【手続補正書】
【提出日】平成24年4月6日(2012.4.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
核酸と、少なくとも１つのエンドソーム分解性成分と、少なくとも１つの標的リガンドとを有する化合物を含むモジュール組成物であって、前記化合物は、式：
【化１】
2011518784.tif 000001
を有し、式中、
2011518784.tif 000002
は、核酸であり、
Ｅは、エンドソーム分解性成分であり、
Ｌは、標的リガンドであり、
ｘは存在ごとに独立して、０または１を表し、
ｙは存在ごとに独立して、１、２、３、４、５、または６を表し、
ｚは存在ごとに独立して、０、１、２、３、４、５、または６を表し、
Ａは、
【化２】
2011518784.tif 000003
から成る群より選択される連結部分であり、式中、
Ｚ１は存在ごとに独立して、ＯまたはＳを表し、
Ｚ２は存在ごとに独立して、−ＯＨ、−ＯＭ、−Ｏアルキル、−Ｏアリール、−Ｏアラルキル、−ＳＨ、−ＳＭ、−サルキル、−サリール、−アラルキル、−Ｎ（Ｒ３）Ｒ４、−Ｃ（Ｒ１１）２）ｍＮ（Ｒ１１）２、−Ｎ（Ｒ１１）（Ｃ（Ｒ１１）２）ｍＮ（Ｒ１１）２、またはアルキルを表し、
Ｒ３およびＲ４は独立して、Ｈもしくはアルキルを表すか、またはＲ３およびＲ４は一緒になって、３、４、５、６、もしくは７員環を形成し、
Ｒ１１は存在ごとに独立して、水素またはアルキルを表し、
Ｍは存在ごとに独立して、＋１の総電荷を有するアルカリ金属または遷移金属を表し、
Ｒ８は存在ごとに独立して、水素、アルキル、アリール、アラルキル、アシル、シリル、核酸への結合、または、Ｂ１０と組み合わされる場合には連結部分間の結合を表し、
Ｂ１０は、Ａと核酸との結合、または、Ｒ８と組み合わされる場合には連結部分間の結合を表し、
Ａ'は、式：−［（Ｐ−Ｑ−Ｒ）ｑ−Ｘ−（Ｐ'−Ｑ'−Ｒ'）ｑ'］ｑ"−Ｔ−を有する直接結合またはテザーであり、式中、
Ｐ、Ｒ、Ｔ、Ｐ'、およびＲ'はそれぞれ独立して、存在しないか、ＣＯ、ＮＨ、Ｏ、Ｓ、ＯＣ（Ｏ）、ＮＨＣ（Ｏ）、ＣＨ２、ＣＨ２ＮＨ、ＣＨ２Ｏ；ＮＨＣＨ（Ｒａ）Ｃ（Ｏ）、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ（Ｒａ）−ＮＨ−、Ｃ（Ｏ）−（随意的に置換されたアルキル）−ＮＨ−、ＣＨ＝Ｎ−Ｏ、
【化３】
2011518784.tif 000004
シクリル、ヘテロシクリル、アリール、またはヘテロアリールであり、
Ｒ５０およびＲ５１は独立して、アルキル、置換アルキルであるか、またはＲ５０およびＲ５１が一緒になって環式環を形成し、
ＱおよびＱ'はそれぞれ存在ごとに独立して、存在しないか、−（ＣＨ２）ｎ−、−Ｃ（Ｒ４０）（Ｒ４１）（ＣＨ２）ｎ−、−（ＣＨ２）ｎＣ（Ｒ４０）（Ｒ４１）−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｍＣＨ２ＣＨ２−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｍＣＨ２ＣＨ２ＮＨ−、アリール、ヘテロアリール、シクリル、またはヘテロシクリルであり、
Ｘは、存在しないか、または開裂可能な連結基であり、
Ｒａは、Ｈまたはアミノ酸側鎖であり、
Ｒ４０およびＲ４１はそれぞれ独立して、Ｈ、ＣＨ３、ＯＨ、ＳＨ、またはＮ（ＲＸ）２であり、
ＲＸは、存在ごとに、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、またはベンジルであり、
ｑ、ｑ'、およびｑ”はそれぞれ独立して、０〜３０であり、
ｎは、存在ごとに、１〜２０の整数であり、
ｍは、存在ごとに、０〜５０の整数であり、
ＥおよびＬがそれぞれ、少なくとも１つは存在することを条件とする、
組成物。
【請求項２】
前記化合物が、式：
【化４】
2011518784.tif 000005
を有することを特徴とする請求項１記載の組成物。
【請求項３】
前記化合物が、式：
【化５】
2011518784.tif 000006
を有し、式中、各ｚが独立して、１、２、３、４、５、または６であることを特徴とする請求項１記載の組成物。
【請求項４】
前記化合物が、式：
【化６】
2011518784.tif 000007
を有し、式中、ｚは、１、２、３、４、５、または６であるか、あるいは、０、１、２、３、４、５、または６であることを特徴とする請求項１記載の組成物。
【請求項５】
前記Ａ'テザーが、アルキルジラジカル、ヘテロアルキルジラジカル、アルケニルジラジカル、アルキニルジラジカル、アルキルアルキニルジラジカル、アミノアルキルジラジカル、チオエーテル、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−Ｃ（Ｒ）２−であるか、または、
【化７】
2011518784.tif 000008
から成る群より選択される式を有し、式中、
ｍは存在ごとに独立して、１、２、３、４、５、６、７、または８を表し、
ｍ１は存在ごとに独立して、０、１、２、３、４、５、６、７、または８を表し、
ｐは存在ごとに独立して、１、２、３、または４を表し、
Ｒは存在ごとに独立して、水素またはアルキルを表す
ことを特徴とする請求項１記載の組成物。
【請求項６】
前記Ａ'テザーが、
【化８】
2011518784.tif 000009
から成る群より選択されることを特徴とする請求項１記載の組成物。
【請求項７】
前記エンドソーム分解性成分が、イミダゾール、ポリまたはオリゴイミダゾール、直鎖または分岐鎖ポリエチレンイミン（ＰＥＩ）、直鎖および分岐鎖ポリアミン、カチオン性直鎖および分岐鎖ポリアミン、ポリカルボン酸塩、ポリカチオン、マスク化オリゴまたはポリカチオンまたはアニオン、アセタール、ポリアセタール、ケタール、ポリケタール、オルトエステル、マスク化または非マスク化カチオンまたはアニオン電荷を有する直鎖または分岐鎖ポリマー、マスク化または非マスク化カチオンまたはアニオン電荷を有するデンドリマー、ポリアニオン性ペプチド、ポリアニオン性ペプチド模倣薬、ｐＨ感受性ペプチド、ならびに天然または合成融合性脂質から成る群より選択されることを特徴とする請求項１記載の組成物。
【請求項８】
前記エンドソーム分解性成分が、ポリアニオン性ペプチドまたはポリアニオン性ペプチド模倣薬であることを特徴とする請求項１記載の組成物。
【請求項９】
前記融合性脂質が、１，２−ジオレオイル−ｓｎ−３−ホスホエタノールアミン（ＤＯＰＥ）、ホスファチジルエタノールアミン（ＰＯＰＥ）、パルミトイルオレオイルホスファチジルコリン（ＰＯＰＣ），（６Ｚ，９Ｚ，２８Ｚ，３１Ｚ）−ヘプタトリアコンタ−６，９，２８，３１−テトラエン−１９−オル（Ｄｉ−Ｌｉｎ）、Ｎ−メチル（２，２−ジ（（９Ｚ，１２Ｚ）−オクタデカ−９，１２−ジエニル）−１，３−ジオキソラン−４−イル）メタンアミン（ＤＬｉｎ−ｋ−ＤＭＡ）、およびＮ−メチル−２−（２，２−ジ（（９Ｚ，１２Ｚ）−オクタデカ−９，１２−ジエニル）−１，３−ジオキソラン−４−イル）エタンアミン（ＸＴＣ）から成る群より選択されることを特徴とする請求項７記載の組成物。
【請求項１０】
前記エンドソーム分解性成分が、ＧＡＬＡ、ＥＡＬＡ、ＩＮＦ−７、Ｉｎｆ ＨＡ−２、ｄｉＩＮＦ−７、ｄｉＩＮＦ３、ＧＬＦ、ＧＡＬＡ−ＩＮＦ３、ＩＮＦ−５、ＪＴＳ−１、ｐｐＴＧ１、ｐｐＴＧ２０、ＫＡＬＡ、ＨＡ、メリチン、およびヒスチジンに富んだペプチドＣＨＫ６ＨＣから成る群より選択されることを特徴とする請求項１記載の組成物。
【請求項１１】
前記標的リガンドが、抗体、受容体のリガンド結合部分、受容体のためのリガンド、アプタマー、Ｄ−ガラクトース、Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトース（ＧａｌＮＡｃ）、多価Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトース、Ｄ−マンノース、コレステロール、脂肪酸、リポタンパク質、葉酸、チロトロピン、メラノトロピン、サーファクタント・タンパク質Ａ、ムチン、炭水化物、多価ラクトース、多価ガラクトース、Ｎ−アセチル−ガラクトサミン、Ｎ−アセチル−グルコサミン、多価マンノース、多価フコース、グリコシル化ポリアミノ酸、トランスフェリン、ビスホスフォネート、ポリグルタミン酸塩、ポリアスパラギン酸塩、血漿タンパク結合を強化する親油性部分、ステロイド、胆汁酸、ビタミンＢ１２、ビオチン、ＲＧＤペプチド、ＲＧＤペプチド模倣薬、イブプロフェン、ナプロキセン、アスピリン、葉酸、ならびにそれらの類似体および誘導体から成る群より選択されることを特徴とする請求項１記載の組成物。
【請求項１２】
前記標的リガンドが、Ｄ−ガラクトース、Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトース（ＧａｌＮＡｃ）、ＧａｌＮＡｃ２、およびＧａｌＮＡｃ３、コレステロール、葉酸、ならびにそれらの類似体および誘導体から成る群より選択されることを特徴とする請求項１１記載の組成物。
【請求項１３】
前記核酸が、ｉＲＮＡ剤、アンチセンスオリゴヌクレオチド、ａｎｔａｇｏｍｉｒ、活性化ＲＮＡ、デコイオリゴヌクレオチド、アプタマー、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）、ｍｉＲＮＡ模倣体、ａｎｔｉｍｉｒ、活性化ＲＮＡ（ＲＮＡａ）、ｓｕｐｅｒｍｉｒ、Ｕ１アダプター、およびリボザイムから成る群より選択されることを特徴とする請求項１記載の組成物。
【請求項１４】
前記核酸が、少なくとも１つの糖修飾を含有することを特徴とする請求項１記載の組成物。
【請求項１５】
前記糖修飾が、２'修飾であることを特徴とする請求項１４記載の組成物。
【請求項１６】
前記２'修飾が、２'−Ｏ−Ｍｅ（２'−Ｏ−メチル）、２'−Ｏ−ＭＯＥ（２'−Ｏ−メトキシエチル）、２'−Ｆ、２'−Ｏ−［２−（メチルアミノ）−２−オキソエチル］（２'−Ｏ−ＮＭＡ）、２'−ＮＨ２、２'−Ｏ−アミン、２'−ＳＨ、２'−Ｓ−アルキル、２'−Ｏ−ＣＨ２−（４'−Ｃ）（ＬＮＡ）、２'−Ｏ−ＣＨ２ＣＨ２−（４'−Ｃ）（ＥＮＡ）、２'−Ｏ−アミノプロピル（２'−Ｏ−ＡＰ）、２'−Ｏ−ジメチルアミノエチル（２'−Ｏ−ＤＭＡＯＥ）、２'−Ｏ−ジメチルアミノプロピル（２'−Ｏ−ＤＭＡＰ）、および２'−Ｏ−ジメチルアミノエチルオキシエチル（２'−Ｏ−ＤＭＡＥＯＥ）から成る群より選択されることを特徴とする請求項１５記載の組成物。
【請求項１７】
前記核酸が、少なくとも１つの骨格修飾を含有することを特徴とする請求項１記載の組成物。
【請求項１８】
前記骨格修飾が、ホスホロチオエート、ホスホロジチオエート、ホスホロアミダート、ホスホネート、アルキルホスホネート、シロキサン、カーボネート、カルボキシメチル、カルバメート、アミド、チオエーテル、エチレンオキシドリンカー、スルホナート、スルホンアミド、チオホルムアセタール、ホルムアセタール、オキシム、メチレンイミノ、メチレンアミノカルボニル、メチレンメチルイミノ（ＭＭＩ）、メチレンヒドラゾ、メチレンジメチルヒドラゾ（ＭＤＨ）、およびメチレンオキシメチルイミノから成る群より選択されることを特徴とする請求項１７記載の組成物。
【請求項１９】
前記核酸が、少なくとも１つの核酸塩基修飾を含むことを特徴とする請求項１記載の組成物。
【請求項２０】
前記核酸塩基修飾が、ジフルオロトリル、５−ニトロインドール、３−ニトロピロール、２−（アミノ）プリン、２，６−（ジアミノ）プリン、５−置換ピリミジン、Ｎ２−置換プリン、Ｎ６−置換プリン、およびＯ６−置換プリンから成る群より選択されることを特徴とする請求項１９記載の組成物。
【請求項２１】
前記核酸が、標的遺伝子の発現を下方制御することを特徴とする請求項１記載の組成物。
【請求項２２】
前記核酸が、ＲＮＡ干渉機構によって標的遺伝子の発現を下方制御することを特徴とする請求項２１記載の組成物。
【請求項２３】
前記核酸が、一本鎖オリゴヌクレオチドであることを特徴とする請求項１記載の組成物。
【請求項２４】
前記核酸が、ヘアピンオリゴヌクレオチドであることを特徴とする請求項１記載の組成物。
【請求項２５】
前記核酸が、二本鎖オリゴヌクレオチドであることを特徴とする請求項１記載の組成物。
【請求項２６】
前記エンドソーム分解剤および前記標的リガンドが、前記核酸の同一末端上にあることを特徴とする請求項１記載の組成物。
【請求項２７】
前記エンドソーム分解剤および前記標的リガンドが、前記核酸の反対側の末端上にあることを特徴とする請求項１記載の組成物。
【請求項２８】
前記エンドソーム分解剤および前記標的リガンドのうちの一方が、前記核酸の末端にあり、他方は、前記核酸上の内部非末端位置にあることを特徴とする請求項１記載の組成物。
【請求項２９】
前記エンドソーム分解剤および前記標的リガンドの両方が、前記核酸上の内部非末端位置にあることを特徴とする請求項１記載の組成物。
【請求項３０】
前記エンドソーム分解剤および前記標的リガンドが両方、同一鎖上にあることを特徴とする請求項２５記載の組成物。
【請求項３１】
前記エンドソーム分解剤および前記標的リガンドが、異なる鎖上にあることを特徴とする請求項２５記載の組成物。
【請求項３２】
前記エンドソーム分解剤および前記標的リガンドが、前記二本鎖オリゴヌクレオチドの同一末端上に位置することを特徴とする請求項３１記載の組成物。
【請求項３３】
前記エンドソーム分解剤および前記標的リガンドが、前記二本鎖オリゴヌクレオチドの反対側の末端上に位置することを特徴とする請求項３１記載の組成物。
【請求項３４】
前記テザーが、少なくとも１つのレドックス開裂可能な連結基を含むことを特徴とする請求項１記載の組成物。
【請求項３５】
前記テザーが、少なくとも１つのｐＨ感受性成分を含むことを特徴とする請求項１記載の組成物。
【請求項３６】
インビトロまたはエクスビボでモジュール組成物を細胞に送達する方法であって、
（ａ）細胞を請求項１記載のモジュール組成物と接触させ、
（ｂ）前記細胞が前記モジュール組成物を取り込むことを可能にする、
各工程を有してなる方法。
【請求項３７】
前記標的リガンドが、前記核酸が前記細胞内に蓄積することを可能にするのに十分な透過性および滞留性を提供することを特徴とする請求項３６記載の方法。
【請求項３８】
前記方法が、インビトロで実施されることを特徴とする請求項３６記載の方法。
【請求項３９】
前記方法が、エクスビボで実施されることを特徴とする請求項３６記載の方法。
【請求項４０】
インビトロまたはエクスビボで１つ以上の遺伝子の発現を阻害する方法であって、１つ以上の細胞を有効量の請求項１記載のモジュール組成物と接触させる工程を含み、前記有効量が、前記１つ以上の遺伝子の発現を抑制する量であることを特徴とする方法。
【請求項４１】
請求項１−３５いずれか１項記載のモジュール組成物を含む、細胞に核酸を送達するための医薬組成物。
【請求項４２】
請求項１−３５いずれか１項記載のモジュール組成物を含む、１つ以上の遺伝子の発現を阻害するための医薬組成物。