(57)【要約】【課題】被検者の負担が少なく、簡便、かつ、正確に、歯周疾患を検出する手段を、唾液検査において提供すること。【解決手段】唾液検体中の乳酸脱水素酵素活性、および、遊離ヘモグロビン量を指標として、好適には、唾液検体の乳酸脱水素酵素活性の基準値と、遊離ヘモグロビン量の基準値を定め、これらの基準値を基とする、一定値以上の乳酸脱水素酵素活性、および、一定量以上の遊離ヘモグロビン量を指標として、歯周疾患を検出することにより、上記の課題を解決し得ることを見出した。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
唾液検体中の乳酸脱水素酵素活性、および、遊離ヘモグロビン量を指標として、歯周疾患を検出する、歯周疾患の検出方法。
【請求項２】
唾液検体の乳酸脱水素酵素活性の基準値と、遊離ヘモグロビン量の基準値を定め、これらの基準値を基とする、一定値以上の乳酸脱水素酵素活性、および、一定量以上の遊離ヘモグロビン量を指標として、歯周疾患を検出する、請求項１記載の検出方法。
【請求項３】
下記の唾液検体を、歯周疾患患者の唾液検体として検出する、請求項１または２記載の検出方法。
１）唾液検体における遊離ヘモグロビン量が基準値以上である。
２）唾液検体における遊離ヘモグロビン量が基準値未満であるが、同乳酸脱水素酵素の活性値が基準値以上である。
【請求項４】
唾液検体中の遊離ヘモグロビン量値の基準値が１ｎｇ／ｍｌであり、かつ、唾液検体中の乳酸脱水素酵素活性値の基準値が３００ＩＵ／ｌである、請求項２または３記載の歯周疾患の検出方法。
【請求項５】
請求項３または４記載の検出方法を行うためのアルゴリズムを含むコンピュータソフトウエアを実行することにより、歯周疾患を検出する、歯周疾患の検出方法。
【請求項６】
請求項３または４記載の検出方法を行うためのアルゴリズムを含むコンピュータソフトウエア。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、特定疾患の検出方法、さらに具体的には、歯肉炎、歯周病等の、歯周疾患の検出方法に関する発明である。
【０００２】
【従来の技術】
歯周疾患は、歯を支えているまわりの組織である、歯肉や歯槽骨等の病気であり、虫歯と異なり、ほとんど痛みがなく、気づかないうちに進行することが多い。しかしながら、放置すると、症状は進行し、やがて歯が抜けることとなる。
【０００３】
特に、近年の日本においては、食生活の欧米化が進み、比較的柔らかな食品を好む傾向や、精神的ストレスの増加等により、歯周疾患が起きる度合いが高まっている。
【０００４】
歯周疾患の対策としては、正しい歯磨きや、定期検診によるプラークコントロール、食生活の改善等の予防行為が挙げられるが、現実的には、進行しつつある歯周疾患をいかに的確に発見し、その症状に適した治療を行うか、というところが非常に重要なポイントとなっている。
【０００５】
歯周疾患の診断法としては、例えば、レントゲン検査、プラーク付着検査、ポケット測定検査等が挙げられるが、特に、歯肉にのみ炎症が生じている、初期の歯肉炎の段階での発見は、担当した歯科医師の技量に依るところが大きいことは否定できない。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
歯周疾患は、歯肉炎の段階であれば、正しい歯磨きや、歯石の除去により改善することが知られている。仮に、この初期段階の歯周疾患を、簡便、かつ、正確に検出し得る手段が提供されれば、歯周炎等の深刻な歯周疾患に罹患する危険性を低下させることが可能なはずである。
【０００７】
よって、本発明が解決すべき課題は、このような、被検者の負担が少なく、簡便、かつ、正確に、歯周疾患を検出する手段を提供することにあるが、特に、様々な歯周疾患の検出手段の中から、簡便に行うことができる唾液検査に的を絞り、従来よりも正確に、歯周疾患を検出することが可能な指標を見いだすことを目的とする。
【０００８】
【課題を解決するための手段】
本発明者は、上記の課題を解決するために、唾液検査における、歯周疾患検出のための適切な指標について検討したところ、唾液検体中の乳酸脱水素酵素（以下、ＬＤＨともいう）活性、および、遊離ヘモグロビン（以下、Ｈｂともいう）量を指標とすることにより、歯周疾患を、簡便、かつ、正確に検出可能であることを見いだし、本発明を完成した。
【０００９】
すなわち、本発明は、唾液検体中のＬＤＨ活性、および、Ｈｂ量を指標として、歯周疾患を検出する、歯周疾患の検出方法（以下、本検出方法ともいう）を提供する発明である。
【００１０】
なお、本発明において、「歯肉炎」とは、上述したように、歯肉にのみ炎症が生じたもので、歯根膜や歯槽骨までは冒されていない状態の歯周疾患のことを意味するものとする。また、「歯周炎」とは、歯槽骨が溶けはじめている状態以上に進行した歯周疾患を意味するものとする。臨床上は、これらの区別を、歯茎に形成されるポケットの程度（大きさと数）により判断することが多い。
【００１１】
【発明の実施の形態】
本検出方法における検出指標であるＬＤＨは、歯周疾患が進行すると、歯肉細胞の破壊が起こり、唾液中のＬＤＨ濃度が上昇して、その酵素活性も上昇するために、歯周疾患の検出指標として有用であると考えられる。
【００１２】
しかしながら、ＬＤＨのみを歯周疾患の指標とすると、疑陽性である場合が多く認められ、問題がある。
唾液検体中のＬＤＨの検出方法は、既に知られている方法を用いることが可能であり、特に限定されないが、好適な方法として、比色法、酵素反応速度測定法等が挙げられる。
【００１３】
また、本検出方法における検出指標であるＨｂは、歯周疾患が進行すると、歯肉細胞の破壊に伴う出血が起こり、唾液中に赤血球の主要成分であるヘモグロビンが遊離し、唾液中のＨｂ濃度が上昇するために、歯周疾患の検出指標として有用であると考えられる。
【００１４】
しかしながら、Ｈｂのみを歯周疾患の指標とすると、疑陰性の患者を見逃してしまう可能性が強い。
唾液中のＨｂの検出方法は、既に知られている方法を用いることが可能であり、特に限定されないが、好適な方法として、比色法、抗体を結合させたラテックスを用いた比濁法、抗体を用いた比濁法等が挙げられる。
【００１５】
上述したように、本検出方法は、単独では、歯周疾患の検出指標としては、不十分な面がある、ＬＤＨ活性とＨｂ量を組み合わせて検出指標とすることにより、驚くべきことに、疑陽性と疑陰性の危険率を低くして、確度良く、歯周疾患を検出することが可能となる。
【００１６】
歯周疾患の検出は、具体的には、唾液検体のＬＤＨ活性の基準値と、Ｈｂ量の基準値を定め、これらの基準値を基とする、一定値以上のＬＤＨ活性、および、一定量以上のＨｂ量を指標とすることにより行うことができる。
【００１７】
唾液検体のＬＤＨ活性の基準値と、Ｈｂ量の基準値は、測定法や測定単位によっても異なるが、それぞれ指標単独のカットオフ値として好適な値を設定することが好適である。具体的には、唾液検体中のＨｂ量値の基準値を１ｎｇ／ｍｌ程度として、かつ、唾液検体中のＬＤＨ値の基準値を３００ＩＵ／ｌ程度とすることが好適である。
【００１８】
また、前述したように、唾液検体中のＬＤＨ値は、歯周疾患に対して陽性的中率は高いが、陰性的中率が低く、その結果として疑陽性率が高い傾向があり、逆に、Ｈｂ値は、陰性的中率は高いが、陽性的中率が低く、その結果として疑陰性率が高い傾向が認められる。よって、上記の基準値を設定した上で、下記１）２）を満たす唾液検体を、歯周疾患患者の唾液検体とすることが好適である。
【００１９】
１）唾液検体におけるＨｂ量が基準値以上である。
２）唾液検体におけるＨｂ量が基準値未満であるが、同ＬＤＨの活性値が基準値以上である。
【００２０】
すなわち、まず、唾液検体におけるＨｂ量が基準値以上であれば、歯周疾患と判定し、さらに、唾液検体におけるＨｂ量が基準値未満であっても、同ＬＤＨの活性値が基準値以上であれば、歯周疾患と判定することが好適である。
【００２１】
歯周疾患には、「歯肉炎」と「歯周炎」があり、さらに、「歯周炎」も、軽度、中等度、重度等、その程度が分類されているが、本検出方法では、「異常なし」か、「歯周疾患」（歯肉炎と歯周炎）かを検出することが適している。つまり、本検出方法を歯科検診前に行うことにより、歯科治療を行う上での有用な事前情報を歯科医に対して提供することができる。また、歯科検診において、「異常なし」と判定された者に対し、本検出方法を行うことにより、検診の漏れを防ぐことが可能となる。
【００２２】
本検出方法は、これを行う行程をアルゴリズムとして含むソフトウエアにより行うことが好適である。
典型的には、第１図に示すフローチャートに示すアルゴリズムを含むことが好適である。
【００２３】
第１図のフローチャート１０において、唾液検体のＨｂ量とＬＤＨ活性の計測データを得て、判定を開始する（１１）。まず、ステップ１２は、Ｈｂ量を基に判断処理を行うステップであり、Ｈｂ量が１ｎｇ／ｍｌ以上である場合には、「歯周疾患の疑いあり」とし（２１）、１ｎｇ／ｍｌ未満である場合には、ステップ１３に進む。ステップ１３は、ＬＤＨ活性値を基に判断処理を行うステップであり、ＬＤＨ活性値が３００ＩＵ／ｌ以上である場合には、「歯周病の疑いあり」とし（２１）、３００ＩＵ／ｌ未満である場合には、「歯周病の疑いなし」（２２）とする。
【００２４】
このように、唾液検体におけるＨｂ量が基準値以上であれば、歯周疾患と判定し、さらに、唾液検体におけるＨｂ量が基準値未満であっても、同ＬＤＨの活性値が基準値以上であれば、歯周疾患と判定するアルゴリズムを行うことが、コンピュータソフトウエア上で可能である。
【００２５】
フローチャート１０として表されるアルゴリズムは、適切なプログラム言語、例えば、機械語、アセンブラ言語等の低水準言語；Ｆｏｒｔｒａｎ、ＣＯＢＯＬ、ＢＡＳＩＣ、Ｃ等の手続型言語；ＲＰＧ、Ｐｒｏｌｏｇ、ＬＩＳＰ、ＡＰＬ、Ｓｍａｌｌｔａｌｋ、Ｃ＋＋、ＪＡＶＡ（登録商標）等の非手続型言語等に従い、ソフトウエア化され、コンピュータ端末等のハードウエアに組み込まれて実行されることで、本発明を行うことができる。
【００２６】
【実施例】以下に、本発明の実施例を記載する。
モデルの内容
埼玉県内において、歯周疾患に関する集団検診を行い、この検診結果を、歯周疾患について伝統的な視診による確定診断を、習熟した歯科医師に従って行い、その結果に対し、検診対象者の唾液検体における遊離ヘモグロビン量と乳酸脱水素酵素活性の間に相関があるか否かを検討した。
【００２７】
１）検診の対象と内容：１３４名の成人男女に対して、ａ）飲食・歯磨きの習慣、ｂ）口腔内の様子、ｃ）生活習慣、ｄ）喫煙の状況、ｅ）その他、についての問診を行った上で、口腔内の検診を行い、ＣＰＩ（Ｃｏｍｍｕｎｉｔｙ  Ｐｅｒｉｏｄｏｒｔａｌ  ｉｎｄｅｘ）を以下の要領で行った。
【００２８】
＜評価基準＞
各歯の頬側面、舌側面について、近心、中央、遠心の合計６点を計測し、最高点をその歯のコードとし、さらに全歯の中から最も高いスコアを代表値とした。
【００２９】
Ｃｏｄｅ  ０：健全歯周組織（処置の必要なし）
Ｃｏｄｅ  １：プローピング後に出血する（歯口清掃状況の改善、口腔衛生教育、保健指導が必要）
Ｃｏｄｅ  ２：縁上、縁下歯石がある。不良辺縁をもつ充填物もしくは冠がある（専門家による歯口清掃が必要）
Ｃｏｄｅ  ３：歯茎に４〜５ｍｍのポケットが認められる（複合歯周処置が必要）
Ｃｏｄｅ  ４：歯茎に６ｍｍ以上のポケットが認められる（複合歯周処置が必要）
【００３０】
なお、Ｈｂ量は、市販の一般的な検査キットを用いて計測し、ＬＤＨ（ＬＤＨ１〜ＬＤＨ５の総活性和）活性は、検査キット（Ｌタイプワコー  ＬＤＨ・Ｊ：和光純薬社製）で計測した。
【００３１】
２）結果
ａ）遊離ヘモグロビン量と歯周疾患の関係の検討
遊離ヘモグロビン量と歯周疾患の関係については、第１表に表される結果が得られた。
【００３２】
【表１】
2004329141.tif 000002
【００３３】
この結果により、遊離ヘモグロビン（Ｈｂ）量は、特異度が高い（８５．７１４２９）反面、敏感度が低い（２７．５）ことが明らかになった。すなわち、Ｈｂ単独を歯周疾患の指標としても、疑陰性が数多く生ずるリスクが認められることが明らかとなった。
【００３４】
ｂ）乳酸脱水素酵素活性と歯周疾患の関係の検討
Ｈｂ量が１ｎｇ／ｍｌ未満であった被験者における、乳酸脱水素酵素活性値と歯周疾患の関係については、第２表に表される結果が得られた。
【００３５】
【表２】
2004329141.tif 000003
【００３６】
この結果により、乳酸脱水素酵素活性（ＬＤＨ）量は、敏感度が高い（８２．７５８６２）反面、特異度が低い（３３．３３３３３）ことが明らかになった。すなわち、ＬＤＨ単独を歯周疾患の指標としても、疑陽性が数多く生ずるリスクが認められることが明らかとなった。
【００３７】
ｃ）統合結果
しかしながら、上記ａ），ｂ）の結果を総合すると、下記第３表に示す結果が得られた。
【００３８】
【表３】
2004329141.tif 000004
【００３９】
この結果から、唾液検体におけるＨｂ量が基準値以上であれば、歯周疾患と判定し、さらに、唾液検体におけるＨｂ量が基準値未満であっても、同ＬＤＨの活性値が基準値以上であれば、歯周疾患と判定することにより、
８２．８％（１１１／１３４×１００）という高い確度で、歯周疾患であるか否かを唾液検体から検出可能であることが明らかになった。
【００４０】
【発明の効果】
本発明により、簡便、かつ、正確な、被験者の唾液検体を用いた、歯周疾患の判定方法が提供される。
【図面の簡単な説明】
【図１】本検出方法を行うためのアルゴリズムの一例を示したフローチャートである。
【図１】
2004329141.tif 000005