(57)【要約】【課題】  ヘルペスウィルス感染の症状を緩和するための手段を提供する。【解決手段】  インフルエンザウイルスワクチンから分離されたチメロサールの有効量を含む薬学的組成物を、ヒト以外の哺乳動物に全身投与する。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヘルペスウイルス感染の症状を緩和する方法であって、当該方法が、インフルエンザウイルスワクチンから分離された有効量のチメロサールを含む薬学的組成物を、ヒト以外の哺乳動物に全身投与する工程を含む、ことを特徴とするヘルペスウイルス感染の症状を緩和する方法。
【請求項２】
前記症状が、慢性疲労症候群である請求項１に記載の方法。
【請求項３】
投与量当たり０.０５μg〜５００μgのチメロサールが投与される請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
投与量当たり０.５μg〜５０μgのチメロサールが投与される請求項１または２に記載の方法。
【請求項５】
前記組成物が、風疹ウイルスワクチンをさらに含む請求項１乃至４のいずれかに記載の方法。
【請求項６】
前記組成物が、医薬上許容される担体を含む０.０５ｃｃの単回投与量にて投与される請求項１乃至５のいずれかに記載の方法。
【請求項７】
前記組成物が、ヒト以外の哺乳動物の舌下に投与される請求項１乃至６のいずれかに記載の方法。
【請求項８】
インフルエンザウイルスワクチンから分離された有効量のチメロサールおよび医薬上許容される担体を含む抗ヘルペスウィルス剤。
【請求項９】
前記チメロサールの量が、０.０５μg〜５００μgである請求項８に記載の抗ヘルペスウィルス剤。
【請求項１０】
前記チメロサールの量が、０.５μg〜５０μgである請求項８に記載の抗ヘルペスウィルス剤。
【請求項１１】
風疹ウイルスワクチンをさらに含む請求項８乃至10のいずれかに記載の抗ヘルペスウィルス剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、動脈硬化性疾患及び高血圧症を包含する斑形成に関わる疾患の処置のための方法及び材料に関し、さらに詳細には、動脈硬化症の処置のための材料及び方法に関する。
【０００２】
本発明のさらなる特徴として、ヘルペスウイルス感染の処置のための材料及び方法が提供され、かかるヘルペスウイルスには、１型及び２型単純ヘルペス、エプスタイン−バール（Epstein-Barr）ウイルス、サイトメガロウイルス、帯状ヘルペスが包含されるが、これらに限定されない。  そしてさらに、本発明によって慢性疲労症候群の処置のための材料及び方法が提供される。
【背景技術】
【０００３】
細胞骨格系は、３つの異なる超微細構造体すなわち、微少管、中間フィラメント、及びミクロフィラメントを有しており、これら三者はすべて、中枢神経系（ＣＮＳ）に関係する線（繊）維状巨大分子である。  神経中間フィラメントは、ニューロフィラメント（アミロイドベータタンパク質構築物を含有する）と規定され、中枢神経系の細胞内に見出される他の中間フィラメントとは異なるものである。  R.D. Goldman、A. Milstead、J.A.Schloss及びM.L. Yerna、Annu.Rev.Physiol.、41巻、703〜722頁(1979)；R.J. Lasak、Neurosci.Res.Program Bull.、19巻、7〜32頁(1981)；R.J. Lasek及びM.L. Shelanski、Neurosci. Res.Program Bull.、19巻、3〜153頁(1981)；C.A. Maretta編、Neurofilaments(1983)；M.L. Shelanski及びR.K.H. Liem、J.Neurochem.、33巻、5〜13頁(1979)。  ニューロフィラメントは、200,000、150,000及び70,000ダルトンの分子量を持つ３つのタンパク質により構成されている。  B.H. Toh、L.J. Gibbs,Jr.、D.C. Gajdusek、J. Goudsmit及びD. Dahl、Proc.Natl.Acad.Sci. USA。  さらなる62,000ダルトンのタンパク質もまた、前記したタンパク質に加えられる。  このようなタンパク質は、遅延型軸索内輸送に関与している。  P.N. Hoffman及びR.J. Lasek、J.Cell Biology、66巻、351〜366頁(1975)。
【０００４】
アルツハイマー病、及び、老年痴呆、ダウン症候群、ピック病、進行性核上麻痺、多発性硬化症その他を包含する他のアミロイド関連病幣は、対をなしたヘリックスフィラメントなどの、反回性アミロイドベータタンパク質または他の類似したアミロイド残基が１以上融合した原線維、神経原線維のよじれ（tangle）、神経斑、アミロイド斑及び大脳血管アミロイド症の存在により、その特徴が表される。  B.H. Anderson、D. Breinberg及びM.J. Downes、Nature、298巻、84〜86頁(1982)。  これらの対をなしたヘリックスフィラメントは、正常のニューロフィラメントとは免疫学的及び化学的に識別不能であり、同じタンパク質性エピトープの多くを共有している。  B.H. Anderson、D. Breinberg及びM.J. Downes、Nature、298巻、84〜86頁(1982)；B.H. Toh、L.J. Gibbs、D.C. Gajdusek、J. Goudsmit及びD. Dahl、Proc.Natl.Acad.Sci. USA；K. Iqbal、I. Grundke-Iqbal、H.M. Wisnieski及びR.D. Terry、Brain Res.、142巻、321〜332頁(1975)。  それらフィラメントは、軸索輸送を妨げることが示唆されてきている。  P.N. Hoffman及びR.J. Lasek、J.Cell.Biol.、66巻、351〜366頁(1975)；J.W. Griffin、P.N. Hoffman、A.W. Clark、P.T. Carroll及びD.L. Price、Science、202巻、633〜665頁(1978)。
【０００５】
アミロイドベータタンパク質をコードする遺伝子のcDNAクローンを遺伝的プローブとして使用して、この遺伝子が第２１クロモソームに位置しており、身体の多くの組織において発現されていることが示された。  D. Goldjaber、M.I. Lerman、O.W. McBridge、U. Suffiotti及びD.C. Gaidusak、Science、235巻、77〜780頁(1987)；R.E. Tanzi、J.F. Gusella、P.C. Watkins、G.A.P. Bruns、P. St.Geroge、M.L. Vankeuren、D. Patterson、S. Pagan、D.M. Kurnit及びR.L. Neve、Science、235巻、880〜884頁(1987)。  cDNAプローブを用いてmRNAレベルによって調べたアミロイドベータタンパク質発現の定量により、このタンパク質のアルツハイマー患者の脳組織における発現のレベルは、中枢神経系外の他の組織について見出されたレベルを越えないことが明らかになった。  かかる発見は、アミロイド斑形成が脳のみで生じることに注目すると、研究者にとって興味深いものであった。  R.E. Tanzi、J.F. Gusella、P.C. Watkins、G.A.P. Bruns、P. St.Geroge、M.L. Vankeuren、D. Patterson、S. Pagan、D.M. Kurnit及びR.L. Neve、Science、235巻、880〜884頁(1987)。
【０００６】
アミロイドベータタンパク質は、当該技術分野において知られている旧来の手段によって得られ、様々な報告でその特徴が示されている。  A.S. Cohen及びE. Calkins、Nature、183巻、1202頁(1959)；A.S. Cohen及びE. Calkins、J.Cell Biology、21巻、481頁(1964)；A.S. Cohen、E. Calkins及びC. Levens、Am.J.Pathol.、35巻、979頁(1959)。  さらに近年の業績は、D. Capsi、M.C. Baltz及びM.K. Pepys、Mol.Biol.Med.、3巻、387〜407頁(1986)；ならびにD. Capsi、M.C. Baltz及びM.K. Pepys、Mol.Biol.Med.、3巻、409〜424頁(1986)に示されている。  アミロイドベータタンパク質は、様々な構造形態で存在している。  実験で使用され、本明細書中の特定の実施態様に言及されているアミロイドベータタンパク質は、そのような形態の混合物の構成要素となる。  本発明の範囲の中において、様々な形態のアミロイドベータタンパク質のいかなるものを使用してもよいことが企図されることは理解されるべきである。
【０００７】
脳由来のアミロイドベータタンパク質は、cDNAクローニングされており、独自の２１個のアミノ酸ＮＨ2末端配列を含むことが示されている。  Glenner,G.G.及びWong, W.、Biochem.Biophys.Res.Comm.、122巻、3号、1131〜35頁(1984)；D. Capsi、M.C. Baltz及びM.K.Pepys、Mol.Biol.Med.、3巻、409〜424頁(1986)；Goldgaber, D.、Lerman, M.I.、McBridge, O.W.、Suffiotti, U.及びGaidusak, D.C.、Science、235巻、777〜80頁(1987)。
【０００８】
脳組織内で異常に組織化されたアミロイドベータタンパク質の蓄積が、アルツハイマー病で明示されることが観察されている。  Dennis J. Selkoe及びCarmela R. Abraham、「Isolation of Paired Helical filaments and Amyloid Fibers from Human Brain,」134巻、Methods in Immunology、388〜404頁(1986)を参照のこと。  アルツハイマー患者で脳にベータアミロイドタンパク質の蓄積があるという事実は、脳組織の死後（post mortem）分析によって立証されており、これによって、神経斑及び大脳血管アミロイド症とともにアルツハイマー罹病者に特徴的に表れる、脳での平行なフィラメントまたは神経原線維のよじれの蓄積の成分としての、アミロイドベータタンパク質の濃縮が明示されている。
【０００９】
ＣＮＳ障害と同様にアルツハイマー病における原線維及び斑におけるアミロイドベータタンパク質の存在は、正常なニューロフィラメントの分解産物に起因するものであること（D. Goldjaber、M.I. Lerman、O.W. McBridge、U. Suffiotti及びD.C. Gaidusak、Science、235巻、77〜780頁(1987)；R.E. Tanzi、J.F. Gusella、P.C. Watkins、G.A.P. Bruns、P. St.Geroge、M.L. Vankeuren、D. Patterson、S. Pagan、D.M. Kurnit及びR.L. Neve、Science、235巻、880〜884頁(1987)；M. Baudry、B.R. Dubrin、L. Beasley、M. Leon及びG. Lynch、Neurobiol.Aging、7巻、255〜260頁(1986)；G.G. Glenner、Arch.Path.Lab.Med.、107巻、218〜282頁(1983)）、あるいはおそらく副産物の不適当な代謝によることが示唆されている。  ニューロフィラメントからのアミロイドベータタンパク質のさらなる分解産物もまた、髄膜管壁に沿ったアミロイド斑及び皮質内血管において観察されている。S. Bahmanyar、E.J. Williams、F.B. Johnson、S. Young及びD.C. Gaidusak、J.Comp.Path、95巻、1〜5頁(1985)；M.E. Bruce及びH. Fraser、Neuropathol.Appl.Neurobiol、1巻、189〜207頁(1981)；M.E. Bruce及びH. Fraser、Neuropathol.Appl.Neurobiol、7巻、289〜298頁(1981)；G.G. Glenner及びW. Wong、J. Quaranta及びG.G. Glenner、Proc.Natl.Acad,Sci.、82巻、8729頁(1985)；D.J. Selkoe、C.R. Abraham、M.B. Podlisky及びL.K. Duffy、J.Neurochem.、46巻、1820頁(1986)。
【００１０】
1960年代中頃に、SolomonとMoosは、免疫学的機能、中枢神経系、精神病理学的因子（情動）と、身体及び精神の双方の疾患との間に密接な統合関係（integration）があることを予測した。  G.F. Solomon及びR.H. Moos、Arch.Gen.Psychiatry、11巻、657〜674頁(1964)。  これらの系の統合関係は、先ず、精神分裂病患者における異常な免疫グロブリンの存在を観察することを通して示唆された。  G.F. Solomon及びR.H. Moos、Arch.Gen.Psychiatry、11巻、657〜674頁(1964)；J.G. Knight、Lancet、82巻、1073〜1076頁(1982)；W.J. Fessel及びM. Hirata-Hibi、Arch.Gen.Psychiatry、9巻、601〜613頁(1981)。  これらの免疫異常（自己抗体と称される）は、特定の体細胞構造を標的とするようであり、（G.F. Solomon、Psychoneuroimmunology、259〜278頁(1985)；G.F. Solomon及びR.H. Moos、Psychosom.Mod.、27巻、135〜149頁(1981)）、ＣＮＳと免疫系との間に密接なコミュニケーションが存在するという概念を支持するものであった。  例えば、メチオニン−エンケファリンは、ＣＮＳにおける神経伝達物質であり、活性化Ｔ−ヘルパー細胞の産物である。G. Zurawaki、M. Benedik、D.J. Kamb、J.S. Abrams、S.M. Zurawaki及びF.O. Lee、Science、232巻、772〜775頁(1986)。
【００１１】
アルツハイマー病及び他のＣＮＳ障害に罹患した患者において、ＣＮＳのニューロフィラメントに対して特異的な自己抗体が出現していることは、生体の免疫系がその疾患の過程において役割を果たしていることを示唆している。  S. Bahmanyar、R.K.H. Liem、J.W. Griffin及びD.C. Gajdusek、J.Neuropathol.Exp.Neurol.、53巻、85〜90頁(1984)；S. Bahmanyar、M.C. Moreau-Dubois、P. Brown、F. Catala及びD.C. Gajdusek、J.Neuroimmunol.、5巻、191〜196頁(1983)；T.S. Elizan、J. Calas及びM.D. Yahr、J.Neurol.Sci.、59巻、341〜347頁(1983)。  正常なＣＮＳニューロフィラメントに対する自己抗体は、アルツハイマー病に特徴的な神経原線維のよじれにおける対をなしたヘリックスフィラメントと反応する。  D. Dahl及びA. Bignami、Exp.Neurol.、58巻、74〜80頁(1978)；M.E. Bruce、J.Neuropathol.Exp.Neurol.、37巻、595頁、要約(1978)。
【００１２】
これらのＣＮＳ障害に対する動物モデルは、塩化アルミニウムまたはB,B'-イミノジプロピオニトライト（IDPN）で誘導されて、対をなしたヘリックスフィラメントを神経原線維のよじれに形成しているものであり、ＣＮＳニューロフィラメントに対して作製された抗体とも反応する。  J.W. Griffen、P.N. Hoffman、A.W. Clark、P.T. Carroll及びD.L. Price、Science、202巻、633〜665頁(1978)。
【００１３】
このような自己免疫反応を制御することで、かかる反応によって明示される症状の緩和が導かれるかもしれない。  過去２０年にわたって、誘発−中和療法と称される技術を用いた自己免疫疾患（あるいは、より適切に称すれば、免疫不全を反映する疾患）の治療に関連した一連の臨床文献が蓄積してきている。  Miller、Annals of Allergy、38巻、185〜191頁(1977)；Miller、Trans.Am.Soc.Opth. & Octolar.Allergy、14巻、159〜168頁(1974)；Miller、Clinical Medicine、81巻、16〜19頁(1974)。  手短に述べると、アレルギー治療のために一般的に用いられるこの方法は、免疫制御障害を反映する症状を誘発する既知の抗原、またはかような誘発を行うことが推測される抗原を、皮下または舌下に導入することを包含する。  誘発物質を連続的に希釈することにより、異なる濃度にて同じ物質により誘導される症状を、その試薬が中和する濃度を定量しうる。  これは、ある量では陽性反応を誘導し、同じ試薬が他の量では陰性の応答を誘導する、量依存性の現象の主たる例である。
【００１４】
中和は、Ｔ８サプレッサー細胞の恒常性機能レベルを回復させる結果として起こると考えられるものの、免疫調節障害を覆す中和濃度で用いた同じ抗原が、症状を覆す内分泌及び／または神経制御機構を誘発しうることもまた（むしろその方が）、事実上可能なのである。  ３つの制御系（内分泌、免疫、神経）と、これら各々の系に含まれる細胞間及び相互の立証された情報伝達経路の間に密接な関連があるので、アルツハイマー及び関わるＣＮＳ障害罹病者におけるベータアミロイドタンパク質などのごとき単一の活性分子が、これらの経路のいずれかまたはすべてを介して症状を覆すかもしれないといえる。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１５】
斑形成は、数多くの他の疾患の病因における共通の構成要素でもある。  それらの内で主たるものは、動脈硬化性疾患である。  アルツハイマー病及びその関連疾患と同様に、アテローム硬化症などの動脈硬化性疾患は、斑形成疾患である。  このような疾患は、動脈斑形成によってその特徴が表される。  これらの斑は通常、大及び中サイズの動脈に生じ、一般に細胞、結合組織（通常はエラスチン、コラーゲン、及びグリコサミノグリカン）、ならびに脂質沈積物を含んでなる。  これら成分の混合物は、通常複合体であり、疾患が進行した段階において石灰化されうる病巣を形成している。  斑の大きさは、血管が進行性の濃縮性筋線維肥厚を行うにつれて、存命中にゆっくりと増大する。  アテローム硬化症患者において、血管壁の脈管内膜の筋線維肥厚は速やかに進行し、これが、脂質の沈積と共に血流に制限を加えることに寄与する。  アテローム硬化症ではない患者では、血管の正常な肥厚が血圧の上昇に寄与することはなく、血流に障害を生じさせたりはしない。  実際のところ、しばしば斑形成疾患は併発し、神経斑を有する患者は血管斑も有している。
【００１６】
アテローム硬化斑が発生するのは、筋線維肥厚の基質上である。  このような斑は、通常、生後３０年でより頻発し、冠状動脈での局在が最も一般的である。  アテローム硬化障害は通常、血管の筋ライニングの進行に際して、すべてのヒトにおいて一過性に生じる脂質沈積から発生すると考えられる。  脂質の沈積または「線条（streaks）」からアテローム硬化障害へ変換する機構は知られていないようである。  しかしながら、少なくとも１つの報告において、アテローム硬化斑への正常な脂質線条の変換が、ウイルスによって惹起こされているかもしれないことが示唆されている。  Melnickら（JAMA、263巻、2204〜207頁(1990)）において、鳥類のヘルペスウイルスがニワトリでアテローム硬化障害を刺激することが報告された。  前記の著者は、ヒトにおけるアテローム硬化障害とヒトにおけるサイトメガロウイルスの存在との関連付けも行った。  動脈平滑筋にヘルペスウイルス及びサイトメガロウイルス抗原、のみならずこれらウイルスをコードする核酸が存在することの発見は、アテローム硬化症の発生と動脈細胞のウイルス感染とが符合しているかもしれないことを示唆するものである。  しかしながら、いかなるウイルスとアテローム硬化症との因果関係も、未だに決定的には立証されていない。
【００１７】
本発明にとって興味深いのは、慢性疲労症候群である。  慢性疲労症候群は、その主たる症状が、横になって休んでも回復しえない慢性的、衰弱性の疲労であり、そして少なくとも６カ月、５０％未満にまで日々の活動性を低下させるほどに重篤な障害である。  診断を確定するためには、疲労の発現時に以下の８つの症状も合併し、さらに少なくとも６カ月の期間にわたって持続または再発することを要件とする。  これらの症状には、軽度の発熱、咽頭炎、リンパ節痛、筋衰弱、筋肉痛、運動後の疲労、頭痛、関節痛、神経精神愁訴、睡眠障害、及び健常人での突発的な発症が包含される。  慢性疲労症候群の診断には、さらに、既往歴、身体検査及び検査所見によって特徴付けられる様々な他の病気を除外することが包含される。
【００１８】
慢性疲労症候群は、種々の原因に基づきうる障害である。  慢性疲労症候群について初期に発表された多くの文献では、原因物質としてエプスタイン−バールウイルスに焦点が向けられている。  エプスタイン−バールウイルスは、急性伝染性単球増加症（発熱、咽頭炎、甚だしい疲労、及びリンパ節の肥大によって顕示される通性の症候群）の主たる原因である、ヘルペス様ウイルスである。
【００１９】
その後、当業者によって、風疹ウイルスが慢性疲労症候群の病因を担っている可能性があることが報告されている。  慢性疲労症候群の患者について行った研究により、それらの患者の多くが異常に高レベルの風疹ウイルスに対する抗体を保有していることが示されている。
【００２０】
当業者により、ヘルペス（エプスタイン−バールウイルス）ウイルス感染の処置に対する、インフルエンザワクチン及び風疹ウイルスワクチンの使用（双方とも単独使用、及び併用）が報告されている。  Lieberman、Clinical Ecology、7(3)、51頁(1990)によって、エプスタイン−バールウイルスに感染した患者でのヒスタミン及び免疫増強剤Staphage溶解液と共に投与されるインフルエンザワクチンの使用が報告された。  患者はさらにまた、風疹ウイルスワクチンと併用して同様の組成物にて、そして風疹ウイルスワクチン単独にて処置され、良好な結果が得られた。
【００２１】
また本発明にとって興味深いのは、再発性のヘルペス単純II型ウイルス感染の患者が、ヒスタミン、麻疹不活性化、弱毒化ウイルス及びインフルエンザワクチン（死滅）ウイルスを含む組成物を用いた処置によって病変部痛及び病変部拡張の軽減を報告しているというMcMichaelの米国特許第4,521,405号の開示である。  McMichaelの米国特許第4,880,626号は、ＡＩＤＳの症状を緩和するためのヒト絨毛性ゴナドトロピン、Staphage溶解液、Fluogen（商標名）などのインフルエンザウイルスワクチン及び分画された不活性化ＨＩＶウイルスを含む組成物を教示していた。
【００２２】
本発明でさらに興味が向けられるのは、高血圧症である。  高血圧症で一般的に観察される血管透過性の増大は、細胞へのリポタンパク質の流入を増加させるかもしれず、しかしてアテローム形成の可能性が高まるかもしれない。  高血圧症は、脳を取り巻く血管でのアテローム硬化にも寄与するかもしれない。  高血圧症が減衰することによって、アテローム硬化症に関連した心筋梗塞の発生率が有意に低減することが示されている。  アテローム硬化症の発生及び進行における他の因子には糖尿病が包含され、これは動脈壁で細胞から脂質の流出を低減させうるものである。  加えて、喫煙は劇的にアテローム硬化症ならびに、それに関わる高血圧症（心筋及び脳の梗塞などといったそれらの余病を含む）の発生の危険性を増加させる。  肥満は、特に喫煙する個体に寄与しうる他の因子である。
【００２３】
総括的に、高血圧症は、冠状動脈の疾患のみならず、脳血管卒中における唯一で最大の危険因子である。
【００２４】
高血圧症が認められることは、動脈硬化症病態の第一の指標であり、これがアテローム硬化症などの疾患のただ一つの診断基準としてしばしば医師に用いられる。  さらには、血圧の低下がアテローム斑の重篤さを減じる上で効果を有すると考えられる。  かかる低下についての機構は、血圧の低下に符合する血管への脂質及びタンパク質の輸送の減少であるかもしれない。  拡張期の血圧は通常、高血圧の第一の指標であると考えられている。
【００２５】
収縮期の血圧は、神経質状態、不安などに大きく依存して変動しうるが、拡張期の血圧は一般に一定のままであって患者の通常の血管状態をより反映するものである。  成人で拡張期圧の読み取り値が９０を越えると軽度の高血圧であると考えられ、また１００を越える拡張期圧の読み取り値の場合高血圧患者であるとみなされて、これが動脈硬化症の指標と考えられている。
【課題を解決するための手段】
【００２６】
本発明により、斑形成に関与する病態の症状を緩和するための方法が提供される。  本発明によれば、アルツハイマー及び関連疾患ならびに動脈硬化性疾患などの斑形成の症状の進行を阻止する、適切な代謝制御系（免疫、ＣＮＳまたは内分泌）を刺激する方法が提供される。  科学者の観察によって、いまや、例えばアルツハイマー病におけるアミロイドベータタンパク質濃度の明らかな上昇が、ゲノム発現の増大に起因するのではなく、正常なニューロフィラメントから、神経原線維のよじれ、神経斑、アミロイド斑を生じる、対をなしたヘリックスフィラメントへのアミロイド部分の再組織化を誘導する機構の活性化におそらく起因するのかもしれないことが示唆されている。  D. Goldjaber、M.I. Lerman、O.W. McBridge、U. Suffiotti及びD.C. Gaidusak、Science、235巻、77〜780頁(1987)；R.E. Tanzi、J.F. Gusella、P.C. Watkins、G.A.P. Bruns、P. St.Geroge、M.L. Vankeuren、D. Patterson、S. Pagan、D.M. Kurnit及びR.L. Neve、Science、235巻、880〜884頁(1987)；M. Baudry、B.R. Dubrin、L. Beasley、M. Leon及びG. Lynch、Neurobiol.Aging、7巻、255〜260頁(1986)；G.G. Glenner、Arch.Path.Lab.Med.、107巻、218〜282頁(1983)。  本発明の機構は、ニューロフィラメントの再編成（rearrangement）を修正し、アミロイドベータ形成を含む異常なアミロイドタンパク質の形成を改変し、且つ／または軸索輸送機構の一掃（clearing）を可能とする制御プロセスの誘因に帰するのかもしれない。  同様に、調節制御系は前記のごとくに動脈硬化斑形成において役割を果たしており、アテローム硬化症などの動脈硬化性疾患を導くものである。  動脈硬化性疾患及び／またはアルツハイマー病などの神経斑形成疾患に罹患した患者において有意にそして共通に起こるのは、高血圧である。  従って、本発明の方法は、総合的な病態の緩和の指標としての高血圧症の低減を惹き起こすものである。  本発明の方法を用いた処置に感受性を示す疾患は、共通して斑形成を伴う。  従って、本発明の方法で処置すると、それら疾患が原因となる症状を緩和することによってかかる疾患のすべてを有効に治療することができるのである。  加うるに、以下に詳説するとおり、本発明の組成物及び方法は、概して高血圧の低減に有用である。
【００２７】
本発明の一つの特徴において、Lieberman、Clinical Ecology、McMichaelの米国特許第4,521,405号及びMcMichaelの米国特許第4,880,626号にて報告されたように、ヘルペスウイルスに対して活性を提供するインフルエンザウイルスワクチンの成分が、Fluogen（商標名、Parke Davis、Morris Plains、ニュージャージー州）Fluzone（商標名、Connaught Laboratories、Swiftwater、ペンシルベニア）、及びFlu-Immune（商標名、Lederle、Wayne、ニュージャージー州）などの市販のインフルエンザウイルスワクチン中に存在する防腐剤のチメロサールであることが見出されている。  その結果、インフルエンザウイルスワクチンの抗ヘルペスウイルス効果にその原因が帰された、McMichael及びLibermanにより報告された結果は、被検組成物中のチメロサールの存在に起因すると考えられる。  さらに、インフルエンザウイルスワクチンの抗ヘルペスウイルス活性は被験ワクチン中のチメロサールの存在に帰するものであって、ヘルペスウイルス感染は、インフルエンザウイルスワクチンと併用せずとも、すなわちインフルエンザウイルスワクチン非存在下でチメロサールを用いて処置されうることが見出された。  従って、本発明は、インフルエンザウイルスと会合していないチメロサールを含む組成物の有効量を投与する工程を含む、ヘルペスウイルス感染に罹患した被験者を処置するための方法を提供するものである。  さらに詳細には、本発明は、インフルエンザウイルスと会合していない、有効量のチメロサールを慢性疲労症候群に罹患した被験者に投与して処置するための方法を提供するものである。
【００２８】
本発明の一つの特徴として、インフルエンザウイルスと会合していないチメロサールを風疹ウイルスと併用することが慢性疲労症候群に罹患している被験者の処置に特に有効であることが見出されている。  本発明はさらに、有効量のチメロサールを投与することにより、in vitroでヘルペスウイルスを死滅させるための方法を提供する。  さらに本発明は、チメロサールを含有するインフルエンザウイルスワクチンなどのチメロサール含有組成物またはチメロサールと、アミロイドベータタンパク質とを併用することによってアテローム性動脈硬化症及び高血圧などの斑形成疾患を処置するための方法を提供する。
【００２９】
本発明にて使用するアミロイドベータタンパク質の用量を同定するために、Moore、Clinical Medicine、81巻、16〜19頁(1974)（参照することによって本明細書の一部とする）に記載された規準に従って、治療用物質の皮内注射に際してできる膨疹を評価した。  皮下注射の場合には、膨疹は、白変し、硬く、隆起した、皮膚からの円盤状突出部として、注射より１０分後に陽性であることが判定されうる。  陰性の膨疹は、１０分になる頃には充分に吸収され、皮膚上の突出部は元のサイズから平均径２ミリメートル小さくなっているものである。
【発明の効果】
【００３０】
後出の実施例に示した結果から、本発明の組成物の適用によって、血圧及び動脈硬化症に関わる症状に加えて、ヘルペスウィルス感染の症状が緩和されることが立証される。
【００３１】
従って、本発明の方法及び組成物は、動脈硬化性疾患の症状に加えて、ヘルペスウィルス感染の症状を緩和するため、及び場合によってはかかる疾患を完全に緩和するための効果的な手段を構成する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３２】
本発明の好ましい実施態様において、斑形成疾患の処置のための本発明の組成物は、約10-10mgから約10-2mgのアミロイドタンパク質と、約0.05μgから約500μgのチメロサール、好ましくは約0.5μgから約50μgのチメロサール、そして特に好ましくは約５μgのチメロサールの用量を含む。  患者に投与するための典型的な本発明の組成物の総容量は、約0.05cc、あるいは１滴である。  斑形成疾患の処置用の本発明の組成物は、β−アミロイドタンパク質またはβ−アミロイドタンパク質の最初の２８個のアミノ酸を含むとよい。
【００３３】
ヘルペスウイルス感染に罹患している被験者の処置のためのチメロサールの好ましい投与量は、約0.05μgから約500μgのチメロサール、好ましくは約0.5μgから約50μgのチメロサール、そして特に好ましくは約５μgのチメロサールの範囲である。
【００３４】
さらに本発明の好ましい実施態様において、本発明の組成物は、医薬上許容されうる担体にアミロイドタンパク質及びチメロサールを含む医薬組成物である、動脈硬化性疾患治療用の医薬組成物である。
【００３５】
さらに好ましい実施態様において、本発明の組成物は、動脈硬化性疾患の処置用の医薬組成物であり、かかる医薬組成物は、医薬上容認されうる担体中にアミロイドベータタンパク質及びチメロサールを含むものである。
【００３６】
本発明の方法は、概して動脈硬化の症状、特にアテローム硬化症を緩和する上で有用である。  かかる方法は、動脈硬化性疾患に罹患していると疑われるまたは罹患が確認されている患者に対して、アミロイドタンパク質及びチメロサールを含む有効量の医薬組成物を投与する工程を含むものである。  本発明の組成物の有効量とは、動脈硬化性疾患の症状が低減される結果が得られる量である。  最も好ましくは、本発明の組成物の有効量は、約10-10mgから約10-2mgのアミロイドタンパク質、好ましくはβ−アミロイドタンパク質、及び約0.05μgから約500μgのチメロサールを含むことが好ましい。  本発明の方法において使用されるアミロイドタンパク質は、β−アミロイドタンパク質であってよく、またはβ−アミロイドタンパク質の最初の２８個のアミノ酸であってよい。  本発明の組成物及び方法において使用される、極めて好ましいアミロイドタンパク質の量は、約10-5mgから約10-2mgのアミロイドタンパク質である。
【００３７】
本発明の方法及び組成物は、斑形成が関わるあらゆる疾患、特にアテローム形成が特徴的な疾患の症状を緩和する上で有効である。  本発明の組成物及び方法は、高血圧症も緩和し、そしてコレステロールを低減させるが、これら双方とも、動脈硬化性疾患に関わる症状の重篤さを低減したり、それらの症状を排除するのに直接的な効果を有する。  以下の発明の詳細な説明に、本発明の請求の範囲にある方法及び組成物の例示を記載する。
【００３８】
しかしながら、本発明の他の用途、特に動脈硬化性疾患の治療に関連する他の用途が本発明の請求の範囲に含まれることは、当業者に理解されるべきである。
【００３９】
本発明の方法は、概して動脈硬化の症状、特にアテローム硬化症を緩和する上で有用である。  かかる方法は、動脈硬化性疾患に罹患していると疑われるまたは罹患が確認されている患者に対して、アミロイドタンパク質及びチメロサールを含む有効量の医薬組成物を投与する工程を含むものである。  本発明の組成物の有効量とは、動脈硬化性疾患の症状が低減される結果が得られる量である。  最も好ましくは、本発明の組成物の有効量は、約10-10mgから約10-2mgのアミロイドタンパク質、好ましくはβ−アミロイドタンパク質、そして約0.05μgから約500μgのチメロサールを含むことが好ましい。  ヘルペスウイルス感染に罹患している被験者の処置のためのチメロサールの好ましい投与量は、約0.05μgから約500μgのチメロサール、好ましくは約0.5μgから約50μgのチメロサール、そして特に好ましくは約５μgのチメロサールの範囲である。  本発明の方法において使用されるアミロイドタンパク質は、β−アミロイドタンパク質であってよく、またはβ−アミロイドタンパク質の最初の２８個のアミノ酸であってよい。  本発明の組成物及び方法において使用される、極めて好ましいアミロイドタンパク質の量は、約10-5mgから約10-2mgのアミロイドタンパク質である。
【００４０】
本発明の方法及び組成物は、斑形成が関わるあらゆる疾患、特にアテローム形成が特徴的な疾患の症状を緩和する上で有効である。  本発明の組成物及び方法は、高血圧症も緩和し、そしてコレステロールを低減させるが、これら双方とも、動脈硬化性疾患に関わる症状の重篤さを低減したり、それらの症状を排除するのに直接的な効果を有する。  以下の発明の詳細な説明に、本発明の請求の範囲にある方法及び組成物の例示を記載する。
【００４１】
しかしながら、本発明の他の用途、特に動脈硬化性疾患の治療に関連する他の用途が本発明の請求の範囲に含まれることは、当業者に理解されるべきである。
【００４２】
また、好ましい実施態様において、本発明によりアミロイドタンパク質またはアミロイド斑の異常な蓄積及び／または分子の組織化に関わる病態の症状を緩和するための方法が提供され、この方法は、アミロイドタンパク質またはその有効な活性断片の有効量を、罹患した患者に投与することを含んでなる。  アミロイドベータタンパク質の最初の２８個のアミノ酸残基を含む断片などのアミロイドタンパク質断片が有用であると考えられるが、アミロイドタンパク質としては、アミロイドベータタンパク質が好ましい。  本発明の方法は、アミロイドタンパク質または斑が中枢神経系及び組織病理学的に関連した疾病に関わるものである病態を包含する、アミロイドタンパク質またはアミロイド斑の異常な蓄積及び／または分子組織化に関わる病態に対して有用である。  かかる疾患には、アルツハイマー病及びパーキンソン病が包含されるが、これらに限定されることはない。  他の病態には、アテローム硬化症などが包含される。
【実施例】
【００４３】
Ａ．アルツハイマー病及び関連疾患の治療への本発明の材料及び方法の適用
本明細書に記載されるごとき、アミロイドベータタンパク質の投与に続いて観察されるアルツハイマー病の症状の緩和は、神経原線維のよじれにおける対をなしたヘリックスフィラメントの蓄積及び／もしくは形成ならびに／またはアミロイド斑の発生が有意に改変または緩徐化され、そして蓄積されたタンパク質が除去されるように、アルツハイマー病患者における適切な代謝調節系を刺激することを反映するようである。  至当な恒常性を樹立するこの再プログラミングにより、処置を行ったアルツハイマー病患者を臨床的に改善するという結果を惹き起こすであろうと考えられる、より効率の良い神経インパルスの伝達が可能となろう。
【００４４】
典型的には、低濃度でアミロイドベータタンパク質を配送するための本発明の医薬投与単位は、液体または固体の担体及び有効量のアミロイドベータタンパク質を含んでなる。
【００４５】
舌下投与のための担体として、生理食塩水が好適に使用できる。  アミロイドタンパク質の有効量は、約10-10mgから約10-2mgの範囲、そして好ましくは約10-5mgから約10-3mg、また最も好ましくは約10-4mgの、医薬的に許容しうる賦形剤と組み合わされたアミロイドベータタンパク質である。  アミロイドベータタンパク質は、舌下、皮下及び経皮の経路を包含する標準法を介して、液体または固体の投与単位にて投与される。
【００４６】
本発明の作用の様式の一つの説明としては、おそらくは正常なニューロフィラメントの分解を通して付加的なアミロイドベータタンパク質の産生が阻害されるよう、負のフィードバック機構を誘因するのに、投与されたこのタンパク質の量が充分であることであるかもしれない。  この理論のもとに、低レベルのアミロイドベータタンパク質またはその誘導体が、異常な合成／分解プロセスを修正する信号を身体に与えるのである。  次いで、身体のセンサーが、アミロイドベータタンパク質処理の正常な代謝制御へと向かうように調整されて、これにより至当な平衡が可能となってそれ自体が再建され、異常な処理を緩和するものである。  免疫系、ならびに内分泌及びＣＮＳ制御系は、低投与量の療法に呼応して完全な調節の役割を果たすことができ、この際アミロイドタンパク質は、アミロイドベータタンパク質部分の分子の組織化を修正するばかりでなく、干渉するアミロイド分子組織体を一掃する機構を通じて機能している。
【００４７】
好ましい実施態様において、本発明はアミロイドベータタンパク質またはその誘導体の投与を列記するものである。  アミロイドベータタンパク質は、液体溶液の一部として、または固体の粉末マトリックス中のいずれにでも供給されるとよく、そして投与を容易にして正確に投与量が移送されることが許容されるよう、旧来の賦形剤と共に投与することができる。  本明細書で以下に特徴を表した患者は、認識能力を測定すべく設計された一連の他覚的試験を用いて評価された。  これらの試験には、mini-mental State Examination、Verbal Fluency Task Examination（単語名の課題及びカテゴリーの課題）、Demattis Dementia Rating Scaleの評価、及びWord-Association Task Examination of the Wechster Memory Scale-Revisedが含まれていた。  本明細書には、すべての試験の結果を列記しているのではないが、すべての試験の結果は以下に記載した結果と同質であり、本発明に従う処置の効果に関連して、本明細書中に列記したと同じ結論を導くものであった。
【００４８】
実施例１
治療開始前の４年間、アルツハイマー病の病歴を有する６７歳の男性は、質問に答えること、顔と名前を識別すること、そして自分の意見を完結することについての能力を有しないという症状を呈していた。  彼の妻は月ごとに彼の状態が一貫して悪化へと進行していくことを認めていた。  本発明の組成物を用いた治療の開始時に、Mini-Mental State Examでの彼の最初の評点は、５（満点30）であった。  生理食塩水に10-4mgのアミロイドベータタンパク質を含む投与単位を１日に４回舌下投与することで、被験者を処置した。
【００４９】
本発明の療法を５カ月間行なった後、Mini-Mental State Examで患者は12 1/2を得点し、旅行中に道路標識を読み取り、そして家族達とコミュニケーションをもった。  また、患者は、よりくつろぎ、彼を介助する妻の努力に対して好ましい対応を行うことができるようであった。
【００５０】
実施例２
アルツハイマー病の病歴を有する８１歳の男性を、本発明に従って処置した。  処置前に、被験者は自分で身支度できず、感情の起伏がなく、コミュニケーションをあまり持てず、そしてMini-Mental State Examでは10 1/2を得点していた。  被験者は、実施例１のアミロイドベータ投与単位を毎日４回舌下に投与することにより処置された。  ３カ月間処置を施した後、被験者はMini-Mental State Examで17ポイントを得点し、精力的に話をし、ほとんど毎日自分で身支度をすることができ、そして身体活動において以前よりも自信に満ちていた。
【００５１】
実施例３
本実施例の被験者は、最初にUniversity of Pittsburgh Medical School Alzheimer's Disease Research Centerで激発型のアルツハイマー病に罹患していると診断された６２歳の女性であった。  １年で被験者は長期療養施設の看護婦長から、常に介護を必要とする状態になってしまった。  被験者はコミュニケーションを持つことができず、誰も認識していないようであり、そしてMini-Mental State Examでは1.5を得点していた。  被験者は、実施例１のアミロイドベータ投与単位を毎日４回舌下に投与することにより処置された。
【００５２】
３カ月間処置を施した後、被験者の夫は、患者の手に暖かみが戻り、治療前には週を追って衰えていることに気づいていたが、いかなるタイプの悪化も顕性でないことを報告した。  コミュニケーションは困難なままであったものの、被験者は快方に向かい、覚醒状態の増加を示し、そして一貫して個体を認識することができるのみならず、時折会話に参加することができ、彼女のMini-Mental State Examでの試験のスコアは7.75にまで上がった。  被験者は元々アルツハイマー病に罹患していると診断されたのであるが、剖検の結果、アルツハイマー病には罹患しておらず、Striatonigral変性として知られるパーキンソン病の一つの型に罹患していることが示された。
【００５３】
実施例４
本実施例の被験者は、２度の一過性虚血発作に見舞われており、またアルツハイマー病に罹患していると診断されたていた７９歳の男性であった。  処置前には、被験者はMini-Mental State Examでは16を得点していた。  被験者は、実施例１のアミロイドベータ投与単位を毎日４回舌下に投与することにより処置された。  被験者は以前よりやや短気になり、そして試験期間を過ぎて２カ月後に、結局、卒中で死亡してしまったが、Dementia Rating Scaleを含む様々な精神活動試験についての彼の成績は最初の６カ月の評価期間のあいだに向上していた。  特に、試験開始後最初の６カ月の間でMini-Mental State Examの結果は向上し、すなわち、３、４、５及び６カ月で試験を行った結果、それぞれ18、20、21及び25を得点した。  ３カ月のフォローアップ検診にて、被験者の精神活動はわずかに衰え、Mini-Mental State Examでのスコアは16を得点した元の成績のレベルに落ちていた。
【００５４】
他の精神活動試験についての被験者のスコアもまた、元の活動レベルにまで顕著に減衰していることが示された。  被験者は６カ月のフォローアップ検診の前に卒中で死亡した。
【００５５】
実施例５
本実施例では、アルツハイマー病に罹患していると診断されてた７６歳の男性を、実施例１のアミロイドベータ投与単位を毎日４回舌下に投与することにより処置した。  Mini-Mental State Exam及びDementia Rating Scaleの双方における被験者の成績は、５カ月間に及ぶ試験期間にわたって有意に向上した。  １、３、４及び５カ月でのMini-Mental State Examの試験のスコアは、20、20、20及び25であり、一方で、Dementia Rating Scaleは、115、117、122及び126であった。  被験者は、注意力及び概念化の領域においてならびに即時型の短期間記憶の領域で、主として改善を示し、流暢に弁舌を行う点についてはある程度の改善を示した。  対照的に、遅延型の記憶の領域での彼の成績に向上は見受けられず、重篤に欠陥が生じているままであった。  加えて、やはり重篤に欠陥が生じていた新しい学習能力を必要とする仕事については、わずかに改善していることが立証された。
【００５６】
被験者のフォローアップ研究の成果については、入手不能であった。
【００５７】
実施例６
本実施例では、被験者はアルツハイマー病に罹患していると診断された７４歳の女性であり、病気が進行しているために彼女は櫛か鍵かを見分けることもできなかった。  被験者は分別を失っており、失禁し、重篤な高血圧であり、看護婦だった彼女の姉妹から集中的な昼夜兼行の介護を受ける必要があった。  被験者を、実施例１のアミロイドベータ投与単位を毎日４回舌下に投与することにより処置した。  被験者のMini-Mental State Examの初期のスコアは２であり、そして被験者にわずかな改善（引き続いてのスコアが２、３、４、８及び７）が明示されたが、この改善のある程度（すべてではない）は、被験者が呈していた顕著な言語表現の欠損に適応した試験の手順の修正に起因しているのかもしれない。  アミロイドタンパク質組成物を用いた処置に伴って、被験者の血圧は、有意に正常値へ復帰した。  このことにより、アミロイド斑に関わりうるアテローム硬化の症状の処置において、アミロイドタンパク質組成物が有用性を発揮することが示唆される。
【００５８】
Ｂ．動脈硬化性疾患の治療への本発明の材料及び方法の適用
如上の通り、アミロイドタンパク質を用いて処置したアルツハイマー病患者は、痴呆の症状の低減に付随して、このような処置の結果、有意な血圧低下を示す。  前記のようにMelnickらは、アテローム発生におけるヘルペスウイルス（サイトメガロウイルス、ＣＭＶ）についての役割を報告している。  共有の米国特許第4,880,626号において、研究したすべての未処置ＡＩＤＳ患者がＣＭＶを保有していた一方で、インフルエンザワクチン（Fluogen（商標名））ベースの組成物で処置した患者は誰一人としてＣＭＶを保有していないことが認められた。  本出願は、動脈硬化症の病態を呈している患者の治療を遂げるために、抗斑形成アミロイドタンパク質及び抗ウイルス性チメロサールを含んでなる組成物及び方法を教示するものである。  以下の実施例により、請求の範囲に記載した組成物及び方法をヒト被験者に対して使用することを含む、代表的な実施態様を通じて、本発明の例証を提示する。  以下の各実施例について、元の（すなわち、処置前の）血圧は、精度を保証すべく、各々の読み取りの際に約３回数値を採った。  引き続いての測定は、約５回繰り返した。  他に示さない限り、本発明の治療を行う患者には、１日当たり４回、１滴(舌下)が与えられた。  １滴は、本発明の組成物のおよそ0.5ccにあたる。
【００５９】
実施例７
５４歳の男性患者は、140/90の血圧を有するアテローム硬化症を呈していた。  生理食塩水中で１：25の希釈率にて、0.05mLのチメロサール含有インフルエンザワクチン（Fluogen（商標名））に10-9mgのアミロイドタンパク質を含む組成物の舌下滴剤で、患者を処置した。  患者は、前記組成物で処置している期間には他のいかなる薬物療法でも処置されなかった。  加えて、患者は高脂肪食を摂食し続けるように伝えられ、そして、処置期間中は運動しないように伝えられた。  ９０日間、毎日舌下にて処置（１日当たり４回、１滴）した後には、患者の血圧は117/72に下がっていた。  前記組成物を２年間摂取した後に、患者の血圧は115/70に安定した。  処置を継続した後、患者のコレステロールも有意に低下していた。
【００６０】
実施例８
中程度に肥満した４４歳の男性は、140/110の血圧を示していた。  患者を、前記実施例１の通り、本発明の組成物を毎日舌下投与量（１日４回）用いて処置した。  患者は他の薬物療法は受けず、処置期間に際して彼の生活様式を他の点で変更したりもせず、血圧が120/90に下がるという結果が得られた。  処置期間中に生活様式または食事を変化させることなく、前記した継続処置を行なった後、患者の血圧は123/78であった。  血圧は、精度を保証するために各測定に際して５回まで求めたものである。
【００６１】
実施例９
初期（処置前）に血圧が約138/90であった５５歳の女性に対し、本発明の組成物を用いて本発明の方法に従う処置を開始した。  ３カ月の処置期間にわたって、患者の拡張期の血圧は着実に改善傾向を示した。  その時点で、患者は処置を中止し、そして３カ月後には拡張期血圧の増加を示した。  処置を再開すると、拡張期の血圧は再び減少した。  処置の間、患者には実施例１及び２に前記した通りの組成物を投与した。
【００６２】
以下の表１に、処置及び非処置期間中の患者の血圧の部分的な追跡の結果を示す。
【００６３】
【表１】
2004256558.tif 000002
実施例１０
血圧が150/104である５０歳の男性に対し、前記と同様の処置を開始した。
【００６４】
その処置の結果を、以下の表２に表す。
【００６５】
【表２】
2004256558.tif 000003
実施例３及び４に示される結果から、動脈硬化症の症状を減じる上での本発明の組成物の効果が立証されるのみならず、このような症状が本発明の処置の中止に伴って復帰することも立証される。
【００６６】
実施例１１
本発明に従う、前記のとおりの処置を210/110の血圧を有する７６歳の女性に対し、１日当たり４滴を用いて開始した。  １ヶ月間の処置を行った後、患者の血圧は200/90に低下していた。  ９０日処置をした後には、彼女の血圧は160/90に低下していた。
【００６７】
実施例１２
本実施例において、ウサギアテローム硬化症モデルにおいて、アテローム硬化症の処置のために、アミロイドベータタンパク質及びインフルエンザウイルスワクチンのチメロサール含有画分を投与することを含む動物臨床試験を行った。
【００６８】
詳細には、保存剤として0.01％の濃度でチメロサールを含有する、市販のインフルエンザウイルスワクチン（Fluviron（商標名））の30kD画分を単離するためにフィルター遠心技術を使用した。  ここで30,000の公称（nominal）分子量限界を有するウルトラフリー（Ultrafree）低結合性回転フィルターユニットにワクチンを負荷し、すべての液体がフィルターを通過するまで微量遠心にて遠心分離した。  濾液をさらに、5,000の公称分子量の回転フィルターに通過させて濾過し、チメロサールを含有する５kDの濾液画分を得た。
【００６９】
試験にて、１群につき６羽の、アテローム硬化傾向を持つWatanabeウサギの４群を、Ａ）対照として生理食塩水；Ｂ）10-4mgのアミロイドベータタンパク質と５kDチメロサール含有インフルエンザウイルスワクチン画分とを含む本発明の組成物；Ｃ）10-3mgのアミロイドベータタンパク質と５kDチメロサール含有インフルエンザウイルスワクチン画分とを含む本発明の組成物；ならびにＤ）10-4mgのアミロイドベータタンパク質と５kDチメロサール含有インフルエンザウイルスワクチン画分とを含む本発明の組成物で処置した。
【００７０】
ウサギを６カ月処置し、この時点で生存しているウサギを体重増加について調べ、各群につき２羽のウサギを屠殺し、動脈の管腔における斑形成の全体的な病理学的実験によって脈管の開存性を調べた。  本発明の組成物で処置されたウサギは、明瞭な分岐構造（bifurcation）を有しており、対照のウサギよりも少なく且つ小さな斑を呈していた。  これら対照のウサギは、年齢及び性を符合させたものであり、動脈に存在する斑形成及び脈管閉塞を呈していた。  ６カ月にわたっての平均体重増加は、対照のウサギについては690グラムであり、これに比して３つの試験群は、それぞれ450グラム（Ｂ群）；450グラム（Ｃ群）；及び525グラム（Ｄ群）の平均体重増加を示していた。
【００７１】
実施例１３
本実施例において、慢性疲労症候群の処置のために、チメロサール含有組成物を使用して、米国ＦＤＡ Phase 1/2制御二重盲検ヒト臨床試験を行った。  文書で証明された慢性疲労症候群に罹患している３６名の患者について試験を行い、このうち３３名が試験を完遂した。  試験を完遂した被験者のうち、１７名は偽薬で処置され、そして１６名は、0.01％（0.2μg）のチメロサールを含有する0.0020 mL（2μL）のインフルエンザワクチン、0.0004 mL（0.4μL）の風疹ウイルスワクチン及び0.0576 mLの生理食塩水を含む組成物の１滴（0.05 mL）を毎日６回、舌下投与することによって処置された。  １０週間処置を行なった後、被験者に対して評価を行い、薬物または偽薬のいずれかの投与をやめ、そしてさらなる処置は行わずに、４週間後に評価を実施した。
【００７２】
当該技術分野で認められた２つの主たる有効性パラメータ、すなわち、(１)疲労の主観的評価のための目視的アナログスケール、および(２)認識、心理的及び社会的障害に関する３６の質問を含む疲労インパクトスケールによって被験者を評価した。  目視的アナログスケールを使用した結果の分析から、被治療者と対照との間に95％の信頼度で統計上の有意差がないことが示された。  疲労インパクトスケールを使用した結果の分析でも、被治療と偽薬群との間で95％の信頼度にて統計上の有意差は立証されなかった。  しかしながら、偽薬を上回って被治療が有効であることを示す傾向は示唆され、治療効果が示唆されるものであった。
【００７３】
Ｃ．ヘルペス感染の処置に対する本発明の物質及び方法の適用
以下の実施例は、インフルエンザウイルスワクチンの抗−ヘルペス活性画分として、in vitro及びin vivoにおけるチメロサールの抗−ヘルペスウイルス活性を樹立するための実験に関するものである。
【００７４】
典型的には、チメロサールの輸送のための本発明の医薬剤形単位には、液体または固体担体及び有効量のチメロサールが含まれる。  舌下投与のための担体として、生理食塩水が好適に使用できる。  チメロサールの有効量は、約0.05μgから約500μgのチメロサールの範囲であり、約0.5μgから約50μgのチメロサールが好ましく、そして約５μgのチメロサールが特に好ましい。  チメロサールは、好ましくは医薬上容認されうる賦形剤と組み合わせて投与される。  チメロサールは、舌下、皮下及び経皮的経路を包含する標準法によって、液体または固体のいずれかの剤形単位にて投与される。
【００７５】
実施例１４
本実施例では、市販のインフルエンザウイルスワクチン（Fluviron（商標名）及びFluzone（商標名））の30kD画分を単離するために、フィルター遠心分離技術が用いられた。
【００７６】
ここで、30,000の公称分子量限界を有するウルトラフリー低結合性回転フィルターユニットにワクチンを負荷し、すべての液体がフィルターを通過するまで微量遠心にて遠心分離した。  30kDの濾液画分（市販のワクチンに保存剤として0.01％の濃度で存在するチメロサールを含有していた）を用いたin vitroアッセイによれば、A549（ヒト肺悪性腫瘍）細胞のHSV-1及びHSV-2感染を利用した細胞培養アッセイにおける、in vitroでのヘルペスウイルスの完全な阻害が認められた。  得られた画分は、ヒト被験者においても、希釈インフルエンザウイルスワクチンの代わりに用いられ、慢性疲労症候群及び他のヘルペス感染に対する臨床的応答を向上させることが見出された。
【００７７】
実施例１５
本実施例では、Fluvirin（商標名）インフルエンザワクチン由来の５kDの画分を単離する、さらなる濾過が行われた。  やはりチメロサールを含有するこの画分は、実施例１４の細胞培養におけるヘルペスウイルスの生育を阻害するうえで有効であり、実施例１４の30kD画分よりも、in vivoでの投与において臨床上優れているようであった。
【００７８】
以下の実施例１６〜２１にて、この30kDのチメロサール含有インフルエンザワクチン単離物を、ヘルペスウイルス感染に罹患している被験者に投与した。
【００７９】
実施例１６
本実施例では、３８歳の女性が、頭部、頸部、肩、胸及び腕の左側に、突発的な疼痛の侵襲を呈し、５日間罹患していた。  彼女は、左足背側にも同様の疼痛を訴えていた。
【００８０】
検査によって、左上腕の四半尺（quarter-sized）の赤色領域に３つの丘疹病変が明らかになった。  帯状ヘルペスへの罹患が疑われた。  実施例１５の30kDのチメロサール含有画分を、約５μgの投薬量にて、毎日４回、１滴（0.05 mL）ずつ舌下に投与した。  被験者は、チメロサール含有画分を投与した後、３０分から６０分で、痛みが95％減少したと報告した。  被験者には、良好な状態となるよう、組成物１滴を１日４回用いて、その後１週間処置を継続した。
【００８１】
実施例１７
本実施例では、回帰性の帯状ヘルペスの病歴を持つ６６歳の女性が、帯状ヘルペスの急襲の初期段階にあった。  実施例１６の組成物を舌下に１滴投与することで、不快感が取り除かれた。  被験者は、２４時間後に２滴目を摂取し、その後２週間疼痛や不快感にさらに苛まれることはなかった。
【００８２】
実施例１８
本実施例では、１９歳の男性が、およそ５日前に、咽頭炎、４＋の疲労、リンパ節腫脹（４＋頸部）、頭痛、めまい、脾腫の症状を伴って、急性伝染性単球増加症を発症する病歴を呈していた。  被験者に実施例１６の組成物0.2 mLを１回皮下注射して処置すると、３０分以内に60〜70％の病状改善が報告された。  ７時間後に、被験者は90％は気分が良くなっていると報告した。
【００８３】
実施例１９
本実施例では、３０歳の女性に、月経周期の２３日目に口腔単純ヘルペスと予測される発症が認められた。  ヘルペスの発症に伴っていたのは、抗精神病薬を要するほどに重篤な月経前症候群の症状であった。  ヘルペス発症の最初の兆候（特有の病変発現領域での口唇の感作である）の際に、実施例１６の組成物を舌下に２滴を患者に投与した。  患者の口中または口表面に口唇発疹を呈することは数年来初めて認められず、月経前症候群も呈していなかった。
【００８４】
実施例２０
数週間継続する病歴を有する６３歳の女性被験者は、口唇に第４日目のＨＳＶ−Ｉ病変を呈していた。  実施例１６の組成物が舌下に１滴投与され、３０分以内に被験者は極めて状態が改善されたと報告した。  １日に組成物を２滴投与すると、病変は２日で消散した。
【００８５】
実施例２１
５０歳以上の年齢の男性は、顕著な無気力、心的混沌（mental fogginess）及び生活の質の貧困化を有する慢性疲労症候群を呈していた。  実施例１６の組成物を２滴被験者に舌下投与し、そして被験者は、数年来初めて活力の増大と心的明晰感をもって、70％を越える病状の改善を報告した。  ３週間後にも被験者は組成物を毎日２滴投与して、良好な状態を継続していた。
【００８６】
実施例２２
本実施例では、５kDのインフルエンザウイルスワクチン画分の抗−ヘルペス活性成分を判定するために様々な試験を行い、チメロサールが抗−ヘルペス効果を有することが判明する結果が得られた。  精製チメロサールを用いたin vitroアッセイで、ヘルペスウイルスに対する活性が立証されている。  興味深いのは、試験管内でチメロサールをヘルペスウイルスと混合し、次いで、感受性細胞にそれを導入すると、ウイルスの繁殖は阻害されないということである。  このことから、チメロサールの抗−ヘルペスウイルス活性は、ウイルスに対する直接的な作用によるのではないことが示唆される。  さらなる研究によって、チメロサールの分解産物であるチオサリチル酸及びジチオ二安息香酸は、in vivoで抗ウイルス活性を提供しないが、ジチオ二安息香酸はin vitroでの抗−ヘルペスウイルス活性を示すことが、明らかになっている。
【００８７】
実施例２３
本実施例では、慢性疲労症候群に罹患している１６名の被験者に対して、１カ月間にわたって、毎日、Ａ、Ｂ及びＣと命名した３種の組成物を舌下投与して、二重盲検試験を行った。  各被験者に、毎日４から６回、１滴（0.05 ml）の舌下投与処置を施した。  組成物Ａは、生理食塩水中に容量当たり0.0004重量％のチメロサール（１滴当たり0.2μg）と、１滴当たり3.2×10-7単位のノイラミニダーゼを含んでいた。  組成物Ｂは、生理食塩水中に容量当たり0.0004重量％のチメロサール（１滴当たり0.2μg）を、0.00032 mL（0.32μL）の風疹ウイルスワクチン（Meruvax、Merck & Co.）と共に含んでいた。  組成物Ｃは、生理食塩水中に容量当たり0.0004重量％のチメロサール（１滴当たり0.2μg）のみを含んでいた。  患者の自己評価報告によって、以下のパラメータを測定した：疲労の総体レベル；痛みの総体レベル；突発性の重篤さ（severity of flare-ups）；筋肉痙攣；頭痛；警戒心（mental alertness）及び記憶；ならびに全体または平均的睡眠。  これらのパラメータの評価により、組成物Ａ及びＢはＣＦＳ症候群の重篤さに有意な改善効果を呈することが判った。  さらに、組成物Ｂで処置された１名の被験者の結果を削除すれば（この療法とほぼ同時に開始及び終了された理学療法が、その被験者についての結果に不利な効果をもたらしていたかもしれないので）、チメロサールと風疹ウイルスワクチンとを併用した組成物Ｂで処置された残りの被験者では、慢性疲労症候群の症状の重篤さが最も低下していることが明らかになった。
【産業上の利用可能性】
【００８８】
実施例の開示から明らかなように、本発明は、ヘルペスウィルス感染の症状を緩和するための手段として極めて有用である。