(57)【要約】　　　（修正有）【課題】全血に含まれる全血液成分の白血球血小板除去された血液製剤成分として無菌的に簡便に分取する方法および装置を提供する。【解決手段】次工程からなる血液成分分取方法（１）全血採血バッグ２と採血バッグユニット１と白血球血小板除去フィルター６及びバフィーコート回収用バッグ７を接続、白血球血小板除去血漿回収用バッグ９と白血球血小板除去赤血球回収用バッグ１１とを並列接続した血液成分分取用ユニット５とを準備する（２）全血を遠心分離し各成分に分層する（３）血漿層を白血球血小板除去フィルター６に通し白血球血小板除去血漿を分取する（４）バフィーコート層をバフィーコート回収用バッグ７に分取する（５）赤血球保存剤を白血球血小板除去フィルター６経由で採血バッグ２に移し赤血球層と混合する（６）白血球血小板除去赤血球を白血球血小板除去赤血球回収用バッグ１１に回収する。【選択図】図１
2004073602.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の工程を順次行うことからなる血液成分の分取方法：
（１）中に抗凝固化された全血が入った採血バッグと無菌接続可能なチューブとからなる採血バッグユニットと、無菌接続用チューブの下流に並列に白血球血小板除去フィルターおよびバフィーコート回収用の第１の回収バッグが接続され、更に前記白血球血小板除去フィルター下流には白血球血小板除去血漿回収用の第２の回収バッグと赤血球保存剤入りの白血球血小板除去赤血球回収用の第３の回収バッグとが並列に接続された無菌状態の血液成分分取用ユニットとを準備する工程；
（２）前記採血バッグユニットの無菌接続可能なチューブを上方に向けた状態で採血バッグを遠心分離し全血を血漿層、バフィーコート層および赤血球層に分層させる工程；
（３）前記採血バッグユニットの無菌接続可能なチューブと前記血液成分分取用ユニットの無菌接続用チューブとを無菌接続する工程；
（４）前記採血バッグ内の血漿層を前記白血球血小板除去フィルターに通し前記第２の回収バッグに白血球血小板除去血漿を分取する工程；
（５）前記採血バッグ内のバフィーコート層を前記第１の回収バッグに分取する工程；
（６）前記第３の回収バッグ内の赤血球保存剤を前記白血球血小板除去フィルター経由で前記採血バッグに移し赤血球層と混合する工程；
（７）赤血球保存剤と混合された赤血球層を前記白血球血小板除去フィルターに通し前記第３の回収バッグに白血球血小板除去赤血球を回収する工程。
【請求項２】
（１）採血バッグと無菌接続可能なチューブとからなる採血バッグユニット、および（２）無菌接続用チューブの下流に並列に白血球血小板除去フィルターおよびバフィーコート回収用の第１の回収バッグが接続され、更に前記白血球血小板除去フィルター下流に白血球血小板除去血漿回収用の第２の回収バッグと赤血球保存剤入りの白血球血小板除去赤血球回収用の第３の回収バッグとが並列に接続された無菌状態の血液成分分取用ユニットからなる血液成分の分取装置。
【請求項３】
遠心分離され、血漿層、バフィーコート層および赤血球層に分層した全血から、血液成分を分取するための装置であって、無菌接続用チューブの下流に並列に白血球血小板除去フィルターおよびバフィーコート回収用の第１の回収バッグが接続され、更に前記白血球血小板除去フィルター下流に白血球血小板除去血漿回収用の第２の回収バッグと赤血球保存剤入りの白血球血小板除去赤血球回収用の第３の回収バッグとが並列に接続された無菌状態の血液成分分取用ユニットからなる血液成分の分取装置。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、血液を、血漿、赤血球など、その成分毎に分離、採取する方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
近年、医学、特に免疫学の進歩により、血液をその成分毎に分離し、治療の目的に適した血液成分のみを輸血する、いわゆる成分輸血が普及した。しかしながら成分輸血の際、輸血用の血液成分中に混入して来る白血球は患者にとっては他人の白血球であるために患者の体内には抗体が産生され、特に繰り返し輸血された患者の場合、患者体内の抗白血球抗体と輸血血液中の白血球、血小板とが抗原抗体反応を起こし、輸血副作用を起こすことが多い。
【０００３】
このため、輸血用血液成分中に含まれる白血球を除去する目的で白血球血小板除去フィルターが開発されるようになった。特開平４−２００５５０号公報には、採血バッグに採取された血液を遠心分離した後に白血球除去フィルターを通して各血液成分を採取する方法が開示されている。しかしながら、特開平４−２００５５０号公報においては、血漿はフィルターを通過しないため、血漿製剤中に多量の白血球混入が生ずる。
【０００４】
特公平６−５９３０４号公報、特公平６−５９３０５号公報には、採血バッグとフィルターと分離された各血液成分の回収用バッグとが予め一体的に接続されたシステムを用いて、採取された全血を白血球除去フィルターに通して白血球を除去した後に遠心分離を行い、比重差により分離された血液成分を採取する方法が開示されている。これらの方法は、一度の濾過操作で白血球が除去された赤血球のみならず血漿、或いは血小板が無菌的に分取できる点で最近の血液成分輸血事情に適応しており、好ましい。
しかしながら、これらの方法においては、予め採血バッグとフィルターおよび各成分の分取用バッグとが一体的に接続されたシステムを使用するため、献血者から採血する際には不要な、フィルターから下流部分が採血操作の邪魔になる恐れがある。
また、これらの方法においては、簡便な操作で血液製剤として使用できる白血球除去赤血球および白血球除去血漿が得られるが、白血球成分、あるいは白血球および血小板は不要成分として除去・廃棄されるので、全血から得られるすべての血液成分を有効活用することができない。血小板は赤血球や血漿と同様に血液製剤としてのニーズがある貴重な成分である。また、白血球はそのままで血液製剤として使用されることは現在は少ないが、インターフェロンの調製などの材料として利用価値がある。
【０００５】
さらに、特開２００１−２７６２１２号公報には、全血採血用バッグ、血漿採血用バッグ、赤血球回収用バッグおよび白血球除去フィルターを少なくとも使用して、全血を採取した後、全血を遠心して全血採取用バッグ内の全血を血漿と血球液に分離させる工程と、遠心工程により分離された血漿成分を白血球除去フィルターに通過させて白血球除去された血漿として血漿採取用バッグに採取する工程と、その後に、全血採血用バッグ内の血球液を白血球除去フィルターを通過させて赤血球採取用バッグに採取する工程とからなる白血球除去された血漿および白血球除去された赤血球を得る発明が記載されている。しかしながら、この発明にも、特公平６−５９３０４号公報や特公平６−５９３０５号公報に記載の発明と同様に、白血球を有効成分として回収する発想がない。また、この発明で使用される器具は、予め全ての部品が一体化されていても、或いは使用直前に個々の部品を無菌接続しても良い、とされており、装置全体として最も使い勝手の良い構成というものに全く考察が及んでいない。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
そこで、本発明の課題は、上記問題点を解決し、献血者から全血を極めて簡便な操作で採血し、無菌性が保持された一連のシステム内で高率に白血球除去された赤血球および血漿と、白血球および血小板成分のすべての血液成分を無駄なく無菌的に簡便に分取する方法および装置を提供することにある。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
上記課題を達成するために、本発明においては採血用ユニットと血液成分分取用ユニットとの２つのユニットとを別立てとし、シンプルな採血用ユニットのみを用いて採血を行なった後、その採血済みのバッグを血液成分分取用ユニットと無菌接続して白血球含有成分を別途分取しつつフィルターを使用して白血球除去血液成分分取操作を行なう。
具体的には以下の操作を順次行なうものである。
（１）中に抗凝固化された全血が入った採血バッグと無菌接続可能なチューブとからなる採血バッグユニットと、無菌接続用チューブの下流に並列に白血球血小板除去フィルターおよびバフィーコート回収用の第１の回収バッグが接続され、更に前記白血球血小板除去フィルター下流には白血球血小板除去血漿回収用の第２の回収バッグと赤血球保存剤入りの白血球血小板除去赤血球回収用の第３の回収バッグとが並列に接続された無菌状態の血液成分分取用ユニットとを準備する；
（２）前記採血バッグユニットの無菌接続可能なチューブを上方に向けた状態で採血バッグを遠心分離し全血を血漿層、バフィーコート層および赤血球層に分層させる；
（３）前記採血バッグユニットの無菌接続可能なチューブと前記血液成分分取用ユニットの無菌接続用チューブとを無菌接続する；
（４）前記採血バッグ内の血漿層を前記白血球血小板除去フィルターに通し前記第２の回収バッグに白血球血小板除去血漿を分取する；
（５）前記採血バッグ内のバフィーコート層を前記第１の回収バッグに分取する；
（６）前記第３の回収バッグ内の赤血球保存剤を前記白血球血小板除去フィルター経由で前記採血バッグに移し赤血球層と混合する；
（７）赤血球保存剤と混合された赤血球層を前記白血球血小板除去フィルターに通し前記第３の回収バッグに白血球血小板除去赤血球を回収する。
本発明は、また、上記の操作を行うための血液成分の分取装置にも関する。
【０００８】
【発明の実施の形態】
本発明の血液成分の分取方法では、献血でごく一般的に使用される採血バッグに通常の方法で全血が採血されたものがそのまま本発明にいう採血バッグユニットとして使用できる。一般的に知られている採血バッグは通常、２枚の軟質シート材を重ね周縁部を融着して袋状に形成されているものであり、内側の採血血液が貯留されるための空間部に予めＡＣＤ−Ａ液、ＣＰＤ液、ＣＰＤＡ液などの抗凝固剤が無菌的に封入されており、且つ少なくとも献血者と接続するための採血針付のポリ塩化ビニル、ポリエチレン、ポリプロピレン、ＰＥＴやＰＢＴなどのポリエステル等血液回路用として周知の軟質樹脂からなるチューブが１本接続され且つ全体が滅菌処理されているので、このチューブ部分を本発明にいう無菌接続可能なチューブとして使用できる。採血針付のチューブとは別に、無菌接続のための専用チューブが別途接続されている採血バッグがあれば、それに通常の手順を経て全血を採血したものも、本発明にいう採血バッグユニットとして使用できる。
【０００９】
本発明の血液成分の分取方法で使用される血液成分分取用ユニットは、赤血球成分からの白血球除去用として知られている白血球血小板除去フィルターと周知の空の血液バッグ類および予め抗凝固剤や赤血球保存剤が封入された薬剤入りバッグ類を構成部品とする。すなわち、バフィーコート回収用、白血球血小板除去血漿回収用および白血球血小板除去赤血球回収用の血液バッグ類は、前述の採血バッグと同様に作製されたものであり、白血球血小板除去赤血球回収用のバッグの内側貯留空間には予めＭＡＰやＳＡＧＭ等の赤血球保存剤が封入されている。
【００１０】
また、白血球血小板除去フィルターは、血液中の白血球および血小板を捕捉するが血漿および赤血球は捕捉しないフィルターであり、繊維状物質、多孔質体、粒子状物質等を扁平な容器や筒形カラム等に充填したものである。フィルター素材としては親水性材料、疎水性材料いずれも使用することができる。フィルター素材の形態としては、繊維状、その中でも特に不織布状のものと、多孔質体からなるシート状のものとが、白血球および血小板双方の捕捉率および血液の通液性の観点から好ましい結果を与える。
上記白血球血小板除去フィルターは、たとえば不織布をフィルターの主要部として扁平な容器に充填して用いるが、白血球及び血小板の捕捉効率をより良くするために、不織布表面を高分子で被覆したり、表面にグラフト処理を施したりすることもできる。繊維の太さは、平均繊維径で０．３ミクロンから５ミクロン程度のものが用いられ、また繊維の素材としては、合成繊維、再生セルロースのような半合成繊維、綿のような天然繊維、ガラスのような無機繊維などが用いられる。なかでも、ポリエチレンテレフタレート、ポリブチレンテレフタレート、ナイロン、ポリプロピレン、ポリアクリロニトリル等の合成繊維が好ましく用いられる。また、被覆材としては、ジエチルアミノエチル（メタ）アクリレートとヒドロキシエチル（メタ）アクリレートとの共重合体のように塩基性含窒素官能基を有する高分子材料を用いることができる。
【００１１】
また、多孔質体をフィルターの主要部とするフィルターの場合は、ポリウレタン、ポリビニルホルマールなどからなる、平均孔径が０．５ミクロンから数ミクロン程度の極薄のシート状フィルター材を繊維状のプレフィルター等と共に複数枚積層して扁平状の容器に充填したものが好適に用いられる。
【００１２】
本発明で使用される白血球血小板除去フィルターは、前述のような素材、形態のものであって、白血球除去率として９９％以上、好ましくは９９．９％、更に好ましくは９９．９９％を達成できる高白血球除去性能を有しているものが望ましい。昨今では白血球の除去率については極めて高い値が必要とされるため、もはや百分率での表示は行わず、下記式１によって算出される白血球除去率
【式１】
白血球除去率（−ｌｏｇ）＝−ｌｏｇ｛（処理後容積）×（処理後白血球濃度）／（処理前容積）×（処理前白血球濃度）｝
が４ｌｏｇ以上、より好ましくは５ｌｏｇ以上が要求される。
【００１３】
血小板の除去率については、白血球ほどの高除去率が達成できないものでも構わない。白血球除去率が十分に高ければ５０％程度の血小板除去率であっても十分に本発明のフィルターとして使用できる。赤血球濃厚液用白血球除去フィルターとして市販されているフィルターの中にこれらの要件を満たすものがあるので、それらを使用することができる。
【００１４】
フィルターの材質についても特に限定はないが、前述したように白血球除去性能、血小板除去性能の向上と共に血液の流れ性においても優れているもの、すなわち、１メートル程度までのヘッド差による重力差を利用して血液を流した際に抵抗なくフィルター内への流動が開始し、且つフィルター表面が一様に濡れる程度の血液親和性が備わっているものが好ましい。
フィルターを充填する容器材質についても特に限定はなく、従来から多く用いられてきた硬質容器にフィルター材が充填されたタイプのものでも、軟質容器にフィルター材が充填されたものでもいずれでも良い。
これらの汎用の血液バッグ類および白血球血小板除去フィルターを予め接続し、閉じた回路に仕上げた後、滅菌処理を施したものが本発明における血液成分分取用ユニットである。
【００１５】
本発明の血液成分の分取方法について、図面に示す一実施例を用いて説明する。
図１は、本発明の成分の採取方法に使用される採血バッグユニットと血液成分分取用ユニットの一例を示す外観図である。
本発明の血液成分分取方法に用いられる抗凝固化全血が入った無菌接続可能なチューブ付採血バッグユニット１としては、通常使用されている塩ビ等からなる軟質シートを２枚貼り合わせてなる軟質容器に予め抗血液凝固剤が封入された中に全血が所定量（１単位）採血されている、抗凝固化全血入りの採血済みバッグ２がそのまま使用できる。通常、全血採血用バッグ２には先端に採血針３が設けられた採血用チューブが予め接続されているので、これを本発明にいう無菌接続可能なチューブ４として利用することができる。或いは、採血用チューブとは別に、他の血液バッグ等への接続を想定し専用の無菌接続用のチューブが接続されている場合はそのチューブを本発明にいう無菌接続可能なチューブ４として使用する。
本発明では上記採血バッグ内の全血をもれなく有効成分として分離回収するために、白血球血小板除去フィルタ−６を経由しない位置にバフィーコート回収用バッグ７が接続された血液成分分取用ユニット５を用いる。即ち、この血液成分分取用ユニット５は、端が閉じられた１本の無菌接続用チューブ８の下流に並列に白血球血小板除去フィルター６とバフィーコート回収用バッグ７とが接続され、更に白血球血小板除去フィルター６の下流に白血球血小板除去血漿回収用バッグ９と赤血球保存剤１０入りの白血球血小板除去赤血球回収用バッグ１１とが並列に接続された構造を有するものである。使用前にはユニット５全体が閉鎖回路をなしており、赤血球保存剤１０はバッグ１１外に流出しないようにバッグ１１入口部にクレンメや破断により流通可能となるいわゆるブレーカブルシール等（図示せず）により封入されており、且つユニット５全体が無菌状態に保たれている。
【００１６】
本発明の血液成分採取方法は、上記２つのユニットを準備した上で、以下の手順で行なわれる。
まず採血バッグユニット１を無菌接続可能なチューブ４を上方に向けた状態で遠心分離機の遠心カップ内に入れ、遠心分離操作を行なって、全血を血漿、バフィーコート、赤血球の３層に分層させる。本発明では、白血球成分を血小板成分と共に有効成分として回収するので、これらの成分を白血球血小板除去フィルターに通して濾過操作でフィルター部に捕捉してしまわないように、濾過操作に先立ち遠心分離の段階で白血球および血小板の大半をバフィーコートとして形成させ、分離回収できるようにする。そのため遠心操作に際しては、バフィーコートがしっかり形成される遠心条件を適宜選択する。
【００１７】
次に、分層された全血が入っている採血バッグユニット１の無菌接続用チューブ４と血液成分分取ユニット５に設けられている無菌接続用のチューブ８とを、汎用の無菌接続装置を用いて無菌的に接続する。このとき、採血バッグ２内で３層に分離している全血が再び混じり合わないように注意する。
【００１８】
接続が完了したら、まず無菌接続用チューブ８の下流の白血球血小板除去フィルター６に通じる側の分岐回路１２および白血球血小板除去血漿回収用バッグ９に通じる側の分岐回路１４を開状態にし、バフィーコート回収用バッグ５に通じる分岐部回路１３をクレンメ等で閉じて閉状態にしておく。なお、赤血球保存剤１０入りの白血球血小板除去赤血球回収用バッグ１１の入口側の分岐回路１５は予め閉じられている。
【００１９】
全血入りの採血バッグユニット１を分離スタンド（図示せず）と呼ばれる血液バッグ押圧器具にセットし、採血バッグ２を下方から静かに挟み上げて最上層の血漿成分を押し上げてバッグ２の外に押し出させ、白血球血小板除去フィルター６を経て白血球血小板除去血漿回収用バッグ９に分取する。採血バッグユニット１内の血漿成分が押し出され、次のバフィーコート成分が採血バッグ２を出てチューブ８の分岐回路１２及び１３の分岐点近くまで押し出されてきた時点を見計らって白血球血小板除去血漿の回収の終了時期と判断し、一旦採血バッグ２の押圧を停止し、白血球血小板除去フィルター６に通じる分岐回路１２および白血球血小板除去血漿回収用バッグに通じる分岐回路１４をクレンメ等で閉じる。白血球血小板除去血漿が回収されたバッグ９はバッグ９入口を無菌的に閉じて切断することで、ユニット５から切り離す。その後、バフィーコート回収用バッグ７に通じる分岐回路１３側を開状態にしてから再び採血バッグ２の押圧を開始しバフィーコート成分全体を採血バッグユニット１の外に静かに押し出し、バフィーコート回収用バッグ７に直接分取する。
バフィーコート成分の最後の部分がチューブ８の分岐回路１２及び１３の分岐点まで到達したら、採血バッグ２の押圧操作を停止し、分岐回路１３側を閉じる。
バフィーコート成分が回収されたバッグ７は分岐回路１３において無菌的に閉じて切断することでユニット５から切り離す。
【００２０】
続いて分岐回路１２およびバッグ１１の入口を開状態にし、白血球血小板除去赤血球回収用バッグ１１に予め封入させてあったＭＡＰ、ＳＡＧＭ液等の赤血球保存剤１０を、白血球血小板除去フィルター６を経由して採血バッグ２に流入させる。この操作は、白血球血小板除去赤血球回収用バッグ１１を採血バッグ２よりも高い位置に持ち上げてからバッグ１１の入口を開状態にすることにより、赤血球保存剤が重力により分岐回路１５、白血球血小板除去フィルター６、分岐回路１２、チューブ８を経て採血バッグ２に流入させることで行なえる。この操作により、白血球血小板除去フィルター６および分岐回路１２に残存していた少量の血漿成分と、チューブ８に残存していた少量のバフィーコート成分が赤血球保存剤に押し流されて採血バッグ２に戻されるので、バッグ２内の赤血球成分は赤血球保存剤で希釈された白血球血小板混入赤血球濃厚液状態になる。
なお、白血球血小板除去赤血球回収用バッグ１１の入口を予め閉じておく機構としては、破断により流体の流通が可能となる機構が設けられたブレーカブルシールタイプのものを使用してもよいが、その場合は、その後の操作でその部分を赤血球が通過する際に赤血球に悪影響を与えない構造であることが望まれる。
【００２１】
赤血球保存剤１０の採血バッグ２内への流入が終了したら、採血バッグ２の赤血球成分は赤血球保存剤と良く混合させた後、白血球血小板除去フィルター６を経て白血球血小板除去赤血球回収用バッグ１１に回収する。この操作はバッグ１を白血球血小板除去フィルター６よりも高い位置に持ち上げることにより重力で流下させて行なうことができるが、流下速度が遅い場合などは適宜採血バッグ１を軽く手で押圧するなどして流下を促しても良い。
バッグ１１には赤血球保存剤入りの白血球血小板除去赤血球が回収されるので、回収操作が終了したら、分岐回路１５の適当な位置を無菌的に閉じてバッグ１１をユニット５から切り離す。
かくして採血バッグ１に採血されていた全血から、バフィーコート、白血球血小板除去血漿および白血球血小板除去赤血球が別々のバッグに無菌的に回収できる。
【００２２】
本発明においては、まず血漿成分が白血球血小板除去フィルターで濾過され、次に赤血球保存剤の逆方向の通過による該白血球血小板除去フィルター洗浄的操作があり、最後に赤血球保存剤によって希釈された赤血球が該白血球血小板除去フィルターで濾過される。赤血球保存剤が白血球血小板除去フィルターを血漿濾過とは逆の方向に流される結果、血漿濾過時にフィルターに付着した血漿の高蛋白溶液が洗い流され、また、フィルター材に捕捉されていた血小板または／および白血球の一部がフィルターから離脱し、フィルター機能が一部回復する。離脱した白血球及び血小板は赤血球保存剤とともに赤血球成分に混ざることになるが、それらは、赤血球の濾過操作段階で再びフィルターで捕捉される。
本発明においてはフィルターで濾過される血漿および赤血球は予めバフィーコートを除去したものであるため、もともと含有されていた白血球及び血小板量が既にかなり少なくなっている。そのため白血球血小板除去フィルターで捕捉すべき白血球及び血小板の量が少なくて済み、濾過時にフィルターにかかる負担が少ないので、短い濾過時間で優れた白血球血小板除去率が達成できる。
かくして、全血から無菌的に高率に白血球および血小板が除去された赤血球および血漿と、バフィーコートとが無菌的に別々の３つのバッグに分取される。
【００２３】
本発明の方法により得られる白血球血小板除去赤血球と白血球血小板除去血漿は、いずれも血液成分製剤としてそのまま輸血に使用できるものである。白血球血小板除去血漿回収用バッグ９および白血球血小板除去赤血球回収用バッグ１１としてバッグ上部にピールタブにより開封可能に封止されたチューブ開口部が形成されたものを用いれば、輸注するときこの部分に輸液針が挿通可能なので、即座に輸血に供することが可能である。或いは、需要状況に応じて回収された各血液成分は、適宜所定期間冷蔵または冷凍保存しておくこともできる。
一方、富裕な血小板と白血球を含むバフィーコートは、本発明の方法によって得られた５バッグ（５単位）〜１０バッグ（１０単位）を無菌接続装置で接続して合体した後、市販の血小板用白血球除去フィルターを無菌接続して白血球除去し、白血球除去血小板製剤を得ることができる。
あるいは本発明の方法によって得られるバフィーコートは、そこに多量に含まれる白血球成分を、例えばインターフェロンの産生原料として用いることができる。
【００２４】
【実施例１】
以下、図１を用いて実施例を説明する。
ＣＰＤ液５６ｍｌ入りの市販の採血バッグ２に採血された全血４００ｍｌが入った採血バッグユニット（採血針３が採血後無菌的に切断され、先端が閉じたチューブ４がつながっている状態のもの）と、ポリ塩化ビニル（塩ビ）製の無菌接続用チューブ８の下流に内容積が約１００ｍｌのバフィーコート回収用の塩ビ製バッグ７と表面改質ポリエステル超極細繊維製不織布を主要部とする白血球血小板除去フィルター（セパセルＲＺ；旭メディカル社製）６とがポリ塩ビ製の分岐回路１３および１２を用いて並列に接続され、さらに該白血球血小板除去フィルター６の下流にそれぞれ内容積が約４００ｍｌで一方のみにＭＡＰ液１０が９２ｍｌ充填されており且つ入口がブレーカブルシールによって閉じられている塩ビ製の２つのバッグ９および１１が塩ビ製分岐回路１４および１５を用いて並列に接続され、全体が滅菌された血液成分分取用ユニット５とを用意した。
採血バッグユニット１をチューブ４を上方に向けた状態で遠心分離機（図示せず）のバケット内にセットし、３０００Ｇで７分遠心分離して中の全血を血漿、バフィーコート、赤血球の３層に分離させた。
採血バッグユニット１を遠心分離機のバケットから取り出し、分層した血液成分が混合しないように注意しながら上部のチューブ４と血液成分分取用ユニットの無菌接続用チューブ８とをＳＣＤ（無菌接続装置、図示せず）を用いて接続した。
血液成分分取用ユニット５の分岐回路１３および１５をクランプして「閉」状態とし分岐回路１２及び１４を「開」状態にしたことを確認してから採血バッグ部２を市販の分離スタンド（図示せず）に挟み、バッグ２を下方から静かに挟圧して血漿成分をバッグ外に押し出し、白血球血小板除去フィルター６および分岐回路１４を経由して白血球血小板除去血漿回収用バッグ９に収容した。
採血バッグ２内から出た最後の血漿成分がチューブ８の分岐回路１２と１３への分岐部に達した時点で分岐回路１２およびバッグ９の上部入口を「閉」状態にして分岐回路１４をシール、切断した。ここで、分岐回路１２、白血球血小板除去フィルター６に血漿の一部を残したままとした。
次に、分岐回路１３を「開」としてバフィーコート成分をバッグ７に回収した。採血バッグ２の挟圧によりバフィーコート成分に続いて採血バッグから押し出された赤血球成分の先端が僅かにチューブ８から分岐回路１３側に入りかけた時点で分岐回路１３を閉じ、バフィーコートの回収を終了し、分岐回路１３をシールしてバッグ７を切断した。
続いて、採血バッグ２を押圧器から外し、分岐回路１２および１５を「開」にし、血液バッグ１１を上方に掲げ、採血バッグ２を最下方に下げてから血液バッグ１１の入口のブレーカブルシールを壊して開き、ヘッド差を利用して血液バッグ１１内のＭＡＰを分岐回路１５、白血球血小板除去フィルター６、分岐回路１２、チューブ８を経て採血バッグ２に流し込ませた。この際、白血球血小板除去フィルター６および分岐回路１２に残存していた血漿成分はＭＡＰに押されて赤血球成分と共にバッグ２に戻された。
採血バッグ２内で赤血球と少量の血漿とＭＡＰとをよく混合した後、バッグ２を最上部に掲げ、バッグ１１を最下部に下ろしてヘッド圧差でＭＡＰ入り赤血球成分を白血球血小板除去フィルター６を経由してバッグ１１に白血球血小板除去赤血球成分として回収し、分岐回路１５をシールしバッグ１１を切り離した。
【００２５】
この操作の結果、白血球血小板除去血漿が１６８ｍｌ、ＭＡＰ入りの赤血球濃厚液が３００ｍｌ、バフィーコートが１単位採取された。血漿中および赤血球中の白血球の残存量は、元血（全血）中の白血球数が２×１０９個であったのに対し、血漿中が２×１０３個、赤血球中が７×１０３個であり、いずれも５ｌｏｇ以上の白血球除去率が達成されていた。また、血小板の除去率は血漿が９７．４％、赤血球濃厚液が９０．３％であった。
【００２６】
【発明の効果】
本発明の血液成分分取方法は、操作手順上、下記の利点を有している。
（１）本発明では、血液採取操作と血液成分の分取操作とで使用されるユニットが別々になっているので、それぞれの操作を別の場所で行なうことができる。採血操作は実質的にバッグ１つだけからなるコンパクトな採血バッグユニットを用いて行なうので、場所を取らない採血専用ユニットだけを多数用意して移動型採血車などで採血してくることができる。集められた全血入り採血バッグは血液センター等に運び込んで血液成分分取用ユニットと接続すれば、発明の分取方法工程を実施できる。
（２）また、採血工程で必要なユニットが血液成分分取工程で必要な白血球血小板除去フィルターを含むユニットとが別立てとなっているので、採血された血液が血液成分分取に不適合な血液であった場合にはその血液を用いては本発明の血液成分分取を行なわない、という選択が可能であり、高価な白血球血小板除去フィルターを含む血液成分分取用ユニットを無駄にすることがない。
（３）採血の際には採血操作に必要のない採血バッグ以外のバッグ類やフィルター等の器具が採血ユニット下流に繋がっていないので、採血操作を手際良く行なうことができる。また、一旦全血を採取した後は、必要な器具が予め一連に繋がれた血液成分分取用ユニットを採血バッグ側のチューブと１箇所で接続するだけで分取操作に必要な回路が即座に完成するので、すぐさま分取操作に移ることができ、また分取操作中に新たな器具の接続操作は必要ないので、操作が簡便に迅速に行なえる。
（４）本発明の方法によれば、単に高率に白血球血小板が除去された赤血球および血漿が簡便且つ迅速に無菌状態で得られるのみでなく、貴重な血小板は勿論、利用価値のある白血球に至るまで、献血された全血中の全ての成分を無駄に棄てることなく回収できる。
（５）本発明の方法では、特別に新規に開発された白血球血小板除去フィルターを必要とせず、汎用の全血若しくは濃厚赤血球用に設計され販売されている高価な白血球血小板除去フィルターを１つ用いるだけで、高効率に白血球血小板が除去された赤血球および血漿を分取することができる。前述したように、本発明においてはフィルターで濾過される血漿および赤血球からは予めバフィーコート除去操作により大半の白血球および血小板が既に取り除かれている上に血漿と赤血球は別々に濾過されるため、濾過時にフィルターにかかる負担（捕捉されるべき白血球および血小板の絶対量）が少ないので、フィルター性能を最大限に発揮させた状態で濾過することができる。その結果、短い濾過時間（フィルターとの接触時間）で優れた白血球血小板除去率が達成できる。しかも、まず液体成分である血漿を先に濾過し、その後フィルターを一旦赤血球保存剤で逆洗して血漿蛋白成分を洗い流し、それから保存剤で希釈されて粘度が下げられた赤血球成分を濾過するという工程を経るので、フィルターは各回とも流動性の良い流体中に混入している白血球及び血小板を十分なフィルター面積で濾過できることになり、この点からも短い濾過時間でも優れた白血球血小板除去率の達成が実現できる。その上、濾過される時点で赤血球懸濁液度が赤血球保存剤で希釈されているので、フィルター部に残留する赤血球が少なくて済み、濾過後の赤血球成分の回収率も良い。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明方法で使用される血液成分分取方法に使用される２つのユニットの一実施態様を示す平面図である。
【符号の説明】
１・・・採血バッグユニット、２・・・採血バッグ、３・・・採血針、４・・・無菌接続可能なチューブ、５・・血液成分分取用ユニット、６・・・白血球血小板除去フィルター、７・・・バフィーコート回収用バッグ、８・・・無菌接続用チューブ、９・・・白血球血小板除去血漿回収用バッグ、１０・・・赤血球保存剤、１１・・・白血球血小板除去赤血球回収用バッグ、１２、１３、１４、１５・・・分岐回路
【図１】
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