(57)【要約】  【課題】ＲＦＲＰおよびＯＴ７Ｔ０２２の新規用途の提供。  【解決手段】ＲＦＲＰおよびＯＴ７Ｔ０２２またはそれらをコードするＤＮＡやＯＴ７Ｔ０２２アゴニストは膵グルカゴン分泌促進剤、血糖上昇剤または尿生成促進剤として、ＯＴ７Ｔ０２２アンタゴニストは膵グルカゴン分泌抑制剤、血糖低下剤または尿生成抑制剤として有用である。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチド、その部分ペプチドもしくはそのアミドもしくはそのエステルまたはその塩を含有してなる膵グルカゴン分泌促進剤、血糖上昇剤、尿生成促進剤、または肥満、高脂血症、２型糖尿病、低血糖症、高血圧、浮腫、排尿困難症、インスリン抵抗性症候群、不安定糖尿病、脂肪萎縮、インスリンアレルギー、インスリノーマ、動脈硬化、血栓性疾患、脂肪毒性または癌の予防・治療剤。
【請求項２】
ポリペプチドが配列番号：１、配列番号：３、配列番号：５、配列番号：７、配列番号：９または配列番号：２２で表されるアミノ酸配列からなるポリペプチドである請求項１記載の剤。
【請求項３】
部分ペプチドが、
（ｉ）配列番号：１または配列番号：３で表わされるアミノ酸配列の第８８番目（Leu）〜第９２番目（Phe）のアミノ酸配列を含有し、そのアミノ酸配列のＮ末端側に、配列番号：１で表わされるアミノ酸配列の第１番目（Met）〜第８７番目（Asn）のアミノ酸配列のＣ末端から数えて１〜８７個のアミノ酸が付加していてもよいアミノ酸配列からなるペプチド、
（ii）配列番号：１または配列番号：３で表わされるアミノ酸配列の第１０１番目（Ser）〜第１１２番目（Ser）のアミノ酸配列を含有し、そのアミノ酸配列のＮ末端側に、配列番号：１で表わされるアミノ酸配列の第１番目（Met）〜第１００番目（Arg）のアミノ酸配列のＣ末端から数えて１〜１００個のアミノ酸が付加していてもよいアミノ酸配列からなるペプチド、
（iii）配列番号：１または配列番号：３で表わされるアミノ酸配列の第１２７番目（Leu）〜第１３１番目（Phe）のアミノ酸配列を含有し、そのアミノ酸配列のＮ末端側に、配列番号：１で表わされるアミノ酸配列の第１番目（Met）〜第１２６番目（Asn）のアミノ酸配列のＣ末端から数えて１〜１２６個のアミノ酸が付加していてもよいアミノ酸配列からなるペプチド、
（iv）配列番号：５で表わされるアミノ酸配列の第８８番目（Leu）〜第９２番目（Phe）のアミノ酸配列を含有し、そのアミノ酸配列のＮ末端側に、配列番号：１で表わされるアミノ酸配列の第１番目（Met）〜第８７番目（Asn）のアミノ酸配列のＣ末端から数えて１〜８７個のアミノ酸が付加していてもよいアミノ酸配列からなるペプチド、
（ｖ）配列番号：５で表わされるアミノ酸配列の第１０１番目（Ser）〜第１１２番目（Ser）のアミノ酸配列を含有し、そのアミノ酸配列のＮ末端側に、配列番号：１で表わされるアミノ酸配列の第１番目（Met）〜第１００番目（Arg）のアミノ酸配列のＣ末端から数えて１〜１００個のアミノ酸が付加していてもよいアミノ酸配列からなるペプチド、
（vi）配列番号：５で表わされるアミノ酸配列の第１２７番目（Leu）〜第１３１番目（Phe）のアミノ酸配列を含有し、そのアミノ酸配列のＮ末端側に、配列番号：１で表わされるアミノ酸配列の第１番目（Met）〜第１２６番目（Asn）のアミノ酸配列のＣ末端から数えて１〜１２６個のアミノ酸が付加していてもよいアミノ酸配列からなるペプチド、
（vii）配列番号：９で表わされるアミノ酸配列の第９０番目（Leu）〜第９４番目（Phe）のアミノ酸配列を含有し、そのアミノ酸配列のＮ末端側に、配列番号：１で表わされるアミノ酸配列の第１番目（Met）〜第８９番目（Asn）のアミノ酸配列のＣ末端から数えて１〜８９個のアミノ酸が付加していてもよいアミノ酸配列からなるペプチド、
（viii）配列番号：９で表わされるアミノ酸配列の第１２１番目（Leu）〜第１２５番目（Phe）のアミノ酸配列を含有し、そのアミノ酸配列のＮ末端側に、配列番号：１で表わされるアミノ酸配列の第１番目（Met）〜第１２０番目（Ser）のアミノ酸配列のＣ末端から数えて１〜１２０個のアミノ酸が付加していてもよいアミノ酸配列からなるペプチド、
（ix）配列番号：７または２２で表わされるアミノ酸配列の第９０番目（Leu）〜第９４番目（Phe）のアミノ酸配列を含有し、そのアミノ酸配列のＮ末端側に、配列番号：１で表わされるアミノ酸配列の第１番目（Met）〜第８９番目（Asn）のアミノ酸配列のＣ末端から数えて１〜８９個のアミノ酸が付加していてもよいアミノ酸配列からなるペプチド、
（ｘ）配列番号：７または２２で表わされるアミノ酸配列の第１２１番目（Leu）〜第１２５番目（Phe）のアミノ酸配列を含有し、そのアミノ酸配列のＮ末端側に、配列番号：１で表わされるアミノ酸配列の第１番目（Met）〜第１２０番目（Ser）のアミノ酸配列のＣ末端から数えて１〜１２０個のアミノ酸が付加していてもよいアミノ酸配列からなるペプチド、
（xi）上記（ｉ）〜（ｘ）のペプチドのアミノ酸配列に１〜５個のアミノ酸が付加したアミノ酸配列からなるペプチド、
（xii）上記（ｉ）〜（ｘ）のペプチドのアミノ酸配列に１〜５個のアミノ酸が挿入されたアミノ酸配列からなるペプチド、
（xiii）上記（ｉ）〜（ｘ）のペプチドのアミノ酸配列中の１〜５個のアミノ酸で置換されたアミノ酸配列からなるペプチド、または
（xiv）上記（xi）〜（xiii）の付加・挿入・置換を組み合わせたアミノ酸配列からなるペプチドである請求項１記載の剤。
【請求項４】
部分ペプチドが、
（ｉ）配列番号：１または配列番号：３で表わされるアミノ酸配列の第５６番目（Ser）〜第９２番目（Phe）、第７０番目（Met）〜第９２番目（Phe）、第７３番目（Met）〜第９２番目（Phe）、第８１番目（Met）〜第９２番目（Phe）または第８４番目（Ser）〜第９２番目（Phe）のアミノ酸配列からなるペプチド、
（ii）配列番号：１または配列番号：３で表わされるアミノ酸配列の第１０１番目（Ser）〜第１１２番目（Ser）のアミノ酸配列からなるペプチド、
（iii）配列番号：１または配列番号：３で表わされるアミノ酸配列の第１０１番目（Asn）〜第１３１番目（Phe）、第１０４番目（Asn）〜第１３１番目（Phe）、第１１５番目（Asn）〜第１３１番目（Phe）、第１２４番目（Val）〜第１３１番目（Phe）、第１２５番目（Pro）〜第１３１番目（Phe）、第１２６番目（Asn）〜第１３１番目（Phe）または第１２７番目（Leu）〜第１３１番目（Phe）のアミノ酸配列からなるペプチド、
（iv）配列番号：５で表わされるアミノ酸配列の第５８番目（Ser）〜第９２番目（Phe）、第７０番目（Lys）〜第９２番目（Phe）、第７３番目（Met）〜第９２番目（Phe）、第８１番目（Met）〜第９２番目（Phe）または第８４番目（Ser）〜第９２番目（Phe）のアミノ酸配列からなるペプチド、
（v）配列番号：５で表わされるアミノ酸配列の第１０１番目（Ser）〜第１１２番目（Ser）のアミノ酸配列からなるペプチド、
（vi）配列番号：５で表わされるアミノ酸配列の第１０１番目（Ser）〜第１３１番目（Phe）、第１０４番目（Ala）〜第１３１番目（Phe）、第１１５番目（Asn）〜第１３１番目（Phe）、第１２４番目（Val）〜第１３１番目（Phe）、第１２５番目（Pro）〜第１３１番目（Phe）、第１２６番目（Asn）〜第１３１番目（Phe）または第１２７番目（Leu）〜第１３１番目（Phe）のアミノ酸配列からなるペプチド、
（vii）配列番号：９で表わされるアミノ酸配列の第５８番目（Ser）〜第９４番目（Phe）、第７２番目（Val）〜第９４番目（Phe）、第７５番目（Met）〜第９４番目（Phe）、第８３番目（Val）〜第９４番目（Phe）または第８４番目（Pro）〜第９４番目（Phe）のアミノ酸配列からなるペプチド、
（viii）配列番号：９で表わされるアミノ酸配列の第１１８番目（Phe）〜第１２５番目（Phe）、第１１９番目（Pro）〜第１２５番目（Phe）、第１２０番目（Ser）〜第１２５番目（Phe）または第１２１番目（Leu）〜第１２５番目（Phe）のアミノ酸配列からなるペプチド、
（ix）配列番号：７または２２で表わされるアミノ酸配列の第５８番目（Ser）〜第９４番目（Phe）、第７２番目（Asp）〜第９４番目（Phe）、第７５番目（Met）〜第９４番目（Phe）、第８３番目（Val）〜第９４番目（Phe）または第８４番目（Pro）〜第９４番目（Phe）のアミノ酸配列からなるペプチド、
（ｘ）配列番号：７または２２で表わされるアミノ酸配列の第１１８番目（Phe）〜第１２５番目（Phe）、第１１９番目（Pro）〜第１２５番目（Phe）、第１２０番目（Ser）〜第１２５番目（Phe）または第１２１番目（Leu）〜第１２５番目（Phe）のアミノ酸配列からなるペプチド、
（xi）上記（ｉ）〜（ｘ）のペプチドのアミノ酸配列中の１〜５個のアミノ酸が欠失したアミノ酸配列からなるペプチド、
（xii）上記（ｉ）〜（ｘ）のペプチドのアミノ酸配列に１〜５個のアミノ酸が付加したアミノ酸配列からなるペプチド、
（xiii）上記（ｉ）〜（ｘ）のペプチドのアミノ酸配列に１〜５個のアミノ酸が挿入されたアミノ酸配列からなるペプチド、
（xiv）上記（ｉ）〜（ｘ）のペプチドのアミノ酸配列中の１〜５個のアミノ酸で置換されたアミノ酸配列からなるペプチド、または
（xv）上記（xi）〜（xiv）の欠失・付加・挿入・置換を組み合わせたアミノ酸配列からなるペプチドである請求項１記載の剤。
【請求項５】
配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチドまたはその部分ペプチドをコードするＤＮＡを含有してなる膵グルカゴン分泌促進剤、血糖上昇剤、尿生成促進剤、または肥満、高脂血症、２型糖尿病、低血糖症、高血圧、浮腫、排尿困難症、インスリン抵抗性症候群、不安定糖尿病、脂肪萎縮、インスリンアレルギー、インスリノーマ、動脈硬化、血栓性疾患、脂肪毒性または癌の予防・治療剤。
【請求項６】
ＤＮＡが配列番号：１、配列番号：３、配列番号：５、配列番号：７、配列番号：９または配列番号：２２で表されるアミノ酸配列からなるポリペプチドをコードするＤＮＡである請求項５記載の剤。
【請求項７】
ＤＮＡが、
（ｉ）配列番号：１または配列番号：３で表わされるアミノ酸配列の第５６番目（Ser）〜第９２番目（Phe）、第７０番目（Met）〜第９２番目（Phe）、第７３番目（Met）〜第９２番目（Phe）、第８１番目（Met）〜第９２番目（Phe）または第８４番目（Ser）〜第９２番目（Phe）のアミノ酸配列からなるペプチド、
（ii）配列番号：１または配列番号：３で表わされるアミノ酸配列の第１０１番目（Ser）〜第１１２番目（Ser）のアミノ酸配列からなるペプチド、
（iii）配列番号：１または配列番号：３で表わされるアミノ酸配列の第１０１番目（Asn）〜第１３１番目（Phe）、第１０４番目（Asn）〜第１３１番目（Phe）、第１１５番目（Asn）〜第１３１番目（Phe）、第１２４番目（Val）〜第１３１番目（Phe）、第１２５番目（Pro）〜第１３１番目（Phe）、第１２６番目（Asn）〜第１３１番目（Phe）または第１２７番目（Leu）〜第１３１番目（Phe）のアミノ酸配列からなるペプチド、
（iv）配列番号：５で表わされるアミノ酸配列の第５８番目（Ser）〜第９２番目（Phe）、第７０番目（Lys）〜第９２番目（Phe）、第７３番目（Met）〜第９２番目（Phe）、第８１番目（Met）〜第９２番目（Phe）または第８４番目（Ser）〜第９２番目（Phe）のアミノ酸配列からなるペプチド、
（ｖ）配列番号：５で表わされるアミノ酸配列の第１０１番目（Ser）〜第１１２番目（Ser）のアミノ酸配列からなるペプチド、
（vi）配列番号：５で表わされるアミノ酸配列の第１０１番目（Ser）〜第１３１番目（Phe）、第１０４番目（Ala）〜第１３１番目（Phe）、第１１５番目（Asn）〜第１３１番目（Phe）、第１２４番目（Val）〜第１３１番目（Phe）、第１２５番目（Pro）〜第１３１番目（Phe）、第１２６番目（Asn）〜第１３１番目（Phe）または第１２７番目（Leu）〜第１３１番目（Phe）のアミノ酸配列からなるペプチド、
（vii）配列番号：９で表わされるアミノ酸配列の第５８番目（Ser）〜第９４番目（Phe）、第７２番目（Val）〜第９４番目（Phe）、第７５番目（Met）〜第９４番目（Phe）、第８３番目（Val）〜第９４番目（Phe）または第８４番目（Pro）〜第９４番目（Phe）のアミノ酸配列からなるペプチド、
（viii）配列番号：９で表わされるアミノ酸配列の第１１８番目（Phe）〜第１２５番目（Phe）、第１１９番目（Pro）〜第１２５番目（Phe）、第１２０番目（Ser）〜第１２５番目（Phe）または第１２１番目（Leu）〜第１２５番目（Phe）のアミノ酸配列からなるペプチド、
（ix）配列番号：７または２２で表わされるアミノ酸配列の第５８番目（Ser）〜第９４番目（Phe）、第７２番目（Asp）〜第９４番目（Phe）、第７５番目（Met）〜第９４番目（Phe）、第８３番目（Val）〜第９４番目（Phe）または第８４番目（Pro）〜第９４番目（Phe）のアミノ酸配列からなるペプチド、
（ｘ）配列番号：７または２２で表わされるアミノ酸配列の第１１８番目（Phe）〜第１２５番目（Phe）、第１１９番目（Pro）〜第１２５番目（Phe）、第１２０番目（Ser）〜第１２５番目（Phe）または第１２１番目（Leu）〜第１２５番目（Phe）のアミノ酸配列からなるペプチド、
（xi）上記（ｉ）〜（ｘ）のペプチドのアミノ酸配列中の１〜５個のアミノ酸が欠失したアミノ酸配列からなるペプチド、
（xii）上記（ｉ）〜（ｘ）のペプチドのアミノ酸配列に１〜５個のアミノ酸が付加したアミノ酸配列からなるペプチド、
（xiii）上記（ｉ）〜（ｘ）のペプチドのアミノ酸配列に１〜５個のアミノ酸が挿入されたアミノ酸配列からなるペプチド、
（xiv）上記（ｉ）〜（ｘ）のペプチドのアミノ酸配列中の１〜５個のアミノ酸で置換されたアミノ酸配列からなるペプチド、または
（xv）上記（xi）〜（xiv）の欠失・付加・挿入・置換を組み合わせたアミノ酸配列からなるペプチド、
をコードするＤＮＡである請求項５記載の剤。
【請求項８】
配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチドまたはその部分ペプチドをコードするＤＮＡを含有してなる糖尿病、耐糖能障害、ケトーシス、アシドーシス、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、頻尿、夜尿症、高脂血症、性機能障害、皮膚疾患、関節症、骨減少症、動脈硬化、血栓性疾患、消化不良、記憶学習障害、肥満、高脂血症、２型糖尿病、低血糖症、高血圧、浮腫、排尿困難症、インスリン抵抗性症候群、不安定糖尿病、脂肪萎縮、インスリンアレルギー、インスリノーマ、脂肪毒性または癌の診断剤。
【請求項９】
配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチド、その部分ペプチドもしくはそのアミドもしくはそのエステルまたはその塩に対する抗体を含有してなる膵グルカゴン分泌抑制剤、血糖低下剤、尿生成抑制剤、または糖尿病、耐糖能障害、ケトーシス、アシドーシス、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、頻尿、夜尿症、高脂血症、性機能障害、皮膚疾患、関節症、骨減少症、動脈硬化、血栓性疾患、消化不良または記憶学習障害の予防・治療剤。
【請求項１０】
配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチド、その部分ペプチドもしくはそのアミドもしくはそのエステルまたはその塩に対する抗体を含有してなる糖尿病、耐糖能障害、ケトーシス、アシドーシス、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、頻尿、夜尿症、高脂血症、性機能障害、皮膚疾患、関節症、骨減少症、動脈硬化、血栓性疾患、消化不良、記憶学習障害、肥満、高脂血症、２型糖尿病、低血糖症、高血圧、浮腫、排尿困難症、インスリン抵抗性症候群、不安定糖尿病、脂肪萎縮、インスリンアレルギー、インスリノーマ、脂肪毒性または癌の診断剤。
【請求項１１】
配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチドまたはその部分ペプチドをコードするＤＮＡに相補的な塩基配列またはその一部を含有するアンチセンスＤＮＡを含有してなる膵グルカゴン分泌抑制剤、血糖低下剤、尿生成抑制剤、または糖尿病、耐糖能障害、ケトーシス、アシドーシス、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、頻尿、夜尿症、高脂血症、性機能障害、皮膚疾患、関節症、骨減少症、動脈硬化、血栓性疾患、消化不良または記憶学習障害の予防・治療剤。
【請求項１２】
配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチドまたはその部分ペプチドの発現量を増加させる化合物またはその塩を含有してなる膵グルカゴン分泌促進剤、血糖上昇剤、尿生成促進剤、または肥満、高脂血症、２型糖尿病、低血糖症、高血圧、浮腫、排尿困難症、インスリン抵抗性症候群、不安定糖尿病、脂肪萎縮、インスリンアレルギー、インスリノーマ、動脈硬化、血栓性疾患、脂肪毒性または癌の予防・治療剤。
【請求項１３】
配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチドまたはその部分ペプチドの発現量を減少させる化合物またはその塩を含有してなる膵グルカゴン分泌抑制剤、血糖低下剤、尿生成抑制剤、または糖尿病、耐糖能障害、ケトーシス、アシドーシス、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、頻尿、夜尿症、高脂血症、性機能障害、皮膚疾患、関節症、骨減少症、動脈硬化、血栓性疾患、消化不良または記憶学習障害の予防・治療剤。
【請求項１４】
配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２、その部分ペプチドまたはその塩を含有してなる膵グルカゴン分泌促進剤、血糖上昇剤、尿生成促進剤、または肥満、高脂血症、２型糖尿病、低血糖症、高血圧、浮腫、排尿困難症、インスリン抵抗性症候群、不安定糖尿病、脂肪萎縮、インスリンアレルギー、インスリノーマ、動脈硬化、血栓性疾患、脂肪毒性または癌の予防・治療剤。
【請求項１５】
ＯＴ７Ｔ０２２が配列番号：１１、配列番号：２４または配列番号：２７で表されるアミノ酸配列からなるレセプター蛋白質である請求項１４記載の剤。
【請求項１６】
配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２またはその部分ペプチドをコードするＤＮＡを含有してなる膵グルカゴン分泌促進剤、血糖上昇剤、尿生成促進剤、または肥満、高脂血症、２型糖尿病、低血糖症、高血圧、浮腫、排尿困難症、インスリン抵抗性症候群、不安定糖尿病、脂肪萎縮、インスリンアレルギー、インスリノーマ、動脈硬化、血栓性疾患、脂肪毒性または癌の予防・治療剤。
【請求項１７】
ＤＮＡが配列番号：１１、配列番号：２４または配列番号：２７で表されるアミノ酸配列からなるレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２またはその部分ペプチドをコードするＤＮＡである請求項１６記載の剤。
【請求項１８】
配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２またはその部分ペプチドをコードするＤＮＡを含有してなる糖尿病、耐糖能障害、ケトーシス、アシドーシス、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、頻尿、夜尿症、高脂血症、性機能障害、皮膚疾患、関節症、骨減少症、動脈硬化、血栓性疾患、消化不良、記憶学習障害、肥満、高脂血症、２型糖尿病、低血糖症、高血圧、浮腫、排尿困難症、インスリン抵抗性症候群、不安定糖尿病、脂肪萎縮、インスリンアレルギー、インスリノーマ、脂肪毒性または癌の診断剤。
【請求項１９】
配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２、その部分ペプチドまたはその塩に対する抗体を含有してなる膵グルカゴン分泌抑制剤、血糖低下剤、尿生成抑制剤、または糖尿病、耐糖能障害、ケトーシス、アシドーシス、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、頻尿、夜尿症、高脂血症、性機能障害、皮膚疾患、関節症、骨減少症、動脈硬化、血栓性疾患、消化不良または記憶学習障害の予防・治療剤。
【請求項２０】
配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２、その部分ペプチドまたはその塩に対する抗体を含有してなる糖尿病、耐糖能障害、ケトーシス、アシドーシス、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、頻尿、夜尿症、高脂血症、性機能障害、皮膚疾患、関節症、骨減少症、動脈硬化、血栓性疾患、消化不良、記憶学習障害、肥満、高脂血症、２型糖尿病、低血糖症、高血圧、浮腫、排尿困難症、インスリン抵抗性症候群、不安定糖尿病、脂肪萎縮、インスリンアレルギー、インスリノーマ、脂肪毒性または癌の診断剤。
【請求項２１】
配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２またはその部分ペプチドをコードするＤＮＡに相補的な塩基配列またはその一部を含有するアンチセンスＤＮＡを含有してなる膵グルカゴン分泌抑制剤、血糖低下剤、尿生成抑制剤、または糖尿病、耐糖能障害、ケトーシス、アシドーシス、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、頻尿、夜尿症、高脂血症、性機能障害、皮膚疾患、関節症、骨減少症、動脈硬化、血栓性疾患、消化不良または記憶学習障害の予防・治療剤。
【請求項２２】
配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２、その部分ペプチドまたはその塩に対するアゴニストを含有してなる膵グルカゴン分泌促進剤、血糖上昇剤、尿生成促進剤、または肥満、高脂血症、２型糖尿病、低血糖症、高血圧、浮腫、排尿困難症、インスリン抵抗性症候群、不安定糖尿病、脂肪萎縮、インスリンアレルギー、インスリノーマ、動脈硬化、血栓性疾患、脂肪毒性または癌の予防・治療剤。
【請求項２３】
配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２、その部分ペプチドまたはその塩に対するアンタゴニストを含有してなる膵グルカゴン分泌抑制剤、血糖低下剤、尿生成抑制剤、または糖尿病、耐糖能障害、ケトーシス、アシドーシス、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、頻尿、夜尿症、高脂血症、性機能障害、皮膚疾患、関節症、骨減少症、動脈硬化、血栓性疾患、消化不良または記憶学習障害の予防・治療剤。
【請求項２４】
配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２またはその部分ペプチドの発現量を増加させる化合物またはその塩を含有してなる膵グルカゴン分泌促進剤、血糖上昇剤、尿生成促進剤、または肥満、高脂血症、２型糖尿病、低血糖症、高血圧、浮腫、排尿困難症、インスリン抵抗性症候群、不安定糖尿病、脂肪萎縮、インスリンアレルギー、インスリノーマ、動脈硬化、血栓性疾患、脂肪毒性または癌の予防・治療剤。
【請求項２５】
配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２またはその部分ペプチドの発現量を減少させる化合物またはその塩を含有してなる膵グルカゴン分泌抑制剤、血糖低下剤、尿生成抑制剤、または糖尿病、耐糖能障害、ケトーシス、アシドーシス、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、頻尿、夜尿症、高脂血症、性機能障害、皮膚疾患、関節症、骨減少症、動脈硬化、血栓性疾患、消化不良または記憶学習障害の予防・治療剤。
【請求項２６】
配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチド、その部分ペプチドもしくはそのアミドもしくはそのエステルまたはその塩、および（または）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２、その部分ペプチドまたはその塩を用いることを特徴とする膵グルカゴン分泌調節薬、血糖調節薬または尿生成調節薬のスクリーニング方法。
【請求項２７】
配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチド、その部分ペプチドもしくはそのアミドもしくはそのエステルまたはその塩、および（または）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２、その部分ペプチドまたはその塩を含有してなる膵グルカゴン分泌調節薬、血糖調節薬または尿生成調節薬のスクリーニング用キット。
【請求項２８】
配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチド、その部分ペプチドもしくはそのアミドもしくはそのエステルまたはその塩、および（または）該ポリペプチド、その部分ペプチドもしくはそのアミドもしくはそのエステルまたはその塩と配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２、その部分ペプチドまたはその塩との結合性を変化させる化合物またはその塩を用いることを特徴とする膵グルカゴン分泌調節薬、血糖調節薬または尿生成調節薬のスクリーニング方法。
【請求項２９】
配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチド、その部分ペプチドもしくはそのアミドもしくはそのエステルまたはその塩、および（または）該ポリペプチド、その部分ペプチドもしくはそのアミドもしくはそのエステルまたはその塩と配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２、その部分ペプチドまたはその塩を含有してなる膵グルカゴン分泌調節薬、血糖調節薬または尿生成調節薬のスクリーニング用キット。
【請求項３０】
哺乳動物に対して、
（ｉ）配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチド、その部分ペプチドもしくはそのアミドもしくはそのエステルまたはその塩、
（ii）配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチドまたはその部分ペプチドをコードするＤＮＡ、
（iii）配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチドまたはその部分ペプチドの発現量を増加させる化合物またはその塩、
（iv）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２、その部分ペプチドまたはその塩、
（ｖ）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２またはその部分ペプチドをコードするＤＮＡ、
（vi）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２、その部分ペプチドまたはその塩に対するアゴニスト、または
（vii）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２またはその部分ペプチドの発現量を増加させる化合物またはその塩の有効量を投与することを特徴とする膵グルカゴン分泌促進方法、血糖上昇方法、尿生成促進方法、または肥満、高脂血症、２型糖尿病、低血糖症、高血圧、浮腫、排尿困難症、インスリン抵抗性症候群、不安定糖尿病、脂肪萎縮、インスリンアレルギー、インスリノーマ、動脈硬化、血栓性疾患、脂肪毒性または癌の予防・治療方法。
【請求項３１】
哺乳動物に対して、
（ｉ）配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチド、その部分ペプチドもしくはそのアミドもしくはそのエステルまたはその塩に対する抗体、
（ii）配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチドまたはその部分ペプチドをコードするＤＮＡに相補的な塩基配列またはその一部を含有するアンチセンスＤＮＡ、
（iii）配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチドまたはその部分ペプチドの発現量を減少させる化合物またはその塩、
（iv）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２、その部分ペプチドまたはその塩に対する抗体、
（ｖ）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２またはその部分ペプチドをコードするＤＮＡに相補的な塩基配列またはその一部を含有するアンチセンスＤＮＡ、
（vi）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２、その部分ペプチドまたはその塩に対するアンタゴニスト、または
（vii）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２またはその部分ペプチドの発現量を減少させる化合物またはその塩の有効量を投与することを特徴とする膵グルカゴン分泌抑制方法、血糖低下方法、尿生成抑制方法、または糖尿病、耐糖能障害、ケトーシス、アシドーシス、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、頻尿、夜尿症、高脂血症、性機能障害、皮膚疾患、関節症、骨減少症、動脈硬化、血栓性疾患、消化不良または記憶学習障害の予防・治療方法。
【請求項３２】
膵グルカゴン分泌促進剤、血糖上昇剤、尿生成促進剤、または肥満、高脂血症、２型糖尿病、低血糖症、高血圧、浮腫、排尿困難症、インスリン抵抗性症候群、不安定糖尿病、脂肪萎縮、インスリンアレルギー、インスリノーマ、動脈硬化、血栓性疾患、脂肪毒性または癌の予防・治療剤を製造するための
（ｉ）配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチド、その部分ペプチドもしくはそのアミドもしくはそのエステルまたはその塩、
（ii）配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチドまたはその部分ペプチドをコードするＤＮＡ、
（iii）配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチドまたはその部分ペプチドの発現量を増加させる化合物またはその塩、
（iv）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２、その部分ペプチドまたはその塩、
（ｖ）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２またはその部分ペプチドをコードするＤＮＡ、
（vi）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２、その部分ペプチドまたはその塩に対するアゴニスト、または
（vii）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２またはその部分ペプチドの発現量を増加させる化合物またはその塩の使用。
【請求項３３】
膵グルカゴン分泌抑制剤、血糖低下剤、尿生成抑制剤、または糖尿病、耐糖能障害、ケトーシス、アシドーシス、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、頻尿、夜尿症、高脂血症、性機能障害、皮膚疾患、関節症、骨減少症、動脈硬化、血栓性疾患、消化不良または記憶学習障害の予防・治療剤を製造するための
（ｉ）配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチド、その部分ペプチドもしくはそのアミドもしくはそのエステルまたはその塩に対する抗体、
（ii）配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチドまたはその部分ペプチドをコードするＤＮＡに相補的な塩基配列またはその一部を含有するアンチセンスＤＮＡ、
（iii）配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチドまたはその部分ペプチドの発現量を減少させる化合物またはその塩、
（iv）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２、その部分ペプチドまたはその塩に対する抗体、
（ｖ）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２またはその部分ペプチドをコードするＤＮＡに相補的な塩基配列またはその一部を含有するアンチセンスＤＮＡ、
（vi）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２、その部分ペプチドまたはその塩に対するアンタゴニスト、または
（vii）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２またはその部分ペプチドの発現量を減少させる化合物またはその塩の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＲＦＲＰおよびＲＦＲＰのレセプター蛋白質であるＯＴ７Ｔ０２２の新規用途に関する。
【背景技術】
【０００２】
新規な受容体ＯＴ７Ｔ０２２とそれに結合するＣ末端がＬＰＬ ＲＦ amide様、ＬＰＬ ＲＳ amide様、ＬＰＱ ＲＦ amide様またはＬＰＬ ＲＬamide様のペプチド（ＲＦＲＰ−１、ＲＦＲＰ−２、ＲＦＲＰ−３）が報告されている（特許文献１）。
【０００３】
ＯＴ７Ｔ０２２とＲＦＲＰ−１、ＲＦＲＰ−２、ＲＦＲＰ−３がプロラクチン分泌に関与していることが報告されている（特許文献２）。
【０００４】
ＲＦＲＰ−１に対応するＮＰＳＦやＲＦＲＰ−３に対応するＮＰＶＦがＯＴ７Ｔ０２２に結合し、抗オピオイドに関与していることが報告されている（非特許文献１）。
【０００５】
しかし、ＲＦＲＰおよびＯＴ７Ｔ０２２の生体内における機能および作用機序については、さらに解明すべき点が数多く残されている。
【特許文献１】ＷＯ００／２９４４１号
【特許文献２】ＷＯ０１／６６１３４号
【非特許文献１】The Journal of Biological Chemistry, vol.276, No.40, p36961-36969, 2001
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、ＲＦＲＰおよびＯＴ７Ｔ０２２のさらなる機能を解明し、新たな医薬を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、上記の課題に鑑み、鋭意研究を重ねた結果、ＲＦＲＰが従来知られている作用と全く異なる膵グルカゴン分泌促進作用、血糖上昇作用、記憶消去促進作用などを有することを見出した。本発明者らは、これらの知見に基づいて、さらに検討を重ねた結果、本発明を完成するに至った。
【０００８】
すなわち、本発明は、
〔１〕配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチド、その部分ペプチドもしくはそのアミドもしくはそのエステルまたはその塩を含有してなる膵グルカゴン分泌促進剤、血糖上昇剤、尿生成促進剤、記憶消去促進剤（嫌な記憶の消去促進剤）、または肥満、高脂血症、２型糖尿病、低血糖症、高血圧、浮腫、排尿困難症、インスリン抵抗性症候群、不安定糖尿病、脂肪萎縮、インスリンアレルギー、インスリノーマ、動脈硬化、血栓性疾患、脂肪毒性または癌の予防・治療剤、
〔２〕ポリペプチドが配列番号：１、配列番号：３、配列番号：５、配列番号：７、配列番号：９または配列番号：２２で表されるアミノ酸配列からなるポリペプチドである上記〔１〕記載の剤、
〔３〕部分ペプチドが、
（ｉ）配列番号：１または配列番号：３で表わされるアミノ酸配列の第８８番目（Leu）〜第９２番目（Phe）のアミノ酸配列を含有し、そのアミノ酸配列のＮ末端側に、配列番号：１で表わされるアミノ酸配列の第１番目（Met）〜第８７番目（Asn）のアミノ酸配列のＣ末端から数えて１〜８７個のアミノ酸が付加していてもよいアミノ酸配列からなるペプチド（ヒトＲＦＲＰ−１）、
（ii）配列番号：１または配列番号：３で表わされるアミノ酸配列の第１０１番目（Ser）〜第１１２番目（Ser）のアミノ酸配列を含有し、そのアミノ酸配列のＮ末端側に、配列番号：１で表わされるアミノ酸配列の第１番目（Met）〜第１００番目（Arg）のアミノ酸配列のＣ末端から数えて１〜１００個のアミノ酸が付加していてもよいアミノ酸配列からなるペプチド（ヒトＲＦＲＰ−２）、
（iii）配列番号：１または配列番号：３で表わされるアミノ酸配列の第１２７番目（Leu）〜第１３１番目（Phe）のアミノ酸配列を含有し、そのアミノ酸配列のＮ末端側に、配列番号：１で表わされるアミノ酸配列の第１番目（Met）〜第１２６番目（Asn）のアミノ酸配列のＣ末端から数えて１〜１２６個のアミノ酸が付加していてもよいアミノ酸配列からなるペプチド（ヒトＲＦＲＰ−３）、
（iv）配列番号：５で表わされるアミノ酸配列の第８８番目（Leu）〜第９２番目（Phe）のアミノ酸配列を含有し、そのアミノ酸配列のＮ末端側に、配列番号：１で表わされるアミノ酸配列の第１番目（Met）〜第８７番目（Asn）のアミノ酸配列のＣ末端から数えて１〜８７個のアミノ酸が付加していてもよいアミノ酸配列からなるペプチド（ウシＲＦＲＰ−１）、
（ｖ）配列番号：５で表わされるアミノ酸配列の第１０１番目（Ser）〜第１１２番目（Ser）のアミノ酸配列を含有し、そのアミノ酸配列のＮ末端側に、配列番号：１で表わされるアミノ酸配列の第１番目（Met）〜第１００番目（Arg）のアミノ酸配列のＣ末端から数えて１〜１００個のアミノ酸が付加していてもよいアミノ酸配列からなるペプチド（ウシＲＦＲＰ−２）、
（vi）配列番号：５で表わされるアミノ酸配列の第１２７番目（Leu）〜第１３１番目（Phe）のアミノ酸配列を含有し、そのアミノ酸配列のＮ末端側に、配列番号：１で表わされるアミノ酸配列の第１番目（Met）〜第１２６番目（Asn）のアミノ酸配列のＣ末端から数えて１〜１２６個のアミノ酸が付加していてもよいアミノ酸配列からなるペプチド（ウシＲＦＲＰ−３）、
（vii）配列番号：９で表わされるアミノ酸配列の第９０番目（Leu）〜第９４番目（Phe）のアミノ酸配列を含有し、そのアミノ酸配列のＮ末端側に、配列番号：１で表わされるアミノ酸配列の第１番目（Met）〜第８９番目（Asn）のアミノ酸配列のＣ末端から数えて１〜８９個のアミノ酸が付加していてもよいアミノ酸配列からなるペプチド（マウスＲＦＲＰ−１）、
（viii）配列番号：９で表わされるアミノ酸配列の第１２１番目（Leu）〜第１２５番目（Phe）のアミノ酸配列を含有し、そのアミノ酸配列のＮ末端側に、配列番号：１で表わされるアミノ酸配列の第１番目（Met）〜第１２０番目（Ser）のアミノ酸配列のＣ末端から数えて１〜１２０個のアミノ酸が付加していてもよいアミノ酸配列からなるペプチド（マウスＲＦＲＰ−３）、
（ix）配列番号：７または２２で表わされるアミノ酸配列の第９０番目（Leu）〜第９４番目（Phe）のアミノ酸配列を含有し、そのアミノ酸配列のＮ末端側に、配列番号：１で表わされるアミノ酸配列の第１番目（Met）〜第８９番目（Asn）のアミノ酸配列のＣ末端から数えて１〜８９個のアミノ酸が付加していてもよいアミノ酸配列からなるペプチド（ラットＲＦＲＰ−１）、
（ｘ）配列番号：７または２２で表わされるアミノ酸配列の第１２１番目（Leu）〜第１２５番目（Phe）のアミノ酸配列を含有し、そのアミノ酸配列のＮ末端側に、配列番号：１で表わされるアミノ酸配列の第１番目（Met）〜第１２０番目（Ser）のアミノ酸配列のＣ末端から数えて１〜１２０個のアミノ酸が付加していてもよいアミノ酸配列からなるペプチド（ラットＲＦＲＰ−３）、
（xi）上記（ｉ）〜（ｘ）のペプチドのアミノ酸配列に１〜５個のアミノ酸が付加したアミノ酸配列からなるペプチド、
（xii）上記（ｉ）〜（ｘ）のペプチドのアミノ酸配列に１〜５個のアミノ酸が挿入されたアミノ酸配列からなるペプチド、
（xiii）上記（ｉ）〜（ｘ）のペプチドのアミノ酸配列中の１〜５個のアミノ酸で置換されたアミノ酸配列からなるペプチド、または
（xiv）上記（xi）〜（xiii）の付加・挿入・置換を組み合わせたアミノ酸配列からなるペプチドである上記〔１〕記載の剤、
〔４〕部分ペプチドが、
（ｉ）配列番号：１または配列番号：３で表わされるアミノ酸配列の第５６番目（Ser）〜第９２番目（Phe）、第７０番目（Met）〜第９２番目（Phe）、第７３番目（Met）〜第９２番目（Phe）、第８１番目（Met）〜第９２番目（Phe）または第８４番目（Ser）〜第９２番目（Phe）のアミノ酸配列からなるペプチド（ヒトＲＦＲＰ−１）、
（ii）配列番号：１または配列番号：３で表わされるアミノ酸配列の第１０１番目（Ser）〜第１１２番目（Ser）のアミノ酸配列からなるペプチド（ヒトＲＦＲＰ−２）、
（iii）配列番号：１または配列番号：３で表わされるアミノ酸配列の第１０１番目（Asn）〜第１３１番目（Phe）、第１０４番目（Asn）〜第１３１番目（Phe）、第１１５番目（Asn）〜第１３１番目（Phe）、第１２４番目（Val）〜第１３１番目（Phe）、第１２５番目（Pro）〜第１３１番目（Phe）、第１２６番目（Asn）〜第１３１番目（Phe）または第１２７番目（Leu）〜第１３１番目（Phe）のアミノ酸配列からなるペプチド（ヒトＲＦＲＰ−３）、
（iv）配列番号：５で表わされるアミノ酸配列の第５８番目（Ser）〜第９２番目（Phe）、第７０番目（Lys）〜第９２番目（Phe）、第７３番目（Met）〜第９２番目（Phe）、第８１番目（Met）〜第９２番目（Phe）または第８４番目（Ser）〜第９２番目（Phe）のアミノ酸配列からなるペプチド（ウシＲＦＲＰ−１）、
（ｖ）配列番号：５で表わされるアミノ酸配列の第１０１番目（Ser）〜第１１２番目（Ser）のアミノ酸配列からなるペプチド（ウシＲＦＲＰ−２）、
（vi）配列番号：５で表わされるアミノ酸配列の第１０１番目（Ser）〜第１３１番目（Phe）、第１０４番目（Ala）〜第１３１番目（Phe）、第１１５番目（Asn）〜第１３１番目（Phe）、第１２４番目（Val）〜第１３１番目（Phe）、第１２５番目（Pro）〜第１３１番目（Phe）、第１２６番目（Asn）〜第１３１番目（Phe）または第１２７番目（Leu）〜第１３１番目（Phe）のアミノ酸配列からなるペプチド（ウシＲＦＲＰ−３）、
（vii）配列番号：９で表わされるアミノ酸配列の第５８番目（Ser）〜第９４番目（Phe）、第７２番目（Val）〜第９４番目（Phe）、第７５番目（Met）〜第９４番目（Phe）、第８３番目（Val）〜第９４番目（Phe）または第８４番目（Pro）〜第９４番目（Phe）のアミノ酸配列からなるペプチド（マウスＲＦＲＰ−１）、
（viii）配列番号：９で表わされるアミノ酸配列の第１１８番目（Phe）〜第１２５番目（Phe）、第１１９番目（Pro）〜第１２５番目（Phe）、第１２０番目（Ser）〜第１２５番目（Phe）または第１２１番目（Leu）〜第１２５番目（Phe）のアミノ酸配列からなるペプチド（マウスＲＦＲＰ−３）、
（ix）配列番号：７または２２で表わされるアミノ酸配列の第５８番目（Ser）〜第９４番目（Phe）、第７２番目（Asp）〜第９４番目（Phe）、第７５番目（Met）〜第９４番目（Phe）、第８３番目（Val）〜第９４番目（Phe）または第８４番目（Pro）〜第９４番目（Phe）のアミノ酸配列からなるペプチド（ラットＲＦＲＰ−１）、
（ｘ）配列番号：７または２２で表わされるアミノ酸配列の第１１８番目（Phe）〜第１２５番目（Phe）、第１１９番目（Pro）〜第１２５番目（Phe）、第１２０番目（Ser）〜第１２５番目（Phe）または第１２１番目（Leu）〜第１２５番目（Phe）のアミノ酸配列からなるペプチド（ラットＲＦＲＰ−３）、
（xi）上記（ｉ）〜（ｘ）のペプチドのアミノ酸配列中の１〜５個のアミノ酸が欠失したアミノ酸配列からなるペプチド（欠失型）、
（xii）上記（ｉ）〜（ｘ）のペプチドのアミノ酸配列に１〜５個のアミノ酸が付加したアミノ酸配列からなるペプチド（付加型）、
（xiii）上記（ｉ）〜（ｘ）のペプチドのアミノ酸配列に１〜５個のアミノ酸が挿入されたアミノ酸配列からなるペプチド（挿入型）、
（xiv）上記（ｉ）〜（ｘ）のペプチドのアミノ酸配列中の１〜５個のアミノ酸で置換されたアミノ酸配列からなるペプチド（置換型）、または
（xv）上記（xi）〜（xiv）の欠失・付加・挿入・置換を組み合わせたアミノ酸配列からなるペプチドである上記〔１〕記載の剤、
〔５〕配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチドまたはその部分ペプチドをコードするＤＮＡを含有してなる膵グルカゴン分泌促進剤、血糖上昇剤、尿生成促進剤、記憶消去促進剤（嫌な記憶の消去促進剤）、または肥満、高脂血症、２型糖尿病、低血糖症、高血圧、浮腫、排尿困難症、インスリン抵抗性症候群、不安定糖尿病、脂肪萎縮、インスリンアレルギー、インスリノーマ、動脈硬化、血栓性疾患、脂肪毒性または癌の予防・治療剤、
〔６〕ＤＮＡが配列番号：１、配列番号：３、配列番号：５、配列番号：７、配列番号：９または配列番号：２２で表されるアミノ酸配列からなるポリペプチドをコードするＤＮＡである上記〔５〕記載の剤、
〔７〕ＤＮＡが、
（ｉ）配列番号：１または配列番号：３で表わされるアミノ酸配列の第５６番目（Ser）〜第９２番目（Phe）、第７０番目（Met）〜第９２番目（Phe）、第７３番目（Met）〜第９２番目（Phe）、第８１番目（Met）〜第９２番目（Phe）または第８４番目（Ser）〜第９２番目（Phe）のアミノ酸配列からなるペプチド（ヒトＲＦＲＰ−１）、
（ii）配列番号：１または配列番号：３で表わされるアミノ酸配列の第１０１番目（Ser）〜第１１２番目（Ser）のアミノ酸配列からなるペプチド（ヒトＲＦＲＰ−２）、
（iii）配列番号：１または配列番号：３で表わされるアミノ酸配列の第１０１番目（Asn）〜第１３１番目（Phe）、第１０４番目（Asn）〜第１３１番目（Phe）、第１１５番目（Asn）〜第１３１番目（Phe）、第１２４番目（Val）〜第１３１番目（Phe）、第１２５番目（Pro）〜第１３１番目（Phe）、第１２６番目（Asn）〜第１３１番目（Phe）または第１２７番目（Leu）〜第１３１番目（Phe）のアミノ酸配列からなるペプチド（ヒトＲＦＲＰ−３）、
（iv）配列番号：５で表わされるアミノ酸配列の第５８番目（Ser）〜第９２番目（Phe）、第７０番目（Lys）〜第９２番目（Phe）、第７３番目（Met）〜第９２番目（Phe）、第８１番目（Met）〜第９２番目（Phe）または第８４番目（Ser）〜第９２番目（Phe）のアミノ酸配列からなるペプチド（ウシＲＦＲＰ−１）、
（v）配列番号：５で表わされるアミノ酸配列の第１０１番目（Ser）〜第１１２番目（Ser）のアミノ酸配列からなるペプチド（ウシＲＦＲＰ−２）、
（vi）配列番号：５で表わされるアミノ酸配列の第１０１番目（Ser）〜第１３１番目（Phe）、第１０４番目（Ala）〜第１３１番目（Phe）、第１１５番目（Asn）〜第１３１番目（Phe）、第１２４番目（Val）〜第１３１番目（Phe）、第１２５番目（Pro）〜第１３１番目（Phe）、第１２６番目（Asn）〜第１３１番目（Phe）または第１２７番目（Leu）〜第１３１番目（Phe）のアミノ酸配列からなるペプチド（ウシＲＦＲＰ−３）、
（vii）配列番号：９で表わされるアミノ酸配列の第５８番目（Ser）〜第９４番目（Phe）、第７２番目（Val）〜第９４番目（Phe）、第７５番目（Met）〜第９４番目（Phe）、第８３番目（Val）〜第９４番目（Phe）または第８４番目（Pro）〜第９４番目（Phe）のアミノ酸配列からなるペプチド（マウスＲＦＲＰ−１）、
（viii）配列番号：９で表わされるアミノ酸配列の第１１８番目（Phe）〜第１２５番目（Phe）、第１１９番目（Pro）〜第１２５番目（Phe）、第１２０番目（Ser）〜第１２５番目（Phe）または第１２１番目（Leu）〜第１２５番目（Phe）のアミノ酸配列からなるペプチド（マウスＲＦＲＰ−３）、
（ix）配列番号：７または２２で表わされるアミノ酸配列の第５８番目（Ser）〜第９４番目（Phe）、第７２番目（Asp）〜第９４番目（Phe）、第７５番目（Met）〜第９４番目（Phe）、第８３番目（Val）〜第９４番目（Phe）または第８４番目（Pro）〜第９４番目（Phe）のアミノ酸配列からなるペプチド（ラットＲＦＲＰ−１）、
（ｘ）配列番号：７または２２で表わされるアミノ酸配列の第１１８番目（Phe）〜第１２５番目（Phe）、第１１９番目（Pro）〜第１２５番目（Phe）、第１２０番目（Ser）〜第１２５番目（Phe）または第１２１番目（Leu）〜第１２５番目（Phe）のアミノ酸配列からなるペプチド（ラットＲＦＲＰ−３）、
（xi）上記（ｉ）〜（ｘ）のペプチドのアミノ酸配列中の１〜５個のアミノ酸が欠失したアミノ酸配列からなるペプチド（欠失型）、
（xii）上記（ｉ）〜（ｘ）のペプチドのアミノ酸配列に１〜５個のアミノ酸が付加したアミノ酸配列からなるペプチド（付加型）、
（xiii）上記（ｉ）〜（ｘ）のペプチドのアミノ酸配列に１〜５個のアミノ酸が挿入されたアミノ酸配列からなるペプチド（挿入型）、
（xiv）上記（ｉ）〜（ｘ）のペプチドのアミノ酸配列中の１〜５個のアミノ酸で置換されたアミノ酸配列からなるペプチド（置換型）、または
（xv）上記（xi）〜（xiv）の欠失・付加・挿入・置換を組み合わせたアミノ酸配列からなるペプチド、
をコードするＤＮＡである上記〔５〕記載の剤、
〔８〕配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチドまたはその部分ペプチドをコードするＤＮＡを含有してなる糖尿病、耐糖能障害、ケトーシス、アシドーシス、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、頻尿、夜尿症、高脂血症、性機能障害、皮膚疾患、関節症、骨減少症、動脈硬化、血栓性疾患、消化不良、記憶学習障害、肥満、高脂血症、２型糖尿病、低血糖症、高血圧、浮腫、排尿困難症、インスリン抵抗性症候群、不安定糖尿病、脂肪萎縮、インスリンアレルギー、インスリノーマ、脂肪毒性または癌の診断剤、
〔９〕配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチド、その部分ペプチドもしくはそのアミドもしくはそのエステルまたはその塩に対する抗体を含有してなる膵グルカゴン分泌抑制剤、血糖低下剤、尿生成抑制剤、記憶学習低下抑制剤（記憶低下抑制剤）、または糖尿病、耐糖能障害、ケトーシス、アシドーシス、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、頻尿、夜尿症、高脂血症、性機能障害、皮膚疾患、関節症、骨減少症、動脈硬化、血栓性疾患、消化不良または記憶学習障害の予防・治療剤、
〔１０〕配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチド、その部分ペプチドもしくはそのアミドもしくはそのエステルまたはその塩に対する抗体を含有してなる糖尿病、耐糖能障害、ケトーシス、アシドーシス、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、頻尿、夜尿症、高脂血症、性機能障害、皮膚疾患、関節症、骨減少症、動脈硬化、血栓性疾患、消化不良、記憶学習障害、肥満、高脂血症、２型糖尿病、低血糖症、高血圧、浮腫、排尿困難症、インスリン抵抗性症候群、不安定糖尿病、脂肪萎縮、インスリンアレルギー、インスリノーマ、脂肪毒性または癌の診断剤、
〔１１〕配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチドまたはその部分ペプチドをコードするＤＮＡに相補的な塩基配列またはその一部を含有するアンチセンスＤＮＡを含有してなる膵グルカゴン分泌抑制剤、血糖低下剤、尿生成抑制剤、記憶学習低下抑制剤（記憶低下抑制剤）、または糖尿病、耐糖能障害、ケトーシス、アシドーシス、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、頻尿、夜尿症、高脂血症、性機能障害、皮膚疾患、関節症、骨減少症、動脈硬化、血栓性疾患、消化不良または記憶学習障害の予防・治療剤、
〔１２〕配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチドまたはその部分ペプチドの発現量を増加させる化合物またはその塩を含有してなる膵グルカゴン分泌促進剤、血糖上昇剤、尿生成促進剤、記憶消去促進剤（嫌な記憶の消去促進剤）、または肥満、高脂血症、２型糖尿病、低血糖症、高血圧、浮腫、排尿困難症、インスリン抵抗性症候群、不安定糖尿病、脂肪萎縮、インスリンアレルギー、インスリノーマ、動脈硬化、血栓性疾患、脂肪毒性または癌の予防・治療剤、
〔１３〕配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチドまたはその部分ペプチドの発現量を減少させる化合物またはその塩を含有してなる膵グルカゴン分泌抑制剤、血糖低下剤、尿生成抑制剤、記憶学習低下抑制剤（記憶低下抑制剤）、または糖尿病、耐糖能障害、ケトーシス、アシドーシス、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、頻尿、夜尿症、高脂血症、性機能障害、皮膚疾患、関節症、骨減少症、動脈硬化、血栓性疾患、消化不良または記憶学習障害の予防・治療剤、
〔１４〕配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２、その部分ペプチドまたはその塩を含有してなる膵グルカゴン分泌促進剤、血糖上昇剤、尿生成促進剤、記憶消去促進剤（嫌な記憶の消去促進剤）、または肥満、高脂血症、２型糖尿病、低血糖症、高血圧、浮腫、排尿困難症、インスリン抵抗性症候群、不安定糖尿病、脂肪萎縮、インスリンアレルギー、インスリノーマ、動脈硬化、血栓性疾患、脂肪毒性または癌の予防・治療剤、
〔１５〕ＯＴ７Ｔ０２２が配列番号：１１、配列番号：２４または配列番号：２７で表されるアミノ酸配列からなるレセプター蛋白質である上記〔１４〕記載の剤、
〔１６〕配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２またはその部分ペプチドをコードするＤＮＡを含有してなる膵グルカゴン分泌促進剤、血糖上昇剤、尿生成促進剤、記憶消去促進剤（嫌な記憶の消去促進剤）、または肥満、高脂血症、２型糖尿病、低血糖症、高血圧、浮腫、排尿困難症、インスリン抵抗性症候群、不安定糖尿病、脂肪萎縮、インスリンアレルギー、インスリノーマ、動脈硬化、血栓性疾患、脂肪毒性または癌の予防・治療剤、
〔１７〕ＤＮＡが配列番号：１１、配列番号：２４または配列番号：２７で表されるアミノ酸配列からなるレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２またはその部分ペプチドをコードするＤＮＡである上記〔１６〕記載の剤、
〔１８〕配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２またはその部分ペプチドをコードするＤＮＡを含有してなる糖尿病、耐糖能障害、ケトーシス、アシドーシス、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、頻尿、夜尿症、高脂血症、性機能障害、皮膚疾患、関節症、骨減少症、動脈硬化、血栓性疾患、消化不良、記憶学習障害、肥満、高脂血症、２型糖尿病、低血糖症、高血圧、浮腫、排尿困難症、インスリン抵抗性症候群、不安定糖尿病、脂肪萎縮、インスリンアレルギー、インスリノーマ、脂肪毒性または癌の診断剤、
〔１９〕配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２、その部分ペプチドまたはその塩に対する抗体を含有してなる膵グルカゴン分泌抑制剤、血糖低下剤、尿生成抑制剤、記憶学習低下抑制剤（記憶低下抑制剤）、または糖尿病、耐糖能障害、ケトーシス、アシドーシス、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、頻尿、夜尿症、高脂血症、性機能障害、皮膚疾患、関節症、骨減少症、動脈硬化、血栓性疾患、消化不良または記憶学習障害の予防・治療剤、
〔２０〕配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２、その部分ペプチドまたはその塩に対する抗体を含有してなる糖尿病、耐糖能障害、ケトーシス、アシドーシス、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、頻尿、夜尿症、高脂血症、性機能障害、皮膚疾患、関節症、骨減少症、動脈硬化、血栓性疾患、消化不良、記憶学習障害、肥満、高脂血症、２型糖尿病、低血糖症、高血圧、浮腫、排尿困難症、インスリン抵抗性症候群、不安定糖尿病、脂肪萎縮、インスリンアレルギー、インスリノーマ、脂肪毒性または癌の診断剤、
〔２１〕配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２またはその部分ペプチドをコードするＤＮＡに相補的な塩基配列またはその一部を含有するアンチセンスＤＮＡを含有してなる膵グルカゴン分泌抑制剤、血糖低下剤、尿生成抑制剤、記憶学習低下抑制剤（記憶低下抑制剤）、または糖尿病、耐糖能障害、ケトーシス、アシドーシス、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、頻尿、夜尿症、高脂血症、性機能障害、皮膚疾患、関節症、骨減少症、動脈硬化、血栓性疾患、消化不良または記憶学習障害の予防・治療剤、
〔２２〕配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２、その部分ペプチドまたはその塩に対するアゴニストを含有してなる膵グルカゴン分泌促進剤、血糖上昇剤、尿生成促進剤、記憶消去促進剤（嫌な記憶の消去促進剤）、または肥満、高脂血症、２型糖尿病、低血糖症、高血圧、浮腫、排尿困難症、インスリン抵抗性症候群、不安定糖尿病、脂肪萎縮、インスリンアレルギー、インスリノーマ、動脈硬化、血栓性疾患、脂肪毒性または癌の予防・治療剤、
〔２３〕配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２、その部分ペプチドまたはその塩に対するアンタゴニストを含有してなる膵グルカゴン分泌抑制剤、血糖低下剤、尿生成抑制剤、記憶学習低下抑制剤（記憶低下抑制剤）、または糖尿病、耐糖能障害、ケトーシス、アシドーシス、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、頻尿、夜尿症、高脂血症、性機能障害、皮膚疾患、関節症、骨減少症、動脈硬化、血栓性疾患、消化不良または記憶学習障害の予防・治療剤、
〔２４〕配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２またはその部分ペプチドの発現量を増加させる化合物またはその塩を含有してなる膵グルカゴン分泌促進剤、血糖上昇剤、尿生成促進剤、記憶消去促進剤（嫌な記憶の消去促進剤）、または肥満、高脂血症、２型糖尿病、低血糖症、高血圧、浮腫、排尿困難症、インスリン抵抗性症候群、不安定糖尿病、脂肪萎縮、インスリンアレルギー、インスリノーマ、動脈硬化、血栓性疾患、脂肪毒性または癌の予防・治療剤、
〔２５〕配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２またはその部分ペプチドの発現量を減少させる化合物またはその塩を含有してなる膵グルカゴン分泌抑制剤、血糖低下剤、尿生成抑制剤、記憶学習低下抑制剤（記憶低下抑制剤）、または糖尿病、耐糖能障害、ケトーシス、アシドーシス、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、頻尿、夜尿症、高脂血症、性機能障害、皮膚疾患、関節症、骨減少症、動脈硬化、血栓性疾患、消化不良または記憶学習障害の予防・治療剤、
〔２６〕配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチド、その部分ペプチドもしくはそのアミドもしくはそのエステルまたはその塩、および（または）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２、その部分ペプチドまたはその塩を用いることを特徴とする膵グルカゴン分泌調節薬、血糖調節薬または尿生成促進薬のスクリーニング方法、
〔２７〕配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチド、その部分ペプチドもしくはそのアミドもしくはそのエステルまたはその塩、および（または）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２、その部分ペプチドまたはその塩を含有してなる膵グルカゴン分泌調節薬、血糖調節薬または尿生成抑制薬のスクリーニング用キット、
〔２８〕配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチド、その部分ペプチドもしくはそのアミドもしくはそのエステルまたはその塩、および（または）該ポリペプチド、その部分ペプチドもしくはそのアミドもしくはそのエステルまたはその塩と配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２、その部分ペプチドまたはその塩との結合性を変化させる化合物またはその塩を用いることを特徴とする膵グルカゴン分泌調節薬、血糖調節薬または尿生成調節薬のスクリーニング方法、
〔２９〕配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチド、その部分ペプチドもしくはそのアミドもしくはそのエステルまたはその塩、および（または）該ポリペプチド、その部分ペプチドもしくはそのアミドもしくはそのエステルまたはその塩と配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２、その部分ペプチドまたはその塩を含有してなる膵グルカゴン分泌調節薬、血糖調節薬または尿生成調節薬のスクリーニング用キット、
〔３０〕哺乳動物に対して、
（ｉ）配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチド、その部分ペプチドもしくはそのアミドもしくはそのエステルまたはその塩、
（ii）配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチドまたはその部分ペプチドをコードするＤＮＡ、
（iii）配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチドまたはその部分ペプチドの発現量を増加させる化合物またはその塩、
（iv）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２、その部分ペプチドまたはその塩、
（ｖ）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２またはその部分ペプチドをコードするＤＮＡ、
（vi）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２、その部分ペプチドまたはその塩に対するアゴニスト、または
（vii）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２またはその部分ペプチドの発現量を増加させる化合物またはその塩の有効量を投与することを特徴とする膵グルカゴン分泌促進方法、血糖上昇方法、尿生成促進方法、記憶消去促進方法（嫌な記憶の消去促進方法）、または肥満、高脂血症、２型糖尿病、低血糖症、高血圧、浮腫、排尿困難症、インスリン抵抗性症候群、不安定糖尿病、脂肪萎縮、インスリンアレルギー、インスリノーマ、動脈硬化、血栓性疾患、脂肪毒性または癌の予防・治療方法、
〔３１〕哺乳動物に対して、
（ｉ）配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチド、その部分ペプチドもしくはそのアミドもしくはそのエステルまたはその塩に対する抗体、
（ii）配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチドまたはその部分ペプチドをコードするＤＮＡに相補的な塩基配列またはその一部を含有するアンチセンスＤＮＡ、
（iii）配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチドまたはその部分ペプチドの発現量を減少させる化合物またはその塩、
（iv）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２、その部分ペプチドまたはその塩に対する抗体、
（ｖ）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２またはその部分ペプチドをコードするＤＮＡに相補的な塩基配列またはその一部を含有するアンチセンスＤＮＡ、
（vi）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２、その部分ペプチドまたはその塩に対するアンタゴニスト、または
（vii）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２またはその部分ペプチドの発現量を減少させる化合物またはその塩の有効量を投与することを特徴とする膵グルカゴン分泌抑制方法、血糖低下方法、尿生成抑制方法、記憶学習低下抑制方法（記憶低下抑制方法）、または糖尿病、耐糖能障害、ケトーシス、アシドーシス、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、頻尿、夜尿症、高脂血症、性機能障害、皮膚疾患、関節症、骨減少症、動脈硬化、血栓性疾患、消化不良または記憶学習障害の予防・治療方法、
〔３２〕膵グルカゴン分泌促進剤、血糖上昇剤、尿生成促進剤、記憶消去促進剤（嫌な記憶の消去促進剤）、または肥満、高脂血症、２型糖尿病、低血糖症、高血圧、浮腫、排尿困難症、インスリン抵抗性症候群、不安定糖尿病、脂肪萎縮、インスリンアレルギー、インスリノーマ、動脈硬化、血栓性疾患、脂肪毒性または癌の予防・治療剤を製造するための
（ｉ）配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチド、その部分ペプチドもしくはそのアミドもしくはそのエステルまたはその塩、
（ii）配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチドまたはその部分ペプチドをコードするＤＮＡ、
（iii）配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチドまたはその部分ペプチドの発現量を増加させる化合物またはその塩、
（iv）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２、その部分ペプチドまたはその塩、
（ｖ）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２またはその部分ペプチドをコードするＤＮＡ、
（vi）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２、その部分ペプチドまたはその塩に対するアゴニスト、または
（vii）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２またはその部分ペプチドの発現量を増加させる化合物またはその塩の使用、
〔３３〕膵グルカゴン分泌抑制剤、血糖低下剤、尿生成抑制剤、記憶学習低下抑制剤（記憶低下抑制剤）、または糖尿病、耐糖能障害、ケトーシス、アシドーシス、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、頻尿、夜尿症、高脂血症、性機能障害、皮膚疾患、関節症、骨減少症、動脈硬化、血栓性疾患、消化不良または記憶学習障害の予防・治療剤を製造するための
（ｉ）配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチド、その部分ペプチドもしくはそのアミドもしくはそのエステルまたはその塩に対する抗体、
（ii）配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチドまたはその部分ペプチドをコードするＤＮＡに相補的な塩基配列またはその一部を含有するアンチセンスＤＮＡ、
（iii）配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチドまたはその部分ペプチドの発現量を減少させる化合物またはその塩、
（iv）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２、その部分ペプチドまたはその塩に対する抗体、
（ｖ）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２またはその部分ペプチドをコードするＤＮＡに相補的な塩基配列またはその一部を含有するアンチセンスＤＮＡ、
（vi）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２、その部分ペプチドまたはその塩に対するアンタゴニスト、または
（vii）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２またはその部分ペプチドの発現量を減少させる化合物またはその塩の使用、
〔３４〕膵グルカゴン分泌促進薬、血糖上昇薬、尿生成促進薬、記憶消去促進薬（嫌な記憶の消去促進薬）、または肥満、高脂血症、２型糖尿病、低血糖症、高血圧、浮腫、排尿困難症、インスリン抵抗性症候群、不安定糖尿病、脂肪萎縮、インスリンアレルギー、インスリノーマ、動脈硬化、血栓性疾患、脂肪毒性、癌などの予防・治療薬、膵グルカゴン分泌抑制薬、血糖低下薬、尿生成抑制薬、記憶学習低下抑制薬（記憶低下抑制薬）、または糖尿病、耐糖能障害、ケトーシス、アシドーシス、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、頻尿、夜尿症、高脂血症、性機能障害、皮膚疾患、関節症、骨減少症、動脈硬化、血栓性疾患、消化不良、記憶学習障害などの予防・治療薬がＯＴ７Ｔ０２２に結合することを確認する方法、
〔３５〕ＯＴ７Ｔ０２２を用いることを特徴とする、膵グルカゴン分泌促進薬、血糖上昇薬、尿生成促進薬、記憶消去促進薬（嫌な記憶の消去促進薬）、または肥満、高脂血症、２型糖尿病、低血糖症、高血圧、浮腫、排尿困難症、インスリン抵抗性症候群、不安定糖尿病、脂肪萎縮、インスリンアレルギー、インスリノーマ、動脈硬化、血栓性疾患、脂肪毒性、癌などの予防・治療薬がＯＴ７Ｔ０２２に対するアゴニストであることを確認する方法、
〔３６〕ＯＴ７Ｔ０２２を用いることを特徴とする、膵グルカゴン分泌抑制薬、血糖低下薬、尿生成抑制薬、記憶学習低下抑制薬（記憶低下抑制薬）、または糖尿病、耐糖能障害、ケトーシス、アシドーシス、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、頻尿、夜尿症、高脂血症、性機能障害、皮膚疾患、関節症、骨減少症、動脈硬化、血栓性疾患、消化不良、記憶学習障害などの予防・治療薬がＯＴ７Ｔ０２２に対するアンタゴニストであることを確認する方法、および
〔３７〕各薬をＯＴ７Ｔ０２２に接触させた場合における、各薬とＯＴ７Ｔ０２２との結合量を測定することを特徴とする上記〔３４〕〜〔３６〕記載のスクリーニング方法を提供する。
【発明の効果】
【０００９】
ＲＦＲＰおよびＯＴ７Ｔ０２２またはそれらをコードするＤＮＡやＯＴ７Ｔ０２２アゴニストは、例えば、膵グルカゴン分泌促進剤、血糖上昇剤、尿生成促進剤、記憶消去促進剤（嫌な記憶の消去促進剤）、または肥満、高脂血症、２型糖尿病、低血糖症、高血圧、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、浮腫、排尿困難症、インスリン抵抗性症候群、不安定糖尿病、脂肪萎縮、インスリンアレルギー、インスリノーマ、動脈硬化、血栓性疾患、脂肪毒性、癌などの予防・治療剤として有用である。
【００１０】
ＯＴ７Ｔ０２２アンタゴニストは、例えば、膵グルカゴン分泌抑制剤、血糖低下剤、尿生成抑制剤、記憶学習低下抑制剤（記憶低下抑制剤）、または糖尿病、耐糖能障害、ケトーシス、アシドーシス、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、頻尿、夜尿症、高脂血症、性機能障害、皮膚疾患、関節症、骨減少症、動脈硬化、血栓性疾患、消化不良、記憶学習障害などの予防・治療剤として使用することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
本発明で用いられるＲＦＲＰは、配列番号：１で表わされるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するポリペプチド（以下、ＲＦＲＰと称する場合がある）であり、ヒトや温血動物（例えば、モルモット、ラット、マウス、ニワトリ、ウサギ、ブタ、ヒツジ、ウシ、サルなど）の細胞（例えば、網膜細胞、肝細胞、脾細胞、神経細胞、グリア細胞、膵臓β細胞、骨髄細胞、メサンギウム細胞、ランゲルハンス細胞、表皮細胞、上皮細胞、内皮細胞、繊維芽細胞、繊維細胞、筋細胞、脂肪細胞、免疫細胞（例、マクロファージ、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ナチュラルキラー細胞、肥満細胞、好中球、好塩基球、好酸球、単球）、巨核球、滑膜細胞、軟骨細胞、骨細胞、骨芽細胞、破骨細胞、乳腺細胞、肝細胞もしくは間質細胞、またはこれら細胞の前駆細胞、幹細胞もしくは癌細胞など）もしくはそれらの細胞が存在するあらゆる組織、例えば、脳、脳の各部位（例、網膜、嗅球、扁桃核、大脳基底球、海馬、視床、視床下部、大脳皮質、延髄、小脳）、脊髄、下垂体、胃、膵臓、腎臓、肝臓、生殖腺、甲状腺、胆のう、骨髄、副腎、皮膚、筋肉、肺、消化管（例、大腸、小腸）、血管、心臓、胸腺、脾臓、顎下腺、末梢血、前立腺、睾丸、卵巣、胎盤、子宮、骨、関節、骨格筋など、または血球系の細胞もしくはその培養細胞（例えば、ＭＥＬ，Ｍ１，ＣＴＬＬ−２，ＨＴ−２，ＷＥＨＩ−３，ＨＬ−６０，ＪＯＳＫ−１，Ｋ５６２，ＭＬ−１，ＭＯＬＴ−３，ＭＯＬＴ−４，ＭＯＬＴ−１０，ＣＣＲＦ−ＣＥＭ，ＴＡＬＬ−１，Ｊｕｒｋａｔ，ＣＣＲＴ−ＨＳＢ−２，ＫＥ−３７，ＳＫＷ−３，ＨＵＴ−７８，ＨＵＴ−１０２，Ｈ９，Ｕ９３７，ＴＨＰ−１，ＨＥＬ，ＪＫ−１，ＣＭＫ，ＫＯ−８１２，ＭＥＧ−０１など）に由来するポリペプチドであってもよく、合成ポリペプチドであってもよい。
【００１２】
配列番号：１で表わされるアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列としては、配列番号：１で表わされるアミノ酸配列と約７０％以上、好ましくは約８０％以上、より好ましくは約９０％以上、さらに好ましくは約９５％以上の相同性を有するアミノ酸配列などがあげられる。例えば、配列番号：１で表わされるアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列としては、配列番号：１で表わされるアミノ酸配列の第２２〜１８０番目のアミノ酸配列を有するアミノ酸配列などがあげられる。
【００１３】
より具体的には、配列番号：１で表されるアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列として、例えば、配列番号：３、配列番号：５、配列番号：７、配列番号：９または配列番号：２２で表されるアミノ酸配列などがあげられる。
【００１４】
本発明に用いられるＲＦＲＰは、具体的には、前記の配列番号：１で表わされるアミノ酸配列からなるポリペプチドまたは配列番号：１で表わされるアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列（例えば、配列番号：３、配列番号：５、配列番号：７、配列番号：９または配列番号：２２で表されるアミノ酸配列など）を有し、配列番号：１で表わされるアミノ酸配列からなるポリペプチドと実質的に同質の膵グルカゴン分泌促進活性、血糖上昇活性、尿生成促進作用、記憶消去促進作用（嫌な記憶の消去促進作用）などを有するポリペプチドである。
【００１５】
アミノ酸配列の相同性は、相同性計算アルゴリズムＮＣＢＩ  ＢＬＡＳＴ（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｅｎｔｅｒ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ  Ｂａｓｉｃ  Ｌｏｃａｌ  Ａｌｉｇｎｍｅｎｔ  Ｓｅａｒｃｈ  Ｔｏｏｌ）を用い、以下の条件（期待値＝１０；ギャップを許す；マトリクス＝ＢＬＯＳＵＭ６２；フィルタリング＝ＯＦＦ）にて計算することができる。
【００１６】
実質的に同質とは、膵グルカゴン分泌促進活性、血糖上昇活性、尿生成促進作用、記憶消去促進作用（嫌な記憶の消去促進作用）などが性質的に（例、生理化学的に、または薬理学的に）同質であることを示す。従って、膵グルカゴン分泌促進活性、血糖上昇活性、尿生成促進作用、記憶消去促進作用（嫌な記憶の消去促進作用）などが同等（例、約０．１〜１００倍、好ましくは約０．５〜１０倍、より好ましくは０．５〜２倍）であることが好ましいが、これらの活性の程度、ポリペプチドの分子量などの量的要素は異なっていてもよい。
【００１７】
膵グルカゴン分泌促進活性、血糖上昇活性、記憶消去促進作用（嫌な記憶の消去促進作用）の測定は、それぞれ実施例１〜３の方法などに準じて行なうことができる。
【００１８】
また、ＲＦＲＰとしては、例えば、（ｉ）配列番号：１、配列番号：３、配列番号：５、配列番号：７、配列番号：９または配列番号：２２で表わされるアミノ酸配列中の１〜２０個（好ましくは、１〜１５個、さらに好ましくは、１〜５個、より好ましくは、１〜３個）のアミノ酸が欠失したアミノ酸配列、（ii）配列番号：１、配列番号：３、配列番号：５、配列番号：７、配列番号：９または配列番号：２２で表わされるアミノ酸配列に１〜２０個（好ましくは、１〜１５個、さらに好ましくは、１〜５個、より好ましくは、１〜３個）のアミノ酸が付加したアミノ酸配列、（iii）配列番号：１、配列番号：３、配列番号：５、配列番号：７、配列番号：９または配列番号：２２で表わされるアミノ酸配列に１〜２０個（好ましくは、１〜１５個、さらに好ましくは、１〜５個、より好ましくは、１〜３個）のアミノ酸が挿入されたアミノ酸配列、（iv）配列番号：１、配列番号：３、配列番号：５、配列番号：７、配列番号：９または配列番号：２２で表わされるアミノ酸配列中の１〜２０個（好ましくは、１〜１５個、さらに好ましくは、１〜５個、より好ましくは、１〜３個）のアミノ酸が他のアミノ酸で置換されたアミノ酸配列、または（ｖ）それら欠失・付加・挿入・置換を組み合わせたアミノ酸配列を有するポリペプチドも含まれる。
【００１９】
上記のようにアミノ酸配列が欠失、付加、挿入または置換されている場合、その欠失、付加、挿入または置換の位は特に限定されない。
【００２０】
本明細書におけるポリペプチドは、ペプチド標記の慣例に従って左端がＮ末端（アミノ末端）、右端がＣ末端（カルボキシル末端）である。配列番号：１で表わされるアミノ酸配列からなるヒトＲＦＲＰをはじめとするＲＦＲＰは、Ｃ末端がカルボキシル基（−ＣＯＯＨ）、カルボキシレート(−ＣＯＯ−)、アミド（−ＣＯＮＨ２）またはエステル（−ＣＯＯＲ）の何れであってもよい。
【００２１】
ここでエステルにおけるＲとしては、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピルもしくはｎ−ブチルなどのＣ１−６アルキル基、例えば、シクロペンチル、シクロヘキシルなどのＣ３−８シクロアルキル基、例えば、フェニル、α−ナフチルなどのＣ６−１２アリール基、例えば、ベンジル、フェネチルなどのフェニル−Ｃ１−２アルキル基もしくはα−ナフチルメチルなどのα−ナフチル−Ｃ１−２アルキル基などのＣ７−１４アラルキル基のほか、経口用エステルとして汎用されるピバロイルオキシメチル基などが用いられる。
【００２２】
ＲＦＲＰがＣ末端以外にカルボキシル基（またはカルボキシレート）を有している場合、カルボキシル基がアミド化またはエステル化されているものも本発明でいうＲＦＲＰの範囲に含まれる。この場合のエステルとしては、例えば上記したＣ末端のエステルなどが用いられる。
【００２３】
さらに、ＲＦＲＰには、Ｎ末端のアミノ酸残基（例、メチオニン残基）のアミノ基が保護基（例えば、ホルミル基、アセチル基などのＣ１−６アルカノイルなどのＣ１−６アシル基など）で保護されているもの、生体内で切断されて生成するＮ末端のグルタミン残基がピログルタミン酸化したもの、分子内のアミノ酸の側鎖上の置換基（例えば−ＯＨ、−ＳＨ、アミノ基、イミダゾール基、インドール基、グアニジノ基など）が適当な保護基（例えば、ホルミル基、アセチル基などのＣ１−６アルカノイル基などのＣ１−６アシル基など）で保護されているもの、あるいは糖鎖が結合したいわゆる糖蛋白質などの複合蛋白質なども含まれる。以下、これらのポリペプチドを含めてＲＦＲＰと略称することもある。
【００２４】
本発明で用いられるＲＦＲＰの具体例としては、例えば、配列番号：１で表わされるアミノ酸配列からなるヒトＲＦＲＰ、配列番号：３で表わされるアミノ酸配列からなるヒトＲＦＲＰ、配列番号：５で表わされるアミノ酸配列からなるウシＲＦＲＰ、配列番号：７で表わされるアミノ酸配列からなるラットＲＦＲＰ、配列番号：９で表わされるアミノ酸配列からなるマウスＲＦＲＰ、配列番号：２２で表わされるアミノ酸配列からなるラットＲＦＲＰなどが用いられ、例えば、配列番号：１で表わされるアミノ酸配列からなるヒトＲＦＲＰ、配列番号：３で表わされるアミノ酸配列からなるヒトＲＦＲＰ、配列番号：５で表わされるアミノ酸配列からなるウシＲＦＲＰが好ましく用いられる。
【００２５】
ＲＦＲＰの部分ペプチド（以下、ＲＦＲＰ部分ペプチドと称する場合がある）としては、前記したＲＦＲＰの部分ペプチドであって、後述するＯＴ７Ｔ０２２（配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質またはその塩）に結合する能力を有するものであれば、いかなるものでもよい。
【００２６】
また、ＲＦＲＰ部分ペプチドは、そのアミノ酸配列中の１〜５個（好ましくは、１〜３個）のアミノ酸が欠失し、または、そのアミノ酸配列に１〜５個（好ましくは、１〜３個）のアミノ酸が付加し、または、そのアミノ酸配列に１〜５個（好ましくは、１〜３個）のアミノ酸が挿入され、または、そのアミノ酸配列中の１〜５個（好ましくは、１〜３個）のアミノ酸が他のアミノ酸で置換されたアミノ酸配列からなるものであってもよく、または、それら欠失・付加・挿入・置換を組み合わせたアミノ酸配列からなるものであってもよい。
【００２７】
また、ＲＦＲＰ部分ペプチドはＣ末端がカルボキシル基（−ＣＯＯＨ）、カルボキシレート（−ＣＯＯ−）、アミド（−ＣＯＮＨ２）またはエステル（−ＣＯＯＲ）（Ｒは上記と同意義を示す）のいずれであってもよい。なかでも、Ｃ末端がアミド（−ＣＯＮＨ２）であるものが好ましい。
【００２８】
ＲＦＲＰ部分ペプチドがＣ末端以外にカルボキシル基（またはカルボキシレート）を有している場合、カルボキシル基がアミド化またはエステル化されているものも本発明でいうＲＦＲＰ部分ペプチドに含まれる。この場合のエステルとしては、例えば上記したＣ末端のエステルなどが用いられる。
【００２９】
さらに、ＲＦＲＰ部分ペプチドには、前記したＲＦＲＰと同様に、Ｎ末端のアミノ酸残基（例、メチオニン残基）のアミノ基が保護基で保護されているもの、Ｎ端側が生体内で切断され生成したグルタミン残基がピログルタミン酸化したもの、分子内のアミノ酸の側鎖上の置換基が適当な保護基で保護されているもの、あるいは糖鎖が結合したいわゆる糖ペプチドなどの複合ペプチドなども含まれる。以下、これらの部分ペプチドも含めてＲＦＲＰ部分ペプチドと略称することもある。
【００３０】
ＲＦＲＰ部分ペプチドとして好ましくは、ＲＦamide、ＲＳamideまたはＲＬamide構造を有するペプチド、より好ましくは、ＲＦamideまたはＲＳamide構造を有するペプチド、特に好ましくは、ＲＦamideを有するペプチドが挙げられる。
【００３１】
ＲＦamide構造とは、ぺプチドのＣ末端がArginine（アルギニン）-Phenylalanine（フェニルアラニン）-NH2構造になっていることをいい、ＲＳamide構造とは、ぺプチドのＣ末端がArginine（アルギニン）-Serine（セリン）-NH2構造になっていることをいい、ＲＬamide構造とは、ぺプチドのＣ末端がArginine（アルギニン）-Leucine（ロイシン）-NH2構造になっていることを意味する。
【００３２】
ＲＦＲＰ部分ペプチドの中でも、例えば、
（ｉ）配列番号：１または配列番号：３で表わされるアミノ酸配列の第８８番目（Leu）〜第９２番目（Phe）のアミノ酸配列を含有し、そのアミノ酸配列のＮ末端側に、配列番号：１で表わされるアミノ酸配列の第１番目（Met）〜第８７番目（Asn）のアミノ酸配列のＣ末端から数えて１〜８７個のアミノ酸が付加していてもよいアミノ酸配列からなるヒトＲＦＲＰ−１、
（ii）配列番号：１または配列番号：３で表わされるアミノ酸配列の第１０１番目（Ser）〜第１１２番目（Ser）のアミノ酸配列を含有し、そのアミノ酸配列のＮ末端側に、配列番号：１で表わされるアミノ酸配列の第１番目（Met）〜第１００番目（Arg）のアミノ酸配列のＣ末端から数えて１〜１００個のアミノ酸が付加していてもよいアミノ酸配列からなるヒトＲＦＲＰ−２、
（iii）配列番号：１または配列番号：３で表わされるアミノ酸配列の第１２７番目（Leu）〜第１３１番目（Phe）のアミノ酸配列を含有し、そのアミノ酸配列のＮ末端側に、配列番号：１で表わされるアミノ酸配列の第１番目（Met）〜第１２６番目（Asn）のアミノ酸配列のＣ末端から数えて１〜１２６個のアミノ酸が付加していてもよいアミノ酸配列からなるヒトＲＦＲＰ−３、
（iv）配列番号：５で表わされるアミノ酸配列の第８８番目（Leu）〜第９２番目（Phe）のアミノ酸配列を含有し、そのアミノ酸配列のＮ末端側に、配列番号：１で表わされるアミノ酸配列の第１番目（Met）〜第８７番目（Asn）のアミノ酸配列のＣ末端から数えて１〜８７個のアミノ酸が付加していてもよいアミノ酸配列からなるウシＲＦＲＰ−１、
（ｖ）配列番号：５で表わされるアミノ酸配列の第１０１番目（Ser）〜第１１２番目（Ser）のアミノ酸配列を含有し、そのアミノ酸配列のＮ末端側に、配列番号：１で表わされるアミノ酸配列の第１番目（Met）〜第１００番目（Arg）のアミノ酸配列のＣ末端から数えて１〜１００個のアミノ酸が付加していてもよいアミノ酸配列からなるウシＲＦＲＰ−２、
（vi）配列番号：５で表わされるアミノ酸配列の第１２７番目（Leu）〜第１３１番目（Phe）のアミノ酸配列を含有し、そのアミノ酸配列のＮ末端側に、配列番号：１で表わされるアミノ酸配列の第１番目（Met）〜第１２６番目（Asn）のアミノ酸配列のＣ末端から数えて１〜１２６個のアミノ酸が付加していてもよいアミノ酸配列からなるウシＲＦＲＰ−３、
（vii）配列番号：９で表わされるアミノ酸配列の第９０番目（Leu）〜第９４番目（Phe）のアミノ酸配列を含有し、そのアミノ酸配列のＮ末端側に、配列番号：１で表わされるアミノ酸配列の第１番目（Met）〜第８９番目（Asn）のアミノ酸配列のＣ末端から数えて１〜８９個のアミノ酸が付加していてもよいアミノ酸配列からなるマウスＲＦＲＰ−１、
（viii）配列番号：９で表わされるアミノ酸配列の第１２１番目（Leu）〜第１２５番目（Phe）のアミノ酸配列を含有し、そのアミノ酸配列のＮ末端側に、配列番号：１で表わされるアミノ酸配列の第１番目（Met）〜第１２０番目（Ser）のアミノ酸配列のＣ末端から数えて１〜１２０個のアミノ酸が付加していてもよいアミノ酸配列からなるマウスＲＦＲＰ−３、
（ix）配列番号：７または２２で表わされるアミノ酸配列の第９０番目（Leu）〜第９４番目（Phe）のアミノ酸配列を含有し、そのアミノ酸配列のＮ末端側に、配列番号：１で表わされるアミノ酸配列の第１番目（Met）〜第８９番目（Asn）のアミノ酸配列のＣ末端から数えて１〜８９個のアミノ酸が付加していてもよいアミノ酸配列からなるラットＲＦＲＰ−１、
（ｘ）配列番号：７または２２で表わされるアミノ酸配列の第１２１番目（Leu）〜第１２５番目（Phe）のアミノ酸配列を含有し、そのアミノ酸配列のＮ末端側に、配列番号：１で表わされるアミノ酸配列の第１番目（Met）〜第１２０番目（Ser）のアミノ酸配列のＣ末端から数えて１〜１２０個のアミノ酸が付加していてもよいアミノ酸配列からなるラットＲＦＲＰ−３、
（xi）上記（ｉ）〜（ｘ）のペプチドのアミノ酸配列に１〜５個のアミノ酸が付加したアミノ酸配列からなるペプチド、
（xii）上記（ｉ）〜（ｘ）のペプチドのアミノ酸配列に１〜５個のアミノ酸が挿入されたアミノ酸配列からなるペプチド、
（xiii）上記（ｉ）〜（ｘ）のペプチドのアミノ酸配列中の１〜５個のアミノ酸で置換されたアミノ酸配列からなるペプチド、または
（xiv）上記（xi）〜（xiii）の付加・挿入・置換を組み合わせたアミノ酸配列からなるペプチドなどが用いられる。
【００３３】
これらのＲＦＲＰ部分ペプチドの中でも、
（ｉ）配列番号：１または配列番号：３で表わされるアミノ酸配列の第５６番目（Ser）〜第９２番目（Phe）、第７０番目（Met）〜第９２番目（Phe）、第７３番目（Met）〜第９２番目（Phe）、第８１番目（Met）〜第９２番目（Phe）または第８４番目（Ser）〜第９２番目（Phe）のアミノ酸配列からなるヒトＲＦＲＰ−１、
（ii）配列番号：１または配列番号：３で表わされるアミノ酸配列の第１０１番目（Ser）〜第１１２番目（Ser）のアミノ酸配列からなるヒトＲＦＲＰ−２、
（iii）配列番号：１または配列番号：３で表わされるアミノ酸配列の第１０１番目（Asn）〜第１３１番目（Phe）、第１０４番目（Asn）〜第１３１番目（Phe）、第１１５番目（Asn）〜第１３１番目（Phe）、第１２４番目（Val）〜第１３１番目（Phe）、第１２５番目（Pro）〜第１３１番目（Phe）、第１２６番目（Asn）〜第１３１番目（Phe）または第１２７番目（Leu）〜第１３１番目（Phe）のアミノ酸配列からなるヒトＲＦＲＰ−３、
（iv）配列番号：５で表わされるアミノ酸配列の第５８番目（Ser）〜第９２番目（Phe）、第７０番目（Lys）〜第９２番目（Phe）、第７３番目（Met）〜第９２番目（Phe）、第８１番目（Met）〜第９２番目（Phe）または第８４番目（Ser）〜第９２番目（Phe）のアミノ酸配列からなるウシＲＦＲＰ−１、
（ｖ）配列番号：５で表わされるアミノ酸配列の第１０１番目（Ser）〜第１１２番目（Ser）のアミノ酸配列からなるウシＲＦＲＰ−２、
（vi）配列番号：５で表わされるアミノ酸配列の第１０１番目（Ser）〜第１３１番目（Phe）、第１０４番目（Ala）〜第１３１番目（Phe）、第１１５番目（Asn）〜第１３１番目（Phe）、第１２４番目（Val）〜第１３１番目（Phe）、第１２５番目（Pro）〜第１３１番目（Phe）、第１２６番目（Asn）〜第１３１番目（Phe）または第１２７番目（Leu）〜第１３１番目（Phe）のアミノ酸配列からなるウシＲＦＲＰ−３、
（vii）配列番号：９で表わされるアミノ酸配列の第５８番目（Ser）〜第９４番目（Phe）、第７２番目（Val）〜第９４番目（Phe）、第７５番目（Met）〜第９４番目（Phe）、第８３番目（Val）〜第９４番目（Phe）または第８４番目（Pro）〜第９４番目（Phe）のアミノ酸配列からなるマウスＲＦＲＰ−１、
（viii）配列番号：９で表わされるアミノ酸配列の第１１８番目（Phe）〜第１２５番目（Phe）、第１１９番目（Pro）〜第１２５番目（Phe）、第１２０番目（Ser）〜第１２５番目（Phe）または第１２１番目（Leu）〜第１２５番目（Phe）のアミノ酸配列からなるマウスＲＦＲＰ−３、
（ix）配列番号：７または２２で表わされるアミノ酸配列の第５８番目（Ser）〜第９４番目（Phe）、第７２番目（Asp）〜第９４番目（Phe）、第７５番目（Met）〜第９４番目（Phe）、第８３番目（Val）〜第９４番目（Phe）または第８４番目（Pro）〜第９４番目（Phe）のアミノ酸配列からなるラットＲＦＲＰ−１、
（ｘ）配列番号：７または２２で表わされるアミノ酸配列の第１１８番目（Phe）〜第１２５番目（Phe）、第１１９番目（Pro）〜第１２５番目（Phe）、第１２０番目（Ser）〜第１２５番目（Phe）または第１２１番目（Leu）〜第１２５番目（Phe）のアミノ酸配列からなるラットＲＦＲＰ−３、
（xi）上記（ｉ）〜（ｘ）のペプチドのアミノ酸配列中の１〜５個のアミノ酸が欠失したアミノ酸配列からなる欠失型ペプチド、
（xii）上記（ｉ）〜（ｘ）のペプチドのアミノ酸配列に１〜５個のアミノ酸が付加したアミノ酸配列からなる付加型ペプチド、
（xiii）上記（ｉ）〜（ｘ）のペプチドのアミノ酸配列に１〜５個のアミノ酸が挿入されたアミノ酸配列からなる挿入型ペプチド、
（xiv）上記（ｉ）〜（ｘ）のペプチドのアミノ酸配列中の１〜５個のアミノ酸で置換されたアミノ酸配列からなる置換型ペプチド、または
（xv）上記（xi）〜（xiv）の欠失・付加・挿入・置換を組み合わせたアミノ酸配列からなるペプチドなどが好ましく用いられる。
【００３４】
特にこれらのペプチドのアミド体（好ましくは、これらペプチドのＣ末端のカルボキシル基（−ＣＯＯＨ）がアミド化された（−ＣＯＮＨ２）ペプチド）が好ましい。
【００３５】
具体的には、配列番号：１で表わされるアミノ酸配列の第８１番目（Met）〜第９２番目（Phe）のアミノ酸配列で表されるペプチドのＣ末端がアミド化された（−ＣＯＮＨ２）ペプチド（配列番号：１３）、配列番号：１で表わされるアミノ酸配列の第１０１番目（Ser）〜第１１２番目（Ser）のアミノ酸配列で表されるペプチドのＣ末端がアミド化された（−ＣＯＮＨ２）ペプチド（配列番号：１５）および配列番号：１で表わされるアミノ酸配列の第１２４番目（Val）〜第１３１番目（Phe）のアミノ酸配列で表されるペプチドのＣ末端がアミド化された（−ＣＯＮＨ２）ペプチド（配列番号：１４）などがあげられる。
【００３６】
ＲＦＲＰまたはＲＦＲＰ部分ペプチドの塩としては、生理学的に許容される酸（例、無機酸、有機酸）や塩基（例、アルカリ金属塩）などとの塩が用いられ、とりわけ生理学的に許容される酸付加塩が好ましい。このような塩としては、例えば、無機酸（例えば、塩酸、リン酸、臭化水素酸、硫酸）との塩、あるいは有機酸（例えば、酢酸、ギ酸、プロピオン酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、酒石酸、クエン酸、リンゴ酸、蓚酸、安息香酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸）との塩などが用いられる。
【００３７】
ＲＦＲＰもしくはその塩またはＲＦＲＰ部分ペプチドもしくはその塩は、ＷＯ００／２９４４１号、ＷＯ０１／６６１３４号などに記載の方法に従って製造することができる。
【００３８】
ＲＦＲＰをコードするＤＮＡとしては、前述したＲＦＲＰをコードする塩基配列を含有するものであればいかなるものであってもよい。また、ゲノムＤＮＡ、ゲノムＤＮＡライブラリー、前記した細胞・組織由来のｃＤＮＡ、前記した細胞・組織由来のｃＤＮＡライブラリー、合成ＤＮＡのいずれでもよい。
【００３９】
ライブラリーに使用するベクターは、バクテリオファージ、プラスミド、コスミド、ファージミドなどいずれであってもよい。また、前記した細胞・組織よりtotalＲＮＡまたはｍＲＮＡ画分を調製したものを用いて直接Reverse Transcriptase Polymerase Chain Reaction（以下、ＲＴ-ＰＣＲ法と略称する）によって増幅することもできる。
【００４０】
ＲＦＲＰをコードするＤＮＡとしては、例えば、配列番号：２、配列番号：４、配列番号：６、配列番号：８、配列番号：１０または配列番号：２３で表わされる塩基配列を含有するＤＮＡ、または配列番号：２、配列番号：４、配列番号：６、配列番号：８、配列番号：１０または配列番号：２３で表わされる塩基配列とハイストリンジェントな条件下でハイブリダイズする塩基配列を有し、配列番号：１、配列番号：３、配列番号：５、配列番号：７、配列番号：９または配列番号：２２で表されるアミノ酸配列からなるＲＦＲＰと実質的に同質の活性を有するポリペプチドをコードするＤＮＡなどであれば何れのものでもよい。
【００４１】
配列番号：２、配列番号：４、配列番号：６、配列番号：８、配列番号：１０または配列番号：２３で表わされる塩基配列とハイストリンジェントな条件下でハイブリダイズできるＤＮＡとしては、例えば、それぞれ配列番号：２、配列番号：４、配列番号：６、配列番号：８、配列番号：１０または配列番号：２３で表わされる塩基配列と約７０％以上、好ましくは約８０％以上、より好ましくは約９０％以上、さらに好ましくは約９５％以上の相同性を有する塩基配列を含有するＤＮＡなどが用いられる。
【００４２】
塩基配列の相同性は、相同性計算アルゴリズムＮＣＢＩ  ＢＬＡＳＴ（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｅｎｔｅｒ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ  Ｂａｓｉｃ  Ｌｏｃａｌ  Ａｌｉｇｎｍｅｎｔ  Ｓｅａｒｃｈ  Ｔｏｏｌ）を用い、以下の条件（期待値＝１０；ギャップを許す；フィルタリング＝ＯＮ；マッチスコア＝１；ミスマッチスコア＝−３）にて計算することができる。
【００４３】
ハイブリダイゼーションは、自体公知の方法あるいはそれに準じる方法、例えば、モレキュラー・クローニング（Molecular Cloning）２nd（J. Sambrook et al., Cold Spring Harbor Lab. Press, 1989）に記載の方法などに従って行なうことができる。また、市販のライブラリーを使用する場合、添付の使用説明書に記載の方法に従って行なうことができる。より好ましくは、ハイストリンジェントな条件に従って行なうことができる。
【００４４】
ハイストリンジェントな条件とは、例えば、ナトリウム濃度が約１９〜４０ｍＭ、好ましくは約１９〜２０ｍＭで、温度が約５０〜７０℃、好ましくは約６０〜６５℃の条件を示す。特に、ナトリウム濃度が約１９ｍＭで温度が約６５℃の場合が最も好ましい。
【００４５】
より具体的には、配列番号：１で表わされるアミノ酸配列からなるヒトＲＦＲＰをコードするＤＮＡとしては、配列番号：２で表わされる塩基配列からなるＤＮＡなどが用いられる。配列番号：３で表わされるアミノ酸配列からなるヒトＲＦＲＰをコードするＤＮＡとしては、配列番号：４で表わされる塩基配列からなるＤＮＡなどが用いられる。配列番号：５で表わされるアミノ酸配列からなるウシＲＦＲＰをコードするＤＮＡとしては、配列番号：６で表わされる塩基配列からなるＤＮＡなどが用いられる。配列番号：７で表わされるアミノ酸配列からなるラットＲＦＲＰをコードするＤＮＡとしては、配列番号：８で表わされる塩基配列からなるＤＮＡなどが用いられる。配列番号：９で表わされるアミノ酸配列からなるマウスＲＦＲＰをコードするＤＮＡとしては、配列番号：１０で表わされる塩基配列からなるＤＮＡなどが用いられる。配列番号：２２で表わされるアミノ酸配列からなるラットＲＦＲＰをコードするＤＮＡとしては、配列番号：２３で表わされる塩基配列からなるＤＮＡなどが用いられる。
【００４６】
ＲＦＲＰ部分ペプチドをコードするＤＮＡとしては、前述したＲＦＲＰ部分ペプチドをコードする塩基配列を含有するものであればいかなるものであってもよい。また、ゲノムＤＮＡ、ゲノムＤＮＡライブラリー、前記した細胞・組織由来のｃＤＮＡ、前記した細胞・組織由来のｃＤＮＡライブラリー、合成ＤＮＡのいずれでもよい。
【００４７】
ＲＦＲＰ部分ペプチドをコードするＤＮＡとしては、例えば、配列番号：２、配列番号：４、配列番号：６、配列番号：８、配列番号：１０または配列番号：２３で表わされる塩基配列を含有するＤＮＡの部分塩基配列を有するＤＮＡ、または配列番号：２、配列番号：４、配列番号：６、配列番号：８、配列番号：１０または配列番号：２３で表わされる塩基配列とハイストリンジェントな条件下でハイブリダイズする塩基配列を有し、配列番号：１、配列番号：３、配列番号：５、配列番号：７、配列番号：９または配列番号：２２で表されるアミノ酸配列からなるＲＦＲＰと実質的に同質の活性を有するポリペプチドをコードするＤＮＡの部分塩基配列を有するＤＮＡなどが用いられる。
【００４８】
配列番号：２、配列番号：４、配列番号：６、配列番号：８、配列番号：１０または配列番号：２３で表わされる塩基配列とハイブリダイズできるＤＮＡは、前記と同意義を示す。
【００４９】
ハイブリダイゼーションの方法およびハイストリンジェントな条件は前記と同様のものが用いられる。
【００５０】
また、ＲＦＲＰ部分ペプチドをコードするＤＮＡとしてより具体的には、前記した具体的なＲＦＲＰ部分ペプチドをコードするＤＮＡなどが用いられる。例えば、
（ｉ）配列番号：１または配列番号：３で表わされるアミノ酸配列の第５６番目（Ser）〜第９２番目（Phe）、第７０番目（Met）〜第９２番目（Phe）、第７３番目（Met）〜第９２番目（Phe）、第８１番目（Met）〜第９２番目（Phe）または第８４番目（Ser）〜第９２番目（Phe）のアミノ酸配列からなるヒトＲＦＲＰ−１をコードするＤＮＡとしては、それぞれ配列番号：２または配列番号：４で表わされる塩基配列の第１６６番目〜第２７６番目、第２０８番目〜第２７６番目、第２１７番目〜第２７６番目、第２４１番目〜第２７６番目または第２５０番目〜第２７６番目の塩基配列からなるＤＮＡ、
（ii）配列番号：１または配列番号：３で表わされるアミノ酸配列の第１０１番目（Ser）〜第１１２番目（Ser）のアミノ酸配列からなるヒトＲＦＲＰ−２をコードするＤＮＡとしては、それぞれ配列番号：２または配列番号：４で表わされる塩基配列の第３０１番目〜第３３６番目の塩基配列からなるＤＮＡ、
（iii）配列番号：１または配列番号：３で表わされるアミノ酸配列の第１０１番目（Asn）〜第１３１番目（Phe）、第１０４番目（Asn）〜第１３１番目（Phe）、第１１５番目（Asn）〜第１３１番目（Phe）、第１２４番目（Val）〜第１３１番目（Phe）、第１２５番目（Pro）〜第１３１番目（Phe）、第１２６番目（Asn）〜第１３１番目（Phe）または第１２７番目（Leu）〜第１３１番目（Phe）のアミノ酸配列からなるヒトＲＦＲＰ−３をコードするＤＮＡとしては、それぞれ配列番号：２または配列番号：４で表わされる塩基配列の第３０１番目〜第３９３番目、第３１０番目〜第３９３番目、第３４３番目〜第３９３番目、第３７０番目〜第３９３番目、第３７３番目〜第３９３番目、第３７６番目〜第３９３番目または第３７９番目〜第３９３番目の塩基配列からなるＤＮＡ、
（iv）配列番号：５で表わされるアミノ酸配列の第５８番目（Ser）〜第９２番目（Phe）、第７０番目（Lys）〜第９２番目（Phe）、第７３番目（Met）〜第９２番目（Phe）、第８１番目（Met）〜第９２番目（Phe）または第８４番目（Ser）〜第９２番目（Phe）のアミノ酸配列からなるウシＲＦＲＰ−１をコードするＤＮＡとしては、配列番号：６で表わされる塩基配列の第１７２番目〜第２７６番目、第２０８番目〜第２７６番目、第２１７番目〜第２７６番目、第２４１番目〜第２７６番目または第２５０番目〜第２７６番目の塩基配列からなるＤＮＡ、
（ｖ）配列番号：５で表わされるアミノ酸配列の第１０１番目（Ser）〜第１１２番目（Ser）のアミノ酸配列からなるウシＲＦＲＰ−２をコードするＤＮＡとしては、配列番号：６で表わされる塩基配列の第３０１番目〜第３３６番目の塩基配列からなるＤＮＡ、
（vi）配列番号：５で表わされるアミノ酸配列の第１０１番目（Ser）〜第１３１番目（Phe）、第１０４番目（Ala）〜第１３１番目（Phe）、第１１５番目（Asn）〜第１３１番目（Phe）、第１２４番目（Val）〜第１３１番目（Phe）、第１２５番目（Pro）〜第１３１番目（Phe）、第１２６番目（Asn）〜第１３１番目（Phe）または第１２７番目（Leu）〜第１３１番目（Phe）のアミノ酸配列からなるウシＲＦＲＰ−３をコードするＤＮＡとしては、配列番号：６で表わされる塩基配列の第３０１番目〜第３９３番目、第３１０番目〜第３９３番目、第３４３番目〜第３９３番目、第３７０番目〜第３９３番目、第３７３番目〜第３９３番目、第３７６番目〜第３９３番目または第３７９番目〜第３９３番目の塩基配列からなるＤＮＡ、
（vii）配列番号：９で表わされるアミノ酸配列の第５８番目（Ser）〜第９４番目（Phe）、第７２番目（Val）〜第９４番目（Phe）、第７５番目（Met）〜第９４番目（Phe）、第８３番目（Val）〜第９４番目（Phe）または第８４番目（Pro）〜第９４番目（Phe）のアミノ酸配列からなるマウスＲＦＲＰ−１をコードするＤＮＡとしては、配列番号：１０で表わされる塩基配列の第１７２番目〜第２８２番目、第２１４番目〜第２８２番目、第２２３番目〜第２８２番目、第２４７番目〜第２８２番目または第２５０番目〜第２８２番目の塩基配列からなるＤＮＡ、
（viii）配列番号：９で表わされるアミノ酸配列の第１１８番目（Phe）〜第１２５番目（Phe）、第１１９番目（Pro）〜第１２５番目（Phe）、第１２０番目（Ser）〜第１２５番目（Phe）または第１２１番目（Leu）〜第１２５番目（Phe）のアミノ酸配列からなるマウスＲＦＲＰ−３をコードするＤＮＡとしては、配列番号：１０で表わされる塩基配列の第３５２番目〜第３７５番目、第３５６番目〜第３７５番目、第３５８番目〜第３７５番目または第３６１番目〜第３７５番目の塩基配列からなるＤＮＡ、
（ix）配列番号：７または２２で表わされるアミノ酸配列の第５８番目（Ser）〜第９４番目（Phe）、第７２番目（Asp）〜第９４番目（Phe）、第７５番目（Met）〜第９４番目（Phe）、第８３番目（Val）〜第９４番目（Phe）または第８４番目（Pro）〜第９４番目（Phe）のアミノ酸配列からなるラットＲＦＲＰ−１をコードするＤＮＡとしては、それぞれ配列番号：８または５１で表わされる塩基配列の第１７２番目〜第２８２番目、第２１４番目〜第２８２番目、第２２３番目〜第２８２番目、第２４７番目〜第２８２番目または第２５０番目〜第２８２番目の塩基配列からなるＤＮＡ、
（ｘ）配列番号：７または２２で表わされるアミノ酸配列の第１１８番目（Phe）〜第１２５番目（Phe）、第１１９番目（Pro）〜第１２５番目（Phe）、第１２０番目（Ser）〜第１２５番目（Phe）または第１２１番目（Leu）〜第１２５番目（Phe）のアミノ酸配列からなるラットＲＦＲＰ−３をコードするＤＮＡとしては、それぞれ配列番号：８または５１で表わされる塩基配列の第３５２番目〜第３７５番目、第３５５番目〜第３７５番目、第３５８番目〜第３７５番目または第３６１番目〜第３７５番目の塩基配列からなるＤＮＡなどが用いられる。
【００５１】
ＲＦＲＰまたはその部分ペプチドを完全にコードするＤＮＡのクローニングは、ＷＯ００／２９４４１号、ＷＯ０１／６６１３４号などに記載の方法に従って行うことができる。
【００５２】
また、ＲＦＲＰまたはその部分ペプチドをコードするＤＮＡからＲＦＲＰまたはその部分ペプチドを製造する場合、ＷＯ００／２９４４１号、ＷＯ０１／６６１３４号などに記載の方法に従って行うことができる。
【００５３】
ＲＦＲＰもしくはその部分ペプチド、後述のＯＴ７Ｔ０２２もしくはその部分ペプチド、およびこれらをコードするＤＮＡは、自体公知の方法で標識化されていてもよく、具体的にはアイソトープラベル化されたもの、蛍光標識されたもの（例えば、フルオレセインなどによる蛍光標識）、ビオチン化されたものまたは酵素標識されたものなどがあげられる。
【００５４】
ＲＦＲＰもしくはそのアミドもしくはそのエステルまたはその塩、ＲＦＲＰ部分ペプチドもしくはそのアミドもしくはそのエステルまたはその塩に対するレセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２（以下、ＯＴ７Ｔ０２２と略記する）としては、例えば、配列番号：１１で表わされるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するレセプター蛋白質が用いられる。
【００５５】
ＯＴ７Ｔ０２２は、例えば、哺乳動物（例えば、ヒト、モルモット、ラット、マウス、ウサギ、ブタ、ヒツジ、ウシ、サルなど）のあらゆる細胞（例えば、脾細胞、神経細胞、グリア細胞、膵臓β細胞、骨髄細胞、メサンギウム細胞、ランゲルハンス細胞、表皮細胞、上皮細胞、内皮細胞、繊維芽細胞、繊維細胞、筋細胞、脂肪細胞、免疫細胞（例、マクロファージ、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ナチュラルキラー細胞、肥満細胞、好中球、好塩基球、好酸球、単球）、巨核球、滑膜細胞、軟骨細胞、骨細胞、骨芽細胞、破骨細胞、乳腺細胞、肝細胞もしくは間質細胞、またはこれら細胞の前駆細胞、幹細胞もしくはガン細胞など）や血球系の細胞、またはそれらの細胞が存在するあらゆる組織、例えば、脳、脳の各部位（例、嗅球、扁頭核、大脳基底球、海馬、視床、視床下部、視床下核、大脳皮質、延髄、小脳、後頭葉、前頭葉、側頭葉、被殻、尾状核、脳染、黒質）、脊髄、下垂体、胃、膵臓、腎臓、肝臓、生殖腺、甲状腺、胆のう、骨髄、副腎、皮膚、筋肉、肺、消化管（例、大腸、小腸）、血管、心臓、胸腺、脾臓、顎下腺、末梢血、末梢血球、前立腺、睾丸、精巣、卵巣、胎盤、子宮、骨、関節、骨格筋など（特に、脳や脳の各部位）に由来する蛋白質であってもよく、また合成蛋白質であってもよい。
【００５６】
配列番号：１１で表わされるアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列としては、例えば、配列番号：１１で表わされるアミノ酸配列と約５０％以上、好ましくは約７０％以上、より好ましくは約８０％以上、さらに好ましくは約９０％以上、最も好ましくは約９５％以上の相同性を有するアミノ酸配列などが挙げられる。
【００５７】
配列番号：１１で表わされるアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を含有する蛋白質としては、例えば、配列番号：１１で表わされるアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を有し、配列番号：１１で表わされるアミノ酸配列からなるＯＴ７Ｔ０２２と実質的に同質の活性を有するレセプター蛋白質などが好ましく、具体的には、配列番号：２４または配列番号：２７で表されるアミノ酸配列からなるレセプター蛋白質などがあげられる。
【００５８】
アミノ酸配列の相同性は、相同性計算アルゴリズムＮＣＢＩ  ＢＬＡＳＴ（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｅｎｔｅｒ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ  Ｂａｓｉｃ  Ｌｏｃａｌ  Ａｌｉｇｎｍｅｎｔ  Ｓｅａｒｃｈ  Ｔｏｏｌ）を用い、以下の条件（期待値＝１０；ギャップを許す；マトリクス＝ＢＬＯＳＵＭ６２；フィルタリング＝ＯＦＦ）にて計算することができる。
【００５９】
実質的に同質の活性としては、例えば、リガンド結合活性またはシグナル情報伝達作用などが挙げられる。実質的に同質とは、それらの活性が性質的に同質であることを示す。したがって、リガンド結合活性またはシグナル情報伝達作用などの活性が同等（例、約０．０１〜１００倍、好ましくは約０．５〜２０倍、より好ましくは約０．５〜２倍）であることが好ましいが、これらの活性の程度や蛋白質の分子量などの量的要素は異なっていてもよい。
【００６０】
リガンド結合活性またはシグナル情報伝達作用などの活性の測定は、自体公知の方法に準じて行なうことができるが、例えば、後述するリガンドの決定方法やスクリーニング方法に従って測定することができる。
【００６１】
また、ＯＴ７Ｔ０２２としては、（ｉ）配列番号：１１、配列番号：２４または配列番号：２７で表わされるアミノ酸配列中の１または２個以上（好ましくは、１〜３０個程度、より好ましくは１〜１０個程度、さらに好ましくは数個（１または２個））のアミノ酸が欠失したアミノ酸配列、（ii）配列番号：１１、配列番号：２４または配列番号：２７で表わされるアミノ酸配列に１または２個以上（好ましくは、１〜３０個程度、より好ましくは１〜１０個程度、さらに好ましくは数個（１または２個））のアミノ酸が付加したアミノ酸配列、（iii）配列番号：１１、配列番号：２４または配列番号：２７で表わされるアミノ酸配列中の１または２個以上（好ましくは、１〜３０個程度、より好ましくは１〜１０個程度、さらに好ましくは数個（１または２個））のアミノ酸が他のアミノ酸で置換されたアミノ酸配列、または（iv）それら欠失・付加・置換を組み合わせたアミノ酸配列からなるレセプター蛋白質なども用いられる。
【００６２】
本明細書におけるＯＴ７Ｔ０２２は、ペプチド標記の慣例に従って左端がＮ末端（アミノ末端）、右端がＣ末端（カルボキシル末端）である。配列番号：１１で表わされるアミノ酸配列からなるＯＴ７Ｔ０２２をはじめとするＯＴ７Ｔ０２２は、Ｃ末端がカルボキシル基（−ＣＯＯＨ）、カルボキシレート(−ＣＯＯ−)、アミド（−ＣＯＮＨ２）またはエステル（−ＣＯＯＲ）のいずれであってもよい。
【００６３】
ここでエステルにおけるＲとしては、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピルもしくはｎ−ブチルなどのＣ１−６アルキル基、例えば、シクロペンチル、シクロヘキシルなどのＣ３−８シクロアルキル基、例えば、フェニル、α−ナフチルなどのＣ６−１２アリール基、例えば、ベンジル、フェネチルなどのフェニル−Ｃ１−２アルキル基もしくはα−ナフチルメチルなどのα−ナフチル−Ｃ１−２アルキル基などのＣ７−１４アラルキル基のほか、経口用エステルとして汎用されるピバロイルオキシメチル基などが用いられる。
【００６４】
ＯＴ７Ｔ０２２がＣ末端以外にカルボキシル基（またはカルボキシレート）を有している場合、カルボキシル基がアミド化またはエステル化されているものもＯＴ７Ｔ０２２の範囲に含まれる。この場合のエステルとしては、例えば上記したＣ末端のエステルなどが用いられる。
【００６５】
さらに、ＯＴ７Ｔ０２２には、上記したＯＴ７Ｔ０２２において、Ｎ末端のメチオニン残基のアミノ基が保護基（例えば、ホルミル基、アセチルなどのＣ２−６アルカノイル基などのＣ１−６アシル基など）で保護されているもの、Ｎ端側が生体内で切断され生成したグルタミル基がピログルタミン酸化したもの、分子内のアミノ酸の側鎖上の置換基（例えば、−ＯＨ、−ＳＨ、アミノ基、イミダゾール基、インドール基、グアニジノ基など）が適当な保護基（例えば、ホルミル基、アセチルなどのＣ２−６アルカノイル基などのＣ１−６アシル基など）で保護されているもの、あるいは糖鎖が結合したいわゆる糖蛋白質などの複合蛋白質なども含まれる。
【００６６】
ＯＴ７Ｔ０２２の具体例としては、例えば、配列番号：１１で表わされるアミノ酸配列からなるラットＯＴ７Ｔ０２２、配列番号：２４で表されるアミノ酸配列からなるヒトＯＴ７Ｔ０２２、配列番号：２７で表されるアミノ酸配列からなるマウスＯＴ７Ｔ０２２などが用いられる。
【００６７】
ＯＴ７Ｔ０２２の部分ペプチドとしては、前記したＯＴ７Ｔ０２２の部分ペプチドであれば何れのものであってもよいが、例えば、ＯＴ７Ｔ０２２蛋白質分子のうち、細胞膜の外に露出している部位であって、レセプター結合活性を有するものなどが用いられる。
【００６８】
具体的には、配列番号：１１、配列番号：２４または配列番号：２７で表わされるアミノ酸配列からなるＯＴ７Ｔ０２２の部分ペプチドとしては、疎水性プロット解析において細胞外領域（親水性（Hydrophilic）部位）であると分析された部分を含むペプチドである。また、疎水性（Hydrophobic）部位を一部に含むペプチドも同様に用いることができる。個々のドメインを個別に含むペプチドも用い得るが、複数のドメインを同時に含む部分のペプチドでも良い。
【００６９】
ＯＴ７Ｔ０２２の部分ペプチドのアミノ酸の数は、前記したＯＴ７Ｔ０２２の構成アミノ酸配列のうち少なくとも２０個以上、好ましくは５０個以上、より好ましくは１００個以上のアミノ酸配列からなるペプチドなどが好ましい。
【００７０】
また、ＯＴ７Ｔ０２２の部分ペプチドは、上記アミノ酸配列中の１または２個以上（好ましくは、１〜１０個程度、さらに好ましくは数個（１または２個））のアミノ酸が欠失し、または、そのアミノ酸配列に１または２個以上（好ましくは、１〜２０個程度、より好ましくは１〜１０個程度、さらに好ましくは数個（１または２個））のアミノ酸が付加し、または、そのアミノ酸配列中の１または２個以上（好ましくは、１〜１０個程度、より好ましくは数個（１または２個））のアミノ酸が他のアミノ酸で置換されていてもよい。
【００７１】
また、ＯＴ７Ｔ０２２の部分ペプチドはＣ末端がカルボキシル基（−ＣＯＯＨ）、カルボキシレート（−ＣＯＯ−）、アミド（−ＣＯＮＨ２）またはエステル（−ＣＯＯＲ）（Ｒは上記と同意義を示す）のいずれであってもよい。
【００７２】
ＯＴ７Ｔ０２２の部分ペプチドがＣ末端以外にカルボキシル基（またはカルボキシレート）を有している場合、カルボキシル基がアミド化またはエステル化されているものもＯＴ７Ｔ０２２の範囲に含まれる。この場合のエステルとしては、例えば上記したＣ末端のエステルなどが用いられる。
【００７３】
さらに、ＯＴ７Ｔ０２２の部分ペプチドには、前記したＯＴ７Ｔ０２２と同様に、Ｎ末端のメチオニン残基のアミノ基が保護基で保護されているもの、Ｎ端側が生体内で切断され生成したグルタミン残基がピログルタミン酸化したもの、分子内のアミノ酸の側鎖上の置換基が適当な保護基で保護されているもの、あるいは糖鎖が結合したいわゆる糖ペプチドなどの複合ペプチドなども含まれる。
【００７４】
ＯＴ７Ｔ０２２またはその部分ペプチドの塩としては、とりわけ生理学的に許容される酸付加塩が好ましい。この様な塩としては、例えば無機酸（例えば、塩酸、リン酸、臭化水素酸、硫酸）との塩、あるいは有機酸（例えば、酢酸、ギ酸、プロピオン酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、酒石酸、クエン酸、リンゴ酸、蓚酸、安息香酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸）との塩などが用いられる。
【００７５】
ＯＴ７Ｔ０２２またはその塩、およびＯＴ７Ｔ０２２を発現する細胞またはその細胞膜画分は、ＷＯ００／２９４４１号、ＷＯ０１／６６１３４号などに記載の方法に従って製造することができる。
【００７６】
ＯＴ７Ｔ０２２をコードするポリヌクレオチドとしては、ＯＴ７Ｔ０２２をコードする塩基配列（ＤＮＡまたはＲＮＡ、好ましくはＤＮＡ）を含有するものであればいかなるものであってもよい。該ポリヌクレオチドとしては、ＯＴ７Ｔ０２２をコードするＤＮＡ、ｍＲＮＡ等のＲＮＡであり、二本鎖であっても、一本鎖であってもよい。二本鎖の場合は、二本鎖ＤＮＡ、二本鎖ＲＮＡまたはＤＮＡ：ＲＮＡのハイブリッドでもよい。一本鎖の場合は、センス鎖（即ち、コード鎖）であっても、アンチセンス鎖（即ち、非コード鎖）であってもよい。
【００７７】
ＯＴ７Ｔ０２２をコードするポリヌクレオチドを用いて、例えば、公知の実験医学増刊「新ＰＣＲとその応用」15(7)、1997記載の方法またはそれに準じた方法により、ＯＴ７Ｔ０２２のｍＲＮＡを定量することができる。
【００７８】
ＯＴ７Ｔ０２２をコードするＤＮＡとしては、ゲノムＤＮＡ、ゲノムＤＮＡライブラリー、前記した細胞・組織由来のｃＤＮＡ、前記した細胞・組織由来のｃＤＮＡライブラリー、合成ＤＮＡのいずれでもよい。ライブラリーに使用するベクターは、バクテリオファージ、プラスミド、コスミド、ファージミドなどいずれであってもよい。また、前記した細胞・組織よりtotalＲＮＡまたはｍＲＮＡ画分を調製したものを用いて直接Reverse Transcriptase Polymerase Chain Reaction（以下、ＲＴ-ＰＣＲ法と略称する）によって増幅することもできる。
【００７９】
具体的には、ＯＴ７Ｔ０２２をコードするＤＮＡとしては、例えば、配列番号：１２、配列番号：２５、配列番号：２６または配列番号：２８で表わされる塩基配列を含有するＤＮＡ、または配列番号：１２、配列番号：２５、配列番号：２６または配列番号：２８で表わされる塩基配列とハイストリンジェントな条件下でハイブリダイズする塩基配列を有し、配列番号：１１、配列番号：２４または配列番号：２７で表されるアミノ酸配列からなるＯＴ７Ｔ０２２と実質的に同質の活性（例、リガンド結合活性、シグナル情報伝達作用など）を有するレセプター蛋白質をコードするＤＮＡであれば何れのものでもよい。
【００８０】
配列番号：１２、配列番号：２５、配列番号：２６または配列番号：２８で表わされる塩基配列とハイブリダイズできるＤＮＡとしては、例えば、配列番号：１２、配列番号：２５、配列番号：２６または配列番号：２８で表わされる塩基配列と約７０％以上、好ましくは約８０％以上、より好ましくは約９０％以上、最も好ましくは約９５％以上の相同性を有する塩基配列を含有するＤＮＡなどが用いられる。
【００８１】
塩基配列の相同性は、相同性計算アルゴリズムＮＣＢＩ  ＢＬＡＳＴ（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｅｎｔｅｒ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ  Ｂａｓｉｃ  Ｌｏｃａｌ  Ａｌｉｇｎｍｅｎｔ  Ｓｅａｒｃｈ  Ｔｏｏｌ）を用い、以下の条件（期待値＝１０；ギャップを許す；フィルタリング＝ＯＮ；マッチスコア＝１；ミスマッチスコア＝−３）にて計算することができる。
【００８２】
ハイブリダイゼーションは、自体公知の方法あるいはそれに準じる方法、例えば、モレキュラー・クローニング（Molecular Cloning）２nd（J. Sambrook et al., Cold Spring Harbor Lab. Press, 1989）に記載の方法などに従って行なうことができる。また、市販のライブラリーを使用する場合、添付の使用説明書に記載の方法に従って行なうことができる。より好ましくは、ハイストリンジェントな条件に従って行なうことができる。
【００８３】
該ハイストリンジェントな条件とは、例えば、ナトリウム濃度が約１９〜４０ｍＭ、好ましくは約１９〜２０ｍＭで、温度が約５０〜７０℃、好ましくは約６０〜６５℃の条件を示す。特に、ナトリウム濃度が約１９ｍＭで温度が約６５℃の場合が最も好ましい。
【００８４】
より具体的には、配列番号：１１で表わされるアミノ酸配列からなるラットＯＴ７Ｔ０２２をコードするＤＮＡとしては、配列番号：１２で表わされる塩基配列からなるＤＮＡなどが用いられる。配列番号：２４で表わされるアミノ酸配列からなるヒトＯＴ７Ｔ０２２をコードするＤＮＡとしては、配列番号：２５または配列番号：２６で表わされる塩基配列からなるＤＮＡなどが用いられる。配列番号：２７で表わされるアミノ酸配列からなるマウスＯＴ７Ｔ０２２をコードするＤＮＡとしては、配列番号：２８で表わされる塩基配列からなるＤＮＡなどが用いられる。
【００８５】
ＯＴ７Ｔ０２２の部分ペプチドをコードするＤＮＡとしては、前述したＯＴ７Ｔ０２２の部分ペプチドをコードする塩基配列を含有するものであればいかなるものであってもよい。また、ゲノムＤＮＡ、ゲノムＤＮＡライブラリー、前記した細胞・組織由来のｃＤＮＡ、前記した細胞・組織由来のｃＤＮＡライブラリー、合成ＤＮＡのいずれでもよい。ライブラリーに使用するベクターは、バクテリオファージ、プラスミド、コスミド、ファージミドなどいずれであってもよい。また、前記した細胞・組織よりｍＲＮＡ画分を調製したものを用いて直接Reverse Transcriptase Polymerase Chain Reaction（以下、ＲＴ-ＰＣＲ法と略称する）によって増幅することもできる。
【００８６】
具体的には、ＯＴ７Ｔ０２２の部分ペプチドをコードするＤＮＡとしては、例えば、（１）配列番号：１２、配列番号：２５、配列番号：２６または配列番号：２８で表わされる塩基配列を有するＤＮＡの部分塩基配列を有するＤＮＡ、または（２）配列番号：１２、配列番号：２５、配列番号：２６または配列番号：２８で表わされる塩基配列とハイストリンジェントな条件下でハイブリダイズする塩基配列を有し、配列番号：１１、配列番号：２４または配列番号：２７で表わされるアミノ酸配列からなるＯＴ７Ｔ０２２と実質的に同質の活性（例、リガンド結合活性またはシグナル情報伝達作用など）を有するレセプター蛋白質をコードするＤＮＡの部分塩基配列を有するＤＮＡなどが用いられる。
【００８７】
ハイブリダイゼーションの方法および条件は前記と同様である。
【００８８】
ＯＴ７Ｔ０２２またはその部分ペプチドをコードするＤＮＡからＯＴ７Ｔ０２２またはその部分ペプチドを製造する場合、ＷＯ００／２９４４１号、ＷＯ０１／６６１３４号などに記載の方法に従って行うことができる。
【００８９】
ＲＦＲＰ、その部分ペプチド、もしくはそのアミドもしくはそのエステルまたはその塩に対する抗体は、自体公知の方法、例えばＷＯ００／２９４４１号、ＷＯ０１／６６１３４号などに記載の方法に従って製造し、使用することができる。
【００９０】
ＯＴ７Ｔ０２２、その部分ペプチドまたはその塩に対する抗体は、自体公知の方法、例えばＷＯ００／２９４４１号、ＷＯ０１／６６１３４号などに記載の方法に従って製造し、使用することができる。
【００９１】
ＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２をコードするＤＮＡの塩基配列の一部、または該ＤＮＡと相補的な塩基配列の一部を含有してなるポリヌクレオチドとは、上記したＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２の部分ペプチドをコードするＤＮＡを包含するだけではなく、ＲＮＡをも包含する意味で用いられる。
【００９２】
本発明に従えば、ＲＦＲＰ遺伝子またはＯＴ７Ｔ０２２遺伝子の複製または発現を阻害することのできるアンチセンス・ポリヌクレオチド（核酸）を、クローン化した、あるいは決定されたＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２をコードするＤＮＡの塩基配列情報に基づき設計し、合成しうる。そうしたポリヌクレオチド（核酸）は、ＲＦＲＰ遺伝子またはＯＴ７Ｔ０２２遺伝子のＲＮＡとハイブリダイズすることができ、該ＲＮＡの合成または機能を阻害することができるか、あるいはＲＦＲＰ関連ＲＮＡまたはＯＴ７Ｔ０２２関連ＲＮＡとの相互作用を介してＲＦＲＰ遺伝子またはＯＴ７Ｔ０２２遺伝子の発現を調節・制御することができる。ＲＦＲＰ関連ＲＮＡまたはＯＴ７Ｔ０２２関連ＲＮＡの選択された配列に相補的なポリヌクレオチド、およびＲＦＲＰ関連ＲＮＡまたはＯＴ７Ｔ０２２関連ＲＮＡと特異的にハイブリダイズすることができるポリヌクレオチドは、生体内および生体外でＲＦＲＰ遺伝子またはＯＴ７Ｔ０２２遺伝子の発現を調節・制御するのに有用であり、また病気などの治療または診断に有用である。用語「対応する」とは、遺伝子を含めたヌクレオチド、塩基配列または核酸の特定の配列に相同性を有するあるいは相補的であることを意味する。ヌクレオチド、塩基配列または核酸とペプチド（蛋白質）との間で「対応する」とは、ヌクレオチド（核酸）の配列またはその相補体から誘導される指令にあるペプチド（蛋白質）のアミノ酸を通常指している。ＯＴ７Ｔ０２２遺伝子の５’端ヘアピンループ、５’端６−ベースペア・リピート、５’端非翻訳領域、ポリペプチド翻訳開始コドン、蛋白質コード領域、ＯＲＦ翻訳開始コドン、３’端非翻訳領域、３’端パリンドローム領域、および３’端ヘアピンループは好ましい対象領域として選択しうるが、ＲＦＲＰ遺伝子またはＯＴ７Ｔ０２２遺伝子内の如何なる領域も対象として選択しうる。
【００９３】
目的核酸と、対象領域の少なくとも一部に相補的でハイブリダイズすることができるポリヌクレオチドとの関係は、対象物と「アンチセンス」であるということができる。アンチセンス・ポリヌクレオチドは、２−デオキシ−Ｄ−リボースを含有しているポリデオキシリボヌクレオチド、Ｄ−リボースを含有しているポリリボヌクレオチド、プリンまたはピリミジン塩基のＮ−グリコシドであるその他のタイプのポリヌクレオチド、あるいは非ヌクレオチド骨格を有するその他のポリマー（例えば、市販の蛋白質核酸および合成配列特異的な核酸ポリマー）または特殊な結合を含有するその他のポリマー（但し、該ポリマーはＤＮＡやＲＮＡ中に見出されるような塩基のペアリングや塩基の付着を許容する配置をもつヌクレオチドを含有する）などが挙げられる。それらは、２本鎖ＤＮＡ、１本鎖ＤＮＡ、２本鎖ＲＮＡ、１本鎖ＲＮＡ、さらにＤＮＡ：ＲＮＡハイブリッドであることができ、さらに非修飾ポリヌクレオチド（または非修飾オリゴヌクレオチド）、さらには公知の修飾の付加されたもの、例えば当該分野で知られた標識のあるもの、キャップの付いたもの、メチル化されたもの、１個以上の天然のヌクレオチドを類縁物で置換したもの、分子内ヌクレオチド修飾のされたもの、例えば非荷電結合（例えば、メチルホスホネート、ホスホトリエステル、ホスホルアミデート、カルバメートなど）を持つもの、電荷を有する結合または硫黄含有結合（例えば、ホスホロチオエート、ホスホロジチオエートなど）を持つもの、例えば蛋白質（ヌクレアーゼ、ヌクレアーゼ・インヒビター、トキシン、抗体、シグナルペプチド、ポリ−Ｌ−リジンなど）や糖（例えば、モノサッカライドなど）などの側鎖基を有しているもの、インターカレント化合物（例えば、アクリジン、プソラレンなど）を持つもの、キレート化合物（例えば、金属、放射活性をもつ金属、ホウ素、酸化性の金属など）を含有するもの、アルキル化剤を含有するもの、修飾された結合を持つもの（例えば、αアノマー型の核酸など）であってもよい。ここで「ヌクレオシド」、「ヌクレオチド」および「核酸」とは、プリンおよびピリミジン塩基を含有するのみでなく、修飾されたその他の複素環型塩基をもつようなものを含んでいて良い。こうした修飾物は、メチル化されたプリンおよびピリミジン、アシル化されたプリンおよびピリミジン、あるいはその他の複素環を含むものであってよい。修飾されたヌクレオチドおよび修飾されたヌクレオチドはまた糖部分が修飾されていてよく、例えば、１個以上の水酸基がハロゲンとか、脂肪族基などで置換されていたり、あるいはエーテル、アミンなどの官能基に変換されていてよい。
【００９４】
本発明のアンチセンス・ポリヌクレオチド（核酸）は、ＲＮＡ、ＤＮＡ、あるいは修飾された核酸（ＲＮＡ、ＤＮＡ）である。修飾された核酸の具体例としては核酸の硫黄誘導体やチオホスフェート誘導体、そしてポリヌクレオシドアミドやオリゴヌクレオシドアミドの分解に抵抗性のものが挙げられるが、それに限定されるものではない。本発明のアンチセンス核酸は次のような方針で好ましく設計されうる。すなわち、細胞内でのアンチセンス核酸をより安定なものにする、アンチセンス核酸の細胞透過性をより高める、目標とするセンス鎖に対する親和性をより大きなものにする、そしてもし毒性があるならアンチセンス核酸の毒性をより小さなものにする。
【００９５】
こうして修飾は当該分野で数多く知られており、例えばJ. Kawakami et al.,
Pharm Tech Japan, Vol. 8, pp.247, 1992; Vol. 8, pp.395, 1992; S. T. Crooke et al. ed., Antisense Research and Applications, CRC Press, 1993 などに開示がある。
【００９６】
本発明のアンチセンス核酸は、変化せしめられたり、修飾された糖、塩基、結合を含有していて良く、リポゾーム、ミクロスフェアのような特殊な形態で供与されたり、遺伝子治療により適用されたり、付加された形態で与えられることができうる。こうして付加形態で用いられるものとしては、リン酸基骨格の電荷を中和するように働くポリリジンのようなポリカチオン体、細胞膜との相互作用を高めたり、核酸の取込みを増大せしめるような脂質（例えば、ホスホリピド、コレステロールなど）といった粗水性のものが挙げられる。付加するに好ましい脂質としては、コレステロールやその誘導体（例えば、コレステリルクロロホルメート、コール酸など）が挙げられる。こうしたものは、核酸の３’端あるいは５’端に付着させることができ、塩基、糖、分子内ヌクレオシド結合を介して付着させることができうる。その他の基としては、核酸の３’端あるいは５’端に特異的に配置されたキャップ用の基で、エキソヌクレアーゼ、ＲＮａｓｅなどのヌクレアーゼによる分解を阻止するためのものが挙げられる。こうしたキャップ用の基としては、ポリエチレングリコール、テトラエチレングリコールなどのグリコールをはじめとした当該分野で知られた水酸基の保護基が挙げられるが、それに限定されるものではない。
【００９７】
アンチセンス核酸の阻害活性は、本発明の形質転換体、本発明の生体内や生体外の遺伝子発現系、あるいはＧ蛋白質共役型レセプター蛋白質の生体内や生体外の翻訳系を用いて調べることができる。該核酸それ自体公知の各種の方法で細胞に適用できる。
【００９８】
ＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２をコードするポリヌクレオチドに対するｓｉＲＮＡは、ＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２をコードするＲＮＡの一部とそれに相補的なＲＮＡを含有する二重鎖ＲＮＡである。
【００９９】
ｓｉＲＮＡは、公知の方法（例、Nature, 411巻, 494頁, 2001年）に準じて、本発明のポリヌクレオチドの配列を基に設計して製造することができる。
【０１００】
ＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２をコードするＲＮＡの一部を含有するリボザイムは、公知の方法（例、TRENDS in Molecular Medicine, 7巻, 221頁, 2001年）に準じて、本発明のポリヌクレオチドの配列を基に設計して製造することができる。例えば、公知のリボザイムの配列の一部をＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２をコードするＲＮＡの一部に置換することによって製造することができる。ＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２をコードするＲＮＡの一部としては、公知のリボザイムによって切断され得るコンセンサス配列ＮＵＸ（式中、Ｎはすべての塩基を、ＸはＧ以外の塩基を示す）の近傍の配列などが挙げられる。
【０１０１】
ＲＦＲＰは膵グルカゴン分泌促進作用、血糖上昇作用、尿生成促進作用、記憶消去促進作用（嫌な記憶の消去促進作用）を有しているので、（ｉ）ＲＦＲＰ、その部分ペプチド、もしくはそのアミドもしくはそのエステルまたはその塩（以下、ＲＦＲＰと略記する）、（ii）ＲＦＲＰをコードするＤＮＡ、（iii）ＲＦＲＰに対する抗体、（iv）ＲＦＲＰをコードするＤＮＡに対するアンチセンスＤＮＡ、（ｖ）ＯＴ７Ｔ０２２、その部分ペプチドまたはその塩（ＯＴ７Ｔ０２２と略記する）、（vi）ＯＴ７Ｔ０２２をコードするＤＮＡ、（vii）ＯＴ７Ｔ０２２に対する抗体、（viii）ＯＴ７Ｔ０２２をコードするＤＮＡに対するアンチセンスＤＮＡは、以下のような用途を有している。
（１）ＲＦＲＰの機能不全に関連する疾患の予防・治療剤
ａ）ＲＦＲＰ、ｂ）ＲＦＲＰをコードするＤＮＡ、ｃ）ＯＴ７Ｔ０２２またはｄ）ＯＴ７Ｔ０２２をコードするＤＮＡを、ＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２の機能不全に関連する疾患の予防・治療などの医薬として使用することができる。
【０１０２】
例えば、生体内においてＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２が減少しているために、ＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２の機能が期待できない患者がいる場合に、ａ）ＲＦＲＰを該患者に投与し該ＲＦＲＰの量を補充したり、ｂ）（イ）ＲＦＲＰをコードするＤＮＡまたはＯＴ７Ｔ０２２をコードするＤＮＡを該患者に投与し発現させることによって、あるいは（ロ）対象となる細胞にＲＦＲＰをコードするＤＮＡまたはＯＴ７Ｔ０２２をコードするＤＮＡを挿入し発現させた後に、該細胞を該患者に移植することなどによって、患者の体内におけるＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２の量を増加させ、ＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２の機能を充分に発揮させることができる。すなわち、ＲＦＲＰをコードするＤＮＡまたはＯＴ７Ｔ０２２をコードするＤＮＡは、安全で低毒性なＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２の機能不全に関連する疾患の予防および／または治療剤として有用である。
【０１０３】
具体的には、ａ）ＲＦＲＰ、ｂ）ＲＦＲＰをコードするＤＮＡ、ｃ）ＯＴ７Ｔ０２２またはｄ）ＯＴ７Ｔ０２２をコードするＤＮＡは、例えば、膵グルカゴン分泌促進剤、血糖上昇剤、尿生成促進剤、記憶消去促進剤（嫌な記憶の消去促進剤）または肥満、高脂血症、２型糖尿病、低血糖症、高血圧、浮腫、排尿困難症、インスリン抵抗性症候群、不安定糖尿病、脂肪萎縮、インスリンアレルギー、インスリノーマ、動脈硬化、血栓性疾患、脂肪毒性、癌などの予防・治療剤として使用することができる。
【０１０４】
ＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２を上記予防・治療剤として使用する場合は、常套手段に従って製剤化することができる。
【０１０５】
一方、ＲＦＲＰをコードするＤＮＡまたはＯＴ７Ｔ０２２をコードするＤＮＡを上記予防・治療剤として使用する場合は、これらＤＮＡを単独あるいはレトロウイルスベクター、アデノウイルスベクター、アデノウイルスアソシエーテッドウイルスベクターなどの適当なベクターに挿入した後、常套手段に従って実施することができる。ＤＮＡは、そのままで、あるいは摂取促進のための補助剤とともに、遺伝子銃やハイドロゲルカテーテルのようなカテーテルによって投与できる。
【０１０６】
例えば、ａ）ＲＦＲＰ、ｂ）ＲＦＲＰをコードするＤＮＡ、ｃ）ＯＴ７Ｔ０２２またはｄ）ＯＴ７Ｔ０２２をコードするＤＮＡは、必要に応じて糖衣を施した錠剤、カプセル剤、エリキシル剤、マイクロカプセル剤などとして経口的に、あるいは水もしくはそれ以外の薬学的に許容し得る液との無菌性溶液、または懸濁液剤などの注射剤の形で非経口的に使用できる。例えば、ａ）ＲＦＲＰ、ｂ）ＲＦＲＰをコードするＤＮＡ、ｃ）ＯＴ７Ｔ０２２またはｄ）ＯＴ７Ｔ０２２をコードするＤＮＡを生理学的に認められる公知の担体、香味剤、賦形剤、ベヒクル、防腐剤、安定剤、結合剤などとともに一般に認められた製剤実施に要求される単位用量形態で混和することによって製造することができる。これら製剤における有効成分量は指示された範囲の適当な容量が得られるようにするものである。
【０１０７】
錠剤、カプセル剤などに混和することができる添加剤としては、例えば、ゼラチン、コーンスターチ、トラガント、アラビアゴムのような結合剤、結晶性セルロースのような賦形剤、コーンスターチ、ゼラチン、アルギン酸などのような膨化剤、ステアリン酸マグネシウムのような潤滑剤、ショ糖、乳糖またはサッカリンのような甘味剤、ペパーミント、アカモノ油またはチェリーのような香味剤などが用いられる。調剤単位形態がカプセルである場合には、上記タイプの材料にさらに油脂のような液状担体を含有することができる。注射のための無菌組成物は注射用水のようなベヒクル中の活性物質、胡麻油、椰子油などのような天然産出植物油などを溶解または懸濁させるなどの通常の製剤実施に従って処方することができる。注射用の水性液としては、例えば、生理食塩水、ブドウ糖やその他の補助薬を含む等張液（例えば、Ｄ−ソルビトール、Ｄ−マンニトール、塩化ナトリウムなど）などが用いられ、適当な溶解補助剤、例えば、アルコール（例、エタノール）、ポリアルコール（例、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール）、非イオン性界面活性剤（例、ポリソルベート８０ＴＭ、ＨＣＯ−５０）などと併用してもよい。油性液としては、例えば、ゴマ油、大豆油などが用いられ、溶解補助剤である安息香酸ベンジル、ベンジルアルコールなどと併用してもよい。
【０１０８】
また、上記予防・治療剤は、例えば、緩衝剤（例えば、リン酸塩緩衝液、酢酸ナトリウム緩衝液）、無痛化剤（例えば、塩化ベンザルコニウム、塩酸プロカインなど）、安定剤（例えば、ヒト血清アルブミン、ポリエチレングリコールなど）、保存剤（例えば、ベンジルアルコール、フェノールなど）、酸化防止剤などと配合してもよい。調製された注射液は通常、適当なアンプルに充填される。
【０１０９】
このようにして得られる製剤は安全で低毒性であるので、例えば、ヒトや哺乳動物（例えば、ラット、マウス、ウサギ、ヒツジ、ブタ、ウシ、ネコ、イヌ、サルなど）に対して投与することができる。
【０１１０】
ＲＦＲＰの投与量は、投与対象、対象臓器、症状、投与方法などにより差異はあるが、経口投与の場合、一般的に例えば、肥満患者（体重６０ｋｇとして）においては、一日につき約０.１〜１００ｍｇ、好ましくは約１．０〜５０ｍｇ、より好ましくは約１．０〜２０ｍｇである。非経口的に投与する場合は、その１回投与量は投与対象、対象臓器、症状、投与方法などによっても異なるが、例えば、注射剤の形では通常例えば、肥満患者（体重６０ｋｇとして）においては、一日につき約０．０１〜３０ｍｇ程度、好ましくは約０．１〜２０ｍｇ程度、より好ましくは約０．１〜１０ｍｇ程度を静脈注射により投与するのが好都合である。他の動物の場合も、体重６０ｋｇ当たりに換算した量を投与することができる。
【０１１１】
ＤＮＡの投与量は、投与対象、対象臓器、症状、投与方法などにより差異はあるが、経口投与の場合、一般的に例えば、肥満患者（体重６０ｋｇとして）においては、一日につき約０.１〜１００ｍｇ、好ましくは約１．０〜５０ｍｇ、より好ましくは約１．０〜２０ｍｇである。非経口的に投与する場合は、その１回投与量は投与対象、対象臓器、症状、投与方法などによっても異なるが、例えば、注射剤の形では通常例えば、肥満患者（体重６０ｋｇとして）においては、一日につき約０．０１〜３０ｍｇ程度、好ましくは約０．１〜２０ｍｇ程度、より好ましくは約０．１〜１０ｍｇ程度を静脈注射により投与するのが好都合である。他の動物の場合も、体重６０ｋｇ当たりに換算した量を投与することができる。
（２）遺伝子診断剤
ＲＦＲＰをコードするＤＮＡ、ＯＴ７Ｔ０２２をコードするＤＮＡ、またはこれらＤＮＡに対するアンチセンスＤＮＡは、プローブとして使用することにより、ヒトまたは哺乳動物（例えば、ラット、マウス、ウサギ、ヒツジ、ブタ、ウシ、ネコ、イヌ、サルなど）におけるＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２をコードするＤＮＡまたはｍＲＮＡの異常（遺伝子異常）を検出することができるので、例えば、該ＤＮＡまたはｍＲＮＡの損傷、突然変異あるいは発現低下や、該ＤＮＡまたはｍＲＮＡの増加あるいは発現過多などの遺伝子診断剤として有用である。
【０１１２】
ＤＮＡまたはアンチセンスＤＮＡを用いる上記の遺伝子診断は、例えば、自体公知のノーザンハイブリダイゼーションやＰＣＲ−ＳＳＣＰ法（ゲノミックス（Genomics），第５巻，８７４〜８７９頁（１９８９年）、プロシージングズ・オブ・ザ・ナショナル・アカデミー・オブ・サイエンシイズ・オブ・ユーエスエー（Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America），第８６巻，２７６６〜２７７０頁（１９８９年））などにより実施することができる。
【０１１３】
例えば、ノーザンハイブリダイゼーションによりＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２の発現低下が検出された場合は、例えば、ＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２の機能不全に関連する疾患である可能性が高いまたは将来罹患する可能性が高いと診断することができる。
【０１１４】
例えば、ノーザンハイブリダイゼーションによりＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２の発現過剰が検出された場合は、例えば、ＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２の過剰発現に関連する疾患である可能性が高いまたは将来罹患する可能性が高いと診断することができる。
【０１１５】
ＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２の機能不全に関連する疾患としては、例えば、肥満、高脂血症、２型糖尿病、低血糖症、高血圧、浮腫、排尿困難症、インスリン抵抗性症候群、不安定糖尿病、脂肪萎縮、インスリンアレルギー、インスリノーマ、動脈硬化、血栓性疾患、脂肪毒性、癌などが挙げられる。
【０１１６】
ＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２の過剰発現に関連する疾患としては、例えば、糖尿病、耐糖能障害、ケトーシス、アシドーシス、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、頻尿、夜尿症、高脂血症、性機能障害、皮膚疾患、関節症、骨減少症、動脈硬化、血栓性疾患、消化不良、記憶学習障害などが挙げられる。
（３）ＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２の発現量を変化させる化合物またはその塩を含有する医薬
ＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２をコードするＤＮＡは、プローブとして用いることにより、ＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２の発現量を変化させる化合物またはその塩のスクリーニングに用いることができる。
【０１１７】
すなわち、本発明は、例えば、（ｉ）非ヒト哺乳動物のａ）血液、ｂ）特定の臓器、ｃ）臓器から単離した組織もしくは細胞、または（ii）形質転換体等に含まれるＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２のｍＲＮＡ量を測定することによる、ＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２の発現量を変化させる化合物またはその塩のスクリーニング方法を提供する。
【０１１８】
ＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２のｍＲＮＡ量の測定は具体的には以下のようにして行なう。
【０１１９】
（ｉ）正常あるいは疾患モデル非ヒト哺乳動物（例えば、マウス、ラット、ウサギ、ヒツジ、ブタ、ウシ、ネコ、イヌ、サルなど、より具体的には免疫不全モデルラット、マウス、ウサギなど）に対して、薬剤（例えば、免疫調節薬など）あるいは物理的ストレス（例えば、浸水ストレス、電気ショック、明暗、低温など）などを与え、一定時間経過した後に、血液、あるいは特定の臓器（例えば、脳、肝臓、腎臓など）、または臓器から単離した組織、あるいは細胞を得る。
【０１２０】
得られた細胞に含まれるＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２のｍＲＮＡは、例えば、通常の方法により細胞等からｍＲＮＡを抽出し、例えば、ＴａｑＭａｎ  ＰＣＲなどの手法を用いることにより定量することができ、自体公知の手段によりノーザンブロットを行うことにより解析することもできる。
【０１２１】
（ii）ＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２を発現する形質転換体をＷＯ００／２９４４１号またはＷＯ０１／６６１３４号に記載の方法に従い作製し、該形質転換体に含まれるＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２のｍＲＮＡを同様にして定量、解析することができる。
【０１２２】
ＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２の発現量を変化させる化合物またはその塩のスクリーニングは、
（ｉ）正常あるいは疾患モデル非ヒト哺乳動物に対して、薬剤あるいは物理的ストレスなどを与える一定時間前（３０分前〜２４時間前、好ましくは３０分前〜１２時間前、より好ましくは１時間前〜６時間前）もしくは一定時間後（３０分後〜３日後、好ましくは１時間後〜２日後、より好ましくは１時間後〜２４時間後）、または薬剤あるいは物理的ストレスと同時に試験化合物を投与し、投与後一定時間経過後（３０分後〜３日後、好ましくは１時間後〜２日後、より好ましくは１時間後〜２４時間後）、細胞に含まれるＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２のｍＲＮＡ量を定量、解析することにより行なうことができ、
（ii）形質転換体を常法に従い培養する際に試験化合物を培地中に混合させ、一定時間培養後（１日後〜７日後、好ましくは１日後〜３日後、より好ましくは２日後〜３日後）、該形質転換体に含まれるＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２のｍＲＮＡ量を定量、解析することにより行なうことができる。
【０１２３】
試験化合物としては、例えば、ペプチド、蛋白質、非ペプチド性化合物、合成化合物、発酵生産物、細胞抽出液、植物抽出液、動物組織抽出液、血漿などが用いられ、これら化合物は新規な化合物であってもよいし、公知の化合物であってもよい。
【０１２４】
試験化合物は塩を形成していてもよく、試験化合物の塩としては、生理学的に許容される酸（例、無機酸など）や塩基（例、有機酸など）などとの塩が用いられ、とりわけ生理学的に許容される酸付加塩が好ましい。この様な塩としては、例えば、無機酸（例えば、塩酸、リン酸、臭化水素酸、硫酸など）との塩、あるいは有機酸（例えば、酢酸、ギ酸、プロピオン酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、酒石酸、クエン酸、リンゴ酸、蓚酸、安息香酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸など）との塩などが用いられる。
【０１２５】
本発明のスクリーニング方法を用いて得られる化合物は、ＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２の発現量を変化させる作用を有する化合物であり、具体的には、（イ）ＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２の発現量を増加させることにより、ＯＴ７Ｔ０２２を介する細胞刺激活性（例えば、アラキドン酸遊離、アセチルコリン遊離、細胞内Ｃａ２＋遊離、細胞内ｃＡＭＰ生成、細胞内ｃＧＭＰ生成、イノシトールリン酸産生、細胞膜電位変動、細胞内蛋白質のリン酸化、ｃ−ｆｏｓの活性化、ｐＨの低下などを促進する活性または抑制する活性など、特に細胞内ｃＡＭＰ生成抑制活性）を増強させる化合物、（ロ）ＲＦＲＰの発現量を減少させることにより、該細胞刺激活性を減弱させる化合物である。
【０１２６】
該化合物としては、ペプチド、蛋白質、非ペプチド性化合物、合成化合物、発酵生産物などが挙げられ、これら化合物は新規な化合物であってもよいし、公知の化合物であってもよい。
【０１２７】
該化合物の塩としては、生理学的に許容される酸（例、無機酸など）や塩基（例、有機酸など）などとの塩が用いられ、とりわけ生理学的に許容される酸付加塩が好ましい。この様な塩としては、例えば、無機酸（例えば、塩酸、リン酸、臭化水素酸、硫酸など）との塩、あるいは有機酸（例えば、酢酸、ギ酸、プロピオン酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、酒石酸、クエン酸、リンゴ酸、蓚酸、安息香酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸など）との塩などが用いられる。
【０１２８】
上記スクリーニング方法で得られるＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２の発現量を増加させる化合物またはその塩は、例えば、膵グルカゴン分泌促進剤、血糖上昇剤、尿生成促進剤、記憶消去促進剤（嫌な記憶の消去促進剤）、または肥満、高脂血症、２型糖尿病、低血糖症、高血圧、浮腫、排尿困難症、インスリン抵抗性症候群、不安定糖尿病、脂肪萎縮、インスリンアレルギー、インスリノーマ、動脈硬化、血栓性疾患、脂肪毒性、癌などの予防・治療剤として使用することができる。
【０１２９】
上記スクリーニング方法で得られるＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２の発現量を減少させる化合物またはその塩は、例えば、膵グルカゴン分泌抑制剤、血糖低下剤、尿生成抑制剤、記憶学習低下抑制剤（記憶低下抑制剤）、または糖尿病、耐糖能障害、ケトーシス、アシドーシス、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、頻尿、夜尿症、高脂血症、性機能障害、皮膚疾患、関節症、骨減少症、動脈硬化、血栓性疾患、消化不良、記憶学習障害などの予防・治療剤として使用することができる。糖尿病には、インスリン依存型（Ｉ型）糖尿病、インスリン非依存型（II型）糖尿病などが含まれる。
【０１３０】
本発明のスクリーニング方法を用いて得られる化合物またはその塩を医薬組成物として使用する場合、常套手段に従って製剤化することができる。具体的には、上記したＲＦＲＰを含有する予防・治療剤と同様に製造することができる。
【０１３１】
得られる製剤は安全で低毒性であるので、例えば、ヒトや哺乳動物（例えば、ラット、マウス、ウサギ、ヒツジ、ブタ、ウシ、ネコ、イヌ、サルなど）に対して投与することができる。
【０１３２】
該化合物またはその塩の投与量は、投与対象、対象臓器、症状、投与方法などにより差異はあるが、経口投与の場合、一般的に例えば、肥満患者（体重６０ｋｇとして）においては、一日につきＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２の発現量を増加させる化合物またはその塩を約０.１〜１００ｍｇ、好ましくは約１．０〜５０ｍｇ、より好ましくは約１．０〜２０ｍｇである。非経口的に投与する場合は、その１回投与量は投与対象、対象臓器、症状、投与方法などによっても異なるが、例えば、注射剤の形では通常例えば、肥満患者（体重６０ｋｇとして）においては、一日につきＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２の発現量を増加させる化合物またはその塩を約０．０１〜３０ｍｇ程度、好ましくは約０．１〜２０ｍｇ程度、より好ましくは約０．１〜１０ｍｇ程度を静脈注射により投与するのが好都合である。他の動物の場合も、体重６０ｋｇ当たりに換算した量を投与することができる。
（４）抗体を用いる診断方法
ＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２に対する抗体（以下、本発明の抗体と略記する）は、ＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２を特異的に認識することができるので、被検液中のＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２の検出や中和に使用することができる。
【０１３３】
すなわち、本発明は、
（ｉ）本発明の抗体と、被検液および標識化されたＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２とを競合的に反応させ、該抗体に結合した標識化されたＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２の割合を測定することを特徴とする被検液中のＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２の定量法、および
（ii）被検液と担体上に不溶化した本発明の抗体および標識化された本発明の別の抗体とを同時あるいは連続的に反応させたのち、不溶化担体上の標識剤の活性を測定することを特徴とする被検液中のＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２の定量法を提供する。
【０１３４】
上記（ii）の定量法においては、一方の抗体がＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２のＮ端部を認識する抗体で、他方の抗体がＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２のＣ端部に反応する抗体であることが望ましい。
【０１３５】
また、ＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２に対するモノクローナル抗体（以下、本発明のモノクローナル抗体）を用いてＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２の定量を行うことができるほか、組織染色等による検出を行なうこともできる。これらの目的には、抗体分子そのものを用いてもよく、また、抗体分子のＦ(ａｂ')２、Ｆａｂ'、あるいはＦａｂ画分を用いてもよい。
【０１３６】
本発明の抗体を用いるＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２の定量法は、特に制限されるべきものではなく、被測定液中の抗原量（例えば、ＲＦＲＰ量またはＯＴ７Ｔ０２２量）に対応した抗体、抗原もしくは抗体−抗原複合体の量を化学的または物理的手段により検出し、これを既知量の抗原を含む標準液を用いて作製した標準曲線より算出する測定法であれば、いずれの測定法を用いてもよい。例えば、ネフロメトリー、競合法、イムノメトリック法およびサンドイッチ法が好適に用いられるが、感度、特異性の点で、後述するサンドイッチ法を用いるのが特に好ましい。
【０１３７】
標識物質を用いる測定法に用いられる標識剤としては、例えば、放射性同位元素、酵素、蛍光物質、発光物質などが用いられる。放射性同位元素としては、例えば、〔１２５Ｉ〕、〔１３１Ｉ〕、〔３Ｈ〕、〔１４Ｃ〕などが用いられる。上記酵素としては、安定で比活性の大きなものが好ましく、例えば、β−ガラクトシダーゼ、β−グルコシダーゼ、アルカリフォスファターゼ、パーオキシダーゼ、リンゴ酸脱水素酵素などが用いられる。蛍光物質としては、例えば、フルオレスカミン、フルオレッセンイソチオシアネートなどが用いられる。発光物質としては、例えば、ルミノール、ルミノール誘導体、ルシフェリン、ルシゲニンなどが用いられる。さらに、抗体あるいは抗原と標識剤との結合にビオチン−アビジン系を用いることもできる。
【０１３８】
抗原あるいは抗体の不溶化に当っては、物理吸着を用いてもよく、また通常酵素等を不溶化、固定化するのに用いられる化学結合を用いる方法でもよい。担体としては、アガロース、デキストラン、セルロースなどの不溶性多糖類、ポリスチレン、ポリアクリルアミド、シリコン等の合成樹脂、あるいはガラス等があげられる。
【０１３９】
サンドイッチ法においては不溶化した本発明のモノクローナル抗体に被検液を反応させ（１次反応）、さらに標識化した別の本発明のモノクローナル抗体を反応させ（２次反応）たのち、不溶化担体上の標識剤の活性を測定することにより被検液中のＲＦＲＰ量を定量することができる。１次反応と２次反応は逆の順序に行っても、また、同時に行なってもよいし時間をずらして行なってもよい。標識化剤および不溶化の方法は前記のそれらに準じることができる。また、サンドイッチ法による免疫測定法において、固相用抗体あるいは標識用抗体に用いられる抗体は必ずしも１種類である必要はなく、測定感度を向上させる等の目的で２種類以上の抗体の混合物を用いてもよい。
【０１４０】
本発明のサンドイッチ法によるＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２の測定法においては、１次反応と２次反応に用いられる本発明のモノクローナル抗体は、ＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２の結合する部位が相異なる抗体が好ましく用いられる。すなわち、１次反応および２次反応に用いられる抗体は、例えば、２次反応で用いられる抗体が、ＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２のＣ端部を認識する場合、１次反応で用いられる抗体は、好ましくはＣ端部以外、例えばＮ端部を認識する抗体が用いられる。
【０１４１】
本発明のモノクローナル抗体をサンドイッチ法以外の測定システム、例えば、競合法、イムノメトリック法あるいはネフロメトリーなどに用いることができる。
【０１４２】
競合法では、被検液中の抗原と標識抗原とを抗体に対して競合的に反応させたのち、未反応の標識抗原(Ｆ）と、抗体と結合した標識抗原（Ｂ）とを分離し（Ｂ／Ｆ分離）、Ｂ，Ｆいずれかの標識量を測定し、被検液中の抗原量を定量する。本反応法には、抗体として可溶性抗体を用い、Ｂ／Ｆ分離をポリエチレングリコール、前記抗体に対する第２抗体などを用いる液相法、および、第１抗体として固相化抗体を用いるか、あるいは、第１抗体は可溶性のものを用い第２抗体として固相化抗体を用いる固相化法とが用いられる。
【０１４３】
イムノメトリック法では、被検液中の抗原と固相化抗原とを一定量の標識化抗体に対して競合反応させた後固相と液相を分離するか、あるいは、被検液中の抗原と過剰量の標識化抗体とを反応させ、次に固相化抗原を加え未反応の標識化抗体を固相に結合させたのち、固相と液相を分離する。次に、いずれかの相の標識量を測定し被検液中の抗原量を定量する。
【０１４４】
また、ネフロメトリーでは、ゲル内あるいは溶液中で抗原抗体反応の結果生じた不溶性の沈降物の量を測定する。被検液中の抗原量が僅かであり、少量の沈降物しか得られない場合にもレーザーの散乱を利用するレーザーネフロメトリーなどが好適に用いられる。
【０１４５】
これら個々の免疫学的測定法を本発明の定量方法に適用するにあたっては、特別の条件、操作等の設定は必要とされない。それぞれの方法における通常の条件、操作法に当業者の通常の技術的配慮を加えてＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２の測定系を構築すればよい。これらの一般的な技術手段の詳細については、総説、成書などを参照することができる。
【０１４６】
例えば、入江  寛編「ラジオイムノアッセイ」（講談社、昭和４９年発行）、入江  寛編「続ラジオイムノアッセイ」（講談社、昭和５４年発行）、石川栄治ら編「酵素免疫測定法」（医学書院、昭和５３年発行）、石川栄治ら編「酵素免疫測定法」（第２版）（医学書院、昭和５７年発行）、石川栄治ら編「酵素免疫測定法」（第３版）（医学書院、昭和６２年発行）、「Methods in ENZYMOLOGY」 Vol. 70(Immunochemical Techniques(Part A))、 同書 Vol. 73(Immunochemical Techniques(Part B))、 同書 Vol. 74(Immunochemical Techniques(Part C))、 同書 Vol. 84(Immunochemical Techniques(Part D : Selected Immunoassays))、 同書 Vol. 92(Immunochemical Techniques(Part E : Monoclonal Antibodies and General Immunoassay Methods))、 同書 Vol. 121(Immunochemical Techniques(Part I : Hybridoma Technology and Monoclonal Antibodies))(以上、アカデミックプレス社発行)などを参照することができる。
【０１４７】
以上のようにして、本発明の抗体を用いることによって、ＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２を感度良く定量することができる。
【０１４８】
さらには、本発明の抗体を用いてＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２の濃度を定量することによって、ＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２の濃度の減少が検出された場合、例えば、肥満、高脂血症、２型糖尿病、低血糖症、高血圧、浮腫、排尿困難症、インスリン抵抗性症候群、不安定糖尿病、脂肪萎縮、インスリンアレルギー、インスリノーマ、動脈硬化、血栓性疾患、脂肪毒性、癌などの疾患である、または将来罹患する可能性が高いと診断することができる。
【０１４９】
また、ＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２の濃度の増加が検出された場合には、例えば、糖尿病、耐糖能障害、ケトーシス、アシドーシス、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、頻尿、夜尿症、高脂血症、性機能障害、皮膚疾患、関節症、骨減少症、動脈硬化、血栓性疾患、消化不良、記憶学習障害などの疾患である、または将来罹患する可能性が高いと診断することができる。
（５）膵グルカゴン分泌調節薬、血糖調節薬、尿生成調節薬、記憶消去促進薬または記憶学習低下抑制薬のスクリーニング方法
ＯＴ７Ｔ０２２を用いるか、または組換え型ＯＴ７Ｔ０２２の発現系を構築し、該発現系を用いたレセプター結合アッセイ系を用いることによって、ＲＦＲＰとＯＴ７Ｔ０２２との結合性またはシグナル伝達を変化させる化合物（例えば、ペプチド、蛋白質、非ペプチド性化合物、合成化合物、発酵生産物など）またはその塩を効率よくスクリーニングすることができる。
【０１５０】
このような化合物には、（イ）ＯＴ７Ｔ０２２を介して細胞刺激活性（例えば、アラキドン酸遊離、アセチルコリン遊離、細胞内Ｃａ２＋遊離、細胞内ｃＡＭＰ生成、細胞内ｃＧＭＰ生成、イノシトールリン酸産生、細胞膜電位変動、細胞内蛋白質のリン酸化、ｃ−ｆｏｓの活性化、ｐＨの低下などを促進する活性または抑制する活性など、特に細胞内ｃＡＭＰ生成抑制活性）を有する化合物（いわゆる、ＯＴ７Ｔ０２２アゴニスト）、（ロ）ＯＴ７Ｔ０２２を介する細胞刺激活性を阻害する化合物（いわゆる、ＯＴ７Ｔ０２２アンタゴニスト）、（ハ）ＲＦＲＰとＯＴ７Ｔ０２２との結合力を増強する化合物、あるいは（ニ）ＲＦＲＰとＯＴ７Ｔ０２２との結合力を減少させる化合物などが含まれる。
【０１５１】
すなわち、本発明は、
（１）ＲＦＲＰおよび（または）ＯＴ７Ｔ０２２を用いることを特徴とする膵グルカゴン分泌調節薬、血糖調節薬、尿生成調節薬、記憶消去促進薬または記憶学習低下抑制薬のスクリーニング方法、
（２）（ｉ）ＲＦＲＰとＯＴ７Ｔ０２２とを接触させた場合と（ii）ＲＦＲＰとＯＴ７Ｔ０２２および試験化合物とを接触させた場合との比較を行なうことを特徴とする膵グルカゴン分泌調節薬、血糖調節薬、尿生成調節薬、記憶消去促進薬または記憶学習低下抑制薬のスクリーニング方法を提供する。
【０１５２】
該膵グルカゴン分泌調節薬、血糖調節薬、尿生成調節薬、記憶消去促進薬または記憶学習低下抑制薬は、ＲＦＲＰとＯＴ７Ｔ０２２との結合性またはシグナル伝達を変化させる化合物またはその塩である。
【０１５３】
本発明のスクリーニング方法においては、（ｉ）と（ii）の場合における、例えば、ＯＴ７Ｔ０２２に対するＲＦＲＰの結合量、細胞刺激活性などを測定して、比較することを特徴とする。
【０１５４】
より具体的には、本発明は、
ａ）標識したＲＦＲＰを、ＯＴ７Ｔ０２２に接触させた場合と、標識したＲＦＲＰおよび試験化合物をＯＴ７Ｔ０２２に接触させた場合における、標識したＲＦＲＰのＯＴ７Ｔ０２２に対する結合量を測定し、比較することを特徴とする該膵グルカゴン分泌調節薬、血糖調節薬、尿生成調節薬、記憶消去促進薬または記憶学習低下抑制薬のスクリーニング方法、
ｂ）標識したＲＦＲＰを、ＯＴ７Ｔ０２２を含有する細胞または該細胞の膜画分に接触させた場合と、標識したＲＦＲＰおよび試験化合物をＯＴ７Ｔ０２２を含有する細胞または該細胞の膜画分に接触させた場合における、標識したＲＦＲＰの該細胞または該膜画分に対する結合量を測定し、比較することを特徴とする該膵グルカゴン分泌調節薬、血糖調節薬、尿生成調節薬、記憶消去促進薬または記憶学習低下抑制薬のスクリーニング方法、
ｃ）標識したＲＦＲＰを、ＯＴ７Ｔ０２２をコードするＤＮＡを含有する形質転換体を培養することによって細胞膜上に発現したＯＴ７Ｔ０２２に接触させた場合と、標識したＲＦＲＰおよび試験化合物をＯＴ７Ｔ０２２をコードするＤＮＡを含有する形質転換体を培養することによって細胞膜上に発現したＯＴ７Ｔ０２２に接触させた場合における、標識したＲＦＲＰのＯＴ７Ｔ０２２に対する結合量を測定し、比較することを特徴とする該膵グルカゴン分泌調節薬、血糖調節薬、尿生成調節薬、記憶消去促進薬または記憶学習低下抑制薬のスクリーニング方法、
ｄ）ＲＦＲＰを活性化する化合物（例えば、ＲＦＲＰなど）をＯＴ７Ｔ０２２を含有する細胞に接触させた場合と、ＲＦＲＰを活性化する化合物および試験化合物をＯＴ７Ｔ０２２を含有する細胞に接触させた場合における、ＯＴ７Ｔ０２２を介した細胞刺激活性を測定し、比較することを特徴とする該膵グルカゴン分泌調節薬、血糖調節薬、尿生成調節薬、記憶消去促進薬または記憶学習低下抑制薬のスクリーニング方法、および
ｅ）ＲＦＲＰを活性化する化合物（例えば、ＲＦＲＰなど）をＯＴ７Ｔ０２２をコードするＤＮＡを含有する形質転換体を培養することによって細胞膜上に発現したＯＴ７Ｔ０２２に接触させた場合と、ＲＦＲＰを活性化する化合物および試験化合物をＯＴ７Ｔ０２２をコードするＤＮＡを含有する形質転換体を培養することによって細胞膜上に発現したＯＴ７Ｔ０２２に接触させた場合における、レセプターを介する細胞刺激活性を測定し、比較することを特徴とする該膵グルカゴン分泌調節薬、血糖調節薬、尿生成調節薬、記憶消去促進薬または記憶学習低下抑制薬のスクリーニング方法を提供する。
【０１５５】
本発明のスクリーニング方法では、ＲＦＲＰの代わりに、ＲＦＲＰとＯＴ７Ｔ０２２との結合性を変化させる化合物またはその塩（例えば、低分子合成化合物、好ましくは低分子合成アゴニスト）を用いることもできる。このＲＦＲＰとＯＴ７Ｔ０２２との結合性を変化させる化合物またはその塩は、ＲＦＲＰを用いて本発明のスクーニング方法を実施することによって得ることができる。
【０１５６】
本発明のスクリーニング方法の具体的な説明を以下にする。
【０１５７】
まず、本発明のスクリーニング方法に用いるＯＴ７Ｔ０２２としては、ＯＴ７Ｔ０２２を含有する哺乳動物の臓器の細胞膜画分が好適である。しかし、特にヒト由来の臓器は入手が極めて困難なことから、スクリーニングに用いられるものとしては、組換え体を用いて大量発現させたヒト由来のＯＴ７Ｔ０２２などが適している。
【０１５８】
ＯＴ７Ｔ０２２を製造するには、ＷＯ００／２９４４１号またはＷＯ０１／６６１３４号に記載の方法が用いられるが、ＯＴ７Ｔ０２２をコードするＤＮＡを哺乳細胞や昆虫細胞で発現することにより行なうことが好ましい。目的とする蛋白質部分をコードするＤＮＡ断片には相補ＤＮＡが用いられるが、必ずしもこれに制約されるものではない。例えば、遺伝子断片や合成ＤＮＡを用いてもよい。ＯＴ７Ｔ０２２をコードするＤＮＡ断片を宿主動物細胞に導入し、それらを効率よく発現させるためには、該ＤＮＡ断片を昆虫を宿主とするバキュロウイルスに属する核多角体病ウイルス（nuclear polyhedrosis virus；ＮＰＶ）のポリヘドリンプロモーター、ＳＶ４０由来のプロモーター、レトロウイルスのプロモーター、メタロチオネインプロモーター、ヒトヒートショックプロモーター、サイトメガロウイルスプロモーター、ＳＲαプロモーターなどの下流に組み込むのが好ましい。発現したレセプターの量と質の検査はそれ自体公知の方法で行うことができる。例えば、文献〔Nambi，P．ら、ザ・ジャーナル・オブ・バイオロジカル・ケミストリー（J. Biol. Chem.）,267巻,19555〜19559頁,1992年〕に記載の方法に従って行なうことができる。
【０１５９】
したがって、本発明のスクリーニング方法において、ＯＴ７Ｔ０２２を含有するものとしては、それ自体公知の方法に従って精製したＯＴ７Ｔ０２２であってもよいし、ＯＴ７Ｔ０２２を含有する細胞を用いてもよく、またＯＴ７Ｔ０２２を含有する細胞の膜画分を用いてもよい。
【０１６０】
本発明のスクリーニング方法において、ＯＴ７Ｔ０２２を含有する細胞を用いる場合、該細胞をグルタルアルデヒド、ホルマリンなどで固定化してもよい。固定化方法はそれ自体公知の方法に従って行なうことができる。
【０１６１】
ＯＴ７Ｔ０２２を含有する細胞としては、ＯＴ７Ｔ０２２を発現した宿主細胞をいうが、該宿主細胞としては、大腸菌、枯草菌、酵母、昆虫細胞、動物細胞などが好ましい。
【０１６２】
細胞膜画分としては、細胞を破砕した後、それ自体公知の方法で得られる細胞膜が多く含まれる画分のことをいう。細胞の破砕方法としては、Potter−Elvehjem型ホモジナイザーで細胞を押し潰す方法、ワーリングブレンダーやポリトロン（Kinematica社製）による破砕、超音波による破砕、フレンチプレスなどで加圧しながら細胞を細いノズルから噴出させることによる破砕などが挙げられる。細胞膜の分画には、分画遠心分離法や密度勾配遠心分離法などの遠心力による分画法が主として用いられる。例えば、細胞破砕液を低速（５００〜３０００ｒｐｍ）で短時間（通常、約１〜１０分）遠心し、上清をさらに高速（１５０００〜３００００ｒｐｍ）で通常３０分〜２時間遠心し、得られる沈澱を膜画分とする。該膜画分中には、発現したＯＴ７Ｔ０２２と細胞由来のリン脂質や膜蛋白質などの膜成分が多く含まれる。
【０１６３】
ＯＴ７Ｔ０２２を含有する細胞や膜画分中のＯＴ７Ｔ０２２の量は、１細胞当たり１０３〜１０８分子であるのが好ましく、１０５〜１０７分子であるのが好適である。なお、発現量が多いほど膜画分当たりのＯＴ７Ｔ０２２結合活性（比活性）が高くなり、高感度なスクリーニング系の構築が可能になるばかりでなく、同一ロットで大量の試料を測定できるようになる。
【０１６４】
ＲＦＲＰとＯＴ７Ｔ０２２との結合性またはシグナル伝達を変化させる化合物またはその塩をスクリーニングする上記のａ）〜ｃ）を実施するためには、例えば、適当なＯＴ７Ｔ０２２画分と、標識したＲＦＲＰが必要である。
【０１６５】
ＯＴ７Ｔ０２２画分としては、天然型のＯＴ７Ｔ０２２画分か、またはそれと同等の活性を有する組換え型ＯＴ７Ｔ０２２画分などが望ましい。ここで、同等の活性とは、同等のリガンド結合活性、シグナル情報伝達作用などを示す。
【０１６６】
標識したＲＦＲＰとしては、標識したＲＦＲＰ、標識したＲＦＲＰアナログ化合物などが用いられる。例えば〔３Ｈ〕、〔１２５Ｉ〕、〔１４Ｃ〕、〔３５Ｓ〕などで標識されたＲＦＲＰなどが用いられる。
【０１６７】
具体的には、ＲＦＲＰとＯＴ７Ｔ０２２との結合性またはシグナル伝達を変化させる化合物またはその塩のスクリーニングを行なうには、まずＯＴ７Ｔ０２２を含有する細胞または細胞の膜画分を、スクリーニングに適したバッファーに懸濁することによりＯＴ７Ｔ０２２標品を調製する。バッファーには、ｐＨ４〜１０（望ましくはｐＨ６〜８）のリン酸バッファー、トリス−塩酸バッファーなどのＲＦＲＰとＯＴ７Ｔ０２２との結合を阻害しないバッファーであればいずれでもよい。また、非特異的結合を低減させる目的で、ＣＨＡＰＳ、Ｔｗｅｅｎ−８０ＴＭ（花王−アトラス社）、ジギトニン、デオキシコレートなどの界面活性剤をバッファーに加えることもできる。さらに、プロテアーゼによるＯＴ７Ｔ０２２やＲＦＲＰの分解を抑える目的でＰＭＳＦ、ロイペプチン、Ｅ−６４（ペプチド研究所製）、ペプスタチンなどのプロテアーゼ阻害剤を添加することもできる。０.０１〜１０ｍｌの該レセプター溶液に、一定量（５０００〜５０００００ｃｐｍ）の標識したＲＦＲＰを添加し、同時に１０−４Ｍ〜１０−１０Ｍの試験化合物を共存させる。非特異的結合量（ＮＳＢ）を知るために大過剰の未標識のＲＦＲＰを加えた反応チューブも用意する。反応は約０〜５０℃、望ましくは約４〜３７℃で、約２０分〜２４時間、望ましくは約３０分〜３時間行う。反応後、ガラス繊維濾紙等で濾過し、適量の同バッファーで洗浄した後、ガラス繊維濾紙に残存する放射活性を液体シンチレーションカウンターまたはγ−カウンターで計測する。拮抗する物質がない場合のカウント(Ｂ０）から非特異的結合量（ＮＳＢ）を引いたカウント（Ｂ０−ＮＳＢ）を１００％とした時、特異的結合量（Ｂ−ＮＳＢ）が、例えば、５０％以下になる試験化合物を拮抗阻害能力のある候補物質として選択することができる。
【０１６８】
ＲＦＲＰとＯＴ７Ｔ０２２との結合性またはシグナル伝達を変化させる化合物またはその塩をスクリーニングする上記のｄ）〜ｅ）の方法を実施するためには、例えば、ＯＴ７Ｔ０２２を介する細胞刺激活性を公知の方法または市販の測定用キットを用いて測定することができる。
【０１６９】
具体的には、まず、ＯＴ７Ｔ０２２を含有する細胞をマルチウェルプレート等に培養する。スクリーニングを行なうにあたっては前もって新鮮な培地あるいは細胞に毒性を示さない適当なバッファーに交換し、試験化合物などを添加して一定時間インキュベートした後、細胞を抽出あるいは上清液を回収して、生成した産物をそれぞれの方法に従って定量する。細胞刺激活性の指標とする物質（例えば、アラキドン酸など）の生成が、細胞が含有する分解酵素によって検定困難な場合は、該分解酵素に対する阻害剤を添加してアッセイを行なってもよい。また、ｃＡＭＰ産生抑制などの活性については、フォルスコリンなどで細胞の基礎的産生量を増大させておいた細胞に対する産生抑制作用として検出することができる。
【０１７０】
細胞刺激活性を測定してスクリーニングを行なうには、適当なＯＴ７Ｔ０２２を発現した細胞が必要である。ＯＴ７Ｔ０２２を発現した細胞としては、天然型のＯＴ７Ｔ０２２を有する細胞株、上記の組換え型ＯＴ７Ｔ０２２を発現した細胞株などが望ましい。
【０１７１】
試験化合物としては、例えば、ペプチド、蛋白質、非ペプチド性化合物、合成化合物、発酵生産物、細胞抽出液、植物抽出液、動物組織抽出液、血漿などが用いられ、これら化合物は新規な化合物であってもよいし、公知の化合物であってもよい。
【０１７２】
試験化合物は塩を形成していてもよく、試験化合物の塩としては、生理学的に許容される酸（例、無機酸など）や塩基（例、有機酸など）などとの塩が用いられ、とりわけ生理学的に許容される酸付加塩が好ましい。この様な塩としては、例えば、無機酸（例えば、塩酸、リン酸、臭化水素酸、硫酸など）との塩、あるいは有機酸（例えば、酢酸、ギ酸、プロピオン酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、酒石酸、クエン酸、リンゴ酸、蓚酸、安息香酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸など）との塩などが用いられる。
【０１７３】
また、試験化合物としては、ＯＴ７Ｔ０２２の活性部位の原子座標およびリガンド結合ポケットの位置に基づいて、リガンド結合ポケットに結合するように設計された化合物が好ましく用いられる。ＯＴ７Ｔ０２２の活性部位の原子座標およびリガンド結合ポケットの位置の測定は、公知の方法あるいはそれに準じる方法を用いて行うことができる。
【０１７４】
ＲＦＲＰとＯＴ７Ｔ０２２との結合性またはシグナル伝達を変化させる化合物またはその塩のスクリーニング用キットは、ＲＦＲＰ、ＯＴ７Ｔ０２２を含有する細胞またはその細胞膜画分を含有するものなどである。
【０１７５】
本発明のスクリーニング用キットの例としては、次のものが挙げられる。
【０１７６】
１．スクリーニング用試薬
ａ）測定用緩衝液および洗浄用緩衝液
Hanks' Balanced Salt Solution（ギブコ社製）に、０.０５％のウシ血清アルブミン（シグマ社製）を加えたもの。
【０１７７】
孔径０.４５μｍのフィルターで濾過滅菌し、４℃で保存するか、あるいは用時調製しても良い。
【０１７８】
ｂ）ＯＴ７Ｔ０２２標品
ＯＴ７Ｔ０２２を発現させたＣＨＯ細胞を、１２穴プレートに５×１０５個／穴で継代し、３７℃、５％ＣＯ２、９５％ａｉｒで２日間培養したもの。
【０１７９】
ｃ）標識ＲＦＲＰ
市販の〔３Ｈ〕、〔１２５Ｉ〕、〔１４Ｃ〕、〔３５Ｓ〕などで標識したＲＦＲＰ
水溶液の状態のものを４℃あるいは−２０℃にて保存し、用時に測定用緩衝液にて１μＭに希釈する。
【０１８０】
ｄ）ＲＦＲＰ標準液
ＲＦＲＰを０.１％ウシ血清アルブミン（シグマ社製）を含むＰＢＳで１ｍＭとなるように溶解し、−２０℃で保存する。
【０１８１】
２．測定法
ａ）１２穴組織培養用プレートにて培養したＯＴ７Ｔ０２２発現ＣＨＯ細胞を、測定用緩衝液１ｍｌで２回洗浄した後、４９０μｌの測定用緩衝液を各穴に加える。
【０１８２】
ｂ）１０−３〜１０−１０Ｍの試験化合物溶液を５μｌ加えた後、標識ＲＦＲＰを５μｌ加え、室温にて１時間反応させる。非特異的結合量を知るためには試験化合物の代わりに１０−３ＭのＲＦＲＰを５μｌ加えておく。
【０１８３】
ｃ）反応液を除去し、１ｍｌの洗浄用緩衝液で３回洗浄する。細胞に結合した標識ＲＦＲＰを０.２Ｎ  ＮａＯＨ−１％ＳＤＳで溶解し、４ｍｌの液体シンチレーターＡ（和光純薬製）と混合する。
【０１８４】
ｄ）液体シンチレーションカウンター（ベックマン社製）を用いて放射活性を測定し、Percent Maximum Binding（ＰＭＢ）を次の式で求める。
【０１８５】
ＰＭＢ＝［（Ｂ−ＮＳＢ）／（Ｂ０−ＮＳＢ）］×１００
ＰＭＢ：Percent Maximum Binding
Ｂ    ：検体を加えた時の値
ＮＳＢ：Non-specific Binding（非特異的結合量）
Ｂ０   ：最大結合量
ＯＴ７Ｔ０２２に対するアゴニストであるかアンタゴニストであるかの具体的な評価方法は以下の（ｉ）または（ii）に従えばよい。
（ｉ）前記ａ）〜ｃ）のスクリーニング方法で示されるバインディング・アッセイを行い、ＲＦＲＰとＯＴ７Ｔ０２２との結合性を変化させる（特に、結合を阻害する）化合物を得た後、該化合物が上記した細胞刺激活性を有しているか否かを測定する。細胞刺激活性を有する化合物またはその塩はＯＴ７Ｔ０２２に対するアゴニストであり、該活性を有しない化合物またはその塩はＯＴ７Ｔ０２２に対するアンタゴニストである。
（ii）（ａ）試験化合物をＯＴ７Ｔ０２２を含有する細胞に接触させ、上記した細胞刺激活性を測定する。細胞刺激活性を有する化合物またはその塩はＯＴ７Ｔ０２２に対するアゴニストである。
（ｂ）ＯＴ７Ｔ０２２を活性化する化合物（例えば、リガンド）をＯＴ７Ｔ０２２を含有する細胞に接触させた場合と、ＯＴ７Ｔ０２２を活性化する化合物および試験化合物をＯＴ７Ｔ０２２を含有する細胞に接触させた場合における、ＯＴ７Ｔ０２２を介した細胞刺激活性を測定し、比較する。ＯＴ７Ｔ０２２を活性化する化合物による細胞刺激活性を減少させ得る化合物またはその塩はＯＴ７Ｔ０２２に対するアンタゴニストである。
【０１８６】
本発明のスクリーニング方法またはスクリーニング用キットを用いて得られる化合物としては、ペプチド、蛋白質、非ペプチド性化合物、合成化合物、発酵生産物などが挙げられ、これら化合物は新規な化合物であってもよいし、公知の化合物であってもよい。
【０１８７】
本発明のスクリーニング方法またはスクリーニング用キットを用いて得られる化合物は、ＲＦＲＰとＯＴ７Ｔ０２２との結合性またはシグナル伝達を変化させる作用を有する化合物であり、具体的には、（イ）ＯＴ７Ｔ０２２を介して細胞刺激活性を有する化合物（いわゆる、ＯＴ７Ｔ０２２アゴニスト）、（ロ）該細胞刺激活性を有しない化合物（いわゆる、ＯＴ７Ｔ０２２アンタゴニスト）、（ハ）ＲＦＲＰとＯＴ７Ｔ０２２との結合力を増強する化合物、あるいは（ニ）ＲＦＲＰとＯＴ７Ｔ０２２との結合力を減少させる化合物である。
【０１８８】
該化合物の塩としては、生理学的に許容される酸（例、無機酸など）や塩基（例、有機酸など）などとの塩が用いられ、とりわけ生理学的に許容される酸付加塩が好ましい。この様な塩としては、例えば、無機酸（例えば、塩酸、リン酸、臭化水素酸、硫酸など）との塩、あるいは有機酸（例えば、酢酸、ギ酸、プロピオン酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、酒石酸、クエン酸、リンゴ酸、蓚酸、安息香酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸など）との塩などが用いられる。
【０１８９】
ＯＴ７Ｔ０２２アゴニストは、ＲＦＲＰが有する生理活性と同様の作用を有しており安全で低毒性な医薬として有用である。
【０１９０】
ＯＴ７Ｔ０２２アンタゴニストは、ＲＦＲＰが有する生理活性を抑制することができるので、ＲＦＲＰの生理活性を抑制するための安全で低毒性な医薬として有用である。
【０１９１】
ＲＦＲＰとＯＴ７Ｔ０２２との結合力を増強する化合物またはその塩は、ＲＦＲＰが有する生理活性を増強することができるので、安全で低毒性な医薬として有用である。
【０１９２】
ＲＦＲＰとＯＴ７Ｔ０２２との結合力を減少させる化合物またはその塩は、ＲＦＲＰが有する生理活性を減少させることができるので、ＲＦＲＰの生理活性を抑制するための安全で低毒性な医薬として有用である。
【０１９３】
具体的には、本発明のスクリーニング方法またはスクリーニング用キットを用いて得られるＯＴ７Ｔ０２２アゴニストおよびＲＦＲＰとＯＴ７Ｔ０２２との結合力を増強する化合物またはその塩は、例えば、膵グルカゴン分泌促進剤、血糖上昇剤、尿生成促進剤、記憶消去促進剤（嫌な記憶の消去促進剤）、 または肥満、高脂血症、２型糖尿病、低血糖症、高血圧、浮腫、排尿困難症、インスリン抵抗性症候群、不安定糖尿病、脂肪萎縮、インスリンアレルギー、インスリノーマ、動脈硬化、血栓性疾患、脂肪毒性、癌などの予防・治療剤として使用することができる。
【０１９４】
一方、本発明のスクリーニング方法またはスクリーニング用キットを用いて得られるＯＴ７Ｔ０２２アンタゴニストおよびＲＦＲＰとＯＴ７Ｔ０２２との結合力を減少させる化合物またはその塩は、例えば、膵グルカゴン分泌抑制剤、血糖低下剤、尿生成抑制剤、記憶学習低下抑制剤（記憶低下抑制剤）、または糖尿病、耐糖能障害、ケトーシス、アシドーシス、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、頻尿、夜尿症、高脂血症、性機能障害、皮膚疾患、関節症、骨減少症、動脈硬化、血栓性疾患、消化不良、記憶学習障害などの予防・治療剤として使用することができる。糖尿病には、インスリン依存型（Ｉ型）糖尿病、インスリン非依存型（II型）糖尿病などが含まれる。
【０１９５】
本発明のスクリーニング方法またはスクリーニング用キットを用いて得られる化合物またはその塩を上記の医薬組成物として使用する場合、常套手段に従って製剤化することができる。具体的には、上記したＲＦＲＰを含有する予防・治療剤と同様に製造することができる。
【０１９６】
得られる製剤は安全で低毒性であるので、例えば、ヒトや哺乳動物（例えば、ラット、マウス、ウサギ、ヒツジ、ブタ、ウシ、ネコ、イヌ、サルなど）に対して投与することができる。
【０１９７】
該化合物またはその塩の投与量は、投与対象、対象臓器、症状、投与方法などにより差異はあるが、経口投与の場合、一般的に例えば、肥満患者（体重６０ｋｇとして）においては、一日につきＯＴ７Ｔ０２２アゴニストを約０.１〜１００ｍｇ、好ましくは約１．０〜５０ｍｇ、より好ましくは約１．０〜２０ｍｇである。非経口的に投与する場合は、その１回投与量は投与対象、対象臓器、症状、投与方法などによっても異なるが、例えば、注射剤の形では通常例えば、肥満患者（体重６０ｋｇとして）においては、一日につきＯＴ７Ｔ０２２アゴニストを約０．０１〜３０ｍｇ程度、好ましくは約０．１〜２０ｍｇ程度、より好ましくは約０．１〜１０ｍｇ程度を静脈注射により投与するのが好都合である。他の動物の場合も、体重６０ｋｇ当たりに換算した量を投与することができる。
（６）細胞膜におけるＯＴ７Ｔ０２２の量を変化させる化合物またはその塩を含有する医薬
ＯＴ７Ｔ０２２に対する抗体は、ＯＴ７Ｔ０２２を特異的に認識することができるので、細胞膜におけるＯＴ７Ｔ０２２の量を変化させる化合物またはその塩のスクリーニングに用いることができる。
【０１９８】
すなわち、本発明は、例えば、
（ｉ）非ヒト哺乳動物のａ）血液、ｂ）特定の臓器、ｃ）臓器から単離した組織もしくは細胞等を破壊した後、細胞膜画分を単離し、細胞膜画分に含まれるＯＴ７Ｔ０２２を定量することによる、細胞膜におけるＯＴ７Ｔ０２２の量を変化させる化合物またはその塩のスクリーニング方法、
（ii）ＯＴ７Ｔ０２２を発現する形質転換体等を破壊した後、細胞膜画分を単離し、細胞膜画分に含まれるＯＴ７Ｔ０２２を定量することによる、細胞膜におけるＯＴ７Ｔ０２２の量を変化させる化合物またはその塩のスクリーニング方法、
（iii）非ヒト哺乳動物のａ）血液、ｂ）特定の臓器、ｃ）臓器から単離した組織もしくは細胞等を切片とした後、免疫染色法を用いることにより、細胞表層での該受容体蛋白質の染色度合いを定量化することにより、細胞膜上の該蛋白質を確認することによる、細胞膜におけるＯＴ７Ｔ０２２の量を変化させる化合物またはその塩のスクリーニング方法を提供する。
【０１９９】
（iv）ＯＴ７Ｔ０２２を発現する形質転換体等を切片とした後、免疫染色法を用いることにより、細胞表層での該受容体蛋白質の染色度合いを定量化することにより、細胞膜上の該蛋白質を確認することによる、細胞膜におけるＯＴ７Ｔ０２２の量を変化させる化合物またはその塩のスクリーニング方法を提供する。
【０２００】
細胞膜画分に含まれるＯＴ７Ｔ０２２の定量は具体的には以下のようにして行なう。
【０２０１】
（ｉ）正常あるいは疾患モデル非ヒト哺乳動物（例えば、マウス、ラット、ウサギ、ヒツジ、ブタ、ウシ、ネコ、イヌ、サルなど、より具体的には免疫不全ラット、マウス、ウサギなど）に対して、薬剤（例えば、免疫調節薬など）あるいは物理的ストレス（例えば、浸水ストレス、電気ショック、明暗、低温など）などを与え、一定時間経過した後に、血液、あるいは特定の臓器（例えば、脳、肝臓、腎臓など）、または臓器から単離した組織、あるいは細胞を得る。得られた臓器、組織または細胞等を、例えば、適当な緩衝液（例えば、トリス塩酸緩衝液、リン酸緩衝液、ヘペス緩衝液など）等に懸濁し、臓器、組織あるいは細胞を破壊し、界面活性剤（例えば、トリトンＸ１００ＴＭ、ツイーン２０ＴＭなど）などを用い、さらに遠心分離や濾過、カラム分画などの手法を用いて細胞膜画分を得る。
【０２０２】
細胞膜画分としては、細胞を破砕した後、それ自体公知の方法で得られる細胞膜が多く含まれる画分のことをいう。細胞の破砕方法としては、Potter−Elvehjem型ホモジナイザーで細胞を押し潰す方法、ワーリングブレンダーやポリトロン（Kinematica社製）による破砕、超音波による破砕、フレンチプレスなどで加圧しながら細胞を細いノズルから噴出させることによる破砕などが挙げられる。細胞膜の分画には、分画遠心分離法や密度勾配遠心分離法などの遠心力による分画法が主として用いられる。例えば、細胞破砕液を低速（５００〜３０００ｒｐｍ）で短時間（通常、約１〜１０分）遠心し、上清をさらに高速（１５０００〜３００００ｒｐｍ）で通常３０分〜２時間遠心し、得られる沈澱を膜画分とする。該膜画分中には、発現したＯＴ７Ｔ０２２と細胞由来のリン脂質や膜蛋白質などの膜成分が多く含まれる。
【０２０３】
細胞膜画分に含まれるＯＴ７Ｔ０２２は、例えば、本発明の抗体を用いたサンドイッチ免疫測定法、ウエスタンブロット解析などにより定量することができる。
【０２０４】
かかるサンドイッチ免疫測定法は上記の方法と同様にして行なうことができ、ウエスタンブロットは自体公知の手段により行なうことができる。
【０２０５】
（ii）ＯＴ７Ｔ０２２を発現する形質転換体を上記の方法に従い作製し、細胞膜画分に含まれるＯＴ７Ｔ０２２を定量することができる。
【０２０６】
細胞膜におけるＯＴ７Ｔ０２２の量を変化させる化合物またはその塩のスクリーニングは、
（ｉ）正常あるいは疾患モデル非ヒト哺乳動物に対して、薬剤あるいは物理的ストレスなどを与える一定時間前（３０分前〜２４時間前、好ましくは３０分前〜１２時間前、より好ましくは１時間前〜６時間前）もしくは一定時間後（３０分後〜３日後、好ましくは１時間後〜２日後、より好ましくは１時間後〜２４時間後）、または薬剤あるいは物理的ストレスと同時に試験化合物を投与し、投与後一定時間経過後（３０分後〜３日後、好ましくは１時間後〜２日後、より好ましくは１時間後〜２４時間後）、細胞膜におけるＯＴ７Ｔ０２２の量を定量することにより行なうことができ、
（ii）形質転換体を常法に従い培養する際に試験化合物を培地中に混合させ、一定時間培養後（１日後〜７日後、好ましくは１日後〜３日後、より好ましくは２日後〜３日後）、細胞膜におけるＲＦＲＰの量を定量することにより行なうことができる。
【０２０７】
細胞膜画分に含まれるＯＴ７Ｔ０２２の確認は具体的には以下のようにして行なう。
【０２０８】
（iii）正常あるいは疾患モデル非ヒト哺乳動物（例えば、マウス、ラット、ウサギ、ヒツジ、ブタ、ウシ、ネコ、イヌ、サルなど、より具体的には免疫不全モデルラット、マウス、ウサギなど）に対して、薬剤（例えば、免疫調節薬など）あるいは物理的ストレス（例えば、浸水ストレス、電気ショック、明暗、低温など）などを与え、一定時間経過した後に、血液、あるいは特定の臓器（例えば、脳、肝臓、腎臓など）、または臓器から単離した組織、あるいは細胞を得る。得られた臓器、組織または細胞等を、常法に従い組織切片とし、本発明の抗体を用いて免疫染色を行う。細胞表層での該受容体蛋白質の染色度合いを定量化することにより、細胞膜上の該蛋白質を確認することにより、定量的または定性的に、細胞膜におけるＯＴ７Ｔ０２２の量を確認することができる。
【０２０９】
（iv）ＯＴ７Ｔ０２２を発現する形質転換体等を用いて同様の手段をとることにより確認することもできる。
【０２１０】
本発明のスクリーニング方法を用いて得られる化合物は、細胞膜におけるＯＴ７Ｔ０２２の量を変化させる作用を有する化合物であり、具体的には、（イ）細胞膜におけるＯＴ７Ｔ０２２の量を増加させることにより、ＯＴ７Ｔ０２２を介する細胞刺激活性を増強させる化合物、（ロ）細胞膜におけるＯＴ７Ｔ０２２の量を減少させることにより、該細胞刺激活性を減弱させる化合物である。
【０２１１】
該化合物の塩としては、生理学的に許容される酸（例、無機酸など）や塩基（例、有機酸など）などとの塩が用いられ、とりわけ生理学的に許容される酸付加塩が好ましい。この様な塩としては、例えば、無機酸（例えば、塩酸、リン酸、臭化水素酸、硫酸など）との塩、あるいは有機酸（例えば、酢酸、ギ酸、プロピオン酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、酒石酸、クエン酸、リンゴ酸、蓚酸、安息香酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸など）との塩などが用いられる。
【０２１２】
細胞膜におけるＯＴ７Ｔ０２２の量を増加させることにより、細胞刺激活性を増強させる化合物またはその塩は、例えば、膵グルカゴン分泌促進剤、血糖上昇剤、尿生成促進剤、記憶消去促進剤（嫌な記憶の消去促進剤）、または肥満、高脂血症、２型糖尿病、低血糖症、高血圧、浮腫、排尿困難症、インスリン抵抗性症候群、不安定糖尿病、脂肪萎縮、インスリンアレルギー、インスリノーマ、動脈硬化、血栓性疾患、脂肪毒性、癌などの予防・治療剤として使用することができる。
【０２１３】
細胞膜におけるＯＴ７Ｔ０２２の量を減少させることにより、細胞刺激活性を減弱させる化合物またはその塩は、例えば、膵グルカゴン分泌抑制剤、血糖低下剤、尿生成抑制剤、記憶学習低下抑制剤（記憶低下抑制剤）、または糖尿病、耐糖能障害、ケトーシス、アシドーシス、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、頻尿、夜尿症、高脂血症、性機能障害、皮膚疾患、関節症、骨減少症、動脈硬化、血栓性疾患、消化不良、記憶学習障害などの予防・治療剤として使用することができる。糖尿病には、インスリン依存型（Ｉ型）糖尿病、インスリン非依存型（II型）糖尿病などが含まれる。
【０２１４】
本発明のスクリーニング方法を用いて得られる化合物またはその塩を医薬組成物として使用する場合、常套手段に従って製剤化することができる。具体的には、上記したＲＦＲＰを含有する予防・治療・改善剤と同様に製造することができる。
【０２１５】
得られる製剤は安全で低毒性であるので、例えば、ヒトや哺乳動物（例えば、ラット、マウス、ウサギ、ヒツジ、ブタ、ウシ、ネコ、イヌ、サルなど）に対して投与することができる。
【０２１６】
該化合物またはその塩の投与量は、投与対象、対象臓器、症状、投与方法などにより差異はあるが、経口投与の場合、一般的に例えば、肥満患者（体重６０ｋｇとして）においては、細胞膜におけるＯＴ７Ｔ０２２の量を増加させる化合物またはその塩を一日につき約０.１〜１００ｍｇ、好ましくは約１．０〜５０ｍｇ、より好ましくは約１．０〜２０ｍｇである。非経口的に投与する場合は、その１回投与量は投与対象、対象臓器、症状、投与方法などによっても異なるが、例えば、注射剤の形では通常例えば、肥満患者（体重６０ｋｇとして）においては、細胞膜におけるＯＴ７Ｔ０２２の量を増加させる化合物またはその塩を一日につき約０．０１〜３０ｍｇ程度、好ましくは約０．１〜２０ｍｇ程度、より好ましくは約０．１〜１０ｍｇ程度を静脈注射により投与するのが好都合である。他の動物の場合も、体重６０ｋｇ当たりに換算した量を投与することができる。
（７）ＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２に対する抗体を含有してなる医薬
ＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２に対して抗体（特に、中和抗体）は、ＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２が関与するシグナル伝達、例えば、ＯＴ７Ｔ０２２を介する細胞刺激活性を不活性化することができる。
【０２１７】
したがって、ＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２に対する抗体は、例えば、膵グルカゴン分泌抑制剤、血糖低下剤、尿生成抑制剤、記憶学習低下抑制剤（記憶低下抑制剤）、または糖尿病、耐糖能障害、ケトーシス、アシドーシス、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、頻尿、夜尿症、高脂血症、性機能障害、皮膚疾患、関節症、骨減少症、動脈硬化、血栓性疾患、消化不良、記憶学習障害などの予防・治療剤として使用することができる。糖尿病には、インスリン依存型（Ｉ型）糖尿病、インスリン非依存型（II型）糖尿病などが含まれる。
【０２１８】
上記予防・治療・改善剤は、前記したＲＦＲＰを含有する医薬と同様にして製造し、使用することができる。
（８）アンチセンスＤＮＡを含有してなる医薬
ＲＦＲＰをコードするＤＮＡに対するアンチセンスＤＮＡまたはＯＴ７Ｔ０２２をコードするＤＮＡに対するアンチセンスＤＮＡ（以下、アンチセンスＤＮＡと略記する）は、例えば、膵グルカゴン分泌抑制剤、血糖低下剤、尿生成抑制剤、記憶学習低下抑制剤（記憶低下抑制剤）、または糖尿病、耐糖能障害、ケトーシス、アシドーシス、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、頻尿、夜尿症、高脂血症、性機能障害、皮膚疾患、関節症、骨減少症、動脈硬化、血栓性疾患、消化不良、記憶学習障害などの予防・治療剤として使用することができる。糖尿病には、インスリン依存型（Ｉ型）糖尿病、インスリン非依存型（II型）糖尿病などが含まれる。
【０２１９】
例えば、該アンチセンスＤＮＡを用いる場合、該アンチセンスＤＮＡを単独あるいはレトロウイルスベクター、アデノウイルスベクター、アデノウイルスアソシエーテッドウイルスベクターなどの適当なベクターに挿入した後、常套手段に従って実施することができる。該アンチセンスＤＮＡは、そのままで、あるいは摂取促進のために補助剤などの生理学的に認められる担体とともに製剤化し、遺伝子銃やハイドロゲルカテーテルのようなカテーテルによって投与できる。
【０２２０】
さらに、該アンチセンスＤＮＡは、組織や細胞におけるＲＦＲＰまたはＯＴ７Ｔ０２２をコードするＤＮＡの存在やその発現状況を調べるための診断用オリゴヌクレオチドプローブとして使用することもできる。
（９）ＯＴ７Ｔ０２２ノックアウト動物
〔ＯＴ７Ｔ０２２遺伝子発現不活性哺乳動物ＥＳ細胞〕
ＯＴ７Ｔ０２２遺伝子が不活性化された哺乳動物ＥＳ細胞とは、哺乳動物ＥＳ細胞が有するＯＴ７Ｔ０２２遺伝子に人為的に変異を加えることにより、遺伝子の発現能を抑制するか、もしくは該遺伝子がコードしているＯＴ７Ｔ０２２の活性を実質的に喪失させることにより、遺伝子が実質的にＯＴ７Ｔ０２２の発現能を有さない不活性化された（以下、本発明のノックアウト遺伝子と称することがある）哺乳動物のＥＳ細胞をいう。
【０２２１】
ＯＴ７Ｔ０２２遺伝子としては、前記したＯＴ７Ｔ０２２をコードするＤＮＡが用いられるが、具体的には、マウスＯＴ７Ｔ０２２遺伝子としては、配列番号：２７で表わされるアミノ酸配列からなるマウスＯＴ７Ｔ０２２の部分蛋白質をコードする、配列番号：２８で表わされる塩基配列からなる遺伝子（ゲノムＤＮＡ）などが用いられる。
【０２２２】
ラットＯＴ７Ｔ０２２遺伝子としては、配列番号：１１で表わされるアミノ酸配列からなるＯＴ７Ｔ０２２をコードする、配列番号：１２で表わされる塩基配列を含有する遺伝子などが用いられる。
【０２２３】
本明細書中、ＥＳ細胞の材料とする哺乳動物としては、例えば、ヒト、ウシ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、ウサギ、イヌ、ネコ、モルモット、ハムスター、マウス、ラットなどが用いられる。
【０２２４】
また、本明細書中、非ヒト動物としては、ＯＴ７Ｔ０２２遺伝子を有するヒト以外の動物ならば、いかなる動物でもよいが、非ヒト哺乳動物が好ましい。非ヒト哺乳動物としては、例えば、ウシ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、ウサギ、イヌ、ネコ、モルモット、ハムスター、マウス、ラットなどが用いられる。非ヒト哺乳動物のなかでも、病態動物モデル系の作製の面から個体発生および生物サイクルが比較的短く、また繁殖が容易なゲッ歯動物、とりわけマウス（例えば純系として、Ｃ５７ＢＬ／６系統，ＤＢＡ２系統など、交雑系として、Ｂ６Ｃ３Ｆ１系統，ＢＤＦ１系統，Ｂ６Ｄ２Ｆ１系統，ＢＡＬＢ／ｃ系統，ＩＣＲ系統など（なかでも好ましくは、純系として、Ｃ５７ＢＬ／６系統など、交雑系として、ＢＤＦ１系統またはＩＣＲ系統など））またはラット（例えば、Ｗｉｓｔａｒ系統，ＳＤ系統など）などが特に好ましい。
【０２２５】
ＯＴ７Ｔ０２２遺伝子に人為的に変異を加える方法としては、例えば、遺伝子工学的手法により該遺伝子配列の一部又は全部の削除、もしくは他遺伝子の挿入または置換があげられる。これらの変異により、例えば、コドンの読み取り枠をずらすか、プロモーターあるいはエキソンの機能を破壊することにより本発明のノックアウト遺伝子を作製することができる。
【０２２６】
ＯＴ７Ｔ０２２遺伝子が不活性化された哺乳動物（好ましくは、非ヒト哺乳動物）ＥＳ細胞（以下、ＯＴ７Ｔ０２２遺伝子不活性化ＥＳ細胞またはノックアウトＥＳ細胞と略記する）の具体例としては、例えば、薬剤耐性遺伝子（例えば、ネオマイシン耐性遺伝子、ハイグロマイシン耐性遺伝子またはゼオシン耐性遺伝子など、好ましくは、ネオマイシン耐性遺伝子など）、あるいはレポーター遺伝子（例えば、ｌａｃＺ（大腸菌β−ガラクトシダーゼ遺伝子）、ｃａｔ（クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ遺伝子）、ＧＵＳ（β−グルクロニダーゼ遺伝子）、ルシフェラーゼ遺伝子、エクオリン遺伝子、タウマリン遺伝子、ＧＦＰ（Green Fluorescent Protein）遺伝子など、好ましくは、ｌａｃＺなど）等を挿入することによりＯＴ７Ｔ０２２遺伝子のエキソンの機能を破壊するか、あるいはエキソン間のイントロン部分に遺伝子の転写を終結させるＤＮＡ配列（例えば、polyＡ付加シグナルなど）を挿入し、完全なｍＲＮＡを合成できなくすることによって、結果的に遺伝子を破壊するように構築したＤＮＡ配列を有するＤＮＡベクター（以下、ターゲティングベクターと略記する）を作製する。レポーター遺伝子を挿入してエキソンの機能を破壊する場合、該レポーター遺伝子は、ＯＴ７Ｔ０２２プロモーターの制御下で発現するように挿入することが好ましい。
【０２２７】
上記「薬剤耐性遺伝子」とは、抗生物質などの薬剤耐性に関与する遺伝子を示し、導入される遺伝子が細胞において発現したか否かを選抜するマーカーとして利用される。
【０２２８】
また、上記「レポーター遺伝子」とは、遺伝子発現の指標になる遺伝子群のことを示し、通常、発光反応や呈色反応を触媒する酵素の構造遺伝子が利用されることが多く、（ｉ）遺伝的背景がないもの、（ii）遺伝子発現を定量的に行える高感度の方法があるもの、（iii）形質転換細胞への影響が少ないもの、（iv）発現部位の局在性が示されるものなどが好ましく用いられる（植物細胞工学、第２巻、第７２１頁、１９９０）。また、上記の「薬剤耐性遺伝子」なども同じ目的で使用されるが、「レポーター遺伝子」は、単に導入される遺伝子が細胞において発現したかどうかだけではなく、どの組織でいつ発現したかを調べることができ、しかも定量的に発現量を正確に調べることができるものである。
【０２２９】
さらに、ターゲティングベクターを、例えば、相同組換え法により該動物の染色体に導入し、得られたＥＳ細胞についてＯＴ７Ｔ０２２遺伝子上あるいはその近傍のＤＮＡ配列をプローブとしたサザンハイブリダイゼーション解析あるいはターゲティングベクター上のＤＮＡ配列とターゲティングベクター作製に使用したＯＴ７Ｔ０２２遺伝子以外の近傍領域のＤＮＡ配列をプライマーとしたＰＣＲ法により解析し、本発明のノックアウトＥＳ細胞を選別することにより得ることができる。
【０２３０】
上記のターゲティングベクターとしては、例えば、大腸菌由来のプラスミド（例、ｐＢＲ３２２，ｐＢＲ３２５，ｐＵＣ１２，ｐＵＣ１３など）、枯草菌由来のプラスミド（例、ｐＵＢ１１０，ｐＴＢ５，ｐＣ１９４など）、酵母由来のプラスミド（例、ｐＳＨ１９，ｐＳＨ１５など）、λファージなどのバクテリオファージ、モロニー白血病ウイルスなどのレトロウイルス、ワクシニアウイルスまたはアデノウイルスベクター、バキュロウイルス、ウシ乳頭腫ウイルス、ヘルペスウイルス群からのウイルス、またはエプスタイン・バー・ウイルスなどの動物ウイルスなどが用いられる。
【０２３１】
また、相同組換え法等によりＯＴ７Ｔ０２２遺伝子を不活性化させる元のＥＳ細胞としては、例えば、前述のような既に樹立されたものを用いてもよく、また公知のEvansとKaufmanの方法に準じて新しく樹立したものでもよい。例えば、マウスのＥＳ細胞の場合、現在、一般的には１２９系統のＥＳ細胞が使用されているが、免疫学的背景がはっきりしていないので、これに代わる純系で免疫学的に遺伝的背景が明らかなＥＳ細胞を取得するなどの目的で例えば、Ｃ５７ＢＬ／６系統マウスやＤＢＡ／２系統との交雑種ＢＤＦ１系統マウス（Ｃ５７ＢＬ／６系統とＤＢＡ／２系統とのＦ１）を用いて樹立したものなども良好に用いうる。ＢＤＦ１系統マウスは、採卵数が多く、かつ、卵が操作上にであるという利点に加えて、Ｃ５７ＢＬ／６系統マウスを遺伝的背景に持つので、これを用いて得られたＥＳ細胞は病態モデルマウスを作出したとき、Ｃ５７ＢＬ／６系統マウスと戻し交配することでその遺伝的背景をＣ５７ＢＬ／６系統に戻すことが可能である点で有利に用い得る。
【０２３２】
また、ＥＳ細胞を樹立する場合、一般には受精後３.５日目の胚盤胞を使用するが、これ以外に８細胞期胚(受精後２．５日目頃の８細胞期胚が好ましい)を採卵し胚盤胞まで培養して用いることにより効率よく多数の初期胚を取得することができる。
【０２３３】
また第二次セレクションは、Ｇ−バンディング法などを用いた核型分析等により行うことができる。得られるＥＳ細胞の染色体数は正常数の１００％が望ましいが、樹立の際の物理的操作等の関係上困難な場合は、ＥＳ細胞の遺伝子をノックアウトした後、正常細胞（例えばマウスでは染色体数が２ｎ＝４０である細胞）に再びクローニングすることが望ましい。
【０２３４】
このようにして得られたＥＳ細胞株は、通常その増殖性は大変良いが、個体発生できる再生能を失いやすいので、注意深く継代培養することが必要である。例えば、ＳＴＯ繊維芽細胞のような適当なフィーダー細胞上でＬＩＦ（１〜１００００U/ml）存在下に炭酸ガス培養器内（好ましくは、５％炭酸ガス、９５％空気または５％酸素、５％炭酸ガス、９０％空気）で約３７℃で培養するなどの方法で培養し、継代時には、例えば、トリプシン／ＥＤＴＡ溶液（通常０.００１〜０.５％トリプシン／０.１〜５ｍＭ ＥＤＴＡ、好ましくは約０.１％トリプシン／１ｍＭ ＥＤＴＡ）処理により単細胞化し、新たに用意したフィーダー細胞上に播種する方法などがとられる。このような継代は、通常１−３日毎に行なうが、この際に細胞の観察を行い、形態的に異常な細胞が見受けられた場合は、その培養細胞は放棄することが望まれる。
【０２３５】
ＥＳ細胞は、適当な条件により、高密度に至るまで単層培養するか、または細胞集塊を形成するまで浮遊培養することにより、頭頂筋、内臓筋、心筋などの種々のタイプの細胞に分化させることが可能であり〔M. J. Evans及びM. H. Kaufman, ネイチャー（Nature）第292巻、154頁、1981年；G. R. Martin  プロシーディングス・オブ・ナショナル・アカデミー・オブ・サイエンス・ユーエスエー（Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A.）第78巻、7634頁、1981年；T. C. Doetschman ら、ジャーナル・オブ・エンブリオロジー・アンド・エクスペリメンタル・モルフォロジー、第87巻、27頁、1985年〕、本発明のＥＳ細胞を分化させて得られるＯＴ７Ｔ０２２遺伝子発現不全細胞は、in vitroにおけるＯＴ７Ｔ０２２の細胞生物学的検討において有用である。
【０２３６】
また、ＥＳ細胞を保存する場合には、適当な凍結用培地（例えば、10％ＤＭＳＯ、10％牛胎児血清を含むダルベッコ変法イーグル培地（ＤＭＥＭ）などを用いて、約−８０℃以下で凍結保存する。
【０２３７】
本発明のＯＴ７Ｔ０２２遺伝子発現不全非ヒト動物（以下、遺伝子発現不全非ヒト動物と称す場合がある）とは、例えば、前記のＯＴ７Ｔ０２２遺伝子が不活性化された哺乳動物ＥＳ細胞由来の細胞を用いて遺伝子工学的に作出されたものであり、例えば、生殖細胞および体細胞に胚形成初期に不活性化ＯＴ７Ｔ０２２遺伝子配列を導入された非ヒト動物である。
【０２３８】
該非ヒト動物としては、前記と同様のものが用いられる。
【０２３９】
ＯＴ７Ｔ０２２遺伝子をノックアウトさせるには、前記のターゲティングベクターを非ヒト動物ＥＳ細胞または非ヒト動物卵細胞に公知の方法（例えば、エレクトロポレーション法、マイクロインジェクション法、リン酸カルシウム法、リポフェクション法、凝集法、パーティクルガン法、ＤＥＡＥ−デキストラン法など）によって導入し（好ましい導入法としては、ＥＳ細胞に導入する場合にはエレクトロポレーション法、卵細胞に導入する場合にはマイクロインジェクション法などがあげられる）、ターゲティングベクターの不活性化されたＯＴ７Ｔ０２２遺伝子配列を相同組換えにより、非ヒト動物ＥＳ細胞または非ヒト動物卵細胞の染色体上のＯＴ７Ｔ０２２遺伝子と入れ換えることにより行うことができる。
【０２４０】
ＯＴ７Ｔ０２２遺伝子がノックアウトされた細胞は、ＯＴ７Ｔ０２２遺伝子上またはその近傍のＤＮＡ配列をプローブとしたサザンハイブリダイゼーション解析またはターゲティングベクター上のＤＮＡ配列と、ターゲティングベクターに使用したマウス由来のＯＴ７Ｔ０２２遺伝子以外の近傍領域のＤＮＡ配列とをプライマーとしたＰＣＲ法による解析で判定することができる。
【０２４１】
非ヒト動物ＥＳ細胞を用いた場合は、相同組換えにより、ＯＴ７Ｔ０２２遺伝子が不活性化された細胞株をクローニングし、その細胞を胚形成の初期の適当な時期、例えば、８細胞期の非ヒト動物胚または胚盤胞に注入し（注入法）、またはＯＴ７Ｔ０２２遺伝子が不活性化されたＥＳ細胞塊を２個の８細胞期胚ではさみ込む（集合キメラ法）ことにより作製したキメラ胚を偽妊娠させた該非ヒト動物の子宮に移植する。
【０２４２】
作出された動物は正常なＯＴ７Ｔ０２２遺伝子座をもつ細胞と人為的に変異したＯＴ７Ｔ０２２遺伝子座をもつ細胞との両者から構成されるキメラ動物である。
【０２４３】
該キメラ動物の生殖細胞の一部が変異したＯＴ７Ｔ０２２遺伝子座をもつ場合、このようなキメラ個体と正常個体を交配することにより得られた個体群より、全ての組織が人為的に変異を加えたＯＴ７Ｔ０２２遺伝子座をもつ細胞で構成された個体を、例えば、コートカラーの判定等により選別することにより得られる。このようにして得られた個体は、通常、ＯＴ７Ｔ０２２ヘテロ発現不全個体であり、ＯＴ７Ｔ０２２ヘテロ発現不全個体同志を交配し、それらの産仔からＯＴ７Ｔ０２２ホモ発現不全個体を得ることができる。
【０２４４】
卵細胞を使用する場合は、例えば、卵細胞核内にマイクロインジェクション法で遺伝子溶液を注入することによりターゲティングベクターを染色体内に導入したトランスジェニック非ヒト動物を得ることができ、これらのトランスジェニック非ヒト動物を比較することにより、相同組換えによりＯＴ７Ｔ０２２遺伝子座に変異のあるものを選択することにより得られる。
【０２４５】
ＯＴ７Ｔ０２２遺伝子発現不全非ヒト動物は、該動物のｍＲＮＡ量を公知の方法を用いて測定して間接的にその発現量を比較することにより、正常動物と区別することが可能である。
【０２４６】
このようにしてＯＴ７Ｔ０２２遺伝子がノックアウトされている個体は、交配により得られた動物個体も該遺伝子がノックアウトされていることを確認して通常の飼育環境で飼育継代を行なうことができる。
【０２４７】
さらに、生殖系列の取得および保持についても常法に従って行うことができる。即ち、該不活化遺伝子配列の保有する雌雄の動物を交配することにより、該不活化遺伝子配列を相同染色体の両方に持つホモザイゴート動物を取得することができる。得られたホモザイゴート動物は、母親動物に対して、正常個体１，ホモザイゴート複数になるような状態で飼育することにより効率的に得ることができる。ヘテロザイゴート動物の雌雄を交配することにより、該不活化遺伝子配列を有するホモザイゴートおよびヘテロザイゴート動物を繁殖継代することができる。このようにして得られた該不活化遺伝子配列を有する動物の子孫も本発明のＯＴ７Ｔ０２２遺伝子発現不全非ヒト動物に含まれる。
【０２４８】
このようにＯＴ７Ｔ０２２遺伝子が不活性化された哺乳動物ＥＳ細胞は、ＯＴ７Ｔ０２２遺伝子発現不全非ヒト動物を作出する上で、非常に有用である。また、ＯＴ７Ｔ０２２遺伝子発現不全非ヒト動物、該動物に対する薬剤誘発あるいはストレス負荷によって生じる病態モデル動物、ＯＴ７Ｔ０２２遺伝子発現不全非ヒト動物と他の病態モデル動物との交配によって生じるより良い病態モデル動物、ＯＴ７Ｔ０２２遺伝子発現不全非ヒト動物と他の病態モデル動物との交配によって生じる病態モデル動物に対する薬剤誘発あるいはストレス負荷によって生じる病態モデル動物およびＯＴ７Ｔ０２２遺伝子発現不全非ヒト動物と他の病態モデル動物を用いた骨髄移植動物、もしくはそれらの組織またはそれらに由来する細胞は、ＯＴ７Ｔ０２２の欠損に起因する疾病、例えば、ＯＴ７Ｔ０２２により誘導され得る種々の生物活性の欠失に基づく、ＯＴ７Ｔ０２２の生物活性の不活性化に起因する疾病（例えば、肥満、高脂血症、２型糖尿病、低血糖症、高血圧、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、浮腫、排尿困難症、インスリン抵抗性症候群、不安定糖尿病、脂肪萎縮、インスリンアレルギー、インスリノーマ、動脈硬化、血栓性疾患、脂肪毒性、癌など）のより良いモデルとなり得るので、これらの疾病の原因究明及び治療法の検討に有用である。ここで、他の病態モデル動物としては、例えば、血液細胞側のみの遺伝子発現の欠損あるいは上昇に限局させた骨髄移植を用いたモデルマウスも挙げられる［Linton, M. F., et al., Science 267: 1034-1037 (1995) ］。骨髄移植マウスは遺伝子機能の変化が限局されることで、より適した病態モデル動物となる可能性を秘めている。例えば、上記されたＯＴ７Ｔ０２２遺伝子発現不全非ヒト動物から得られた病態モデル動物をドナー動物として、その骨髄を採取し、あらかじめ放射線照射で骨髄を破壊した他のレシピエント動物に移植したマウス、あるいは、他の病態モデル動物をドナー動物として、その骨髄を採取し、あらかじめ放射線照射で骨髄を破壊したＯＴ７Ｔ０２２遺伝子発現不全非ヒト動物から得られた病態モデル動物をレシピエント動物として移植した骨髄移植マウスなども含まれる。
【０２４９】
このように、本発明のＯＴ７Ｔ０２２遺伝子発現不全非ヒト動物、該動物に対する薬剤誘発あるいはストレス負荷によって生じる病態モデル動物、ＯＴ７Ｔ０２２遺伝子発現不全非ヒト動物と他の病態モデル動物との交配によって生じる病態モデル動物、ＯＴ７Ｔ０２２遺伝子発現不全非ヒト動物と他の病態モデル動物との交配によって生じる病態モデル動物に対する薬剤誘発あるいはストレス負荷によって生じる病態モデル動物、ＯＴ７Ｔ０２２遺伝子発現不全非ヒト動物から得られた病態モデル動物と他の病態モデル動物を用いて骨髄移植して得られた病態モデル動物、もしくはそれらの組織またはそれらに由来する細胞を、該疾病の予防・治療・改善薬のスクリーニングに用いることができる。ここで、上記組織やそれに由来する細胞の例としては、肝臓や腎臓などのホモジネートを用いて特定の活性を測定する、あるいは、腹腔マクロファージを用いて特定産物の活性や産生量を測定することでスクリーニングに用いることができる。
[本発明のスクリーニング方法Ａ]
本発明のスクリーニング方法において用いられるＯＴ７Ｔ０２２遺伝子発現不全非ヒト動物、該動物の薬剤誘発あるいはストレス負荷によって生じる病態モデル動物、ＯＴ７Ｔ０２２遺伝子発現不全非ヒト動物と他の病態モデル動物との交配によって生じる病態モデル動物、ＯＴ７Ｔ０２２遺伝子発現不全非ヒト動物と他の病態モデル動物との交配によって生じる病態モデル動物に対する薬剤誘発あるいはストレス負荷によって生じる病態モデル動物、ＯＴ７Ｔ０２２遺伝子発現不全非ヒト動物から得られた病態モデル動物と他の病態モデル動物を用いて骨髄移植して得られた病態モデル動物、もしくはそれらの組織またはそれらに由来する細胞としては、前記と同様のものが挙げられる。
【０２５０】
試験化合物としては、例えば、ペプチド、蛋白質、非ペプチド性化合物、合成化合物、発酵生産物、細胞抽出液、植物抽出液、動物組織抽出液、血漿などが挙げられ、これら化合物は新規な化合物であってもよいし、公知の化合物であってもよい。
【０２５１】
試験化合物は塩を形成していてもよく、試験化合物の塩としては、生理学的に許容される酸（例、無機酸など）や塩基（例、有機酸など）などとの塩が用いられ、とりわけ生理学的に許容される酸付加塩が好ましい。この様な塩としては、例えば、無機酸（例えば、塩酸、リン酸、臭化水素酸、硫酸など）との塩、あるいは有機酸（例えば、酢酸、ギ酸、プロピオン酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、酒石酸、クエン酸、リンゴ酸、蓚酸、安息香酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸など）との塩などが用いられる。
【０２５２】
具体的には、本発明のＯＴ７Ｔ０２２遺伝子発現不全非ヒト動物、該動物の薬剤誘発あるいはストレス負荷によって生じる病態モデル動物、ＯＴ７Ｔ０２２遺伝子発現不全非ヒト動物と他の病態モデル動物との交配によって生じる病態モデル動物、ＯＴ７Ｔ０２２遺伝子発現不全非ヒト動物と他の病態モデル動物との交配によって生じる病態モデル動物に対する薬剤誘発あるいはストレス負荷によって生じる病態モデル動物およびＯＴ７Ｔ０２２遺伝子発現不全非ヒト動物から得られた病態モデル動物と他の病態モデル動物を用いて骨髄移植して得られた病態モデル動物（以下、ＯＴ７Ｔ０２２遺伝子発現不全非ヒト動物等と称する場合がある）、もしくはそれらの組織またはそれらに由来する細胞を、試験化合物で処理し、無処理の対照動物と比較し、該動物の各器官、組織、細胞、疾病の症状等の変化を指標として試験化合物の予防・治療・改善効果を試験することができる。
【０２５３】
試験動物（ＯＴ７Ｔ０２２遺伝子発現不全非ヒト動物等）を試験化合物で処理する方法としては、例えば、経口投与、静脈注射などが用いられ、試験動物の症状、試験化合物の性質などにあわせて適宜選択することができる。また、試験化合物の投与量は、投与方法、試験化合物の性質などにあわせて適宜選択することができる。
【０２５４】
例えば、肥満の予防・治療薬をスクリーニングする場合、本発明のＯＴ７Ｔ０２２遺伝子発現不全非ヒト動物等にコレステロール負荷処置を行い、コレステロール負荷処置前または処置後に試験化合物を投与し、該動物の血中コレステロール値および体重変化などを経時的に測定することによりスクリーニングすることができる。また、本発明のＯＴ７Ｔ０２２遺伝子発現不全非ヒト動物等にＳＴＺあるいはアロキサンなどの薬剤投与を行い、糖負荷処置前または処置後に試験化合物を投与し、該動物の血糖値および体重変化などを経時的に測定することによりスクリーニングすることができる。
【０２５５】
例えば、該スクリーニング方法において、試験動物に試験化合物を投与した場合、該試験動物の体重が約１０％以上、好ましくは約３０％以上、より好ましくは約５０％以上減少した場合、該試験化合物を肥満に対して治療・予防効果を有する物質として選択することができる。
【０２５６】
本発明のスクリーニング方法を用いて得られる予防・治療薬は、上記した試験化合物から選ばれた化合物を含有するものであり、ＯＴ７Ｔ０２２欠損によって引き起こされる疾患の予防・治療・改善効果を有するので、ＯＴ７Ｔ０２２の欠損によって引き起こされる疾病に対する安全で低毒性な治療・予防薬などの医薬として有用である。また、該化合物から誘導される化合物も同様に用いることができる。
【０２５７】
該スクリーニング方法で得られた化合物は塩を形成していてもよく、該化合物の塩としては、例えば、無機塩基との塩、有機塩基との塩、無機酸との塩、有機酸との塩、塩基性または酸性アミノ酸との塩などの薬学的に許容し得る塩などがあげられる。
【０２５８】
無機塩基との塩の好適な例としては、例えばナトリウム塩、カリウム塩などのアルカリ金属塩、カルシウム塩、マグネシウム塩などのアルカリ土類金属塩、並びにアルミニウム塩、アンモニウム塩などがあげられる。
【０２５９】
有機塩基との塩の好適な例としては、例えばトリメチルアミン、トリエチルアミン、ピリジン、ピコリン、２，６−ルチジン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、シクロヘキシルアミン、ジシクロヘキシルアミン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミンなどとの塩あげられる。
【０２６０】
無機酸との塩の好適な例としては、例えば塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸などとの塩があげられる。
【０２６１】
有機酸との塩の好適な例としては、例えばギ酸、酢酸、プロピオン酸、フマル酸、シュウ酸、酒石酸、マレイン酸、クエン酸、コハク酸、リンゴ酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸などとの塩があげられる。
【０２６２】
塩基性アミノ酸との塩の好適な例としては、例えばアルギニン、リジン、オルチニンなどとの塩があげられ、酸性アミノ酸との好適な例としては、例えばアスパラギン酸、グルタミン酸などとの塩があげられる。
【０２６３】
本発明のスクリーニング方法を用いて得られる化合物またはその塩を上述の治療・予防薬として使用する場合、常套手段に従って実施することができ、例えば、必要に応じて糖衣を施した錠剤、カプセル剤、エリキシル剤、マイクロカプセル剤などとして経口的に、あるいは水もしくはそれ以外の薬学的に許容し得る液との無菌性溶液、または懸濁液剤などの注射剤の形で非経口的に使用できる。例えば、該化合物またはその塩を薬学的に認められる担体、香味剤、賦形剤、ベヒクル、防腐剤、安定剤、結合剤などとともに一般に認められた製薬実施に要求される単位用量形態で混和することによって製造することができる。これら製剤における有効成分量は指示された範囲の適当な容量が得られるようにするものである。
【０２６４】
錠剤、カプセル剤などに混和することができる添加剤としては、例えば、ゼラチン、コーンスターチ、トラガントゴム、アラビアゴムのような結合剤、結晶性セルロースのような賦形剤、コーンスターチ、ゼラチン、アルギン酸などのような膨化剤、ステアリン酸マグネシウムのような潤滑剤、ショ糖、乳糖またはサッカリンのような甘味剤、ペパーミント、アカモノ油またはチェリーのような香味剤などが用いられる。調剤単位形態がカプセルである場合には、前記タイプの材料にさらに油脂のような液状担体を含有することができる。注射のための無菌組成物は注射用水のようなベヒクル中の活性物質、胡麻油、椰子油などのような天然産出植物油などを溶解または懸濁させるなどの通常の製剤実施に従って処方することができる。
【０２６５】
注射用の水溶液としては、例えば、生理食塩水、ブドウ糖やその他の補助薬を含む等張液（例えば、Ｄ−ソルビトール、Ｄ−マンニトール、塩化ナトリウムなど）などが挙げられ、適当な溶解補助剤、例えば、アルコール（例えば、エタノールなど）、ポリアルコール（例えば、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールなど）、非イオン性界面活性剤（例えば、ポリソルベート８０TM、ＨＣＯ−５０など）などと併用してもよい。油性液としては、例えば、ゴマ油、大豆油などが挙げられ、溶解補助剤として安息香酸ベンジル、ベンジルアルコールなどと併用してもよい。また、緩衝剤（例えば、リン酸塩緩衝液、酢酸ナトリウム緩衝液など）、無痛化剤（例えば、塩化ベンザルコニウム、塩酸プロカインなど）、安定剤（例えば、ヒト血清アルブミン、ポリエチレングリコールなど）、保存剤（例えば、ベンジルアルコール、フェノールなど）、酸化防止剤などと配合してもよい。調製された注射液は通常、適当なアンプルに充填される。
【０２６６】
このようにして得られる製剤は安全で低毒性であるので、例えば、ヒトまたは温血動物（例えば、マウス、ラット、ウサギ、ヒツジ、ブタ、ウシ、ウマ、トリ、ネコ、イヌ、サル、チンパンジーなど）に対して投与することができる。
【０２６７】
該化合物またはその塩の投与量は、症状などにより差異はあるが、経口投与の場合、一般的に成人（体重６０ｋｇとして）の肥満患者においては、一日につき約０.１〜１００ｍｇ、好ましくは約１．０〜５０ｍｇ、より好ましくは約１．０〜２０ｍｇである。非経口的に投与する場合は、その１回投与量は投与対象、対象臓器、症状、投与方法などによっても異なるが、例えば、注射剤の形では通常成人（体重６０ｋｇとして）の肥満患者においては、一日につき約０．０１〜３０ｍｇ程度、好ましくは約０．１〜２０ｍｇ程度、より好ましくは約０．１〜１０ｍｇ程度を静脈注射により投与するのが好都合である。他の動物の場合も、体重６０ｋｇ当たりに換算した量を投与することができる。
［本発明のスクリーニング方法Ｂ］
本発明は、本発明のＯＴ７Ｔ０２２遺伝子発現不全非ヒト動物に、試験化合物を投与し、レポーター遺伝子の発現を検出することを特徴とする本発明の遺伝子に対するプロモーターの活性を促進または阻害する物質のスクリーニング方法を提供する。
【０２６８】
上記スクリーニング方法において、本発明のＯＴ７Ｔ０２２遺伝子発現不全非ヒト動物としては、前記した本発明のＯＴ７Ｔ０２２遺伝子発現不全非ヒト動物の中でも、ＯＴ７Ｔ０２２遺伝子がレポーター遺伝子を導入することにより不活性化され、該レポーター遺伝子がＯＴ７Ｔ０２２遺伝子に対するプロモーターの制御下で発現しうるものが用いられる。
【０２６９】
試験化合物としては、前記と同様のものがあげられる。
【０２７０】
レポーター遺伝子としては、前記と同様のものが用いられ、β−ガラクトシダーゼ遺伝子（ｌａｃＺ）、可溶性アルカリフォスファターゼ遺伝子またはルシフェラーゼ遺伝子などが好適である。
【０２７１】
ＯＴ７Ｔ０２２遺伝子をレポーター遺伝子で置換された本発明のＯＴ７Ｔ０２２遺伝子発現不全非ヒト動物では、レポーター遺伝子がＯＴ７Ｔ０２２遺伝子に対するプロモーターの支配下に存在するので、レポーター遺伝子がコードする物質の発現をトレースすることにより、プロモーターの活性を検出することができる。
【０２７２】
例えば、ＯＴ７Ｔ０２２遺伝子領域の一部を大腸菌由来のβ−ガラクトシダーゼ遺伝子（ｌａｃＺ）で置換している場合、本来、ＯＴ７Ｔ０２２遺伝子の発現する組織で、ＯＴ７Ｔ０２２の代わりにβ−ガラクトシダーゼが発現する。従って、例えば、５−ブロモ−４−クロロ−３−インドリル−β−ガラクトピラノシド（Ｘ−ｇａｌ）のようなβ−ガラクトシダーゼの基質となる試薬を用いて染色することにより、簡便にＯＴ７Ｔ０２２の動物生体内における発現状態を観察することができる。具体的には、ＯＴ７Ｔ０２２遺伝子欠損マウスまたはその組織切片をグルタルアルデヒドなどで固定し、リン酸緩衝生理食塩液（ＰＢＳ）で洗浄後、Ｘ−ｇａｌを含む染色液で、室温または３７℃付近で、約３０分ないし１時間反応させた後、組織標本を１ｍＭ ＥＤＴＡ／ＰＢＳ溶液で洗浄することによって、β−ガラクトシダーゼ反応を停止させ、呈色を観察すればよい。また、常法に従い、ｌａｃＺをコードするｍＲＮＡを検出してもよい。
【０２７３】
例えば、該スクリーニング方法において、試験動物に試験化合物を投与した場合、レポーター蛋白質の発現が約１０％以上、好ましくは約３０％以上、より好ましくは約５０％以上増加した場合、該試験化合物をＯＴ７Ｔ０２２遺伝子に対するプロモーター活性を促進する物質として選択でき、試験動物に試験化合物を投与した場合、レポーター蛋白質の発現が約１０％以上、好ましくは約３０％以上、より好ましくは約５０％以上減少した場合、該試験化合物をＯＴ７Ｔ０２２遺伝子に対するプロモーター活性を阻害する物質として選択できる。
【０２７４】
上記スクリーニング方法を用いて得られる物質は、上記した試験化合物から選ばれた物質であり、ＯＴ７Ｔ０２２遺伝子に対するプロモーター活性を促進または阻害する物質である。
【０２７５】
該スクリーニング方法で得られた物質は塩を形成していてもよく、該物質の塩としては、生理学的に許容される酸（例、無機酸など）や塩基（例、有機酸など）などとの塩が用いられ、とりわけ生理学的に許容される酸付加塩が好ましい。この様な塩としては、例えば、無機酸（例えば、塩酸、リン酸、臭化水素酸、硫酸など）との塩、あるいは有機酸（例えば、酢酸、ギ酸、プロピオン酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、酒石酸、クエン酸、リンゴ酸、蓚酸、安息香酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸など）との塩などが用いられる。
【０２７６】
ＯＴ７Ｔ０２２遺伝子に対するプロモーター活性を促進する物質は、ＯＴ７Ｔ０２２の発現を促進し、ＯＴ７Ｔ０２２の機能を促進することができるので、例えば、膵グルカゴン分泌促進剤、血糖上昇剤、尿生成促進剤、記憶消去促進剤（嫌な記憶の消去促進剤）、または肥満、高脂血症、２型糖尿病、低血糖症、高血圧、浮腫、排尿困難症、インスリン抵抗性症候群、不安定糖尿病、脂肪萎縮、インスリンアレルギー、インスリノーマ、動脈硬化、血栓性疾患、脂肪毒性、癌などの予防・治療剤として使用することができる。
【０２７７】
一方、ＯＴ７Ｔ０２２遺伝子に対するプロモーター活性を阻害する物質は、ＯＴ７Ｔ０２２の発現を阻害し、ＯＴ７Ｔ０２２の機能を阻害することができるので、例えば、膵グルカゴン分泌抑制剤、血糖低下剤、尿生成抑制剤、記憶学習低下抑制剤（記憶低下抑制剤）、または糖尿病、耐糖能障害、ケトーシス、アシドーシス、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、頻尿、夜尿症、高脂血症、性機能障害、皮膚疾患、関節症、骨減少症、動脈硬化、血栓性疾患、消化不良、記憶学習障害などの予防・治療剤として使用することができる。糖尿病には、インスリン依存型（Ｉ型）糖尿病、インスリン非依存型（II型）糖尿病などが含まれる。
【０２７８】
さらに、上記スクリーニングで得られた物質から誘導される物質も同様に用いることができる。
【０２７９】
該スクリーニング方法で得られた物質を含有する医薬は、前記したスクリーニング方法Ａで得られた化合物を含有する医薬と同様にして製造することができる。
【０２８０】
このようにして得られる製剤は、安全で低毒性であるので、例えば、ヒトまたは哺乳動物（例えば、ラット、マウス、モルモット、ウサギ、ヒツジ、ブタ、ウシ、ウマ、ネコ、イヌ、サルなど）に対して投与することができる。
【０２８１】
該物質の投与量は、対象疾患、投与対象、投与ルートなどにより差異はあるが、例えば、肥満の治療目的でＯＴ７Ｔ０２２遺伝子に対するプロモーター活性を促進する物質を経口投与する場合、一般的に成人患者（体重６０ｋｇとして）においては、一日につき該物質を約０.１〜１００ｍｇ、好ましくは約１．０〜５０ｍｇ、より好ましくは約１．０〜２０ｍｇ投与する。非経口的に投与する場合は、該物質の１回投与量は投与対象、対象疾患などによっても異なるが、例えば、肥満の治療目的でＯＴ７Ｔ０２２遺伝子に対するプロモーター活性を促進する物質を注射剤の形で通常成人患者（体重６０ｋｇとして）に投与する場合、一日につき該物質を約０．０１〜３０ｍｇ程度、好ましくは約０．１〜２０ｍｇ程度、より好ましくは約０．１〜１０ｍｇ程度を静脈注射により投与するのが好都合である。他の動物の場合も、体重６０ｋｇ当たりに換算した量を投与することができる。
【０２８２】
このように、本発明のＯＴ７Ｔ０２２遺伝子発現不全非ヒト動物は、ＯＴ７Ｔ０２２遺伝子に対するプロモーターの活性を促進または阻害する化合物またはその塩をスクリーニングする上で極めて有用であり、ＯＴ７Ｔ０２２遺伝子発現不全に起因する各種疾患の原因究明または予防・治療・改善薬の開発に大きく貢献することができる。
【０２８３】
また、ＯＴ７Ｔ０２２遺伝子のプロモーター領域を含有するＤＮＡを使って、その下流に種々の蛋白質をコードする遺伝子を連結し、これを動物の卵細胞に注入していわゆるトランスジェニック動物（遺伝子移入動物）を作成すれば、特異的にそのペプチドを合成させ、その生体での作用を検討することも可能となる。さらに上記プロモーター部分に適当なレポーター遺伝子を結合させ、これが発現するような細胞株を樹立すれば、ＯＴ７Ｔ０２２そのものの体内での産生能力を特異的に促進もしくは抑制する作用を持つ低分子化合物の探索系として使用できる。
（１０）各種薬物の作用メカニズムの解明方法
ＯＴ７Ｔ０２２を用いることによって、各種薬物がＯＴ７Ｔ０２２を介して薬理効果を発揮しているか否かを確認することができる。
【０２８４】
すなわち、本発明は、
（１）膵グルカゴン分泌促進薬、血糖上昇薬、尿生成促進薬、記憶消去促進薬（嫌な記憶の消去促進薬）、または肥満、高脂血症、２型糖尿病、低血糖症、高血圧、浮腫、排尿困難症、インスリン抵抗性症候群、不安定糖尿病、脂肪萎縮、インスリンアレルギー、インスリノーマ、動脈硬化、血栓性疾患、脂肪毒性、癌などの予防・治療薬、膵グルカゴン分泌抑制薬、血糖低下薬、尿生成抑制薬、記憶学習低下抑制薬（記憶低下抑制薬）、または糖尿病、耐糖能障害、ケトーシス、アシドーシス、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、頻尿、夜尿症、高脂血症、性機能障害、皮膚疾患、関節症、骨減少症、動脈硬化、血栓性疾患、消化不良、記憶学習障害などの予防・治療薬がＯＴ７Ｔ０２２に結合することを確認する方法、
（２）ＯＴ７Ｔ０２２を用いることを特徴とする、膵グルカゴン分泌促進薬、血糖上昇薬、尿生成促進薬、記憶消去促進薬（嫌な記憶の消去促進薬）、または肥満、高脂血症、２型糖尿病、低血糖症、高血圧、浮腫、排尿困難症、インスリン抵抗性症候群、不安定糖尿病、脂肪萎縮、インスリンアレルギー、インスリノーマ、動脈硬化、血栓性疾患、脂肪毒性、癌などの予防・治療薬がＯＴ７Ｔ０２２に対するアゴニストであることを確認する方法、
（３）ＯＴ７Ｔ０２２を用いることを特徴とする、膵グルカゴン分泌抑制薬、血糖低下薬、尿生成抑制薬、記憶学習低下抑制薬（記憶低下抑制薬）、または糖尿病、耐糖能障害、ケトーシス、アシドーシス、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、頻尿、夜尿症、高脂血症、性機能障害、皮膚疾患、関節症、骨減少症、動脈硬化、血栓性疾患、消化不良、記憶学習障害などの予防・治療薬がＯＴ７Ｔ０２２に対するアンタゴニストであることを確認する方法、
（４）各薬をＯＴ７Ｔ０２２に接触させた場合における、各薬とＯＴ７Ｔ０２２との結合量を測定することを特徴とする上記（１）〜（３）記載のスクリーニング方法を提供する。
【０２８５】
この確認方法は、ＲＦＲＰとＯＴ７Ｔ０２２との結合性を変化させる化合物のスクリーニング方法において、試験化合物に代えて、上記の薬物を使用することによって実施することができる。
【０２８６】
また、本発明の確認方法用キットは、ＲＦＲＰとＯＴ７Ｔ０２２との結合性を変化させる化合物のスクリーニング用キットにおいて、試験化合物に代えて、上記の薬物を含有するものである。
【０２８７】
このように、本発明の確認方法を用いることによって、市販または開発途中の各種薬物がＯＴ７Ｔ０２２を介して薬理効果を発揮していることを確認することができる。
【０２８８】
本明細書および図面において、塩基やアミノ酸などを略号で表示する場合、ＩＵＰＡＣ−ＩＵＢ  Commission on Biochemical Nomenclatureによる略号あるいは当該分野における慣用略号に基づくものであり、その例を下記する。またアミノ酸に関し光学異性体があり得る場合は、特に明示しなければＬ体を示すものとする。
【０２８９】
ＤＮＡ          ：デオキシリボ核酸
ｃＤＮＡ        ：相補的デオキシリボ核酸
Ａ            ：アデニン
Ｔ            ：チミン
Ｇ            ：グアニン
Ｃ            ：シトシン
Ｉ            ：イノシン
Ｒ            ：アデニン（Ａ）またはグアニン（Ｇ）
Ｙ            ：チミン（Ｔ）またはシトシン（Ｃ）
Ｍ            ：アデニン（Ａ）またはシトシン（Ｃ）
Ｋ            ：グアニン（Ｇ）またはチミン（Ｔ）
Ｓ            ：グアニン（Ｇ）またはシトシン（Ｃ）
Ｗ            ：アデニン（Ａ）またはチミン（Ｔ）
Ｂ            ：グアニン（Ｇ）、グアニン（Ｇ）またはチミン（Ｔ）
Ｄ            ：アデニン（Ａ）、グアニン（Ｇ）またはチミン（Ｔ）
Ｖ            ：アデニン（Ａ）、グアニン（Ｇ）またはシトシン（Ｃ）
Ｎ            ：アデニン（Ａ）、グアニン（Ｇ）、シトシン（Ｃ）もしく
はチミン（Ｔ）または不明もしくは他の塩基
ＲＮＡ          ：リボ核酸
ｍＲＮＡ        ：メッセンジャーリボ核酸
ｄＡＴＰ        ：デオキシアデノシン三リン酸
ｄＴＴＰ        ：デオキシチミジン三リン酸
ｄＧＴＰ        ：デオキシグアノシン三リン酸
ｄＣＴＰ        ：デオキシシチジン三リン酸
ＡＴＰ          ：アデノシン三リン酸
ＥＤＴＡ        ：エチレンジアミン四酢酸
ＳＤＳ          ：ドデシル硫酸ナトリウム
ＢＨＡ          ：ベンズヒドリルアミン
ｐＭＢＨＡ      ：ｐ−メチルベンズヒドリルアミン
Ｔｏｓ          ：ｐ−トルエンスルフォニル
Ｂｚｌ          ：ベンジル
Ｂｏｍ          ：ベンジルオキシメチル
Ｂｏｃ          ：ｔ−ブチルオキシカルボニル
ＤＣＭ          ：ジクロロメタン
ＨＯＢｔ        ：１−ヒドロキシベンズトリアゾール
ＤＣＣ          ：Ｎ,Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド
ＴＦＡ          ：トリフルオロ酢酸
ＤＩＥＡ        ：ジイソプロピルエチルアミン
Ｇｌｙ          ：グリシン
ＡｌａまたはＡ  ：アラニン
ＶａｌまたはＶ  ：バリン
ＬｅｕまたはＬ  ：ロイシン
ＩｌｅまたはＩ  ：イソロイシン
ＳｅｒまたはＳ  ：セリン
ＴｈｒまたはＴ  ：スレオニン
ＣｙｓまたはＣ  ：システイン
ＭｅｔまたはＭ  ：メチオニン
ＧｌｕまたはＥ  ：グルタミン酸
ＡｓｐまたはＤ  ：アスパラギン酸
ＬｙｓまたはＫ  ：リジン
ＡｒｇまたはＲ  ：アルギニン
ＨｉｓまたはＨ  ：ヒスチジン
ＰｈｅまたはＦ  ：フェニルアラニン
ＴｙｒまたはＹ  ：チロシン
ＴｒｐまたはＷ  ：トリプトファン
ＰｒｏまたはＰ  ：プロリン
ＡｓｎまたはＮ  ：アスパラギン
ＧｌｎまたはＱ  ：グルタミン
ｐＧｌｕ        ：ピログルタミン酸
本願明細書の配列表の配列番号は、以下の配列を示す。
〔配列番号：１〕
ＲＦＲＰのアミノ酸配列（ヒト型）を示す。
〔配列番号：２〕
配列番号：１で表わされるアミノ酸配列を有するＲＦＲＰをコードするＤＮＡの塩基配列を示す。
〔配列番号：３〕
ＲＦＲＰのアミノ酸配列（ヒト型）を示す。
〔配列番号：４〕
配列番号：３で表わされるアミノ酸配列を有するＲＦＲＰをコードするＤＮＡの塩基配列を示す。
〔配列番号：５〕
ＲＦＲＰのアミノ酸配列（ウシ型）を示す。
〔配列番号：６〕
配列番号：５で表わされるアミノ酸配列を有するＲＦＲＰをコードするＤＮＡの塩基配列を示す。
〔配列番号：７〕
ＲＦＲＰのアミノ酸配列（ラット型）を示す（リクローニング前）。
〔配列番号：８〕
配列番号：７で表わされるアミノ酸配列を有するＲＦＲＰをコードするＤＮＡの塩基配列を示す。
〔配列番号：９〕
ＲＦＲＰのアミノ酸配列（マウス型）を示す。
〔配列番号：１０〕
配列番号：９で表わされるアミノ酸配列を有するＲＦＲＰをコードするＤＮＡの塩基配列を示す。
〔配列番号：１１〕
ラット由来Ｇ蛋白質共役型レセプター蛋白質ｒＯＴ７Ｔ０２２のアミノ酸配列を示す。
〔配列番号：１２〕
ラット由来Ｇ蛋白質共役型レセプター蛋白質ｒＯＴ７Ｔ０２２をコードするｃＤＮＡの塩基配列を示す。
〔配列番号：１３〕
ＲＦＲＰ部分ペプチドのアミノ酸配列を示す。
〔配列番号：１４〕
ＲＦＲＰ部分ペプチドのアミノ酸配列を示す。
〔配列番号：１５〕
ＲＦＲＰ部分ペプチドのアミノ酸配列を示す。
〔配列番号：１６〕
配列番号：１で表わされるアミノ酸配列の第８１番目（Ｍｅｔ）〜第９２番目（Ｐｈｅ）のアミノ酸配列を含有するペプチドをコードする塩基配列を示す。
〔配列番号：１７〕
配列番号：１で表わされるアミノ酸配列の第１０１番目（Ｓｅｒ）〜第１１２番目（Ｓｅｒ）のアミノ酸配列を含有するペプチドをコードする塩基配列を示す。
〔配列番号：１８〕
配列番号：１で表わされるアミノ酸配列の第１２４番目（Ｖａｌ）〜第１３１番目（Ｐｈｅ）のアミノ酸配列を含有するペプチドをコードする塩基配列を示す。
〔配列番号：１９〕
配列番号：１で表わされるアミノ酸配列の第１番目（Ｍｅｔ）〜第９２番目（Ｐｈｅ）のアミノ酸配列を含有するペプチドをコードする塩基配列を示す。
〔配列番号：２０〕
配列番号：１で表わされるアミノ酸配列の、第１番目（Ｍｅｔ）〜第１１２番目（Ｓｅｒ）のアミノ酸配列を含有するペプチドをコードする塩基配列を示す。
〔配列番号：２１〕
配列番号：１で表わされるアミノ酸配列の、第１番目（Ｍｅｔ）〜第１３１番目（Ｐｈｅ）のアミノ酸配列を含有するペプチドをコードする塩基配列を示す。
〔配列番号：２２〕
ＲＦＲＰのアミノ酸配列（ラット型）を示す（リクローニング後）。
〔配列番号：２３〕
配列番号：２２で表わされるアミノ酸配列を有するＲＦＲＰをコードするＤＮＡの塩基配列を示す。
〔配列番号：２４〕
ヒト由来Ｇ蛋白質共役型レセプター蛋白質ｈＯＴ７Ｔ０２２をコードするアミノ酸配列を示す。
〔配列番号：２５〕
配列番号：２４で表されるアミノ酸配列を有するｈＯＴ７Ｔ０２２をコードするＤＮＡの塩基配列を示す。
〔配列番号：２６〕
配列番号：２４で表されるアミノ酸配列を有するｈＯＴ７Ｔ０２２をコードするＤＮＡの塩基配列を示す。
〔配列番号：２７〕
マウス由来Ｇ蛋白質共役型レセプター蛋白質ＯＴ７Ｔ０２２の部分アミノ酸配列を示す。
〔配列番号：２８〕
配列番号：２７で表されるアミノ酸配列を有するマウス由来ＯＴ７Ｔ０２２をコードするゲノムＤＮＡの塩基配列を示す。
〔配列番号：２９〕
参考例３で使用したプライマーの塩基配列を示す。
〔配列番号：３０〕
参考例３で使用したプライマーの塩基配列を示す。
〔配列番号：３１〕
参考例３で使用したプライマーの塩基配列を示す。
【実施例】
【０２９０】
以下に、実施例を挙げて本発明をさらに具体的に説明するが、本発明はそれに限定されるものではない。なお、大腸菌を用いての遺伝子操作法は、モレキュラー・クローニング（Molecular cloning）に記載されている方法に従った。
参考例１  マウスＯＴ７Ｔ０２２のクローニング
ラットＯＴ７Ｔ０２２ｃＤＮＡ（配列番号：１２、ＷＯ００／２９４４１号）をプローブにした。ラットｃＤＮＡの５８０−１１７０ｂｐのＤＮＡ断片をプローブとして作製した（ＰＣＲ−ＤＩＧプローブ合成キット、ロシュダイアゴニスティックス社）。そのプローブを用いて、マウス１２９ＳｖＪラムダゲノムライブラリー（ストラタジ−ン社）に１ｓｔ  プラークハイブリダイゼーションを行った結果、陽性プラークが６個得られた。１ｓｔ  プラークハイブリダイゼーションで得られた６個の陽性プラークに対して２ｎｄ  プラークハイブリダイゼーションを行い、２個の陽性クローンを単離した。
【０２９１】
サザンハイブリダイゼーションを行った結果、約４．５ｋｂｐのＢａｍＨＩ断片にＯＴ７Ｔ０２２のコード領域が存在することが判明した。常法によりクローニングしたＤＮＡ断片をシークエンサー（パーキンエルマー社）により塩基配列を調べた結果、ラットＯＴ７Ｔ０２２の３’側エクソン（０．９ｋｂｐ）と９４％の相同性を有する断片であり、マウスＯＴ７Ｔ０２２ゲノムＤＮＡであることを確認した。さらにＯＴ７Ｔ０２２をコードするＢａｍＨＩ断片の５’側３．８ｋｂｐおよび３’側５．５ｋｂｐのＢａｍＨＩ断片をクローニングした。サザン解析により３’側エクソンから１．８ｋｂｐ以上はなれた上流に一つのエクソンが存在することがわかった（配列番号：２８）。
参考例２  ターゲッティングベクターの構築およびＥＳ相同組み換えの作製
ＯＴ７Ｔ０２２ターゲッティングベクターの構築は、３’側エクソンの５’側ＳａｃＩ−ＢａｍＨＩ断片（３．２ｋｂｐ）、３’側ＢｓｔＥＩＩ−ＸｈｏＩ断片（５．２ｋｂｐ）、ネオマイシン耐性遺伝子およびジフテリアトキシン遺伝子を用いて行い、３’側エクソン１．２ｋｂｐを欠失させたＯＴ７Ｔ０２２ターゲッティングベクターｐ０２２Ｔｇｖ−２の構築を終了した。ＯＴ７Ｔ０２２ターゲッティングベクターをマウス１２９ＳｖＥｖ系統由来ＥＳ細胞（ＡＢ２．２系統）にエレクトロポレーションにより導入した。エレクトロポレーションはジーンパルサーエレクトロポレーションシステム（バイオラッド社製）を用いて電圧２３０Ｖ，抵抗値５００μＦ，ＤＮＡ溶液濃度３０μｇ／ｍｌの条件を設定して行った。
【０２９２】
遺伝子導入実験は３回行い、それぞれ１０００株以上のネオマイシン耐性株を得ることができた。ターゲティングベクターｐ０２２Ｔｇｖ−２によって得られた７３９株のネオマイシン耐性株を２４ウェルプレートで培養し、−７０℃凍結融解、Ｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ  Ｋ処理後、エタノール沈殿によりＤＮＡを抽出した。
【０２９３】
そのうち５９５株のゲノムに対して５’側のＢａｍＨＩ−ＸｈｏＩ６００ｂｐ断片（ターゲティングベクターに用いたゲノムの外側の領域）をプローブとし、サザンハイブリダイゼーションを行った。その結果、６株に相同組換え体と推定される５．４ｋｂのバンドがみられた（野生型３．８ｋｂ）。
【０２９４】
相同組換え体と考えられるＤＮＡ断片が検出された６種のＥＳ細胞株（Ｎｏ．１２６，１３０，２８３，４９１，５３２，５４５）について、再確認のためサザン解析を行った。凍結保存しておいた各細胞を培養後、ＤＮＡを抽出し、ＢａｍＨＩ−ＸｈｏＩ切断後、上記６００ｂｐ断片をプローブとし、サザンハイブリダイゼーションを行った。その結果、全ての細胞において５．４ｋｂ断片（野生型は３．８ｋｂ断片のみが観察される）が再確認できた。また、プローブをネオマイシン耐性遺伝子としてサザンハイブリダイゼーションを行った結果、２ｋｂ付近に野生型、組換え体共通に見られるバンドがあったが、組換え体のみに５．４ｋｂのバンドが確認でき、６種のＥＳ細胞すべてが相同組換え体であることが確認できた。
【０２９５】
これら６系統の相同組換え体のうち増殖が良好であった３系統の相同組換え体細胞株（Ｎｏ．１３０，２８３，５３２）について核型分析のためフィーダー細胞存在下、ＥＳ細胞を２５ｃｍ２フラスコにコンフルエントになるまで培養し、コルセミドを添加（最終細胞密度０．１μｇ／ｍｌ）し、３７℃、２時間培養した。ＰＢＳで洗浄後、トリプシン処理し、遠心１０００ｒｐｍ、５分した。ペレットに０．０７５Ｍ  ＫＣｌ  ４ｍｌを添加し室温で２０分放置後、細胞浮遊液にカルノア液（酢酸：メタノール比＝１：３）を１滴添加後穏やかに懸濁した。室温放置６０分させ、遠心し、ペレットをカルノア液４ｍｌで穏やかに懸濁し、さらに室温放置した。３０分５回程度繰り返した。遠心後ペレットにカルノア液２〜３ｍｌを加え適度な濃度に調製し、スライドグラス上に細胞浮遊液を２〜３滴  滴下した。風乾後、３％ギムザ溶液で染色し、顕微鏡下で分裂期中期の染色体観察を行った。結果、正常核型を有する細胞の割合は６９〜６１％であった。３系統の相同組換え体細胞株の核型異常がみられなかったので、増殖性の良好な細胞株Ｎｏ．２８３を選抜した。
参考例３  ノックアウトマウスの作製
相同組み換え細胞株Ｎｏ．２８３をＣ５７ＢＬ／６系統マウス胚盤胞へのインジェクションを常法により行った。インジェクションされた胚盤胞は別途精管結紮マウスと交配することによって得られた偽妊娠マウス卵管に移植することによって妊娠させた。２８３株については移植胚の約半分が産仔として生まれ、７５％がキメラマウスであった。雄キメラマウスはＣ５７ＢＬ／６系統雌マウスと交配し、産仔での生殖系列移行およびヘテロマウスの取得をおこなった。
【０２９６】
キメラとＣ５７ＢＬ系統マウスとの交配によって５１匹のＥＳ細胞由来マウスが得られた。マウス尾よりゲノムＤＮＡを精製し、まずＰＣＲによる遺伝子型判定の条件を検討した。検討の結果プライマーはターゲティングした領域の３’側(AGGTGCTCAGTGTGTAGAAGTGG（配列癌号：２９）)を共通とし、また５’側は野生型検出用として、欠損させた領域内の終止コドン付近配列(ATCCCAGCCTGGAACATTTTGAGG（配列番号：３０）)、変異型検出用としてネオマイシン耐性遺伝子内配列 (TCATAGCCGAATACGGTCTCCAC（配列番号：３１）)とし、ポリメラーゼはＫＯＤ−ｐｌｕｓ−（東洋紡株式会社製）を用いた。野生型は３００ｂｐ断片のみを検出し、ヘテロ欠損個体であれば、３００ｂｐおよび６００ｂｐ断片を検出できるように設計されたＰＣＲによる遺伝子判定の結果、ヘテロ欠損マウスを得ることができた。次に、サザンハイブリダイゼーションを行って、遺伝子欠損の確認を行った。
実施例１  ＲＦＲＰの血糖上昇作用
ＲＦＲＰとして、配列番号：１で表わされるアミノ酸配列の第５６番目（Ser）〜第９２番目（Phe）のアミノ酸配列からなるヒトＲＦＲＰ−１（３７アミノ酸）を用いた。以下、このペプチドをＲＦＲＰ−１と略記する。
【０２９７】
ＲＦＲＰ−１の末梢投与による血糖値に及ぼす影響を検討するため、自由行動下採血用の手術を行った。成熟Ｗｉｓｔａｒ系雄性ラット（手術時体重３１０〜３５０ｇ）をペントバルビタール５０ｍｇ／ｋｇの腹腔内投与にて麻酔した。解剖用パッドの上に背位に固定し、左側の頚静脈を露出させた。ポリエチレンチューブＳＰ３５（内径０．５ｍｍ、外径０．９ｍｍ、夏目製作所）を約３０ｃｍの長さに切り、２００単位／ｍｌのヘパリン含有生理食塩水で満たした後、頚静脈に約４．５ｃｍ挿入し固定した。チューブのもう一端は背側の皮下を通して頚部（背側）より露出させた。
【０２９８】
術後一晩待ってから、ＲＦＲＰ−１投与前に用量１ｍｌのツベルクリン用注射筒と２５ゲージ注射針（いずれもテルモ社）を用いて３００μｌの血液を採取した。血液凝固を防止するため、注射筒には予め３ｍｇ／ｍｌ  ＥＤＴＡを含む３００ＫＩＵ／ｍｌ  ａｐｒｏｔｉｎｉｎ溶液を３μｌ入れておいた。大塚生理食塩水またはＲＦＲＰ−１（（株）ペプチド研究所）  （１７，８０，１７０ｎｍｏｌ））の１ｍＬ生理食塩水溶解液をチューブより１ｍＬ／Ｋｇで静脈投与した。静脈投与の開始時点から０、５、１５、３０、６０分後に頚静脈より３００μｌずつ採血した。採血した血液は微量高速冷却遠心機（ＭＲ‐１５０、トミー精工）を用いて遠心（１３，０００  ｒｐｍ、５分間）し、上清（血漿）を回収した。血中グルコース濃度は、フジドライケム３５００（ＦＵＪＩＦＩＬＭ社）を用いて測定した。図１に示すごとくＲＦＲＰ−１  １０ｎｍｏｌ／ｋｇ投与群は対象群に比し、静脈投与５分および１５分後に有意な（ｐ＜０．０５，ｎ＝４）血中グルコース濃度の上昇作用を示した。
実施例２  ＲＦＲＰの膵グルカゴン分泌促進作用
ＲＦＲＰ−１の血中グルコース濃度上昇作用についてそのメカニズムを検討するため、血中グルコース濃度に変動を与えるホルモンとして知られている血中グルカゴンおよびインスリン濃度に対するＲＦＲＰ−１の影響について検討した。成熟Ｗｉｓｔａｒ系雄性ラット（手術時体重３１０〜３５０ｇ）に対し自由行動下採血用の手術を行った。術後一晩待ってから、ＲＦＲＰ−１投与前に用量１ｍｌのツベルクリン用注射筒と２５ゲージ注射針（いずれもテルモ社）を用いて３００μｌの血液を採取した。血液凝固を防止するため、注射筒には予め３ｍｇ／ｍｌ  ＥＤＴＡを含む３００ＫＩＵ／ｍｌ  ａｐｒｏｔｉｎｉｎ溶液を３μｌ入れておいた。大塚生理食塩水またはＲＦＲＰ−１の生理食塩水溶解液（８０ｎｍｏｌ／ｍＬ）をチューブより１ｍＬ／Ｋｇで静脈投与した。静脈投与の開始時点から１、３、５、１５分後に頚静脈より３００μｌずつ採血した。採血した血液は微量高速冷却遠心機（ＭＲ−１５０、トミー精工）を用いて遠心（１３，０００ｒｐｍ、５分間）し、上清（血漿）を回収した。血中グルカゴン濃度はグルカゴンキット「第一」（第一ラジオアイソトープ研究所）、血中インスリン濃度はラットインスリン［１２５Ｉ］、アッセイシステム（Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を用いて測定した。図２に示すごとくＲＦＲＰ−１投与群は対象群に比し、投与２分後で有意（ｐ＜０．０１）な血中グルカゴン濃度の上昇が認められ、投与５分後においても有意（Ｐ＜０．０１）な上昇は持続した。一方、血中インスリン濃度はＲＦＲＰ−１投与による変動は認められなかった（図３）。これらの結果およびＲＦＲＰ−１投与群では、血中グルカゴン濃度の上昇の後に血中グルコース濃度の上昇が見られることから、ＲＦＲＰ−１静脈投与による血中グルコース濃度の上昇作用は、ＲＦＲＰ−１によるグルカゴン分泌刺激によって引き起こされるものと考えられた。
実施例３  ＲＦＲＰの記憶消去促進作用
ＲＦＲＰ神経が扁桃体に投射していることから、ＲＦＲＰの扁桃体依存性の記憶・学習能力への関与を検討するため、ＲＦＲＰ−１の脳室内投与による音手がかり試験（ｃｕｅｄ  ｆｅａｒ  ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇ）での影響を検討した。成熟Ｗｉｓｔａｒ系雄性ラット（手術時体重２８０〜３２０ｇ）をペントバルビタール５０ｍｇ／ｋｇの腹腔内投与にて麻酔し、ラット脳定位固定装置に固定した。切歯用バーはインターオーラルラインから３．３ｍｍ低くした。頭蓋骨を露出し、脳室内にガイドカニューレＡＧ−１２（内径０．４ｍｍ、外径０．５ｍｍ、エイコム）を埋め込むために歯科用ドリルを用いて骨に穴を開けた。また、その周囲４箇所にアンカービスを埋めた。ステンレス製ガイドカニューレ、ＡＧ−１２を、その先端が側脳室の上部に位置するように挿入した。定位座標は、ＰａｘｉｎｏｓとＷａｔｓｏｎ（１９８６）のアトラスに従い、ブレグマより、ＡＰ：−０．８ｍｍ、Ｌ：１．５ｍｍ、Ｈ：４．５ｍｍとした。ガイドカニューレは瞬間接着剤と歯科用セメントおよびアンカービスで頭蓋骨に固定した。ガイドカニューレにはステンレス製ダミーカニューレ、ＡＤ−１２（外径０．３５ｍｍ、エイコム社）を挿入し、キャプナイト（エイコム社）で固定した。術後、ラットは個別のケージで飼育した。回復期間を術後１週間とし、その間十分ハンドリングを行った。
【０２９９】
音手がかり試験は、まずトレーニングセッションとしてラットをショックチャンバーに入れ２分間馴化した後、３０秒間の音刺激を与えた直後に電気刺激２．５ｍＡを２秒間与え２８秒間の休息を与えるサイクルを５回繰り返した（計５分間）。試験後、２分間チャンバー内に放置した後、元のケージに戻した。次にテストセッションとして上記トレーニングの２４時間後（１日目）および４８時間後（２日目）に、ラットをトレーニング時と同じチャンバーに入れて３０秒間の音刺激を５回トレーニング時と同じタイミングで与え、チャンバーに入れてから５分間の行動を観察した。行動解析は、解析ソフトＦｒｅｅｚｅＦｒａｍｅ（Ａｃｔｉｍｅｔｒｉｃ社）を用いて行った。音刺激により変化率１５以下の行動が観察された場合をフリージングと定義した。ＲＦＲＰ−１（３ｎｍｏｌ）および生理食塩水（大塚製薬）をトレーニング前後およびテスト前に脳室内へ投与した。実験匹数は、各群とも１２匹づつで行った。本試験の条件として、実験室に試験動物を連れてくる際の道順を毎回変更し、実験動物は実験を行う部屋と別の部屋に待機させた。図４に示すごとくＲＦＲＰ−１投与群は生理食塩水投与群に比し、フリージングの割合が２日目において顕著に低下した（生理食塩水投与群；４６．５％、ＲＦＲＰ投与群；３５．５％）。これらの結果から、ＲＦＲＰ−１は記憶消去促進作用を示すことが分かった。
【図面の簡単な説明】
【０３００】
【図１】ＲＦＲＰ−１を無麻酔下のラットに静脈投与した際の血中グルコース濃度の変動を調べた結果を示す。図中、（−○−）は生理食塩水投与群、（−▲−）はＲＦＲＰ−１  １ｎｍｏｌ／ｋｇ投与群および（−■−）はＲＦＲＰ−１  １０ｎｍｏｌ／ｋｇ投与群の血中グルコース濃度を表す。値は平均値±標準偏差（ｍｅａｎ±ＳＥ）（ｎ＝４）を示す。＊は生理食塩水投与群に比べて、Ｐ値が０．０５以下であることを示す。
【図２】ＲＦＲＰ−１を無麻酔下のラットに静脈投与した際の血中グルカゴン濃度の変動を調べた結果を示す。図中、（−○−）は生理食塩水投与群、（−▲−）はＲＦＲＰ−１  １ｎｍｏｌ／ｋｇ投与群および（−■−）はＲＦＲＰ−１  １０ｎｍｏｌ／ｋｇ投与群の血中グルカゴン濃度を表す。値は平均値±標準偏差（ｍｅａｎ±ＳＥ）（ｎ＝４）を示す。＊＊は生理食塩水投与群に比べて、Ｐ値が０．０１以下であることを示す。
【図３】ＲＦＲＰ−１を無麻酔下のラットに静脈投与した際の血中インスリン濃度の変動を調べた結果を示す。図中、（（−○−）は生理食塩水投与群、（−▲−）はＲＦＲＰ−１  １ｎｍｏｌ／ｋｇ投与群および（−■−）はＲＦＲＰ−１  １０ｎｍｏｌ／ｋｇ投与群の血中インスリン濃度を表す。値は平均値±標準偏差（ｍｅａｎ±ＳＥ）（ｎ＝４）を示す。
【図４】ＲＦＲＰ−１（◆）および生理食塩水（○）を脳室内に投与した時の音手がかり試験におけるフリージングの割合を示す。縦軸は投与後１日目および２日目のそれぞれのフリージング（％）を平均値±標準誤差（ｍｅａｎ±ＳＥ）（ｎ＝４）で示したものである。
【図１】
2004315504.tif 000002
【図２】
2004315504.tif 000003
【図３】
2004315504.tif 000004
【図４】
2004315504.tif 000005
【配列表】
2004315504000001.app