(57)【要約】【課題】糖尿病モデル非ヒト哺乳動物を用いて、ヒト糖尿病治療薬を簡便にかつ精度よくスクリーニングすることができる方法を提供する。【解決手段】糖尿病モデル非ヒト哺乳動物に試験化合物を投与し、投与後の糖化ヘモグロビン値低下度が０．５％以上である化合物を選択することを特徴とするヒト糖尿病治療薬のスクリーニング方法。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
糖尿病モデル非ヒト哺乳動物に試験化合物を投与し、投与後の糖化ヘモグロビン値低下度が０．５％以上である化合物を選択することを特徴とするヒト糖尿病治療薬のスクリーニング方法。
【請求項２】
非ヒト哺乳動物がゲッシ動物である請求項１記載のスクリーニング方法。
【請求項３】
ゲッシ動物がラットである請求項２記載のスクリーニング方法。
【請求項４】
糖尿病モデル非ヒト哺乳動物がウィスターファティーラットである請求項１記載のスクリーニング方法。
【請求項５】
糖尿病モデル非ヒト哺乳動物がズッカーダイアベティックファティーラットである請求項１記載のスクリーニング方法。
【請求項６】
投与後が投与４週間後である請求項１記載のスクリーニング方法。
【請求項７】
ヒト糖尿病治療薬が、投与１２週間後のヘモグロビンＡ１ｃ値低下度０．５％以上の化合物である請求項１記載のスクリーニング方法。
【請求項８】
請求項１記載のスクリーニング方法により得られたヒト糖尿病治療薬。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、ヒト糖尿病治療薬をスクリーニングするための方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
糖化ヘモグロビン（ｇｌｙｃａｔｅｄ　ｈｅｍｏｇｌｏｂｉｎ）（以下、ＧＨｂと略記することがある）は、グリコシル化ヘモグロビンまたはグリコヘモグロビンとも呼ばれ、Ｄ−グルコース、グルコース−６−リン酸、フルクトースなどの糖が結合したヘモグロビンである。該糖化ヘモグロビンの分類は、ヒトと非ヒト哺乳動物との間で異なることが知られている。
例えば、ヒト糖化ヘモグロビンは、ヘモグロビンＡ、ヘモグロビンＦおよびヘモグロビンＡ２に分類されるヒトヘモグロビンのうちのヘモグロビンＡのβ鎖Ｎ末端バリンのアミノ基に糖が結合したものであり、Ａ１ａ１、Ａ１ａ２、Ａ１ｂ、Ａ１ｃなどに分類される。このうちヘモグロビンＡ１ｃはヘモグロビンＡのβ鎖Ｎ末端バリンのアミノ基にＤ−グルコースが非酵素的に結合したものであり、ヒト糖化ヘモグロビンの大部分を占めている。
ヘモグロビンＡ１ｃは安定であり、赤血球の寿命（約１２０日）がつきるまで消滅しないので、過去１〜３ヶ月間の平均血糖値を反映し得る。従って、糖尿病患者においては、ヘモグロビンＡ１ｃが長期にわたる血糖コントロールの重要な指標として用いられている。
一方、ラットにおいては、ヘモグロビンの分子種が多様であり、糖が結合するヘモグロビンの位置も多様であるために、ラット糖化ヘモグロビンの分類は、ヒト糖化ヘモグロビンの分類とは異なる。ラットにおいては、ラット糖化ヘモグロビンの一部を占めるヘモグロビンＡ１が、ラットにおける長期にわたる血糖コントロールの指標として使用されている。例えば、遺伝性肥満・糖尿病ウィスターファティーラットに塩酸ピオグリタゾンを投与し、１４日後にヘモグロビンＡ１値を測定したことが報告されている（特許文献１参照）。
しかしながら、糖尿病モデル非ヒト哺乳動物における糖化ヘモグロビン値低下度が０．５％以上である化合物を選択することを特徴とするヒト糖尿病治療薬のスクリーニング方法についての報告はない。
【０００３】
【特許文献１】
欧州特許出願公開第７４９７５１号明細書
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
糖尿病モデル非ヒト哺乳動物を用いて、ヒト糖尿病治療薬を簡便にかつ精度よくスクリーニングすることができる方法が求められている。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、上記の課題を解決するために鋭意研究を重ねた結果、糖尿病モデル非ヒト哺乳動物における糖化ヘモグロビン値低下度が０．５％以上である化合物を選択することによって、ヒト糖尿病治療薬をスクリーニングできることを初めて見出した。本発明者らは、この知見に基づいて、さらに検討を重ねた結果、本発明を完成するに至った。
【０００６】
すなわち、本発明は、
１）糖尿病モデル非ヒト哺乳動物に試験化合物を投与し、投与後の糖化ヘモグロビン値低下度が０．５％以上である化合物を選択することを特徴とするヒト糖尿病治療薬のスクリーニング方法；
２）非ヒト哺乳動物がゲッシ動物である上記１）記載のスクリーニング方法；
３）ゲッシ動物がラットである上記２）記載のスクリーニング方法；
４）糖尿病モデル非ヒト哺乳動物がウィスターファティーラットである上記１）記載のスクリーニング方法；
５）糖尿病モデル非ヒト哺乳動物がズッカーダイアベティックファティーラットである上記１）記載のスクリーニング方法；
６）投与後が投与４週間後である上記１）記載のスクリーニング方法；
７）ヒト糖尿病治療薬が、投与１２週間後のヘモグロビンＡ１ｃ値低下度０．５％以上の化合物である上記１）記載のスクリーニング方法；
８）上記１）記載のスクリーニング方法により得られたヒト糖尿病治療薬；などに関する。
【０００７】
本発明のスクリーニング方法は、糖尿病モデル非ヒト哺乳動物に試験化合物を投与し、投与後の糖化ヘモグロビン値低下度が０．５％以上である化合物を選択することによって行われる。
「糖尿病モデル非ヒト哺乳動物」とは、先天的に糖尿病に罹患しているか、後天的に糖尿病に罹患した非ヒト哺乳動物を意味する。
ここで、糖尿病とは、飽食あるいは絶食時において、正常動物よりも血糖値が高い状態を意味する。
また、非ヒト哺乳動物としては、マウス、ラット、モルモット、ハムスター、ウサギ、イヌ、サルなどが挙げられる。これらのなかでも、マウス、ラットなどのゲッシ動物が好ましく、さらにラットが好ましい。
「糖尿病モデル非ヒト哺乳動物」の好適な具体例としては、ｄｂ／ｄｂマウス、ｏｂ／ｏｂマウス、ＫＫＡｙマウス、ＮＯＤマウス、ＮＳＹマウス、ＫＫマウス、ウィスターファティーラット、ズッカーダイアベティックファティー（ＺＤＦ）ラット、ＧＫラット、ＯＬＥＴＦラット、ＢＢラット、ＷＢＮ／Ｋｏｂラット、ズッカーファティーラットなどの先天的に糖尿病に罹患している非ヒト哺乳動物；アロキサンあるいはストレプトゾトシン（ＳＴＺ）投与により糖尿病を誘発したＳＤ（Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ）ラットなどの後天的に糖尿病に罹患している非ヒト哺乳動物などが挙げられる。
「糖尿病モデル非ヒト哺乳動物」は、好ましくはウィスターファティーラット、ズッカーダイアベティックファティーラットなどであり、さらに好ましくはウィスターファティーラットである。
「糖尿病モデル非ヒト哺乳動物」は、市販品として入手可能であるが、自体公知の方法にしたがって作成することもできる。
また、「糖尿病モデル非ヒト哺乳動物」としては、血糖値が高い状態を安定的に示し、かつ、重篤な糖尿病状態にないものが好ましい。
例えば、「糖尿病モデル非ヒト哺乳動物」としてｄｂ／ｄｂマウス、ｏｂ／ｏｂマウス、ＫＫＡｙマウス、ズッカーダイアベティックファティーラット、ＧＫラット、ウィスターファティーラット等を用いる場合、約１０〜約３０週齢のものを用いることが好ましい。
【０００８】
本発明のスクリーニング方法において、糖尿病モデル非ヒト哺乳動物として、耐糖能異常モデル非ヒト哺乳動物を用いてもよい。
「耐糖能異常モデル非ヒト哺乳動物」とは、先天的に耐糖能異常に罹患しているか、後天的に耐糖能異常に罹患した非ヒト哺乳動物を意味する。
ここで、耐糖能異常とは、絶食時の血糖値は正常だが、糖負荷時（例、摂食時あるいは経口糖負荷試験時）には一旦上昇した血糖値が１〜２時間経過しても正常動物に比べて低下しない状態を意味する。また、非ヒト哺乳動物としては、前記と同様のものが挙げられる。
「耐糖能異常モデル非ヒト哺乳動物」の好適な具体例としては、前述の「糖尿病モデル非ヒト哺乳動物」と同様のものが挙げられる。なかでも、ＫＫマウスあるいはズッカーファティーラットなどの随時血糖値が正常値かそれに近い動物が好ましい。
また、「耐糖能異常モデル非ヒト哺乳動物」としては、前記「糖尿病モデル非ヒト哺乳動物」として汎用される哺乳動物のうち、糖尿病を発症していない比較的若齢期のもの、例えば、それぞれ約４〜約７週齢のＫＫＡｙマウスおよびウィスターファティーラットなども好ましい。
【０００９】
「試験化合物」は、例えばペプチド、タンパク質、非ペプチド性化合物、合成化合物、発酵生産物、細胞抽出液、植物抽出液、動物組織抽出液などのいずれであってもよく、これらは公知物質または新規物質のいずれであってもよい。
【００１０】
「試験化合物」の「糖尿病モデル非ヒト哺乳動物」への投与方法は、特に限定されない。試験化合物の投与方法としては、例えば１）試験化合物を必要に応じて水などに溶解または懸濁した後に動物に経口投与する方法、２）試験化合物を餌と混合した後に動物に経口投与する方法、３）試験化合物を動物に注射剤として投与（例、皮下注射、静脈内注射、筋肉内注射、腹腔内注射など）する方法などが挙げられる。
「試験化合物」の「糖尿病モデル非ヒト哺乳動物」への投与量は、投与対象、投与ルートなどによっても異なるが、例えば「試験化合物」をマウスまたはラットに経口投与する場合、通常１回量として約０．０００１〜１００００ｍｇ／ｋｇ体重、好ましくは０．００１〜１０００ｍｇ／ｋｇ体重、さらに好ましくは０．０１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重である。
「試験化合物」の「糖尿病モデル非ヒト哺乳動物」への投与回数は、特に限定されないが、例えば１日１ないし３回程度が好ましい。「試験化合物」の「糖尿病モデル非ヒト哺乳動物」への投与は、１日１ないし３回程度、糖化ヘモグロビン値低下度の測定時まで継続して行われることが好ましい。
【００１１】
「糖化ヘモグロビン値低下度」における「糖化ヘモグロビン値」とは、非ヒト哺乳動物から採取した血液中の全ヘモグロビン量に対する糖化ヘモグロビン量の比率（％）を意味する。
「糖化ヘモグロビン値低下度」とは、次式により算出される値を意味する。
「糖化ヘモグロビン値低下度」＝（「試験化合物投与前の糖化ヘモグロビン値」−「試験化合物投与後の糖化ヘモグロビン値」）−「試験化合物非投与群における糖化ヘモグロビン値低下度」
上記「試験化合物非投与群における糖化ヘモグロビン値低下度」は、通常対照群として用いられる試験化合物非投与群において、試験化合物投与群における試験化合物投与前後の期間中に、変動した糖化ヘモグロビン値の低下量を意味する。
なお、本発明において用いられる「糖化ヘモグロビン（ｇｌｙｃａｔｅｄ　ｈｅｍｏｇｌｏｂｉｎ）」とは、Ｄ−グルコース、グルコース−６−リン酸、フルクトースなどの糖が結合したヘモグロビンすべてを意味する。
糖尿病モデル非ヒト哺乳動物における「糖化ヘモグロビン値」は、例えば公知の方法、例えばアフィニティーカラムクロマトグラフィー法などを用いて測定することができる。「糖化ヘモグロビン値」は、具体的には、アミノフェニルボロネートアフィニティーカラムを用いた動物用グリコヘモグロビン分析計［例、ＨＬＣ−７２３ＧＨｂＶ　Ａ１ｃ２．２（商品名）（東ソー製）］を用いて測定することができる。
【００１２】
また、「糖化ヘモグロビン値」を測定する際には、より精度の高い測定値を得るために、非ヒト哺乳動物から採取した血液に、有効量の血液凝固防止剤を添加することが好ましい。ここで、血液凝固防止剤としては、例えば、ヘパリン、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）などが挙げられる。例えば、血液凝固防止剤としてヘパリン（例、ヘパリンナトリウムの生理食塩水溶液）を用いる場合、通常、血液中のヘパリン濃度が約１０〜５０　Ｕ／ｍｌあるいは０．１〜０．５　ｍｇ／ｍｌとなるようにして使用することが好ましい。また、血液凝固防止剤としてＥＤＴＡを用いる場合、通常、血液中のＥＤＴＡ濃度が約０．００５〜０．０２Ｍとなるように、ＥＤＴＡを水溶液として用いることが好ましい。
糖化ヘモグロビン値低下度の測定時期は、糖尿病モデル非ヒト哺乳動物におけるヘモグロビンの生存期間を考慮して適宜決定される。具体的な測定時期としては、「試験化合物投与後４週間以上経過後」、さらに具体的には、「試験化合物投与４週間後」、「試験化合物投与８週間後」、「試験化合物投与１２週間後」などが挙げられる。
ただし、糖尿病モデル非ヒト哺乳動物に試験化合物を投与した後、短期間内に糖化ヘモグロビン値の低下が観察される場合、糖化ヘモグロビン値低下度の測定時期は、例えば「試験化合物投与後２週間以上経過後」などの短期間経過後であってもよい。
「糖化ヘモグロビン値低下度が０．５％以上である化合物」は、さらに好ましくは「糖化ヘモグロビン値低下度が１％以上である化合物」である。
【００１３】
本発明のスクリーニング方法により得られる「ヒト糖尿病治療薬」に関し、ヒト糖尿病の判定基準については、下記の報告がある。
１９９９年の日本糖尿病学会からの報告によれば、糖尿病とは、空腹時血糖値（静脈血漿におけるグルコース濃度）が１２６ｍｇ／ｄｌ以上、７５ｇ経口ブドウ糖負荷試験（７５ｇＯＧＴＴ）２時間値（静脈血漿におけるグルコース濃度）が２００ｍｇ／ｄｌ以上、随時血糖値（静脈血漿におけるグルコース濃度）が２００ｍｇ／ｄｌ以上のいずれかを示す状態である。また、上記糖尿病に該当せず、かつ、「空腹時血糖値（静脈血漿におけるグルコース濃度）が１１０ｍｇ／ｄｌ未満または７５ｇ経口ブドウ糖負荷試験（７５ｇＯＧＴＴ）２時間値（静脈血漿におけるグルコース濃度）が１４０ｍｇ／ｄｌ未満を示す状態」（正常型）でない状態を、「境界型」と呼ぶ。
また、１９９７年のＡＤＡ（米国糖尿病学会）からの報告、および１９９８年のＷＨＯからの報告によれば、糖尿病とは、空腹時血糖値（静脈血漿におけるグルコース濃度）が１２６ｍｇ／ｄｌ以上であり、かつ、７５ｇ経口ブドウ糖負荷試験２時間値（静脈血漿におけるグルコース濃度）が２００ｍｇ／ｄｌ以上を示す状態である。また、上記報告によれば、空腹時血糖値（静脈血漿におけるグルコース濃度）が１２６ｍｇ／ｄｌ未満であり、かつ、７５ｇ経口ブドウ糖負荷試験２時間値（静脈血漿におけるグルコース濃度）が１４０ｍｇ／ｄｌ以上２００ｍｇ／ｄｌ未満を示す状態を耐糖能不全と呼ぶ。さらに、ＡＤＡの報告によれば、空腹時血糖値（静脈血漿におけるグルコース濃度）が１１０ｍｇ／ｄｌ以上１２６ｍｇ／ｄｌ未満の状態をＩＦＧ（Ｉｍｐａｉｒｅｄ　Ｆａｓｔｉｎｇ　Ｇｌｕｃｏｓｅ）と呼ぶ。一方、ＷＨＯの報告によれば、該ＩＦＧ（Ｉｍｐａｉｒｅｄ　Ｆａｓｔｉｎｇ　Ｇｌｕｃｏｓｅ）のうち、７５ｇ経口ブドウ糖負荷試験２時間値（静脈血漿におけるグルコース濃度）が１４０ｍｇ／ｄｌ未満である状態をＩＦＧ（Ｉｍｐａｉｒｅｄ　Ｆａｓｔｉｎｇ　Ｇｌｙｃｅｍｉａ）と呼ぶ。
「ヒト糖尿病治療薬」は、上記した「糖尿病」、「境界型」、「耐糖能不全」、「ＩＦＧ（Ｉｍｐａｉｒｅｄ　Ｆａｓｔｉｎｇ　Ｇｌｕｃｏｓｅ）」および「ＩＦＧ（Ｉｍｐａｉｒｅｄ　Ｆａｓｔｉｎｇ　Ｇｌｙｃｅｍｉａ）」のうちの少なくとも１種を治療し得る薬剤を意味する。また、「ヒト糖尿病治療薬」は、上記した「境界型」、「耐糖能不全」、「ＩＦＧ（Ｉｍｐａｉｒｅｄ　Ｆａｓｔｉｎｇ　Ｇｌｕｃｏｓｅ）」または「ＩＦＧ（Ｉｍｐａｉｒｅｄ　Ｆａｓｔｉｎｇ　Ｇｌｙｃｅｍｉａ）」から「糖尿病」への進展を防止する薬剤であってもよい。
【００１４】
本発明のスクリーニング方法により得られる「ヒト糖尿病治療薬」の作用メカニズムは特に限定されず、「ヒト糖尿病治療薬」の種類としては、例えばインスリン抵抗性改善薬、ＰＰＡＲγアゴニスト、ＰＰＡＲγアンタゴニスト、ＰＰＡＲγ／αデュアルアゴニスト、ＰＰＡＲγ／δデュアルアゴニスト、ビグアナイド薬、インスリン分泌促進薬、α−グルコシダーゼ阻害薬、アドレナリンβ３アゴニスト、インスリンおよびその誘導体、ＧＬＰ−１受容体アゴニスト、アミリンアゴニスト、フォスフォチロシンフォスファターゼ阻害薬、ジペプチジルペプチダーゼＩＶ阻害薬、グリコーゲンホスホリラーゼ阻害薬、グルコース−６−ホスファターゼ阻害薬、グルカゴン拮抗薬、ソマトスタチン受容体アゴニスト、ＳＧＬＴ（ｓｏｄｉｕｍ−ｇｌｕｃｏｓｅ　ｃｏｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ）阻害薬などが挙げられる。
【００１５】
また、「ヒト糖尿病治療薬」としては、例えば、「ヒト糖尿病患者における投与４週間後のヘモグロビンＡ１ｃ値低下度が０．１％以上の化合物」、「ヒト糖尿病患者における投与８週間後のヘモグロビンＡ１ｃ値低下度が０．２％以上の化合物」、「ヒト糖尿病患者における投与１２週間後のヘモグロビンＡ１ｃ値低下度が０．５％以上の化合物」、「ヒト糖尿病患者における投与１２週間後のヘモグロビンＡ１ｃ値低下度が１％以上の化合物」などが挙げられる。
ここで、「ヘモグロビンＡ１ｃ値低下度」における「ヘモグロビンＡ１ｃ値」とは、ヒト糖尿病患者から採取した血液中の全ヘモグロビン量に対するヘモグロビンＡ１ｃ値の比率（％）を意味する。また、「ヘモグロビンＡ１ｃ値低下度」とは、次式により算出される値を意味する。
「ヘモグロビンＡ１ｃ値低下度」（％）＝（「試験化合物投与前のヘモグロビンＡ１ｃ値」−「試験化合物投与後のヘモグロビンＡ１ｃ値」）−「試験化合物非投与群におけるヘモグロビンＡ１ｃ値低下度」
上記「試験化合物非投与群におけるヘモグロビンＡ１ｃ値低下度」は、通常対照群として用いられる試験化合物非投与群において、試験化合物投与群における試験化合物投与前後の期間中に、変動したヘモグロビンＡ１ｃ値の低下量を意味する。
ヒト糖尿病患者における「ヘモグロビンＡ１ｃ値」は、例えば公知の方法、例えばイオン交換カラムクロマトグラフィー法、アフィニティーカラムクロマトグラフィー法などを用いて測定することができる。「ヘモグロビンＡ１ｃ値」は、具体的には、グリコヘモグロビン分析計［例、ＨＬＣ−７２３ＧＨｂＶ　Ａ１ｃ２．２（商品名）（東ソー製）；ＣＬＣ３８５（商品名）（プリムス社（Ｐｒｉｍｕｓ　Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）製、米国））を用いて測定することができる。
「ヒト糖尿病治療薬」は、好ましくは「ヒト糖尿病患者における投与１２週間後のヘモグロビンＡ１ｃ値低下度が０．５％以上の化合物」であり、さらに好ましくは「ヒト糖尿病患者における投与１２週間後のヘモグロビンＡ１ｃ値低下度が１％以上の化合物」である。ここで、「ヒト糖尿病患者における投与１２週間後のヘモグロビンＡ１ｃ値低下度」は、好ましくは「化合物をヒト糖尿病患者に１日１ないし３回程度、１２週間にわたって継続投与した後のヘモグロビンＡ１ｃ値低下度」である。
【００１６】
本発明のスクリーニング方法により得られた「ヒト糖尿病治療薬」は、そのまま、または薬理学的に許容し得る担体などと混合して医薬組成物とした後に、ヒト糖尿病患者に投与することができる。
ここにおいて、薬理学的に許容し得る担体としては、製剤素材として慣用の各種有機あるいは無機担体物質が用いられ、固形製剤における賦形剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤；液状製剤における溶剤、溶解補助剤、懸濁化剤、等張化剤、緩衝剤、無痛化剤などとして配合される。また必要に応じて、防腐剤、抗酸化剤、着色剤、甘味剤などの製剤添加物を用いることもできる。
賦形剤の好適な例としては、乳糖、白糖、Ｄ−マンニトール、Ｄ−ソルビトール、デンプン、α化デンプン、デキストリン、結晶セルロース、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、アラビアゴム、デキストリン、プルラン、軽質無水ケイ酸、合成ケイ酸アルミニウム、メタケイ酸アルミン酸マグネシウムなどが挙げられる。
滑沢剤の好適な例としては、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、タルク、コロイドシリカなどが挙げられる。
結合剤の好適な例としては、α化デンプン、ショ糖、ゼラチン、アラビアゴム、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、結晶セルロース、白糖、Ｄ−マンニトール、トレハロース、デキストリン、プルラン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドンなどが挙げられる。
崩壊剤の好適な例としては、乳糖、白糖、デンプン、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、クロスカルメロースナトリウム、カルボキシメチルスターチナトリウム、軽質無水ケイ酸、低置換度ヒドロキシプロピルセルロースなどが挙げられる。
【００１７】
溶剤の好適な例としては、注射用水、生理的食塩水、リンゲル液、アルコール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、ゴマ油、トウモロコシ油、オリーブ油、綿実油などが挙げられる。
溶解補助剤の好適な例としては、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、Ｄ−マンニトール、トレハロース、安息香酸ベンジル、エタノール、トリスアミノメタン、コレステロール、トリエタノールアミン、炭酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、サリチル酸ナトリウム、酢酸ナトリウムなどが挙げられる。
懸濁化剤の好適な例としては、ステアリルトリエタノールアミン、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリルアミノプロピオン酸、レシチン、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、モノステアリン酸グリセリンなどの界面活性剤；例えばポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロースなどの親水性高分子；ポリソルベート類、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油などが挙げられる。
等張化剤の好適な例としては、塩化ナトリウム、グリセリン、Ｄ−マンニトール、Ｄ−ソルビトール、ブドウ糖などが挙げられる。
緩衝剤の好適な例としては、リン酸塩、酢酸塩、炭酸塩、クエン酸塩などの緩衝液などが挙げられる。
無痛化剤の好適な例としては、ベンジルアルコールなどが挙げられる。
防腐剤の好適な例としては、パラオキシ安息香酸エステル類、クロロブタノール、ベンジルアルコール、フェネチルアルコール、デヒドロ酢酸、ソルビン酸などが挙げられる。
抗酸化剤の好適な例としては、亜硫酸塩、アスコルビン酸塩などが挙げられる。
着色剤の好適な例としては、水溶性食用タール色素（例、食用赤色２号および３号、食用黄色４号および５号、食用青色１号および２号などの食用色素、水不溶性レーキ色素（例、前記水溶性食用タール色素のアルミニウム塩など）、天然色素（例、β−カロチン、クロロフィル、ベンガラなど）などが挙げられる。
甘味剤の好適な例としては、サッカリンナトリウム、グリチルリチン酸二カリウム、アスパルテーム、ステビアなどが挙げられる。
【００１８】
前記医薬組成物の剤形としては、例えば錠剤（舌下錠、口腔内崩壊錠を含む）、カプセル剤（ソフトカプセル、マイクロカプセルを含む）、顆粒剤、散剤、トローチ剤、シロップ剤、乳剤、懸濁剤などの経口剤；および注射剤（例、皮下注射剤、静脈内注射剤、筋肉内注射剤、腹腔内注射剤、点滴剤など）、外用剤（例、経皮製剤、軟膏剤など）、坐剤（例、直腸坐剤、膣坐剤など）、ペレット、経鼻剤、経肺剤（吸入剤）、点眼剤等の非経口剤が挙げられ、これらはそれぞれ経口的あるいは非経口的に安全に投与できる。
これらの製剤は、速放性製剤または徐放性製剤などの放出制御製剤（例、徐放性マイクロカプセルなど）であってもよい。
医薬組成物は、製剤技術分野において慣用の方法、例えば日本薬局方に記載の方法等により製造することができる。以下に、製剤の具体的な製造法について詳述する。
なお、医薬組成物中の「ヒト糖尿病治療薬」の含量は、剤形、「ヒト糖尿病治療薬」の投与量などにより異なるが、例えば約０．０１〜１００重量％である。
【００１９】
例えば、経口剤は、有効成分に、賦形剤（例、乳糖，白糖，デンプン，Ｄ−マンニトールなど）、崩壊剤（例、カルボキシメチルセルロースカルシウムなど）、結合剤（例、α化デンプン，アラビアゴム，カルボキシメチルセルロース，ヒドロキシプロピルセルロース，ポリビニルピロリドンなど）または滑沢剤（例、タルク，ステアリン酸マグネシウム，ポリエチレングリコール６０００など）などを添加して圧縮成形し、次いで必要により、味のマスキング、腸溶性あるいは持続性を目的として、コーティング基剤を用いて自体公知の方法でコーティングすることにより製造される。
該コーティング基剤としては、例えば糖衣基剤、水溶性フィルムコーティング基剤、腸溶性フィルムコーティング基剤、徐放性フィルムコーティング基剤などが挙げられる。
糖衣基剤としては、白糖が用いられ、さらに、タルク、沈降炭酸カルシウム、ゼラチン、アラビアゴム、プルラン、カルナバロウなどから選ばれる１種または２種以上を併用してもよい。
水溶性フィルムコーティング基剤としては、例えばヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、メチルヒドロキシエチルセルロースなどのセルロース系高分子；ポリビニルアセタールジエチルアミノアセテート、アミノアルキルメタアクリレートコポリマーＥ〔オイドラギットＥ（商品名）、ロームファルマ社〕、ポリビニルピロリドンなどの合成高分子；プルランなどの多糖類などが挙げられる。
腸溶性フィルムコーティング基剤としては、例えばヒドロキシプロピルメチルセルロース　フタレート、ヒドロキシプロピルメチルセルロース　アセテートサクシネート、カルボキシメチルエチルセルロース、酢酸フタル酸セルロースなどのセルロース系高分子；メタアクリル酸コポリマーＬ〔オイドラギットＬ（商品名）、ロームファルマ社〕、メタアクリル酸コポリマーＬＤ〔オイドラギットＬ−３０Ｄ５５（商品名）、ロームファルマ社〕、メタアクリル酸コポリマーＳ〔オイドラギットＳ（商品名）、ロームファルマ社〕などのアクリル酸系高分子；セラックなどの天然物などが挙げられる。
徐放性フィルムコーティング基剤としては、例えばエチルセルロースなどのセルロース系高分子；アミノアルキルメタアクリレートコポリマーＲＳ〔オイドラギットＲＳ（商品名）、ロームファルマ社〕、アクリル酸エチル−メタクリル酸メチル共重合体懸濁液〔オイドラギットＮＥ（商品名）、ロームファルマ社〕などのアクリル酸系高分子などが挙げられる。
上記したコーティング基剤は、その２種以上を適宜の割合で混合して用いてもよい。また、コーティングの際に、例えば酸化チタン、三二酸化鉄等のような遮光剤を用いてもよい。
【００２０】
注射剤は、有効成分を分散剤（例、ポリソルベート８０，ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油６０など）、ポリエチレングリコール，カルボキシメチルセルロース，アルギン酸ナトリウムなど）、保存剤（例、メチルパラベン，プロピルパラベン，ベンジルアルコール，クロロブタノール，フェノールなど）、等張化剤（例、塩化ナトリウム，グリセリン，Ｄ−マンニトール，Ｄ−ソルビトール，ブドウ糖など）などと共に水性溶剤（例、蒸留水，生理的食塩水，リンゲル液等）あるいは油性溶剤（例、オリーブ油，ゴマ油，綿実油，トウモロコシ油などの植物油、プロピレングリコール等）などに溶解、懸濁あるいは乳化することにより製造される。この際、所望により溶解補助剤（例、サリチル酸ナトリウム，酢酸ナトリウム等）、安定剤（例、ヒト血清アルブミン等）、無痛化剤（例、ベンジルアルコール等）等の添加物を用いてもよい。
【００２１】
本発明のスクリーニング方法により得られた「ヒト糖尿病治療薬」の投与量は、投与対象、投与ルート、症状などによっても異なるが、例えば成人糖尿病患者（体重６０ｋｇ）に経口投与する場合、通常１回量として約０．００１〜１００００ｍｇ、好ましくは０．０１〜１０００ｍｇ、さらに好ましくは０．１〜５００ｍｇであり、この量を１日１回〜３回投与するのが望ましい。
【００２２】
本発明のスクリーニング方法により得られた「ヒト糖尿病治療薬」は、その糖尿病治療効果の増強、投与量の低減、あるいは副作用の低減などを目的として、糖尿病治療剤、糖尿病性合併症治療剤、抗高脂血症剤、降圧剤、抗肥満剤、利尿剤、化学療法剤、免疫療法剤、抗血栓剤、骨粗鬆症治療剤、抗痴呆剤、勃起不全改善剤、尿失禁・頻尿治療剤などの薬剤（以下、併用薬剤と略記する）と組み合わせて用いることができる。
この際、「ヒト糖尿病治療薬」および併用薬剤の投与時期は限定されず、これらを投与対象に対し、同時に投与してもよいし、時間差をおいて投与してもよい。さらに、「ヒト糖尿病治療薬」と併用薬剤とは、それぞれの活性成分を含む２種類の製剤として投与されてもよいし、両方の活性成分を含む単一の製剤として投与されてもよい。
併用薬剤の投与量は、臨床上用いられている用量を基準として適宜選択することができる。また、「ヒト糖尿病治療薬」と併用薬剤の配合比は、投与対象、投与ルート、症状、組み合わせなどにより適宜選択することができる。例えば投与対象がヒトである場合、「ヒト糖尿病治療薬」１重量部に対し、併用薬剤を０．０１〜１００重量部用いればよい。
【００２３】
なお、糖尿病治療剤としては、インスリン製剤（例、ウシ、ブタの膵臓から抽出された動物インスリン製剤；大腸菌またはイーストを用い、遺伝子工学的に合成したヒトインスリン製剤；インスリン亜鉛；プロタミンインスリン亜鉛；インスリンのフラグメントまたは誘導体（例、ＩＮＳ−１等）など）、インスリン抵抗性改善剤（例、塩酸ピオグリタゾン、（マレイン酸）ロシグリタゾン、ＧＩ−２６２５７０、ＪＴＴ−５０１、ＭＣＣ−５５５、ＹＭ−４４０、ＫＲＰ−２９７、ＣＳ−０１１、ＦＫ−６１４、ＮＮ‐６２２、ＡＺ‐２４２、ＢＭＳ−２９８５８５、ＥＭＬ−１６３３６、ＷＯ９９／５８５１０に記載の化合物（例えば（Ｅ）−４−［４−（５−メチル−２−フェニル−４−オキサゾリルメトキシ）ベンジルオキシイミノ］−４−フェニル酪酸）等）、ＰＰＡＲγアゴニスト、ＰＰＡＲγアンタゴニスト、ＰＰＡＲγ／αデュアルアゴニスト、α−グルコシダーゼ阻害剤（例、ボグリボース、アカルボース、ミグリトール、エミグリテート等）、ビグアナイド剤（例、フェンホルミン、メトホルミン、ブホルミン等）、インスリン分泌促進剤［スルホニルウレア剤（例、トルブタミド、グリベンクラミド、グリクラジド、クロルプロパミド、トラザミド、アセトヘキサミド、グリクロピラミド、グリメピリド、グリピザイド、グリブゾール等）、レパグリニド、セナグリニド、ナテグリニド、ミチグリニドまたはそのカルシウム塩水和物］、ＧＬＰ−１受容体アゴニスト［例、ＧＬＰ−１、ＮＮ−２２１１、ＡＣ−２９９３（ｅｘｅｎｄｉｎ−４）、ＢＩＭ−５１０７７、Ａｉｂ（８，３５）ｈＧＬＰ−１（７，３７）ＮＨ２等］、アミリンアゴニスト（例、プラムリンチド等）、フォスフォチロシンフォスファターゼ阻害剤（例、バナジン酸等）、ジペプチジルペプチダーゼＩＶ阻害剤（例、ＮＶＰ−ＤＰＰ−２７８、ＰＴ−１００、Ｐ３２／９８、ＬＡＦ−２３７等）、β３アゴニスト（例、ＣＬ−３１６２４３、ＳＲ−５８６１１−Ａ、ＵＬ−ＴＧ−３０７、ＳＢ−２２６５５２，ＡＪ−９６７７、ＢＭＳ−１９６０８５、ＡＺ４０１４０等）、糖新生阻害剤（例、グリコーゲンホスホリラーゼ阻害剤、グルコース−６−ホスファターゼ阻害剤、グルカゴン拮抗剤、ソマトスタチン受容体アゴニスト等）、ＳＧＬＴ（ｓｏｄｉｕｍ−ｇｌｕｃｏｓｅ　ｃｏｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ）阻害剤（例、Ｔ−１０９５等）等が挙げられる。
【００２４】
糖尿病性合併症治療剤としては、アルドース還元酵素阻害剤（例、トルレスタット、エパルレスタット、ゼナレスタット、ゾポルレスタット、ミナルレスタット、フィダレスタット、ＳＮＫ−８６０、ＣＴ−１１２等）、神経栄養因子およびその増加薬（例、ＮＧＦ、ＮＴ−３、ＢＤＮＦ、ＷＯ０１／１４３７２に記載のニューロトロフィン産生・分泌促進剤（例えば４−（４−クロロフェニル）−２−（２−メチル−１−イミダゾリル）−５−［３−（２−メチルフェノキシ）プロピル］オキサゾールなど）等）、神経再生促進薬（例、Ｙ−１２８等）、ＰＫＣ阻害剤（例、ＬＹ−３３３５３１等）、ＡＧＥ阻害剤（例、ＡＬＴ９４６、ピマゲジン、ピラトキサチン、Ｎ−フェナシルチアゾリウム　ブロマイド（ＡＬＴ７６６）、ＥＸＯ−２２６等）、活性酸素消去薬（例、チオクト酸等）、脳血管拡張剤（例、チアプリド、メキシレチン等）が挙げられる。
抗高脂血症剤としては、コレステロール合成阻害剤であるスタチン系化合物（例、セリバスタチン、プラバスタチン、シンバスタチン、ロバスタチン、アトルバスタチン、フルバスタチン、イタバスタチンまたはそれらの塩（例、ナトリウム塩）等）、スクアレン合成酵素阻害剤（例、ＷＯ９７／１０２２４に記載の化合物、例えばＮ−［［（３Ｒ，５Ｓ）−１−（３−アセトキシ−２，２−ジメチルプロピル）−７−クロロ−５−（２，３−ジメトキシフェニル）−２−オキソ−１，２，３，５−テトラヒドロ−４，１−ベンゾオキサゼピン−３−イル］アセチル］ピペリジン−４−酢酸など）あるいはトリグリセリド低下作用を有するフィブラート系化合物（例、ベザフィブラート、クロフィブラート、シムフィブラート、クリノフィブラート等）、ＡＣＡＴ阻害剤（例、アバシマイブ（Ａｖａｓｉｍｉｂｅ）、エフルシマイブ（Ｅｆｌｕｃｉｍｉｂｅ）など）、陰イオン交換樹脂（例、コレスチラミンなど）、プロブコール、ニコチン酸系薬剤（例、ニコモール（ｎｉｃｏｍｏｌ）、ニセリトロール（ｎｉｃｅｒｉｔｒｏｌ）など）、イコサペント酸エチル、植物ステロール（例、ソイステロール（ｓｏｙｓｔｅｒｏｌ）、ガンマオリザノール（γ−ｏｒｙｚａｎｏｌ）など）等が挙げられる。
降圧剤としては、アンジオテンシン変換酵素阻害剤（例、カプトプリル、エナラプリル、デラプリル等）、アンジオテンシンＩＩ拮抗剤（例、カンデサルタン　シレキセチル、ロサルタン、エプロサルタン、バルサンタン、テルミサルタン、イルベサルタン、タソサルタン等）、カルシウム拮抗剤（例、マニジピン、ニフェジピン、アムロジピン、エホニジピン、ニカルジピン等）、カリウムチャンネル開口薬（例、レブクロマカリム、Ｌ−２７１５２、ＡＬ　０６７１、ＮＩＰ−１２１など）、クロニジン等が挙げられる。
抗肥満剤としては、例えば中枢性抗肥満薬（例、デキスフェンフルラミン、フェンフルラミン、フェンテルミン、シブトラミン、アンフェプラモン、デキサンフェタミン、マジンドール、フェニルプロパノールアミン、クロベンゾレックス等）、膵リパーゼ阻害薬（例、オルリスタット等）、β３アゴニスト（例、ＣＬ−３１６２４３、ＳＲ−５８６１１−Ａ、ＵＬ−ＴＧ−３０７、ＳＢ−２２６５５２，ＡＪ−９６７７、ＢＭＳ−１９６０８５、ＡＺ４０１４０等）、ペプチド性食欲抑制薬（例、レプチン、ＣＮＴＦ（毛様体神経栄養因子）等）、コレシストキニンアゴニスト（例、リンチトリプト、ＦＰＬ−１５８４９等）等が挙げられる。
【００２５】
利尿剤としては、例えばキサンチン誘導体（例、サリチル酸ナトリウムテオブロミン、サリチル酸カルシウムテオブロミン等）、チアジド系製剤（例、エチアジド、シクロペンチアジド、トリクロルメチアジド、ヒドロクロロチアジド、ヒドロフルメチアジド、ベンチルヒドロクロロチアジド、ペンフルチジド、ポリチアジド、メチクロチアジド等）、抗アルドステロン製剤（例、スピロノラクトン、トリアムテレン等）、炭酸脱水酵素阻害剤（例、アセタゾラミド等）、クロルベンゼンスルホンアミド系製剤（例、クロルタリドン、メフルシド、インダパミド等）、アゾセミド、イソソルビド、エタクリン酸、ピレタニド、ブメタニド、フロセミド等が挙げられる。
化学療法剤としては、例えばアルキル化剤（例、サイクロフォスファミド、イフォスファミド等）、代謝拮抗剤（例、メソトレキセート、５−フルオロウラシルおよびその誘導体等）、抗癌性抗生物質（例、マイトマイシン、アドリアマイシン等）、植物由来抗癌剤（例、ビンクリスチン、ビンデシン、タキソール等）、シスプラチン、カルボプラチン、エトポシドなどが挙げられる。なかでも５−フルオロウラシル誘導体であるフルツロンあるいはネオフルツロンなどが好ましい。
免疫療法剤としては、例えば微生物または細菌成分（例、ムラミルジペプチド誘導体、ピシバニール等）、免疫増強活性のある多糖類（例、レンチナン、シゾフィラン、クレスチン等）、遺伝子工学的手法で得られるサイトカイン（例、インターフェロン、インターロイキン（ＩＬ）等）、コロニー刺激因子（例、顆粒球コロニー刺激因子、エリスロポエチン等）などが挙げられ、なかでもＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−１２などのインターロイキンが好ましい。
【００２６】
抗血栓剤としては、例えばヘパリン（例、ヘパリンナトリウム、ヘパリンカルシウム、ダルテパリンナトリウム（ｄａｌｔｅｐａｒｉｎ　ｓｏｄｉｕｍ）など）、ワルファリン（例、ワルファリンカリウムなど）、抗トロンビン薬（例、アルガトロバン（ａｒａｇａｔｒｏｂａｎ）など）、血栓溶解薬（例、ウロキナーゼ（ｕｒｏｋｉｎａｓｅ）、チソキナーゼ（ｔｉｓｏｋｉｎａｓｅ）、アルテプラーゼ（ａｌｔｅｐｌａｓｅ）、ナテプラーゼ（ｎａｔｅｐｌａｓｅ）、モンテプラーゼ（ｍｏｎｔｅｐｌａｓｅ）、パミテプラーゼ（ｐａｍｉｔｅｐｌａｓｅ）など）、血小板凝集抑制薬（例、塩酸チクロピジン（ｔｉｃｌｏｐｉｄｉｎｅ　ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、シロスタゾール（ｃｉｌｏｓｔａｚｏｌ）、イコサペント酸エチル、ベラプロストナトリウム（ｂｅｒａｐｒｏｓｔ　ｓｏｄｉｕｍ）、塩酸サルポグレラート（ｓａｒｐｏｇｒｅｌａｔｅ　ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）など）などが挙げられる。
骨粗鬆症治療剤としては、例えばアルファカルシドール（ａｌｆａｃａｌｃｉｄｏｌ）、カルシトリオール（ｃａｌｃｉｔｒｉｏｌ）、エルカトニン（ｅｌｃａｔｏｎｉｎ）、サケカルシトニン（ｃａｌｃｉｔｏｎｉｎ　ｓａｌｍｏｎ）、エストリオール（ｅｓｔｒｉｏｌ）、イプリフラボン（ｉｐｒｉｆｌａｖｏｎｅ）、パミドロン酸二ナトリウム（ｐａｍｉｄｒｏｎａｔｅ　ｄｉｓｏｄｉｕｍ）、アレンドロン酸ナトリウム水和物（ａｌｅｎｄｒｏｎａｔｅ　ｓｏｄｉｕｍ　ｈｙｄｒａｔｅ）、インカドロン酸二ナトリウム（ｉｎｃａｄｒｏｎａｔｅ　ｄｉｓｏｄｉｕｍ）等が挙げられる。
抗痴呆剤としては、例えばタクリン（ｔａｃｒｉｎｅ）、ドネペジル（ｄｏｎｅｐｅｚｉｌ）、リバスチグミン（ｒｉｖａｓｔｉｇｍｉｎｅ）、ガランタミン（ｇａｌａｎｔａｍｉｎｅ）等が挙げられる。
勃起不全改善剤としては、例えばアポモルフィン（ａｐｏｍｏｒｐｈｉｎｅ）、クエン酸シルデナフィル（ｓｉｌｄｅｎａｆｉｌ　ｃｉｔｒａｔｅ）等が挙げられる。
尿失禁・頻尿治療剤としては、例えば塩酸フラボキサート（ｆｌａｖｏｘａｔｅ　ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、塩酸オキシブチニン（ｏｘｙｂｕｔｙｎｉｎ　ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、塩酸プロピベリン（ｐｒｏｐｉｖｅｒｉｎｅ　ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）等が挙げられる。
【００２７】
さらに、動物モデルや臨床で悪液質改善作用が認められている薬剤、すなわち、シクロオキシゲナーゼ阻害剤（例、インドメタシン等）〔キャンサー・リサーチ（Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ）、第４９巻、５９３５〜５９３９頁、１９８９年〕、プロゲステロン誘導体（例、メゲステロールアセテート）〔ジャーナル・オブ・クリニカル・オンコロジー（Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｃｌｉｎｉｃａｌ　Ｏｎｃｏｌｏｇｙ）、第１２巻、２１３〜２２５頁、１９９４年〕、糖質ステロイド（例、デキサメサゾン等）、メトクロプラミド系薬剤、テトラヒドロカンナビノール系薬剤（文献はいずれも上記と同様）、脂肪代謝改善剤（例、エイコサペンタエン酸等）〔ブリティシュ・ジャーナル・オブ・キャンサー（Ｂｒｉｔｉｓｈ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｃａｎｃｅｒ）、第６８巻、３１４〜３１８頁、１９９３年〕、成長ホルモン、ＩＧＦ−１、あるいは悪液質を誘導する因子であるＴＮＦ−α、ＬＩＦ、ＩＬ−６、オンコスタチンＭに対する抗体なども併用薬剤として挙げられる。
【００２８】
【発明の実施の形態】
以下において、実験例により本発明をより具体的にするが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【実施例】
実験例１
血糖値［日立７０７０（商品名、日立製作所製）にて測定した際の平均値±標準誤差］が３８２．７±３３．９　ｍｇ／ｄｌであり、糖化ヘモグロビン値［平均値±標準誤差］が７．８±０．４　％である１９週齢のウィスターファティー（Ｗｉｓｔａｒ　ｆａｔｔｙ）雄性ラット２１匹を、ａ、ｂおよびｃの３群（各７匹）に分けた。
なお、本実験例中、血糖値および糖化ヘモグロビン値を測定する場合には、血液凝固防止剤として最終０．０１ＭのＥＤＴＡを含むマイクロチューブに、ラットの血液を採取した。
また、糖化ヘモグロビン値は、アミノフェニルボロネートアフィニティカラムと４１５　ｎｍでの吸光度検出法を用いた高速液体クロマトグラフ（ＨＬＣ−７２３ＧｈｂＶＡ１ｃ２．２（商品名、東ソー製））を用いて測定した。移動相には東ソー製の溶離液Ａ，　Ｂを用い、カラム温度、流速など、クロマトグラフの設定条件も全て本クロマトグラフの標準設定条件に従った。
前記ａ群には通常の粉末飼料（日本クレア、ＣＥ−２）を、ｂ群およびｃ群には塩酸ピオグリタゾンを１日量としてそれぞれ０．８　ｍｇ／ｋｇ体重および２．４　ｍｇ／ｋｇ体重（飼料に対する重量比で各０．００１５％、０．００４５％）になるように配合した前記粉末飼料を与えて、５週間飼育し、実験開始４および５週間後に、糖化ヘモグロビン値の測定を行った。
その結果、対照群であるａ群においては、実験開始４および５週間後に、糖化ヘモグロビン値がそれぞれ０．３％および０．６％低下した。また、ｂ群においては、投与開始４および５週後に、糖化ヘモグロビン値が、それぞれ１．４％および１．９％低下した。さらに、ｃ群においては、投与開始４および５週後に、糖化ヘモグロビン値が、それぞれ２．８％および３．３％低下した。すなわち、ｂ群における投与開始４および５週後の糖化ヘモグロビン値低下度は、それぞれ１．１％（１．４％−０．３％）および１．３％（１．９％−０．６％）であった。また、ｃ群における投与開始４および５週後の糖化ヘモグロビン値低下度は、それぞれ２．５％（２．８％−０．３％）および２．７％（３．３％−０．６％）であった。
【００２９】
実験例２
糖尿病患者（１３４人、年齢５７．６±１１．５歳、空腹時血糖値１８３．２±３５．２　ｍｇ／ｄｌ、ヘモグロビンＡ１ｃ値９．２７±１．６０　％）を２群に分け、１群（６６人）にプラセボを、もう１群（６８人）に塩酸ピオグリタゾン３０ｍｇ（１日あたりの量）を１２週間にわたって経口投与し、投与開始８および１２週後にヘモグロビンＡ１ｃ値を測定した。
その結果、プラセボ投与群においては、投与開始８および１２週後に、ヘモグロビンＡ１ｃ値が、いずれも０．０２％低下した。また、塩酸ピオグリタゾン投与群においては、投与開始８および１２週後に、ヘモグロビンＡ１ｃ値が、それぞれ０．７０％および１．０８％低下した。すなわち、塩酸ピオグリタゾン投与群における投与開始８および１２週後のヘモグロビンＡ１ｃ値低下度は、それぞれ０．６８％（０．７０％−０．０２％）および１．０６％（１．０８％−０．０２％）であった。
【００３０】
【発明の効果】
本発明のスクリーニング法によれば、ヒト糖尿病治療薬を簡便にかつ精度よくスクリーニングすることができる。