【手続補正書】
【提出日】平成26年4月14日(2014.4.14)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
モノクローナル抗体、単離された抗体またはその抗原結合性断片であって、
（ａ）クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）のトキシンＢに特異的に結合し、ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−９６９３で寄託されたハイブリドーマ細胞株によって産生されるモノクローナル抗体の、クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）のトキシンＢに対する結合と交差競合する、および／または、（ｂ）前記ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−９６９３で寄託されたハイブリドーマ細胞株によって産生される、モノクローナル抗体によって認識されるクロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）のトキシンＢのエピトープに特異的に結合する、
ここで、任意に、（ｉ）前記抗体またはその抗原結合性断片が、トキシンＢをｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイで中和するための、６ｐＭ〜９．５ｐＭの範囲であるＥＣ５０値か、５ｐＭのＥＣ５０を有する、または、（ｉｉ）前記抗体またはその抗原結合性断片が、ＥＣ５０値が１．１−１１Ｍ〜６．５−１０Ｍであることを理由に判断して、クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）の高病原性株によって産生されるトキシンＢに対する中和活性を有する、または、（ｉｉｉ）ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−９６９３で寄託された前記ハイブリドーマ細胞株によって産生される、前記モノクローナル抗体によって認識される前記エピトープが、クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキシンＢのＮ末端酵素ドメイン、例えば、クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）のトキシンＢのＮ末端酵素ドメインを含む１０３ｋＤａの断片と６３ｋＤａの断片とを含む、
または、
（ｃ）クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）のトキシンＡに特異的に結合し、ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−９６９２、ＰＴＡ−９６９４またはＰＴＡ−９８８８で寄託されたハイブリドーマ細胞株によって産生されるモノクローナル抗体の、クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）のトキシンＡに対する結合と交差競合する、および／または、（ｄ）前記ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−９６９２、ＰＴＡ−９６９４またはＰＴＡ−９８８８で寄託されたハイブリドーマ細胞株によって産生される、モノクローナル抗体によって認識されるクロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）のトキシンＡのエピトープに特異的に結合する、
ここで、任意に、（ｉ）前記抗体またはその抗原結合性断片が、トキシンＡをｉｎ  ｖｉｔｒｏで中和するための、９３ｐＭ〜３０ｎＭの範囲であるＥＣ５０中和値か、４６ｐＭのＥＣ５０を有する、または、（ｉｉ）前記抗体またはその抗原結合性断片が、ＥＣ５０値が２．６−１２Ｍ〜７．７−１１Ｍまたは７．７−１２Ｍ〜４．８−８Ｍであることを理由に判断して、クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）の高病原性株によって産生されるトキシンＡに対する中和活性を有する、または、（ｉｉｉ）ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−９６９２で寄託された前記ハイブリドーマ細胞株によって産生される、前記モノクローナル抗体によって認識される前記エピトープが、クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキシンＡのトランスロケーションドメインを含む、または、（ｉｖ）ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−９６９４で寄託された前記ハイブリドーマ細胞株によって産生される、前記モノクローナル抗体によって認識される前記エピトープが、クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキシンＡのＣ末端受容体結合エピトープを含む、
または、
（ｅ）モノクローナル抗体ＰＡ−４１（ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−９６９３）またはその抗原結合性断片である、
または、
（ｆ）（ｉ）モノクローナル抗体ＰＡ−３９（ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−９６９２）またはその抗原結合性断片、（ｉｉ）モノクローナル抗体ＰＡ−５０（ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−９６９４）またはその抗原結合性断片、（ｉｉｉ）モノクローナル抗体ＰＡ−３８（ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−９８８８）またはその抗原結合性断片から選択されるモノクローナル抗体である、
ここで、任意に、前記抗体またはその抗原結合性断片は、（ｉ）キメラ形態またはヒト化形態である、および／または、（ｉｉ）モノクローナル抗体であるかモノクローナル抗体由来である、（ｉｉｉ）ヒトである、（ｉｖ）二重特異性抗体であるか二重特異性抗体に含まれる、（ｖ）Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）２断片またはＦｖ断片から選択される、（ｖｉ）単鎖抗体であるか単鎖抗体を含む、
前記モノクローナル抗体、単離された抗体またはその抗原結合性断片。
【請求項２】
（ａ）クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）のトキシンＡまたはトキシンＢのｉｎ  ｖｉｖｏ毒性を中和する、ここで、任意に、（ｉ）１μｇ〜１０００μｇの範囲または１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの範囲の量で、または、（ｉｉ）（Ａ）２、５、１０、５０または１００μｇまたは（Ｂ）４０または５０ｍｇ／ｋｇから選択される用量で、クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）のトキシンＡまたはトキシンＢのｉｎ  ｖｉｖｏ毒性を中和する、または、
（ｂ）クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）のトキシンＡに特異的に結合する、ここで、前記抗体または抗原結合性断片が、クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）のトキシンＢに特異的に結合する単離された抗体またはその抗原結合性断片との組み合わせで、クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）感染症被検体に投与されると、前記被検体の生存性を高める、ここで、任意に、クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）のトキシンＢに特異的に結合する前記抗体または抗原結合性断片が、ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−９６９３で寄託された前記ハイブリドーマ細胞株によって産生される抗体、その抗原結合性断片またはそのヒト化形態である、または、
（ｃ）クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）のトキシンＢに特異的に結合する、ここで、前記抗体または抗原結合性断片が、クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）のトキシンＡに特異的に結合する単離された抗体またはその抗原結合性断片との組み合わせで、クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）感染症被検体に投与されると、前記被検体の生存性を高める、ここで、任意に、クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）のトキシンＡに特異的に結合する前記抗体または抗原結合性断片が、前記ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−９６９２、ＰＴＡ−９６９４またはＰＴＡ−９８８８で寄託されたハイブリドーマ細胞株によって産生される抗体、その抗原結合性断片またはそのヒト化形態である、または、
（ｄ）クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）のトキシンＡに特異的に結合し、クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）感染症被検体に投与されると、クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）のトキシンＢに特異的に結合する単離された抗体またはその抗原結合性断片との組み合わせで、治癒率５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または１００％を達成する、ここで、任意に、前記抗体またはその抗原結合性断片が、（ｉ）２、５、１０、５０または１００μｇまたは（ｉｉ）４０または５０ｍｇ／ｋｇから選択される用量で、前記クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）のトキシンＢのｉｎ  ｖｉｖｏ毒性を中和する、
請求項１に記載の抗体またはその抗原結合性断片。
【請求項３】
二重特異性抗体またはその抗原結合性断片であって、
（ｉ）ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−９６９２、ＰＴＡ−９６９４またはＰＴＡ−９８８８で寄託されたハイブリドーマ細胞株によって産生されるモノクローナル抗体、その抗原結合性断片、前記抗体またはその抗原結合性断片のヒト化バージョン、前記抗体またはその抗原結合性断片の重鎖可変ドメインおよび／または前記抗体またはその抗原結合性断片の軽鎖可変ドメインのうちの１つ以上と、（ｉｉ）ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−９６９３で寄託された前記ハイブリドーマ細胞株によって産生されるモノクローナル抗体、その抗原結合性断片、前記抗体またはその抗原結合性断片のヒト化バージョン、前記抗体またはその抗原結合性断片の重鎖可変ドメインおよび／または前記抗体またはその抗原結合性断片の軽鎖可変ドメインを含む、ここで、任意に、前記抗体が、ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−９６９２、ＰＴＡ−９６９４またはＰＴＡ−９８８８、その抗原結合性断片、前記抗体またはその抗原結合性断片のヒト化バージョン、前記抗体またはその抗原結合性断片の重鎖可変ドメインおよび／または前記抗体またはその抗原結合性断片の軽鎖可変ドメインのうちの１つ以上と、（ｉｉ）ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−９６９３で寄託された単離されたモノクローナル抗体、その抗原結合性断片、前記抗体またはその抗原結合性断片のヒト化バージョン、前記抗体またはその抗原結合性断片の重鎖可変ドメインおよび／または前記抗体またはその抗原結合性断片の軽鎖可変ドメインを含む、前記二重特異性抗体またはその抗原結合性断片。
【請求項４】
クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）のトキシンＡおよびトキシンＢを結合するための結合部位を含む少なくとも２つのポリペプチド鎖を含む結合タンパク質であって、
少なくとも１つのポリペプチド鎖が、第１の重鎖可変ドメイン、第２の重鎖可変ドメイン、重鎖定常ドメインまたはその一部を含み、少なくとも１つのポリペプチド鎖が、第１の軽鎖可変ドメイン、第２の軽鎖可変ドメイン、軽鎖定常ドメインまたはその一部を含み、前記ポリペプチド鎖を含む前記可変ドメインが、クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）のトキシンＡおよびトキシンＢに対する機能的結合部位を形成する、
ここで、任意に、
（ａ）前記第１の重鎖可変ドメインおよび前記第１の軽鎖可変ドメインが、クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）のトキシンＡに対する機能的結合部位を形成し、前記第２の重鎖可変ドメインおよび前記第２の軽鎖可変ドメインが、クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）のトキシンＢに対する機能的結合部位を形成する、または、
（ｂ）前記第１の重鎖可変ドメインおよび前記第１の軽鎖可変ドメインが、クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）のトキシンＢに対する機能的結合部位を形成し、前記第２の重鎖可変ドメインおよび前記第２の軽鎖可変ドメインが、クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）のトキシンＡに対する機能的結合部位を形成する、および／または、
（ｃ）前記結合タンパク質がＦｃ領域を含む、および／または、
（ｄ）前記結合タンパク質が、クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）のトキシンＡおよびトキシンＢの毒性を中和する、および／または、
（ｅ）前記結合タンパク質が、（ｉ）表面プラズモン共鳴で測定した場合の少なくとも１０２Ｍ−１ｓ−１；少なくとも１０３Ｍ−１ｓ−１；少なくとも１０４Ｍ−１ｓ−１；少なくとも１０５Ｍ−１ｓ−１；少なくとも１０６Ｍ−１ｓ−１；または少なくとも１０７Ｍ−１ｓ−１から選択される、トキシンＡまたはトキシンＢに対する結合速度定数（Ｋｏｎ）および／または（ｉｉ）表面プラズモン共鳴で測定した場合の最大で１０−３ｓ−１；最大で１０−４ｓ−１；最大で１０−５ｓ−１；または最大で１０−６ｓ−１から選択される、トキシンＡまたはトキシンＢに対する解離速度定数（Ｋｏｆｆ）を有する、および／または、
（ｆ）前記結合タンパク質が、最大で１０−７Ｍ；最大で１０−８Ｍ；最大で１０−９Ｍ；最大で１０−１０Ｍ；最大で１０−１１Ｍ；最大で１０−１２Ｍ；または最大で１０−１３Ｍから選択される、トキシンＡまたはトキシンＢに対する解離定数（ＫＤ）を有する、
前記結合タンパク質。
【請求項５】
（Ａ）ＰＴＡ−９６９２、ＰＴＡ−９６９４またはＰＴＡ−９８８８から選択される少なくとも１つの抗トキシンＡ抗体、その抗原結合性断片またはそのヒト化形態と、ＰＴＡ−９６９２またはＰＴＡ−９６９３から選択される少なくとも１つの抗トキシンＢ抗体、その抗原結合性断片またはそのヒト化形態とを含む、
ここで、任意に、
（ａ）前記組成物が、薬学的に許容されるキャリア、希釈剤、賦形剤または溶媒をさらに含む、および／または、（ｂ）少なくとも１つの追加の治療剤、例えば、メトロニダゾール、バンコマイシン、フィダキソマイシン、ニタゾキサニド、リファキシミン、ラモプラニンまたはこれらの組み合わせから選択される、を含む、
または、
（Ｂ）請求項１〜４のいずれか一項に記載の、抗体、発現ベクター、宿主細胞、二重特異性抗体、結合タンパク質または抗原結合性断片、および、薬学的に許容されるキャリア、賦形剤、溶媒または希釈剤を含み、任意に、（ａ）追加の治療剤、例えば、抗生剤、抗菌剤、殺菌剤または静菌剤、例えば、メトロニダゾール、バンコマイシン、フィダキソマイシン、ニタゾキサニド、リファキシミン、ラモプラニンまたはこれらの組み合わせから選択される追加の治療剤を含み、および／または、（ｂ）前記組成物が、（ｉ）請求項１の（ａ）、（ｂ）または（ｅ）に記載の抗体またはその抗原結合性断片、および、（ｉｉ）請求項１の（ｃ）、（ｄ）または（ｆ）に記載の抗体またはその抗原結合性断片、を含む、
組成物。
【請求項６】
請求項１の（ａ）、（ｂ）または（ｅ）に記載の抗体またはその抗原結合性断片および請求項１の（ｃ）、（ｄ）または（ｆ）に記載の抗体またはその抗原結合性断片、または、請求項５に記載の組成物の、
（ａ）被検体におけるクロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）感染症、クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）関連疾患またはクロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）関連下痢症（ＣＤＡＤ）を治療する方法、ここで前記抗体またはその抗原結合性断片は、同時にまたは異なる時点で投与する、
または、
（ｂ）クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）のトキシンＡおよびトキシンＢによる、細胞に対する毒性を阻害または中和する方法であって、前記細胞を、有効クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキシンＡ阻害用量または中和用量の請求項１の（ａ）、（ｂ）または（ｅ）に記載の抗体またはその抗原結合性断片および有効クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキシンＢ阻害用量または中和用量の請求項１の（ｃ）、（ｄ）または（ｆ）に記載の抗体またはその抗原結合性断片に曝露することを含み、ここで前記抗体またはその抗原結合性断片は、同時にまたは異なる時点で投与する、前記方法、ここで、任意に、（ｉ）前記細胞が被検体に存在し、前記抗体またはその抗原結合性断片を、クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキシンＡおよびトキシンＢの毒性を阻害または中和するのに有効な量で前記被検体に投与する、および／または、（ｉｉ）前記抗トキシンＡ抗体またはその抗原結合性断片および／または前記抗トキシンＢ抗体またはその抗原結合性断片が、ヒトであるか、ヒト化形態またはキメラ形態である、
または、
（ｃ）クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキシンによる細胞に対する毒性を阻害または中和する方法であって、前記細胞を、有効クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキシン阻害用量または中和用量の前記組成物に曝露することを含む、前記方法、ここで、任意に、前記細胞が被検体に存在し、前記組成物を、クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）のトキシンＡおよびトキシンＢを阻害または中和するのに有効な量で前記被検体に投与する、
または、
（ｄ）クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）の高病原性株によって産生されるトキシンを中和する方法であって、（ｉ）請求項１の（ａ）、（ｂ）または（ｅ）に記載の抗体またはその抗原結合性断片と、（ｉｉ）請求項１の（ｃ）、（ｄ）または（ｆ）に記載の抗体またはその抗原結合性断片とを、前記高病原性株によって産生される前記トキシンを中和するのに有効な量で、その投与が必要な被検体に投与することを含む、前記方法、ここで、任意に、（ｉ）前記抗体またはその抗原結合性断片を同時にまたは異なる時点で投与する、または、（ｉｉ）クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）の前記高病原性株の前記トキシンが、トキシンＡおよびトキシンＢであり、例えば、クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）の前記高病原性株が、ＢＩ／ＮＡＰ１／０２７、ｔｃｄＡ−／ｔｃｄＢ＋、外来患者分離株、臨床分離株、臨床上、頻繁に分離される菌株のうちの１つ以上から選択され、例えば、ＣＣＬ６７８、ＨＭＣ５５３、Ｐｉｔｔ４５、ＣＤ１９６、ｍｏｎｔｒｅａｌ  ５、ｍｏｎｔｒｅａｌ  ７．１、ＭＨ５、Ｐｉｔｔ２、ＣＣＬ１４１３７、ＵＶＡ１７、ＵＶＡ３０／ＴＬ４２、Ｐｉｔｔ７のうちの１つ以上から選択される、または（ｉｉｉ）前記抗体またはその抗原結合性断片が、ヒトであるか、ヒト化形態またはキメラ形態である、
または、
（ｅ）無症状ではあるが、クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）感染症、クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）関連疾患またはクロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）関連下痢症（ＣＤＡＤ）に感染しやすいか罹患するリスクがある被検体を治療する方法であって、前記被検体に、（ｉ）請求項１の（ａ）、（ｂ）または（ｅ）に記載の抗体またはその抗原結合性断片および（ｉｉ）請求項１の（ｃ）、（ｄ）または（ｆ）に記載の抗体またはその抗原結合性断片を、前記被検体を治療するのに有効な量で投与することを含む、前記方法、ここで、任意に、前記被検体が入院している、
における使用。
【請求項７】
ＥＣ５０値が７．７−１２Ｍ〜４．８−８Ｍの範囲にあることを理由に判断して、クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）の高病原性株のトキシンＡを中和するおよび／またはＥＣ５０値が１．１−１１Ｍ〜６．５−１０Ｍの範囲にあることを理由に判断して、クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）の高病原性株のトキシンＢを中和する、モノクローナル抗体またはその抗原結合性断片であって、
ここで、任意に、（ａ）前記抗体が、ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−９６９３、ＰＴＡ−９６９２、ＰＴＡ−９６９４、ＰＴＡ−９８８８またはＰＴＡ−９６９２で寄託されたハイブリドーマ細胞株によって産生される、例えば、ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−９６９３、ＰＴＡ−９６９２、ＰＴＡ−９６９４、ＰＴＡ−９８８８またはＰＴＡ−９６９２で寄託された前記ハイブリドーマ細胞株によって産生される前記抗体が、ヒト化されている、および／または、（ｂ）クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）の前記高病原性株が、ＢＩ／ＮＡＰ１／０２７、ＣＣＬ６７８、ＨＭＣ５５３、Ｐｉｔｔ４５、ＣＤ１９６、ｍｏｎｔｒｅａｌ  ５、ｍｏｎｔｒｅａｌ  ７．１、ＭＨ５、Ｐｉｔｔ２、ＣＣＬ１４１３７、ＵＶＡ１７、ＵＶＡ３０／ＴＬ４２、Ｐｉｔｔ７のうちの１つ以上から選択される、または、（ｃ）前記抗体またはその抗原結合性断片が、ヒトであるか、ヒト化形態またはキメラ形態である、
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合性断片。
【請求項８】
クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）のモノクローナル抗体であって、
（ａ）トキシンＡに対して生成され、２つの重鎖ポリペプチドと２つの軽鎖ポリペプチドとからなり、重鎖が各々、配列番号１に記載の連続したアミノ酸配列を含むＶＨ領域と、ヒトＣＨ領域とを含有し、軽鎖が各々、配列番号３に記載の連続したアミノ酸配列を含むＶＬ領域と、ヒトＣＬ領域とを含有する、
または
（ｂ）トキシンＡに対して生成され、２つの重鎖ポリペプチドと２つの軽鎖ポリペプチドとからなり、重鎖が各々、配列番号２に記載の連続したアミノ酸配列を含むＶＨ領域と、ヒトＣＨ領域とを含有し、軽鎖が各々、配列番号３に記載の連続したアミノ酸配列を含むＶＬ領域と、ヒトＣＬ領域とを含有する、
または
（ｃ）トキシンＡに対して生成され、２つの重鎖ポリペプチドと２つの軽鎖ポリペプチドとからなり、重鎖が各々、配列番号１に記載の連続したアミノ酸配列を含むＶＨ領域と、ヒトＣＨ領域とを含有し、軽鎖が各々、配列番号４に記載の連続したアミノ酸配列を含むＶＬ領域と、ヒトＣＬ領域とを含有する、
または
（ｄ）トキシンＡに対して生成され、２つの重鎖ポリペプチドと２つの軽鎖ポリペプチドとからなり、重鎖が各々、配列番号２に記載の連続したアミノ酸配列を含むＶＨ領域と、ヒトＣＨ領域とを含有し、軽鎖が各々、配列番号４に記載の連続したアミノ酸配列を含むＶＬ領域と、ヒトＣＬ領域とを含有する、
または
（ｅ）トキシンＡに対して生成され、２つの重鎖ポリペプチドと２つの軽鎖ポリペプチドとからなり、重鎖が各々、配列番号５に記載の連続したアミノ酸配列を含むＶＨ領域と、ヒトＣＨ領域とを含有し、軽鎖が各々、配列番号７に記載の連続したアミノ酸配列を含むＶＬ領域と、ヒトＣＬ領域とを含有する、
または
（ｆ）トキシンＡに対して生成され、２つの重鎖ポリペプチドと２つの軽鎖ポリペプチドとからなり、重鎖が各々、配列番号６に記載の連続したアミノ酸配列を含むＶＨ領域と、ヒトＣＨ領域とを含有し、軽鎖が各々、配列番号７に記載の連続したアミノ酸配列を含むＶＬ領域と、ヒトＣＬ領域とを含有する、
または
（ｇ）トキシンＢに対して生成され、２つの重鎖ポリペプチドと２つの軽鎖ポリペプチドとからなり、重鎖が各々、配列番号８に記載の連続したアミノ酸配列を含むＶＨ領域と、ヒトＣＨ領域とを含有し、軽鎖が各々、配列番号１０に記載の連続したアミノ酸配列を含むＶＬ領域と、ヒトＣＬ領域とを含有する、
または
（ｈ）トキシンＢに対して生成され、２つの重鎖ポリペプチドと２つの軽鎖ポリペプチドとからなり、重鎖が各々、配列番号９に記載の連続したアミノ酸配列を含むＶＨ領域と、ヒトＣＨ領域とを含有し、軽鎖が各々、配列番号１０に記載の連続したアミノ酸配列を含むＶＬ領域と、ヒトＣＬ領域とを含有する、
ここで、任意に、前記ＣＨ領域が、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ、ＩｇＥまたはＩｇＭから選択される、および／または、前記ＣＬ領域が、κアイソタイプまたはλアイソタイプから選択される、
前記モノクローナル抗体。
【請求項９】
抗クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）抗体であって、
（ａ）トキシンＡ抗体またはその断片であり、Ｌ鎖のＶ領域が、配列番号３、配列番号４または配列番号７のうちの１つ以上から選択されるアミノ酸配列を含む、
（ｂ）トキシンＢ抗体またはその断片であり、Ｌ鎖のＶ領域が配列番号１０に記載のアミノ酸配列を含む、
（ｃ）トキシンＡ抗体またはその断片であり、Ｈ鎖のＶ領域が、配列番号１、配列番号２、配列番号５、配列番号６のうちの１つ以上から選択されるアミノ酸配列を含む、
（ｄ）トキシンＢ抗体またはその断片であり、Ｈ鎖のＶ領域が、配列番号８または配列番号９うちの１つ以上から選択されるアミノ酸配列を含む、
前記抗体。
【請求項１０】
モノクローナル抗体またはその断片であって、
（ａ）クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）のトキシンＡに対して生成され、前記抗体が、２つの重鎖ポリペプチドと２つの軽鎖ポリペプチドとからなり、重鎖が各々ＶＨ領域とヒトＣＨ領域とを含有し、軽鎖が各々ＶＬ領域とヒトＣＬ領域とを含有し、前記重鎖ポリペプチドが、配列番号１４で示される連続したアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ポリペプチドが、配列番号１６で示される連続したアミノ酸配列を含む、
または
（ｂ）クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）のトキシンＡに対して生成され、前記抗体が、２つの重鎖ポリペプチドと２つの軽鎖ポリペプチドとからなり、重鎖が各々ＶＨ領域とヒトＣＨ領域とを含有し、軽鎖が各々ＶＬ領域とヒトＣＬ領域とを含有し、前記重鎖ポリペプチドが、配列番号１８で示される連続したアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ポリペプチドが、配列番号２０で示される連続したアミノ酸配列を含む、
または
（ｃ）クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）のトキシンＢに対して生成され、前記抗体が、２つの重鎖ポリペプチドと２つの軽鎖ポリペプチドとからなり、重鎖が各々ＶＨ領域とヒトＣＨ領域とを含有し、軽鎖が各々ＶＬ領域とヒトＣＬ領域とを含有し、前記重鎖ポリペプチドが、配列番号２２で示される連続したアミノ酸配列を含み、前記軽鎖ポリペプチドが、配列番号２４で示される連続したアミノ酸配列を含む、
ここで、任意に、前記抗体の前記重鎖がＩｇＧクラスのものである、例えば、ＩｇＧ１クラスのものである、および／または、前記抗体の前記軽鎖がκアイソタイプのものである、
前記モノクローナル抗体またはその断片。
【請求項１１】
単離された抗体またはその抗原結合性断片であって、
（Ａ）トキシンＢのＮ末端酵素領域のエピトープ部位に結合することによって、クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）のトキシンＢの毒性、ここで、任意に、（ａ）前記抗体がモノクローナル抗体、例えば、前記抗体がヒト化抗体またはキメラ抗体である、（ｂ）前記抗体がＰＡ−４１（ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−９６９３）またはヒト化ＰＡ−４１である、（ｃ）前記抗体が、ＰＡ−４１（ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−９６９３）またはヒト化ＰＡ−４１の、クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）のトキシンＢの前記Ｎ末端酵素領域に対する結合と競合する、例えば、ここで、前記抗体が、混合−競合的作用機序によってトキシンＢの毒性を阻害する、
または、
（Ｂ）トキシンＡの内部移行と細胞毒性（ｃｙｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ  ｔｏｘｉｃｉｔｙ）を阻害、ブロックまたは防止することによって、クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）のトキシンＡの毒性、ここで、任意に、（ａ）前記抗体がモノクローナル抗体、例えば、ヒト化抗体またはキメラ抗体である、（ｂ）前記抗体がＰＡ−３９（ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−９６９２）またはヒト化ＰＡ−３９である、（ｃ）前記抗体がＰＡ−５０（ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−９６４）またはヒト化ＰＡ−５０である、（ｄ）前記抗体が、ＰＡ−３９（ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−９６９２）、ヒト化ＰＡ−３９、ＰＡ−５０（ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−９６９４）またはヒト化ＰＡ−５０のトキシンＡへの結合と競合する、例えば、ここで、抗体は、（ｉ）トキシンＡの前記受容体結合ドメイン外のトキシンＡの領域における単一部位に結合することによって、ＰＡ−３９（ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−９６９２）またはそのヒト化形態と競合する、任意に、混合−競合的作用機序によってトキシンＡの毒性を阻害する、または（ｉｉ）トキシンＡの前記受容体結合ドメインの少なくとも２つの部位に結合することによって、ＰＡ−５０（ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−９６９４）またはそのヒト化形態と競合する、
を阻害、ブロックまたは防止する、前記単離された抗体またはその抗原結合性断片。
【請求項１２】
クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）のトキシンＡおよび／またはトキシンＢの一部、断片またはペプチドを含むワクチンまたは免疫原であって、
モノクローナル抗体ＰＡ−４１（ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−９６９３）、ＰＡ−４１のヒト化形態、モノクローナル抗体ＰＡ−３９（ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−９６９２）、ＰＡ−３９のヒト化形態、モノクローナル抗体ＰＡ−５０（ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−９６９４）、ＰＡ−５０のヒト化形態、モノクローナル抗体ＰＡ−３９またはそのヒト化形態の、トキシンＡに対する結合と競合する抗体、モノクローナル抗体ＰＡ−５０またはそのヒト化形態の、トキシンＡに対する結合と競合する抗体、または、モノクローナル抗体ＰＡ−４１またはそのヒト化形態の、トキシンＢに対する結合と競合する抗体のうちの１つ以上によって認識および／または結合されるエピトープ領域を含有する、ここで、任意に、（ａ）トキシンＡおよび／またはトキシンＢのエピトープ含有部分、断片またはペプチドが、タンパク質分解的な切断によって、トキシンＡまたはトキシンＢのタンパク質から得られる、例えば、ここで、前記トキシンＡタンパク質が、エンテロキナーゼによってタンパク質分解的に切断される、および／または、前記トキシンＢタンパク質が、カスパーゼによってタンパク質分解的に切断される、
（ｂ）エピトープ含有部分または断片が、トキシンＡまたはトキシンＢのタンパク質の化学的または組換え的に合成されたペプチドである、
（ｃ）前記抗体によって認識および結合される１つ以上のエピトープ領域または部位を含む前記断片が、トキシンＡのアミノ末端、トキシンＢのアミノ末端、トキシンＡのカルボキシ末端、トキシンＢのカルボキシ末端、トキシンＡの受容体結合ドメイン、トキシンＡの前記受容体結合ドメイン外の領域、トキシンＢの受容体結合ドメイン、トキシンＢの前記受容体結合ドメイン外の領域、トキシンＢのＮ末端酵素領域、トキシンＡのグルコシルトランスフェラーゼドメイン、トキシンＢのグルコシルトランスフェラーゼドメイン、トキシンＡのタンパク質分解ドメイン、トキシンＢのタンパク質分解ドメイン、トキシンＡの疎水性のポア形成ドメインまたはトキシンＢの疎水性のポア形成ドメインのうちの１つ以上に由来する、例えば、ここで、前記抗体によって認識および結合される１つ以上のエピトープ領域または部位を含む前記断片が、トキシンＡの前記受容体結合ドメイン外またはドメイン内の領域に由来する、または、トキシンＢの前記Ｎ末端酵素領域に由来する、
（ｄ）トキシンＡおよび／またはトキシンＢの前記エピトープ含有断片または部分の大きさが＜３００ｋＤａである、任意に、約１５８〜１６０ｋＤａ、約１００〜１０５ｋＤａ、１０３ｋＤａ、約９０〜９５ｋＤａ、９１ｋＤａ、約６３〜６８ｋＤａ、６３ｋＤａおよび／または６８ｋＤａである、例えば、トキシンＡの前記エピトープ含有断片または部分の大きさが、約１５８〜１６０ｋＤａ、約９０〜９５ｋＤａ、９１ｋＤａ、約６３〜６８ｋＤａおよび／または６８ｋＤａである、および／または、トキシンＢの前記エピトープ含有断片または部分の大きさが、約１００〜１０５ｋＤａ、１０３ｋＤａ、約６３〜６８ｋＤａおよび／または６３ｋＤａである、または、
（ｅ）前記ワクチンまたは免疫原が、クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）感染症またはクロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）関連疾患の中和、阻害、ブロック、低減、緩和、治療（ｃｕｒｅ）または治療（ｔｒｅａｔ）を必要とする被検体において、これをする方法であって、前記ワクチンまたは免疫原を有効量で前記被検体に投与することを含み、前記被検体が、クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）のトキシンＡおよび／またはトキシンＢに対する液性反応を誘発することで、前記被検体においてクロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）関連疾患またはＣＤＡＤを中和、阻害、ブロック、低減、緩和、治療（ｃｕｒｅ）または治療（ｔｒｅａｔ）する、前記方法において用いるためである、
前記ワクチンまたは免疫原。
【請求項１３】
ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−９６９３、ＰＴＡ−９６９２、ＰＴＡ−９４９４またはＰＴＡ−９８８８で寄託された、ハイブリドーマ細胞株。
【請求項１４】
（ａ）配列番号１４で示すアミノ酸配列を有する重鎖ポリペプチドをコードする、配列番号１５に記載の配列、（ｂ）配列番号１６で示すアミノ酸配列を有する軽鎖ポリペプチドをコードする、配列番号１７に記載の配列、（ｃ）配列番号１８で示すアミノ酸配列を有する重鎖ポリペプチドをコードする、配列番号１９に記載の配列、（ｄ）配列番号２０で示すアミノ酸配列を有する軽鎖ポリペプチドをコードする、配列番号２１に記載の配列、（ｅ）配列番号２２で示すアミノ酸配列を有する重鎖ポリペプチドをコードする、配列番号２３に記載の配列、または、（ｆ）配列番号２４で示すアミノ酸配列を有する軽鎖ポリペプチドをコードする、配列番号２５に記載の配列を有する単離された核酸。
【請求項１５】
クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）のトキシンＡ向けの抗クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキシンＡ中和モノクローナル抗体またはクロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）のトキシンＢ向けの抗クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキシンＢ中和モノクローナル抗体を作製する方法であって、
（ａ）１匹以上のレシピエント動物を、不活性トキソイドＡで一定間隔で免疫すること、
（ｂ）前記動物を、活性トキシンＡまたは活性トキシンＢの量を増して一定間隔でブーストすること、
（ｃ）好適な不死化細胞株に融合させた前記免疫してブーストした動物の免疫細胞からハイブリドーマ細胞を得ることを含み、前記ハイブリドーマ細胞が、クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）のトキシンＡを中和する抗トキシンＡ抗体またはクロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）のトキシンＢを中和する抗トキシンＢ抗体を産生して分泌すること、
を含み、任意に、さらに、
（ｄ）前記抗クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキシンＡ中和モノクローナル抗体または前記抗クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキシンＢ中和モノクローナル抗体を単離すること
を含む、例えば、ここで、
（ａ）前記免疫するステップ（ａ）およびブーストするステップ（ｂ）が、アジュバントを投与することを含む、
（ｂ）前記免疫するステップ（ａ）および前記ブーストするステップ（ｂ）を、３週間ごとの一定間隔で実施する、
（ｃ）ステップ（ａ）において、前記レシピエント動物を２用量または３用量のトキソイドＡで免疫する、または、
（ｄ）ステップ（ｂ）において、前記レシピエント動物を、用量を増やしてトキシンＡまたはトキシンＢで３〜５回ブーストする、
前記方法。
【請求項１６】
請求項１の（ａ）、（ｂ）または（ｅ）に記載の前記抗体またはその抗原結合性断片および／または請求項１の（ｃ）、（ｄ）または（ｆ）に記載の前記抗体またはその抗原結合性断片と、取扱説明書とを含む、キットであって、
任意に、
（ａ）前記抗体または抗原結合性断片が、前記キットの同一の容器に収容されるか、前記キットの別の容器に収容される、
（ｂ）前記抗体またはその抗原結合性断片をコンジュゲートするためのリンカーをさらに含む、
および／または
（ｃ）追加の治療剤、例えば、抗生剤、抗菌剤、殺菌剤または静菌剤をさらに含む、
前記キット。
【請求項１７】
（ａ）請求項１に記載の前記抗体または抗原結合性断片をコードする少なくとも１つの核酸分子、
（ｂ）請求項１に記載の前記抗体または抗原結合性断片の重鎖またはその一部をコードする核酸分子、
（ｃ）請求項１に記載の前記抗体または抗原結合性断片の軽鎖またはその一部をコードする核酸分子、
（ｄ）請求項１に記載の前記抗体または抗原結合断片の前記重鎖またはその一部および軽鎖またはその一部をコードする少なくとも１つの核酸分子、
を含む、発現ベクター、または、前記発現ベクターによって形質転換またはトランスフェクトされる宿主細胞。
【請求項１８】
（ａ）クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）のトキシンＡおよびトキシンＢによる、細胞に対する毒性を阻害または中和する、ここで、
前記細胞を、有効クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキシンＡ阻害用量または中和用量の請求項１の（ａ）、（ｂ）または（ｅ）に記載の抗体またはその抗原結合性断片および有効クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキシンＢ阻害用量または中和用量の請求項１の（ｃ）、（ｄ）または（ｆ）に記載の抗体またはその抗原結合性断片に曝露することを含む、
または、
（ｂ）クロストリジウム・ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）感染症にかかりやすい細胞においてまたは前記細胞に対してトキシンＡおよび／またはトキシンＢの活性を中和、阻害またはブロックする、ここで、前記細胞を、請求項１に記載の前記抗体またはその抗原結合性断片と接触させることを含み、前記抗体またはその抗原結合性断片が、トキシン阻害の競合的または混合競合的作用機序によって、前記細胞においてまたは前記細胞に対して前記トキシンＡおよび／またはトキシンＢの活性を中和、阻害またはブロックする、
ここで、任意に、
（ｉ）前記トキシンがトキシンＡまたはトキシンＢである、
（ｉｉ）前記トキシンがトキシンＡであり、前記作用機序が競合的阻害作用機序である、例えば、前記抗体またはその抗原結合断片が、ＰＡ−５０（ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−９６９４）、そのヒト化形態であるか、ＰＡ−５０のトキシンＡ活性の中和と競合する抗体またはその断片である、または、
（ｉｉｉ）前記トキシンがトキシンＡであり、前記作用機序が混合−競合的阻害作用機序である、例えば、前記抗体またはその抗原結合断片が、ＰＡ−３９（ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−９６９２）、そのヒト化形態であるか、ＰＡ−３９のトキシンＡ活性の中和と競合する抗体またはその断片である、または、
（ｉｖ）前記トキシンがトキシンＢであり、前記作用機序が混合競合的阻害作用機序である、例えば、前記抗体またはその抗原結合断片が、ＰＡ−４１（ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−９６９３）、そのヒト化形態であるか、ＰＡ−４１のトキシンＢ活性の中和と競合する抗体またはその断片である、
ex vivoでの方法。
【請求項１９】
前記細胞が被検体に存在し、前記抗体またはその抗原結合性断片を有効な量で前記被検体に投与する、請求項１８に記載の方法において用いる、請求項１に記載の抗体またはその抗原結合性断片。