【手続補正書】
【提出日】平成24年2月22日(2012.2.22)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
第ＶＩＩＩ因子（ＦＶＩＩＩ）に水溶性ポリマー（ＷＳＰ）を結合する方法であって、
（ａ）前記ＦＶＩＩＩにＦＶＩＩＩ特異抗体を結合させる条件下で、前記抗体と共に前記ＦＶＩＩＩをインキュベートして、抗体−ＦＶＩＩＩ複合体を形成させる工程と、
（ｂ）前記抗体−ＦＶＩＩＩ複合体に前記ＷＳＰを結合させる条件下で、前記ＷＳＰと共に前記抗体−ＦＶＩＩＩ複合体をインキュベートする工程と、
（ｃ）前記ＷＳＰ結合ＦＶＩＩＩを、前記抗体から離す工程を含み、
前記ＷＳＰは、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、分枝ＰＥＧ、ポリシアル酸（ＰＳＡ）、炭水化物、多糖類、プルラン、キトサン、ヒアルロン酸、コンドロイチン硫酸、デルマタン硫酸、でんぷん、デキストラン、カルボキシメチルデキストラン、ポリアルキレンオキシド（ＰＡＯ）、ポリアルキレングリコール（ＰＡＧ）、ポリプロピレングリコール（ＰＰＧ）ポリオキサゾリン、ポリアクリロイルモルホリン、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポリカルボキシレート、ポリビニルピロリドン、ポリホスファゼン、ポリオキサゾリン、ポリエチレン−ｃｏ−マレイン酸無水物、ポリスチレン−ｃｏ−マレイン酸無水物、ポリ（１−ヒドロキシメチルエチレンヒドロキシメチルホルマール）（ＰＨＦ）、および／または２−メタクリロイルオキシ−２’−エチルトリメチルアンモニウムホスフェート（ＭＰＣ）からなる群から選択される、方法。
【請求項２】
前記ＦＶＩＩＩが完全長ＦＶＩＩＩである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記ＷＳＰが約２，０００から約１５０，０００Ｄａの分子量を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記ＷＳＰが直鎖状構造または分枝構造を有する、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記ＷＳＰがＰＥＧである、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記ＷＳＰがＰＳＡである、請求項４に記載の方法。
【請求項７】
前記抗体が樹脂に固定化されている、請求項１に記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２９】
さらに別の実施形態では、ＷＳＰが約２，０００Ｄａから約１５０，０００Ｄａの分子量を有する前記タンパク質性構築体が提供される。別の実施形態では、ＷＳＰは直鎖状構造または分枝構造を有する。一実施形態では、ＷＳＰはＰＥＧである。別の実施形態では、ＷＳＰはＰＳＡである。本発明のさらに別の実施形態では、抗体が樹脂に固定化されている前記タンパク質性構築体が提供される。
本発明は、例えば以下の項目を提供する。
（項目１）
血液凝固因子に、水溶性ポリマー（ＷＳＰ）を結合する方法であって、
（ａ）前記血液凝固因子に血液凝固因子特異抗体を結合させる条件下で、前記抗体と共に前記血液凝固因子をインキュベートして、抗体−血液凝固因子複合体を形成させる工程と、
（ｂ）前記抗体−血液凝固因子複合体に前記ＷＳＰを結合させる条件下で、前記ＷＳＰと共に前記抗体−血液凝固因子複合体をインキュベートする工程と、
（ｃ）前記ＷＳＰ結合血液凝固因子を、前記抗体から離す工程を含み、
前記血液凝固因子は、第ＩＸ因子（ＦＩＸ）、第ＶＩＩＩ因子（ＦＶＩＩＩ）、第ＶＩＩａ因子（ＦＶＩＩａ）、フォンヴィレブランド因子（ＶＷＦ）、第Ｖ因子（ＦＶ）、第Ｘ因子（ＦＸ）、第ＸＩ因子、第ＸＩＩ因子（ＦＸＩＩ）、トロンビン（ＦＩＩ）、プロテインＣ、プロテインＳ、ｔＰＡ、ＰＡＩ−１、組織因子（ＴＦ）およびＡＤＡＭＴＳ１３プロテアーゼからなる群から選択され、
前記ＷＳＰは、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、分枝ＰＥＧ、ポリシアル酸（ＰＳＡ）、炭水化物、多糖類、プルラン、キトサン、ヒアルロン酸、コンドロイチン硫酸、デルマタン硫酸、でんぷん、デキストラン、カルボキシメチルデキストラン、ポリアルキレンオキシド（ＰＡＯ）、ポリアルキレングリコール（ＰＡＧ）、ポリプロピレングリコール（ＰＰＧ）ポリオキサゾリン、ポリアクリロイルモルホリン、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポリカルボキシレート、ポリビニルピロリドン、ポリホスファゼン、ポリオキサゾリン、ポリエチレン−ｃｏ−マレイン酸無水物、ポリスチレン−ｃｏ−マレイン酸無水物、ポリ（１−ヒドロキシメチルエチレンヒドロキシメチルホルマール）（ＰＨＦ）、および／または２−メタクリロイルオキシ−２’−エチルトリメチルアンモニウムホスフェート（ＭＰＣ）からなる群から選択される、方法。
（項目２）
前記血液凝固因子がＦＶＩＩＩである、項目１に記載の方法。
（項目３）
前記ＦＶＩＩＩが完全長ＦＶＩＩＩである、項目２に記載の方法。
（項目４）
前記ＷＳＰが約２，０００から約１５０，０００Ｄａの分子量を有する、項目１に記載の方法。
（項目５）
前記ＷＳＰが直鎖状構造または分枝構造を有する、項目４に記載の方法。
（項目６）
前記ＷＳＰがＰＥＧである、項目５に記載の方法。
（項目７）
前記ＷＳＰがＰＳＡである、項目５に記載の方法。
（項目８）
前記抗体が樹脂に固定化されている、項目１に記載の方法。
（項目９）
（ａ）血液凝固因子、および
（ｂ）前記血液凝固因子に結合している少なくとも１種の水溶性ポリマー（ＷＳＰ）分子
を含むタンパク質性構築体であって、
前記少なくとも１種のＷＳＰは、前記血液凝固因子に特異的に結合する抗体の存在下で、前記血液凝固因子に結合し、
前記血液凝固因子は、第ＩＸ因子（ＦＩＸ）、第ＶＩＩＩ因子（ＦＶＩＩＩ）、第ＶＩＩａ因子（ＦＶＩＩａ）、フォンヴィレブランド因子（ＶＷＦ）、第Ｖ因子（ＦＶ）、第Ｘ因子（ＦＸ）、第ＸＩ因子、第ＸＩＩ因子（ＦＸＩＩ）、トロンビン（ＦＩＩ）、プロテインＣ、プロテインＳ、ｔＰＡ、ＰＡＩ−１、組織因子（ＴＦ）およびＡＤＡＭＴＳ１３プロテアーゼからなる群から選択され、
前記ＷＳＰは、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、分枝ＰＥＧ、ポリシアル酸（ＰＳＡ）、炭水化物、多糖類、プルラン、キトサン、ヒアルロン酸、コンドロイチン硫酸、デルマタン硫酸、でんぷん、デキストラン、カルボキシメチルデキストラン、ポリアルキレンオキシド（ＰＡＯ）、ポリアルキレングリコール（ＰＡＧ）、ポリプロピレングリコール（ＰＰＧ）ポリオキサゾリン、ポリアクリロイルモルホリン、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポリカルボキシレート、ポリビニルピロリドン、ポリホスファゼン、ポリオキサゾリン、ポリエチレン−ｃｏ−マレイン酸無水物、ポリスチレン−ｃｏ−マレイン酸無水物、ポリ（１−ヒドロキシメチルエチレンヒドロキシメチルホルマール）（ＰＨＦ）、および／または２−メタクリロイルオキシ−２’−エチルトリメチルアンモニウムホスフェート（ＭＰＣ）からなる群から選択される、構築体。
（項目１０）
前記血液凝固因子がＦＶＩＩＩである、項目９に記載のタンパク質性構築体。
（項目１１）
前記ＦＶＩＩＩが完全長ＦＶＩＩＩである、項目１０に記載のタンパク質性構築体。
（項目１２）
前記ＷＳＰが約２，０００から約１５０，０００Ｄａの分子量を有する、項目９に記載のタンパク質性構築体。
（項目１３）
前記ＷＳＰが直鎖状構造または分枝構造を有する、項目１２に記載のタンパク質性構築体。
（項目１４）
前記ＷＳＰがＰＥＧである、項目１３に記載のタンパク質性構築体。
（項目１５）
前記ＷＳＰがＰＳＡである、項目１３に記載のタンパク質性構築体。
（項目１６）
前記抗体が樹脂に固定化されている、項目９に記載のタンパク質性構築体。