(57)【要約】【課題】複数の受光素子により光ビームの強度の測定を行い、各受光素子が出力する光検出信号を、隣接する２つの受光素子の出力毎に微分して暗線の位置の検出を行う測定装置において、全反射減衰角θＳＰの測定精度を向上させる。【解決手段】信号処理部２０により、自身を基準として両側に離れる方向に所定数の受光素子の検出信号値が単調増加する受光素子、すなわちある程度の幅を有する暗線領域の谷間を検出した受光素子を基準受光素子（本例ではフォトダイオード１７ｎ）として検出し、基準受光素子を挟んだ所定数の受光素子の出力を該受光素子の並設方向に関して微分した微分値に基づいて、全反射減衰角θＳＰを算出する。【選択図】　　　　　図５
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
誘電体ブロック、該誘電体ブロックの一面に形成された薄膜層、および該薄膜層の表面上に試料を保持する試料保持機構を備えてなる測定チップと、
光ビームを発生させる光源と、
前記光ビームを前記誘電体ブロックに対して、該誘電体ブロックと前記薄膜層との界面で全反射条件が得られる入射角で入射させる入射光学系と、
前記界面で全反射した前記入射角の異なる光ビームの強度を測定する複数の受光素子からなる光検出手段と、
該光検出手段の各受光素子が出力する光検出信号を、隣接する２つの前記受光素子の出力毎に該受光素子の並設方向に関して微分する微分手段と、
該微分手段による微分値に基づいて、前記界面での反射光中に含まれる暗線の位置を求める演算手段とを備えてなる測定装置において、
前記演算手段が、所定の方法により基準受光素子を特定し、該基準受光素子を中心として両側に離れる方向に所定数の受光素子の検出信号値が単調増加するか否かを判定し、単調増加すると判定されたときの該基準受光素子を挟んだ所定数の受光素子の出力を該受光素子の並設方向に関して微分した微分値に基づいて、前記暗線の位置を求めるものであることを特徴とする測定装置。
【請求項２】
前記所定の方法が、各受光素子の中から、前記光検出信号の最小値を出力した受光素子を前記基準受光素子として特定するものであることを特徴とする請求項１記載の測定装置。
【請求項３】
前記所定の方法が、隣接する２つの前記受光素子の出力毎に該受光素子の並設方向に関して微分した際に、微分値が最も０に近くなる２つの受光素子を前記基準受光素子として特定するものであることを特徴とする請求項１記載の測定装置。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、試料に接した薄膜層と誘電体ブロックとの界面で光ビームを全反射させてエバネッセント波を発生させ、それにより全反射した光ビームの強度に表れる変化を測定して試料の分析を行うエバネッセント波を利用した測定装置に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
金属中においては、自由電子が集団的に振動して、プラズマ波と呼ばれる粗密波が生じる。そして、金属表面に生じるこの粗密波を量子化したものは、表面プラズモンと呼ばれている。
【０００３】
従来より、この表面プラズモンが光波によって励起される現象を利用して、被測定物質の特性を分析する表面プラズモン測定装置が種々提案されている。そして、それらの中で特に良く知られているものとして、　Ｋｒｅｔｓｃｈｍａｎｎ配置と称される系を用いるものが挙げられる（例えば特開平６−１６７４４３号公報参照）。
【０００４】
上記の系を用いる表面プラズモン測定装置は基本的に、例えばプリズム状に形成された誘電体ブロックと、この誘電体ブロックの一面に形成されて試料液などの被測定物質に接触させられる金属膜と、光ビームを発生させる光源と、上記光ビームを誘電体ブロックに対して、該誘電体ブロックと金属膜との界面で全反射条件が得られるように種々の角度で入射させる光学系と、上記界面で全反射した光ビームの強度を測定して表面プラズモン共鳴の状態、つまり全反射減衰の状態を検出する光検出手段とを備えてなるものである。
【０００５】
なお上述のように種々の入射角を得るためには、比較的細い光ビームを入射角を変化させて上記界面に入射させてもよいし、あるいは光ビームに種々の角度で入射する成分が含まれるように、比較的太い光ビームを上記界面に収束光状態であるいは発散光状態で入射させてもよい。前者の場合は、入射した光ビームの入射角の変化に従って、反射角が変化する光ビームを、上記反射角の変化に同期して移動する小さな光検出器によって検出したり、反射角の変化方向に沿って延びるエリアセンサによって検出することができる。一方後者の場合は、種々の反射角で反射した各光ビームを全て受光できる方向に延びるエリアセンサによって検出することができる。
【０００６】
上記構成の表面プラズモン測定装置において、光ビームを金属膜に対して全反射角以上の特定入射角で入射させると、該金属膜に接している被測定物質中に電界分布をもつエバネッセント波が生じ、このエバネッセント波によって金属膜と被測定物質との界面に表面プラズモンが励起される。エバネッセント光の波数ベクトルが表面プラズモンの波数と等しくて波数整合が成立しているとき、両者は共鳴状態となり、光のエネルギーが表面プラズモンに移行するので、誘電体ブロックと金属膜との界面で全反射した光の強度が鋭く低下する。この光強度の低下は、一般に上記光検出手段により暗線として検出される。なお上記の共鳴は、入射ビームがｐ偏光のときにだけ生じる。したがって、光ビームがｐ偏光で入射するように予め設定しておく必要がある。
【０００７】
この全反射減衰（ＡＴＲ）が生じる入射角、すなわち全反射減衰角θＳＰより表面プラズモンの波数が分かると、被測定物質の誘電率が求められる。すなわち表面プラズモンの波数をＫＳＰ、表面プラズモンの角周波数をω、真空中の光速をｃ、金属、被測定物質の誘電率をそれぞれεｍ　、εｓ　とすると、以下の関係がある。
【０００８】
【数１】
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すなわち、上記反射光強度が低下する入射角である全反射減衰角θＳＰを知ることにより、被測定物質の誘電率εｓ、つまりは屈折率に関連する特性を求めることができる。
【０００９】
なおこの種の表面プラズモン測定装置においては、全反射減衰角θＳＰを精度良く、しかも大きなダイナミックレンジで測定することを目的として、特開平１１−３２６１９４号公報に示されるように、アレイ状の光検出手段を用いることが考えられている。この光検出手段は、複数の受光素子が所定方向に配設されてなり、前記界面において種々の反射角で全反射した光ビームの成分をそれぞれ異なる受光素子が受光する向きにして配設されたものである。
【００１０】
そしてその場合は、上記アレイ状の光検出手段の各受光素子が出力する光検出信号を、該受光素子の配設方向に関して微分する微分手段が設けられ、この微分手段が出力する微分値に基づいて全反射減衰角θＳＰを特定し、被測定物質の屈折率に関連する特性を求めることが多い。
【００１１】
また、全反射減衰（ＡＴＲ）を利用する類似の測定装置として、例えば「分光研究」第４７巻　第１号（１９９８）の第２１〜２３頁および第２６〜２７頁に記載がある漏洩モード測定装置も知られている。この漏洩モード測定装置は基本的に、例えばプリズム状に形成された誘電体ブロックと、この誘電体ブロックの一面に形成されたクラッド層と、このクラッド層の上に形成されて、試料液に接触させられる光導波層と、光ビームを発生させる光源と、上記光ビームを上記誘電体ブロックに対して、該誘電体ブロックとクラッド層との界面で全反射条件が得られるように種々の角度で入射させる光学系と、上記界面で全反射した光ビームの強度を測定して導波モードの励起状態、つまり全反射減衰状態を検出する光検出手段とを備えてなるものである。
【００１２】
上記構成の漏洩モード測定装置において、光ビームを誘電体ブロックを通してクラッド層に対して全反射角以上の入射角で入射させると、このクラッド層を透過した後に光導波層においては、ある特定の波数を有する特定入射角の光のみが導波モードで伝搬するようになる。こうして導波モードが励起されると、入射光のほとんどが光導波層に取り込まれるので、上記界面で全反射する光の強度が鋭く低下する全反射減衰が生じる。そして導波光の波数は光導波層の上の被測定物質の屈折率に依存するので、全反射減衰が生じる上記特定入射角を知ることによって、被測定物質の屈折率や、それに関連する被測定物質の特性を分析することができる。
【００１３】
なおこの漏洩モード測定装置においても、全反射減衰によって反射光に生じる暗線の位置を検出するために、前述したアレイ状の光検出手段を用いることができ、またそれと併せて前述の微分手段が適用されることも多い。
【００１４】
また、上述した表面プラズモン測定装置や漏洩モード測定装置は、創薬研究分野等において、所望のセンシング物質に結合する特定物質を見いだすランダムスクリーニングへ使用されることがあり、この場合には前記薄膜層（表面プラズモン測定装置の場合は金属膜であり、漏洩モード測定装置の場合はクラッド層および光導波層）上に上記被測定物質としてセンシング物質を固定し、該センシング物質上に種々の被検体が溶媒に溶かされた試料液を添加し、所定時間が経過する毎に前述の全反射減衰角θＳＰの角度を測定している。
【００１５】
試料液中の被検体が、センシング物質と結合するものであれば、この結合によりセンシング物質の屈折率が時間経過に伴って変化する。したがって、所定時間経過毎に上記全反射減衰角θＳＰを測定し、該全反射減衰角θＳＰの角度に変化が生じているか否か測定することにより、被検体とセンシング物質の結合状態を測定し、その結果に基づいて被検体がセンシング物質と結合する特定物質であるか否かを判定することができる。このような特定物質とセンシング物質との組み合わせとしては、例えば抗原と抗体、あるいは抗体と抗体が挙げられる。具体的には、ウサギ抗ヒトＩｇＧ抗体をセンシング物質として薄膜層の表面に固定し、ヒトＩｇＧ抗体を特定物質として用いることができる。
【００１６】
なお、被検体とセンシング物質の結合状態を測定するためには、全反射減衰角θＳＰの角度そのものを必ずしも検出する必要はない。例えばセンシング物質に試料液を添加し、その後の全反射減衰角θＳＰの角度変化量を測定して、その角度変化量の大小に基づいて結合状態を測定することもできる。前述したアレイ状の光検出手段と微分手段を全反射減衰を利用した測定装置に適用する場合であれば、微分値の変化量は、全反射減衰角θＳＰの角度変化量を反映しているため、微分値の変化量に基づいて、センシング物質と被検体との結合状態を測定することができる。（本出願人による特願２００１−２９７０７４号参照）
このような全反射減衰を利用した測定方法および装置においては、底面に予め形成された薄膜層上にセンシング物質が固定されたカップ状あるいはシャーレ状の測定チップに、溶媒と被検体からなる試料液を滴下供給して、上述した全反射減衰角θＳＰの角度変化量の測定を行っている。
【００１７】
なお本出願人は、ターンテーブル等に搭載された複数個の測定チップの測定を順次行うことにより、多数の試料についての測定を短時間で行うことができる全反射減衰を利用した測定装置を特開２００１−３３０５６０号公報により提案している。
【００１８】
また、本出願人は、特願２００２−０６８７６７号において、複数個の試料液保持部が設けられた測定チップを用いて測定を行う全反射減衰を利用した測定装置も提案している。このような構成の測定装置を用いれば、測定チップを移動させることなく多数の試料についての測定を同時に行うことができる。
【００１９】
【発明が解決しようとする課題】
ところで、上述の特開平１１−３２６１９４号公報に記載されているような、複数の受光素子からなる光検出手段により前記界面で全反射した光ビームの強度を測定し、この光検出手段の各受光素子が出力する光検出信号を、隣接する２つの受光素子の出力毎に微分し、この微分値に基づいて全反射減衰角θＳＰを求める測定装置においては、微分値が極小（大）から極大（小）となる曲線のゼロクロス点に対応する位置を暗線の位置、すなわち全反射減衰角θＳＰと認識する。そのため、光検出手段が出力する光検出信号にノイズが重畳し、微分信号中に複数のゼロクロス点が発生してしまうと、正確に全反射減衰角θＳＰを算出することが難しいという問題があった。
【００２０】
本発明は上記の事情に鑑みて、複数の受光素子により光ビームの強度の測定を行い、各受光素子が出力する光検出信号を、隣接する２つの受光素子の出力毎に微分して暗線の位置の検出を行う測定装置において、正確に全反射減衰角θＳＰを算出することが可能な測定装置を提供することを目的とする。
【００２１】
【課題を解決するための手段】
本発明による測定装置は、誘電体ブロック、誘電体ブロックの一面に形成された薄膜層、および薄膜層の表面上に試料を保持する試料保持機構を備えてなる測定チップと、光ビームを発生させる光源と、光ビームを電体ブロックに対して、誘電体ブロックと薄膜層との界面で全反射条件が得られる入射角で入射させる入射光学系と、前記界面で全反射した入射角の異なる光ビームの強度を測定する複数の受光素子からなる光検出手段と、光検出手段の各受光素子が出力する光検出信号を、隣接する２つの受光素子の出力毎に受光素子の並設方向に関して微分する微分手段と、微分手段による微分値に基づいて、前記界面での反射光中に含まれる暗線の位置を求める演算手段とを備えてなる測定装置において、演算手段が、所定の方法により基準受光素子を特定し、この基準受光素子を中心として両側に離れる方向に所定数の受光素子の検出信号値が単調増加するか否かを判定し、単調増加すると判定されたときの基準受光素子を挟んだ所定数の受光素子の出力を受光素子の並設方向に関して微分した微分値に基づいて、暗線の位置を求めるものであることを特徴とするものである。
【００２２】
ここで、上記所定の方法は、各受光素子の中から、光検出信号の最小値を出力した受光素子を基準受光素子として特定するものとしてもよい。
【００２３】
また、上記所定の方法は、隣接する２つの受光素子の出力毎に受光素子の並設方向に関して微分した際に、微分値が最も０に近くなる２つの受光素子を基準受光素子として特定するものとしてもよい。なお、この方法の場合は、２つの受光素子が基準受光素子として特定されるが、このうちの一方の受光素子のみに上記判定を行ってもよいし、両方の受光素子に対して上記判定を行ってもよい。
【００２４】
上記のような測定装置としては、金属膜を上記薄膜層として用いる前述の表面プラズモン測定装置や、誘電体ブロックの一面に形成されたクラッド層と、このクラッド層の上に形成された光導波層とからなる層を上記薄膜層として用いる前述の漏洩モード測定装置等がある。
【００２５】
上記のような測定装置において、光検出信号の各受光素子により検出された光検出信号のビームプロファイルの波形中には、上記表面プラズモン効果等により生じた暗線による谷の他に、スパイクノイズ等のノイズが重畳することによって生じる谷が形成される場合があり、ビームプロファイル中にこのように複数の谷が形成されると微分信号中に複数のゼロクロス点を生じてしまい、正確に暗線の位置を算出することが困難になる。
【００２６】
これらのノイズによる谷の波形は概ね急峻な幅の狭い谷を形成しており、一方、正常に検出された暗線による谷の波形は測定装置の光学系に応じたある程度の幅を有するため、本発明では光検出手段により検出されたビームプロファイル中から、上記所定の方法により基準受光素子を特定し、この基準受光素子を中心として両側に離れる方向に所定数の受光素子の検出信号値が単調増加するか否かを判定し、単調増加すると判定されたときの基準受光素子を挟んだ所定数の受光素子の出力を受光素子の並設方向に関して微分した微分値に基づいて、すなわち微分信号の中から暗線に対応した領域を限定し、その間のゼロクロス点の位置に基づいて暗線の位置を求めることにより、正確に暗線の位置を算出可能としたものである。
【００２７】
なお、上記「基準受光素子を中心として両側に離れる方向に所定数の受光素子」および「基準受光素子を挟んだ所定数の受光素子」にそれぞれ記述の「所定数」については、必ずしも同数とする必要はなく、異なる数としてもよい。
【００２８】
本発明による測定装置において、光検出手段により前記界面で全反射した光ビームの強度を測定して試料の分析を行うには種々の方法があり、例えば、光ビームを前記界面で全反射条件が得られる種々の入射角で入射させ、各入射角に対応した位置毎に前記界面で全反射した光ビームの強度を測定して、全反射減衰により発生した暗線の位置（角度）を検出することにより試料分析を行ってもよいし、Ｄ．Ｖ．Ｎｏｏｒｔ，Ｋ．ｊｏｈａｎｓｅｎ，Ｃ．−Ｆ．Ｍａｎｄｅｎｉｕｓ，　Ｐｏｒｏｕｓ　Ｇｏｌｄ　ｉｎ　Ｓｕｒｆａｃｅ　Ｐｌａｓｍｏｎ　Ｒｅｓｏｎａｎｃｅ　Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ，　ＥＵＲＯＳＥＮＳＯＲＳ　ＸＩＩＩ，　１９９９，　ｐｐ．５８５−５８８　に記載されているように、複数の波長の光ビームを前記界面で全反射条件が得られる入射角で入射させ、各波長毎に前記界面で全反射した光ビームの強度を測定して、各波長毎の全反射減衰の程度（暗線の位置および程度）を検出することにより試料分析を行ってもよい。
【００２９】
【発明の効果】
複数の受光素子により光ビームの強度の測定を行い、各受光素子が出力する光検出信号を、隣接する２つの受光素子の出力毎に微分して暗線の位置の検出を行う測定装置において、本発明の測定装置は、演算手段を、所定の方法により基準受光素子を特定し、この基準受光素子を中心として両側に離れる方向に所定数の受光素子の検出信号値が単調増加するか否かを判定し、単調増加すると判定されたときの基準受光素子、すなわちある程度の幅を有する暗線領域の谷間を検出した受光素子を挟んだ所定数の受光素子の出力を受光素子の並設方向に関して微分した微分値に基づいて、暗線の位置を求めるようにしたので、スパイクノイズ等の発生により微分信号中に複数のゼロクロス点がある場合であっても、正確に全反射減衰角θＳＰを特定することが可能である。
【００３０】
【発明の実施の形態】
以下、本発明の実施の形態を図面を参照して説明する。本発明の一実施の形態の測定装置は、複数の誘電体ブロックに光ビームを並列的に入射させることにより複数の試料の分析を同時に行うことが可能な表面プラズモン測定装置であり、図１は本実施の形態の表面プラズモン測定装置の概略構成を示す平面図であり、図２はこの表面プラズモン測定装置の側面形状を示すものである。
【００３１】
上記表面プラズモン測定装置１０１は、同様の構成の複数の表面プラズモン測定ユニット１０１Ａ、１０１Ｂ、１０１Ｃ…により構成されている。
【００３２】
各測定ユニットの構成について、個別の要素を表す符号であるＡ、Ｂ、Ｃ…の符号は省略して説明する。各測定ユニットは、測定チップ９と、光ビーム１３を発生する光源であるレーザ光源１４と、上記光ビーム１３を測定チップ９に対して入射させる入射光学系１５と、測定チップ９で反射された光ビーム１３を平行光化して光検出器１７に向けて射出するコリメーターレンズ１６と、コリメーターレンズ１６より出射された光ビーム１３を受光して光強度を検出する光検出器１７と、光検出器１７に接続された差動アンプアレイ（微分手段）１８と、差動アンプアレイ１８に接続されたドライバ１９と、ドライバ１９に接続されたコンピュータシステム等からなる信号処理部（演算手段）２０とからなる。
【００３３】
測定チップ９は、四角錐の４つの稜線が集まる頂角を含む一部分が切り取られ、かつこの四角錐の底面に試料液１１を貯える試料保持機構として機能する凹部１０ｃが形成された形状の誘電体ブロック１０と、この誘電体ブロック１０の凹部１０ｃの底面に形成された、例えば金、銀、銅、アルミニウム等からなる薄膜層である金属膜１２とからなる。この誘電体ブロック１０は、例えば透明樹脂等により形成することができる。なお、金属膜１２の上に後述するセンシング媒体３０を設けてもよい。また、測定チップ９の誘電体ブロック１０は、図３に示すように、互いに隣接する複数の表面プラズモン測定ユニットの測定チップの誘電体ブロックと一体的に構成されたものであってもよい。
【００３４】
入射光学系１５は、レーザ光源１４から射出された光ビーム１３を平行光化するコリメーターレンズ１５ａと、この平行光化された光ビーム１３を上記界面１０ｂに向けて収束させる集光レンズ１５ｂとから構成されている。
【００３５】
光ビーム１３は、集光レンズ１５ｂにより上述のように集光されるので、界面１０ｂに対して種々の入射角θで入射する成分を含むことになる。なお、この入射角θは、全反射角以上の角度とされる。そのため、界面１０ｂで全反射した光ビーム１３には、種々の反射角で全反射された成分が含まれることになる。なお、上記入射光学系１５は、光ビーム１３を界面１０ｂ上に点状に集光させずにデフォーカス状態で入射させるように構成してもよい。そのようにすれば、界面１０ｂ上のより広い領域において光ビーム１３が全反射されるので、全反射減衰の状態の検出誤差が平均化されて全反射減衰角の測定精度を高めることができる。
【００３６】
なお光ビーム１３は、界面１０ｂに対してｐ偏光で入射させる。そのようにするためには、予めレーザ光源１４をその偏光方向が上記所定の方向となるように配設すればよい。その他、光ビーム１３を界面１０ｂに対してｐ偏光で入射させるには波長板で光ビーム１３の偏光の向きを制御するようにしてもよい。
【００３７】
また、表面プラズモン測定装置１０１は、各測定ユニットの信号処理部２０Ａ、２０Ｂ、２０Ｃ…に接続された１つの表示手段２１を備えている。
【００３８】
以下、上記構成の表面プラズモン測定装置による試料分析について説明する。
【００３９】
図２に示す通り、レーザ光源１４から射出された光ビーム１３は、入射光学系１５を通して、誘電体ブロック１０と金属膜１２との界面１０ｂ上に収束される。
【００４０】
界面１０ｂ上に収束され、この界面１０ｂで全反射された光ビーム１３は、コリメーターレンズ１６を通して光検出器１７によって検出される。光検出器１７は、複数の受光素子であるフォトダイオード１７ａ、１７ｂ、１７ｃ…が１列に並設されてなるフォトダイオードアレイであり、フォトダイオードの並設方向が図２の紙面に略平行となるように、かつコリメーターレンズ１６を通して平行光化されて入射される光ビーム１３の伝播方向に対して略直交するように配設されている。したがって、上記界面１０ｂにおいて種々の反射角で全反射された光ビーム１３の各成分を、それぞれ異なるフォトダイオード１７ａ、１７ｂ、１７ｃ…が受光することになる。そして、光検出器１７は、各フォトダイオード１７ａ、１７ｂ、１７ｃ…によって検出された上記光ビーム１３の強度分布を示す信号を
差動アンプアレイ１８およびＡ／Ｄ変換器２７に出力する。Ａ／Ｄ変換器２７は各フォトダイオードから出力された信号をＡ／Ｄ変換して信号処理部２０に出力する。
【００４１】
界面１０ｂに特定入射角θＳＰで入射した上記光ビーム１３の成分は、金属膜１２とこの金属膜１２に接している物質との界面に表面プラズモンを励起させるので、この光については反射光強度が鋭く低下する。つまり上記特定入射角θＳＰが全反射減衰角であり、この角度θＳＰにおいて反射光強度は極小値を示す。この反射光強度が低下する領域は、図２にＤで示すように、界面１０ｂで全反射された光ビーム１３中の暗線として観察される。
【００４２】
次に、光検出器１７から出力された光ビーム１３の強度分布を示す信号の処理について詳細に説明する。
【００４３】
図４は、この表面プラズモン測定装置の電気的構成を示すブロック図である。図示の通り上記ドライバ１９は、差動アンプアレイ１８の各差動アンプ１８ａ、１８ｂ、１８ｃ…の出力をサンプルホールドするサンプルホールド回路２２ａ、２２ｂ、２２ｃ…、これらのサンプルホールド回路２２ａ、２２ｂ、２２ｃ…の各出力が入力されるマルチプレクサ２３、このマルチプレクサ２３の出力をデジタル化して信号処理部２０に入力するＡ／Ｄ変換器２４、マルチプレクサ２３とサンプルホールド回路２２ａ、２２ｂ、２２ｃ…とを駆動する駆動回路２５、および信号処理部２０からの指示に基づいて駆動回路２５の動作を制御するコントローラ２６から構成されている。
【００４４】
上記フォトダイオード１７ａ、１７ｂ、１７ｃ…の各出力は、差動アンプアレイ１８の各差動アンプ１８ａ、１８ｂ、１８ｃ…に入力される。この際、互いに隣接する２つのフォトダイオードの出力が、共通の差動アンプに入力される。したがって各差動アンプ１８ａ、１８ｂ、１８ｃ…の出力は、複数のフォトダイオード１７ａ、１７ｂ、１７ｃ…が出力する光検出信号を、それらの並設方向に関して微分したものと考えることができる。
【００４５】
各差動アンプ１８ａ、１８ｂ、１８ｃ…の出力は、それぞれサンプルホールド回路２２ａ、２２ｂ、２２ｃ…により所定のタイミングでサンプルホールドされ、マルチプレクサ２３に入力される。マルチプレクサ２３は、サンプルホールドされた各差動アンプ１８ａ、１８ｂ、１８ｃ…の出力を、所定の順序に従ってＡ／Ｄ変換器２４に入力する。Ａ／Ｄ変換器２４はこれらの出力をデジタル化して信号処理部２０に入力する。
【００４６】
図５は、界面１０ｂで全反射された光ビーム１３の界面１０ｂへの入射角θ毎の光強度と、差動アンプ１８ａ、１８ｂ、１８ｃ…の出力との関係を説明するものである。ここで、光ビーム１３の界面１０ｂへの入射角θと上記反射された光ビーム１３の光強度Ｉとの関係は、同図（１）に示すようなものであるとする。
【００４７】
また図５（２）は、フォトダイオード１７ａ、１７ｂ、１７ｃ…の並設方向を示しており、先に説明した通り、これらのフォトダイオード１７ａ、１７ｂ、１７ｃ…の並設方向位置は上記入射角θと一義的に対応している。また、各フォトダイオード１７ａ、１７ｂ、１７ｃ…により検出された上記光ビーム１３の強度Ｉａ、Ｉｂ、Ｉｃ…を、光ビーム１３の光強度Ｉのグラフと対応させて図５（１）に示す。
【００４８】
またフォトダイオード１７ａ、１７ｂ、１７ｃ…の並設方向位置、つまりは入射角θと、差動アンプ１８ａ、１８ｂ、１８ｃ…の出力Ｉ’（反射光強度Ｉの微分値）との関係は、同図（３）に示すようなものとなる。なお、本例では同図（１）に示すように光検出信号の強度が低い領域が２カ所あるため、同図（３）に示す微分値Ｉ’中にゼロクロス点が２カ所発生する。
【００４９】
次に、本実施の形態の表面プラズモン測定装置の信号処理部２０における暗線算出のプロセスについて説明する。図６に暗線算出の処理の流れを示すフローチャートを示す。なお、各種処理ステップを図上＃印を付した記号で示し、以下の説明において参照するものとする。
【００５０】
説明に入る前に、本説明において用いる用語（各種値）について定義する。フォトダイオードの各チャネルについてはＰｄｃｈと記載する。また、フォトダイオード（Ｐｄｃｈ）の信号検出値をＰｄ＿ｖａｌと記載する。また、隣接する２つのフォトダイオード（ＰｄｃｈｎおよびＰｄｃｈｎ＋１）が接続された差動アンプ、すなわち微分チャネルについてはＤｆｃｈと記載する。また、微分チャネル（Ｄｆｃｈ）の信号の出力電圧値（Ｐｄ＿ｖａｌｎ＋１−Ｐｄ＿ｖａｌｎ）をＤｆ＿ｖａｌと記載する。
【００５１】
最初に暗線の判定Ｐｄｃｈ数ｍを設定する（＃１）。暗線の幅は測定装置の光学系の配置に応じて変化するため、測定装置に生じる暗線の幅に基づいて、暗線を適正に検出可能な値を設定する。本実施の形態ではこの判定Ｐｄｃｈ数を３とする。
【００５２】
次に、基準受光素子として、Ｐｄｃｈ（１＋ｍ）からＰｄｃｈ（ｍａｘ−ｍ）の範囲内でＰｄ＿ｖａｌが最小値を検出したＰｄｃｈｎを検索する（＃２）。本実施の形態のフォトダイオードアレイ１７はフォトダイオード１７ａ〜１７ｕの２１ｃｈのフォトダイオード（Ｐｄｃｈ）から構成されており、また、判定Ｐｄｃｈ数ｍは３としたため、上記範囲はフォトダイオード１７ｄからフォトダイオード１７ｒとなる。
【００５３】
次に、検索された最小値検出Ｐｄｃｈｎを基準に両側に離れる方向に判定Ｐｄｃｈ数ｍの受光素子の検出信号値が単調増加しているか、すなわちＰｄｃｈｎ→Ｐｄｃｈ（ｎ−ｍ）およびＰｄｃｈｎ→Ｐｄｃｈ（ｎ＋ｍ）が単調増加しているか否か判定し（＃３）、単調増加していると判定された場合には、そのＰｄｃｈｎを基準受光素子として設定する（＃５）。また、単調増加していないと判定された場合には、検索済みのＰｄｃｈを除いて再度最小値検出Ｐｄｃｈｎを検索し（＃４）、ステップ＃３の処理に再度移行する。
【００５４】
本実施の形態の説明において、フォトダイオード１７ｄからフォトダイオード１７ｒの範囲内での最小値検出Ｐｄｃｈｎはフォトダイオード１７ｄであるが、このフォトダイオード１７ｄを基準に両側に離れる方向に３ｃｈのフォトダイオードの検出信号値が単調増加しているか、すなわちフォトダイオード１７ｄ→フォトダイオード１７ａおよびフォトダイオード１７ｄ→フォトダイオード１７ｇが単調増加しているか判定した場合、フォトダイオード１７ｄ→フォトダイオード１７ｇは単調増加をしているが、フォトダイオード１７ｄ→フォトダイオード１７ａは単調増加をしていないため、フォトダイオード１７ｄを基準受光素子の候補から外して、フォトダイオード１７ｄからフォトダイオード１７ｒの範囲内で再度最小値検出Ｐｄｃｈｎを検索する。
【００５５】
フォトダイオード１７ｄの次に最小値を検出したＰｄｃｈｎはフォトダイオード１７ｎであるが、このフォトダイオード１７ｎを基準に両側に離れる方向に３ｃｈのフォトダイオードの検出信号値が単調増加しているか、すなわちフォトダイオード１７ｎ→フォトダイオード１７ｋおよびフォトダイオード１７ｎ→フォトダイオード１７ｑが単調増加しているか判定した場合、両方とも単調増加をしているため、フォトダイオード１７ｎを基準受光素子として設定する。
【００５６】
そして、微分値Ｉ’の中の、この特定したフォトダイオード１７ｎを挟んだ所定数（本実施の形態では判定Ｐｄｃｈ数ｍと同数の３とするが、必ずしも同数である必要は無い）のフォトダイオード群の出力に対応する差動アンプ（Ｄｆｃｈ）１８ｋから１８ｐまでの出力領域の中で、微分値Ｉ’（Ｄｆ＿ｖａｌ）＝０に最も近い出力のものを選択し、それらの差動アンプが出力する微分値に基づいて、全反射減衰角θＳＰを算出する。このようにすることにより、光検出信号の強度が低い領域、すなわち微分値Ｉ’中のゼロクロス点が複数箇所あっても、真の暗線による信号とその他の信号とを区別して、正確に全反射減衰角θＳＰを算出することができる。
【００５７】
なお、差動アンプアレイ１８により出力される微分値Ｉ’のみにパルス状のノイズが重畳している場合であっても、上記と同様の処理により真の暗線を受光したフォトダイオード群を特定し、この特定したフォトダイオード群の出力に対応する差動アンプ群の出力領域中の信号より全反射減衰角θＳＰを算出することによって、パルス状のノイズと暗線による信号とを区別して、正確に全反射減衰角θＳＰを算出することができる。
【００５８】
以後、所定時間が経過する毎に上記と同様な動作を繰り返し、全反射減衰角θＳＰを算出し、測定開始時からの角度変化量を求め表示手段２１に表示する。
【００５９】
上述のように、測定チップの金属膜１２に接している物質の誘電率つまりは屈折率が変化すると、それに応じて全反射減衰角θＳＰも変化するため、この全反射減衰角θＳＰの角度変化量を時間の経過とともに測定し続けることにより、金属膜１２に接している物質の屈折率変化を調べることができる。
【００６０】
なお金属膜１２の上に、試料液１１の中の特定物質と結合するセンシング媒体３０を固定した場合、試料液１１とセンシング媒体３０との結合状態に応じてセンシング媒体３０の屈折率が変化するので、上記微分値Ｉ’を測定し続けることにより、この結合状態の変化の様子を調べることができる。つまりこの場合は、試料液１１およびセンシング媒体３０の双方が、分析対象の試料となる。そのような特定物質とセンシング媒体３０との組合せとしては、例えば抗原と抗体等が挙げられる。
【００６１】
また、本実施の形態では、各受光素子の中から、光検出信号の最小値を出力した受光素子を基準受光素子として特定していたが、本発明はそのような態様に限定されるものではない。
【００６２】
例えば、隣接する２つの受光素子の出力毎に受光素子の並設方向に関して微分した際に、微分値が最も０に近くなる２つの受光素子を基準受光素子として特定するものとしてもよい。なお、この方法の場合は、２つの受光素子が基準受光素子として特定されるが、このうちの一方の受光素子のみに上記判定を行ってもよいし、両方の受光素子に対して上記判定を行ってもよい。
【００６３】
上述の表面プラズモン測定装置は、一部の構成を変更することにより漏洩モード測定装置とすることができる。図７は、上述の表面プラズモン測定装置１０１の一部を変更して構成した漏洩モード測定装置の測定ユニットの側面図である。なおこの図７において、図２中の要素と同等の要素には同番号を付してあり、それらについての説明は特に必要の無い限り省略する。
【００６４】
この漏洩モード測定装置も、上述の表面プラズモン測定装置と同様に測定チップ９を用いるように構成されている。この測定チップ９の上面に形成された凹部１０ｃの底面にはクラッド層４０が形成され、さらにその上には光導波層４１が形成されている。これらクラッド層４０と光導波層４１とによって薄膜層が形成されている。
【００６５】
誘電体ブロック１０は、例えば合成樹脂やＢＫ７等の光学ガラスを用いて形成されている。一方クラッド層４０は、誘電体ブロック１０よりも低屈折率の誘電体や、金等の金属を用いて薄膜状に形成されている。また光導波層４１は、クラッド層４０よりも高屈折率の誘電体、例えばＰＭＭＡを用いてこれも薄膜状に形成されている。クラッド層４０の膜厚は、例えば金薄膜から形成する場合で３６．５ｎｍ、光導波層４１の膜厚は、例えばＰＭＭＡから形成する場合で７００ｎｍ程度とされる。
【００６６】
上記構成の漏洩モード測定装置において、レーザ光源１４から射出された光ビーム１３を誘電体ブロック１０を通してクラッド層４０に対して全反射角以上の入射角で入射させると、該光ビーム１３の多くの成分が誘電体ブロック１０とクラッド層４０との界面１０ｂで全反射するが、クラッド層４０を透過して光導波層４１に特定入射角で入射した特定波数の光は、該光導波層４１を導波モードで伝搬されるようになる。こうして導波モードが励起されると、特定入射角で入射した入射光のほとんどが光導波層４１に取り込まれるので、上記界面１０ｂに特定入射角で入射し、全反射された光の強度が鋭く低下する全反射減衰が生じる。
【００６７】
光導波層４１における導波光の波数は、該光導波層４１上の試料液１１の屈折率に依存するので、全反射減衰が生じる上記特定入射角である全反射減衰角を知ることによって、試料液１１の屈折率や、それに関連する試料液１１の特性を分析することができ、上記実施の形態と同様の効果を得ることができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明の実施の形態による表面プラズモン測定装置の概略構成を示す平面図
【図２】表面プラズモン測定装置の側面形状を示す図
【図３】測定チップの概略構成図
【図４】表面プラズモン測定装置の電気的構成を示すブロック図
【図５】光ビームの界面への入射角と差動アンプの出力との関係を示す図
【図６】基準受光素子検出プロセスを示すフローチャート
【図７】漏洩モード測定装置の一例を示す図
【符号の説明】
９　　測定チップ
１０　　誘電体ブロック
１３　　光ビーム
１４　　レーザ光源
１５　　入射光学系
１６　　コリメータレンズ
１７　　光検出器
１８　　差動アンプアレイ
１９　　ドライバ
２０　　信号処理部
２１　　表示手段
１０１　　表面プラズモン測定装置
１０１Ａ、１０１Ｂ、１０１Ｃ…　　表面プラズモン測定ユニット
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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