【手続補正書】
【提出日】平成24年4月6日(2012.4.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象において免疫応答を調節するのに使用するため、あるいは対象における細菌感染又は真菌感染を治療するのに使用するため、あるいは対象にワクチン接種するのに使用するための組成物であって、該組成物は、クロレラから得られる多糖又は多糖複合体を含み、該多糖又は多糖複合体は、
ｉ）式３−Ｏ−メチルα−Ｍａｎｐ−（１−ＰＯ３Ｈ→を有する少なくとも１つのメチル化されたリン糖単位又は
ｉｉ）式α−Ｄ−Ｍａｎｐ−（１−ＰＯ３Ｈ→を有する少なくとも１つのリン糖単位を含み、該多糖又は多糖複合体は１×１０３〜１×１０６Ｄａの分子量を有する、組成物。
【請求項２】
クロレラから得られる多糖又は多糖複合体であって、
ｉ）式３−Ｏ−メチルα−Ｍａｎｐ−（１−ＰＯ３Ｈ→を有する少なくとも１つのメチル化されたリン糖単位を含み、該多糖又は多糖複合体は１×１０３〜１×１０６Ｄａの分子量を有する多糖又は多糖複合体。
【請求項３】
前記多糖又は多糖複合体が、実質的に硫酸化を含まない請求項２に記載の多糖又は多糖複合体。
【請求項４】
前記多糖又は多糖複合体が、実質的にウロン酸残基を含まない請求項２又は３に記載の多糖又は多糖複合体。
【請求項５】
前記多糖又は多糖複合体が、Ｏ−３で結合するβ−Ｄ−ガラクトピラノシル残基の反復単位を含む請求項２〜４のいずれかに記載の多糖又は多糖複合体。
【請求項６】
多糖又は多糖複合体が、６−リン酸化β−Ｄ−ガラクトピラノシル単位を含む請求項２〜５のいずれかに記載の多糖又は多糖複合体。
【請求項７】
多糖又は多糖複合体が、β−Ｄ−グルコピラノシル−（１→６）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→を含む請求項２〜６のいずれかに記載の多糖又は多糖複合体。
【請求項８】
多糖
【化１３】
2011522911.tif 000001
【化１４】
2011522911.tif 000002
を含む請求項２〜７のいずれかに記載の多糖又は多糖複合体。
【請求項９】
クロレラにおける多糖又は多糖複合体に会合する１以上のタンパク質又は核酸をさらに含む請求項２〜８のいずれかに記載の多糖又は多糖複合体。
【請求項１０】
前記多糖又は多糖複合体が、Ｃ．ｍｉｎｕｔｉｓｓｉｍａ、Ｃ．ｍａｒｉｎａ、Ｃ．ｓａｌｉｎａ、Ｃ．ｖｕｌｇａｒｉｓ、Ｃ．ａｎｉｔｒａｔａ、Ｃ．ａｎｔａｒｃｔｉｃａ、Ｃ．ａｕｔｏｔｒｏｐｈｉｃａ、Ｃ．ｒｅｇｕｌａｒｉｓ、Ｃ．ｅｌｌｉｐｓｏｉｄｅａ又はこれらの混合物から、あるいはＣ．ｐｙｒｅｎｏｉｄｏｓａから得られる請求項２〜９のいずれかに記載の多糖又は多糖複合体。
【請求項１１】
前記多糖又は多糖複合体が、
ｉ）式３−Ｏ−メチルα−Ｍａｎｐ−（１−ＰＯ３Ｈ→を有する少なくとも１つのメチル化されたリン糖単位および
ｉｉ）式α−Ｄ−Ｍａｎｐ−（１−ＰＯ３Ｈ→を有する少なくとも１つのリン糖単位を含み、該多糖又は多糖複合体は１×１０３〜１×１０６Ｄａの分子量を有する、請求項２〜１０のいずれかに記載の多糖又は多糖複合体。
【請求項１２】
クロレラから多糖又は多糖複合体を得るためのプロセスであって、該多糖又は多糖複合体が、必要に応じて請求項３〜１１のいずれかに記載の特徴を有し、該プロセスは、
（ｉ）式３−Ｏ−メチルα−Ｍａｎｐ−（１−ＰＯ３Ｈ→を有する少なくとも１つのメチル化されたリン糖単位又は
（ｉｉ）式α−Ｄ−Ｍａｎｐ−（１−ＰＯ３Ｈ→を有する少なくとも１つのリン糖単位
をクロレラから抽出することを含み、該多糖又は多糖複合体は１×１０３〜１×１０６Ｄａの分子量を有する、プロセス。
【請求項１３】
組成物であって、
ａ）請求項２〜１１のいずれかに記載されるか又は請求項１２に記載のプロセスによって得られる、１以上の多糖又は多糖複合体と、
ｂ）１以上の添加剤成分
を含む組成物。
【請求項１４】
医薬組成物であって、
ａ）請求項２〜１１のいずれかに記載されるか又は請求項１２に記載のプロセスによって得られる、１以上の多糖又は多糖複合体と、
ｂ）１以上の薬学上許容可能な成分
を含む、医薬組成物。
【請求項１５】
補完的栄養組成物であって、
ａ）請求項２〜１１のいずれかに記載されるか又は請求項１２に記載のプロセスによって得られる、１以上の多糖又は多糖複合体と、
ｂ）１以上の食べられる又は栄養のある成分
を含み、該組成物は、必要に応じて、炭水化物、脂肪、又は窒素の１以上の供給源、ビタミンＥ、ビタミンＣ、ビタミンＢ及び葉酸から選択される１以上の補完物、あるいは魚油、藻類油、真菌油、魚類油、Ｓｐｉｒｕｌｉｎａ、及びＥｃｈｉｎａｃｅａから選択される１以上の油をさらに含む補完的栄養組成物。
【請求項１６】
多糖又は多糖複合体を調製する方法であって、
ａ）クロレラ抽出物を９５％のエタノールと接触させて沈殿物を形成することと；
ｂ）該沈殿物を界面活性剤、好ましくは四級アンモニウム化合物の水溶液と接触させて不溶分画を形成し、不溶分画を単離することと；
ｃ）１×１０３〜１×１０５Ｄａの分子量分画範囲を用いて、好ましくはクロマトグラフィ又は限外濾過により該不溶分画をサイズ分画することと；
ｄ）（ｉ）式３−Ｏ−メチルα−Ｍａｎｐ−（１−ＰＯ３Ｈ→を有する少なくとも１つのメチル化されたリン糖単位又は
（ｉｉ）式α−Ｄ−Ｍａｎｐ−（１−ＰＯ３Ｈ→を有する少なくとも１つのリン糖単位を含む１以上の多糖又は多糖複合体を単離することを含み、
該単離された多糖又は多糖複合体が１×１０３〜１×１０６Ｄａの分子量を有し、該方法は必要に応じて、イオン交換クロマトグラフィによって多糖又は多糖複合体を分離することをさらに含む、方法。
【請求項１７】
工程（ｂ）の後、沈殿物が脱色され、該脱色することが、好ましくは、該沈殿物をクロロホルム／メタノールの混合物に接触させることから成る、請求項１６に記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２０】
追加の利点は、次に続く記載において部分的に示され、記載から部分的に明らかになり、又は以下に記載される態様の実践によって教示され得る。以下に記載される利点は、添付の特許請求の範囲で特に指摘される要素及び組み合わせによって実現され、達成されるであろう。前述の一般的記載及び以下の詳細な記載の双方は例及び説明となるのみであって、限定ではないことが理解されるべきである。
本発明の好ましい実施形態では、例えば以下が提供される：
（項目１）
クロレラから得られる多糖又は多糖複合体であって、
ｉ）式３−Ｏ−メチルα−Ｍａｎｐ−（１−ＰＯ３Ｈ→を有する少なくとも１つのメチル化されたリン糖単位又は
ｉｉ）式α−Ｄ−Ｍａｎｐ−（１−ＰＯ３Ｈ→を有する少なくとも１つのリン糖単位を含み、多糖又は多糖複合体は約１×１０３〜約１×１０６Ｄａの分子量を有する多糖又は多糖複合体。
（項目２）
多糖又は多糖複合体が、実質的に硫酸化を含まない項目１に記載の多糖又は多糖複合体。
（項目３）
多糖又は多糖複合体が、実質的にウロン酸残基を含まない項目１又は２に記載の多糖又は多糖複合体。
（項目４）
多糖又は多糖複合体が、Ｏ−３で結合するβ−Ｄ−ガラクトピラノシル残基の反復単位を含む項目１〜３のいずれかに記載の多糖又は多糖複合体。
（項目５）
多糖又は多糖複合体が、６−リン酸化β−Ｄ−ガラクトピラノシル単位を含む項目１〜４のいずれかに記載の多糖又は多糖複合体。
（項目６）
多糖又は多糖複合体が、β−Ｄ−グルコピラノシル−（１→６）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→を含む項目１〜５のいずれかに記載の多糖又は多糖複合体。
（項目７）
図２６に係る多糖を含む項目１〜６のいずれかに記載の多糖又は多糖複合体。
（項目８）
図２７に係る多糖を含む項目１〜６のいずれかに記載の多糖又は多糖複合体。
（項目９）
図２８に係る多糖を含む項目１〜６のいずれかに記載の多糖又は多糖複合体。
（項目１０）
図２９に係る多糖を含む項目１〜６のいずれかに記載の多糖又は多糖複合体。
（項目１１）
図３０に係る多糖を含む項目１〜６のいずれかに記載の多糖又は多糖複合体。
（項目１２）
図３１に係る多糖を含む項目１〜６のいずれかに記載の多糖又は多糖複合体。
（項目１３）
図３２に係る多糖を含む項目１〜６のいずれかに記載の多糖又は多糖複合体。
（項目１４）
図３３に係る多糖を含む項目１〜６のいずれかに記載の多糖又は多糖複合体。
（項目１５）
図３４に係る多糖を含む項目１〜６のいずれかに記載の多糖又は多糖複合体。
（項目１６）
クロレラにおける多糖又は多糖複合体に会合する１以上のタンパク質又は核酸をさらに含む項目１〜１５のいずれかに記載の多糖又は多糖複合体。
（項目１７）
多糖又は多糖複合体が、Ｃ．ｍｉｎｕｔｉｓｓｉｍａ、Ｃ．ｍａｒｉｎａ、Ｃ．ｓａｌｉｎａ、Ｃ．ｖｕｌｇａｒｉｓ、Ｃ．ａｎｉｔｒａｔａ、Ｃ．ａｎｔａｒｃｔｉｃａ、Ｃ．ａｕｔｏｔｒｏｐｈｉｃａ、Ｃ．ｒｅｇｕｌａｒｉｓ、Ｃ．ｅｌｌｉｐｓｏｉｄｅａ又はこれらの混合物から得られる項目１〜１６のいずれかに記載の多糖又は多糖複合体。
（項目１８）
多糖又は多糖複合体が、Ｃ．ｐｙｒｅｎｏｉｄｏｓａから得られる項目１〜１６のいずれかに記載の多糖又は多糖複合体。
（項目１９）
組成物であって、
ａ）（ｉ）式３−Ｏ−メチルα−Ｍａｎｐ−（１−ＰＯ３Ｈ→を有する少なくとも１つのメチル化されたリン糖単位又は
（ｉｉ）式α−Ｄ−Ｍａｎｐ−（１−ＰＯ３Ｈ→を有する少なくとも１つのリン糖単位を含む１以上の多糖又は多糖複合体と、
ｂ）１以上の添加剤成分を含み、多糖又は多糖複合体は約１×１０３〜約１×１０６Ｄａの分子量を有する組成物。
（項目２０）
医薬組成物であって、
ａ）（ｉ）式３−Ｏ−メチルα−Ｍａｎｐ−（１−ＰＯ３Ｈ→を有する少なくとも１つのメチル化されたリン糖単位又は
（ｉｉ）式α−Ｄ−Ｍａｎｐ−（１−ＰＯ３Ｈ→を有する少なくとも１つのリン糖単位を含む１以上の多糖又は多糖複合体と、
ｂ）１以上の薬学上許容可能な成分を含み、多糖又は多糖複合体は約１×１０３〜約１×１０６Ｄａの分子量を有する医薬組成物。
（項目２１）
補完的栄養組成物であって、
ａ）（ｉ）式３−Ｏ−メチルα−Ｍａｎｐ−（１−ＰＯ３Ｈ→を有する少なくとも１つのメチル化されたリン糖単位又は
（ｉｉ）式α−Ｄ−Ｍａｎｐ−（１−ＰＯ３Ｈ→を有する少なくとも１つのリン糖単位を含む１以上の多糖又は多糖複合体と、
ｂ）１以上の食べられる又は栄養のある成分を含み、多糖又は多糖複合体は約１×１０３〜約１×１０６Ｄａの分子量を有する補完的栄養組成物。
（項目２２）
多糖又は多糖複合体が、硫酸化を実質的に含まない項目１９〜２１のいずれかに記載の組成物。
（項目２３）
多糖又は多糖複合体が、実質的にウロン酸残基を含まない項目１９〜２１のいずれかに記載の組成物。
（項目２４）
多糖又は多糖複合体が、Ｏ−３で結合するβ−Ｄ−ガラクトピラノシル残基の反復単位を含む項目１９〜２１のいずれかに記載の組成物。
（項目２５）
多糖又は多糖複合体が、６−リン酸化β−Ｄ−ガラクトピラノシル単位を含む項目１９〜２１のいずれかに記載の組成物。
（項目２６）
多糖又は多糖複合体が、β−Ｄ−グルコピラノシル−（１→６）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→を含む項目１９〜２１のいずれかに記載の組成物。
（項目２７）
図２６に係る多糖を含む項目１９〜２６のいずれかに記載の組成物。
（項目２８）
図２７に係る多糖を含む項目１９〜２６のいずれかに記載の組成物。
（項目２９）
図２８に係る多糖を含む項目１９〜２６のいずれかに記載の組成物。
（項目３０）
図２９に係る多糖を含む項目１９〜２６のいずれかに記載の組成物。
（項目３１）
図３０に係る多糖を含む項目１９〜２６のいずれかに記載の組成物。
（項目３２）
図３１に係る多糖を含む項目１９〜２６のいずれかに記載の組成物。
（項目３３）
図３２に係る多糖を含む項目１９〜２６のいずれかに記載の組成物。
（項目３４）
図３３に係る多糖を含む項目１９〜２６のいずれかに記載の組成物。
（項目３５）
図３４に係る多糖を含む項目１９〜２６のいずれかに記載の組成物。
（項目３６）
クロレラにおける多糖又は多糖複合体に会合する１以上のタンパク質又は核酸をさらに含む項目１９〜２６のいずれかに記載の組成物。
（項目３７）
多糖又は多糖複合体が、Ｃ．ｍｉｎｕｔｉｓｓｉｍａ、Ｃ．ｍａｒｉｎａ、Ｃ．ｓａｌｉｎａ、Ｃ．ｖｕｌｇａｒｉｓ、Ｃ．ａｎｉｔｒａｔａ、Ｃ．ａｎｔａｒｃｔｉｃａ、Ｃ．ａｕｔｏｔｒｏｐｈｉｃａ、Ｃ．ｒｅｇｕｌａｒｉｓ、Ｃ．ｅｌｌｉｐｓｏｉｄｅａ又はこれらの混合物から得られる項目１９〜２６のいずれかに記載の組成物。
（項目３８）
多糖又は多糖複合体が、Ｃ．ｐｙｒｅｎｏｉｄｏｓａから得られる項目１９〜２６のいずれかに記載の組成物。
（項目３９）
炭水化物、脂肪、又は窒素の１以上の供給源をさらに含む項目２１に記載の組成物。
（項目４０）
ビタミンＥ、ビタミンＣ、ビタミンＢ及び葉酸から選択される１以上の補完物をさらに含む項目２１に記載の組成物。
（項目４１）
魚油、藻類油、真菌油、魚類油、Ｓｐｉｒｕｌｉｎａ、及びＥｃｈｉｎａｃｅａから選択される１以上の油をさらに含む項目２１に記載の組成物。
（項目４２）
多糖又は多糖複合体を調製する方法であって、
ａ）クロレラ抽出物を９５％のエタノールと接触させて沈殿物を形成することと；
ｂ）沈殿物を界面活性剤の水溶液と接触させて不溶分画を形成し、不溶分画を単離することと；
ｃ）約１×１０３〜約１×１０５Ｄａの分子量分画範囲を用いて不溶分画をサイズ分画することと；
ｄ）（ｉ）式３−Ｏ−メチルα−Ｍａｎｐ−（１−ＰＯ３Ｈ→を有する少なくとも１つのメチル化されたリン糖単位又は
（ｉｉ）式α−Ｄ−Ｍａｎｐ−（１−ＰＯ３Ｈ→を有する少なくとも１つのリン糖単位を含む１以上の多糖又は多糖複合体を単離することを含み、
単離された多糖又は多糖複合体が約１×１０３〜約１×１０６Ｄａの分子量を有する方法。
（項目４３）
工程（ｂ）の後、沈殿物が脱色される項目４２に記載の方法。
（項目４４）
脱色することが、沈殿物をクロロホルム／メタノールの混合物に接触させることから成る項目４３に記載の方法。
（項目４５）
界面活性剤が、四級アンモニウム化合物である項目４２に記載の方法。
（項目４６）
サイズ分画する工程が、クロマトグラフィ又は限外濾過を含む項目４２に記載の方法。
（項目４７）
イオン交換クロマトグラフィによって多糖又は多糖複合体を分離することをさらに含む項目４２に記載の方法。
（項目４８）
項目４２の方法によってクロレラから得られる多糖又は多糖複合体を含む組成物。
（項目４９）
対象において免疫応答を調節する方法であって、
（ｉ）式３−Ｏ−メチルα−Ｍａｎｐ−（１−ＰＯ３Ｈ→を有する少なくとも１つのメチル化されたリン糖単位又は
（ｉｉ）式α−Ｄ−Ｍａｎｐ−（１−ＰＯ３Ｈ→を有する少なくとも１つのリン糖単位を含む、クロレラから得られる多糖又は多糖複合体の有効量を対象に投与することを含み、多糖又は多糖複合体は約１×１０３〜約１×１０６Ｄａの分子量を有する方法。
（項目５０）
対象における細菌感染又は真菌感染を治療する方法であって、
（ｉ）式３−Ｏ−メチルα−Ｍａｎｐ−（１−ＰＯ３Ｈ→を有する少なくとも１つのメチル化されたリン糖単位又は
（ｉｉ）式α−Ｄ−Ｍａｎｐ−（１−ＰＯ３Ｈ→を有する少なくとも１つのリン糖単位を含む、クロレラから得られる多糖又は多糖複合体の有効量を対象に投与することを含み、多糖又は多糖複合体は約１×１０３〜約１×１０６Ｄａの分子量を有する方法。
（項目５１）
対象にワクチン接種する方法であって、
ワクチンと、
（ｉ）式３−Ｏ−メチルα−Ｍａｎｐ−（１−ＰＯ３Ｈ→を有する少なくとも１つのメチル化されたリン糖単位又は
（ｉｉ）式α−Ｄ−Ｍａｎｐ−（１−ＰＯ３Ｈ→を有する少なくとも１つのリン糖単位を含む、クロレラから得られる多糖又は多糖複合体の有効量とを対象に投与することを含み、
多糖又は多糖複合体は約１×１０３〜約１×１０６Ｄａの分子量を有する方法。
（項目５２）
クロレラから得られる多糖又は多糖複合体の使用であって、
対象において免疫応答を調節するために薬物を作製するための、
（ｉ）式３−Ｏ−メチルα−Ｍａｎｐ−（１−ＰＯ３Ｈ→を有する少なくとも１つのメチル化されたリン糖単位又は
（ｉｉ）式α−Ｄ−Ｍａｎｐ−（１−ＰＯ３Ｈ→を有する少なくとも１つのリン糖単位を含む多糖又は多糖複合体の使用であり、
多糖又は多糖複合体は約１×１０３〜約１×１０６Ｄａの分子量を有する使用。
（項目５３）
クロレラから得られる多糖又は多糖複合体の使用であって、
対象において細菌感染又は真菌感染を治療するための薬物を作製するための、
（ｉ）式３−Ｏ−メチルα−Ｍａｎｐ−（１−ＰＯ３Ｈ→を有する少なくとも１つのメチル化されたリン糖単位又は
（ｉｉ）式α−Ｄ−Ｍａｎｐ−（１−ＰＯ３Ｈ→を有する少なくとも１つのリン糖単位を含む多糖又は多糖複合体の使用であり、
多糖又は多糖複合体は約１×１０３〜約１×１０６Ｄａの分子量を有する使用。
（項目５４）
クロレラから得られる多糖又は多糖複合体の使用であって、
対象にワクチン接種するために薬物を作製するための、
（ｉ）式３−Ｏ−メチルα−Ｍａｎｐ−（１−ＰＯ３Ｈ→を有する少なくとも１つのメチル化されたリン糖単位又は
（ｉｉ）式α−Ｄ−Ｍａｎｐ−（１−ＰＯ３Ｈ→を有する少なくとも１つのリン糖単位を含む多糖又は多糖複合体の使用であり、
多糖又は多糖複合体は約１×１０３〜約１×１０６Ｄａの分子量を有する使用。