(57)【要約】【課題】発作、頭部外傷、脊髄損傷、癲癇、不安などの神経病または神経障害、アルツハイマー病、ハンチントン病、またはパーキンソン病などの神経変性病の治療的処置に有用な、または、筋肉弛緩薬、鎮痛薬、または一般的な麻酔薬への補助剤として有用な化合物を提供すること。【解決手段】以下の構造：【化１】2004002437.tif 000062または【化２】2004002437.tif 000063または【化３】2004002437.tif 000064または【化４】2004002437.tif 000065を有する化合物。【選択図】　　なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の構造：
【化１】
2004002437.tif 000047
［式中，
各Ｘは，独立して，１またはそれ以上のＨ，Ｂｒ，Ｃｌ，Ｆ，低級アルキルおよび／またはＯＣＨ３であってよく，およびＲ１は，独立して，Ｈ，低級アルキル，ＯＨ，Ｏ−アルキルまたはＯ−アシルであってよく，および各Ｒ２は，独立して，Ｈまたは低級アルキルであってよい；
ただし，３，３−ジフェニルプロピルアミン，３−（３−メチルフェニル）−３−フェニルプロピルアミン，Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−１−メチル−３，３−ジフェニルプロピルアミン，Ｎ−メチル−３，３−ジフェニルプロピルアミン，Ｎ−イソプロピル−３，３−ジフェニルプロピルアミン，およびＮ−（３−メチル−２−ブチル）−３，３−ジフェニルプロピルアミンは除かれる］
または
【化２】
2004002437.tif 000048
［式中，
各Ｘは，独立して，１またはそれ以上のＨ，Ｂｒ，Ｃｌ，Ｆ，低級アルキルおよび／またはＯＣＨ３であってよく，および各Ｒ１は，独立して，Ｈ，低級アルキル，ＯＨ，Ｏ−アルキルまたはＯ−アシルであってよく，および各Ｒ２は，独立して，Ｈまたは低級アルキルであってよい］
または
【化３】
2004002437.tif 000049
［式中，ｎ＝１−６であり，および各Ｘは，独立して，１またはそれ以上のＨ，Ｂｒ，Ｃｌ，Ｆ，低級アルキル，および／またはＯＣＨ３であってよく，およびＲ１は，Ｈ，低級アルキル，ＯＨ，Ｏ−アルキル，またはＯ−アシルであってよく，およびＲ２は、Ｈまたは低級アルキルであってよい］
または
【化４】
2004002437.tif 000050
［式中，
ｎ＝１−６であり，および各Ｘは，独立して，１またはそれ以上のＨ，Ｂｒ，Ｃｌ，Ｆ，低級アルキル，および／またはＯＣＨ３であってよく，およびＲ１は，Ｈ，低級アルキル，ＯＨ，Ｏ−アルキル，またはＯ−アシルであってよく，および各Ｒ２は，独立して，Ｈまたは低級アルキルであってよい］
を有する化合物であって，ただし，化合物２０（３，３−ビス（３−フルオロフェニル）プロピルアミン）は除かれる化合物，またはその薬学的に許容しうる塩。
【請求項２】
【化５】
2004002437.tif 000051
【化６】
2004002437.tif 000052
【化７】
2004002437.tif 000053
である，請求項１記載の化合物またはその薬学的に許容しうる塩。
【請求項３】
請求項１または２記載の化合物またはその薬学的に許容しうる塩を，任意に薬学的に許容しうる担体との組み合わせで含む医薬組成物。
【請求項４】
以下の構造：
【化８】
2004002437.tif 000054
［式中，
各Ｘは，独立して，１またはそれ以上のＨ，Ｂｒ，Ｃｌ，Ｆ，低級アルキルおよび／またはＯＣＨ３であってよく，およびＲ１は，独立して，Ｈ，低級アルキル，ＯＨ，Ｏ−アルキルまたはＯ−アシルであってよく，および各Ｒ２は，独立して，Ｈまたは低級アルキルであってよい］
または
【化９】
2004002437.tif 000055
［式中，
各Ｘは，独立して，１またはそれ以上のＨ，Ｂｒ，Ｃｌ，Ｆ，低級アルキルおよび／またはＯＣＨ３であってよく，および各Ｒ１は，独立して，Ｈ，低級アルキル，ＯＨ，Ｏ−アルキルまたはＯ−アシルであってよく，および各Ｒ２は，独立して，Ｈまたは低級アルキルであってよい］
または
【化１０】
2004002437.tif 000056
［式中，
ｎ＝１−６，および各Ｘは，独立して，１またはそれ以上のＨ，Ｂｒ，Ｃｌ，Ｆ，低級アルキル，および／またはＯＣＨ３であってよく，およびＲ１は，Ｈ，低級アルキル，ＯＨ，Ｏ−アルキル，またはＯ−アシルであってよく，およびＲ２は，Ｈまたは低級アルキルであってよい］
または
【化１１】
2004002437.tif 000057
［式中，
ｎ＝１−６，および各Ｘは，独立して，１またはそれ以上のＨ，Ｂｒ，Ｃｌ，Ｆ，低級アルキル，および／またはＯＣＨ３であってよく，およびＲ１は，Ｈ，低級アルキル，ＯＨ，Ｏ−アルキル，またはＯ−アシルであってよく，および各Ｒ２は，独立して，Ｈまたは低級アルキルであってよい］
を有する化合物であって，ただしテロジリン（Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−１−メチル−３，３−ジフェニルプロピルアミン）ではない化合物，またはその薬学的に許容しうる塩を含む，ＮＭＤＡレセプターに対して活性な医薬組成物。
【請求項５】
化合物が，
【化１２】
2004002437.tif 000058
【化１３】
2004002437.tif 000059
【化１４】
2004002437.tif 000060
【化１５】
2004002437.tif 000061
であるかまたはその薬学的に許容しうる塩である，請求項４記載の医薬組成物。
【請求項６】
医薬組成物が神経性疾患または疾病の治療用である，請求項４または５記載の医薬組成物。
【請求項７】
神経性疾患または疾病が，総体虚血または巣状虚血または出血性発作，頭部障害，脊髄損傷，低酸素誘導性神経細胞傷害，てんかん，不安または神経変性性疾患である，請求項６記載の医薬組成物。
【請求項８】
神経変性性疾患がアルツハイマー病，ハンチントン病またはパーキンソン病である，請求項７記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
発明の分野
本発明は，神経保護薬，抗痙攣薬，抗不安薬，鎮痛薬，筋肉弛緩薬，または一般的な麻酔薬への補助薬として有用な化合物に関する。本発明は，限定されないが，総体および巣状虚血症ならびに出血性発作を含む神経障害および神経病，頭部外傷，脊髄損傷，心拍停止または新生児窮迫（ｎｅｏｎａｔａｌ　ｄｉｓｔｒｅｓｓ）における低酸素誘発性神経細胞損傷，癲癇，不安，ならびに，アルツハイマー病，ハンチントン病およびパーキンソン病などの神経変性病の治療に有用な方法にも関する。本発明は，受容体作動性（ｒｅｃｅｐｔｏｒ−ｏｐｅｒａｔｅｄ）カルシウムチャネル上の新規部位で活性であり，これにより，神経保護薬，抗痙攣薬，抗不安薬，鎮痛薬，筋肉弛緩薬または一般的な麻酔薬への補助薬としての治療的利用能を有し，および／または前記神経障害および神経病の治療のための有効な治療的利用能を有する化合物についてのスクリーニング方法にも関する。
【０００２】
発明の背景
以下は，関連技術の説明であり，請求の範囲についての従来技術であると認められるものはない。
【０００３】
グルタミン酸（ｇｌｕｔａｍａｔｅ）は，哺乳動物脳において主要な興奮性神経伝達物質である。グルタミン酸は，薬理学的にいくつかのサブタイプに区別され得る１つ以上のグルタミン酸受容体と結合または相互作用する。哺乳動物の中枢神経系（ＣＮＳ）には，選択的作動薬であるＮ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸（ＮＭＤＡ），カイニン酸（ＫＡ）およびα−アミノ−３−ヒドロキシ−５−メチルイソオキサゾール−４−プロピオン酸（ＡＭＰＡ）によって薬理学的に定義されたイオノトロピック（ｉｏｎｏｔｒｏｐｉｃ）グルタミン酸受容体の３つの主要なサブタイプがある。ＮＭＤＡ受容体は，発作，頭部外傷，脊髄損傷，癲癇，不安，およびアルツハイマー病などの神経変性病を含む種々の神経科病理学に関連している［ワトキンズ（Ｗａｔｋｉｎｓ）およびコリングリッジ（Ｃｏｌｌｉｎｇｒｉｄｇｅ），ザ・ＮＭＤＡ・レセプター（Ｔｈｅ　ＮＭＤＡ　Ｒｅｃｅｐｔｏｒ），オックスフォード（Ｏｘｆｏｒｄ）：ＩＲＬプレス，１９８９］。侵害受容および無痛におけるＮＭＤＡ受容体についての役割も要求された［ディッケンソン（Ｄｉｃｋｅｎｓｏｎ），終結のための治療：有効な鎮痛薬としてのＮＭＤＡ受容体拮抗薬（Ａ　ｃｕｒｅ　ｆｏｒ　ｗｉｎｄ−ｕｐ：　ＮＭＤＡ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ　ａｓ　ｐｏｔｅｎｔｉａｌ　ａｎａｌｇｅｓｉｃｓ），トレンズ・イン・ファーマコロジカル・サイエンシズ（Ｔｒｅｎｄｓ　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｓｃｉ．）１１：３０７，１９９０］。さらに近年，ＡＭＰＡ受容体は，それらのかかる神経科病理学への可能な貢献について広範囲に研究された［フィッシャー（Ｆｉｓｈｅｒ）およびボゴウススラヴスキー（Ｂｏｇｏｕｓｓｌａｖｓｋｙ），急性虚血性発作についての有効な治療への開発（Ｅｖｏｌｖｉｎｇ　ｔｏｗａｒｄ　ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ　ｔｈｅｒａｐｙ　ｆｏｒ　ａｃｕｔｅ　ｉｓｃｈｅｍｉｃ　ｓｔｒｏｋｅ），ジャーナル・オブ・アメリカン・メディカル・アソシエイション（Ｊ．Ａｍｅｒ．Ｍｅｄ．Ａｓｓｏｃ．）２７０：３６０，１９９３；ヤマグチ（Ｙａｍａｇｕｃｈｉ）ら，ＡＭＰＡ／カイニン酸拮抗薬の抗痙攣活性：最大電気ショックおよび化学的痙攣発作モデルにおけるＧＹＫＩ５２４６６およびＮＢＱＸの比較（Ａｎｔｉｃｏｎｖｕｌｓａｎｔ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ＡＭＰＡ／ｋａｉｎａｔｅ　ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ：　ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ　ｏｆ　ＧＹＫＩ　５２４６６　ａｎｄ　ＮＢＱＸ　ｉｎ　ｍａｘｉｍａｌ　ｅｌｅｃｔｒｏｓｈｏｃｋ　ａｎｄ　ｃｈｅｍｏｃｉｎｖｕｌｓａｎｔ　ｓｅｉｚｕｒｅ　ｍｏｄｅｌｓ），Ｅｐｉｌｅｐｓｙ　Ｒｅｓ．１５：１７９，１９９３］。
【０００４】
内因性神経伝達物質であるグルタミン酸によって活性化されると，ＮＭＤＡ受容体は，関連イオンチャネルを介して細胞外カルシウム（Ｃａ２＋）およびナトリウム（Ｎａ＋）を流入させる。ＮＭＤＡ受容体は，カイニン酸またはＡＭＰＡ受容体（以下を参照）よりもかなり多くのＣａ２＋を流入させ，受容体作動性Ｃａ２＋チャネルの例である。一般に，該チャネルは，簡単に開口され，これにより，細胞内Ｃａ２＋の濃度（［Ｃａ２＋］ｉ）の局在化された一過性の増加が行われ，次いで，細胞の機能的活性が変えられる。しかしながら，ＮＭＤＡ受容体の慢性的な刺激により得られる［Ｃａ２＋］ｉの長期増加は，細胞に対して毒性であり，細胞死を導く。ＮＭＤＡ受容体の刺激により生じる［Ｃａ２＋］ｉの慢性的な上昇は，発作の後の神経変性の主な原因であると言われている［チョイ（Ｃｈｏｉ），グルタミン酸神経毒性および神経系の疾患（Ｇｌｕｔａｍａｔｅ　ｎｅｕｒｏｔｏｘｉｃｉｔｙ　ａｎｄ　ｄｉｓｅａｓｅｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｎｅｒｖｏｕｓ　ｓｙｓｔｅｍ），ニューロン（Ｎｅｕｒｏｎ）１：６２３，１９８８］。ＮＭＤＡ受容体の過剰刺激は，また，いくつかの形態の癲癇［ディングレディン（Ｄｉｎｇｌｅｄｉｎｅ）ら，癲癇における興奮性アミノ酸受容体（Ｅｘｃｉｔａｔｏｒｙ　ａｍｉｎｏ　ａｃｉｄ　ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ　ｉｎ　ｅｐｉｌｅｐｓｙ），トレンズ・イン・ファーマコロジカル・サイエンシズ（Ｔｒｅｎｄｓ　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｓｃｉ．）１１：３３４，１９９０）］，不安［ウィリー（Ｗｉｌｅｙ）およびバルスター（Ｂａｌｓｔｅｒ），抗不安効果のためのＮ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸拮抗薬の症状発現前の評価：リビュー（Ｐｒｅｃｌｉｎｉｃａｌ　ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｎ−ｍｅｔｈｙｌ−Ｄ−ａｓｐａｒｔａｔｅ　ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ　ｆｏｒ　ａｎｔｉａｎｘｉｅｔｙ　ｅｆｆｅｃｔｓ：　Ａ　ｒｅｖｉｅｗ），マルチプル・シグマ・アンド・ＰＣＰ・レセプター・リガンズ：メカニズムス・フォー・ニューロモジュレーション・アンド・ニューロプロテクション？（Ｍｕｌｔｉｐｌｅ　Ｓｉｇｍａ　ａｎｄ　ＰＣＰ　Ｒｅｃｅｐｔｏｒ　Ｌｉｇａｎｄｓ：　Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ　ｆｏｒ　Ｎｅｕｒｏｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ｎｅｕｒｏｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ？），ＮＰＰブックス，ミシガン州アナーバー，第８０１〜８１５頁，１９９２］，および痛覚過敏状態［ディッケンソン（Ｄｉｃｋｅｎｓｏｎ），終結のための治療：有効な鎮痛薬としてのＮＭＤＡ受容体拮抗薬（Ａ　ｃｕｒｅ　ｆｏｒ　ｗｉｎｄ−ｕｐ：　ＮＭＤＡ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ　ａｓ　ｐｏｔｅｎｔｉａｌ　ａｎａｌｇｅｓｉｃｓ），トレンズ・イン・ファーマコロジカル・サイエンシズ（Ｔｒｅｎｄｓ　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｓｃｉ．）１１：３０７，１９９０］の病因に関係すると言われている。
【０００５】
ＮＭＤＡ受容体−イオノフォア複合体の活性は，選択的拮抗薬によって標的とされ得る種々のモジュレートリー部位によって調節される。ホスホン酸ＡＰ５などの競合的拮抗薬は，グルタミン酸結合部位で作用するが，一方，フェンシクリジン（ＰＣＰ），ＭＫ−８０１またはマグネシウム（Ｍｇ２＋）などの非競合的拮抗薬は，関連イオンチャネル内で作用する（イオノフォア）。７−クロロキヌレン酸などの化合物で選択的に遮断され得るグリシン結合部位もある。グリシンが共作動薬（ｃｏ−ａｇｏｎｉｓｔ）として作用し，その結果，グルタミン酸およびグリシンがＮＭＤＡ受容体媒介応答を充分に誘発するために必要であるということを示す証拠がある。ＮＭＤＡ受容体機能のモジュレーションのための他の有効な部位として，亜鉛（Ｚｎ２＋）結合部位およびシグマリガンド結合部位が挙げられる。さらに，スペルミンなどの内因性ポリアミン類は，特異的な部位に結合すると思われ，そこで，ＮＭＤＡ受容体機能の効力を増す［ランソム（Ｒａｎｓｏｍ）およびステック（Ｓｔｅｃ），グルタミン酸，グリシンおよびポリアミン類によってＮＭＤＡ受容体−イオンチャネル複合体に結合する［３Ｈ］ＭＫ−８０１の協同モジュレーション（Ｃｏｏｐｅｒａｔｉｖｅ　ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ［３Ｈ］ＭＫ−８０１　ｂｉｎｄｉｎｇ　ｔｏ　ｔｈｅ　ＮＭＤＡ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ−ｉｏｎ　ｃｈａｎｎｅｌ　ｃｏｍｐｌｅｘ　ｂｙ　ｇｌｕｔａｍａｔｅ，ｇｌｙｃｉｎｅ　ａｎｄ　ｐｏｌｙａｍｉｎｅｓ），ジャーナル・オブ・ニューロケミストリー（Ｊ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．）５１：８３０，１９８８］。ＮＭＤＡ受容体機能に対するポリアミン類の増強する効果は，ポリアミン類についての特異的な受容体部位を介して媒介される；作動活性，拮抗活性および逆作動活性を示すポリアミン類が開示されている［レノルズ（Ｒｅｙｎｏｌｄｓ），アルカインは，ＮＭＤＡ受容体上のポリアミン部位の競合拮抗薬である（Ａｒｃａｉｎｅ　ｉｓ　ａｃｏｍｐｅｔｉｔｉｖｅ　ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｐｏｌｙａｍｉｎｅ　ｓｉｔｅ　ｏｎ　ｔｈｅ　ＮＭＤＡ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ），ヨーロピアン・ジャーナル・オブ・ファーマコロジー（Ｅｕｒｏｐ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．）１７７：２１５，１９９０；ウィリアムズ（Ｗｉｌｌｉａｍｓ）ら，ＮＭＤＡ受容体のポリアミン認識部位での作動効果，拮抗効果，および逆作動効果を有するポリアミン類の特徴付け（Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｏｌｙａｍｉｎｅｓ　ｈａｖｉｎｇ　ａｇｏｎｉｓｔ，ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ，ａｎｄ　ｉｎｖｅｒｓｅ　ａｇｏｎｉｓｔ　ｅｆｅｃｔｓ　ａｔ　ｔｈｅ　ｐｏｌｙａｍｉｎｅ　ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ　ｓｉｔｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ＮＭＤＡ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ），ニューロン（Ｎｅｕｒｏｎ）５：１９９，１９９０］。放射リガンド結合研究は，さらに，高濃度のポリアミン類がＮＭＤＡ受容体機能を阻害することを示した［レノルズ（Ｒｅｙｎｏｌｄｓ）およびミラー（Ｍｉｌｌｅｒ），イフェンプロジルは，ＮＭＤＡ受容体拮抗薬の新規タイプである：ポリアミン類との相互作用（Ｉｆｅｎｐｒｏｄｉｌ　ｉｓ　ａ　ｎｏｖｅｌ　ｔｙｐｅ　ｏｄ　ＮＭＤＡ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ：　Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　ｐｏｌｙａｍｉｎｅｓ），モレキュラー・ファーマコロジー（Ｍｏｌｅｃ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．）３６：７５８，１９８９；ウィリアムズ（Ｗｉｌｌｉａｍｓ）ら，［３Ｈ］ＭＫ−８０１のＮＭＤＡ受容体への結合に対するポリアミン類の効果：ポリアミン認識部位の存在についての薬理学的証拠（Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｐｏｌｙａｍｉｎｅｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｂｉｎｄｉｎｇ　ｏｆ［３Ｈ］ＭＫ−８０１　ｔｏ　ｔｈｅ　ＮＭＤＡｒｅｃｅｐｔｏｒ：　Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ　ｅｖｉｄｅｎｃｅ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｅｘｉｓｔｅｎｃｅ　ｏｆ　ａ　ｐｏｌｙａｍｉｎｅ　ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ　ｓｉｔｅ），モレキュラー・ファーマコロジー（Ｍｏｌｅｃ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．）３６：５７５，１９８９；サッカン（Ｓａｃｃａｎ）およびジョンソン（Ｊｏｈｎｓｏｎ），ＮＭＤＡ受容体−イオノフォア複合体に結合する［３Ｈ］ＴＣＰに対するポリアミン類の刺激効果および阻害効果の特徴付け（Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｓｔｉｍｕｌａｔｏｒｙ　ａｎｄ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｐｏｌｙａｍｉｎｅｓ　ｏｎ　［３Ｈ］ＴＣＰ　ｂｉｎｄｉｎｇ　ｔｏ　ｔｈｅ　ＮＭＤＡ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ−ｉｏｎｏｐｈｏｒｅ　ｃｏｍｐｌｅｘ），モレキュラー・ファーマコロジー（Ｍｏｌｅｃ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．）３７：５７２，１９９０］。パッチクランプ電気生理学的研究により，作動薬または拮抗薬のいずれかとしてポリアミン受容体で作用することが予め示された化合物によってこの阻害が生じることが判明したので，ＮＭＤＡ受容体に対するポリアミン類のこの阻害効果は，おそらく，非特異的効果であろう（すなわち，ポリアミン受容体を介して媒介されない）［ドネバン（Ｄｏｎｅｖａｎ）ら，アルカインは，オープン・チャネル・メカニズムによってＮ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸受容体応答を遮断する：培養した海馬ニューロンにおける全細胞および単一チャネル・レコーディング研究（Ａｒｃａｉｎｅ　Ｂｌｏｃｋｓ　Ｎ−Ｍｅｔｈｙｌ−Ｄ−Ａｓｐａｒｔａｔｅ　Ｒｅｃｅｐｔｏｒ　Ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ　ｂｙ　ａｎ　Ｏｐｅｎ　Ｃｈａｎｎｅｌ　Ｍｅｃｈａｎｉｓｍ：　Ｗｈｏｌｅ−Ｃｅｌｌ　ａｎｄ　Ｓｉｎｇｌｅ−Ｃｈａｎｎｅｌ　Ｒｅｃｏｒｄｉｎｇ　Ｓｔｕｄｉｅｓ　ｉｎ　Ｃｕｌｔｕｒｅｄ　Ｈｉｐｐｏｃａｍｐａｌ　Ｎｅｕｒｏｎｓ），モレキュラー・ファーマコロジー（Ｍｏｌｅｃ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．）４１：７１７，１９９２；ロック（Ｒｏｃｋ）およびマクドナルド（Ｍａｃｄｏｎａｌｄ），スペルミンおよび関連ポリアミン類は，ＮＭＤＡ受容体単一チャネルコンダクタンスの電位依存性減少を生じる（Ｓｐｅｒｍｉｎｅ　ａｎｄ　Ｒｅｌａｔｅｄ　Ｐｏｌｙａｍｉｎｅｓ　Ｐｒｏｄｕｃｅ　ａ　Ｖｏｌｔａｇｅ−Ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ　Ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ＮＭＤＡ　Ｒｅｃｅｐｔｏｒ　Ｓｉｎｇｌｅ−Ｃｈａｎｎｅｌ　Ｃｏｎｄｕｃｔａｎｃｅ），モレキュラー・ファーマコロジー（Ｍｏｌｅｃ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．）４２：１５７，１９９２］。最近の研究により，グルタミン酸受容体の分子多様性（ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ）が判明した［ナカニシ（Ｎａｋａｎｉｓｈｉ），グルタミン酸受容体の分子多様性および脳機能についての密接な関係（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｇｌｕｔａｍａｔｅ　Ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ　ａｎｄ　Ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ　ｆｏｒ　Ｂｒａｉｎ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎ），サイエンス（Ｓｃｉｅｎｃｅ）２５８：５９７，１９９２］。
【０００６】
各々異なる遺伝子によってコードされている少なくとも５種類のＮＭＤＡ受容体サブユニット（ＮＭＤＡＲ１およびＮＭＤＡＲ２Ａ〜ＮＭＤＡＲ２Ｄ）が現在までに同定されている。ＮＭＤＡＲ１において，代替スプライシングは，少なくとも６つのさらなるイソ形態を生じる。ＮＭＤＡＲ１が必要なサブユニットであり，ＮＭＤＡＲ１と，ＮＭＤＡＲ２の異なるメンバーとの組合せが充分に機能的なＮＭＤＡ受容体−イオノフォア複合体を形成することは，明らかである。かくして，ＮＭＤＡ受容体−イオノフォア複合体は，少なくともＮＭＤＡＲ１およびＮＭＤＡＲ２サブユニットからなるヘテロ−オリゴマー構造体として定義される；まだ発見されていないが，さらなるサブユニットの存在は，この定義によって除外されない。ＮＭＤＡＲ１は，グルタミン酸，グリシン，Ｍｇ２＋，ＭＫ−８０１，およびＺｎ２＋についての結合部位を有することが判明した。シグマリガンドおよびポリアミン類についての結合部位は，ＮＭＤＡ受容体サブユニット上に局在していなかったが，イフェンプロジルは，最近，ＮＭＤＡＲ２Ｂサブユニットでの方がＮＭＤＡＲ２Ａサブユニットでよりも有効であることが報告された［ウィリアムズ（Ｗｉｌｌｉａｍｓ），イフェンプロジルは，Ｎ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸受容体のサブタイプを区別する：組換えヘテロメリック受容体での選択性およびメカニズム（Ｉｆｅｎｐｒｏｄｉｌ　ｄｉｓｃｒｉｍａｔｅｓ　ｓｕｂｔｙｐｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｎ−Ｍｅｔｈｙｌ−Ｄ−ａｓｐａｒｔａｔｅ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ：　ｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙ　ａｎｄ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ　ａｔ　ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ　ｈｅｔｅｒｏｍｅｒｉｃ　ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ）］。
【０００７】
ＡＭＰＡおよびカイニン酸受容体のいくつかの異なるサブタイプもクローンされる［ナカニシ（Ｎａｋａｎｉｓｈｉ）ら，グルタミン酸受容体の分子多様性および脳機能についての密接な関係（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｇｌｕｔａｍａｔｅ　Ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ　ａｎｄ　Ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ　ｆｏｒ　Ｂｒａｉｎ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎ），サイエンス（Ｓｃｉｅｎｃｅ）２５８：５９７，１９９２］。ＧｌｕＲ１，ＧｌｕＲ２，ＧｌｕＲ３，およびＧｌｕＲ４（ＧｌｕＲＡ〜ＧｌｕＲＤとも称される）と称されるＡＭＰＡ受容体が特に関連しており，各々，フリップおよびフロップと称される２つの形態のうち一方で存在し，ＲＮＡ代替スプライシングによって生じる。ＧｌｕＲ１，ＧｌｕＲ３およびＧｌｕＲ４は，ホモメリック（ｈｏｍｏｍｅｒｉｃ）またはヘテロメリック（ｈｅｔｅｒｏｍｅｒｉｃ）受容体として発現されると，Ｃａ２＋に対して透過性があり，したがって，受容体作動性Ｃａ２＋チャネルの例である。単独または他のサブユニットと組み合わせたＧｌｕＲ２の発現は，Ｃａ２＋に対して非常に非透過性である受容体を生じる。ｉｎ　ｓｉｔｕで研究したほとんどのＡＭＰＡ受容体は，Ｃａ２＋透過性ではないので（前記した），ｉｎ　ｓｉｔｕでのかかる受容体は，少なくとも１つのＧｌｕＲ２サブユニットを有すると思われる。さらにまた，ＧｌｕＲ２サブユニットは，推定のポア形成膜内外領域ＩＩ内にアルギニン残基を含有するという事実によって機能的に異なるという仮説が設けられる；ＧｌｕＲ１，ＧｌｕＲ３およびＧｌｕＲ４は，全て，この棄却域（Ｑ／Ｒ部位と称される，ここで，ＱおよびＲは，各々，グルタミンおよびアルギニンについての一文字呼称である）にグルタミン残基を含有する。ＡＭＰＡ受容体の活性は，選択的拮抗薬によって標的とされ得る多くのモジュレートリー部位によって調節される［アナレイ（Ｈｏｎｏｒｅ）ら，キノキサリンジオン類：８４ｂ４な競合的非ＮＭＤＡグルタミン酸受容体拮抗薬（Ｑｕｉｎｏｘａｌｉｎｅｄｉｏｎｅｓ：　ｐｏｔｅｎｔ　ｃｏｍｐｅｔｉｔｉｖｅ　ｎｏｎ−ＮＭＤＡ　ｇｌｕｔａｍａｔｅ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ），サイエンス（Ｓｃｉｅｎｃｅ）２４１：７０１，１９８８；ドネバン（Ｄｏｎｅｖａｎ）およびロガヴスキー（Ｒｏｇａｗｓｋｉ），ＧＹＫＩ　５２４６６，２，３−ベンゾジアゼピンは，ＡＭＰＡ／カイニン酸受容体応答の非常に選択的な非競合拮抗薬である（ＧＹＫＩ　５２４６６，ａ２，３−ｂｅｎｚｏｄｉａｚｅｐｉｎｅ，ｉｓ　ａ　ｈｉｇｈｌｙ　ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ，ｎｏｎｃｏｍｐｅｔｉｔｉｖｅ　ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ　ｏｆ　ＡＭＰＡ／ｋａｉｎａｔｅ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ），ニューロン（Ｎｅｕｒｏｎ）１０：５１，１９９３］。ＮＢＱＸなどの競合的拮抗薬は，グルタミン酸結合部位で作用し，一方，ＧＹＫＩ　５２４６６などの化合物は，関連したアロステリックな部位で非競合的に作用すると思われる。
【０００８】
ＮＭＤＡ受容体で競合的または非競合的拮抗薬として作用する化合物は，種々のイン・ビトロ神経毒性アッセイ［メルドラム（Ｍｅｌｄｒｕｍ）およびガースウェイト（Ｇａｒｔｈｗａｉｔｅ），興奮性アミノ酸神経毒性および神経変性病（Ｅｘｃｉｔａｔｏｒｙ　ａｍｉｎｏ　ａｃｉｄ　ｎｅｕｒｏｔｏｘｉｃｉｔｙ　ａｎｄ　ｎｅｕｒｏｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｖｅ　ｄｉｓｅａｓｅ），トレンズ・イン・ファーマコロジカル・サイエンイズ（Ｔｒｅｎｄｓ　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｓｃｉ．）１１：３７９，１９９０］および発作のイン・ビボモデル［スキャットン（Ｓｃａｔｔｏｎ），虚血性脳血管疾患におけるＮＭＤＡ受容体拮抗薬の治療的潜在能力（Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ　ｐｏｔｅｎｔｉａｌ　ｏｆ　ＮＭＤＡ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ　ｉｎ　ｉｓｃｈｅｍｉｃ　ｃｅｒｅｂｒｏｖａｓｃｕｌａｒ　ｄｉｓｅａｓｅ），ドラッグ・ストラテジズ・イン・ザ・プリベンション・アンド・トリートメント・オブ・ストローク（Ｄｒｕｇ　Ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｓｔｒｏｋｅ），ＩＢＣ・テクニカル・サーバシズ・リミテッド（ＩＢＣ　Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ　Ｓｅｒｖｉｃｅｓ　Ｌｔｄ．），１９９０］において，ニューロン細胞死を予防するのに有効であると言われている。かかる化合物は，有効な抗痙攣薬［メルドラム（Ｍｅｌｄｒｕｍ），癲癇における興奮性アミノ酸神経伝達物質および抗痙攣薬治療（Ｅｘｃｉｔａｔｏｒｙ　ａｍｉｎｏ　ａｃｉｄ　ｎｅｕｒｏｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ　ｉｎ　ｅｐｉｌｅｐｓｙ　ａｎｄ　ａｎｔｉｃｏｎｖｕｌｓａｎｔ　ｔｈｅｒａｐｙ），エキサイテイトリー・アミノ・アシッズ（Ｅｘｃｉｔａｔｏｒｙ　Ａｍｉｎｏ　Ａｃｉｄｓ），メルドラム（Ｍｅｌｄｒｕｍ），モロニ（Ｍｏｒｏｎｉ），サイモン（Ｓｉｍｏｎ），およびウッズ（Ｗｏｏｄｓ）編，ニューヨーク：レイベン・プレス（Ｒａｖｅｎ　Ｐｒｅｓｓ），第６５５頁，１９９１］，抗不安薬［ウィリー（Ｗｉｌｅｙ）およびバルスター（Ｂａｌｓｔｅｒ），抗不安効果のためのＮ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸拮抗薬の症状発現前の評価：リビュー（Ｐｒｅｃｌｉｎｉｃａｌ　ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｎ−ｍｅｔｈｙｌ−Ｄ−ａｓｐａｒｔａｔｅ　ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ　ｆｏｒ　ａｎｔｉａｎｘｉｅｔｙ　ｅｆｆｅｃｔｓ：　Ａ　ｒｅｖｉｅｗ），マルチプル・シグマ・アンド・ＰＣＰ・レセプター・リガンズ：メカニズムス・フォー・ニューロモジュレーション・アンド・ニューロプロテクション？（Ｍｕｌｔｉｐｌｅ　Ｓｉｇｍａ　ａｎｄ　ＰＣＰ　Ｒｅｃｅｐｔｏｒ　Ｌｉｇａｎｄｓ：　Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ　ｆｏｒ　Ｎｅｕｒｏｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ｎｅｕｒｏｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ？），ＮＰＰブックス，ミシガン州アナーバー，第８０１〜８１５頁，１９９２］，および鎮痛薬［ディッケンソン（Ｄｉｃｋｅｎｓｏｎ），終結のための治療：有効な鎮痛薬としてのＮＭＤＡ受容体拮抗薬（Ａ　ｃｕｒｅ　ｆｏｒ　ｗｉｎｄ−ｕｐ：　ＮＭＤＡ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ　ａｓ　ｐｏｔｅｎｔｉａｌ　ａｎａｌｇｅｓｉｃｓ），トレンズ・イン・ファーマコロジカル・サイエンシズ（Ｔｒｅｎｄｓ　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｓｃｉ．）１１：３０７，１９９０］でもあり，あるＮＭＤＡ受容体拮抗薬は，アルツハイマー病に関連する痴呆を減少させる［ヒューズ（Ｈｕｇｈｅｓ），痴呆の治療へのメルツ新規アプローチ（Ｍｅｒｚ’　ｎｏｖｅｌ　ａｐｐｒｏａｃｈ　ｔｏｔｈｅ　ｔｒｅａｔｅｍｎｔ　ｏｆ　ｄｅｍｅｎｔｉａ），スクリプト（Ｓｃｒｉｐｔ）第１６６６号：２４，１９９１］。
【０００９】
同様に，ＭＡＰＡ受容体拮抗薬は，かかる神経障害および神経病の治療のために有効な治療薬として強い監視下に入った。ＡＭＰＡ受容体拮抗薬は，虚血性発作および癲癇の動物モデルにおいて，各々，神経保護活性［フィッシャー（Ｆｉｓｈｅｒ）およびボゴウススラヴスキー（Ｂｏｇｏｕｓｓｌａｖｓｋｙ），急性虚血性発作についての有効な治療への開発（Ｅｖｏｌｖｉｎｇ　ｔｏｗａｒｄ　ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ　ｔｈｅｒａｐｙ　ｆｏｒ　ａｃｕｔｅ　ｉｓｃｈｅｍｉｃ　ｓｔｒｏｋｅ），ジャーナル・オブ・アメリカン・メディカル・アソシエイション（Ｊ．Ａｍｅｒ．Ｍｅｄ．Ａｓｓｏｃ．）２７０：３６０，１９９３］および抗痙攣活性［ヤマグチ（Ｙａｍａｇｕｃｈｉ）ら，ＡＭＰＡ／カイニン酸拮抗薬の抗痙攣活性：最大電気ショックおよび化学的痙攣発作モデルにおけるＧＹＫＩ　５２４６６およびＮＢＱＸの比較（Ａｎｔｉｃｏｎｖｕｌｓａｎｔ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ＡＭＰＡ／ｋａｉｎａｔｅ　ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ：　ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ　ｏｆ　ＧＹＫＩ　５２４６６　ａｎｄ　ＮＢＱＸ　ｉｎ　ｍａｘｉｍａｌ　ｅｌｅｃｔｒｏｓｈｏｃｋ　ａｎｄ　ｃｈｅｍｏｃｉｎｖｕｌｓａｎｔ　ｓｅｉｚｕｒｅ　ｍｏｄｅｌｓ），Ｅｐｉｌｅｐｓｙ　Ｒｅｓ．１５：１７９，１９９３］を有することが判明した。
【００１０】
哺乳動物ＣＮＡ中に存在するニコチン性コリン作動性受容体は，受容体作動性Ｃａ２＋チャネルの別の例である［デネリス（Ｄｅｎｅｒｉｓ）ら，ニューロンのニコチン性アセチルコリン受容体の薬理学的および機能的多様性（Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ　ａｎｄ　ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　ｎｅｕｒｏｎａｌ　ｎｉｃｏｔｉｎｉｃ　ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅ　ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ），トレンズ・イン・ファーマコロジカル・サイエンシズ（Ｔｒｅｎｄｓ　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｓｃｉ．）１２：３４，１９９１］。いくつかの異なる受容体サブユニットがクローン化され，これらのサブユニットは，例えばゼノプス（Ｘｅｎｏｐｕｓ）卵母細胞中で，発現して，それらの関連したカチオンチャネルについての機能的受容体を形成することができる。かかる受容体−イオノフォア複合体は，ヘテロペンタメリック構造であるという仮説が設けられる。虚血性発作，癲癇および神経変性病などの神経障害および神経病の病理学におけるニコチン性受容体作動性Ｃａ２＋チャネルの可能な役割は，探求されていない。
【００１１】
ある種のクモおよびスズメバチ（ｗａｓｐ）の毒が，哺乳動物ＣＮＳにおけるグルタミン酸受容体に対して活性を有するアリールアルキルアミン毒（ポリアミン毒，アリールアミン毒，アシルポリアミン毒またはポリアミンアミド毒とも称される）を含有することは，従前に開示されている［ジャクソン（Ｊａｃｋｓｏｎ）およびアシャーウッド（Ｕｓｈｅｒｗｏｏｄ），興奮性アミノ酸伝達の要素を解剖するための道具としてクモ毒（Ｓｐｉｄｅｒ　ｔｏｘｉｎｓ　ａｓ　ｔｏｏｌｓ　ｆｏｒ　ｄｉｓｓｅｃｔｉｎｇ　ｅｌｅｍｅｎｔｓ　ｏｆ　ｅｘｃｉｔａｔｏｒｙ　ａｍｉｎｏ　ａｃｉｄ　ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ），トレンズ・イン・ニューロサイエンシズ（Ｔｒｅｎｄｓ　Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．）１１：２７８，１９８８；ジャクソン（Ｊａｃｋｓｏｎ）およびパークス（Ｐａｒｋｓ），クモ毒：神経生物学における最近の応用（Ｓｐｉｄｅｒ　Ｔｏｘｉｎｓ：　Ｒｅｃｅｎｔ　Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ　Ｉｎ　Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｙ），Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．１２：４０５，１９８９；サッコマノ（Ｓａｃｃｏｍａｎｏ）ら，ポリアミンクモ毒：固有の薬理学的道具（Ｐｏｌｙａｍｉｎｅ　ｓｐｉｄｅｒ　ｔｏｘｉｎｓ：　Ｕｎｉｑｕｅ　ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ　ｔｏｏｌｓ），Ａｎｎｕ．Ｒｅｐ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．　２４：２８７，１９８９；アシャーウッド（Ｕｓｈｅｒｗｏｏｄ）およびブラグブロー（Ｂｌａｇｂｒｏｕｇｈ），グルタミン酸受容体に影響を及ぼすクモ毒：治療学的神経化学におけるポリアミン類（Ｓｐｉｄｅｒ　Ｔｏｘｉｎｓ　Ａｆｆｅｃｔｉｎｇ　Ｇｌｕｔａｍａｔｅ　Ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ：　Ｐｏｌｙａｎｉｍｅｓ　ｉｎ　Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ　Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ），ファーマコロジー・アンド・セラピューティクス（Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｈｅｒａｐ．）５２：２４５，１９９１；カワイ（Ｋａｗａｉ），クモ毒の神経活性毒（Ｎｅｕｒｏａｃｔｉｖｅ　Ｔｏｘｉｎｓ　ｏｆ　ＳｐｉｄｅｒＶｅｎｏｍｓ），ジャーナル・オブ・トキシコロジー：トキシン・リビューズ（Ｊ．Ｔｏｘｉｃｏｌ．Ｔｏｘｉｎ　Ｒｅｖ．）１０：１３１，１９９１を参照］。アリールアルキルアミン毒は，まず，哺乳動物ＣＮＳにおけるグルタミン酸受容体のＡＭＰＡ／カイニン酸サブタイプの選択的拮抗薬であると報告された［カワイ（Ｋａｗａｉ）ら，哺乳動物脳におけるグルタミン作動性シナプスに対するクモ毒の効果（Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ａ　ｓｐｉｄｅｒ　ｔｏｘｉｎ　ｏｎ　ｇｌｕｔａｍｉｎｅｒｇｉｃ　ｓｙｎａｐｓｅｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｍａｍｍａｌｉａｎ　ｂｒａｉｎ），Ｂｉｏｍｅｄ．Ｒｅｓ．３：３５３，１９８２；サイト（Ｓａｉｔｏ）ら，クモ毒（ＪＳＴＸ）は，海馬錐体ニューロンにおいてグルタミン酸シナプスを遮断する（Ｓｐｉｄｅｒ　Ｔｏｘｉｎ（ＪＳＴＸ）ｂｌｏｃｋｓ　ｇｌｕｔａｍａｔｅ　ｓｙｎａｐｓｅ　ｉｎ　ｈｉｐｐｏｃａｍｐａｌ　ｐｙｒａｍｉｄａｌ　ｎｅｕｒｏｎｓ），ブレイン・リサーチ（Ｂｒａｉｎ　Ｒｅｓ．）３４６：３９７，１９８５；サイト（Ｓａｉｔｏ）ら，イン・ビトロでの海馬ＣＡ１ニューロンに対するクモ毒（ＪＳＴＸ）の効果（Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ａ　ｓｐｉｄｅｒ　ｔｏｘｉｎ（ＪＳＴＸ）ｏｎｈｉｐｐｏｃａｍｐａｌ　ＣＡ１　ｎｅｕｒｏｎｓ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ），ブレイン・リサーチ（Ｂｒａｉｎ　Ｒｅｓ．）４８１：１６，１９８９；アカイケ（Ａｋａｉｋｅ）ら，クモ毒は，単離した海馬錐体ニューロンにおける興奮性アミノ酸応答を遮断する（Ｓｐｉｄｅｒ　ｔｏｘｉｎ　ｂｌｏｃｋｓ　ｅｘｃｉｔａｔｏｒｙ　ａｍｉｎｏ　ａｃｉｄ　ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ　ｉｎ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｈｉｐｐｏｃａｍｐａｌ　ｐｙｒａｍｉｄａｌ　ｎｅｕｒｏｎｓ），ニューロサイエンス・レターズ（Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ｌｅｔｔ．）７９：３２６，１９８７；アッシュ（Ａｓｈｅ）ら，アルギオトキシン−６３６は，ラット海馬ＣＡ１錐体ニューロンにおける興奮性シプス伝達を遮断する（Ａｒｇｉｏｔｏｘｉｎ−６３６　ｂｌｏｃｋｓ　ｅｘｃｉｔａｔｏｒｙ　ｓｙｎａｐｔｉｃ　ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ　ｉｎ　ｒａｔ　ｈｉｐｐｏｃａｍｐａｌ　ＣＡ１　ｐｙｒａｍｉｄａｌ　ｎｅｕｒｏｎｓ），ブレイン・リサーチ（Ｂｒａｉｎ　Ｒｅｓ．）４８０：２３４，１９８９；ジョーンズ（Ｊｏｎｅｓ）ら，フィラントトキシンは，イン・ビボでラット脳幹ニューロンのキスカル酸誘発性，ＡＭＰＡ誘発性およびカイニン酸誘発性であるが，ＮＭＤＡ誘発性ではない興奮を遮断する（Ｐｈｉｌａｎｔｈｏｔｏｘｉｎ　ｂｌｏｃｋｓ　ｑｕｉｓｑｕａｌａｔｅ−ｉｎｄｕｃｅｄ，ＡＭＰＡ−ｉｎｄｕｃｅｄ　ａｎｄ　ｋａｉｎａｔｅ−ｉｎｄｕｃｅｄ，ｂｕｔ　ｎｏｔ　ＮＭＤＡ−ｉｎｄｕｃｅｄ　ｅｘｃｉｔａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｒａｔ　ｂｒａｉｎｓｔｅｍ　ｎｅｕｒｏｎｅｓ　ｉｎ　ｖｉｖｏ），ブリテイッシュ・ジャーナル・オブ・ファーマコロジー（Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．）１０１：９６８，１９９０］。
【００１２】
続く研究により，ある種のアリールアルキルアミン毒は，種々のグルタミン酸受容体で無効かつ非選択的であるが，他のアリールアルキルアミン類は，哺乳動物ＣＮＳにおけるＮＭＤＡ受容体活性化によって媒介される応答を拮抗する際に非常に有効かつ選択的であることが判明した［ミューラー（Ｍｕｅｌｌｅｒ）ら，イン・ビトロでのラット海馬におけるＮＭＤＡ受容体媒介伝達に対するポリアミンクモ毒の効果（Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｐｏｌｙａｍｉｎｅ　ｓｐｉｄｅｒ　ｔｏｘｉｎｓ　ｏｎ　ＮＭＤＡ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ−ｍｅｄｉａｔｅｄ　ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ　ｉｎ　ｒａｔ　ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ），Ｓｏｃ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ａｂｓｔ．１５：９４５，１９８９；ミューラー（Ｍｕｅｌｌｅｒ）ら，アリールアミンクモ毒は，ラット海馬スライスにおけるＮＭＤＡ受容体媒介シナプス伝達を拮抗する（Ａｒｙｌａｍｉｎｅ　ｓｐｉｄｅｒ　ｔｏｘｉｎｓ　ａｎｔａｇｏｎｉｚｅ　ＮＭＤＡ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ−ｍｅｄｉａｔｅｄ　ｓｙｎａｐｔｉｃ　ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ　ｉｎ　ｒａｔ　ｈｉｐｐｏｃａｍｐａｌ　ｓｌｉｃｅｓ），シナプス（Ｓｙｎａｐｓｅ）９：２４４，１９９１；パークス（Ｐａｒｋｓ）ら，ポリアミンクモ毒は，小脳顆粒ニューロンにおけるサイトゾルカルシウムのＮＭＤＡ受容体媒介増加を遮断する（Ｐｏｌｙａｍｉｎｅ　ｓｐｉｄｅｒ　ｔｏｘｉｎｓ　ｂｌｏｃｋ　ＮＭＤＡ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ−ｍｅｄｉａｔｅｄ　ｉｎｃｒｅａｓｅｓ　ｉｎ　ｃｙｔｏｓｏｌｉｃ　ｃａｌｃｉｕｍｉｎ　ｃｅｒｅｂｅｌｌａｒ　ｇｒａｎｕｌｅ　ｎｅｕｒｏｎｓ），Ｓｏｃ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ａｂｓｔ．１５：１１６９，１９８９；パークス（Ｐａｒｋｓ）ら，ジョウゴグモ（アゲレノプシス・アペルタ）毒からのアリールアミン毒は，哺乳動物脳におけるＮ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸受容体機能を拮抗する（Ａｒｙｌａｍｉｎｅ　ｔｏｘｉｎｓ　ｆｒｏｍ　ｆｕｎｎｅｌ−ｗｅｂ　ｓｐｉｄｅｒ（Ａｇｅｌｅｎｏｐｓｉｓ　ａｐｅｒｔａ）ｖｅｎｏｍ　ａｎｔａｇｏｎｉｚｅ　Ｎ−ｍｅｔｈｙｌ−Ｄ−ａｓｐａｒｔａｔｅ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ｆｕｎｃｔｉｏｎ　ｉｎ　ｍａｍｍａｌｉａｎ　ｂｒａｉｎ），ジャーナル・オブ・バイオロジカル・ケミストリー（Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．）２６６：２１５２３，１９９１；プリーストリィ（Ｐｒｉｅｓｔｌｅｙ）ら，クモ毒アルギオトキシン−６３６によるラット皮質ニューロン上の興奮性アミノ酸に対する応答の拮抗作用（Ａｎｔａｇｏｎｉｓｍ　ｏｆ　ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ　ｔｏ　ｅｘｃｉｔａｔｏｒｙ　ａｍｉｎｏ　ａｃｉｄｓ　ｏｎ　ｒａｔ　ｃｏｒｔｉｃａｌ　ｎｅｕｒｏｎｅｓ　ｂｙ　ｔｈｅ　ｓｐｉｄｅｒ　ｔｏｘｉｎ，ａｒｇｉｏｔｏｘｉｎ−６３６），ブリテイッシュ・ジャーナル・オブ・ファーマコロジー（Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．）９７：１３１５，１９８９；ドラグーン（Ｄｒａｇｕｈｎ）ら，アルギオトキシン−６３６は，ゼノプス卵母細胞において発現されたＮＭＤＡ活性化イオンチャネルを阻害する（Ａｒｇｉｏｔｏｘｉｎ−６３６　ｉｎｈｉｂｉｔｓ　ＮＭＤＡ−ａｃｔｉｖａｔｅｄ　ｉｏｎ　ｃｈａｎｎｅｌｓ　ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ　ｉｎ　Ｘｅｎｏｐｕｓ　ｏｏｃｙｔｅｓ），ニューロサイエンス・レターズ（Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ｌｅｔｔ．）１３２：１８７，１９９１；キスキン（Ｋｉｓｋｉｎ）ら，アゲレノプシス・アペルタクモの毒からの非常に有効かつ選択的なＮ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸受容体拮抗薬（Ａ　ｈｉｇｈｌｙ　ｐｏｔｅｎｔ　ａｎｄ　ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ　Ｎ−ｍｅｔｈｙｌ−Ｄ−ａｓｐａｒｔａｔｅ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｖｅｎｏｍ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ａｇｅｌｅｎｏｐｓｉｓ　ａｐｅｒｔａ　ｓｐｉｄｅｒ），ニューロサイエンス（Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ）５１：１１，１９９２；ブラックリィ（Ｂｒａｃｋｌｅｙ）ら，ポリアミン含有毒による天然およびクローン化カイニン酸およびＮＭＤＡ受容体の選択的拮抗作用（Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ　ａｎｔａｇｏｎｉｓｍ　ｏｆ　ｎａｔｉｖｅ　ａｎｄ　ｃｌｏｎｅｄ　ｋａｉｎａｔｅ　ａｎｄ　ＮＭＤＡ　ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ　ｂｙ　ｐｏｌｙａｍｉｎｅ−ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ　ｔｏｘｉｎｓ），ジャーナル・オブ・ファーマコロジー・アンド・イクスペリメンタル・セラピューティクス（Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒａｐ．）２６６：１５７３，１９９３；ウィリアムズ（Ｗｉｌｌｉａｍｓ），Ｎ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸受容体に対するアゲレノプシス・アペルタ毒の効果：ポリアミン様および高親和性拮抗作用（Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　Ａｇｅｌｅｎｏｐｓｉｓ　ａｐｅｒｔａ　ｔｏｘｉｎｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　Ｎ−ｍｅｔｈｙｌ−Ｄ−ａｓｐａｒｔａｔｅ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ：Ｐｏｌｙａｍｉｎｅ−ｌｉｋｅ　ａｎｄ　ｈｉｇｈ−ａｆｆｉｎｉｔｙ　ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ　ａｃｔｉｏｎｓ），ジャーナル・オブ・ファーマコロジー・アンド・イクスペリメンタル・セラピューティクス（Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒａｐ．）２６６：２３１，１９９３］。アリールアルキルアミン毒フィラントトキシンによるニコチン性コリン作動性受容体の阻害も報告された［ロゼンタル（Ｒｏｚｅｎｔａｌ）ら，フィラントトキシンによる脊椎動物および昆虫のニコチン性アセチルコリン受容体のアロステリック阻害（Ａｌｌｏｓｔｅｒｉｃ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｏｆ　ｎｉｃｏｔｉｎｉｃ　ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅ　ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ　ｏｆ　ｖｅｒｔｅｂｒａｔｅｓ　ａｎｄ　ｉｎｓｅｃｔｓ　ｂｙ　ｐｈｉｌａｎｔｈｏｔｏｘｉｎ），ジャーナル・オブ・ファーマコロジー・アンド・イクスペリメンタル・セラピューティクス（Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒａｐ．）２４９：１２３，１９８９］。
【００１３】
パークス（Ｐａｒｋｓ）ら［ジョウゴグモ（アゲレノプシス・アペルタ）毒は，哺乳動物脳におけるＮ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸受容体機能を拮抗する（Ａｒｙｌａｍｉｎｅ　ｔｏｘｉｎｓ　ｆｒｏｍ　ｆｕｎｎｅｌ−ｗｅｂ　ｓｐｉｄｅｒ（Ａｇｅｌｅｎｏｐｓｉｓ　ａｐｅｒｔａ）ｖｅｎｏｍａｎｔａｇｏｎｉｚｅ　Ｎ−ｍｅｔｈｙｌ−Ｄ−ａｓｐａｒｔａｔｅ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ｆｕｎｃｔｉｏｎ　ｉｎ　ｍａｍｍａｌｉａｎ　ｂｒａｉｎ），ジャーナル・オブ・バイオロジカル・ケミストリー（Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．）２６６：２１５２３，１９９１］は，哺乳動物脳におけるＮＭＤＡ受容体機能を拮抗するアリールアルキルアミンクモ毒（α−アガトキシン）を開示している。該著者は，アリールアルキルアミン毒の作用機序を検討しており，ＮＭＤＡ受容体作動性イオンチャネルがα−アガトキシンおよびほとんどの有望な他のクモ毒アリールアルキルアミン類の作用の有望な部位であることを示す。彼らは，以下のように開示している：　「脊椎動物脳における内因性ポリアミン類がＮＭＤＡ受容体の機能をモジュレートするという発見は，アリールアミン毒がグルタミン酸受容体上のポリアミン結合部位を介してそれらの拮抗作用を生じることを示す。ブラックリィ（Ｂｒａｃｋｌｅｙ）らは，ラットまたはヒヨコの脳由来のｍＲＮＡを注射したゼノプス卵母細胞における興奮性アミノ酸の適用によって誘発されたスペルミンおよびフィラントトキシン４３３の効果を研究した。これらの著者は，グルタミン酸受容体機能を拮抗する濃度よりも低い濃度で，スペルミンおよびフィラントトキシンが，共に，興奮性アミノ酸およびいくつかの他の神経伝達物質の効果を強くすることを報告した。これらおよび他のデータに基づいて，ブラックリィらは，アリールアミン毒が，興奮可能な細胞の膜に非特異的に結合することによって，膜流動性および別の受容体機能を低下させると推断した。レノルズ（Ｒｅｎｏｌｄｓ）は，アルギオトキシン６３６が，グルタミン酸，グリシンまたはスペルミジンに対して無感性である方法で［３Ｈ］ＭＫ−８０１のラット脳膜への結合を阻害することを報告した。この著者は，アルギオトキシン６３６が，ＮＭＤＡゲートイオンチャネル中に位置するＭｇ２＋部位の１つに結合することによるＮＭＤＡ受容体複合体に対する新規阻害性効果を発揮すると推断した。ウィリアムズ（Ｗｉｌｌｉａｍｓ）らによって報告された結合データもまたアルギオトキシン６３６がＮＭＤＡ受容体上のポリアミンモジュレートリー部位では主に作用しないが，むしろ，直接作用してイオンチャネルの活性依存性ブロックを生じるという推断を支持している。フェニルシクリジンおよびケタミンなどの化合物が，節足動物筋肉グルタミン酸受容体および哺乳動物ＮＭＤＡ受容体の両方に関連するイオンチャネルを遮断することは，既に知られている。かくして，脊椎動物および無脊椎動物グルタミン酸受容体は，ことによると二価の陽イオン結合部位に関係するかもしれない受容体機能のアロステリックモジュレーターに対するさらなる結合部位を分担することは可能らしい。明確には，アリールアミン類がかかる新規な調節部位を定義するかを決定するために多くのさらなる研究が必要と��れるであろう。」
【００１４】
アシャーウッド（Ｕｓｈｅｒｗｏｏｄ）およびブラグブロー（Ｂｌａｇｂｒｏｕｇｈ）［グルタミン酸受容体に影響を及ぼすクモ毒：治療学的神経化学におけるポリアミン類（Ｓｐｉｄｅｒ　Ｔｏｘｉｎｓ　Ａｆｆｅｃｔｉｎｇ　Ｇｌｕｔａｍａｔｅ　Ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ：　Ｐｏｌｙａｎｉｍｅｓ　ｉｎ　Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ　Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ），ファーマコロジー・アンド・セラピューティクス（Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｈｅｒａｐ．）５２：２４５，１９９１］は，アリールアルキルアミン毒に対する提案された細胞内結合部位がＱＵＩＳ−Ｒチャネル選択性フィルターに関する膜電位場内にあったことを開示している。該著者は，ポリアミンアミド毒に対する結合部位がローカスト（ｌｏｃｕｓｔ）筋肉のＱＵＩＳ−Ｒによってゲーティングされるチャネルの内部入口への接近を生じることを仮定している。該著者は，また，かかる毒，アルキセオトキシン−６３６が，培養されたラットの皮質ニューロンにおいてＮＭＤＡ受容体を選択的に拮抗することにも注目している。
【００１５】
ガラク（Ｇｕｌｌａｋ）ら［新規ＮＭＤＡ拮抗薬Ａｒｇ−６３６のＣＮＳ結合部位（ＣＮＳ　ｂｉｎｄｉｎｇ　ｓｉｔｅｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｎｏｖｅｌ　ＮＭＤＡ　ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ　Ａｒｇ−６３６），Ｓｏｃ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ａｂｓｔ．１５：１１６８，１９８９］は，クモ毒のポリアミン（アリールアルキルアミン）毒成分としてのアルギオトキシン−６３６（Ａｒｇ−６３６）を開示している。この毒は，非競合形態でｃＧＭＰのＮＭＤＡ誘導性上昇を遮断すると言われている。該著者は，以下のように開示している：　「［１２５Ｉ］Ａｒｇ−６３６は，１１．２５μＭおよび２８．９５ｐｍｏｌ／ｍｇタンパクのＫｄおよびＢｍａｘ値でラット前脳膜に結合した（特異性８０％）。他の公知のポリアミン類，および最近発見されたアゲレノプシス・アペルタ（Ａｇｅｌｅｎｏｐｓｉｓ　ａｐｅｒｔａ）由来のポリアミン類の結合阻害能は，機能性ＮＭＤＡ拮抗薬としての神経活性に匹敵する。試験した他の化合物は，全く，特異的結合を遮断することができなかった。」
【００１６】
次いで，該著者は，ポリアミン類（アリールアルキルアミン類）が膜イオンチャネルと相互作用することによってＮＭＤＡへの応答を拮抗することを開示している。
【００１７】
シーモア（Ｓｅｙｍｏｕｒ）およびメナ（Ｍｅｎａ）［ポリアミンクモ毒成分アルギオトキシン−６３６のイン・ビボＮＭＤＡ拮抗性（Ｉｎ　ｖｉｖｏ　ＮＭＤＡ　ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｐｏｌｙａｍｉｎｅ　ｓｐｉｄｅｒ　ｖｅｎｏｍ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ，ａｇｇｉｏｔｏｘｉｎ−６３６），Ｓｏｃ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ａｂｓｔｒ．１５：１１６８，１９８９］は，ＤＢＡ／２マウスにおいて聴源発作に対して有効である投与量で運動活性に有意には影響を及ぼさないこと，および，皮下投与（ｓ．ｃ．）される３２ｍｇ／ｋｇの最小有効投与量でＮＭＤＡ誘発性発作を有意に拮抗することを示すと言われる研究を開示している。
【００１８】
ヘロルド（Ｈｅｒｏｌｄ）およびヤクシュ（Ｙａｋｓｈ）［ラットにおける，２つのアシルポリアミンクモ毒であるＡＲ６３６およびＡＧ４８９の鞘内注射による麻酔および筋肉弛緩（Ａｎｅｓｔｈｅｓｉａ　ａｎｄ　ｍｕｓｃｌｅ　ｒｅｌａｘａｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　ｉｎｔｒａｔｈｅｃａｌ　ｉｎｊｅｃｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ＡＲ６３６　ａｎｄ　ＡＧ４８９，ｔｗｏ　ａｃｙｌｐｏｌｙａｍｉｎｅ　ｓｐｉｄｅｒ　ｔｏｘｉｎｓ，ｉｎ　ｒａｔｓ），アネスシージオロジー（Ａｎｅｓｔｈｅｓｉｏｌｏｇｙ）７７：５０７，１９９２］は，アリールアルキルアミンアルギオトキシン−６３６（ＡＲ６３６）は，ラットにおける鞘内投与後に筋肉弛緩および麻酔を生じるが，アガトキシン−４８９（ＡＧ４８９）は，生じないことを示すと言われる研究を開示している。
【００１９】
ウィリアムズ（Ｗｉｌｌｉａｍｓ）［Ｎ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸受容体に対するアゲレノプシス・アペルタ毒の効果：ポリアミン様および高親和性拮抗作用（Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　Ａｇｅｌｅｎｏｐｓｉｓ　ａｐｅｒｔａ　ｔｏｘｉｎｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　Ｎ−ｍｅｔｈｙｌ−Ｄ−ａｓｐａｒｔａｔｅ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ：　Ｐｏｌｙａｍｉｎｅ−ｌｉｋｅ　ａｎｄ　ｈｉｇｈ−ａｆｆｉｎｉｔｙ　ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ　ａｃｔｉｏｎｓ），ジャーナル・オブ・ファーマコロジー・アンド・イクスペリメンタル・セラピューティクス（Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒａｐ．）２６６：２３１，１９９３］は，α−アガトキシン（アリールアルキルアミン類）Ａｇｅｌ−４８９およびＡｇｅｌ−５０５が刺激性ポリアミン受容体での作用によってラット脳から調製した膜上の［３Ｈ］ＭＫ−８０１のＮＭＤＡ受容体への結合を増強する；ポリアミン受容体作動薬がＡｇｅｌ−４８９およびＡｇｅｌ−５０５の刺激効果を妨げ，ポリアミン受容体拮抗薬がＡｇｅｌ−５０５の刺激効果を阻害したことを報告している。より高い濃度のＡｇｅｌ−４８９およびＡｇｅｌ−５０５，ならびに試験された全ての濃度のアルギオトキシン−６３６は，［３Ｈ］ＭＫ−８０１の結合に対する阻害効果を有した。−７０ｍＶで電位クランプしたゼノプス（Ｘｅｎｏｐｕｓ）卵母細胞において，Ａｇｅｌ−５０５は，１３ｎＭのＩＣ５０でＮＭＤＡへの応答を阻害した；このＡｇｅｌ−５０５の効果は，［３Ｈ］ＭＫ−８０１結合に影響を及ぼした濃度よりも約１０，０００倍低い濃度で生じた。カイニン酸への応答は，Ａｇｅｌ−５０５　３０ｎＭによって１１％だけ阻害された。Ａｇｅｌ−５０５によるＮＭＤＡ誘発性電流の拮抗作用は，毒のオープン−チャネル遮断効果と一致した，強い電位性であった。ウィリアムズ（Ｗｉｌｌｉａｍｓ）は，以下のように開示している：　「α−アガトキシンは，ＮＭＤＡ受容体上での正のアロステリックポリアミン部位で相互作用することができるが，この相互作用によって生じた刺激効果は，高親和性として毒の分離作用により機能的アッセイで受容体の非競合的拮抗薬を遮蔽する」
【００２０】
ブラックリィ（Ｂｒａｃｋｌｅｙ）ら［ポリアミン含有毒による天然およびクローン化カイニン酸およびＮＭＤＡ受容体の選択的拮抗作用（Ｓｌｅｃｔｉｖｅ　ａｎｔａｇｏｎｉｓｍ　ｏｆ　ｎａｔｉｖｅ　ａｎｄ　ｃｌｏｎｅｄ　ｋａｉｎａｔｅ　ａｎｄ　ＮＭＤＡ　ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ　ｂｙ　ｐｏｌｙａｍｉｎｅ−ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ　ｔｏｘｉｎｓ），ジャーナル・オブ・ファーマコロジー・アンド・イクスペリメンタル・セラピューティクス（Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒａｐ．）２６６：１５７３，１９９３］は，ポリアミン含有毒（アリールアルキルアミン類）フィラントトキシン−３４３（ＰｈＴＸ−３４３）およびアルギオトキシン−６３６（Ａｇｒ−６３６）が，ラット脳ＲＮＡを注射したゼノプス（Ｘｅｎｏｐｕｓ）卵母細胞におけるカイニン誘発性およびＮＭＤＡ誘発性電流の可逆的な，非競合的な，一部電位依存性の拮抗作用を生じることを報告している。Ａｒｇ−６３６は，カイニン酸誘発性応答（ＩＣ５０＝０．０７μＭ）と比較してＮＭＤ誘発性応答（ＩＣ５０＝０．０４μＭ）について選択的であることが判明し，一方，ＰｈＴＸ−３４３は，ＮＭＤＡ誘発性応答（ＩＣ５０＝２．５μＭ）と比較してカイニン酸誘発性応答（ＩＣ５０＝０．１２μＭ）について選択的であった。Ａｒｇ−６３６は，クローン化されたＧｌｕＲ１（ＩＣ５０＝３．４μＭ）またはＧｌｕＲ１＋ＧｌｕＲ２サブユニット（ＩＣ５０＝約３００μＭ）のいずれかを発現する卵母細胞におけるカイニン酸への応答よりもクローン化ＮＭＤＡＲ１サブユニット（ＩＣ５０＝０．０９μＭ）を発現するゼノプス（Ｘｅｎｏｐｕｓ）卵母細胞におけるＮＭＤＡへの応答を有効に拮抗した。他方，ＰｈＴＸ−３４３は，ＮＭＤＡＲ１（ＩＣ５０＝２．１９μＭ）およびＧｌｕＲ１（ＩＣ５０＝２．８μＭ）を拮抗する際に等しい効力を有したか，ＧｌｕＲ１＋ＧｌｕＲ２サブユニット（ＩＣ５０＝２７０μＭ）に対してはあまり有効ではなかった。
【００２１】
ラディッチュ（Ｒａｄｉｔｓｃｈ）ら［アルギオトキシン−６３６によるクローン化ＮＭＤＡ受容体のサブユニット特異的遮断（Ｓｕｂｕｎｉｔ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ｂｌｏｃｋ　ｏｆ　ｃｌｏｎｅｄＮＭＤＡ　ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ　ｂｙ　ａｒｇｉｏｔｏｘｉｎ−６３６），ＦＥＢＳ・レターズ（ＦＥＢＳ　Ｌｅｔｔ．）３２４：６３，１９９３］は，たとえ受容体サブユニットの全てが推定のポア形成膜内外領域ＩＩ（前記Ｑ／Ｒ部位）においてアスパラギン酸残基を含有するとしても，Ａｒｇ−６３６が，ＮＭＤＡＲ１＋ＮＭＤＡＲ２Ｃサブユニット（ＩＣ５０＝４６０ｎＭ）よりもＮＭＤＡＲ１＋ＮＭＤＡＲ２Ａサブユニット（ＩＣ５０＝９ｎＭ）またはＮＭＤＡＲ１＋ＮＭＤＡＲ２Ｂサブユニット（ＩＣ５０＝２．５ｎＭ）を発現するゼノプス（Ｘｅｎｏｐｕｓ）卵母細胞における応答を有効に拮抗することを報告している。該著者は，ＮＭＤＡＲ１＋ＮＭＤＡＲ２ＡおよびＮＭＤＡＲ１＋ＮＭＤＡＲ２Ｃチャネル間のＡｒｇ−６３６選択性の大きな差異が「他の構造的決定因子によって与えられなければならない」ことを開示している。
【００２２】
ハーリッツ（Ｈｅｒｌｉｔｚ）ら［アルギオトキシンは，ＡＭＰＡ受容体チャネルにおける分子的差異を決定する（Ａｒｇｉｏｔｏｘｉｎ　ｄｅｔｅｃｔｓ　ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ　ｉｎ　ＡＭＰＡ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ｃｈａｎｎｅｌｓ），ニューロン（Ｎｅｕｒｏｎ）１０：１１３１，１９９３］は，Ａｒｇ−６３６が，オープンチャネル遮断に匹敵する電位依存性および用途依存性手段で，ＡＭＰＡ受容体のサブタイプを拮抗することを報告している。Ａｒｇ−６３６は，ＧｌｕＲＡｉサブユニット（Ｋｉ＝０．３５μＭ），ＧｌｕＲＣｉサブユニット（Ｋｉ＝０．２３μＭ），またはＧｌｕＲＤｉサブユニット（Ｋｉ＝０．４３μＭ）からなるＣａ２＋透過性ＡＭＰＡ受容体を拮抗するが，一方，１０μＭまでの濃度のＣａ２＋非透過性ＧｌｕＲ　Ｂｉサブユニットに対して実質的に効果的ではない。これらの研究者によって報告された他のデータは，推定のポア形成膜内外領域ＩＩにおけるＱ／Ｒ部位がＡｒｇ−６３６ポテンシーおよびＣａ２＋透過性を測定するのに主に重要なものであることを強く示している。
【００２３】
ブラッシュク（Ｂｌａｓｃｈｋｅ）ら［単一のアミノ酸は，アルファーアミノ−３−ヒドロキシ−５−メチルイソオキサゾール−４−プロピオン酸／カイニン酸受容体チャネルのサブユニット特異的クモ毒遮断を決定する（Ａｓｉｎｇｌｅ　ａｍｉｎｏ　ａｃｉｄｄｅｔｅｒｍｉｎｅｓ　ｔｈｅ　ｓｕｂｕｎｉｔ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ｓｐｉｄｅｒ　ｔｏｘｉｎ　ｂｌｏｃｋ　ｏｆ　α−ａｍｉｎｏ−３−ｈｙｄｒｏｘｙ−５−ｍｅｔｈｙｌｉｓｏｘａｚｏｌｅ−４−ｐｒｏｐｉｏｎａｔｅ／ｋａｉｎａｔｅ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ｃｈａｎｎｅｌｓ），プロシーディングズ・オブ・ナショナル・アカデミー・オブ・サイエンシズ・ユーエスエイ（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ）９０：６５２８，１９９３］は，アリールアルキルアミンＪＳＴＸ−３が，ＧｌｕＲ１サブユニット（ＩＣ５０＝０．０４μＭ）またはＧｌｕＲ３サブユニット（ＩＣ５０＝０．０３μＭ）を発現するゼノプス（Ｘｅｎｏｐｕｓ）卵母細胞への応答を有効に拮抗するが，ＧｌｕＲ２サブユニットが存在する発現受容体が毒によって実質的に影響を及ぼさないことを報告している。部位特異的突然変異誘発研究は，毒効力に影響を及ぼす主な部位としてＱ／Ｒ部位に強い影響を及ぼす。
【００２４】
ナカニシ（Ｎａｋａｎｉｓｈｉ）ら［フィラントトキシン類似体を用いる伝達受容体の生物有機化学的研究（Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ　ｓｔｕｄｉｅｓ　ｏｆ　ｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｒ　ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ　ｗｉｔｈ　ｐｈｉｌａｎｔｈｏｔｏｚｉｎ　ａｎａｌｏｇｓ），ピュア・アンド・アプライド・ケミストリー（Ｐｕｒｅ　Ａｐｐｌ．Ｃｈｅｍ．）印刷中］は，多くの非常に有効な光親和性標識フィラントトキシン（ＰｈＴＸ）類似体を合成した。かかる類似体は，受容体作動性カルシウムチャネル受容体についてのモデル系としてニコチン性コリン作動性受容体を発現することにおいて研究した。これらの研究者は，これらのＰｈＸＴ類似体が，細胞質表面付近の部位に結合する毒の疎水性頭部を用いてイオンチャネルを遮断し，一方，ポリアミン尾部が細胞質側部からイオンチャネル中に伸びていることを示している。
【００２５】
発明の概要
出願人は，クモおよびスズメバチ毒におけるアリールアルキルアミン類（しばしば，アリールアミン毒，ポリアミン毒，アシルポリアミン毒またはポリアミンアミド毒とも称される）の構造的多様性および生物学的活性を試験し，これらの毒に存在するアリールアルキルアミン類のいくつかが，哺乳動物ＣＮＳにおけるグルタミン酸受容体作動性Ｃａ２＋チャネルの有効な非競合的拮抗薬として作用することを測定した。これらのアリールアルキルアミン化合物は，該化合物の構造内にポリアミン部分を含有するが，該化合物は，あるタイプの受容体作動性Ｃａ２＋チャネルに対して非常に有効かつ特異的な効果を有することにおいて，他の公知の簡単なポリアミン類とは異なる。
【００２６】
リード構造物として天然のアリールアルキルアミン類を用いて，多くの類似体を合成し，試験した。毒から単離および精製されたアリールアルキルアミン類についての最初の発見は，合成アリールアルキルアミン類の利用を確立した。これらの化合物は，発作および癲癇のイン・ビボモデルにおいて効力を示した小さな分子（分子量＜８００）である。ＮＭＤＡ受容体−イオノフォア複合体を受容体作動性Ｃａ２＋チャネルのモデルとして用いた。選択されたアリールアルキルアミン類は，新規メカニズムによってＮＭＤＡ受容体媒介性応答を遮断することが判明した。さらにまた，これらの化合物の固有行動薬理学的プロフィールは，それらがＮＭＤＡレセプターの他の阻害薬を特徴付けるＰＣＰ様精神異常作用性および認識欠損を生じそうにないことを示す。最終的に，該アリールアルキルアミン類は，それらがクローン化され発現されたＡＭＰＡ受容体のある種のサブタイプ，すなわち，Ｃａ２＋を透過可能なものを拮抗することができるという点でＮＭＤＡ受容体拮抗薬の中で独特である。したがって，該アリールアルキルアミン類は，受容体サブタイプの薬理学的定義とは無関係のサイトゾルＣａ２＋のグルタミン酸受容体媒介性増加を拮抗することができる化合物の唯一の公知の分類である。さらに，該アリールアルキルアミン類は，他の受容体作動性Ｃａ２＋チャネル，ニコチン性コリン作動性受容体を阻害する。サイトゾルＣａ２＋の過剰かつ延長された増加がいくつかの神経障害および神経病の原因に関係していたとすれば，かかるアリールアルキルアミン類により，種々の神経障害および神経病のための新規治療の研究が導かれる。
【００２７】
出願人は，選択されたアリールアルキルアミン類がこれまで定義されなかったＮＭＤＡ受容体−イオノフォア複合体上の新規部位で高い親和性で結合すること，および，該アリールアルキルアミン類が，ＮＭＤＡ受容体−イオノフォア複合体上の公知の部位（グルタミン酸結合部位，グリシン結合部位，ＭＫ−８０１結合部位，Ｍｇ２＋結合部位，Ｚｎ２＋結合部位，ポリアミン結合部位，シグマ結合部位）のいずれでも高い親和性で結合しないことを測定した。この測定により，出願人は，治療的に有用な化合物および他の治療学的に有用な化合物の研究についてのリード化合物の両方を提供する有用な化合物を同定することができる方法およびプロトコールを研究した。これらの化合物は，この新規アリールアルキルアミン結合部位で結合する化合物についてスクリーニングすることによって，ならびにかかる化合物が必要とされる生物学的，薬理学的，および生理学的性質を有するかを測定することによって定義することができる。
【００２８】
かくして，第１の態様では，本発明は，非競合的拮抗薬として１つ以上の受容体作動性Ｃａ２＋チャネルで活性な治療学的に有用な化合物についてスクリーニングする方法を特徴とするものである。かかる化合物は，代替的にまたはさらに，生物農薬または薬理学的道具（ｔｏｏｌ）として有用である。当該方法は，化合物１，化合物２または化合物３として本明細書に記載しており，以下に示す構造式を有するアリールアルキルアミン類によって結合された部位で受容体作動性Ｃａ２＋チャネルに結合する化合物を同定する工程を含む。
【００２９】
【化１６】
2004002437.tif 000002
【００３０】
好ましい具体例では，本発明は，ＮＭＤＡ受容体−イオノフォア複合体の一部，カルシウム透過性ＡＭＰＡ受容体−イオノフォア複合体の一部，または，ニコチン性コリン作動性受容体−イオノフォア複合体の一部である受容体作動性カルシウムチャネルで活性な１つ以上の化合物を同定するための方法を特徴とし，ここで，治療用途は，神経障害または神経病の治療のため，または，神経保護薬，抗痙攣薬，抗不安薬，鎮痛薬，筋肉弛緩薬もしくは一般的な麻酔薬中の補助薬としてである。
【００３１】
「治療学的に有用な化合物」とは，障害または病気の症状の治療において有用な化合物を意味する。スクリーニング方法によって発見された化合物は，臨床試験が実際の治療的利用性を判断するために行われていないので，治療における有効な利用性を有するものとして特徴付けられる。
【００３２】
「神経障害または神経病」とは，限定されないが，総体および巣状虚血性ならびに出血性発作，頭部外傷，脊髄損傷，心拍停止または新生児窮迫におけるような低酸素誘発性神経細胞損傷，癲癇，不安および神経変性病を含む神経系の障害または病気を意味する。また，「神経障害または神経病」とは，神経保護薬，抗痙攣薬，抗不安薬，鎮痛薬，筋肉弛緩薬および／または一般的な麻酔薬中の補助薬が有用であると示されるか，推奨されるかまたは処方される病状および状態を意味する。
【００３３】
「神経変性病」とは，限定されないが，アルツハイマー病，ハンチントン病およびパーキンソン病を含む疾患を意味する。
【００３４】
「神経保護薬」とは，神経障害または神経病に関連するニューロンの死を予防する能力を有する化合物を意味する。
【００３５】
「抗痙攣薬」とは，単純な部分発作，複雑な部分発作，癲癇重積持続状態，および頭部手術を含む頭部損傷の後に生じるような外傷性発作などの症状によって生じる癲癇を減少させる能力を有する化合物を意味する。
【００３６】
「抗不安薬」とは，不安の特徴である危惧，半信半疑および恐怖の感情を免荷する能力を有する化合物を意味する。
【００３７】
「鎮痛薬」とは，麻酔または意識の喪失を生じずに，侵害受容性刺激の知覚を変えることによって痛みを免荷する能力を有する化合物を意味する。
【００３８】
「筋肉弛緩薬」とは，筋肉の緊張を減少させる化合物を意味する。
【００３９】
「一般的な麻酔薬中の補助薬」とは，意識の喪失に関連する痛みを知覚する能力の喪失を生じる際に麻酔薬と共に有用な化合物を意味する。
【００４０】
関連する態様では，本発明は，アリールアルキルアミン類である化合物１，化合物２および化合物３のうちの１つによって結合された部位で受容体作動性カルシウムチャネルに結合する化合物からなる医薬組成物を投与する工程からなる神経病または神経障害を有する患者の治療方法であって，該化合物が，かかる受容体作動性カルシウムチャネルで有効かつ選択的な非競合的拮抗薬であり，以下の薬理的特性および生理学的特性：受容体作動性カルシウムチャネル機能のイン・ビトロでの生化学的および電気生理学的アッセイにおける効果，イン・ビボ抗痙攣活性，イン・ビボ神経保護活性，イン・ビボ抗不安活性，およびイン・ビボ鎮痛活性のうち１つ以上を有し；該化合物が，また，以下の薬理的効果：該化合物が，ラットの海馬スライスにおける長期間薬効増強作用の誘発を妨害せず，治療的投与量で，認識力を損なわず，運動動作を中断せず，ニューロンの空胞形成を生じず，最小の心臓血管活性を有し，鎮静または異常興奮性を生じず，最小のＰＣＰ様乱用潜在能力を有し，最小のＰＣＰ様精神異常作用性を有するという薬理効果の１つ以上を有することを特徴とする神経病または神経障害を有する患者の治療方法を特徴とするものである。「最小の」とは，薬物のいずれの副作用も平均個体によって許容されること，および，該薬物が標的疾患の治療に用いることができることを意味する。かかる副作用は，当該技術分野でよく知られており，ＦＤＡによって慣用的に，標的疾患のための薬物を認可する場合に最小とみなされている。
【００４１】
治療は，最初に標準的な臨床学的方法によって神経障害または神経病に罹っている患者を同定し，次いで，かかる患者を本発明の組成物で治療する工程を含む。
【００４２】
「有効な」とは，当該化合物が，ＮＭＤＡ受容体，Ｃａ２＋透過性ＡＭＰＡ受容体およびニコチン性コリン作動性受容体を含む受容体作動性カルシウムチャネルで，１０μＭ以下，好ましくは，１００ｎＭ以下，さらに好ましく１ｎＭ以下のＩＣ５０値を有することを意味する。
【００４３】
「選択的」とは，当該化合物が前記定義の受容体作動性カルシウムチャネルで有効であり，他の神経伝達物質受容体，神経伝達物質受容体作動性イオンチャネル，または，電位依存性イオンチャネルで，１０倍以上，好ましくは，５０倍以上，より好ましくは，１００倍以上有効ではないことを意味する。
【００４４】
「受容体作動性カルシウムチャネル機能の生化学および電気生理学的アッセイ」とは，生化学または電気生理学的手段によって受容体作動性カルシウムチャネルの機能的活性を検出するように設計されたアッセイを意味する。かかるアッセイの例としては，限定されないが，培養されたラット小脳顆粒細胞中のサイトゾルカルシウムについてのｆｕｒａ−２蛍光アッセイ（実施例１および実施例２を参照），パッチクランプ電気生理学的アッセイ（実施例３および実施例２７を参照），ラット海馬スライスシナプス伝達アッセイ（実施例５を参照），放射リガンド結合アッセイ（実施例４，実施例２４，実施例２５，および実施例２６を参照），およびイン・ビトロ神経保護アッセイ（実施例６を参照）が挙げられる。
【００４５】
「効力」とは，所望の活性の統計学的に有意なレベルが選択された化合物を用いて検出可能であることを意味する；「有意な」とは，ｐ＜０．０５レベルで統計学的有意さを意味する。
【００４６】
「神経保護活性」とは，限定されないが，総体および巣状虚血性および出血性発作，頭部外傷，脊髄損傷，心拍停止または新生児窮迫におけるような低酸素誘発性神経細胞損傷，ならびに，アルツハイマー病，ハンチントン病およびパーキンソン病などの神経変性を含む神経障害または神経病の治療における効力を意味する（以下の実施例７および８を参照）。
【００４７】
「抗痙攣活性」とは，単純な部分発作，複雑な部分発作，癲癇重積持続状態，および頭部手術を含む頭部損傷の後に生じるような外傷性発作などの症状によって生じる痙攣を軽減する効力を意味する（以下の実施例９および１０を参照）。
【００４８】
「抗不安活性」とは，化合物が，不安の特徴である危惧，半信半疑および恐怖の感情を軽減することを意味する。
【００４９】
「鎮痛活性」とは，化合物が，通常痛む刺激に応じる痛みの欠如を生じることを意味する。かかる活性は，限定されないが，以下のものを含む急性および慢性疼痛の臨床症状において有用である：プレエンプティブ（ｐｒｅｅｍｐｔｉｖｅ）手術前無痛法；真性糖尿病および多発硬化症で生じるような末梢ニューロパシー；幻想肢痛；カウザルギー；帯状ヘルペスで生じるような神経痛；脊髄損傷で見られるような中枢痛；痛覚過敏；および異痛症。「神経痛」とは，神経の分布における痛みを意味する。「中枢痛」とは，中枢神経系の損傷に関連する痛みを意味する。「痛覚過敏」とは，通常痛む刺激に対する増加した応答を意味する。「異痛症」とは，通常痛みを引き起こさない刺激による痛みを意味する（以下の実施例１１〜１４を参照）。
【００５０】
「ラットの海馬スライスにおける長期薬効増強作用の誘発」とは，求心性シャファー側副線維の強直性電気的刺激の，イン・ビトロに維持されるラット海馬スライスにおけるシャファー側副−ＣＡ１錐体細胞経路でのシナプス伝達の強度の長期増加を誘起する能力を意味する（実施例１９を参照）。
【００５１】
「治療投与量」とは，疾患の１つ以上の症候または患者の状態をある程度は免荷する化合物の量を意味する。さらに，「治療投与量」とは，疾患もしくは症状に関連するかまたは疾患もしくは症状の原因となる生理学的または生化学的パラメーターを一部または完全に正常に戻す量を意味する。一般的には，化合物のＥＣ５０（拮抗薬の場合，ＩＣ５０）に依存し，ならびに，患者に関連する年齢，大きさ，および疾患に依存して，化合物の約１ｎｍｏｌ〜１ｕｍｏｌの量である。
【００５２】
「認識力を損なう」とは，記憶の取得または学習した課題の動作を損なう能力を意味する（実施例２０）。「認識力を損なう」とは，また，プロセスおよび理論を思考する正常な合理性を妨害する能力を意味する。
【００５３】
「運動機能を中断する」とは，運動活性を有意に変える能力（実施例１５），または，有意な運動失調，立直り反射の損失，鎮静，または筋肉弛緩を誘起する能力（実施例１６を参照）を意味する。
【００５４】
「運動活性」とは，正常な歩行運動を行う能力を意味する。
【００５５】
「立直り反射」とは，動物，典型的には齧歯動物の，背臥位置においた後，自分自身で正す能力を意味する。
【００５６】
「ニューロン空胞形成」とは，帯状皮質またはレトロスプレーニアル（ｒｅｔｒｏ−ｓｐｌｅｎｉａｌ）皮質のニューロンにおける空胞の生成を意味する（実施例１８を参照）。
【００５７】
「心臓血管活性」とは，限定されないが，平均動脈血圧および心拍数を含むパラメーターの有意な変化を誘起する能力を意味する（実施例２１および２２を参照）。
【００５８】
「異常興奮性」とは，興奮性刺激に対する増強された感受性を意味する。異常興奮性は，しばしば，薬物を投与した齧歯動物における運動活性の有意な増大として証明される（実施例１５を参照）。
【００５９】
「鎮静」とは，鎮静効果または活性および興奮を鎮めることを意味する。鎮静は，しばしば，薬物を投与した齧歯動物における運動活性の有意な減少として証明される（実施例１５を参照）。
【００６０】
「ＰＣＰ様乱用潜在能力」とは，ヒトによるＰＣＰ（すなわち，「合成ヘロイン」）の娯楽的使用におけるような，違法に用いられる薬物の潜在能力を意味する。ＰＣＰ様乱用潜在能力は，薬物の，ＰＣＰを生理食塩水と識別するように訓練された齧歯動物においてＰＣＰを汎化させる能力によって予想することができると思われる（実施例１７を参照）。
【００６１】
「ＰＣＰ様精神異常作用活性」とは，薬物の，幻視，パラノイア，動揺，および錯乱を含む急性精神病に似ている一連の行動的徴候をヒトにおいて誘起する能力を意味する。ＰＣＰ様精神異常作用活性は，薬物の，運動失調，頭部ウィービング（ｗｅａｖｉｎｇ），異常興奮性，およびＰＣＰを生理食塩水と識別するように訓練された齧歯動物におけるＰＣＰの汎化を生じる能力によって齧歯動物において予想することができると思われる（実施例１５，実施例１６および実施例１７を参照）。
【００６２】
「運動失調」とは，筋肉協調の欠損を意味する。
【００６３】
「頭部ウィービング」とは，頭部が，ゆっくりと，左右に広く，繰り返し動かされるＰＣＰによる齧歯動物において誘起された常同性行動を意味する。
【００６４】
さらなる態様では，本発明は，式：
【化１７】
2004002437.tif 000003
［式中，Ａｒは，適当に置換された芳香族環，環系または他の疎水性部分であり；Ａｒは，所望により，独立して，炭素原子１〜５個の低級アルキル，ハロゲン原子１〜７個で置換されている炭素原子１〜５個の低級ハロアルキル，炭素原子１〜５個の低級アルコキシ，ハロゲン，ニトロ，アミノ，炭素原子１〜５個の低級アルキルアミノ，アミド，炭素原子１〜５個の低級アルキルアミド，シアノ，ヒドロキシル，スルフヒドリル，炭素原子２〜４個の低級アシル，スルホンアミド，炭素原子１〜５個のアルキルスルホンアミド，炭素原子１〜５個の低級アルキルスルホキシド，炭素原子１〜５個の低級ヒドロキシアルキル，炭素原子１〜５個の低級アルキルケト，または炭素原子１〜５個の低級チオアルキルから選択される１〜５個の置換基で置換されていてもよい５〜７員環を有する，芳香族（例えば，フェニルなどの炭素環式アリール基，ならびにナフチル，１，２，３，４−テトラヒドロナフチル，インダニルおよびインデニルなどの二環式炭素環式アリール環系），ヘテロ芳香族（例えば，インドリル，ジヒドロインドリル，キノリニルおよびイソキノリニルならびにそれらに関する１，２，３，４−テトラヒドロ−および２−オキソ−誘導体），脂肪環式（環式脂肪族），もしくはヘテロ脂肪環式環または環系（単環，二環，または三環）であってもよく，
ｍは，各々，０〜３の整数であり，
ｋは，各々，１〜１０の整数であり，
ｊは，各々，同一または異なって，１〜１２の整数であり，
Ｒ１およびＲ２は，各々，独立して，水素，炭素原子１〜５個の低級アルキル，炭素原子１〜５個の低級アルキルアミノ，炭素原子１〜５個の低級アルキルアミド，炭素原子１〜５個の低級モノ−，ジ−，またはトリフルオロアルキル，ヒドロキシ，アミジノ，グアニジノ，または典型的な一般的なアミノ酸側鎖からなる群から選択されるか，または，付随した炭素原子を用いて，Ｒ１およびＲ２は，一緒になって，カルボニルを形成し，
Ｚは，各々，窒素，酸素，硫黄，アミド，スルホンアミドおよび炭素からなる群から選択される］
で示されるポリアミン型化合物またはその類似体（すなわち，ポリヘテロ原子性分子）である，神経障害または神経病を有する患者の治療に有用な化合物を特徴とするものである。
【００６５】
末端−ＮＲ１Ｒ２基がＮ−エチル（Ｒ１＝Ｈ，Ｒ２＝ＣＨ２ＣＨ３）である化合物は，高血圧などの望ましくない心臓血管副作用の非常に減少された発生率および重篤度に関連するので，該化合物は，これらの特に好ましい具体例である。
【００６６】
好ましい芳香族ヘッドグループとしては，限定されないが，以下のものが挙げられる：
【化１８】
2004002437.tif 000004
【化１９】
2004002437.tif 000005
化学構造が前記一般式によって網羅される公知の化合物は，本発明から除かれる。
【００６７】
さらに好ましい具体例では，当該化合物は，化合物４〜１８のグループから選択される。ここで，かかる化合物は，以下の式を有する：
【化２０】
2004002437.tif 000006
【化２１】
2004002437.tif 000007
【化２２】
2004002437.tif 000008
【００６８】
本発明は，また，化合物４〜１８またはその医薬的に許容される塩を含む種々の本発明化合物の組成物および医薬的に許容される担体および投与量におけるその医薬組成物またはその医薬的に許容される塩を特徴とするものである。
【００６９】
「医薬組成物」とは，医薬的に許容される担体中の本発明化合物の治療有効量，すなわち，当該化合物を添加して，溶解させることができるか，または，当該化合物の投与を促進することができる製剤を意味する。医薬的に許容される担体の例としては，水，生理食塩水，および生理的緩衝化食塩水が挙げられる。かかる医薬組成物は，好適な投与量で提供される。かかる組成物は，一般に，ＦＤＡまたは非Ｕ．Ｓ．国でのそれと同等のものによって特定の障害の治療における使用について認可されているものである。
【００７０】
出願人は，単純化アリールアルキルアミン類（以下，参照）が，ＮＭＤＡ受容体−イオノフォア複合体の有効な非競合的拮抗薬であることも判定した（以下の実施例２３を参照）。単純化アリールアルキルアミン類は，前記化合物４〜１８によって例示されたアリールアルキルアミン類とは異なる。例えば，かかる化合物は，ＮＭＤＡ受容体媒介性機能を拮抗する濃度よりも約１〜５０倍高い範囲の濃度で［３Ｈ］ＭＫ−８０１によって標識化され他部位に結合する。かかる単純化アリールアルキルアミン類は，以下のさらなる生物学的特性の１つ以上を有する：有意な神経保護活性，有意な抗痙攣活性，有意な鎮痛活性，有効な神経保護，抗痙攣および鎮痛投与量で齧歯動物においてＰＣＰ様常同性行動（異常興奮性および頭部ウィービング）がないこと，有効な神経保護，抗痙攣および鎮痛投与量でＰＣＰ識別アッセイにおけるＰＣＰの汎化がないこと，有効な神経保護，抗痙攣および鎮痛投与量でニューロン空胞形成がないこと，電位感受性カルシウムチャネルに対する有意に有効ではない活性，および有効な神経保護，抗痙攣および鎮痛投与量で最小の血圧降下活性。
【００７１】
さらなる態様では，本発明は，下記構造式からなる医薬組成物を投与することからなる神経病または神経障害を有する患者の治療方法を特徴とするものである：
【化２３】
2004002437.tif 000009
［式中，Ｘは，各々，独立して，１個以上のＨ，Ｂｒ，Ｃｌ，Ｆ，低級アルキル，および／またはＯＣＨ３であってよく，Ｒ１は，各々，独立して，Ｈ，低級アルキル，ＯＨ，Ｏ−アルキルまたはＯ−アシルであってよく，Ｒ２は，各々，独立して，Ｈまたは低級アルキルであってよい］；または
【化２４】
2004002437.tif 000010
［式中，Ｘは，各々，独立して，１個以上のＨ，Ｂｒ，Ｃｌ，Ｆ，低級アルキル，および／またはＯＣＨ３であってよく，Ｒ１は，各々，独立して，Ｈ，低級アルキル，ＯＨ，Ｏ−アルキル，またはＯ−アシルであってよく，Ｒ２は，各々，独立して，Ｈまたは低級アルキルであってよい］；または
【化２５】
2004002437.tif 000011
［式中，ｎ＝１〜６，Ｘは，各々，独立して，１個以上のＨ，Ｂｒ，Ｃｌ，Ｆ，低級アルキル，および／またはＯＣＨ３であってよく，Ｒ１は，Ｈ，低級アルキル，ＯＨ，Ｏ−アルキル，またはＯ−アシルであってよく，Ｒ２は，Ｈまたは低級アルキルであってよい］；または
【化２６】
2004002437.tif 000012
［式中，ｎ＝１〜６，Ｘは，各々，独立して，１個以上のＨ，Ｂｒ，Ｃｌ，Ｆ，低級アルキル，および／またはＯＣＨ３であってよく，Ｒ１は，Ｈ，低級アルキル，ＯＨ，Ｏ−アルキル，またはＯ−アシルであってよく，Ｒ２は，各々，独立して，Ｈまたは低級アルキルであってよい］。
【００７２】
化学構造が前記一般式によって網羅されている公知の化合物は，本発明から除く。
【００７３】
好ましい具体例では，医薬組成物は，化合物１９〜５３またはその医薬的に許容される塩からなる。
【化２７】
2004002437.tif 000013
【化２８】
2004002437.tif 000014
【化２９】
2004002437.tif 000015
【化３０】
2004002437.tif 000016
【化３１】
2004002437.tif 000017
【化３２】
2004002437.tif 000018
【００７４】
さらなる具体例は，化合物１９またはその医薬的に許容される塩からなる組成物および医薬的に許容される担体および投与量における医薬組成物またはその医薬的に許容される塩を包含する。
【００７５】
本発明の他の特徴および長所は，その好ましい具体例の以下の説明および請求の範囲から明らかであろう。
【００７６】
好ましい具体例の説明
以下は，治療的に有用な化合物を同定し，神経障害および神経病の治療に利用することができる方法および試験の詳細な説明である。化合物１，化合物２または化合物３の利用によって，該試験を例示するが，同様の生物活性を有する他の化合物を用いて（発見したように），試験を改良することができる。標準的な方法を用いて分子モデル化のために化合物１，化合物２または化合物３などのリード化合物を用いることができるか，または，天然ライブラリー中の現存または新規の化合物を以下の方法によってスクリーニングすることができる。
【００７７】
１つの重要な方法は，化合物を標準的な放射リガンド結合法（放射性標識アリールアルキルアミン結合アッセイ）で素早くスクリーニングして，受容体作動性Ｃａ２＋チャネル上の同一部位で結合するものを化合物１，化合物２または化合物３と同定することができる手段である。かかる放射リガンド結合研究からのデータは，化合物が，受容体作動性Ｃａ２＋チャネル上の公知の部位（例えば，ＮＭＤＡ受容体−イオノフォア複合体上のグルタミン酸結合部位，グリシン結合部位，ＭＫ−８０１結合部位，Ｚｎ２＋結合部位，Ｍｇ２＋結合部位，シグマ結合部位，またはポリアミン結合部位）での作用を介して［３Ｈ］アリールアルキルアミン結合を阻害しないことも確認するであろう。このスクリーニング試験は，莫大な数の潜在的に有用な化合物を同定し，他のアッセイにおける活性についてスクリーニングさせる。当業者は，受容体作動性Ｃａ２＋チャネル上のアリールアルキルアミン部位への結合の検出のための他の迅速なアッセイが発明され，本発明で用いることができることを理解するであろう。
【００７８】
さらなる試験は，前記放射リガンド結合アッセイを用いて得られた結果を拡大する電気生理学的（パッチクランプ）法を利用する。かかる結果は，アリールアルキルアミン部位に結合する化合物が，アリールアルキルアミン類自体と共通の以下の性質を有する受容体作動性Ｃａ２＋チャネルの機能的な非競合的拮抗薬であることを確認するであろう：用途依存性遮断として証明されたオープンチャネル遮断ならびに遮断からの電位依存性開始および反転。かかる結果は，該化合物が受容体作動性Ｃａ２＋チャネル上の前記部位（ＮＭＤＡ受容体−イオノフォア複合体上のグルタミン酸結合部位，グリシン結合部位，ＭＫ−８０１結合部位，Ｚｎ２＋結合部位，Ｍｇ２＋結合部位，シグマ結合部位，またはポリアミン結合部位）でそれらの主要な活性を有しないことも確認するであろう。
【００７９】
さらに，組換えＤＮＡ技術を用いて，かかる試験をさらに迅速に行うこともできる。例えば，標準的な方法を用いて，新規アリールアルキルアミン結合部位をコードする遺伝子（すなわち，受容体）を同定し，クローン化することができる。これは，いくつかの方法のうちの１つにおいて行うことができる。例えば，アリールアルキルアミン親和性カラムを調製し，カラムを通過した該アリールアルキルアミン受容体を含有する細胞または組織からの膜を可溶化することができる。該受容体分子は，カラムに結合し，かくして，単離される。次いで部分アミノ酸配列情報を得ることができ，これにより，受容体をコードする遺伝子を単離することができる。別法としては，ｃＤＮＡ発現ライブラリーを調製し，該ライブラリーのサブフラクションを，それらの，かる受容体を正常には発現しない細胞（例えば，ＣＨＯ細胞，マウスＬ細胞，ＨＥＫ　２９３細胞，またはゼノプス（Ｘｅｎｏｐｕｓ）卵母細胞）上にアリールアルキルアミン受容体を与える能力について試験する。この方法では，受容体をコードするクローンを含有するライブラリーフラクションを同定する。活性ライブラリーフラクションの連続サブフラクショネーションおよびアッセイは，最終的に，アリールアルキルアミン受容体をコードする単一クローンを生じる。同様に，ハイブリッド阻害またはハイブリッド消耗（ｄｅｐｌｅｔｉｏｎ）クローニングを用いることができる。ゼノプス（Ｘｅｎｏｐｕｓ）卵母細胞に，適当な組織または細胞源（例えば，ヒト脳組織）からのｍＲＮＡを注入する。該アリールアルキルアミン受容体の発現を，例えば，化合物１，化合物２または化合物３によって遮断することができるカルシウムのＮＭＤＡまたはグルタミン酸刺激性流入として検出する。ゼノプス（Ｘｅｎｏｐｕｓ）卵母細胞中への注入前にｃＤＮＡまたはｃＲＮＡをえり抜きのｍＲＮＡにハイブリダイズさせた場合のｃＤＮＡクローンのこの受容体の発現を遮断する能力について該ｃＤＮＡクローンを試験する。次いで，この効果の原因であるクローンを前記方法によって単離する。受容体遺伝子を単離した後，標準的な方法を用いて，アリールアルキルアミン類を結合するのに充分なポリペプチドまたはその一部（アリールアルキルアミン結合ドメイン）を同定する。さらに，標準的な方法を用いて，組換え技術によって，全体の受容体またはアリールアルキルアミン結合ドメインを発現することができる。該受容体または結合ドメインを単離し，生化学的試薬として用いることができ，その結果，以下に例示する競合アッセイを用いるよりも，単純な直接結合アッセイを用いることができる。すなわち，新規アリールアルキルアミン受容体で結合する化合物についてスクリーニングを開始する。この方法では，多数の化合物を，例えば，新規アリールアルキルアミン受容体またはアリールアルキルアミン結合ドメインを含有するカラムに通すことによって，同時にスクリーニングし，カラムに結合する化合物について分析を行うことができる。さらなる試験は，分子生物学的技術（クローン化ＮＭＤＡ，ＡＭＰＡまたはニコチン性コリン作動性受容体の発現）およびパッチクランプ電気生理学的技術の組合せを用いる。詳細には，クローン化され，発現された前記受容体−イオンフォア複合体サブユニットでの効力について，アリールアルキルアミン類似体を迅速にスクリーニングすることができる。いずれのアミノ酸残基がアリールアルキルアミン効力を測定する際に重要であるかを同定する試みにおいて部位特異的突然変異誘発を用いることができる。
【００８０】
哺乳動物ＣＮＳにおける受容体作動性カルシウムチャネルの有効かつ選択な拮抗薬についてのアッセイ
薬物の望ましい性質としては，以下のものが挙げられる：ＮＭＤＡ，ＡＭＰＡおよびニコチン性コリン作動性受容体−イオノフォア複合体中に存在するもののような受容体作動性Ｃａ２＋チャネルについての高い親和性および選択性（他の神経伝達受容体，神経伝達受容体作動性イオンチャネル，または電位依存性イオンチャネルにより媒介される応答と比較した）および受容体作動性Ｃａ２＋チャネルの非競合的拮抗作用。
【００８１】
ＮＭＤＡ受容体−イオノフォア複合体を受容体作動性Ｃａ２＋チャネルの例として用いる。ＮＭＤＡ受容体の活性化は，カチオン選択性チャネルを開口し，それにより，細胞外Ｃａ２＋およびＮａ＋が流入し，その結果，［Ｃａ２＋］ｉの増加および細胞膜の脱分極を生じる。ＮＭＤＡ受容体上のアリールアルキルアミン化合物の活性を検出するための主要なアッセイとして［Ｃａ２＋］ｉの測定を用いた。精製したアリールアルキルアミン類，合成アリールアルキルアミン類，およびアリールアルキルアミン類の合成類似体を，グルタミン酸受容体活性を測定する能力を有するイン・ビトロアッセイでの活性について試験した。詳述した試験のために種々のクモ種の毒中に存在するアリールアルキルアミン類を選択した。これらの毒中に存在するアリールアルキルアミンは，構造的に異なるが，化合物１〜３によって表されるクラスの基本構造を有する。他のより単純化された合成類似体は，一般的に，アルキル（ポリ）アミン部分に結合した好適に置換された芳香族発色基からなる（以下の化合物１９〜５３を参照）。
【００８２】
グルタミン酸受容体活性の機能的インデックスを提供し，高い処理量スクリーニングを行わせしめる主要なアッセイを研究した。蛍光指示薬ｆｕｒａ−２を負荷したラット小脳顆粒細胞の一次培養物を用いて，ＮＭＤＡおよびその共作動性グリシンによって誘起された［Ｃａ２＋］ｉの変化を測定した。このアッセイは，非常に選択的かつ正確なＮＭＤＡ受容体活性のインデックスを提供する。ＮＭＤＡによって誘起される［Ｃａ２＋］ｉの増加は，グリシンの存在に依存しており，グルタミン酸，グリシン，またはＭＫ−８０１結合部位で作用する細胞外Ｍｇ２＋または拮抗薬によって遮断される。ＮＭＤＡ／グリシンによって誘起される［Ｃａ２＋］ｉの増加は，電位選択性Ｃａ２＋チャネルの遮断薬による阻害に対するそれらの不応性による脱分極により生じるものとは容易に区別される。［Ｃａ２＋］ｉの測定が電気生理学的およびリガンド結合研究によって得られた結果を確証する適合度は，かかる測定がＮＭＤＡ受容体−イオノフォア複合体の活性化を厳密に反映することを示す。
【００８３】
実施例１：ＮＭＤＡ受容体機能の有効な非競合的阻害
培養したラット小脳顆粒細胞中の［Ｃａ２＋］ｉのＮＭＤＡ受容体媒介性増加に対するアリールアルキルアミン類の選択的阻害効果を測定した。［Ｃａ２＋］ｉの増加は，種々の濃度の各試験化合物の存在または不在下で，ＮＭＤＡ／グリシン（５０μＭ／１μＭ）の添加によって誘導された。ＩＣ５０値は，試験化合物当たり２〜８種類の実験を用いて各試験化合物について得られ，標準誤差レベルは，各化合物について平均値の１０％未満であった。
【００８４】
試験されたアリールアルキルアミン類の全てが，ＮＭＤＡ／グリシンによって誘導された小脳顆粒細胞中の［Ｃａ２＋］ｉの増加を遮断した。化合物１または化合物２と構造上類似のある種のアリールアルキルアミン類は，ＮＭＤＡ受容体を選択的に遮断するのが知られている文献において最も有効な化合物であるＭＫ−８０１（ＩＣ５０＝３４ｎＭ）とほぼ同様に有効である。化合物３は，ＩＣ５０＝２ｎＭを有しており，すなわち，ＭＫ−８０１よりも１７倍有効であった。試験されたアリールアルキルアミン類の多くは，ＡＰ５（ＩＣ５０＝１５μＭ）などの競合的拮抗薬よりも有効であった。アリールアルキルアミン類の阻害効果は，ＮＭＤＡまたはグリシンの濃度を増加させることによって克服されなかった。すなわち，ＮＭＤＡまたはグリシンのいずれについてもＥＣ５０において変化が見られなかった。かくして，アリールアルキルアミン類は，ＮＭＤＡ受容体−イオノフォア複合体での非競合的拮抗薬であり，グルタミン酸またはグルタミン結合部位のいずれでも作用しない。
【００８５】
実施例２：カイニン酸およびＡＭＰＡ受容体機能に対する活性
小脳顆粒細胞中の［Ｃａ２＋］ｉの測定値を用いて，この組織中に存在する天然のカイニン酸およびＡＭＰＡ受容体の活性化をモニターすることもできる。これらの作動薬によって誘発された［Ｃａ２＋］ｉの増加は，ＮＭＤＡ／グリシンによって誘発されたものよりも小さいが，かかる応答は，強く，これを用いて，薬理学的に定義されたグルタミン酸受容体サブタイプに対するアリールアルキルアミン類の作用の特異性を正確に評価することができる。［Ｃａ２＋］ｉの比較測定は，アリールアルキルアミン類の受容体特異性において明確な識別を示した。ＪＳＴＸ−２［ネフィラ・クラバータ（Ｎｅｐｈｉｌａ　ｃｌａｖａｔａ）クモからのジョロ・スパイダー（Ｊｏｒｏ　Ｓｐｉｄｅｒ）毒素］などのよう，カイニン酸（１００μＭ）またはＡＭＰＡ（３０μＭ）によって誘発された応答の有効な拮抗薬もあった。他方，化合物１によって，および化合物２によって定義された２つの構造的分類の範囲内のアリールアルキルアミン類は，ＮＭＤＡによって誘発された応答を選択的に阻害することが判明した（約１００倍の効力差を示す）。かくして，化合物１および化合物２などのアリールアルキルアミン類は，小脳顆粒細胞におけるＮＭＤＡ受容体媒介性応答の有効かつ選択的な阻害薬である。
【００８６】
実施例３：パッチクランプ電気生理学的研究
成体ラット脳から単離した皮質または海馬ニューロンに対するパッチクランプ電気生理学的研究は，化合物１，化合物２および化合物３の作用機序へのさらなる洞察を提供した。これらの研究は，ＮＭＤＡ受容体によって媒介される応答に対するアリールアルキルアミン類の有効かつ選択的な阻害効果を示した。かくして，化合物１などの化合物は，カイニン酸への応答に影響を及ぼすことなくナノモル濃度でＮＭＤＡへの応答を遮断した。皮質および海馬ニューロンにおけるアリールアルキルアミン類の選択的阻害効果を示すこれらの結果は，該アリールアルキルアミン類が哺乳動物ＣＮＳ内の種々の領域におけるＮＭＤＡ受容体を標的とすることを示す。さらにまた，これらの化合物の阻害効果は，用途依存性および電位依存性であったことが判明した。これは，これらの化合物がオープン・チャネルを遮断しており，この作用によって非競合的ＮＭＤＡ受容体拮抗薬として機能することを強く示している。しかしながら，重要なことには，該アリールアルキルアミン類は，特に，それらの作用の開始の電位依存性および効果の可逆性に関して，Ｍｇ２＋およびＭＫ−８０１の両方により区別されることができた。
【００８７】
実施例４：放射リガンド結合アッセイ
放射リガンド結合研究は，化合物１および化合物２などのアリールアルキルアミン類が作用の固有部位を有することを示した。それらは，ある点でＭＫ−８０１のように作用するが（前記した非競合的オープン−チャネル遮断），それらは，ＮＭＤＡ受容体媒介性応答を完全に遮断する濃度で結合する［３Ｈ］ＭＫ−８０１を置換できない。これらのようなアッセイは，また，該アリールアルキルアミン類が，ＮＭＤＡ受容体−イオノフォア複合体上で公知のＭＫ−８０１，Ｍｇ２＋またはポリアミン結合部位に高い親和性で結合しないことを示す。該アリールアルキルアミン類は，ＮＭＤＡ受容体媒介性応答を遮断する濃度でグルタミン酸，グリシンまたはシグマ結合部位のいずれにも直接結合しない［３Ｈ］化合物２は，化合物２の作用機序を探究するために結合研究において用いるための，特に，他の類似体の活性を評価するためおよび新しいリード構造物を検出するために高処理量スクリーンにおいて用いるための放射リガンドとして合成された。［３Ｈ］化合物５について，同様のアプローチが採られた。化合物１および化合物２などの化合物が，他の公知の化合物が現在存在しないＮＭＤＡ受容体−イオノフォア複合体上の部位を標的とすることは，明らかである。分子レベルでの該アリールアルキルアミン類の作用の新規部位は，行動レベルでの著しい治療的利点に変わる。以下に説明するとおり，該アリールアルキルアミン類は，ＮＭＤＡ受容体の他の非競合的拮抗薬とは全く異なる行動プロフィールを有する。
【００８８】
実施例５：シナプス伝達研究
前記発見は，ある種のアリールアルキルアミン類，特に，化合物１および化合物２に構造的に関連するアリールアルキルアミン類が新しいメカニズムを介して作用し，作用の部位が数種類の脳からのニューロンに対するＮＭＤＡ受容体媒介性応答を有効かつ選択的に阻害することを示す。さらに該アリールアルキルアミン類の選択的阻害作用を評価するために，ＮＭＤＡまたはＡＭＰＡ受容体によって媒介されたシナプス伝達に対するそれらの効果を評価した。
【００８９】
シェファー側副線維およびＣＡ１錐体細胞のシナプスでのグルタミン酸媒介性伝達を，海馬を含有するラット脳のスライスにおいて測定した。このアッセイは，グルタミン酸のシナプス前放出によって引き起こされるシナプス後脱分極を電気生理学的に測定し，ＮＭＤＡまたはＡＭＰＡ受容体によって媒介されるシナプス伝達を容易に区別することができる。化合物１，化合物２および化合物３などのアリールアルキルアミン類は，ＮＭＤＡ受容体媒介性応答に対する選択的阻害効果を発揮し，非常に高い濃度でのみＡＭＰＡ受容体によって媒介される応答を抑制することが判明した。例えば，化合物１は，ＮＭＤＡ受容体媒介性応答についてのＩＣ５０２０μＭを有するが，ＡＭＰＡ受容体媒介性応答についてのＩＣ５０は，６４７μＭであった。これらの結果は，アリールアルキルアミン類がＮＭＤＡ受容体によって媒介されるシナプス伝達を選択的に阻害することができることを示す。アゲレノプシス・アペルタ（Ａｇｅｌｅｎｏｐｓｉｓ　ａｐｅｒｔａ）の毒に存在する他の天然アリールアルキルアミン類は，同様に，ラット海馬におけるＮＭＤＡ受容体媒介性応答に対する有効かつ選択的阻害効果を発揮する。
【００９０】
全体として，これらの種々の研究の結果は，相補的であり，一緒になって，哺乳動物ＣＮＳにおけるＮＭＤＡ受容体に対する有効かつ選択的な阻害活性を有する構造的に新規な化合物を同定する。さらに，これらの化合物は，ＮＭＤＡ受容体−イオノフォア複合体上の固有の部位を標的とする。化合物１，化合物２および化合物３は，治療学的に重要なエンドポイントを模擬実験する種々のイン・ビトロおよびイン・ビボアッセイにおけるさらなる研究について選択された。
【００９１】
神経保護活性
神経保護薬の望まれる特性としては，以下のものが挙げられる。（１）該薬物は，経口経路または注射可能な経路によって投与することができる（すなわち，胃，腸または血管系において有意には分解せず，かくして，治療的に有効な量で治療されるべき組織に達する）。かかる薬物は，それらの生物学的利用能を測定するために齧歯動物において容易に試験される。（２）該薬物は，虚血性発作（発作，仮死）または外傷性損傷（頭部外傷，脊髄損傷）後に投与されると，神経保護活性（すなわち，効力）を示す。（３）該薬物は，認識障害，運動動作の中断（ｄｉｓｒｕｐｔｉｏｎ），鎮静または異常興奮性，ニューロン空胞形成，心臓血管活性，ＰＣＰ様乱用潜在能力，またはＰＣＰ様精神異常作用性などの副作用が全くないか，または最小の該副作用を有する。
【００９２】
グルタミン酸は，生理学的シナプス伝達物質であるが，グルタミン酸への長期にわたる曝露は，ニューロン細胞死を導く。グルタミン酸によって引き起こされる神経変性の多くは，ＮＭＤＡ受容体によって媒介されることが明らかであり，サイトゾルＣａ２＋の長期にわたって上昇したレベルにより直接的に生じる。現在，ＮＭＤＡおよびＡＭＰＡ受容体が発作および他の虚血性／低酸素性事象の後のニューロン変性を媒介する際に主要な役割を果たすという点について広範囲の実験的支持がある［チョイ（Ｃｈｏｉ），グルタミン酸神経毒および神経系の疾患（Ｇｌｕｔａｍａｔｅ　ｎｅｕｒｏｔｏｘｉｃｉｔｙ　ａｎｄ　ｄｉｓｅａｓｅｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｎｅｒｖｏｕｓ　ｓｙｓｔｅｍｓ），ニューロン（Ｎｅｕｒｏｎ）１：６２３，１９８８］。この証拠のほとんどは，ＮＭＤＡまたはＡＭＰＡ受容体の競合的または非競合的拮抗薬の，イン・ビトロおよびイン・ビボの両方のモデルにおけるニューロン細胞死を有効に遮断する能力に基づいている。したがって，化合物１，化合物２および化合物４を，かかる活性を検出するように設計された標準的なアッセイにおいて神経保護効果について試験した。
【００９３】
実施例６：皮質ニューロン保護
アリールアルキルアミン類のイン・ビトロ神経保護効果を評価するために，培養中で増殖したマウス皮質ニューロンを５分間ＮＭＤＡに曝露し，２４時間後の細胞死を，死亡細胞から放出される細胞質酵素である乳酸テヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）の放出を測定することによってモニターした［チョイ（Ｃｈｏｉ）ら，皮質細胞培養物中のグルタミン酸神経毒（Ｇｌｕｔａｍａｔｅ　ｎｅｕｒｏｔｏｘｉｃｉｔｙ　ｉｎ　ｃｏｒｔｉｃａｌｃｅｌｌｃｕｌｔｕｒｅ），ジャーナル・オブ・ニューロサイエンス（Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．）７：３５７，１９８７］。ＮＭＤＡへの曝露は，皮質ニューロンの約８０％を殺した。ＮＭＤＡと一緒に含まれる化合物１または化合物２は，各々，７０μＭおよび３０μＭのＩＣ５０値で細胞死を予防した。該アリールアルキルアミン類の有効な濃度は，他の競合的ＮＭＤＡ受容体拮抗薬のものよりも高いが，競合的拮抗薬のものと同様である。ＮＭＤＡ受容体拮抗薬の有効な濃度は，特定の実験条件および研究された細胞のタイプ（皮質，海馬，線条体）に依存して変化する。この神経保護効果は，同様に，これらの化合物の，ＮＭＤＡ受容体によって引き起こされる細胞外Ｃａ２＋の流入を遮断する能力により生じる。
【００９４】
有効な治療効果を測定するためのより厳密な試験は，イン・ビボ発作モデルを含んだ。これらのモデルでは，血液供給は，脳への主動脈をクランプすることによって一時的に遮断される。この種の２つのイン・ビボモデルを用いて，化合物１，化合物２および化合物４のニューロン細胞損失を予防する能力を測定した。
【００９５】
実施例７：両側の頸動脈閉塞
第１のアッセイは，アレチネズミ（ｇｅｒｂｉｌ）において行われた前脳虚血の両側の一般的な頸動脈閉塞モデルであった［カーピアク（Ｋａｒｐｉａｋ）ら，虚血性発作における薬物の研究のための動物モデル（Ａｎｉｍａｌ　ｍｏｄｅｌｓ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｓｔｕｄｙ　ｏｆ　ｄｒｕｇｓ　ｉｎ　ｉｓｃｈｅｍｉｃ　ｓｔｒｏｋｅ），Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｏｘｉｃｏｌ．２９：４０３，１９８９；ギンズバーグ（Ｇｉｎｓｂｅｒｇ）およびバスト（Ｂｕｓｔｏ），大脳虚血の齧歯動物モデル（Ｒｏｄｅｎｔ　ｍｏｄｅｌｓ　ｏｆ　ｃｅｒｅｂｒａｌ　ｉｓｃｈｅｍｉａ），ストローク（Ｓｔｒｏｋｅ）２０：１６２７，１９８９］。脳への血流を，頸動脈をクランプすることによって７分間中断した。血流を回復させた３０分後に，腹腔内投与される（ｉ．ｐ．）単投与として試験化合物を投与した。これらの実験の経過の間，動物の中心体温を３７℃に維持して，低温反応を予防した。多くのＮＭＤＡ受容体拮抗薬は，低温症を引き起こし，この効果は，これらの化合物のほとんどの保護効果の原因であり得る。脳のセクションを銀染色し，形態計測分析によって死亡を定量化することによって，４日後にニューロン細胞死について脳を試験した。化合物２（２０ｍｇ／ｋｇ）は，試験された脳の全ての領域（海馬，線条，新皮質の領域ＣＡ１）におけるニューロン細胞死を有意に（ｐ＜０．０５）保護した。１ｍｇ／ｋｇ程度の低い投与量は，線条の完全な（＞９８％）保護を提供した。保護の程度は，非競合的ＮＭＤＡ拮抗薬であるＭＫ−８０１の同様の投与量を用いて達成される保護と比較できる。
【００９６】
次の実験では，化合物１（１０ｍｇ／ｋｇ）は，虚血後７日目に測定したアレチネズミ海馬の領域ＣＡ１におけるニューロン死の量の２３％減少を生じたが，一方，化合物４（１０ｍｇ／ｋｇ）は，９０％保護を提供した。
【００９７】
実施例８：中大脳動脈閉塞
ラットにおいて行った発作の中大脳動脈モデル［カーピアク（Ｋａｒｐｉａｋ）ら，虚血性発作における薬物の研究のための動物モデル（Ａｎｉｍａｌ　ｍｏｄｅｌｓ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｓｔｕｄｙ　ｏｆ　ｄｒｕｇｓ　ｉｎ　ｉｓｃｈｅｍｉｃ　ｓｔｒｏｋｅ），Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｏｘｉｃｏｌ．２９：４０３，１９８９；ギンズバーグ（Ｇｉｎｓｂｅｒｇ）およびバスト（Ｂｕｓｔｏ），大脳虚血の齧歯動物モデル（Ｒｏｄｅｎｔ　ｍｏｄｅｌｓ　ｏｆ　ｃｅｒｅｂｒａｌ　ｉｓｃｈｅｍｉａ），ストローク（Ｓｔｒｏｋｅ）２０：１６２７，１９８９］は，それがより制限された脳梗塞において生じ，これにより，異なる種類の発作（巣状血栓性発作）に近づくので，アレチネズミのモデルとは異なる。この発作モデルを用いる第１の研究では，１つの大脳動脈を手術的結紮（ｓｕｒｇｉｃａｌ　ｌｉｇａｔｉｏｎ）によって永久に閉塞した。単回の腹腔内（ｉ．ｐ．）注射によって，閉塞の３０分後に試験化合物を投与した。これらの実験の経過の間，動物の中心体温を３７℃に維持して，低温反応を予防した。２４時間後，脳をニューロン細胞損失について組織学的に評価した。梗塞量は，１０個のスライドからの組織学的蒼白の領域を用いて，各連続セクション間の距離を積分して算出した。化合物１の単回投与（３０ｍｇ／ｋｇ）は，ＭＫ−８０１の最大有効投与量（１０ｍｇ／ｋｇ）と同等にニューロン細胞損失に対して有意に（ｐ＜０．０５）保護することが判明した（約１５％保護）。化合物２（２０ｍｇ／ｋｇ）を用いる予備試験は，同様の傾向を示した。
【００９８】
ラットにおける巣状大脳虚血の第２の研究では，頸動脈を介して中大脳動脈の領域へ縫合糸の小片を通すことによって，中大脳動脈を永久に閉塞した。中心体温を３７℃に維持した。虚血性事象の開始直後に投与した化合物４（１０ｍｇ／ｋｇ，ｉ．ｐ．）は，２４時間後に記録した脳梗塞の量の統計学的に有意な減少（２０％）を生じた。
【００９９】
ラットにおける巣状大脳虚血の第３のモデルでは，ローズ・ベンガル顔料を用いるフォト血栓法（ｐｈｏｔｏｔｈｒｏｍｂｏｔｉｃ　ｍｅｔｈｏｄ）によって虚血性梗塞を生じた。虚血性事象の３０分後に投与した化合物４（１０ｍｇ／ｋｇ，ｉ．ｐ．）は，非競合的ＮＭＤＡ受容体拮抗薬であるＭＫ−８０１を用いて示したと同様に梗塞の量の２０％減少を生じた。
【０１００】
ラットにおける巣状大脳虚血の第４のモデルでは，頸動脈を介して中大脳動脈の領域へ縫合糸の小片を通すことによって，中大脳動脈を一時的に閉塞した。２時間の虚血期間後，縫合糸を引き抜いた。中心体温を３７℃に維持した。虚血事象の開始直後に投与した化合物４（１０ｍｇ／ｋｇ，ｉ．ｐ．）は，７２時間後に記録した脳梗塞の量の統計学的に有意な減少（２０％）を生じた。
【０１０１】
主な化合物のいくつかの重要な特徴は，これらのイン・ビボ結果から明らかになる。第１に，最も重要なことには，化合物１，化合物２および化合物４は，発作の数種類のイン・ビボモデルにおいて神経保護効果を示す。アレチネズミのアッセイは，心拍停止または周産期低酸素症などの一過性の完全な脳虚血および低酸素症についてのモデルである。ラットのアッセイは，永久的および一時的な巣状大脳虚血のモデルである。化合物１および化合物４が永久的巣状発作モデルにおいて神経保護的であることの発見は，薬物の梗塞の部位への接近性が一般的に大きくない周縁領域に制限されるので，驚くべきことである。それにもかかわらず，化合物１および化合物４は，ダメージの程度を有意に（ｐ＜０．０５）制限した。第２に，当該化合物は虚血事象後に投与すると有効である。これは，薬物が壊死性ダメージを有効に停止させる梗塞の後の「機会の窓（ｗｉｎｄｏｗ　ｏｆ　ｏｐｐｏｒｔｕｎｉｔｙ）」であると思われるので，重要である。この時間がヒトにおいてどの程度長いかは，正確には定義されておらず，おそらく梗塞のタイプに依存して変わるであろう。しかしながら，本質的な観察は，変性プロセスが始まった後にこれらの化合物がニューロン細胞死の蔓延を予防することができるということである。最後に，化合物１，化合物２および化合物４は，非経口投与すると有効であり，それらが血液−脳バリヤーを透過することを示す。
【０１０２】
抗痙攣活性
抗痙攣薬の望まれる特性としては，以下のことが挙げられる：該薬物は，経口または注射可能な経路によって投与することができ，該薬物は，限定されないが，単純な部分発作，複雑な部分発作，痙攣重積状態，および頭部手術を含む頭部損傷の後に生じるような外傷誘発性発作が挙げられるいくつかの発作タイプに対して有効な抗痙攣活性を示し；該薬物は，認識障害，運動動作の中断，鎮静または異常興奮性，ニューロン空胞形成，心臓血管活性，ＰＣＰ様乱用潜在能力，またはＰＣＰ様精神異常作用性などの副作用が全くないか，または最小の該副作用を有する。
【０１０３】
グルタミン酸は，脳における主要な興奮性伝達物質であり，かくして，発作活性において主要な役割を果たし，癲癇の病因に寄与する。癲癇においてグルタミン酸受容体についての主要な役割に好都合である事象のほとんどは，グルタミン酸受容体作動薬が発作を誘発すること，および，ＮＭＤＡおよびＡＭＰＡ受容体拮抗薬がイン・ビボで投与されると有効な抗痙攣薬であることを示す薬理学的研究に由来する。癲癇の臨床的に異なる形態に関連した種々の発作および行動的効果を含む多くのイン・ビボモデルがある。かくして，同一のメカニズムが発作活性の全ての活性の基礎となると仮定するのは単純化し過ぎるので，いくつかのモデルにおいて効果について試験することは，慎重なことである。
【０１０４】
実施例９：痙攣毒遮断活性
最初の研究では，アリールアルキルアミン類の，カイニン酸，ピクロトキシンまたはビククリンによって誘発された発作を遮断する能力を実験した。これらの痙攣毒の各々は，異なるメカニズムを介して作用し，カイニン酸によって誘発された発作は，ピクロトキシンまたはビククリンによって誘発された発作とは定性的に異なる。これらの実験では，ピクロトキシンまたはビククリン投与の５分前，およびカイニン酸投与の５分後，いくつかのアリールアルキルアミン毒素を含有するアゲレノプシス・アペルタ（Ａｇｅｌｅｎｏｐｓｉｓ　ａｐｅｒｔａ）毒のフラクションを静脈内（ｉｖ）投与した。該アリールアルキルアミン類は，これらの３つの薬剤の全てによって誘発された発作を減少させた。ピクロトキシンまたはビククリンの効果は，１９匹の対照動物の全てが２５分以内に死亡するほど猛烈であった。対照的に，該アリールアルキルアミン類で前処理された９匹の動物には，死亡しなかった。要するに，該アリールアルキルアミン類で処理した動物の約半分だけは，いずれの痙攣も全く示さず，これらの症状は，１時間以内に軽減された。これらの結果は，明らかにアリールアルキルアミン類の抗痙攣効果を示し，さらに，精製したアリールアルキルアミン類およびそれらの類似体を用いる研究を刺激した。
【０１０５】
実施例１０：発作刺激
研究のこの第２のグループにおいて，まず，３種類の発作誘発性試験パラダイムを用い，化合物１のようなアリールアルキルアミン類が２つのかかるパラダイムにおいて有効な抗痙攣薬であることを証明した。第１の２つのモデルは，聴覚原性発作の傾向にあるＤＢＡ／２マウ又を用いた。音（１０９ｄＢのベル音）またはＮＭＤＡ（５６ｍｇ／ｋｇ）の腹腔内（ｉ．ｐ．）投与によって発作を誘発した。痙攣刺激の１５〜３０分前に試験物質を投与した。聴覚原性刺激後１分間，または，ＮＭＤＡ投与後１５分間，間代性発作の数を記録した。化合物１，化合物２ならびに化合物３および化合物４などのいくつかの他のアリールアルキルアミン類は，いずれかの刺激によって誘発された発作を抑制した。例えば，化合物２は，聴覚原性刺激について０．１３ｍｇ／ｋｇ　ｓ．ｃ．のＥＤ５０およびＮＭＤＡ刺激について０．０８３ｍｇ／ｋｇ　ｓ．ｃ．のＥＤ５０を有した。同様に，聴覚原性発作モデルにおける化合物についてのＥＤ５０（０．０８ｍｇ／ｋｇ）は，ＭＫ−８０１についてのＥＤ５０（０．０２ｍｇ／ｋｇ）に近づいた。対照的に，化合物１または化合物２は，ｉ．ｐ．ＮＭＤＡによって誘発されたＣＦ−１マウスにおいて発作を減少させることにおいて５０ｍｇ／ｋｇ　ｓ．ｃ．までの投与量で有効であった。
【０１０６】
実験の第２の独立したシリーズでは，化合物１および化合物４は，各々，１４．３ｍｇ／ｋｇおよび〜１５ｍｇ／ｋｇのＩＣ５０値で腹腔内注射後に反射性癲癇の他の遺伝的に罹病性のマウスモデルにおいて音によって誘発された発作を予防することが見いだされた。これらの化合物は，０．６３μｇ（化合物１）および４．７７μｇ（化合物４）のＩＣ５０値で脳室内（ｉ．ｃ．ｖ．）注射後にフリングス（Ｆｒｉｎｇｓ）マウスにおける聴覚原性発作に対して非常に有効であった。化合物１は，また，４μｇ　ｉ．ｃ．ｖ．の投与量でＣＦ１マウスにおいて最大の電気ショックによって誘発された発作に対して有効であることが判明した。
【０１０７】
反射性癲癇の遺伝的に罹病性のマウスモデル（フリングスマウス）を用いるさらなる研究では，ｉ．ｃ．ｖ．注射によって投与した化合物９，化合物１２および化合物１４は，各々，４．７７μｇ，１２．２μｇおよび１３．９μｇのＩＣ５０値で音誘発性発作を予防した。これらの集合的な発見は，化合物１，化合物２および化合物４などのアリールアルキルアミン類が，癲癇性（聴覚原性）および非癲癇性（化学的痙攣性）発作を予防する際に有効である。活性のこの一般化されたパターンは，アリールアルキルアミン類が発作活性を制御する際に臨床的に有用であることを示す。さらに，発作活性のイン・ビボモデルにおける化合物１，化合物２および特に化合物４の有効性は，これらの化合物が低投与量で非経口投与した場合の治療的に関連した効果を有することができ，脳室中に直接投与した場合に特に有効であることを示す。
【０１０８】
鎮痛活性
鎮痛薬の望まれる特性としては，以下のことが挙げられる：該薬物は，経口または注射可能な経路によって投与することができ，該薬物は，鎮痛活性を示し，該薬物は，認識障害，運動動作の中断，鎮静または異常興奮性，ニューロン空胞形成，心臓血管活性，ＰＣＰ様乱用潜在能力，またはＰＣＰ様精神異常作用性などの副作用が全くないか，または最小の該副作用を有する。
【０１０９】
グルタミン酸およびＮＭＤＡ受容体媒介性応答は，ある種の疼痛知覚における役割を果たす［ディケンソン（Ｄｉｃｋｅｎｓｏｎ），終結のための治療：有効な鎮痛薬としてのＮＭＤＡ受容体拮抗薬（Ａ　ｃｕｒｅ　ｆｏｒ　ｗｉｎｄ　ｕｐ：　ＮＭＤＡ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ　ａｓ　ｐｏｔｅｎｔｉａｌ　ａｎａｌｇｅｓｔｉｃｓ），トレンズ・イン・ファーマコロジカル・サイエンシズ（Ｔｒｅｎｄｓ　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｓｃｉ．）１１：３０２，１９９０］。したがって，化合物１，化合物２，化合物３および化合物４の起こり得る鎮痛効果を実験した。
【０１１０】
実施例１１：身もだえ（ｗｒｉｔｈｉｎｇ）応答試験
実験の第１シリーズでは，身もだえ応答（腹部伸張）を誘発する不快な刺激物（２−フェニル−１，４−ベンゾキノン，ＰＢＱ）を動物に投与した。典型的には，５分間の観察において生じた身もだえの数を記録する。モルヒネなどの古典的な鎮痛薬は，ＰＢＱ誘発性身もだえの数の減少に有効である（４ｍｇ／ｋｇ　ｉ．ｐ．で身もだえ応答の１００％遮断）。非ステロイド系抗炎症薬は，同様に，このモデルにおいて有効である。化合物１（２ｍｇ／ｋｇ），化合物２（２ｍｇ／ｋｇ）および化合物３（１ｍｇ／ｋｇ）は，ＰＢＱの３０分前にｓ．ｃ．またはｉ．ｐ．投与した場合，９５％よりも大きく身もだえ応答を抑制した。これらの結果は，化合物１，化合物２および化合物３が内臓痛を緩和することを示す。
【０１１１】
研究の同様のシリーズでは，化合物１および化合物４は，各々，１０ｍｇ／ｋｇおよび１ｍｇ／ｋｇのＩＣ５０値でｉ．ｐ．注射後にマウスにおいて酢酸誘発性身もだえを阻害することが判明した。
【０１１２】
実施例１２：ホットプレート試験
さらなるアッセイにおいて鎮痛活性について，化合物１を試験した。鎮痛活性のこのモデルでは，ホットプレート（５０℃）上に置く３０分前に試験物質をマウスにｓ．ｃ．投与した。脚をなめたりプレートから跳び退いたりするのに要した時間は，鎮痛活性のインデックスであり，有効な鎮痛薬は，なめたり跳んだりするまでの潜伏時間を増加させる。モルヒネ（５．６ｍｇ／ｋｇ）は，跳ぶまでの潜伏時間を７６５％増加させた。化合物１は，同様に，このアッセイで有効であり，４および３２ｍｇ／ｋｇの投与量で，各々，脚なめまでの潜伏時間を１３６％増加させ，跳ぶまでの潜伏時間を３６０％増加させた。
【０１１３】
ホットプレートアッセイにおける化合物１の鎮痛効果は，反転性グリッドアッセイ（以下を参照）において低下した動作を付随しなかった。これは，ホットプレートから跳び退くまでの潜伏時間の増加が，損なわれた運動能力を単純に反映しないことを示す。一緒に，これらのデータは，化合物１が有意な鎮痛活性を有することを示す。
【０１１４】
実験の後者のシリーズでは，化合物１および化合物４は，クモ膜下内（ｉ．ｔｈ）経路によって投与される場合，ラットにおいて有意な鎮痛活性を有することが示された。これらの実験では，侵害受容刺激として５２℃のホットプレートを用いた。化合物１（０．３〜３ｎｍｏｌ）および化合物４（０．３〜３ｎｍｏｌ）は，投与量依存性および時間依存性抗侵害受容効果を生じた；これらのアリールアルキルアミン類は，有効性および効力に関してモルヒネ（０．３〜３ｎｍｏｌ）と同様であった。他方，ＮＭＤＡ受容体拮抗薬であるＭＫ−８０１は，このアッセイにおいて無効であった（３〜３０ｎｍｏｌ）。
【０１１５】
実施例１３：尾のフリック（ｆｌｉｃｋ）試験
この標準的なアッセイでは，熱的侵害受容刺激は，エンドポイントとして取られた尾をフリックするかまたは引っ込めるまでの潜伏時間を有する５２℃の温水であった。化合物１（０．３〜３ｎｍｏｌ）および化合物４（０．３〜３ｎｍｏｌ）は，ｉ．ｔｈ．投与後の投与量依存性および時間依存性鎮痛効果を生じた。これらのアリールアルキルアミン類は，有効性および効力に関してモルヒネ（０．３〜３ｎｍｏｌ）と同様であった。他方，ＮＭＤＡ受容体拮抗薬であるＭＫ−８０１は，このアッセイでは無効であった（３〜３０ｎｍｏｌ）。
【０１１６】
実施例１４：ホルマリン試験
雄性のスプレイグードーリー種ラットを，左後ろ足中に５０μｌの容量の希ホルマリン（５％）を注射する前に少なくとも１時間，観察チャンバーに慣らした。動物によって示されたフリンチ（ｆｌｉｎｃｈ）の数を計数することによって，該足の背面中にホルマリンをｓ．ｃ．注射した直後に動作応答をモニターした。ホルマリン注射後，少なくとも５０分間，動作をモニターし，初期応答（ホルマリン後０〜１０分）および後期応答（ホルマリン後２０〜５０分）として記録した。ホルマリンの１０分前（予備処理）またはホルマリンの１０分後（後処理）化合物を５μｌの容量でクモ膜下内（ｉ．ｔｈ．）注射した。
【０１１７】
ホルマリンの足底内投与は，フリンチ動作の典型的な二相性応答（一般的に，初期および後期応答として記載されている）を生じた。ホルマリンへの予備処理として投与された化合物１（０．３〜１０ｎｍｏｌ）または化合物４（０．３〜１０ｎｍｏｌ）のクモ膜下内投与は，初期および後期のフリンチ動作を有効に示した。このアリールアルキルアミン類による予備処理の効果は，モルヒネ（１〜０ｎｍｏｌ）またはＭＫ−８０１（１〜３０ｎｍｏｌ）による予備処理についてみられた効果と同様であった。
【０１１８】
ホルマリン後に投与した化合物１（０．３〜１０ｎｍｏｌ　ｉ．ｔｈ．）は後期フリンチの阻害を生じたが，有意さは１０ｎｍｏｌの投与量でのみ達成された。ホルマリン後に投与した化合物４（０．３〜１０ｎｍｏｌ）は，３および１０ｎｍｏｌの投与量で達成された有意さで後期フリンチの有意な阻害を生じた。該アリールアルキルアミン類の活性のこの鎮痛プロフィールはモルヒネ（１〜１０ｎｍｏｌ）のホルマリン後投与について見られたプロフィールと同様である；しかしながら，ＭＫ−８０１（１〜３０ｎｍｏｌ）のホルマリン後投与は，後期フリンチに影響を及ぼさなかった。
【０１１９】
ホットプレート，尾のフリックおよびホルマリンアッセイについて得られた結果は，一緒になって，化合物１および化合物４などのアリールアルキルアミン類が，急性疼痛のいくつかの齧歯動物モデルにおいて有意な鎮痛活性を有することを示す。ホルマリンアッセイは，さらに，アリールアルキルアミン類が慢性疼痛の動物モデルにおいて有効であることを示す。重要なことには，該アリールアルキルアミン類は，ホルマリン刺激後に投与した場合，有意な鎮痛活性を有する。この活性のプロフィールは，該アリールアルキルアミン類をＭＫ−８０１などの標準的なＮＭＤＡ受容体拮抗薬と明確に区別する。
【０１２０】
アリールアルキルアミン類の副作用
ＮＭＤＡ受容体が種々の脳機能において重要な役割を果たすとすれば，この受容体の拮抗薬が典型的にはある種の歓迎されない副作用に関連することが見いだされても驚くことではない。実際，それは，ＮＭＤＡ受容体を標的とする治療の開発に対する主要な障害を提供するこの特性である。競合的および非競合的拮抗薬の両方を特徴付ける主な副作用は，ＰＣＰ様精神異常作用性，運動動作の障害，鎮静または異常興奮性，認識能力の障害，ニューロン空胞形成，または心臓血管効果［ウィレッツ（Ｗｉｌｌｅｔｔｓ）ら，ＮＭＤＡ受容体拮抗薬の行動薬理学（Ｔｈｅｂｅｈａｖｉｏｒａｌ　ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ　ｏｆ　ＮＭＤＡ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ），トレンズ・イン・ファーマコロジカル・サイエンシズ（Ｔｒｅｎｄｓ　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｓｃｉ．）１１：４２３，１９９０；オルニィー（Ｏｌｎｅｙ）ら，フェンシクリジンおよび関連薬物による大脳皮質ニューロンにおいて誘発される病理学的変化（Ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ　ｃｈａｎｇｅｓ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｉｎ　ｃｅｒｅｂｒｏｃｏｒｔｉｃａｌ　ｎｅｕｒｏｎｓ　ｂｙ　ｐｈｅｎｃｙｃｌｉｄｉｎｅ　ａｎｄ　ｒｅｌａｔｅｄ　ｄｒｕｇｓ），サイエンス（Ｓｃｉｅｎｃｅ）２４４：１３６０，１９８９］である。ＮＭＤＡ受容体媒介性応答の阻害に関連する精神異常作用効果は，ＭＫ−８０１結合部位で作用するフェンシクリジン（ＰＣＰ）または「合成ヘロイン（ａｎｇｅｌ　ｄｕｓｔ）」への応答における典型である。認識能の障害は，ＮＭＤＡ受容体が学習および記憶において正常に果たす重要な役割に関連する。
【０１２１】
ＡＭＰＡ受容体拮抗薬の副作用プロフィールに関しては，比較的にあまり知られていない。しかしながら，かかる化合物が運動障害，運動失調および深い鎮静をも誘発することが明らかになってきた。
【０１２２】
運動障害，鎮静および精神異常作用活性を指し示す動物モデルならびに学習および記憶のイン・ビトロおよびイン・ビボモデルにおいて，アリールアルキルアミン類の活性を試験した。
【０１２３】
（ａ）ＰＣＰ様精神異常作用活性
齧歯動物において，ＮＭＤＡ受容体の競合的および非競合的拮抗薬は，活動過剰，頭部ウィービングおよび運動失調によって特徴付けられたＰＣＰ様セロタイプ動作を生じる［ウィレッツ（Ｗｉｌｌｅｔｔｓ）ら，ＮＭＤＡ受容体拮抗薬の行動薬理学（Ｔｈｅ　ｂｅｈａｖｉｏｒａｌ　ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ　ｏｆ　ＮＭＤＡ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ），トレンズ・イン・ファーマコロジカル・サイエンシズ（Ｔｒｅｎｄｓ　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ　Ｓｃｉ．）１１：４２３，１９９０；スネル（Ｓｎｅｌｌ）およびジョンソン（Ｊｏｈｎｓｏｎ），健康および疾患における興奮性アミノ酸（Ｅｘｃｉｔａｔｏｒｙ　Ａｍｉｎｏ　Ａｃｉｄｓ　ｉｎ　Ｈｅａｌｔｈ　ａｎｄ　Ｄｉｓｅａｓｅ），ジョン・ウィリー・アンド・サンズ（Ｊｏｈｎ　Ｗｉｌｅｙ　＆　Ｓｏｎｓ），第２６１頁，１９８８］。本発明者らは，アリールアルキルアミン類がかかる動作を誘発するかを研究した。さらに，本発明者らは，該アリールアルキルアミン類がＰＣＰを生理食塩水と識別するように訓練したラットにおいてＰＣＰの代わりになるか［ウィレッツ（Ｗｉｌｌｅｔｔｓ）ら，ＮＭＤＡ受容体拮抗薬の行動薬理学（Ｔｈｅ　ｂｅｈａｖｉｏｒａｌ　ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ　ｏｆ　ＮＭＤＡ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ），トレンズ・イン・ファーマコロジカル・サイエンシズ（Ｔｒｅｎｄｓ　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｓｃｉ．）１１：４２３，１９９０］，および，該アリールアルキルアミン類がＰＣＰ様ニューロン空胞形成を誘発するか［オルニィ（Ｏｌｎｅｙ）ら，フェンシクリジンおよび関連薬物による大脳皮質ニューロンにおいて誘発される病理学的変化（Ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｎｇｅｓ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｉｎ　ｃｅｒｅｂｒｏｃｏｒｔｉｃａｌ　ｎｅｕｒｏｎｓ　ｂｙ　ｐｈｅｎｃｙｃｌｉｄｉｎｅ　ａｎｄ　ｒｅｌａｔｅｄｄｒｕｇｓ），サイエンス（Ｓｃｉｅｎｃｅ）２４４：１３６０，１９８９］を研究した。
【０１２４】
実施例１５：運動活性
第１のアッセイは，試験物質の末梢（ｓ．ｃ．またはｉ．ｐ．）投与の後の最初の１時間の間，運動活性を単純にモニターする。活性チャンバー中に入れる１５分前にマウスに化合物１を投与した。６０分間，光電管グリッドにおけるブレイクの数を計数することによって定量化した。このアッセイでは，ＭＫ−８０１（０．２５ｍｇ／ｋｇｐ．ｏ．）は，運動活性の２〜３倍の増加を生じる。しかしながら，化合物１は，３２ｍｇ／ｋｇ　ｓ．ｃ．で試験した場合でさえ，活動過剰を誘発せず，実際，それを抑制する傾向にあった。マウスにおいて精製したアリールアルキルアミン類を用いるこの結果は，アゲレノプシス・アペルタ（Ａｇｅｌｅｎｏｐｓｉｓ　ａｐｅｒｔａ）からの完全なアリールアルキルアミン類含有フラクションが静脈内注射される場合にＰＣＰ様動作症候群を誘発しないが，軽い鎮静効果を生じると思われるラットにおいて得られた初期の結果を補足する。
【０１２５】
実施例１６：運動障害
一般化された運動障害についての第１のアッセイでは，反転グリッドアッセイにおいて化合物１を試験した。このアッセイでは，動物を，反転することができる回転式金属棒から吊り下げられたワイヤー中空グリッド上に置く。次いで，該動物の，頂上に昇る能力またはグリッドにぶらさがる能力について，該動物を評価する。重篤な運動障害を有する動物は，グリッドから落ちる。このアッセイは，運動失調，立直り反射の損失，鎮静，または筋肉弛緩により生じる「行動中断（ｂｅｈａｖｉｏｒａｌ　ｄｉｓｒｕｐｔｉｏｎ）」のインデックスを提供する。これらの試験では，３２ｍｇ／ｋｇ　ｓ．ｃ．で投与した化合物１は，グリッドが反転した場合，ＤＢＡ／２マウスの自分自身を直す能力を減少させなかった（ｐ＞０．０５）。化合物２は，同様に，２０ｍｇ／ｋｇ　ｓ．ｃ．の投与量で投与した場合，ＤＢＡ／２マウスにおける運動動作に対する効果を有しなかった（ｐ＞０．０５）。これらの投与量は，ＤＢＡ／２マウスにおける音誘発性発作を予防するために必要とする投与量（前記実施例１０を参照）よりも非常に高かった。
【０１２６】
急性運動障害の第２のアッセイは，ロートロッドアッセイであった。このアッセイでは，フリングス（Ｆｒｉｎｇｓ）およびＣＦ１マウスに試験化合物を注射し，６ｒｐｍの速度で回転する節だらけのロッド上に置いた。該マウスの，長時間，平衡を維持する能力を測定した；３回の試行の各々において１分間，ロートロッド上で平衡を維持することができなかったこれらのマウスは，障害を負っていると考えられた。化合物１は，１６．８ｍｇ／ｋｇ　ｉ．ｐ．のＴＤ５０（試験動物の５０％において運動毒性を生じた投与量）でフリングスマウスにおいて急性運動障害を生じた。この投与量は，フリングスマウスにおける音誘発性発作を予防する投与量（前記実施例１０を参照）と同様である。しかしながら，フリングスマウスにおける化合物１の有効投与量および毒性投与量の間の非常に明らかな分離が，当該化合物をｉ．ｃ．ｖ．投与する場合にある。この場合，化合物の投与量が１．５６μｇ　ｉ．ｃ．ｖ．を超えるまで（０．６３μｇのＥＤ５０の＞２倍），明らかな運動毒性が明らかではなかった。最終的に，ＣＦ１における運動障害は，４μｇのｉ．ｃ．ｖ．投与後に化合物１について示された。
【０１２７】
化合物４，化合物９，化合物１２および化合物１４をフリングスマウスにｉ．ｃ．ｖ．注射によって投与し，急性運動障害を測定した。化合物４，９，１２および１４についてのＴＤ５０は，各々，８〜１６μｇ，１４．８μｇ，３０．２μｇおよび３０．８μｇであった。これらのＴＤ５０値は，抗痙攣効力についての有効なＩＣ５０値（前記実施例１０を参照）よりも２〜３倍高かった；有効投与量および毒性投与量の間の明確な分離が示された。
【０１２８】
実施例１７：ＰＣＰ識別
このアッセイでは，食物促進のためにレバーを押すように訓練したラットは，該ラットのカゴにおける２本のレバーのうち正しい方を選択しなければならない。該ラットが正しいレバーを選択するために有する唯一の刺激は，該ラットにＰＣＰまたは賦形剤を注射したかを検出する能力である。約２カ月の訓練の後，ラットは，ＰＣＰを賦形剤注射と識別することに対して非常に良好になり，次いで，該ラットがＰＣＰとして識別するかを判断するために他の薬物を用いて試験することができる。この方法で試験する場合，ＰＣＰ様中毒を生じることが知られている他の薬物は，ＰＣＰの代わりになる。これらの薬物としては，ケタミンなどの種々のＰＣＰ類似体および非競合的ＮＭＤＡ受容体拮抗薬であるＭＫ−８０１が挙げられる。
【０１２９】
化合物１（１〜３０ｍｇ／ｋｇ　ｉ．ｐ．）は，ＰＣＰの代わりにならず，かくして，ＰＣＰ様識別刺激効果が完全に欠けている。３０ｍｇ／ｋｇ　ｉ．ｐ．で，試験した動物７匹のうち１匹だけがいずれのレバーについても全く反応しなかった。かくして，化合物１の動作的に有効な投与量範囲が評価されたことが明らかである。試験化合物のラットにおけるＰＣＰ様効果を生じる能力がそれらのヒトにおけるＰＣＰ様精神異常作用活性および乱用傾向性を生じる能力の予言となると思われるので，これらの結果は，化合物１などのアリールアルキルアミン類がヒトにおけるかかる有害な副作用を欠くであろうということを強く示す。
【０１３０】
実施例１８：ニューロン空胞形成
ＰＣＰおよびＭＫ−８０１などの化合物のラットへの投与は，ニューロン空胞と称される神経毒性効果を生じる。かかる化合物の単回投与の後，特定の中枢神経，特に，帯状皮質およびレトロスプレーニアル皮質における中枢神経に空胞が見られる。かかる空胞形成は，１００ｍｇ／ｋｇ　ｉ．ｐ．の単回の高投与量で化合物１で処理されたラットにおいては，存在しなかった。
【０１３１】
運動活性，運動障害，ＰＣＰ識別およびニューロン空胞形成に対する結果は，一緒になって，アリールアルキルアミン類が，ヒトにおいてＰＣＰ様副作用が全くないであろうということを強く示す。
【０１３２】
（ｂ）認識障害
記憶および学習におけるＮＭＤＡ受容体の役割を仮定するための主要な理由の１つは，ラットの海馬において長期薬効増強作用（ＬＴＰ）についての細胞研究から導く。ＬＴＰは，短くしかも強いシナプス刺激によって生じたシナプス応答の大きさの長期永続性増加である。この現象の発見以来，脊椎動物脳における学習の卓越した細胞モデルになった［テイラー（Ｔｅｙｌｅｒ）およびディスセンナ（Ｄｉｓｃｅｎｎａ），長期薬効増強作用（Ｌｏｎｇ−ｔｅｒｍ　ｐｏｔｅｎｔｉａｔｉｏｎ），Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．１０：１３１，１９８７］。シェーファー側副枝によって形成されたシナプスでのＣＡ１錐体細胞への伝達は，ＮＭＤＡおよびＡＭＰＡ受容体によって媒介される。短い強直刺激後，個体群スパイクの大きさ（シナプス伝達の測定）は，非常に増加し，数時間そのままである。ＮＭＤＡ受容体の全ての公知の競合的および非競合的拮抗薬がラットの海馬においてＬＴＰを遮断するが，一方，非ＮＭＤＡ受容体の拮抗薬が効果を有しないことが示された［コリングリッジ（Ｃｏｌｌｉｎｇｒｉｄｇｅ）およびデイヴィス（Ｄａｖｉｓ），ザ・ＮＭＤＡ・レセプター（Ｔｈｅ　ＮＭＤＡ　Ｒｅｃｅｐｔｏｒ），ＩＲＬプレス，第１２３頁，１９８９］。これは，記憶および学習におけるＮＭＤＡ受容体の役割を支持する。
【０１３３】
実施例１９：ＬＴＰアッセイ
ラット海馬のスライスにおけるＬＴＰに対する効果について，選択されたアリールアルキルアミン類および文献標準試料の効果を試験した。予想されるように，全ての慣用の競合的ＮＭＤＡ受容体拮抗薬（ＡＰ５およびＡＰ７）および非競合的ＮＭＤＡ受容体拮抗薬（ＭＫ−８０１およびイフェンプロジル）は，海馬におけるＬＴＰの誘発を阻害した。毎回１秒間，１００Ｈｚの，５００ミリ秒ごとに分けた３回試行からなる強直誘発性刺激を導出する前に，試験化合物をラット海馬のスライスに３０〜６０分間注いだ。持続性筋強直後さらに１５分間，応答の大きさをモニターした。強直誘発性刺激は，シナプス応答の大きさにおいて，平均９５％の増加を生じた。ＬＴＰの誘発は，競合的ＮＭＤＡ受容体拮抗薬（ＡＰ５，ＡＰ７）または非競合的ＮＭＤＡ受容体拮抗薬（ＭＫ−８０１，イフェンプロジル）によって有意に（ｐ＜０．０５）遮断された。全く驚くべきことに，対照応答の阻害を生じた高濃度（１００〜３００μＭ）で用いた場合でさえ，試験したアリールアルキルアミン類（化合物１，化合物２，化合物３など）のうちＬＴＰの誘発を遮断したもの（ｐ＞０．０５）は全くなかった。
【０１３４】
これらの結果は，アリールアルキルアミン類のもう１つの固有かつ重要な特徴を目立たせる。アリールアルキルアミン類は，ＬＴＰの誘発を遮断しないＮＭＤＡ受容体の選択的かつ有効な拮抗薬であることを示す化合物の第１の，および，現在では唯一の類である。これは，同様に，アリールアルキルアミン類の作用の新規メカニズムおよび部位を反映し，ＮＭＤＡ受容体上の新規部位を標的とする薬物が，同様に，ＬＴＰに対する効果を欠いていることを示す。ＬＴＰは，哺乳動物のＣＮＳにおける学習および記憶についての主要な細胞モデルであるので，それは，さらに，かかる薬物が認識動作に対する有害な効果を欠いているであろうということを示す。
【０１３５】
実施例２０：学習試験
イン・ビボ学習パラダイムにおける，より有効な合成アリールアルキルアミン類似体のうちの１つである化合物３を用いる予備実験は，これらの薬物が認識動作に対する効果を欠いていることを示す。この試験では，食物報酬のためにＴ迷路において方向転換を互い違いにするようにラットを訓練した。ＭＫ−８０１を比較のために含んだ。試験の１５分前に試験化合物をｉ．ｐ．投与した。対照動物は，この時の正しい選択約８０％を行った。ＭＫ−８０１の増加した投与量は，正しい選択の数を徐々に減少させ，この行動の衰退は，活動過剰を伴った。対照的に，化合物３は，該動物の正しい選択を行う能力を害しなかった（ｐ＞０．０５）。試験した最高投与量で，化合物３は，運動活性の多少の減少，正確には，ＭＫ−８０１を用いて観察された反対の効果を生じた。
【０１３６】
ＭＫ−８０１は，運動活性の増加と同時に学習動作を減少させたが，齧歯動物および霊長類において異なるパラダイムを用いる他の研究は，学習および運動に対する効果の間の明確な分離を示した。かくして，競合的ＮＭＤＡ受容体拮抗薬および非競合的ＮＭＤＡ受容体拮抗薬は，共に，運動行動の如何なる明白な変化をも生じない投与量で学習を害する。これは，慣用のＮＭＤＡ受容体拮抗薬が他の副作用とは無関係に学習を害することを示す。Ｔ迷路アッセイの結果は，化合物３および他のアリールアルキルアミン類が，運動活性の多少の減少を生じる投与量でさえ，学習を害しないことを示す。
【０１３７】
１つのさらなる観察は，これらの学習試験から現れる。試験の２日目の動物の最初の応答は，ランダムであり，したがって，前日の試験の最後の応答に依存しなかった。かくして，対照動物は，この時の最初の選択約５０％を正しく行った。ＭＫ−８０１は，この最初の選択に対する効果を有しなかった。しかしながら，前日に化合物３を投与した動物は，非常にしばしば最初の選択を正しく行った。対照動物とは異なって，化合物３で処理した動物は，それらが前日の最後の選択を記憶していたかのように行動した。
【０１３８】
実験の第２のシリーズでは，モリスウォーター迷路タスク（Ｍｏｒｒｉｓ　ｗａｔｅｒ　ｍａｚｅ　ｔａｓｋ）における学習に対する化合物４の効果を評価した。この試験では，環状のスチール製タンク中の固定された位置に隠されたプラットホームを置き，水面下２ｃｍに沈めた。各ラットに，１０分間の試行間隔で１日当たり試行３回を５日間行った。３つの予め決定した開始位置のうちの１つで，鼻をタンクの壁に向けて水中にラットを置くことによって試行を開始した。開始位置の順序は，毎日変えた。学習を，プラットホームまで泳ぐのに必要な時間の減少として測定した。動物が試行の開始後６０秒以内にプラットホームの位置を捜し当てられなかった場合，該ラットを該プラットホームに手でガイドした。該動物は，タンクから離れる前に１０秒間，プラットホーム上にとどまった。５日目の最後の訓練試行の１０分後，該動物にプローブ試験を行った。この１試行タスクのためにプラットホームを取り除き，動物を６０秒間泳がせて，プラットホーム位置についての空間的偏向を評価した。このタスクから２つの測定値を記録した：プラットホームがあった領域を最初に横切るまでの潜伏時間，および横切る合計回数。各ラットに化合物４を合計５回注射した。実験の最初のシリーズでは，化合物４を毎日１０ｍｇ／ｋｇ　ｉ．ｐ．で５日間投与した。この処理方針は，学習を害した；しかしながら，これらの動物は，化合物４の反復投与により，有意な体重損失および異常な行動サイン（「震え」，運動障害，泳ぎの困難さ）を体験した。次の研究では，訓練の最初に４日間，６匹の動物に１ｍｇ／ｋｇ　ｉ．ｐ．を投与し，一方，２匹の動物には，この期間，５ｍｇ／ｋｇ　ｉ．ｐ．を投与した。訓練の最終日に，両方のグループに１０ｍｇ／ｋｇを投与した。１ｍｇ／ｋｇの動物および５ｍｇ／ｋｇの動物は，共に，隠されたプラットホームの位置を学習する際の障害を示さず，最後の１０ｍｇ／ｋｇ投与は，動物の既に学習したタスクを行う能力において障害を生じなかった。
【０１３９】
これらの学習タスクの結果は，有望である。それらは，アリールアルキルアミン類が，他のＮＭＤＡ受容体拮抗薬に特徴的に備わっている学習および記憶欠損を欠いていることを示す。実際，アリールアルキルアミン類がヌートロピックでさえあることを示す（記憶エンハンサー）。
【０１４０】
（ｃ）心臓血管効果
ある種のアリールアルキルアミン類によるイン・ビボ研究は，これらの化合物の，特に高投与量での，血圧降下効果を示した。これらの結果に基づいて，心臓血管機能に対するアリールアルキルアミン類の効果の系統的研究を行った。
【０１４１】
実施例２１：Ｃａ２＋チャネル阻害
本発明者らは，アリールアルキルアミン類のいくつかが電位感受性Ｃａ２＋チャネル，特に，ジヒドロピリジンによる阻害に対して感受性のあるもの（Ｌ型チャネル）の全く有効な阻害薬であることを見いだした。血管の平滑筋に対するかかる効果は，血管を膨張し，血圧の低下を生じ，かくして，血圧降下を生じることが予想される。
【０１４２】
小脳顆粒細胞およびラット大動脈平滑筋細胞系Ａ７ｒ５細胞において，アリールアルキルアミン類のジヒドロピリジン感受性Ｃａ２＋チャネルを阻害する能力を試験した。化合物２は，小脳顆粒細胞において，ＮＭＤＡに対する応答を遮断するのに必要な濃度よりも１００倍高い濃度で［Ｃａ２＋］ｉの脱分極誘発性増加を阻害した（各々，ＩＣ５０値は２４μＭおよび１６１μＭ）。全体的に，本発明者らは，ＮＭＤＡ受容体に対する有効性とは相互に関係のない電位感受性Ｃａ２＋チャネルに対する広範囲の有効性を観察した。これは，電位感受性Ｃａ２＋チャネルに対して低い有効性を有する非常に有効性のあるＮＭＤＡ拮抗薬である化合物の研究に導くであろうということを示す。実際，化合物１（小脳顆粒細胞中におけるＮＭＤＡ受容体媒介性応答に対して１０２ｎＭのＩＣ５０を有する）は，小脳顆粒細胞における電位感受性Ｃａ２＋チャネルの比較的乏しい阻害薬であり（ＩＣ５０＝２５７μＭ，Ａ７ｒ５細胞において電位感受性Ｃａ２＋流入に対する効果を実質的には有しない（ＩＣ５０＝８０８μＭ）。
【０１４３】
しかしながら，アリールアルキルアミン類は，電位感受性Ｃａ２＋チャネルの無差別の遮断薬ではない。それらは，例えば，小脳プルキンエ細胞における電位感受性Ｃａ２＋チャネル（Ｐ型チャネル）または神経伝達物質放出に関係すると考えられるこれらのチャネル（Ｎ−チャネル）に影響を及ぼさない。電位感受性Ｃａ２＋チャネルを遮断するアリールアルキルアミン類は，特にＬ型Ｃａ２＋チャネルを標的とすると思われる。さらにまた，前記のとおり，この効果には，高度の構造的特異性がある。例えば，あるアリールアルキルアミンは，Ｌ型チャネルを通るＣａ２＋流入を遮断することにおいて別のアリールアルキルアミンよりも５７倍有効である。ここで，化合物間の唯一の構造的差異がヒドロキシル基の存在または不在である。
【０１４４】
実施例２２：イン・ビボ心臓血管研究
アリールアルキルアミン類である化合物１および化合物２は，イン・ビボ発作モデルにおいて有効な投与量（１０〜３０ｍｇ／ｋｇ　ｓ．ｃ．）で麻酔したラットにおける平均動脈血圧（ＭＡＢＰ）の適度な低下（２０〜４０ｍｍＨｇ）を生じる。より詳細には，化合物４の血圧降下効果を評価した。化合物４は，１０ｍｇ／ｋｇ　ｉ．ｐ．の投与量で投与した場合に約９０〜１２０分間持続した平均動脈血圧の顕著な低下（４０ｍｍＨｇ）を誘発した；それは，ラットのこの同一のグループにおいて，化合物４が中大脳動脈閉塞の縫合モデル（前記実施例８を参照）において有意な神経保護を提供したことであった。化合物４が巣状虚血性発作のローズ・ベンガル・フォト血栓モデル（Ｒｏｓｅ　Ｂｅｎｇａｌ　ｐｈｏｔｏｔｈｒｏｍｂｏｔｉｃ　ｍｏｄｅｌ）において（前記実施例８を参照）神経保護活性を示したラット研究において同様の結果が得られた。脳脊髄を穿刺したラット標本を用いるさらなる研究は，化合物４の血圧降下活性が，末梢的に媒介された効果であることを強く示す。化合物４によって生じた血圧降下および徐脈は，アトロピンを用いて予備処理されたラットにおいて維持され，これらの効果がコリン作動性メカニズムによって媒介されないことを示す。同様に，化合物４は，化学的交感神経切除したラット（神経節遮断薬で予備処理された）において血圧降下および徐脈を誘発し，これらの効果が交感神経系を介して媒介されないことを示す。
【０１４５】
これらの発見に基づいて，化学的試みが，（１）神経保護のためにより低い投与量が必要とされるために，脳中へのアリールアルキルアミンの摂取を増強し，（２）電位感受性Ｃａ２＋チャネルよりも受容体作動性Ｃａ２＋チャネルについてのアリールアルキルアミン類の選択性（有効性比）を増大させることによって，心臓血管副作用を最小にするであろうということが予想される。
【０１４６】
単純化された合成アリールアルキルアミン類の化学的性質および生物学的活性
単純化されたアリールアルキルアミン類は，以下の構造式からなる：
【化３３】
2004002437.tif 000019
［式中，Ｘは，各々，独立して，１個以上のＨ，Ｂｒ，Ｃｌ，Ｆ，低級アルキル，および／またはＯＣＨ３であってよく，Ｒ１は，各々，独立して，Ｈ，低級アルキル，ＯＨ，Ｏ−アルキルまたはＯ−アシルであってよく，Ｒ２は，各々，独立して，Ｈまたは低級アルキルであってよい］；または
【化３４】
2004002437.tif 000020
［式中，Ｘは，各々，独立して，１個以上のＨ，Ｂｒ，Ｃｌ，Ｆ，低級アルキル，および／またはＯＣＨ３であってよく，Ｒ１は，各々，独立して，Ｈ，低級アルキル，ＯＨ，Ｏ−アルキルまたはＯ−アシルであってよく，Ｒ２は，各々，独立して，Ｈまたは低級アルキルであってよい］；または
【化３５】
2004002437.tif 000021
［式中，ｎ＝１〜６，Ｘは，各々，独立して，１個以上のＨ，Ｂｒ，Ｃｌ，Ｆ，低級アルキル，および／またはＯＣＨ３であってよく，Ｒ１は，Ｈ，低級アルキル，ＯＨ，Ｏ−アルキル，またはＯ−アシルであってよく，Ｒ２は，Ｈまたは低級アルキルであってよい］；または
【化３６】
2004002437.tif 000022
［式中，ｎ＝１〜６，Ｘは，各々，独立して，１個以上のＨ，Ｂｒ，Ｃｌ，Ｆ，低級アルキル，および／またはＯＣＨ３であってよく，Ｒ１は，Ｈ，低級アルキル，ＯＨ，Ｏ−アルキル，またはＯ−アシルであってよく，Ｒ２は，各々，独立して，Ｈまたは低級アルキルであってよい］。
【０１４７】
これらの化合物は，より複雑な前記化合物１，２および３の代わりに本発明において潜在的に有用であるかもしれない。
【０１４８】
かかる単純化アリールアルキルアミン類の例としては，限定されないが，以下の構造式を有する化合物１９〜５３が挙げられる。
【０１４９】
【化３７】
2004002437.tif 000023
【化３８】
2004002437.tif 000024
【化３９】
2004002437.tif 000025
【化４０】
2004002437.tif 000026
【化４１】
2004002437.tif 000027
【化４２】
2004002437.tif 000028
【化４３】
2004002437.tif 000029
【０１５０】
実施例２３：化合物１９および類似体の生物活性
化合物１９〜５３は，培養物中で増殖したラット小脳顆粒細胞中の［Ｃａ２＋］ｉのＮＭＤＡ誘発性増加に対して高い効力を有した。ＮＭＤＡに対する応答に対する化合物１９の阻害効果は，非競合的であった。化合物１９〜３７は，ラット海馬および皮質組織から調製した膜における［３Ｈ］ＭＫ−８０１結合を阻害した（第１表）。
【０１５１】
化合物１９は，以下のさらなる生物活性を有した：ｉ．ｐ．投与（ＥＤ５０＝２６．４ｍｇ／ｋｇおよびＴＤ５０（ロートロッド）＝４３．８ｍｇ／ｋｇ）後のマウスにおける最大電気ショック誘発性発作に対する有意な（対照と比較してｐ＜０．０５）抗痙攣活性；経口（ｐ．ｏ．）投与（ＥＤ５０＝３５ｍｇ／ｋｇ）後のマウスにおける最大電気ショック誘発性発作に対する，または，３０ｍｇ／ｋｇでの運動障害についての有意な抗痙攣活性；１６ｍｇ／ｋｇ　ｉ．ｐ．でのホットプレートおよびＰＢＱ誘発性身もだえアッセイにおける有意な鎮静活性：ラットにおける３０ｍｇ／ｋｇ　ｉ．ｐ．でのＰＣＰ様常同症行動（異常興奮性および頭部ウィービング）がないこと；３０ｍｇ／ｋｇ　ｉ．ｐ．の行動活性投与量までの投与量でのＰＣＰ識別アッセイにおけるＰＣＰへの一般化がないこと。化合物１９は，ラット小脳顆粒細胞におけるＫＣｌの脱分極濃度（ＩＣ５０＝１０．２μＭ）によって誘発される［Ｃａ２＋］ｉ，の増加を拮抗することにおいて有意に有効でなく，１００ｍｇ／ｋｇまでの投与量でラットにおいてｓ．ｃ．投与した場合，血圧に対する効果を有しなかった。しかしながら，実施例１９は，１００μＭで試験した場合，ラット海馬スライスにおけるＬＴＰの誘発を遮断した。
【０１５２】
化合物２０は，以下のさらなる生物活性を有した：ｉ．ｐ．投与後のマウスにおける最大電気ショック誘発性発作に対する有意な抗痙攣活性（ＥＤ５０＝２０．１ｍｇ／ｋｇおよびＴＤ５０（ロートロッド）＝２０．６ｍｇ／ｋｇ）；３０ｍｇ／ｋｇで運動障害を伴うが，３０ｍｇ／ｋｇまでの投与量での経口（ｐ．ｏ．）投与後のマウスにおける最大電気ショック誘発性発作に対する有意な抗痙攣活性がないこと；ｉ．ｐ．投与（ＥＤ５０＝２．１ｍｇ／ｋｇおよびＴＤ５０＝１９．９ｍｇ／ｋｇ）および経口投与（ＥＤ５０＝９．７ｍｇ／ｋｇおよびＴＤ５０＝２１．８／ｍｇ／ｋｇ）後の反射性癲癇の一般的に罹病性のマウスモデル（フリングスマウス）における音誘発性発作に対する有意な抗痙攣活性；一時的巣状虚血症のラットモデルにおける有意な神経保護活性（中大脳動脈閉塞の直後に１回目の投与および６時間後に２回目の投与をする１ｍｇ／ｋｇｉ．ｐ．の２回投与の後の梗塞量の５１％減少；中大脳動脈閉塞の２時間後（すなわち，再灌流時）に１回目の投与および６時間後に２回目の投与をする１ｍｇ／ｋｇ　ｉ．ｐ．の２回投与の後の梗塞量の４３％減少）；１０ｍｇ／ｋｇ　ｉ．ｐ．の行動的に活性な投与量までの投与量でＰＣＰ識別アッセイにおいてＰＣＰへの一般化がないこと；１０および３０ｍｇ／ｋｇ　ｉ．ｐ．の投与量で投与した場合のニューロン空胞形成がないこと；１５μｍｏｌ／ｋｇ　ｉ．ｖ．または１０ｍｇ／ｋｇ　ｉ．ｐ．までの投与量での有意な心臓血管活性がないこと。
【０１５３】
化合物２１は，以下のさらなる生物活性を有した：ｉ．ｐ．投与（ＥＤ５０＝３．４１ｍｇ／ｋｇおよびＴＤ５０（振動）＝１５．３ｍｇ／ｋｇ）後の反射性癲癇の一般的な罹病性のマウスモデル（フリングスマウス）における音誘発性発作に対する有意な抗痙攣活性。
【０１５４】
化合物２２は，以下のさらなる生物活性を有した：ｉ．ｐ．投与（ＥＤ５０＝４．９０ｍｇ／ｋｇおよびＴＤ５０（反転グリッド）＝２６．８ｍｇ／ｋｇ）および経口投与（ＥＤ５０＝５．１ｍｇ／ｋｇおよびＬＤ５０＝１８．３ｍｇ／ｋｇ）後の反射性癲癇の一般的な罹病性のマウスモデル（フリングスマウス）における音誘発性発作に対する有意な抗痙攣活性；１５μｍｏｌ／ｋｇ（４．４７ｍｇ／ｋｇ）ｉ．ｖ．以下の投与量での有意な心臓血管活性がないこと。
【０１５５】
これらの単純化合成アリールアルキルアミン類を用いて得られた結果は，一緒になって，かかる単純化分子が，化合物１，２および３と同様に，受容体作動性Ｃａ２＋チャネル上のアリールアルキルアミン結合部位と特異的には相互に作用し合わないことを示す。特に，化合物１９〜５３は，ＮＭＤＡ受容体−イオノフォア複合体の機能を拮抗するものよりも約１〜５０倍の範囲の濃度で［３Ｈ］ＭＫ−８０１によって標識された部位に結合する。しかしながら，治療薬与量の化合物１９〜５３がＰＣＰ様常同症行動を生じないか，薬物識別アッセイにおいてＰＣＰを置換しないか，またはニューロン空胞形成を誘発しないという事実は，かかる化合物が，神経障害および神経病についてのリード化合物または薬物候補として有用であるということを示す。［３Ｈ］ＭＫ−８０１によって標識された部位に対して低い親和性（ＭＫ−８０１と比較して）で結合する化合物が，治療的利用能を有し，ＭＫ−８０１自体などの高親和性拮抗薬によって有されるものよりも優れた副作用プロフィールを有する［ロガヴスキー（Ｒｏｇａｗｓｋｉ），興奮性アミノ酸拮抗薬の治療的潜在性：チャネル遮断薬および２，３−ベンゾジアゼピン（Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ　ｐｏｔｅｎｔｉａｌ　ｏｆ　ｅｘｃｉｔａｔｏｒｙ　ａｍｉｎｏ　ａｃｉｄ　ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ：　ｃｈａｎｎｅｌ　ｂｌｏｃｋｅｒｓ　ａｎｄ　２，３−ｂｅｎｚｏｄｉａｚｅｐｉｎｅｓ），トレンズ・イン・ファーマコロジカル・サイエンシズ（Ｔｒｅｎｄｓ　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｓｃｉ．）１４：３２５，１９９３］。［３Ｈ］ＭＫ−８０１によって標識された部位に対する化合物１９〜５３の低い親和性（ＭＫ−８０１と比較して）により，化合物１９〜５３は，低い親和性の非競合的拮抗薬のこの一般的なクラスに入れられる。
【０１５６】
受容体作動性カルシウムチャネル上の新規調節的部位の同定
前記定義のとおり治療学的に有用な特性を有するアリールアルキルアミン類を同定すると，ＮＭＤＡ，ＡＭＰＡおよびニコチン性コリン作動性受容体−イオノフォア複合体内に存在するものなどの受容体作動性Ｃａ２＋チャネル上の重要なアリールアルキルアミン結合部位で作用する化合物を同定することができる。
【０１５７】
好適な試験の例は，以下のとおりである：
実施例２４：ラット皮質または小脳における放射リガンド結合
以下のアッセイを高処理量アッセイとして利用して，産生物ライブラリー（例えば，主要な製薬会社での天然産生物ライブラリーおよび化合物ファイル）をスクリーニングすることができ，この固有のアリールアルキルアミン部位で活性を有する化合物の新しいクラスを同定することができる。次いで，これらの新しいクラスの化合物は，受容体作動性Ｃａ２＋チャネル上のアリールアルキルアミン結合部位を標識とする薬物開発プログラムのために化学的なリード構造として利用される。このアッセイによって同定された化合物は，神経障害または神経病の治療への新しい治療的アプローチを提供する。かかる化合物の例としては，前記の一般的な化学式において与えられるものが挙げられる。慣用の実験を行って，所望の活性を有するこれらの化合物を同定することができる。
【０１５８】
ラット脳膜は，以下のように変更して，ウイリアムズ（Ｗｉｌｌｉａｍｓ）らの方法［［３Ｈ］ＭＫ−８０１のＮＭＤＡ受容体への結合に対するポリアミンの効果：ポリアミン認識部位の存在についての薬理学的証拠（Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｐｏｌｙａｍｉｎｅｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｂｉｎｄｉｎｇ　ｏｆ［３Ｈ］ＭＫ−８０１　ｔｏ　ｔｈｅ　ＮＭＤＡ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ：Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌｅｖｉｄｅｎｃｅ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｅｘｉｓｔｅｎｃｅ　ｏｆ　ａ　ｐｏｌｙａｍｉｎｅ　ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ　ｓｉｔｅ），モレキュラー・ファーマコロジー（Ｍｏｌｅｃ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．）３６：５７５，１９８９］に従って調製される：体重１００〜２００ｇの雄性スプレーグ−ドーリー種ラット［ハーラン・ラボラトリーズ（Ｈａｒｌａｎ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）］を断頭によって殺す。ラット２０匹からの皮質または小脳を浄化し，解剖する。得られた脳組織を，５ｍＭ　Ｋ−ＥＤＴＡ（ｐＨ７．０）を含有する０．３２Ｍシュークロース３００ｍｌ中，最も低いセッティングで，ポリトロンホモジナイザーを用いて４℃でホモジナイズする。ホモジナートを１，０００×ｇで１０分間遠心分離し，上清を除去し，３０，０００×ｇで３０分間遠心分離する。得られたペレットを５ｍＭ　Ｋ−ＥＤＴＡ（ｐＨ７．０）２５０ｍｌ中に再懸濁させ，氷上で１５分間撹拌し，次いで，３０，０００×ｇで３０分間遠心分離する。ペレットを５ｍＭ　Ｋ−ＥＤＴＡ（ｐＨ７．０）３００ｍｌに再懸濁し，３２℃で３０分間インキュベートする。次いで，該懸濁液を１００，０００×ｇで３０分間遠心分離する。膜を，５ｍＭ　Ｋ−ＥＤＴＡ（ｐＨ７．０）５００ｍｌ中に再懸濁させることによって洗浄し，３２℃で３０分間インキュベートし，１００，０００×ｇで３０分間遠心分離する。３０分間のインキュベーションを含む洗浄工程を繰り返す。最終ペレットを５ｍＭ　Ｋ−ＥＤＴＡ（ｐＨ７．０）６０ｍｌに再懸濁させ，−８０℃でアリコートで貯蔵する。このアッセイにおいて利用した広範囲な洗浄工程は，膜標本中に存在するグルタミン酸およびグリシン（ＮＭＤＡ受容体−イオノフォア複合体での共作動薬）の濃度を最小にする試みにおいて設計された。
【０１５９】
［３Ｈ］アリールアルキルアミンを用いる結合アッセイを行うために，ＳＰＭ［シナプスプラズマ膜（Ｓｙｎａｐｔｉｃ　Ｐｌａｓｍａ　Ｍｅｍｂｒａｎｅｓ）］のアリコートを解凍し，３０ｍＭ　ＥＰＰＳ／１ｍＭ　Ｋ−ＥＤＴＡ（ｐＨ７．０）３０ｍｌに再懸濁させ，１００，０００×ｇで３０分間遠心分離した。ＳＰＭを緩衝液Ａ（３０ｍＭ　ＥＰＰＳ／１　ｍＭ　Ｋ−ＥＤＴＡ，ｐＨ７．０）中に再懸濁する。この反応混合物に［３Ｈ］アリールアルキルアミンを添加する。結合アッセイは，ポリエチレン試験管中で行われる。最終インキュベーション容量は，５００μｌである。非特異的結合は，１００μＭ非放射性アリールアルキルアミンの存在下で測定される。二重試料を０℃で１時間インキュベートする。アッセイは，氷冷緩衝液Ａ（３ｍｌ）の添加，次いで，０．３３％ポリエチレンイミン（ＰＥＩ）中に予備浸漬されたガラス繊維フィルター［シュライヒャー・アンド・シュール（Ｓｃｈｌｅｉｃｈｅｒ　＆　Ｓｃｈｕｅｌｌ）Ｎｏ．３０］上での濾過によって終わらせる。該フィルターを別の緩衝液Ａ（３ｍｌ）で３回洗浄し，３Ｈについて３５〜４０％の効率でシンチレーションカウンティングによって，放射能を測定する。
【０１６０】
前記アッセイを確認するために，以下の実験も行われる：
（ａ）予備浸漬されたガラス繊維フィルターを介して種々の濃度の［３Ｈ］アリールアルキルアミンを含有する緩衝液Ａ（５００μｌ）を通すことによって，［３Ｈ］アリールアルキルアミンのフィルターへの非特異的結合の量を測定する。該フィルターを別の緩衝液Ａ（３ｍｌ）で４回洗浄し，３Ｈについて３５〜４０％の効率でシンチレーションカウンティングすることによって，フィルターに結合した放射能を測定する。０．３３％ＰＥＩで予備処理されないフィルターでは，３Ｈ−リガンドの８７％がフィルターに結合したことが判明した。０．３３％ＰＥＩによる予備浸漬は，非特異的に結合を添加した全リガンドの０．５〜１．０％に減少させる。
【０１６１】
（ｂ）緩衝液ＡにＳＰＭを再懸濁することによって飽和曲線を作成する。該アッセイ緩衝液（５００μｌ）は，タンパク６０μｇを含有する。［３Ｈ］アリールアルキルアミンを，ハーフーログ・ユニット（ｈａｌｆ−ｌｏｇ　ｕｎｉｔ）で１．０ｎＭ〜４００μＭの範囲で用いる。該データから飽和曲線を作成し，スキャッチャード分析法［スキャッチャード（Ｓｃａｔｃｈａｒｄ），小さな分子およびイオンについてのタンパクの吸引（Ｔｈｅ　ａｔｔｒａｃｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ｐｒｏｔｅｉｎｓ　ｆｏｒ　ｓｍａｌｌ　ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ　ａｎｄ　ｉｏｎｓ），アナルス・オブ・ニューヨーク・アカデミー・オブ・サイエンシズ（Ａｎｎ．Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．）５１：６６０，１９４９］によって見かけのＫＤ値およびＢｍａｘ値を測定した。ヒル・プロット［ヒル（Ｈｉｌｌ），興奮モードに対する理論を用いる，電流の作用下，筋肉および神経におけるイオン濃度の変化の新しい数学的処理（Ａｎｅｗ　ｍａｔｈｅｍａｔｉｃａｌ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｏｆ　ｃｈａｍｇｅｓ　ｏｆ　ｉｏｎｉｃ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ　ｉｎ　ｍｕｓｃｌｅａｎｄ　ｎｅｒｖｅ　ｕｎｄｅｒ　ｔｈｅ　ａｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｅｌｅｃｔｒｉｃ　ｃｕｒｒｅｎｔｓ，ｗｉｔｈ　ａ　ｔｈｅｏｒｙ　ｔｏ　ｔｈｅｉｒｍｏｄｅ　ｏｆ　ｅｘｃｉｔａｔｉｏｎ），ジャーナル・オブ・フィジオロジー（Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．）４０：１９０，１９１０］の作成によって，［３Ｈ］アリールアルキルアミンの結合の協同性を測定する。
【０１６２】
（ｃ）緩衝液ＡにＳＰＭを再懸濁させることによって，結合のタンパク（受容体）濃度への依存性を測定する。該アッセイ緩衝液（５００μｌ）は，そのＫＤ値と等しい濃度の［３Ｈ］アリールアルキルアミンおよび増加する濃度のタンパクを含有する。［３Ｈ］アリールアルキルアミンの特異的結合は，存在するタンパク（受容体）の量と正比例すべきである。
【０１６３】
（ｄ）緩衝液ＡにＳＰＭを再懸濁することによって，リガンドー受容体結合のタイムコースを測定する。該アッセイ緩衝液（５００μＭ）は，そのＫＤ値と等しい濃度の［３Ｈ］アリールアルキルアミンおよびタンパク１００μｇを含有する。二重試料を，０℃で，変化する時間，インキュベートする；平衡に達した時を測定し，全ての次のアッセイで，この時点を慣例的に用いる。
【０１６４】
（ｅ）競合実験によって，結合部位の薬理を分析することができる。かかる実験では，［３Ｈ］アリールアルキルアミンの濃度およびタンパクの量は，一定に維持されるが，一方，試験（競合）薬物の濃度は，変えられる。このアッセイにより，競合薬についてのＩＣ５０および見かけのＫＤが測定される［チェン（Ｃｈｅｎｇ）およびプルソフ（Ｐｒｕｓｏｆｆ），酵素反応の５０％阻害（ＩＣ５０）を生じる阻害薬の濃度と阻害定数との関係（Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｔｈｅ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｃｏｎｓｔａｎｔ（Ｋｉ）ａｎｄ　ｔｈｅ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ　ｗｈｉｃｈ　ｃａｕｓｅｓ　５０　ｐｅｒｃｅｎｔ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ（ＩＣ５０）ｏｆ　ａｎ　ｅｎｚｙｍａｔｉｃ　ｒｅａｃｔｉｏｎ），Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２２：３０９９，１９７３］。ヒル・プロット分析法によって，競合薬の結合の協同性を測定する。
【０１６５】
［３Ｈ］アリールアルキルアミンの特異的結合は，ＮＭＤＡ−，ＡＭＰＡ−およびニコチン性コリン作動性受容体−イオノフォア複合体内に存在するものなどの受容体作動性Ｃａ２＋チャネル上の新規部位への結合を表す。それとして，他のアリールアルキルアミン類は，競合的形態の［３Ｈ］アリールアルキルアミンの結合と競合すべきであり，このアッセイにおけるそれらの有効性は，受容体作動性Ｃａ２＋チャネルの機能的アッセイにおけるそれらの阻害有効性と相互に関係すベきである（例えば，ラット小脳顆粒細胞の培養物中の［Ｃａ２＋］ｉのＮＭＤＡ受容体誘発性増加）。逆に言えば，受容体作動性Ｃａ２＋チャネル上の他の公知の部位で活性を有する化合物（例えば，ＭＫ−８０１，Ｍｇ２＋，ポリアミン）は，競合的方法で［３Ｈ］アリールアルキルアミン結合を置換すべきではない）。むしろ，非競合的相互作用を示す［３Ｈ］アリールアルキルアミン結合の複雑なアロステリックモジュレーションが生じることは予想される。予備実験では，ＭＫ−８０１は，１００μＭまでの濃度で［３Ｈ］アリールアルキルアミン結合を示さなかった。
【０１６６】
（ｆ）平衡になった後に［３Ｈ］アリールアルキルアミンの結合を測定することによって（前記（ｄ）を参照），解離速度を評価するための研究を行い，該反応混合物に大過剰の非放射性競合薬を添加する。次いで，種々の時間間隔で，［３Ｈ］アリールアルキルアミンの結合をアッセイする。このアッセイを用いて，［３Ｈ］アリールアルキルアミンの結合の会合および解離速度を測定する［タイトラー（Ｔｉｔｅｌｅｒ），多ドーパミン受容体：ドーパミン薬理学における受容体結合研究（Ｍｕｌｔｉｐｌｅ　Ｄｏｐａｍｉｎｅ　Ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ：　Ｒｅｃｅｐｔｏｒ　Ｂｉｎｄｉｎｇ　Ｓｔｕｄｉｅｓ　ｉｎ　ＤｏｐａｍｉｎｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ），マルセル・デッカー，インコーポレィテッド（Ｍａｒｃｅｌ　Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．），ニューヨーク，１９８３］。さらなる実験は，このパラメーターの温度依存性を理解するために，反応温度（０℃〜３７℃）を変えることを含む。
【０１６７】
実施例２５：小脳顆粒細胞における放射リガンド結合
８日齢のラットから小脳顆粒ニューロンの一次培養物を得，ポリ−Ｌ−リシンで被覆したアクラー（Ａｃｌａｒ）プラスチックスクェア上で平板培養する。プラスチックスクェアを２４ウエル培養プレートに置き，各ウエルに顆粒細胞約７．５×１０５個を添加する。該培養物を，シトシンアラビノシド（１０μＭ，最終）の添加前２４時間，大気中５％ＣＯ２の湿潤雰囲気中，３７℃で，２５ｍＭ　ＫＣｌ，１０％ウシ胎児血清［ハイクローン・ラボラトリーズ（ＨｙＣｌｏｎｅ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）］，２ｍＭグルタミン，１００μｇ／ｍｌゲンタマイシン，５０Ｕ／ｍｌペニシリン，および５０μｇ／ｍｌストレプトマイシンを含有するイーグル培地［ハイクローン・ラボラトリーズ（ＨｙＣｌｏｎｅ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）］中に維持する。平板培養後６〜８日目に受容体結合実験のために細胞を用いるまで，培養培地を変化させない。
【０１６８】
［３Ｈ］アリールアルキルアミンを用いて結合アッセイを行うために，該反応混合物は，２４ウエルプレートの各ウエル中，緩衝液Ａ（２０ｍＭ　Ｋ−ＨＥＰＥＳ，１ｍＭ　Ｋ−ＥＤＴＡ，ｐＨ７．０）２００μｌからなる。この反応混合物に［３Ｈ］アリールアルキルアミンを添加する。１００μＭ非放射性アリールアルキルアミンの存在下，非特異的結合を測定する。三重試料を０℃で１時間インキュベートする。細胞をアクラースクェアから手動により掻き集め，それをポリプロピレン試験管中に入れることによって，アッセイを終わらせた。この方法で全細胞から調製した膜を氷冷緩衝液Ａ　１０ｍｌに再懸濁し，０．３３％ＰＥＩ中で予備浸漬されたガラス繊維フィルター［シュライヒャー・アンド・シュール　Ｎｏ．３０］で濾過する。該フィルターを別の緩衝液Ａ　３ｍｌで３回洗浄し，３Ｈについて３５〜４０％の効率でシンチレーションカウンティングすることによって，フィルター上の放射能を測定する。非特異的結合を最小にするために，濾過よりもむしろ遠心分離によってアッセイを終わらせる。
【０１６９】
初期結合のために膜の代わりに細胞を用いる以外は，実質的に前記に従って，該アッセイを特徴付け確認するための特異的な実験を行う。結合アッセイにより，スキャッチャード分析法［小さな分子およびイオンについてのタンパクの吸引（Ｔｈｅ　ａｔｔｒａｃｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ｐｒｏｔｅｉｎｓ　ｆｏｒ　ｓｍａｌｌ　ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ　ａｎｄ　ｉｏｎｓ），アナルス・オブ・ニューヨーク・アカデミー・オブ・サイエンシズ（Ａｎｎ．Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．）５１：６６０，１９４９］によってＩＣ５０値および見かけのＫＤ値を測定する。ヒル・プロット分析法［興奮モードに対する理論を用いる，電流の作用下，筋肉および神経におけるイオン濃度の変化の新しい数学的処理（Ａ　ｎｅｗ　ｍａｔｈｅｍａｔｉｃａｌ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｏｆ　ｃｈａｍｇｅｓ　ｏｆ　ｉｏｎｉｃ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ　ｉｎ　ｍｕｓｃｌｅ　ａｎｄ　ｎｅｒｖｅ　ｕｎｄｅｒ　ｔｈｅ　ａｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｅｌｅｃｔｒｉｃ　ｃｕｒｒｅｎｔｓ，ｗｉｔｈ　ａ　ｔｈｅｏｒｙ　ｔｏ　ｔｈｅｉｒ　ｍｏｄｅ　ｏｆ　ｅｘｃｉｔａｔｉｏｎ），ジャーナル・オブ・フィジオロジー（Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．）４０：１９０，１９１０］によって，競合薬の結合の協同性を測定する。［３Ｈ］アリールアルキルアミンの特異的結合は，受容体作動性カルシウムチャネル上の新規な部位への結合を示す。
【０１７０】
実施例２６：組換え受容体結合アッセイ
以下は，本発明の有用な化合物についての迅速なスクリーニングアッセイの一例である。このアッセイでは，標準的な方法を用いて，ヒトのような好適な生物からのアリールアルキルアミン結合部位（受容体）をコードするｃＤＮＡまたは遺伝子クローンを得る。適当な発現ベクター中でクローンの異なるフラグメントを発現させて，化合物１，化合物２または化合物３を結合する能力を保持する受容体から入手可能な最小のポリペプチドを得る。この方法では，これらの化合物についての新規アリールアルキルアミン受容体を含むポリペプチドを同定することができる。安定にトランスフェクトした哺乳動物細胞系（例えば，ＨＥＫ　２９３細胞）を利用して，アリールアルキルアミン受容体を発現することによってかかる実験を促進させることができる。
【０１７１】
別法としては，選択化合物と接触する（または隣接する）アリールアルキルアミン受容体のアミノ酸残基を修飾し，これにより同定可能になるような方法で，該アリールアルキルアミン受容体を化学的に修飾した化合物１，化合物２または化合物３と化学的に反応させることができる。次いで，化合物１，化合物２または化合物３と相互に作用するかを測定され，該分子に結合するのに充分であるこれらのアミノ酸を含有するアリールアルキルアミン受容体のフラグメントを，標準的な発現ベクターを用いて，前記のとおり，組換え的に発現することができる。
【０１７２】
標準的な化学的方法を用いて，所望の結合特性を有する組換えポリペプチドを固相支持体に結合することができる。次いで，この固相または親和性マトリックスを化合物１，化合物２または化合物３と接触させて，これらの化合物がカラムに結合することができることを示し，化合物を固相から除去される条件を同定する。次いで，化合物の大きなライブラリーを用いて，この方法を繰り返して，親和性マトリックスに結合することができるこれらの化合物を測定し，次いで，化合物１，化合物２または化合物３と同様の方法で放出することができる。しかしながら，アリールアルキルアミン結合のために用いたものと異なる条件下で結合能を有する化合物を得るために，二者択一的な結合および放出条件を利用してもよい（例えば，良好な模擬生理学的条件が病原的状態で特に遭遇した条件）。かくして，結合するこれらの化合物は，液体培地または抽出物中に存在する化合物の非常に大きなコレクションから選択することができる。
【０１７３】
前記のアリールアルキルアミン結合ポリペプチドへの結合能を有する化合物を同定すると，次いで，種々のアッセイにおいて，これらの化合物を容易に試験して，それらまたはそれらの簡単な誘導体が前記神経障害および神経病の治療的処置のために有用な化合物であるかを判定することができる。
【０１７４】
別の方法では，天然アリールアルキルアミン受容体をカラムまたは他の固相支持体に結合させることができる。次いで，受容体上の他の部位を結合する試薬によって競争されないこれらの化合物を同定することができる。かかる化合物は，受容体上の新規な結合部位を定義する。かくして，他の公知化合物によって競争される化合物は，公知の部位に結合するか，または，公知の結合部位と重複する新規部位に結合する。それにもかかわらず，かかる化合物は，構造的に公知化合物と異なり，治療薬として有用である作用薬または拮抗薬の新規化学的クラスを定義する。すなわち，競合アッセイを用いて，本発明の有用な化合物を同定することができる。
【０１７５】
実施例２７：パッチクランプ電気生理学的アッセイ
ＮＭＤＡ−，ＡＭＰＡ−またはニコチン性コリン作動性受容体−イオノフォア複合体中に存在するもののような受容体作動性Ｃａ２＋チャネル上の新規アリールアルキルアミン結合部位で非常に有効かつ競合的な形態で相互に作用すると前記放射リガンド結合アッセイで同定された選択化合物について，以下のアッセイを行った。このパッチクランプアッセイは，予め選択した化合物の作用部位および作用機序についてのさらなる関連データを提供する。特に，受容体作動性Ｃａ２＋チャネルの例としてＮＭＤＡ受容体−イオノフォア複合体を用いて，アリールアルキルアミン結合部位で相互に作用する化合物の以下の薬理学的および生理学的特性を測定する：ＮＭＤＡ受容体媒介性イオン電流を遮断する時の有効性および効力，グルタミン酸およびグリシンに関する遮断の非競合的性質，作用の用途依存性，作用の電位依存性，遮断の開始および反転に関する両者，遮断および非遮断（反転）の速度，および遮断のオープンチャネルメカニズム。かかるデータにより，アリールアルキルアミン結合部位で相互に作用する化合物がアリールアルキルアミン類の固有の生理学的プロフィールを維持し，ＮＭＤＡ受容体−イオノフォア複合体上の公知の部位（グルタミン酸結合部位，グリシン結合部位，ＭＫ−８０１結合部位，Ｍｇ２＋結合部位，Ｚｎ２＋結合部位，シグマ結合部位，ポリアミン結合部位）でそれらの主な活性を有しないことが確認される。
【０１７６】
標準的な方法［ドネヴァン（Ｄｏｎｅｖａｎ）ら，アルカイン・ブロックス・Ｎ−メチル−Ｄ−アスパルテート・レセプター・レアルカインは，オープンチャネルメカニズムによるＮ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸受容体応答を遮断する：培養した海馬ニューロンにおける全細胞および単一チャネル記録研究（Ａｒｃａｉｎｅ　ｂｌｏｃｋｓ　Ｎ−ｍｅｔｈｙｌ−Ｄ−ａｓｐａｒｔａｔｅ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ　ｂｙ　ａｎ　ｏｐｅｎ　ｃｈａｎｎｅｌ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ：　ｗｈｏｌｅ−ｃｅｌｌ　ａｎｄ　ｓｉｎｇｌｅ−ｃｈａｎｎｅｌ　ｒｅｃｏｒｄｉｎｇ　ｓｔｕｄｉｅｓ　ｉｎ　ｃｕｌｔｕｒｅｄ　ｈｉｐｐｏｃａｍｐａｌ　ｎｅｕｒｏｎｓ），モレキュラー・ファーマコロジー（Ｍｏｌｅｃ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．）４１：７２７，１９９２；ロック（Ｒｏｃｋ）およびマクドナルド（Ｍａｃｄｏｎａｌｄ），スペルミンおよび関連ポリアミン類は，ＮＭＤＡ受容体単一チャネルコンダクタンスの電位依存性減少を生じる（Ｓｐｅｒｍｉｎｅ　ａｎｄ　ｒｅｌａｔｅｄ　ｐｏｌｙａｍｉｎｅｓ　ｐｒｏｄｕｃｅ　ａ　ｖｏｌｔａｇｅ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ　ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ＮＭＤＡ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ｓｉｎｇｌｅ−ｃｈａｎｎｅｌ　ｃｏｎｄｕｃｔａｎｃｅ），モレキュラー・ファーマコロジー（Ｍｏｌｅｃ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．）４２：１５７，１９９２］を用いて，哺乳動物ニューロン（海馬，皮質，小脳顆粒細胞）のパッチクランプ記録を行う。
【０１７７】
別法として，受容体作動性Ｃａ２＋チャネルの特異的サブユニットを発現させて，ゼノプス（Ｘｅｎｏｐｕｓ）卵母細胞または安定にトランスフェクトした哺乳動物細胞系（例えば，ＨＥＫ　２９３細胞）について，パッチクランプ実験を行うことができる。この方法では，例えば，種々のグルタミン酸受容体サブタイプ（例えば，ＮＭＤＡＲ１，ＮＭＤＡＲ２Ａ〜ＮＭＤＡＲ２Ｄ，ＧｌｕＲ１〜ＧｌｕＲ４）での有効性および効力を測定することができる。部位特異的突然変異誘発を用いることによって，これらのグルタミン酸受容体サブタイプに対するアリールアルキルアミン類の作用の部位に関するさらなる情報を得ることができる。
【０１７８】
実施例２８：アリールアルキルアミン類の合成
化合物１，化合物２および化合物３などのアリールアルキルアミン類は，標準的な方法によって合成される［ジャシス（Ｊａｓｙｓ）ら，アルギオトキシンの全合成（Ｔｈｅ　ｔｏｔａｌ　ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｏｆ　ａｒｇｉｏｔｏｘｉｎｓ）６３６，６５９および６７３，テトラヘドロン・レターズ（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　Ｌｅｔｔ．）２９：６２２３，１９８８；ネイソン（Ｎａｓｏｎ）ら，神経毒性ネフィラクモ毒の合成：ＮＳＴＸ−３およびＪＳＴＸ−３（Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｏｆ　ｎｅｕｒｏｔｏｘｉｃ　Ｎｅｐｈｉｌａ　ｓｐｉｄｅｒ　ｖｅｎｏｍｓ：ＮＳＴＸ−３　ａｎｄ　ＪＳＴＸ−３），テトラヘドロン・レターズ（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　Ｌｅｔｔ．）３０：２３３７，１９８９］。アリールアルキルアミン類似体の合成の特定の例を以下に示す。
【０１７９】
化合物４の合成は，以下のとおり行った：
１，４−ジアミノブタン（２０３．４ｇ，２．３１２ｍｍｏｌ）のメタノール（５０ｍＬ）中溶液をアクリロニトリル（ＡＮ，１３５ｇ，２．５４３ｍｏｌ）で４０ｍｌ／時の速度で処理した。該反応を室温（２０〜２６℃）で１６時間撹拌した。ＧＣ−ＭＳは，生成物Ａ６４％［ＧＣ−ＭＳ（Ｒｔ＝４．２６分）ｍ／ｚ（相対強度）１４１（Ｍ＋，４），１２４（８），１０１（４２），８３（１００），７０（６５），５６（６３），４２（８１）］，および二付加物Ｂ３６％［ＧＣ−ＭＳ（Ｒｔ＝７．５０分）ｍ／ｚ（相対強度）１９４（Ｍ＋，１３），１５４（２３），１２３（４５），９６（１５），８３（１００），７０（２４），５６（２９），４２（４０）］を示した。クーゲルロール蒸留により，透明な油状物として生成物Ａ（１２０ｇ）（３７％）を得た。３−ブロモ−１−プロピルアミン・臭化水素酸塩（１０２．４ｇ，４６８ｍｍｏｌ）およびジ炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（１００．１ｇ，４６２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（６００ｍＬ）中溶液をトリエチルアミン（７０ｍＬ，５００ｍｍｏｌ）で処理し，該反応を室温で１時間撹拌した。該反応を，Ｈ２Ｏ　５００ｍＬおよびジエチルエーテル５０ｍＬを含有する分液漏斗に移した。該混合物を平衡化させ，水性層を取り出した。エーテル層を１％ＨＣｌ（３×）で洗浄し，Ｋ２ＣＯ３で乾燥させ，減少させて，生成物Ｃ（１０５ｇ）（９５％）を得た。
【０１８０】
Ａ（８０ｇ，５６７ｍｍｏｌ）およびＫＦ−セライト（１３７ｇ，セライト上５０重量％）のアセトニトリル（１Ｌ）中溶液をアセトニトリル（１００ｍＬ）中の臭化物Ｃ（１０５ｇ，４４４ｍｍｏｌ）で１時間かけて処理した。次いで，該反応を５０℃で２４時間撹拌した。ＧＣ−ＭＳは，臭化物Ｃが消費されたことを示した。該反応を冷却し，濾過し，油状物に濃縮した。この物質をエーテル（５００ｍＬ）に溶解させ，水（５００ｍＬ）を用いて平衡化させた。エーテル層を取り出し，水性相をエーテル（４×５００ｍＬ），次いで，エーテル−ジクロロメタン（１：１，５００ｍＬ）で１回で洗浄した。この方法により，未反応ニトリルＡ（水性フラクション）を生成物Ｄから分離した。有機洗液を合わせ，濃縮して，油状物１２０ｇを得た。この物質をヘキサン−ジクロロメタン（１：１）中のシリカカラム（乾燥シリカ１５００ｃｍ３）に付し，ヘキサン−ジクロロメタン（１：１）からジクロロメタンまでメタノール−ジクロロメタン（１：９）までメタノール−ジクロロメタン−イソプロピルアミン（１０：９０：１）までの複合体勾配液を用いて洗浄した（３００ｍＬ／分）。同様のフラクション（ＴＬＣ分析）を合わせ，濃縮して，生成物Ｄ９３ｇ（臭化物Ｃから７０％）を得た。１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）により，ｄ　１５５．８，１１８．５，７７．７，４９．３，４８．６，４７．３，４４．７，３８．７，２９．６，２８．１，２７．４，２７．３，１８．３が得られた（文献の値と一致した）。
【０１８１】
Ｄ（９３ｇ，３１２ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２００ｍＬ）中溶液をジ炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（８０ｇ，３６７ｍｍｏｌ）で強い還流を与える速度で処理した。該反応を室温で１６時間撹拌し，シリカ３００ｃｍ３に吸着させた。これを，真空中，濃縮乾固し，シリカカラム（乾燥シリカ１０００ｃｍ３を含有する１０ｃｍ　ｉ．ｄ．）の上部に付した。該カラムをヘキサンから酢酸エチル−ヘキサン（３：２）の勾配液で洗浄した。同様のフラクションを合わせ，濃縮して，生成物Ｅ（８９ｇ）（４９％）を得た。
【０１８２】
Ｅ（８９ｇ，１７９ｍｍｏｌ）および二水酸化パラジウム（２０ｇ）の酢酸（３００ｍＬ）中溶液を，室温で２時間，５５ｐ．ｓ．ｉ．水素で水素添加した。該反応を濾過し，濃い油状物に濃縮した。この物質をジクロロメタンに溶解させ，平衡相のｐＨが塩基性（ｐＨ１４）になるまで，１Ｎ　ＮａＯＨで処理した。ジクロロメタンを取り出し，水性層をジクロロメタンでさらに３回洗浄した。有機洗液を合わせ，乾燥させ，油状物に濃縮した。ジクロロメタンからメタノール−ジクロロメタン−イソプロピルアミン（１０：９０：１）までの勾配液を用いてクロマトグラフィー（シリカ）に付して，生成物Ｆ（５５ｇ）（６１％）を得た。
【０１８３】
前記のとおり，鎖伸長を繰り返した。Ｆ（５５ｇ，１１０ｍｍｏｌ）のメタノール中溶液をアクリロニトリル（６．１ｇ，１１６ｍｍｏｌ）で処理し，ＴＬＣ分析によって示されるように反応が完了するまで，室温で撹拌した。該反応を濃縮し，ジクロロメタンに溶解させ，ジ炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（２６．４ｇ，１２１ｍｍｏｌ）で処理した。該反応を，完了するまで室温で撹拌し，生成物を，ヘキサンから酢酸エチル−ヘキサン（３：２）の勾配液を用いてクロマトグラフィー（シリカ）に付して精製した。これにより，純粋なＧ（３２ｇ）（４９％）および半純粋な物質（主としてＧを含有する）２３ｇを得た。Ｇ（３２ｇ，４９ｍｍｏｌ）および二水酸化パラジウム（３２ｇ）の酢酸（３００ｍＬ）中溶液を，室温で２時間，５５ｐ．ｓ．ｉ．水素で水素添加した。該反応を，Ｆを生じる反応についてと同一の形態で処理した。これにより，生成物Ｈ２４ｇ（Ｆから３３％）を得た。前記のとおり，鎖伸長を繰り返して，ポリアミンＩ（２１ｇ）（７０％）を得た。
【０１８４】
５−フルオロインドール−３−酢酸（２ｇ，１０．４ｍｍｏｌ）およびｐ−ニトロフェノール（１．６ｇ，１１．６ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２５０ｍＬ）中溶液をＤＣＣ（２．４ｇ，１１．６ｍｍｏｌ）で処理し，該反応を室温で２４時間撹拌した。該反応混合物をポリアミンＩ（２１ｇ，２５ｍｍｏｌ）のジクロロメタン中撹拌溶液中に直接濾過した。該反応を室温で４時間撹拌し，ジクロロメタンからメタノール−ジクロロメタン−イソプロピルアミン（５０：９５０：１）の勾配液を用いてクロマトグラフィー（シリカ）に付して，生成物Ｊ（８．７ｇ）（出発インドールから８５％）を得た。
【０１８５】
Ｊ（８．７ｇ，８．８ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（１．８Ｌ）中溶液を濃ＨＣｌ（２００ｍＬ）で処理し，該反応を，室温で４時間，アルコン下で撹拌した。該反応を濾過し，沈殿物を回収して，化合物４（５．５３ｇ）（９３％）を得た。該物質は，分析用ＲＰ−ＨＰＬＣによって純度９８．７％であることが判明した。
ＵＶｍａｘ（０．１％ＴＦＡ）２８４ｎｍ（ε６１４０）。
【化４４】
2004002437.tif 000030
【０１８６】
化合物５の合成は，以下のとおり行った。化合物６，７，８および１０は，以下に記載した以外は同様の方法で調製した。
【０１８７】
ジアミノペンタン（４９ｇ，０．４８ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（４８ｇ，０．４３ｍｍｏｌ）のジオキサン２００ｍＬ中溶液にジ炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（５３．４ｇ，ジクロロメタン２００ｍＬ中０．１４ｍｍｏｌ）の溶液を３０分間かけて添加した。該反応をさらに２時間撹拌し，次いで，真空中，溶媒を除去した。得られた固体をエーテル中に取り，５０ｍＭ水酸化ナトリウムで３回，食塩水で１回洗浄し，硫酸ナトリウムで乾燥させ，真空中，濃縮した。得られた油状物を２０％酢酸エチル／ヘキサンに溶解させ，９ｃｍ×２０ｃｍシリカカラムに付した。該カラムを２０％〜３５％酢酸エチル／ヘキサンで，次いで，５％エタノール／クロロホルムで，最後に，５％エタノール／５％イソプロピルアミン／クロロホルムで溶離した。生成物を含有する（ＧＣ−ＭＳによって同定した）フラクション（最終溶媒で溶離した）をプールし，真空中，濃縮して，化合物Ａ（２０．１ｇ）を得た。
【０１８８】
ベンズアルデヒド（１１ｇ，０．１０４ｍｍｏｌ）および化合物Ａ（２０．１ｇ，０．０９９ｍｏｌ）を一緒に混合し，渦巻撹拌した。２０分後，無水エタノール２０ｍＬを添加し，さらに１０分間撹拌し，次いで，真空中，エタノールおよび水を除去した。油状物を乾燥エタノール５０ｍＬ中に取り，これをホウ水素化ナトリウム（３．７４ｇ，０．０９９ｍｏｌ）に添加した。該反応を室温で一晩撹拌した。溶媒を真空除去し，残留物をエーテルおよび５０ｍＭ水酸化ナトリウム中に取った。水層を分離し，エーテル層を５０ｍＭ水酸化ナトリウムで２回，食塩水で１回洗浄し，硫酸ナトリウムで乾燥させ，真空中，濃縮して，化合物Ｂ（２８．８ｇ）（９９％）を得た。
【０１８９】
化合物Ｂ（２８．８ｇ，０．０９８５ｍｏｌ）をアセトニトリル４００ｍＬに溶解させ，次いで，フッ化カリウム／セライト（２２．９ｇ，０．１９７ｍｏｌ）およびＮ−（３−ブロモ−プロピル）フタルイミド（３９．６１ｇ，０．１４７ｍｏｌ）を添加した。反応をアルゴン下で１０．５時間加熱還流した。冷却後，該反応を濾過し，固体をアセトニトリルで洗浄した。合わせたアセトニトリル溶液を，真空中，濃縮して，濃い黄色の油状物を得た。該油状物をエタノール１Ｌ中に取り，これにヒドラジン９．３ｍＬを添加した。該溶液をアルゴン下で２．２５時間加熱還流した。溶媒を真空除去し，残留物をエーテルおよび５０ｍＭ水酸化ナトリウム中に取った。エーテル層を分離し，硫酸ナトリウムで乾燥させ，真空中，ストリップして，粗製化合物Ｃ（３３．４ｇ）を得た。該粗製物質を９ｃｍ×３０ｃｍシリカカラム上でのクロマトグラフィーに付してジクロロメタン／メタノール／イソプロピルアミン（９４：５：１）で溶離して，化合物Ｃ（２６．９ｇ）を得た。
【０１９０】
ベンズアルデヒド（８．５４ｇ，０．０８１ｍｏｌ）および化合物Ｃ（２６．９ｇ，００７６７ｍｏｌ）を一緒に混合し，渦巻撹拌した。３０分後，無水エタノール２０ｍＬを添加し，さらに４５分間撹拌し，次いで，真空中，エタノールおよび水を除去した。油状物を乾燥エタノール８０ｍＬ中に取り，これにホウ水素化ナトリウム（２．９ｇ，０．０７６７ｍｏｌ）を添加した。該反応を室温で一晩撹拌した。溶媒を真空除去し，残留物をエーテルおよび５０ｍＭ水酸化ナトリウム中に取った。水層を分離し，エーテル層を５０ｍＭ水酸化ナトリウムで２回，食塩水で１回洗浄し，炭酸カリウムで乾燥させ，真空中，濃縮して，化合物Ｄ（３２．６ｇ）（９６％）を得た。
【０１９１】
化合物Ｄ（３２．６ｇ，０．０７４２ｍｏｌ）をアセトニトリル３００ｍＬに溶解させ，次いで，フッ化カリウム／セライト（１７．２４ｇ，０．１４８ｍｏｌ）およびＮ−（３−ブロモ−プロピル）フタルイミド（２９．８３ｇ，０．１１１ｍｏｌ）を添加した。該反応をアルゴン下で１５．２５時間加熱還流した。冷却後，該反応を濾過し，固体をアセトニトリルで洗浄した。合わせたアセトニトリル溶液を真空中でストリップした。油状物をエタノール７５０ｍＬ中に取り，これにヒドラジン７ｍＬを添加した。該溶液をアルゴン下で２時間加熱還流した。溶媒を真空除去し，残留物をエーテルおよび５０ｍＭ水酸化ナトリウム中に取った。エーテル層を分離し，硫酸ナトリウムで乾燥させ，真空中でストリップした。粗製物質を９ｃｍ×３０ｃｍシリカカラム上でのクロマトグラフィーに付してジクロロメタン／メタノール／イソプロピルアミン（９４：５：１）で溶離して，化合物Ｅ（３１．９ｇ）を得た。
【０１９２】
化合物Ｅ（１８．２２ｇ，３６．７ｍｍｏｌ）およびトリ−ＣＢＺ−アルギニンＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（２５ｇ，３７．１ｍｍｏｌ）をジクロロメタン１００ｍＬに溶解させ，室温で２日間，撹拌した。該反応混合物をクロロホルムで希釈し，５０ｍＭ水酸化ナトリウムで抽出した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ，溶媒を真空除去して，化合物Ｅ（４０．４ｇ）を得た。この物質をさらには精製せずに次工程で用いた。
【０１９３】
化合物Ｆを５０％トリフルオロ酢酸／ジクロロメタン４００ｍＬに溶解させ，２時間撹拌した。溶媒を真空除去し，残留物をクロロホルム／１００ｍＭ水酸化ナトリウム中に取った。クロロホルム層を分離し，硫酸ナトリウムで乾燥させ，真空中，ストリップした。粗製化合物Ｇを精製せずに次工程で用いた。
【０１９４】
工程Ｇからの化合物Ｇの全て（約３６ｍｍｏｌ）をＢｏｃ−アスパラギン−ニトロフェニルエステル（１２．７２ｇ，３６ｍｍｏｌ）と一緒にジクロロメタン１７５ｍＬに溶解させた。該反応を室温で２日間撹拌し，次いで，クロロホルム中で希釈し，５０ｍＭ水酸化ナトリウムで５回，食塩水で１回抽出し，硫酸ナトリウムで乾燥させ，真空中，ストリップした。粗製油状物を９ｃｍ×３０ｃｍシリカカラム上でのクロマトグラフィーに付してジクロロメタン／メタノール／イソプロピルアミン（９４：５：１）で溶離して，化合物Ｈ（２９．３ｇ）を得た。
【０１９５】
化合物Ｈ（７．２９ｇ，６．３ｍｍｏｌ）を５０％トリフルオロ酢酸／ジクロロメタン５０ｍＬに溶解させ，アルゴン下で１時間撹拌した。溶媒を真空除去し，残留物をクロロホルムおよび５０ｍＭ水酸化ナトリウムに溶解させた。層を分離し，水層をクロロホルムでさらに１回抽出した。合わせたクロロホルム抽出物を食塩水で洗浄し，炭酸カリウムで乾燥させ，真空中，ストリップした。残留固体を少量のクロロホルムに溶解させ，エーテルを用いて沈殿させた。固体を濾過し，エーテルで洗浄し，真空乾燥させて，化合物Ｉ（５．６１ｇ）を得た。
【０１９６】
化合物Ｉ（２１４ｍｇ，０．２ｍｍｏｌ）をクロロホルム２ｍＬに溶解させた。この溶液に２−メトキシ−フェニル酢酸Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（５８ｍｇ，０．２２ｍｍｏｌ）を添加し，該溶液を室温で一晩撹拌した。該反応混合物をクロロホルムで希釈し，希水酸化ナトリウムで洗浄した。クロロホルム層を分離し，硫酸ナトリウムで乾燥させ，真空中，ストリップして，化合物Ｊを得，これを直接次工程で用いた。
【０１９７】
工程Ｊからの化合物Ｊの全てを酢酸５ｍＬに溶解させた。水酸化パラジウム−炭（１００ｍｇ）を添加し，該反応を水素下（水素充填バルーンから）に置き，一晩撹拌した。該反応を０．２ミクロンのシリンジフィルターを介して濾過して触媒を除去し，得られた溶液を凍結乾燥させた。残留物を０．１５トリフルオロ酢酸に溶解させ，Ｃ−１８カラム（１０ｍｍ×２５０ｍｍ　Ｖｙｄａｃ　Ｃ−１８）上でのクロマトグラフィーに付してアセトニトリルで溶離した。生成物を含有するフラクションを凍結乾燥させて，ＴＦＡ塩として標記化合物５（９０ｍｇ）を得た。
【０１９８】
化合物６の合成は，工程Ｈにおいて，化合物Ｇを，Ｂｏｃ−アスパラギンｐ−ニトロフェニルエステルの代わりにＢｏｃ−フェニルアラニンＮ−ヒドロキシスクシシンイミドエステルと反応させた以外は，化合物５についての方法と同様の方法で行った。
【０１９９】
化合物７の合成は，工程Ｈにおいて，化合物ＧをＢｏｃ−アスパラギンｐ−ニトロフェニルエステルの代わりにＢｏｃ−ロイシンＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステルと反応させた以外は，化合物５についての方法と同様の方法で行った。
【０２００】
化合物８の合成は，工程Ｆにおいて，化合物Ｅをトリ−ＣＢＺ−アルギニン−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステルの代わりにＣＢＺ−リシンＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステルと反応させること以外は，化合物５についての方法と同様の方法で行った。
【０２０１】
化合物１０の合成は，工程Ｊにおいて，化合物Ｉを２−メトキシフェニル酢酸Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステルの代わりに２−ベンジルオキシフェニル酢酸Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステルにカップリングさせること以外は，化合物５についてと同様の方法で行った。
【０２０２】
【化４５】
2004002437.tif 000031
【化４６】
2004002437.tif 000032
【０２０３】
化合物９の合成は，以下のとおり行った：
１，３−ジアミノプロパン（１００ｇ，１．３５ｍｏｌ）のメタノール（１００ｍＬ）中溶液にアクリロニトリル（７９ｇ，１．４８ｍｏｌ）を１０分間かけて滴下した。該反応を室温で４時間撹拌し，油状物に濃縮した。この物質を減圧下で蒸留し，Ｎ−シアノエチル−１，３−ジアミノプロパン，Ａ（６６ｇ）（３９％）を９５〜１１５℃の沸騰範囲で回収した。
【０２０４】
Ａ（６６ｇ，５２０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１Ｌ）中溶液にジ炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（２５０ｇ，１．１４ｍｏｌ）を添加した。該反応を室温で１６時間撹拌した。この後，該反応を１．０Ｎ　ＮａＯＨ（１回）で洗浄し，無水炭酸カリウムで乾燥させ，油状物に濃縮した。ヘキサンから酢酸エチル−ヘキサン（１：１）までの勾配液を用いてクロマトグラフィー（シリカ）に付して，生成物Ｂ（７３ｇ）（４３％）を得た。
【０２０５】
Ｂ（７３ｇ，２２２ｍｍｏｌ）および二水酸化パラジウム（１０ｇ，２０％Ｐｄ）の酢酸（７５０ｍｌ）中溶液を，室温で４時間，５５ｐ．ｓ．ｉ．水素下で水素添加した。該反応混合物を濾過し，触媒を酢酸（３×１００ｍＬ）で洗浄した。濾液および酢酸洗液を合わせ，濃い油状物に濃縮した。この物質をジクロロメタン（１Ｌ）および１Ｎ　ＮａＯＨ（１Ｌ）の間で平衡化させた。有機層を分離し，無水Ｋ２ＣＯ３で乾燥させ，濃縮して，生成物Ｃ（７３．５ｇ）（１００％）を得た。
【０２０６】
Ｃ（６９．６ｇ，２１０ｍｍｏｌ）のメタノール（３００ｍＬ）中溶液をアクリロニトリル（１１．２ｇ，２１１ｍｍｏｌ）で１０分間滴下処理し，該反応を室温で１６時間撹拌した。この後，該反応を油状物に濃縮した。この物質のジクロロメタン（３００ｍＬ）中溶液をジ炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（４６．１ｇ，２１１ｍｍｏｌ）で処理し，該反応を室温で１６時間撹拌した。この後，該反応混合物を油状物に濃縮した。ヘキサンから酢酸エチル−ヘキサン（１：１）までの勾配液を用いてクロマトグラフィー（シリカ）に付して，生成物Ｄ（７９．５ｇ）（７７％）を得た。
【０２０７】
Ｄ（７９．５ｇ，１６２ｍｍｏｌ）および二水酸化パラジウム（４ｇ，２０％Ｐｄ）の酢酸（８００ｍＬ）中溶液を，室温で４時間，５ｐ．ｓ．ｉ．水素で水素添加した。この後，該反応混合物を濾過し，触媒を酢酸（３×１００ｍＬ）で洗浄した。濾液および酢酸洗液を合わせ，濃い油状物に濃縮した。この物質をジクロロメタン（１Ｌ）および１Ｎ　ＮａＯＨ（１Ｌ）の間で平衡化した。有機層を分離し，無水炭酸カリウムで乾燥し，濃縮して，生成物Ｅ（７９ｇ）（１００％）を得た。
【０２０８】
Ｅ（１．４ｇ，２．８７ｍｍｏｌ），５−フルオロ−インドール−３−酢酸（５０７ｍｇ，２．６２ｍｍｏｌ），および１−トリヒドロキシベンゾトリアゾール（８５８ｍｇ，６．３５ｍｏｌ）の溶液をＤＭＦ（５ｍＬ）中で混合し，クロロホルム（５ｍＬ）中のＤＣＣ（５９４ｍｇ，２．８８ｍｍｏｌ）で処理した。該反応混合物を室温で４時間撹拌し，次いで，濾過し，濃縮した。ジクロロメタンからメタノール−ジクロロメタン（１：９）までの勾配液を用いてクロマトグラフィー（シリカゲル）に付して，生成物Ｆ（１．１ｇ）（５８％）を得た。
【０２０９】
アミドＦ（１．１ｇ，１．６６ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（３６ｍＬ）中溶液を濃ＨＣｌ（４ｍＬ）を用いて１分間かけて滴下処理した。該反応を室温で４時間撹拌した。アセトニトリルを真空蒸発させ，粗製生成物を，全容量１０ｍＬまで水に溶解させた。この物質を，０．１％ＨＣｌからアセトニトリルまでの勾配液を用いて，１０個のアリコート（１ｍＬ）において，Ｖｙａｄａｃ　ＲＰ（Ｃ１８，２０×２．５ｃｍｉ．ｄ．）を介してクロマトグラフィーに付し，２８０ｎｍで光学密度を測定して，化合物９（４８３ｍｇ）（８０％）を得た。ＦＡＢＭＳの測定値（Ｍ＋Ｈ）ｍ／ｚ＝３６４。
【０２１０】
【化４７】
2004002437.tif 000033
【０２１１】
化合物１１の合成は，以下のとおり行った：
エチルアミン・塩酸塩（１００ｇ，１．２３ｍｏｌ）のメタノール（５００ｍＬ）中溶液を０℃に冷却し，トリエチルアミン（１３０ｇ，１．２９ｍｏｌ），次いで，アクリロニトリル（６５．２ｇ，１．２３ｍｏｌ）で処理した。次いで，反応を室温に加温し，１６時間撹拌した。これにジクロロメタン（３００ｍＬ）中のジ炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（２６８ｇ，１．２３ｍｏｌ）を添加した。該反応を室温で４時間撹拌し，濃縮し，ジエチルエーテルに溶解させた。これを１０％ＨＣｌ（３回），０．１ＮＮａＯＨ（３回）および食塩水（１回）で洗浄した。エーテルフラクションをＫ２ＣＯ３で乾燥させ，濃縮して，油状物として生成物Ａ（２２０ｇ）（９１％）を得た。ＧＣ−ＭＳ（Ｒｔ＝３．９６４分）ｍ／ｚ（相対強度）１９８（Ｍ＋，２），１４３（７），１２５（２７），９７（３１），５７（１００）。
【０２１２】
Ａ（５０ｇ，２５３ｍｍｏｌ）および二水酸化パラジウム（５ｇ）の酢酸（３００ｍＬ）中溶液を，室温で１６時間，７０ｐ．ｓ．ｉ．水素で水素添加した。該反応を濾過し，触媒を酢酸（３回）で洗浄した。濾液および酢酸洗液を合わせ，濃い油状物に濃縮した。この物質をジクロロメタン（５００ｍＬ）に溶解させ，平衡化相のｐＨが塩基性（ｐＨ１４）になるまで，１Ｎ　ＮａＯＨで処理した。有機層を除去し，Ｋ２ＣＯ３で乾燥させ，濃縮して，油状物として生成物Ｂ（３９．０６ｇ）（７６％）を得た。
【０２１３】
Ｂ（３９．０６ｇ，１９３．４ｍｍｏｌ）のメタノール（５０ｍＬ）中溶液をベンズアルデヒド（２０．５ｇ，１９３．４ｍｍｏｌ）および無水ＭｇＳＯ４で処理した。該反応を室温で８時間撹拌し，ホウ水素化ナトリウム（７．３ｇ，１９３ｍｍｏｌ）のエタノール（３００ｍＬ）中溶液中に直接注いだ。該反応を室温で４時間撹拌し，希ＨＣｌでクエンチし，真空中，濃縮した。酸性溶液を１Ｎ　ＮａＯＨで塩基性化し，該生成物をエーテル中に抽出した。エーテル層を乾燥させ，濃縮して，油状物として生成物Ｃ　１９．５ｇ（３５％）を得た。
【０２１４】
Ｃ（１９．５ｇ，６６．８ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（１００ｍＬ）中溶液をＮ−（３−ブロモプロピル）フタルイミド（１９．７ｇ，７３ｍｍｏｌ），ＫＦ−セライト（８．５ｇ，５０％ＫＦ）で処理し，１６時間還流させた。次いで，該反応を濾過し，濃縮して，中間体Ｄを得た。この物質のメタノール（５００ｍＬ）中溶液をヒドラジン（１５ｍＬ）で処理し，４時間還流させた。この後，該反応を白色固体に濃縮し，エーテル−１Ｎ　ＮａＯＨに溶解させた。水性層を取り出し，残存するエーテルを１Ｎ　ＮａＯＨ（３回），食塩水で洗浄し，油状物に濃縮した。クロロホルムからクロロホルム−メタノール（９：１）までの勾配液を用いてクロマトクラフィー（シリカ）に付して，透明な油状物として生成物Ｅ（６．４７ｇ）（２８％）を得た。
【０２１５】
Ｅ（６．４７ｇ，１８．５ｍｍｏｌ）のメタノール（５０ｍＬ）中溶液をベンズアルデヒド（２．０６ｇ，１９．５ｍｍｏｌ）および無水ＭｇＳＯ４で処理し，室温で８時間撹拌した。この後，該反応をホウ水素化ナトリウム（１ｇ，２６ｍｍｏｌ）のエタノール（３００ｍＬ）中溶液中に直接注ぎ，室温で４時間撹拌した。該反応を希ＨＣｌでクエンチし，濃縮した。この物質をエーテル中に懸濁させ，ｐＨ１４まで１Ｎ　ＮａＯＨで処理した。エーテル層を分離し，Ｋ２ＣＯ３で乾燥させ，濃縮し，油状物として中間体Ｆ（６．２３ｇ）を得た。この物質のアセトニトリル（５０ｍＬ）中溶液をＮ−（３−ブロモプロピル）フタルイミド（５．４ｇ，２０ｍｍｏｌ），ＫＦ−セライト（２．３ｇ）で処理し，１６時間還流させた。該反応を濾過し，濃縮した。メタノール（３００ｍＬ）中の中間体Ｇを含有するこの物質をヒドラジン（１０ｍＬ）で処理し，４時間還流させた。この後，該反応を白色固体に濃縮し，エーテル−１Ｎ　ＮａＯＨに溶解させた。水性層を取り出し，残存するエーテルを１Ｎ　ＮａＯＨ（３回），食塩水で洗浄し，油状物に濃縮した。クロロホルムからクロロホルム−メタノール（９：１）までの勾配液を用いてシリカを介してクロマトグラフィー（シリカ）に付して，透明な油状物として生成物Ｈ（４．５ｇ）（４９％）を得た。
【０２１６】
５−フルオロ−３−インドール酢酸（２ｇ，１０．４ｍｍｏｌ）およびｐ−ニトロフェノール（１．６ｇ，１１．６ｍｍｏｌ）のクロロホルム−ＤＭＦ（１００：１，２００ｍＬ）中溶液をＤＣＣ（２．１８ｇ，１０．６ｍｍｏｌ）で処理し，該反応を室温で１６時間撹拌した。活性エステルＩを含有する反応混合物をＨ（４．５ｇ，９ｍｍｏｌ）の撹拌溶液中に直接濾過した。この反応を室温で４時間撹拌し，エーテル３００ｍＬ中に注いだ。エーテル層を１Ｎ　ＮａＯＨ（６回），食塩水で洗浄し，乾燥させ，油状固体に濃縮した。この物質を，クロロホルム−メタノールを用いて小さなシリカプラグを介してクロマトグラフィーに付して，中間体Ｊを得た。この物質および触媒量の二水酸化パラジウムの酢酸（２００ｍＬ）中溶液を，室温で２時間，６０ｐ．ｓ．ｉ．水素下で水素添加した。該反応を濾過し，触媒を酢酸（３回）で洗浄した。濾液および洗液を合わせ，濃縮して，濃い油状物としてＫを得た。この物質のアセトニトリル（２０ｍＬ）中溶液を濃ＨＣｌ（２ｍＬ）で処理し，該反応を，室温で２時間，窒素下で撹拌した。該反応を濾過し，沈殿物（粗製化合物１１）をＨ２Ｏ（１５ｍＬ）に溶解させた。該生成物の濃度は，ＵＶによって２３３ｍＭと測定された。分析用ＲＰ　ＨＰＬＣは，該生成物が純度９１％であることを示した。この物質の一部（アリコート１００μＬ）を，０．１％ＨＣｌからアセトニトリルまでの勾配液（１％／分）を用いてＶｙｄａｃ　ＲＰ（Ｃ１８，２５×２ｃｍ）を介してクロマトグラフィーに付して，２８０ｎｍでの光学密度をモニターして，純粋な化合物１１を得た。ＵＶｍａｘ（０．１％ＴＦＡ）２８４ｎｍ（ｅ　６１４０）。
【０２１７】
【化４８】
2004002437.tif 000034
【０２１８】
化合物１２の合成は，以下のとおり行った：
４，９−ジオキサ−１，１２−ドデカンジアミン（５０ｇ，２４５ｍｍｏｌ）のジオキサン（５００ｍＬ）中溶液をジ炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（５．８８ｇ，２７ｍｍｏｌ）のジオキサン（３００ｍＬ）中溶液で６０分間かけて滴下処理した。該反応を室温で２４時間撹拌し，白色固体に減少させた。この物質を水−ヘキサンに分配させた。有機フラクションおよび水性フラクションのＧＣ−ＭＳは，生成物Ａを有するヘキサンフラクション中の二付加物および水性フラクション中の出発ジアミンを示した。水性層を分離し，エーテルで洗浄した。ＧＣ−ＭＳ分析は，エーテル層中の生成物Ａおよび水性層中の出発ジアミンを示した。エーテル層を分離し，硫酸ナトリウムで乾燥させ，濃縮して，透明な油状物として生成物Ａ（１０．２ｇ）（１４％）を得た。ＧＣ−ＥＩＭＳ（Ｒｔ＝８．８６分），ｍ／ｚ（相対強度）２０５（Ｍ＋１，５），１４８（５９），１３０（１６），１１４（１７），１００（１６），７４（６１），５８（１００）。
【０２１９】
５−フルオロ−インドール−３−酢酸（２ｇ，１０．４ｍｍｏｌ）およびｐ−ニトロフェノール（１．７３ｇ，１２．４ｍｍｏｌ）のクロロホルム−ＤＭＦ（７５：１，１２５ｍＬ）中溶液をＤＣＣ（２．２５ｇ，１０．９ｍｍｏｌ）で処理し，該反応を室温で２４時間撹拌した。次いで，これをＡ（５．２ｇ，１７．１ｍｍｏｌ）のクロロホルム（１００ｍＬ）中撹拌溶液中に直接濾過した（ＤＣＵを除去）。この添加後，トリエチルアミン（２ｇ，２０ｍｍｏｌ）を添加し，反応を室温で４時間撹拌した。溶液をエーテル（６００ｍＬ）に添加し，１Ｎ　ＮａＯＨ（６×１００ｍＬ），１０％ＨＣｌ（１×１００ｍＬ）および食塩水で洗浄した。有機層を乾燥させ（硫酸ナトリウム），透明な油状物に濃縮した。クロロホルム−メタノール（５０：１）を用いてクロマトグラフィー（シリカ）に付して，透明な油状物として生成物Ｂ（４．９３ｇ）（インドールからの９９％）を得た。
【０２２０】
化合物Ｂ（４．９３ｇ，１０．３ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（５０ｍＬ）中溶液を濃ＨＣｌ（５ｍＬ）で処理し，該溶液を室温で４時間撹拌した。真空中で溶媒を蒸発させ，水から凍結乾燥させて，濃い油状物として化合物１２（５．２６ｇ，９９％）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，遊離塩基）ｄ　９．９２（１Ｈ，ｂｒ　ｓ），７．３０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，Ｊ＝４Ｈｚ），７．２０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，Ｊ＝２Ｈｚ），７．１９（１Ｈ，ｓ），６．９４（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝９Ｈｚ，Ｊ＝２），６．３０（１Ｈ　ｂｒ　ｔ），３．６７（２Ｈ，ｓ），３．５６（２ｈ，ｔ，Ｊ＝６ｈｚ），３．４０（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６Ｈｚ），３．３２（４Ｈ，ｂｒ　ｔ，Ｊ＝６Ｈｚ），３．１０（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ），２．８８（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ），１．７９（２Ｈ，ｐ，Ｊ＝６Ｈｚ），１．７２（２Ｈ，ｂｒ　ｍ），１．６４（２Ｈ，ｐ，Ｊ＝６Ｈｚ），１．４４（２Ｈ，ｍ），１．３６（２Ｈ，ｍ）；１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，遊離塩基）ｄ１７１．２，１２５．７，１１２．１，１１２．０，１１０．８，１１０．４，１０４．４，１０３．８，１０３．５，７１．０，７０．９，７０．０，６９．４，３９．９，３８．５，３３．４，３２．９，２８．８，２６．５，２６．４。
【０２２１】
【化４９】
2004002437.tif 000035
【０２２２】
化合物１３〜１８は，前記に従って標準的な方法で合成した。
【０２２３】
実施例２９：単純化されたアリールアルキルアミン類の合成
化合物２０の合成は，以下のとおり行った：　水素化ナトリウム（１．２１ｇ，５０ｍｍｏｌ）のジメトキシエタン中溶液をシアノメチルホスホン酸ジエチル（８．８６ｇ，５０ｍｍｏｌ）で処理し，該反応を室温で４時間撹拌した。これにＤＭＥ中の３，３’−ジフルオロベンゾフェノン（１０ｇ，４６ｍｍｏｌ）を添加した。該反応を室温で２４時間撹拌し，Ｈ２Ｏでクエンチし，ジエチルエーテルおよび水に分配させた。エーテルフラクションをＮａ２ＳＯ４で乾燥させ，濃縮した。この物質のＧＣ−ＭＳは，生成物Ａ　９０％および出発ベンゾフェノン１０％を示した。
【０２２４】
この物質の，触媒量のＰｄ（ＯＨ）２を有するエタノール中溶液を，室温で４時間，５５ｐ．ｓ．ｉ．水素で水素添加した。該反応を濾過し，触媒をエタノール（３回）で洗浄した。濾液およびエタノール洗液を合わせ，濃縮した。この物質のＧＣ−ＭＳは，生成物Ｂ　９０％および出発ベンゾフェノン１０％を示した。
【０２２５】
この物質のＴＨＦ中溶液をＴＨＦ中の１Ｍ　Ｂ２Ｈ６　７０ｍＬ（７０ｍｍｏｌ）で処理し，１時間還流した。冷却後，該反応を６Ｎ　ＨＣｌ（５０ｍＬ）で処理し，さらに１時間還流させた。冷却後，該反応を１０Ｎ　ＮａＯＨでｐＨ１４に塩基性化し，エーテルで平衡化させた。エーテル層を取り出し，１０％ＨＣｌで洗浄した。酸性洗液を合わせ，１０Ｎ　ＮａＯＨでｐＨ１４に塩基性化し，ジクロロメタン（３回）で抽出した。有機洗液を合わせ，Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ，濃縮して，油状物を得た。この物質のＧＣ−ＭＳは，化合物２０　１００％を示した。ＧＣ−ＥＩＭＳ（Ｒｔ＝７．１１分）ｍ／ｚ（相対強度）２４７（Ｍ＋，３１），２３０（１００），２１５（３０），２０１（５２），１８３（６３），１３４（２３），１２１（１６），１０１（２１），９５（１５），７７（１５）。ジエチルエーテル中のこの物質を濾過し，エーテル中１Ｍ　ＨＣｌ　３５ｍＬで処理した。沈殿物を回収し，乾燥させ，水−エタノールから再結晶して，塩酸塩として化合物２０（１．０４５ｇ）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）ｄ　８．２８（３Ｈ，ｂｒ　ｓ），７．２８−７．１７（２Ｈ，ｍ），７．０２−６．８６（６Ｈ，ｍ），４．１１（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ），２．８９（２Ｈ，ｂｒ　ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ），２．４８（２Ｈ，ｂｒ　ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ）；１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）ｄ　１６４．６，１６１．３，１４４．８，１４４．７，１３０．４，１３０．３，１２３．３，１２３．２，１１４．７，１１４．５，１１４．１，１１３．８，４７．４，３８．４，３２．７。
【０２２６】
【化５０】
2004002437.tif 000036
【０２２７】
化合物２１，化合物３３および化合物３４の合成を以下のとおり行った：
撹拌棒，隔壁，およびアルゴン原料を装着した１００ｍｌの丸底フラスコに，ＴＨＦ　３０ｍＬ中の化合物１（２．４３ｇ，１０ｍｍｏｌ）を充填した。該溶液を−７８℃に冷却し，１Ｍ（ＴＨＦ）リチウムビス（トリメチルシリル）アミド１１ｍＬ（１１ｍｍｏｌ）で滴下処理した。該反応を−７８℃で３０分間撹拌し，過剰のヨードメタン（５０ｍｍｏｌ，３．１ｍＬ）で滴下処理した。該反応を−５８℃で３０分間撹拌した。該反応からのアリコートのＧＣ−ＥＩ−ＭＳ分析は，出発ニトリル１の消費を示した。該反応を水でクエンチし，ジエチルエーテルで希釈し，分液漏斗に移した。エーテル層を１０％ＨＣｌ（３回），食塩水（１回）で洗浄し，無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ，茶色の油状物に濃縮した。この物質を，減圧下，蒸留して（クーゲロール，１００℃），透明な油状物１．５ｇを得た。この物質のＧＣ−ＥＩ−ＭＳは，所望の生成物２を含有することを示した。（Ｒｔ＝７．３５分）ｍ／ｚ（相対強度）２５７（Ｍ＋，３），２０３（１００），１８３（５９），１７０（５），１３３（４），１０９（３）；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）７．４−６．９（８Ｈ，ｍ），４．０１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０Ｈｚ），３．３８（１Ｈ，ｄｑ，Ｊ＝７，１０Ｈｚ），１．３２（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ）；１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）１９．４，３０．５，５４．２，１１４．５，１１４．６，１１４．７，１１４．９，１１５．０，１１５．３，１２３．３，１２３．４，１２３．６，１２３．７，１３０．５，１３０．６，１３１．７。
【０２２８】
６０ｐ．ｓ．ｉ．水素下，ＥｔＯＨ：水酸化ナトリウム水溶液（２当量）（９５：５）中，ラニーニッケルを用いて，２の触媒反応によって，生成物３を合成した。ＧＣ−ＥＩ−ＭＳ（Ｒｔ＝７．２５分）ｍ／ｚ（相対強度）２６１（Ｍ＋，２０），２４４（３５），２２９（１６），２１５（１７），２０１（８０），１８３（１００），１３３（４２），１１５（２７），１０９（４７），９５（２０）；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）７．３−６．８（８Ｈ，ｍ），３．６２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０Ｈｚ），２．７０（１Ｈ，Ｍ），２．４０（２Ｈ，ｍ），１．７３（２Ｈ，ｍ），０．９１（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ）。この反応シーケンスにおける生成物３が化合物２１と一致することに注意する。
【０２２９】
１０％ＩＰＡ−ヘキサン（１００ｍｇ／ｍＬ）中の生成物２を，アリコート５００μＬで，１０ｍｌ／分で１０％ＩＰＡ−ヘキサンを用いてＣｈｉｒａｌ　Ｃｅｌ　ＯＤ（２．０×２５ｃｍ）を介してクロマトグラフィーに付して，２５４ｎｍでの光学密度を測定した。これにより，２つの光学的に純粋な鏡像異性体４および５を得た（分析用キラルＨＰＬＣによって測定した；これら２つの化合物の立体化学がこの時に挙げられていなかったことに注意する）。これら２つの化合物は，それらのＧＣ−ＥＩ−ＭＳおよび１Ｈ−ＮＭＲスペクトルにおいて生成物２（前記データ）と同一であった。
【０２３０】
鏡像異性体４および５の各々は，以下の方法で，ジメチルスルフィド−ボラン複合体を用いて別々に分割された。化合物（４または５）のＴＨＦ中溶液を加熱還流し，過剰（２当量）の１Ｍ（ＴＨＦ中）ジメチルスルフィド−ボラン複合体で処理し，該反応を３０分間還流した。この後，該反応を０℃に冷却し，６Ｎ　ＨＣｌで処理した。該反応を３０分間還流させた。この後，該反応を分液漏斗に移し，１０Ｎ　ＮａＯＨでｐＨ＞１２に塩基性化し，生成物（６または７）をエーテル中に抽出した。エーテル層を食塩水で洗浄し，無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ，油状物に濃縮した。生成物を５％メタノール−クロロホルムを用いて分取用ＴＬＣによって精製した。個々の鏡像異性体の各々（６および７）は，それらのＧＣ−ＥＩ−ＭＳおよび１Ｈ−ＮＭＲスペクトルにおいて生成物３（前記データ）と同一であることが判明した。このスキームにおける生成物６および７は，化合物３３および３４と一致することが判明した。
【０２３１】
【化５１】
2004002437.tif 000037
【０２３２】
化合物２２の合成は，以下のとおり行った。化合物２３は，同様の方法で合成した。
水素化ナトリウム（３．０７ｇ，７６．８ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド３５０ｍＬ中懸濁液にホスホノ酢酸トリエチル（１７．２ｇ，７６．８ｍｍｏｌ）をゆっくりと添加した。１５分後，該溶液に３，３’−ジフルオロベンゾフェノン（１５．２ｇ，６９．８ｍｍｏｌ）を添加し，さらに１８時間撹拌した。該反応混合物を水でクエンチし，水およびエーテルに分配した。合わせた有機層を食塩水で洗浄し，無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶媒を真空蒸発させて，黄色油状物として３，３−ビス（３−フルオロフェニル）アクリル酸エチル１９．７ｇを得た。
【０２３３】
３，３−ビス（３−フルオロフェニル）アクリル酸エチル（１９．７ｇ，６８．４ｍｍｏｌ）のエタノール２００ｍＬ中溶液に水酸化パラジウム−炭（３．５ｇ）を添加した。該混合物を６０ｐｓｉの水素下で３時間振盪し，次いで，濾過し，真空蒸発させて，無色油状物として生成物Ａ　１９．５ｇを得た。
【０２３４】
エチルエーテルＡ（１９．２ｇ）を，１０Ｎ水酸化ナトリウム５０ｍＬと一緒に６日間撹拌することによって加水分解した。次いで，該反応混合物を水５０ｍＬで希釈し，濃ＨＣｌでｐＨ０に酸性化した。水性混合物をエーテルで３回抽出し，該エーテル抽出物を硫酸マグネシウムで乾燥させ，蒸発させて，白色粉末として３，３−ビス（３−フルオロフェニル）プロピオン酸を得た。
【０２３５】
３，３−ビス（３−フルオロフェニル）プロピオン酸（１３ｇ，４９．６ｍｍｏｌ）を塩化チオニル５０ｍＬ（６８５ｍｍｏｌ）に溶解させ，室温で一晩撹拌した。過剰の塩化チオニルを回転式エバポレーターで真空除去して，黄色油状物として生成物Ｂ（１３．７ｇ）を得た。
【０２３６】
乾燥ＴＨＦ（１００ｍＬ）に溶解させた酸塩化物Ｂ（１３．７ｇ，４９ｍｍｏｌ）に鉄（ＩＩＩ）アセチルアセトナート（０．５２ｇ，１．４７ｍｍｏｌ）を添加した。次いで，塩化メチルマグネシウム（１６．３ｍＬ，４９ｍｍｏｌ）をシリンジポンプによって１時間かけて添加した。該反応をさらに１時間撹拌し，次いで，エーテル／５％ＨＣｌ中に添加することによってクエンチした。エーテル層を分離し，５％ＨＣｌおよび飽和ＮａＣｌで洗浄し，硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を真空蒸発させて，黄色油状物として４，４−ビス（３−フルオロフェニル）−２−ブタノンを得た。粗製油状物を，溶離液としてヘプタン／酢酸エチルを用いてシリカゲル上で精製した。
【０２３７】
エタノール２．５ｍＬ中の４，４−ビス（３−フルオロフェニル）−２−ブタノン（５．７ｇ，２１．９ｍｍｏｌ）にピリジン（１．９１ｇ，２４．１ｍｍｏｌ）およびメトキシルアミン塩酸塩（２．０１ｇ，２４．１ｍｍｏｌ）を添加した。該反応を室温で一晩撹拌し，エーテル／５％ＨＣｌ中に注いだ。エーテル層を分離し，５％ＨＣｌおよび飽和ＮａＣｌで洗浄し，硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を真空蒸発させて，４，４−ビス（３−フルオロフェニル）−２−ブタノンのＯ−メチルオキシム６．２６ｇを得た。
【０２３８】
ＴＨＦ（１５ｍＬ）中のホウ水素化ナトリウム（４．１ｇ，１０８．３ｍｍｏｌ）に四塩化ジルコニウム（６．３１ｇ，２７．１ｍｍｏｌ）をゆっくりと添加した。この混合物を１５分間撹拌し，ＴＨＦ（６ｍＬ）中のオキシム（６．２６ｇ，２１．７ｍｍｏｌ）を５分間かけて添加した。室温で３時間撹拌した後，該反応を５０ｍＭ水酸化ナトリウム，次いで，エーテルをゆっくりと添加することによって後処理した。水性層をエーテルで４回抽出し，合わせたエーテル抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を真空蒸発させて，化合物２２（５．３ｇ）を得た。
【０２３９】
【化５２】
2004002437.tif 000038
【０２４０】
化合物２４の合成を以下のとおり行った。化合物２５〜２９は，同様の方法で製造した。
マグネシウム屑（０．９５ｇ，３９．２ｍｍｏｌ）の無水ジエチルエーテル１５０ｍｌ中懸濁液を１−ブロモ−３−フルオロベンゼン（６．８３ｇ，３９．２ｍｍｏｌ）をシリンジを介して滴下処理した。１．５時間後，該溶液を，０℃の無水ジエチルエーテル１００ｍｌ中のｏ−アニスアルデヒド（５．０ｇ，３６．７ｍｍｏｌ）を含有するフラスコにカニューレを介して移し，２時間撹拌した。該反応混合物を水を用いてクエンチし，水およびエーテルに分配した。合わせた有機層を食塩水で洗浄し，無水硫酸マグネシウムで乾燥させて，生成物Ａ（７．９０ｇ）（収率９３％）を得た。
【０２４１】
アルコールＡ（７．９０ｇ，３４．０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン１００ｍｌ中溶液にジクロム酸ピリジニウム（１６．０ｇ，４２．５ｍｍｏｌ）を添加し，該反応を２時間撹拌した。該反応混合物にジエチルエーテル３００ｍｌを添加し，黒色溶液を３０ｃｍのシリカゲルプラグを介して濾過し，さらにエーテル５００ｍｌで洗浄した。真空中，溶媒の蒸発の後，固体をアセトンから再結晶して，生成物Ｂ（７．４５ｇ）（収率９５％）を得た。
【０２４２】
水素化ナトリウム（１．５８ｇ，３９．５ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド１００ｍｌ中懸濁液にシアノメチルホスホン酸ジエチル（７．０ｇ，３９．５ｍｍｏｌ）を添加した。３０分後，該溶液にケトンＢを添加し，さらに２時間撹拌した。該反応混合物を水でクエンチし，水およびエーテルに分配した。合わせた有機層を食塩水で洗浄し，無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶媒を真空蒸発させて，薄黄色油状物を得た。
【０２４３】
ガラスボンベ中，該油状物をエタノール１００ｍｌおよび１０Ｎ　ＮａＯＨ（２０ｍｌ）に溶解させた。該溶液に，水に懸濁した触媒量のラニーニッケル（約１５モル％）を添加した。該反応混合物を，パー・ハイドロジェネーター（Ｐａｒｒ　Ｈｙｄｒｏｇｅｎａｔｏｒ）で１２時間，６０ｐ．ｓ．ｉ．Ｈ２下で振盪した。過剰のラニーニッケルを濾去した後，該溶液をクロロホルムで抽出した。合わせた有機層を食塩水で洗浄し，無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。濾過後，該油状物をクロロホルムおよびメタノール中でシリカゲルカラムに付した。溶媒を真空蒸発させて，薄黄色油状物を得た。ＧＣ−ＥＩＭＡ（Ｒｔ＝８．１０分）ｍ／ｚ（相対強度）２５９（１００），２４２（４４），２１３（４８），１８３（４２），１３６（５０），１０９（９４），９１（６０），７７（２５）。次いで，油状物をジエチルエーテル中の塩化水素で酸性化した。エーテルを蒸発させて，薄黄色固体を得，これを熱アセトニトリル中で再結晶して，化合物２４（白色針状物）３．４５ｇ（収率４２．１％）を得た。
【化５３】
2004002437.tif 000039
【０２４４】
化合物３０の合成を以下のとおり行った。化合物３１は，同様の方法で製造した。
無水ジエチルエーテル１５０ｍｌ中にマグネシウム屑（０．９５ｇ，３９．１ｍｍｏｌ）を含有する懸濁液に１−ブロモ−３−フルオロベンゼン（６．８５ｇ，３９．１ｍｍｏｌ）をシリンジを介して滴下処理した。１．５時間後，該溶液を，０℃の無水ジエチルエーテル１００ｍｌ中の３−クロロベンズアルデヒド（５．０ｇ，３５．６ｍｍｏｌ）を含有するフラスコにカニューレを介して移し，２時間撹拌した。該反応混合物を水を用いてクエンチし，水およびエーテルに分配した。合わせた有機層を食塩水で洗浄し，無水硫酸マグネシウムで乾燥させて，生成物Ａ（８．４０ｇ）（収率＞９９％）を得た。
【０２４５】
アルコールＡ（８．４０ｇ，３５．５ｍｍｏｌ）のジクロロメタン１００ｍｌ中溶液にクロロクロム酸ピリジニウム（１５．０ｇ，３９．８ｍｍｏｌ）を添加し，１８時間撹拌した。該反応混合物にジエチルエーテル３００ｍｌを添加し，黒色溶液を３０ｃｍのシリカゲルプラグを介して濾過し，さらにエーテル５００ｍｌで洗浄した。溶媒の蒸発後，固体をアセトンから再結晶して，生成物Ｂ（６．３１ｇ）（収率７６％）を得た。
【０２４６】
水素化ナトリウム（１．２ｇ，２９．６ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド１００ｍｌ中懸濁液にシアノメチルホスホン酸ジエチル（５．２ｇ，２９．６ｍｍｏｌ）をゆっくりと添加した。３０分後，該溶液にケトンＢを添加し，さらに６時間撹拌した。該反応混合物を水でクエンチし，水およびエーテルに分配した。合わせた有機層を食塩水で洗浄し，無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶媒を真空蒸発させて，黄色固体を得た。
【０２４７】
ガラスボンベ（ｇｌａｓｓ　ｂｏｍｂ）中，該油状物をエタノール１００ｍｌおよび１０ＮＮａＯＨ（２０ｍｌ）に溶解させた。該溶液に，アルミナ上で懸濁した触媒量のロジウム（約３５モル％）を添加した。該反応混合物を，パー・ハイドロジェネーターで２４時間，６０ｐ．ｓ．ｉ．Ｈ２下で振盪した。過剰のロジウムを濾去した後，該溶液をクロロホルムで抽出した。合わせた有機層を食塩水で洗浄し，無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。濾過および真空中の溶媒の蒸発の後，油状物をテトラヒドロフラン１００ｍｌ中に取った。ジボラン（２３．４ｍｌ，１．０Ｍ）を添加し，溶液を１．５時間還流した。溶媒を真空蒸発し，６Ｎ　ＨＣｌ（５０ｍｌ）を注意深く添加した。該溶液を１時間還流した。冷却した後，該混合物を１０Ｎ　ＮａＯＨでｐＨ１４に塩基性化し，ジクロロメタンおよび水に分配した。合わせた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ，濾過した。溶媒の蒸発後，黄色油状物をクロロホルムおよびメタノール中でシリカゲルカラムに付した。溶媒を真空蒸発して，黄色油状物を得た。ＧＣ−ＥＩＭＳ（Ｒｔ＝８．１５分）ｍ／ｚ（相対強度）２６３（１７），２４６（２１），２１１（８４），１９６（３３），１８３（１００），１６５（１９），１３３（１９）。次いで，該油状物をジエチルエーテル中の塩化水素で酸性化した。エーテルを蒸発して，化合物３０（白色固体）０．９６ｇを得た。
【０２４８】
【化５４】
2004002437.tif 000040
【０２４９】
化合物３５の合成を以下のとおり行った。化合物３６〜３７は，同様の方法で製造した。
０℃の３−フルオロベンズアルデヒド（３．０ｇ，２４．２ｍｍｏｌ）のジエチルエーテル１５０ｍｌ中溶液をテトラヒドロフラン中３．０Ｍ塩化エチルマグネシウム（１２．７ｍｌ，２５．４ｍｍｏｌ）でシリンジを介して処理した。４時間後，該反応混合物を水でクエンチし，水およびエーテルに分配した。合わせた有機層を食塩水で洗浄し，無水硫酸マグネシウムで乾燥させて，生成物Ａ（４．２５ｇ）を得た。
【０２５０】
Ａのジクロロメタン中溶液にクロロクロム酸ピリジニウム（６．３５ｇ，３０．３ｍｍｏｌ）を添加し，１８時間撹拌した。該反応混合物にジエチルエーテル３００ｍｌを添加し，黒色溶液を３０ｃｍのシリカゲルプラグを介して濾過し，さらにエーテル５００ｍｌで洗浄した。溶媒の蒸発後，固体をアセトンから再結晶して，生成物Ｂ（３．０５ｇ）を得た。溶媒を真空蒸発させて，薄黄色油状物を得た。
【０２５１】
水素化ナトリウム（１．１ｇ，２６．４ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド１００ｍｌ中懸濁液にシアノメチルホスホン酸ジエチル（４．７ｇ，２６．４ｍｍｏｌ）を添加した。３０分後，該溶液にケトンＢを添加し，さらに６時間撹拌した。該反応混合物を水でクエンチし，水およびエーテルに分配した。合わせた有機層を食塩水で洗浄し，無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶媒を真空蒸発させて，黄色油状物を得た。
【０２５２】
ガラスボンベ中，該油状物をエタノール１００ｍｌおよび１０Ｎ　ＮａＯＨ（２０ｍｌ）に溶解させた。該溶液に，水に懸濁した触媒量のラニーニッケル（約１５モル％）を添加した。該反応混合物を，パー・ハイドロジェネーターで２４時間，６０ｐ．ｓ．ｉ．Ｈ２下で振盪した。過剰のラニーニッケルを濾去した後，該溶液をクロロホルムで抽出した。合わせた有機層を食塩水で洗浄し，無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。濾過後，該油状物をクロロホルムおよびメタノール中でシリカゲルカラムに付した。溶媒を真空蒸発して，薄黄色油状物を得た。ＧＣ−ＥＩＭＳ（Ｒｔ＝３．４５分）ｍ／ｚ（相対強度）１６７（４），１５０（６３），１３５（５８），１０９（１００），９６（５３），７５（４８）。次いで，該油状物をジエチルエーテル中の塩化水素で酸性化した。エーテルの蒸発により，薄黄色固体が得られ，これを熱アセトニトリル中で再結晶して，化合物３５（２．２ｇ）を得た。
【０２５３】
【化５５】
2004002437.tif 000041
【０２５４】
化合物３８の合成を以下のとおり行った。
３，３−ビス（３−フルオロフェニル）プロピオニトリル（１．５ｇ，６．１７ｍｍｏｌ）の−７０℃のＴＨＦ　２５０ｍＬ中懸濁液にブチルリチウム（ヘキサン中４．２５ｍＬ，６．８ｍｍｏｌ）をシリンジによって５分間かけて添加した。該溶液を５分間撹拌し，次いで，ヨウ化メチル（１．７５ｇ，１２．３ｍｍｏｌ）を１分間かけて添加した。次いで，該反応混合物を室温に加温した。エーテルで希釈し，５％ＨＣｌおよび水で希釈することによって後処理した。エーテル層を硫酸ナトリウムで乾燥させ，蒸発させて，黄色油状物としてメチル化したニトリル１．５ｇを得た。
【０２５５】
０℃のジクロロメタン５０ｍＬ中の３，３−ビス（３−フルオロフェニル）−２−メチルプロピオニトリル（１．４６ｇ，５．７ｍｍｏｌ）に水素化ジイソブチルアルミニウム（１．０２ｍＬ，５．７ｍｍｏｌ）をシリンジによって１０分間かけて添加した。該反応を０℃で３０分間，次いで，室温でさらに２時間撹拌した。該反応を，１０％ＨＣｌ（２００ｍＬ）を添加することによって後処理し，４０℃で３０分間撹拌し，次いで，該生成物をジクロロメタンで抽出した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ，蒸発させて，生成物Ａ（１．３６ｇ）を得た。
【０２５６】
アルデヒドＡ（１．３６ｇ，５．２３ｍｍｏｌ）の０℃のエーテル４０ｍＬ中溶液に臭化メチルマグネシウム（エーテル中５．２３ｍＬ，５．２３ｍｍｏｌ）を添加した。該反応を室温で３時間撹拌し，次いで希ＨＣｌでクエンチした。エーテル層を分離し，硫酸ナトリウムで乾燥させ，蒸発して，４，４−ビス（３−フルオロフェニル）−３−メチルブタン−２−オール１．４８ｇを得た。
【０２５７】
アルコール（１．４ｇ，５．０７ｍｍｏｌ）のジクロロメタン３００ｍＬ中溶液にクロロクロム酸ピリジニウム（１．２ｇ，５．５８ｍｍｏｌ）を添加し，該混合物を一晩撹拌した。次いで，該反応をエーテル１００ｍＬで希釈し，セライトプラグを介して濾過した。溶媒を蒸発させて，生成物Ｂ（１．３９ｇ）を得た。
【０２５８】
メトキシルアミン塩酸塩（０．４５ｇ，５．３８ｍｍｏｌ）およびピリジン（０．４４ｍＬ，５．３８ｍｍｏｌ）のエタノール３０ｍＬ中溶液にケトンＢ（１．３ｇ，４．９ｍｍｏｌ）を添加し，一晩撹拌した。次いで，エタノールを蒸発し，残留物をエーテルおよび１０％ＨＣｌ中に取った。エーテル層を分離し，１０％ＨＣｌで１回洗浄し，硫酸ナトリウムで乾燥し，蒸発して，Ｏ−メチルオキシム１．４ｇを得た。
【０２５９】
ホウ水素化ナトリウム（０．８７ｇ，２３．１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５ｍＬ）中懸濁液に四塩化ジルコニウム（１．３５ｇ，５．８ｍｍｏｌ）を添加し，該溶液を１５分間撹拌し，次いで，さらにＴＨＦ　５ｍＬを添加した。次いで，ＴＨＦ（５ｍＬ）中のＯ−メチルオキシム（１．４ｇ，４．６ｍｍｏｌ）を添加し，該混合物を一晩撹拌した。ＴＨＦを真空蒸発によって除去し，残留物を１０％水酸化ナトリウムで処理した。発泡が止んだ後，エーテルを添加し，層を分離した。水性層をエーテルで４回抽出し，合わせたエーテル抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥させた。エーテルを蒸発させて，化合物３８（１．２５ｇ）を得た。
【０２６０】
【化５６】
2004002437.tif 000042
【０２６１】
化合物３２および化合物３９〜５３を前記の標準的な方法に従って合成した。
【０２６２】
実施例３０：合成したアリールアルキルアミン類の生物特性
実施例２８および実施例２９に記載に従って合成した化合物を実施例に詳述した種々の生物特性について試験した。
【０２６３】
第１表
【表１】
2004002437.tif 000043
【表２】
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【表３】
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【０２６４】
ＲＣＧＣアッセイにおけるＩＣ５０値の［３Ｈ］ＭＫ−８０１結合アッセイにおけるＩＣ５０値との比較は，本発明のアリールアルキルアミン類がＭＫ−８０１結合部位への結合のものとは異なるメカニズムによるＮＭＤＡ受容体活性を阻害することを示す。ＮＭＤＡ受容体機能を阻害する化合物の濃度は，［３Ｈ］ＭＫ−８０１によって標識された部位で競合する濃度よりも数桁低い。しかしながら，これは，化合物１９〜５３によって例示された単純化アリールアルキルアミン類についてまったくない。かかる化合物は，ラット小脳顆粒細胞アッセイにおいてＮＭＤＡ受容体媒介性機能を拮抗するものよりも約１〜５０倍高い範囲の濃度で［３Ｈ］ＭＫ−８０１によって標識された部位に結合する。
【０２６５】
第２表
【表４】
2004002437.tif 000046
【０２６６】
本発明のアリールアルキルアミン化合物類の優れた特性は，ＮＭＤＡ受容体媒介性シナプス伝達を抑制する濃度がＬＴＰを阻害しないという事実によって示される。さらにまた，化合物９および１１などの化合物は，ラットにおける全身系投与の後に血圧降下応答を生じるが，これらの化合物によって生じた血圧降下効果は，比較的短期間のものである（約３０分間）。さらに，化合物１２および１４は，各々，３７．３μｍｏｌ／ｋｇ　ｉ．ｖ．および１５μｍｏｌ／ｋｇ　ｉ．ｖ．までの投与量で心臓血管活性を有しない。
【０２６７】
製剤化および投与
ここで説明するように，本発明の有用な化合物およびそれらの医薬的に許容される塩は，神経障害または神経病を試験するのに用いられる。これらの化合物は，典型的には，ヒト患者のための治療において用いられるが，それらは，他の霊長類，ブタ，ウシおよび家禽などの家畜動物，ウマ，イヌおよびネコなどのスポーツ動物ならびにペットのような他の脊椎動物における類似のまたは同一の疾患を治療するためにも用いられる。
【０２６８】
治療用および／または診断用用途において，本発明化合物は，全身および局所または局在化投与を含む種々の投与の形態のために製剤化することができる。技術および製剤化は，一般的に，レミントンズ・ファーマシューティカル・サイエンシズ（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）［マック・パブリッシング・カンパニー（Ｍａｃｋ　Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ　Ｃｏ．），ペンシルベニア州イーストン］に開示されている。
【０２６９】
正確な製剤化，投与経路および投与量は，患者の症状を考慮して個々の医師によって選択され得る。（例えば，フィングル（Ｆｉｎｇｌ）ら，ザ・ファーマコロジカル・ベイシス・オブ・セラピューティクス（Ｔｈｅ　Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｂａｓｉｓ　ｏｆ　Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ），１９７５，第１章，第１頁を参照）。
【０２７０】
診療する医師は，毒性または臓器不全のために，投与を停止，中断または調節する方法および時を知っているだろうということに注意すべきである。逆に言えば，診療する医師は，臨床的応答が充分ではなかった場合，治療をより高いレベルに調節すること（毒性を排除しつつ）も知っているであろう。関心のある腫瘍形成性障害の管理において投与された投与量の多さは，治療されるべき症状の重篤度および投与経路によって変わるであろう。症状の重篤度は，例えば，標準的な予後評価方法によって部分的に評価されてもよい。さらに，投与量およびおそらく投与回数は，個々の患者の年齢，体重，および応答に従っても変わるであろう。前記で検討したものと同一のプログラムを獣医学において用いてもよい。
【０２７１】
治療される特異的な症状によって，かかる薬剤は，全身的または局所的に製剤化および投与されてもよい。製剤化および投与の技術は，レミントンズ・ファーマシューティカル・サイエンシズ［マック・パブリッシング・カンパニー，ペンシルベニア州イーストン］に開示されている。好適な経路としては，いくつか挙げるとすれば，経口，直腸，経皮，膣，経粘膜，または腸投与；筋肉内，皮下，髄内注射，および，鞘内，直接脳室内，静脈内，腹腔内，鼻腔内，または眼内注射を含む非経口デリバリーが挙げられる。
【０２７２】
注射については，本発明の薬剤は，水溶液中で，好ましくは，ハンクス溶液，リンゲル溶液，または生理食塩緩衝液などの生理学的に適合する緩衝液中で製剤化される。かかる経粘膜投与については，透過されるべきバリヤーに適切な浸透剤が製剤化において用いられる。
【０２７３】
本発明のプラクティスについて記載した化合物を全身系投与に適当な投薬に製剤化するための医薬的に許容される担体の使用は，本発明の範囲内である。担体および好適な製造業務の正しい選択について，本発明の組成物，特に，溶液として製剤化された組成物は，静脈内注射によるような非経口投与される。該化合物は，当該技術分野でよく知られている医薬的に許容される担体を用いて経口投与に適切な投薬に容易に製剤化することができる。かかる担体は，本発明の化合物を，治療されるべき患者による経口摂取のための錠剤，丸剤，カプセル剤，液剤，ゲル剤，シロップ剤，スラリー剤，懸濁液剤として製剤化することを可能にする。
【０２７４】
細胞内投与される予定の薬剤は，当業者によく知られている技術を用いて投与される。例えば，かかる薬剤は，リポソーム中に被包され，前記のとおり投与される。リポソームは，水性内部を有する球状の脂質二層構造である。リポソーム形成時に水溶液中に存在する全ての分子は，水性内部に取り込まれる。リポソーム内容物は，共に，外部の微小環境から保護されており，リポソームは，細胞膜と融合するので，細胞質中に有効に運搬される。さらに，それらの疎水性のために，小さな有機分子は，直接細胞内投与される。
【０２７５】
本発明の使用に好適な医薬組成物としては，活性成分がその予定の目的を達成するために有効な量で含有される組成物が挙げられる。有効量の決定は，特に，ここで挙げられた詳細な説明を考慮にいれて，当業者の能力内である。
【０２７６】
該活性成分に加えて，これらの医薬組成物は，活性化合物の医薬的に使用することができる調製物への加工処理を促進する賦形剤および補助剤からなる好適な医薬的に許容される担体を含有する。経口投与のために製剤化された調製物は，錠剤，糖衣丸，カプセル剤または溶液剤の形態であってもよい。
【０２７７】
本発明の医薬組成物は，自体公知の方法で，例えば，慣用の混合，溶解，顆粒化，糖衣丸調製，すりつぶし，乳化，被包化，エントラッピングまたは凍結乾燥プロセスによって，調製される。
【０２７８】
非経口投与用医薬製剤としては，水溶性形態の活性化合物の水溶液が挙げられる。さらに，活性化合物の懸濁液は，適切な油性注射用懸濁液として調製される。好適な凍結乾燥溶媒または賦形剤としては，ゴマ油などの脂肪油，または，オレイン酸エチルまたはトリグリセリドなどの合成脂肪酸油，またはリポソームが挙げられる。水性注射用懸濁液は，カルボキシメチルセルロースナトリウム，ソルビトールまたはデキストランなどの懸濁液の粘性を増加させる物質を含有してもよい。所望により，懸濁液は，好適な安定化剤または非常に濃縮した溶液を調製させるために化合物の溶解性を増加させる薬剤を含有してもよい。
【０２７９】
経口用医薬組成物は，活性化合物を固体賦形剤と混合し，所望により，得られた混合物を摩砕し，顆粒の混合物を加工処理することにより，所望により錠剤または糖衣丸を得るために好適な補形剤を添加した後，得ることができる。好適な賦形剤は，特に，ラクトース，シュークロース，マンニトールまたはソルビトールを含む糖などの充填剤；セルロース調製物，例えば，トウモロコシデンプン，小麦デンプン，米デンプン，ジャガイモデンプン，ゼラチン，トラガカントガム，メチルセルロース，ヒドロキシプロピルメチルセルロース，カルボキシメチルセルロースナトリウム，および／またはポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）である。所望により，架橋ポリビニルピロリドン，寒天，またはアルギン酸もしくはアルギン酸ナトリウムのようなその塩などの崩壊剤を添加してもよい。
【０２８０】
糖衣丸コアに好適なコーティングを付す。この目的のために，濃縮された糖溶液を用い，所望により，アラビアガム，タルク，ポリビニルピロリドン，カルボポールガム，ポリエチレングリコール，および／または二酸化チタン，ラッカー溶液，ならびに好適な有機溶媒または溶媒混合物を含有してもよい。同定のため，または，活性化合物投薬の異なる組合せを特徴付けるために，錠剤または糖衣丸コーティングに染料または顔料を添加してもよい。
【０２８１】
経口用に用いることができる医薬調製物としては，ゼラチンから作られたプッシューフィットカプセル，ならびにゼラチンから作られた軟らかなシールドカプセル，およびグリセロールまたはソルビトールなどの可塑剤が挙げられる。プッシューフィットカプセルは，活性成分を，ラクトースなどの充填剤，デンプンなどの結合剤，および／またはタルクまたはステアリン酸マグネシウムなどの滑沢剤，および，所望により，安定化剤と混合して含有することができる。軟カプセルにおいては，活性成分は，脂肪油，液体パラフィン，または液体ポリエチレングリコールなどの好適な液体中に溶解または懸濁させてもよい。さらに，安定化剤を添加してもよい。
【０２８２】
他の具体例は，以下の請求の範囲内である。