【手続補正書】
【提出日】平成23年12月8日(2011.12.8)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
親ＧＰＣＲに対して増大した安定性を有する変異体ＧＰＣＲを生産するための方法であって、
（ａ）第一の親ＧＰＣＲに対して増大した立体構造安定性を有する第一の親ＧＰＣＲの一又は複数の変異体のアミノ酸配列において、一又は複数の変異体が第一の親ＧＰＣＲと比較して少なくとも１個の異なるアミノ酸残基を有する一又は複数の位置を同定すること、及び
（ｂ）（ｉ）対応する一又は複数の位置で、第二のＧＰＣＲを規定するアミノ酸配列において一又は複数の変異を作製して、第二の親ＧＰＣＲと比較して増大した立体構造安定性を有する第二の親ＧＰＣＲの一又は複数の変異体を提供すること；（ｉｉ）ｉが対応する位置であるｉプラス又はマイナス５残基のウィンドウ内において第二のＧＰＣＲを定めるアミノ酸配列に一又は複数の変異を作製して、第二の親ＧＰＣＲに対して増大した立体構造安定性を有する第二の親ＧＰＣＲの一又は複数の変異体を提供すること；又は（ｉｉｉ）ｉが対応する位置であるアミノ酸残基ｉのＣα原子から１２Åの距離内、又はその任意の原子から８Åの距離内に第二のＧＰＣＲを定めるアミノ酸配列に一又は複数の変異を作製して、第二の親ＧＰＣＲに対して増大した安定性を有する第二の親ＧＰＣＲの一又は複数の変異体を提供すること
を含む方法。
【請求項２】
親ＧＰＣＲに対して増大した安定性を有する変異体ＧＰＣＲを製造するための方法であって、
（ａ）第一の親ＧＰＣＲに対して増大した立体構造安定性を有する第一の親ＧＰＣＲの一又は複数の変異体を提供すること、
（ｂ）一又は複数の変異体が第一の親ＧＰＣＲと比較して少なくとも１個の異なるアミノ酸残基を有する一又は複数の構造モチーフを構造膜タンパク質モデル中で同定すること、及び
（ｃ）第二の親ＧＰＣＲにおける一又は複数の対応する構造モチーフを定めるアミノ酸配列における一又は複数の変異を作製し、第二の親ＧＰＣＲに対して増大した立体構造安定性を有する第二の親ＧＰＣＲの一又は複数の変異を提供すること
を含む方法。
【請求項３】
工程（ａ）における第一の親ＧＰＣＲの一又は複数の変異体が、
（ｉ）第一の親ＧＰＣＲの一又は複数の変異体を提供すること、
（ｉｉ）親ＧＰＣＲが特定の立体構造を備えている際に該親ＧＰＣＲに結合するものであるリガンドを選択すること、
（ｉｉｉ）リガンドの結合に関して特定の立体構造にあるときの前記又は各変異体ＧＰＣＲが、そのリガンドの結合に関して同じ特定の立体構造にあるときの親ＧＰＣＲの安定性と比較して増大した立体構造安定性を有するか否かを決定すること、及び
（ｉｖ）選択したリガンドの結合に関して、第一の親ＧＰＣＲと比較して増大した立体構造安定性を有する変異体を選択すること
を含む方法によって得ることができる請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
第一のＧＰＣＲの一又は複数の変異体の結合親和性が、選択されるリガンドに対する親の結合親和性と実質的に同じかそれより大きい請求項３に記載の方法。
【請求項５】
工程（ｉ）−（ｉｖ）が一又は複数回繰り返され、工程（ｉｖ）における増大した安定性を有する第一のＧＰＣＲの選択された変異体が方法の次の回における親ＧＰＣＲを表す請求項３又は４に記載の方法。
【請求項６】
工程（ｉｉ）において、二以上のリガンドが選択され、それぞれの存在がＧＰＣＲを同じ特定の立体構造になるようにさせる請求項３から５の何れか一項に記載の方法。
【請求項７】
工程（ｉｖ）において、その親と比較して、工程（ｉｉ）で選択したリガンドと異なるクラスのリガンドに結合する能力が低減した変異体ＧＰＣＲを選択する請求項３から６の何れか一項に記載の方法。
【請求項８】
工程（ｉｖ）において選択された変異体ＧＰＣＲがＧタンパク質に共役できるか、工程（ｉｖ）において選択された変異体ＧＰＣＲが、親ＧＰＣＲに匹敵する伝播及び／又は親和性の順番で選択リガンドと同じクラスの複数のリガンドに結合できるかが決定される請求項３から７の何れか一項に記載の方法。
【請求項９】
工程（ａ）における第一の親ＧＰＣＲの一又は複数の変異体が、
（ｉ）請求項３から８の何れか一項に記載の工程（ｉ）から（ｉｖ）に従って親ＧＰＣＲに対して増大した立体構造安定性を有する一又は複数の変異体を選択すること、
（ｉｉ）増大した立体構造安定性について選択された一又は複数の変異体ＧＰＣＲ中の一又は複数の変異したアミノ酸残基の一又は複数の位置を同定すること、及び
（ｉｉｉ）同定した位置の一又は複数にアミノ酸置換を含む一又は複数の変異体ＧＰＣＲを合成すること
を含む方法によって得ることができる請求項１又は２に記載の方法。
【請求項１０】
工程（ａ）における第一の親ＧＰＣＲの一又は複数の変異体が、第一の親ＧＰＣＲと比較して複数の変異を含んでいるか、又は工程（ａ）における第一の親ＧＰＣＲの一又は複数の変異体が、熱、界面活性剤、カオトロピック剤及び極端なｐＨの何れか一又は複数に対して増大した安定性を有している請求項１から９の何れか一項に記載の方法。
【請求項１１】
第一の親ＧＰＣＲの変異体ＧＰＣＲが、その対応する親受容体と比較して、図９に記載のシチメンチョウβ−アドレナリン受容体の番号付けした次の位置：Ｉｌｅ５５、Ｇｌｙ６７、Ａｒｇ６８、Ｖａｌ８９、Ｍｅｔ９０、Ｇｌｙ９８、Ｉｌｅ１２９、Ｓｅｒ１５１、Ｖａｌ１６０、Ｇｌｎ１９４、Ｇｌｙ１９７、Ｌｅｕ２２１、Ｔｙｒ２２７、Ａｒｇ２２９、Ｖａｌ２３０、Ａｌａ２３４、Ａｌａ２８２、Ａｓｐ３２２、Ｐｈｅ３２７、Ａｌａ３３４、及びＰｈｅ３３８の何れか一又は複数に対応する位置に異なるアミノ酸を有しているもののような変異体βアドレナリン受容体であり、場合によっては該変異体βアドレナリン受容体は、配列を図９に記載したシチメンチョウβアドレナリン受容体のものと少なくとも２０％同一であるアミノ酸配列を有し；又は第一の親ＧＰＣＲの変異体ＧＰＣＲは、その対応する親受容体と比較して、図１０に記載のヒトアデノシンＡ２ａ受容体の番号付けした次の位置：Ｇｌｙ１１４、Ｇｌｙ１１８、Ｌｅｕ１６７、Ａｌａ１８４、Ａｒｇ１９９、Ａｌａ２０３、Ｌｅｕ２０８、Ｇｌｎ２１０、Ｓｅｒ２１３、Ｇｌｕ２１９、Ａｒｇ２２０、Ｓｅｒ２２３、Ｔｈｒ２２４、Ｇｌｎ２２６、Ｌｙｓ２２７、Ｈｉｓ２３０、Ｌｅｕ２４１、Ｐｒｏ２６０、Ｓｅｒ２６３、Ｌｅｕ２６７、Ｌｅｕ２７２、Ｔｈｒ２７９、Ａｓｎ２８４、Ｇｌｎ３１１、Ｐｒｏ３１３、及びＬｙｓ３１５の何れか一又は複数に対応する位置に異なるアミノ酸を有している変異体アデノシン受容体であり、場合によっては変異体アデノシン受容体が、配列を図１０に記載したヒトアデノシンＡ２ａ受容体のものと少なくとも２０％同一であるアミノ酸配列を有し；又は第一の親ＧＰＣＲの変異体ＧＰＣＲは、その対応する親受容体と比較して、図１１に記載のラットニューロテンシン受容体の番号付けした次の位置：Ａｌａ６９、Ｌｅｕ７２、Ａｌａ７３、Ａｌａ８６、Ａｌａ９０、Ｓｅｒ１００、Ｈｉｓ１０３、Ｓｅｒ１０８、Ｌｅｕ１０９、Ｌｅｕ１１１、Ａｓｐ１１３、Ｉｌｅ１１６、Ａｌａ１２０、Ａｓｐ１３９、Ｐｈｅ１４７、Ａｌａ１５５、Ｖａｌ１６５、Ｇｌｕ１６６、Ｌｙｓ１７６、Ａｌａ１７７、Ｔｈｒ１７９、Ｍｅｔ１８１、Ｓｅｒ１８２、Ａｒｇ１８３、Ｐｈｅ１８９、Ｌｅｕ２０５、Ｔｈｒ２０７、Ｇｌｙ２０９、Ｇｌｙ２１５、Ｖａｌ２２９、Ｍｅｔ２５０、Ｉｌｅ２５３、Ｌｅｕ２５６、Ｉｌｅ２６０、Ａｓｎ２６２、Ｖａｌ２６８、Ａｓｎ２７０、Ｔｈｒ２７９、Ｍｅｔ２９３、Ｔｈｒ２９４、Ｇｌｙ３０６、Ｌｅｕ３０８、Ｖａｌ３０９、Ｌｅｕ３１０、Ｖａｌ３１３、Ｐｈｅ３４２、Ａｓｐ３４５、Ｔｙｒ３４９、Ｔｙｒ３５１、Ａｌａ３５６、Ｐｈｅ３５８、Ｖａｌ３６０、Ｓｅｒ３６２、Ａｓｎ３７０、Ｓｅｒ３７３、Ｐｈｅ３８０、Ａｌａ３８５、Ｃｙｓ３８６、Ｐｒｏ３８９、Ｇｌｙ３９０、Ｔｒｐ３９１、Ａｒｇ３９２、Ｈｉｓ３９３、Ａｒｇ３９５、Ｌｙｓ３９７、及びＰｒｏ３９９の何れか一又は複数に対応する位置に異なるアミノ酸を有している変異体ニューロテンシン受容体であり、場合によっては変異体ニューロテンシン受容体が、配列を図１１に記載したラットニューロテンシン受容体のものと少なくとも２０％同一であるアミノ酸配列を有し；又は第一の親Ｇ���ＣＲの変異体ＧＰＣＲは、対応する野生型のムスカリン受容体と比較して、図１７に記載のヒトムスカリン受容体の番号付けした次の位置：Ｌｅｕ６５、Ｍｅｔ１４５、Ｌｅｕ３９９、Ｉｌｅ３８３及びＭｅｔ３８４の何れか一又は複数に対応する位置に異なるアミノ酸を有している変異体ムスカリン受容体であり、場合によっては変異体ムスカリン受容体が、配列を図１７に記載したラットニューロテンシン受容体のものと少なくとも２０％同一であるアミノ酸配列を有する請求項１から１０の何れか一項に記載の方法。
【請求項１２】
構造膜タンパク質モデルが、第一の親ＧＰＣＲと比較して少なくとも一つの異なるアミノ酸を有するタンパク質ドメインにわたって、工程（ａ）の第一の親ＧＰＣＲの変異体と少なくとも２０％の配列同一性を有する完全な膜タンパク質、ＧＰＣＲであり、場合によっては第一の親ＧＰＣＲと同じＧＰＣＲのクラス又はファミリーであるＧＰＣＲのような完全な膜タンパク質のモデルであり、又は構造膜タンパク質モデルが、ヒトβ２アドレナリン受容体又はウシロドプシンのモデルである請求項２から１０の何れか一項に記載の方法。
【請求項１３】
構造モチーフが、ヘリックス界面、ヘリックスのねじれ、ヘリックスのねじれの反対側のヘリックス、脂質二重層に向いたヘリックス表面、疎水性−親水性境界層の脂質二重層を向いたヘリックス表面、ループ領域、又はタンパク質結合ポケットの何れかである請求項２から１２の何れか一項に記載の方法。
【請求項１４】
第二の親ＧＰＣＲが第一の親ＧＰＣＲであるか、又は第二の親ＧＰＣＲが第一のＧＰＣＲではなく、例えば第一の親ＧＰＣＲと少なくとも２０％の配列同一性を有するＧＰＣＲ、又は第一の親ＧＰＣＲと同じＧＰＣＲのクラス又はファミリーのＧＰＣＲである請求項１から１３の何れか一項に記載の方法。
【請求項１５】
その親ＧＰＣＲに対して増大した安定性を有する変異体ＧＰＣＲを製造するための方法であって、
（ａ）親ＧＰＣＲに対して増大した立体構造安定性を有するＧＰＣＲの一又は複数の変異体の一の三次元モデルを提供するか一を越える三次元モデルを整列させること、
（ｂ）一又は複数の変異体が親ＧＰＣＲと比較して少なくとも１個の異なるアミノ酸残基を一又は複数の変異体が有する一又は複数の位置を一又は複数の変異体のアミノ酸配列中に同定すること、
（ｃ）一又は複数の変異体が親ＧＰＣＲと比較して異なったアミノ酸残基を有する一又は複数の位置におけるアミノ酸残基のＣα原子又は任意の原子から設定距離ｄÅ内に、一又は複数の変異体が親ＧＰＣＲと比較して少なくとも１個の異なるアミノ酸残基を有する任意の整列されたモデルからの他の位置の数を決定すること、及び
（ｄ）（ｉ）他の位置の数が統計的に有意なクラスターを表すかどうかを決定し、もしそうなら、一又は複数の変異体が親ＧＰＣＲと比較して少なくとも１個の異なるアミノ酸残基を有する一又は複数の位置のアミノ酸残基のＣα原子又は任意の原子からｄÅの距離内に第二のＧＰＣＲを定めるアミノ酸配列中に一又は複数の変異を作製して、第二の親ＧＰＣＲに対して増大した立体構造安定性を有する第二の親ＧＰＣＲの一又は複数の変異体を提供すること；又は（ｉｉ）他の位置の数が統計的に有意なクラスターを表すかどうかを決定し；同定された二以上の統計的に有意なクラスターの中心を決定し、及び二以上の統計的に有意なクラスターの中心に対応する位置からｘÅの距離内に第二のＧＰＣＲを定めるアミノ酸配列中に一又は複数の変異を作製して、第二の親ＧＰＣＲに対して増大した立体構造安定性を有する第二の親ＧＰＣＲの一又は複数の変異体を提供すること
を含む方法。
【請求項１６】
一又は複数の三次元モデルが請求項１１に記載の変異体ＧＰＣＲの何れか一又は複数のモデルであり、又は少なくとも２、３、４、５又は１０のモデルがアラインされ、又はＣＩ原子からの設定距離ｄÅが１２Å以下であり、又は任意の原子からの設定距離ｄÅが１２Å以下であり、又は統計的に有意なクラスターが、９５％レベルで有意である（ρ＜０．０５）ものである請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
（Ｉ）第二の親ＧＰＣＲが特定の立体構造を備える際に、該第二の親ＧＰＣＲに結合するものであるリガンドを選択すること、
（ＩＩ）そのリガンドの結合について同じ特定の立体構造を備えている際の第二の親ＧＰＣＲの安定性と比較して、第二の親ＧＰＣＲの変異体が、特定の立体構造を備える際に選択したリガンドの結合について増大した立体構造安定性を有するか否かを決定すること、及び
（ＩＩＩ）選択したリガンドの結合に関して、第二の親ＧＰＣＲと比較して増大した立体構造安定性を有する変異体を選択すること
をさらに含む請求項１から１６の何れか一項に記載の方法。
【請求項１８】
工程（ｉｉｉ）又は（ＩＩ）におけるＧＰＣＲが備える特定の立体構造が、工程（ｉｉ）又は（Ｉ）で選択したリガンドのクラスに対応し、場合によっては選択したリガンドがリガンドのアゴニストクラスに由来し、特定の立体構造がアゴニスト立体構造であるか、又は選択したリガンドがリガンドのアンタゴニストクラスに由来し、特定の立体構造がアンタゴニスト立体構造である請求項３又は１７に記載の方法。
【請求項１９】
リガンドが、完全アゴニスト、部分アゴニスト、インバースアゴニスト及びアンタゴニストの何れか一つであり、又はリガンドが、ＧＰＣＲに結合するポリペプチド、例えば抗体、アンキリン、Ｇタンパク質、ＲＧＳタンパク質、アレスチン、ＧＰＣＲキナーゼ、レセプターチロシンキナーゼ、ＲＡＭＰ、ＮＳＦ、ＧＰＣＲ、ＮＭＤＡレセプターサブユニットＮＲ１又はＮＲ２ａ、又はカルシオン（calcyon）、又はＧＰＣＲに結合するその断片又は誘導体の何れかである請求項３から１８の何れか一項に記載の方法。
【請求項２０】
第二のＧＰＣＲの一又は複数の変異体の結合親和性が、選択したリガンドについての第二の親ＧＰＣＲの結合親和性と実質的に同一であるか又はそれ以上である請求項３から１９の何れか一項に記載の方法。
【請求項２１】
請求項１から２０の何れか一項に記載の方法によって生産されるその親ＧＰＣＲに対して増大した安定性を有する変異体ＧＰＣＲであって、場合によっては該変異体が、熱、界面活性剤、カオトロピック剤及び極端なｐＨの何れか一に対して増大した安定性を有しており、例えば変異体は増大した熱安定性を有し（例えばその親より少なくとも１℃より安定）、場合によっては、変異体ＧＰＣＲがリガンドの存在下においてその親と比較して増大した熱安定性を有している変異体ＧＰＣＲ。
【請求項２２】
変異体ＧＰＣＲが、その親受容体と比較して、以下の（ｉ）図９に記載のシチメンチョウβ−アドレナリン受容体の番号付けした位置：Ｉｌｅ５５、Ｇｌｙ６７、Ａｒｇ６８、Ｖａｌ８９、Ｍｅｔ９０、Ｇｌｙ９８、Ｉｌｅ１２９、Ｓｅｒ１５１、Ｖａｌ１６０、Ｇｌｎ１９４、Ｇｌｙ１９７、Ｌｅｕ２２１、Ｔｙｒ２２７、Ａｒｇ２２９、Ｖａｌ２３０、Ａｌａ２３４、Ａｌａ２８２、Ａｓｐ３２２、Ｐｈｅ３２７、Ａｌａ３３４、及びＰｈｅ３３８、（ｉｉ）図１０に記載のヒトアデノシンＡ２ａ受容体の番号付けした位置：Ｇｌｙ１１４、Ｇｌｙ１１８、Ｌｅｕ１６７、Ａｌａ１８４、Ａｒｇ１９９、Ａｌａ２０３、Ｌｅｕ２０８、Ｇｌｎ２１０、Ｓｅｒ２１３、Ｇｌｕ２１９、Ａｒｇ２２０、Ｓｅｒ２２３、Ｔｈｒ２２４、Ｇｌｎ２２６、Ｌｙｓ２２７、Ｈｉｓ２３０、Ｌｅｕ２４１、Ｐｒｏ２６０、Ｓｅｒ２６３、Ｌｅｕ２６７、Ｌｅｕ２７２、Ｔｈｒ２７９、Ａｓｎ２８４、Ｇｌｎ３１１、Ｐｒｏ３１３、及びＬｙｓ３１５、（ｉｉｉ）図１１に記載のラットニューロテンシンの番号付けした位置：Ａｌａ６９、Ｌｅｕ７２、Ａｌａ７３、Ａｌａ８６、Ａｌａ９０、Ｓｅｒ１００、Ｈｉｓ１０３、Ｓｅｒ１０８、Ｌｅｕ１０９、Ｌｅｕ１１１、Ａｓｐ１１３、Ｉｌｅ１１６、Ａｌａ１２０、Ａｓｐ１３９、Ｐｈｅ１４７、Ａｌａ１５５、Ｖａｌ１６５、Ｇｌｕ１６６、Ｌｙｓ１７６、Ａｌａ１７７、Ｔｈｒ１７９、Ｍｅｔ１８１、Ｓｅｒ１８２、Ａｒｇ１８３、Ｐｈｅ１８９、Ｌｅｕ２０５、Ｔｈｒ２０７、Ｇｌｙ２０９、Ｇｌｙ２１５、Ｖａｌ２２９、Ｍｅｔ２５０、Ｉｌｅ２５３、Ｌｅｕ２５６、Ｉｌｅ２６０、Ａｓｎ２６２、Ｖａｌ２６８、Ａｓｎ２７０、Ｔｈｒ２７９、Ｍｅｔ２９３、Ｔｈｒ２９４、Ｇｌｙ３０６、Ｌｅｕ３０８、Ｖａｌ３０９、Ｌｅｕ３１０、Ｖａｌ３１３、Ｐｈｅ３４２、Ａｓｐ３４５、Ｔｙｒ３４９、Ｔｙｒ３５１、Ａｌａ３５６、Ｐｈｅ３５８、Ｖａｌ３６０、Ｓｅｒ３６２、Ａｓｎ３７０、Ｓｅｒ３７３、Ｐｈｅ３８０、Ａｌａ３８５、Ｃｙｓ３８６、Ｐｒｏ３８９、Ｇｌｙ３９０、Ｔｒｐ３９１、Ａｒｇ３９２、Ｈｉｓ３９３、Ａｒｇ３９５、Ｌｙｓ３９７、及びＰｒｏ３９９、並びに（ｉｖ）図１７に記載のムスカリン受容体の番号付けした位置：Ｌｅｕ６５、Ｍｅｔ１４５、Ｌｅｕ３９９、Ｉｌｅ３８３、及びＭｅｔ３８４のいずれか一又は複数と対応する位置に少なくとも１つの異なるアミノ酸を有し；又は変異体ＧＰＣＲは、変異体β−アドレナリン受容体、例えば対応する野生型アドレナリン受容体と比較したとき、図９に記載のシチメンチョウβ−アドレナリン受容体の番号付けした次の位置：Ｉｌｅ５５、Ｇｌｙ６７、Ａｒｇ６８、Ｖａｌ８９、Ｍｅｔ９０、Ｇｌｙ９８、Ｉｌｅ１２９、Ｓｅｒ１５１、Ｖａｌ１６０、Ｇｌｎ１９４、Ｇｌｙ１９７、Ｌｅｕ２２１、Ｔｙｒ２２７、Ａｒｇ２２９、Ｖａｌ２３０、Ａｌａ２３４、Ａｌａ２８２、Ａｓｐ３２２、Ｐｈｅ３２７、Ａｌａ３３４、及びＰｈｅ３３８の何れか一又は複数に対応する位置に異なるアミノ酸残基を有する変異体β−アドレナリン受容体；又は図９に記載のシチメンチョウβ−アドレナリン受容体の番号付けした次の位置：Ｉｌｅ５５、Ｇｌｙ６７、Ａｒｇ６８、Ｖａｌ８９、Ｍｅｔ９０、Ｇｌｙ９��、Ｉｌｅ１２９、Ｓｅｒ１５１、Ｖａｌ１６０、Ｇｌｎ１９４、Ｇｌｙ１９７、Ｌｅｕ２２１、Ｔｙｒ２２７、Ａｒｇ２２９、Ｖａｌ２３０、Ａｌａ２３４、Ａｌａ２８２、Ａｓｐ３２２、Ｐｈｅ３２７、Ａｌａ３３４、及びＰｈｅ３３８の何れかに対応する位置で、変異体受容体がその親受容体と比較して異なるアミノ酸を有する構造モチーフに少なくとも１つの異なるアミノ酸残基を有する変異体β−アドレナリン受容体であり；又は変異体ＧＰＣＲは、変異体アデノシン受容体、例えば対応する野生型アデノシン受容体と比較した場合、図１０に記載のヒトアデノシンＡ２ａ受容体の番号付けした以下の位置：Ｇｌｙ１１４、Ｇｌｙ１１８、Ｌｅｕ１６７、Ａｌａ１８４、Ａｒｇ１９９、Ａｌａ２０３、Ｌｅｕ２０８、Ｇｌｎ２１０、Ｓｅｒ２１３、Ｇｌｕ２１９、Ａｒｇ２２０、Ｓｅｒ２２３、Ｔｈｒ２２４、Ｇｌｎ２２６、Ｌｙｓ２２７、Ｈｉｓ２３０、Ｌｅｕ２４１、Ｐｒｏ２６０、Ｓｅｒ２６３、Ｌｅｕ２６７、Ｌｅｕ２７２、Ｔｈｒ２７９、Ａｓｎ２８４、Ｇｌｎ３１１、Ｐｒｏ３１３、及びＬｙｓ３１５のいずれかに対応する位置で異なったアミノ酸を有している変異体アデノシン受容体、又は図１０に記載のヒトアデノシンＡ２ａ受容体の番号付けした以下の位置：Ｇｌｙ１１４、Ｇｌｙ１１８、Ｌｅｕ１６７、Ａｌａ１８４、Ａｒｇ１９９、Ａｌａ２０３、Ｌｅｕ２０８、Ｇｌｎ２１０、Ｓｅｒ２１３、Ｇｌｕ２１９、Ａｒｇ２２０、Ｓｅｒ２２３、Ｔｈｒ２２４、Ｇｌｎ２２６、Ｌｙｓ２２７、Ｈｉｓ２３０、Ｌｅｕ２４１、Ｐｒｏ２６０、Ｓｅｒ２６３、Ｌｅｕ２６７、Ｌｅｕ２７２、Ｔｈｒ２７９、Ａｓｎ２８４、Ｇｌｎ３１１、Ｐｒｏ３１３、及びＬｙｓ３１５のいずれかに対応する位置で、前記変異体受容体がその親受容体と比較して異なるアミノ酸を有する構造モチーフに少なくとも１つの異なるアミノ酸残基を有する変異体アデノシン受容体であり；又は変異体ＧＰＣＲは、変異体ニューロテンシン受容体、例えば対応する野生型ニューロテンシン受容体と比較した場合、図１１に記載のラットニューロテンシン受容体の番号付けした以下の位置：Ａｌａ６９、Ｌｅｕ７２、Ａｌａ７３、Ａｌａ８６、Ａｌａ９０、Ｓｅｒ１００、Ｈｉｓ１０３、Ｓｅｒ１０８、Ｌｅｕ１０９、Ｌｅｕ１１１、Ａｓｐ１１３、Ｉｌｅ１１６、Ａｌａ１２０、Ａｓｐ１３９、Ｐｈｅ１４７、Ａｌａ１５５、Ｖａｌ１６５、Ｇｌｕ１６６、Ｌｙｓ１７６、Ａｌａ１７７、Ｔｈｒ１７９、Ｍｅｔ１８１、Ｓｅｒ１８２、Ａｒｇ１８３、Ｐｈｅ１８９、Ｌｅｕ２０５、Ｔｈｒ２０７、Ｇｌｙ２０９、Ｇｌｙ２１５、Ｖａｌ２２９、Ｍｅｔ２５０、Ｉｌｅ２５３、Ｌｅｕ２５６、Ｉｌｅ２６０、Ａｓｎ２６２、Ｖａｌ２６８、Ａｓｎ２７０、Ｔｈｒ２７９、Ｍｅｔ２９３、Ｔｈｒ２９４、Ｇｌｙ３０６、Ｌｅｕ３０８、Ｖａｌ３０９、Ｌｅｕ３１０、Ｖａｌ３１３、Ｐｈｅ３４２、Ａｓｐ３４５、Ｔｙｒ３４９、Ｔｙｒ３５１、Ａｌａ３５６、Ｐｈｅ３５８、Ｖａｌ３６０、Ｓｅｒ３６２、Ａｓｎ３７０、Ｓｅｒ３７３、Ｐｈｅ３８０、Ａｌａ３８５、Ｃｙｓ３８６、Ｐｒｏ３８９、Ｇｌｙ３９０、Ｔｒｐ３９１、Ａｒｇ３９２、Ｈｉｓ３９３、Ａｒｇ３９５、Ｌｙｓ３９７、及びＰｒｏ３９９のいずれかに対応する位置で異なったアミノ酸を有しているニューロテンシン受容体、又は図１１に記載のラットニューロテンシン受容体の番号付けした以下の位置：Ａｌａ６９、Ｌｅｕ７２、Ａｌａ７３、Ａｌａ８６、Ａｌａ９０、Ｓｅｒ１００、Ｈｉｓ１０３、Ｓｅｒ１０８、Ｌｅｕ１０９、Ｌｅｕ１１１、Ａｓｐ１１３、Ｉｌｅ１１６、Ａｌａ１２０、Ａｓｐ１３９、Ｐｈｅ１４７、Ａｌａ１５５、Ｖａｌ１６５、Ｇｌｕ１６６、Ｌｙｓ１７６、Ａｌａ１７７、Ｔｈｒ１７９、Ｍｅｔ１８１、Ｓｅｒ１８２、Ａｒｇ１８３、Ｐｈｅ１８９、Ｌｅｕ２０５、Ｔｈｒ２０７、Ｇｌｙ２０９、Ｇｌｙ２１５、Ｖａｌ２２９、Ｍｅｔ２５０、Ｉｌｅ２５３、Ｌｅｕ２５６、Ｉｌｅ２６０、Ａｓｎ２６２、Ｖａｌ２６８、Ａｓｎ２７０、Ｔｈｒ２７９、Ｍｅｔ２９３、Ｔｈｒ２９４、Ｇｌｙ３０６、Ｌｅｕ３０８、Ｖａｌ３０９、Ｌｅｕ３１０、Ｖａｌ３１３、Ｐｈｅ３４２、Ａｓｐ３４５、Ｔｙｒ３４９、Ｔｙｒ３５１、Ａｌａ３５６、Ｐｈｅ３５８、Ｖａｌ３６０、Ｓｅｒ３６２、Ａｓｎ３７０、Ｓｅｒ３７３、Ｐｈｅ３８０、Ａｌａ３８５、Ｃｙｓ３８６、Ｐｒｏ３８９、Ｇｌｙ３９０、Ｔｒｐ３９１、Ａｒｇ３９２、Ｈｉｓ３９３、Ａｒｇ３９５、Ｌｙｓ３９７、及びＰｒｏ３９９のいずれかに対応する位置で、前記変異体受容体がその親受容体と比較して異なるアミノ酸を有する構造モチーフに少なくとも１つの異なるアミノ酸残基を有するニューロテンシン受容体であり；又は変異体ＧＰＣＲは、変異体ムスカリン受容体、例えば図１７に記載のヒトムスカリン受容体の番号付けした以下の位置：Ｌｅｕ６５、Ｍｅｔ１４５、Ｌｅｕ３９９、Ｉｌｅ３８３、及びＭｅｔ３８４のいずれかに対応する位置で、対応する野生型ムスカリン受容体と比較して異なるアミノ酸を有するムスカリン受容体、又は図１７に記載のヒトムスカリン受容体の番号付けした以下の位置：Ｌｅｕ６５、Ｍｅｔ１４５、Ｌｅｕ３９９、Ｉｌｅ３８３、及びＭｅｔ３８４のいずれかに対応する位置で、前記受容体変異体がその親受容体と比較して異なるアミノ酸を有する構造モチーフに少なくとも１つの異なるアミノ酸残基を有するムスカリン受容体である請求項２１に記載の変異体ＧＰＣＲ。
【請求項２３】
請求項２１又は２２に記載の変異体ＧＰＣＲをコードするポリヌクレオチド。
【請求項２４】
請求項２３に記載のポリヌクレオチドを含む宿主細胞。
【請求項２５】
可溶化形態にあるか、又は他のタンパク質を実質的に含まず、場合によっては固体担体に固定化された、請求項２１又は２２に記載の変異体ＧＰＣＲ。
【請求項２６】
請求項２１、２２及び２５の何れか一項に記載の変異体ＧＰＣＲの、結晶化のための、又は創薬における（例えばリガンド結合スクリーニング又はアッセイ開発における）、又はバイオセンサーとしての使用。