【手続補正書】
【提出日】平成25年11月29日(2013.11.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＣＤ４＋ＣＤ２５＋制御性Ｔ細胞を活性化可能な抗体又は抗体断片であって、ＢＴ０６１軽鎖のＣＤＲ１及びＣＤＲ２とＢＴ０６１重鎖のＣＤＲ１及びＣＤＲ３とを含み、前記ＣＤＲはそれぞれ、その配列中に以下に記載するアミノ酸置換を任意で含んでいてもよいＣＤＲであり、
（ｉ）Ｓｅｒ３２；Ｇｌｙ３３；及びＴｙｒ３４を含む軽鎖ＣＤＲ１、
（ｉｉ）Ｌｅｕ５４；及びＩｌｅ５７を含む軽鎖ＣＤＲ２、
（ｉｉｉ）Ａｓｐ３１、Ｇｌｕ３１、Ｔｈｒ３１、Ｃｙｓ３１、Ｐｒｏ３１、Ｍｅｔ３１、又はＴｙｒ３１を含む重鎖ＣＤＲ１、
（ｉｖ）Ｔｙｒ１０３、Ｐｈｅ１０３、又はＨｉｓ１０３；Ａｒｇ１０４；Ｔｙｒ１０５；Ａｓｐ１０６；及びＴｒｐ１１０、Ｐｈｅ１１０、Ｈｉｓ１１０、又はＴｙｒ１１０を含む重鎖ＣＤＲ３、
前記抗体又は抗体断片が、ＢＴ０６１重鎖のＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３、並びにＢＴ０６１軽鎖のＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含まないことを特徴とする抗体又は抗体断片。
【請求項２】
ＢＴ０６１軽鎖のＣＤＲ１に由来する配列ＳＧＹＳＹ、ＢＴ０６１軽鎖のＣＤＲ２に由来する配列ＬＡＳＩＬＥ、及びＢＴ０６１重鎖のＣＤＲ３に由来する配列ＹＹＲＹＤの少なくともいずれかを含む請求項１に記載の抗体又は抗体断片。
【請求項３】
ＣＤＲの配列中のアミノ酸置換が、等配電子変異である請求項１に記載の抗体又は抗体断片。
【請求項４】
ＢＴ０６１軽鎖のＣＤＲ１及びＣＤＲ２、並びにＢＴ０６１重鎖のＣＤＲ１及びＣＤＲ３の少なくともいずれかの配列中のアミノ酸置換が、表４及び５に記載されるアミノ酸置換から選択される請求項１に記載の抗体又は抗体断片。
【請求項５】
抗体又は抗体断片が、Ｔｙｒ５３又はＰｈｅ５３を含む軽鎖、及びＳｅｒ２８を含む重鎖の少なくともいずれかを含む請求項１又は４に記載の抗体又は抗体断片。
【請求項６】
抗体又は抗体断片が、Ａｓｐ６４を含有する軽鎖を含む請求項１、４、及び５のいずれかに記載の抗体又は抗体断片。
【請求項７】
抗体又は抗体断片が、Ｇｌｕ５６を含有する重鎖を含む請求項１及び４から６のいずれかに記載の抗体又は抗体断片。
【請求項８】
抗体又は抗体断片が、ＢＴ０６１軽鎖のＣＤＲ３及びＢＴ０６１重鎖のＣＤＲ２の少なくともいずれかを更に含み、これらＣＤＲの配列中にアミノ酸置換が任意で存在し、前記アミノ酸置換が、表４及び５に記載されるアミノ酸置換から選択される請求項１及び４から７のいずれかに記載の抗体又は抗体断片。
【請求項９】
下記（ａ）又は（ｂ）のＣＤＲ配列を含む請求項１及び４から８のいずれかに記載の抗体又は抗体断片：
（ａ）以下の単一アミノ酸置換を含むＢＴ０６１軽鎖のＣＤＲ配列及びＢＴ０６１重鎖のＣＤＲ配列：
（ｉ）重鎖におけるＡ６３Ｇ；
（ｉｉ）重鎖におけるＲ３３Ｋ；又は
（ｉｉｉ）軽鎖におけるＬ９８Ｉ；
（ｂ）以下の二重アミノ酸置換を含むＢＴ０６１軽鎖のＣＤＲ配列及びＢＴ０６１重鎖のＣＤＲ配列：
（ｉｖ）重鎖におけるＲ３３Ｋ及びＡ６３Ｇ；又は
（ｖ）軽鎖におけるＬ９８Ｉ及び重鎖におけるＲ３３Ｋ。
【請求項１０】
ＢＴ０６１の残りの可変ドメイン配列を更に含む請求項９に記載の抗体又は抗体断片。
【請求項１１】
ＣＤ４＋ＣＤ２５＋制御性Ｔ細胞を活性化可能な抗体又は抗体断片であって、抗体ＢＴ０６１のＶドメインと少なくとも８０％同一であるＶドメインを含み、前記Ｖドメインが、
（ｉ）軽鎖ＶドメインのＣＤＲ１における配列モチーフＳＧＹＳＹ、
（ｉｉ）軽鎖ＶドメインのＣＤＲ２における配列モチーフＬＡＳＩＬＥ、及び
（ｉｉｉ）重鎖ＶドメインのＣＤＲ３における配列モチーフＳＹＸＲＹＤ（式中、Ｘは、Ｙ、Ｆ、又はＨである）を含むが、
但し、前記抗体又は抗体断片は、抗体ＢＴ０６１のＶドメインと１００％同一であるＶドメインを含まないことを特徴とする抗体又は抗体断片。
【請求項１２】
ＣＤ６４に結合可能なＦｃ受容体を更に含む請求項１から１１のいずれかに記載の抗体又は抗体断片。
【請求項１３】
抗体が、ＩｇＧ抗体である請求項１から１２のいずれかに記載の抗体。
【請求項１４】
（ａ）ヒトＣＤ４タンパク質のうちの５０未満のアミノ酸を含み、且つヒトＣＤ４の以下の領域：アミノ酸１４８〜１５４、アミノ酸１６４〜１６８、及びアミノ酸１８５〜１９２のうちの２つ又は３つを含むか、或いは、
（ｂ）ヒトＣＤ４タンパク質のうちの２０未満のアミノ酸を含み、且つヒトＣＤ４の以下の領域：アミノ酸１４８〜１５４、アミノ酸１６４〜１６８、及びアミノ酸１８５〜１９２のうちの１以上を含むことを特徴とする単離ペプチド。
【請求項１５】
請求項１から１３のいずれかに記載の抗体又は抗体断片をコードしていることを特徴とする核酸。
【請求項１６】
請求項１５に記載の核酸を含むことを特徴とするベクター。
【請求項１７】
請求項１５に記載の核酸又は請求項１６に記載のベクターを含むことを特徴とするホスト細胞又はハイブリドーマ。
【請求項１８】
請求項１から１３のいずれかに記載の抗体又は抗体断片を産生する方法であって、前記抗体又は抗体断片を発現させる条件下で培養培地中にて請求項１７に記載のホスト細胞を培養し、前記培養培地から前記抗体又は抗体断片を分離する工程を含むことを特徴とする方法。
【請求項１９】
請求項１から１３のいずれかに記載の抗体又は抗体断片を含み、薬学的に許容し得る担体を更に含むことを特徴とする医薬組成物。
【請求項２０】
標識を更に含む請求項１から１３のいずれかに記載の抗体又は抗体断片。
【請求項２１】
ＣＤ４＋ＣＤ２５＋制御性Ｔ細胞を活性化させるためのインビトロにおける方法であって、前記ＣＤ４＋ＣＤ２５＋制御性Ｔ細胞と請求項１から１３のいずれかに記載の抗体又は抗体断片とを接触させることを含むことを特徴とする方法。
【請求項２２】
自己免疫疾患又は移植拒絶の治療のための医薬であって、請求項１から１３のいずれかに記載の抗体又は抗体断片を有効成分として含むことを特徴とする医薬。
【請求項２３】
インビトロにおいてＣＤ４＋ＣＤ２５＋制御性Ｔ細胞を活性化させるため又は同定するための請求項１から１３のいずれかに記載の抗体又は抗体断片の使用。
【請求項２４】
サンプル中のＣＤ４＋ＣＤ２５＋制御性Ｔ細胞の存在をスクリーニングする方法であって、請求項２０に記載の標識抗体又は標識抗体断片と前記サンプルとを接触させ、前記サンプルを洗浄して結合していない抗体を除去し、前記サンプル中の前記標識の存在を検出する工程を含むことを特徴とする方法。
【請求項２５】
請求項１から１３のいずれかに記載の抗体又は抗体断片でコーティングされた磁気ビーズと、第２の抗ＣＤ４抗体又は抗ＣＤ２５抗体とを含むことを特徴とするＣＤ４＋ＣＤ２５＋制御性Ｔ細胞を単離するためのキット。
【請求項２６】
ＣＤ４に結合可能な分子をスクリーニングする方法であって、
（ａ）１以上の候補分子を提供する工程と；
（ｂ）前記１以上の候補分子が、ヒトＣＤ４の以下の領域：アミノ酸１４８〜１５４、アミノ酸１６４〜１６８、及びアミノ酸１８５〜１９２のうちの１以上に結合可能であるかどうかを判定する工程と；
（ｃ）工程（ｂ）においてＣＤ４に結合可能であると判定された分子を選択する工程と
を含むことを特徴とする方法。
【請求項２７】
工程（ｂ）が、１以上の候補分子がヒトＣＤ４の以下のアミノ酸：２６、１５６、１５９、及び１６１のうちの少なくとも１つに結合するかどうかを判定することを更に含む請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
１以上の候補分子が、抗体、抗体由来分子、ペプチド、オリゴヌクレオチド、ｓｉＲＮＡ、ミモトープ、ペプチド模倣物質、フォルダマー、小分子、天然のリポカリン又は改変されたリポカリンに基づく認識タンパク質、ＤＡＲＰｉｎ、フィブロネクチン、アフィボディ、Ｋｕｎｉｔｚ型阻害剤、ペプチドアプタマー、リボザイム、又は毒素である請求項２６から２７のいずれかに記載の方法。
【請求項２９】
抗体が、ヒト化抗体又はラクダ抗体である請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
ＣＤ４＋ＣＤ２５＋制御性Ｔ細胞を活性化する能力について、工程（ｃ）で選択された分子をスクリーニングする工程（ｄ）、及び
ＣＤ４発現細胞におけるＣＤ４受容体の発現を低下させる能力について、工程（ｃ）で選択された分子をスクリーニングする工程（ｅ）
の少なくともいずれかを更に含む請求項２６から２９のいずれかに記載の方法。
【請求項３１】
（ａ）請求項３０に記載の方法を用いてＣＤ４＋ＣＤ２５＋制御性Ｔ細胞を活性化可能であると判定された分子を選択する工程と、
（ｂ）前記選択された分子を含む治療組成物を製造する工程と
を含むことを特徴とする治療組成物を製造する方法。
【請求項３２】
分子が、ＢＴ０６１重鎖のＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３、並びにＢＴ０６１軽鎖のＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含まないことを特徴とする請求項３１に記載の方法によって得ることができる治療組成物。