【手続補正書】
【提出日】平成24年7月9日(2012.7.9)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
生物学的に活性な官能基の複数のフィールドが付着された基材を含む細胞増殖材料であって、該生物学的に活性な官能基のフィールドが、生物学的に活性な官能基を実質的に含有しない基材の領域によってお互いに分離されており、フィールドおよび領域が、該生物学的に活性な官能基のフィールドのピッチが実質的に一定であるドメインを画成しており、生物学的に活性な官能基のフィールド間のピッチが、およそ75nm〜2,000nmである、細胞増殖材料。
【請求項２】
生物学的に活性な官能基が、メチル基;イソプロピル基;シクロヘキシル基;アリール基;アリル基;アルキニル基;ヒドロキシル（アルコール）基;エーテル基;モルホリノ基;エチレングリコシル化基;ポリエチレングリコシル化基;単糖、例えば、グルコース、リボース、ヘパロース、またはマンノースなど;カルボキシレート基;スルフェート基;ホスフェート基;フェノキシド基;アミノ基;ジアルキルアミノ基;アルキルアミノ基;ホスフィン基;およびアミノ酸から成る群より選択される、請求項1記載の細胞増殖材料。
【請求項３】
生物学的に活性な官能基が、メチル、カルボキシル、アミノ、ヒドロキシル、またはPEGである、請求項1記載の細胞増殖材料。
【請求項４】
基材が、シリカ;ガラス;ニトロセルロース;ポリカプロラクトン（PCL）;ポリ乳酸（PLLA）;ポリグリコール酸（PGA）;ポリ（ウレタン）;ヒドロキシアパタイト;リン酸三カルシウム;チタン;チタン合金;形状記憶合金;およびステンレス鋼から成る群より選択される、請求項1記載の細胞増殖材料。
【請求項５】
生物学的に活性な官能基のフィールド間のピッチが、およそ140nm〜1,000nmである、請求項1記載の細胞増殖材料。
【請求項６】
生物学的に活性な官能基のフィールド間のピッチが、およそ250nm〜350nmである、請求項1記載の細胞増殖材料。
【請求項７】
生物学的に活性な官能基が、孤立した官能基である、請求項1記載の細胞増殖材料。
【請求項８】
生物学的な官能基がメチル基であり、かつフィールド間のピッチが200nm〜750nmである、幹細胞集団または前駆細胞集団の増幅のための請求項1記載の細胞増殖材料。
【請求項９】
生物学的な官能基がカルボキシル基;メチル基;およびヒドロキシル基から選択され、かつフィールド間のピッチが140nm〜1,000nmである、軟骨形成細胞の産生のための請求項1記載の細胞増殖材料。
【請求項１０】
生物学的な官能基がアミノ基およびカルボキシル基から選択され、かつフィールド間のピッチが140nm〜1,000nmである、骨形成細胞の産生のための請求項1記載の細胞増殖材料。
【請求項１１】
生物学的な官能基がアミノ基またはヒドロキシル基であり、かつフィールド間のピッチが140nm〜1,000nmである、神経形成細胞の産生のための請求項1記載の細胞増殖材料。
【請求項１２】
生物学的な官能基がアミノ基であり、かつフィールド間のピッチが140nm〜1,000nmである、筋原細胞の産生のための請求項1記載の細胞増殖材料。
【請求項１３】
生物学的な官能基がヒドロキシル基であり、かつフィールド間のピッチが140nm〜1,000nmである、脂質生成細胞の産生のための請求項1記載の細胞増殖材料。
【請求項１４】
幹細胞または前駆細胞を請求項8〜13のいずれか一項記載の細胞増殖材料に接触させる工程と、該細胞を、幹細胞または前駆細胞の増幅されたまたは分化した集団が産生されるまで培養する工程とを含む、幹細胞集団または前駆細胞集団を増幅するまたは分化する方法。
【請求項１５】
基材上に生物学的に活性な化合物の複数の離散したフィールドを形成するために、チップを使用して少なくとも1種類の生物学的に活性な化合物を基材上に堆積させる工程であって、複数の離散したフィールドを含む基材が、75nm〜2,000nmの、フィールド間のピッチを含む、工程、
増幅された細胞集団が産生されるまで、複数の離散したフィールドを含む基材上で少なくとも1種類の細胞を増殖させる工程
を含む方法であって、
該離散したフィールドが、離散したフィールドを有さない基材上で増殖させる場合と比較して、細胞集団の均質性を改善し、かつ増幅された細胞集団中の不均質性のレベルが40％以下である、方法。
【請求項１６】
細胞が、幹細胞または前駆細胞であり、増殖が、細胞の分化を誘導せず、かつインビボまたはインビトロの増殖である、請求項15記載の方法。
【請求項１７】
基材が、ドメインを形成する複数の離散したフィールドを含み、かつ該ドメインが、実質的に一定の140nm〜1,000nmのピッチを含む、請求項15記載の方法。
【請求項１８】
離散したフィールドが、100nm未満の少なくとも1つの寸法を有し、かつ100nm未満の平均直径を有するドットである、請求項15記載の方法。
【請求項１９】
基材が、2次元または3次元基材である、請求項15記載の方法。
【請求項２０】
生物学的に活性な官能基の複数のフィールドを作成するために、複数の生物学的に活性な官能基を基材上に堆積する工程を含む方法であって、
該生物学的に活性な官能基のフィールドが、生物学的に活性な官能基を実質的に含有しない基材の領域によってお互いに分離されるように配置され、
堆積されたフィールドおよび領域が、生物学的に活性な官能基のフィールドのピッチが実質的に一定であるドメインを画成しており、
生物学的に活性な官能基がナノリソグラフィ技術によって堆積される、
請求項1〜13のいずれか一項記載の細胞増殖材料を製造する方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２９】
本発明の材料または方法を使用した脂質生成系列の産生は、いくつかの治療用途を有し得る脂肪細胞の産生を可能にする。例えば、脂肪細胞は、傷害または疾病のために失われた構造体の再構成において使用され得る。このことが有益であり得る状況としては、豊胸または乳房の再造形において使用される代替組織、および（例えば、火傷または類似の傷害の後の）皮膚移植術に関連して使用される皮下脂肪層の産生が挙げられる。本発明の材料または方法を使用して産生される脂肪細胞は、自然な脂肪組織産生が不足するポーランド症候群などの先天性欠損の処置においても有用であり得る。
[本発明1001]
生物学的に活性な官能基の複数のフィールドが付着された基材を含む細胞増殖材料であって、該生物学的に活性な官能基のフィールドが、生物学的に活性な官能基を実質的に含有しない基材の領域によってお互いに分離されており、フィールドおよび領域が、該生物学的に活性な官能基のフィールドのピッチが実質的に一定であるドメインを画成している、細胞増殖材料。
[本発明1002]
生物学的に活性な官能基が、メチル基;イソプロピル基;シクロヘキシル基;アリール基;アリル基;アルキニル基;ヒドロキシル（アルコール）基;エーテル基;モルホリノ基;エチレングリコシル化基;ポリエチレングリコシル化基;単糖、例えば、グルコース、リボース、ヘパロース、またはマンノースなど;カルボキシレート基;スルフェート基;ホスフェート基;フェノキシド基;アミノ基;ジアルキルアミノ基;アルキルアミノ基;ホスフィン基;およびアミノ酸から成る群より選択される、本発明1001の材料。
[本発明1003]
生物学的に活性な官能基のフィールド間のピッチが、およそ75nm〜2,000nmである、本発明1001の材料。
[本発明1004]
生物学的に活性な官能基のフィールド間のピッチが、およそ140nm〜1,000nmである、本発明1003の材料。
[本発明1005]
基材が、シリカ;ガラス;ニトロセルロース;ポリカプロラクトン（PCL）;ポリ乳酸（PLLA）;ポリグリコール酸（PGA）;ポリ（ウレタン）;ヒドロキシアパタイト;リン酸三カルシウム;チタン;チタン合金;形状記憶合金;およびステンレス鋼から成る群より選択される、本発明1001の材料。
[本発明1006]
生物学的に活性な官能基の複数のフィールドが付着されている基材を含む、生体細胞の接着を阻害するための材料であって、該生物学的に活性な官能基のフィールドが、生物学的に活性な官能基を実質的に含有しない基材の領域によってお互いに分離されている、材料。
[本発明1007]
医薬として使用するための、本発明1001〜1006のいずれかの材料。
[本発明1008]
メチル官能基を含む複数のフィールドが付着されている基材を含む、幹細胞集団または前駆細胞集団の増幅のための細胞増殖材料であって、該メチル官能基のフィールドが、メチル官能基を実質的に含有しない基材の領域によってお互いに分離され、かつフィールド間のピッチがおよそ200nm〜750nmである、細胞増殖材料。
[本発明1009]
フィールド間のピッチが、およそ280nmである、本発明1008の細胞増殖材料。
[本発明1010]
カルボキシル基;メチル基;およびヒドロキシル基から成る群より選択される生物学的に活性な官能基の複数のフィールドが付着されている基材を含む、軟骨形成細胞の産生のための細胞増殖材料であって、該生物学的に活性な官能基のフィールドが、生物学的に活性な官能基を実質的に含有しない基材の領域によってお互いに分離されている、細胞増殖材料。
[本発明1011]
アミノ基およびカルボキシル基から成る群より選択される生物学的に活性な官能基の複数のフィールドが付着されている基材を含む、骨形成細胞の産生のための細胞増殖材料であって、該生物学的に活性な官能基のフィールドが、生物学的に活性な官能基を実質的に含有しない基材の領域によってお互いに分離されている、細胞増殖材料。
[本発明1012]
アミノ基およびヒドロキシル基から成る群より選択される生物学的に活性な官能基の複数のフィールドが付着されている基材を含む、神経形成細胞の産生のための細胞増殖材料であって、該生物学的に活性な官能基のフィールドが、生物学的に活性な官能基を実質的に含有しない基材の領域によってお互いに分離されている、細胞増殖材料。
[本発明1013]
アミノ基の複数のフィールドが付着されている基材を含む、筋原細胞の産生のための細胞増殖材料であって、該アミノ基のフィールドが、アミノ基を実質的に含有しない基材の領域によってお互いに分離されている、細胞増殖材料。
[本発明1014]
ヒドロキシル基の複数のフィールドが付着されている基材を含む、脂質生成細胞の産生のための細胞増殖材料であって、該ヒドロキシル基のフィールドが、ヒドロキシル基を実質的に含有しない基材の領域によってお互いに分離されている、細胞増殖材料。
[本発明1015]
フィールドおよび領域が、生物学的に活性な官能基のフィールドのピッチが実質的に一定であるドメインを画成している、本発明1006〜1014のいずれかの材料。
[本発明1016]
生物学的に活性な官能基が、孤立した官能基である、本発明1001〜1015のいずれかの細胞増殖材料。
[本発明1017]
生物学的に活性な官能基の複数のフィールドを作成するために、複数の生物学的に活性な官能基を基材上に堆積する工程を含む方法であって、該生物学的に活性な官能基のフィールドが、生物学的に活性な官能基を実質的に含有しない基材の領域によってお互いに分離されるように配置される、本発明1001〜1016のいずれかの材料を製造する方法。
[本発明1018]
堆積されたフィールドおよび領域が、生物学的に活性な官能基のフィールドのピッチが実質的に一定であるドメインを画成している、本発明1017の方法。
[本発明1019]
生物学的に活性な官能基がナノリソグラフィ技術によって堆積される、本発明1017または本発明1018の方法。
[本発明1020]
ナノリソグラフィ技術が、ディップペンナノリソグラフィ、ナノインプリントリソグラフィ、直接原子間力顕微鏡、エッチング斜め堆積法、レーザーアブレーション、レーザー堆積法、X線リソグラフィマスターのレプリカ成形、マイクロコンタクトプリンティング、およびエッチング電子ビーム直接描画リソグラフィから成る群より選択される、本発明1019の方法。
[本発明1021]
ナノリソグラフィ技術がディップペンナノリソグラフィを含む、本発明1020の方法。
[本発明1022]
生物学的に活性な官能基が、インク構成物の形態で堆積される、本発明1021の方法。
[本発明1023]
幹細胞または前駆細胞を本発明1008の細胞増殖材料に接触させる工程と、該細胞を、増幅された集団が産生されるまで培養する工程とを含む、幹細胞集団または前駆細胞集団を増幅する方法。
[本発明1024]
幹細胞または前駆細胞を本発明1010の細胞増殖材料に接触させる工程と、該細胞を、軟骨形成細胞が産生されるまで培養する工程とを含む、軟骨形成細胞を産生する方法。
[本発明1025]
幹細胞または前駆細胞を本発明1011の細胞増殖材料に接触させる工程と、該細胞を、骨形成細胞が産生されるまで培養する工程とを含む、骨形成細胞を産生する方法。
[本発明1026]
幹細胞または前駆細胞を本発明1012の細胞増殖材料に接触させる工程と、該細胞を、神経形成細胞が産生されるまで培養する工程とを含む、神経形成細胞を産生する方法。
[本発明1027]
幹細胞または前駆細胞を本発明1013の細胞増殖材料に接触させる工程と、該細胞を、筋原細胞が産生されるまで培養する工程とを含む、筋原細胞を産生する方法。
[本発明1028]
幹細胞または前駆細胞を本発明1014の細胞増殖材料に接触させる工程と、該細胞を、脂質生成細胞が産生されるまで培養する工程とを含む、脂質生成細胞を産生する方法。
[本発明1029]
ディップペンナノリソグラフにより基材に印刷する工程と、続いて基材上の少なくとも1種類の細胞の増殖を改善する工程とを含む、方法。
[本発明1030]
前記細胞が幹細胞であり、前記改善が幹細胞分化の改善または幹細胞集団もしくは前駆細胞集団の増幅の改善である、本発明1029の方法。
[本発明1031]
基材上に生物学的に活性な化合物の複数の離散したフィールドを形成するために、チップを使用して少なくとも1種類の生物学的に活性な化合物を基材上に堆積させる工程、
増幅された細胞集団が産生されるまで、複数の離散したフィールドを含む基材上で少なくとも1種類の細胞を増殖させる工程
を含む方法であって、
該離散したフィールドが、離散したフィールドを有さない基材上で増殖させる場合と比較して、細胞集団の均質性または再現性を改善する、方法。
[本発明1032]
離散したフィールドを有さない基材が、少なくとも1種類の生物学的に活性な化合物を含む実質的に均質な表面を含む、本発明1031の方法。
[本発明1033]
離散したフィールドが、細胞集団の均質性を改善する、本発明1031の方法。
[本発明1034]
増殖が、インビボまたはインビトロでの増殖である、本発明1031の方法。
[本発明1035]
増殖が、細胞の分化を誘導する、本発明1031の方法。
[本発明1036]
増殖が、細胞の分化を誘導しない、本発明1031の方法。
[本発明1037]
細胞が、幹細胞または前駆細胞である、本発明1031の方法。
[本発明1038]
複数の離散したフィールドを含む基材が、75nm〜2,000nmの、フィールド間のピッチを含む、本発明1031の方法。
[本発明1039]
複数の離散したフィールドを含む基材が、140nm〜1,000nmのピッチを含む、本発明1031の方法。
[本発明1040]
基材が、ドメインを形成する複数の離散したフィールドを含み、かつ該ドメインが、実質的に一定のピッチを含む、本発明1031の方法。
[本発明1041]
離散したフィールドが、100nm未満の少なくとも1つの寸法を有し、かつ100nm未満の平均直径を有するドットである、本発明1031の方法。
[本発明1042]
基材が、2次元または3次元基材である、本発明1031の方法。
[本発明1043]
離散したフィールドが、ドット形状を有する、本発明1031の方法。
[本発明1044]
生物学的に活性な化合物が、少なくとも1種類の孤立した生物学的に活性な基を含む、本発明1031の方法。
[本発明1045]
チップが、走査型プローブチップである、本発明1031の方法。
[本発明1046]
堆積工程が、ナノリソグラフィを使用して実施される、本発明1031の方法。
[本発明1047]
堆積工程が、ディップペンナノリソグラフィを使用して実施される、本発明1031の方法。
[本発明1048]
増幅された細胞集団中の不均質性のレベルが40％以下となるように、均質性を改善する、本発明1031の方法。
[本発明1049]
少なくとも24時間の増殖試験において均質性または再現性を測定するか、または少なくとも28日間の増殖試験において均質性または再現性を測定する、本発明1031の方法。
[本発明1050]
基材上に生物学的に活性な化合物の複数の離散したフィールドを提供する工程、
増幅された細胞集団が産生されるまで、複数の離散したフィールドを含む基材上で少なくとも1種類の細胞を増殖させる工程
を含む方法であって、
該離散したフィールドが、離散したフィールドを有さない基材上で増殖させる場合と比較して、細胞集団の均質性または再現性を改善する、方法。
[本発明1051]
基材上に生物学的に活性な化合物の複数の離散したフィールドを形成するために、チップを使用して少なくとも1種類の生物学的に活性な化合物を基材上に堆積させる工程、
分化した細胞集団が産生されるまで、複数の離散したフィールドを含む基材上で少なくとも1種類の細胞を増殖させる工程
を含む方法であって、
該離散したフィールドが、該離散したフィールドを有さない基材上で増殖させる場合と比較して、細胞集団の均質性または再現性を改善する、方法。
[本発明1052]
基材、
基材上の、生物学的に活性な分子の複数のフィールド、
フィールド間の、生物学的に活性な分子を含有しない領域
を含む、細胞を培養するための物品であって、
その上で培養された細胞集団が、フィールドを有さない生物学的に活性な分子の表面上で培養された細胞集団よりも、より均質または再現可能である、物品。
[本発明1053]
本発明1052の物品を含むキット。