【手続補正書】
【提出日】平成26年6月24日(2014.6.24)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
異染性白質ジストロフィー（ＭＬＤ）症の治療方法における使用のための安定な製剤であって、前記製剤は、対象に髄腔内投与されることを特徴とし、前記安定な製剤は、アリールスルファターゼＡ（ＡＳＡ）タンパク質を含む、使用のための安定な製剤。
【請求項２】
前記製剤が、塩と、ポリソルベート界面活性剤と、緩衝剤とをさらに含む、請求項１に記載の使用のための安定な製剤。
【請求項３】
前記ポリソルベート界面活性剤が、約０〜０．２％の範囲の濃度で存在する、請求項２に記載の使用のための安定な製剤。
【請求項４】
前記アリールスルファターゼＡ（ＡＳＡ）タンパク質が少なくとも５ｍｇ／ｍｌの範囲の濃度で存在する、請求項１〜３のいずれか一項に記載の使用のための安定な製剤。
【請求項５】
前記緩衝剤がリン酸塩であり、そして５０ｍＭ以下の濃度で存在する、請求項２〜４のいずれか一項に記載の使用のための安定な製剤。
【請求項６】
前記製剤の髄腔内投与によって、前記対象において実質的な副作用が生じず、必要に応じて、前記製剤の髄腔内投与によって、前記対象において、実質的なＴ細胞媒介性適応免疫反応が生じない、請求項１〜５のいずれか一項に記載の使用のための安定な製剤。
【請求項７】
（ｉ）前記製剤の髄腔内投与によって、前記ＡＳＡタンパク質を深部の脳白質の乏突起グリア細胞に送達する、
（ｉｉ）前記ＡＳＡタンパク質をニューロン、グリア細胞、血管周囲細胞、および／または髄膜細胞に送達する、
（ｉｉｉ）前記ＡＳＡタンパク質をさらに脊髄のニューロンに送達する、
（ｉｖ）前記製剤の髄腔内投与によってさらに、末梢標的組織中の前記ＡＳＡタンパク質を全身送達し、必要に応じて、前記末梢標的組織が、肝臓、腎臓、および／または心臓から選択される、
（ｖ）前記製剤の髄腔内投与によって、脳標的組織、脊髄ニューロン、および／または末梢標的組織におけるリソソーム局在化が生じる、
（ｖｉ）前記製剤の髄腔内投与によって、脳標的組織、脊髄ニューロン、および／または末梢標的組織におけるスルファチド蓄積量が減少し、必要に応じて、前記スルファチド蓄積量が対照と比較して少なくとも２０％、４０％、５０％、６０％、８０％、９０％、１倍、１．５倍、または２倍減少する、そして／あるいは
（ｖｉｉ）前記製剤の髄腔内投与によって、ＣＮＳおよびＰＮＳ内での進行性脱髄および軸索消失が低減される、請求項１〜６のいずれか一項に記載の使用のための安定な製剤。
【請求項８】
前記製剤の髄腔内投与によって、脳標的組織、脊髄ニューロン、および／または末梢標的組織におけるＡＳＡの酵素活性が増大し、必要に応じて、
（ｉ）前記ＡＳＡの酵素活性が対照と比較して少なくとも１倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、または１０倍増大する、そして／あるいは
（ｉｉ）前記増大したＡＳＡの酵素活性が少なくとも約１０ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、２０ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、４０ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、５０ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、６０ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、７０ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、８０ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、９０ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、１００ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、１５０ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、２００ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、２５０ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、３００ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、３５０ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、４００ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、４５０ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、５００ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、５５０ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、または６００ｎｍｏｌ／時・ｍｇである、あるいは
（ｉｉｉ）前記ＡＳＡの酵素活性が腰部領域で増大し、
必要に応じて、前記腰部領域で増大したＡＳＡの酵素活性が少なくとも約２０００ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、３０００ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、４０００ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、５０００ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、６０００ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、７０００ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、８０００ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、９０００ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、または１０,０００ｎｍｏｌ／時・ｍｇである、請求項１〜７のいずれか一項に記載の使用のための安定な製剤。
【請求項９】
前記製剤の髄腔内投与によって、ＭＬＤ症の少なくとも１つの症状または特徴の強度、重症度、もしくは頻度が低減されるか、またはＭＬＤ症の少なくとも１つの症状または特徴が遅発し、必要に応じて、ＭＬＤ症の前記少なくとも１つの症状または特徴が、頭蓋内圧増大、真空水頭症、中枢および末梢神経系と内臓器官とにおけるミエリン鞘中の硫酸化糖脂質蓄積、ＣＮＳおよびＰＮＳ内の進行性脱髄および軸索損失、ならびに／または運動および認知機能障害である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の使用のための安定な製剤。
【請求項１０】
（ｉ）前記髄腔内投与を静脈内投与と併用し、必要に応じて、前記静脈内投与が１ヶ月に１回以下の頻度もしくは２ヶ月に１回以下の頻度である、または
（ｉｉ）前記髄腔内投与を静脈内投与の非存在下で用いる、そして／または
（ｉｉｉ）前記髄腔内投与を２週間に１回、１ヶ月に１回、もしくは２ヶ月に１回実施する、そして／または
（ｉｖ）前記髄腔内投与を併用免疫抑制療法の非存在下で用いる、請求項１〜９のいずれか一項に記載の使用のための安定な製剤。
【請求項１１】
髄腔内投与用の安定な製剤であって、アリールスルファターゼＡ（ＡＳＡ）タンパク質と、塩と、ポリソルベート界面活性剤および／または緩衝剤とを含む安定な製剤。
【請求項１２】
前記ＡＳＡタンパク質が約０〜１００ｍｇ／ｍｌの範囲の濃度で存在し、必要に応じて、前記ＡＳＡタンパク質が、１０ｍｇ／ｍｌ、３０ｍｇ／ｍｌ、５０ｍｇ／ｍｌ、または１００ｍｇ／ｍｌから選択した濃度で存する、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の安定な製剤または使用のための安定な製剤。
【請求項１３】
前記ＡＳＡタンパク質が配列番号１のアミノ酸配列を含む、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の安定な製剤または使用のための安定な製剤。
【請求項１４】
（ｉ）前記ＡＳＡタンパク質がヒト細胞株から生成される、または
（ｉｉ）前記ＡＳＡタンパク質がＣＨＯ細胞から生成される、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の安定な製剤または使用のための安定な製剤。
【請求項１５】
前記塩がＮａＣｌであり、必要に応じて、前記ＮａＣｌが、約０〜３００ｍＭの範囲の濃度で、必要に応じて、約１３７〜１５４ｍＭの範囲の濃度で、必要に応じて、約１５４ｍＭの濃度で存在する、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の安定な製剤または使用のための安定な製剤。
【請求項１６】
前記ポリソルベート界面活性剤が、ポリソルベート２０、ポリソルベート４０、ポリソルベート６０、ポリソルベート８０、およびこれらの組み合わせからなる群から選択され、必要に応じて、前記ポリソルベート界面活性剤がポリソルベート２０であり、そして約０〜０．２％の範囲の濃度で、必要に応じて約０．００５％の濃度で存在する、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の安定な製剤または使用のための安定な製剤。
【請求項１７】
前記安定な製剤が緩衝剤を含み、必要に応じて、前記緩衝剤が、リン酸塩、酢酸塩、ヒスチジン、コハク酸塩、クエン酸塩、トリス、およびこれらの組み合わせからなる群から選択され、必要に応じて、前記緩衝剤がリン酸塩であり、そして５０ｍＭ以下の濃度で、必要に応じて２０ｍＭ以下の濃度で存在する、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の安定な製剤または使用のための安定な製剤。
【請求項１８】
前記製剤が、約３〜８．０、約６．０〜６．５、または約６．０のｐＨを有する、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の安定な製剤または使用のための安定な製剤。
【請求項１９】
（ｉ）液状製剤である、または
（ｉｉ）凍結乾燥粉末として調合される、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の安定な製剤または使用のための安定な製剤。
【請求項２０】
前記製剤が、ポリソルベート界面活性剤を含み、そして安定化剤をさらに含み、必要に応じて、前記安定化剤が、ショ糖、グルコース、マンニトール、ソルビトール、ＰＥＧ４０００、ヒスチジン、アルギニン、リジン、リン脂質、およびこれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の安定な製剤または使用のための安定な製剤。
【請求項２１】
請求項１１〜２０のいずれか一項に記載の安定な製剤の単一剤形を含む容器であって、必要に応じて、
（ｉ）前記容器は、アンプル、バイアル、カートリッジ、レザバー、Ｌｙｏ−ｊｅｃｔ、または前充填した注射器から選択され、必要に応じて、前記容器は前充填した注射器であり、そして必要に応じて、シリコーンの焼付コーティングを有するホウケイ酸ガラス注射器、スプレーしたシリコーンを有するホウケイ酸ガラス注射器、または、シリコーンを含まないプラスチック樹脂注射器から選択される、あるいは
（ｉｉ）前記安定な製剤が約５０．０ｍＬ未満の体積で存在する、必要に応じて、前記安定な製剤が約５．０ｍＬ未満の体積で存在する、
容器。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１０】
本発明は、例えば、以下を提供する：
（項目１）
髄腔内投与用の安定な製剤であって、アリールスルファターゼＡ（ＡＳＡ）タンパク質と、塩と、ポリソルベート界面活性剤とを含む安定な製剤。
（項目２）
前記ＡＳＡタンパク質が約０〜１００ｍｇ／ｍＬの範囲の濃度で存在する、項目１に記載の安定な製剤。
（項目３）
前記ＡＳＡタンパク質が、１０ｍｇ／ｍＬ、３０ｍｇ／ｍＬ、５０ｍｇ／ｍＬ、または１００ｍｇ／ｍＬから選択した濃度で存する、項目１または２に記載の安定な製剤。
（項目４）
前記ＡＳＡタンパク質が配列番号１のアミノ酸配列を含む、項目１〜３のいずれか一項に記載の安定な製剤。
（項目５）
前記ＡＳＡタンパク質がヒト細胞株から生成される、項目１〜４のいずれか一項に記載の安定な製剤。
（項目６）
前記ＡＳＡタンパク質がＣＨＯ細胞から生成される、項目１〜４のいずれか一項に記載の安定な製剤。
（項目７）
前記塩がＮａＣｌである、項目１〜６のいずれか一項に記載の安定な製剤。
（項目８）
前記ＮａＣｌが、約０〜３００ｍＭの範囲の濃度で存在する、項目７に記載の安定な製剤。
（項目９）
前記ＮａＣｌが、約１３７〜１５４ｍＭの範囲の濃度で存在する、項目７に記載の安定な製剤。
（項目１０）
前記ＮａＣｌが、約１５４ｍＭの濃度で存在する、項目９に記載の安定な製剤。
（項目１１）
前記ポリソルベート界面活性剤が、ポリソルベート２０、ポリソルベート４０、ポリソルベート６０、ポリソルベート８０、およびこれらの組み合わせからなる群から選択される、項目１〜１０のいずれか一項に記載の安定な製剤。
（項目１２）
前記ポリソルベート界面活性剤がポリソルベート２０である、項目１１に記載の安定な製剤。
（項目１３）
前記ポリソルベート２０が、約０〜０．２％の範囲の濃度で存在する、項目１２に記載の安定な製剤。
（項目１４）
ポリソルベート２０が、約０．００５％の濃度で存在する、項目１３に記載の安定な製剤。
（項目１５）
緩衝剤をさらに含む、項目１４に記載の安定な製剤。
（項目１６）
前記緩衝剤が、リン酸塩、酢酸塩、ヒスチジン、コハク酸塩、クエン酸塩、トリス、およびこれらの組み合わせからなる群から選択される、項目１５に記載の安定な製剤。
（項目１７）
前記緩衝剤がリン酸塩である、項目１〜１６のいずれか一項に記載の安定な製剤。
（項目１８）
前記リン酸塩が５０ｍＭ以下の濃度で存在する、項目１７に記載の安定な製剤。
（項目１９）
前記リン酸塩が２０ｍＭ以下の濃度で存在する、項目１７に記載の安定な製剤。
（項目２０）
ｐＨが約３〜８．０である、項目１〜１９のいずれか一項に記載の安定な製剤。
（項目２１）
ｐＨが約６．０〜６．５である、項目２０に記載の安定な製剤。
（項目２２）
ｐＨが約６．０である、項目２１に記載の安定な製剤。
（項目２３）
液状製剤である、項目１〜２２のいずれか一項に記載の安定な製剤。
（項目２４）
凍結乾燥粉末として調合される、項目１〜１５のいずれか一項に記載の安定な製剤。
（項目２５）
安定化剤をさらに含む、項目１７に記載の安定な製剤。
（項目２６）
前記安定化剤が、ショ糖、グルコース、マンニトール、ソルビトール、ＰＥＧ４０００、ヒスチジン、アルギニン、リジン、リン脂質、およびこれらの組み合わせからなる群から選択される、項目２５に記載の安定な製剤。
（項目２７）
髄腔内投与用の安定な製剤であって、アリールスルファターゼＡ（ＡＳＡ）タンパク質と、塩と、緩衝剤とを含む安定な製剤。
（項目２８）
前記ＡＳＡタンパク質が、約０〜１００ｍｇ／ｍＬの範囲の濃度である、項目２７に記載の安定な製剤。
（項目２９）
前記緩衝剤が、リン酸塩、酢酸塩、ヒスチジン、コハク酸塩、クエン酸塩、トリス、およびこれらの組み合わせからなる群から選択される、項目２７または２８に記載の安定な製剤。
（項目３０）
前記緩衝剤がリン酸塩である、項目２９に記載の安定な製剤。
（項目３１）
前記リン酸塩が、約２０ｍＭ以下の濃度である、項目３０に記載の安定な製剤。
（項目３２）
前記リン酸塩が、約５０ｍＭ以下の濃度である、項目３１に記載の安定な製剤。
（項目３３）
ポリソルベート界面活性剤をさらに含む、項目２７〜３１のいずれか一項に記載の安定な製剤。
（項目３４）
前記ポリソルベート界面活性剤が、ポリソルベート２０、ポリソルベート４０、ポリソルベート６０、ポリソルベート８０、およびこれらの組み合わせからなる群から選択される、項目３３に記載の安定な製剤。
（項目３５）
前記ポリソルベート界面活性剤が約０〜０．２％の範囲の濃度で存在する、項目３３または３４に記載の安定な製剤。
（項目３６）
ｐＨが約６．０〜６．５である、項目２７〜３５のいずれか一項に記載の安定な製剤。
（項目３７）
項目１〜３６のいずれか一項に記載の安定な製剤の単一剤形を含む容器。
（項目３８）
アンプル、バイアル、カートリッジ、レザバー、Ｌｙｏ−ｊｅｃｔ、または前充填した注射器から選択される、項目３７に記載の容器。
（項目３９）
前充填した注射器である、項目３７または３８のいずれか一項に記載の容器。
（項目４０）
前記前充填した注射器が、シリコーンの焼付コーティングを有するホウケイ酸ガラス注射器、スプレーしたシリコーンを有するホウケイ酸ガラス注射器、または、シリコーンを含まないプラスチック樹脂注射器から選択される、項目３９に記載の容器。
（項目４１）
前記安定な製剤が約５０．０ｍＬ未満の体積で存在する、項目３７〜４０のいずれか一項に記載の容器。
（項目４２）
前記安定な製剤が約５．０ｍＬ未満の体積で存在する、項目３７〜４０のいずれか一項に記載の容器。
（項目４３）
異染性白質ジストロフィー（ＭＬＤ）症の治療方法であって、
治療の必要な対象に、項目１〜２９のいずれか一項に記載の製剤を髄腔内投与するステップ
を含む方法。
（項目４４）
前記製剤の髄腔内投与によって、前記対象において実質的な副作用が生じない、項目４３に記載の方法。
（項目４５）
前記製剤の髄腔内投与によって、前記対象において、実質的なＴ細胞媒介性適応免疫反応が生じない、項目４４に記載の方法。
（項目４６）
前記製剤の髄腔内投与によって、ＡＳＡタンパク質を深部の脳白質の乏突起グリア細胞に送達する、項目４３〜４５のいずれか一項に記載の方法。
（項目４７）
前記ＡＳＡタンパク質をニューロン、グリア細胞、血管周囲細胞、および／または髄膜細胞に送達する、項目４３〜４６のいずれか一項に記載の方法。
（項目４８）
前記ＡＳＡタンパク質をさらに脊髄のニューロンに送達する、項目４３〜４７のいずれか一項に記載の方法。
（項目４９）
前記製剤の髄腔内投与によってさらに、末梢標的組織中の前記ＡＳＡタンパク質を全身送達する、項目４３〜４８のいずれか一項に記載の方法。
（項目５０）
前記末梢標的組織が、肝臓、腎臓、および／または心臓から選択される、項目４９に記載の方法。
（項目５１）
前記製剤の髄腔内投与によって、脳標的組織、脊髄ニューロン、および／または末梢標的組織におけるリソソーム局在化が生じる、項目４３〜５０のいずれか一項に記載の方法。
（項目５２）
前記製剤の髄腔内投与によって、脳標的組織、脊髄ニューロン、および／または末梢標的組織におけるスルファチド蓄積量が減少する、項目４３〜５１のいずれか一項に記載の方法。
（項目５３）
前記スルファチド蓄積量が対照と比較して少なくとも２０％、４０％、５０％、６０％、８０％、９０％、１倍、１．５倍、または２倍減少する、項目５２に記載の方法。
（項目５４）
前記製剤の髄腔内投与によって、ＣＮＳおよびＰＮＳ内での進行性脱髄および軸索消失が低減される、項目４３〜５３のいずれか一項に記載の方法。
（項目５５）
前記製剤の髄腔内投与によって、脳標的組織、脊髄ニューロン、および／または末梢標的組織におけるＡＳＡの酵素活性が増大する、項目４３〜５４のいずれか一項に記載の方法。
（項目５６）
前記ＡＳＡの酵素活性が対照と比較して少なくとも１倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、または１０倍増大する、項目５６に記載の方法。
（項目５７）
前記増大したＡＳＡの酵素活性が少なくとも約１０ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、２０ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、４０ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、５０ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、６０ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、７０ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、８０ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、９０ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、１００ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、１５０ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、２００ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、２５０ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、３００ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、３５０ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、４００ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、４５０ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、５００ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、５５０ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、または６００ｎｍｏｌ／時・ｍｇである、項目５５または５６に記載の方法。
（項目５８）
前記ＡＳＡの酵素活性が腰部領域で増大する、項目５５に記載の方法。
（項目５９）
前記腰部領域で増大したＡＳＡの酵素活性が少なくとも約２０００ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、３０００ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、４０００ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、５０００ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、６０００ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、７０００ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、８０００ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、９０００ｎｍｏｌ／時・ｍｇ、または１０,０００ｎｍｏｌ／時・ｍｇである、項目５８に記載の方法。
（項目６０）
前記製剤の髄腔内投与によって、ＭＬＤ症の少なくとも１つの症状または特徴の強度、重症度、もしくは頻度が低減されるか、またはＭＬＤの少なくとも１つの症状または特徴が遅発する、項目４３〜５９のいずれか一項に記載の方法。
（項目６１）
ＭＬＤ症の前記少なくとも１つの症状または特徴が、頭蓋内圧増大、真空水頭症、中枢および末梢神経系と内臓器官とにおけるミエリン鞘中の硫酸化糖脂質蓄積、ＣＮＳおよびＰＮＳ内の進行性脱髄および軸索損失、ならびに／または運動および認知機能障害である、項目６０に記載の方法。
（項目６２）
前記髄腔内投与を２週間に１回実施する、項目４３〜６１のいずれか一項に記載の方法。
（項目６３）
前記髄腔内投与を１ヶ月に１回実施する、項目４３〜６１のいずれか一項に記載の方法。
（項目６４）
前記髄腔内投与を２ヶ月に１回実施する、項目４３〜６１のいずれか一項に記載の方法。
（項目６５）
前記髄腔内投与を静脈内投与と併用する、項目４３〜６４のいずれか一項に記載の方法。
（項目６６）
前記静脈内投与が１ヶ月に１回以下の頻度である、項目６５に記載の方法。
（項目６７）
前記静脈内投与が２ヶ月に１回以下の頻度である、項目６５に記載の方法。
（項目６８）
前記髄腔内投与を静脈内投与の非存在下で用いる、項目４３〜６４のいずれか一項に記載の方法。
（項目６９）
前記髄腔内投与を併用免疫抑制療法の非存在下で用いる、項目４３〜６８のいずれか一項に記載の方法。
本発明は、中枢神経系（ＣＮＳ）への治療薬の直接送達のための有効且つ低侵襲性のアプローチを提供する。本発明は、一部は、酵素が種々の表面を横断して有効に且つ広範に拡散して、深部脳領域を含めて脳を横断する種々の領域に浸透するよう、リソソーム蓄積症（例えばＭＬＤ）のための補充酵素（例えばアリールスルファターゼＡ（ＡＳＡ））が高濃度（例えば、約３ｍｇ／ｍｇ以上、４ｍｇ／ｍｌ、５ｍｇ／ｍｌ、１０ｍｇ／ｍｌ以上）での治療を必要とする対象の脳脊髄液（ＣＳＦ）中に直接的に導入され得る、という予期せぬ発見に基づいている。さらに意外なことに、単なる生理食塩水または緩衝液ベースの製剤を用いて、そして対象において実質的副作用、例えば重篤な免疫応答を誘導することなく、このような高タンパク質濃度送達を実施することができることを本発明人等は実証した。したがって、本発明は、ＣＮＳ構成成分を有する種々の疾患および障害、特にリソソーム蓄積症の治療のための直接ＣＮＳ送達のための非常に効率的な、臨床的に望ましい、且つ患者に優しいアプローチを提供する。本発明は、ＣＮＳターゲッティングおよび酵素補充療法の分野における有意の進歩を示す。