【手続補正書】
【提出日】平成26年4月23日(2014.4.23)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
１．０〜２．７×１０７細胞／ｍＬ、および場合により
凍結保存用培地
を含む投与処方物であって、該細胞の少なくとも９８％は、線維芽細胞についての細胞表面マーカーと反応性であるがケラチノサイト細胞についての細胞表面マーカーとは反応性ではない、自己ヒト線維芽細胞またはその前駆体であり、凍結保存後に該細胞の少なくとも８５％は生存している、投与処方物。
【請求項２】
イスコフ改変ダルベッコ培地（ＩＭＤＭ）およびＰｒｏｆｒｅｅｚｅＴＭおよび７．５％ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）からなる凍結保存用培地を含む、請求項１に記載の投与処方物。
【請求項３】
前記細胞の９８％以上が線維芽細胞である、請求項１に記載の投与処方物。
【請求項４】
１、２、３または６ｍＬを含む、請求項１に記載の投与処方物。
【請求項５】
皮膚欠陥を処置するための組成物であって、１．０〜２．７×１０７細胞／ｍＬを含む有効量の投与処方物を含み、ステップを含み、ここで、該細胞の少なくとも９８％は自己ヒト線維芽細胞またはその前駆体であり、該細胞の少なくとも８５％は生存しており、有効量の該組成物が、４週または５週±７〜１０日間離した２回または３回の処置において、処置しようとする部位に注射されることを特徴とする、組成物。
【請求項６】
しわ、鼻唇溝、および頬と唇との間の溝、口周囲のライン、外側眼角のライン、眼窩周囲のライン、ならびに眉間のラインの処置のための、請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
１リニアセンチメートル当たり０．０５〜０．５ｍＬの前記投与処方物が注射されることを特徴とする、請求項５に記載の組成物。
【請求項８】
各処置において、２〜６ｍＬが注射されることを特徴とする、請求項５に記載の組成物。
【請求項９】
鼻唇溝のひだの処置のための請求項５に記載の組成物であって、５週±７〜１０日間離した３回の処置セッションにおいて、処置セッション１回当たり１〜２ｍＬの前記投与処方物が、該ひだの表層真皮乳頭内に、１リニアｃｍ当たり０．１ｍＬの用量分布での注射により投与されることを特徴とする、組成物。
【請求項１０】
複数の顔面領域におけるしわの処置のための請求項５に記載の組成物であって、５週±７〜１０日間離した１回または２回の処置セッションにおいて、処置セッション１回当たり５〜６ｍＬが、表層真皮乳頭内に、１リニアｃｍ当たり０．０５ｍＬの用量分布で注射されることを特徴とする、組成物。
【請求項１１】
ざ瘡瘢痕の処置のための請求項５に記載の組成物であって、１４日±３日間離した１〜３回の処置セッションにおいて、処置セッション１回当たり２〜１２ｍＬが、表層真皮乳頭内に、瘢痕化領域１ｃｍ２当たり０．１ｍＬの用量分布で注射されることを特徴とする、組成物。
【請求項１２】
制限性の熱傷瘢痕の処置のための請求項５に記載の組成物であって、２〜６週間離した１〜５回の処置において、処置セッション１回当たり１〜１０ｍＬが、該熱傷瘢痕の触診により認められる制限帯内に、瘢痕化領域１ｃｍ２当たり０．１〜０．５ｍＬの用量分布で注射されることを特徴とする、組成物。
【請求項１３】
組織の修復または再生のための多能性細胞を提供するための方法であって、
１．０〜２．７×１０７細胞／ｍＬを含む投与処方物を提供するステップであって、該細胞の少なくとも９８％は自己ヒト線維芽細胞またはその前駆体であり、該細胞の少なくとも８５％は生存している、ステップと、
該細胞を脱分化させるための手段を提供するステップと
を含む、方法。
【請求項１４】
前記細胞を、細胞のプログラミング、細胞融合または体細胞の移植により脱分化させる、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
１．０〜２．７×１０７細胞／ｍＬを含む投与処方物の脱分化により調製された多能性細胞処方物であって、該細胞の少なくとも９８％は自己ヒト線維芽細胞またはその前駆体であり、前記細胞の少なくとも８５％は生存している、多能性細胞処方物。
【請求項１６】
前記細胞の少なくとも９８％が、線維芽細胞についての細胞表面マーカーであるＣＤ９０に対する抗体に反応性であるが、ケラチノサイト細胞に対する細胞表面マーカーであるＣＤ１０４に対する抗体には反応性ではない、自己ヒト線維芽細胞またはその前駆体である、請求項１に記載の投与処方物。
【請求項１７】
前記処方物が、注射によるヒトへの投与のための内毒素試験に合格している、請求項１に記載の投与処方物。
【請求項１８】
前記自己細胞が細胞培養において継代されている、請求項１に記載の投与処方物。
【請求項１９】
前記継代した真皮線維芽細胞が、タンパク質を含有しない培地中で、拡大増殖した線維芽細胞を一定期間インキュベートすることによって、前記培養培地中に存在する免疫原性タンパク質を実質的に含まないようにされている、請求項１に記載の投与処方物。
【請求項２０】
注射用滅菌希釈剤１ｍＬあたり３．４×１０８細胞から本質的になる投与処方物であって、ここで、該細胞の少なくとも９８％は、線維芽細胞についての細胞表面マーカーと反応性であるがケラチノサイト細胞についての細胞表面マーカーとは反応性ではない、自己ヒト線維芽細胞またはその前駆体であり、該細胞の少なくとも８５％は生存しており、鼻唇溝の処置のためのものである、投与処方物。
【請求項２１】
前記細胞の少なくとも９８％が、線維芽細胞についての細胞表面マーカーであるＣＤ９０に対する抗体に反応性であるが、ケラチノサイト細胞に対する細胞表面マーカーであるＣＤ１０４に対する抗体には反応性ではない、自己ヒト線維芽細胞またはその前駆体である、請求項５に記載の投与処方物。
【請求項２２】
前記処方物が、注射によるヒトへの投与についての内毒素試験に合格している、請求項５に記載の投与処方物。
【請求項２３】
前記自己細胞が、細胞培養において継代されている、請求項５に記載の投与処方物。
【請求項２４】
前記継代した真皮線維芽細胞が、タンパク質を含有しない培地中で、拡大増殖した線維芽細胞を一定期間インキュベートすることによって、前記培養培地中に存在する免疫原性タンパク質を実質的に含まないようにされている、請求項５に記載の投与処方物。
【請求項２５】
皮膚欠損を処置するための投与処方物であって、該処方物は、注射用滅菌希釈剤１ｍＬあたり３．４×１０８細胞から本質的になり、ここで、該細胞の少なくとも９８％は、自己ヒト線維芽細胞またはその前駆体であり、該細胞の少なくとも８５％は生存しており、該処方物の有効量は、４週または５週±７〜１０日間離した２回または３回の処置において、処置しようとする部位に注射されることを特徴とする、投与処方物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１１】
また、線維芽細胞の投与処方物は、組織の修復および再生ための多能性細胞を提供するのにも有用である。
特定の実施形態では、例えば以下が提供される：
（項目１）
１．０〜２．７×１０７細胞／ｍＬ、および場合により
凍結保存用培地
を含む投与処方物であって、該細胞の少なくとも９８％は自己ヒト線維芽細胞またはその前駆体であり、該細胞の少なくとも８５％は生存している、投与処方物。
（項目２）
イスコフ改変ダルベッコ培地（ＩＭＤＭ）およびＰｒｏｆｒｅｅｚｅＴＭおよび７．５％ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）からなる凍結保存用培地を含む、項目１に記載の投与処方物。
（項目３）
前記細胞の９８％以上が線維芽細胞である、項目１に記載の投与処方物。
（項目４）
１、２、３または６ｍＬを含む、項目１に記載の投与処方物。
（項目５）
皮膚欠陥を処置する方法であって、４週または５週±７〜１０日間離した２回または３回の処置において、１．０〜２．７×１０７細胞／ｍＬを含む有効量の投与処方物を、処置しようとする部位に注射するステップを含み、ここで、該細胞の少なくとも９８％は自己ヒト線維芽細胞またはその前駆体であり、該細胞の少なくとも８５％は生存している、方法。
（項目６）
しわ、鼻唇溝、および頬と唇との間の溝、口周囲のライン、外側眼角のライン、眼窩周囲のライン、ならびに眉間のラインの処置のための、項目５に記載の方法。
（項目７）
１リニアセンチメートル当たり０．０５〜０．５ｍＬの前記投与処方物を注射するステップを含む、項目５に記載の方法。
（項目８）
各処置において、２〜６ｍＬを注射するステップを含む、項目５に記載の方法。
（項目９）
鼻唇溝のひだの処置のための項目５に記載の方法であって、５週±７〜１０日間離した３回の処置セッションにおいて、処置セッション１回当たり１〜２ｍＬの前記投与処方物を投与するステップを含み、該投与処方物を、該ひだの表層真皮乳頭内に、１リニアｃｍ当たり０．１ｍＬの用量分布で注射する、方法。
（項目１０）
複数の顔面領域におけるしわの処置のための項目５に記載の方法であって、５週±７〜１０日間離した１回または２回の処置セッションにおいて、処置セッション１回当たり５〜６ｍＬを、表層真皮乳頭内に、１リニアｃｍ当たり０．０５ｍＬの用量分布で注射するステップを含む、方法。
（項目１１）
ざ瘡瘢痕の処置のための項目５に記載の方法であって、１４日±３日間離した１〜３回の処置セッションにおいて、処置セッション１回当たり２〜１２ｍＬを、表層真皮乳頭内に、瘢痕化領域１ｃｍ２当たり０．１ｍＬの用量分布で注射するステップを含む、方法。
（項目１２）
制限性の熱傷瘢痕の処置のための項目５に記載の方法であって、２〜６週間離した１〜５回の処置において、処置セッション１回当たり１〜１０ｍＬを、該熱傷瘢痕の触診により認められる制限帯内に、瘢痕化領域１ｃｍ２当たり０．１〜０．５ｍＬの用量分布で注射するステップを含む、方法。
（項目１３）
組織の修復または再生のための多能性細胞を提供するための方法であって、
１．０〜２．７×１０７細胞／ｍＬを含む投与処方物を提供するステップであって、該細胞の少なくとも９８％は自己ヒト線維芽細胞またはその前駆体であり、該細胞の少なくとも８５％は生存している、ステップと、
該細胞を脱分化させるための手段を提供するステップと
を含む、方法。
（項目１４）
前記細胞を、細胞のプログラミング、細胞融合または体細胞の移植により脱分化させる、項目１３に記載の方法。
（項目１５）
１．０〜２．７×１０７細胞／ｍＬを含む投与処方物の脱分化により調製された多能性細胞処方物であって、該細胞の少なくとも９８％は自己ヒト線維芽細胞またはその前駆体であり、前記細胞の少なくとも８５％は生存している、多能性細胞処方物。