【誤訳訂正書】
【提出日】平成26年4月23日(2014.4.23)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象の中枢神経系で産生される生体分子の２つ以上のイソ型のインビボ代謝を同時に測定するための方法であって、
ａ）前記対象へ、前記生体分子が前記対象内で産生される際に前記生体分子へ取り入れられる標識部分を投与することと、
ｂ）前記対象から、前記標識部分で標識された第１の生体分子画分と、前記標識部分では標識されていない第２の生体分子画分とを含み、前記第１の生体分子画分は、前記生体分子の２つ以上の標識されたイソ型を含み、前記第２の生体分子画分は、前記生体分子の２つ以上の非標識イソ型を含む、生体試料を得ることと、
ｃ）前記対象の中枢神経系で産生される生体分子の２つ以上のイソ型のインビボ代謝を同時に測定するために、標識されたイソ型各々の量および非標識イソ型各々の量を検出することと、
を含む、方法。
【請求項２】
前記生体分子はタンパク質であって、前記タンパク質の前記２つ以上のイソ型は、プロテアーゼ活性によりインビボで生成される切断断片、非プロテアーゼ活性によってインビボで生成される切断断片、前記タンパク質の遺伝的対立遺伝子、ＲＮＡプロセシング産物、および翻訳後産物からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記遺伝的対立遺伝子、前記ＲＮＡプロセシング産物、および前記翻訳後産物は、プロテアーゼ活性によりエクスビボで生成されるイソ型特異的断片として、ステップ（ｃ）で検出される、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記タンパク質は、アミロイドベータ、アポリポタンパク質Ｅ、アポリポタンパク質Ｊ、シヌクレイン、可溶性アミロイド前駆体タンパク質、タウ、ＴＤＰ―４３、ハンチンチン、プログラニュリン、アルファ―２マクログロブリン、Ｓ１００Ｂ、ミエリン塩基性タンパク質、インターロイキン、およびＴＮＦからなる群から選択される、請求項２に記載の方法。
【請求項５】
前記標識部分は、２Ｈ、１３Ｃ、１５Ｎ、１７Ｏ、１８Ｏ、３３Ｓ、３４Ｓ、および３６Ｓからなる群から選択される非放射性同位体を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記標識部分は、１３Ｃを含むアミノ酸である、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記標識部分は、静脈内、動脈内、皮下、腹腔内、筋肉内、および経口からなる群から選択される経路によって前記対象に投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記生体試料は、脳脊髄液、血液、尿、唾液、涙、脳組織、および脊髄組織からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記生体試料から、前記標識されたイソ型および前記非標識イソ型を単離することをさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記標識されたイソ型および前記非標識イソ型は、免疫沈降、誘導体化高分子への吸着、液体クロマトグラフィー、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される方法によって、前記生体試料から単離される、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
標識されたイソ型各々の量および非標識イソ型各々の量は、質量分析法により検出される、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
前記生体分子はタンパク質であり、前記標識部分は、１３Ｃ６―ロイシンであり、前記タンパク質は、アポリポタンパク質Ｅ（ＡｐｏＥ）であり、ＡｐｏＥは、免疫沈降または誘導体化ポリヒドロキシメチレン高分子への吸着によって前記生体試料から単離され、検出される前記イソ型は、ＡｐｏＥのエクスビボ切断により生成されるＡｐｏＥイソ型特異的断片であり、前記標識されたイソ型および前記非標識イソ型は、質量分析法により検出される、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
前記生体分子はタンパク質であり、前記標識部分は、１３Ｃ６―ロイシンであり、前記タンパク質は、アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）であり、前記イソ型は、可溶性ＡＰＰ―アルファおよび可溶性ＡＰＰ―ベータであり、前記標識されたイソ型および前記非標識イソ型は免疫沈降により前記生体試料から単離され、前記標識されたイソ型および前記非標識イソ型は質量分析法により検出される、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
前記生体分子はタンパク質であり、前記標識部分は、１３Ｃ６―ロイシンであり、前記タンパク質は、アミロイドベータであり、前記イソ型は、アミロイドベータ１−３８、アミロイドベータ１−３９、アミロイドベータ１−４０、アミロイドベータ１−４１、およびアミロイドベータ１−４２からなる群から選択され、前記標識されたイソ型および前記非標識イソ型は免疫沈降により前記生体試料から単離され、前記標識されたイソ型および前記非標識イソ型は質量分析法により検出される、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
治療薬が、対象の中枢神経系で産生される生体分子の２つ以上のイソ型のインビボ代謝に作用するか否かを判別するための方法であって、
ａ）前記対象へ前記治療薬を投与することと、
ｂ）前記対象へ、前記生体分子が前記対象内で産生される際に前記生体分子へ取り入れられる標識部分を投与することと、
ｃ）前記対象から、前記標識部分で標識された第１の生体分子画分と、前記標識部分では標識されていない第２の生体分子画分とを含み、前記第１の生体分子画分は、前記生体分子の２つ以上の標識されたイソ型を含み、前記第２の生体分子画分は、前記生体分子の２つ以上の非標識イソ型を含む、生体試料を得ることと、
ｄ）前記対象の中枢神経系で産生される生体分子の２つ以上のイソ型のインビボ代謝を同時に測定するために、前記生体試料中の標識されたイソ型各々の量および非標識イソ型各々の量を検出することと、
ｅ）好適な対照値と各イソ型の代謝を比較することであって、特定のイソ型における前記対照値からの変化は、前記治療薬が、前記対象の中枢神経系で前記特定のイソ型の代謝に作用することを示す、前記比較することと、
を含む、方法。
【請求項１６】
ステップ（ｂ）は、ステップ（ａ）の前に実施される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記生体分子はタンパク質であり、前記タンパク質の前記２つ以上のイソ型は、プロテアーゼ活性によりインビボで生成される切断断片、非プロテアーゼ活性によりインビボで生成される切断断片、前記タンパク質の遺伝的対立遺伝子、ＲＮＡプロセシング産物、および翻訳後産物からなる群から選択される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１８】
前記遺伝的対立遺伝子、ＲＮＡプロセシング産物、および翻訳後産物は、プロテアーゼ活性によりエクスビボで生成されるイソ型特異的断片として、ステップ（ｄ）で検出される、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記タンパク質は、アミロイドベータ、アポリポタンパク質Ｅ、アポリポタンパク質Ｊ、シヌクレイン、可溶性アミロイド前駆体タンパク質、タウ、ＴＤＰ―４３、ハンチンチン、プログラニュリン、アルファ―２マクログロブリン、Ｓ１００Ｂ、ミエリン塩基性タンパク質、インターロイキン、およびＴＮＦからなる群から選択される、請求項１７に記載の方法。
【請求項２０】
前記標識部分は、２Ｈ、１３Ｃ、１５Ｎ、１７Ｏ、１８Ｏ、３３Ｓ、３４Ｓ、および３６Ｓからなる群から選択される非放射性同位体を含む、請求項１５に記載の方法。
【請求項２１】
前記標識部分は、１３Ｃを含むアミノ酸である、請求項１５に記載の方法。
【請求項２２】
前記標識部分は、静脈内、動脈内、皮下、腹腔内、筋肉内、および経口からなる群から選択される経路によって前記対象に投与される、請求項１５に記載の方法。
【請求項２３】
前記治療薬は、静脈内、動脈内、皮下、腹腔内、筋肉内、および経口からなる群から選択される経路によって前記対象に投与される、請求項１５に記載の方法。
【請求項２４】
前記生体試料は、脳脊髄液、血液、尿、唾液、涙、脳組織、および脊髄組織とからなる群から選択される、請求項１５に記載の方法。
【請求項２５】
前記好適な対照値は、前記治療薬投与前の同一の対象、前記治療薬を投与されていない対照対象、および対照イソ型からなる群から選択される、請求項１５に記載の方法。
【請求項２６】
前記生体試料から前記標識されたイソ型および前記非標識イソ型を単離することをさらに含む、請求項１５に記載の方法。
【請求項２７】
前記標識されたイソ型および前記非標識イソ型は、免疫沈降、誘導体化高分子への吸着、液体クロマトグラフィー、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される方法によって、前記生体試料から単離される、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
各標識されたイソ型の量および各非標識イソ型の量は、質量分析法により検出される、請求項１５に記載の方法。
【請求項２９】
前記生体分子はタンパク質であり、前記標識部分は１３Ｃ６―ロイシンであり、前記タンパク質はアポリポタンパク質Ｅ（ＡｐｏＥ）であり、ＡｐｏＥは免疫沈降または誘導体化ポリヒドロキシメチレン高分子への吸着によって前記生体試料から単離され、検出される前記イソ型は、ＡｐｏＥのエクスビボ切断により生成されるＡｐｏＥイソ型特異的断片であり、前記標識されたイソ型および前記非標識イソ型は、質量分析法により検出される、請求項１５に記載の方法。
【請求項３０】
前記生体分子はタンパク質であり、前記標識部分は１３Ｃ６―ロイシンであり、前記タンパク質はアミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）であり、前記イソ型は可溶性ＡＰＰ―アルファおよび可溶性ＡＰＰ―ベータであり、前記標識されたイソ型および前記非標識イソ型は免疫沈降により前記生体試料から単離され、前記標識されたイソ型および前記非標識イソ型は質量分析法により検出される、請求項１５に記載の方法。
【請求項３１】
前記生体分子はタンパク質であり、前記タンパク質はアミロイドベータであり、前記標識部分は１３Ｃ６―ロイシンであり、前記イソ型は、アミロイドベータ１−３８、アミロイドベータ１−３９、アミロイドベータ１−４０、アミロイドベータ１−４１、およびアミロイドベータ１−４２からなる群から選択され、前記標識されたイソ型および前記非標識イソ型は、免疫沈降により前記生体試料から単離され、前記標識されたイソ型および非標識イソ型は質量分析法により検出される、請求項１５に記載の方法。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００７７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００７７】
標識されたおよび非標識Ａβは、上記に詳しく説明されるようにＣＳＦおよび細胞培地から単離し得る。ＡβはＮ末端または中間領域結合抗体によって免疫沈降し、次にトリプシンを用いて消化し得る（または他のペプチターゼ）。例えば、ＡβをＨＪ５．１抗Ａβ抗体（中間領域）を用いて培地から免疫沈降し、トリプシン消化した。結果のペプチド（Ａβ２９−４０）は上記に詳しく説明されるようにナノＬＣタンデムＭＳによって分析した。結果は図１１に提示される。加えて、２つ以上の異なるＣ末端ＡβペプチドをＸｂｒｉｄｇｅＣ８（ＷａｔｅｒｓＣｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ社）液体クロマトグラフィーカラム上でまた質量分析法を用いて異なる質量により分離した。代替として、Ａβを図１２−１４に図示されるように、Ｌｙｓ―Ｎを用いて消化し、次に分析し得る。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】図面
【訂正対象項目名】図４Ａ
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【図４Ａ】
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【誤訳訂正４】
【訂正対象書類名】図面
【訂正対象項目名】図４Ｂ
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【図４Ｂ】
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