(57)【要約】【課題】デヒドロアルテナシンの全合成を可能とする方法を提供すること【解決手段】鈴木カップリング反応を利用することにより、下記の反応スキームに従い、商業的に入手可能な２，４，６−トリヒドロキシ安息香酸４から出発してデヒドロアルテナシン１を全合成する。【化１】2004175751.tif 000010【選択図】    なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記の反応に従うデヒドロアルテナシンの製造方法であって：
【化１】
2004175751.tif 000007
（ここで、Ｒ１およびＲ２は低級アルキル基であり、Ｅは脱離基であり、
Ｐは水酸基の保護基である）
ｉ）化合物２と化合物３との鈴木カップリング反応により、カップリング生成物１０を得る工程と；
ｉｉ）カップリング生成物１０の加水分解に続き、酸性メタノールとの反応により化合物１１を得る工程と；
ｉｉｉ）塩化第二鉄を触媒として化合物１１の環化反応を行うことにより、デヒドロアルテナシン１を得る工程とを具備したことを特徴とする方法。
【請求項２】
請求項１に記載の製造方法であって、Ｒ１およびＲ２はメチル基であり、Ｅはトリフレート基であり、Ｐはメトキシメチルエーテル基である方法。
【請求項３】
請求項１または２に記載の製造方法であって、前記化合物２が下記の反応スキームに従って合成される方法。
【化２】
2004175751.tif 000008
【請求項４】
請求項１〜３の何れか１項に記載の製造方法であって、前記化合物３が下記の反応スキームに従って合成される方法。
【化３】
2004175751.tif 000009
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明はデヒドロアルテナシンの合成方法に関する。デヒドロアルテナシンは、ＤＮＡポリメラーゼαに対する阻害剤等として有用である。
【０００２】
【従来の技術】
デヒドロアルテナシンは、１９７５年にＲｏｓｅｔｔらがＡｌｔｅｒｎａｒｉａ  ｔｅｎｎｕｉｓおよびＡ．  ｋｋｕｃｈｉａｎａの菌体抽出物から単離して以来（非特許文献１）、様々な真菌類から発見された（非特許文献２〜５）。その構造は、化学的および分光学的データから、当初はβ−レゾルシン酸モノメチルエーテルのγ−ラクトン誘導体として提案された（非特許文献２）。しかし、その後のＸ線結晶解析の結果に基づき、次式で示されるδ−ラクトン環を有する構造に訂正された（非特許文献６）。
【０００３】
【化４】
2004175751.tif 000002
【０００４】
１９９５年に、上記のデヒドロアルテナシンは、ミオシン軽鎖キナーゼ（ＭＬＣＫ）のカルモジュリン依存活性を阻害する（０．６９μＭのＩＣ５０値）ことが報告された（非特許文献４）。更に、デヒドロアルテナシンは哺乳類のＤＮＡポリメラーゼαの強力な阻害剤であることが、本願の発明者等によって示された（非特許文献５）。これらの知見は、デヒドロアルテナシンが将来的に有望な生物学的ツールになり得ることを示している。
【０００５】
上記のような有用な生物学的ツールとして利用するためには、デヒドロアルテナシンを安価に入手することが必要であり、そのための手段として、これを全合成で製造することが求められている。
【０００６】
【非特許文献１】
Ｒｏｓｅｔｔ，  Ｔ．；  Ｓａｎｋｈａｌａ，  Ｒ．；  Ｓｔｉｃｋｉｎｇｓ，  Ｃ．Ｅ．；  Ｔａｙｌｏｒ，  Ｍ．Ｅ．Ｕ．；  Ｔｈｏｍａｓ，  Ｒ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｊ．，  １９５７，  ６１７，  ３９０−４００
【０００７】
【非特許文献２】
Ｃｏｏｍｂｅ，  Ｒ．Ｇ．；  Ｊａｃｏｂｓ，  Ｊ．Ｊ．；  Ｗａｔｓｏｎ，  Ｔ．Ｒ．，  Ａｕｓｔ．  Ｊ．  Ｃｈｅｍ．，  １９７０，  ２３，  ２３４３−２３５１
【０００８】
【非特許文献３】
Ａｙｅｒ，  Ｗ．Ａ．；  Ｒａｃｏｋ，  Ｊ．Ｓ．，  Ｃａｎ．  Ｊ．  Ｃｈｅｍ．，  １９９０，  ６８，  ２０８５−２０９４
【０００９】
【非特許文献４】
Ｎａｋａｎｉｓｈｉ，  Ｓ．；  Ｔｏｋａｉ，  Ｓ．；  Ｓａｉｔｏｈ，  Ｙ．；  Ｔｓｕｋｕｄａ，  Ｅ．；  Ｋａｗａｈａｒａ，  Ｋ．；  Ａｎｄｏ，Ｋ．；  Ｍａｔｓｕｄａ，  Ｙ．，  Ｂｉｏｓｃｉ．  Ｂｉｏｔｅｃｈ．  Ｂｉｏｃｈｅｍ．，  １９９５，  ５９，  １３３３−１３３５
【００１０】
【非特許文献５】
Ｍｉｚｕｓｈｉｎａ，  Ｙ．；  Ｋａｍｉｓｕｋｉ，  Ｓ．；  Ｍｉｚｕｎｏ，  Ｔ．；  Ｔａｋｅｍｕｒａ，  Ｍ．；  Ａｓａｈａｒａ，  Ｈ．；  Ｌｉｎｎ，  Ｓ．；  Ｙａｍａｇｕｃｈ，  Ｔ．；  Ｍａｔｓｕｋａｇｅ，  Ａ．；  Ｈａｎａｏｋａ，  Ｆ．；  Ｙｏｓｈｉｄａ，  Ｓ．；  Ｓａｎｅｙｏｓｈｉ，  Ｍ．；  Ｓｕｇａｗａｒａ，  Ｆ．；  Ｓａｋａｇｕｃｈｉ，  Ｋ．，  Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．，  ２０００，  ２７５，  ３３９５７−３３９６１
【００１１】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は上記事情に鑑みてなされたものであり、その課題は、デヒドロアルテナシンの全合成を可能とする方法を提供することである。
【００１２】
【課題を解決するための手段】
上記課題を解決するために、本発明は、下記の反応に従うデヒドロアルテナシンの製造方法であって：
【化５】
2004175751.tif 000003
（ここで、Ｒ１およびＲ２は低級アルキル基であり、Ｅは脱離基であり、
Ｐは水酸基の保護基である）
ｉ）化合物２と化合物３との鈴木カップリング反応により、カップリング生成物１０を得る工程と；
ｉｉ）カップリング生成物１０の加水分解に続き、酸性メタノールとの反応により化合物１１を得る工程と；
ｉｉｉ）塩化第二鉄を触媒として化合物１１の環化反応を行うことにより、デヒドロアルテナシン１を得る工程とを具備したことを特徴とする方法を提供する。
【００１３】
上記の方法で使用する化合物２および化合物３は、何れも商業的に入手可能な出発原料から、公知の方法で合成することができる。従って、本発明によれば、デヒドロアルテナシン１の全合成が可能である。
【００１４】
【発明の実施の形態】
本発明の方法における最も特徴的な工程は、上記の通り、化合物２と化合物３との鈴木カップリング反応により、カップリング生成物４を得る工程である。
【００１５】
この鈴木カップリング反応に使用する化合物２は、次式に示すように、商業的に入手可能な２，２，２−トリヒドロキシ安息香酸４から製造することができる。
【００１６】
【化６】
2004175751.tif 000004
【００１７】
ここで、Ｒ１およびＲ２は、同一でも異なってもよい炭素原子数１〜６の低級アルキル基であり、好ましくはメチル基である。Ｒ１およびＲ２がメチル基の場合、２，２，２−トリヒドロキシ安息香酸４から化合物５を得る工程は、Ｄａｎｉｓｈｅｆｓｋｙの方法（Ｄｕｓｈｉｎ，  Ｒ．Ｇ．；  Ｄａｎｉｓｈｅｆｓｋｙ，  Ｓ．Ｊ．，  Ｊ．  Ａｍ．  Ｃｈｅｍ．  Ｓｏｃ．，  １９９２，  １１４，  ６５５−６５９）に従って行えばよい。化合物５におけるアセタール部分は、二つの水酸基を保護すると共に、両者の間の空間的位置を固定する。次に、化合物５の二つの水酸基のうち、カルボキシ置換基に対してｐ−位にある水酸基を選択的にメトキシエーテルに変換して、化合物６を得る。次いで、化合物６の水酸基を脱離基Ｅに変換して、化合物２を得る。脱離基Ｅとしては、これに続く鈴木カップリング反応において脱離基として機能する限り特に限定されない。しかし、好ましくはトリフルオロメタンスルホネート基（トリフレート基）、ｐ−トルエンスルホネート基（トシレート基）である。
【００１８】
一方、本発明において鈴木カップリング反応に使用するもう一つの化合物３は、次式で示すように、商業的に入手可能なメチルカテコール７から公知の方法により製造することができる。
【００１９】
【化７】
2004175751.tif 000005
【００２０】
ここで、メチルカテコール７から４−ブロモカテコール８への変換は、既知の方法、例えばＭａｔａｋａ，  Ｓ．：  Ｅｇｕｃｈｉ，  Ｈ．；  Ｔａｋａｈａｓｈｉ，  Ｋ．；  Ｈａｔｔａ，  Ｔ，；  Ｔａｓｈｉｒｏ，  Ｍ．，  Ｂｕｌｌ．  Ｃｈｅｍ．  Ｓｏｃ．  Ｊｐｎ．  １９８９，  ６２，  ３１２７−３１３１に記載の方法により行うことができる。このブロモカテコール８の二つの水酸基を、水酸基の保護基Ｐに変換して化合物９を得る。ここでの保護基Ｐは、後続の反応から水酸基を保護し、所望により後で水酸基に戻すことができるものであれば特に限定されない。しかし、好ましくはアルキルエーテル基であり、より好ましくはメトキシメチルエーテル基（ＭＯＭＯ）である。次に、化合物９のＢｒ基をＢ（ＯＨ）２基に変換して、鈴木カップリング反応に供するためのアリールホウ酸化合物３を得る。この反応は、例えばｎ−ブチルリチウムを用いたハロゲン／リチウム交換反応に続き、トリイソプロポキシボランによるトラップを行うことにより実施することができる。
【００２１】
上記のようにして得た化合物２と化合物３との鈴木カップリング反応による生成物１０は、アセタール部分および保護基Ｐ２を水酸基に戻すことにより、アルテナシン１１に変換される。この反応は、アルカリ加水分解および酸処理により行うことができる。
【００２２】
最後に、塩化第二鉄触媒を用いた酸化反応により、アルテナシン１１からデヒドロアルテナシン１を得ることができる。
【００２３】
【実施例】
以下、本発明の方法により、次式の反応スキームに従ってデヒドロアルテナシンを合成した一実施例を示す。
【００２４】
【化８】
2004175751.tif 000006
【００２５】
ｉ）商業的に入手可能な２，４，６−トリヒドロキシ安息香酸４から出発し、Ｄａｎｉｓｈｅｆｓｋｙの方法（Ｄｕｓｈｉｎ，  Ｒ．Ｇ．；  Ｄａｎｉｓｈｅｆｓｋｙ，  Ｓ．Ｊ．，  Ｊ．  Ａｍ．  Ｃｈｅｍ．  Ｓｏｃ．，  １９９２，  １１４，  ６５５−６５９）に従って、１，３−ベンゾジオキシン５を得た（収率４３％）。
【００２６】
ｉｉ）次に、光延の条件（Ｍｉｔｓｕｎｏｂｕ，  Ｏ．  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  １９８１，  １−２８）に従い、１モル当量の化合物５と、１．２５モル当量のジイソプロピルアゾジカルボキシレートと、１．０５モル当量のトリフェニルホスフィンと、１．０５モル当量のメタノールとを、室温において１〜１６時間、ＴＨＦ中で反応させることにより、モノメチルエーテル６を得た（収率８９％）。
【００２７】
ｉｉｉ）次いで、１モル当量の化合物６と、１．１モル当量のトリフルオロメタンスルホン酸無水物（Ｔｆ２Ｏ）とを、０℃において１〜１６時間、ピリジン中で反応させることにより、対応するトリフレート化合物２を得た（収率９４％）。
【００２８】
ｉｖ）上記とは別に、商業的に入手可能な４−メチルカテコール７から、Ｍａｔａｋａ，  Ｓ．：  Ｅｇｕｃｈｉ，  Ｈ．；  Ｔａｋａｈａｓｈｉ，  Ｋ．；  Ｈａｔｔａ，  Ｔ，；  Ｔａｓｈｉｒｏ，  Ｍ．，  Ｂｕｌｌ．  Ｃｈｅｍ．  Ｓｏｃ．  Ｊｐｎ．  １９８９，  ６２，  ３１２７−３１３１に記載の方法により４−ブロモカテコール８を調製した。１モル当量の該化合物８と、２．５モル当量の水素化ナトリウム（ＮａＨ）と、２．５モル当量のクロロメチルメチルエーテル（ＭＯＭＣｌ）とを、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）中において０℃で１〜１６時間反応させて化合物８をメトキシメチル化することにより、ビスメトキシメチルエーテル化合物９を得た（収率９０％）。
【００２９】
ｖ）１モル当量の化合物９と、１．１モル当量のｎ−ブチルリチウム（ｎ−ＢｕＬｉ）とを、ＴＨＦ中において−７８〜−３０℃で１〜１６時間反応させることにより、化合物９のハロゲン／リチウム交換反応を行った。続いて、１．１モル当量のトリイソプロポキシボラン（（Ｉ−ＰｒＯ）３Ｂ）を用い、ジエチルエーテル中において−７８℃〜室温の温度で１〜１６時間反応させることにより、アリールホウ酸３を得た（収率９５％）。
【００３０】
なお、この化合物３は不安定であるため、精製せずにそのまま次のカップリング工程に用いた。
【００３１】
ｖｉ）次に、工程ｉｉｉ）で得た１モル当量のトリフレート化合物２と、工程ｖ）で得た１．５モル当量のアリールホウ酸化合物３とを、０．０５モル当量のテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（（Ｐｈ３Ｐ）４Ｐｄ）、１．５モル当量のリン酸カリウム（Ｋ３ＰＯ４）、および１．０モル当量の臭化カリウム（ＫＢｒ）の存在下に、ジオキサン中において１００℃で１〜１６時間反応させた。これにより、鈴木カップリング反応が最も実用的なものとなり、収率９３％でカップリング生成物１０が得られた。
【００３２】
ｖｉｉ）次に、化合物１０に２ＮのＫＯＨを加え、エタノール中において６０℃で１〜１６時間反応させてアルカリ加水分解を行い、続いて塩化メチレン中において、１０％のＨＣｌ−ＭｅＯＨを用いて室温で１〜１６時間の酸処理を行うことにより、アルテナシン１１を得た（収率６４％）。
【００３３】
ｖｉｉｉ）最後に、水性エタノール溶液中において、塩化第二鉄（ＦｅＣｌ３）を触媒として、室温で１〜１６時間攪拌してアルテナシン１１の酸化反応を行い、生成物としてデヒドロアルテナシン１を得た（収率８２％）。得られた生成物の融点およびスペクトルデータは下記の通りであり、これらは天然のデヒドロアルテナシンのデータと一致した。
【００３４】
Ｍｐ：１８９−１９０℃
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）：δ  １．７３  （３Ｈ，  ｓ），  ３．９１  （３Ｈ，  ｓ），  ６．２８  （１Ｈ，  ｓ），６．４１  （１Ｈ，  ｓ），  ６．６３  （１Ｈ，  ｄ，  Ｊ＝２．４Ｈｚ），  ６．６９  （１Ｈ，  ｓ），  ６．７３  （１Ｈ，  ｄ，  Ｊ＝２．４Ｈｚ），  １１．２９  （１Ｈ，  ｓ）
１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）：δ  ２９．６，  ５６．０，  ７９．１，  ９９．８，  １０３．６，  １０４．３，  １１６．１，  １２０．７，  １３４．９，  １４５．９，  １５２．９，  １６４．５，  １６６．２，  １６７．２，  １８０．６
上記の結果、商業的に入手可能なカルボン酸化合物４から出発して、７工程でデヒドロアルテナシン１を得ることができた。全体の収率は１８％であった。
【００３５】
また、既述の非特許文献５に記載の方法に従って、上記の合成により得られた化合物１について真核生物のＤＮＡポリメラーゼαおよびβに対する阻害活性を試験し、これを天然由来のデヒドロアルテナシン１の阻害活性と比較したところ、両者の化合物のＩＣ５０値に差はなかった。
【００３６】
【発明の効果】
以上詳述したように、本発明によれば、デヒドロアルテナシンを商業的に入手可能な化合物から全合成することができ、ＤＮＡポリメラーゼαおよびβの阻害活性等の有用な性質を有するデヒドロアルテナシンを安価に供給でき、またデヒドロアルテナシンの有用な誘導体の研究を促す上でも極めて有用である。