(57)【要約】【課題】食経験が存し、他の作用がその作用を阻害しない、糖質消化酵素阻害剤を提供する。【解決手段】カシグルミ、オニグルミ、マンシュウグルミ、ウォールナッツなどクルミ科クルミ属の植物のエキスからなる、糖質消化酵素阻害剤を食品組成物に含有させる。前記エキス作成の植物体の使用部位としては、種子が好ましく、中でも仁が好ましく、更に好ましいのは、胡桃の仁を脱脂した後、極性溶媒で抽出し、液液抽出、カラムクロマトグラフィーなどで精製したエキスである。該糖質消化酵素阻害剤は、スクラーゼ、マルターゼ等のα−グルコシダーゼやアミラーゼを阻害する作用に優れる。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
クルミ科クルミ属の植物のエキスからなる、糖質消化酵素阻害剤。
【請求項２】
クルミ科クルミ属の植物のエキスが、種子の抽出物、その溶剤除去物及びそれらの分画精製物から選択されるものであることを特徴とする、請求項１に記載の糖質消化酵素阻害剤。
【請求項３】
抽出が、中極性溶剤による抽出であることを特徴とする、請求項１又は２に記載の糖質消化酵素阻害剤。
【請求項４】
阻害の対象となる糖質消化酵素が、α−グルコシダーゼ及び／又はアミラーゼであることを特徴とする、請求項１〜３何れか１項に記載の糖質消化酵素阻害剤。
【請求項５】
α−グルコシダーゼが、スクラーゼ又はマルターゼであることを特徴とする、請求項４に記載の糖質消化酵素阻害剤。
【請求項６】
請求項１〜５何れか１項に記載の糖質消化酵素阻害剤を含有する、ダイエット用の組成物。
【請求項７】
食品であることを特徴とする、請求項６に記載の糖尿病患者の食後血糖上昇抑制を含むダイエット用の組成物。
【請求項８】
クルミ科クルミ属の種子の抽出物、その溶剤除去物及びそれらの分画精製物から選択されるものの、糖質消化酵素阻害の為の組成物の製造に於ける使用。
【請求項９】
クルミ科クルミ属の種子の抽出物、その溶剤除去物及びそれらの分画精製物から選択されるもののを、糖質消化酵素と共存させることを特徴とする、前記糖質消化酵素の阻害方法。
【請求項１０】
共存場所が、消化管内であることを特徴とする、請求項９に記載の阻害方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、糖質消化酵素阻害剤及びそれを含有する食品などの組成物に関する。
【０００２】
【従来の技術】
現代社会において、肥満は、各種の慢性疾患、生活慣習病を誘発する危険因子として、重要な解決課題の一つに挙げられている。又、実際に肥満の現状としては、日本に於いては、社会構成員の半数以上が肥満の傾向にあるという統計データも存する。この様な状況になった原因の一つとしては、食事の西欧化と、近代社会に於ける運動量の減少構造が存する。この為、摂取したエネルギーが消費を越えて過剰となり、体脂肪を増加せしめていると言われている。この様な状況下、肥満を抑制する為の種々の技術の開発が必要とされてきており、種々のダイエット手段が勘案されているが、その中に有望な技術として、糖質消化酵素阻害剤を開発し、糖質の消化を妨げ、エネルギーの蓄積を抑制しようとする技術が存する。この様な技術を列挙すれば、有機酸或いはツクバネソウの抽出物を用いてα−グルコシダーゼを阻害する方法（例えば特許文献１、特許文献２参照）、バナバの抽出物を用いてアミラーゼを阻害する方法（例えば、特許文献３参照）或いは、オキサゾリンやトレハラミンなどを用いてスクラーゼを阻害する方法などが知られている。（例えば、特許文献４、特許文献５参照）しかしながら、これらに於いては阻害する基質である酵素の種類が限られていたり、阻害能が充分ではなかったり、他に主たる作用が存し、該主たる作用によって使用が制限を受けたりと言った問題が存し、満足の行く阻害手段は今のところ無いと言える。同様な傾向は糖尿病患者の食後血糖上昇抑制作用についても言える。糖尿病患者に於いては、食後に誘起される血糖値の上昇によって、糖尿病の病状が急速に悪化することがあり、食事にあたっては、この様な現象が起こらないように注意深く、食事をすることが必要であった。この様な現象が抑制されれば、安心して食事することが可能になり、その意義は大きい。
【０００３】
一方、クルミ科クルミ属の植物のエキスについて、利尿作用を有する成分を含有すること（例えば、特許文献６参照）、ウレアーゼ活性阻害作用を有すること（例えば、特許文献７参照）、エステル分解抑制作用を有すること（例えば特許文献８参照）、マトリックスメタルプロテアーゼ阻害作用を有すること（例えば特許文献９参照）等が知られているが、糖質消化酵素に係わる作用は全く知られていない。又、クルミ科クルミ属のエキスを用いて、ダイエット用の組成物を製造することも全く知られていなかった。
【０００４】
【特許文献１】
特開２００３−１１６４８６号公報
【特許文献２】
特開２００３−９５９４１号公報
【特許文献３】
特開２００３−８１８５８号公報
【特許文献４】
特開平５−２５２９６７号公報
【特許文献５】
特開平７−２４７２９８号公報
【特許文献６】
特開２００３−９５９４０号公報
【特許文献７】
特開２００３−４８８４４号公報
【特許文献８】
特開２００１−３０２４４０号公報
【特許文献９】
特開２００１−１９２３１６号公報
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、この様な状況下為されたものであり、食経験が存し、他の作用がその作用を阻害しない、糖尿病患者の食後血糖上昇抑制を含む、糖質消化酵素阻害剤を提供すること課題とする。
【０００６】
【課題の解決手段】
本発明者らは、この様な状況に鑑みて、食経験が存し、他の作用がその作用を阻害しない、糖質消化酵素阻害剤を求めて、鋭意研究努力を重ねた結果、クルミ科クルミ属の植物のエキスにその様な作用が存し、これを食品などの組成物に含有させることにより、ダイエットに好適な組成物となることを見出し、発明を完成させるに至った。即ち、本発明は以下に示す技術に関するものである。
（１）クルミ科クルミ属の植物のエキスからなる、糖質消化酵素阻害剤。
（２）クルミ科クルミ属の植物のエキスが、種子の抽出物、その溶剤除去物及びそれらの分画精製物から選択されるものであることを特徴とする、（１）に記載の糖質消化酵素阻害剤。
（３）抽出が、中極性溶剤による抽出であることを特徴とする、（１）又は（２）に記載の糖質消化酵素阻害剤。
（４）阻害の対象となる糖質消化酵素が、α−グルコシダーゼ及び／又はアミラーゼであることを特徴とする、（１）〜（３）何れか１項に記載の糖質消化酵素阻害剤。
（５）α−グルコシダーゼが、スクラーゼ又はマルターゼあることを特徴とする、（４）に記載の糖質消化酵素阻害剤。
（６）（１）〜（５）何れか１項に記載の糖質消化酵素阻害剤を含有する、ダイエット用の組成物。
（７）食品であることを特徴とする、（６）に記載のダイエット用の組成物。
（８）クルミ科クルミ属の種子の抽出物、その溶剤除去物及びそれらの分画精製物から選択されるものの、糖質消化酵素阻害の為の組成物の製造に於ける使用。
（９）クルミ科クルミ属の種子の抽出物、その溶剤除去物及びそれらの分画精製物から選択されるもののを、糖質消化酵素と共存させることを特徴とする、前記糖質消化酵素の阻害方法。
（１０）共存場所が、消化管内であることを特徴とする、（９）に記載の阻害方法。
【０００７】
【発明の実施の形態】
（１）本発明の糖質消化酵素阻害剤
本発明の糖質消化酵素阻害剤は、クルミ科クルミ属の植物のエキスからなることを特徴とする。本発明の糖質消化酵素阻害剤の基源植物となる、クルミ科クルミ属の植物としては、通常日本に生育しているものであれば特段の限定無く使用できる。この様な、クルミ科クルミ属の植物としては、カシグルミ、オニグルミ、マンシュウグルミ、ウォールナッツなどが好適に例示できる。又、植物体の使用部位としては、特段の限定はないが、種子が好ましく、中でも仁を用いることが好ましく、更に好ましいのは、胡桃の仁を脱脂した後、極性溶媒で抽出し、液液抽出、カラムクロマトグラフィーなどで精製することにより、製造したものである。脱脂はノルマルヘキサンなどの非極性溶剤を使用して抽出することによって行うことが出来る。しかる後、ジエチルエーテル、イソプロピルエーテル、テトラヒドロフランなどのエーテル類、塩化メチレン、クロロホルムなどのハロゲン化炭化水素類、酢酸エチル、蟻酸メチルなどのエステル類、アセトンやメチルエチルケトン等のケトン類、アセトニトリルなどのニトリル類、１，３−ブタンジオール、エタノール、イソプロピルアルコールなどのアルコール類などの中極性溶剤で抽出することが好ましく例示できる。これらの内では、アルコールが好ましく、ｎ−ブタノールが特に好ましい。抽出は、植物体に対して１〜１０重量倍の溶剤を加え、室温であれば数日間、沸点付近の温度であれば数時間浸漬すればよい。抽出後は、必要に応じて、水などとともに液液抽出を行った後、減圧濃縮などして溶剤を除去することが好ましい。この時、液液抽出は、ノルマルブタノールと水の溶媒系が、抽出操作後そのまま液液抽出を行えるので、好ましく例示できる。更に、それをカラムクロマトグラフィーなどで精製することも出来る。かかるカラムクロマトグラフィーとしては、担体をシリカゲルとして、溶出溶媒をクロロホルム−メタノール系で行うもの、ダイアイオンＨＰ−２０（三菱化学株式会社製）等のイオン交換樹脂を担体として、水−メタノール系溶媒を溶出溶媒とするものなどが好ましく例示できる。かくして得られた本発明の糖質消化酵素阻害剤は、糖質消化に係わる酵素、特にスクラーゼ、マルターゼ等のα−グルコシダーゼやアミラーゼを阻害する作用に優れる。特記すべきは、糖代謝酵素に分類される酵素を複数にわたって、著しく阻害できる点である。本発明の糖質消化酵素阻害剤を組成物に含有させて、糖質消化酵素を阻害しようとする場合、本発明の糖質消化酵素阻害剤は唯一種を含有させることも出来るし、二種以上を組み合わせて含有させることも出来る。かかる組成物中に於ける、本発明の糖質消化酵素阻害剤の好ましい含有量は、総量で、組成物全量に対して０．１〜７０重量％であり、更に好ましくは１〜５０重量％である。これは、少なすぎると効果を奏さない場合があり、多すぎると、剤形上の任意成分の自由度を損なう場合があるからである。
【０００８】
（２）本発明の組成物
本発明の組成物は、上記本発明の糖質消化酵素阻害剤を含有することを特徴とする。組成物としては、経口で投与されるものが好ましく、食品が特に好適に例示できる。これは経口投与することにより、糖質消化酵素が実際に稼働する消化管にて、直接これを阻害することが出来るからである。食品としては、飴、ガム、焼き菓子などの菓子やソーセージ、ハム、はんぺん、インスタントラーメン等の総菜などの通常の食品や健康維持や健康促進を目的とする、錠剤や顆粒剤、カプセル剤形式の健康食品或いは特定保険用食品などが好ましく例示できる。通常の食品においては、本発明の糖質消化酵素阻害剤は、消化管内の糖質消化酵素を阻害し、以て、エネルギーの摂取量を減ずる目的で使用できる。これにより、過剰な摂取エネルギーにより、肥満を誘起することを防ぐことが出来る。更に、食事直前又は食事とともに摂取することにより、糖尿病患者に於ける食後血糖値上昇を抑制し、血糖値レベルを危険域に上昇することを避けることが出来る。本発明に言う、「ダイエット用」とは、これらの作用を包含した「食事関連療法用」という意味を表す。又、健康維持や健康促進を目的とする、健康食品或いは特定保険用食品などでは、特に、エネルギーの過剰摂取抑制による肥満防止が主たる効果とすることが出来る。本発明の食品においては、必須成分の糖質消化酵素阻害剤以外に食品で通常使用される任意成分を含有することができる。かかる任意の成分としては、例えば、賦形剤、結合剤、矯味剤、矯臭剤、滑沢剤、被覆剤、増粘剤、乳化剤、分散剤、着色剤、油脂等が好ましく例示できる。これら必須の成分と任意の成分とを常法に従って処理することにより、本発明の食品は製造できる。その他の組成物としては、経皮吸収させて、皮下脂肪の蓄積などを防ぐ化粧料などが例示できる。
【０００９】
【実施例】
以下に、実施例を挙げて、本発明について更に詳細に説明を加えるが、本発明が、かかる実施例にのみ限定されないことは言うまでもない。
【００１０】
＜実施例１＞
カシグルミの可食部５００ｇを粉砕した後、３ｌのノルマルヘキサンを加え、２時間加熱還流し、冷却、濾過し、脂質をノルマルヘキサンで溶出させた後、固形分を集めた。この固形分にノルマルブチルアルコール５ｌを加え、２時間加熱還流した後、冷却し、濾過により不溶分を取り除いた後、水１ｌで２回液液抽出を行い、水溶性の分画を除去した。ブタノール層を減圧濃縮し、溶媒を取り除き、本発明の糖質消化酵素阻害剤１を１２．７ｇ得た。
【００１１】
＜実施例２＞
スクラーゼ阻害作用
本発明の、糖質消化酵素阻害剤１について、スクラーゼ阻害活性を以下に示す手順に従って求めた。
スクラーゼの調整：ラット腸管アセトン粉末１ｇを１０倍量のマレイン酸緩衝液（ｐＨ  ６．０）中でホモジナイズし、遠心分離（３０００ｒｐｍ，  １０  分，  ４℃）した。得られた上清をマレイン酸緩衝液（ｐＨ  ６．０）で２倍希釈し、スクラーゼ溶液とした。スクラーゼ阻害活性の測定：２％スクロース水溶液０．６  ｍｌに１％糖質消化酵素阻害剤１水溶液０．６  ｍｌを加え３７℃，  ５  ｍｉｎ，  プレインキュベートした。スクラーゼ液０．６  ｍｌを加え３７℃、６０分インキュベートした。各々を沸騰水浴中で１０  分放置し、酵素を失活させ、遠心分離（３０００ｒｐｍ，  １０  分）した。上清を一定量取り、グルコーステストワコー（和光純薬）にてグルコース量を定量した。失活させた酵素液をブランクとし、１％糖質消化酵素阻害剤１水溶液の代わりに水を入れたものをコントロールとして、コントロールに対する百分率でスクラーゼ阻害活性を求めた。
結果：コントロールのグルコース量：９９．４  ｍｇ／ｄｌ
１％クルミ抽出物添加時のグルコース量：２．６  ｍｇ／ｄｌ
これより、スクラーゼ活性阻害率を求めると９７．４％になった。これより、本発明の糖質消化酵素阻害剤である、糖質消化酵素阻害剤１は優れたスクラーゼ阻害活性を有することがわかる。
【００１２】
＜実施例３＞
マルターゼ阻害作用
本発明の、糖質消化酵素阻害剤１について、マルターゼ阻害活性を以下に示す手順に従って求めた。
マルターゼの調整：ラット腸管アセトン粉末１ｇを１０倍量のマレイン酸緩衝液（ｐＨ  ６．０）中でホモジナイズし、遠心分離（３０００ｒｐｍ，  １０分，  ４℃）した。得られた上清をマレイン酸緩衝液（ｐＨ  ６．０）で１０倍希釈し、マルターゼ溶液とした。
マルターゼ阻害活性の測定：２％マルトース水溶液０．６  ｍｌに１％糖質消化酵素阻害剤１０．６  ｍｌを加え３７℃，  ５  ｍｉｎ，  プレインキュベートした。マルターゼ液０．６  ｍｌを加え３７℃、６０分インキュベートした。各々を沸騰水浴中で１０分放置し、酵素を失活させ、遠心分離（３０００ｒｐｍ，  １０分）した。上清を一定量取り、グルコーステストワコー（和光純薬）にてグルコース量を定量した。失活させた酵素液をブランクとし、１％糖質消化酵素阻害剤１水溶液の代わりに水を入れたものをコントロールとして、コントロールに対する百分率でマルターゼ阻害活性を求めた。
結果：コントロールのグルコース量：２６４．０  ｍｇ／ｄｌ
１％クルミ抽出物添加時のグルコース量：３．８  ｍｇ／ｄｌ
これより、マルターゼ活性阻害率を求めると、９８％となり、本発明の糖質消化酵素阻害剤である、糖質消化酵素阻害剤１は優れたマルターゼ阻害活性を有することがわかる。
【００１３】
＜実施例４＞
アミラーゼ阻害活性
本発明の、糖質消化酵素阻害剤１について、アミラーゼ阻害活性を以下に示す手順に従って求めた。アミラーゼ活性はアミラーゼテストワコー（和光純薬）を用いて測定した。すなわち、可溶性デンプン含有緩衝液１  ｍｌを基質として、１％糖質消化酵素阻害剤１水溶液１  ｍｌを加え、３７℃，  ５分間プレインキュベートした後、アミラーゼ溶液（５．３５  Ｕｎｉｔｓ）０．０２  ｍｌを加え３７℃，  ６０分，インキュベートした。発色試液（０．０１Ｎ  ヨウ素液）１  ｍｌと蒸留水４  ｍｌを加え、残存するデンプンをヨウ素で発色させることにより定量した。１％糖質消化酵素阻害剤１水溶液の代わりに水を入れたものをコントロールとして、コントロールに対する百分率でアミラーゼ阻害活性を求めた。
結果：コントロールのアミラーゼ活性：７７７．８
１％クルミ抽出物水溶液添加時のアミラーゼ活性：１７．８
これより、アミラーゼ活性阻害率は９７．７％となり、本発明の糖質消化酵素阻害剤である、糖質消化酵素阻害剤１は優れたアミラーゼ阻害活性を有することがわかる。
【００１４】
＜実施例５＞
下記に示す処方に従って、本発明の食品である錠剤を作成した。即ち、処方成分をフローコーターに仕込み、２０重量部の水を噴霧しながら、流動層造粒を行い、３時間４０℃で送風乾燥し、顆粒を得た。これを打錠して錠剤を得た。これらの錠剤を用いて１群１５人のパネラーによる飲用試験を行った。比較例１として、糖質消化酵素阻害剤１を結晶セルロースに置換したものを、比較例２として、糖質消化酵素阻害剤１をバナバエキスに置換したものも作成した。このものを一人一日３ｇ（糖質消化酵素阻害剤１を０．９ｇ）、連日６０日飲用し、その前後に於ける体重の変化を求めた。結果を平均の体重減少率として表１に示す。これより、本発明の組成物である、食品は体重増加の抑制作用があることがわかる。
結晶セルロース                      ４０重量部
乳糖                                ２０重量部
糖質消化酵素阻害剤１                ３０重量部
ヒドロキシプロピルメチルセルロース    ８重量部
ステアリン酸マグネシウム              ２重量部
【００１５】
【表１】
2004352649.tif 000002
【００１６】
【発明の効果】
本発明によれば、食経験が存し、他の作用がその作用を阻害しない、糖質消化酵素阻害剤を提供することができる。