【手続補正書】
【提出日】平成26年8月1日(2014.8.1)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
マウスであって、重鎖定常領域の核酸配列と作動可能に連結した、再構成されていない軽鎖Ｖセグメントおよび再構成されていないＪセグメントを該マウスの生殖系列に含む、マウス。
【請求項２】
前記再構成されていない軽鎖Ｖセグメントが、ヒトκセグメント、ヒトλセグメント、およびこれらの組合せから選択される、請求項１に記載のマウス。
【請求項３】
前記重鎖定常領域の核酸配列が、ＣＨ１配列、ヒンジ配列、ＣＨ２配列、ＣＨ３配列、およびこれらの組合せからなる群から選択される、請求項１に記載のマウス。
【請求項４】
前記再構成されていない軽鎖Ｖセグメントおよび前記再構成されていないＪセグメントにより、マウス内因性重鎖遺伝子座におけるマウス内因性重鎖Ｖセグメントおよびマウス内因性重鎖Ｊセグメントが置き換えられる、請求項１に記載のマウス。
【請求項５】
前記再構成されていない軽鎖Ｖセグメントにより、前記マウス内因性重鎖遺伝子座の、全てのまたは実質的に全ての機能的なマウス重鎖Ｖセグメントが置き換えられる、請求項４に記載のマウス。
【請求項６】
前記再構成されていないＪセグメントが軽鎖Ｊセグメントを含み、該軽鎖Ｊセグメントにより、前記マウス内因性重鎖遺伝子座の、全てのまたは実質的に全ての機能的なマウス重鎖Ｊセグメントが置き換えられる、請求項４に記載のマウス。
【請求項７】
前記再構成されていない軽鎖Ｖセグメントと前記再構成されていない軽鎖Ｊセグメントとが作動可能に連結され、前記マウスが、前記再構成されていない軽鎖Ｖセグメントと前記再構成されていない軽鎖Ｊセグメントとの間で機能的なＤセグメントを欠いている、請求項６に記載のマウス。
【請求項８】
前記再構成されていない軽鎖Ｖセグメントがヒトκセグメントであり、前記再構成されていない軽鎖Ｊセグメントがヒトκセグメントである、請求項７に記載のマウス。
【請求項９】
マウス定常領域遺伝子に作動可能に連結したヒトκ可変領域を含む再構成された免疫グロブリン遺伝子を前記マウスのゲノムに含むＢ細胞を含む、請求項１に記載のマウス。
【請求項１０】
前記再構成された免疫グロブリン遺伝子が、マウス内因性免疫グロブリン重鎖遺伝子座に位置する、請求項１に記載のマウス。
【請求項１１】
軽鎖定常遺伝子に作動可能に連結したヒト軽鎖Ｖセグメントおよびヒト軽鎖Ｊセグメントを前記マウスの生殖系列にさらに含む、請求項１に記載のマウス。
【請求項１２】
前記軽鎖定常遺伝子が、マウス軽鎖定常遺伝子である、請求項１１に記載のマウス。
【請求項１３】
前記ヒト軽鎖Ｖセグメントが、ヒトκＶセグメントである、請求項１２に記載のマウス。
【請求項１４】
前記マウス軽鎖定常遺伝子が、マウスκ軽鎖定常遺伝子である、請求項１３に記載のマウス。
【請求項１５】
マウスであって、免疫グロブリン重鎖定常領域と融合している第１のヒト軽鎖可変領域配列を含む第１のポリペプチドと、免疫グロブリン軽鎖定常領域と融合している第２のヒト軽鎖可変領域を含む第２のポリペプチドとを含む免疫グロブリンを該マウスの生殖系列から発現する、マウス。
【請求項１６】
前記第１のヒト軽鎖可変領域配列がヒトκ可変領域配列を含み、前記第２のヒト軽鎖可変領域がヒトκ可変領域およびヒトλ可変領域から選択される、請求項１５に記載のマウス。
【請求項１７】
前記免疫グロブリン重鎖定常領域が、ヒト重鎖定常領域およびマウス重鎖定常領域から選択される、請求項１６に記載のマウス。
【請求項１８】
前記免疫グロブリン軽鎖定常領域が、ヒト軽鎖定常領域およびマウス軽鎖定常領域から選択される、請求項１６に記載のマウス。
【請求項１９】
前記第１のポリペプチドを、機能的な内因性重鎖Ｖ遺伝子セグメントを欠く、改変されたマウス内因性免疫グロブリン重鎖遺伝子座から発現する、請求項１６に記載のマウス。
【請求項２０】
前記第２のポリペプチドを、機能的な内因性軽鎖Ｖ遺伝子セグメントを欠く、改変されたマウス内因性免疫グロブリン軽鎖遺伝子座から発現する、請求項１９に記載のマウス。
【請求項２１】
マウスであって、該マウスの生殖系列におけるマウス内因性免疫グロブリン重鎖遺伝子座で、全てのまたは実質的に全ての機能的なマウス内因性重鎖可変遺伝子セグメントの、少なくとも６つ以上の再構成されていない軽鎖Ｖ遺伝子セグメントおよび１または複数の再構成されていないＪ遺伝子セグメントによる置き換えを含み、ここで該再構成されていない軽鎖Ｖ遺伝子セグメントと該Ｊ遺伝子セグメントとが作動可能に連結されており、ここで該マウスは重鎖Ｖ遺伝子セグメントに由来する免疫グロブリン重鎖を発現することが不可能であり、ここで該マウスは野生型マウスの脾性Ｂ細胞集団（Ｂ２２０＋／ＩｇＭ＋）の少なくとも約７５％のサイズである脾性Ｂ細胞集団（Ｂ２２０＋／ＩｇＭ＋）を含む、マウス。
【請求項２２】
ヒト軽鎖可変ドメインを含む結合タンパク質を生成させるための、請求項１から２１のいずれか一項に記載のマウスの使用。
【請求項２３】
抗体を生成させるための、請求項１から２１のいずれかに記載のマウスの使用。
【請求項２４】
前記抗体がヒト抗体である、請求項２３に記載の使用。
【請求項２５】
二重特異性抗体を生成させるための、請求項１から２１のいずれか一項に記載のマウスの使用。
【請求項２６】
請求項１から２１のいずれか一項に記載のマウスに由来する細胞または組織。
【請求項２７】
ＥＳ細胞、Ｂ細胞、およびハイブリドーマから選択される、請求項２６に記載の細胞。
【請求項２８】
遺伝子改変マウスを作製するための方法であって、該遺伝子改変マウスは、重鎖定常領域の核酸配列と作動可能に連結した、再構成されていない免疫グロブリン軽鎖可変領域（ＶＬ）遺伝子セグメントおよび再構成されていない免疫グロブリン軽鎖接合（ＪＬ）遺伝子セグメントを該マウスの生殖系列に含み、該方法は：
（ａ）免疫グロブリン重鎖定常領域の核酸配列と作動可能に連結した、１つ以上の再構成されていないＶＬ遺伝子セグメントおよび少なくとも１つの再構成されていないＪＬ遺伝子セグメントを含む免疫グロブリン遺伝子座を含有するように、全能性マウス細胞を改変するステップ；
（ｂ）該全能性マウス細胞を適切な条件下で維持して、重鎖定常領域の核酸配列と作動可能に連結した、再構成されていない軽鎖Ｖセグメントおよび再構成されていないＪセグメントを該マウスの生殖系列に含む、遺伝子改変マウスに発生させるステップ、
を包含する、方法。
【請求項２９】
前記１つ以上の再構成されていないＶＬ遺伝子セグメントが、１つ以上のヒトＶκ遺伝子セグメント、１つ以上のヒトＶλ遺伝子セグメントまたはそれらの組み合わせを含み、そして必要に応じて前記少なくとも１つの再構成されていないＪＬ遺伝子セグメントが、ヒトＪκ遺伝子セグメント、ヒトＪλ遺伝子セグメントまたはそれらの組み合わせである、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記免疫グロブリン重鎖定常領域の核酸配列が、ＣＨ１配列、ヒンジ配列、ＣＨ２配列、ＣＨ３配列、およびこれらの組合せからなる群より選択される、請求項２８に記載の方法。
【請求項３１】
前記免疫グロブリン遺伝子座が、内因性マウス免疫グロブリン重鎖遺伝子座であり、かつ前記１つ以上の再構成されていない軽鎖ＶＬ遺伝子セグメントおよび前記少なくとも１つの再構成されていないＪＬ遺伝子セグメントにより、該内因性マウス重鎖遺伝子座の、１つ以上の内因性マウス重鎖可変領域（ＶＨ）遺伝子セグメントおよび１つ以上の内因性マウス重鎖接合（ＪＨ）遺伝子セグメントがそれぞれ置き換えられる、請求項２８に記載の方法。
【請求項３２】
前記１つ以上の再構成されていないＶＬ遺伝子セグメントにより、前記内因性マウス免疫グロブリン重鎖遺伝子座の、全てのまたは実質的に全ての機能的なマウスＶＨ遺伝子セグメントが置き換えられる、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
前記少なくとも１つの再構成されていないＪＬ遺伝子により、前記内因性マウス重鎖遺伝子座の、全てのまたは実質的に全ての機能的なマウスＪＨ遺伝子セグメントが置き換えられる、請求項３１に記載の方法。
【請求項３４】
前記１つ以上の再構成されていないＶＬ遺伝子セグメントと前記少なくとも１つの再構成されていないＪＬ遺伝子セグメントとが作動可能に連結され、前記マウスが、前記１つ以上の再構成されていないＶＬ遺伝子セグメントと前記少なくとも１つの再構成されていないＪＬ遺伝子セグメントとの間で機能的なＤセグメントを欠いている、請求項３１〜３３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３５】
前記１つ以上の再構成されていないＶＬ遺伝子セグメントがヒトＶκ遺伝子セグメントであり、かつ前記少なくとも１つの再構成されていないＪＬ遺伝子セグメントがヒトＪκ遺伝子セグメントである、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
マウス重鎖定常領域遺伝子セグメントに作動可能に連結したヒトκ可変領域を含む再構成された免疫グロブリン遺伝子をそのゲノムに含む、単離された細胞。
【請求項３７】
前記再構成された免疫グロブリン遺伝子が、内因性マウス免疫グロブリン重鎖遺伝子座に位置する、請求項３６に記載の単離された細胞。
【請求項３８】
軽鎖定常遺伝子に作動可能に連結したヒト軽鎖ＶＬ遺伝子セグメントおよびヒト軽鎖ＪＬ遺伝子セグメントを前記細胞の生殖系列にさらに含む、請求項３６に記載の単離された細胞。
【請求項３９】
前記軽鎖定常遺伝子が、マウス軽鎖定常遺伝子である、請求項３８に記載の単離された細胞。
【請求項４０】
前記ヒト軽鎖ＶＬ遺伝子セグメントが、ヒトＶκ遺伝子セグメントである、請求項３９に記載の単離された細胞。
【請求項４１】
前記マウス軽鎖定常遺伝子が、マウスκ軽鎖定常遺伝子である、請求項４０に記載の単離された細胞。
【請求項４２】
第１の免疫グロブリン重鎖定常領域と融合している第１のヒト軽鎖可変領域配列を含む第１のポリペプチドを含む、抗原結合タンパク質。
【請求項４３】
免疫グロブリン軽鎖定常領域と融合している第２の軽鎖可変領域を含む第２のポリペプチドをさらに含む、請求項４２に記載の抗原結合タンパク質。
【請求項４４】
前記第１のヒト軽鎖可変領域配列がヒトκ可変領域配列を含み、かつ前記第２のヒト軽鎖可変領域がヒトκ可変領域およびヒトλ可変領域から選択される、請求項４３に記載の抗原結合タンパク質。
【請求項４５】
前記免疫グロブリン重鎖定常領域が、ヒト重鎖定常領域およびマウス重鎖定常領域から選択される、請求項４４に記載の抗原結合タンパク質。
【請求項４６】
前記免疫グロブリン軽鎖定常領域が、ヒト軽鎖定常領域およびマウス軽鎖定常領域から選択される、請求項４４に記載の抗原結合タンパク質。
【請求項４７】
第２の免疫グロブリン重鎖定常領域と融合している第３のヒト軽鎖可変領域配列を含む第３のポリペプチドをさらに含む、請求項４２に記載の抗原結合タンパク質であって、ここで、前記第１の免疫グロブリン重鎖定常領域と該第２の免疫グロブリン重鎖定常領域とが同一であり、かつ前記第１のポリペプチドと前記第２のポリペプチドと該第３のポリペプチドとが会合して、二重特異性抗原結合タンパク質を形成する、抗原結合タンパク質。
【請求項４８】
前記第１のヒト軽鎖可変領域配列および前記第３のヒト軽鎖可変領域配列が、各々ヒトκ可変領域配列を含み、かつ前記第２のヒト軽鎖可変領域が、ヒトκ可変領域およびヒトλ可変領域から選択される、請求項４７に記載の抗原結合タンパク質。
【請求項４９】
前記第１の免疫グロブリン重鎖定常領域および前記第２の免疫グロブリン重鎖定常領域の各々が、ヒト重鎖定常領域およびマウス重鎖定常領域から選択される、請求項４７に記載の抗原結合タンパク質。
【請求項５０】
遺伝子改変マウスを作製するための方法であって、該方法は：
（ａ）全能性マウス細胞の内因性免疫グロブリン重鎖遺伝子座において、全てのまたは実質的に全ての機能的な内因性マウス重鎖可変遺伝子セグメントを、少なくとも６つ以上の再構成されていない軽鎖ＶＬ遺伝子セグメントおよび１つ以上の再構成されていないＪＬ遺伝子セグメントで置き換えるステップであって、ここで該少なくとも６つ以上の再構成されていない軽鎖ＶＬ遺伝子セグメントと該１つ以上の再構成されていないＪＬ遺伝子セグメントとが作動可能に連結されている、ステップ；
該細胞を適切な条件下で維持して、１つ以上の再構成されていないＪＬ遺伝子セグメントと作動可能に連結した、少なくとも６つ以上の再構成されていない軽鎖ＶＬ遺伝子セグメントを該細胞の生殖系列の内因性免疫グロブリン重鎖遺伝子座に含む、遺伝子改変マウスに発生させるステップ
を包含し、ここで該マウスは重鎖ＶＨ遺伝子セグメントに由来する免疫グロブリン重鎖を発現することが不可能であり、かつ該マウスは野生型マウスの脾性Ｂ細胞集団（Ｂ２２０＋／ＩｇＭ＋）の少なくとも約７５％のサイズである脾性Ｂ細胞集団（Ｂ２２０＋／ＩｇＭ＋）を含む、方法。
【請求項５１】
前記全能性マウス細胞を適切な条件下で維持して、遺伝子改変マウスに発生させるステップが、以下：
多能性／全能性マウス細胞を培養すること；
培養された該多能性／全能性細胞を宿主の胚に導入して、キメラ胚を形成すること；および
該キメラ胚を適切な宿主マウスに導入して、遺伝子改変マウスに発生させること、
を含む、請求項２８〜３５および５０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５２】
前記全能性細胞が、多能性マウス細胞、マウス胚性幹（ＥＳ）細胞または人工多能性マウス細胞である、請求項５１に記載の方法。
【請求項５３】
抗原結合タンパク質を作製するための方法であって、該方法は、以下：
請求項２８〜３５、５０〜５２のいずれか一項にしたがって作製されたマウスを対象の抗原で免疫するステップ、および
免疫された動物から細胞を回収するステップ
を包含し、ここで、該細胞は、ヒト軽鎖可変ドメインを含む抗原結合タンパク質を産生する、方法。
【請求項５４】
請求項２８〜３５または５０〜５２のいずれか一項にしたがって作製されたマウスに由来する細胞または組織。
【請求項５５】
ＥＳ細胞、Ｂ細胞、およびハイブリドーマから選択される、請求項５４に記載の細胞。
【請求項５６】
ターゲティングベクターであって、以下：
（ａ）第１のターゲティングアームおよび第２のターゲティングアームであって、該第１のターゲティングアームおよび該第２のターゲティングアームは、ヒトターゲティングアームおよびマウスターゲティングアームから独立して選択され、ここで該ターゲティングアームは、該ベクターを、内因性免疫グロブリンＶ領域遺伝子の遺伝子座または改変された免疫グロブリンＶ領域遺伝子の遺伝子座へと方向付ける、第１のターゲティングアームおよび第２のターゲティングアーム；ならびに
（ｂ）ヒトＶＬ遺伝子セグメントの隣接配列
を含む、ターゲティングベクター。
【請求項５７】
前記隣接配列が、ヒトＶＬ遺伝子セグメントおよび少なくとも１つのヒトＪκ遺伝子セグメントを含む、請求項５６に記載のターゲティングベクター。
【請求項５８】
前記隣接配列が、（ｉ）ｈＶκ４−１〜ｈＶκ１−６およびＪκ１、（ｉｉ）ｈＶκ４−１〜ｈＶκ１−６およびＪκ１〜Ｊκ２、（ｉｉｉ）ｈＶκ４−１〜ｈＶκ１−６およびＪκ１〜Ｊκ３、（ｉｖ）ｈＶκ４−１〜ｈＶκ１−６およびＪκ１〜Ｊκ４、（ｖ）ｈＶκ４−１〜ｈＶκ１−６およびＪκ１〜Ｊκ５、（ｖｉ）ｈＶκ３−７〜ｈＶκ１−１６、（ｖｉｉ）ｈＶκ１−１７〜ｈＶκ２−３０、（ｖｉｉｉ）ｈＶκ３−３１〜ｈＶκ２−４０、および（ｉｘ）これらの組合せからなる群より選択される、請求項５７に記載のターゲティングベクター。
【請求項５９】
前記第１のターゲティングアームおよび前記第２のターゲティングアームが、内因性免疫グロブリン遺伝子座または改変された免疫グロブリン遺伝子座における配列と同一である、請求項５６に記載のターゲティングベクター。
【請求項６０】
ＶＬ結合タンパク質をコードする核酸構築物であって、該構築物は、重鎖定常領域の遺伝子セグメントに作動可能に連結された、免疫グロブリン軽鎖可変ドメインまたはその一部をコードする遺伝子セグメントを含む、改変された免疫グロブリン遺伝子座を含み、ここで、
免疫グロブリン軽鎖可変ドメインをコードする該遺伝子セグメントは、重鎖定常領域をコードする第２の配列と融合した、軽鎖可変ドメインをコードする第１の配列を含む再構成されたヌクレオチド配列を形成するように再構成することができ、
該再構成されたヌクレオチド配列は、重鎖定常領域と融合した免疫グロブリン軽鎖可変ドメインを有するポリペプチドをコードする、
核酸構築物。
【請求項６１】
（ｃ）ヒトＶＬドメインをコードするヌクレオチド配列を取得するステップ；
（ｄ）ヒトＣＨ領域をコードする遺伝子とインフレームになったＶＬ領域配列をコードする該ヌクレオチド配列をクローニングして、ヒト結合タンパク質配列を形成させるステップ；ならびに
（ｅ）適切な細胞においてヒト抗原結合タンパク質配列を発現させるステップ
をさらに包含する、請求項５３に記載の方法。
【請求項６２】
（ａ）請求項２８〜３５および５０〜５２のいずれか一項にしたがって作製されたマウスを対象の抗原で免疫するステップ；
（ｂ）該マウスに該対象の抗原に対する免疫反応を発生させるステップ；ならびに
（ｃ）該対象の抗原に高アフィニティーで特異的に結合する、体細胞変異し、クラススイッチしているＶＬドメインを、該マウスから単離するステップ
を包含する、方法。
【請求項６３】
請求項５３および６１〜６２のいずれか一項に記載の方法にしたがって作製されたＶＬドメイン。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１３０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１３０】
一態様では、本明細書で記載されるマウスにおいて作製されるか、または本明細書で記載されるマウスにおいて作製された配列に由来する、抗体またはその抗原結合断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ）２、ｓｃＦｖ）が提供される。
例えば、本発明は、以下の項目を提供する：
（項目１）
マウスであって、重鎖定常領域の核酸配列と作動可能に連結した、再構成されていない軽鎖Ｖセグメントおよび再構成されていないＪセグメントを該マウスの生殖系列に含む、マウス。
（項目２）
上記再構成されていない軽鎖Ｖセグメントが、ヒトκセグメント、ヒトλセグメント、およびこれらの組合せから選択される、項目１に記載のマウス。
（項目３）
上記重鎖定常領域の核酸配列が、ＣＨ１配列、ヒンジ配列、ＣＨ２配列、ＣＨ３配列、およびこれらの組合せからなる群から選択される、項目１に記載のマウス。
（項目４）
上記再構成されていない軽鎖Ｖセグメントおよび上記再構成されていないＪセグメントにより、マウス内因性重鎖遺伝子座におけるマウス内因性重鎖Ｖセグメントおよびマウス内因性重鎖Ｊセグメントが置き換えられる、項目１に記載のマウス。
（項目５）
上記再構成されていない軽鎖Ｖセグメントにより、上記マウス内因性重鎖遺伝子座の、全てのまたは実質的に全ての機能的なマウス重鎖Ｖセグメントが置き換えられる、項目４に記載のマウス。
（項目６）
上記再構成されていないＪセグメントが軽鎖Ｊセグメントを含み、該軽鎖Ｊセグメントにより、上記マウス内因性重鎖遺伝子座の、全てのまたは実質的に全ての機能的なマウス重鎖Ｊセグメントが置き換えられる、項目４に記載のマウス。
（項目７）
上記再構成されていない軽鎖Ｖセグメントと上記再構成されていない軽鎖Ｊセグメントとが作動可能に連結され、上記マウスが、上記再構成されていない軽鎖Ｖセグメントと上記再構成されていない軽鎖Ｊセグメントとの間で機能的なＤセグメントを欠いている、項目６に記載のマウス。
（項目８）
上記再構成されていない軽鎖Ｖセグメントがヒトκセグメントであり、上記再構成されていない軽鎖Ｊセグメントがヒトκセグメントである、項目７に記載のマウス。
（項目９）
マウス定常領域遺伝子に作動可能に連結したヒトκ可変領域を含む再構成された免疫グロブリン遺伝子を上記マウスのゲノムに含むＢ細胞を含む、項目１に記載のマウス。
（項目１０）
上記再構成された免疫グロブリン遺伝子が、マウス内因性免疫グロブリン重鎖遺伝子座に位置する、項目１に記載のマウス。
（項目１１）
軽鎖定常遺伝子に作動可能に連結したヒト軽鎖Ｖセグメントおよびヒト軽鎖Ｊセグメントを上記マウスの生殖系列にさらに含む、項目１に記載のマウス。
（項目１２）
上記軽鎖定常遺伝子が、マウス軽鎖定常遺伝子である、項目１１に記載のマウス。
（項目１３）
上記ヒト軽鎖Ｖセグメントが、ヒトκＶセグメントである、項目１２に記載のマウス。
（項目１４）
上記マウス軽鎖定常遺伝子が、マウスκ軽鎖定常遺伝子である、項目１３に記載のマウス。
（項目１５）
マウスであって、免疫グロブリン重鎖定常領域と融合している第１のヒト軽鎖可変領域配列を含む第１のポリペプチドと、免疫グロブリン軽鎖定常領域と融合している第２のヒト軽鎖可変領域を含む第２のポリペプチドとを含む免疫グロブリンを該マウスの生殖系列から発現する、マウス。
（項目１６）
上記第１のヒト軽鎖可変領域配列がヒトκ可変領域配列を含み、上記第２のヒト軽鎖可変領域がヒトκ可変領域およびヒトλ可変領域から選択される、項目１５に記載のマウス。
（項目１７）
上記免疫グロブリン重鎖定常領域が、ヒト重鎖定常領域およびマウス重鎖定常領域から選択される、項目１６に記載のマウス。
（項目１８）
上記免疫グロブリン軽鎖定常領域が、ヒト軽鎖定常領域およびマウス軽鎖定常領域から選択される、項目１６に記載のマウス。
（項目１９）
上記第１のポリペプチドを、機能的な内因性重鎖Ｖ遺伝子セグメントを欠く、改変されたマウス内因性免疫グロブリン重鎖遺伝子座から発現する、項目１６に記載のマウス。
（項目２０）
上記第２のポリペプチドを、機能的な内因性軽鎖Ｖ遺伝子セグメントを欠く、改変されたマウス内因性免疫グロブリン軽鎖遺伝子座から発現する、項目１９に記載のマウス。
（項目２１）
マウスであって、該マウスの生殖系列におけるマウス内因性免疫グロブリン重鎖遺伝子座で、全てのまたは実質的に全ての機能的なマウス内因性重鎖可変遺伝子セグメントの、少なくとも６つ以上の再構成されていない軽鎖Ｖ遺伝子セグメントおよび１または複数の再構成されていないＪ遺伝子セグメントによる置き換えを含み、ここで該再構成されていない軽鎖Ｖ遺伝子セグメントと該Ｊ遺伝子セグメントとが作動可能に連結されており、ここで該マウスは重鎖Ｖ遺伝子セグメントに由来する免疫グロブリン重鎖を発現することが不可能であり、ここで該マウスは野生型マウスの脾性Ｂ細胞集団（Ｂ２２０＋／ＩｇＭ＋）の少なくとも約７５％のサイズである脾性Ｂ細胞集団（Ｂ２２０＋／ＩｇＭ＋）を含む、マウス。
（項目２２）
ヒト軽鎖可変ドメインを含む結合タンパク質を生成させるための、上記項目のいずれかに記載のマウスの使用。
（項目２３）
抗体を生成させるための、項目１から２１のいずれかに記載のマウスの使用。
（項目２４）
上記抗体がヒト抗体である、項目２３に記載の使用。
（項目２５）
二重特異性抗体を生成させるための、項目１から２１のいずれか一項に記載のマウスの使用。
（項目２６）
項目１から２１のいずれか一項に記載のマウスに由来する細胞または組織。
（項目２７）
ＥＳ細胞、Ｂ細胞、およびハイブリドーマから選択される、項目２６に記載の細胞。