(57)【要約】【課題】　コンタクトレンズに付着したタンパク質汚れのみを、短時間に、簡便且つ安価に検出する方法を、提供すること。【解決手段】　装用後のコンタクトレンズを、ブロモクロロフェノールブルー又はテトラブロモフェノールブルーを含有する発色試薬溶液と、ｐＨが３以下の酸性溶液に、順次、浸漬せしめることにより、該コンタクトレンズに付着したタンパク質成分のみを発色させた状態において、コンタクトレンズに付着したタンパク質汚れの検出を行なうようにした。【選択図】　　　　　なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
　装用後のコンタクトレンズを、ブロモクロロフェノールブルー又はテトラブロモフェノールブルーを含有する発色試薬溶液に接触させた後、かかるコンタクトレンズを、ｐＨが３以下の溶液に接触せしめることにより、該コンタクトレンズに付着したタンパク質成分を発色させた状態において、コンタクトレンズに付着したタンパク質成分の検出を行なうことを特徴とするコンタクトレンズにおけるタンパク質汚れの検出方法。
【請求項２】
　前記発色試薬溶液中の発色試薬濃度が、１００〜５００ｐｐｍである請求項１に記載のコンタクトレンズにおけるタンパク質汚れの検出方法。
【請求項３】
　前記コンタクトレンズに付着したタンパク質成分の検出が、比色分析法、分光分析法、又はそれらの分析法を組み合わせた分析法にて、行なわれる請求項１又は請求項２に記載のコンタクトレンズにおけるタンパク質汚れの検出方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
　本発明は、コンタクトレンズにおけるタンパク質汚れの検出方法に係り、特に、コンタクトレンズに付着したタンパク質成分を短時間に且つ簡便に検出するための方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
　近年においては、目的とする特性を付与すべく、各種材質のコンタクトレンズが提案されてきているのであるが、特に、原料として、イオン性基を有するモノマー成分を用いて得られる、イオン性の重合体材料からなるコンタクトレンズにあっては、涙液中に含まれるタンパク質が、付着し易くなっている。かかるタンパク質は、コンタクトレンズの表面や内部に徐々に固着、蓄積されると、その除去が難しい傾向にあり、また、そのようなタンパク質の固着、蓄積によって、コンタクトレンズの装用感の悪化や酸素透過性能の低下、レンズ寿命の低下、視力の低下、アレルギー、角膜障害等といった様々な問題が惹起せしめられる恐れがある。
【０００３】
　ところで、コンタクトレンズに付着したタンパク質成分を検知及び定量する方法としては、従来より、アミノ酸アナライザー、薄層クロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィー、イライザ法等が知られているが、何れの手法にあっても、コンタクトレンズに付着した汚れを、先ず、所定の溶媒に抽出する、抽出操作が必要なところから、検出が煩雑であったり、時間を要したり、また、大型で高価な装置を必要とするために、日常的な分析には不向きであった。
【０００４】
　また、特開昭５８−２２２１５４号公報（特許文献１）や特開昭５８−２２２１５５号公報（特許文献２）には、発色試薬として、ニールブルー硫酸塩或いはエリトロシンを含む汚れ検出溶液を用いて、この溶液にコンタクトレンズを浸漬することにより、コンタクトレンズに付着した特定成分を検知する方法が明らかにされているが、かかる発色試薬は、タンパク質成分のみならず、脂質成分をも発色せしめる恐れがあるところから、タンパク質成分のみを選択的に検知することが出来ないといった問題を有していた。また、特開２０００−６５８４０号公報（特許文献３）には、塩基性染料溶液を用いて、コンタクトレンズに付着したタンパク質汚れ及び脂質汚れを検知する方法が、提案されている。
【０００５】
　一方、実開平５−４０８７４号公報（特許文献４）には、呈色比較色調体が提案され、ｐＨ指示薬のタンパク誤差法によって尿中のタンパク質成分を検査するために使用される尿タンパク質試験紙においては、呈色剤として、テトラブロモフェノールブルーが一般に用いられると記載されている。また、特表平８−５０５９３８号公報（特許文献５）には、即時応答性検査パネルが提案されており、この中で、目視インジケーターとして、ブロム−クロロフェノールブルー、テトラブロモフェノールブルー等が挙げられ、このインジケーターの色調によって、涙等の体液中の分析物（例えば、タンパク質）の存在又は欠失が分かることが記載されている。更に、特開平１１−３０４８０３号公報（特許文献６）には、試料中のタンパク質の分析方法及びそのキットが提案され、その中で、ブロモクロロフェノールブルーやテトラブロモフェノールブルー等のトリフェニルメタン系色素とタンパク質との会合体を、疎水性フィルタに吸着せしめて、タンパク質の分析を行なう手法が明らかにされている。しかしながら、それら特許文献４〜６に開示される手法は、何れも、尿等の液体に含まれるタンパク質成分の検出を主要な目的としているところから、コンタクトレンズに付着した涙液由来のタンパク質成分を検出するための具体的な手法については、何等の開示も為されてはいない。
【０００６】
【特許文献１】特開昭５８−２２２１５４号公報
【特許文献２】特開昭５８−２２２１５５号公報
【特許文献３】特開２０００−６５８４０号公報
【特許文献４】実開平５−４０８７４号公報
【特許文献５】特表平８−５０５９３８号公報
【特許文献６】特開平１１−３０４８０３号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
　ここにおいて、本発明は、かかる事情を背景にして為されたものであって、その解決課題とするところは、コンタクトレンズに付着したタンパク質汚れのみを、短時間に、簡便且つ安価に検出する方法を、提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
　そして、本発明は、上述の如き課題を解決するために為されたものであって、その第一の態様とするところは、装用後のコンタクトレンズを、ブロモクロロフェノールブルー又はテトラブロモフェノールブルーを含有する発色試薬溶液に接触させた後、かかるコンタクトレンズを、ｐＨが３以下の溶液に接触せしめることにより、該コンタクトレンズに付着したタンパク質成分を発色させた状態において、コンタクトレンズに付着したタンパク質成分の検出を行なうことを特徴とするコンタクトレンズにおけるタンパク質汚れの検出方法にある。
【０００９】
　また、本発明に係る第二の態様にあっては、前記発色試薬溶液中の発色試薬濃度は、１００〜５００ｐｐｍとされることとなる。
【００１０】
　さらに、本発明に従うコンタクトレンズにおけるタンパク質汚れの検出方法の第三の態様によれば、前記コンタクトレンズに付着したタンパク質成分の検出が、比色分析法、分光分析法、又はそれらの分析法を組み合わせた分析法にて、行なわれることとなる。
【発明の効果】
【００１１】
　そして、本発明に従う、先述した第一の態様によれば、発色試薬として、ブロモクロロフェノールブルー又はテトラブロモフェノールブルーのうちの何れかが用いられるところから、タンパク質成分の種類に応じて検出結果が左右されるような不具合を惹起することなく、コンタクトレンズに付着するタンパク質成分の選択的な検出が有利に実現されることとなる。つまり、かかる発色試薬は、脂質成分を発色せしめることなく、各種のタンパク質成分と会合乃至は反応して、発色するのである。
【００１２】
　また、本発明においては、装用後のコンタクトレンズを、上記した発色試薬を含有する溶液（発色試薬溶液）に、浸漬する等して接触せしめた後、更に、ｐＨが３以下に調整された溶液（酸性溶液）に浸漬する等して接触せしめるようにしているところから、タンパク質成分のみが、短時間で、有利に発色乃至は呈色せしめられて、コンタクトレンズにおけるタンパク質付着部位が緑色に着色され、その発色の程度（色の濃淡）によって、タンパク質成分の検出を行なうことが可能となっている。
【００１３】
　このように、本発明にあっては、従来よりタンパク質の検出に採用されている、アミノ酸アナライザー、薄層クロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィー、イライザ法等の、長い検出時間を要したり、検出操作が煩雑であったり、高いコストが掛かる分析手法を採用しなくても、発色試薬溶液と酸性溶液とに、順次、接触せしめるだけの簡単な操作で、コンタクトレンズに付着したタンパク質成分のみを、短時間に、簡便且つ安価に検出することが出来る。
【００１４】
　従って、コンタクトレンズの中でも、特にイオン性ソフトコンタクトレンズにあっては、タンパク質成分の付着量が多く、これが原因で、コンタクトレンズの装用感の悪化や酸素透過性能の低下、レンズ寿命の低下、視力不良、アレルギー、角膜障害等といった様々な問題を引き起こす可能性が大きくなっているのであるが、上述せる態様によれば、装用者に大きな経済的負担をかけることなく、また、検査の煩わしさを与えることもなく、コンタクトレンズに付着したタンパク質汚れの検出が可能となり、上記した問題の発生を、効果的に予防することが出来るようになるのである。
【００１５】
　また、本発明の第二の態様においては、発色試薬の濃度が所定の範囲とされているところから、コンタクトレンズに付着したタンパク質成分の発色が、更に有利に実現されることとなる。
【００１６】
　さらに、本発明の第三の態様において、タンパク質成分の検出を、比色分析法、分光分析法、又はそれらの分析法を組み合わせた分析法にて行なえば、従来手法に比して、より一層低廉に、タンパク質成分の検出を実施することが出来る。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１７】
　ところで、本発明において採用される発色試薬溶液には、タンパク質成分と呈色反応を生じる発色試薬として、ブロモクロロフェノールブルー（ＢＣＰＢ）又はテトラブロモフェノールブルー（ＴＢＰＢ）が、用いられることとなる。これらブロモクロロフェノールブルーとテトラブロモフェノールブルーは、何れも、トリフェニルメタン系の色素の一つであり、あらゆる種類のタンパク質と会合乃至は反応して、緑色に呈色する。中でも、特に、テトラブロモフェノールブルーにあっては、室温において、各種のタンパク質と、短時間で且つ定量的に呈色反応を起こし易く、また、発色（呈色）時の色調の変化も顕著であるといった特徴を有しているところから、つまり、タンパク質成分の定量において優位性があるところから、好適に採用することが出来るのである。なお、ブロモクロロフェノールブルーとテトラブロモフェノールブルーは、何れも、ｐＨが３以下では、黄色を呈し、ｐＨが３を超えるようになると、ヒドロキシル基の水素が解離することによって、タンパク質と発色試薬との会合体（タンパク質−発色試薬会合体）の色と同様な色、つまり、緑色を呈するといった特性を有している。
【００１８】
　そして、本発明にあっては、上述せる如き発色試薬が、所定の溶媒に溶解、含有せしめられることによって、発色試薬溶液が調製されることとなるのであるが、かかる発色試薬溶液中における発色試薬の濃度としては、高過ぎる場合には、発色試薬の溶媒への溶解が困難となる一方、低過ぎる場合には、発色し難いか、或いは測定に長時間かかるため不都合であるところから、一般に、１〜１０００ｐｐｍ程度の濃度が採用されることとなる。なお、本発明においては、この濃度範囲の中でも、特に、１００〜５００ｐｐｍとされることが望ましい。なぜならば、発色試薬の濃度を、１００〜５００ｐｐｍの範囲内に設定し、適量の発色試薬溶液を使用すると、発色試薬が短時間でタンパク質と会合するからである。
【００１９】
　なお、発色試薬を溶解するための溶媒としては、発色試薬を溶解出来るものであれば、特に限定されるものではなく、例えば、水、メタノール、エタノール、アセトン、及びこれらのうちの２種以上を組み合わせた混合液等を、例示することが出来る。これらの中でも、病院等で使用することから、水、エタノール、及び水−エタノール混合液が、特に、好適に用いられることとなる。
【００２０】
　また、本発明において採用される発色試薬溶液には、必要に応じて、ブチルヒドロキシトルエン等の安定化剤、ラウリル硫酸ナトリウム等の可溶化剤等、各種の添加剤が、適宜に選択されて、含有せしめられても、何等差し支えない。なお、それらの添加剤は、本発明の目的を阻害しない量的範囲で用いられることとなる。
【００２１】
　さらに、発色試薬溶液を調製するにあたっては、何等特殊な方法を必要とせず、通常の溶液を調製する場合と同様に、媒体中に、発色試薬やその他必要に応じて添加される添加剤を溶解させることにより、容易に得ることが出来る。
【００２２】
　そして、本発明は、上述せる如くして得られた発色試薬溶液を用いて、装用によってコンタクトレンズに付着したタンパク質成分を検知又は定量して、タンパク質汚れを検出するのである。
【００２３】
　より具体的には、一般に、先ず、コンタクトレンズを収容可能な大きさの容器内に、ブロモクロロフェノールブルー又はテトラブロモフェノールブルーを含有する発色試薬溶液を、適量において収容し、そしてこの発色試薬溶液の中に、装用後のコンタクトレンズ、つまりタンパク質汚れの付着したコンタクトレンズを、コンタクトレンズ全体が漬かるように浸漬して、コンタクトレンズを発色試薬溶液に接触せしめる。これにより、コンタクトレンズに付着した各種タンパク質成分が、短時間で、発色試薬溶液中の発色試薬と会合乃至は反応することとなる。
【００２４】
　この際、接触（浸漬）時間としては、特に制限されるものではなく、使用する発色試薬溶液の濃度等に応じて適宜に設定されるものの、コンタクトレンズと発色試薬溶液との接触時間が短過ぎると、タンパク質成分と発色試薬とが、定量的に会合乃至は反応することが困難となって、充分な発色が出来なくなる恐れがあり、また、接触（浸漬）時間が長過ぎると、会合乃至は反応が進み過ぎて、コンタクトレンズからタンパク質−発色試薬会合体が溶出乃至は溶解してしまう恐れがあるところから、好ましくは１秒〜１０分、より好ましくは１〜５分とされることが、望ましい。
【００２５】
　そして、発色試薬溶液からコンタクトレンズを取り出すと、発色試薬溶液がコンタクトレンズの表面全体に付着して、コンタクトレンズが全体的に着色されて、緑色を呈することとなる。しかし、このままでは、発色試薬の色が、タンパク質−発色試薬会合体の色に重なって、発色したタンパク質成分のみを判別、検出することが出来ないところから、コンタクトレンズ表面に付着した発色試薬による妨害を除去する必要がある。そこで、本発明においては、かかるコンタクトレンズを、更に、ｐＨが３以下に調整された溶液（酸性溶液）中に、その全体が漬かるように浸漬して、コンタクトレンズを酸性溶液に接触せしめるのである。このように、酸性溶液でコンタクトレンズを処理することにより、コンタクトレンズ表面に付着した発色試薬が、取り除かれたり、緑色から黄色への色変化が短時間で起こり、コンタクトレンズには、タンパク質−発色試薬会合体のみの緑色が残る。
【００２６】
　なお、ここにおいて、上記酸性溶液のｐＨが３を超える場合には、コンタクトレンズに付いた発色試薬を、充分に変色せしめることが出来ないところから、コンタクトレンズにおけるタンパク質付着部位のみを有利に発色せしめることが不可能となって、タンパク質汚れの検出を正確に行ない得なくなる。例えば、上記酸性溶液に代えて、ｐＨが調整されていない蒸留水や水道水等を用いて、発色試薬溶液に浸漬したコンタクトレンズを濯いでも、コンタクトレンズに付いた発色試薬を完全に除去することが出来ず、コンタクトレンズ全体に発色試薬の色が残って、タンパク質−発色試薬会合体のみを視認することが出来ない。また、上述せる如き酸性溶液のｐＨの下限としては、特に制限されるものではないものの、低くなり過ぎると、タンパク質やコンタクトレンズ材料が分解する恐れがあるところから、２以上とされることが望ましい。
【００２７】
　さらに、上記酸性溶液は、従来から公知のｐＨ調整剤やｐＨ緩衝剤を適宜に選択して、これを、水系媒体に溶解せしめることによって、容易に調製されるものである。水系媒体としては、例えば、水及び水にエタノール等を混合した溶媒等、水を主体とする各種の溶媒を例示することが出来る一方、ｐＨ調整剤やｐＨ緩衝剤としては、例えば、リン酸、塩酸、硫酸、硝酸等の酸を例示することが出来る。これらの中でも、安全性の点から、リン酸水溶液が、好適に用いられる。
【００２８】
　また、この酸性溶液にコンタクトレンズを接触（浸漬）せしめる時間としては、コンタクトレンズに付着した発色試薬を黄色に変色させるのに充分な時間であれば、特に制限されるものではないものの、好ましくは１秒〜１０分、より好ましくは１分〜５分とされることが、望ましい。けだし、かかる接触時間が短過ぎると、発色試薬を完全に黄色へ変色せしめることが出来なくなる恐れがあり、タンパク質−発色試薬会合体のみの緑色を判別することが困難となる傾向があるからであり、また、接触（浸漬）時間が長くなり過ぎると、コンタクトレンズに付着したタンパク質が、酸性溶液によって分解する恐れがあるからである。
【００２９】
　かくして、コンタクトレンズに付着しているタンパク質と会合している発色試薬のみが、緑色に発色し、以て、タンパク質汚れを容易に検出することが出来る。また、かかる検出は、コンタクトレンズを酸性溶液中に存在せしめた状態で行なってもよく、また、酸性溶液から取り出した状態で行なってもよい。
【００３０】
　そして、かかるコンタクトレンズの色の変化を、換言すれば、コンタクトレンズにおけるタンパク質−発色試薬会合体の色の濃淡（発色の程度）を、目視による比色分析法や、分光光度計を用いた分光分析法、ＣＣＤ型やＣＭＯＳ型等のセンサを用いて撮像したカメラ画像から、輝度値を積算する等の画像処理を行なって求める方法、及びそれらの分析法を組み合わせた方法等、公知の各種手法を用いて分析することによって、コンタクトレンズに付着したタンパク質成分を、容易に且つ安価に、検知及び定量することが出来るのである。なお、上記した分析手法の中でも、コンタクトレンズ全体のタンパク質付着量を数値化して得ることが出来るという点では、カメラ画像を画像処理することによって、輝度積算値を得る手法（輝度積算法）が好適に用いられる一方、より一層の簡便性を必要としたり、安価に検出したい場合には、目視による比色分析法が好適に用いられる。
【００３１】
　なお、比色分析法にてタンパク質の付着量を検出する場合には、標準の色調見本（対照試料）が準備され、かかる色調見本と検出対象であるコンタクトレンズとを、目視にて比較することによって、タンパク質成分量が検出され得る。具体的に、一例を挙げると、タンパク質成分の付着量が０μｇ／レンズ、１００μｇ／レンズ、２００μｇ／レンズ、３００μｇ／レンズ及び４００μｇ／レンズとなるように、タンパク質成分を人工的に付着させたコンタクトレンズを、それぞれ、検出対象であるコンタクトレンズと同様にして、発色せしめることにより、対照試料を用意し、これらの対照試料と検出対象レンズとを比色することにより、コンタクトレンズに付着したタンパク質成分を、検知、定量することが出来る。
【００３２】
　また、分光分析法にてタンパク質の付着量を検出する場合には、分光光度計等にて、タンパク質−発色試薬会合体の特異的な吸収波長（極大吸収波長）である、６２４ｎｍでの吸光度を測定したり、また、カラーＣＣＤカメラ等の撮像装置を用いて、コンタクトレンズを撮像し、得られたカメラ画像を画像処理することによって、特定波長域における輝度（明るさ）を求める等して、タンパク質量を検出することが出来る。
【００３３】
　このように、本発明に従ってタンパク質汚れを検出すれば、コンタクトレンズを、発色試薬溶液と酸性溶液とに、順次、接触せしめるだけの簡単な操作で、短時間に、また、簡易且つ安価に、コンタクトレンズに付着したタンパク質成分のみを有利に検出することが出来るのである。
【００３４】
　このため、コンタクトレンズ装用者に大きな経済的負担をかけることなく、また、検査の煩わしさを与えることもなく、コンタクトレンズに付着するタンパク質の付着量の測定を行なうことが可能となり、これによって、コンタクトレンズの装用感の悪化や酸素透過性能の低下、レンズ寿命の低下、視力不良、アレルギー、角膜障害等といった様々な問題の発生を、有利に防止乃至は抑制することが出来るようになるのである。
【００３５】
　以上、本発明の代表的な実施形態について詳述してきたが、それは、あくまでも例示に過ぎないものであって、本発明は、そのような実施形態に係る具体的な記述によって、何等限定的に解釈されるものではないことが、理解されるべきである。
【００３６】
　例えば、上記の実施形態では、コンタクトレンズを、発色試薬溶液や酸性溶液に浸漬することにより、それらの溶液を接触せしめていたが、接触せしめる手法としては、そのような「浸漬」に何等限定されることなく、コンタクトレンズに対して、各溶液を、流しかけたり、吹きかけたり等して、コンタクトレンズに接触せしめることも可能である。
【００３７】
　その他、一々列挙はしないが、本発明が、当業者の知識に基づいて、種々なる変更、修正、改良等を加えた態様において実施され得るものであり、また、そのような実施態様が、本発明の趣旨を逸脱しない限り、何れも、本発明の範囲内に含まれるものであることは、言うまでもないところである。
【００３８】
　以下に、本発明の代表的な実施例を示し、本発明を更に具体的に明らかにすることとするが、本発明が、そのような実施例の記載によって、何等の制約をも受けるものでないことは、言うまでもないところである。
【実施例１】
【００３９】
　先ず、供試用のコンタクトレンズとして、以下に示される４種類の市販のコンタクトレンズ（Ａ〜Ｄ）を、それぞれ、２枚ずつ準備した。なお、下記Ａ及びＢのコンタクトレンズは、同様な材質ではあるが、製造元が異なっている。
　Ａ：ＨＥＭＡ（ヒドロキシエチルメタクリレート）系イオン性高含水率ソフトコンタクトレンズ
　Ｂ：ＨＥＭＡ系イオン性高含水率ソフトコンタクトレンズ
　Ｃ：Ｎ−ビニルピロリドン系非イオン性高含水率ソフトコンタクトレンズ
　Ｄ：ＨＥＭＡ系非イオン性低含水率ソフトコンタクトレンズ
【００４０】
　そして、各種含水性ソフトコンタクトレンズの１枚を、それぞれ、０．７％リゾチーム水溶液に、１６時間浸漬せしめることにより、タンパク質成分（リゾチーム）を人工的にコンタクトレンズに付着させた。
【００４１】
　また、各種含水性ソフトコンタクトレンズの残りの１枚は、リゾチーム水溶液に浸漬することなく、それぞれ、対照レンズ（リゾチーム未付着レンズ）Ａ〜Ｄとした。
【００４２】
　そして、タンパク質を付着させたレンズＡ〜Ｄと、対照レンズＡ〜Ｄの計８枚のコンタクトレンズを、それぞれ、室温下、４００ｐｐｍのＴＢＰＢエタノール溶液に１分間浸漬して取り出し、次いで、１０ｍｍｏｌ／Ｌのリン酸水溶液（ｐＨ２〜３程度）に３０秒以上浸漬して、コンタクトレンズに付着するタンパク質成分を発色させた。
【００４３】
　そして、浸漬したままの状態で、これらのコンタクトレンズの色を、目視にて観察した。その結果、タンパク質を付着せしめなかった対照レンズＡ〜Ｄは、何れも、緑色に発色していないことを確認した。また、リゾチーム水溶液に漬けたレンズＡは、対照レンズＡと比較して、明らかに濃い緑色に呈色していた。更に、リゾチーム水溶液に漬けたレンズＢは、対照レンズＢと比較して、僅かに緑色に呈色していた。また、リゾチーム水溶液に浸漬したレンズＣ，Ｄは、それぞれ、対照レンズＣ，Ｄと比較して、色の変化は見られなかった。これらの結果より、目視で比色分析することによっても、タンパク質汚れを容易に検出することが可能であることを、確認した。
【００４４】
　また、上述せるように、ＴＢＰＢエタノール溶液に浸漬し、次いでリン酸水溶液に浸漬した８枚のコンタクトレンズを、浸漬したままの状態において、ＣＣＤカメラで撮像し、デジタルカメラ画像を取り込んだ。そして、浜松ホトニクス製の画像処理ソフト「アクアコスモ」を用いて、６２４ｎｍにおけるタンパク質付着レンズの輝度と対照レンズの輝度との差を、レンズの種類毎にそれぞれ、画像処理を行なって、輝度積算値を求めたところ、レンズＡ：５０５８、Ｂ：９９９、Ｃ：１１１、Ｄ：７９であった。このようにすれば、コンタクトレンズに付着したタンパク質汚れを、数値化して表わすことが可能であり、また、目視による比色分析法では識別が困難なものでも、検出することが可能であった。
【実施例２】
【００４５】
　上述せる如き市販のレンズＡとレンズＣの２種類の含水性ソフトコンタクトレンズを準備し、これらのレンズを、ａ〜ｃの３人のコンタクトレンズ装用者に、それぞれ、１時間、３時間、５時間、及び１日間装用させた。そして、装用後のコンタクトレンズを、室温下、４００ｐｐｍのＴＢＰＢエタノール溶液に１分間浸漬した後、１０ｍｍｏｌ／Ｌのリン酸水溶液に３０秒以上浸漬せしめることにより、コンタクトレンズに付着するタンパク質成分を発色させた。そして、これらのレンズを目視にて確認したところ、レンズＡは、装用時間が増加するにつれて、緑色が濃くなっていたが、レンズＣは、殆んど発色していなかった。また、レンズＡについて、目視による比色分析を行ない、得られた結果を、下記表２に示した。なお、比色分析における色調見本（対照試料）としては、タンパク質成分を人工的に付着させたコンタクトレンズ（０μｇ／レンズ、１００μｇ／レンズ、２００μｇ／レンズ、３００μｇ／レンズ及び４００μｇ／レンズ）を、それぞれ、上記レンズＡ，Ｃと同様に発色せしめたものを準備し、これらのレンズの色と比べることにより、比色分析を行なった。
【００４６】
　また一方、上記と同様にして、市販のレンズＡとレンズＣを、上記３人のコンタクトレンズ装用者に、それぞれ、１時間、３時間、５時間、及び１日間装用させた。そして、装用後のコンタクトレンズを、それぞれ別個に、１ｍＬの抽出液（０．２％トリフルオロ酢酸水溶液／アセトニトリル＝５０／５０）と共に、バイアル瓶に収容して、コンタクトレンズに付着するタンパク質を抽出した。抽出後、抽出液を、サイズ排除クロマトグラフィー（ウォーターズ社製：アライアンス２６９０）を用いて、以下の検出器及び条件にて分析することにより、タンパク質成分の付着量を測定し、得られた結果を下記表１及び表２に示した。なお、下記表１には、定量値の平均値を示す一方、下記表２には、レンズＡに付着していたタンパク質付着量のみを示した。更に、得られたサイズ排除クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）による定量値を、上記比色分析による定量値に対してプロットした（図１参照）。
　ＰＤＡ（フォトダイオードアレイ）検出器：ウォーターズ社製　ＰＤＡ　９９６
　カラム：東ソー（株）製　ＴＳＫ−ＧＥＬ　Ｇ３０００ＳＷＸＬ　７．８×３００ｍｍ
　オーブン温度：３０℃
　移動相：０．５ｍｏｌ／Ｌ塩化ナトリウム＋０．１ｍｏｌ／Ｌリン酸緩衝液（ｐＨ５）
　流量：０．５ｍＬ／分
【００４７】
【表１】
2004004117.tif 000002
【００４８】
【表２】
2004004117.tif 000003
【００４９】
　表２及び図１から明らかなように、発色試薬によるタンパク質の定量結果（目視による比色分析法）と、サイズ排除クロマトグラフィーによる定量結果には、良い相関が確認され、発色試薬による定量方法が有効であることが、認められた。また、上記表１より明らかなように、コンタクトレンズの種類に応じて、装用時間とタンパク質成分付着量との関係が異なることも確認されたため、タンパク質成分の蓄積によって惹起される問題（アレルギー、視力不良、装用感不良）を有利に予想し得ると考えられる。
【図面の簡単な説明】
【００５０】
【図１】実施例２において、比色分析法による定量結果とサイズ排除クロマトグラフィーによる定量結果との相関関係を示すグラフである。
【図１】
2004004117.tif 000004