【手続補正書】
【提出日】平成26年11月10日(2014.11.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
平面状オプトフルイディックプラットフォームを提供すること、
前記平面状オプトフルイディックプラットフォーム中へ、核酸粒子含有液体溶液を導入すること、
導入された前記液体溶液を、前記平面状オプトフルイディックプラットフォームを用いて光学的に励起させ、シグナルを発生させること、
発生したシグナルを回収すること、及び
前記発生したシグナルが、前記核酸粒子のうちの１の核酸粒子に取り付けたフルオロフォアによって生じさせた蛍光を含むことを決定すること
を含む核酸試験法。
【請求項２】
さらに、
核酸粒子不含の純粋な緩衝溶液を前記平面状オプトフルイディックプラットフォームへと導入し、かつ励起すること、
前記純粋な緩衝溶液に相応する発生したシグナルを回収すること、及び
前記液体溶液に相応する発生したシグナルを、前記純粋な緩衝溶液に相応する発生したシグナルに対して比較すること
を含む請求項１記載の方法。
【請求項３】
さらに、前記発生したシグナルを用いた蛍光相関スペクトルの作出を含む請求項１記載の方法。
【請求項４】
前記蛍光相関スペクトル中の予め決定した閾値を超えるシグナルが、励起体積中の１より少ない単一粒子を示す請求項３記載の方法。
【請求項５】
前記蛍光相関スペクトルが、検出した粒子の拡散係数を抽出するよう構成されている請求項３記載の方法。
【請求項６】
蛍光シグナルが単一核酸粒子の指標である、及び／又は、前記核酸がウィルス由来である請求項１記載の方法。
【請求項７】
前記平面状オプトフルイディックプラットフォームが、複数の平面状の液体コア集積光学導波路を含む請求項１記載の方法。
【請求項８】
前記平面状オプトフルイディックプラットフォームが、複数の中空コア反共振反射光学導波路（ＡＲＲＯＷｓ）、前記中空コアＡＲＲＯＷｓの種々の点に連結された複数の中実コアＡＲＲＯＷｓ、前記中空コアＡＲＲＯＷｓ中へ液体溶液を導入するための手段、前記中空コアＡＲＲＯＷｓへ励起光を提供するための手段、及び、発生した光を回収するための手段を含む、又は
前記平面状オプトフルイディックプラットフォームが、複数の中空コア反共振反射光学導波路（ＡＲＲＯＷｓ）、前記中空コアＡＲＲＯＷｓの種々の点に連結するよう構成された複数の中実コアＡＲＲＯＷｓを含み、前記中空コアＡＲＲＯＷｓ及び前記中実コアＡＲＲＯＷｓが、前記中空コアＡＲＲＯＷｓへの液体溶液及び光のための複数の別個のアクセスポイントを提供し、かつ、ピコリットル未満の体積で光学励起領域を定義して、単一分子感受性を達成するように構成されている、又は
前記平面状オプトフルイディックプラットフォームが、複数の中空コア反共振反射光学導波路（ＡＲＲＯＷｓ）、前記中空コアＡＲＲＯＷｓの種々の点に連結するよう構成された複数の中実コアＡＲＲＯＷｓ、前記中空コアＡＲＲＯＷｓ中へ液体溶液を少なくとも導入するように構成された前記中空コアＡＲＲＯＷｓの末端にある複数の流体貯蔵器、前記中空コアＡＲＲＯＷｓに垂直に交差する中実コアＡＲＲＯＷｓを通して中空コアＡＲＲＯＷｓに励起光を入れるための１のパス、及び、前記平面状オプトフルイディックプラットフォーム平面中で垂直方向に発生した光を回収するためのかつ回収した光を検出のために前記平面状オプトフルイディックプラットフォームの縁へと案内するための１のパス、を含む、請求項１記載の方法。
【請求項９】
前記液体溶液の導入が、前記平面状オプトフルイディックプラットフォーム中に含まれる複数の液体貯蔵器の使用を含む、又は、平面状オプトフルイディックプラットフォーム中に含まれる光学的励起点を通過して移動する蒸気としての前記液体溶液の導入を含む請求項１記載の方法。
【請求項１０】
前記導入された液体溶液の励起が、前記平面状オプトフルイディックプラットフォームに入る励起光の使用を含み、前記導入された液体溶液の光学的励起が、レーザー光の使用を含む請求項１記載の方法。
【請求項１１】
前記発生した光の回収が、前記平面状オプトフルイディックプラットフォームに対して垂直に発生し、かつ、前記平面状オプトフルイディックプラットフォームの縁へと案内される光の回収を含む請求項１記載の方法。
【請求項１２】
前記液体溶液が、特異的核酸を検出するために構成されている請求項１記載の方法。
【請求項１３】
前記液体溶液が、マッチングオリゴヌクレオチドと混合した核酸配列に特異的な分子標識を含む請求項１２記載の方法。
【請求項１４】
さらに、前記オリゴヌクレオチドに対する分子標識の結合を含み、前記結合が、前記液体溶液の加熱及びその後の冷却期間によって容易になる請求項１３記載の方法。
【請求項１５】
さらに、前記液体溶液中に特異的核酸配列が存在することを決定するために、前記発生したシグナルに基づく標識蛍光のプロットの作出を含む請求項１２記載の方法。
【請求項１６】
前記発生したシグナルの回収が、光検出器、フォトダイオード又はアバランシェフォトダイオードの使用を含む請求項１記載の方法。
【請求項１７】
１の平面状オプトフルイディックプラットフォーム、
前記平面状オプトフルイディックプラットフォーム中へ、核酸粒子含有液体溶液を導入するための手段、
前記平面状オプトフルイディックプラットフォームを用いて前記導入された液体溶液を光学的に励起して、シグナルを発生させるための手段、及び
前記発生したシグナルを回収するための手段
を含む単一核酸粒子検出システム。
【請求項１８】
さらに、前記発生したシグナルが蛍光バーストを含むことを決定するための手段を含み、前記発生したシグナルのプロットの経時分析を含む請求項１７記載のシステム。
【請求項１９】
前記平面状オプトフルイディックプラットフォームが、平面状液体コア集積光学導波路を含む、又は、複数の中空コア反共振反射光学導波路（ＡＲＲＯＷｓ）、前記中空コアＡＲＲＯＷｓの種々の点に連結された複数の中実コアＡＲＲＯＷｓ、前記中空コアＡＲＲＯＷｓ中へ液体溶液を導入するための手段、中空コアＡＲＲＯＷｓへ励起光を提供するための手段、及び、発生した光の回収のための手段を含む請求項１７記載のシステム。
【請求項２０】
前記液体溶液の導入のための手段が、平面状オプトフルイディックプラットフォーム中に含まれる複数の液体貯蔵器を含み、前記導入された液体溶液の励起のための手段が、前記平面状オプトフルイディックプラットフォーム中への励起光の注入のための手段を含み、及び／又は、前記発生した光の回収のための手段が、前記平面状オプトフルイディックプラットフォームの縁で、前記平面状オプトフルイディックプラットフォームに対して垂直方向に発生した光を回収するための手段を含む請求項１７記載のシステム。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２４】
上述の発生シグナルは、光センサー、例えば光検出器を用いて回収されることができる。例えば、フォトダイオードが、液体コア導波路に沿って発生した蛍光シグナルを捕捉し、かつ、蛍光バースト分析のために及び特異的核酸の存在の決定のために使用される電流又は電圧に変換すべく、使用されることができる。さらなる一例として、発生した光を電気に変換するためにアバランシェフォトダイオードも使用されることができる。光に対し高感度の半導体であるので、アバランシェフォトダイオードは、発生した光の高度に正確なシグナル表示を提供すべく構成されることができる。
本発明の好ましい態様：
態様１
平面状オプトフルイディックプラットフォームを提供すること、
前記平面状オプトフルイディックプラットフォーム中へ、核酸粒子含有液体溶液を導入すること、
導入された前記液体溶液を、前記平面状オプトフルイディックプラットフォームを用いて光学的に励起させ、シグナルを発生させること、
発生したシグナルを回収すること、及び
前記発生したシグナルが、前記核酸粒子のうちの１の核酸粒子に取り付けたフルオロフォアによって生じさせた蛍光を含むことを決定すること
を含む核酸試験法。
態様２
さらに、
核酸粒子不含の純粋な緩衝溶液を前記平面状オプトフルイディックプラットフォームへと導入し、かつ励起すること、及び
前記純粋な緩衝溶液に相応する発生したシグナルを回収すること
を含む態様１記載の方法。
態様３
前記発生したシグナルが蛍光を含むことを決定することが、前記液体溶液に相応する発生したシグナルを、前記純粋な緩衝溶液に相応する発生したシグナルに対して比較することを含む態様２記載の方法。
態様４
さらに、前記発生したシグナルを用いた蛍光相関スペクトルの作出を含む態様１記載の方法。
態様５
前記蛍光相関スペクトル中の予め決定した閾値を超えるシグナルが、励起体積中の１より少ない単一粒子を示す態様４記載の方法。
態様６
前記蛍光相関スペクトルが、検出した粒子の拡散係数を抽出するよう構成されている態様４記載の方法。
態様７
蛍光シグナルが単一核酸粒子の指標である態様１記載の方法。
態様８
前記核酸がウィルス由来である態様１記載の方法。
態様９
前記平面状オプトフルイディックプラットフォームが、複数の平面状の液体コア集積光学導波路を含む態様１記載の方法。
態様１０
前記平面状オプトフルイディックプラットフォームが、複数の中空コア反共振反射光学導波路（ＡＲＲＯＷｓ）、前記中空コアＡＲＲＯＷｓの種々の点に連結された複数の中実コアＡＲＲＯＷｓ、前記中空コアＡＲＲＯＷｓ中へ液体溶液を導入するための手段、前記中空コアＡＲＲＯＷｓへ励起光を提供するための手段、及び、発生した光を回収するための手段を含む態様１記載の方法。
態様１１
前記平面状オプトフルイディックプラットフォームが、複数の中空コア反共振反射光学導波路（ＡＲＲＯＷｓ）、前記中空コアＡＲＲＯＷｓの種々の点に連結するよう構成された複数の中実コアＡＲＲＯＷｓを含み、前記中空コアＡＲＲＯＷｓ及び前記中実コアＡＲＲＯＷｓが、前記中空コアＡＲＲＯＷｓへの液体溶液及び光のための複数の別個のアクセスポイントを提供し、かつ、ピコリットル未満の体積で光学励起領域を定義して、単一分子感受性を達成するように構成されている態様１記載の方法。
態様１２
前記平面状オプトフルイディックプラットフォームが、複数の中空コア反共振反射光学導波路（ＡＲＲＯＷｓ）、前記中空コアＡＲＲＯＷｓの種々の点に連結するよう構成された複数の中実コアＡＲＲＯＷｓ、前記中空コアＡＲＲＯＷｓ中へ液体溶液を少なくとも導入するように構成された前記中空コアＡＲＲＯＷｓの末端にある複数の流体貯蔵所、前記中空コアＡＲＲＯＷｓに垂直に交差する中実コアＡＲＲＯＷｓを通して中空コアＡＲＲＯＷｓに励起光を入れるための１のパス、及び、前記平面状オプトフルイディックプラットフォーム平面中で垂直方向に発生した光を回収するためのかつ回収した光を検出のために前記平面状オプトフルイディックプラットフォームの縁へと案内するための１のパス、を含む、態様１記載の方法。
態様１３
前記液体溶液の導入が、前記平面状オプトフルイディックプラットフォーム中に含まれる複数の液体貯蔵所の使用を含む態様１記載の方法。
態様１４
前記導入された液体溶液の励起が、前記平面状オプトフルイディックプラットフォームに入る励起光の使用を含む態様１記載の方法。
態様１５
前記発生した光の回収が、前記平面状オプトフルイディックプラットフォームに対して垂直に発生し、かつ、前記平面状オプトフルイディックプラットフォームの縁へと案内される光の回収を含む態様１記載の方法。
態様１６
前記液体溶液が、特異的核酸を検出するために構成されている態様１記載の方法。
態様１７
前記液体溶液が、マッチングオリゴヌクレオチドと混合した核酸配列に特異的な分子標識を含む態様１６記載の方法。
態様１８
さらに、前記オリゴヌクレオチドに対する分子標識の結合を含み、前記結合が、前記液体溶液の加熱及びその後の冷却期間によって容易になる態様１７記載の方法。
態様１９
さらに、前記液体溶液中に特異的核酸配列が存在することを決定するために、前記発生したシグナルに基づく標識蛍光のプロットの作出を含む態様１６記載の方法。
態様２０
前記液体溶液の導入が、平面状オプトフルイディックプラットフォーム中に含まれる光学的励起点を通過して移動する蒸気としての前記液体溶液の導入を含む態様１記載の方法。
態様２１
前記導入された液体溶液の光学的励起が、レーザー光の使用を含む態様１記載の方法。
態様２２
前記発生したシグナルの回収が、光検出器の使用を含む態様１記載の方法。
態様２３
前記発生したシグナルの回収が、フォトダイオードの使用を含む態様１記載の方法。
態様２４
前記発生したシグナルの回収が、アバランシェフォトダイオードの使用を含む態様１記載の方法。
態様２５
１の平面状オプトフルイディックプラットフォーム、
前記平面状オプトフルイディックプラットフォーム中へ、核酸粒子含有液体溶液を導入するための手段、
前記平面状オプトフルイディックプラットフォームを用いて前記導入された液体溶液を光学的に励起して、シグナルを生じるための手段、及び
前記発生したシグナルを回収するための手段
を含む単一核酸粒子検出システム。
態様２６
さらに、前記発生したシグナルが蛍光バーストを含むことを決定するための手段を含み、前記発生したシグナルのプロットの経時分析を含む態様２５記載のシステム。
態様２７
前記平面状オプトフルイディックプラットフォームが、平面状液体コア集積光学導波路を含む態様２５記載のシステム。
態様２８
前記平面状オプトフルイディックプラットフォームが、複数の中空コア反共振反射光学導波路（ＡＲＲＯＷｓ）、前記中空コアＡＲＲＯＷｓの種々の点に連結された複数の中実コアＡＲＲＯＷｓ、前記中空コアＡＲＲＯＷｓ中へ液体溶液を導入するための手段、中空コアＡＲＲＯＷｓへ励起光を提供するための手段、及び、発生した光の回収のための手段を含む態様２５記載のシステム。
態様２９
前記液体溶液の導入のための手段が、平面状オプトフルイディックプラットフォーム中に含まれる複数の液体貯蔵所を含む態様２５記載のシステム。
態様３０
前記導入された液体溶液の励起のための手段が、前記平面状オプトフルイディックプラットフォーム中への励起光の注入のための手段を含む態様２５記載のシステム。
態様３１
前記発生した光の回収のための手段が、前記平面状オプトフルイディックプラットフォームの縁で、前記平面状オプトフルイディックプラットフォームに対して垂直方向に発生した光を回収するための手段を含む態様２５記載のシステム。