【誤訳訂正書】
【提出日】平成24年1月26日(2012.1.26)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】請求項１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【請求項１】
少なくとも一種の抗体を、高分子量凝集体を含む抗体調製物から精製するための方法であって、
（ａ）抗体調製物をヒドロキシアパタイト樹脂と接触させ、精製抗体を、高イオン強度のホスフェート１〜２０ｍＭおよびＮａＣｌ  ０．２〜２．５Ｍを含む少なくとも一種の溶出緩衝液で樹脂から溶出させる工程、または
（ｂ）ヒドロキシアパタイト樹脂を、高イオン強度のホスフェート１〜２０ｍＭおよびＮａＣｌ  ０．２〜２．５Ｍを含む負荷緩衝液中で抗体調製物と接触させ、精製抗体にカラムを通過させる工程、を含む、少なくとも一種の抗体の精製方法。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】請求項１５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【請求項１５】
少なくとも一種の抗体を、高分子量凝集体を含む抗体調製物から精製するための方法であって、抗体調製物を、（ａ）プロテインＡ親和クロマトグラフィー、（ｂ）イオン交換クロマトグラフィー、および（ｃ）ヒドロキシアパタイトクロマトグラフィーに付す工程を含み、ここで、
（ｉ）精製抗体は、高イオン強度のホスフェート１〜２０ｍＭおよびＮａＣｌ
０．２〜２．５Ｍを含む溶出緩衝液を用いて、ヒドロキシアパタイト樹脂から溶出されるか、または
（ｉｉ）ヒドロキシアパタイト樹脂を、高イオン強度のホスフェート１〜２０ｍＭおよびＮａＣｌ
０．２〜２．５Ｍを含む負荷溶出緩衝液中で抗体調製物と接触させ、精製抗体にカラムを通過させる、少なくとも一種の抗体の精製方法。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】請求項４８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【請求項４８】
少なくとも一種の抗体を、高分子量凝集体を含む抗体調製物から精製するための方法であって、
（ａ）前記調製物をプロテインＡ基体と接触させる工程、
（ｂ）前記抗体を、前記プロテインＡ基体に吸着させる工程、
（ｃ）前記プロテインＡ基体および吸着された抗体を、少なくとも一種のプロテインＡ洗浄緩衝液で洗浄する工程、
（ｄ）前記吸着された抗体を、少なくとも一種のプロテインＡ溶出緩衝液で溶出する工程、
（ｅ）前記プロテインＡ溶出物を、イオン交換基体と接触させる工程、
（ｆ）前記抗体を、前記イオン交換基体に通す工程、
（ｇ）前記イオン交換基体を、少なくとも一種のイオン交換洗浄緩衝液で洗浄する工程、
（ｈ）前記イオン交換フロースルーを、リン酸ナトリウム１〜２０ｍＭおよびＮａＣｌ
０．２〜２．５Ｍを含む負荷緩衝液中に交換する工程、
（ｉ）前記イオン交換フロースルーを、ヒドロキシアパタイト樹脂と接触させる工程、
（ｊ）前記抗体に、前記ヒドロキシアパタイト樹脂を通過させる工程、および
（ｋ）前記ヒドロキシアパタイト樹脂を、少なくとも一種のヒドロキシアパタイト洗浄緩衝液で洗浄する工程、
を含む、少なくとも一種の抗体の精製方法。
【誤訳訂正４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０００９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０００９】
（発明の開示）
出願人は、驚くべきことに、異なる原料から免疫グロブリンを精製し、かつＨＭＷＡを除去するための新規ヒドロキシアパタイトクロマトグラフィー方法にＮａＣｌを用いることができることを見出した（図２）。したがって、本発明は、抗体調製物をヒドロキシアパタイト樹脂と接触させ、抗体を樹脂から選択的に溶出することよって、高分子量凝集体を該調製物から除去する方法に関する。あるいは、抗体調製物は、平衡緩衝液中に緩衝液交換され、次いでヒドロキシアパタイト樹脂を通過させられるであろう。これらの結合／フロースルーヒドロキシアパタイトクロマトグラフィー方法の組合せはまた、抗体調製物を精製するのに用いられるであろう。
【誤訳訂正５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１６
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１６】
一実施形態においては、アニオン交換およびプロテインＡクロマトグラフィーは、セラミックヒドロキシアパタイトクロマトグラフィーとの組合せで用いられる。アニオン交換およびプロテインＡクロマトグラフィーは、例えば、抗体調製物をプロテインＡ基体と接触させる工程、抗体を基体に吸着させる工程、基体および吸着された抗体を少なくとも一種のプロテインＡ洗浄緩衝液で洗浄する工程、吸着された抗体を少なくとも一種のプロテインＡ溶出緩衝液で溶出する工程、調製物をイオン交換基体と接触させる工程、抗体に基体を通過させる工程、基体を少なくとも一種のイオン交換洗浄緩衝液で洗浄する工程、イオン交換フロースルーをヒドロキシアパタイト樹脂と接触させる工程、フロースルーを樹脂に吸着させる工程、樹脂を少なくとも一種のヒドロキシアパタイト洗浄緩衝液で洗浄する工程、および精製抗体を少なくとも一種のヒドロキシアパタイト溶出緩衝液で樹脂から溶出する工程によって、組合せで用いられるであろう。
【誤訳訂正６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１７】
さらなる実施形態においては、アニオン交換およびプロテインＡクロマトグラフィーは、例えば、調製物をプロテインＡ基体と接触させる工程、抗体をプロテインＡ基体に吸着させる工程、プロテインＡ基体および吸着された抗体を少なくとも一種のプロテインＡ洗浄緩衝液で洗浄する工程、吸着された抗体を少なくとも一種のプロテインＡ溶出緩衝液で溶出する工程、プロテインＡ溶出物をイオン交換基体と接触させる工程、抗体にイオン交換基体を通過させる工程、イオン交換基体を少なくとも一種のイオン交換洗浄緩衝液で洗浄する工程、イオン交換フロースルーをリン酸ナトリウム１〜２０ｍＭおよびＮａＣｌ
０．２〜２．５Ｍを含む負荷緩衝液中に交換する工程、イオン交換フロースルーをヒドロキシアパタイト樹脂と接触させる工程、抗体にヒドロキシアパタイト樹脂を通過させる工程、およびヒドロキシアパタイト樹脂を少なくとも一種のヒドロキシアパタイト洗浄緩衝液で洗浄する工程によって、組合せで用いられるであろう。
【誤訳訂正７】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１８】
さらに他の実施形態においては、アニオン交換およびプロテインＡクロマトグラフィーは、セラミックヒドロキシアパタイトクロマトグラフィーとの組合せで用いられるであろう。アニオン交換およびプロテインＡクロマトグラフィーは、例えば、抗体調製物をプロテインＡ基体と接触させる工程、抗体を基体に吸着させる工程、基体および吸着された抗体を少なくとも一種のプロテインＡ洗浄緩衝液で洗浄する工程、吸着された抗体を少なくとも一種のプロテインＡ溶出緩衝液で溶出する工程、調製物をイオン交換基体と接触させる工程、抗体に基体を通過させる工程、基体を少なくとも一種のイオン交換洗浄緩衝液で洗浄する工程、イオン交換フロースルーをヒドロキシアパタイト樹脂と接触させる工程、フロースルーを樹脂に吸着させる工程、ＨＭＷＡを抗体モノマーより強固に結合させ、負荷が継続するにつれて、結合モノマーをＨＭＷＡによって置換させる工程、ヒドロキシアパタイト樹脂を少なくとも一種のヒドロキシアパタイト洗浄緩衝液で洗浄する工程、および置換された抗体モノマーを収集する工程によって、組合せで用いられるであろう。
【誤訳訂正８】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２８】
用語「フロースルー方式」は、抗体調製物の分離技術を云う。ここで、調製物に含まれる少なくとも一種の抗体は、クロマトグラフ樹脂または基体を通過するものであり、一方少なくとも一種の潜在的汚染物または不純物は、クロマトグラフ樹脂または基体に結合する。フロースルー方式は、例えば、ヒドロキシアパタイトクロマトグラフィーおよびイオン交換クロマトグラフィーで用いられるであろう。
【誤訳訂正９】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３２】
フロースルー方式においては、抗体調製物は、ＮａＣｌ
０．２〜２．５Ｍを含む負荷緩衝液中に、弱酸性〜弱塩基性のｐＨで緩衝液交換される。抗体調製物は、次いで、ヒドロキシアパタイトカラムを通過させられ、一方ＨＭＷＡなどの不純物は、カラムに結合する。カラムは、任意に、続いて洗浄されて、さらなる精製抗体が、カラムを通過させられる。最後に、カラムは、任意にストリッピングされ、次いで水酸化ナトリウムおよびリン酸カリウム溶液を用いて再生されるであろう。
【誤訳訂正１０】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３３】
結合／フロースルー組合せ方式においては、抗体調製物は、ヒドロキシアパタイトカラムに通され、抗体モノマーおよびＨＭＷＡの両者が最初に結合する。しかし、負荷が継続するにつれて、流入するＨＭＷＡは、抗体モノマーより強固に結合可能であり、したがって結合モノマーを置換する。したがって、置換されたモノマーは、カラムを通過する。カラムは、任意に、続いて、洗浄されて、さらなる置換抗体がカラムを通過させられる。最後に、カラムは、任意に、高い塩（高いホスフェート）溶液でストリッピングされ、次いで水酸化ナトリウムおよびリン酸カリウム溶液を用いて再生されるであろう。