【手続補正書】
【提出日】平成24年6月4日(2012.6.4)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式(I)のカチオン性脂質:
【化１】
2012509258.tif 000001
[式中、
R1はコレステロール又はその類似体であり、
Y1、Y2及びY5は独立にO、S又はNR4であり、
Y3及びY4は独立にO、S又はNR5であり、
L1は、一つ又は複数の炭素がNR6、O、S又はC(=Y)(YはO、S又はNR4である)で置き換えられている、置換、飽和又は不飽和、分岐又は直鎖のC3〜50アルキルを有するスペーサーであり、
(a)、(c)及び(e)は独立に0又は1であり、
(b)は0又は正の整数であるが、但し、(b)が0であるとき、(a)及び(c)は両方が同時に正の整数であることはなく、
(d)は0又は正の整数であり、
XはC又はPであり、
Q1はH、C1〜6アルキル、NH2又は-(L11)d1-R11であり、
Q2はH、C1〜6アルキル、NH2又は-(L12)d2-R12であり、
Q3は(=O)、H、C1〜6アルキル、NH2又は-(L13)d3-R13であるが、
但し、
(i)XがCであるとき、Q3は(=O)ではなく、
(ii)XがPであるとき、(e)は0であり、
L11、L12及びL13は独立に選択される二官能性スペーサーであり、
(d1)、(d2)及び(d3)は独立に0又は正の整数であり、
R11、R12及びR13は独立に水素、NH2、
【化２】
2012509258.tif 000002
であり、
Y'4はO、S又はNR'5であり、
Y'5は独立にO、S又はNR'4であり、
(c')及び(e')は独立に0又は1であり、
(d')は0又は正の整数であり、
X'はC又はPであり、
Q'1はH、C1〜6アルキル、NH2又は-(L'11)d'1-R'11であり、
Q'2はH、C1〜6アルキル、NH2又は-(L'12)d'2-R'12であり、
Q'3は(=O)、H、C1〜6アルキル、NH2又は-(L'13)d'3-R'13であるが、
但し、
(i)X'がCであるとき、Q'3は(=O)ではなく、
(ii)X'がPであるとき、(e')は0であり、
L'11、L'12及びL'13は独立に選択される二官能性スペーサーであり、
(d'1)、(d'2)及び(d'3)は独立に0又は正の整数であり、
R'11、R'12及びR'13は独立に水素、NH2、
【化３】
2012509258.tif 000003
であり、
R2〜7、R'2〜5及びR'7は水素、アミノ、置換アミノ、C1〜6アルキル、C2〜6アルケニル、C2〜6アルキニル、C3〜19分岐アルキル、C3〜8シクロアルキル、C1〜6置換アルキル、C2〜6置換アルケニル、C2〜6置換アルキニル、C3〜8置換シクロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、C1〜6ヘテロアルキル及び置換C1〜6ヘテロアルキルの中から独立に選択されるが、
但し、Q1〜3及びQ'1〜3の少なくとも一つは、
【化４】
2012509258.tif 000004
を含む]。
【請求項２】
L1が、(Y4)c-(CR2R3)d-C(=Y5)eの一部分と結合している場合、
-(CR21R22)t1-[C(=Y6)]e1-(Y4)c-(CR2R3)d-C(=Y5)e-、
-(CR21R22)t1Y7-(CR23R24)t2-(Y8)e2-[C(=Y6)]e1-(Y4)c-(CR2R3)d-C(=Y5)e-、
-(CR21R22CR23R24Y7)t3-[C(=Y6)]e1-(Y4)c-(CR2R3)d-C(=Y5)e-、
-(CR21R22CR23R24Y7)t3(CR25R26)t4-(Y8)e2-[C(=Y6)]e1-(Y4)c-(CR2R3)d-C(=Y5)e-、
-(CR21R22CR23R24Y7)t3(CR25R26)t4-(Y8)e2-[C(=Y6)]e1-(CR27R28)t1-(Y4)c-(CR2R3)d-C(=Y5)e-、
-[(CR21R22CR23R24)t5Y7]t6(CR25R26)t4-(Y8)e2-[C(=Y6)]e1-(Y4)c-(CR2R3)d-C(=Y5)e-、
-(CR21R22)t1-[(CR23R24)t2Y7]t7(CR25R26)t4-(Y4)c-(CR2R3)d-C(=Y5)e-、及び
-(CR21R22)t1-[(CR23R24)t2Y7]t7(CR25R26)t4-(Y8)e2-[C(=Y6)]e1-(Y4)c-(CR2R3)d-C(=Y5)e-
[式中、
Y6はO、NR29又はSであり、
Y7〜8は独立にO、NR29又はSであり、
R21〜29は水素、C1〜6アルキル、C3〜12分岐アルキル、C3〜8シクロアルキル、C1〜6置換アルキル、C3〜8置換シクロアルキル、アリール、置換アリール、アラルキル、C1〜6ヘテロアルキル、置換C1〜6ヘテロアルキル、C1〜6アルコキシ、フェノキシ及びC1〜6ヘテロアルコキシからなる群から独立に選択され、
(t1)、(t2)、(t3)、(t4)、(t5)、(t6)及び(t7)は各々独立に0又は正の整数であり、
各(c)、(e)、(e1)及び(e2)は独立に0又は1であり、
全ての他の変数は上に定義されたとおりである]
からなる群から独立に選択される、請求項1に記載のカチオン性脂質。
【請求項３】
L1が、(Y4)c-(CR2R3)d-C(=Y5)eの一部分と結合している場合、
-(CH2)4-C(=O)-、
-(CH2)5-C(=O)-、
-(CH2)6-C(=O)-、
-CH2CH2O-CH2O-C(=O)-、
-(CH2CH2O)2-CH2O-C(=O)-、
-(CH2CH2O)3-CH2O-C(=O)-、
-(CH2CH2O)2-C(=O)-、
-CH2CH2O-CH2CH2NH-C(=O)-、
-(CH2CH2O)2-CH2CH2NH-C(=O)-、
-(CH2CH2O)2-CH2CH2NH-C(=O)-CH2NHC(=O)-、
-(CH2CH2O)2-CH2CH2O-C(=O)-、
-CH2-O-CH2CH2O-CH2CH2NH-C(=O)-、
-CH2-O-(CH2CH2O)2-CH2CH2NH-C(=O)-、
-CH2-O-CH2CH2O-CH2C(=O)-、
-CH2-O-(CH2CH2O)2-CH2C(=O)-、
-(CH2)4-C(=O)NH-、
-(CH2)5-C(=O)NH-、
-(CH2)6-C(=O)NH-、
-CH2CH2O-CH2O-C(=O)-NH-、
-(CH2CH2O)2-CH2O-C(=O)-NH-、
-(CH2CH2O)3-CH2O-C(=O)-NH-、
-(CH2CH2O)2-C(=O)-NH-、
-(CH2CH2O)2-CH2C(=O)-NH-、
-CH2CH2O-CH2CH2NH-C(=O)-NH-、
-(CH2CH2O)2-CH2CH2NH-C(=O)-NH-、
-CH2-O-CH2CH2O-CH2CH2NH-C(=O)-NH-、
-CH2-O-(CH2CH2O)2-CH2CH2NH-C(=O)-NH-、
-CH2-O-CH2CH2O-CH2C(=O)-NH-、
-CH2-O-(CH2CH2O)2-CH2C(=O)-NH-、
-(CH2CH2O)2-、
-(CH2CH2O)3-、
-CH2CH2O-CH2O-、
-(CH2CH2O)2-CH2CH2NH-、
-(CH2CH2O)3-CH2CH2NH-、
-CH2CH2O-CH2CH2NH-、
-(CH2CH2O)2-CH2CH2NH-、
-CH2-O-CH2CH2O-CH2CH2NH-、
-CH2-O-(CH2CH2O)2-CH2CH2NH-、
-CH2-O-CH2CH2O-、及び
-CH2-O-(CH2CH2O)2-
からなる群から独立に選択される、請求項1に記載のカチオン性脂質。
【請求項４】
L11〜13及びL'11〜13が、
-(CR'21R'22)q1(Y'8)v'[C(=Y'9)]v(CR'23R'24)q2-、
-(CR'21R'22)q1(Y'8)v'[C(=Y'9)]vY'10(CR'23R'24)q2-、
-(CR'21R'22)q1(Y'8)v'[C(=Y'9)]v(CR'23R'24)q2-Y'11-(CR'23R'24)q3-、
-(CR'21R'22)q1(Y'8)v'[C(=Y'9)]vY'10(CR'23R'24)q2-Y'11-(CR'23R'24)q3-、
-(CR'21R'22)q1(Y'8)v'[C(=Y'9)]v(CR'23R'24CR'25R'26Y'12)q4(CR'27CR'28)q5-、
-(CR'21R'22)q1(Y'8)v'[C(=Y'9)]vY'10(CR'23R'24CR'25R'26Y'12)q4(CR'27CR'28)q5-、及び
【化５】
2012509258.tif 000005
[式中、
Y'8及びY'10〜12は独立にO、NR'30又はSであり、
Y'9は独立にO、NR'31又はSであり、
R'21〜31は水素、C1〜6アルキル、C3〜12分岐アルキル、C3〜8シクロアルキル、C1〜6置換アルキル、C3〜8置換シクロアルキル、アリール、置換アリール、アラルキル、C1〜6ヘテロアルキル、置換C1〜6ヘテロアルキル、C1〜6アルコキシ、フェノキシ及びC1〜6ヘテロアルコキシからなる群から独立に選択され、
(q1)、(q2)、(q3)、(q4)、(q5)及び(q6)は独立に0又は約1〜約10の正の整数であり、
(v)及び(v')は独立に0又は1である]
からなる群から独立に選択される、請求項1に記載のカチオン性脂質。
【請求項５】
L11〜13及びL'11〜13が、
-(CH2)4-、
-(CH2)3-、
-O(CH2)2-
-C(=O)O(CH2)3-、
-C(=O)NH(CH2)3-、
-C(=O)(CH2)2-、
-C(=O)(CH2)3-、
-CH2-C(=O)-O(CH2)3-、
-CH2-C(=O)-NH(CH2)3-、
-CH2-OC(=O)-O(CH2)3-、
-CH2-OC(=O)-NH(CH2)3-、
-(CH2)2-C(=O)-O(CH2)3-、
-(CH2)2-C(=O)-NH(CH2)3-、
-CH2C(=O)O(CH2)2-O-(CH2)2-、
-CH2C(=O)NH(CH2)2-O-(CH2)2-、
-(CH2)2C(=O)O(CH2)2-O-(CH2)2-、
-(CH2)2C(=O)NH(CH2)2-O-(CH2)2-、
-CH2C(=O)O(CH2CH2O)2CH2CH2-、及び
-(CH2)2C(=O)O(CH2CH2O)2CH2CH2-
からなる群から独立に選択される、請求項1に記載のカチオン性脂質。
【請求項６】
X(Q1)(Q2)(Q3)部分が、
【化６】
2012509258.tif 000006
である、請求項1に記載の化合物。
【請求項７】
式(Ia)
【化７】
2012509258.tif 000007
又は
【化８】
2012509258.tif 000008
[式中、
Y6及びY7は独立にO、S又はNR29、好ましくはO又はNHであり、
R21〜26及びR29は水素、C1〜6アルキル、C3〜12分岐アルキル、C3〜8シクロアルキル、C1〜6置換アルキル、C3〜8置換シクロアルキル、アリール、置換アリール、アラルキル、C1〜6ヘテロアルキル、置換C1〜6ヘテロアルキル、C1〜6アルコキシ、フェノキシ及びC1〜6ヘテロアルコキシの中から独立に選択され、
(t1)、(t2)、(t3)、(t4)及び(t7)は独立に0又は正の整数であり、
(t1)が2以上であるとき、R21及びR22は各発生時に独立に同一又は異なり、
(t2)及び(t7)が独立に2以上であるとき、R23、R24及びY7は各発生時に独立に同一又は異なり、
(t3)が2以上であるとき、R21、R22、R23、R24及びY6は各発生時に独立に同一又は異なり、
(t4)が2以上であるとき、R25及びR26は各発生時に独立に同一又は異なり、
全ての他の変数は上に定義されたとおりである]
を有する、請求項1に記載のカチオン性脂質。
【請求項８】
【化９】
2012509258.tif 000009
2012509258.tif 000010
2012509258.tif 000011
2012509258.tif 000012
2012509258.tif 000013
からなる群から選択される、請求項1に記載のカチオン性脂質。
【請求項９】
請求項1に記載の式(I)のカチオン性脂質を含むナノ粒子組成物。
【請求項１０】
融合性脂質及びPEG脂質を更に含む、請求項9に記載のナノ粒子組成物。
【請求項１１】
前記カチオン性脂質が、
【化１０】
2012509258.tif 000014
からなる群から選択される、請求項10に記載のナノ粒子組成物。
【請求項１２】
前記融合性脂質が、DOPE、DOGP、POPC、DSPC、EPC及びそれらの組合せからなる群から選択され、前記PEG脂質が、PEG-DSPE、PEG-ジパルミトイルグリカミド、C16mPEG-セラミド及びそれらの組合せからなる群から選択される、請求項10に記載のナノ粒子組成物。
【請求項１３】
コレステロールを更に含む、請求項10に記載のナノ粒子組成物。
【請求項１４】
式(I)のカチオン性脂質、ジアシルホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルエタノールアミンに結合したPEG(PEG-PE)及びコレステロール、
式(I)のカチオン性脂質、ジアシルホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミンに結合したPEG(PEG-PE)及びコレステロール、
式(I)のカチオン性脂質、ジアシルホスファチジルエタノールアミン、ジアシルホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミンに結合したPEG(PEG-PE)及びコレステロール、
式(I)のカチオン性脂質、ジアシルホスファチジルエタノールアミン、セラミドに結合したPEG(PEG-Cer)及びコレステロール、並びに
式(I)のカチオン性脂質、ジアシルホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルエタノールアミンに結合したPEG(PEG-PE)、セラミドに結合したPEG(PEG-Cer)及びコレステロール
の混合物の群から選択される、請求項13に記載のナノ粒子組成物。
【請求項１５】
前記カチオン性脂質が、ナノ粒子組成物中に存在する総脂質の約10%〜約99.9%の範囲のモル比を有する、請求項13に記載のナノ粒子組成物。
【請求項１６】
カチオン性脂質と、非コレステロール系融合性脂質と、PEG脂質と、コレステロールとのモル比が、ナノ粒子組成物中に存在する総脂質の約15〜25%：20〜78%：0〜50%：2〜10%である、請求項13に記載のナノ粒子組成物。
【請求項１７】
前記カチオン性脂質、DOPE、コレステロール及びC16mPEG-セラミドが、ナノ粒子組成物中に存在する総脂質の約17%:60%:20%:3%のモル比で含まれ、前記カチオン性脂質が、
【化１１】
2012509258.tif 000015
である、請求項13に記載のナノ粒子組成物。
【請求項１８】
請求項13に記載のナノ粒子組成物で封入された核酸を含むナノ粒子。
【請求項１９】
前記核酸がデオキシヌクレオチド、リボヌクレオチド、ロック核酸(LNA)、低分子干渉RNA(siRNA)、マイクロRNA(miRNA)、アプタマー、ペプチド核酸(PNA)、ホスホロジアミデートモルホリノオリゴヌクレオチド(PMO)、トリシクロ-DNA、二本鎖オリゴヌクレオチド(デコイODN)、触媒RNA(RNAi)、アプタマー、シュピーゲルマー、CpGオリゴマー及びそれらの組合せからなる群から選択される、請求項18に記載のナノ粒子。
【請求項２０】
前記核酸が一本鎖又は二本鎖のオリゴヌクレオチドであり、アンチセンスHIF-1αオリゴヌクレオチド、アンチセンススルビビンオリゴヌクレオチド、アンチセンスErbB3オリゴヌクレオチド、βカテニンオリゴヌクレオチド及びアンチセンスBcl-2オリゴヌクレオチドからなる群から選択される、請求項18に記載のナノ粒子。
【請求項２１】
前記オリゴヌクレオチドが、配列番号1、配列番号2及び3、配列番号3、配列番号4、配列番号5及び配列番号6に示される8個以上の連続ヌクレオチドを含む、請求項20に記載のナノ粒子。
【請求項２２】
前記カチオン性脂質と前記核酸との電荷比が約1:1〜約20:1の範囲である、請求項18に記載のナノ粒子。
【請求項２３】
前記ナノ粒子が、約50nm〜約150nmの範囲のサイズを有する、請求項18に記載のナノ粒子。
【請求項２４】
有効量の請求項18に記載のナノ粒子を含む、遺伝子発現を抑制又はダウンレギュレートする、あるいは癌細胞の増殖又は成長を抑制するための医薬組成物。
【請求項２５】
化学療法剤を更に含む、請求項24に記載の医薬組成物。
【請求項２６】
有効量の請求項18に記載のナノ粒子を含む、哺乳動物における癌を治療するための医薬組成物。
【請求項２７】
前記癌が肝臓への転移性である、請求項26に記載の医薬組成物。