(57)【要約】【課題】高い除去率を与え、容易に製造でき、生体適合性があり、免疫防御を誘発せず、従来の吸着剤に比べて、血小板に対して親和性が低い一方で、同時にフィブリノゲンに対する高親和性を示す吸着剤を提供する【解決手段】本発明は、有機マトリクスに共有結合し、末端エポキシ基の加水分解によって形成される末端ビシナルヒドロキシ基を示す合成側鎖を有する該有機マトリクスを包含し、該合成側鎖がペプチド及びいかなる芳香族基も有しない、血液及び血漿中のフィブリノゲン及び／又はフィブリンの濃度を低減するための吸着剤に関する。さらに、本発明は、該吸着剤の調製方法、ならびに血液及び血漿中のフィブリノゲン及び／又はフィブリンの濃度を低減するために役立つ吸着剤の製造のための吸着剤の使用に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
末端エポキシ基の加水分解によって形成される末端ビシナルヒドロキシ基を示し、有機マトリクスに共有結合している合成側鎖を有する該有機マトリクスを包含し、前記合成側鎖がペプチドを含まず、芳香族基を欠いている、血液又は血漿中のフィブリノゲン及び／又はフィブリンの濃度を低減するための吸着剤。
【請求項２】
該有機マトリクスが、（メタ）アクリル酸エステルから得られるコポリマーである請求項１に記載の吸着剤。
【請求項３】
該有機マトリクスが、吸着材料の乾燥重量について５０〜１０００μｍｏｌ／ｇのヒドロキシル数を有する請求項１又は２に記載の吸着剤。
【請求項４】
該有機マトリクスが、少なくとも１種のエポキシ（メタ）アクリレートならびに、アルキレンジ（メタ）アクリレート及びポリグリコールジ（メタ）アクリレートからなる群より選択される少なくとも１種の架橋剤から得られるコポリマーである、前記請求項の１以上に記載の吸着剤。
【請求項５】
該コポリマーが、モノマー単位の総重量に対するそれぞれの場合の割合が以下：
（ｉ）５〜９５重量％、好ましくは４０〜８０重量％及び最も望ましくは６０重量％の量のグリシジルメタクリレート；ならびに
（ｉｉ）５〜９５重量％、好ましくは２０〜６０重量％及び最も望ましくは４０重量％の量のエチレングリコールジメタクリレート
のモノマー単位の重合によって製造されるランダムコポリマーである請求項４に記載の吸着剤。
【請求項６】
該有機マトリクスが、球形、非凝集粒子から構成される前記請求項の１以上に記載の吸着剤。
【請求項７】
該有機マトリクスが、５０〜２５０μｍの粒径分布を有する球形、非凝集粒子から構成される前記請求項の１以上に記載の吸着剤。
【請求項８】
該有機マトリクスが、５０〜２５０μｍ粒径分布及び１０〜２００ｎｍの範囲の細孔半径分布(pore radius distribution)を有する多孔質で、球形の、非凝集粒子から構成される前記請求項の１以上に記載の吸着剤。
【請求項９】
血液または血漿中のフィブリノゲン及び／又はフィブリンの濃度を低減するために役立つ吸着剤を製造するための、請求項１〜８のうち１以上に記載される吸着剤の使用。
【請求項１０】
以下の工程：
（ａ）有機マトリクスに結合した合成側鎖を有し、末端エポキシ基を示す該有機マトリクスの調製；
（ｂ）該マトリクスに共有結合している該合成側鎖に末端ビシナルヒドロキシ基を導入する間の、該有機マトリクスのエポキシ基の加水分解；ならびに、
（ｃ）必要に応じて、１００℃の温度での工程（ｂ）で得られた材料の熱処理
を含む、請求項１〜８のうち１以上に記載される吸着剤の製造方法。
【請求項１１】
工程（ａ）で調製された有機マトリクスは、該吸着剤材料の乾燥重量に対して２５〜５００μｍｏｌ／ｇの量のエポキシ基を含有する、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
該有機マトリクスが、少なくとも１種のエポキシ（メタ）アクリレートならびに、アルキレンジ（メタ）アクリレート及びポリグリコールジ（メタ）アクリレートからなる群より選択される少なくとも１種の架橋剤から得られるコポリマーである、請求項１０又は１１に記載の方法。
【請求項１３】
該コポリマーが懸濁重合によって製造される請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
該コポリマーが、モノマー単位の総重量に対するそれぞれの場合の割合が以下：
（ｉ）５〜９５重量％、好ましくは４０〜８０重量％及び最も望ましくは６０重量％の量のグリシジルメタクリレート；ならびに
（ｉｉ）５〜９５重量％、好ましくは２０〜６０重量％、及び最も望ましくは４０重量％の量のエチレングリコールジメタクリレート
のモノマー単位の重合によって製造されるランダムコポリマーである、請求項１２又は１３に記載の方法。
【請求項１５】
該加水分解が、１〜８Ｍ ＮａＯＨ及び好ましくは４Ｍ ＮａＯＨ中において、室温〜９０℃の温度で、継続時間３０分〜２４時間のインキュベーションによって得られる、請求項１０〜１４の１以上に記載の方法。
【請求項１６】
該熱処理が、１００〜１４０℃の温度での滅菌を伴う、請求項１０〜１５の１以上に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、エポキシ基の加水分解によって形成される末端ビシナルヒドロキシ基を示し、有機マトリクスに共有結合した合成側鎖を有する有機マトリクスを包含し、該合成側鎖がペプチドを含まず、芳香族基を欠いている、血液または血漿中のフィブリノゲン及び／又はフィブリンの濃度を低減するための吸着剤に関する。さらに、本発明は、該吸着剤の調製方法、ならびに血液または血漿中のフィブリノゲン及び／又はフィブリンの濃度を低減するために役立つ吸収剤(absorber)の製造のための該吸着剤の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
吸着剤は、医療技術において幅広く使用されている。多くの文献が、特許文献１に記載されるように、血液からの低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）を除去、又はその濃度を低減する吸着剤を含む吸収剤（adsorber）について論じている。後者は、固定された粒径及び排除限界（exclusion limit）を有し、ＬＤＬ分子が結合されるリガンドを、その表面に保有する有機キャリアとしての吸収材料（adsorber material）に関する。
【０００３】
特許文献２は、過剰な血中フィブリノゲン濃度に起因する疾病の治療又は予防を目的とした、フィブリノゲン及び／又はフィブリンに対するリガンドの使用を記載している。特許文献２は、フィブリノゲン及び／又はフィブリンに特異的に付着し、ならびに、好ましくは３〜１０アミノ酸を有するペプチドである物質としてのリガンドを明示している。
【０００４】
非特許文献１は、トリプトファン又はフェニルアラニン吸着剤を使用した免疫吸着療法（immunoadsorption therapy）による、血漿フィブリノゲン、イムノグロブリンＧ（ＩｇＧ）及びイムノグロブリンＭ（ＩｇＭ）の濃度の減少を論じている。
【０００５】
免疫吸着療法は、その担体が球状ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）ゲル粒子形態である吸着カラムを用いる。その表面では、これらのＰＶＡゲル粒子が、スペーサーによってＰＶＡに共有結合しているアミノ酸リガンドとしてトリプトファン又はフェニルアラニンのいずれかを保有する。血液細胞から分離された血漿を該吸着カラムに通し（channel through）、その後、患者に再導入する前に血液細胞と再度一体化（reunite）させる。この種類の免疫吸着療法は、フィブリノゲン、ＩｇＧ及びＩｇＭの濃度を同時に、及び顕著に低減する。
【０００６】
事実上、今では、吸着が疾病を緩和する常習的な臨床手段となり、今まで以上に厳しい選択性の要求を満たさなければならない。これは、１つは、吸着剤が人体に必要なタンパク質を、全く又は可能な限りわずかしか吸着しない一方で、同時に、患者が受けた体外処理の効果を最大限に利用するポイントにまで有害なタンパク質の濃度を減少することを意味する。
【０００７】
多くの疾病は、血液の微小循環の欠如に起因するということが、かなり前から知られている。この様な疾病の例を以下にあげる。
ＣＮＳ／中枢神経系：脳卒中、ＴＩＡ（一過性脳虚血発作）、ＰＲＩＮＤ（prolonged reversible neurological deficit）、ＣＮＳの慢性血管障害（chronic vascular disorder)、慢性頭蓋内灌流障害(chronic intracranial perfusion disorders)、慢性頭蓋外灌流障害(chronic extracranial perfusion disorders)、脳血管灌流障害(cerebrovascular perfusion disorders)、痴呆、アルツハイマー病、重度の中枢性眩暈（severe central vertigo)、
眼：慢性灌流障害（chronic perfusion disorder）、急性血管閉塞症（acute vascular occlusion）
耳：卒中性聴覚障害（Apoplectiform deafness）、内耳性眩暈（inner-ear-related vertigo）、メニエール病
肺：原発性肺高血圧症（primary pulmonary hypertension）、肺静脈閉塞性疾患（veno-occlusive lung diseases）、血栓性原発性肺高血圧症（thrombotic primary pulmonary hypertension）、大血管の血栓塞栓性疾患
心臓：移植血管症（transplant vasculopathy）、急性心筋梗塞、不安定狭心症、心臓の小血管疾患、手術不可能な重度の冠動脈心疾患（inoperable severe coronary heart disease）、心筋症（myocardiopathy）
腹部：オートナー症(Ortner's disease)
腎臓：腎臓血管症（renal vasculopathy）、糸球体腎炎（glomerulonephritis）、慢性腎不全（chronic renal insufficiency）
末梢動脈閉塞性疾患（peripheral arterial occlusive diseases）
急性血管閉塞症（acute vascular occlusions）
脈管炎（vasculitis）
敗血性ショック（septic shock）
腫瘍形成等の他の原因による播種性血管内凝固症候群（DIC）（Disseminated intravascular coagulation）
Ｉ型及びＩＩ型糖尿病
糖尿病性網膜症
糖尿病性神経障害
糖尿病性腎症
今日まで、これらの疾病は、主に医薬品によって処置され、しばしば症状のみを治療してきた。これまでのところ、微小循環を処置及び改善させる目的で使用されるアプローチ及び血液レオロジー（rheology of blood）は、血漿交換、ヘパリン誘発性体外ＬＤＬコレステロール沈殿（ＨＥＬＰ）、ならびにフィブリン及び／又はフィブリノゲンが特異的に結合するリガンドの添加によるフィブリノゲンの吸着である。特許文献２は、このタイプのリガンドの使用を記載している。言及されるリガンドは、グリシン−プロリン−アルギニン−プロリン−Ｘであると考えられる特別な選好の配列（sequence of particular preference）を有する、好ましくは３〜１０アミノ酸を含むペプチドである。
【０００８】
しかし、ペプチドの合成製造は、扱いにくく、費用のかかる仕事であり、特定の吸着剤のリガンドとしての使用を非常に高価なものにしている。さらに、一定の長さを超えると、ペプチドは抗体反応を引き起こすため、長期間にわたる反復投与は、極めて強い免疫反応を引き起こし得る。確かに、免疫防御を最小限にするために、最も短い有力なペプチドオリゴマーが使用されているが、免疫原性（immunogeneity）を完全に阻止することはできない。また、漏出、すなわち、ペプチド断片の気づかれない分離は、体の固有の構造の構成成分としてのペプチドが生物活性分子を構成するということを考えれば、特に危険である。
【０００９】
その点に関し（on its part）、免疫吸着療法は、非特許文献１に記載されるように、ＰＶＡゲル粒子に接着するアミノ酸としてトリプトファン又はフェニルアラニンを使用し、同様に複雑及び高価なものにしている。さらに、前記療法の過程において、ＩｇＧ及びＩｇＭ等の血漿から除去されるべきでない物質が、フィブリノゲンと同程度の量で血漿から分離される。
【００１０】
特許文献３及び特許文献４は、ペプチドフリーの吸着剤ビーズを記載している。しかし、特許文献３及び特許文献４に記載の吸着剤ビーズの実用的な適用は、血小板と過剰に強い結合を示すことがわかった。続いて、このタイプの吸着剤ビーズが、ＰＲＰ（多血小板血漿）（platelet-rich-plasma）と同様に、全血及び血液成分中のフィブリノゲン減少に使用され得る前に、フィブリノゲンに対する強い親和性と同時に、特に血小板に対する減少した親和性の点について、いくつかの改良が必要である。
【特許文献１】ＤＥ  ３９  ３２  ９７１
【特許文献２】ＤＥ  １９７  ２９  ５９１
【特許文献３】ＥＰ−Ａ１−１  １３２  １２８
【特許文献４】ＥＰ−Ａ１−１  １３２  １２９
【非特許文献１】Artificial Organs, vol. 20, No. 9 (1996), 986-990頁
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
従って、本発明の目的は、高い除去率（elimination rate）を与える、容易に製造でき、生体適合性があり、免疫防御を誘発せず、従来の吸着剤に比べて、血小板に対して親和性が低い一方で、同時にフィブリノゲンに対する高親和性を示すようにデザインされた、血液又は血漿中のフィブリノゲン及び／又はフィブリンの濃度を低減させるための吸着剤を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
この目的は、請求項に明記される実施の形態によって達成される。
【００１３】
特に、本発明は、末端エポキシ基の加水分解によって形成される末端ビシナルヒドロキシ基を示し、有機マトリクスに共有結合した合成側鎖を有する該有機マトリクスを包含し、前記合成側鎖がペプチドフリーであり、いかなる芳香族基も含まない、血液及び血漿中のフィブリノゲン及び／又はフィブリンの濃度を低減するための吸着剤に関する。
【００１４】
驚くべきことに、末端エポキシ基の加水分解によって形成される末端ビシナルヒドロキシ基を示し、有機マトリクスに共有結合した合成側鎖を有する該有機マトリクスを包含する吸着剤は、フィブリノゲンレベルの大幅な減少を引き起こし、処理後の微小循環を改善し、しかも、従来の吸着剤に比べ、同時に血小板に対する低い親和性が得られる。
【００１５】
処理された血液が敗血症又は感染症を発症する危険性を引き起こすことなく患者に戻されなければならないため、このタイプの吸着剤の使用に関する重要な側面は、滅菌できる能力、特に熱滅菌できる能力である。安定な側鎖を有する有機マトリクスである本発明に係る有機マトリクスとは対照的に、従来技術に利用されるペプチド及びアミノ酸は、熱的又は化学的に安定ではない。従って、該有機マトリクスに共有結合する合成側鎖は、完全にペプチドフリーである。
【００１６】
また、側鎖における芳香族基の存在も、フィブリノゲン及び／又はフィブリンに関する吸着剤の選択性をさらに減少すると同時に、結合キャパシティ（bonding capacity）に悪影響を与える。従って、本発明に係る共有結合した合成側鎖は、芳香族基を含まない。
【００１７】
本文中に使用される用語“合成（synthetic）”は、該有機マトリクスに側鎖を導入するために、生物学的な材料、特にペプチド、すなわちジペプチド、トリペプチド、オリゴペプチド、ポリペプチド、又はタンパク質（マクロペプチド）が、たとえそれらが合成的に製造されたとしても、使用されないことを意味する。１つの例としては、該有機マトリクスに共有結合する合成側鎖は、以下の構造を有することが可能である：
【００１８】
【化１】
2004358256.tif 000002
【００１９】
ここで、ｎは１〜１８、好ましくは１〜１０の整数であり、最も望ましくは１である。
【００２０】
原則的には、例えば炭水化物或いはポリアミドのみならず、アクリレート又はメタクリレートコポリマー等の有機マトリクスのような、有機マトリクスとなり得る様々な材料がある。本発明の範囲内において、好ましい有機マトリクスは、（メタ）アクリル酸エステルから得られたコポリマーである。用語“（メタ）アクリル（(meth)acrylic）”は、メタクリリック化合物（methacrylic componds）のみならず、対応するアクリリック（acrylic）を含むことを意図する。さらに好ましい有機マトリクスとしては、少なくとも１種のエポキシ（メタ）アクリレート、並びにアルキレンジ（メタ）アクリレート及びポリグリコールジ（メタ）アクリレートからなる群より選択される少なくとも１種の架橋剤から得られたコポリマーである。このタイプのコポリマーは、好ましくは、懸濁重合（susupension polymerization）によって製造される。
【００２１】
最も好ましい該有機マトリクスは、モノマー単位の総重量に対するそれぞれの場合の割合が以下：
（ｉ）５〜９５重量％、好ましくは４０〜８０重量％及び最も望ましくは６０重量％の量のグリシジルメタクリレート；ならびに
（ｉｉ）５〜９５重量％、好ましくは２０〜６０重量％及び最も望ましくは４０重量％の量のエチレングリコールジメタクリレート
のモノマー単位の重合によって製造されるランダムコポリマーである。
【００２２】
本発明によれば、本発明の一部として、例えば上記のコポリマーのようなエポキシ基（オキシラン基）を含む有機マトリクスは、１，２−ジオール基を意味する、末端ビシナルヒドロキシ基を形成するように、加水分解される。この加水分解は、例えば、１〜８Ｍ ＮａＯＨ、好ましくは４Ｍ ＮａＯＨ中で、室温付近〜９０℃の温度にて、３０分〜２４時間のインキュベーションによって行われ得る。該有機マトリクスのヒドロキシル数は、好ましくは吸着材料の乾燥重量に対して５０〜１０００μｍｏｌ／ｇである。このヒドロキシル数は、使用されたコポリマーのエポキシ基含量の関数として制御され得る。
【００２３】
該有機マトリクスは、表面積を増大させる多孔質の有機マトリクスを有する、球状の非凝集粒子、いわゆるビーズ、又は繊維、もしくは膜の形態であり得る。多孔性は、懸濁重合の反応混合物に、例えば、シクロヘキサノール又は１−ドデカノール等の細孔形成物質を混合することによって得ることができる。該有機マトリクスが、少なくとも１０7ダルトンの排除限界を有することは、フィブリノゲンが血漿と共に細孔内に浸透すること、及び末端ビシナルヒドロキシ基を含む該有機マトリクスの側鎖に到達することを可能にすることからも、有利である。
【００２４】
本発明の他の実施形態において、本発明に係る吸着剤は、キャリアマトリクス（carrier matrix）の好適な選択に基づいて、全血中で使用される。その趣旨で、該有機マトリクスは、粒径分布が好ましくは５０〜２５０μｍであり、その細孔半径分布が１０〜２００ｎｍである非凝集球形粒子から構成される。これは、血液細胞がカラムに詰まることなく、また、許容できない量の細胞が阻止され又は凝集を生じることなく吸着材料に接触させることを可能にする。本発明の吸着剤は、ビーズの平滑な外表面に沿って細胞を滑らせることで、フィブリノゲンを含む血漿が細孔内に浸透することを可能としながら、血小板の接着を最小限にするように、ビーズのサイズ及び球状形状によってそれを可能としている。
【００２５】
これは、血液細胞の分離、分離された血漿の処理及び血液成分の組み換え（recombination）等の体外処理を不要にし、そのようにして、例えば補体活性化（complement activation）の脅威をさらに顕著に減少させることによって、この方法の生体適合性を高めている。体外処理をなくすことは、処理時間を短縮し、及び方法を単純化し、かわりに、より一層安全で、患者にとって楽なものにしている。
【００２６】
本発明の吸着剤を使用した吸収体（adsorber）は、好ましくは、該吸着剤で満たされたチューブ又はカラムの形態のケーシング（casing）を含む。一方で血液又は血漿の典型的な処理量（throughput amount）、また他方で本発明に係る吸収体の有効性の観点から、該吸収体は、好ましくは２５０〜１２５０ｍｌの容量にデザインされる。該吸収体は、単一（single）、ツイン（twin）及びマルチユニット操作（operation）を可能にする。２以上の吸収体の使用は、１つの吸収体が血液又は血漿で満たされると同時に、他方の吸収体が再生（regenerate）されることによって、交互の操作を可能にし、そのようにして、本発明の吸収体の効果的な使用をさらに高めている。この吸収体は、好ましくは、その先が血液又は血漿を該吸収体に送り込む注入口（inlet）として特徴づけられるケーシングを有し、そのケースにおいて、排出口（outlet）が該吸収材ケーシングの底面に位置づけられるように設計される。
【００２７】
該吸着材料に起因する物質といった好ましくない物質が、処理された血液又は血漿と共に患者の血流中に再循環されることを防止するため、該吸収体ケーシングの排出口にフィルター、好ましくは粒子フィルターを備えることが望ましい。
【００２８】
他の目的としては、本発明は、血液又は血漿中のフィブリノゲン及び／又はフィブリンの濃度を低減するための上記の吸着剤の製造方法にも関し、前記方法は、以下の工程を含む：
（ａ）有機マトリクスに共有結合し、末端エポキシ基を露出した合成側鎖を有する該有機マトリクスの調製；
（ｂ）該有機マトリクスに共有結合した合成側鎖中への末端ビシナルヒドロキシ基の導入と同時の、該有機マトリクスのエポキシ基の加水分解；及び
（ｃ）適切な場合には、工程（ｂ）で得られた材料の温度＝１００℃での熱処理
この概念に沿った方法を適用することによって、容易に製造され、生体適合性があり、そして、いかなる免疫防御も引き起こすことがない吸着材料を得ることができる。驚いたことに、有機マトリクスに共有結合し、上記のような末端エポキシ基を示す合成側鎖を有する有機マトリクスの単純な加水分解は、優れたフィブリノゲン結合キャパシティと同時に血小板への減少した親和性を表す吸着材料を結果として生じた。
【００２９】
このタイプの吸着剤の使用に重要な側面は、処理された血液が敗血症又は感染症を発症する危険性を引き起こすことなく患者に戻されなければならないため、滅菌、特に好ましくは１００〜１４０℃、又は、さらに望ましくは、１２１℃にて、例えば２０〜６０分の持続時間で熱滅菌が可能なことである。特定の利点としては、熱処理及び滅菌が、単一の作業工程で行われ得ることである。さらに、本発明に従って製造された吸着剤は、生体適合性があることがわかっている。
【００３０】
本発明の方法の適用において利用される有機マトリクスは、好ましくは、吸収材料の乾燥重量に対して２５〜５００μｍｏｌ／ｇの量のエポキシ基を含む。該有機マトリクスは、好ましくは、少なくとも１種のエポキシ（メタ）アクリレートならびにアルキレンジ（メタ）アクリレート及びポリグリコールジ（メタ）アクリレートからなる群より選択される少なくとも１種の架橋剤から得られるコポリマーである。このコポリマーのタイプは、特に、ＷＯ９５／２６９８８に記載される懸濁重合によって製造され得る。
【００３１】
最も好ましい有機マトリクスは、モノマー単位の総重量に対するそれぞれの場合の割合が以下：
（ｉ）５〜９５重量％、好ましくは４０〜８０重量％及び最も望ましくは６０重量％の量のグリシジルメタクリレート；ならびに
（ｉｉ）５〜９５重量％、好ましくは２０〜６０重量％、及び最も望ましくは４０重量％の量のエチレングリコールジメタクリレート
のモノマー単位の重合によって製造されるランダムコポリマーである。
【００３２】
本発明に係る方法の一部としての加水分解を、例えば、１〜８Ｍ ＮａＯＨ、好ましくは４Ｍ ＮａＯＨ中にて、室温付近〜９０℃の温度範囲にて３０分〜２４時間の持続時間のインキュベーションによって行うことができる。
【発明の効果】
【００３３】
絶対的な記述を構成することなく、本発明に係る吸着剤の驚くべき効果の１つの説明は、フィブリノゲンと血小板間の相互作用が、ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩＡ（血小板膜糖タンパク（thrombocytic membrane glycoprotein））とフィブリノゲン分子のＤドメインのインテグリン結合配列間の相互作用によってはたらくことであるかもしれない。疎水性の程度が高まるにつれて増加する非生理的表面上のフィブリノゲンの結合強さに依存して、Ｄドメインのコンフォーメーションは変化しやすくなり、もはや血小板が相互作用することができない程度にまで至る。結果として、本発明に係る吸着剤は、高いフィブリノゲン結合と高い血小板回収率（high thrombocyte recovery rate）を兼ね合わせ、それ故、全血の適用にも使用が可能である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３４】
以下は、実施例によって本発明を、下記に限定することなく、さらに詳細に説明する。
実施例
コポリマーを、ＷＯ９５／２６９８８に記載される方法を用いて、懸濁重合によって、エチレングリコールジメタクリレート（ＥＧＤＭＡ）及びグリシジルメタクリレート（ＧＭＡ）から製造した。１８１ｇのＥＧＤＭＡ及び２７２ｇのＧＭＡ、ならびに開始剤（initiator）ＡＩＢＮ（モノマー単位の総重量に対して１重量％）と共に溶媒シクロヘキサノール（５４２ｇ）及びドデカノール（５４ｇ）の混合溶液を、３０７５ｍｌのポリビニルアルコール水溶液中で攪拌した。結果として生じた混合物を、２時間、５４℃にて重合させた。残留モノマーの７５℃及び８８℃における重合の後、この様にして得られた材料を、イソプロパノール及び水で洗浄し、そして分画（fractionate）した。
【００３５】
その後、この生成物を、およそ７０℃で３０分間、４Ｍ ＮａＯＨで加水分解した。
【００３６】
５ｍｌの熱滅菌された吸収材料（ＡＭ）を、小さなクロマトグラフィーカラムに満たした。該吸着剤を、蠕動ポンプ（peristaltic pump）を用いて流速５．２ｍｌ／ｍｉｎにて８０ｍｌの電解液（プライマー溶液（primer solution））で予備処理した。その後、流速３．２５ｍｌ／ｍｉｎにてカラムを通し、（シトレート（citrate）１５：１によって抗凝固処理された）全血３０ｍｌを処理した。５ｍｌずつを６つの各画分について採取した。処理前の値（pre-(process) value）及び各フラクションにおけるフィブリノゲン濃度を、ＣＬＡＵＳＳ法（Clauss, A., Rapid Coagulation-Physiological Method for  Determining the Fibrinogen: Acta Haematologica (1957) 17, 237-246）を用いてコアグロメーターモデルトロンボタイマー４（coagulometer model Thrombotimer 4（登録商標））（Behnk-Elektronik, Norderstedt製）にて測定した。結合キャパシティは、処理前値（pre-value）及び平均された処理後値（post-value）間の相違の関数であり、絶対的に結合したフィブリノゲン［ｍｇ］のＡＭ湿重量（ＷＷ）のグラムあたりとして表される（図１参照）。血小板回収率は、処理前値及び個々のフラクションにおける血球数を細胞解析モデルSysmex K-1000（登録商標）（Sysmex製）を用いて測定することで確立し（establish）、処理前値からのパーセント減少として表した（図２参照）。この試験を、８人の異なる血液提供者について行った。フィブリノゲン処理前値は、平均３２８ｍｇ／ｄｌ±７８ｍｇ／ｄｌと決定した。
【００３７】
図１から明らかなように、本発明の吸着剤は、特許文献３及び特許文献４に記載されるアミノ化したキャリア材料とほぼ同じくらい効果的にフィブリノゲンを結合する。また、図１は、本発明の吸着剤が、例えばDarmstadtの Rohm GmbH & Co. KGによって販売される Eupergit hydrolyzateよりも、はるかに強くフィブリノゲンを結合することを示している。本発明の意外な効果は、図２において明白である。特許文献３及び特許文献４に記載されるアミノ化したキャリア材料と同じくらい効果的にフィブリノゲンを結合する、この新規な吸着剤は、血小板回収率を大幅に増加させるという点で、これらよりも優れている。従って、本発明の吸着剤は、驚いたことに、低減された血小板に対する親和性を伴う、顕著なフィブリノゲンレベルの減少を組み合わせており（combine）、これらの性能特性の点を考慮すると、上記文献の吸着剤よりも優れている。
【図面の簡単な説明】
【００３８】
【図１】図１は、フィブリノゲンの減少、すなわち、ｇ  ＡＭ  ＷＷに対する、ｍｇでのフィブリノゲン結合を、参考の吸着剤との比較で表す。
【図２】図２は、血小板回収率を、処理前値のパーセントとして、相当するように選択された参照の吸着剤との比較で表す。
【符号の説明】
【００３９】
Ｈｙｄｒｏｘｙ−ＦＢ：本発明の上記実施例における吸着剤
Ａｍｉｎｏ−ＦＢ：特許文献４の実施例２における吸着剤
ＦＢ  ＦＩＢ  ＰＫ：グリシジルメタクリレート−エチレングリコールジメタクリレートコポリマーに基づく有機マトリクスを伴う、特許文献３における吸着剤
ＦＢ  Ｄａｌｉ：ＥＰ−Ａ１−０  ４２４  ６９８の実施例１における吸着剤
Ｅｕｐｅｒｇｉｔ  ＦＩＢ  ＰＫ：Darmstadtの Rohm GmbH & Co. KG によって販売される、Ｅｕｐｅｒｇｉｔに基づく有機マトリクスを伴う特許文献３における吸着剤
Ｈｙｄｒｏｘｙ−Ｅｕｐｅｒｇｉｔ：ＥｕｐｅｒｇｉｔのＮａＯＨ加水分解物
【図１】
2004358256.tif 000003
【図２】
2004358256.tif 000004