【手続補正書】
【提出日】平成26年8月26日(2014.8.26)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の段階を含む、疎水性部分によって修飾されリポソーム中で再構成されたペプチドを含む、リポソームベースの構築物を調製する方法：
(i)溶液中でリポソームを調製する段階；
(ii)ペプチドのN末端および/またはC末端に少なくとも1つの疎水性部分を付加することにより、修飾ペプチドを調製する段階；
(iii)界面活性物質の存在下で前記修飾ペプチドを可溶化する段階；
(iv)前記可溶化されたペプチドを前記界面活性物質の臨界ミセル濃度未満に希釈する段階；
(v)予備形成されたリポソーム調製物に前記希釈された可溶化されたペプチドを添加し、該添加されたペプチドを該リポソームの外層中に可溶化することにより、予備形成されたリポソームに、希釈された可溶化されたペプチドを負荷する段階；および
(vi)任意で、予備形成されたリポソームにアジュバントをさらに負荷する段階。
【請求項２】
アジュバント負荷が、希釈された可溶化された抗原性ペプチドをリポソームに負荷する(a) 前；(b) 同時；または(c) 後に行われる、請求項1記載の方法。
【請求項３】
疎水性部分により脂質二重層中に挿入された再構成されたペプチドの少なくとも72％、80％、90％、または100％がリポソームの外表面上に存在する、請求項1または2記載の方法。
【請求項４】
前記ペプチドが、
(a)脂肪酸、トリグリセリド、ジグリセリド、ステロイド、スフィンゴ脂質、糖脂質、リン脂質、詳細にはパルミチン酸、の付加によって修飾される；および/または
(b)共有結合しているパルミトイル化アミノ酸残基によって、詳細には該ペプチドのN末端およびC末端にそれぞれ共有結合している2〜4個、より詳細には4個の残基によって修飾される；および/または
(c)4つのパルミトイル化アミノ酸残基によって修飾され、そのうちの2つが該ペプチドのN末端およびC末端にそれぞれ共有結合している、
請求項1〜3のいずれか一項記載の方法。
【請求項５】
請求項1〜4のいずれか一項記載の方法によって得られる、疎水性部分によって修飾されリポソーム中で再構成されたペプチド、および、任意でリポソーム中で再構成されたアジュバントを含むリポソームベースの構築物であって、該再構成されたペプチドの、および、任意で該再構成されたアジュバントの、少なくとも72％、少なくとも80％、少なくとも90％、または少なくとも100％がリポソームの外表面上に存在し、該ペプチドが、いかなる化学反応または付加的な分子修飾の助けも借りずに、その疎水性部分により脂質二重層中に挿入されている、リポソームベースの構築物。
【請求項６】
前記ペプチドが、共有結合によってリポソーム膜に結合していない、請求項5記載の構築物。
【請求項７】
前記ペプチドが抗原性ペプチドである、請求項5または6記載の構築物。
【請求項８】
前記ペプチドが、
(a)脂肪酸、トリグリセリド、ジグリセリド、ステロイド、スフィンゴ脂質、糖脂質、リン脂質、詳細にはパルミチン酸、の付加によって修飾されている；および/または
(b)共有結合しているパルミトイル化アミノ酸残基によって、詳細には該ペプチドのN末端およびC末端にそれぞれ共有結合している2〜4個、より詳細には4個の残基によって修飾されている；および/または
(c)4つのパルミトイル化アミノ酸残基によって修飾され、そのうちの2つが該ペプチドのN末端およびC末端にそれぞれ共有結合している、
請求項5〜7のいずれか一項記載の構築物。
【請求項９】
請求項5〜8のいずれか一項記載の抗原性構築物、および、任意で薬学的に許容される担体を含む、組成物。
【請求項１０】
請求項5〜8のいずれか一項記載の抗原性構築物または請求項9記載の組成物を非ヒト哺乳動物に投与する段階、および該哺乳動物によって産生された抗体を単離する段階を含む、抗体を生成する方法。
【請求項１１】
請求項10記載の方法によって生成された、ポリクローナルもしくはモノクローナル抗体またはそれらの機能的誘導体である、抗体。
【請求項１２】
哺乳動物において免疫応答を誘導するための、請求項5〜8のいずれか一項記載の抗原性構築物または請求項9記載の組成物。
【請求項１３】
(a)感染症、CNS関連疾患もしくは障害、腫瘍学、アレルギー、II型糖尿病、または炎症の分野における；および/または
(b)プロテオパシー(proteopathy)に関連した疾患もしくは障害、タンパク質の誤った折りたたみを伴う疾患、および/またはタンパク質の蓄積もしくは凝集を伴う疾患、詳細にはアルツハイマー病、に罹患している、
哺乳動物、詳細にはヒトの治療的または予防的処置において使用するための、請求項5〜8のいずれか一項記載の抗原性構築物または請求項9記載の組成物。
【請求項１４】
(a)感染症、CNS関連疾患もしくは障害、腫瘍学、アレルギー、II型糖尿病、または炎症の分野における、哺乳動物、詳細にはヒトの治療的または予防的処置；および/または
(b)プロテオパシーに関連した疾患もしくは障害、タンパク質の誤った折りたたみを伴う疾患、および/またはタンパク質の蓄積もしくは凝集を伴う疾患、詳細にはアルツハイマー病、に罹患している哺乳動物、詳細にはヒトの治療的または予防的処置；および/または
(c)感染症、CNS関連疾患もしくは障害、腫瘍学、アレルギー、II型糖尿病、または炎症の分野における疾患または障害の検出または診断；および/または
(d)プロテオパシーに関連した疾患もしくは障害、タンパク質の誤った折りたたみを伴う疾患、および/またはタンパク質の蓄積もしくは凝集を伴う疾患、詳細にはアルツハイマー病、の検出または診断
において使用するための、請求項11記載の抗体。
【請求項１５】
疾患または障害の検出または診断において使用するための、詳細には
(a)感染症、CNS関連疾患もしくは障害、腫瘍学、アレルギー、II型糖尿病、または炎症の分野における疾患または障害の検出または診断；および/または
(b)プロテオパシーに関連した疾患もしくは障害、タンパク質の誤った折りたたみを伴う疾患、および/またはタンパク質の蓄積もしくは凝集を伴う疾患、詳細にはアルツハイマー病、の検出または診断；および/または
(c)疾患または障害を示すタンパク質マーカーの検出
において使用するための、請求項11記載の抗体を含む、診断キット。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１８１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１８１】
「疾患または障害」という用語はさらに、多発性骨髄腫、ならびに例えば、結腸直腸癌、黒色腫；IL-2、癌、とりわけ乳癌、肺癌、肝臓癌、胃癌、および脾臓癌、ならびに腫瘍；IL-4、癌；TNF、癌；IGF-1アンチセンス、脳腫瘍；IFN、神経芽細胞腫；GM-CSF、腎細胞癌；MDR-1、癌、とりわけ進行癌、乳癌、および卵巣癌；ならびにHSVチミジンキナーゼ、脳腫瘍、頭頸部腫瘍、中皮腫、卵巣癌、白血病などの他の癌を含む細胞増殖性疾患および障害に関する。「疾患または障害」という用語はまた、真菌症、カンジダ症、白癬症、およびリーシュマニア症など真菌感染症に関する。
[本発明1001]
以下の段階を含む、疎水性部分によって修飾されリポソーム中で再構成されたペプチドを含む、リポソームベースの構築物を調製する方法：
i 溶液中でリポソームを調製する段階；
ii ペプチド分子のN末端および/またはC末端に少なくとも1つの疎水性部分を付加することにより、修飾ペプチドを調製する段階；
iii 界面活性物質の存在下で前記修飾ペプチドを可溶化する段階；
iv 前記可溶化されたペプチドを前記界面活性物質の臨界ミセル濃度未満に希釈する段階；
v 予備形成されたリポソーム調製物に前記希釈された可溶化されたペプチドを添加し、該添加されたペプチドを該リポソームの外層中に可溶化することにより、予備形成されたリポソームに、希釈された可溶化されたペプチドを負荷する段階。
[本発明1002]
前記ペプチドが抗原性ペプチドである、本発明1001の方法。
[本発明1003]
予備形成されたリポソームにアジュバントをさらに負荷する、本発明1002の方法。
[本発明1004]
アジュバント負荷が、希釈された可溶化された抗原性ペプチドをリポソームに負荷する(a) 前；(b) 同時；または(c) 後に行われる、本発明1003の方法。
[本発明1005]
前記アジュバントが、リピドA、詳細にはモノホスホリルまたはジホスホリルリピドAなどの解毒化リピドA、ミョウバン、Pam2CSK4、Pam3CSK4、Pam3CAG、サポニン、CpG、ホスホロチオエート化PS-CpG-ODN、脂質化CpG、例えばCpG-A、CpG-B、またはCpG-CなどのCpGオリゴデオキシヌクレオチド(CpG-ODN)、陽イオン性脂質である、本発明1003または1004の方法。
[本発明1006]
疎水性部分により脂質二重層中に挿入された再構成されたペプチドの少なくとも72％がリポソームの外表面上に存在する、前記本発明のいずれかの方法。
[本発明1007]
再構成されたペプチドの少なくとも80％がリポソームの外表面上に存在する、前記本発明のいずれかの方法。
[本発明1008]
再構成されたペプチドの少なくとも90％がリポソームの外表面上に存在する、前記本発明のいずれかの方法。
[本発明1009]
再構成されたペプチドの100％がリポソームの外表面上に存在する、本発明1007の方法。
[本発明1010]
前記ペプチドが、脂肪酸、トリグリセリド、ジグリセリド、ステロイド、スフィンゴ脂質、糖脂質、またはリン脂質の付加によって修飾される、前記本発明のいずれかの方法。
[本発明1011]
前記疎水性部分がパルミチン酸である、本発明1010の方法。
[本発明1012]
前記ペプチドが、共有結合しているパルミトイル化アミノ酸残基によって、詳細には該ペプチドのN末端およびC末端にそれぞれ共有結合している2〜4個、より詳細には4個の残基によって修飾される、前記本発明のいずれかの方法。
[本発明1013]
前記ペプチドが4つのパルミトイル化アミノ酸残基によって修飾され、そのうちの2つが該ペプチドのN末端およびC末端にそれぞれ共有結合している、前記本発明のいずれかの方法。
[本発明1014]
前記本発明のいずれかの方法によって得られる、疎水性部分によって修飾されリポソーム中で再構成されたペプチドを含むリポソームベースの構築物であって、該再構成されたペプチドの少なくとも72％がリポソームの外表面上に存在し、該ペプチドが、いかなる化学反応または付加的な分子修飾の助けも借りずに、その疎水性部分により脂質二重層中に挿入されている、リポソームベースの構築物。
[本発明1015]
前記ペプチドが、共有結合によってリポソーム膜に結合していない、本発明1014の構築物。
[本発明1016]
前記ペプチドが抗原性ペプチドである、本発明1014または1015の構築物。
[本発明1017]
再構成されたペプチドの少なくとも80％がリポソームの外表面上に存在する、本発明1014〜1016のいずれかの構築物。
[本発明1018]
再構成されたペプチドの少なくとも90％がリポソームの外表面上に存在する、本発明1014〜1016のいずれかの構築物。
[本発明1019]
再構成されたペプチドの100％がリポソームの外表面上に存在する、本発明1014〜1016のいずれかの構築物。
[本発明1020]
リポソーム中で再構成されたアジュバントを含む、前記本発明のいずれかの構築物。
[本発明1021]
再構成されたアジュバントの少なくとも72％がリポソームの外表面上に存在する、本発明1020の構築物。
[本発明1022]
再構成されたアジュバントの少なくとも80％がリポソームの外表面上に存在する、本発明1020の構築物。
[本発明1023]
再構成されたアジュバントの少なくとも90％がリポソームの外表面上に存在する、本発明1020の構築物。
[本発明1024]
再構成されたアジュバントの100％がリポソームの外表面上に存在する、本発明1020の構築物。
[本発明1025]
前記アジュバントが、リピドA、詳細にはモノホスホリルまたはジホスホリルリピドAなどの解毒化リピドA、ミョウバン、Pam2CSK4、Pam3CSK4、Pam3CAG、サポニン、CpG、脂質化CpG、陽イオン性脂質、ホスホロチオエート化PS-CpG-ODN、例えばCpG-A、CpG-B、またはCpG-CなどのCpGオリゴデオキシヌクレオチド(CpG-ODN)である、前記本発明のいずれかの構築物。
[本発明1026]
前記ペプチドが、脂肪酸、トリグリセリド、ジグリセリド、ステロイド、スフィンゴ脂質、糖脂質、またはリン脂質の付加によって修飾されている、前記本発明のいずれかの構築物。
[本発明1027]
前記疎水性部分がパルミチン酸である、本発明1026の構築物。
[本発明1028]
前記ペプチドが、共有結合しているパルミトイル化アミノ酸残基によって、詳細には該ペプチドのN末端およびC末端にそれぞれ共有結合している2〜4個、より詳細には4個の残基によって修飾されている、前記本発明のいずれかの構築物。
[本発明1029]
前記ペプチドが4つのパルミトイル化アミノ酸残基によって修飾され、そのうちの2つが該ペプチドのN末端およびC末端にそれぞれ共有結合している、前記本発明のいずれかの構築物。
[本発明1030]
本発明1014〜1029のいずれかの抗原性構築物を含む、組成物。
[本発明1031]
治療有効量の前記抗原性構築物を薬学的に許容される担体と共に含む薬学的組成物である、本発明1030の組成物。
[本発明1032]
本発明1014〜1029のいずれかの構築物または本発明1030もしくは1031の組成物を哺乳動物に投与する段階を含む、哺乳動物において免疫応答を誘導する方法。
[本発明1033]
本発明1014〜1029のいずれかの抗原性構築物または本発明1031もしくは1032の組成物を哺乳動物に投与する段階、および該哺乳動物によって産生された抗体を単離する段階を含む、抗体を生成する方法。
[本発明1034]
免疫化した哺乳動物から得られた脾臓細胞からハイブリドーマ細胞を調製する段階、および該ハイブリドーマ細胞によって産生された抗体を単離する段階をさらに含む、本発明1033の方法。
[本発明1035]
本発明1033または1034の方法によって生成された抗体。
[本発明1036]
ポリクローナルもしくはモノクローナル抗体またはそれらの機能的誘導体である、本発明1035の抗体。
[本発明1037]
感染症、CNS関連疾患もしくは障害、腫瘍学、アレルギー、II型糖尿病、または炎症の分野における、哺乳動物、詳細にはヒトの治療的または予防的処置のための、本発明1014〜1029のいずれかの抗原性構築物または本発明1030もしくは1031の組成物の使用。
[本発明1038]
前記処置が哺乳動物、詳細にはヒトのワクチン接種を含む、本発明1037の使用。
[本発明1039]
プロテオパシー(proteopathy)に関連した疾患もしくは障害、タンパク質の誤った折りたたみを伴う疾患、および/またはタンパク質の蓄積もしくは凝集を伴う疾患に罹患している哺乳動物、詳細にはヒトの治療的または予防的処置のための、本発明1014〜1029のいずれかの抗原性構築物または本発明1030もしくは1031の組成物の使用。
[本発明1040]
感染症、CNS関連疾患もしくは障害、腫瘍学、アレルギー、II型糖尿病、または炎症の分野における、哺乳動物、詳細にはヒトの治療的または予防的処置のための、本発明1035または1036の抗体の使用。
[本発明1041]
プロテオパシーに関連した疾患もしくは障害、タンパク質の誤った折りたたみを伴う疾患、および/またはタンパク質の蓄積もしくは凝集を伴う疾患に罹患している哺乳動物、詳細にはヒトの治療的または予防的処置のための、本発明1035または1036の抗体の使用。
[本発明1042]
感染症、CNS関連疾患もしくは障害、腫瘍学、アレルギー、II型糖尿病、または炎症の分野における疾患または障害を検出または診断する上での、本発明1035または1036の抗体の使用。
[本発明1043]
プロテオパシーに関連した疾患もしくは障害、タンパク質の誤った折りたたみを伴う疾患、および/またはタンパク質の蓄積もしくは凝集を伴う疾患を検出または診断する上での、本発明1035または1036の抗体の使用。
[本発明1044]
感染症、CNS関連疾患もしくは障害、腫瘍学、アレルギー、II型糖尿病、または炎症の分野における疾患または障害の検出または診断において使用するための、本発明1035または1036の抗体を含む、診断キット。
[本発明1045]
プロテオパシーに関連した疾患もしくは障害、タンパク質の誤った折りたたみを伴う疾患、および/またはタンパク質の蓄積もしくは凝集を伴う疾患の検出または診断において使用するための、本発明1035または1036の抗体を含む、診断キット。
[本発明1046]
疾患または障害を示すタンパク質マーカーの検出において使用するための、本発明1044または1045の診断キット。