(57)【要約】【課題】生体における抗菌ペプチドの分泌を誘発させる物質を投与することによる、薬剤耐性菌に起因する感染症治療剤を提供すること。【解決手段】イソロイシン、ロイシンまたはバリンから選択される少なくとも１種の分枝鎖必須アミノ酸を有効成分として含有する薬剤耐性菌による感染症治療剤であり、薬剤耐性菌による感染症が、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）、メシチリン耐性表皮ブドウ球菌（ＭＲＳＥ）、バンコマイシン耐性腸球菌（ＶＲＥ）またはペニシリン耐性肺炎球菌（ＰＲＳＰ）に起因する感染症である治療薬である。また、生体において抗菌ペプチドを分泌させ、抗菌作用を発現させることにより薬剤耐性菌による感染症を治療するための分枝鎖必須アミノ酸の使用方法である。【選択図】          なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
イソロイシン、ロイシンまたはバリンから選択される少なくとも１種の分枝鎖必須アミノ酸を有効成分として含有する薬剤耐性菌による感染症治療剤。
【請求項２】
薬剤耐性菌による感染症が、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）、メシチリン耐性表皮ブドウ球菌（ＭＲＳＥ）、バンコマイシン耐性腸球菌（ＶＲＥ）またはペニシリン耐性肺炎球菌（ＰＲＳＰ）に起因する感染症である請求項１に記載の感染症治療薬。
【請求項３】
生体において抗菌ペプチドを分泌させ、抗菌作用を発現させることにより薬剤耐性菌による感染症を治療するために、イソロイシン、ロイシンまたはバリンから選択される少なくとも１種の分枝鎖必須アミノ酸を投与する当該アミノ酸の使用方法。
【請求項４】
薬剤耐性菌による感染症が、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）、メシチリン耐性表皮ブドウ球菌（ＭＲＳＥ）、バンコマイシン耐性腸球菌（ＶＲＥ）またはペニシリン耐性肺炎球菌（ＰＲＳＰ）に起因する感染症である請求項３に記載の使用方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、生体内において、デフェンシン等の抗菌ペプチドの分泌させ、抗菌活性を発現させることによる薬剤耐性菌に起因する感染症の治療剤、特にメチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）、メシチリン耐性表皮ブドウ球菌（ＭＲＳＥ）、バンコマイシン耐性腸球菌（ＶＲＥ）、ペニシリン耐性肺炎球菌（ＰＲＳＰ）に起因する感染症の治療剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
【非特許文献１】
ＰＮＡＳ，  ９７：  １２７２３−１２７２８  （２０００）
【０００３】
合成抗菌剤や抗生物質の発見、また新たな抗生物質の開発により、細菌感染症の治療は著しい進歩を遂げてきたが、抗生物質の開発は、耐性菌との戦いであるともいわれており、近年、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）が新しいタイプの多剤耐性菌として各科領域の感染症で注目されてきている。このＭＲＳＡは、年々増加する傾向にあり、最近では、ＭＲＳＡによる院内感染の問題が大きく取り上げられるようになってきた。
【０００４】
このような耐性菌の問題はＭＲＳＡだけに止まらず、ＭＲＳＥ（メシチリン耐性表皮ブドウ球菌）、ＶＲＥ（バンコマイシン耐性腸球菌）、ＰＲＳＰ（ペニシリン耐性肺炎球菌）などのグラム陽性菌における薬剤耐性の出現が認められるようになってきている。また、肺炎桿菌や緑膿菌などのグラム陰性桿菌おける、広域β−ラクタム薬、アミノグリコシド、フルオロキノロンなどのニューキノロン系抗菌剤への耐性の進行が、医療の現場にとって脅威となってきている。
【０００５】
さらに今後、臓器移植などの高度の医療技術、先端医療技術の一層の推進が見込まれており、また、高齢者の増加が確実なものとなっている現状下では、これらの易感染宿主（ｃｏｍｐｒｏｍｉｓｅｄ  ｈｏｓｔ）、あるいは免疫不全宿主（ｉｍｍｕｎｏｃｏｍｐｒｏｍｉｓｅｄ  ｈｏｓｔ）を、薬剤耐性菌による感染症からいかに守っていくかが、非常に重要な課題となってきている。
【０００６】
このように、薬剤耐性菌としてＭＲＳＡやＶＲＥなどの院内感染起因菌が医療の現場で問題となってきているが、最近の現状では、これらの院内感染菌に止まらず、ＰＲＳＰやインフルエンザ菌などの市中感染症起因菌、カンピロバクター、サルモネラなどの食中毒菌、赤痢菌、ペスト菌、コレラ菌などの伝染病起因菌、淋菌などの性病起因菌、さらには胃潰瘍や胃癌の原因とされるヘリコバクターピロリなど、ヒトに感染症を引き起こすほぼすべての病原細菌において、薬剤耐性の出現が例外なく進行しているといえる。しかも、多剤耐性（ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ）や高度耐性を獲得した耐性菌が出現しつつある。
【０００７】
したがって、ＭＲＳＡやＶＲＥなどの抗生物質や、消毒薬に対する耐性菌が出現し、このような薬物に対する耐性の情報が、ある菌種から他の菌種へと伝搬されることが明らかとなっている現状下では、従来の抗生物質あるいは抗真菌剤に代わる抗菌物質の必要性が、ここ最近、非常に高まっているのが現状である。
【０００８】
ところで、これまで抗生物質は、細菌や真菌由来の抗菌物質として把握され、感染症に対する生体防御反応のため、広く利用してきたが、前記したごとく抗生物質の開発は、耐性菌との戦いであるともいわれており、新たな抗生物質を開発していく過程では、かかる抗生物質に対する新たな耐性菌の出現を回避することはできない。最近の傾向では、臨床試験段階においても、すでにその臨床試験に供している抗生物質に対して耐性菌が出現することがある。
【０００９】
一方、これに対して抗菌ペプチドと呼ばれる物質は、免疫反応を担う宿主由来の防御物質と把握することができる。すなわち、生体には本来的に、外来異物（細菌、ウイルス）の進入に対する保護を行うため、先天的な免疫反応のメカニズムが備わっている。この場合の先天的な免疫反応（Ｉｎｎａｔｅ  Ｉｍｍｕｎｅ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅ）の構成要素の一つとして、生体由来の抗菌ペプチドの分泌、通常は、デフェンシン類の分泌が挙げられる。
【００１０】
すなわち、生体の免疫的な防御機構として、細菌、ウイルス感染等の危険性が生じた場合には、デフェンシンなどいくつかのタイプの抗菌ペプチドが上皮細胞表面において産生され、この抗菌ペプチドが、病原体となり得るものに対する先天性免疫のエフェクターとして作用していることが知られている。例えば、小腸の上皮表面は細菌感染に直接暴露され得る部分であり、この部分（上皮表面）では、β−デフェンシンなどいくつかのタイプの抗菌ペプチドが産出されている。
【００１１】
１９８０年代の初期に、動物が抗菌性のペプチドを自ら産生することが報告されて以来、現在までに、マガイニン（Ｍａｇａｉｎｉｎ）、セクロピン（Ｃｅｃｒｏｐｉｎ）、メリチチン（Ｍｅｌｉｔｉｔｉｎ）、ラクトフェリシン（Ｌａｃｔｏｆｅｒｒｉｃｉｎ）、デフェンシン（Ｄｅｆｅｎｃｉｎ）をはじめ、非常に多くの抗菌ペプチドが報告され、このような抗菌ペプチドは、ヒトに限らず、他の哺乳類、爬虫類、昆虫、あるいは植物など自然界の様々な生物に存在することが判明している。
【００１２】
このように、抗菌ペプチドは、先天的な免疫反応（Ｉｎｎａｔｅ  Ｉｍｍｕｎｅ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅ）を担う重要な物質である。その抗菌ペプチドのなかでもデフェンシン類は、細菌、ガビなどの微生物に対して殺菌活性を有する塩基性の抗菌ペプチドであり、好中球やマクロファージの細胞内顆粒に存在し、貪食した細胞の処理に関わっている。デフェンシンは、ヒトにおいては、多くの場合２９〜３４アミノ酸残基からなるペプチドであり、３個の分子内ジスルフィド結合を構成する６つのシステイン（Ｃｙｓ）が共通構造として見いだされており、その殺菌作用は、微生物の細胞膜構造の破壊により、殺菌作用を示すものと考えられている。
【００１３】
この好中球やマクロファージの細胞内顆粒に存在するデフェンシン類（クリプトジン類）の殺菌作用はきわめて強いものであり、生体は、先天的な免疫機能として、細菌またはウイルスの進入を感知し、殺菌性ペプチドをその有効濃度で放出することによって、粘膜免疫に積極的に応答し、宿主の細菌またはウイルス感染に対する防衛反応における機能的な役割を果たしていると考えられる。すなわち、デフェンシンは、ほとんどすべての哺乳類で、皮膚、気道、消化管、泌尿生殖器などの表面上皮で産生されており、デフェンシンは恒常的に産生されて、非炎症性の抗菌バリヤーとして粘膜の一次防御に携わっているものである。
【００１４】
このような直接的な抗菌作用に加えて、デフェンシンは、メモリーＴ細胞や樹状細胞の遊走因子としての作用をもち、先天性免疫機能と、後天性免疫機能の橋渡しをする重要な働きもする。したがって、粘膜や上皮のバリヤーとして重要なデフェンシンを生体内で意図的に誘導する化合物は、感染症治療薬として極めて有用なものとなる。
【００１５】
ところで、これまでにも、細菌や真菌感染を認識するｐａｔｔｅｒｎ  ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ  ｒｅｃｅｐｔｏｒを介して、リポポリサッカライド、ｈｅａｔ−ｋｉｌｌｅｄ  ｂａｃｔｅｒｉａやインターロイキン−１（ＩＬ−１）等が、デフェンシンを誘導するものであることが知られていた。さらに最近、Ｆｅｈｌｂａｕｍらはイソロイシンが上皮細胞からデフェンシンの分泌を誘導することを報告している（非特許文献）。彼らは、Ｍａｄｉｎ−Ｄａｒｂｙのウシ腎臓（ＭＤＢＫ）培養上皮細胞の培養液中に６．５−２５μｇ／ｍｌのイソロイシンを添加すると、ＮＦ−κＢ／ｒｅｌを介して、デフェンシンの遺伝子発現の増強が認められたことを報告している。しかしながら、彼らの報告は、ＭＤＢＫ培養上皮細胞を用いた検討であり、また、イソロイシンあるいはその類似物質が、抗菌ペプチドであるβ−デフェンシンの発現を特異的に誘発しているとされているが、その上皮細胞をマクロ的に培養しているものであり、実際の生体内においての抗菌ペプチドの発現に関しての詳細は、検討されていない。
【００１６】
したがって、イソロイシンあるいはその類似物質が、細菌あるいはウイルス等の攻撃に対する生体防御メカニズムとして、例えば、腸管上皮細胞あるいは気道粘膜上皮細胞から、直接的に抗菌ペプチドを豊富に含む顆粒を分泌し、その結果、各種感染症を治療し得るか否かは、いまだ不明なものである。
【００１７】
かかる観点に立脚して、本発明者等は、強力な作用を持つＩｎｎａｔｅ  Ｉｍｍｕｎｅ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅ（先天性免疫応答）の担い手である生体内で産生される抗菌ペプチド、デフェンシンの分泌を誘導するこのイソロイシンを、薬剤耐性菌に起因する感染症患者に投与し、その起因菌の消失、ならびに感染症治療の実際を検討した。その結果、イソロイシン、ロイシンあるいはバリン等の分枝鎖を有する必須アミノ酸の投与、特にイソロイシンの投与により、生体内においてデフェンシンの産生が誘導され、極めて効果的に感染症の起因菌を消失させるものであることを確認し、本発明を完成させるに至った。
【００１８】
【発明が解決しようとする課題】
したがって本発明は、かかる検討結果に基づき完成されたものであり、生体における抗菌ペプチドの分泌を誘発させる物質を投与することによる、薬剤耐性菌に起因する感染症治療剤を提供すること、さらに、かかる薬剤耐性菌に起因する感染症の治療のための、イソロイシン、ロイシンあるいはバリン等の分枝鎖を有する必須アミノ酸の使用方法を提供することを課題とする。
【００１９】
【課題を解決するための手段】
しかして本発明の基本的態様である請求項１に記載の発明は、イソロイシン、ロイシンまたはバリンから選択される少なくとも１種の分枝鎖必須アミノ酸を有効成分として含有する薬剤耐性菌による感染症治療剤である。
【００２０】
そのなかでも、より具体的な請求項２に記載の発明は、請求項１記載の発明において、薬剤耐性菌による感染症が、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）、メシチリン耐性表皮ブドウ球菌（ＭＲＳＥ）、バンコマイシン耐性腸球菌（ＶＲＥ）またはペニシリン耐性肺炎球菌（ＰＲＳＰ）に起因する感染症である、感染症治療薬である。
【００２１】
また、本発明の別の基本的態様である請求項３に記載の発明は、生体において抗菌ペプチドを分泌させ、抗菌作用を発現させることにより薬剤耐性菌による感染症を治療するために、イソロイシン、ロイシンまたはバリンから選択される少なくとも１種の分枝鎖必須アミノ酸を投与する当該アミノ酸の使用方法である。
【００２２】
この場合のより具体的な請求項４に記載の発明は、薬剤耐性菌による感染症が、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）、メシチリン耐性表皮ブドウ球菌（ＭＲＳＥ）、バンコマイシン耐性腸球菌（ＶＲＥ）またはペニシリン耐性肺炎球菌（ＰＲＳＰ）に起因する感染症である使用方法である。
【００２３】
すなわち本発明は、イソロイシン、ロイシンまたはバリンから選択される少なくとも１種の分枝鎖必須アミノ酸を投与することでデフェンシンを誘導し、粘膜や上皮の防御バリヤーを増強し、薬剤耐性菌に起因する感染症の全く新しい治療方法を提供する点に特徴を有するものである。
【００２４】
多くの薬剤耐性菌は、抗生物質を分解する酵素を産生する遺伝子を有することで薬剤に対する抵抗性を獲得する。これに対して本発明は、生体内において先天性免疫応答（Ｉｎｎａｔｅ  Ｉｍｍｕｎｅ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅ）の担い手である抗菌ペプチド、デフェンシンの分泌を誘導し、起因菌の細胞膜構造の破壊により殺菌作用を示すという、全く新しいメカニズムで細菌に対する生体防御に関わることより、従来の薬剤耐性のメカニズムにとらわれず、薬剤耐性菌に起因する感染症を有効に治療し得るものである。
【００２５】
【発明の実施の形態】
本発明は上記したように、生体における先天的免疫能を発揮する抗菌ペプチドの分泌を誘発させ、かかる抗菌ペプチドによる殺菌作用により薬剤耐性菌に起因する感染症の治療を行うべく、抗菌ペプチドの分泌を誘導するイソロイシン、ロイシンあるいはバリン等の分枝鎖状の必須アミノ酸を有効成分とする薬剤耐性菌による感染症の治療剤である。
【００２６】
かかる分枝鎖必須アミノ酸により分泌される抗菌ペプチドとしては、生体由来の抗菌ペプチドであり、例えば、α−デフェンシン（クリプトジン）、β−デフェンシン等を挙げることができる。
【００２７】
本発明において、かかる抗菌ペプチドを生体内において有効に発現させることにより、細菌からの攻撃に対し、これらの細胞膜の構想を破壊することにより、殺細菌活性を発現し、治療し得る薬剤耐性菌に起因する感染症としては、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）、メシチリン耐性表皮ブドウ球菌（ＭＲＳＥ）、バンコマイシン耐性腸球菌（ＶＲＥ）またはペニシリン耐性肺炎球菌（ＰＲＳＰ）に起因する感染症を挙げることができる。そのなかでも、本発明は特にＭＲＳＡ（メチシリン耐性黄色ブドウ球菌）に起因する感染症に対して有効なものであることが判明した。
【００２８】
本発明が提供する薬剤耐性菌に起因する感染症の治療薬を投与するにあたっては、その有効成分であるイソロイシン、ロイシンまたはバリンから選択される少なくとも１種の分枝鎖必須アミノ酸を含有する組成物を、経口的あるいは非経口的に投与することで行い得る。
【００２９】
その含有量は特に限定されるものではなく、生体に投与することにより、先天性免疫応答の担い手である生体内で産生される抗菌ペプチドの分泌が促進され、その結果殺菌活性を発現するに十分な量を投与すればよい。なお、本発明が提供する感染症治療薬の有効成分であるイソロイシン、ロイシンまたはバリンは、必須アミノ酸の一種であり、その安全性は十分確認されていることより、ある程度過剰量を投与しても、何ら悪影響をあたえるものではない。
【００３０】
例えば、経口的に投与する場合には、適宜他の賦形剤等と共に、製剤学的に汎用されている経口投与製剤である錠剤、顆粒剤、カプセル剤、あるいは散剤等の形態に製剤化することができる。また、非経口的に投与する場合には、注射剤の形態で投与することができる。
【００３１】
【実施例】
以下に本発明が提供する、感染症治療剤の有効成分となるイソロイシン、ロイシンまたはバリンから選択される少なくとも１種の分枝鎖必須アミノ酸における実際の臨床結果を説明することにより、本発明をさらに詳細に説明する。
【００３２】
臨床試験例：ＭＲＳＡ感染症に対するイソロイシンの投与効果（先天性免疫活性化効果の検討）
年齢７２歳の男性で、慢性呼吸器感染症で長期臥床患者に対して、１日４ｇのイソロイシンを２回に分けて経口投与した。２週間連日投与を行い、投与を中止した後２週間臨床経過を観察した。
投与前の炎症反応を示すＣＲＰ値は５．７５であったが、２週間のイソロイシン投与により、速やかに０．７５まで低下し、著明な改善を認めた。
なお、イソロイシンの投与を中止した後の２週間後には、ＣＲＰ値は１．２３まで再度上昇した。
【００３３】
起因菌の検出検討
（１）イソロイシン投与前の喀痰培養検査では、
Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ（ＧＮＢ）    １＋
Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓ  （Ｐｓｅｕ．）  ｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ（ＧＮＢ）    １＋
Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ［ＭＲＳＡ］（ＧＰＣ）    ２０個
Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  Ｐｅｎｕｍｏｎｉａｅ  （ＧＰＣ）    ３＋
が検出された。
（２）イソロイシン２週間投与後の喀痰培養検査では、
Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ（ＧＮＢ）    ２＋
のみが検出され、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ［ＭＲＳＡ］（ＧＰＣ）は検出されなかった。
（３）投与中止した後の２週間投与後の喀痰培養検査では、
Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ（ＧＮＢ）    ２＋
Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓ  （Ｐｓｅｕ．）  ｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ（ＧＮＢ）    １＋
Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ  （ＧＰＣ）    １０個
Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｐｐ（常在菌））    ３＋
と喀痰中の細菌数は増加していたが、薬剤耐性菌であるＭＲＳＡは検出されなかった。
【００３４】
以上の臨床試験から考察すると、イソロイシンの投与により喀痰中のＭＲＳＡや、肺炎球菌などのグラム陽性球菌に対する抗菌効果が認められ、炎症反応のマーカーであるＣＲＰ値が著明に低下したと考えられた。イソロイシンによる肺胞上皮細胞からのデフェンシンの誘導が、気道粘膜での感染防御に貢献したものと考えられる。
投与中止後、これらの粘膜防御作用が消失すると、慢性感染症が再発し始めたことからも、イソロイシンの投与による気道粘膜防御作用が非常に効果的であったことが裏付けられた。
【００３５】
【発明の効果】
以上記載のように、本発明は、生体がウイルスの感染に対する先天的な防御機構として作用する生体抗菌ペプチドの分泌を誘発させることにより効果的な殺菌作用を発揮させ、それにより感染症を治療するものであり、特に薬剤耐性菌に起因する感染症の治療薬を提供するものである。したがって、本発明の有効成分であるイソロイシン、ロイシンまたはバリンから選択される少なくとも１種の分枝鎖を有する必須アミノ酸の投与による抗菌ペプチドであるデフェンシンの誘導と先天性免疫応答反応（Ｉｎｎａｔｅ  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ）の活性化は、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）、メシチリン耐性表皮ブドウ球菌（ＭＲＳＥ）、バンコマイシン耐性腸球菌（ＶＲＥ）またはペニシリン耐性肺炎球菌（ＰＲＳＰ）に起因する感染症に対する治療剤として極めて有用なものであり、その医療上の価値は多大なものである。