(57)【要約】【課題】カンキツから機能性成分のポリメトキシフラボン高含有組成物の製造方法及びその用途を提供する。【解決手段】カンキツ搾汁工場から出る副産物を原料として、吸着剤を用いた吸着及び選択的分離の１段工程により、ポリメトキシフラボン高含有組成物を製造する方法であって、カンキツ果汁製造工程で出る搾汁粕に消石灰を加えた後プレスして得られるピールジュース又はそれを濃縮した糖蜜等を原料として、これを吸着剤に吸着させ、水による洗浄と、アルコール濃度２５〜５０％の含水アルコール洗浄により不純物を除去し、高濃度アルコール溶出液による目的化合物の溶出により、ポリメトキシフラボンを選択的に分離し、ポリメトキシフラボン高含有組成物を調製することからなるポリメトキシフラボン高含有組成物の製造方法、及び該組成物を配合した食品。【選択図】        なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
カンキツ果汁製造工程から出る副産物を原料として、該原料中のカンキツ機能性成分のポリメトキシフラボンを吸着剤を用いた吸着及び選択的分離の１段工程により処理して、少なくともポリメトキシフラボン含有量１０％以上のポリメトキシフラボン高含有組成物を製造することを特徴とするカンキツ機能性成分高含有組成物の製造方法。
【請求項２】
原料として、カンキツ果汁製造工程から出る副産物の搾汁粕に消石灰を加えた後、プレスして得られるピールジュースあるいはそれを濃縮した糖蜜、又は果皮に消石灰を加えた後、プレスして得られる水溶液あるいはその濃縮物を用いる、請求項１に記載の製造方法。
【請求項３】
吸着剤として、吸着樹脂、ポリアミド、イオン交換樹脂、活性炭などの有機系吸着剤、又はオクタデシル基などで化学修飾したシリカゲルなどの官能基を導入した無機系吸着剤を用いる、請求項１に記載の製造方法。
【請求項４】
原料中のポリメトキシフラボンを吸着剤に吸着させ、水による洗浄と、含水アルコール洗浄による不純物の除去、及びアルコール溶出液による目的化合物の溶出により、ポリメトキシフラボンを選択的に分離する、請求項１に記載の製造方法。
【請求項５】
カンキツ果汁製造工程から出る搾汁粕に消石灰を加えた後、プレスして得られるピールジュースあるいはそれを濃縮した糖蜜を原料として、該原料中のカンキツ機能性成分のポリメトキシフラボンを吸着剤に吸着させ、上記吸着剤を水で洗浄し、アルコール濃度２５〜５０％の含水アルコール洗浄により不純物を除去し、８０〜１００％アルコール溶出液により目的化合物を溶出し、ポリメトキシフラボンを選択的に分離することによりポリメトキシフラボン高含有組成物を製造する、請求項１に記載の製造方法。
【請求項６】
請求項１から５のいずれかに記載の方法で製造したポリメトキシフラボン高含有組成物を、そのままあるいは適当な溶媒による溶液として、食品に配合したことを特徴とするポリメトキシフラボン高含有食品。
【請求項７】
次の工程；
（１）カンキツ果実を搾汁処理して、果汁及び搾汁粕に分離する工程、
（２）上記果汁からパルプを除去する工程、
（３）上記搾汁粕に消石灰を加えた後、プレスしてピールジュースあるいはそれを濃縮した糖蜜を調製する工程、
（４）上記ピールジュース又は糖蜜を原料として、該原料中のカンキツ機能性成分のポリメトキシフラボンを吸着剤に吸着させ、水による洗浄と、アルコール濃度２５〜５０％の含水アルコール洗浄による不純物の除去、及び８０〜１００％アルコール溶出液による目的化合物の溶出により、ポリメトキシフラボンを選択的に分離し、ポリメトキシフラボン高含有組成物を調製する工程、及び、
（５）上記パルプを除去した果汁に、上記ポリメトキシフラボン高含有組成物を所定の濃度で配合する工程、
からなることを特徴とするポリメトキシフラボン高含有果汁の製造方法。
【請求項８】
請求項７に記載の方法で製造された、カンキツ機能性成分のポリメトキシフラボンを所定の濃度で配合してなるポリメトキシフラボン高含有果汁。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、カンキツ機能性成分のポリメトキシフラボン高含有組成物の製造方法に関するものであり、更に詳しくは、カンキツ果汁製造工程から出る副産物であるピールジュースあるいはそれを濃縮した糖蜜を原料として、該原料中のカンキツ機能性成分のポリメトキシフラボンを吸着剤を用いた吸着及び選択的分離の１段工程により、少なくともポリメトキシフラボン含有量１０％以上のポリメトキシフラボン高含有組成物を効率よく量産することを可能とする上記カンキツ機能性成分高含有組成物の製造方法、及び該カンキツ機能性成分高含有組成物を配合したポリメトキシフラボン高含有食品に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
一般に、カンキツ特有のフラボノイド成分であるポリメトキシフラボンは、発ガン予防効果、血糖値抑制、血圧抑制、抗潰瘍性等の種々の機能性を有することから、例えば、食品への成分強化、食品添加物，医薬品等の多方面への応用が期待されており、近年、その需要が高まっている。しかし、上記成分の既存の分離、精製法は、大量のカンキツ果皮からの抽出操作が必要であり、未だそれらの工業的な製造は、実用化されていない。
【０００３】
従来、先行文献において、カンキツのポリメトキシフラボンに関するいくつかの研究報告がなされている。例えば、先行技術文献には、ノビレチンのエタノール潰瘍を抑制する効果を利用した抗潰瘍剤（特許文献１）、ポリメトキシフラボンの酸味や塩味を緩和し、食品本来のこく味、うま味、風味を増強する作用を利用した呈味改善剤とその方法（特許文献２）、ポリメトキシフラボンの食品の香味劣化を抑制する効果を利用した食品あるいは口腔衛生剤（特許文献３）、ポリメトキシフラボンがリュウマチ等の関節疾患に有効なことを利用した薬剤（特許文献４）、ポリメトキシフラボンの血圧及び血糖値の上昇を抑制する作用を利用した薬剤及び機能性食品（特許文献５）、システィニル誘導体にポリメトキシフラボン等の抗酸化成分を添加することにより安定化された抗炎症剤（特許文献６）、ポリメトキシフラボンを添加してなる美白効果、保湿効果、しわ抑制効果等を持った化粧組成物（特許文献７）、及びポリメトキシフラボンの神経細胞を活性化する作用を利用した痴呆等の脳神経障害を改善する薬剤（特許文献８）、等が提案されている。
【０００４】
しかしながら、これらの先行技術は、いずれも、成分の医薬品、食品添加物、化粧品、機能性食品等としての用途に関するものであり、また、カンキツ機能性成分の製造法については、例えば、上記特許文献７には、カンキツからの精製法として、原料としては果皮を用い、これからアルコール等の有機溶媒で成分を抽出し、その後の数段階の精製工程を経て目的成分を分離する方法が記載されている。即ち、ポリメトキシフラボンの分離には、一般に、果皮等の固形物から有機溶媒で抽出液を採取し、シリカゲル等によるカラム処理を数段階経てその純度を上げて行くことにより上記化合物を単離する方法が用いられている。
【０００５】
しかしながら、上記従来法による化合物の抽出では、化合物の単離、精製を目的としているために、大量の有機溶媒を必要とし、更に、複数のカラム処理が必要であり、その操作がきわめて煩雑である。一例を挙げると、先行技術文献では、未熟ミカン乾燥果皮を９０％エタノールで抽出し、固形物をろ過で除き、ろ液を減圧濃縮した後、濃縮物を水と酢酸エチルで分配し、酢酸エチル層を分離、減圧濃縮し、粗抽出物を得て、これをシリカゲルクロマトグラフィーで分離後、分取ＨＰＬＣにより分画物を得て、濃縮乾固後、ジエチルエーテルで結晶化してノビレチンとタンゲレチンを単離する方法が提案されている（特許文献８）。しかし、この種の方法は、医薬用途等を目的としてポリメトキシフラボンの単離、精製品を得ることを技術的課題としたものであり、また、従来法では、食品衛生法で使うことのできない溶媒等を使用することから、これを技術分野が異なるカンキツ果汁製造工程等の食品製造ラインにそのまま適用することはできない。
【０００６】
【特許文献１】
特開平０６−０７２８７０号公報
【特許文献２】
特開平０６−３３５３６２号公報
【特許文献３】
特開平１１−１６９１４８号公報
【特許文献４】
特開２０００−０８００３５号公報
【特許文献５】
特開２００１−２４０５３９号公報
【特許文献６】
特表２００１−５２４０８７号公報
【特許文献７】
特開２００２−００３３６３号公報
【特許文献８】
特開２００２−０６０３４０号公報
【０００７】
このように、従来、ポリメトキシフラボンの分離法として、一般に、果皮等の固形物から有機溶媒で処理してその抽出液を採取し、シリカゲル等によるカラム処理を数段階経てその純度を上げて行く方法が用いられている。しかし、この種の方法は、医薬用途等を目的としてポリメトキシフラボンの単離、精製品を得ることを目的としたものであり、前述のように、大量の有機溶媒を必要とし、更に、複数のカラム処理が必要であり、その操作が煩雑であり、これらの方法は、技術分野が異なるカンキツ果汁製造工程等には適用し得ない、という問題を有しており、当該技術分野においては、上記問題を解消すると共に、カンキツ果汁製造工程等に適用することが可能な新しい上記カンキツ機能性成分の製造方法の開発が要請されていた。
【０００８】
【発明が解決しようとする課題】
このような状況の中で、本発明者らは、上記従来技術に鑑みて、上記従来技術の諸問題を抜本的に解決すると共に、カンキツ果汁製造工程等に適用することが可能な新しいカンキツ機能性成分の製造方法を開発することを目標として鋭意研究を積み重ねた結果、原料として、カンキツ果汁製造時の副産物であり、水溶液となっているピールジュースあるいは糖蜜を用いることにより、最初の抽出のための大量の有機溶媒を必要とすることなく、しかも、吸着剤を用いた吸着及び選択的分離の１段工程により、少なくともポリメトキシフラボン含有量１０％以上のポリメトキシフラボン高含有組成物が得られること、及びこの組成物が例えば食品配合用ポリメトキシフラボン高含有組成物として使用できることを見出し、本発明を完成するに至った。
即ち、本発明は、カンキツ果汁製造時の副産物であるピールジュース又は糖蜜を原料として、吸着剤を用いた吸着及び選択的分離の１段工程により、少なくともカンキツ機能性成分のポリメトキシフラボン含有量１０％以上のポリメトキシフラボン高含有組成物を製造する方法を提供することを目的とするものである。
また、本発明は、大量の有機溶媒を用いることなく、しかも、簡易な操作で、カンキツ機能性成分のポリメトキシフラボンを選択的に分離する方法を提供することを目的とするものである。
更に、本発明は、上記ポリメトキシフラボン高含有組成物を食品配合用組成物として食品に配合したポリメトキシフラボン高含有食品を提供することを目的とするものである。
【０００９】
【課題を解決するための手段】
上記課題を解決するための本発明は、（１）カンキツ果汁製造工程から出る副産物を原料として、該原料中のカンキツ機能性成分のポリメトキシフラボンを吸着剤を用いた吸着及び選択的分離の１段工程により処理して、少なくともポリメトキシフラボン含有量１０％以上のポリメトキシフラボン高含有組成物を製造することを特徴とするカンキツ機能性成分高含有組成物の製造方法、である。
また、本発明は、（２）原料として、カンキツ果汁製造工程から出る副産物の搾汁粕に消石灰を加えた後、プレスして得られるピールジュースあるいはそれを濃縮した糖蜜、又は果皮に消石灰を加えた後、プレスして得られる水溶液あるいはその濃縮物を用いる前記（１）記載の製造方法、（３）吸着剤として、吸着樹脂、ポリアミド、イオン交換樹脂、活性炭などの有機系吸着剤、又はオクタデシル基などで化学修飾したシリカゲルなどの官能基を導入した無機系吸着剤を用いる前記（１）記載の製造方法、（４）原料中のポリメトキシフラボンを吸着剤に吸着させ、水による洗浄と、含水アルコール洗浄による不純物の除去、及びアルコール溶出液による目的化合物の溶出により、ポリメトキシフラボンを選択的に分離する前記（１）記載の製造方法、（５）カンキツ果汁製造工程で出る搾汁粕に消石灰を加えた後、プレスして得られるピールジュースあるいはそれを濃縮した糖蜜を原料として、該原料中のカンキツ機能性成分のポリメトキシフラボンを吸着剤に吸着させ、上記吸着剤を水で洗浄し、アルコール濃度２５〜５０％の含水アルコール洗浄により不純物を除去し、８０〜１００％アルコール溶出液により目的化合物を溶出し、ポリメトキシフラボンを選択的に分離することによりポリメトキシフラボン高含有組成物を製造する前記（１）記載の製造方法、を好ましい実施態様とするものである。
また、本発明は、（６）前記（１）から（５）のいずれかに記載の方法で製造したポリメトキシフラボン高含有組成物を、そのままあるいは適当な溶媒による溶液として、食品に配合したことを特徴とするポリメトキシフラボン高含有食品、である。
また、本発明は、（７）次の工程；（ａ）カンキツ果実を搾汁処理して、果汁及び搾汁粕に分離する工程、（ｂ）上記果汁からパルプを除去する工程、（ｃ）上記搾汁粕に消石灰を加えた後、プレスしてピールジュースあるいはそれを濃縮した糖蜜を調製する工程、（ｄ）上記ピールジュース又は糖蜜を原料として、該原料中のカンキツ機能性成分のポリメトキシフラボンを吸着剤に吸着させ、水による洗浄と、アルコール濃度２５〜５０％の含水アルコール洗浄による不純物の除去、及び８０〜１００％アルコール溶出液による目的化合物の溶出により、ポリメトキシフラボンを選択的に分離し、ポリメトキシフラボン高含有組成物を調製する工程、及び、（ｅ）上記パルプを除去した果汁に、上記ポリメトキシフラボン高含有組成物を所定の濃度で配合する工程、からなることを特徴とするポリメトキシフラボン高含有果汁の製造方法、である。
更に、本発明は、（８）前記（７）に記載の方法で製造された、カンキツ機能性成分のポリメトキシフラボンを所定の濃度で配合してなるポリメトキシフラボン高含有果汁、を好ましい実施態様とするものである。
【００１０】
【発明の実施の形態】
次に、本発明について更に詳細に説明する。
本発明の方法では、原料として、カンキツ果汁製造時の副産物であるピールジュースあるいはそれを濃縮した糖蜜、又は果皮に消石灰を加えた後、プレスして得られる水溶液あるいはその濃縮物が用いられる。これらは、水溶液であるため、抽出操作が不要であり、これらの原料を使用することにより、従来法のように大量の有機溶媒を使用する必要がない。また、上記ピールジュースあるいは糖蜜の原料は、ポリメトキシフラボンを果皮を主体とした搾汁粕の５０％程度の含有量で含んでいる。本発明においては、好適には、例えば、ミカン、イヨカンのピールジュース等が用いられるが、これらに制限されるものではなく、これらと同効のものであれば同様に使用することが可能であり、例えば、オレンジ類、ポンカン、シークワシャー、キング、日向夏、夏ミカン、ハッサク、レモン、ライム等のピールジュース等も用いられる。
【００１１】
原料としては、好適には、搾汁シーズン中であれば、ポリメトキシフラボン含量もやや高く、そのまま使用できるピールジュースが適している。本発明において、ピールジュースとは、搾汁粕に消石灰を、例えば、０．３％程度加えて混合した後、専用の脱水機でプレスして得られる水分９０％程度の液を意味する。また、糖蜜とは、このピールジュースを５〜６倍に濃縮したものであり、モラセスとも呼ばれる。一方、シーズンオフでは、濃縮した物を再び水で薄めるデメリットはあるものの、原料の保管性、貯蔵性に優れる糖蜜が適している。また、カンキツの缶詰製造等の加工副産物である果皮に消石灰と水を添加して破砕混合し、脱水機でプレスして得られる水溶液もピールジュースと同様に原料として使用することができる。
【００１２】
本発明では、まず、原料を吸着剤を充填したカラムに通した後、水による洗浄で糖類やクエン酸、無機塩等のイオン性成分を除去する。この場合、吸着剤として、例えば、吸着樹脂（ポーラスポリマービーズ、合成吸着剤とも呼ばれる）、ポリアミド、イオン交換樹脂、活性炭などの有機系吸着剤、又はオクタデシル基などで化学修飾したシリカゲルなどの官能基を導入した無機系吸着剤が使用されるが、これらに制限されない。これらのうち、特に、安価で目的化合物の回収率の高い吸着樹脂を使用することが好ましい。この水による洗浄により不純物の８０％以上を除くことができる。次に、含水アルコールで洗浄することによりフラボノイド配糖体等の吸着不純物を除去する。この含水アルコールによる洗浄により不純物量を１／１０〜１／２０に減少でき、着色物質も大部分除去できる。特に、上記含水アルコールのアルコール濃度は、目的化合物の溶出が全くない２５〜５０％の範囲が好ましい。また、用いるアルコールとしては、安全性の高いエタノールが好ましい。この含水アルコール洗浄を行わず、水洗後直接１００％アルコールで溶出すると、残存する吸着不純物のため総ポリメトキシフラボンの純度は１％程度の非常に低い値となってしまう。最後に、８０〜１００％の高濃度アルコール溶出液で溶出することでポリメトキシフラボンを選択的に分離することができ、これにより、総ポリメトキシフラボン量を約３００倍、純度２０％程度まで濃縮することが可能となる。上記アルコール溶出液のアルコール濃度は、溶出率の最も高い１００％が好ましい。なお、含水アルコール洗浄液には、フラボノイド配糖体やリモノイド配糖体などの有用な機能性成分が含まれており、任意に、適宜の分離手段により、これらの成分を回収、精製することも可能である。
【００１３】
図１に、本発明のカンキツ機能性成分高含有組成物を果汁に配合した機能性成分強化果汁の製造工程を示す。従来法では、カンキツ果実を搾汁処理して、果汁及び搾汁粕に分離し、上記果汁からパルプを除去し、均質化して果汁を製造し、一方、上記搾汁粕に消石灰を加えた後、プレスしてピールジュースを得て、これを濃縮して糖蜜を調製している。しかし、従来、上記ピールジュース等からカンキツ機能性成分高含有組成物を製造した例はなく、また、ポリメトキシフラボン高含有果汁を製造した例もない。一般に、上記従来法で成分強化果汁を製造するには、上記果汁に外来の強化成分を添加剤として添加配合し、強化する方法が採られていた。本発明は、カンキツ果実由来の機能性成分を吸着剤を用いた吸着及び選択的分離の１段工程で選択的に分離する方法を用いることにより、食品配合用カンキツ機能性成分高含有組成物を製造することを可能とし、該組成物を利用することにより、外来の強化成分を使用することなく、ポリメトキシフラボン高含有果汁を製造することを可能としたものである。
【００１４】
果汁等の食品への成分配合については、この濃縮物のポリメトキシフラボン高含有組成物を、そのままあるいは適当な溶媒による溶液として、食品に有効に添加することが可能であり、更なる精製は不要である。例えば、温州ミカンのピールジュースから得られた濃縮物のポリメトキシフラボン高含有組成物を３０％の濃度になるようにエタノールに溶かし、これを温州ミカン果汁に０．２％添加するだけでポリメトキシフラボンを１０倍強化することが可能となる。この場合、上記食品の種類は特に制限されるものではなく、適宜の食品に添加することが可能である。原料は、果汁工場の副産物であり、また、吸着樹脂によるカラム処理は果汁工場で一般に中晩柑の脱苦味に用いられる既存設備であり、そのまま流用することが可能であり、本発明の方法により、工業的な大量処理が可能である。
本発明の方法により、一般式（Ｉ）
【００１５】
【化１】
2004210682.tif 000002
【００１６】
（式中、Ｒ１、Ｒ２は、メトキシル基、水酸基又は水素原子を、Ｒ３〜Ｒ８は、メトキシル基又は水素原子を示す。）で表されるポリメトキシフラボンの含有量が少なくとも１０％以上のポリメトキシフラボン高含有組成物を製造することができる。本発明において、ポリメトキシフラボン高含有組成物とは、上記化１のポリメトキシフラボンを純度１０〜２０％程度、好適には、１５〜２０％程度の範囲で含む組成物を意味する。表１に、本発明方法により得られる代表的なポリメトキシフラボンの化学構造の一例についての記載を示す。
【００１７】
【表１】
2004210682.tif 000003
【００１８】
本発明は、果汁製造の副産物を原料とし、簡便、かつ効率的にポリメトキシフラボン高含有組成物の工業規模での製造を可能とするものであり、カンキツ加工業をはじめとする食品分野等に幅広い利用が見込まれる。また、原料の糖蜜は、発酵原料として販売される場合もあるが、廃棄物として処理されることが多い。本発明は、この糖蜜の有効利用を図ることができ、かつ既存設備の利用が可能であることから、国内のカンキツ加工業界への技術移転が容易であり、カンキツ産業の活性化に資することが期待できる。更に、本発明の方法は、用いる吸着剤、エタノールともに食品衛生法で使用が認められており、果汁をはじめとする食品への応用が容易である。
【００１９】
本発明の方法を適用することにより、カンキツ果汁製造工程の副産物からポリメトキシフラボンを１段工程で効率的に純度２０％程度まで濃縮することが可能となり、従来法のように大量の有機溶媒を用いた抽出操作を必要とせず、目的組成物を工業的規模で簡易に製造することが可能となる。本発明の方法は、吸着剤を用いた、カンキツ機能性成分のポリメトキシフラボン成分の吸着及び選択的分離の１段工程によって、水による洗浄及びアルコール濃度２５〜５０％の含水アルコール洗浄により、目的化合物を全く溶出させることなく、不純物を除去し、続く８０〜１００％の高濃度アルコール溶出液による目的化合物の溶出により、ポリメトキシフラボンを選択的に分離し、純度２０％程度の目的化合物を含むカンキツ機能性成分高含有組成物を製造することを可能とするものである。本発明の方法は、従来法のような、多段のカラム処理と大量の有機溶媒の使用が不要であり、しかも、処理操作が簡便であるが、これらは、上記特定の構成を有機的に組み合わせてはじめて可能となったものであり、これらは、従来の通常の分離、精製方法からは全く予期し得ないものである。
【００２０】
本発明の方法は、上記方法をカンキツ果汁製造工程に一体的に組み込むことが可能であり、これにより、機能性成分強化果汁の製造システムを構築することができる。本発明の方法は、多段の処理工程を経て化学物質としてのポリメトキシフラボンを単離することを目的とする従来の分離・精製法とは異なり、上記カンキツ果汁製造工程に組み込むことが可能なカンキツ機能性成分高含有組成物の製造工程を開発することを目的とするものである。本発明は、多段階の分離プロセスではなく、カンキツ機能性成分のポリメトキシフラボンを吸着剤を用いた、吸着及び選択的分離の１段工程により処理して、少なくともポリメトキシフラボン含有量１０％以上のポリメトキシフラボン高含有組成物の製造システムを実現するものである点で、従来の分離・精製法と明確に区別される技術的特徴を有するものである。
【００２１】
【実施例】
次に、実施例に基づいて本発明を具体的に説明するが、本発明は、以下の実施例によって何ら限定されるものではない。
参考例１
（副産物中のポリメトキシフラボン濃度の分析）
ポリメトキシフラボンは、カンキツの果皮に多く含まれ、それ以外の部位にはほとんど含まれていない。そこで、ジュース工場での温州ミカンとイヨカンの副産物中のポリメトキシフラボン濃度について分析を行った。まず、ポリメトキシフラボンの抽出は、溶媒として、メタノール／ジメチルスルフォキシド（ＤＭＳＯ）の１：１混液を用いて次のように行った。搾汁粕については、０．５ｇに抽出溶媒１０ｍｌを加えて均質化し、超音波処理による抽出後、５ｍｌをとり、遠心分離して上澄みを得た。沈殿は、更に、溶媒１ｍｌで２回超音波抽出し、各上澄み液を合わせて抽出液とした。
【００２２】
果汁、パルプ、ピールジュース、希釈糖蜜は、それぞれ、３ｍｌを遠心分離して、透明液を得た。沈殿は、更に、抽出溶媒１ｍｌで２回超音波処理により抽出し、各上澄みを透明液と合わせ抽出液とした。精油は、エタノールで希釈後、更に、抽出溶媒で希釈し、抽出液とした。各抽出液は、溶媒濃度が１０％になるように水で希釈後、次のように、固相抽出処理を行った。メタノール３ｍｌ、１０％メタノール６ｍｌで順次コンディショニングしたボンドエルート（登録商標）ＨＦ（Ｃ１８、５００ｍｇ）にサンプルを通液し、１０％メタノール１５ｍｌで洗浄後、抽出溶媒５ｍｌで溶出し、５ｍｌに定容した。これを表２に示す条件でＨＰＬＣ分析を行い各成分を定量した。
【００２３】
【表２】
2004210682.tif 000004
【００２４】
表３に温州ミカン、表４にイヨカンの果汁と副産物のポリメトキシフラボンの分析結果を示した。温州ミカンの組成についてみると、３，５，６，７，８，３’，４’−ヘプタメトキシフラボンが最も含有量が高く、以下、ノビレチン、タンゲレチン、シネンセチンの順であった。副産物の中では、精油が最も含有量が高く、果皮と比べると、タンゲレチンでは１０倍以上であった。しかし、ノビノレチンではほぼ同じであり、シネンセチンは逆に少なかった。これは，精油の製造時に水と接触する時間が長いために、水に対する溶解度の高い成分が減少することによるものと考えられる。
【００２５】
精油の次に含有量の高いものは、搾汁粕、ピールジュース、希釈糖蜜の順であった。搾汁粕は、果皮のほぼ半分の含有量であった。パルプと果汁については、あまり差は認められなかった。果皮を除いて搾汁した果汁中にはポリメトキシフラボンは認められなかったが、本実施例はインライン搾汁であるので，果皮の精油分の一部が果汁に混入し、果皮の１／２０程度の成分を含有していた。イヨカンについても、温州ミカンと同じ４成分であったが、ノビレチンが最も含有量が高く、次が３，５，６，７，８，３’，４’−ヘプタメトキシフラボンである点が異なっていた。その他については、温州ミカンとほぼ同じ傾向が見られた。搾汁粕、ピールジュース、希釈糖蜜、精油については、温州ミカンより含有量は高かったが、果汁とパルプについてはほぼ同じレベルであった。
【００２６】
【表３】
2004210682.tif 000005
【００２７】
【表４】
2004210682.tif 000006
【００２８】
参考例２
（吸着樹脂からの溶出試験）
目的成分を吸着樹脂に吸着させ、水で洗浄後、効率的な洗浄及び溶出のためのアルコール濃度について検討を行った。エタノールに懸濁した吸着樹脂ダイヤイオン（登録商標）ＨＰ−２０（三菱化学製）をカラムに２ｍｌ充填し、５ｍｌのエタノール、４０ｍｌの水で順次洗浄した。ろ過し、不溶物を除いた温州ミカンの希釈糖蜜（Ｂｒｉｘ１０）を３ｍｌカラムに通し、ポリメトキシフラボンを吸着させた。次に、水２０ｍｌで洗浄後、５０％、６０％、７５％、９０％エタノール各５ｍｌで順次溶出し、各溶出画分のポリメトキシフラボン濃度を測定した。その結果を表５に示す。
【００２９】
【表５】
2004210682.tif 000007
【００３０】
５０％エタノールでは、ポリメトキシフラボンは、４成分のいずれも全く溶出しておらず、吸着樹脂に完全に保持されていた。また、希釈糖蜜は、褐色を呈しているが、該希釈糖蜜の着色物質はこの画分でほとんど除去できることが観察された。６０％エタノールでは、タンゲレチン以外の成分で溶出が見られ、最も溶出の多いシネンセチンでは１０％を超えていた。また、９０％エタノールで溶出後にも、各成分の４７〜６９％が樹脂に残存しており、溶出は不完全であった。以上の結果と他の試験結果から、洗浄液のアルコール濃度は５０％以下が最適であり、溶出液のアルコール濃度は１００％が最適であることが明らかとなった。
【００３１】
実施例１
エタノールに懸濁した吸着樹脂ダイヤイオン（登録商標）ＨＰ−２０（三菱化学製）をガラスカラムに１０ｍｌ充填し、エタノール５０ｍｌ、水１００ｍｌで順次洗浄した。ろ過し、不溶物を除いた温州ミカンのピールジュース１５ｍｌを、カラムに通した。次に、水５０ｍｌ、２５％エタノール２５ｍｌ、５０％エタノール２５ｍｌで洗浄を行った。なお、流速はすべて１〜２ｍｌ／ｍｉｎとした。最後に、エタノール５０ｍｌでポリメトキシフラボンを溶出した。この時の各フラクションのポリメトキシフラボン濃度の測定結果を、表６に示す。
【００３２】
【表６】
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【００３３】
水、２５％エタノール、５０％エタノールいずれの洗液においても、ポリメトキシフラボンは溶出しておらず、効率的に不純物の除去が行われていた。エタノール溶出により、ポリメトキシフラボンは、６７〜７１％の回収率であった。エタノール量を更に多くすると回収率は高くなった。エタノール溶液の溶媒を除いた固形物中の総ポリメトキシフラボン含有率は２６％であり、ピールジュースの３４０倍まで濃縮ができた。組成については、３，５，６，７，８，３’，４’−ヘプタメトキシフラボンの濃度が最も高く、以下、ノビレチン、タンゲレチン、シネンセチンの順であった。
【００３４】
実施例２
エタノールに懸濁した吸着樹脂ＨＰ−２０を、ガラスカラムに１０ｍｌ充填し、エタノール５０ｍｌ、水１００ｍｌで順次洗浄した。温州ミカンの糖蜜（Ｂｒｉｘ６１）を水で希釈してＢｒｉｘ１０とした。ろ過し、不溶物を除いた希釈糖蜜１５ｍｌを、カラムに流速１〜２ｍｌ／ｍｉｎで通した。次に、同じ流速で水５０ｍｌ、２５％エタノール２５ｍｌ、５０％エタノール２５ｍｌで洗浄を行った。最後に、エタノール５０ｍｌでポリメトキシフラボンを同じ流速で溶出した。この時の各フラクションのポリメトキシフラボン濃度の測定結果を、表７に示す。
【００３５】
【表７】
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【００３６】
水、２５％エタノール、５０％エタノールいずれの洗液においても、ポリメトキシフラボンは溶出しておらず、効率的に不純物の除去が行われていた。エタノール溶出により、ポリメトキシフラボンは、６８〜７４％の回収率であった。エタノール量を更に多くすると回収率は高くなった。エタノール溶液の溶媒を除いた固形物中の総ポリメトキシフラボン含有率は１７％であり、希釈糖蜜の２７０倍まで濃縮ができた。組成については、３，５，６，７，８，３’，４’−ヘプタメトキシフラボンの濃度が最も高く、以下、ノビレチン、タンゲレチン、シネンセチンの順であった。なお、２５％エタノールと５０％エタノール洗浄液には、分析の結果、機能性成分であるリモノイド配糖体が原液のそれぞれ６０〜９０％溶出しており、リモノイド配糖体の分離精製用の原料として利用できることが分かった。
【００３７】
【発明の効果】
以上詳述したように、本発明は、カンキツ機能性成分のポリメトキシフラボン高含有組成物の製造法に係るものであり、本発明により、１）カンキツ果汁製造工程の副産物であるピールジュース又は糖蜜からポリメトキシフラボンを吸着剤を用いた吸着及び選択的分離の１段工程により、効率よく、純度２０％程度のポリメトキシフラボン高含有組成物を製造することができる、２）従来法のように大量の有機溶媒を用いた抽出操作を必要とせず、目的組成物を工業的規模で簡易に製造することができる、３）用いる吸着剤、エタノールともに食品衛生法で使用が認められており、上記組成物は、果汁をはじめとする食品への応用が容易であり、例えば、食品配合用カンキツ機能性成分高含有組成物として有用である、４）既存設備の利用が可能であり、カンキツ加工業界への技術移転が容易である、５）カンキツ機能性成分のポリメトキシフラボン高含有組成物の量産が可能となり、その高度活用が可能となる、６）果汁製造工程の副産物の有効利用、及び再資源化が可能となる、７）発酵原料以外用途のない糖蜜の有効利用を図ることができる、という格別の効果が奏される。
【図面の簡単な説明】
【図１】機能性成分強化果汁製造工程を示す。
【図１】
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