【手続補正書】
【提出日】平成23年9月22日(2011.9.22)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
単離した第Ｘａ因子（ｆＸａ）誘導体ポリペプチドであって、
（ａ）重鎖の活性部位に修飾を含むｆＸａ重鎖を含み、そして
（ｂ）Ｇｌａ欠損もしくはデス−Ｇｌａ  ｆＸａ軽鎖を含むかまたは軽鎖を含まない、
単離したｆＸａ誘導体ポリペプチド。
【請求項２】
前記修飾がデヒドロ−アラニンまたはアラニンでのＳｅｒ３７９の置換である、請求項１に記載の単離したｆＸａ誘導体ポリペプチド。
【請求項３】
前記修飾がＳ３７９Ａである、請求項１に記載の単離したｆＸａ誘導体ポリペプチド。
【請求項４】
前記重鎖が、アミノ酸位置Ａｒｇ３０６、Ｇｌｕ３１０、Ａｒｇ３４７、Ｌｙｓ３５１、Ｌｙｓ４１４またはＡｒｇ４２４での少なくとも１つのアミノ酸置換をさらに含む、請求項１から３のいずれか１項に記載の単離したｆＸａ誘導体ポリペプチド。
【請求項５】
前記誘導体ポリペプチドが軽鎖を含まない、請求項１から４のいずれか１項に記載の単離したｆＸａ誘導体ポリペプチド。
【請求項６】
前記誘導体ポリペプチドがＧｌａ欠損軽鎖を含む、請求項１から５のいずれか１項に記載の単離したｆＸａ誘導体ポリペプチド。
【請求項７】
前記Ｇｌａドメインが未カルボキシル化、低カルボキシル化または脱カルボキシル化されている、請求項６に記載の単離したｆＸａ誘導体ポリペプチド。
【請求項８】
前記誘導体ポリペプチドがデス−Ｇｌａ軽鎖を含む、請求項１から５のいずれか１項に記載の単離したｆＸａ誘導体ポリペプチド。
【請求項９】
前記軽鎖が配列番号３のアミノ酸残基１〜３９、６〜３９、１〜４４または１〜４５を欠く、請求項８に記載の単離したｆＸａ誘導体ポリペプチド。
【請求項１０】
前記軽鎖がＥＧＦ１ドメインおよび／またはＥＧＦ２ドメインを含まない、請求項１から９のいずれか１項に記載の単離したｆＸａ誘導体ポリペプチド。
【請求項１１】
前記誘導体ポリペプチドが別個の軽鎖および重鎖を有する二本鎖ポリペプチドである、請求項１から１０のいずれか１項に記載の単離したｆＸａ誘導体ポリペプチド。
【請求項１２】
前記軽鎖と重鎖とが連結されている、請求項１１に記載の単離したｆＸａ誘導体ポリペプチド。
【請求項１３】
前記軽鎖と前記重鎖との間にペプチドリンカーをさらに含む、請求項１２に記載の単離したｆＸａ誘導体ポリペプチド。
【請求項１４】
前記ペプチドリンカーが−ＲＫＲＲＫＲ−を含む、請求項１３に記載の単離したｆＸａ誘導体ポリペプチド。
【請求項１５】
前記誘導体ポリペプチドが活性化ペプチドを含まない、請求項１から１４のいずれか１項に記載の単離したｆＸａ誘導体ポリペプチド。
【請求項１６】
配列番号１３のアミノ酸配列または配列番号１３に少なくとも９０％の相同性を有するアミノ酸配列を含む単離した二本鎖ポリペプチドであって、
該配列番号１３に少なくとも９０％の相同性を有するアミノ酸配列は、
（ａ）野生型第Ｘａ因子と比較して低下した凝固活性を有する、
（ｂ）第Ｘａ因子阻害剤へ結合し得る、および
（ｃ）集合してプロトロンビナーゼ複合体を形成することがない、
単離した二本鎖ポリペプチド。
【請求項１７】
配列番号１３のアミノ酸配列を含む、単離した二本鎖ポリペプチド。
【請求項１８】
配列番号１２のアミノ酸配列または配列番号１２に少なくとも９０％の相同性を有するアミノ酸配列を含む単離したポリペプチドであって、
該配列番号１２に少なくとも９０％の相同性を有するアミノ酸配列は、
（ａ）野生型第Ｘａ因子と比較して低下した凝固活性を有する、
（ｂ）第Ｘａ因子阻害剤へ結合し得る、および
（ｃ）集合してプロトロンビナーゼ複合体を形成することがない、
単離した二本鎖ポリペプチド。
【請求項１９】
配列番号１２のアミノ酸配列を含む、単離したポリペプチド。
【請求項２０】
配列番号１５のアミノ酸配列または配列番号１５に少なくとも９０％の相同性を有するアミノ酸配列を含む単離したポリペプチドであって、
該配列番号１５に少なくとも９０％の相同性を有するアミノ酸配列は、
（ａ）野生型第Ｘａ因子と比較して低下した凝固活性を有する、
（ｂ）第Ｘａ因子阻害剤へ結合し得る、および
（ｃ）集合してプロトロンビナーゼ複合体を形成することがない、
単離した二本鎖ポリペプチド。
【請求項２１】
配列番号１５のアミノ酸配列を含む、単離したポリペプチド。
【請求項２２】
担体および請求項１から２１のいずれか一項に記載のポリペプチドを含む薬剤組成物。
【請求項２３】
請求項１から２１のいずれか一項に記載のポリペプチドと共有結合または非共有結合した担体を含む、ペプチドコンジュゲート。
【請求項２４】
前記担体が、リポソーム、ミセル、製薬上許容されるポリマー、または製薬上許容される担体である、請求項２３に記載のペプチドコンジュゲート。
【請求項２５】
請求項１から２１のいずれか一項に記載のポリペプチドをコードしているポリヌクレオチド。
【請求項２６】
請求項１から２１のいずれか一項に記載のポリペプチドと結合する抗体。
【請求項２７】
前記抗体が、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、キメラ抗体またはヒト化抗体である、請求項２６に記載の抗体。
【請求項２８】
検出可能標識をさらに含む、請求項２６または２７に記載の抗体。
【請求項２９】
請求項２６から２８のいずれか一項に記載の抗体の生物活性断片。
【請求項３０】
請求項２６から２８のいずれか一項に記載の抗体および担体を含む組成物。
【請求項３１】
請求項２９に記載の抗体断片を含む組成物。
【請求項３２】
請求項２６から２８のいずれか一項に記載の抗体および前記抗体と特異的に結合するポリペプチドを含む、抗体−ペプチド複合体。
【請求項３３】
前記ポリペプチドが、それに対する抗体が産生されたポリペプチドである、請求項３２に記載の複合体。
【請求項３４】
前記抗体が、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、キメラ抗体またはヒト化抗体である、請求項３２または３３に記載の複合体。
【請求項３５】
請求項１から２１のいずれか一項に記載のポリペプチドをコードしているポリヌクレオチドを、原核または真核宿主細胞中で発現させることを含む、請求項１から２１のいずれか一項に記載のポリペプチドを調製するインビトロでの方法。
【請求項３６】
前記方法がリンカーを除去する工程をさらに含み、そして前記ポリペプチドが、配列番号１３のアミノ酸配列を含む、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
前記宿主細胞がチャイニーズハムスター卵巣細胞である、請求項３５または３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記ポリペプチドを単離することをさらに含む、請求項３５から３７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３９】
請求項１から２１のいずれか一項に記載のポリペプチドをコードしているポリヌクレオチドを含む、単離した原核または真核宿主細胞。
【請求項４０】
担体および請求項３９に記載の原核または真核宿主細胞を含む組成物。
【請求項４１】
第Ｘａ因子阻害剤を用いた抗凝固療法を受けている被験体において出血を防止または減少するための、請求項２２に記載の組成物。
【請求項４２】
第Ｘａ因子阻害剤を用いた抗凝固療法を受けている被験体において、体外から投与した第Ｘａ因子阻害剤と選択的に結合してそれを阻害するための、請求項２２に記載の組成物。
【請求項４３】
前記第Ｘａ因子阻害剤が、フォンダパリヌクス、イドラパリナックス、ビオチン標識イドラパリナックス、エノキサパリン、ｆｒａｇｍｉｎ、ＮＡＰ−５、ｒＮＡＰｃ２、組織因子経路阻害剤、ＤＸ−９０６５ａ、ＹＭ−６０８２８、ＹＭ−１５０、アピキサバン、リバロキサバン、ＰＤ−３４８２９２、オタミキサバン、ＤＵ−１７６ｂ、ＬＹ５１７７１７、ＧＳＫ９１３８９３、ラザキサバン、低分子量ヘパリン、ベトリキサバンまたは製薬上許容されるその塩、およびその組合せからなる群から選択される、請求項４１または４２に記載の組成物。
【請求項４４】
前記第Ｘａ因子阻害剤が、ベトリキサバン、リバラオキサバン、アピキサバン、低分子量ヘパリン、およびその組合せから選択される、請求項４３に記載の組成物。
【請求項４５】
前記組成物は手術前に投与されるものであることを特徴とする、請求項４３に記載の組成物。
【請求項４６】
第Ｘａ因子阻害剤と結合し、そして集合してプロトロンビナーゼ複合体を形成することがない第Ｘａ因子タンパク質誘導体を含む、第Ｘａ因子阻害剤を用いた抗凝固療法を受けている被験体において出血を防止または減少するための組成物。
【請求項４７】
第Ｘａ因子阻害剤と結合し、そして集合してプロトロンビナーゼ複合体を形成することがない第Ｘａタンパク質誘導体を含む、被験体において体外から投与した第Ｘａ因子阻害剤と選択的に結合してそれを阻害するための組成物。
【請求項４８】
前記誘導体が、Ｇｌａ欠損第Ｘａ因子タンパク質誘導体またはデス−Ｇｌａ第Ｘａ因子タンパク質である、請求項４６または４７に記載の組成物。
【請求項４９】
前記誘導体が修飾された活性部位を有する、請求項４６から４８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５０】
前記誘導体が、タンパク質分解活性を欠くが、結合に必要な構造的特徴を維持するように任意選択で化学的にまたは組換えによって修飾された触媒ドメインを含み、前記ドメインが、
ａ．血漿カリクレイン、トロンビン、およびトリプシンからなる群から選択される哺乳動物プロテアーゼ；または
ｂ．細菌プロテアーゼのサブチリシン
のいずれかに由来する、請求項４６から４９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５１】
前記組成物が前記誘導体の循環半減期を延長させる薬剤の有効量と組み合わせて投与されるものであることを特徴とする、請求項４６から５０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５２】
前記薬剤が、ｆＸａの非活性部位またはα−２−マクログロブリンと結合したｆＸａ誘導体を特異的に認識してそれと結合する抗ｆＸａ抗体である、請求項５１に記載の組成物。
【請求項５３】
前記第Ｘａ因子阻害剤が、フォンダパリヌクス、イドラパリナックス、ビオチン標識イドラパリナックス、エノキサパリン、ｆｒａｇｍｉｎ、ＮＡＰ−５、ｒＮＡＰｃ２、組織因子経路阻害剤、ＤＸ−９０６５ａ、ＹＭ−６０８２８、ＹＭ−１５０、アピキサバン、リバロキサバン、ＰＤ−３４８２９２、オタミキサバン、ＤＵ−１７６ｂ、ＬＹ５１７７１７、ＧＳＫ９１３８９３、ラザキサバン、低分子量ヘパリン、ベトリキサバンまたは製薬上許容されるその塩、およびその組合せからなる群から選択される、請求項４６から５２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５４】
前記被験体が、出血、重要臓器内への出血、再手術または新しい治療手順を要する出血、および関連する明白な出血を伴う２．０以上の出血指数からなる群から選択される臨床的な大量出血事象を起こしている、請求項４６から５３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５５】
前記被験体が、持続性または再発性の鼻出血、治療手順を必要としない直腸または尿路の出血、実質的な注射部位の血腫、非注射部位での自発性血腫、小さな外傷に伴って発生する血腫、実質的な失血、および予定外の輸血を要する出血からなる群から選択される出血事象を起こしている、請求項４６から５４のいずれか一項に記載の組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】発明の名称
【補正方法】変更
【補正の内容】
【発明の名称】第Ｘａ因子阻害剤に対する解毒剤およびその使用の方法
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２８】
さらに別の実施形態では、本発明のポリペプチドおよび担体を含む組成物を対象に有効量投与することを含む、第Ｘａ因子阻害剤を用いた抗凝固療法を受けている対象において出血を防止または減少する方法を提供する。さらに、直前に記載した組成物を対象に有効量投与することを含む、抗凝固療法を受けている対象において、体外から投与した第Ｘａ因子阻害剤と選択的に結合してそれを阻害する方法を提供する。
本発明の好ましい実施形態では、例えば以下が提供される：
（項目１）
第Ｘａ因子阻害剤と結合し、そしてプロトロンビナーゼ複合体を集合して形成しない第Ｘａ因子タンパク質誘導体の有効量を対象に投与することを含む、前記第Ｘａ因子阻害剤を用いた抗凝固療法を受けている前記対象において出血を防止または減少する方法。
（項目２）
前記第Ｘａ因子阻害剤と結合し、そしてプロトロンビナーゼ複合体を集合して形成しないＸａタンパク質誘導体の有効量を対象に投与することを含む、前記対象において体外から投与した第Ｘａ因子阻害剤と選択的に結合してそれを阻害する方法。
（項目３）
前記第Ｘａ因子タンパク質誘導体が、直接または間接的に前記第Ｘａ因子阻害剤と結合する、項目１または項目２に記載の方法。
（項目４）
前記誘導体が、凝固促進活性が減少しているか、または凝固促進活性を有さない、項目３に記載の方法。
（項目５）
前記誘導体が、Ｇｌａ欠損第Ｘａ因子タンパク質誘導体またはデス−Ｇｌａ第Ｘａ因子タンパク質である、項目１から４のいずれかに記載の方法。
（項目６）
前記誘導体が修飾された活性部位を有する、項目１から５のいずれかに記載の方法。
（項目７）
前記誘導体が、配列番号３の少なくともアミノ酸残基４６〜４４８またはその均等物を含む、項目１から６のいずれかに記載の方法。
（項目８）
前記誘導体が、配列番号３の少なくともアミノ酸残基４６〜１３９および１９５〜４４８またはその均等物を含む、項目１から７のいずれかに記載の方法。
（項目９）
前記誘導体が、ｆＸａの軽鎖を欠き、前記重鎖中に存在するセリンプロテアーゼ触媒ドメインを含有する、項目１から８のいずれかに記載の方法。
（項目１０）
前記誘導体が、配列番号５のアミノ酸配列を含むポリペプチドである、項目１から９のいずれかに記載の方法。
（項目１１）
前記誘導体が、タンパク質分解活性を欠くが、結合に必要な構造的特徴を維持するように任意選択で化学的にまたは組換えによって修飾された触媒ドメインを含み、前記ドメインが、
ａ．血漿カリクレイン、トロンビン、およびトリプシンからなる群から選択される哺乳動物プロテアーゼ；または
ｂ．細菌プロテアーゼのサブチリシン
のいずれかに由来する、項目１から１０のいずれかに記載の方法。
（項目１２）
前記誘導体が、修飾された軽鎖を有する配列番号７のアミノ酸配列またはその均等物を含む、項目１から１１のいずれかに記載の方法。
（項目１３）
前記誘導体が、リン脂質膜結合が減少するように修飾された軽鎖を含む、項目１から１２のいずれかに記載の方法。
（項目１４）
前記修飾された軽鎖が、野生型ヒト第Ｘａ因子タンパク質の前記Ｇｌａ−ドメインと比較して、前記Ｇｌａ−ドメイン中に少なくとも１つのアミノ酸置換、付加、または欠失を含む、項目１から１３のいずれかに記載の方法。
（項目１５）
前記誘導体が、未カルボキシル化、低カルボキシル化、および脱カルボキシル化第Ｘａ因子タンパク質からなる群から選択される、項目１から１４のいずれかに記載の方法。
（項目１６）
前記誘導体が、修飾されている配列番号７の前記重鎖またはその均等物を含む、項目１から１５のいずれかに記載の方法。
（項目１７）
前記誘導体が、Ｇｌｕ２１６、Ｇｌｕ２１８、Ａｒｇ３３２、Ａｒｇ３４７、Ｌｙｓ３５１、およびＳｅｒ３７９からなる群から選択されるアミノ酸の少なくとも１つのアミノ酸置換によって修飾されている、項目１から１６のいずれかに記載の方法。
（項目１８）
Ｓｅｒ３７９がデヒドロ−アラニンまたはアラニンへと修飾されている、項目１から１７のいずれかに記載の方法。
（項目１９）
前記誘導体が、配列番号１０のアミノ酸配列またはその均等物を有するデス−Ｇｌａアンヒドロ−ｆＸａである、項目１から１８のいずれかに記載の方法。
（項目２０）
前記誘導体が、配列番号１１のアミノ酸配列またはその均等物を有するデス−Ｇｌａ  ｆＸａ−Ｓ３７９Ａである、項目１から１９のいずれかに記載の方法。
（項目２１）
前記誘導体が、ＡＴＩＩＩ、補因子ｆＶ／ｆＶａおよび／またはｆＶＩＩＩ／ｆＶＩＩＩａとの相互作用が減少しており、配列番号７のアミノ酸配列またはその均等物を含む、項目１から２０のいずれかに記載の方法。
（項目２２）
前記誘導体が、配列番号１２もしくは１３もしくは１５のアミノ酸配列または配列番号１２もしくは１３もしくは１５と少なくとも８０％の相同性を有するポリペプチドを含む、項目１から２１のいずれかに記載の方法。
（項目２３）
前記誘導体が、アミノ酸位置Ａｒｇ３０６、Ｇｌｕ３１０、Ａｒｇ３４７、Ｌｙｓ３５１、Ｌｙｓ４１４、またはＡｒｇ４２４で少なくとも１つのアミノ酸置換を有する、項目１から２２のいずれかに記載の方法。
（項目２４）
前記誘導体が、ＥＧＦドメイン中に修飾を有し、前記修飾が、ＥＧＦ１ドメインの欠失、ＥＧＦ２ドメインの欠失、ならびに前記ＥＧＦ１およびＥＧＦ２ドメインの両方の欠失からなる群から選択される、項目１から２３のいずれかに記載の方法。
（項目２５）
前記誘導体が、前記誘導体の循環半減期を延長させることができる部分とコンジュゲートしている、項目１から２４のいずれかに記載の方法。
（項目２６）
前記部分が、ポリエチレングリコール、アシル基、リポソーム、カプセル封入剤、担体タンパク質、人工リン脂質膜、ナノ粒子、Ｆｃペプチド断片、Ｆｃ担体ドメインおよびｆＸａ誘導体を含むキメラタンパク質ならびにその組合せからなる群から選択される、項目２５に記載の方法。
（項目２７）
前記誘導体の循環半減期を延長させる薬剤を有効量投与することをさらに含む、項目１から２６のいずれかに記載の方法。
（項目２８）
前記薬剤が、ｆＸａの非活性部位またはα−２−マクログロブリンと結合したｆＸａ誘導体を特異的に認識してそれと結合する抗ｆＸａ抗体である、項目２７に記載の方法。
（項目２９）
前記第Ｘａ因子阻害剤が、フォンダパリヌクス、イドラパリナックス、ビオチン標識イドラパリナックス、エノキサパリン、ｆｒａｇｍｉｎ、ＮＡＰ−５、ｒＮＡＰｃ２、組織因子経路阻害剤、ＤＸ−９０６５ａ、ＹＭ−６０８２８、ＹＭ−１５０、アピキサバン、リバロキサバン、ＰＤ−３４８２９２、オタミキサバン、ＤＵ−１７６ｂ、ＬＹ５１７７１７、ＧＳＫ９１３８９３、ラザキサバン、低分子量ヘパリン、ベトリキサバンまたは製薬上許容されるその塩、およびその組合せからなる群から選択される、項目１から２８のいずれかに記載の方法。
（項目３０）
前記第Ｘａ因子阻害剤が、ベトリキサバン、リバラオキサバン、アピキサバン、低分子量ヘパリン、およびその組合せから選択される、項目２９に記載の方法。
（項目３１）
前記対象が、出血、重要臓器内への出血、再手術または新しい治療手順を要する出血、および関連する明白な出血を伴う２．０以上の出血指数からなる群から選択される臨床的な大量出血事象を起こしている、項目１から３０のいずれかに記載の方法。
（項目３２）
前記対象が、持続性または再発性の鼻出血、治療手順を必要としない直腸または尿路の出血、実質的な注射部位の血腫、非注射部位での自発性血腫、小さな外傷に伴って発生する血腫、実質的な失血、および予定外の輸血を要する出血からなる群から選択される出血事象を起こしている、項目１から３１のいずれかに記載の方法。
（項目３３）
前記誘導体を手術前に投与する、項目１から３２のいずれかに記載の方法。
（項目３４）
第Ｘａ因子阻害剤と結合し、プロトロンビナーゼ複合体を集合して形成しない第Ｘａ因子誘導体タンパク質と、製薬上許容される担体とを含む薬剤組成物。
（項目３５）
配列番号１２のアミノ酸配列または配列番号１２と少なくとも８０％の相同性を有するポリペプチドを含む、単離したポリペプチド。
（項目３６）
配列番号１２のアミノ酸配列を含む、単離したポリペプチド。
（項目３７）
配列番号１３のアミノ酸配列または配列番号１３と少なくとも８０％の相同性を有するポリペプチドを含む、単離した二本鎖ポリペプチド。
（項目３８）
配列番号１５のアミノ酸配列または配列番号１５と少なくとも８０％の相同性を有するポリペプチドを含む、単離したポリペプチド。
（項目３９）
項目３５から３８のいずれか一項に記載のポリペプチドと共有または非共有結合した担体を含む、ペプチドコンジュゲート。
（項目４０）
前記担体が、リポソーム、ミセル、製薬上許容されるポリマー、または製薬上許容される担体である、項目３９に記載のペプチドコンジュゲート。
（項目４１）
担体および項目３５から３８のいずれか一項に記載のポリペプチドを含む薬剤組成物。
（項目４２）
項目３５から３８のいずれか一項に記載のポリペプチドをコードしているポリヌクレオチド。
（項目４３）
項目３５から３８のいずれか一項に記載のポリペプチドと結合する抗体。
（項目４４）
前記抗体が、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、キメラ抗体またはヒト化抗体である、項目４３に記載の抗体。
（項目４５）
項目４３に記載の抗体の生物活性断片。
（項目４６）
検出可能に標識されている、項目４３に記載の抗体。
（項目４７）
項目４３に記載の抗体および担体を含む組成物。
（項目４８）
項目４５に記載の抗体断片を含む組成物。
（項目４９）
項目４６に記載の抗体および前記抗体と特異的に結合するポリペプチドを含む、抗体−ペプチド複合体。
（項目５０）
前記ポリペプチドが、それに対する抗体が産生されたポリペプチドである、項目４９に記載の複合体。
（項目５１）
前記抗体が、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、キメラ抗体またはヒト化抗体である、項目４９に記載の複合体。
（項目５２）
項目３５から３８のいずれか一項に記載のポリペプチドをコードしているポリヌクレオチドを、原核または真核宿主細胞中で発現させることを含む、項目３５から３８のいずれか一項に記載のポリペプチドを調製する方法。
（項目５３）
前記ポリペプチドが、配列番号１２のアミノ酸配列を含み、前記ポリヌクレオチドが、配列番号１６のヌクレオチド配列を含む、項目５２に記載の方法。
（項目５４）
前記宿主細胞がチャイニーズハムスター卵巣細胞である、項目５２に記載の方法。
（項目５５）
前記ポリペプチドを単離することをさらに含む、項目５２から５４のいずれか一項に記載の方法。
（項目５６）
項目３５から３８のいずれか一項に記載のポリペプチドをコードしているポリヌクレオチドを含む、単離した原核または真核宿主細胞。
（項目５７）
担体および項目５６に記載の原核または真核宿主細胞を含む組成物。
（項目５８）
項目４１に記載の組成物を対象に有効量投与することを含む、第Ｘａ因子阻害剤を用いた抗凝固療法を受けている前記対象において出血を防止または減少する方法。
（項目５９）
項目４１に記載の組成物を対象に有効量投与することを含む、第Ｘａ因子阻害剤を用いた抗凝固療法を受けている前記対象において、体外から投与した第Ｘａ因子阻害剤と選択的に結合してそれを阻害する方法。
（項目６０）
前記第Ｘａ因子阻害剤が、フォンダパリヌクス、イドラパリナックス、ビオチン標識イドラパリナックス、エノキサパリン、ｆｒａｇｍｉｎ、ＮＡＰ−５、ｒＮＡＰｃ２、組織因子経路阻害剤、ＤＸ−９０６５ａ、ＹＭ−６０８２８、ＹＭ−１５０、アピキサバン、リバロキサバン、ＰＤ−３４８２９２、オタミキサバン、ＤＵ−１７６ｂ、ＬＹ５１７７１７、ＧＳＫ９１３８９３、ラザキサバン、低分子量ヘパリン、ベトリキサバンまたは製薬上許容されるその塩、およびその組合せからなる群から選択される、項目５８または５９に記載の方法。
（項目６１）
前記第Ｘａ因子阻害剤が、ベトリキサバン、リバラオキサバン、アピキサバン、低分子量ヘパリン、およびその組合せから選択される、項目６０に記載の方法。
（項目６２）
前記誘導体を手術前に投与する、項目６０に記載の方法。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５１】
「ｒ−解毒剤」または「組換え解毒剤」とは、以下にさらに詳細に記載するＣＨＯ細胞中で発現されるｆＸａ突然変異体に対応する、配列番号３のアミノ酸残基６〜３９を欠くｆＸａ誘導体（配列番号１３、表１２ａ）をいう。