【手続補正書】
【提出日】平成24年9月24日(2012.9.24)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
配列番号２３の位置Ａ１２２に対応する位置での突然変異及び配列番号２３の位置Ｓ６５３に対応する位置での突然変異を含むアブラナ属アセトヒドロキシ酸シンターゼ大サブユニット（ＡＨＡＳＬ）タンパク質をコードする単離核酸分子、組換え核酸分子、突然変異誘発核酸分子、又は合成核酸分子。
【請求項２】
（ａ）配列番号２３の位置Ａ１２２に対応する位置での突然変異が、アラニンからトレオニンへの置換であるか、又は
（ｂ）配列番号２３の位置Ｓ６５３に対応する位置での突然変異が、セリンからアスパラギンへの置換である、
請求項１に記載の単離核酸分子、組換え核酸分子、突然変異誘発核酸分子、又は合成核酸分子。
【請求項３】
ＡＨＡＳ阻害性除草剤による阻害に抵抗性のＡＨＡＳＬタンパク質をコードし、好ましくはコードＡＨＡＳＬタンパク質が、それぞれの単一置換を含有する核酸分子によってコードされるＡＨＡＳＬタンパク質の相加的なレベルと比較して、ＡＨＡＳ阻害性除草剤による阻害に対する相乗的なレベルの抵抗性を示す、請求項１又は２に記載の単離核酸分子、組換え核酸分子、突然変異誘発核酸分子、又は合成核酸分子。
【請求項４】
（ａ）ＢＮ０２−１３１のアミノ酸配列（配列番号２１）を有するＡＨＡＳタンパク質をコードするか、又は
（ｂ）ＢＮ０２−１３１の核酸配列（配列番号１６）を有する、
請求項１に記載の単離核酸分子、組換え核酸分子、突然変異誘発核酸分子、又は合成核酸分子。
【請求項５】
セイヨウアブラナＡＨＡＳ  ＩＩＩタンパク質をコードする、請求項１〜４のいずれかに記載の単離核酸分子、組換え核酸分子、突然変異誘発核酸分子、又は合成核酸分子。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれかに記載の単離核酸分子を含む発現ベクター。
【請求項７】
請求項１〜５のいずれかに記載の単離核酸分子を含み、少なくともＡＨＡＳ阻害除草剤に耐性のアブラナ属植物。
【請求項８】
（ａ）セイヨウアブラナ、カブ及びセイヨウカラシナから成る群から選択されるアブラナ属種であるか、及び／又は
（ｂ）第２の突然変異ＡＨＡＳＬタンパク質を含むか、及び／又は
（ｃ）突然変異誘発核酸分子が、組換え発現ベクターの一部であるか、及び／又は
（ｄ）アブラナ属種がイミダゾリノン除草剤、スルホニルウレア除草剤、トリアゾロピリミジン除草剤、ピリミジニルオキシベンゾエート除草剤、スルホニルアミノ−カルボニルトリアゾリノン除草剤、及びそれらの混合物から成る群から選択されるＡＨＡＳ阻害性除草剤の少なくとも一つに抵抗性であるか、及び／又は
（ｅ）植物が非トランスジェニックである、
請求項７に記載のアブラナ属植物。
【請求項９】
対象とするタンパク質をコードする、少なくとも１つのさらなる核酸分子をさらに含み、前記少なくとも１つのさらなる核酸分子が、ＡＨＡＳ耐性、グリホサート耐性、ジカンバ耐性、ＰＰＯ阻害剤耐性、昆虫抵抗性、グルホシネート耐性、ＨＰＰＤ阻害剤耐性オーキシン除草剤耐性、及び耐病性から成る群から選択される、対象とする形質を提供する、対象とするタンパク質をコードし、
好ましくは対象とするタンパク質が、ＡＨＡＳ阻害剤耐性を提供し、
（ａ）対象とするタンパク質が、Ａ１２２、Ｐ１９７、Ｒ１９９、Ｔ２０３、Ａ２０５、Ｗ５７４、Ｓ６５３、Ｇ６５４、及びその組合せから成る群から選択されるアミノ酸位置に少なくとも１つの突然変異を有するアミノ酸分子を含むＡＨＡＳタンパク質であるか、又は
（ｂ）ＡＨＡＳ耐性が、ＰＭ１、ＰＭ２、及びＢＲ１並びにその組合せから成る群から選択される遺伝子によってコードされる、
請求項７又は８に記載のアブラナ属植物。
【請求項１０】
請求項１〜５のいずれかに記載の突然変異誘発核酸分子を含むアブラナ属植物を、作出するかアブラナ属植物を作出することができるアブラナ属種子。
【請求項１１】
請求項１〜５のいずれかに記載の突然変異核酸分子を含むアブラナ属植物を作出することができる種子を少なくとも１０％含む、アブラナ属種子の容器。
【請求項１２】
アブラナ属植物の畑の雑草を防除するための方法であって、以下のステップを含む方法：
（ａ）前記畑に、突然変異誘発アセトヒドロキシ酸シンターゼ大サブユニット（ＡＨＡＳＬ）をコードする、除草剤抵抗性のＡＨＡＳＬタンパク質をコードする請求項１〜５のいずれかに記載の突然変異誘発核酸分子をゲノム中に少なくとも一つ含むアブラナ属植物成長せしめるステップ；及び
（ｂ）アブラナ属植物の畑の雑草及びアブラナ属植物に、有効量の少なくとも１つのＡＨＡＳ阻害性除草剤を適用するステップ、前記有効量の除草剤は野生種のアブラナ科属植物を枯らすかその成長を阻害するために十分である。
【請求項１３】
（ａ）アブラナ属植物が、セイヨウカラシナ、セイヨウアブラナ、カブ、アビシニアガラシ、キャベツ、及びクロガラシから成る群から選択されるか、
（ｂ）ＡＨＡＳ阻害性除草剤が、イミダゾリノン除草剤、スルホニルウレア除草剤、トリアゾロピリミジン除草剤、ピリミジニルオキシベンゾエート除草剤、及びそれらの混合物から成る群から選択されるか、又は
（ｃ）アブラナ属植物が非トランスジェニックである、
請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
アブラナ属植物を育種するための、以下のステップを含む方法：
第１のアブラナ属系統を与えるステップ、該第１のアブラナ属系統は請求項１〜５のいずれかに記載の突然変異誘発核酸分子を含む
前記第１のアブラナ属系統を第２のアブラナ属系統と交雑させるステップ；及び
種子を得るステップ。
【請求項１５】
ＡＴＣＣ寄託番号ＰＴＡ−９２７８の下で寄託された系統の種子の代表的サンプルであるＢｎＣＬ１２０Ｃ７と称するアブラナ属植物系統の種子又はその子孫であるアブラナ属植物の系統の種子。
【請求項１６】
ＡＴＣＣ寄託番号ＰＴＡ−９２７９の下で寄託された系統の種子の代表的サンプルであるＢｎＣＬ１３１Ａｌと称するアブラナ属植物系統の種子又はその子孫であるアブラナ属植物の系統の種子。
【請求項１７】
ＡＴＣＣ寄託番号ＰＴＡ−９４０２の下で寄託された系統の種子の代表的サンプルであるＢｎＣＬ１４ＯＢ３と称するアブラナ属植物系統の種子又はその子孫であるアブラナ属植物の系統の種子。
【請求項１８】
ＡＴＣＣ寄託番号ＰＴＡ−９４０３の下で寄託された前記系統の種子の代表的サンプルであるＢｎＣＬ１４０Ｃ７と称するアブラナ属植物系統の種子又はその子孫であるアブラナ属植物の系統の種子。
【請求項１９】
請求項１５〜１８のいずれかに記載の種子から成長させた植物。
【請求項２０】
配列番号２３の位置１２２に対応する位置にトレオニンを有するアブラナ属アセトヒドロキシ酸シンターゼ大サブユニット（ＡＨＡＳＬ）タンパク質をコードする突然変異核酸分子を含むアブラナ属植物。
【請求項２１】
ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−９２７９の下で寄託された上述の系統の種子の代表的サンプル、突然変異系統ＢｎＣＬ１３１Ａ１の種子を成長させることから得られたアブラナ属植物である、請求項２０に記載のアブラナ属植物。
【請求項２２】
１つ又は複数のアミノ酸位置で突然変異しているＡＨＡＳタンパク質を発現する突然変異体ＡＨＡＳ遺伝子を含む、少なくとも１つのＡＨＡＳ阻害性除草剤に耐性の非トランスジェニックアブラナ属植物であって、前記位置が、配列番号２３のＡ１２２及びＰ１９７から成る群から選択される位置に対応する上記非トランスジェニックアブラナ属植物。
【請求項２３】
（ａ）変異体ＡＨＡＳ遺伝子によって発現されたＡＨＡＳタンパク質が、配列番号２３のＲ１９９、Ｔ２０３、Ａ２０５、Ｓ６５３、及び０６５４から成る群から選択される位置に対応する、１つ又は複数のさらなるアミノ酸位置でさらに突然変異しているか、
（ｂ）ＡＨＡＳタンパク質が、配列番号２３の位置Ｐ１９７及び位置Ｗ５７４に対応する２つの位置で突然変異しているか、
（ｃ）ＡＨＡＳタンパク質が、配列番号２３の位置Ａ１２２及び位置Ｗ５７４に対応する２つの位置で突然変異しているか、
（ｄ）ＡＨＡＳタンパク質が、配列番号２３の位置Ａ１２２、位置Ｐ１９７、及び位置Ｗ５７４に対応する３つの位置で突然変異しているか、
（ｅ）ＡＨＡＳタンパク質が、配列番号２３の位置Ｐ１９７及びＡ１２２に対応する位置で突然変異しているか、
（ｆ）ＡＨＡＳタンパク質が、配列番号２３の位置Ｐ１９７に対応する位置で突然変異しているか、又は
（ｇ）ＡＨＡＳタンパク質が、位置Ａ１２２に対応する位置で突然変異していて、
好ましくはＡＨＡＳタンパク質遺伝子が、配列番号２３の位置１２２に対応する位置にトレオニンを含み、配列番号２３の位置６５３に対応する位置にアスパラギンをさらに含む、
請求項２２に記載の非トランスジェニックアブラナ属植物。
【請求項２４】
配列番号２３の位置Ａ１２２に対応する位置に突然変異を含むセイユウアブラナアセトヒドロキシ酸シンターゼ大サブユニット（ＡＨＡＳＬ）タンパク質をコードする単離核酸分子、組換え核酸分子、突然変異誘発核酸分子、又は合成核酸分子。
【請求項２５】
（ａ）配列番号２３の位置Ａ１２２に対応する位置での突然変異が、配列番号２３の位置Ａ１２２に対応する位置での突然変異が、アラニンからトレオニンへの置換であり、好ましくはＢＮ０２−１２０の核酸配列（配列番号１５）を有するか、
（ｂ）ＡＨＡＳ阻害性除草剤による阻害に抵抗性のＡＨＡＳタンパク質をコードするか、又は
（ｃ）セイヨウアブラナＡＨＡＳ  ＩＩＩタンパク質をコードする、
請求項２４に記載の単離核酸分子、組換え核酸分子、突然変異誘発核酸分子、又は合成核酸分子。
【請求項２６】
請求項２４又は２５に記載の単離突然変異誘発セイヨウアブラナ核酸分子を含む発現ベクター。
【請求項２７】
少なくとも１つのＡＨＡＳ阻害性除草剤に抵抗性である、請求項２４又は２５に記載の単離突然変異誘発セイヨウアブラナ核酸分子を含む発現ベクター。
【請求項２８】
（ａ）セイヨウアブラナ、カブ及びセイヨウカラシナから成る群から選択されるアブラナ属種であるか、
（ｂ）第２の突然変異ＡＨＡＳＬタンパク質を含むか、又は
（ｃ）アブラナ属種がイミダゾリノン除草剤、スルホニルウレア除草剤、トリアゾロピリミジン除草剤、及びそれらの混合物から成る群から選択されるＡＨＡＳ阻害性除草剤の少なくとも一つに抵抗性であるか、又は
（ｄ）植物が非トランスジェニックアブラナ属植物である、
請求項２７に記載のアブラナ属植物。
【請求項２９】
請求項２４又は２５に記載の突然変異誘発核酸分子を含むアブラナ属植物を、作出するかアブラナ属植物を作出することができるアブラナ属種子。
【請求項３０】
請求項２４又は２５に記載の突然変異核酸分子を含むアブラナ属植物を作出することができる種子を少なくとも１０％含む、アブラナ属種子の容器。
【請求項３１】
アブラナ属植物の畑の雑草を防除するための方法であって、以下のステップを含む方法：
（ａ）前記畑に、突然変異誘発アセトヒドロキシ酸シンターゼ大サブユニット（ＡＨＡＳＬ）をコードする、除草剤抵抗性のＡＨＡＳＬタンパク質をコードする請求項２４又は２５に記載の突然変異誘発核酸分子をゲノム中に少なくとも一つ含むアブラナ属植物を成長せしめるステップ；及び
（ｂ）アブラナ属植物の畑の雑草及びアブラナ属植物に、有効量の少なくとも１つのＡＨＡＳ阻害性除草剤を適用するステップ、前記有効量の除草剤は野生種のアブラナ科属植物を枯らすかその成長を阻害するために十分である。
【請求項３２】
（ａ）ＡＨＡＳ阻害性除草剤が、イミダゾリノン除草剤、スルホニルウレア除草剤、トリアゾロピリミジン除草剤、ピリミジニルオキシベンゾエート除草剤、及びそれらの混合物から成る群から選択されるか、
（ｂ）アブラナ属植物が非トランスジェニックであるか、又は
（ｄ）アブラナ属植物が、Ａ１２２、Ｐ１９７、Ｒ１９９、Ｔ２０３、Ａ２０５、Ｗ５７４、Ｇ６５４、及びその組合せから成る群から選択される位置に突然変異を有する第２の除草剤抵抗性のＡＨＡＳＬタンパク質をコードする第２のＡＨＡＳＬ核酸分子の少なくとも１つをそのゲノム中に含み、好ましくはアブラナ属植物が、Ａ１２２、Ｐ１９７、Ｒ１９９、Ｔ２０３、Ａ２０５、Ｗ５７４、Ｇ６５４、及びその組合せから成る群から選択される位置に突然変異を有する第３の除草剤抵抗性のＡＨＡＳＬタンパク質をコードする第３のＡＨＡＳＬ核酸分子の少なくとも１つをそのゲノム中に含む、
請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
種子処理製剤によりコートされた、請求項１０、１５、１６，１７、１８又は２９に記載のアブラナ属種子。
【請求項３４】
ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−１０３２１の下で寄託された系統の種子の代表的サンプルであるＰＭ１ＰＭ２／ＢｎＣＬ１３１Ａｌと称されるアブラナ属系統の種子又はその子孫であるアブラナ属植物の系統の種子。
【請求項３５】
請求項８、９、１９、２０、２１、２２、２３、２７又は２８に記載の植物からの植物の一部分。