(57)【要約】【課題】生理活性の高い共役脂肪酸を含む家畜肉及び家禽卵、これらを得るための安全な飼料、並びに、該家畜肉又は該家禽卵から得られる共役脂肪酸又は共役脂肪酸含有油脂を提供すること。【解決手段】苦瓜又は苦瓜由来物を含有する飼料、該飼料を与えて飼育された家禽から得られる共役リノール酸含有家禽卵、該飼料を与えて飼育された家畜から得られる共役リノール酸含有家畜肉、及び、該家禽卵又は該家畜肉から得られる、共役リノール酸又は共役リノール酸含有油脂。【選択図】      なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
苦瓜又は苦瓜由来物を含有する飼料。
【請求項２】
上記苦瓜由来物が、苦瓜種子胚そのもの、又は裁断若しくは破砕することによって任意の大きさに調製した苦瓜種子胚である請求項１記載の飼料。
【請求項３】
上記苦瓜由来物が、苦瓜種子胚から得られた、苦瓜種子胚油若しくはα−エレオステアリン酸である請求項１記載の飼料。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれかに記載の飼料を与えて飼育された家禽から得られる共役リノール酸含有家禽卵。
【請求項５】
請求項１〜３のいずれかに記載の飼料を与えて飼育された家畜から得られる共役リノール酸含有家畜肉。
【請求項６】
請求項４記載の家禽卵又は請求項５記載の家畜肉から得られる、共役リノール酸又は共役リノール酸含有油脂。
【請求項７】
請求項４記載の家禽卵又は請求項５記載の家畜肉を原料とする医薬品、化粧品又は飲食品。
【請求項８】
請求項６記載の共役リノール酸又は共役リノール酸含有油脂を含有する医薬品、化粧品又は飲食品。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、共役リノール酸を含有する家禽卵又は家畜肉に関し、さらに該家禽卵又は家禽肉を生産するための飼料に関する。
【０００２】
【従来の技術】
近年、様々な生理活性作用を有する機能性物質として注目されている共役脂肪酸は、分子内に共役二重結合を有する脂肪酸の総称であり、反芻動物由来の食品中、  特に牛乳やチーズ等には、微量に共役リノール酸が存在している。この共役リノール酸は、抗癌作用、抗動脈硬化作用等の様々な生理作用を持つことがよく知られている（非特許文献１参照）。しかし、この共役リノール酸は、微量にしか存在しないとともに、極めて酸化されやすい性質を有するため、その活用が充分されていないのが現状である。
【０００３】
従来、共役リノール酸等の共役脂肪酸を製造する方法として、エチレングリコール等の有機溶媒を使用したアルカリ共役化法が知られている（非特許文献２参照）。アルカリ共役化法は、通常、不飽和脂肪酸と過剰のアルカリ（脂肪酸の１〜１０倍モル）とをエチレングリコール等の有機溶媒中で１５０℃以上に加熱して行われる。この時、得られる共役脂肪酸は、二重結合の結合位置や配置が異なる混合物であり、共役する脂肪酸の二重結合数が増えるとこの傾向が強くなる。従って、上記共役脂肪酸の生理作用は、共役脂肪酸の混合物としての作用であり、特定の共役脂肪酸が製造できれば学術的にも産業的にも価値は高い。また、アルカリ共役化法では、環化及びその他の副反応も起こり、共役脂肪酸の収率が低下する、精製が困難となる等の問題点が指摘されている。また、アメリカ産の藻類を利用した共役脂肪酸の調製（非特許文献３参照）、紅藻を用いて共役脂肪酸を得る方法（特許文献１参照）等も報告されているが、未だ充分満足いくものではない。
【０００４】
また、採卵用家禽に高度不飽和脂肪酸を与えて、アラキドン酸及びドコサヘキサエン酸を高濃度で含有する家禽卵を得る方法（特許文献２参照）や、共役リノール酸を鶏に摂取させ、共役リノール酸を含有する家禽卵を得る方法（特許文献３参照）も提案されている。しかし、当該共役リノール酸は極めて酸化されやすく、酸化された脂肪酸は、栄養価の低下、嗜好性の低下、変色、変臭の原因となり、また、酸化された脂肪酸を摂取することにより食中毒の原因にもなる。従って、飼料においても共役リノール酸等の脂肪酸の酸化を抑制することが重要な課題である。
【０００５】
一方、苦瓜の種子は、種皮を取り除くと胚があり、中国では古くから民間療法素材として使用されてきた。その成分は、水分８．６重量％、無機成分２１．８重量％、繊維質１９．５重量％、炭水化物１６．４重量％、脂肪３１．０％重量で構成される（中薬大辞典、保育社）。また、該脂肪に含まれる脂肪酸は、酪酸１．８％、パルミチン酸２．８％、ステアリン酸２１．７％、オレイン酸３０．０％、α−エレオステアリン酸４３．７％で構成される。このα−エレオステアリン酸についても、現在、共役トリエン酸に関する研究が共役リノール酸と並行して展開されており、中性脂肪低減効果や抗癌効果等が報告されてきているが、共役リノール酸ほどその生理活性作用が解明されていない。
【０００６】
また、桐油には、多量のα−エレオステアリン酸が含まれ、これを鶏に飼料として摂取させ共役脂肪酸を含む卵を得る方法が提示されている（特許文献４参照）が、桐油は食用とされた歴史がなく、種子油には毒性があるとの指摘もあり、その安全性には不安がある。さらに、桐油は従来から塗料に使用されているが、これは酸化により固化する性質があるためである。従って、桐油をそのまま飼料に配合すると容易に酸化が進行し、生体に有毒な酸化脂質が形成されてしまう可能性があるため、取り扱いが困難であるという問題がある。
【０００７】
【非特許文献１】
Ｍ．Ｗ．  Ｐａｒｉｚａ；  Ａｎｎ．  Ｒｅｖ．  Ｎｕｔｒ．，  ８，  １６７−１８３頁，  １９８８年
【非特許文献２】
Ｊ．  Ａｍ．  Ｏｉｌ  Ｃｈｅｍ．  Ｓｏｃ．，Ｖｏｌ．３６，  ６３１頁，  １９５９年
【非特許文献３】
Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，  Ｖｏｌ．３６，  ２９８５頁，  １９９７年
【特許文献１】
特開２００１−８６９９７号公報
【特許文献２】
国際公開第９６／３８０５１号パンフレット
【特許文献３】
国際公開第９９／５２３８２号パンフレット
【特許文献４】
特開２００１−３４００５４号公報
【０００８】
【発明が解決しようとする課題】
従って、本発明の目的は、生理活性の高い共役脂肪酸を含む家畜肉及び家禽卵、これらを得るための安全な飼料、並びに、該家畜肉又は該家禽卵から得られる共役脂肪酸又は共役脂肪酸含有油脂を提供することにある。
【０００９】
【課題を解決するための手段】
本発明者は、鋭意検討を重ねた結果、毒性の問題のない安全な苦瓜を用いることにより上記課題を解決し得ることを見出し、さらに、酸化しやすい共役脂肪酸を苦瓜種子から油脂として抽出するのではなく、苦瓜種子の胚をそのまま、若しくは裁断・破砕することで粉状にしたものを飼料に配合することにより、飼料中の共役脂肪酸の酸化を防止することができ、且つ、該飼料を家畜に摂取させることにより、共役脂肪酸に富んだ食肉及び家禽卵が得られることを見出し、本発明に至った。本発明においては、安全な苦瓜を使用し、さらに酸化に対し安定な状態で保持されている苦瓜の種子胚細胞を破壊することなく利用することで、飼料として与える際の油脂の酸化を抑制し、酸化油脂による家畜の中毒等を誘発しない安全な飼料で飼育して得られる食肉及び家禽卵を提供することができる。
【００１０】
即ち、本発明は、苦瓜又は苦瓜由来物を含有する飼料を提供するものである。
また、本発明は、前記苦瓜由来物が、苦瓜種子胚そのもの、又は裁断若しくは破砕することによって任意の大きさに調製した苦瓜種子胚である前記飼料を提供するものである。
また、本発明は、前記苦瓜由来物が、苦瓜種子胚から得られた、苦瓜種子胚油若しくはα−エレオステアリン酸である前記飼料を提供するものである。
また、本発明は、前記飼料を与えて飼育された家禽から得られる共役リノール酸含有家禽卵を提供するものである。
また、本発明は、前記飼料を与えて飼育された家畜から得られる共役リノール酸含有家畜肉を提供するものである。
また、本発明は、前記家禽卵又は前記家畜肉から得られる、共役リノール酸又は共役リノール酸含有油脂を提供するものである。
また、本発明は、前記家禽卵又は前記家畜肉を原料とすることを特徴とする医薬品、化粧品又は飲食品を提供するものである。
また、本発明は、前記共役リノール酸又は前記共役リノール酸含有油脂を含有することを特徴とする医薬品、化粧品又は飲食品を提供するものである。
【００１１】
【発明の実施の形態】
本発明は、苦瓜又は苦瓜由来物を与えて飼育された家畜から得られる共役リノール酸含有家畜肉及び家禽卵、並びに該家畜肉及び該家禽卵を得るための飼料であり、得られた家畜肉又は家禽卵、特に卵黄から抽出等により得られた共役リノール酸又は共役リノール酸含有油脂であり、また、前記の家畜肉、家禽卵、共役リノール酸又は共役リノール酸含有油脂を利用した医薬品、化粧品又は飲食品である。
【００１２】
本発明において用いられる家畜としては、家畜と称される多種の動物のうち、食肉、卵、乳を得ることを目的として飼育されるものであればいずれでもよく、牛、豚、羊、山羊、鳥類（家禽）等が挙げられる。これらの中でも、その卵を食用として得ることを目的として飼育される鳥類、即ち採卵用の家禽が好ましく、採卵用の家禽としては、例えば、鶏、ウズラ、アヒル、アイガモ、チャボ、ダチョウ等が挙げられ、特に鶏が好ましい。
【００１３】
本発明の飼料は、苦瓜又は苦瓜由来物を含有する。苦瓜又は苦瓜由来物は、必要に応じて、裁断、破砕等により適宜な大きさに調整し、単独で或いは通常使用される飼料に配合して、家畜に供給すればよい。該苦瓜由来物は、α−エレオステアリン酸を含むものであればよいが、苦瓜種子胚、苦瓜種子胚油、苦瓜種子胚から得られたα−エレオステアリン酸が好ましく、苦瓜種子胚が特に好ましい。
【００１４】
上記苦瓜種子胚は、種々の形態で家畜に与えることができ、例えば、そのまま通常の飼料に配合することも可能であるが、破砕機等により適当な大きさに裁断又は破砕して粉状にして飼料に配合することも可能である。苦瓜種子胚をそのまま又は粉状の状態で飼料に配合することにより、苦瓜種子胚に含まれる脂肪の酸化が抑制され、通常の飼料の保管状態であれば過酸化物価（ＰＶ）を１０以下に保持することが可能であるため、非常に好ましい。
【００１５】
上記苦瓜種子胚中には、α−エレオステアリン酸が、主にトリアシルグリセロール及びリン脂質から選ばれる少なくとも１種の形態で含有されている。本発明の飼料には、α−エレオステアリン酸がこれらの形態で含有されていることが好ましい。
【００１６】
また、本発明の飼料においては、上記苦瓜由来物として、苦瓜種子胚から抽出等の化学的操作により得られた、α−エレオステアリン酸、或いはα−エレオステアリン酸を含有する苦瓜種子胚油を、飼料に含有させることもできるが、この場合、酸化反応が進み易いため、飼料の保管状態の管理等を適宜行うことが好ましい。この場合のα−エレオステアリン酸は、遊離の脂肪酸、塩類、エステル類、トリアシルグリセロール、ジアシルグリセロール、モノアシルグリセロール、グリセロリン脂質、グリセロ糖脂質、スフィンゴリン脂質、及びスフィンゴ糖脂質から選ばれたいずれの形態で使用してもよい。
【００１７】
本発明の飼料を家畜に与える際の与え方は、特に制限されるものではないが、家禽卵を産生する鶏等の家禽に本発明の飼料を与えて、後述する本発明の家禽卵を産生させるためには、α−エレオステアリン酸を好ましくは６０ｍｇ／日／ｋｇ体重以上、さらに好ましくは２５０ｍｇ／日／ｋｇ体重以上与えることができるように、苦瓜、又は苦瓜種子胚等の苦瓜由来物を通常使用される飼料に配合して与えることが望ましい。
また、鶏等の家禽以外の牛、豚等の家畜に本発明の飼料を与えて後述する本発明の家畜肉を産生させるためには、α−エレオステアリン酸を好ましくは２０ｍｇ／日／ｋｇ体重以上、さらに好ましくは８０ｍｇ／日／ｋｇ体重以上与えることができるように、苦瓜又は苦瓜由来物を通常使用される飼料に配合して与えることが望ましい。
【００１８】
本発明の飼料中における苦瓜又は苦瓜由来物の含有量は、α−エレオステアリン酸として好ましくは０．０７５〜３．７５重量％、特に０．３７５〜０．７５重量％が好ましい。例えば、苦瓜由来物として苦瓜種子胚を使用する場合、苦瓜種子胚にはα−エレオステアリン酸が約１５重量％含まれることから、本発明の飼料中に苦瓜種子胚を０．５〜２５．０重量％含有させるのが好ましく、２．５〜５．０重量％がより好ましい。
【００１９】
また、苦瓜又は苦瓜由来物を配合する飼料は、特に制限されるものではなく、従来公知のものを用いることができる。
【００２０】
本発明の飼料を与えて飼育する期間は、家禽卵を得る場合は、採卵可能となってから１５０日以上、特に２００〜４００日とするのが好ましい。家畜肉を得る場合は、例えば、豚では４ヶ月以上、特に５〜８ヶ月とするのが好ましく、牛では、ホルスタインで１０ヶ月以上、特に１５〜２５ヶ月、和牛で１５ヶ月以上、特に２５〜４０ヶ月とするのが好ましい。
【００２１】
共役リノール酸を含有する本発明の家禽卵及び家畜肉は、好ましくはこのように飼料を与えて飼育した家畜から得ることができる。
【００２２】
本発明の家禽卵からは、溶媒抽出等により、高純度の生理活性の高い共役リノール酸又は共役リノール酸含有油脂を得ることができる。
家禽卵中の油脂は、卵白及び卵殻に痕跡程度含まれる以外は、すべて卵黄中に含有され、卵黄脂質の大部分は蛋白質と結合しているといわれている。従って、卵黄から脂質を抽出する場合、使用する溶媒の種類、抽出の条件により、抽出される脂質の量や組成が異なる。酵素（脂肪分解酵素を含む蛋白分解酵素剤）を用いて予め卵黄を処理しておくと、溶媒抽出による抽出脂質量が増加する。一般的に用いられている有効な抽出剤としては、エタノール・エーテル（３：１）、クロロホルム・メタノール混液（１：１）があり、これらの溶剤は全卵黄脂質の抽出に適している。また、予め卵黄を凍結乾燥して粉末とした後、クロロホルム・メタノール混液で抽出すると、脂質は完全に抽出される。特に、エタノール若しくはヘキサン単独、又はエタノールとヘキサンとの混合液、エタノールと水との混合液等は、食品用に適した溶媒であり好ましい。
【００２３】
本発明の家禽卵から得られた本発明の共役リノール酸又は共役リノール酸含有油脂の脂肪酸組成分析は、常法に従って行うことができ、例えば、ガスクロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィー等によって測定することができる。
【００２４】
このようにして得られた本発明の共役リノール酸含有油脂は、従来の家禽卵から得られる油脂がほとんど含有していなかった共役脂肪酸を、高い濃度で含有している。具体的には、本発明の家禽卵は、卵黄中の全脂肪酸に対し、共役リノール酸を０．１重量％以上、好ましくは０．８重量％以上、さらに好ましくは２重量％以上含有する。また、本発明の家禽卵中には、α−エレオステアリン酸はほとんど検出されず、家禽に与えた苦瓜由来のα−エレオステアリン酸の一部が共役リノール酸に代謝されたものと考えられる。
【００２５】
また、本発明の飼料は、該飼料を与えた家禽自体には、体重の変化、飼料摂取量、産卵率等に悪影響を及ぼすことがなく、安全である。
【００２６】
本発明の飼料を与えて飼育した家禽は、その卵のみならず、食肉部分や血中、筋肉、内臓部位、特に体内の脂肪組織に、共役リノール酸を高濃度で含有するようになる。本発明の飼料を与えて飼育した家禽は、共役リノール酸を含有した食用の家畜肉としても利用できる。もちろん、これらの部位から共役リノール酸又は共役リノール酸含有油脂を抽出して利用してもよい。
【００２７】
もちろん鶏等の家禽以外の牛、豚等の家畜についても同様であり、本発明の飼料を与えて飼育すると、その食肉部分や血中、筋肉、内臓部位、体内の脂肪組織に、共役リノール酸を高濃度で含有するようになり、共役リノール酸を含有した食用の家畜肉として利用したり、これらの部位から共役リノール酸又は共役リノール酸含有油脂を抽出して利用することができる。
【００２８】
本発明の家禽卵、家畜肉、及びこれらから得られた共役リノール酸又は共役リノール酸含有油脂は、中性脂肪低減作用や抗癌活性等、様々な生理活性作用や栄養効果が期待でき、医薬品、飲食品、化粧品等に利用できる。
【００２９】
飲食品への利用方法としては、本発明の家禽卵又は本発明の家畜肉を各種飲食品の原料として用いる方法だけでなく、例えば、共役リノール酸又は共役リノール酸含有油脂を、油脂を用いて製造される食品へ添加する方法が挙げられる。油脂を用いて製造される食品としては、例えば、肉、魚、ナッツ等の油脂を含む天然食品、中華料理、ラーメン、スープ等の調理時に油脂を加える食品、天ぷら、フライ、油揚げ、チャーハン、ドーナッツ、カリン糖等の熱媒体として油脂を用いる食品、バター、マーガリン、マヨネーズ、ドレッシング、チョコレート、即席ラーメン、キャラメル、ビスケット、アイスクリーム等の油脂食品又は加工時に油脂を加える加工食品、おかき、ハードビスケット、あんパン等の加工仕上げ時に油脂を噴霧又は塗布する食品等が挙げられる。もちろん、油脂を用いて製造される食品に制限されず、例えば、パン、めん類、ごはん、菓子類、豆腐及びその加工食品等の農産食品、清酒、薬用酒等の醗酵食品、みりん、食酢、醤油、味噌、ドッレシング、ヨーグルト、ハム、ベーコン、ソーセージ、マヨネーズ、乳製品等の畜産食品、かまぼこ、揚げ天、はんぺん等の水産食品、果汁飲料、清涼飲料、スポーツ飲料、アルコール飲料、茶等の飲料、健康食品等にも添加することができる。もちろん、本発明の共役リノール酸又は共役リノール酸含有油脂と、他の油脂や共役脂肪酸とを併用してもよい。また、本発明の共役リノール酸は、遊離の脂肪酸、塩類、エステル類、トリアシルグリセロール、ジアシルグリセロール、モノアシルグリセロール、グリセロリン脂質、グリセロ糖脂質、スフィンゴリン脂質、及びスフィンゴ糖脂質等のいずれの形態で使用してもよい。
【００３０】
本発明の家禽卵、本発明の家畜肉、又はこれらから得られた共役リノール酸若しくは共役リノール酸含有油脂の使用量については、特に制限はないが、飲食品に対して、共役リノール酸が好ましくは０．００１重量％以上、さらに好ましくは０．１重量％以上、最も好ましくは１重量％以上となるように使用することが望ましい。
【００３１】
前記医薬品としては、中性脂肪低減剤、抗癌剤等が挙げられるが、共役リノール酸の生理活性作用を利用したものであればいずれでもよい。また、その投与方法、投与形態等は制限されるものではなく、注射液、座薬、軟膏、錠剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤、ドリンク剤等が挙げられる。
また、本発明の家禽卵、本発明の家畜肉、又はこれらから得られた共役リノール酸若しくは共役リノール酸含有油脂の使用量は、医薬品中における共役リノール酸の含有量が、医薬品の種類や投与形態等によって適宜な量となるように選択すればよいが、医薬品中における共役リノール酸の含有量が、好ましくは０．０１重量％以上、さらに好ましくは１重量％以上、最も好ましくは１０重量％以上となるように使用することが望ましい。
【００３２】
また、本発明の家禽卵又は家畜肉から得られた共役リノール酸又は共役リノール酸含有油脂は、共役リノール酸の生理活性作用を活かした化粧品にも利用できる。化粧品としては、例えば、皮膚化粧品、化粧水、化粧クリーム、乳液、ファンデーション、口紅、整髪料、ヘアトニック、育毛料等の他、歯磨き、口腔ケア製品、シャンプー、リンス、入浴剤等の日用品が挙げられる。
また、本発明の家禽卵又は本発明の家畜肉から得られた共役リノール酸又は共役リノール酸含有油脂の使用量は、化粧品中における共役リノール酸の含有量が、化粧品の種類等によって適宜な量となるように選択すればよいが、化粧品に対して、共役リノール酸が好ましくは０．００１重量％以上、さらに好ましくは０．１重量％以上、最も好ましくは１重量％以上となるように使用することが望ましい。
【００３３】
【実施例】
以下、実施例により本発明を具体的に説明するが、本発明は、これら実施例により何等制限されるものではない。
【００３４】
＜実施動物＞
実施動物としては、岩谷種鶏場（仙台）から購入した４０週齢の産卵鶏（Ｗｈｉｔｅ  Ｌｅｇｈｏｒｎ）を用いた。産卵鶏は１匹ずつ別々のケージで飼育した。
【００３５】
＜試験飼料＞
苦瓜由来物としては、共役リノレン酸としてα−エレオステアリン酸を含有している苦瓜種子胚をそのまま使用した。１週間の予備飼育期間中は、市販飼料（協同飼料）を使用し、自由摂取とした。予備飼育期間後与える試験飼料として、  上記の市販飼料に苦瓜種子胚を０、２．０、又は４．０重量％添加した３種類の食餌を調製した。なお、各試験飼料の油脂含量が等しくなるように、上記の３種類の食餌に、大豆油をそれぞれ０．９４、０．４７、又は０重量％加え、各試験飼料中に３．７５重量％の油脂が含有されるようにした。各試験飼料は、１週間分を一度で調製し、１．５ｋｇ（１日分）ずつ袋に分けて低温室で保管した。
図１に、１週間の保管期間での各試験飼料から抽出した油脂の過酸化物価（ＰＶ）の変化を示す。３種類の食餌はいずれも、保管期間中ではＰＶが１０．０以下であり、酸化が進んでいないことが確認された。一方、桐油を飼料に対し１．０重量％添加したもの（１．０重量％桐油食）は、３日目でＰＶが２３．５、５日目でＰＶが３０．５、７日目でＰＶが３８．５となり、酸化が進んでいることが確認された。
また、各群の食餌の脂肪酸組成を、ガスクロマトグラフィーにより分析した。各群の食餌からＦｏｌｃｈ法（下記の＜卵黄脂質の抽出＞の項参照）により抽出した脂質をメチル化し、ガスクロマトグラフィー分析（下記の＜脂肪酸組成分析＞の項参照）に供した。
【００３６】
＜飼育条件、鶏の成育指標の測定、並びに卵及び各組織の採取＞
１週間の予備飼育後、  産卵率がほぼ一定になるように各群８羽ずつ３群に分け、上記の３種類の試験飼料（０，２．０，４．０重量％苦瓜種子胚含有飼料）それぞれで飼育した。これらの試験飼料による飼育は６週間行い、食餌・飲料水ともに自由摂取とした。成育指標として、産卵率及び卵重量を毎日、体重及び食餌摂取量を１週間に１度測定した。飼育７、１４、２８日後に卵を回収し、下記の＜卵黄脂質の抽出＞に供した。飼育期間終了後、産卵鶏を屠殺し、肝臓・心臓・筋肉・脂肪組織を採取し、各組織の重量を測定し、次いで下記の＜各組織の脂質抽出＞に供した。なお、これらの組織は、脂質抽出まで−８０℃で保存した。
【００３７】
＜卵黄脂質の抽出＞
飼育７、１４、２８日後に回収した卵について、  卵黄脂質をＦｏｌｃｈ法により抽出した。まず、卵黄と卵白とを出来るだけきれいに分け、卵黄のみの重量を測定した後、クロロホルム／メタノール（２：１，ｖｏｌ）を約１００ｍｌ加え（このとき脂質の酸化抑制のために１％ＢＨＡ−エタノール溶液を１ｍｌ添加）、攪拌後減圧濾過し、残渣に再度クロロホルム／メタノールを加え減圧濾過し、この濾液と先の濾液とを合わせて分液ロートに移した。そこに０．８８重量％ＫＣｌ溶液を約５０ｍｌ加え、振とう攪拌後、二層に分かれるまで放置した。その後、下層のクロロホルム層を分取し、エバポレーターで濃縮し、得られた脂質の重量を測定した後、脂質を再び２０ｍｌのクロロホルムに溶解してバイアルに移し、脂肪酸組成分析に供するまで−３０℃で保存した。
【００３８】
＜各組織の脂質抽出＞
回収した各組織は、全量をビーカーに移し、クロロホルム／メタノール（２：１，ｖｏｌ）を約１００ｍｌ加え、上記の＜卵黄脂質の抽出＞と同様の方法で、減圧濾過、分液、濃縮し、脂質を得た。得られた脂質の重量を測定した後、脂質を再びクロロホルムに溶かしてバイアルに移し、脂肪酸組成分析に供するまで−３０℃で保存した。
【００３９】
＜脂肪酸組成分析＞
卵黄又は各組織それぞれの脂質を約１０ｍｇ取り、ガスクロマトグラフィー用塩化水素−メタノール溶液（関東化学（株）製）を０．５ｍｌ加え、６０℃で４０分放置後、室温まで冷却し、２ｍｌの水及び５ｍｌのヘキサンを加えて攪拌し静置した。二層に分かれた後、ヘキサン層を取り、水層を再度５ｍｌのヘキサンで抽出し、このヘキサン層と先のヘキサン層とを合わせ、無水硫酸ナトリウムで脱水し、濃縮してガスクロマトグラフィーに供した。分析条件を以下に示す。
【００４０】
（分析条件）
・分析機器：ＧＣ−３８０（ジーエルサイエンス社製）
・カラム：ＣＰ−Ｓｉｌ８８（０．２５ｍｍ×６０ｍｍ）
・カラム温度：１７０℃で２分間保持後、４℃／分で２２５℃まで昇温
・注入口及び検出器（ＦＩＤ）温度：２５０℃
【００４１】
＜試験飼料の成分組成及び試験飼料の脂肪酸組成分析結果＞
表１に、試験飼料〔０重量％苦瓜種子胚含有飼料（対照）、２．０重量％苦瓜種子胚含有飼料（２．０％苦瓜食）、４．０重量％苦瓜種子胚含有飼料（４．０％苦瓜食）〕の成分組成を示す。また、表２に、飼料に添加した苦瓜種子胚に含まれる苦瓜種子胚油の脂肪酸組成及び各試験飼料の脂肪酸組成を示す。苦瓜種子胚には約２５重量％の脂肪が含まれ、α、βあわせて６０重量％のエレオステアリン酸が含まれていた。苦瓜種子胚には、油分以外に繊維質、炭水化物が含まれることから、トウモロコシの配合量を調節することにより、各食餌の繊維質含量、炭水化物含量が同一となるようにした。２．０％苦瓜食及び４．０％苦瓜食の飼料中の脂肪酸組成としては、それぞれ約５重量％及び約１０重量％のエレオステアリン酸が含まれていた。また、リノール酸を除く他の脂肪酸については、全ての飼料ともほとんど同じ量が含まれていた。
【００４２】
【表１】
2004173535.tif 000002
【００４３】
【表２】
2004173535.tif 000003
【００４４】
＜鶏の成育指標測定結果、並びに卵黄の重量及び脂質含量測定結果＞
表３に、鶏の初期体重、最終体重、食餌摂取量、産卵率及び卵重量、並びに卵黄の重量及び脂質含量の測定結果を示す。鶏の体重は、試験開始前と飼育４週間後とを比較すると、対照群で＋０．０４ｋｇ、２．０％苦瓜食群で＋０．０５ｋｇ、４．０％苦瓜食群で＋０．０３ｋｇとなり、群間で差は認められなかった。比較として桐油を１重量％配合した飼料（脂肪中のエレオステアリン酸として１０％）で飼育したもの（１．０％桐油食群）は、僅かではあるが体重が減少していた。産卵率は、１．０％桐油食群の場合、僅かではあるが減少する傾向が認められた。調製後７日経過した試験飼料から抽出した油脂のＰＶは、苦瓜種子胚を含有する試験飼料の場合は最大で８、１．０％桐油食の場合は３８．５であった（図１参照）ことから、１．０％桐油食群においては、油脂の酸化による栄養面、嗜好面での飼料の劣化及び過酸化脂質による生体への影響が生じていることが考えられる。一方、対照群、２．０％苦瓜食群及び４．０％苦瓜食群においては、食餌摂取量及び産卵率に関しても群間に大きな差はなく、  卵と卵黄の重量及び脂質含量にも苦瓜種子胚添加による影響は見られなかった。このように、産卵鶏の体重や産卵率等の成育指標は、苦瓜種子胚を含有する飼料の投与により変化せず、苦瓜種子胚の影響は見られなかったことから、桐油のように酸化し易い油脂を抽出して用いるよりも、苦瓜種子胚そのものを摂取させたほうが好ましく、本発明の飼料は安全であることがわかった。
【００４５】
【表３】
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【００４６】
＜組織の重量及び脂質含量測定結果＞
表４に肝臓、心臓、脂肪組織及び胸筋肉それぞれの重量及び脂質含量の測定結果を示す。脂肪組織の重量は、２．０％苦瓜食群及び４．０％苦瓜食群では対照群に比べて減少した。しかし、その他の臓器の重量及び脂質含量については、群間に大きな差は見られなかった。このことは、本発明の飼料を用いて飼育することが、食鳥加工における廃棄物の削減に有効であることを示している。
【００４７】
【表４】
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【００４８】
＜組織の脂肪酸組成分析結果＞
表５に産卵鶏の各組織の脂肪酸組成分析結果を示す。食餌性苦瓜種子胚由来のエレオステアリン酸は、いずれの組織においてもほとんど検出されなかった。また、対照群には、いずれの組織においても共役リノール酸の存在が認められなかったのに対し、２．０％苦瓜食群及び４．０％苦瓜食群には、肝臓、心臓、脂肪組織及び筋肉いずれにおいても、共役リノール酸の存在が確認された。本発明の飼料を与えて飼育することにより、共役リノール酸を含有する家畜肉が得られたことがわかる。
【００４９】
【表５】
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【００５０】
＜卵黄の脂肪酸組成分析結果＞
表６に卵黄の脂肪酸組成分析結果を示す。食餌性苦瓜種子胚由来のエレオステアリン酸は、いずれの卵黄においてもほとんど検出されなかった。しかし、組織の場合と同様に、２．０％苦瓜食群及び４．０％苦瓜食群の卵黄においては共役リノール酸の存在が確認された。共役リノール酸含量は飼育日数と苦瓜種子胚添加量に比例して有意に増加し、４週間後には４．０％苦瓜食群の卵黄では２．５重量％の共役リノール酸が検出された。このことから、α−エレオステアリン酸の一部は、共役リノール酸に代謝されたものと考えられる。これらの結果から、本発明の飼料を与えて飼育することにより、共役リノール酸を含有する家禽卵が得られたことがわかる。
【００５１】
【表６】
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【００５２】
【発明の効果】
本発明によれば、生理活性の高い共役脂肪酸を含む家畜肉及び家禽卵、これらを得るための安全な飼料、並びに該家畜肉又は該家禽卵から得られる共役リノール酸又は共役リノール酸含有油脂を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】図１は、試験飼料から抽出した油脂の過酸化物価（ＰＶ）の変化を示すグラフである。
【図１】
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