【手続補正書】
【提出日】平成23年12月20日(2011.12.20)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００９７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００９７】
前記プラスミドによってコードされたプレプロインスリンは、化合物Arg (A0), His (A8), Gly (A21), Arg (B30)−NH2−ヒトインスリンについての前駆体であった。該化合物は、トリプシン及びリシルエンドペプチダーゼＣとの反応によって中間体Arg (A0), His (A8), Gly (A21), des Thr (B30)−ヒトインスリンを最初に調製し、続いてこの中間体を、アルギニンアミドでのアミド化によって所望の化合物YKL202−7に変換することによって得られ、これは、Arg (A0), His(A8), Gly(A21), Arg (B30)−NH2−ヒトインスリンとキャラクタライズされた。
【手続補正２】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉのインスリンアナログ
【化１】
2011509269.tif 000001
（式中、
A−1は、Lys、Arg又はアミノ基に対応し；
A0は、Lys、Arg又は化学結合に対応し；
A1は、Arg又はGlyに対応し；
A5は、Asp、Glu又はGlnに対応し；
A15は、Asp、Glu又はGlnに対応し；
A18は、Asp、Glu又はAsnに対応し；
A21は、Ala、Ser、Thr又はGlyに対応し；
B−1は、Asp、Glu又はアミノ基に対応し；
B0は、Asp、Glu又は化学結合に対応し；
B1は、Asp、Glu、Phe又は化学結合に対応し；
B3は、Asp、Glu又はAsnに対応し；
B4は、Asp、Glu又はGlnに対応し；
B29は、Arg、Lys又はアミノ酸Phe、Ala、Thr、Ser、Val、Leu、Glu若しくはAspを含む群より選択されるアミノ酸、又は化学結合に対応し；
B30は、Thr又は化学結合に対応し；
B31は、Arg、Lys又は化学結合に対応し；
B32は、Arg−アミド又はLys−アミドに対応し、
ここで、A5、A15、A18、B−1、B0、B1、B2、B3及びB4を含む群の１つかそれ以下のアミノ酸残基がAsp又はGluに対応する）。
【請求項２】
A−1がArgに対応する、請求項１に記載のインスリンアナログ。
【請求項３】
A0がArgに対応する、請求項１または２に記載のインスリンアナログ。
【請求項４】
A5がGluに対応する、請求項１〜３のいずれか１項に記載のインスリンアナログ。
【請求項５】
A15がGluに対応する、請求項１〜４のいずれか１項に記載のインスリンアナログ。
【請求項６】
A18がAspに対応する、請求項１〜５のいずれか１項に記載のインスリンアナログ。
【請求項７】
A8がHisに対応する、請求項１〜６のいずれか１項に記載のインスリンアナログ。
【請求項８】
A21がGlyに対応する、請求項１〜７のいずれか１項に記載のインスリンアナログ。
【請求項９】
B0がGluに対応する、請求項１〜８のいずれか１項に記載のインスリンアナログ。
【請求項１０】
B3がAspに対応する、請求項１〜９のいずれか１項に記載のインスリンアナログ。
【請求項１１】
B4がGluに対応する、請求項１〜１０のいずれか１項に記載のインスリンアナログ。
【請求項１２】
B30がArgに対応する、請求項１〜１１のいずれか１項に記載のインスリンアナログ。
【請求項１３】
B30がLysに対応する、請求項１〜１１のいずれか１項に記載のインスリンアナログ。
【請求項１４】
以下を含む群より選択される、請求項１〜１３のいずれか１項に記載のインスリンアナログ：
Arg (A−1), Arg (A0), Glu (A5), His (A8), Gly (A21), Arg (B30)−NH2 ヒトインスリン、
Arg (A−1), Arg (A0), Glu (A5), His (A8), Gly (A21), Lys (B30)−NH2 ヒトインスリン、
Arg (A−1), Arg (A0), Glu (A15), His (A8), Gly (A21), Arg (B30)−NH2 ヒトイン
スリン、
Arg (A−1), Arg (A0), Glu (A15), His (A8), Gly (A21), Lys (B30)−NH2 ヒトイン
スリン、
Arg (A−1), Arg (A0), Asp (A18), His (A8), Gly (A21), Arg (B30)−NH2 ヒトイン
スリン、
Arg (A−1), Arg (A0), Asp (A18), His (A8), Gly (A21), Arg (B30)−NH2 ヒトイン
スリン、
Arg (A−1), Arg (A0), His (A8), Gly (A21), Glu (B0), Arg (B30)−NH2 ヒトインスリン、
Arg (A−1), Arg (A0), His (A8), Gly (A21), Glu (B0), Lys (B30)−NH2 ヒトインスリン、
Arg (A−1), Arg (A0), His (A8), Gly (A21), Asp (B3), Arg (B30)−NH2 ヒトインスリン、
Arg (A−1), Arg (A0), His (A8), Gly (A21), Asp (B3), Lys (B30)−NH2 ヒトインスリン、
Arg (A−1), Arg (A0), His (A8), Gly (A21), Glu (B4), Arg (B30)−NH2 ヒトインスリン、
Arg (A−1), Arg (A0), His (A8), Gly (A21), Glu (B4), Lys (B30)−NH2 ヒトインスリン、
Arg (A0), His (A8), Gly (A21), Arg (B31), Arg (B32)−NH2−ヒトインスリン、
Arg (A0), His (A8), Gly (A21), Arg (B31), Lys (B32)−NH2−ヒトインスリン、
Arg (A0), Glu (A5), His (A8), Gly (A21), Arg (B31), Arg (B32)−NH2−ヒトインスリン、
Arg (A0), Glu (A5), His (A8), Gly (A21), Arg (B31), Lys (B32)−NH2−ヒトインスリン、
Arg (A0), Asp (A18), His (A8), Gly (A21), Arg (B31), Arg (B32)−NH2−ヒトイン
スリン、
Arg (A0), Asp (A18), His (A8), Gly (A21), Arg (B31), Lys (B32)−NH2−ヒトイン
スリン、
Arg (A0), Glu (A15), His (A8), Gly (A21), Arg (B31), Arg (B32)−NH2−ヒトイン
スリン、
Arg (A0), Glu (A15), His (A8), Gly (A21), Arg (B31), Lys (B32)−NH2−ヒトイン
スリン、
Arg (A0), His (A8), Gly (A21), Asp (B3), Arg (B31), Arg (B32)−NH2−ヒトインスリン、
Arg (A0), His (A8), Gly (A21), Asp (B3), Arg (B31), Lys (B32)−NH2−ヒトインスリン、
Arg (A0), His (A8), Gly (A21), Glu (B4), Arg (B31), Arg (B32)−NH2−ヒトインスリン、
Arg (A0), His (A8), Gly (A21), Glu (B4), Arg (B31), Lys (B32)−NH2−ヒトインスリン、
Arg (A0), His (A8), Gly (A21), Glu (B0), Arg (B31), Arg (B32)−NH2−ヒトインスリン、
Arg (A0), His (A8), Gly (A21), Glu (B0), Arg (B31), Lys (B32)−NH2−ヒトインスリン、
Arg (A0), His (A8), Gly (A21), Arg (B30)−NH2−ヒトインスリン、
Arg (A0), His (A8), Gly (A21), Lys (B30)−NH2−ヒトインスリン、
Arg (A−1), Arg (A0), His (A8), Gly (A21), Arg (B30)−NH2−ヒトインスリン、
Arg (A−1), Arg (A0), His (A8), Gly (A21), Lys (B30)−NH2−ヒトインスリン、
Arg (A0), Arg (A1), His (A8), Gly (A21), Arg (B30)−NH2−ヒトインスリン、
Arg (A0), Arg (A1), His (A8), Gly (A21), Lys (B30)−NH2−ヒトインスリン、
His (A8), Gly (A21), Arg (B31), Arg (B32)−NH2−ヒトインスリン。
【請求項１５】
請求項１〜１４のいずれか１項に記載のインスリンアナログの調製方法。
【請求項１６】
インスリンアナログの前駆体を組換えによって調製し、前駆体を二本鎖インスリンに酵素的に処理し、そしてアルギニンアミドとのカップリングを、トリプシン活性を有する酵素の存在下で行ない、そしてインスリンアナログを単離する、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
糖尿病を処置する医薬を製造するための請求項１〜１４のいずれか１項に記載のインスリンアナログの使用。
【請求項１８】
Ｉ型若しくはII型糖尿病を処置する、軟骨を再生する、又はベータ細胞再生を補助する、医薬を調製するための方法における、請求項１７に記載の使用。
【請求項１９】
請求項１〜１４のいずれか１項に記載のインスリンアナログ及び／又はその生理学的に許容される塩を含む医薬。
【請求項２０】
製剤が、溶解したインスリンアナログを含む水性形態である、請求項１〜１４のいずれか１項に記載のインスリンアナログの製剤。
【請求項２１】
製剤が散剤の形態である、請求項１〜１４のいずれか１項に記載のインスリンアナログの製剤。
【請求項２２】
請求項１〜１４のいずれか１項に記載のインスリンアナログが、結晶形及び／又はアモルファス形で存在する、請求項２１に記載の製剤。
【請求項２３】
製剤が懸濁剤の形態である、請求項１〜１４のいずれか１項に記載のインスリンアナログの製剤。
【請求項２４】
製剤が化学シャペロンをさらに含む、請求項１〜１４のいずれか１項に記載のインスリンアナログの製剤。
【請求項２５】
請求項１〜１４のいずれか１項に記載のインスリンアナログの前駆体をコードするＤＮＡ。
【請求項２６】
請求項１〜１４のいずれか１項に記載のインスリンアナログのＡ鎖をコードするＤＮＡ。
【請求項２７】
請求項１〜１４のいずれか１項に記載のインスリンアナログのＢ鎖をコードするＤＮＡ。
【請求項２８】
請求項２５〜２７のいずれか１項に記載のＤＮＡを含むベクター。
【請求項２９】
請求項２５〜２７のいずれか１項に記載のＤＮＡを含む宿主生物。
【請求項３０】
請求項２５〜２７のいずれか１項に記載のＤＮＡ又は請求項２８に記載のベクターを含む宿主生物。
【請求項３１】
ＣペプチドがそのＮ末端にアミノ酸残基アルギニンを担持し、そのＣ末端が、形態Arg Arg、Arg Lys又はLys Arg Argを特徴とする、プレプロインスリンアナログ。
【請求項３２】
グルカゴン様ペプチド−１（GLP1）、若しくはそのアナログ若しくは誘導体、又はエキセンジン−３若しくは−４、若しくはそのアナログ若しくは誘導体をさらに含む、請求項２０〜２４のいずれか１項に記載の製剤。
【請求項３３】
エキセンジン−４をさらに含む、請求項３２に記載の製剤。
【請求項３４】
エキセンジン−4のアナログが、
H−desPro36−エキセンジン−4−Lys6−NH2、
H−des(Pro36,37)−エキセンジン−4−Lys4−NH2及び
H−des(Pro36,37)−エキセンジン−4−Lys5−NH2、
又はその薬理学的に許容される塩を含む群より選択される、請求項３２に記載の製剤。
【請求項３５】
エキセンジン−4のアナログが、
desPro36 [Asp28]エキセンジン−4 (1−39)、
desPro36 [IsoAsp28]エキセンジン−4 (1−39)、
desPro36 [Met(O)14, Asp28]エキセンジン−4 (1−39)、
desPro36 [Met(O)14, IsoAsp28]エキセンジン−4 (1−39)、
desPro36 [Trp(O2)25, Asp28]エキセンジン−2 (1−39)、
desPro36 [Trp(O2)25, IsoAsp28]エキセンジン−2 (1−39)、
desPro36 [Met(O)14Trp(O2)25, Asp28]エキセンジン−4 (1−39)及び
desPro36 [Met(O)14Trp(O2)25, IsoAsp28]エキセンジン−4 (1−39)、
又はその薬理学的に許容される塩を含む群より選択される、請求項３２に記載の製剤。
【請求項３６】
ペプチド−Lys6−NH2が、エキセンジン−４のアナログのＣ末端に結合されている、請求項３２に記載の製剤。
【請求項３７】
エキセンジン−4のアナログが、
H−(Lys)6−des Pro36 [Asp28]エキセンジン−4(1−39)−Lys6−NH2、
des Asp28Pro36, Pro37, Pro38 エキセンジン−4(1−39) −NH2、
H−(Lys)6−des Pro36, Pro37, Pro38 [Asp28]エキセンジン−4(1−39) −NH2、
H−Asn−(Glu)5 des Pro36, Pro37, Pro38 [Asp28]エキセンジン−4(1−39) −NH2、
des Pro36, Pro37, Pro38 [Asp28]エキセンジン−4(1−39)−(Lys)6−NH2、
H−(Lys)6−des Pro36, Pro37, Pro38 [Asp28]エキセンジン−4(1−39)−(Lys)6−NH2、
H−Asn−(Glu)5−des Pro36, Pro37, Pro38 [Asp28]エキセンジン−4(1−39)−(Lys)6−NH2、
H−(Lys)6−des Pro36 [Trp(O2)25, Asp28]エキセンジン−4(1−39)−Lys6−NH2、
H−des Asp28 Pro36, Pro37, Pro38 [Trp(O2)25]エキセンジン−4(1−39) −NH2、
H−(Lys)6−des Pro36, Pro37, Pro38 [Trp(O2)25, Asp28]エキセンジン−4(1−39) −NH2、
H−Asn−(Glu)5−des Pro36, Pro37, Pro38 [Trp(O2)25, Asp28]エキセンジン−4(1−39)−NH2、
des Pro36, Pro37, Pro38 [Trp(O2)25, Asp28]エキセンジン−4(1−39)−(Lys)6−NH2、
H−(Lys)6−des Pro36, Pro37, Pro38 [Trp(O2)25, Asp28]エキセンジン−4(1−39)−(Lys)6−NH2、
H−Asn−(Glu)5−des Pro36, Pro37, Pro38 [Trp(O2)25, Asp28]エキセンジン−4(1−39)−(Lys)6−NH2、
H−(Lys)6−des Pro36 [Met(O)14, Asp28]エキセンジン−4(1−39)−Lys6−NH2、
des Met(O)14 Asp28 Pro 36, Pro37, Pro38 エキセンジン−4(1−39) −NH2、
H−(Lys)6−des Pro36, Pro 37, Pro38 [Met(O)14, Asp28]エキセンジン−4(1−39) −NH2、
H−Asn−(Glu)5−des Pro36, Pro37, Pro38 [Met(O)14, Asp28] エキセンジン−4(1−39) −NH2、
des Pro36, Pro37, Pro38 [Met(O)14, Asp28]エキセンジン−4(1−39)−(Lys)6−NH2、
H−(Lys)6−des Pro36, Pro37, Pro38 [Met(O)14, Asp28]エキセンジン−4(1−39)−Lys6−NH2、
H−Asn−(Glu)5 des Pro36, Pro37, Pro38 [Met(O)14, Asp28] エキセンジン−4(1−39)−(Lys)6−NH2、
H−(Lys)6−des Pro36 [Met(O)14, Trp(O2)25, Asp28]エキセンジン−4(1−39)−Lys6−NH2、
des Asp28 Pro36, Pro37, Pro38 [Met(O)14, Trp(O2)25]エキセンジン−4(1−39) −NH2、
H−(Lys)6−des Pro36, Pro37, Pro38 [Met(O)14, Trp(O2)25, Asp28]エキセンジン−4(1−39) −NH2、
H−Asn−(Glu)5−des Pro36, Pro37, Pro38 [Met(O)14, Asp28] エキセンジン−4(1−39)−NH2、
des Pro36, Pro37, Pro38 [Met(O)14, Trp(O2)25, Asp28]エキセンジン−4(1−39)−(Lys)6−NH2、
H−(Lys)6−des Pro36, Pro37, Pro38 [Met(O)14, Trp(O2)25, Asp28]エキセンジン−4(1−39)−(Lys)6−NH2、
H−Asn−(Glu)5−des Pro36, Pro37, Pro38 [Met(O)14, Trp(O2)25, Asp28] エキセンジン−4(1−39)−(Lys)6−NH2、
又はその薬理学的に許容される塩を含む群より選択される、請求項３２に記載の製剤。
【請求項３８】
Arg34, Lys26 (Nε(γ−グルタミル(Nα−ヘキサデカノイル))) GLP−1 (7−37)［リラグルチド］をさらに含む、請求項３２に記載の製剤。