【誤訳訂正書】
【提出日】平成26年8月18日(2014.8.18)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０００８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０００８】
サイトカイン／シグナル伝達物質カクテルは、抗IgM F(ab')2またはB細胞受容体とクロスリンクするかもしくはB細胞受容体を活性化する他の物質、組換え型ヒトインターロイキン（IL）-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-9、IL-10、IL-13、インターフェロン-α（IFN）-α、BAFF、および／もしくはB細胞分化を引き起こす他のサイトカイン、ならびに／または可溶性CD40L、ならびに／またはヒトB細胞に共刺激シグナルを供給する他の物質を含んでもよい。集団は、末梢血、扁桃、骨髄、脾臓、リンパ節、臍帯血、肝臓、アフェレーシス技法、および／またはバフィーコートから得てもよい。 
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１８９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１８９】
本明細書で開示および請求される組成物および／または方法のすべてを、本開示に照ら
して、必要以上の実験なしに、行い、そして実行する。本発明の組成物および方法が好ま
しい実施態様に関して記載されており、変形、本発明の概念、精神、および範囲から逸脱
することなく、本明細書に記載の組成物および／または方法に、ならびに工程において、
または、方法の一連の工程において適用できることは当業者に明らかでありうる。より具
体的には、化学的および生理学的のいずれでも関連する特定の薬剤を、本明細書に記載の
薬剤に代用でき、同じまたは類似の結果が達成されうることは明らかでありうる。当業者
に明らかであるすべてのそのような類似の代用物および改変は、添付の特許請求の範囲に
より定義される本発明の精神、範囲、および概念の範囲内であると見なされる。
上記の開示によって提供される本願発明の具体例として、以下の発明が挙げられる。
[1]  以下の工程を含む、予め決定された抗原に特異的な抗体を分泌する不死化ヒトB細胞を産生する方法：
(a)IgM陽性ヒトB細胞集団を得る工程；
(b)該集団を、
(i)ヒトB細胞を不死化するために、エプスタイン-バーウイルス（EBV）と、および
(ii)免疫グロブリンアイソタイプのIgMからIgGへのクラススイッチを誘導するために、サイトカイン／増殖因子／シグナル伝達物質のカクテルと
接触させる工程；
(c)前記不死化および免疫グロブリンアイソタイプクラススイッチを支持する条件下で細胞を培養する工程。
[2]  以下の工程をさらに含む、[1]記載の方法：
(d)予め決定された抗原に対する抗体を発現する不死化ヒトB細胞を選択する工程。
[3]  予め決定された抗原が、ウイルス抗原、細菌抗原、真菌抗原、寄生虫抗原、毒素抗原、ウイルスの侵入に関する細胞受容体抗原、細菌の侵入に関する細胞受容体、真菌の侵入に関する細胞受容体、寄生虫の侵入を媒介する細胞受容体、毒素の侵入を媒介する細胞受容体、腫瘍抗原、サイトカイン／ケモカイン／増殖因子抗原、サイトカイン／ケモカイン／増殖因子受容体抗原、炎症を媒介する分子上の抗原、疼痛を媒介する分子上の抗原、組織損傷／障害を媒介する分子上の抗原、活性化分子／リガンド／受容体上の抗原、共刺激分子／リガンド／受容体上の抗原、先天免疫を媒介する分子上の抗原、細胞接着分子上の抗原、細胞接着分子受容体上の抗原、病状に関連する過剰発現した／不十分にグリコシル化された／酸化した／ミスフォールドした／変異した細胞タンパク質（「改変された自己」抗原）上の抗原、細胞アポトーシスを媒介する分子／リガンド／受容体上の抗原、増殖阻害分子上の抗原、H5N1血液凝集素（H5 HA）、癌血管新生分子である胎盤誘発増殖因子（PLGF）、癌および自己免疫関連因子であるインターロイキン-6（IL6）、ブドウ球菌エンテロトキシンB（SEB）、ブドウ球菌エンテロトキシンC2（SEC2）、またはリシンBサブユニットを含む、[1]記載の方法。
[4]  予め決定された抗原がH5 HA、PLGF、IL6、SEB、SEC2、またはリシンBサブユニットである、[3]記載の方法。
[5]  抗体がモノクローナル抗体である、[2]記載の方法。
[6]  予め決定された抗原がH5 HAである、［4］記載の方法。
[7]  予め決定された抗原がPLGFである、[4]記載の方法。
[8]  予め決定された抗原がIL6である、[4]記載の方法。
[9]  予め決定された抗原がSEBである、[4]記載の方法。
[10]  予め決定された抗原がSEC2である、[4]記載の方法。
[11]  予め決定された抗原がリシンBサブユニットである、[4]記載の方法。
[12]  選択する工程が、不死化B細胞培地の上清に対して実施されるイムノアッセイを含む、[2]記載の方法。
[13]  サイトカインカクテルが、抗IgM F(ab’)2またはB細胞受容体とクロスリンクするかもしくはB細胞受容体を活性化する他の物質、組換えヒトインターロイキン(IL)-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-9、IL-10、IL-13、INFα、BAFF、および／もしくはB細胞の分化を引き起こす他のサイトカイン、ならびに／または可溶性CD40L、ならびに／またはヒトB細胞に共刺激シグナルを供給する他の物質を含む、[1]記載の方法。
[14]  集団が末梢血、扁桃、骨髄、脾臓、リンパ節、臍帯血、肝臓、アフェレーシス技法、および／またはバフィーコートから得られる、[1]記載の方法。
[15]  工程（d）の不死化ヒトB細胞から重鎖および／または軽鎖全体をコードする核酸を単離する工程をさらに含む、[2]記載の方法。
[16]  工程（d）の不死化ヒトB細胞から重鎖および／または軽鎖の抗原結合領域をコードする核酸を単離する工程をさらに含む、[2]記載の方法。
[17]  前記核酸を、重鎖および／または軽鎖のフレームワーク領域をコードする核酸へとクローニングする工程をさらに含む、[16]記載の方法。
[18]  工程（b）が、EBVを濃縮する工程、感染の間に遠心分離する工程、または両方をさらに含む、[1]記載の方法。
[19]  工程（c）の後に、ヒトB細胞集団を凍結する工程をさらに含む、[1]記載の方法。
[20]  工程（b）（ii）の後に、工程（b）（ii）を約0〜96時間実施する、[1]記載の方法
。
[21]  工程（b）（ii）の後に、工程（b）（ii）を約16〜20時間実施する、[20]記載の方
法。
[22]  集団の約50%〜99%がEBV感染によって不死化される、[1]記載の方法。
[23]  集団の約95%〜99%がEBV感染によって不死化される、[22]記載の方法。
[24]  工程（d）が、感染の後1〜4週間行われる、[2]記載の方法。
[25]  工程（d）が、感染の後2〜3週間行われる、[24]記載の方法。
[26]  工程（d）が、保存された凍結不死化B細胞を解凍した後、および／または不死化B細胞由来の保存された凍結培地上清を解凍した後に行われる、[2]記載の方法。
[27]  B細胞が抗原で処理されていない、[1]記載の方法。
[28]  B細胞が抗原で処理された、[1]記載の方法。
[29]  炭疽菌毒素、エボラウイルス抗原、リシンA鎖、A鎖、ペスト菌（Yersinia pestis）抗原、マールブルグウイルス抗原、MDRブドウ球菌（Staphylococcus）抗原、およびコレラ毒素と免疫学的に結合するIgGを発現する、ハイブリドーマではない不死化ヒトB細胞。
[30]  EBVで不死化されている、[29]記載の不死化ヒトB細胞。
[31]  [29]記載の細胞によって作製された、単離されたモノクローナル抗体。
[32]  H5N1血液凝集素（H5 HA）に対して特異性を有する、単離されたモノクローナル抗体。
[33]  以下を含む、[32]記載の単離された抗体：
（a）SEQ ID NO：22、25、または36に示したアミノ酸配列を含む重鎖可変領域；および
（b）SEQ ID NO：16、19、または32に示したアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域。
[34]  以下を含む、[32]記載の単離された抗体：
（a）SEQ ID NO：23、26、または37の核酸配列によってコードされている重鎖可変領域；および
（b）SEQ ID NO：17、20、または33の核酸配列によってコードされている軽鎖可変領域。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
(a)IgMからIgGへの免疫グロブリンアイソタイプクラススイッチを大部分が受けていないヒトB細胞集団を得る工程；
(b)前記集団をエプスタイン-バーウイルス（EBV）と接触させて、ヒトB細胞を不死化する工程
(c)前記ヒトB細胞をサイトカイン/増殖因子/シグナル伝達物質のカクテルと接触させて、IgMからIgGへの免疫グロブリンアイソタイプクラススイッチを誘導する工程であって、前記サイトカイン/増殖因子/シグナル伝達物質のカクテルが、CD40L、抗IgM F(ab’)2またはB細胞受容体とクロスリンクするかもしくはB細胞受容体を活性化させる１以上の他の物質を含む工程；
(d)前記不死化および免疫グロブリンアイソタイプクラススイッチを支持する条件下で細胞を培養する工程；ならびに
(e)前記予め決定された抗原に特異的な抗体を発現する不死化ヒトB細胞を選択する工程を含む、予め決定された抗原に特異的な抗体を発現する不死化ヒトB細胞を調製する方法。
【請求項２】
工程（e）の不死化ヒトB細胞から重鎖および／または軽鎖全体、あるいは
工程（e）の不死化ヒトB細胞から重鎖および／または軽鎖の抗原結合領域
をコードする核酸を単離する工程をさらに含む、請求項１記載の方法。
【請求項３】
工程(e)の選択する工程が、不死化B細胞培地の上清に対して実施されるイムノアッセイを含む、請求項１記載の方法。
【請求項４】
工程（b）の接触させることがさらに濃縮EBVの使用または遠心分離工程の使用を含む、請求項１記載の方法。
【請求項５】
工程（b）が濃縮EBVの使用および遠心分離工程の使用をさらに含む、請求項４記載の方法。
【請求項６】
前記集団の95%〜99%がEBV感染によって不死化される、請求項５記載の方法。
【請求項７】
EBVが10倍濃縮されており、遠心分離が900×Gにて１時間実施される、請求項５記載の方法。
【請求項８】
前記集団の95%〜99%がEBV感染によって不死化される、請求項７記載の方法。
【請求項９】
前記工程(b)が、前記B細胞とToll様受容体リガンドとを接触させる工程をさらに含む、請求項１記載の方法。
【請求項１０】
前記サイトカイン/増殖因子/シグナル伝達物質のカクテルが、抗IgM F(ab’)2及び可溶性CD40Lのうちの１以上を含む、請求項１記載の方法。
【請求項１１】
前記サイトカイン/増殖因子/シグナル伝達物質のカクテルが、
(a) 抗IgM F(ab’)2及びCD40L、
(b) 抗IgM F(ab’)2及びBAFF、
(c) CD40L、
(d) 抗IgM F(ab’)2及びIL-6、
(e) 抗IgM F(ab’)2及びIL-9、
(f) 抗IgM F(ab’)2及びIL-4、又は
(g) 抗IgM F(ab’)2及びIL-13
を含む、請求項１記載の方法。
【請求項１２】
工程（b）の後に工程（c）を0〜96時間実施する、請求項１記載の方法。
【請求項１３】
工程（b）の後に工程（c）を16〜20時間実施する、請求項１記載の方法。
【請求項１４】
工程(c)が、毎週の間隔で２回、３回、４回または５回実施される、請求項１記載の方法。
【請求項１５】
工程（e）がEBV感染の1〜4週間後に行われる、請求項１記載の方法。
【請求項１６】
工程（e）がEBV感染の2〜3週間後に行われる、請求項１記載の方法。
【請求項１７】
工程（d）の後に、ヒトB細胞集団を凍結する工程をさらに含む、請求項１記載の方法。
【請求項１８】
工程（e）が、保存された凍結不死化B細胞を解凍した後、および／または不死化B細胞由来の保存された凍結培地上清を解凍した後に行われる、請求項１７記載の方法。
【請求項１９】
予め決定された抗原が、ウイルス抗原、細菌抗原、真菌抗原、寄生虫抗原、毒素抗原、ウイルスの侵入に関する細胞受容体抗原、細菌の侵入に関する細胞受容体、真菌の侵入に関する細胞受容体、寄生虫の侵入を媒介する細胞受容体、毒素の侵入を媒介する細胞受容体、腫瘍抗原、サイトカイン／ケモカイン／増殖因子受容体抗原、炎症を媒介する分子上の抗原、疼痛を媒介する分子上の抗原、組織損傷／障害を媒介する分子上の抗原、活性化分子／リガンド／受容体上の抗原、先天免疫を媒介する分子上の抗原、細胞接着分子上の抗原、細胞接着分子受容体上の抗原、病状に関連する過剰発現した／不十分にグリコシル化された／酸化した／ミスフォールドした／変異した細胞タンパク質（「改変された自己」抗原）上の抗原、細胞アポトーシスを媒介する分子／リガンド／受容体上の抗原、増殖阻害分子上の抗原、H5N1血液凝集素（H5 HA）、癌血管新生分子である胎盤誘発増殖因子（PLGF）、癌および自己免疫関連因子であるインターロイキン-6（IL6）、ブドウ球菌エンテロトキシンB（SEB）、ブドウ球菌エンテロトキシンC2（SEC2）、またはリシンBサブユニット、炭疽菌毒素、エボラウイルス抗原、リシンA鎖、ペスト菌（Yersinia pestis）抗原、マールブルグウイルス抗原、MDRブドウ球菌（Staphylococcus）抗原、およびコレラ毒素
を含む、請求項１記載の方法。
【請求項２０】
前記ヒトB細胞集団が、扁桃、末梢血、骨髄、脾臓、リンパ節、臍帯血、肝臓、アフェレーシス技法、および／またはバフィーコートから得られる、請求項１記載の方法。
【請求項２１】
前記工程(a)にて得られたヒトB細胞が、以下の特徴：
a) 前記ヒトB細胞集団の大部分がIgD陽性であること、
b) 前記ヒトB細胞集団が大部分がナイーブであること、
c) 前記工程(c)のヒトB細胞が、IgMよりもIgGをより高レベルで分泌するように誘導されること、
d) 前記ヒトB細胞集団が前記予め定められた抗原に以前に晒されていない被験体から得られること
e) 前記ヒトB細胞集団が、ヒトB細胞の成熟集団と比較して、CD20の発現増加を示すこと、
f) 前記ヒトB細胞集団の大部分が、CD27及びCD30からなる群より選択されるマーカーについて低レベルの発現を示すこと、ならびに
g) 前記ヒトB細胞集団の大部分が体細胞超変異を受けていないこと
のうちの１つ以上を有する、請求項１記載の方法。
【請求項２２】
抗体がモノクローナル抗体である、請求項１記載の方法。
【請求項２３】
(a)IgMからIgGへの免疫グロブリンアイソタイプクラススイッチを大部分が受けていないヒトB細胞集団を得る工程、
(b)前記集団をエプスタイン-バーウイルス（EBV）と接触させて、ヒトB細胞を不死化する工程、
(c)前記ヒトB細胞をサイトカイン/増殖因子/シグナル伝達物質のカクテルと接触させて、IgMからIgGへの免疫グロブリンアイソタイプクラススイッチを誘導する工程であって、前記サイトカイン/増殖因子/シグナル伝達物質のカクテルが、CD40L、抗IgM F(ab’)2またはB細胞受容体とクロスリンクするかもしくはB細胞受容体を活性化させる１以上の他の物質を含む工程、ならびに
(d)前記不死化および免疫グロブリンアイソタイプクラススイッチを支持する条件下で細胞を培養する工程、
を含む、予め決定された抗原に特異的な抗体を発現するB細胞レパートリーを調製する方法。
【請求項２４】
(a)IgMからIgGへの免疫グロブリンアイソタイプクラススイッチを大部分が受けていないヒトB細胞の集団を得る工程；
(b)前記集団を、エプスタイン-バーウイルス（EBV）と共に遠心分離して、ヒトB細胞を不死化する工程、および
(c)前記不死化を支持する条件下で細胞を培養する工程
を含む、不死化ヒトB細胞を調製する方法。
【請求項２５】
工程(b)が濃縮EBVの使用をさらに含む、請求項２４記載の方法。
【請求項２６】
EBVが10倍濃縮されており、遠心分離が900×Gにて１時間実施される、請求項２５記載の方法。
【請求項２７】
工程(b)が、前記ヒトB細胞を、サイトカイン/増殖因子/シグナル伝達物質のカクテルと接触させて、IgMからIgGへの免疫グロブリンアイソタイプクラススイッチを誘導する工程をさらに含み、かつ
工程(c)が、前記免疫グロブリンアイソタイプクラススイッチを支持する条件下で細胞を培養する工程をさらに含む、請求項２５記載の方法。
【請求項２８】
予め決定された抗原に特異的な抗体を発現することをさらに含む、請求項２７記載の方法。
【請求項２９】
前記B細胞集団の95〜99％がEBV感染によって不死化される、請求項２５記載の方法。
【請求項３０】
(a) 請求項２記載の方法によって得られた核酸を宿主細胞に導入する工程、および
(b) 予め決定された抗原に特異的なIgG抗体を産生する工程
をさらに含む、請求項２に記載の方法。
【請求項３１】
前記サイトカイン/増殖因子/シグナル伝達物質のカクテルが、
(a) 抗IgM F(ab’)2及びCD40L、
(b) 抗IgM F(ab’)2及びBAFF、
(c) CD40L、
(d) 抗IgM F(ab’)2及びIL-6、又は
(e) 抗IgM F(ab’)2及びIL-13
を含む、請求項１１記載の方法。