【手続補正書】
【提出日】平成24年6月1日(2012.6.1)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
β−Ｎ−メチルアミノ−Ｌ−アラニン（ＢＭＡＡ）の存在を検出するために試料をスクリーニングするためのイムノアッセイ。
【請求項２】
遊離ＢＭＡＡが検出される、請求項１に記載のイムノアッセイ。
【請求項３】
タンパク質結合ＢＭＡＡが検出される、請求項１に記載のイムノアッセイ。
【請求項４】
遊離ＢＭＡＡおよびタンパク質結合ＢＭＡＡの双方が検出される、請求項１に記載のイムノアッセイ。
【請求項５】
前記イムノアッセイは、酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）である、請求項１に記載のイムノアッセイ。
【請求項６】
前記ＥＬＩＳＡは、抗体捕捉アッセイである、請求項５に記載のイムノアッセイ。
【請求項７】
前記ＥＬＩＳＡは、間接競合ＥＬＩＳＡである、請求項５に記載のイムノアッセイ。
【請求項８】
前記ＥＬＩＳＡは、直接ＥＬＩＳＡである、請求項５に記載のイムノアッセイ。
【請求項９】
前記イムノアッセイは、免疫ブロットアッセイである、請求項１に記載のイムノアッセイ。
【請求項１０】
ＢＭＡＡに結合する抗体を含む、請求項１に記載のイムノアッセイ。
【請求項１１】
ＢＭＡＡに結合する前記抗体は、Ｌ−アラニン、Ｌ−グルタミン、Ｌ−チロシン、グリシル−グリシン、Ｌ−グリシン、Ｌ−ロイシン、Ｌ−フェニルアラニン、ガンマ−アミノ酪酸（ＧＡＢＡ）、Ｌ−グルタミン酸、およびＬ−アスパラギン酸からなる群から選択されるアミノ酸には実質的に結合しない、請求項１０に記載のイムノアッセイ。
【請求項１２】
ＢＭＡＡに結合する前記抗体は、ポリクローナル抗体である、請求項１０に記載のイムノアッセイ。
【請求項１３】
ＢＭＡＡに結合する前記抗体は、モノクローナル抗体である、請求項１０に記載のイムノアッセイ。
【請求項１４】
ＢＭＡＡに結合する前記抗体は、抗体フラグメントである、請求項１０に記載のイムノアッセイ。
【請求項１５】
ＢＭＡＡに結合する前記抗体は、検出可能に標識される、請求項１０に記載のイムノアッセイ。
【請求項１６】
前記抗体は、放射性標識、蛍光部分、発光部分、化学発光部分、コロイド金標識、色素部分、常磁性化合物、検出可能な酵素、ビオチン、アビジン、およびストレプトアビジンからなる群から選択される標識を用いて標識される、請求項１５に記載のイムノアッセイ。
【請求項１７】
ＢＭＡＡに結合する前記抗体は、検出可能に標識されず、ＢＭＡＡに結合する前記抗体に結合する検出可能に標識される二次抗体を更に含む、請求項１０に記載のイムノアッセイ。
【請求項１８】
前記二次抗体は、放射性標識、蛍光部分、発光部分、化学発光部分、コロイド金標識、色素部分、常磁性化合物、検出可能な酵素、検出可能なリガンド、ビオチン、アビジン、およびストレプトアビジンからなる群から選択される標識を用いて標識される、請求項１７に記載のイムノアッセイ。
【請求項１９】
前記二次抗体は、検出可能な酵素を用いて標識される、請求項１８に記載のイムノアッセイ。
【請求項２０】
前記検出可能な酵素は、西洋ワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）である、請求項１９に記載のイムノアッセイ。
【請求項２１】
請求項１に記載のイムノアッセイに従ってβ−Ｎ−メチルアミノ−Ｌ−アラニン（ＢＭＡＡ）の存在を検出するために試料をスクリーニングするための方法であって、ＢＭＡＡに結合する抗体と前記試料とを接触させることと、前記抗体を検出することと、を含む、方法。
【請求項２２】
被験体からの組織試料をスクリーニングし、前記組織試料中のＢＭＡＡの存在を検出することを含み、前記試料中の検出可能な量のＢＭＡＡの存在は、ＢＭＡＡの環境源への前記被験体の曝露を示す、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記組織試料は、神経組織である、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記組織試料は、非神経組織である、請求項２２に記載の方法。
【請求項２５】
前記非神経組織は、ケラチン組織である、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記ケラチン組織は、毛髪である、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記ケラチン組織は、皮膚である、請求項２５に記載の方法。
【請求項２８】
前記ケラチン組織は、爪、鉤爪、または蹄である、請求項２５に記載の方法。
【請求項２９】
前記組織試料の免疫ブロット上でタンパク質結合ＢＭＡＡの存在を検出することを含む、請求項２２に記載の方法。
【請求項３０】
前記試料は、環境試料である、請求項２１に記載の方法。
【請求項３１】
前記環境試料は、水試料である、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
前記環境試料は、食料品からのものである、請求項３０に記載の方法。
【請求項３３】
前記試料中のシアノバクテリア物質を検出するために前記試料をスクリーニングすることを更に含む、請求項３０に記載の方法。
【請求項３４】
ＢＭＡＡに結合する抗体。
【請求項３５】
Ｌ−アラニン、Ｌ−グルタミン、Ｌ−チロシン、グリシル−グリシン、Ｌ−グリシン、Ｌ−ロイシン、Ｌ−フェニルアラニン、ガンマ−アミノ酪酸（ＧＡＢＡ）、Ｌ−グルタミン酸、およびＬ−アスパラギン酸からなる群から選択されるアミノ酸には実質的に結合しない、請求項３４に記載の抗体。
【請求項３６】
前記抗体は、遊離ＢＭＡＡに結合する、請求項３４に記載の抗体。
【請求項３７】
前記抗体は、タンパク質結合ＢＭＡＡに結合する、請求項３４に記載の抗体。
【請求項３８】
前記抗体は、遊離ＢＭＡＡおよびタンパク質結合ＢＭＡＡの双方に結合する、請求項３４に記載の抗体。
【請求項３９】
前記抗体は、Ｌ−ＢＭＡＡ異性体に結合し、ＢＭＡＡのＤ異性体には実質的に結合しない、請求項３４に記載の抗体。
【請求項４０】
前記抗体は、ポリクローナル抗体である、請求項３４に記載の抗体。
【請求項４１】
前記抗体は、モノクローナル抗体である、請求項３４に記載の抗体。
【請求項４２】
前記抗体は、抗体フラグメントである、請求項３４に記載の抗体。
【請求項４３】
前記抗体は、検出可能に標識される、請求項３４に記載の抗体。
【請求項４４】
前記抗体は、インビボ画像診断法で用いるために標識される、請求項３４に記載の抗体。
【請求項４５】
１つ以上の容器手段を受容するように区画化された運搬手段を含む、β−Ｎ−メチルアミノ−Ｌ−アラニン（ＢＭＡＡ）の存在を検出するために、試料をスクリーニングするためのキットであって、少なくとも１つの容器手段は、ＢＭＡＡに結合する抗体を含む、キット。
【請求項４６】
ＢＭＡＡに結合する前記抗体は、検出可能に標識される、請求項４５に記載のキット。
【請求項４７】
前記試料に結合した前記標識された抗体を検出するための手段を含む、少なくとも１つの容器手段を更に含む、請求項４６に記載のキット。
【請求項４８】
ＢＭＡＡに結合する前記抗体は、標識されない、請求項４５に記載のキット。
【請求項４９】
前記標識されない抗体に結合する標識された二次抗体を含む、容器手段を更に含む、請求項４８に記載のキット。
【請求項５０】
既知量のＢＭＡＡを含有する対照試料を含む、容器手段を更に含む、請求項４５に記載のキット。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１３】
本発明は、ＢＭＡＡの存在を検出するために、試料をスクリーニングするためのキットを提供し、キットは、１つ以上の容器手段（容器）を受容するように区画化される運搬手段（運搬）を含み、キットは、ＢＭＡＡに結合する抗体を伴う少なくとも１つの容器手段を含む。本明細書に提供されるようなキットでは、ＢＭＡＡに結合する抗体が、検出可能に標識され得、キットは、試料に結合した標識された抗体を検出するための手段を伴う、少なくとも１つの容器手段（容器）を更に含むことができる。本明細書に提供されるようなキットでは、ＢＭＡＡに結合する抗体は、標識されないものであり得、標識されない抗体に結合する標識された二次抗体を伴う、少なくとも１つの容器手段を更に含むことができ、試料に結合した標識されない抗体に結合する標識された二次抗体を検出するための手段を伴う容器手段を更に含むことができる。本明細書に提供されるようなキットには、既知量のＢＭＡＡを含有する対照試料を伴う容器手段を含むことができる。本明細書に提供されるようなキットには、ＢＭＡＡの存在を検出するために、試料を調製するための手段を含むことができ、かかる手段には、試料を機械的に分離するための手段、および試料を化学的に分離するための手段が含まれ得るが、これらに限定されない。本発明は、ＢＭＡ
Ａの存在を検出するために、被験体からの組織試料をスクリーニングするためのキットを提供し、組織試料は、毛髪または皮膚等のケラチン組織試料であり得るが、これらに限定されない。本発明は、ＢＭＡＡの存在を検出するために、環境試料をスクリーニングするためのキットを提供し、環境試料は、水試料または食料品からの試料であり得るが、これらに限定されない。本明細書に提供されるようなキットは、複数の試料タイプをスクリーニングするための手段を含有することができる。
本発明の好ましい実施形態では、例えば以下が提供される：
（項目１）
β−Ｎ−メチルアミノ−Ｌ−アラニン（ＢＭＡＡ）の存在を検出するために試料をスクリーニングするためのイムノアッセイ。
（項目２）
遊離ＢＭＡＡが検出される、項目１に記載のイムノアッセイ。
（項目３）
タンパク質結合ＢＭＡＡが検出される、項目１に記載のイムノアッセイ。
（項目４）
遊離ＢＭＡＡおよびタンパク質結合ＢＭＡＡの双方が検出される、項目１に記載のイムノアッセイ。
（項目５）
前記イムノアッセイは、酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）である、項目１に記載のイムノアッセイ。
（項目６）
前記ＥＬＩＳＡは、抗体捕捉アッセイである、項目５に記載のイムノアッセイ。
（項目７）
前記ＥＬＩＳＡは、間接競合ＥＬＩＳＡである、項目５に記載のイムノアッセイ。
（項目７）
前記ＥＬＩＳＡは、直接ＥＬＩＳＡである、項目５に記載のイムノアッセイ。
（項目８）
前記イムノアッセイは、免疫ブロットアッセイである、項目１に記載のイムノアッセイ。
（項目１０）
ＢＭＡＡに結合する抗体を含む、項目１に記載のイムノアッセイ。
（項目１１）
ＢＭＡＡに結合する前記抗体は、Ｌ−アラニン、Ｌ−グルタミン、Ｌ−チロシン、グリシル−グリシン、Ｌ−グリシン、Ｌ−ロイシン、Ｌ−フェニルアラニン、ガンマ−アミノ酪酸（ＧＡＢＡ）、Ｌ−グルタミン酸、およびＬ−アスパラギン酸からなる群から選択されるアミノ酸には実質的に結合しない、項目１０に記載のイムノアッセイ。
（項目１２）
ＢＭＡＡに結合する前記抗体は、ポリクローナル抗体である、項目１０に記載のイムノアッセイ。
（項目１３）
ＢＭＡＡに結合する前記抗体は、モノクローナル抗体である、項目１０に記載のイムノアッセイ。
（項目１４）
ＢＭＡＡに結合する前記抗体は、抗体フラグメントである、項目１０に記載のイムノアッセイ。
（項目１５）
ＢＭＡＡに結合する前記抗体は、検出可能に標識される、項目１０に記載のイムノアッセイ。
（項目１６）
前記抗体は、放射性標識、蛍光部分、発光部分、化学発光部分、コロイド金標識、色素部分、常磁性化合物、検出可能な酵素、ビオチン、アビジン、およびストレプトアビジンからなる群から選択される標識を用いて標識される、項目１５に記載のイムノアッセイ。
（項目１７）
ＢＭＡＡに結合する前記抗体は、検出可能に標識されず、ＢＭＡＡに結合する前記抗体に結合する検出可能に標識される二次抗体を更に含む、項目１０に記載のイムノアッセイ。
（項目１８）
前記二次抗体は、放射性標識、蛍光部分、発光部分、化学発光部分、コロイド金標識、色素部分、常磁性化合物、検出可能な酵素、検出可能なリガンド、ビオチン、アビジン、およびストレプトアビジンからなる群から選択される標識を用いて標識される、項目１７に記載のイムノアッセイ。
（項目１９）
前記二次抗体は、検出可能な酵素を用いて標識される、項目１８に記載のイムノアッセイ。
（項目２０）
前記検出可能な酵素は、西洋ワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）である、項目１９に記載のイムノアッセイ。
（項目２１）
増幅ステップを更に含む、項目１に記載のイムノアッセイ。
（項目２２）
項目１に記載のイムノアッセイに従ってβ−Ｎ−メチルアミノ−Ｌ−アラニン（ＢＭＡＡ）の存在を検出するために試料をスクリーニングするための方法であって、ＢＭＡＡに結合する抗体と前記試料とを接触させることと、前記抗体を検出することと、を含む、方法。
（項目２３）
被験体からの組織試料をスクリーニングし、前記組織試料中のＢＭＡＡの存在を検出することを含み、前記試料中の検出可能な量のＢＭＡＡの存在は、ＢＭＡＡの環境源への前記被験体の曝露を示す、項目２２に記載の方法。
（項目２４）
前記組織試料は、神経組織である、項目２３に記載の方法。
（項目２５）
前記組織試料は、非神経組織である、項目２３に記載の方法。
（項目２６）
前記非神経組織は、ケラチン組織である、項目２５に記載の方法。
（項目２８）
前記ケラチン組織は、毛髪である、項目２６に記載の方法。
（項目２９）
前記ケラチン組織は、皮膚である、項目２６に記載の方法。
（項目３０）
前記ケラチン組織は、爪、鉤爪、または蹄である、項目２６に記載の方法。
（項目３１）
前記組織試料の免疫ブロット上でタンパク質結合ＢＭＡＡの存在を検出することを含む、項目２３に記載の方法。
（項目３２）
前記試料は、環境試料である、項目２２に記載の方法。
（項目３３）
前記環境試料は、水試料である、項目３２に記載の方法。
（項目３４）
前記環境試料は、食料品からのものである、項目３２に記載の方法。
（項目３５）
前記試料中のシアノバクテリア物質を検出するために前記試料をスクリーニングすることを更に含む、項目３２に記載の方法。
（項目３６）
前記環境試料の免疫ブロット上でタンパク質結合ＢＭＡＡの存在を検出することを含み、前記免疫ブロット上でシアノバクテリアタンパク質を検出することを更に含む、項目３２に記載の方法。
（項目３７）
ＢＭＡＡに結合する抗体。
（項目３８）
Ｌ−アラニン、Ｌ−グルタミン、Ｌ−チロシン、グリシル−グリシン、Ｌ−グリシン、Ｌ−ロイシン、Ｌ−フェニルアラニン、ガンマ−アミノ酪酸（ＧＡＢＡ）、Ｌ−グルタミン酸、およびＬ−アスパラギン酸からなる群から選択されるアミノ酸には実質的に結合しない、項目３７に記載の抗体。
（項目３９）
前記抗体は、遊離ＢＭＡＡに結合する、項目３７に記載の抗体。
（項目４０）
前記抗体は、タンパク質結合ＢＭＡＡに結合する、項目３７に記載の抗体。
（項目４１）
前記抗体は、遊離ＢＭＡＡおよびタンパク質結合ＢＭＡＡの双方に結合する、項目３７に記載の抗体。
（項目４２）
前記抗体は、Ｌ−ＢＭＡＡ異性体に結合し、ＢＭＡＡのＤ異性体には実質的に結合しない、項目３７に記載の抗体。
（項目４３）
前記抗体は、ポリクローナル抗体である、項目３７に記載の抗体。
（項目４４）
前記抗体は、モノクローナル抗体である、項目３７に記載の抗体。
（項目４５）
前記抗体は、抗体フラグメントである、項目３７に記載の抗体。
（項目４６）
前記抗体は、検出可能に標識される、項目３７に記載の抗体。
（項目４７）
前記抗体は、インビボ画像診断法で用いるために標識される、項目３７に記載の抗体。
（項目４８）
１つ以上の容器手段を受容するように区画化された運搬手段を含む、β−Ｎ−メチルアミノ−Ｌ−アラニン（ＢＭＡＡ）の存在を検出するために、試料をスクリーニングするためのキットであって、少なくとも１つの容器手段は、ＢＭＡＡに結合する抗体を含む、キット。
（項目４９）
ＢＭＡＡに結合する前記抗体は、検出可能に標識される、項目４８に記載のキット。
（項目５０）
前記試料に結合した前記標識された抗体を検出するための手段を含む、少なくとも１つの容器手段を更に含む、項目４９に記載のキット。
（項目５１）
ＢＭＡＡに結合する前記抗体は、標識されない、項目４８に記載のキット。
（項目５２）
前記標識されない抗体に結合する標識された二次抗体を含む、容器手段を更に含む、項目５１に記載のキット。
（項目５３）
前記試料に結合した前記標識されない抗体に結合する前記標識された二次抗体を検出するための手段を含む、容器手段を更に含む、項目５２に記載のキット。
（項目５４）
既知量のＢＭＡＡを含有する対照試料を含む、容器手段を更に含む、項目４８に記載のキット。
（項目５５）
ＢＭＡＡの存在を検出するために、前記試料を調製するための手段を更に含む、項目４
８に記載のキット。
（項目５６）
前記試料を調製するための前記手段は、前記試料を機械的に分離するための手段を含む、項目５５に記載のキット。
（項目５７）
前記試料を調製するための前記手段は、前記試料を化学的に分離するための手段を含む、項目５５に記載のキット。
（項目５８）
被験体からの組織試料をスクリーニングするための、項目４８に記載のキット。
（項目５９）
前記組織試料は、ケラチン組織試料である、項目５８に記載のキット。
（項目６０）
環境試料をスクリーニングするための、項目４８に記載のキット。
（項目６１）
前記環境試料は、水試料である、項目６０に記載のキット。
（項目６２）
前記環境試料は、食料品からのものである、項目６０に記載のキット。
（項目６３）
複数の試料タイプをスクリーニングするための、項目４８に記載のキット。
【手続補正３】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図３】
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