【誤訳訂正書】
【提出日】平成26年4月7日(2014.4.7)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１７】
糖尿病性腎症は、持続性アルブミン尿症（＞３００mg／２４時間、または２００μｇ／分）によって特徴付けられ、下記の付加的な標準を満たすかどうかで臨床的に判断し得る：糖尿病性網膜症が存在する；糖尿病性糸球体硬化症以外の腎臓または泌尿器管の疾患の、臨床的証拠または検査上の証拠がない。糖尿病性腎症は、西洋では、腎臓疾患の最終段階の最も一般的な原因である。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１９】
試験実施例１：腎亜全摘（５／６）ラットにおける抗蛋白尿作用 [巣状糸球体硬化症モデル；T. W. Meyer と H. G. Renake, Am. J. Physio. 254, F856 (1988)]．
５週目のオスのラットを、ペントバルビタール ナトリウムの腹腔内注射によって麻酔をかけ、右の腎臓を２／３除去した。１週間後、同様の麻酔下で左の腎臓全部を除去した。２週間飼育した後、２４時間尿を集め、尿中の全蛋白量とアルブミン量をＡ／Ｇ−Ｂテスト（和光純薬）を用いて測定した。尿蛋白と血圧を基に、ラットを２つのグループ（賦形剤処置するラットと、「本発明の化合物」を経口で１mg／kg／日で処置するラット）に分ける。左の腎臓のみを腎摘出したラットを、シャム施術ラットとして用いた。「本発明の化合物」は、アラビアゴム中に懸濁し、懸濁液を経口で１日に１回、８週間投薬する。尿中の全蛋白量と尿中のアルブミンの量を測定するために、処置してから２週間目、４週間目、６週間目、８週間目に、２４時間尿を集める。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２０】
試験実施例２：インスリン非依存性（ＮＩＤＤ）糖尿病のラット（Ｗｉｓｔａｒ肥満ラット）における抗蛋白尿作用[H. Ikeda ら、Diabetes 30,1045 (1981)]
血中のグルコースのレベルと尿中の蛋白量を基に、１１週のＷｉｓｔａｒ肥満ラットを２つのグループ（賦形剤処置するラットと、「本発明の化合物」を経口で１mg／kg／日で処置するラット）に分ける。非糖尿病性コントロールラット（やせたラット）もまた用いる。「本発明の化合物」は、アラビアゴムに懸濁し、懸濁液を経口で１日に１回１０日間投薬する。処置してから２週間目、４週間目、６週間目、８週間目に、２４時間尿を集める。尿は、３，０００rpm で遠心分離し、上清の一部をカラム (Pharmacia PD10) で脱塩する。尿中の全蛋白量とアルブミンの量は、それぞれ LowryおよびELISA 法を用いて測定する。
細胞の増殖と細胞外マトリックス蓄積は、ヒトの進行性糸球体疾患の特徴的な観点であり、かつ最終段階の腎機能障害の主要な原因である。
【誤訳訂正４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２１】
試験実施例３：in vitro におけるメサンギウム細胞増殖の阻害
インターロイキン−１０は、in vitro および in vivo の両方で、メサンギウム細胞の増殖を刺激することが示される（S. J. Chadban ら、Lab. Invest 76 (5,1997,619-627）。１０９７ラットのメサンギウム細胞株の増殖（Y. Kakizaki ら、Clin. Exp. Immunol. 85 (1), 1991,157-63）は、３Ｈ−チミジンの取り込みで評価される。細胞は、３０−４０回目の継代の間の細胞を用いる。細胞は、ＲＰＭＩ １６４０培地（Gibco, USA）中で、熱で不活性化した牛胎児血清（ＦＣＳ）と、２０ｍＭのＨＥＰＥＳ緩衝液と、１００単位／ml のペニシリンと、１００μｇ／ml のストレプトマイシンと共に、加湿した５％ ＣＯ２雰囲気下で、３７℃で培養する。メサンギウム細胞は、低密度で９６−ウェル平底マイクロタイタープレート中のＲＰＭＩ／１０％ ＦＣＳ中に移し、一晩固着させる。次いで、サブコンフルエントの細胞を、ＲＰＭＩ／０．５％ ＦＣＳ中で、３日間飢餓状態に置く。次いで、２μmol／ml の「本発明の化合物」を含む溶液、好ましくは「本発明の化合物」をＤＭＳＯに溶解し、この保存液を標準生理食塩水で１：１０に希釈して新しく調整した溶液によって、またはサイトカイン類（R&D systems）を添加しもしくは添加しないコントロールによって、培地を置き換える。さらに４８時間細胞を培養し、３Ｈ−チミジンで６時間パルスした後、採取する。ＩＬ−１０（２０−１００ｎｇ／ml）を選択したウェルに加える。全試験において、６ウェルの２倍を用い、試験は３−５回繰り返す。ＩＬ−１０は、コントロールと比べて、常に１０９７増殖を促進する。（２５−７５％の増大、コントロールに対してＰ＜０．０１−０．００１）。Ｎ−{５−[４−(４−メチル−ピペラジノ−メチル)−ベンゾイルアミド]−２−メチルフェニル}−４−(３−ピリジル)−２−ピリミジン−アミン（ＣＧＰ５７１４８Ｂ）を、「本発明の化合物」として用いれば、メサンギウム細胞増殖の増大は、「本発明の化合物」の添加によって、完全に阻害される。
【誤訳訂正５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２２】
試験実施例４：オスのＷｉｓｔａｒラットにおける、モノクローナルＯＸ−７ 抗ラットＴｈｙ−１.１抗体で誘発される、メサンギウム細胞増殖性糸球体腎炎
モノクローナルＯＸ−７ 抗ラットＴｈｙ−１.１抗体は、メサンギウム細胞増殖性糸球体腎炎の誘発に用いられ（D. W. Mason と A. F. Williams, Biochem. J. 187 (1), 1980,1−20）、マクロファージは、ＥＤ１ 抗ラットＣＤ６８（C. D. Dijkstra ら、Immunology 54 (3), 1985,589-99）を用いて検出し、筋繊維芽細胞は、１Ａ４、抗ヒトａ−平滑筋アクチンでラベルすることによって同定し（Sigma Immunochemicals, St. Louis, MO）、そしてＭ７４４、抗−ＢｒｄＵ（Dako, Glostrup, Denmark）は、増殖している細胞を同定するために用いる。ヤギのポリクローナル 抗牛／抗ヒト タイプIVコラーゲン抗体（Southern Biotechnology, Birmingham, AL）は、細胞外マトリックスの試験に用いる。
【誤訳訂正６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２５】
組織は、４％の中性緩衝−ホルマリン液中で固定し、そしてパラフィンで包埋する。腎臓切片（４μｍ）は、過ヨウ素酸シッフ試薬（ＰＡＳ）で染色する。核の定量は、動物当たり５０個（hilar）の糸球体を試験することによって行う。
【誤訳訂正７】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２７】
ＢｒｄＵまたはＥＤ１抗体の何れかで染色された切片は、ＥＤ１＋またはＢｒｄＵ＋として採点される。
計数は、糸球体房領域を測定し、そして糸球体房に限定するために、計数線を用いて行い、それにより細管の内腔の細胞を除く。５０個の糸球体を、各々の動物で計数し、ラベルされた細胞を１ｍｍ２当たり平均値±ＳＤとして表す。さらに、二重にラベルされた切片の細胞の数はまた、ＥＤ１＋ＢｒｄＵ＋、ＥＤ１＋ＢｒｄＵ−、およびＥＤ１−ＢｒｄＵ＋として計数する。この疾患のモデルにおいて、有足細胞が増殖せず、かつ糸球体の内皮が増殖している細胞の＜３％を占めるので、増殖している細胞は、ＥＤ１＋ＢｒｄＵ＋としたマクロファージ、またはＥＤ１−ＢｒｄＵ＋とした増殖したメサンギウム細胞の何れかとして同定される。
【誤訳訂正８】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２９】
蛋白尿は、ＯＸ−７ ＩｇＧを摂取した動物で、コントロールラットと比べて穏やかに増大し、ＣＧＰ ５７１４８Ｂ４の処置によって影響を受けない（標準コントロール：２.１±０.２mg／２４時間；賦形剤処置したＴｈｙ−１腎炎：１３.４±７.２mg／２４時間、ＣＧＰ ５７１４８Ｂ−処置したＴｈｙ−１腎炎：１６.４±７.０mg／２４時間）。処置していないラットの糸球体において、ＰＡＳ−染色切片のメサンギウム 細胞過多と、増大したメサンギウム細胞マトリックスが示される。これらの病理学的変化は、ＣＧＰ ５７１４８Ｂを摂取したラットにおいては、観測されない。
【誤訳訂正９】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３０】
図の記載：抗Ｔｈｙ−１腎炎の動物は、核の数を数えることによって評価した場合に、コントロール動物と比較して、適度な糸球体細胞過多を表し、そしてＣＧＰ ５７１４８Ｂで処置したラットにおいて、有意に減少する（図１）。メサンギウム細胞（ＢｒｄＵ＋ＥＤ１−）増殖は、コントロールラットと比べて５倍に増大し、そしてＣＧＰ ５７１４８Ｂで処置によって、有意に減少する（図２）。同様に、活性化されたメサンギウム細胞の数（ａ−平滑筋アクチンはポジティブである）はまた、抗Ｔｈｙ−１腎炎で処置していないラットにおいて増大し、ＣＧＰ ５７１４８Ｂの投薬によって、有意に減少する（図３）。著しい免疫染色性タイプIVコラーゲンの糸球体マトリックス蓄積は、抗Ｔｈｙ−１腎炎で処置していないラットに存在し、ＣＧＰ ５７１４８Ｂの投薬によって有意に減少する。（図４）
【誤訳訂正１０】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３１】
試験実施例５：２００から２５０ｇの体重のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットにおける、実験的糖尿病性腎症への、「本発明の化合物」の効果
糖尿病は、上記のラットにおいて、ストレプトゾトシン（ＳＴＺ，５５mg／kg）を注射することによって誘発される。
７日以内で糖尿病を発症した全動物（ランダム・グルコース＞１５mmol／l）を、下記の試験に用いる。全ての糖尿病のラットに、体重を維持させ、そして正常血糖値を伴わないケトン尿を避けるために２単位／日のインシュリン（ヒトのウルトラレンテ）を摂取し、グルコースのレベルを２０−２５ｍＭにする。コントロールラットは、緩衝液のみを偽注射する。「本発明の化合物」、例えばＣＧＰ ５７１４８Ｂは、２０mg／kg／日の用量で、胃管栄養法によって投薬する。ＳＴＺ−糖尿病ラットは、「本発明の化合物」または賦形剤の摂取のために無作為化する。各々１６匹のラットで構成される試験群は、それぞれ下記：
（Ｉ）コントロ−ルラット、薬剤非投与；
（II）コントロールラット、「本発明の化合物」投与；
（III）ＳＴＺ−糖尿病性ラット、薬剤非投与；
（IV）ＳＴＺ−糖尿病性ラット、「本発明の化合物」投与；
の通りである。０週目、１週目、４週目、８週目、１２週目、２４週目および３２週目において、体重、血圧、グルコース、ＨｂＡ１Ｃ、水摂取量、食物摂取量を測定する。糸球体と管間質の組織学的分析は、試験の最後に行う。
糸球体の構造は、定量的組織形態学電子顕微鏡によって評価する。
ラットの除去した腎臓は、ＧＢＭの厚さと断片メサンギウム細胞の体積について分析する。
【誤訳訂正１１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３２】
得られた結果によって、例えばメサンギウム細胞増殖性糸球体腎炎の、病理学的所見の改善、特にメサンギウム細胞過多とマトリックス蓄積の改善などによって、「本発明の化合物」が、特に糖尿病性腎症、また糸球体腎炎、慢性腎盂腎炎、またはＩｇＡ腎症の、予防または好ましくは処置のために、使われ得ることを示している。
【誤訳訂正１２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００４３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００４３】
本発明の好ましい具体的態様において、「本発明の化合物」を含む医薬の投薬は、本明細書で記載の試験系の１つ、または好ましくは進行性糸球体疾患に罹患したヒトにおいて、恒温動物の糸球体細胞過多、メサンギウム細胞増殖、活性化したメサンギウム細胞の量と比べて、糸球体細胞過多、メサンギウム細胞増殖、活性化したメサンギウム細胞の数の減少をもたらす。
【誤訳訂正１３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】図面の簡単な説明
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【図面の簡単な説明】
【図１】  動物当たり５０個の糸球体における、糸球体断面（ｇｃｓ）当たりの核の数（平均値±ＳＤ）によって評価した、糸球体細胞質。糸球体細胞過多は、ＣＧＰ ５７１４８Ｂによって有意に減衰した。＊ｐ＜０．０５。
【図２】  動物当たり５０個の糸球体核における、糸球体断面（ｇｃｓ）当たりのＢｒｄＵ＋／ＥＤ１−細胞の数（平均値±ＳＥＭ）によって評価した、メサンギウム細胞増殖。メサンギウム細胞増殖は、ＣＧＰ ５７１４８Ｂによって有意に減衰した。＊ｐ＜０．００１。
【図３】  非処置ラット、およびＣＧＰ ５７１４８Ｂで処置したラット由来の、動物当たり５０個の糸球体における、糸球体断面（ｇｃｓ）当たりのａ−平滑筋アクチン免疫染色細胞の数（平均値±ＳＤ）によって評価した、活性化したメサンギウム細胞。＊ｐ＜０．０５。
【図４】  免疫染色した糸球体の断片領域（平均値±ＳＤ）によって評価した、タイプIVコラーゲンの定量。非処置ラットに対して＊ｐ＜０．０５。