【手続補正書】
【提出日】平成24年10月18日(2012.10.18)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
不溶化形態にある骨形成タンパク質とアニオン性多糖類との少なくとも１種の複合体、及び少なくとも１種の不溶性カルシウム塩から成る共沈物であって、前記共沈物は分割形態にある、共沈物。
【請求項２】
前記不溶性カルシウム塩は、単独で又は混合物として無水形態又は水和形態にあるオルトリン酸カルシウムから成る群より選択される、請求項１に記載の共沈物。
【請求項３】
前記不溶性カルシウム塩は、カルシウムカチオンイオンと、１、２又は３塩基性リン酸、カルボン酸多糖類、炭酸、水酸化物及び塩基により生じ得るアニオンのようなアニオンイオンとの間に形成される混合塩から成る群より選択される、請求項１に記載の共沈物。
【請求項４】
化学的吸引力及び血管形成力を有する少なくとも１種の成長因子をも含有する、請求項１ないし３のうちいずれか１項に記載の共沈物。
【請求項５】
前記アニオン性多糖類は、一般式ＩＸ：
【化１】
2012509303.tif 000001
（式中、
ｑは、Ｆ−Ｒ−Ｇ−Ａｈにより置換された多糖類のカルボキシル官能基のモル分率を表すものであって、０．０１ないし０．７であり、
Ｆ’は、アミド官能基を表し、
Ｇは、エステル、チオエステル、カーボネート又はカルバメート官能基を表し、
Ｒは、枝分れ状であっても、及び／又は不飽和であっても、Ｏ、Ｎ及び／又はＳのような１つ以上のヘテロ原子を含有していてもよく、そして少なくとも１つの酸官能基−ＣＯ２Ｈを有する１ないし１８個の炭素原子を含有する鎖を表し、
Ａｈは、疎水性アルコールのヒドロキシル官能基と、Ｒ基により保有される少なくとも１つの求電子性官能基との間のカップリングから生じる、疎水性アルコールの残基を表し、
多糖類のカルボキシル官能基がＦ’−Ｒ−Ｇ−Ａｈにより置換されていない場合、多糖類のカルボキシル官能基（群）は、カルボン酸カチオン、好ましくはＮａ＋又はＫ＋のようなアルカリ金属カチオンのカルボキシレートを表し、
前記カルボキシル官能基を含有する多糖類は、中性ｐＨにて両親媒性である。）
で表される、疎水性アルコールによって部分的に置換されたカルボキシル官能基を含有する多糖類から成る群より選択されることを特徴とする、請求項１ないし４のうちいずれか１項に記載の共沈物。
【請求項６】
前記アニオン性多糖類は、
下記の一般式Ｉ：
【化２】
2012509303.tif 000002
［式中、
多糖類は、大部分が（１，４）及び／又は（１，３）及び／又は（１，２）型のグリコシド結合からなり、
Ｆは、リンカーアームＲと、中性又はアニオン性多糖類の−ＯＨ官能基との間のカップリング由来のものであって、エステル官能基、チオエステル官能基、アミド官能基、カーボネート官能基、カルバメート官能基、エーテル官能基、チオエーテル官能基又はアミン官能基のいずれかを表し、
Ｒは、枝分れ状であっても、及び／又は不飽和であっても、Ｏ、Ｎ及び／又はＳのような１つ以上のヘテロ原子を含有していてもよく、そして少なくとも１つの酸官能基−ＣＯ２Ｈを有する１ないし１８個の炭素原子を含有する鎖を表し、
Ｔｒｐは、トリプトファン誘導体のアミンと、Ｒ基により保有される少なくとも１つの酸及び／又はアニオン性多糖類により保有される少なくとも１つの酸との間のカップリングから生じるＬ−又はＤ−トリプトファン誘導体の残基を表し、
ｎは、Ｔｒｐにより置換された基Ｒのモル分率であって、０．０５ないし０．７であり、
ｏは、Ｔｒｐにより置換された多糖類の酸官能基のモル分率であって、０．０５ないし０．７であり、
ｉは、糖単位当りの基Ｒにより保有される酸官能基のモル分率であって、０ないし２であり、
ｊは、糖単位当りのアニオン性多糖類により保有される酸官能基のモル分率であって、０ないし１であり、
（ｉ＋ｊ）は、糖単位当りの酸官能基のモル分率であって、０．１ないし２であり、
ＲがＴｒｐにより置換されていない場合、基Ｒの酸（群）は、カルボン酸カチオンであって、前記カチオンは、好ましくはＮａ又はＫのようなアルカリ金属のカチオンであり、
前記多糖類がアニオン性多糖類である場合、多糖類の１つ以上の酸官能基（群）がＴｒｐにより置換されておらず、その場合にそれらはカチオンにより塩化されており、前記カチオンは、好ましくはＮａ＋又はＫ＋のようなアルカリ金属カチオンであり、
前記多糖類は、中性ｐＨにて両親媒性である。］
に対応する少なくとも１種のトリプトファン誘導体により官能化された、大部分が（１，４）、（１，３）及び／又は（１，２）型のグリコシド結合を含有するアニオン性多糖類からなる群より選択されることを特徴とする、請求項１ないし５のうちいずれか１項に記載の共沈物。
【請求項７】
前記アニオン性多糖類は、下記の一般式ＩＩＩ
【化３】
2012509303.tif 000003
（式中、
Ｒは、枝分れ状であっても、及び／又は不飽和であっても、Ｏ、Ｎ及び／又はＳのような１つ以上のヘテロ原子を含有していてもよく、そして少なくとも１つの酸官能基−ＣＯ２Ｈを有する１ないし１８個の炭素原子を含有する鎖を表し、
Ｆは、リンカーＲと、中性の又はアニオン性の多糖類の−ＯＨ官能基との間のカップリング由来のものであって、エステル官能基、チオエステル官能基、アミド官能基、カーボネート官能基、カルバメート官能基、エーテル官能基、チオエーテル官能基又はアミン官能基のいずれかを表し、
ＡＡは、アミノ酸のアミンと、基Ｒにより保有される酸との間のカップリングから生じる疎水性のＬ−又はＤ−アミノ酸残基を表し、前記疎水性のアミノ酸は、トリプトファン、トリプトファノール、トリプトファンアミド及び２−インドールエチルアミンのようなトリプトファン誘導体、及びそれらのアルカリ金属カチオン塩より選択されるか、或いは、フェニルアラニン、ロイシン、イソロイシン及びバリン、及びそのアルコール、アミド又は脱カルボキシル化誘導体より選択され、
ｔは、グリコシド単位当りの置換基Ｆ−Ｒ−［ＡＡ］ｎのモル分率であって、０．１ないし２であり、
ｐは、ＡＡにより置換された基Ｒのモル分率であって、０．０５ないし１であり、
ＲがＡＡにより置換されていない場合、Ｒ基の酸（群）は、カルボン酸カチオンであって、前記カチオンは、好ましくはＮａ＋又はＫ＋のようなアルカリ金属カチオンである）
で表される官能化されたアニオン性多糖類からなる群より選択されることを特徴とする、請求項１ないし５のうちいずれか１項に記載の共沈物。
【請求項８】
前記骨形成タンパク質は、ＢＭＰ−２（ジボテルミンα（ｄｉｂｏｔｅｒｍｉｎ−ａｌｆａ））、ＢＭＰ−４、ＢＭＰ−７（エプトテルミンα（ｅｐｔｏｔｅｒｍｉｎ−ａｌｆａ））、ＢＭＰ−１４及びＧＤＦ−５の単独、及びそれらの組み合わせからなる群より選択されることを特徴とする、請求項１ないし７のうちいずれか１項に記載の共沈物。
【請求項９】
前記化学的吸引力及び血管形成力を有する少なくとも１種の成長因子は、ＰＤＧＦである、請求項４ないし７のうちいずれか１項に記載の共沈物。
【請求項１０】
少なくとも、
ａ−少なくとも１種の骨形成タンパク質を含有する組成物、
ｂ−少なくとも１種の多糖類を含有する組成物、
ｃ−少なくとも１種の可溶性カルシウム塩を含有する組成物、
ｄ−不溶性カルシウム塩を形成し得る少なくとも１種の可溶性アニオン塩を含有する組成物
を含有する、骨形成インプラントを調製するためのキット。
【請求項１１】
少なくとも１種の塩基を含有する付加的な組成物をさらに含有する、請求項１０に記載のキット。
【請求項１２】
前記骨形成タンパク質を含有する組成物は、前記複合体を形成する多糖類をさらに含有し得る、請求項１０又は１１に記載のキット。
【請求項１３】
前記アニオン性多糖類は、疎水性誘導体により官能化された多糖類から成る群より選択される、請求項１０ないし１２のうちいずれか１項に記載のキット。
【請求項１４】
前記骨形成タンパク質は、ＢＭＰ−２（ジボテルミンα（ｄｉｂｏｔｅｒｍｉｎ−ａｌｆａ））、ＢＭＰ−４、ＢＭＰ−７（エプトテルミンα（ｅｐｔｏｔｅｒｍｉｎ−ａｌｆａ））、ＢＭＰ−１４及びＧＤＦ−５の単独、及びそれらの組み合わせからなる群より選択されることを特徴とする、請求項１０ないし１３のうちいずれか１項に記載のキット。
【請求項１５】
カルシウムイオン塩溶液の添加により、前記アニオン性ポリマーと前記骨成長タンパク質との複合体を沈澱させる段階、
与えられたｐＨにおける、不溶性カルシウム塩を形成し得る少なくとも１種の可溶性アニオン塩を含有する組成物の添加により、カルシウムイオンを沈澱させる段階、
により与えられる共沈段階を含み、
前記アニオン性ポリマーと骨形成タンパク質との複合体は、前記アニオン性多糖類溶液を前記骨形成タンパク質溶液に添加することにより得られる、請求項１ないし１０のうちいずれか１項に定義される共沈物の製造方法。