(57)【要約】【課題】比較的簡単な装置により、工場排水は勿論、ラーメン屋、洋食屋、てんぷら屋などの排水を手軽に処理するために有用な新規な微生物、それを含有する油脂分解剤、および該分解剤を用いた油脂含有物質の処理方法の提供。【解決手段】Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ属に属し、非運動性、グラム染色陰性でカタラーゼ陽性、オキシダーゼ陰性を示す球状桿菌であって、コロニー形態として、円形、周縁波状、低凸状であり、光沢のある淡黄色を呈するものである油脂分解性を有することを特徴とする微生物、それを含有する油脂分解剤、および該分解剤を用いた油脂含有物質の処理方法。【選択図】      なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ属に属し、非運動性、グラム染色陰性でカタラーゼ陽性、オキシダーゼ陰性を示す球状桿菌であって、コロニー形態として、円形、周縁波状、低凸状であり、光沢のある淡黄色を呈し、かつ、油脂分解性を有することを特徴とする微生物。
【請求項２】
生理性状試験結果が下記のものである請求項１記載の微生物。
生理性状試験結果
１．生化学試験
β−ガラクトシダーゼ                          −
アルギニンジヒドロラーゼ                      −
リシンデカルボキシラーゼ                      −
オルニチンデカルボキシラーゼ                  −
クエン酸の利用性                              ＋
Ｈ２Ｓ産生                                      −
ウレアーゼ                                    −
トリプトファンデアミナーゼ                    −
インドール産生                                −
アセトイン産生                                −
ゼラチナーゼ                                  −
オキシダーゼ                                  −
ＮＯ２産生                                    −
Ｎ２ガスへの還元                              −
２．発酵／酸化試験
ブドウ糖                                      ＋
Ｄ−マンニトール                              ＋
イノシトール                                  −
Ｄ−ソルビトール                              −
Ｌ−ラムノース                                ＋
白糖                                          −
Ｄ−メリビオース                              ＋
Ｄ−アミグダリン                              ＋
Ｌ−アラビノース                              ＋
ＯＦ培地での酸化                              ＋
ＯＦ培地での発酵                              ＋
なお、上記試験において「＋」は陽性、「−」は陰性を示す。
【請求項３】
配列番号１で示される１６ＳｒＤＮＡの塩基配列を有する請求項１または２記載の微生物。
【請求項４】
独立行政法人産業技術総合研究所  特許生物寄託センター  受託番号ＦＥＲＭ  Ｐ−１８８０５で示されるアシネトバクター（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ）  ｓｐ．ＧＫＮ−４株。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれかに記載の微生物を含有することを特徴とする油脂分解剤。
【請求項６】
請求項５記載の油脂分解剤を用いることを特徴とする油脂含有物質の処理方法。
【請求項７】
前記油脂含有物質が排水である請求項６記載の油脂含有物質の処理方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、新規な微生物、特に油脂分解性を有する微生物、それを含む油脂分解剤およびそれを用いた油脂含有物質の処理方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
油脂分を含む排水の処理は、工業的には加圧浮上装置、自然浮上槽（オイルピット）あるいは油分分離槽（グリーストラップ）等の処理施設が用いられている。
しかし、従来用いられているグリーストラップなどの油脂分除外設備の設置では、固形化油脂の蓄積、下水管の閉塞、悪臭の発生、排水基準値の超過などの問題が煩雑に発生する。
この問題を解決する排水の処理技術の一つに自然界に存在する種々の生物、特に微生物を利用して排水中の油脂分を含む汚濁物質を除去したり分解する生物学的処理法がある。このための微生物としてはＢａｃｉｌｌｕｓ  ｓｐ．，Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｓｐ．ＳＫ０４０１株（微工研菌１３２３１），Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．ＳＫ０４０２Ａ株（微工研菌１３２３２），Ｓ．ｓａｐｒｏｐｈｙｔｉｃｕｓ  ＯＤ−１（微工研菌１７２０１）などが、原生動物としてはアメーバー類、繊毛虫類、鞭毛虫類などが、また藻類としては藍藻類、緑藻類、ケイ藻類などがある。本発明と同じＡｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ属に属する菌については、特許文献１において、Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．ＳＫ０４０２Ａ（微工研菌１３２３２）が開示されているが、これは、運動性短桿菌であって、本発明のものが非運動性球状桿菌である点で異なっている。
【０００３】
【特許文献１】
特開平６−１５３９２２号公報
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の目的は、比較的簡単な装置により、工場排水は勿論、ラーメン屋、洋食屋、てんぷら屋などの排水を手軽に処理するために有用な新規な微生物、それを含有する油脂分解剤、および該分解剤を用いた油脂含有物質の処理方法を提供する点にある。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
本発明の第１は、Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ属に属し、非運動性、グラム染色陰性でカタラーゼ陽性、オキシダーゼ陰性を示す球状桿菌であって、コロニー形態として、円形、周縁波状、低凸状であり、光沢のある淡黄色を呈し、かつ、油脂分解性を有することを特徴とする微生物に関する。
本発明の第２は、生理性状試験結果が下記のものである請求項１記載の微生物に関する。
生理性状試験結果
１．生化学試験
β−ガラクトシダーゼ                          −
アルギニンジヒドロラーゼ                      −
リシンデカルボキシラーゼ                      −
オルニチンデカルボキシラーゼ                  −
クエン酸の利用性                              ＋
Ｈ２Ｓ産生                                    −
ウレアーゼ                                    −
トリプトファンデアミナーゼ                    −
インドール産生                                −
アセトイン産生                                −
ゼラチナーゼ                                  −
オキシダーゼ                                  −
ＮＯ２産生                                    −
Ｎ２ガスへの還元                              −
２．発酵／酸化試験
ブドウ糖                                      ＋
Ｄ−マンニトール                              ＋
イノシトール                                  −
Ｄ−ソルビトール                              −
Ｌ−ラムノース                                ＋
白糖                                          −
Ｄ−メリビオース                              ＋
Ｄ−アミグダリン                              ＋
Ｌ−アラビノース                              ＋
ＯＦ培地での酸化                              ＋
ＯＦ培地での発酵                              ＋
なお、上記試験において「＋」は陽性、「−」は陰性を示す。
本発明の第３は、配列番号１で示される１６ＳｒＤＮＡの塩基配列を有する請求項１または２記載の微生物に関する。
本発明の第４は、独立行政法人産業技術総合研究所  特許生物寄託センター  受託番号ＦＥＲＭ  Ｐ−１８８０５で示されるアシネトバクター（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ）  ｓｐ．ＧＫＮ−４株に関する。
本発明の第５は、請求項１〜４のいずれかに記載の微生物を含有することを特徴とする油脂分解剤に関する。
本発明の第６は、請求項５記載の油脂分解剤を用いることを特徴とする油脂含有物質の処理方法に関する。
本発明の第７は、前記油脂含有物質が排水である請求項６記載の油脂含有物質の処理方法に関する。
【０００６】
本発明者等は、油脂を効率的に分解する微生物を分離することに成功し、本発明を完成した。
本発明における油脂とは、主として動植物由来のものであるが、必ずしもそれに限定するものではなく、合成法により得られた油脂類やその誘導体およびその他の種々の炭化水素等を含むものである。
【０００７】
本発明において用いた培地の組成
＜無機培地の組成＞
（ＮＨ４）２ＰＯ４                                ２．０ｇ／ｌ
Ｋ２ＨＰＯ４                                      ２．０ｇ／ｌ
ＮａＨ２ＰＯ４                                    １．０ｇ／ｌ
ＭｇＳＯ４                                      ０．２ｇ／ｌ
蒸留水を加えて、全体で１リットルとした。
ｐＨ：７．０
＜栄養寒天培地の組成＞
ポリペプトン                                  １０．０ｇ／ｌ
酵母エキス                                      ５．０ｇ／ｌ
ＮａＣｌ                                        ５．０ｇ／ｌ
寒天                                          １０．０ｇ／ｌ
蒸留水を加えて、全体で１リットルとした。
ｐＨ：７．３
＜栄養培地の組成＞
ポリペプトン                                    １．８ｇ／ｌ
肉エキス                                        １．２ｇ／ｌ
尿素                                            ０．３ｇ／ｌ
ＮａＣｌ                                      ０．０９ｇ／ｌ
Ｋ２ＨＰＯ４                                      ０．３ｇ／ｌ
ＫＣｌ                                      ０．０４２ｇ／ｌ
ＣａＣｌ２・２Ｈ２Ｏ                          ０．０４２ｇ／ｌ
ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ                            ０．０３ｇ／ｌ
蒸留水を加えて、全体で１リットルとした。
＜トリプチカーゼ  大豆  寒天培地  （Ｔｒｙｐｔｉｃａｓｅ  Ｓｏｙ  Ａｇａｒ）＞
トリプチカーゼ  ペプトン（Ｔｒｙｐｔｉｃａｓｅ  Ｐｅｐｔｏｎｅ）  １５ｇ
フィトン  ペプトン（Ｐｈｙｔｏｎｅ  Ｐｅｐｔｏｎｅ）                ５ｇ
ＮａＣｌ                                                            ５ｇ
寒天（Ａｇａｒ）                                                  １５ｇ
＜培地Ａ＞
ペプトン                                    １０ｇ／ｌ
肉エキス                                    １０ｇ／ｌ
ＮａＣｌ                                      ２ｇ／ｌ
蒸留水を加えて、全体で１リットルとした。
ｐＨ：７．０
＜培地Ｂ＞
リン酸２アンモニウム                          ２ｇ／ｌ
リン酸２カリウム                              ２ｇ／ｌ
リン酸１ナトリウム                            １ｇ／ｌ
リン酸マグネシウム                        ０．２ｇ／ｌ
酵母エキス                                ０．１ｇ／ｌ
蒸留水を加えて、全体で１リットルとした。
ｐＨ：７．０
【０００８】
（イ）新潟県黒川村油田近郊から採取した土壌を蒸留水に加え振とうした後、その上澄み液を分取した。
（ロ）水道水１リットルを入れたビーカーに（イ）で分取された上澄み液とオリーブオイルを加え水中ポンプで３日間撹拌した。
（ハ）上記無機培地１０ｍｌを加えたＬ−字管に（ロ）によって得られた撹拌液１００μｌ及びオリーブオイル１００μｌを加え、３０℃で培養液が懸濁するまで振とう培養した。
（ニ）培養液の懸濁が認められた後、上記無機培地１０ｍｌを入れたＬ−字管に（ハ）の懸濁液１００μｌ及びオリーブオイル１００μｌを加え、３０℃で再度培養液が懸濁するまで振とう培養した。
（ホ）培養液の懸濁が認められた後、（ニ）の操作を５回繰り返した。
（ヘ）（ホ）の操作が終了した後、培養液１００μｌを１０００倍に希釈し、上記栄養寒天培地上に滴下し、コラージ棒で均一にのばし一晩３０℃で培養する。
（ト）栄養寒天培地上に発現したコロニーを単離し、オリーブオイルの分解実験を行い、分解率の高い菌株を選択し、ＧＫＮ−４とした。
【０００９】
本発明微生物であるＡｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．ＧＫＮ−４と前記Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．ＳＫ０４０２Ａとの相違点を下記表に示す。
【００１０】
【表１】
2004166533.tif 000002
【００１１】
本発明の微生物を油脂分解剤として提供するためには、本発明の微生物を、種々の担体により固定化し、製剤化すればよい。具体的には、例えば１９９３年培風館発行、村尾澤夫他１名編「応用微生物学改訂版」や１９９５年丸善発行、上島孝之著、「産業用酵素」などに記載の製剤法を採用することができる。
【００１２】
液状製剤とするには、下記の方法を使用することができる。
（１）栄養培地で本発明の微生物を１２〜３６時間程度培養し、必要に応じてこれにｐＨ調整剤などを加えて製剤とする。
（２）前記（１）の培養物から菌体を遠心分離などで回収し、生理食塩水などの媒体に適当な濃度となるように懸濁し、必要に応じてこれにｐＨ調整剤などを加えて製剤とする。
（３）前記（１）の培養物を凍結乾燥などにより適度に濃縮し、必要に応じてこれにｐＨ調整剤などを加えて製剤とする。
（４）前記（１）の培養物から菌体を遠心分離などで回収し、栄養培地に懸濁し、必要に応じてこれにｐＨ調整剤などを加えて製剤とする。
（５）前記（４）をさらに凍結乾燥などにより適度に濃縮して製剤とする。
【００１３】
粉末製剤とするには、下記の方法を採用することができる。
（ａ）栄養培地で本発明の微生物を１２〜３６時間程度培養し、必要に応じてｐＨ調整剤などを加え、凍結乾燥などにより乾燥したものを製剤とする。
（ｂ）前記（ａ）の培養物から菌体を遠心分離などで回収し、生理食塩水あるいはスキムミルクとグルタミン酸ナトリウムなどからなる溶液などの媒体に適当な濃度となるように懸濁し、必要に応じてｐＨ調整剤を加え、凍結乾燥などにより乾燥したものを製剤とする。
（ｃ）前記（ａ）の培養物から菌体を遠心分離などで回収し、栄養培地に懸濁し、必要に応じてｐＨ調整剤などを加え、凍結乾燥などにより乾燥し製剤とする。
（ｄ）前記（ａ）〜（ｃ）のものに、繊維くず、おがくずなどの微粉体を適度に加えたものを製剤とする。
（ｅ）例えば１９９５年丸善発行、上島孝之著、「産業用酵素」に記載されている方法により、本発明の微生物を顆粒化することができる。具体的には（ａ）〜（ｄ）と同様にして調製した菌体懸濁液をプリム顆粒、マルム顆粒、フィルムコーティングしたマルム顆粒、セルロース繊維配合のＴ顆粒などとする。
【００１４】
また、前記方法以外にも、担体結合法、架橋法、包括法、複合法などの公知の技術により、本発明の微生物を種々の固定化用材料を用いて、固定化することができ、さらに、公知の錠剤化技術により、本発明微生物を錠剤化することもできる。
【００１５】
本発明の微生物を使用するにあたっては、微生物の高い活性を維持するために空気を吹き込むための散気手段、すなわちエアレーション手段を採用することが好ましい。また本発明の微生物を用いた処理装置においては本発明の微生物もしくは本発明の油脂分解剤の流出を防止し、かつ油脂分と分離するためのトラップを付設することが好ましい。トラップとしては、所定のポアサイズ（微生物は透過せず、水や低分子化合物などのみを通過させる）を有する膜フィルターをもつものが好ましい。また低温で固形化するような動物油脂を多く含む排水の場合には、ヒーターなどによるトラップ内の排水温度をコントロールすることにより一層高い効果を挙げることができる。
【００１６】
【実施例】
以下に実施例を挙げて本発明を説明するが、本発明はこれにより何ら限定され得るものではない。
【００１７】
実施例１
本発明のＧＫＮ−４株について、１２１℃で１５分間滅菌したトリプチカーゼ大豆  寒天培地  （Ｔｒｙｐｔｉｃａｓｅ  Ｓｏｙ  Ａｇａｒ）（ＢＢＬ、米国）上でのコロニー形態、顕微鏡観察による細胞形態、グラム染色、胞子の有無、鞭毛による運動性の有無およびカタラーゼ、オキシダーゼ、ブドウ糖の酸化発酵（ＯＦ）などの観察・試験を行った結果を表２に示す。
【表２】
2004166533.tif 000003
【００１８】
実施例２
本発明のＧＫＮ−４株の生化学的同定を行った。各種試験は、ＫＲＩＥＧ，（Ｎ．Ｒ．）  ａｎｄ  ＨＯＬＴ，（Ｊ．Ｇ．）１９８４：Ｂｅｒｇｅｙ’ｓ  ｍａｎｕａｌ  ｏｆ  Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ  Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ．Ｖｏｌ．１．  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ａｎｄ  Ｗｉｌｋｉｎｓ，  Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ．を参考に、ＡＰＩ  ２０Ｅの測定方法にしたがって測定した測定結果を下記に示す。
１．生化学試験
β−ガラクトシダーゼ                          −
アルギニンジヒドロラーゼ                      −
リシンデカルボキシラーゼ                      −
オルニチンデカルボキシラーゼ                  −
クエン酸の利用性                              ＋
Ｈ２Ｓ産生                                    −
ウレアーゼ                                    −
トリプトファンデアミナーゼ                    −
インドール産生                                −
アセトイン産生                                −
ゼラチナーゼ                                  −
オキシダーゼ                                  −
ＮＯ２産生                                    −
Ｎ２ガスへの還元                              −
２．発酵／酸化試験
ブドウ糖                                      ＋
Ｄ−マンニトール                              ＋
イノシトール                                  −
Ｄ−ソルビトール                              −
Ｌ−ラムノース                                ＋
白糖                                          −
Ｄ−メリビオース                              ＋
Ｄ−アミグダリン                              ＋
Ｌ−アラビノース                              ＋
ＯＦ培地での酸化                              ＋
ＯＦ培地での発酵                              ＋
なお、上記試験において「＋」は陽性、「−」は陰性を示す。
【００１９】
実施例３
ＧＫＮ−４株を１２１℃で１５分間滅菌したトリプチカーゼ  大豆  寒天培地（Ｔｒｙｐｔｉｃａｓｅ  Ｓｏｙ  Ａｇａｒ）（ＢＢＬ、米国）に植菌し、３０℃での培養物を供試菌体とし、菌体からゲノムＤＮＡを抽出した。抽出したゲノムＤＮＡを鋳型としてＰＣＲにより１６ＳｒＤＮＡの塩基配列約１６００ｂｐを増幅し、塩基配列をシーケンスして解析に使用した。ＰＣＲ産物の精製、サイクルシークエンスにはＭｉｃｒｏＳｅｑ（商標名）５００  １６ＳｒＤＮＡ  バクテリアル  シークエンシング  キット〔Ｂａｃｔｅｒｉａｌ  Ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ  Ｋｉｔ（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，米国）〕を使用した。ゲノムＤＮＡ抽出からサイクルシークエンスまでの操作に関してはＡｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ社のプロトコール（Ｐ／Ｎ４３０８１３２  Ｒｅｖ．Ａ）に従った。サーマルサイクラーにはＧｅｎｅＡｍｐ（商標名）ＰＣＲＳｙｓｔｅｍ９６００（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ社  米国）、ＤＮＡシークエンサーにはＡＢＩ  ＰＲＩＳＭ（商標名）３７７  ＤＮＡ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅｒ（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ社  米国）を使用した。
ＤＮＡシークエンサーによって解析した結果、本発明菌株ＧＫＮ−４の１６ＳｒＤＮＡをコードする遺伝子は、配列番号１に示す１４９４ｂａｓｅの塩基対からなることが確認された。
【００２０】
得られた１６ＳｒＤＮＡの塩基配列を使って相同性検索、系統樹の作製をし、検体の近縁種および帰属分類群の検討を行った。相同性検索および系統樹の作製にはＭｉｃｒｏＳｅｑ（商標名）Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  Ｓｙｓｔｅｍ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｖ．１．４．１およびＭｉｃｒｏＳｅｑ（商標名）Ｂａｃｔｅｒｉａｌ  ５００  Ｌｉｂｒａｒｙ  ｖ．００２３（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ社  米国）を使用した。
【００２１】
本発明の菌株と近縁とされる菌株とその相違性および近縁上位株との相違点を以下に示す。
ＧＫＮ−４株と近縁とされる菌株とその相違性
【表３】
2004166533.tif 000004
近縁上位株との相違点
【表４】
2004166533.tif 000005
【００２２】
ＧＫＮ−４と近縁株との近隣結合法による系統樹を表５に示す。
【表５】
2004166533.tif 000006
【００２３】
本発明のＧＫＮ−４株の１６ＳｒＤＮＡ塩基配列は相同率９９．００％でＡｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ  ｇｅｎｏｍｏｓｐｅｃｉｅｓ  ３に対し最も高い相同性を示した。分子系統樹上でもＧＫＮ−４株は、Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ  ｇｅｎｏｍｏｓｐｅｃｉｅｓ  ３、Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ  ｃａｌｃｏａｃｅｔｉｃｕｓとクラスターを形成し近縁であることが示された。
Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ  ｇｅｎｏｍｏｓｐｅｃｉｅｓ  ３（ＡＴＣＣ１７９２２株）は、Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ  ｃａｌｃｏａｃｅｔｉｃｕｓの一系統株で、ｇｅｎｏｍｏｓｐｅｃｉｅｓとはＡｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒにおいてＤＮＡ−ＤＮＡ相同性の比較から認められた集団に適用されたグループ名である。本発明のＧＫＮ−４株は、別に行った形態学的・生理性状学的試験から腸内細菌群の性状に類似している。本発明のＧＫＮ−４株の生理性状は多くの性状においてＡｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒの典型性状にも一致したが、ブドウ糖の発酵性を示す点で絶対好気性菌として記載されているＡｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒの典型性状とは異なるが、１６ＳｒＤＮＡを用いた解析から本発明のＧＫＮ−４株は、Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒへの帰属が示唆されており、本発明のＧＫＮ−４株は、従来公知のＡｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．に比較して極めて優れた油脂分解性能を有することから、新規微生物と判断し、Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．ＧＫＮ−４株とした。
【００２４】
実施例４
培地Ａ、培地Ｂはともに調整後、オートクレーブ滅菌し、培地Ｂについては、さらにフィルターを用いて濾過をした。
Ｌ字管に培地Ａを１０ｍｌに微生物（ＧＫＮ−４）の栄養寒天培地に発現した単コロニーを植菌し、２５℃、４０ｒｅｐ／ｍｉｎで振とう培養を行い、前培養液とした。
次いで、５００ｍｌ坂口フラスコに培地Ｂを１４０ｍｌ、上記前培養液１０ｍｌおよび基質としてオリーブオイルを添加し、４８時間１２０ｒｅｐ／ｍｉｎで振とう培養を行った。また、前培養液を加えず、同様の実験を行い、対照例とした。
【００２５】
オートクレーブ滅菌後、ＪＩＳ法に基づきｎ−ヘキサン抽出を行った。
１．ｐＨ７での温度変化による分解性能を表６に示す。
【表６】
2004166533.tif 000007
【００２６】
２．表６で判明した最適温度（２８℃）にてｐＨ変化による分解性能を表７に示す。
【表７】
2004166533.tif 000008
【００２７】
３．最適温度（２８℃）、最適ｐＨ（ｐＨ８）を用いての油脂添加量別分解性能を表８に示す。
【表８】
2004166533.tif 000009
この結果、本発明のＡｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．ＧＫＮ−４株を含有する油脂処理剤は、弱アルカリ性に維持された油脂含有排水を２０〜３５℃で使用されたときに特に優れた効果を発揮することが明らかとなった。
【００２８】
Ａホテル厨房内グリーストラップにおいて、平成１３年１０月６日から１０月２４日の１９日間にわたり、実際の排水について、本発明のＡｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．ＧＫＮ−４株からなる製剤を添加した場合の、水温、ｐＨ、溶存酸素（ＤＯ）、アンモニア性窒素、ノルマルヘキサン抽出物質（ｎ−Ｈｅｘ値）（ＪＩＳ  Ｋ  ０１０２による）の５項目について測定を行った。
このＡホテル厨房内グリーストラップは、４００ｍｍ×５００ｍｍ×１０００ｍｍ＝２００リットルで、油分量は、約５〜６リットル／日、使用水量４０ｔ／日、油分濃度は約１５０００〜約３０００ｐｐｍであり、通常は、１日１回、凝集剤により凝集させ、手作業による汲み取りを実施することによりグリーストラップの清掃を実施していた。
実験スケジュールは以下の表９に示す通りである。
【表９】
2004166533.tif 000010
【００２９】
油分解微生物製剤ＧＫＮ−４によるフィールド試験結果を表１０に示す。
【表１０】
2004166533.tif 000011
表中、「−」は、測定を実施しなかったことを示す。
【００３０】
通常通り、手作業による油脂分を完全に回収することは難しく、実際に清掃後、採取した排水の測定結果を見ても１９６１ｐｐｍという高い数値を示していた。微生物製剤投入後、２日目（１０月８日）は７２１ｐｐｍという数値を示しているが、投入前と比較すると約１／３の値に減少していることが分かる。（これは微生物増殖段階と考えられる。）４日目以降は、多少の増減は見られるが、平均６３．９ｐｐｍという数値が示され、投入前と比較すると明らかな差があり、微生物製剤による投入効果が充分に発揮することができた。
また、試験期間中は槽内からの悪臭の発生も感じられなかった。
【００３１】
【発明の効果】
本発明により、油脂を分解する能力を有する新規な微生物、それを含有する油脂分解剤、それを用いた油脂含有物質の処理方法を提供することができた。
【００３２】
【配列表】
2004166533.tif 000012
2004166533.tif 000013