(57)【要約】【課題】最適量のニッケル、コバルトをメタン発酵槽内に添加でき、これによって、メタン菌の活性を充分に向上して安定した発酵状態を長期間維持できるメタン発酵処理方法を提供する。【解決手段】有機性廃棄物をメタン発酵槽内１４に投入し、嫌気性微生物によりメタン発酵させて、消化液として取り出すメタン発酵処理方法において、メタン発酵槽１４内の発酵処理物中の菌体の増殖数を測定し、この増殖数に応じた量のニッケル化合物及び／又はコバルト化合物を、ニッケル・コバルト供給タンク１９によって、メタン発酵槽１４内に添加する。また、取り出された消化液中の菌体数を測定し、この菌体数に応じた量のニッケル化合物及び／又はコバルト化合物を添加してもよい。【選択図】  図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
有機性廃棄物をメタン発酵槽内に投入し、嫌気性微生物によりメタン発酵させて、消化液として取り出すメタン発酵処理方法において、
前記メタン発酵槽内の発酵処理物中の菌体の増殖数を測定し、この増殖数に応じた量のニッケル化合物及び／又はコバルト化合物を、前記メタン発酵槽内に添加しつつメタン発酵させることを特徴とするメタン発酵処理方法。
【請求項２】
有機性廃棄物をメタン発酵槽内に投入し、嫌気性微生物によりメタン発酵させて、消化液として取り出すメタン発酵処理方法において、
前記取り出された消化液中の菌体数を測定し、この菌体数に応じた量のニッケル化合物及び／又はコバルト化合物を、前記メタン発酵槽内に添加しつつメタン発酵させることを特徴とするメタン発酵処理方法。
【請求項３】
前記菌体１個あたりに取り込まれるニッケル及び／又はコバルトの質量を測定し、この質量を、前記菌体の増殖数又は前記取り出された消化液中の菌体数に乗じることにより、前記ニッケル化合物及び／又はコバルト化合物の添加量を算出する請求項１又は２に記載のメタン発酵処理方法。
【請求項４】
前記菌体数の測定は、測定すべき試料に、前記菌体内に存在するエステラーゼ酵素によって蛍光物質を生成する試薬を混合し、前記蛍光物質の蛍光を測定することにより行なう請求項１〜３のいずれか１つに記載のメタン発酵処理方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、嫌気性微生物を用いて、生ゴミ、食品加工残滓、活性汚泥処理等の余剰汚泥等の有機性廃棄物を処理するメタン発酵処理方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
生ゴミ等の有機性廃棄物のほとんどは、焼却や埋立処分されているが、焼却に伴うダイオキシンの発生や埋立処分地の逼迫、悪臭などの問題から、環境負荷の少ない処理方法が求められている。これらの問題を解決するために有機性廃棄物をメタン発酵処理し、発生したメタンガスを燃料電池やガスエンジンを用いて発電するシステムが研究、開発されている。
【０００３】
メタン発酵処理は、有機性廃棄物を粉砕、スラリー化した後、このスラリーを発酵槽に投入し、嫌気性下でメタン菌により発酵処理して有機性廃棄物をバイオガスと水とに分解する方法であり、有機性廃棄物を大幅に減量することができると共に、副産物として生成するメタンガスをエネルギーとして回収できるメリットがある。また、嫌気性のため曝気動力が不要であるため省エネルギーな処理法である。
【０００４】
ここで、上記のメタン発酵においては、効率よく有機性廃棄物を分解してメタンガスを取り出す必要があるため、メタン発酵槽内の発酵状態を最適に制御することが重要である。このような、メタン発酵槽内の発酵効率を向上させる方法として、メタン菌の栄養素となる金属である、ニッケルやコバルト等をメタン発酵槽内に添加することが知られている。
【０００５】
例えば、特開平１１−２８４４５号公報には、嫌気性生物にて分解可能な固形状の有機性廃棄物を含有する廃棄物を破砕した破砕物をメタン発酵処理する廃棄物処理方法において、メタン発酵処理時の前記破砕物中の全蒸発残留物の濃度（ＴＳ濃度）が５％以上となる場合、鉄化合物、コバルト化合物及びニッケル化合物の少なくともいずれか一方を添加する廃棄物処理方法が開示されている。
【０００６】
また、特開平３−１５４６９２号公報には、過負荷によって、全有機性炭素（ＴＯＣ）が低下した際に、メタン菌の代謝に必要なニッケル化合物、コバルト化合物、窒素化合物、リン酸化合物が所定の比率になるように、前記化合物のいずれか、あるいは、すべてを添加することが開示されている。
【０００７】
更に、特開平６−２４６２８８号公報には、有機性廃水を高温上向流式嫌気性汚泥床装置によりメタン発酵処理する方法において、高温メタン発酵処理における温度域からスタ−トアップし、栄養塩としてＦｅ、Ｎｉ及びＣｏの塩類の濃度を、それぞれＦｅ：１×１０−５Ｆｅ／ＣＯＤｃｒ、Ｎｉ：１×１０−６Ｎｉ／ＣＯＤｃｒ、及びＣｏ：１×１０−６Ｃｏ／ＣＯＤｃｒ以上の濃度に制御しながら運転することが開示されている。
【０００８】
また、特開２００１−２１１８９４号公報には、消化汚泥から得た中温メタン菌を馴化させ、馴化メタン菌を微量金属要素の無機栄養塩包括担体上で固定床バイオリアクターにより増殖させてメタンに改質させることが開示されており、微量金属として、Ｃｏ、Ｆｅを用いることが開示されている。
【０００９】
【特許文献１】
特開平１１−２８４４５号公報
【特許文献２】
特開平３−１５４６９２号公報
【特許文献３】
特開平６−２４６２８８号公報
【特許文献４】
特開２００１−２１１８９４号公報
【００１０】
【発明が解決しようとする課題】
ニッケル、コバルトは、メタン菌の代謝に必要な金属として菌体内に存在する補酵素に含有されており、酢酸や水素、二酸化炭素の基質からメタンを生成する際の代謝経路を速やかに進行させる働きがある。
【００１１】
ここで、上記のニッケル、コバルトがメタン菌に有効に取り込まれるには、それぞれニッケルイオン、コバルトイオンのようなフリーの金属イオンの状態であることが必要とされるが、この必要量は、それぞれの菌体内に所定量が取り込まれれば充分であり、それ以上の過剰のニッケル、コバルトは不要である。
【００１２】
しかしながら、上記の特開平１１−２８４４５号公報の方法においては、ＴＳ濃度に基づいてコバルト化合物、ニッケル化合物を添加している。また、特開平３−１５４６９２号公報の方法では、ＴＯＣが低下した際にニッケル化合物、コバルト化合物を添加しており、特開平６−２４６２８８号公報の方法ではＣＯＤｃｒ（化学的酸素要求量）負荷に応じて、コバルト化合物、ニッケル化合物を添加している。また、特開２００１−２１１８９４号公報の方法においても、実際の菌体数に応じた添加量の調整は開示されていない。このように、上記の従来技術においては、いずれもニッケル、コバルトの添加量を、ＴＳ濃度、ＴＯＣ、ＣＯＤｃｒ負荷といった、メタン発酵槽の運転状態を監視する指標によって検討しており、コバルト、ニッケルが取り込み可能な菌体数に応じて、最適な添加量を検討することは行なわれていなかった。
【００１３】
このため、上記の従来の方法においては、実際にはニッケル、コバルトの添加量が不足して菌の活性が低下したり、逆に添加量が過剰となって、残渣中に余分なニッケル、コバルトが残存して処理が別途必要となるという問題があった。また、過剰のコバルト化合物、ニッケル化合物の添加はコスト高になるという問題もあった。
【００１４】
したがって、本発明の目的は、上記の問題を解決して、最適量のニッケル、コバルトをメタン発酵槽内に添加でき、これによって、メタン菌の活性を充分に向上して安定した発酵状態を長期間維持できる、メタン発酵処理方法を提供することにある。
【００１５】
【課題を解決するための手段】
すなわち、本発明のメタン発酵処理方法の１つは、有機性廃棄物をメタン発酵槽内に投入し、嫌気性微生物によりメタン発酵させて、消化液として取り出すメタン発酵処理方法において、
前記メタン発酵槽内の発酵処理物中の菌体の増殖数を測定し、この増殖数に応じた量のニッケル化合物及び／又はコバルト化合物を、前記メタン発酵槽内に添加しつつメタン発酵させることを特徴とする。
【００１６】
この方法によれば、メタン発酵槽内の発酵処理物中の菌体の増殖数は、新たに生成した菌体であり、この増殖分が、ニッケル及び／又はコバルトが取り込まれていない菌体数に相当すると考えることができる。よって、この増殖数に基づいて、菌体が必要とするニッケル化合物及び／又はコバルト化合物の量を求めることができ、これによって、メタン菌の活性を充分に向上して安定した発酵状態を長期間維持できる。
【００１７】
本発明のメタン発酵処理方法の他の１つは、有機性廃棄物をメタン発酵槽内に投入し、嫌気性微生物によりメタン発酵させて、消化液として取り出すメタン発酵処理方法において、
前記取り出された消化液中の菌体数を測定し、この菌体数に応じた量のニッケル化合物及び／又はコバルト化合物を、前記メタン発酵槽内に添加しつつメタン発酵させることを特徴とする。
【００１８】
この方法によれば、取り出された消化液の量に相当する、新たな原料スラリーがメタン発酵槽内に投入されるので、取り出された消化液中の菌体数が、これから増殖する菌体数に相当すると考えることができる。よって、この取り出された消化液中の菌体数に基づいて、菌体が必要とするニッケル化合物及び／又はコバルト化合物の量を求めることができ、これによって、メタン菌の活性を充分に向上して安定した発酵状態を長期間維持できる。
【００１９】
本発明の方法においては、前記菌体１個あたりに取り込まれるニッケル及び／又はコバルトの質量を測定し、この質量を、前記菌体の増殖数又は前記取り出された消化液中の菌体数に乗じることにより、前記ニッケル化合物及び／又はコバルト化合物の添加量を算出することが好ましい。
【００２０】
これによれば、あらかじめ菌体１個あたりに取り込まれるニッケル及び／又はコバルトの質量を測定しておくことによって、上記の菌体の増殖数又は取り出された消化液中の菌体数を基に、ニッケル化合物及び／又はコバルト化合物の必要添加量を、直ちに算出することができる。
【００２１】
また、本発明の方法においては、前記菌体数の測定は、測定すべき試料に、前記菌体内に存在するエステラーゼ酵素によって蛍光物質を生成する試薬を混合し、前記蛍光物質の蛍光を測定することにより行なうことが好ましい。
【００２２】
これによれば、メタン菌のみならず、有機酸を生成する酸生成菌を含んだ全ての活性菌体数が把握できるので、より正確にメタン発酵槽内の菌体数を把握できる。また、測定サンプルは少量の消化液をメタン発酵槽から抜き取れば足り、測定も短時間で行なうことができる。
【００２３】
【発明の実施の形態】
以下、本発明について図面を用いて更に詳細に説明する。図１には、本発明のメタン発酵処理方法に用いることができるメタン発酵処理装置の概略構成図が示されている。
【００２４】
まず、図１の処理装置について説明すると、この処理装置は、有機性廃棄物を粉砕する粉砕機１１、微粉砕機１２と、これをスラリー化するスラリー調整槽１３と、メタン発酵槽１４と、生成したバイオガスを貯留するためのガスタンクホルダー１６とで主に構成されている。
【００２５】
有機性廃棄物を投入、粉砕するための粉砕機１１は、供給配管によって微粉砕機１２に連結され、更に、有機性廃棄物をスラリー化するスラリー調整槽１３に連結されるように構成されている。そして、スラリー調整槽１３からの供給配管が、メタン発酵槽１４に接続され、スラリー調整槽１３とメタン発酵槽１４とが連結されている。
【００２６】
メタン発酵槽１４には、鉄化合物を添加するための鉄供給タンク１８、及び、ニッケル化合物及び／又はコバルト化合物を供給するためのニッケル・コバルト供給タンク１９が接続されている。ここで、鉄供給タンク１８、ニッケル・コバルト供給タンク１９としては、従来公知の溶液供給装置等が使用できる。
【００２７】
また、メタン発酵槽１４内には、スラリー化された有機性廃棄物を攪拌するための攪拌羽根１５が配置されている。
【００２８】
メタン発酵槽１４の上部空間からは、ガスホルダー１６に連結される配管が接続されており、メタン発酵槽１４において発生したバイオガスが、ガスホルダー１６に貯蔵されるように構成されている。これによって、このガスホルダー１６に貯蔵されたバイオガスが、燃料電池発電装置、ガスエンジン等の発電機やボイラーの燃料として、ガス利用システム１７で有効利用されるようになっている。
【００２９】
更に、メタン発酵槽１４の底部からは、発酵後のスラリーを消化液として取り出すための配管が接続されており、この消化液は、処理後の残渣として、図示しない固液分離槽等の後処理装置に送られるように構成されている。
【００３０】
次に、この処理装置を用いた、本発明のメタン発酵処理方法について説明する。
【００３１】
図１において、有機性廃棄物は、粉砕機１１で粗砕された後、更に分解速度及び消化率の向上を図るために、微粉砕機１２で微粉砕・ペースト化されてスラリー調整槽１３に投入される。スラリー化は、固形物濃度が１０〜２０質量％となるように調整することが好ましい。その後、スラリー調整槽１３においてペースト化された有機性廃棄物は、希釈水により適当な固形物濃度に調整されてスラリー化され、図示しないポンプによりメタン発酵槽１４に送られる。
【００３２】
このメタン発酵槽１４には、メタン菌等の嫌気性微生物が付着・担持された固定化微生物を充填した固定ろ床等が設置されており、ここでスラリー状の有機性廃棄物のメタン発酵が行なわれ、嫌気性微生物による有機性廃棄物の分解が行われる。メタン発酵における温度は５０〜６０℃で行なうことが好ましい。これによれば、より活性の高い、高温メタン菌での発酵が行なえるので、有機性廃棄物の分解速度を更に向上することができる。
【００３３】
なお、メタン発酵槽１４内では、攪拌羽根１５によって、スラリーの攪拌が行なわれる。なお、スラリーの攪拌方法としては、他にポンプにより有機性廃棄物を循環させてもよく、また、バイオガスの一部をポンプによりメタン発酵槽１４の下部に吹き込んでバブリングして攪拌してもよい。
【００３４】
また、一定時間毎に供給されるスラリーと同量の消化液が、メタン発酵槽１４から引き抜かれ、メタン発酵槽１４内は、常に一定量のスラリーで満たされている。なお、発酵により生成したバイオガスは、ガスホルダー１６に回収され、ガスタービンや燃料電池などのガス利用システム１７でエネルギーとして利用される。
【００３５】
ここで、本発明においては、メタン発酵槽処理中に、ニッケル・コバルト供給タンク１８から、必要量のニッケル化合物及び／又はコバルト化合物を供給する。
【００３６】
ニッケル化合物としては、塩化ニッケル、塩化ニッケル・四水和物、塩化ニッケル・六水和物等が挙げられる。また、コバルト化合物としては、塩化コバルト、塩化コバルト・四水和物、塩化コバルト・六水和物等が挙げられる。これらは水溶性化合物であることが好ましい。
【００３７】
なお、上記の化合物はそれぞれ単独で添加してもよいが、ニッケル化合物とコバルト化合物を併用して添加することが好ましい。この場合、両者の配合割合としてはニッケルイオン及びコバルトイオンとして、１：１〜２：１とすることが好ましい。なお、上記のニッケル化合物及び／又はコバルト化合物は、水溶液として添加することが好ましい。
【００３８】
そして、本発明においては、上記のニッケル化合物及び／又はコバルト化合物の添加量を、メタン発酵槽内の発酵処理物中の菌体の増殖数又は取り出された消化液中の菌体数に応じて決定する点を特徴としている。
【００３９】
具体的には、以下の手順によって、菌体が必要とするニッケル化合物及び／又はコバルト化合物の量を求めることができる。
【００４０】
まず、あらかじめ菌体１個当たりに取り込まれるニッケル、コバルト量をそれぞれ計算しておく。例えば菌体１個当たりに取り込まれるニッケル量は、以下の（Ｉ）式に従って求めることができる。
Ａ＝（Ｂ−Ｃ）／Ｄ・・・（Ｉ）
Ａ：菌１個あたりに取り込まれるニッケル量（ｍｇ／個）
Ｂ：既知濃度のニッケルを添加したスラリー中のニッケル量（ｍｇ）
Ｃ：ろ液中のニッケル量（ｍｇ）
Ｄ：スラリー中の菌体数（個）
すなわち、まず、メタン発酵槽に導入されるスラリーを所定量サンプリングし、これに既知濃度のニッケルを溶液状態で添加してニッケル過剰とした後、このスラリーのニッケル量（Ｂ）を、例えば、ＩＣＰ発光分析法等の分析手段によって測定する。
【００４１】
次に、このサンプルを遠心分離等によって固液分離し、ろ液中のニッケル量（Ｃ）について上記と同様の分析手段で測定する。このろ液中のニッケル量（Ｃ）は、菌体内に取り込まれていない金属とみなすことができる。
したがって、上記のスラリー中のニッケル量（Ｂ）と、ろ液中のニッケル量と（Ｃ）の差である（Ｂ−Ｃ）が、菌体内に取り込まれたニッケル量を表す。
【００４２】
よって、上記の差（Ｂ−Ｃ）をスラリー中の菌体数（Ｄ）で割れば、菌１個あたりに取り込まれるニッケル量（Ａ）を算出することができる。なお、コバルト量についても同様な方法で求めることが可能である。
【００４３】
具体的な、菌１個あたりに取り込まれるニッケル量（Ａ）としては、原料の有機性廃棄物等によって異なるが、０．５×１０−１３〜３×１０−１３（ｍｇ／個）程度である。また、菌１個あたりに取り込まれるコバルト量としては、０．５×１０−１３〜２×１０−１３（ｍｇ／個）程度である。
【００４４】
ここで、上記（Ｄ）の菌体数測定には、測定すべき試料に、菌体内に存在するエステラーゼ酵素によって蛍光物質を生成する試薬を混合し、前記蛍光物質の蛍光を測定することにより行なうことが好ましい。これによれば、メタン菌のみならず、有機酸を生成する酸生成菌を含んだ全ての活性菌体数が把握できるので、より正確にメタン発酵槽内の菌体数を把握できる。
【００４５】
具体的には、まず、前処理として、サンプリングした測定試料を水で希釈後、固形分を除去する。次に超音波分散によって菌をばらばらにし数え易くした後、必要に応じてｐＨ７．５〜８ｐＨに調整する。
【００４６】
次に、前処理後の試料に、５−（６−）カルボキシフルオレセインジアセテート、５−カルボキシフルオレセインジアセテートアセトキシメチルエステートなどの蛍光試薬を加える。この蛍光試薬が、活性菌内に存在する加水分解酵素である、エステラーゼ酵素によって加水分解することにより蛍光物質を生成する。これにより、メタン菌のみならず、酸生成菌等を含むすべての活性菌の測定が可能となる。これらの蛍光試薬は、元来蛍光性を有していないが、拡散によって生細胞内に取込まれると、すべての細胞が共通に持っている酵素のエステラーゼによってエステル結合が加水分解され、蛍光物質として細胞内に蓄積される。一方、死菌はエステラーゼ活性が失われており染色されないため、活性菌だけの検出が可能となる。活性菌の菌体数測定方法としては、従来公知の蛍光顕微鏡による測定が使用できる。なお、上記の菌体数測定方法は、本出願人による特願２００２−１６５７１４号に詳細に記載されている。
【００４７】
次に、この菌体１個あたりに取り込まれるニッケル、コバルトの質量を、菌体の増殖数又は前記取り出された消化液中の菌体数に乗じることにより、ニッケル化合物及び／又はコバルト化合物の添加量を算出する。
【００４８】
すなわち、例えば、メタン発酵槽内に滞留する有機性廃棄物の量が段階的に増加する場合、すなわちＣＯＤｃｒ負荷が増加する場合には、負荷に応じてメタン発酵槽内の菌体数は増加していくので、この場合には、メタン発酵槽内のスラリー中の菌体の増殖数が、ニッケル及び／又はコバルトが取り込まれていない新たな菌体数とみなすことができる。したがって、この増殖数を、前記の菌体１個あたりに取り込まれるニッケル、コバルトの質量に乗じることにより、菌体が必要とするニッケル化合物及び／又はコバルト化合物の量を求めることができる。
【００４９】
この場合、ニッケル化合物及び／又はコバルト化合物の添加の間隔は、ＣＯＤｃｒ負荷の増加に併せて行なえばよい。なお、添加のタイミングは、必ずしもＣＯＤｃｒ負荷の増加と同時でなくてもよい。
【００５０】
一方、例えば、メタン発酵槽内に滞留する有機性廃棄物の量が一定の場合、すなわちＣＯＤｃｒ負荷等が一定の場合には、見かけの菌体数は一定であるが、メタン発酵槽内では、スラリーを間欠的又は連続的に投入しつつ、前記投入量と同量のメタン発酵処理された消化液をメタン発酵槽内から取り出しているので、取り出された消化液中の菌体数を、新たに投入されるスラリーに含まれる、これから増殖する菌体数とみなすことができる。したがって、この取り出された消化液中の菌体数を、前記の菌体１個あたりに取り込まれるニッケル、コバルトの質量に乗じることにより、菌体が必要とするニッケル化合物及び／又はコバルト化合物の量を正確に求めることができる。
【００５１】
この場合、ニッケル化合物及び／又はコバルト化合物の添加の間隔は、一定の間隔で、例えば毎日行なうことが好ましい。
【００５２】
したがって、ＣＯＤｃｒ負荷を段階的に増加する運転の場合には、ニッケル化合物及び／又はコバルト化合物の添加の間隔は、一定負荷の期間には一定の間隔、例えば毎日行い、更に加えて、ＣＯＤｃｒ負荷が増加する毎に追加の添加を行なうことになる。
【００５３】
なお、本発明においては、上記のニッケル化合物及び／又はコバルト化合物の添加の前に、メタン発酵槽１４内の硫化水素濃度を、図示しない硫化水素濃度分析計によってモニタリングし、この測定値が所定値以下、好ましくは１００ｐｐｍ以下となるようにメタン発酵槽１４内の硫化水素濃度を調整してもよい。このような、硫化水素濃度の調整方法としては、例えば、メタン発酵槽１４内に鉄供給タンク１８によって鉄化合物を添加することが好ましく行なわれる。
【００５４】
これによって、ニッケルイオン、コバルトイオンの阻害物質となる硫化水素が鉄化合物と反応して硫化鉄となるので、硫化水素濃度の低下を迅速、確実に行なうことができる。そして、あらかじめ硫化水素濃度が低下されているので、ニッケル、コバルトをイオンの状態でメタン菌内へ有効に取り込むことができる。したがって、メタン菌の活性を充分に向上して、安定した発酵状態を長期間にわたって維持することができる。鉄化合物としては、例えば、塩化第一鉄、塩化第一鉄・四水和物、塩化第一鉄・六水和物等が挙げられ、水溶性の鉄化合物を用いることが好ましい。
【００５５】
【実施例】
以下、本発明を実施例によって更に詳細に説明する。なお、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。
【００５６】
実施例１
＜菌体１個あたりに取り込まれるニッケル、コバルト量の測定＞
表１に示す組成の生ゴミ原料を固形分濃度１０％に調整した生ゴミスラリーを調製し、上記の生ゴミスラリーをサンプリングし、鉄化合物として塩化第一鉄四水和物を過剰量の１００ｍｇ／Ｌとなるように添加して硫化鉄として沈殿させた。なお、表１におけるＴＳは固形分濃度、ＶＳは有機物濃度、Ｔ−ＣＯＤは全化学的酸素要求量、Ｔ−Ｎは全窒素である。
【００５７】
【表１】
2004243259.tif 000003
【００５８】
次に、このスラリー１Ｌあたり、ニッケルイオン０．３ｍｇ／Ｌ、コバルトイオン０．２６ｍｇ／Ｌとなるように、塩化ニッケル、コバルト化合物として塩化コバルトを添加した後、このスラリー全量のニッケル量（Ｂ）、コバルト量（Ｂ’）を、ＩＣＰ発光分析法によって測定した。
【００５９】
次に、このスラリーを遠心分離によって分離し、ろ液中のニッケル量（Ｃ）、コバルト量（Ｃ’）について上記と同様の分析手段で測定した。
【００６０】
一方、同じスラリー中の菌体数（Ｄ）を、上記のエステラーゼ酵素を用いた菌体数測定法により計測した。すなわち、まず、スラリーの一部を５ｍｌ採取し、超純水で１０倍に希釈した。希釈後、孔径２０μｍのろ紙に通して、ろ過した後、超音波分散を１５分間行なった。次に、ＫＨ２ＰＯ４からなるｐＨ緩衝液を加え、ｐＨを８となるように調整した。上記のｐＨ調整後の消化液２００μｌに対して、蛍光試薬である５−カルボキシフルオレセインジアセテート（５−ＣＦＤＡ、フナコシ株式会社製）を２４μｌ加え、再び充分に混合して測定試料を調整した。
【００６１】
この測定試料３μｌを、バクテリア計測盤を持つ深さ０．０２ｍｍのプレパラートに垂らし、蛍光顕微鏡により観察をした。蛍光顕微鏡の励起波長は３８０〜４２０ｍｍの青色を用い、蛍光発光波長は５００〜５５０ｎｍであった。観察画像は市販のソフト（Ｏｐｔｉｍａｓ６．５、ＭＥＤＩＡ  ＣＹＢＥＲＮＥＴＩＣＳ製）で画像解析し、菌数をカウントして、スラリー中の菌体数（Ｄ）を求めた。
【００６２】
上記の差（Ｂ−Ｃ）、（Ｂ’−Ｃ’）をスラリー中の菌体数（Ｄ）で割って、菌１個あたりに取り込まれるニッケル量（Ａ）、コバルト量（Ａ’）を算出した。その結果をまとめて表２に示す。なお、測定結果はすべてスラリー１Ｌ中の金属量に換算している。
【００６３】
【表２】
2004243259.tif 000004
【００６４】
＜メタン発酵処理装置の連続運転とニッケル、コバルト添加量の決定＞
図１に示すような処理装置を用い、本発明のメタン発酵処理方法を用いて連続運転を行なった。メタン発酵槽１４としては容量は１０リットルの発酵槽を使用し、発酵温度は５５℃とした。
【００６５】
なお、有機性廃棄物としては上記の表１に示す組成の生ゴミ原料を使用し、鉄供給タンク１８に投入する鉄化合物としては、塩化第一鉄・４水和物を用いた。また、ニッケル・コバルト供給タンク１９に投入する化合物としては、塩化ニッケル及び塩化コバルトを用いた。
【００６６】
まず、メタン発酵槽１４へ、上記の生ゴミ原料を固形分濃度１０％に調整された生ゴミスラリーとして導入した。
【００６７】
次いで、鉄供給タンク１８からメタン発酵槽１４に、上記の鉄化合物である塩化第一鉄・４水和物を、生ゴミスラリー１Ｌに対して鉄イオン換算で１００ｍｇ／Ｌとなるように添加して硫化水素を硫化鉄として沈殿させ、これを１日毎に添加した。
【００６８】
なお、スラリーのＣＯＤｃｒ負荷は、起動時は５ｇ／Ｌ／ｄとし、その後５日毎に段階的に増加させ、目標負荷である２０ｇ／Ｌ／ｄまで５段階に設定した。
【００６９】
表３、図２に、スラリーのＣＯＤｃｒ負荷を段階的に上げていったときの、菌体数変化を示す。なお、菌体数測定は、上記のエステラーゼ酵素を用いた菌体数測定法により計測した。表３、図２より、ＣＯＤｃｒ負荷の増加に伴い、発酵槽内のスラリーの菌数が増加していることがわかる。
【００７０】
【表３】
2004243259.tif 000005
【００７１】
次に、表３を基に、表４よりＣＯＤｃｒ負荷を増加させた場合の菌体の増殖数を計算し、これに上記の菌１個あたりに取り込まれるニッケル量（Ａ）、コバルト量（Ａ’）を乗じて、ニッケル、コバルトの添加量を計算した。その結果を表４に示す
【００７２】
【表４】
2004243259.tif 000006
【００７３】
表４に示したニッケル、コバルトの添加量となるように、塩化ニッケル及び塩化コバルトを水溶液の状態で添加した。塩化ニッケル及び塩化コバルトを添加するタイミングは、ＣＯＤｃｒ負荷を増加した日、すなわち、５日目、１０日目、１５日目、２０日目に行った。
【００７４】
更に、一定負荷期間には、見かけ上の菌体数は一定であるので、引き抜き分の消化液に含まれる菌数を増殖分と考えて、これを表３より算出し、この各負荷における菌体数に、上記の菌１個あたりに取り込まれるニッケル量（Ａ）、コバルト量（Ａ’）である、ニッケル０．５〜３×１０−１３ｍｇ／個、コバルト０．５〜２×１０−１３ｍｇ／個を乗じて毎日添加した。
【００７５】
上記の条件で、メタン発酵処理装置を連続運転し、メタン発酵槽１４内のバイオガス発生量及びｐＨの経時変化を測定した。その結果を図３にまとめて示す。
【００７６】
図３より、本実施例のメタン発酵処理方法においては、バイオガス発生量が低下することなく、ｐＨも菌にとって良好な環境であるｐＨ７〜８付近を維持していた。また、ＣＯＤｃｒ負荷２０ｇ／Ｌ／ｄの高負荷運転が可能であった。
【００７７】
実施例２
実施例１において、ＣＯＤｃｒ負荷を２０ｇ／Ｌ／ｄの定負荷、滞留時間（ＨＲＴ）１０日間の条件で運転した。
【００７８】
なお、このとき、見かけ上の菌体数は一定であるので、引き抜き分の消化液に含まれる菌数を増殖分と考え、ニッケル、コバルトを添加した。
【００７９】
すなわち、表３より、ＣＯＤｃｒ負荷を２０ｇ／Ｌ／ｄでの菌体数が５．５×１０１２個／Ｌであるため、１０Ｌの発酵槽では、１Ｌ分、すなわち５．５×１０１２個が流出し、同時に新たなスラリーが増加しているとして、この５．５×１０１２個に、上記の菌１個あたりに取り込まれるニッケル量（Ａ）、コバルト量（Ａ’）である、ニッケル０．５〜３×１０−１３ｍｇ／個、コバルト０．５〜２×１０−１３ｍｇ／個を乗じた量を毎日添加した。なお、上記以外の条件は実施例１と同様の条件で運転した。
【００８０】
その結果、やはりバイオガス発生量が低下することなく、ｐＨも菌にとって良好な環境であるｐＨ７〜８付近を維持していた。
【００８１】
【発明の効果】
以上説明したように、本発明によれば、最適添加量のニッケル、コバルトをメタン発酵槽内に添加でき、これによって、メタン菌の活性を充分に向上して安定した発酵状態を長期間維持できる、メタン発酵処理方法を提供することができる。したがって、本発明の方法は、生ゴミ、食品加工残滓、活性汚泥処理等の余剰汚泥等の有機性廃棄物を処理するために好適に用いられる。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明のメタン発酵処理方法に用いることができるメタン発酵処理装置の概略構成図である。
【図２】実施例における発酵槽の運転期間と、ＣＯＤｃｒ負荷の変化及び菌体数の変化を測定した図表である。
【図３】実施例における発酵槽の運転期間と、バイオガス発生量及びｐＨの変化を測定した図表である。
【符号の説明】
１１  粉砕機
１２  微粉砕機
１３  スラリー調整槽
１４  メタン発酵槽ンプ
１５  攪拌羽根
１６  ガスホルダー
１７  ガス利用システム
１８  鉄供給タンク
１９  コバルト・ニッケル供給タンク
【図１】
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【図２】
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【図３】
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