【手続補正書】
【提出日】平成25年12月3日(2013.12.3)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
試料中の標的分子を精製するための方法であって、以下の工程を含む方法：
(a) 標的分子を含む試料をアパタイト固体表面に接触させる工程であって、それによって標的分子を該固体表面に吸着させる、工程；
(b) 吸着された標的分子を含む固体表面を溶液と接触させる工程であって、該溶液が
(i) 塩基性アミノ化合物及びアルカリ金属イオン；または
(ii) スルホン化されたアミン化合物及びアルカリ金属イオン
を、該アパタイト固体表面を中和するのに十分な量及び濃度で含み、標的分子が固体支持体に吸着されたままであるように該溶液が十分低いイオン強度を有する、工程；及び
(c)固体支持体を工程(b)の溶液とは異なる組成の溶液と接触させることにより、固体支持体から標的分子を溶出する工程であって、それによって試料中の標的分子を精製する、工程。
【請求項２】
塩基性アミノ化合物が、アルギニン、ヒスチジン、Tris((HOCH2)3CNH2)、及びリジンより選択される、請求項1記載の方法。
【請求項３】
アルカリ金属イオンが、ナトリウム、リチウム、またはカリウムより選択される、請求項1記載の方法。
【請求項４】
アパタイトが、ヒドロキシアパタイト及びフルオロアパタイトからなる群より選択される、請求項1記載の方法。
【請求項５】
標的分子がタンパク質である、請求項1記載の方法。
【請求項６】
タンパク質が抗体である、請求項5記載の方法。
【請求項７】
工程(b)の溶液が、pH6.5〜9.0である、請求項1記載の方法。
【請求項８】
溶液が、100mMまたはそれ未満であるアルカリ金属イオンを有する、請求項1記載の方法。
【請求項９】
一つまたは複数の追加的洗浄工程を、請求項1記載の工程(a)及び(b)の間または請求項1記載の工程(b)及び(c)の間にさらに含む、請求項1記載の方法。
【請求項１０】
一つまたは複数の追加的洗浄工程が、標的分子を固体支持体に実質的に保持している間に、固体表面から試料の少なくとも一種類の成分を取り除く、請求項9記載の方法。
【請求項１１】
成分が、エンドトキシン、宿主細胞タンパク質、凝集した標的タンパク質または他の凝集物、中性脂質、荷電脂質、多糖、沈殿剤、非標的小分子、及び凝集した標的タンパク質からなる群の少なくとも一つより選択される、請求項10記載の方法。
【請求項１２】
溶液が、スルホン化されたアミン化合物を含む、請求項1記載の方法。
【請求項１３】
スルホン化されたアミン化合物が、PIPES、MES、MOPS、ACES、MOPSO、及びHEPESより選択される、請求項12記載の方法。
【請求項１４】
スルホン化されたアミン化合物の濃度が、5〜100mMである、請求項12記載の方法。
【請求項１５】
スルホン化されたアミン化合物の濃度が、5〜50mMである、請求項12記載の方法。
【請求項１６】
溶液がアミノ化合物を含む、請求項1記載の方法。
【請求項１７】
アミノ化合物が、トリス(ヒドロキシメチル)アミノメタン、リジン、ヒスチジン、アルギニン、及びイミダゾールからなる群より選択される、請求項16記載の方法。
【請求項１８】
固体支持体がカラムであり、かつ工程(b)が、固体表面を少なくとも１カラム容量の溶液と接触させる工程を含む、請求項1記載の方法。
【請求項１９】
アミノ化合物の濃度が、5〜100mMである、請求項16記載の方法。
【請求項２０】
アミノ化合物の濃度が、5〜50mMである、請求項16記載の方法。
【請求項２１】
アパタイトが、セラミックヒドロキシアパタイトまたはセラミックフルオロアパタイトである、請求項1記載の方法。
【請求項２２】
アパタイトが、非セラミックアパタイトである、請求項1記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１５】
いくつかの態様において、アパタイトは、セラミックヒドロキシアパタイトまたはセラミックフルオロアパタイトである。いくつかの態様において、アパタイトは、非セラミックアパタイトである。
[本発明1001]
試料中の標的分子を精製するための方法であって、以下の工程を含む方法：
(a) 標的分子を含む試料をアパタイト固体表面に接触させる工程であって、それによって標的分子を該固体表面に吸着させる、工程；
(b) 吸着された標的分子を含む固体表面を溶液と接触させる工程であって、該溶液が
(i) 塩基性アミノ化合物及びアルカリ金属イオン；または
(ii) スルホン化されたアミン化合物及びアルカリ金属イオン
を、該アパタイト固体表面を中和するのに十分な量及び濃度で含み、標的分子が固体支持体に吸着されたままであるように該溶液が十分低いイオン強度を有する、工程；及び
(c)固体支持体を工程(b)の溶液とは異なる組成の溶液と接触させることにより、固体支持体から標的分子を溶出する工程であって、それによって試料中の標的分子を精製する、工程。
[本発明1002]
アルカリ金属イオンが、リチウム、ナトリウムまたはカリウムより選択される、本発明1001の方法。
[本発明1003]
アパタイトが、ヒドロキシアパタイト及びフルオロアパタイトからなる群より選択される、本発明1001の方法。
[本発明1004]
標的分子がタンパク質である、本発明1001の方法。
[本発明1005]
タンパク質が抗体である、本発明1004の方法。
[本発明1006]
工程(b)の溶液が、pH6.5〜9.0である、本発明1001の方法。
[本発明1007]
溶液が、100mMまたはそれ未満であるアルカリ金属イオンを有する、本発明1001の方法。
[本発明1008]
一つまたは複数の追加的洗浄工程を、本発明1001の工程(a)及び(b)の間または本発明1001の工程(b)及び(c)の間にさらに含む、本発明1001の方法。
[本発明1009]
一つまたは複数の追加的洗浄工程が、標的分子を固体支持体に実質的に保持している間に、固体表面から試料の少なくとも一種類の成分を取り除く、本発明1008の方法。
[本発明1010]
成分が、エンドトキシン、宿主細胞タンパク質、凝集した標的タンパク質または他の凝集物、中性脂質、荷電脂質、多糖、沈殿剤、非標的小分子、及び凝集した標的タンパク質からなる群の少なくとも一つより選択される、本発明1009の方法。
[本発明1011]
溶液が、スルホン化されたアミン化合物を含む、本発明1001の方法。
[本発明1012]
スルホン化されたアミン化合物が、PIPES、MES、MOPS、ACES、MOPSO、及びHEPESより選択される、本発明1011の方法。
[本発明1013]
スルホン化されたアミン化合物の濃度が、5〜100mMである、本発明1011の方法。
[本発明1014]
スルホン化されたアミン化合物の濃度が、5〜50mMである、本発明1011の方法。
[本発明1015]
溶液がアミノ化合物を含む、本発明1001の方法。
[本発明1016]
アミノ化合物が、トリス(ヒドロキシメチル)アミノメタン、リジン、ヒスチジン、アルギニン、及びイミダゾールからなる群より選択される、本発明1015の方法。
[本発明1017]
固体支持体がカラムであり、かつ工程(b)が、固体表面を少なくとも1カラム容量の溶液と接触させる工程を含む、本発明1001の方法。
[本発明1018]
アミノ化合物の濃度が、5〜100mMである、本発明1015の方法。
[本発明1019]
アミノ化合物の濃度が、5〜50mMである、本発明1015の方法。
[本発明1020]
アパタイトが、セラミックヒドロキシアパタイトまたはセラミックフルオロアパタイトである、本発明1001の方法。
[本発明1021]
アパタイトが、非セラミックアパタイトである、本発明1001の方法。