【手続補正書】
【提出日】平成22年12月13日(2010.12.13)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ポリスチレン又はポリアクリレートを含んでなるポリマー微粒子であって、４族金属若しくは５族金属又はＡｌのうちの少なくとも１つの遷移金属の酸化物、又はそれらの混合物で形成されたコーティングを有する微粒子。
【請求項２】
磁性を有する、請求項１記載の微粒子。
【請求項３】
前記少なくとも１つの遷移金属酸化物によるコーティングの前に、磁性材料が、粒子の表面上へ吸着される、請求項２記載の微粒子。
【請求項４】
多孔性である、請求項１から３のいずれか１項記載の微粒子。
【請求項５】
前記磁性材料が、前記少なくとも１つの遷移金属酸化物によるコーティングの前に、粒子の孔中に堆積する、請求項２又は４記載の微粒子。
【請求項６】
前記少なくとも１つの遷移金属酸化物によるコーティングの前に、更なる高分子コーティング層によって被覆される、請求項１から５のいずれか１項記載の微粒子。
【請求項７】
単分散性である、請求項１から６のいずれか１項記載の微粒子。
【請求項８】
０．２〜１０μｍの直径を有する、請求項１から７のいずれか１項記載の微粒子。
【請求項９】
前記遷移金属酸化物が、チタン、タンタル、ニオブ又はジルコニウムの酸化物である、請求項１から８のいずれか１項記載の微粒子。
【請求項１０】
スチレンジビニルベンゼン粒子である、請求項１から９のいずれか１項記載の微粒子。
【請求項１１】
ポリスチレン又はポリアクリレートを含んでなるポリマー微粒子と、酸化物に変換されうる、４族若しくは５族の金属又はＡｌのうちの少なくとも１つの遷移金属化合物又はそれらの混合物とを反応させる段階と、
例えば熱及び／又は水を加えることにより、遷移金属酸化物コーティングを形成させる段階と
を有してなる、請求項１から１０のいずれか１項記載の微粒子の調製のための方法。
【請求項１２】
事前に、前記微粒子の出発材料の表面が官能化される、請求項１１記載の方法。
【請求項１３】
前記微粒子の表面が官能化されて、アミノ基、ヒドロキシ基、エポキシド基、カルボキシ基又はシロキシ基を担持する、請求項１２記載の方法。
【請求項１４】
前記遷移金属化合物がアルコキシドである、請求項１１から１３のいずれか１項記載の方法。
【請求項１５】
前記アルコキシドが、テトラ（Ｃ１−６）のジルコニウム又はチタンのアルコキシドである、請求項１４記載の方法。
【請求項１６】
少なくとも２つの段階で実施される方法であって、
第１の段階が、無水環境において遷移金属化合物と微粒子とを接触させることを含んでなり、
第２の段階が、該第１段階の生成物に水を添加することを含んでなる、
請求項１１から１５のいずれか１項記載の方法。
【請求項１７】
リン酸化タンパク質を含んでなるサンプルからリン酸化タンパク質を単離するための方法であって、請求項１から１０のいずれか１項記載のポリマー微粒子と該サンプルとを接触させる段階を含んでなる方法。
【請求項１８】
（Ｉ）１つまたは複数のリン酸化タンパク質を含んでなるサンプルを準備する段階と、
（ＩＩ）該サンプルと単分散のポリマー微粒子とを混合する段階と、
（ＩＩＩ）該サンプルと該粒子とをインキュベートする段階と、
（ＩＶ）該粒子を任意に磁場中で回収し、上清を除去する段階と、
任意で（Ｖ）１つまたは複数の単離されたリン酸化タンパク質を溶出させる段階と
を含んでなる、請求項１７記載の方法。
【請求項１９】
段階（Ｖ）が、フェニルホスフェート及び水酸化アンモニウムを含んでなる緩衝液の存在下で実施される、請求項１８記載の方法。
【請求項２０】
段階（ＩＩ）が、水、エタノール及び酢酸ナトリウムを含んでなり且つ３．９〜４．１のｐＨを有する緩衝液の存在下で実施される、請求項１８記載の方法。
【請求項２１】
段階（ＩＩ）が、ＤＨＢの非存在下で実施される、請求項１８記載の方法。
【請求項２２】
リン酸化タンパク質の単離における、請求項１から１０のいずれか１項記載のポリマー微粒子の使用。
【請求項２３】
フェニルホスフェート及び水酸化アンモニウムを含んでなる緩衝液。
【請求項２４】
核酸を含んでなるサンプルから核酸を単離するための方法であって、請求項１から１０のいずれか１項記載のポリマー微粒子と該サンプルとを接触させる段階を含んでなる方法。
【請求項２５】
核酸と微粒子との接触が、カオトロピック緩衝液の存在下で生じる、請求項２４記載の方法。
【請求項２６】
（Ｉ）１つまたは複数の核酸を含むサンプルを準備する段階と、
（ＩＩ）該サンプルと、遷移金属酸化物でコーティングされた微粒子とを前記したように混合する段階と、
（ＩＩＩ）該サンプルと該粒子とをインキュベートする段階と、
（ＩＶ）該粒子を任意に磁場中で回収し、上清を除去する段階と、
（Ｖ）任意で、１つまたは複数の単離された核酸を溶出させる段階と
を含んでなる、サンプルから核酸を単離するための請求項２４又は２５記載の方法。
【請求項２７】
核酸を単離するための、請求項１から１０のいずれか１項記載のポリマー微粒子の使用。
【請求項２８】
請求項１から１０のいずれか１項記載のポリマー微粒子と、カオトロピック緩衝液とを含んでなる、核酸単離用のキット。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１０３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１０３】
以下の実施例及び図を参照することにより、本発明を更に詳細に記載する。これらは本発明を限定することを目的とせず、単に例示することを目的とするものである。
[請求項1001]
ポリスチレン又はポリアクリレートを含んでなるポリマー微粒子であって、4族金属若しくは5族金属又はＡｌのうちの少なくとも1つの遷移金属の酸化物、又はそれらの混合物で形成されたコーティングを有する微粒子。
[請求項1002]
磁性を有する、請求項1001記載の微粒子。
[請求項1003]
前記少なくとも1つの遷移金属酸化物によるコーティングの前に、磁性材料が、粒子の表面上へ吸着される、請求項1002記載の微粒子。
[請求項1004]
多孔性である、請求項1001から1003のいずれか1項記載の微粒子。
[請求項1005]
前記磁性材料が、前記少なくとも1つの遷移金属酸化物によるコーティングの前に、粒子の孔中に沈着される、請求項1002又は1004記載の微粒子。
[請求項1006]
前記少なくとも1つの遷移金属酸化物によるコーティングの前に、更なる高分子コーティング層によって被覆される、請求項1001から1005のいずれか1項記載の微粒子。
[請求項1007]
単分散性である、請求項1001から1006のいずれか1項記載の微粒子。
[請求項1008]
0．2〜10μｍの直径を有する、請求項1001から1007のいずれか1項記載の微粒子。
[請求項1009]
前記遷移金属酸化物が、チタン、タンタル、ニオブ又はジルコニウムの酸化物である、請求項1001から1008のいずれか1項記載の微粒子。
[請求項1010]
スチレンジビニルベンゼン粒子である、請求項1001から1009のいずれか1項記載の微粒子。
[請求項1011]
ポリスチレン又はポリアクリレートを含んでなるポリマー微粒子と、酸化物に変換されうる、4族若しくは5族の金属又はＡｌのうちの少なくとも1つの遷移金属化合物又はそれらの混合物とを反応させる段階と、
例えば熱及び／又は水を加えることにより、遷移金属酸化物コーティングを形成させる段階と
を有してなる、請求項1001から1010のいずれか1項記載の微粒子の調製のための方法。
[請求項1012]
事前に、前記微粒子の出発材料の表面が官能化される、請求項1011記載の方法。
[請求項1013]
前記微粒子の表面が官能化されて、アミノ基、ヒドロキシ基、エポキシド基、カルボキシ基又はシロキシ基を担持する、請求項1012記載の方法。
[請求項1014]
前記遷移金属化合物がアルコキシドである、請求項1011から1013のいずれか1項記載の方法。
[請求項1015]
前記アルコキシドが、テトラ（Ｃ1−6）のジルコニウム又はチタンのアルコキシドである、請求項1014記載の方法。
[請求項1016]
少なくとも2つの段階で実施される方法であって、
第1の段階が、無水環境において遷移金属化合物と微粒子とを接触させることを含んでなり、
第2の段階が、該第1段階の生成物に水を添加することを含んでなる、
請求項1011から1015のいずれか1項記載の方法。
[請求項1017]
リン酸化タンパク質を含んでなるサンプルからリン酸化タンパク質を単離するための方法であって、請求項1001から1010記載のポリマー微粒子と該サンプルとを接触させる段階を含んでなる方法。
[請求項1018]
（Ｉ）1つまたは複数のリン酸化タンパク質を含んでなるサンプルを準備する段階と、
（ＩＩ）該サンプルと単分散のポリマー微粒子とを混合する段階と、
（ＩＩＩ）該サンプルと該粒子とをインキュベートする段階と、
（ＩＶ）該粒子を任意に磁場中で回収し、上清を除去する段階と、
任意で（Ｖ）1つまたは複数の単離されたリン酸化タンパク質を溶出させる段階と
を含んでなる、請求項1017記載の方法。
[請求項1019]
段階（Ｖ）が、フェニルホスフェート及び水酸化アンモニウムを含んでなる緩衝液の存在下で実施される、請求項1018記載の方法。
[請求項1020]
段階（ＩＩ）が、水、エタノール及び酢酸ナトリウムを含んでなり且つ3．9〜4．1のｐＨを有する緩衝液の存在下で実施される、請求項1018記載の方法。
[請求項1021]
段階（ＩＩ）が、ＤＨＢの非存在下で実施される、請求項1018記載の方法。
[請求項1022]
リン酸化タンパク質の単離における、請求項1001から1010のいずれか1項記載のポリマー微粒子の使用。
[請求項1023]
フェニルホスフェート及び水酸化アンモニウムを含んでなる緩衝液。
[請求項1024]
核酸を含んでなるサンプルから核酸を単離するための方法であって、請求項1001から1010のいずれか1項記載のポリマー微粒子と該サンプルとを接触させる段階を含んでなる方法。
[請求項1025]
核酸と微粒子との接触が、カオトロピック緩衝液の存在下で生じる、請求項1024記載の方法。
[請求項1026]
（Ｉ）1つまたは複数の核酸を含むサンプルを準備する段階と、
（ＩＩ）該サンプルと、遷移金属酸化物でコーティングされた微粒子とを前記したように混合する段階と、
（ＩＩＩ）該サンプルと該粒子とをインキュベートする段階と、
（ＩＶ）該粒子を任意に磁場中で回収し、上清を除去する段階と、
（Ｖ）任意で、1つまたは複数の単離された核酸を溶出させる段階と
を含んでなる、サンプルから核酸を単離するための請求1024又は1025記載の方法。
[請求項1027]
核酸の単離への、請求項1001から1010のいずれか1項記載のポリマー微粒子の使用。
[請求項1028]
請求項1001から1010記載のポリマー微粒子と、カオトロピック緩衝液とを含んでなる、核酸単離用のキット。