(57)【要約】      （修正有）【課題】アレルギーの諸症状、特にアトピー性皮膚炎症状を予防するために日常手軽に摂食することのできる抗アレルギー剤を提供する。【解決手段】有効成分として糖を含有するリン脂質を配合した抗アレルギー剤。特に、糖を含有するリン脂質が、ホスフォリパーゼＤの作用により製造された、例えば、ホスファチジルマンノースである。卵黄レシチンや大豆レシチンにホスフォリパーゼＤを作用させて製造する方法が経済的で有利である。カプセル、錠剤または飲料として経口的に摂取できる。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
有効成分として糖を含有するリン脂質を配合した抗アレルギー剤。
【請求項２】
糖を含有するリン脂質がホスフォリパーゼＤの作用により製造されたホスファチジル基結合糖である請求項１に記載の抗アレルギー剤。
【請求項３】
糖を含有するリン脂質が、ホスファチジルマンノースである請求項１または２項に記載の抗アレルギー剤。
【請求項４】
抗アレルギー剤の作用がアトピー性皮膚炎を抑制する作用である請求項１〜３のいずれか１項に記載の抗アレルギー剤。
【請求項５】
抗アレルギー剤の作用が遅延型アレルギーを抑制する作用である請求項１〜４のいずれか１項に記載の抗アレルギー剤。
【請求項６】
抗アレルギー剤が経口摂取できることを特徴とする請求項１〜５のいずれか１項に記載の抗アレルギー剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、抗アレルギー剤、特にアトピー性皮膚炎症状の予防・治療を目的として、日常手軽に摂食することのできる抗アレルギー剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
近年、アトピー性皮膚炎などのアレルギー性疾患が深刻な問題となっている。アトピー性皮膚炎は、乾燥した苔癬状の湿疹が特徴で、強い痒みを有する難治性の慢性炎症疾患である。アトピー性皮膚炎の湿疹が形成される機序は、不明な点が多いが、Ｉ型アレルギーおよびＩＶ型アレルギー反応が関わっていることが明らかとなっている。Ｉ型アレルギーは主にＩｇＥ抗体が関与した即時型アレルギーで、マスト細胞や好塩基球上のＩｇＥとアレルギーの原因物質（アレルゲン）が反応すると、ヒスタミンやロイコトリエン等の化学伝達物質や酵素が遊離し、皮膚に炎症反応が起こる。このＩ型アレルギーは、アトピー性皮膚炎の湿疹病変には直接は結びつかないとされている。ＩＶ型アレルギーは遅延型アレルギーあるいは細胞伝達型アレルギーと呼ばれ、リンパ球が関与する炎症反応で、感作されてから発症するまでに２４〜７２時間かかる。
【０００３】
アトピー性皮膚炎の治療法として様々な試みがなされてきたが、満足な効果をあげていない。副腎皮質ホルモン外用剤を用いた外用療法が主に行われているが、副作用等の問題を有している。また、抗ヒスタミン剤など即時型反応を抑制する薬剤も利用されているが、効果が十分でないことや、副作用等の問題がある。
最近になって、ラフィノースを有効成分とする抗アトピー性皮膚炎組成物（特許文献１）、ウーロン茶を有効成分とする抗アレルギー剤（特許文献２、特許文献３）トクサ科植物を利用した抗アレルギー作用を有する健康食品（特許文献４）、ソヤサポゲノールＢを有効成分とする抗アレルギー剤（特許文献５）、トマト抽出物を有効成分とする抗アレルギー剤（特許文献６）、タイム抽出物を含有することを特徴とする抗アレルギー食品（特許文献７）が開発されているが性能が必ずしも充分とはいえない。これらのことから、安全で且つ優れたアトピー性皮膚炎予防・治療剤が望まれていた。
【０００４】
【特許文献１】
特開平１１‐２５５６５６号公報
【特許文献２】
特開平１０‐１７５８７４号公報
【特許文献３】
特開平１０‐０７７２３１号公報
【特許文献４】
特開２００３‐０６１６１７号公報
【特許文献５】
特開２００２‐１２８６６３号公報
【特許文献６】
特開２００２‐０８０３８７号公報
【特許文献７】
特開平０９‐１８７２４８号公報
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、アトピー性皮膚炎の治療法に関する上記実情に鑑み、有効かつ安全にアトピー性皮膚炎症状を予防・治療し得る抗アレルギー剤を提供せんとするものである。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、上記目的を達成するために、食品成分中に抗アレルギー作用を持つ物質を探索した結果、糖を含有するリン脂質が抗アレルギー作用を有し、特に該リン脂質にアトピー性皮膚炎抑制作用、遅延型アレルギー抑制作用があることを見出し、本発明を完成させた。
【０００７】
【発明の実施の形態】
本発明における糖を含有するリン脂質は、糖としては単糖類、二糖類など、リン脂質としては植物由来、動物由来のものなど、種々の糖とリン脂質とからなるものが使用できる。特に、ホスフォリパーゼＤの作用により製造されたホスファチジル基結合糖が好ましく、より好ましくはホスフォリパーゼＤの作用によりマンノースにホスファチジル基を導入して作られたホスファチジルマンノースが挙げられる。
本発明の糖を含有するリン脂質の抗アレルギー作用について以下に述べる。
【０００８】
性能評価試験
本試験においては、アトピー性皮膚炎モデルとして汎用されるＮＣ／Ｎｇａマウスにハプテンを反復塗布することによって発症される皮膚炎に対して、飼料に混合したホスファチジルマンノースの性能を評価した。
【０００９】
（試料の調製）
マンノース６リン酸は、シグマ社より購入した。ホスファチジルマンノースは、以下の方法により製造した。高純度大豆レシチン（ホスファチジルコリン濃度７０％、（株）ホーネンコーポレーション社製）２０ｇをジエチルエーテル１６００ｍｌに溶解した。酢酸緩衝液（０．４Ｍ，  ｐＨ６．０）４０ｍｌ、ホスフォリパーゼＤ粗酵素液（２００  ｕｎｉｔ／ｍｌ、（株）ホーネンコーポレーション社製、単位は文献  Ｂｉｏｓｃｉ．  Ｂｉｏｔｅｃｈ．  Ｂｉｏｃｈｅｍ，  ５７，  １９４６−１９４８，  １９９３による）を４０ｍｌ、純水２８０ｍｌにマンノース１３４ｇを加えて溶解する。エーテル溶液とマンノース・酵素溶液を混合し、激しく攪拌しながら室温で１８時間反応した。反応後エーテル層を回収し、溶媒を除去してホスファチジルマンノースを得た。ホスファチジルマンノース濃度は約６０％であった。
【００１０】
（動物実験１）
６週齢のＮＣ／Ｎｇａ  Ｔｎｄ  Ｃｒｊ系オスマウス（日本チャールズ・リバー株式会社）を購入し２週間馴化し、一般状態の観察および体重測定を行い、健康と判断した動物を実験に使用した。１群を９匹として、体重が均一になるように、３群に分けた。基本飼料として精製飼料（ＡＩＮ９６Ｇ、オリエンタル酵母株式会社）を使用した。表１に示した様に、第１群（コントロール群）は精製飼料のみを与え、第２〜３群は被験サンプルを添加した飼料を与えた。
【００１１】
【表１】
2004285006.tif 000002
【００１２】
８週齢に達したマウスを３群に分けてマウスが上記飼料を摂取し始めると同時に、以下の様にハプテンに感作させ皮膚炎を誘発した。すなわち、バリカンを用いてエーテル麻酔したマウス腹部の毛刈りを行ない、毛刈りした腹部および足蹠に感作用２，４，６−トリニトロクロロベンゼン（Ｐｉｃｒｙｌ  Ｃｈｌｏｒｉｄｅ以下、ＰｉＣｌ）溶液（１５０μＬ／匹）を塗布した。このようにしたマウスを試験に用いた。
感作後４日目から誘発を開始した。以降、週１回、５週間誘発を繰り返した。すなわち、バリカンを用いてエーテル麻酔したマウス背部の毛刈りを行い、毛刈りした背部および左右の耳（内外両側）に誘発用ＰｉＣｌ溶液（１５０μＬ／匹）を塗布した。なお、誘発２回目以降の毛刈りについては、育毛に応じて行った。アトピー性皮膚炎の状態を以下の様に観察した。誘発１回目の前日から、週２回皮膚の状態を観察し、ヒトのアトピー性皮膚炎の臨床症状の評価基準に基づき以下に示す項目について評点化した。
【００１３】
１）観察項目
▲１▼  ｐｒｕｒｉｔｕｓ／ｉｔｃｈｉｎｇ（掻痒症）
▲２▼  ｅｒｙｔｈｅｍａ／ｈｅｍｏｒｒｈａｇｅ（発赤・出血）
▲３▼  ｅｄｅｍａ（浮腫）
▲４▼  ｅｘｃｏｒｉａｔｉｏｎ／ｅｒｏｓｉｏｎ（擦傷・組織欠損）
▲５▼  ｓｃａｒｉｎｇ／ｄｒｙｎｅｓｓ（痂皮形成・乾燥）
２）評点化
上記各観察項目について下記に示す程度により評点化した。
評点
０・・・・・・・・無症状
１・・・・・・・・軽度
２・・・・・・・・中等度
３・・・・・・・・高度
皮膚炎スコアのデータは、平均値±標準誤差で表し、有意差検定は、Ｓｔｕｄｅｎｔ  ｔ  ｔｅｓｔで行った。危険率５％未満を有意とし、５％未満（Ｐ＜０．０５）および１％未満（Ｐ＜０．０１）とに分けて表示した。
【００１４】
動物実験１の結果
皮膚炎スコアのデータを図１に示した。図１に示した様に、ホスファチジルマンノース投与群では、アトピー性皮膚炎の進行が顕著に妨げられた。一方、マンノース６リン酸にはコントロールと差がなかったことから、本作用はホスファチジルマンノースに特有の作用と考えられた。
【００１５】
（動物実験２）
動物実験１では、感作前から群分けし各種飼料を摂取させたが、実験２では、感作、誘発し皮膚炎が発症した後に、群分けし表２に示した飼料を摂取させて皮膚炎の進行を比較した。感作、誘発および皮膚炎スコアの判定は動物実験１と同様に行なった。感作後、４日目および１１日目に誘発を行ない、１７日目に皮膚炎スコアが４程度になる様に群分けし表２に示した飼料を実験終了まで投与した。さらに１８日目、２５日目、３２日目、３９日目に感作を行なった。皮膚炎スコアは、３１日目、３８日目、４５日目に判定した。
【００１６】
【表２】
2004285006.tif 000003
【００１７】
動物実験２の結果
皮膚炎スコアのデータを図２に示した。図２に示した様に、ホスファチジルマンノース投与群では、アトピー性皮膚炎の進行が顕著に妨げられた。一方、ホスファチジルコリンにはコントロールと差が認められなかったことから、本作用はホスファチジルマンノースに特有の作用と考えられた。
【００１８】
リン脂質は、血中中性脂肪低下作用など脂質代謝改善作用があることが知られているが、本発明の様な抗アトピー性皮膚炎作用は知られていない。ましてや糖を含有する糖リン脂質の抗アトピー性皮膚炎作用および抗アレルギー作用は知られていない。本発明で示されたホスファチジルマンノースの抗アトピー性皮膚炎作用の発現メカニズムは明らかではないが、腸管免疫に関与する細胞に直接的あるいは間接的に作用するのかもしれない。あるいは、腸管で吸収されたのち体内で免疫機構に作用するのかもしれない。
【００１９】
本発明に用いる、糖を含有するリン脂質の糖には、マンノース、グルコース、ガラクトース、グルコサミン、Ｎ−アセチルグルコサミンなどの単糖の他、ラクトースサッカロース、マルトースなどの二糖類が含まれる。またリン脂質の起源は特定されず、大豆、ナタネ、ヒマワリなどの植物由来のものの他、卵黄、魚卵、さらに微生物由来のものも使用できる。さらには、本発明に用いる糖を含有するリン脂質の製法は特に限定されず、天然物由来あるいは化学合成品、酵素合成品のいずれも使用できるが、ホスファチジルマンノースの場合、卵黄レシチンあるいは大豆レシチンにホスフォリパーゼＤを作用させて製造する方法が経済的に有利である。この製造に用いるホスフォリパーゼＤの起源は特に限定されないが、ホスファチジル基転移活性の高い酵素を用いることが望ましい。糖を含有するリン脂質は精製して利用してもクルードな状態で利用しても構わない。
【００２０】
【実施例】
以下に本発明の実施例を挙げるが、本発明は以下の実施例によって制限されない。
実施例１
2004285006.tif 000004
これらを混合した後、ゼラチンを用いてカプセル化した。
【００２１】
実施例２
2004285006.tif 000005
これらを混合した後、打錠して錠剤にした。
【００２２】
実施例３
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これらを混合した後、殺菌して大豆オリゴ糖およびスタキオース入りの飲料を製造した。
【００２３】
【発明の効果】
本発明の抗アレルギー剤を日常、摂食することにより、副作用も生ぜず、アレルギーの諸症状、特にアトピー性皮膚炎を予防、治療することができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】動物実験１の結果を示すグラフである。
【図２】動物実験２の結果を示すグラフである。
【図１】
2004285006.tif 000007
【図２】
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