【手続補正書】
【提出日】平成24年6月29日(2012.6.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
多重特異性融合タンパク質であって、該多重特異性融合タンパク質は、介在ドメインにより異種結合ドメインに連結されたＴＮＦ−αアンタゴニストドメインを含み；
ここで、該異種結合ドメインは、異種標的に結合し、そして、以下：
ＩＬ６アンタゴニスト、ＲＡＮＫＬアンタゴニスト、ＩＬ７アンタゴニスト、ＩＬ１７Ａ／Ｆアンタゴニスト、ＴＷＥＡＫアンタゴニスト、ＣＳＦ２アンタゴニスト、ＩＧＦアンタゴニスト、ＢＬｙＳ／ＡＰＲＩＬアンタゴニスト、およびＩＬ１０アゴニストからなる群から選択される、多重特異性融合タンパク質。
【請求項２】
前記ＴＮＦ−αアンタゴニストドメインが、前記多重特異性融合タンパク質のＮ末端に存在する、請求項１に記載の多重特異性融合タンパク質。
【請求項３】
前記ＴＮＦ−αアンタゴニストドメインが、前記多重特異性融合タンパク質のＣ末端に存在する、請求項１に記載の多重特異性融合タンパク質。
【請求項４】
前記ＴＮＦ−αアンタゴニストドメインが、ＴＮＦＲ外部ドメイン、もしくはそのサブドメイン、またはＴＮＦ−α特異的結合ドメインである、請求項１から３のいずれかに記載の多重特異性融合タンパク質。
【請求項５】
前記ＴＮＦ−α特異的結合ドメインが、ＴＮＦ−αに対して特異的な、Ｆａｂ、ｓｃＦｖ、ドメイン抗体、および重鎖のみの抗体からなる群から選択される、請求項４に記載の多重特異性融合タンパク質。
【請求項６】
前記異種結合ドメインが、前記異種標的に特異的な、外部ドメインもしくはそのサブドメイン、または結合ドメインである、請求項１から５のいずれか一項に記載の多重特異性融合タンパク質。
【請求項７】
前記異種標的に特異的な前記結合ドメインが、Ｆａｂ、ｓｃＦｖ、ドメイン抗体、および重鎖のみの抗体からなる群から選択される、請求項６に記載の多重特異性融合タンパク質。
【請求項８】
前記介在ドメインが、Ｎ末端からＣ末端までに、免疫グロブリンヒンジ領域リンカー；ＩｇＧ１  ＣＨ２ドメイン；およびＩｇＧ１  ＣＨ３ドメインを含む、請求項１から７のいずれか一項に記載の多重特異性融合タンパク質。
【請求項９】
前記免疫グロブリンヒンジ領域リンカーが、第一のシステインを異なるアミノ酸で置換することにより変異される、請求項８に記載の多重特異性融合タンパク質。
【請求項１０】
前記介在ドメインが、Ｎ末端からＣ末端までに、第一のリンカー；ＩｇＧ１  ＣＨ２ドメイン；ＩｇＧ１  ＣＨ３ドメイン；および第二のリンカーを含み、前記第一のリンカーと第二のリンカーとは同じであるかまたは異なるものである、請求項１から９のいずれか一項に記載の多重特異性融合タンパク質。
【請求項１１】
前記ＩｇＧ１  ＣＨ２ドメインおよびＩｇＧ１  ＣＨ３ドメインが、ＦｃＲｎ結合性を保持しながら、ＦｃγＲＩ−ＩＩＩ結合性が除かれるように変異される、請求項８または１０に記載の多重特異性融合タンパク質。
【請求項１２】
前記第１のリンカーおよび前記第２のリンカーが、配列番号４９７〜６０４および配列番号７９１〜７９６からなる群から独立して選択される、請求項１０に記載の多重特異性融合タンパク質。
【請求項１３】
前記第１のリンカーが、配列番号５７６であり、前記第２のリンカーが、配列番号７９１である、請求項１０または１２に記載の多重特異性融合タンパク質。
【請求項１４】
配列番号７９８〜８０４からなる群から選択されるアミノ酸配列、または配列番号６０７〜６７０からなる群から選択されるアミノ酸配列によってコードされる成熟ポリペプチド配列を含む、請求項１から１３のいずれか一項に記載の多重特異性融合タンパク質。
【請求項１５】
請求項１から１４のいずれかに記載の多重特異性融合タンパク質、および薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤を含む組成物。
【請求項１６】
前記多重特異性融合タンパク質が、前記組成物中に二量体または多量体として存在する、請求項１５に記載の組成物。
【請求項１７】
請求項１から１４のいずれか一項に記載の多重特異性融合タンパク質をコードするポリヌクレオチド。
【請求項１８】
発現制御配列に作動可能に連結している、請求項１７に記載のポリヌクレオチドを含む発現ベクター。
【請求項１９】
請求項１８に記載の発現ベクターを含む宿主細胞。
【請求項２０】
多重特異性融合タンパク質を産生する方法であって、培地中で請求項１９に記載の宿主細胞を培養する工程、および前記タンパク質を発現する工程を含む、方法。
【請求項２１】
被験体において、炎症性障害、自己免疫障害または過剰増殖障害を治療するための組成物であって、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の多重特異性融合タンパク質、請求項１５〜１６のいずれか一項に記載の組成物、請求項１７に記載のポリヌクレオチド、請求項１８に記載のベクター、または請求項１９に記載の宿主細胞を含む、組成物。
【請求項２２】
前記障害が、関節リウマチ、強直性脊椎炎、若年性関節リウマチ、若年性特発性関節炎、乾癬性関節炎、乾癬、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、クローン病、潰瘍性大腸炎、重度の難治性喘息、ＴＮＦＲＳＦ１Ａ関連周期性症候群（ＴＲＡＰＳ）、子宮内膜症、全身性エリテマトーデスおよびアルツハイマー病からなる群から選択される、請求項２１に記載の組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００８】
詳細な説明
本記載においては、任意の濃度の範囲、パーセントの範囲、割合の範囲、または整数の範囲は、別段の記載がない限り、列挙する範囲に属する任意の整数値、および適宜、その分数（例として、ある整数の１０分の１および１００分の１）を含むと理解されたい。また、ポリマーサブユニット、サイズまたは厚さなどの任意の物理的特性に関する、本明細書に列挙する任意の数の範囲は、別段の記載がない限り、列挙する範囲に属する任意の整数を含むと理解されたい。本明細書で使用する場合、「約（ａｂｏｕｔ）」または「から本質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ）」は、別段の記載がない限り、表示する範囲、値または構造の±２０％を意味する。本明細書で使用する場合、用語「ａ」および「ａｎ」は、列挙する構成成分のうちの「１つまたは複数」を指すと理解されるべきである。選択肢（例えば、「または（ｏｒ）」）の使用は、選択肢のうちの１つ、両方、またはそれらの任意の組合せのうちのいずれかを意味すると理解されるべきである。本明細書で使用する場合、用語「含む（ｉｎｃｌｕｄｅ）」と「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」とは、同義語として使用する。さらに、本明細書に記載する構造および置換基の種々の組合せから得られる個々の化合物または化合物群は、それぞれの化合物または化合物群が、個々に記載されているのと同じ程度で本出願によって開示されると理解されるべきである。したがって、特定の構造または特定の置換基の選択は、本開示の範囲に属する。
本発明は、例えば以下の項目を提供する。
（項目１）
アミノ末端からカルボキシ末端までに、以下の構造のうちの１つを有する多重特異性融合タンパク質：
（ａ）ＢＤ−ＩＤ−ＥＤ、
（ｂ）ＥＤ−ＩＤ−ＢＤ、または
（ｃ）ＥＤ１−ＩＤ−ＥＤ２
［式中、
ＥＤは、ＴＮＦアンタゴニストであり、ＥＤ１とＥＤ２とは、異なる結合ドメインまたは外部ドメインであり、ＥＤ１またはＥＤ２は、ＴＮＦアンタゴニストであり、
ＩＤは、介在ドメインであり、かつ
ＢＤは、ＩＬ６アンタゴニスト、ＲＡＮＫＬアンタゴニスト、ＩＬ７アンタゴニスト、ＩＬ１７Ａ／Ｆアンタゴニスト、ＴＷＥＡＫアンタゴニスト、ＣＳＦ２アンタゴニスト、ＩＧＦアンタゴニスト、ＢＬｙＳ／ＡＰＲＩＬアンタゴニストまたはＩＬ１０アゴニストである］。
（項目２）
ＢＤが、免疫グロブリン可変結合ドメインである、項目１に記載の多重特異性融合タンパク質。
（項目３）
ＥＤ１およびＥＤ２が、受容体リガンド結合外部ドメインである、項目１または２に記載の多重特異性融合タンパク質。
（項目４）
介在ドメインが、以下の構造を有する、項目１から３のいずれかに記載の多重特異性融合タンパク質：
−Ｌ１−ＣＨ２ＣＨ３−
［式中、
Ｌ１は、免疫グロブリンヒンジリンカーであって、場合により、ＩｇＧ１ヒンジが異なるアミノ酸で置換されている第１システインを有し、
−ＣＨ２ＣＨ３−は、ＩｇＧ１のＦｃドメインのＣＨ２ＣＨ３領域であり、場合により、変異させて、ＦｃＲｎへの結合性は保持されるが、ＦｃγＲＩ−ＩＩＩへの結合性が除かれている］。
（項目５）
前記ＢＤが、第１のリンカーによって前記介在ドメインに接続しており、前記ＥＤが、第２のリンカーによって前記介在ドメインに接続しており、ここで、前記第１のリンカーおよび前記第２のリンカーは、同じであってもまたは異なっていてもよい、項目１から４のいずれかに記載の多重特異性融合タンパク質。
（項目６）
前記第１のリンカーおよび前記第２のリンカーが、配列番号４９７〜６０４および配列番号７９１〜７９６からなる群から選択され、場合により、前記第１リンカーが、配列番号５７６であり、前記第２リンカーが配列番号７９１である、項目５に記載の多重特異性融合タンパク質。
（項目７）
配列番号６０７〜６７０および配列番号７９８〜８０４のいずれか１つに記載のアミノ酸配列を含む、項目１から６のいずれかに記載の多重特異性融合タンパク質。
（項目８）
１つまたは複数の項目１から７のいずれかに記載の多重特異性融合タンパク質、および薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤を含む組成物。
（項目９）
前記多重特異性融合タンパク質が、前記組成物に二量体または多量体として存在する、項目８に記載の組成物。
（項目１０）
項目１から７のいずれか一項に記載の多重特異性融合タンパク質をコードするポリヌクレオチド。
（項目１１）
発現制御配列に作動可能に連結している、項目１０に記載のポリヌクレオチドを含む発現ベクター。
（項目１２）
項目１１に記載の発現ベクターを含む宿主細胞。
（項目１３）
炎症性障害、自己免疫障害または過剰増殖障害を有する被験体を治療するための方法であって、治療有効量の前記項目のいずれかに記載の多重特異性融合タンパク質またはその組成物を投与する工程を含む方法。
（項目１４）
前記障害が、関節リウマチ、強直性脊椎炎、若年性関節リウマチ、若年性特発性関節炎、乾癬性関節炎、乾癬、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、クローン病（Ｃｈｒｏｎ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ）、潰瘍性大腸炎、重度の難治性喘息、ＴＮＦＲＳＦ１Ａ関連周期性症候群（ＴＲＡＰＳ）、子宮内膜症、全身性エリテマトーデスまたはアルツハイマー病である、項目１３に記載の方法。