【手続補正書】
【提出日】平成24年8月6日(2012.8.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
試料中のアンジオテンシン１の量を測定するための方法であって、
（ａ）前記試料中のアンジオテンシン１をイオン化して、質量分析法によって検出可能な１つ以上のイオンを生成するステップと、
（ｂ）質量分析法によって、アンジオテンシンイオンの量を検出するステップであって、前記イオンは、４３３．０±０．５、６１９．４±０．５、および６４７．４±０．５の質量／電荷比をもつイオンから成る群から選択されるステップと、
（ｃ）検出されたイオンの量を使用して、前記試料中のアンジオテンシン１の量を測定するステップと、
を含む方法。
【請求項２】
前記方法は、０．１ｎｇ／ｍＬ以下の定量限界を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記方法は、高性能液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）によって、または固相抽出カラムによって、前記試料からアンジオテンシン１を精製するステップをさらに含む、請求項１−２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４】
アンジオテンシン１イオンの量は、内部標準物質との比較によって、試験試料中のアンジオテンシン１の有無または量と関連付けられる、請求項１−３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
試料中のアンジオテンシン１の量を測定するための方法であって、
（ａ）前記試料中のレニンによるアンジオテンシン１の生成に好適な条件下で、レニンに対して有効ではない水安定性プロテアーゼ阻害剤と予混合された試料をインキュベーションするステップと、
（ｂ）液体クロマトグラフィーによって、前記試料中のアンジオテンシン１を精製するステップと、
（ｃ）前記試料から精製されたアンジオテンシン１をイオン化して、質量分析法によって検出可能な１つ以上のイオンを生成するステップと、
（ｄ）質量分析法によって、アンジオテンシン１イオンの量を検出するステップと、
（ｅ）検出されたイオンの量を使用して、前記試料中のアンジオテンシン１の量を測定するステップと、
を含む方法。
【請求項６】
前記方法は、０．１ｎｇ／ｍＬ以下の定量限界を有するか、または前記液体クロマトグラフィーは高性能液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）である、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記アンジオテンシン１イオンは、４３３．０±０．５、６１９．４±０．５、６４７．４±０．５、および１２９７±０．５の質量／電荷比をもつイオンから成る群から選択される１つ以上のイオンを含む、請求項５−６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
前記イオン化ステップは、４３３．０±０．５の質量／電荷比をもつ前駆体イオンを生成するステップと、６１９．４±０．５および６４７．４±０．５の質量／電荷比をもつイオンから成る群から選択される、１つ以上の断片イオンを生成するステップとを含む、請求項５−７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
アンジオテンシン１イオンの量は、内部標準物質との比較によって、試験試料中のアンジオテンシン１の有無または量と関連付けられる、請求項５−８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
前記ステップ（ｂ）は、固相抽出カラムによって、前記試料からアンジオテンシン１を精製するステップを含む、請求項５−９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
前記水安定性プロテアーゼ阻害剤は、フッ化アミノエチルベンジルスルホニルである、請求項５−１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
分解標準物質との比較によって、試料中のアンジオテンシン１の分解度を測定するステップをさらに含む、請求項５−１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
試料中のアンジオテンシン１の量を測定するための方法であって、
（ａ）試料中のレニンによるアンジオテンシン１の生成に好適な条件下で試料をインキュベーションするステップと、
（ｂ）固相抽出によって、前記試料中のアンジオテンシン１を精製するステップと、
（ｃ）オンライン処理を備えた液体クロマトグラフィーによって、前記試料中のアンジオテンシン１をさらに精製するステップと、
（ｄ）前記試料から精製されたアンジオテンシン１をイオン化して、質量分析法によって検出可能な１つ以上のイオンを生成するステップと、
（ｅ）質量分析法によって、アンジオテンシン１イオンの量を検出するステップと、
（ｆ）検出されたイオンの量を使用して、前記試料中のアンジオテンシン１の量を測定するステップと、
を含む方法。
【請求項１４】
前記液体クロマトグラフィーは、高性能液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）である、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記方法は、０．１ｎｇ／ｍＬ以下の定量限界を有する、請求項１３−１４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
前記アンジオテンシン１イオンは、４３３．０±０．５、６１９．４±０．５、６４７．４±０．５、および１２９７±０．５．の質量／電荷比をもつイオンから成る群から選択される１つ以上のイオンを含む、請求項１３−１５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
前記イオン化ステップは、４３３．０±０．５の質量／電荷比をもつ前駆体イオンを生成するステップと、６１９．４±０．５または６４７．４±０．５の質量／電荷比をもつイオンから成る群から選択される、１つ以上の断片イオンを生成するステップとを含む、請求項１３−１６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１８】
ステップ（ａ）におけるインキュベーションステップは、レニンに対して有効ではない水安定性プロテアーゼ阻害剤の存在下でインキュベーションするステップを含む、請求項１３−１７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９】
前記水安定性プロテアーゼ阻害剤は、フッ化アミノエチルベンジルスルホニルである、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
アンジオテンシン１イオンの有無または量は、内部標準物質との比較によって、試験試料中のアンジオテンシン１の有無または量と関連付けられる、請求項１３−１９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２１】
分解標準物質との比較によって、試料中のアンジオテンシン１の分解度を測定するステップをさらに含む、請求項１３−２０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２２】
試料中のレニン活性も測定され、該方法はさらに、
（ｇ）前記試料中で測定されたアンジオテンシン１の量を使用して、試料中のレニン活性を計算するステップ
を含む、請求項１４−２１のいずれかに記載の方法。
【請求項２３】
試料中のレニン活性も測定され、該方法はさらに、
（ｆ）前記試料中で測定されたアンジオテンシン１の量を使用して、試料中のレニン活性を計算するステップ
を含む、請求項５−１２のいずれかに記載の方法。
【請求項２４】
試料中のレニン活性を測定するための方法であって、
（ａ）試料中のレニンによるアンジオテンシン１の生成に好適な条件下で試料をインキュベーションするステップと、
（ｂ）液体クロマトグラフィーによって、前記試料中のアンジオテンシン１を精製するステップと、
（ｃ）前記試料から精製されたアンジオテンシン１をイオン化して、質量分析法によって検出可能な１つ以上のイオンを生成するステップと、
（ｄ）質量分析法によって、アンジオテンシン１イオンの量を検出するステップであって、前記イオンは、４３３．０±０．５、６１９．４±０．５、６４７．４±０．５、および１２９７±０．５の質量／電荷比をもつイオンから成る群から選択されるステップと、
（ｅ）検出されたイオンの量を使用して、前記試料中のアンジオテンシン１の量を測定するステップと、
（ｆ）前記試料中で測定されたアンジオテンシン１の量を使用して、試料中のレニン活性を計算するステップと、
を含む方法。