(57)【要約】【課題】メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）に対する新しい抗菌剤の開発すること、特に、開発されたポリ酸に比べ、より人体への毒性が低く、より高い抗ＭＲＳＡ効果をもち、更にβ―ラクタム抗生物質とより高い相乗効果をもつポリ酸を開発すること。【解決手段】以下の一般式（Ｉ）を有する化合物：Ｘ１７［Ｍ６（Ｈ２Ｏ）２（ＡｓＷ６Ｏ２６）（ＡｓＷ９Ｏ３４）２］・ＹＨ２Ｏ    （Ｉ）（上記式中、Ｘは陽イオン、ＭはＭｎ、Ｃｏ、及びＺｎから成る群から選択される同一又は二種以上の金属元素、Ｙは０〜５０の整数）、該化合物を有効成分として含有する薬剤、特に、抗生物質耐性黄色ブドウ球菌増殖抑制剤及び細胞壁合成酵素ＰＢＰ２’活性阻害剤を提供する。【選択図】      図５
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の一般式（Ｉ）を有する化合物：
Ｘ１７［Ｍ６（Ｈ２Ｏ）２（ＡｓＷ６Ｏ２６）（ＡｓＷ９Ｏ３４）２］・ＹＨ２Ｏ    （Ｉ）
（上記式中、Ｘは陽イオン、ＭはＭｎ、Ｃｏ、及びＺｎから成る群から選択される同一又は二種以上の金属元素、Ｙは０〜５０の整数）。
【請求項２】
一般式（Ｉ）において、Ｍ６がＭｎ６である、請求項１記載の化合物。
【請求項３】
一般式（Ｉ）において、Ｍ６がＣｏ６である、請求項１記載の化合物。
【請求項４】
一般式（Ｉ）において、Ｍ６がＺｎ６である、請求項１記載の化合物。
【請求項５】
一般式（Ｉ）において、Ｍ６がＭｎ３Ｃｏ３である、請求項１記載の化合物。
【請求項６】
一般式（Ｉ）において、ＸがＨ＋、Ｎａ＋、Ｋ＋、Ｌｉ＋、ＮＨ４＋、ＣＨ３ＮＨ３＋、及び（ＣＨ３）２ＮＨ２＋、から成る群から選択される同一又は二種以上の陽イオンである、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７】
ＸがＮａ＋である、請求項６記載の化合物。
【請求項８】
一般式（Ｉ）において、Ｙが４５である、請求項１〜７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物を有効成分として含有する薬剤。
【請求項１０】
抗生物質耐性黄色ブドウ球菌増殖抑制剤である、請求項９記載の薬剤。
【請求項１１】
抗生物質耐性黄色ブドウ球菌がメチシリン耐性黄色ブドウ球菌である、請求項１０記載の黄色ブドウ球菌増殖抑制剤。
【請求項１２】
細胞壁合成酵素ＰＢＰ２’活性阻害剤である、請求項９記載の薬剤。
【請求項１３】
請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物を投与することから成る、抗生物質耐性黄色ブドウ球菌による感染症の治療方法。
【請求項１４】
請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物を投与することから成る、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌による感染症の治療方法。
【請求項１５】
請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物をβ―ラクタム抗生物質と併用することを特徴とする、請求項１３又は１４に記載の治療方法。
【請求項１６】
β―ラクタム抗生物質がペニシリン系抗生物質である、請求項１５に記載の治療方法。
【請求項１７】
ペニシリン系抗生物質がオキサシリン及び／又はペニシリンＧである、請求項１６に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、抗生物質（例えば、メチシリン）耐性黄色ブドウ球菌に対する優れた増殖抑制活性を示すと共に、毒性が低く、且つ、β―ラクタム系抗生物質との併用による相乗効果が見られる、新規な砒素含有ポリタングステン酸，並びに、該化合物を利用する各種薬剤及び治療方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
［黄色ブドウ球菌とβ−ラクタム項抗生物質］
ブドウ球菌はグラム陽性、カタラーゼ陽性、通性嫌気性の直径０．５〜１．５μｍの球菌でブドウの房状の配列をとり、人や動物の皮膚、粘膜などの常在菌である。ブドウ球菌の細胞の内圧は浸透圧にして約２０気圧であり・高い内圧による細胞破裂を防ぐために堅固な細胞壁が保持されている。そして、細胞内では代謝がさかんに行われており、たいへん増殖力が高い。
【０００３】
病原性の強い菌にしばしばみられる生化学的性質としてコアグラーゼ産生性とマンニット分解性があり、両反応が陽性の菌は病原性が強く黄色ブドウ球菌  （Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ）と分類されている。黄色ブドウ球菌は主として皮膚の化膿性感染症をおこす菌として古くから知られている。そこで、けがなどで皮膚に傷がつくと感染をおこし、溶血毒、ロイコシジン、コアグラーゼ、プロテアーゼ、ＤＮａｓｅ、ＴＳＳＴ−１などの菌体外毒素をつくって、化膿性疾患や食中毒、毒素性ショック症候群をおこす。
【０００４】
ペニシリン系およびセフェム系（セファロスポリン誘導体）はその分子中にβ―ラクタム環と呼ばれる化学構造を有するのでβ―ラクタム抗生物質と総称される（図１）。β―ラクタム抗生物質は細胞壁の合成を阻害して細菌を殺してしまう作用をもっている。選択毒性が高く、各種のグラム陽性菌や陰性菌に幅広い抗菌活性を示すため、臨床的にも広く使用されている。
【０００５】
黄色ブドウ球菌は内圧が高いため、細胞質膜の外側に細胞全体を覆うように細胞壁が存在する。菌が生きて増殖していくためには、この細胞壁を絶えず合成していかなければならない。細胞壁は三次元の鎖の組み合わせで出来ている。一次元目の鎖は２種類の糖（ＧｌｃＮＡｃ：Ｎ−ａｃｅｔｙｌｇｌｕｃｏｓａｍｉｎｅ，ＭｕｒＮＡｃ−ｐｅｎｔａｐｅｐｔｉｄｅ：  Ｎ−ａｃｅｔｙｌｍｕｒａｍｙｌ  ｐｅｎｔａｐｅｐｔｉｄｅ）が交互に並んでおり、二次元目の鎖はアミノ酸４個（Ｌ−Ａｌａ−Ｄ−Ｇｌｕ−Ｌ−Ｌｙｓ−Ｄ−Ａｌａ）から成るテトラペプチド鎖であり、そして、三次元目の鎖はグリシンが５つ連なったペンタグリシンである。細胞壁形成は次のように成される。細胞質内で作り出されたムレインモノマー前駆体（ＭＭＰ：Ｍｕｒｅｉｎ  Ｍｏｎｏｍｅｒ  Ｐｒｅｃｕｒｓｏｒ）が、細胞膜を通過する間にムレインモノマー（ＭＭ：Ｍｕｒｅｉｎ  Ｍｏｎｏｍｅｒ）となって細胞膜の外に輸送される（図２）。その時、ＭＭの糖の部分  （ＧｌｃＮＡｃとＭｕｒＮＡｃ−ｐｅｎｔａｐｅｐｔｉｄｅ）はＴＧ（ｔｒａｎｓｇｌｙｃｏｓｙｌａｓｅ）とペニシリン結合タンパク質（ＰＢＰ：Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ  Ｂｉｎｄｉｎｇ  Ｐｒｏｔｅｉｎ）によって連結される。そして、この糖鎖のアミノ酸（Ｌ−Ａｌａ−Ｄ−Ｇｌｕ−Ｌ−Ｌｙｓ−Ｄ−Ａｌａ−Ｄ−Ａｌａ）から成るペンタペプチドと別の糖鎖のグリシン鎖がＰＢＰによって連結される際、ペンタペプチドの先端のＤ一アラニンが切り離され、ペンタグリシンの端と結合する（図３）。この過程は架橋と言われ、そのためＰＢＰは架橋酵素とも言われる。ＰＢＰはＤ一アラニルーＤ一アラニンを認識し、ペンタグリシンと連結させる役割を果たしている。ところが、Ｄ一アラニルーＤ一アラニンの２つのアミノ酸構造とβ―ラクタム抗生物質はとても類似した構造をしている。そのため、β―ラクタム抗生物質が入ってくるとＰＢＰは誤ってβ―ラクタム抗生物質と結合してしまい、細胞壁の合成が阻害される。細胞壁が合成されなくなると、高い内圧により細菌は破裂してしまう。これがβ―ラクタム抗生物質の作用機構である。
【０００６】
［メチシリン耐性黄色ブドウ球菌］
１９４１年のβ―ラクタム抗生物質であるペニシリンＧの実用化以来、黄色ブドウ球菌による感染症はしばらく克服されていたが、１９５０年頃にはペニシリンを分解するペニシリナーゼという酵素を産出する黄色ブドウ球菌が蔓延し、その効果は低下していった。１９６０年には、ペニシリナーゼによって分解されない化学構造をもった半合成ペニシリンであるメチシリンが開発された。しかしながら、その翌年にはメチシリンの開発国であるイギリスで、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ：Ｍｅｔｈｉｃｉｌｌｉｎ−Ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  Ｓｔａｐｈｙ１ｏｃｏｃｃｕｓ  Ａｕｒｅｕｓ）が世界で初めて発見され、その後３０年以上の間、１７０種以上開発された抗生物質の全てに耐性化してきた。日本でＭＲＳＡが問題とされるようになったのは１９８０年代の初頭からである。その後１９９２年から１９９３年にかけてのＭＲＳＡのサーベイランス結果では、臨床分離された黄色ブドウ球菌の約６０％がＭＲＳＡであると報告され、１０年余りの間に急速に全国の病院に蔓延していったことが示されている。ＭＲＳＡは唯一バンコマイシン（糖ペプチド型抗菌薬）のみ耐性化しなかったが、１９９６年に世界で初めて日本で、バンコマイシン耐性黄色ブドウ球菌（ＶＲＳＡ：Ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ−Ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  Ａｕｒｅｕｓ）が臨床から検出され、新たな院内感染への危機感が高まっている。ＶＲＳＡ株はバンコマイシンの阻害から逃れるための新たな因子を獲得したというよりも、細胞壁の合成量を増強して肥厚した細胞壁にバンコマイシンをトラップして消費し、バンコマイシンが細胞壁に到達するのを防ぎ、生育阻害から免れていることが明らかとなっている。
【０００７】
基本的には、ペニシリンをはじめとするβ―ラクタム抗生物質は、細胞壁合成酵素であるＰＢＰ（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ  Ｂｉｎｄｉｎｇ  Ｐｒｏｔｅｉｎ）に結合し、細胞壁の網目構造の完成を妨げ溶菌させる。ペニシリンやアンピシリンは、黄色ブドウ球菌が産出するβ―ラクタマーゼにより不活性化されるが、メチシリンは分解されないため、ＰＢＰによる細胞壁の合成を阻害することが出来る。ところが、ＭＲＳＡは本来所有している４種類のＰＢＰ（ＰＢＰ１〜４）以外に、β―ラクタム抗生物質に対して低親和性である分子量約７８ｋＤａのＰＢＰ２’と呼ばれる細胞壁合成酵素をもっており、ＭＲＳＡの耐性の本質はこのことによって説明される（Ｙ．，Ｕｔｓｕｉ  ａｎｄ  Ｔ．  Ｙｏｋｏｔａ，  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．，  ２８，  ３９７  （１９８５））。しかしながら、ＭＲＳＡの耐性レベルは必ずしもＰＢＰ２’量と相関しているわけではない。ＰＢＰ２’以外にも耐性の原因となっている因子がいくつかあり、ｆｅｍ（ｆａｃｔｏｒ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ｍｅｔｈｉｃｉｌｌｉｎ  ｒｅｓｉｓｔａｎｔ）遺伝子（ｆｅｍＡ，Ｂ等）やＳｉｇｍａ因子などのいくつか報告されているが確定的なことはまだ明らかにされていない。
【０００８】
ＰＢＰ２’は本来黄色ブドウ球菌には存在しない外来性の遺伝子ｍｅｃＡによりコードされている。ｍａｃＡ遺伝子の上流には逆方向に２つの遺伝子群ｍｅｃＩ  （レプレッサータンパクＭｅｃＩをコード）とｍｅｃＲ１（シグナル伝達タンパクＭｅｃＲｌをコード）が存在する。β―ラクタム抗生物質との結合により活性化されたＭｅｃＲｌは、ｍｅｃＡのプロモーターに結合して転写を制御しているＭｅｃＩに働き、ＭｅｃＩによる制御を解除させると考えられている。すなわちＰＢＰ２’は薬剤存在下で誘導産生されるペニシリン結合タンパク質であり、これにより薬剤耐性となる。しかしながら、現在臨床から分離されるほとんどのＭＲＳＡ株においてｍｅｃＩ遺伝子が欠如しており、ｍｅｃＩを保有しているｐｒｅＭＲＳＡはほとんどみることはない。そこで調査検討の結果、ｍｅｃＡ遺伝子の転写にはペニシリナーゼプラスミド上のｂｌａ調節遺伝子（ｂｌａＲ１とｂｌａ１）が関与していることが報告されている。このｂｌａ調節遺伝子によってＰＢＰ２’量が左右されるばかりか、基質特異性の広いｂｌａＲ１が関与することによってほとんどのβ―ラクタム抗生物質を感知し、ＰＢＰ２’を誘導発現して耐性化している。これを誘導型と言い、常にＰＢＰ２’を産出しているものを構成型と言う。
【０００９】
以前までｍｅｃＡ遺伝子のブドウ球菌間の伝達機序は全く不明だったが、自由に移動することの出来るブドウ球菌カセット染色体（ＳＣＣｍｅｃ：Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃａｌ  Ｃａｓｓｅｔｔｅ  Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ  ｍｅｃ）上からブドウ球菌本体の染色体に組み込まれたり、切り出されたりすることが順天堂大学医学部細菌学教室グループにより解明された。しかしながら、実際的な菌株間での伝達機序は今もって不明である。また近年、ゲノム解読技術の進歩により黄色ブドウ球菌の全ゲノムが解読された（Ｋ．  Ｈｉｒａｍａｔｓｕ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｔｈｅ  Ｌａｎｃｅｔ，  ３５７  （２００１））。
【００１０】
［ポリ酸］
ポリ酸は、前期遷移金属元素（Ｍｏ（ＶＩ），Ｗ（ＶＩ），Ｖ（ＶＩ）等）により構成されている金属酸化物クラスターで、金属原子等のＯ原子が通常４又は６配位した四面体（ＭＯ４）または八面体（ＭＯ６）を基本単位として、これが稜、頂点、又は面を共有し、多数縮合した構造をとっている。金属の種類、結合様式の相異により多種多様な構造を示し、それとともに物理化学的性質も変化する。代表的なポリ酸の構造として、Ｋｅｇｇｉｎ型、β‐ｔｒｉｖａｃａｎｔ  Ｋｅｇｇｉｎ型、Ｗｅｌｌｓ−Ｄａｗｓｏｎ型、Ａｎｄｅｒｓｏｎ型などがあり、その構造を図４に示す。
【００１１】
ポリ酸はその多様な構造、酸塩基特性、多電子酸化還元特性（電気化学的・光化学的）から広く応用が検討されており、抗ウィルス、抗腫瘍、抗ＨＩＶといった生物化学分野から、触媒、蛍光体、電子素子といった分野にまで幅広く応用研究が進められている。
【００１２】
ポリ酸の生理活性に関する研究は早くから行われてきている。ＤＮＡ−とＲＮＡ−ポリメラーゼ、逆転写酵素に対する阻害作用、抗ウィルス作用などが報告されている。エイズ化学療法剤の研究初期に治療薬として用いられた（ＮＨ４）１７Ｈ［ＮａＳｂ９Ｗ２１Ｏ８６］・１４Ｈ２Ｏ（ＨＰＡ２３）は、以前からレトロウィルス（ＲＮＡウィルス）逆転写酵素の阻害剤として知られており、臨床段階では若干ＨＩＶ−１の増殖阻害が認められたが、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでは効果的な抗ＨＩＶ−１活性を示さなかった。また、Ｋ７［ＰＴｉ２Ｗ１０Ｏ４０］・６Ｈ２Ｏ等のケギン（Ｋｅｇｇｉｎ）構造を有するポリ酸が、ＲＮＡウィルスであるＨＩＶ−１やＤＮＡウィルスであるヘルペス  （ＨＳＶ−１、ＨＳＶ−２）に対し、抗ウィルス活性を示すことが見出されている。
【００１３】
ポリモリブデン酸［Ｍｏ７Ｏ２４］６−および［ＭＭｏ６Ｏ２４］ｎ−（Ｍ＝Ｉｒ，Ｐｔ，Ｃｏ，Ｃｒ等）がＭｅｔｈ−Ａサルコーマ、ＭＭ−４６アデノカルシノーマ、Ｂ−１６メラノーマ、ＭＸ−１人乳癌、Ｃｏ−４人結腸癌を移植したマウスに対して固形腫瘍の増殖抑制作用を示すことが報告されている。この固形腫瘍に対して強い増殖抑制作用を示すヘプタモリブデン酸イオン［Ｍｏ７Ｏ２４］６−と組み換えＤＮＡ実験でベクターとして用いられるｐＢＲ３２２プラスミドＤＮＡとの混合溶液に［Ｍｏ７Ｏ２４］６−のＯ→Ｍｏ  ＬＭＣＴ吸収帯への紫外線光照射を行なうと、プラスミドＤＮＡを切断させることが報告されている。
【００１４】
タングステン酸とリン酸の混合溶液を９０℃に加熱後、酸性（ｐＨｌ〜２）にして再び加熱し、さらに中性することにより得られるファクターＴと呼ぱれる化合物が、院内感染で問題となっているメチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）において、β―ラクタム抗生物質の抗菌力を回復させることが報告されている（Ｙ．  Ｔａｊｉｍａ，  Ｚ．  Ｎａｇａｓａｗａ  ａｎｄ  Ｊ．  Ｔａｄａｎｏ，  Ｍｉｃｒｏｂｉｌｏ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．，  ３７，  ６９５  （１９９３）：非特許文献１）。寒天培地中でのこの構造は不明だがポリタングステン酸が同様の方法で合成することができるためポリ酸を形成している可能性がある。そこで、様々なポリタングステン酸のＭＲＳＡにおける抗菌活性を検討した結果、特にケギン構造を有するポリタングステン酸がβ―ラクタム抗生物質の抗菌力を回復させることを本発明者等が明らかにした（Ｎ．  Ｆｕｋｕｄａ，  Ｔ．  Ｙａｍａｎｅ  ａｎｄ  Ｙ．  Ｔａｊｉｍａ，  Ｂｉｏｌ．  Ｐｈａｒｍ．  Ｂｕｌｌ．，  ２２，  ４６３  （１９９９）：非特許文献２）。
【００１５】
【非特許文献１】
Ｙ．  Ｔａｊｉｍａ，  Ｚ．  Ｎａｇａｓａｗａ  ａｎｄ  Ｊ．  Ｔａｄａｎｏ，  Ｍｉｃｒｏｂｉｌｏ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．，  ３７，  ６９５  （１９９３）
【非特許文献２】
Ｎ．  Ｆｕｋｕｄａ，  Ｔ．  Ｙａｍａｎｅ  ａｎｄ  Ｙ．  Ｔａｊｉｍａ，  Ｂｉｏｌ．  Ｐｈａｒｍ．  Ｂｕｌｌ．，  ２２，  ４６３  （１９９９）
【非特許文献３】
Ｐ．Ｊ．  Ｄｏｍａｉｌｌｅ  ａｎｄ  Ｗ．Ｈ．Ｋｎｏｔｈ，  Ｉｎｏｒｇ．  Ｃｈｅｍ．，  ２２，  ８１８  （１９８３）
【００１６】
【発明が解決しようとする課題】
近年、抗生物質が頻繁に用いられるようになったことに伴い、病原菌の薬剤耐性が大きな問題となっている。特にメチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）は院内感染の原因菌として重要である。この問題を克服するためには新しい抗菌剤の開発はもちろんのこと、現在臨床で使用されている抗生物質の抗菌効果を回復させる化合物の開発も重要である。更に、ポリタングステン酸のＭＲＳＡに対する抗菌活性メカニズムを解明することは、このようなポリ酸の新たな生理活性を見出し、その医薬分野での応用を図る上で、大いに期待される。
【００１７】
そこで、本発明者は、今までに開発されたポリ酸に比べ、より人体への毒性が低く、より高い抗ＭＲＳＡ効果をもち、更にβ―ラクタム抗生物質とより高い相乗効果をもつポリ酸を開発し、並びにそのメカニズムを解明することを目的とし、鋭意研究を重ねた。
【００１８】
【課題を解決するための手段】
まず、様々なＭＲＳＡ株に対する最小発育阻止濃度（ＭＩＣ：Ｍｉｎｉｍｕｍ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ  Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ）、ならびにβ―ラクタム抗生物質（オキサシリン、ペニシリンＧ）との相乗効果を調べ、その指標であるＦｒａｃｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ    Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ（ＦＩＣ）ｉｎｄｅｘを求めた。次に、毒性実験にヒト癌細胞株（ＭＫＮ−１，ＭＫＮ−４５，ＭＣＦ７）を用いてのｉｎ  ｖｉｔｒｏにおけるポリ酸の細胞毒性を調べた。更に、ポリ酸が誘起する相乗効果の要因として可能性が高いＭＲＳＡ中の因子（ＰＢＰ２’，β―ラクタマーゼ）のうち、ポリ酸によるβ―ラクタマーゼの抑制について注目し相乗効果との関連を調べた。その結果、以上の研究から得られた知見に基づき本発明を完成させた。
【００１９】
即ち、本発明は、以下の一般式（Ｉ）を有する化合物：
Ｘ１７［Ｍ６（Ｈ２Ｏ）２（ＡｓＷ６Ｏ２６）（ＡｓＷ９Ｏ３４）２］・ＹＨ２Ｏ    （Ｉ）
（上記式中、Ｘは陽イオン、ＭはＭｎ、Ｃｏ、及びＺｎから成る群から選択される同一又は二種以上の金属元素、Ｙは０〜５０の整数）に係る。
【００２０】
本発明の化合物における好適例として、上記一般式（Ｉ）において、Ｍ６がＭｎ６、Ｃｏ６、Ｚｎ６、又はＭｎ３Ｃｏ３である化合物を挙げることが出来る。
更に好適例として、一般式（Ｉ）において、ＸがＨ＋、Ｎａ＋、Ｋ＋、Ｌｉ＋、ＮＨ４＋、ＣＨ３ＮＨ３＋、及び（ＣＨ３）２ＮＨ２＋、から成る群から選択される同一又は二種以上の陽イオンであり、特に、ＸがＮａ＋である化合物を挙げることが出来る。
或いは、その他の好適例として、一般式（Ｉ）において、Ｙが４５である化合物を挙げることが出来る。
【００２１】
上記一般式（Ｉ）で表わされる本発明の化合物は、以下の実施例において示されるように、抗生物質耐性黄色ブドウ球菌、特に、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌に対して、例えば、増殖抑制作用（抗菌活性）のような優れた薬理作用を有する。従って、本発明は、該化合物を有効成分として含有する薬剤、例えば、抗生物質耐性黄色ブドウ球菌増殖抑制剤にも係る。
【００２２】
更に、以下の実施例に示されるように、本発明化合物の抗生物質耐性黄色ブドウ球菌に対する優れた増殖抑制作用は、細胞壁合成酵素であるＰＢＰ２’の活性を阻害することにより発揮されていると考えられるので、本発明は、該化合物を有効成分として含有する細胞壁合成酵素ＰＢＰ２’活性阻害剤にも係る。尚、本発明において、「ＰＢＰ２’の活性を阻害する」とは、単にＰＢＰ２’の活性自体をを阻害することに加えて、（１）ＰＢＰ２’とβ―ラクタム抗生物質の親和性を高めること、（２）ＰＢＰ２’の産生を抑制すること、及び、（３）ＰＢＰ２’の反応を阻害すること等の態様も含むものである。
【００２３】
又、本発明は、上記本発明化合物を投与することから成る、抗生物質耐性黄色ブドウ球菌による感染症の治療方法に係る。
更に、以下の実施例に示すように、本発明化合物をβ―ラクタム抗生物質と併用することによって、抗生物質耐性黄色ブドウ球菌に対して優れた相乗効果が認めれた。従って、本発明は、本発明化合物をβ―ラクタム抗生物質と併用することを特徴とする、抗生物質耐性黄色ブドウ球菌による感染症の治療方法にも係る。
【００２４】
ここで、β―ラクタム抗生物質は当業者に公知の任意の物質であり、例えば、既に記載したようなペニシリン系及びセフェム系抗生物質がある。ペニシリン系抗生物質の代表的例としてはオキサシリン及びペニシリンＧ等を挙げることが出来る。
【００２５】
【発明の実施の形態】
本発明化合物は、以下の実施例に従い当業者が容易に調製することが出来る。
【００２６】
本発明に用いられる化合物を有効成分として含有する各種薬剤を用いて治療する際の患者への投与経路は特に限定されず、経口投与若しくは非経口投与（たとえば、筋肉内投与、静脈内投与、皮下投与、腹腔内投与、経皮投与、鼻腔などへの粘膜投与、または吸入投与など）のいずれでもよい。
【００２７】
本発明方法における活性成分の有効な投与量は、症状の程度、患者の年齢、性別、体重、感受性差、投与方法、投与の時期、間隔、医薬製剤の性質、調剤などを総合的に勘案して適宜選択することができる。投与量は、特に限定されないが、通常成人１日あたり約０．０１〜２０００ｍｇ、好ましくは約１〜１０００ｍｇであり、より好ましくは１０〜５００ｍｇであり、これを、通例、１日１〜４回にわけて投与する。１日１回投与の場合の投与量合計が０．０１ｍｇ以下では予防治療効果が得られず、１日４回投与での投与量合計が２０００ｍｇ以上では、薬剤の血中濃度が上昇し、発疹等を引き起こすおそれがある。
【００２８】
本発明の各薬剤は、当業者に公知の任意の方法に従って製造することが出来る。その形態は投与経路等に応じて適宜選択することが出来、例えば、経口投与のための製剤としては、たとえば、錠剤、カプセル剤、細粒剤、粉末剤、顆粒剤、口腔内崩壊錠、液剤、シロップ剤などが挙げられ、非経口投与のための製剤としては、たとえば、注射剤、点滴剤、坐薬、吸入剤、経皮吸収剤、経粘膜吸収剤、点鼻剤、点耳剤などが挙げられる。尚、これら薬剤にはその形態等に応じて、製薬業界において通常使用されるような、当業者に公知の任意の各種補助物質を適宜含むことが出来る。又、これら薬剤中の活性成分の含有量は、その形態等にもよるが、通常、０．１〜１０重量％程度である。
【００２９】
【実施例】
以下の実施例で本発明をさらに詳細に説明するが、本発明の技術的範囲はこれら実施例に限定されない。
【００３０】
［ポリ酸の合成］
以下の実施例で使用するポリ酸は以下の通り調製した。尚、これらの合成に使用した試薬は、和光純薬工業（株）やＳｉｇｍａの特級品または一級品を精製することなくそのまま使用した。
【００３１】
Ｋ７［ＰＴｉ２Ｗ１０Ｏ４０］・６Ｈ２０（ＰＭｌ９）
既に報告されている方法（非特許文献３）を用いて以下のとおり合成した。２００ｍｌの蒸留水に６０ｇのＮａ２ＷＯ４・２Ｈ２Ｏおよび１２ｇのＮａＨ２ＰＯ４・２Ｈ２Ｏを完全に溶解した。この溶液に撹伴しながらＴｉＣｌ４を加えた。その後、この溶液を３００ｍ１ナス型フラスコに移し３０分程度還流し、室温まで冷却し、析出した白色沈殿物（大部分が酸化チタン）をろ別した。このろ液にＫＣｌを６０ｇ加え、Ｋ７［ＰＴｉ２Ｗ１０Ｏ４０］・６Ｈ２０の粗結晶を得た。この結晶を１５０ｍｌの蒸留水で再結晶した。結晶の同定はＩＲスペクトルにより行なった。
【００３２】
Ｎａ１７［Ｍ６（Ｈ２Ｏ）２（ＡｓＷ６Ｏ２６）（ＡｓＷ９Ｏ３４）２］・４５Ｈ２Ｏ（Ｍ６＝Ｍｎ６，Ｃｏ６，Ｚｎ６，Ｍｎ３Ｃｏ３）
５９．５ｇのＮａ２ＷＯ４・２Ｈ２Ｏと６．２４ｇのＮａ２ＨＡｓＯ４・７Ｈ２Ｏを６０ｍｌの蒸留水に溶解し約８０℃に加熱した。その溶液に６ＭＨＣｌを６０ｍｌ加え、これにｉ）  Ｍ６＝Ｍｎ６；５．９４ｇのＭｎＣ１２・４Ｈ２Ｏ      ｉｉ）  Ｍ６＝Ｃｏ６；８．７３ｇのＣｏ（ＮＯ３）２・６Ｈ２０    ｉｉｉ）  Ｍ６＝Ｚｎ６；８．９１ｇのＺｎ（ＮＯ３）２・６Ｈ２０    ｉｖ）  Ｍ６＝Ｍｎ３Ｃｏ３；２．９７ｇのＭｎＣｌ２・４Ｈ２０と４．３７ｇのＣｏ（ＮＯ３）２を溶解した水溶液３０ｍｌを加えた。さらに、濃ＮａＯＨ水溶液を徐々に加え、溶液のｐＨを７〜８に調整した。析出した沈殿物をろ別し、ろ液を室温で放置し、粗結晶を得た。再結晶を行なうために、この粗結晶１．Ｏｇを蒸留水３０ｍ１に溶解し、１．ＯｇのＮａＣ１を加えた後、懸濁液をろ別した。そのろ液を室温で一日放置し、Ｎａ１７［Ｍ６（Ｈ２Ｏ）２（ＡｓＷ６Ｏ０２６）（ＡｓＷ９Ｏ３４）２］・４５Ｈ２Ｏ  （Ｍ６＝Ｍｎ６，Ｃｏ６，Ｚｎ６，Ｍｎ３Ｃｏ３）の結晶を得た。
尚、その他のポリ酸は既報に従い、本発明者等が合成した。
【００３３】
【実施例１】
［ＭＲＳＡにおけるポリ酸の抗菌効果］
本発明に係る新規な砒素含有ポリタングステン酸化合物であるＮａ１７［Ｍ６（Ｈ２Ｏ）２（ＡｓＷ６Ｏ２６）（ＡｓＷ９Ｏ３４）２］４５Ｈ２Ｏ（Ｍ６＝Ｍｎ６（１），Ｃｏ６（２），Ｚｎ６（３），Ｍｎ３Ｃｏ３（４））（これら化合物の構造を図５に示す）、これらと同じ元素から構成されているが構造の異なる（ケギン構造）ポリ酸Ｎａ１０［Ｃｏ２ＷＯ（Ｈ２Ｏ）３（ＡｓＷ９Ｏ３３）２］・ｎＨ２Ｏ（この化合物の構造を図６に示す）、既に記載したように以前本発明者等により抗菌効果があることが明らかとされたポリ酸Ｋ７［ＰＴｉ２Ｗ１０Ｏ４０］・６Ｈ２Ｏ（ＰＭｌ９）、並びに上記化合物（１），（２），（３），（４）の主原料であるＮａ２ＨＡｓＯ４・７Ｈ２０とＮａ２ＷＯ４・２Ｈ２０を用い、ＭＲＳＡに対する抗菌活性をＭＩＣ及びβ―ラクタム抗生物質（オキサシリンとペニシリンＧ）との相乗効果を指標として検討した。
【００３４】
［細胞］
ペニシリン系抗生物質であるオキサシリンとペニシリンＧ（図７）はＳｉｇｍａから購入した。菌体は表１に示す５種類を用いた。メチシリン耐性（ＭＲ）、感受性（ＭＳ）かは、細胞壁合成酵素（ＰＢＰ２’）の有無で区別され、該酵素を有する菌がＭＲＳＡであり、無い菌がＭＳＳＡである。
【００３５】
【表１】
2004339015.tif 000003
【００３６】
ＮＣＴＣ８３２５株はＰＢＰ２’をコードする遺伝子ｍｅｃＡをもたず、Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎａｓｅも産生しないＭＳＳＡである。その他のＡＴＣＣ４３３００株、ＴＫ７８４株、ＭＲＳ３９４−１株、ＳＲ３６０５株はＭＲＳＡである。さらにＭＲＳＡにおいて、β―ラクタム抗生物質存在下でｍｅｃＡ遺伝子からＰＢＰ２’を誘導する菌体を誘導型（Ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ）、β―ラクタム抗生物質存在有無に関わらずＰＢＰ２’を生産している菌体を構成型（Ｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｖｅ）と表現した。今回用いた菌体では、誘導型がＡＴＣＣ４３３００株とＴＫ７８４株、構成型がＳＲ３６０５株とＭＲＳ３９４−１株である。
【００３７】
［培養］
オートクレーブで１２１℃、１５分間滅菌処理したミューラーヒントン寒天培地  （栄研化学（株））に植菌を行い、３５℃のインキュベーター内で１８時間培養した。
こうして培養した菌体を白金耳で採取し、オートクレーブで１２１℃、１５分間滅菌処理したミューラーヒントン培地（ＭＨＢ、Ｄｉｆｃｏ  Ｌａｂ．）に懸濁させ、６〜８時間、３７℃の振盤培養器内で培養した。この懸濁液を希釈し、６６０ｎｍでの吸光度が０．０８５〜０．１になるように調整した。この懸濁液の菌体密度は１×１０８ＣＦＵ／ｍｌであり、この密度から必要な菌体密度に調整した。
【００３８】
［ポリ酸又はβ―ラクタム抗生物質のＭＩＣの判定］
オートクレーブで１２１℃、１５分間滅菌処理したミューラーヒントン培地に一定濃度になるようポリ酸又はβ―ラクタム抗生物質を溶解した。９６穴プレートの各ウェルにこの溶液を９０μｌ加え、さらに菌体密度５×１０５ＣＦＵ／ｍｌの懸濁液を１０μｌ（最終的な菌体密度：５×１０４ＣＦＵ／ｍｌ）加えた。この９６穴プレートを３５℃のインキュベーター内で２４時間培養した。培養２４時間後、肉眼的に菌体の発育の無い最低濃度を最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）とした。
【００３９】
各々のポリ酸とβ―ラクタム抗生物質のＭＩＣを表２に示した。表２からＮａ２ＷＯ４・２Ｈ２ＯとＰＭ１９以外の全ての化合物はＭＲＳＡに対するＭＩＣが１６００μｇ／ｍｌ以下であり、Ｎａ２ＷＯ４・２Ｈ２Ｏと既に抗菌効果があることが知られているＰＭｌ９に比べて有意に高い抗菌力をもつことが分かった。
【００４０】
【表２】
2004339015.tif 000004
【００４１】
［ポリ酸とβ―ラクタム抗生物質によるＦＩＣの判定］
オートクレーブで１２１℃、１５分間滅菌処理したミューラーヒントン培地に一定濃度になるようポリ酸又はβ―ラクタム抗生物質を溶かした。９６穴プレートの各ウェルにこの二つの溶液をそれぞれ４５μｌ加え、さらに菌体密度５×１０５ＣＦＵ／ｍｌの懸濁液を１０μｌ（最終的な菌体密度：５×１０４ＣＦＵ／ｍｌ）加えた。この９６穴プレートを３５℃のインキュベーター内で２４時間培養した。２４時間培養後、肉眼的に菌体の発育の無い最小濃度をＦＩＣとした。
【００４２】
ここで、ＦＩＣの算出と併用効果は以下のように定義する。
ＦＩＣ＝（ポリ酸；最小濃度／ＭＩＣ）＋（β―ラクタム抗生物質；最小濃度／ＭＩＣ）
ＦＩＣ＞１；不関、１≧ＦＩＣ≧０．５・相加効果、０．５＞ＦＩＣ；相乗効果
【００４３】
各々のポリ酸とオキサシリン及びペニシリンＧによるＦＩＣ  ｉｎｄｅｘを、それぞれ表３及び表４に示した。
【００４４】
【表３】
2004339015.tif 000005
【００４５】
【表４】
2004339015.tif 000006
【００４６】
表３から、ＭＳＳＡであるＮＣＴＣ８３２５に対して、全ての化合物はＦＩＣ  ｉｎｄｅｘが０．５以上であることから、あまり効果が無いことが分かった。一方、全てのＭＲＳＡに対して、（１），（２），（３），（４）とＰＭｌ９に相乗効果（全てのＦＩＣ  ｉｎｄｅｘが０．２以下）が観察され、Ｎａ１０［Ｃｏ２ＷＯ（Ｈ２０）３（ＡｓＷ９Ｏ３３）２］・ｎＨ２Ｏと、（１），（２），（３），（４）の原料であるＮａ２ＨＡｓＯ４・７Ｈ２ＯとＮａ２ＷＯ４・２Ｈ２Ｏにはほとんど効果（ほとんどのＦＩＣ  ｉｎｄｅｘが０．５以上）が見られなかった。表４においても同様な結果が観察された。
【００４７】
このように、本発明化合物である（１），（２），（３），（４）、特に、Ｍ６＝Ｍｎ６，Ｃｏ６，Ｍｎ３Ｃｏ３である本発明の化合物はペニシリン系β―ラクタム抗生物質との間で、ＭＲＳＡに対して非常に高い相乗効果を示す一方で、ＭＳＳＡに対しては有意な相乗効果を示さないことが観察された。
これらの結果から、本発明化合物の抗生物質耐性黄色ブドウ球菌に対する優れた増殖抑制作用は、（１）ポリ酸によるＰＢＰ２’とβ―ラクタム抗生物質の親和性の向上、（２）ポリ酸によるＰＢＰ２’の産生抑制、又は（３）ポリ酸によるＰＢＰ２’の反応阻害、等の機序によって、細胞壁合成酵素であるＰＢＰ２’の活性を阻害することにより発揮されていると考えられる。又、ＡＴＣＣ４３３００株とＴＫ７８４株はβ―ラクタマーゼを産生することから、ポリ酸がβ―ラクタマーゼ活性を抑制している可能性も考えられる。
【００４８】
【実施例２】
［ヒト癌細胞株に対するポリ酸の毒性］
感染症治療薬として人体への投与を考えた場合、人体に対して強い毒性をもつポリ酸（ＰＯＴ）は治療薬として不適当であると考えられる。そこで、人体に対するポリ酸の毒性を探索するために、本発明の化合物を含む各種ポリ酸のヒト細胞毒性試験（小山秀基、細胞ラボマニュアル、シュプリンガー・フェアラーク東京株式会社（１９９９））を行なった。
【００４９】
［測定法］
細胞毒性試験における生細胞数の測定法として、比色法であるＭＴＳ法を用いた。ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ９６（登録商標）Ａｑｕｅｏｕｓ  Ｏｎｅ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ  Ｒｅａｇｅｎｔにはテトラゾリウム化合物  ［ＭＴＳ：３−（４，５ｄｉｍｅｔｈｙｌｔｈｉａｚｏ１−２−ｙ１）−５−（３−ｃａｒ  ｂｏｘｙｍｅｔｈｏｘｙｐｈｅｎｙｌ）−２−（４−ｓｕｌｆｏｐｈｅｎｙｌ）−２Ｈ−ｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ，ｉｎｎｅｒ  ｓａｌｔ］と電子輸送試薬（ＰＥＳ：ｐｈｅｎａｚｉｎｅ  ｅｔｈｏｓｕ１ｆａｔｅ）が含まれている。ＭＴＳテトラゾリウム化合物は細胞によって生物的に還元され、細胞培養液に可溶な発色性のホルマザン産物へと変換される  （図８）。この変換は、代謝活性がある細胞のデヒドロゲナーゼによって産生されるＮＡＤＰＨまたはＮＡＤＨによって行なわれると考えられている。ホルマザン産物量は４９０ｎｍの吸光度として測定され、その値は培養液に含まれる生細胞数と比例関係にある。
【００５０】
［試薬・培地］
５一ｆｌｕｏｒｏｕｒａｃｉｌ（５−ＦＵ）はＳｉｇｍａから購入した。
ＲＰＭＩｌ６４０  Ｍｅｄｉｕｍ（Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ）５００ｍｌ中に、５０℃で非働化したウシ胎児血清（ＦＢＳ：Ｆｅｔａｌ  Ｂｏｖｉｎｅ  Ｓｅｒｕｍ，  Ｔｅｒｍｏ  Ｔｒａｃｅ）５０ｍｌと（１００×）硫酸カナマイシン（インビトロジェン）５ｍｌを加えて、ＲＰＭＩｌ６４０培地を調製した。
Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ  Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ  Ｂｕｆｆｅｒｅｄ  Ｓａｌｉｎｅ（ＰＢＳ，大日本製薬株式会社）５粒を超純水５００ｍ１に溶解した。その後、オートクレープで１２１℃、１５分滅菌処理し、ＰＢＳ溶液を調製した。
ＰＢＳ溶液５０ｍ１に（１０×）トリプシンーＥＤＴＡ（インビトロジェン）５ｍｌを加えてトリプシンーＥＤＴＡ溶液の調製した。
【００５１】
［細胞株］
本研究で使用したヒト胃癌細胞株ＭＫＮ−１とＭＫＮ−４５は理化学研究所ライフサイエンス筑波研究センター細胞開発銀行から購入し、ヒト乳癌細胞株ＭＣＦ−７は関谷剛男先生（三菱化学生命科学研究所副所長兼トランスレイショナル研究部長）から分与して頂いた。
【００５２】
［細胞の融解と培養］
液体窒素中で保存されていた細胞の入ったアンプルを３７℃の温水で溶かした。この細胞懸濁液全量をＲＰＭＩｌ６４０培地５ｍｌに懸濁させ、遠心分離（１０００ｒｐｍ，３分間２５℃）を行い、上清を除去した。得られた細胞のペレットに少量の培地を加えて懸濁させ、８ｍｌの培地を加えてふた付き１００×２０ｍｍディッシュ（ＦＡＬＣＯＮ）で培養した。このディッシュを３７℃、５％ＣＯ２雰囲気下のインキュベータ内に入れ、培養した。
【００５３】
［細胞の計数］
ディッシュから培地をアスピレーターで除去し、ＰＢＳ溶液で１回細胞を洗浄した後、トリプシンーＥＤＴＡ溶液１ｍｌで細胞をディッシュ面から遊離させた。そして、ＲＰＭＩｌ６４０培地２ｍｌを加えよく懸濁した後、エッペンドルチューブにこの細胞懸濁液を移し、０．４％トリパンブルー溶液を等量加えた。この混合溶液をＢｕｒｋｅｒ−Ｔｕｒｋ型血球計算版（測定体積；縦：１ｍｍ横：１ｍｍ深さ：０．１  ｍｍエルマ）に注入し、ＣＫ４０培養顕微鏡（１００倍、ＯＬＹＭＰＵＳ）で染色の見られない生細胞数を計測した。測定された細胞数に２００００倍した数から細胞密度（ｃｅｌｌｓ／ｍｌ）を求めた。
【００５４】
［細胞の継代］
ふた付き１００×２０ｍｍディッシュにＲＰＭＩｌ６４０培地８ｍｌを加え、細胞懸濁液を細胞密度が１×１０５ｃｅｌｌｓ／ｍ１になるように調製した。このディッシュを３７℃、５％ＣＯ２雰囲気下のインキュベータ内に入れ、３〜４日間培養した。細胞が常に対数増殖期にあるよう継代し続けた。
【００５５】
［ヒト癌細胞に対するポリ酸の毒性試験］
それぞれの細胞懸濁液を細胞密度４×１０４ｃｅｌｌｓ／ｍｌになるように希釈した。９６穴プレート（Ｎｕｎｃ）のウェルにこの細胞懸濁液を９０μｌ（細胞密度３．６×１０５ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌ）加え、３７℃、５％ＣＯ２雰囲気下のインキュベータ内で２４時間培養した。２４時間培養後、各々のウェルに一定濃度のポリ酸溶液を１０μｌ加え、再び３７℃、５％ＣＯ２雰囲気下のインキュベータ内で７２時間培養した。７２時間培養後、各々のウェルの培地をアスピレーターで除去し、ＲＰＭＩ１６４０培地で１回洗浄後、各々のウェルにＲＰＭＩｌ６４０培地ｌ００μｌとＣｅｌｌＴｉｔｅｒ９６（登録商標）Ａｑｕｅｏｕｓ  Ｏｎｅ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ  ２０μｌを加え、３７℃、５％ＣＯ２雰囲気下で２時間インキュベートした。２時間後、ＩＭＭＵＮＯ−ＭＩＮＩ  ＮＪ−２３００    ９６穴プレートリーダー（Ｎｕｎｃ）により、各々のウェルに対して波長４９０ｍｍにおける吸光度（Ａ４９０）を測定した（バックグラウンドはＲＰＭＩｌ６４０培地１００μｌとＣｅｌｌＴｉｔｅｒ９６（登録商標）Ａｑｕｅｏｕｓ  Ｏｎｅ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ  ２０μｌの混合溶液を用いた）。得られた吸光度から生細胞数を比色定量し、５０％生育阻止濃度（ＩＣ５０：  ５０％Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ）を求めた。各ポリ酸濃度につき６検体解析を行い、平均値を求めた。
【００５６】
［ＩＣ５０値の算出］
５０＝｛ポリ酸濃度（Ｘμｇ／ｍｌ）の吸光度（Ａ４９０）／ポリ酸非存在下の吸光度（Ａ４９０）｝×１００の式に従いＩＣ５０値Ｘを求めた。
【００５７】
各ヒト癌細胞株（ＭＫＮ−１，ＭＫＮ−４５，ＭＣＦ７）における種々のポリ酸のＩＣ５０値を表５に示した。
【００５８】
【表５】
2004339015.tif 000007
【００５９】
５−ＦＵをコントロールに用いて細胞毒性試験を行い、他の参考文献と比較した結果、文献値とほぼ等しいＩＣ５０値が得られたことを確認した。
表５から、ヒト癌細胞株に対するポリ酸の毒性がわかった。ほとんどのポリ酸やその原料化合物において、化合物濃度１０００μｇ／ｍｌでの細胞生育阻止率がほぼ１００％であることから、ＩＣ５０＞１００μｇ／ｍｌのポリ酸は毒性が低いと見なし、これ以上詳細には求めなかった。
【００６０】
その結果、ほとんどのポリモリブデン酸は細胞毒性が低く、ほとんどのポリバナジウム酸は細胞毒性が高いことが分かった。
砒素含有ポリタングステン酸の毒性も強さは様々であった。本発明化合物であるＮａ１７［Ｃｏ６（Ｈ２Ｏ）２（ＡｓＷ６Ｏ２６）（ＡｓＷ９Ｏ３４）２］・４５Ｈ２ＯとＮａ１７［Ｍｎ６（Ｈ２Ｏ）２（ＡｓＷ６Ｏ２６）（ＡｓＷ９Ｏ３４）２］・４５Ｈ２ＯのＩＣ５０はいずれも細胞についても１００μｇ／ｍｌより高く、本発明の化合物の毒性は低いことが確認された。一方、これに対して、同じ構成元素を有するＮａ１０［Ｃｏ２ＷＯ（Ｈ２Ｏ）３（ＡｓＷ９Ｏ３３）２］・ｎＨ２Ｏはこれらに比べて毒性が高いことが明らかとなった。この原因として、構造、砒素の価数、及び、ポリ酸の溶液中の安定性等における違いが考えられる。
尚、それぞれの細胞株においてポリ酸の毒性が異なるのは、細胞株の金属に対する代謝機能や細胞増殖速度などに関与している可能性があると考えられる。
【００６１】
【発明の効果】
以上の実施例から、本発明化合物である一般式（Ｉ）を有する砒素含有ポリタングステン酸は抗生物質耐性黄色ブドウ球菌等のＭＲＳＡに対して優れた抗菌力があり、且つ、ヒト癌細胞株に対しては毒性が低く、更にβ―ラクタム抗生物質との併用により高い相乗効果を示すため、有効な抗ＭＲＳＡ薬としての可能性があることが確認された。
今後さらなる研究により、本発明化合物が有する様々な生理活性を活かした新規薬剤や抗菌製品が開発される可能性がある。
【図面の簡単な説明】
【図１】ペニシリン系（上）およびセフェム系（下）抗生物質の構造を示す。
【図２】細胞膜を通過する間にムレインモノマー前駆体からムレインモノマーが合成される様子を示す。
【図３】黄色ブドウ球菌の細胞壁形成の過程を示す。
【図４】代表的なポリ酸の構造であるＫｅｇｇｉｎ型（ａ）、Ｔｒｉｖａｃａｎｔ  Ｋｅｇｇｉｎ型（ｂ）、Ｗｅｌｌｓ−Ｄａｗｓｏｎ型（ｃ）、Ｄｅｃａｔｕｎｇｓｔａｔｅ型（ｄ）及びＡｎｄｅｒｓｏｎ型（ｅ）の構造を示す。
【図５】本発明の化合物の構造を示す。
【図６】ポリ酸Ｎａ１０［Ｃｏ２ＷＯ（Ｈ２０）３（ＡｓＷ９Ｏ３３）２］・ｎＨ２Ｏのケギン構造を示す。
【図７】ペニシリン系抗生物質であるオキサシリンとペニシリンＧの構造を示す。
【図８】ＭＴＳテトラゾリウム化合物からホルマザン産物への変換を示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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