【手続補正書】
【提出日】平成25年12月5日(2013.12.5)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
そのゲノム中に少なくとも１つの突然変異体ＡＨＡＳアレルを含む植物であって、前記突然変異体ＡＨＡＳアレルが完全ノックアウトＡＨＡＳアレルであり、前記完全ノックアウトＡＨＡＳアレルが内在性ＡＨＡＳ遺伝子の内在性アレルであり、そのゲノム中に少なくとも１つの第２の突然変異体ＡＨＡＳアレルをさらに含み、前記第２の突然変異体ＡＨＡＳアレルが除草剤耐性ＡＨＡＳタンパク質をコードする、植物。
【請求項２】
前記完全ノックアウトアレルが終止コドン突然変異を含む、請求項１に記載の植物。
【請求項３】
前記完全ノックアウトアレルが、
ａ）配列番号：１のｎｔ８７１〜８７３もしくは配列番号：３のｎｔ８２６〜８２８に対応する位置に終止コドンを含むヌクレオチド配列；
ｂ）配列番号：１のｎｔ８６２〜８６４もしくは配列番号：５のｎｔ８０８〜８１０に対応する位置に終止コドンを含むヌクレオチド配列；
ｃ）配列番号：１のｎｔ７７５〜７７７もしくは配列番号：５のｎｔ７２１〜７２３に対応する位置に終止コドンを含むヌクレオチド配列；または
ｄ）配列番号：１のｎｔ７９９〜８０１もしくは配列番号：５のｎｔ７４５〜７４７に対応する位置に終止コドンを含むヌクレオチド配列
からなる群から選択される、請求項１または２に記載の植物。
【請求項４】
前記除草剤耐性ＡＨＡＳタンパク質が、配列番号：２の位置１９７、または配列番号：４の位置１８２または配列番号：６の位置１７９に対応する位置にセリンを含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の植物。
【請求項５】
前記除草剤耐性ＡＨＡＳタンパク質が、配列番号：２、配列番号：４または配列番号：６との少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１〜４のいずれか一項に記載の植物。
【請求項６】
前記ＡＨＡＳアレルが、配列番号：１、配列番号：３または配列番号：５との少なくとも９０％の配列同一性を有する、請求項１〜５のいずれか一項に記載の植物。
【請求項７】
カラシナ（Ｂ．ｊｕｎｃｅａ）、セイヨウアブラナ（Ｂ．ｎａｐｕｓ）、カブ（Ｂ．ｒａｐａ）、アビシニアガラシ（Ｂ．ｃａｒｉｎａｔａ）、ブラッシカ・オレラセア（Ｂ．ｏｌｅｒａｃｅａ）およびクロガラシ（Ｂ．ｎｉｇｒａ）からなる群から選択される、請求項１〜６のいずれか一項に記載の植物。
【請求項８】
請求項１〜７のいずれか一項に記載の植物の植物細胞、種子、または子孫。
【請求項９】
ａ）受託番号ＮＣＩＭＢ４１６９０の下、２００９年１２月１７日にＮＣＩＭＢ  Ｌｉｍｉｔｅｄに寄託されたＡＨＡＳ１−ＨＥＴＯ１１２を含むアブラナ属（Ｂｒａｓｓｉｃａ）の種子；
ｂ）受託番号ＮＣＩＭＢ４１６８７の下、２００９年１２月１７日にＮＣＩＭＢ  Ｌｉｍｉｔｅｄに寄託されたＡＨＡＳ３−ＨＥＴＯ１０２を含むアブラナ属（Ｂｒａｓｓｉｃａ）の種子；
ｃ）受託番号ＮＣＩＭＢ４１６８８の下、２００９年１２月１７日にＮＣＩＭＢ  Ｌｉｍｉｔｅｄに寄託されたＡＨＡＳ３−ＨＥＴＯ１０３を含むアブラナ属（Ｂｒａｓｓｉｃａ）の種子；または
ｄ）受託番号ＮＣＩＭＢ４１６８９の下、２００９年１２月１７日にＮＣＩＭＢ  Ｌｉｍｉｔｅｄに寄託されたＡＨＡＳ３−ＨＥＴＯ１０４を含むアブラナ属（Ｂｒａｓｓｉｃａ）の種子
からなる群から選択される、アブラナ属（Ｂｒａｓｓｉｃａ）の種子。
【請求項１０】
請求項９に記載の種子から得られる、アブラナ属（Ｂｒａｓｓｉｃａ）植物、またはその細胞、部分、種子もしくは子孫。
【請求項１１】
前記ヌクレオチド配列が、
ａ）配列番号：１のｎｔ８７１〜８７３もしくは配列番号：３のｎｔ８２６〜８２８に対応する位置に終止コドンを含むヌクレオチド配列；
ｂ）配列番号：１のｎｔ８６２〜８６４もしくは配列番号：５のｎｔ８０８〜８１０に対応する位置に終止コドンを含むヌクレオチド配列；
ｃ）配列番号：１のｎｔ７７５〜７７７もしくは配列番号：５のｎｔ７２１〜７２３に対応する位置に終止コドンを含むヌクレオチド配列；または
ｄ）配列番号：１のｎｔ７９９〜８０１もしくは配列番号：５のｎｔ７４５〜７４７に対応する位置に終止コドンを含むヌクレオチド配列
からなる群から選択されるヌクレオチド配列を含む、完全ノックアウトＡＨＡＳアレルをコードする核酸分子。
【請求項１２】
配列番号：１、配列番号：３または配列番号：５との少なくとも９０％の配列同一性を有するヌクレオチド配列を含む、請求項１１に記載の核酸。
【請求項１３】
１つの植物から別の植物に少なくとも１つの選択された完全ノックアウトＡＨＡＳアレルを移動させるための方法であって、
ａ）請求項１１または１２に記載の少なくとも１つの選択された完全ノックアウトＡＨＡＳアレルを含む第１の植物を同定するかまたは請求項１１または１２に記載の少なくとも１つの選択された完全ノックアウトＡＨＡＳアレルを含む第１の植物を作製する工程、ここで前記完全ノックアウトＡＨＡＳアレルは内在性ＡＨＡＳ遺伝子の内在性アレルである、と、
ｂ）前記第１の植物を前記少なくとも１つの選択された完全ノックアウトＡＨＡＳアレルを含まない第２の植物と交配し、前記交配種からＦ１雑種種子を回収する工程と、
ｃ）場合により、前記少なくとも１つの選択された完全ノックアウトＡＨＡＳアレルを含むＦ１植物を同定する工程と、
ｄ）少なくとも１世代（ｘ）の間、前記少なくとも１つの選択された内在性ＡＨＡＳ遺伝子の完全ノックアウトＡＨＡＳアレルを含むＦ１植物を、前記少なくとも１つの選択された完全ノックアウトＡＨＡＳアレルを含まない第２の植物と戻し交配し、前記交配種からＢＣｘ種子を回収する工程と、
ｅ）前記少なくとも１つの選択された内在性ＡＨＡＳ遺伝子の完全ノックアウトＡＨＡＳアレルを含むＢＣｘ植物を全ての世代で同定する工程と
を含む、方法。
【請求項１４】
１つの植物中で請求項１１または１２に記載の完全ノックアウトＡＨＡＳアレルを除草剤耐性ＡＨＡＳアレルと組み合わせるための方法であって、前記完全ノックアウトＡＨＡＳアレルが内在性ＡＨＡＳ遺伝子の内在性アレルであり、
ａ）少なくとも１つの選択された内在性ＡＨＡＳ遺伝子の完全ノックアウトＡＨＡＳアレルを含む少なくとも１つの植物および少なくとも１つの選択された除草剤耐性ＡＨＡＳアレルを含む少なくとも１つの植物を作製および／または同定する工程と、
ｂ）前記少なくとも２つの植物を交配し、前記少なくとも１つの交配種からＦ１雑種種子を回収する工程と、
ｃ）場合により、少なくとも１つの選択された内在性ＡＨＡＳ遺伝子の完全ノックアウトＡＨＡＳアレルおよび前記少なくとも１つの選択された除草剤耐性ＡＨＡＳアレルを含むＦ１植物を同定する工程と
を含む、方法。
【請求項１５】
請求項１〜７のいずれか一項に記載の植物を産生する方法であって、請求項１３または１４に従って、１つの植物中で突然変異体ＡＨＡＳアレルを組み合わせることおよび／または１つの植物に突然変異体ＡＨＡＳアレルを移動させることを含む、方法。
【請求項１６】
植物の除草剤耐性を増大させるための方法であって、前記植物のゲノムＤＮＡ中で少なくとも１つの完全ノックアウトＡＨＡＳアレル、ここで前記完全ノックアウトＡＨＡＳアレルが内在性ＡＨＡＳ遺伝子の内在性アレルである、と少なくとも１つの除草剤耐性ＡＨＡＳアレルとを組み合わせることを含む、方法。
【請求項１７】
前記完全ノックアウトアレルが、
ａ）配列番号：１のｎｔ８７１〜８７３もしくは配列番号：３のｎｔ８２６〜８２８に対応する位置に終止コドンを含むヌクレオチド配列；
ｂ）配列番号：１のｎｔ８６２〜８６４もしくは配列番号：５のｎｔ８０８〜８１０に対応する位置に終止コドンを含むヌクレオチド配列；
ｃ）配列番号：１のｎｔ７７５〜７７７もしくは配列番号：５のｎｔ７２１〜７２３に対応する位置に終止コドンを含むヌクレオチド配列；または
ｄ）配列番号：１のｎｔ７９９〜８０１もしくは配列番号：５のｎｔ７４５〜７４７に対応する位置に終止コドンを含むヌクレオチド配列
からなる群から選択される、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記完全ノックアウトアレルが、配列番号：１、配列番号：３または配列番号：５との少なくとも９０％の配列同一性を有するヌクレオチド配列を含む、請求項１６または１７に記載の方法。
【請求項１９】
作物植物周辺の雑草を防除する方法であって、
ａ）請求項１〜７のいずれか一項に記載の植物によって産生された種子を圃場に植える工程と、
ｂ）前記雑草を防除するために有効量のＡＨＡＳ阻害除草剤を前記圃場の前記雑草および前記作物植物に適用する工程と
を含む、方法。
【請求項２０】
工程ａ）の前に、有効量のＡＨＡＳ阻害除草剤を前記圃場に適用する工程をさらに含む、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記植物を１種以上のＡＨＡＳ阻害除草剤で処理することを特徴とする、請求項１〜７のいずれか一項に記載の植物を処理する方法。
【請求項２２】
前記植物が、少なくとも５．０ｇ  ａ．ｉ．／ｈａのメチル４−［（４，５−ジヒドロ−３−メトキシ−４−メチル−５−オキソ−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）カルボニルスルファモイル］−５−メチルチオフェン−３−カルボキシレートの適用に対して耐性がある、請求項１９〜２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３】
前記植物が、カラシナ（Ｂ．ｊｕｎｃｅａ）、セイヨウアブラナ（Ｂ．ｎａｐｕｓ）、カブ（Ｂ．ｒａｐａ）、アビシニアガラシ（Ｂ．ｃａｒｉｎａｔａ）、ブラッシカ・オレラセア（Ｂ．ｏｌｅｒａｃｅａ）およびクロガラシ（Ｂ．ｎｉｇｒａ）からなる群から選択される、請求項１３〜２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４】
除草剤耐性植物を得るための請求項１１または１２に記載の完全ノックアウトＡＨＡＳアレルの使用。
【請求項２５】
１つ以上の完全ノックアウトＡＨＡＳアレルを含む種子を産生するための請求項１〜７または１０のいずれか一項に記載の植物の使用。
【請求項２６】
１つ以上の完全ノックアウトＡＨＡＳアレルを含む菜種の作物を産生するための請求項１〜７または１０のいずれか一項に記載の植物の使用。