(57)【要約】【課題】薬理学的活性が高く、毒性の低い特定のニトロン（ｎｉｔｒｏｎｅ）化合物およびその塩ならびに薬学的ニトロンフリーラジカルトラップ剤としてのこれらの有益な使用。【解決手段】【化１】2004075696.tif 000028の２，４−ジスルホ−α−フェニル−ｔｅｒｔ−ブチルニトロンおよびその薬学的に受容可能な塩，ならびに、活性成分としてこの化合物またはその塩を有する、非経口投与および経口投与可能な薬学的組成物。中枢神経系への急性酸化的損傷を伴う病態にかかっている患者を治療する方法であって、本発明の化合物またはその塩に基づく薬学的組成物が非経口投与される、方法。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
２，４−ジスルホニル　α−フェニルｔｅｒｔ−ブチルニトロンを用いて中枢神経系の酸化的疾患を治療する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
　本発明は、特定のニトロン（ｎｉｔｒｏｎｅ）化合物およびその塩ならびに薬学的ニトロンフリーラジカルトラップ剤としてのこれらの有益な使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
　α−フェニル−ｔｅｒｔ−ブチルニトロン（ａｌｐｈａ−ｐｈｅｎｙｌ−ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌ　ｎｉｔｒｏｎｅ）（
【０００３】
【化１】
2004075696.tif 000002
【０００４】
すなわち「ＰＢＮ」）は、１９７０年代に有用な分析試薬として同定され、電子スピン共鳴（「ＥＳＲ」）と共に用いてフリーラジカルの検出に役立った。ＰＢＮは、特定のフリーラジカルと反応し、そして特徴的なＥＳＲスペクトルを生じる化学種を生成することが見い出され、これによりフリーラジカルの存在または不在を決定することが可能になった。
【０００５】
　１９７０年代後期および１９８０年代初期に、医学会は、心臓発作、脳卒中などのような疾患において、フリーラジカルが演ずる役割に注目し始めた。ＰＢＮは、これらの環境内にフリーラジカルが存在するという分析的な証拠を提供するために、次第にインビトロで用いられるようになった。その後、ＰＢＮはまた、インビボで動物モデルに投与され、さらにまた、虚血シミュレーションなどの間にフリーラジカルを観察しようとして、分析用補助物として投与された。
【０００６】
　１９８０年代中頃において、重篤な外傷性虚血動物の試験により、ＰＢＮ治療された動物の方がコントロールに比べてより生存しがちであることが示されたとき、ＰＢＮの治療効果の可能性が初めて暗示された。
【０００７】
　１９９１年５月２日に、ＰＣＴ特許出願ＷＯ−９１−０５５５２号が公開された。この特許出願（現在発行されている米国特許第５，８２５，０３２号および同第５，０３６，０９７号と一部対応する）に、以下の式により定義されるＰＢＮおよびＰＢＮ誘導体の一群が記載されていた：
【０００８】
【化２】
2004075696.tif 000003
【０００９】
ここで、Ｘは、フェニルまたは
【００１０】
【化３】
2004075696.tif 000004
【００１１】
（ここで、Ｒは、Ｈ、
【００１２】
【化４】
2004075696.tif 000005
【００１３】
またはＺであり；あるいは
【００１４】
【化５】
2004075696.tif 000006
【００１５】
であり、そしてｎは、１〜５の全ての整数である）あるいは
【００１６】
【化６】
2004075696.tif 000007
【００１７】
であり、そしてＹは、ｔｅｒｔ−ブチルまたは水酸化またはアセチル化ｔｅｒｔ−ブチルまたは置換フェニルである。これらの化合物は、フリーラジカル損傷に関連すると報告された脳卒中および他の病態の後遺症（ａｆｔｅｒｍａｔｈ）を治療するための薬剤として提案された。
【００１８】
　１９９２年に、ＰＢＮおよび関連化合物ならびにそれらの医療的使用に関連した２番目のＰＣＴ特許出願が出願された。この出願（先願の米国特許出願第７１６，９５２号（１９９１年６月１８日付け出願）に基づく）は、１９９２年１２月２３日にＷＯ　９２／２２２９０号として公開された。この１９９２年の刊行物は、２つの非常に広範でかつ一般的な開示内容を提供した。第１に、フリーラジカルに関連するできるだけ多くの疾患病態を記載することが試みられた。これらは、ほんのちょっと主要な部分を述べただけでも、ＣＮＳ病態（脳卒中、老化、片頭痛などを含む）から末梢器官疾患（アテローム性動脈硬化症、とこずれ（ｂｅｄ　ｓｏｒｅ）、創傷、および筋肉疲労（ｍｕｓｃｌｅ　ｏｖｅｒｅｘｅｒｔｉｏｎ）を含む）まで、さらにＵＶ被曝までおよんでいる。第２に、出来るだけ多くの可能性のあるスピントラップ剤（ｓｐｉｎ　ｔｒａｐ）を掲載することが試みられた。
【００１９】
　全範囲の非ＰＢＮ物質に加えて、この出願は、潜在的に有用なＰＢＮ化合物の定義を大きく拡げて、ＰＢＮおよび以下の式のＰＢＮ誘導体を包含していた：
【００２０】
【化７】
2004075696.tif 000008
【００２１】
ここで、Ｘは、フェニル、イミダゾリル、フェノチアジニルまたは
【００２２】
【化８】
2004075696.tif 000009
【００２３】
であり、ｎは、１〜５（好ましくは１〜３）であり；
Ｒ2は、独立して（分子内でさまざまであり得る）、ハロゲン、アルキル、オキシアルキル、アルケニル、オキシアルケニル、ＯＨ、ＮＨ2、ＮＨＺ、ＮＺ2、ＮＯ、
【００２４】
【化９】
2004075696.tif 000010
【００２５】
【化１０】
2004075696.tif 000011
【００２６】
または
【００２７】
【化１１】
2004075696.tif 000012
【００２８】
−ＳＯ3Ｈ、−ＯＳＯ3Ｈ、ＳＨ、−Ｓ（アルキル）、−Ｓ（アルケニル、およびハロアルキル（特に−ＣＦ3を含む））であり；
Ａは、ＯまたはＳであり；そして
Ｚは、Ｃ1〜Ｃ6の直鎖、分岐鎖のアルキル基または環状基であり；そして
Ｙは、１つまたはそれ以上の位置が水酸化またはアセチル化され得るｔｅｒｔ−ブチル基であり；フェニルまたは
【００２９】
【化１２】
2004075696.tif 000013
【００３０】
である。
【００３１】
　ＰＢＮは、当時、最も好ましい化合物であると述べられ、正常な細胞または損傷のない細胞に対しては測定可能な効果を有さないと言われ、そして多くの誘導体もまた、有用であると述べられ、そしてその誘導体としては以下のものが挙げられた：ヒドロキシ誘導体（特に、２−、３−または４−ヒドロキシフェニルｔ−ブチルニトロンおよびフェニル（モノ−、ジ−、またはトリヒドロキシ）ｔｅｒｔ−ブチルニトロン）；ＰＢＮエステル（特に、アセトキシ誘導体のような２−、３−または４−ヒドロキシフェニルｔ−ブチルニトロンを遊離するエステル）；２−、３−、または４−カルボキシフェニルｔ−ブチルニトロン；フェニルヒドロキシブチルニトロン；アルコキシル誘導体（特に、２−、３−、または４−ヒドロキシフェニルｔ−ブチルニトロン、例えば、ＰＢＮの２−、３−、または４−メトキシフェニル誘導体を遊離するアルコキシル誘導体）；およびアセトアミド誘導体（特に、２−、３−、または４−アミノフェニルｔ−ブチルニトロンを遊離するアセトアミド誘導体）；ジフェニルニトロン（ＰＰＮ）および類似のジフェニルニトロン誘導体；Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−α−（４−ニトロフェニル）ニトロン；およびＮ−ｔｅｒｔ−ブチル−α−（２−スルホフェニル）ニトロン。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００３２】
　１つの特定のＰＢＮ誘導体およびその塩は、予期せぬ優れた薬理学的特性を有することが、現在発見されている。この誘導体、すなわち２，４−ジスルホニルＰＢＮは、一般的に前述のＷＯ　９２／０２２２９０号公報において記載された物質の広範囲の一群に分けられるが、具体的には開示されていない。その有益な特性も予測されていない。
【００３３】
　２つのスルホネート基を有する本発明の化合物は、水に対する溶解性の改善を示すことが予想されたが、その疎油的な（ｌｉｐｏｐｈｏｂｉｃ）特性のために、血液／脳関門を越えて輸送されにくいことを示すこともまた予想された。しかし、本発明の化合物を製造し、そしてインビボで試験すると、本発明の化合物は、ＰＢＮと比較して予期しない薬効（ｅｆｆｉｃａｃｙ）の増大を示した。この薬効の増大は、ＰＢＮと比較して効力（ｐｏｔｅｎｃｙ）の増大と共に生じた。この効力および薬効の著しい増大とは全く対照的に、ＰＢＮと比較して著しいかつ非常に大きな毒性の減少があった。
【００３４】
　これらの結果は予想されなかった。なぜなら、特定の定義された化合物の一群内における構造／活性の関係の一般文献においては、治療的効力は、代表的には、毒性と共に共変化するからである。従って、大部分の関連化合物は、治療的効力対毒性の比を維持している。対照的に、密接に関連するアナログに対してその効力が増大し、かつその毒性が減少した場合、本発明の化合物は、この予想される関係から逸脱した。
【課題を解決するための手段】
【００３５】
　従って、第１の局面において、本発明は、以下のＰＢＮ−ジスルホニル化合物：
【００３６】
【化１３】
2004075696.tif 000014
【００３７】
およびその薬学的に受容可能な塩を提供する。
【００３８】
　第２の局面において、本発明は、活性成分として、この化合物またはその塩を有する、非経口（例えば、静脈内）投与および経口投与可能な薬学的組成物を提供する。
【００３９】
　第３の局面において、本発明は、中枢神経系への急性酸化的損傷を伴う病態にかかっている患者（例えば、脳卒中になった患者）を治療する方法を提供し、この方法においては、本発明の化合物またはその塩に基づく薬学的組成物は非経口（例えば、静脈内）投与される。
【００４０】
　第４の局面において、本発明は、中枢神経系に対する長期の低グレード酸化ストレス（ｐｒｏｔｒａｃｔｅｄ　ｌｏｗ　ｇｒａｄｅ　ｏｘｉｄａｔｉｖｅ　ｓｔｒｅｓｓ）および中枢神経系機能の進行性喪失により特徴付けられる病態にかかっている患者を治療する方法を提供する。この方法においては、本発明の化合物またはその塩に基づく薬学的組成物は、非経口（例えば、静脈内）投与、または好ましくは経口投与される。
【００４１】
　第５の局面において、本発明は、癌治療により患者に発生した酸化的損傷から生じる副作用を減少させ、または改善する方法を提供する。この方法においては、本発明の化合物またはその塩に基づく薬学的組成物は、非経口（例えば、静脈内）投与または経口投与される。
【００４２】
　ある局面において、本発明は、２，４−ジスルホニル　α−フェニルｔｅｒｔ−ブチルニトロンを提供する。
【００４３】
　ある局面において、本発明は、以下の式の化合物：
【００４４】
【化１４】
2004075696.tif 000015
【００４５】
を提供する。
【００４６】
　ある局面において、本発明は、以下の薬学的に受容可能な塩：
【００４７】
【化１５】
2004075696.tif 000016
【００４８】
を提供する。
【００４９】
　ある局面において、本発明は、以下の式を有する、上記の塩：
【００５０】
【化１６】
2004075696.tif 000017
【００５１】
を提供する。ここで、Ｘは、Ｎａ、Ｋ、ＮＨ4、Ｃａ、Ｍｇ、ＣａＹおよびＭｇＹ（Ｙは、薬学的に受容可能な一価のアニオンである）からなる群から選択される。
【００５２】
　ある実施態様において、本発明は、薬学的に受容可能で非経口的に注射可能なキャリア中の上記に記載の化合物または塩を含有する薬学的組成物を提供する。
【００５３】
　ある実施態様において、本発明は、脳卒中にかかった患者を治療する方法であって、少なくとも約０．２ｍｇ／ｋｇ／時間の上記の薬学的組成物の有効な脳卒中の治療量を、患者に非経口投与する方法を提供する。ある実施態様において、上記組成物は静脈内投与される。
【００５４】
　ある実施態様において、本発明は、進行性中枢神経機能喪失病態にかかっている患者を治療する方法であって、上記の薬学的組成物の有効な進行性中枢神経系機能喪失病態の治療量を、該患者に非経口投与する方法を提供する。ある実施態様において、上記組成物は、静脈内投与される。
【００５５】
　ある実施態様において、本発明は、酸化的損傷を生じる抗新生物疾患治療によって患者に引き起こされる副作用を改善する方法であって、上記の薬学的組成物の有効な副作用改善量を、患者に非経口投与する方法を提供する。ある実施態様において、上記組成物は、静脈内投与される。
【００５６】
　別の実施態様において、本発明は、薬学的に受容可能な経口キャリア中の上記の化合物または塩を含有する薬学的組成物を提供する。
【００５７】
　ある実施態様において、本発明は、脳卒中にかかった患者を治療する方法であって、上記の薬学的組成物の有効な脳卒中の治療量を、患者に経口投与する方法を提供する。
【００５８】
　ある実施態様において、本発明は、進行性中枢神経系機能喪失病態にかかっている患者を治療する方法であって、少なくとも約０．１ｍｇ／ｋｇ／日の上記の薬学的組成物の有効な進行性中枢神経系機能喪失の治療量を、患者に経口投与する方法を提供する。
【００５９】
　ある実施態様において、本発明は、酸化的損傷を生じる抗新生物疾患治療によって患者に引き起こされる副作用を改善する方法であって、上記の薬学的組成物の有効な副作用改善量を、患者に経口投与する方法を提供する。
【発明の効果】
【００６０】
　本発明の２つのスルホネート基を有する化合物は、ＰＢＮと比較して予期しない薬効（ｅｆｆｉｃａｃｙ）および効力（ｐｏｔｅｎｃｙ）の増大を生じた。一方、この効果と対照的にＰＢＮと比較して著しいかつ非常に大きな毒性の減少があった。
【００６１】
　一般文献において、特定の化合物の治療的効力は、代表的には、毒性と共に共変化するが、本発明の化合物は、この予想される関係から逸脱しており、このような結果は予測できないものであった。
【００６２】
　本発明により、薬効が増強され、毒性が減少したＰＢＮが提供される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００６３】
　（発明の詳細な説明）
　この詳細な説明を以下の節に並べる：
　　図面の簡単な説明
　　化合物および塩
　　化合物の調製
　　薬学的組成物
　　治療される病態および治療レジュメ
　　実施例。
【００６４】
　（化合物および塩）
　本発明の化合物は、２，４−ジスルホニル　α−フェニルｔｅｒｔ−ブチルニトロンである。この化合物はまた、本明細書中において「２，４−ジスルホニルＰＢＮ」または「ＰＢＮ　２，４−ジスルホネート」と略称される。この化合物は、固体として以下の酸の形態で存在し：
【００６５】
【化１７】
2004075696.tif 000018
【００６６】
そして低いｐＨ条件においては溶液中に存在する。この化合物はまた、高いｐＨでは、以下のものとして示され得るイオン化した塩の形態で存在する：
【００６７】
【化１８】
2004075696.tif 000019
【００６８】
または
【００６９】
【化１９】
2004075696.tif 000020
【００７０】
ここで、Ｘは、薬学的に受容可能なカチオンである。最も一般的には、このカチオンは、ナトリウム、カリウム、またはアンモニウムのような一価の物質であるが、これはまた薬学的に受容可能な一価のアニオンと組み合わせて多価カチオン（例えば、クロライド、ブロマイド、ヨーダイド、ヒドロキシル、ニトレート、スルホネート、アセテート、タルトレート、オキサレート、スクシネート、パルモエート（ｐａｌｍｏａｔｅ）などのアニオンとのカルシウム；このようなアニオンとのマグネシウム；このようなアニオンとの亜鉛など）でもあり得る。これらの多価カチオンと一価アニオンとの組み合わせが、構造式中に示される場合、本明細書中では、一価アニオンは「Ｙ」とする。
【００７１】
　これらの物質の中で、遊離酸およびナトリウム単塩、カリウム単塩またはアンモニウム単塩が最も好ましく、カルシウム塩およびマグネシウム塩もまた、上記単塩より幾分よくないが、好ましい。
【００７２】
　（化合物の調製）
　図１において詳述され、そして実施例１において実証されるように、本発明の化合物は、２工程の反応系列により調製され得る。第１工程においては、市販のｔｅｒｔ−ブチルニトレート（２−メチル−２−ニトロプロパン）を、活性化亜鉛／酢酸触媒またはアルミニウム／水銀アマルガム触媒のような適切な触媒を用いて、対応するｎ−ヒドロキシルアミンに変換する。この反応は、０．５〜１２時間、特に約２〜６時間ぐらいで、約１５〜１００℃の温度にて、液体反応媒質（例えば、亜鉛触媒の場合、アルコール／水混合液、またはアルミニウムアマルガム触媒の場合、エーテル／水混合液）中で行われ得る。
【００７３】
　第２工程においては、新たに形成されたヒドロキシルアミンを、４−ホルミル−１，３−ベンゼンジスルホン酸と、代表的にはアミンをわずかに過剰に用いて反応させる。この反応は、同様の温度条件で行われ得る。この反応は、一般に、１０〜２４時間で完了する。
【００７４】
　このように形成される生成物は、遊離酸であり、そして８９ｇ／モルの分子量により特徴付けられる。この生成物は、白色粉末状物質であり、加熱すると分解する。この生成物は、１ｇ／ｍｌより大きい水溶解性を示すこと、およびＤ2Ｏ中での1Ｈ　ＮＭＲスペクトルが８．０４８ｐｐｍ（ｄｄ，８．４，　１．７Ｈｚ）；８．８３６ｐｐｍ（ｄ，８．４Ｈｚ）；８．８３９ｐｐｍ（ｄ，１．７Ｈｚ）；８．７７４ｐｐｍ（ｓ）に表れることにより特徴付けられる。
【００７５】
　水性媒質に溶かした遊離酸を２当量の適切な塩基（例えば、カリウム塩についてはＫＯＨなど）と混合することにより、様々な塩が容易に形成され得る。
【００７６】
　（薬学的組成物）
　化合物（その塩を包含する）は経口または非経口（例えば、静脈内または筋肉内注射）投与に適する薬学的組成物に処方され得る。
【００７７】
　経口投与のための組成物は、液体溶液または懸濁液、粉末、錠剤、カプセル剤などの形態をとり得る。このような組成物において、ＰＢＮ　２，４−ジスルホネートまたはその塩は、通常、少量成分（０．１〜約５０重量％）であり、残りは所望の剤形を形成するのに有用な種々のビヒクルまたはキャリアおよび加工補助物（ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ　ａｉｄ）である。液体形態としては、緩衝剤、懸濁調合剤、着色剤、フレーバーなどを含有する適切な水性または非水性ビヒクルが挙げられ得る。
【００７８】
　固体形態としては、例えば、任意の以下の成分または同様の特性の化合物が挙げられ得る：微結晶セルロース、トラガカントゴムまたはゼラチンのような結合剤；澱粉または乳糖のような賦形剤；アルギン酸、プリモゲル（Ｐｒｉｍｏｇｅｌ）またはコーンスターチのような崩壊剤；ステアリン酸マグネシウムのような潤滑剤；コロイド状二酸化ケイ素のようなグライダント（ｇｌｉｄａｎｔ）；ショ糖またはサッカリンのような甘味剤；またはペパーミント、砂糖、メチルサリチレートまたはオレンジフレーバーのようなフレーバー剤。
【００７９】
　注射可能な組成物の場合、これらは、一般に、注射可能な減菌生理食塩水またはリン酸緩衝化生理食塩水または当該分野で公知の他の注射可能なキャリアに基づく。さらに、活性ニトロンは、代表的には、少量成分であり、しばしば約０．０５〜１０重量％であり、残りは注射可能なキャリアなどである。
【００８０】
　（治療される病態および治療レジュメ）
　２，４−ジスルホニル　ＰＢＮで治療される病態は、一般的に３つのグループに分かれる。第１のグループは、中枢神経系領域への急性の強い酸化的損傷を伴う病態を含む。これらの病態の例としては、脳卒中、脳卒中に関連する病態、振とう症およびクモ膜下出血が挙げられる。この環境において、化合物は、可能な限り迅速かつ直接に患者の血流中へ薬剤を送達するように設計されるようにして投与される。これは、通常、静脈内投与を意味する。
【００８１】
　これらの病態を治療するための静脈内用量レベルは、約１〜約１２０時間、特に２４〜９６時間の間ではすべて、約０．１ｍｇ／ｋｇ／時間〜少なくとも１０ｍｇ／ｋｇ／時間の範囲である。約１０〜約５００ｍｇの予備添加（ｐｒｅｌｏａｄｉｎｇ）のボーラスもまた、適切な定常病態レベルを達成するために投与され得る。
【００８２】
　静脈内投与が好ましいが、筋肉内注射のような非経口投与の他の形態も同様に用いられる。この場合、同様の用量レベルが用いられる。２，４−ジスルホニル
　ＰＢＮの予期せぬ主要な利点は、それが、ＰＢＮ自体の場合において可能であるレベルよりも非常に高いレベルで投与され得ることである。実施例に示されるように、１０００ｍｇ／ｋｇ／時間までの用量およびそれ以上の用量、または１０〜２５００ｍｇ／ｋｇの静脈内ボーラス用量は、ＰＢＮそれ自体ではこのような用量からは死亡または急性毒性に至るが、２，４−ジスルホニル　ＰＢＮまたはその塩では可能であることが示されている。２，４−ジスルホニル　ＰＢＮでは、これらの高用量レベルにおける予想せぬ用量／応答曲線のポジティブな持続があり、これは、脳卒中または他の外傷の直後の強力な大量投与が、多くの場合には、回復に対して主要なポジティブな劇的効果を提供し得るという明瞭なメッセージを有する。
【００８３】
　２，４−ジスルホニル　ＰＢＮ治療に好適に応答する病態の第２のグループは、中枢神経系への長期の低グレード酸化的ストレスおよび段階的進行性中枢神経系機能喪失により特徴付けられる病態である。これらの病態としては、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、多発脳梗塞性痴呆、網膜症などが挙げられる。これらの病態の各々は、機能の進行性喪失により特徴付けられる。２，４−ジスルホニル−ＰＢＮまたはその塩は、経口または非経口（例えば、静脈内）投与される場合、機能の喪失を遅くし、ことによると逆転させ得る。非経口（例えば、静脈内）投与が所望される場合、急性の病態の場合に使用されるのと同様のレベルであるが、その範囲の下限レベルが一般に用いられる。
【００８４】
　これらの場合には、治療のためのレジュメは、長い年月にわたって続くので、患者の利便性および耐容性のためには経口投与が好ましい。経口投与では、１日当たり１〜３回の経口用量であり、それぞれ約０．０２〜約５０ｍｇ／ｋｇが必要とされ、好ましい用量は約０．０４〜約５．０ｍｇ／ｋｇである。
【００８５】
　当然ながら、２，４−ジスルホニル　ＰＢＮは、単独の活性薬剤として投与され得るし、または他の薬剤と組み合わせて投与され得る。これはこの化合物の第３の適用につながる。
【００８６】
　２，４−ジスルホニル　ＰＢＮによる治療に応答する病態の第３の組は、癌（新生物疾患）治療により生じる酸化的損傷から患者に起こる副作用である。酸化的損傷（およびこれによる副作用）を生じる治療としては、放射線照射（例えば、γ放射線）療法および酸化的損傷を引き起こす化学療法剤による治療が挙げられる。これらの薬剤の例としては、ダウノルビシン、ドキソルビシンおよびブレオマイシンのような抗生物質；プロカルバジン；イフォスファミド（ｉｆｏｓｆａｍｉｄｅ）、メルファランおよびクロラムブシルのようなナイトロジェンマスタード；アルキル化剤；代謝拮抗剤；ホルモンおよび拮抗剤が挙げられる。
【００８７】
　２，４−ジスルホニル　ＰＢＮの投与は、これらの治療の間、患者の不安感を軽減する効果を有し得る。さらに、本発明の化合物の投与は、これらの治療に対する患者の耐容力を増大させ得る。しばしば治療の副作用は、これらの治療を中止させるか、または最適な高い用量の投与または多頻度のこれらの治療を妨げることを余儀なくさせる。ある場合には、これらの副作用は、非常に有害であり、そして心不全および他の主要な機能喪失につながる。動物での試験において、本発明の化合物がこれらの抗新生物疾患治療の患者の耐容性を改善させ得ることが観察された。
【００８８】
　この治療において、本発明の化合物は、放射線照射または化学療法が行われる前、行われている間、および行われた後に投与され得る。投与は、非経口または経口であってもよく、もしくは２，４−ジスルホネート　ＰＢＮを患者の血流中に導入するのを可能にする任意の他の方法でもよい。
【００８９】
　ポジティブな用量−応答関係が観察されている。それ自体では、そして副作用の重篤度ならびに最大の可能な防護または改善を提供するという利点を考慮すると、ある環境においては、急性の強い酸化的ＣＮＳ損傷に対しての上記のような多量の２，４−ジスルホニル　ＰＢＮを投与することが望ましい。他の環境においては、進行性ニューロン性疾患治療に対して述べられたようなより低い用量が使用され得る。
【００９０】
　以下は、代表的な投与レジュメの実施例である：単一療法（アドリアマイシン単独）において、２つの代表的な用量の組合せは、１平方メートル面積当たり１０〜６００ｍｇの化合物Ｉおよび１平方メートルの表面積当たり６０ｍｇのアドリアマイシン（アドリアマイシンの投薬は、７日毎または２１日毎に行われる）である。化合物Ｉは、アドリアマイシン投与の前に（例えば、アドリアマイシン投与の最高６０分前に）、アドリアマイシン投与と同時に、あるいはアドリアマイシン投与の後に（アドリアマイシン投与の数時間後および後日に）である。小児の用量は、代表的には、両方の薬剤に対しては、より低い。より高用量は、多回投与耐性の腫瘍の治療に対して用いられ得る。
【実施例】
【００９１】
　（実施例１）
　２，４−ジスルホニルフェニル−Ｎ−ｔ−ブチルニトロン（後の実施例における化合物「Ｉ」）の合成。この好ましい合成法は、Ｒ．Ｈ．　ＨｉｎｔｏｎおよびＥ．Ｇ．Ｊａｎｚｅｎ（Ｊ．　Ｏｒｇ．　Ｃｈｅｍ．　５７：２６４６−２６５１，１９９２）による研究に基づく。図１に示すように、この合成は、アルデヒドとヒドロキシルアミンとの縮合を包含する。ヒドロキシルアミンは、不安定であり、そして活性化亜鉛触媒を用いて、使用する日に新しく調製される。この合成は、以下の通りである。
【００９２】
　（必須の化学物質）
　１．　９５％エタノール
　２．　２−メチル−２−ニトロプロパン
　３．　亜鉛末
　４．　氷酢酸
　５．　ジエチルエーテル
　６．　飽和塩化ナトリウム
　７．　硫酸マグネシウム、無水固形物
　８．　４−ホルミル−１，３−ベンゼンスルホン酸（分子量　３１０．２１ｇ／モル）、二ナトリウム塩、水和物
　９．　メタノール
　１０．　ジクロロメタン。
【００９３】
　（手順）
Ａ．Ｎ−ｔ−ブチルヒドロキシルアミンの調製
　１．５００ｍｌ用の３つ口丸底フラスコに、磁気撹拌子、温度計アダプター、温度計、および滴下漏斗を取り付ける。
【００９４】
　２．９５％エタノール（３５０ｍｌ）をフラスコに加え、そして氷浴中で１０℃まで冷却した。
【００９５】
　３．２−メチル−２−ニトロプロパン（６．１８ｇ、０．０６０モル）、および亜鉛末（５．８９ｇ、０．０９０モル）を一度に（ｓｉｎｇｌｅ　ｐｏｒｔｉｏｎ）加えた。
【００９６】
　４．氷酢酸（１０．８ｇ、０．１８０モル）を滴下漏斗に入れ、そして激しく撹拌しながら、温度を１５℃未満に維持するような速度で滴下した。
【００９７】
　５．氷浴を外し、そして混合物を３時間室温で撹拌した。
【００９８】
　６．溶媒を混合物から除去して、ｔ−ブチルヒドロキシルアミン、酢酸亜鉛および水が残った。
【００９９】
　７．ジクロロメタン（５０ｍｌ）を加え、そして混合物をブフナー漏斗を通して濾過した。
【０１００】
　８．濾紙上に残った硫酸亜鉛ケーキを２×２５ｍｌのジクロロメタンで洗浄した。
【０１０１】
　９．水を分液漏斗中で濾液から分離し、そして有機層を硫酸マグネシウムで乾燥した。
【０１０２】
　１０．硫酸マグネシウムをひだ付き（ｆｌｕｔｅｄ）濾紙を通して濾過することにより除去し、次いでジクロロメタンをロータリーエバポレーションにより除去した。
【０１０３】
　１１．生成物（収率１００％＝５．３４グラム）（粘性液）を、Ｂの部で使用するためにメタノール（５０ｍｌ）に溶解した。
【０１０４】
　Ｂ．２，４−ジスルホニルフェニル−Ｎ−ｔ−ブチルニトロンの調製
　１．２５０ｍｌ用の３つ口丸底フラスコに、撹拌子、ガス分散チューブ、滴下漏斗、および氷水の再循環により冷却されるフリードリッヒ冷却器を備え付けた。
【０１０５】
　２．フラスコに、２００ｍｌのメタノール、４−ホルミル−１，３−ベンゼンジスルホン酸（９．３１ｇ、３０ミリモル）およびＮ−ｔ−ブチルヒドロキシルアミン（Ａの部で得た２５ｍｌのメタノール溶液、理論上３０ミリモル）を加えた。
【０１０６】
　３．反応物を撹拌して窒素で泡立てさせながら、反応物を加熱用マントルで加熱して還流した。
【０１０７】
　４．混合物を２時間還流した。
【０１０８】
　５．Ａの部で得たヒドロキシルアミンの残りを加えた。
【０１０９】
　６．窒素で泡立てさせながら、少なくとも１８時間（ただし、２４時間以下）還流を続けた。
【０１１０】
　７．熱い反応混合物をブフナー漏斗で濾過し、そして固体を熱メタノールで洗浄した。
【０１１１】
　８．メタノールをロータリーエバポレーションにより除去して、黄色で粘性のある油状物を得た。
【０１１２】
　９．熱い１：１のエタノール：アセトン（２００ｍｌ）を加え、そして混合物を加熱して油状物を溶解させた。
【０１１３】
　１０．溶液を冷却して生成物を結晶化させた。
【０１１４】
　１１．生成物をブフナー漏斗上で集め、そして真空下で一晩乾燥した。
【０１１５】
　１２．この反応は、代表的には、７５％収率の化合物Ｉ（白色粉末）を与える。
【０１１６】
　（実施例２）
　２，４−ジスルホニルフェニル−Ｎ−ｔ−ブチルニトロン（化合物Ｉ）の別の合成。これは、初期に開発された方法であり、この方法を用いて、本明細書の実施例において報告される幾つかの実験に用いられる化合物の試料を調製する。この実施例の生成物は、全ての点において実施例１の生成物と同一である。この合成方法は、以下の通りである：
　（必須の化学物質）
　１．アルミニウム箔（５ｃｍ幅の細片に切断し、そして約１ｃｍ直径の円筒状に丸めた）
　２．塩化水銀（ＩＩ）（４７６ｍｌの水中、９．６８ｇ）
　３．エタノール
　４．エーテル（６リットル）
　５．純水
　６．２−メチル−２−ニトロプロパン
　７．水酸化ナトリウム、２Ｍ（１リットルの水中８０ｇ）
　８．硫酸マグネシウム、無水固形物
　９．４−ホルミル−１，３−ベンゼンスルホン酸（分子量３１０．２１ｇ／モル）。
【０１１７】
　（手順）
Ａ．Ｎ−ｔ−ブチルヒドロキシルアミンの調製
　１．円筒状のアルミニウム箔をＨｇＣｌ2溶液に１５〜３０秒間浸し、次いでエタノールに浸し、次いでエーテルに浸し、次いで５００ｍｌのジエチルエーテルおよび２１．４ｍｌの水を含む５リットル用のフラスコ内に置いた。
【０１１８】
　２．フラスコに、２５０ｍｌ用の均圧滴下漏斗、機械的撹拌子、窒素流入口、および氷水の再循環により冷却されるフリードリッヒ冷却器を取り付けた。
【０１１９】
　３．混合物を１０分間撹拌した。
【０１２０】
　４．２−メチル−２−ニトロプロパン（７１．６８ｇ、７５．５ｍｌ）を滴下漏斗を用いて、激しい還流を維持するような速度で加えた。
【０１２１】
　注意点：添加は、２０分未満内で完了しなければならない、さもないと収率がかなり低下する。
【０１２２】
　５．添加が進むにつれて、５００ｍｌ部のエーテルを加えた。これは、ゲルを形成することなく出来るだけ高い生成物濃度を維持するために行った。２リットルまでのエーテルを、収率に悪影響を及ぼすことなく加え得る。
【０１２３】
　６．２−メチル−２−ニトロプロパンの添加が完了すると、反応物をさらに３０分間撹拌した。
【０１２４】
　７．得られた灰色の懸濁液を３回分吸引濾過して、アルミニウム塩を取り除いた。
【０１２５】
　８．各濾過ケーキを１リットルのエーテルで洗浄した。
【０１２６】
　９．各層を一緒にしたものを３００ｍｌの２Ｍ　ＮａＯＨで洗浄し、次いで乾燥（ＭｇＳＯ4）し、そして真空下で濃縮すると軟らかい白色固形物が残った。
【０１２７】
　１０．固形物は、室温よりわずかに高い温度で溶融するが、真空オーブン中でさらに乾燥され得て（わずか数分間）、３８〜４５ｇの固形物が残った。
【０１２８】
　１１．固形物は、ペンタンからの再結晶により精製されるまたは精製されたものとして用いられ得る。
【０１２９】
　１２．分子量　−　８９ｇ／モル。
【０１３０】
　Ｂ．２，４−ジスルホニルフェニル−Ｎ−ｔ−ブチルニトロンの調製
　１．２５０ｍｌ用のフラスコに、撹拌子、および氷水の再循環により冷却されるフリードリッヒ冷却器を取り付けた。
【０１３１】
　２．フラスコに、７１．８ｍｌのメタノール、１４．５ｇの４−ホルミル−１，３−ベンゼンジスルホン酸（４６．７ミリモル、１当量）および５．０ｇのＮ−ｔ−ブチルヒドロキシルアミン（５６．２ミリモル、１．２当量）を入れた。
【０１３２】
　３．混合物を一晩還流した。
【０１３３】
　４．反応生成物を丸底フラスコに移し、そしてロータリーエバポレーションにより蒸発させて（ｒｏｔｏｖａｐｅｄ）乾燥した。
【０１３４】
　５．固形分の残査をエーテルで混ぜ合わせ、このエーテルをデカンテーションにより除いた（黄色）。
【０１３５】
　６．工程５を繰り返した。
【０１３６】
　７．熱メタノール濾過の後に、生成物（「化合物Ｉ」）をメタノールから結晶化して、不溶性の沈殿物を除去し、そしてメタノールで２回再結晶した。
【０１３７】
　（実施例３）
　脳の虚血および再灌流損傷の後のニューロン喪失に対して防護（ｐｒｏｔｅｃｔ）するための薬剤として、２，４ジスルホニルＰＢＮ（「化合物Ｉ」）、ＰＢＮ、および２つのモノスルホネートＰＢＮ化合物のインビボでの薬効を比較するために、一連の実験を行った。この試験の手順は、Ｗ．　Ｃａｏ、Ｊ．Ｍ．　Ｃａｒｎｅｙ、Ａ．　Ｄｕｃｈｏｎ、Ｒ．Ａ．　ＦｌｏｙｄおよびＭ．　Ｃｈｅｖｉｏｎの「脳に対する虚血および再灌流損傷への酸素フリーラジカルの関わり」（Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ　Ｌｅｔｔｅｒｓ，　８８（１９８８），　２３３）により報告されている手順である。実験では、６匹のアレチネズミ（ｇｅｒｂｉｌ）のグループに、５分間の両側頸動脈閉塞の３０分前に、試験化合物を単回用量として腹腔内投与した。１００ミクロン中のニューロン核の密度を測定した。２匹のコントロールが存在した（試験化合物を投与されないコントロール、および試験化合物を投与されず、かつ脳虚血を受けていないコントロール）。表１に図示したように、本発明の化合物は、先行技術の化合物と比較して、予期せぬ利点を示した。まず、低用量レベル（例えば、３．２ｍｇ／ｋｇ）では、化合物Ｉは、ニューロン喪失の予防に対して、２〜３倍の効力があると考えられる。高用量レベルでは、試験された脳が、非虚血のコントロールと同一のニューロン密度を示したので、化合物Ｉは、ニューロン喪失に対して完全な防護（ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ）を達成し得ると考えられる。先行技術の化合物は、これらの用量レベルで毒性であるか、または非常に低い程度の防護を示すかのいずれかであった。これらの結果は、ＰＢＮおよび２つの密接に関連したアナログと比較して、化合物Ｉでは、神経防護に対する効力の明確な増大を示し、そしてＰＢＮと比較して予期せぬ毒性の低下を示す。
【０１３８】
【表１】
2004075696.tif 000021
【０１３９】
　（実施例４）
　虚血後の治療において、化合物ＩをＰＢＮおよび２つのスルホネートアナログと比較した一連の実験を行った。実施例１に記載される一般的な方法を用いたが、５分間の虚血の後の再潅流の３０分後に、単回用量として試験化合物を腹腔内投与した。結果は、表２に要約される。表２は、本発明の化合物がさらにまた、低用量でより効力があり、高用量でより効力がありかつ毒性が低いことを示す。さらにまた、毒性は、従来技術の化合物が高用量をなし得る能力を妨害し、このレベルでは、本発明の化合物は劇的に効果的な治療を提供する。
【０１４０】
【表２】
2004075696.tif 000022
【０１４１】
　（実施例５）
　実施例１に記載される一般的な試験方法を用いて、アレチネズミにおいて５分間の虚血の後の再潅流の開始６０分後に静脈内投与したとき、化合物ＩをＰＢＮと比較してニューロン喪失の防護に対する相対的な効果を決定した。結果は、表３に要約され、そして化合物Ｉが脳に対する損傷後の臨床上の治療環境において有意により大きな治療利益を有することを示す。
【０１４２】
【表３】
2004075696.tif 000023
【０１４３】
　脳損傷のないコントロールのアレチネズミにおいて、ＰＢＮも化合物Ｉもニューロン密度に対して効果を有さなかった。
【０１４４】
　（実施例６）
　脳損傷は、行動の変化として現れ得る。この実験において、実施例１に記載されるように、若い成熟（３〜４ヶ月齢）のアレチネズミを試験して、虚血が起こって２４時間後に８アーム迷路試験を行う能力を測定した。非虚血の動物と比較すると、治療されない場合、多くのさらなるエラーを犯した。ＰＢＮおよび化合物Ｉを試験動物の何匹かに投与した。表４に詳細に示されるように、高用量の化合物Ｉで治療されたアレチネズミは、非虚血の動物とは識別不能なエラーレベルを有した。ＰＢＮは、効果がより低かった。これは、５分の虚血の後の若いアレチネズミの８アーム放射状迷路試験において、化合物Ｉが、虚血後（２４時間後）の時間的／空間的な短期間の記憶の喪失に対してエラーを防止し得ることを示す。
【０１４５】
【表４】
2004075696.tif 000024
【０１４６】
　（実施例７）
　虚血が起こった後の梗塞容積を減少させる本発明の化合物の能力を測定した。表５に詳細に示されるように、低用量ではＰＢＮおよび化合物Ｉは両方とも効果的であったが、高用量ではＩは最良の防護を提供し、そしてＰＢＮは毒性があった。表５は、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウスにおいて、中大脳閉塞の６０分後に試験化合物を静脈内投与し、そして２４時間継続したときに観察された梗塞容積を示す。
【０１４７】
【表５】
2004075696.tif 000025
【０１４８】
　（実施例８）
　この研究において、高齢のアレチネズミ（１８〜２４ヶ月齢、ｎ＝１２／グループ）において、化合物ＩとＰＢＮとを虚血の３０分前に投与した場合、１０分の虚血からの致死率の防護（生存した％）を与える能力について、化合物ＩとＰＢＮとを比較した。表６に示されるように、ＰＢＮは、部分的にのみ効果的であるが、化合物Ｉは、すべての用量レベルにおいて優れており、そして高レベルにおいては完全な防護を達成した。
【０１４９】
【表６】
2004075696.tif 000026
【０１５０】
　（実施例９）
　当該分野で公知の化合物であるＰＢＮと比較しての本発明の化合物の重要な利点は、その著しく減少した毒性である。表７に詳細に示されるように、Ｃ５７ＢＬ／６Ｌマウスにおける急性死亡率は、ニトロンの単回腹腔内用量の様々なサイズに基づいて決定される。ＰＢＮは、５６０ｍｇ／ｋｇ用量レベルにおいて有意な毒性を示した。化合物Ｉは、ほぼ２０倍大きな用量において毒性を示さなかった。
【０１５１】
【表７】
2004075696.tif 000027
【０１５２】
　（実施例１０）
　ニトロンラジカルトラップ剤を用いて、インビボで観察された別の望ましくない全身的効果は、体温の低下である。この毒性は、重篤な健康上の結果となり得、そして他の病態の診断を複雑にもし得る。図２および４に詳細に示されるように、本発明の化合物を１０００ｍｇ／ｋｇという程の高いレベルでマウスおよびアレチネズミに投与しても、測定可能な体温の低下はなかった。対照的に、当該分野の化合物であるＰＢＮは、ほんの５００ｍｇ／ｋｇの用量で最高８℃の体温の低下があった。
【０１５３】
　（実施例１１）
　本発明の化合物を試験して、中枢神経系への長期の低グレード酸化ストレスおよび段階的進行性中枢神経系機能喪失により特徴付けられる病態の治療におけるその有効性を、アルツハイマー病（「ＡＤ」）用モデルにおけるその有効性を試験することにより決定した。このモデルは以下のことを基礎としている：最近の研究は、高齢の個体の脳において、加齢に伴うタンパク質酸化の増加および酵素活性の喪失があることを示している。高齢の個体からの線維芽細胞および異なる年齢の赤血球の組織培養は共に、タンパク質のカルボニル含量（タンパク質酸化の尺度）の指数的増加およびマーカー酵素活性の減少を示す。脳タンパク質の酸化は、個体の生涯期間にわたり徐々に増加する。
【０１５４】
　ＡＤにおける異常アミロイド前駆体ペプチドのプロセシングおよび代謝の役割もまた、多くの異なるモデルにおいて調査した。胎児海馬ニューロンおよびニューロン／神経膠の培養物を用いるインビトロの研究は、βＡＰ　１〜４０位が長時間の共インキュベーションにわたって細胞障害性を生じることを示した。このペプチドをラットの脳に注入した場合、病変が生じた。提示されたβＡＰの分解フラグメントのいくつかはまた、ニューロン障害性である［例えば、βＡＰ（２５〜３５位）］。ニューロン障害性は、グルタミン酸レセプターを介しても、そして非グルタミン酸レセプターメカニズムによっても、その両方で仲介されるようである。ニューロン培養物の共焦点顕微鏡による研究は、βＡＰ　（１〜４０位）への曝露が酸化的ストレスを生じることを示した［ジクロロフルオレセインおよび増加した細胞内遊離カルシウムＦｕｒａ−２］。
【０１５５】
　βＡＰフラグメントは、組織抽出物中で、ならびに培養された海馬ニューロンおよび神経膠中で直接的にグルタミンシンテターゼ（ＧＳ）およびクレアチンキナーゼ（ＣＫ）を不活性化することが示されている（図４のＡおよびＢを参照のこと）。図４のＡおよびＢは、ＡＰ　（２５〜３５位）によるグルタミンシンテターゼおよびクレアチンキナーゼの用量に関連した不活性化を表す。アレチネズミの新皮質からの細胞質ゾル画分を調製し、そして酵素活性を測定した。試料を、アッセイの前に１０分間、異なる濃度のペプチドの存在下でインキュベートした。実線記号は天然由来の２５〜３５位のフラグメントの効果を表す。白丸は、逆配列（３２〜２５位）が酵素活性に対して効果を有さなかったことを示す。白三角は、並び変えた（ｓｃｒａｍｂｌｅｄ）アミノ酸配列もまた、２５〜３５位のものの効果に比較して酵素活性に対して効果を有さなかったことを示す。各点は、５つの観察点の平均（＋／−　ｓ．ｅ．）である。誘導されたβＡＰおよびフリーラジカルの他の細胞起源は、ＡＤの開始および進行の重要な決定因子である。
【０１５６】
　図４のＣおよびＤに示されるように、化合物ＩおよびＰＢＮは、それぞれ、βＡＰフラグメントの効果に対して、ＧＳおよびＣＫを防護する能力を示す。図４のＣおよびＤは、異なる濃度のＰＢＮ（白丸）または化合物Ｉ（黒丸）を組み合わせて、ＢＡＰ　２５〜３５位（０．４ｍｇ／ｍｌ）と細胞質ゾル画分との共インキュベーションの防護効果を表す。各点は、３つの観察点の平均（＋／−　ｓ．ｅ．）である。ＣおよびＤに見られるように、化合物Ｉは完全な防護を与え、そして事実上、酸化の効果を逆転さえ可能である。対照的に、ＰＢＮの有効性は、実質的に防護が不完全なレベルで漸近的に横ばい状態になっていくにつれて、全く制限される。
【０１５７】
　（実施例１２）
　脳卒中により引き起こされる中枢神経系の損傷を予防する本発明の化合物の有効性をさらに示すために、実験を行った。
ラット限局性虚血の結果。
【０１５８】
　ラット限局性虚血モデルにおける化合物Ｉの薬効を決定するために２つの研究を行った。このモデルにおいて、Ｓｐｒａｇｕｅ　Ｄａｗｌｅｙラット（２００〜３００ｇ）は、永久的中大脳動脈閉塞（ＭＣＡＯ）を受けて限局性脳卒中を誘起した。化合物Ｉを、永久的閉塞の後に、先ず腹腔内（ｉ．ｐ．）へのボーラス用量として投与し、次いで脳卒中後２４時間までの残り時間の間、静脈内（ｉ．ｖ．）への連続注入により投与した。用いた化合物Ｉの用量は、１００ｍｇ／ｋｇ（ｉ．ｐ．）　次いで４．２ｍｇ／ｋｇ／時間（ｉ．ｖ．）であるか、または１０ｍｇ／ｋｇ（ｉ．ｐ．）次いで０．４２ｍｇ／ｋｇ／時間（ｉ．ｖ．）であるかのいずれかであった。
【０１５９】
　ラットを脳卒中の３日後に屠殺し、トリフェニルテトラゾリウム染色技術を用いて、組織を組織学的に処理し、そして梗塞容積、すなわち総細胞壊死の領域を画像解析を用いて定量した。これらの実験の結果は、図５に図示され、そして化合物Ｉが両方の研究において約７０％の有意な防護を提供することを示す。
【０１６０】
　（文献の結果との比較）
　ＣａｏおよびＰｈｉｌｌｉｓ（Ｂｒａｉｎ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　６６４：２６７−２７２，　１９９４）により、本発明の化合物ではないＰＢＮについて、同様のデータが最近報告された。それらの研究において、ラットは、永久的中大脳動脈閉塞（ＭＣＡＯ）および総頸動脈閉塞を受けた。ＰＢＮは、脳卒中後の種々の時点において１００ｍｇ／ｋｇで腹腔内投与された。ラットを脳卒中の２日後に屠殺し、そしてトリフェニルテトラゾリウム染色を用いて、梗塞容積を定量した。
【０１６１】
　脳卒中の０．５、５、１７、２９および４１時間後に、または脳卒中の５、１７、２９、４１時間後にＰＢＮを投与した場合、梗塞容積はそれぞれの場合において約５０％減少した。５０％防護を達成するために投与されたＰＢＮの累積用量は、７０％防護に要する化合物Ｉの量の最低４倍である。従って、化合物Ｉは、ラットＭＣＡＯ限局性虚血モデルにおいて防護を提供する場合に、ＰＢＮよりもはるかに優れている。
【０１６２】
　（実施例１３）
　本実施例において、本発明の化合物（化合物Ｉ）を評価して、酸化を引き起こす抗癌治療の副作用を改善する能力を決定した。
【０１６３】
　（アドリアマイシン研究）
　アドリアマイシンは広く使用される抗癌剤である。それは非常に有効であることが知られているが、酸化的損傷を引き起こす傾向から生じる重篤な副作用を有することもまた知られている。これらの副作用は、高用量レベルで重篤なレベルの心臓損傷を引き起こすことを包含する。これらの副作用は、しばしば、この薬剤の使用を制限するか、または使用され得る用量レベルを最大の抗新生物疾患の有効性に対して望まれるレベルより低いレベルに制限する。
【０１６４】
　実験を行って、本発明の化合物が、アドリアマイシンのような抗癌剤の副作用を減少させる場合に、そして動物で耐容性を与え得るより高いアドリアマイシンの用量レベルを可能にする場合に効果的であることを示した。
【０１６５】
　Ｃ５７ＢＬ／６ＪおよびＤＢＡ／２Ｊ雄マウス（３５〜４０ｇ）を、アドリアマイシンの急性致死効果および化合物Ｉの前治療用量による急性致死率の予防について試験した。生理食塩水または化合物Ｉのいずれかを、アドリアマイシン投与の３０分前にマウスに注射した。すべての注射は腹腔内に行った。アドリアマイシンの急性致死率は、１０〜３０ｍｇ／ｋｇの範囲であった。これらの試験におけるアドリアマイシンに対するＬＤ50は、両方のマウス系統において２５ｍｇ／ｋｇであることが見い出された。アドリアマイシン治療を行わない最高３００ｍｇ／ｋｇまでの化合物Ｉの用量は、２つのマウス系統における生存率に対して効果を有さなかった。
【０１６６】
　３０および１００ｍｇ／ｋｇの化合物Ｉによる前治療は、アドリアマイシン致死率用量効果曲線において、用量に関係したシフトを生じた。図６は、ＤＢＡ／２Ｊマウスを用いて得られた結果を示す。１００ｍｇ／ｋｇの化合物Ｉの用量は、右へ（致死率の低下の方向）５倍のシフトを生じた。従って、化合物Ｉとアドリアマイシンとの組み合わせは、最大耐容性用量の著しい増加を生じた。これらのより高用量は、多剤耐性腫瘍を効果的に死滅させる範囲にある。
【０１６７】
　（比較試験）
　ＰＢＮ前治療は、アドリアマイシン用量−効果曲線において右へのわずかなシフトを生じた。化合物Ｉの用量は、アドリアマイシンと組み合わせて３００ｍｇ／ｋｇまで増加し得たが、ＰＢＮとのこの組み合わせでは上限があった。１００ｍｇ／ｋｇのＰＢＮの用量はわずかな鎮静作用を生じ、そして３００ｍｇ／ｋｇのＰＢＮの用量は著しい鎮静作用およびいくらかの複合毒性（１０〜２０％の致死率）を生じた。化合物Ｉ／アドリアマイシンは、３００ｍｇ／ｋｇまでの化合物Ｉの用量では、何の複合毒性も生じなかった。
【０１６８】
　（実施例１４）
　（安全性試験）
　化合物ＩおよびＰＢＮを、その急性毒性に関して雄のＳｐｒａｇｕｅ　Ｄａｗｌｅｙ（２００〜３００ｇ）ラットにおいて試験した。化合物を１０００ｍｇ／ｋｇで６匹のラットのグループに腹腔内投与した。３日後に致死率を評価した。化合物Ｉは、致死にはならなかったが、一方ＰＢＮは、この試験に使用した６匹のラットのうち５匹に致死的であった。これらのデータは、化合物ＩがＰＢＮよりも高い安全性を有するという点でアレチネズミのデータを確証する。
【０１６９】
　（要約）
　式Ｉの２，４−ジスルホ−α−フェニル−ｔｅｒｔ−ブチルニトロンおよびその薬学的に受容可能な塩が開示される。これらの物質は、脳卒中において起こるような急性中枢神経系酸化にかかっている患者に、または進行性中枢神経系機能喪失として現われ得る段階的中枢神経系酸化にかかっている患者の、経口または非経口（例えば、静脈内）投与に対して薬剤として有用である。これらの物質はまた、酸化的損傷を引き起こす疾患の治療の副作用を改善するためにも用いられる。
【０１７０】
　本明細書中において、以下のものが添付の図面により参照される：
【図面の簡単な説明】
【０１７１】
【図１】図１は、化合物を調製するために用いた反応を図示したフローチャートである。
【図２】図２（Ａ、ＢおよびＣ）のグラフは、先行技術のニトロンラジカルトラップ剤の場合の動物の体温調節能力（用量レベルの関数として生じる）の望ましくない変化を図示したものであり、そしてこれと、本発明の化合物の場合のそのような望ましくない毒性効果の欠如とを対比させたものである。
【図３】図３（Ａ、Ｂ、Ｃ、およびＤ）のグラフは、先行技術のニトロンラジカルトラップ剤の場合の動物の体温調節能力（用量レベルの関数として生じる）の望ましくない変化を図示したものであり、そしてこれと、本発明の化合物の場合のそのような望ましくない毒性効果の欠如とを対比させたものである。
【図４】図４（Ａ、Ｂ、ＣおよびＤ）は、４つ１組のグラフであり、このグラフは、溶液中の主要酵素のβアミロイドタンパク質の不活性化を妨げる相対的能力により図示されるように、段階的な神経変性病態（例えば、アルツハイマー病）の治療において、密接に関連する先行技術のニトロン化合物と比較して、本発明の化合物の優位性を実証したものである。
【図５】図５は、ラットにおける中大脳動脈閉塞の後に観察された最終的な梗塞容積（ｉｎｆａｒｃｔ　ｖｏｌｕｍｅ）の減少における本発明の化合物の有効性を図示したグラフである。
【図６】図６（Ａ、ＢおよびＣ）は、本発明の化合物が動物における高用量レベルの抗癌剤の副作用を減少させる能力を図示した３つのグラフである。
【図１】
2004075696.tif 000029
【図２】
2004075696.tif 000030
【図３】
2004075696.tif 000031
【図４】
2004075696.tif 000032
【図５】
2004075696.tif 000033
【図６】
2004075696.tif 000034