【手続補正書】
【提出日】平成23年5月6日(2011.5.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＭＵＣ１６ポリペプチドに結合し、１つ以上の遊離システインアミノ酸と、以下：
【化２５】
2010526821.tif 000001
を含む重鎖配列とを含む、システイン改変抗ＭＵＣ１６抗体。
【請求項２】
親抗ＭＵＣ１６抗体の１つ以上のアミノ酸残基をシステインで置換する工程を包含するプロセスによって調製される、請求項１に記載のシステイン改変抗ＭＵＣ１６抗体。
【請求項３】
以下：
【化２６】
2010526821.tif 000002
を含む軽鎖配列をさらに含む請求項１に記載のシステイン改変抗ＭＵＣ１６抗体。
【請求項４】
前記親抗ＭＵＣ１６抗体が、モノクローナル抗体、二重特異性抗体、キメラ抗体、ヒト抗体およびヒト化抗体から選択される、請求項１〜３のいずれか１項に記載のシステイン改変抗ＭＵＣ１６抗体。
【請求項５】
Ｆａｂフラグメントである、請求項１〜４のいずれか１項に記載のシステイン改変抗ＭＵＣ１６抗体。
【請求項６】
細菌またはＣＨＯ細胞において産生される、請求項１〜５のいずれか１項に記載のシステイン改変抗ＭＵＣ１６抗体。
【請求項７】
ＭＵＣ１６タンパク質を含むと疑われるサンプル中の該タンパク質の存在を判定する方法であって、該方法は、以下の工程：
該サンプルを、１つ以上の遊離システインアミノ酸および配列番号１の重鎖配列を有するシステイン改変抗ＭＵＣ１６抗体に曝露する工程、および；
該サンプル中の該抗体の該ＭＵＣ１６タンパク質への結合を測定する工程であって、ここで、該抗体の該タンパク質への結合は、該サンプル中の該タンパク質の存在を示す、工程を包含し、ここで：
（ａ）該サンプルは細胞を含み、該細胞は、卵巣癌細胞、乳癌細胞、肺癌細胞または膵癌細胞であり；そして
（ｂ）該抗体は、蛍光色素、放射性同位体、ビオチンまたは金属錯化リガンドから選択される標識に共有結合されている、方法。
【請求項８】
ＭＵＣ１６ポリペプチドに結合し、配列番号１の重鎖配列を含むシステイン改変抗ＭＵＣ１６抗体（Ａｂ）およびアウリスタチン薬物部分（Ｄ）を含む、抗体−薬物結合体化合物であって、該システイン改変抗ＭＵＣ１６抗体は、１つ以上の遊離システインアミノ酸を介してリンカー部分（Ｌ）によってＤに結合され；該化合物は、式Ｉ：
Ａｂ−（Ｌ−Ｄ）ｐ        Ｉ
を有し、ここで、ｐは、１、２、３または４である、
抗体−薬物結合体化合物。
【請求項９】
ｐが２である、および／または
Ｌが、式：
【化２９】
2010526821.tif 000003
を有し、ここで：
Ａは、前記システイン改変抗体（Ａｂ）のシステインチオールに共有結合されたストレッチャー単位であり；
ａは、０または１であり；
各Ｗは、独立してアミノ酸単位であり；
ｗは、０〜１２の範囲の整数であり；
Ｙは、前記薬物部分に共有結合されたスペーサー単位であり；そして
ｙは、０、１または２である、
請求項８に記載の抗体−薬物結合体化合物。
【請求項１０】
式：
【化３０】
2010526821.tif 000004
を有し、ここで、ＰＡＢは、パラ−アミノベンジルカルバモイルであり、Ｒ１７は、（ＣＨ２）ｒ、Ｃ３−Ｃ８カルボシクリル、Ｏ−（ＣＨ２）ｒ、アリーレン、（ＣＨ２）ｒ−アリーレン、−アリーレン−（ＣＨ２）ｒ−、（ＣＨ２）ｒ−（Ｃ３−Ｃ８カルボシクリル）、（Ｃ３−Ｃ８カルボシクリル）−（ＣＨ２）ｒ、Ｃ３−Ｃ８ヘテロシクリル、（ＣＨ２）ｒ−（Ｃ３−Ｃ８ヘテロシクリル）、−（Ｃ３−Ｃ８ヘテロシクリル）−（ＣＨ２）ｒ−、−（ＣＨ２）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２）ｒ−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ２−、−（ＣＨ２）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−、−（ＣＨ２）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ２−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ２−および−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２）ｒ−から選択される二価のラジカルであり；ここで、Ｒｂは、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、フェニルまたはベンジルであり；そしてｒは、独立して、１〜１０の範囲の整数である、
請求項９に記載の抗体−薬物結合体化合物。
【請求項１１】
Ｗｗが、バリン−シトルリンである、および／または
Ｒ１７が、（ＣＨ２）５または（ＣＨ２）２である、請求項９に記載の抗体−薬物結合体化合物。
【請求項１２】
式：
【化３１】
2010526821.tif 000005
を有する、請求項９に記載の抗体−薬物結合体化合物。
【請求項１３】
Ｒ１７が、（ＣＨ２）５または（ＣＨ２）２である、請求項１２に記載の抗体−薬物結合体化合物。
【請求項１４】
式：
【化３２】
2010526821.tif 000006
を有する、請求項９に記載の抗体−薬物結合体化合物。
【請求項１５】
（ａ）Ｌが、ＭＣ−ｖａｌ−ｃｉｔ−ＰＡＢまたはＭＣである；および／または
（ｂ）Ｌが、リンカー試薬のＳＭＣＣ、ＢＭ（ＰＥＯ）２またはＢＭ（ＰＥＯ）３によって形成されたリンカーである；および／または
（ｃ）Ｄが、構造：
【化３３】
2010526821.tif 000007
を有するＭＭＡＥであり、ここで、波線は、前記リンカーＬへの結合部位を示す；または  （ｄ）Ｄが、構造：
【化３４】
2010526821.tif 000008
を有するＭＭＡＦであり、ここで、波線は、前記リンカーＬへの結合部位を示す；または  （ｅ）前記システイン改変抗ＭＵＣ１６抗体が、モノクローナル抗体、二重特異性抗体、キメラ抗体、ヒト抗体およびヒト化抗体から選択される；または
（ｆ）前記システイン改変抗ＭＵＣ１６抗体が、Ｆａｂフラグメントである、
請求項８に記載の抗体−薬物結合体化合物。
【請求項１６】
構造：
【化３５】
2010526821.tif 000009
から選択される抗体−薬物結合体化合物であって、ここで、Ｖａｌは、バリンであり；Ｃｉｔは、シトルリンであり；ｐは、１、２、３または４であり；そしてＡｂは、ＭＵＣ１
６ポリペプチドに結合し、配列番号１の重鎖配列を含む、システイン改変抗ＭＵＣ１６抗体である、抗体−薬物結合体化合物。
【請求項１７】
Ａｂが、配列番号２をさらに含む、請求項１６に記載の抗体−薬物結合体化合物。
【請求項１８】
ＭＵＣ１６ポリペプチドに結合し、配列番号１の重鎖配列を含むシステイン改変抗ＭＵＣ１６抗体（Ａｂ）およびアウリスタチン薬物部分（Ｄ）を含む、抗体−薬物結合体化合物の混合物であって、ここで、該システイン改変抗ＭＵＣ１６抗体は、１つ以上の遊離システインアミノ酸を介してリンカー部分（Ｌ）によってＤに結合され；該化合物は、式Ｉ：
Ａｂ−（Ｌ−Ｄ）ｐ        Ｉ
を有し、ここで、ｐは、１、２、３または４であり、平均薬物負荷は、１〜２である、抗体−薬物結合体化合物の混合物。
【請求項１９】
ＭＵＣ１６ポリペプチドに結合し、配列番号１の重鎖配列を含むシステイン改変抗ＭＵＣ１６抗体を含む抗体−薬物結合体化合物、および薬学的に許容可能な希釈剤、キャリアまたは賦形剤を含む、薬学的処方物であって、ここで該システイン改変抗ＭＵＣ１６抗体は、アウリスタチン薬物部分に共有結合されている、薬学的処方物。
【請求項２０】
レトロゾール、オキサリプラチン、ドセタキセル、５−ＦＵ、ラパチニブ、カペシタビン、ロイコボリン、エルロチニブ、パーツズマブ、ベバシズマブおよびゲムシタビンから選択される治療有効量の化学療法剤をさらに含む、請求項１８または請求項１９に記載の薬学的処方物。
【請求項２１】
癌を処置するための薬学的処方物であって、
ＭＵＣ１６ポリペプチドに結合し、配列番号１の重鎖配列を有するシステイン改変抗ＭＵＣ１６抗体を含む抗体−薬物結合体化合物、および薬学的に許容可能な希釈剤、キャリアまたは賦形剤を含み、ここで、該システイン改変抗ＭＵＣ１６抗体は、アウリスタチン薬物部分に共有結合されている、薬学的処方物。
【請求項２２】
前記癌が、卵巣癌、前立腺癌、尿路の癌、膵癌、肺癌、乳癌および結腸癌からなる群から選択される、請求項２１に記載の薬学的処方物。
【請求項２３】
前記抗体−薬物結合体化合物が、化学療法剤と組み合わせて投与されるようにされているものであり、ここで、該化学療法剤は、レトロゾール、シスプラチン、カルボプラチン、タキソール、パクリタキセル、オキサリプラチン、ドセタキセル、５−ＦＵ、ロイコボリン、エルロチニブ、パーツズマブ、ベバシズマブ、ラパチニブおよびゲムシタビンから選択される、請求項２１に記載の薬学的処方物。
【請求項２４】
ＭＵＣ１６ポリペプチドに結合し、配列番号１の重鎖配列を含むシステイン改変抗ＭＵＣ１６抗体、および薬学的に許容可能な希釈剤、キャリアまたは賦形剤を含む抗体−薬物結合体化合物を含む薬学的処方物の、癌を有する患者の処置のための医薬の製造における使用であって、ここで、該癌は、ＭＵＣ１６ポリペプチドの過剰発現を特徴とする、使用。
【請求項２５】
前記癌が、卵巣癌、前立腺癌、尿路の癌、膵癌、肺癌、乳癌または結腸癌である、請求項２４に記載の使用。
【請求項２６】
ＭＵＣ１６ポリペプチドに結合し、配列番号１の重鎖配列を有するシステイン改変抗ＭＵＣ１６抗体（Ａｂ）およびアウリスタチン薬物部分（Ｄ）を含む抗体−薬物結合体化合物を作製するための方法であって、ここで、該システイン改変抗体は、１つ以上の操作されたシステインアミノ酸を介してリンカー部分（Ｌ）によってＤに結合され；該化合物は、式Ｉ：
Ａｂ−（Ｌ−Ｄ）ｐ        Ｉ
を有し、ここで、ｐは、１、２、３または４であり；該方法は、以下の工程：
（ａ）該システイン改変抗体の操作されたシステイン基をリンカー試薬と反応させて、抗体−リンカー中間体Ａｂ−Ｌを形成する工程；および
（ｂ）Ａｂ−Ｌを、活性化された薬物部分Ｄと反応させ；それによって、該抗体−薬物結合体化合物を形成する工程；
を包含するか、または、以下の工程：
（ｃ）薬物部分の求核基をリンカー試薬と反応させて、薬物−リンカー中間体Ｄ−Ｌを形成する工程；および
（ｄ）Ｄ−Ｌを、該システイン改変抗体の操作されたシステイン基と反応させ；それによって、該抗体−薬物結合体化合物を形成する工程
を包含する、方法。
【請求項２７】
チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞において、前記システイン改変抗体を発現させる工程をさらに包含する、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記発現されたシステイン改変抗体を還元剤で処理する工程をさらに包含し、必要に応じて該還元剤が、ＴＣＥＰおよびＤＴＴから選択される、請求項２６に記載の方法。
【請求項２９】
前記発現されたシステイン改変抗体を、前記還元剤で処理した後、酸化剤で処理する工程をさらに包含し、必要に応じて該酸化剤が、硫酸銅、デヒドロアスコルビン酸および大気から選択される、請求項２８に記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２３】
本発明の１つの局面は、式Ｉの抗体薬物結合体複合物を作製するための方法であり、その方法は、以下の工程：（ａ）システイン改変抗体の操作されたシステイン基をリンカー試薬と反応させて、抗体−リンカー中間体Ａｂ−Ｌを形成する工程；および（ｂ）Ａｂ−Ｌを、活性化された薬物部分Ｄと反応させ；それによって、抗体−薬物結合体を形成する
工程；または、以下の工程：（ｃ）薬物部分の求核基をリンカー試薬と反応させて、薬物−リンカー中間体Ｄ−Ｌを形成する工程；および（ｄ）Ｄ−Ｌを、システイン改変抗体の操作されたシステイン基と反応させ；それによって、抗体−薬物結合体を形成する工程を包含する。
本発明の好ましい実施形態では、例えば以下が提供される：
（項目１）
ＭＵＣ１６ポリペプチドに結合し、１つ以上の遊離システインアミノ酸および配列番号９〜４０から選択される配列を含む、システイン改変抗ＭＵＣ１６抗体。
（項目２）
親抗ＭＵＣ１６抗体の１つ以上のアミノ酸残基をシステインで置換する工程を包含するプロセスによって調製される、項目１に記載のシステイン改変抗ＭＵＣ１６抗体。
（項目３）
前記１つ以上の遊離システインアミノ酸残基が、軽鎖に位置する、項目１に記載のシステイン改変抗ＭＵＣ１６抗体。
（項目４）
以下：
【表８】
2010526821.tif 000010
から選択される１つ以上の配列を含む、項目３に記載のシステイン改変抗ＭＵＣ１６抗体。
（項目５）
以下：
【表９】
2010526821.tif 000011
から選択される１つ以上の配列を含む、項目３に記載のシステイン改変抗ＭＵＣ１６抗体。
（項目６）
前記１つ以上の遊離システインアミノ酸残基が、重鎖に位置する、項目１に記載のシステイン改変抗ＭＵＣ１６抗体。
（項目７）
以下：
【表１０】
2010526821.tif 000012
から選択される１つ以上の配列を含む、項目６に記載のシステイン改変抗ＭＵＣ１６抗体。
（項目８）
以下：
【表１１】
2010526821.tif 000013
から選択される１つ以上の配列を含む、項目６に記載のシステイン改変抗ＭＵＣ１６抗体。
（項目９）
以下：
【化２５】
2010526821.tif 000014
を含む重鎖配列を含む、項目１に記載のシステイン改変ｈｕ抗ＭＵＣ１６抗体。
（項目１０）
以下：
【化２６】
2010526821.tif 000015
を含む軽鎖配列を含む項目１に記載のシステイン改変ｈｕ抗ＭＵＣ１６抗体。
（項目１１）
以下：
【化２７】
2010526821.tif 000016
を含む重鎖配列を含む、項目１に記載のシステイン改変キメラ抗ＭＵＣ１６抗体。
（項目１２）
以下：
【化２８】
2010526821.tif 000017
を含む軽鎖配列を含む、項目１に記載のシステイン改変キメラ抗ＭＵＣ１６抗体。
（項目１３）
前記親抗ＭＵＣ１６抗体が、モノクローナル抗体、二重特異性抗体、キメラ抗体、ヒト抗体およびヒト化抗体から選択される、項目１に記載のシステイン改変抗ＭＵＣ１６抗体。
（項目１４）
Ｆａｂフラグメントである、項目１に記載のシステイン改変抗ＭＵＣ１６抗体。
（項目１５）
細菌において産生される、項目１に記載のシステイン改変抗ＭＵＣ１６抗体。
（項目１６）
ＣＨＯ細胞において産生される、項目１に記載のシステイン改変抗ＭＵＣ１６抗体。
（項目１７）
ＭＵＣ１６タンパク質を含むと疑われるサンプル中の該タンパク質の存在を判定する方法であって、該方法は、以下の工程：
該サンプルを、１つ以上の遊離システインアミノ酸および配列番号９〜４０から選択される配列を有するシステイン改変抗ＭＵＣ１６抗体に曝露する工程、および；
該サンプル中の該抗体の該ＭＵＣ１６タンパク質への結合を測定する工程であって、ここで、該抗体の該タンパク質への結合は、該サンプル中の該タンパク質の存在を示す、工程を包含する、方法。
（項目１８）
前記細胞が、卵巣癌細胞、乳癌細胞、肺癌細胞または膵癌細胞である、項目１７に記載の方法。
（項目１９）
前記抗体が、蛍光色素、放射性同位体、ビオチンまたは金属錯化リガンドから選択される標識に共有結合されている、項目１７に記載の方法。
（項目２０）
前記抗体が、アウリスタチン薬物部分に共有結合されており、それによって、抗体−薬物結合体が形成されている、項目１に記載のシステイン改変抗ＭＵＣ１６抗体。
（項目２１）
ＭＵＣ１６ポリペプチドに結合し、１つ以上の遊離システインアミノ酸および配列番号９〜４０から選択される配列を含むシステイン改変抗ＭＵＣ１６抗体、ならびに薬学的に許容可能な希釈剤、キャリアまたは賦形剤を含む、薬学的処方物。
（項目２２）
ＭＵＣ１６ポリペプチドに結合し、１つ以上の遊離システインアミノ酸、配列番号９〜４０から選択される配列を含むシステイン改変抗ＭＵＣ１６抗体（Ａｂ）およびアウリスタチン薬物部分（Ｄ）を含む、抗体−薬物結合体であって、該システイン改変抗ＭＵＣ１６抗体は、１つ以上の遊離システインアミノ酸を介してリンカー部分（Ｌ）によってＤに結合され；この複合物は、式Ｉ：
Ａｂ−（Ｌ−Ｄ）ｐ        Ｉ
を有し、ここで、ｐは、１、２、３または４である、
抗体−薬物結合体。
（項目２３）
ｐが２である、項目２２に記載の抗体−薬物結合体複合物。
（項目２４）
Ｌが、式：
【化２９】
2010526821.tif 000018
を有し、ここで：
Ａは、前記システイン改変抗体（Ａｂ）のシステインチオールに共有結合されたストレッチャー単位であり；
ａは、０または１であり；
各Ｗは、独立してアミノ酸単位であり；
ｗは、０〜１２の範囲の整数であり；
Ｙは、前記薬物部分に共有結合されたスペーサー単位であり；そして
ｙは、０、１または２である、
項目２２に記載の抗体−薬物結合体複合物。
（項目２５）
式：
【化３０】
2010526821.tif 000019
を有し、ここで、ＰＡＢは、パラ−アミノベンジルカルバモイルであり、Ｒ１７は、（ＣＨ２）ｒ、Ｃ３−Ｃ８カルボシクリル、Ｏ−（ＣＨ２）ｒ、アリーレン、（ＣＨ２）ｒ−アリーレン、−アリーレン−（ＣＨ２）ｒ−、（ＣＨ２）ｒ−（Ｃ３−Ｃ８カルボシクリル）、（Ｃ３−Ｃ８カルボシクリル）−（ＣＨ２）ｒ、Ｃ３−Ｃ８ヘテロシクリル、（ＣＨ２）ｒ−（Ｃ３−Ｃ８ヘテロシクリル）、−（Ｃ３−Ｃ８ヘテロシクリル）−（ＣＨ２）ｒ−、−（ＣＨ２）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２）ｒ−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ２−、−（ＣＨ２）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−、−（ＣＨ２）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ２−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ２−および−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２）ｒ−から選択される二価のラジカルであり；ここで、Ｒｂは、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、フェニルまたはベンジルであり；そしてｒは、独立して、１〜１０の範囲の整数である、
項目２４に記載の抗体−薬物結合体複合物。
（項目２６）
Ｗｗが、バリン−シトルリンである、項目２４に記載の抗体−薬物結合体複合物。
（項目２７）
Ｒ１７が、（ＣＨ２）５または（ＣＨ２）２である、項目２４に記載の抗体−薬物結合体複合物。
（項目２８）
式：
【化３１】
2010526821.tif 000020
を有する、項目２４に記載の抗体−薬物結合体複合物。
（項目２９）
Ｒ１７が、（ＣＨ２）５または（ＣＨ２）２である、項目２８に記載の抗体−薬物結合体複合物。
（項目３０）
式：
【化３２】
2010526821.tif 000021
を有する、項目２４に記載の抗体−薬物結合体複合物。
（項目３１）
Ｌが、ＭＣ−ｖａｌ−ｃｉｔ−ＰＡＢまたはＭＣである、項目２２に記載の抗体薬物結合体。
（項目３２）
Ｌが、リンカー試薬のＳＭＣＣ、ＢＭ（ＰＥＯ）２またはＢＭ（ＰＥＯ）３によって形成されたリンカーである、項目２２に記載の抗体−薬物結合体複合物。
（項目３３）
Ｄが、構造：
【化３３】
2010526821.tif 000022
を有するＭＭＡＥであり、ここで、波線は、前記リンカーＬへの結合部位を示す、項目２２に記載の抗体−薬物結合体複合物。
（項目３４）
Ｄが、構造：
【化３４】
2010526821.tif 000023
を有するＭＭＡＦであり、ここで、波線は、前記リンカーＬへの結合部位を示す、項目２２に記載の抗体−薬物結合体複合物。
（項目３５）
前記システイン改変抗ＭＵＣ１６抗体が、モノクローナル抗体、二重特異性抗体、キメラ抗体、ヒト抗体およびヒト化抗体から選択される、項目２２に記載の抗体−薬物結合体複合物。
（項目３６）
前記システイン改変抗ＭＵＣ１６抗体が、Ｆａｂフラグメントである、項目２２に記載の抗体−薬物結合体複合物。
（項目３７）
構造：
【化３５】
2010526821.tif 000024
から選択される抗体−薬物結合体複合物であって、ここで、Ｖａｌは、バリンであり；Ｃｉｔは、シトルリンであり；ｐは、１、２、３または４であり；そしてＡｂは、ＭＵＣ１
６ポリペプチドに結合し、１つ以上の遊離システインアミノ酸および配列番号９〜４０から選択される配列を含む、システイン改変抗ＭＵＣ１６抗体である、抗体−薬物結合体複合物。
（項目３８）
Ａｂが、配列番号１を含む、項目３７に記載の抗体薬物結合体。
（項目３９）
Ａｂが、配列番号２を含む、項目３７に記載の抗体薬物結合体。
（項目４０）
Ａｂが、配列番号３を含む、項目３７に記載の抗体薬物結合体。
（項目４１）
Ａｂが、配列番号４を含む、項目３７に記載の抗体薬物結合体。
（項目４２）
Ａｂが、配列番号１および配列番号２を含む、項目３７に記載の抗体薬物結合体。
（項目４３）
Ａｂが、配列番号３および配列番号４を含む、項目４２に記載の抗体薬物結合体。
（項目４４）
ＭＵＣ１６ポリペプチドに結合し、１つ以上の遊離システインアミノ酸、配列番号９〜４０から選択される配列を含むシステイン改変抗ＭＵＣ１６抗体（Ａｂ）およびアウリスタチン薬物部分（Ｄ）を含む、抗体−薬物結合体複合物の混合物であって、ここで、該システイン改変抗ＭＵＣ１６抗体は、１つ以上の遊離システインアミノ酸を介してリンカー部分（Ｌ）によってＤに結合され；該複合物は、式Ｉ：
Ａｂ−（Ｌ−Ｄ）ｐ        Ｉ
を有し、ここで、ｐは、１、２、３または４であり、平均薬物負荷は、１〜２である、抗体−薬物結合体複合物の混合物。
（項目４５）
ＭＵＣ１６ポリペプチドに結合し、１つ以上の遊離システインアミノ酸および配列番号９〜４０から選択される配列を含むシステイン改変抗ＭＵＣ１６抗体を含む抗体−薬物結合体、および薬学的に許容可能な希釈剤、キャリアまたは賦形剤を含む、薬学的処方物であって、ここで該システイン改変抗ＭＵＣ１６抗体は、アウリスタチン薬物部分に共有結合されている、薬学的処方物。
（項目４６）
レトロゾール、オキサリプラチン、ドセタキセル、５−ＦＵ、ラパチニブ、カペシタビン、ロイコボリン、エルロチニブ、パーツズマブ、ベバシズマブおよびゲムシタビンから選択される治療有効量の化学療法剤をさらに含む、項目４５に記載の薬学的処方物。
（項目４７）
ＭＵＣ１６ポリペプチドに結合し、１つ以上の遊離システインアミノ酸および配列番号９〜４０から選択される配列を有するシステイン改変抗ＭＵＣ１６抗体を含む抗体−薬物結合体、および薬学的に許容可能な希釈剤、キャリアまたは賦形剤を含む薬学的処方物を患者に投与する工程を包含する、癌を処置する方法であって、ここで、該システイン改変抗ＭＵＣ１６抗体は、アウリスタチン薬物部分に共有結合されている、方法。
（項目４８）
前記癌が、卵巣癌、前立腺癌、尿路の癌、膵癌、肺癌、乳癌および結腸癌からなる群から選択される、項目４７に記載の方法。
（項目４９）
前記患者が、前記抗体−薬物結合体複合物とともに化学療法剤を投与され、ここで、該化学療法剤は、レトロゾール、シスプラチン、カルボプラチン、タキソール、パクリタキセル、オキサリプラチン、ドセタキセル、５−ＦＵ、ロイコボリン、エルロチニブ、パーツズマブ、ベバシズマブ、ラパチニブおよびゲムシタビンから選択される、項目４７に記載の方法。
（項目５０）
ＭＵＣ１６ポリペプチドに結合し、１つ以上の遊離システインアミノ酸および配列番号９〜４０から選択される配列を有するシステイン改変抗ＭＵＣ１６抗体、および薬学的に許容可能な希釈剤、キャリアまたは賦形剤を含む抗体−薬物結合体を含む薬学的処方物であって、ここで、該システイン改変抗ＭＵＣ１６抗体は、アウリスタチン薬物部分に共有結合されている、薬学的処方物；
容器；および
該複合物が、ＭＵＣ１６ポリペプチドの過剰発現を特徴とする癌を処置するために使用され得ることを示している添付文書またはラベル
を備えた、製品。
（項目５１）
前記癌が、卵巣癌、前立腺癌、尿路の癌、膵癌、肺癌、乳癌または結腸癌である、項目５０に記載の製品。
（項目５２）
ＭＵＣ１６ポリペプチドに結合し、１つ以上の遊離システインアミノ酸および配列番号９〜４０から選択される配列を有するシステイン改変抗ＭＵＣ１６抗体（Ａｂ）およびアウリスタチン薬物部分（Ｄ）を含む抗体薬物結合体複合物を作製するための方法であって、ここで、該システイン改変抗体は、該１つ以上の操作されたシステインアミノ酸を介してリンカー部分（Ｌ）によってＤに結合され；該複合物は、式Ｉ：
Ａｂ−（Ｌ−Ｄ）ｐ        Ｉ
を有し、ここで、ｐは、１、２、３または４であり；該方法は、以下の工程：
（ａ）該システイン改変抗体の操作されたシステイン基をリンカー試薬と反応させて、抗体−リンカー中間体Ａｂ−Ｌを形成する工程；および
（ｂ）Ａｂ−Ｌを、活性化された薬物部分Ｄと反応させ；それによって、該抗体−薬物結合体複合物を形成する工程；
または、以下の工程：
（ｃ）薬物部分の求核基をリンカー試薬と反応させて、薬物−リンカー中間体Ｄ−Ｌを形成する工程；および
（ｄ）Ｄ−Ｌを、該システイン改変抗体の操作されたシステイン基と反応させ；それによって、該抗体−薬物結合体複合物を形成する工程
を包含する、方法。
（項目５３）
チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞において、前記システイン改変抗体を発現させる工程をさらに包含する、項目５２に記載の方法。
（項目５４）
前記発現されたシステイン改変抗体を還元剤で処理する工程をさらに包含する、項目５３に記載の方法。
（項目５５）
前記還元剤が、ＴＣＥＰおよびＤＴＴから選択される、項目５４に記載の方法。
（項目５６）
前記発現されたシステイン改変抗体を、前記還元剤で処理した後、酸化剤で処理する工程をさらに包含する、項目５５に記載の方法。
（項目５７）
前記酸化剤が、硫酸銅、デヒドロアスコルビン酸および大気から選択される、項目５６に記載の方法。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２４６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２４６】
【表５】
2010526821.tif 000025
チオｃｈ３Ａ５−ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−ＭＭＡＥは、卵巣癌の異種移植片モデルに対して、各ＩｇＧ用量レベルにおいて、ｓｔｄ  ｃｈ３Ａ５−ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−ＭＭＡＥと少なくとも同程度に活性であり、１．５ｍｇ／ｋｇにおいて部分的な有効性がもたらされ（ＭＭＡＥ用量は、チオｃｈ３Ａ５−ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−ＭＭＡＥに対して３５μｇ／ｍ２であり、ｓｔｄ  ｃｈ３Ａ５−ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−ＭＭＡＥに対して７１μｇ／ｍ２である）、３ｍｇ／ｋｇ（６９  対  １４１μｇ／ｍ２  ＭＭＡＥ）および６ｍｇ／ｋｇ（１３９  対  ２８３μｇ／ｍ２  ＭＭＡＥ）において腫瘍のほぼ完全な除去がもたらされた。ＭＭＡＥ用量に関して述べると、チオｃｈ３Ａ５−ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−ＭＭＡＥは、ｓｔｄ  ｃｈ３Ａ５−ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−ＭＭＡＥの約２倍有効だった。いずれの結合体についても、すべての用量レベルにおいて、有害作用は観察されなかった。