(57)【要約】【課題】血液型の判定を目視によらず，迅速に，そして，正確に血液型判定ができるようにし，さらに，赤血球の凝集経過等の検査データを定量的に把握することができ，必要が有れば，測定値データのプリントアウトもすることができるようにすること。【解決手段】抗体を検体に添加し，適宜の時間毎に検体の赤血球が抗体と反応した赤血球数と，赤血球が抗体と反応しない赤血球数の総数を測定し，これらの測定値を出力する血液型判定方法，及び，検体の希釈用チャンバーと赤血球測定用チャンバーを備え，所定の抗体を所定量滴下された検体の赤血球数を所望時間毎に測定する手段と，検体の所望時間毎の測定結果を表示する手段と，所望時間毎の測定結果をプリントアウトする手段を備えた血液型判定装置。【選択図】  図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
抗体を検体に添加し，適宜の時間毎に検体の赤血球が抗体と反応した赤血球数と，赤血球が抗体と反応しない赤血球数の総数を測定し，これらの測定値を出力することを特徴とする血液型判定方法。
【請求項２】
抗Ａ抗体を添加した検体と，抗Ｂ抗体を添加した検体を用意し，適宜の時間毎に抗Ａ抗体を添加した検体の赤血球数の測定と抗Ｂ抗体を添加した検体の赤血球数の測定を行い，これらの測定値を出力することを特徴とする請求項１に記載のＡＢＯ式血液型判定方法。
【請求項３】
抗Ｄ抗体を検体に添加し，適宜の時間毎に抗Ｄ抗体を添加した検体の赤血球数を測定し，これらの測定値を出力する請求項１に記載のＲＨ式血液型判定方法。
【請求項４】
抗体を添加しない検体の赤血球数の総数を測定し，それと同時に，或いは，その後，抗体を添加した検体の赤血球数の総数を測定する請求項１から請求項３に記載の血液型判定方法。
【請求項５】
血液凝固防止剤が添加された血液を希釈液で希釈して検体とする請求項１から請求項４に記載の血液型判定方法。
【請求項６】
検体の希釈用チャンバーと，検体の赤血球測定用チャンバーと，チャンバー内の検体を希釈する手段と，希釈用チャンバーに所定の抗体を所定量供給する手段と，希釈用チャンバー内の検体を所定の赤血球測定用チャンバーに移送する手段と，移送された検体の赤血球数を所望時間毎に測定する手段と，検体の所望時間毎の測定結果をプリントアウトする手段と，検体の所望時間毎の測定結果を表示する手段と，チャンバーを洗浄する手段とを備えたことを特徴とする血液型判定装置。
【請求項７】
検体の赤血球数を所望時間毎に測定する手段として，電気抵抗式自動血球計算装置，静電容量式自動血球計算装置，光学式自動血球計算装置のいずれかが採択されている請求項６記載の血液型判定装置。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は，ＡＢＯ型，ＲＨ型の血液型を正確に，かつ，定量的に判定する方法及び装置に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
従来，ＡＢＯ式血液型判定方法として，試験管法，載せガラス法が知られている。これらは検体に抗Ａ抗体及び抗Ｂ抗体を滴下し，赤血球の凝集度合いを肉眼で判断するものである。しかしながら，抗Ａ抗体，抗Ｂ抗体に対する赤血球の凝集反応は，各個体によって凝集速度，凝集力等が異なるため，特に，弱い亜型，非常に弱い亜型等，例えば，Ａｍ型，Ａｅｌ型等の判定は，熟練した検査技師でも難しい場合が有った。判定した血液型を確認するため，既知のＡ１型血球，Ｂ型血球等を用い，被検血清（血漿）中の不規則性抗体を検査するいわゆるウラ試験をおこなっているが，このウラ試験も目視による判断によるものであった。ＲＨ型の判定方法も，上記したＡＢＯ式血液型判定方法と同様に目視による判断によるものであった（以下，肉眼による判定方法を目視法という）。
【０００３】
このように，血液型の判定を肉眼による判断で行っている結果，１検体の血液型判定に多くの時間が費やされており，最近の医科検査のスピード化，正確さの要求には充分には答えられないのが実情である。
【０００４】
さらに，これらの判定結果が，定性的であり，赤血球の凝集経過等の検査データが記憶もされないため，医療の現場の要求，即ち，定量的，かつ，その数値データのプリントアウトに対応できていないのが実情である。
【０００５】
【特許文献１】
特開２００１−４６２５号公報（００２２及び図１）
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
そこで，本発明は，ＡＢＯ型，ＲＨ型の血液型の判定を目視法によらず，迅速に，そして，正確に血液型判定ができるようにし，さらに，赤血球の凝集経過等の検査データを定量的に把握することができ，必要が有れば，測定値データのプリントアウトもすることができるようにすることを目的とするものである。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
本発明は，上記の目的を達成するために，所望の時間毎に，検体の抗原が抗体と反応した赤血球数と抗原が抗体と反応しない赤血球数の総数を測定すると共にこれらの測定値を出力することにより赤血球の凝集度を経時的に，かつ，量的に把握し，弱い亜型，非常に弱い亜型であっても正確に血液型を判定できるようにしたものである。
【０００８】
また，本発明は，抗Ａ抗体を添加した検体と，抗Ｂ抗体を添加した検体を用意し，適宜の時間毎に抗Ａ抗体を添加した検体の赤血球数の計測と抗Ｂ抗体を添加した検体の赤血球数の測定を行い，これらの測定値を出力してＡＢＯ式血液型を判定することもできる。
【０００９】
また，本発明は，抗Ｄ抗体を検体に添加し，適宜の時間毎に抗Ｄ抗体を添加した検体の赤血球数の測定し，これらの測定値を出力してＲＨ式血液型を判定することもできる。
【００１０】
また，本発明は，抗体を添加しない検体の赤血球数の総数を測定し，それと同時に，或いは，その後，抗体を添加した検体の赤血球数の総数を測定することにより凝集速度，凝集力等を数値的に把握することもできる。
【００１１】
また，本発明は，血液凝固防止剤が添加された血液を希釈液で希釈して検体とすることもできる。
【００１２】
さらに，本発明は，検体の希釈用チャンバーと，検体の赤血球測定用チャンバーと，チャンバー内の検体を希釈する手段と，希釈用チャンバーに所定の抗体を所定量供給する手段と，希釈用チャンバー内の検体を所定の赤血球測定用チャンバーに移送する手段と，移送された検体の赤血球数を所望時間毎に測定する手段と，検体の所望時間毎の測定結果をプリントアウトする手段と，検体の所望時間毎の測定結果を表示する手段と，チャンバーを洗浄する手段とを備えた血液型判定装置として構成することもできる。
【００１３】
そして，本発明は，上記血液型判定装置における検体の赤血球数を所望時間毎に測定する手段として，公知の電気抵抗式自動血球計算装置，静電容量式自動血球計算装置，或いは，光学式自動血球計算装置のいずれであっても採択することが出来る。
【００１４】
【発明の実施の形態】
以下、  図面を参照して，本発明の装置及び方法の実施の形態を説明する。
【００１５】
本発明の方法を実施する装置の一例は，図１に示した通り，検体血液の吸引部，４つの希釈用チャンバーを備えた検体血液の自動希釈部，抗体の供給部，３つの赤血球測定用チャンバーを備えた検体血液の赤血球数自動計算部，測定値のＬＣＤ表示部，測定値の記憶部，測定値のプリンター，操作部等により，全自動血液型判定装置として構成されている。
【００１６】
図２，及び，図３を参照して血液型判定手順の一般的な説明すると，まず，血液凝固防止剤が添加された検体血液（以下全血という）を準備する。
【００１７】
そして，４つの希釈用チャンバーＰ，Ｑ，Ｒ，Ｓの内の１つＰに全血１０μｌを入れ，希釈液２ｍｌを入れて２００倍希釈サンプルにする。次に，図示しない移送手段により希釈用チャンバーＰから２００倍希釈サンプルを採り，３つの赤血球測定用チャンバーＴ，Ｕ，Ｖの内の１つＴにて希釈液２ｍｌを入れて４００００倍希釈サンプルにし，赤血球数を測定する。こうして全血の希釈サンプルの抗体を加えない状態の赤血球数が測定される。
【００１８】
次に，希釈用チャンバーＰに抗Ａ抗体１０μｌを加え攪拌する。別の希釈用チャンバーＱに全血１０μｌを入れ，希釈液２ｍｌを入れて２００倍希釈サンプルにし，抗Ｂ抗体３００μｌを加え攪拌する。また，別の希釈用チャンバーＲには全血２００μｌを入れ，抗Ｄ抗体６０μｌを加え攪拌する。
【００１９】
続いて，移送手段により希釈用チャンバーＰから抗Ａ抗体を加えた希釈サンプル１０μｌを採り，赤血球測定用チャンバーＴで希釈液２ｍｌを入れて４００００倍希釈サンプルにし，赤血球数を測定する。また，移送手段により希釈用チャンバーＱから抗Ｂ抗体を加えた希釈サンプル１０μｌを採り，赤血球測定用チャンバーＵで希釈液２ｍｌを入れて４００００倍希釈サンプルにし，赤血球数を測定する。
【００２０】
そして，チャンバーＲから抗Ｄ抗体を加えた全血１０μｌを採り，希釈用チャンバーＳで希釈液２ｍｌを入れて２００倍に希釈し攪拌する。この２００倍希釈サンプルを１０μｌを採り，赤血球測定用チャンバーＶで希釈液２ｍｌを加えて４００００倍希釈サンプルにし，赤血球数を測定する。
【００２１】
赤血球数の測定は，赤血球測定用チャンバーＴ，Ｕ，Ｖの順番で行い，適宜定めた時間ごとに，例えば，一分間隔ごとに，３〜５回赤血球数の測定を行う。
【００２２】
抗Ａ抗体，抗Ｂ抗体，抗Ｄ抗体による赤血球数の変化の測定データは，自動的に，横軸に時間を，縦軸に赤血球数を示すグラフとしてＬＣＤに表示すると共にプリントアウトする。
【００２３】
測定が終了すると，希釈用チャンバーＰ，Ｑ，Ｒ，Ｓ，及び，赤血球測定用チャンバーＴ，Ｕ，Ｖは洗浄され，次の測定に備える。
【００２４】
上記の血液型判定装置が採択した赤血球数測定の手段は，図４に示した通り，電気抵抗式自動血球計算装置を採択している。
【００２５】
即ち，食塩水等の電解液中に血球を浮遊させ，検出器内部と外部に電極を配して一定電流を流す。その時，検出器内に定圧吸引をかけて陰圧状態にすると，電解液と共に血球粒子は予め検出器に取り付けてある細孔部を通過する。この時血球粒子と電解液が持つ電気抵抗が異なるため，２つの電極間の抵抗は瞬間的に増大し，血球粒子数に比例した電気信号（パルス）を発生する。この電気信号をさらに電気的処理を施して赤血球数を測定するものである。
【００２６】
もっとも，本発明においては，赤血球数測定の手段として，上記した電気抵抗式自動血球計算装置だけでなく，上記電気抵抗式自動血球計算装置と良く似ているが，２極間の電気信号を静電容量として電気的処理をする静電容量式自動血球計算装置を採択することもできる。また，赤血球数測定の手段として，光学式自動血球計算装置を採択することもできる。光学式自動血球計算装置は，血球が出来るだけ一列に並んで通過出来るように少し長く形成した検出器細孔の流路に対して直角方向の一方から細孔部中心に向けてレーザー光等の平行光線を照射して細孔を通過させ，その光を受光素子で感知するもので，希釈された血球が細孔を通過する瞬間，光は血球により一部遮られ，粒子に比例した強度の光が受光素子に当たって発生する電気信号を，電気抵抗式自動血球計算装置と同様の電気的処理を施して赤血球数を測定するものである。
【００２７】
これら自動血球計算装置は，血球を一個ずつ数える。赤血球にある抗原が抗Ａ抗体，抗Ｂ抗体，抗Ｄ抗体と反応すると，二個以上の凝集した赤血球塊となり赤血球数の合計数量は減少する。自動血球計算装置は，二個以上の凝集した赤血球塊が検出部を通過する時，一個として計数するので，適宜定めた時間ごとに，例えば，一分間隔ごとに，３〜５回赤血球数の測定を行うと，抗原抗体反応の進行状況を赤血球数の減少状況として把握することが出来る。これら自動血球計算装置は，通常，一回の測定で血液中に存在する有形成分である赤血球，白血球，血小板の計数測定，血球容積測定，これらのデータから求められる指数値測定を行うが，血液型判定は判定するまでの反応時間が必要であること，反応開始から終了までの反応過程をデータ化することにより，より正確な判定データ得られるところから，適宜定めた時間ごとに数回赤血球数の測定を行うことが望ましい。
【００２８】
表１は，Ａ型血液の測定データ表である。尚，表１乃至表５，及び，図５乃至図８で，ブランクは希釈サンプルの抗体を加えない状態の赤血球数，抗Ａは抗Ａ抗体を加えた希釈サンプルの赤血球数，抗Ｂは抗Ｂ抗体を加えた希釈サンプルの赤血球数，時間経過は測定時間間隔を示している。赤血球数は，×１０の６乗／μｌを省略している。
【００２９】
表１の数値を横軸に時間を，縦軸に赤血球数を示すグラフとしてＬＣＤに表示し，プリントアウトしたものが図５である。
【表１】
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【００３０】
表２は，Ｂ型血液の測定データ表である。これを図５と同様にＬＣＤ表示し，プリントアウトしたものが図６である。
【表２】
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【００３１】
表３は，ＡＢ型血液の測定データ表である。これを図５と同様にＬＣＤ表示し，プリントアウトしたものが図７である。
【表３】
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【００３２】
表４は，Ｏ型血液の測定データ表である。これを図５と同様にＬＣＤ表示し，プリントアウトしたものが図８である。
【表４】
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【００３３】
表５は，非常に弱い亜型ＡＢｍ型検体の２００倍希釈サンプルについて，抗Ａ抗体を２滴（６０μｌ）滴下してその赤血球数の変化を見たものである。この検体は，目視法ではＯ型と判定されたものである。
【表５】
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【００３４】
表６は，非常に弱い亜型ＡＢｍ型検体の２００倍希釈サンプルについて，抗Ｂ抗体の滴下量と反応時間の関係を赤血球数の変化で見たものである。尚，表６におけるブランク値の変化は，抗体を滴下したときに，滴下数に応じて検体が薄められることによるものである。減少率は，この変動するブランク値から求めた。
【表６】
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【００３５】
表７は，非常に弱い亜型ＡＢｍ型検体の２００倍希釈サンプルについて，抗Ｂ抗体の滴下量を６滴（１８０μｌ）として赤血球数の時間変化を見たものである。
【表７】
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【００３６】
以上から，弱い亜型，非常に弱い亜型であっても，抗体の滴下量の適切な設定，希釈倍率の適切な設定，測定時間の延長等によって，極めて正確にＡＢＯ式血液型の判定が出来ることが確認された。
【００３７】
次に，表８は，ＡＢ型ＲＨ＋型の全血の測定した結果を示している。時間経過と共に赤血球数は減少しており，ＲＨ＋−型の判定に有効と確認された。尚，表８乃至表９において，抗Ｄは抗Ｄ抗体を加えたサンプルの赤血球数，時間経過は測定時間間隔を示している。また，表８乃至表９において，ブランク値の変化は，抗体を滴下したときに，滴下数に応じて検体が薄められることによるものである。減少率は，この変動するブランク値から求めた。
【００３８】
【表８】
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【００３９】
表９は，ＡＢ型ＲＨ＋型の全血に抗Ｄ抗体を加え，これを２００倍に希釈し，１０分間放置後に赤血球数を測定したものである。
【表９】
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【００４０】
この結果，希釈サンプルの凝集速度は遅いことから，ＲＨ＋−型の判定には，検体に全血を使用するほうが良いと判断される。
【００４１】
尚，上記装置の使用に際しては，希釈用チャンバーＰ，Ｑ，Ｒ，Ｓにおいて，抗体を検体に加えて攪拌し，所定時間放置した後に測定するようにしてもよい。この測定手法は，ＡＢＯ型の弱い亜型や非常に弱い亜型の正確な判定や，ＲＨ型＋−の正確な判定には特に有効であり，これらの誤判定を避けるために，採択することが望ましい。
【００４２】
【発明の効果】
以上に説明した通り，本発明によれば，ＡＢＯ型，ＲＨ型の血液型の判定を，目視法よりも，迅速に，そして，正確に，さらに，ローコストで行うことができるのである。しかも，本発明による判定によれば，検体毎の，言い換えれば，個体毎の赤血球の凝集経過等の数値データを得ることができるのであり，医療の現場の要請に答えることができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明を実施する血液型判定装置の概略図
【図２】図１の血液型判定装置の作動手順を示すフローチャート
【図３】図１の血液型判定装置の血液型判定手順の説明図
【図４】図１の血液型判定装置の赤血球数計算部の説明図
【図５】血液型Ａ型のグラフの一例
【図６】血液型Ｂ型のグラフの一例
【図７】血液型ＡＢ型のグラフの一例
【図８】血液型Ｏ型のグラフの一例
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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