【手続補正書】
【提出日】平成24年10月16日(2012.10.16)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
組換え血液因子および血液因子分子１個につき少なくとも１個かつ１０個以下の水溶性ポリマー部分を含む、改変血液因子分子。
【請求項２】
前記改変血液因子分子が血液因子分子１個につき少なくとも２、３、４、５、６、７、８または９個の水溶性ポリマー部分を含む、請求項１に記載の改変血液因子分子。
【請求項３】
前記改変血液因子分子が、
ｉ）血液因子分子１個につき８個の水溶性ポリマー部分を含む、
ｉｉ）血液因子分子１個につき４個以上８個以下の水溶性ポリマー部分を含む、
ｉｉｉ）血液因子分子１個につき１個以上４個以下の水溶性ポリマー部分を含む、
ｉｖ）血液因子分子１個につき４個以上６個以下の水溶性ポリマー部分を含む、
ｖ）血液因子分子１個につき１個または２個の水溶性ポリマー部分を含む、
ｖｉ）血液因子分子１個につき５個の水溶性ポリマー部分を含む、または
ｖｉｉ）血液因子分子１個につき４個の水溶性ポリマー部分を含む、
請求項１に記載の改変血液因子分子。
【請求項４】
前記水溶性ポリマー部分が遊離可能なリンカーを介して前記血液因子分子に結合している、請求項１から３のいずれか一項に記載の改変血液因子分子。
【請求項５】
前記遊離可能なリンカーが加水分解性リンカーまたは安定なリンカーである、請求項４に記載の改変血液因子分子。
【請求項６】
前記水溶性ポリマーが、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリ（プロピレングリコール）（ＰＰＧ）、エチレングリコールとプロピレングリコールの共重合体、ポリエチレンオキシド（ＰＥＯ）、ポリ（オキシエチル化ポリオール）、ポリ（オレフィンアルコール）、ポリ（ビニルピロリドン）、ポリ（ヒドロキシアルキルメタクリルアミド）、ポリ（ヒドロキシアルキルメタクリレート）、ポリ（サッカライド）、ポリ（α−ヒドロキシ酸）、ポリ（ビニルアルコール）、ポリホスファゼン、ポリオキサゾリン、ポリ（Ｎ−アクリロイルモルホリン）、ポリ（アルキレンオキシド）ポリマー類、ポリ（マレイン酸）、ポリ（ＤＬ−アラニン）、多糖類、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、デンプンもしくはデンプン誘導体、ヒアルロン酸、キチン、ポリ（メタ）アクリレート、ポリシアル酸（ＰＳＡ）およびそれらの組合せからなる群から選択される、請求項１から５のいずれか一項に記載の改変血液因子分子。
【請求項７】
前記水溶性ポリマーがポリエチレングリコール（ＰＥＧ）である、請求項６に記載の改変血液因子分子。
【請求項８】
前記ＰＥＧが２ｋＤ〜２００ｋＤの分子量を有する、請求項７に記載の改変血液因子分子。
【請求項９】
前記血液因子が、第ＩＩ因子、第ＩＩＩ因子、第Ｖ因子、第ＶＩＩ因子、第ＶＩＩａ因子、第ＶＩＩＩ因子、第ＩＸ因子、第Ｘ因子、第ＸＩ因子、フォン・ヴィレブランド因子およびフィブリノーゲンからなる群から選択される、請求項１から８のいずれか一項に記載の改変血液因子分子。
【請求項１０】
前記血液因子分子がヒトのものである、請求項９に記載の改変血液因子分子。
【請求項１１】
前記血液因子分子が第ＶＩＩＩ因子である、請求項９に記載の改変血液因子分子。
【請求項１２】
前記改変血液因子分子が第ＶＩＩＩ因子分子１個につき少なくとも４個かつ１０個未満のＰＥＧ部分を含む、請求項１１に記載の改変血液因子分子。
【請求項１３】
ｉ）第ＶＩＩＩ因子分子１個につき４個以上８個以下のポリエチレングリコール部分を含む、
ｉｉ）第ＶＩＩＩ因子分子１個につき４個以上６個以下のポリエチレングリコール部分を含む、
ｉｉｉ）第ＶＩＩＩ因子分子１個につき１個以上４個以下のポリエチレングリコール部分を含む、または
ｉｖ）第ＶＩＩＩ因子分子１個につき１個または２個のポリエチレングリコール部分を含む、
請求項１に記載の改変血液因子分子。
【請求項１４】
前記ポリエチレングリコール部分が、遊離可能なリンカー、加水分解性リンカー、または安定なリンカーを介して結合している、請求項１３に記載の改変血液因子分子。
【請求項１５】
ｉ）第ＶＩＩＩ因子分子１個につき４個以上６個以下のポリシアル酸部分を含む、
ｉｉ）第ＶＩＩＩ因子分子１個につき１個以上４個以下のポリシアル酸部分を含む、または
ｉｉｉ）第ＶＩＩＩ因子分子１個につき１個または２個のポリシアル酸部分を含む、
請求項１に記載の改変血液因子分子。
【請求項１６】
前記ポリシアル酸部分が、遊離可能なリンカー、加水分解性リンカー、または安定なリンカーを介して結合している、請求項１５に記載の改変血液因子分子。
【請求項１７】
ｉ）第ＶＩＩａ因子分子１個につき１個以上６個以下の水溶性ポリマー部分を含む、または
ｉｉ）第ＶＩＩａ因子分子１個につき１個または２個の水溶性部分を含む、
請求項１に記載の改変血液因子分子。
【請求項１８】
ｉ）第ＩＸ因子分子１個につき１個以上６個以下の水溶性ポリマー部分を含む、または
ｉｉ）第ＩＸ因子分子１個につき１個または２個の水溶性部分を含む、
請求項１に記載の改変血液因子分子。
【請求項１９】
前記水溶性ポリマー部分が、安定なリンカー、遊離可能なリンカーまたは加水分解性リンカーを介して結合している、請求項１８に記載の改変血液因子分子。
【請求項２０】
前記水溶性ポリマーが、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）およびポリシアル酸（ＰＳＡ）からなる群から選択される、請求項１７から１９のいずれか一項に記載の改変血液因子分子。
【請求項２１】
請求項１から２０のいずれか一項に記載の改変血液因子分子を含む医薬組成物。
【請求項２２】
少数の水溶性ポリマーとコンジュゲートしている改変血液因子分子をｉｎ  ｖｉｔｒｏで作製する方法であって、前記血液因子分子１個に対して少なくとも１個かつ１０個未満の水溶性ポリマーの結合を可能にする条件下で、前記血液因子分子を、血液因子分子１個に対して３０Ｍ過剰以下の水溶性ポリマーであるモル濃度過剰の水溶性ポリマーと接触させる工程を含む方法。
【請求項２３】
前記モル濃度過剰の水溶性ポリマーが２Ｍ過剰〜３０Ｍ過剰、または１０Ｍ過剰〜２５Ｍ過剰である、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記水溶性ポリマーがポリエチレングリコールである、請求項２２から２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５】
前記血液因子が第ＶＩＩＩ因子である、請求項２２から２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６】
請求項１から２０のいずれか一項に記載の改変血液因子分子の治療的有効量を含む、血液凝固障害に罹患している被験体を治療するための組成物。
【請求項２７】
前記血液凝固障害が、血友病Ａ、血友病Ｂ、フォン・ヴィレブランド症候群、第Ｘ因子欠乏症、第ＶＩＩ因子欠乏症、アレキサンダー病、ローゼンタール症候群（血友病Ｃ）および第ＸＩＩＩ因子欠乏症からなる群から選択される、請求項２６に記載の組成物。
【請求項２８】
前記血液凝固障害が血友病Ａであり、前記改変血液因子分子が第ＶＩＩＩ因子分子を含む、請求項２６に記載の組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３３】
さらに別の実施形態では、本方法で用いられる血液因子は、第ＩＩ因子、第ＩＩＩ因子、第Ｖ因子、第ＶＩＩ因子、第ＶＩＩａ因子、第ＶＩＩＩ因子、第ＩＸ因子、第Ｘ因子、第ＸＩ因子、フォン・ヴィレブランド因子およびフィブリノーゲンからなる群から選択される。一実施形態では、血液因子分子は第ＶＩＩＩ因子である。さらに別の実施形態では、血液因子はＦＶＩＩａである。さらなる実施形態では、血液因子はＦＩＸである。さらなる実施形態では、血液因子分子はヒトのものである。
例えば、本発明は以下の項目を提供する。
（項目１）
組換え血液因子および血液因子１分子につき少なくとも１個かつ１０個以下の水溶性ポリマー部分を含む、改変血液因子分子。
（項目２）
前記改変血液因子が血液因子１分子につき少なくとも２、３、４、５、６、７、８または９個の水溶性ポリマー部分を含む、項目１に記載の改変血液因子分子。
（項目３）
前記改変血液因子が血液因子１分子につき８個の水溶性ポリマー部分を含む、項目１に記載の改変血液因子分子。
（項目４）
前記改変血液因子が血液因子１分子につき４個以上８個以下の水溶性ポリマー部分を含む、項目１に記載の改変血液因子分子。
（項目５）
前記改変血液因子が血液因子１分子につき１個以上４個以下の水溶性ポリマー部分を含む、項目１に記載の改変血液因子分子。
（項目６）
前記改変血液因子が血液因子１分子につき４個以上６個以下の水溶性ポリマー部分を含む、項目１に記載の改変血液因子分子。
（項目７）
前記改変血液因子が血液因子１分子につき１個または２個の水溶性ポリマー部分を含む、項目１に記載の改変血液因子分子。
（項目８）
前記改変血液因子が血液因子１分子につき５個の水溶性ポリマー部分を含む、項目１に記載の改変血液因子分子。
（項目９）
前記改変血液因子が血液因子１分子につき４個の水溶性ポリマー部分を含む、項目１に記載の改変血液因子分子。
（項目１０）
前記水溶性ポリマー部分が遊離可能なリンカーを介して前記血液因子分子に結合している、項目１から９のいずれか一項に記載の改変血液因子分子。
（項目１１）
前記遊離可能なリンカーが加水分解性リンカーである、項目１０に記載の改変血液因子分子。
（項目１２）
前記水溶性ポリマー部分が安定なリンカーを介して前記血液因子分子に結合している、項目１から９のいずれか一項に記載の改変血液因子分子。
（項目１３）
前記水溶性ポリマーが、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリ（プロピレングリコール）（ＰＰＧ）、エチレングリコールとプロピレングリコールの共重合体、ポリエチレンオキシド（ＰＥＯ）、ポリ（オキシエチル化ポリオール）、ポリ（オレフィンアルコール）、ポリ（ビニルピロリドン）、ポリ（ヒドロキシアルキルメタクリルアミド）、ポリ（ヒドロキシアルキルメタクリレート）、ポリ（サッカライド）、ポリ（α−ヒドロキシ酸）、ポリ（ビニルアルコール）、ポリホスファゼン、ポリオキサゾリン、ポリ（Ｎ−アクリロイルモルホリン）、ポリ（アルキレンオキシド）ポリマー類、ポリ（マレイン酸）、ポリ（ＤＬ−アラニン）、多糖類、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、デンプンもしくはデンプン誘導体、ヒアルロン酸、キチン、ポリ（メタ）アクリレート、ポリシアル酸（ＰＳＡ）およびそれらの組合せからなる群から選択される、項目１から１２のいずれか一項に記載の改変血液因子分子。
（項目１４）
前記水溶性ポリマーがポリエチレングリコール（ＰＥＧ）である、項目１３に記載の改変血液因子分子。
（項目１５）
前記ＰＥＧが直鎖状ＰＥＧ部分である、項目１４に記載の改変血液因子分子。
（項目１６）
前記ＰＥＧが分枝状ＰＥＧ部分である、項目１４に記載の改変血液因子分子。
（項目１７）
前記ＰＥＧが２ｋＤ〜２００ｋＤの分子量を有する、項目１４から１６のいずれか一項に記載の改変血液因子分子。
（項目１８）
前記血液因子が、第ＩＩ因子、第ＩＩＩ因子、第Ｖ因子、第ＶＩＩ因子、第ＶＩＩａ因子、第ＶＩＩＩ因子、第ＩＸ因子、第Ｘ因子、第ＸＩ因子、フォン・ヴィレブランド因子およびフィブリノーゲンからなる群から選択される、項目１から１７のいずれか一項に記載の改変血液因子分子。
（項目１９）
前記血液因子分子がヒトのものである、項目１８に記載の改変血液因子分子。
（項目２０）
前記血液因子分子が第ＶＩＩＩ因子である、項目１８に記載の改変血液因子分子。
（項目２１）
前記改変血液因子が第ＶＩＩＩ因子１分子につき少なくとも４個かつ１０個未満のＰＥＧ部分を含む、項目２０に記載の改変血液因子分子。
（項目２２）
前記血液因子分子が第ＶＩＩａ因子である、項目１８に記載の改変血液因子。
（項目２３）
前記血液因子分子が第ＩＸ因子である、項目１８に記載の改変血液因子。
（項目２４）
第ＶＩＩＩ因子１分子につき４個以上８個以下のポリエチレングリコール部分を含む、項目１に記載の改変血液因子分子。
（項目２５）
第ＶＩＩＩ因子１分子につき４個以上６個以下のポリエチレングリコール部分を含む、項目１に記載の改変血液因子分子。
（項目２６）
第ＶＩＩＩ因子１分子につき１個以上４個以下のポリエチレングリコール部分を含む、項目１に記載の改変血液因子分子。
（項目２７）
前記ポリエチレングリコール部分が、遊離可能なリンカーまたは加水分解性リンカーを介して結合している、項目２５または２６に記載の改変血液因子分子。
（項目２８）
第ＶＩＩＩ因子１分子につき１個または２個のポリエチレングリコール部分を含む、項目１に記載の改変血液因子分子。
（項目２９）
前記ポリエチレングリコール部分が安定なリンカーを介して結合している、項目２８に記載の改変血液因子分子。
（項目３０）
第ＶＩＩＩ因子１分子につき４個以上６個以下のポリシアル酸部分を含む、項目１に記載の改変血液因子分子。
（項目３１）
第ＶＩＩＩ因子１分子につき１個以上４個以下のポリシアル酸部分を含む、項目１に記載の改変血液因子分子。
（項目３２）
前記ポリシアル酸部分が、遊離可能なリンカーまたは加水分解性リンカーを介して結合している、項目３０または３１に記載の改変血液因子分子。
（項目３３）
第ＶＩＩＩ因子１分子につき１個または２個のポリシアル酸部分を含む、項目１に記載の改変血液因子分子。
（項目３４）
前記ポリシアル酸部分が安定なリンカーを介して結合している、項目３３に記載の改変血液因子分子。
（項目３５）
第ＶＩＩａ因子１分子につき１個以上６個以下の水溶性ポリマー部分を含む、項目１に記載の改変血液因子分子。
（項目３６）
第ＩＸ因子１分子につき１個以上６個以下の水溶性ポリマー部分を含む、項目１に記載の改変血液因子分子。
（項目３７）
前記水溶性ポリマー部分が、遊離可能なリンカーまたは加水分解性リンカーを介して結合している、項目３５または３６に記載の改変血液因子分子。
（項目３８）
第ＶＩＩａ因子１分子につき１個または２個の水溶性部分を含む、項目１に記載の改変血液因子分子。
（項目３９）
第ＩＸ因子１分子につき１個または２個の水溶性部分を含む、項目１に記載の改変血液因子分子。
（項目４０）
前記水溶性ポリマー部分が、安定なリンカー、遊離可能なリンカーまたは加水分解性リンカーを介して結合している、項目３８または３９に記載の改変血液因子分子。
（項目４１）
前記水溶性ポリマーが、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）およびポリシアル酸（ＰＳＡ）からなる群から選択される、項目３５から４０のいずれか一項に記載の改変血液因子分子。
（項目４２）
項目１から４１のいずれか一項に記載の改変血液因子を含む医薬組成物。
（項目４３）
少数の水溶性ポリマーとコンジュゲートしている改変血液因子分子を作製する方法であって、前記血液因子１分子に対して少なくとも１個かつ１０個未満の水溶性ポリマーの結合を可能にする条件下で、前記血液因子分子を、血液因子１分子に対して３０Ｍ過剰以下の水溶性ポリマーであるモル濃度過剰の水溶性ポリマーと接触させる工程を含む方法。
（項目４４）
前記モル濃度過剰の水溶性ポリマーが２Ｍ過剰〜３０Ｍ過剰である、項目４３に記載の方法。
（項目４５）
前記モル濃度過剰の水溶性ポリマーが１０Ｍ過剰〜２５Ｍ過剰である、項目４３に記載の方法。
（項目４６）
前記水溶性ポリマーがポリエチレングリコールである、項目４３から４５のいずれか一項に記載の方法。
（項目４７）
前記血液因子が第ＶＩＩＩ因子である、項目４３から４６のいずれか一項に記載の方法。
（項目４８）
項目１から４１のいずれか一項に記載の改変血液因子の治療的有効量を患者に投与する工程を含む、血液凝固障害に罹患している被験体を治療する方法。
（項目４９）
前記血液凝固障害が、血友病Ａ、血友病Ｂ、フォン・ヴィレブランド症候群、第Ｘ因子欠乏症、第ＶＩＩ因子欠乏症、アレキサンダー病、ローゼンタール症候群（血友病Ｃ）および第ＸＩＩＩ因子欠乏症からなる群から選択される、項目４８に記載の方法。
（項目５０）
前記血液凝固障害が血友病Ａであり、前記改変血液因子が第ＶＩＩＩ因子分子を含む、項目４８に記載の方法。