(57)【要約】【課題】生体における抗菌ペプチドの分泌を誘発させる物質を投与することによる、レトロウイルスに起因する疾患に対する治療剤を提供すること、さらにかかる物質を投与することによるレトロウイルスに起因する疾患の治療方法を提供すること。【解決手段】イソロイシン、ロイシンまたはバリンから選択される少なくとも１種の分枝鎖必須アミノ酸からなる抗菌ペプチド分泌誘発化合物を有効成分とするレトロウイルス感染症治療薬であり、レトロウイルス感染症がＨＩＶウイルス（ヒト免疫不全ウイルス）による後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）またはＨＴＬＶ−Ｉ（成人Ｔ細胞性白血病ウイルス）による成人Ｔ細胞性白血病（ＡＴＬ）である。【選択図】          図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
イソロイシン、ロイシンまたはバリンから選択される少なくとも１種の分枝鎖必須アミノ酸からなる抗菌ペプチド分泌誘発化合物を有効成分とするレトロウイルス感染症治療薬。
【請求項２】
レトロウイルス感染症が、ＨＩＶウイルス（ヒト免疫不全ウイルス）による後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）である請求項１に記載のレトロウイルス感染症治療薬。
【請求項３】
レトロウイルス感染症が、ＨＴＬＶ−Ｉ（成人Ｔ細胞性白血病ウイルス）による成人Ｔ細胞性白血病（ＡＴＬ）である請求項１に記載のレトロウイルス感染症治療薬。
【請求項４】
イソロイシン、ロイシンまたはバリンから選択される少なくとも１種の分枝鎖必須アミノ酸を投与することにより、生体内において抗菌ペプチドを分泌させ、抗ウイルス作用を発現させることによるレトロウイルスに起因する感染症の治療方法。
【請求項５】
レトロウイルス感染症が、ＨＩＶウイルス（ヒト免疫不全ウイルス）による後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）である請求項４に記載の治療方法。
【請求項６】
レトロウイルス感染症が、ＨＴＬＶ−Ｉ（成人Ｔ細胞性白血病ウイルス）による成人Ｔ細胞性白血病（ＡＴＬ）である請求項４に記載の治療方法。
【請求項７】
生体内において抗菌ペプチドを分泌させ、抗ウイルス作用を発現させることによるレトロウイルスに起因する感染症の治療のため、イソロイシン、ロイシンまたはバリンから選択される少なくとも１種の分枝鎖必須アミノ酸を投与する当該アミノ酸の使用方法。
【請求項８】
レトロウイルス感染症が、ＨＩＶウイルス（ヒト免疫不全ウイルス）による後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）である請求項７に記載の使用方法。
【請求項９】
レトロウイルス感染症が、ＨＴＬＶ−Ｉ（成人Ｔ細胞性白血病ウイルス）による成人Ｔ細胞性白血病（ＡＴＬ）である請求項７に記載の使用方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、生体内においてデフェンシン等の抗菌ペプチドを分泌させ、抗ウイルス作用を発現させることによるレトロウイルスに起因する感染症、特に後天性免疫不全症候群（エイズ：ＡＩＤＳ）あるいは成人Ｔ細胞性白血病（ＡＴＬ）の治療剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
エイズ（ＡＩＤＳ）は、後天性免疫不全症候群（Ａｃｑｕｉｒｅｄ  Ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  Ｓｙｎｄｒｏｍｅ）の略称であり、ウイルスの感染によって免疫を司る細胞の一種、ヘルパーＴ細胞が破壊される結果、免疫能が極端に低下することにより生ずる症候群である。エイズは、ヒトが生きてゆくための最も基本的な機能の一つである免疫を冒す疾患であり、この疾患の克服は、現代医学が解決するべき重要な一つの課題であるとされている。
【０００３】
エイズは、１９８０年代から短期間のうちに全世界に蔓延し、今日においても、いまだ広く流行している。現在では、ＷＨＯ（世界保健機関）では、毎日およそ５，０００〜６，０００人の新たな感染者が発生しているであろうと推定しており、また、英国保健省の推定では、１６，０００人／日の新たな感染者が発生しているとされている。ＵＮＩＣＥＦの推計によれば、２０１０年までに４千万人の子供が、エイズで親を失うといわれている。取り分け、エイズ治療とＨＩＶ感染予防が不十分な東アフリカでは、４割の子供が、１５歳になるまでに、片親をエイズで亡くす悲惨な状況にあるという。
【０００４】
エイズ感染の診断方法は開発され、実用化されており、発展途上国においてもエイズの診断が可能になってきている。また、エイズ治療薬の開発も活発に行われており、感染後におけるエイズの発症の進行を遅らせることが可能になったが、治療薬の薬価が高いことから、発展途上国では、一部の患者にしかその恩恵が及んでいない問題がある。一方、先進国でも厄介な副作用の多いこの疾患を完全に解明したわけではなく、いまだ改善するべき点が多く、エイズワクチンの開発と共に、今後の課題として残されている。
【０００５】
ところでエイズは、レトロウイルス（Ｒｅｔｒｏｖｉｒｕｓ）というウイルス感染によって引き起こされる一種の疾患である。すなわち、エイズの病原体は、レトロウイルス科（Ｒｅｔｒｏｖｉｖｉｄａｅ）に属するＲＮＡウイルスであるヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ：Ｈｕｍａｎ  Ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  Ｖｉｒｕｓ）であり、このＨＩＶはリンパ球に好んで感染してリンパ球を破壊するため、その減少による細胞性免疫不全（後天性）が生じ、エイズが発病する。
【０００６】
このリンパ球を中心とした後天性免疫機能を傷害されたエイズ患者にとっては、Ｉｎｎａｔｅ  Ｉｍｍｕｎｅ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅ（先天性免疫応答）がより重要な役割を担うこととなる。そこで、本発明者らは、強力な作用を持つＩｎｎａｔｅ  Ｉｍｍｕｎｅ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅ（先天性免疫応答）の担い手である生体内で産生される抗菌ペプチドに着目した。
【０００７】
すなわち、生体には本来的に、外来異物（細菌、ウイルスなど）の進入に対する保護を行うため、先天的な免疫反応のメカニズムが備わっている。この場合の先天的な免疫反応（Ｉｎｎａｔｅ  Ｉｍｍｕｎｅ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅ）の構成要素の一つとして、生体由来の抗菌ペプチド類の分泌、すなわち、通常はα−デフェンシンの分泌が挙げられている。
【０００８】
すなわち、生体の免疫的な防御機構として、細菌、ウイルス感染等の危険性が生じた場合には、β−デフェンシンなどいくつかのタイプの抗菌ペプチドが上皮表面において産生され、この抗菌ペプチドが、病原体となり得るものに対する先天性免疫のエフェクターとして作用していることが知られている。例えば、小腸の上皮表面は細菌感染に直接暴露され得る部分であり、この部分（上皮表面）では、β−デフェンシンなどいくつかのタイプの抗菌ペプチドが産出されている。
【０００９】
デフェンシン類は、細菌、ガビなどの微生物に対して強力な殺菌活性を有する塩基性の抗菌ペプチドであり、好中球やマクロファージの細胞内顆粒に存在するものである。ヒトにおいては、多くの場合２９〜３４アミノ酸残基からなるペプチドであり、３個の分子内ジスルフィド結合を構成する６つのシステイン（Ｃｙｓ）が共通構造として見いだされており、その殺菌作用は、微生物細胞膜構造の破壊により、殺菌作用を示すものと考えられている。
【００１０】
この好中球やマクロファージの細胞内顆粒に存在するα−デフェンシン類（クリプトジン類）の殺菌作用は極め強いものであり、生体は、先天的な免疫機能として、細菌またはウイルスを感知し、殺菌性ペプチドをその有効濃度で放出することによって粘膜免疫に積極的に応答し、宿主の細菌またはウイルス感染に対する防衛反応における機能的な役割を果たしていると考えられる。
【００１１】
したがって、後天性免疫機能不全患者においては、意図的に抗菌ペプチド（殺菌性ペプチド）の分泌を誘発し得る物質を投与すれば、Ｉｎｎａｔｅ  Ｉｍｍｕｎｅ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅ（先天性免疫応答）が働き、生体の細菌あるいはウイルス感染に起因する疾患に対する有効な治療剤となり得るものといえる。特に、かかる物質が生体にとって毒性が無く、安全に投与できるものであれば、臨床的に極めて効果的な、抗ウイルス剤となるものである。
【００１２】
かかる観点に立脚して、本発明者等は、強力な作用を持つＩｎｎａｔｅ  Ｉｍｍｕｎｅ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅ（先天性免疫応答）の担い手である生体内で産生される抗菌ペプチド、デフェンシンの分泌を誘導することが知られているイソロイシンを投与することにより、その抗レトロウイルス活性を検討した。その結果、イソロイシン、ロイシンあるいはバリン等の分枝鎖を有する必須アミノ酸の投与によりデフェンシンの産生が誘導され、極めて効果的に抗レトロウイルス活性を発揮していることを確認した。
【００１３】
特にその効果は、レトロウイルス感染に基づく、急性期の発症を効果的に抑制するものであることが判明した。
【００１４】
【発明が解決しようとする課題】
したがって本発明は、かかる検討結果に基づき完成されたものであり、生体における抗菌ペプチドの分泌を誘発させる物質を投与することによる、レトロウイルスに起因する疾患に対する治療剤を提供すること、さらにかかる物質を投与することによるレトロウイルスに起因する疾患の治療方法を提供することを課題とする。
【００１５】
【課題を解決するための手段】
しかして本発明の基本的形態である請求項１に記載の発明は、イソロイシン、ロイシンまたはバリンから選択される少なくとも１種の分枝鎖必須アミノ酸からなる抗菌ペプチド分泌誘発化合物を有効成分とするレトロウイルス感染症治療薬である。
【００１６】
そのなかでも、より具体的な請求項２に記載の発明は、請求項１に記載の発明において、レトロウイルス感染症が、ＨＩＶウイルス（ヒト免疫不全ウイルス）による後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）であるレトロウイルス感染症治療薬である。
【００１７】
さらに、また別な請求項３に記載の発明は、請求項１に記載の発明において、レトロウイルス感染症が、ＨＴＬＶ−Ｉ（成人Ｔ細胞性白血病ウイルス）による成人Ｔ細胞性白血病（ＡＴＬ）であるレトロウイルス感染症治療薬である。
【００１８】
また、本発明の別の基本的態様である請求項４に記載の発明は、イソロイシン、ロイシンまたはバリンから選択される少なくとも１種の分枝鎖必須アミノ酸を投与することにより、生体内において抗菌ペプチドを分泌させ、抗ウイルス作用を発現させることによるレトロウイルスに起因する感染症の治療方法でもある。
【００１９】
その場合のより具体的な請求項５および６に記載の発明は、レトロウイルス感染症が、ＨＩＶウイルス（ヒト免疫不全ウイルス）による後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）、あるいは、ＨＴＬＶ−Ｉ（成人Ｔ細胞性白血病ウイルス）による成人Ｔ細胞性白血病（ＡＴＬ）である治療方法である。
【００２０】
本発明の、さらにまた別の基本的態様における請求項７に記載の発明は、生体内において抗菌ペプチドを分泌させ、抗ウイルス作用を発現させることによるレトロウイルスに起因する感染症の治療のため、イソロイシン、ロイシンまたはバリンから選択される少なくとも１種の分枝鎖必須アミノ酸を投与する当該アミノ酸の使用方法でもある。
【００２１】
その場合のより具体的な請求項８および９に記載の発明は、レトロウイルス感染症が、ＨＩＶウイルス（ヒト免疫不全ウイルス）による後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）、あるいは、ＨＴＬＶ−Ｉ（成人Ｔ細胞性白血病ウイルス）による成人Ｔ細胞性白血病（ＡＴＬ）である使用方法である。
【００２２】
【発明の実施の形態】
本発明は、上記したように、生体において先天的免疫能を発揮する抗菌ペプチドの分泌を誘発させ、かかる抗菌ペプチドにより抗レトロウイルス活性を発揮し、レトロウイルスに起因する感染症の治療を行うべく、イソロイシン、ロイシンまたはバリンから選択される少なくとも１種の分枝鎖必須アミノ酸を有効成分とするレトロウイルス感染症治療薬である。
【００２３】
かかる分枝鎖必須アミノ酸により分泌される抗菌ペプチドとしては、生体由来の抗菌ペプチドであり、例えば、α−デフェンシン（クリプトジン）、β−デフェンシン等を挙げることができる。
【００２４】
本発明は、かかる抗菌ペプチドを生体内において有効に発現させルことにより、レトロウイルスからの攻撃に対し、これらの細胞膜の構想を破壊することにより、殺ウイルス活性を発現する。したがって、本発明は別の観点からみれば、臨床的に有効な抗ウイルス剤、特に抗レトロウイルス剤に関するものでも有り、また、ウイルス、特にレトロウイルスに起因する疾患の治療剤にも関するものである。そのような疾患としては、例えば、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶウイルス）による後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）、あるいは、成人Ｔ細胞性白血病ウイルス（ＨＴＬＶ−Ｉ）による成人Ｔ細胞性白血病（ＡＴＬ）等の疾患を挙げることができる。
【００２５】
そのなかでも、本発明が提供するレトロウイルス感染症治療薬は、当該レトロウイルス感染に基づく、急性期の発症を効果的に抑制するものであることが判明した。したがって、本発明のレトロウイルス感染症治療薬は、例えば、エイズ感染後の免疫不全の基づく、カリニ肺炎、カポジ肉腫などの発症初期における劇症的な症状を、効果的に抑制することができる。
【００２６】
本発明が提供するレトロウイルス感染症治療薬を投与するにあたっては、その有効成分であるイソロイシン、ロイシンまたはバリンから選択される少なくとも１種の分枝鎖必須アミノ酸を含有する組成物を、経口的あるいは非経口的に投与することで行い得る。
【００２７】
その含有量は特に限定されるものではなく、生体に投与することにより、先天性免疫応答の担い手である生体内で産生される抗菌ペプチドの分泌が促進され、その結果抗レトロウイルス活性を発現するに十分な量を投与すればよい。なお、本発明が提供するレトロウイルス感染症治療薬の有効成分であるイソロイシン、ロイシンまたはバリンは、必須アミノ酸の一種であり、その安全性は十分確認されていることより、ある程度過剰量を投与しても、何ら悪影響をあたえるものではない。
【００２８】
例えば、経口的に投与する場合には、適宜他の賦形剤等と共に、製剤学的に汎用されている経口投与製剤である錠剤、顆粒剤、カプセル剤、あるいは散剤等の形態に製剤化することができる。また、非経口的に投与する場合には、注射剤の形態で投与することができる。
【００２９】
【実施例】
以下に本発明が提供する、抗レトロウイルス感染症治療剤の有効成分となるイソロイシン、ロイシンまたはバリンから選択される少なくとも１種の分枝鎖必須アミノ酸における抗レトロウイルス活性の詳細を説明することにより、本発明をさらに詳細に説明する。
【００３０】
レトロウイルス感染症の動物モデルとして利用されている、マウスのレトロウイルス感染症に対してイソロイシン等を投与して、その効果を確認した。
【００３１】
試験１：フレンド白血病ウイルス（Ｆｒｉｅｎｄ  ｌｅｕｋｅｍｉａ  ｖｉｒｕｓ）に対する、イソロイシン（Ｉｌｅ）の効果試験
フレンド白血病ウイルス（Ｆｒｉｅｎｄ  ｌｅｕｋｅｍｉａ  ｖｉｒｕｓ）は、エーリッヒ腹水癌より分離されたレトロウイルスで、感受性マウスに接種すると、数日〜２週間程度で赤芽球症を起こし、脾臓の肥大を伴う白血病を発症する。したがって、かかるフレンド（Ｆｒｉｅｎｄ）白血病ウイルスは、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）や、成人Ｔ細胞性白血病ウイルス（ＨＴＬＶ−Ｉ）と同じレトロウイルスとして、ＨＩＶ感染症の治療薬であるＡＺＴなどの抗ウイルス活性の効果判定に使用されているレトロウイルスの代表的なウイルスである。なお発病は、マウスの脾臓の重量を比較することで容易に確認することができる。
【００３２】
方法：
フレンド（Ｆｒｉｅｎｄ）白血病ウイルスを、雄性Ｂａｌｂ／ｃマウス（一群：５匹）の腹腔内に接種して、白血病を発症させた。
イソロイシン（Ｉｌｅ）０．５ｇを１００ｍｌの蒸留水に溶解し、マウスの給水瓶に入れ、経口摂取することにより投与した。溶液は、隔日で新しく調製したものと交換した。マウスの摂取量は、マウス１匹当り１日当り平均５ｍｌ（イソロイシンとして平均５ｍｇ）を経口投与した計算になる。
イソロイシンの投与は、フレンド（Ｆｒｉｅｎｄ）白血病ウイルスの接種感染前１日目より、連続１０日間行い、１０日目に脾臓を摘出し、重量を比較し、その効果を判定した。
【００３３】
なお、比較投与群（一群５匹）として、イソロイシンを投与せず、フレンド（Ｆｒｉｅｎｄ）白血病ウイルスの接種感染群を置き、対照群（１群３匹）として、無処置［フレンド（Ｆｒｉｅｎｄ）白血病ウイルスの接種感染なし／イソロイシンの投与なし］マウスを置いた。
【００３４】
結果：
下記表中に摘出した脾臓の重量をまとめた。
【００３５】
【表１】
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【００３６】
グループ１（マウス＃１〜５）：
フレンド（Ｆｒｉｅｎｄ）白血病ウイルス感染（＋）：蒸留水摂取
グループ２（マウス＃６〜１０）：
フレンド（Ｆｒｉｅｎｄ）白血病ウイルス感染（＋）：イソロイシン内服
グループ３（マウス＃１１〜１３）：
フレンド（Ｆｒｉｅｎｄ）白血病ウイルス非感染（−）：蒸留水摂取
【００３７】
また、各試験マウスの摘出脾臓の写真を、図１に示した。
図に示すように、フレンド（Ｆｒｉｅｎｄ）白血病ウイルス感染したグループ１およびグループ２では、フレンド（Ｆｒｉｅｎｄ）白血病ウイルス感染処理をしないグループ３に比較して、感染後１０日で巨大な脾種を認め、白血病の発症が観察された。そのうちで、イソロイシン未処理群（グループ１）では脾臓重量は０．６７６±０．２２５ｇ（最大・最小値を除いたｎ＝３では、０．６６６±０．０８１ｇ）であったが、イソロイシン投与群（グループ２）では脾臓重量は０．４８３±０．２５４ｇ（最大・最小値を除いたｎ＝３では、０．４１６±０．０８１ｇ）と、２９％（最大・最小値を除いたｎ＝３では、３９％）と、著名な脾種の軽減が認められ、イソロイシン（Ｉｌｅ）の投与はレトロウイルス感染症の進行を遅らせていることが判明した。
【００３８】
なお、同様の実験を分枝鎖アミノ酸であるロイシン（Ｌｅｕ）およびバリン（Ｖａｌ）についても行ったが、イソロイシン（Ｉｌｅ）と同様に、脾種の軽減が認められ、これらアミノ酸の投与はレトロウイルス感染症の進行を遅らせていることが判明した。
【００３９】
試験２：マウスエイズウイルス（ＭＡＩＤＳ）に対する、イソロイシン（Ｉｌｅ）の効果試験
方法：
マウスエイズウイルス（ＭＡＩＤＳ）を、雄性Ｃ５７ＢＬ６マウス（一群：５匹）の腹腔内に接種して、エイズを発症させた。
イソロイシン（Ｉｌｅ）０．５ｇを１００ｍｌの蒸留水に溶解し、マウスの給水瓶に入れ、経口摂取することにより投与した。溶液は、隔日で新しく調製したものと交換した。マウスの摂取量は、マウス１匹当り１日当り平均５ｍｌ（イソロイシンとして平均５ｍｇ）を経口投与した計算になる。
イソロイシンの投与は、マウスエイズウイルス（ＭＡＩＤＳ）の接種感染前１日目より、連続３ヶ月間行い、投与後３ヶ月目に、その効果を判定した。
【００４０】
なお、比較投与群（一群５匹）として、イソロイシンを投与せず、マウスエイズウイルス（ＭＡＩＤＳ）接種感染群を置き、対照群（１群３匹）として、無処置［マウスエイズウイルス（ＭＡＩＤＳ）の接種感染なし／イソロイシンの投与なし］マウスを置いた。
【００４１】
結果：
イソロイシン投与群では、比較投与群［イソロイシンを投与せず、マウスエイズウイルス（ＭＡＩＤＳ）摂取感染群］に比較して、無処置対照群と同様の延命が認められた。
【００４２】
【発明の効果】
以上記載のように、本発明は、生体がウイルスの感染に対する先天的な防御機構として作用する生体抗菌ペプチドの分泌を誘発させることによりレトロウイルスに対して効果的な抗ウイルス活性を発揮させ、それによりレトロウイルス感染症を治療する、臨床的に有効なレトロウイルス感染症、特にエイズの治療薬を提供するものである。また、その有効成分であるイソロイシン、ロイシンまたはバリンから選択される少なくとも１種の分枝鎖を有する必須アミノ酸は、極めて安全性の高い物質であり、その副作用も無いことから、本発明の医療上の価値は多大なものであるといえる。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明の試験１における、各試験マウスの摘出脾臓の写真である。
【図１】
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