(57)【要約】【課題】  安定した軟骨の修復および再生を誘導し、かつ表在性軟骨欠損あるいは損傷が重症の変形性関節症へ進行することを防止する、信頼性の高い軟骨結損治療法を提供すること。【解決手段】  軟骨の欠損あるいは損傷の領域を覆うために使用される、生分解性マトリックスあるいはマトリックス形成物質を包含する、軟骨の欠損あるいは損傷を、治療あるいは修復するための組成物であって、該マトリックスあるいはマトリックス形成物質が：該マトリックス中および該欠損あるいは損傷の領域中の修復細胞の増殖を刺激するのに適切な濃度の増殖因子；および送達システムと組合わされ、そして、引き続き該マトリックスおよび欠損中の増殖した修復細胞に該トランスフォーミング因子が送達された時に、該修復細胞を、軟骨組織を生産する軟骨細胞に形質転換するために適切な濃度である、トランスフォーミング因子；を含有する、組成物。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
軟骨の欠損あるいは損傷の領域を覆うために使用される、生分解性マトリックスあるいはマトリックス形成物質を包含する、軟骨の欠損あるいは損傷を、治療あるいは修復するための組成物であって、
該マトリックスあるいはマトリックス形成物質が：
該マトリックス中および該欠損あるいは損傷の領域中の修復細胞の増殖を刺激するのに適切な濃度の増殖因子；および
送達システムと組合わされ、そして、引き続き該マトリックスおよび欠損中の増殖した修復細胞に該トランスフォーミング因子が送達された時に、該修復細胞を、軟骨組織を生産する軟骨細胞に形質転換するために適切な濃度である、トランスフォーミング因子；
を含有する、組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
【数１−１】
2004230184.tif 000002
【背景技術】
【０００２】
【数１−２】
2004230184.tif 000003
【０００３】
【数２】
2004230184.tif 000004
【０００４】
【数３】
2004230184.tif 000005
【０００５】
【数４】
2004230184.tif 000006
【０００６】
【数５】
2004230184.tif 000007
【０００７】
【数６−１】
2004230184.tif 000008
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
【数６−２】
2004230184.tif 000009
【課題を解決するための手段】
【０００９】
【数４１】
2004230184.tif 000010
【００１０】
【数４２】
2004230184.tif 000011
【００１１】
【数４３】
2004230184.tif 000012
【００１２】
【数４４】
2004230184.tif 000013
【００１３】
【数４５】
2004230184.tif 000014
【００１４】
【数４６】
2004230184.tif 000015
【００１５】
【数４７】
2004230184.tif 000016
【００１６】
【数４８】
2004230184.tif 000017
【００１７】
【数６−３】
2004230184.tif 000018
【００１８】
【数７】
2004230184.tif 000019
【発明を実施するための最良の形態】
【００１９】
【数８】
2004230184.tif 000020
【００２０】
【数９】
2004230184.tif 000021
【００２１】
【数１０】
2004230184.tif 000022
【００２２】
【数１１】
2004230184.tif 000023
【００２３】
【数１２】
2004230184.tif 000024
【００２４】
【数１３】
2004230184.tif 000025
【００２５】
【数１４】
2004230184.tif 000026
【００２６】
【数１５】
2004230184.tif 000027
【００２７】
【数１６】
2004230184.tif 000028
【００２８】
【数１７】
2004230184.tif 000029
【００２９】
【数１８】
2004230184.tif 000030
【００３０】
【数１９】
2004230184.tif 000031
【００３１】
【数２０】
2004230184.tif 000032
【００３２】
【数２１】
2004230184.tif 000033
【００３３】
【数２２】
2004230184.tif 000034
【００３４】
【数２３】
2004230184.tif 000035
【００３５】
【数２４】
2004230184.tif 000036
【００３６】
【数２５】
2004230184.tif 000037
【００３７】
【数２６】
2004230184.tif 000038
【００３８】
【数２７】
2004230184.tif 000039
【００３９】
【数２８】
2004230184.tif 000040
【００４０】
【数２９】
2004230184.tif 000041
【００４１】
【数３０】
2004230184.tif 000042
【００４２】
【数３１】
2004230184.tif 000043
【実施例】
【００４３】
【数３２】
2004230184.tif 000044
【００４４】
【数３３】
2004230184.tif 000045
【００４５】
【数３４】
2004230184.tif 000046
【００４６】
【数３５】
2004230184.tif 000047
【００４７】
【数３６】
2004230184.tif 000048
【００４８】
【数３７】
2004230184.tif 000049
【００４９】
【数３８】
2004230184.tif 000050
【００５０】
【数３９】
2004230184.tif 000051
【００５１】
【数４０】
2004230184.tif 000052
【手続補正書】
【提出日】平成16年5月7日(2004.5.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
軟骨の欠損あるいは損傷の領域を覆うために使用される、生分解性マトリックスあるいはマトリックス形成物質を含む、軟骨の欠損あるいは損傷を、治療あるいは修復するための組成物であって、
該マトリックスあるいはマトリックス形成物質が：
該マトリックス中および該欠損あるいは損傷の領域中の線維芽細胞修復細胞の増殖を刺激するのに適切な濃度の増殖因子；および
送達システムと組合わされ、そして、該マトリックスおよび欠損中の増殖した線維芽細胞修復細胞に該トランスフォーミング因子が引き続き送達された時に、該修復線維芽細胞細胞を、軟骨組織を生産する軟骨細胞に形質転換するために適切な濃度である、トランスフォーミング因子；
を含有し、ここで、該トランスフォーミング因子が、ＴＧＦ−βスーパーファミリーのメンバー、ＦＧＦおよびＥＧＦからなる群より選択される、組成物。
【請求項２】
前記マトリックスおよび欠損領域に線維芽細胞修復細胞を誘引するために、適切な濃度で化学遊走因子をさらに含有する、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記化学遊走因子が、ＴＧＦ−β類、ＦＧＦ類、ＰＤＧＦ、ＴＮＦ−α、ＴＮＦ−βおよびプロテオグリカン分解産物からなる群より選択される、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
前記増殖因子が、ＴＧＦ−β類、ＦＧＦ類、ＩＧＦ  Ｉ、ＰＤＧＦ、ＥＧＦ、ＴＧＦ−α類、ヒト成長ホルモンおよび造血性増殖因子からなる群より選択される、請求項１あるいは２に記載の組成物。
【請求項５】
前記欠損領域に充填するために使用される前記生分解性マトリックスが、フィブリン、コラーゲン、ゼラチン、セファロース、あるいはこれらの組み合わせからなる群より選択される、請求項１あるいは２に記載の組成物。
【請求項６】
前記増殖因子、前記化学遊走因子および前記トランスフォーミング因子が、ＴＧＦ−β類からなる群より選択される、請求項２に記載の組成物。
【請求項７】
前記トランスフォーミング因子が、１種類あるいはそれ以上のトランスフォーミング因子の混合物である、請求項１あるいは２に記載の組成物。
【請求項８】
前記増殖因子および化学遊走因子が、マトリックス中で２−５０ｎｇ／ｍｌの濃度のＴＧＦ−βである；そして
前記トランスフォーミング因子が、適切な送達システムに組込まれたＴＧＦ−βであり、該送達システムが、マトリックス中で２００ｎｇ／ｍｌを超える濃度のＴＧＦ−βを提供する；
請求項６に記載の組成物。
【請求項９】
前記送達システムが、リポソーム、生物腐食性ポリマ−、ヘパリン硫酸プロテオグリカン類に化学的に結合したコラーゲン線維、および炭水化物ベースの小体からなる群より選択される、請求項１あるいは２に記載の組成物。
【請求項１０】
軟骨の欠損あるいは損傷の、治療あるいは修復のための組成物であって：
トロンビンをフィブリノーゲン溶液に添加することで形成したフィブリンマトリックス；
該マトリックスおよび欠損中の線維芽細胞修復細胞の、増殖の刺激および誘引を行う増殖因子および化学遊走因子としての、該フィブリノーゲン溶液１ｍｌ当り２−１０ｎｇの濃度で存在するＴＧＦ−β；および
増殖した該線維芽細胞修復細胞へ引続き送達され、該線維芽細胞修復細胞を軟骨組織を生産する軟骨細胞に形質転換する、トランフォーミング因子としての、リポソーム中にカプセル化され、そして、該フィブリノーゲン溶液１ｍｌ当り２００ｎｇを超える濃度で存在するＴＧＦ−β；
を含有する組成物。
【請求項１１】
トリペプチドＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐを含む細胞接着促進因子をさらに含有する、請求項１あるいは２に記載の組成物。
【請求項１２】
請求項１〜１１に記載のいずれかの組成物を含む軟骨の表層性欠損の治療のための治療薬。
【請求項１３】
動物の軟骨組織の選択された部位に、軟骨形成を誘起する方法に適した請求項１〜１１のいずれかに記載の組成物であって、該方法は、該組成物で該部位を覆う工程を包含する、組成物。
【請求項１４】
動物の軟骨の欠損あるいは損傷を治療する方法において使用するためのキットであって、該キットは：
生分解性マトリックスあるいはマトリックス形成物質；
線維芽細胞修復細胞の増殖を刺激するために有効な量の増殖因子；および
線維芽細胞修復細胞を軟骨細胞に形質転換するために有効な量のトランスフォーミング因子；
を含み、ここで該方法は、該増殖因子を含有し、そして引き続く線維芽細胞修復細胞への送達のために隔離された該トランスフォーミング因子を含有する、該生分解性マトリックスあるいはマトリックス形成物質を、該欠損あるいは損傷へ充填する工程を包含し、該トランスフォーミング因子が、ＴＧＦ−βスーパーファミリーのメンバー、ＦＧＦおよびＥＧＦからなる群より選択される、キット。
【請求項１５】
動物の軟骨中の欠損あるいは損傷を治療する方法において使用するためのキットであって、該キットは：
生分解性マトリックスあるいはマトリックス形成物質；
線維芽細胞修復細胞の増殖を刺激するために有効な量の増殖因子；および
線維芽細胞修復細胞を軟骨細胞に形質転換するために有効な量のトランスフォーミング因子；
を含み、ここで該方法は、該増殖因子を含有する該生分解性マトリックスあるいはマトリックス形成物質を、該欠損あるいは損傷へ充填する工程、および該欠損に該マトリックスを充填してから約１−２週間後に、該トランスフォーミング因子を該マトリックス中に送達する工程を包含し、ここで、該トランスフォーミング因子が、ＴＧＦ−βスーパーファミリーのメンバー、ＦＧＦおよびＥＧＦからなる群より選択される、キット。
【請求項１６】
線維芽細胞修復細胞を誘引するために有効な量の化学遊走因子をさらに含む、請求項１４あるいは１５に記載のキットであって、ここで前記方法は、前記生分解性マトリックスあるいはマトリックス形成物質の中に、該化学遊走因子を含める工程をさらに包含する、キット。
【請求項１７】
フィブリン接着剤あるいはトランスグルタミナーゼをさらに含む、請求項１４あるいは１５に記載のキットであって、ここで前記方法は、前記欠損へ前記生分解性マトリックスを充填する前に、該欠損の表面を該フィブリン接着剤あるいはトランスグルタミナーゼで覆う工程をさらに包含する、キット。
【請求項１８】
前記欠損の表面からプロテオグリカンを除去する薬剤をさらに含む、請求項１４あるいは１５に記載のキットであって、ここで前記方法は、前記欠損へ前記生分解性マトリックスを充填する前に、該薬剤を該欠損に充填する工程、および該薬剤を除去する工程をさらに包含する、キット。
【請求項１９】
請求項１６に記載のキットであって、該キットは：
前記欠損の表面からプロテオグリカンを除去する薬剤；および
フィブリン接着剤あるいはトランスグルタミナーゼ；
をさらに含み、ここで前記方法は、該欠損を前記生分解性マトリックスで覆う前に、プロテオグリカンを除去する該薬剤を該欠損に充填する工程、該薬剤を除去する工程、および該欠損の表面を該フィブリン接着剤あるいはトランスグルタミナーゼで覆う工程をさらに包含する、キット。
【請求項２０】
欠損の表面からプロテオグリカンを除去する前記薬剤が、コンドロイチナーゼＡＢＣ、コンドロイチナーゼＡＣ、ヒアルロニダーゼ、ペプシン、パパイン、トリプシン、キモトリプシン、プロナーゼ、ストロメリシンおよびスタフＶ８プロテアーゼからなる群より選択される、請求項１８あるいは１９に記載のキット。
【請求項２１】
前記増殖因子、前記化学遊走因子および前記トランスフォーミング因子が、ＴＧＦ−βである、請求項１６あるいは１９に記載のキット。
【請求項２２】
前記トランスフォーミング因子が、リポソーム、生物腐食性ポリマー、ヘパリン硫酸プロテオグリカンに化学的に結合したコラーゲン線維、および炭水化物ベースの小体からなる群より選択される送達システムと組み合わされた、請求項１４に記載のキット。
【請求項２３】
前記生分解性マトリックスが、フィブリン、コラーゲン、ゼラチン、セファロース、あるいはこれらの組合わせからなる群より選択される、請求項１４あるいは１５に記載のキット。
【請求項２４】
前記生分解性マトリックスが、フィブリノーゲン溶液で前記欠損あるいは損傷を充填する直前に、フィブリノーゲン溶液にトロンビンを添加することによって形成される、フィブリンである、請求項１４あるいは１５に記載のキット。
【請求項２５】
前記増殖因子および前記化学遊走因子が、１ｍｌのマトリックス当り２−１０ｎｇの濃度のＴＧＦ−βであり、そして、前記トランスフォーミング因子が、１ｍｌのマトリックス当り２００ｎｇを超える濃度で存在するＴＧＦ−βである、請求項１６あるいは１９に記載のキット。
【請求項２６】
欠損の表面からプロテオグリカンを除去する前記薬剤が、コンドロイチナーゼＡＢＣであり、そして、１単位／ｍｌの濃度のコンドロイチナーゼＡＢＣを含有する溶液を４分間、該欠損に充填する、請求項１８あるいは１９に記載のキット。
【請求項２７】
前記生分解性マトリックスあるいはマトリックス形成物質がさらに、トリペプチドＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐを含む細胞接着促進因子を含有する、請求項１４あるいは１５に記載のキット。
【請求項２８】
動物の軟骨の欠損あるいは損傷を治療する方法において使用するためのキットであって、該キットは：
コンドロイチナーゼＡＢＣの無菌溶液；
トロンビン；および
１ｍｇ／ｍｌのフィブリノーゲンを含有し、そして２−１０ｎｇ／ｍｌの濃度のＴＧＦ−βと、２００ｎｇ／ｍｌを超える濃度のリポソーム中のＴＧＦ−βとを含む、マトリックス形成溶液、
を含み、ここで該方法は：
１単位／ｍｌの濃度の該コンドロイチナーゼＡＢＣの無菌溶液を４分間、該欠損あるいは損傷領域に充填する工程；
該コンドロイチナーゼＡＢＣの溶液を除去する工程；
無菌生理食塩水で該欠損領域を洗浄する工程；
該欠損領域を乾燥する工程；
マトリックス形成溶液の１ｍｌ当り２単位の該トロンビンを添加する工程；および
該トロンビンを添加した直後に、該マトリックス形成溶液を該欠損に充填する工程；
を包含する、キット。
【請求項２９】
請求項２８に記載のキットであって、該キットはフィブリン接着剤あるいはトランスグルタミナーゼをさらに含み、ここで前記方法は、前記マトリックス形成溶液を前記欠損に充填する前に、該フィブリン接着剤あるいはトランスグルタミナーゼで該欠損の表面を覆う工程をさらに包含する、キット。
【請求項３０】
リポソーム中の前記ＴＧＦ−βが、５００ｎｇ／ｍｌよりも高い濃度である、請求項２８に記載のキット。