【手続補正書】
【提出日】平成26年4月7日(2014.4.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
生体内または体外で患者の細胞または組織における線維芽細胞増殖因子２１（ＦＧＦ２１）ポリヌクレオチドの機能および／または発現をアップレギュレートする方法であって、    
前記細胞または組織を、１０〜３０個のヌクレオチドの長さの少なくとも１つのアンチセンスオリゴヌクレオチドと接触させることであって、前記少なくとも１つのオリゴヌクレオチドは、線維芽細胞増殖因子２１（ＦＧＦ２１）ポリヌクレオチドの天然のアンチセンスオリゴヌクレオチドの１つの領域を標的とする、前記細胞または組織を、少なくとも１つのアンチセンスオリゴヌクレオチドと接触させることを含み、
それによって、生体内または体外で患者の細胞または組織における線維芽細胞増殖因子２１（ＦＧＦ２１）ポリヌクレオチドの機能および／または発現をアップレギュレートする、方法。
【請求項２】
線維芽細胞増殖因子２１（ＦＧＦ２１）の機能および／または発現が、対照と比較して生体内または体外で増加する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記少なくとも１つのアンチセンスオリゴヌクレオチドが、線維芽細胞増殖因子２１（ＦＧＦ２１）ポリヌクレオチドの天然のアンチセンス配列を標的とする、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記少なくとも１つのアンチセンスオリゴヌクレオチドが、線維芽細胞増殖因子２１（ＦＧＦ２１）ポリヌクレオチドのコード核酸配列および／または非コード核酸配列を含む核酸配列を標的とする、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記少なくとも１つのアンチセンスオリゴヌクレオチドが、線維芽細胞増殖因子２１（ＦＧＦ２１）ポリヌクレオチドの重複配列および／または非重複配列を標的とする、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記少なくとも１つのアンチセンスオリゴヌクレオチドが、少なくとも１つの修飾糖部分、少なくとも１つの修飾ヌクレオチド間結合、少なくとも１つの修飾ヌクレオチド、およびそれらの組み合わせから選択された１以上の修飾を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記１以上の修飾が、２’−Ｏ−メトキシエチル修飾糖部分、２’−メトキシ修飾糖部分、２’−Ｏ−アルキル修飾糖部分、二環糖部分、およびそれらの組み合わせから選択された、少なくとも１つの修飾糖部分を含む、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記１以上の修飾は、ホスホロオチオエート、２’−Ｏ−メトキシエチル（ＭＯＥ）、２’−フルオロ、アルキルホスホナート、ホスホロジチオエート、アルキルホスホノチオアート、ホスホルアミダート、カルバメート、炭酸塩、リン酸トリエステル、アセトアミダート、カルボキシメチルエステル、およびそれらの組み合わせから選択された少なくとも１つの修飾ヌクレオチド間結合を含む、請求項６に記載の方法。
【請求項９】
前記１以上の修飾が、ペプチド核酸（ＰＮＡ）、ロックト核酸（ＬＮＡ）、アラビノ核酸（ＦＡＮＡ），類似体、誘導体、およびそれらの組み合わせから選択された少なくとも１つの修飾ヌクレオチドを含む、請求項６に記載の方法。
【請求項１０】
前記少なくとも１つのオリゴヌクレオチドが、配列番号３乃至配列番号９に記載するオリゴヌクレオチド配列を少なくとも１つ含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
生体内または体外で哺乳動物の細胞または組織における線維芽細胞増殖因子２１（ＦＧＦ２１）遺伝子の機能および／または発現をアップレギュレートする方法であって、
前記細胞または組織を、５〜３０個のヌクレオチドの長さの少なくとも１つの低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）オリゴヌクレオチドと接触させることであって、前記少なくとも１つのｓｉＲＮＡオリゴヌクレオチドは線維芽細胞増殖因子２１（ＦＧＦ２１）ポリヌクレオチドのアンチセンスポリヌクレオチドに対して特異的であり、前記少なくとも１つのｓｉＲＮＡオリゴヌクレオチドは、線維芽細胞増殖因子２１（ＦＧＦ２１）ポリヌクレオチドのアンチセンスおよび／またはセンス核酸分子の少なくとも５個の連続した核酸の相補的配列と少なくとも５０％の配列同一性を有する、前記細胞または組織を、５〜３０個のヌクレオチドの長さの少なくとも１つの低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）オリゴヌクレオチドと接触させることを含み、
生体内または体外で哺乳動物の細胞または組織における線維芽細胞増殖因子２１（ＦＧＦ２１）の機能および／または発現をアップレギュレートする、方法。
【請求項１２】
前記オリゴヌクレオチドが、線維芽細胞増殖因子２１（ＦＧＦ２１）ポリヌクレオチドのアンチセンス核酸分子および／またはセンス核酸分子に相補的な連続した少なくとも５個の核酸の配列と、少なくとも８０％の配列同一性を有する、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
生体内または体外で哺乳動物の細胞または組織における線維芽細胞増殖因子２１（ＦＧＦ２１）の機能および／または発現をアップレギュレートする方法であって、
前記細胞または組織を、約５〜３０個のヌクレオチドの長さの少なくとも１つのアンチセンスオリゴヌクレオチドと接触させることであって、前記少なくとも１つのオリゴヌクレオチドは、線維芽細胞増殖因子２１（ＦＧＦ２１）ポリヌクレオチドのセンスおよび／またはアンチセンス鎖の非コード配列および／またはコード配列に対して特異的であり、前記少なくとも１つのアンチセンスオリゴヌクレオチドは、配列番号１および配列番号２の配列の少なくとも１つの核酸配列と少なくとも５０％の配列同一性を有する、前記細胞または組織を、約５〜３０個のヌクレオチドの長さの少なくとも１つのアンチセンスオリゴヌクレオチドと接触させることと、
生体内または体外で哺乳動物の細胞または組織における線維芽細胞増殖因子２１（ＦＧＦ２１）の機能および／または発現をアップレギュレートする工程とを含む、方法。
【請求項１４】
少なくとも１つの修飾を含む合成された１０〜３０個のヌクレオチドの長さの修飾オリゴヌクレオチドであって、
前記少なくとも１つの修飾が、少なくとも１つの修飾糖部分、少なくとも１つの修飾ヌクレオチド間結合、少なくとも１つの修飾ヌクレオチド、およびそれらの組み合わせから選択されたものであり、
前記オリゴヌクレオチドは、標的遺伝子の天然アンチセンスポリヌクレオチドに対して特異的であり、前記標的遺伝子の発現をアップレギュレートし、また前記オリゴヌクレオチドは、生体内または体外で線維芽細胞増殖因子２１（ＦＧＦ２１）にハイブリダイズし、通常の対照と比較してその機能および／または発現をアップレギュレートするアンチセンス化合物である、オリゴヌクレオチド。
【請求項１５】
前記少なくとも１つの修飾は、ホスホロオチオエート、アルキルホスホナート、ホスホロジチオアート、アルキルホスホノチオアート、ホスホルアミダート、カルバメート、炭酸塩、リン酸トリエステル、アセトアミダート、カルボキシメチルエステル、およびそれらの組み合わせから選択されたヌクレオチド間結合を含む、請求項１４に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項１６】
前記オリゴヌクレオチドが、少なくとも１つのホスホロオチオエートヌクレオチド間結合を含む、請求項１４に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項１７】
前記オリゴヌクレオチドが、ホスホロオチオエートヌクレオチド間結合の骨格を含む、請求項１４に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項１８】
前記オリゴヌクレオチドは、少なくとも１つの修飾されたヌクレオチドを含み、該修飾されたヌクレオチドは、ペプチド核酸、ロックト核酸（ＬＮＡ）、類似体、誘導体、およびそれらの組み合わせから選択されたものである、請求項１４に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項１９】
前記オリゴヌクレオチドは、複数の修飾を含み、前記修飾は、ホスホロオチオエート、アルキルホスホナート、ホスホロジチオアート、アルキルホスホノチオアート、ホスホラミダート、カルバメート、炭酸塩、リン酸トリエステル、アセトアミダート、カルボキシメチルエステル、およびそれらの組み合わせから選択された修飾ヌクレオチドを含む、請求項１４に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項２０】
前記オリゴヌクレオチドは複数の修飾を含み、前記複数の修飾は、ペプチド核酸、ロックト核酸（ＬＮＡ）、類似体、誘導体、およびそれらの組み合わせから選択された修飾ヌクレオチドを含む、請求項１４に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項２１】
前記オリゴヌクレオチドが、２’−Ｏ−メトキシエチル修飾糖部分、２’−メトキシ修飾糖部分、２’−Ｏ−アルキル修飾糖部分、二環糖部分、およびそれらの組み合わせから選択された、少なくとも１つの修飾糖部分を含む、請求項１４に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項２２】
前記オリゴヌクレオチドは複数の修飾を含み、前記複数の修飾は、２’−Ｏ−メトキシエチル修飾糖部分、２’−メトキシ修飾糖部分、２’−Ｏ−アルキル修飾糖部分、二環糖部分、およびそれらの組み合わせから選択された修飾糖部分を含む、請求項１４に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項２３】
前記オリゴヌクレオチドは約５〜３０個のヌクレオチドの長さを有し、線維芽細胞増殖因子２１（ＦＧＦ２１）のアンチセンスおよび／またはセンス鎖にハイブリダイズし、
前記オリゴヌクレオチドは、線維芽細胞増殖因子２１（ＦＧＦ２１）ポリヌクレオチドのアンチセンスおよび／またはセンスコード核酸配列および／または非コード核酸配列の連続した少なくとも５個の核酸の配列に相補的な配列に対して、少なくとも約２０％配列同一性を有する、請求項１４に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項２４】
前記オリゴヌクレオチドは、線維芽細胞増殖因子２１（ＦＧＦ２１）ポリヌクレオチドのアンチセンスおよび／またはセンスコード核酸配列および／または非コード核酸配列の連続した少なくとも５個の核酸の配列に相補的な配列に対して、少なくとも約８０％配列同一性を有する、請求項１４に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項２５】
前記オリゴヌクレオチドは、生体内または体外で線維芽細胞増殖因子２１（ＦＧＦ２１）にハイブリダイズし、通常の対照と比較してその機能および／または発現をアップレギュレートする、請求項１４に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項２６】
前記オリゴヌクレオチドは、配列番号３乃至配列番号９に記載する配列を含む、請求項１４に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項２７】
１以上の線維芽細胞増殖因子２１（ＦＧＦ２１）ポリヌクレオチドに特異的な１以上のオリゴヌクレオチドを含む組成物であって、
前記ポリヌクレオチドは、アンチセンス配列、相補配列、アレル、ホモログ、アイソフォーム、変異型、誘導体、突然変異体、断片、またはそれらの組み合わせを含む、組成物。
【請求項２８】
前記オリゴヌクレオチドは、配列番号３乃至配列番号９に記載する配列のいずれかと比較して、少なくとも約４０％の配列同一性を有する、請求項２７に記載の組成物。
【請求項２９】
前記オリゴヌクレオチドは、配列番号３乃至配列番号９に記載するヌクレオチド配列を含む、請求項２７に記載の組成物。
【請求項３０】
配列番号３乃至配列番号９に記載する配列の前記オリゴヌクレオチドは、１以上の修飾または置換を含む、請求項２９に記載の組成物。
【請求項３１】
前記１以上の修飾は、ホスホロオチオエート、メチルホスホナート、ペプチド核酸、ロックト核酸（ＬＮＡ）分子、およびそれらの組み合わせから選択されたものである、請求項３０に記載の組成物。
【請求項３２】
少なくとも１つの線維芽細胞増殖因子２１（ＦＧＦ２１）および／または少なくとも１つのそのコードされた生成物に関連する疾病を予防または治療する方法であって、
患者に対し、少なくとも１つのＲＮａｓｅ  Ｈ１ポリヌクレオチドの天然のアンチセンス配列に結合し、かつ前記少なくとも１つの線維芽細胞増殖因子２１（ＦＧＦ２１）ポリヌクレオチドの発現をアップレギュレートする、少なくとも１つのアンチセンスオリゴヌクレオチドを治療上有効な用量投与することを含み、
それによって、前記少なくとも１つの線維芽細胞増殖因子２１（ＦＧＦ２１）ポリヌクレオチドおよび／または少なくとも１つのそのコードされた生成物に関連する疾病を予防または治療する、方法。
【請求項３３】
前記少なくとも１つの線維芽細胞増殖因子２１（ＦＧＦ２１）ポリヌクレオチドに関連する疾病が、ＦＧＦ２１の機能異常および／または発現に関連する疾患または障害、代謝性疾患または代謝性障害（例えば、糖尿病、肥満、脂質異常症、高血糖、高インスリン血症、高血圧、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）といった脂肪肝など）、癌、脂質代謝障害に関連する疾患または障害、腎機能障害に関連する疾患または障害、肝機能障害に関連する疾患または障害、異常な細胞増殖、血管の疾患または障害（例えば、冠動脈疾患、末梢動脈疾患、アテローム性動脈硬化症、腹部大動脈瘤、血栓症、深部静脈血栓症、静脈うっ血性疾患、静脈炎、静脈瘤など）、血管新生、アテローム性動脈硬化症、心血管の疾患または障害、血管形成に関連する疾患または障害、細胞シグナル伝達障害に関連する疾患または障害、キナーゼ活性に関連する疾患または障害、脂肪細胞へのグルコースの取り込みに関連する疾患または障害、ＦＧＦ２１とＦＧＦＲ−１またはＦＧＦＲ−２のうちの１つまたは両方間の相互作用の障害に関連する疾患または障害、ＦＧＦＲ−１またはＦＧＦＲ−２タンパク質のリン酸化障害およびアポトーシスに関連する疾患または障害から選択される、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
生体内投与のための少なくとも１つのオリゴヌクレオチドを特定し、選択する方法であって、
疾病状態に関連する標的ポリヌクレオチドを選択することと、
選択された標的ポリヌクレオチドに対して、または選択された標的ポリヌクレオチドに相補的なポリヌクレオチドに対して相補的な、少なくとも５個の連続したヌクレオチドを含む、少なくとも１つのオリゴヌクレオチドを特定することと、
ストリンジェントなハイブリダイゼーション条件の下での、前記標的ポリヌクレオチドまたは選択された標的ポリヌクレオチドに対するアンチセンスであるポリヌクレオチドとアンチセンスオリゴヌクレオチドとのハイブリッドの熱融解温度を測定することと、
得られた情報に基づいて、生体内投与のための少なくとも１つのオリゴヌクレオチドを選択することとを含む、方法。