【誤訳訂正書】
【提出日】平成24年4月24日(2012.4.24)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の段階を含む、ポリマーまたは樹脂を含む1つまたは複数の表面に少なくとも1つのポリヌクレオチドを可逆的に結合する方法：
表面を、少なくとも1つのポリヌクレオチドを含有する溶液と接触させる段階；および
溶液の塩濃度および／または有機溶媒濃度を調節して、表面へのポリヌクレオチドの結合を可能にする段階；
ここで、表面がポリマーを含む場合には、ポリマーは、ポリビニルピロリドン(Polyvinypyrrolidone)、ポリエチレングリコールまたはポリマーポリオールを含むとさらに規定されるが、ただし任意のポリマーポリオールはセルロースでありえないことを条件とする。
【請求項２】
表面がポリマーを含む、請求項1記載の方法。
【請求項３】
ポリマーがポリマーポリオールである、請求項2記載の方法。
【請求項４】
ポリマーポリオールがデキストランである、請求項3記載の方法。
【請求項５】
ポリマーポリオールが多糖である、請求項3記載の方法。
【請求項６】
多糖が、キサンタンガム、グリコーゲン、フィコール、アラビアゴム、カラゲナン(carageenan)、アミロース、寒天、アミロペクチン、キシランまたはβ-グルカンである、請求項2記載の方法。
【請求項７】
ポリマーがポリエチレングリコールである、請求項2記載の方法。
【請求項８】
ポリマーが、ポリビニルピロリドンである、請求項2記載の方法。
【請求項９】
ポリマーが親水性である、請求項2記載の方法。
【請求項１０】
ポリマーが、溶液中のポリヌクレオチドの少なくとも10%に結合する、請求項2記載の方法。
【請求項１１】
ポリマーが、核酸と共沈するポリマーであるとさらに規定される、請求項2記載の方法。
【請求項１２】
表面が樹脂を含む、請求項1記載の方法。
【請求項１３】
樹脂が、イソシアネート、グリセロール(ジオール)、ピペリジノ-メチル、ポリDMAP、DIPAM、アミノメチル、ポリスチレンアルデヒド、トリス(2-アミノメチル)アミン、モルホリノ-メチル、BOBA、トリフェニル-ホスフィンまたはベンジルチオ-メチルである、請求項12記載の方法。
【請求項１４】
樹脂が、フェニルセファロース、グリセロール(ジオール)、モルホリノ-メチル、ピペリジノ-メチルまたはポリスチレンアルデヒドである、請求項12記載の方法。
【請求項１５】
表面が1つまたは複数の磁性微粒子である、請求項1記載の方法。
【請求項１６】
塩濃度が、塩化ナトリウム、塩化マグネシウム、塩化カルシウム、塩化カリウム、塩化リチウム、塩化バリウム、塩化セシウム、過塩素酸ナトリウム、イソチオシアン酸グアニジニウム(guanidinium isothiocyanate)、塩酸グアニジニウム(guanidinium hydrochloride)、ヨウ化カリウムおよびヨウ化ナトリウムのうち少なくとも1つを含む、1つまたは複数の塩の濃度である、請求項1記載の方法。
【請求項１７】
塩濃度が0.1 M〜5 Mである、請求項16記載の方法。
【請求項１８】
有機溶媒濃度が、C1〜C5アルコール、ポリエチレングリコール、ジメチルスルホキシドまたはアセトンの少なくとも1つを含む、1つまたは複数の有機溶媒の濃度である、請求項16記載の方法。
【請求項１９】
有機溶媒の濃度が、約5%〜50%に調節される、請求項18記載の方法。
【請求項２０】
塩が、イソチオシアン酸グアニジニウムである、請求項18記載の方法。
【請求項２１】
試料が生体試料または生体試料の溶解物である、請求項1記載の方法。
【請求項２２】
ポリヌクレオチド溶液が、血液の溶解物、血液分画、新鮮組織、固定組織または培養細胞を含む、請求項21記載の方法。
【請求項２３】
ポリヌクレオチドが、細菌ポリヌクレオチドまたは細菌成分をコードするポリヌクレオチドである、請求項1記載の方法。
【請求項２４】
ポリヌクレオチドが、真核生物ポリヌクレオチドまたは真核生物成分をコードするポリヌクレオチドである、請求項1記載の方法。
【請求項２５】
ポリヌクレオチドが、ウイルスポリヌクレオチドまたはウイルス成分をコードするポリヌクレオチドである、請求項1記載の方法。
【請求項２６】
ポリヌクレオチドがDNAである、請求項1記載の方法。
【請求項２７】
ポリヌクレオチドがRNAである、請求項1記載の方法。
【請求項２８】
溶液を調製する段階をさらに含む、請求項1記載の方法。
【請求項２９】
溶液を調製する段階が、RNA増幅反応、インビトロにおける転写反応、逆転写反応、第2鎖DNA合成反応、DNase反応および／またはPCR反応を実施する段階を含む、請求項28記載の方法。
【請求項３０】
溶液を調製する段階が細胞を溶解する段階を含む、請求項28記載の方法。
【請求項３１】
溶液を調製する段階が、溶液中のRNA、DNAまたはPNAをレポーター色素に結合する段階を含む、請求項28記載の方法。
【請求項３２】
RNA、DNAまたはPNAを単離または濃縮する方法としてさらに規定される、請求項1記載の方法。
【請求項３３】
RNA、DNAまたはPNAをレポーター色素に結合する段階をさらに含む、請求項32記載の方法。
【請求項３４】
RNA、DNAまたはPNAをフラグメント化する段階、次いでフラグメント化したRNA、DNAまたはPNAの少なくとも一部をマイクロアレイにハイブリダイズする段階をさらに含む、請求項32記載の方法。
【請求項３５】
RNA、DNAまたはPNAの少なくとも一部をマイクロアレイにハイブリダイズする段階をさらに含む、請求項32記載の方法。
【請求項３６】
ポリヌクレオチドを含有する溶液から少なくとも1つのポリヌクレオチドを分離する方法としてさらに規定され、以下の段階を含む、請求項1記載の方法：
ポリマーまたは樹脂を含む少なくとも1つの表面と、少なくとも1つのポリヌクレオチドを含有する溶液とを混合して、混合物を作製する段階；
少なくとも1つのポリヌクレオチドが少なくとも1つの表面に結合する濃度に、混合物の塩濃度および有機溶媒濃度を調節する段階；
混合物の残りから、少なくとも1つのポリヌクレオチドが表面に結合したまま、少なくとも1つの修飾された表面を分離する、段階；および
表面を溶出緩衝液と接触させ、それによって少なくとも1つの表面から少なくとも1つのポリヌクレオチドを分離する段階。
【請求項３７】
表面が磁性微粒子上に、請求項36記載の方法。
【請求項３８】
表面の分離が、磁石を使用して実施される、請求項37記載の方法。
【請求項３９】
少なくとも1つの表面に結合した少なくとも1つのポリヌクレオチドを、表面に結合した1つまたは複数の不純物を溶解するが、少なくとも1つの表面に結合した少なくとも1つのポリヌクレオチドを残存させる緩衝溶液で洗浄する、請求項36記載の方法。
【請求項４０】
少なくとも1つのポリヌクレオチドが、少なくとも1つのRNAであるとさらに規定される、請求項36記載の方法。
【請求項４１】
表面への実質的なDNAの結合を可能にしないが、表面へのRNAの結合を可能にする選択的な結合溶液を使用する段階を含む方法において、少なくとも1つの表面に結合した少なくとも1つのRNAを結合する段階を含むとさらに規定される、請求項40記載の方法。
【請求項４２】
表面に結合したRNAを選択的な洗浄溶液で洗浄し、選択的な結合溶液は、表面に結合したDNAフラグメントを実質的に溶解するが、RNAフラグメントを実質的に表面に結合させたままにする、請求項40記載の方法。
【請求項４３】
表面から少なくとも1つのRNAフラグメントを溶出するが、DNAフラグメントを実質的に表面に結合させたままにする選択的溶出溶液で、少なくとも1つの表面に結合した少なくとも1つのRNAを溶出する、請求項40記載の方法。
【請求項４４】
少なくとも1つのポリヌクレオチドが、少なくとも1つの支持体に結合したまま、1つまたは複数の酵素で消化される、請求項36記載の方法。
【請求項４５】
ポリヌクレオチドが、ウイルスポリヌクレオチドまたはウイルス成分をコードするポリヌクレオチドである、請求項36記載の方法。
【請求項４６】
溶液が生体試料または生体試料の溶解物である、請求項36記載の方法。
【請求項４７】
溶液が、インビトロ転写反応物、逆転写反応物、第2鎖DNA合成反応物、DNase反応物、PCR反応物またはRNA増幅反応物である、請求項36記載の方法。
【請求項４８】
DNA、RNAおよび／またはPNAを単離または濃縮する方法としてさらに規定される、請求項36記載の方法。
【請求項４９】
溶液を調製する段階としてさらに規定される、請求項36記載の方法。
【請求項５０】
溶液を調製する段階が、RNA増幅反応、インビトロ転写反応、逆転写反応、第2鎖DNA合成反応、DNase反応および／またはPCR反応を実施する段階を含む、請求項49記載の方法。
【請求項５１】
溶液を調製する段階が細胞を溶解する段階を含む、請求項49記載の方法。
【請求項５２】
結合緩衝液またはその1つもしくは複数の成分、および少なくとも1つのポリマー修飾表面を含むキットであって、結合緩衝液が、使用中に表面の表面(the surface of the surface)にポリヌクレオチドを結合するのに好適な濃度の好適な塩および好適な有機溶媒を含み、ポリマー修飾表面が、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコールまたはポリマーポリオールを含むとさらに規定され、ただし任意のポリマーポリオールはセルロースではありえないことを条件とする、キット。
【請求項５３】
溶出緩衝液またはその1つもしくは複数の成分をさらに含み、溶出緩衝液が、使用中に表面に結合したポリヌクレオチドを溶解することができる、請求項52記載のキット。
【請求項５４】
洗浄緩衝液またはその1つもしくは複数の成分をさらに含み、洗浄緩衝液が、使用中に表面に結合した不純物を溶解することができるが、表面に結合した選択的なポリヌクレオチドを溶解することができない、請求項52記載のキット。
【請求項５５】
使用中にRNAまたはDNAの無傷性を保存する、試薬またはその1つもしくは複数の成分をさらに含む、請求項53記載のキット。
【請求項５６】
以下の段階を含む、ポリマーを含む1つまたは複数の表面に少なくとも1つのポリヌクレオチドを可逆的に結合する方法：
表面を、少なくとも1つのポリヌクレオチドを含有する溶液と接触させる段階；および
溶液中の塩濃度および／または非ポリエチレングリコール核酸共沈剤の濃度を調節して、表面へのポリヌクレオチドの結合を可能にする段階；
ここで、ポリマーは、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコールまたはポリマーポリオールを含むとさらに規定されるが、ただし任意のポリマーポリオールはセルロースではありえないことを条件とする。
【請求項５７】
非ポリエチレングリコール核酸共沈剤がPVP、フィコールまたはアラビアゴムである、請求項56記載の方法。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２８】
ある態様において、本発明は、以下の段階を含む方法に関する：ポリヌクレオチドを含有する溶液から少なくとも1つのポリヌクレオチドを分離する方法であって、ポリマーを含む少なくとも1つの表面と少なくとも1つのポリヌクレオチドを含有する溶液を混合して混合物を作製する段階であって、表面はポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコールまたはポリマーポリオールを含むとさらに規定されるが、ポリマーポリオールはセルロースでありえない、段階；少なくとも1つのポリヌクレオチドが少なくとも1つの表面に結合する濃度に、混合物の塩濃度および有機溶媒濃度を調節する段階；混合物の残りから、少なくとも1つのポリヌクレオチドが表面に結合したまま、少なくとも1つの修飾された表面を分離する段階；ならびに表面に溶出緩衝液を接触させ、それによって少なくとも1つの表面から少なくとも1つのポリヌクレオチドを分離する段階。好ましいある態様において、ポリマーは、ポリマーポリオール、デキストラン、多糖、溶液中のポリヌクレオチドの少なくとも10%に結合するポリマー、および／または上記に規定するように、核酸と共沈するポリマーである。本発明のこの局面の好ましい態様において、表面は微粒子などの磁性粒子上であり、表面の分離は磁石を使用して実施してもよく、または磁石を使用して実施される。さらに特定の態様において、少なくとも1つの表面に結合している少なくとも1つのポリヌクレオチドは、表面に結合している1つまたは複数の不純物を溶解するが、少なくとも1つのポリヌクレオチドを少なくとも1つの表面に結合させておく緩衝溶液で洗浄される。少なくとも1つのポリヌクレオチドは、例えば、少なくとも1つのRNAとさらに規定してもよい。本発明の方法は、よりさらに具体的には、実質的なDNA結合を可能にしないが表面へのRNA結合を可能にする選択的な結合溶液を使用する段階を含む方法において、少なくとも1つの表面に結合した少なくとも1つのRNAを結合する段階を含んでもよい。あるこのような態様において、表面に結合したRNAは選択的な洗浄溶液で洗浄することができ、選択的な結合溶液は、表面に結合したDNAフラグメントを実質的に溶解するがRNAフラグメントを実質的に表面に結合させたままにする。または、本発明の方法を実施することにより、表面から少なくとも1つのRNAフラグメントを溶出するがDNAフラグメントを実質的に表面に結合させたままにする選択的溶出溶液で、少なくとも1つの表面に結合した少なくとも1つのRNAを溶出することができる。ある態様において、少なくとも1つのポリヌクレオチドは、少なくとも1つの支持体に結合したまま、1つまたは複数の酵素によって消化される。ポリヌクレオチドは本明細書において上記または下記の、および／または当業者に公知の種類のポリヌクレオチドのいずれかであってもよい。同様に、溶液は本明細書において上記または下記の、および／または当業者に公知の溶液のいずれかであってもよい。これらの方法は、本明細書に記載するポリヌクレオチドを単離または濃縮する方法とさらに規定してもよい。本発明の方法は上記の溶液を調製する段階も含んでもよく、調製する段階は細胞を溶解する段階を含んでもよい。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３９】
本発明の別の局面は、ポリヌクレオチドを含有する溶液から少なくとも1つのポリヌクレオチドを分離する方法であって、以下の段階を含む方法を提供する：樹脂を含む少なくとも1つの表面および少なくとも1つのポリヌクレオチドを含有する溶液を混合して混合物を作製する段階；少なくとも1つのポリヌクレオチドが少なくとも1つの表面に結合する濃度に、混合物の塩濃度および有機溶媒濃度を調節する段階；混合物の残りから、少なくとも1つのポリヌクレオチドが表面に結合したまま少なくとも1つの表面を分離する段階；ならびに表面に溶出緩衝液を接触させ、それによって少なくとも1つの表面から少なくとも1つのポリヌクレオチドを分離する段階。上記および本書類全体において考察される樹脂、ポリヌクレオチドおよび結合型ポリヌクレオチド、塩および対応する塩濃度ならびに溶液は、本発明のこの局面に有用であると考慮される。例えば、樹脂はイソシアネート、グリセロール(ジオール)、ピペリジノ-メチル、ポリDMAP、DIPAM、アミノメチル、ポリスチレンアルデヒド、トリス(2-アミノメチル)アミン、モルホリノ-メチル、BOBA、トリフェニル-ホスフィンまたはベンジルチオ-メチルであってもよい。