(57)【要約】【課題】薬剤耐性感染菌の抑制に効果的で、耐性菌を含む細菌の感染症の予防及び治療に供することが可能な、抗菌剤、好ましくは抗抗酸菌剤、特に好ましくは抗結核菌剤を提供すること。【解決手段】３−エピルペオール、ファラジオール及び（２４Ｓ）−２４，２５−ジヒドロキシシクロアルタノールからなる群から選ばれた少なくとも１種のトリテルペンアルコールを有効成分とする抗菌剤。【選択図】        なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
３−エピルペオール、ファラジオール及び（２４Ｓ）−２４，２５−ジヒドロキシシクロアルタノールからなる群から選ばれた少なくとも１種のトリテルペンアルコールを有効成分とする抗菌剤。
【請求項２】
３−エピルペオールを有効成分とする抗菌剤。
【請求項３】
ファラジオールを有効成分とする抗菌剤。
【請求項４】
（２４Ｓ）−２４，２５−ジヒドロキシシクロアルタノールを有効成分とする抗菌剤。
【請求項５】
抗抗酸菌剤である請求項１〜４のいずれか１項に記載の抗菌剤。
【請求項６】
抗結核菌剤である請求項５に記載の抗抗酸菌剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、トリテルペンアルコールを有効成分とする、抗菌活性を有する抗菌剤、好ましくは抗抗酸菌剤、特に好ましくは抗結核菌剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
結核を含む細菌感染症の予防及び治療には、各種ベータラクタム抗生物質、アミノ配糖体、イソニアジド、リファンピシン等が使用されてきたが、最近これらの抗生物質に耐性を示す薬剤耐性感染菌、とりわけ抗抗酸菌、中でも結核菌の増加が注目され、対応を迫られている。
そして、栄養状態の改善とともに一時は沈静化の兆しがみられた結核は、高齢化時代を迎えたこととも相俟って、再び深刻な問題を投げかけている。とりわけ抗生物質の多用に伴う薬剤耐性結核菌は、対応が極めて困難で、薬剤耐性結核菌の抑制に効果的な抗結核菌剤の要望は極めて高い。
【０００３】
ルペオールが抗菌活性を有することは知られている（特許文献１参照。）。
特許文献１には、ルペオールを配合した化粧料が、細菌や真菌に対して抗菌性を有することが記載されている。しかし、ルペオールは、３−エピルペオールとは異なる物質である。
【０００４】
【特許文献１】
特開平１０−１３９６０１号公報
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
そこで本発明の課題は、薬剤耐性感染菌の抑制に効果的で、耐性菌を含む細菌の感染症の予防及び治療に供することが可能な、抗菌剤、好ましくは抗抗酸菌剤、特に好ましくは抗結核菌剤を提供することである。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
本発明者等は、薬剤耐性感染菌の抑制に効果的な抗菌剤、好ましくは抗抗酸菌剤、特に好ましくは抗結核菌剤を提供すべく種々研究を重ねた結果、３−エピルペオール、ファラジオール及び（２４Ｓ）−２４，２５−ジヒドロキシシクロアルタノールからなる群から選ばれた少なくとも１種のトリテルペンアルコールが優れた働きを有することを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００７】
３−エピルペオール、ファラジオール及び（２４Ｓ）−２４，２５−ジヒドロキシシクロアルタノールの化学式は下記のとおりである。
【化１】
2004175679.tif 000002
【化２】
2004175679.tif 000003
【化３】
2004175679.tif 000004
【０００８】
前記トリテルペンアルコールは、その薬理上許容されるエステル誘導体、エーテル誘導体、カルバモイル基のＮ−アルキル誘導体等の、著しい毒性を有さず、医薬として使用され得る誘導体、又は、塩を包含する。薬理上許容される塩とは、著しい毒性を有さず、医薬として使用され得る塩をいう。
【０００９】
薬理上許容されるエステル誘導体、エーテル誘導体又はＮ−アルキル誘導体がアミノ基等の塩基性基を有する場合は、常法に従って酸と処理することにより、相当する薬理上許容し得る酸付加塩に変えることができる。このような酸付加塩の例としては、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸等の無機酸、酢酸、安息香酸、シュウ酸、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸等の有機酸又はメタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸等のスルホン酸による付加塩が挙げられる。
【００１０】
薬理上許容されるエステル誘導体、エーテル誘導体又はＮ−アルキル誘導体がカルボキシ基等の酸性基を有する場合は、例えば、ナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩のようなアルカリ金属塩、カルシウム塩、マグネシウム塩のようなアルカリ土類金属塩、アルミニウム塩、鉄塩、亜鉛塩、銅塩、ニッケル塩、コバルト塩等の金属塩；又は第４級アンモニウム塩を挙げることができる。
【００１１】
【発明の実施の形態】
本剤を内服薬として用いる場合、錠剤、カプセル剤、トローチ剤、散剤、液剤、シロップ剤等、任意の剤形を採用することができ、製剤化に当たっては、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、安定剤、矯味・矯臭剤等の助剤を、必要に応じて適宜配合することができる。
【００１２】
経肺投与用に液剤及び懸濁剤として使用する場合、化合物の溶液及び懸濁液は水性であり、例えば、水のみ（例えば、無菌又は発熱物質非含有水）、あるいは水及び生理学的に許容される補助溶媒（例えば、エタノール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、例えばＰＥＧ  ４００）から一般に製造される。そのような溶液又は懸濁液は他の賦形剤、例えば防腐剤（例えば、塩化ベンザルコニウム）、ポリソルベートのような可溶化剤／表面活性剤（例えば、Ｔｗｅｅｎ  ８０、Ｓｐａｎ  ８０、塩化ベンザルコニウム）、緩衝剤、等張性調節剤（例えば、塩化ナトリウム）、吸収促進剤及び増粘剤をさらに含有していてもよい。懸濁液は懸濁化剤（例えば、微結晶質セルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム）をさらに含有していてもよい。液剤又は懸濁剤は一般的な手段、例えばスポイト、ピペット又は噴霧器で鼻腔又は口腔に直接施す。配合物は一回のみの投与量又は多数回投与量の形で提供し得る。後者の場合、投与量計量手段を設けるのが望ましい。スポイト又はピペットの場合、これは患者が適切な所定容量の液剤又は懸濁剤を投与することによってなし得る。噴霧器の場合、これは、例えば、計量噴霧スプレーポンプの手段によってなし得る。気道又は肺への投与は、化合物をクロロフルオロカーボン（ＣＦＣ）、例えばジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン又はジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素又は他の適当なガスのような適当な噴射剤と共に加圧パックの形にされたエアゾール配合物によってなし得る。エアゾールはまたレシチンのような表面活性剤を含有していると好都合である。薬剤の投与量は、計量バルブを備えることによって制御し得る。
【００１３】
経肺投与用に散剤として使用する場合、化合物は、乾燥粉末、例えば、ラクトース、デンプン、デンプン誘導体（例えばヒドロキシプロピルメチルセルロース）、及びポリビニルピロリジン（ＰＶＰ）のような適当な粉末基剤に化合物を混合した粉末混合物の形で提供してもよい。粉末担体が鼻腔内でゲルを形成すると好都合である。粉末組成物は、例えばゼラチンでできた、カプセルもしくはカートリッジ、又はブリスターパック（粉末を吸入器によってこれらから投与し得る）のような単位投与量形態で提供し得る。鼻内配合物を含めた気道又は肺へ投与するための配合物では、化合物の粒子サイズは一般に小さく、例えば５ミクロン以下である。そのような粒子サイズは、超微粉化によるような当業界で公知の方法によって得られる。望ましいときには、活性成分を持続放出するようにしてある配合物を用いてもよい。
【００１４】
外用薬として用いる場合は液剤もしくは軟膏剤とする。また、塗布剤で使用する場合、通常使用されるそれ自体知られた分散液、乳液、ワックスなどに含有させて使用することができる。この他、注射剤、座薬等の形にして使用することができる。
【００１５】
これらの製剤は、さらに必要に応じて着色剤、保存剤、香料、風味剤、甘味剤等や他の医薬品を含有せしめてもよい。
【００１６】
前記医薬製剤に含まれる有効成分化合物の量は、特に限定されず広範囲に適宜選択されるが、通常全組成物中１〜７０重量％、好ましくは１〜３０重量％含まれる量とするのが適当である。
【００１７】
前記医薬製剤の投与方法は特に限定は無く、各種製剤形態、患者の年齢、性別その他の条件、疾患の程度等に応じて決定される。例えば錠剤、丸剤、液剤、懸濁剤、乳剤、顆粒剤及びカプセル剤の場合には経口投与される。また、注射剤の場合には単独であるいはグルコース、アミノ酸等の通常の補液と混合して静脈内投与され、さらに必要に応じて単独で筋肉内、皮内、皮下もしくは腹腔内投与される。坐剤の場合には直腸投与される。
【００１８】
その使用量は症状、年齢、体重、投与方法及び剤形等によって異なるが、通常は成人に対して１日あたり、上限として２０００  ｍｇ（好ましくは１００  ｍｇ）であり、下限として０．１ｍｇ（好ましくは１ｍｇ、さらに好ましくは  １０ｍｇ）を症状に応じて１回又は数回に分けて投与することができる。
【００１９】
【実施例】
以下、本発明の実施例を示す。
【００２０】
実施例１
３−エピルペオール［化学名、ルプ−２０（２９）−エン−３α−オール］
シラカバ外樹皮１２０ｇをメタノールで抽出し、抽出物１６ｇを得た。この抽出物のシリカゲルカラムクロマトグラフィーを行い、１．７ｇのトリテルペンモノオール画分を得た。次いでメタノールから再結晶を行うことにより、６４０ｍｇの結晶部を得た。この結晶部について、再度シリカゲルカラムクロマトグラフィー、続いてオクタデシルシリカ（ＯＤＳ）カラムクロマトグラフィーを行い、ルペオール２６０ｍｇを得た。
このルペオール２１０ｍｇをピリジン中で三酸化クロム処理することにより、ルペノン１６１ｍｇを得た。次にこのルペノンを乾燥テトラヒドロフラン中で水素化リチウムアルミニウムで処理した後、反応生成物のＯＤＳ高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を行うことにより、ルペオール１３０ｍｇとともに３−エピルペオール１０ｍｇを得た。
【００２１】
実施例２
ファラジオール［化学名、タラクサスト−２０−エン−３β、１６β−ジオール］乾燥食用菊（もってのほか）花弁１００ｇをメタノールで抽出し４８ｇの抽出物を得た。この抽出物をｎ−ヘキサン：メタノール：水（９５：９５：１０）で溶剤分画を行い、７ｇのｎ−ヘキサン画分を得た。次いで５％水酸化カリウム／メタノール溶液中で加熱還流することにより加水分解を行い、不けん化脂質２．２ｇを得た。この不けん化脂質についてシリカゲルカラムクロマトグラフィーを行い、２０８ｍｇのトリテルペンジオール画分を得た。この画分につき、ＯＤＳカラムクロマトグラフィー、続いてＯＤＳ‐ＨＰＬＣを行うことにより、ファラジオール５８ｍｇを得た。
【００２２】
実施例３
（２４Ｓ）−２４，２５−ジヒドロキシシクロアルタノール［化学名、（２４Ｓ）−シクロアルタン−３β，２４，２５−トリオール］
γ−オリザノール１０ｇを５％水酸化カリウム／メタノール溶液中で加熱還流することにより加水分解を行い、不けん化脂質５．７ｇを得た。次いでシリカゲルカラムクロマトグラフィーを行い、トリテルペンモノオール画分２．５ｇを得た。この画分につき硝酸銀含浸シリカゲル薄層クロマトグラフィーを行うことにより、１．２ｇのシクロアルテノールを得た。
このシクロアルテノール１００ｍｇを、文献（Ｄｅｌｌａ  Ｇｒｅｃａ，Ｍ．，Ｆｉｏｒｅｎｔｉｎｏ，Ａ．，Ｍｏｎａｃｏ，Ｐ．，Ｐｒｅｖｉｔｅｒａ，Ｌ．，Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，３５巻、１０１７−１０２２頁、１９９７年）記載の方法でメタクロロ過安息香酸処理し、２４，２５−エポキシドを調製した。このエポキシドにつき過塩素酸水溶液処理を行い、（２４Ｒ）−および（２４Ｓ）−２４，２５−ジヒドロキシシクロアルタノールの混合物を得た。この混合物のシリカゲルＨＰＬＣを行って、（２４Ｓ）−２４，２５−ジヒドロキシシクロアルタノール（３０ｍｇ）を単離した。
【００２３】
実施例４
結核菌に対する成長抑制率
検体濃度６．２５μｇ／ｍｌ（ただし、ファラジオールは１２．５μｇ／ｍｌ）時の結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ  Ｈ３７Ｒｖ）の成長抑制率（％）を、ＢＡＣＴＥＣ  ４６０システムにて文献（Ｃｏｌｌｉｎｓ，Ｌ．，Ｆｒａｎｚｂｌａｕ，Ｓ．Ｇ．，Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ，４１巻、１００４−１００９頁、１９９７年）記載の方法で測定した。
その結果を表１に示す。
参照化合物としては、抗結核菌薬であるリファンピンを用いた。３種のトリテルペンアルコールは何れも参照化合物と同程度の活性を示した。
【００２４】
【表１】
2004175679.tif 000005
【００２５】
実施例５
薬剤耐性結核菌に対する最小抑制濃度
前記文献記載のマイクロプレートアラマーブルーアッセイ法にて、無耐性結核菌及び４種の薬剤耐性結核菌（いずれも、Ｈ３７Ｒｖ。）に対する最小抑制濃度（μｇ／ｍｌ）を測定した。
その結果を表２に示す（表中、「−」は、未測定であることを示す。）。
全ての検体に無耐性結核菌に対して活性が認められた。
３−エピルぺオールは４種の薬剤耐性結核菌に対して活性が認められ、特にリファンピン耐性結核菌に対して参照化合物よりも著しく高い活性を示した。
【００２６】
【表２】
2004175679.tif 000006