(57)【要約】      （修正有）【課題】ビンカアルカロイドと呼称されるCatharanthusroseusの２量体アルカイドおよび誘導体は抗癌化学療法において広く利用されているが、ビンカアルカイド新規誘導体、それらの調整法、治療的応用を提供する。【解決手段】一般式１2004277418.tif 000015［ｎ＝１又は２、R1は水素又はフッ素原子を、R2は塩素原子を示す］で表される化合物の塩。また一般式の誘導体である４’−デオキシ−２Ｏ’、２Ｏ’−ジフルオロビンブラスチン等の新規合成法も含まれる。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
４´−デオキシ−２０´，２０´−ジフルオロビンブラスチンの調製方法であって、一般式２の化合物
【化１】
2004277418.tif 000013
［式中、
Ｒ３はヒドロキシル基を表し、Ｒ４は水素原子を表し、あるいは
Ｒ３およびＲ４は二重結合を形成する］
を、フッ化水素酸ＨＦ等のブレンステッド酸および五フッ化アンチモンＳｂＦ５等のルイス酸の併合により生ずる超酸媒体中で、超求電子型の物質を生ずる試薬の存在下、反応媒体の温度−４５〜−３５℃で反応させることを特徴とする調製方法。
【請求項２】
超求電子型の物質を生ずる試薬が、クロロホルム、２，２−ジクロロプロパンおよびそれらの混合物から選択される超求電子性イオンを生ずる塩素化誘導体であることを特徴とする、請求項１に記載の化合物の調製方法。
【請求項３】
超求電子型の物質を生ずる試薬が、四臭化炭素ＣＢｒ４、ジブロモメタンＣＨ２Ｂｒ２および三臭化ホウ素ＢＢｒ３から選択されることを特徴とする、請求項１に記載の化合物の調製方法。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれか１項により得られる４´−デオキシ−２０´，２０´−ジフルオロビンブラスチンを、塩化メチレン等の塩素化溶媒中、トリフルオロ酢酸等の酸の存在下に、−１０℃未満の温度でＮ−ブロモ琥珀酸イミド等のハロゲン化剤と反応させて、単離されない中間体である４´−デオキシ−２０´，２０´−ジフルオロビンブラスチンの対応９´−ブロモインドレニンを生じ、２０´，２０´−ジフルオロ−３´，４´−ジヒドロビンオレルビンもしくはビンフルニンを得ることを特徴とする、ビンフルニンの調製方法。
【請求項５】
下記の図式に従い、４´−デオキシ−２０´，２０´−ジフルオロビンブラスチンの９´−ブロモインドレニンを含む反応混合物を塩基性媒体で中和し、次いでテトラフルオロホウ酸銀の存在下もしくは非存在下に、−１０℃から溶媒の還流温度で、好ましくは［塩化メチレン：水：テトラヒドロフラン］混合物を用いて、加水分解することを特徴とする、請求項４に記載の方法。
【化２】
2004277418.tif 000014
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
通常はビンカアルカロイドと呼称される、Catharanthus roseus の２量体アルカロイドおよびそれらの誘導体は抗癌化学療法において約３０年間、広く使用されている。これらは次の４種の生成物で代表される：
−２種の天然化合物：ビンブラスチンおよびビンクリスチン、
−２種の半合成生成物：ビンブラスチンから得られるビンデシン、および単量体アルカロイド前駆体であるカタランチンおよびビンドリンから合成されるビンオレルビン（vinorelbine）。
【化１】
2004277418.tif 000002
化学療法に使用するビンカアルカロイドの構造
【０００２】
抗癌化学療法における新規応用に通じ得るこの種系列の新規誘導体の取得を指向する本発明者らの研究に関連して、これらの高度機能化分子中に重大な変化を誘発し得る超酸媒体の異例の反応性を利用することからなる独創的接近方法を本発明者らは採用した。
【０００３】
かくして標準合成法によつては従来達成し得なかった、位置２０’でジフッ素化された一連の化合物を本発明者らは既に調製したが［ＦＲ第2,707,988 号特許公報（07.21.93）、ＷＯ 95/03312 号公報）］、これらの薬理学的性質は殊の外有益である。
【化２】
2004277418.tif 000003
ＦＲ第 2,707,988 号特許公報に記載の化合物の一般式
【０００４】
この種の型の複雑な分子に上記非凡な化学を応用することにより、標準的化学によっては到達し得ない新規系列のハロゲン化化合物の調製が可能になった。
【０００５】
ピエール・ファーブル・リサーチ・センター（ Pierre Fabre Reseach Center）で実施された本発明の主題はビンカアルカロイド新規誘導体、それらの調製法およびそれらの治療的応用である。
【０００６】
本発明における化合物は次の図式で表される一般式１を有する：
【化３】
2004277418.tif 000004
［式中、ｎ＝１または２、
Ｒ１ は水素またはフッ素原子を示し、
Ｒ２ は塩素原子を示す］
【０００７】
また本発明は、医薬として許容し得る無機もしくは有機酸との、一般式１で表される化合物の塩にも関する。使用される酸は、非限定的例示としては硫酸もしくは酒石酸である。
【０００８】
本発明は、一般式１で表される化合物の４’および２０’炭素のＲおよびＳ立体配置に対応する異性体ならびに任意割合のそれらの混合物の両方に関する。
【０００９】
本発明におけるこの誘導体は、フッ化水素酸等の強ブレンステッド酸および五フッ化アンチモン等の強ルイス酸を混合して得られる超酸媒体中で、G.Olah  により提案 (Ang. Chem. Int. Ed. Engl., 32, 767-88, 1993)された専門用語に従った超求電子性型の種を生じる試薬の存在下に一般式２で表される化合物を反応させて調製する。上記試薬は塩化メチレン、クロロホルム、四塩化炭素、２，２−ジクロロプロパン等のクロロ誘導体、または任意割合のこれら誘導体の混合物からなっていてもよい。
【００１０】
式２で表される化合物の構造は次のように記載される：
【化４】
2004277418.tif 000005
［式中、Ｒ３ はヒドロキシル基を示し、Ｒ４ は水素原子を示し、この場合の化合物２はビンブラスチンに相当し、またはこれとは別に：
Ｒ３ およびＲ４ は二重結合を形成し、この場合の式２で表される化合物は３’，４’−無水ビンブラスチンに相当する］
【００１１】
超酸媒体中での反応は「Teflon Ｒ」または適切組成のスチール等のフッ化水素酸耐性容器中で実施する。Ｒ３ およびＲ４ が上記のように定義された式２で表される誘導体をフッ化水素酸中に、または溶媒として機能する上記定義のクロロ誘導体中に溶解し、次いでクロロ誘導体の部分を既に任意に含有し得る超酸混合物中に添加する。この添加は、選択温度−８０℃から−３０℃に媒体を維持しながら実施する。
【００１２】
塩化メチレンまたは四塩化炭素の存在下および低温では、式１で表される化合物［式中、ｎ＝２、Ｒ１ ＝ＨおよびＲ２ ＝Ｃｌ］が主として単離される。式１で表される化合物［式中、ｎ＝２、Ｒ１ ＝ＦおよびＲ２ ＝Ｃｌ］は一層低い割合で同一反応媒体から単離される。これは次の図式で要約される：
【化５】
2004277418.tif 000006
【００１３】
一般式１［式中、ｎ＝１、Ｒ１ およびＲ２ は上記定義と同じ］で表される誘導体は、文献（Eur.J. Med. Chem., 18, 419-24, 1983 ）記載の方法により、特にトリフルオロ酢酸等の酸の存在下に、温度−１０℃未満で塩化メチレン中のＮ−ブロモ琥珀酸イミドの作用により、一般式１で表される化合物［式中、ｎ＝２］の環Ｃ’を収縮（ｎ＝２→ｎ＝１）させることにより調製される。塩基性媒体中での中和後、比較的不安定で単離されない中間体である、式１［式中、ｎ＝２］の誘導体の９’−ブロモインドレニンは、テトラフルオロホウ酸銀（ＡｇＢＦ４ ）の存在下もしくは非存在下に、温度−１０℃から溶媒の還流点温度で、好ましくは［塩化メチレン：水：テトラヒドロフラン］混合物中で加水分解を受ける。中和工程後にこの反応が完結しない場合は、化合物１［ｎ＝２］に対して触媒量もしくは化学量論的量のＡｇＢＦ４ を添加すると、反応過程を促進できる。
【００１４】
主たる反応生成物は式１［ｎ＝１］で表される化合物に対応する。この反応は次の図式により示される：
【化６】
2004277418.tif 000007
【００１５】
本発明の主題は、07.21.93  （ＷＯ 95/03312 号公報）のＦＲ 2,707,988号特許公報中で特許請求される化合物である４’−デオキシ−２０’，２０’−ジフルオロビンブラスチンならびに２０’，２０’−ジフルオロ−３’，４’−ジヒドロビンオレルビンすなわちビンフルニンの新規合成法でもある。
【００１６】
式２の化合物［ｎ＝２、Ｒ３ およびＲ４ は上記定義と同じ］を使用する超酸媒体中での反応操作条件を修飾すると、４’−デオキシ−２０’，２０’−ジフルオロビンブラスチンが主として得られる。操作条件の変更は、昇温（−４５から−３５℃）、反応時間延長、または反応性の異なる超求電子性物質の使用から本質的になる。事実から、上記の場合に支配的（４１％）である、単離可能な式１化合物［式中、ｎ＝２、Ｒ１ ＝ＨおよびＲ２ ＝Ｃｌ］は、これらの新規条件下では位置２０’がジフッ素化される生成物を代償として消失することを本発明者らは反応速度論の研究において示した。
【００１７】
Ｎ−ブロモ琥珀酸イミド（ＮＢＳ）存在下でのビンオレルビンのジフッ素化に対して示される収率は僅か２５％に過ぎないので、操作条件を最適化したこの場合のジフッ素化反応の収率は、求電子性試薬として特にＮ−ブロモ琥珀酸イミド（ＮＢＳ）を使用する上記特許記載方法により得られる収率よりも良好（５０％）である。
【００１８】
Ｒ３ ＝ＯＨおよびＲ４ ＝Ｈの場合の一般式２の化合物はビンブラスチンであり，Ｒ３ およびＲ４ が一緒に二重結合を形成する場合の化合物は３’，４’−無水ビンブラスチンである。式２で表されるこの誘導体は、クロロ誘導体好ましくはクロロホルムもしくは２，２−ジクロロプロパン中、またはクロロホルムもしくは２，２−ジクロロプロパンを含む混合物中に溶解し、次いで媒体温度を−４５から−３５℃に維持しながら超酸媒体中に添加する。かくしてジフルオロ誘導体である４’−デオキシ−２０’，２０’−ジフルオロビンブラスチンがこの反応の主たる最終生成物を構成する。ＨＰＬＣ分析による検定では、この化合物の割合は約５０％であることを示す。
【００１９】
この反応は次の図式により説明される：
【化７】
2004277418.tif 000008
【００２０】
四臭化炭素ＣＢｒ４ 、ジブロモメタンＣＨ２ Ｂｒ２ または三臭化ホウ素ＢＢｒ３ 等の超求電子性イオンを生ずる他の試薬（agents）も４’−デオキシ−２０’，２０’−ジフルオロビンブラスチンを主として与える。
【００２１】
かくしてこの方法は、従来法により得られるよりも一層高い収率で４’−デオキシ−２０’，２０’−ジフルオロビンブラスチンを調製する新規方法を構成する。
【００２２】
この経路に従って得られる４’−デオキシ−２０’，２０’−ジフルオロビンブラスチンは、次いでトリフルオロ酢酸等の酸の存在下に、温度−１０℃未満で塩化メチレン中のＮ−ブロモ琥珀酸イミドと反応させて、上記のように、その環Ｃ’の収縮（ｎ＝２→ｎ＝１）を受けさせ得る。塩基性媒体中での中和後、比較的不安定で単離されない中間化合物である、４’−デオキシ−２０’，２０’−ジフルオロビンブラスチンの９’−ブロモインドレニンは、テトラフルオロボレートの存在下もしくは非存在下に、好ましくは［塩化メチレン：水：テトラヒドロフラン］混合物中で加水分解を受ける。上記同様に、ＡｇＢＦ４ を添加すると反応速度を増進できる。
【００２３】
約８０％収率で得られる上記主化合物は２０’，２０’−ジフルオロ−３’，４’−ジヒドロビンオレルビンもしくはビンフルニンに相当する。次の略図はこの反応を要約する：
【化８】
2004277418.tif 000009
【００２４】
かくしてこの連続２段工程は、次の意味において従前法よりも一層有利な、ビンフルニン合成の新規方法を構成する：
１）超酸媒体中でのフッ素化反応は、一層高価な半合成生成物であるビンオレルビンからよりも寧ろ、Catharanthus roseus の葉の抽出により直接入手できるビンブラスチンもしくは３’，４’−無水ビンブラスチン等の天然化合物を用いて実施され、
２）この新規方法によるジフッ素化反応の収率は従来法の２５％に比べて約５０％であり、
３）得られる化合物特に４’−デオキシ−２０’，２０’−ジフルオロビンブラスチンのクロマトグラフイーによる精製は従来の場合よりも困難が少ない。
次の実施例は本発明を説明するものであるが、発明の範囲を限定するものではない。ここに記載の分光学的特性は本発明に従って得られた化合物の構造を確認する。
【００２５】
実施例１：
２０’−クロロ−４’−デオキシビンブラスチン  １ 
（ｎ＝２、Ｒ１ ＝Ｈ、Ｒ２ ＝Ｃｌ）
五フッ化アンチモン（６０ｇ；０．２８ｍｏｌ）の無水フッ化水素酸８０ｍｌ（４ｍｏｌ）中の溶液を２５０ｍｌの 「Teflon」製容器中で調製し、−６０℃に冷却する。磁気撹拌し乍ら、次いで四塩化炭素１．６３ｍｌ（１７ｍｍｏｌ）を添加し、さらに３’，４’−無水ビンブラスチン  ２［ｎ＝２、Ｒ３ およびＲ４ は二重結合を形成］１３．７５ｇ（１７ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（２５ｍｌ）溶液を、温度−４０℃を超過しないように滴下する。３０分後、この反応媒体を塩化メチレン２００ｍｌを含有するＮａ２ ＣＯ３ の水性３Ｍ懸濁液１．５リットル中に注意深く注ぐ。静置により相を分離後、水性相を塩化メチレン１００ｍｌで抽出する。有機相を併合し、飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄し、ＭｇＳＯ４ 上で乾燥し、かつ蒸発する。  
回収した残渣の分析用ＨＰＬＣによる分析では、全４１％（２１および２０％）に統合される２つの近接ピークの存在を示し、ＮＭＲスペクトルを記載する諸表中では実施例１ａの生成物および実施例１ｂの生成物と注解され、２０’−クロロ−４’−デオキシ−ビンブラスチンの２０’における二種のジアステレオ異性体に相当する。  
精製はシリカのカラム上でのクロマトグラフーにより実施し、次いで逆相予備ＨＰＬＣにより実施する。  
分離した２０’−クロロ−４’−デオキシビンブラスチンの２種のジアステレオ異性体は、２（モル）当量の酒石酸水溶液の添加により二酒石酸塩形態となし、凍結乾燥する。
Ｃ４６Ｈ５７ＣｌＮ４ Ｏ８ ・２（Ｃ４ Ｈ６ Ｏ６ ）：  １１２９．６２
融点：  ＞２６０℃
ＩＲ（ＫＢｒ）：  3448.17   1736.05   1615.36    1459.86    1372.51    1231.89
1121.18   1067.54 cm−１
質量スペクトル（Ｄ／ＣＩ  ＮＨ３ ）：
ＭＨ＋ ＝８２９．４
【００２６】
実施例２：
２０’−クロロ−４’−デオキシビンブラスチン  １ 
（ｎ＝２、Ｒ１＝Ｈ、Ｒ２＝Ｃｌ）
この化合物は、３’，４’−無水ビンブラスチン  ２［ｎ＝２、Ｒ３ およびＲ４ は二重結合を形成］をビンブラスチン  ２［ｎ＝２、Ｒ３ ＝ＯＨ、Ｒ４ ＝Ｈ］で置き換えて、実施例１に記載の方法に従って得られる。  
単離された生成物の物理化学的および分光特性は実施例１で得られる化合物の特性と同一である。
【００２７】
実施例３：
２０’−クロロ−４’−デオキシ−４’−フルオロビンブラスチン  １ 
［ｎ＝２、Ｒ１ ＝Ｆ、Ｒ２ ＝Ｃｌ］
この化合物は、シリカカラム上のクロマトグラフイーから由来する一層極性の低い他の画分を用いて、実施例１または実施例２で得られる反応混合物から単離される。最終精製は逆相分離ＨＰＬＣにより実施する。
２（モル）当量の酒石酸水溶液の添加により２０’−クロロ−４’−デオキシ−４’−フルオロビンブラスチンを二酒石酸塩形態へと転化し、さらに凍結乾燥する。Ｃ４６Ｈ５６ＣｌＦＮ４ Ｏ８ ・２（Ｃ４ Ｈ６ Ｏ６ ）：  １１４７．６１
融点：  ＞２６０℃
ＩＲ（ＫＢｒ）： 3470.13    2951.45    1735.92    1616.62    1458.44    1371.64
1228.52    1040.10    743.07 cm−１
質量スペクトル（Ｄ／ＣＩＮＨ３ ）：
ＭＨ＋ ＝８４７．４
【００２８】
実施例  ４：
２０’−クロロ−３’，４’−ジヒドロビンオレルビン  １ 
（ｎ＝１、Ｒ１ ＝Ｈ、Ｒ２ ＝Ｃｌ）
実施例１に従って単離した２０’−クロロ−４’−デオキシ−ビンブラスチン１［ｎ＝２、Ｒ１ ＝Ｈ、Ｒ２ ＝Ｃｌ］９００ｍｇ（１．０８ｍｍｏｌ）をトリフルオロ酢酸９５μｌ（１．２ｍｍｏｌ）を含む塩化メチレン５ｍｌ（−４５℃に冷却）中に溶解する。このアセンブリーを光遮蔽下に置き、次いでＮ−ブロモ琥珀酸イミド１９３ｍｇ（１．０８ｍｍｏｌ）をＣＨ２ Ｃｌ２ ２ｍｌおよびＴＦＡ９５μｌ（１．２ｍｍｏｌ）中の溶液として添加し、この混合物を３０分間撹拌しながら放置する。次いでこの混合物を、飽和ＮａＨＣＯ３ 溶液５ｍｌを添加し、その直後にテトラヒドロフラン５ｍｌおよび水２ｍｌの混合物中のテトラフルオロホウ酸銀２１１ｍｇ（１．０８ｍｍｏｌ）の溶液を添加して中和する。約２時間、磁気撹拌して生成混合物を室温に戻す。  
濾過後、有機相を分離し、水１０ｍｌで２回、さらに飽和ＮａＣｌ溶液１０ｍｌで洗浄する。ＭｇＳＯ４ 上で乾燥後、溶液を蒸発し、シリカカラム上のクロマトグラフイーにより残渣を精製し、次いで逆相分離ＨＰＬＣで精製する。  
Ｃ４５Ｈ５５ＣｌＮ４ Ｏ８ ：８１５．４１
ＩＲ（ＫＢｒ）： 3446    2950    1740.89    1459.16    1246.59    1200.65
1042 cm−１
質量スペクトル（Ｄ／ＣＩ  ＮＨ３ ）：
ＭＨ＋ ＝８１５．４
【００２９】
実施例  ５：
２０’−クロロ−３’，４’−ジヒドロ−４’−フルオロビンオレルビン  １ 
（ｎ＝１、Ｒ１ ＝Ｆ、Ｒ２ ＝Ｃｌ）
この化合物は、２０’−クロロ−４’−デオキシビンブラスチンを２０’−クロロ−４’−デオキシ−４’−フルオロビンブラスチン  １［ｎ＝２、Ｒ１ ＝Ｆ、Ｒ２ ＝Ｃｌ］で置き換え、実施例４に記載の方法に従って得られる。
この２０’−クロロ−３’，４’−ジヒドロ−４’−フルオロビンオレルビンは同一条件下のクロマトグラフイーにより精製する。  
Ｃ４５Ｈ５４ＣｌＦＮ４ Ｏ８ ：  ８３３．４０
ＩＲ（ＫＢｒ）：  3446.83    2950.98    1742.73    1617.73    1457.36
1234.38    1042.23     996.50     742.15 cm−１
質量スペクトル  （Ｄ／ＣＩ  ＮＨ３ ）：
ＭＨ＋ ＝８３３．５
【００３０】
上記のように調製した新規構造の特徴的プロトンの化学シフトを次表に整理する：
【化９】
2004277418.tif 000010

水素                        実施例の生成物
原子      １ａおよび１ｂ          ３            ４              ５        

Ｈ４’      1.95 (m,1H)             -          1.90 (m,1H)        -
Ｈ７’      3.1-3.3 (m,2H)      3.1 (m,1H)     4.32 (d,1H)     4.38 (d,1H)
3.3 (m,1H)     4.46 (d,1H)     5.07 (d,1H)
Ｈ８’      3.1-3.25 (m,2H)     3.05 (m,1H)       -               -  
3.45 (m,1H)  
Ｈ２０’    3.68 (m,1H)         3.80 (m,1H)    3.80 (m,1H)     3.93 (m,1H)  
Ｈ２１’    1.50 (d,3H)         1.44 (d,3H)    1.50 (d,3H)     1.57 (d,3H)  
【００３１】
上記実施例に従って得られた新規生成物の１３Ｃ  ＮＭＲスペクトルを次表に詳しく記載する：
【化１０】
2004277418.tif 000011
2004277418.tif 000012
【００３２】
実施例  ６：
４’−デオキシ−２０’，２０’−ジフルオロビンブラスチン
五フッ化アンチモン（７５０ｇ；３．４５ｍｏｌ）の無水フッ化水素酸５００ｍｌ（２５ｍｏｌ）溶液を６リットルの「Astelloy」スチール製反応器中で調製し、−４５℃に冷却する。３’，４’−無水ビンブラスチン２塩酸塩［１０７ｇ（０．１２ｍｏｌ）］のクロロホルム（２５０ｍｌ）溶液を３０分に亙ってこれに添加し、この間温度−３５℃に維持する。この温度でこの混合物をさらに３０分間撹拌する。アセトン２００ｍｌを−３０℃で３０分間に亘り加え、−２５℃で水１５０ｍｌを１５分に亘り添加する。２０℃に温度を上げ、塩化メチレン９００ｍｌを添加し、さらに水６５０ｍｌを加える。静置により相分離後、水相を塩化メチレン１００ｍｌで抽出する。有機相を併合し、１０％ＫＯＨ６００ｍｌを用いて温度２０℃未満で中和する。静置により相分離後、１０％水性アンモニア８００ｍｌの存在下に一夜有機相を撹拌し、次いで水４００ｍｌで２回洗浄し、ＭｇＳＯ４ 上で乾燥し、さらに蒸発する。
トルエン／アセトン混合物（６５／３５）で溶離するシリカカラム上のクロマトグラフーにより精製する。蒸発後に得られる残渣を塩化メチレン８０ｍｌ中に溶解し、イソピロピルエーテル３５０ｍｌの添加により沈殿させる。濾過後、４１ｇ（４０％）の４’−デオキシ−２０’，２０’−ジフルオロビンブラスチンが回収される。
単離した化合物の物理化学的および分光特性は 07.21.93 ( ＷＯ 95/03312 号）のＦＲ2,707,988 号特許中に記載の方法に従って得られる生成物と同一である。
【００３３】
実施例  ７：
４’−デオキシ−２０’，２０’−ジフルオロビンブラスチン
五フッ化アンチモン（８．６ｇ；４０ｍｍｏｌ）の無水フッ化水素酸７．２ｍｌ（３６０ｍｍｏｌ）溶液を１２５ｍｌ Teflon 製容器中で調製し、−４５℃に冷却する。磁気撹拌し乍ら、次いで２，２−ジクロロプロパン０．９４ｍｌ（９ｍｍｏｌ）を添加し、さらに３’，４’−無水ビンブラスチン  ２［ｎ＝２、Ｒ３ およびＲ４ は二重結合を形成］０．７１ｇ（０．９ｍｍｏｌ）のフッ化水素酸（３．６ｍｌ）溶液を、温度−３５℃を超過しないように滴下する。２５分後、この反応媒体を３Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３水性溶液３００ｍｌ中に注意深く注ぐ。静置による相分離後、水性相を塩化メチレン５０ｍｌで抽出する。有機相は併合し、飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄し、ＭｇＳＯ４ 上で乾燥し、さらに蒸発する。
この残渣は４’−デオキシ−２０’，２０’−ジフルオロビンブラスチンの４６％を含み、このものは 07.21.93 ( ＷＯ 95/03312 号）のＦＲ2,707,988 号公報中に記載の方法に従って得られる生成物と同一である。
【００３４】
実施例  ８：
４’−デオキシ−２０’，２０’−ジフルオロビンブラスチン
この化合物は、超酸媒体中での処理の際に２，２−ジクロロプロパンを四臭化炭素ＣＢｒ４で置き換えることにより、実施例７記載の方法に従って得られる。
単離した化合物の物理化学的および分光特徴は 07.21.93 ( ＷＯ 95/03312 号公報）のＦＲ2,707,988 号特許公報中に記載の方法に従って得られる生成物の特徴と同一である。
【００３５】
実施例  ９：
４’−デオキシ−２０’，２０’−ジフルオロビンブラスチン
この化合物は、超酸媒体中での処理期間に２，２−ジクロロプロパンを三臭化ホウ素ＢＢｒ３で置き換えることにより、実施例７記載の方法に従って得られる。
単離した化合物の物理化学的および分光特徴は 07.21.93 ( ＷＯ 95/03312 号公報）のＦＲ2,707,988 号公報中に記載の方法に従って得られる生成物の特徴と同一である。
【００３６】
実施例  １０：
４’−デオキシ−２０’，２０’−ジフルオロビンブラスチン
この化合物は、超酸媒体中での処理期間に２，２−ジクロロプロパンをジブロモメタンＣＨ２ Ｂｒ２ で置き換えることにより、実施例７記載の方法に従って得られる。
単離した化合物の物理化学的および分光特徴は 07.21.93 ( ＷＯ 95/03312 号）のＦＲ2,707,988 号特許公報中に記載の方法に従って得られる生成物の特徴と同一である。
【００３７】
実施例  １１：
２０’，２０’−ジフルオロ−３’，４’−ジヒドロビンオレルビン（ビンフルニン）
４’−デオキシ−２０’，２０’−ジフルオロビンブラスチン９０ｇ（０．１０８ｍｏｌ）を塩化メチレン８００ｍｌ中に溶解し、−４５℃に冷却し、この溶液中にトリフルオロ酢酸１０．４ｍｌ（０．１３５ｍｏｌ）を添加する。このアセンブリーを光遮断下に置き、塩化メチレン２００ｍｌおよびトリフルオロ酢酸１０．４ｍｌ（０．１３５ｍｏｌ）の混合物中のＮ−ブロモ琥珀酸イミド１９．３ｇ（０．１０８ｍｏｌ）を含む溶液を約３０分間に亘り添加し、この間、媒体温度が約−４５℃を超えないように注意する。
３０分後、１０％ＮａＨＣＯ３ 溶液３００ｍｌを添加し、この直後にテトラヒドロフラン３００ｍｌおよび水１００ｍｌの混合物中のテトラフルオロホウ酸銀２３．４ｇ（０．１２ｍｏｌ）溶液を添加して混合物を中和する。得られる混合物を撹拌しながら約２時間を要して室温に戻す。
濾過後、有機相を分離し、水１５０ｍｌで２回洗浄する。ＭｇＳＯ４ 上で乾燥後、溶液を蒸発し、残渣をメタノール５００ｍｌ中に溶解し、次いで蒸発すると、２０’，２０’−ジフルオロ−３’，４’−ジヒドロビンオレルビン（ビンフルニン）の８８％を含有する乾燥残渣９７ｇが得られる。
水、酢酸、酢酸アンモニウム、メタノールおよびアセトニトリルから構成される溶離液を用いた、Ｃ１８グラフトシリカ（粒径１５−２５μ）上での分離ＨＰＬＣにより精製する。精製画分の容積を１／２に濃縮し、ｐＨ＝７に調整し、トルエンで２回抽出する。有機相を希釈水で３回洗浄し、次いで分析用ＨＰＬＣで検定する。
ビンフルニンのトルエン溶液を、正確に２（モル）当量の酒石酸を含む水性溶液で抽出する。ビンフルニン・二酒石酸塩を得る目的で水性相を凍結乾燥する。
単離した化合物の物理化学的および分光特徴は 07.21.93 ( ＷＯ 95/03312 号公報）のＦＲ2,707,988 号公報中に記載の方法に従って得られる生成物の特徴と同一である。
【００３８】
本発明にしたがって調製した化合物は Cantharanthus roseus の抗癌性アルカロイドと同様に”有糸分裂紡錘体の毒物”である。
【００３９】
本発明による化合物の存在下におけるチユ−ブリン（tubulin）の微小管への 重合抑制を、 R.C. Weisenberg (Science 177, 1196-7, 1972 ）により記載された方法に従って測定することにより、この性質を確認した。重合の５０％抑制をもたらす化合物濃度に対応するＩＣ５０で結果を表示する。この現象は光学密度の変化により容易にモニターおよび定量化できる。
【００４０】
例示として次表は本発明に従って調製した２種の誘導体を用いて得られた結果を示す：

生成物                        ＩＣ５０（μＭ）                
実施例  １                      １．９９            
実施例  ３                      １．５４                    
ビンオレルビン                  １．７０                    
【００４１】
ビンカアルカロイドのこの特徴的薬理的性質を考慮すれば、本発明による化合物は抗癌化学治療に使用できる。
【００４２】
これらの活性成分を含有する医薬用調合物は、当業者には周知の慣習的態様で経口用、静注用または皮下投与用として調合できる。