【手続補正書】
【提出日】平成26年10月23日(2014.10.23)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
インスリン組成物の連続的皮下インスリン注入(ＣＳＩＩ)治療と組み合わせて糖尿病の処置に使用するためのヒアルロナン分解酵素を含む組成物であって：
該ヒアルロナン分解酵素含有組成物がＣＳＩＩによるインスリン組成物の注入前にＣＳＩＩ治療と別々に投与するために製剤されており；そして
ヒアルロナン分解酵素含有組成物が連続的皮下インスリン注入(ＣＳＩＩ)の間に起こるインスリン吸収の変化を最小化する量で直接投与するために製剤されている、
組成物。
【請求項２】
ヒアルロナン分解酵素が組織透過性を高めるためにヒアルロン酸の加水分解を触媒するのに十分な治療有効量である、請求項１記載の組成物。
【請求項３】
ヒアルロナン分解酵素がヒアルロニダーゼである、請求項１または２記載の組成物。
【請求項４】
ヒアルロナン分解酵素が中性ｐＨで活性であるヒアルロニダーゼである、請求項１〜３のいずれか記載の組成物。
【請求項５】
ヒアルロナン分解酵素がグリコシルホスファチジルイノシトール(ＧＰＩ)アンカーを欠きまたは細胞から発現されたとき膜型ではない；または
ヒアルロナン分解酵素が１個以上のアミノ酸残基のＣ末端短縮化を含み、ＧＰＩアンカーの全てまたは一部を欠く、
請求項１〜４のいずれか記載の組成物。
【請求項６】
ヒアルロナン分解酵素がＰＨ２０またはそのＣ末端切断フラグメントであるヒアルロニダーゼである、請求項１〜５のいずれか記載の組成物。
【請求項７】
ヒアルロナン分解酵素が配列番号４〜９、４７〜４８、２３４〜２５４、および２６７〜２７３のいずれかに示すアミノ酸配列、または配列番号４〜９、４７〜４８、２３４〜２５４、および２６７〜２７３のいずれかに少なくとも８５％配列同一性を示すアミノ酸配列を有し、ヒアルロニダーゼ活性を維持するＣ末端切断型ＰＨ２０ポリペプチドである、請求項１〜６のいずれか記載の組成物。
【請求項８】
ヒアルロナン分解酵素が配列番号４〜９のいずれかに示すアミノ酸配列、または配列番号４〜９のいずれかに示すアミノ酸配列と少なくとも８５％配列同一性を示すアミノ酸配列を含み、ヒアルロニダーゼ活性を維持するＣ末端切断型ＰＨ２０である、請求項１〜７のいずれか記載の組成物。
【請求項９】
ヒアルロナン分解酵素が配列番号４〜９のいずれかに示すアミノ酸配列を有するＣ末端切断型ＰＨ２０である、請求項１〜８のいずれか記載の組成物。
【請求項１０】
組成物中のヒアルロナン分解酵素が１単位〜２００単位、５単位〜１５０単位、１０単位〜１５０単位、５０単位〜１５０単位または１単位〜５０単位と機能的等価の量である；または
組成物中のヒアルロナン分解酵素が８ng〜２μg、２０ng〜１.６μg、８０ng〜１.２５μgまたは２００ng〜１μgの量である、
請求項１〜９のいずれか記載の組成物。
【請求項１１】
組成物中のヒアルロナン分解酵素が１０単位／mL〜２０,０００単位／mL、３０単位／mL〜３０００Ｕ／mL、１００Ｕ／mL〜１０００Ｕ／mL、３００Ｕ／mL〜２０００Ｕ／mL、６００Ｕ／mL〜２０００Ｕ／mLまたは６００Ｕ／mL〜１０００Ｕ／mLの量である、請求項１〜１０のいずれか記載の組成物。
【請求項１２】
連続的皮下インスリン注入(ＣＳＩＩ)治療において使用するためのインスリン組成物が速効性インスリンを含む、請求項１〜１１のいずれか記載の組成物。
【請求項１３】
速効性インスリンがレギュラーインスリンである、請求項１２記載の組成物。
【請求項１４】
レギュラーインスリンがヒトインスリンまたはブタインスリンである、請求項１３記載の組成物。
【請求項１５】
レギュラーインスリンが配列番号１０３に示すアミノ酸配列を有するＡ鎖および配列番号１０４に示すアミノ酸配列を有するＢ鎖を有するインスリンまたは配列番号１２３のアミノ酸残基位置８８〜１０８として示すアミノ酸配列を有するＡ鎖および配列番号１２３のアミノ酸残基位置２５〜５４として示すアミノ酸配列を有するＢ鎖を有するインスリンである、請求項１３または１４記載の組成物。
【請求項１６】
速効性インスリンがインスリン類似体である、請求項１２記載の組成物。
【請求項１７】
速効性インスリン類似体がインスリンアスパルト、インスリンリスプロまたはインスリングルリジンである、請求項１６記載の組成物。
【請求項１８】
インスリン類似体が配列番号１０３に示すアミノ酸配列を有するＡ鎖および配列番号１４７〜１４９のいずれかに示すアミノ酸配列を有するＢ鎖を有するインスリンから選択される、請求項１６または１７記載の組成物。
【請求項１９】
速効性インスリンが１００Ｕ／mL〜１０００Ｕ／mLまたは５００Ｕ／mL〜１０００Ｕ／mLの量でＣＳＩＩ用インスリン組成物に製剤されている、請求項１〜１８のいずれか記載の組成物。
【請求項２０】
ヒアルロナン分解酵素含有組成物がＣＳＩＩによるインスリン組成物の注入の１５秒〜１時間、３０秒〜３０分、１分〜１５分、１分〜１２時間、５分〜６時間、３０分〜３時間、または１時間〜２時間前に使用するために製剤されている、請求項１〜１９のいずれか記載の組成物。
【請求項２１】
ヒアルロナン分解酵素含有組成物がＣＳＩＩによるインスリン組成物の注入の２時間より前に投与しない使用のために製剤されている、請求項１〜２０のいずれか記載の組成物。
【請求項２２】
インスリン組成物の連続的皮下インスリン注入(ＣＳＩＩ)治療と組み合わせて糖尿病の処置に使用するための医薬の製造のためのヒアルロナン分解酵素を含む組成物の使用であって：
該ヒアルロナン分解酵素含有組成物がＣＳＩＩによるインスリン組成物の注入前にＣＳＩＩ治療と別々に投与するために製剤されておりそして
ヒアルロナン分解酵素含有組成物が連続的皮下インスリン注入(ＣＳＩＩ)の間に起こるインスリン吸収の変化を最小化する量で直接投与するために製剤されている、使用。
【請求項２３】
ヒアルロナン分解酵素が組織透過性を高めるためにヒアルロン酸の加水分解を触媒するのに十分な治療有効量である、請求項２２記載の使用。
【請求項２４】
ヒアルロナン分解酵素がヒアルロニダーゼである、請求項２２または２３記載の使用。
【請求項２５】
ヒアルロナン分解酵素が中性ｐＨで活性であるヒアルロニダーゼである、請求項２２〜２４のいずれか記載の使用。
【請求項２６】
ヒアルロナン分解酵素がグリコシルホスファチジルイノシトール(ＧＰＩ)アンカーを欠きまたは細胞から発現されたとき膜型ではない；または
ヒアルロナン分解酵素が１個以上のアミノ酸残基のＣ末端短縮化を含み、ＧＰＩアンカーの全てまたは一部を欠く、
請求項２２〜２５のいずれか記載の使用。
【請求項２７】
ヒアルロナン分解酵素がＰＨ２０またはそのＣ末端切断フラグメントであるヒアルロニダーゼである、請求項２２〜２６のいずれか記載の使用。
【請求項２８】
ヒアルロナン分解酵素が配列番号４〜９、４７〜４８、２３４〜２５４、および２６７〜２７３のいずれかに示すアミノ酸配列、または配列番号４〜９、４７〜４８、２３４〜２５４、および２６７〜２７３のいずれかに少なくとも８５％配列同一性を示すアミノ酸配列を有し、ヒアルロニダーゼ活性を維持するＣ末端切断型ＰＨ２０ポリペプチドである、請求項２２〜２７のいずれか記載の使用。
【請求項２９】
ヒアルロナン分解酵素が配列番号４〜９のいずれかに示すアミノ酸配列、または配列番号４〜９のいずれかに示すアミノ酸配列と少なくとも８５％配列同一性を示すアミノ酸配列を含むＣ末端切断型ＰＨ２０である、請求項２２〜２８のいずれか記載の使用。
【請求項３０】
ヒアルロナン分解酵素が配列番号４〜９のいずれかに示すアミノ酸配列を有する、請求項２２〜２９のいずれか記載の使用。
【請求項３１】
組成物中のヒアルロナン分解酵素が１単位〜２００単位、５単位〜１５０単位、１０単位〜１５０単位、５０単位〜１５０単位または１単位〜５０単位と機能的等価の量である；または
組成物中のヒアルロナン分解酵素が８ng〜２μg、２０ng〜１.６μg、８０ng〜１.２５μgまたは２００ng〜１μgの量である、
請求項２２〜３０のいずれか記載の使用。
【請求項３２】
組成物中のヒアルロナン分解酵素が１０単位／mL〜２０,０００単位／mL、３０単位／mL〜３０００Ｕ／mL、１００Ｕ／mL〜１０００Ｕ／mL、３００Ｕ／mL〜２０００Ｕ／mL、６００Ｕ／mL〜２０００Ｕ／mLまたは６００Ｕ／mL〜１０００Ｕ／mLの量である、請求項２２〜３１のいずれか記載の使用。
【請求項３３】
連続的皮下インスリン注入(ＣＳＩＩ)治療において使用するためのインスリン組成物が速効性インスリンを含む、請求項２２〜３２のいずれか記載の使用。
【請求項３４】
速効性インスリンがレギュラーインスリンである、請求項３３記載の使用。
【請求項３５】
レギュラーインスリンがヒトインスリンまたはブタインスリンである、請求項３４記載の使用。
【請求項３６】
レギュラーインスリンが配列番号１０３に示すアミノ酸配列を有するＡ鎖および配列番号１０４に示すアミノ酸配列を有するＢ鎖を有するインスリンまたは配列番号１２３のアミノ酸残基位置８８〜１０８として示すアミノ酸配列を有するＡ鎖および配列番号１２３のアミノ酸残基位置２５〜５４として示すアミノ酸配列を有するＢ鎖を有するインスリンである、請求項３４または３５記載の使用。
【請求項３７】
速効性インスリンがインスリン類似体である、請求項３３記載の使用。
【請求項３８】
速効性インスリン類似体がインスリンアスパルト、インスリンリスプロまたはインスリングルリジンである、請求項３７記載の使用。
【請求項３９】
インスリン類似体が配列番号１０３に示すアミノ酸配列を有するＡ鎖および配列番号１４７〜１４９のいずれかに示すアミノ酸配列を有するＢ鎖を有するインスリンから選択される、請求項３７または３８記載の使用。
【請求項４０】
速効性インスリンが１００Ｕ／mL〜１０００Ｕ／mLまたは５００Ｕ／mL〜１０００Ｕ／mLの量でＣＳＩＩ用インスリン組成物に製剤されている、請求項２２〜３９のいずれか記載の使用。
【請求項４１】
ヒアルロナン分解酵素含有組成物がＣＳＩＩによるインスリン組成物の注入の１５秒〜１時間、３０秒〜３０分、１分〜１５分、１分〜１２時間、５分〜６時間、３０分〜３時間、または１時間〜２時間前に使用するために製剤されている、請求項２２〜４０のいずれか記載の使用。
【請求項４２】
ヒアルロナン分解酵素含有組成物がＣＳＩＩによるインスリン組成物の注入の２時間より前に投与しない使用のために製剤されている、請求項２２〜４１のいずれか記載の使用。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１８８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１８８】
本方法において、投与レジメンの経過中、投与する超速効性インスリン、基礎および／またはボーラス量は、ヒアルロナン分解酵素を含まない速効性インスリン組成物を使用する患者に対する通常の計画された投与レジメンと比較して、少なくとも１％増加する。具体例において、インスリンの基底速度および／またはボーラス投与量は、ヒアルロナン分解酵素を含まない速効性インスリン組成物を使用する患者に対する通常の計画された投与レジメンと比較して、１％〜５０％、５％〜４０％、１０％〜２０％または５％〜１５％増加する。本方法の実施に際し、総インスリン作用を、注入セットの間にインスリン送達の組織的増加を含まない投与レジメンと比較して増加させる。例えば、正常血糖クランプ実験における累積グルコース注入(Ｕ／kg)で測定して、総インスリン作用は少なくともまたは約または正確に１.１倍、１.２倍、１.３倍、１.４倍、１.５倍、１.６倍、１.７倍、１.８倍、１.９倍、２.０倍、３.０倍、４.０倍、５.０倍以上増加し得る。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０４４３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０４４３】
４００Ｌリアクターを滅菌し、２３０mLのＣＤ  ＣＨＯ培地を加えた。使用前に、リアクターを汚染についてチェックした。約３０Ｌの細胞を３６Ｌスピナーフラスコから４００Ｌバイオリアクター(Ｂｒａｕｎ)に、１mlあたり４.０×１０５個の生細胞という接種密度および２６０Ｌの総体積で移した。パラメータは温度設定値：３７℃；インペラー速度４０〜５５ＲＰＭ；容器圧：３ｐｓｉ；空気散布量０.５〜１.５Ｌ／分；空気オーバーレイ：３Ｌ／分とした。細胞数、ｐＨ確認、培地分析、タンパク質の生産および貯留を調べるために、リアクターから毎日試料を採取した。また、運転中に栄養フィードを加えた。１２０時間(５日目)の時点で、１０.４Ｌの第１フィード培地(４×ＣＤ−ＣＨＯ＋３３ｇ／Ｌグルコース＋１６０mL／Ｌ  GlutaMAX-1(商標)＋８３mL／Ｌイーストレート(Yeastolate)＋３３mg／Ｌ  ｒＨｕインスリン)を加えた。１６８時間(７日目)の時点で、１０.８Ｌの第２フィード(２×ＣＤ−ＣＨＯ＋３３ｇ／Ｌグルコース＋８０mL／Ｌ  GlutaMAX-1(商標)＋１６７mL／Ｌイーストレート＋０.９２ｇ／Ｌ酪酸ナトリウム)を加え、培養温度を３６.５℃に変えた。２１６時間(９日目)の時点で、１０.８Ｌの第３フィード(１×ＣＤ−ＣＨＯ＋５０ｇ／Ｌグルコース＋５０mL／Ｌ  GlutaMAX-1(商標)＋２５０mL／Ｌイーストレート＋１.８０ｇ／Ｌ酪酸ナトリウム)を加え、培養温度を３６℃に変えた。２６４時間(１１日目)の時点で、１０.８Ｌの第４フィード(１×ＣＤ−ＣＨＯ＋３３ｇ／Ｌグルコース＋３３mL／Ｌ  GlutaMAX-1(商標)＋２５０mL／Ｌイーストレート＋０.９２ｇ／Ｌ酪酸ナトリウム)を加え、培養温度を３５.５℃に変えた。フィード培地の添加は生産の最終段階における溶解性ｒＨｕＰＨ２０の生産を劇的に強化することが観察された。１４日時点もしくは１５日時点で、または細胞の生存度が４０％未満に低下した時に、リアクターを収集した。このプロセスにより、１２００万細胞／mLの最大細胞密度で１７,０００単位／mlの最終生産能力が得られた。インビトロおよびインビボでのマイコプラズマ、生物汚染度、エンドトキシン、透過電子顕微鏡法(ＴＥＭ)ならびに酵素活性について、収集時に、培養物を試料採取した。