【誤訳訂正書】
【提出日】平成26年8月28日(2014.8.28)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
安定なレンチウイルスパッケージング細胞株を得る方法であって、
i. 第1の発現カセットがレンチウイルスのgagおよびpol遺伝子をそして第2の発現カセットがレンチウイルスのrevおよび選択マーカーをコードする2つの発現カセットを含むAAV ITRに隣接した組込みカセットを含有するバキュロウイルスの主鎖を含むハイブリッドベクター(A)を調製するステップ；および
ii. プロモーターの調節下にあるAAV repオープンリードフレームを含有する発現プラスミド(B)を調製するステップ
iii. 細胞を発現プラスミドBでトランスフェクトし、続いて細胞をハイブリッドベクターAに感染させるステップ
iv. 細胞を選択用の抗生物質の存在のもとで培養するステップ
v. 安定してgag、polおよびrevタンパク質を発現する細胞を得るステップ
vi. 細胞にenv遺伝子を組み込むステップ
vii. 細胞を培養してgag、pol、revおよびenvタンパク質を安定して発現する細胞株を得るステップ
を含むものである前記方法。
【請求項２】
安定なレンチウイルスパッケージング細胞株を得る方法であって、
i. 第1の発現カセットがレンチウイルスのgagおよびpol遺伝子をそして第2の発現カセットがレンチウイルスのrevおよび選択マーカーをコードする2つの発現カセットを含むアデノ随伴ウイルス（AAV）逆方向末端反復（ITR）に隣接した組込みカセットを含有するバキュロウイルスの主鎖を含むハイブリッドベクター(A)を調製するステップ；および
ii. プロモーターの調節下にあるAAV rep ORFを含有する発現プラスミド(B)を調製するステップ
iii. 細胞を発現プラスミドBでトランスフェクトし、続いて細胞をハイブリッドベクターAに感染させるステップ
iv. 細胞を選択用の抗生物質の存在のもとで培養するステップ
v. 安定してgag、polおよびrevタンパク質を発現する細胞を得るステップ
vi. かかる細胞にレンチウイルスtat遺伝子を組み込むステップ
vii. 細胞を培養してgag、pol、revおよびtatタンパク質を安定して発現する細胞株を得るステップ
viii. かかる細胞にenv遺伝子を組み込むステップ
ix. 細胞を培養して安定してgag、pol、rev、tatおよびenvタンパク質を発現する細胞株を得るステップ
を含むものである前記方法
【請求項３】
ハイブリッドベクターの2つの発現カセットがテール・ツー・テール配向でありかつそれぞれが構成的プロモーターおよびポリAにより駆動される、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
プロモーターがCMV、CMV IE、PGK、SV40、eF1α、SFFV、およびRSVから選択される、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
プロモーターがCMV IEである、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
選択マーカーがハイグロマイシン、カナマイシン、ネオマイシンまたはゼオマイシン耐性遺伝子から選択される、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
選択マーカーがハイグロマイシン耐性遺伝子である、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
選択マーカーがIRES下流にクローニングされる、請求項１または７に記載の方法。
【請求項９】
AAV Repタンパク質がRep78である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
env遺伝子がMLV4070 env、RD114 env、キメラエンベロープタンパク質RD114-TR、キメラエンベロープタンパク質RD114-pro、バキュロウイルスGP64 envまたはGALV envまたはそれらの誘導体から選択される、請求項１〜９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
env遺伝子がキメラエンベロープタンパク質RD114-TRをコードする遺伝子である、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
RD114-TRを、5'から3'末端へCMVプロモーター、その配列中にRREエレメントを含有するβ-グロビンイントロン、およびRD114-TR ORFを含有する発現カセットを含むSIN レンチウイルスベクターを用いて組み込む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
i. 第1の発現カセットがレンチウイルスのgagおよびpol遺伝子をコードしそして第2の発現カセットがレンチウイルスのrevおよび選択マーカーをコードする2つの発現カセットを含む、AAV ITRに隣接した組込みカセットの少なくとも１つのコピー
ii. env遺伝子の少なくとも１つのコピー：
を安定してそのゲノム中に組み込んで含有する、安定なレンチウイルスパッケージング細胞株。
【請求項１４】
細胞が安定してゲノム中に組み込まれたHIV-1 tat遺伝子をさらに含有する、請求項１３に記載の安定なレンチウイルスパッケージング細胞株。
【請求項１５】
細胞がHEK293、HEK293-T、HEK293-SF、TE671、HT1080 または HeLaから選択されるヒト細胞株である、請求項１３または１４に記載の安定なレンチウイルスパッケージング細胞株。
【請求項１６】
組込みカセットの2つの発現カセットがテール・ツー・テール配向でありそれぞれが構成的なプロモーターおよびポリAにより駆動される、請求項１３〜１５のいずれか一項に記載の安定なレンチウイルスパッケージング細胞株。
【請求項１７】
プロモーターがCMV、CMV IE、PGK、SV40、eF1α、SFFV、および RSVから選択される、請求項１３〜１６のいずれか一項に記載の安定なレンチウイルスパッケージング細胞株。
【請求項１８】
選択マーカーがハイグロマイシン、カナマイシン、ネオマイシンまたはゼオマイシン耐性遺伝子から選択される、請求項１３〜１７のいずれか一項に記載の安定なレンチウイルスパッケージング細胞株。
【請求項１９】
env遺伝子がMLV4070 env、RD114 env、キメラエンベロープタンパク質RD114-TR、キメラエンベロープタンパク質RD114-pro、バキュロウイルスGP64 envまたはGALV envまたはそれらの誘導体から選択される、請求項１３〜１８のいずれか一項に記載の安定なレンチウイルスパッケージング細胞株。
【請求項２０】
env遺伝子がキメラエンベロープタンパク質RD114-TRをコードする遺伝子である、請求項１３〜１９のいずれか一項に記載の安定なレンチウイルスパッケージング細胞株。
【請求項２１】
i. 請求項１３〜２０に記載のいずれか一項に記載の安定なレンチウイルスパッケージング細胞株を培養するステップ；
ii. 安定パッケージング細胞株に導入ベクターを挿入するステップ
を含むレンチウイルスベクターを産生する方法。
【請求項２２】
i. 第1の発現カセットがレンチウイルスのgagおよびpol遺伝子をコードしそして第2の発現カセットがレンチウイルスのrevおよび選択マーカーをコードする2つの発現カセットを含む、AAV ITRに隣接した組込みカセットの少なくとも１つのコピー
ii. envの少なくとも１つのコピー：
iii. 導入ベクター
を安定してそのゲノム中に組み込んで含有する、プロデューサー細胞株。
【請求項２３】
細胞がさらに、安定してそのゲノム中に組込まれたレンチウイルスのtat遺伝子の少なくとも１つのコピーを含有する、請求項２２に記載のプロデューサー細胞株。
【請求項２４】
細胞がHEK293、HEK293-T、HEK293-SF、TE671、HT1080 または HeLaから選択されるヒト細胞株である、請求項２２または２３に記載のプロデューサー細胞株。
【請求項２５】
ハイブリッド ベクターの2つの発現カセットがテール・ツー・テール配向でありそれぞれが構成的プロモーターおよびポリAにより駆動される、請求項２２〜２４のいずれか一項に記載のプロデューサー細胞株。
【請求項２６】
プロモーターがCMV、CMV IE、PGK、SV40、eF1α、SFFV、およびRSVから選択される、請求項２２〜２５のいずれか一項に記載のプロデューサー細胞株。
【請求項２７】
選択マーカーがハイグロマイシン、カナマイシン、ネオマイシンまたはゼオマイシン耐性遺伝子から選択される、請求項２２〜２６のいずれか一項に記載のプロデューサー細胞株。
【請求項２８】
env遺伝子がMLV 4070 env、RD114 env、キメラエンベロープタンパク質RD114-TR、キメラエンベロープタンパク質RD114-pro、バキュロウイルスGP64 envまたはGALV env またはそれらの誘導体から選択される、請求項２２〜２７のいずれか一項に記載のプロデューサー細胞株。
【請求項２９】
env遺伝子がキメラエンベロープタンパク質RD114-TRをコードする遺伝子である、請求項２２〜２８のいずれか一項に記載のプロデューサー細胞株。
【請求項３０】
請求項２２〜３０のいずれか一項に記載のプロデューサー細胞株を培養するステップを含む、レンチウイルスベクターを産生する方法。