【手続補正書】
【提出日】平成24年4月3日(2012.4.3)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
抗癌活性のための化合物をスクリーニングする方法であって、
ａ．化合物または化合物のライブラリーを提供すること；
ｂ．ＮＦ−κＢ阻害活性のための化合物または化合物のライブラリーをアッセイすること；
ｃ．ＪＮＫ活性化活性のための化合物または化合物のライブラリーをアッセイすること；
ｄ．同定される化合物が抗癌活性を有する、ＮＦ−κＢ阻害活性とＪＮＫ活性化活性の両方を有する化合物を同定すること、
を備える、方法。
【請求項２】
前記ステップｂのアッセイが直接的ＮＦ−κＢ阻害についてアッセイする、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記ステップｂのアッセイが間接的ＮＦ−κＢ阻害についてアッセイする、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
ＦＬＩＰ活性化についてアッセイすることをさらに備える、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
癌細胞の腹膜接種を予防するための、有効量のＪＮＫ活性化因子およびＮＦ−κＢ阻害剤を備える、組み合わせ物。
【請求項６】
前記組み合わせ物が、シアノ基、スルホ−オキシ基、ホスホ−オキシ基、カルボキシル基、ニトロ基、ハロゲン、ハロゲン化アルキル基、非置換芳香族環、または少なくとも１つのシアノ基、スルホ−オキシ基、ホスホ−オキシ基、カルボキシル基、ヒドロキシル基、アミノ基、エーテル基、ハロゲン化アルキル基、ハロゲン、もしくはニトロ基を有する置換芳香族環から選択される少なくとも１つの電子吸引基を有するオレフィンを備える、請求項５に記載の組み合わせ物。
【請求項７】
前記組み合わせ物が構造
2011520096.tif 000001
を備え、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は、独立して、水素、アルキル、ハロゲン化アルキル、アルケニル、アルキニル、アラルキル、または置換もしくは非置換芳香族であり、前記構造がＥ−またはＺ−異性体である、請求項５に記載の組み合わせ物。
【請求項８】
前記組み合わせ物が構造
【化１Ａ】
2011520096.tif 000002
を備え、ＲがＭｅまたはｔ−Ｂｕである、請求項５に記載の組み合わせ物。
【請求項９】
前記組み合わせ物がチアゾリジンジオンを備える、請求項５に記載の組み合わせ物。
【請求項１０】
ＮＦ−κＢの阻害剤およびＪＮＫの活性化因子を備える、癌細胞の増殖を阻害するための組み合わせ物。
【請求項１１】
前記増殖が転移または腫瘍形成を備える、請求項１０に記載の組み合わせ物。
【請求項１２】
前記増殖が再接着をさらに備える、請求項１０に記載の組み合わせ物。
【請求項１３】
前記ＮＦ−κＢ阻害剤が構造
【化２Ａ】
2011520096.tif 000003
を備え、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は、独立して、水素、アルキル、ハロゲン化アルキル、アルケニル、アルキニル、アラルキル、または置換もしくは非置換芳香族であり、前記構造がＥ−またはＺ−異性体である、請求項１０に記載の組み合わせ物。
【請求項１４】
前記ＮＦ−κＢ阻害剤が構造
【化３Ａ】
2011520096.tif 000004
を備え、ＲがＭｅまたはｔ−Ｂｕである、請求項１０に記載の組み合わせ物。
【請求項１５】
前記ＪＮＫ活性化因子がチアゾリジンジオンを備える、請求項１０に記載の組み合わせ物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００７】
さらなる利点は、以下に続く明細書中で部分的に示され、そして部分的には、その明細書から明白であり、または以下に記載される態様の実施によって学習されてもよい。以下に記載される利点は、添付の特許請求の範囲において特に指摘される要素および組み合わせによって実現および達成される。前述の一般的記載と以下の詳細な記載の両方は単に典型的かつ説明的であって、制限的ではないことが理解されるべきである。
本発明は、例えば以下の項目を提供する。
（項目１）
抗癌活性のための化合物をスクリーニングする方法であって、
ａ．化合物または化合物のライブラリーを提供すること；
ｂ．ＮＦ−κＢ阻害活性のための化合物または化合物のライブラリーをアッセイすること；
ｃ．ＪＮＫ活性化活性のための化合物または化合物のライブラリーをアッセイすること；ｄ．同定される化合物が抗癌活性を有する、ＮＦ−κＢ阻害活性とＪＮＫ活性化活性の両方を有する化合物を同定すること、
を備える、方法。
（項目２）
前記ＮＦ−κＢアッセイ、前記ＪＮＫアッセイ、または前記ＮＦ−κＢアッセイと前記ＪＮＫアッセイの両方のいずれかが、ＤＬＤ−１癌細胞系統、ＨＴ−２９癌細胞系統、Ｓｕ．８６細胞系統、またはＢｘＰＣ−３細胞系統を使用する、項目１に記載の方法。
（項目３）
前記ＮＦ−κＢアッセイおよび前記ＪＮＫアッセイが同時に実施される、項目１に記載の方法。
（項目４）
前記ステップｂのアッセイが直接的ＮＦ−κＢ阻害についてアッセイする、項目１に記載の方法。
（項目５）
前記ステップｂのアッセイが間接的ＮＦ−κＢ阻害についてアッセイする、項目１に記載の方法。
（項目６）
ＦＬＩＰ活性化についてアッセイすることをさらに備える、項目１に記載の方法。
（項目７）
前記化合物または化合物のライブラリーが少なくとも１つの電子求引基を有するオレフィンを備える、項目１に記載の方法。
（項目８）
前記化合物または化合物のライブラリーが少なくとも２つの電子求引基を有するオレフィンを備える、項目１に記載の方法。
（項目９）
前記電子吸引基が、シアノ基、スルホ−オキシ基、ホスホ−オキシ基、カルボキシル基、ニトロ基、ハロゲン、ハロゲン化アルキル基、非置換芳香族環、または少なくとも１つのシアノ基、スルホ−オキシ基、ホスホ−オキシ基、カルボキシル基、ヒドロキシル基、アミノ基、エーテル基、ハロゲン化アルキル基、ハロゲン、もしくはニトロ基を有する置換芳香族環を備える、項目８に記載の方法。
（項目１０）
前記ホスホ−オキシ基が構造
【化９】
2011520096.tif 000005
を有し、ここで、Ｒ１は水素、アルキル、ハロゲン化アルキル、アルケニル、アルキニル、アラルキル、または置換もしくは非置換芳香族である、項目９に記載の方法。
（項目１１）
前記スルホ−オキシ基が構造
【化１０】
2011520096.tif 000006
を有し、ここで、Ｒ２は水素、アルキル、ハロゲン化アルキル、アルケニル、アルキニル、アラルキル、または置換もしくは非置換芳香族である、項目９に記載の方法。
（項目１２）
前記化合物または化合物のライブラリーがシアノ基および構造
【化１１】
2011520096.tif 000007
を有するスルホ−オキシ基を有するオレフィンを備え、Ｒ２は水素、アルキル、ハロゲン化アルキル、アルケニル、アルキニル、アラルキル、または置換もしくは非置換芳香族である、項目１に記載の方法。
（項目１３）
前記化合物または化合物のライブラリーが構造
【化１２】
2011520096.tif 000008
を備え、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は、独立して、水素、アルキル、ハロゲン化アルキル、アルケニル、アルキニル、アラルキル、または置換もしくは非置換芳香族であり、前記化合物がＥ−またはＺ−異性体である、項目１に記載の方法。
（項目１４）
Ｒ３およびＲ４が水素である、項目１３に記載の方法。
（項目１５）
Ｒ２がメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、第三ブチル、置換もしくは非置換フェニル、またはベンジルである、項目１３に記載の方法。
（項目１６）
Ｒ２が少なくとも１つのアルキル基を有するフェニル基である、項目１３に記載の方法。
（項目１７）
前記化合物がＥ−異性体である、項目１３に記載の方法。
（項目１８）
前記化合物または化合物のライブラリーが構造
【化１３】
2011520096.tif 000009
を備える、項目１に記載の方法。
（項目１９）
前記化合物または化合物のライブラリーが構造
【化１４】
2011520096.tif 000010
を備える、項目１に記載の方法。
（項目２０）
前記化合物または化合物のライブラリーがチアゾリジンジオンを備える、項目１に記載の方法。
（項目２１）
前記化合物または化合物のライブラリーがロシグリタゾン、ピオグリタゾン、トログリタゾン、またはシグリタゾンを備える、項目２０に記載の方法。
（項目２２）
前記化合物または化合物のライブラリーがアニソマイシンを備える、項目１に記載の方法。
（項目２３）
癌細胞の腹膜接種を予防するための有効量のＪＮＫ活性化因子およびＮＦ−κＢ阻害剤を備える、癌細胞の腹腔内接種を予防するための組成物。
（項目２４）
前記組成物が少なくとも１つの電子求引基を有するオレフィンを備える、項目２３に記載の組成物。
（項目２５）
前記組成物が少なくとも２つの電子求引基を有するオレフィンを備える、項目２３に記載の組成物。
（項目２６）
前記電子吸引基が、シアノ基、スルホ−オキシ基、ホスホ−オキシ基、カルボキシル基、ニトロ基、ハロゲン、ハロゲン化アルキル基、非置換芳香族環、または少なくとも１つのシアノ基、スルホ−オキシ基、ホスホ−オキシ基、カルボキシル基、ヒドロキシル基、アミノ基、エーテル基、ハロゲン化アルキル基、ハロゲン、もしくはニトロ基を有する置換芳香族環を備える、項目２５に記載の組成物。
（項目２７）
前記ホスホ−オキシ基が構造
【化１５】
2011520096.tif 000011
を有し、ここで、Ｒ１は水素、アルキル、ハロゲン化アルキル、アルケニル、アルキニル、アラルキル、または置換もしくは非置換芳香族である、項目２６に記載の組成物。
（項目２８）
前記スルホ−オキシ基が構造
【化１６】
2011520096.tif 000012
を有し、ここで、Ｒ２は水素、アルキル、ハロゲン化アルキル、アルケニル、アルキニル、アラルキル、または置換もしくは非置換芳香族である、項目２６に記載の組成物。
（項目２９）
前記組成物がシアノ基および構造
【化１７】
2011520096.tif 000013
を有するスルホ−オキシ基を有するオレフィンを備え、Ｒ２は水素、アルキル、ハロゲン化アルキル、アルケニル、アルキニル、アラルキル、または置換もしくは非置換芳香族である、項目２３に記載の組成物。
（項目３０）
前記組成物が構造
【化１８】
2011520096.tif 000014
を備え、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は、独立して、水素、アルキル、ハロゲン化アルキル、アルケニル、アルキニル、アラルキル、または置換もしくは非置換芳香族であり、前記化合物がＥ−またはＺ−異性体である、項目２３に記載の組成物。
（項目３１）
Ｒ３およびＲ４が水素である、項目３０に記載の組成物。
（項目３２）
Ｒ２がメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、第三ブチル、置換もしくは非置換フェニル、またはベンジルである、項目３０に記載の組成物。
（項目３３）
Ｒ２が少なくとも１つのアルキル基を有するフェニル基である、項目３０に記載の組成物。
（項目３４）
前記化合物がＥ−異性体である、項目３０に記載の組成物。
（項目３５）
前記組成物が構造
【化１９】
2011520096.tif 000015
を備える、項目２３に記載の組成物。
（項目３６）
前記組成物が構造
【化２０】
2011520096.tif 000016
を備える、項目２３に記載の組成物。
（項目３７）
前記組成物がチアゾリジンジオンを備える、項目２３に記載の組成物。
（項目３８）
前記組成物がロシグリタゾン、ピオグリタゾン、トログリタゾン、またはシグリタゾンを備える、項目３７に記載の組成物。
（項目３９）
前記組成物がアニソマイシンを備える、項目２３に記載の組成物。
（項目４０）
前記組成物が
【化２１】
2011520096.tif 000017
および、ロシグリタゾン、ピオグリタゾン、トログリタゾン、シグリタゾン、またはアニソマイシンの１つ以上を備える、項目２３に記載の組成物。
（項目４１）
前記組成物が
【化２２】
2011520096.tif 000018
および、ロシグリタゾン、ピオグリタゾン、トログリタゾン、シグリタゾン、またはアニソマイシンの１つ以上を備える、項目２３に記載の組成物。
（項目４２）
ＮＦ−κＢの阻害剤およびＪＮＫの活性化因子を備える組成物を被験体に投与することを備える、被験体において癌細胞の増殖を阻害するための方法。
（項目４３）
ＮＦ−κＢの阻害剤およびＪＮＫの活性化因子を備える組成物を被験体に投与することを備える、被験体において表面への癌細胞の再接着を阻害する方法。
（項目４４）
ＮＦ−κＢの阻害剤およびＪＮＫの活性化因子を備える組成物を被験体に投与することを備える、被験体において癌細胞の転移を阻害する方法。
（項目４５）
ＮＦ−κＢの阻害剤およびＪＮＫの活性化因子を備える組成物を被験体に投与することを備える、被験体において癌細胞の腫瘍形成を阻害する方法。
（項目４６）
前記組成物が静脈内注射または点滴によって投与される、項目４２〜４５のいずれか１項に記載の方法。
（項目４７）
前記組成物が腹腔内投与される、項目４２〜４５のいずれか１項に記載の方法。
（項目４８）
前記組成物が手術前後に投与される、項目４２〜４５のいずれか１項に記載の方法。
（項目４９）
前記組成物が腹内手術の前に投与される、項目４２〜４５のいずれか１項に記載の方法。
（項目５０）
前記組成物が腹内手術の後に投与される、項目４２〜４５のいずれか１項に記載の方法。
（項目５１）
前記癌細胞が、腹部癌細胞、肝癌細胞、腹膜癌細胞、壁癌細胞、直腸癌細胞、胃癌細胞、膵臓癌細胞、または結腸癌細胞である、項目４２〜４５のいずれか１項に記載の方法。
（項目５２）
前記癌細胞がＤＬＤ−１癌細胞系統またはＨＴ−２９癌細胞系統に関連する、項目４２〜４５のいずれか１項に記載の方法。
（項目５３）
前記癌細胞がＨＴ−Ｓｕ．８６またはＢｘＰＣ−３細胞系統に関連する、項目４２〜４５のいずれか１項に記載の方法。
（項目５４）
前記ＮＦ−κＢ阻害剤がＮＦ−κＢを直接的に阻害する、項目４２〜４５のいずれか１項に記載の方法。
（項目５５）
前記ＮＦ−κＢ阻害剤がＮＦ−κＢを間接的に阻害する、項目４２〜４５のいずれか１項に記載の方法。
（項目５６）
前記ＮＦ−κＢ阻害剤がＮＦ−κＢの発現を阻害する、項目４２〜４５のいずれか１項に記載の方法。
（項目５７）
前記ＮＦ−κＢ阻害剤がＮＦ−κＢの翻訳を阻害する、項目４２〜４５のいずれか１項に記載の方法。
（項目５８）
前記ＮＦ−κＢ阻害剤が核へのＮＦ−κＢの輸送を阻害する、項目４２〜４５のいずれか１項に記載の方法。
（項目５９）
前記ＮＦ−κＢ阻害剤が少なくとも１つの電子吸引基を有するオレフィンを備える、項目４２〜４５のいずれか１項に記載の方法。
（項目６０）
前記ＮＦ−κＢ阻害剤が少なくとも２つの電子吸引基を有するオレフィンを備える、項目４２〜４５のいずれか１項に記載の方法。
（項目６１）
前記電子吸引基が、シアノ基、スルホ−オキシ基、ホスホ−オキシ基、カルボキシル基、ニトロ基、ハロゲン、ハロゲン化アルキル基、非置換芳香族環、または少なくとも１つのシアノ基、スルホ−オキシ基、ホスホ−オキシ基、カルボキシル基、ヒドロキシル基、アミノ基、エーテル基、ハロゲン化アルキル基、ハロゲン、もしくはニトロ基を有する置換芳香族環を備える、項目６０に記載の方法。
（項目６２）
前記ホスホ−オキシ基が構造
【化２３】
2011520096.tif 000019
を有し、ここで、Ｒ１は水素、アルキル、ハロゲン化アルキル、アルケニル、アルキニル、アラルキル、または置換もしくは非置換芳香族である、項目６１に記載の方法。
（項目６３）
前記スルホ−オキシ基が構造
【化２４】
2011520096.tif 000020
を有し、ここで、Ｒ２は水素、アルキル、ハロゲン化アルキル、アルケニル、アルキニル、アラルキル、または置換もしくは非置換芳香族である、項目６１に記載の方法。
（項目６４）
前記ＮＦ−κＢ阻害剤がシアノ基および構造
【化２５】
2011520096.tif 000021
を有するスルホ−オキシ基を有するオレフィンを備え、Ｒ２は水素、アルキル、ハロゲン化アルキル、アルケニル、アルキニル、アラルキル、または置換もしくは非置換芳香族である、項目４２〜４５のいずれか１項に記載の方法。
（項目６５）
前記ＮＦ−κＢ阻害剤が構造
【化２６】
2011520096.tif 000022
を備え、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は、独立して、水素、アルキル、ハロゲン化アルキル、アルケニル、アルキニル、アラルキル、または置換もしくは非置換芳香族であり、前記化合物がＥ−またはＺ−異性体である、項目４２〜４５のいずれか１項に記載の方法。
（項目６６）
Ｒ３およびＲ４が水素である、項目６５に記載の方法。
（項目６７）
Ｒ２がメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、第三ブチル、置換もしくは非置換フェニル、またはベンジルである、項目６５に記載の方法。
（項目６８）
Ｒ２が少なくとも１つのアルキル基を有するフェニル基である、項目６５に記載の方法。
（項目６９）
前記化合物がＥ−異性体である、項目６５に記載の方法。
（項目７０）
前記ＮＦ−κＢ阻害剤が構造
【化２７】
2011520096.tif 000023
を備える、項目４２〜４５のいずれか１項に記載の方法。
（項目７１）
前記ＮＦ−κＢ阻害剤が構造
【化２８】
2011520096.tif 000024
を有する、項目１〜４５のいずれか１項に記載の方法。
（項目７２）
前記ＪＮＫ活性化因子がチアゾリジンジオンを備える、項目４２〜４５のいずれか１項に記載の方法。
（項目７３）
前記チアゾリジンジオンがロシグリタゾン、ピオグリタゾン、トログリタゾン、またはシグリタゾンからなる群より選択される、項目７２に記載の方法。
（項目７４）
前記ＪＮＫ活性化因子がアニソマイシンを備える、項目４２〜４５のいずれか１項に記載の方法。
（項目７５）
前記組成物がＮＦ−κＢ阻害剤
【化２９】
2011520096.tif 000025
およびロシグリタゾン、ピオグリタゾン、トログリタゾン、またはシグリタゾンからなる群より選択されるＪＮＫ活性化因子を備える、項目４２〜４５のいずれか１項に記載の方法。
（項目７６）
前記組成物がＮＦ−κＢ阻害剤
【化３０】
2011520096.tif 000026
およびＪＮＫ活性化因子アニソマイシンを備える、項目４２〜４５のいずれか１項に記載の方法。
（項目７７）
前記組成物がＮＦ−κＢ阻害剤
【化３１】
2011520096.tif 000027
およびロシグリタゾン、ピオグリタゾン、トログリタゾン、またはシグリタゾンからなる群より選択されるＪＮＫ活性化因子を備える、項目４２〜４５のいずれか１項に記載の方法。
（項目７８）
前記組成物がＮＦ−κＢ阻害剤
【化３２】
2011520096.tif 000028
およびＪＮＫ活性化因子アニソマイシンを備える、項目４２〜４５のいずれか１項に記載の方法。