【手続補正書】
【提出日】平成26年3月25日(2014.3.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒト患者における使用に適当な複製欠損アデノ随伴ウイルス組成物であって、少なくとも１つのアデノ随伴ウイルスゲノムが、
（ａ）転写を制御するプロモーターと機能的に結合した治療用製品をコードする第１の転写単位であって、アブレーション認識部位を含有する該第１の転写単位；および
（ｂ）誘導性プロモーターと機能的に結合したアブレーション認識部位に特異的なアブレーターをコードする第２の転写単位であって、該転写および／もしくはアブレーション活性は薬理学的作用物質により制御される該第２の転写単位
を含んでなる、複製欠損アデノ随伴ウイルス組成物。
【請求項２】
請求項１に記載の複製欠損アデノ随伴ウイルス組成物であって、以下の任意の特徴：（ｉ）該第１の転写単位が１つより多くのアブレーション認識部位を含有すること、または
（ｉｉ）ゲノムが１つより多くのアブレーション認識部位を含んでなり、該１つより多くのアブレーション認識部位が第１のアブレーション認識部位および該第１のアブレーション認識部位と異なる第２のアブレーション認識部位を含んでなり、該ウイルスが第１のアブレーション認識部位に特異的な第１のアブレーターおよび第２の認識部位に特異的な第２のアブレーターをさらに含むこと、または
（ｉｉｉ）誘導性プロモーターが調節可能なプロモーター系であること
を有する、複製欠損アデノ随伴ウイルス組成物。
【請求項３】
調節可能なプロモーター系がｔｅｔ−オン／オフ系、ｔｅｔＲ−ＫＲＡＢ系、ミフェプリストン（ＲＵ４８６）調節可能な系、タモキシフェン依存的な調節可能な系、ラパマイシンで調節可能な系もしくはエクジソンに基づく調節可能な系から選択される請求項２記載の複製欠損アデノ随伴ウイルス組成物。
【請求項４】
アブレーターが、第１の転写単位中のアブレーション認識部位に結合しそしてＤＮＡを切除するかもしくは取り除くエンドヌクレアーゼ、リコンビナーゼ、メガヌクレアーゼもしくはジンクフィンガーエンドヌクレアーゼおよび第１の転写単位のＲＮＡ転写産物を取り除くかもしくは第１の転写単位のＲＮＡ転写産物の翻訳を抑制する干渉ＲＮＡ、リボザイムまたはアンチセンスよりなる群から選択される、請求項１〜３のいずれかに記載の複製欠損アデノ随伴ウイルス組成物。
【請求項５】
アブレーターがＣｒｅであり、そしてアブレーション認識部位がｌｏｘＰであるか、またはアブレーターがＦＬＰであり、そしてアブレーション認識部位がＦＲＴである、請求項１記載の複製欠損アデノ随伴ウイルス組成物。
【請求項６】
請求項１に記載の複製欠損アデノ随伴ウイルス組成物であって、アブレーターがキメラの改変されたエンドヌクレアーゼであり、かつ、該ウイルス組成物が（ｉ）第１の薬理学的作用物質の結合ドメインに融合したエンドヌクレアーゼのＤＮＡ結合ドメインを含んでなる第１の配列を含んでなり；そして該ウイルス組成物が（ｉｉ）第１の薬理学的作用物質の結合ドメインに融合したエンドヌクレアーゼのヌクレアーゼ切断ドメインをコードする第２の配列をさらに含んでなり、かつ、第１の配列（ｉ）および第２の配列（ｉｉ）が各々その発現を制御する少なくとも１つのプロモーターと機能的に結合している、複製欠損アデノ随伴ウイルス組成物。
【請求項７】
請求項６記載の複製欠損アデノ随伴ウイルス組成物であって、以下の任意の特徴：
（ａ）キメラの改変されたエンドヌクレアーゼがバイシストロン性の転写単位中の単一のバイシストロン性オープンリーディングフレーム内に含有され、該転写単位が（ｉ）と（ｉｉ）の間にリンカーをさらに含んでなること、または
（ｂ）配列（ｉ）および／もしくは配列（ｉｉ）が誘導性プロモーターを有すること、または
（ｃ）キメラの改変されたエンドヌクレアーゼが別個のオープンリーディングフレーム内に含有されていること、または
（ｄ）第１の配列および第２の配列の各々が構成的プロモーターの制御下にあり、そしてアブレーターが第１の薬理学的作用物質により生物活性化されていること
を有する、複製欠損アデノ随伴ウイルス組成物。
【請求項８】
アブレーターのコーディング配列が、アブレーターコーディング配列の５’もしくは３’に位置する核局在化シグナルをさらに含んでなる、請求項１〜７のいずれかに記載の複製欠損アデノ随伴ウイルス組成物。
【請求項９】
請求項６〜８のいずれかに記載の複製欠損アデノ随伴ウイルス組成物であって、以下の任意の特徴：
（ｉ）ＤＮＡ結合ドメインがジンクフィンガー、ヘリックス−ターン−ヘリックス、ＨＭＧ−ボックス、Ｓｔａｔタンパク質、Ｂ３、ヘリックス−ループ−ヘリックス、ウィングドヘリックス−ターン−ヘリックス、ロイシンジッパー、ウィングドヘリックス、ＰＯＵドメインおよびホメオドメインよりなる群から選択されること、または
（ｉｉ）エンドヌクレアーゼがＩＩ型制限エンドヌクレアーゼ、イントロンエンドヌクレアーゼ、およびセリンもしくはチロシンリコンビナーゼよりなる群から選択されること
を有する複製欠損アデノ随伴ウイルス組成物。
【請求項１０】
該アブレーターがキメラのＦｏｋＩ酵素である、請求項９の（ｉｉ）に記載の複製欠損アデノ随伴ウイルス組成物。
【請求項１１】
請求項１〜３のいずれかに記載の複製欠損アデノ随伴ウイルス組成物であって、ウイルスゲノムが、アブレーターの誘導性プロモーターを調節する転写因子の二量化可能なドメインを各々コードする、第３および第４の転写単位をさらに含んでなり、かつ、
（ｃ）第３の転写単位が、第１のプロモーターと機能的に結合した薬理学的作用物質の結合ドメインに融合した転写因子のＤＮＡ結合ドメインをコードし；そして
（ｄ）第４の転写単位が、第２のプロモーターと機能的に結合した薬理学的作用物質の結合ドメインに融合した転写因子の活性化ドメインをコードする、複製欠損アデノ随伴ウイルス組成物。
【請求項１２】
（ｃ）の第１のプロモーターおよび（ｄ）の第２のプロモーターが構成的プロモーターおよび誘導性プロモーターから独立して選択される、請求項１１記載の複製欠損アデノ随伴ウイルス組成物。
【請求項１３】
請求項１２記載の複製欠損アデノ随伴ウイルス組成物であって、以下の任意の特徴：
（ｉ）第１および第２のプロモーターが両方とも構成的プロモーターであり、そして薬理学的作用物質が転写因子のドメインを二量化する二量化剤であること、または
（ｉｉ）  第１のプロモーターおよび第２のプロモーターの一方が誘導性プロモーターであること
を有する、複製欠損アデノ随伴ウイルス組成物。
【請求項１４】
第３および第４の転写単位がＩＲＥＳもしくはフューリン−２Ａを含有するバイシストロン性単位である請求項１１〜１３のいずれかに記載の複製欠損アデノ随伴ウイルス組成物。
【請求項１５】
請求項１〜１４のいずれかに記載の複製欠損アデノ随伴ウイルス組成物であって、以下の任意の特徴：
（ｉ）薬理学的作用物質がラパマイシンもしくはラパログであること、および／または
（ｉｉ）アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）がＡＡＶ１、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９およびｒｈ１０よりなる群から選択されること、および／または
（ｉｉｉ）治療用製品がＨＩＶ感染性を中和する抗体もしくは抗体フラグメント、可溶性血管内皮成長因子受容体−ｌ（ｓＦｌｔ−ｌ）、第ＶＩＩＩ因子、第ＩＸ因子、インシュリン様成長因子（ＩＧＦ）、肝細胞成長因子（ＨＧＦ）、ヘムオキシゲナーゼ−ｌ（ＨＯ−１）または神経成長因子（ＮＧＦ）であること、および／または
（ｉｖ）第１の転写単位および第２の転写単位が組成物中の異なるアデノ随伴ウイルスストック上にあること、および／または
（ｖ）第１の転写単位および第２の転写単位が第１のアデノ随伴ウイルスストック中にあり、そして第２のアデノ随伴ウイルスストックが第２のアブレーター（１つもしくは複数）を含んでなること
を有する複製欠損アデノ随伴ウイルス組成物。
【請求項１６】
アデノ随伴ウイルスゲノムのパッケージングシグナルが隣接する第１および第２の転写単位を含んでなる組換えＤＮＡ組成物であって、
（ａ）第１の転写単位が、転写を制御する誘導性プロモーターと機能的に結合した治療用製品をコードし、該第１の転写単位が少なくとも１つのアブレーション認識部位を含有し；そして
（ｂ）第２の転写単位が、薬理学的作用物質に反応して転写を誘導するプロモーターと機能的に結合した少なくとも１つのアブレーション認識部位に特異的なアブレーターをコードする、組換えＤＮＡ組成物。
【請求項１７】
請求項１６記載のＤＮＡ組成物であって、以下の任意の特徴：
（ｉ）転写単位に隣接するパッケージングシグナルがＡＡＶ５’逆方向末端反復（ＩＴＲ）およびＡＡＶ３’ＩＴＲであり、ＡＡＶ  ＩＴＲが任意にＡＡＶ１、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９もしくはｒｈ１０  ＩＴＲであること、または
（ｉｉ）前記複数の転写単位にＡＡＶ  ＩＴＲが隣接していること、または
（ｉｉｉ）転写単位が２つもしくはそれ以上のＤＮＡ構築物中に含まれていること
を有するＤＮＡ組成物。
【請求項１８】
請求項１６または１７記載のＤＮＡ組成物であって、治療用製品がＨＩＶ感染性を中和する抗体もしくは抗体フラグメント、可溶性血管内皮成長因子受容体−ｌ（ｓＦｌｔ−ｌ）、第ＶＩＩＩ因子、第ＩＸ因子、インシュリン様成長因子（ＩＧＦ）、肝細胞成長因子（ＨＧＦ）、ヘムオキシゲナーゼ−ｌ（ＨＯ−１）または神経成長因子（ＮＧＦ）であり、かつ、場合により、治療用製品の転写を制御するプロモーターが構成的プロモーター、組織特異的プロモーター、細胞特異的プロモーター、誘導性プロモーターもしくは生理学的刺激に反応するプロモーターである、ＤＮＡ組成物。
【請求項１９】
請求項１〜１５のいずれかに記載の複製欠損アデノ随伴ウイルス組成物であって、導入遺伝子産物の送達を制御することにおいて使用するためのものである、複製欠損アデノ随伴ウイルス組成物。
【請求項２０】
治療用製品がＶＥＧＦアンタゴニスト、第ＩＸ因子、第ＶＩＩＩ因子、インシュリン様成長因子、肝細胞成長因子、神経成長因子およびＨＩＶに対する中和抗体よりなる群から選択される、請求項１９記載の複製欠損アデノ随伴ウイルス組成物。
【請求項２１】
請求項１〜１５のいずれかに記載の複製欠損アデノ随伴ウイルス組成物または請求項１６〜１８のいずれかに記載のＤＮＡ組成物を含んでなる遺伝子操作されている細胞であって、場合により、植物、細菌もしくは非ヒト哺乳類細胞から選択される、遺伝子操作されている細胞。