【手続補正書】
【提出日】平成25年11月20日(2013.11.20)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
複製欠損性ドミナントネガティブ単純ヘルペスウイルス２（ＨＳＶ−２）組換えウイルスであって、該ウイルスは、そのゲノム内に：
ａ）第１のＨＳＶ−２糖タンパク質Ｄ（ｇＤ２）をコードする第１の配列であって、ここで該配列は、第１のプロモーターに作動可能に連結されており、該第１のプロモーターは、第１のテトラサイクリンオペレーター（Ｔｅｔ−Ｏ）配列に作動可能に連結されている、第１の配列；
ｂ）第２のｇＤ２タンパク質をコードする第２の配列であって、ここで該第２の配列は、第２のプロモーターに作動可能に連結されており、該第２のプロモーターは、第２のＴｅｔ−Ｏ配列に作動可能に連結されている、第２の配列；
ｃ）ＨＳＶ−１もしくはＨＳＶ−２のＵＬ９タンパク質の第１のドミナントネガティブ変異体形態をコードする第３の配列であって、ここで該第３の配列は、第３のプロモーターに作動可能に連結されており、該第３のプロモーターは、第３のテトラサイクリンオペレーター（Ｔｅｔ−Ｏ）配列に作動可能に連結されている、第３の配列；
ｄ）ＨＳＶ−１もしくはＨＳＶ−２のＵＬ９タンパク質の第２のドミナントネガティブ変異体形態をコードする第４の配列であって、ここで該第４の配列は、第４のプロモーターに作動可能に連結されており、該第４のプロモーターは、第４のテトラサイクリンオペレーター（Ｔｅｔ−Ｏ）配列に作動可能に連結されており、ここで、該第４の配列は必要に応じたものである、第４の配列；
を含み、そしてここで
ｉ）該第１のプロモーターおよび該第２のプロモーターはともに、ＨＳＶ−１もしくはＨＳＶ−２の最初期プロモーターである、
ｉｉ）該第３の配列は、ＵＬ９−Ｃ５３５Ｃをコードし、そして該第３のプロモーターは、ｈＣＭＶ最初期プロモーターである、
ｉｉｉ）第１のＨＳＶ−２  ｇＤをコードする該第１の配列および第２のＨＳＶ−２  ｇＤをコードする該第２の配列は、各々、ＩＣＰ０タンパク質をコードする配列が野生型ＨＳＶ−２ゲノム中に存在する場所に位置しており、その結果、該組換えウイルスのゲノムは、機能的ＩＣＰ０タンパク質をコードする配列を含まない、組換えウイルス。
【請求項２】
前記組換えウイルスは、そのゲノム内に、前記第４の配列を含み、該第４の配列は、ＵＬ９−Ｃ５３５Ｃをコードする、請求項１に記載の組換えウイルス。
【請求項３】
前記第４の配列は、ｈＣＭＶ最初期プロモーターに作動可能に連結されている、請求項２に記載の組換えウイルス。
【請求項４】
前記第１のプロモーターまたは前記第２のプロモーターのいずれかが、ＩＣＰ４プロモーターである、請求項１に記載の組換えウイルス。
【請求項５】
前記第１のプロモーターおよび前記第２のプロモーターがともに、ＩＣＰ４プロモーターである、請求項４に記載の組換えウイルス。
【請求項６】
前記ＩＣＰ４プロモーターが自己調節を受けないように改変されている、請求項４または５に記載の組換えウイルス。
【請求項７】
前記第３のプロモーターが、短縮されておりかつ、該ｈＣＭＶ最初期プロモーターと前記改変されたＩＣＰ４プロモーターとが反対の配向にあるハイブリッドを形成するように該改変されたＩＣＰ４プロモーターにつながれているｈＣＭＶ最初期プロモーターである、請求項６に記載の組換えウイルス。
【請求項８】
前記ｈＣＭＶ最初期プロモーターは、該ｈＣＭＶ最初期プロモーターがＶＰ１６に応答性であるように前記ハイブリッド内に配置されている、請求項７に記載の組換えウイルス。
【請求項９】
ａ）前記第１のプロモーター、前記第２のプロモーター、前記第３のプロモーターおよび前記第４のプロモーターは、各々ＴＡＴＡエレメントを有し；
ｂ）前記第１のＴｅｔ−Ｏ配列、前記第２のＴｅｔ−Ｏ配列、前記第３のＴｅｔ−Ｏ配列および前記第４のＴｅｔ−Ｏ配列の各々は、２〜２０個連結するヌクレオチドによってつながれた２個のｏｐ２リプレッサー結合部位を含み、ここで該ｔｅｔオペレーターにおける最初のヌクレオチドは、該ＴＡＴＡエレメントにおける最後のヌクレオチドに対して６〜２４ヌクレオチド、３’側にあり；
ｃ）ＨＳＶ−２  ｇＤ２をコードする前記配列およびＨＳＶ−２  ｇＤ２をコードする前記第２の配列は、該第１のＴｅｔ−Ｏ配列および該第２のＴｅｔ−Ｏ配列に対して３’側にあり、該第１のプロモーターおよび該第２のプロモーターに作動可能に連結されており、
ｄ）ＨＳＶ−１もしくはＨＳＶ−２のＵＬ９タンパク質の前記第１のドミナントネガティブ変異体形態をコードする前記配列は、該第３のＴｅｔ−Ｏ配列に対して３’側にあり、該第３のプロモーターに作動可能に連結されており；
ｅ）ＨＳＶ−１もしくはＨＳＶ−２のＵＬ９タンパク質の前記第２のドミナントネガティブ変異体形態をコードする前記配列は、該第４のＴｅｔ−Ｏ配列に対して３’側にあり、該第４のプロモーターに作動可能に連結されている、
請求項１〜５のいずれか１項に記載の組換えウイルス。
【請求項１０】
前記組換えウイルスはまた、１個以上の組換え免疫調節遺伝子を発現する、請求項１〜５、７または８のいずれか１項に記載の組換えウイルス。
【請求項１１】
前記組換えウイルスは、ＩＬ１２を発現する、請求項１０に記載の組換えウイルス。
【請求項１２】
前記組換えウイルスは、ＩＬ１５を発現する、請求項１０に記載の組換えウイルス。
【請求項１３】
前記組換えウイルスはまた、前記ＴｅｔＯを有するＨＳＶ最初期プロモーターもしくはｈＣＭＶ最初期プロモーターの制御下で、ＨＳＶ−２  ｇＢを発現する、請求項１〜５、７または８のいずれか１項に記載の組換えウイルス。
【請求項１４】
前記組換えウイルスはまた、前記ＴｅｔＯを有するＨＳＶ最初期プロモーターもしくはｈＣＭＶ最初期プロモーターの制御下で、ＨＳＶ−２  ｇＣを発現する、請求項１〜５、７または８のいずれか１項に記載の組換えウイルス。
【請求項１５】
請求項１〜５、７または８のいずれか１項に記載の組換えウイルスを単位用量形態で含む、ワクチン。
【請求項１６】
前記組換えウイルスは、１×１０７  ｐｆｕ／単位用量の最小限の量で存在する、請求項１５に記載のワクチン。
【請求項１７】
前記組換えウイルスは、１×１０７〜１×１０９  ｐｆｕ／単位用量において存在する、請求項１５に記載のワクチン。
【請求項１８】
ＨＳＶ−１感染もしくはＨＳＶ−２感染に対して患者を免疫するための、請求項１５〜１７のいずれか１項に記載のワクチン。
【請求項１９】
前記患者は、ＨＳＶ−１に対してセロポジティブである、請求項１８に記載のワクチン。
【請求項２０】
前記患者は、ＨＳＶ−２に対してセロポジティブである、請求項１８に記載のワクチン。
【請求項２１】
前記患者は、ＨＳＶ−１およびＨＳＶ−２の両方に対してセロポジティブである、請求項１８に記載のワクチン。
【請求項２２】
前記個体は、ＨＳＶ−１感染およびＨＳＶ−２感染に対してセロネガティブである、請求項１８に記載のワクチン。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１６】
本発明はまた、ＨＳＶ−１感染もしくはＨＳＶ−２感染およびこのような感染から生じる状態（例えば、陰部ヘルペス潰瘍）に対して患者を免疫する方法を包含し、上記方法は、上記のワクチンを上記患者に投与することによる。上記ワクチンはまた、上記ウイルスの大発生を予防もしくは低下させるために、感染した患者に与えられ得る。ウイルスの破壊を生じない患者にワクチンを投与するための任意の方法は、本発明と適合する。一般に、投与は、非経口的手段による（例えば、筋肉内注射もしくは静脈内注射による）。ワクチンの投与および投与の予定作成は、当該分野で慣用的な方法を使用して決定され得る。上記調製物は、１回もしくは複数回いずれかの注射において投与され得る。
特定の実施形態では、例えば以下が提供される：
（項目１）
複製欠損性ドミナントネガティブ単純ヘルペスウイルス２（ＨＳＶ−２）組換えウイルスであって、該ウイルスは、そのゲノム内に：
ａ）第１のＨＳＶ−２糖タンパク質Ｄ（ｇＤ２）をコードする第１の配列であって、ここで該配列は、第１のプロモーターに作動可能に連結され、該第１のプロモーターは、第１のテトラサイクリンオペレーター（Ｔｅｔ−Ｏ）配列に作動可能に連結されている、第１の配列；
ｂ）第２のＨＳＶ−２  ｇＤ２をコードする第２の配列であって、ここで該第２の配列は、第２のプロモーターに作動可能に連結され、該第２のプロモーターは、第２のｔｅｔ−Ｏ配列に作動可能に連結されており、ここで、該第２の配列は必要に応じたものである、第２の配列；
ｃ）ＨＳＶ−１もしくはＨＳＶ−２のＵＬ９タンパク質の第１のドミナントネガティブ変異体形態をコードする第３の配列であって、ここで該第３の配列は、第３のプロモーターに作動可能に連結され、該第３のプロモーターは、第３のテトラサイクリンオペレーター（Ｔｅｔ−Ｏ）配列に作動可能に連結されている、第３の配列；
ｄ）ＨＳＶ−１もしくはＨＳＶ−２のＵＬ９タンパク質の第２のドミナントネガティブ変異体形態をコードする第４の配列であって、ここで該第４の配列は、第４のプロモーターに作動可能に連結され、該第４のプロモーターは、第４のテトラサイクリンオペレーター（Ｔｅｔ−Ｏ）配列に作動可能に連結されており、ここで、該第４の配列は必要に応じたものである、第４の配列；
を含み、そしてここで該ゲノムは、機能的ＩＣＰ０タンパク質をコードする配列を含まない、組換えウイルス。
（項目２）
前記組換えウイルスは、そのゲノム内に、第２のＨＳＶ−２  ｇＤ２をコードする前記第２の配列を含み、ここで該第２の配列は、第２のプロモーターに作動可能に連結され、該第２のプロモーターは、第２のｔｅｔ−Ｏ配列に作動可能に連結されている、項目１に記載の組換えウイルス。
（項目３）
前記組換えウイルスは、そのゲノム内に、ＨＳＶ−１もしくはＨＳＶ−２のＵＬ９タンパク質の第２のドミナントネガティブ変異体形態をコードする前記第４の配列を含み、該第４の配列は、第４のプロモーターに作動可能に連結され、該第４のプロモーターは、第４のテトラサイクリンオペレーター（Ｔｅｔ−Ｏ）配列に作動可能に連結されている、項目２に記載の組換えウイルス。
（項目４）
前記第１のプロモーター、前記第２のプロモーター、前記第３のプロモーターおよび前記第４のプロモーターのうちの１つ以上は、ｈＣＭＶ最初期プロモーターである、項目１〜３のいずれか１項に記載の組換えウイルス。
（項目５）
前記第１のプロモーター、前記第２のプロモーター、前記第３のプロモーターおよび前記第４のプロモーターのうちの１つ以上は、ＨＳＶ−１もしくはＨＳＶ−２の最初期プロモーターである、項目１〜３のいずれか１項に記載の組換えウイルス。
（項目６）
前記ＨＳＶ−１もしくはＨＳＶ−２の最初期プロモーターは、ＩＣＰ４である、項目５に記載の組換えウイルス。
（項目７）
前記第１のプロモーター、前記第２のプロモーター、前記第３のプロモーターおよび前記第４のプロモーターは、すべてＨＳＶ−１もしくはＨＳＶ−２の最初期プロモーターである、項目５に記載の組換えウイルス。
（項目８）
前記第１のプロモーター、前記第２のプロモーター、前記第３のプロモーターおよび前記第４のプロモーターは、ＩＣＰ４プロモーターである、項目５に記載の組換えウイルス。
（項目９）
ａ）前記第１のプロモーター、前記第２のプロモーター、前記第３のプロモーターおよび前記第４のプロモーターは、各々ＴＡＴＡエレメントを有し；
ｂ）前記第１のＴｅｔ−Ｏ配列、前記第２のＴｅｔ−Ｏ配列、前記第３のＴｅｔ−Ｏ配列および前記第４のＴｅｔ−Ｏ配列の各々は、２〜２０個連結するヌクレオチドによってつながれた２個のｏｐ２リプレッサー結合部位を含み、ここで該ｔｅｔオペレーターにおける最初のヌクレオチドは、該ＴＡＴＡエレメントにおける最後のヌクレオチドに対して６〜２４ヌクレオチド、３’側にあり；
ｃ）ＨＳＶ−２  ｇＤ２をコードする前記配列およびＨＳＶ−２  ｇＤ２をコードする前記第２の配列は、該第１のｔｅｔ−Ｏ配列および該第２のｔｅｔ−Ｏ配列に対して３’側にあり、該第１のプロモーターおよび該第２のプロモーターに作動可能に連結されており、
ｄ）ＨＳＶ−１もしくはＨＳＶ−２のＵＬ９タンパク質の前記第１のドミナントネガティブ変異体形態をコードする前記配列は、該第３のＴｅｔ−Ｏ配列に対して３’側にあり、該第３のプロモーターに作動可能に連結されており；
ｅ）ＨＳＶ−１もしくはＨＳＶ−２のＵＬ９タンパク質の前記第２のドミナントネガティブ変異体形態をコードする前記配列は、該第４のＴｅｔ−Ｏ配列に対して３’側にあり、該第４のプロモーターに作動可能に連結されている、
項目１〜３のいずれか１項に記載の組換えウイルス。
（項目１０）
ＵＬ９タンパク質の前記変異体形態は、ＵＬ９−Ｃ５３５Ｃである、項目１〜９のいずれか１項に記載の組換えウイルス。
（項目１１）
前記組換えウイルスはまた、１個以上の組換え免疫調節遺伝子を発現する、項目１〜１０のいずれか１項に記載の組換えウイルス。
（項目１２）
前記組換えウイルスは、ＩＬ１２を発現する、項目１１に記載の組換えウイルス。
（項目１３）
前記組換えウイルスは、ＩＬ１５を発現する、項目１１に記載の組換えウイルス。
（項目１４）
前記組換えウイルスはまた、前記ｔｅｔＯを有するＨＳＶ最初期プロモーターもしくはｈＣＭＶ最初期プロモーターの制御下で、ＨＳＶ−２  ｇＢを発現する、項目１〜１３のいずれか１項に記載の組換えウイルス。
（項目１５）
前記組換えウイルスはまた、前記ｔｅｔＯを有するＨＳＶ最初期プロモーターもしくはｈＣＭＶ最初期プロモーターの制御下で、ＨＳＶ−２  ｇＣを発現する、項目１〜１４のいずれか１項に記載の組換えウイルス。
（項目１６）
項目１〜１５のいずれか１項に記載の組換えウイルスを単位用量形態で含む、ワクチン。
（項目１７）
前記組換えウイルスは、１×１０７  ｐｆｕ／単位用量の最小限の量で存在する、項目１６に記載のワクチン。
（項目１８）
前記組換えウイルスは、１×１０７〜１×１０９  ｐｆｕ／単位用量において存在する、項目１６に記載のワクチン。
（項目１９）
ＨＳＶ−１感染もしくはＨＳＶ−２感染に対して患者を免疫する方法であって、該方法は、項目１６〜１８のいずれか１項に記載のワクチンを該患者に投与する工程を包含する、方法。
（項目２０）
前記患者は、ＨＳＶ−１に対してセロポジティブである、項目１９に記載の方法。
（項目２１）
前記患者は、ＨＳＶ−２に対してセロポジティブである、項目１９に記載の方法。
（項目２２）
前記患者は、ＨＳＶ−１およびＨＳＶ−２の両方に対してセロポジティブである、項目１９に記載の方法。
（項目２３）
前記個体は、ＨＳＶ−１感染およびＨＳＶ−２感染に対してセロネガティブである、項目１９に記載の方法。