【手続補正書】
【提出日】平成23年10月24日(2011.10.24)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
プロテアーゼ阻害性ペプチド基質を眼科的に許容される賦形剤中に含む、局所眼科用組成物であって、該プロテアーゼ阻害性ペプチド基質が、ゼラチン、コラーゲン及びカゼインからなる群から選択される、組成物。
【請求項２】
ガラクトマンナンを更に含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記ガラクトマンナンがＨＰ−グアルを含む、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコールおよびプロピレングリコールからなる群より選択される剤をさらに含む、請求項１、２、又は３に記載の組成物。
【請求項５】
有効量のプロテアーゼ阻害性ペプチド基質を含む組成物であって、該組成物を眼球表面に適用することを含むドライアイ治療方法において使用するための、組成物。
【請求項６】
ＭＭＰ−９を阻害するのに有効なプロテアーゼ阻害性ペプチド基質を含む、請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
前記プロテアーゼ阻害性ペプチド基質が、ゼラチン、アルファ−２−マクログロブリン、オボマクログロブリン、コラーゲン及びカゼインからなる群から選択される、請求項５又は６に記載の組成物。
【請求項８】
ガラクトマンナンを更に含む、請求項５、６、又は７に記載の組成物。
【請求項９】
前記ガラクトマンナンがＨＰ−グアルを含む、請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコールおよびプロピレングリコールからなる群より選択される剤をさらに含む、請求項５〜９のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１１】
前記プロテアーゼ阻害性ペプチド基質が約０．０５％ｗ／ｖを超え約０．２５％ｗ／ｖ未満の量で存在する、請求項１に記載の組成物。
【請求項１２】
前記プロテアーゼ阻害性ペプチド基質が、約０．０５％ｗ／ｖを超える量で存在するゼラチンである、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１３】
前記プロテアーゼ阻害性ペプチド基質が、約０．０３％ｗ／ｖを超える量で存在するコラーゲンである、請求項１に記載の組成物。
【請求項１４】
抗生物質、抗炎症剤及び免疫抑制薬からなる群から選択される治療薬を更に含む、請求項１、２、３又は１１のいずれかに記載の組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００２】
ドライアイ又は眼球乾燥症は、多数の個体にとう痛及び不快を引き起こす症状である。大部分の個体では、１日を通したまばたき及び涙液補給は、清浄で調節された眼球表面を提供する。ドライアイでは、眼球表面がかなり敏感になり、とう痛及び炎症を生じる。ドライアイの原因は不明であるが、この症状の原因又は複数の原因に関して多数の理論がある。一理論は、腺の欠陥を仮定する。涙液を分泌して、まばたき、排液及び蒸発で失われた涙液を補給する眼腺が欠乏し、不十分な量の涙液を分泌する。ドライアイの別の考えられる原因は、結膜及び角膜に存在する神経を含む。これらの神経の感受性が低下し、まばたきが減少し、したがって乾燥する。あるいは、これらの神経が過度に敏感になり、ドライアイの総体的症状に特有であるとう痛及び炎症の増加を直接もたらす。慢性炎症は、炎症性傷害の起源が何であれ、ドライアイの別の原因因子又は寄与因子であり得る。眼の感染はドライアイを生じ得る。感染に起因する炎症は、涙管を遮断し得る。体がその自己組織を外来起源であると誤認する自己免疫異常は、眼組織を免疫学的攻撃にさらし、やはりドライアイの原因の寄与因子であり得る。一つのかかる自己免疫異常であるシェーグレン症候群においては、ドライアイ（及び口内乾燥症）は、涙及び唾液を産生する外分泌腺を攻撃する免疫細胞に起因する特徴的症候の一つである。シェーグレン症候群は、米国単独で四百万人もの人を苦しめていると推定され、２番目に多い自己免疫疾患になっている。ドライアイの別の考えられる原因としては、ホルモン又はビタミンの欠乏又は過剰が挙げられる。ドライアイは、実際に、多数の異なる症状の結果であり得る。そのいずれか１つ以上が、任意の個々の患者における症状をもたらし得る。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１６】
理論に拘泥するものではないが、ＭＭＰ−９などのプロテアーゼの活性を阻害するように作用するプロテアーゼ阻害性ペプチド基質は、それによって、ドライアイ障害を受けやすい眼組織中に通常存在する内在性基質に作用するプロテアーゼの能力を低下させると考えられる。このようにして、プロテアーゼ阻害性ペプチド基質は、ＭＭＰ−９又は他の眼球プロテアーゼの直接損傷作用を低下させるように働くことができる。ＭＭＰ−９などのプロテアーゼに対するプロテアーゼ阻害性ペプチド基質の阻害効果の一部又はすべては、間接的であり得、すなわち、アロステリック型阻害様式であり得る。プロテアーゼ阻害性ペプチド基質のサイズ又は分子量は、この阻害効力をもたらし得る。さらに、プロテアーゼ阻害性ペプチド基質は、過敏になった眼球表面組織に対して直接又は間接的な抗炎症効果、並びに抗組織再構築効果をもたらすことができる。これらの作用は、ペプチド基質とＭＭＰ酵素、特にＭＭＰ−９の相互作用によって媒介されると考えられる。さらに、本発明のある実施形態は、プロテアーゼ阻害性ペプチドの徐放性を与えることによって、これらの治療上の作用を延長することができる。例えば、本発明の好ましい一実施形態においては、プロテアーゼ阻害性ペプチド基質は、ＨＰ−グアル及びホウ酸塩と化合してゲルを形成する。このゲルは、涙液膜の安定性を高め、眼球表面を乾燥から保護するように作用する。さらに、ゲルは、プロテアーゼ阻害性ペプチド基質を捕捉することができ、基質はそれによって涙液膜中に保持され、活性の持続時間が延長される。プロテアーゼ阻害性ペプチド基質は、ゼラチン−ムチンゲルマトリックスを形成する可溶性ムチンの足場として作用し、それによって涙液膜の安定性を高めることもできる。
本発明は、例えば、以下を提供する：
（項目１）
プロテアーゼ阻害性ペプチド基質を眼科的に許容される賦形剤中に含む、局所眼科用組成物。
（項目２）
ガラクトマンナンを更に含む、項目１に記載の組成物。
（項目３）
上記プロテアーゼ阻害性ペプチド基質が上記プロテアーゼＭＭＰ−９を阻害する能力のある、項目１又は２に記載の組成物。
（項目４）
上記プロテアーゼ阻害性ペプチド基質が、ゼラチン、アルファ−２−マクログロブリン、オボマクログロブリン、コラーゲン及びカゼインからなる群から選択される、項目１、２又は３に記載の組成物。
（項目５）
上記ガラクトマンナンがＨＰ−グアルを含む、項目２に記載の組成物。
（項目６）
有効量のプロテアーゼ阻害性ペプチド基質を含む組成物を眼球表面に適用することを含む、ドライアイ治療方法。
（項目７）
ＭＭＰ−９を阻害するのに有効なある量のプロテアーゼ阻害性ペプチド基質を含む組成物を眼球表面に適用することを含む、ドライアイ治療方法。
（項目８）
上記プロテアーゼ阻害性ペプチド基質が、ゼラチン、アルファ−２−マクログロブリン、オボマクログロブリン、コラーゲン及びカゼインからなる群から選択される、項目６又は７に記載の方法。
（項目９）
有効量のプロテアーゼ阻害性ペプチド基質とガラクトマンナンとを含む組成物を眼球表面に適用することを含む、ドライアイ治療方法。
（項目１０）
ＭＭＰ−９を阻害する量の項目１に記載の組成物を眼球表面に適用することを含む、ドライアイ治療方法。
（項目１１）
上記プロテアーゼ阻害性ペプチド基質が約０．０５％を超え約０．２５％未満の量で存在する、項目１に記載の組成物。
（項目１２）
上記プロテアーゼ阻害性ペプチド基質が、約０．０５％ｗ／ｖを超える量で存在するゼラチンである、項目１１に記載の組成物。
（項目１３）
上記プロテアーゼ阻害性ペプチド基質が、約０．０３％ｗ／ｖを超える量で存在するコラーゲンである、項目１１に記載の組成物。
（項目１４）
上記基質が、約０．０１５％ｗ／ｖを超える量で存在するアルファ−２−マクログロブリンである、項目１１に記載の組成物。
（項目１５）
抗生物質、抗炎症剤及び免疫抑制薬からなる群から選択される治療薬を更に含む、項目１、２、３、４、５又は１１のいずれかに記載の組成物。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３９】
本発明の一実施形態においては、プロテアーゼ阻害性ペプチド基質は、潤滑ポリマー系を含むＳＹＳＴＡＮＥ（登録商標）Ｌｕｂｒｉｃａｎｔ  Ｅｙｅ  Ｄｒｏｐｓ（Ａｌｃｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．）などの既存のドライアイ製剤と組み合わせられる。ＳＹＳＴＡＮＥ（登録商標）の重合性保護（ｐｏｌｙｍｅｒｉｚｉｎｇ  ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ）は、粘滑剤（ポリエチレングリコール４００及びプロピレングリコール）、ＨＰ−グアル及び患者の自然の涙液の相互作用によって得られる。ＨＰ−グアルが自然の涙液と組み合わせると、化学反応が起こる。ＨＰ−グアルは、疎水性（はっ水）表面に結合し、ゲル様粘ちゅう性を有するネットワークを形成する。ＨＰ−グアルは、眼球表面の粘滑系をより長く維持するのにも役立つ。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４４】
最も早く最も成功した人工涙溶液の１つは、米国特許第４，０３９，６６２号（Ｈｅｃｈｔ他）に記載されている。この溶液は、ＴＥＡＲＳ  ＮＡＴＵＲＡＬＥ（商標）Ｌｕｂｒｉｃａｎｔ  Ｅｙｅ  Ｄｒｏｐｓ（Ａｌｃｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．、Ｆｏｒｔ  Ｗｏｒｔｈ、Ｔｅｘａｓ）として長年市販されている。Ｈｅｃｈｔ他の’６６２号特許に記載され、特許請求された溶液、及び対応する市販品は、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、デキストラン７０及び塩化ベンザルコニウムの独特の組合せの使用に基づく。ＴＥＡＲＳ  ＮＡＴＵＲＡＬＥ（商標）ＩＩ  Ｐｏｌｙｑｕａｄ（登録商標）Ｌｕｂｒｉｃａｎｔ  Ｅｙｅ  Ｄｒｏｐｓ（Ａｌｃｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．）の名称で現在市販されているこの製品のその後のバージョンでは、塩化ベンザルコニウムは、重合体抗菌剤／防腐剤であるポリクオタニウム−１で置換された。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５１】
他の成分を本発明の組成物に添加することができる。かかる成分としては、一般に、張性調節剤、キレート化剤、活性薬剤、可溶化剤、防腐剤、ｐＨ調節剤及び担体が挙げられる。ポリエチレングリコール及びグリセロールなどの他のポリマー又は単量体薬剤も特別なプロセシングのために添加することができる。本発明の組成物に有用である張性剤（ｔｏｎｉｃｉｔｙ  ａｇｅｎｔ）としては、塩化ナトリウム、塩化カリウム及び塩化カルシウムなどの塩を挙げることができる。非イオン性張性剤としては、プロピレングリコール及びグリセロールを挙げることができる。キレート化剤としては、プロピレングリコール及びグリセロールを挙げることができる。キレート化剤としては、ＥＤＴＡ及びその塩を挙げることができる。可溶化剤としては、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ  ＥＬ（登録商標）及びＴｗｅｅｎ  ８０を挙げることができる。別の担体としては、Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ（登録商標）ＩＲＰ−６０を挙げることができる。ｐＨ調節剤としては、塩酸、Ｔｒｉｓ、トリエタノールアミン及び水酸化ナトリウムを挙げることができる。適切な防腐剤としては、塩化ベンザルコニウム、ポリクオタニウム−１及びポリエキサメチレン（ｐｏｌｙｅｘａｍｅｔｈｙｌｅｎｅ）ビグアナイドを挙げることができる。上に列挙した例は、説明のためのものであって、網羅的なものではない。上記目的に有用である他の薬剤の例は眼科用製剤において周知であり、本発明によって企図される。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６１】
これらの試験では、乾燥保護を与え、ヒト角膜上皮細胞の生存度を高めるゼラチンＡの能力を調べた。これらの試験では、ＣＥＰＩ  １７ヒト角膜上皮細胞を、本明細書に記載のＡｌａｍａｒ  Ｂｌｕｅ法によって分析した。ヒト角膜上皮細胞系（ＣＥＰＩ  １７、Ａｌｃｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ  Ｉｎｃ．）を９６ウェルマイクロプレート中でコンフルエントに増殖させた。試験ウェルから培地を除去し、各試験溶液１００μｌを添加した。培地を含む対照ウェルを単独で放置した。プレートを恒温器中に６０分間戻した。インキュベーション後、すべてのウェルを吸引し、ＨｙＱ緩衝剤（改変ダルベッコリン酸緩衝溶液、Ｈｙｃｌｏｎｅ  ｃａｔ＃ＳＨ３００２８．０２）２００μｌ／ウェルで１回リンスした。ＨｙＱ中のＡｌａｍａｒ  Ｂｌｕｅ（Ｂｉｏｓｏｕｒｃｅ、ＤＡＬ１１００）の１／１０希釈物を調製し、１００μｌを各ウェルに添加して、３７℃でインキュベートした。４時間インキュベーション後、プレートを蛍光マイクロプレートリーダー（モデルＦＬｘ８００、Ｂｉｏ−Ｔｅｋ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ）によって励起５６０ｎｍ及び発光５９０ｎｍの設定で読み取った。試料の平均蛍光を対照の平均蛍光で除算し、１００％を掛けて、％細胞生存率を計算した。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６４】
この試験は、ＭＭＰ−９活性を阻害するアルファ−２−マクログロブリンの能力を調べるために試みられた。分光蛍光計を用いて蛍光変化を２５℃で１０分間記録することによってＭＭＰ−９の活性を評価した。活性を１分当たりの蛍光変化として表した。ＭＭＰ−９  ３６０μ単位／アッセイを使用した（Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ  Ｃａｔ＃４４４２３１、Ｌｏｔ＃Ｂ５６４５８；ヒト好中球）。α２−マクログロブリン（Ｓｉｇｍａ  Ｃａｔ＃Ｍ−６１５９、Ｌｏｔ＃１１８Ｈ７６０６；ヒト胎盤由来）。使用基質は、ＭＭＰ−２／ＭＭＰ−９蛍光発生基質Ｉ  １０μＭ／アッセイ（Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ  ｃａｔ＃４４２１５、ｌｏｔ＃Ｂ４７２４６；ペプチド構造＝ＤＮＰ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｍｅｔ−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−ＯＨ）であった。その結果、アルファ−２−マクログロブリンは、ＭＭＰ−９活性を用量反応様式で阻害することを示す。結果を図１０にグラフを用いて示す。
（実施例９）