【手続補正書】
【提出日】平成26年7月25日(2014.7.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）式（Ｉ）
【化１】
2013537628.tif 000001
の１つもしくは複数の化合物であり：
式中：
Ａは、−Ｃ（Ｒ４）＝Ｃ（Ｒ４）−もしくは−Ｃ（Ｒ４）＝Ｃ（Ｒ４）−Ｃ（Ｒ４）２−であり；
Ｙは、Ｎ、ＳもしくはＯであり；
Ｒ１は、ＹがＮである場合に、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、アルケニル、任意選択的に置換されたアラルキル、任意選択的に置換されたシクロアルキル、任意選択的に置換されたシクロアルキルアルキルもしくは任意選択的に置換されたヘテロシクリルアルキルであり、ＹがＳもしくはＯである場合にはＲ１はなく；
Ｒ２は、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、アルケニル、任意選択的に置換されたアラルキル、任意選択的に置換されたシクロアルキル、任意選択的に置換されたシクロアルキルアルキルもしくは任意選択的に置換されたヘテロシクリルアルキルであり；
Ｒ３は、Ｃ１〜Ｃ１６アルキル、任意選択的に置換されたアリールもしくは任意選択的に置換されたアラルキルであり；
各Ｒ４は、独立して、水素、シアノ、ニトロ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ５、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ５）２、−Ｎ（Ｒ５）２、ハロ、ハロアルキル、ヒドロキシ、アルキル、アルコキシ、ハロアルコキシ、アルコキシアルキル、アルケニル、任意選択的に置換されたアリール、任意選択的に置換されたアラルキル、任意選択的に置換されたシクロアルキル、任意選択的に置換されたシクロアルキルアルキル、任意選択的に置換されたヘテロシクリル、任意選択的に置換されたヘテロシクリルアルキル、任意選択的に置換されたヘテロアリールもしくは任意選択的に置換されたヘテロアリールアルキルであり；
または２つの隣接Ｒ４はそれらが結合している炭素と一緒になって任意選択的に置換されたシクロアルキル、任意選択的に置換されたアリール、任意選択的に置換されたヘテロシクリルもしくは任意選択的に置換されたヘテロアリールを形成し得；
各Ｒ５は、独立して、水素、アルキル、アリールもしくはアラルキルであり；ならびに
Ｘは、医薬上許容可能なアニオンであり；ならびに
（ｂ）
（ｉ）少なくとも１つの沈殿剤、
（ｉｉ）少なくとも１つの低級アルコール、ならびに
（ｉｉｉ）少なくとも１つのカオトロープ
の１つ、２つ、もしくは全３つを含む生体試料中の核酸およびポリペプチド分子を実質的に安定的に貯蔵するための組成物。
【請求項２】
（ａ）キレート剤、
（ｂ）還元剤、
（ｃ）ｐＨ緩衝液、および
（ｄ）水
の１つもしくは複数をさらに含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記医薬上許容可能なアニオンが、ブロミド、塩化物、ヨウ化物、Ｃ１〜Ｃ１２アルキルスルホネート、ヘキサフルオロホスファート、メチルスルファート、エチルスルファート、テトラフルオロボラート、トリフルオロメタンスルホネートおよびビス（トリフルオロメチルスルホニル）イミドからなる群から選択される、請求項１または請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
前記式中：
Ａは、−Ｃ（Ｒ４）＝Ｃ（Ｒ４）−であり；
Ｒ１は、Ｃ１〜Ｃ８アルキルであり；
Ｒ２は、水素もしくはＣ１〜Ｃ８アルキルであり；ならびに
Ｒ３は、Ｃ１〜Ｃ１６アルキル、任意選択的に置換されたアリール、もしくは任意選択的に置換されたアラルキルであり；
各Ｒ４は、独立して、水素、シアノ、ニトロ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ５、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ５）２、−Ｎ（Ｒ５）２、ハロ、ハロアルキル、ヒドロキシ、アルキル、アルコキシ、ハロアルコキシ、アルコキシアルキル、アルケニル、任意選択的に置換されたアリール、任意選択的に置換されたアラルキル、任意選択的に置換されたシクロアルキル、任意選択的に置換されたシクロアルキルアルキル、任意選択的に置換されたヘテロシクリル、任意選択的に置換されたヘテロシクリルアルキル、任意選択的に置換されたヘテロアリールもしくは任意選択的に置換されたヘテロアリールアルキルであり；ならびに
各Ｒ５は、独立して、水素、アルキル、アリールもしくはアラルキルである、請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
（ａ）前記式（Ｉ）の化合物が、
１−メチル−３−カルボキシエチル−イミダゾリウムブロミド、
１−ヘキシル−３−メチルイミダゾリウムブロミド、
１−デシル−３−メチルイミダゾリウムブロミド、
１−（２−ヒドロキシエチル）−３−メチルイミダゾリウムブロミド、および
１−ベンジル−３−ヘキシルイミダゾリウムブロミドからなる群から選択され、
（ｂ）前記沈殿剤が、
５−（４−ジメチル）アミノベンジリデンロダニン、
スルホサリチル酸、
塩化リチウム、および
水酸化リチウムからなる群から選択され、
（ｃ）前記低級アルコールが、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、イソプロパノール、ｎ−ブタノール、およびイソブタノール（２−メチルプロパン−１−オール）からなる群から選択され、
（ｄ）前記カオトロープが、
塩酸グアニジン、チオシアン酸グアニジン、チオシアン酸カリウム、チオシアン酸ナトリウムおよび尿素からなる群から選択される、
組成物のうちの少なくとも一つである請求項１又は請求項２に記載の組成物。
【請求項６】
（ａ）前記キレート剤が、ジエチレントリアミンペンタ酢酸（ＤＴＰＡ）、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、エチレングルコール四酢酸（ＥＧＴＡ）、トランス−１，２−ジアミノシクロヘキサン−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−四酢酸（ＣＤＴＡ）、１，２−ビス（２−アミノフェノキシ）エタン−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−四酢酸（ＢＡＰＴＡ）、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）、Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−三酢酸、およびニトリロ三酢酸（ＮＴＡ）からなる群から選択され、
（ｂ）前記還元剤が、２−メルカプトエタノール、チオスルファート、ＴＣＥＰ（トリス−（２−カルボキシエチル）ホスフィン）、ジチオスレイトールおよびジチオエリトリトールからなる群から選択され、
（ｃ）前記ｐＨ緩衝液が、クエン酸、酒石酸、リンゴ酸、スルホサリチル酸、スルホイソフタル酸、シュウ酸、ボラート、ＣＡＰＳ（３−（シクロヘキシルアミノ）−１−プロパンスルホン酸）、ＣＡＰＳＯ（３−（シクロヘキシルアミノ）−２−ヒドロキシ−１−プロパンスルホン酸）、ＥＰＰＳ（４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンプロパンスルホン酸）、ＨＥＰＥＳ（４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−１−エタンスルホン酸）、ＭＥＳ（２−（Ｎ−モルホリノ）エタンスルホン酸）、ＭＯＰＳ（３−（Ｎ−モルホリノ）プロパンスルホン酸）、ＭＯＰＳＯ（３−モルホリノ−２−ヒドロキシプロパンスルホン酸）、ＰＩＰＥＳ（１，４−ピペラジンジエタンスルホン酸）、ＴＡＰＳ（Ｎ−［トリス（ヒドロキシメチル）メチル］−３−アミノプロパンスルホン酸）、ＴＡＰＳＯ（２−ヒドロキシ−３−［トリス（ヒドロキシメチル）メチルアミノ］−１−プロパンスルホン酸）、ＴＥＳ（Ｎ−［トリス（ヒドロキシメチル）メチル］−２−アミノエタンスルホン酸）、ビシン（Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）グリシン）、トリシン（Ｎ−［トリス（ヒドロキシメチル）メチル］グリシン）、トリス（トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン）およびビス−トリス（２−［ビス（２−ヒドロキシエチル）アミノ］−２−（ヒドロキシメチル）−１，３−プロパンジオール）からなる群から選択される、組成物のうちの少なくとも一つである請求項２に記載の組成物。
【請求項７】
界面活性剤または洗剤をさらに含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項８】
前記界面活性剤または洗剤が、Ｔｒｉｔｏｎ（登録商標）Ｘ−１００、Ｎｏｎｉｄｅｔ（登録商標）Ｐ４０およびＢｒｉｊ（登録商標）洗剤から選択される、請求項７に記載の組成物。
【請求項９】
前記核酸分子がＤＮＡ分子およびＲＮＡ分子を１つまたは複数含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項１０】
前記生体試料が脊椎動物血液を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項１１】
前記脊椎動物血液が未分画である、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１２】
前記生体試料がヒト血液を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項１３】
前記ヒト血液が未分画である、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１４】
前記生体試料が、ＤＮＡ、ＲＮＡ、血液、血液由来の軟膜、尿、糞便、血清、漿液、血漿、リンパ液、脳髄液、唾液、粘膜分泌液、膣液、腹水液、胸膜液、心嚢液、腹水（ｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ  ｆｌｕｉｄ）、腹液、細胞培養培地、器官培養培地、口腔内細胞、細菌、ウイルス、酵母細胞、プラスミドＤＮＡ、ｍＲＮＡ、ｔＲＮＡ、ｒＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ、マイクロＲＮＡ、ｈｎＲＮＡ、ｃＤＮＡ、タンパク質、ポリペプチド、脂質、糖脂質、糖タンパク質、オリゴ糖、多糖類、ワクチン、細胞、ソートもしくは選択された細胞、組織、細胞溶解物、ホモジネートもしくは抽出物、組織溶解物、ホモジネートもしくは抽出物、血液試料、生検材料、組織移植片、器官培養および体液からなる群から選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項１５】
請求項１に記載の組成物と混合した生体試料を含む、生体試料由来の実質的に安定的に貯蔵された核酸分子。
【請求項１６】
前記生体試料は、
（ａ）脊椎動物血液、
（ｂ）ヒト血液、
（ｃ）前記核酸分子がＤＮＡ分子およびＲＮＡ分子を１つまたは複数含む（ａ）又は（ｂ）の試料、からなる群から選択される、請求項１５に記載の実質的に安定的に貯蔵された核酸分子。
【請求項１７】
（ａ）試験混合物を得るために未分画ヒト血液の第１試料と混合し、少なくとも６０日間冷蔵せずに前記試験混合物を保存した後に、前記期間中−２０℃で貯蔵された前記未分画ヒト血液の第２試料から収集可能なＤＮＡと比較して、前記試験混合物から収集可能なＤＮＡの分解を少なくとも７０％実質的に防止することが可能な組成物、または、
（ｂ）試験混合物を得るために未分画ヒト血液の第１試料と混合し、少なくとも２１日間冷蔵せずに前記試験混合物を保存した後に、前記期間中−８０℃で貯蔵された前記未分画ヒト血液の第２試料から収集可能なＲＮＡと比較して、前記試験混合物から収集可能なＤＮＡの分解を少なくとも７０％実質的に防止することが可能な組成物、から選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項１８】
生体試料中に存在する核酸もしくはポリペプチド分子の１つもしくは複数の実質的な安定化方法であり、
（ａ）請求項１に記載の組成物と生体試料を混合して混合物を得ること；ならびに
（ｂ）前記混合物を冷蔵せずに少なくとも７日間維持することであって、
（ｉ）請求項１に記載の組成物を用いずに前記期間−２０℃で貯蔵時の試料から収集可能なＤＮＡもしくはポリペプチド量と比較して、混合物中で収集可能なＤＮＡの分解が少なくとも７０％実質的に防止されること、
（ｉｉ）請求項１に記載の組成物を用いずに前記期間−８０℃で貯蔵時の試料から収集可能なＲＮＡ量と比較して、混合物中で収集可能なＲＮＡの分解が少なくとも７０％実質的に防止されること、ならびに
（ｉｉｉ）請求項１に記載の組成物を用いずに前記期間−２０℃で貯蔵時の試料から収集可能なポリペプチド分子の量と比較して、混合物中で収集可能なポリペプチド分子の分解が少なくとも７０％実質的に防止されること、のうち１つ、２つもしくは全３つのいずれかであり、それにより、生体試料中に存在する前記核酸もしくはポリペプチド分子の１つもしくは複数を実質的に安定化させること、
を含む生体試料中に存在する核酸もしくはポリペプチド分子の１つもしくは複数の実質的な安定化方法。
【請求項１９】
前記生体試料が以下の生体試料：
（ａ）脊椎動物血液を含む生体試料、
（ｂ）前記脊椎動物血液が未分画である前記（ａ）の生体試料、
（ｃ）ヒト血液を含む生体試料、
（ｄ）前記ヒト血液が未分画である前記（ｃ）の生体試料、
（ｅ）ＤＮＡ、ＲＮＡ、血液、血液軟膜、尿、糞便、血清、漿液、血漿、リンパ液、脳髄液、唾液、粘膜分泌液、膣液、腹水液、胸膜液、心嚢液、腹水（ｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ  ｆｌｕｉｄ）、腹液、細胞培養培地、器官培養培地、口腔内細胞、細菌、ウイルス、酵母細胞、プラスミドＤＮＡ、ｍＲＮＡ、ｔＲＮＡ、ｒＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ、マイクロＲＮＡ、ｈｎＲＮＡ、ｃＤＮＡ、タンパク質、ポリペプチド、脂質、糖脂質、糖タンパク質、オリゴ糖、多糖類、ワクチン、細胞、ソートもしくは選択された細胞、組織、細胞溶解物、ホモジネートもしくは抽出物、組織溶解物、ホモジネートもしくは抽出物、血液試料、生検材料、組織移植片、器官培養および体液からなる群から選択される生体試料、
から選択される、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記維持工程が少なくとも１０日間、２０日間、３０日間、４０日間、５０日間、６０日間または７０日間の維持を含む、請求項１８に記載の方法。