【手続補正書】
【提出日】平成24年7月20日(2012.7.20)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下：
【化３９】
2011528710.tif 000001
（式中、ｎは、１より大きく、ｍは、１〜１０から選択される整数であり、ｐは１〜２０から選択される数字であり、そしてＲはＨまたはアルキル基である）
であるリンカーを介して担体に結合させられたオリゴ糖を含むオリゴ糖−担体結合体を含む組成物であって、ここで、
該リンカーは該オリゴ糖にＯ結合され、かつ該担体にＮ結合され、そして
該組成物は、免疫応答を刺激することができる、組成物。
【請求項２】
（ａ）薬学的に許容される担体、
（ｂ）アジュバント、または
（ｃ）抗菌剤
をさらに含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
オリゴ糖−担体結合体を合成するための方法であって、
式ＩＸａまたはＩＸｂのリンカー：
【化４０】
2011528710.tif 000002
（式中、ｎは、１より大きく、ｍは、１〜１０から選択される整数であり、ｐは１〜２０から選択される数字であり、そしてＲはＨまたはアルキル基である）
に結合させられたオリゴ糖を、アミノ基が修飾されている担体と反応させ、続いて、式
【化４１】
2011528710.tif 000003
の化合物と反応させて、式ＶＩＩＩａまたはＶＩＩＩｂの構造を有しているリンカーによって担体化合物に結合させられたオリゴ糖を生じさせる工程を含む、方法。
【請求項４】
前記オリゴ糖−担体結合体が、１：１、２：１、３：１、４：１、５：１、６：１、７：１、８：１、９：１、１０：１、２０：１、３０：１、４０：１、５０：１、６０：１、７０：１、８０：１、９０：１、または１００：１の担体に対するオリゴ糖の比を有する、請求項１に記載の組成物、または請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記担体が、
（ａ）ペプチド、
（ｂ）タンパク質、または
（ｃ）破傷風トキソイド
である、請求項１に記載の組成物、または請求項３に記載の方法。
【請求項６】
前記オリゴ糖が
（ａ）β−１−６結合グルコサミン
（ｂ）２〜２０個の単量体の長さである、β−１−６結合グルコサミン
（ｃ）５〜１１個の単量体の長さである、β−１−６結合グルコサミン
（ｄ）７個、９個、または１１個の単量体の長さである、β−１−６結合グルコサミン、または
（ｅ）０〜４０％がアセチル化された、β−１−６結合グルコサミン
である、請求項１に記載の組成物、または請求項３に記載の方法。
【請求項７】
医薬としての使用のための、請求項１〜２、または４〜６のいずれか一項に記載の組成物、あるいは請求項３〜６のいずれか一項に記載の方法により合成されたオリゴ糖−担体結合体。
【請求項８】
請求項７に記載の使用のための組成物またはオリゴ糖−担体結合体であって、
（ａ）アジュバント、または
（ｂ）抗菌剤
とともに使用される、組成物またはオリゴ糖−担体結合体。
【請求項９】
ＰＮＡＧを産生する細菌種によって引き起こされる感染を有するか、または発症するリスクがある被験体において、感染の処置または予防に使用するための、請求項１〜２、または４〜６のいずれか一項に記載の組成物、あるいは請求項３〜６のいずれか一項に記載の方法により合成されたオリゴ糖−担体結合体。
【請求項１０】
請求項９に記載の使用のための組成物またはオリゴ糖−担体結合体であって、前記感染は、
（ａ）Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ感染
（ｂ）Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ感染
（ｃ）Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ感染、あるいは
（ｄ）Ｅ．ｃｏｌｉ感染、Ｙ．ｐｅｓｔｉｓ感染、Ｙ．ｅｎｔｅｒｃｏｌｉｔｉｃａ感染、Ｙ．ｐｓｅｕｄｏｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ感染、Ａｇｇｒｅｇａｔｉｂａｃｔｅｒ  ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｍｃｏｍｉｔａｎｓ感染、Ａｃｔｉｎｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｌｅｕｒｏｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ感染、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ  ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ感染、Ｂ．ｐａｒａｐｅｒｔｕｓｓｉｓ感染、Ｂ．ｂｒｏｎｃｈｉｓｅｐｔｉｃａ感染、アシネトバクター感染、バークホルデリア感染、Ｓｔｅｎａｔｒｏｐｈｏｍｏｎａｓ  ｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ感染、赤痢菌感染、またはクレブシエラ感染
である、組成物またはオリゴ糖−担体結合体。
【請求項１１】
請求項９に記載の使用のための組成物またはオリゴ糖−担体結合体であって、前記被験体は、
（ａ）Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓに曝されるリスクがある被験体、または
（ｂ）Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓに曝された被験体
である、組成物またはオリゴ糖−担体結合体。
【請求項１２】
請求項９に記載の使用のための組成物またはオリゴ糖−担体結合体であって、前記被験体は、
（ａ）ヒト、または
（ｂ）非ヒト
である、組成物またはオリゴ糖−担体結合体。
【請求項１３】
請求項９に記載の使用のための組成物またはオリゴ糖−担体結合体であって、アジュバントとともに使用される、組成物またはオリゴ糖−担体結合体。
【請求項１４】
抗体を産生する細胞を得る方法であって、該方法は、
ＰＮＡＧに特異的な抗体を産生するために有効な量の、請求項１〜２、または４〜６のいずれか一項に記載の組成物、あるいは請求項３〜６のいずれか一項に記載の方法により合成されたオリゴ糖−担体結合体を、非ヒト被験体に投与する工程、および
該非ヒト被験体から抗体を産生する細胞を採取する工程
を含み、該方法は、手術または治療によって動物の身体を処置する方法ではない、方法。
【請求項１５】
抗体を産生する方法であって、該方法は、
請求項１４に記載の方法にしたがって、抗体を産生する細胞を得る工程、
前記非ヒト被験体由来の抗体を産生する細胞を骨髄腫細胞に融合させる工程、および
融合体のサブクローンから産生された抗体を採取する工程
を含む、方法。
【請求項１６】
式ＩＩＩの化合物または式ＩＶの化合物
【化４２】
2011528710.tif 000004
式ＩＩＩ（スクシンイミジル４−アセチルスルファニルブチラート）
【化４３】
2011528710.tif 000005
式ＩＶ（パラ−ニトロフェニル４−アセチルスルファニルブチラート）
であって、式中、Ａｃはアセチル基である、式ＩＩＩの化合物または式ＩＶの化合物。
【請求項１７】
スクシンイミジル４−アセチルスルファニルブチラート（式ＩＩＩ）またはパラ−ニトロフェニル４−アセチルスルファニルブチラート（ＩＶ）を合成するための方法であって、
４−アセチルスルファニル酪酸（式Ｖ）：
【化４４】
2011528710.tif 000006
（式中、Ａｃはアセチル基である）：
を、スクシンイミジルトリフルオロアセテート（ＣＦ３ＣＯＯＳｕ）またはＮ−ニトロフェニルトリフルオロアセテート（ＣＦ３ＣＯＯｐＮｐ）と反応させて、それぞれ、スクシンイミジル４−アセチルスルファニルブチラート（式ＩＩＩ）またはパラ−ニトロフェニル４−アセチルスルファニルブチラート（式ＩＶ）を生じさせる工程を含む、方法。
【請求項１８】
担体に結合させられたオリゴ糖を合成するための方法であって、
該オリゴ糖を、最初に、式ＶａまたはＶｂの構造：
【化４５】
2011528710.tif 000007
（式中、ｍは、１〜１０より選択される数字であり、ｐは１〜２０から選択される数字であり、そしてＲはＨまたはアルキル基である）を有する化合物と、
２番目に、式Ｉの化合物：
【化４６】
2011528710.tif 000008
（式中、Ｘは任意の原子または基であり、Ｙは硫黄保護基であり、そしてｎは１より大きい）；
式ＩＩの化合物：
【化４７】
2011528710.tif 000009
（式中、Ｘは任意の原子または基であり、ｎは１より大きく、そしてＡｃはアセチル基である）；
式ＩＩＩの化合物、またはＩＶの化合物と、そして
３番目に、担体と
反応させる工程を含み、ここで、該オリゴ糖はβ−１−６結合グルコサミンである、方法。
【請求項１９】
Ｏ結合リンカーを持つオリゴ糖を含む組成物であって、ここで、前記リンカーが
【化４８】
2011528710.tif 000010
を含み、該オリゴ糖は、結合グルコサミンである、組成物。
【請求項２０】
前記結合グルコサミンは、
（ａ）β−１−６結合グルコサミンであるか、
（ｂ）２〜２０個の単量体の長さである、β−１−６結合グルコサミンであるか、
（ｃ）５〜１１個の単量体の長さである、β−１−６結合グルコサミンであるか、
（ｄ）７個、９個、または１１個の単量体の長さである、β−１−６結合グルコサミンであるか、
（ｅ）７個、９個、または１１個の単量体の長さであり、１００％がアセチル化された、β−１−６結合グルコサミンであるか、
（ｆ）７個、９個、または１１個の単量体の長さであり、５０％未満がアセチル化された、β−１−６結合グルコサミンであるか、
（ｇ）２〜２０個の単量体の長さであるか、
（ｈ）５〜１１個の単量体の長さであるか、
（ｉ）７個、９個、または１１個の単量体の長さであるか、
（ｊ）７個、９個、または１１個の単量体の長さであり、１００％がアセチル化されているか、または
（ｋ）７個、９個、または１１個の単量体の長さであり、５０％未満がアセチル化されている、請求項１９に記載の組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００９】
本発明は、抗原性組成物（例えば、ワクチンであるがこれに限定されない）を作製するための新規の方法および化合物を提供する。具体的には、本発明は、オリゴ糖抗原を修飾するための新規の方法を提供する。これらの方法は、（ａ）予め決定された順序の単糖単量体からなり、（ｂ）担体化合物に結合させられたオリゴ糖の制御合成を含む。得られる結合体は、目的の微生物多糖類抗原に対する免疫応答を（誘導によるかまたは増強によるかを問わず）よりうまく刺激できる。本明細書中に記載されるように、そのような免疫応答は、ブドウ球菌感染を含むがこれに限定されない様々な感染の処置および／または予防に有用である。
本発明は、例えば以下の項目を提供する。
（項目１）
式Ｉの化合物：
【化３１】
2011528710.tif 000011
式中、Ｘは任意の原子または基であり、Ｙは硫黄保護基であり、そしてｎは１より大きい。
（項目２）
Ｙがアシル基である、項目１に記載の化合物。
（項目３）
Ｙがアセチル基であり、化合物が式ＩＩの構造：
【化３２】
2011528710.tif 000012
を有し、式中、Ａｃはアセチル基である、項目１または２に記載の化合物。
（項目４）
前記化合物が式Ｉの活性化エステルである、項目１に記載の化合物。
（項目５）
前記化合物が、式Ｉの活性化エステルのシアノ、アジド、またはハロゲン誘導体である、項目１に記載の化合物。
（項目６）
前記化合物が式ＩＩＩの構造：
【化３３】
2011528710.tif 000013
を有し、式中、Ａｃはアセチル基である、項目４に記載の化合物。
（項目７）
前記化合物が式ＩＶの構造：
【化３４】
2011528710.tif 000014
を有し、式中、Ａｃはアセチル基である、項目４に記載の化合物。
（項目８）
Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジル４−アセチルスルファニルブチラート（式ＩＩＩ）を合成するための方法であって、
４−アセチルスルファニル酪酸（式Ｖ）：
【化３５】
2011528710.tif 000015
式中、Ａｃはアセチル基である：
を、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジルトリフルオロアセテート（ＣＦ３ＣＯＯＳｕ）と反応させて、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジル４−アセチルスルファニルブチラート（式ＩＩＩ）を生じさせる工程を含む、方法。
（項目９）
Ｎ−ニトロフェニル４−アセチルスルファニルブチラート（ＩＶ）を合成するための方法であって、
４−アセチルスルファニル酪酸（式Ｖ）：
【化３６】
2011528710.tif 000016
式中、Ａｃはアセチル基である：
を、Ｎ−ニトロフェニルトリフルオロアセテート（ＣＦ３ＣＯＯｐＮｐ）と反応させて、Ｎ−ニトロフェニル４−アセチルスルファニルブチラート（式ＩＶ）を生じさせる工程を含む、方法。
（項目１０）
担体に結合させられたオリゴ糖を合成するための方法であって、
該オリゴ糖を、最初に、式ＶａまたはＶｂの構造：
【化３７】
2011528710.tif 000017
を有しており、式中、ｍは、１〜１０より選択される数字であり、ｐは１〜２０から選択される数字であり、そしてＲはＨまたはアルキル基である化合物と、
２番目に、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、またはＩＶの化合物と、そして
３番目に、担体と
反応させる工程を含み、ここで、該オリゴ糖はβ−１−６結合グルコサミンである、方法。
（項目１１）
Ｏ結合リンカーを持つオリゴ糖を含む組成物であって、ここで、前記リンカーが
【化３８】
2011528710.tif 000018
を含む、組成物。
（項目１２）
前記オリゴ糖が、β−１−６結合グルコサミンである、項目１１に記載の組成物。
（項目１３）
前記オリゴ糖が、２〜２０個の単量体の長さである、項目１０または１１に記載の組成物。
（項目１４）
前記オリゴ糖が、５〜１１個の単量体の長さである、項目１０または１１に記載の組成物。
（項目１５）
前記オリゴ糖が、７個、９個、または１１個の単量体の長さである、項目１０または１１に記載の組成物。
（項目１６）
前記オリゴ糖は１００％がアセチル化される、項目１５に記載の組成物。
（項目１７）
前記多糖は５０％未満がアセチル化される、項目１５に記載の組成物。
（項目１８）
以下：
【化３９】
2011528710.tif 000019
であるリンカーを介して担体に結合させられたオリゴ糖を含むオリゴ糖−担体結合体を含む組成物であって、ここで、該リンカーは該オリゴ糖にＯ結合され、該担体にＮ結合される、組成物。
（項目１９）
前記担体がペプチドである、項目１８に記載の組成物。
（項目２０）
前記担体がタンパク質である、項目１８に記載の組成物。
（項目２１）
前記担体が破傷風トキソイドである、項目１８に記載の組成物。
（項目２２）
前記オリゴ糖がβ−１−６結合グルコサミンである、項目１８に記載の組成物。
（項目２３）
前記組成物が、１：１、２：１、３：１、４：１、５：１、６：１、７：１、８：１、９：１、１０：１、２０：１、３０：１、４０：１、５０：１、６０：１、７０：１、８０：１、９０：１、または１００：１の担体に対するオリゴ糖の比を有する、項目１８に記載の組成物。
（項目２４）
前記オリゴ糖が、２〜２０個の単量体の長さである、項目２２に記載の組成物。
（項目２５）
前記オリゴ糖が、５〜１１個の単量体の長さである、項目２２に記載の組成物。
（項目２６）
前記オリゴ糖が、７個、９個、または１１個の単量体の長さである、項目２２に記載の組成物。
（項目２７）
前記オリゴ糖は０〜４０％がアセチル化される、項目２２に記載の組成物。
（項目２８）
薬学的に許容される担体をさらに含む、項目１８に記載の組成物。
（項目２９）
アジュバントをさらに含む、項目１８に記載の組成物。
（項目３０）
抗菌剤をさらに含む、項目１８に記載の組成物。
（項目３１）
オリゴ糖−担体結合体を合成するための方法であって、
式ＩＸａまたはＩＸｂのリンカー：
【化４０】
2011528710.tif 000020
に結合させられたオリゴ糖を、アミノ基が修飾されている担体と反応させ、続いて、式
【化４１】
2011528710.tif 000021
の化合物と反応させて、式ＶＩＩＩａまたはＶＩＩＩｂの構造を有しているリンカーによって担体化合物に結合させられたオリゴ糖を生じさせる工程を含む、方法。
（項目３２）
前記オリゴ糖−担体結合体が、１：１、２：１、３：１、４：１、５：１、６：１、７：１、８：１、９：１、１０：１、２０：１、３０：１、４０：１、５０：１、６０：１、７０：１、８０：１、９０：１、または１００：１の担体に対するオリゴ糖の比を有する、項目３１に記載の方法。
（項目３３）
前記担体がペプチドである、項目３１に記載の方法。
（項目３４）
前記担体がタンパク質である、項目３１に記載の方法。
（項目３５）
前記担体が破傷風トキソイドである、項目３１に記載の方法。
（項目３６）
前記オリゴ糖がβ−１−６結合グルコサミンである、項目３１に記載の方法。
（項目３７）
前記オリゴ糖が、２〜２０個の単量体の長さである、項目３１に記載の方法。
（項目３８）
前記オリゴ糖が、５〜１１個の単量体の長さである、項目３１に記載の方法。
（項目３９）
前記オリゴ糖が、７個、９個、または１１個の単量体の長さである、項目３１に記載の方法。
（項目４０）
前記オリゴ糖は０〜４０％がアセチル化される、項目３６に記載の方法。
（項目４１）
被検体において免疫応答を刺激するための方法であって、
該被検体において免疫応答を刺激するために有効な量の、項目１８〜２７のいずれか１項に記載のオリゴ糖−担体結合体または項目３１〜４０のいずれか１項に記載の方法によって合成されたオリゴ糖−担体結合体を、該刺激を必要とする被検体に投与する工程を含む、方法。
（項目４２）
前記被検体がヒトである、項目４１に記載の方法。
（項目４３）
前記被検体が非ヒトである、項目４１に記載の方法。
（項目４４）
前記被検体から抗体または抗体を形成する細胞を単離する工程をさらに含む、項目４１、４２、または４３に記載の方法。
（項目４５）
前記被検体にアジュバントを投与する工程をさらに含む、項目４１、４２、４３、または４４に記載の方法。
（項目４６）
前記被検体に抗菌剤を投与する工程をさらに含む、項目４１〜４４、または４５に記載の方法。
（項目４７）
被検体の感染を処置または予防するための方法であって、
免疫応答を誘導するための有効量の、項目１８〜２７のいずれか１項に記載のオリゴ糖−担体結合体または項目３１〜４０のいずれか１項に記載の方法によって合成されたオリゴ糖−担体結合体を、感染を発症しているかまたは感染を発症するリスクがある被検体に投与する工程を含み、
ここで、該感染は、ＰＮＡＧを生産する細菌種によって引き起こされる、方法。
（項目４８）
前記感染がブドウ球菌感染である、項目４７に記載の方法。
（項目４９）
前記ブドウ球菌感染がＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ感染である、項目４７に記載の方法。
（項目５０）
前記ブドウ球菌感染がＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓである、項目４７に記載の方法。
（項目５１）
前記被検体がブドウ球菌に曝されるリスクがある、項目４７〜４９、または５０に記載の方法。
（項目５２）
前記被検体がブドウ球菌に曝されている、項目４７〜４９、または５０に記載の方法。
（項目５３）
前記感染が、Ｅ．ｃｏｌｉ感染、Ｙ．ｐｅｓｔｉｓ感染、Ｙ．ｅｎｔｅｒｃｏｌｉｔｉｃａ感染、Ｙ．ｐｓｅｕｄｏｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ感染、Ａｇｇｒｅｇａｔｉｂａｃｔｅｒ  ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｍｃｏｍｉｔａｎｓ感染、Ａｃｔｉｎｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｌｅｕｒｏｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ感染、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ  ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ感染、Ｂ．ｐａｒａｐｅｒｔｕｓｓｉｓ感染、Ｂ．ｂｒｏｎｃｈｉｓｅｐｔｉｃａ感染、アシネトバクター感染、バークホルデリア感染、Ｓｔｅｎａｔｒｏｐｈｏｍｏｎａｓ  ｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ感染、赤痢菌感染、またはクレブシエラ感染である、項目４７〜５１、または５２に記載の方法。
（項目５４）
前記オリゴ糖−担体結合体が、アジュバントとともに投与される、項目４７〜５２、または５３に記載の方法。
（項目５５）
抗体を生産するための方法であって：
ＰＮＡＧに特異的な抗体を生産させるための有効量の、項目１８〜２７のいずれか１項に記載のオリゴ糖−担体結合体または項目３１〜４０のいずれか１項に記載の方法によって合成されたオリゴ糖−担体結合体を被検体に投与する工程、および
前記被検体から抗体を単離する工程
を含む、方法。
（項目５６）
モノクローナル抗体を生産するための方法であって：
ＰＮＡＧに特異的な抗体を生産させるための有効量の、項目１８〜２７のいずれか１項に記載のオリゴ糖−担体結合体または項目３１〜４０のいずれか１項に記載の方法によって合成されたオリゴ糖−担体結合体を被検体に投与する工程、
該被検体から抗体を生産する細胞を採取する工程、
該被検体由来の抗体を生産する細胞を骨髄腫細胞に融合させる工程、および
融合体のサブクローンによって生産された抗体を採取する工程
を含む、方法。
（項目５７）
前記抗体がポリクローナル抗体である、項目５５に記載の方法。
（項目５８）
前記被検体がウサギである、項目５５または５６に記載の方法。
（項目５９）
前記被検体がヒトである、項目５５または５６に記載の方法。