【手続補正書】
【提出日】平成23年12月7日(2011.12.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００６】
要旨
開示される方法は、濾過の濾液中のタンパク質の回収を実質的に損傷せず、または別様に限定もせずに、バッチ方式または連続方式のいずれかで、液体混合物中のタンパク質を濾過するのに有用である。この方法は概して、濾液に逆圧を加えてフィルタの圧力差を正確に減少させ、調整する。開示される方法は、高い圧力差によってタンパク質の液体混合物の濾過流速が実際に減少するのとは対照的に、比較的低い圧力差で、比較的高い濾過流速が得られるという利点を備える。さらにこの方法は、液体混合物中に始めから存在するタンパク質のほぼ全てを回収することができる。
本発明は、例えば以下の項目を提供する。
（項目１）
液体のタンパク質混合物を濾過する方法であって、該方法が
第１の圧力（Ｐ１）で液体混合物を提供するステップであって、該液体混合物が担体液体と、該担体液体に対して第１の濃度（Ｃ１）のタンパク質と、分散した混入物とを含むステップと、
該液体混合物をフィルタに通過させて第２の圧力（Ｐ２）で濾液を形成するステップであって、該濾液が、該担体液体と、該担体液体に対して第２の濃度（Ｃ２）の該タンパク質とを含み、該フィルタが、該液体混合物から該分散した混入物の少なくとも一部を除去するためにサイズ調整されたステップと、
該第１の圧力と該第２の圧力との間の圧力差（Ｐ１−Ｐ２）を確実に約３００ｍｂａｒ
以下にするために逆圧を該濾液に加えるステップと
を含む方法。
（項目２）
前記タンパク質が剪断に感受性のあるタンパク質を含む項目１に記載の方法。
（項目３）
前記タンパク質が血液凝固カスケードのタンパク質を含む項目１に記載の方法。
（項目４）
前記圧力差が約９０ｍｂａｒ以下である項目１に記載の方法。
（項目５）
前記液体混合物中に存在する前記タンパク質の少なくとも約９５％が前記濾液中に回収される項目１に記載の方法。
（項目６）
前記液体混合物中に存在する前記タンパク質の少なくとも約９９％が前記濾液中に回収される項目５に記載の方法。
（項目７）
前記逆圧がフィルタ表面積の少なくとも約３００ｇ／ｍｉｎ・ｍ２の平均濾液流速を生じさせるのに十分である項目１に記載の方法。
（項目８）
前記第１の圧力（Ｐ１）が少なくともゲージ圧約２００ｍｂａｒである項目１に記載の方法。
（項目９）
前記担体液体が水を含む項目１に記載の方法。
（項目１０）
前記タンパク質がフォンウィルブランド因子（ｖＷＦ）、第ＶＩＩＩ因子、第ＸＩＩＩ因子およびその混合物からなる群から選択される項目１に記載の方法。
（項目１１）
前記分散した混入物が微生物を含む項目１に記載の方法。
（項目１２）
前記濾液が前記分散した混入物を実質的に含まない項目１に記載の方法。
（項目１３）
前記フィルタが多孔性メンブレンを含み、前記多孔性メンブレンが約０．１μｍ〜約０．５μｍにサイズ調整された孔を含む項目１に記載の方法。
（項目１４）
前記孔が約０．２μｍまたは約０．２２μｍにサイズ調整された項目１３に記載の方法。
（項目１５）
液体のタンパク質混合物を濾過する方法であって、該方法が
第１の圧力（Ｐ１）で液体混合物を提供するステップであって、該液体混合物が担体液体と、該担体液体に対して第１の濃度（Ｃ１）でタンパク質と、分散した混入物とを含むステップと、
該液体混合物をフィルタに通過させて第２の圧力（Ｐ２）で濾液を形成するステップであって、該濾液が、該担体液体と、該担体液体に対して第２の濃度（Ｃ２）で該タンパク質とを含み、該フィルタが、該液体混合物から該分散した混入物の少なくとも一部を除去するためにサイズ調整されたステップと、
フィルタ表面積の少なくとも約３００ｇ／ｍｉｎ・ｍ２の平均濾液流速を生じさせるのに十分な逆圧を該濾液に加えるステップと
を含む方法。
（項目１６）
前記タンパク質が剪断に感受性のあるタンパク質を含む項目１５に記載の方法。
（項目１７）
前記タンパク質が血液凝固カスケードのタンパク質を含む項目１５に記載の方法。
（項目１８）
前記液体混合物中に存在する前記タンパク質の少なくとも約９５％が前記濾液中に回収される項目１５に記載の方法。
（項目１９）
前記液体混合物中に存在する前記タンパク質の少なくとも約９９％が前記濾液中に回収される項目１８に記載の方法。
（項目２０）
前記担体液体が水を含む項目１５に記載の方法。
（項目２１）
前記タンパク質がフォンウィルブランド因子（ｖＷＦ）、第ＶＩＩＩ因子、第ＸＩＩＩ因子、およびその混合物からなる群から選択される項目１５に記載の方法。
（項目２２）
前記分散した混入物が微生物を含む項目１５に記載の方法。
（項目２３）
前記濾液が前記分散した混入物を実質的に含まない項目１５に記載の方法。
（項目２４）
前記フィルタが多孔性メンブレンを含み、該多孔性メンブレンが約０．１μｍ〜約０．５μｍにサイズ調整された孔を含む項目１５に記載の方法。
（項目２５）
前記孔が約０．２μｍまたは約０．２２μｍにサイズ調整された項目２４に記載の方法。
（項目２６）
水性のタンパク質混合物を濾過する方法であって、該方法が
第１の圧力（Ｐ１）で水性混合物を提供するステップであって、該水性混合物が水と、該水に対して第１の濃度（Ｃ１）のフォンウィルブランド因子（ｖＷＦ）とを含むステップと、
該水性混合物を多孔性メンブレンフィルタに通過させて第２の圧力（Ｐ２）で濾液を形成するステップであって、該濾液が、該水と、該水に対して第２の濃度（Ｃ２）の該ｖＷＦとを含み、該多孔性メンブレンフィルタが、約０．１μｍ〜約０．５μｍにサイズ調整された孔を含むステップと、
該第１の圧力と該第２の圧力との間の圧力差（Ｐ１−Ｐ２）を確実に約９０ｍｂａｒ以
下にするために逆圧を該濾液に加えるステップと
を含む方法。
（項目２７）
前記液体混合物中に存在する前記ｖＷＦの少なくとも約９５％が前記濾液中に回収される項目２６に記載の方法。
（項目２８）
前記液体混合物中に存在する前記ｖＷＦの少なくとも約９９％が前記濾液中に回収される項目２７に記載の方法。
（項目２９）
前記孔が約０．２μｍまたは約０．２２μｍにサイズ調整された項目２６に記載の方法。
（項目３０）
前記水性混合物が微生物の個体群をさらに含み、該微生物の個体群の少なくとも一部が該水性混合物から前記多孔性メンブレンフィルタによって除去される項目２６に記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
液体のタンパク質混合物を濾過する方法であって、該方法が
第１の圧力（Ｐ１）で液体混合物を提供するステップであって、該液体混合物が、担体液体と、該担体液体に対して第１の濃度（Ｃ１）のタンパク質と、分散した混入物とを含むステップと、
該液体混合物をフィルタに通過させて第２の圧力（Ｐ２）で濾液を形成するステップであって、該濾液が、該担体液体と、該担体液体に対して第２の濃度（Ｃ２）の該タンパク質とを含み、該フィルタが、該液体混合物から該分散した混入物の少なくとも一部を除去するためにサイズ調整されたステップと、
該第１の圧力と該第２の圧力との間の圧力差（Ｐ１−Ｐ２）を確実に０ｍｂａｒより高く、かつ約３００ｍｂａｒ以下にするために逆圧を該濾液に加えるステップと
を含み、該液体混合物中に存在する該タンパク質の少なくとも約８５％が、該濾液中に回収される、方法。
【請求項２】
前記圧力差が約９０ｍｂａｒ以下である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記液体混合物中に存在する前記タンパク質の少なくとも約９５％が前記濾液中に回収される、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記液体混合物中に存在する前記タンパク質の少なくとも約９９％が前記濾液中に回収される、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記逆圧がフィルタ表面積の少なくとも約３００ｇ／分・ｍ２の平均濾液流速を生じさせるのに十分である、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記第１の圧力（Ｐ１）が少なくとも約２００ｍｂａｒのゲージ圧である、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記担体液体が水を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記分散した混入物が微生物を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記濾液が前記分散した混入物を実質的に含まない、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記フィルタが多孔性メンブレンを含み、該多孔性メンブレンが約０．１μｍ〜約０．５μｍにサイズ調整された孔を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
前記孔が約０．２μｍまたは約０．２２μｍにサイズ調整された、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
液体のタンパク質混合物を濾過する方法であって、該方法が
第１の圧力（Ｐ１）で液体混合物を提供するステップであって、該液体混合物が、担体液体と、該担体液体に対して第１の濃度（Ｃ１）のタンパク質と、分散した混入物とを含むステップと、
該液体混合物をフィルタに通過させて第２の圧力（Ｐ２）で濾液を形成するステップであって、該濾液が、該担体液体と、該担体液体に対して第２の濃度（Ｃ２）の該タンパク質とを含み、該フィルタが、該液体混合物から該分散した混入物の少なくとも一部を除去するためにサイズ調整されたステップと、
フィルタ表面積の少なくとも約３００ｇ／分・ｍ２の平均濾液流速を生じさせるのに十分な逆圧を該濾液に加えるステップと
を含み、該液体混合物中に存在する該タンパク質の少なくとも約８５％が、該濾液中に回収される、方法。
【請求項１３】
前記液体混合物中に存在する前記タンパク質の少なくとも約９５％が前記濾液中に回収される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記液体混合物中に存在する前記タンパク質の少なくとも約９９％が前記濾液中に回収される、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記担体液体が水を含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１６】
前記分散した混入物が微生物を含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１７】
前記濾液が前記分散した混入物を実質的に含まない、請求項１２に記載の方法。
【請求項１８】
前記フィルタが多孔性メンブレンを含み、該多孔性メンブレンが約０．１μｍ〜約０．５μｍにサイズ調整された孔を含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１９】
前記孔が約０．２μｍまたは約０．２２μｍにサイズ調整された、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
水性のタンパク質混合物を濾過する方法であって、該方法が
第１の圧力（Ｐ１）で水性混合物を提供するステップであって、該水性混合物が、水と、該水に対して第１の濃度（Ｃ１）のフォンウィルブランド因子（ｖＷＦ）とを含むステップと、
該水性混合物を多孔性メンブレンフィルタに通過させて第２の圧力（Ｐ２）で濾液を形成するステップであって、該濾液が、該水と、該水に対して第２の濃度（Ｃ２）の該ｖＷＦとを含み、該多孔性メンブレンフィルタが、約０．１μｍ〜約０．５μｍにサイズ調整された孔を含むステップと、
該第１の圧力と該第２の圧力との間の圧力差（Ｐ１−Ｐ２）を確実に０ｍｂａｒより高く、かつ約９０ｍｂａｒ以下にするために逆圧を該濾液に加えるステップと
を含む方法。
【請求項２１】
前記液体混合物中に存在する前記ｖＷＦの少なくとも約９５％が前記濾液中に回収される、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記液体混合物中に存在する前記ｖＷＦの少なくとも約９９％が前記濾液中に回収される、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記孔が約０．２μｍまたは約０．２２μｍにサイズ調整された、請求項２０に記載の方法。
【請求項２４】
前記水性混合物が微生物の個体群をさらに含み、該微生物の個体群の少なくとも一部が該水性混合物から前記多孔性メンブレンフィルタによって除去される、請求項２０に記載の方法。