【手続補正書】
【提出日】平成26年5月19日(2014.5.19)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
水溶性バッファーの存在下（ここで前記バッファーのｐＨは５．９〜６．３である）で、式
2013526577.tif 000001
で表される化合物を、式
2013526577.tif 000002
（式中、Ｘは、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、アリールチオまたはヘテロアリールチオである）で表される化合物で処理する工程を含む、EC145を調製するためのプロセス。
【請求項２】
Ｘは、２−チオピリジニルまたは３−ニトロ−２−チオピリジニルである、請求項１に記載のプロセス。
【請求項３】
Ｘは、２−チオピリジニルである、請求項１に記載のプロセス。
プロセス。
【請求項４】
前記バッファーは、ｐＨが５．９〜６．１である、請求項１に記載のプロセス。
【請求項５】
前記バッファーは、リン酸バッファーである、請求項１〜４のいずれかに記載のプロセス。
【請求項６】
前記バッファーは、リン酸ナトリウムバッファーである、請求項５に記載のプロセス。
【請求項７】
ｐＨが５．９〜６．３のリン酸ナトリウムバッファーの存在下で、式
2013526577.tif 000003
で表される化合物を、式
2013526577.tif 000004
で表される化合物で処理する工程を含む、請求項１に記載のプロセス。
【請求項８】
アセトニトリルを含む溶液で前記処理を実施する、請求項１〜７のいずれかに記載のプロセス。
【請求項９】
デスアセチルビンブラスチンヒドラジドを、前記式Ｙ−ＣＯ−Ｏ−（ＣＨ2）2−Ｓ−Ｘ（式中、Ｙは脱離基である）で表されるアシル化剤またはその酸付加塩で処理し、式
2013526577.tif 000005
で表される化合物を含む反応混合物を形成する工程と、
前記式
2013526577.tif 000006
で表される化合物を、前記式
2013526577.tif 000007
で表される化合物を単離せずに、前記反応混合物で直接処理する工程と、をさらに含む、請求項１〜８のいずれかに記載のプロセス。
【請求項１０】
前記アシル化剤は、式
2013526577.tif 000008
で表されるアシル化剤またはその酸付加塩である、請求項９に記載のプロセス。
【請求項１１】
前記アシル化剤は、式
2013526577.tif 000009
で表され、酸付加塩の形態で導入される、請求項１０に記載のプロセス。
【請求項１２】
前記アシル化剤は、式
2013526577.tif 000010
で表され、遊離塩基の形態で導入される、請求項１０に記載のプロセス。
【請求項１３】
アセトニトリルを含む溶媒中で、前記デスアセチルビンブラスチンヒドラジドが前記アシル化剤で処理される、請求項９〜１２のいずれかに記載のプロセス。
【請求項１４】
前記デスアセチルビンブラスチンヒドラジドは、高度に精製された形態で提供される、請求項９〜１３のいずれかに記載のプロセス。
【請求項１５】
デスアセチルビンブラスチンヒドラジドをアシル化剤で処理し、前記式
2013526577.tif 000011
で表される化合物を含む反応混合物を形成する工程と、EC119を前記反応混合物で処理する工程とが、同一の反応容器で実施される、請求項９〜１４のいずれかに記載のプロセス。
【請求項１６】
EC145を含有する前記反応混合物を、クエン酸緩衝塩化ナトリウム水溶液で希釈し、精製用のポリスチレン−ジビニルベンゼンポリマー樹脂カラムまたはカートリッジに通す工程をさらに含む、請求項１〜１５のいずれかに記載のプロセス。
【請求項１７】
アセトニトリルとクエン酸緩衝塩化ナトリウム水溶液とを含む移動相を用いて、前記EC145生成物を前記カラムまたはカートリッジから溶出する工程をさらに含む、請求項１６に記載のプロセス。
【請求項１８】
EC145を精製生成物として水溶液で得るために限外濾過を使用する工程をさらに含む、請求項１〜１７のいずれか１項に記載のプロセス。
【請求項１９】
どの工程で用いる水にも約０．９パーツパーミリオン（ｐｐｍ）を超えない濃度で溶存酸素が含まれる、請求項１〜１８のいずれか１項に記載のプロセス。
【請求項２０】
請求項１〜１９のいずれかに記載のプロセスによって調製される、EC145結合体。
【請求項２１】
水溶性バッファーの存在下（ここで、前記バッファーのｐＨは５．９〜６．３である）で、式
2013526577.tif 000012
で表される化合物を、式
2013526577.tif 000013
（式中、Ｘは、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、アリールチオまたはヘテロアリールチオである）で表される化合物で処理する工程を含むプロセスによって調製される、EC145結合体。
【請求項２２】
Ｘは、２−チオピリジニルである、請求項２１に記載の結合体。
【請求項２３】
前記プロセスが、
デスアセチルビンブラスチンヒドラジドを、式Ｙ−ＣＯ−Ｏ−（ＣＨ2）2−Ｓ−Ｘ（式中、Ｙは脱離基である）で表されるアシル化剤またはその酸付加塩で処理し、前記式
2013526577.tif 000014
で表される化合物を含む反応混合物を形成する工程と、前記式
2013526577.tif 000015
で表される化合物を、前記式
2013526577.tif 000016
で表される化合物を単離せずに、前記反応混合物で直接処理する工程と、をさらに含む、請求項２１または２２に記載の結合体。
【請求項２４】
前記アシル化剤は、式
2013526577.tif 000017
で表され、遊離塩基の形態で導入される、請求項２３に記載の結合体。
【請求項２５】
請求項２０〜２４のいずれかに記載した前記EC145結合体を、希釈剤、賦形剤またはキャリアと一緒に含む、薬学的組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００７】
この分解は抑制可能であることがわかり、それが本発明の一態様を提供するものである。よって、一実施形態として、ｐＨが８未満の水溶性バッファーの存在下で、式
2013526577.tif 000018
で表される化合物を、式
2013526577.tif 000019
（式中、Ｘは、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、アリールチオ、またはヘテロアリールチオである）で表される化合物で処理する工程を含む、EC145を調製するためのプロセスが提供される。このプロセスの一実施形態では、Ｘは、２−チオピリジニルまたは３−ニトロ−２−チオピリジニルである。このプロセスの一実施形態では、Ｘは、２−チオピリジニルである。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２０】
本発明の一態様として、本明細書にて上述したプロセスによって調製される結合体EC145が、一実施形態として提供される。一実施形態は、水溶性バッファーの存在下（ここで、バッファーのｐＨは５．９〜６．３である）で、式
2013526577.tif 000020
で表される化合物を、式
2013526577.tif 000021
（式中、Ｘは、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、アリールチオ、またはヘテロアリールチオである）で表される化合物で処理する工程を含むプロセスによって調製される、EC145結合体である。上記の一実施形態では、Ｘは、２−チオピリジニルである。上記の結合体の別の実施形態では、このプロセスは、デスアセチルビンブラスチンヒドラジドを、式Ｙ−ＣＯ−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｓ−Ｘ（式中、Ｙは脱離基である）で表されるアシル化剤またはその酸付加塩で処理し、式
2013526577.tif 000022
で表される化合物を含む反応混合物を形成する工程と、
式
2013526577.tif 000023
で表される化合物を、式
2013526577.tif 000024
で表される化合物を単離せずに、当該反応混合物で直接処理する工程と、をさらに含む。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２４】
詳細な説明
本発明の実施形態について、以下に列挙する項によってさらに説明する。
１．  ｐＨが８未満の水溶性バッファーの存在下で、式
2013526577.tif 000025
で表される化合物を、式
2013526577.tif 000026
（式中、Ｘは、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、アリールチオ、またはヘテロアリールチオである）で表される化合物で処理する工程を含む、EC145を調製するためのプロセス。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４９】
２２．  水溶性バッファーの存在下（ここで、バッファーのｐＨは５．９〜６．３である）で、式
2013526577.tif 000027
で表される化合物を、式
2013526577.tif 000028
（式中、Ｘは、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、アリールチオ、またはヘテロアリールチオである）で表される化合物で処理する工程を含むプロセスによって調製される、EC145結合体。