【手続補正書】
【提出日】平成26年2月10日(2014.2.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下を含む、関心対象のヘテロ二量体分子を生成する細胞の同定方法：
（ａ）少なくとも１つの第２のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドで、第１のポリペプチドを発現する細胞を形質移入することであって、
ここで、第１のポリペプチドが、（ｉ）ＣＨ２ドメイン及びＣＨ３ドメインを含む免疫グロブリン重鎖定常領域を含む細胞外部分、並びに（ｉｉ）非免疫グロブリン膜貫通部を含み、
第２のポリペプチドが、免疫グロブリン重鎖を含み、かつ
第１のポリペプチド及び第２のポリペプチドを含むヘテロ二量体分子が、該細胞の表面上に発現される、ことと、
（ｂ）該細胞を検出分子に接触させることであって、ここで、該検出分子が該ヘテロ二量体分子と結合する、ことと、
（ｃ）該検出分子と結合した細胞を同定すること。
【請求項２】
第１のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドで、細胞を形質移入することを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
第１のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドが、細胞に一時的に形質移入されるか又は安定的に形質移入される、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
少なくとも１つの第２のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドが、ＤＮＡライブラリーを含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
ＤＮＡライブラリーが未処理動物の細胞から又は免疫化動物の細胞から生成される、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
第２のポリペプチドが、免疫グロブリン重鎖及び免疫グロブリン軽鎖を有する単鎖免疫グロブリンを含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
以下を含む、関心対象のヘテロ二量体分子を生成する細胞の同定方法：
（ａ）第１の細胞を抗体産生細胞と融合させることであって、
ここで、第１の細胞が、（ｉ）ＣＨ２ドメイン及びＣＨ３ドメインを含む免疫グロブリン重鎖定常領域を含む細胞外部分、並びに（ｉｉ）非免疫グロブリン膜貫通部を含む、第１のポリペプチドを発現し、
ヘテロ二量体分子が、第１のポリペプチドを含み、かつ
該抗体産生細胞由来の第２のポリペプチドが、該細胞の表面上に発現される、ことと、
（ｂ）該融合細胞を検出分子に接触させることであって、ここで、該検出分子が該ヘテロ二量体分子と結合する、ことと、
（ｃ）該検出分子と結合した細胞を同定すること。
【請求項８】
抗体産生細胞が、Ｂ細胞、プラズマ細胞、ハイブリドーマ、骨髄腫及び組換え細胞から成る群から選択される、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
抗体産生細胞が未処理動物由来であるか又は免疫化動物由来である、請求項７又は８に記載の方法。
【請求項１０】
第２のポリペプチドが免疫グロブリン重鎖を含む、請求項７〜９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
第２のポリペプチドの免疫グロブリン重鎖が、免疫グロブリン軽鎖と結合し、抗原結合部位を形成する、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
第１のポリペプチドの非免疫グロブリン膜貫通部が、ＣＤ４、ＣＤ８、クラスＩＭＨＣ、クラスＩＩＭＨＣ、ＣＤ１９、Ｔ細胞受容体α鎖及びβ鎖、ＣＤ３、ｚｅｔａ鎖、ＩＣＡＭ１（ＣＤ５４）、ＩＣＡＭ２、ＩＣＡＭ３、ＩＣＡＭ４、ＩＣＡＭ５、ＣＤ２８、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂ、並びにＣＤ２から成る群から選択される膜貫通ドメインの少なくとも一部を含む、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
第１のポリペプチドが、配列番号１２、配列番号３２、配列番号２３、配列番号２８、配列番号３０、配列番号２６、配列番号１０、配列番号２２、又は配列番号３１に対し少なくとも８０％の同一性を有する配列を含む、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
第１のポリペプチドが、ヘテロ二量体分子を形成するために第２のポリペプチドと少なくとも１つのジスルフィド結合を形成する、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
ヘテロ二量体分子が１つの抗原結合部位を含む、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
細胞が哺乳動物細胞である、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
検出分子が標識化されている、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
検出分子と結合した細胞を同定することが、フローサイトメトリまたは蛍光活性化細胞選別（ＦＡＣＳ）を使用することを含む、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
（ｄ）検出分子と結合した細胞を単離すること
をさらに含む、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
（ｅ）検出分子と結合した細胞から抗体を単離すること
をさらに含む、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
請求項１〜１９のいずれか一項に記載の方法により同定される細胞。
【請求項２２】
請求項１〜２０のいずれか一項に記載の方法により同定される細胞により生成される抗体。
【請求項２３】
ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドで細胞を形質移入することを含み、該ポリペプチドが、
（ａ）ＣＨ２ドメイン及びＣＨ３ドメインを含む免疫グロブリン重鎖定常領域を含む細胞外部分；並びに
（ｂ）非免疫グロブリン膜貫通部
を含み、膜結合性であり、かつ該細胞の表面上に発現される、宿主細胞の製造方法。
【請求項２４】
以下を含む、ヘテロ二量体分子を細胞表面上に発現する細胞ライブラリーの製造方法：
複数の第２のポリペプチドをコードする複数のポリヌクレオチドで、第１のポリペプチドを発現する細胞集団を形質移入することであって、
ここで、第１のポリペプチドが、（ｉ）ＣＨ２ドメイン及びＣＨ３ドメインを含む免疫グロブリン重鎖定常領域を含む細胞外部分、並びに（ｉｉ）非免疫グロブリン膜貫通部を含み、
第２のポリペプチドが、免疫グロブリン重鎖を含み、かつ
第１のポリペプチド及び１つの第２のポリペプチドを含むヘテロ二量体分子が、該細胞の表面上に発現される、こと。
【請求項２５】
第２のポリペプチドの免疫グロブリン重鎖が、免疫グロブリン軽鎖と結合し、抗原結合部位を形成する、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
第１のポリペプチドの非免疫グロブリン膜貫通部が、ＣＤ４、ＣＤ８、クラスＩＭＨＣ、クラスＩＩＭＨＣ、ＣＤ１９、Ｔ細胞受容体α鎖及びβ鎖、ＣＤ３、ｚｅｔａ鎖、ＩＣＡＭ１（ＣＤ５４）、ＩＣＡＭ２、ＩＣＡＭ３、ＩＣＡＭ４、ＩＣＡＭ５、ＣＤ２８、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂ、並びにＣＤ２から成る群から選択される膜貫通ドメインの少なくとも一部を含む、請求項２４または２５に記載の方法。
【請求項２７】
第１のポリペプチドが、配列番号１２、配列番号３２、配列番号２３、配列番号２８、配列番号３０、配列番号２６、配列番号１０、配列番号２２、又は配列番号３１に対し少なくとも８０％の同一性を有する配列を含む、請求項２４〜２６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２８】
（ｉ）ＣＨ２ドメイン及びＣＨ３ドメインを含む免疫グロブリン重鎖定常領域を含む細胞外部分、並びに（ｉｉ）非免疫グロブリン膜貫通部を含み、配列番号１２、配列番号３２、配列番号２３、配列番号２８、配列番号３０、配列番号２６、配列番号１０、配列番号２２、又は配列番号３１に対し少なくとも８０％の同一性を有する配列を含む、ポリペプチド。
【請求項２９】
請求項２８に記載のポリペプチドを含む、細胞。
【請求項３０】
細胞ライブラリーであって、各細胞には、
（ａ）（ｉ）ＣＨ２ドメイン及びＣＨ３ドメインを含む免疫グロブリン重鎖定常領域を含む細胞外部分、並びに（ｉｉ）非免疫グロブリン膜貫通部を含む、第１のポリペプチドと、
（ｂ）ＣＨ２ドメイン及びＣＨ３ドメインを含む免疫グロブリン重鎖定常領域を含む第２のポリペプチドと
が含まれ、第１及び第２のポリペプチドがヘテロ二量体分子を形成する、細胞ライブラリー。
【請求項３１】
第１のポリペプチドの非免疫グロブリン膜貫通部が、ＣＤ４、ＣＤ８、クラスＩＭＨＣ、クラスＩＩＭＨＣ、ＣＤ１９、Ｔ細胞受容体α鎖及びβ鎖、ＣＤ３、ｚｅｔａ鎖、ＩＣＡＭ１（ＣＤ５４）、ＩＣＡＭ２、ＩＣＡＭ３、ＩＣＡＭ４、ＩＣＡＭ５、ＣＤ２８、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂ、並びにＣＤ２から成る群から選択される膜貫通ドメインの少なくとも一部を含む、請求項３０に記載の細胞ライブラリー。
【請求項３２】
第１のポリペプチドが、配列番号１２、配列番号３２、配列番号２３、配列番号２８、配列番号３０、配列番号２６、配列番号１０、配列番号２２、又は配列番号３１に対し少なくとも８０％の同一性を有する配列を含む、請求項３０または３１に記載の細胞ライブラリー。
【請求項３３】
第２のポリペプチドが免疫グロブリンＦｃ領域を含む、請求項３０〜３２のいずれか一項に記載の細胞ライブラリー。
【請求項３４】
第２のポリペプチドが免疫グロブリン可変領域をさらに含む、請求項３３に記載の細胞ライブラリー。
【請求項３５】
第２のポリペプチドが無作為抽出ポリペプチドをさらに含む、請求項３０〜３２のいずれか一項に記載の細胞ライブラリー。
【請求項３６】
無作為抽出ポリペプチドが無作為ポリペプチドライブラリー由来である、請求項３５に記載の細胞ライブラリー。
【請求項３７】
各細胞が免疫グロブリン軽鎖をさらに含む、請求項３０〜３６のいずれか一項に記載の細胞ライブラリー。
【請求項３８】
第２のポリペプチドが、免疫グロブリン軽鎖と結合し、抗原結合部位を形成する、請求項３０〜３７のいずれか一項に記載の細胞ライブラリー。
【請求項３９】
第２のポリペプチドが、免疫グロブリン重鎖及び免疫グロブリン軽鎖を有する単鎖免疫グロブリンを含む、請求項３０〜３２のいずれか一項に記載の細胞ライブラリー。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３９】
別の態様では、本発明は、本明細書に記載の任意の方法により生成され、同定され、及び／又は単離される抗体を提供する。
[本発明1001]
ポリペプチドであって、
（ａ）ＣＨ２ドメイン及びＣＨ３ドメインを含む免疫グロブリン重鎖定常領域を含む細胞外部分、及び
（ｂ）非免疫グロブリン膜貫通部
を含むポリペプチド。
[本発明1002]
免疫グロブリン重鎖定常領域がさらに、少なくともヒンジ領域の一部を含む、本発明1001のポリペプチド。
[本発明1003]
免疫グロブリン重鎖定常領域がＦｃ領域を含む、本発明1001又は1002のポリペプチド。
[本発明1004]
免疫グロブリン重鎖定常領域がＩｇＡ，ＩｇＤ，ＩｇＥ，ＩｇＧ、ＩｇＭ抗体又はそれらの任意のサブタイプである、本発明1001〜1003のいずれかのポリペプチド。
[本発明1005]
免疫グロブリン重鎖定常領域がＩｇＧ１又はＩｇＧ２である、本発明1001〜1004のいずれかのポリペプチド。
[本発明1006]
免疫グロブリン重鎖定常領域がヒト免疫グロブリン重鎖定常領域である、本発明1001〜1005のいずれかのポリペプチド。
[本発明1007]
免疫グロブリン重鎖定常領域がマウス免疫グロブリン重鎖定常領域である、本発明1001〜1005のいずれかのポリペプチド。
[本発明1008]
免疫グロブリン重鎖定常領域が、配列番号２、配列番号４、配列番号６、又は配列番号８を含む、本発明1001〜1005のいずれかのポリペプチド。
[本発明1009]
膜貫通部が、ＣＤ４，ＣＤ８、クラスＩＭＨＣ、クラスＩＩＭＨＣ、ＣＤ１９、Ｔ細胞受容体α鎖及びβ鎖、ＣＤ３、ｚｅｔａ鎖、ＩＣＡＭ１（ＣＤ５４）、ＩＣＡＭ２、ＩＣＡＭ３、ＩＣＡＭ４、ＩＣＡＭ５、ＣＤ２８、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂ、及びＣＤ２から成る群から選択される、膜貫通ドメインの少なくとも一部を含む、本発明1001〜1008のいずれかのポリペプチド。
[本発明1010]
膜貫通部が配列番号１３又は配列番号１６を含む、本発明1001〜1009のいずれかのポリペプチド。
[本発明1011]
膜結合性であり、免疫グロブリン重鎖領域が細胞表面上に発現される、本発明1001〜1010のいずれかのポリペプチド。
[本発明1012]
抗原結合部位を有しない、本発明1001〜1011のいずれかのポリペプチド。
[本発明1013]
第２のポリペプチドを有するヘテロ二量体分子を形成することができる、本発明1001〜1012のいずれかのポリペプチド。
[本発明1014]
第２のポリペプチドが、ＣＨ２ドメイン及びＣＨ３ドメインを含む免疫グロブリン重鎖定常領域を含む、本発明1013のポリペプチド。
[本発明1015]
第２のポリペプチドが免疫グロブリンＦｃ領域を含む、本発明1013又は1014のポリペプチド。
[本発明1016]
第２のポリペプチドが、無作為抽出されたポリペプチドを含む、本発明1013〜1015のいずれかのポリペプチド。
[本発明1017]
第２のポリペプチドが免疫グロブリン重鎖を含む、本発明1013のポリペプチド。
[本発明1018]
免疫グロブリン重鎖が免疫グロブリン軽鎖と結合する、本発明1017のポリペプチド。
[本発明1019]
第２のポリペプチドが、免疫グロブリン重鎖及び免疫グロブリン軽鎖を有する単鎖免疫グロブリンを含む、本発明1013〜1018のいずれかのポリペプチド。
[本発明1020]
第２のポリペプチドと少なくとも１つのジスルフィド結合を形成することができる、本発明1013〜1019のいずれかのポリペプチド。
[本発明1021]
ヘテロ二量体抗体分子を形成する免疫グロブリン重鎖−軽鎖のペアと、少なくとも１つのジスルフィド結合を形成することができる、本発明1001〜1012のいずれかのポリペプチド。
[本発明1022]
ヘテロ二量体抗体分子が１つの抗原結合部位を含む、本発明1013〜1021のいずれかのポリペプチド。
[本発明1023]
分泌抗体と結合しない、本発明1001〜1022のいずれかのポリペプチド。
[本発明1024]
配列番号１０、配列番号１２、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２６、配列番号２８、配列番号３０、配列番号３１、又は配列番号３２に対し少なくとも８０％相同的な配列を含むポリペプチド。
[本発明1025]
配列番号１０、配列番号１２、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２６、配列番号２８、配列番号３０、配列番号３１、又は配列番号３２を含むポリペプチド。
[本発明1026]
配列番号３０、配列番号３１、又は配列番号３２に対し少なくとも８０％相同的な配列を含むポリペプチド。
[本発明1027]
配列番号３０、配列番号３１、又は配列番号３２を含むポリペプチド。
[本発明1028]
本質的に配列番号３０、配列番号３１、又は配列番号３２から成るポリペプチド。
[本発明1029]
配列番号９、配列番号１１、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２７、又は配列番号２９によりコードされる配列を含むポリペプチド。
[本発明1030]
本発明1001〜1029のいずれかのポリペプチドを含む抗体分子。
[本発明1031]
本発明1030の抗体分子であって、
（ａ）免疫グロブリン重鎖、及び
（ｂ）免疫グロブリン軽鎖
をさらに含む、抗体分子。
[本発明1032]
ポリペプチドが、免疫グロブリン重鎖−軽鎖のペアのＦｃ領域と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成する、本発明1030又は1031の抗体分子。
[本発明1033]
単一の抗原結合部位を含む、本発明1030〜1032のいずれかの抗体分子。
[本発明1034]
本発明1001〜1029のいずれかのポリペプチドをコードするポリヌクレオチド。
[本発明1035]
配列番号９、配列番号１１、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２７、又は配列番号２９に対し少なくとも８０％相同的である配列を有するポリヌクレオチドを含む、単離されたポリヌクレオチド。
[本発明1036]
配列番号９、配列番号１１、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２７、又は配列番号２９のポリヌクレオチド配列を含む、単離されたポリヌクレオチド。
[本発明1037]
本発明1034〜1036のいずれかのポリヌクレオチドを含むベクター。
[本発明1038]
本発明1034〜1037のいずれかのポリヌクレオチド又はベクターを含む宿主細胞。
[本発明1039]
本発明1001〜1033のいずれかのポリペプチド又は抗体分子を含む宿主細胞。
[本発明1040]
本発明1034〜1037のいずれかのポリヌクレオチド又はベクターで細胞を形質移入することを含む、宿主細胞の製造方法。
[本発明1041]
形質移入された細胞がポリペプチドを発現する、本発明1040の方法。
[本発明1042]
細胞が一時的に形質移入される、本発明1040又は1041の方法。
[本発明1043]
細胞が安定的に形質移入される、本発明1040又は1041の方法。
[本発明1044]
ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドが細胞のゲノムに統合された、本発明1040の方法。
[本発明1045]
ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドが安定的に発現される、本発明1040、1041、1043、又は1044のいずれかの方法。
[本発明1046]
ポリペプチドが細胞の表面に発現される、本発明1040〜1045のいずれかの方法。
[本発明1047]
細胞の表面上のポリペプチド発現を検出することを含む、本発明1040〜1046のいずれかの方法。
[本発明1048]
細胞の表面上にポリペプチドを発現する細胞を単離することを含む、本発明1040〜1047のいずれかの方法。
[本発明1049]
細胞が哺乳動物細胞である、本発明1040〜1048のいずれかの方法。
[本発明1050]
細胞がマウス細胞である、本発明1040〜1049のいずれかの方法。
[本発明1051]
細胞がヒト細胞である、本発明1040〜1049のいずれかの方法。
[本発明1052]
細胞が融合パートナー細胞株である、本発明1040〜1051のいずれかの方法。
[本発明1053]
細胞が、Ｓｐ２／０、Ｓｐ２／０−Ａｇ１４、ＹＢ２／０、Ｋ６Ｈ６／Ｂ５、ＮＳ−１、ＦＯ、Ｙ３／Ａｇ１．２．３、Ｐ３Ｘ６３Ａｇ８．６５３、ＨＥＫ−２９３、２９３Ｔ、及びＣＨＯから成る群から選択される、本発明1040〜1048のいずれかの方法。
[本発明1054]
本発明1040〜1053のいずれかの方法により作製される宿主細胞。
[本発明1055]
本発明1034〜1037のポリヌクレオチド又はベクターを含む宿主細胞。
[本発明1056]
本発明1001〜1033のいずれかのポリペプチド又は抗体分子を含む宿主細胞。
[本発明1057]
本発明1001〜1033のいずれかのポリペプチド又は抗体分子を発現する宿主細胞。
[本発明1058]
少なくとも１つの追加ポリペプチドをさらに含む、本発明1054〜1057のいずれかの宿主細胞。
[本発明1059]
少なくとも１つの追加ポリペプチドが、ＣＨ２ドメイン及びＣＨ３ドメインを含む免疫グロブリン重鎖定常領域を含む、本発明1058の宿主細胞。
[本発明1060]
少なくとも１つの追加ポリペプチドが免疫グロブリンＦｃ領域を含む、本発明1058の宿主細胞。
[本発明1061]
少なくとも１つの追加ポリペプチドが免疫グロブリン重鎖を含む、本発明1058の宿主細胞。
[本発明1062]
少なくとも１つの追加ポリペプチドが免疫グロブリン軽鎖を含む、本発明1058〜1061のいずれかの宿主細胞。
[本発明1063]
少なくとも１つの追加ポリペプチドが、免疫グロブリン重鎖及び免疫グロブリン軽鎖を有する単鎖抗体を含む、本発明1058の宿主細胞。
[本発明1064]
少なくとも１つの追加のポリペプチドが抗体である、本発明1058〜1063のいずれかの宿主細胞。
[本発明1065]
ポリペプチドが第２のポリペプチドと少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、ヘテロ二量体分子を形成する、本発明1058〜1064のいずれかの宿主細胞。
[本発明1066]
ポリペプチドが免疫グロブリン重鎖−軽鎖のペアと少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、ヘテロ二量体抗体分子を形成する、本発明1058〜1065のいずれかの宿主細胞。
[本発明1067]
免疫グロブリン重鎖−軽鎖のペアが単一抗原結合部位を形成する、本発明1066の宿主細胞。
[本発明1068]
ヘテロ二量体分子が細胞表面上に発現し、単一抗原結合部位を含む、本発明1065〜1067のいずれかの宿主細胞。
[本発明1069]
ヘテロ二量体分子が分泌抗体と結合しない、本発明1065〜1068のいずれかの宿主細胞。
[本発明1070]
本発明1054〜1057のいずれかの細胞を抗体産生細胞と融合することを含む、ハイブリドーマ細胞の製造方法。
[本発明1071]
融合された細胞が細胞表面上にヘテロ二量体抗体分子を発現する、本発明1070の方法。
[本発明1072]
抗体産生細胞が抗体産生細胞集団である、本発明1070又は1071の方法。
[本発明1073]
抗体産生細胞が免疫化動物由来である、本発明1070〜1072のいずれかの方法。
[本発明1074]
抗体産生細胞が未処理動物由来である、本発明1070〜1072のいずれかの方法。
[本発明1075]
抗体産生細胞が、Ｂ細胞、プラズマ細胞、ハイブリドーマ、骨髄腫及び組換え細胞から成る群から選択される、本発明1070〜1074のいずれかの方法。
[本発明1076]
抗体産生細胞がマウス細胞である、本発明1070〜1075のいずれかの方法。
[本発明1077]
抗体産生細胞がヒト細胞である、本発明1070〜1075のいずれかの方法。
[本発明1078]
抗体産生細胞が複数のポリヌクレオチドを含む、本発明1070〜1077のいずれかの方法。
[本発明1079]
複数のポリヌクレオチドが免疫グロブリン重鎖を含む複数のポリペプチドをコードする、本発明1078の方法。
[本発明1080]
複数のポリヌクレオチドが免疫グロブリン軽鎖を含む複数のポリペプチドをコードする、本発明1078又は1079の方法。
[本発明1081]
複数のポリヌクレオチドが、免疫グロブリン重鎖及び免疫グロブリン軽鎖を有する単鎖抗体分子を含む複数のポリペプチドをコードする、本発明1078又は1079の方法。
[本発明1082]
複数のポリヌクレオチドがＤＮＡライブラリーを含む、本発明1078〜1081のいずれかの方法。
[本発明1083]
ＤＮＡライブラリーが免疫化動物の細胞から生成される、本発明1082の方法。
[本発明1084]
ＤＮＡライブラリーが未処理ライブラリーである、本発明1082の方法。
[本発明1085]
ＤＮＡライブラリーがｃＤＮＡライブラリーである、本発明1082〜1084のいずれかの方法。
[本発明1086]
融合細胞が、複数のヘテロ二量体抗体分子を発現するハイブリドーマ細胞集団を含む、本発明1070〜1085のいずれかの方法。
[本発明1087]
本発明1070〜1086のいずれかの方法により作製されるハイブリドーマ又はハイブリドーマライブラリー。
[本発明1088]
本発明1054〜1057のいずれかの細胞を、複数のポリペプチドをコードする複数のポリヌクレオチドで形質移入することを含む細胞ライブラリーの製造方法。
[本発明1089]
形質移入された細胞がヘテロ二量体分子を発現する、本発明1088の方法。
[本発明1090]
ヘテロ二量体分子が形質移入された細胞の表面上に発現される、本発明1089の方法。
[本発明1091]
複数のポリヌクレオチドが、ＣＨ２ドメイン及びＣＨ３ドメインを含む免疫グロブリン重鎖定常領域を含む複数のポリペプチドをコードする、本発明1088〜1090のいずれかの方法。
[本発明1092]
複数のポリヌクレオチドが、免疫グロブリンＦｃ領域を含む複数のポリペプチドをコードする、本発明1088〜1090のいずれかの方法。
[本発明1093]
複数のポリヌクレオチドが、免疫グロブリン重鎖を含む複数のポリペプチドをコードする、本発明1088〜1090のいずれかの方法。
[本発明1094]
複数のポリヌクレオチドが、免疫グロブリン軽鎖を含む複数のポリペプチドをコードする、本発明1088〜1093のいずれかの方法。
[本発明1095]
複数のポリヌクレオチドが、免疫グロブリン重鎖及び免疫グロブリン軽鎖を有する単鎖抗体分子を含む複数のポリペプチドをコードする、本発明1088〜1090のいずれかの方法。
[本発明1096]
複数のポリヌクレオチドが複数のポリペプチドをコードし、各ポリペプチドに（ａ）免疫グロブリンＦｃ領域及び（ｂ）無作為抽出されたポリペプチドが含まれる、本発明1088〜1090のいずれかの方法。
[本発明1097]
複数のポリヌクレオチドがＤＮＡライブラリーを含む、本発明1088〜1096のいずれかの方法。
[本発明1098]
ＤＮＡライブラリーが免疫化動物の細胞から生成される、本発明1097の方法。
[本発明1099]
ＤＮＡライブラリーが未処理ライブラリーである、本発明1097の方法。
[本発明1100]
ＤＮＡライブライブラリーがｃＤＮＡライブラリーである、本発明1097〜1099のいずれかの方法。
[本発明1101]
ＤＮＡライブラリーが無作為抽出のポリペプチドライブラリーをコードする、本発明1097の方法。
[本発明1102]
本発明1088〜1101のいずれかの方法により作製された細胞ライブラリー。
[本発明1103]
ハイブリドーマ細胞集団を生成するため、本発明1054〜1057のいずれかの細胞を抗体産生細胞と融合させることを含む、特異的抗体を生成する細胞の同定方法。
[本発明1104]
ハイブリドーマ細胞が、細胞表面上にヘテロ二量体抗体分子を発現する、本発明1103の方法。
[本発明1105]
ハイブリドーマ細胞集団を検出分子に接触させることを含む、本発明1103又は1104の方法。
[本発明1106]
検出分子と結合するハイブリドーマ細胞を同定することを含む、本発明1105の方法。
[本発明1107]
検出分子に結合するハイブリドーマ細胞を単離することを含む、本発明1105又は1106の方法。
[本発明1108]
抗体産生細胞が抗体産生細胞集団である、本発明1103〜1107のいずれかの方法。
[本発明1109]
抗体産生細胞が免疫化動物由来である、本発明1103〜1108のいずれかの方法。
[本発明1110]
抗体産生細胞が未処理動物由来である、本発明1103〜1108のいずれかの方法。
[本発明1111]
抗体産生細胞が、Ｂ細胞、プラズマ細胞、ハイブリドーマ、骨髄腫及び組換え細胞から成る群から選択される、本発明1103〜1110のいずれかの方法。
[本発明1112]
抗体産生細胞がマウス細胞である、本発明1103〜1111のいずれかの方法。
[本発明1113]
抗体産生細胞がヒト細胞である、本発明1103〜1111のいずれかの方法。
[本発明1114]
抗体産生細胞が、複数のポリヌクレオチドを含む、本発明1103〜1113のいずれかの方法。
[本発明1115]
複数のポリヌクレオチドが、免疫グロブリン重鎖を含む複数のポリペプチドをコードする、本発明1114の方法。
[本発明1116]
複数のポリヌクレオチドが、免疫グロブリン軽鎖を含む複数のポリペプチドをコードする、本発明1114又は1115の方法。
[本発明1117]
複数のポリヌクレオチドが、免疫グロブリン重鎖及び免疫グロブリン軽鎖を有する単鎖抗体分子を含む複数のポリペプチドをコードする、本発明1114の方法。
[本発明1118]
複数のポリヌクレオチドがＤＮＡライブラリーを含む、本発明1114〜1117のいずれかの方法。
[本発明1119]
ＤＮＡライブラリーが免疫化動物の細胞から生成される、本発明1118の方法。
[本発明1120]
ＤＮＡライブラリーが未処理ライブラリーである、本発明1118の方法。
[本発明1121]
ＤＮＡライブラリーがｃＤＮＡライブラリーである、本発明1118〜1120のいずれかの方法。
[本発明1122]
抗体産生細胞により作られる抗体が、組換え抗体、モノクロナール抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体、又は抗体の断片である、本発明1103〜1121のいずれかの方法。
[本発明1123]
抗体産生細胞により作られる抗体が、モノ特異的抗体又は二重特異的抗体である、本発明1103〜1122のいずれかの方法。
[本発明1124]
抗体産生細胞により作られる抗体が一価抗体である、本発明1103〜1122のいずれかの方法。
[本発明1125]
抗体産生細胞により作られる抗体が、ＩｇＡ，ＩｇＤ，ＩｇＥ，ＩｇＧ若しくはＩｇＭ抗体又はそのサブタイプである、本発明1103〜1124のいずれかの方法。
[本発明1126]
抗体産生細胞により作られる抗体が、ＩｇＧ１抗体又はＩｇＧ２抗体である、本発明1103〜1124のいずれかの方法。
[本発明1127]
検出分子がタンパク質又はその断片である、本発明1105〜1126のいずれかの方法。
[本発明1128]
検出分子が対象の抗原である、本発明1105〜1127のいずれかの方法。
[本発明1129]
検出分子が標識化されている、本発明1105〜1128のいずれかの方法。
[本発明1130]
検出分子が蛍光団、発色団又は磁気化合物で標識化される、本発明1129の方法。
[本発明1131]
検出分子と結合する細胞の同定はフローサイトメトリにより行われる、本発明1106〜1130のいずれかの方法。
[本発明1132]
検出分子と結合する細胞の単離はＦＡＣＳにより行われる、本発明1107〜1131のいずれかの方法。
[本発明1133]
少なくとも１つのポリペプチドをコードする少なくとも１つのポリヌクレオチドで、本発明1054〜1057のいずれかの細胞を形質移入することを含む特異的抗体を生成する細胞の同定方法。
[本発明1134]
形質移入された細胞が細胞表面上にヘテロ二量体抗体分子を発現する、本発明1133の方法。
[本発明1135]
形質移入された細胞を検出分子に接触させることを含む、本発明1133又は1134の方法。
[本発明1136]
検出分子と結合する細胞を同定することを含む、本発明1135の方法。
[本発明1137]
検出分子と結合する細胞を単離することを含む、本発明1135又は1136の方法。
[本発明1138]
ポリヌクレオチドの少なくとも１つが、複数のポリペプチドをコードする複数のポリヌクレオチドを含む、本発明1133〜1137のいずれかの方法。
[本発明1139]
複数のポリヌクレオチドが、免疫グロブリン重鎖を含む複数のポリペプチドをコードする、本発明1138の方法。
[本発明1140]
複数のポリヌクレオチドが、免疫グロブリン軽鎖を含む複数のポリペプチドをコードする、本発明1138又は1139の方法。
[本発明1141]
複数のポリヌクレオチドが、免疫グロブリン重鎖及び免疫グロブリン軽鎖を有する単鎖抗体分子を含む複数のポリペプチドをコードする、本発明1138〜1140のいずれかの方法。
[本発明1142]
複数のポリヌクレオチドがＤＮＡライブラリーを含む、本発明1138〜1141のいずれかの方法。
[本発明1143]
ＤＮＡライブラリーが免疫化動物の細胞から生成される、本発明1142の方法。
[本発明1144]
ＤＮＡライブラリーが未処理ライブラリーである、本発明1142の方法。
[本発明1145]
ＤＮＡライブラリーがｃＤＮＡライブラリーである、本発明1142〜1144のいずれかの方法。
[本発明1146]
少なくとも１つのポリヌクレオチドが、組換え抗体、モノクロナール抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体、又は抗体の断片であるポリペプチドをコードする、本発明1133〜1145のいずれかの方法。
[本発明1147]
少なくとも１つのポリヌクレオチドが、モノ特異的抗体又は二重特異的抗体であるポリペプチドをコードする、本発明1133〜1146のいずれかの方法。
[本発明1148]
少なくとも１つのポリヌクレオチドが、一価抗体であるポリペプチドをコードする、本発明1133〜1146のいずれかの方法。
[本発明1149]
少なくとも１つのポリヌクレオチドが、ＩｇＡ，ＩｇＤ，ＩｇＥ，ＩｇＧ若しくはＩｇＭ抗体又はそのサブタイプであるポリペプチドをコードする、本発明1133〜1148のいずれかの方法。
[本発明1150]
少なくとも１つのポリヌクレオチドが、ＩｇＧ１抗体又はＩｇＧ２抗体であるポリペプチドをコードする、本発明1133〜1149のいずれかの方法。
[本発明1151]
検出分子がタンパク質又はその断片である、本発明1135〜1150のいずれかの方法。
[本発明1152]
検出分子が対象の抗原である、本発明1135〜1151のいずれかの方法。
[本発明1153]
検出分子が標識化されている、本発明1135〜1152のいずれかの方法。
[本発明1154]
検出分子が蛍光団、発色団又は磁気化合物で標識化されている、本発明1153の方法。
[本発明1155]
検出分子と結合する細胞の同定をフローサイトメトリで行う、本発明1136〜1154のいずれかの方法。
[本発明1156]
検出分子と結合する細胞の単離をＦＡＣＳで行う、本発明1137〜1155のいずれかの方法。
[本発明1157]
本発明1034〜1037のいずれかのポリヌクレオチド又はベクターで、抗体産生細胞を含む細胞ライブラリーを形質移入することを含む、特異的抗体を生成する細胞の同定方法。
[本発明1158]
形質移入された細胞が細胞表面上にヘテロ二量体抗体分子を発現する、本発明1157の方法。
[本発明1159]
形質移入された細胞を検出分子と接触させることを含む、本発明1157又は1158の方法。
[本発明1160]
検出分子と結合する細胞を同定することを含む、本発明1159の方法。
[本発明1161]
検出分子と結合する細胞を単離することを含む、本発明1159又は1160の方法。
[本発明1162]
細胞ライブラリーが、Ｂ細胞、プラズマ細胞、ハイブリドーマ、骨髄腫、及び組換え細胞から成る群から選択される、本発明1151〜1161のいずれかの方法。
[本発明1163]
細胞ライブラリーがハイブリドーマライブラリーである、本発明1151〜1162のいずれかの方法。
[本発明1164]
細胞ライブラリーがマウス細胞を含む、本発明1151〜1163のいずれかの方法。
[本発明1165]
細胞ライブラリーがヒト細胞を含む、本発明1151〜1163のいずれかの方法。
[本発明1166]
本発明1103〜1165のいずれかの方法により同定される細胞により生成される抗体。
[本発明1167]
本発明1107〜1132、1137〜1156、又は1161〜1165のいずれかの方法により単離される細胞により生成される抗体。
[本発明1168]
細胞ライブラリーであって、各細胞には、
（ａ）本発明1001〜1029のいずれかの第１ポリペプチド、及び
（ｂ）２本のポリペプチドがヘテロ二量体分子を形成し得る、免疫グロブリン重鎖を含む第２ポリペプチド
が含まれる、細胞ライブラリー。
[本発明1169]
ヘテロ二量体分子が細胞表面上に発現される、本発明1168の細胞ライブラリー。
[本発明1170]
各細胞がさらに免疫グロブリン軽鎖を含む、本発明1168又は1169の細胞ライブラリー。
[本発明1171]
第２のポリペプチドが、免疫グロブリン重鎖及び免疫グロブリン軽鎖を有する単鎖抗体分子を含む、本発明1168又は1169の細胞ライブラリー。
[本発明1172]
ヘテロ二量体分子が単一抗原結合部位を含む、本発明1168〜1171のいずれかの細胞ライブラリー。
[本発明1173]
細胞ライブラリーであって、各細胞には、
（ａ）本発明1001〜1029のいずれかの第１ポリペプチド、及び
（ｂ）２本のポリペプチドがヘテロ二量体分子を形成し得る、ＣＨ２ドメイン及びＣＨ３ドメインを含む免疫グロブリン重鎖定常領域を含む第２ポリペプチド、
が含まれる、細胞ライブラリー。
[本発明1174]
ヘテロ二量体分子が細胞表面上に発現される、本発明1173の細胞ライブラリー。
[本発明1175]
第２のポリペプチドに免疫グロブリンＦｃ領域が含まれる、本発明1173又は1174の細胞ライブラリー。
[本発明1176]
第２のポリペプチドに、免疫グロブリン重鎖及び免疫グロブリン軽鎖を有する単鎖抗体分子を含む、本発明1173又は1174の細胞ライブラリー。
[本発明1177]
第２のポリペプチドにさらに無作為抽出ポリペプチドが含まれる、本発明1173の細胞ライブラリー。
[本発明1178]
本発明1168〜1177のいずれかの細胞ライブラリーを検出分子と接触させることを含む、細胞ライブラリーのスクリーニング法。
[本発明1179]
検出分子と結合する細胞を同定することを含む、本発明1178の方法。
[本発明1180]
検出分子と結合する細胞を単離することを含む、本発明1178又は1179の方法。
[本発明1181]
検出分子がタンパク質又はその断片である、本発明1178〜1180のいずれかの方法。
[本発明1182]
検出分子が対象の抗原である、本発明1178〜1181のいずれかの方法。
[本発明1183]
検出分子が細胞表面受容体、リガンド、抗体又はその断片である、本発明1178〜1182のいずれかの方法。
[本発明1184]
検出分子は小分子である、本発明1178〜1180のいずれかの方法。
[本発明1185]
検出分子は標識化されている、本発明1178〜1184のいずれかの方法。
[本発明1186]
検出分子と結合する細胞の同定がフローサイトメトリで行われる、本発明1179〜1185のいずれかの方法。
[本発明1187]
検出分子に結合する細胞の単離がＦＡＣＳで行われる、本発明1180〜1186のいずれかの方法。
[本発明1188]
本発明1178〜1187のいずれかの方法により同定される細胞。
[本発明1189]
本発明1178〜1187のいずれかの方法により単離される細胞。
[本発明1190]
（ａ）免疫グロブリンをコードするＤＮＡ、及び（ｂ）無関係ＤＮＡの過剰量を宿主細胞に形質移入することを含む、宿主細胞の表面上のヘテロ二量体抗体分子の発現調節方法。
[本発明1191]
免疫グロブリンをコードするＤＮＡの無関係ＤＮＡに対する割合が、１：１０〜１：１，０００，０００である、本発明1190の方法。
[本発明1192]
免疫グロブリンをコードするＤＮＡがプラスミドＤＮＡであり、無関係ＤＮＡがプラスミドＤＮＡである、本発明1190〜1191の方法。
[本発明1193]
宿主細胞が本発明1001〜1029のポリペプチド又は本発明1034〜1036のポリヌクレオチドを含む、本発明1190〜1192のいずれかの方法。
[本発明1194]
免疫グロブリンが免疫グロブリン重鎖を含む、本発明1190〜1193のいずれかの方法。
[本発明1195]
抗体が免疫グロブリン軽鎖を含む、本発明1190〜1193のいずれかの方法。
[本発明1196]
免疫グロブリンが、免疫グロブリン重鎖及び免疫グロブリン軽鎖を有する単鎖抗体分子である、本発明1190〜1195のいずれかの方法。
[本発明1197]
免疫グロブリンをコードするＤＮＡがＤＮＡライブラリーである、本発明1190〜1195のいずれかの方法。
[本発明1198]
ＤＮＡライブラリーが免疫化動物の細胞から生成される、本発明1197の方法。
[本発明1199]
ＤＮＡライブラリーが未処理動物の細胞から生成される、本発明1197の方法。
[本発明1200]
ＤＮＡライブラリーがｃＤＮＡライブラリーである、本発明1197〜1199のいずれかの方法。
[本発明1201]
宿主細胞を検出分子と接触させることをさらに含む、本発明1190〜1200のいずれかの方法。
[本発明1202]
検出分子と結合する宿主細胞を同定することを含む、本発明1201の方法。
[本発明1203]
検出分子と結合する宿主細胞を単離することを含む、本発明1201及び1202の方法。
[本発明1204]
ヘテロ二量体分子であって、
（ａ）（ｉ）第１の二量体形成ドメインを含む細胞外部分、及び（ｉｉ）膜貫通部の両者を含んだ第１ポリペプチド、並びに
（ｂ）第２の二量体形成ドメインを含む第２ポリペプチド
が含まれる。
[本発明1205]
第１の二量体形成領域が免疫グロブリン定常領域である、本発明1204のヘテロ二量体分子。
[本発明1206]
第１の二量体形成ドメインが免疫グロブリン重鎖定常領域である、本発明1204又は1205のヘテロ二量体分子。
[本発明1207]
第２の二量体形成ドメインが免疫グロブリン定常領域である、本発明1204〜1206のいずれかのヘテロ二量体分子。
[本発明1208]
第２の二量体形成ドメインが免疫グロブリン重鎖定常領域である、本発明1204〜1207のいずれかのヘテロ二量体分子。
[本発明1209]
第１のポリペプチドが本発明1001〜1029のいずれかのポリペプチドを含む、本発明1204のヘテロ二量体分子。
[本発明1210]
第２のポリペプチドが免疫グロブリン重鎖定常領域を含む、本発明1204〜1209のいずれかのヘテロ二量体分子。
[本発明1211]
第２のポリペプチドが免疫グロブリンＦｃ領域を含む、本発明1204〜1210のいずれかのヘテロ二量体分子。
[本発明1212]
第２のポリペプチドが免疫グロブリン重鎖を含む、本発明1204〜1211のいずれかのヘテロ二量体分子。
[本発明1213]
免疫グロブリン重鎖が免疫グロブリン軽鎖と結合する、本発明1212のヘテロ二量体分子。
[本発明1214]
第２のポリペプチドが免疫グロブリン重鎖及び免疫グロブリン軽鎖を有する単鎖免疫グロブリンを含む、本発明1204〜1213のいずれかのヘテロ二量体分子。
[本発明1215]
第１のポリペプチドが第２のポリペプチドと少なくとも１つのジスルフィド結合を形成する、本発明1204〜1214のいずれかのヘテロ二量体分子。
[本発明1216]
１つの抗原結合部位を含む、本発明1204〜1215のいずれかのヘテロ二量体分子。