【手続補正書】
【提出日】平成24年6月4日(2012.6.4)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｈｅｒｂａ  Ｓｃｕｔｅｌｌａｒｉａ  Ｂａｒｂａｔａ、Ｒａｄｉｘ  Ｓｏｐｈｏｒａ  Ｓｕｂｐｒｏｓｔｒａｔａｅ、Ｒａｄｉｘ  Ａｎａｍａｒｒｈｅｎａ、Ｓｅｍｅｎ  Ｇｌｙｃｉｎｅ  Ｓｏｊａｅ、Ｒａｄｉｘ  Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ、Ｒｈｉｚｏｍａ  Ｒｈｅｉ、Ｆｒｕｃｔｕｓ  Ｔｒｉｔｉｃｉ  Ｌｅｖｉｓ、Ｒａｄｉｘ  Ａｓｔｒａｇａｌｉ、Ｒａｄｉｘ  Ｒｅｈｍａｎｉａ、Ｆｒｕｃｔｕｓ  Ｌｉｇｕｓｔｒｉ  Ｌｕｃｉｄｉ、Ｓｅｍｅｎ  Ｚｙｚｉｐｈｉ  Ｓｐｉｎｏｚａｅ、Ｐｌｕｍｕｌａ  Ｎｅｌｕｍｂｉｎｉｓ、Ｐｏｒｉａ  Ｃｏｃｏｓ、Ｒｈｉｚｏｍａ  Ａｌｉｓｍａｔｉｓ、Ｃｏｒｔｅｘ  Ｍｏｕｔａｎ  Ｒａｄｉｃｉｓ、Ｆｒｕｃｔｕｓ  Ｃｏｒｎｉ、Ｒａｄｉｘ  Ａｃｈｙｒａｎｔｈｉｓ、Ｃｏｎｃｈａ  Ｏｓｔｒｅａ、Ｒａｄｉｘ  Ａｓｐａｒｇｉ、Ｒａｄｉｘ  Ｐｕｅｒａｒｉａ、Ｒａｄｉｘ  Ａｔｒａｃｔｙｌｏｄｉｓ  ＭａｃｒｏｃｅｐｈａｌａおよびＨｅｒｂａ  Ｅｐｉｍｅｄｉａの混合物のエキス又は該エキスから単離分離された活性物質を含有する、閉経期症状の治療のための医薬。
【請求項２】
前記閉経期症状が、のぼせ、疲労感、イライラ感、不眠、集中力の低下、鬱、記憶力の減退、頭痛、不安感、神経質、断続的なめまい、感覚異常、動悸、頻脈、吐き気、便秘、下痢、関節痛、筋肉痛、手足の冷え、体重増加、尿失禁、膣乾燥および骨盤筋の緊張の低下からなる群より選択される、請求項１記載の医薬。
【請求項３】
（ａ）Ｈｅｒｂａ  Ｓｃｕｔｅｌｌａｒｉａ  Ｂａｒｂａｔａ、Ｒａｄｉｘ  Ｓｏｐｈｏｒａ  Ｓｕｂｐｒｏｓｔｒａｔａｅ、Ｒａｄｉｘ  Ａｎａｍａｒｒｈｅｎａ、Ｓｅｍｅｎ  Ｇｌｙｃｉｎｅ  Ｓｏｊａｅ、Ｒａｄｉｘ  Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ、Ｒｈｉｚｏｍａ  Ｒｈｅｉ、Ｆｒｕｃｔｕｓ  Ｔｒｉｔｉｃｉ  Ｌｅｖｉｓ、Ｒａｄｉｘ  Ａｓｔｒａｇａｌｉ、Ｒａｄｉｘ  Ｒｅｈｍａｎｉａ、Ｆｒｕｃｔｕｓ  Ｌｉｇｕｓｔｒｉ  Ｌｕｃｉｄｉ、Ｓｅｍｅｎ  Ｚｙｚｉｐｈｉ  Ｓｐｉｎｏｚａｅ、Ｐｌｕｍｕｌａ  Ｎｅｌｕｍｂｉｎｉｓ、Ｐｏｒｉａ  Ｃｏｃｏｓ、Ｒｈｉｚｏｍａ  Ａｌｉｓｍａｔｉｓ、Ｃｏｒｔｅｘ  Ｍｏｕｔａｎ  Ｒａｄｉｃｉｓ、Ｆｒｕｃｔｕｓ  Ｃｏｒｎｉ、Ｒａｄｉｘ  Ａｃｈｙｒａｎｔｈｉｓ、Ｃｏｎｃｈａ  Ｏｓｔｒｅａ、Ｒａｄｉｘ  Ａｓｐａｒｇｉ、Ｒａｄｉｘ  Ｐｕｅｒａｒｉａ、Ｒａｄｉｘ  Ａｔｒａｃｔｙｌｏｄｉｓ  ＭａｃｒｏｃｅｐｈａｌａおよびＨｅｒｂａ  Ｅｐｉｍｅｄｉａを組み合わせ、ハーブ混合物を形成することと、
（ｂ）前記ハーブ混合物を、抽出溶媒での抽出に供することと、
（ｃ）前記ハーブ混合物を水から分離してエキスを形成し、任意選択で、前記エキスからタンパク質を沈殿させることと、
（ｄ）前記エキスから活性物質を分離することと、
（ｅ）前記（ｄ）の活性物質の１種類以上を少なくとも１種類の薬学的に許容され得る成分と組み合わせ、それにより医薬を形成することと、
を含む、医薬の調製方法。
【請求項４】
前記ハーブ混合物中のハーブ成分を下記の表に示した割合で組み合わせる、請求項３記載の方法。
【表１】
2011523713.tif 000001
【請求項５】
前記ハーブ混合物中のハーブ成分を下記の表に示した割合で組み合わせる、請求項３記載の方法。
【表２】
2011523713.tif 000002
【請求項６】
Ｈｅｒｂａ  Ｓｃｕｔｅｌｌａｒｉａ  Ｂａｒｂａｔａ、Ｒａｄｉｘ  Ｓｏｐｈｏｒａ  Ｓｕｂｐｒｏｓｔｒａｔａｅ、Ｒａｄｉｘ  Ａｎａｍａｒｒｈｅｎａ、Ｓｅｍｅｎ  Ｇｌｙｃｉｎｅ  Ｓｏｊａｅ、Ｒａｄｉｘ  Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ、Ｒｈｉｚｏｍａ  Ｒｈｅｉ、Ｆｒｕｃｔｕｓ  Ｔｒｉｔｉｃｉ  Ｌｅｖｉｓ、Ｒａｄｉｘ  Ａｓｔｒａｇａｌｉ、Ｒａｄｉｘ  Ｒｅｈｍａｎｉａ、Ｆｒｕｃｔｕｓ  Ｌｉｇｕｓｔｒｉ  Ｌｕｃｉｄｉ、Ｓｅｍｅｎ  Ｚｙｚｉｐｈｉ  Ｓｐｉｎｏｚａｅ、Ｐｌｕｍｕｌａ  Ｎｅｌｕｍｂｉｎｉｓ、Ｐｏｒｉａ  Ｃｏｃｏｓ、Ｒｈｉｚｏｍａ  Ａｌｉｓｍａｔｉｓ、Ｃｏｒｔｅｘ  Ｍｏｕｔａｎ  Ｒａｄｉｃｉｓ、Ｆｒｕｃｔｕｓ  Ｃｏｒｎｉ、Ｒａｄｉｘ  Ａｃｈｙｒａｎｔｈｉｓ、Ｃｏｎｃｈａ  Ｏｓｔｒｅａ、Ｒａｄｉｘ  Ａｓｐａｒｇｉ、Ｒａｄｉｘ  Ｐｕｅｒａｒｉａ、Ｒａｄｉｘ  Ａｔｒａｃｔｙｌｏｄｉｓ  ＭａｃｒｏｃｅｐｈａｌａおよびＨｅｒｂａ  Ｅｐｉｍｅｄｉａの混合物のエキスの活性物質の定量方法であって、
（ａ）前記エキスからタンパク質を沈殿させ、上清みを単離することと、
（ｂ）前記上清みを抽出媒体上にインジェクトし、溶出液を前記抽出媒体から収集することと、
（ｃ）（ｂ）の溶出液をＭＳ／ＭＳ分離および定量に供し、それにより、前記活性物質の定量を得ることと、
を含む方法。
【請求項７】
前記タンパク質沈殿（ａ）がタンパク質分離用バイアル内で行われる、請求項６記載の方法。
【請求項８】
前記抽出媒体が抽出カラムである、請求項６又は７記載の方法。
【請求項９】
生物学的試料から活性物質を単離し、前記活性物質を定量する方法であって、前記活性物質が、Ｈｅｒｂａ  Ｓｃｕｔｅｌｌａｒｉａ  Ｂａｒｂａｔａ、Ｒａｄｉｘ  Ｓｏｐｈｏｒａ  Ｓｕｂｐｒｏｓｔｒａｔａｅ、Ｒａｄｉｘ  Ａｎａｍａｒｒｈｅｎａ、Ｓｅｍｅｎ  Ｇｌｙｃｉｎｅ  Ｓｏｊａｅ、Ｒａｄｉｘ  Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ、Ｒｈｉｚｏｍａ  Ｒｈｅｉ、Ｆｒｕｃｔｕｓ  Ｔｒｉｔｉｃｉ  Ｌｅｖｉｓ、Ｒａｄｉｘ  Ａｓｔｒａｇａｌｉ、Ｒａｄｉｘ  Ｒｅｈｍａｎｉａ、Ｆｒｕｃｔｕｓ  Ｌｉｇｕｓｔｒｉ  Ｌｕｃｉｄｉ、Ｓｅｍｅｎ  Ｚｙｚｉｐｈｉ  Ｓｐｉｎｏｚａｅ、Ｐｌｕｍｕｌａ  Ｎｅｌｕｍｂｉｎｉｓ、Ｐｏｒｉａ  Ｃｏｃｏｓ、Ｒｈｉｚｏｍａ  Ａｌｉｓｍａｔｉｓ、Ｃｏｒｔｅｘ  Ｍｏｕｔａｎ  Ｒａｄｉｃｉｓ、Ｆｒｕｃｔｕｓ  Ｃｏｒｎｉ、Ｒａｄｉｘ  Ａｃｈｙｒａｎｔｈｉｓ、Ｃｏｎｃｈａ  Ｏｓｔｒｅａ、Ｒａｄｉｘ  Ａｓｐａｒｇｉ、Ｒａｄｉｘ  Ｐｕｅｒａｒｉａ、Ｒａｄｉｘ  Ａｔｒａｃｔｙｌｏｄｉｓ  ＭａｃｒｏｃｅｐｈａｌａおよびＨｅｒｂａ  Ｅｐｉｍｅｄｉａの混合物のエキス由来のエストロゲン様化合物であり、
（ａ）前記生物学的試料からタンパク質を沈殿させ、上清みを単離することと、
（ｂ）前記上清みを抽出媒体上にインジェクトし、溶出液を前記抽出媒体から収集することと、
（ｃ）（ｂ）の溶出液をＭＳ／ＭＳ分離および定量に供し、それにより、前記活性物質の定量を得ることと、
を含む方法。
【請求項１０】
前記生物学的試料が、哺乳動物組織試料である、請求項９記載の方法。
【請求項１１】
前記生物学的試料が、血液試料、尿試料、肝臓試料、乳房組織試料、卵巣組織試料、子宮組織試料、外陰部組織試料、膣組織試料、頚部組織試料、ファローピウス管組織試料、子宮内膜組織試料、リンパ節組織試料および／または骨組織試料である、請求項９又は１０記載の方法。
【請求項１２】
前記タンパク質沈殿（ａ）がタンパク質分離用バイアル内で行われる、請求項８〜１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
前記抽出媒体が抽出カラムである、請求項８〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
（ｉ）推定活性物質がＥＲα結合ＥＲＥおよびＥＲβ結合ＥＲＥを活性化する能力を測定することと、
（ｉｉ）推定活性物質が前記ＥＲα結合ＥＲＥおよび前記ＥＲβ結合ＥＲＥを活性化する能力を比較し、それにより、ＥＲβ結合ＥＲＥをＥＲα結合ＥＲＥよりも高い程度で活性化する推定活性物質を活性であると判定することと、
を含む、前記請求項のいずれか一項に記載の１種類以上の活性物質の特性評価方法。
【請求項１５】
前記活性物質が乳癌細胞の増殖を刺激する能力を評価することと、乳癌細胞増殖の刺激を実質的に示さない活性物質を閉経期の治療薬として選択することとをさらに含む、請求項１４記載の方法。