(57)【要約】【課題】加齢性黄班変性症、未熟児網膜症などの網膜および／またはブドウ膜疾患を効果的に予防または改善する薬剤を提供すること。【解決手段】トコトリエノール類を含有する、網膜及び／又はブドウ膜疾患の予防乃至治療用点眼薬。特に、トコトリエノール類が、α−トコトリエノール、β−トコトリエノール、γ−トコトリエノール及びδ−トコトリエノールからなる群から選ばれる少なくとも１種である、網膜及び／又はブドウ膜疾患の予防乃至治療用点眼薬。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
トコトリエノール類を含有する、網膜及び／又はブドウ膜疾患の予防乃至治療用点眼薬。
【請求項２】
トコトリエノール類が、α−トコトリエノール、β−トコトリエノール、γ−トコトリエノール及びδ−トコトリエノールからなる群から選ばれる少なくとも１種である請求項１記載の点眼薬。
【請求項３】
トコトリエノール類を、ミセル又はリポソーム懸濁液中に存在させて含有する請求項１記載の点眼薬。
【請求項４】
更に水溶性のビタミン類及び／又はメルカプト基含有化合物を含有する請求項１記載の点眼薬。
【請求項５】
水溶性のビタミン類がアスコルビン酸である請求項４記載の点眼薬。
【請求項６】
メルカプト基含有化合物がシステイン又はグルタチオンである請求項４記載の点眼薬。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、加齢性黄班変性症、未熟児網膜症などの網膜、ブドウ膜疾患を効果的に予防乃至治療する薬剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
網膜、ブドウ膜疾患には、加齢性黄斑変性症、糖尿病網膜症、未熟児網膜症、網膜動脈閉塞症、網膜静脈閉塞症、網膜色素変性症などの遺伝性網膜変性疾患、眼科手術顕微鏡の光源による術中黄斑障害、ブドウ膜炎などの眼内炎症性疾患がある。これらの網膜、ブドウ膜疾患に対しては、通常、薬物、レーザー、手術の組み合わせによる集学的治療が行われるが、しばしば難治であり、本邦における失明原因の主要疾患となっている。また、これらの網膜、ブドウ膜疾患は、いったん発症すると難治であるため、予防医学的見地から、疾患の予防あるいは進行遅延に効果があり、かつ、年余に渡る投与が可能な薬物あるいはその投与法の開発が望まれている。また、発症した際に薬物治療による方法を用いる場合、より少量で効果を発揮する薬物あるいは投与法の開発が、長期薬物投与による副作用の軽減にとって有効である。
【０００３】
これらの網膜、ブドウ膜疾患の発症あるいは増悪に、網膜組織での活性酸素種、フリーラジカルの生成亢進といった「酸化ストレス」が深く関わっていることが、種々のヒトあるいは実験モデルによる検討から示唆されている。たとえば、加齢性黄斑変性症、網膜色素変性症などの遺伝性網膜変性疾患、眼科手術顕微鏡の光源による術中黄斑障害では、その発症あるいは増悪に、慢性あるいは急性の光曝露が関与することが報告されている。即ち、網膜への光曝露は、１）光を感受するという網膜機能の亢進による酸素代謝の亢進と、その結果としての網膜細胞内での活性酸素種の過剰生成、２）網膜内に豊富に含まれるチトクローム、フラビン、レチノイドといった物質の光増感反応による網膜不飽和脂肪酸の過酸化反応がその病態の主因であると考えられている。一方、糖尿病網膜症では高血糖の持続によってひきおこされる網膜毛細血管障害に起因する虚血、未熟児網膜症では網膜血管の未発達に起因する虚血、網膜動脈閉塞症、網膜静脈閉塞症では網膜細動静脈の循環障害による虚血、ブドウ膜炎では、血管炎による循環障害が、網膜局所の病態として知られている。さらに、網膜、ブドウ膜における虚血あるいは低酸素状態は、種々の酸化酵素、アラキドン酸カスケードといった活性酸素種の発生源を活性化させることで、網膜に含まれる不飽和脂肪酸の過酸化を助長すると考えられている。
【０００４】
以上のように、網膜、ブドウ膜疾患では、細胞の脂質成分の過酸化反応とそれによる細胞機能低下が、組織障害の機構として重要であると考えられる。生体過酸化反応の予防薬としてビタミンＥは広く知られている。網膜、ブドウ膜疾患においてもビタミンＥによる疾病の予防、治療に有用である報告が多く、たとえば、ヒトの加齢性黄斑変性症では、ビタミンＥ（４００ＩＵ／日）の内服をビタミンＣ（５００ｍｇ／日）、βカロテン（１５ｍｇ／日）の内服と組み合わせることで、進行を遅延させることができた（非特許文献１）。また、ラットを用いた実験的糖尿病網膜症では、ビタミンＥを含む抗酸化剤の投与が網膜症の重症度を有意に低下させた（非特許文献２）。さらに、糖尿病患者では、ビタミンＥ（１８００ＩＵ／日）の全身投与が網膜血管の血流低下を有意に改善した（非特許文献３）。未熟児網膜症では、ビタミンＥの全身投与を、網膜冷凍凝固療法に組み合わせることで、有意に重症度を低下させることができた（非特許文献４）。網膜色素変性症患者では、ビタミンＥ（４００ｍｇ／日）の内服を、タウリン（１ｇ／日）、ジルチアゼム（３０ｍｇ／日）の内服と組み合わせることで、視野狭窄の進行を有意に遅延させることができた（非特許文献５）。
【０００５】
ラットを用いた実験的ブドウ膜炎では、ビタミンＥ欠乏により、著明な網膜障害が引き起こされるのに対し、ビタミンＥ投与により、網膜障害が抑制された（非特許文献６）。ヒトの急性前部ブドウ膜炎では、ビタミンＥ（２００ｍｇ／日）の内服をビタミンＣ（１ｇ／日）の内服と組み合わせることで、視力低下を抑制することができた（非特許文献７）。
【０００６】
ビタミンＥとして、トコフェロール類やトコトリエノール類が広く知られているが、以上のようにビタミンＥが網膜、ブドウ膜疾患に対して予防あるいは改善の効果を有することは明白である。
【０００７】
しかしながら、これらのいずれの方法も服薬としてビタミンＥを経口吸収することによって網膜、水晶体などの眼球局所へ取り込む方法であり、一日あたり数百ｍｇといった大量の投与が必要である。一方、眼球組織への効率的薬物吸収を目的として点眼による投与方法も試みられている。たとえば、ラット眼に対してリポソーム化α−トコフェロールを９週間投与することで、網膜内ビタミンＥ濃度を約１１％上昇させる報告があるが（非特許文献８）、投与が長期間である割には網膜内のトコフェロール上昇率は１１％と低い。
【０００８】
また、特許文献１によれば、白内障の遅延、治療用剤としてトコトリエノールが有効であるとの報告があるが、水晶体に着目した記載のみで、網膜、ブドウ膜疾患に関する記載はまったくない。
【０００９】
【特許文献１】
特開平９−１５７１６５号公報
【００１０】
【非特許文献１】
Ａ  ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ，  ｐｌａｃｅｂｏ−ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ，  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｔｒｉａｌ  ｏｆ  ｈｉｇｈ−ｄｏｓｅ  ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎ  ｗｉｔｈ  ｖｉｔａｍｉｎｓ  Ｃ  ａｎｄ  Ｅ，  ｂｅｔａ  ｃａｒｏｔｅｎｅ，  ａｎｄ  ｚｉｎｃ  ｆｏｒ  ａｇｅ−  ｒｅｌａｔｅｄ  ｍａｃｕｌａｒ  ｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｖｉｓｉｏｎ  ｌｏｓｓ：  ＡＲＥＤＳ  ｒｅｐｏｒｔ  ｎｏ．  ８．  Ａｒｃｈ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ  ２００１；１１９（１０）：１４１７−３６．
【００１１】
【非特許文献２】
Ｋｏｗｌｕｒｕ  ＲＡ，  Ｔａｎｇ  Ｊ，  Ｋｅｒｎ  ＴＳ．  Ａｂｎｏｒｍａｌｉｔｉｅｓ  ｏｆ  ｒｅｔｉｎａｌ  ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ｉｎ  ｄｉａｂｅｔｅｓ  ａｎｄ  ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ｇａｌａｃｔｏｓｅｍｉａ．  ＶＩＩ．  Ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ｌｏｎｇ−ｔｅｒｍ  ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｓ  ｏｎ  ｔｈｅ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  ｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ．  Ｄｉａｂｅｔｅｓ  ２００１；５０（８）：１９３８−４２．
【００１２】
【非特許文献３】
Ｂｕｒｓｅｌｌ  ＳＥ，  Ｃｌｅｒｍｏｎｔ  ＡＣ，  Ａｉｅｌｌｏ  ＬＰ，  Ａｉｅｌｌｏ  ＬＭ，  Ｓｃｈｌｏｓｓｍａｎ  ＤＫ，  Ｆｅｅｎｅｒ  ＥＰ，  Ｌａｆｆｅｌ  Ｌ，  Ｋｉｎｇ  ＧＬ．  Ｈｉｇｈ−ｄｏｓｅ  ｖｉｔａｍｉｎ  Ｅ  ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎ  ｎｏｒｍａｌｉｚｅｓ  ｒｅｔｉｎａｌ  ｂｌｏｏｄ  ｆｌｏｗ  ａｎｄ  ｃｒｅａｔｉｎｉｎｅ  ｃｌｅａｒａｎｃｅ  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｔｙｐｅ  １  ｄｉａｂｅｔｅｓ．  Ｄｉａｂｅｔｅｓ  Ｃａｒｅ  １９９９；２２（８）：１２４５−５１．
【００１３】
【非特許文献４】
Ｊｏｈｎｓｏｎ  Ｌ，  Ｑｕｉｎｎ  ＧＥ，  Ａｂｂａｓｉ  Ｓ，  Ｇｅｒｄｅｓ  Ｊ，  Ｂｏｗｅｎ  ＦＷ，  Ｂｈｕｔａｎｉ  Ｖ．  Ｓｅｖｅｒｅ  ｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ  ｏｆ  ｐｒｅｍａｔｕｒｉｔｙ  ｉｎ  ｉｎｆａｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｂｉｒｔｈ  ｗｅｉｇｈｔｓ  ｌｅｓｓ  ｔｈａｎ  １２５０  ｇｒａｍｓ：  ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ  ａｎｄ  ｏｕｔｃｏｍｅ  ｏｆ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｗｉｔｈ  ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃ  ｓｅｒｕｍ  ｌｅｖｅｌｓ  ｏｆ  ｖｉｔａｍｉｎ  Ｅ  ｉｎ  ａｄｄｉｔｉｏｎ  ｔｏ  ｃｒｙｏｔｈｅｒａｐｙ  ｆｒｏｍ  １９８５  ｔｏ  １９９１．  Ｊ  Ｐｅｄｉａｔｒ  １９９５；１２７（４）：６３２−９．
【００１４】
【非特許文献５】
Ｐａｓａｎｔｅｓ−Ｍｏｒａｌｅｓ  Ｈ，  Ｑｕｉｒｏｚ  Ｈ，  Ｑｕｅｓａｄａ  Ｏ．  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｗｉｔｈ  ｔａｕｒｉｎｅ，  ｄｉｌｔｉａｚｅｍ，  ａｎｄ  ｖｉｔａｍｉｎ  Ｅ  ｒｅｔａｒｄｓ  ｔｈｅ  ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｖｅ  ｖｉｓｕａｌ  ｆｉｅｌｄ  ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ  ｉｎ  ｒｅｔｉｎｉｔｉｓ  ｐｉｇｍｅｎｔｏｓａ：  ａ  ３−ｙｅａｒ  ｆｏｌｌｏｗ−ｕｐ  ｓｔｕｄｙ．  Ｍｅｔａｂ  Ｂｒａｉｎ  Ｄｉｓ  ２００２；１７（３）：１８３−９７．
【００１５】
【非特許文献６】
Ｃｉｄ  Ｌ，  Ｐａｒａｒａｊａｓｅｇａｒａｍ  Ｇ，  Ｓｅｖａｎｉａｎ  Ａ，  Ｇａｕｄｅｒｍａｎ  Ｗ，  Ｒｏｍｅｒｏ  ＪＬ，  Ｍａｒａｋ  ＧＥ，  Ｊｒ．，  Ｒａｏ  ＮＡ．  Ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ｖｉｔａｍｉｎ  Ｅ  ｏｎ  ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ｌｅｎｓ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｕｖｅｉｔｉｓ．  Ｉｎｔ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ  １９９２；１６（１）：２７−３２．
【００１６】
【非特許文献７】
ｖａｎ  Ｒｏｏｉｊ  Ｊ，  Ｓｃｈｗａｒｔｚｅｎｂｅｒｇ  ＳＧ，  Ｍｕｌｄｅｒ  ＰＧ，  Ｂａａｒｓｍａ  ＳＧ．  Ｏｒａｌ  ｖｉｔａｍｉｎｓ  Ｃ  ａｎｄ  Ｅ  ａｓ  ａｄｄｉｔｉｏｎａｌ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ａｃｕｔｅ  ａｎｔｅｒｉｏｒ  ｕｖｅｉｔｉｓ：  ａ  ｒａｎｄｏｍｉｓｅｄ  ｄｏｕｂｌｅ  ｍａｓｋｅｄ  ｓｔｕｄｙ  ｉｎ  １４５  ｐａｔｉｅｎｔｓ．  Ｂｒ  Ｊ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ  １９９９；８３（１１）：１２７７−８２．
【００１７】
【非特許文献８】
丹羽隆史、太田好次、山崎俊、馬嶋慶直、堀口正之、「ガラクトース投与ラットにおけるビタミンＥ点眼の白内障治療効果−網膜での酸化的ストレス抑制との関連性−」、あたらしい眼科、２０００；１７（６）：８８３−７．
【００１８】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の目的は、網膜及び／又はブドウ膜疾患、たとえば、加齢性黄斑変性症、糖尿病網膜症、未熟児網膜症、網膜動脈閉塞症、網膜静脈閉塞症、網膜色素変性症などの遺伝性網膜変性疾患、眼科手術顕微鏡の光源による術中黄斑障害、ブドウ膜炎などの眼内炎症性疾患に対して、少量の薬物投与によって眼球の疾患部位へ効率的に薬物を取り込ませる薬剤を提供することにある。
【００１９】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは上記課題を解決することを主な目的として鋭意検討を重ねた結果、網膜及び／又はブドウ膜の関連する疾患を予防乃至治療する際に、トコトリエノール類を含有する点眼薬を投与することによって少量の点眼量で効率的に網膜およびブドウ膜にトコトリエノール類が取り込まれることを見出し、更に鋭意検討を重ねて本発明を完成するに至った。
【００２０】
即ち、本発明は次の事項に係る。
【００２１】
１．トコトリエノール類を含有する、網膜及び／又はブドウ膜疾患の予防乃至治療用点眼薬。
【００２２】
２．トコトリエノール類が、α−トコトリエノール、β−トコトリエノール、γ−トコトリエノール及びδ−トコトリエノールからなる群から選ばれる少なくとも１種である項１記載の点眼薬。
【００２３】
３．トコトリエノール類を、ミセル又はリポソーム懸濁水溶液中に存在させて含有する項１記載の点眼薬。
【００２４】
４．更に水溶性のビタミン類及び／又はメルカプト基含有化合物を含有する項１記載の点眼薬。
【００２５】
５．水溶性のビタミン類がアスコルビン酸である項４記載の点眼薬。
【００２６】
６．メルカプト基含有化合物がシステイン又はグルタチオンである項４記載の点眼薬。
【００２７】
本発明は、トコトリエノール類を含有する網膜及び／又はブドウ膜疾患の予防乃至治療のための点眼薬である。特にトコトリエノール類がα−トコトリエノール、β−トコトリエノール、γ−トコトリエノール及び／又はδ−トコトリエノールである場合に優れた効果が期待できる。
【００２８】
【発明の実施の形態】
以下、本発明について詳細に説明する。
【００２９】
本発明に用いられるトコトリエノール類とは、α−トコトリエノール、β−トコトリエノール、γ−トコトリエノール及びδ−トコトリエノール（以下、それぞれα、β、γ又はδ型トコトリエノールともいう）、デスメチルトコトリエノール、ジデスメチルトコトリエノール、α、β、γ又はδ型トコトリエノールの酢酸エステル、α、β、γ又はδ型トコトリエノールのコハク酸エステル等である。
【００３０】
より詳しくは、α−トコトリエノールは下記一般式（化１）で表される化合物である。
【００３１】
【化１】
2004323486.tif 000002
【００３２】
（ここで、Ｒは下記一般式（化２）で表される構造を有する。）
【００３３】
【化２】
2004323486.tif 000003
【００３４】
また、β−トコトリエノールは下記一般式（化３）で表される化合物である。
【００３５】
【化３】
2004323486.tif 000004
【００３６】
（Ｒは上記と同じ。）
また、γ−トコトリエノールは下記一般式（化４）で表される化合物である。
【００３７】
【化４】
2004323486.tif 000005
【００３８】
（Ｒは上記と同じ。）
また、δ−トコトリエノールは下記一般式（化５）で表される化合物である。
【００３９】
【化５】
2004323486.tif 000006
【００４０】
（Ｒは上記と同じ。）
また、デスメチルトコトリエノールは下記一般式（化６）で表される化合物である。
【００４１】
【化６】
2004323486.tif 000007
【００４２】
（Ｒは上記と同じ。）
また、ジデスメチルトコトリエノールは下記一般式（化７）で表される化合物である。
【００４３】
【化７】
2004323486.tif 000008
【００４４】
（Ｒは上記と同じ。）
α、β、γ又はδ型トコトリエノール、デスメチルトコトリエノール、ジデスメチルトコトリエノールはパーム油、米糠等の植物油脂から常法に従い抽出、精製、濃縮を行って得ることができる。α、β、γ又はδ型トコトリエノールの酢酸エステルおよびα、β、γ又はδ型トコトリエノールのコハク酸エステルはα、β、γ又はδ型トコトリエノールから常法のエステル化法によって容易に合成することができる。
【００４５】
本発明の点眼薬に含有されるトコトリエノール類としては、上記各化合物を、純度が９９％以上の単一成分として用いても良く、混合物として用いても良い。
【００４６】
本発明のトコトリエノール類を含有した点眼薬の調製方法は特に制限されない。例えば、トコトリエノール類を、流動パラフィン、コーンオイルなどの脂溶性化合物又は脂溶性化合物および水からなるミセル懸濁液、或いはフォスファチジルコリン類から調製できるリポソーム懸濁液中に存在させて調製することができる。
【００４７】
トコトリエノール類をミセル懸濁液及び／又はリポソーム懸濁液に存在させて用いる場合には、水溶性のビタミン類および／またはメルカプト基含有化合物を同時に含有させることができ、トコトリエノール類と水溶性化合物との相乗的な効果により、より高い治療効果や生体過酸化反応に対する高い抑制効果が期待できる点で好ましい。水溶性の化合物である水溶性のビタミン類および／またはメルカプト基含有化合物と脂溶性のトコトリエノール類とが脂質と水相の界面で酸化還元反応をおこし、酸化抑制によって消費されたトコトリエノール（クロマノキシルラジカル）を水溶性化合物が還元してトコトリエノールを再生し、効果の持続及び／又は向上がみられる。
【００４８】
水溶性ビタミンとしてはアスコルビン酸、メルカプト基含有化合物としてはシステイン又はグルタチオンがより効果的な相乗効果が期待できる点で好ましい。
【００４９】
本発明の点眼薬には、トコトリエノール類とともに通常点眼薬に配合されている各種成分を添加することもできる。そのような成分としては、例えば、イプシロンアミノカプロン酸、マレイン酸クロルフェニラミン、アスパラギン酸カリウム、アラントイン、塩化ナトリウム、塩化カリウム、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、クエン酸、ホウ酸、マンニトールなどが挙げられる。
【００５０】
点眼薬におけるトコトリエノール類の配合割合は適宜設定することができる。通常トコトリエノール類が０．００１〜１００重量％、好ましくは０．０１〜１００重量％の割合で配合される。
【００５１】
また、点眼薬のｐＨも適宜設定し得る。水懸濁液で投与する場合には４〜９の範囲にあることが好ましく、より好ましくは６〜８である。
【００５２】
点眼薬の投与量も特に限定されないが、一回の点眼投与においてトコトリエノール類が０．００１〜１０ｍｇを投与される量とすることが好ましい。
【００５３】
また、投与回数も特に限定されないが一日あたり１〜１０回程度が好ましい。
【００５４】
【実施例】
以下、実施例及び比較例をあげて本発明をより具体的に説明するが、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。
【００５５】
実施例及び比較例において、高速液体クロマトグラフィーによるビタミンＥ類の分析は、カラムとしてＯＤＳカラムを移動相として５０ｍＭの過塩素酸ナトリウムを含有したｔ−ブチルアルコール／メタノール（５／９５、体積比）を用い、電気化学的分析法によって行った。また、眼球は摘出後、角膜、水晶体、虹彩、神経網膜、眼杯（網膜色素上皮細胞、ブドウ膜の主要部分である脈絡膜と毛様体、強膜を含む）の各組織に分画し、分析に供した。
【００５６】
実施例１
１２週齢Ｗｉｓｔａｒ系雄性ラットの両眼へα−トコトリエノールをそれぞれ２．０２ｍｇ無麻酔状態で添加した。２４時間後、ラットおよびその眼球の状態を目視によって異常のない事を確認し再度両眼へα−トコトリエノールをそれぞれ２．０２ｍｇ無麻酔状態で添加した。４日間同様な目視による確認および点眼を行った後、２４時間経過した時点でラットから眼球の摘出を行い、その眼球を角膜、水晶体、虹彩、神経網膜、眼杯の各組織に分画した。それぞれの組織画分に約１０倍（重量／体積比）のリン酸−塩化ナトリウム緩衝液を加え、物理的接触によって十分に細片化した。細片化したホモジネート液に３倍溶液量のクロロホルム／メタノール（２／１、体積比）混合液を添加して激しく攪拌した後、遠心法によって分液しクロロホルム層を高速液体クロマトグラフィーによる分析へ供した。
【００５７】
両眼の各組織画分におけるα−トコトリエノールの組織重量あたりの含有量（ｎｍｏｌ／ｇ）は、角膜、水晶体、虹彩、神経網膜、眼杯に対してそれぞれ右眼１．１７／左眼２．４４、右眼０．０８／左眼０．３０、右眼４．０９／左眼６．５１、右眼１．９６／左眼２．１４、右眼０．１８／左眼０．３２であった。
【００５８】
実施例２
ラットの個体差を判定するため、実施例１と全く同様に、異なるラットを用いてα−トコトリエノールの取り込みを検討した。
【００５９】
両眼の各組織画分におけるα−トコトリエノールの組織重量あたりの含有量（ｎｍｏｌ／ｇ）は、角膜、水晶体、虹彩、神経網膜、眼杯に対してそれぞれ右眼１．２６／左眼０．６５、右眼０．０８／左眼０．０６、右眼５．２０／左眼６．２６、右眼２．１９／左眼１．５６、右眼０．３８／左眼０．１６であった。
【００６０】
個体差の影響は少なく、各組織へα−トコトリエノールが取り込まれることがわかった。
【００６１】
比較例１
α−トコトリエノールを添加しないこと以外は、実施例１とまったく同様に飼育したラットについて、眼球を角膜、水晶体、虹彩、神経網膜、眼杯の各組織に分画した。実施例１と全く同様の操作によって各組織のα−トコフェロールおよびα−トコトリエノール量を測定した。
【００６２】
両眼の各組織画分におけるα−トコフェロールおよびα−トコトリエノールの組織重量あたりの含有量（ｎｍｏｌ／ｇ）は、角膜、水晶体、虹彩、神経網膜、眼杯に対してそれぞれα−トコフェロールは右眼３．７６／左眼２．７０、右眼０．５０／左眼０．４８、右眼３２．８／左眼４０．１、右眼４４．３／左眼５０．５、右眼０．５０／左眼０．５２であり、α−トコトリエノールは網膜で右眼０．１０／左眼０．１２と検出されたが、その他はいずれの組織も検出限界以下であった。
【００６３】
実施例１と比較例１の数値を比較した結果から、α−トコトリエノールは、点眼によって、眼球の表面だけでなく、眼球後部の神経網膜、眼杯まで取り込まれることがわかった。
【００６４】
比較例２
ラットの個体差を判定するため、比較例１と全く同様に、異なるラットを用いて無点眼での各組織におけるα−トコフェロールおよびα−トコトリエノール量を測定した。
【００６５】
両眼の各組織画分におけるα−トコフェロールおよびα−トコトリエノールの組織重量あたりの含有量（ｎｍｏｌ／ｇ）は、角膜、水晶体、虹彩、神経網膜、眼杯に対してそれぞれα−トコフェロールは右眼４．９３／左眼２．７３、右眼０．４９／左眼０．４６、右眼３８．４／左眼３４．０、右眼４９．５／左眼４８．２、右眼０．６２／左眼０．６９であり、α−トコトリエノールは神経網膜で右眼０．１６／左眼０．０９と検出されたが、その他はいずれの組織も検出限界以下であった。
【００６６】
比較例３
実施例１において、α−トコトリエノールの代わりにα−トコフェロールを用いた事以外は全く同様に眼球各組織のα−トコフェロール量を測定した。
【００６７】
両眼の各組織画分におけるα−トコフェロールの組織重量あたりの含有量（ｎｍｏｌ／ｇ）は、角膜、水晶体、虹彩、神経網膜、眼杯に対してそれぞれ右眼１．７３／左眼５．５６、右眼０．４２／左眼０．３６、右眼３３．４／左眼２２．６、右眼４０．２／左眼３６．７、右眼０．８３／左眼１．２３であった。
【００６８】
α−トコフェロールの点眼によっては各組織のα−トコフェロール量は影響を受けず、点眼によってα−トコフェロールが眼球組織へ取り込まれることはほとんどないことがわかった。
【００６９】
比較例４
ラットの個体差を判定するため、比較例３と全く同様に、異なるラットを用いてα−トコフェロールの眼球各組織への取り込みを検討した。
【００７０】
両眼の各組織画分におけるα−トコフェロールの組織重量あたりの含有量（ｎｍｏｌ／ｇ）は、角膜、水晶体、虹彩、神経網膜、眼杯に対してそれぞれ右眼３．９８／左眼３．７８、右眼０．４４／左眼０．５６、右眼３５．６／左眼５１．１、右眼３１．９／左眼３９．２、右眼０．６９／左眼０．８６であった。
【００７１】
トコトリエノール類の眼球各組織への取り込みを明確にするために、無点眼の場合と対比して表１に示した。表１において、α−トコトリエノール点眼の値は、実施例１及び２の各組織におけるα−トコトリエノール量の平均値を示す。また、無点眼の値は比較例１及び２の各組織におけるα−トコトリエノール量の平均値を示す。
【００７２】
【表１】
2004323486.tif 000009
【００７３】
ＮＤは定量限界（０．０１ｎｍｏｌ／ｇ）以下を示す。
【００７４】
また、比較のため、トコフェロール点眼の場合についても無点眼の場合と対比して表２に示した。表２において、α−トコフェロール点眼の値は、比較例３及び４の各組織におけるα−トコフェロール量の平均値を示す。また無点眼の値は、比較例１及び２における各組織のα−トコフェロール量の平均値を示す。
【００７５】
【表２】
2004323486.tif 000010
【００７６】
表１及び２の結果から明らかなように、α−トコトリエノールは、点眼によって、有意に眼球各組織へα−トコトリエノールが取り込まれることがわかった。
【００７７】
これに対して、α−トコフェロールは点眼による各組織への取り込みはほとんど認められなかった。トコフェロールは、もともと眼球中に存在するため、引き算するとマイナスになるものもあるが、すべての組織において、トコトリエノール類の上昇に比べて低い値となった。
【００７８】
このように、α−トコトリエノールが、眼球表面だけでなく、目の奥の組織に有意に取り込まれること、特に虹彩、網膜、眼杯などの網膜及び／ブドウ膜疾患に関わる組織において有意に取り込まれることが明らかとなった。
【００７９】
実施例３
トコトリエノール類として、α−トコトリエノールを用いて以下のように、点眼薬を調製した。フォスファチジルコリンを用いて調製したリポソーム懸濁液３ｇに、α−トコトリエノール０．５ｇを加えて加温溶解した。これにクエン酸１．３ｇ、アスコルビン酸０．２ｇ、グルタチオン０．３ｇ、プロピレングリコール５ｇを混合し、精製水で全量を１０００ｍｌ（ｐＨ＝６．０）とし、無菌ろ過して、点眼容器に充填して、点眼薬を調製した。
【００８０】
実施例４
トコトリエノール類として、γ−トコトリエノールを用いて以下のように、点眼薬を調製した。流動パラフィンと水から調製したミセル懸濁液３ｇに、γ−トコトリエノール０．６ｇを加えて加温溶解した。これにマレイン酸クロルフェニラミン０．２ｇ、アスコルビン酸０．１ｇ、システイン０．４ｇ、ポリエチレングリコール５ｇを混合し、精製水で全量を１０００ｍｌ（ｐＨ＝７．４）とし、無菌ろ過して、点眼容器に充填して、点眼剤を調製した。
【００８１】
【発明の効果】
本発明の点眼薬によれば、トコトリエノール類が、網膜及びブドウ膜に有意に到達する。トコトリエノール類は、網膜及び／又はブドウ膜の予防乃至治療に有効とされる成分であって、本発明により、該疾患の予防乃至治療に対する優れた効果が奏され得る。また従来、水晶体より奥に存在する組織への有効成分への取り込みは経口投与により行われていたのに対し、本発明によれば点眼により有効成分を取り込むことができ、これにより、生体内での分解による損失の抑制や、投与手段としての利便性の向上などの効果も奏される。
【００８２】
このように、本願発明は、網膜及び／又はブドウ膜疾患の予防乃至治療において優れた技術手段を提供するものである。