(57)【要約】      （修正有）【課題】プラスチックの処理方法として自然環境の点から好ましいものに微生物を利用した生分解法があるが、プラスチックは一般に生分解性ではないという問題を有する。本発明は、プラスチックを分解することのできる微生物、および該微生物を用いたプラスチックの分解方法を提供する。【解決手段】特に分子構造中にエステル結合を有するプラスチックを分解する能力を有するペニバチルス属に属する微生物を提供するものであり、また、ペニバチルス属に属する微生物を用いたプラスチックの分解方法を提供するものである。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ペニバチルス属に属し、プラスチック分解能を有する微生物、または、プラスチック分解能を有するその変異株。
【請求項２】
ペニバチルス属に属する微生物がペニバチルスアミロリチカスである、請求項１記載の微生物。
【請求項３】
ペニバチルス属に属する微生物がペニバチルスアミロリチカス  ＴＢ−１３株（受託番号ＦＥＲＭ  Ｐ−１９１０４）である、請求項１記載の微生物。
【請求項４】
プラスチックが分子構造中にエステル結合を有するものである、請求項１乃至３記載の微生物。
【請求項５】
プラスチックがポリウレタンである、請求項１乃至３記載の微生物。
【請求項６】
プラスチックがポリ乳酸、ポリブチレンサクシネート、ポリブチレンサクシネート−ｃｏ−アジペート、またはポリエチレンサクシネートである、請求項１乃至３記載の微生物。
【請求項７】
ペニバチルス属に属し、プラスチック分解能を有する微生物またはその変異株をプラスチックと接触させる工程を含む、プラスチックの分解方法。
【請求項８】
ペニバチルス属に属する微生物がペニバチルス  アミロリチカスである、請求項７記載の分解方法。
【請求項９】
ペニバチルス属に属する微生物がペニバチルスアミロリチカス  ＴＢ−１３株（受託番号ＦＥＲＭ  Ｐ−１９１０４）である、請求項７記載の分解方法。
【請求項１０】
プラスチックがポリウレタンである、請求項７乃至９記載の分解方法。
【請求項１１】
プラスチックが分子構造中にエステル結合を有するものである、請求項７乃至９記載の分解方法。
【請求項１２】
プラスチックがポリ乳酸、ポリブチレンサクシネート、ポリブチレンサクシネート−ｃｏ−アジペート、またはポリエチレンサクシネートである、請求項７乃至９記載の分解方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、新規な微生物、および該微生物を用いる生物学的処理法によるプラスチックの分解方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】近年、プラスチック廃棄物の処理が問題になっている。プラスチック廃棄物の処理方法としては焼却や埋め立てが主であるが、焼却は地球温暖化の促進、埋め立ては埋立地の減少等の問題を抱えている。例えばポリウレタンは、全世界で年間約６００万ｔ，国内では約５５万ｔが消費されている。このうち、その発泡緩衝体は断熱性に優れることから冷蔵庫等の断熱材として大量に利用されている。現在、このポリウレタン廃棄物は不燃ゴミとして埋め立て処分される場合が多いが処分場の不足ならびに環境汚染の問題が生じている。一方、自然環境の点から好ましいものに微生物を利用した生分解法があるが、プラスチックは一般に生分解性ではないという問題を有する。
【０００３】
プラスチックを分解できる微生物に関する報告は少ないが、その例を以下に示す。
ポリ乳酸を分解する微生物の例としては、アミコラトプシス（Ａｍｙｃｏｌａｔｏｐｓｉｓ）属菌（Ｐｒａｎａｍｕｄａ  Ｈ，  Ｔｏｋｉｗａ  Ｙ，  Ｔａｎａｋａ  Ｈ  （１９９５）  Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ  ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｎ  ａｌｉｐｈａｔｉｃ  ｐｏｌｙｅｓｔｅｒ  ｗｉｔｈ  ａ  ｈｉｇｈ  ｍｅｌｔｉｎｇ  ｐｏｉｎｔ，  ｐｏｌｙ（ｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌｅｎｅ  ｓｕｃｃｉｎａｔｅ）．  Ａｐｐｌ．  Ｅｎｖｉｒｉｏｎ．  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．  ６１：  １８２８−１８３２）やバシラススミッチイ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｍｉｔｉｉ）（  Ｓａｋａｉ  Ｋ，  Ｋａｗａｎｏ  Ｈ，  Ｉｗａｍｉ  Ａ，  Ｎａｋａｍｕｒａ  Ｍ，  Ｍｏｒｉｇｕｃｈｉ  Ｍ  （２００１）  Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｉｃ  ｐｏｌｙ−Ｌ−ｌａｃｔｉｄｅ  ｄｅｇｒａｄｉｎｇ  ｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｆｒｏｍ  ｃｏｍｐｏｓｔ  ａｎｄ  ｉｔｓ  ｅｎｚｙｍａｔｉｃ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ．  Ｊ．  Ｂｉｏｓｃｉ．  Ｂｉｏｅｎｇ．  ９２：  ２９８−３００）等が報告されている。
【０００４】
【非特許文献１】
Ｐｒａｎａｍｕｄａ  Ｈ，  Ｔｏｋｉｗａ  Ｙ，  Ｔａｎａｋａ  Ｈ  著、Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ  ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｎ  ａｌｉｐｈａｔｉｃ  ｐｏｌｙｅｓｔｅｒ  ｗｉｔｈ  ａ  ｈｉｇｈ  ｍｅｌｔｉｎｇ  ｐｏｉｎｔ，  ｐｏｌｙ（ｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌｅｎｅ  ｓｕｃｃｉｎａｔｅ）．Ａｐｐｌ．  Ｅｎｖｉｒｉｏｎ．  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．  ６１：  １８２８−１８３２、１９９５年
【非特許文献２】
Ｓａｋａｉ  Ｋ，  Ｋａｗａｎｏ  Ｈ，  Ｉｗａｍｉ  Ａ，  Ｎａｋａｍｕｒａ  Ｍ，  Ｍｏｒｉｇｕｃｈｉ  Ｍ  著、Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｉｃ  ｐｏｌｙ−Ｌ−ｌａｃｔｉｄｅ  ｄｅｇｒａｄｉｎｇ  ｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｆｒｏｍ  ｃｏｍｐｏｓｔ  ａｎｄ  ｉｔｓ  ｅｎｚｙｍａｔｉｃ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ．  Ｊ．  Ｂｉｏｓｃｉ．  Ｂｉｏｅｎｇ．  ９２：  ２９８−３００、２００１年
ポリウレタンは分子内にウレタン結合及びエステル結合またはエーテル結合を含み、それらの結合が切断されることによって分解が進む。ポリオール部分のエステル結合はカビや細菌によって切断されるという報告が数例ある。Ｄａｒｂｙ（Ｄａｒｂｙ  Ｒ．  Ｔ．  ａｎｄ  Ｋａｐｌａｎ  Ａ．  Ｍ．：  Ａｐｐｌ．  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．，  １６，  ９００−９０５  （１９６８）．）らはカビによる種々のポリウレタン分解試験を行い、エーテル系よりもエステル系ポリウレタンの方が分解を受け易いことや、イソシアネートやポリオールの種類によって分解特性が異なることを報告している。Ｋａｙ（Ｋａｙ，  Ｍ．  Ｊ．，  ＭｃＣａｂｅ，  Ｒ．  Ｗ．，  Ｍｏｒｔｏｎ，  Ｌ．  Ｈ．  Ｇ．：  Ｉｎｔ．  Ｂｉｏｄｅｔｅｒｉｏ．  Ｂｉｏｄｅｇｒａｄ．，  ３１，  ２０９−２２５  （１９９１）．）らはエステル系ポリウレタン分解菌として１５種類の菌を単離し、分解力の強かったＣｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  属菌について分解特性を検討した結果について報告している。
【非特許文献３】
Ｄａｒｂｙ  Ｒ．  Ｔ．  ａｎｄ  Ｋａｐｌａｎ  Ａ．  Ｍ．著、Ａｐｐｌ．  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．，  １６，  ９００−９０５  （１９６８）
【非特許文献４】
Ｋａｙ，  Ｍ．  Ｊ．，  ＭｃＣａｂｅ，  Ｒ．  Ｗ．，  Ｍｏｒｔｏｎ，  Ｌ．  Ｈ．  Ｇ．著、Ｉｎｔ．  Ｂｉｏｄｅｔｅｒｉｏ．  Ｂｉｏｄｅｇｒａｄ．，  ３１，  ２０９−２２５  （１９９１）
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、プラスチックを分解することのできる新規微生物、および該微生物を用いたプラスチックの分解方法を提供することを目的とする。特に、複数種のプラスチックを分解することのできる微生物を提供することを目的とする。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
この問題を解決するため、我々はプラスチック、特に分子構造中にエステル結合を有するプラスチックを分解する微生物のスクリーングを行い、ペニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）属に属する微生物が該プラスチックを分解できることを見出した。尚、ペニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）属に属する微生物が該プラスチックの分解能を有することはこれまで知られていなかった。また、本発明者らはペニバチルス属に属する微生物を用いるプラスチックの分解方法を見出した。
【０００７】
即ち、本発明はプラスチック、特に分子構造中にエステル結合を有するプラスチックを分解する能力を有するペニバチルス属に属する微生物を提供するものであり、また、ペニバチルス属に属する微生物を用いたプラスチックの分解方法を提供するものである。尚、該微生物由来のプラスチック分解活性を有する酵素、該酵素のアミノ酸配列および遺伝子配列は、同一出願人による「発明の名称：新規なプラスチック分解酵素および該酵素をコードする遺伝子」の同日特許出願に記載されている。
【０００８】
【発明の実施の形態】
ペニバチルス属に属し、プラスチック分解能を有する微生物は、既に公知の微生物であってもよく、新たにスクリーニングされた微生物であってもよい。微生物のスクリーニングの一例を示せば、各地より採取した土壌をポリ乳酸の粉末を含む培地の入った試験管に入れ、３０℃にて振とう培養し、一週間ごとに植え継ぎを繰り返した後、エマルジョン化したポリ乳酸を含んだ寒天平板に希釈塗布し、コロニー周辺にプラスチックの分解に伴うクリヤーゾーンの形成が見られた菌を取得することにより行うことができる。
【０００９】
本発明の微生物は、プラスチック、特に分子構造中にエステル結合を有するプラスチックを分解する能力を有するペニバチルス属菌であればよい。具体的には、代表例として、平成１４年１１月１４日付けで、独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センターに寄託されたペニバチルスアミロリチカス  （Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｍｙｌｏｌｙｔｉｃｕｓ）ＴＢ−１３株（受託番号ＦＥＲＭ  Ｐ−１９１０４）が挙げられる。ペニバチルス属菌の菌学的性質は、バージーズ・マニュアル・オブ・システマティック・バクテリオロジー（ＢＥＲＧＥＹ’Ｓ  ＭＡＮＵＡＬ  ＯＦ  Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ  Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ）（第１巻１９８４年、第２巻１９８６年、第３巻１９８９年、第４巻１９８９年）に記載されている。
【００１０】
更に本発明の微生物は、プラスチック、特に分子構造中にエステル結合を有するプラスチックを分解する能力を有するペニバチルス属菌であれば、野生株、変異株のいずれでも良い。
【００１１】
変異株は、従来からよく用いられている変異剤であるエチルメタンスルホン酸による変異処理、ニトロソグアニジン、メチルメタンスルホン酸などの他の化学物質処理、紫外線照射、或いは変異剤処理なしで得られる、いわゆる自然突然変異によって取得することも可能である。
【００１２】
ペニバチルス属に属する微生物の培養に用いる培地としては、ペニバチルス属に属する微生物が生育できる培地であれば特に制限なく用いることができ、例えば、ＬＢ培地（１％トリプトン、０．５％酵母エキス、１％ＮａＣｌ）が挙げられるがこれらに限定されない。本発明の微生物の生育に使用する培地は、具体的には、本発明の微生物が資化し得る炭素源、例えばグルコース等、及び本発明の微生物が資化し得る窒素源を含有し、窒素源としては有機窒素源、例えばペプトン、肉エキス、酵母エキス、コーン・スチープ・リカー等、無機窒素源、例えば硫酸アンモニウム、塩化アンモニウム等を含有することができる。さらに所望により、ナトリウムイオン、カリウムイオン、カルシウムイオン、マグネシウムイオン等の陽イオンと硫酸イオン、塩素イオン、リン酸イオン等の陰イオンとからなる塩類を含んでもよい。さらに、ビタミン類、核酸類等の微量要素を含有することもできる。炭素源の濃度は、例えば０．１〜１０％程度であり、窒素源の濃度は、種類により異るが、例えば０．０１〜５％程度である。また、無機塩類の濃度は、例えば０．００１〜１％程度である。
【００１３】
本発明において分解できるプラスチックは、プラスチックの分子構造中にエステル結合を有するものであればよい。制限的でない例としては、ポリ乳酸、ポリウレタン、ポリブチレンサクシネート、ポリブチレンサクシネート―ｃｏ―アジペート、およびポリエチレンサクシネートが挙げられる。
【００１４】
ポリ乳酸とは、乳酸を主要成分とする重合体をさし、ポリＬ−乳酸や、ポリＤ−乳酸等のポリ乳酸ホモポリマー、ポリＬ／Ｄ−乳酸共重合体、およびこれらにε−カプロラクトン、グリコリド、デプシペプチド等の他の成分を共重合させたポリ乳酸共重合体、そして上記ポリマー間、および他の成分ポリマーとのブレンド体を含む。その重合方法としては、乳酸からの直接重合法、ラクタイド（乳酸の環状二量体）を介する開環重合法等が知られている。また、本発明の分解方法において適用し得るポリ乳酸樹脂の数平均分子量は、特に制限はなく、分子量５，０００〜２０，０００のポリ乳酸の分解については実施例に示している。
【００１５】
ポリウレタンとは、分子中にウレタン結合（−ＮＨＣＯＯ−）を有する高分子化合物の総称で、多官能イソシアネートとヒドロキル基含有化合物との反応により得られ、エステル、エーテル、アミド、ウレア、カルバメートなどの基を有するポリマーである。ヒドロキシル基もしくはイソシアネート基の官能性数を変化させることで多種多様の分岐あるいは架橋ポリマーを調製することができる。用いるポリオールの種類によってエステル系とエーテル系に大別できる。ポリウレタンは、易加工性、耐腐敗性、耐変質性、低比重等の優れた特性により、弾性体、発泡体、接着剤、塗料、繊維、合成皮革など幅広い用途を持っており、自動車部品としても広く使用されている。本発明の分解方法において適用し得るポリウレタン樹脂の数平均分子量は、特に制限はない。
【００１６】
ポリブチレンサクシネートとは、コハク酸とブタンジオールからなる高分子をいう。ポリプロピレンやＰＥＴなみの機械的強度を有し、融点もポリカプロラクトンより高い。成形加工性もポリエチレンに近く、同種の成形加工機が使用できる。本発明の分解方法において適用し得るポリブチレンサクシネートの数平均分子量は、特に制限はなく、分子量１４０，０００のポリブチレンサクシネートの分解については実施例に示している。
【００１７】
ポリブチレンサクシネート−ｃｏ−アジペートとは、ポリブチレンサクシネート合成において原料にアジピン酸を加えることにより調製される高分子をいう。融点は９０℃ぐらいにまで下がるが、柔軟性が向上する。包装材や苗のポット、ゴミ袋などに利用されている。本発明の分解方法において適用し得るポリブチレンサクシネート−ｃｏ−アジペートの数平均分子量は、特に制限はなく、分子量１４０，０００および２５０，０００のポリブチレンサクシネート−ｃｏ−アジペートの分解については実施例に示している。
【００１８】
ポリエチレンサクシネートとは、ポリブチレンサクシネートのブタンジオールをエチレングリコールに代えたものをいう。機械物性はポリエチレンやポリプロピレンと同等、融点は１００℃と低めであるが、酸素を通しにくいため食品フィルムへの応用が期待されている。本発明の分解方法において適用し得るポリエチレンサクシネートの数平均分子量は、特に制限はなく、分子量６０，０００のポリエチレンサクシネートの分解については実施例に示している。
【００１９】
更に本発明は、プラスチック、特に分子構造中にエステル結合を有するプラスチックを微生物の作用により分解処理する方法を提供する。該方法は、微生物の増殖過程でプラスチックが分解され栄養源として消費されることを利用する、あるいは微生物の有する酵素の作用によりプラスチックを分解する作用を利用するもの、すなわち増殖した後の微生物菌体、例えば休止菌体を利用するものである。
あるいは、菌体を定法により凍結乾燥した粉末状、その粉末と各種ビタミンやミネラル、必要な栄養源、例えば酵母エキス、カザミノ酸、ペプトン等を配合した後に打錠した錠剤等固形状の形態の調製物としてプラスチックの処理に提供しても良い。また、菌株を活性汚泥およびコンポストの成分として利用することもできる。
【００２０】
分解に共されるプラスチックは、例えば液体の培地中にエマルジョンとして、あるいは粉体の形で加えても良いし、フィルム、ペレット等の塊として加えても良い。なお、培地に対するプラスチックの投入量は、０．０１〜１０重量％が望ましい。添加する微生物量は極少量であってもよいが、分解効率を考慮してプラスチックに対して０．１重量％以上（湿重量）が好ましい。また、分解に供するプラスチックは、１種類であっても複数種類であっても良い。
【００２１】
微生物の増殖過程でプラスチックが分解され栄養源として消費されることを利用する態様では、プラスチックを単一の炭素源として与えることも、他の炭素源とともに与えることもできる。使用し得る培地としては、炭素源としては、プラスチックあるいはグルコース等、及び本発明の微生物が資化し得る窒素源を含有し、窒素源としては有機窒素源、例えばペプトン、肉エキス、酵母エキス、コーン・スチープ・リカー等、無機窒素源、例えば硫酸アンモニウム、塩化アンモニウム等を含有することができる。さらに所望により、ナトリウムイオン、カリウムイオン、カルシウムイオン、マグネシウムイオン等の陽イオンと硫酸イオン、塩素イオン、リン酸イオン等の陰イオンとからなる無類を含んでもよい。さらに、ビタミン類、核酸類等の微量要素を含有することもできる。炭素源の濃度は、例えば０．１〜１０％程度であり、窒素源の濃度は、種類により異るが、例えば０．０１〜５％程度である。また、無機塩類の濃度は、例えば０．００１〜１％程度である。
【００２２】
微生物の有する酵素のプラスチックを分解する作用を利用する態様、すなわち増殖した後の微生物菌体、例えば休止菌体を利用する態様では、プラスチックの分解に際し、該微生物の増殖を伴わないため、緩衝液にプラスチックを添加した培地などであっても良いが、その他に窒素源、無機塩、ビタミンなどを添加しても良い。緩衝液としては、例えばリン酸緩衝液が挙げられる。
【００２３】
プラスチックの分解に要する時間は、分解に供するプラスチックの種類、組成、形状及び量、使用した微生物の種類及び樹脂に対する相対量、その他種々の培養条件等に応じて変化しうる。
【００２４】
本発明において、上記微生物に対し、好気条件で、静置培養、振盪培養あるいは通気培養を行えばプラスチックの分解がみられる。好ましくは回転振盪培養が良く、回転数は３０〜２５０回転／分の範囲であるのが良い。培養条件としては、培養温度は１０〜５０℃、特に３０℃付近が好ましい。また、培地のｐＨは４〜１０の範囲、好ましくは７付近であるのが良い。
【００２５】
培地中のプラスチックの分解の確認は、例えば、分解に供したプラスチックの重量減少の測定、エマルジョンとして供する場合はプラスチックの分解によるクリアーゾーンの形成により測定することができる。
【００２６】
【実施例】本発明を実施例によってさらに詳しく説明するが、本発明の範囲はこれらのみに限定されるものではない。
実施例１  微生物のスクリーニング
エマルジョンの作成方法
各種プラスチックのエマルジョンの作成は以下の方法に従った。各種プラスチック２ｇ  を４０ｍｌのジクロロメタンに溶解し、４０ｍｇのアニオン界面活性剤であるＰｌｙｓｕｒｆ  Ａ２１０Ｇを含んだ蒸留水２５０ｍｌに加えてホモジナイザー（１０，０００  ｒｐｍ  １０  ｍｉｎ）にてエマルジョン化した。その後、これを８０℃に加熱してジクロロメタンを揮発させた。
【００２７】
培地
以下の培地を使用した。  ＫＨ２ＰＯ４  ２．０（ｇ／ｌ）；  Ｋ２ＨＰＯ４，  ７．０（ｇ／ｌ）；  ＮＨ４ＮＯ３，  １．０（ｇ／ｌ）；  ＭｇＳＯ４．７Ｈ２Ｏ，  ０．１（ｇ／ｌ）；  ＺｎＳＯ４．７Ｈ２Ｏ，  ０．００１（ｇ／ｌ）；  ＣｕＳＯ４．７Ｈ２Ｏ，  ０．０００１（ｇ／ｌ）；  ＦｅＳＯ４．７Ｈ２Ｏ，  ０．０１（ｇ／ｌ）；  ＭｎＳＯ４．４−６Ｈ２Ｏ，  ０．００２（ｇ／ｌ）。ｐＨ  は７．２とした。固体培地として上記の培地に寒天（１５  ｇ／ｌ）  を加えたものを用いた。
【００２８】
スクリーニング
日本各地より採取した土壌各０．２グラムを内径１０ｍｍの大型試験管に入れ培地１０ｍｌを加えた。ここにポリ乳酸の粉末２ｍｇを加えて３０℃にて振とう培養した。一週間ごとに植え継ぎを４回繰り返した後、エマルジョン化したポリ乳酸（和光純薬（株）より購入）および１ｇ／ｌの酵母エキスを含んだ寒天平板に希釈塗布した。コロニー周辺にプラスチックの分解に伴うクリヤーゾーンの形成が見られた菌を取得した。
【００２９】
約４００種類の土壌を用いて分解菌の検索を行った結果、最優良株としてＴＢ−１３株を選出した。
実施例２  微生物の同定
生理学的試験は一般的な方法に従って行った。同定にはＢｅｒｇｅｙ’ｓ  Ｍａｎｕａｌ  ｏｆ  Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ  Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ  （Ｂｅｒｇｅｙ  ＤＨ，  Ｋｒｉｅｎｇ  ＮＲ  （１９８６）  Ｐ．  ａｍｙｌｏｌｙｔｉｃｕｓ．  Ｉｎ：Ｂｅｒｇｅｙ’ｓ  Ｍａｎｕａｌ  ｏｆ  Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ  Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ，  Ｖｏｌ．  ２．  Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ：  ＷＩＬＬＩＡＵＭＳ＆ＷＩＬＫＩＮＳ  Ｃｏ．，  ｐｐ．１１３９．）を参考にした。１６ｓ  ｒＤＮＡの配列決定と解析は（株）エヌシーアイエムビージャパンに依頼した。
【００３０】
常法に従い、各種生理試験を行った。ＴＢ−１３株はグラム陰性、好気性の桿菌で、その他の生理学的性質は以下の表１のとおりであった。
【００３１】
【表１】
2004166542.tif 000002
【００３２】
また、本菌株はグルコース、Ｌ−アラビノース、リボース、マンノース、マンニトール、マルトース、キシロース、フルクトース、Ｎ−アセチルグルコサミン、スクロース、トレハロースに生育可能で、グルコナート、ソルビトール、アラビトール、エリスリトール、Ｄ−アラビノース、イヌリンには生育できなかった。
【００３３】
これらの結果をＢｅｒｇｅｙ’ｓ  Ｍａｎｕａｌ  ｏｆ  Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ  Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ（Ｂｅｒｇｅｙ  ＤＨ，  Ｋｒｉｅｎｇ  ＮＲ  （１９８６）  Ｐ．  ａｍｙｌｏｌｙｔｉｃｕｓ  Ｉｎ：  Ｂｅｒｇｅｙ’ｓ  Ｍａｎｕａｌ  ｏｆ  Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ  Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ，  Ｖｏｌ．  ２．  Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ：  ＷＩＬＬＩＡＵＭＳ＆ＷＩＬＫＩＮＳ  Ｃｏ．，  ｐｐ．１１３９．）に照らしたところ、ＴＢ−１３株はペニバチルスアミロリチカス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｍｙｌｏｌｙｔｉｃｕｓ）であると同定した。また１６Ｓ  ｒＲＮＡ  遺伝子配列の解析結果からも本菌株はペニバチルス  アミロリチカス  と９７．６５％の相同性を示した。
【００３４】
実施例３  プラスチック分解試験
材料
エステル型ポリウレタンは、ポリジエチレングリコールアジペート（平均分子量２，５００）と２，４−トリレンジイソシアネートより合成した物を用いた。ポリ乳酸は和光純薬（株）より購入した。ポリブチレンサクシネートおよびポリブチレンサクシネート−ｃｏ−アジペートは（株）昭和高分子製のビオノーレを使用した。ポリエチレンサクシネートは日本触媒社製のルナーレＳＥをもちいた。アニオン界面活性剤Ｐｌｙｓｕｒｆ  Ａ２１０Ｇは第一工業製薬社製のものを用いた。
【００３５】
分解試験
ポリウレタンを除く各種プラスチックの分解活性はエマルジョン化した各種プラスチックを含んだ寒天平板上で鑑定した。各種平板に植菌して、３０℃にて２週間培養して、コロニー周辺のクリヤーゾーンの形成量を持って分解量とした。
【００３６】
ポリウレタンは有機溶媒に不溶なためエマルジョンを作成できないので、以下の方法で分解試験を行った。酵母エキス１％を含む上記培地１０ｍｌにキューブ状のポリウレタン１ｇをいれ、滅菌後植菌して、３０℃にて２週間培養した。分解量は重量法にて測定した。
【００３７】
ペニバチルスアミロリチカスＴＢ−１３株を用いて、各種プラスチックに対する分解活性を試験した結果を表２に示した。本菌株はポリ乳酸、ポリブチレンサクシネート−ｃｏ−アジペートおよびポリエチレンサクシネートに高い分解活性を示した。また、ポリブチレンサクシネートにも弱い分解活性を示した。また、ペニバチルス  アミロリチカスＴＢ−１３株を用いたポリウレタンに対する分解試験の結果を表３に示した。本菌株はポリウレタンの分解も可能であった。つまり、本菌株は、複数種のプラスチックを分解可能であることが判明した。
【００３８】
【表２】
2004166542.tif 000003
【００３９】
【表３】
2004166542.tif 000004
【００４０】
【発明の効果】本菌株の純粋培養系を用いた各種ポリエステル型プラスチックの集約的分解処理、土壌中やコンポスト中に添加することによる分解処理や肥料として再資源化等への応用が期待される。