【誤訳訂正書】
【提出日】平成24年6月21日(2012.6.21)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】特許請求の範囲
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  標的遺伝子の一次翻訳産物のＣ末端又はＮ末端のいずれかであるタンパク質フラグメントであるタンパク質の産生方法であって、
前記フラグメントが生物活性をもち、
前記方法が、
（ｉ）（ａ）前記フラグメントをコードするＤＮＡの転写及び翻訳を開始するか又は終結させる能力をもつ調節ＤＮＡ；及び
（ｂ）前記フラグメントをコードする配列の５′側又は３′側に位置する前記標的遺伝子の１領域に相同な複数の配列を含むＤＮＡターゲティングセグメント；
を含むＤＮＡ構成体によるトランスフェクションを受けた宿主細胞を増殖させる段階であって、前記構成体は、前記フラグメントの発現が前記調節ＤＮＡの制御下にあるような形で前記ＤＮＡターゲティングセグメントにより決定された位置で、宿主細胞のゲノミックＤＮＡ内に組込まれる前記段階、
（ｉｉ）相同的に組換え型の細胞を培養する段階；並びに、
（ｉｉｉ）機能性タンパク質ドメインを収集する段階
を含んで成り、
前記フラグメントが、
（ｉ）膜レセプタの細胞外結合ドメイン；
（ｉｉ）脈管形成防止特性をもつ構造的細胞外基質タンパク質のタンパク質分解フラグメン；及び
（ｉｉｉ）不活性前駆体タンパク質からタンパク質分解によって放出されたタンパク質
からなる群より選択される前記方法。
【請求項２】  前記フラグメントが、エキソンによってコードされ、前記ＤＮＡターゲティングセグメントが、前記タンパク質をコードするエキソンの５′側又は３′側に位置するゲノミック領域に相同な複数の配列を含む、請求項１記載の方法。
【請求項３】  （ｉ）前記フラグメントが、標的遺伝子の一次翻訳産物のＣ末端に対応し、少なくともイントロン含有標的遺伝子の最も３′側に位置するエキソンによってコードされ、
（ｉｉ）前記ＤＮＡターゲティングセグメントが、前記フラグメントをコードするエキソンの５′側に位置するゲノミック領域に相同な複数の配列を含み、
（ｉｉｉ）前記ＤＮＡ構成体が、相同な組換えによる宿主細胞ゲノム内への組込みを経て前記エキソンに操作可能な形で連結され；
（ｉｖ）前記調節ＤＮＡが、
（ａ）前記フラグメントをコードするＤＮＡの転写を活性化する能力をもつＤＮＡ配列から成る転写モジュール；及び
（ｂ）前記一次転写産物から前記フラグメントへの翻訳を開始する能力をもつ翻訳制御要素を含むＤＮＡ配列から成る翻訳モジュール
を含む、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】  （ｖ）前記ＤＮＡ構成体が、前記フラグメントのＮ末端をコードする内因性エキソンの不対合３′スプライス受容部位を補完することにより、一次転写産物のスプライシングを可能にして、前記フラグメントをコードする配列に対する前記翻訳モジュールの「インフレーム」並置を結果としてもたらす、不対合５′スプライス供与部位を含むスプライシングモジュールを含む、請求項３に記載の方法。
【請求項５】  前記翻訳モジュールが５′の未翻訳領域を含み、翻訳開始コドンが、前記フラグメントのＮ末端をコードするエキソンの中に含まれている、請求項３又は４に記載の方法。
【請求項６】  前記翻訳モジュールが、５′の未翻訳領域及び翻訳開始コドンを含む１又は複数の外因性エキソンを含む、請求項３又は４に記載の方法。
【請求項７】  前記外因性エキソンが、前記スプライシングモジュールにより前記フラグメントをコードする配列と「インフレーム」に置かれ、前記フラグメントのＮ末端エキソンとなる、請求項６記載の方法。
【請求項８】  前記外因性エキソンが前記フラグメントのＮ末端をコードするエキソンと融合するように前記ターゲティングセグメントを選択することにより、前記外因性エキソンが前記フラグメントをコードする配列と「インフレーム」に配置される、請求項６記載の方法。
【請求項９】  前記外因性エキソンがシグナルペプチド又はそのＮ末端をコードする、請求項６〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】  （ｉ）前記フラグメントが、標的遺伝子の一次翻訳産物のＮ末端に対応し、少なくともイントロン含有標的遺伝子の最も５′側に位置するエキソンによってコードされ、
（ｉｉ）前記ＤＮＡターゲティングセグメントが、前記フラグメントをコードするエキソンの３′側に位置するゲノミック領域に相同な複数の配列を含み、
（ｉｉｉ）前記ＤＮＡ構成体が、相同な組換えによる宿主細胞ゲノム内への組込みを経て前記エキソンに操作可能な形で連結され；
（ｉｖ）前記調節ＤＮＡが、
（ａ）ゲノミックＤＮＡの転写を終結させる能力をもつＤＮＡ配列から成る転写モジュール；及び
（ｂ）前記一次転写産物から前記フラグメントへの翻訳を終結させる能力をもつ翻訳制御要素を含むＤＮＡ配列から成る翻訳モジュール
を含む、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項１１】  （ｖ）前記ＤＮＡ構成体が、前記フラグメントのＣ末端をコードする内因性エキソンの不対合５′スプライス受容部位を補完することにより、一次転写産物のスプライシングを可能にして、前記フラグメントをコードする配列に対する前記翻訳モジュールの「インフレーム」並置を結果としてもたらす、不対合３′スプライス供与部位を含むスプライシングモジュールを含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】  前記翻訳モジュールが翻訳終止コドン及び３′の未翻訳領域を含む、請求項１０又は１１に記載の方法。
【請求項１３】  翻訳モジュールが３′の未翻訳領域及び翻訳終止コドンを含む１又は複数の外因性エキソンを含み、前記翻訳終止コドンが、前記スプライシングモジュールにより前記フラグメントをコードする配列と「インフレーム」に置かれ、前記フラグメントの翻訳終止コドンとなる、請求項１０〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】  前記外因性エキソンが、前記フラグメントをコードする１又は複数のエキソンとインフレームに置かれた時点で、前記標的遺伝子によってコードされる一次翻訳産物内に含まれたタンパク質配列と非相同なタンパク質配列をコードする、請求項６、７、８，９又は１３に記載の方法。
【請求項１５】  前記外因性エキソンが、前記フラグメントをコードする１又は複数のエキソンとインフレームに置かれた時点で、前記標的遺伝子によりコードされる一次翻訳産物内に含まれたタンパク質配列と相同なタンパク質配列をコードする、請求項６、７、８、９又は１３に記載の方法。
【請求項１６】  前記外因性エキソンがさらに、タンパク質分解酵素の認識部位をコードする、請求項１４又は１５に記載の方法。
【請求項１７】  前記タンパク質分解酵素が宿主細胞により発現される、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】  前記タンパク質分解酵素が市販のプロテアーゼである、請求項１６又は１７に記載の方法。
【請求項１９】  前記ターゲティングセグメントが２つのターゲティングセグメントで構成されている、請求項１〜１８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】  前記構成体がさらに１又は複数の選択可能な及び／又は増幅可能なマーカー遺伝子を含んで成る、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２１】  前記フラグメントをコードする１又は複数のエキソンを含有する標的遺伝子の一次翻訳産物がホルモン、サイトカイン、リンフォカイン、ケモカイン、膜結合タンパク質、トランスメンブランタンパク質、細胞外基質タンパク質、細胞内タンパク質、核タンパク質、細胞成長及び代謝調節因子、酵素、レセプタ、血液製剤又はモノクローナル抗体である、請求項１〜２０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２２】  前記フラグメントが可溶性ＴＲＡＮＣＥ、エンドスタチン、Ｔｒｘ８０、チロシン−ｔＲＮＡシンセターゼ由来サイトカイン、又は免疫グロブリンの抗原結合部位から選択される、請求項２１に記載の方法。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２０】
発明の要約
現在、例えば少なくともイントロン含有遺伝子の最も５′側又は３′側に位置するエキソンによってコードされる一次翻訳産物のＮ又はＣ末端に対応する場合、機能タンパク質ドメインを産生できるさらなる方法が存在するということが発見された。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２５】
好ましい実施形態においては、機能タンパク質ドメインを形成するペプチド又はポリペプチドは、イントロン含有遺伝子の少なくとも最も５′側又は３′側に位置するエキソンによってコードされる。かくして、第１の好ましい実施形態においては、
標的遺伝子の一次翻訳産物のＣ末端に対応し、少なくともイントロン含有標的遺伝子の最も３′側に位置するエキソンによってコードされる機能タンパク質ドメインであるタンパク質を産生する方法において：
（ｉ）相同な組換えによる宿主細胞ゲノム内の組込みの後前記エキソンに操作可能な形でリンクされるＤＮＡ構成体でトランスフェクションされた宿主細胞を増殖させる段階であって、前記構成体が、
（ａ）該タンパク質についてコードする１又は複数のエキソンの５′側に位置するゲノミック領域に相同な複数の配列を含むＤＮＡターゲティング領域：
（ｂ）機能タンパク質ドメインをコードするＤＮＡの転写を活性化する能力をもつＤＮＡ配列から成る転写モジュール；
（ｃ）機能タンパク質ドメインの翻訳を開始する能力をもつＤＮＡ配列から成る翻訳モジュール；そして任意には、
（ｄ）機能タンパク質ドメインのＮ末端をコードする内因性エキソンの不対合３′スプライス受容部位を補完することにより、一次転写産物のスプライシングを可能にして、機能タンパク質ドメインについてコードする配列に対する翻訳モジュールの「インフレーム」並置を結果としてもたらす、不対合５′スプライス供与部位を含むスプライシングモジュール；
を含んで成る段階；
（ｉｉ）相同に組換え型である細胞を培養する段階；
（ｉｉｉ）機能タンパク質ドメインを収集する段階、
を含んで成る方法が提供されている。
【誤訳訂正４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３０】
本発明の第２の好ましい実施形態においては、
標的遺伝子の一次翻訳産物のＮ末端に対応し、少なくともイントロン含有標的遺伝子の最も５′側に位置するエキソンによってコードされる機能タンパク質ドメインであるタンパク質を産生する方法において：
（ｉ）相同な組換えによる宿主細胞ゲノム内の組込みの後前記エキソンに操作可能な形で連結されるＤＮＡ構成体でのトランスフェクションを受けた宿主細胞を増殖させる段階であって、前記構成体が、
（ａ）該タンパク質についてコードする１又は複数のエキソンの５′側に位置するゲノミック領域に相同な複数の配列を含むＤＮＡターゲティング領域：
（ｂ）ゲノミックＤＮＡの転写を終結させる能力をもつＤＮＡ配列から成る転写モジュール；
（ｃ）機能タンパク質ドメインの翻訳を終結させるＤＮＡ配列から成る翻訳モジュール；そして任意には、
（ｄ）機能タンパク質ドメインのＣ末端をコードする内因性エキソンの不対合５′スプライス供与部位を補完することにより、一次転写産物の正しいスプライシングを可能にして、機能タンパク質ドメインについてコードする配列に対する翻訳モジュールの「インフレーム」並置を結果としてもたらす、不対合３′スプライス受容部位を含むスプライシングモジュール；
を含んで成る段階；
（ｉｉ）相同に組換え型である細胞を培養する段階；
（ｉｉｉ）機能タンパク質ドメインを収集する段階、
を含んで成る方法が提供されている。