(57)【要約】【課題】哺乳動物の記憶力を向上させる組成物及びその製造方法を提供する。【解決手段】複数の酵母菌を含む組成物であって、特定の周波数および特定の場の強さを有する交番電場の存在下で、哺乳動物の記憶力を向上させる前記複数の酵母菌の能力が増大するのに十分な時間、前記複数の酵母菌を培養した組成物。このような組成物の製造方法も含む。【選択図】  図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
複数の酵母菌を含む組成物であって、前記複数の酵母菌が周波数１２０００〜１２１００ＭＨｚ、場の強さ５０〜６００ｍＶ／ｃｍの交番電場の存在下で培養された結果、そのように培養されていない酵母菌に比べて、哺乳動物の記憶力を向上させる前記複数の酵母菌の能力が増大することを特徴とする組成物。
【請求項２】
周波数が１２０２０〜１２０９０ＭＨｚである、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
場の強さが５０〜４８０ｍＶ／ｃｍである、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
前記酵母菌が、サッカロミセス種（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｓｐ）、シゾサッカロミセス  ポンベ  リンドナー（Ｓｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｐｏｍｎｅ  Ｌｉｎｄｎｅｒ）、サッカロミセス  サケ  ヤベ（Ｓａｃｃｈａｒｍｙｃｅｓ  ｓａｋｅ  Ｙａｂｅ）、サッカロミセス  ウバルム  ベイジャー（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｕｒａｒｕｍ  Ｂｅｉｊｅｒ）、しょう油酵母  ボウトロウクス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｒｏｘｉｉ  Ｂｏｕｔｒｏｕｘ）、サッカロミセス  セレビシェ  ハンセン  バル  エリプソイデウス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｅｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ  Ｈａｎｓｅｎ  Ｖａｒ．ｅｌｌｉｐｓｏｉｄｅｕｓ）、ビール酵母  ハンセン（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃａｒｌｓｂｅｒｇｅｎｓｉｓ  Ｈａｎｓｅｎ）、ロドトルラ  アウランティアカ  ロダー（Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ  ａｕｒａｎｔｉａｃａ  Ｌｏｄｄｅｒ）、およびサッカロミセス  セレビシェ  ハンセン（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ  Ｈａｎｓｅｎ）からなる群から選択される種である、請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
前記酵母菌が、ＡＳ２．５０１、ＡＳ２．５０２、ＡＳ２．５０３、ＡＳ２．５０４、ＡＳ２．５３５、ＡＳ２．５５８、ＡＳ２．５６０、ＡＳ２．５６１、およびＡＳ２．５６２からなる群から選択される受託番号でＣｈｉｎａ  Ｇｅｎｅｒａｌ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ  Ｃｅｎｔｅｒに寄託されている菌株である、請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
前記菌株がＡＳ２．５０２である、請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
組成物が錠剤、粉末、または健康飲料の形である、請求項１に記載の組成物。
【請求項８】
組成物が健康飲料の形である、請求項１に記載の組成物。
【請求項９】
周波数１２０００〜１２１００ＭＨｚ、場の強さ５０〜６００ｍＶ／ｃｍの交番電場の存在下で複数の酵母菌を培養することを含む酵母菌の調製方法であって、前記複数の酵母菌を前記の通り培養した結果、そのように培養していない酵母菌に比べて、哺乳動物の記憶力を向上させる前記複数の酵母菌の能力が増大することを特徴とする方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、記憶力を向上させ、栄養補助食品として摂取可能な組成物に関する。これらの組成物は、特定の周波数および場の強さを有する電磁場中で増殖させて得られる酵母菌を含んでいる。
【０００２】
【従来の技術】
記憶は以下の４つのプロセスを含んでいる：同定および記銘、情報の保存、再認、および想起。同定は、印象または経験を脳に刻み込むプロセスである。情報の保存は、印象を強化し維持するプロセスである。再認は、刺激と印象との関連を確立するプロセスである。想起は、印象を活性化するプロセスである。また、記憶は３つのシステムに分けることができる：感覚記録、情報の短期保存、および情報の長期保存。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】
脳細胞は、過度のストレスおよび毒物に曝されると劣化することがある。この劣化は、記憶力に影響する。化学肥料、農薬、および薬品で汚染された食物の摂取は、脳が毒物に曝されるひとつの経路である。毒物は、空気からも吸入される。したがって、脳細胞の損傷を軽減し、記憶力を改善するのに有効な組成物を提供することが望ましい。
【０００４】
【課題を解決するための手段】
本発明は、特定の周波数および場の強さを有する電磁場によって特定の酵母菌を活性化して、記憶力衰退および脳細胞損傷からの回復を助け、また正常に機能している脳の記憶力を向上させる物質を産生することができるという発見に基づいている。本発明の組成物は、健康飲料または錠剤の形の栄養補助食品として摂取することができる。
【０００５】
本発明は、周波数が約１２０００〜１２１００ＭＨｚ、場の強さが約５０〜６００ｍＶ／ｃｍである交番電場中で培養した複数の酵母菌を含む組成物を包含する。一実施形態では、周波数は１２０２０〜１２０９０ＭＨｚである。別の実施形態では、場の強さは５０〜４８０ｍＶ／ｃｍである。前記複数の酵母菌が非活性化酵母菌よりも哺乳動物の記憶力を改善する能力を高めるのに十分な時間、交番電場中で酵母菌を培養する。一実施形態では、交番電場の周波数および／または場の強さを、前記時間中に前記範囲内で変えることができる。換言すれば、一連の電磁場に酵母菌を曝すことができる。例示的な時間は約５〜１５０時間である。一実施形態では、この時間は５０〜７７時間である。これらの組成物を製造する方法も本発明に含まれる。
【０００６】
この組成物に含めることができる酵母菌はすべて、ブダペスト条約の下に承認された保管所であるＣｈｉｎａ  Ｇｅｎｅｒａｌ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ  Ｃｅｎｔｅｒ（「ＣＧＭＣＣ」）、中国科学アカデミー、微生物研究所、中国微生物寄託所、ハイディアン、Ｐ．Ｏ．ＢＯＸ２７１４、北京、１０００８０、中国（Ｃｈｉｎａ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ  ｆｏｒ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓ、Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ、Ｃｈｉｎｅｓｅ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｈａｉｄｉａｎ、Ｐ．Ｏ．ＢＯＸ２７１４、Ｂｅｉｊｉｎｇ、１０００８０、Ｃｈｉｎａ）から入手することができる。有用な酵母種としては、シゾサッカロミセス  ボンベ（Ｓｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｐｏｍｂｅ）、サッカロミセス  サケ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｓａｋｅ）、サッカロミセス  ウバルム（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｕｒａｒｕｍ）、しょう油酵母（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｒｏｕｘｉｉ）、ビール酵母（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃａｒｌｓｂｅｒｇｅｎｓｉｓ）、ロドトルラ  アウランティアカ（Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ  ａｕｒａｎｔｉａｃａ）、およびサッカロミセス  セレビシェ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）が挙げられるが、これらだけに限定されない。例えば、酵母菌を、サッカロミセス  セレビシェ  ハンセン（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ  Ｈａｎｓｅｎ）  ＡＳ２．５０２菌株とすることができる。別の実施形態では、ＡＳ２．５０１、ＡＳ２．５０２、ＡＳ２．５０３、ＡＳ２．５０４、ＡＳ２．５３５、ＡＳ２．５５８、ＡＳ２．５６０、ＡＳ２．５６１、およびＡＳ２．５６２からなる群から選択される菌株である。他の有用な酵母菌種を表１、２、３、４に示す。
【０００７】
特に定義しない限り、本明細書で使用する専門用語および科学用語はすべて、本発明が属する技術分野の当業者に通常理解されるのと同じ意味である。例示的な方法および材料を以下に記述するが、本明細書に記載するそれらと類似または同等の方法および材料も本発明の実施または試験に使用することができる。本明細書に記載する出版物およびその他の参考文献は、参照によりその全体が援用される。紛争が生じた場合、定義を含めた本明細書を基準とするものとする。材料、方法、および例は例示的なものにすぎず、限定することを意図するものではない。本明細書および特許請求の範囲を通して、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」の語、あるいは「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」または「含んでいる（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」などその変形は、記述した構成要素（ｉｎｔｅｇｅｒ）または構成要素群を包含するが、その他の構成要素または構成要素群を排除しないことを意味すると理解すべきである。
【０００８】
本発明のその他の特徴および利点は、以下の詳細な説明および特許請求の範囲から明らかになるはずである。
【０００９】
【発明の実施の形態】
本発明は、特定の周波数および場の強さを有する電磁場（ＥＭＦ）によって特定の酵母菌株を活性化して、免疫の改善に有用な薬剤を産生することができるという発見に基づいている。活性な酵母菌を含有する酵母菌組成物は、例えば、健康飲料または錠剤の形の栄養補助食品として使用することができる。
【００１０】
これらの酵母菌組成物が含有する活性な酵母菌は、ｐＨ２．５〜４．２の酸性条件に耐えるように培養されているので、この組成物は胃の中で安定であり、腸に送ることができる。腸に入ると、酵母菌は種々の消化酵素で破壊され、記憶力を向上させるのに有用な薬剤が放出されて直ちに吸収される。
【００１１】
いかなる理論または機構にも拘束されるものではないが、酵母菌中の遺伝子または遺伝子セットの発現をＥＭＦが活性化または促進して、酵母菌が特定の代謝活性を示すのに活性またはより効率的になり、記憶力を向上させる薬剤の産生をもたらすと本発明者は考えている。
【００１２】
Ｉ．本発明に有用な酵母菌株
本発明に有用な酵母のタイプとしては、サッカロミセス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）属、シゾサッカロミセス（Ｓｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）属、およびロドトルラ（Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ）属の酵母菌が挙げられるが、これらだけに限定されるものではない。
【００１３】
前記属の例示的な種としては、表１、２、３、４に示す種が挙げられるが、これらだけに限定されるものではない。本発明に有用な酵母菌株は、研究室における培養から、または、ＣＧＭＣＣおよびＡｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ、１０８０１  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｂｏｕｌｅｖａｒｄ、Ｍａｎａｓｓａｓ、ＶＡ  ２０１１０−２２０９などの利用可能な公共の培養物寄託所から入手することができる。有用な菌株（とＣＧＭＣＣの受託番号）の非限定的な例は、表１、２、３、４に例示している。一般に、本発明の好ましい酵母菌株は、食品およびワイン工業の発酵で使用されている菌株である。したがって、これらの酵母菌を含有する組成物は、ヒトが消費しても安全である。本発明の酵母菌組成物の調製は、純粋な酵母菌株を用いて始めることが好ましいが、それだけに限定されない。本発明の酵母菌組成物は、異なる種または菌株の酵母菌の混合物を培養して生成させることができる。
【００１４】
【表１】
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【００１５】
【表２】
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【００１６】
【表３】
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【００１７】
【表４】
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【００１８】
ＩＩ．電磁場の適用
本発明に有用な電磁場は、当分野で周知の様々な方法によって発生させ、かけることができる。例えば、ＥＭＦは、交番電場または振動磁場をかけることによって発生させることができる。
【００１９】
交番電場は、培養培地と直接接触させた電極により、または電磁誘導により酵母菌培養物にかけることができる。例えば、図１を参照されたい。電極を培地に接触させる方法を用いることによって、比較的強い電場を培地中に発生させることができる。電極での電気分解によって有害なイオンが培地中に混入しないように、また、接触抵抗、泡、または電気分解の他の特性により電場レベルが所望のレベルより低下しないように注意しなければならない。電極は、その周囲環境に合ったもの、例えば、塩素イオンが豊富な溶液にはＡｇ−ＡｇＣｌを用い、できるだけ低い電圧で運転すべきである。一般的な総説としては、グッドマン等、１９９５、アカデミックプレス、１５８巻、細胞生物学概説、細胞学の国際的レビュー、細胞と分子における電磁場の影響（Ｇｏｏｄｍａｎｅｔ  ａｌ．、Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ＥＭＦ  ｏｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  ａｎｄ  Ｃｅｌｌｓ、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｒｅｖｉｅｗ  ｏｆ  Ｃｙｔｏｌｏｇｙ、Ａ  Ｓｕｒｖｅｙ  ｏｆ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ、Ｖｏｌ．１５８、Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ、１９９５）を参照されたい。
【００２０】
本発明に有用なＥＭＦは、振動磁場をかけることによっても発生させることができる。振動磁場は、ヘルムホルツコイルを流れる振動電流によって発生させることができる。このような磁場はさらに電場を誘導する。
【００２１】
本発明に有用なＥＭＦの周波数は、約１２０００ＭＨｚ〜１２１００ＭＨｚの範囲である。例示的な周波数は、１２０３４、１２０４１、１２０５２、１２０６４、および１２０６９ＭＨｚである。本発明に有用な電場の場の強さは、約５０〜６００ｍＶ／ｃｍ（例えば、５０〜１００、１２０〜２００、２６０〜４００、または４５０〜４９０ｍＶ／ｃｍ）の範囲である。例示的な場の強さは、６５、１２２、１４２、１６０、１６８、１８８、２８０、３００、３３５、３８７、３６７、および４７５ｍＶ／ｃｍである。
【００２２】
酵母培養物に一連のＥＭＦをかけるときには、酵母培養物を同一容器中に保持したまま、同じＥＭＦ発生装置とエミッターのセットを用いて周波数および／または場の強さを変化させることができる。この一連のＥＭＦはそれぞれ、異なる周波数または異なる場の強さ、あるいは異なる周波数と異なる場の強さをそれぞれ有することができる。このような周波数および場の強さは、前記範囲内にあることが好ましい。一連におけるＥＭＦの実際の数は、どんなものでも使用することができるが、総数が２、３、４、５、６、７、８、９、または１０の一連のＥＭＦに酵母培養物を曝すことが好ましいこともある。
【００２３】
酵母菌は、ＥＭＦの存在下で数時間培養しただけでも活性化させることができるが、活性化した酵母菌を含む組成物を、合計５０〜７７時間、ＥＭＦの存在下で繁殖および増殖させることが好ましいこともある。
【００２４】
図１は、交番電場を発生させるための例示的な装置である。所望の周波数および強度の電場は、好ましくは正弦波の形をした、周波数範囲が５〜２０，０００ＭＨｚの交番電場を発生できるＡＣ電源（３）で発生させることができる。狭い周波数範囲の信号を発生できる信号発生器も使用することができる。必要ならば、信号増幅器も使用して出力を上げることができる。培養容器（２）は、非導電材料、例えばガラス、プラスチック、またはセラミックス製とすることができる。培養容器（２）と信号発生器（３）とを結合するケーブルは、少なくとも２０Ｇｈｚの伝送周波数を有する高周波同軸ケーブルであることが好ましい。一実施形態では、この伝送周波数は３０Ｇｈｚである。
【００２５】
ＥＭＦを伝達可能な金属ワイヤまたはチューブなどの信号エミッタの極めて近傍に酵母培養物（１）を置くことを含めて様々な手段によって、培養物に交番電場をかけることができる。金属ワイヤまたはチューブは、赤銅でできていてもよく、容器（２）の内部に置くことができ、３〜３０ｃｍの深さまで達することができる。例えば、容器（２）の中の流体の深さが１５〜２０ｃｍ、２０〜３０ｃｍ、３０〜５０ｃｍ、５０〜７０ｃｍ、７０〜１００ｃｍ、１００〜１５０ｃｍ、または１５０〜２００ｃｍである場合、金属ワイヤをそれぞれ、容器（２）の底部から３〜５ｃｍ、５〜７ｃｍ、７〜１０ｃｍ、１０〜１５ｃｍ、１５〜２０ｃｍ、２０〜３０ｃｍ、および２５〜３０ｃｍとすることができる。使用する金属ワイヤ／チューブの数は、１〜１０（例えば、２〜３）本とすることができる。体積が１０Ｌまでの培養には、直径０．５〜２ｍｍの金属ワイヤ／チューブを使用することを推奨するが、必ずしも使用しなくともよい。体積が１０〜１００Ｌの培養には、直径３〜５ｍｍの金属ワイヤ／チューブを使用することができる。体積が１００〜１０００Ｌの培養には、直径６〜１５ｍｍの金属ワイヤ／チューブを使用することができる。体積が１０００Ｌを超える培養には、直径２０〜２５ｍｍの金属ワイヤ／チューブを使用することができる。
【００２６】
一実施形態では、培養物（１）中に沈めた電極で電場をかける。この実施形態では、一方の電極を容器（２）底部上に置いた金属板とすることができ、もう一方の電極を培養物（１）中に均一に分散させた複数の電極で構成して、電場のエネルギー分布を均一にすることができる。使用する電極線の数は、培養物の体積ならびに電極線の直径によって決まる。
【００２７】
ＩＩＩ．培養培地
本発明に有用な培養培地は、酵母菌が同化できる栄養源を含んでいる。適切な形（例えば、スクロース、グルコース、ブドウ糖、マルトース、デンプン、キシロース、マンニトールなどの炭水化物）の複雑な炭素含有物質は、酵母菌の炭素源となり得る。炭素源の正確な量は、培地の他の成分に応じて調節することができる。一般に、炭素を含む物質の量は、培地の約０．５重量％〜１０重量％の間で変わり、好ましくは約１％〜５％、最も好ましくは約１．３〜２．２％である。これらの炭素源は、個別にまたは組み合わせて使用することができる。培養培地に添加できる無機塩には、ナトリウム、カリウム、カルシウム、リン酸、硫酸、炭酸などのイオンを生成できる通常の塩がある。栄養素の無機塩の非限定的な例は、（ＮＨ４）２ＨＰＯ４、ＣａＣＯ３、ＫＨ２ＰＯ４、Ｋ２ＨＰＯ４、ＭｇＳＯ４、ＮａＣｌ、およびＣａＳＯ４である。
【００２８】
ＩＶ．電磁気による酵母菌の活性化
記憶力を向上させる酵母菌生来の能力を活性化または高めるために、適切な培地中無菌状態下２０℃〜３５℃（例えば、２８〜３２℃）で十分な時間、例えば５〜１５０時間（例えば、５０〜７７時間）、前記交番電場または連続した交番電場中でこの菌を培養することができる。
【００２９】
培養プロセスの例示的な構成を図１に示す（前記を参照のこと）。例示的な培養培地は、１０００ｍｌの無菌水当たり以下の成分を含有する：１５ｇの可溶性デンプン、１０ｇのマンニトール、０．２５ｇのＫ２ＨＰ０４、０．２ｇのＫＨ２Ｐ０４、０．２ｇのＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ、０．３ｇのＮａＣｌ、０．１ｇのＣａＳＯ４・２Ｈ２Ｏ、３．０ｇのＣａＣＯ３・５Ｈ２Ｏ、０．４ｇの酵母菌ペースト。次いで、所望の菌株の酵母菌を培養培地に添加して、培養培地１０００ｍｌ当たり１×１０８個の酵母菌を含有する混合物を形成させる。酵母菌は表１、２、３、４に列記した菌株のうち任意のものとすることができる。一実施形態では、この菌株は、サッカロミセス  セレビシェ  ハンセン（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ  Ｈａｎｓｅｎ）Ａ２．５０２である。次いで、この混合物を図１に示す装置に入れる。
【００３０】
酵母菌の活性化プロセスは以下のステップを含む：１）活性化装置の温度を２０〜３５℃（例えば、２８〜３２℃）に維持して、酵母菌を２４〜３６時間培養するステップ；２）周波数が約１２０３４ＭＨｚ、場の強さが１７０〜２００ｍＶ／ｃｍ（例えば、約１８８ｍＶ／ｃｍ）の電場を１０〜１５時間（例えば、１２時間）かけるステップ；３）活性化装置の温度を２８〜３２℃に維持して、酵母菌を２４〜３６時間培養するステップ；４）次いで、周波数が約１２０４１ＭＨｚ、場の強さが１２０〜２００ｍＶ／ｃｍ（例えば、約１６８ｍＶ／ｃｍ）の電場を２４〜３０時間（例えば、２８時間）かけるステップ；５）次いで、周波数が約１２０５２ＭＨｚ、場の強さが３２０〜４００ｍＶ／ｃｍ（例えば、約３６７ｍＶ／ｃｍ）の電場を１８〜２０時間（例えば、１９時間）かけるステップ；６）次いで、周波数が約１２０６４ＭＨｚ、場の強さが４５０〜４９０ｍＶ／ｃｍ（例えば、約４７５ｍＶ／ｃｍ）の電場を７〜１０時間（例えば、８時間）かけるステップ；７）次いで、周波数が約１２０６９ＭＨｚ、場の強さが２９０〜３２０ｍＶ／ｃｍ（例えば、約３００ｍＶ／ｃｍ）の電場を９〜１２時間（例えば、１０時間）かけるステップ；および７）最後に、活性化した酵母菌を含む組成物を凍結乾燥して粉体とし、その粉体を４℃で貯蔵するステップ。凍結乾燥した酵母菌の濃度は１０１０個／ｇを超えることが好ましい。
【００３１】
Ｖ．胃の環境への酵母菌の順化
本発明の酵母菌組成物は、胃を通過してから小腸に達し、そこでその有効成分を酵母菌から放出するので、これらの酵母菌を酸性条件下で培養して菌を胃液に順化させることが好ましい。この順化プロセスにより、酵母菌の酸性胃環境中での生存能力が高まることになる。
【００３２】
これを達成するために、酸性の強い順化用培養培地１０００ｍｌ当たり、活性酵母菌を含有する酵母菌粉体１０ｇ（グラム当たり１０１０個の活性酵母菌を含む）を混合することができる。それから、はじめに周波数が約１２０６４ＭＨｚで場の強さが３５０〜４００ｍＶ／ｃｍ（例えば、約３８７ｍＶ／ｃｍ）の交番電場の存在下、約２８〜３２℃で４５時間この酵母菌混合物を培養する。得られた酵母菌を、周波数が約１２０６９ＭＨｚで場の強さが２６０〜３００ｍＶ／ｃｍ（例えば、約２８０ｍＶ／ｃｍ）の交番電場の存在下、約２８〜３２℃で２２時間さらにインキュベートする。次いで、得られる順化した酵母菌を、乾燥し、粉体の形で（１０１０酵母菌／ｇ以上）室温または減圧下０〜４℃で貯蔵する。
【００３３】
例示的な培養培地の順化は、７００ｍｌの新鮮なブタの胃液および３００ｍｌの野生のカナメモチ（Ｃｈｉｎｅｓｅ  ｈａｗｔｈｏｒｎ）のエキスを混合して行なわれる。順化用培養培地のｐＨを、０．１Ｍ塩酸および０．２Ｍフタル酸水素カリウムで２．５に調整する。新鮮なブタの胃液を以下のように調製する。約４カ月齢で、新生のオランダ白ブタ（Ｈｏｌｌａｎｄ  ｗｈｉｔｅ  ｐｉｇｓ）を屠殺し、その胃の全内容物を回収して、２０００ｍｌの水と無菌条件下で混合する。次いで、この混合物を４℃で６時間無菌条件下で静置して、食物の残骸を沈殿させる。野生のカナメモチのエキスを調製するため、５００ｇの新鮮な野生カナメモチを無菌条件下で乾燥して含水量を（８％以下に）減らす。次いで、その乾燥した果実を粉砕し（２０メッシュ以上）、１５００ｍｌの無菌水に添加する。この混合物を４℃で６時間無菌条件下で静置する。その上清を回収して、順化用培養培地に使用する。
【００３４】
ＶＩ．酵母菌組成物の製造
本発明の酵母菌組成物を調製するために、図２に示す装置またはその等価物を使用することができる。この装置は、それぞれ１対の電極（４）を装着した第１の容器（１）、第２の容器（２）、および第３の容器（３）を備える。一方の電極は容器底部上に配置した金属板であり、もう一方の電極は容器内の空間に均一に分散させた複数の電極で構成して、電場のエネルギーを均一に分布させる。３対の電極すべてを共通の信号発生器に接続する。
【００３５】
この目的に使用する培養培地は、１０００Ｌ当たり次の成分を含有する混合果実エキス溶液である：３００Ｌの野生カナメモチエキス、３００Ｌのナツメエキス、３００Ｌのチョウセンゴミシ（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ  ｃｈｉｎｅｎｓｉｓＢａｉｌｌ）からの果実エキス（朝鮮五味子）、および１００Ｌの大豆エキス。カナメモチエキス、ナツメエキス、朝鮮五味子エキスを調製するため、新鮮な果実を無菌条件下で洗浄し、乾燥して、含水量を８％以下に減少させる。次いで、１００キログラムの乾燥果実を粉砕し（２０メッシュ以上）、４００Ｌの無菌水に添加する。この混合物を無菌条件下室温で１２時間撹拌し、次いで１０００ｒｐｍで遠心分離して不溶の残渣を除去する。大豆エキスを生成するため、新鮮な大豆を無菌条件下で洗浄し、乾燥して、含水量を８％以下に減少させる。次いで、３０キログラムの乾燥大豆を粉砕して２０メッシュ以上の粒子とし、１３０Ｌの無菌水に添加する。この混合物を無菌条件下室温で１２時間撹拌し、１０００ｒｐｍで遠心分離して不溶の残渣を除去する。混合果実エキス溶液を調製した後、その溶液を１２１℃で３０分間滅菌し、４０℃に冷却してから使用する。
【００３６】
前記（前記Ｖ項）の通りに調製した１０００グラムの活性酵母菌粉体を１０００Ｌの混合果実エキス溶液に添加し、この酵母菌溶液を図２に示す第１の容器（１）に移送する。次いで、周波数が約１２０６４ＭＨｚで場の強さが約３００〜３５０ｍＶ／ｃｍ（例えば、約３３５ｍＶ／ｃｍ）の交番電場の存在下、２８〜３２℃、無菌条件下で１２時間この酵母菌を培養する。この酵母菌を、周波数が約１２０６９ＭＨｚで場の強さが約２８０〜３５０ｍＶ／ｃｍ（例えば、約３００ｍＶ／ｃｍ）の交番電場の存在下でさらにインキュベートする。培養をさらに１０時間続ける。
【００３７】
次いで、酵母菌培養物を第１の容器（１）から第２の容器（２）へ移送し（必要であれば、酵母菌培養の新たなバッチを現在使用可能になった第１の容器（１）で開始することができる）、周波数が約１２０６４ＭＨｚで場の強さが１２０〜１５０ｍＶ／ｃｍ（例えば、約１４２ｍＶ／ｃｍ）の交番電場に６時間かける。続いて、電場の周波数および場の強さをそれぞれ約１２０６９ＭＨｚおよび１４０〜１８０ｍＶ／ｃｍ（例えば、約１６０ｍＶ／ｃｍ）に変える。培養をさらに８時間続ける。
【００３８】
次いで、酵母菌培養物を第２の容器（２）から第３の容器（３）へ移送し、周波数が約１２０６４ＭＨｚで場の強さが５０〜８０ｍＶ／ｃｍ（例えば、約６５ｍＶ／ｃｍ）の交番電場に６時間かける。続いて、電場の周波数および場の強さをそれぞれ約１２０６９ＭＨｚおよび１１０〜１４０ｍＶ／ｃｍ（例えば、約１２２ｍＶ／ｃｍ）に変える。培養をさらに１０時間続ける。
【００３９】
次いで、第３の容器（３）の酵母菌培養物を減圧密封ボトルに詰め、栄養補助食品として使用する。この栄養補助食品は、毎回３０〜６０ｍｌの用量を毎日３〜４回で３カ月間（食事および就寝の１０〜３０分前に）摂取することができる。必要に応じて、最後の酵母菌培養物を２４時間以内に乾燥し、粉体の形で貯蔵することもできる。
【００４０】
一実施形態では、本発明の組成物を無菌の注射用製剤の形で静脈内または腹膜に投与することもできる。このような無菌製剤を、次のように調製する。無菌健康飲料組成物をまず超音波（１０００Ｈｚ）で１０分間処理し、次いで、さらに１０分間４３５５ｒｐｍで遠心分離する。得られる上清を１Ｍ  ＮａＯＨでｐＨ７．２〜７．４に調整し、その後無菌条件下でメンブレン（静脈内用は０．２２μｍ、腹膜用は０．４５μｍ）を通してろ過する。得られる無菌製剤を３５〜３８℃の水浴に３０分間浸してから使用する。
【００４１】
【実施例】
以下の実施例は、本発明の方法および材料を説明するためのものである。当業者に自明である適切な変形および記載条件もしくはパラメータの調節は、本発明の精神および範囲に含まれる。
【００４２】
推奨範囲に従って括弧内に例示した電場周波数および場の強さを有する交番電場の存在下で培養したサッカロミセス  セレビシェ  ハンセン（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ  Ｈａｎｓｅｎ）ＡＳ２．５０２を用いて、以下の実験に使用する活性酵母菌組成物を調製した。対照の酵母菌組成物は、酵母菌をＥＭＦなしで培養した以外は同様にして調製した酵母菌組成物である。特に示さない限り、酵母組成物すべておよびその対応する対照を動物の胃内ヘ送って投与した。
【００４３】
（実施例１）マウスのプラットホーム跳躍実験
この実験では、まず、条件反射によりある課題を実行するようにマウスを訓練した。一定時間後、マウスがこの課題を実行できるかどうか再度試験した。
【００４４】
実験には矩形の箱を備える装置を使用し、その底を平行な銅製のレールで覆った。各銅製レールを隣接する銅製レールから０．５ｃｍ離した。銅製レールを電源に接続し、その電圧を変圧器で制御した。高さおよび直径が４．５ｃｍの円形のプラットホームを、各銅製レールの左後端に置いた。大豆粉末のフライなどの食物を銅製レール上に置いた。
【００４５】
まず、マウスをその箱の中に３分間置いて順化させた。マウスが食物に向かって競走し始めたらすぐに３６Ｖの交流を銅製レールにかけた。マウスの一般的な反応は、プラットホームへ跳んで戻って電気ショックを避けることであった。食物の誘惑のため、大多数のマウスは、銅製レールに跳んで戻り、次いで電気ショックを受けるとプラットホームへ戻ることを繰り返す。５分間の訓練中、各マウスが受けた電気ショックの数を記録した。この数値を、エラー回数とも呼んだ。２４時間後、この訓練を３分間再開した。この期間、電気ショックを受けたマウスの数、各マウスが銅製レールに最初に跳んでいくまでの時間（遅延期間）、および各マウスのエラー回数を記録した。
【００４６】
３６匹のＮＩＨグレードのマウスを１２匹ずつ３つのグループに分けた。グループＡ、Ｂ、およびＣの各マウスに、それぞれ活性酵母菌組成物、対照酵母菌組成物、および生理食塩水を毎日２ｍｌ投与した。マウスを６週間処置してから最初のプラットホーム跳躍実験を実施した（表５）。最初のプラットホーム跳躍実験の２４時間後に実施したプラットホーム跳躍実験の結果を表６に示す。
【００４７】
【表５】
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【００４８】
【表６】
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【００４９】
（実施例２）マウスのＹ形迷路実験
動物の記憶力を試験する方法にはいろいろある。その方法の１つは、Ｙ形迷路を使用することである。Ｒ．Ｃ．ミラ−等、ネイチャ−、２２８、１１０７〜１１０８頁（１９７０）（Ｒ．Ｃ．Ｍｉｌｌｅｒ  ｅｔ  、Ｎａｔｕｒｅ、２２８、ｐｐ．  １１０７〜１１０８（１９７０））を参照されたい。この文献を参照により本明細書に組み込む。Ｙの幹の部分が出発点であり、そこに試験動物を最初に置く。迷路の一本の枝を電源に接続して、この枝に入る動物が電気ショックを受けるようにする。迷路のもう１本の枝は食物のある安全地帯である。
【００５０】
この実験では、３６匹のＮＩＨマウスをＡ、Ｂ、およびＣの３つの等グループに分けた。このマウスすべてをＹ形迷路で訓練した。始めにマウスを出発点に置き、電気地帯でショックを受けると安全地帯に逃避する正常反応を示すように訓練した。マウスが電気地帯から安全地帯にその回数の９０％逃避することを学習するまで訓練した。
【００５１】
訓練から２４時間後、グループＡ、Ｂ、およびＣの各マウスに、それぞれ活性酵母菌、対照酵母菌組成物、および生理食塩水を６週間毎日３ｍｌ投与した。６週間の終わりに、マウスをＹ形迷路に再び置いて、行動を観察した。結果を下記表７に示す。
【００５２】
【表７】
2004159643.tif 000009
【００５３】
この実験から、活性酵母菌組成物が、対照酵母菌および生理食塩水よりも、試験動物の記憶力を向上させることがわかる。
【００５４】
本発明のいくつかの実施形態を示したが、その基本的な構成を変更して、本発明の組成物および方法を利用する他の実施形態を提供できることも明らかである。
【００５５】
【発明の効果】
本発明は、特定の周波数および場の強さを有する電磁場によって特定の酵母菌を活性化して、記憶力衰退および脳細胞損傷からの回復を助け、また正常に機能している脳の記憶力を向上させる物質を産生することができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】電磁場を用いて酵母菌を活性化するための例示的な装置を示す概略図である。
【図２】本発明の酵母菌組成物を製造するための例示的な装置を示す概略図である。この装置は、信号発生器および相互に連結された容器１、２、および３を備える。
【符号の説明】
１酵母培養物
２容器
３電源
【図１】
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【図２】
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【外国語明細書】
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