(57)【要約】      （修正有）【課題】  対象における尿酸を削減するためのヒスチジンまたはその機能的等価物およびアラニンまたはその機能的等価物から成る有効量の１種類以上のジペプチドを含む組成物、および該組成物を対象に投与または適用するステップを含む、痛風の治療または高レベルの尿酸に関連した症状の改善のための方法を提供する。【解決手段】  自然発生し、または人工的に合成しうる、ヒスチジンまたはその機能的等価物およびアラニンまたはその機能的等価物から成る有効量の１種類以上のジペプチドを含む組成物を医薬品または栄養補助食品として錠剤、粉剤、顆粒剤、カプセル剤、液体、および懸濁液で調製し、連続的に、または同時に投与または適用する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒスチジンまたはその機能的等価物およびアラニンまたはその機能的等価物から成る有効量の１種類以上のジペプチドを含む対象における尿酸を削減するための組成物。
【請求項２】
ヒスチジンの機能的等価物がメチルヒスチジンまたはヒスタミンである、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
アラニンの機能的等価物がγ−アミノ酪酸である、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
１種類以上のジペプチドが、カルノシン、アンセリン、カルシニン、ホモカルノシン、およびオフィジンから選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
ジペプチドがカルノシンおよびアンセリンである、請求項４に記載の組成物。
【請求項６】
カルノシンおよびアンセリンがそれぞれ、ジペプチドの総量の約５〜３０％ｗ／ｗ、および約９５〜７０％ｗ／ｗ含む、請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
カルノシンおよびアンセリンがそれぞれ、ジペプチドの総量の約７％ｗ／ｗ、および約９０％ｗ／ｗ含む、請求項６に記載の組成物。
【請求項８】
経口または非経口の経路によって対象に投与または適用される、請求項１に記載の組成物。
【請求項９】
１日約８ｍｇ〜５０ｍｇの量の１種類以上のジペプチドを提供するように投与または適用される、請求項１に記載の組成物。
【請求項１０】
１日約１０ｍｇ〜４５ｍｇの量の１種類以上のジペプチドを提供するように投与または適用される、請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】
オリゴペプチド、遊離アミノ酸、カルニチン、および薬学的または生理学的に許容される賦形剤をさらに含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項１２】
尿酸排泄剤と併用し、同時に、または連続的に対象に投与または適用される、請求項１に記載の組成物。
【請求項１３】
尿酸排泄剤が、ベンズブロマロン、ブロべネシド、アロプリノール、ブコロム、シンコファン、およびコルヒチンから選択される、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１４】
痛風の治療、または筋痙攣、局在性腫脹、炎症、関節痛、筋疲労、ストレス感、および心筋梗塞から選択される高レベルの尿酸と関連した症状の改善のための医薬品として用いられる、請求項１に記載の組成物。
【請求項１５】
栄養補助食品として用いられる、請求項１に記載の組成物。
【請求項１６】
ヒスチジンまたはその機能的等価物およびアラニンまたはその機能的等価物から成る有効量の１種類以上のジペプチドを対象に投与または適用するステップを含む、それを必要とする対象における尿酸を削減するための方法。
【請求項１７】
ヒスチジンの機能的等価物がメチルヒスチジンまたはヒスタミンである、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
アラニンの機能的等価物がγ−アミノ酪酸である、請求項１６に記載の方法。
【請求項１９】
１種類以上のジペプチドが、カルノシン、アンセリン、カルシニン、ホモカルノシン、およびオフィジンから選択される、請求項１６に記載の方法。
【請求項２０】
ジペプチドがカルノシンおよびアンセリンである、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
カルノシンおよびアンセリンがそれぞれ、ジペプチドの総量の約５〜３０％ｗ／ｗ、および約９５〜７０％ｗ／ｗ含む、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
カルノシンおよびアンセリンがそれぞれ、ジペプチドの総量の約７％ｗ／ｗ、および約９０％ｗ／ｗ含む、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
経口または非経口の経路によって対象に投与または適用される、請求項１６に記載の方法。
【請求項２４】
１日約８ｍｇ〜５０ｍｇの量の１種類以上のジペプチドを提供するように投与または適用される、請求項１６に記載の方法。
【請求項２５】
１日約１０ｍｇ〜４５ｍｇの量の１種類以上のジペプチドを提供するように投与または適用される、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
請求項１または１５に記載の有効量の組成物を対象に投与または適用するステップを含む、請求項１６に記載の方法。
【請求項２７】
痛風の治療、または筋痙攣、局在性腫脹、炎症、関節痛、筋疲労、ストレス感、および心筋梗塞から選択される高レベルの尿酸と関連した症状の改善のために用いられる、請求項１６に記載の方法。
【請求項２８】
１種類以上のジペプチドが、尿酸排泄剤と併用し、同時に、または連続的に投与または適用される、請求項１６に記載の方法。
【請求項２９】
尿酸排泄剤が、ベンズブロマロン、ブロべネシド、アロプリノール、ブコロム、シンコファン、およびコルヒチンから選択される、請求項２８に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、対象における尿酸を削減するための組成物および方法に関する。特に、本発明の組成物は、ヒスチジンまたはその機能的等価物およびアラニンまたはその機能的等価物から成る１種類以上のジペプチドを含み、本発明の方法は、尿酸の削減を必要とする対象に上記のジペプチド（類）を投与または適用する方法を含む。
【背景技術】
【０００２】
最近、ジペプチド類が哺乳動物におけるその生理的機能に関して徹底的な研究の対象となっている。研究の大半はジペプチド類の抗酸化特性に重点が置かれている（非特許文献１；非特許文献２；非特許文献３；および非特許文献４）が、これらは直接的または間接的に抗癌活性（非特許文献５；および非特許文献６）、免疫強化（非特許文献７）、脂肪削減（非特許文献８）、創傷治癒の改善（非特許文献５）等に関係がある。カルノシンは、ヒスチジンおよびアラニンから成るジペプチドである。アンセリンは、筋内に存在し、アラニンとメチルヒスチジンとのペプチド結合によって結合されるジペプチドである。カルノシンおよびアンセリンは、２つのきわめて関連性の化合物であり、多くの研究者によって上記の活性および特性に関して指摘されている。さらに、カルノシンおよびアンセリンは、好中球の刺激を通じて細胞有糸分裂の速度を増大させ、ストレス下に筋組織のメカニズム修復を潜在的に強化する活性を有することも示されている（非特許文献９）。
【０００３】
これらの機能を考慮して、疲労軽減における最近の研究により、筋内乳酸の含量およびカルニチンホスホキナーゼのレベルを減少させ、筋のストレス耐性レベルを効率的に増大させうる海起源由来の高濃縮アンセリンの開発および商品化がもたらされた（非特許文献１０）。きわめて安定なジペプチドであるアンセリンおよびカルノシンは、低ｐＨ（＜３．０）下に引き続き完全であり続け、膵または他の消化器から分泌されるペプチダーゼおよびプロテアーゼによって消化に対して抵抗する。ジペプチド類は腸管膜の中を進み、完全な血流に侵入し、肝、腎、および心臓などターゲット器官に対して直接その機能を発揮することになる。アンセリンおよびカルノシンと同様の構造を有するカルシニン、ホモカルノシン、およびオフィジンなど他のジペプチド類は、自然発生し、または人工的に合成しうる。
【０００４】
高レベルの尿酸は、筋痙攣、局在性腫脹、炎症、関節痛、筋疲労、ストレス感、および心筋梗塞などの症状を有する痛風を誘発しうる。ベンズブロマロン（ＵＲＩＮＯＲＭ）、ブロべネシド、アロプリノール、ブコロム、シンコファン、およびコルヒチンなど、商品化されている多くの薬剤が痛風治療に用いられている。これらの薬剤は、尿酸の形成を抑止し、体内から余分な尿酸を除去し、腎に作用して身体が尿酸を除去するのを助け、キサンチンを尿酸へ変換するためのキサンチンオキシダーゼの活性を抑制し、体内からの尿酸の排泄を促進することによって作用する。しかし、これらの尿酸排泄剤は、尿結石、消化管閉塞、黄疸、および貧血など多くの副作用を同時に示す。したがって、痛風を治療するための多数の薬剤はあるが、尿酸のレベルを削減し、痛風を治療するとともに、痛風関連性症状を抑えるための新しい薬剤または栄養補助食品の必要が依然として存在する。
【非特許文献１】ボルディレフ（Ｂｏｌｄｙｒｅｖ）ＡＡ．ら著、Ｍｏｌ  Ｃｈｅｍ  Ｎｅｕｒｏｐａｔｈｏｌ  １９９３年５〜６月、１９（１〜２）：１８５〜１９２頁
【非特許文献２】ファング（Ｈｕａｎｇ）ＳＣとクオ（Ｋｕｏ）ＪＣ著、Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ｓｃｉ  Ｃｏｕｎｕｃ  Ｒｅｐｕｂ  Ｃｈｉｎａ  Ｂ．、２０００年１０月、２４（４）：１９３から２０１頁
【非特許文献３】キャンドリッシュ（Ｃａｎｄｌｉｓｈ）ＪＫとダス（Ｄａｓ）ＮＰ著、１９９６年９月、９（２〜３）：１１７〜１２３頁
【非特許文献４】マクファスナーレン（ＭａｃＦａｒｌａｎｅ）Ｎ著、Ｊ  Ｍｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｃａｒｄｉｏｌ．、１９９１年１１月、２３（１１）：１２０５〜１２０７頁
【非特許文献５】ナガイ（Ｎａｇａｉ）Ｋとスダ（Ｓｕｄａ）Ｔ著、１９８８年８月、１０（８）：４９７〜５０７頁
【非特許文献６】ホリデイ（Ｈｏｌｌｉｄａｙ）Ｒとマクファーランド（ＭｃＦａｒｌａｎｄ）ＧＡ著、Ｂｒ  Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ、１９９６年４月、７３（８）：９６６〜９７１頁
【非特許文献７】ボルディレフ（Ｂｏｌｄｙｒｅｖ）ＡＡ．とセバリアン（Ｓｅｖｅｒｉｎ）ＳＥ著、Ａｄｖ  Ｅｎｚｙｍｅ  Ｒｅｇｕａｌ、１９９０年、３０：１７５〜１９４頁
【非特許文献８】チャン（Ｃｈａｎ）ＷＫら著、１９９４年７月、２９（７）：４６１〜４６６頁
【非特許文献９】タン（Ｔａｎ）ＫＭとキャンディッシュ（Ｃａｎｄｌｉｓｈ）ＪＫ、１９９８年８月、２０（４）：２３９〜２４４頁
【非特許文献１０】カズオ・サカイ（Ｋａｚｕｏ  Ｓａｋａｉ）ら著、”Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ  Ｒｅｆｉｎｉｎｇ  ａｎｄ  Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ｆｏｒ  Ｄｉｐｅｐｔｉｄｅｓ，  Ａｎｓｅｒｉｎ  ａｎｄ  Ｃａｒｎｏｓｉｎｅ，  ｆｒｏｍ  Ｆｉｓｈ  Ｂｏｉｌｉｎｇ  Ｊｕｉｃｅ  ａｎｄ  Ｔｈｅｉｒ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｐｒｏｐｅｒｔｙ（魚煮沸汁からのジペプチド類、アンセリンおよびカルノシンの工業的精製および分離の開発、およびそれらの機能的特性）”、焼津水産化学工業株式会社
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明の１つの目的は、ヒスチジンまたはその機能的等価物およびアラニンまたはその機能的等価物から成る有効量の１種類以上のジペプチドを含む対象の尿酸を削減するための組成物を提供することである。本発明の組成物は、痛風および関連性症状の治療、または高レベルの尿酸に関連した症状の改善において使用するための医薬品として、または栄養補助食品として用いることができる。
【０００６】
本発明の別の目的は、本発明の有効量の１種類以上のジペプチドを対象に投与または適用するステップを含む、それを必要とする対象における尿酸を削減するための方法を提供することである。本発明の方法は、痛風の治療、または筋痙攣、局在性腫脹、炎症、関節痛、筋疲労、ストレス感、および心筋梗塞など高レベルの尿酸と関連した症状の改善において有用である。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明は、対象における尿酸を削減するためのヒスチジンまたはその機能的等価物およびアラニンまたはその機能的等価物から成るジペプチドの新規な用途に関する。第１の態様において、本発明は、対象における尿酸を削減するためのヒスチジンまたはその機能的等価物およびアラニンまたはその機能的等価物から成る有効量の１種類以上のジペプチドを含む組成物を提供する。
【０００８】
アラニンおよびヒスチジンの化学構造は以下のように示される：
【化１】
2004359663.tif 000002
【０００９】
本願明細書で用いられる本発明による「有効量」のジペプチドなる用語は、対象における尿酸の実質的な削減をもたらす対象に適用されるジペプチドの量を指す。本願明細書で用いられる「ジペプチド」なる用語は、２つのアミノ酸分子またはペプチド結合によって結合されるそれらの機能的等価物から成るペプチドを指す。アミノ酸の「機能的等価物」なる用語は、アミノ酸（例えば、１種類以上の置換基によって置換されたアミノ酸）から改変され、未改変アミノ酸と実質的に同等の機能を有する化合物を指す。本発明の１つの実施形態では、ヒスチジンの機能的等価物はメチルヒスチジンまたはヒスタミンであり、アラニンの機能的等価物はγ−アミノ酪酸である。本発明のジペプチドは、自然発生し、または人工的に合成しうる。本発明における使用のためのジペプチドの例としては、市販されているカルノシン（β−アラニル−Ｌ−ヒスチジン）、アンセリン（β−アラニル−１−メチル−Ｌ−ヒスチジン）、カルシニン（β−アラニルヒスタミン）、ホモカルノシン（γ−アミノブチリル−Ｌ−ヒスチジン）、オフィジン（β−アラニル−Ｌ−３−メチルヒスチジン）が挙げられるが、これらに限定されない。
【００１０】
本発明の組成物は、本発明による２種類以上のジペプチドを含むことが好ましい。本発明の組成物は、カルノシンおよびアンセリンを含むことがより好ましい。カルノシンおよびアンセリンはそれぞれ、ジペプチドの総量の約５〜３０％ｗ／ｗおよび約９５〜７０％ｗ／ｗ含みうる。本発明の組成物は、ジペプチドの総量に基づき、約７％ｗ／ｗのカルノシンおよび約９０％ｗ／ｗのアンセリン含むことが好ましい。  
【００１１】
本発明の組成物は、オリゴペプチド類、遊離アミン酸類、および薬学的または生理学的に許容される賦形剤をさらに含みうる。適切な薬学的に許容される賦形剤は、デキシトリン、乳糖、でんぷん、タルク、ステアリン酸、酒石酸、アルコール、グリセリン、植物油、または蝋類を含むが、これらに限定されない。
【００１２】
医薬品として用いられるために、本発明の組成物は、（異なる投与経路による使用のために）適切な薬学的に許容される賦形剤による従来の方法によって、適切な薬学的剤形、例えば、錠剤、粉剤、顆粒剤、カプセル剤、液体、および懸濁液で調製することができる。
【００１３】
医薬品として、本発明の組成物は、経口または非経口の経路など、任意の適切な経路を通じて投与しうる。組成物の投与量は、ジペプチドの種類、投与経路、および治療される対象の状態によって変動し、これは熟練医師によって容易に決定されうる。例えば、経口投与では、本発明の組成物は、毎日約８ｍｇ〜約５０ｍｇ、好ましくは約１０ｍｇ〜約４５ｍｇの量のジペプチドを提供するように投与される。  
【００１４】
本発明の組成物は、医薬品として用いられる場合、哺乳動物、好ましくは、ヒトなどの対象における尿酸の削減において有用である。特に、本発明の組成物は、痛風に罹患した対象における尿酸のレベルのコントロール、および筋痙攣、局在性腫脹、炎症、関節痛、筋疲労、ストレス感、および心筋梗塞など高レベルの尿酸と関連した症状の改善において有用である。  
【００１５】
栄養補助食品として用いられるために、本発明の組成物は、従来の方法によって、錠剤、粉剤、顆粒剤、カプセル剤、液体、および懸濁液など、経口適用に適切な形で調製することができる。栄養補助食品の適用量は、ジペプチドの種類および栄養補助食品が適用される対象の状態によって変動する。本発明の栄養補助食品は、毎日約８ｍｇ〜約５０ｍｇ、好ましくは約１０ｍｇ〜約４５ｍｇの量のジペプチドを提供するように適用されることが好ましい。  
【００１６】
ベンズブロマロン（ＵＲＩＮＯＲＭ）、ブロべネシド、アロプリノール、ブコロム、シンコファン、およびコルヒチンなど、痛風の治療用に周知の多くの尿酸排泄剤が市販されている。本発明の組成物は、尿酸を削減するための上記の１種類以上の尿酸排泄剤と併用して用いることができる。併用使用が望ましい場合、本発明の組成物および１種類以上の尿酸排泄剤は、連続的に、または同時に投与または適用することができる。例えば、本発明の組成物は、単一剤形で１種類以上の尿酸排泄剤をさらに含みうる。あるいは、本発明の組成物および１種類以上の尿酸排泄剤は、別々の剤形として調製することができ、同時に、または連続的に対象に投与または適用することができる。  
【００１７】
別の態様において、本発明は、ヒスチジンまたはその機能的等価物およびアラニンまたはその機能的等価物から成る有効量の１種類以上のジペプチドを対象に投与または適用するステップを含む、それを必要とする対象における尿酸を削減するための方法を提供する。本発明の方法は、本発明による組成物を対象に投与または適用するステップを含むことが好ましい。
【発明の効果】
【００１８】
特に、本発明の方法は、痛風の治療、および筋痙攣、局在性腫脹、炎症、関節痛、筋疲労、ストレス感、および心筋梗塞など高レベルの尿酸と関連した症状の改善において有用である。本願明細書で用いられる「有効量」、「ジペプチド」、および「機能的等価物」なる用語の定義は上記の通りである。適切な比率の本発明による２種類以上のジペプチドが尿酸の削減を必要とする対象に投与されることが好ましい。２種類のジペプチドの総量に基づき、約５〜３０％ｗ／ｗのカルノシン、および約９５〜７０％ｗ／ｗのアンセリンが投与されることがより好ましく、約７％ｗ／ｗのカルノシン、および９０％ｗ／ｗのアンセリンが投与されることが最も好ましい。  
【００１９】
本発明のジペプチドは、経口または非経口の経路など、任意の適切な経路によって対象に投与または適用することができる。異常レベルの尿酸を有する対象を治療するための１種類以上のジペプチドの有効量は、ジペプチドの種類、投与および適用経路、および治療される対象の状態によって変動し、これは熟練医師によって容易に決定されうる。例えば、経口投与または適用では、ジペプチドは毎日約８ｍｇ〜約５０ｍｇ、好ましくは約１０ｍｇ〜約４５ｍｇの量で投与することができる。  
【００２０】
本発明の１つの実施形態では、本発明のジペプチドは、ベンズブロマロン（ＵＲＩＮＯＲＭ）、ブロべネシド、アロプリノール、ブコロム、シンコファン、およびコルヒチンなどの１種類以上の従来の尿酸排泄剤と併用して投与または適用される。併用投与または適用が望ましい場合、本発明のジペプチドおよび１種類以上の尿酸排泄剤は、連続的に、または同時に投与または適用することができる。例えば、本発明のジペプチドは、単一剤形で１種類以上の尿酸排泄剤で調製することができる。あるいは、本発明のジペプチドおよび１種類以上の尿酸排泄剤は、別々の剤形として調製することができ、同時に、または連続的に対象に投与または適用することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２１】
本発明は、以下の実施例を参照することで明らかとなる。以下に記載される実施例は、例示のみを目的に示されており、本発明に対する制限は意図されていない。
【実施例１】
【００２２】
５％ｗ／ｗのジペプチド混合物（９０．９％のアンセリンおよび７．３％のカルノシン）、魚タンパク質の酵素消化から開発された１５％ｗ／ｗのオリゴペプチド、１０％ｗ／ｗの遊離アミノ酸、および７０％ｗ／ｗのデキシトリンを含有する商品名が「マリーン・アクティブ（Ｍａｒｉｎｅ  Ａｃｔｉｖｅ）」（焼津水産化学工業株式会社（静岡県焼津市））のアンセリン粉剤をそれぞれ２５０ｍｇでゼラチンカプセルに充填した。高レベルの血清尿酸を有する痛風患者が、２４時間の間の毎食前に１カプセル服用した。迅速血清尿酸試験ストリップであるウロスピード（ＵｒｏＳｐｅｅｄ）（アペックス・バイオテクノロジー株式会社（Ａｐｅｘ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｃｏ．，Ｉｎｃ．）、台湾（ＲＯＣ）、新竹市（Ｈｓｉｎｃｈｕ））によって血清尿酸レベルをモニタリングした。結果は表１に示されている。  
【００２３】
【表１】
2004359663.tif 000003
【００２４】
表１に示されているように、患者の血清尿酸レベルは、マリーン・アクティブ服用後に大幅に減少した。具体的には、朝８時３０分にマリーン・アクティブ２５０ｍｇの服用後、患者の腫脹足首から生じる疼痛が消失した。しかし、患者が２日目にマリーン・アクティブの服用を中止したところ、患者の血清尿酸レベルは、１０．１ｍｇ／ｄｌの高さのレベルに戻った。運良く、痛風症状が再開することはなく、もう３週間、同じままであった。患者は、第３週の最後に発端の症状の別の開始を感じ、マリーン・アクティブ２５０ｍｇカプセルの服用を開始した。４時間後、症状は再び消失した。
【実施例２】
【００２５】
慢性高血清尿酸含量（＞７．５ｐｐｍ）を有する患者８例（それぞれ、「ＸＬ」、「ＣＨ」、「ＨＴ」、「ＨＨ」、「ＬＨ」、「ＣＰ」、「ＣＤ」、および「ＣＣ」の記号で表示）が、少なくとも３日間、通常の薬物療法が中止され、平均血清尿酸レベルが８．５ｍｇ／ｄｌ異常に上昇した。マリーン・アクティブ１カプセル２５０ｍｇが毎食前に服用され、患者の血清尿酸レベルが平均で７．５ｍｇ／ｄｌに低下した。さらに、疼痛、ひりひり感、炎症、筋疲労、およびストレス感など、患者の痛風と関連した症状も大幅に減少した。これはまったく予想外であり、異常に思われる。詳しい結果は表２に示されている。
【００２６】
【表２】
2004359663.tif 000004