(57)【要約】【課題】単一の容器で、間葉系幹細胞の培養環境を維持し、効率的に増殖させる。【解決手段】底面２に沿って成長する細胞を培養する培養容器１であって、細胞を成長させる底面２の面積を拡大可能な培養容器１を提供する。【選択図】　図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
底面に沿って成長する細胞を培養する培養容器であって、
細胞を成長させる底面の面積を拡大可能な培養容器。
【請求項２】
底面を構成する容器壁を伸張可能な請求項１に記載の培養容器。
【請求項３】
相互に角度をなして配置され、それぞれを底面とすることが可能な面積の異なる複数の内面を有する請求項１に記載の培養容器。
【請求項４】
内部に貯留する培養液量を増加させることにより培養液内に浸される底面積を拡大可能な段差が底面に設けられている請求項１に記載の培養容器。
【請求項５】
前記段差により低く形成される領域が、相互に間隔をあけて複数設けられている請求項４に記載の培養容器。
【請求項６】
前記段差により高低差が付けられた隣接する領域どうしが、傾斜面によって接続されている請求項４または請求項５に記載の培養容器。
【請求項７】
前記段差により低く形成される領域が、帯状に形成された溝からなる請求項４に記載の培養容器。
【請求項８】
相対移動可能に設けられた少なくとも２つの容器片を備え、隣接する容器片の間に、相互間の隙間を密封状態に維持する密封手段を備える請求項１に記載の培養容器。
【請求項９】
前記容器片が、シリンダと、該シリンダに嵌合されるピストンとからなり、
前記密封手段が、シリンダとピストンとの間に配されるシール部材である請求項５に記載の培養容器。
【請求項１０】
容器本体と、容器本体の底面に置かれ、容器本体の内部を区画する筒状の容器壁部材とを備える培養容器。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
この発明は、底面に沿って成長する間葉系幹細胞等を培養するための培養容器に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
従来より、間葉系幹細胞等の幹細胞は、様々な組織に分化でき、その組織を再生することができる細胞として知られている。間葉系幹細胞は、骨髄液に含まれている。しかしながら、骨髄液から採取可能な間葉系幹細胞はごく微量であり、組織の再生に必要な量の間葉系幹細胞を得るためには、骨髄液を培養することにより増殖させる必要がある。
【０００３】
従来、間葉系幹細胞を培養するには、患者から採取した骨髄液を平坦な培養容器上に播種して、適当な培地内において培養する。骨髄液内の赤血球や白血球などの造血系の細胞は培地内に浮遊する一方、間葉系幹細胞は培養容器の底面に付着して増殖する性質を有している。したがって、培地交換によって造血系の細胞を廃棄することにより、培養容器の底面に付着して増殖した間葉系幹細胞のみを抽出することが可能となる。
【０００４】
【特許文献１】
特公平３−６９５０８号公報（第１頁、第１図）
【特許文献２】
特公平３−５７７４４号公報（第７頁、第４図）
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
しかしながら、このように培養容器の底面に付着して増殖する間葉系幹細胞の増殖速度は、それが置かれている空間的な培養環境に左右される傾向がある。すなわち、間葉系幹細胞は培養容器の底面に付着して増殖するため、付着可能な広さの底面積が必要であることは言うまでもないが、あまりに広すぎると逆に増殖速度が低下して、効率的に成長させることができないという不都合がある。
【０００６】
このような不都合を回避するために、間葉系幹細胞の増殖度合に応じて、順次容積の大きな培養容器に移し替えることにより、間葉系幹細胞の適正な培養環境を維持することが考えられている。
しかしながら、複数の培養容器に移し替える作業は繁雑であり、これを自動的に行う場合には、培養容器間で細胞や培地を移動させる手段が必要となる他、多数の容器を収納しておくスペースが必要となり、装置が大型化するという不都合がある。また、間葉系幹細胞の培養は、患者毎に異なる培養容器を使用し、一度使用された培養容器を再利用することはない。したがって、１人の患者の間葉系幹細胞の培養に多数の培養容器を使用したのでは、廃棄物が多くなり、資源の無駄が増大する不都合もある。
また、細胞の培養を自動的に行う装置も提案されている（例えば、特許文献１、特許文献２参照。）。
【０００７】
この発明は、上述した事情に鑑みてなされたものであって、単一の容器で、間葉系幹細胞の培養環境を維持し、効率的に増殖させることができる培養容器を提供することを目的としている。
【０００８】
【課題を解決するための手段】
上記目的を達成するために、この発明は、以下の手段を提供する。
請求項１に係る発明は、底面に沿って成長する細胞を培養する培養容器であって、細胞を成長させる底面の面積を拡大可能な培養容器を提供する。
この発明によれば、細胞の成長に合わせて底面の面積を拡大させることにより、単一の容器内において、培養を効率的に成長させることが可能となる。
【０００９】
請求項２に係る発明は、請求項１に記載の培養容器において、底面を構成する容器壁を伸張可能な培養容器を提供する。
この発明によれば、細胞の成長の度合に応じて、例えば、容器に外力、熱等を加えて、底面を構成する容器壁を伸張させることにより、底面積を拡大し、細胞の効率的な成長に必要な底面積を確保することが可能となる。
【００１０】
請求項３に係る発明は、請求項１に記載の培養容器において、相互に角度をなして配置され、それぞれを底面とすることが可能な面積の異なる複数の内面を有する培養容器を提供する。
この発明によれば、細胞の成長の度合に応じて、培養容器の角度を変化させることにより、底面となる内面の面積を小さいものから大きいものへ変化させることが可能となる。これにより、底面積を拡大して細胞の効率的な成長を図ることができる。
【００１１】
請求項４に係る発明は、請求項１に記載の培養容器において、内部に貯留する培養液量を増加させることにより培養液内に浸される底面積を拡大可能な段差が底面に設けられている培養容器を提供する。
この発明によれば、細胞の成長が進行するに従って培養液の量を増加させることにより、培養液が、底面に設けられている段差を超えて貯留される結果、細胞の培養に寄与する底面積を増加させることが可能となる。
【００１２】
請求項５に係る発明は、請求項１に記載の培養容器において、相対移動可能に設けられた少なくとも２つの容器片を備え、隣接する容器片の間に、相互間の隙間を密封状態に維持する密封手段を備える培養容器を提供する。
この発明によれば、２つの容器片の相対移動方向に沿って底面を配しておき、２つの容器片の位置を相対的に移動させることにより、底面積を増加させることが可能となる。この際、容器片間に配されている密封手段により間隙が密封状態に維持されるので、内部の培養液が漏洩することが防止される。
【００１３】
請求項６に係る発明は、請求項５に記載の培養容器において、前記容器片が、シリンダと、該シリンダに嵌合されるピストンとからなり、前記密封手段が、シリンダとピストンとの間に配されるシール部材である培養容器を提供する。
この発明によれば、シリンダ内において、該シリンダに嵌合されているピストンを移動させることにより、容器の内部容積を拡大することが可能となる。したがって、ピストンの移動方向に沿って底面を配しておくことにより、ピストンの移動により底面積を拡大することが可能となる。また、シリンダとピストンとの間に配されるシール部材によって培養容器内から培養液等が漏洩することが防止される。
【００１４】
【発明の実施の形態】
この発明の各実施形態に係る培養容器について説明する前に、生体組織補填体としての骨補填体の製造工程について概略的に説明する。骨補填体を製造するには、図１５に示されるように、まず、患者の腸骨等から骨髄液を採取する。採取された骨髄液は遠心分離機にかけられて、旋回されることにより、比重の重い骨髄細胞を抽出される。
【００１５】
抽出された骨髄細胞は、予め調製されている培地とともに培養容器内に投入され混合される。培地の一部は取り出されて感染検査に回される。
この後に、混合された骨髄液および培地を所定の温度（例えば、３７±０．５℃）およびＣＯ２濃度（例えば５％）等の培養条件に維持することにより、所定時間にわたって一定培養条件下で細胞が一次培養される。細胞の培養途中の所定の交換時期には、培養容器内から培地が廃棄される。そして、再度培地を混合されて培養工程が繰り返し継続される。廃棄された培地の一部は感染検査に回される。
【００１６】
所定の培養期間が終了すると、培養容器内から培地が廃棄された後に、培養容器内にトリプシンのような蛋白質分解酵素が投入・混合される。これにより、培養容器の底面に付着して成長していた間葉系幹細胞が、主培養容器の底面から剥離される。そして、このように剥離された間葉系幹細胞は、遠心分離機にかけられることにより抽出される。
【００１７】
抽出された間葉系幹細胞は、細胞数調整が行われた後に、骨補填材と適当な培地が投入された培養容器内に混合される。実際には、間葉系幹細胞を骨補填材に付着させ、培地内に投入する。そして、上記と同様にして、混合された間葉系幹細胞と培地を所定の温度（例えば、３７±０．５℃）およびＣＯ２濃度（例えば５％）等の培養条件に維持することにより、所定時間にわたって一定培養条件下で細胞が二次培養される。
【００１８】
二次培養工程においても、一次培養工程と同様にして、定期的に培地の交換が行われ、投入される培地の一部および廃棄される培地の一部がそれぞれ、感染検査に回される。そして、所定の培養期間が経過したところで、出荷用の品質検査と感染検査のための検体抽出が行われ、製造された骨補填材は密封されて製品として提供される。
【００１９】
以下に説明するこの発明の各実施形態に係る培養容器は、主に、上述した培養工程の内、一次培養工程において使用されるものであるが、二次培養工程において使用してもよい。
本実施形態に係る培養容器１は、図１に示されるように、伸縮可能な高分子フィルム（例えば、ポリスチレン）から構成されており、外力を加えることにより、外力を加えた方向（図１中矢印の方向）に底面２を構成する容器壁自体を伸張させることができるようになっている。
【００２０】
このように構成された本実施形態に係る培養容器１の作用について以下に説明する。
本実施形態に係る培養容器１を使用して間葉系幹細胞の一次培養を行う場合には、間葉系幹細胞の培養開始初期においては、図１および図２に実線で示すような比較的狭い底面２を有する状態に保持して所定期間培養を行う。次いで、間葉系幹細胞の増殖が進行して、実線に示す状態の培養容器１では間葉系幹細胞の増殖するスペースが狭くなってきた時点で、培養容器１に外力を加えて、鎖線で示す位置まで伸張させる。
これにより、間葉系幹細胞にとって、広過ぎず、かつ、狭過ぎない、快適な空間的培養環境を整えることが可能となり、間葉系幹細胞を効率的に増殖させることができる。
【００２１】
なお、上述した伸縮可能な培養容器１に代えて、例えば、図３に示されるような弾性変形可能なチューブ状の培養容器３と、該培養容器３を任意の位置で絞ることができるクリップ４とを採用してもよい。細胞の成長に合わせて、クリップ４の位置をずらすことによって、培養容器３の内容積を増大させていくことにしてもよい。
【００２２】
次に、この発明の第２の実施形態に係る培養容器１０について、図４および図５を参照して以下に説明する。
本実施形態に係る培養容器１０は、相互にスライド可能に組み合わせられた２つの容器片１１，１２と、これらの間に配置されたシール部材１３とから構成されている。
【００２３】
各容器片１１，１２は、方形状の底壁部１１ａ，１２ａと、底壁部１１ａ，１２ａの３辺から立ち上がる３枚の側壁部１１ｂ，１２ｂとから構成された上方および一方の側方に開口する箱状の部材である。そして、一方の容器片１１の対向する側壁部１１ｂの内側に、他方の容器片１２がぴったりと嵌合される寸法に形成されている。外側の容器１１片の内面には、対向する側壁部１１ｂに底面１１ａに平行に形成された案内溝１１ｃと、これらの側壁部１１ｂおよび底壁部１１ａに連続して形成されたシール溝１１ｄとを備えている。また、内側の容器片１２の外面には、前記案内溝１１ｃ内にスライド可能に挿入される突起１２ｃが形成されている。また、前記シール部材１３は、前記シール溝１１ｄ内に配置されて、２つの容器片１１，１２のどの相対位置においても外側の容器片１１のシール溝１１ｄ内面と内側の容器片１２の外面とに密着状態に保持されて、両者間から内部の培養液が漏洩しないように保持するようになっている。
【００２４】
このように構成された本実施形態に係る培養容器１０によれば、間葉系幹細胞の培養開始初期においては、容器片１１，１２を図４および図５に実線で示す相対的に縮んだ相対位置関係に保持して所定期間培養を行う。次いで、間葉系幹細胞の増殖が進行して、実線に示す状態の培養容器では間葉系幹細胞の増殖するスペースが狭くなってきた時点で、培養容器１０の容器片１１，１２に外力を加えて、外側の容器片１１内面の案内溝１１ｃに沿って外側の容器片１２の突起１２ｃをスライドさせることにより、２つの容器片１１，１２を鎖線で示す位置まで相対的に移動させる。
【００２５】
これにより、第１実施形態に係る培養容器１と同様に、間葉系幹細胞にとって、広過ぎず、かつ、狭過ぎない、快適な空間的培養環境を整えることが可能となり、間葉系幹細胞を効率的に増殖させることができる。また、本実施形態に係る培養容器１０によれば、一方の容器片１１に対して他方の容器片１２をスライドさせるだけで、培養容器１０の底面積を簡易に増加させることができる。したがって、細胞の増殖状況に応じて、きめ細かく培養容器１０の底面積を調整することができ、間葉系幹細胞のより効率的な培養を行うことができる。
【００２６】
次に、この発明の第３の実施形態に係る培養容器２０について、図６を参照して以下に説明する。
本実施形態に係る培養容器２０は、第２の実施形態に係る培養容器１０と同様に２つの容器片２１，２２をスライド可能に組み合わせることにより、容器２０の底面積を増大することができるように構成したものである。具体的には、図６に示されるように、本実施形態に係る培養容器２０は、筒状のシリンダ２１と該シリンダ２１内に嵌合されるピストン２２と、これらシリンダ２１とピストン２２との間を密封するシール部材２３とを備えている。
図中、符号２４は、シリンダ２１に設けられた培地供給口２５を閉鎖する蓋体、符号２６は、リング状のシール部材２３を取り付けるシール溝、符号２７は、図示しない駆動部に接続されピストン２２を駆動するロッドを示している。
【００２７】
このように構成された本実施形態に係る培養容器２０によれば、培養開始初期においては、シリンダ２１に対して、ピストン２２を図中に実線で示す位置に配置した状態で所定期間培養を行い、培養が進行するに従って、ピストン２２を鎖線で示すように引き出すことにより、底面積の大きさを増大させることが可能となる。シリンダ２１とピストン２２とから構成することにより、シール部材２３による密封を容易に行うことができる。
【００２８】
次に、この発明の第４の実施形態に係る培養容器３０について、図７を参照して以下に説明する。
本実施形態に係る培養容器３０は、図７に示されるように、底部に複数の段部３１，３２，３３を有している。図７に示す例では、中央から外周に向かって漸次高さが高くなるような段差が形成されている。
【００２９】
このように構成された本実施形態に係る培養容器３０を用いて間葉系幹細胞の培養を行う場合について、以下に説明する。
まず、培養開始初期においては、図中に符号３４で示す最下位の底面のみが浸るように培養液をレベルＡまで供給して培養を行う。これにより、間葉系幹細胞は、最下位の底面３４が狭いと感じる状態となるまでその底面３４に沿って増殖する。
【００３０】
次に、間葉系幹細胞がある程度増殖した状態で、下から２番目の底面３５まで浸るように、培養液をレベルＢまで供給して培養を行う。これにより、間葉系幹細胞が増殖可能な底面積が、底面３４，３５の底面積の和となる。したがって、間葉系幹細胞は、新たに増殖可能な底面３５を与えられるので、増殖を進行させることが可能となる。この作業をレベルＣ，Ｄまで繰り返すことにより、底面３６，３７まで底面積を３段階増大させることができ、間葉系幹細胞の効率的な成長を促すことができる。
【００３１】
なお、本実施形態に係る培養容器においては、複数段の段部３１、３２，３３を有する底面に、貯留する培地の量を増加させることにより、細胞が増殖可能な底面積を増加させることにしたが、これに代えて、図８に示すように、段部３１，３２，３３を構成する底面３４，３５，３６を昇降可能に構成しておき、最下位の底面３４における細胞の培養が終了した時点で、該最下位の底面３４をその一段上方の底面３５の高さまで上昇させることにより、細胞の培養に必要な底面積を増加させることにしてもよい。この場合、底面３４，３５，３６を昇降させる手段は、ピストン、モータ等の任意の機構でよい。
【００３２】
また、本実施形態に係る培養容器においては、複数段の段差を培養容器の底面の１カ所に設けたが、これに代えて、図９および図１０に示されるように、一段低く形成される底面３８を相互に間隔をあけて複数設けることにしてもよい。これによれば、培養初期において、培養容器内の複数箇所で適正な培養環境を実現することができるので、培養の効率を向上することができる。
【００３３】
また、図７に示されるような鉛直方向に延びる段差に代えて、図１０に示されるように、高低差を付けられた底面３７，３８どうしを、なだらかな傾斜面３９によって接続するようにしてもよい。これにより、培養初期に下側の底面３８で増殖した細胞が、次の培養段階において上側の底面３７まで乗り上げて増殖することができる。
また、図１１に示されるように、下側の底面を比較的狭い溝状の底面３８とし、これを培養容器の底面全域に連続して形成することにしてもよい。これにより、培養初期における細胞の投入を、溝状の底面３８の１カ所において行っても、底面３８全体において培養を行うことができるので、処理が容易である。
【００３４】
次に、この発明の第５の実施形態に係る培養容器４０について、図１２を参照して以下に説明する。
本実施形態に係る培養容器４０は、図１２に示されるように、平坦な底面を有する容器本体４１と、この容器本体４１の底面に置かれる筒状の容器壁部材４２とを備えている。容器壁部材４２は、例えば、円筒状に形成された筒体であって、その一端が、前記容器本体の底面に密着することができるように平坦に形成されている。
【００３５】
このように構成された本実施形態に係る培養容器４０を用いて、間葉系幹細胞を培養するには、まず、筒状の容器壁部材４２を容器本体４１の底面上に載せて容器本体４１内の空間を２つに区画する。そして、容器壁部材４２の内部に、備置および細胞を投入して所定の培養条件下に配する。これにより、容器壁部材４２内の間葉系幹細胞は、広過ぎず、適度に狭い底面４３ａに沿って効率的な増殖を行うことができる。
【００３６】
次いで、所定の培養期間が経過した後には、容器本体４１の内部から容器壁部材４２を取り出すことにより、容器本体４１内の区画を取り払う。これにより、間葉系幹細胞は、より広い底面４３を得ることができるので快適な培養環境下において効率的に増殖することが可能となる。
【００３７】
なお、本実施形態に係る培養容器４０においては、容器壁部材４２の下端部に、容器本体４１の底面４３上に置かれたときに、容器壁部材４２の内外を密封するシール部材を設けてもよい。これによれば、培養初期には容器壁部材４２内部の培地のみを用いて培養が行われ、容器壁部材４２を取り外すことにより、容器壁部材４２の外部の新たな培地を細胞に提供することができる。
【００３８】
また、複数の容器壁部材４２を容器本体４１内に配置しておき、複数箇所において細胞の培養を行ってもよい。また、図１２に鎖線で示すように、容器壁部材４２の周囲を大きさの異なる他の１つ以上の容器壁部材で囲んでおき、内側の容器壁部材４２から順に取り外して行くことにより、培養を行う底面の面積を徐々に大きくしていくことにしてもよい。
【００３９】
次に、この発明の第６の実施形態に係る培養容器５０について、図１３を参照して以下に説明する。
本実施形態に係る培養容器５０は、例えば、図１３に示されるように、相互に角度をなして隣接する複数の壁面５１，５２，５３を有している。各壁面５１，５２，５３の面積は相互に相違している。例えば、第１の壁面５１より第２の壁面５２の方が面積が大きく、第２の壁面５２より第３の壁面５３の方が面積が大きくなっている。これら第１〜第３の壁面５１，５２，５３は、培養容器５０に設けられた培地供給口５４から離れた位置に配置されており、いずれも最下位に水平に配されることにより培養容器５０の底面を構成することができるようになっている。
【００４０】
このように構成された本実施形態に係る培養容器５０を用いて、間葉系幹細胞を培養する場合について以下に説明する。
まず、培養開始初期においては、図１３（ａ）に示されるように、最も狭い第１の壁面５１を最下位に水平に配置して培養が行われる。これにより、培養液内部の間葉系幹細胞は、広過ぎず、適度に狭い底面５１に沿って効率的な増殖を行うことができる。
【００４１】
次いで、所定の培養期間にわたって培養が進行した後には、図１３（ｂ）に示されるように、第２の壁面５２を最下位に水平に配置して培養が行われる。第２の壁面５２は、第１の壁面５１よりも面積が広いので、間葉系幹細胞の効率的な成長が進行する。さらに、所定の培養期間にわたる培養後に、図１３（ｃ）に示されるように、第３の壁面５３を最下位に水平に配置して培養が行われる。これにより、間葉系幹細胞の効率的な増殖が継続される。
【００４２】
このように、本実施形態に係る培養容器５０によれば、培養容器５０を回転させて底面となるべき壁面５１，５２，５３を選択するだけで、間葉系幹細胞の増殖に適した培養環境を整えることができるので、極めて簡易に効率的な培養を行うことができる。したがって、必要量の間葉系幹細胞を迅速に製造することができる。
【００４３】
なお、上記実施形態においては、面積の異なる平面状の壁面を隣接させた培養容器５０を例に挙げて説明したが、図１４に示すように、曲率の異なる曲面を隣接させた培養容器６０を採用することにしてもよい。これによっても、図１４の（ａ）〜（ｃ）に示されるように、培養容器５４の傾斜角度を異ならせていくことにより、培地内に浸る底面の面積を大きくしていくことができる。
【００４４】
なお、上記各実施形態では、底面積を増大させつつ間葉系幹細胞を培養する培養工程のみについて例示して説明したが、実際には、底面２，１１ａ，１２ａ，３４，３５，３６，３７，５１，５２，５３に付着した状態で成長する間葉系幹細胞を各底面２，１１ａ，１２ａ，３４，３５，３６，３７，５１，５２，５３から剥離させる工程や、培養液を定期的に交換する工程が培養工程の間に行われる必要がある。
【００４５】
間葉系幹細胞を培養容器１，１０，２０，３０，４０，５０，６０の底面から剥離させる工程は、例えば、トリプシンのような蛋白質分解酵素を培養容器１，１０，２０，３０，４０，５０，６０内に投入することにより行われる。この場合には、トリプシン内に混入した間葉系幹細胞を抽出するために、例えば、遠心分離工程が必要となる。これに代えて、培養容器１，１０，２０，３０，４０，５０，６０内面に、所定の温度を境界として疎水性と親水性とが切り替わる温度応答性処理を施すことにしてもよい。
【００４６】
温度応答性処理は、温度応答性高分子ポリ（Ｎ−イソプロピルアクリルアミド）を共有結合で固定することにより行われる。温度応答性処理された領域は、３２℃を境界温度として、それ以上では、市販の細胞用培養容器と同程度の弱い疎水性を呈するが、温度を境界温度以下に冷却することにより高い親水性を呈するようになる領域である。したがって、例えば、３７℃で培養した後に３２℃以下に冷却することにより、培養容器１，１０，２０，３０，４０，５０，６０内面を高い親水性を呈するように変化させ、容易に間葉系幹細胞を剥離させることができる。
このようにすれば、トリプシン処理や遠心分離工程を行うことなく、培養液を入れ替えるだけで、単一の培養容器１，１０，２０，３０，４０，５０，６０内で間葉系幹細胞を増殖させ続けることができる。
【００４７】
なお、上記各実施形態においては、開放型と密封型の容器をそれぞれ別々に例示して説明したが、これに限定されるものではなく、各実施形態において両方の形式の容器を採用することができる。
また、第４の実施形態における培養容器３０の底面の段差の数や高さ、第６の実施形態における培養容器５０の壁面５１，５２，５３の数や大きさ等は、特に制限されることなく適宜設定してよいことは言うまでもない。
【００４８】
また、上記各実施形態においては、生体組織として骨を例に挙げ、骨髄液から抽出した間葉系幹細胞を培養する場合について説明したが、骨髄液のみならず末梢血や臍帯血から抽出することにしてもよい。また、間葉系幹細胞に限定されるものではなく、ＥＳ細胞、体性幹細胞、骨細胞、軟骨細胞、神経細胞等の体細胞の培養にも使用できる。
【００４９】
【発明の効果】
以上、説明したように、この発明に係る培養容器によれば、単一の容器内において増殖させられる細胞に対して、成長に合わせて順次増大する底面積の底面を提供することができるので、細胞に対して快適な培養環境を与えて効率的な増殖を促し、必要量の細胞を迅速に得ることができるという効果を奏する。
【図面の簡単な説明】
【図１】この発明の第１の実施形態に係る培養容器を示す斜視図である。
【図２】図１の培養容器を示す縦断面図である。
【図３】図１の培養容器の変形例を示す縦断面図である。
【図４】この発明の第２の実施形態に係る培養容器を示す斜視図である。
【図５】図４の培養容器を示す縦断面図である。
【図６】この発明の第３実施形態に係る培養容器を示す縦断面図である。
【図７】この発明の第４実施形態に係る培養容器を示す縦断面図である。
【図８】図７の培養容器の変形例を示す縦断面図である。
【図９】図７の培養容器の他の変形例を示す平面図である。
【図１０】図９の培養容器を示す縦断面図である。
【図１１】図７の培養容器の他の変形例を示す平面図である。
【図１２】この発明の第５の実施形態に係る培養容器を示す縦断面図である。
【図１３】この発明の第６の実施形態に係る培養容器を、培養状態毎に分けて示す縦断面図である。
【図１４】図１３の培養容器の変形例を示す縦断面図である。
【図１５】この発明の各実施形態に係る培養容器が使用される培養工程を説明する模式図である。
【符号の説明】
１，１０，２０，３０，４０，５０，６０　培養容器
２，１１ａ，１２ａ，３４，３５，３６，３７　底面
１１，１２　容器片
１３，２３　シール部材（密封手段）
２１　シリンダ（容器片）
２２　ピストン（容器片）
３９　傾斜面
４１　容器本体
４２　容器壁部材
５１，５２，５３　壁面（底面、内面）
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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