【手続補正書】
【提出日】平成25年12月9日(2013.12.9)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
生殖系列遺伝子改変を含むマウスであって、該生殖系列遺伝子改変は、ＩｇＧのＣＨ１をコードしているヌクレオチド配列の欠失を含み、該マウスは、
ＣＨ１ドメインを含むＩｇＭを発現し、
ＣＨ１ドメインおよび軽鎖を欠いているＩｇＧ抗体を血清中で発現する、
マウス。
【請求項２】
前記ＣＨ１をコードしている前記ヌクレオチド配列の前記欠失が、ＩｇＧ１遺伝子内に存在している、請求項１に記載のマウス。
【請求項３】
機能性免疫グロブリン軽鎖遺伝子の遺伝子座を含む、請求項１に記載のマウス。
【請求項４】
軽鎖を欠いている前記ＩｇＧ抗体が、ヒト可変ドメインと、ＣＨ１ドメインを欠いているマウス定常ドメインとを含む、請求項１に記載の遺伝子改変マウス。
【請求項５】
軽鎖を欠いている前記ＩｇＧ抗体が、マウス可変ドメインと、ＣＨ１ドメインを欠いているマウス定常ドメインとを含む、請求項１に記載の遺伝子改変マウス。
【請求項６】
ＩｇＧ２ａ遺伝子の欠失を含む、請求項１に記載の遺伝子改変マウス。
【請求項７】
ＩｇＧ２ｂ遺伝子の欠失を含む、請求項１に記載の遺伝子改変マウス。
【請求項８】
ＩｇＧ２ａ遺伝子の欠失およびＩｇＧ２ｂ遺伝子の欠失を含む、請求項１に記載の遺伝子改変マウス。
【請求項９】
１つ以上の内因性マウス重鎖可変領域遺伝子セグメントの１つ以上のヒト重鎖可変領域遺伝子セグメントでの置き換えを含む、請求項１に記載の遺伝子改変マウス。
【請求項１０】
前記１つ以上のヒト重鎖可変領域遺伝子セグメントがヒトＶＨ１ファミリー遺伝子セグメントである、請求項９に記載の遺伝子改変マウス。
【請求項１１】
前記ＶＨ１ファミリー遺伝子セグメントが、ヒトＶＨ遺伝子セグメント１−８、１−１８、および１−６９のＦＲ１、ＦＲ２およびＦＲ３遺伝子セグメントと少なくとも９０％同一であるＦＲ１、ＦＲ２およびＦＲ３領域を含む、請求項１０に記載の遺伝子改変マウス。
【請求項１２】
さらに、ヒトＤ遺伝子セグメントおよびヒトＪ遺伝子セグメントを含む、請求項１０に記載の遺伝子改変マウス。
【請求項１３】
請求項１０に記載の遺伝子改変マウスであって、該マウスが、ＦＲ４をコードしている再編成免疫グロブリン遺伝子を含み、該ＦＲ４が、ヒトＤ１−７／Ｊ４、Ｄ３−１６／Ｊ６、Ｄ４−４／Ｊ４、Ｄ６−６／Ｊ４、Ｄ６−６／Ｊ２、Ｄ６−７／Ｊ４、またはＤ６−１９／Ｊ６によってコードされたＦＲ４と少なくとも９０％同一である、遺伝子改変マウス。
【請求項１４】
１つ以上の内因性マウス重鎖可変領域遺伝子セグメントの１つ以上のラクダ化ヒト重鎖可変領域遺伝子セグメントでの置き換えを含む、請求項１に記載の遺伝子改変マウス。
【請求項１５】
マウスにおいて体細胞変異重鎖抗体を作製するための方法であって、該方法は、
ａ．マウスを抗原で免疫化する工程であって、ここで、該マウスは、再編成されていないヒトまたはマウス重鎖免疫グロブリンの可変領域遺伝子セグメントを含み、機能性ＩｇＧ  ＣＨ１ドメインをコードする少なくとも１つの対立遺伝子のヌクレオチド配列を欠いており、かつＣＨ１ドメインを含むＩｇＭを発現する、工程；
ｂ．該マウスを、該抗原に対する免疫応答が起こるのに充分な条件下で維持する工程；および
ｃ．該マウスから体細胞変異重鎖抗体を単離する工程であって、ここで、該体細胞変異重鎖抗体は、該ヒトまたはマウス重鎖免疫グロブリンの可変領域遺伝子セグメントに由来する可変ドメインを含み、かつ該抗原に特異的に結合する、工程
を含む、方法。
【請求項１６】
Ｖ、ＤおよびＪ遺伝子セグメントの全部または実質的に全部の１つ以上のヒトＶ、ヒトＤおよびヒトＪ遺伝子セグメントでの置き換えを含む遺伝子改変マウスであって、該１つ以上のヒトＶ、ＤおよびＪ遺伝子セグメントは、内因性マウス遺伝子座でマウス重鎖定常領域遺伝子の遺伝子座に作動可能に連結されており、該マウス重鎖定常領域遺伝子の遺伝子座は、完全長ＩｇＭ遺伝子、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ、ＩｇＧ３およびその組合せから選択されるＩｇＧ遺伝子内のＣＨ１ドメインをコードしているヌクレオチド配列内に欠失を含むＩｇＧ遺伝子を含み、該マウスは、ＣＨ１領域を有するＩｇＭを含むＢ細胞受容体を発現し、該ＩｇＭは、関連λまたはκ軽鎖と会合している重鎖を含む、遺伝子改変マウス。
【請求項１７】
前記１つ以上のヒトＶ、ＤおよびＪ遺伝子セグメントが、ＶＨ１、ＶＨ３、ＶＨ４およびその組合せから選択される可変領域ファミリー由来のヒト遺伝子セグメントを含む、請求項１６に記載の遺伝子改変マウス。
【請求項１８】
前記１つ以上のヒト遺伝子セグメントが、１−２、１−８、１−１８、１−４６、１−６９、３−２１、３−７２、４−５９およびその組合せから選択される、請求項１７に記載の遺伝子改変マウス。
【請求項１９】
前記１つ以上のヒトＶ、ＤおよびＪ遺伝子セグメントが、Ｄ１−７、Ｄ３−１６、Ｄ４−４、Ｄ６−６、Ｄ６−７、Ｄ６−１９、Ｊ２、Ｊ３、Ｊ４およびその組合せを含む、請求項１７に記載の遺伝子改変マウス。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７９】
他の実施形態を記載するが、当業者には、以下の詳細説明を検討すると自明となろう。
特定の実施形態では、例えば以下が提供される：
（項目１）
生殖系列遺伝子改変を含むマウスであって、該生殖系列遺伝子改変は、ＩｇＧのＣＨ１をコードしているヌクレオチド配列の欠失を含み、該マウスは、
ＣＨ１ドメインを含むＩｇＭを発現し、
ＣＨ１ドメインおよび軽鎖を欠いているＩｇＧ抗体を血清中で発現し、かつ
ＣＨ１ドメインをコードしている配列を含むＩｇＧ  ｍＲＮＡを発現できない、
マウス。
（項目２）
前記ＣＨ１をコードしている前記ヌクレオチド配列の前記欠失が、ＩｇＧ１遺伝子内に存在している、項目１に記載のマウス。
（項目３）
機能性免疫グロブリン軽鎖遺伝子の遺伝子座を含む、項目１に記載のマウス。
（項目４）
軽鎖を欠いている前記ＩｇＧ抗体が、ヒト可変ドメインと、ＣＨ１ドメインを欠いているマウス定常ドメインとを含む、項目１に記載の遺伝子改変マウス。
（項目５）
軽鎖を欠いている前記ＩｇＧ抗体が、マウス可変ドメインと、ＣＨ１ドメインを欠いているマウス定常ドメインとを含む、項目１に記載の遺伝子改変マウス。
（項目６）
ＩｇＧ２ａ遺伝子の欠失を含む、項目１に記載の遺伝子改変マウス。
（項目７）
ＩｇＧ２ｂ遺伝子の欠失を含む、項目１に記載の遺伝子改変マウス。
（項目８）
ＩｇＧ２ａ遺伝子の欠失およびＩｇＧ２ｂ遺伝子の欠失を含む、項目１に記載の遺伝子改変マウス。
（項目９）
ＩｇＧ２ａ遺伝子の欠失およびＩｇＧ２ｂ遺伝子の欠失を含む、項目１に記載の遺伝子改変マウス。
（項目１０）
１つ以上の内因性マウス重鎖可変領域遺伝子セグメントの１つ以上のヒト重鎖可変領域遺伝子セグメントでの置き換えを含む、項目１に記載の遺伝子改変マウス。
（項目１１）
前記１つ以上のヒト重鎖可変領域遺伝子セグメントがヒトＶＨ１ファミリー遺伝子セグメントである、項目１０に記載の遺伝子改変マウス。
（項目１２）
前記ＶＨ１ファミリー遺伝子セグメントが、ヒトＶＨ遺伝子セグメント１−８、１−１８、および１−６９のＦＲ１、ＦＲ２およびＦＲ３遺伝子セグメントと少なくとも９０％同一であるＦＲ１、ＦＲ２およびＦＲ３領域を含む、項目１１に記載の遺伝子改変マウス。
（項目１３）
さらに、ヒトＤ遺伝子セグメントおよびヒトＪ遺伝子セグメントを含む、項目１１に記載の遺伝子改変マウス。
（項目１４）
項目１１に記載の遺伝子改変マウスであって、該マウスが、ＦＲ４をコードしている再編成免疫グロブリン遺伝子を含み、該ＦＲ４が、ヒトＤ１−７／Ｊ４、Ｄ３−１６／Ｊ６、Ｄ４−４／Ｊ４、Ｄ６−６／Ｊ４、Ｄ６−６／Ｊ２、Ｄ６−７／Ｊ４、またはＤ６−１９／Ｊ６によってコードされたＦＲ４と少なくとも９０％同一である、遺伝子改変マウス。
（項目１５）
１つ以上の内因性マウス重鎖可変領域遺伝子セグメントの１つ以上のラクダ化ヒト重鎖可変領域遺伝子セグメントでの置き換えを含む、項目１に記載の遺伝子改変マウス。
（項目１６）
マウスにおいて体細胞変異重鎖抗体を作製するための方法であって、該方法は、
ａ．マウスを抗原で免疫化する工程であって、ここで、該マウスは、再編成されていないヒトまたはマウス重鎖免疫グロブリンの可変領域遺伝子セグメントを含み、機能性ＩｇＧ  ＣＨ１ドメインをコードする少なくとも１つの対立遺伝子のヌクレオチド配列を欠いており、かつＣＨ１ドメインを含むＩｇＭを発現する、工程；
ｂ．該マウスを、該抗原に対する免疫応答が起こるのに充分な条件下で維持する工程；および
ｃ．該マウスから体細胞変異重鎖抗体を単離する工程であって、ここで、該体細胞変異重鎖抗体は、該ヒトまたはマウス重鎖免疫グロブリンの可変領域遺伝子セグメントに由来する可変ドメインを含み、かつ該抗原に特異的に結合する、工程
を含む、方法。
（項目１７）
Ｖ、ＤおよびＪ遺伝子セグメントの全部または実質的に全部の１つ以上のヒトＶ、ヒトＤおよびヒトＪ遺伝子セグメントでの置き換えを含む遺伝子改変マウスであって、該１つ以上のヒトＶ、ＤおよびＪ遺伝子セグメントは、内因性マウス遺伝子座でマウス重鎖定常領域遺伝子の遺伝子座に作動可能に連結されており、該マウス重鎖定常領域遺伝子の遺伝子座は、完全長ＩｇＭ遺伝子、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ、ＩｇＧ３およびその組合せから選択されるＩｇＧ遺伝子内のＣＨ１ドメインをコードしているヌクレオチド配列内に欠失を含むＩｇＧ遺伝子を含み、該マウスは、ＣＨ１領域を有するＩｇＭを含むＢ細胞受容体を発現し、該ＩｇＭは、関連λまたはκ軽鎖と会合している重鎖を含む、遺伝子改変マウス。
（項目１８）
前記１つ以上のヒトＶ、ＤおよびＪ遺伝子セグメントが、ＶＨ１、ＶＨ３、ＶＨ４およびその組合せから選択される可変領域ファミリー由来のヒト遺伝子セグメントを含む、項目１７に記載の遺伝子改変マウス。
（項目１９）
前記１つ以上のヒト遺伝子セグメントが、１−２、１−８、１−１８、１−４６、１−６９、３−２１、３−７２、４−５９およびその組合せから選択される、項目１８に記載の遺伝子改変マウス。
（項目２０）
前記１つ以上のヒトＶ、ＤおよびＪ遺伝子セグメントが、Ｄ１−７、Ｄ３−１６、Ｄ４−４、Ｄ６−６、Ｄ６−７、Ｄ６−１９、Ｊ２、Ｊ３、Ｊ４およびその組合せを含む、項目１８に記載の遺伝子改変マウス。