、ここで上記ＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度が、上記尿サンプルおよび上記血清サンプルにおいて、上記正常なレベルより高い場合、間葉系幹細胞（ＭＳＣ）の治療上有効な量が、上記患者に投与され、それによって、上記患者におけるＡＫＩを処置する。いくつかの実施形態によれば、上記患者の尿もしくは血清中のＳＤＦ−１の正常なレベル、量もしくは濃度は、上記患者がＡＫＩに罹患する前の時点で、上記患者におけるＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度を測定することによって決定される。いくつかの実施形態において、上記ＳＤＦ−１の正常な量、レベルもしくは濃度は、数名の被験体に由来する尿もしくは血清中で測定して、上記ＳＤＦ−１の正常な量、レベルもしくは濃度が決定される。いくつかの実施形態において、酵素結合イムノソルベントアッセイ（ＥＬＩＳＡ）は、ＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度を検出するために使用される。いくつかの実施形態において、上記尿中ＳＤＦ−１は、尿中クレアチニンに対して正規化される。いくつかの実施形態において、ＭＳＣの治療上の用量は、約１×１０５〜１．５×１０６細胞の間である。いくつかの実施形態において、上記ＭＳＣは、密度勾配から単離され、ここで上記ＭＳＣが存在する勾配の密度は、１．０５０〜１．０７０ｇ／ｍｌの間である。いくつかの実施形態において、上記ＭＳＣは、投与する前に、血小板溶解物（ＰＬ）中で培養される。
【００１５】
本発明はまた、患者におけるＡＫＩを処置するための方法を提供し、上記方法は、上記患者の尿中のＳＤＦ−１の正常なレベル、量もしくは濃度を提供する工程、ＣＤ２６を投与して、上記患者から得た尿サンプル中のＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度を測定する工程によるものであり、ここで上記ＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度が、上記尿サンプルおよび上記血清サンプルにおいて、上記正常なレベルより高い場合、間葉系幹細胞（ＭＳＣ）の治療上有効な量は、上記患者に投与され、それによって、上記患者におけるＡＫＩを処置する。いくつかの実施形態によれば、上記患者の尿もしくは血清中のＳＤＦ−１の正常なレベル、量もしくは濃度は、上記患者がＡＫＩに罹患する前の時点で、上記患者におけるＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度を測定することによって決定される。いくつかの実施形態において、上記ＳＤＦ−１の正常な量、レベルもしくは濃度は、数名の被験体に由来する尿もしくは血清中で測定して、上記ＳＤＦ−１の正常な量、レベルもしくは濃度が決定される。いくつかの実施形態において、酵素結合イムノソルベントアッセイ（ＥＬＩＳＡ）は、上記ＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度を検出するために使用される。いくつかの実施形態において、上記尿中ＳＤＦ−１は、尿中クレアチニンに対して正規化される。いくつかの実施形態において、ＭＳＣの治療上の用量は、約１×１０５〜１．５×１０６細胞の間である。いくつかの実施形態において、上記ＭＳＣは、密度勾配から単離され、ここで上記ＭＳＣが存在する勾配の密度は、１．０５０〜１．０７０ｇ／ｍｌの間である。いくつかの実施形態において、上記ＭＳＣは、投与する前に、血小板溶解物（ＰＬ）中で培養される。
【００１６】
いくつかの実施形態によれば、本発明はまた、ドナーから患者への腎移植のための方法を提供し、上記方法は、上記ドナーの尿中のＳＤＦ−１の正常なレベル、量もしくは濃度を提供する工程、上記ドナーから得た尿サンプル中のＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度を測定する工程によるものであり、ここで上記ＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度は、上記尿サンプルおよび上記血清サンプルにおいて、上記正常なレベルより高い場合、間葉系幹細胞（ＭＳＣ）の治療上有効な量は、上記腎臓が移植されるときに上記患者に投与される。いくつかの実施形態によれば、上記患者の尿もしくは血清中のＳＤＦ−１の正常なレベル、量もしくは濃度は、上記患者がＡＫＩに罹患する前の時点で、上記患者におけるＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度を測定することによって決定される。いくつかの実施形態において、上記ＳＤＦ−１の正常な量、レベルもしくは濃度は、数名の被験体に由来する尿もしくは血清において測定して、上記ＳＤＦ−１の正常な量、レベルもしくは濃度が決定される。いくつかの実施形態において、酵素結合イムノソルベントアッセイ（ＥＬＩＳＡ）は、上記ＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度を検出するために使用される。いくつかの実施形態において、上記尿中ＳＤＦ−１は、尿中クレアチニンに対して正規化される。いくつかの実施形態において、上記ＭＳＣの治療上の用量は、約１×１０５〜１．５×１０６細胞の間である。いくつかの実施形態において、上記ＭＳＣは、密度勾配から単離され、ここで上記ＭＳＣが存在する勾配の密度は、１．０５０〜１．０７０ｇ／ｍｌの間である。いくつかの実施形態において、上記ＭＳＣは、投与する前に、血小板溶解物（ＰＬ）中で培養される。
本発明の好ましい実施形態では、例えば以下が提供される：
（項目１）
検出を必要とする患者において急性腎損傷（ＡＫＩ）の可能性を検出する方法であって、該方法は、
ａ．該患者の尿中のＳＤＦ−１の正常なレベル、量もしくは濃度を提供する工程；および
ｂ．該患者から得た尿サンプル中のＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度を測定する工程、
を包含し、ここで該ＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度が、該尿サンプルにおいて、該ＳＤＦ−１の正常なレベル、量もしくは濃度より高い場合、該患者は、ＡＫＩを有する可能性がある、
方法。
（項目２）
前記患者の尿における前記ＳＤＦ−１の正常なレベル、量もしくは濃度は、該患者がＡＫＩに罹患する前の時点で、該患者におけるＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度を測定することによって決定される、項目１に記載の方法。
（項目３）
前記ＳＤＦ−１の正常な量、レベルもしくは濃度を、数名の被験体に由来する尿中で測定して、該ＳＤＦ−１の正常な量、レベルもしくは濃度を決定する、項目１に記載の方法。
（項目４）
酵素結合イムノソルベントアッセイ（ＥＬＩＳＡ）が、前記ＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度を検出するために使用される、項目１に記載の方法。
（項目５）
前記尿中のＳＤＦ−１は、尿中クレアチニンに対して正規化される、項目１に記載の方法。
（項目６）
検出を必要とする患者において多臓器不全（ＭＯＦ）の可能性を検出する方法であって、該方法は、
ａ．該患者の尿におけるＳＤＦ−１の正常なレベル、量もしくは濃度を提供する工程；
ｂ．該患者の血清におけるＳＤＦ−１の正常なレベル、量もしくは濃度を提供する工程；および
ｃ．該患者から得た尿サンプルおよび血清サンプルにおけるＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度を測定する工程；
を包含し、
ここで該ＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度は、該尿サンプルおよび該血清サンプルにおいて、尿もしくは血清における該ＳＤＦ−１の正常なレベル、量もしくは濃度より高い場合、該患者は、ＭＯＦを有する可能性がある、
方法。
（項目７）
前記患者の尿もしくは血清における前記ＳＤＦ−１の正常なレベル、量もしくは濃度は、該患者がＭＯＦに罹患する前の時点で、該患者におけるＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度を測定することによって決定される、項目６に記載の方法。
（項目８）
前記ＳＤＦ−１の正常な量、レベルもしくは濃度を、数名の被験体に由来する尿もしくは血清中で測定して、該ＳＤＦ−１の正常な量、レベルもしくは濃度を決定する、項目６に記載の方法。
（項目９）
酵素結合イムノソルベントアッセイ（ＥＬＩＳＡ）が、前記ＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度を検出するために使用される、項目６に記載の方法。
（項目１０）
前記尿中ＳＤＦ−１は、尿中クレアチニンに対して正規化される、項目６に記載の方法。
（項目１１）
処置を必要とする患者においてＡＫＩを処置する方法であって、該方法は、
ａ．該患者の尿におけるＳＤＦ−１の正常なレベル、量もしくは濃度を提供する工程；および
ｂ．該患者から得た尿サンプルにおけるＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度を測定する工程、
を包含し、ここで該ＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度は、該尿サンプルおよび該血清サンプルにおいて、該正常なレベルより高い場合、治療上有効な量の間葉系幹細胞（ＭＳＣ）が該患者に投与され、それによって、該患者におけるＡＫＩを処置する、
方法。
（項目１２）
前記患者の尿もしくは血清における前記ＳＤＦ−１の正常なレベル、量もしくは濃度は、該患者がＡＫＩに罹患する前の時点で、該患者におけるＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度を測定することによって決定される、項目１１に記載の方法。
（項目１３）
前記ＳＤＦ−１の正常な量、レベルもしくは濃度を、数名の被験体に由来する尿もしくは血清において測定して、該ＳＤＦ−１の正常な量、レベルもしくは濃度を決定する、項目１１に記載の方法。
（項目１４）
酵素結合イムノソルベントアッセイ（ＥＬＩＳＡ）は、前記ＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度を検出するために使用される、項目１１に記載の方法。
（項目１５）
前記尿中ＳＤＦ−１は、尿中クレアチニンに対して正規化される、項目１１に記載の方法。
（項目１６）
前記ＭＳＣの治療上の用量は、約１×１０５〜１．５×１０６細胞の間である、項目１１に記載の方法。
（項目１７）
前記ＭＳＣは、密度勾配から単離され、該ＭＳＣが存在する該勾配の密度は、１．０５０〜１．０７０ｇ／ｍｌの間である、項目１１に記載の方法。
（項目１８）
前記ＭＳＣは、投与する前に、血小板溶解物（ＰＬ）中で培養される、項目１１に記載の方法。
（項目１９）
処置を必要とする患者においてＡＫＩを処置する方法であって、該方法は、
ａ．該患者の尿におけるＳＤＦ−１の正常なレベル、量もしくは濃度を提供する工程；および
ｂ．該患者から得た尿サンプルにおけるＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度を測定するためにＣＤ２６を投与する工程、
を包含し、ここで該ＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度が、該尿サンプルおよび該血清サンプルにおいて、該正常なレベルより高い場合、治療上有効な量の間葉系幹細胞（ＭＳＣ）が、該患者に投与され、それによって、該患者におけるＡＫＩを処置する、
方法。
（項目２０）
前記患者の尿もしくは血清における前記ＳＤＦ−１の正常なレベル、量もしくは濃度は、該患者がＡＫＩに罹患する前の時点で、該患者におけるＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度を測定することによって決定される、項目１９に記載の方法。
（項目２１）
前記ＳＤＦ−１の正常な量、レベルもしくは濃度を、数名の被験体に由来する尿もしくは血清において測定して、該ＳＤＦ−１の正常な量、レベルもしくは濃度を決定する、項目１９に記載の方法。
（項目２２）
酵素結合イムノソルベントアッセイ（ＥＬＩＳＡ）が、前記ＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度を検出するために使用される、項目１９に記載の方法。
（項目２３）
前記尿中ＳＤＦ−１は、尿中クレアチニンに対して正規化される、項目１９に記載の方法。
（項目２４）
前記治療上の用量のＭＳＣは、約１×１０５〜１．５×１０６細胞の間である、項目１９に記載の方法。
（項目２５）
前記ＭＳＣは、密度勾配から単離され、該ＭＳＣが存在する該勾配の密度は、１．０５０〜１．０７０ｇ／ｍｌの間である、項目１９に記載の方法。
（項目２６）
前記ＭＳＣは、投与する前に、血小板溶解物（ＰＬ）中で培養される、項目１９に記載の方法。
（項目２７）
ドナーから患者へ腎臓を移植する方法であって、該方法は、
ａ．該ドナーの尿におけるＳＤＦ−１の正常なレベル、量もしくは濃度を提供する工程；および
ｂ．該ドナーから得た尿サンプルにおけるＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度を測定する工程、
を包含し、ここで
該ＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度が、該尿サンプルおよび該血清サンプルにおいて、該正常なレベルより高い場合、治療上有効な量の間葉系幹細胞（ＭＳＣ）が、該腎臓が移植されるときに該患者に投与される、方法。
（項目２８）
前記患者の尿もしくは血清における前記ＳＤＦ−１の正常なレベル、量もしくは濃度は、該患者がＡＫＩに罹患する前の時点で、該患者におけるＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度を測定することによって決定される、項目２７に記載の方法。
（項目２９）
前記ＳＤＦ−１の正常な量、レベルもしくは濃度を、数名の被験体に由来する尿もしくは血清において測定して、該ＳＤＦ−１の正常な量、レベルもしくは濃度を決定する、項目２７に記載の方法。
（項目３０）
酵素結合イムノソルベントアッセイ（ＥＬＩＳＡ）が、前記ＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度を検出するために使用される、項目２７に記載の方法。
（項目３１）
前記尿中ＳＤＦ−１は、尿中クレアチニンに対して正規化される、項目２７に記載の方法。
（項目３２）
前記治療上の用量のＭＳＣは、約１×１０５〜１．５×１０６細胞の間である、項目２７に記載の方法。
（項目３３）
前記ＭＳＣは、密度勾配から単離され、該ＭＳＣが存在する勾配の密度は、１．０５０〜１．０７０ｇ／ｍｌの間である、項目２７に記載の方法。
（項目３４）
前記ＭＳＣは、投与する前に、血小板溶解物（ＰＬ）中で培養される、項目２７に記載の方法。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
【図１】図１は、急性腎損傷（ＡＫＩ）の前後の種々の時点での、ラットにおける血清クレアチニンの濃度を示す棒グラフである。
【図２】図２は、ＡＫＩの前後の種々の時点での、ラットにおける血漿ＳＤＦ−１の濃度を示す棒グラフである。
【図３】図３は、ＡＫＩの前後の種々の時点での、ラットにおける尿中ＳＤＦ−１の濃度を示す棒グラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
（好ましい実施形態の詳細な説明）
本発明のタンパク質、ヌクレオチド配列、ペプチドなど、および方法が記載される前に、本発明が、記載される特定の方法論、プロトコル、および試薬に限定されず、これらが変動し得ることは、理解される。本明細書に記載される用語法が、特定の実施形態を記載する目的に過ぎず、添付の特許請求の範囲によってのみ限定される発明の範囲を限定することを意図しないこともまた、理解されるべきである。
【００１９】
よって、本発明は、尿中ＳＤＦ−１レベルにおける示された上昇が、腎傷害後２時間以内に急性腎損傷（ＡＫＩ）を診断するための新たなツールを提供することを示す。本明細書に提供される方法は、腎臓保護的治療の初期の開始を可能にし、独特なことには、ＭＳＣの投与が腎傷害を処置するに最も有効である腎傷害後の時点を同定する。特定の薬物が、腎臓におけるそのＣＤ２６（ジペプチジルペプチダーゼＩＶ）媒介性不活性化のブロックによって、ＳＤＦ−１の腎臓発現を長期化し、それによって、ＡＫＩにおいて投与されたＭＳＣのホーミングおよび腎臓保護的活性を強化するために有用であることは、国際出願番号ＰＣＴ／ＵＳ０８／００１３７１（その全体が本明細書に参考として援用される）に示された。重要なことには、このような介入はまた、ＭＳＣ倹約効果（ｓｐａｒｉｎｇ  ｅｆｆｅｃｔ）（すなわち、同じ有益な効果が、少数のＭＳＣで達成されることを可能にする）を有すると予測される。従って、ＳＤＦ−１は、ＭＳＣ治療の有効性にとって重要であり、尿中のＳＤＦ−１の高レベルの検出は、ＭＳＣの投与に都合のよい時間を示す。
【００２０】
尿中ＳＤＦ−１レベルの上昇はまた、死体ドナーからの腎採取の時点に起こる。生体ドナー由来の腎臓におけるＳＤＦ−１レベルの上昇は、上記ドナー腎臓のＡＫＩを診断するために使用され得、かつ臓器移植の時点でＭＳＣ治療の有用性を同定し得、それによって、手術後ＡＫＩ（移植片機能の遅れ）および拒絶に起因するその後の移植片喪失でのＡＫＩ誘導性の上昇に起因する移植片喪失の増大を改善する。
【００２１】
尿および血液の両方におけるＳＤＦ−１レベルの同時測定は、急性腎損傷（血中レベルで大きな上昇なしに尿レベルで増大）と、腎外器官（例えば、肝臓、脳、心臓、肺、膵臓など）の傷害（腎臓の寄与なしの血中レベルでの増大）との間の区別を可能にする非常に有用なツールを提供する。多臓器不全（ＭＯＦ）の状況において、ＳＤＦ−１の血中レベルおよび尿中レベルは上昇し、このことは、多臓器の傷害を示す。ＭＯＦは、敗血症を有する（特に、後者は、大手術もしくは外傷後に発生する場合）最も重篤に病んでいる患者において発生する。これはまた、高齢の患者、糖尿病、根底にある心血管疾患および損傷した免疫防御を有する患者において、より高い頻度でかつより重い重篤度で生じる。ＭＯＦは、ショック、ＡＫＩ、漏出性の（ｌｅａｋｙ）細胞膜、肺、肝臓、心臓、血管および他の器官の機能不全によって特徴付けられる。ＭＯＦに起因する死亡率は、最も積極的な治療形態（挿管および換気支援、昇圧剤および抗生物質の投与、ステロイド、血液透析、ならびに非経口栄養が挙げられる）の利用にも拘わらず、１００％に近づいている。これら患者のうちの多くは、手術もしくは外傷の創傷の治癒が重篤に損なわれており、感染した場合には、これら創傷は、再発性の感染、病的状態および死亡にさらに寄与する。
【００２２】
ＳＤＦ−１プロファイリング（尿および血液）は、現在の技術水準を超える以下の利点を有する。これは、ＡＫＩの非常に初期の診断を可能にする。ＡＫＩ後の尿中ＳＤＦ−１におけるピーク上昇は、ＡＫＩ治療が最も有効であるときを示す。いかなる腎臓治療も、ＳＤＦ−１プロファイリングによって管理され得る。ＡＫＩ治療の一例は、ＭＳＣ治療である。ＡＫＩ後の尿中ＳＤＦ−１のピーク上昇は、ＭＳＣ治療が最も有効であるときを示す。本発明のＳＤＦ−１プロファイリング方法とともに使用される代替の治療の例としては、国際公開番号ＷＯ  ０４／０４４１４２およびＷＯ  ０８／０４２１７４（これは、それら全体が本明細書に援用される）に記載されるものが挙げられる。ＳＤＦ−１プロファイリングは、ＡＫＩと、他の主要な器官（心臓、脳、肝臓、肺、膵臓など）の傷害との間の区別を可能にする。ＳＤＦ−１プロファイリングは、死体腎臓ドナーにおける腎傷害の初期評価を可能にし、移植後のＭＳＣ投与の効力を同時に同定する。ハイリスク手順（心臓手術）の前の上昇した尿中ＳＤＦ−１レベルは、不十分な腎臓の結果を予測し、ＭＳＣ治療が有効且つ必要とされることを示す。上昇した尿中ＳＤＦ−１は、慢性腎疾患（糖尿病、糸球体腎炎、高血圧症など）を有する患者が、進行性の疾患を有し、そしてＭＳＣ治療に応答し得ることを示し得る。
【００２３】
ＳＤＦ−１プロファイリングは、ＡＫＩを有するかもしくはＡＫＩのリスクがあると疑われる患者において、簡単な診断特異的で、予後特異的でかつ治療特異的な試験を提供する。このことは、処置（ＭＳＣ治療）の初期かつ特異的な開始を可能にする。このような情報は、世界中の非常に多くの患者において非常に有用である。
【００２４】
ＳＤＦ−１プロファイリングはまた、尿中レベルおよび血中レベルにおける特徴的変化から、腎臓傷害と他の主要器官の傷害との間の区別を提供する。このことは、集中治療室患者において特に有用である。
【００２５】
ＳＤＦ−１プロファイリングは、死体ドナーから得た移植用腎臓の健康状態の評価を可
能にし、移植後のＭＳＣ治療が結果を改善するときを示す。
【００２６】
ＭＳＣ治療後のＳＤＦ−１プロファイリングは、さらなるＭＳＣ治療が、ＡＫＩを有する患者、腎移植後患者、および進行性慢性腎疾患もしくは他の主要器官の傷害を有する患者において必要とされるか否かを決定するために使用され得る。
【００２７】
まとめると、ＳＤＦ−１プロファイリングは、全世界の非常に多くの患者において、高い診断的、予後予測的かつ治療的な価値のある、完全に特有のバイオマーカーを提供する。特定的治療（ＭＳＣ投与）が最も有効である時点を同定するとともに、ＡＫＩを初期に診断するその能力は、このバイオマーカーと他のバイオマーカー（例えば、ＮＧＡＬ、ＩＬ−１８、ＫＩＭ−１、Ｌ型脂肪酸結合タンパク質）とを基本的に区別する。後者は、腎傷害を早期に同定するが、所定の時点で最も有効である特定の介入タイプについての情報を提供しない。
【００２８】
（ＳＤＦ−１量の決定）
患者の尿、血清もしくは任意の他の体液におけるＳＤＦ−１の量は、タンパク質濃度およびまたは特定のタンパク質の存在もしくは非存在を検出するために使用される当該分野で公知の任意のアッセイを使用して測定され得る。ＳＤＦ−１タンパク質検出の方法としては、ウェスタンブロットイムノアッセイ、免疫組織学、蛍光活性化セルソーティング（ＦＡＣＳ）、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）、経口免疫アッセイ、酵素結合イムノソルベントアッセイ（ＥＬＩＳＡ）、もしくは固体支持体（例えば、ラテックスビーズ）を使用するイムノアッセイが挙げられるが、これらに限定されない。
【００２９】
いくつかの実施形態によれば、腎臓も器官の病状もない患者に由来するコントロールサンプルは、相対的ＳＤＦ−１量もしくは１の濃度値を割り当てられる。好ましい実施形態において、尿中ＳＤＦ−１量、レベルおよび濃度は、尿中クレアチニン量、レベルおよび濃度に対して正規化される。この場合、ＡＫＩに罹患しているもしくはＡＫＩに罹った患者もしくは被験体におけるＳＤＦ−１の増加量は、少なくとも２倍、５倍、１０倍、２０倍、３０倍、４０倍、５０倍、６０倍、７０倍、８０倍、９０倍、および１００倍増大し得る。倍数増加は、ＡＫＩの開始時期と、尿サンプルが上記ＡＫＩに罹患しているかもしくは罹っている患者もしくは被験体から採取された時期との間の時間量に依存する。コントロールに対するＳＤＦ−１の最高の倍数誘導は、ＡＫＩ後２時間〜２４時間の間であるはずである。上記患者もしくは被験体の尿中のＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度は、この時期の後に徐々に減少するはずである。
【００３０】
腎臓もしくは器官の病状に対する化合物の効果は、患者の体液（好ましくは、血清もしくは尿）中のＳＤＦ−１の量もしくは濃度を検出することによって測定され得る。患者の体液中のＳＤＦ−１の量もしくは濃度に影響を及ぼす任意の適切な生理学的変化は、本発明の方法に従って検出され得る。好ましくは、上記腎臓の病状は、急性腎損傷（ＡＫＩ）である。
【００３１】
さらに、腎臓もしくは他の器官の病状の処置のためのＭＳＣの投与に適したタイミングは、患者の体液（好ましくは、血清もしくは尿）中のＳＤＦ−１の量もしくは濃度を検出することによって測定され得る。虚血再灌流傷害（ＩＲＩ）が、ＳＤＦ−１（ＣＸＣＬ１２）の腎臓レベルが骨髄中のものを上回る急激な上昇を引き起こすようにすることが示された。このことは、ＣＸＣＲ４発現（ＳＤＦ−１レセプター）細胞（例えば、投与された間葉系幹細胞（ＭＳＣ）、循環内皮前駆細胞など）の腎臓ホーミングを強化する。ＡＫＩの直後および２４時間後のＭＳＣ、およびそれらの投与は、腎機能を強力に保護し、複雑なパラクリン機構を介する腎修復を促進する。よって、ＡＫＩ後の尿中ＳＤＦ−１／クレアチニン濃度比の顕著な上昇は、ＡＫＩの早期診断を促進し、腎へのＭＳＣのホーミングが、この時点で与えられる場合には、強化され得ることを同時に示す。このことは、続いて、最適化された腎臓の保護および修復を生じる。
【００３２】
（医療用途）
本発明の組成物は、患者の体液中のＳＤＦ−１の検出を介して、器官もしくは腎臓の病状を検出および／もしくは診断するために有用である。好ましくは、これら体液は、血清および／もしくは尿である。腎臓の病状としては、急性腎損傷（ＡＫＩ）が挙げられる。ＡＫＩは、腎前性の原因（低下した血液容積、肝腎症候群、血管の病状、および感染が挙げられる）によって引き起こされ得る。ＡＫＩはまた、腎性の原因（毒素、横紋筋融解、溶血、多発性骨髄腫、および急性糸球体腎炎が挙げられる）によって引き起こされ得る。ＡＫＩはまた、腎後性の原因（通常の膀胱が空になることを妨げる医薬、前立腺癌、腎臓結石、腹部悪性腫瘍、もしくは遮断された尿カテーテルが挙げられる）によって引き起こされ得る。ＡＫＩによってしばしば開始される多臓器不全の状況における他の主要器官の種々の傷害、またはＡＫＩ自体はまた、ＳＤＦ−１のアップレギュレーションを引き起こす。
【００３３】
本発明の組成物はまた、ＡＫＩと関連したＭＳＣ治療の投与のタイミングに有用である。ＳＤＦ−１レベルが、患者の尿中で高いときに、ＭＳＣは、ＡＫＩの処置のために投与されるべきである。さらに、ＣＤ２６インヒビターは、上記患者に投与され得、上記患者の尿中のＳＤＦ−１レベルが上記患者において決定され得、ここで上記ＳＤＦ−１レベルが高いときに、ＭＳＣ治療は、患者に投与される。本発明の組成物はまた、移植されるべき腎臓が、ＭＳＣの投与と共に移植されるべきであるか否かを決定するために有用である。ドナーの尿が、多量のＳＤＦ−１を含む場合、上記ドナーの腎臓が上記患者に移植されるときに、治療上有効な用量のＭＳＣと同時に投与することは好ましい。
【００３４】
さらに、腎臓および他の場所でＳＤＦ−１を不活性化する基本的な酵素であるＣＤ２６（ジペプチジルペプチダーゼＩＶ）の薬理学的阻害は、臨床的に使用中である薬物（例えば、シタグリプチン、ＪａｎｕｖｉａTM）で容易に可能であるので、ＣＤ２６インヒビターおよびＭＳＣの両方でのＡｋｉを有する患者の処置は、投与されたＭＳＣの、腎臓へのＳＤＦ−１媒介性補充を高める。このことは、続いて、それらの腎臓保護効力を強化すると同時に、少数のＭＳＣしか必要としない。この組み合わせ治療は、よって上記患者にとって有利であり、ＭＳＣの生成コストも下げる。
【００３５】
レシピエントにおける採取の時期および移植の時期での、ドナー腎臓の機能は、後の移植片機能の遅れ（ＤＧＦ）の程度（すなわち、移植後ＡＫＩの重篤度）を決定する。このことは、続いて、腎移植レシピエントにおける初期の結果（透析の必要性、入院期間の増大、ＡＫＩの罹病率および死亡率）およびその後の、拒絶に起因する移植片喪失の頻度の両方を決定する。腎採取時、移植時、および移植後の尿中ＳＤＦ−１およびクレアチニンレベルの測定は、上記レシピエントにおける移植片機能の予後予測的評価を可能にし、ＭＳＣ投与自体、またはＣＤ２６インヒビターと一緒の投与が、顕著なＤＧＦに対する保護および拒絶に起因するその後の移植片喪失の二次的な上昇において有益であることを決定する。
【００３６】
（間葉系幹細胞（ＭＳＣ））
本発明に従うＭＳＣは、例えば、米国特許出願公開第２００７０１７８０７１号（その全体が本明細書に参考として援用される）に記載されている。血小板溶解物（ＰＬ）中でのＭＳＣの培養は、米国仮特許出願第６１／０８６，０３３号（これもまた、その全体が本明細書に参考として援用される）に非常に詳細に記載されている。治療上有効な投与量のＭＳＣの特定の実施形態は、米国特許出願第１１／９１３，９００号（これもまた、その全体が本明細書に参考として援用される）に非常に詳細に記載されている。ＭＳＣの治
療効果を強化するためにＣＤ２６インヒビターを使用することは、国際出願番号ＰＣＴ／ＵＳ０８／００１３７１（これもまた、その全体が本明細書に参考として援用される）に記載されている。密度勾配によるＭＳＣの単離の特定の実施形態は、米国特許出願公開第２００７０１６０５８３号（これもまた、その全体が本明細書に参考として援用される）に示される。
【００３７】
（定義）
別段定義されなければ、本明細書で使用される全ての技術用語および科学用語は、本発明が属する分野の当業者によって一般に理解されるものと同じ意味を有する。本明細書に記載されるものと類似もしくは等価な方法および材料が、本発明の実施もしくは試験する上で使用され得るが、適切な方法および材料は、以下に記載される。本明細書で言及される全ての刊行物、特許出願、特許および他の参考文献は、それらの全体が本明細書に参考として援用される。矛盾する場合、定義を含め、本願明細書が優先する。さらに、材料、方法および実施例は、例示に過ぎず、限定であることを意図しない。本発明の他の特徴および利点は、以下の詳細な説明および特許請求の範囲から明らかである。
【００３８】
本明細書で記載される実施形態の理解を促進する目的で、好ましい実施形態に言及がなされ、特定の語句が、これを記載するために使用される。本明細書で使用される用語法は、特定の実施形態を記載する目的のみであり、本発明の範囲を限定することは意図されない。この開示全体を通して使用される場合、単数形「１つの、ある（ａ）」、「１つの、ある（ａｎ）」、および「上記、この、その（ｔｈｅ）」は、文脈が明らかに別のことを指さなければ、複数形を含む。従って、例えば、「１つの（ある）組成物」への言及は、複数のこのような組成物、同様に単数の組成物を含み、「１つの（ある）治療剤」への言及は、１つ以上の治療剤および／もしくは薬剤ならびに当業者に公知のその等価物などへの言及である。従って、例えば、「１つの（ある）宿主細胞」への言及は、複数のこのような宿主細胞を含み、「１つの（ある）抗体」への言及は、１種以上の抗体および当業者に公知のその等価物などへの言及である。
【００３９】
本明細書に記載される実施形態の理解を促進する目的で、患者もしくは被験体のサンプル中のＳＤＦ−１の多量もしくはより多量が意味することに、言及が為される。本発明は、ＳＤＦ−１の量、レベルおよび／もしくは濃度が、ＡＫＩを有する患者もしくは被験体の血液もしくは血清中で顕著に上昇していないが、ＡＫＩを有する患者および被験体の尿中のＳＤＦ−１の量、レベルおよび／もしくは濃度が顕著に上昇しているという予測外の所見に基づいている。本発明はまた、ＳＤＦ−１の量、レベルおよび／もしくは濃度が、多臓器不全（ＭＯＦ）を有する患者もしくは被験体の血液もしくは血清および尿中で顕著に上昇するという予測外の所見に基づく。
【００４０】
いくつかの実施形態において、ＳＤＦ−１の量は、尿中クレアチニンの量、レベルおよび／もしくは濃度に対して正規化される。この場合、ＡＫＩに罹患しているもしくはＡＫＩに罹った患者もしくは被験体におけるＳＤＦ−１の増加量は、少なくとも２倍、少なくとも５倍、少なくとも１０倍、少なくとも２０倍、少なくとも３０倍、少なくとも４０倍、少なくとも５０倍、少なくとも６０倍、少なくとも７０倍、少なくとも８０倍、少なくとも９０倍および少なくとも１００倍増大し得る。倍数増加は、ＡＫＩの開始時と、尿サンプルが上記ＡＫＩに罹患しているもしくは罹患した患者もしくは被験体から採取される時期との間の時間量に依存する。コントロールを上回るＳＤＦ−１の最高の倍数誘導は、ＡＫＩ後２時間〜２４時間の間（例えば、ＡＫＩ後４時間、６時間、８時間、１０時間、１２時間、１４時間、１６時間、１８時間、２０時間、および／もしくは２２時間）であるはずである。上記患者もしくは被験体の尿中のＳＤＦ−１の量、レベルもしくは濃度は、この期間の後に徐々に減少するはずである。
【実施例】
【００４１】
以下の実施例は、本発明の方法および組成物の例示であるが限定ではない。治療において通常遭遇し、当業者にとって明らかな種々の条件およびパラメーターの他の適切な改変および適合は、上記実施形態の趣旨および範囲内である。
【００４２】
（実施例１：ＳＤＦ−１レベルは、急性腎損傷に罹ったラットにおいて増大する）
ラットにおけるＡＫＩの標準的虚血／再灌流モデル（例えば、両方の腎動脈の一時的クランプ止め、続いて、クランプ除去後の再灌流）を使用して、血清および尿中のＳＤＦ−１レベル（特異的ＥＬＩＳＡ；Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）を、血清クレアチニンレベルおよび尿中クレアチニンレベルとともに、ＡＫＩの誘導後２時間、５時間、１２時間、２４時間、４８時間および７２時間にモニターし、およびＡＫＩの７日後に再びモニターした。ＳＤＦ−１の血清レベルは、これら時点で最小限にしか上昇しなかった一方で、ＳＣｒレベルは、７２時間にわたって次第に上昇し、７日目にベースラインに向かって徐々に下降した。対照的に、尿中ＳＤＦ−１レベル（尿中クレアチニンに対して正規化した）は、２時間、５時間、１２時間および２４時間で非常に顕著に上昇し、その後徐々に低下した。尿中ＳＤＦ−１／クレアチニン濃度比は、２時間で１３倍、５時間で６８倍、２４時間で４倍、およびＩＲＩ後７日で１．７倍（対  ベースライン）、顕著に増加した。このことは、腎臓で生成されたＳＤＦ−１が、尿中に放出されることを示す。ＳＤＦ−１の血中レベルは、腎機能が低下するにつれても本質的に変化しないままであるので、血中ＳＤＦ−１の、尿中ＳＤＦ−１レベルへの貢献度は、無視してよい。現在の研究は、血清、腎臓（ｍＲＮＡ、タンパク質）、および尿において、ラットにおけるＡＫＩ後のＳＤＦ−１発現プロフィールをさらに規定している。
【００４３】
（実施例２：ＳＤＦ−１レベルが尿サンプル中で上昇したときに急性腎損傷に罹ったラットへ投与されたＭＳＣは、保護された腎機能および加速した回復を生じる）
ラットにおける同じＡＫＩモデルを使用して、ＭＳＣを、以前のように（Ｆ．Ｔｏｅｇｅｌ  Ｃ．  Ｗｅｓｔｅｎｆｅｌｄｅｒ．  Ａｍ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｒｅｎａｌ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  ２８９：Ｆ３１−Ｆ４２，２００５）、尿中ＳＤＦ−１レベルがそのピークを迎えたとき（ＡＫＩ後約５時間）およびＳＤＦ−１レベルが落ち始めたとき（２４時間後）に投与した。ＭＳＣの早期の投与は、腎機能の保護および腎機能の回復の加速において最も有効であった。
【００４４】
（実施例３：ＳＤＦ−１レベルは、急性腎損傷に罹患したヒトにおいて増加している）
血清ＳＤＦ−１レベルおよび尿中ＳＤＦ−１レベルを、血清クレアチニンレベルおよび尿中クレアチニンレベルとともに、急性腎損傷（ＡＫＩ）に罹患したヒト被験体においてモニターし、ＡＫＩ後７日目に再びモニターし、ＡＫＩを経験していないヒト被験体におけるＳＤＦ−１レベルと比較する。ＳＤＦ−１の血清レベルは、これら時点において最小限にしか上昇しないと予測される一方で、ＳＣｒレベルは、７２時間にわたって次第に上昇し、７日目にベースラインに向かって徐々に低下する。対照的に、本発明者らは、尿中ＳＤＦ−１レベル（尿中クレアチニンに対して正規化した）が、２時間、５時間、１２時間、および２４時間で顕著に上昇し、その後徐々に低下すると予測する。
【００４５】
（実施例４：ＭＳＣ投与後のラットにおけるＡＫＩの血中ＳＤＦ−１、腎臓ＳＤＦ−１および尿中ＳＤＦ−１の発現レベル）
血中ＳＤＦ−１、尿中ＳＤＦ−１および腎臓ＳＤＦ−１のレベルを、ＡＫＩに罹ったラット（例えば、両方の腎動脈を一時的にクランプ止めし、続いて、クランプ除去後に再灌流）においてモニターする。ＳＤＦ−１レベルを、ＡＫＩの誘導後２時間、５時間、１２時間、２４時間、４８時間、および７２時間でモニターし、ＡＫＩ後７日目に再びモニターする。本発明者らは、ＳＤＦ−１の血清レベルが、これら時点で最小限にしか上昇しない一方で、ＳＤＦ−１の腎臓レベルおよび尿中レベルは、２時間、５時間、１２時間およ
び２４時間で顕著であり、その後徐々に低下すると予測する。
【００４６】
（実施例５：ＭＳＣ投与後のラットにおける慢性腎疾患モデルの血中ＳＤＦ−１、腎臓ＳＤＦ−１および尿中ＳＤＦ−１の発現レベル）
血中ＳＤＦ−１、尿中ＳＤＦ−１および腎臓ＳＤＦ−１のレベルを、慢性腎疾患モデルに供したラットにおいてモニターする。ＳＤＦ−１レベルを、慢性腎疾患の誘導後の種々の時点でモニターし、慢性腎疾患の誘導後７日目に再びモニターする。本発明者らはまた、慢性腎疾患に罹り、ＭＳＣ治療で処置したラットにおける血液、尿および腎臓中のＳＤＦ−１の発現を評価する。
【００４７】
（実施例６：ＭＳＣ投与ありまたはなしの、後に腎移植のドナーをつとめるラットにおける血中ＳＤＦ−１、腎臓ＳＤＦ−１および尿中ＳＤＦ−１の発現レベル）
血中ＳＤＦ−１、尿中ＳＤＦ−１および腎臓ＳＤＦ−１のレベルを、腎臓ドナーをつとめるラットにおいてモニターする。本発明者らはまた、ＭＳＣ治療で処置している腎臓ドナーを務めるラットにおいて血液、尿および腎臓中のＳＤＦ−１の発現を評価する。
【００４８】
（実施例７：ＭＳＣ投与ありまたはなしの、後に腎移植のためのドナーをつとめるヒトにおける血中ＳＤＦ−１、腎臓ＳＤＦ−１および尿中ＳＤＦ−１の発現レベル）
血液ＳＤＦ−１、尿中ＳＤＦ−１および腎臓ＳＤＦ−１のレベルを、腎臓ドナーをつとめるヒトにおいてモニターする。本発明者らはまた、ＭＳＣ治療で処置している腎臓ドナーをつとめるヒト被験体における血液、尿および腎臓におけるＳＤＦ−１の発現を評価する。