【手続補正書】
【提出日】平成26年7月1日(2014.7.1)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ｒＡＡＶの有効量を髄腔内投与によって投与することにより、導入遺伝子を対象の中枢神経系（ＣＮＳ）組織に送達するためのベクターであって、
前記ｒＡＡＶが、（ｉ）配列番号９で示される配列を含むカプシドタンパク質および（ｉｉ）導入遺伝子と操作可能に連結されたプロモーターを含む核酸を含む、前記ベクター。
【請求項２】
前記ｒＡＡＶの有効量を脳内投与によってさらに投与することによる、請求項１に記載のベクター。
【請求項３】
ｒＡＡＶの有効量を髄腔内投与および脳内投与によって投与することにより、導入遺伝子を対象の中枢神経系（ＣＮＳ）組織に送達するためのベクターであって、
前記ｒＡＡＶは、前記対象のＣＮＳ組織の細胞を感染させ、かつ導入遺伝子と操作可能に連結されたプロモーター核酸を含む、前記ベクター。
【請求項４】
前記脳内投与が脳室内投与である、請求項２または３に記載のベクター。
【請求項５】
前記髄腔内投与が前記対象の腰部である、請求項１〜４のいずれか１項に記載のベクター。
【請求項６】
前記脳室内投与が前記対象の前脳の脳室領域内への投与である、請求項４または５に記載のベクター。
【請求項７】
髄腔内投与のための前記ｒＡＡＶの用量が１０１０ゲノムコピー〜１０１１ゲノムコピーの範囲内である、請求項１〜６のいずれか１項に記載のベクター。
【請求項８】
脳内投与のための前記ｒＡＡＶの前記用量が、１０１０ゲノムコピー〜１０１１ゲノムコピーの範囲内である、請求項２〜６のいずれか１項に記載のベクター。
【請求項９】
前記導入遺伝子がＣＮＳ関連遺伝子である、請求項１〜８のいずれか１項に記載のベクター。
【請求項１０】
前記ＣＮＳ関連遺伝子が神経細胞アポトーシス抑制タンパク質（ＮＡＩＰ）、神経成長因子（ＮＧＦ）、グリア由来成長因子（ＧＤＮＦ）、脳由来成長因子（ＢＤＮＦ）、毛様体神経栄養因子（ＣＮＴＦ）、チロシンヒドロキシラーゼ（ＴＨ）、ＧＴＰ−シクロヒドロラーゼ（ＧＴＰＣＨ）、アミノ酸デカルボキシラーゼ（ＡＡＤＣ）またはアスパルトアシラーゼ（ＡＳＰＡ）である、請求項９に記載のベクター。
【請求項１１】
前記導入遺伝子が、ＳＯＤ１ｍＲＮＡに特異的に結合して前記対象におけるＳＯＤ１の発現を抑制する抑制性ＲＮＡをコードする、請求項１〜８のいずれか１項に記載のベクター。
【請求項１２】
前記抑制性ＲＮＡがアンチセンスＲＮＡ、ｓｈＲＮＡまたはｍｉＲＮＡである、請求項１１に記載のベクター。
【請求項１３】
前記抑制性ＲＮＡが、配列番号２６で示される配列を有する、請求項１１に記載のベクター。
【請求項１４】
配列番号２６で示される配列を含む核酸。
【請求項１５】
請求項１の核酸を含む組み換えＡＡＶ。
【請求項１６】
配列番号９で示される配列を含むカプシドタンパク質をさらに含む、請求項１５に記載の組み換えＡＡＶ。
【請求項１７】
ｒＡＡＶの有効量を、治療を必要としている対象のＣＮＳ組織に投与することによる、前記対象における、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）を治療するための医薬組成物であって、
前記ｒＡＡＶが、（ｉ）配列番号９で示される配列を含むカプシドタンパク質および（ｉｉ）ＳＯＤ１  ｍＲＮＡに特異的に結合して前記対象におけるＳＯＤ１の発現を抑制する抑制性ＲＮＡをコードしている領域と操作可能に連結されたプロモーターを含む核酸を含む、前記医薬組成物。
【請求項１８】
前記抑制性ＲＮＡがアンチセンスＲＮＡ、ｓｈＲＮＡまたはｍｉＲＮＡである、請求項１７に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
前記抑制性ＲＮＡが、配列番号２６で示される配列を有する、請求項１７に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
ｒＡＡＶの有効量を、治療を必要としている対象に投与することによる、前記対象における、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）を治療するための医薬組成物であって、
ｒＡＡＶが配列番号２６で示される配列をコードしている領域と操作可能に連結されたプロモーターを含む核酸を含み、かつ前記ｒＡＡＶが前記対象のＣＮＳ組織の細胞を感染させる、医薬組成物。
【請求項２１】
ｒＡＡＶの有効量を対象に投与することによる、導入遺伝子を前記対象のＣＮＳ組織に送達するためのベクターであって、
（ｉ）配列番号１０〜１２のいずれか１つで示される配列を有するカプシドタンパク質および（ｉｉ）導入遺伝子と操作可能に連結されたプロモーターを含む核酸を含む、前記ベクター。
【請求項２２】
前記導入遺伝子がレポータータンパク質をコードする、請求項２１に記載のベクター。
【請求項２３】
前記レポータータンパク質が、蛍光タンパク質、検出可能な生成物を産する反応を触媒する酵素、または細胞表面抗原である、請求項２２に記載のベクター。
【請求項２４】
前記酵素が、ルシフェラーゼ、β−グルクロニダーゼ、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ、アミノグリコシドホスホトランスフェラーゼ、アミノシクリトールホスホトランスフェラーゼ、またはピューロマイシンＮ−アセチル−トランスフェラーゼである、請求項２３に記載のベクター。
【請求項２５】
前記導入遺伝子がＣＮＳ関連遺伝子である、請求項２１に記載のベクター。
【請求項２６】
前記ＣＮＳ関連遺伝子が、神経細胞アポトーシス抑制タンパク質（ＮＡＩＰ）、神経成長因子（ＮＧＦ）、グリア由来成長因子（ＧＤＮＦ）、脳由来成長因子（ＢＤＮＦ）、毛様体神経栄養因子（ＣＮＴＦ）、チロシンヒドロキシラーゼ（ＴＨ）、ＧＴＰ−シクロヒドロラーゼ（ＧＴＰＣＨ）、アミノ酸デカルボキシラーゼ（ＡＡＤＣ）またはアスパルトアシラーゼ（ＡＳＰＡ）である、請求項２５に記載のベクター。
【請求項２７】
（ｉ）配列番号１０〜１２のいずれか１つで示される配列を有するカプシドタンパク質および（ｉｉ）ＣＮＳ関連遺伝子と操作可能に連結されたプロモーターを含む核酸を含む、ｒＡＡＶ。
【請求項２８】
前記ＣＮＳ関連遺伝子から発現されるｍＲＮＡが、非ＣＮＳ組織で優先的に発現されるｍｉＲＮＡのｍｉＲＮＡ結合部位を含む、請求項２７に記載のｒＡＡＶ。
【請求項２９】
前記ＣＮＳ関連遺伝子から発現されるｍＲＮＡが、ＣＮＳ組織で優先的に発現されるｍｉＲＮＡのｍｉＲＮＡ結合部位を含まない、請求項２７または２８に記載のｒＡＡＶ。
【請求項３０】
前記プロモーターがＣＮＳ組織特異的プロモーターである、請求項２７〜２９のいずれか１項に記載のｒＡＡＶ。
【請求項３１】
前記プロモーターが、ニューロン核（ＮｅｕＮ）、グリア線性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）、大腸腺腫症（ＡＰＣ）、およびイオン化カルシウム結合アダプター分子１（Ｉｂａ−１）から選択される遺伝子のプロモーターである、請求項２７〜３０のいずれか１項に記載のｒＡＡＶ。
【請求項３２】
前記ＣＮＳ関連遺伝子が、神経細胞アポトーシス抑制タンパク質（ＮＡＩＰ）、神経成長因子（ＮＧＦ）、グリア由来成長因子（ＧＤＮＦ）、脳由来成長因子（ＢＤＮＦ）、毛様体神経栄養因子（ＣＮＴＦ）、チロシンヒドロキシラーゼ（ＴＨ）、ＧＴＰ−シクロヒドロラーゼ（ＧＴＰＣＨ）、アミノ酸デカルボキシラーゼ（ＡＡＤＣ）またはアスパルトアシラーゼ（ＡＳＰＡ）である、請求項２７〜３１のいずれか１項に記載のｒＡＡＶ。
【請求項３３】
請求項２７〜３２のいずれか１項に記載のｒＡＡＶを含む組成物。
【請求項３４】
薬学的に許容される担体をさらに含む、請求項３３に記載の組成物。
【請求項３５】
請求項３３または３４に記載の組成物を収納する容器を含むキット。
【請求項３６】
前記容器が密封された小瓶またはアンプルである、請求項３５に記載のキット。
【請求項３７】
前記容器が注射器である、請求項３５に記載のキット。
【請求項３８】
配列番号１０〜１２で示される配列を有するカプシドタンパク質をコードしている核酸およびＣＮＳ疾患関連遺伝子をコードしている核酸を含むｒＡＡＶベクターを含む、単離された哺乳類細胞。
【請求項３９】
ＡＡＶヘルパー機能ベクターをさらに含む、請求項３８に記載の単離された哺乳類細胞。
【請求項４０】
補助機能ベクターをさらに含む、請求項３８または３９に記載の単離された哺乳類細胞。
【請求項４１】
前記ＣＮＳ関連遺伝子が、神経細胞アポトーシス抑制タンパク質（ＮＡＩＰ）、神経成長因子（ＮＧＦ）、グリア由来成長因子（ＧＤＮＦ）、脳由来成長因子（ＢＤＮＦ）、毛様体神経栄養因子（ＣＮＴＦ）、チロシンヒドロキシラーゼ（ＴＨ）、ＧＴＰ−シクロヒドロラーゼ（ＧＴＰＣＨ）、アミノ酸デカルボキシラーゼ（ＡＡＤＣ）またはアスパルトアシラーゼ（ＡＳＰＡ）である、請求項３８〜４０のいずれか１項に記載の単離された哺乳類細胞。
【請求項４２】
ｒＡＡＶの有効量を、治療を必要としている対象のＣＮＳ組織に投与することによる、前記対象におけるカナバン病を治療するための医薬組成物であって、
前記ｒＡＡＶが、（ｉ）ＡＡＶ血清型２のカプシドタンパク質以外のカプシドタンパク質および（ｉｉ）アスパルトアシラーゼ（ＡＳＰＡ）をコードしている領域と操作可能に連結されたプロモーターを含む核酸を含む、前記医薬組成物。
【請求項４３】
ｒＡＡＶの有効量を、脳内投与以外の経路によって、治療を必要としている対象のＣＮＳ組織に投与することによる、前記対象におけるカナバン病を治療するための医薬組成物であって、
ｒＡＡＶが、アスパルトアシラーゼ（ＡＳＰＡ）をコードしている領域と操作可能に連結されたプロモーターを含む核酸を含む、前記医薬組成物。
【請求項４４】
ｒＡＡＶの有効量を、治療を必要としている対象のＣＮＳ組織に投与すること、および、前記投与後少なくとも一度、前記対象の腎機能を評価することによって、前記対象におけるカナバン病を治療するための医薬組成物であって、
ｒＡＡＶが、アスパルトアシラーゼ（ＡＳＰＡ）をコードしている領域と操作可能に連結されたプロモーターを含む核酸を含む、前記医薬組成物。
【請求項４５】
ｒＡＡＶの有効量を、治療を必要としている対象のＣＮＳ組織に投与すること、および、前記投与後少なくとも一度、前記対象の視力を評価することによって、前記対象におけるカナバン病を治療するための医薬組成物であって、
ｒＡＡＶがアスパルトアシラーゼ（ＡＳＰＡ）をコードしている領域と操作可能に連結されたプロモーターを含む核酸を含む、前記医薬組成物。
【請求項４６】
前記ｒＡＡＶが配列番号８または９で示されるようなアミノ酸配列を有するカプシドタンパク質を有する、請求項４２〜４５のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項４７】
投与が髄腔内的または脳内的に実施される、請求項４４〜４６のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項４８】
投与が血管内的に実施される、請求項４２〜４６のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項４９】
前記核酸が、ＣＮＳ組織と比較して、１つ以上の非ＣＮＳ組織中の方が豊富である１つ以上のｍｉＲＮＡの１つ以上のｍｉＲＮＡ結合部位を含むアスパルトアシラーゼ（ＡＳＰＡ）ｍＲＮＡを発現する、請求項４８に記載の医薬組成物。
【請求項５０】
前記ＣＮＳ組織と比較して、１つ以上の非ＣＮＳ組織中の方が豊富である前記１つ以上のｍｉＲＮＡが、少なくとも２倍豊富である、請求項４９に記載の医薬組成物。
【請求項５１】
前記１つ以上の非ＣＮＳ組織が腎臓組織または網膜組織ではない、請求項４９または５０に記載の医薬組成物。
【請求項５２】
導入遺伝子を含むｒＡＡＶの有効量を対象に投与することによって、導入遺伝子を対象の中枢神経系（ＣＮＳ）組織に送達するためのベクターであって、
前記ｒＡＡＶがＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ６．２、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ｒｈ．１０、ｒｈ．３９、ｒｈ．４３およびＣＳｐ３からなる群から選択されるＡＡＶ血清型のカプシドタンパク質を含み、
(ａ)前記ＡＡＶ血清型がＡＡＶ１である場合、前記投与経路は脳内、筋肉内、神経内、または脳室内ではなく、かつ／または前記対象はマウス、ラットまたはネコではない；
（ｂ）前記ＡＡＶ血清型がＡＡＶ２である場合、前記投与経路は脳内投与または脳室内投与ではなく、かつ／または前記対象はラット、マウス、ネコ、マーモセット、またはマカクではない；
（ｃ）前記ＡＡＶ血清型がＡＡＶ５である場合、前記投与経路は脳内投与または脳室内投与ではなく、かつ／または前記対象は、ラット、マウス、またはマーモセットではない；
（ｄ）前記ＡＡＶ血清型がＡＡＶ６である場合、前記対象はマウスではない；
（ｅ）前記ＡＡＶ血清型がＡＡＶ７である場合、前記投与経路は脳内投与ではなく、かつ／または前記対象はマウスまたはマカクではない；
（ｆ）前記ＡＡＶ血清型がＡＡＶ８である場合、前記投与経路は脳内投与、腹腔内投与、または血管内投与ではなく、かつ／または前記対象はマウスまたはマカクではない；
（ｇ）前記ＡＡＶ血清型がＡＡＶ９である場合、前記投与経路は脳内投与または血管内投与ではなく、かつ／または前記対象はラットまたはマウスではない；そして
（ｈ）前記ＡＡＶ血清型がＡＡＶｒｈ．１０である場合、前記投与経路は脳内投与または血管内投与ではなく、かつ／または前記対象はラットまたはマウスではない、前記ベクター。
【請求項５３】
前記ＡＡＶ血清型が、ＡＡＶ１、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ｒｈ．３９、ｒｈ．４３、およびＣＳｐ３から選択され、前記投与経路が血管内投与である、請求項５２に記載のベクター。
【請求項５４】
前記ＡＡＶ血清型がＡＡＶ７であり、前記投与経路が血管内投与である、請求項５２に記載のベクター。
【請求項５５】
前記ＣＮＳ組織が皮質、海馬、視床、視床下部、小脳、脳幹、頚髄、胸髄、および腰髄から選択される、請求項５２に記載のベクター。