【手続補正書】
【提出日】平成24年8月28日(2012.8.28)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０４６５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０４６５】
ＹｌＤＧＡＴ*過剰発現の蓄積脂質レベルに対する効果は、これまでの実施例に記載されるように決定および比較され得る。実際に、ＤＧＡＴが、ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼによるその不活性化のためにリン酸化されれば、その天然ＤＧＡＴが変異されていない細胞に比べて全脂質の増大（全乾燥細胞質量の割合［「ＴＦＡ％ＤＣＷ」］で測定）を実証する変異体Ｙ４１８４Ｕ株は、ＡＭＰＫ／Ｓｎｆ１リン酸化部位における変異を有する変異体ＤＧＡＴに対応するであろう。
本発明の例示的態様を以下に列挙する。
（１）（ａ）非遺伝子導入油性真核宿主細胞のヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼの活性と比べて低下された活性を有するヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼと、
（ｂ）活性が低下されていないヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼを含む非遺伝子導入油性真核宿主細胞の総脂質含量と比べたときの総脂質含量の増大と
を含む、遺伝子導入油性真核宿主細胞。
（２）ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼの活性の低下および総脂質含量の増大が、
（ａ）前記ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼに関連する上流制御タンパク質の変更、
（ｂ）前記ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼのサブユニットをコードするポリヌクレオチドの変更、および
（ｃ）前記ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼによって制御される下流タンパク質の変更、
からなる群から選択される改変によるものである、（１）に記載の遺伝子導入油性真核宿主細胞。
（３）ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼの活性の低下および総脂質含量の増大が、
（ａ）前記ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼに関連し、Ｓａｋ１およびＴｏｓ３からなる群から選択されるキナーゼである上流制御タンパク質の下方制御と、
（ｂ）前記ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼに関連し、ヘキソキナーゼアイソザイム２（Ｈｘｋ２）からなるヘキソキナーゼである上流制御タンパク質の上方制御と、
（ｃ）前記ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼに関連し、グルコキナーゼ（Ｇｌｋ１）である上流制御タンパク質の上方制御と、
（ｄ）前記ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼに関連し、Ｒｅｇ１およびＧｌｃ７からなる群から選択されるＲｅｇ１−Ｇｌｃ７タンパク質−ホスファターゼ１複合体のタンパク質である上流制御タンパク質の上方制御と、
（ｅ）前記ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼのＳＮＦ１α−サブユニットをコードするポリヌクレオチドの下方制御と、
（ｆ）前記ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼのＳＮＦ１α−サブユニットをコードするポリヌクレオチドの制御ドメインの上方制御と、
（ｇ）触媒的に不活性なＳｎｆ１α−サブユニットの上方制御と、
（ｈ）前記ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼの、Ｇａｌ８３からなるＳＮＦ１β−サブユニットをコードするポリヌクレオチドの下方制御と、
（ｉ）前記ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼのＳＮＦ１γ−サブユニットをコードするポリヌクレオチドの下方制御と、
（ｊ）前記ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼによって制御され、Ｒｍｅ１およびＭｈｙ１からなる群から選択される亜鉛−フィンガータンパク質である下流タンパク質の上方制御と、
（ｋ）前記ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼによって制御され、ミクロソームチトクロムｂ5レダクターゼ（Ｃｂｒ１）である下流タンパク質の上方制御と、
（ｌ）前記ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼによって制御され、グルコーストランスポーター（Ｓｎｆ３）である下流タンパク質の上方制御と、
（ｍ）前記ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼによるリン酸化によって制御され、アセチル−ＣｏＡカルボキシラーゼおよびジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼからなる群から選択されるタンパク質である下流タンパク質の、前記ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼによってリン酸化することができない突然変異体の上方制御、
とからなる群から選択される改変によるものである、（２）に記載の遺伝子導入油性真核宿主細胞。
（４）ＳＮＦ１タンパク質キナーゼのα−サブユニットをコードするポリヌクレオチドが、
ａ）セリン／スレオニンタンパク質キナーゼ活性を有するポリペプチドであって、ＢＬＡＳＴＰアライメント法に基づいて、配列番号２、配列番号１７、配列番号２１、配列番号２３、配列番号２５、配列番号２７からなる群から選択されるアミノ酸配列と比べて少なくとも８０％のアミノ酸同一性を有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列、
ｂ）セリン／スレオニンタンパク質キナーゼ活性を有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列であって、ＢＬＡＳＴＮアライメント法に基づいて、配列番号１、配列番号１６、配列番号２０、配列番号２２、配列番号２４および配列番号２６からなる群から選択されるヌクレオチド配列と比べて少なくとも８０％の配列同一性を有するヌクレオチド配列、
ｃ）セリン／スレオニンタンパク質キナーゼ活性を有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列であって、配列番号１、配列番号１６、配列番号２０、配列番号２２、配列番号２４および配列番号２６からなる群から選択されるヌクレオチド配列とストリンジェント条件下でハイブリッド形成するヌクレオチド配列、あるいは
ｄ）前記（ａ）、（ｂ）または（ｃ）のヌクレオチド配列の相補配列（前記相補配列および前記ヌクレオチド配列は同じ数のヌクレオチドからなり、１００％相補的である）、
を含む、単離Ｓｎｆ１ヌクレオチド分子を含む、（３）に記載の油性真核宿主細胞。
（５）油性真核宿主細胞が、藻類、真菌、卵菌、ユーグレナ、ストラメノパイルおよび酵母からなる群から選択される、（１）〜（４）のいずれか一項に記載の遺伝子導入油性真核宿主細胞。
（６）酵母が、ヤロウイア属、カンジダ属、ロドトルラ属、ロドスポリジウム属、クリプトコッカス属、トリコスポロン属およびリポマイセス属からなる群から選択される、（５）に記載の遺伝子導入油性真核宿主細胞。
（７）酵母が、ヤロウイア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ  ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）である、（６）に記載の遺伝子導入油性真核酵母細胞。
（８）（１）〜（６）のいずれか一項に記載の遺伝子導入油性真核宿主細胞から得られる油または脂質。
（９）ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼを含む油性真核宿主細胞の総脂質含量を増大させるための方法であって、
（ａ）前記油性真核宿主細胞を形質転換し、それにより、前記ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼの活性が、非形質転換油性真核宿主細胞中のヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼの活性のレベルと比べて低下されることと、
（ｂ）前記ステップ（ａ）の形質転換細胞を適切な条件下で増殖させ、それにより、前記総脂質含量が、活性が低下されていないヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼを有する非形質転換油性真核宿主細胞から得られる総脂質含量と比べて増大されることと、
（ｃ）場合により、前記ステップ（ｂ）の細胞から油または脂質を回収してもよいことと
を含む前記方法。
（１０）ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼを有する油性真核宿主細胞が、
（ａ）前記ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼに関連する上流制御タンパク質の変更、
（ｂ）前記ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼのサブユニットをコードするポリヌクレオチドの変更、および
（ｃ）前記ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼによって制御される下流タンパク質の変更
からなる群から選択される改変によって形質転換される、（９）に記載の方法。
（１１）形質転換が、
（ａ）ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼに関連し、Ｓａｋ１およびＴｏｓ３からなる群から選択されるキナーゼである上流制御タンパク質の下方制御と、
（ｂ）ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼに関連し、ヘキソキナーゼアイソザイム２（Ｈｘｋ２）からなるヘキソキナーゼである上流制御タンパク質の上方制御と、
（ｃ）ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼに関連し、グルコキナーゼ（Ｇｌｋ１）である上流制御タンパク質の上方制御と、
（ｄ）ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼに関連し、Ｒｅｇ１およびＧｌｃ７からなる群から選択されるＲｅｇ１−Ｇｌｃ７タンパク質−ホスファターゼ１複合体のタンパク質である上流制御タンパク質の上方制御と、
（ｅ）ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼのＳＮＦ１α−サブユニットをコードするポリヌクレオチドの下方制御と、
（ｆ）ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼのＳＮＦ１α−サブユニットをコードするポリヌクレオチドの制御ドメインの上方制御と、
（ｇ）触媒的に不活性なＳｎｆ１α−サブユニットの上方制御と、
（ｈ）ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼの、Ｇａｌ８３からなるＳＮＦ１β−サブユニットをコードするポリヌクレオチドの下方制御と、
（ｉ）ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼのＳＮＦ１γ−サブユニットをコードするポリヌクレオチドの下方制御と、
（ｊ）ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼによって制御され、Ｒｍｅ１およびＭｈｙ１からなる群から選択される亜鉛−フィンガータンパク質である下流タンパク質の上方制御と、
（ｋ）ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼによって制御され、ミクロソームチトクロムｂ5レダクターゼ（Ｃｂｒ１）である下流タンパク質の上方制御と、
（ｌ）ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼによって制御され、グルコーストランスポーター（Ｓｎｆ３）である下流タンパク質の上方制御と、
（ｍ）ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼによるリン酸化によって制御され、アセチル−ＣｏＡカルボキシラーゼおよびジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼからなる群から選択されるタンパク質である下流タンパク質の、前記ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼによってリン酸化することができない突然変異体の上方制御、
とからなる群から選択される、（１０）に記載の方法。
（１２）ＳＮＦ１タンパク質キナーゼのＳｎｆ１α−サブユニットをコードするポリヌクレオチドが、
ａ）セリン／スレオニンタンパク質キナーゼ活性を有するポリペプチドであって、ＢＬＡＳＴＰアライメント法に基づいて、配列番号２、配列番号１７、配列番号２１、配列番号２３、配列番号２５、配列番号２７からなる群から選択されるアミノ酸配列と比べて少なくとも８０％のアミノ酸同一性を有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列、
ｂ）セリン／スレオニンタンパク質キナーゼ活性を有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列であって、ＢＬＡＳＴＮアライメント法に基づいて、配列番号１、配列番号１６、配列番号２０、配列番号２２、配列番号２４および配列番号２６からなる群から選択されるヌクレオチド配列と比べて少なくとも８０％の配列同一性を有するヌクレオチド配列、
ｃ）セリン／スレオニンタンパク質キナーゼ活性を有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列であって、配列番号１、配列番号１６、配列番号２０、配列番号２２、配列番号２４および配列番号２６からなる群から選択されるヌクレオチド配列とストリンジェント条件下でハイブリッド形成するヌクレオチド配列、あるいは
ｄ）前記（ａ）、（ｂ）または（ｃ）のヌクレオチド配列の相補配列（前記相補配列および前記ヌクレオチド配列は同じ数のヌクレオチドからなり、１００％相補的である）
を含む単離ヌクレオチド分子を含む、（１１）に記載の方法。
（１３）油性真核宿主細胞が、藻類、真菌、卵菌、ユーグレナ、ストラメノパイルおよび酵母からなる群から選択される、（１０）〜（１２）のいずれか一項に記載の方法。
（１４）酵母が、ヤロウイア属、カンジダ属、ロドトルラ属、ロドスポリジウム属、クリプトコッカス属、トリコスポロン属およびリポマイセス属からなる群から選択される、（１３）に記載の方法。
（１５）酵母が、ヤロウイア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ  ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）である、（１４）に記載の方法。
（１６）ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼを含む油性真核宿主細胞から得られる微生物油中の総多価不飽和脂肪酸含量を増大させるための方法であって、
（ａ）機能性多価不飽和脂肪酸生合成経路をコードする単離ポリヌクレオチドで前記油性真核宿主細胞を形質転換し、非形質転換油性真核宿主細胞中のヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼの活性のレベルと比べて、前記ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼの活性も低下されることと、
（ｂ）前記ステップ（ａ）の形質転換細胞を適切な条件下で増殖させ、それにより、総脂質含量が、活性が低下されていないヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼを有する非形質転換油性真核宿主細胞から得られる総脂質含量と比べて増大されることと、
（ｃ）場合により、前記ステップ（ｂ）の細胞から油または脂質を回収してもよいことと
を含む方法。
（１７）機能性多価不飽和脂肪酸をコードする遺伝子が、Δ９デサチュラーゼ、Δ１２デサチュラーゼ、Δ６デサチュラーゼ、Δ５デサチュラーゼ、Δ１７デサチュラーゼ、Δ８デサチュラーゼ、Δ１５デサチュラーゼ、Δ４デサチュラーゼ、Ｃ14/16エロンガーゼ、Ｃ16/18エロンガーゼ、Ｃ18/20エロンガーゼ、Ｃ20/22エロンガーゼおよびΔ９エロンガーゼからなる群から選択され、そしてヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼの活性の低下が、
（ａ）ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼに関連する上流制御タンパク質の変更、
（ｂ）ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼのサブユニットをコードするポリヌクレオチドの変更、および
（ｃ）ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼによって制御される下流タンパク質の変更
からなる群から選択される改変によるものである、（１６）に記載の方法。
（１８）多価不飽和脂肪酸がω−３脂肪酸またはω−６脂肪酸である、（１６）または（１７）に記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）非遺伝子導入油性真核宿主細胞のヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼの活性と比べて低下された活性を有するヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼと、
（ｂ）活性が低下されていないヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼを含む非遺伝子導入油性真核宿主細胞の総脂質含量と比べたときの総脂質含量の増大と
を含む、遺伝子導入油性真核宿主細胞。
【請求項２】
ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼの活性の低下および総脂質含量の増大が、
（ａ）前記ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼに関連する上流制御タンパク質の変更、
（ｂ）前記ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼのサブユニットをコードするポリヌクレオチドの変更、および
（ｃ）前記ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼによって制御される下流タンパク質の変更、
からなる群から選択される改変によるものである、請求項１に記載の遺伝子導入油性真核宿主細胞。
【請求項３】
ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼの活性の低下および総脂質含量の増大が、
（ａ）前記ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼに関連し、Ｓａｋ１およびＴｏｓ３からなる群から選択されるキナーゼである上流制御タンパク質の下方制御と、
（ｂ）前記ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼに関連し、ヘキソキナーゼアイソザイム２（Ｈｘｋ２）からなるヘキソキナーゼである上流制御タンパク質の上方制御と、
（ｃ）前記ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼに関連し、グルコキナーゼ（Ｇｌｋ１）である上流制御タンパク質の上方制御と、
（ｄ）前記ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼに関連し、Ｒｅｇ１およびＧｌｃ７からなる群から選択されるＲｅｇ１−Ｇｌｃ７タンパク質−ホスファターゼ１複合体のタンパク質である上流制御タンパク質の上方制御と、
（ｅ）前記ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼのＳＮＦ１α−サブユニットをコードするポリヌクレオチドの下方制御と、
（ｆ）前記ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼのＳＮＦ１α−サブユニットをコードするポリヌクレオチドの制御ドメインの上方制御と、
（ｇ）触媒的に不活性なＳｎｆ１α−サブユニットの上方制御と、
（ｈ）前記ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼの、Ｇａｌ８３からなるＳＮＦ１β−サブユニットをコードするポリヌクレオチドの下方制御と、
（ｉ）前記ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼのＳＮＦ１γ−サブユニットをコードするポリヌクレオチドの下方制御と、
（ｊ）前記ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼによって制御され、Ｒｍｅ１およびＭｈｙ１からなる群から選択される亜鉛−フィンガータンパク質である下流タンパク質の上方制御と、
（ｋ）前記ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼによって制御され、ミクロソームチトクロムｂ5レダクターゼ（Ｃｂｒ１）である下流タンパク質の上方制御と、
（ｌ）前記ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼによって制御され、グルコーストランスポーター（Ｓｎｆ３）である下流タンパク質の上方制御と、
（ｍ）前記ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼによるリン酸化によって制御され、アセチル−ＣｏＡカルボキシラーゼおよびジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼからなる群から選択されるタンパク質である下流タンパク質の、前記ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼによってリン酸化することができない突然変異体の上方制御、
とからなる群から選択される改変によるものである、請求項２に記載の遺伝子導入油性真核宿主細胞。
【請求項４】
ＳＮＦ１タンパク質キナーゼのα−サブユニットをコードするポリヌクレオチドが、
ａ）セリン／スレオニンタンパク質キナーゼ活性を有するポリペプチドであって、ＢＬＡＳＴＰアライメント法に基づいて、配列番号２、配列番号１７、配列番号２１、配列番号２３、配列番号２５、配列番号２７からなる群から選択されるアミノ酸配列と比べて少なくとも８０％のアミノ酸同一性を有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列、
ｂ）セリン／スレオニンタンパク質キナーゼ活性を有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列であって、ＢＬＡＳＴＮアライメント法に基づいて、配列番号１、配列番号１６、配列番号２０、配列番号２２、配列番号２４および配列番号２６からなる群から選択されるヌクレオチド配列と比べて少なくとも８０％の配列同一性を有するヌクレオチド配列、
ｃ）セリン／スレオニンタンパク質キナーゼ活性を有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列であって、配列番号１、配列番号１６、配列番号２０、配列番号２２、配列番号２４および配列番号２６からなる群から選択されるヌクレオチド配列とストリンジェント条件下でハイブリッド形成するヌクレオチド配列、あるいは
ｄ）前記（ａ）、（ｂ）または（ｃ）のヌクレオチド配列の相補配列（前記相補配列および前記ヌクレオチド配列は同じ数のヌクレオチドからなり、１００％相補的である）、
を含む、単離Ｓｎｆ１ヌクレオチド分子を含む、請求項３に記載の油性真核宿主細胞。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれか一項に記載の遺伝子導入油性真核宿主細胞から得られる油または脂質。
【請求項６】
ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼを含む油性真核宿主細胞の総脂質含量を増大させるための方法であって、
（ａ）前記油性真核宿主細胞を形質転換し、それにより、前記ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼの活性が、非形質転換油性真核宿主細胞中のヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼの活性のレベルと比べて低下されることと、
（ｂ）前記ステップ（ａ）の形質転換細胞を適切な条件下で増殖させ、それにより、前記総脂質含量が、活性が低下されていないヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼを有する非形質転換油性真核宿主細胞から得られる総脂質含量と比べて増大されることと、
（ｃ）場合により、前記ステップ（ｂ）の細胞から油または脂質を回収してもよいことと
を含む前記方法。
【請求項７】
ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼを有する油性真核宿主細胞が、
（ａ）前記ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼに関連する上流制御タンパク質の変更、
（ｂ）前記ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼのサブユニットをコードするポリヌクレオチドの変更、および
（ｃ）前記ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼによって制御される下流タンパク質の変更
からなる群から選択される改変によって形質転換される、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
形質転換が、
（ａ）ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼに関連し、Ｓａｋ１およびＴｏｓ３からなる群から選択されるキナーゼである上流制御タンパク質の下方制御と、
（ｂ）ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼに関連し、ヘキソキナーゼアイソザイム２（Ｈｘｋ２）からなるヘキソキナーゼである上流制御タンパク質の上方制御と、
（ｃ）ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼに関連し、グルコキナーゼ（Ｇｌｋ１）である上流制御タンパク質の上方制御と、
（ｄ）ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼに関連し、Ｒｅｇ１およびＧｌｃ７からなる群から選択されるＲｅｇ１−Ｇｌｃ７タンパク質−ホスファターゼ１複合体のタンパク質である上流制御タンパク質の上方制御と、
（ｅ）ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼのＳＮＦ１α−サブユニットをコードするポリヌクレオチドの下方制御と、
（ｆ）ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼのＳＮＦ１α−サブユニットをコードするポリヌクレオチドの制御ドメインの上方制御と、
（ｇ）触媒的に不活性なＳｎｆ１α−サブユニットの上方制御と、
（ｈ）ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼの、Ｇａｌ８３からなるＳＮＦ１β−サブユニットをコードするポリヌクレオチドの下方制御と、
（ｉ）ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼのＳＮＦ１γ−サブユニットをコードするポリヌクレオチドの下方制御と、
（ｊ）ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼによって制御され、Ｒｍｅ１およびＭｈｙ１からなる群から選択される亜鉛−フィンガータンパク質である下流タンパク質の上方制御と、
（ｋ）ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼによって制御され、ミクロソームチトクロムｂ5レダクターゼ（Ｃｂｒ１）である下流タンパク質の上方制御と、
（ｌ）ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼによって制御され、グルコーストランスポーター（Ｓｎｆ３）である下流タンパク質の上方制御と、
（ｍ）ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼによるリン酸化によって制御され、アセチル−ＣｏＡカルボキシラーゼおよびジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼからなる群から選択されるタンパク質である下流タンパク質の、前記ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼによってリン酸化することができない突然変異体の上方制御、
とからなる群から選択される、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
ＳＮＦ１タンパク質キナーゼのＳｎｆ１α−サブユニットをコードするポリヌクレオチドが、
ａ）セリン／スレオニンタンパク質キナーゼ活性を有するポリペプチドであって、ＢＬＡＳＴＰアライメント法に基づいて、配列番号２、配列番号１７、配列番号２１、配列番号２３、配列番号２５、配列番号２７からなる群から選択されるアミノ酸配列と比べて少なくとも８０％のアミノ酸同一性を有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列、
ｂ）セリン／スレオニンタンパク質キナーゼ活性を有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列であって、ＢＬＡＳＴＮアライメント法に基づいて、配列番号１、配列番号１６、配列番号２０、配列番号２２、配列番号２４および配列番号２６からなる群から選択されるヌクレオチド配列と比べて少なくとも８０％の配列同一性を有するヌクレオチド配列、
ｃ）セリン／スレオニンタンパク質キナーゼ活性を有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列であって、配列番号１、配列番号１６、配列番号２０、配列番号２２、配列番号２４および配列番号２６からなる群から選択されるヌクレオチド配列とストリンジェント条件下でハイブリッド形成するヌクレオチド配列、あるいは
ｄ）前記（ａ）、（ｂ）または（ｃ）のヌクレオチド配列の相補配列（前記相補配列および前記ヌクレオチド配列は同じ数のヌクレオチドからなり、１００％相補的である）
を含む単離ヌクレオチド分子を含む、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼを含む油性真核宿主細胞から得られる微生物油中の総多価不飽和脂肪酸含量を増大させるための方法であって、
（ａ）機能性多価不飽和脂肪酸生合成経路をコードする単離ポリヌクレオチドで前記油性真核宿主細胞を形質転換し、非形質転換油性真核宿主細胞中のヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼの活性のレベルと比べて、前記ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼの活性も低下されることと、
（ｂ）前記ステップ（ａ）の形質転換細胞を適切な条件下で増殖させ、それにより、総脂質含量が、活性が低下されていないヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼを有する非形質転換油性真核宿主細胞から得られる総脂質含量と比べて増大されることと、
（ｃ）場合により、前記ステップ（ｂ）の細胞から油または脂質を回収してもよいことと
を含む方法。
【請求項１１】
機能性多価不飽和脂肪酸をコードする遺伝子が、Δ９デサチュラーゼ、Δ１２デサチュラーゼ、Δ６デサチュラーゼ、Δ５デサチュラーゼ、Δ１７デサチュラーゼ、Δ８デサチュラーゼ、Δ１５デサチュラーゼ、Δ４デサチュラーゼ、Ｃ14/16エロンガーゼ、Ｃ16/18エロンガーゼ、Ｃ18/20エロンガーゼ、Ｃ20/22エロンガーゼおよびΔ９エロンガーゼからなる群から選択され、そしてヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼの活性の低下が、
（ａ）ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼに関連する上流制御タンパク質の変更、
（ｂ）ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼのサブユニットをコードするポリヌクレオチドの変更、および
（ｃ）ヘテロ三量体ＳＮＦ１タンパク質キナーゼによって制御される下流タンパク質の変更
からなる群から選択される改変によるものである、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
多価不飽和脂肪酸がω−３脂肪酸またはω−６脂肪酸である、請求項１０または１１に記載の方法。