【手続補正書】
【提出日】平成24年2月1日(2012.2.1)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
インフルエンザ・ウイルス・ポリメラーゼ・サブユニットＰＡのＣ末端ＰＡＣとＰＢ１のＮ末端ＰＢ１Ｎとの複合体の結晶体であって、前記インフルエンザ・ウイルス・ポリメラーゼ・サブユニットＰＡのＣ末端ＰＡＣは前記インフルエンザ・ウイルス・ポリメラーゼ・サブユニットＰＡの約２０１〜約３０１位アミノ酸から約６５０〜末端のアミノ酸までであり、前記ＰＢ１のＮ末端ＰＢ１Ｎは前記インフルエンザ・ウイルス・ポリメラーゼ・サブユニットＰＢ１のＮ末端ＰＢ１Ｎの４８個以内のアミノ酸のオリゴペプチドであり、前記結晶体の三次元構造中の原子は表１中で挙げた少なくとも４０％の原子座標を持ち、又はインフルエンザ・ウイルス・ポリメラーゼ・サブユニットＰＡのＣ末端ＰＡＣとＰＢ１のＮ末端ＰＢ１Ｎとの複合体の結晶体の三次元構造中少なくとも４０％のアミノ酸の主鎖炭素骨格の原子構造座標と表１中の座標の平均二乗偏差が１．７Å以下である、インフルエンザ・ウイルス・ポリメラーゼ・サブユニットＰＡのＣ末端ＰＡＣとＰＢ１のＮ末端ＰＢ１Ｎとの複合体の結晶体。
【請求項２】
前記インフルエンザ・ウイルスはＡ、Ｂ、Ｃ型インフルエンザ・ウイルスより選択され、好ましくは、前記インフルエンザ・ウイルスはＡ型インフルエンザ・ウイルス株：Ａ／ｇｏｏｓｅ／Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ／１／９６、Ａ／Ｂｒｅｖｉｇ  Ｍｉｓｓｉｏｎ／１／１９１８；Ｂ型インフルエンザ・ウイルス株：Ｂ／Ａｎｎ  Ａｒｂｏｒ／１／１９６６又はＣ型インフルエンザ・ウイルス株：Ｃ／ＪＪ／１９５０より選択される、請求項１に記載のインフルエンザ・ウイルス・ポリメラーゼ・サブユニットＰＡのＣ末端ＰＡＣとＰＢ１のＮ末端ＰＢ１Ｎとの複合体の結晶体。
【請求項３】
前記複合体の結晶体はＰ４（１）２（１）２の空間群を持ち、格子定数は約α＝ｂ＝１２２Å、ｃ＝１３３Å、α＝β＝γ＝９０°である、請求項１に記載のインフルエンザ・ウイルス・ポリメラーゼ・サブユニットＰＡのＣ末端ＰＡＣとＰＢ１のＮ末端ＰＢ１Ｎとの複合体の結晶体。
【請求項４】
前記Ａ型インフルエンザ・ウイルスのポリメラーゼ・サブユニットＰＡのＣ末端ＰＡＣはインフルエンザ・ウイルス・ポリメラーゼＰＡのＣ末端ＰＡＣ中のαへリックス４、即ち４０６−４１４位を含むアミノ酸領域、αへリックス５、即ち４４０−４５０位を含むアミノ酸領域、αへリックス８、即ち５８３−６０３位を含むアミノ酸領域、αへリックス９、即ち６０８−６１３位を含むアミノ酸領域、αへリックス１０、即ち６３３−６４９位を含むアミノ酸領域、αへリックス１１、即ち６５３−６７３位を含むアミノ酸領域、αへリックス１２、即ち６８３−６９１位を含むアミノ酸領域、とαへリックス１３、即ち６９８−７１４位を含むアミノ酸領域、及び二つのβシート：βシート８とβシート９、それぞれ６１９−６２３位を含むアミノ酸領域と６２８−６３１位を含むアミノ酸領域、がＰＡのＣ末端ＰＡＣの第一部分を構成し、Ａ型インフルエンザ・ウイルスのポリメラーゼ・サブユニットＰＡのＣ末端ＰＡＣは主要なβシート折り畳み断片より成り、これらのβシートにはβシート１、即ち２９０−２９２位を含むアミノ酸領域、βシート２、即ち３１７−３２４位を含むアミノ酸領域、βシート３、即ち４８０−４９１位を含むアミノ酸領域、βシート４、即ち４９６−５０６位を含むアミノ酸領域、βシート５、即ち５１７−５２６位を含むアミノ酸領域、βシート６、即ち５４１−５５０位を含むアミノ酸領域、βシート７、即ち５５７−５７１位を含むアミノ酸領域などが含まれ、これらのβシートが共同でＰＡのＣ末端ＰＡＣ第二部分の折り畳みシート層の主な部分を構成し、前記Ａ型インフルエンザ・ウイルスのポリメラーゼ・サブユニットＰＡのＣ末端ＰＡＣはαへリックス１、即ち３０３−３１１位を含むアミノ酸領域、αへリックス２、即ち３３１−３４９位を含むアミノ酸領域、αへリックス３、即ち３６４−３６９位を含むアミノ酸領域、αへリックス６、即ち４５４−４７５位を含むアミノ酸領域及びαへリックス７、即ち５７２−５７８位を含むアミノ酸領域、がＰＡのＣ末端ＰＡＣ第二部分の前記折り畳みβシート層の周囲を囲い、その中、Ｂ型又はＣ型インフルエンザ・ウイルスにおけるＡ型インフルエンザ・ウイルスに対応する領域のアミノ酸はそれぞれ図１Ａと図１Ｂ及び図１Ｃ及び図１０Ａと図１０Ｂに示すとおりである、請求項２に記載のインフルエンザ・ウイルス・ポリメラーゼ・サブユニットＰＡのＣ末端ＰＡＣとＰＢ１のＮ末端ＰＢ１Ｎとの複合体の結晶体。
【請求項５】
Ａ型インフルエンザ・ウイルスのポリメラーゼ・サブユニットＰＡのＣ末端ＰＡＣは主にαへリックス８、αへリックス１０、αへリックス１１とαへリックス１３を通してＰＢ１のＮ末端ＰＢ１Ｎ相互作用に関与し、好ましくは、インフルエンザ・ウイルス・ポリメラーゼ・サブユニットＰＡのＣ末端ＰＡＣのαへリックス１１のＬｅｕ６６６、αへリックス１３のＰｈｅ７１０、αへリックス１０のＶａｌ６３６、Ｌｅｕ６４０、αへリックス１３のＴｒｐ７０６、αへリックス１１のＧｌｎ６７０から構成される群より選択される少なくとも一つのアミノ酸をインフルエンザ・ウイルス・ポリメラーゼ・サブユニットＰＢ１との相互作用に関与させ、Ｂ型又はＣ型インフルエンザ・ウイルスにおけるＡ型インフルエンザ・ウイルスに対応する領域のアミノ酸はそれぞれ図１Ａと図１Ｂ及び図１Ｃ及び図１０Ａと図１０Ｂに示すとおりである、請求項２に記載のインフルエンザ・ウイルス・ポリメラーゼ・サブユニットＰＡのＣ末端ＰＡＣとＰＢ１のＮ末端ＰＢ１Ｎとの複合体の結晶体。
【請求項６】
前記Ａ型インフルエンザ・ウイルス・ポリメラーゼ・サブユニットＰＡのＣ末端ＰＡＣ中のαへリックス９とαへリックス１０の間の環状ペプチド・セグメントのＩｌｅ６２１、Ｇｌｙ６２２、Ｇｌｕ６２３、Ｔｈｒ６１８とＰｒｏ６２０から構成される群より選択される少なくとも一つのアミノ酸を、インフルエンザ・ウイルス・ポリメラーゼ・サブユニットＰＢ１との相互作用に関与させ、Ｂ型又はＣ型インフルエンザ・ウイルスにおけるＡ型インフルエンザ・ウイルスに対応する領域のアミノ酸はそれぞれ図１Ａと図１Ｂ及び図１Ｃ及び図１０Ａと図１０Ｂに示すとおりである、請求項２に記載のインフルエンザ・ウイルス・ポリメラーゼ・サブユニットＰＡのＣ末端ＰＡＣとＰＢ１のＮ末端ＰＢ１Ｎとの複合体の結晶体。
【請求項７】
インフルエンザ・ウイルス・ポリメラーゼ・サブユニットＰＡのＣ末端ＰＡＣ中のＡｓｎ６４７、Ｇｌｎ４０８、Ｃｙｓ５８４、Ｇｌｎ５８７、Ｇｌｎ５９１、Ｌｙｓ６４３、Ａｓｎ６４７、Ｓｅｒ６５９、Ｌｙｓ６６３、Ｔｒｐ６９９、Ａｓｎ７０３から構成される群より選択される少なくとも一つのアミノ酸が、インフルエンザ・ウイルス・ポリメラーゼ・サブユニットＰＡのＣ末端ＰＡＣのインフルエンザ・ウイルス・ポリメラーゼ・サブユニットＰＢ１Ｎと結合する「袋状」のアミノ・サイトを構成し、前記Ｂ型又はＣ型インフルエンザ・ウイルスにおけるＡ型インフルエンザ・ウイルスに対応する領域のアミノ酸はそれぞれ図１Ａと図１Ｂ及び図１Ｃ及び図１０Ａと図１０Ｂに示すとおりである、請求項２に記載のインフルエンザ・ウイルス・ポリメラーゼ・サブユニットＰＡのＣ末端ＰＡＣとＰＢ１のＮ末端ＰＢ１Ｎとの複合体の結晶体。
【請求項８】
インフルエンザ・ウイルス・ポリメラーゼ・サブユニットＰＡのＣ末端ＰＡＣ中のＴｒｐ４０６、Ｇｌｕ４１０、Ｌｙｓ４６１、Ｇｌｕ５２４、Ｐｈｅ５２５、Ｓｅｒ５２６、Ｌｙｓ５３６、Ｌｙｓ５３９、Ｔｙｒ５４０、Ｌｅｕ５６３、Ｔｙｒ５６４、Ａｒｇ５６６及びＬｙｓ５７４から構成される群より選択される少なくとも一つのアミノ酸はヌクレオチド、ＲＮＡ若しくはその他小分子又はタンパク質と結合するＰＡＣ中の主溝及びチャンネルの形成に関与し、前記Ｂ型又はＣ型インフルエンザ・ウイルスにおけるＡ型インフルエンザ・ウイルスに対応する領域のアミノ酸はそれぞれ図１Ａと図１Ｂ及び図１Ｃ及び図１０Ａと図１０Ｂに示すとおりである、請求項２に記載のインフルエンザ・ウイルス・ポリメラーゼ・サブユニットＰＡのＣ末端ＰＡＣとＰＢ１のＮ末端ＰＢ１Ｎとの複合体の結晶体。
【請求項９】
前記Ａ型インフルエンザ・ウイルス・ポリメラーゼ・サブユニットＰＡのＣ末端ＰＡＣの３７０から４０５位アミノ酸残基が一つの大環状を構成し、前記Ｂ型又はＣ型インフルエンザ・ウイルスにおけるＡ型インフルエンザ・ウイルスに対応する領域のアミノ酸はそれぞれ図１Ａと図１Ｂ及び図１Ｃ及び図１０Ａと図１０Ｂに示すとおりである、請求項２に記載のインフルエンザ・ウイルス・ポリメラーゼ・サブユニットＰＡのＣ末端ＰＡＣとＰＢ１のＮ末端ＰＢ１Ｎとの複合体の結晶体。
【請求項１０】
前記Ａ型インフルエンザ・ウイルス・ポリメラーゼ・サブユニットＰＡのＣ末端ＰＡＣのαへリックス１２、αへリックス１３をその他タンパク質の相互作用に関与させ、好ましくは、αへリックス１２及αへリックス１３中のＩｌｅ６９０、Ｇｌｕ６９１、Ｇｌｕ６９２、Ｃｙｓ６９３、Ａｓｎ６９６から構成される群より選択される少なくとも一つのアミノ酸を、その他タンパク質との相互作用に関与させ、前記Ｂ型又はＣ型インフルエンザ・ウイルスにおけるＡ型インフルエンザ・ウイルスに対応する領域のアミノ酸はそれぞれ図１Ａと図１Ｂ及び図１Ｃ及び図１０Ａと図１０Ｂに示すとおりである、請求項４に記載のインフルエンザ・ウイルス・ポリメラーゼ・サブユニットＰＡのＣ末端ＰＡＣとＰＢ１のＮ末端ＰＢ１Ｎとの複合体の結晶体。
【請求項１１】
前記Ａ型インフルエンザ・ウイルス・ポリメラーゼ・サブユニットＰＡのＣ末端ＰＡＣのＬｙｓ５０６、Ｇｌｙ５０７、Ａｒｇ５０８、Ｓｅｒ５０９、Ｈｉｓ５１０、Ｌｅｕ５１１、Ａｒｇ５１２、Ａｓｎ５１３及びＡｓｐ５１４から構成される群より選択される少なくとも一つのアミノ酸を、その他タンパク質との相互作用に関与させ、Ｈｉｓ５１０はポリメラーゼ複合体ＲＮａｓｅの一部分を構成し、前記Ｂ型又はＣ型インフルエンザ・ウイルスにおけるＡ型インフルエンザ・ウイルスに対応する領域のアミノ酸はそれぞれ図１Ａと図１Ｂ及び図１Ｃ及び図１０Ａと図１０Ｂに示すとおりである、請求項４に記載のインフルエンザ・ウイルス・ポリメラーゼ・サブユニットＰＡのＣ末端ＰＡＣとＰＢ１のＮ末端ＰＢ１Ｎとの複合体の結晶体。
【請求項１２】
インフルエンザ・ウイルス・ポリメラーゼ・サブユニットＰＡのＣ末端ＰＡＣ中のαへリックス８、αへリックス１０、αへリックス１１とαへリックス１３から構成される群より選択される少なくとも一つのメンバーと結合するポリペプチド、タンパク質、無機若しくは有機化合物であって、前記インフルエンザ・ウイルスはＡ、Ｂ、Ｃ型インフルエンザ・ウイルスより選択され、好ましくは、前記インフルエンザ・ウイルスはＡ型インフルエンザ・ウイルス株：Ａ／ｇｏｏｓｅ／Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ／１／９６、Ａ／Ｂｒｅｖｉｇ  Ｍｉｓｓｉｏｎ／１／１９１８；Ｂ型インフルエンザ・ウイルス株：Ｂ／Ａｎｎ  Ａｒｂｏｒ／１／１９６６又はＣ型インフルエンザ・ウイルス株：Ｃ／ＪＪ／１９５０より選択され、好ましくは、前記ポリペプチド、タンパク質、無機若しくは有機化合物は前記Ａ型インフルエンザ・ウイルス・ポリメラーゼ・サブユニットＰＡのＣ末端ＰＡＣのαへリックス１１のＬｅｕ６６６、αへリックス１３のＰｈｅ７１０、αへリックス１０のＶａｌ６３６、Ｌｅｕ６４０、αへリックス１３のＴｒｐ７０６、αへリックス１１のＧｌｎ６７０から構成される群より選択される少なくとも一つのアミノ酸と結合するポリペプチド、タンパク質、無機若しくは有機化合物であり、前記Ｂ型又はＣ型インフルエンザ・ウイルスにおけるＡ型インフルエンザ・ウイルスに対応する領域のアミノ酸はそれぞれ図１Ａと図１Ｂ及び図１Ｃ及び図１０Ａと図１０Ｂに示すとおりである、ポリペプチド、タンパク質、無機若しくは有機化合物。
【請求項１３】
インフルエンザ・ウイルス・ポリメラーゼ・サブユニットＰＡのＣ末端ＰＡＣでＡ型インフルエンザ・ウイルス・ポリメラーゼ・サブユニットＰＡのＣ末端ＰＡＣ中のＴｒｐ４０６、Ｇｌｕ４１０、Ｌｙｓ４６１、Ｇｌｕ５２４、Ｐｈｅ５２５、Ｓｅｒ５２６、Ｌｙｓ５３６、Ｌｙｓ５３９、Ｔｙｒ５４０、Ｌｅｕ５６３、Ｔｙｒ５６４、Ａｒｇ５６６及びＬｙｓ５７４から構成される群より選択される少なくとも一つのアミノ酸と結合するポリペプチド、タンパク質、無機若しくは有機化合物、抗体又は免疫結合物であって、Ｂ型又はＣ型インフルエンザ・ウイルスにおけるＡ型インフルエンザ・ウイルスに対応する領域のアミノ酸はそれぞれ図１Ａと図１Ｂ及び図１Ｃ及び図１０Ａと図１０Ｂに示すとおりである、ポリペプチド、タンパク質、無機若しくは有機化合物、抗体又は免疫結合物。
【請求項１４】
主にＰＡＣ中αへリックス８、αへリックス１１、αへリックス１３、αへリックス１０が形成する疎水性コアと相互に作用し、好ましくはＡ型インフルエンザ・ウイルス・ポリメラーゼ・サブユニットＰＡのＣ末端ＰＡＣ中αへリックス８中のＭｅｔ５９５、αへリックス１１中のＬｅｕ６６６、αへリックス１３中のＴｒｐ７０６とＰｈｅ７１０、及びαへリックス１０中のＶａｌ６３６とＶａｌ６４０と相互に作用し、Ｂ型又はＣ型インフルエンザ・ウイルスにおけるＡ型インフルエンザ・ウイルスに対応する領域のアミノ酸はそれぞれ図１Ａと図１Ｂ及び図１Ｃ及び図１０Ａと図１０Ｂに示すとおりである、インフルエンザ・ウイルス・ポリメラーゼＰＢ１と競合的にＰＡＣと結合するポリペプチド、タンパク質、無機若しくは有機化合物、抗体又は免疫結合物。
【請求項１５】
前記ポリペプチド又はタンパク質のアミノ酸配列における、野生型インフルエンザ・ウイルス・ポリメラーゼＰＢ１のＮ末端ＰＢ１Ｎ残基５から１０位Ｐｒｏ５、Ｔｈｒ６、Ｌｅｕ７、Ｌｅｕ８、Ｐｈｅ９とＬｅｕ１０が形成する短へリックス領域を含む短ＰＴＬＬＦＬモチーフの中の少なくとも三つは、該モチーフとのポリペプチド配列対比において対応する位置のアミノ酸が同じである、請求項１４に記載のインフルエンザ・ウイルス・ポリメラーゼＰＢ１と競合的にＰＡＣと結合するポリペプチド、タンパク質、無機若しくは有機化合物、抗体又は免疫結合物。
【請求項１６】
インフルエンザ・ウイルス・ポリメラーゼ・サブユニットＰＡのＣ末端ＰＡＣとＰＢ１のＮ末端ＰＢ１Ｎとの複合体の発現と精製方法であって、
（ａ）標識タンパク質遺伝子を融合した又は融合していないインフルエンザ・ウイルス・ポリメラーゼ・サブユニットＰＡのＣ末端ＰＡＣ約２０１〜約３０１位アミノ酸から約６５０〜末端位アミノ酸をコードする遺伝子配列のベクターを構築し、該ベクターを使って原核又は真核細胞を形質転換し、よって標識タンパク質がついているＰＡＣを発現することと；
（ｂ）ＰＡＣの発現と似た方法で標識が付く又は付かないＰＢ１Ｎを発現することと；
（ｃ）（ａ）で取得されるインフルエンザ・ウイルスＰＡＣを発現する細胞と（ｂ）で取得されるインフルエンザ・ウイルスＰＢ１のＮ末端４８個のアミノ酸以内のアミノ酸ＰＢ１Ｎを発現する細胞を一定比率で混合し、特異標識を特異的に識別する方法でこの混合タンパク質を分離し、酵素性分解で標識がつくポリペプチド中の標識タンパク質を取り去り、ＰＡＣとＰＢ１Ｎとの複合体を分離し、タンパク質の濃度を確定することと、
を含み、
前記ウイルス・ポリメラーゼ・サブユニットＰＡのＣ末端ＰＡＣとＰＢ１のＮ末端ＰＢ１Ｎとの複合体の結晶体三次元構造中の原子は表１中で挙げた少なくとも４０％の原子座標を持ち、又はインフルエンザ・ウイルス・ポリメラーゼ・サブユニットＰＡのＣ末端ＰＡＣとＰＢ１のＮ末端ＰＢ１Ｎとの複合体の結晶体三次元構造中の少なくとも４０％のアミノ酸の主鎖炭素骨格の原子構造座標は表１中の座標と平均二乗偏差が１．７Å以下である、方法。
【請求項１７】
前記標識タンパク質はＧＳＴ、Ｆｌａｇ−ｔａｇ、Ｍｙｃ−ｔａｇ、ＭＢＰ−ｔａｇ、特異性抗体より選ばれ；前記ベクターは選択性標識遺伝子を含み、ステップ（ｃ）中での一定比率とは標識タンパク質−ＰＡＣと標識タンパク質−ＰＢ１Ｎのタンパク質総量のモル比が０．１：１〜１：０．１となるものであり、好ましくは標識タンパク質−ＰＡＣと標識タンパク質−ＰＢ１Ｎのタンパク質総量のモル比を０．５：１〜１：０．５にさせ、更に好ましくは標識タンパク質−ＰＡＣと標識タンパク質−ＰＢ１のタンパク質総量のモル比を１：１に近づかせ、更に好ましくは標識タンパク質はＧＳＴであり、特異標識を識別する前記方法はアフィニティ・カラムを使用し、標識を取り除く前記方法はプロティナーゼ酵素性分解を使用し、前記ＰＡＣとＰＢ１Ｎとの複合体の分離方法はゲル濾過法又はイオン交換クロマトグラフィーで行い、前記タンパク質の濃度確定はゲル電気泳動法で行う、請求項１６に記載のインフルエンザ・ウイルス・ポリメラーゼ・サブユニットＰＡのＣ末端ＰＡＣとＰＢ１のＮ末端ＰＢ１Ｎとの複合体の発現と精製方法。
【請求項１８】
前記原核細胞は大腸菌である、請求項１７に記載のインフルエンザ・ウイルス・ポリメラーゼ・サブユニットＰＡのＣ末端ＰＡＣとＰＢ１のＮ末端ＰＢ１Ｎとの複合体の発現と精製方法。
【請求項１９】
インフルエンザ・ウイルス・ポリメラーゼ・サブユニットＰＡのＣ末端ＰＡＣとＰＢ１のＮ末端ＰＢ１Ｎとの複合体の共結晶方法であって、
精製したＰＡＣとＰＢ１Ｎ複合体のタンパク質濃度を５〜３０ｍｇ／ｍｌまで濃縮することと；
ｈａｎｇｉｎｇ−ｄｒｏｐ蒸気拡散法またはｓｉｔｔｉｎｇ−ｄｒｏｐ蒸気拡散法で結晶体成長条件を選別することと；
インフルエンザ・ウイルス・ポリメラーゼ・サブユニットＰＡのＣ末端ＰＡＣとＰＢ１のＮ末端ＰＢ１Ｎとの複合体の結晶体を得ることと
を含む、方法。
【請求項２０】
インフルエンザ・ウイルス・ポリメラーゼ・サブユニットＰＡのＣ末端ＰＡＣとＰＢ１のＮ末端ＰＢ１Ｎとの複合体の結晶体三次元構造の、インフルエンザ・ウイルス感染による病気の治療に用いる各種ポリペプチド、タンパク質、無機若しくは有機化合物、抗体又は免疫結合物の設計と選別における応用であって、
タンパク質三次元構造座標に基づき、コンピューター・シミュレーションにて特定位置に結合するポリペプチド、タンパク質、無機若しくは有機化合物、抗体又は免疫結合物分子を設計することと；
タンパク質三次元構造座標に基づき、コンピューター・シミュレーションにて特定位置に結合可能なポリペプチド、タンパク質、無機若しくは有機化合物、抗体又は免疫結合物分子をスクリーニングすることと；
タンパク質三次元構造座標に基づき、設計或はスクリーニングしたポリペプチド、タンパク質又は無機若しくは有機化合物、抗体又は免疫結合物分子を前記ＰＡＣ及びＰＢ１Ｎ配列と少なくとも５０％同配列を持つ任意亜型のインフルエンザ・ウイルス・ポリメラーゼタンパク質に結合させ、更に結合状況を分析することと；
タンパク質三次元構造座標に基づき、設計或はスクリーニングしたポリペプチド、タンパク質又は無機若しくは有機化合物、抗体又は免疫結合物分子を前記ＰＡＣ及びＰＢ１Ｎ配列と少なくとも５０％同じ配列を持つ任意亜型のインフルエンザ・ウイルス・ポリメラーゼ・タンパク質に結合させ結晶にし、よってタンパク質Ｘ線結晶構造解析方法にてポリペプチド及び化合物分子のタンパク質との結合状況を分析することと
を含み、
前記ＰＡＣ及びＰＢ１Ｎ配列と少なくとも５０％の同配列を持つ任意亜型のインフルエンザ・ウイルス・ポリメラーゼ・タンパク質と結合する前記ポリペプチド、タンパク質又は無機若しくは有機化合物、抗体又は免疫結合物分子が即ち候補化合物である、応用。