【手続補正書】
【提出日】平成25年12月6日(2013.12.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＫＬＨ−ペプチド結合体と、緩衝液と、糖と、界面活性剤とを含む組成物であって、ＫＬＨ−ペプチド結合体においてＫＬＨに結合したペプチドは、ＥＧＦＲｖＩＩＩアミノ酸配列を含む、前記組成物。
【請求項２】
緩衝液が、リン酸緩衝液を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
緩衝液が、リン酸カリウム緩衝液を含む、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
緩衝液が、５ｍＭ〜３０ｍＭの範囲の濃度で存在する、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５】
緩衝液が、４０℃において１２週後に、前記組成物中のＫＬＨ−ペプチド結合体の濃度が、ｍｇ／ｍＬで測定されるときに元の濃度と比較して１５％未満変化しているような濃度で存在する、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６】
糖が二糖である、請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
二糖が、トレハロースであり、かつ：
（ａ）４５〜１５０ｍｇ／ｍＬの範囲の濃度で存在する；
（ｂ）ＫＬＨ−ペプチド結合体１ｍｇあたり８０〜１１０ｍｇの範囲の量で存在する；
または、
（ｃ）４０℃において１２週後に、前記組成物中のＫＬＨ−ペプチド結合体の濃度が、ｍｇ／ｍＬで測定されるときに元の濃度と比較して１５％未満変化しているような濃度で存在する、
請求項６に記載の組成物。
【請求項８】
界面活性剤が、ポリソルベートであり、かつ：
（ａ）０．０１〜０．３ｍｇ／ｍＬの範囲の濃度で存在する；
（ｂ）ＫＬＨ−ペプチド結合体１ｍｇあたり０．０１〜０．３ｍｇの範囲の量で存在する；
または、
（ｃ）４０℃において１２週後に、前記組成物中のＫＬＨ−ペプチド結合体の濃度が、ｍｇ／ｍＬで測定されるときに元の濃度と比較して１５％未満変化しているような濃度で存在する、請求項１に記載の組成物。
【請求項９】
ＫＬＨ−ペプチド結合体においてＫＬＨに結合したペプチドが、配列番号１または配列番号２からなる、上記請求項のいずれかに記載の組成物。
【請求項１０】
ペプチドが、スルホ−ＳＭＣＣリンカーを有するＫＬＨに結合されている、上記請求項のいずれかに記載の組成物。
【請求項１１】
エピトープ密度が２０〜８０の範囲である、上記請求項のいずれかに記載の組成物。
【請求項１２】
（ａ）  ダイマー形態で存在するＫＬＨ−ペプチド結合体の量が、サイズ排除クロマトグラフィによって決定されるとき、組成物の全質量の４５質量％〜６５質量％の範囲である、
（ｂ）  モノマー形態で存在するＫＬＨ−ペプチド結合体の量が、サイズ排除クロマトグラフィによって決定されるとき、組成物の全質量の１５質量％〜４０質量％の範囲である、または、
（ｃ）  サイズ排除クロマトグラフィによって決定されるとき、モノマー形態で存在するＫＬＨ−ペプチド結合体の量が、組成物の全質量の１８質量％〜３５質量％の範囲であり、かつダイマー形態で存在するＫＬＨ−ペプチド結合体の量が、組成物の全質量の５０質量％〜６５質量％の範囲である、
上記請求項のいずれかに記載の組成物。
【請求項１３】
該組成物が水性医薬組成物であり、かつ該組成物のｐＨは６〜８の範囲である、上記請求項のいずれかに記載の組成物。
【請求項１４】
前記組成物が水性医薬組成物であり、かつ該組成物のｐＨが、４０℃において１２週後に、該組成物中のＫＬＨ−ペプチド結合体の濃度が、ｍｇ／ｍＬで測定されるときに元の濃度と比較して１５％未満変化しているような量である、上記請求項のいずれかに記載の組成物。
【請求項１５】
ＫＬＨ−ＥＧＦＲｖＩＩＩペプチド結合体と、リン酸カリウム緩衝液と、トレハロースと、ポリソルベート８０とを含む液体組成物であって：ＫＬＨに結合したペプチドは配列番号１を含み；ＫＬＨ−ＥＧＦＲｖＩＩＩペプチド結合体は、３０〜６５の範囲のエピトープ密度を有し；緩衝液は、９ｍＭ〜１１ｍＭの範囲の濃度で存在し；組成物のｐＨは、７．３〜７．５の範囲であり；トレハロースは、８５ｍｇ／ｍＬ〜９５ｍｇ／ｍＬの範囲の濃度で存在し；ポリソルベート８０は、０．１ｍｇ／ｍＬ〜０．３ｍｇ／ｍＬの範囲の濃度で存在し；さらに、サイズ排除クロマトグラフィによって決定されるとき、モノマー形態で存在するＫＬＨ−ＥＧＦＲｖＩＩＩペプチド結合体の量は、組成物の全質量の１８質量％〜３５質量％の範囲であり、かつダイマー形態で存在するＫＬＨ−ＥＧＦＲｖＩＩＩペプチド結合体の量は、組成物の全質量の５０質量％〜６５質量％である、前記液体組成物。
【請求項１６】
液体組成物は、水によって凍結乾燥組成物を再構成することによって調製される、請求項１５に記載の組成物。
【請求項１７】
緩衝液が、１０ｍＭの濃度で存在し、組成物のｐＨが、７．４であり、トレハロースが、９０ｍｇ／ｍＬの濃度で存在し、ポリソルベート８０が、０．２ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する、請求項１５または１６に記載の組成物。
【請求項１８】
ＫＬＨ−ＥＧＦＲｖＩＩＩ結合体を調製するための方法であって：ａ）ＫＬＨをリンカーと組み合わせて、ＫＬＨおよびリンカーを３０〜６０分の範囲の時間にわたって相互作用させる工程と；ｂ）配列番号１を含むペプチドを工程ａ）から得られる活性化ＫＬＨ生成物に添加して、ＫＬＨ−ＥＧＦＲｖＩＩＩ結合体を付与する工程とを含む、前記方法。
【請求項１９】
リンカーは、７５：１〜３２５：１の範囲のリンカー：ＫＬＨモル比でＫＬＨと組み合わされる、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
ＫＬＨ−ＥＧＦＲｖＩＩＩ結合体を調製するための方法であって：ａ）ＫＬＨをリンカーと組み合わせて、ＫＬＨおよびリンカーを相互作用させる工程と；ｂ）配列番号１を含むペプチドを工程ａ）から得られる活性化ＫＬＨ生成物に添加して、ＫＬＨ−ＥＧＦＲｖＩＩＩ結合体を付与する工程とを含み、該リンカーが、非水性溶媒に添加されたスルホ−ＳＭＣＣリンカーである、前記方法。
【請求項２１】
非水性溶媒がＤＭＳＯを含む、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
ＫＬＨ−ＥＧＦＲｖＩＩＩペプチド結合体を含む組成物であって、
（ａ）サイズ排除クロマトグラフィによって決定されるとき、モノマー形態で存在するＫＬＨ−ＥＧＦＲｖＩＩＩペプチド結合体の量は、該組成物の全質量の１８質量％〜３５質量％の範囲であり、ダイマー形態で存在するＫＬＨ−ＥＧＦＲｖＩＩＩペプチド結合体の量は、該組成物の全質量の５０質量％〜６５質量％である；
（ｂ）該組成物が、４０℃において１２週後に、該組成物中のＫＬＨ−ＥＧＦＲｖＩＩＩペプチド結合体の濃度が、ｍｇ／ｍＬで測定されるときに元の濃度と比較して１５％未満変化しているように安定化された水性医薬組成物である；
または、
（ｃ）該結合体の平均エピトープ密度が約２０〜８０の間である、
前記組成物。
【請求項２３】
ＫＬＨ−ＥＧＦＲｖＩＩＩペプチド結合体を含む組成物であって：
ｉ）３０〜７０個のペプチド／ＫＬＨの、アミノ酸組成物によって測定されたエピトープ密度；
ｉｉ）以下の通りの、ＳＥＣ  ＨＰＬＣによって測定されたサイズ分布プロファイル：
ピーク１  ＜２％
ピーク２  ８〜１７％
ピーク３  ５０〜６０％
ピーク４  ２０〜３０％
ピーク５  １〜５％：
および、
ｉｉｉ）以下の通りの、ＡＥＸ  ＲＰ−ＨＰＬＣによって測定された純度：
ペプチドダイマー≦５％
リンカーまたはリンカー関連の不純物≦１％
合計ペプチド−リンカー不純物≦１０％
の特性を有する、前記組成物。
【請求項２４】
緩衝液を含む、請求項２２または２３に記載の組成物。
【請求項２５】
緩衝液が、リン酸緩衝液を含む、請求項２４に記載の組成物。
【請求項２６】
緩衝液が、リン酸カリウム緩衝液を含む、請求項２５に記載の組成物。
【請求項２７】
凍結保護物質または凍結乾燥保護物質を含む、請求項２２〜２６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２８】
糖を含む、請求項２２〜２６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２９】
糖が二糖である、請求項２８に記載の組成物。
【請求項３０】
二糖がトレハロースである、請求項２９に記載の組成物。
【請求項３１】
界面活性剤を含む、請求項２２〜３０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３２】
界面活性剤が、ポリソルベート、ポロキサマーまたはトリトン界面活性剤である、請求項３１に記載の組成物。
【請求項３３】
界面活性剤が、ポリソルベート８０である、請求項３２に記載の組成物。
【請求項３４】
５℃において２６週後に、２５μｍ以上の粒子状物質の数が、ＵＳＰ＜７８８＞で測定したときに１０００％未満増加する、請求項２２〜３３のいずれか一項に記載の組成物。