(57)【要約】【課題】皮膚のシワを減少させたり皮膚のハリを改善したり皮膚の弛みを減少させたりすることができる老化防止剤を提供する。【解決手段】親水性有機溶媒と水との混合液によるスピルリナからの抽出物を含有する。スピルリナの抽出物により皮膚繊維芽細胞を賦活することができる。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
親水性有機溶媒と水との混合液によるスピルリナからの抽出物を含有して成ることを特徴とする老化防止剤。
【請求項２】
親水性有機溶媒で抽出される部分を除いた後のスピルリナから親水性有機溶媒と水との混合液による抽出物を得ることを特徴とする請求項１に記載の老化防止剤。
【請求項３】
親水性有機溶媒と水との混合液が、容量比で親水性有機溶媒：水＝６５：３５〜８５：１５であることを特徴とする請求項１又は２に記載の老化防止剤。
【請求項４】
アスコルビン酸、アスコルビン酸塩、アスコルビン酸誘導体から選ばれる少なくとも一つを含有して成ることを特徴とする請求項１乃至３のいずれかに記載の老化防止剤。
【請求項５】
請求項１乃至４のいずれかに記載の老化防止剤を含有して成ることを特徴とする皮膚外用剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、皮膚（肌）のシワを減少させたり皮膚のハリを改善したり皮膚の弛みを減少させたりするための老化防止剤及び皮膚外用剤に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
従来より、藻類であるクロレラの水抽出物や有機溶媒抽出物に関して、細胞賦活作用や細胞芽細胞増殖作用があることが知られている（例えば、特許文献１、２参照）。
【０００３】
しかしながら、同じ藻類であるスピルリナは化粧料に利用することが知られているに過ぎない。例えば、特許文献３にはスピルリナに含有されているアミノ酸あるいはペプチド、蛋白質等を有効成分とする美容パック剤が記載されている。また、特許文献４にはスピルリナからの抽出物を含有する皮膚栄養剤が、特許文献５にはスピルリナからの抽出物を含有する養毛剤がそれぞれ開示されている。
【０００４】
そこで、本発明者らはスピルリナのより高度な利用方法について開発を行い、親水性有機溶媒と水の混合液によるスピルリナの抽出物に皮膚繊維芽細胞を賦活する作用があることを見出し、本発明に至ったものである。
【０００５】
【特許文献１】
特開平９−４０５２３号公報（特許請求の範囲等）
【特許文献２】
特開平１１−３３５２９３号公報（特許請求の範囲等）
【特許文献３】
特開昭５２−３１８３６号公報（特許請求の範囲等）
【特許文献４】
特開昭５４−３７８３５号公報（特許請求の範囲等）
【特許文献５】
特開昭５４−３５２２３号公報（特許請求の範囲等）
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、上記問題点に鑑みて為されたものであり、その目的は、皮膚のシワを減少させたり皮膚のハリを改善したり皮膚の弛みを減少させたりすることができる老化防止剤及び皮膚外用剤を提供することにある。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
本発明の請求項１に係る老化防止剤は、親水性有機溶媒と水との混合液によるスピルリナからの抽出物を含有して成ることを特徴とするものである。本発明によれば、スピルリナの抽出物により皮膚繊維芽細胞を賦活することができ、皮膚のシワを減少させたり皮膚のハリを改善したり皮膚の弛みを減少させたりすることができる。
【０００８】
また、本発明の請求項２に係る老化防止剤は、請求項１に加えて、親水性有機溶媒で抽出される部分を除いた後のスピルリナから親水性有機溶媒と水との混合液による抽出物を得るのが好ましい。この場合は、親水性有機溶媒と水との混合液でスピルリナから抽出する前に、クロロフィルなどの着色物質をスピルリナから除去することができ、得られる老化防止剤の色が薄くなって各種の用途に使用しやすくなり応用範囲を広げることができる。
【０００９】
また、本発明の請求項３に係る老化防止剤は、請求項１又は２に加えて、親水性有機溶媒と水との混合液が、容量比で親水性有機溶媒：水＝６５：３５〜８５：１５であるのが好ましい。この場合は、皮膚繊維芽細胞を賦活化する成分をスピルリナの抽出物に多く含ませることができ、抽出効率を高くすることができる。
【００１０】
また、本発明の請求項４に係る老化防止剤は、請求項１乃至３のいずれかに加えて、アスコルビン酸、アスコルビン酸塩、アスコルビン酸誘導体から選ばれる少なくとも一つを含有するのが好ましい。この場合は、アスコルビン酸等を含有しない場合に比べて、皮膚のシワを減少させたり皮膚のハリを改善したり皮膚の弛みを減少させたりする効果を向上させることができる。
【００１１】
本発明の請求項５に係る皮膚外用剤は、請求項１乃至４のいずれかに記載の老化防止剤を含有するものである。この場合、老化防止剤を直接皮膚に塗布して作用させることができ、経口の場合に比べて、スピルリナの抽出物による皮膚繊維芽細胞の賦活化を効率よく行うことができるものである。
【００１２】
【発明の実施の形態】
以下、本発明の実施の形態を説明する。
【００１３】
本発明の老化防止剤は、親水性有機溶媒と水との混合液によるスピルリナからの抽出物を含有するものである。親水性有機溶媒としては、メタノール、エタノール、アセトン、ブタノールあるいはグリセリン、１，３ブチレングリコール、プロピレングリコールなどの多価アルコールなどを例示することができる。本発明ではこれらを単独で用いたり二種類以上併用したりすることができる。また、上記の親水性有機溶媒の中でも取扱いが容易なメタノールやエタノールを用いるのが好ましい。
【００１４】
親水性有機溶媒としてメタノールを用いる場合、容量比でメタノール：水＝７０：３０〜８５：１５の割合でメタノールと水とを混合することにより、混合液を調製することが好ましい。また、親水性有機溶媒としてエタノールを用いる場合、容量比でエタノール：水＝６５：３５〜８５：１５の割合でエタノールと水とを混合することにより、混合液を調製することが好ましい。このような混合割合の混合液を用いてスピルリナからの抽出物を得ることによって、皮膚繊維芽細胞を賦活する成分（物質）をスピルリナからの抽出物中に多く含ませることができ、抽出効率を高くすることができるものである。尚、親水性有機溶媒としてメタノールとエタノール以外のものを使用する場合は、メタノールやエタノールと水との混合液で抽出される物質の割合を参考にして、親水性有機溶媒と水との混合割合を決定することができるが、概ね、容量比で親水性有機溶媒：水＝６５：３５〜８５：１５であるのが好ましい。
【００１５】
そして、粉砕等により細かくされたスピルリナの粉末を上記の混合液に浸漬することによって、混合液中にスピルリナから皮膚繊維芽細胞を賦活する成分を抽出することができる。この時、スピルリナ１００ｇに対して親水性有機溶媒と水との混合液を５００ミリリットル〜１０リットル配合することによって抽出を行うことができるが、この条件はスピルリナの粉砕の状態や攪拌条件によって異なるものである。また、抽出温度、抽出時間、攪拌条件は、スピルリナの状態（粉砕の状態や浸漬量）、用途、抽出溶媒の種類等によって変わるが、例えば、抽出温度は室温〜５０℃、抽出時間は１０分間〜５日間で、撹拌は連続的、間欠的のいずれであってもよい。撹拌は手動でも攪拌機を用いても良い。
【００１６】
上記のようにしてスピルリナから皮膚繊維芽細胞を賦活する成分を混合液中に抽出した後、スピルリナの残渣などの不溶物を混合液から除去することによって、皮膚繊維芽細胞を賦活する成分を溶解して含有する混合液を得ることができ、この混合液を本発明の老化防止剤としてそのまま用いることができる。尚、不溶物を混合液から除去するにあたっては、デカンテーション、遠心分離、ろ過などの公知の方法を採用することができる。
【００１７】
また、皮膚繊維芽細胞を賦活する成分を含有する混合液を精製して本発明の老化防止剤としてもよく、この場合、皮膚繊維芽細胞の賦活を指標として、イオン交換、順相、逆相、分子ふるい、アフィニティ、薄層等のクロマトグラフィー、向流分配、溶媒抽出等の公知の方法を単独或いは組み合わせて用いることができる。
【００１８】
また、皮膚繊維芽細胞を賦活する成分を含有する混合液から親水性有機溶媒と水の一方あるいは両方を除去することによって本発明の老化防止剤としてもよく、この場合、除去の方法は乾燥、減圧濃縮、凍結乾燥等の公知の方法を単独或いは組み合わせて用いることができる。尚、親水性有機溶媒と水は必要に応じて全部あるいは一部を除去することができる。
【００１９】
上記のような本発明の老化防止剤はそのまま人体に適用する他に、他の配合物質とともに製剤化して人体に適用してもよい。また、本発明の老化防止剤において人体への適用方法としては、経口や経皮などを例示することができる。本発明の老化防止剤を経口により人体に摂取する場合は、上記の老化防止剤と必要な既知の材料とを配合することにより、液剤、ペースト剤、粉剤、顆粒、カプセル剤、錠剤等に製剤化したり、あるいは菓子類、パン類、穀物調製加工品類、乳製品類、油脂加工品類、清涼飲料類、粉末飲料類、調味料類などの普通一般の飲食物や嗜好品に本発明の老化防止剤を配合したりすることができる。
【００２０】
また、本発明の老化防止剤を経皮により人体に摂取する場合は皮膚への塗布や付着などを行いやすいように皮膚外用剤とするのが好ましい。すなわち、本発明の皮膚外用剤は上記のような本発明の老化防止剤と必要な既知の材料とを配合することにより、パップ剤、プラスター剤、化粧水、クリーム、軟膏、エアゾール剤、乳剤、ローション、乳液、エッセンス、パック、ゲル剤、パウダー、ファンデーション、サンケア、浴用剤などとして製剤化したものである。
【００２１】
そして、本発明の老化防止剤は、親水性有機溶媒と水との混合液によるスピルリナからの抽出物を含有するので、この抽出物中に含まれている皮膚繊維芽細胞を賦活化する成分の作用により皮膚繊維芽細胞を賦活化することができる。皮膚繊維芽細胞は皮膚の三次元的構造の維持に重要な役割を持っており、加齢や紫外線などの影響により皮膚繊維芽細胞の機能が低下し、シワや弛みなどという皮膚上に現れる老化現象を引き起こす。すなわち、皮膚の老化を抑えるには皮膚繊維芽細胞の賦活化が有効であり、本発明ではこの皮膚繊維芽細胞の賦活化するものである。本発明者らは本発明の老化防止剤として用いる抽出物中に含まれている成分がビオプテリングリコシドであることを見出したが、このビオプテリングリコシドが皮膚繊維芽細胞を賦活する成分としてと考えられる。尚、ビオプテリングリコシドは化粧品等に利用されているが、この場合、紫外線吸収やチロシナーゼ活性阻害の作用を利用したものであり、本発明の作用とは大きく異なるものである。
【００２２】
また、本発明の老化防止剤にはアスコルビン酸、アスコルビン酸塩、アスコルビン酸誘導体から選ばれる少なくとも一つを含有するのが好ましい。アスコルビン酸塩及びアスコルビン酸誘導体としては、アスコルビン酸硫酸エステル及びその塩、アスコルビン酸リン酸エステル及びその塩、アスコルビン酸ジパルミテート、アスコルビン酸モノステアレート、アスコルビン酸グリコシドなどを例示することができるが、これに限定されるものではない。また、本発明では上記のアスコルビン酸、アスコルビン酸塩、アスコルビン酸誘導体を一つ或いは複数組み合わせて用いることができる。また、本発明の老化防止剤においてアスコルビン酸、アスコルビン酸塩、アスコルビン酸誘導体の配合量は、種類、剤形、用途等によって異なるが、スピルリナの抽出物に対して０．１〜３０重量％にすることができる。そして、本発明の老化防止剤はアスコルビン酸、アスコルビン酸塩、アスコルビン酸誘導体を配合することによって、配合しない場合に比べて、老化防止効果を向上させることができるものである。
【００２３】
また、本発明の老化防止剤において、上記のように親水性有機溶媒と水との混合液によりスピルリナから抽出物を得る前に、予め、スピルリナから親水性有機溶媒で抽出される部分を除くようにするのが好ましい。すなわち、スピルリナを親水性有機溶媒のみに浸漬し、これにより抽出される部分を除いた後、このスピルリナを上記のように親水性有機溶媒と水との混合液により抽出して抽出物を得て老化防止剤とするものである。この場合は、親水性有機溶媒としては上記と同様のものを使用することができる。また、親水性有機溶媒のみで抽出される物質は、クロロフィルなどの着色物質を含むものである。そして、このようにして得られる老化防止剤はスピルリナから着色物質を除去することができるので、色が薄くなって各種の用途に使用しやすくなる。
【００２４】
尚、本発明の老化防止剤の人体への摂取量は適量でよいが、経口の場合は１日当たり体重１ｋｇに対して０．１ｍｇ〜１ｇ摂取するのが好ましく、経皮の場合は１日当たり皮膚１ｃｍ２に対して０．００１〜１０ｍｇ摂取するのが好ましい。
【００２５】
【実施例】
以下本発明を実施例によって具体的に説明する。
【００２６】
以下、実施例によって、具体的に説明するが、本発明は、実施例によって、限定されるものではないことは云うまでもない。なお、実施例は各製品の製造における常法によって作成したので、配合量のみを示した。また、特に指定のない場合、「％」は重量％を表している。
【００２７】
（実施例１）
スピルリナの粉末の１００ｇに８０％（Ｖ／Ｖ）エタノールを２リットル加え、２時間攪拌を行った後、濾過した（使用濾紙はＮｏ．５Ｃ）。次に、濾過時の残留物を取り出した後、これに上記と同様にエタノールを加え、２時間攪拌を行った後、濾過した。この２回の濾過で得られた濾液を減圧乾燥することによって、スピルリナの抽出物（乾燥後の残留物）を得た。尚、８０％（Ｖ／Ｖ）エタノールは、容量比でエタノール：水＝８０：２０の混合液である。
【００２８】
（実施例２）
スピルリナの粉末の１００ｇにメタノールを２リットル加え、２時間攪拌を行った後、濾過した（使用濾紙はＮｏ．５Ｃ）。次に、濾過時の残留物を取り出した後、これに上記と同様にメタノールを加え、２時間攪拌を行った後、濾過した。さらに、濾過時の残留物を取り出した後、これに上記と同様にメタノールを加え、２時間攪拌を行った後、濾過した。
【００２９】
次に、濾過時の残留物を取り出した後、これに８０％（Ｖ／Ｖ）エタノールを２リットル加え、２時間攪拌を行った後、濾過した。次に、濾過時の残留物を取り出した後、これに上記と同様にエタノールを加え、２時間攪拌を行った後、濾過した。そして、上記のエタノールによる２回の濾過で得られた濾液を減圧乾燥することによって、スピルリナの抽出物（乾燥後の残留物）を得た。
【００３０】
（実施例３）錠剤の第１例
乳糖                                      ７０．０％
実施例２                                  １０．０％
ステアリン酸マグネシウム                  ２０．０％
この配合量により１個あたりの重量が５００ｍｇの錠剤を製造した。
【００３１】
（実施例４）錠剤の第２例
乳糖の配合量を６５．０％、アスコルビン酸の配合量を５．０％とした以外は実施例３と同様に配合して上記と同様の錠剤を製造した。
【００３２】
（実施例５）キャンディーの第１例
グラニュー糖                              ５０．０％
水飴                                      ４４．３％
クエン酸                                    ０．５％
香料                                        ０．１％
色素                                        ０．１％
実施例１                                    ５．０％
この配合量により１個あたりの重量が１ｇのキャンディーを製造した。
【００３３】
（実施例６）キャンディーの第２例
グラニュー糖の配合量を４５．０％、アスコルビン酸の配合量を５．０％とした以外は実施例５と同様に配合して上記と同様のキャンディーを製造した。
【００３４】
2004359554.tif 000002
（実施例８）クリームの第２例
精製水の配合量を３４．７％、アスコルビン酸リン酸マグネシウムの配合量を２．０％とした以外は実施例７と同様に配合してクリームを製造した。
【００３５】
（実施例９）美容液の第１例
ヒアルロン酸ナトリウム                      １．０％
コンドロイチン硫酸ナトリウム                ０．５％
乳酸菌発酵代謝物                            ０．１％
グリセリン                                  ５．０％
ソルビトール                                ２．０％
トレハロース                                １．０％
１，２−ペンタンジオール                    １．０％
フェノキシエタノール                        ０．３％
実施例２                                    １．０％
精製水                                    ８８．１％
（実施例１０）美容液の第２例
精製水の配合量を８６．１％、アスコルビン酸リン酸マグネシウムの配合量を２．０％とした以外は実施例９と同様に配合して美容液を製造した。
【００３６】
2004359554.tif 000003
（実施例１２）乳液の第２例
精製水の配合量を５０．４％、アスコルビン酸グリコシドの配合量を２．０％とした以外は実施例１１と同様に配合して乳液を製造した。
【００３７】
（実施例１３）入浴剤
硫酸ナトリウム                            ４８．８％
炭酸水素ナトリウム                        ４８．０％
カルボキシメチルセルロースナトリウム        １．０％
実施例１                                    ２．０％
色素                                        ０．１％
香料                                        ０．１％
（比較例１）
実施例２を配合しなかった以外は実施例３と同様にした。
【００３８】
（比較例２）
実施例１を配合しなかった以外は実施例５と同様にした。
【００３９】
（比較例３）
実施例２を配合しなかった以外は実施例７と同様にした。
【００４０】
（比較例４）
実施例２を配合しなかった以外は実施例９と同様にした。
【００４１】
（比較例５）
実施例２を配合しなかった以外は実施例１１と同様にした。
【００４２】
以下に示すように、本発明の効果を確認するための実験を行った。
【００４３】
（実験１）皮膚繊維芽細胞の賦活試験
１０％牛胎児血清含有イーグルＭＥＭ培地に懸濁したヒト皮膚由来正常繊維芽細胞を２４穴マイクロプレートに１穴当たり１００００個になるように分注し、３７℃、５％ＣＯ２−９５％ａｉｒ下で４８時間培養し、培地を無血清イーグルＭＥＭ培地に交換して同条件下４８時間培養した。次に、培地を、所定の濃度に実施例２（以下、被験物質という）を添加した０．５％牛胎児血清含有イーグルＭＥＭ培地に交換し、さらに５日間同条件で培養した。
【００４４】
ＭＴＴ［３−（４，５−ジメチル−２−チアゾリル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウム  ブロマイド］溶液（５ｍｇ／ｍｌリン酸緩衝液）０．１ｍｌを加えて４時間培養後、２０％ドデシル硫酸ナトリウム０．０１モル／リットル塩酸溶液１ｍｌを加えて色素を溶解し、５７０ｎｍの吸光度を測定した。対照として被験物質を入れないもの（コントロール）も同様に試験した。
【００４５】
結果を表１に示す。
【００４６】
【表１】
2004359554.tif 000004
【００４７】
表１から明らかなように、被験物質を加えたものは被験物質を加えてないものに比べて吸光度が大きくなり、ヒト皮膚由来正常繊維芽細胞を賦活化したと考えられる。
【００４８】
（実験２）使用試験
シワの気になる女性（４１〜６２歳）８０名を第１群〜第８群に分け（１群当たり１０名）、各群の女性に対して顔面を左右にＡとＢに区分して表２に示す組み合わせで実施例及び比較例を６ヶ月間使用した。尚、錠剤及びキャンディは１日３錠（個）とし、乳液、クリーム、美容液については適量（通常通り）使用した。
【００４９】
そして、各女性に６ヶ月後に評価を聞き取り調査し、以下の基準で評点をつけ、その平均値を算出した。結果を表３に示す。
Ａの方が非常によい  ＋５
Ａの方がよい        ＋３
Ａの方がややよい    ＋１
Ａ、Ｂの差がない      ０
Ｂの方がややよい    −１
Ｂの方がよい        −３
Ｂの方が非常によい  −５
【００５０】
【表２】
2004359554.tif 000005
【００５１】
【表３】
2004359554.tif 000006
【００５２】
表３から明らかなように、スピルリナからの抽出物を含有する実施例３〜１１は、スピルリナからの抽出物を含有しない比較例１〜５と対比して、皮膚の老化現象を低減することができた。
【００５３】
【発明の効果】
上記のように本発明の請求項１の発明は、親水性有機溶媒と水との混合液によるスピルリナからの抽出物を含有するので、スピルリナの抽出物により皮膚繊維芽細胞を賦活することができ、皮膚のシワを減少させたり皮膚のハリを改善したり皮膚の弛みを減少させたりすることができるものである。
【００５４】
また、本発明の請求項２の発明は、親水性有機溶媒で抽出される部分を除いた後のスピルリナから親水性有機溶媒と水との混合液による抽出物を得るので、親水性有機溶媒と水との混合液でスピルリナから抽出する前に、クロロフィルなどの着色物質をスピルリナから除去することができ、得られる老化防止剤の色が薄くなって各種の用途に使用しやすくなり応用範囲を広げることができるものである。
【００５５】
また、本発明の請求項３の発明は、親水性有機溶媒と水との混合液が、容量比で親水性有機溶媒：水＝６５：３５〜８５：１５であるので、皮膚繊維芽細胞を賦活化する成分をスピルリナの抽出物に多く含ませることができ、抽出効率を高くすることができるものである。
【００５６】
また、本発明の請求項４の発明は、アスコルビン酸、アスコルビン酸塩、アスコルビン酸誘導体から選ばれる少なくとも一つを含有するので、上記のアスコルビン酸等とスピルリナの抽出物との相乗効果により、アスコルビン酸等を含有しない場合に比べて、皮膚のシワを減少させたり皮膚のハリを改善したり皮膚の弛みを減少させたりする効果を向上させることができるものである。
【００５７】
本発明の請求項５に係る皮膚外用剤は、請求項１乃至４のいずれかに記載の老化防止剤を含有するので、老化防止剤を直接皮膚に塗布して作用させることができ、経口の場合に比べて、スピルリナの抽出物による皮膚繊維芽細胞の賦活化を効率よく行うことができるものである。