【手続補正書】
【提出日】平成24年8月10日(2012.8.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
配列番号２５に記載の軽鎖可変領域及び配列番号２６に記載の重鎖可変領域を含む、単離モノクローナル抗体、又はその抗原結合断片。
【請求項２】
前記軽鎖可変及び重鎖領域が、対応する軽鎖及び重鎖免疫グロブリン定常領域、並びに重鎖ヒンジ領域に融合する、請求項１に記載の単離抗体。
【請求項３】
請求項１に記載の抗体を含む医薬組成物。
【請求項４】
配列番号２５及び配列番号２６に記載の変異体を更に含み、かかる変異体が、ＩＬ−１３（配列番号１）のエピトープに結合する能力を保持し、前記エピトープが、配列番号１の１０の位置のアルギニン及び１０７の位置のアルギニンを含む、請求項２に記載の単離抗体。
【請求項５】
前記エピトープが、配列番号１の６の位置のセリン、１３の位置のイソロイシン、１４の位置のグルタミン酸、１００の位置のロイシン、１０３の位置のリジン、１０６の位置のフェニルアラニン、及び１０８の位置のグルタミン酸からなる群から選択される残基を更に含む、請求項４に記載の単離抗体。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１７８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１７８】
Ｍ１２９５及び関連結合領域を含む抗体断片の試験は、喘息の被験体において、潜在的に有用であり得る用量を含む、広範な用量（０．１ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ、３．０ｍｇ／ｋｇ、及び１０．０ｍｇ／ｋｇ）について調べる。このフェイズ１研究で評価される用量範囲は、ラット及びカニクイザルにおけるヒトＩＬ−１３生物活性のインビトロ中和、毒性、及び薬物動態データ、並びに高親和性でヒトＩＬ−１３に結合する抗ＩＬ−１３  ｍＡｂであるＩＭＡ−６３８を用いた臨床試験に基づく。
本発明は、以下を提供する。
（１）  ＩＬ−１３（配列番号１）のエピトープに結合する単離モノクローナル抗体又はその抗原結合断片であって、前記エピトープが配列番号１の１０の位置のアルギニン、及び１０７の位置のアルギニンを含む、前記モノクローナル抗体又はその抗原結合断片。
（２）  前記エピトープが、配列番号１の６の位置のセリン、１３の位置のイソロイシン、１４の位置のグルタミン酸、１００の位置のロイシン、１０３の位置のリジン、１０６の位置のフェニルアラニン、及び１０８の位置のグルタミン酸からなる群から選択される残基を更に含む、（１）に記載のモノクローナル抗体。
（３）  軽鎖可変領域を含むパラトープを含み、更にａ）配列番号１の１０の位置のアルギニンでＩＬ−１３と相互作用し、且つｂ）配列番号１の１４の位置のグルタミン酸と結合を形成するチロシン残基を含む単離モノクローナル抗体又はその抗原結合断片。
（４）  前記パラトープが、前記軽鎖可変領域にヒスチジン残基及びアスパラギン残基を更に含む、（３）に記載のモノクローナル抗体。
（５）  前記パラトープが、チロシン、トリプトファン、アスパラギン酸、バリン、及びアルギニンからなる群から選択されるパラトープ接触残基を含む重鎖可変領域を更に含む、（３）に記載のモノクローナル抗体。
（６）  前記軽鎖可変領域が、配列番号２を含み、前記チロシンが、配列番号２の３２の位置に存在し、前記重鎖可変領域が、配列番号３を含み、及び前記接触残基が、３２の位置のチロシン、５４の位置のトリプトファン、及び１０４の位置のチロシンを含む、（５）に記載のモノクローナル抗体。
（７）  軽鎖可変領域を含むパラトープを含み、更にａ）配列番号１の１０の位置のアルギニンでＩＬ−１３と相互作用し、且つｂ）配列番号１の６の位置のセリンと結合を形成するアスパラギン酸残基を含む単離モノクローナル抗体又はその抗原結合断片。
（８）  前記パラトープが、前記軽鎖可変領域にチロシン残基及びヒスチジン残基を更に含む、（７）に記載のモノクローナル抗体。
（９）  前記パラトープが、チロシン、トリプトファン、アスパラギン酸、バリン、及びアルギニンから成る群から選択されるパラトープ接触残基を含む重鎖可変領域を更に含む、（７）に記載のモノクローナル抗体。
（１０）  前記軽鎖可変領域が、配列番号２５を含み、前記アスパラギン酸が、配列番号２５の９２の位置に存在し、前記重鎖可変領域が、配列番号２６を含み、及び前記接触残基が、３２の位置のチロシン、５４の位置のトリプトファン、及び１０４の位置のチロシンを含む、（９）に記載のモノクローナル抗体。
（１１）  Ｃ８６３、ＨＦＡＬ６２、及びＭ１２９５からなる群から選択されるモノクローナル抗体と、ＩＬ−１３のエピトープに対する結合を競合する、単離モノクローナル抗体又はその抗原結合断片。
（１２）  ＩＬ−１３のエピトープに対する結合を競合する前記抗体が、配列番号２９に記載の軽鎖ＣＤＲ３（Ｌ−ＣＤＲ３）を含む、（１１）に記載の単離モノクローナル抗体。
（１３）  前記配列番号２９に記載のＬ−ＣＤＲ３が、以下の式（Ｉ）により更に定義される、（１２）に記載の単離モノクローナル抗体：
式（Ｉ）−−Ｑ−Ｑ−Ｘａａ１−Ｘａａ２−Ｘａａ３−Ｘａａ４−Ｐ−Ｙ−Ｔ（配列番号２９）
（式中、Ｘａａ１は、Ｈｉｓ、Ｇｌｎ、又はＰｒｏであってもよく；
Ｘａａ２は、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｓｅｒ、Ｌｅｕ、Ｐｒｏ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ｇｌｕ、又はＶａｌであってもよく；
Ｘａａ３は、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｉｌｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｙｐ、Ａｓｎ、Ｈｉｓ、Ｖａｌ、Ｍｅｔ、Ａｒｇ、Ｌｅｕ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏであってもよく、又は存在しなくてもよく；及び
Ｘａａ４は、Ｔｙｒ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｐｈｅ、Ｔｈｒ、Ｇｌｕであってもよく、又は存在しなくてもよい）。
（１４）  ＩＬ−１３のエピトープに対する結合を競合する前記抗体が、配列番号２８に記載の重鎖可変領域を含む、（１１）に記載の抗体。
（１５）  ＩＬ−１３のエピトープに対する結合を競合する前記抗体が、配列番号２７に記載の軽鎖可変領域を更に含む、（１１）に記載の抗体。
（１６）  配列番号９に記載の可変軽鎖及びその変異体、並びに配列番号２０に記載の可変重鎖及びその変異体を含む単離モノクローナル抗体。
（１７）  前記配列番号９に記載の可変軽鎖の変異体が、９１の位置のヒスチジン、９２の位置のアスパラギン、９３の位置のグルタミン酸、及び９４の位置のチロシンからなる群から選択される残基における変化を含む、（１６）に記載のモノクローナル抗体。
（１８）  ９１の位置のヒスチジン、９２の位置のアスパラギン、９３の位置のグルタミン酸、及び９４の位置のチロシンからなる群から選択される前記残基が、以下のように異なるアミノ酸に変化している又は欠失している、（１７）に記載のモノクローナル抗体：
【表１２】
2012506695.tif 000001
2012506695.tif 000002
2012506695.tif 000003
2012506695.tif 000004
。
（１９）  前記配列番号２０に記載の可変重鎖の変異体が、３１の位置のスレオニン、３４の位置のメチオニン、１００の位置のメチオニン、及び１０６の位置のバリンからなる群から選択される残基における変化を含む、（１６）に記載のモノクローナル抗体。
（２０）  ３１の位置のスレオニン、３４の位置のメチオニン、１００の位置のメチオニン、及び１０６の位置のバリンからなる群から選択される前記残基が、以下のように異なるアミノ酸に変化している又は欠失している、（１９）に記載のモノクローナル抗体：
【表１３】
2012506695.tif 000005
。
（２１）  配列番号２５に記載の軽鎖可変領域及び配列番号２６に記載の重鎖可変領域を含む、単離モノクローナル抗体、又はその抗原結合断片。
（２２）  前記軽鎖可変及び重鎖領域が、対応する軽鎖及び重鎖免疫グロブリン定常領域、並びに重鎖ヒンジ領域に融合する、（２１）に記載の単離抗体。
（２３）  （２１）に記載の抗体を含む医薬組成物。
（２４）  配列番号２５及び配列番号２６に記載の変異体を更に含み、かかる変異体が、ＩＬ−１３（配列番号１）のエピトープに結合する能力を保持し、前記エピトープが、配列番号１の１０の位置のアルギニン及び１０７の位置のアルギニンを含む、（２２）に記載の単離抗体。
（２５）  前記エピトープが、配列番号１の６の位置のセリン、１３の位置のイソロイシン、１４の位置のグルタミン酸、１００の位置のロイシン、１０３の位置のリジン、１０６の位置のフェニルアラニン、及び１０８の位置のグルタミン酸からなる群から選択される残基を更に含む、（２４）に記載の単離抗体。
（２６）  ヒト化重鎖可変領域及びヒト化軽鎖可変領域を含む単離ヒト化組換え抗体であって、前記ヒト化重鎖可変領域が、重鎖配列番号３の３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）及びヒト受容器抗体重鎖のヒトフレームワーク領域を含み、前記ヒト化軽鎖可変領域が、軽鎖配列番号２の３つの相補性決定領域及びヒト受容器抗体軽鎖のヒトフレームワーク領域を含み、前記ヒト化抗体が、ＳＴＡＴ６シグナル伝達により測定したとき、ＴＨＰ−１細胞におけるＩＬ−１３のＩＬ−１３受容体への結合を低減する、前記単離ヒト化組換え抗体。
（２７）  前記抗体が、（ａ）野生型ＩＬ−１３誘導性Ｓｔａｔ−６リン酸化により測定したとき、ヒトＩＬ−１３受容体アルファ１又は好適な動物のＩＬ−１３受容体に対するヒト組換え野生型ヒトＩＬ−１３の結合を阻害する、（ｂ）ヒトＩＬ−１３受容体アルファ２又は好適な動物のＩＬ−１３受容体に対するヒト組換え野生型ヒトＩＬ−１３の結合を阻害する、（ｃ）生理食塩水処理されたオボアルブミン感作動物に比べて、抗体で処理されたラット群の好酸球、リンパ球、マクロファージ、及び好中球細胞数を減少させる、及び（ｄ）非特異的対照剤と比べて、化学的にアレルギー誘発された動物における気道抵抗性を低下させる、からなる群から選択されるＩＬ−１３ポリペプチドの少なくとも１つの活性を実質的に調節する、（２６）に記載の抗体。
（２８）  配列番号３、２０、及び２６からなる群から選択される重鎖可変領域のＣＤＲを含む、（２６）に記載の抗体。
（２９）  配列番号２、９、１４、及び２６からなる群から選択される軽鎖可変領域のＣＤＲを含む、（２６）に記載の抗体。
（３０）  表面プラズモン共鳴（Ｂｉａｃｏｒｅ）により測定したとき、２５０ｐＭ（０．２５０×１０−９Ｍ）未満のＫＤでＩＬ−１３変異体Ｒ１１０Ｑに結合し、且つＳＴＡＴ６シグナル伝達により測定したとき、ＴＨＰ−１細胞におけるＩＬ−１３のＩＬ−１３Ｒ２アルファ１への結合を阻止する、ヒトＩＬ−１３に免疫特異的な抗原結合抗体断片であって、前記抗体が、Ａｒｇ１０、Ｉｌｅ１３、Ｇｌｕ１４を含むへリックスＡの残基、及びＬｙｓ１０３、Ｐｈｅ１０６、Ａｒｇ１０７、Ｇｌｕ１０８を含むへリックスＤの残基において、ヒトＩＬ−１３と接触することを示され得、この場合の原子間距離が４．０Åを超えない、前記抗原結合抗体断片。
（３１）  （１）に記載のＩＬ−１３抗体をコードする単離核酸。
（３２）  （３１）に記載の単離核酸を含む、核酸ベクター。
（３３）  （３１）に記載の単離核酸を含む、原核又は真核宿主細胞。
（３４）  （１）に記載のＩＬ−１３抗体と、製薬上許容できる担体又は希釈剤とを含む組成物。
（３５）  有効量の（１）に記載の抗体を含む組成物を接触させる又は投与する工程を含む、細胞、組織、器官、又は動物におけるＩＬ−１３関連病状を診断又は治療する方法。
（３６）  前記ＩＬ−１３関連病状が喘息である、（３５）に記載の方法。
（３７）  前記有効量が、前記細胞、組織、器官又は動物１キログラム当たり０．００１〜５０ｍｇである、（３５）に記載の方法。
（３８）  前記接触又は前記投与が、非経口、皮下、筋肉内、静脈内、関節内、気管支内、腹腔内、関節包内、軟骨内、洞内、腔内、小脳内、脳室内、結腸内、頚管内、胃内、肝臓内、心筋内、骨内、骨盤内、心膜内、腹腔内、胸膜内、前立腺内、肺臓内、直腸内、腎臓内、網膜内、脊髄内、滑液嚢内、胸郭内、子宮内、膀胱内、病巣内、ボーラス、膣内、直腸、バッカル、舌下、鼻腔内、又は経皮から選択される少なくとも１つの方式による、（３５）に記載の方法。
（３９）  検出可能な標識又はリポーター、抗感染薬、循環器（ＣＶ）系薬、中枢神経系（ＣＮＳ）薬、自律神経系（ＡＮＳ）薬、呼吸器薬、胃腸（ＧＩ）管薬、ホルモン又はホルモン刺激薬、体液又は電解質平衡薬、血液製剤、抗新生物薬、免疫調節薬、栄養製品、サイトカイン、又はサイトカイン拮抗薬から選択される、少なくとも１つの化合物又はポリペプチドの有効量を含む少なくとも１つの組成物を、前記（ａ）接触又は投与の、前、同時、又は後に投与することを更に含む、（３５）に記載の方法。
（４０）  それを必要としている患者の細胞、組織、又は器官と、（１）に記載のＩＬ−１３抗体との接触を促進するのに好適である医療機器。
（４１）  （１）に記載の少なくとも１つのＩＬ−１３抗体の、溶液又は凍結乾燥形態を含む、容器及び包装材を含む、ヒトの製薬又は診断用途向けの製造品（article of manufacture）。
（４２）  前記容器が、非経口、皮下、筋肉内、静脈内、関節内、気管支内、腹腔内、関節包内、軟骨内、洞内、腔内、小脳内、脳室内、結腸内、頚管内、胃内、肝臓内、心筋内、骨内、骨盤内、心膜内、腹腔内、胸膜内、前立腺内、肺臓内、直腸内、腎臓内、網膜内、脊髄内、滑液嚢内、胸郭内、子宮内、膀胱内、病巣内、ボーラス、膣内、直腸、バッカル、舌下、鼻腔内、又は経皮的送達デバイス又は系の構成要素である、（４１）に記載の製造品。
（４３）  （１）に記載の少なくとも１つの単離された哺乳動物ＩＬ−１３抗体を産生する方法であって、前記抗体を回収可能な量で発現し得る宿主細胞、トランスジェニック動物、トランスジェニック植物又は植物細胞を提供すること、を含む前記方法。
（４４）  （４３）に記載の方法により生成される、ＩＬ−１３抗体。
（４５）  へリックスＡ（Ａｒｇ１０、Ｉｌｅ１３、Ｇｌｕ１４）の残基、及びへリックスＤ（Ｌｙｓ１０３、Ｐｈｅ１０６、Ａｒｇ１０７、Ｇｌｕ１０８）の残基を含むＩＬ−１３エピトープ、又はその模倣ペプチドを用いる宿主の免疫方法。
（４６）  （１）〜（２２）及び（２４）〜（３０）のいずれか一項に記載の抗体を含む医薬組成物。
（４７）  ＩＬ−１３介在疾患を治療する薬剤を製造するための、（１）〜（２２）及び（２４）〜（３０）のいずれか一項に記載の抗ＩＬ−１３抗体の使用。