【手続補正書】
【提出日】平成24年4月16日(2012.4.16)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１７】
本発明によれば、個体においてα−シヌクレイン関連疾患の発症を遅延させるためまたはα−シヌクレイン関連疾患を治療するための抗体であって、該抗体は、安定化可溶性α−シヌクレインオリゴマーに結合し、該安定化可溶性α−シヌクレインオリゴマーが、α−シヌクレインの非安定化オリゴマーよりも非可溶性凝集形態への形成率が低い抗体が提供される。
１つの実施形態では、本発明は、個体においてα−シヌクレイン関連疾患の発症を遅延させるためまたはα−シヌクレイン関連疾患を治療するためのワクチンであって、α−シヌクレインの非安定化オリゴマーよりも非可溶性凝集形態への形成率が低い、単離された安定化可溶性α−シヌクレインオリゴマーの治療有効量を含有するワクチンを対象とする。もう１つの実施形態では、本発明は、本発明によるワクチンを個体に投与することを含む、個体においてα−シヌクレイン関連疾患の発症を遅延させるためまたはα−シヌクレイン関連疾患を治療するための方法を対象とする。さらなる実施形態では、本発明は、可溶性α−シヌクレインに対する抗体を作製するための、本発明によるワクチンの使用を対象とする。
【手続補正２】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
個体においてα−シヌクレイン関連疾患の発症を遅延させるためまたはα−シヌクレイン関連疾患を治療するための抗体であって、該抗体が、安定化可溶性α−シヌクレインオリゴマーに結合し、該安定化可溶性α−シヌクレインオリゴマーが、α−シヌクレインの非安定化オリゴマーよりも非可溶性凝集形態への形成率が低い抗体。
【請求項２】
前記安定化可溶性α−シヌクレインオリゴマーが、安定化可溶性α−シヌクレインプロトフィブリルを含む請求項１記載の抗体。
【請求項３】
前記安定化可溶性α−シヌクレインオリゴマーが、疎水性有機物質で修飾されたα−シヌクレインを含む請求項１または２記載の抗体。
【請求項４】
前記疎水性有機物質が、飽和、不飽和もしくは多不飽和脂肪酸、またはそれらの誘導体もしくは組合せを含む請求項３記載の抗体。
【請求項５】
前記疎水性有機物質が、アルデヒドを含む請求項３記載の抗体。
【請求項６】
前記アルデヒドが、アルケナールを含む請求項５記載の抗体。
【請求項７】
前記アルケナールが、α，β−不飽和である請求項６記載の抗体。
【請求項８】
前記アルデヒドが、４−ヒドロキシ−２−ノネナール、マロンジアルデヒド、４−オキソ−２−ノネナールおよびアクロレイン、ならびにそれらの任意の組合せからなる群より選択される請求項５記載の抗体。
【請求項９】
前記アルデヒドが、２つのアルデヒド基を連結する２〜２５個の炭素原子の一不飽和または多不飽和炭素鎖を有するジアルデヒドである請求項５記載の抗体。
【請求項１０】
前記疎水性有機物質が、非イオン性界面活性剤もしくは両性イオン性界面活性剤、またはそれらの任意の組合せを含む請求項４記載の抗体。
【請求項１１】
前記界面活性剤が、ポリエチレングリコールｐ−（１，１，３，３−テトラメチルブチル）−フェニルエーテル、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレート、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート、脂肪族アルコールの非イオン性ポリオキシエチレンエーテルおよび（３−［（３−コルアミドプロピル）ジメチルアンモニオ］−１−プロパンスルホネート）（ＣＨＡＰＳ）、ならびにそれらの任意の組合せからなる群より選択される請求項１０記載の抗体。
【請求項１２】
前記疎水性有機物質が、トリグリセリド、リン脂質、スフィンゴ脂質、ガングリオシド、コレステロール、コレステロールエステル、長鎖アルコールおよびそれらの任意の組合せからなる群より選択される少なくとも１つの化合物を含む請求項３記載の抗体。
【請求項１３】
前記疎水性有機物質が、デオキシコール酸塩、コール酸塩およびタウロコール酸塩、ならびにそれらの任意の組合せからなる群より選択される胆汁酸誘導体を含む請求項３記載の抗体。
【請求項１４】
前記安定化可溶性α−シヌクレインオリゴマーが、１−α−ヒドロキシ−セコステロールで修飾されたα−シヌクレインを含む請求項１記載の抗体。
【請求項１５】
前記安定化可溶性α−シヌクレインオリゴマーが、酒石酸ジスクシンイミジル、スベリイミド酸ビススルホスクシンイミジルおよび３，３−ジチオビス−スルホスクシンイミジルプロピオネート、ならびにそれらの任意の組合せからなる群より選択される少なくとも１つのタンパク質架橋剤で架橋されたα−シヌクレインを含む請求項１記載の抗体。
【請求項１６】
前記α−シヌクレインが、野生型α−シヌクレイン（配列番号１）を含む請求項１乃至１５のいずれか１項に記載の抗体。
【請求項１７】
前記α−シヌクレインが、Ａ３０Ｐ（配列番号２）、Ｅ４６Ｋ（配列番号３）およびＡ５３Ｔ（配列番号４）、ならびにそれらの任意の組合せからなる群より選択される突然変異体を含む請求項１乃至１６のいずれか１項に記載の抗体。
【請求項１８】
前記α−シヌクレインが、１またはそれ以上のＳｅｒおよび／またはＡｌａアミノ酸が部位指定突然変異誘発によってＣｙｓで置換された野生型α−シヌクレインを含む請求項１乃至１７のいずれか１項に記載の抗体。
【請求項１９】
前記抗体が、モノクローナルである請求項１乃至１８のいずれか１項に記載の抗体。
【請求項２０】
前記抗体が、ヒト、ヒト化である、またはヒトにおける抗原性を低減するように修飾されている請求項１乃至１９のいずれか１項に記載の抗体。
【請求項２１】
前記抗原性の低減が、抗体のＴ細胞エピトープを修飾するまたは排除することによって為された請求項２０記載の抗体。
【請求項２２】
前記抗体が、ＩｇＧクラスである請求項１乃至２１のいずれか１項に記載の抗体。
【請求項２３】
前記抗体が、ＩｇＧ１またはＩｇＧ４サブクラスである請求項２２記載の抗体。
【請求項２４】
前記抗体が、低い補体活性を有する請求項２３記載の抗体。
【請求項２５】
前記の低い補体活性が、重鎖のアミノ酸配列の２９７位または３３１位で抗体のＦｃ部分を突然変異させることによって達成された請求項２４記載の抗体。
【請求項２６】
前記の低い補体活性が、抗体を酵素的に脱グリコシル化することによって達成された請求項２４記載の抗体。
【請求項２７】
前記抗体が、Ｆａｂフラグメントである請求項１９記載の抗体。
【請求項２８】
前記抗体が、Ｆ（ａｂ）、Ｆ（ａｂ）２およびダイアボディから選択される請求項２７記載の抗体。
【請求項２９】
前記抗体が、ポリクローナルである請求項１乃至１８のいずれか１項に記載の抗体。
【請求項３０】
前記抗体が、一本鎖抗体である請求項２９記載の抗体。
【請求項３１】
前記一本鎖抗体が、ｓｃＦｖ−ＦｃおよびｓｃＦａｂから選択される請求項３０記載の抗体。
【請求項３２】
前記抗体が、Ｆａｂフラグメントである請求項２９記載の抗体。
【請求項３３】
前記Ｆａｂフラグメントが、Ｆ（ａｂ）、Ｆ（ａｂ）２およびダイアボディから選択される請求項３２記載の抗体。
【請求項３４】
個体においてα−シヌクレイン関連疾患の発症を遅延させるためまたはα−シヌクレイン関連疾患を治療するための抗体を作製する方法であって、該抗体またはそのフラグメントが可溶性α−シヌクレインに結合し、該方法が、抗原を非ヒト動物に投与すること、および抗原に対して形成された抗体を収集することを含み、該抗原が、α−シヌクレインの非安定化オリゴマーよりも非可溶性凝集形態への形成率が低い、安定化された可溶性α−シヌクレインオリゴマーを含む方法。
【請求項３５】
請求項１乃至３３のいずれか１項に記載の抗体、ならびにヒトまたは動物での使用のために医薬的に許容される抗菌剤、アジュバント、緩衝剤、塩、ｐＨ調整剤、界面活性剤およびそれらの任意の組合せからなる群より選択される１またはそれ以上の賦形剤を含有する抗体組成物。
【請求項３６】
前記組成物が、凍結乾燥されている請求項３５記載の組成物。
【請求項３７】
前記組成物が、凍結乾燥の間および／または凍結乾燥後の抗体の安定性を高めるために賦形剤と共に凍結乾燥されている請求項３５または３６記載の組成物。
【請求項３８】
前記賦形剤が、マンニトールおよび／またはトレハロースである請求項３７記載の組成物。
【請求項３９】
請求項１乃至３３のいずれか１項に記載の抗体を、可溶性α−シヌクレインを含有するまたは含有することが疑われる生物学的試料に添加すること、および該抗体と可溶性α−シヌクレインの間で形成された任意の複合体を検出し、その濃度を測定することを含む、インビトロでα−シヌクレインオリゴマーを検出する方法。
【請求項４０】
インビボでα−シヌクレインオリゴマーを検出するための請求項１乃至３３のいずれか１項に記載の抗体であって、該抗体が、検出可能なマーカで標識されている抗体。
【請求項４１】
前記α−シヌクレイン関連疾患が、パーキンソン病、レビー小体および／またはレビー神経突起を伴う認知症、アルツハイマー病、ダウン症候群、多系統委縮症（ＭＳＡ）、レビー小体病変を有する他の疾患、アルツハイマー病症候群、筋委縮性側索硬化症、前頭側頭型認知症、ハンチントン病、プリオン病、クロイツフェルト−ヤコブ病、ゲルストマン−シュトロイスラー−シャインカー症候群、クールー、致死性家族性不眠症、脳血管アミロイドーシス、緑内障、加齢性黄斑変性、精神症候群、統合失調症および統合失調症様障害からなる群より選択される請求項１記載の抗体。
【請求項４２】
前記α−シヌクレイン関連疾患が、パーキンソン病である請求項４１記載の抗体。
【請求項４３】
個体においてα−シヌクレイン関連疾患の発症を遅延させるためまたはα−シヌクレイン関連疾患を治療するためのワクチンであって、該ワクチンが、単離された安定化可溶性α−シヌクレインオリゴマーの治療有効量を含有し、かつ、該安定化可溶性α−シヌクレインオリゴマーが、α−シヌクレインの非安定化オリゴマーよりも非可溶性凝集形態への形成率が低いワクチン。
【請求項４４】
安定化可溶性α−シヌクレインオリゴマーに結合することが可能であり、かつ、安定化可溶性α−シヌクレインオリゴマーから作製される抗体であって、該安定化可溶性α−シヌクレインオリゴマーが、α−シヌクレインの非安定化オリゴマーよりも非可溶性凝集形態への形成率が低い抗体。