(57)【要約】【課題】敗血性の横隔膜筋の機能不全を阻害する薬剤およびそれに起因する急性呼吸不全の治療剤を提供することを目的とする。【解決手段】一般式（Ｉ）【化１】2004315403.tif 000010で表される６，１０，１４，１８−テトラメチル−５，９，１３，１７−ノナデカテトラエン−２−オンもしくはその塩またはそれらの水和物を有効成分とする急性呼吸不全の予防・治療剤を提供することにより、急性呼吸不全、特に敗血症由来の急性呼吸不全の予防・治療に対して有効な結果が得られた。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ｉ）
【化１】
2004315403.tif 000007
で表される６，１０，１４，１８−テトラメチル−５，９，１３，１７−ノナデカテトラエン−２−オンもしくはその塩またはそれらの水和物を有効成分とする急性呼吸不全の予防・治療剤。
【請求項２】
一般式（Ｉ）
【化２】
2004315403.tif 000008
で表される６，１０，１４，１８−テトラメチル−５，９，１３，１７−ノナデカテトラエン−２−オンもしくはその塩またはそれらの水和物を有効成分とする横隔膜機能不全の予防・治療剤。
【請求項３】
急性呼吸不全が敗血症に由来することを特徴とする請求項１記載の急性呼吸不全の予防・治療剤。
【請求項４】
横隔膜機能不全が敗血症に由来することを特徴とする請求項２記載の横隔膜機能不全の予防・治療剤。
【請求項５】
一般式（Ｉ）
【化３】
2004315403.tif 000009
で表される６，１０，１４，１８−テトラメチル−５，９，１３，１７−ノナデカテトラエン−２−オンもしくはその塩またはそれらの水和物を有効成分とする横隔膜筋にヒートショックプロテインを誘導することを特徴とするヒートショックプロテイン誘導剤。
【請求項６】
誘導されるヒートショックプロテインがＨＳＰ７０であることを特徴とする請求項５記載のヒートショックプロテイン誘導剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明が属する技術分野】
本発明は、急性呼吸不全の予防・治療剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
腹腔内敗血症は急性呼吸不全をしばしば伴うことが知られている。呼吸筋の機能不全、特に横隔膜の機能不全は腹腔内敗血症に由来する急性呼吸不全の罹患において重大な役割を果たしている。
腹腔内における炎症のプロセスは、好中球や単球／マクロファージがエンドトキシンにより活性化され、インターロイキン１やＴＮＦ−αといった炎症性サイトカインを産生し、放出するというものである。炎症性サイトカインは多形核球白血球を活性化し、この活性化は結果として、酸素由来のフリーラジカルを産生し、そのラジカルは呼吸筋の機能に影響を与えることとなる（非特許文献１参照）。Ｃｅｃａｌ  ｌｉｇａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｐｅｒｆｏｒａｔｉｏｎ（以下「ＣＬＰ」という）は臨床に近似した腹腔内敗血症の典型的な実験モデルである（非特許文献２参照）。従前の研究からＣＬＰは横隔膜機能不全と密接に関連し、フリーラジカル捕捉剤がＣＬＰ由来の横隔膜機能不全を弱めることがわかっている。これらの結果は酸素由来のフリーラジカルはＣＬＰ後の横隔膜収縮を減少させる重要な役割を果たしていることを示している。
いくつかの研究から熱ストレスを与えると敗血症による死亡率と器官の不全が減少することが知られている（非特許文献３および４参照）。
この熱ストレスの保護効果はヒートショックプロテインとりわけＨＳＰ７０発現の誘導のためである。ＨＳＰ７０の発現は損傷した細胞間タンパク質の再構築と分解を促進し、結果として敗血症を含むさまざまな損傷に対する保護となる。ＨＳＰ７０発現の誘導はＣＬＰ後の死亡率と器官損傷を減少させる。一方ＣＬＰ自体はＨＳＰ７０の発現レベルを減少させ、その結果として肺の損傷へと導くことがある。ＨＳＰ７０発現誘導の種々の方法は、熱ストレス、ひ酸ソーダの投与、重金属の処置からなるが、臨床の現場では使用はできない。
ところで、一般式（Ｉ）
【化４】
2004315403.tif 000002
で示されるゲラニルゲラニルアセトンは、胃炎や胃潰瘍の治療剤として公知であるが（特許文献１および特許文献２参照）、近年ヒートショックプロテインをさまざまな器官で誘導することが知られている（非特許文献５、６および７参照）。
しかし、急性呼吸不全や敗血症に伴う横隔膜機能不全を改善することに関してはなんらの開示や示唆もなされていない。
従って、急性呼吸不全や敗血症に伴う横隔膜機能不全を予防・治療する薬剤の開発が望まれていた。
【０００３】
【非特許文献１】
Ｇｏｏｄｅ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｃｒｉｔ．  Ｃａｒｅ．  Ｍｅｄ．”，１９９３；２１：１７７０−７６
【非特許文献２】
Ｗｉｔｃｈｅｒｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｊ．  Ｓｕｒｇ．  Ｒｅｓ．”，１９８０；２９：１８９−２０１
【非特許文献３】
Ｒｙａｎ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｊ．  Ａｐｐｌｙ．  Ｐｈｙｓｉｏｌ．”，１９９２；７３：１５１７−２２
【非特許文献４】
Ｈｏｔｃｈｋｉｓｓ  ｅｔ  ａｌ．，“Ａｍ．  Ｊ．  Ｐｈｙｓｉｏｌ．”，１９９３；２６５：ｐ１４４７−５７
【非特許文献５】
Ｉｋｅｙａｍａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｊ．  Ｈｅｐａｔｏｌ”２００１；３５：ｐ５３−６１
【非特許文献６】
Ｔｓｕｒｕｍａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ  Ｐｒｏｃ．”，１９９９；３１：ｐ５７２−７３
【非特許文献７】
Ｏｏｉｅ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ”，２００１；１０４：ｐ１８３７−４３
【特許文献１】
特開昭５３−１４５９２２号公報
【特許文献２】
特開昭６２−１００１３号公報
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
従って本発明の目的は、安全かつ有効な急性呼吸不全、特に敗血症に由来する急性呼吸不全を抑制する薬剤を提供することにある。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
本発明者らが鋭意検討した結果、本願発明を見出すに至った。すなわち本発明は、
（１）一般式（Ｉ）
【化５】
2004315403.tif 000003
で表される６，１０，１４，１８−テトラメチル−５，９，１３，１７−ノナデカテトラエン−２−オンもしくはその塩またはそれらの水和物を有効成分とする急性呼吸不全の予防・治療剤；
（２）一般式（Ｉ）
【化６】
2004315403.tif 000004
で表される６，１０，１４，１８−テトラメチル−５，９，１３，１７−ノナデカテトラエン−２−オンもしくはその塩またはそれらの水和物を有効成分とする横隔膜機能不全の予防・治療剤；
（３）急性呼吸不全が敗血症に由来することを特徴とする請求項１記載の急性呼吸不全の予防・治療剤；
（４）横隔膜機能不全が敗血症に由来することを特徴とする請求項２記載の横隔膜機能不全の予防・治療剤；
（５）一般式（Ｉ）
【化７】
2004315403.tif 000005
で表される６，１０，１４，１８−テトラメチル−５，９，１３，１７−ノナデカテトラエン−２−オンもしくはその塩またはそれらの水和物を有効成分とする横隔膜筋にヒートショックプロテインを誘導することを特徴とするヒートショックプロテイン誘導剤；
（６）誘導されるヒートショックプロテインがＨＳＰ７０であることを特徴とする請求項５記載のヒートショックプロテイン誘導剤；
に関する。
【０００６】
本発明において有効成分たる化合物は、一般式（Ｉ）で表されるプレニルケトン系化合物である。本発明における化合物の化合物名は６，１０，１４，１８−テトラメチル−５，９，１３，１７−ノナデカテトラエン−２−オン（別名：ゲラニルゲラニルアセトン、一般名：テプレノン、以下ＧＧＡと称する）である。ＧＧＡはその構造から明らかな如く、種々の異性体が考えられるが、本発明はそれらのいずれを含むものであり、例えば、５，９，１３位がＥ体、Ｚ体のいずれでもよく、また１種類の化合物もしくは２種類の化合物の混合物でもよい。好ましくは、９位かつ１３位がＥ体である５Ｅ体、５Ｚ体または任意の混合比のそれらの混合物であり、より好ましくは、（５Ｅ，９Ｅ，１３Ｅ）体と（５Ｚ，９Ｚ，１３Ｚ）体とが３：２の混合物である。
【０００７】
ＧＧＡの製造方法は公知の方法、例えば、前述の特許文献１に記載されている方法に準じて製造することができる。
【０００８】
本発明に用いられる化合物の投与形態は特に制限されず、経口的・非経口的に投与することができる。
経口投与のための剤型は、固体または液体の剤型、具体的には錠剤、被覆錠剤、丸剤、細粒剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤、シロップ剤、乳剤、懸濁剤、注射剤などが好ましい。
非経口投与のための剤型は、注射用製剤、点滴剤、外用剤、坐剤等が好ましい。本発明にかかる化合物は、慣用される方法により製剤化することが可能で、通常用いられる賦形剤（例えば乳糖、白糖、でんぷん、マンニトール等）、結合剤（例えば、α化デンプン、アラビアゴム、カルボキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドン等）、滑沢剤（ステアリン酸マグネシウム、タルク等）、着色剤、矯味矯臭剤等、および必要により安定化剤、乳化剤、吸収促進剤、界面活性剤等を使用することができ、一般に医薬品製剤の原料として用いられる成分を配合して定法により製剤化される。
【０００９】
本発明に用いられる化合物（Ｉ）の塩、例えば無機酸との塩、有機酸との塩、無機塩基との塩、有機塩基との塩、酸性または塩基性アミノ酸との塩などが挙げられ、中でも薬理学的に許容される塩が好ましい。酸、塩基は当該化合物１分子に対し、０．１〜５分子の適宜な比で塩を形成する。無機酸との塩の好ましい例として、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などとの塩が挙げられ、有機酸との塩の好ましい例としては、例えば酢酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、酒石酸、クエン酸、乳酸、ステアリン酸、安息香酸、メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸などとの塩が挙げられる。無機塩基との好ましい例としては、ナトリウム塩、カリウム塩などのアルカリ金属塩、カルシウム塩、マグネシウム塩などのアルカリ土類金属塩、アルミニウム塩、アンモニウム塩などが挙げられる。有機塩基との好ましい例としては、ジエチルアミン、ジエタノールアミン、メグルミン、Ｎ，Ｎ‘−ジベンジルエチレンジアミンなどとの塩が挙げられる。酸性アミノ酸との塩との好ましい例としては、アスパラギン酸、グルタミン酸などとの塩が挙げられ、塩基性アミノ酸との塩の好ましい例としては、アルギニン、リジン、オルチニンなどとの塩が挙げられる。
【００１０】
本発明に用いられる化合物の投与量は、症状、年齢、体重などの条件により適宜定められるが、成人一日あたり２０〜２０００ｍｇ、好ましくは５０〜１０００ｍｇ、さらに好ましくは１００〜５００ｍｇである。
【００１１】
本発明にいう「急性呼吸不全」とは、横隔膜の機能不全、特に敗血症を起因とする横隔膜の機能不全により引き起こされる急性の呼吸不全のことをいう。
【００１２】
本発明にいう「横隔膜の機能不全」というのは、横隔膜筋の張力が減少することにより呼吸筋としての機能が不全になることをいう。
【００１３】
【発明の実施の形態】
【実施例】
以下に、実験例をあげて本発明をさらに具体的に説明するが、本発明はこれらにより限定されるべきものではない。
【００１４】
実験
（実験動物と敗血症の誘導）
ニッポンＳＬＣから購入した１０８匹のＷｉｓｔａｒ  雄性ラット（２５０−３００ｇ）を国立衛生研究所の実験動物の使用ガイドに従って使用した。全ての実験はイソフルランによる吸入麻酔の下で行った。
腹腔内敗血症はＪ．  Ｓｕｒｇ．  Ｒｅｓ．  １９８０；２９：１８９−２０１に記載されたＣＬＰ技術を用いて発症させた。ＣＬＰの後、ラットは食事を制限されたが、水については自由摂取できるようにした。また、偽手術群のラットは開腹手術のみ施され、盲腸の結札や穿刺はされなかった。
【００１５】
（ＨＳＰ７０発現の誘導と阻害）
横隔膜におけるＨＳＰ７０の発現はＧＧＡを用いて誘導した。ＧＧＡ（商品名「セルベックス」、エーザイ株式会社製）は５％アラビアゴム溶液と０．００８％のトコフェロールを用いてエマルジョンとして調製された。ＨＳＰ発現を誘導するため、ＧＧＡ  ２ｍｌを７Ｆｒ  ｏｒｏ−ｇａｓｔｒｉｃ  ｔｕｂｅを用いて腹腔内に注射した。一方、ＨＳＰ発現を阻害するため０．５％グリセロールで乳化したケルセチン  ２ｍｌを腹腔内に注射した。ケルセチンはＨＳＰ７０の発現を阻害することが知られている（Ｎａｇａｉ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｂｉｏｐｈｙｓ．  Ｒｅｓ．  Ｃｏｍｍｕｎ．”，１９９５，２０８、１０９９−１０５）。
【００１６】
（実験１）
ＨＳＰ９０、ＨＳＰ７０、ＨＳＰ６０、ＨＳＰ２７、β−アクチンの横隔膜における発現の時間依存性測定のため、ＧＧＡ（４００ｍｇ／ｋｇ）投与の０，１２，２４，３６時間後にラット（ｎ＝６）をイソフルランの吸入麻酔により安楽死させた。横隔膜はすぐに切除して液体窒素にて冷凍した。得られた横隔膜ホモジネートを使用してウェスタンブロットを行った。
ＨＳＰ７０発現の阻害の最適投与量を決めるため、０．５％グリセロールまたは１、１０、５０ｍｇ／ｋｇケルセチンをＧＧＡの投与１時間前にラット（ｎ＝６）の腹腔内に注射した。ラットはＧＧＡ投与の２４時間後に前述と同様の吸入麻酔にて安楽死させた。同様にウェスタンブロットは横隔膜のホモジネートを使用して行った。
【００１７】
（実験２）
ＧＧＡ投与と横隔膜収縮、フリーラジカル関連の変数およびＣＬＰ中のＨＳＰ７０の発現との関係を調べるため、ラットを無作為に５つの群に分けた。偽群（ｎ＝６）はアラビアゴム溶液（ビヒクル）のみを投与され、前述の偽手術を施されたものである；Ｇ０群（ｎ＝６）はビヒクルのみ投与の群である；Ｇ１００、Ｇ２００、Ｇ４００（各ｎ＝６）はそれぞれＧＧＡを１００、２００、４００ｍｇ／ｋｇ投与された群である。各群において、ＧＧＡやビヒクルの投与の２４時間後にＣＬＰもしくは偽手術を施した。収縮能を測定のため、横隔膜の右半分か左半分が切除された。ｍａｌｏｎｄｉａｌｄｅｈｙｄｅ（以下「ＭＤＡ」という）濃度、ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ  ｄｉｓｍｕｔａｓｅ（以下「ＳＯＤ」という）とｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ  ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ（以下「ＧＰＸ」という）の活性、血漿サイトカイン濃度とＨＳＰ７０発現レベルをＣＬＰの１０時間後に測定した。なお、ＭＤＡは損傷により発生するフリーラジカルの指標として、ＳＯＤやＧＰＸは酸化阻害の指標として用いられる。
【００１８】
（実験３）
横隔膜収縮能やＭＤＡレベルにおけるＧＧＡの直接的効果を調べるため、ラットを無作為に５つの群に分けた。偽群（ｎ＝６）はグリセロールおよびビヒクルをラットに与え、偽手術を施した。Ｑｃｔ群（ｎ＝６）はケルセチンおよびビヒクルを投与した。Ｑｃｔ＋Ｇ４００群（ｎ＝６）はグリセロールとＧＧＡ４００ｍｇ／ｋｇ投与した。Ｇ４００群（ｎ＝６）はＧＧＡ４００ｍｇ／ｋｇおよびグリセロールを投与した。敗血症対象群（ｎ＝６）はグリセロールおよびビヒクルを投与した。ケルセチンまたはグリセロールによる前処理はラットにＧＧＡ４００ｍｇ／ｋｇまたはビヒクルを投与する１時間前に腹腔内に投与した。各群とも、ＣＬＰや偽手術はＧＧＡもしくはビヒクルの投与２４時間後に行った。右もしくは左半分の横隔膜を除去し、術後１０時間後の横隔膜の収縮能、ＭＤＡ濃度を測定した。
【００１９】
（単離した横隔膜筋のＩｎ  Ｖｉｔｒｏにおける収縮能の測定）
ラットは術後１０時間後にイソフルランにて安楽死させ、横隔膜を除去した。横隔神経のついていない幅約１０ｍｍの繊維を各ラットの横隔膜の左半分の内側面から取り出した。全ての筋繊維は結合した肋骨や腱とともに取り出される。摘出された横隔膜筋は酸化したＫｒｅｂの溶液（２７度）からなるＯｒｇａｎ  Ｂａｔｈで処置した。収縮能はＦｕｊｉｍｕｒａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ａｍ．  Ｊ．  Ｒｅｓ．  Ｃｒｉｔ．  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．”，２０００年；１６２：２１５９−２１６５に示された電気生理学的刺激法により測定した。
【００２０】
（刺激実験評価手順）
筋繊維はＯｒｇａｎ  Ｂａｔｈにて２０分間定常状態にした。最適な張力−長さの関係（Ｌ０）の決定は筋繊維の断続的刺激におけるマイクロポジショナーの調製で行った。実験中の全ての刺激はＬ０で行った。筋収縮特性は単収縮特性と張力―長さ関係により評価した。張力―周波数決定の２０分後に筋繊維は４分間疲労試験を行った。
【００２１】
（単収縮特性）
最大収縮張力、収縮時間（以下、「ＣＴ」という。最大張力に達するまでの時間）および半減期（以下「ＲＴ１／２」という。最大張力から１／２になるまでの時間）は単収縮（０．１Ｈｚの刺激）から求めた。
【００２２】
（張力―周波数関係）
張力と周波数の関係は１０〜１００Ｈｚまで１０Ｈｚ刻みで刺激を与えて測定した。張力−周波数関係はＬ０の決定後２０分で測定した。
【００２３】
（疲労度）
２０分間の張力―周波数決定の後、筋繊維を４分間疲労させた。筋疲労は収縮の４分間にわたって張力が減少する度合を測定することで決定した。疲労度は初期張力からの減少度（％）とした。
【００２４】
（ウェスタンブロット解析）
前述したように、ラットを安楽死後、すぐに横隔膜筋の切除と液体窒素による冷凍が処置された。横隔膜筋は続いて解凍され、Ｌｙｓｉｓ  Ｂｕｆｆｅｒ（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ  リン酸バッファー溶液）にてホモジネートし、１５０００ｘｇで１５分間４℃にて遠心分離をした。上澄みを集め、タンパク濃度をＬｏｗｒｙらの方法（Ｊ  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．１９５１；１９３，２６３−２７５）で決定した。
サンプルバッファー中の横隔膜筋ホモジネートはＳＤＳ−ＰＡＧＥゲルに乗せ、Ｐｈａｓｔ  Ｓｙｓｔｅｍ（Ｐｈａｒｍａｃｉａ  Ｂｉｏｔｅｃｈ社）を使って電気泳動で分離した。ゲルのタンパクはニトロセルロース膜に転写した。ニトロセルロースはＨＳＰ７０やβ−アクチンと特異的に結合するモノクローナル抗体で反応させた。さらに、アンチマウスＩｇＧ  ｂｉｏｔｉｎ−ｓｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎｅ、ｈｏｒｓｅｒａｄｉｓｈ  ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ−ｃｏｎｊｕｇａｔｅｄ  抗体を反応させた。ジアミノベンジジンテトラヒドロクロライドで展開した。
【００２５】
（ＭＤＡ濃度とＳＯＤやＧＰｘ活性の測定）
ＭＤＡ濃度はＢＩＯＸＹＴＥＣＨ  ＬＰＯ−５８６（ＯＸＩＳ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ社製）を用いて測定した。ＳＯＤ活性は修飾したナイトライトにより測定した。ＧＰｘ活性はＮＡＤＰＨからＮＡＤＰへの酸化の速度を計算して決定した。その酸化反応はグルタチオンレダクターゼにより加速させた。
【００２６】
（サイトカインの決定）
血漿ＴＮＦ−α濃度はｅｎｚｙｍｅ―ｌｉｎｋｅｄ  ｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔ  ａｓｓａｙ  ｋｉｔ（ＴＦＢ社製）を用いて決定した。
【００２７】
（統計分析）
群間の張力―周波数曲線の比較はＡＮＯＶＡを用いて行った。群間の相違はワンウェイＡＮＯＶＡにより評価した。
【００２８】
実験の結果を以下に示す。以上のことから、本願発明は横隔膜機能不全に対して有効であることが示される。
（実験１）
１）ラットの横隔膜においてＧＧＡによるＨＳＰ７０発現の誘導
ＨＳＰ７０は４００ｍｇ／ｋｇのＧＧＡ投与後１２時間から検出され、２４時間でピークを打った。しかし、投与後３６時間での発現レベルは投与後２４時間のそれとほぼ同レベルであった（図１）。
２）ラットの横隔膜におけるケルセチンによるＧＧＡ誘導ＨＳＰ７０発現の阻害ＨＳＰ７０発現を阻害するケルセチンの投与量決定のため、ＧＧＡの投与前に腹腔内にケルセチン（０，１，１０，５０）を投与した。１０ｍｇ／ｋｇ以上の投与のケルセチンは横隔膜でＨＳＰ７０の誘導を阻害した（図２）。上記結果に基づき、実験３では、ケルセチンの投与量を１０ｍｇ／ｋｇとした。
【００２９】
（実験２）
１）ＣＬＰ後のＧＧＡによるＨＳＰ７０発現の投与量依存性
ＨＳＰ７０発現のレベルは投与量依存性があり、ＣＬＰの１０時間後に４００ｍｇ／ｋｇの投与量でピークを打った（図３）。一方、偽群やＧ０群ではＨＳＰ７０の発現は見出されなかった。
２）ＧＧＡ投与と横隔膜収縮の関係
表１に伸縮の特性と疲労度を示す。ＧＧＡ０群のピークの伸縮張力は偽群よりもかなり低い。Ｇ１００、Ｇ２００、Ｇ４００の群はＧ０群よりも投与量依存的に大きくなる。しかし、ＲＴ１／２やＣＴにおける各群間の重大な相違は見出されなかった。偽群の張力は２０６０±６０ｇ／ｃｍ２であり、Ｇ４００群では１９７４±７３、Ｇ２００では１６９９±３３ｇ／ｃｍ２であり、Ｇ１００群では１５２０±５６ｇ／ｃｍ２であり、Ｇ０群では１３５６±３７ｇ／ｃｍ２である。Ｇ０群、Ｇ１００群、Ｇ２００群の計算した疲労度は偽群よりも大きい。偽群とＧ４００群の間に大きな相違はない。Ｇ０群はＧ４００群よりも疲労度が大きい。張力−周波数曲線を図４に示す。Ｇ０群のカーブは偽群よりも小さい。
ＧＧＡの投与を増やすに従い、カーブは上方へシフト、つまり、敗血性の横隔膜筋の損傷を抑制することができた。
【表１】
2004315403.tif 000006
３）ＧＧＡとＭＤＡ濃度の関係とＳＯＤ活性とＧＰｘ活性の関係
ＭＤＡ濃度を図５に示す。ＧＧＡ０群のＭＤＡ濃度は偽群よりも大きい。ＧＧＡ投与量の増加に従い、ＭＤＡ濃度は減少する。
図６にＳＯＤとＧＰｘの活性を示す。偽群の活性はＧ０、Ｇ１００、Ｇ２００、Ｇ４００の活性よりもかなり低い。Ｇ０、Ｇ１００、Ｇ２００、Ｇ４００群においてＳＯＤとＧＰｘ活性に重大な相違はなかった。
【００３０】
（実験３）
１）ＣＬＰ後の横隔膜収縮能におけるケルセチンの効果
偽群、Ｑｃｔ群、敗血症対照群の張力−周波数曲線を図７Ａに示す。張力のピークは偽群では１９９６±８２ｇ／ｃｍ２、Ｑｃｔ群では１４６１±７４ｇ／ｃｍ２、敗血症対照群ではでは１４１１±８５ｇ／ｃｍ２であった。Ｑｃｔ群と敗血症対照群との間では重大な相違は見出されなかった。ケルセチンはＣＬＰ後の横隔膜収縮能の改善に効果がほとんどない。Ｇ４００群とＱｃｔ＋Ｇ４００群、敗血症対照群の張力−周波数曲線を図７Ｂに示す。張力のピークはＧ４００群では１９５２±８６ｇ／ｃｍ２であり、Ｑｃｔ＋Ｇ４００群では１３２６±１１４ｇ／ｃｍ２であった。Ｑｃｔ＋Ｇ４００群と敗血症対照群の間に重大な相違は見出せなかった。
２）ＣＬＰ後のＭＤＡレベルのケルセチンの効果
図８に実験群の横隔膜ＭＤＡレベルを示す。敗血症対照群、Ｑｃｔ＋Ｇ４００、ＱｃｔのＭＤＡレベルは偽群やＧ４００よりもかなり大きい。一方偽群とＧ４００間でのＭＤＡレベルに差はない。また、敗血症対照群、Ｑｃｔ＋Ｇ４００群及びＱｃｔ群間でのＭＤＡレベルの差もなかった。
【００３１】
【発明の効果】
以上より、本願発明にかかる化合物を投与することにより、腹腔内にＨＳＰを発現させることができ、その結果敗血症由来の横隔膜機能不全の予防・治療に対して効果があるということが判明した。
【００３２】
【図面の簡単な説明】
【図１】ＧＧＡの腹腔内注射による投与後のＨＳＰ発現の時間依存性を示す図である。
【図２】ケルセチンによるＧＧＡ誘導ＨＳＰ７０発現阻害の投与量依存性を示す図である。
【図３】ＧＧＡの腹腔内注射による投与後のＨＳＰ７０発現の投与量依存性を示す図である。
【図４】ＣＬＰまたは偽手術後の横隔膜筋の張力−周波数曲線を示す図である。
【図５】ＣＬＰまたは偽手術後の横隔膜筋のＭＤＡ濃度を示す図である。
【図６】ＣＬＰまたは偽手術後の横隔膜筋のＳＯＤやＧＰｘ活性を示す図である。
【図７】ＧＧＡを投与した横隔膜筋のケルセチンの効果を示す張力―周波数曲線である。
【図８】ＧＧＡを投与した横隔膜筋のケルセチンの効果を示すＭＤＡ濃度を示す図である。
【図１】
2004315403.tif 000011
【図２】
2004315403.tif 000012
【図３】
2004315403.tif 000013
【図４】
2004315403.tif 000014
【図５】
2004315403.tif 000015
【図６】
2004315403.tif 000016
【図７】
2004315403.tif 000017
【図８】
2004315403.tif 000018