【手続補正書】
【提出日】平成26年9月26日(2014.9.26)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
デキストラン成分にコンジュゲートした結合部を含む検出可能試薬。
【請求項２】
デキストラン成分が検出可能実体に結合されている、請求項１に記載の検出可能試薬。
【請求項３】
デキストラン成分が約２〜約１０のデキストラン、約４〜約８のデキストランまたは約６のデキストランを含む、請求項１に記載の検出可能試薬。
【請求項４】
各デキストランが約１０ｋＤａ〜約２００ｋＤａの分子量、約３０ｋＤａ〜約１００ｋＤａの分子量、または約５０ｋＤａ〜約７０ｋＤａの分子量である、請求項１に記載の検出可能試薬。
【請求項５】
デキストランが約７０ｋＤａの分子量である、請求項１に記載の検出可能試薬。
【請求項６】
デキストラン成分が２つ以上のデキストランを含み、各デキストランが実質的に同じ分子量を有する、請求項１に記載の検出可能試薬。
【請求項７】
デキストラン成分が２つ以上のデキストランを含み、少なくとも１つのデキストランが別のデキストランとは異なる分子量を有する、請求項１に記載の検出可能試薬。
【請求項８】
検出対象実体がフルオロフォアである、請求項２に記載の検出可能試薬。
【請求項９】
フルオロフォアが緑色蛍光、オレンジ色蛍光、赤色蛍光、および遠赤外蛍光を有するフルオロフォアから選択される、請求項８に記載の検出可能試薬。
【請求項１０】
フルオロフォアが約３５０ｎｍ〜７７５ｎｍの範囲の励起および発光スペクトルを有するフルオロフォアから選択される、請求項８に記載の検出可能試薬。
【請求項１１】
フルオロフォアが約３４６ｎｍ／４４６ｎｍ、約４９４ｎｍ／５１９ｎｍ、約５５４ｎｍ／５７０ｎｍ、約５５５ｎｍ／５７２ｎｍ、約５９０ｎｍ／６１７ｎｍ、約６５１ｎｍ／６７２ｎｍ、約６７９ｎｍ／７０２ｎｍまたは約７４９ｎｍ／７７５ｎｍの励起および発光スペクトルを有するフルオロフォアから選択される、請求項１０に記載の検出可能試薬。
【請求項１２】
結合部がアビジン、ストレプトアビジン、ビオチン、ジゴキシゲニン、免疫試薬、オリゴヌクレオチド、ペプチド核酸、タンパク質Ａおよびタンパク質Ｇからなる群より選択される、請求項１に記載の検出可能試薬。
【請求項１３】
デキストラン成分を提供し、
デキストラン−結合部複合体を形成するために、デキストラン成分を結合部とコンジュゲートさせ、および
検出可能実体をデキストラン−結合部複合体に結合させること、
を含む、検出試薬を作る。
【請求項１４】
少なくとも１つのコアデキストランにコンジュゲートされた結合部を含むコアデキストラン−結合部を形成するために、結合部をデキストランにコンジュゲートさせ、
コアデキストランにコンジュゲートした複数のデキストランを含むデキストラン−結合部複合体を形成するために、コアデキストラン−結合部を１つ以上のデキストランとコンジュゲートさせ、および
検出可能実体をデキストラン−結合部複合体に結合させること、
を含む、検出試薬を作る方法。
【請求項１５】
結合部がアビジンまたはストレプトアビジンである、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
請求項２に記載の検出可能試薬と標的分子を含むと疑われる試料を接触させ、そこに結合部が標的分子に結合でき、および
デキストラン成分に結合した検出可能実体のシグナルを検出し、それにより、標的分子を検出または定量することを含む、標的分子を検出または定量する方法。
【請求項１７】
複数の相互連結デキストランを含む試薬であって、少なくとも２つのデキストランを含む試薬。
【請求項１８】
デキストランの合計分子量が少なくとも５００ｋＤａである、請求項１７に記載の試薬。
【請求項１９】
複数の相互連結デキストランが層状配置または分岐配置に構成されている、請求項１７に記載の試薬。
【請求項２０】
複数の相互連結デキストランが検出可能実体に結合されている、請求項１７に記載の試薬。
【請求項２１】
検出可能試薬が、結合部当たり約４〜約８のデキストランを有する、請求項１に記載の検出可能試薬。
【請求項２２】
検出可能試薬が、結合部当たり約６のデキストランを有する、請求項２１に記載の検出可能試薬。
【請求項２３】
結合部がアビジンまたはストレプトアビジンである、請求項１２に記載の検出可能試薬。
【請求項２４】
少なくとも１つのデキストランが、結合部にコンジュゲートされたコアデキストランであり、少なくとも１つの他のデキストランがコアデキストランにコンジュゲートされているが結合部にはコンジュゲートされていない、請求項２１に記載の検出可能試薬。
【請求項２５】
検出可能試薬を作る方法であって、
デキストラン−アミンを誘導体化してマレイミド官能基を生成すること、
結合部を誘導体化して、チオール官能基を生成すること、
誘導体化された結合部をモル比率の１つまたは複数の誘導体化デキストラン−アミン分子と反応させることであって、ここで、誘導体化された結合部を誘導体化されたデキストラン−アミンとの反応によりデキストラン−結合部を生じる、こと
デキストラン−結合部を誘導体化させて、デキストラン当たり１つまたは複数のチオール基を生成すること、
誘導体化デキストラン−結合部をモル比率の１つまたは複数のマレイミド−誘導体化デキストラン−アミン分子を反応させることであって、ここで、誘導体化デキストラン−結合部とマレイミド−誘導体化デキストラン−アミンの間の反応により、相互連結デキストラン−結合部複合体が生じる、こと、および
相互連結デキストラン−結合部複合体をモル比率の１つまたは複数の検出対象実体と反応させることであって、ここで、相互連結デキストラン−結合部複合体と検出対象実体との反応が検出可能試薬を作る、こと
を含む、方法。
【請求項２６】
結合部がアビジンまたはストレプトアビジンである、請求項２５に記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１５】
本発明は複数の相互連結デキストランを含む試薬であって、この試薬は少なくとも２つのデキストランを含むことを特徴とする試薬を提供する。ある実施形態では、合計分子量は少なくとも５００ｋＤａである。ある実施形態では、複数の相互連結デキストランは層状配置または分岐配置として構成される。ある実施形態では、複数の相互連結デキストランは検出対象実体に結合される。
特定の実施形態では、例えば以下が提供される：
（項目１）
デキストラン成分にコンジュゲートした結合部を含む検出可能試薬。
（項目２）
デキストラン成分が検出可能実体に結合されている、項目１に記載の検出可能試薬。
（項目３）
デキストラン成分が約２〜約１０のデキストラン、約４〜約８のデキストランまたは約６のデキストランを含む、項目１に記載の検出可能試薬。
（項目４）
各デキストランが約１０ｋＤａ〜約２００ｋＤａの分子量、約３０ｋＤａ〜約１００ｋＤａの分子量、または約５０ｋＤａ〜約７０ｋＤａの分子量である、項目１に記載の検出可能試薬。
（項目５）
デキストランが約７０ｋＤａの分子量である、項目１に記載の検出可能試薬。
（項目６）
デキストラン成分が２つ以上のデキストランを含み、各デキストランが実質的に同じ分子量を有する、項目１に記載の検出可能試薬。
（項目７）
デキストラン成分が２つ以上のデキストランを含み、少なくとも１つのデキストランが別のデキストランとは異なる分子量を有する、項目１に記載の検出可能試薬。
（項目８）
検出対象実体がフルオロフォアである、項目２に記載の検出可能試薬。
（項目９）
フルオロフォアが緑色蛍光、オレンジ色蛍光、赤色蛍光、および遠赤外蛍光を有するフルオロフォアから選択される、項目８に記載の検出可能試薬。
（項目１０）
フルオロフォアが約３５０ｎｍ〜７７５ｎｍの範囲の励起および発光スペクトルを有するフルオロフォアから選択される、項目８に記載の検出可能試薬。
（項目１１）
フルオロフォアが約３４６ｎｍ／４４６ｎｍ、約４９４ｎｍ／５１９ｎｍ、約５５４ｎｍ／５７０ｎｍ、約５５５ｎｍ／５７２ｎｍ、約５９０ｎｍ／６１７ｎｍ、約６５１ｎｍ／６７２ｎｍ、約６７９ｎｍ／７０２ｎｍまたは約７４９ｎｍ／７７５ｎｍの励起および発光スペクトルを有するフルオロフォアから選択される、項目１０に記載の検出可能試薬。
（項目１２）
結合部がアビジン、ストレプトアビジン、ビオチン、ジゴキシゲニン、免疫試薬、オリゴヌクレオチド、ペプチド核酸、タンパク質Ａおよびタンパク質Ｇからなる群より選択される、項目１に記載の検出可能試薬。
（項目１３）
デキストラン成分を提供し、
デキストラン−結合部複合体を形成するために、デキストラン成分を結合部とコンジュゲートさせ、および
検出可能実体をデキストラン−結合部複合体に結合させること、
を含む、検出試薬を作る。
（項目１４）
コアデキストラン−結合部を形成するために、結合部をデキストランにコンジュゲートさせ、
デキストラン−結合部複合体を形成するために、コアデキストラン−結合部をデキストランと反応させ、および
検出可能実体をデキストラン−結合部複合体に結合させること、
を含む、検出試薬を作る方法。
（項目１５）
結合部がアビジンである、項目１４に記載の方法。
（項目１６）
項目２に記載の検出可能試薬と標的分子を含むと疑われる試料を接触させ、そこに結合部が標的分子に結合でき、および
デキストラン成分に結合した検出可能実体のシグナルを検出し、それにより、標的分子を検出または定量することを含む、標的分子を検出または定量する方法。
（項目１７）
複数の相互連結デキストランを含む試薬であって、少なくとも２つのデキストランを含む試薬。
（項目１８）
デキストランの合計分子量が少なくとも５００ｋＤａである、項目１７に記載の試薬。
（項目１９）
複数の相互連結デキストランが層状配置または分岐配置に構成されている、項目１７に記載の試薬。
（項目２０）
複数の相互連結デキストランが検出可能実体に結合されている、項目１７に記載の試薬。