(57)【要約】　【課　題】　ソフトカプセルに充填可能で、且つルテイン含量の高いマリーゴールドオレオレジンを得る方法を提供する。　【解決手段】オレオレジンを超臨界抽出処理する工程と、ケトン系溶剤に溶解後冷却し、該溶剤に不溶の成分を除く工程とを組み合わせることにより、低粘度で且つルテイン含量の高いマリーゴールドオレオレジンが得られる。　【選択図】　なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
　マリーゴールドオレオレジンを超臨界抽出処理する工程と、ケトン系溶剤に溶解後冷却し、該溶剤不溶の成分を除く工程を実施することを特徴とするマリーゴールドオレオレジンの精製方法。
【請求項２】
　マリーゴールドオレオレジンを超臨界抽出処理する工程と、ケトン系溶剤に溶解後冷却し、該溶剤不溶の成分を除く工程を実施して、低粘度、且つルテイン含量の高いマリーゴールドオレオレジン精製物を得ることを特徴とする請求項１記載のマリーゴールドオレオレジンの精製方法。
【請求項３】
　超臨界抽出処理する工程を希釈剤の存在下、実施することを特徴とする請求項１〜２のいずれかに記載のマリーゴールドオレオレジンの精製方法。
【請求項４】
　二酸化炭素、エタン、エチレン、プロパン、トルエンおよび亜酸化窒素からなる群から選ばれる超臨界流体を使用することを特徴とする請求項１〜３のいずれかに記載のマリーゴールドオレオレジンの精製方法。
【請求項５】
　請求項１に記載のケトン系溶剤がアセトン、メチルエチルケトンまたはジエチルケトンであることを特徴とするマリーゴールドオレオレジンの精製方法。
【請求項６】
　超臨界抽出処理する工程を、二酸化炭素超臨界流体を使用し、二酸化炭素の圧力が（９８０〜２９４０）×１０４Ｐａ（＝Ｎ／ｍ２）、温度が臨界温度〜８００Ｃの条件下で実施することを特徴とする請求項１〜５のいずれかに記載のマリーゴールドオレオレジンの精製方法。
【請求項７】
　超臨界抽出処理する工程を、二酸化炭素超臨界流体を使用し、二酸化炭素の圧力が（１４７０〜２４５０）×１０４Ｐａ（＝Ｎ／ｍ２）、温度が４０〜６００Ｃの条件下で実施することを特徴とする請求項１〜５のいずれかに記載のマリーゴールドオレオレジンの精製方法。
【請求項８】
　請求項１〜７のいずれかに記載の方法により得られるマリーゴールドオレオレジン精製物。
【請求項９】
　請求項１〜７のいずれかに記載の方法により得られる、低粘度、且つルテイン含量の高いマリーゴールドオレオレジン精製物。
【請求項１０】
　ルテイン脂肪酸エステルの含量が２０％以上で、且つ３０℃における粘度が２０，０００ミリパスカル秒以下であるマリーゴールドオレオレジン精製物。
【請求項１１】
　ルテイン脂肪酸エステルの含量が３０％以上で、且つ３０℃における粘度が２０，０００ミリパスカル秒以下であるマリーゴールドオレオレジン精製物。
【請求項１２】
　３０℃における粘度が１０，０００ミリパスカル秒以下である、請求項１１記載のマリーゴールドオレオレジン精製物。
【請求項１３】
　３０℃における粘度が５，０００ミリパスカル秒以下である、請求項１１記載のマリーゴールドオレオレジン精製物。
【請求項１４】
　請求項８〜１３のいずれかに記載のマリーゴールドオレオレジン精製物を含有するソフトカプセル。
【請求項１５】
　マリーゴールドオレオレジンを超臨界抽出処理する工程と、ケトン系溶剤に溶解後冷却し、該溶剤不溶の成分を除く工程を実施することを特徴とする精製されたマリーゴールドオレオレジンの製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
　本発明は、マリーゴールドオレオレジンの精製方法、及びそれにより得られるマリーゴールドオレオレジン精製物に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
　カロチノイドの一種であるルテインについて、最近の研究では、網膜黄斑部の酸化変性に起因する加齢性黄斑変性症（Age-related　Macular　Degeneration：ＡＭＤ）のリスク低減との関連を示す報告（例えば、非特許文献1参照）や動脈硬化の予防、白内障の予防あるいは発癌抑制等にも有効であるとの報告（例えば、非特許文献２、３および４参照）がなされている。このようにルテインは、健康食品、栄養補助食品、食品用色素、医薬品用色素、医薬品として有用であり、その利用が期待されている。
【０００３】
　ルテインは、ルテイン脂肪酸エステルの形で、オレンジ、桃、パパイヤ、プルーン、マンゴーのような果実に含まれ、又多くの花や野菜中に存在するが、特にマリーゴールドの花弁に顕著に存在する。乾燥・粉砕されたマリーゴールドの花をヘキサンや石油エーテル等の炭化水素系、またはジクロロメタン等の塩素化炭化水素系の溶剤で抽出し、抽出液から溶剤を除去することにより、マリーゴールドオレオレジンが得られる。商業的に取引されている大部分のマリーゴールドオレオレジンの性状は常温で固状または高粘度のペースト状で、オレオレジン中のルテイン脂肪酸エステル含量は、エステルとして通常１４〜２０％である（例えば、特許文献１参照）。
【０００４】
　ルテインを健康食品、栄養補助食品として利用するために、該マリーゴールドオレオレジンをゼラチン皮膜で包み込んだソフトカプセルが作られる。特に内容物が油性の場合、液体の固形化による取り扱いの利便性、内容物の保護・安定化、内容物の均一性、味・臭いのマスキング、高付加価値感などの点でソフトカプセルに優るものはない（例えば、非特許文献５参照）、と言われている。ソフトカプセルは、通常、２枚のゼラチンシートの間に内容物を一定量注入して打ち抜く打ち抜き法で製造されるが、内容物は定量ポンプで送液可能な粘度、例えばロータリーダイ法では２０，０００ｃｐｓ以下（例えば、非特許文献５参照）、の液体でなければならないことから、該マリーゴールドオレオレジンのソフトカプセルを作る場合、該マリーゴールドオレオレジンを加熱・溶融し液状にすることが必要となる。
【０００５】
　しかし、ソフトカプセルの製造においては、ソフトカプセルの原料であるゼラチンが４０℃以上では成形性を失うことから、通常４０℃以上の加温・加熱工程はなく（例えば、非特許文献５参照）、それ故該マリーゴールドオレオレジンを加熱・溶融し、充填することには困難が伴う。
【０００６】
　そこで、該マリーゴールドオレオレジンに食用植物油を加えて希釈・溶解し、常温で液状とする方法がとられる。しかし、この方法では１カプセル当りのルテイン含量が少なくなるため、１回或いは１日当り摂取するカプセルの個数が多くなるという欠点がある。
【０００７】
　また、マリーゴールドの花から抽出分離したルテイン脂肪酸エステルを食用植物油中に懸濁させ、総カロチノイドエステルとして１５％以上含む、常温でスラリー状の製品が商業的に提供されている。しかし、このものはルテイン脂肪酸エステル含量が低い上、このものを殺菌のため一旦約８０℃で加熱・溶融し、室温まで冷却すると全体が固状となり、ソフトカプセルには充填不可能になるという欠点がある。
【特許文献１】国際公開第９９／５４４０８号パンフレット（ｐ．２、ｌｉｎｅ　２４）
【非特許文献１】「食品と開発」、（株）健康産業新聞社、２０００年、第３５巻、第４号、ｐ．７０
【非特許文献２】西野輔翼、フレデリック・カチック共著、「なぜマルチカロチンがガンを抑制するのか」、メタモル出版、１９９８年、ｐ．８０
【非特許文献３】「ＦＯＯＤ　Ｓｔｙｌｅ　２１」、（株）食品化学新聞社、１９９９年、第３巻、第３号、ｐ．５２
【非特許文献４】「ＦＦＩジャーナル（FOODS & FOOD INGREDIENTS JOURNALOF JAPAN）］、ＦＦＩジャーナル編集委員会、２００１年３月、第１９１巻、ｐ．７５−７６
【非特許文献５】「食品と開発」、（株）健康産業新聞社、１９９５年、第３０巻、第２号、ｐ．１６、１７、１８
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
　この発明は、ソフトカプセルに充填可能で、且つルテイン含量の高いマリーゴールドオレオレジンを得る方法を提供するためになされたものである。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
　本発明者は、上記課題を解決するために鋭意研究を重ねた結果、オレオレジンを超臨界抽出処理する工程と、ケトン系溶剤に溶解後冷却し、リン脂質等のケトン系溶剤に不溶の成分を除く工程とを組み合わせることにより、低粘度で且つルテイン含量の高いマリーゴールドオレオレジンが得られることを見出し、この知見に基づいて本発明をなすに至った。
【００１０】
　即ち、本発明の方法は、次の１〜１４からなっている。
１．マリーゴールドオレオレジンを超臨界抽出処理する工程と、ケトン系溶剤に溶解後冷却し、該溶剤不溶の成分を除く工程を実施することを特徴とするマリーゴールドオレオレジンの精製方法。
２．マリーゴールドオレオレジンを超臨界抽出処理する工程と、ケトン系溶剤に溶解後冷却し、該溶剤不溶の成分を除く工程を実施して、低粘度，且つルテイン含量の高いマリーゴールドオレオレジン精製物を得ることを特徴とする前記１記載のマリーゴールドオレオレジンの精製方法。
３．超臨界抽出処理する工程を希釈剤の存在下、実施することを特徴とする前記１〜２のいずれかに記載のマリーゴールドオレオレジンの精製方法。
４．二酸化炭素、エタン、エチレン、プロパン、トルエンおよび亜酸化窒素からなる群から選ばれる超臨界流体を使用することを特徴とする前記１〜３のいずれかに記載のマリーゴールドオレオレジンの精製方法。
５．前記１に記載のケトン系溶剤がアセトン、メチルエチルケトンまたはジエチルケトンであることを特徴とするマリーゴールドオレオレジンの精製方法。
６．超臨界抽出処理する工程を、二酸化炭素超臨界流体を使用し、二酸化炭素の圧力が（９８０〜２９４０）×１０４Ｐａ（＝Ｎ／ｍ２）、温度が臨界温度〜８０℃の条件下で実施することを特徴とする前記１〜５のいずれかに記載のマリーゴールドオレオレジンの精製方法。
７．超臨界抽出処理する工程を、二酸化炭素超臨界流体を使用し、二酸化炭素の圧力が（１４７０〜２４５０）×１０４Ｐａ（＝Ｎ／ｍ２）、温度が４０〜６０℃の条件下で実施することを特徴とする前記１〜５のいずれかに記載のマリーゴールドオレオレジンの精製方法。
８．前記１〜７のいずれかに記載の方法により得られるマリーゴールドオレオレジン精製物。
９．前記１〜７のいずれかに記載の方法により得られる、低粘度，且つルテイン含量の高いマリーゴールドオレオレジン精製物。
１０．ルテイン脂肪酸エステルの含量が２０％以上で、且つ３０℃における粘度が２０，０００ミリパスカル秒以下であるマリーゴールドオレオレジン精製物。
１１．ルテイン脂肪酸エステルの含量が３０％以上で、且つ３０℃における粘度が２０，０００ミリパスカル秒以下であるマリーゴールドオレオレジン精製物。
１２．３０℃における粘度が１０，０００ミリパスカル秒以下である、前記１１記載のマリーゴールドオレオレジン精製物。
１３．３０℃における粘度が５，０００ミリパスカル秒以下である、前記１１記載のマリーゴールドオレオレジン精製物。
１４．前記８〜１３のいずれかに記載のマリーゴールドオレオレジン精製物を含有するソフトカプセル。
１５．マリーゴールドオレオレジンを超臨界抽出処理する工程と、ケトン系溶剤に溶解後冷却し、該溶剤不溶の成分を除く工程を実施することを特徴とする精製されたマリーゴールドオレオレジンの製造方法。
【発明の効果】
【００１１】
　本発明によれば、マリーゴールドオレオレジンを超臨界抽出処理する工程と、ケトン系溶剤に溶解後冷却し、リン脂質等のケトン系溶剤に不溶の成分を除く工程とを組み合わせることにより、低粘度で且つルテイン含量の高いマリーゴールドオレオレジンが得られる。本発明により得られる精製マリーゴールオレオレジンはソフトカプセルに充填可能で、健康食品、栄養補助食品、食品用色素、医薬品用色素、医薬品として有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１２】
　本発明において用いられるマリーゴールドオレオレジンは、キク科マリーゴールド（Tagetes erecta WILLD.）の花を乾燥し、粉砕し必要ならペレツト状に加工した後、有機溶剤、通常ヘキサン、で抽出し、抽出液から溶剤を除去することにより得られたものである。その性状は、常温で固状またはペースト状で、特有のにおいを有する。その主成分は、ルテイン脂肪酸エステルであるが、通常ゼアキサンチン及びクリプトキサンチンの脂肪酸エステルを含む。従って、本発明で言うルテイン脂肪酸エステルは、これら全てを含む総カロチノイドエステルを指している。
【００１３】
　本発明の方法において、マリーゴールドオレオレジンは高圧二酸化炭素を用いる超臨界抽出で処理される。二酸化炭素は、臨界点（温度３１．３℃、圧力：７２．９気圧）以上を越えると超臨界状態となり、優れた溶解性を示す。また、このような超臨界流体は、圧力或いは温度を変化させることにより溶解力を調整することができるので、抽出槽に供給する超臨界流体の圧力を調整することにより選択的な抽出をすることができる。本発明における超臨界抽出工程で使用する抽出槽は、当該分野でそれ自体公知のものを使用することができ、例えば、特開昭６３−１１２６５９号公報、ｐ．６、第２図に記載された抽出槽を挙げることができる。
【００１４】
　具体的には、マリーゴールドオレオレジンはそのまま或いは食用油脂を加えて抽出槽に仕込まれる。ここで用いられる食用油脂としては、例えば菜種油、とうもろこし油、大豆油、綿実油、ひまわり油、紅花油、パーム油、椰子油等の植物油脂、魚油等の動物油脂、あるいは中鎖飽和脂肪酸トリグリセライド等が挙げられる。食用油脂を加えることにより被抽出物の粘度が下がり、発泡が起こりにくくなるため、抽出操作が容易となる。被抽出物の粘度を調整するための希釈剤としては、上記食用油脂の他に、例えばエタノール、ヘキサン、アセトン、グリセリン、プロピレングリコール等が用いられる。
　これらの希釈剤は、マリーゴールドオレオレジン１００質量部に対して、約１０〜１００質量部、好ましくは約１５〜５０質量部、加えることができる。
【００１５】
　抽出槽に供給する超臨界流体としては二酸化炭素が一般的であるが、エタン、エチレン、プロパン、トルエン、亜酸化窒素等を用いることもできる。超臨界状態の二酸化炭素により抽出された成分は、分離槽で降圧され、二酸化炭素を気化することにより回収され、除かれる。
【００１６】
　超臨界抽出の処理方法は特に制限されないが、二酸化炭素を（９８０〜２９４０）×１０４Ｐａ（＝Ｎ/ｍ2）、好ましくは（１４７０〜２４５０）×１０４Ｐａ（＝Ｎ/ｍ2）、臨界温度〜８０℃、好ましくは４０〜６０℃の臨界条件で抽出を行った後、（４９０〜５８８）×１０４Ｐａ（＝Ｎ/ｍ2）、４０〜６０℃で溶媒が分離するのが好適である。抽出される成分は臭気成分の外、残存有機溶剤、遊離の脂肪酸及びある程度までしか同定できない付随物質を含む残部を含んでいる。希釈剤として加えられた食用油脂は、１１７６×１０４Ｐａ（＝Ｎ/ｍ2）、４０℃以上の条件で、ほぼ全量が抽出され除かれる。抽出時間は、特に制限されないが、例えば、約１時間〜約３０時間、好ましくは約３時間〜約２０時間を例示することができる。
【００１７】
　抽出の終点は、マリーゴールドオレオレジンの粘度に影響を及ぼしている成分の特定が困難なため、抽出率を目安として決められる。抽出率は被抽出物に対する抽出物の割合であり、被抽出物の品質により異なり一様ではないが、通常、１０％以上、好ましくは１５％以上、更に好ましくは２０％以上の条件で抽出処理される。
【００１８】
　超臨界抽出処理されたマリーゴールドオレオレジンは、次にケトン系溶剤に溶解される。ここで用いられるケトン系溶剤としては、アセトン、メチルエチルケトン、ジエチルケトンなどが挙げられるが、好ましくはアセトンである。アセトンの量はオレオレジン１質量部に対して、０．５〜１０質量部、好ましくは２〜３質量部である。
【００１９】
　オレオレジンとアセトンの混合液は、４０〜５５℃、好ましくは４５〜５０℃で緩やかな還流状態を維持しながら、０．５〜１時間攪拌される。次に混合液は、１０〜３０℃、好ましくは１５〜２５℃まで、通常２〜４時間位かけて緩やかに冷却される。冷却された混合液はろ紙或いはろ布を通して、必要ならば珪藻土などのろ過助剤を使用して、ろ過される。ろ液は減圧下で濃縮され、アセトンを除去することによりマリーゴールドオレオレジン精製物が得られる。精製されたマリーゴールドオレオレジンは、減圧下、５０℃を越えない温度で、好ましくは窒素ガスの雰囲気下で、残留する溶剤が除去される。
【００２０】
　本発明の方法は、オレオレジンを超臨界抽出処理する工程と、ケトン系溶剤に溶解後冷却し、該溶剤に不溶の成分を除く工程とを組み合わせることから成っており、どちらの工程を先に行っても良いが、好ましくは先ずオレオレジンを超臨界抽出処理し、次にケトン系溶剤に溶解後冷却し、該溶剤に不溶の成分を除く工程を実施する方法である。
【００２１】
　本発明の方法で得られるマリーゴールドオレオレジン精製物は、室温で液状或いは低粘度のペースト状で、ルテイン脂肪酸エステルの含量は２０％以上、しばしば３０％を越えるものも得られる。その粘度は２０，０００ミリパスカル秒以下、好ましくは１０，０００ミリパスカル秒以下、更に好ましくは５，０００ミリパスカル秒以下のものが容易に得られる。その結果、高濃度のルテイン脂肪酸エステルを含有するソフトカプセルを製造することが可能となった。
【００２２】
　本発明で得られるマリゴールドオレオレジンのソフトカプセルは、医薬品分野、食品分野で用いられているそれ自体公知の方法、例えば、浸漬法、打ち抜き法、滴下法等により製造することができる。ソフトカプセルの形態には特に制限はなく、フットボール型、長楕円型、球型、三角型、涙型、ひし型のいずれの形態をも取ることができるが、通常はフットボール型が好ましい。本発明の精製マリーゴールドオレオレジンは、一ソフトカプセル当たり、約５０〜５，０００ｍｇ、好ましくは約２５０〜３００ｍｇ充填される。ソフトカプセル化された精製マリーゴールドオレオレジンは、長期間、安定である。
マリゴールドオレオレジンのソフトカプセルは、健康食品、栄養補助食品、食品用色素、医薬品用色素、医薬品として有用である。
【００２３】
〔実施例〕
　以下、実施例をもって本発明を具体的に説明する。
［ルテイン脂肪酸エステル含量測定方法］
　試料約０．１ｇを正確に秤量し、ヘキサンに溶解し１００ｍｌとする。これを吸光度が０．３〜０．７になるようにヘキサンで希釈し、この希釈液の４４５ｎｍ近辺の極大吸収での吸光度を分光光度計にて測定し、次の計算式により含量を計算する。
含量（％）＝｛（吸光度／試料の質量）×希釈倍率｝／１，３９４×１００
　　　※１，３９４は４４５ｎｍにおける吸光係数
【００２４】
［粘度測定方法］
　第７版食品添加物公定書記載「２８.　粘度測定法」の「第２法　回転粘度測定法」に基づいて測定した。測定には４号ローターを使用し、想定される粘度に応じて回転数を選択した。尚、測定時間は３０秒に統一した。
【実施例１】
【００２５】
　マリーゴールドオレオレジン（ルテイン脂肪酸エステル：１６．９質量％）１００ｇを１Ｌの抽出槽に仕込み、１７６４×１０４Ｐａ（＝Ｎ/ｍ2）、５０℃の超臨界二酸化炭素を抽出槽に供給し、抽出を行った。抽出液は分離槽で４９０×１０４Ｐａ（＝Ｎ/ｍ2）、６０℃と降圧昇温して分離し、抽出物２４．４ｇを得た。
　次に抽残物約７５ｇとアセトン１９０ｍｌを混合し、５０℃に加温して溶解する。溶液をおよそ３時間かけて２０℃まで徐冷し、生じた不溶物をろ過により除去し、ろ液を減圧濃縮してマリーゴールドオレオレジン精製物約７１ｇ（ルテイン脂肪酸エステル：２３．８質量％）を得た。
【実施例２】
【００２６】
　マリーゴールドオレオレジン（ルテイン脂肪酸エステル：２３．３質量％）１００ｇと菜種油３０ｇを１Ｌの抽出槽に仕込み、１７６４×１０４Ｐａ（＝Ｎ/ｍ2）、５０℃の超臨界二酸化炭素を抽出槽に供給し、抽出を行った。抽出液は分離槽で４９０×１０４Ｐａ（＝Ｎ/ｍ2）、６０℃と降圧昇温して分離し、抽出物５０．１ｇを得た。
　次に抽残物約７９．９ｇとアセトン２１０ｍｌを混合し、５０℃に加温して溶解する。溶液をおよそ３時間かけて２０℃まで徐冷し、生じた不溶物をろ過により除去し、ろ液を減圧濃縮してマリーゴールドオレオレジン精製物約７６ｇ（ルテイン脂肪酸エステル：３０．５質量％）を得た。
【実施例３】
【００２７】
　マリーゴールドオレオレジン（ルテイン脂肪酸エステル：２６．９質量％）１００ｇとアセトン２５０ｍｌを混合し、５０℃に加温して溶解する。溶液をおよそ３時間かけて２０℃まで徐冷し、生じた不溶物をろ過により除去し、ろ液を減圧濃縮して抽出物９４．８ｇを得た。
　次に抽出物約９４．８ｇと菜種油３０ｇを１Ｌの抽出槽に仕込み、１７６４×１０４Ｐａ（＝Ｎ/ｍ2）、５０℃の超臨界二酸化炭素を抽出槽に供給し、抽出を行った。抽出液は分離槽で４９０×１０４Ｐａ（＝Ｎ/ｍ2）、６０℃と降圧昇温して抽出物４５．５ｇを分離し、抽残物としてマリーゴールドオレオレジン精製物約７９ｇ（ルテイン脂肪酸エステル：３２．９質量％）を得た。
【００２８】
　実施例１〜３のマリーゴールドオレオレジン（出発原料）とマリーゴールドオレオレジン精製物（本発明品）の粘度を表１に示す。
【表１】
2004131496.tif 000002
　　＊測定条件　４号ローター、　６回転、３０秒
　＊＊測定条件　４号ローター、６０回転、３０秒