(57)【要約】【課題】モリンダ・シトリフォリアの全葉粉末およびその抽出物を製造する方法を提供すること。【解決手段】モリンダ・シトリフォリア葉を湿式加圧加熱処理し、セルロース加水分解酵素により処理し、そして乾燥させることにより、モリンダ・シトリフォリア葉の粉末物を製造する。また、モリンダ・シトリフォリア葉を湿式加圧加熱処理し、セルロース加水分解酵素により処理し、そして濾過することにより、モリンダ・シトリフォリア葉の抽出物を製造する。【選択図】　　なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
モリンダ・シトリフォリア葉の粉末物を製造する方法であって、モリンダ・シトリフォリア葉を湿式加圧加熱処理し、セルロース加水分解酵素により処理し、そして乾燥させることを特徴とする方法。
【請求項２】
湿式加圧加熱処理を１３０〜１５０℃で１０〜３０分間行う、請求項１記載の方法。
【請求項３】
モリンダ・シトリフォリア葉の抽出物を製造する方法であって、モリンダ・シトリフォリア葉を湿式加圧加熱処理し、セルロース加水分解酵素により処理し、そして濾過することを特徴とする方法。
【請求項４】
セルロース加水分解酵素により処理した後、濾過する前に、試料を乾燥し、乾燥物に水を加える工程をさらに含む、請求項３記載の方法。
【請求項５】
抽出物を乾燥する工程をさらに含む、請求項３または４に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、モリンダ・シトリフォリアの全葉粉末およびその抽出物の新規な製造方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
モリンダ・シトリフォリア（和名ヤエヤマアオキ）は、世界各地の熱帯の海岸領域に自生する低木であり、常緑の，対生の（または擬似互生の），暗色の，光沢のある，波状の，葉脈の突起した葉を有する。この葉は、両末端がとがったやや楕円形であり，長さ１０−３０ｃｍ，幅５−１５ｃｍであり、硬く、ワックス成分に覆われている。この葉には、種々の薬用作用を示すアントラキノン類が豊富に含まれていることが見いだされているため、モリンダ・シトリフォリアの全葉粉末およびその抽出物は、各種の機能性食品の素材として有用であることが期待されている。
【０００３】
薬用または有用植物の葉の粉末化は臼等の機械的磨細法で粉末化する方法が一般的である。この方法では生葉や葉脈を含む全葉を粉末化することは不可能であるため、原料葉から葉脈を除去した後、乾燥させるなどの粉末化前処理が必要である。
【０００４】
また、薬用植物の葉から抽出物を製造するためには、細断した原料葉に５〜１０倍量の水を加え、９５℃前後で６０分間加熱する熱水抽出法や有機溶媒による抽出方法などが一般的に行われている。これらの抽出方法では細胞壁を破壊できないため、細胞間隙に存在する物質は抽出できても、細胞壁を含む細胞内に存在する成分を抽出することは非常に困難である。特に、モリンダ・シトリフォリア葉においては、種々の薬効を示すアントラキノン類が細胞間隙ばかりではなく細胞内にも存在するため、従来の抽出方法ではこれらの有効成分を効率的に回収することが困難である。
【０００５】
モリンダ・シトリフォリア葉から抽出物を得る方法としては、エタノール抽出法（Ｔｏｎａ　Ｌ．，ｅｔ　ａｌ．，Ｊ．Ｅｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ．，６８，１９３−２０３，１９９９，Ｓｉｔｔｉｅ　Ａ．Ａ．，ｅｔ　ａｌ．，Ｐｌａｎｔａ　Ｍｅｄ．，６５，２５９−２６１，１９９９，Ｋｏｕｍａｇｌｏ　Ｋ．ｅｔ　ａｌ．，Ｐｌａｎｔａ　Ｍｅｄ．，５８，５３３−５３４，１９９２）、メタノール法（Ｏｌｕｍａｙｏｋｕｎ　Ａ．，ｅｔ　ａｌ．，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．５１，１３２１−１３２４，１９９９，ＣｉｍａｎｇａＫ．，ｅｔ　ａｌ，Ｊ．Ｎａｔｕｒａｌ　Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，５８，３７２−３７８，１９９５）、および熱水法（Ｙｏｎｏｓ　Ｃ．，ｅｔ　ａｌ．，Ｐｌａｎｔａ　Ｍｅｄ．，５６，４３０−４３４，１９９０，Ｔｏｎａ　Ｌ．，ｅｔａｌ．，Ｊ．Ｅｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ　６１，５７−６５，１９９８）が報告されている。いずれの方法も抽出効率は１０〜１５％程度と低く、減圧による有機溶媒の除去や濃縮等にコストを要するという欠点がある。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
したがって、本発明は、モリンダ・シトリフォリアの全葉粉末および抽出物を製造する新規な方法を提供することを目的とする。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
本発明は、モリンダ・シトリフォリア葉を湿式加圧加熱処理し、セルロース加水分解酵素により処理し、そして乾燥させることにより、モリンダ・シトリフォリア葉の粉末物を製造する方法を提供する。好ましくは、湿式加圧加熱処理は１３０〜１５０℃で１０〜３０分間行う。
【０００８】
本発明はまた、モリンダ・シトリフォリア葉を湿式加圧加熱処理し、セルロース加水分解酵素により処理し、そして濾過することにより、モリンダ・シトリフォリア葉の抽出物を製造する方法を提供する。該方法は、セルロース加水分解酵素により処理する工程の後に、試料を乾燥し、そして乾燥物に水を加える工程をさらに含んでいてもよい、また、該方法は、得られた抽出物をさらに乾燥する工程を含んでいてもよい。
【０００９】
【発明の実施の形態】
モリンダ・シトリフォリア葉の粉末物を製造する本発明の方法の第１工程においては、モリンダ・シトリフォリア葉を湿式加圧加熱処理する。モリンダ・シトリフォリア葉は、生でもよく、乾燥させたものでもよい。湿式加圧加熱は、慣用のオートクレーブ装置等を用いて行うことができる。湿式加圧加熱処理は、好ましくは約１３０〜約１５０℃の範囲の温度、より好ましくは約１４０〜約１５０℃で行う。また、湿式加圧加熱処理は、好ましくは約１０〜約３０分間、より好ましくは約２０分間行う。このような湿式加圧加熱処理により、硬い葉脈を含む葉体を粥状化することができる。第２工程においては、湿式加圧加熱処理した材料をセルロース加水分解酵素により処理する。セルロース加水分解酵素としては、市販のセルロシンＨＣ１００（阪急バイオ社製）等を用いることができる。酵素処理は用いる酵素に適した条件下で行う。例えば、セルロシンＨＣ１００を用いる場合には、ｐＨ４−５で、３５−４５℃で１０−１６時間酵素反応を行わせることができる。このようなセルロース加水分解酵素処理により、葉体が液状化する。第３工程においては、酵素処理した材料を乾燥して、モリンダ・シトリフォリアの全葉の粉末物を得る。乾燥は、慣用の噴霧乾燥または凍結乾燥などにより行うことができる。
【００１０】
モリンダ・シトリフォリア葉の抽出物を製造する本発明の方法は、モリンダ・シトリフォリア葉を湿式加圧加熱処理する第１工程、セルロース加水分解酵素により処理する第２工程、および濾過する第３工程を含む。第１工程および第２工程は粉末物の製造について上述したとおりである。酵素処理した材料を濾過する第３工程は、慣用の濾過装置を用いて行うことができる。好ましくは濾過工程は珪藻土を用いて行う。本発明の方法の別の態様においては、セルロース加水分解酵素により処理した後に、試料を乾燥し、乾燥物に水を加え、これを濾過する。本発明の方法により得られた抽出物は、さらに乾燥してもよい。乾燥は、慣用の噴霧乾燥または凍結乾燥などにより行うことができる。
【００１１】
本発明の方法により得られる粉末モリンダ・シトリフォリア葉は、茶として、あるいは各種の機能性食品の素材として用いることができる。例えば、本発明の粉末物をティーバッグ等に使用する場合、機械式粉末化モリンダ・シトリフォリア葉に本法による粉末物を１／４〜１／５程度添加すればよい。
【００１２】
また、本発明の方法により得られるモリンダ・シトリフォリア葉の抽出物は、各種の機能性食品の材料として、あるいは化粧品や医薬品の原料として用いることができる。本発明の方法にしたがえば、アントラキノン類を含むポリフェノール等の有効成分を簡単かつ短時間で効率よく抽出することができる。
【００１３】
【実施例】
以下、実施例により本発明をさらに詳細に説明する。
実施例１：モリンダ・シトリフォリア葉の湿式加圧加熱処理
モリンダ・シトリフォリア葉を加熱により粥状化する条件を検討した。１００〜１５０℃までの各温度で２０分間処理したモリンダ・シトリフォリア葉に等量の脱イオン水を加え、塩酸でｐＨを４．５に調整した。これにモリンダ・シトリフォリア葉乾燥重量の１／１００量のセルロシンＨＣ１００を加えて、４５℃、１６時間撹拌しながら反応させた。反応終了後、９５℃、１０分間の加熱で酵素を失活させ、酵素消化度と官能評価の試験を行った。結果を表１に示す。
【００１４】
【表１】
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【００１５】
加熱時間と使用酵素量を同一に設定し、各温度で加熱処理した試料の酵素消化度を調べた。酵素消化度はサイズ２００μｍのメッシュの通過度により−〜＋＋＋までの４段階評価とした。殆ど通過しないものを−、通過度５０％以下を±、５０〜８０％を＋＋、８０％以上を＋＋＋とスコア化した。官能評価は舌の上でのざらつき感の度合いを＋＋＋〜−の４段階評価とした。強いざらつき感を＋＋＋、やや弱いざらつき感を＋＋、かすかなざらつき感を±、殆どまたは全くざらつき感のないものを−とした。
【００１６】
以上の検討により、モリンダ・シトリフォリア葉の酵素消化前処理の条件としては、１３０℃〜１５０℃、２０分間の湿式加圧加熱が最も良好な結果が得られた。
【００１７】
実施例２：全葉粉末の製造
２０ｋｇの冷凍モリンダ・シトリフォリア生葉（タヒチ産、モリンダインターナショナル社製）を湿式加圧加熱装置（東洋高圧社製）で１５０℃、２０分間保持した後、４０〜４５℃に冷却した。塩酸でｐＨを４．０に調整した２０ｋｇの脱イオン水（４５℃）を加え、ギアポンプ循環器で液を循環させながら、２０ｇのセルロシンＨＣ１００（阪急バイオ社製）を加えた。反応液の温度を４０〜４５℃に保持した状態で、循環させながら１０〜１６時間反応させた。反応終了後、液のｐＨを水酸化カリウムで６．０〜６．５に調整した後、９５℃、１０分間の加熱で酵素を失活させた。試料液をサイズ２００μｍのメッシュを通した後、噴霧乾燥した。この方法による粉末モリンダ・シトリフォリア葉の回収率は９０％以上で、色調は濃い緑色であった。
【００１８】
従来の機械式粉末化（臼式または凍結粉砕法）と本法による粉末化モリンダ・シトリフォリア葉１ｇをそれぞれ市販のティーバッグに入れ、１５０ｍｌの熱水（９０℃）を加えて１分間保持した。その間３回ティーバッグを上下にゆっくり振騰させ、ティーバッグを取り除いた。遠心分離にて微細な不溶物を除去した後、色調をＡ．４２０ｎｍの吸光度で、アントラキノン類を含むポリフェノールの抗酸化能をＤＰＰＨの還元活性で測定した。更に、味を官能検査によって評価した。本法と機械式粉末モリンダ・シトリフォリア葉を比較した結果を表２に示す。
【００１９】
【表２】
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【００２０】
冷凍生葉の代わりに乾燥葉を用いて、同じ工程により粉末を作成し、試験したところ、同様の結果が得られた。
【００２１】
実施例３：抽出物の製造
実施例２に記載されるように、モリンダ・シトリフォリア生葉を湿式加圧加熱処理し、セルロシンＨＣ１００を作用させた後、酵素を加熱失活させた。この液を６０℃以下に冷却した後、珪藻土をプレコーティングしたフィルタープレスで不溶物を除去して清澄化した。本法と従来法のエタノール抽出（５倍量の５０％エタノール溶液を加え、４０℃で１時間撹拌抽出）および熱水抽出（５倍量の蒸留水を加えて１時間加熱抽出）の抽出効率、アントラキノン類の回収率を調べた。アントラキノン類はＹｏｎｏｓら（ＹｏｎｏｓＣ．，ｅｔ　ａｌ．，ＰｌａｎｔａＭｅｄ．，５６，４３０−４３４，１９９０）のシリカゲル薄層クロマトグラフィー法により測定した。
【００２２】
【表３】
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抽出効率（％）は（抽出物重量／原料葉重量）×１００で算出した。その際、小数点以下は切り捨てた。アントラキノン類の含有量の測定はダンナカンタール（和光純薬社製）を標準品として用いた。薄層クロマトグラフィーによる測定：既知量の各抽出物を５０％（ｖ／ｖ）メタノールに溶解し、その１０μｌをスポットして展開層で展開した。展開溶媒はイソプロパノール：水：エチルエーテル：トルエン（５０：１２．５：２５：１０；ｖ／ｖ／ｖ／ｖ）で、展開後風乾させ、標準品と同じＲｆ値と色（黄色）のスポットを集め、５０％（ｖ／ｖ）メタノールで溶出した。波長４９５ｎｍの吸光度を測定し、標準物質から量を算出した。