(57)【要約】【課題】測定時間内に一定の閾値に到達しない検体について、測定時間内に得られた透過光若しくは吸光度の変化のデータを用いることにより測定時間を延長することなく一定の閾値に到達する時間を推定し、高感度測定を可能にする装置と方法を提供する。【解決手段】被検試料とゲル化若しくは色素発生試薬との混合後であって反応により変化する前の透過光量若しくは吸光度と、経時的に変化する透過光量若しくは吸光度との比率を測定するか、若しくは被検試料の反応による該比率の経時変化（タイムコース）をモニターし、該比率が予め定めた一定の値(ゲル化若しくは色素発生判定閾値)に到達するまでの時間を測定するか、若しくは測定時間終了時点で前記ゲル化若しくは色素発生判定閾値に到達していない場合に、モニターしていたタイムコースを推定計算により測定時間以降に延長し推定タイムコース曲線を計算し、該推定タイムコース曲線が前記ゲル化若しくは色素発生判定閾値に到達する時間を算出することによって、測定時間内に一定の閾値に到達しない検体の短時間の測定を可能とした。【選択図】        図４
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
被検試料とゲル化若しくは色素発生試薬との混合後であって反応により変化する前の透過光量若しくは吸光度と、経時的に変化する透過光量若しくは吸光度との比率を測定する手段と、被検試料の反応による該比率の経時変化（タイムコース）をモニターする手段と、該比率が予め定めた所定の値(ゲル化若しくは色素発生判定閾値)に到達するまでの時間を測定する手段と、測定時間終了時点で前記ゲル化若しくは色素発生判定閾値に到達していない場合に、モニターしていたタイムコースを推定計算により測定時間以降に延長し推定タイムコース曲線を計算し、該推定タイムコース曲線が前記ゲル化若しくは色素発生判定閾値に到達する時間を算出する推定値計算プログラムと、を具備することを特徴とする測定値推定機能を持つ生化学的若しくは免疫学的測定装置。
【請求項２】
前記ゲル化若しくは色素発生判定閾値は、被検試料とゲル化若しくは色素発生試薬との混合時点から前記比率が反応進行による変化を開始し始めた後の値であって且つこの値に達する時間と被検試料中の測定対象物質濃度との間に一定の相関関係が認められる予め設定された一定値である請求項１記載の測定装置。
【請求項３】
前記ゲル化若しくは色素発生試薬が、エンドトキシン、β―グルカン又はペプチドグリカン測定用試薬である請求項１又は２記載の測定装置。
【請求項４】
前記ゲル化若しくは色素発生試薬は、カブトガニ血球由来の試薬、蚕体液由来の試薬又はエンドトキシン若しくはβ―グルカン測定用合成基質含有試薬である請求項１〜３のいずれかに記載の測定装置。
【請求項５】
前記プログラムは、測定時間終了時点付近のタイムコースデータのノイズを補正し、その後の推定に使用できるレベルの補正タイムコースを得る手段を具備する請求項１〜４のいずれかに記載の測定装置。
【請求項６】
前記プログラムは、タイムコースの最終測定点及び／又はその前の連続する数点の測定ポイント（推定処理ポイント）を認定する手段と、該推定処理ポイント各点の傾きの平均値を算出し、推定継続の可否判定を実施する手段と、該推定処理ポイントを使用して、関数式１及び関数式２によるカーブフィッティングを実施する手段と、前記ゲル化若しくは色素発生判定閾値と前記関数式１及び関数式２によるカーブフィッティングの曲線との交点を算出し推定値の候補とする手段と、該関数式１によるカーブフィッティングと関数式２によるカーブフィッティングとによるカーブフィッティングとの推定値候補値の比を算出し、その比の値を基準とする計算式で推定値を算出する手段と、を具備する請求項１〜５のいずれかに記載の測定装置。
【請求項７】
前記関数式１が一次式であり、前記関数式２が二次式である、請求項６に記載の測定装置。
【請求項８】
前記一次式による推定値Ｔ１と前記二次式による推定値Ｔ２との差が、所定の値より小さい場合は推定値をＴ１とし、所定の値より大きい場合は、推定値を（Ｔ１＋Ｔ２）／２とする請求項７に記載の測定装置。
【請求項９】
前記ゲル化若しくは色素発生判定閾値に到達するまでの時間をゲル化時間若しくは活性化時間とし、予め求めた測定物質濃度と該ゲル化時間若しくは活性化時間との関係に基づいて被検試料中の測定物質濃度を求める手段を具備する請求項１〜８のいずれかに記載の測定装置。
【請求項１０】
被検試料とゲル化若しくは色素発生試薬との混合後であって反応により変化する前の透過光量若しくは吸光度と、経時的に変化する透過光量若しくは吸光度との比率を測定し、被検試料の反応による透過光量の比率若しくは吸光度の経時変化（タイムコース）をモニターし、該比率が予め定めた一定の値(ゲル化若しくは色素発生判定閾値)に到達するまでの時間を測定するか若しくは、測定時間終了時点で前記ゲル化若しくは色素発生判定閾値に到達していない場合に、モニターしていたタイムコースを推定計算により測定時間以降に延長して推定タイムコース曲線を計算し、該推定タイムコース曲線が前記ゲル化若しくは色素発生判定閾値に到達する時間を算出することを特徴とする生化学的若しくは免疫学的測定方法。
【請求項１１】
前記ゲル化若しくは色素発生判定閾値に到達するまでの時間をゲル化時間若しくは活性化時間とし、予め求めた測定対象物質濃度と該ゲル化時間若しくは活性化時間との関係に基づいて被検試料中の測定物質濃度を求める請求項１０記載の測定方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
この発明は、測定対象物質濃度の測定に使用される測定値推定機能を持つ生化学的若しくは免疫学的測定装置及び測定方法に係り、詳記すれば、測定時間内に一定の閾値に到達しないため測定に長時間要する検体について、迅速に測定できるようにした測定値推定機能を持つ生化学的若しくは免疫学的測定装置及び測定方法に関する。
【０００２】
【従来技術】
本発明は、主としてエンドトキシン、β―グルカン又はペプチドグリカンの測定に使用されるが、この代表例であるエンドトキシンは、発熱性物質の代表的なものである。このエンドトキシンが混入した血液、注射液などが生体内に注入されると強い発熱やショックなどの重篤な副作用を引き起こすことが知られている。
【０００３】
近年、エンドトキシンの測定法としては、カブトガニ血球成分、例えばリムルス・アメーボサイト・ライセート（以下ＬＡＬと略す。）がエンドトキシンと反応してゲル化することが見出され、これを応用したエンドトキシンの測定法が開発されている。
【０００４】
しかしながら、この従来のエンドトキシンの測定法は、正確で安定した測定値を得るという点に問題があったので、本出願人は、各々にゲル化試薬を混合した２以上の被検試料に各々光線を照射し、混合後の透過光量の最大値（反応により変化する前の値）と経時的に変化する透過光量との比率を各々測定し、混合時点から該比率が急激な減少を開始し始めた後の値であってかつ予め設定された一定値(ゲル化判定閾値)に到達する時点までを前記試料のゲル化時間として求め、予め求めたエンドトキシン濃度と該ゲル化時間との関係に基づいて前記二以上の被検液試料中のエンドトキシン濃度を並列して求める方法（時間測定法）を開発し、先に特許を取得している（特許文献1参照）。尚、この方法は、エンドトキシンに限らず、β―グルカン及びペプチドグリカンの測定にも使用し得るものであり、またゲル化時間でなく、色素が発生する活性化時間でも同様にして行うことができるものである。
【０００５】
【特許文献1】
特許第１８６０５７６号
【発明が解決しようとする課題】
上記時間測定法は、感度良く効率的に測定ができるという利点があったが、測定時間内にゲル化判定閾値に到達しない検体については、所定の濃度以下という結果しか得られなかった。このように一定の測定時間内で陽性判定されないサンプルに対しては、測定値が出せないため、測定時間を長くして再測定を実施するか、あらかじめ十分長い測定時間を設定して測定を実施する必要があった。そのため、処理能力の低下を生ずる問題があった。
【０００６】
この発明は、このような点に着目してなされたものであり、測定時間内に一定の閾値に到達しない検体について、測定時間内に得られた透過光若しくは吸光度の変化のデータを用いて一定の閾値に到達する時間を推定し、測定時間を延長することなく高感度測定を可能にする装置と方法を提供することを目的とする。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
上記目的に沿う本発明のうち請求項１に記載の発明は、被検試料とゲル化若しくは色素発生試薬との混合後であって反応により変化する前の透過光量若しくは吸光度と、経時的に変化する透過光量若しくは吸光度との比率を測定する手段と、被検試料の反応による該比率の経時変化（タイムコース）をモニターする手段と、該比率が予め定めた所定の値(ゲル化若しくは色素発生判定閾値)に到達するまでの時間を測定する手段と、測定時間終了時点で前記ゲル化若しくは色素発生判定閾値に到達していない場合に、モニターしていたタイムコースを推定計算により測定時間以降に延長し推定タイムコース曲線を計算し、該推定タイムコース曲線が前記ゲル化若しくは色素発生判定閾値に到達する時間を算出する推定値計算プログラムと、を具備することを特徴とする。
【０００８】
ゲル化若しくは色素発生判定閾値は、被検試料とゲル化若しくは色素発生試薬との混合時点から前記比率が反応進行による変化を開始し始めた後の値であってかつこの値に達する時間と被検試料中の測定対象物質濃度との間に一定の関係が認められる予め設定された一定値とするのが良い（請求項２）。
【０００９】
ゲル化若しくは色素発生試薬としては、エンドトキシン、β―グルカン又はペプチドグリカン測定用試薬が好ましい（請求項３）。言いかえれば、測定対象物質としては、エンドトキシン、β―グルカン、ペプチドグリカン等が好ましい
【００１０】
本発明に使用するゲル化若しくは色素発生試薬は、カブトガニ血球由来の試薬（リムルステスト：エンドトキシン及びβ―グルカンの測定ができる試薬）、蚕体液由来の試薬（SLP試薬：β―グルカン及びペプチドグリカンの測定ができる試薬）又は合成基質含有試薬（エンドトキシン及びβ―グルカンの測定ができる試薬）であるのが好ましい（請求項４）。
【００１１】
本発明の測定値推定プログラムは、測定時間終了時点付近のタイムコースデータのノイズを補正し、その後の推定に使用できるレベルの補正タイムコースを得る手段を具備するのが好ましい（請求項５）。
【００１２】
本発明のプログラムは、タイムコースの最終測定点及び／又はその前の連続する数点の測定ポイント（推定処理ポイント）を認定する手段と、該推定処理ポイント各点の傾きの平均値を算出し、推定継続の可否判定を実施する手段と、該推定処理ポイントを使用して、関数式１及び関数式２、要すればその他の関数式によるカーブフィッティングを実施する手段と、前記ゲル化若しくは色素発生判定閾値と前記関数式１及び関数式２、要すればその他の関数式によるカーブフィッティングの曲線との交点を算出し推定値の候補とする手段と、該関数式１によるカーブフィッティングと関数式２によるカーブフィッティングと要すればその他の関数式のカーブフィッティングとの推定値候補値の比を算出し、その比の値を基準とする計算式で推定値を算出する手段と、を具備するようにするのが良い（請求項６）。
ここで用いられる関数式１、関数式２及びその他の関数式は、一次式、二次式又は三次式等を表し、統計学等において、関数をあてはめることにより得られるカーブフィッティングを実施するために用いられる式であり、好ましくは最小自乗法等により求められる式等が挙げられる。本発明の場合、上記関数式１が一次式であり、上記関数式２が二次式であることが好ましい（請求項７）。
【００１３】
前記一次式による推定値Ｔ１と前記二次式による推定値Ｔ２との差が、所定の値より小さい場合は推定値Ｔ１とし、所定の値より大きい場合は、推定値を（Ｔ１＋Ｔ２）／２とするのが良い（請求項８）。
【００１４】
ゲル化若しくは色素発生判定閾値に到達するまでの時間をゲル化時間若しくは活性化時間とし、予め求めた測定物質濃度と該ゲル化時間若しくは活性化時間との関係に基づいて被検試料中の測定物質濃度を求める手段を具備するのが良い（請求項９）。
【００１５】
本発明の測定方法は、被検試料とゲル化若しくは色素発生試薬との混合後であって反応により変化する前の透過光量若しくは吸光度と、経時的に変化する透過光量若しくは吸光度との比率を測定し、被検試料の反応による透過光量の比率若しくは吸光度の経時変化（タイムコース）をモニターし、該比率が予め定めた一定の値(ゲル化若しくは色素発生判定閾値)に到達するまでの時間を測定するか、若しくは測定時間終了時点で前記ゲル化若しくは色素発生判定閾値に到達していない場合に、モニターしていたタイムコースを推定計算により測定時間以降に延長して推定タイムコース曲線を計算し、該推定タイムコース曲線が前記ゲル化若しくは色素発生判定閾値に到達する時間を算出することを特徴とする（請求項１０）。
【００１６】
ゲル化若しくは色素発生判定閾値に到達するまでの時間をゲル化時間若しくは活性化時間とし、予め求めた測定物質濃度と該ゲル化時間若しくは活性化時間との関係に基づいて被検試料中の測定物質濃度を求めるのが良い（請求項１１）。
【００１７】
要するに本発明は、モニターしているタイムコースを測定時間以降に延長することにより、将来生じるゲル化時間若しくは色素発生時間（活性化時間）を推定するという従来全く行われていなかった方法を行うことによって、該推定した閾値に到達するまでの時間と一定の相関関係が認められる被検試料中の測定対象物質濃度を短時間で測定し得るようにしたことを要旨とするものである。
【００１８】
【発明の実施の形態】
次に、本発明の実施の形態を説明する。
【００１９】
測定対象物質（例えば、エンドトキシン、β―グルカン又はペプチドグリカン等）を含有する被検試料とＬＡＬ試薬若しくはSLP試薬とを混合して得た試液に対し、光源（例えばＬＥＤ）からの光線を照射し、試液を通過した光線は、光電検出器で透過光量に対応する電気量に変換される。
【００２０】
光電検出器で検知された透過光量Ｉ（ｔ）は、被検試料とＬＡＬ試薬若しくはSLP試薬とを混合した後の反応時間に対して、図１に示すような経時変化を示す。即ち、混合直後の透過光量Ｉｏから始まってゆっくりとした透過光量の変動を示すａの段階、次いで透過光量Ｉ（ｔ）が急激に減少するｂの段階、最後にＩ（ｔ）が殆ど変動のない一定値を示すｃの段階、以上３つの段階を経て試液はゲル化若しくは発色する。合成基質を用いた色素生成についても同様の変化を示すことが確認されている。
【００２１】
測定対象物質がエンドトキシンであってLAL試薬を用いた場合、上記ｃの段階に至った試液が従来の目視判定でゲル化反応陽性と判定される状態であること、更に図２に示すように、反応開始からｂの段階及びｃの段階へ到達するまでの所要時間が、被検試料中のエンドトキシン濃度に相関する。また、LAL試薬以外のSLP試薬及び合成基質含有試薬を用いた場合の色素発生についても同様の図になることは実験により確認されている。
【００２２】
光学系を複数準備し、複数の被検試料中の測定対象物質を測定する場合、測定されるＩ（ｔ）は、各光学系、各試料毎に全くばらばらの値を示すので、そのままでは各光学系を等価と考えて並列測定することはできない。本発明においては、各光学系のＩ（ｔ）を経時測定し、その反応初期段階（ａ）の透過光量と経時的に変化する透過光量Ｉ（ｔ）とｔの比Ｒ（ｔ）を求め、この値を用いて目的の測定を行うので、各光学系の感度差及び試料の違いによる感度差をキャンセルすることができる。
【００２３】
Ｒ（ｔ）は、図１におけるゲル化開始（色素発生）前のａの段階の透過光量（即ち、混合した直後の試液の揺動やノイズを除去した正しい初期透過光量）で光学系毎の特性を補正した透過光量の比率であり、各光学系で互換可能な量である。Ｒ（ｔ）の経時変化は図３に示すようにＩ（ｔ）と相似の挙動を示すが、本発明では、ゲル化進行（色素発生）の段階ｂにゲル化（色素発生）判定閾値Ｒｔｈを任意に設定し、反応開始からＲ（ｔ）がＲｔｈに到達するまでの時間を試料のゲル化時間ＴG（活性化時間ＴA）として検知する。
【００２４】
図２に示すように、エンドトキシン濃度とゲル化時間ＴGとは、それぞれ両対数目盛でプロットすると直線関係を示す。エンドトキシン濃度と活性化時間ＴAとも同様の直線関係を示す。従って、上記ゲル化時間ＴG（活性化時間ＴA）を検知することによって、エンドトキシン濃度を求めることができる。ゲル化（色素発生）判定閾値Ｒｔｈは、広範囲にわたってこのような直線関係が得られる値を選択する。
【００２５】
上記説明は、透過光量を測定して行ったが、吸光度を測定して行っても同様の結果が得られる。透過光量変化に基づいて目的物の定量を行う装置であれば、透過光量変化と吸光度変化は実質的に同義になるからである。
【００２６】
本発明は、測定終了時間ではＲｔｈに到達しない検体について、測定時間内に得られた透過光量若しくは吸光度の変化のデータを用いることにより、測定時間を延長することなく、一定のＲｔｈに到達する時間を推定するものである。
【００２７】
従って、本発明の装置は、前記公知の特許文献1記載の被検試料を収容する試料キューベットを恒温状態とする恒温槽と、該試料キューベットに光線を照射し、透過光量若しくは吸光度を検知する手段と、被検試料液の透過光量若しくは吸光度の測定開始を指示する手段と、測定開始時点からの経過時間を計時する手段とを具備した装置に加えて、透過光量若しくは吸光度の記憶手段（具体的にはメモリー）と未来の経時変化を推定し透過光量若しくは吸光度の比率あるいは吸光度が一定の値に到達するまでの時間を推定する手段（具体的には推定のプログラム）を付加したものである。
【００２８】
本発明方法は、測定時間終了時に一定の閾値に到達していない全ての検体について、各々推定処理を実行する。各々の検体では、モニターしていたタイムコースを推定計算により測定時間以降に延長し、推定タイムコース曲線を計算する。その推定タイムコース曲線が閾値に到達する時間を算出し、推定値とする。
【００２９】
実際の個々の被検試料の推定処理は、図４の推定処理のフローチャートに示す次のステップで実行する。
【００３０】
ノイズ除去のためタイムコースのスムージング（平滑化）を実行する。
タイムコースの最終測定点を含みその前の連続する数点の測定ポイント（該当ポイントをまとめて推定処理ポイントと呼び、その点数ｎは変更可能とする。図５にその説明図を示す）の各ポイントにおける傾き（微分係数）を算出する。
推定処理ポイント各点の傾きの平均値の算出と推定継続の判定を実施する。
推定処理ポイントを使用して、関数式１及び関数式２、更にその他の関数式によるカーブフィッティング、例えば一次式及び二次式によるカーブフィッティングを実行する。
以下、一次式及び二次式によるカーブフィッティングを用いる場合を例にとると、ゲル化（色素発生）判定閾値と4で求めた一次式及び二次式フィッティングの曲線との交点を算出し、推定値の候補とする。
二次式フィッティングと一次式フィッティングの推定値候補値の比を算出し、その比の値を基準とする計算式で推定値を算出する。
【００３１】
次に、各々のステップをより詳細に説明する。
ノイズ除去のためタイムコースのスムージング（平滑化）
推定処理を必要とする検体のタイムコースは、たいていの場合、その変化が緩やかなため、ノイズによる影響を受けやすい。次ステップ以降の処理の信頼性を上げるためには、ノイズを極力低減しておく必要がある。一般的な雑音軽減処理の移動平均処理でも良いが、後記本発明の実施例においては、種々の移動平均処理を実行できるSavitzky-Golay法（参考文献１）を利用し、重み付き移動平均処理を実施している。Savitzky-Golay法（参考文献１）：A Savitzky,  M.J.E.Golay, Smoothing and Differentiation of Data by Simplified Least Squares Procediares, " Analytical Chemistry " Vol.36, No.8, pp. 1627-1639 (1964)。
【００３２】
これを要約すると、ある点における平滑化値は、その点を含む前後数点（一般的には、測定点を含む５〜１１点を使用する。）の測定点を用いて重み付き平均値を計算する。ランダムな雑音成分は、平均化により相殺され、実波形に近い成分が取り出せる。
【００３３】
推定処理ポイントの各ポイントにおける傾き（微分係数）の算出
測定打ち切り時間付近でのタイムコースの変化量を表わす指標として、測定終了付近の測定ポイント、すなわち推定処理ポイントの各ポイントで各々傾きを計算する。各ポイントの傾きを求めるために、その点の前後の測定点を利用して計算するが、その処理方法は公知の方法で行えば良い。傾きの計算においても、ノイズを軽減するため、平滑化処理が事前に必要となるので、後記実施例では、平滑化と傾きを求めるための処理である微分演算を移動平均処理の一環として実行できる前記参考文献１に記載の方法を利用し、平滑化微分処理を実施して各点の傾きを算出している。
【００３４】
推定処理ポイント各点の傾きの平均値の算出と推定継続の判定
リムルステストの反応には、見かけ上反応が進まない期間（反応ラグタイム）が存在する。測定打ち切り時間において、反応ラグタイムの最中である場合や、反応ラグタイム期間終了後間もなくタイムコースがほとんど変化していない場合、推定を実施することが困難であるか、推定値が非常に大きな値となり、十分な精度が得られない。またタイムコースが上昇している場合は、推定できない。
【００３５】
推定が可能かどうかの判定基準として、測定打ち切り時間付近での平均的なタイムコースの傾きを用いることとし、上記２．で求めた推定処理ポイント各点の傾きを計算する。この値が一定の基準値ｔより小さい時推定を打ち切ることとする。例えば、この基準値ｔとしては、経験的にタイムコースがほとんど減少していないと考えても良いとみなせる−0.0001（%/分）を使用することができる。これより大きい場合には減少していないかあるいは上昇していると見なし推定を打ち切る。
【００３６】
推定処理ポイントを使用する一次式及び二次式によるカーブフィッティング
推定処理ポイントのデータを使用して、一次式及び二次式の2種類のカーブフィッティングを実行する。カーブフィッティングとは、離散的にサンプリングした観測点（測定点）から、最小自乗法によって最も近いと思われる連続曲線を求めるための処理である。ここでは、曲線として一次多項式（一次式）と二次多項式（二次式）を使用する場合の２通りの方法を同時に実行する。２通りの式を使う理由は、完全に一致するような曲線を見つけることが困難であり、一次式を使った場合の推定結果と二次式を使った場合の推定結果の中間的な値が、推定値として最適であることが、実験により確認されているからである。一次式及び二次式のカーブを測定終了時間以降に延長したものが、タイムコースの推定曲線となる。
【００３７】
ゲル化（色素発生）判定閾値と4で求めた一次式及び二次式フィッティングの曲線との交点の算出
一次式及び二次式の各推定曲線とゲル化（色素発生）判定閾値との交点を算出する。これら2つの値が、推定タイムコースの測定値［ゲル化時間（活性化時間）］、すなわち推定測定値の候補となる。
【００３８】
二次式フィッティングと一次式フィッティングの推定値候補値の比を算出し、その比の値を基準とする計算式で推定値を算出する
タイムコースがほぼ直線と見なせる場合、一次式、二次式の推定結果はほとんど同じ値となる。一方、タイムコースの湾曲度が大きいほど、一次式と二次式の推定結果に差が出る。
【００３９】
ここで、二次式の推定値T２と一次式の推定値T１の比T２／T１が1に近いこと（すなわちT１とT２の値が近い）を示す指標として判定係数αを導入し、比が1±αの範囲に入る場合（すなわちT１とT２が十分近いとみなせる）場合には、一次式の値を推定値として採用する。それ以外の場合は、一次式と二次式の各推定値の中点を推定値として採用する。中点を採用する理由は、実験的に、一次式では交点が実際の値より少し大きくなり、二次式では交点が実際の値より少し小さくなり、一次式と二次式の交点の中間的な値が最適な値であることがわかっているからである。種々の実データから検討した結果、αとして好ましくは０．１〜０．３、後記実施例では0.2という値を使用している。
【００４０】
次に、実施例を挙げて、本発明を更に説明するが、本発明はこの実施例に限定されない。
【００４１】
【実施例】
【００４２】
実際に測定した種々の測定値を示すサンプルを多数集め、測定時間をソフトウェアの処理によって実際の測定時間より前の８０分で打ち切ることにより、強制的に推定処理を行わせ、その結果の性能を検証した。この実施例では、推定処理ポイントの点数ｎは5点、判定係数αとして0.2を使用した。得られた結果の推定時間と推定時間の実測時間に対するずれを次表１に示す。尚、比較のため実測時間も併記した。
【００４３】
【表１】
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表１をグラフ化したものが、図６のグラフである。図６は、X軸には実測値、Y軸には推定値の実測値に対するずれを示す指標である計算式［（推定値―実測値）÷実測値］を割り当てたグラフである。
【００４４】
上記結果より明らかなように、本発明方法は、80分の測定で、150分位までなら±20％以内の精度で推定値を取得することが可能であり、十分実用的な性能である。
【００４５】
本発明によれば、所定の測定時間内に一定のゲル化判定閾値に到達していない検体について、過去のデータから未来の経時変化を推定して測定するものであるので、測定値が出せないとか、非常に長い測定時間を要する等の問題が解消し、迅速な測定が可能となる。
【００４６】
【発明の効果】
本発明によれば、測定時間内に一定の閾値に到達しない検体について、測定時間内に得られた透過光量若しくは吸光度の変化のデータを用いることにより測定時間を延長することなく一定の閾値に到達する時間を推定するというこの種方法では全く行われていなかった方法を行うことによって、長い測定時間を必要としたリムルステスト等の生化学的若しくは免疫学的測定を短時間で行うことができるという画期的な効果を奏する。
【図面の簡単な説明】
【図１】試料透過光量の経時変化を示す線図である。
【図２】エンドトキシン濃度とゲル化時間の検量関係を示す線図である。
【図３】試料透過光量比率の経時変化を示す線図である。
【図４】本発明の測定方法を示すフローチャートである。
【図５】ポイント数が５点の場合の推定処理ポイントの説明図である。
【図６】実施例で得たゲル化時間の実測値と推定値の実測値に対するずれを示すグラフである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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