【手続補正書】
【提出日】平成26年11月4日(2014.11.4)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
胚、内胚乳、デンプン、及び、低レベル又は低活性の全デンプン分枝酵素ＩＩ（ＳＢＥＩＩ）タンパク質、を含むコムギ穀粒（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ  ａｅｓｔｉｖｕｍ）において、
当該胚が、ＳＢＥＩＩａ−Ａ、ＳＢＥＩＩａ−Ｂ、ＳＢＥＩＩａ−Ｄ、ＳＢＥＩＩｂ−Ａ、ＳＢＥＩＩｂ−Ｂ、及びＳＢＥＩＩｂ−Ｄからなる群から選択される、内生ＳＢＥＩＩ遺伝子の５〜１２個の対立遺伝子の各々に機能喪失突然変異体を含み、
前記穀粒中の全ＳＢＥＩＩタンパク質のレベル又は活性が、野生型コムギ穀粒中の全ＳＢＥＩＩタンパク質のレベル又は活性の２％〜３０％であり、
前記５〜１２個の対立遺伝子が、各々が機能喪失突然変異体を含む４個、５個又は６個のＳＢＥＩＩａ対立遺伝子を含み、当該機能喪失突然変異体を含むＳＢＥＩＩａ対立遺伝子数が４個のみであれば、機能喪失突然変異体を含むＳＢＥＩＩｂ対立遺伝子数は６個であり、
前記穀粒が、穀粒の全デンプン中の比率として、少なくとも５０％（ｗ／ｗ）のアミロース含有量を有する、
ことを特徴とするコムギ穀粒。
【請求項２】
請求項１に記載のコムギ穀粒において、
ａ）前記穀粒の胚が、２個又は３個のＳＢＥＩＩａ遺伝子の各々の対立遺伝子に対して同型接合であり、当該同型接合対立遺伝子の各々が機能喪失突然変異体を含み；
ｂ）前記穀粒が、対応する野生型対立遺伝子の量又は活性に対して２％〜６０％、又は１０％〜５０％に相当する量及び／又は活性のＳＢＥＩＩａ又はＳＢＥＩＩｂ酵素を発現する部分的機能喪失突然変異体を含み；
ｃ）前記胚内のＳＢＥＩＩａ遺伝子のｎｕｌｌ対立遺伝子の数が２個又は４個であり；
ｄ）各々が機能喪失突然変異体を含む前記４個、５個又は６個のＳＢＥＩＩａ対立遺伝子が、それぞれｎｕｌｌ対立遺伝子であり、
ｅ）前記胚がＳＢＥＩＩｂ遺伝子のｎｕｌｌ対立遺伝子を有していないか、又は前記胚内のＳＢＥＩＩｂ遺伝子のｎｕｌｌ対立遺伝子の数が２個、４個又は６個であり、
ｆ）前記胚が、各々が部分的機能喪失突然変異体を含む２個のＳＢＥＩＩｂ対立遺伝子を含み、
ｇ）前記穀粒が、Ａゲノム、Ｂゲノム、Ｄゲノム、Ａ及びＢゲノム、Ａ及びＤゲノム、又はＢ及びＤゲノム、にＳＢＥＩＩａ遺伝子のｎｕｌｌ対立遺伝子を含み、
ｈ）前記穀粒が、Ａゲノム、Ｂゲノム、Ｄゲノム、Ａ及びＢゲノム、Ａ及びＤゲノム、Ｂ及びＤゲノム、又はＡ、Ｂ、及びＤゲノムの３つ全て、にＳＢＥＩＩｂ遺伝子のｎｕｌｌ対立遺伝子を含み、
ｉ）前記穀粒が、発達中の内胚乳で生成される時にデンプン分枝酵素活性を有する、１種のみ又は２種のみのＳＢＥＩＩｂタンパク質、又は、ウエスタンブロット分析によって検出可能な、１種のみ又は２種のみのＳＢＥＩＩｂタンパク質を含み、
ｊ）前記穀粒が、ゲノム上でＳＢＥＩＩａ遺伝子の少なくとも一部とＳＢＥＩＩｂ遺伝子の少なくとも一部が欠失している、前記Ａ、Ｂ又はＤゲノム中の欠失変異体である、ｎｕｌｌ変異体を含み、
ｋ）前記穀粒が、ゲノム上で全てのＳＢＥＩＩａ遺伝子及び／又は全てのＳＢＥＩＩｂ遺伝子が欠失している、前記Ａ、Ｂ又はＤゲノム中の欠失変異体である、ｎｕｌｌ変異体を含み、
ｌ）前記穀粒が、ＳＢＥＩＩａ遺伝子中に、アミノ酸置換変異体であるｎｕｌｌ変異体を含み、
ｍ）前記胚が、１個のＳＢＥＩＩａ遺伝子中にｎｕｌｌ変異体を含み、又は２以上のＳＢＥＩＩａ遺伝子中にｎｕｌｌ変異体を含み、各変異体が、欠失変異体、挿入変異体、スプライス部位変異体、翻訳早期終止変異体、及びフレームシフト変異体、からなる群から独立して選択され、
ｎ）前記穀粒が、ウエスタンブロット分析で判定される１種のＳＢＥＩＩａタンパク質のみを有し、当該タンパク質が、ＳＢＥＩＩａ−Ａ、ＳＢＥＩＩａ−Ｂ、及びＳＢＥＩＩａ−Ｄ遺伝子のうちの１つによりコードされ、対応する野生型遺伝子によりコードされたＳＢＥＩＩａタンパク質と比較して、発達中のコムギ内胚乳で生成される時にデンプン分枝酵素活性を低下させることを特徴とするコムギ穀粒、又は、
ｏ）ａ）からｎ）までのうちの２以上の組み合わせである、
ことを特徴とするコムギ穀粒。
【請求項３】
請求項１又は２に記載の穀粒において、
前記穀粒中の全ＳＢＥＩＩタンパク質のレベル又は活性が、前記野生型コムギ穀粒中の全ＳＢＥＩＩタンパク質のレベル又は活性の２％〜１５％、又は３％〜１０％、又は２％〜２０％、又は２％〜２５％であることを特徴とする穀粒。
【請求項４】
請求項１乃至３のいずれか１項に記載の穀粒において、
前記穀粒中のＳＢＥＩＩａタンパク質の量又は活性が、前記野生型コムギ穀粒中のＳＢＥＩＩａタンパク質の量又は活性の２％未満、又は２％〜１５％、又は３％〜１０％、又は２％〜２０％、又は２％〜２５％であることを特徴とする穀粒。
【請求項５】
請求項１乃至４のいずれか１項に記載の穀粒が、
前記穀粒の全デンプン中の比率として、少なくとも６０％（ｗ／ｗ）又は少なくとも６７％（ｗ／ｗ）のアミロース含有量を有することを特徴とする穀粒。
【請求項６】
請求項１乃至５のいずれか１項に記載の穀粒が、
非遺伝子組み換え型で、又は、ＳＢＥＩＩａ遺伝子の発現を低下させるＲＮＡをコードする、いかなる外来性核酸も含まないことを特徴とする穀粒。
【請求項７】
請求項１乃至６のいずれか１項に記載の穀粒が、
野生型穀粒の発芽率と比較して、約７０％〜約１００％の発芽率を有することを特徴とする穀粒。
【請求項８】
請求項１乃至７のいずれか１項に記載の穀粒において、
前記全ＳＢＥＩＩタンパク質のレベル又は活性が、免疫学的手段によって、コムギ植物で発生中の穀物中の前記ＳＢＥＩＩタンパク質のアッセイ、又は、前記ＳＢＥＩＩタンパク質のレベル又は活性のアッセイで判定されることを特徴とする穀粒。
【請求項９】
請求項１乃至８のいずれか１項に記載の穀粒において、
前記穀粒のデンプンが、
（ｉ）少なくとも２％の難消化性デンプンの含有、
（ｉｉ）低相対血糖指数（ＧＩ）の含有、
（ｉｉｉ）低相対アミロペクチンレベルの含有、
（ｉｖ）歪んだデンプン顆粒の含有、
（ｖ）デンプン顆粒の複屈折の低下、
（ｖｉ）膨張体積の低下、
（ｖｉｉ）鎖長分布及び／又は分枝発生頻度の修正、
（ｖｉｉｉ）糊化温度の終了の遅延及びピーク温度の上昇、
（ｉｘ）粘度低下、
（ｘ）アミロペクチンの分子量増大、
（ｘｉ）デンプン結晶度の修正された割合、及び、
（ｘｉｉ）野生型のコムギデンプン顆粒又はデンプンに対する、修正されたＡ型又はＢ型の結晶デンプンの割合、
からなる群から選択される、１又はそれ以上の特性により特徴づけられる、
ことを特徴とする穀粒。
【請求項１０】
請求項１乃至９のいずれか１項に記載の穀粒が、発芽できないように処理をされ、又は、粗挽き、挽き割り、湯通し、圧延、パール加工、製粉され、若しくは粉砕穀粒にされていることを特徴とする穀粒。
【請求項１１】
請求項１乃至１０のいずれか１項に記載の穀粒が、雄性及び雌性稔性であるコムギ植物を産生できることを特徴とする穀粒。
【請求項１２】
穀粒を産生するコムギ植物（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ  ａｅｓｔｉｖｕｍ）であって、
当該穀粒が、
胚、内胚乳、デンプン、及び低レベル又は低活性の全ＳＢＥＩＩタンパク質を含み、
当該胚が、ＳＢＥＩＩａ−Ａ、ＳＢＥＩＩａ−Ｂ、ＳＢＥＩＩａ−Ｄ、ＳＢＥＩＩｂ−Ａ、ＳＢＥＩＩｂ−Ｂ、及びＳＢＥＩＩｂ−Ｄからなる群から選択される、内生ＳＢＥＩＩ遺伝子の５〜１２個の対立遺伝子の各々に機能喪失突然変異体を含み、
前記穀粒中の全ＳＢＥＩＩタンパク質のレベル又は活性が、野生型コムギ穀粒中の全ＳＢＥＩＩタンパク質のレベル又は活性の２％〜３０％であり、
前記５〜１２個の対立遺伝子が、各々が機能喪失突然変異体を含む４個、５個又は６個のＳＢＥＩＩａ対立遺伝子を含み、当該機能喪失突然変異体を含むＳＢＥＩＩａ対立遺伝子数が４個のみであれば、機能喪失突然変異体を含むＳＢＥＩＩｂ対立遺伝子数は６個であり、
前記穀粒が、穀粒の全デンプン中の比率として、少なくとも５０％（ｗ／ｗ）のアミロース含有量を有し、
前記コムギ植物が雄性及び雌雄稔性である、
ことを特徴とするコムギ植物。
【請求項１３】
請求項１乃至１１のいずれか１項に記載の穀粒から製造された全粒小麦又は小麦粉であって、
当該全粒小麦又は小麦粉が、
低レベル又は低活性の全ＳＢＥＩＩタンパク質、及び、ＳＢＥＩＩａ−Ａ、ＳＢＥＩＩａ−Ｂ、ＳＢＥＩＩａ−Ｄ、ＳＢＥＩＩｂ−Ａ、ＳＢＥＩＩｂ−Ｂ、及びＳＢＥＩＩｂ−Ｄからなる群から選択される、内生ＳＢＥＩＩ遺伝子の５〜１２個の対立遺伝子の各々に機能喪失突然変異体を含み、
前記穀粒中の全ＳＢＥＩＩタンパク質のレベル又は活性が、野生型コムギ穀粒中の全ＳＢＥＩＩタンパク質のレベル又は活性の２％〜３０％であり、
前記５〜１２個の対立遺伝子が、各々が機能喪失突然変異体を含む４個、５個又は６個のＳＢＥＩＩａ対立遺伝子を含み、当該機能喪失突然変異体を含むＳＢＥＩＩａ対立遺伝子数が４個のみであれば、機能喪失突然変異体を含むＳＢＥＩＩｂ対立遺伝子数は６個であり、
前記穀粒が、穀粒の全デンプン中の比率として、少なくとも５０％（ｗ／ｗ）のアミロース含有量を有する、
ことを特徴とする全粒小麦又は小麦粉。
【請求項１４】
請求項１３に記載に記載の全粒小麦又は小麦粉において、
当該全粒小麦又は小麦粉のデンプンが、
（ｉ）少なくとも６０％（ｗ／ｗ）、又は少なくとも６７％（ｗ／ｗ）のアミロースの含有、
（ｉｉ）少なくとも２％の難消化性デンプンの含有、
（ｉｉｉ）低相対血糖指数（ＧＩ）の含有、
（ｉｖ）低相対アミロペクチンレベルの含有、
（ｖ）歪んだデンプン顆粒の含有、
（ｖｉ）デンプン顆粒の複屈折の低下、
（ｖｉｉ）膨張体積の低下、
（ｖｉｉｉ）鎖長分布及び／又は分枝発生頻度の修正
（ｉｘ）糊化温度の終了の遅延及びピーク温度の上昇、
（ｘ）粘度低下、
（ｘｉ）アミロペクチンの分子量増大、
（ｘｉｉ）修正された％結晶度、及び／又は
（ｘｉｉｉ）野生型コムギの全粒小麦又は小麦粉に対する、修正されたＡ型又はＢ型の結晶デンプンの割合、
のうちの１つ又は複数により特徴づけられる、
ことを特徴とする全粒小麦又は小麦粉。
【請求項１５】
請求項１乃至１１のいずれか１項に記載の穀粒、又は、請求項１３又は１４に記載の全粒小麦又は小麦粉、を含む食品成分。
【請求項１６】
請求項１５に記載の食品成分において、
前記穀粒が、粗挽き、挽き割り、湯通し、圧延、パール加工、製粉され、若しくは粉砕穀粒にされ、又はこれらを組み合わせた処理がなされていることを特徴とする食品成分。
【請求項１７】
乾燥重量が少なくとも１０％のレベルの食品成分を含む食品であって、
当該成分が、請求項１乃至１１のいずれか１項に記載のコムギ穀粒である、請求項１３又は１４に記載の全粒小麦又は小麦粉である、又は、請求項１５又は１６に記載の食品成分である、ことを特徴とする食品。
【請求項１８】
少なくとも１０％の重量レベルである、請求項１乃至１１のいずれか１項に記載の穀粒、又は、請求項１３又は１４に記載の全粒小麦若しくは小麦粉、及び、約５０％（ｗ／ｗ）未満のアミロースレベルを有するコムギ穀粒、又は、当該コムギ穀粒から得られる小麦粉、全粒小麦、デンプン顆粒、若しくはデンプン、を含むことを特徴とする、組成物又は混合物。
【請求項１９】
（ｉ）請求項１乃至１１のいずれか１項の記載によるコムギ穀粒を得るステップと、
（ｉｉ）当該穀粒からデンプンを抽出するステップと、
を具え、
これらのステップによりデンプンを製造することを特徴とする、デンプンの製造方法。
【請求項２０】
コムギ植物又はコムギ穀粒のスクリーニング方法であって、
（ｉ）野生型のコムギ植物又は穀粒の量又は活性に対する、コムギ植物又はコムギ穀粒中のＳＢＥＩＩａ及び／又はＳＢＥＩＩｂの量又は活性を判定するステップと、
（ｉｉ）野生型の植物又は穀粒中の全ＳＢＥＩＩタンパク質の２％〜３０％の量又は活性を有する植物又は穀粒をステップ（ｉ）から選別するステップにおいて、
当該選別された植物又は穀粒が、ＳＢＥＩＩａ−Ａ、ＳＢＥＩＩａ−Ｂ、ＳＢＥＩＩａ−Ｄ、ＳＢＥＩＩｂ−Ａ、ＳＢＥＩＩｂ−Ｂ、及びＳＢＥＩＩｂ−Ｄからなる群から選択される、内生ＳＢＥＩＩ遺伝子の５〜１２個の対立遺伝子の各々に機能喪失突然変異体を含み、
前記穀粒中の全ＳＢＥＩＩタンパク質のレベル又は活性が、野生型コムギ穀粒中の全ＳＢＥＩＩタンパク質のレベル又は活性の２％〜３０％であり、
前記５〜１２個の対立遺伝子が、各々が機能喪失突然変異体を含む４個、５個又は６個のＳＢＥＩＩａ対立遺伝子を含み、当該機能喪失突然変異体を含むＳＢＥＩＩａ対立遺伝子数が４個のみであれば、機能喪失突然変異体を含むＳＢＥＩＩｂ対立遺伝子数は６個であり、
前記穀粒が、穀粒の全デンプン中の比率として、少なくとも５０％（ｗ／ｗ）のアミロース含有量を有する、ステップと、
を含むことを特徴とする、コムギ植物又はコムギ穀粒のスクリーニング方法。
【請求項２１】
食料又は飲料の製造方法であって、
（ｉ）請求項１乃至１１のいずれか１項に記載の穀粒を得るステップと、
（ｉｉ）前記穀粒を処理して食料又は飲料の成分を製造するステップと、
（ｉｉｉ）ステップ（ｉｉ）の食料又は飲料の成分を、他の食料又は飲料の成分に加え、これにより食料又は飲料を製造するステップと、
を具えることを特徴とする製造方法。
【請求項２２】
被検者の、代謝の健康、腸の健康、心血管の健康のパラメータの、１つ又は複数を改善する、又は、
代謝疾患、腸疾患、心血管疾患の重症化若しくは発生を予防し又は低下させる目的で使用される食品において、
当該食品が、乾燥重量が少なくとも１０％のレベルの食品成分を含み、当該食品成分が、請求項１乃至１１のいずれか１項に記載のコムギ穀粒である、請求項１４又は１５に記載の全粒小麦又は小麦粉である、又は、請求項１６又は１７に記載の食品成分である、
ことを特徴とする食品。
【請求項２３】
穀粒の製造方法であって、
（ｉ）請求項１２に記載のコムギ植物を得るステップと、
（ｉｉ）当該植物からコムギ穀粒を収穫するステップと、
（ｉｉｉ）選択的に、当該穀粒を加工するステップと、
を具えることを特徴とする、穀粒の製造方法。