(57)【要約】【課題】合成が容易でかつ保存安定性にすぐれ、標識用蛍光試薬として有用なキノキサリン系複素環化合物を提供する。【解決手段】下記一般式（１）で表される活性塩素を有する複素環化合物。【化１】2004256488.tif 000033（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３は水素、脂肪族基または芳香族基を示し、Ｒ４は水素、脂肪族基または脂肪族炭化水素オキシ基を示す）【選択図】      なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（１）で表される活性塩素を有する複素環化合物。
【化１】
2004256488.tif 000023
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３は水素、脂肪族基または芳香族基を示し、Ｒ４は水素、脂肪族基または脂肪族炭化水素オキシ基を示す）
【請求項２】
下記一般式（２）で表される活性塩素を有する複素環化合物。
【化２】
2004256488.tif 000024
（式中、Ｒ４は水素、脂肪族基または脂肪族炭化水素オキシ基を示す）
【請求項３】
下記一般式（３）で表される複素環化合物。
【化３】
2004256488.tif 000025
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３は水素、脂肪族基または芳香族基を示し、Ｒ４は水素、脂肪族基または脂肪族炭化水素オキシ基を示し、Ｃｒｏｗｎは１級または２級のアミノ基を１つ有するクラウンエーテルの該アミノ基を結合する１つの水素原子を除いたクラウンエーテル残基を示す）
【請求項４】
下記一般式（４）で表される複素環化合物。
【化４】
2004256488.tif 000026
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３は水素、脂肪族基または芳香族基を示し、Ｒ４は水素、脂肪族基または脂肪族炭化水素オキシ基を示し、Ｃｒｏｗｎは１級または２級のアミノ基を２つ有するクラウンエーテルの該２つの各アミノ基に結合する１つの水素原子を除いた２価クラウンエーテル残基を示す）
【請求項５】
下記一般式（５）で表される複素環化合物。
【化５】
2004256488.tif 000027
（式中、Ｒ４は水素、脂肪族基または脂肪族炭化水素オキシ基を示し、Ｃｒｏｗｎは１級または２級のアミノ基を１つ有するクラウンエーテルの該アミノ基を結合する１つの水素原子を除いたクラウンエーテル残基を示す）
【請求項６】
下記一般式（６）で表される複素環化合物。
【化６】
2004256488.tif 000028
（式中、Ｒ４は水素、脂肪族基または脂肪族炭化水素オキシ基を示し、Ｒ５は脂肪族基を示し、ＸはＮＨ、ＳまたはＯを示す）
【請求項７】
下記一般式（１）
【化７】
2004256488.tif 000029
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３は水素、脂肪族基または芳香族基を示し、Ｒ４は水素、脂肪族基または脂肪族炭化水素オキシ基を示す）
で表される複素環化合物の製造方法において、下記一般式（７）
【化８】
2004256488.tif 000030
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４は前記と同じ意味を有する）
で表される複素環化合物を熱反応させることを特徴とする前記方法。
【請求項８】
下記一般式（２）
【化９】
2004256488.tif 000031
（式中、Ｒ４は水素、脂肪族基または脂肪族炭化水素オキシ基を示す）
で表される複素環化合物の製造方法において、下記一般式（８）
【化１０】
2004256488.tif 000032
（式中、Ｒ４は前記と同じ意味を有する）
で表される複素環化合物を熱反応させることを特徴とする前記方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は新規なキノキサリン系複素環化合物及びその製造方法に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
従来より、希薄溶液中の対象物質を高感度で検出し、その定量を行うために、対象物質に様々な標識を付加することが行われてきた。この場合の標識の付加は専ら共有結合により対象物質と標識物質を結合させることにより行われる。即ち、対象物質の標識部位のある特性を検出、評価することにより、間接的に対象物質の分析を行う方法である。感度の高さ、簡便さ、安全性の面から、標識部位として蛍光物質が最もよく利用されており、その目的で多くの蛍光性標識物質の開発が行われてきた。
対象物質がアミノ基、メルカプト基、ヒドロキシル基などの反応性基を有する化合物の場合、その標識化合物としては、それらの反応性対象物質の基と共有結合を形成させるために、反応性の官能基を有しているものが用いられる。この場合、対象物質との反応を穏和な条件で行うために、標識物質の官能基の反応性は非常に高くなければならない。反応性の高い官能基をもつ標識物質は、当然、安定性に欠け、長期間の保存に適さないことを意味している。該標識物質の劣化を避け、長期に保存するためには、通常、遮光、乾燥雰囲気、低温の条件が必要であった。
様々な蛍光性の標識試薬の中で、キノキサリンを母体とする試薬は、蛍光特性に優れるところから、しばしば標識物質として用いられ、何種類かの試薬が現在市販されている。
【０００３】
しかしながら、これらの試薬の調製には多段の合成反応が必要であったり、対象物質との反応にかかわる活性基の導入にも手間がかかった。このような理由のために、当然試薬は高価なものとならざるを得なかった。市販の標識試薬としては以下のようなものが知られている。これらの試薬では活性な官能基として、カルボン酸クロライドとメチレンブロマイドがキノキサリン母核に導入されているが、これらの官能基は空気中の水分により容易に分解を起こし、試薬は乾燥雰囲気下に低温で保存する必要がある。
【０００４】
（化合物ａ）
【化１１】
2004256488.tif 000002
【０００５】
（化合物ｂ）
【化１２】
2004256488.tif 000003
【０００６】
（化合物ｃ）
Ｊ．  Ｉｓｈｉｄａ，Ｍ．Ｙａｍａｇｕｃｈｉ，Ｉ．Ｙｕｍｉ  ａｎｄ  Ｍ．Ｎａｋａｍｕｒａ，“３，４−Ｄｉｈｙｄｒｏ−６，７−Ｄｉｍｅｔｈｏｘｙ−５−Ｍｅｔｈｙｌ−３−Ｏｘｏｑｕｉｎｏｚａｌｉｎｅ−２−ＣａｒｂｏｎｙｌＣｈｌｏｒｉｄｅ  ａｓ  ａ  Ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ  ＦｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅＤｅｒｉｖａｔｉｚａｔｉｏｎ  Ｒｅａｇｅｎｔ  ｆｏｒ  Ａｍｉｎｅｓ  ｉｎ  Ｌｉｑｕｉｄ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，”Ａｎａｌ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ．，２２３，３１９（１９８９）（非特許文献１）。
【０００７】
（化合物ｄ）
Ｍ．Ｙａｍａｇｕｃｈｉ，Ｓ．Ｈａｒａ，Ｒ．Ｍａｔｓｕｎａｇａ，Ｍ．Ｎａｋａｍａｕｒａ  ａｎｄ  Ｙ．Ｏｈｋｕｒａ，“３−Ｂｒｏｍｏｍｅｔｈｙｌ−６，７−Ｄｉｍｅｔｈｏｘｙ−１−Ｍｅｔｈｙｌ−２（１Ｈ）−Ｑｕｉｎｏｘａｌｉｎｏｎｅ  ａｓ  ａ  Ｎｅｗ  Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ  Ｄｅｒｉｖａｔｉｚａｔｉｏｎ  Ｒｅａｇｅｎｔ  ｆｏｒ  Ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ  Ａｃｉｄｓｉｎ  Ｈｉｇｈ−ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  Ｌｉｑｕｉｄ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，”Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ．，３４６，２２７（１９８５）（非特許文献２）。
【０００８】
（化合物ｅ）
Ｍ．Ｙａｍａｇｕｃｈｉ，Ｓ．Ｈａｒａ，Ｒ．Ｍａｔｓｕｓｉｔａ，Ｍ．Ｎａｋａｍａｕｒａ  ａｎｄ  Ｙ．Ｏｈｋｕｒａ，“Ｈｉｇｈｌｙ  Ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ  Ｆｌｕｏｒｏｇｅｎｉｃ  Ｒｅａｇｅｎｔ  ｆｏｒ  Ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ  Ａｃｉｄ，３−Ｂｒｏｍｏｍｅｔｈｙｌ−６，７−Ｄｉｍｅｔｈｏｘｙ−１−Ｍｅｔｈｙｌ−２（１Ｈ）−Ｑｕｉｎｏｘａｌｉｎｏｎｅ，ｉｎ  Ｈｉｇｈ−ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  Ｌｉｑｕｉｄ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，”Ａｎａｌ．Ｓｃｉ．，１，２９５（１９８５）（非特許文献３）。
【０００９】
【非特許文献１】
Ｊ．  Ｉｓｈｉｄａ，Ｍ．Ｙａｍａｇｕｃｈｉ，Ｉ．Ｙｕｍｉ  ａｎｄ  Ｍ．Ｎａｋａｍｕｒａ，Ａｎａｌ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ．，２２３，３１９（１９８９）
【非特許文献２】
Ｍ．Ｙａｍａｇｕｃｈｉ，Ｓ．Ｈａｒａ，Ｒ．Ｍａｔｓｕｎａｇａ，Ｍ．Ｎａｋａｍａｕｒａ  ａｎｄ  Ｙ．Ｏｈｋｕｒａ，Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ．，３４６，２２７（１９８５）
【非特許文献３】
Ｍ．Ｙａｍａｇｕｃｈｉ，Ｓ．Ｈａｒａ，Ｒ．Ｍａｔｓｕｓｉｔａ，Ｍ．Ｎａｋａｍａｕｒａ  ａｎｄ  Ｙ．Ｏｈｋｕｒａ，Ａｎａｌ．Ｓｃｉ．，１，２９５（１９８５）
【００１０】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、合成が容易でかつ保存安定性にすぐれ、標識用蛍光試薬として有用な新規なキノキサリン系複素環化合物及びその製造方法を提供することをその課題とする。
【００１１】
【課題を解決するための手段】
本発明によれば、以下に示すキノキサリン系複素環化合物及びその製造方法が提供される。
（１）下記一般式（１）で表される活性塩素を有する複素環化合物（１）。
【化１３】
2004256488.tif 000004
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３は水素、脂肪族基または芳香族基を示し、Ｒ４は水素、脂肪族基または脂肪族炭化水素オキシ基を示す）
（２）下記一般式（２）で表される活性塩素を有する複素環化合物（２）。
【化１４】
2004256488.tif 000005
（式中、Ｒ４は水素、脂肪族基または脂肪族炭化水素オキシ基を示す）
（３）下記一般式（３）で表される複素環化合物（３）。
【化１５】
2004256488.tif 000006
（式中、Ｒ１、Ｒ２は水素、脂肪族基または芳香族基を示し、Ｒ４は水素脂肪族基または脂肪族炭化水素オキシ基を示し、Ｃｒｏｗｎは１級または２級のアミノ基を１つ有するクラウンエーテルの該アミノ基を結合する１つの水素原子を除いたクラウンエーテル残基を示す由来の残基を示す）
（４）下記一般式（４）で表される複素環化合物。
【化１６】
2004256488.tif 000007
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３は水素、脂肪族基または芳香族基を示し、Ｒ４は水素、脂肪族基または脂肪族炭化水素オキシ基を示し、Ｃｒｏｗｎは１級または２級のアミノ基を２つ有するクラウンエーテルの該２つの各アミノ基に結合する１つの水素原子を除いた２価クラウンエーテル残基を示す）
（５）下記一般式（５）で表される複素環化合物（５）。
【化１７】
2004256488.tif 000008
（式中、Ｒ４は水素、脂肪族基または脂肪族炭化水素オキシ基を示し、Ｃｒｏｗｎは１級または２級のアミノ基を１つ有するクラウンエーテルの該アミノ基を結合する１つの水素原子を除いたクラウンエーテル残基を示す）
（６）下記一般式（６）で表される複素環化合物（６）。
【化１８】
2004256488.tif 000009
（式中、Ｒ４は水素、脂肪族基または脂肪族炭化水素オキシ基を示し、Ｒ５は脂肪族基を示し、ＸはＮＨ、ＳまたはＯを示す）
（７）下記一般式（１）
【化１９】
2004256488.tif 000010
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３は水素、脂肪族基または芳香族基を示し、Ｒ４は水素、脂肪族基または脂肪族炭化水素オキシ基を示す）
で表される複素環化合物の製造方法において、下記一般式（７）
【化２０】
2004256488.tif 000011
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４は前記と同じ意味を有する）
で表される標識前駆物質である複素環化合物を熱反応させることを特徴とする前記方法。
（８）下記一般式（２）
【化２１】
2004256488.tif 000012
（式中、Ｒ４は水素、脂肪族基または脂肪族炭化水素オキシ基を示す）
で表される複素環化合物の製造方法において、下記一般式（８）
【化２２】
2004256488.tif 000013
（式中、Ｒ４は前記と同じ意味を有する）
で表される標識前駆物質である複素環化合物を熱反応させることを特徴とする前記方法。
【００１２】
【発明の実施の形態】
前記一般式（１）、（３）、（４）、（７）において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３は水素、脂肪族基または芳香族基を示す。
該脂肪族基において、その炭素数は１〜１８、好ましくは１〜８である。該脂肪族基には、飽和及び不飽和の鎖状及び環状の炭化水素基（アルキル基、アルケニル基等）が包含される。
該脂肪族基の具体例としては、メチル、エチル、プロピル、ブチル、オクチル、ドデシル、ステアリル、ベヘニル、シクロヘキシル、ビニル、プロペニル、ブテニル、ドデセニル、シクロヘキセニル等が挙げられる。
【００１３】
該芳香族基において、その炭素数は６〜２４、好ましくは６〜１２である。該芳香族基には、アリール基及びアリールアルキル基が包含される。
該芳香族基の具体例としては、フェニル、トリル、ナフチル、ベンジル、フェネチル、ナフチルメチル、ナフチルエチル等が挙げられる。
【００１４】
前記一般式（１）〜（８）において、Ｒ４は水素、脂肪族基または脂肪族炭化水素オキシ基を示す。
該脂肪族基は、Ｒ１〜Ｒ３に関して示したのと同様の意味を有する。
該脂肪族炭化水素オキシ基は、一般式ＲＯ−で表される基である。この場合、Ｒは脂肪族基を示すが、この脂肪族基は、Ｒ１〜Ｒ３に関して示したのと同様の意味を有する。
【００１５】
前記一般式（６）において、Ｒ５は脂肪族基を示すが、この脂肪族基は、Ｒ１〜Ｒ３に関して示したのと同様の意味を有する。
【００１６】
前記一般式（３）及び（５）において、Ｃｒｏｗｎは、１級または２級アミノ基を１つ有するクラウンエーテルの該アミノ基に結合する１つの水素原子を除いたクラウンエーテル残基を示す。
該クラウンエーテルにおいて、その分子量は、通常、２００〜８００、好ましくは２００〜３００である。
該クラウンエーテルの具体例としては、例えば、１−アザ−１５−クラウン５−エーテル、１−アザ−１８−クラウン６−エーテル、４’−アミノベンゾ−１５−クラウン５−エーテル等が挙げられる。
【００１７】
前記一般式（４）において、Ｃｒｏｗｎは、１級または２級アミノ基を２つ有するクラウンエーテルの該２つの各アミノ基に結合する１つの水素原子を除いた２価クラウンエーテル残基を示す。
該クラウンエーテルにおいて、その分子量は、通常、２００〜８００、好ましくは２００）〜３００である。
該クラウンエーテルの具体例としては、例えば、４，１３−ジアザ−１８−クラウン６−エーテル、４，１０−ジアザ−１５−クラウン５−エーテル等が挙げられる。
【００１８】
本発明によるキノキサリン系複素環化合物（以下、単に本発明化合物とも言う）は、下記一般式（１１）で表される２位と３位に塩素置換されたキノキサリンを出発原料として用いて合成される。
【化２３】
2004256488.tif 000014
（式中、Ｒ４は前記と同じ意味を有する）
【００１９】
一般式（１）の本発明化合物（１）を合成するには、まず、前記一般式（１１）で表されるキノキサリン（１１）に対し、下記一般式（１２）
【化２４】
2004256488.tif 000015
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３は前記と同じ意味を有する）
で表されるアリルアルコール誘導体（１２）と反応させて、２位の塩素がアリルアルコール誘導体残基で置換された前記一般式（７）の化合物（７）を合成した後、これを熱反応させる。
前記の反応により、前記一般式（１）で表される複素環化合物（１）を得ることができる。
【００２０】
また、本発明によれば、前記アリルアルコール誘導体の代わりに、２つのヒドロキシル基を持つ２−ブテニル−１，３−プロパンジオールを用いて同様の反応を行うことにより、前記一般式（２）で表される化合物（２）を得ることができる。この場合、前記一般式（１１）で表される化合物と２−ブテニル−１，３−プロパンジオールとの反応により、前記一般式（８）の化合物（８）を得ることができ、これを熱反応させることにより、前記一般式（２）の化合物を得ることができる。
【００２１】
前記一般式（１１）の化合物と前記一般式（１２）のアリルアルコール誘導体又は２−ブテニル−１，３−プロパンジオールとの熱反応は、塩基の存在下で、不活性な極性有機溶媒中で、４０〜１００℃の温度で実施される。
塩基としては、無水炭酸カリウム等の無機塩基や、トリエチルアミン、ピリジンなどの有機塩基が用いられ、極性溶媒としては、アセトン、Ｎ，Ｎ’−ジメチルイミダゾリジノン、ジメチルスルホキシド、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドなどの脱水溶媒が用いられる。
前記反応は、具体的には、塩素置換キノキサリン（１１）とアルケニルアルコールとを当量で、またはやや過剰のアルケニルアルコールを塩基と共に溶媒に溶かし、乾燥雰囲気下で数時間または１日程度加熱を行う。反応物の回収は、反応液を水中に注ぎ、析出物を濾過によるか、またはクロロホルムやトルエンなどで抽出することにより行う。また、反応物の回収は、反応液を減圧下に加熱して、溶媒を除き、残留物をクロロホルムやトルエンで抽出することによっても行うことができる。精製は、再結晶法またはシリカゲルカラムを用いて行うことができる。
【００２２】
前記一般式（７）及び一般式（８）の化合物の熱反応は、置換基を転位させる反応である。一般式（７）の化合物の場合、酸素原子に結合する下記一般式（１３）
【化２５】
2004256488.tif 000016
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３は前記と同じ意味を有する）
で表される置換基が１位の窒素原子に転位する。一方、一般式（８）の化合物の場合、酸素原子に結合する下記式（１４）
【化２６】
2004256488.tif 000017
で表される置換基が１位の窒素原子に転位する。
この熱転位反応において、その反応温度は１５０〜３００℃、好ましくは１８０〜２５０℃である。また、この反応は、窒素ガス等の不活性ガス雰囲気下において、有機溶媒中において好ましく実施される。有機溶媒としては、ドデカン、ジフェニルエーテル等の沸点２５０℃以上の高沸点炭化水素溶媒や、高沸点エーテル溶媒等が挙げられる。
【００２３】
前記熱反応により得られる反応生成物は、蛍光物質であり、そのまま標識物質として使用することができる。また、必要に応じ、溶媒を除去し、トルエン、アセトニトリル等の適当な不活性有機溶媒に置換して使用することができる。
【００２４】
本発明による活性塩素を有するキノキサリン系複素環化合物は、有機溶媒溶液状態で、アミノ化合物、ヒドロキシ化合物、メルカプト化合物等の活性水素を有する化合物と容易に縮合する。この場合の結合反応は、本発明化合物の有機溶媒溶液に、有機塩基又は無機塩基の存在下において室温ないし３０〜６０℃の加温下で実施することができる。
【００２５】
本発明によれば、前記一般式（１）で表される化合物（１）に対し、１級又は２級アミノ基を１つ有するクラウンエーテル化合物を反応させることにより、前記一般式（３）で表される複素環化合物（３）を得ることができる。
本発明によれば、前記一般式（１）で表される化合物（１）に対し、１級又は２級アミノ基を２つ有するクラウンエーテル化合物を反応させることにより、前記一般式（４）で表される複素環化合物（４）を得ることができる。
本発明によれば、前記一般式（２）で表される化合物（２）に対し、１級又は２級アミノ基を１つ有するクラウンエーテル化合物を反応させることにより、前記一般式（５）で表される複素環化合物（５）を得ることができる。
前記した本発明化合物とアミノ基を有するクラウンエーテル化合物との反応は、有機塩基又は無機塩基の存在下で常温ないし３０〜６０℃の加温下で実施することができる。
【００２６】
前記一般式（３）〜（５）で表されるクラウンエーテルが結合した複素環化合物（３）〜（５）は、クラウンエーテル特有の性質により、金属イオンやアンモニウム基を有する有機化合物をその環の内孔へ捕捉することが可能な化合物である。金属イオンやアンモニウム基を捕捉すると、キノキサリンの蛍光強度の著しい増減や発光波長の変化が現れる。このような蛍光挙動の変化を利用すると、水溶液中または有機溶媒中に存在する金属イオンやアンモニウム基を有する有機化合物を検知したり、あるいは定量を行うなど可能であり、本発明のクラウンエーテルが結合した複素環化合物は分析用の試薬として有用である。
【００２７】
本発明によれば、前記一般式（２）で表される化合物（２）に対し、アミノ化合物、メルカプト化合物又はヒドロキシ化合物を反応させることにより、前記一般式（６）で表される化合物（６）を得ることができる。この化合物（６）は、金属イオンに対する配位性の官能基（カルボニル酸素、及びヘテロ原子Ｘ）を有し、クラウンエーテルが結合した複素環化合物（３）〜（５）と同様に蛍光挙動の変化を利用して分析用の試薬として、また、金属の回収・分離材料として有用である
前記アミノ化合物、メルカプト化合物及びヒドロキシ化合物としては、従来公知の様々な脂肪族系及び芳香族系化合物が用いられる。
【００２８】
【実施例】
次に本発明を実施例により詳述する。
【００２９】
実施例１
［下記式（１５）の化合物（１５）の合成方法］
【化２７】
2004256488.tif 000018
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は水素を示す）
【００３０】
２，３−ジクロロキノキサリン１．９９ｇ、アリルアルコール１．１６ｇ、およびジメチルイミダゾリジノン２０ｍｌを無水炭酸カリウム１．６６ｇの存在下、１夜９５℃で加熱攪拌した。反応液より無機塩を濾別し、溶媒を真空蒸発させた後、残留物から目的物をシリカゲルのクロマトグラフ（溶離液クロロホルム）により単離精製した。無色粘稠液体１．１５ｇ。室温に１月間放置しても、薄層クロマトグラフでは分解物は認められない。
【００３１】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＴＭＳ）：５．０７−５．０８（２Ｈ，ｍ，ＯＣＨ２−），５．３５−５．３７（１Ｈ，ｍ，＝ＣＨ２），５．５２−５．５６（１Ｈ，ｍ，＝ＣＨ２），７．５７−７．９５（１Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ），７．６６−７．７（１Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ），７．８３−７．８５（１Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ），７．９３−７．９５（１Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ）
【００３２】
実施例２
（熱転位反応とそれに連続したアミノクラウンエーテルとの反応）
実施例１で得た式（１５）の化合物０．２６ｇにジフェニールエーテル３．５ｍｌを加え、窒素雰囲気下に２２０℃で２４時間加熱した。反応液に無水炭酸カリウム０．１９５ｇと１−アザ−１８−クラウン６−エーテル０．３７９ｇを加え、５０℃で１日攪拌した。反応液より無機塩を濾別した後、真空乾燥した。残留物からシリカゲルのクロマトグラフ（溶離液アセトン−クロロホルム１：９）で精製して、下記式（１６）の化合物（１６）を得た。収量０．３０７ｇ。
【００３３】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＴＭＳ）：３．６８−３．７２（１６Ｈ，ｍ，ＯＣＨ２−），３．８５（４Ｈ，ｔ，Ｊ＝６Ｈｚ，ＮＣＨ２−），４．１（４Ｈ，ｔ，Ｊ＝６Ｈｚ，ＮＣＨ２−），４．８３−４．８４（２Ｈ，ｍ，ＯＣＨ２−），５．１２−５．１６（１Ｈ，ｍ，＝ＣＨ２），５．２２−５．２４（１Ｈ，ｍ，＝ＣＨ２），５．９−５．９５（１Ｈ，ｍ，＝ＣＨ−），７．０８−７．１（１Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ），７．１４−７．１９（２Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ），７．４５−７．４７（１Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ）
【００３４】
【化２８】
2004256488.tif 000019
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４は水素、Ｃｒｏｗｎは１−アザ−１８−クラウン６−エーテルよりアミノ基の水素が脱離した残基）
【００３５】
実施例３
（下記式（１７）で表される複素環化合物（１７）の合成）
【化２９】
2004256488.tif 000020
（式中、Ｃｒｏｗｎは１級または２級のアミノ基を２つ有するクラウンポリエーテル残基、Ｒ４は水素）
【００３６】
実施例１で得た化合物（１５）０．４６ｇにジフェニールエーテル８ｍｌを加え、窒素雰囲気下に２２０℃で２４時間加熱した。反応液に無水炭酸カリウム０．６３ｇと４，１３−ジアザ−１８−クラウン６−エーテル０．２５ｇを加え、５０℃で１日攪拌した。反応液より無機塩を濾別した後、真空乾燥した。残留物からシリカゲルのクロマトグラフ（溶離液アセトン−クロロホルム  １：９）で目的物を分離精製した。収量０．２７ｇ
【００３７】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＴＭＳ）：３．６７（８Ｈ，ｓ，ＯＣＨ２−），３．８７（８Ｈ，ｔ，Ｊ＝６Ｈｚ，ＯＣＨ２−），４．１２（８Ｈ，ｔ，Ｊ＝６Ｈｚ，ＮＣＨ２−），４．８３−４．８４（４Ｈ，ｍ，ＯＣＨ２−），５．１２−５．１６（２Ｈ，ｍ，＝ＣＨ２），５．２２−５．２４（２Ｈ，ｍ，＝ＣＨ２），５．８９−５．９６（２Ｈ，ｍ，＝ＣＨ−），７．０８−７．１（２Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ），７．１３−７．１９（４Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ），７．４５−７．４７（２Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ）
【００３８】
実施例４
［下記式（１８）の化合物（１８）の合成］
【化３０】
2004256488.tif 000021
（式中、Ｒ４は水素）
【００３９】
２，３−ジクロロキノキサリン７．９６ｇ、２−メチレン−１，３−プロパンジオール１．７６ｇ、無水炭酸カリウム８．５ｇに溶媒Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミノＮ−ジメチルアセトアミド３０ｍｌを加え、１００℃で１日加熱攪拌した。反応液より無機塩を濾別し、溶媒を真空蒸発させて得られた残留物をシリカゲルクロマトグラフで処理した。収率７８％。室温に１月間放置しても、薄層クロマトグラフでは分解物は認められない。
【００４０】
実施例４
［下記式（１９）で表される複素環化合物（１９）の合成］
【化３１】
2004256488.tif 000022
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は水素、Ｃｒｏｗｎは１−アザ−１８−クラウン６−エーテルよりアミノ基の水素が脱離した残基）
実施例３で得た式（１８）の化合物０．１０ｇにジフェニールエーテル２ｍｌを加え、窒素雰囲気下に２２０℃で２４時間加熱した。反応液に無水炭酸カリウム０．０９ｇと１−アザ−１８−クラウン６−エーテル０．１４ｇを加え、５０℃で１日攪拌した。反応液より無機塩を濾別した後、真空乾燥した。残留物からシリカゲルのクロマトグラフ（溶離液アセトン−クロロホルム  １：９）で精製して、式（１９）の化合物を得た。収率６４％。
【００４１】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＴＭＳ）：３．６６−３．６９（３２Ｈ，ｍ，ＯＣＨ２−），３．８５（８Ｈ，ｔ，Ｊ＝６Ｈｚ，ＯＣＨ２−），４．１（８Ｈ，ｓ，Ｊ＝６Ｈｚ，ＮＣＨ２−），７．０１−７．４７（２Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ），７．０７−７．１１（２Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ），７．１５−７．１８（２Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ），
７．４５−７．４７（２Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ）
【００４２】
実施例５
実施例４と同様に、化合物（１８）の熱転位反応を行い、オクタデシルアミンを反応させることにより、一般式（６）において、Ｒ４は水素、Ｒ５はオクタデシル基、ＸはＮＨの化合物が得られた。収率６８％。
【００４３】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＴＭＳ）：０．８１（６Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，ＯＣＨ２−），１．１８−１．２９（５６Ｈ，ｍ，−ＣＨ２−），１．３２−１．３６（４Ｈ，ｍ，−ＣＨ２−），３．４４−３．４７（４Ｈ，ｍ，ＮＣＨ２−），６．２６（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６Ｈｚ，ＮＨ），６．９９−７．（２Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ），７．０３−７．０６（２Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ），７．１４−７．１７（２Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ），７．４７−７．４９（２Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ）
【００４４】
同様にして、オクタデシルメルカプタンとの反応により、一般式（６）において、Ｒ４は水素、Ｒ５はオクタデシル基、ＸはＳの化合物が得られた。収率４２％。
【００４５】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＴＭＳ）：０．８７（６Ｈ，ｔ，ＣＨ３），１．２１−１．３６（５６Ｈ，ｍ，−ＣＨ２−），１．４５−１．５２（４Ｈ，ｍ，−ＣＨ２−），１．７３−１．７７（４Ｈ，ｔｔ，−ＣＨ２−），３．１８（４Ｈ，ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，−ＳＣＨ２−），４．８１（２Ｈ，ｓ，＝ＣＨ２），４．９７（４Ｈ，ｓ，ＮＣＨ２−），７．２２−７．３３（２Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ），７．３７−７．４（１Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ），７．７５−７．７７（１Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ）
【００４６】
【発明の効果】
本発明によれば、蛍光標識物質の前駆体であるキノキサリン系複素環化合物を容易に合成することができる。これは保存安定性に優れる。
本発明による前駆体の熱転位反応により生成する、活性塩素を有するキノキサリン系複素環化合物は、標識物質として有利に用いることができる。