【誤訳訂正書】
【提出日】平成24年7月6日(2012.7.6)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０００８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０００８】
式：ｂ１ｂ２ｂ３ＣＷｂ６ｂ７ｂ８ｂ９ＧＣｂ１２ｂ１３ｂ１４（配列番号：２７４）
（式中、
ｂ１、ｂ２、ｂ３、ｂ８、ｂ９、ｂ１３及びｂ１４は、それぞれ独立に、存在しないか又はアミノ酸残基であり、
ｂ６は、中性の疎水性アミノ酸残基であり、
ｂ７は、極性の疎水性アミノ酸残基であり、
ｂ１２は、中性の疎水性アミノ酸残基又は酸性のアミノ酸残基である。）
のアミノ酸配列を含む、ＮＧＦ活性を調節するペプチド又は生理的に許容されるその塩も本発明に属する。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１０】
さらに、
式：
ｄ１ｄ２ｄ３ｄ４ｄ５ｄ６ｄ７ＰＰｄ１０ｄ１１ｄ１２ｄ１３ｄ１４ｄ１５Ｐｄ１７ｄ１８ｄ１９ｄ２０ｄ２１ｄ２２ｄ２３ｄ２４
（式中、
ｄ１は、Ｗ、Ｙ、Ｑ又はＥであり；
ｄ２は、Ｖ、Ｌ、Ｆ、Ｓ又はＱであり；
ｄ３は、Ｗ、Ｆ、Ｇ、Ｓ又はＱであり；
ｄ４は、Ａ、Ｑ、Ｄ、Ｅ又はＫであり；
ｄ５は、Ｖ、Ｗ、Ｇ又はＲであり；
ｄ６は、Ｍ、Ｓ、Ｙ、Ｑ、Ｎ、Ｅ、Ｋ又はＲであり；
ｄ７は、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｐ、Ｗ、Ｑ又はＨであり；
ｄ１０は、Ｄ又はＥであり；
ｄ１１は、Ｖ又はＩであり；
ｄ１２は、Ｖ、Ｌ、Ｆ又はＹであり、
ｄ１３は、Ｖ、Ｌ、Ｇ、Ｑ又はＥであり、
ｄ１４は、Ｑ、Ｄ又はＥであり；
ｄ１５は、Ｗ又はＣであり；
ｄ１７は、Ｗ、Ｙ又はＱであり；
ｄ１８は、Ｖ、Ｔ、Ｑ、Ｎ又はＫであり；
ｄ１９は、Ａ、Ｌ又はＰであり；
ｄ２０は、Ｐ、Ｑ、Ｒ又はＨであり、
ｄ２１は、Ｖ、Ｉ、Ｗ、Ｄであり、
ｄ２２は、Ａ、Ｉ、Ｓ、Ｑ又はＤであり；
ｄ２３は、Ｌであり又は存在しない、
ｄ２４は、Ｅであり又は存在しない。）
のアミノ酸配列を含む、ＮＧＦ活性を調節するペプチド又は生理的に許容されるその塩も本発明に属する。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１１】
本発明の別の側面は、式：
式：ｆ１ｆ２ｆ３ｆ４ｆ５ｆ６ｆ７ｆ８ｆ９ｆ１０ｆ１１Ｌｆ１３ＥＱＹＦｆ１８Ｌｆ２０ＰＰＧｆ２４ｆ２５ｆ２６
（式中、
ｆ１−ｆ６、ｆ８、ｆ９、ｆ１１、ｆ１８、ｆ２４、ｆ２５及びｆ２６は、それぞれ独立に、存在しないか又はアミノ酸残基であり、
ｆ７、ｆ１０及びｆ１３は、それぞれ独立に、中性の疎水性アミノ酸残基又は極性の疎水性アミノ酸残基であり、
ｆ２０は、Ｔ、Ｍ又はＩである。）
のアミノ酸配列を含む、ＮＧＦ活性を調節するペプチド又は生理的に許容されるその塩である。
【誤訳訂正４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１２】
さらに、式：
ｈ１ｈ２ｈ３ｈ４ｈ５ｈ６ＬＧｈ９ｈ１０ｈ１１Ｌｈ１３ＹＦｈ１６Ｌｈ１８ＰＰＧｈ２２ｈ２３ｈ２４
（式中、
ｈ１−ｈ６、ｈ９、ｈ１１、ｈ２３、及びｈ２４は、それぞれ独立に、存在しないか又はアミノ酸残基であり、
ｈ１０及びｈ１３は、それぞれ独立に、中性の疎水性アミノ酸残基又は極性の疎水性アミノ酸残基であり、
ｈ１６は、極性の疎水性アミノ酸残基又は塩基性のアミノ酸残基であり、
ｈ１８は、中性の疎水性アミノ酸残基であり、
ｈ２２は、中性の極性アミノ酸残基である。）
のアミノ酸配列を含む、ＮＧＦ活性を調節するペプチド又は生理的に許容されるその塩も本発明に属する。
【誤訳訂正５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００４０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００４０】
「アンタゴニスト」及び「阻害剤」という用語は、当該関連するタンパク質の生物活性を遮断し又は何らかの方法で妨害する分子を表す。本発明の好ましい「アンタゴニスト」又は「阻害剤」は、ＮＧＦ活性のインビトロアッセイにおいて、ＮＧＦに結合し、２０ｎＭ以下のＩＣ５０でＮＧＦを阻害する分子である。本発明のさらに好ましい「アンタゴニスト」又は「阻害剤」は、ＮＧＦ活性のインビトロアッセイにおいて、ＮＧＦに結合し、１ｎＭ以下のＩＣ５０でＮＧＦを阻害する分子である。最も本発明の好ましい「アンタゴニスト」又は「阻害剤」は、ＮＧＦ活性のインビトロアッセイにおいて、ＮＧＦに結合して、２０ｎＭ以下のＩＣ５０でＮＧＦを阻害し、且つ少なくとも１つの一般的に受容されている神経の痛みのインビボ動物モデルで測定した場合に、痛みを予防し、軽減し又は消失させる分子である。
【誤訳訂正６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００６２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００６２】
前節に記したように、天然の残基は、配列の修飾に有用であり得る共通な側鎖特性に基づいてクラスに分割することができる。例えば、非保存的置換では、これらのクラスの１つに属するメンバーを、別のクラスに属するメンバーと交換することがある。このような置換された残基は、非ヒトオーソログと相同なペプチドの領域中や、あるいは前記分子の非相同領域中に導入することができる。さらに、鎖の配向性に影響を与える目的で、Ｐ又はＧを用いた修飾を施すこともできる。
【誤訳訂正７】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００７２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００７２】
本発明に含まれるペプチドと修飾ペプチドの断片（すなわち、サブシーケンス）は、完全長配列より短いが、抗ＮＧＦ活性に関して、インビトロ及び／又はインビボで実質的に同一の生物活性を有しており、アミノ末端、カルボキシ末端、及び／又は内部が切断されている断片である。
【誤訳訂正８】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００７５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００７５】
ビヒクル。本明細書において使用される「ビヒクル」という用語は、治療用タンパク質の分解を抑え、及び／又は半減期を増加させ、毒性を軽減し、免疫原性を減少させ又は生物活性を増加させる分子を表す。本発明において、好ましいビヒクルには、Ｆｃドメインが含まれる。本発明の１つの側面では、Ｎ末端、Ｃ末端、及び／又はアミノ酸残基の１つの側鎖を介してペプチドに付着した少なくとも１つのビヒクル（Ｆ１）が存在する必要がある。例えば、各末端にＦｃドメイン（Ｆｃ）を設けるなど、複数のビヒクルを使用してもよい。
【誤訳訂正９】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１０４
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１０４】
炭水化物（オリゴ糖）基は、都合よく、タンパク質中のグリコシル化部位であることが知られている部位に付着させ得る。一般に、Ｏ−結合型のオリゴ糖はセリン（Ｓｅｒ）又はスレオニン（Ｔｈｒ）残基に付着されているのに対して、Ｎ−結合型のオリゴ糖はアスパラギン残基が配列Ａｓｎ−Ｘ−Ｓｅｒ／Ｔｈｒ（Ｘは、プロリンを除く任意のアミノ酸であり得る）の一部であるときには、アスパラギン（Ａｓｎ）残基に付着されている。Ｘは、好ましくは、プロリン以外の１９種の天然アミノ酸の１つである。それぞれのタイプに見出されるＮ−結合型及びＯ−結合型オリゴ糖の構造と糖残基は様々である。両方に一般に見出される糖の１つのタイプは、Ｎ−アセチルノイラミン酸（シアル酸と称される）である。シアル酸は、通常、Ｎ−連結型とＯ−連結型の両オリゴ糖の末端基であり、その負電荷により、グリコシル化された修飾ペプチドに酸性特性を付与し得る。このような部位は、本発明の修飾ペプチドのリンカー中に取り込ませることができ（例えば、ＣＨＯ、ＢＨＫ、ＣＯＳなどの哺乳類細胞中において）、ポリペプチド修飾ペプチドを組換え的に産生させる間に、細胞によってグリコシル化されることが好ましい。しかし、本分野において公知の合成または半合成手法によって、このような部位をさらにグリコシル化することもできる。
【誤訳訂正１０】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１１４
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１１４】
本分野では、数多くの適切な哺乳類宿主細胞も公知であり、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）、１０８０１  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｂｏｕｌｅｖａｒｄ、Ｍａｎａｓｓａｓ、ＶＡ  ２０１１０−２２０９から、多くが入手可能である。例として、チャイニーズハムスター卵巣細胞（ＣＨＯ）（ＡＴＣＣ番号ＣＬＬ６１）、ＣＨＯ−ＤＨＦＲ細胞（Ｕｒｌａｕｂ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９７：４２１６−４２２０（１９８０））、ヒト胎児由来腎臓（ＨＥＫ）２９３又は２９３Ｔ細胞（ＡＴＣＣ番号ＣＲＬ１５７３）又は３Ｔ３細胞（ＡＴＣＣ番号ＣＣＬ９２）などの哺乳類細胞が含まれるが、これらに限定されるものではない。適切な哺乳類宿主細胞の選択と、形質転換、培養、増幅、スクリーニング及び生成物の産生と精製法は、本分野において公知である。他の適切な哺乳類細胞株は、サルのＣＯＳ−１（ＡＴＣＣ番号ＣＲＬ１６５０）及びＣＯＳ−７細胞株（ＡＴＣＣ番号ＣＲＬ１６５１）並びにＣＶ−１細胞株（ＡＴＣＣ細胞株ＣＣＬ７０）である。さらなる典型的な哺乳類細胞株には、霊長類の細胞株やげっ歯類の細胞株（形質転換された細胞株を含む）が含まれる。通常の二倍体細胞、一次組織のインビトロ培養から得られた細胞系統、及び一次外植片も適切である。候補細胞は、選択遺伝子が欠損した遺伝子型であってもよく、あるいは優性に作用する選択遺伝子を含有していてもよい。他の適切な哺乳類細胞には、マウスの神経芽細胞腫Ｎ２Ａ細胞、ＨｅＬａ、マウスＬ−９２９細胞、Ｓｗｉｓｓ、Ｂａｌｂ−ｃ又はＮＩＨマウスに由来する３Ｔ３株、ＢＨＫ又はＨａｋハムスター細胞株が含まれ、これらはＡＴＣＣから入手できる（これらに限定されるものではない。）。これらの各細胞株は、タンパク質発現の分野における当業者にとって公知であり、当業者が入手可能なものである。
【誤訳訂正１１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１６６
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１６６】
５．クローン分析（ファージＥＬＩＳＡ及び配列決定）
ファージクローンは、ファージＥＬＩＳＡ及び従来の配列決定方法によって分析した。該配列は、これら２種類のアッセイから得られた結果を合わせたものに基づいてランク付けした。
【誤訳訂正１２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１６７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１６７】
Ａ．ファージＥＬＩＳＡ。ＸＬ−１  Ｂｌｕｅ  ＭＲＦ’培養物を、ＯＤ６００が０．５に達するまで培養した。この培養物３０マイクロリットルを９６ウェルＭａｘｉｓｏｒｐマイクロタイタープレートの各ウェルに分注した。（４項の）溶出ファージ１０マイクロリットルを各ウェルに添加し、室温で１５分間細菌に感染させた。１２．５μｇ／ｍｌのテトラサイクリン及び５０μｇ／ｍｌのアンピシリンを含有するＬＢ培地１３０マイクロリットルを各ウェルに添加した。次に、該マイクロタイタープレートを振盪しながら３７℃で一晩インキュベートした。組換えＮＧＦタンパク質（１ｍｇ／ｍｌのＰＢＳ溶液）を９６ウェルプレート（ＮＵＮＣ）に４℃で一晩コーティングした。対照として、純粋なストレプトアビジンをＰＢＳ中に２μｇ／ｍｌとして、別のＭａｘｉｓｏｒｐプレートにコーティングした。翌日、タンパク質をコーティングしたＭａｘｉｓｏｒｐプレートの液体を廃棄し、５％ミルク溶液３００ｍｌ中において、４℃で一晩（あるいは、室温で１時間）各ウェルをブロックした。ミルク溶液を廃棄し、ウェルをＰＢＳＴ溶液で３回洗浄した。最終洗浄工程後、タンパク質をコートしたＭａｘｉｓｏｒｐプレートの各ウェルにＰＢＳＴ−４％ミルク５０μｌを添加した。９６ウェルマイクロタイタープレートの一晩培養液それぞれ５０μｌをＮＧＦコーティングプレート及び対照ストレプトアビジンコーティングプレートの対応するウェルに移した。２種類のプレート内の混合物１００μｌを室温で１時間インキュベートした。Ｍａｘｉｓｏｒｐプレートの液体を廃棄し、ウェルをＰＢＳＴで５回洗浄した。ＨＲＰ結合抗Ｍ１３抗体（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）を１：７５００に希釈し、該希釈溶液１００μｌをＭａｘｉｓｏｒｐプレートの各ウェルに添加し、室温で１時間インキュベートした。この液体を再度廃棄し、ウェルをＰＢＳＴで７回洗浄した。発色反応を起こすためにＴＭＢ基質（Ｓｉｇｍａ）１００マイクロリットルを各ウェルに添加し、５Ｎ  Ｈ２ＳＯ４溶液５０μｌで反応を停止させた。ＯＤ４５０は、プレートリーダー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ）で読み取った。
【誤訳訂正１３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１８５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１８５】
後根神経節神経細胞培養。一定期間妊娠し、最後に麻酔を行ったスプラーグ−ドーリーラット（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ、マサチューセッツ州ウィルミントン）の子宮から外科的に取り出した胎齢１９日（Ｅ１９）のラットの全脊髄部分から後根神経節（ＤＲＧ）を無菌条件下で１つずつ切断した。５％熱不活性化ウマ血清（ＧｉｂｃｏＢＲＬ）を含有する氷冷Ｌ−１５培地（ＧｉｂｃｏＢＲＬ、ニューヨーク州グランドアイランド）にＤＲＧを収集し、疎性結合組織及び血管を除去した。該ＤＲＧはＣａ２＋及びＭｇ２＋を含まないダルベッコリン酸緩衝生理食塩水（ＤＰＢＳ）、ｐＨ７．４（ＧｉｂｃｏＢＲＬ）で２回洗浄した。次に、パパイン分離系（Ｗｏｒｔｈｉｎｇｔｏｎ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｒｐ．ニュージャージー州フリーホールド）を使用して該ＤＲＧを単一細胞懸濁液に分離した。簡単に説明すると、Ｅａｒｌｅ’ｓ緩衝塩類溶液（ＥＢＳＳ）に溶かしたパパイン２０Ｕ／ｍｌを含有する消化溶液中でＤＲＧを３７℃で５０分間インキュベートした。細胞は、ＭＥＭ／Ｈａｍ’ｓ  Ｆ１２、１：１、１ｍｇ／ｍｌ  オボムコイド阻害剤及び１ｍｇ／ｍｌオボアルブミン、並びに０．００５％のデオキシリボヌクレアーゼＩ（ＤＮＡ分解酵素）からなる分離培地でファイアーポリッシュパスツールピペットによって磨砕して分離した。分離した細胞は、２００ｘｇ、５分間でペレットにして、１ｍｇ／ｍｌ  オボムコイド阻害剤、１ｍｇ／ｍｌ  オボアルブミン及び０．００５％のＤＮＡ分解酵素を含有するＥＢＳＳに再懸濁した。細胞懸濁液は、１０ｍｇ／ｍｌ  オボムコイド阻害剤、１０ｍｇ／ｍｌ  オボアルブミンを含有する勾配溶液において２００ｘｇで６分間遠心することによって細胞残渣を除去し、次に８８μｍのナイロンメッシュ（Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、ペンシルバニア州ピッツバーグ）で濾過して凝集を除去した。細胞数は血球計数計で測定し、細胞は完全培地に入れて、１００μｇ／ｍｌ  ポリオルニチン（Ｓｉｇｍａ、ミズーリ州セントルイス）及び１μｇ／ｍｌ  マウスラミニン（ＧｉｂｃｏＢＲＬ）でコーティングした９６ウェルプレートに１０ｘ１０３細胞／ウェルで接種した。該完全培地は、基礎培地（ＭＥＭ）及びＨａｍ’ｓ  Ｆ１２、１：１、ペニシリン（１００Ｕ／ｍｌ）、ストレプトマイシン（１００μｇ／ｍｌ）、及び１０％熱不活性化ウマ血清（ＧｉｂｃｏＢＲＬ）から構成された。培養は、３７℃、５％ＣＯ２及び湿度１００％で維持した。非神経細胞の増殖を制御するために、５−フルオロ−２’−デオキシウリジン（７５μＭ）及びウリジン（１８０μＭ）を培地中に含めた。
【誤訳訂正１４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１８７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１８７】
ＤＲＧ神経におけるＶＲ１発現の測定。培養物は、Ｈａｎｋｓ’緩衝塩類溶液に溶かした４％パラホルムアルデヒド溶液で１５分間固定し、Ｓｕｐｅｒｂｌｏｃｋ（Ｐｉｅｒｃｅ、イリノイ州ロックフォード）でブロックし、Ｔｒｉｓ．ＨＣｌ（Ｓｉｇｍａ）緩衝生理食塩水（ＴＢＳ）に溶かした０．２５％のＮｏｎｉｄｅｔ  Ｐ−４０（Ｓｉｇｍａ）を用いて、室温で１時間、透過処理を施した。培養物は０．１％のＴｗｅｅｎ２０（Ｓｉｇｍａ）を含有するＴＢＳで１回洗浄し、ウサギ抗ＶＲ１ＩｇＧ（Ａｍｇｅｎ製）とともに、室温で１時間半インキュベートし、その後Ｅｕ標識抗ウサギ第２抗体（Ｗａｌｌａｃ  Ｏｙ、フィンランド、Ｔｕｒｋｕ）とともに、室温で１時間インキュベートした。各抗体とのインキュベートが終了した後、ＴＢＳ洗浄（ゆっくり振盪しながら５分間３回）を行った。増強溶液（１５０μｌ／ウェル、Ｗａｌｌａｃ  Ｏｙ）を該培養物に添加した。次に蛍光シグナルを時間分解型蛍光計（Ｗａｌｌａｃ  Ｏｙ）で測定した。修飾ペプチドで処理した試料におけるＶＲ１発現は、０−１０００ｎｇ／ｍｌのＮＧＦで測定した標準曲線と比較して決定した。ＤＲＧ神経におけるＶＲ１発現に対するＮＧＦの（可能な最大阻害値に対する）％阻害効果は、ＮＧＦ処理していない対照と比較することによって決定した。表４に結果を示す。実施例１、６項、段落Ａで同定したペプチドのサンプリングの効果も、前述と同様の方法で測定した（データは示さず）。
【誤訳訂正１５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０２１５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０２１５】
ＩＶ．クローン分析
Ａ．マスタープレートの調製。２回目の選択から単独のコロニーを採取し、ウェル当たり２ｘＹＴＡＧＴ１２０μｌを含有する９６ウェルプレートに接種した。該９６ウェルプレートを振盪機中にて３０℃で一晩インキュベートした。ウェル当たり６０％グリセロール４０マイクロリットルを添加し、−８０℃で保存した。
【誤訳訂正１６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０２２０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０２２０】
Ｖ．配列のランク付け。ヌクレオチド配列（ＩＶ．Ｃ項）から翻訳したペプチド配列をＥＬＩＳＡデータに関連づけた。修飾用と見なしたペプチドは、対応するＢＳＡコーティングウェルで生じたＯＤ４５０値よりもＮＧＦコーティングウェルにおけるＯＤ４５０値の方が高いファージクローンによって発現したものである。複数回生じる配列によってコードされたペプチド配列も、修飾用と見なした。この基準によって、ライブラリー９３からは上位２個のペプチド、ライブラリー７２から上位９個のペプチド、ライブラリー３９からは上位１７個のペプチド、ライブラリー９５からは上位１１個のペプチド、ライブラリー５９からは上位６個、及びライブラリー６３からは上位１０個のペプチドを修飾用に選択した。
【誤訳訂正１７】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０２２３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０２２３】
【表７】
2006505255.tif 000001
2006505255.tif 000002
【誤訳訂正１８】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０２２４
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０２２４】
「＋」は、濃度２０ｎＭ以下の成熟修飾ペプチドで認められるＮＧＦ誘導活性の阻害が少なくとも５０％であることを示す。
「−」は、少なくとも２０ｎＭの成熟修飾ペプチドで認められるＮＧＦ誘導活性の阻害が５０％未満であることを示す。
「ｎ／ａ」は、適用しなかったことを意味する。
＊（Ｌ）−（Ｐ）融合物がＦｃドメイン（配列番号６０）のＣ末端に結合させたことを表す「Ｃ末端」と指定されていない場合は、（Ｌ）−（Ｐ）融合物はＦｃドメイン（Ｎ末端メチオニンを欠失した配列番号６０）のＮ末端に結合させた。
【誤訳訂正１９】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０２２５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０２２５】
ラット疼痛モデルにおける抗ＮＧＦ成熟修飾ペプチドの抗侵害受容活性
Ａ．神経障害性疼痛モデル。雄のスプラーグ−ドーリーラット（２００ｇ）をイソフルラン吸入麻酔で麻酔して、Ｋｉｍ  ａｎｄ  Ｃｈｕｎｇ（Ｋｉｍ、Ｓ．Ｈ．．Ｃｈｕｎｇ、Ｊ．Ｍ．「分節脊髄神経結紮によって作製したラットの末梢神経障害実験モデル（Ａｎ  ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ｍｏｄｅｌ  ｆｏｒ  ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ  ｎｅｕｒｏｐａｔｈｙ  ｐｒｏｄｕｃｅｄ  ｂｙ  ｓｅｇｍｅｎｔａｌ  ｓｐｉｎａｌ  ｎｅｒｖｅ  ｌｉｇａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｒａｔ．）」Ｐａｉｎ  ５０：３５５−３６３、（１９９２））によって最初に報告されたように、後根神経節末梢側で座骨神経に入る前に左腰髄をＬ５及びＬ６のレベルで強く結紮した（４−０絹縫合糸）。切り口を縫合し、ラットを回復させた。この方法では、ワイヤーメッシュ製観察用ケージから足裏（足蹠の中間）表面に垂直に（ｖｏｎ  Ｆｒｅｙ型刺激毛によって４．０から１４８．１ｍＮの範囲の）段階的刺激を加え、（神経傷害と同側の）処置した足が回避する圧力を記録することによって評価を行ったところ、後肢左足において機械的（接触性）アロディニア（異痛症）が生じた。足の回避閾値（ＰＷＴ）は、刺激強度を連続的に増加及び減少させることによって測定し、回避データはＣｈａｐｌａｎ  ｅｔ  ａｌ．，（Ｃｈａｐｌａｎ、Ｓ．Ｒ．，  Ｂａｃｈ、Ｆ．Ｗ．,Ｐｏｇｒｅｌ，  Ｊ．Ｗ．Ｃｈｕｎｇ，Ｊ．Ｍ．，  Ｙａｋｓｈ，  Ｔ．Ｌ．，  Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ  ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ  ｏｆ  ｔａｃｔｉｌｅ  ａｌｌｏｄｙｎｉａ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｒａｔ  ｐａｗ．，  Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ｍｅｔｈ、５３：５５−６３（１９９４））に記載されているように、ディクソンのノンパラメトリック検定を使用して分析した。
【誤訳訂正２０】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０２２６
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０２２６】
正常なラット及び疑似処置ラット（神経は分離したが、結紮はしない）は、少なくとも１４８．１ｍＮ（１５ｇ相当）の圧力にも耐えて応答を示さなかった。脊髄神経を結紮したラットは、処置した足では４．０ｍＮ（０．４１ｇ相当）といった少ない圧力であっても応答した。運動機能障害（例えば、足を引きずったり、垂れ下がったりする）を示さず、ＰＷＴが３９．２ｍＮ（４．０ｇに相当）未満の場合のみ、そのラットをこの研究に加えた。術後少なくとも７日経ってから、インビトロで２０ｎＭ以下の濃度でＮＧＦ誘導活性を少なくとも５０％阻害することが既に認められている成熟修飾ペプチド（表５において「＋」で示した成熟修飾ペプチド）でラットを処理した。一般的に、ラットは６０ｍｇ／ｋｇのスクリーニング用量の成熟修飾ペプチド又は対照希釈液（ＰＢＳ）でｓ．ｃ．注射によって１回処理し、ＰＷＴをその後毎日７日間測定した（図５）。
【誤訳訂正２１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０２２７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０２２７】
Ｂ．ＣＦＡ炎症疼痛モデル。雄のスプラーグ−ドーリーラット（２００ｇ）をイソフルラン吸入麻酔で軽く麻酔して、後肢左足にフロインド完全アジュバント（ＣＦＡ）０．１５ｍｌを注射した。この方法では、ワイヤーメッシュ製観察用ケージから足裏（足蹠の中間）表面に垂直に（ｖｏｎ  Ｆｒｅｙ型刺激毛によって４．０から１４８．１ｍＮの範囲の）段階的刺激を加え、処置した足が回避する圧力を記録することによって評価を行ったところ、後肢左足において機械的（接触性）アロディニア（異痛症）が生じた。ＰＷＴは、刺激強度を連続的に増加及び減少させることによって測定し、Ｃｈａｐｌａｎ他（１９９４）が記載したようにディクソンのノンパラメトリック検定を使用して回避データを分析した。運動機能障害（例えば、足を引きずったり、垂れ下がったりする）又は皮膚破裂を示さず、ＰＷＴが３９．２ｍＮ（４．０ｇ相当）未満の場合のみ、そのラットはこの研究に含めた。
【誤訳訂正２２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０２２８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０２２８】
ＣＦＡ注射後少なくとも７日経ってから、既にインビトロで２０ｎＭ以下の濃度でＮＧＦ誘導活性を少なくとも５０％阻害することが認められた成熟修飾ペプチド（表５において「＋」で示した成熟修飾ペプチド）で処理した。一般的に、ラットは６０ｍｇ／ｋｇのスクリーニング用量の成熟修飾ペプチド又は対照希釈液（ＰＢＳ）でｓ．ｃ．注射によって１回処理し、ＰＷＴはその後毎日７日間測定した。平均足回避閾値（ＰＷＴ）は、以下の式、％ＭＰＥ＝１００＊（処理ラットのＰＷＴ−対照ラットのＰＷＴ）／（１５−対照ラットのＰＷＴ）を使用した可能な最大効果のパーセント（％ＭＰＥ）に変換した。したがって、１５ｇ（１４８．１ｍＮ）のカットオフ値は、ＭＰＥの１００％に相当し、対照応答は０％ＭＰＥに相当する。
【誤訳訂正２３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０２３０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０２３０】
【表８】
2006505255.tif 000003