(57)【要約】【構成】一般式（Ｉ）【化１】2004359641.tif 000025（式中、環Ａは置換基を有していてもよい含窒素単環、二環または三環式複素環を表わし、環Ｂは置換基を有していてもよい５または６員含窒素複素環を表わし、Ｗは水素原子、置換基を有していてもよい炭化水素基、または置換基を有していてもよい複素環基を表わし、Ｙは結合手または主鎖の原子数１〜１０のスペーサーを表わす。）で示される化合物、またはそれらの塩、またはそれらのプロドラッグを含有してなるＣＣＲ５活性化剤。【効果】ＣＣＲ５活性化剤は、ＣＣＲ５を活性化し、さらにはＣＣＲ５発現細胞に対する遊走活性を引き起こす、ＣＣＲ５の脱感作を引き起こす、ＣＣＲ５のインターナリゼーションを引き起こす等の作用を有するため、種々の医薬品として有用である。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ｉ）
【化１】
2004359641.tif 000021
（式中、環Ａは置換基を有していてもよい含窒素単環、二環または三環式複素環を表わし、環Ｂは置換基を有していてもよい５または６員含窒素複素環を表わし、Ｗは水素原子、置換基を有していてもよい炭化水素基、または置換基を有していてもよい複素環基を表わし、Ｙは結合手または主鎖の原子数１〜１０のスペーサーを表わす。）
で示される化合物もしくはその塩、またはそのプロドラッグを含有してなるＣＣＲ５活性化剤。
【請求項２】
細胞遊走を引き起こす作用を有する請求項１記載のＣＣＲ５活性化剤。
【請求項３】
脱感作を引き起こす作用を有する請求項１記載のＣＣＲ５活性化剤。
【請求項４】
インターナリゼーションを引き起こす作用を有する請求項１記載のＣＣＲ５活性化剤。
【請求項５】
ＹがＣ１〜３アルキレンである請求項１記載のＣＣＲ５活性化剤。
【請求項６】
環Ａが９〜１５員含窒素二環または三環式複素環である請求項１記載のＣＣＲ５活性化剤。
【請求項７】
環Ｂが置換基を有していてもよいピラゾールである請求項１記載のＣＣＲ５活性化剤。
【請求項８】
Ｗが置換基を有していてもよい炭化水素基または置換基を有していてもよい３〜１５員複素環基である請求項１記載のＣＣＲ５活性化剤。
【請求項９】
環Ａが
【化２】
2004359641.tif 000022
（式中、環Ａ１は置換基を有していてもよい３〜８員同素環または複素環を表わす。）である請求項１記載のＣＣＲ５活性化剤。
【請求項１０】
ＹがＣ１〜３アルキレンである請求項９記載のＣＣＲ５活性化剤。
【請求項１１】
環Ａ１が置換基を有していてもよい３〜８員複素環である請求項９記載のＣＣＲ５活性化剤。
【請求項１２】
環Ｂが置換基を有していてもよいピラゾールである請求項９記載のＣＣＲ５活性化剤。
【請求項１３】
Ｗが置換基を有していてもよい炭素数３〜８の環状炭化水素基または置換基を有していてもよい５〜１０員複素環基である請求項９記載のＣＣＲ５活性化剤。
【請求項１４】
一般式（Ｉ）
【化３】
2004359641.tif 000023
（式中の記号は請求項１の記載と同じ意味を表わす。）
で示される化合物もしくはその塩、またはそのプロドラッグの有効量を哺乳動物に投与することを特徴とする、ＣＣＲ５を活性化する方法。
【請求項１５】
ＣＣＲ５活性化剤を製造するための、一般式（Ｉ）
【化４】
2004359641.tif 000024
（式中の記号は請求項１の記載と同じ意味を表わす。）
で示される化合物もしくはその塩、またはそのプロドラッグの使用。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明が属する技術分野】
本発明は、ＣＣＲ５活性化剤に関する。
【０００２】
【発明の背景】
Ｔ細胞は、Ｂ細胞とともに、免疫系を司る主要な細胞として知られている。Ｔ細胞は、免疫系、すなわち細胞性免疫、液性免疫のうち、主に細胞性免疫に関与するリンパ球であるが、その機能から、あるいはその表面抗原から幾つかのサブクラスに分類される。Ｔ細胞の表面抗原であるＣＤ４、ＣＤ８分子の発現は、胸腺内でのＴ細胞の分化の程度を示す一つの指標となっており、一般にＣＤ４陽性Ｔ細胞は、主に抗体産生の補助や種々の免疫応答の誘導に関与するもの、ＣＤ８陽性Ｔ細胞は主に細胞傷害活性を有するものとされている。これらＣＤ４陽性Ｔ細胞、ＣＤ８陽性Ｔ細胞において、未だ抗原刺激を受けたことが無い細胞を、それぞれＣＤ４陽性ナイーブＴ細胞、ＣＤ８陽性ナイーブＴ細胞というが、これらの細胞は、抗原提示細胞から抗原特異的活性化シグナルと補助刺激シグナルを受けることによって、種々の機能を有するエフェクター細胞へと分化する。このエフェクター細胞としては、ＣＤ４陽性ナイーブＴ細胞から分化したＴｈ１細胞およびＴｈ２細胞、ＣＤ８陽性ナイーブＴ細胞から分化した細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＴＬ）が知られている。一般にＴ細胞の機能として知られる、抗体産生の補助や種々の免疫応答の誘導、または細胞傷害活性は、ナイーブＴ細胞のものでは無く、これらエフェクター細胞の機能を表わしたものである。
【０００３】
また、Ｔ細胞は、ＣＤ４やＣＤ８といった表面抗原の他に、複数の表面抗原を発現している。これら表面抗原のうちには、抗原提示細胞からの刺激を受ける受容体として機能しているものも多数含まれる。ケモカイン受容体の中には、ケモカインに応答して細胞遊走を仲介する機能の他に、この様な抗原提示細胞からの刺激を受ける受容体として機能するものがあることが知られており（Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １９９６  Ｍａｒ  １５；１５６（６）：２０９５−２１０３．）、ＣＣＲ５もその一つである。
【０００４】
ケモカインは、種々の細胞の移動に深く関与している。また、ケモカイン受容体は、種々の特異的な細胞において、ある特定した時期に発現し、そのエフェクター細胞がケモカインの産生される個所に集積するというメカニズムを通じて、炎症、免疫反応の制御に大きく関与している。
【０００５】
近年、移植の拒絶反応（例えば、固形臓器移植片の拒絶、糖尿病における膵島細胞移植の拒絶、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ（ｇｒａｆｔ−ｖｅｒｓｕｓ−ｈｏｓｔ  ｄｉｓｅａｓｅ））等）、自己免疫疾患（例えば、関節炎、慢性関節炎リウマチ、多発性硬化症、潰瘍性大腸炎等）、アレルギー性疾患（例えば、喘息等）、および虚血性疾患（例えば、虚血再灌流傷害等）において、ケモカイン受容体であるＣＣＲ５、さらにはＣＣＲ５を発現するＴ細胞がその病態進行に関与する可能性を示す報告がなされている。例えば、移植の拒絶反応に関する報告としては、動物モデルにおいて抗ＣＣＲ５抗体や抗ＭＩＰ−１α抗体が効果を示すことや、ＣＣＲ５ノックアウトマウスを用いた実験等が報告されている。また、自己免疫疾患に関する報告としては、慢性関節リウマチ患者の滑膜組織にＣＣＲ５陽性Ｔ細胞の浸潤が見られることや、多発性硬化症、潰瘍性大腸炎の動物モデルにおいてＣＣＲ５の関与を示す実験等が報告されている。アレルギー性疾患に関する報告としては、喘息患者の肺にＣＣＲ５陽性Ｔ細胞の浸潤が見られることが報告されている。また、これらＣＣＲ５の関与が示唆されている疾患において、不活性型ＣＣＲ５を発現するヒトと野生型ＣＣＲ５を発現するヒトの比較を行った報告がなされている。
【０００６】
上記したように、Ｔ細胞の関与が示唆されているこれらの疾患では、新たな薬剤の開発が切望されており、Ｔ細胞の亢進した機能を阻害する薬剤、またはＴ細胞の過剰な遊走を阻害する薬剤は、移植の拒絶反応（例えば、固形臓器移植片の拒絶、糖尿病における膵島細胞移植の拒絶、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ（ｇｒａｆｔ−ｖｅｒｓｕｓ−ｈｏｓｔ  ｄｉｓｅａｓｅ））等）、自己免疫疾患（例えば、関節炎、慢性関節炎リウマチ、多発性硬化症、潰瘍性大腸炎等）、アレルギー性疾患（例えば、喘息等）、および虚血性疾患（例えば、虚血再灌流傷害等）等の優れた予防および／または治療剤となると考えられる。
【０００７】
一方、ヒト免疫不全ウィルス（以下、ＨＩＶと略する。）感染によって引き起こされる後天性免疫不全症候群（エイズ（ＡＩＤＳ）と呼ばれている。）は、近年最もその治療法を切望されている疾患の一つである。主要な標的細胞であるＣＤ４陽性細胞がＨＩＶにいったん感染すると、ＨＩＶは患者の体内で増殖をくり返し、やがては免疫機能を司るＴ細胞を壊滅的に破壊する。この過程で徐々に免疫機能が低下し、発熱、下痢、リンパ節の腫脹等の様々な免疫不全状態を示すようになり、カリニ肺炎等の種々の日和見感染症を併発し易くなる。このような状態がエイズの発症であり、カボジ肉腫等の悪性腫瘍を誘発し、重篤化することはよく知られている。
【０００８】
エイズに対する各種の予防、治療方法としては、例えば、（１）逆転写酵素阻害剤やプロテアーゼ阻害剤の投与によるＨＩＶの増殖抑制、（２）免疫賦活作用のある薬物の投与による日和見感染症の予防、緩和等が試みられている。
【０００９】
ＨＩＶが主に感染する細胞は、免疫系の中枢を司るヘルパーＴ細胞である。その際、Ｔ細胞の膜上に発現している膜蛋白ＣＤ４を利用することが報告されている（Ｃｅｌｌ，  ５２，  ６３１  （１９８５））。ＣＤ４分子は４３３個のアミノ酸残基からなり、成熟ヘルパーＴ細胞以外にマクロファージ、一部のＢ細胞、血管内皮細胞、皮膚組織のランゲルハンス細胞、リンパ組織にある樹状細胞、中枢神経系のグリア細胞等で発現が見られる。しかし、ＣＤ４分子のみではＨＩＶの感染が成立しないことが明らかになるにつれて、ＨＩＶが細胞に感染する際にかかわるＣＤ４分子以外の因子の存在の可能性が示唆されるようになった。
【００１０】
ＲＡＮＴＥＳ、ＭＩＰ−１α、ＭＩＰ−１βの受容体であるＣＣＲ５は、マクロファージ指向性（Ｒ５）ＨＩＶが感染する際に利用されることが発見された（Ｓｃｉｅｎｃｅ，  ２７２，  １９５５  （１９９６））。
【００１１】
従って、ＨＩＶとＣＣＲ５を奪い合うことのできる化合物、あるいはＨＩＶウイルスに結合し、該ウイルスがＣＣＲ５に結合できない状態にさせる化合物は、新しいタイプのＨＩＶ感染阻害剤となり得るはずである。
【００１２】
以上のことから、ケモカインレセプター、特にＣＣＲ５は、各種炎症性疾患、自己免疫疾患、アレルギー疾患等の免疫疾患、またはＨＩＶ感染に深く関与していると考えられる。例えば、喘息、腎炎、腎症、肝炎、関節炎、慢性関節リウマチ、鼻炎、結膜炎、潰瘍性大腸炎等、移植臓器拒絶反応、免疫抑制、乾癬、多発性硬化症、ヒト免疫不全ウィルス感染（後天性免疫不全症候群等）、アトピー性皮膚炎、蕁麻疹、アレルギー性気管支肺アスペルギルス症、アレルギー性好酸球性胃腸症、虚血再灌流傷害、急性呼吸窮迫症候群、細菌感染に伴うショック、糖尿病、癌転移等に関与していると考えられる。
【００１３】
【従来の技術】
トリアザスピロ［５．５］ウンデカン誘導体化合物、それらの四級アンモニウム塩、それらのＮ−オキシドまたはそれらの薬理学的に許容される塩が、ケモカイン／ケモカイン受容体（ＣＣＲ）の作用を制御することにより、各種炎症性疾患、喘息、アトピー性皮膚炎、蕁麻疹、アレルギー疾患（アレルギー性気管支肺アスペルギルス症、アレルギー性好酸球性胃腸症等）、腎炎、腎症、肝炎、関節炎、慢性関節リウマチ、乾癬、鼻炎、結膜炎、虚血再灌流傷害の抑制、多発性硬化症、潰瘍性大腸炎、急性呼吸窮迫症候群、細菌感染に伴うショック、糖尿病、自己免疫疾患の治療、移植臓器拒絶反応、免疫抑制、癌転移、後天性免疫不全症候群の予防および／または治療として有用であることが報告されている（特許文献１、２参照。）。
【００１４】
【特許文献１】
国際公開第０１／４０２２７号パンフレット
【特許文献２】
国際公開第０２／７４７７０号パンフレット
【００１５】
【発明が解決しようとする課題】
ＣＣＲ５に結合する化合物は、ＨＩＶやその他の免疫反応に関連するタンパク質のＣＣＲ５への結合を阻害する。したがって、これらの化合物、とりわけ低分子化合物はＨＩＶ感染や免疫疾患等の種々の疾患に有効であることが予測される。一方、いったんＣＣＲ５に結合した化合物が何らかの要因で受容体から解離してしまうと、上述の活性が消失してしまうことが考えられる。また、ＣＣＲ５アンタゴニストがＣＣＲ５と結合した場合、アップレギュレーションが起こり、細胞表面の受容体数が増加し、上述の活性部位が多数出現し、ＨＩＶ感染や免疫疾患が増悪される可能性も考えられる。
【００１６】
一方、ＭＩＰ−１α、ＭＩＰ−１β、ＲＡＮＴＥＳなどの内因性リガンドがＣＣＲ５に結合すると、活性化が起こり、引き続いて様々な作用が引き起こされることが知られている。活性化とは、例えば、ＣＣＲ５アゴニストがＣＣＲ５と結合することにより、細胞内Ｃａ濃度の上昇、ｃＡＭＰ濃度の減少、遺伝子発現の誘導をもたらしたり、アゴニストの濃度勾配に応じて細胞を遊走させる機能をいう。ＣＣＲ５アゴニストは細胞遊走作用を有するので、例えば、全身投与することによって、炎症部へ遊走しようとしているエフェクター細胞の方向性を撹乱させ、炎症部位で増悪しているエフェクター細胞の過剰な集積を阻止することが可能である。活性化に引き続いて起こる作用とは、例えば、受容体のリン酸化を誘導することで脱感作をもたらしたり、受容体を細胞内に内在化（インターナリゼーション）させる機能をいう。インターナリゼーションが起こると細胞表面の受容体数が減少する。したがって、ＣＣＲ５アゴニスト作用を有する化合物は、ＣＣＲ５に結合し内因性リガンドやＨＩＶ等のＣＣＲ５への結合を阻害するだけでなく、ＣＣＲ５のインターナリゼーションを引き起こすことで内因性リガンドやＨＩＶ等が細胞に結合する部位やその結合確率を減らし、内因性リガンドによる望ましくない免疫作用や、ＨＩＶ等の感染を抑制することができる。
【００１７】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、鋭意検討した結果、一般式（Ｉ）で示される化合物がＣＣＲ５を活性化すること、さらにはＣＣＲ５発現細胞に対する遊走活性を有すること、ＣＣＲ５受容体の脱感作を引き起こすこと、ＣＣＲ５受容体のインターナリゼーションを引き起こすこと等を見出し、本発明を完成した。
【００１８】
【発明の開示】
本発明は、
１．一般式（Ｉ）
【化５】
2004359641.tif 000002
（式中、環Ａは置換基を有していてもよい含窒素単環、二環または三環式複素環を表わし、環Ｂは置換基を有していてもよい５または６員含窒素複素環を表わし、Ｗは水素原子、置換基を有していてもよい炭化水素基、または置換基を有していてもよい複素環基を表わし、Ｙは結合手または主鎖の原子数１〜１０のスペーサーを表わす。）
で示される化合物もしくはその塩、またはそのプロドラッグを含有してなるＣＣＲ５活性化剤、
２．細胞遊走を引き起こす作用を有する前記１記載のＣＣＲ５活性化剤、
３．脱感作を引き起こす作用を有する前記１記載のＣＣＲ５活性化剤、
４．インターナリゼーションを引き起こす作用を有する前記１記載のＣＣＲ５活性化剤、
５．ＹがＣ１〜３アルキレンである前記１記載のＣＣＲ５活性化剤、
６．環Ａが９〜１５員含窒素二環または三環式複素環である前記１記載のＣＣＲ５活性化剤、
７．環Ｂが置換基を有していてもよいピラゾールである前記１記載のＣＣＲ５活性化剤、
８．Ｗが置換基を有していてもよい炭化水素基または置換基を有していてもよい３〜１５員複素環基である前記１記載のＣＣＲ５活性化剤、
９．環Ａが
【化６】
2004359641.tif 000003
（式中、環Ａ１は置換基を有していてもよい３〜８員同素環または複素環を表わす。）である前記１記載のＣＣＲ５活性化剤、
１０．ＹがＣ１〜３アルキレンである前記９記載のＣＣＲ５活性化剤、
１１．環Ａ１が置換基を有していてもよい３〜８員複素環である前記９記載のＣＣＲ５活性化剤、
１２．環Ｂが置換基を有していてもよいピラゾールである前記９記載のＣＣＲ５活性化剤、
１３．Ｗが置換基を有していてもよい炭素数３〜８の環状炭化水素基または置換基を有していてもよい５〜１０員複素環基である前記９記載のＣＣＲ５活性化剤、
１４．一般式（Ｉ）
【化７】
2004359641.tif 000004
（式中の記号は前記１の記載と同じ意味を表わす。）
で示される化合物もしくはその塩、またはそのプロドラッグの有効量を哺乳動物に投与することを特徴とする、ＣＣＲ５を活性化する方法、
１５．ＣＣＲ５活性化剤を製造するための、一般式（Ｉ）
【化８】
2004359641.tif 000005
（式中の記号は前記１の記載と同じ意味を表わす。）
で示される化合物もしくはその塩、またはそのプロドラッグの使用に関する。
【００１９】
本発明におけるＣＣＲ５活性化剤としては、前記一般式（Ｉ）で示されるＣＣＲ５アゴニストが好適である。
【００２０】
一般式（Ｉ）中、環Ａで示される「置換基を有していてもよい含窒素単環、二環または三環式複素環」における「含窒素単環、二環または三環式複素環」とは、一般式（Ｉ）の環Ａにおいて表示されている窒素原子以外に、窒素原子、酸素原子および硫黄原子から任意に選ばれる１〜３個のヘテロ原子を含んでいてもよい複素環を表わす。「含窒素単環、二環または三環式複素環」としては、例えば、「３〜１５員含窒素不飽和単環、二環または三環式複素環」、「３〜１５員含窒素飽和単環、二環または三環式複素環」等が挙げられる。
【００２１】
「３〜１５員含窒素不飽和単環、二環または三環式複素環」としては、例えばピロール、イミダゾール、トリアゾール、テトラゾール、ピラゾール、アゼピン、ジアゼピン、インドール、イソインドール、インダゾール、プリン、ベンゾイミダゾール、ベンゾアゼピン、ベンゾジアゼピン、ベンゾトリアゾール、カルバゾール、β−カルボリン、フェノチアジン、フェノキサジン、ペリミジン、ピロリン、イミダゾリン、トリアゾリン、テトラゾリン、ピラゾリン、ジヒドロピリジン、テトラヒドロピリジン、ジヒドロピラジン、テトラヒドロピラジン、ジヒドロピリミジン、テトラヒドロピリミジン、ジヒドロピリダジン、テトラヒドロピリダジン、ジヒドロアゼピン、テトラヒドロアゼピン、ジヒドロジアゼピン、テトラヒドロジアゼピン、ジヒドロオキサゾール、ジヒドロイソオキサゾール、ジヒドロチアゾール、ジヒドロイソチアゾール、ジヒドロフラザン、ジヒドロオキサジアゾール、ジヒドロオキサジン、ジヒドロオキサジアジン、ジヒドロオキサゼピン、テトラヒドロオキサゼピン、ジヒドロオキサジアゼピン、テトラヒドロオキサジアゼピン、ジヒドロチアジアゾール、ジヒドロチアジン、ジヒドロチアジアジン、ジヒドロチアゼピン、ジヒドロチアジアゼピン、テトラヒドロチアジアゼピン、インドリン、イソインドリン、ジヒドロインダゾール、ジヒドロキノリン、テトラヒドロキノリン、ジヒドロイソキノリン、テトラヒドロイソキノリン、ジヒドロフタラジン、テトラヒドロフタラジン、ジヒドロナフチリジン、テトラヒドロナフチリジン、ジヒドロキノキサリン、テトラヒドロキノキサリン、ジヒドロキナゾリン、テトラヒドロキナゾリン、ジヒドロシンノリン、テトラヒドロシンノリン、ジヒドロベンゾオキサジン、ジヒドロベンゾチアジン、ピラジノモルホリン、ジヒドロベンゾオキサゾール、ジヒドロベンゾチアゾール、ジヒドロベンゾイミダゾール、ジヒドロベンゾアゼピン、テトラヒドロベンゾアゼピン、ジヒドロベンゾジアゼピン、テトラヒドロベンゾジアゼピン、ジヒドロベンゾオキサゼピン、テトラヒドロベンゾオキサゼピン、ジヒドロカルバゾール、テトラヒドロカルバゾール、ジヒドロアクリジン、テトラヒドロアクリジン等が挙げられる。
【００２２】
また、「３〜１５員含窒素飽和単環、二環または三環式複素環」としては、アジリジン、アゼチジン、アゾカン、ピロリジン、イミダゾリジン、トリアゾリジン、テトラゾリジン、ピラゾリジン、ピペリジン、ピペラジン、パーヒドロピリミジン、パーヒドロピリダジン、パーヒドロアゼピン、パーヒドロジアゼピン、テトラヒドロオキサゾール（オキサゾリジン）、テトラヒドロイソオキサゾール（イソオキサゾリジン）、テトラヒドロチアゾール（チアゾリジン）、テトラヒドロイソチアゾール（イソチアゾリジン）、テトラヒドロフラザン、テトラヒドロオキサジアゾール（オキサジアゾリジン）、テトラヒドロオキサジン、テトラヒドロオキサジアジン、パーヒドロオキサゼピン、パーヒドロオキサジアゼピン、テトラヒドロチアジアゾール（チアジアゾリジン）、テトラヒドロチアジン、テトラヒドロチアジアジン、テトラヒドロチアゼピン、パーヒドロチアゼピン、パーヒドロチアジアゼピン、モルホリン、チオモルホリン、パーヒドロインダゾール、パーヒドロキノリン、パーヒドロイソキノリン、パーヒドロフタラジン、パーヒドロナフチリジン、パーヒドロキノキサリン、パーヒドロキナゾリン、パーヒドロシンノリン、パーヒドロベンゾオキサゾール、パーヒドロベンゾチアゾール、パーヒドロベンゾイミダゾール、パーヒドロカルバゾール、パーヒドロアクリジン、
【化９】
2004359641.tif 000006
等が挙げられる。
【００２３】
さらに、環Ａには、
【化１０】
2004359641.tif 000007
も含まれる。
ここで、環Ａ１は「置換基を有していてもよい３〜８員同素環または複素環」を表わす。
【００２４】
環Ａ１で示される「置換基を有していてもよい３〜８員同素環または複素環」における「３〜８員同素環」としては、「炭素数３〜８の環状炭化水素」等が挙げられる。「炭素数３〜８の環状炭化水素」における「環状炭化水素」としては、「不飽和環状炭化水素」または「飽和環状炭化水素」が挙げられる。「飽和環状炭化水素」としては、例えば、シクロプロパン、シクロブタン、シクロペンタン、シクロヘキサン、シクロヘプタン、シクロオクタン等のシクロアルカン、さらに、ビシクロ［２．２．１］ヘプタン、ビシクロ［３．１．１］ヘプタン、ビシクロ［２．２．２］オクタン等が挙げられる。「不飽和環状炭化水素」としては、例えば、シクロペンテン、シクロヘキセン、シクロヘプテン、シクロオクテン、シクロペンタジエン、シクロヘキサジエン、シクロヘプタジエン、シクロオクタジエン等のシクロアルケン、さらに、ビシクロ［２．２．１］ヘプタ−２−エン、ビシクロ［３．１．１］ヘプタ−２−エン、ビシクロ［２．２．２］オクタ−２−エン等が挙げられる。
【００２５】
環Ａ１で示される「置換基を有していてもよい３〜８員同素環または複素環」における「３〜８員複素環」としては、「３〜８員不飽和複素環」、「３〜８員飽和複素環」が挙げられる。
【００２６】
「３〜８員不飽和複素環」としては、例えば、アゼピン、ジアゼピン、チオピラン、オキサジン、オキサジアジン、チアジン、チアジアジン、ピロリン、イミダゾリン、トリアゾリン、テトラゾリン、ピラゾリン、ジヒドロピリジン、テトラヒドロピリジン、ジヒドロピラジン、テトラヒドロピラジン、ジヒドロピリミジン、テトラヒドロピリミジン、ジヒドロピリダジン、テトラヒドロピリダジン、ジヒドロアゼピン、テトラヒドロアゼピン、ジヒドロジアゼピン、テトラヒドロジアゼピン、ジヒドロフラン、ジヒドロピラン、ジヒドロオキセピン、テトラヒドロオキセピン、ジヒドロチオフェン、ジヒドロチオピラン、ジヒドロチエピン、テトラヒドロチエピン、ジヒドロオキサゾール、ジヒドロイソオキサゾール、ジヒドロチアゾール、ジヒドロイソチアゾール、ジヒドロフラザン、ジヒドロオキサジアゾール、ジヒドロオキサジン、ジヒドロオキサジアジン、ジヒドロオキサゼピン、テトラヒドロオキサゼピン、ジヒドロオキサジアゼピン、テトラヒドロオキサジアゼピン、ジヒドロチアジアゾール、ジヒドロチアジン、ジヒドロチアジアジン、ジヒドロチアゼピン、テトラヒドロチアゼピン、ジヒドロチアジアゼピン、テトラヒドロチアジアゼピン環等が挙げられる。
【００２７】
また、「３〜８員飽和複素環」としては、アジリジン、アゼチジン、アゾカン、ピロリジン、イミダゾリジン、トリアゾリジン、テトラゾリジン、ピラゾリジン、ピペリジン、ピペラジン、パーヒドロピリミジン、パーヒドロピリダジン、パーヒドロアゼピン、パーヒドロジアゼピン、オキシラン、オキセタン、テトラヒドロフラン、テトラヒドロピラン、パーヒドロオキセピン、チイラン、チエタン、テトラヒドロチオフェン、テトラヒドロチオピラン、パーヒドロチエピン、テトラヒドロオキサゾール（オキサゾリジン）、テトラヒドロイソオキサゾール（イソオキサゾリジン）、テトラヒドロチアゾール（チアゾリジン）、テトラヒドロイソチアゾール（イソチアゾリジン）、テトラヒドロフラザン、テトラヒドロオキサジアゾール（オキサジアゾリジン）、テトラヒドロオキサジン、テトラヒドロオキサジアジン、パーヒドロオキサゼピン、パーヒドロオキサジアゼピン、テトラヒドロチアジアゾール（チアジアゾリジン）、テトラヒドロチアジン、テトラヒドロチアジアジン、パーヒドロチアゼピン、パーヒドロチアジアゼピン、モルホリン、チオモルホリン、オキサチアン、
【化１１】
2004359641.tif 000008
環等が挙げられる。
【００２８】
環Ａで示される「含窒素単環、二環または三環式複素環」として好ましくは、「９〜１５員含窒素二環または三環式複素環」、または
【化１２】
2004359641.tif 000009
が挙げられる。
【００２９】
「９〜１５員含窒素二環または三環式複素環」として具体的には、例えば「９〜１５員含窒素不飽和二環または三環式複素環」としては、インドール、イソインドール、インダゾール、プリン、ベンゾイミダゾール、ベンゾアゼピン、ベンゾジアゼピン、ベンゾトリアゾール、カルバゾール、β−カルボリン、フェノチアジン、フェノキサジン、ペリミジン、インドリン、イソインドリン、ジヒドロインダゾール、ジヒドロキノリン、テトラヒドロキノリン、ジヒドロイソキノリン、テトラヒドロイソキノリン、ジヒドロフタラジン、テトラヒドロフタラジン、ジヒドロナフチリジン、テトラヒドロナフチリジン、ジヒドロキノキサリン、テトラヒドロキノキサリン、ジヒドロキナゾリン、テトラヒドロキナゾリン、ジヒドロシンノリン、テトラヒドロシンノリン、ジヒドロベンゾオキサジン、ジヒドロベンゾチアジン、ピラジノモルホリン、ジヒドロベンゾオキサゾール、ジヒドロベンゾチアゾール、ジヒドロベンゾイミダゾール、ジヒドロベンゾアゼピン、テトラヒドロベンゾアゼピン、ジヒドロベンゾジアゼピン、テトラヒドロベンゾジアゼピン、ジヒドロベンゾオキサゼピン、テトラヒドロベンゾオキサゼピン、ジヒドロカルバゾール、テトラヒドロカルバゾール、ジヒドロアクリジン、テトラヒドロアクリジン等が挙げられる。
【００３０】
また、「９〜１５員含窒素飽和二環または三環式複素環」としては、パーヒドロインダゾール、パーヒドロキノリン、パーヒドロイソキノリン、パーヒドロフタラジン、パーヒドロナフチリジン、パーヒドロキノキサリン、パーヒドロキナゾリン、パーヒドロシンノリン、パーヒドロベンゾオキサゾール、パーヒドロベンゾチアゾール、パーヒドロベンゾイミダゾール、パーヒドロカルバゾール、パーヒドロアクリジン等が挙げられる。
【００３１】
環Ａとして特に好ましくは、
【化１３】
2004359641.tif 000010
が挙げられる。
【００３２】
環Ａおよび環Ａ１における「置換基」としてはオキソ基、置換基を有していてもよい炭化水素基、−ＯＲ１、−ＮＲ２Ｒ３、−ＳＲ４（式中、Ｒ１〜Ｒ４は水素原子または置換基を有していてもよい炭化水素基を表わす。）等が挙げられる。
【００３３】
「置換基を有していてもよい炭化水素基」における「炭化水素基」としては、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓ−ブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシル、トリデシル、テトラデシル、ペンタデシル等の炭素数１ないし１５のアルキル基、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル等の炭素数３ないし８のシクロアルキル基、例えば、ビニル、アリル、２−メチルアリル、２−ブテニル、３−ブテニル、３−オクテニル等の炭素数２ないし１０のアルケニル基、例えば、エチニル、２−プロピニル、３−ヘキシニル等の炭素数２ないし１０のアルキニル基、例えば、シクロプロペニル、シクロペンテニル、シクロヘキセニル等の炭素数３ないし１０のシクロアルケニル基、例えば、フェニル、ナフチル等の炭素数６ないし１４のアリール基、例えば、ベンジル、フェニルエチル等の炭素数７〜１６のアラルキル基、例えば、シクロヘキシルメチル、シクロヘキシルエチル、シクロヘキシルプロピル、１−メチル−１−シクロヘキシルメチル等の（炭素数３ないし８のシクロアルキル）−（炭素数１ないし４のアルキル）基等が挙げられる。
【００３４】
また、「置換基を有していてもよい炭化水素基」における「置換基」としては、例えば（１）ニトロ、（２）水酸基、（３）オキソ、（４）チオキソ、（５）シアノ、（６）カルバモイル、（７）Ｎ−ブチルアミノカルボニル、Ｎ−シクロヘキシルメチルアミノカルボニル、Ｎ−ブチル−Ｎ−シクロヘキシルメチルアミノカルボニル、Ｎ−シクロヘキシルアミノカルボニル、フェニルアミノカルボニル等の炭素数１〜８の炭化水素等で置換されたアミノカルボニル、（８）カルボキシ、（９）例えば、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル等の炭素数１ないし４のアルコキシ−カルボニル、（１０）スルホ、（１１）フッ素、塩素、臭素、ヨウ素等のハロゲン、（１２）例えば、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、イソブトキシ、ｓ−ブトキシ、ｔ−ブトキシ、シクロヘキシルメチルオキシ、ベンジルオキシ等の炭素数１ないし８のアルコキシ、（１３）例えばシクロヘキシルオキシ等の炭素数３ないし８のシクロアルコキシ、（１４）フェノキシ、（１５）例えば、ｏ−、ｍ−またはｐ−クロロフェノキシ、ｏ−、ｍ−またはｐ−ブロモフェノキシ等のハロゲノフェノキシ、（１６）例えば、メチルチオ、エチルチオ、ｎ−プロピルチオ、イソプロピルチオ、ｎ−ブチルチオ、ｔ−ブチルチオ等の炭素数１ないし４の低級アルキルチオ、（１７）フェニルチオ、（１８）例えば、メチルスルフィニル、エチルスルフィニル等の炭素数１ないし４の低級アルキルスルフィニル、（１９）例えば、メチルスルホニル、エチルスルホニル等の炭素数１ないし４の低級アルキルスルホニル、（２０）アミノ、（２１）例えば、アセチルアミノ、プロピオニルアミノ等の炭素数１ないし６の低級アシルアミノ、（２２）例えば、メチルアミノ、エチルアミノ、ｎ−プロピルアミノ、イソプロピルアミノ、ｎ−ブチルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、シクロヘキシルアミノ、１−カルバモイル−２−シクロヘキシルエチルアミノ、Ｎ−ブチル−Ｎ−シクロヘキシルメチルアミノ、フェニルアミノ等の炭化水素基で置換された第１または第２アミノ（ここで、「炭化水素基」は、前記の「炭化水素基」と同じ意味を表わし、オキソ、アミノ、カルバモイル等で置換されていてもよい。）、（２３）例えば、ホルミル、アセチル等の炭素数１ないし４の低級アシル、（２４）ベンゾイル、（２５）（ａ）例えば、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｆ等のハロゲン、（ｂ）オキソ、ヒドロキシ等で置換されていてもよい、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ベンジル、シクロヘキシル、シクロヘキシルメチル、シクロヘキシルエチル等の炭化水素基（ここで、「炭化水素基」は前記の「炭化水素基」と同じ意味を表わす。）、（ｃ）例えば、ｏ−、ｍ−またはｐ−クロロフェノキシ、ｏ−、ｍ−またはｐ−ブロモフェノキシ等のハロゲノフェノキシ、および（ｄ）オキソ等から選ばれた１ないし４個の置換基を有していてもよい、例えば、２−または３−チエニル、２−または３−フリル、３−、４−または５−ピラゾリル、４−テトラヒドロピラニル、２−、４−または５−チアゾリル、３−、４−または５−イソチアゾリル、２−、４−または５−オキサゾリル、３−、４−または５−イソオキサゾリル、２−、４−または５−イミダゾリル、１，２，３−または１，２，４−トリアゾリル、１Ｈまたは２Ｈ−テトラゾリル、２−、３−または４−ピリジル、２−、４−または５−ピリミジル、３−または４−ピリダニジル、キノリル、イソキノリル、インドリル等の炭素原子以外に酸素原子、硫黄原子および窒素原子等から任意に選ばれるヘテロ原子を１ないし４個含む５または６員複素環基、および（２６）例えば、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、トリフルオロエチル、トリクロロエチル等の炭素数１ないし１０のハロアルキル基、（２７）ヒドロキシイミノ基、（２８）例えば、メチルオキシイミノ、エチルオキシイミノ等のアルキルオキシイミノ基、（２９）スルファモイル基、（３０）例えばメチルアミノスルホニル等の炭化水素基で置換されたアミノスルホニル、（３１）例えば、ジメチルアミノエチルアミノスルホニル、ジメチルアミノプロピルアミノスルホニル等のアミノ基で置換された炭化水素基によって置換されたアミノスルホニル、または（３２）例えばメチルスルホニルアミノ等の炭化水素基で置換されたスルホニルアミノ等が挙げられる。「置換基を有していてもよい炭化水素基」は、前記（１）から（３２）から選ばれる任意の１ないし５個の置換基を有していてもよいほか、「炭化水素基」がシクロアルキル、シクロアルケニル、アリールまたはアラルキル基である場合は、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル等の炭素数１ないし４の低級アルキルを置換基として１〜４個有していてもよい。また、置換基の数が２以上の場合、それぞれの置換基は同一または異なっていてもよい。
【００３５】
環Ａの置換基として好ましくは、オキソ基、置換されていてもよいベンジル基、置換されていてもよいシクロヘキシルメチル基またはメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓ−ブチル、ｔ−ブチル等の炭素数１ないし４のアルキル基が挙げられる。
【００３６】
環Ｂで示される「置換基を有していてもよい５または６員含窒素複素環」における「５または６員含窒素複素環」とは、少なくともひとつの窒素原子を含み、さらに窒素原子、酸素原子および硫黄原子から任意に選ばれる１〜３個のヘテロ原子を含んでいてもよい５または６員複素環を表わす。「５または６員含窒素複素環」としては、例えば、ピロール、イミダゾール、トリアゾール、テトラゾール、ピラゾール、ピリジン、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、オキサゾール、イソオキサゾール、チアゾール、イソチアゾール、フラザン、オキサジアゾール、オキサジン、オキサジアジンチアジアゾール、チアジン、チアジアジン、ピロリン、イミダゾリン、トリアゾリン、テトラゾリン、ピラゾリン、ジヒドロピリジン、テトラヒドロピリジン、ジヒドロピラジン、テトラヒドロピラジン、ジヒドロピリミジン、テトラヒドロピリミジン、ジヒドロピリダジン、テトラヒドロピリダジン、ジヒドロオキサゾール、ジヒドロイソオキサゾール、ジヒドロチアゾール、ジヒドロイソチアゾール、ジヒドロフラザン、ジヒドロオキサジアゾール、ジヒドロオキサジン、ジヒドロオキサジアジン、ジヒドロチアジアゾール、ジヒドロチアジン、ジヒドロチアジアジン、ピロリジン、イミダゾリン、トリアゾリジン、テトラゾリジン、ピラゾリジン、ピペリジン、ピペラジン、パーヒドロピリミジン、パーヒドロピリダジン、テトラヒドロオキサゾール、テトラヒドロイソオキサゾール、テトラヒドロチアゾール、テトラヒドロイソチアゾール、テトラヒドロフラザン、テトラヒドロオキサジアゾール、テトラヒドロオキサジン、テトラヒドロオキサジアジン、テトラヒドロチアジアゾール、テトラヒドロチアジン、テトラヒドロチアジアジン、モルホリン、チオモルホリン等が挙げられる。「５または６員含窒素複素環」として好ましくは、置換基を有していてもよいピラゾール等が挙げられる。さらに好ましくは、
【化１４】
2004359641.tif 000011
が挙げられる。
【００３７】
環Ｂおよび環Ｂ１で示される「置換基を有していてもよい５または６員含窒素複素環」における「置換基」としては、置換基を有していてもよい炭化水素基、例えば、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｆ等のハロゲン、または−ＯＲ１（式中、Ｒ１は前記と同じ意味を表わす。）等が挙げられる。環Ｂおよび環Ｂ１の置換基としての「置換基を有していてもよい炭化水素基」は前記環Ａにおける置換基としての「置換基を有していてもよい炭化水素基」と同じ意味を表わす。
【００３８】
環Ｂおよび環Ｂ１の置換基として好ましくは、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓ−ブチル、ｔ−ブチル等の炭素数１ないし４のアルキル基、Ｃｌ、−ＯＲ１が挙げられる。
【００３９】
Ｙで示される「主鎖の原子数１〜１０のスペーサー」とは、主鎖の原子が１〜１０個連なっている間隔を意味する。ここで、「主鎖の原子数」は、主鎖の原子が最小となるように数えるものとする。「主鎖の原子数１〜１０のスペーサー」としては、例えば、１または２個の置換基を有していてもよいメチレン基（−ＣＨ２−）、置換基を有していてもよいイミノ基（−ＮＨ−）、−ＣＯ−、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ２−から選ばれる１〜１０個からなる２価基等が挙げられる。ここで、メチレン基の置換基およびイミノ基の置換基としては、前記「置換基を有していてもよい炭化水素基」における「置換基」と同じ意味を表わす。具体的には、例えば、−ＣＲ５Ｒ６−、−ＮＲ７−、−ＣＯ−、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲ７ＣＯ−、−ＣＯＮＲ７−、−ＮＲ７ＣＯＣＲ５Ｒ６−、−ＣＯＮＲ７ＣＲ５Ｒ６−（式中、Ｒ５〜Ｒ７は前記「置換基を有していてもよい炭化水素基」における「置換基」と同じ意味を表わす。）等が挙げられる。
【００４０】
Ｙで示される「主鎖の原子数１〜１０のスペーサー」として好ましくは「主鎖の原子数１〜３のスペーサー」が挙げられ、さらに好ましくは「Ｃ１〜３アルキレン」が挙げられる。「Ｃ１〜３アルキレン」としては、メチレン、エチレン、プロピレン等が挙げられる。さらに、Ｙとして好ましくは、メチレンが挙げられる。
【００４１】
Ｗで示される「置換基を有していてもよい炭化水素基」における「炭化水素基」は、前記環Ａにおける置換基としての「置換基を有していてもよい炭化水素基」と同じ意味を表わす。好ましい「炭化水素基」としては、炭素数３〜８の環状炭化水素等が挙げられる。ここで「炭素数３〜８の環状炭化水素」は、前記と同じ意味を表わす。さらに好ましくは、シクロヘキサン、ベンゼン等が挙げられる。
【００４２】
Ｗで示される「置換基を有していてもよい複素環基」における「複素環」としては、例えば、「３〜１５員不飽和複素環」、「３〜１５員飽和複素環」等が挙げられる。
【００４３】
「３〜１５員不飽和複素環」としては、例えば、ピロール、イミダゾール、トリアゾール、テトラゾール、ピラゾール、ピリジン、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、アゼピン、ジアゼピン、フラン、ピラン、オキセピン、チオフェン、チオピラン、チエピン、オキサゾール、イソオキサゾール、チアゾール、イソチアゾール、フラザン、オキサジアゾール、オキサジン、オキサジアジン、オキサゼピン、オキサジアゼピン、チアジアゾール、チアジン、チアジアジン、チアゼピン、チアジアゼピン、インドール、イソインドール、インドリジン、ベンゾフラン、イソベンゾフラン、ベンゾチオフェン、イソベンゾチオフェン、ジチアナフタレン、インダゾール、キノリン、イソキノリン、キノリジン、プリン、フタラジン、プテリジン、ナフチリジン、キノキサリン、キナゾリン、シンノリン、ベンゾオキサゾール、ベンゾチアゾール、ベンゾイミダゾール、クロメン、ベンゾオキセピン、ベンゾオキサゼピン、ベンゾオキサジアゼピン、ベンゾチエピン、ベンゾチアゼピン、ベンゾチアジアゼピン、ベンゾアゼピン、ベンゾジアゼピン、ベンゾフラザン、ベンゾチアジアゾール、ベンゾトリアゾール、カルバゾール、β−カルボリン、アクリジン、フェナジン、ジベンゾフラン、キサンテン、ジベンゾチオフェン、フェノチアジン、フェノキサジン、フェノキサチイン、チアンスレン、フェナントリジン、フェナントロリン、ペリミジン、ピロリン、イミダゾリン、トリアゾリン、テトラゾリン、ピラゾリン、ジヒドロピリジン、テトラヒドロピリジン、ジヒドロピラジン、テトラヒドロピラジン、ジヒドロピリミジン、テトラヒドロピリミジン、ジヒドロピリダジン、テトラヒドロピリダジン、ジヒドロアゼピン、テトラヒドロアゼピン、ジヒドロジアゼピン、テトラヒドロジアゼピン、ジヒドロフラン、ジヒドロピラン、ジヒドロオキセピン、テトラヒドロオキセピン、ジヒドロチオフェン、ジヒドロチオピラン、ジヒドロチエピン、テトラヒドロチエピン、ジヒドロオキサゾール、ジヒドロイソオキサゾール、ジヒドロチアゾール、ジヒドロイソチアゾール、ジヒドロフラザン、ジヒドロオキサジアゾール、ジヒドロオキサジン、ジヒドロオキサジアジン、ジヒドロオキサゼピン、テトラヒドロオキサゼピン、ジヒドロオキサジアゼピン、テトラヒドロオキサジアゼピン、ジヒドロチアジアゾール、ジヒドロチアジン、ジヒドロチアジアジン、ジヒドロチアゼピン、テトラヒドロチアゼピン、ジヒドロチアジアゼピン、テトラヒドロチアジアゼピン、インドリン、イソインドリン、ジヒドロベンゾフラン、ジヒドロイソベンゾフラン、ジヒドロベンゾチオフェン、ジヒドロイソベンゾチオフェン、ジヒドロインダゾール、ジヒドロキノリン、テトラヒドロキノリン、ジヒドロイソキノリン、テトラヒドロイソキノリン、ジヒドロフタラジン、テトラヒドロフタラジン、ジヒドロナフチリジン、テトラヒドロナフチリジン、ジヒドロキノキサリン、テトラヒドロキノキサリン、ジヒドロキナゾリン、テトラヒドロキナゾリン、ジヒドロシンノリン、テトラヒドロシンノリン、ベンゾオキサチアン、ジヒドロベンゾオキサジン、ジヒドロベンゾチアジン、ピラジノモルホリン、ジヒドロベンゾオキサゾール、ジヒドロベンゾチ���ゾール、ジヒドロベンゾイミダゾール、ジヒドロベンゾアゼピン、テトラヒドロベンゾアゼピン、ジヒドロベンゾジアゼピン、テトラヒドロベンゾジアゼピン、ベンゾジオキセパン、ジヒドロベンゾオキサゼピン、テトラヒドロベンゾオキサゼピン、ジヒドロカルバゾール、テトラヒドロカルバゾール、ジヒドロアクリジン、テトラヒドロアクリジン、ジヒドロジベンゾフラン、ジヒドロジベンゾチオフェン、テトラヒドロジベンゾフラン、テトラヒドロジベンゾチオフェン、ジオキサインダン、ベンゾジオキサン、クロマン、ベンゾジチオラン、ベンゾジチアン環等が挙げられる。
【００４４】
また、「３〜１５員飽和複素環」としては、アジリジン、アゼチジン、アゾカン、ピロリジン、イミダゾリジン、トリアゾリジン、テトラゾリジン、ピラゾリジン、ピペリジン、ピペラジン、パーヒドロピリミジン、パーヒドロピリダジン、パーヒドロアゼピン、パーヒドロジアゼピン、オキシラン、オキセタン、テトラヒドロフラン、テトラヒドロピラン、パーヒドロオキセピン、チイラン、チエタン、テトラヒドロチオフェン、テトラヒドロチオピラン、パーヒドロチエピン、テトラヒドロオキサゾール（オキサゾリジン）、テトラヒドロイソオキサゾール（イソオキサゾリジン）、テトラヒドロチアゾール（チアゾリジン）、テトラヒドロイソチアゾール（イソチアゾリジン）、テトラヒドロフラザン、テトラヒドロオキサジアゾール（オキサジアゾリジン）、テトラヒドロオキサジン、テトラヒドロオキサジアジン、パーヒドロオキサゼピン、パーヒドロオキサジアゼピン、テトラヒドロチアジアゾール（チアジアゾリジン）、テトラヒドロチアジン、テトラヒドロチアジアジン、パーヒドロチアゼピン、パーヒドロチアジアゼピン、モルホリン、チオモルホリン、オキサチアン、パーヒドロベンゾフラン、パーヒドロイソベンゾフラン、パーヒドロベンゾチオフェン、パーヒドロイソベンゾチオフェン、パーヒドロインダゾール、パーヒドロキノリン、パーヒドロイソキノリン、パーヒドロフタラジン、パーヒドロナフチリジン、パーヒドロキノキサリン、パーヒドロキナゾリン、パーヒドロシンノリン、パーヒドロベンゾオキサゾール、パーヒドロベンゾチアゾール、パーヒドロベンゾイミダゾール、パーヒドロカルバゾール、パーヒドロアクリジン、パーヒドロジベンゾフラン、パーヒドロジベンゾチオフェン、ジオキソラン、ジオキサン、ジチオラン、ジチアン環等が挙げられる。
【００４５】
Ｗで示される「複素環」として好ましくは、「５〜１０員複素環」が挙げられる。具体的には、例えば、ピロール、イミダゾール、トリアゾール、テトラゾール、ピラゾール、ピリジン、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、アゼピン、ジアゼピン、フラン、ピラン、オキセピン、チオフェン、チオピラン、チエピン、オキサゾール、イソオキサゾール、チアゾール、イソチアゾール、フラザン、オキサジアゾール、オキサジン、オキサジアジン、オキサゼピン、オキサジアゼピン、チアジアゾール、チアジン、チアジアジン、チアゼピン、チアジアゼピン、インドール、イソインドール、インドリジン、ベンゾフラン、イソベンゾフラン、ベンゾチオフェン、イソベンゾチオフェン、ジチアナフタレン、インダゾール、キノリン、イソキノリン、キノリジン、プリン、フタラジン、プテリジン、ナフチリジン、キノキサリン、キナゾリン、シンノリン、ベンゾオキサゾール、ベンゾチアゾール、ベンゾイミダゾール、クロメン、ベンゾフラザン、ベンゾチアジアゾール、ベンゾトリアゾール、ピロリン、イミダゾリン、トリアゾリン、テトラゾリン、ピラゾリン、ジヒドロピリジン、テトラヒドロピリジン、ジヒドロピラジン、テトラヒドロピラジン、ジヒドロピリミジン、テトラヒドロピリミジン、ジヒドロピリダジン、テトラヒドロピリダジン、ジヒドロアゼピン、テトラヒドロアゼピン、ジヒドロジアゼピン、テトラヒドロジアゼピン、ジヒドロフラン、ジヒドロピラン、ジヒドロオキセピン、テトラヒドロオキセピン、ジヒドロチオフェン、ジヒドロチオピラン、ジヒドロチエピン、テトラヒドロチエピン、ジヒドロオキサゾール、ジヒドロイソオキサゾール、ジヒドロチアゾール、ジヒドロイソチアゾール、ジヒドロフラザン、ジヒドロオキサジアゾール、ジヒドロオキサジン、ジヒドロオキサジアジン、ジヒドロオキサゼピン、テトラヒドロオキサゼピン、ジヒドロオキサジアゼピン、テトラヒドロオキサジアゼピン、ジヒドロチアジアゾール、ジヒドロチアジン、ジヒドロチアジアジン、ジヒドロチアゼピン、テトラヒドロチアゼピン、ジヒドロチアジアゼピン、テトラヒドロチアジアゼピン、インドリン、イソインドリン、ジヒドロベンゾフラン、ジヒドロイソベンゾフラン、ジヒドロベンゾチオフェン、ジヒドロイソベンゾチオフェン、ジヒドロインダゾール、ジヒドロキノリン、テトラヒドロキノリン、ジヒドロイソキノリン、テトラヒドロイソキノリン、ジヒドロフタラジン、テトラヒドロフタラジン、ジヒドロナフチリジン、テトラヒドロナフチリジン、ジヒドロキノキサリン、テトラヒドロキノキサリン、ジヒドロキナゾリン、テトラヒドロキナゾリン、ジヒドロシンノリン、テトラヒドロシンノリン、ベンゾオキサチアン、ジヒドロベンゾオキサジン、ジヒドロベンゾチアジン、ピラジノモルホリン、ジヒドロベンゾオキサゾール、ジヒドロベンゾチアゾール、ジヒドロベンゾイミダゾール、ジオキサインダン、ベンゾジオキサン、クロマン、ベンゾジチオラン、ベンゾジチアン等の５〜１０員不飽和複素環、例えば、ピロリジン、イミダゾリジン、トリアゾリジン、テトラゾリジン、ピラゾリジン、ピペリジン、ピペラジン、パーヒドロピリミジン、パーヒドロピリダジン、パーヒドロアゼピン、パーヒドロジアゼピン、テトラヒドロフラン、テトラヒドロピラン、パーヒドロオキセピン、テトラヒドロチオフェン、テトラヒドロチオピラン、パーヒドロチエピン、テトラヒドロオキサゾール（オキサゾリジン）、テトラヒドロイソオキサゾール（イソオキサゾリジン）、テトラヒドロチアゾール（チアゾリジン）、テトラヒドロイソチアゾール（イソチアゾリジン）、テトラヒドロフラザン、テトラヒドロオキサジアゾール（オキサジアゾリジン）、テトラヒドロオキサジン、テトラヒドロオキサジアジン、パーヒドロオキサゼピン、パーヒドロオキサジアゼピン、テトラヒドロチアジアゾール（チアジアゾリジン）、テトラヒドロチアジン、テトラヒドロチアジアジン、パーヒドロチアゼピン、パーヒドロチアジアゼピン、モルホリン、チオモルホリン、オキサチアン、パーヒドロベンゾフラン、パーヒドロイソベンゾフラン、パーヒドロベンゾチオフェン、パーヒドロイソベンゾチオフェン、パーヒドロインダゾール、パーヒドロキノリン、パーヒドロイソキノリン、パーヒドロフタラジン、パーヒドロナフチリジン、パーヒドロキノキサリン、パーヒドロキナゾリン、パーヒドロシンノリン、パーヒドロベンゾオキサゾール、パーヒドロベンゾチアゾール、パーヒドロベンゾイミダゾール、ジオキソラン、ジオキサン、ジチオラン、ジチアン環等の５〜１０員飽和複素環等の５〜１０員複素環が挙げられる。
【００４６】
Ｗで示される「置換基を有していてもよい複素環基」の「置換基」は、Ｗで示される「置換基を有していてもよい炭化水素基」における「置換基」と同じ意味を表わす。さらに、Ｗで示される「置換基を有していてもよい複素環基」は「置換基を有していてもよい炭化水素基」を置換基として有していてもよい。ここで、「置換基を有していてもよい炭化水素基」は前記と同じ意味を表わす。
【００４７】
また、好ましい化合物の具体例としては、
化合物１：１−ブチル−８−［（３，５−ジメチル−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メチル］−１，３，８−トリアザスピロ［４．５］デカン−２，４−ジオン・塩酸塩、
化合物２：１−ベンジル−９−［（３，５−ジメチル−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メチル］−３−イソブチル−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン−２，５−ジオン・２塩酸塩、
化合物３：９−［（３，５−ジメチル−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メチル］−３−イソブチル−１−（３−メチルベンジル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン−２，５−ジオン・２塩酸塩、
化合物４：９−［（３，５−ジメチル−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メチル］−３−イソブチル−１−（２−メトキシベンジル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン−２，５−ジオン・２塩酸塩、
化合物５：９−［（３，５−ジメチル−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メチル］−３−イソブチル−１−（３−メトキシベンジル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン−２，５−ジオン・２塩酸塩、
【００４８】
化合物６：９−［（３，５−ジメチル−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メチル］−３−イソブチル−１−（２−メチルベンジル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン−２，５−ジオン・２塩酸塩、
化合物７：３−［（シクロヘキシルメトキシ）メチル］−９−［（３，５−ジメチル−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メチル］−１−プロピル−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン−２，５−ジオン・２塩酸塩、
化合物８：１−ブチル−９−［（３，５−ジメチル−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メチル］−３−（１−ヒドロキシ−２−メチルプロピル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン−２，５−ジオン・２塩酸塩、
化合物９：（３Ｒ）−１−ブチル−９−［（３，５−ジメチル−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メチル］−３−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−２−メチルプロピル］−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン−２，５−ジオン・２塩酸塩、
化合物１０：１−ブチル−９−｛［３，５−ジメチル−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］メチル｝−３−イソブチル−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン−２，５−ジオン・２塩酸塩、
【００４９】
化合物１１：１−ブチル−９−［（３，５−ジメチル−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メチル］−３−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン−２，５−ジオン・２塩酸塩、
化合物１２：１−ブチル−３−（２−シクロヘキシルエチル）−９−［（３，５−ジメチル−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メチル］−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン−２，５−ジオン・２塩酸塩、
化合物１３：（３Ｓ）−１−ブチル−９−［（５−クロロ−３−メチル−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メチル］−３−イソブチル−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン−２，５−ジオン・２塩酸塩、
化合物１４：Ｎ−［４−（４−｛［（３Ｓ）−１−ブチル−３−イソブチル−２，５−ジオキソ−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン−９−イル］メチル｝−３，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）フェニル］メタンスルホンアミド・２塩酸塩、
化合物１５：（３Ｓ）−１−ブチル−９−｛［１−（４−フルオロフェニル）−３，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］メチル｝−３−イソブチル−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン−２，５−ジオン・２塩酸塩、
【００５０】
化合物１６：（３Ｓ）−１−ブチル−９−｛［１−（４−ヒドロキシフェニル）−３，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］メチル｝−３−イソブチル−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン−２，５−ジオン・２塩酸塩、
化合物１７：（３Ｒ）−１−ブチル−９−｛［３，５−ジメチル−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］メチル｝−３−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−２−メチルプロピル］−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン−２，５−ジオン・２塩酸塩、
化合物１８：（３Ｓ）−１−ブチル−９−［（３，５−ジメチル−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メチル］−３−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシ−２−メチルプロピル］−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン−２，５−ジオン・２塩酸塩、
化合物１９：（３Ｓ）−９−［（１−シクロヘキシル−３，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メチル］−３−イソブチル−１−プロピル−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン−２，５−ジオン・２塩酸塩、
化合物２０：（３Ｓ）−９−［（１−シクロヘキシル−３，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メチル］−３−（シクロヘキシルメチル）−１−プロピル−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン−２，５−ジオン・２塩酸塩、
【００５１】
化合物２１：（３Ｒ）−１−ブチル−３−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−２−メチルプロピル］−９−｛［１−（４−ヒドロキシフェニル）−３，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］メチル｝−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン−２，５−ジオン・２塩酸塩、
化合物２２：Ｎ−｛４−［４−（｛（３Ｒ）−１−ブチル−３−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−２−メチルプロピル］−２，５−ジオキソ−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン−９−イル｝メチル）−３，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］フェニル｝メタンスルホンアミド・２塩酸塩、
化合物２３：Ｎ−［２−（ジメチルアミノ）エチル］−４−（４−｛［（３Ｓ）−３−イソブチル−２，５−ジオキソ−１−プロピル−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン−９−イル］メチル｝−３，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ベンゼンスルホンアミド・３塩酸塩、
化合物２４：メチル  ４−（４−｛［（３Ｓ）−１−ブチル−３−イソブチル−２，５−ジオキソ−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン−９−イル］メチル｝−３，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）安息香酸・２塩酸塩、
化合物２５：メチル  ４−（４−｛［（３Ｓ）−１−ブチル−３−（シクロヘキシルメチル）−２，５−ジオキソ−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン−９−イル］メチル｝−３，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）安息香酸・２塩酸塩、
【００５２】
化合物２６：４−（４−｛［（３Ｓ）−１−ブチル−３−イソブチル−２，５−ジオキソ−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン−９−イル］メチル｝−３，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−Ｎ−［３−（ジメチルアミノ）プロピル］ベンゼンスルホンアミド・３塩酸塩、
化合物２７：（３Ｒ）−９−［（１−シクロヘキシル−３，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メチル］−３−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−２−メチルプロピル］−１−プロピル−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン−２，５−ジオン・２塩酸塩、
化合物２８：（３Ｒ）−９−［（１−シクロヘキシル−３，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メチル］−３−［（Ｒ）−シクロヘキシル（ヒドロキシ）メチル］−１−プロピル−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン−２，５−ジオン・２塩酸塩、
化合物２９：９−［（３，５−ジメチル−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メチル］−３−イソブチル−１−プロピル−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン−２，５−ジオン、
化合物３０：１−ベンジル−９−［（３，５−ジメチル−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メチル］−３−イソブチル−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン−２，５−ジオン、
【００５３】
化合物３１：９−［（３，５−ジメチル−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メチル］−３−イソブチル−１−（３−メトキシベンジル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン−２，５−ジオン、
化合物３２：９−［（３，５−ジメチル−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メチル］−３−イソブチル−１−（ピリジン−２−イルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン−２，５−ジオン、
化合物３３：９−［（３，５−ジメチル−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メチル］−３−イソブチル−１−（ピリジン−３−イルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン−２，５−ジオン、
化合物３４：９−［（３，５−ジメチル−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メチル］−３−イソブチル−１−（２−メチルベンジル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン−２，５−ジオン、
化合物３５：９−［（３，５−ジメチル−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メチル］−３−イソブチル−１−（３−メチルベンジル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン−２，５−ジオン、
【００５４】
化合物３６：９−［（３，５−ジメチル−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メチル］−３−イソブチル−１−プロピル−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン−２，５−ジオン・２塩酸塩、
化合物３７：１−ブチル−９−［（３，５−ジメチル−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メチル］−３−イソブチル−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン−２，５−ジオン・２塩酸塩等が挙げられる。
【００５５】
本発明においては、特に指示しない限り異性体はこれをすべて包含する。例えば、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アルコキシ基、アルキルチオ基、アルキレン基、アルケニレン基、アルキニレン基には直鎖のものおよび分枝鎖のものが含まれる。さらに、二重結合、環、縮合環における異性体（Ｅ、Ｚ、シス、トランス体）、不斉炭素の存在等による異性体（Ｒ、Ｓ体、α、β配置、エナンチオマー、ジアステレオマー）、旋光性を有する光学活性体（Ｄ、Ｌ、ｄ、ｌ体）、クロマトグラフ分離による極性体（高極性体、低極性体）、平衡化合物、回転異性体、これらの任意の割合の混合物、ラセミ混合物は、すべて本発明に含まれる。
【００５６】
一般式（Ｉ）で示される化合物は、公知の方法で塩に変換される。塩としては薬理学的に許容される塩が好ましい。
薬理学的に許容される塩としては、アルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩、アンモニウム塩、アミン塩、酸付加塩等が挙げられる。
【００５７】
薬理学的に許容される塩は、水溶性のものが好ましい。適当な塩としては、アルカリ金属（カリウム、ナトリウム等）の塩、アルカリ土類金属（カルシウム、マグネシウム等）の塩、アンモニウム塩、薬学的に許容される有機アミン（テトラメチルアンモニウム、トリエチルアミン、メチルアミン、ジメチルアミン、シクロペンチルアミン、ベンジルアミン、フェネチルアミン、ピペリジン、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン、リジン、アルギニン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン等）の塩が挙げられる。
【００５８】
酸付加塩は水溶性であることが好ましい。適当な酸付加塩としては、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩のような無機酸塩、または酢酸塩、乳酸塩、酒石酸塩、安息香酸塩、クエン酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、トルエンスルホン酸塩、イセチオン酸塩、グルクロン酸塩、グルコン酸塩のような有機酸塩が挙げられる。
【００５９】
一般式（Ｉ）で示される化合物およびそれらの塩は溶媒和物に変換することもできる。
溶媒和物は非毒性かつ水溶性であることが好ましい。適当な溶媒和物としては、例えば水、アルコール系の溶媒（例えば、エタノール等）のような溶媒和物が挙げられる。
【００６０】
一般式（Ｉ）で示される化合物またはそれらの薬理学的に許容される塩はすべて好ましい。具体的には、実施例に記載した化合物またはそれらの薬理学的に許容される塩が挙げられる。
【００６１】
さらに塩には、四級アンモニウム塩も含まれる。四級アンモニウム塩とは、一般式（Ｉ）で示される化合物の窒素原子が、Ｒ０基によって四級化されたものを表わす。
Ｒ０基は、Ｃ１〜８アルキル基、フェニル基によって置換されたＣ１〜８アルキル基を表わす。
【００６２】
本発明化合物は任意の方法でＮ−オキシドにすることができる。Ｎ−オキシドとは、一般式（Ｉ）で示される化合物の窒素原子が、酸化されたものを表わす。
【００６３】
また、一般式（Ｉ）で示される化合物のプロドラッグは、生体内において酵素や胃酸等による反応により一般式（Ｉ）で示される化合物に変換する化合物をいう。一般式（Ｉ）で示される化合物のプロドラッグとしては、一般式（Ｉ）で示される化合物がアミノ基を有する場合、該アミノ基がアシル化、アルキル化、リン酸化された化合物（例えば、一般式（Ｉ）で示される化合物のアミノ基がエイコサノイル化、アラニル化、ペンチルアミノカルボニル化、（５−メチル−２−オキソ−１，３−ジオキソレン−４−イル）メトキシカルボニル化、テトラヒドロフラニル化、ピロリジルメチル化、ピバロイルオキシメチル化、アセトキシメチル化、ｔｅｒｔ−ブチル化された化合物等）；一般式（Ｉ）で示される化合物が水酸基を有する場合、該水酸基がアシル化、アルキル化、リン酸化、ホウ酸化された化合物（例えば、一般式（Ｉ）で示される化合物の水酸基がアセチル化、パルミトイル化、プロパノイル化、ピバロイル化、サクシニル化、フマリル化、アラニル化、ジメチルアミノメチルカルボニル化された化合物等）；一般式（Ｉ）で示される化合物がカルボキシ基を有する場合該カルボキシ基がエステル化、アミド化された化合物（例えば、一般式（Ｉ）で示される化合物のカルボキシ基がエチルエステル化、フェニルエステル化、カルボキシメチルエステル化、ジメチルアミノメチルエステル化、ピバロイルオキシメチルエステル化、エトキシカルボニルオキシエチルエステル化、フタリジルエステル化、（５−メチル−２−オキソ−１，３−ジオキソレン−４−イル）メチルエステル化、シクロヘキシルオキシカルボニルエチルエステル化、メチルアミド化された化合物等）；等が挙げられる。これらの化合物は自体公知の方法によって製造することができる。また、一般式（Ｉ）で示される化合物のプロドラッグは水和物および非水和物のいずれであってもよい。
【００６４】
【本発明化合物の製造方法】
一般式（Ｉ）で示される本発明化合物は、国際公開第０１／４０２２７号パンフレットまたは国際公開第０２／７４７７０号パンフレットに記載された方法、あるいはそれに準じた方法で製造することができる。
以下に化合物１の製造方法を記す。
【００６５】
化合物１（１−ブチル−８−［（３，５−ジメチル−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メチル］−１，３，８−トリアザスピロ［４．５］デカン−２，４−ジオン・塩酸塩）の製造方法：
Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−４−ピペリドンとブチルアミン・塩酸塩、およびシアン化カリウムを用いて、Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−４−シアノ−４−（１−ブチルアミノ）ピペリジン・塩酸塩を得た。さらに、シアン酸カリウムを用いて環化反応に付した後、脱保護反応によって１−ブチル−１，３，８−トリアザスピロ［４．５］デカン−２，４−ジオンを得た。得られた化合物と３，５−ジメチル−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボアルデヒドおよびトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウムを用いて還元的アミノ化反応に付し、以下の物性値を有する化合物１を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ  ０．５８（クロロホルム：メタノール＝１０：１）；
ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ  ７．５５  （ｍ，  ５Ｈ），  ４．３８  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．６９  （ｍ，  ２Ｈ），  ３．２１  （ｍ，  ４Ｈ），  ２．４７  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．４５  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．４１  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．０９  （ｍ，  ２Ｈ），  １．６２  （ｍ，  ２Ｈ），  １．３６  （ｍ，  ２Ｈ），  ０．９５  （ｔ，  Ｊ＝７．２  Ｈｚ，  ３Ｈ）。
化合物２〜３７の製造方法は、国際公開第０１／４０２２７号パンフレットまたは国際公開第０２／７４７７０号パンフレットに記載されている。
【００６６】
【毒性】
一般式（Ｉ）で示される化合物の毒性は非常に低いものであり、医薬として使用するために十分安全である。
【００６７】
【医薬品への適用】
哺乳動物、特にヒトにおいて、一般式（Ｉ）で示される本発明化合物は、ＣＣＲ５アゴニスト作用を有するので、例えば、喘息、腎炎、腎症、肝炎、関節炎、慢性関節リウマチ、鼻炎、結膜炎、潰瘍性大腸炎等、移植臓器拒絶反応、免疫抑制、乾癬、多発性硬化症、ヒト免疫不全ウィルス感染（後天性免疫不全症候群等）、アトピー性皮膚炎、蕁麻疹、アレルギー性気管支肺アスペルギルス症、アレルギー性好酸球性胃腸症、虚血再灌流傷害、急性呼吸窮迫症候群、細菌感染に伴うショック、糖尿病、癌転移等の予防および／または治療に有用である。
【００６８】
一般式（Ｉ）で示される化合物、またはそれらの塩、またはそれらのプロドラッグを上記の目的で用いるには、通常、全身的または局所的に、経口または非経口の形で投与される。
【００６９】
投与量は、年齢、体重、症状、治療効果、投与方法、処理時間等により異なるが、通常、成人一人あたり、１回につき、１ｍｇから１０００ｍｇの範囲で、１日１回から数回経口投与されるか、または成人一人あたり、１回につき、１ｍｇから１００ｍｇの範囲で、１日１回から数回非経口投与（好ましくは、静脈内投与）されるか、または１日１時間から２４時間の範囲で静脈内に持続投与される。
もちろん前記したように、投与量は、種々の条件によって変動するので、上記投与量より少ない量で十分な場合もあるし、また範囲を越えて必要な場合もある。
【００７０】
本発明化合物を投与する際には、経口投与のための内服用固形剤、内服用液剤および、非経口投与のための注射剤、外用剤、坐剤等として用いられる。
経口投与のための内服用固形剤には、錠剤、丸剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤等が含まれる。カプセル剤には、ハードカプセルおよびソフトカプセルが含まれる。
【００７１】
このような内服用固形剤においては、ひとつまたはそれ以上の活性物質はそのままか、または賦形剤（ラクトース、マンニトール、グルコース、微結晶セルロース、デンプン等）、結合剤（ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリドン、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム等）、崩壊剤（繊維素グリコール酸カルシウム等）、滑沢剤（ステアリン酸マグネシウム等）、安定剤、溶解補助剤（グルタミン酸、アスパラギン酸等）等と混合され、常法に従って製剤化して用いられる。また、必要によりコーティング剤（白糖、ゼラチン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート等）で被覆していてもよいし、また２以上の層で被覆していてもよい。さらにゼラチンのような吸収されうる物質のカプセルも包含される。
【００７２】
経口投与のための内服用液剤は、薬剤的に許容される水剤、懸濁剤、乳剤、シロップ剤、エリキシル剤等を含む。このような液剤においては、ひとつまたはそれ以上の活性物質が、一般的に用いられる希釈剤（精製水、エタノールまたはそれらの混液等）に溶解、懸濁または乳化される。さらにこの液剤は、湿潤剤、懸濁化剤、乳化剤、甘味剤、風味剤、芳香剤、保存剤、緩衝剤等を含有していてもよい。
【００７３】
非経口投与のための注射剤としては、溶液、懸濁液、乳濁液および用時溶剤に溶解または懸濁して用いる固形の注射剤を包含する。注射剤は、ひとつまたはそれ以上の活性物質を溶剤に溶解、懸濁または乳化させて用いられる。溶剤として、例えば、注射用蒸留水、生理食塩水、植物油、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、エタノールのようなアルコール類等およびそれらの組み合わせが用いられる。さらにこの注射剤は、安定剤、溶解補助剤（グルタミン酸、アスパラギン酸、ポリソルベート８０（登録商標）等）、懸濁化剤、乳化剤、無痛化剤、緩衝剤、保存剤等を含んでいてもよい。これらは最終工程において滅菌するか無菌操作法によって製造される。また無菌の固形剤、例えば凍結乾燥品を製造し、その使用前に無菌化または無菌の注射用蒸留水または他の溶剤に溶解して使用することもできる。
【００７４】
非経口投与のためのその他の製剤としては、ひとつまたはそれ以上の活性物質を含み、常法により処方される外用液剤、軟膏剤、塗布剤、吸入剤、スプレー剤、坐剤および膣内投与のためのペッサリー等が含まれる。
【００７５】
スプレー剤は、一般的に用いられる希釈剤以外に亜硫酸水素ナトリウムのような安定剤と等張性を与えるような緩衝剤、例えば、塩化ナトリウム、クエン酸ナトリウムあるいはクエン酸のような等張剤を含有していてもよい。スプレー剤の製造方法は、例えば米国特許第２，８６８，６９１号および同第３，０９５，３５５号に詳しく記載されている。
【００７６】
本発明の一般式（Ｉ）で表される化合物、またはそれらの塩は、他の薬剤、例えば、ＨＩＶ感染の予防および／または治療剤（特に、ＡＩＤＳの予防および／または治療剤）と組み合わせて用いてもよい。この場合、これらの薬物は、別々にあるいは同時に、薬理学的に許容されうる賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、安定剤、溶解補助剤、希釈剤等と混合して製剤化し、ＨＩＶ感染の予防および／または治療のための医薬組成物として経口的にまたは非経口的に投与することができる。
【００７７】
本発明の一般式（Ｉ）で表される化合物、またはそれらの塩は、他のＨＩＶ感染の予防および／または治療剤（特に、ＡＩＤＳの予防および／または治療剤）に対して耐性を獲得したＨＩＶ−１に対して感染阻害作用を有する。従って、他のＨＩＶ感染の予防および／または治療剤が効果を示さなくなったＨＩＶ感染者に対しても用いることができる。この場合、本発明化合物を単剤で用いても良いが、感染しているＨＩＶ−１株が耐性を獲得したＨＩＶ感染の予防および／または治療剤またはそれ以外の薬剤と併用して用いても良い。
【００７８】
本発明は一般式（Ｉ）で表わされる化合物、またはそれらの塩とＨＩＶ感染を阻害しない薬物を組み合わせてなり、単剤よりもＨＩＶ感染の予防および／または治療効果が増強されたものをも含む。
【００７９】
本発明の一般式（Ｉ）で表される化合物、またはそれらの塩と組み合わせて用いられる他のＨＩＶ感染の予防および／または治療剤の例としては、逆転写酵素阻害剤、プロテアーゼ阻害剤、ＣＣＲ結合剤（例えば、ケモカイン活性化剤、ケモカインレセプターの内因性のリガンドまたはその誘導体、ケモカインレセプターに対する抗体、ケモカイン拮抗剤（例えば、ＣＣＲ２拮抗剤、ＣＣＲ３拮抗剤、ＣＣＲ４拮抗剤、ＣＣＲ５拮抗剤、ＣＸＣＲ４拮抗剤等）等）、フュージョン阻害剤、ＨＩＶ−１の表面抗原に対する抗体、ＨＩＶ−１のワクチン等が挙げられる。
【００８０】
逆転写酵素阻害剤として、具体的には、（１）核酸系逆転写酵素阻害剤のジドブジン（商品名：レトロビル）、ジダノシン（商品名：ヴァイデックス）、ザルシタビン（商品名：ハイビッド）、スタブジン（商品名：ゼリット）、ラミブジン（商品名：エピビル）、アバカビル（商品名：ザイアジェン）、アデフォビル、アデフォビル  ジピボキシル、エントリシタビン（商品名：コビラシル）、ＰＭＰＡ（商品名：テノフォヴィル）等、（２）非核酸系逆転写酵素阻害剤のネビラピン（商品名：ビラミューン）、デラビルジン（商品名：レスクリプター）、エファビレンツ（商品名：サスティバ、ストックリン）、カプラヴィリン（ＡＧ１５４９）等が挙げられる。
【００８１】
プロテアーゼ阻害剤として、具体的には、インジナビル（商品名：クリキシバン）、リトナビル（商品名：ノービア）、ネルフィナビル（商品名：ビラセプト）、サキナビル（商品名：インビラーゼ、フォートベース）、アンプリナビル（商品名：エジネラーゼ）、ロピナビル（商品名：カレトラ）、ティプラナビル等が挙げられる。
【００８２】
ケモカインレセプターの内因性のリガンドとしては、具体的には、ＭＩＰ−１α、ＭＩＰ−１β、ＲＡＮＴＥＳ、ＳＤＦ−１α、ＳＤＦ−１β、ＭＣＰ−１、ＭＣＰ−２、ＭＣＰ−４、エオタキシン（Ｅｏｔａｘｉｎ）、ＭＤＣ等が挙げられる。
【００８３】
内因性リガンドの誘導体としては、具体的には、ＡＯＰ−ＲＡＮＴＥＳ、Ｍｅｔ−ＳＤＦ−１α、Ｍｅｔ−ＳＤＦ−１β等が挙げられる。
ケモカインレセプターの抗体としては、具体的には、Ｐｒｏ−１４０等が挙げられる。
【００８４】
ＣＣＲ２拮抗剤としては、具体的には、ＷＯ９９／０７３５１号、ＷＯ９９／４０９１３号、ＷＯ００／４６１９５号、ＷＯ００／４６１９６号、ＷＯ００／４６１９７号、ＷＯ００／４６１９８号、ＷＯ００／４６１９９号、ＷＯ００／６９４３２号、ＷＯ００／６９８１５号またはＢｉｏｏｒｇ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  Ｌｅｔｔ．，  １０，  １８０３  （２０００）に記載された化合物等が挙げられる。
【００８５】
ＣＣＲ３拮抗剤としては、具体的には、ＤＥ１９８３７３８６号、ＷＯ９９／５５３２４号、ＷＯ９９／５５３３０号、ＷＯ００／０４００３号、ＷＯ００／２７８００号、ＷＯ００／２７８３５号、ＷＯ００／２７８４３号、ＷＯ００／２９３７７号、ＷＯ００／３１０３２号、ＷＯ００／３１０３３号、ＷＯ００／３４２７８号、ＷＯ００／３５４４９号、ＷＯ００／３５４５１号、ＷＯ００／３５４５２号、ＷＯ００／３５４５３号、ＷＯ００／３５４５４号、ＷＯ００／３５８７６号、ＷＯ００／３５８７７号、ＷＯ００／４１６８５号、ＷＯ００／５１６０７号、ＷＯ００／５１６０８号、ＷＯ００／５１６０９号、ＷＯ００／５１６１０号、ＷＯ００／５３１７２号、ＷＯ００／５３６００号、ＷＯ００／５８３０５号、ＷＯ００／５９４９７号、ＷＯ００／５９４９８号、ＷＯ００／５９５０２号、ＷＯ００／５９５０３号、ＷＯ００／６２８１４号、ＷＯ００／７３３２７号またはＷＯ０１／０９０８８号に記載された化合物等が挙げられる。
【００８６】
ＣＣＲ４拮抗剤としては、具体的には、ＷＯ０２／０３０３５７号、ＷＯ０２／０３０３５８号に記載された等が挙げられる。
【００８７】
ＣＣＲ５拮抗剤としては、具体的には、ＴＡＫ−７７９、ＴＡＫ−２２０、ＳＣＨ−Ｄ、ＳＣＨ−Ｃ等が挙げられる。さらにＷＯ９９／１７７７３号、ＷＯ９９／３２１００号、ＷＯ００／０６０８５号、ＷＯ００／０６１４６号、ＷＯ００／１０９６５号、ＷＯ００／０６１５３号、ＷＯ００／２１９１６号、ＷＯ００／３７４５５号、ＥＰ１０１３２７６号、ＷＯ００／３８６８０号、ＷＯ００／３９１２５号、ＷＯ００／４０２３９号、ＷＯ００／４２０４５号、ＷＯ００／５３１７５号、ＷＯ００／４２８５２号、ＷＯ００／６６５５１号、ＷＯ００／６６５５８号、ＷＯ００／６６５５９号、ＷＯ００／６６１４１号、ＷＯ００／６８２０３号、ＪＰ２０００３０９５９８号、ＷＯ００／５１６０７号、ＷＯ００／５１６０８号、ＷＯ００／５１６０９号、ＷＯ００／５１６１０号、ＷＯ００／５６７２９号、ＷＯ００／５９４９７号、ＷＯ００／５９４９８号、ＷＯ００／５９５０２号、ＷＯ００／５９５０３号、ＷＯ００／７６９３３号、ＷＯ９８／２５６０５号、ＷＯ９９／０４７９４号、ＷＯ９９／３８５１４号またはＢｉｏｏｒｇ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  Ｌｅｔｔ．，  １０，  １８０３  （２０００）に記載された化合物等が挙げられる。
【００８８】
ＣＸＣＲ４拮抗剤としては、具体的には、ＡＭＤ−３１００、Ｔ−２２、ＫＲＨ−１１２０またはＷＯ００／６６１１２号に記載された化合物等が挙げられる。
【００８９】
フュージョン阻害剤としては、具体的には、Ｔ−２０（ｐｅｎｔａｆｕｓｉｄｅ）、Ｔ−１２４９等が挙げられる。
以上の併用薬剤は例示であって、本発明はこれらに限定されるものではない。
【００９０】
代表的な逆転写酵素阻害剤およびプロテアーゼ阻害剤の通常の臨床投与量は、例えば、以下に示すとおりであるが、本発明はこれらに限定されるものではない。
ジドブジン：１００ｍｇカプセル、１回２００ｍｇ、１日３回；
３００ｍｇ錠剤、１回３００ｍｇ、１日２回；
ジダノシン：２５〜２００ｍｇ錠剤、１回１２５〜２００ｍｇ、１日２回；
ザルシタビン：０．３７５ｍｇ〜０．７５ｍｇ錠剤、１回０．７５ｍｇ、１日３回；
スタブジン：１５〜４０ｍｇカプセル、１回３０〜４０ｍｇ、１日２回；
ラミブジン：１５０ｍｇ錠剤、１回１５０ｍｇ、１日２回；
アバカビル：３００ｍｇ錠剤、１回３００ｍｇ、１日２回；
ネビラピン：２００ｍｇ錠剤、１回２００ｍｇ、１４日間１日１回、その後１日２回；
デラビルジン：１００ｍｇ錠剤、１回４００ｍｇ、１日３回；
エファビレンツ：５０〜２００ｍｇカプセル、１回６００ｍｇ、１日１回；
インジナビル：２００〜４００カプセル、１回８００ｍｇ、１日３回；
リトナビル：１００ｍｇカプセル、１回６００ｍｇ、１日２回；
ネルフィナビル：２５０ｍｇ錠剤、１回７５０ｍｇ、１日３回；
サキナビル：２００ｍｇカプセル、１回１，２００ｍｇ、１日３回；
アンプレナビル：５０〜１５０ｍｇ錠剤、１回１，２００ｍｇ、１日２回。
【００９１】
【実施例】
一般式（Ｉ）で示される本発明化合物の効果は、以下の実験によって証明された。以下に実験方法を示すが、これに限定されるものではない。
【００９２】
［生物学的実施例］
ＣＣＲ５活性化剤がＣＣＲ５活性化作用を有することは、例えば、以下の実験で証明された。全体の操作は、基本的な遺伝子工学的手法に基づき、遺伝子高発現細胞を作製し、常法となっている方法を活用した。また、本発明の測定方法は、以下のように、本発明化合物を評価するために、測定精度の向上および／または測定感度の改良を加えたものである。以下に詳細な実験方法を示した。
【００９３】
実施例１：ＣＣＲ５アゴニストによる細胞内Ｃａ濃度の上昇
（１−１）ヒトＣＣＲ５発現細胞の樹立
＜１−１−Ａ＞ヒトＣＣＲ５遺伝子の単離
ヒト胎盤ｃＤＮＡは、Ｍａｒａｔｈｏｎ  ｃＤＮＡ  ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｋｉｔ（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ）を用いて作製した。ＰＣＲプライマーであるｈＣＣＲ５ＸｂａＩ−Ｆ１：５’−ＡＧＣＴＡＧＴＣＴＡＧＡＴＣＣＧＴＴＣＣＣＣＴＡＣＡＡＧＡＡＡＣＴＣＴＣＣ−３’（配列番号１）およびｈＣＣＲ５ＸｂａＩ−Ｒ１：５’−ＡＧＣＴＡＧＴＣＴＡＧＡＧＴＧＣＡＣＡＡＣＴＣＴＧＡＣＴＧＧＧＴＣＡＣＣＡ−３’（配列番号２）は、ＧｅｎＢａｎｋ  Ｕ５４９９４の配列に基き設計した。
ヒト胎盤ｃＤＮＡを鋳型として、Ｅｘ  Ｔａｑ（Ｔａｋａｒａ）を用いて、ＰＣＲ反応（９５℃で２分→［９５℃で３０秒、６０℃で４５秒、７２℃で１分］×３５回）を行なった。増幅したＰＣＲ産物を、１％アガロースゲル電気泳動後、ＱＩＡｑｕｉｃｋ  Ｇｅｌ  Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ  Ｋｉｔ（ＱＩＡＧＥＮ）を用いて精製し、制限酵素ＸｂａＩで切断した。切断した断片を、発現ベクターｐＥＦ−ＢＯＳ−ｂｓｒにＤＮＡ  Ｌｉｇａｔｉｏｎ  Ｋｉｔ  Ｖｅｒ．２（Ｔａｋａｒａ）を用いて連結し、大腸菌ＤＨ５αに形質転換した。このプラスミドｐＥＦ−ＢＯＳ−ｂｓｒ／ｈＣＣＲ５を調製し、ＤＮＡ配列を確認した。
【００９４】
＜１−１−Ｂ＞ＣＨＯ細胞の培養
ＣＨＯ−ｄｈｆｒ（−）は、Ｈａｍ’ｓ  Ｆ−１２（ウシ胎児血清（１０％）、ペニシリン（５０Ｕ／ｍｌ）、ストレプトマイシン（５０ｍｇ／ｍｌ）含有）を用いて炭酸ガスインキュベーター（温度：３７℃、ＣＯ２濃度：５％、湿度：９５％）内で培養した。また、形質導入した細胞は、上記にブラストサイジン（５μｇ／ｍｌ）を添加し、培養した。
【００９５】
＜１−１−Ｃ＞ＣＨＯ細胞への形質導入
ＤＭＲＩＥ−Ｃ  ｒｅａｇｅｎｔ（Ｇｉｂｃｏ  ＢＲＬ）を用いて、プラスミドｐＥＦ−ＢＯＳ−ｂｓｒ／ｈＣＣＲ５をＣＨＯ−ｄｈｆｒ（−）細胞に形質導入した。４８時間後、５μｇ／ｍｌのブラストサイジンを含む培地に交換して選択を行ない、安定過剰発現細胞を樹立した。
【００９６】
＜１−１−Ｄ＞ＣＣＲ５発現解析
前記＜１−１−Ｃ＞に記載の方法によって得られたクローンにおけるヒトＣＣＲ５発現強度を、細胞をフルオレセインイソチオシアネート（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎ  ｉｓｏｔｈｉｏｃｙａｎａｔｅ）（ＦＩＴＣ）標識抗ヒトＣＣＲ５抗体（ＢＤ  Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ）によって検出し、ＦＡＣＳｏｒｔ（登録商標、ベクトン・ディッキンソン社製）を用いて測定し、解析を行った。なお、アイソタイプコントロール抗体として、ＦＩＴＣ標識マウスＩｇＧ２ａκ（ＢＤ  Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ）を使用した。
【００９７】
（１−２）ＣＣＲ５アゴニストによる細胞内Ｃａ濃度上昇と、内因性リガンドによるＣＣＲ５アゴニスト作用の阻害
＜１−２−Ａ＞ＣＣＲ５アゴニストによる細胞内Ｃａ濃度の上昇
前記（１−１）で作製したヒトＣＣＲ５安定発現ＣＨＯ細胞を３．５×１０４ｃｅｌｌｓ／１００μｌ／ウェルで播種した。翌日、培地を８０μｌ／ウェルのアッセイバッファー（Ｆｕｒａ−２ＡＭ（５μＭ）、Ｐｒｏｂｅｎｅｃｉｄ（２．５ｍＭ）、ＨＥＰＥＳ（２０ｍＭ  ｐＨ７．４）含有Ｈａｍ’ｓ  Ｆ−１２）に置き換えて１時間３７℃で培養した後、１００μｌの洗浄バッファー（Ｈａｎｋｓ（９．８ｍｇ／ｍｌ）、ＨＥＰＥＳ（２０ｍＭ）、ｐｒｏｂｅｎｅｃｉｄｅ（２．５ｍＭ）含有）で２回洗い、更に１００μｌの洗浄バッファーを加え３０分室温静置した。化合物４、化合物６、化合物７、化合物２３、化合物３６（各々０．０１、０．０３、０．１、０．３、１、３、１０、３０μＭ）を加え、３分後にＭＩＰ−１α（３０μＭ）を添加し、４分後に細胞内Ｃａ濃度の上昇をモニターした。細胞内Ｃａ濃度はＦｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ  Ｄｒｕｇ  Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ  Ｓｙｓｔｅｍ４０００（浜松ホトニクス社製）を用いて、励起光３４０ｎｍ／３８０ｎｍのシグナル強度を測定した。試験化合物のアゴニスト活性は、化合物非添加時のＭＩＰ−１αのシグナル強度を１００％として次の式により算出した。
【数１】
2004359641.tif 000012
【００９８】
［結果］
化合物４、化合物６、化合物７、化合物２３、化合物３６の５化合物は１０μＭの濃度で、内因性リガンドであるＭＩＰ−１αと同様にアゴニスト活性を示した（表１）。
【表１】
2004359641.tif 000013
【００９９】
＜１−２−Ｂ＞内因性リガンドによるＣＣＲ５アゴニストの作用阻害
前記＜１−２−Ａ＞と同様にして、内因性リガンドによるＣＣＲ５アゴニストの作用阻害活性を調べた。ＣＣＲ５内因性リガンドであるＭＩＰ−１α（１０ｎＭ）を加え、３分後に各アゴニスト（１０μＭ）を添加し、４分後に細胞内Ｃａ濃度（シグナル強度）を測定した。
【０１００】
［結果］
化合物４、化合物６、化合物７、化合物２３、化合物３６の５化合物は単独でＣＣＲ５の細胞内Ｃａ濃度（シグナル強度）を上昇させたが、ＣＣＲ５の内因性リガンドであるＭＩＰ−１αを予め添加することによりＣＣＲ５の脱感作が起こり、本発明化合物による細胞内Ｃａ濃度（シグナル強度）の上昇はほぼ完全に抑制された（表２）。したがって、これらの化合物はＣＣＲ５を特異的に活性化することが示された。
【表２】
2004359641.tif 000014
【０１０１】
実施例２：ヒトＣＣＲ５発現細胞（ｈＣＣＲ５−Ｂａ／Ｆ３細胞）の遊走試験
（２−１）ヒトＣＣＲ５発現細胞の樹立
＜２−１−Ａ＞ヒトＣＣＲ５遺伝子の単離
前記＜１−１−Ａ＞ヒトＣＣＲ５遺伝子の単離に記載の方法によって行った。
【０１０２】
＜２−１−Ｂ＞Ｂａ／Ｆ３細胞の培養
Ｂａ／Ｆ３細胞は抗生剤（Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ−Ａｎｔｉｍｙｏｔｉｃ）（終濃度：ペニシリンＧナトリウム（１００Ｕ／ｍｌ）、硫酸ストレプトマイシン（１００μｇ／ｍｌ）、アンフォテリシンＢ（０．２５μｇ／ｍｌ））（Ｇｉｂｃｏ  ＢＲＬ）、ウシ胎児血清（ＦＢＳ）（１０％）、インターロイキン３（ＩＬ−３）（５ｎｇ／ｍｌ）（Ｐｅｐｒｏ  Ｔｅｃｈ、Ｉｎｃ）含有ＲＰＭＩ−１６４０培地（Ｇｉｂｃｏ  ＢＲＬ）を用い、炭酸ガスインキュベーター内（温度：３７℃、ＣＯ２濃度：５％、湿度：９５％）で静置培養した。外来遺伝子安定過剰発現細胞の培養には上記培地に終濃度１０μｇ／ｍｌになるようにブラストサイジン（Ｋａｋｅｎ  ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ）を添加した。
【０１０３】
＜２−１−Ｃ＞Ｂａ／Ｆ３細胞への形質導入
ヒトＣＣＲ５発現用プラスミド（ｐＥＦ−ＢＯＳ−ｂｓｒ／ｈＣＣＲ５）をＡａｔ  ＩＩで消化し、直鎖化した。直鎖化したプラスミドをＱＩＡ  ｑｕｉｃｋ  ＰＣＲ  Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ  Ｋｉｔ（ＱＩＡＧＥＮ）を用いて精製した後、エレクトロポレーション（Ｇｅｎｅ  Ｐｕｌｓｅｒ（ＢＩＯ  ＲＡＤ）９６０μＦ／２５０Ｖ）によりＢａ／Ｆ３細胞に導入した。細胞は９６ウェル培養プレートに１０００、１００、１０ｃｅｌｌｓ／１００μｌ／ウェルの密度で播種し、４８時間後、終濃度１０μｇ／ｍｌになるようにブラストサイジンを添加して、ブラストサイジン耐性株をクローニングし、導入した外来遺伝子を発現する安定過剰発現クローン（ｈＣＣＲ５−Ｂａ／Ｆ３細胞）を樹立した。
【０１０４】
＜２−１−Ｄ＞ＣＣＲ５発現解析
前記＜１−１−Ｄ＞に記載の方法によって行った。
【０１０５】
（２−２）細胞遊走試験
ＣＣＲ５アゴニストに対するヒトＣＣＲ５を発現したＢａ／Ｆ３細胞の遊走能を調べた。まず、２４穴トランスウェルプレートの下室に０．０１、０．０３、０．１、０．３、１μＭの試験化合物（０．５ｍｌ／ウェル）を加え、上室にｈＣＣＲ５−Ｂａ／Ｆ３細胞（１×１０５ｃｅｌｌｓ／０．０５ｍｌ／ウェル）を加えた。上室を下室に重ねることで試験を開始し、炭酸ガスインキュベーター（温度：３７℃、ＣＯ２濃度：５％、湿度：９５％）内で３時間インキュベーションした。また、これらの遊走細胞数を相対評価するために、最初に添加した細胞すべてが遊走した場合のスタンダードサンプル（１×１０５ｃｅｌｌｓ／０．５ｍｌ／ウェルのケモカイン含有培地）を調製し、これも同様にインキュベーションした。上室の外側下部を０．５ｍＬの洗浄バッファー（エチレンジアミン四酢酸ナトリウム（ＥＤＴＡ）（２ｍＭ）、ＦＢＳ（０．１％）含有リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ））を用いて下室に洗い込み、下室に遊走した細胞をＦＡＣＳチューブに回収した。スタンダードについても、０．５ｍｌの洗浄バッファーを加えた。スタンダードサンプルおよび下室の細胞数をＦＡＣＳｏｒｔ（登録商標、ベクトン・ディッキンソン社製）を用いて測定し、３０秒間のゲート（ＦＳＣ×ＳＳＣ）内の細胞数を計数した。
各濃度の試験化合物による遊走活性は、以下の式に従って算出し、結果はｎ＝２の平均値で示した。
【数２】
2004359641.tif 000015
【０１０６】
［結果］
０．０１、０．１、１、１０μＭの濃度で、化合物４は３３．１％、４８．９％、２３．４％、４．５％、化合物６は４．５％、２９．７％、２２．８％、７．４％、化合物７は０．１％、５．６％、３８．９％、２０．４％の細胞遊走活性を示した。これらの化合物による細胞遊走活性は、内因性リガンドと同様なベルシェイプ型の作用を示した。したがって、これらの化合物は内因性リガンドと同様にＣＣＲ５発現細胞を遊走させる作用を有することを確認した。
【０１０７】
実施例３：ＣＣＲ５受容体のインターナリゼーション試験
前記（１−１）に記載の方法によって調製したヒトＣＣＲ５発現ＣＨＯ細胞１×１０６ｃｅｌｌｓを１０μＭの試験化合物（０．５％ＦＢＳ含、０．１％ＤＭＳＯ含、Ｈａｍ’ｓ  Ｆ−１２（Ｇｉｂｃｏ  ＢＲＬ））、１００ｎＭ  ヒトＭＩＰ−１α（０．５％ＦＢＳ含、０．１％ＤＭＳＯ含、Ｈａｍ’ｓ  Ｆ−１２）または培地（０．５％ＦＢＳ含、０．１％ＤＭＳＯ含、Ｈａｍ’ｓ  Ｆ−１２）１００μｌに懸濁し、３７℃の恒温槽にて３０分間インキュベーションした。その後１ｍｌの氷冷したＰＢＳ（−）を加えて１４００ｒｐｍにて遠心し、上清を除去することによって細胞を洗浄した。洗浄は２回行った。細胞をＦＩＴＣ標識抗ｈｕｍａｎＣＣＲ５抗体（２Ｄ７）またはアイソタイプコントロール抗体１０μｌに懸濁して氷上にて３０分間静置した。１ｍｌの氷冷ＰＢＳを加え１４００ｒｐｍにて遠心して洗浄を行った後５００μＬのＰＢＳ（−）に再懸濁したのち、ＦＡＣＳｏｒｔ（登録商標、ベクトン・ディッキンソン社製）にてＦＩＴＣ（ＦＬ−１）の蛍光強度を測定した。蛍光強度（ｍｅａｎ値）から以下の式を用いて受容体残存率（％）を算出した。
【数３】
2004359641.tif 000016
【０１０８】
［結果］
化合物４、化合物６、化合物７を添加した群において細胞表面上のＣＣＲ５受容体残存率はそれぞれ４４．８％、５２．８％、５８．０％であり、内因性リガンドであるＭＩＰ−１α（５５．３％）と同等のＣＣＲ５インターナリゼーションを起こす能力を有した。
【０１０９】
実施例４：細胞内ｃＡＭＰ濃度の低下試験
前記（１−１）に記載の方法によって調製した２×１０５ｃｅｌｌｓのヒトＣＣＲ５発現ＣＨＯ細胞を１０％ＦＢＳ含Ｈａｍ’ｓ  Ｆ−１２  ２００μｌ／ウェルで９６ウェルプレートに播種し、一晩３７℃炭酸ガスインキュベーター内にて培養した。上清を捨て、細胞をＰＢＳ（−）２００μｌで２回洗浄してから１００μｌの０．５ｍＭ  ＩＢＭＸ（０．５％ＦＢＳ  含Ｈａｍ’ｓ  Ｆ−１２）を加えて３７℃にて３０分間インキュベーションした。その後４０ｍＭのフォルスコリンまたはアッセイバッファー（０．５％ＦＢＳ  Ｈａｍ’ｓ  Ｆ−１２）５０μｌと各試験化合物（１０、１００、１０００ｎＭ）または内因性リガンド（ヒトＭＩＰ−１α、ヒトＲＡＮＴＥＳ、ヒトＭＤＣ、各１００ｎＭ）を５０μｌ加えて、３７℃にて１５分間インキュベーションした。上清を捨て、ｃＡＭＰ  Ｅｎｚｙｍｅｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ  Ｂｉｏｔｒａｋ（ＥＩＡ）Ｓｙｓｔｅｍ（Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）  に附属のＬｙｓｉｓ  Ｂｕｆｆｅｒを２００μｌ加えて１０分間シェイカーで振とうさせた。この上清中のｃＡＭＰ濃度は、ｃＡＭＰ  Ｅｎｚｙｍｅｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ  Ｂｉｏｔｒａｋ（ＥＩＡ）Ｓｙｓｔｅｍを用いて測定した。詳しくは、サンプルとウサギ抗ｃＡＭＰ血清を混合してロバ抗ウサギＩｇコートプレートに撒きこみ、室温にて２時間静置した。ペルオキシダーゼ標識ｃＡＭＰを加えて室温で１時間静置した後、上清を廃棄してキット付属の洗浄バッファーにてウェルを洗浄した。酵素基質を加えて室温にて１時間静置した後、４５０ｎｍ（対照波長：６９０ｎｍ）の吸光度をマイクロプレートリーダー（ＳＰＥＣＴＲＡＭＡＸ−ＰＲＯ）によって測定した。
【０１１０】
［結果］
ＣＣＲ５アゴニストは、１０、１００、１０００ｎＭにおいて，試験化合物を添加してない群と比べて、１３．９％、６４．０％、７０．６％（化合物４の抑制率）、６．８％、５８．２％、６９．２％（化合物６の抑制率）、−３１．１％、１３．５％、７２．９％（化合物７の抑制率）、４３．２％、５０．２％、５４．０％（化合物１９の抑制率）、６．４％、４３．６％、７２．７％（化合物３６の抑制率）の抑制率を示した。また、ＣＣＲ５リガンドであるＭＩＰ−１αおよびＲＡＮＴＥＳは１００ｎＭでそれぞれ７９．０％、６９．３％の抑制率を示したが、ＣＣＲ４リガンドであるＭＤＣは抑制作用を示さなかった。したがって、これらの化合物はＣＣＲ５に特異的に作用して細胞内ｃＡＭＰ濃度を減少させることが示された。
【０１１１】
実施例５：ｍＲＮＡ発現誘導試験
（５−１）細胞調製
前記（２−１）ヒトＣＣＲ５発現細胞の樹立に記載の方法によって細胞を調製した。
【０１１２】
（５−２）ＲＮＡの調製
細胞を回収して、４ｍｌのＰＢＳで１回洗浄し、１７５μｌのＳＶ  ＲＮＡ  Ｌｙｓｉｓ  Ｂｕｆｆｅｒ（Ｐｒｏｍｅｇａ）で溶解した。ｔｏｔａｌ  ＲＮＡの精製にはＳＶ  ｔｏｔａｌ  ＲＮＡ  Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ  Ｓｙｓｔｅｍ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を用い、ＲＮＡの収量はＯＤ２６０ｎｍ測定によって算出した。
【０１１３】
（５−３）ｃＤＮＡの合成
ｃＤＮＡは１〜５μｇのｔｏｔａｌ  ＲＮＡを熱変性（６５℃、１０分間）させて、氷上で急冷した後、Ｆｉｒｓｔ−Ｓｔｒａｎｄ  ｃＤＮＡ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  Ｋｉｔ（Ａｍｅｒｓｈａｍ  −  Ｐｈａｒｍａｃｉａ  Ｂｉｏｔｅｃｈ）を用いて合成した。
【０１１４】
（５−４）ＲＴ−ＰＣＲ法によるｍＲＮＡ発現解析
前記（５−３）の方法により調製したｃＤＮＡをＲＴ−ＰＣＲ法によって解析した。
ｍＭＣＰ−１のＰＣＲプライマーであるｍＣＣＬ２ｓ：５’−ＣＴＣＴＴＣＣＴＣＣＡＣＣＡＣＣＡＴＧＣ−３’（配列番号３）およびｍＣＣＬ２ａ：５’−ＣＡＴＴＴＧＧＴＴＣＣＧＡＴＣＣＡＧＧＴＴ−３’（配列番号４）は、ＧｅｎＢａｎｋ  ＮＭ＿０１１３３３の配列に基づいて設計した。ｍＭＩＰ−１βのＰＣＲプライマーであるｍＣＣＬ４ｓ：５’−ＴＣＴＴＧＣＴＣＧＴＧＧＣＴＧＣＣＴ−３’（配列番号５）およびｍＣＣＬ４ａ：５’−ＴＧＡＧＡＡＧＣＡＴＣＡＧＧＧＣＴＧＡＧ−３’（配列番号６）は、ＧｅｎＢａｎｋ  ＮＭ＿０１３６５２の配列に基づいて設計した。β−ａｃｔｉｎのＰＣＲプライマーであるβ−ａｃｔｉｎ  Ｆ１：５’−ＧＣＡＴＴＧＴＴＡＣＣＡＡＣＴＧＧＧＡＣ−３’（配列番号７）およびβ−ａｃｔｉｎ  Ｒ１：５’−ＣＧＴＧＡＧＧＧＡＧＡＧＣＡＴＡＧＣＣＣ−３’（配列番号８）は、ＧｅｎＢａｎｋ  ＮＭ＿００７３９３の配列に基づいて設計した。
ｃＤＮＡを鋳型として、Ｅｘ  Ｔａｑ（Ｔａｋａｒａ）を用いて、ＰＣＲ反応（９５℃で２分→［９４℃で３０秒、６２℃で３０秒、７２℃で３０秒］×２８〜３４回）を行なった。増幅したＰＣＲ産物を、エチジウムブロマイド含有１．２％アガロースゲルで電気泳動後、ＵＶイルミネ−ター上で写真を撮影した。
【０１１５】
（５−５）内因性リガンドおよびＣＣＲ５アゴニストによるｍＲＮＡ発現誘導
ヒト末梢血由来単球をＲＡＮＴＥＳで刺激すると、刺激２時間後にＭＣＰ−１、ＭＩＰ−１βなどのｍＲＮＡ発現が誘導されることが報告されている（Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，  ２００２，  １６８，  ３５５７−６２）。そこで、化合物４、化合物６、化合物７の３化合物による、ｈＣＣＲ５−Ｂａ／Ｆ３細胞でのＭＣＰ−１、ＭＩＰ−１β、β−ａｃｔｉｎのｍＲＮＡ発現誘導能を解析した。また、これらのｍＲＮＡ発現誘導がヒトＣＣＲ５を介していることを確認するために、ネガティブコントロールとしてＢａ／Ｆ３親細胞を用いた。
詳しくは、ｈＣＣＲ５−Ｂａ／Ｆ３細胞（１×１０６ｃｅｌｌｓ／ｍｌ／ウェル）を１２穴培養プレートに播き、ヒトＲＡＮＴＥＳ、ヒトＭＩＰ−１α、ヒトＭＩＰ−１β（各々終濃度０．０１μＭ）、あるいは化合物４、化合物６、化合物７（各々終濃度０．０１、０．１、１、１０μＭ）を１ｍｌ加えて培養した。ネガティブコントロールのＢａ／Ｆ３親細胞（１×１０６ｃｅｌｌｓ／ｍｌ／ウェル）に対しては、ヒトＲＡＮＴＥＳ、ヒトＭＩＰ−１α、ヒトＭＩＰ−１β（各々終濃度０．０１μＭ）、あるいは化合物４、化合物６、化合物７（各々終濃度１０μＭ）１ｍｌを加えて培養した。刺激１時間後に細胞を回収して、ｔｏｔａｌ  ＲＮＡを調製し、ｍＲＮＡ発現を解析した。
【０１１６】
［結果］
化合物４、化合物６、化合物７の３化合物は、ヒトＣＣＲ５発現細胞においてＭＣＰ−１およびＭＩＰ−１βのｍＲＮＡ発現を誘導した。また、これらの３化合物のＢａ／Ｆ３親細胞に対するｍＲＮＡ発現誘導能についても調べた結果、いずれも無影響であった。したがって、これらのｍＲＮＡ発現誘導はヒトＣＣＲ５を介していることが確認された。
【０１１７】
製剤例１：
以下の各成分を常法により混合した後打錠して、一錠中に５０ｍｇの活性成分を含有する錠剤１００錠を得た。
・９−［（３，５−ジメチル−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メ
チル］−３−イソブチル−１−プロピル−１，４，９−トリアザスピロ［５．５
］ウンデカン−２，５−ジオン・２塩酸塩                ・・・・・・５．０ｇ
・カルボキシメチルセルロースカルシウム（崩壊剤）      ・・・・・・０．２ｇ
・ステアリン酸マグネシウム（潤滑剤）                  ・・・・・・０．１ｇ
・微結晶セルロース                                    ・・・・・・４．７ｇ
【０１１８】
製剤例２：
以下の各成分を常法により混合した後、溶液を常法により滅菌し、５ｍｌずつアンプルに充填し、常法により凍結乾燥し、１アンプル中２０ｍｇの活性成分を含有するアンプル１００本を得た。
・９−［（３，５−ジメチル−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メ
チル］−３−イソブチル−１−プロピル−１，４，９−トリアザスピロ［５．５
］ウンデカン−２，５−ジオン・２塩酸塩                ・・・・・・  ２．０ｇ
・マンニトール                                        ・・・・・・２０ｇ
・蒸留水                                          ・・・・・・５００ｍｌ
【０１１９】
【配列表】
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