【手続補正書】
【提出日】平成15年6月12日(2003.6.12)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１９】
＜実施例６〜１２＞
（植物エキスの発ガンプロモーター抑制試験）
次の方法により、各種植物エキスを調製した。即ち、バラ科（Ｒｏｓａｃｅａｅ）モモ属（Ａｍｙｇｄａｌｕｓ）植物、スモモ（Ｐｒｕｎｕｓ）属植物、アンズ属（Ａｒｍｅｎｉａｃａ）植物の乾燥種子の仁５００ｇに５Ｌの５０％エタノールを加え、一週間室温で抽出後、濾過して不溶物を取り除き、更に減圧濃縮をして、その後、凍結乾燥した。そして、本発明の発ガンプロモーター抑制剤である植物エキスを得た。エプスタインーバーウィルス（ＥＢＶ）潜在感染ヒトリンパ芽球様細胞株レイジ（Ｒａｊｉ）細胞の培養液としてＲＰＭＩ１６４０に４％胎仔血清および抗生物質（ペニシリン２００単位／ｍｌ、ストレプトマイシン０．２５ｍｇ／ｍｌ）を加えたものを使用した。この条件下で、ＥＢＶ自然活性率は、０．１％以下であった。１×１０６／ｍｌの濃度に調製したレイジ（Ｒａｊｉ）細胞に、酪酸（４ｍＭ）、１２−Ｏ―テトラデカノイルフォルボールー１３−アセテイト（ＴＰＡ：１２−Ｏ−ｔｅｔｒａｄｅｃａｎｏｙｌｐｈｏｒｂｏｌ−１３−ａｃｅｔａｔｅ）３２ｐＭのＤＭＳＯ溶液を加え、ＣＯ２インキュベーター中、３７℃で４８時間培養後、塗沫標本を作成し、上咽頭癌患者血清を用いた間接蛍光抗体法にてＥＢＶ−ＥＡを染色し、陽性細胞の発現率を１００とし、これを陽性コントロールとした。各サンプルの発現率は、同じくレイジ（Ｒａｊｉ）細胞株に、酪酸４ｍＭ，ＴＰＡ３２ｐＭと各濃度、即ち、１００００  ｍｏｌ  ｒａｔｉｏ／ＴＰＡ濃度のモモ（Ａｍｙｇｄａｌｕｓ  ｐｅｒｓｉｃａ  Ｂａｔｓｃｈ）のエキス、アーモンド（Ａｍｙｇｄａｌｕｓ  ｃｏｍｍｕｎｉｓ）のエキス、スモモ（Ｐｒｕｎｕｓ  ｓａｌｉｃｉｎａ）のエキス、アメリカスモモ（Ｐｒｕｎｕｓ  ａｍｅｒｉｃａｎａ）のエキス、ウメ（Ａｒｍｅｎｉａｃａ  ｍｕｍｅ）のエキス、アンズ（Ａｒｍｅｎｉａｃａ  ｖｕｌｇａｒｉｓ）のエキスのサンプル溶液を加え、同様に培養後算出した。結果を表２に示す。これより、本発明の発ガンプロモーター抑制剤である植物エキスは、１００００  ｍｏｌ  ｒａｔｉｏ／ＴＰＡ濃度において、レイジ（Ｒａｊｉ）細胞に対する早期抗原（ＥＢＶ−ＥＡ）の発現の阻害活性を示した。特に、モモ（Ａｍｙｇｄａｌｕｓ  ｐｅｒｓｉｃａ  Ｂａｔｓｃｈ）のエキスは、阻害活性が高かった。これは、本発明の発ガンプロモーター抑制剤である植物エキスは、ガン細胞の悪性化の過程であるプロモーションを阻害することを示しており、発ガンプロモーター抑制剤がガン予防に有効であることを示している。


【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２１】
＜実施例１３〜１８＞
以下に示す処方に従って、本発明の医薬組成物である顆粒剤を作成した。即ち、下記処方成分を流動層造粒装置に仕込み、良く混合した後、５０％エタノール４０重量部を噴霧して造粒し、４０℃で４８時間乾燥し、篩過して１００メッシュパス２００メッシュオンを取り、本発明のガン防止用の医薬組成物を得た。
デンプン                                                                      ３０  重量部
結晶セルロース                                                          ３３  重量部
乳糖                                                                              ２０  重量部
＊本発明の化合物１〜６                                              ２  重量部
ヒドロキシプロピルセルロース                              １５  重量部
＊表３に詳細を記す。


【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２３】
＜実施例１９〜２９＞
以下に示す処方に従って、本発明の医薬組成物である顆粒剤を作成した。即ち、下記処方成分を流動層造粒装置に仕込み、良く混合した後、５０％エタノール４０重量部を噴霧して造粒し、４０℃で４８時間乾燥し、篩過して１００メッシュパス２００メッシュオンを取り、本発明のガン防止用の医薬組成物を得た。
デンプン                                                                      ３０  重量部
結晶セルロース                                                          ２８  重量部
乳糖                                                                              ２０  重量部
＊本発明の植物エキス                                                  ７  重量部
ヒドロキシプロピルセルロース                              １５  重量部
＊表４に詳細を記す。


【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２５】
＜実施例３０〜３５＞
以下に示す処方に従ってクリームを作製した。即ち、イ、ロ、ハをそれぞれ８０℃に加熱溶解して、イにロを徐々に加え、更にハを加え乳化した後、ホモミキサーにより乳化粒子を均一化し、冷却してクリームを得た。表５に示す。このクリームは、皮膚のシワ・クスミなどの老化現象、ほくろやメラノーマの防止作用があった。
イ）
スクワラン                                  １０  重量部
セタノール                                    ３  重量部
ソルビタンセスキステアレート                  ２  重量部
ポリオキシエチレン（２０）ベヘニルエーテル    ２  重量部
ビタミンＡ酸                                  １  重量部
ロ）
１，３−ブタンジオール                        ５  重量部
＊本発明の化合物１〜６                        １  重量部
カルボキシビニルポリマー                  ０．３  重量部
水                                          ４０  重量部
ハ）
水                                      ３７．３  重量部
水酸化カリウム                            ０．２  重量部
＊表３に詳細を記す。


【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２７】
＜実施例３６〜４６＞
以下に示す処方に従ってクリームを作製した。即ち、イ、ロ、ハをそれぞれ８０℃に加熱溶解して、イにロを徐々に加え、更にハを加え乳化した後、ホモミキサーにより乳化粒子を均一化し、冷却してクリームを得た。表６に示す。このクリームは、皮膚のシワ・クスミなどの老化現象、ほくろやメラノーマの防止作用があった。
イ）
スクワラン                                  １０  重量部
セタノール                                    ３  重量部
ソルビタンセスキステアレート                  ２  重量部
ポリオキシエチレン（２０）ベヘニルエーテル    ２  重量部
ビタミンＡ酸                                  １  重量部
ロ）
１，３−ブタンジオール                        ５  重量部
＊本発明の植物エキス                          ２  重量部
カルボキシビニルポリマー                  ０．３  重量部
水                                          ４０  重量部
ハ）
水                                      ３５．３  重量部
水酸化カリウム                            ０．２  重量部
＊表６に詳細を記す。