【手続補正書】
【提出日】平成26年6月19日(2014.6.19)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般構造Ｂ−ＬＭ−Ａを有する単鎖インスリンアゴニスト類縁体であって、
Ｂは、配列Ｘ25ＬＣＧＸ29Ｘ30ＬＶＸ33Ｘ34ＬＹＬＶＣＧＤＸ42ＧＦＸ45（配列番号５８）を有するインスリンのＢ鎖であり、
Ａは、配列ＧＩＶＸ4Ｘ5ＣＣＸ8Ｘ9Ｘ10ＣＸ12ＬＸ14Ｘ15ＬＸ17Ｘ18Ｘ19ＣＸ21−Ｒ13（配列番号２２）を有するインスリンのＡ鎖であり、
ＬＭは、前記Ｂ鎖のカルボキシ末端と前記Ａ鎖のアミノ末端とを結合する橋渡し部分であり、
Ｒ13は、ＣＯＯＨまたはＣＯＮＨ2であり、
Ｘ4は、グルタミン酸またはアスパラギン酸であり、
Ｘ5は、グルタミンまたはグルタミン酸であり、
Ｘ8は、ヒスチジン、スレオニン、またはフェニルアラニンであり、
Ｘ9は、セリン、アルギニン、リジン、オルニチン、またはアラニンであり、
Ｘ10は、イソロイシンまたはセリンであり、
Ｘ12は、セリンまたはアスパラギン酸であり、
Ｘ14は、チロシン、アルギニン、リジン、オルニチン、またはアラニンであり、
Ｘ15は、グルタミン、グルタミン酸、アルギニン、アラニン、リジン、オルニチン、またはロイシンであり、
Ｘ17は、グルタミン、グルタミン酸、アルギニン、アスパラギン酸、リジン、またはオルニチンであり、
Ｘ18は、メチオニン、アスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、またはスレオニンであり、
Ｘ19は、チロシン、４−メトキシフェニルアラニン、または４−アミノフェニルアラニンであり、
Ｘ21は、アラニン、グリシン、セリン、バリン、スレオニン、イソロイシン、ロイシン、グルタミン、グルタミン酸、アスパラギン、アスパラギン酸、ヒスチジン、トリプトファン、チロシン、およびメチオニンからなる群から選択され、
Ｘ25は、ヒスチジンおよびスレオニンからなる群から選択され、
Ｘ29は、アラニン、グリシン、およびセリンからなる群から選択され、
Ｘ30は、ヒスチジン、アスパラギン酸、グルタミン酸、ホモシステイン酸、およびシステイン酸からなる群から選択され、
Ｘ33は、アスパラギン酸、グルタミン、およびグルタミン酸からなる群から選択され、
Ｘ34は、アラニンおよびスレオニンからなる群から選択され、
Ｘ41は、アスパラギン酸、アスパラギン、およびグルタミン酸からなる群から選択され、
Ｘ42は、アラニン、リジン、オルニチン、およびアルギニンからなる群から選択され、
Ｘ45は、チロシン、ヒスチジン、アスパラギン、およびフェニルアラニンからなる群から選択され、
ここでさらに、前記橋渡し部分は、８〜１０個のアミノ酸の配列からなり、
前記８〜１０個のアミノ酸配列は、以下の（ｉ）〜（ｉｉ）のいずれかを含む、インスリン類縁体：
（ｉ）配列Ｘ51Ｘ52Ｘ53Ｘ54Ｘ55ＳＲＲ（配列番号２６）
（式中、
Ｘ51は、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、およびメチオニンからなる群から選択され、
Ｘ52は、チロシン以外のアミノ酸であり、
Ｘ53、Ｘ54、およびＸ55は各々独立に、グリシン、アラニン、セリン、スレオニン、およびプロリンからなる群から選択される）；または、
（ｉｉ）配列Ｘ51Ｘ52ＧＳＳＳＸ57Ｘ58（配列番号２９）
（式中、
Ｘ51は、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、およびメチオニンからなる群から選択され、
Ｘ52は、非芳香族アミノ酸であり、
Ｘ57およびＸ58は各々独立に、アルギニン、リジン、およびオルニチンからなる群から選択され、
Ｒ22は、ＡＹＲＰＳＥ（配列番号１４）、ＦＶＮＱ（配列番号１２）、ＰＧＰＥ（配列番号１１）、トリペプチドであるグリシン−プロリン−グルタミン酸、トリペプチドであるバリン−アスパラギン−グルタミン、ジペプチドであるプロリン−グルタミン酸、ジペプチドであるアスパラギン−グルタミン、グルタミン、グルタミン酸、および、Ｎ末端アミンからなる群から選択される）。
【請求項２】
前記橋渡し部分は、配列ＧＸ52ＧＳＳＳＲＲ（配列番号３１）を有する８個のアミノ酸の配列（ここで、Ｘ52は、Ｘ52はチロシン以外である）であるか、または、配列番号３１の１番目、３番目、４番目、５番目、６番目、７番目、または８番目のいずれかの位置における１つのアミノ酸置換によって配列番号３１とは異なる配列である、請求項１に記載のインスリン類縁体。
【請求項３】
前記橋渡し部分のアミノ酸、前記Ａ鎖のＡ９、Ａ１４、およびＡ１５からなる群から選択される位置におけるアミノ酸、または、前記Ｂ鎖の位置Ｂ１、Ｂ２、Ｂ１０、Ｂ２２、Ｂ２８、もしくはＢ２９におけるアミノ酸のいずれかに、親水体が共有結合している、請求項１または２に記載のインスリン類縁体。
【請求項４】
前記親水体はポリエチレングリコール鎖であって、
前記ポリエチレングリコール鎖は、前記橋渡し部分のＣ７もしくはＣ８の位置におけるアミノ酸の側鎖、前記Ｂ鎖のＮ末端のαアミン、前記Ａ鎖のＡ１４の位置におけるアミノ酸の側鎖、または、前記Ｂ鎖のＢ１、Ｂ２、Ｂ２２、もしくはＢ２９の位置におけるアミノ酸の側鎖のいずれかに共有結合している、請求項３に記載のインスリン類縁体。
【請求項５】
ＬＭは、前記Ｂ鎖のカルボキシ末端と前記Ａ鎖のアミノ末端とを結合する橋渡し部分であり、
前記橋渡し部分は、配列Ｘ51Ｘ52ＧＳＳＳＸ57Ｘ58（配列番号２９）を有し、
Ｘ51は、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、およびメチオニンからなる群から選択され、
Ｘ52は、非芳香族アミノ酸であり、
Ｘ57およびＸ58は各々独立に、アルギニン、リジン、およびオルニチンからなる群から選択される、請求項１に記載のインスリン類縁体。
【請求項６】
前記橋渡し部分は、以下の（ｉ）または（ｉｉ）からなる８アミノ酸長のペプチドである、請求項１、請求項３、または請求項５に記載のインスリン類縁体：
（ｉ）配列Ｘ51Ｘ52ＧＳＳＳＲＲ（配列番号２７）、または、
（ｉｉ）配列番号２７の３、４、５、６、７、または８番目のいずれかの位置における１つのアミノ酸置換により配列番号２７とは異なるアミノ酸配列
（ここで、Ｘ51は、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、およびメチオニンからなる群から選択され、Ｘ52は非芳香族アミノ酸である）。
【請求項７】
前記橋渡し部分は、ＧＡＧＳＳＳＲＲ（配列番号３２）である、請求項６に記載のインスリン類縁体。
【請求項８】
前記Ａ鎖は、配列ＧＩＶＤＥＣＣＸ8ＲＳＣＤＬＹＱＬＥＮＸ19ＣＮ−Ｒ13（配列番号１９５）、または配列ＧＩＶＥＱＣＣＴＳＩＣＳＬＹＱＬＥＮＹＣＮ（配列番号１）を有し、
前記Ｂ鎖は、配列ＧＰＥＸ25ＬＣＧＳＨＬＶＤＡＬＹＬＶＣＧＤＸ42ＧＦＸ45（配列番号１９６）、または配列ＦＶＮＱＨＬＣＧＳＨＬＶＥＡＬＹＬＶＣＧＥＲＧＦＦＹＴＰＫＴ（配列番号２）を有し、ここで、
Ｘ8は、スレオニン、ヒスチジンまたはフェニルアラニンであり、
Ｘ19は、チロシン、４−メトキシフェニルアラニンまたは４−アミノフェニルアラニンであり、
Ｘ25は、ヒスチジンまたはスレオニンであり、
Ｘ42は、アラニン、オルニチンまたはアルギニンであり、
Ｘ45は、チロシン  ヒスチジン、アスパラギンまたはフェニルアラニンであり、
Ｒ13は、ＣＯＯＨまたはＣＯＮＨ2である、
請求項１、請求項５、または請求項６に記載のインスリン類縁体。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれか１項に記載の単鎖インスリン類縁体のプロドラッグ誘導体であって、
構造Ｕ−Ｂを有し、ここで、
Ｕは、アミノ酸またはヒドロキシ酸であり、
Ｂは、前記単鎖インスリン類縁体のアミンとＢのカルボキシル部分との間のアミド結合を介して前記単鎖インスリン類縁体に結合したＮアルキル化アミノ酸であり、
Ｕ、Ｂ、またはＵ−Ｂが結合している前記単鎖インスリン類縁体上のアミノ酸は、コードされていないアミノ酸であり、
前記単鎖インスリン類縁体からＵ−Ｂが化学反応によって切断される半減期（ｔ1/2）が、ＰＢＳ中にて生理的条件下で少なくとも約１時間から約１週間である、プロドラッグ誘導体。
【請求項１０】
Ｕ−Ｂは、以下の式Ｘの構造を有する、請求項９に記載のプロドラッグ：
2013533864.tif 000001
（式中、
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ4、Ｒ8は各々独立に、Ｈ、Ｃ1〜Ｃ18アルキル、Ｃ2〜Ｃ18アルケニル、（Ｃ1〜Ｃ18アルキル）ＯＨ、（Ｃ1〜Ｃ18アルキル）ＳＨ、（Ｃ2〜Ｃ3アルキル）ＳＣＨ3、（Ｃ1〜Ｃ4アルキル）ＣＯＮＨ2、（Ｃ1〜Ｃ4アルキル）ＣＯＯＨ、（Ｃ1〜Ｃ4アルキル）ＮＨ2、（Ｃ1〜Ｃ4アルキル）ＮＨＣ（ＮＨ2+）ＮＨ2、（Ｃ0〜Ｃ4アルキル）（Ｃ3〜Ｃ6シクロアルキル）、（Ｃ0〜Ｃ4アルキル）（Ｃ2〜Ｃ5複素環）、（Ｃ0〜Ｃ4アルキル）（Ｃ6〜Ｃ10アリール）Ｒ7、（Ｃ1〜Ｃ4アルキル）（Ｃ3〜Ｃ9ヘテロアリール）、Ｃ1〜Ｃ12アルキル（Ｗ1）Ｃ1〜Ｃ12アルキルからなる群から選択され、Ｗ1は、Ｎ、Ｓ、Ｏからなる群から選択されるヘテロ原子であるか、あるいは、
Ｒ1およびＲ2は、これらが結合している原子と一緒になって、Ｃ3〜Ｃ12シクロアルキルまたはアリールを形成するか、あるいは、
Ｒ4およびＲ8は、これらが結合している原子と一緒になって、Ｃ3〜Ｃ6シクロアルキルを形成し、
Ｒ3は、Ｃ1〜Ｃ18アルキル、（Ｃ1〜Ｃ18アルキル）ＯＨ、（Ｃ1〜Ｃ18アルキル）ＮＨ2、（Ｃ1〜Ｃ18アルキル）ＳＨ、（Ｃ0〜Ｃ4アルキル）（Ｃ3−Ｃ6）シクロアルキル、（Ｃ0〜Ｃ4アルキル）（Ｃ2〜Ｃ5複素環）、（Ｃ0〜Ｃ4アルキル）（Ｃ6〜Ｃ10アリール）Ｒ7、（Ｃ1〜Ｃ4アルキル）（Ｃ3〜Ｃ9ヘテロアリール）からなる群から選択されるか、あるいは、Ｒ4およびＲ3は、これらが結合している原子と一緒になって、４員環、５員環または６員環の複素環を形成し、
Ｒ5は、ＮＨＲ6またはＯＨであり、
Ｒ6は、Ｈ、Ｃ1〜Ｃ8アルキルであるか、あるいは、Ｒ6およびＲ1は、これらが結合している原子と一緒になって、４員環、５員環または６員環の複素環を形成し、
Ｒ7は、Ｈ、ＯＨ、Ｃ1〜Ｃ18アルキル、Ｃ2〜Ｃ18アルケニル、（Ｃ0〜Ｃ4アルキル）ＣＯＮＨ2、（Ｃ0〜Ｃ4アルキル）ＣＯＯＨ、（Ｃ0〜Ｃ4アルキル）ＮＨ2、（Ｃ0〜Ｃ4アルキル）ＯＨ、ハロからなる群から選択される。
【請求項１１】
Ｒ1およびＲ2は独立に、Ｃ1〜Ｃ18アルキルまたはアリールであり、
Ｒ3は、Ｃ1〜Ｃ18アルキルであるか、あるいは、Ｒ3およびＲ4は、これらが結合している原子と一緒になって、４〜１２員環の複素環を形成し、
Ｒ4およびＲ8は独立に、水素、Ｃ1〜Ｃ18アルキル、アリールからなる群から選択され、
Ｒ5は、アミンまたはヒドロキシルである、請求項１０に記載のプロドラッグ。
【請求項１２】
Ｒ1は、水素、Ｃ1〜Ｃ18アルキル、アリールからなる群から選択されるか、あるいは、Ｒ1およびＲ2は、−（ＣＨ２）ｐ−（式中、ｐは２〜９である）を介して結合し、
Ｒ3は、Ｃ1〜Ｃ18アルキルであるか、あるいは、Ｒ3およびＲ4は、これらが結合している原子と一緒になって、４〜６員環の複素環を形成し、
Ｒ4およびＲ8は独立に、水素、Ｃ1〜Ｃ18アルキル、アリールからなる群から選択され、
Ｒ5は、アミンまたはＮ置換アミンである、請求項１０に記載のプロドラッグ。
【請求項１３】
Ｒ1およびＲ2は独立に、水素、Ｃ1〜Ｃ8アルキル、アリールからなる群から選択され、
Ｒ3は、Ｃ1〜Ｃ18アルキルであるか、あるいは、Ｒ3およびＲ4は、これらが結合している原子と一緒になって、４〜６員環の複素環を形成し、
Ｒ4およびＲ8は各々水素であり、
Ｒ5は、アミン、Ｎ置換アミン、ヒドロキシルからなる群から選択される、請求項１０に記載のプロドラッグ。
【請求項１４】
前記構造Ｕ−Ｂのアミノ酸または前記橋渡し部分に結合した、ポリエチレングリコール鎖をさらに有するか、または、
前記構造Ｕ−Ｂのアミノ酸または前記橋渡し部分に結合した、デポーポリマーをさらに有する、
請求項９〜１３のいずれか１項に記載のプロドラッグ。
【請求項１５】
前記単鎖インスリンアゴニストのアミノ酸側鎖が、アルキルアミン結合、アミド結合、エーテル結合、エステル結合、チオエーテル結合、またはチオエステル結合を介してアシル基またはアルキル基に共有結合し、
前記アシル基またはアルキル基は、天然のアミノ酸に対して非天然である、請求項１に記載の単鎖インスリンアゴニスト類縁体。
【請求項１６】
請求項１に記載の単鎖インスリンアゴニストを有する、ダイマーまたはマルチマー。
【請求項１７】
請求項１に記載の単鎖インスリンアゴニストまたはそのプロドラッグ誘導体と、薬学的に許容されるキャリアとを含む、薬学的組成物。
【請求項１８】
糖尿病の治療剤である、請求項１７に記載の薬学的組成物。