【手続補正書】
【提出日】平成26年10月10日(2014.10.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ）ヘルペスウイルス由来の第１のタンパク質もしくはその断片をコードする第１のヌクレオチド配列またはその断片および
ｂ）前記ヘルペスウイルス由来の第２のタンパク質もしくはその断片をコードする第２のヌクレオチド配列またはその断片
を含むポリヌクレオチドを含む自己複製ＲＮＡ分子であって、
前記自己複製ＲＮＡ分子が適した細胞の中に導入された場合に、前記第１のヘルペスウイルスタンパク質またはその断片および前記第２のヘルペスウイルスタンパク質またはその断片が、前記第１のタンパク質または断片および前記第２のタンパク質または断片を含有する前記細胞における複合体の形成に十分な量で産生されるように、前記第１のヌクレオチド配列および前記第２のヌクレオチド配列が１つまたは複数の制御エレメントに作動可能に連結されており、ただし、前記第１のタンパク質および前記第２のタンパク質が、同じタンパク質でも同じタンパク質の断片でもなく、前記第１のタンパク質が、前記第２のタンパク質の断片ではなく、前記第２のタンパク質が、前記第１のタンパク質の断片ではないことを条件とする、自己複製ＲＮＡ分子。
【請求項２】
前記第１のヌクレオチド配列が、第１の制御エレメントに作動可能に連結され、前記第２のヌクレオチド配列が、第２の制御エレメントに作動可能に連結されている、請求項１に記載の自己複製ＲＮＡ分子。
【請求項３】
前記ヘルペスウイルス由来の第３のタンパク質またはその断片をコードする第３のヌクレオチド配列をさらに含み、前記第３のヌクレオチド配列は、制御エレメントに作動可能に連結されている、請求項１または２に記載の自己複製ＲＮＡ分子。
【請求項４】
前記ヘルペスウイルス由来の第４のタンパク質またはその断片をコードする第４のヌクレオチド配列をさらに含み、前記第４のヌクレオチド配列が、制御エレメントに作動可能に連結されている、請求項３に記載の自己複製ＲＮＡ分子。
【請求項５】
前記ヘルペスウイルス由来の第５のタンパク質またはその断片をコードする第５のヌクレオチド配列をさらに含み、前記第５のヌクレオチド配列が、制御エレメントに作動可能に連結されている、請求項４に記載の自己複製ＲＮＡ分子。
【請求項６】
各々の前記制御エレメントが、サブゲノムプロモーター、ＩＲＥＳ、およびウイルス２Ａ部位から成る群から独立して選択される、請求項１〜５のいずれか一項に記載の自己複製ＲＮＡ分子。
【請求項７】
前記ヘルペスウイルスが、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の自己複製ＲＮＡ分子。
【請求項８】
前記第１のタンパク質または断片がｇＭまたはその断片であり、そして前記第２のタンパク質または断片がｇＮまたはその断片である、請求項７に記載の自己複製ＲＮＡ分子。
【請求項９】
前記第１のタンパク質または断片が、ｇＨまたはその断片であり、前記第２のタンパク質または断片が、ｇＬまたはその断片である、請求項７に記載の自己複製ＲＮＡ分子。
【請求項１０】
前記第１のタンパク質または断片が、ｇＨまたはその断片であり、前記第２のタンパク質または断片が、ｇＬまたはその断片であり、前記第３のタンパク質または断片が、ｇＯまたはその断片である、請求項７に記載の自己複製ＲＮＡ分子。
【請求項１１】
前記第１のタンパク質または断片が、ｇＨまたはその断片であり、前記第２のタンパク質または断片が、ｇＬまたはその断片であり、前記第３のタンパク質または断片が、ＵＬ１２８またはその断片であり、前記第４のタンパク質または断片が、ＵＬ１３０またはその断片であり、前記第５のタンパク質または断片が、ＵＬ１３１またはその断片である、請求項７に記載の自己複製ＲＮＡ分子。
【請求項１２】
前記ヘルペスウイルスが、水痘帯状疱疹ウイルス（ＶＺＶ）である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の自己複製ＲＮＡ分子。
【請求項１３】
前記第１のタンパク質または断片がｇＥまたはその断片であり、そして前記第２のタンパク質または断片がｇＬまたはその断片である、請求項１２に記載の自己複製ＲＮＡ分子。
【請求項１４】
前記第１のタンパク質または断片が、ｇＨまたはその断片であり、前記第２のタンパク質または断片が、ｇＬまたはその断片である、請求項１２に記載の自己複製ＲＮＡ分子。
【請求項１５】
前記ヘルペスウイルスがＨＳＶであり、ここで前記第１のタンパク質または断片が、ｇＨまたはその断片であり、そして前記第２のタンパク質または断片が、ｇＬまたはその断片である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の自己複製ＲＮＡ分子。
【請求項１６】
前記ヘルペスウイルスがＥＢＶであり、ここで
前記第１のタンパク質または断片が、ｇＨまたはその断片であり、そして前記第２のタンパク質または断片が、ｇＬまたはその断片であるか；あるいは
前記第１のタンパク質または断片がｇＭまたはその断片であり、そして前記第２のタンパク質または断片がｇＮまたはその断片である、
請求項１〜６のいずれか一項に記載の自己複製ＲＮＡ分子。
【請求項１７】
前記ヘルペスウイルスがＨＨＶ６またはＨＨＶ７であり、ここで
前記第１のタンパク質または断片がｇＨまたはその断片であり、そして前記第２のタンパク質または断片がｇＬまたはその断片であるか；あるいは
前記第１のタンパク質または断片がｇＨまたはその断片であり、そして前記第２のタンパク質または断片がｇＬまたはその断片であり、そして前記第３のタンパク質または断片がｇＯまたはその断片である、
請求項１〜６のいずれか一項に記載の自己複製ＲＮＡ分子。
【請求項１８】
前記ヘルペスウイルスがＨＨＶ８であり、ここで前記第１のタンパク質または断片がｇＨまたはその断片であり、そして前記第２のタンパク質または断片がｇＬまたはその断片である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の自己複製ＲＮＡ分子。
【請求項１９】
アルファウイルスレプリコンである、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の自己複製ＲＮＡ分子。
【請求項２０】
請求項１９に記載のアルファウイルスレプリコンを含むアルファウイルスレプリコン粒子（ＶＲＰ）。
【請求項２１】
請求項２０に記載のＶＲＰおよび薬学的に許容されるビヒクルを含む組成物。
【請求項２２】
アジュバントをさらに含む、請求項２１に記載の組成物。
【請求項２３】
請求項１〜１９のいずれか一項に記載の自己複製ＲＮＡおよび薬学的に許容されるビヒクルを含む組成物。
【請求項２４】
ＲＮＡ送達系をさらに含む、請求項２３に記載の組成物。
【請求項２５】
前記ＲＮＡ送達系が、（i）リポソーム、（ii）ポリマーナノ粒子、（iii）水中油型カチオン性ナノエマルジョン、または（iv）それらの任意の組み合わせを含む、請求項２４に記載の組成物。
【請求項２６】
前記送達系が、水中油型カチオン性ナノエマルジョンを含む、請求項２５に記載の組成物。
【請求項２７】
タンパク質複合体を形成するための組成物であって、前記組成物は、請求項２０に記載のＶＲＰを含み、前記組成物は、細胞に送達され、そして前記細胞は、アルファウイルスレプリコンの発現に適した条件下で維持され、ここでタンパク質複合体が形成されることを特徴とする、組成物。
【請求項２８】
前記細胞が、ｉｎ  ｖｉｖｏにおけるものである、請求項２７に記載の組成物。
【請求項２９】
タンパク質複合体を形成するための組成物であって、前記組成物は、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の自己複製ＲＮＡを含み、前記組成物は、細胞に送達され、そして前記細胞は、前記自己複製ＲＮＡの発現に適した条件下で維持され、ここでタンパク質複合体が形成されることを特徴とする、組成物。
【請求項３０】
前記細胞が、ｉｎ  ｖｉｖｏにおけるものである、請求項２９に記載の組成物。
【請求項３１】
細胞へのヘルペスウイルス侵入を阻害するための組成物であって、前記組成物は、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の自己複製ＲＮＡを含み、前記組成物を前記細胞と接触させることを特徴とする、組成物。
【請求項３２】
細胞へのヘルペスウイルス侵入を阻害するための組成物であって、前記組成物は、請求項２０に記載のＶＲＰを含み、前記組成物を前記細胞と接触させることを特徴とする、組成物。
【請求項３３】
前記細胞が、上皮細胞、内皮細胞、および線維芽細胞から成る群から選択される、請求項３１または請求項３２に記載の組成物。
【請求項３４】
前記細胞が、上皮細胞である、請求項３３に記載の組成物。
【請求項３５】
前記細胞が、ｉｎ  ｖｉｖｏにおけるものである、請求項３１〜３４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３６】
個体において免疫応答を誘発するための、請求項２０に記載のＶＲＰを含む組成物または請求項２１または２２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３７】
個体において免疫応答を誘発するための、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の自己複製ＲＮＡ分子を含む組成物または請求項２３〜２６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３８】
前記免疫応答が、中和抗体の産生を含む、請求項３６または３７に記載の組成物。
【請求項３９】
前記中和抗体が、補体非依存性である、請求項３８に記載の組成物。
【請求項４０】
請求項１〜１９のいずれか一項に記載の自己複製ＲＮＡ分子をコードする組換えＤＮＡ分子。
【請求項４１】
前記組換えＤＮＡ分子が、プラスミドである、請求項４０に記載の組換えＤＮＡ分子。
【請求項４２】
細胞においてタンパク質複合体を形成するための、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の自己複製ＲＮＡまたは請求項２０に記載のＶＲＰを含む組成物。
【請求項４３】
細胞へのヘルペスウイルス侵入を阻害するための、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の自己複製ＲＮＡまたは請求項２０に記載のＶＲＰを含む組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２６】
本発明はまた、免疫応答を誘発するまたは細胞の中へのＣＭＶ侵入を阻害するために、細胞においてＣＭＶタンパク質複合体を形成する、２つ以上のＣＭＶタンパク質をコードする自己複製ＲＮＡ分子（たとえばＶＲＰ、自己複製ＲＮＡ分子を含む組成物、およびリポソーム）の使用にも関する。
例えば、本願発明は、以下の項目を提供する：
（項目１）
ａ）ヘルペスウイルス由来の第１のタンパク質もしくはその断片をコードする第１のヌクレオチド配列またはその断片および
ｂ）上記ヘルペスウイルス由来の第２のタンパク質もしくはその断片をコードする第２のヌクレオチド配列またはその断片
を含むポリヌクレオチドを含む自己複製ＲＮＡ分子であって、
上記自己複製ＲＮＡ分子が適した細胞の中に導入された場合に、上記第１のヘルペスウイルスタンパク質またはその断片および上記第２のヘルペスウイルスタンパク質またはその断片が、上記第１のタンパク質または断片および上記第２のタンパク質または断片を含有する上記細胞における複合体の形成に十分な量で産生されるように、上記第１のヌクレオチド配列および上記第２のヌクレオチド配列が１つまたは複数の制御エレメントに作動可能に連結されている、自己複製ＲＮＡ分子。
（項目２）
上記第１のタンパク質および上記第２のタンパク質が、同じタンパク質でも同じタンパク質の断片でもなく、上記第１のタンパク質が、上記第２のタンパク質の断片ではなく、上記第２のタンパク質が、上記第１のタンパク質の断片ではないという条件を有する、項目１に記載の自己複製ＲＮＡ分子。
（項目３）
上記第１のヌクレオチド配列が、第１の制御エレメントに作動可能に連結され、上記第２のヌクレオチド配列が、第２の制御エレメントに作動可能に連結されている、項目１または２に記載の自己複製ＲＮＡ分子。
（項目４）
上記ヘルペスウイルス由来の第３のタンパク質またはその断片をコードする第３のヌクレオチド配列をさらに含み、上記第３のヌクレオチド配列は、制御エレメントに作動可能に連結されている、項目１〜３のいずれか一項に記載の自己複製ＲＮＡ分子。
（項目５）
上記第３のヌクレオチド配列が、第３の制御エレメントに作動可能に連結されている、項目４に記載の自己複製ＲＮＡ分子。
（項目６）
上記ヘルペスウイルス由来の第４のタンパク質またはその断片をコードする第４のヌクレオチド配列をさらに含み、上記第４のヌクレオチド配列が、制御エレメントに作動可能に連結されている、項目４または５に記載の自己複製ＲＮＡ分子。
（項目７）
上記第４のヌクレオチド配列が、第４の制御エレメントに作動可能に連結されている、項目６に記載の自己複製ＲＮＡ分子。
（項目８）
上記ヘルペスウイルス由来の第５のタンパク質またはその断片をコードする第５のヌクレオチド配列をさらに含み、上記第５のヌクレオチド配列が、制御エレメントに作動可能に連結されている、項目６または７に記載の自己複製ＲＮＡ分子。
（項目９）
上記第５のヌクレオチド配列が、第５の制御エレメントに作動可能に連結されている、項目８に記載の自己複製ＲＮＡ分子。
（項目１０）
上記制御エレメントが、サブゲノムプロモーター、ＩＲＥＳ、およびウイルス２Ａ部位から成る群から独立して選択される、項目１〜９のいずれか一項に記載の自己複製ＲＮＡ分子。
（項目１１）
上記ヘルペスウイルスが、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）である、項目１〜１０のいずれか一項に記載の自己複製ＲＮＡ分子。
（項目１２）
上記第１のタンパク質または断片、上記第２のタンパク質または断片、上記第３のタンパク質または断片、上記第４のタンパク質または断片、および上記第５のタンパク質または断片が、ｇＢ、ｇＨ、ｇＬ；ｇＯ；ｇＭ、ｇＮ；ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１、および前述のもののいずれか１つの断片から成る群から独立して選択される、項目１１に記載の自己複製ＲＮＡ分子。
（項目１３）
上記第１のタンパク質または断片が、ｇＨまたはその断片であり、上記第２のタンパク質または断片が、ｇＬまたはその断片である、項目１１に記載の自己複製ＲＮＡ分子。
（項目１４）
上記第１のタンパク質または断片が、ｇＨまたはその断片であり、上記第２のタンパク質または断片が、ｇＬまたはその断片であり、上記第３のタンパク質または断片が、ｇＯまたはその断片である、項目１１に記載の自己複製ＲＮＡ分子。
（項目１５）
上記第１のタンパク質または断片が、ｇＨまたはその断片であり、上記第２のタンパク質または断片が、ｇＬまたはその断片であり、上記第３のタンパク質または断片が、ＵＬ１２８またはその断片であり、上記第４のタンパク質または断片が、ＵＬ１３０またはその断片であり、上記第５のタンパク質または断片が、ＵＬ１３１またはその断片である、項目１１に記載の自己複製ＲＮＡ分子。
（項目１６）
上記ヘルペスウイルスが、水痘帯状疱疹ウイルス（ＶＺＶ）である、項目１０に記載の自己複製ＲＮＡ分子。
（項目１７）
上記第１のタンパク質または断片、上記第２のタンパク質または断片、上記第３のタンパク質または断片、上記第４のタンパク質または断片、および上記第５のタンパク質または断片が、ｇＢ、ｇＥ、ｇＨ、ｇＩ、ｇＬ、および前述のもののいずれか１つの断片から成る群から独立して選択される、項目１６に記載の自己複製ＲＮＡ分子。
（項目１８）
上記第１のタンパク質または断片が、ｇＨまたはその断片であり、上記第２のタンパク質または断片が、ｇＬまたはその断片である、項目１６に記載の自己複製ＲＮＡ分子。
（項目１９）
アルファウイルスレプリコンである、項目１〜１８のいずれか一項に記載の自己複製ＲＮＡ分子。
（項目２０）
項目１９に記載のアルファウイルスレプリコンを含むアルファウイルスレプリコン粒子（ＶＲＰ）。
（項目２１）
項目２０に記載のＶＲＰおよび薬学的に許容されるビヒクルを含む組成物。
（項目２２）
第２のＶＲＰをさらに含み、上記第２のＶＲＰは、上記ヘルペスウイルス由来のタンパク質またはその断片をコードする自己複製ＲＮＡ分子を含有する、項目２１に記載の組成物。
（項目２３）
アジュバントをさらに含む、項目２１または２２に記載の組成物。
（項目２４）
項目１〜１９のいずれか一項に記載の自己複製ＲＮＡおよび薬学的に許容されるビヒクルを含む組成物。
（項目２５）
上記ヘルペスウイルス由来のタンパク質またはその断片をコードする第２の自己複製ＲＮＡ分子をさらに含む、項目２４に記載の組成物。
（項目２６）
ＲＮＡ送達系をさらに含む、項目２４または２５に記載の組成物。
（項目２７）
上記ＲＮＡ送達系が、リポソーム、ポリマーナノ粒子、水中油型カチオン性ナノエマルジョン、またはその組み合わせである、項目２６に記載の組成物。
（項目２８）
上記送達系が、水中油型カチオン性ナノエマルジョンである、項目２６に記載の組成物。
（項目２９）
タンパク質複合体を形成する方法であって、細胞に項目２０に記載のＶＲＰを送達する工程およびアルファウイルスレプリコンの発現に適した条件下で上記細胞を維持する工程を含み、ここでタンパク質複合体が形成される、方法。
（項目３０）
上記細胞が、ｉｎ  ｖｉｖｏにおけるものである、項目２９に記載の方法。
（項目３１）
タンパク質複合体を形成する方法であって、細胞に項目１〜１９のいずれか一項に記載の自己複製ＲＮＡを送達する工程および上記自己複製ＲＮＡの発現に適した条件下で上記細胞を維持する工程を含み、ここでタンパク質複合体が形成される、方法。
（項目３２）
上記細胞が、ｉｎ  ｖｉｖｏにおけるものである、項目２１に記載の方法。
（項目３３）
細胞へのヘルペスウイルス侵入を阻害する方法であって、上記細胞を項目１〜１９のいずれか一項に記載の自己複製ＲＮＡと接触させる工程を含む、方法。
（項目３４）
細胞へのヘルペスウイルス侵入を阻害する方法であって、上記細胞を項目２０に記載のＶＲＰと接触させる工程を含む、方法。
（項目３５）
上記細胞が、上皮細胞、内皮細胞、および線維芽細胞から成る群から選択される、項目３３または項目３４に記載の方法。
（項目３６）
上記細胞が、上皮細胞である、項目３５に記載の方法。
（項目３７）
上記細胞が、ｉｎ  ｖｉｖｏにおけるものである、項目３３〜３６のいずれか一項に記載の方法。
（項目３８）
個体において免疫応答を誘発する方法であって、項目２０に記載のＶＲＰまたは項目２１〜２３のいずれか一項に記載の組成物を上記個体に投与する工程を含む、方法。
（項目３９）
個体において免疫応答を誘発する方法であって、項目１〜１９のいずれか一項に記載の自己複製ＲＮＡ分子または項目２４〜２８のいずれか一項に記載の組成物を上記個体に投与する工程を含む、方法。
（項目４０）
上記免疫応答が、中和抗体の産生を含む、項目３８または３９に記載の方法。
（項目４１）
上記中和抗体が、補体非依存性である、項目４０に記載の方法。
（項目４２）
項目１〜１９のいずれか一項に記載の自己複製ＲＮＡ分子をコードする組換えＤＮＡ分子。
（項目４３）
上記組換えＤＮＡ分子が、プラスミドである、項目４２に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目４４）
細胞においてタンパク質複合体を形成するための、項目１〜１９のいずれか一項に記載の自己複製ＲＮＡまたは項目２０に記載のＶＲＰの使用。
（項目４５）
細胞へのヘルペスウイルス侵入を阻害するための、項目１〜１９のいずれか一項に記載の自己複製ＲＮＡまたは項目２０に記載のＶＲＰの使用。
（項目４６）
個体において免疫応答を誘発するための、項目１〜１９のいずれか一項に記載の自己複製ＲＮＡ、項目２０に記載のＶＲＰ、または項目２１〜２８のいずれか一項に記載の組成物の使用。