(57)【要約】【課題】ヒメマツタケの子実体及び／又はその処理物から分離される水溶性の複合成分や蛋白多糖体複合成分を活用した新規の抗動脈硬化剤を提供する。【解決手段】ヒメマツタケの子実体及び／又はその処理物から分離される水溶性の複合成分又は蛋白多糖体複合成分を活性成分とした。【選択図】          なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒメマツタケの子実体及び／又はその処理物から分離される水溶性の複合成分を活性成分とすることを特徴とする抗動脈硬化剤。
【請求項２】
水溶性の複合成分が、ヒメマツタケの子実体及び／又はその処理物を熱水又は含水有機溶媒で抽出処理して得られるものである請求項１記載の抗動脈硬化剤。
【請求項３】
ヒメマツタケの子実体及び／又はその処理物から分離される水溶性の蛋白多糖体複合成分を活性成分とすることを特徴とする抗動脈硬化剤。
【請求項４】
水溶性の蛋白多糖体複合成分が、ヒメマツタケの子実体及び／又はその処理物を熱水又は含水有機溶媒で抽出処理して得られる水溶性の複合成分を、更にクロマト分画処理及び／又は膜分離処理して得られるものである請求項３記載の抗動脈硬化剤。
【請求項５】
経口投与剤である請求項１〜４のいずれか一つの項記載の抗動脈硬化剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は抗動脈硬化剤に関し、更に詳しくはハラタケ属（アガリクス）のきのこであるヒメマツタケ（アガリクス・ブラゼイ・ムリル）の子実体及び／又はその処理物から分離される水溶性の複合成分又は蛋白多糖体複合成分を活性成分とする抗動脈硬化剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
従来、ヒメマツタケの子実体及び／又はその処理物から分離される水溶性の複合成分に、抗腫瘍作用、肝機能改善作用、免疫能低下改善作用のあることが知られている（例えば特許文献１〜６参照）。
【０００３】
【特許文献１】
特開平１−６７１９４号公報
【特許文献２】
特開平１−６７１９５号公報
【特許文献３】
特開平２−７８６３０号公報
【特許文献４】
特開平２−１２４８２９号公報
【特許文献５】
特開平６−１２８１６４号公報
【特許文献６】
特開平７−２５８１０７号公報
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
本発明が解決しようとする課題は、ヒメマツタケの子実体及び／又はその処理物から分離される水溶性の複合成分の薬剤としての新たな用途を提供する処にある。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
前記の課題を解決する本発明は、ヒメマツタケの子実体及び／又はその処理物から分離される水溶性の複合成分又は蛋白多糖体複合成分を活性成分とすることを特徴とする抗動脈硬化剤に係る。
【０００６】
本発明において、活性成分である水溶性の複合成分や蛋白多糖体複合成分の原料として用いるのは、ヒメマツタケの子実体及び／又はその処理物である。かかる処理物には、ヒメマツタケの子実体の破砕物、磨砕物、組織破壊物、乾燥物、乾燥粉砕物等が含まれる。
【０００７】
活性成分である水溶性の複合成分は、前記のようなヒメマツタケの子実体及び／又はその処理物から分離されるものであるが、好ましくはヒメマツタケの子実体及び／又はその処理物を熱水又は含水有機溶媒で抽出処理して得られるものである。この場合、熱水としては６０℃以上のもの、好ましくは８０℃以上のものが挙げられ、含水有機溶媒としては、２０〜６０重量％程度の低級アルコール、好ましくはエチルアルコールを含有する水溶液が挙げられる。
【０００８】
また活性成分である水溶性の蛋白多糖体複合成分も、前記のようなヒメマツタケの子実体及び／又はその処理物から分離されるものであるが、好ましくはヒメマツタケの子実体及び／又はその処理物を熱水又は含水有機溶媒で抽出処理して得られる前記のような水溶性の複合成分を、更にクロマト分画処理及び／又は膜分離処理して得られるものである。この場合、クロマト分画処理としては、カラムクロマトグラフィーや液体クロマトグラフィーが挙げられ、膜分離処理としては、透析や限外濾過が挙げられる。
【０００９】
原料として用いるヒメマツタケの子実体及び／又はその処理物は、これらを前記したように熱水又は含水有機溶媒で抽出処理するに先立ち、低級アルコール、好ましくはエチルアルコールで洗浄しておくと、ヒメマツタケの子実体に特有の色や臭を相応に取り除くことができる。またヒメマツタケの子実体及び／又はその処理物から熱水又は含水有機溶媒で抽出処理して得た水溶性の複合成分は、これを前記したようにクロマト分画処理及び／又は膜分離処理するに先立ち、アルコール沈澱処理しておくと、より精製された水溶性の蛋白多糖体複合成分を得ることができる。この場合は例えば、水溶性の複合成分にエチルアルコールを加え、生成した沈澱物をクロマト分画処理及び／又は膜分離処理する。
【００１０】
ヒメマツタケの子実体及び／又はその処理物から分離される前記したような水溶性の複合成分、とりわけ蛋白多糖体複合成分は、詳しくは実施例で後述するように、優れた抗動脈硬化作用を示す。抗動脈硬化作用を示す活性成分の中心となるのは水溶性の蛋白多糖体複合成分であるが、かかる蛋白多糖体複合成分は、これを分離するための処理内容にもよるが、一般に約４０重量％の粗蛋白と約４０重量％の糖質とを含んでいる。粗蛋白を構成するアミノ酸としては、同定されたものだけでも、アラニン、アスパラギン酸、グルタミン酸、ロイシン、プロリン、リジン等の１４種類が含まれており、また糖質を構成する成分としては、いずれも平均分子量が１万以上のα−グルカン、β−グルカン、β−ガラクトグルカン、キシログルカン等が含まれている。
【００１１】
抗動脈硬化作用を示す活性成分としての前記したような複合成分や蛋白多糖体複合成分は、共に水溶性であるため、これらを経口投与することができる。これらは、経口投与によっても、優れた抗動脈硬化作用を示すのである。前記したような水溶性の複合成分や蛋白多糖体複合成分を経口投与する場合の製剤形としては、錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤等の固体製剤、内用水剤、振とう合剤、懸濁液剤、乳剤、シロップ剤等の液体製剤が挙げられる。かかる固体製剤や液体製剤を製剤化する手段それ自体には公知の方法を適用できる。
【００１２】
活性成分としての前記したような水溶性の複合成分や蛋白多糖体複合成分は経日的に極めて安定であり、急性、亜急性及び慢性毒性試験についての問題を有しない。
【００１３】
【発明の実施の形態】
本発明の実施形態としては、下記の１）〜３）が挙げられる。
１）ヒメマツタケの子実体をジェットミルに供し、その細胞壁を破壊した組織破壊物を得る。この組織破壊物を９０℃以上の熱水で抽出し、その抽出系を遠心分離して、上澄液を得る。この上澄液を減圧濃縮し、更に凍結乾燥した後、粉砕して、粉砕物を得る。この粉砕物を活性成分とする抗動脈硬化剤。
【００１４】
２）前記１）の上澄液を減圧濃縮し、その減圧濃縮液にエチルアルコールを加えて沈澱物を生成させる。この沈澱物を遠心分離し、更に凍結乾燥した後、粉砕して、粉砕物を得る。この粉砕物を活性成分とする抗動脈硬化剤。
【００１５】
３）前記２）の遠心分離した沈澱物をＤＥＡＥ−トヨパールゲル（東洋曹達工業社製の商品名）を充填したカラムクロマトグラフィーに供し、水で溶出して、溶出画分を得る。この溶出画分を透析し、その残留液を凍結乾燥した後、粉砕して、粉砕物を得る。この粉砕物を活性成分とする抗動脈硬化剤。
【００１６】
【実施例】
実施例１
ヒメマツタケの子実体（岩出菌学研究所社製の商品名岩出１０１株）を乾燥し、その乾燥物１０００ｇをジェットミルに供して、細胞壁を破壊した組織破壊物を得た。この組織破壊物を１０倍重量の９０℃以上の熱水で３時間抽出し、その抽出系を遠心分離して、上澄液を得た。この上澄液を凍結乾燥し、粉砕して、粉砕物２５２ｋｇを得た。この粉砕物は前記したような水溶性の複合成分に相当する。これを活性成分Ａとした。
【００１７】
実施例２
実施例１の場合と同様にして得た濃縮液に最終エチルアルコール濃度が８０％になるまでエチルアルコールを加えて沈澱物を生成させ、遠心分離した。遠心分離した沈澱物をＤＥＡＥ−トヨパールゲル（東洋曹達工業社製の商品名）を充填したカラムクロマトグラフィーに供し、フェノール硫酸法による糖の発色がなくなるまで水で溶出して、溶出画分を得た。この溶出画分を透析し、その残留液を凍結乾燥した後、粉砕して、粉砕物５．７ｇを得た。この粉砕物は、その赤外線吸収スペクトルによるパターン及び１３Ｃ−ＮＭＲによるケミカルシフト等の分析から、前記したような水溶性の蛋白多糖体複合成分であった。これを活性成分Ｂとした。
【００１８】
評価１
コレステロール飼料を摂取させた対照群と、同じコレステロール飼料に活性成分Ａを０．５重量％加えた飼料を摂取させた投与群とで、各群５匹の実験動物を６週間飼育し、血漿については２週間毎に、また肝脂質については６週間後に検査した。飼育や検査の条件等は下記の通りで行ない、結果を表１及び表２にまとめて示した。
【００１９】
実験動物：日本エスエルシー社（浜松）より購入した１０週齢の、体重２ｋｇの日本白色種雄性家兎（ＪＷ／ｃｓｋ）
コレステロール飼料：家兎用普通飼育飼料にコレステロール（和光純薬社製）を１重量％加えた飼料
飼育雰囲気：温度２３±１℃、湿度５５±５％に空調した実験動物室
摂取量：飼料は１匹当たり１日に１００ｇ摂取させ、水は自由摂取させた
【００２０】
血漿について、
総コレステロール（ＴＣ）：Ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ  Ｃ−ｔｅｓｔ（和光純薬社製）で測定した
遊離コレステロール（ＦＣ）：Ｆｒｅｅ  Ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ  Ｃ−ｔｅｓｔ（和光純薬社製）で測定した
トリグリセライド（ＴＧ）：Ｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅ  Ｃ−ＩＩ−ｔｅｓｔ（和光純薬社製）で測定した
リン脂質（ＰＬ）：Ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄ  Ｂ−ｔｅｓｔ（和光純薬社製）で測定した
高比重リポ蛋白−コレステロール（ＨＤＬ−Ｃ）：酵素法（ＮＣ−Ｈｉｓｅｔｅｒｏｌ）で測定した
動脈硬化指数：｛ＴＣ−（ＨＤＬ−Ｃ）｝／（ＨＤＬ−Ｃ）で求めた
【００２１】
肝脂質について、
総脂質（ＴＬ）：Ｂｒａｇｄｏｎ酸化法で測定した
総コレステロール（ＴＣ）：Ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ  Ｃ−ｔｅｓｔ（和光純薬社製）で測定した
トリグリセリド（ＴＧ）：Ｒａｎｄｏｒｕｐ法で測定した
【００２２】
【表１】
2004359645.tif 000002
【００２３】
【表２】
2004359645.tif 000003
【００２４】
表１及び表２において、
数値：平均値±標準誤差で示した
有意差検定：Ｓｔｕｄｅｎｔのｔ検定を行ない、＊印はＰ＜０．０５で有意差のあることを意味する
【００２５】
以上の評価１では、飼育中、対照群と投与群とで、体重に差はなく、全身症状にも差は認められなかった。また血漿のＴＧ値、ＦＣ値及びＰＬ値についても、対照群と投与群とで、有意な差は認められなかった。しかし、血漿のＴＣ値については、対照群で顕著に上昇したのに対し、投与群では４週以降において有意の低下作用が認められた。また血漿のＨＤＬ−Ｃ値については、投与群で４週以降において有意に上昇した。更に血漿の動脈硬化指数については、投与群で２週以降において有意の抑制作用が認められた。そして肝脂質中のＴＬ値、ＴＣ値及びＴＧ値については、投与群で６週間後において有意の低下作用が認められた。これらの結果から、活性成分Ａ（水溶性の複合成分）には優れた抗動脈硬化作用のあることが解る。
【００２６】
評価２
コレステロール飼料を摂取させた対照群と、同じコレステロール飼料に活性成分Ｂを０．１重量％加えた飼料を摂取させた投与群とで、各群５匹の実験動物を６週間飼育し、血漿については２週間毎に、また肝脂質については６週間後に検査した。飼育や検査の条件等は評価１と同様に行なった。但しここでは、評価１で血漿のＴＧ値、ＦＣ値及びＰＬ値に、対照群と投与群とで有意な差は認められなかったので、これらについては省略した。結果を表３及び表４にまとめて示した。
【００２７】
【表３】
2004359645.tif 000004
【００２８】
【表４】
2004359645.tif 000005
【００２９】
表３及び表４において、
数値：平均値±標準誤差で示した
有意差検定：Ｓｔｕｄｅｎｔのｔ検定を行ない、＊印はＰ＜０．０５で有意差のあることを意味する
【００３０】
以上の評価２では、飼育中、対照群と投与群とで、体重に差はなく、全身症状にも差は認められなかった。しかし、血漿のＴＣ値については、対照群で顕著に上昇したのに対し、投与群では４週以降において有意の低下作用が認められた。また血漿のＨＤＬ−Ｃ値については、投与群で４週以降において有意に上昇した。更に血漿の動脈硬化指数については、投与群で２週以降において有意の抑制作用が認められた。そして肝脂質中のＴＬ値、ＴＣ値及びＴＧ値については、投与群で６週間後において有意の低下作用が認められた。これらの結果から、活性成分Ｂ（水溶性の蛋白多糖体成分）には優れた抗動脈硬化作用のあることが解る。
【００３１】
【発明の効果】
既に明らかなように、以上説明した本発明には、ヒメマツタケの子実体及び／又はその処理物から分離される水溶性の複合成分や蛋白多糖体複合成分を活性成分として、優れた抗動脈硬化作用を示すという効果がある。