(57)【要約】【課題】新規なヒト由来プロスタグランジンＤ２合成酵素阻害剤の提供。【解決手段】１−アミノ−４−（４−スルファモイルアニリノ）−アントラキノン−２−スルホン酸（水溶性の赤色色素）、２−（２’−ベンゾチアゾリル）−５−スチリル−３−（４’−フタルヒドラジディル）テトラゾリウム塩化物を有効成分とするヒト由来プロスタグランジンＤ２合成酵素阻害剤。さらに、睡眠、体温、性周期，鎮痛または臭覚らの生理作用を調節することができる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の一般式（Ｉ）または（ＩＩ）で示される化合物を有効成分とするヒト由来プロスタグランジンＤ２　合成酵素阻害剤。
【化１】
2004002248.tif 000009
【化２】
2004002248.tif 000010
ただし、式（Ｉ）中、Ａは−Ｏ−，又は−ＣＯ−を、Ｒ１は‐ＳＯ２（ＯＨ），−ＰＯ３　Ｈ若しくは−ＣＯＯＨ、またはそれらの塩（Ｎａ＋，Ｋ＋、ＮＨ４＋）を示し、Ｒ２は−ＳＯ２　ＮＨ２、−ＳＯ２　Ｎ（Ｒ４）２、ＣＯＮ（Ｒ４）２、ＣＯＮＨ（Ｒ４）を示し、Ｒ４は水素原子若しくは炭素数１〜６までのアルキル基を示す。
Ｒ１は２位または３位のいずれに存在してもよく、好ましくは２位に、Ｒ２は、オルト、メタ、パラのいずれの位置に存在していてもよい。
また、式（ＩＩ）のＲ３は
【化３】
2004002248.tif 000011
を示す。また−ＮＨ−（ＣＨ２）ｎ−ＮＨ−のｎは０、１又は２を示し、あるいはここで開環して−ＮＨ２，ＮＨ２−となってもよいことを示す。Ｒ５、Ｒ６は水素原子若しくは炭素数１から６までのアルキル基を示す。また、ＸはＩ−、Ｂｒ−、Ｃｌ−、Ｆ−、ＨＣｌＯ４−、ＳＯ４２−、またはＰＯ４２−を示す。
【請求項２】
請求項１の化合物を含有するアレルギー予防乃至治療剤、性周期調節剤、睡眠調節剤、体温調節剤、鎮痛剤または嗅覚調節剤。
【請求項３】
請求項１の化合物を含有し、アレルギー予防乃至治療作用、性周期調節作用、睡眠調節作用、体温調節作用、鎮痛作用または臭覚調節作用を有する保健飲食品、機能性飲食品または強化飲食品。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、新規なプロスタグランジン合成酵素阻害剤に関する。また、本発明は、このプロスタグランジン合成酵素の阻害作用を利用したアレルギー予防乃至治療剤、睡眠調節剤、体温調節剤、性周期調節剤、鎮痛剤または嗅覚調節剤に関する。さらに、本発明は、アレルギー抑制、睡眠調節、体温調節、性周期調節、鎮痛または嗅覚調節することのできる保健乃至機能性飲食品に関する。
【０００２】
【従来の技術】
近年、アレルギー性疾患が急激に増加している。たとえば、宮本「臨床と研究；平成１４年２月２０日（通巻９２５号）」１８９頁によると我国の気管支喘息の発症率は小児、成人とも全人口の１％前後といわれていたが、最近では幼児で４．５％、小児で４〜７％、成人で３〜４％であるといわれている。また戦前皆無か、あってもきわめてまれであるとされていた花粉症は、スギ花粉症のみをとっても地域によっては人口の１０％をかなり超えており、花粉症を含めたアレルギー性鼻炎の発症率は、乳児７．５％、小児２４．６％、成人２２．０％であり、しかも発症年令は若年層へと移行する傾向が見られているといわれている。
これらのアレルギー疾患の発症には、遺伝的要因と環境要因とが関与し、これらは具体的な種々の要因が挙げられている。
【０００３】
アレルギー反応は、ＣｏｏｍｂｓとＧｅｌｌによりＩ，ＩＩ，ＩＩＩ，ＩＶ型に分類されている。これらのうち気管支喘息、アトピー性皮膚炎、アレルギー性鼻炎、結膜炎などの発症には、Ｉ型アレルギー反応が関与するとされている。そして、このＩ型アレルギー反応を阻止し、アレルギーを予防もしくは治療する目的で抗アレルギー剤が使用されている。このような抗アレルギー剤には、抗ヒスタミン薬、ケミカルメディエーター遊離抑制薬、ロイコトリエン受容体拮抗薬、ＴＸＡ２合成阻害薬及び受容体拮抗薬、Ｔｈ２サイトカイン阻害剤、免疫抑制薬などが用いられている（「臨床と研究」７９巻２号３０〜３３頁（平成１４年２月））。
しかし、これらの抗アレルギー剤は薬効が充分でなかったり、副作用のあるものが多く見受けられ、さらに薬効が高く副作用の低い抗アレルギー剤の開発が求められていた。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、このような情況下においてなされたものであって、低用量でヒト由来プロスタグランジンＤ２　合成酵素を阻害し、副作用の少ないヒト由来プロスタグランジン合成酵素阻害剤を提供することを課題とする。
またプロスタグランジンＤ２は中枢神経系で睡眠誘発、体温低下、黄体ホルモンの分泌抑制、痛みや匂いの応答の調節作用をすることが知られており（Ｕｒａｄｅ　Ｙ．等，　Ｖｉｔａｍ　Ｈｏｒｍ，　５８，　８９−１２０（２０００），　Ｕｒａｄｅ　Ｙ．等　，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２６０，２１４０　−２４１５（１９８５），　Ｕｒａｄｅ　Ｙ．等，　Ｂｉｏｃｈｉｍｉｃａ　Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａ　Ａｃｔａ，１４８２，２５９−２７１　（２０００））、プロスタグランジンＤ２　合成酵素を阻害する物質はそれらの面からの生理病理調節剤となる。
また、本発明は、このような阻害剤を含有させた抗アレルギー予防乃至治療剤、性周期調節剤、睡眠調節剤、体温調節剤、鎮痛剤または嗅覚調節剤あるいはそれらの用途の保健飲食品、機能性飲食品、強化飲食品等を提供しようとするものである。
本発明は、このような抗アレルギー予防乃至治療剤あるいは性周期調節剤、睡眠調節剤、体温調節剤、鎮痛剤、嗅覚調節剤あるいはそれらの用途の上記の飲食品を毎日摂取することにより、アレルギー、性周期異常、睡眠異常、体温異常、痛み、嗅覚異常の発症を防止あるいは発症したアレルギー、性周期異常、睡眠異常、体温異常、痛み、嗅覚異常を治療しようとするものである。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
すなわち、本発明は、次の一般式（Ｉ）または（ＩＩ）で示される化合物を有効成分とするプロスタグランジン合成酵素阻害剤に関する。
【０００６】
【化４】
2004002248.tif 000002
【化５】
2004002248.tif 000003
ただし、式（Ｉ）中、Ａは、−Ｏ−、又は−ＣＯ−を、Ｒ１は‐ＳＯ２（ＯＨ）、−ＰＯ３Ｈ若しくは−ＣＯＯＨ、またはそれらの塩（Ｎａ＋，Ｋ＋、ＮＨ４＋）を示し、Ｒ２は−ＳＯ２　ＮＨ２、−ＳＯ２　Ｎ（Ｒ４）２、ＣＯＮ（Ｒ４）２を示し、Ｒ４は水素原子若しくは炭素数１〜６までのアルキル基を示す。Ｒ１は２位または３位のいずれに存在してもよく、好ましくは２位に、Ｒ２は、オルト、メタ、パラのいずれの位置に存在していてもよい。
また、式（ＩＩ）のＲ３は
【化６】
2004002248.tif 000004
を、また−ＮＨ−（ＣＨ２）ｎ−ＮＨ−のｎは０、１又は２を示し、あるいはここで開環して−ＮＨ２，ＮＨ２−となっていてもよい。Ｒ５，及びＲ６は水素原子若しくは炭素数１から６までのアルキル基を示す。また、ＸはＩ−、Ｂｒ−、Ｃｌ−、Ｆ−、ＨＣｌＯ４−、ＳＯ４２−、またはＰＯ４２−を示す。
また、本発明は、前記の化合物を含有するアレルギー予防乃至治療剤，性周期調節剤、睡眠調節剤、体温調節剤、鎮痛剤、臭覚調節剤に関する。さらに本発明はこれらの作用を有する保健乃至機能性飲食品に関する。
【０００７】
プロスタグランジンＰＧＤ２は、末梢神経系において肥満細胞から炎症やアレルギーのメディエイターとして産出される。その生合成はＰＧＨ２を基質として行われ、造血型のプロスタグランジンＰＧＤ合成酵素がＰＧＤ２への異性化を担っている。近年、ＰＧＤ２受容体を過剰発現させたマウスではアレルギー反応が促進されることが報告され（Ｆｕｊｉｔａｎｉ，Ｙ．，ｅｔ　ａｌ．　Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ，２００２）、また反対にＰＧＤ２受容体のノックアウトマウスがアレルギー反応を示さないことも報告されている（Ｍａｔｓｕｏｋａ，　　Ｔ．ｅｔ　ａｌ．，　Ｓｃｉｅｎｃｅ，２０００）。このことからヒト由来のプロスタグランジンＤ２合成酵素（Ｈ・ＰＧＤＳ）は、「抗アレルギー剤」または「鎮痛剤」を開発するターゲットタンパク質として注目され、次の化学式（ＩＩＩ）をもつ４−ベンズヒドリルオキシ−１−［３−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−プロピル］ピペリジン（ＨＱＬ−７９）のラットＰＧＤＳ活性を阻害することが知られているが必ずしも十分な効果ではなかった。
【０００８】
【化７】
2004002248.tif 000005
【０００９】
本発明者等はこのことに着目し、種々の化合物についてＨ・ＰＧＤＳ阻害活性を測定したところ阻害率が非常に高い化合物を見出し、本発明を完成するに至った。
【００１０】
すなわち、本発明は、前記一般式（Ｉ）または（ＩＩ）で表される化合物を有効成分とするプロスタグランジン合成酵素阻害剤に関する。
前記一般式で表される化合物のうち、次の化学式（ＩＶ）および（Ｖ）で表される化合物、すなわち１−アミノ−４−（４−スルファモイルアニリノ）−アントラキノン−２−スルホン酸（化合物式（ＩＶ）（水溶性の赤色色素））、２−（２’−ベンゾチアゾリル−５−スチリル−３−（４’−フタルヒドラジディル）テトラゾリウム塩化物（化合物式（Ｖ）（不溶性））がヒト由来プロスタグランジンＤ２合成酵素を高い阻害率で阻害するので好ましく用いられる。
【００１１】
【化８】
2004002248.tif 000006
【００１２】
【化９】
2004002248.tif 000007
【００１３】
本発明において使用される化合物は、それ自体は、従来、色素等として知られていた公知化合物である。
本発明におけるこれらの化合物のヒト由来プロスタグランジンＤ２合成酵素阻害活性を見出したものである。
【００１４】
【実施例】
次に本発明の実施例を示す。しかし、本発明は、実施例に限定して解釈されるべきではない。
【実施例１】
まず、本発明で使用する化合物のＰＧＤＳ活性を測定した。ＰＧＤＳ活性を測定するために表１に示すアッセイコポーネントを調製する。
【００１５】
【表１】
2004002248.tif 000008
＊１）蒸留水で希釈
＊２）　　１ｍｇ／ｍｌのγＩｇＧで希釈
＊３）　　１０ｍＭの化合物式（Ｖ）、及び化合物式（ＩＶ）をそれぞれＤＭＳＯで調整、その後ｂｕｆｆｅｒで希釈（化合物式（Ｖ）はＳＩＧＭＡ・カタログコード：Ｂ８１３１、及び化合物式（ＩＶ）ＳＰＥＣＳ・カタログコード：ＡＨ―０３４／３２８５７０５９で市販品を購入して使用）
＊４）　　Ｄｉｅｔｈｙｌｅｎｅ　　ｇｌｙｃｏｌ　　ｄｉｅｔｈｙｌ　ｅｔｈｅｒで調整
【００１６】
測定方法は、次のとおりである。
［１４Ｃ］ＰＧＨ２以外を含んだ溶液を２５℃で５分間プレインキュベーションする。
１μｌの［１４Ｃ］ＰＧＨ２を加えてボルテックスし、反応を開始する。
２５℃、１分間反応させる。
２５０μｌのＳｔｏｐ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ（エーテル：メタノール：１Ｍクエン酸＝３０：４：１）を加え、ボルテックスして、氷上に放置する。
硫酸ナトリウムをスパーテルで適量加えて水相部分を水和物にする。
上層（有機溶媒相）５０μｌをＴＬＣプレートにアプライし、展開（展開剤；エタノール：メタノール：酢酸＝９０：２：１）する。
プレートを乾燥後、イメージングプレートに露光する。
１時間〜ｏｖｅｒ　ｎｉｇｈｔ露光後、ＰＧＤ２を定量する。この定量結果を図１に示す。
この図に基づいて、ＰＧＤ２のバンドが１レーン中に占める％を算出した。この結果を表２に示す。
【００１７】
【表２】
──────────────────────────
ブランク　　　　　　　　　　９．４３
コントロール　　　　　　　　２９．６
化合物式（Ｖ）　　　　　　　　　　　　　　１５．６２
化合物式（ＩＶ）　　　　　　　　　　　　　１２．４５
──────────────────────────
このように、試料（薬物濃度）１０μＭにおいて、化合物式（Ｖ）は阻害率６９％、化合物式（ＩＶ）は阻害率８５％でプロスタグランジンＤ２合成酵素を阻害する。
この結果を、ＨＱＬ−７９のＰＧＤ合成酵素阻害作用（蛋白質核酸酵素２０００年、ｖｏｌ．４５，Ｎｏ．６　３２０ｐ−３２４ｐ）と対比すると、ＨＱＬ−７９は薬物濃度１０μＭではＰＧＤ合成酵素阻害活性を全く示さず、１００μＭにおいて阻害率７５％を示したのに対し、化合物式（Ｖ）、及び化合物式（ＩＶ）ともに薬物濃度１０μＭでそれぞれ阻害率６９％、８５％という高い阻害活性を示した。
卵白アルブミンで能動感作したモルモットに抗原を反復吸入させて作製した喘息モデルを用いて好酸球浸潤作用を評価することもできる。
【００１８】
本発明における化合物をアレルギーの発症の予防あるいは治療に用いるときの投与量は、症状、年令、体重、性別等において異なるが、成人一人一日当り、１μｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇを、好ましくは１０μｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇを、さらに好ましくは５０μｇ／ｋｇ〜１ｍｇ／ｋｇを、経口あるいは非経口に投与するとよい。
このようにして投与すると、ヒトプロスタグランジンＤ２合成酵素阻害作用を示し、アレルギーの発症防止あるいは発症した症状を低減することができる。さらに、睡眠調節、体温調節、性周期調節、鎮痛または臭覚調節等をすることができる。また、飲食品に添加する場合にも、成人一人当り一日に前記の量摂取できるように投与するとよい。その結果、アレルギーの発症を予防し発症したアレルギーを低減したり、前記の生理活性を奏することができる。
【００１９】
本発明における有効成分の化合物は、水などに溶解した形態、粉末化した形態、あるいはそのまま利用することが可能であり、製剤としてもよく、また飲食品、医薬などに適宜配合することができる。一般的には適当な液体担体に溶解するかもしくは分散させ、または、適当な粉末担体と混合するかもしくはこれに吸着させ、場合によっては、さらにこれらに乳化剤、分散剤、懸濁剤、展着剤、浸透剤、湿潤剤、安定剤などを添加し、乳剤、油剤、水和剤、散剤、錠剤、カプセル剤（ソフトカプセルを含む）、液剤などの製剤として使用する。化合物式（Ｖ）、及び化合物式（ＩＶ）は親水性が高く、このような場合には中長鎖脂肪酸トリグリセリド、若しくはごま油などの植物油のような油に超音波等で粉体のまま分散した状態でもしくは有機溶媒を用いて溶解させて服用させると良い。製剤として使用する場合における、化合物の使用量は製剤の形態によっても異なるが、０．０１重量％以上５０重量％以下が好ましく、この範囲において安全にヒト由来プロスタグランジンＤ２合成酵素阻害作用を示し、アレルギーの発症を予防し、発症したアレルギーを治療することができる。さらに、睡眠調節、体温調節、性周期調節、鎮痛または臭覚調節等をすることができる。
【００２０】
本発明における有効成分をアレルギー症の予防乃至治療剤として用いる場合には、前記のように、製剤学的に許容することのできる担体を含有することができる。投与形態としては、特に限定がなく、例えば、散剤、細粒剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、懸濁液、エマルジョン剤、シロップ剤、エキス剤、若しくは丸剤などの経口剤、又は注射剤、外用液剤、軟膏剤、坐剤、局所投与のクリーム、若しくは点眼薬などの非経口剤を挙げることができる。
これらのうち経口剤は、賦形剤、結合剤、崩壊剤、界面活性剤、滑沢剤、流動性促進剤、希釈剤、保存剤、着色剤、香料、安定化剤、保湿剤、防腐剤、又は酸化防止剤などを用いて、常法に従って製造することができる。非経口剤も同様に常法で製造することができ、その投与方法としては、筋肉注射、静脈注射、経皮投与、直腸投与などが例示される。
【００２１】
【実施例２】
化合物式（ＩＶ）３０ｇ及び大豆硬化油１００ｇをジャケット付き高速流動型混合機に仕込み、攪拌しながら７０℃に加温して大豆硬化油を溶融させた後、攪拌を続けた。これを攪拌下、５０℃に冷却して固化させ、整粒を行ってアレルギー発症予防（治療）剤を得た。これは花粉症の予防に１日３回１錠ずつ服用する。
【００２２】
【実施例３】
化合物式（Ｖ）２．５ｍｇ、デキストリン粉末１００ｍｇをゼラチンカプセルに充填してカプセル剤を得た。これは花粉症の予防に１日３回１カプセルずつ服用する。
【００２３】
【実施例４】
化合物ＩＶ　５０ｇをゴマ油２ｋｇに超音波で均一に分散し、ゴマ油懸濁液に高純度アルゴンガスをバブリングし、溶存酸素を除き、１カプセル中に５ｍｇの化合物ＩＶを含有するように　軟カプセル製造機を用いて常法により軟カプセル剤を製造した。
剤皮処方（最終形態における重量部）
ゼラチン　　　　　　　　　　　　　　１０重量部
グリセリン　　　　　　　　　　　　　　２
防腐剤（エチルパラベン）　０．０５
チタンホワイト　　　　　　　　０．２
水　　　　　　　　　　　　　　　０．２
【００２４】
【発明の効果】
本発明によると、ヒト由来プロスタグランジンＤ２合成酵素を阻害することにより、ヒトで生ずるアレルギー反応を阻害し、アレルギーの発症を予防及び治療することができる。このような予防乃至治療できるアレルギー症として気管支喘息、アトピー性皮膚炎、アレルギー性鼻炎、結膜炎、花粉症などのＩ型アレルギーがある。また、本発明における化合物は、抗アレルギー剤開発のリード化合物として利用することもできる。さらに、本発明における化合物の摂取により、睡眠調節、体温調節、性周期調節，鎮痛、臭覚調節等を行うことができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明の実施例１のＴＬＣを示す。
【図１】
2004002248.tif 000012