(57)【要約】【課題】　加工特性に優れ、風味良好で、ＰＰＡＲ活性化作用、β酸化活性化作用に優れ糖尿病、高脂血症、肥満用の医薬用途の他に、食品、飼料として有用な油脂組成物の提供。　　【解決手段】　次の成分（Ａ）及び（Ｂ）：（Ａ）構成脂肪酸の２０〜７５重量％がドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）であり、０．１〜２５重量％がイコサペンタエン酸（ＩＰＡ）であり、それらの重量比（ＤＨＡ／ＩＰＡ）が２以上であるモノグリセライド　　８０〜９９．９重量％、（Ｂ）ジグリセライド　　　　　　　　０．１〜２０重量％を含有する油脂組成物。【選択図】　なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
　次の成分（Ａ）及び（Ｂ）：
（Ａ）構成脂肪酸の２０〜７５重量％がドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）であり、０．１〜２５重量％がイコサペンタエン酸（ＩＰＡ）であり、それらの重量比（ＤＨＡ／ＩＰＡ）が２以上であるモノグリセライド　　８０〜９９．９重量％、
（Ｂ）ジグリセライド　　　　　　　　０．１〜２０重量％
を含有する油脂組成物。
【請求項２】
　更に（Ｃ）抗酸化剤０．０１〜５重量％を含有するものである請求項１記載の油脂組成物。
【請求項３】
　更に（Ｄ）植物ステロール０．０５〜１９．９重量％を含有するものである請求項１又は２記載の油脂組成物。
【請求項４】
　請求項１〜３のいずれか１項に記載の油脂組成物を含有する食品。
【請求項５】
　請求項１〜３のいずれか１項に記載の油脂組成物を含有する飼料。
【請求項６】
　請求項１〜３のいずれか１項に記載の油脂組成物を含有する医薬品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
　本発明は、特定のグリセライド組成及び脂肪酸組成を有し、風味良好で、しかも顕著なゲル化性及び水取込性を有することから加工特性に優れ、優れたペルオキシソーム増殖剤活性化受容体（Peroxisome Proliferator Activated Receptor、以下PPARと記載する）活性化作用、β酸化活性化作用を有する食品、医薬、飼料等として有用な油脂組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
　近年、特に健康の維持増進、疾病の予防治療に対する関心が高まり、魚油やその構成成分であるイコサペンタエン酸（Ｃ２０：５、以下ＩＰＡと記載する）、ドコサヘキサエン酸（Ｃ２２：６、以下ＤＨＡと記載する）の健康機能に関する研究が数多く行われてきている。具体的には、抗動脈硬化作用、脳機能改善作用、視覚機能改善作用、抗腫瘍作用、抗炎症作用等が知られている（非特許文献１等）。
【０００３】
　しかしながらこれらの成分は、保存時の劣化臭がひどく、風味の点で実用化が著しく制限されている。また、ＩＰＡに血小板凝集抑制作用や出血時間の延長作用のあることが指摘されている（非特許文献２、３等）。
【０００４】
　一方、本発明者らは、ＩＰＡ、ＤＨＡを含むω３系不飽和モノグリセライド・ジグリセライドに体脂肪燃焼作用が有ることを見出している（特許文献１）。また、モノグリセライド、特にＩＰＡモノグリセライドにＰＰＡＲ活性化作用が高いことを見出している（特許文献２）。しかし、ＤＨＡモノグリセライドのＰＰＡＲ活性化作用については、未だ明らかにされていない。
【０００５】
　ここで、ＰＰＡＲとは、核内受容体の１種で、ペルオキシソーム増殖剤により活性化を受けるレセプターのことである（Peroxisome Proliferator Activated Receptor：ペルオキシソーム増殖剤活性化受容体）。最近の研究から、このＰＰＡＲが、非常に多くの生理、病理現象に関わっていることが明らかになっている。すなわち、高脂血症治療薬であるフィブラート系化合物や、糖尿病治療薬として知られるチアゾリジン誘導体が、ＰＰＡＲのアゴニストであることが明らかにされて以来、これらの化合物に続く高脂血症やインスリン抵抗性、糖尿病の改善薬の開発が試みられている（非特許文献４〜６）。
【０００６】
　この他にもモノグリセライドに関する種々の技術が開示されている。モノグリセライドの製造法として、特許文献３〜７等が開示されている。また、特許文献８には、高度不飽和脂肪酸含有モノグリセライドが開示されている。しかし、これらのモノグリセライドはいずれも風味の点で問題がある。
【０００７】
　更に、特許文献９及び１０には、モノグリセライドを含む部分グリセライドが開示されている。これらの技術は、ジグリセライドを主成分とするため、トリグリセライドに比べて水への分散性が良好である。しかし、モノグリセライドが少ないために水を取り込むことができない等、加工特性の点で課題がある。
　このように、ＩＰＡやＤＨＡを含む油脂には、いろいろな健康機能が解明されてきている。しかし、加工特性、風味等の点で課題があり、充分な技術が確立されていないのが現状である。
【非特許文献１】日本油化学会誌, 48, 1017(1999)
【非特許文献２】Atherosclerosis, 50, 3-10(1984)
【非特許文献３】Lipids, 32, 1129-1136(1997)
【非特許文献４】細胞, 31(6), 218-234(1999)
【非特許文献５】J. Lipid Res. 37, 907-925(1996)
【非特許文献６】Curr. Opin. Lipidol. 10, 151-159(1999)
【特許文献１】特開２００１−６４６７２号公報
【特許文献２】特開２００１−３５４５５８号公報
【特許文献３】特開平３−１０３４９９号公報
【特許文献４】特開平８−２１４８９２号公報
【特許文献５】特開平１０−５７０８６号公報
【特許文献６】特開２０００−２１２５８８号公報
【特許文献７】特開２００１−３２９２９１号公報
【特許文献８】特開平７−３９３０２号公報
【特許文献９】特開平８−６０１８１号公報
【特許文献１０】特開平１０−２６５７９５号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
　かかる観点から、食品としての加工特性や風味が良好で、優れた生理作用を有する油脂組成物の開発が望まれている。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
　本発明者は、モノグリセライドの脂肪酸組成について種々検討した。その結果、構成脂肪酸としてＩＰＡ及びＤＨＡを特定量含むモノグリセライド混合物が、風味良好で、しかも顕著なゲル化性及び水取込性を有することから加工特性に優れており、かつＰＰＡＲ活性化作用、β酸化活性化作用が極めて強く、健康上有益な食品、飼料及び医薬品として有用であることを見出した。
【００１０】
　すなわち、本発明は、次の成分（Ａ）及び（Ｂ）：
（Ａ）構成脂肪酸の２０〜７５重量％がドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）であり、０．１〜２５重量％がイコサペンタエン酸（ＩＰＡ）であり、それらの重量比（ＤＨＡ／ＩＰＡ）が２以上であるモノグリセライド　　８０〜９９．９重量％、
（Ｂ）ジグリセライド　　　　　　　　０．１〜２０重量％
を含有する油脂組成物を提供するものである。
　また、本発明は、上記油脂組成物を含有する食品、飼料及び医薬品を提供するものである。
【発明の効果】
【００１１】
　本発明油脂組成物は、加工特性に優れ、風味良好で、ＰＰＡＲ活性化作用、β酸化活性化作用に優れ糖尿病、高脂血症、肥満用の医薬用途の他に、食品、飼料として有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１２】
　本発明の油脂組成物のモノグリセライド（成分（Ａ））を構成する脂肪酸のうち、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）の含量は、生理効果、加工特性、風味の点で２０〜７５重量％であり、さらに３０〜６５重量％、特に３５〜５５重量％であるのが好ましい。
【００１３】
　また、モノグリセライド（成分（Ａ））を構成する脂肪酸のうち、イコサペンタエン酸（ＩＰＡ）の含量は、生理効果、加工特性、風味の点で０．１〜２５重量％であり、さらに０．１〜２０重量％、特に０．１〜１５重量％であるのが好ましい。
【００１４】
　モノグリセライド中のＤＨＡとＩＰＡの重量比（ＤＨＡ／ＩＰＡ）は、風味、加工特性、生理効果の点から、２以上であることが必要で、好ましくは２〜２０、より好ましくは３〜１３、更に４〜１１、特に５〜８であることが好ましい。
【００１５】
　モノグリセライド（成分（Ａ））の残余の構成脂肪酸としては、ω９系不飽和脂肪酸、ω６系不飽和脂肪酸、飽和脂肪酸等が含まれる。ここで、例えばオレイン酸等の炭素数８〜２２のω９系不飽和脂肪酸は、工業的生産性、脂肪酸の摂取バランスの点から０〜５０重量％、更に０．１〜２５重量％、特に０．１〜１５重量％含有するのが好ましい。
【００１６】
　また、例えばリノール酸、γ−リノレン酸等の炭素数８〜２２のω６系不飽和脂肪酸は、工業的生産性、脂肪酸の摂取バランスの点で０．１〜２５重量％、更に０．１〜１０重量％、特に０．２〜５重量％含有するのが好ましい。
　更に、飽和脂肪酸は、工業的生産性、生理効果の点から０〜３０重量％、更に０．１〜２０重量％、特に０．５〜１５重量％含有するのが好ましい。
【００１７】
　かかるモノグリセライド（成分（Ａ））は、生理効果、加工特性の点で、本発明油脂組成物中に８０〜９９．９重量％含まれることが必要で、好ましくは９０〜９９重量％、更に９２．９〜９７重量％、特に９３〜９７重量％含まれるのが好ましい。
【００１８】
　ジグリセライド（成分（Ｂ））は、加工特性、工業的生産性、風味の点で、本発明油脂組成物中に０．１〜２０重量％含有することが必要で、好ましくは１〜１０重量％、更に２．９〜７重量％、特に３〜７重量％含有するのが好ましい。
　ジグリセライド（成分（Ｂ））の構成脂肪酸は、モノグリセライドと同様であるのが工業的生産性の点で好ましい。
【００１９】
　本発明の油脂組成物において、トリグリセライドの含有量は、生理効果、加工特性、工業的生産性の点で、１９．９重量％以下であるのが好ましく、更に０〜９重量％、特に０．０１〜４重量％、殊更０．１〜４重量％であるのが好ましい。
　トリグリセライドの構成脂肪酸は、モノグリセライドと同様であるのが工業的生産性の点で好ましい。
【００２０】
　本発明の油脂組成物において、遊離脂肪酸又はその塩の含有量は、風味、安定性、工業的生産性の点から、５重量％以下であるのが好ましく、更に０〜２．５重量％、特に０．０１〜１重量％、殊更０．１〜０．５重量％であるのが好ましい。
　本発明の油脂組成物の遊離脂肪酸又はその塩は、モノグリセライドの構成脂肪酸と同様であるのが工業的生産性の点で好ましい。
【００２１】
　かかる特定のグリセライド組成及び脂肪酸組成を有する本発明の油脂組成物は、例えば、リパーゼ等の酵素を用いたグリセリンと脂肪酸とのエステル化反応や、アルカリ触媒等を用いたグリセリンと油脂とのエステル交換反応等により製造することができる。また、後記製造例に示すように、ジオキソラン等の保護基をグリセリンに結合した後、油脂とエステル交換反応を行い、次いで保護基を外すことにより目的とする油脂組成物を製造することもできる。
【００２２】
　本発明の油脂組成物は、脱ガム、脱酸、水洗、脱色、脱臭等の精製を施して使用するのが風味、安定性の点で好ましいが、特に過酸化物価（ＰＯＶ）が２０以下、好ましくは１０以下、より好ましくは７以下、更に好ましくは５以下、特に好ましくは３以下、最も好ましくは０．１〜１とするのが好ましい。更には、ロビボンド法（５　１／４インチガラスセル使用）による色（１０Ｒ＋Ｙ）が５０以下、好ましくは４０以下、更に好ましくは３０以下、特に５〜２５とするのが好ましい。
【００２３】
　本発明の油脂組成物には、抗酸化剤（成分（Ｃ））を添加するのが、風味、安定性の点で好ましい。抗酸化剤は通常、食品、医薬品に使用されるものであればいずれでもよいが、カテキン、トコフェロール、ビタミンＣ脂肪酸エステル、ブチルヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、ブチルヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ターシャルブチルヒドロキノン（ＴＢＨＱ）、リン脂質、天然抗酸化成分の１種又は２種以上の組合せが好ましく、特にトコフェロール、カテキンが好ましい。ビタミンＣ脂肪酸エステルとしては、パルミチン酸エステル、ステアリン酸エステルが、天然抗酸化成分としては、ローズマリー等のハーブ、桃の葉や根塊からの抽出物等が挙げられる。抗酸化剤は本発明の油脂組成物に０．０１〜５重量％、特に０．０５〜１重量％添加することが好ましい。
【００２４】
　本発明の油脂組成物には、コレステロール低下効果の点で、植物ステロール（成分（Ｄ））を含有するのが好ましい。植物ステロールは、本発明の油脂組成物に０．０５〜１９．９重量％含有するのが好ましく、更に０．３〜４．７重量％、特に１．２〜４．７重量％含有するのが好ましい。ここで植物ステロールとしては、例えばα−シトステロール、β−シトステロール、スチグマステロール、カンペステロール、α−シトスタノール、β−シトスタノール、スチグマスタノール、カンペスタノール、シクロアルテノール等のフリー体、及びこれらの脂肪酸エステル、フェルラ酸エステル、桂皮酸エステル等のエステル体が挙げられる。
【００２５】
　本発明の油脂組成物には、更に結晶抑制剤を添加するのが、外観、作業性の点で好ましい。本発明で使用する結晶抑制剤としては、ポリグリセリン縮合リシノレイン酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、プロピレングリコール脂肪酸エステルのポリオール脂肪酸エステルが挙げられる。またポリオール脂肪酸エステルは、ＨＬＢ（Griffinの計算式）が４以下、特に３以下のポリグリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステルが好ましい。本発明の油脂組成物に、結晶抑制剤は０．０２〜５重量％、特に０．０５〜２重量％含有するのが好ましい。
【００２６】
　かくして得られた油脂組成物は、極めて優れたＰＰＡＲ活性化作用、β酸化活性化作用を有し、更に良好なゲル化性及び水取込性を有することから加工特性や風味に優れている。かかる優れた特性を有するため、本発明の油脂組成物は食品、飼料及び医薬品に利用することができる。
【００２７】
　食品としては、該油脂組成物を食品の一部として含有する油脂含有食品や食品添加物に用いることができる。かかる油脂含有食品としては、例えば特定の機能を発揮して健康増進を図る健康食品が挙げられる。また、食品添加物としては、乳化、解乳化、可溶化、分散、湿潤、コーティング、起泡、消泡、浸透、離型、洗浄、抗菌、品質改良等の目的で、乳化剤、品質改良剤等として食品に補助的に用いることができる。
【００２８】
　具体的な食品としては、かかる油脂組成物を配合したカプセル剤、錠剤、顆粒剤、粉末剤、パン、ケーキ、クッキー、パイ、ピザクラスト、ベーカリーミックス等のベーカリー食品、スープ、ソース、アイスクリーム、コーヒーホワイトナー、ドレッシング、マヨネーズ、ホイップクリーム等の水中油型乳化食品、マーガリン、スプレッド、バタークリーム等の油中水型乳化食品、チョコレート、キャンデー、キャラメル、タブレット等の菓子、ソーセージ、ハム、ハンバーグ等の肉加工食品の他、飲料、麺、惣菜、冷凍食品、レトルト食品等が挙げられる。かかる食品は、上記油脂組成物の他に、油脂含有食品や食品添加物の種類に応じて一般に用いられる食品原料を添加して製造することができる。
【００２９】
　本発明の油脂組成物の油脂含有食品への配合量は、食品の種類によっても異なるが、一般に０．１〜１００重量％、特に１〜８０重量％が好ましい。また、本発明の油脂組成物の食品添加物への配合量は、食品添加物の用途によっても異なるが、一般に１〜１００重量％、特に８０〜１００重量％が好ましい。本発明の食品添加物の食品への配合量は、食品添加物の用途によっても異なるが、一般に０．０１〜１０重量％、特に０．１〜５重量％が好ましい。
【００３０】
　医薬品としては、例えば散剤、顆粒剤、カプセル剤、丸剤、錠剤等の固形製剤、水剤、懸濁剤、乳剤等の液剤等の経口投与剤が挙げられる。この経口投与剤は、上記油脂組成物の他、経口投与剤の形態に応じて一般に用いられる賦形剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤、界面活性剤、アルコール類、水、水溶性高分子、甘味料、矯味剤、酸味料等を添加して製造することができる。経口投与用医薬品としては、ＰＰＡＲ活性化作用、β酸化活性化作用に基づき、糖尿病予防治療薬、肥満予防治療薬、高脂血症予防治療薬が挙げられる。本発明の油脂組成物の経口投与用医薬品への配合量は、医薬品の用途及び形態によっても異なるが、一般に０．１〜１００重量％、特に１〜８０重量％が好ましい。また、投与量は、油脂組成物として、１日当たり０．１〜５０ｇを、１〜数回に分けて投与することが好ましい。
【００３１】
　飼料としては、豚、鶏、魚等の動物用のエサだけでなく、犬、猫等のペット用のペットフードが挙げられる。本発明の油脂組成物の飼料への配合量は、１〜４０重量％、さらに１〜３０重量％、特に２〜２０重量％であるのが好ましい。本発明の油脂組成物は、飼料中の全部又は一部の油脂を置き換えて用いることができる。
【００３２】
　かかる飼料は、上記油脂組成物の他に、肉類、蛋白質、穀物類、ぬか類、粕類、糖類、野菜、ビタミン類、ミネラル類等一般に用いられる飼料原料とともに混合して製造される。肉類としては、牛、豚、羊（マトン又はラム）、うさぎ、カンガルー等の畜肉、獣肉及びその副生物、加工品；ミートボール、ミートボーンミール、チキンミール等の上記原料のレンダリング物；まぐろ、かつお、あじ、いわし、ほたて、さざえ、魚粉（フィシュミール）等の魚介類等が例示される。蛋白質としては、カゼイン、ホエー等の乳蛋白質や、大豆蛋白質等の植物蛋白質等が、穀物類としては、小麦、大麦、ライ麦、マイロ、トウモロコシ等が挙げられる。ぬか類としては、米ぬか、ふすま等が、粕類としては、大豆粕等が例示される。飼料中の肉類、蛋白質、穀物類、ぬか類、粕類の合計量は、５〜９５重量％であるのが好ましい。糖類としては、ぶどう糖、オリゴ糖、砂糖、糖みつ、澱粉、液糖等が挙げられ、飼料中５〜８０重量％含有するのが好ましい。野菜類としては、野菜エキス等が挙げられ、飼料中１〜３０重量％含有するのが好ましい。ビタミン類としては、Ａ、Ｂ１、Ｂ２、Ｄ、Ｅ、ナイアシン、パントテン酸、カロチン等が挙げられ、飼料中０．０５〜１０重量％含有するのが好ましい。ミネラル類としては、カルシウム、リン、ナトリウム、カリウム、鉄、マグネシウム、亜鉛等が挙げられ、飼料中０．０５〜１０重量％含有するのが好ましい。この他、一般的に飼料に使用されるゲル化剤、保型剤、pH調整剤、調味料、防腐剤、栄養補強剤等も含有することができる。
【実施例】
【００３３】
実施例１　　油脂組成物の製造
　次の油脂組成物を製造した。得られた油脂組成物の組成を表１に示す。グリセライド組成は、ＨＰＬＣ法にて測定した（カラム：「TSKgelG2500H」東ソー（株）製、溶出溶媒：ＴＨＦ、溶媒流速：０．４mL／分、検出器：ＲＩ）。脂肪酸組成は、メチルエステル化後、ＧＬＣ法にて測定した（日本油化学協会「基準油脂分析試験法」2.4.1.2-1996、2.4.2.2-1996）。
【００３４】
　油脂組成物１（本発明品）
　４ツ口フラスコに、２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−メタノール４２２．９ｇと水酸化ナトリウム０．６４ｇを入れ、８０℃にて減圧脱水とアルコラート化を行った後、５０℃に冷却した。これにＤＨＡ高含有油「ＤＨＡ−２２」（マルハ（株）製）３５５．３ｇを加え、１．５時間反応を行った後、５０％硫酸で中和した。次に１．３３kPa、８０〜１００℃で減圧蒸留を行い、水と２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−メタノールを留去した。これを水洗し、モノグリセライドアセタール４５１．４ｇを得た。
　得られたモノグリセライドアセタール２２０ｇに、酸性白土（ガレオンアースＮＶ、水澤化学（株）製）１３．２ｇを加えた。反応系内に、１時間あたりモノグリセライドアセタールに対して１０％の水蒸気を導入して、反応時に生成するアセトンと過剰な水蒸気を系外に除去しながら、脱アセタール化反応を６時間行った（７０℃、１３．３kPa）。次いで、酸吸着剤（ＫＷ６００Ｓ、協和化学（株）製）を６．６ｇ加えた後、０．５時間脱水を行った（６．６５kPa、７０℃）。これを濾過し、モノグリセライド１７０．７ｇを得た。これにトコフェロール「イーミックスＤ」（エーザイ（株）製）を２００ppm加え、油脂組成物１を製造した。
【００３５】
　油脂組成物２（本発明品）
　ＤＨＡ高含有油として、「ＤＨＡ−４５」（マルハ（株）製）を用い、油脂組成物１と同様にして、油脂組成物２を製造した。
【００３６】
　油脂組成物３（本発明品）
　４ツ口フラスコに、ＤＨＡ高含有油「ＤＨＡ−７０Ｇ」（日本化学飼料（株）製）１０００ｇ、グリセリン２８０ｇと水酸化ナトリウム１ｇを入れ、窒素気流下にて、１７０℃で２時間反応を行った。反応終了後、リン酸０．８８ｇを加え、中和した。次いで、１０分間脱グリセリンを行った（１８０℃、０．６６７kPa）後、薄膜蒸留を行った（１８５℃、０．００４kPa）。薄膜蒸留で得られた留分を採取し、トコフェロール「イーミックスＤ」（エーザイ（株）製）を２００ppm添加して、油脂組成物３を得た。
【００３７】
　油脂組成物４（比較品）
　油脂組成物４として、ＤＨＡ高含有油「ＤＨＡ−２２」（マルハ（株）製）を用いた。
【００３８】
　油脂組成物５（比較品）
　油脂組成物３の製造時に生成した薄膜蒸留の残分を採取した。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（「ワコーゲルＣ−２００」（和光純薬（株）製））で、溶媒としてヘキサンと酢酸エチル（最初１００：０、次いで９５：５、次いで９０：１０、次いで８０：２０、最後に７０：３０、ｖ／ｖ）を用いて分画した。次いで、溶媒をエバポレーターで留去した。得られた各画分を混合した後、トコフェロール「イーミックスＤ」（エーザイ（株）製）を２００ppm加え、油脂組成物５を製造した。
　油脂組成物６（比較品）
【００３９】
　油脂組成物６として、高純度モノグリセライド「エキセルＯ−９５Ｒ」（花王（株）製）を用いた。
【００４０】
　油脂組成物７（比較品）
　「eicosapentaenoic acid」（Sigma社製）を用いた。
【００４１】
　油脂組成物８（比較品）
　「docosahexaenoic acid」（Sigma社製）を用いた。
【００４２】
実施例２　　ＰＰＡＲγ活性化試験
　小腸上皮細胞株ＩＥＣ−６を１２ウェルプレートにまき、ＤＭＥＭ（５％ＦＣＳ）中で１日培養した。ここにＧＡＬ４、ＤＮＡ結合ドメイン（ＤＢＤ）とＰＰＡＲγリガンド結合ドメイン（ＬＢＤ）のキメラ分子を発現するプラスミド（pGAL4-PPARγ-LBD）と、蛍ルシフェラーゼ遺伝子の上流にＧＡＬ４結合配列を含むレポータープラスミド（pREP）を同時に各々０．５μg／wellとなるようトランスフェクション試薬（Superfect transfection reagent；QIAGEN）を用いて導入した。尚、トランスフェクション効率をモニタリングするため、ｐＧＡＬ４−ＰＰＡＲγ−ＬＢＤに、ウミシイタケルシフェラーゼ遺伝子を同時に組み込んだ。その後、培養液を被験物質（５００μM）を含むＤＭＥＭ（＋２５０μM BSA）培地に交換し、更に２４時間培養した。ＰＢＳにて洗浄後、デュアルルシフェラーゼアッセイシステム（Promega）を用いて細胞を溶解した。次いで、該溶解液にルシフェリンを含む基質溶液を加え、ルミノメーターにて蛍及びウミシイタケのルシフェラーゼ活性を各々測定した。このようにしてＰＰＡＲγ依存的な遺伝子の転写活性（ルシフェラーゼ活性）を測定することにより、ＰＰＡＲγ活性化能を評価した。尚、ＰＰＡＲγ依存的な転写活性（ルシフェラーゼ活性）は以下のように定義した。
【００４３】
　ＰＰＡＲγ依存的な遺伝子の転写活性（ルシフェラーゼ活性）＝（p REPによる蛍ルシフェラーゼ活性）／（pGAL4-PPARγ-LBDによるウミシイタケルシフェラーゼ活性）。
【００４４】
　尚、コントロールにおけるＰＰＡＲγ依存的転写活性を１００とし、それに対する相対値を表１に示す。
【００４５】
実施例３　　ゲル化性の評価
　各油脂：水＝７０：３０（重量／重量）において、ゲル化性を目視で観察し、下記評価基準にて、評価を行った。結果を表１に示す。
　　Ａ：流動性がなく、ゲル化している。
　　Ｂ：流動性があまりなく、ややゲル化している。
　　Ｃ：流動性があり、一部ゲル化している。
　　Ｄ：流動性があり、全くゲル化していない。
【００４６】
実施例４　　劣化臭の評価
　実施例３にて作製したサンプル（各油脂：水＝７０：３０）を室温にて、１週間静置した。この臭いを嗅ぎ、下記評価基準にて、劣化臭の官能評価を行った。結果を表１に示す。
　　Ａ：劣化臭が殆どなく、不快ではない。
　　Ｂ：劣化臭がややあるが、あまり不快でない。
　　Ｃ：劣化臭があり、不快である。
　　Ｄ：強い劣化臭があり、非常に不快である。
【００４７】
実施例５　　水取込性の評価
　５０℃に加温した各サンプルに、対全系で何重量％まで水を取り込ませることができるかを５重量％毎に調べた。水が分離した点の１つ手前を、水取込性の値とした。結果を表１に示す。
【００４８】
【表１】
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【００４９】
　表１より、本発明品は、ゲル化性が高く、かつ水取込性に優れているので、多量の水を取り込んだゲルを形成しやすく、しかも劣化臭が少ないことが示された。従って、本発明の油脂組成物は、種々の食品への加工特性に優れ、かつ風味も良好である。このような特徴を有することから、例えば、冷凍・解凍時のドリップが少なくなる、水分活性（Ａｗ）が低下して保存性が向上する等のメリットが生じる。これに対しモノグリセライド含量の低い比較品４及び５はゲル化性が悪く、水を取り込むことができない。
　また、本発明の油脂組成物は、比較品６（モノグリセライド含量は高いが、脂肪酸組成が異なる）に比べて、極めて強力なＰＰＡＲγ活性化作用を有することが示された。
【００５０】
実施例６　　動物実験（β酸化活性化試験）
　表２に示す配合の基本食に、油脂組成物２（本発明品）又は油脂組成物６（比較品）を１０重量部添加した餌を、Ｃ５７ＢＬ／６マウス（ｎ＝６）に１０日間摂取させた。最終日に解剖して、小腸を採取し、ｍＲＮＡを単離した。次いで、Ｒｅａｌ　ｔｉｍｅ　ＲＴ−ＰＣＲ法により、ＡＣＯ（Ａｃｙｌ−ＣｏＡ　Ｏｘｉｄａｓｅ）のｍＲＮＡの発現量を測定した。その結果を、油脂組成物６を摂取して発現したｍＲＮＡ量を１．００とした相対量で、表３に示す。
【００５１】
【表２】
2004083902.tif 000003
【００５２】
【表３】
2004083902.tif 000004
【００５３】
　本発明の油脂組成物２を摂取することで、β酸化関連酵素であるＡＣＯのｍＲＮＡ発現量が小腸で顕著に増加し、β酸化の活性化が示された。
【００５４】
実施例７　　錠剤
　油脂組成物２を１００重量部、「ミックスビタミンＥ　ＭＤＥ−６０００」（八代（株）製）０．０２重量部、カテキン「サンカートルＮｏ．１」（太陽化学（株）製）０．１重量部、「ビタミンＣパルミテート」（ロッシュ社製）０．０２重量部、及び植物ステロール「CANOLA STERYLESTERS」（ＡＤＭ（株）製）２．０重量部を混合して油脂組成物７を得た。該油脂組成物１０重量部、コーンスターチ４４重量部、結晶性セルロース４０重量部、カルボキシメチルセルロースカルシウム５重量部、無水ケイ酸０．５重量部及びステアリン酸マグネシウム０．５重量部の混合物を打錠して錠剤（２００mg／個）を製造した。
【００５５】
実施例８　　ソフトカプセル
　油脂組成物３を１００重量部、「ミックスビタミンＥ　ＭＤＥ−６０００」（八代（株）製）０．０２重量部、カテキン「サンカートルＮｏ．１」（太陽化学（株）製）０．５重量部、ローズマリー抽出物「ハーバロックスタイプＨＴ−Ｏ」（カルセック社製）０．１重量部及びポリグリセリン脂肪酸エステル「ＴＨＬ−３」（阪本薬品工業（株）製）０．２重量部を混合して油脂組成物８を得た。該油脂組成物３００mgをオバール型のソフトカプセルに封入し、ソフトカプセルを作製した。
【００５６】
実施例９　　さつま揚げ
　油脂組成物１を６重量部、スケソウタラ（すり身）６００重量部、砂糖３０重量部、醤油３０重量部、味醂５重量部、馬鈴薯澱粉５重量部、全卵１００重量部をフードプロセッサーにてよく撹拌・混合した。これを５０ｇずつ小判型に成形した後、１８０℃のサラダ油（日清製油製）で４分間揚げて、さつま揚げを作った。
【００５７】
実施例１０　　スプレッド
　油相：油脂組成物２を０．５重量部、部分硬化大豆油６８．８重量部、レシチン０．１重量部、縮合リシノレイン酸エステル０．５重量部、フレーバー０．１重量部
　水相：２８．４重量部、脱脂粉乳０．３重量部、食塩１．３重量部
　上記油相と水相を調製し、次いで、ホモミキサー（特殊幾化工業製）により１０分間混合・乳化を行った。得られた乳化物を常法により急冷・可塑化してスプレッドを得た。
【００５８】
実施例１１　　ペットフード
　油脂組成物７を２重量部、トウモロコシ粉１５重量部、ミートミール８重量部、小麦粉２６重量部、脱脂大豆２０重量部、魚粉１６重量部、ビートパルプ４重量部、骨粉２重量部、ビタミン・ミネラル混合物４重量部、ラード３重量部を混合し、犬用ペットフードを作製した。
【手続補正書】
【提出日】平成15年8月27日(2003.8.27)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４２】
実施例２　　ＰＰＡＲγ活性化試験
　小腸上皮細胞株ＩＥＣ−６を１２ウェルプレートにまき、ＤＭＥＭ（５％ＦＣＳ）中で
１日培養した。ここにＧＡＬ４−ＤＮＡ結合ドメイン（ＤＢＤ）とＰＰＡＲγリガンド結
合ドメイン（ＬＢＤ）のキメラ分子を発現するプラスミド（pGAL4-PPARγ-LBD）と、蛍ル
シフェラーゼ遺伝子の上流にＧＡＬ４結合配列を含むレポータープラスミド（pREP）を同
時に各々０．５μg／wellとなるようトランスフェクション試薬（Superfect transfectio
n reagent；QIAGEN）を用いて導入した。尚、トランスフェクション効率をモニタリング
するため、ｐＧＡＬ４−ＰＰＡＲγ−ＬＢＤに、ウミシイタケルシフェラーゼ遺伝子を同
時に組み込んだ。その後、培養液を被験物質（５００μM）を含むＤＭＥＭ（＋２５０μM
BSA）培地に交換し、更に２４時間培養した。ＰＢＳにて洗浄後、デュアルルシフェラー
ゼアッセイシステム（Promega）を用いて細胞を溶解した。次いで、該溶解液にルシフェ
リンを含む基質溶液を加え、ルミノメーターにて蛍及びウミシイタケのルシフェラーゼ活
性を各々測定した。このようにしてＰＰＡＲγ依存的な遺伝子の転写活性（ルシフェラー
ゼ活性）を測定することにより、ＰＰＡＲγ活性化能を評価した。尚、ＰＰＡＲγ依存的
な転写活性（ルシフェラーゼ活性）は以下のように定義した。