【手続補正書】
【提出日】平成24年6月8日(2012.6.8)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
第VIII因子（FVIII）及びフォン・ヴィレブランド因子（VWF）を含む複合体の少なくとも１つのポリペプチド成分又はその個々の成分のうちの少なくとも１つが、その一次翻訳産物のＣ末端部分で半減期増大ポリペプチド（HLEP）のＮ末端部分に融合される、上記複合体、又はその個々のポリペプチド成分のうちの１つ。
【請求項２】
修飾FVIIIが、FVIIIの一次翻訳ポリペプチドのＣ末端部分でHLEPのＮ末端部分に融合されるか、又は修飾VWFが、VWFの一次翻訳ポリペプチドのＣ末端部分でHLEPのＮ末端部分に融合される、修飾FVIII、又は修飾VWF（modified von VWF）、又は修飾FVIII及び非修飾VWFを含む複合体、又は非修飾FVIII及び修飾VWFを含む複合体、又は修飾FVIII及び修飾VWFを含む複合体。
【請求項３】
a．修飾FVIIIが、野生型FVIIIの機能的半減期と比較して延長された機能的半減期を有するか、又は
b．修飾VWFが、野生型VWFの機能的半減期と比較して延長された機能的半減期を有するか、又は
c．修飾FVIII及び非修飾VWFを含む複合体が、野生型FVIII及び野生型VWFを含む対応の複合体の機能的半減期と比較して延長された機能的半減期を有するか、又は
d．非修飾FVIII及び修飾VWFを含む複合体が、野生型FVIII及び野生型VWFを含む対応の複合体の機能的半減期と比較して延長された機能的半減期を有するか、又は
e．修飾FVIIIと修飾VWFとの複合体が、野生型FVIII及び野生型VWFを含む対応の複合体の機能的半減期と比較して延長された機能的半減期を有する、
請求項１又は２に記載の修飾FVIII、又は修飾VWF、又は修飾FVIII及び非修飾VWFを含む複合体、又は非修飾FVIII及び修飾VWFを含む複合体、又は修飾FVIII及び修飾VWFを含む複合体。
【請求項４】
前記一つの修飾ポリペプチドが、対応の野生型ポリペプチドの機能的半減期と比較して少なくとも25％増加した機能的半減期を有するか、又は一つの該修飾ポリペプチドを含む複合体若しくは複数の該修飾ポリペプチドを含む複合体が、野生型FVIII及び野生型VWFの対応の複合体と比較して少なくとも25％増加した機能的半減期を有する、請求項３に記載
の修飾ポリペプチド、又は一つの該修飾ポリペプチドを含む複合体若しくは複数の該修飾ポリペプチドを含む複合体。
【請求項５】
a．修飾FVIIIが、野生型FVIIIの抗原半減期と比較して延長された抗原半減期を有するか、又は
b．修飾VWFが、野生型VWFの抗原半減期と比較して延長された抗原半減期を有するか、又は
c．修飾FVIII及び非修飾VWFを含む複合体が、野生型FVIII及び野生型VWFを含む対応の複合体の抗原半減期と比較して延長された抗原半減期を有するか、又は
d．非修飾FVIII及び修飾VWFを含む複合体が、野生型FVIII及び野生型VWFの対応の複合体の抗原半減期と比較して延長された抗原半減期を有するか、又は
e．修飾FVIII及び修飾VWFを含む複合体が、野生型FVIII及び野生型VWFの対応の複合体の抗原半減期と比較して延長された抗原半減期を有する、
請求項１又は２に記載の修飾FVIII、又は修飾VWF、又は修飾FVIII及び非修飾VWFを含む複合体、又は非修飾FVIII及び修飾VWFを含む複合体、又は修飾FVIII及び修飾VWFを含む複合体。
【請求項６】
前記一つの修飾ポリペプチドが、対応の野生型ポリペプチドの抗原半減期と比較して少なくとも25％増加した抗原半減期を有するか、又は一つの該修飾ポリペプチドを含む複合体若しくは複数の該修飾ポリペプチドを含む複合体が、野生型FVIII及び野生型VWFの対応の複合体と比較して少なくとも25％増加した抗原半減期を有する、請求項５に記載の修飾ポリペプチド、又は一つの該修飾ポリペプチドを含む複合体若しくは複数の該修飾ポリペプチドを含む複合体。
【請求項７】
a．修飾FVIIIが、野生型FVIIIのインビボリカバリーと比較して増加したインビボリカバリーを有するか、又は
b．修飾VWFが、野生型VWFのインビボリカバリーと比較して増加したインビボリカバリーを有するか、又は
c．修飾FVIII及び非修飾VWFを含む複合体が、野生型FVIII及び野生型VWFを含む対応の複合体のインビボリカバリーと比較して増加したインビボリカバリーを有するか、又は
d．非修飾FVIII及び修飾VWFを含む複合体が、野生型FVIII及び野生型VWFを含む対応の複合体のインビボリカバリーと比較して増加したインビボリカバリーを有するか、又は
e．修飾FVIII及び修飾VWFを含む複合体が、野生型FVIII及び野生型VWFを含む対応の複合体のインビボリカバリーと比較して増加したインビボリカバリーを有する、
請求項１又は２に記載の修飾FVIII、又は修飾VWF、又は修飾FVIII及び非修飾VWFを含む複合体、又は非修飾FVIII及び修飾VWFを含む複合体、又は修飾FVIII及び修飾VWFを含む複合体。
【請求項８】
前記一つの修飾ポリペプチドが、対応の野生型ポリペプチドのインビボリカバリーと比較して少なくとも10％増加したインビボリカバリーを有するか、又は該一つの修飾ポリペプチドを含む複合体若しくは複数の該修飾ポリペプチドを含む複合体が、野生型FVIII及び野生型VWFの対応の複合体と比較して少なくとも10％増加したインビボリカバリーを有する、請求項７に記載の修飾ポリペプチド、又は一つの該修飾ポリペプチドを含む複合体若しくは複数の該修飾ポリペプチドを含む複合体。
【請求項９】
複合体の少なくとも１つのポリペプチド成分が、その一次翻訳産物のＣ末端アミノ酸でHLEPのＮ末端部分に融合されている、請求項１〜８のいずれか１項に記載の修飾ポリペプチド、又は該一つの修飾ポリペプチドを含む複合体若しくは複数の該修飾ポリペプチドを含む複合体。
【請求項１０】
複合体の少なくとも1つのポリペプチド成分が、その一次翻訳産物のＣ末端部分でHLEPのＮ末端アミノ酸に融合される、請求項１〜９のいずれか１項に記載の修飾ポリペプチド、又は該一つの修飾ポリペプチドを含む複合体若しくは複数の該修飾ポリペプチドを含む複合体。
【請求項１１】
複合体の少なくとも１つのポリペプチド成分が、その一次翻訳産物のＣ末端アミノ酸でHLEPのＮ末端アミノ酸に融合されている、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の修飾ポリペプチド、又は該一つの修飾ポリペプチドを含む複合体若しくは複数の該修飾ポリペプチドを含む複合体。
【請求項１２】
修飾ポリペプチドが、野生型ポリペプチドの生物学的活性の少なくとも10％を有するか、又は該一つの修飾ポリペプチドを含む複合体若しくは複数の該修飾ポリペプチドを含む複合体が、野生型FVIII及び野生型VWFの対応の複合体の生物学的活性の少なくとも10％を有する、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の修飾ポリペプチド、又は該一つの修飾ポリペプチドを含む複合体若しくは複数の該修飾ポリペプチドを含む複合体。
【請求項１３】
HLEPが、アルブミンファミリータンパク質及び免疫グロブリンの定常領域からなる群より選択される、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の修飾ポリペプチド、又は該一つの修飾ポリペプチドを含む複合体若しくは複数の該修飾ポリペプチドを含む複合体。
【請求項１４】
HLEPがアルブミン又はそのフラグメントである、請求項１３に記載の修飾ポリペプチド、又は該一つの修飾ポリペプチドを含む複合体若しくは複数の該修飾ポリペプチドを含む複合体。
【請求項１５】
組換え修飾FVIIIが野生型FVIIIよりも高い収率で哺乳動物細胞から分泌される、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の組換え修飾FVIII。
【請求項１６】
請求項１〜１５のいずれか１項に記載のポリペプチド又は該一つの修飾ポリペプチドを含む複合体若しくは複数の該修飾ポリペプチドを含む複合体をコードする、一つのポリヌクレオチド又はポリヌクレオチドのグループ。
【請求項１７】
プラスミド、又はベクターのグループが請求項１６に記載のポリヌクレオチドのグループを含む、請求項１６に記載の一つのポリヌクレオチドを含むプラスミド若しくはベクター、又はプラスミド若しくはベクターのグループ。
【請求項１８】
一つ若しくは複数のプラスミド又は一つ若しくは複数のベクターが一つ若しくは複数の発現ベクターである、請求項１７に記載のプラスミド若しくはベクター、又はプラスミド若しくはベクターのグループ。
【請求項１９】
ヒト遺伝子治療における使用のための導入ベクターである、請求項１７に記載のベクター、又はベクターのグループ。
【請求項２０】
請求項１６に記載のポリヌクレオチド又はポリヌクレオチドのグループ、又は請求項１７〜１９のいずれか１項に記載のプラスミド若しくはベクター又はプラスミド若しくはベクターのグループを含む、宿主細胞。
【請求項２１】
（a）修飾VWFが発現されるような条件下で請求項２０に記載の宿主細胞を培養する工程；及び
（b）場合により、宿主細胞から又は培養培地から修飾VWFを回収する工程
を含む、修飾VWFの製造方法。
【請求項２２】
請求項１〜１５のいずれか１項に記載のポリペプチド又は該修飾ポリペプチドを含む複合体、請求項１６に記載のポリヌクレオチド又はポリヌクレオチドのグループ、又は請求項１７〜１９のいずれか１項に記載のプラスミド若しくはベクター又はプラスミド若しくはベクターのグループを含む、薬学的組成物。
【請求項２３】
血液凝固障害の治療又は予防用の医薬の製造のための、請求項１〜１５のいずれか１項に記載のポリペプチド又は該修飾ポリペプチドを含む複合体、請求項１６に記載のポリヌクレオチド又はポリヌクレオチドのグループ、又は請求項１７〜１９のいずれか１項に記載のプラスミド若しくはベクター又はプラスミド若しくはベクターのグループ、又は請求項２０に記載の宿主細胞の使用。
【請求項２４】
血液凝固障害が血友病Ａである、請求項２３に記載の使用。
【請求項２５】
血液凝固障害がフォン・ヴィレブランド病である、請求項２３に記載の使用。
【請求項２６】
治療がヒト遺伝子治療を含む、請求項２３〜２５のいずれか１項に記載の使用。
【請求項２７】
半減期増大ポリペプチドのＮ末端部分を、FVIIIの一次翻訳ポリペプチドのＣ末端部分に、又はVWFの一次翻訳ポリペプチドのＣ末端部分に融合する工程を含む、増大した機能的半減期を有する修飾FVIII又は修飾VWFを製造する方法。
【請求項２８】
請求項２７に記載の方法によって製造された修飾FVIIIと野生型VWFとを混合する工程による、又は野生型FVIIIと請求項２７に記載の方法によって製造された修飾VWFとを混合する工程による、又は請求項２７に記載の方法によって製造された修飾FVIII及び修飾VWFを混合することによる、修飾FVIII及び非修飾VWFを含む複合体、又は非修飾FVIII及び修飾VWFを含む複合体、又は修飾FVIII及び修飾VWFを含む複合体を調製する方法。
【請求項２９】
出血性障害の治療における、好ましくは血友病Ａ及び／又はフォン・ヴィレブランド病の治療における、同時の、別々の又は逐次的な使用のための組み合わせ薬学的製剤の製造のための、
a．請求項２７に記載の方法によって製造された修飾FVIII及び野生型VWF、又は
b．野生型FVIII及び請求項２７に記載の方法によって製造された修飾VWF、又は
c．請求項２７に記載の方法によって製造された修飾FVIII及び請求項２７に記載の方法によって製造された修飾VWF
の使用。