【手続補正書】
【提出日】平成23年12月2日(2011.12.2)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
エラスターゼ活性化配列を含むI型膵臓エラスターゼタンパク質であって、前記エラスターゼ活性化配列は、エラスターゼ認識配列を含み、かつ、成熟I型膵臓エラスターゼのアミノ酸配列に作動的に連結されたものである、前記I型膵臓エラスターゼタンパク質。
【請求項２】
前記エラスターゼ認識配列の位置2にプロリン残基を含む、請求項1に記載のタンパク質。 
【請求項３】
前記エラスターゼ認識配列が配列番号11、13、15、20及び93からなる群より選択される配列を含む、請求項1に記載のタンパク質。
【請求項４】
前記活性化配列が配列番号80、72及び73からなる群より選択される配列を含む、請求項1に記載のタンパク質。
【請求項５】
配列番号42、48、49、53及び55からなる群より選択される配列を含む切断ドメインを含む、請求項1に記載のタンパク質。
【請求項６】
前記成熟エラスターゼ配列が配列番号84又は配列番号1の位置6から末端までのアミノ酸配列と少なくとも85％の配列同一性を有する配列を含む、請求項1〜5のいずれか１項に記載のタンパク質。
【請求項７】
配列番号64、65、67及び69からなる群より選択される配列を含む、請求項1に記載のタンパク質。
【請求項８】
シグナル配列を含む、請求項1に記載のタンパク質。
【請求項９】
請求項1〜8のいずれか1項に記載のタンパク質をコードする核酸分子。
【請求項１０】
請求項9に記載の核酸分子を含むベクター。
【請求項１１】
請求項9に記載の核酸分子を発現するように遺伝子組み換えされた宿主細胞。
【請求項１２】
請求項10に記載のベクターを含む宿主細胞。
【請求項１３】
前記宿主細胞のゲノムに前記ベクターの少なくとも1コピーが取り込まれている、請求項12に記載の宿主細胞。
【請求項１４】
プロペプチド配列を含むI型膵臓エラスターゼタンパク質を生成する条件下で請求項11〜13のいずれか1項に記載の宿主細胞を培養する工程を含む、I型膵臓エラスターゼタンパク質の製造方法。
【請求項１５】
前記I型膵臓エラスターゼタンパク質を、成熟I型膵臓エラスターゼタンパク質が生成される活性化条件に置く工程をさらに含む、請求項14に記載の方法。
【請求項１６】
前記方法のいずれの部分においてもトリプシンの使用を含まない、請求項14又は15に記載の方法。
【請求項１７】
前記宿主細胞をクエン酸化合物、コハク酸化合物又は酢酸化合物の存在下で培養する工程を含む、請求項14〜16のいずれか1項に記載の方法。
【請求項１８】
クエン酸化合物、コハク酸化合物又は酢酸化合物の少なくとも1つが5〜50 mM、7.5〜100 mM、10〜150 mM、50〜200 mM、100〜150 mM、75〜125 mM又は90〜110 mMの濃度で前記培養系に存在する、請求項17に記載の方法。
【請求項１９】
前記クエン酸化合物、コハク酸化合物及び酢酸化合物がそれぞれクエン酸ナトリウム、コハク酸ナトリウム及び酢酸ナトリウムである、請求項17又は18に記載の方法。
【請求項２０】
前記宿主細胞をpH2〜6で一定時間増殖させるか又は誘導し、前記タンパク質を含む溶液のpHをpH6からpH12まで上昇させる工程を含む、請求項17〜19のいずれか1項に記載の方法。
【請求項２１】
前記成熟I型膵臓エラスターゼタンパク質を単離する工程をさらに含む、請求項15に記載の方法。
【請求項２２】
成熟I型膵臓エラスターゼタンパク質を含む医薬組成物の製造方法であって、
（a）成熟I型エラスターゼタンパク質が生成される自己活性化条件下に自己活性化I型膵臓プロエラスターゼタンパク質を置く工程、及び
（b）前記成熟I型膵臓エラスターゼタンパク質を製剤化する工程、
を含み、前記工程により前記成熟I型膵臓エラスターゼタンパク質を含む医薬組成物を製造する、前記方法。
【請求項２３】
工程（b）が前記成熟I型膵臓エラスターゼを凍結乾燥する操作を含む、請求項22に記載の方法。
【請求項２４】
工程（b）が前記成熟エラスターゼタンパク質を凍結乾燥した後に1種類以上の緩衝成分と混合する操作をさらに含む、請求項23に記載の方法。
【請求項２５】
工程（b）が前記成熟エラスターゼタンパク質を凍結乾燥する前に1種類以上の緩衝成分と混合する操作をさらに含む、請求項23に記載の方法。
【請求項２６】
前記プロエラスターゼタンパク質の活性化が触媒量のエラスターゼの添加により開始される、請求項22〜25のいずれか1項に記載の方法。
【請求項２７】
請求項22〜26のいずれか1項に記載の方法により得ることのできる医薬組成物。
【請求項２８】
配列番号1に示すアミノ酸配列と少なくとも95％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む成熟ヒトI型エラスターゼタンパク質とトリプシンとを含む医薬組成物であって、前記トリプシンの上限が前記成熟エラスターゼタンパク質1 mgに対し5 ng未満のトリプシンである、前記医薬組成物。
【請求項２９】
トリプシンの上限が前記成熟エラスターゼタンパク質1 mgに対し4 ng未満のトリプシンである、請求項28に記載の医薬組成物。
【請求項３０】
トリプシンを含まない、請求項28に記載の医薬組成物。
【請求項３１】
配列番号70及び71からなるタンパク質のいずれをも含まない、請求項28〜30のいずれか1項に記載の医薬組成物。
【請求項３２】
トリプシンの上限がN-ベンゾイル-Phe-Val-Arg-pニトロアニリド（BENZ）比色分析トリプシン活性アッセイを用いて定量されるものである、請求項28〜31のいずれか1項に記載の医薬組成物。
【請求項３３】
前記医薬組成物中のトリプシン活性の上限が前記成熟エラスターゼタンパク質1 mgに対し1.56 ng未満に相当する、請求項28〜31のいずれか1項に記載の医薬組成物。
【請求項３４】
前記医薬組成物中のトリプシン活性の上限が、BENZ比色分析トリプシン活性アッセイを用いて定量した場合、前記成熟エラスターゼタンパク質1 mgに対し1.56 ng未満に相当する、請求項28〜31のいずれか1項に記載の医薬組成物。
【請求項３５】
前記成熟ヒトI型エラスターゼタンパク質が、N-スクシニル-Ala-Ala-Ala-pニトロアリニド（SLAP）加水分解アッセイを用いて定量した場合に20〜40 U/タンパク質mgの活性を有する、請求項28〜34のいずれか1項に記載の医薬組成物。
【請求項３６】
前記成熟ヒトI型エラスターゼタンパク質が配列番号1に示すアミノ酸配列と少なくとも99％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項28〜35のいずれか1項に記載の医薬組成物。
【請求項３７】
細菌タンパク質を含まない、請求項28〜36のいずれか1項に記載の医薬組成物。
【請求項３８】
前記成熟エラスターゼタンパク質以外には哺乳動物タンパク質を含まない、請求項28〜36のいずれか1項に記載の医薬組成物。
【請求項３９】
エンドトキシンの量が薬学的に許容される量を超えない、請求項28〜36のいずれか1項に記載の医薬組成物。
【請求項４０】
前記成熟エラスターゼタンパク質を0.0033 mg〜200 mg含む単位用量の形態にある、請求項28〜36のいずれか1項に記載の医薬組成物。
【請求項４１】
リン酸イオンを含む、請求項28〜36のいずれか1項に記載の医薬組成物。
【請求項４２】
カリウムイオンを含む、請求項28〜36のいずれか1項に記載の医薬組成物。
【請求項４３】
ポリソルベート-80を含む、請求項28〜36のいずれか1項に記載の医薬組成物。
【請求項４４】
ナトリウムイオン及び塩化物イオンを含む、請求項28〜36のいずれか1項に記載の医薬組成物。
【請求項４５】
0.5重量％未満の配列番号2からなるタンパク質及び0.5重量％未満の配列番号3からなるタンパク質を含む、請求項28〜44のいずれか1項に記載の医薬組成物。
【請求項４６】
前記成熟エラスターゼタンパク質が4℃で少なくとも1ヶ月保存した後にその比活性の60％〜100％を維持する、請求項28〜45のいずれか1項に記載の医薬組成物。
【請求項４７】
前記成熟エラスターゼタンパク質が4℃で少なくとも3ヶ月保存した後にその比活性の60％〜100％を維持する、請求項46に記載の医薬組成物。
【請求項４８】
前記成熟エラスターゼタンパク質が4℃で少なくとも6ヶ月保存した後にその比活性の60％〜100％を維持する、請求項47に記載の医薬組成物。
【請求項４９】
液体医薬組成物である、請求項28〜48のいずれか1項に記載の医薬組成物。
【請求項５０】
凍結乾燥医薬組成物である、請求項28〜48のいずれか1項に記載の医薬組成物。
【請求項５１】
動脈又は静脈の治療を必要とするヒト対象の動脈又は静脈の治療における、請求項27〜50のいずれか1項に記載の医薬組成物の使用。
【請求項５２】
動脈又は静脈の治療を必要とするヒト対象の動脈又は静脈を治療するための薬物の調製における、請求項27〜49のいずれか1項に記載の医薬組成物の使用。
【請求項５３】
動脈又は静脈の治療を必要とするヒト対象の動脈又は静脈の治療に使用するための、請求項27〜50のいずれか1項に記載の医薬組成物。