(57)【要約】【課題】生体細胞又は生体組織の成長過程において、生体細胞又は生体組織に電気刺激を与えることのできる電気刺激装置、及びその装置を用いた生体細胞又は生体組織の成長促進又は抑制方法の提供。【解決手段】パルス電流を発生させ、かつパルス電流の強度等を調整するための電流発生手段４と、前記電流発生手段４を固着するためのキャップ１と、前記キャップ１から懸垂され、かつパルス電流を電気刺激として培養容器２内の培地１１に与えるために前記電流発生手段４の両端部に連結された１対の電極９，９’とを有する。【選択図】　　　　　　　　図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
パルス電流を発生させ、かつパルス電流の強度等を調整するための電流発生手段と、前記電流発生手段を固着するためのキャップと、前記キャップから懸垂され、かつパルス電流を電気刺激として培養容器内の培地に与えるために、前記電流発生手段の両端に連結された１対の電極とを有することを特徴とする生体細胞又は生体組織の電気刺激装置。
【請求項２】
前記電流発生手段が、ロジックＩＣ、マイクロスイッチ及び電源からなる電気回路である請求項１に記載の電気刺激装置。
【請求項３】
前記電源が電池又は電気供給装置である請求項２に記載の電気刺激装置。
【請求項４】
前記電気回路がプリント基板上に形成され、かつ前記プリント基板と前記キャップとが一体的に装着されている請求項２又は３に記載の電気刺激装置。
【請求項５】
前記電気回路が、培養容器内の培地に電気刺激として与えられるパルス電流の供給状況を監視するためのモニタリング装置をさらに有する請求項２〜４のいずれか一項に記載の電気刺激装置。
【請求項６】
前記モニタリング装置が発光素子である請求項５に記載の電気刺激装置。
【請求項７】
前記キャップが、マルチウェルプレートのウェル配列に対応可能なキャップである請求項１〜６のいずれか一項に記載の電気刺激装置。
【請求項８】
前記キャップを前記培養容器に嵌着することにより、前記培養容器内の培地に装入された生体細胞又は生体組織に前記電極から前記パルス電流が電気刺激として与えられる請求項１〜７のいずれか一項に記載の電気刺激装置。
【請求項９】
生体細胞若しくは生体組織の成長を促進又は抑制させるために用いられる請求項１〜８のいずれか一項に記載の電気刺激装置。
【請求項１０】
前記パルス電流が、生体細胞若しくは組織細胞の成長を促進させ又は抑制させる強度を有する請求項１〜９のいずれか一項に記載の電気刺激装置。
【請求項１１】
請求項１〜１０のいずれか一項に記載の電気刺激装置を用いた生体細胞若しくは生体組織の成長促進又は抑制方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する分野】
本発明は、生体細胞、組織等の電気刺激装置、及び生体細胞、組織等の成長促進又は抑制方法に関する。より詳しくは、本発明は、研究所等において実験で用いられる生体細胞、組織等に特定の電気刺激を与えることにより生体細胞、組織等の成長を促進又は抑制させることのできる電気刺激装置及びその電気刺激装置を用いた生体細胞、組織等の成長促進又は抑制方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
てんかん性痴呆や低酸素脳症のように神経細胞の過剰興奮がその直接的原因とされる変性疾患の治療法開発にとって、効果的なｉｎ　ｖｉｔｒｏ病態モデルの開発は重要である。
【０００３】
従来、生体の培養細胞や組織に興奮性神経伝達物質を大量投与する試みや通常の電気刺激装置を用いた電気刺激が行われてきた。しかしながら、興奮性神経伝達物質の大量投与では、刺激を受ける受容体の種類が興奮性神経伝達物質受容体に限定されてしまい、生体内での過剰興奮時に起こり得る多様な情報伝達分子に対する細胞応答が興奮性神経伝達物質受容体応答に偏った様式で表現される可能性がある。
【０００４】
一方、電気刺激によって惹起された過剰興奮は、より生理的に近いと考えられるが、従来の電気刺激装置では、電極の装着や狭いインキュベーター内での刺激の実行には煩雑さが伴い、電気生理実験を専門としていない生化学者やゲノム科学者など、多くの研究者にとって困難を伴う。また、培養環境下で比較的長時間の電気刺激を必要とするその他の基礎研究及び応用研究の分野において、より簡便でコンパクトな刺激機能の付いた培養装置は研究遂行上の強力な武器となり得る。
【０００５】
このような簡便性とコンパクト性において理想的な電気刺激装置は、生理学、薬理学、生化学のみならず、再生医学やゲノム科学を遂行している研究施設から極めて大きな潜在需要を引き出す可能性も有している。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は上記課題を解決するためになされたものであり、本発明の目的は、生体細胞又は生体組織（以下、「生体細胞等」ともいう。）の成長過程において、生体細胞等に電気刺激を与えることのできる電気刺激装置を提供することにある。
本発明の他の目的は、前記電気刺激装置を用いて生体細胞等の成長を促進又は抑制する方法を提供することにある。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
本発明者は、生体細胞等の成長と電気刺激との関係について鋭意検討し、本発明を完成するに至った。
すなわち、本発明の目的は、パルス電流を発生させ、かつパルス電流の強度等を調整するための電流発生手段と、前記電流発生手段を固着するためのキャップと、前記キャップから懸垂され、かつパルス電流を電気刺激として培養容器内の培地に与えるために前記電流発生手段の両端に連結された１対の電極とを有することを特徴とする電気刺激装置により達成される。
【０００８】
本発明の電気刺激装置は、キャップに電流発生手段と１対の電極とを有する構造からなる。このため、本発明の電気刺激装置であれば、装置の作製が容易であると共に、キャップの培養容器からの着脱が簡便である。また、本発明の電気刺激装置はキャップを交換するだけで、簡単に生体細胞等に任意の強度、波形を有するパルス電流を与えて、培養過程において生体細胞等の成長を適宜調整することができる。
【０００９】
また、本発明の電気刺激装置の好ましい態様は、次のとおりである。
（１）前記電流発生手段が、ロジックＩＣ、マイクロスイッチ及び電源からなる電気回路である前記電気刺激装置。
（２）前記電源が電池又は電気供給装置である前記電気刺激装置。
（３）前記電気回路がプリント基板上に形成され、かつ前記プリント基板と前記キャップとが一体的に装着されている（１）又は（２）の電気刺激装置。
（４）前記電気回路が、培養容器内の培地に電気刺激として与えられるパルス電流の供給状況を監視するためのモニタリング装置をさらに有する（１）〜（３）のいずれかの電気刺激装置。
（５）前記モニタリング装置が発光素子である（４）の電気刺激装置。
（６）前記キャップは、マルチウェルプレートのウェル配列に対応可能なキャップである（１）〜（５）のいずれかの電気刺激装置。
（７）前記キャップを前記培養容器に嵌着することにより、前記培養容器内の培地に装入された生体細胞又は生体組織に前記電極から前記パルス電流が電気刺激として与えられる（１）〜（６）のいずれかの電気刺激装置。
（８）生体細胞若しくは生体組織の成長を促進又は抑制させるために用いられる（１）〜（７）のいずれかの電気刺激装置。
（９）前記パルス電流が、生体細胞若しくは組織細胞の成長を促進させ又は抑制させる強度を有する（１）〜（８）のいずれかの電気刺激装置。
【００１０】
本発明の他の目的は、前記電気刺激装置を用いた生体細胞等の成長促進又は抑制方法により達成される。
本発明の方法によれば、従来の刺激装置のように生体細胞等の成長を促進するように培養するだけではなく、生体細胞等に損傷を与えて生体細胞及び生体組織の成長を抑制するように培養することもできる。
【００１１】
【発明の実施の態様】
以下に、本発明の電気刺激装置、及びこの電気刺激装置を用いた生体細胞等の成長促進又は成長抑制方法につき詳細に説明する。
【００１２】
先ず、本発明の電気刺激装置１０の構成について、図面を参酌しながら以下に説明する。
【００１３】
図１は、本発明の電気刺激装置１０の好適な一実施例を示した概略図である。図１において、符号１は電気刺激装置装着用キャップ（以下、単に「キャップ」という）、符号２は培養容器をそれぞれ表す。図１（Ａ）に示されるように、キャップ１上にはプリント基板３がキャップ１と一体的に装着されている。プリント基板３上には電気供給手段としての電気回路４が形成されている。
【００１４】
図１における電気回路４は、ロジックＩＣ５、ボタン電池６、マイクロスイッチ７及び発光素子（ＬＥＤ）８で構成されている。電極９，９’は、陽極と陰極とからなり、キャップ１を貫通してキャップ１内に吊り下げられて配置されている。
【００１５】
次に、本発明の電気刺激装置について具体的に説明する。
本発明の電気刺激装置１０は、キャップ１上に電流発生手段を有する。電流発生手段は、キャップ１に固着でき、かつパルス電流を発生させ、パルス電流の強度、サイクル等を調整できるものであれば特に制限はない。電流発生手段は、好ましくは、図１に示されるようなロジックＩＣ５、ボタン電池６、マイクロスイッチ７及びＬＥＤ８からなる電気回路４である。
【００１６】
電流発生手段から供給されるパルス電流の波形、強度、サイクル等については、電気刺激を与える生体細胞等の種類、培養目的（成長促進又は成長抑制）に応じて適宜調整することができる。例えば、パルス電流の波形については、三角形、矩形、その他の各種関数波形（例えば、サイン波形、指数関数波形など）などを挙げることができ、中でも矩形であることが好ましい。また、パルス電流の強度は、生体細胞等の成長促進と成長抑制（損傷）の二つの培養目的に応じて適宜調整することができる。例えば、生体細胞等の成長促進を目的として培養する場合、パルス電流の強度は０．１〜５０ｍＶ／ｍｍであり、０．５〜２５ｍＶ／ｍｍであることが好ましく、１〜１０ｍＶ／ｍｍであることがさらに好ましい。一方、生体細胞等の成長抑制（損傷）を目的として培養する場合、パルス電流の強度は５０〜２５０ｍＶ／ｍｍであり、７５〜２００ｍＶ／ｍｍであることが好ましく、１００〜１５０ｍＶ／ｍｍであることがさらに好ましい。また、パルス電流のサイクルについては、例えば、０．００１〜１０００Ｈｚであり、０．００５〜１００Ｈｚであることが好ましく、０．０１〜１０Ｈｚであることがさらに好ましい。また、パルス電流の通電時間は、例えば、１μ秒〜１０秒であり、５μ秒〜１秒であることが好ましく、１０μ秒〜０．１秒であることがさらに好ましい。
【００１７】
キャップ１は、嵌着する培養容器２のサイズ及び形状に対応させてサイズ及び形状を自由に選択することができる。例えば、キャップ１は、市販の３５ｍｍ、６０ｍｍ、９０ｍｍ、１５０ｍｍのペトリデイッシュ、６穴〜３８４穴マルチウェルプレート、及び直径１０〜３０ｍｍの組織培養チューブに対応した円形キャップや、各種スクエアデイッシュに対応した方形キャップを用いることができる。好ましくは、キャップ１は、マルチウェルプレートのウェル配列に対応したキャップである。
【００１８】
キャップ１の材質は、金属、ガラス、プラスチック等、種々の材料が使用可能であるが、培養物を観察しやすいよう透明性に優れ、取り扱いの際に破損しにくいプラスチック製であることが好ましく、特に高透明で剛性に優れたアクリル樹脂製であることが好ましい。
【００１９】
キャップ１は、本発明の電気刺激装置１０においてはプリント基板３と一体的に装着されていることが好ましい。プリント基板３は、耐熱性のあるプラスチック製又はガラス繊維等の繊維強化プラスチック製の基板上に電気回路４がプリントされている公知の材料を用いて作製することができる。プリント基板３の形状は特に限定されないが、電気回路４の形状に合わせたものであることが好ましい。
【００２０】
電気回路４は、ロジックＩＣ５、電源（６）及びマイクロスイッチ７で構成され、さらに後述する発光素子８を有することが好ましい。電気回路４を形成する方法は、特に限定されるものではないが、例えば、プリント基板上に導電性塗料を塗布してプリント基板上にプリント印刷する方法、あるいは細い導線等を溶接する方法などを挙げることができる。中でも基板上にプリント印刷する方法が回路をコンパクトにできる観点から好ましい。
【００２１】
電気回路４を構成するロジックＩＣ５は、汎用ＩＣやプログラマブルＩＣのように、一連の作業指示が設定され又はプログラムにより一連の作業指示を与え得る集積回路（ＩＣ）を用いることができる。本発明の電気刺激装置では、ロジックＩＣ５は、パルス電流の大きさを時間軸で変化させる役割を有する。
【００２２】
ロジックＩＣ５としては、例えば、汎用ロジックＩＣ、ＰＬＤ（プログラム　ロジック　ディバイス）、ＣＰＬＤ（コンプレックス　プログラム　ロジック　ディバイス）、ＦＰＧＡ（フィールド　プログラム　ゲート　アレイ）、カスタムＩＣ等の公知のものを挙げることができる。汎用ロジックＩＣにはＣＭＯＳ系のものとバイポーラ系のものとがあるが、ＣＭＯＳ系のものであることが好ましい。ロジックＩＣ５は市場で容易に入手できる。ロジックＩＣ５は、さらにコンデンサー等の周辺素子を有していてもよい。
【００２３】
本発明の電気刺激装置では、ロジックＩＣ５により調整されたパルス電流を電気回路４に流すように設定されている。このパルス電流は、ロジックＩＣにより実験の目的に応じて、電圧（強度）、発生の頻度（サイクル）、発生パターン（波形）等を一連のプロトコールとして変更可能であることが好ましい。このような変更可能な刺激のプロトコールを実現する方法としては、ロジックＩＣへのプロトコールの書き込みと消去がある。
【００２４】
本発明の電気刺激装置における電源は、電池又は外部より電気を供給するための電気供給装置であることが好ましい。電源が電池である場合、電池はキャップ１上に装着する必要があるため、できるだけ小型であることが好ましく、ボタン型であることがさらに好ましい。電池に必要な性能としては、５Ｖ以下、好ましくは１〜３Ｖ程度の電位差の電圧を有していることが好ましい。また、平均１０μＡのパルス電流を２時間以上、好ましくは５時間以上、さらに好ましくは２４時間以上、培地に流し得る容量を有していることが望ましい。
【００２５】
本発明の電気刺激装置の好適な実施例では、電源はボタン電池６が使用されている（図１（Ａ）参照）。ボタン電池６は、水銀電池又はリチウムのような使い捨て型の電池はもちろん、ニッケル−カドミニウム電池、電気二重層コンデンサー、リチウム蓄電池等の再充電可能な蓄電池であってもよい。
【００２６】
一方、本発明の電気刺激装置における電源が電気供給装置である場合、電気供給装置はＡＣアダプター、ＡＣ／ＤＣスイッチング電源、ＡＣ／ＤＣコンバーター、各種電源トランス製品のような直流電源であってもよい。
【００２７】
本発明の電気刺激装置１０におけるマイクロスイッチ７は、通常のスイッチと同様、刺激装置の回路におけるパルス電流をオン／オフ制御する装置である。マイクロスイッチ７は、人が操作することにより機械的に切り替わるスイッチであってもよいし、圧力により電流が自動的にオン／オフ制御可能な、例えば圧電素子を用いたスイッチであってもよい。マイクロスイッチ７は、操作が可能である限りできるだけ小型で軽量であることが望ましい。
【００２８】
本発明の電気刺激装置では、電気回路４が培養容器２内の培地１１へ供給されるパルス電流の供給状況を監視するためのモニタリング装置をさらに有することができる。モニタリング装置として、例えば本発明の好適な実施例で示されるように発光素子（ＬＥＤ）８などが設けられていることが好ましい。
本発明の電気刺激装置で好ましく用いられる発光素子８は、パルス電流が電気回路４内に流れると、このパルス電流を光に変換可能とする素子であり、流れるパルス電流の強弱が光の強弱として表すことができる。このため、発光素子８は、培養容器内の培地へ供給されるパルス電流の供給状況を目で認識できる役割を果たす。このような発光素子８として、例えば、発光ダイオード等が用いられることが好ましい。
【００２９】
本発明の電気刺激装置における電極９，９’は、パルス電流を培養容器内の培地に電気刺激として与えるための端子である。図１では、電極９，９’は、電気回路４の両端に連結され、キャップ１を貫通してキャップ１内に吊り下げされている。電極９，９’は、１対の陽極と陰極とで構成されている。電極９，９’の形状は、図１ではＴ字形状であるが、本発明の電気刺激装置における電極はこの形状に限定されるものではなく、その他の形状（例えば、格子あるいは同心円の形状）であってもよい。さらに、電極９，９’の端子の長さは、培養容器２の深さ（高さ）に応じて適宜決定することができる。また、電極９，９’は互いに平行に吊り下げられてもよく、例えば、互いに向かい合ったときにハの字形又は逆ハの字形になるように吊り下げられていてもよい。さらに、電極９，９’は電気発生手段（電気回路４）の両端に連結されていれば、電気発生手段（電気回路４）に連結される位置はキャップ１及び培養容器２の形状に合わせて適宜決定することができる。電極９，９’の材料としては、例えば、銀−塩化銀、白金、チタン、窒化チタン、カーボン、金、ガラス等を挙げることができる。
【００３０】
図１（Ｂ）に示されるように、本発明の電気刺激装置１０におけるキャップを嵌合するための培養容器２は、その中に培地１１を充填できるようになっている。培地１１は、通常は、Ｎａ、Ｍｇ、Ｃａ等の金属イオンを含んだ生理食塩水に各種アミノ酸、例えばＬ−Ａｒｇ，　Ｌ−Ｃｙｓ，　Ｌ−Ｇｌｎ，　Ｌ−Ｈｉｓ及び各種ビタミン、例えば、葉酸、パントテン酸、ニコチンアミド、ピリドキサール、リボフラビン等を含んだ培地等を用いることができる。
【００３１】
培地１１には従来から組織の培養において提案されている各種サイトカイン類や増殖因子類、例えばインターロイキン類、ニューロトロピン類、血小板由来成長因子、上皮成長因子、線維芽細胞成長因子を０．０１ｎｇ／ｍｌから１００ｍｇ／ｍｌの範囲の量で配合することが好ましい。また培地１１は、固体培地及び液体培地のいずれであってもよい。
【００３２】
本発明の電気刺激装置１０を用いて生体細胞等の成長を促進又は抑制するように培養する場合、培地１１には、生体細胞又は生体組織１２（以下「原組織等」という。）を培地表面又は培地中に装入する。この原組織等としては、公知の細胞又は組織として用いられている各種の原組織等を使用することが可能である。例えば、原組織等を構成する細胞（群）及びその幹細胞（群）、原組織等を培養すべき組織の一部、培養すべき組織に類似した組織、胚細胞、ＥＳ細胞等であってもよい。
【００３３】
本発明の電気刺激装置により刺激が与えられる生体細胞等の「生体」とは、人間をはじめ、犬、ねこ、馬、豚、羊、マウス、ラット等の哺乳動物のほか、鳥類、爬虫類、両生類、魚類、細菌、ウイルス等の微生物、植物をも包含する概念である。
【００３４】
また、本発明の電気刺激装置により刺激を与える「組織」には、生体のあらゆる組織、臓器、それらの一部が包含される。例えば、中枢神経、末梢神経、骨、軟骨、関節、リンパ管、血管、心臓（心筋、弁）、肺、肝臓、脾臓、すい臓、食道、胃、小腸、大腸、腎臓、膀胱、子宮、卵巣、精巣、横隔膜、筋肉、腱、皮膚、眼、鼻、気管、舌、唇、爪、毛髪等それらの１部をいう。本発明の電気装置で用いられる組織は、これらの臓器、組織の中でも生体内で興奮性の電気刺激が常在する組織、例えば心臓、骨格筋、平滑筋、末梢神経、脳等の中枢神経等の組織を主な対象とすることができる。
【００３５】
本発明の電気刺激装置における電気回路４のロジックＩＣ５、電源（６）、マイクロスイッチ、モニタリング装置（８）及び電極９，９’の回路配置は特に限定されるものではなく、キャップ１の形状、大きさ等に応じて適宜決定することができる。例えば、本発明の電気刺激装置では、図２（Ａ）〜（Ｃ）に示されるような回路配置をとることが可能である。
【００３６】
図２（Ａ）は、ロジックＩＣ５がＣＭＯＳ系ＩＣ（７４ＨＣ）である場合の回路配置を示す。電源（６）から発生した電流はＣＭＯＳ系ＩＣにおいて、所望の波形のパルス電流に変換され、さらに周辺素子であるコンデンサーや抵抗により所望の電流強度、サイクル、通電時間に調整される。調整されたパルス電流は、発光素子（ＬＥＤ）８でモニタリングされながら電極へ供給される。
図２（Ｂ）は、周辺素子がすべてロジックＩＣ５の中に盛り込まれている場合の回路配置を示す。図２（Ｂ）で示される回路配置では、周辺素子の占有スペースが省けるため、装置の小型化に寄与できるというメリットがある。
図２（Ｃ）は、周辺素子をすべてロジックＩＣの中に盛り込み、さらにマイクロスイッチ７がロジックスイッチとなっている場合の回路配置を示す。図２（Ｃ）で示されるロジックスイッチを使用すると、フェザータッチのスイッチとなるため、軽いタッチとなり、特に好ましい。
【００３７】
本発明の電気刺激装置は、生体細胞等の成長を促進又は抑制させるために用いられることが好ましい。さらに本発明の電気刺激装置は、生体細胞等の成長促進又は成長抑制方法において用いられることが好ましい。本発明の電気刺激装置を生体細胞等の成長促進又は抑制方法に用いると、実験の目的に応じて予め設定されたパルス電気信号を電気刺激として原組織に与え、興奮入力により発生し得る細胞内カルシウムイオン濃度変動を考慮した生体細胞等の成長を促進又は抑制することができる。
【００３８】
本発明の電気刺激装置の製造方法は、特に限定されるものではないが、例えば、通常の単一容器適用の電極と、刺激回路及びマルチウェルプレート適用の電極配列と、刺激回路とを半導体技術により一つのマイクロチップとして一体形成し、懸垂電極を追加して構築することができる。
【００３９】
【実施例】
以下に、本発明の好適な実施例を示す。なお、下の実施例に示される材料、使用量、割合、手順等は、本発明の趣旨を逸脱しない限り適宜変更することができる。したがって、本発明の範囲は以下に示す具体例により限定的に解釈されるべきものではない。
【００４０】
（実施例１）
温度３７℃、湿度９９％、ＣＯ２濃度５％の条件下で、本発明の電気刺激装置を用いて知覚神経細胞とシュワン細胞の混合標本に成長促進を目的とした条件の電気刺激（５　ｍＶ／ｍｍ，　持続時間１　ｍｓｅｃ，　０．２Ｈｚ）を１０日間印加しながら培養した。結果を図３に示す。
【００４１】
（比較例１）
電気刺激を与えなかったことを除き、実施例１と同様の方法で知覚神経細胞とシュワン細胞の混合標本を培養した。結果を図３に示す。
【００４２】
図３に示されるように、電気刺激を与えて培養した標本（実施例１、図３（Ｂ））では、電気刺激を与えないで培養した標本（比較例１、図３（Ａ））と比べると、著明な神経突起の伸張及び分枝とシュワン細胞の増殖が見られた。
【００４３】
（実施例２）
温度３７℃、湿度９９％、ＣＯ２濃度５％の条件下で、本発明の電気刺激装置を用いて、知覚神経細胞とシュワン細胞の混合標本に成長抑制（細胞障害付与）を目的とした条件の電気刺激（１５０ｍＶ／ｍｍ，　持続時間５ｍｓｅｃ，　２Ｈｚ）を５時間印加し、さらに２日間培養した。結果を図４に示す。
【００４４】
図４に示されるように、電気刺激前の状態（図４の（Ａ））と比べて、電気刺激後には神経突起を中心に遅発性のネクローシス（壊死）が見られた（図４の（Ｂ））。
【００４５】
【本発明の効果】
以上の説明したように、本発明の電気刺激装置は、所望のパルス電流を培養容器内の培地に電気刺激として与える装置としては、構造が簡単で製作が容易で安価である。また本発明の電気刺激装置のキャップは簡便に脱着が可能である。
また、本発明の電気刺激装置を用いれば、電気刺激として与えられるパルス電流を調整することにより、生体細胞等の成長を促進又は抑制する方法を提供することができる。
【００４６】
特に、本発明の電気刺激装置を用いて生体細胞等を成長させれば、従来の組織の培養装置では静置か、せいぜい攪拌下で培養できたに過ぎないのに対し、本発明ではパルス電気信号、好ましくは実験の目的に応じて予め設定されたパルス電気信号を電気刺激として原組織に与え、興奮入力により発生し得る細胞内カルシウムイオン濃度変動を考慮した生体細胞等の成長を促進又は抑制することができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明の電気刺激装置の一実施例を示す概要図である。
【図２】本発明の電気刺激装置における電気回路の回路配置を示す説明図である。
【図３】本発明の電気刺激装置を用いて神経細胞に電気刺激を与え、成長を促進した場合の状態を表す写真である。
（Ａ）電気刺激を与えないで培養した場合における結果を示す写真である。
（Ｂ）電気刺激を与えて培養した場合における結果を示す写真である。
【図４】本発明の電気刺激装置を用いて神経細胞に電気刺激を与え、成長を抑制した場合の状態を表す写真である。
（Ａ）電気刺激を与える前の神経細胞の状態を示す写真である。
（Ｂ）電気刺激を与えた後の神経細胞の状態を示す写真である。
【符号の説明】
１　電気刺激装置装着用キャップ
２　培養容器
３　プリント基板
４　電気回路（電流発生手段）
５　ロジックＩＣ
６　ボタン電池（電源）
７　マイクロスイッチ
８　発光素子（モニタリング装置）
９，９’　電極
１０　電気刺激装置
１１　培地
１２　生体細胞又は生体組織
【図１】
2004089018.tif 000003
【図２】
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【図３】
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【図４】
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