(57)【要約】      （修正有）【課題】抗痙攣薬として有益である一連の３−アルキル−４−アミノ酪酸または３一アルキルグルタミン酸類縁体の提供。【解決手段】式（Ｉ）で示されるＳ（＋）鏡像異性体である３−アルキル−４−アミノ酪酸または３一アルキルグルタミン酸類縁体。2004238398.tif 000039（Ｘは−ＯＨ，−ＮＨ２，−Ｎ３もしくはｐ−トルエンスルホニルオキシ、Ｙは−ＣＨ２−を表わすか、又はＸ−Ｙ−は一緒に−ＣＯＯＨである。Ｒは、Ｘが−ＯＨ，−Ｎ３もしくはｐ−トルエンスルホニルオキシであり、Ｙが−ＣＨ２−である場合、又はＸ−Ｙ−が一緒に−ＣＯＯＨである場合は、ベンジルまたは１，１−ジメチルエチルを表わすか、あるいは、Ｒは、Ｘが−ＮＨ２であり、かつ、Ｙが−ＣＨ２−である場合、水素である。）【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の一般式（Ｉ）：
【数１】
2004238398.tif 000036
を有する化合物のＳ（＋）鏡像異性体または該化合物の医薬上許される塩であって、
式中、Ｘは−ＯＨ、−ＮＨ２、Ｎ３もしくはｐ−トルエンスルホニルオキシを表し、かつ、Ｙは、−ＣＨ２−を表すか、または、Ｘ−Ｙ−は一緒に−ＣＯＯＨであり；かつ
Ｒは、Ｘが−Ｎ３、−ＯＨもしくはｐ−トルエンスルホニルオキシであり、かつ、Ｙが−ＣＨ２である場合、または、Ｘ−Ｙ−が一緒に−ＣＯＯＨである場合、ベンジルまたは１，１−ジメチルエチルを表すか、あるいは、Ｒは、Ｘが−ＮＨ２であり、かつ、Ｙが−ＣＨ２−である場合、水素を表す、
化合物のＳ（＋）鏡像異性体または該化合物の医薬上許される塩。
【請求項２】
Ｓ−（＋）−４−アミノ−３−（２−メチルプロピル）ブタン酸又はその医薬上許される塩。
【請求項３】
Ｓ−（＋）−３−（アジドメチル）−５−メチル−ヘキサン酸。
【請求項４】
請求項１に記載のＳ−（＋）−３−（ヒドロキシメチル）−５−メチル−ヘキサン酸フェニルメチルエステル。
【請求項５】
請求項１に記載のＳ−（＋）−５−メチル−３―［［［（４−メチルフェニル）スルホニル］オキシ］−メチル］−ヘキサン酸フェニルメチルエステル。
【請求項６】
請求項１に記載のＳ−（＋）−２−（２−メチルプロピル）−１，４−ブタン二酸４−（１，１−ジメチルエチル）エステル。
【請求項７】
請求項１に記載のＳ−（＋）−３−（アジドメチル）−５−メチル−ヘキサン酸１，１−ジメチルエチルエステル。
【請求項８】
請求項１に記載のＳ−（＋）−３−（ヒドロキシメチル）−５−メチル−ヘキサン酸１，１−ジメチルエチルエステル。
【請求項９】
請求項１に記載のＳ−（＋）−２−（２−メチルプロピル）−１，４−ブタン二酸４−フェニルメチルエステル。
【請求項１０】
請求項１に記載のＳ−（＋）−３−（アジドメチル）−５−メチル−ヘキサン酸フェニルメチルエステル。
【請求項１１】
請求項１に記載のＳ−（＋）−５−メチル−３―［［［（４−メチルフェニル）スルホニル］オキシ］−メチル］−ヘキサン酸１，１ジメチルエチルエステル。
【請求項１２】
Ｓ−（＋）−４−メチル−２−（２−メチルプロピル）−γ，２−ジオキソ−５−フェニル−３−オキサゾリジンブタン酸１，１−ジメチルエチルエステル。
【請求項１３】
Ｓ−（＋）−４−アミノ−３−（２−メチルプロピル）ブタン酸又はその医薬上許容される塩、及び医薬上許されるキャリヤーを含む医薬組成物。
【請求項１４】
Ｓ−（＋）−４−アミノ−３−（２−メチルプロピル）ブタン酸の調製方法であって、式
【数２】
2004238398.tif 000037
のアジドを式
【数３】
2004238398.tif 000038
の中間体アジドに加水分解し、そしてそのアジドを対応アミンに還元することを特徴とする該調製方法。
【請求項１５】
アジドを水酸化ナトリウムによる処理により加水分解する請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
中間体アジドを水性塩基で抽出する工程を更に含む請求項１４又は１５に記載の方法。
【請求項１７】
水性抽出液を酸性にする工程を更に含む請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
治療に使用するための、Ｓ−（＋）−４−アミノ−３−（２−メチルプロピル）ブタン酸又はその医薬上許される塩。
【請求項１９】
Ｓ−（＋）−４−アミノ−３−（２−メチルプロピル）ブタン酸又はその医薬上許される塩を含有する抗痙攣薬。
【請求項２０】
Ｓ−（＋）−４−アミノ−３−（２−メチルプロピル）ブタン酸又はその医薬上許される塩を含有する抗不安薬。
【請求項２１】
Ｓ−（＋）−４−アミノ−３−（２−メチルプロピル）ブタン酸又はその医薬上許される塩を含有する抗精神病薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（技術分野）
本発明はグルタミン酸及びγ一アミノ酪酸（ＧＡＢＡ）の類縁体である新規化合物に
関する。更に詳しくは、これらの類縁体は、中枢神経系障害、例えば、てんかん、ハンチントン舞踏病、脳虚血、パーキンソン病、晩発性ジスキネジー、及び痙直の抗発作治療として有益である。また、本発明は抗欝薬、抗不安薬、及び抗精神病作用薬として使用し得ることが可能である。
【背景技術】
【０００２】
（発明の背景）
γアミノ酪酸（ＧＡＢＡ）及びグルタミン酸は、脳神経作用の調節に関与する二つの主要な神経伝達物質である。ＧＡＢＡは主要な抑制性神経伝達物質であり、またＬ−グルタミン酸は興奮伝達物質である（Ｒｏｂｅｒｔｓ  Ｅ  ら著、ＧＡＢＡ  ｉｎ  Ｎｅｒｖｏｕｓ  Ｓｙｓｔｅｍ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎ，Ｒａｖｅｎ  Ｐｒｅｓｓ：ＮｅｗＹｏｒｋ，１９７６；ＭｃＧｅｅｒ  ＥＧ  ら著、Ｇｌｕｔａｍｉｎｅ，  Ｇｌｕｔａｍａｔｅ，ａｎｄＧＡＢＡ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｃｅｎｔｒａｌ  Ｎｅｒｖｏｕｓ  Ｓｙｓｔｅｍ；ＨｅｒｔｚＬ，  Ｋｖａｍｍｅ  Ｅ，  ＭｃＧｅｅｒ  ＥＧ，  Ｓｃｈｏｕｓｂａｌ  Ａ，  編集，  Ｌｉｓｓ：ＮｅｗＹｏｒｋ，１９８３；３−１７）。これらの神経伝達物質の濃度の不均衡は痙攣状態をもたらすことがある。それ故、この神経伝達物質の代謝を調節することにより痙攣状態を制御することができることが臨床上適切である。ＧＡＢＡの濃度が脳中で限界値より低下する場合、痙攣が生じる（Ｋａｒｌｓｓｏｎ  Ａ  ら著、Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｐｈａｍａｃｏｌ  １９７４；２３：３０５３−３０６１）。ＧＡＢＡレベルが痙攣中に脳中で増加する時、発作が停止する（Ｈａｙａｓｈｉ  ＴＪ  著、Ｐｈｙｓｉｏ１．（Ｌｏｎｄｏｎ）１９５９；１４５：５７０−５７８）。ここに使用される発作という用語は、正常な神経機能を乱す過度の同調されていない神経活性を意味する。幾つかの発作障害において、低下された脳ＧＡＢＡレベルに付随して、Ｌ−グルタミン酸デカルボキシラーゼ（ＧＡＤ）の減少されたレベルがまた観察される（ＭｃＧｅｅｒ  ＰＯ  ら著、ＧＡＢＡ  ｉｎ  Ｎｅｒｖｏｕｓ  Ｓｙｓｔｅｍ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎ；  Ｒｏｂｅｒｔｓ  Ｅ，Ｃｈａｓｅ  ＴＮ，  Ｔｏｗｅｒ  ＤＢ編集，  Ｒａｖａｎ  Ｐｒｅｓｓ：  ＮｅｗＹｏｒｋ，１９７６：４８７−４９５；Ｂｕｔｔｅｒｗｏｒｔｈ  Ｊ  ら著、  Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ  １９８３；４１：４４０−４４７；Ｓｐｏｋｅｓ  ＥＧ著、Ａｄｖ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏｌ．１９７８：１２３：４６１−４７３；  Ｗｕ  ＪＹら  著、Ｎｅｕｒｏｃｈｅ．Ｒｅｓ．１９７９；４：５７５−５８６；及びＩｖｅ−ｒｓｅｎＬＬら著、Ｐｓｙｃｈｉａｔ．Ｒｅｓ．１９７４；１１：２５５−２５６）。しばしば、ＧＡＤ及びＧＡＢＡの濃度は平行して変化する。何となれば、低下したＧＡＤ濃度は更に少ないＧＡＢＡ生産を生じるからである。
【０００３】
抑制性神経伝達物質としてのＧＡＢＡの重要性、並びに痙攣状態及びその他の運動障害に対するその効果のために、種々のアプローチが脳ＧＡＢＡ濃度を増大するのに採用されてきた。例えば、最も自明のアプローチはＧＡＢＡを投与することであった。
ＧＡＢＡが痙攣している動物の脳に注射される場合、痙攣が停止する（Ｐｕｒｐｕｒａ  ＤＰら著、Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ, １９５９;３;２３８−２６８）。しかしながら、ＧＡＢＡが系統的に投与される場合、抗痙攣作用がない。何となれば、ＧＡＢＡは、通常の状況下では、血液脳関門を横断することができないからである（ＭｅｌｄｒｕｍＢＳら著、Ｅｐｉｌｅｐｓｙ； Ｈａｒｒｉｓ Ｐ， Ｍａｗｄｓｌｅｙ Ｃ編集，Ｃｈｕｒｃｈｉｌｌ Ｌｉｖｉｎｇｓｔｏｎ：  Ｅｄｉｎｂｕｒｇ  １９７４：５５）。この制限に鑑みて、ＧＡＢＡレベルを上昇させるのに採用し得る三つの別のアプローチがある。
【０００４】
最も頻繁なアプローチは、血液脳関門を横断し、次いでＧＡＢＡアミノトランスフェラーゼを失活する化合物を設計することである。その作用は、ＧＡＢＡの分解を阻止し、それによりその濃度を増大することである。ＧＡＢＡアミノトランスフェラーゼの多数の機構をベースとした失活剤が知られている（Ｓｉｌｖｅｍａｎ  ＲＢ著、Ｍｅｃｈａ−
ｎｉｓｍ−Ｂａｓｅｄ  Ｅｎｚｙｍｅ  Ｉｎａｃｔｉｖａｔｉｏｎ：Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，Ｉ巻及びＩＩ巻，ＣＲＣ：Ｂｏｃａ  Ｒａｔｏｎ  １９８８）。
【０００５】
別のアプローチは、ＧＡＢＡが血液脳関門を横断することができるように、疎水性ＧＡＢＡアミドヘの変換によりＧＡＢＡを親油性にすることによりＧＡＢＡ濃度を脳中で増大することである（Ｋａｐｌａｎ  ＪＰら著、Ｇ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．  １９８０；２３：７０２−７０４；  Ｃａｒｖａｊａｌ  Ｇら著、Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｐｈａｍａｃｏｌ．１９６４；１３：１０５９−１０６９；イミン： Ｋａｐｌａｎ  ＪＰ著、上記文献；またはＧＡＢＡエステル：Ｓｈａｓｈｏｕａ  ＶＥら著、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９８４；２７：６５９−６６４；及び１９８５年２月１４日に公開されたＰＣＴ特許出願  ＷＯ８５／００５２０）。脳内部に一旦入ると、これらの化合物はキャリヤー基を加水分解し、ＧＡＢＡを放出するのにアミラ一ゼ及びエステラーゼを必要とする。
【０００６】
更に別のアプローチは、ＧＡＤの活性化物質を設計することにより２５の脳ＧＡＢＡレベルを増大することである。二三の化合物がＧＡＤの活性化物質として記載されていた。抗痙攣薬であるマレイシミドは、ＧＡＤの活性をｌｌ％だけ増大し、その結果として黒質中のＧＡＢＡ濃度を３８％まで増大すると報告されていた（Ｊａｎｓｓｅｎｓｄｅ Ｖ−ａｒｅｂｅｋｅ Ｐ ら著、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｍａｃｏｌ．１９８３；３２：２７５１−２７５５）。また、抗痙攣薬であるナトリウムバルプロエート（Ｌｏｓｃｈｅｒ  Ｗ  著、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１９８２；３１：８３７−８４２；Ｐｈｉｌｌｉｐｓ  ＮＩら著、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｍａｃｏｌ．１９８２；３１：２２５７−２２６１）がＧＡＤを活性化し、ＧＡＢＡレベルを増大すると報告されていた。
【０００７】
本発明の化合物は、試験管内でＧＡＤを活性化し、生体内で発作に対し投薬量依存性の保護作用を有することがわかった。
【０００８】
また、本発明の化合物は、トリチウム標識ガバペンチンを結合すると同定された新規な結合部位を結合することがわかった。ガバペンチンは、その他の抗痙攣薬で難治の患者にて部分発作の予防に有効な処置であることがわかった（Ｃｈａｄｗｉｃｋ  Ｄ著、Ｇａｂａｐｅｎｔｉｎ，２１１−２２２頁、Ｒｅｃｅｎｔ  Ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  Ｅｐｉｌｅｐｓｙ，５巻，Ｐｅｄｌｅｙ  ＴＡ，Ｍｅｌｄｒｕｍ  ＢＳ（編集），Ｃｈｕｒｃｈｉｌｌ  Ｌｉｖｉｎｇｓｔｏｎｅ，ＮｅｗＹｏｒｋ（１９９１））。トリチウム標識ガバペンチンにより標識された新規な結合部位は、ラット脳組織からの膜フラクション及びラット脳部分におけるオートラジオグラフィー研究において記載されていた（Ｈｉｌｌ  Ｄ著、上記文献）。この結合部位が本発明の化合物を評価するのに使用された。
【０００９】
本発明の新規化合物は下記の式１として示される。Ｒ１がメチルであり、かつＲ２及びＲ３の夫々が水素である式１の化合物は、日本特許第４９−４０４６０号明細書に教示されている。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【００１０】
１．４−メチル−５−フェニル−２−オキサゾリジノン、
４−メチル−（２−メチルプロピル）−２−ジオキソ−５−フェニル−３  −オキサゾリジンブタン酸フェニルメチルエステル、
４−メチル−ペンタノイルクロリド、
４−メチル−３−（４−メチル−１−オキソペンチル）−５−フェニル−２−オキサゾリジノン、
２−（２−メチルプロピル）−ブタンニ酸４−（フェニルメチル）エステル、
３−（アジドメチル）−５−メチル−ヘキサン酸フェニルメチルエステル、
３−（ヒドロキシメチル）−５−メチル−ヘキサン酸フェニルメチルエステル、
５−メチル−３−［［［（４−メチルフェニル）スルホニル］オキシ］−メ
チル］−ヘキサン酸フェニルメチルエステル、
３−（アジドメチル）−５−メチル−ヘキサン酸、
２−（２−メチルプロピル）−１，４−ブタンニ酸４−（１，１−ジメチルエチル）エステル、
３−（アジドメチル）−５−メチル−、１，１−ジメチルエチルエステル、                  ３−（ヒドロキシメチル）−５−メチル−ヘキサン酸１，１−ジメチルエス
テル、
５−メチル−３−［［［（４−メチル（フェニル）スルホニル］オキシ］−
メチル−ヘキサン酸１，１−ジメチルエチルエステル、または
４−メチル−（２−メチルプロピル）−２−ジオキソ−５−フェニル−３−オキサゾリジンブタン酸１，１−ジメチルエチルエステルである化合物。
２．（Ｓ）−３−（アジドメチル）−５−メチル−ヘキサン酸である化合物。
３．（Ｓ）−３−（アジドメチル）−５−メチル−ヘキサン酸１，１−ジメチルエチルエステルである化合物。
４．（Ｓ）−５−メチル−３−［［［（４−メチル（フェニル）スルホニル］オキ
シ］−メチル−ヘキサン酸１，１−ジメチルエチルエステル、
（Ｓ）−３−（ヒドロキシメチル）−５−メチル−、
１，１−ジメチルエチルエステル、
（Ｓ）−２−（２−メチルプロピル）−1，４−ブタンニ酸４−（１，１−ジメチルエチル）エステル、または
（Ｓ）−４−メチル−（２−メチルプロピル）−２−ジオキソ−５−フェニル−３−オキサゾリジンブタン酸１，１−ジメチルエチルエステルである化合物。
５．式
【００１１】
【化１】
2004238398.tif 000002
【００１２】
（式中、Ｒ１は１〜６個の炭素原子の直鎖または分枝アルキル、フェニルまた
は３〜６個の炭素原子を有するシクロアルキルであり；Ｒ２は水素またはメチ
ルであり；かつＲ３は水素、メチル、またはカルボキシルである）
のキラル化合物の調製方法であって、
式
【００１３】
【化２】
2004238398.tif 000003
【００１４】
のアジドを式
【００１５】
【化３】
2004238398.tif 000004
【００１６】
の中間体アジドに加水分解し、そしてその中間体アジドを式
【００１７】
【化４】
2004238398.tif 000005
【００１８】
（式中、Ｒｌ及びＲ２は第１項に定義された意味を有し、Ｐｈはフェ
ニルであり、Ｍｅはメチルであり、かっＢｎはベンジルである）
のアミンに還元することを特徴とする式１のキラル化合物の調製方法。
６．アジドを水酸化ナトリウムによる処理により加水分解する第５項に記載の方法。
７．中間体アジドを水性塩基で抽出する工程を更に含む第５項に載の方法。                  
【００１９】
８．水性抽出液を酸性にする工程を更に含む第７項に記載の方法。
９．中間体アジドを中性付近の条件で還元してアミノ酸を得る第５項に記載の方法。
１０．第５項に記載の方法により得られたアミノ酸。
１１．式
【００２０】
【化５】
2004238398.tif 000006
【００２１】
（式中、Ｒ１は１〜６個の炭素原子の直鎖または分枝アルキルであり；Ｒ２は
水素またはメチルであり；かっＲ３は水素、メチル、またはカルボキシルであ
る）のキラル化合物の調製方法であって、
式
【００２２】
【化６】
2004238398.tif 000007
【００２３】
のアジドを式
【００２４】
【化７】
2004238398.tif 000008
【００２５】
の中間体アジドに加水分解し、そしてその中間体アジドを式
【００２６】
【化８】
2004238398.tif 000009
【００２７】
（式中、Ｒ１及びＲ２は第１項に定義された意味を有し、Ｐｈはフェ
ニルであり、かっＭｅはメチルである）
のアミンに還元することを特徴とするキラル化合物の調製方法。
１２．アジドを水酸化ナトリウムによる処理により加水分解する第１１項に記載の方法。
１３．中間体アジドを水性塩基で抽出する工程を更に含む第１１項に記載の方法。
１４．水性抽出液を酸性にする工程を更に含む第１３項に記載の方法。
１５．中間体アジドを中性付近の条件で還元してアミノ酸を得る第１１項に記載の方法。
１６．第１１項に記載の方法により得られたアミノ酸。
【００２８】
（発明の要約）
本発明によれば、式１の化合物が提供される。
【００２９】
【化９】
2004238398.tif 000010
【００３０】
（式中、Ｒ１は１〜６個の炭素原子の直鎖または分枝アルキル、フェニルまたは３〜６個の炭素原子を有するシクロアルキルであり；Ｒ２は水素またはメチルであり；かっＲ３は水素、メチル、またはカルボキシルであり；但し、Ｒ２及びＲ３の夫々が水素である場合、Ｒ１はメチル以外であることを条件とする）
また、式１の化合物の医薬上許される塩が、本発明の範囲内に含まれる。また、式Ｉの化合物の個々の鏡像異性体が、本発明の範囲内に含まれる。
【００３１】
また、本発明は、式１の化合物の医薬組成物を提供する。
【００３２】
また、本発明の一部として、抗痙攣有効量の下記の式ＩＩの化合物もしくはその個々の鏡像異性体またはこれらの医薬上許される塩を患者に投与することにより患者の発作障害を治療する新規な方法が提供される。
【００３３】
【化１０】
2004238398.tif 000011
【００３４】
（式中、Ｒ１１は１〜６個の炭素原子の直鎖または分枝アルキル、フェニルまたは３〜６個の炭素原子を有するシクロアルキルであり；Ｒ１２は水素またはメチルであり；かつＲ１３は水素、メチル、またはカルボキシルである）
また、本発明は、脳神経ＧＡＢＡの増加方法を提供し、また式ＩＩの化合物の医薬組成物を提供する。
【００３５】
本発明はキラルの式１の化合物の新規な合成方法を提供する。
【００３６】
（発明の詳細な説明）
本発明によれば、抗痙攣薬として有益である一連の３−アルキル−４−アミノ酪酸または３一アルキルグルタミン酸類縁体が提供される。式１及び式ＩＩ中Ｒ１及びＲ１１により表されるアルキル部分の例は、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、イソペンチル基、及びネオペンチル基並びにその他のアルキル基である。式Ｉ及び式ＩＩ中Ｒ１及びＲ１１により表されるシクロアルキル基は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、及びシクロヘキシルにより例示される。これらの類縁体は、運動失調の副作用を生じないで発作を防止すると本明細書で更に示され、このような副作用は幾つかの抗発作医薬品に見られる。
【００３７】
本発明の更に好ましい化合物は、Ｒ３が水素であり、Ｒ２が水素であり、かつＲ１がイソブチルである上記の式Ｉの化合物である。
【００３８】
即ち、好ましい化合物は４−アミノ−３−（２−メチルプロピル）ブタン酸である。この化合物は、本発明により合成され、生体内で試験されたその他の類縁体よりも予期しないことに更に効力のあることがわかった。更に驚くべきことは、下記のデータが示すように、この好ましい化合物が試験管内でＧＡＤを活性化する点で試験された類縁体のうちの最低に有効な化合物であることである。それ故、この好ましい化合物は生体内で試験された時にこのような高い効力を有することは全く予測されなかった。
【００３９】
本発明の最も好ましい化合物は（Ｓ）−（＋）−４−アミノ−３−（２−メチルプロピル）ブタン酸及び（Ｒ）（−）−４−アミノ−３−（２−メチルプロピル）ブタン酸であり、（Ｓ）−（＋）−鏡像体が最も好ましい。（Ｓ）−（＋）−鏡像体はトリチウム標識ガバペンチンの置換につき本発明の範囲内で最も効力のある化合物であることがわかり、（Ｓ）−（＋）−鏡像体及び（Ｒ）（−）−鏡像体の両方がトリチウム標識ガバペンチンの置換及び生体内の抗痙攣活性の両方につき顕著な立体選択性を示した。
【００４０】
本発明によりつくられた化合物は、有機及び無機の酸または塩基の両方と医薬上許される塩を生成し得る。例えば、塩基性化合物の酸付加塩は、適当な酸を含む水溶液もしくは水性アルコール溶液またはその他の適当な溶媒に遊離塩基を溶解し、その溶液を蒸発させることによりその塩を単離することにより調製される。医薬上許される塩の例は、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸水素塩、等であるだけでなく、ナトリウム、カリウム、及びマグネシウム、等の塩である。
【００４１】
２−アルカン酸エステルから出発する３−アルキル−４−アミノブタン酸の生成方法は、エチル４，４−ジメチル−２−ペンテノエートを除いてクネベナゲル反応（Ｋｉｍ  ＹＣら著、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ.  １９６５：８５０９）により市販のアルデヒド及びモノメチルマロネートから調製される。
【００４２】
更に詳しくは、全ての３−アルキルグルタミン酸の調製に一般に適用し得る操作は以下のとおりである。３−アルキル−５，５−ジカルボエトキシ−２−ピロリジノン１０ｇを４９％の発煙ＨＢｒ１５０ｍｌ中で４時間還流させた。この時間後に、内容物をエバポレーターに入れ、揮発性成分を熱水浴の助けにより減圧で除去した。ガム状残渣を蒸留水２５ｍｌに溶解し、水をエバポレ一夕ーの助けで除去した。この方法をもう一度繰り返した。残渣を水２０ｍlに溶解し、溶液のｐＨを濃ＮＨ３溶液で３．２に調節した。この時点で、個々の３−アルキルグルタミン酸の鎖長がその溶解性を変え、その結果、その側鎖が一層大きいものが溶液から容易に沈殿した。一層小さい置換基（メチル、エチル、及びプロピル）を有するアルキルグルタミン酸の沈殿が、氷浴による冷却により、または無水エタノール１００ｍlで水溶液を希釈することにより促進し得た。水−アルコール混合物からの沈殿は４８時間で完結する。所望の３−アルキルグルタミン酸の特徴ではない無定形の固体の沈殿を防止するためにエタノールを徐々に添加するように注意を払う必要がある。アミノ酸の試料を、水−エタノール混合物で再結晶することにより分析のために精製した。全てが分解しながら融解した。分解した３−アルキルグルタミン酸の融点はそれらのピログルタミン酸の融点と一致した。
【００４３】
エチル４，４−ジメチル−２−ペンテノエートを２，２−ジメチルプロパノール及びエチルリチオアセテートから調製し、続いてβ−ヒドロキシエステルを塩化ホスホリル及びピリジンで脱水した。
【００４４】
１，１，３，３−テトラメチルグアニジンまたは１，８−ジアザビシクロ−［５．４．０］ウンデカ−７−エン（ＤＢＵ）により媒介されるα，β−不飽和化合物へのニトロメタンのミカエル付加が、４−ニトロエステルを良好な収率で与えた。更に詳しくは、ニトロメタン（５モル）、α，β−不飽和エステル（１モル）及びテトラメチル−グアニジン（０．２モル）の混合物を室温で２〜４日撹拌した。（メチルアタリレートの場合、そのエステルは３００℃以下の温度で添加されるべきである）。その反応の進行をＩＲ（Ｃ＝Ｃバンドの消失）及びＧ．Ｌ．Ｃ．分析により追跡した。その反応混合物を希塩酸で洗浄し、エーテルで抽出した。有機抽出物を乾燥させ、溶媒を減圧で除去し、２０の残渣を２トルの圧力で蒸留した。脂肪族ニトロ化合物は通常金属触媒作用を受けたトランスファー水素化による高圧接触水素化により、またはギ酸アンモニウムもしくはホウ水素化ナトリウム及び触媒としてのパラジウムを用いる新しく導入された水添分解法により還元されるが、本件出願人は４−ニトロカルボン酸エステルが室温で大気圧で酢酸中の触媒としての１０％パラジウム／カーボンを使用する水素化により相当する４−アミノカルボン酸エステルにほぼ定量的に還元し得ることを見出した。生成されたアミノエステルを酸加水分解にかけて主題の本発明の化合物を良好な収率で得た。この操作は、例として表１及び表２にリストされた種々の３−アルキル−４−アミノブタン酸の入手を与え、こうして従来使用された方法と比較して有利である。
【００４５】
本発明に従ってこれらの化合物を製造する更に特別な方法の例は、必要により先に詳細に記載された方法を利用して、以下のとおりである。出発物質が市販されていない場合、その合成順序は相当するアルコールで開始されてもよく、これはＣｏｒｅｙ  ＥＪら著、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．  １９７５：２６４７−２６５０の方法によりアルデヒドに酸化される。
【００４６】
式Ｉ及び式ＩＩのキラル化合物は、本明細書のチャートＩ中のスキームに示されるように調製される。チャートＩ中のスキームは特定の化合物（Ｓ）−（＋）−４−アミノ−３−（２一メチルプロピル）ブタン酸のキラル合成を示すが、当業者はその合成方法が式１及び式ＩＩのあらゆるジアステレオマー化合物に適用し得ることを容易にわかるであろう。
【００４７】
チャートＩ中、ＰＨはフェニルであり、Ｂｎはベンジルであり、ＴＨＦはテトラヒドロフランであり、ＬＤＡはリチウムジイソプロピルアミドであり、ＢＨ３・ＳＭｅ２はボランジメチルスルフィド錯体であり、ＴｓＣ１は塩化トシルであり、またＤＭＳＯはジメチルスルホキシドである。
【００４８】
詳細な合成操作が以下に実施例１に示される。この方法に関する主要な紹介の文献がエバンス（Ｅｖａｎｓ）の論文、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９８２；１０４：１７３７−９に説明されていた。金属エノレートはリチウムアミドまたはナトリウムアミド塩基で生成でき、続いてアルキル化されて置換カルボン酸誘導体を得ることができる。この方法はこれらのα−置換カルボン酸誘導体の鏡像選択的合成に有益であった。このゼミナール論文において、エバンスは一連の簡単なアルキル化剤によるプロピオン酸の調製を記載していた。キラルのシントン（オキサゾリジノン）の立体化学を変化させることにより、彼は高い立体選択性を得ることができた。
【００４９】
エバンスはその他の合成研究においてこのキラルの補助物質を使用していたが、いずれもがβ−置換−γ−アミノ酸を含む４−アミノ−３−（２−メチルプロピル）ブタン酸に関するものではなかった。エバンスにより提供された方法はα−置換につき教示しているが、β−置換とは別のことにつき教示するものであり、この種の格別のアミノ酸の調製に使用されていなかった。Ｎ−アシルオキサゾリジノンがクロロチタンエノレートを生成するのに使用されており、これらがアクリロニトリルの如きミカエル付加物と反応させられていた（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．  １９９１  ５６：５７５０−２）。それらは抗生物質のルタマイシンファミリーの合成（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９９０；５５：６２６０−８）及び立体選択的アルドール縮合（Ｏｒｇ．Ｓｙｎｔｈ．１９９０；６８：８３−９１）に使用されていた。キラルのα−アミノ酸がオキサゾリジノンアプローチにより調製された。この順序において、ジブチルホウ素エノレートが臭素化され、アジドで置換された（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．１９８７；２８：１１２３−６）。また、β−ヒドロキシ−α−アミノ酸のその他の合成が、アルドール縮合によりこのキラルの補助物質を経由して報告されていた（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．１９８７；２８：３９−４２；Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９８７；１０９：７１５１−７）。また、α，β−不飽和Ｎ−アシルオキサゾリジノンがディールス−アルダー反応においてキラリティーを誘導するのに使用されていた（Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９８８；１１０：１２３８−５６）。これらの例、またはその文献に見られるその他の例のいずれにおいても、この方法が（β−置換カルボン酸または３−置換ＧＡＢＡ類縁体を調製するのに使用されていない。
【００５０】
別の実施態様において、式Ｉ及び式ＩＩのキラル化合物が、チャートＩに示された合成と同様である方法で調製し得る。しかしながら、この実施態様において、チャートＩ中の工程８が別の２工程操作により置換され、これが以下の実施例２に示される。チャートＩ中でアジド（８）をアミノ酸（９）に還元する代わりに、アジド（８）を中間体アジド（８ａ）に加水分解し得る当分野の技術が使用し得る。チャートＩ中でアジド（８）をアミノ酸（９）に還元する代わりに、別法はアジド（８）を加水分解して中間体アジド（８ａ）を得、これが続いて還元される（チャートＩａを参照のこと）。
【００５１】
還元の前にアジド（８）を加水分解して中間体アジド（８ａ）を得ることには、二つの重要な利点がある。第一の利点は、中間体アジド（８ａ）が水性塩基への抽出により精製し得ることである。水性抽出物が酸性にされた後、中間体アジド（８ａ）が有機相に抽出され、単離し得る。これは、クロマトグラフィーを伴わない中間体アジド（８ａ）の精製を可能にする。アジド（８）の精製は、非常に高価であり、またしばしば大規模で実施されるクロマトグラフィーを必要とする。
【００５２】
第二の利点は、中間体アジド（８ａ）が酸を添加しないでアミノ酸酸（９）に還元し得ることである。アジド（８）の還元は、アミノ酸（９）を得るために酸、例えば、塩酸の添加を必要とする。不運なことに、アミノ酸（９）のラクタム化が酸の存在により促進される。中間体アジド（８ａ）はほぼ中性条件下で還元されてアミノ酸（９）を生じ、こうしてラクタム生成の問題を最小にし得る。
【００５３】
別の好ましい実施態様において、式１及び式ＩＩのキラル化合物は本明細書のチャートＩＩ中のスキームに示されるようにして調製し得る。チャートＩＩ中のスキームは特定の化合物（Ｓ）−（＋）−４−アミノー３一（２−メチルプロピル）ブタン酸のキラル合成を示すが、当業者は、その合成方法が式１及び式ＩＩのあらゆるジアステレオマー化合物に適用し得ることを容易にわかるであろう。
【００５４】
チャートＩＩ中、Ｐｈはフェニルであり、またＴｓはトシルである。
【００５５】
詳細な合成操作が下記の実施例３に示される。この操作はチャートＩに示された合成経路と同様であるが、チャートＩＩの操作はチャートＩの合成経路中のベンジルエステルをｔ−ブチルエステルで置換する。所望のアミノ酸（９）及び（１０９）は夫々チャートＩ及びチャートＩＩの両方で同じ最終生成物である。
【００５６】
アミノ酸（９）または（１０９）の合成においてベンジルエステルではなくｔ−ブチルエステルを使用することには、幾つかの利点がある。第一の利点は、チャートＩの工程４中のキラルの補助物質の加水分解に関する。この反応におけるキラルの補助物質の加水分解中に、ベンジルエステルの一部の加水分解がしばしば起こる。チャートＩＩ中のｔ−ブチルエステルの加水分解は経験されなかった。
【００５７】
別の利点は、チャート１中のアルコール（６）の使用に対してチャートＩＩ中のアルコール（１０６）の使用に関する。ベンジルエステル−アルコールによる問題は、下記に示されるようなラクトン化を受けるベンジルエステル−アルコールの傾向である。ベンジルエステルのラクトン化は或る条件下で避けられるが、ｔ−ブチルエステル−アルコールはラクトン化の傾向がはるかに小さい。
【００５８】
【化１１】
2004238398.tif 000012
【００５９】
更に別の利点（これはチャートＩａにより示された合成操作に関して先に説明された）は、ｔ−ブチル合成経路がアミノ酸最終生成物（ｌ０９）のうクタム生成の問題を最小にすることである。アミノ酸（１０９）のラクタム化を生じる酸の添加を必要とするアミノ酸（１０９）へのアジド（１０８）の還元に代えて、アジド（１０８）が最初に中間体アジド（１０８ａ）に加水分解される。中間体アジド（１０８ａ）は中性条件下で還元されてアミノ酸（１０９）を生じ、こうしてラクタム生成の問題を最小にし得る。
【００６０】
また、幾つかの新規な中間体は本明細書に説明された方法により生成されることが言及されるべきである。チャートＩ、チャートＩａ、及びチャートＩＩ中に示されるこれらの中間体の幾つかとして、ラセミ体またはＲもしくはＳ鏡像体の
４−メチル−５−フェニル−２−オキサゾリジノン、
４−メチル−（２−メチルプロピル）−２−ジオキソ−５−フェニル−３−オキサゾリジンブタン酸フェニルメチルエステル、
４−メチル−ペンタノイルクロリド、
４−メチル−３−（４−メチル−１−オキソペンチル）−５−フェニル−２−オキサゾリジノン、
２−（２−メチルプロピル）−ブタンニ酸４−（フェニルメチル）エステル、
３−（アジドメチル）−５−メチルーヘキサン酸フェニルメチルエステル、
３−（ヒドロキシメチル）−５−メチル−ヘキサン酸フェニルメチルエステル、
５−メチル−３−［［［（４−メチルフェニル）スルホニル］オキシ］−メチル］−ヘキサン酸フェニルメチルエステル、
３−（アジドメチル）−５−メチル−ヘキサン酸、
２−（２−メチルプロピル）−１，４−ブタンニ酸４−（１，１−ジメチルエチル）エステル、
３−（アジドメチル）−５−メチル−１，１−ジメチルエステル、
３−（ヒドロキシメチル）−５−メチル−ヘキサン酸１，１−ジメチルエステル、
５−メチル−３−［［［（４−メチル（フェニル）スルホニル〕オキシ］−メチル−ヘキサン酸１，１−ジメチルエチルエステル、または
４−メチル−（２−メチルプロピル）−２−ジオキソ−５−フェニル−３−オキサゾリジンブタン酸１，１−ジメチルエチルエステルが挙げられる。
【００６１】
上記の合成方法によりつくられた化合物は、医薬上許される担体と一緒に有効量の上記の式の化合物が使用される時に抗うつ薬、抗不安薬、抗精神病薬、抗発作薬、抗ジスキネジー薬、またはハンチントン病もしくはパーキンソン病の抗症候薬（ａｎｔｉｓｙｍｐ
ｔｏｍａｔｉｃ）として医薬組成物として使用し得る。即ち、本発明は、てんかんから生じる発作の抑制、脳虚血、パーキンソン病、ハンチントン病及び痙直の治療用、そしてまたおそらく抗うつ薬、抗不安薬及び抗精神病薬用の医薬組成物を提供する。これらの後者の使用は、これらの薬理学的活性を有するその他の既知化合物に対する機能上の類似性により予測される。その医薬品は、このような障害を患っているヒトを含む哺乳類に有効量の単位投薬形態の上記の式Ｉ及び式ＩＩに記載された化合物を投与することによる、このような哺乳類のこのような障害の治療方法に使用し得る。
【００６２】
本発明によりつくられた医薬化合物は種々の投薬形態で調製、投与し得る。例えば、これらの医薬組成物は、固体または液体である不活性な医薬上許される担体中でつくられる。固体形態の製剤として、粉末、錠剤、分散性グラニュール、カプセル、カシェ剤、及び座薬が挙げられる。その他の固体形態及び液体形態の製剤が、当業界の既知の方法によりつくられる。単位投薬量の製剤中の活性化合物の量は、平均７０ｋｇの患者を基準として、毎日１ｍｇ〜約３００ｍｇ／ｋｇ（ミリグラム／キログラム）に変化または調節し得る。約ｌｍｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇの毎日の投薬量範囲が好ましい。しかしながら、その投薬量は、患者による要求、治療される症状の重度、及び使用される化合物に応じて変化し得る。特別な状況に適した投薬量の決定は当業者の技量内にある。
【００６３】
本発明によりつくられた化合物の例を試験して、試験管内でＧＡＤを活性化し、また運動失調の副作用を生じないで生体内で発作を予防するこれらの化合物の能力を実証した。
試験管内のＧＡＤ活性化
アッセイを、中央ウェル（コンテス（Ｋｏｎｔｅｓ）カタログＮｏ．８８２３２０−０００）を挿入した血清キャップでシールした１０ｍl
のバイアル中で行った。中央ウェルに新たに調製した８％のＫＯＨ溶液２００μ１を仕込んだ。５０ｍＭのリン酸カリウム緩衝液、ｐＨ７．２中に［１４Ｃ］Ｌ−グルタメート（１０μＣｉ／ミリモル）を含む種々の濃度のＬ−グルタミン酸（０．５、０．２５、０．１６６、０．１２５、０．１０ｍＭ）を、精製Ｌ−グルタミン酸デカルボキシラーゼ（１８．７５μｇ；比活性１０．８５μモル／分ｍｇ）を含むセパレートバイアル中で３７℃で２．００ｍｌの全容積で振とうした。６０分間振とうした後、酵素反応を夫々のバイアルの内容物への６Ｍの硫酸２００μ１の添加により停止した。バイアルを３７℃で更に６０分間振とうした。中央ウェルを除去し、放射能測定用のシンチレーション液１０ｍ１を含むシンチレーションバイアルに入れた。種々の濃度の活性化剤（２．５、１．０、０．５、０．２５、０．１、０．０５ｍＭ）の存在下で反復する以外は同アッセイを反復した。Ｖｍａｘを、種々の活性化剤における１／ｃｐｍ対１／［グルタメート］のプロットから求めた。データを活性化剤の存在下のＶｍax対活性化剤の不在下のＶｍａｘの比Ｘ１００％として表した。
【００６４】
実験の結果を表１に示す。これらの試験は、異なる程度に試験された種々の化合物によりかなりの活性化があったことを示す。既知の活性化剤であるナトリウムバルプロエート及びガバペンチンを試験した。
【００６５】
生体内試験を行って新規化合物の発作防止能を実証した。限界最大の電気ショックは、Ｐｉｒｅｄｄａ  ＳＧら著、Ｐｈａｍａｃｏｌ．ａｎｄ  Ｅｘｐｔｌ．Ｔｈｅｒａｐ．１９８５；２３２（３）：７４１−４５の動物モデル試験と同様である全身発作に関する動物モデル試験である。この試験のための方法を、以下に記載する。
【００６６】
雄のＣＦ−１マウス（２２〜３０ｇ）を試験前に断食、断水させた。スクリーニングにつき、５匹のマウスの群に３０、１００、及び３００ｍｇ／ｋｇの投薬量で化合物を静脈内投与し、投与の０．５、２．０及び４．０時間後に試験した。薬剤を０．９％の食塩水に溶解し、または０．２％のメチルセルロース中に懸濁させた。動物に角膜電極（以下を参照のこと）でショックを与え、強直性の後肢伸筋発作にっき観察した。後肢伸びの不在を抗痙攣効果として測定した。
【００６７】
電気ショック装置は０．２秒間で１４ｍＡ（ピークピーク値）の電流振幅で６０Ｈｚの正弦波を送出した。この操作に使用した１４ｍＡの電流強さは未処理のマウスの約９５％で強直性の伸筋発作を生じたが、強直性の伸筋の限界値をごくわずかに上回った。
【００６８】
左側の欄に示された夫々の化合物の投与後１２０分に試験した場合の発作から保護される動物の数の要約を、表の第二欄に示された種々の投薬量レベルにつき表２に示す。
【００６９】
（Ｒ，ｓ）−ｉ−ブチルＧＡＢＡ（その化合物は運動失調を生じないでかなり高い効力及び有効性を有する）に関する重要な現象のために、試験時間を１時間から８時間まで変化させて限界値最大の電気ショック試験を行い、投薬量はマウス１ｋｇ当たり１０ｍｇであり、静脈内注射した。表３は、これらの試験の結果が試験の２時間後に最高の保護を示すことを示す。
【００７０】
上記の結果に鑑みて、投薬量応答曲線をマクスにおける２時間の試験時間につき作成し、薬剤を１０ｍｇ／ｋｇで静脈内投与した。この試験の結果を表４に示し、計算ＥＤ５０は２．０７ｍｇ／ｋｇに等しい。
【００７１】
第三の薬理試験を、Ｋｒａｌｌ  ＲＬら著、Ｅｐｉｌｅｐｓｉａ．１９７８；１９：４０９に記載されたようにして行った。この操作において、ペンチレンテトラゾールの皮下投与（８５ｍｇ／ｋｇ）（これは欠神型発作に一般に認められているモデルである）により生じたマウスの限界値の間代性発作の減衰につき薬剤を試験した。静脈内投与または経口投与した場合の化合物に関する第三の試験からの結果を表５に示す。試験を三つの投薬量レベルで行ったところ、運動失調を生じないで３０ｍｇ／ｋｇ及び１００ｍｇ／ｋｇで有効
な保護を示した。
【００７２】
以上のことは重要な知見である。何となれば、試験管内でＧＡＤを活性化する最小の能力を有する化合物が、驚くことに、試験したその他の化合物よりも効力の点で約１０倍の増加を有していたからである。この効力の増大と対の運動失調の副作用の不在が、なお一層予測されない。
【００７３】
【表１−１】
2004238398.tif 000013
【００７４】
【表１−２】
2004238398.tif 000014
【００７５】
【表１−３】
2004238398.tif 000015
【００７６】
【表２−１】
2004238398.tif 000016
【００７７】
【表２−２】
2004238398.tif 000017
【００７８】
【表２−３】
2004238398.tif 000018
【００７９】
強い強さの角膜電気ショックは０．２秒間にわたって５０ｍＡのベースピーク値の正弦電流からなっていた。全てのその他のデータは、０．２秒間の１７ｍＡのベースピーク値の正弦電流である弱い強さの電気ショックからのものであった。
【００８０】
【表３】
2004238398.tif 000019
【００８１】
【表４】
2004238398.tif 000020
【００８２】
【表５】
2004238398.tif 000021
【００８３】
上で注目されるように、既知の抗痙攣薬であるガバペンチンに構造上関連している４−アミノ−３−（２−メチルプロピル）ブタン酸（３−イソブチルＧＡＢＡまたはＩＢＧ）のＳ−（＋）鏡像体は、ラット脳膜部分中の新規な高アフィニティー部位からトリチウム標識ガバペンチンを強力に置換する。また、３−イソブチルＧＡＢＡのＳ−（＋）鏡像体は、マウス及びラットにおける最大電気ショック発作の実際に全ての遮断の原因となる。３−イソブチルＧＡＢＡのＲ（−）鏡像体は、最大電気ショック発作の遮断及び新規な高アフィニティー結合部位からのトリチウム標識ガバペンチンの置換において極めて有効ではない。下記の表６は、これらのアッセイにおいてガバペンチン、ラセミ３−イソブチルＧＡＢＡ（（±）−ＩＢＧ）、Ｓ−（＋）−３−イソブチルＧＡＢＡ（（Ｓ）−ＩＢＧ）及びＲ−（−）−３−イソブチルＧＡＢＡ（（Ｒ）−ＩＢＧ）を比較するデータを示す。
【００８４】
【表６】
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【００８５】
投薬の２．０時間後、また殆どが投薬後８時間経過した抗痙攣活性（全ての化合物）ピークの時間経過
表６に示されたデータを、以下のようにして得た。抗痙攣薬試験につき、雄のＣＦ−１系統のマウス（２０〜２５ｇ）及び雄のスプラギュー−ダウレイ（Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ）ラット（７５〜１１５ｇ）をチャールズ・リバ−（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ）研究所から入手し、試験前に断食、断水を保った。最大電気ショックを、マウスの場合の弱い強さの電気ショックが通常の５０ｍＡ（０からピークまで）ではなく１７ｍＡの電流からなる以外は、通常の方法（Ｋｒａｌｌの上記文献、１９７５）により角膜電極で送出した。簡単に言えば、マウスに試験物質を投与し、ガーゼで覆われ、０．９％の塩化ナトリウムで飽和された二つの金属電極による角膜への電流の適用により発作の防止につき試験した。電気ショック刺激を、０．２秒間にわたって６０Ｈｚの正弦電流を生じる一定電流装置により送出した。ラットにつき、最大電気ショック刺激は１２０ｍＡの電流からなっていた。マウスの運動失調を、倒立スクリーン操作により分析し、この場合、マウスを４．０インチ平方のワイヤメッシュの上に個々に置き、続いてこれを倒立させた（Ｃｏｕｇｈｅｎｏｕｒ著、上記文献、１９７８）。６０秒の試験期間中にワイヤメッシュから落下したマウスを運動失調と評価した。ＥＤ５０値を、夫々１０匹のマウスまたは８匹のラットの少なくとも５つの投薬群の結果のプロビット分析により測定した。
【００８６】
全ての薬剤は水性媒体に自由に可溶性であった。生体内研究にっき、薬剤溶液を０．９％の塩化ナトリウム中でつくり、１ｍｌ／体重１００ｇの容積で投与した。静脈内投与をマウスの眼窩後洞への巨丸剤注射により施した。経口投与は胃内ガバージュによるものであった。
【００８７】
結合研究につき、部分精製したシナプス原形質膜を、蔗糖密度勾配を使用してラット新皮質から調製した。１０匹の脳皮質を脳の残部から切除し、テフロン（登録商標）乳棒をフィットしたガラスホモジナイザーを使用して５ｍＭのトリス−アセテート（ｐＨ７．４）中の氷冷した０．３２Ｍの蔗糖の１０倍容（重量／容積）中で均質にした（２００ｒｐｍで１０〜１５回のストローク）。ホモジネートを１００ｇで１０分間遠心分離し、上澄みを回収し、氷の上に保った。ペレット（ＰＩ）をトリス−庶糖２０ｍ１中で再度均質にし、ホモジネートを再度遠心分離した。合わせた上澄みを２１，５００ｇで２０分間遠心分離した。ペレット（Ｐ２）を１．２Ｍのトリス−庶糖中で再度懸濁し、この混合物１５ｍｌを超遠心分離管に添加した。これに、０．９Ｍの蔗糖１０ｍｌを層形成し、続いて５ｍＭのトリス−アセテート（ｐＨ８．０）の最終層を形成した。管を１００，０００ｇで９０分間遠心分離した。０．９／１．２Ｍの蔗糖界面に位置したシナプス原形質膜を回収し、５ｍＭのトリスーアセテート（ｐＨ７．４）中で再度懸濁させ、４８，０００ｇで遠心分離した。最終ペレットをトリスーアセテート（ｐＨ７．４）５０ｍｌ中で再度懸濁させ、アリコートとし、使用するまで凍結した。
【００８８】
そのアッセイ組織（０．１〜０．３ｍｇのタンパク質）を室温で３０分間にわたって種々の濃度の試験化合物の存在下で１０ｍＭのＨＥＰＥＳ緩衝液（２０℃でｐＨ７．４、ナトリウムを含まない）中の２０ｍＭの［３Ｈ]−ガバペンチンでインキュベートし、その後、減圧でＧＦＢフィルターで濾過した。フィルターを氷冷した１００ｍＭのＮａＣ１溶液５ｍｌで３回洗浄し、フィルターに結合したｄｐｍを液体シンチレーションカウンティングを使用して測定した。非特異的結合を、１００ｍＭのガバペンチンの存在下で観察した非特異的結合と定義した。
【００８９】
本発明を特徴付ける化合物、特に、４−アミノ−３−（２−メチルプロピル）ブタン酸（イソブチルＧＡＢＡ）の上記の実証された活性に鑑みて、本発明によりつくられた化合物は、特に、ヒトを含む哺乳類の発作の治療用の薬理学的薬剤として有益である。
【実施例】
【００９０】
実施例１
（Ｓ）−（＋）−４−アミノ−３−（２−メチルプロピル）ブタン酸
下記の“工程”はチャートＩを参照する。
【００９１】
工程１
無水クロロホルム１００ｍl中の４−メチル吉草酸（５０．０ｇ、０．４３モル）の溶液に、塩化チオニル（６０ｍl、０．８２モル）を添加した。その反応混合物を２時間還流させ、次いで室温に冷却した。過剰のクロロホルム及び塩化チオニルを蒸留により除去した。次いで残渣の油を分別蒸留して酸クロリド（２）４５．３ｇ（７８％）を得た。沸点１４３〜１４４℃。
【００９２】
また、酸クロリド（２）を、廃棄及び作業者被爆の難点を有するクロロホルムの使用を排除する別法により調製した。また、その別法は４一メチル無水吉草酸の生成を最小にした。
【００９３】
塩化チオニル（９８．５ｋｇ、８２８モル）及びＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｋｇ、２７モル）の溶液に、２５〜３０℃の反応温度を保ちながら４一メチル吉草酸（７４ｋｇ、６３７モル）を添加した。ヘキサン（３０Ｌ）を添加し、その溶液を３０〜３５℃で１時間１５分保った。次いでその溶液を１時間１０分にわたって７０〜７５℃に加熱した。その溶液を、９５℃の溶液温度に達するまで大気蒸留にかけた。冷却後、ヘキサン（３０Ｌ）を添加し、その溶液を、９７℃の溶液温度に達するまで大気蒸留にかけた。残留油の蒸留は酸クロリド（２）７９ｋｇ（９２％）を生じた。沸点約７７℃、６０〜６５ｍｍＨｇ。
【００９４】
工程２
アルゴン雰囲気下で−７８℃の無水テトラヒドロフラン７０ｍｌ中の（４Ｒ，５Ｓ）−（＋）−４−メチル−５−フェニル−２−オキサゾリジノン（５．２７ｇ、２９．７４ミリモル）の溶液にヘキサン中のｎ一ブチルリチウムの１．６Ｍの溶液（１９ｍl、３０．４０ミリモル）を徐々に添加した。その混合物を−７８℃で１５分間撹拝し、次いで酸クロリド（４．５ｇ、３３．４３ミリモル）を添加して反応を停止した。その反応液を−７８℃で１０分間、次いで０℃で３０分間撹拌した。重炭酸ナトリウムの飽和溶液（５０ｍｌ）を添加し、その混合物を０℃で３０分間撹拝した。有機層を回収し、水層を酢酸エチル（３ｘ）で抽出した。有機抽出物を合わせ、無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。次いでそれを濾過し、濃縮して無色の油を得た。次いで油をシリカゲルでヘキサン中８％
の酢酸エチルを用いてクロマトグラフィーにかけてアシルオキサゾリジノン（３）７．５６ｇ（８２％）を白色の固体として得た。
分析、Ｃ１６Ｈ２１ＮＯ３としての計算値：
Ｃ，６９．７９；Ｈ，７．６９；Ｎ，５．０９
実測値：  Ｃ，６９．５６；Ｈ，７．６３；Ｎ，５．０６
また、アシルオキサゾリジノン（３）を−７８℃（これは製造スケールで達成するのに困難であり、また高価である）ではなく−５℃〜０℃で行う別法により調製した。また、その別法は、クロマトグラフィーにかける必要がある油ではなく、反応混合物から結晶固体を生じた。
【００９５】
−５℃の無水テトラヒドロフラン（２７０ｇ）中の４−メチル−５−フェニル−２−オキサゾリジノン（６４ｇ、０．３６モル）の溶液に、ヘキサン中のｎ−ブチルリチウムの１５％溶液（１６０ｇ、０.３７モル）を−５℃〜０℃の温度範囲で添加した。酸クロリド（２）（４８.６ｇ、０．３６モル）を−１０℃〜０℃で添加した。その反応を水（９０ｍｌ）及び重炭酸ナトリウム（４ｇ）の溶液で停止した。酢酸エチル（２００ｇ）を添加し、層を分離した。有機層を水（２ｘ５０ｍl）で抽出し、水相を酢酸エチル（１００ｇ）で逆抽出した。有機抽出物を合わせ、溶媒約１５０ｍｌを蒸留により除去した。大気蒸留を続け、９５℃の蒸気温度に達するまでヘプタン（２ｘ２００ｇ）を添加した。その溶液を５℃に冷却した。生成物を濾過により回収し、冷ヘプタンで洗浄し、乾燥させてアシルオキサゾリジノン（３）７９ｇ（８０％）を得た。
【００９６】
工程３
アルゴン雰囲気下の０℃の無水テトラヒドロフラン３０ｍl中のジイソプロピルアミン（４．８ｍ１、３４．２５ミリモル）の溶液に、ヘキサン中のｎ−ブチルリチウムの１．６Ｍの溶液（２１ｍｌ、３３．６０ミリモル）を徐々に添加した。その溶液を０℃で３０分間撹拌し、−７８℃に冷却した。無水テトラヒドロフラン３０ｍｌ中のアシルオキサゾリジノン（３）（７．５６ｇ、２７．４６ミリモル）の溶液を添加し、淡黄色の溶液を−７８℃で３０分間撹拌した。ベンジルα−ブロモアセテートを添加し、得られる溶液を−２５℃で２時間撹拌した。その反応混合物を半飽和塩化アンモニウム溶液で反応停止し、酢酸エチル（２ｘ）により抽出した。合わせた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、次いで濾過し、濃縮して無色の油を得た。次いでその油をシリカゲルでヘキサン中８％の酢酸エチルを用いてクロマトグラフィーにかけてアシルオキサゾリジノン（４）６．１６ｇ（５３％）を白色固体として得た。
分析、Ｃ２５Ｈ２９ＮＯ５としての計算値：
Ｃ，７０．９０；Ｈ，６．９０；Ｎ，３．３１
実測値：  Ｃ，７０．４７；Ｈ，６．８７；Ｎ，３．４５
また、アシルオキサゾリジノン（４）を、反応を高温（−７８℃ではなく−３５℃〜−２５℃）で行い、高価かつ困難なクロマトグラフィー分離を避ける）点で有利である別法により調製した。
【００９７】
アシルオキサゾリジノン（３）（８５ｋｇ、３０８モル）を無水テトラヒドロフラン（２０１ｋｇ）に溶解し、−３０℃に冷却した。メチル−ｔ−ブチルエーテル／ヘキサン中のリチウムジイソプロピルアミン（３４０モル）を、−３５℃〜−２５℃の温度を保ちながら添加した。次いでベンジルブロモアセテート（８５ｋｇ、３７１モル）を、−３５℃〜−２５℃の反応温度を保ちながら添加した。水（６０ｋｇ）及びメチル−ｔ−ブチルエーテル（９３ｋｇ）を添加し、その混合物を１８℃に温めた。層を分離し、有機層を水（４０Ｌ）及び塩化ナトリウム（７ｋｇ）の溶液で抽出した。層を分離し、有機層を蒸留により２００リットルに濃縮した。イソプロピルアルコール（２００Ｌ）を添加し、その溶液を再度蒸留により２００リットルに濃縮した。イソプロピルアルコール（４２５Ｌ）及び水（１６０Ｌ）を添加し、その混合物を５０℃に加熱した。その溶液を１８℃に冷却した。生成物を濾過により回収し、イソプロピルアルコール／水で洗浄し、減圧で乾燥させてアシルオキサゾリジノン（４）５８．７ｋｇ（収率４９％）を固体として得た。
【００９８】
工程４
テトラヒドロフラン６００ｍｌ中のアシルオキサゾリジノン（４）（２４．３ｇ、５７．３８ミリモル）の予め冷却した（０℃）溶液に、０．２Ｍの水酸化リチウム溶液３２０ｍｌ中の３０％の過酸化水素（２３．７ｍｌ）の溶液を滴下ロートにより２０分間で添加した。その反応混合物を０℃で４時間撹拌した。次いで水３２０ｍｌ中のメタ重亜硫酸ナトリウム（６２．２ｇ、０．３３モル）の溶液を徐々に添加して反応を停止した。その混合物を０℃で２０分間撹拌した。過剰のテトラヒドロフランをロー夕バップ（ｒｏｔａｖａｐ）で除去した。水性残渣を酢酸エチル（３ｘ３５０ｍｌ）で抽出した。合わせた有機抽出物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、次いで濾過した。濃縮後の油状残渣をシリカゲルでヘキサン中４０％の酢酸エチルによりクロマトグラフィーにかけて酸（５）１３.３４ｇ（８８％）を透明な油として得た。次いでそのカラムをヘキサン中５０％の酢酸エチルで溶離してオキサゾリジノンキラル補助物質を得た。
【００９９】
【化１２】
2004238398.tif 000023
【０１００】
別法において、反応液を油状残渣に濃縮した後、オキサゾリジノンキラル補助物質を沈殿させるためにヘキサンまたはヘプタンを添加し得る。次いで濾過してキラル補助物質を８０％の回収率で得る。次いで、酸（５）を含むヘキサンまたはヘプタン濾液をエタノール水溶液または温水で抽出して、残っているキラル補助物質を除去する。この別法は酸（５）からのキラル補助物質のコストのかかる困難なクロマトグラフィー分離を避ける。
【０１０１】
工程５
アルゴン雰囲気下の０℃の無水テトラヒドロフラン４６０ｍｌ中の酸（５）（１３．３４ｇ、５０．４７ミリモル）の溶液に、ボランジメチルスルフィド錯体（１０Ｍ、１１．２ｍｌ、１１２．０ミリモル）を徐々に添加した。その反応混合物を０℃で３０分間、次いで室温で４時間攪拌した。その反応を０℃に冷却し、メタノール２５０ｍｌを徐々に添加した。その混合物を０℃で３０分間撹拝し、過剰の溶媒を減圧で除去した。得られる油をシリカゲルでヘキサン中１５％の酢酸エチルによりクロマトグラフィーにかけてアルコール（６）１０．５９ｇ（８４％）を無色の油として得た。
【０１０２】
【化１３】
2004238398.tif 000024
【０１０３】
工程６
０℃の無水ピリジン５０ｍｌ中のアルコール（６）（１０．２２ｇ、４０．８２ミリモル）の溶液に、塩化トシル（８．６０ｇ、４５．１１ミリモル）を添加した。その反応混合物を０℃で１５分間撹拌し、次いで冷蔵庫中で４℃で一夜放置した。その反応混合物を酢酸エチル１６０ｍｌ及び水１００ｍｌで希釈した。その混合物を氷−水浴中で０℃に冷却し、次いで濃塩酸を徐々に添加して過剰のピリジンを中和した（ｐＨ２まで）。有機層を回収し、水層を酢酸エチル（３ｘ１００ｍｌ）で抽出した。合わせた有機物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、次いで濾過した。濃縮後に得られる淡黄色の油をシリカゲルでヘキサン中１０％の酢酸エチルによりクロマトグラフィーにかけてトシレート（７）１４．４４ｇ（８７％）を無色の油として得た。
【０１０４】
【化１４】
2004238398.tif 000025
【０１０５】
また、トシレート（７）を別法において酸（５）から調製した。この方法は上記の先の操作よりも有利であった。何となれば、それは上記の反応において副生物として生成されるβ一イソブチルーγ一ラクトンの量を最小にしたからである。
【０１０６】
メチル−ｔ−ブチルエーテル（１９８ｋｇ）中の酸（５）（２２．３ｋｇ、８４．４モル）の溶液を−６℃に冷却した。ボラン−メチルスルフィド錯体（１５．６ｋｇ、１７７モル）を、５℃以下の反応温度を保ちながら添加した。次いでその混合物を２０℃に温め、２時間攪拌した。その混合物を０℃に冷却し、メタノール（２４Ｌ）を、反応温度を５℃以下に保ちながら添加した。水（１３２Ｌ）を１５℃以下の温度で添加した。相を分離し、水相をメチル−ｔ−ブチルエーテル（２７ｋｇ）で抽出した。有機物を合わせ、水（７２Ｌ）で抽出した。その溶液を蒸留により油に濃縮し、酢酸エチル（２３ｋｇ）を添加した。その溶液を再度蒸留により油に濃縮してアルコール（６）を得た。ピリジン（５３ｋｇ）を添加した。その溶液を１℃に冷却し、−５℃〜５℃の反応温度を保ちながらパラートルエンスルホニルクロリド（２３ｋｇ、１２１モル）を添加した。その混合物を２℃で８時間攪拌し、次いで２０℃に温めた。２３℃以下の反応温度を保ちながら水（１２Ｌ）を添加した。その混合物を１℃に冷却し、塩酸水溶液（水６３Ｌ中濃塩酸５２ｋｇ）を添加した。メチル−ｔ−ブチルエーテル（２９６ｋｇ）を添加し、その混合物を１８℃に温めた。相を分離し、水相をメチル−ｔ−ブチルエーテル（７４ｋｇ）で抽出した。有機相を合わせ、塩酸水溶液（水２０リットル中０．６ｋｇの濃塩酸）、重炭酸ナトリウム水溶液（水５０リットル中の２.７ｋｇの重炭酸ナトリウム）、及び水（３０Ｌ）で抽出した。有機溶液を蒸留により油に濃縮した。メチル−ｔ−ブチルエーテル（１９ｋｇ）を添加し、その混合物を再度油に濃縮した。得られる生成物をメチル−ｔ−ブチルエーテル（３７．９ｋｇ）に溶解し、溶液として貯蔵した。トシレート（７）の重量はメチル−ｔ−ブチルエーテル溶液３０．１ｋｇ中に含まれていた（収率８８％）。
【０１０７】
工程７
無水ジメチルスルホキシド１８０ｍｌ中のトシレート（７）（１４．４４ｇ、３５.７０ミリモル）及びアジ化ナトリウム（５．５０ｇ、８４．５９ミリモル）の混合物を６５℃で一夜加熱した。
その反応混合物を室温に冷却し、水９００ｍｌを添加した。その混合物を合計２Ｌのへキサンで抽出した（４ｘ）。合わせた有機抽出物を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、次いで濾過した。濾液を濃縮し、次いで得られる油をシリカゲルでヘキサン中８％の酢酸エチルによりクロマトグラフィーにかけてアジド（８）８．５５ｇ（８７％）を無色の油として得た。
【０１０８】
【化１５】
2004238398.tif 000026
【０１０９】
工程８
テトラヒドロフラン５００ｍｌ中のアジド（８）（８．５５ｇ、３１．０５ミリモル）の溶液に、１Ｎの塩酸水溶液６２ｍｌ及び１０％のパラジウム／カーボン触媒１ｇを添加した。その混合物をパール装置で室温で一夜振とうした。触媒をセライトのパッドによる濾過により除去した。濾液を濃縮し、１Ｎの塩酸水溶液５０ｍｌを添加した。水溶液をエーテル（３ｘ５０ｍｌ）で洗浄した。水層を回収し、次いでダウエックス（Ｄｏｗｅｘ）５０Ｗｘ８（Ｈ＋形態）カラムでクロマトグラフィーにかけ、０．５Ｎの水酸化アンモニウム溶液で溶離した。アミノ酸（ニンヒドリン陽性）を含む画分を回収し、次いで凍結乾燥してアミノ酸（９）３．２ｇ（６５％）を白色の固体として得た。融点１７５〜１７６  ℃；  ［α］Ｄ２３＝１０．５２０（１．０６，  Ｈ２Ｏ）。
【０１１０】
（実施例２）
（Ｓ）−（＋）−４−アミノ−３−（２一メチルプロピル）ブタン酸
この化合物を、アミノ酸（９）が中間体アジド（８ａ）を使用する２工程方法によりアジド（８）から調製され、続いてこれが還元される（工程８として表示される１工程還元方法が上記されている）こと以外は、実施例１と同じ方法で調製した。
実施例２の合成操作をチャートＩａに示す。
【０１１１】
工程１：中間体アジド（８ａ）の調製
エタノール（１００ｍｌ）及び水（２０ｍｌ）中のアジド（８）（１０．７ｇ、０．０４０ｍｌ）を５０％の水酸化ナトリウム水溶液（９．８ｇ）で処理した。その混合物を３０℃で４５分間攪拌した。エタノールを、液体３０ｇが残るまで減圧で除去し、水（１００ｍｌ）を添加し、その混合物をメチル−ｔ−ブチルエーテル（４ｘ１ＯＯｍｌ）で抽出した。メチル−ｔ−ブチルエーテル抽出物を１Ｍの水酸化ナトリウムで抽出し、水相を合わせ、濃塩酸でｐＨ１．６に酸性にした。次いでその水性混合物をメチル−ｔ−ブチルエーテル（２ｘ１００ｍｌ）で抽出し、有機抽出物を合わせ、減圧下で濃縮した。得られる油をヘプタン（５０ｍｌ）に溶解し、飽和重炭酸ナトリウム水溶液（２×４０ｍｌ）で抽出した。水性抽出物をヘプタン（５０ｍｌ）で抽出し、合わせ、濃塩酸でｐＨ１．６に酸性にした。水性混合物をヘプタン（２ｘ５０ｍｌ）で抽出した。ヘプタン抽出物を水（４０ｍｌ）で抽出し、合わせ、減圧で濃縮して中間体アジド（８ａ）５．４ｇ（７５％）を油として得た。
【０１１２】
【化１６】
2004238398.tif 000027
【０１１３】
工程２：中間体アジド（８ａ）からのアミノ酸（９）の合成  
中間体アジド（８ａ）（１２．７ｇ、６８．６モル）をメチル−ｔ−ブチルエーテル（８０ｋｇ）に溶解した。その混合物を、中間体アジド（８ａ）が消費されるまで、５％のパラジウム／カーボン（５０％の水で湿らされたもの２．０ｋｇ）の存在下で水素４９〜５５ｐｓｉで接触水素化にかけた。その混合物を濾過し、固体をメチル−ｔ−ブチルエーテル（３０ｋｇ）で洗浄した。固体を熱イソプロパノール（７５ｋｇ）及び水（６０ｋｇ）の溶液に溶解し、その溶液を濾過した。イソプロパノール水溶液を−３℃に冷却し、生成物を濾過し、冷イソプロパノール（１６ｋｇ）で洗浄した。その固体を減圧で乾燥させてアミノ酸（９）６．４ｋｇ（５９％）を得た。
【０１１４】
この還元を種々の溶媒中で行い得る。成功した還元は、ヘプタン、エタノール／水、イソプロパノール、イソプロパノール／水、メタノール／水、及びテトラヒドロフラン／水並びにメチルーｔ一ブチルエーテル中で行われた。
【０１１５】
（実施例３）
（Ｓ）−（＋）−４−アミノ−３−（２一メチルプロピル）ブタン酸
以下の「工程」はチャートＩＩを参照する。全ての反応を窒素の雰囲気下で行った。
【０１１６】
工程１
無水クロロホルム１００ｍｌ中の４−メチル吉草酸（５０．０ｇ、０．４３モル）の溶液に、塩化チオニル（６０ｍｌ、０．８２モル）を添加した。反応混合物を２時間還流し、次いで室温に冷却した。過剰のクロロホルム及び塩化チオニルを蒸留により除去した。次いで残渣の油を分別蒸留して酸クロリド（１０２）４５．３ｇ（７８％）を得た。沸点１４３〜１４４℃。
【０１１７】
また、酸クロリド（１０２）を、廃棄及び作業者被爆の難点を有するクロロホルムの使用を排除する別法により調製した。また、その別法は４−メチル無水吉草酸を最小にした。
【０１１８】
塩化チオニル（９８．５ｋｇ、８２８モル）及びＮ，Ｎ一ジメチルホルムアミド（２ｋｇ、２７モル）の溶液に、２５〜３０℃の反応温度を保ちながら４−メチル吉草酸（７４ｋｇ、６３７モル）を添加した。ヘキサン（３０Ｌ）を添加し、その溶液を３０℃〜３５℃で１時間１５分保った。次いでその溶液を１時間１０分にわたって７０℃〜７５℃に加熱した。その溶液を、９５℃の溶液温度に達するまで大気蒸留にかけた。冷却後、ヘキサン（３０Ｌ）を添加し、その溶液を、９７℃の溶液温度に達するまで大気蒸留にかけた。残留油の蒸留は酸クロリド（１０２）  ７９ｋｇ（９２  ％）を生じた。沸点約７７℃、６０〜６５ｍｍＨｇ。
【０１１９】
工程２
アルゴン雰囲気下で−７８℃の無水テトラヒドロフラン７０ｍ１中の（４Ｒ，５Ｓ）−（＋）−４−メチル−５−フェニル−２−オキサゾリジノン（５．２７ｇ、２９．７４ミリモル）の溶液に、ヘキサン中のｎ−ブチルリチウムの１．６Ｍの溶液（１９ｍｌ、３０．４０ミリモル）を徐々に添加した。その混合物を−７８  ℃で１５分間撹拌し、次いで酸クロリド（４．５ｇ、３３．４３ミリモル）を添加して反応を停止した。その反応液を−７８℃で１０分間、次いで０℃で３０分間攪拌した。重炭酸ナトリウムの飽和溶液（５０  ｍｌ）を添加し、その混合物を０℃で３０分間撹拌した。有機層を回収し、水層を酢酸エチル（３ｘ）で抽出した。有機抽出物を合わせ、無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。次いでそれを濾過し、濃縮して無色の油を得た。次いで油をシリカゲルでヘキサン中８％の酢酸エチルを用いてクロマトグラフィーにかけてアシルオキサゾリジノン（１０３）７．５６ｇ（８２％）を白色の固体として得た。
分析、Ｃ１６Ｈ２１ＮＯ３としての計算値：
Ｃ，６９．７９；Ｈ，７．６９；Ｎ，５．０９
実測値：Ｃ，６９．５６；Ｈ，７．６３；Ｎ，５．０６
また、アシルオキサゾリジノン（１０３）を−７８℃（これは製造スケールで達成するのに困難であり、また高価である）ではなく−５℃〜０℃で行う別法により調製した。また、その別法は、クロマトグラフィーにかける必要がある油ではなく、反応混合物から結晶固体を生じた。
【０１２０】
−５℃の無水テトラヒドロフラン（２７０ｇ）中の４−メチル−５−フェニル−２−オキサゾリジノン（６４ｇ、０．３６モル）の溶液に、ヘキサン中のｎ−ブチルリチウムの１５％溶液（１６０ｇ、０．３７モル）を−５℃〜０℃の温度範囲で添加した。酸クロリド（１０２）（４８．６ｇ、０．３６モル）を−１０℃〜０℃で添加した。その反応を水（９０ｍｌ）及び重炭酸ナトリウム（４ｇ）の溶液で停止した。酢酸エチル（２００ｇ）を添加し、層を分離した。有機層を水（２ｘ５０ｍｌ）で抽出し、水相を酢酸エチル（１００ｇ）で逆抽出した。有機抽出物を合わせ、溶媒約１５０ｍｌを蒸留により除去した。大気蒸留を続け、９５℃の蒸気温度に達するまでヘプタン（２ｘ２００ｇ）を添加した。その溶液を５℃に冷却した。生成物を濾過により回収し、冷ヘプタンで洗浄し、乾燥させてアシルオキサゾリジノン（１０３）７９ｇ（８０％）を得た。
【０１２１】
工程３
窒素雰囲気下の０℃の無水テトラヒドロフラン（１０ｍl）中のジイソプロピルアミン（７．６ｇ、０．０７５モル）の溶液に、ヘキサン中のｎ−ブチルリチウムの１．６Ｍの溶液（４７ｍｌ、０．０７５モル）を−５℃〜０℃の温度に保ちながら添加した。得られる溶液を−５５℃〜−４５℃のテトラヒドロフラン（１６０ｍｌ）中のアシルオキサゾリジノン（１０３）（１８．６ｇ、０．０６８モル）の溶液に添加した。その溶液を−５５℃〜−４５℃で３０分間撹拌した。次いでその溶液をテトラヒドロフラン中のｔ−ブチルブロモアセテート（１４．６ｇ、０．０７５モル）の溶液に添加した。その溶液を−６５℃に冷却し、２時間の期間にわたって１０℃に温めた。その反応混合物を飽和塩化アンモニウム水溶液の添加により反応停止し、酢酸エチルで抽出した。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を減圧で除去した。残渣をヘプタンで再結晶し、濾過し、減圧で乾燥させてアシルオキサゾリジノン（１０４）１８ｇ（６８％）を得た。
【０１２２】
【化１７】
2004238398.tif 000028
【０１２３】
また、試薬の添加の順序を逆にし得る。ｔ一ブチルブロモアセテートは、ジイソプロピルアミン、ｎ一ブチルリチウム及びアシルオキサゾリジノン（１０３）を含む溶液に添加し得る。また、最終生成物の単離は、蒸留を行い、存在する溶媒（ヘキサン及びテトラヒドロフラン）をイソプロピルアルコールで置換することにより行い得る。次いでアシルオキサゾリジノン（１０４）がイソプロピルアルコール溶液から結晶化する。下記の実験方法が、この別法を説明する。
【０１２４】
窒素雰囲気下の０℃の無水テトラヒドロフラン（３０ｍｌ）中のジイソプロピルアミン（２３．１ｇ、０．２２９モル）の溶液に、ヘキサン中のｎ−ブチルリチウムの２．５Ｍの溶液（９２ｍｌ、０．２２９モル）を−５℃〜０℃の温度に保ちながら添加した。得られる溶液を−４５℃〜−４０℃のテトラヒドロフラン（４００ｍｌ）中のアシルオキサゾリジノン（１０３）（６０．Ｏｇ、０．２１８モル）の溶液に添加した。その溶液を−４５℃〜−４０℃で３０分間撹拌した。次いでｔ−ブチルブロモアセテート（４４．６ｇ、０．２２９モル）を−４５℃〜−４０℃でその反応溶液に添加した。その溶液を２〜３時間にわたって１０℃に温めた。その反応混合物を飽和塩化アンモニウム水溶液の添加により反応停止した。有機層を水層から分離した。溶媒を減圧で除去し、イソプロピルアルコールで置換した。生成物がイソプロピルアルコールで結晶化し、これを濾過し、減圧で乾燥させてアシルオキサゾリジノン（１０４）５３．８ｇ（６３％）を得た。
【０１２５】
工程４
テトラヒドロフラン（２６６ｇ）中のアシルオキサゾリジノン（１０４）（６０．Ｏｇ、０．１５モル）の予め冷却した（５℃）溶液に、３０％の過酸化水素（７１ｇ）、水酸化リチウム−水和物９．４ｇ（０．２２モル）及び水（１２０ｍｌ）の溶液を５℃の反応温度を保つように３５分の期間にわたって添加した。その混合物を３〜５℃で２．５時間撹拌した。その反応を２９℃以下の温度で亜硫酸ナトリウム（５０ｇ）、重亜硫酸ナトリウム（２７ｇ）、
及び水（３１０ｍｌ）の溶液の添加により停止した。ヘプタン（１００ｍｌ）及びメチル−ｔ−ブチルエーテル（１００ｍｌ）を添加し、層を分離した。水層をメチル−ｔ−ブチルエーテル（１００ｍｌ）で抽出し、有機層を合わせた。その溶媒を蒸留によりヘプタンと交換し、得られるヘプタン溶液（４００ｍｌ）を５℃に冷却した。得られる固体を濾過し、濾液を温水（２ｘ１５０ｍ１、１ｘ２００ｍｌ、１ｘ３００ｍｌ）で抽出した。その溶液を蒸発により濃縮して酸（１０５）３４．５ｇ（９７％）を油として得た。
【０１２６】
【化１８】
2004238398.tif 000029
【０１２７】
工程５
酸（１０５）（７２．４ｇ、０．３１４モル）をテトラヒドロフラン（３６０ｍl）に溶解し、０℃に冷却した。テトラヒドロフラン中のボランジメチルスルフィド錯体の２．０Ｍの溶液（１７８ｍ１、０．３５６モル）を０℃で添加した。その溶液を４０℃に温め、次いで２５℃に冷却した。２時間４５分後、その反応をメタノール（３００ｍl）の添加により停止し、溶媒を減圧で除去した。追加のメタノール（３００ｍｌ）を添加し、その溶液を減圧で濃縮してアルコール（１０６）６６ｇ（９７  ％）を油として得た。
【０１２８】
【化１９】
2004238398.tif 000030
【０１２９】
工程６
アルコール（１０７）（５１．９ｇ、０．２４モル）をピリジン（１３０ｍｌ）に溶解し、５℃に冷却した。ｐ−トルエンスルホニルクロリド（５７．２ｇ、０．３０モル）を添加し、その混合物を２２℃で２１時間撹拌した。その反応を３００℃以下で水（９５ｍｌ）及び塩酸水溶媒（３００ｍｌ）の添加により停止した。メチル−ｔ−ブチルエーテル（３５０ｍｌ）を添加し、層を分離した。水層をメチル−ｔ−ブチルエーテル（３５０ｍｌ）で抽出した。有機層を合わせ、１％の塩酸水溶液（２ｘ１００ｍｌ）、飽和重炭酸ナトリウム水溶液（１ｘ１５０ｍｌ）、そして水（１ｘ１００ｍｌ）で洗浄した。有機溶液を脱色炭で処理し、濾過し、蒸発させてトシレート（１０７）７７ｇ（８６％）を油として得た。
【０１３０】
【化２０】
2004238398.tif 000031
【０１３１】
工程７
トシレート（１０７）（６５ｇ、０．１７５モル）をジメチルスルホキシド（４０ｍｌ）に溶解した。追加のジメチルスルホキシド（１０ｍｌ）と一緒にそのジメチルスルホキシド溶液を６３℃のジメチルスルホキシド（４５０ｇ）中のアジ化ナトリウム（１１ｇ、０．２６モル）の溶液に添加した。次いでその混合物を６５℃で６時間撹拌した。水（１４０ｍｌ）及びヘプタン（２５０ｍｌ）をその反応に添加し、層を分離した。水層をヘプタン（２５０ｍｌ）で抽出し、有機層を合わせた。溶媒を減圧で除去してアジド（１０８）４２ｇ（９５％）を油として得た。
【０１３２】
【化２１】
2004238398.tif 000032
【０１３３】
工程８
アジド（１０８）（３６．３ｇ、０．１５モル）を８８％のギ酸水溶液（３６５ｍｌ）に入れた。その混合物を３０。Ｃで４．５時間攪拌した。脱色炭を添加し、その混合物を濾過し、減圧で濃縮して油を得た。ヘプタン（２５０ｍｌ）を添加し、その混合物を減圧蒸留して油を得た。水（１２５ｍｌ）及びヘプタン（２５０ｍｌ）を添加し、激しく混合した。層を分離し、水層をヘプタン（２５０ｍｌ）で洗浄した。ヘプタン層を合わせ、減圧で濃縮して中間体アジド（１０８ａ）２４．６ｇ（８８％）を油として得た。
【０１３４】
また、加水分解を行うために、ギ酸水溶液ではなく塩酸水溶液を使用し得る。
【０１３５】
工程９
中間体アジド（１０８ａ）（１２．７ｇ、６８．６モル）をメチル−ｔ−ブチルエーテル（８０ｋｇ）に溶解した。その混合物を、中間体アジド（１０８ａ）が消費されるまで５％のパラジウム／カーボン（５０％の水で湿ったもの２．０ｋｇ）の存在下で４９−５５ｐｓｉの水素で接触水素化にかけた。その混合物を濾過し、固体をメチルーｔ−ブチルエーテル（３０ｋｇ）で洗浄した。固体を熱イソプロパノール（７５ｋｇ）及び水（６０ｋｇ）の溶液に溶解し、その溶液を濾過した。イソプロパノール水溶液を−３℃に冷却し、生成物を濾過し、冷イソプロパノール（１６ｋｇ）で洗浄した。固体を減圧で乾燥させてアミノ酸（１０９）６．４ｋｇ（５９％）を得た。
【０１３６】
この還元は種々の溶媒中で行い得る。成功した還元は、ヘプタン、エタノール／水、イソプロパノール、イソプロパノール／水、メタノール／水、及びテトラヒドロフラン／水並びにメチル−ｔ−ブチルエーテル中で行われた。
【０１３７】
本発明が例示様式で記載され、そして使用された技術は限定の用語ではなく説明の用語の性質であることが意図されていることが理解されるべきである。
【０１３８】
明らかに、本発明の多くの改良及び変化が上記の教示に鑑みて可能である。それ故、請求の範囲内において、参考数字は単に便宜上のものであり、限定のためではなく、本発明が明記された以外に実施し得ることが理解されるべきである。
【０１３９】
【化２２】
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【０１４０】
【化２３】
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【０１４１】
【化２４】
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