(57)【要約】【課題】高血圧症の治療あるいは予防するために、アンジオテンシン変換酵素阻害作用を有し、長期間服用しても安全でなおかつ確実な治療を行うのに充分満足できるような血圧降下剤、およびその剤を含有する経口用又は非経口用組成物、その食品あるいは医薬を提供すること。【解決手段】プロポリス又はその抽出物を含有する、アンジオテンシン変換酵素阻害剤、それを含有する血圧降下剤、それを含有する経口用又は非経口用組成物、その食品又は医薬に関する。【選択図】　　　　なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
プロポリス又はその抽出物を含有することを特徴とするアンジオテンシン変換酵素阻害剤。
【請求項２】
請求項１に記載のアンジオテンシン変換酵素阻害剤を含有することを特徴とする血圧降下剤。
【請求項３】
請求項１又は２のいずれか記載の剤を含む経口用又は非経口用組成物。
【請求項４】
食品である請求項３記載の経口用組成物。
【請求項５】
医薬である請求項３記載の経口用又は非経口用組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明が属する技術分野】本発明は、アンジオテンシン変換酵素阻害作用を有し、血圧の降下に有効な剤、それらを含有する経口用又は非経口用組成物、食品又は医薬に関する。
【０００２】
【従来技術】高血圧症は現代成人病の最大疾患とも言われ、その治療あるいは予防は緊急かつ重大な課題となっている。
【０００３】
高血圧症には、本態性高血圧症と二次性高血圧症とがあり、アンジオテンシン変換酵素（以下、ＡＣＥと略す）は、本態性高血圧症及び二次性高血圧症である腎性高血圧症あるいは内分泌性高血圧症などの疾患に大きな関わりを持っている。
【０００４】
生体の血圧上昇機構の一つであるレニン−アンジオテンシン系では、ＡＣＥが中心的な役割を果たしている。すなわち、血圧の上昇に不活性なアンジオテンシンＩは、ＡＣＥにより血管の筋肉を収縮させる作用のあるアンジオテンシンＩＩへと変換され、血圧を上昇させる。一方、血管の筋肉を拡張させる作用があるブラジキニンは、ＡＣＥにより分解され、不活性化される。従って、このＡＣＥを阻害すれば、昇圧性ペプチドであるアンジオテンシンＩＩの生成を抑制し、降圧性ペプチドであるブラジキニンの分解も抑制して血圧を降下させる。
【０００５】
このＡＣＥの昇圧作用を阻害する治療薬として、例えば、カプトリル（Ｄ−２−メチル−３−メルカプトプロパノイル−Ｌ−プロリン）やエナラプリルなどの合成治療薬が多数知られているが、これらはアレルギー症状、頭痛、目眩、ふらつき等の副作用を起こす場合がある。
【０００６】
一方、病気（高血圧症）までには至らない状態の人が通常の生活をする上で血圧上昇に対する予防手段として服用できる安全性の高い血圧上昇抑制剤が求められており、漢方薬である地骨皮（ジコッピ）（特開昭６２−１６４６２１号公報）、貝母（バイモ）（特開昭６２−１６４６２２号公報）や牛乳カゼインをトリプシンで分解して得られるペプチド類（特開昭５９−４４３２３号公報、特開昭５９−４４３２４号公報、特開昭６１−３６２２６号公報、特開昭６１−３６２２７号公報）、茶ポリフェノール（特開昭６３−２１４１８３号公報）、豆科植物種子の抽出物（特開平４−２６１１２２号公報）、米タンパク質中のペプタイド（特開平５−２９４８４４号公報）、そば脱穀種子及び／又はそば粉抽出物（特開平５−９７７９８号公報）、ニンニク抽出液（特開平６−２５６３８７号公報）、ユーカリ属植物の抽出物（特開平６−１９９６７７号公報、特開平１１−６０４９８号公報）、果実ポリフェノール（特開平７−２８５８７６号公報、特開平８−２５９４５３号公報）、クロロゲン酸（食品研究成果情報，（９），２０−２１，１９９７）など、主にペプチド類、ポリフェノール類などが報告されているが、その効果は必ずしも満足できるものではない。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】本発明の課題は、ＡＣＥ阻害作用を有し、長期間服用しても安全でなおかつ確実な治療を行うのに充分満足できるような血圧降下剤、及びその剤を含有する経口用又は非経口用組成物、食品あるいは医薬を提供することである。
【０００８】
【課題を解決するための手段】本発明者は、上述した課題を解決するために鋭意研究を行った結果、抗癌作用や免疫賦活作用などの目的で健康補助食品に利用されているプロポリスに、ＡＣＥ阻害作用を有することを見出し、本発明を完成させた。
【０００９】
すなわち、本発明は、プロポリス或はその抽出物を含有するＡＣＥ阻害剤、血圧降下剤、これらを含有する経口用又は非経口用組成物、その食品、医薬に関する。
【００１０】
【発明の実施形態】本発明で使用するプロポリスは、蜂が集めた樹脂状の黒い塊であり、ブラジル産プロポリス、中国産プロポリス、オーストラリア産プロポリス、ウルグアイ産プロポリス、日本産プロポリスなど何れの産地のものでもよく、特に限定されるものではないが、汎用性の面から見て、ブラジル産プロポリス、中国産プロポリスが好ましい。
【００１１】
本発明におけるプロポリスは、プロポリス自体を乾燥させた乾燥物、その粉砕物、超臨界抽出物、水あるいはアルコール、エーテル、アセトンなどの有機溶媒による粗抽出物、および粗抽出物を分配、カラムクロマトなどの各種クロマトグラフィーなどで段階的に精製して得られた抽出物画分など、全てを含む。これらは単独で用いても良く、また２種以上混合して用いても良い。
【００１２】
例えば、ブラジル産プロポリスの原塊乾燥物１Ｋｇに９９．５％エタノール抽出液３Ｌを加え、室温で一晩浸漬することにより得た抽出液を、そのまま使用しても良いし、各種クロマトグラフィーを組み合わせて、精製したものを使用しても良い。
【００１３】
抽出されたプロポリス抽出物の溶液中のプロポリス抽出物濃度は特に制限はないが、１５〜７０質量％、好ましくは２０〜６０質量％程度が好ましい。この濃度が１５質量％未満では、乾燥時に多量のエタノールや水などの溶液を蒸発させる必要があり、７０質量％を超えると溶液の粘度が高くなり過ぎ、加工適性が悪くなる恐れがある。
【００１４】
これらの本発明によるプロポリスまたは抽出物に、ＡＣＥ阻害作用を有することは、従来から全く知られておらず、本発明により得られた新知見である。
【００１５】
本発明によるプロポリスは、卓越したＡＣＥ阻害作用を有しており、血圧降下剤を目的とした食品又は医薬として使用可能である。
【００１６】
すなわち、ＡＣＥ阻害剤が臨床的に使用されている血圧降下の治療に使用できる。ＡＣＥを阻害すれば、昇圧性ペプチドであるアンジオテンシンＩＩの生成を抑制し、降圧性ペプチドであるブラジキニンの分解も抑制して高血圧の治療に有用である。
【００１７】
本発明のプロポリスを、ＡＣＥ阻害剤、血圧降下に対する治療剤含有食品又は医薬として製造することができる。
【００１８】
本発明のＡＣＥ阻害剤、血圧降下に対する治療剤のような医薬の適用方法としては、経口投与あるいは非経口投与を採用することができる。投与に際しては、有効成分を経口投与、直腸内投与、注射などの投与方法に適した固体又は液体の医薬用無毒性担体と混合して、慣用の医薬製剤の形態で投与することができる。このような製剤としては、例えば、錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤などの固形剤、溶液剤、懸濁剤、乳剤などの液剤、凍結乾燥製剤などが挙げられ、これらの製剤は製剤上の常套手段により調製することができる。上記の医薬用無毒性担体としては、例えば、グルコース、乳糖、ショ糖、澱粉、マンニトール、デキストリン、脂肪酸グリセリド、ポリエチレングルコール、ヒドロキシエチルデンプン、エチレングリコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、アミノ酸、ゼラチン、アルブミン、水、生理食塩水などが挙げられる。また、必要に応じて、安定化剤、湿潤剤、乳化剤、結合剤、等張化剤などの慣用の添加剤を適宜添加することもできる。
【００１９】
食品としては、そのまま、又は種々の栄養成分を加えて、若しくは飲食品中に含有せしめて、ＡＣＥ阻害剤、血圧の降下に対する治療剤に有用な保健用食品又は食品素材として食される。例えば、上述した適当な助剤を添加した後、慣用の手段を用いて、食用に適した形態、例えば、顆粒状、粒状、錠剤、カプセル、ペーストなどに成形して食用に供してもよく、また種々の食品、例えば、ハム、ソーセージなどの食肉加工食品、かまぼこ、ちくわなどの水産加工食品、パン、菓子、バター、粉乳、発酵乳製品に添加して使用したり、水、果汁、牛乳、茶、清涼飲料などの飲料に添加して使用してもよい。
【００２０】
本発明のプロポリスの有効投与量は、患者の年齢、体重、症状、患者の程度、投与経路、投与スケジュール、製剤形態、素材の阻害活性の強さなどにより、適宜選択・決定されるが、例えば、経口投与の場合、一般に乾燥重量として１日当たり１０〜５００ｍｇ／ｋｇ体重程度、好ましくは、１日当たり１５０〜３５０ｍｇ／ｋｇ体重程度とされ、１日に数回に分けて投与してもよい。
【００２１】
プロポリスは天然由来であるためその毒性は低く、例えばブラジル産プロポリスのエタノール抽出物を毎日１０００ｍｇ／ｋｇ、１００日間という長期間に亘ってラットに経口投与しても、死亡例は認められず、体重変化も観察されなかった。
【００２２】
【実施例】以下に実施例を挙げて、具体的に説明するが、これに限定されるものではない。
【００２３】
［製造例］プロポリス抽出物の製造
ブラジル産及び中国産プロポリス原塊それぞれ１０ｇに９９．５％エタノール（和光純薬工業）３Ｌを加え、５０℃で一晩浸漬した後、ロータリーエバポレーターにてエタノールを除去することにより、プロポリス抽出物をそれぞれ３２４ｍｇ、２１６ｍｇを得た。
【００２４】
［実施例］ＡＣＥ阻害活性試験
ＡＣＥ阻害活性試験は、Ｈｏｏｒｎ，Ｃ．Ｍ．とＲｏｔｈ，Ｒ．Ａ．の方法（Ｂｒｉｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，１１０，５９７−６０２，１９９３）を一部改変して行った。
【００２５】
すなわち、ガラス試験管中に、製造例で得られたプロポリス抽出物を最終濃度が５００μｇ／ｍｌとなるように１０％ジメチルスルホキシド（以下、ＤＭＳＯと略す）に溶解したものを０．０６ｍｌ加え、次いで、１００ｍＵ／ｍｌのＡＣＥ（シグマ社製）０．０３ｍｌを添加し、３７℃で５分間、プレインキュベーションした後、１００ｍＭ　ホウ酸緩衝液　ｐＨ　８．３、５００ｍＭ　ＮａＣｌ、６．５ｍＭ　［３Ｈ］標識したヒプリルグリシルグリシン（ｈｙｐｐｕｒｙｌｇｌｙｃｙｌｇｌｙｃｉｎｅ、以下、［３Ｈ］ＨＧＧと略す）０．３ｍｌを加え、３７℃で５時間、インキュベーションし、１Ｎ　塩酸０．５ｍｌを加えて反応を停止させた。その後、酢酸エチル１．５ｍｌを加えて１分間攪拌し、ＡＣＥにより遊離した［３Ｈ］標識したヒプリル酸（ｈｉｐｐｕｒｉｃ　ａｃｉｄ）を抽出し、この酢酸エチル層１．０ｍｌを分取して乾固させた後、液体シンチレーションを加え、放射活性を測定し、次式にて阻害率（％）を算出した。
【００２６】
【数１】
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（ここで、Ａは阻害剤を含まない場合の放射活性値を表わし、Ｂは阻害剤を添加した場合の放射活性値を表わす。）
【００２７】
なお、本反応系におけるポジティブコントロールとしてのＡＣＥ阻害剤であるカプトプリル（ｃａｐｔｏｐｒｉｌ、和光純薬製）のＩＣ５０値は、０．００１１μＭであった。
【００２８】
【表１】
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【００２９】
表１から、本発明のプロポリス抽出物は強いＡＣＥ阻害作用を有することがわかる。
【００３０】
以下に処方例を示す。
［錠剤の製造］
製造例で得られたブラジル産プロポリスのエタノール抽出物を用いて、常法に従って、下記の組成の錠剤を製造した。
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【００３１】
［ジュースの製造］
製造例で得られた中国産プロポリスのエタノール抽出物を用いて、常法に従って、下記の組成のジュースを製造した。
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【００３２】
【発明の効果】プロポリス或はその抽出物がＡＣＥ阻害作用を有することから、これらを含有するＡＣＥ阻害作用剤は、血圧降下剤、それらを含有する経口用又は非経口用組成物、食品又は医薬として有用である。このような組成物は、長期間服用しても安全で、確実な治療を行うことができる。