(57)【要約】【課題】皮膚の老化症状の防止・改善に優れた効果を発揮する皮膚外用剤、優れた効果を有する細胞賦活剤、及び優れた効果を有する抗酸化剤を提供することを目的とする。【解決手段】皮膚の老化症状の防止・改善のために、セスビウム属（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ）植物の１種または２種以上の植物の抽出物を皮膚外用剤に配合する。また、セスビウム属（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ）植物の１種または２種以上の植物の抽出物を細胞賦活剤及び抗酸化剤として用いる。【選択図】　　　　　なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
セスビウム属（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ）植物の１種または２種以上の植物の抽出物を含有する皮膚外用剤。
【請求項２】
セスビウム属（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ）植物がミルスベリヒユ（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ　ｐｏｒｔｕｌａｃａｓｔｒｕｍ）である請求項１に記載の皮膚外用剤。
【請求項３】
セスビウム属（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ）植物の１種または２種以上の植物の抽出物を有効成分とする細胞賦活剤。
【請求項４】
セスビウム属（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ）植物がミルスベリヒユ（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ　ｐｏｒｔｕｌａｃａｓｔｒｕｍ）である請求項３に記載の細胞賦活剤。
【請求項５】
請求項３又は４に記載の細胞賦活剤を含有する皮膚外用剤。
【請求項６】
セスビウム属（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ）植物の１種または２種以上の植物の抽出物を有効成分とする抗酸化剤。
【請求項７】
セスビウム属（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ）植物がミルスベリヒユ（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ　ｐｏｒｔｕｌａｃａｓｔｒｕｍ）である請求項６に記載の抗酸化剤。
【請求項８】
請求項６又は７に記載の抗酸化剤を含有する皮膚外用剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、老化症状の防止・改善に優れた効果を発揮する皮膚外用剤、細胞賦活剤、及び抗酸化剤に関する。さらに詳しくは、セスビウム属（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ）植物抽出物を含有する皮膚外用剤、セスビウム属（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ）植物抽出物を有効成分とする細胞賦活剤、及びセスビウム属（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ）植物抽出物を有効成分とする抗酸化剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
加齢などによる真皮線維芽細胞の機能低下は、コラーゲンやエラスチン等の真皮マトリックスの減少や変性を引き起こし、シワや皮膚の弾性低下といった老化症状の重要な要因となっている。また、紫外線等の外来ストレスによる酸化傷害も、シワ，シミ，皮膚の弾性低下といった老化症状の原因となっている。これまでの皮膚外用剤の分野では、係る細胞の機能低下や酸化傷害による老化症状を防止・改善するために、様々な細胞賦活剤や抗酸化剤の検索及び配合検討がなされてきた。細胞賦活剤としては、ポンカンのエッセンス（特許文献１参照）、ツリガネニンジン属，クサギ及びそれらの抽出物（特許文献２参照）、有機溶媒によるクロレラ抽出物（特許文献３参照）が知られており、抗酸化剤としては、キク科へテロテカ属植物抽出物（特許文献４参照）、サルオガセ科サルオガセ属植物の抽出物（特許文献５参照）が知られている。
【０００３】
なお、本発明に係るセスビウム属（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ）植物の従来の技術としては、セスビウム属植物にアグロバクテリウム属細菌を感染させて組織培養し、生成した培養物からファイトエクダイステロイドを抽出することを特徴とするファイトエクダイステロイドの製法（特許文献６参照）、昆虫脱皮ホルモン高生産植物体としてのセスビウム属植物の利用（特許文献７参照）が開示されている。しかし、これらの文献公知発明には、セスビウム属植物抽出物の皮膚外用剤、細胞賦活剤、及び抗酸化剤への利用に関する記載は全く認められなかった。
【０００４】
【特許文献１】
特開２００１−１３１０４５号公報
【特許文献２】
特開２０００−１７８１９８号公報
【特許文献３】
特開平１１−３３５２９３号公報
【特許文献４】
特開平１１−１８０８８６号公報
【特許文献５】
特開平１０−１８２４１３号公報
【特許文献６】
特開平１−３１７３９７号公報
【特許文献７】
特開平４−１９７１１８号公報
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
従来用いられている細胞賦活剤及び抗酸化剤は、老化現象の一部の過程にのみ作用している場合が多く、本質的な老化改善効果としては不十分であると考えられた。また、皮膚外用剤の基剤中に配合した場合、有効な効果を得るにはかなりの高濃度を配合しなければならず、製剤に好ましくない色や臭いを付与してしまう場合があるなど、作用効果や安定性の面ですべてを満足できるものが少ないのが現状であった。このため、より優れた有効成分の開発が期待されており、本発明はこのような事情に鑑みてなされたものである。従って、本発明の目的は、皮膚の老化症状の防止・改善に優れた効果を発揮する皮膚外用剤、優れた効果を有する細胞賦活剤、及び優れた効果を有する抗酸化剤を提供することにある。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、皮膚の老化症状の防止・改善に優れた成分を見出すために、種々の物質について細胞賦活作用と抗酸化作用に関する検討を行った。その結果、セスビウム属（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ）植物抽出物に優れた細胞賦活作用と抗酸化作用を見出し、さらに検討を重ね、本発明を完成するに至った。
【０００７】
【発明の実施の形態】
本発明の原料として用いられる植物は、ハマミズナ科（Ａｉｚｏａｃｅａｅ）のセスビウム属（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ）の植物であればよい。セスビウム属（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ）植物としては、ミルスベリヒユ（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ　ｐｏｒｔｕｌａｃａｓｔｒｕｍ），セスビウム　エレクツム（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ　ｅｒｅｃｔｕｍ），セスビウム　トリアンテモイデス（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ　ｔｒｉａｎｔｈｅｍｏｉｄｅｓ），セスビウム　セシレ（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ　ｓｅｓｓｉｌｅ），セスビウム　ベルコスム（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ　ｖｅｒｒｕｃｏｓｕｍ），セスビウム　マリチマム（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ　ｍａｒｉｔｉｍｕｍ），セスビウムセスビオイデス（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ　ｓｅｓｕｖｉｏｉｄｅｓ）などが知られている。これらの中で、入手が比較的容易などの理由から原料として適当なものとしては、ミルスベリヒユ（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ　ｐｏｒｔｕｌａｃａｓｔｒｕｍ），セスビウム　マリチマム（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ　ｍａｒｉｔｉｍｕｍ）などが挙げられる。
【０００８】
これらセスビウム属（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ）植物を使用する際は、抽出物を用いるのが一般的である。抽出には、セスビウム属（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ）植物の茎，葉，花，種子，根，芽などのいずれの部位を用いても構わないが、簡便に利用するには、全草を用いるとよい。抽出の際は、生のまま用いてもよいが、抽出効率を考えると、細切，乾燥，粉砕等の処理を行った後に抽出を行うことが好ましい。抽出は、抽出溶媒に浸漬するか、超臨界流体や亜臨界流体を用いた抽出方法でも行うことができる。抽出効率を上げるため、撹拌や抽出溶媒中でホモジナイズしてもよい。抽出温度としては、５℃程度から抽出溶媒の沸点以下の温度とするのが適切である。抽出時間は抽出溶媒の種類や抽出温度によっても異なるが、１時間〜１４日間程度とするのが適切である。
【０００９】
抽出溶媒としては、水の他、メタノール，エタノール，プロパノール，イソプロパノール等の低級アルコール、１，３−ブチレングリコール，プロピレングリコール，ジプロピレングリコール，グリセリン等の多価アルコール、エチルエーテル，プロピルエーテル等のエーテル類、酢酸ブチル，酢酸エチル等のエステル類、アセトン，エチルメチルケトン等のケトン類などの溶媒を用いることができ、これらより１種又は２種以上を選択して用いる。また、生理食塩水，リン酸緩衝液，リン酸緩衝生理食塩水等を用いてもよい。さらに、水や二酸化炭素，エチレン，プロピレン，エタノール，メタノール，アンモニアなどの１種又は２種以上の超臨界流体や亜臨界流体を用いてもよい。
【００１０】
セスビウム属（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ）植物の上記溶媒による抽出物は、そのままでも使用することができるが、濃縮，乾固した物を水や極性溶媒に再度溶解したり、或いはこれらの生理作用を損なわない範囲で脱色，脱臭，脱塩等の精製処理を行ったり、カラムクロマトグラフィー等による分画処理を行った後に用いてもよい。セスビウム属（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ）植物の前記抽出物やその処理物及び分画物は、各処理及び分画後に凍結乾燥し、用時に溶媒に溶解して用いることもできる。また、リポソーム等のベシクルやマイクロカプセル等に内包させて用いることもできる。
【００１１】
本発明における老化症状の予防・改善に優れた効果を発揮する皮膚外用剤は、上述のセスビウム属（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ）植物抽出物を含有する。また、優れた効果を発揮する細胞賦活剤及び抗酸化剤は、係るセスビウム属（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ）植物抽出物を有効成分とする。
【００１２】
本発明におけるセスビウム属（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ）植物抽出物の配合量は、皮膚外用剤の種類や目的等によって調整することができるが、皮膚外用剤の全量に対して、０．０００１〜１０．０重量％が好ましく、より好ましくは、０．００１〜５．０重量％である。
【００１３】
本発明に係る皮膚外用剤は、ローション，乳液，ゲル，クリーム，軟膏剤，粉末，顆粒等、種々の剤型で提供することができる。
【００１４】
なお、本発明に係る皮膚外用剤には、セスビウム属（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ）植物抽出物の他に、通常医薬品，医薬部外品，皮膚化粧料，毛髪用化粧料及び洗浄料に配合される、油性成分，保湿剤，粉体，色素，乳化剤，可溶化剤，洗浄剤，紫外線吸収剤，増粘剤，薬剤，香料，樹脂，防菌防黴剤，アルコール類等を適宜配合することができる。また、本発明の効果を損なわない範囲において、他の細胞賦活剤，抗酸化剤，植物抽出物との併用も可能である。
【００１５】
【実施例】
さらに実施例により、本発明の特徴について詳細に説明する。まず、本発明のセスビウム属（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ）植物抽出物の調製方法について示す。
【００１６】
［調製方法１］
セスビウム属（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ）植物の全草の乾燥粉砕物１ｋｇに５０重量％エタノール水溶液を１０リットル加え、室温で７日間浸漬した。抽出液をろ過して回収し、溶媒を除去した後、セスビウム属（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ）植物抽出物を得た。
【００１７】
［調製方法２］
セスビウム属（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ）植物の全草の乾燥粉砕物１ｋｇに水を９リットル加え、９０℃にて６時間還流して抽出した。抽出液をろ過して回収し、溶媒を除去した後、セスビウム属（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ）植物抽出物を得た。
【００１８】
［調製方法３］
セスビウム属（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ）植物の全草の乾燥粉砕物１ｋｇにメタノールを９リットル加え、室温で７日間浸漬した。抽出液をろ過して回収し、溶媒を除去した後、セスビウム属（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ）植物抽出物を得た。
【００１９】
［調製方法４］
超臨界抽出装置にセスビウム属（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ）植物の全草を投入し、４０℃において１５ＭＰａの気圧下で二酸化炭素の超臨界流体を用いて抽出した。抽出物を回収し、セスビウム属（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ）植物抽出物を得た。
【００２０】
次に、セスビウム属（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ）植物抽出物の真皮線維芽細胞賦活作用を示す。試料には、ミルスベリヒユ（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ　ｐｏｒｔｕｌａｃａｓｔｒｕｍ）の全草より調製方法１を用いて抽出したミルスベリヒユ抽出物を用いた。
【００２１】
評価は、以下の手順で行った。正常ヒト真皮線維芽細胞を１ウェル当たり２．０×１０４個となるように９６穴マイクロプレートに播種した。播種培地には、ダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）に１％のウシ胎児血清を添加したものを用いた。２４時間培養後、任意の濃度の試料を添加した試験培地に交換し、さらに４８時間培養した。次いで３−（４，５−ジメチル−２−チアゾリル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロミド（ＭＴＴ）を４００μｇ／ｍＬ含有する培地に交換して２時間培養し、テトラゾリウム環の開環により生じるフォルマザンを２−プロパノールにて抽出し、マイクロプレートリーダーにて５５０ｎｍの吸光度を測定した。同時に濁度として６５０ｎｍにおける吸光度を測定し、両測定値の差により細胞賦活作用を評価した。また、測定法の妥当性を確認するために、試料を添加した培地の代わりに、ダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）に５％のウシ胎児血清を添加したものを陽性コントロールとし、測定を行った。評価結果を、試料無添加のブランクにおける細胞賦活作用を１００とした相対値にて表１に示す。
【００２２】
【表１】
2004137168.tif 000002
【００２３】
表１より明らかなように、ミルスベリヒユ抽出物を添加した培地では、有意な真皮線維芽細胞賦活作用が認められた。特に、ミルスベリヒユ抽出物を０．０８〜１０．０ｍｇ／ｍＬ添加した場合に、ブランクと比較して、危険率１％未満で有意な真皮線維芽細胞賦活作用が認められた。このことから、ミルスベリヒユ抽出物は、優れた真皮線維芽細胞賦活作用を有することが明らかとなった。
【００２４】
次に、セスビウム属（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ）植物抽出物の抗酸化作用について示す。試料には、ミルスベリヒユ（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ　ｐｏｒｔｕｌａｃａｓｔｒｕｍ）の全草より調製方法１を用いて抽出したミルスベリヒユ抽出物を用いた。
【００２５】
評価は、以下の手順で行った。５０重量％エタノール水溶液にて１０ｍｇ／ｍＬに希釈したミルスベリヒユ抽出物溶液を９６穴マイクロプレートに１００μＬ添加した。次に、０．２ｍＭの濃度になるようにエタノールにて調製した１，１−ジフェニル−２−ピクリルヒドラジル（ＤＰＰＨ）溶液を９６穴マイクロプレートに１００μＬ添加した。攪拌しながら暗所に放置し、１０分後と２４時間後に５１６ｎｍの吸光度を測定した。試料が無添加のブランクの吸光度を（Ａ）、試料を添加したときの吸光度を（Ｂ）としたとき、式（１）の値をラジカル消去率とした。
式（１）　｛１−（Ｂ）／（Ａ）｝×１００（％）
ミルスベリヒユ抽出物の実験結果を表２に示す。
【００２６】
【表２】
2004137168.tif 000003
【００２７】
表２より明らかなように、ミルスベリヒユ抽出物は優れた抗酸化作用を有することが分かった。
【００２８】
続いて、本発明に係るセスビウム属（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ）植物抽出物を配合した皮膚外用剤の処方を示す。実施例１〜５の処方には、表３に示すセスビウム属（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ）植物抽出物を配合し、実施例６〜１６の各処方には、それぞれの処方に記載のセスビウム属（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ）植物の全草から得られる抽出物を配合した。
【００２９】
2004137168.tif 000004
製法：（１）〜（６）の油相成分を８０℃にて加熱溶解する。一方（７）〜（１０）の水相成分を８０℃にて加熱溶解する。これに前記油相成分を攪拌しながら加え、ホモジナイザーにより均一に乳化する。乳化終了後、冷却を開始し、（１１）と（１２）を順次加え、均一に混合する。
【００３０】
【表３】
2004137168.tif 000005
【００３１】
2004137168.tif 000006
製法：（１）に（２）及び（３）を溶解する。溶解後、（４）〜（８）を順次添加した後、十分に攪拌し、（９）を加え、均一に混合する。
【００３２】
2004137168.tif 000007
製法：（１）〜（６）の油相成分を８０℃にて加熱溶解する。一方（７）〜（１０）の水相成分を８０℃にて加熱溶解する。これに前記油相成分を攪拌しながら加え、ホモジナイザーにより均一に乳化する。乳化終了後、（１１）を加え、冷却を開始し、４０℃にて（１２）を加え、均一に混合する。
【００３３】
2004137168.tif 000008
製法：（１）〜（６）の水相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解する。一方、（７）〜（１４）の油相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解する。次いで、上記水相成分に油相成分を添加して予備乳化を行った後、ホモミキサーにて均一に乳化する。乳化終了後に冷却を開始し、５０℃にて（１５）を加える。さらに４０℃まで冷却し、（１６）を加え、均一に混合する。
【００３４】
2004137168.tif 000009
製法：（１）を（２）に加え、均一に攪拌した後、（３）を加える。均一に攪拌した後，（４）に予め溶解した（５）を加える。均一に攪拌した後、予め混合しておいた（６）〜（８）を加える。均一に攪拌した後、（９）〜（１０）を順次加え、均一に混合する。
【００３５】
2004137168.tif 000010
製法：（１）と（２）を均一に溶解する。これに、（３）〜（５）を順次加え、均一に混合する。
【００３６】
2004137168.tif 000011
製法：（１）〜（４）の油相成分を８０℃にて加熱溶解する。一方（５）〜（７）の水相成分を８０℃にて加熱溶解し、油相成分と均一に混合撹拌する。冷却を開始し、４０℃にて（８）と（９）を加え、均一に混合する。
【００３７】
2004137168.tif 000012
製法：（１）〜（４）の油相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解する。一方、（５）〜（７）の水相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解し、これに（８）〜（１０）の顔料を加え、ホモミキサーにて均一に分散させる。この水相成分に前記油相成分を加え、ホモミキサーにて乳化する。乳化終了後に冷却を開始し、４０℃にて（１１）〜（１３）の成分を加え、均一に混合する。
【００３８】
2004137168.tif 000013
製法：（１）〜（６）の油相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解する。一方、（７）〜（１０）の水相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解し、これに（１１）〜（１５）の顔料を加え、ホモミキサーにて均一に分散する。油相成分を加え、乳化を行う。乳化終了後に冷却を開始し、４０℃にて（１６）〜（１８）の成分を順次加え、均一に混合する。
【００３９】
2004137168.tif 000014
製法：（５）と（６）を（１１）の一部に溶解して５０℃とし、５０℃に加熱した（４）に撹拌しながら徐々に加える。これを混合した後、７０℃にて加熱溶解した（１）〜（３）に均一に分散する。これに（７）〜（１０）を（１１）の残部に７０℃にて加熱溶解したものを撹拌しながら加え、ホモミキサーにて乳化する。乳化終了後に冷却を開始し、４０℃にて（１２）と（１３）を加え、均一に混合する。
【００４０】
2004137168.tif 000015
製法：（２）と（３）を混合し、８０℃に加温した後、８０℃に加温した（１）に溶解する。均一に溶解した後、（４）〜（５）を加え、攪拌しながら冷却を開始する。４０℃まで冷却し、（６）〜（８）を加え、均一に混合する。
【００４１】
2004137168.tif 000016
製法：（１）〜（５）を均一に混合する。
【００４２】
本発明の実施例１〜５について使用試験を行い、シワ，タルミ，肌のハリの改善効果を評価した。その際、実施例１において、配合したミルスベリヒユ抽出物を精製水に代替し、比較例１として同時に使用試験を行った。
【００４３】
各試料について、シワ，タルミ，肌のハリの低下といった症状が顕著に認められる５０〜６０才代の男女パネラー各２０名を一群とし、ブラインドにて１カ月間使用させ、使用前後の皮膚状態の変化を観察して評価した。皮膚症状の指標として、シワ，タルミ，肌のハリについて、「改善」，「やや改善」，「変化なし」の三段階で評価し、表４に各評価を得たパネラー数にて示した。
【００４４】
【表４】
2004137168.tif 000017
【００４５】
表４より、シワ，タルミ，肌のハリについて、セスビウム属（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ）植物抽出物を含有しない比較例使用群においては、半数以上のパネラーに改善は認められなかったが、セスビウム属（Ｓｅｓｕｖｉｕｍ）植物抽出物を配合した実施例使用群においては、６割以上のパネラーに明確な改善が認められた。
【００４６】
以上のように、本発明の実施例においては、従来の比較例よりも、シワ，タルミ，肌のハリといった老化症状の改善に優れた効果を有していた。
【００４７】
【発明の効果】
以上詳述したように、本発明により、皮膚の老化症状の防止・改善に優れた効果を有する皮膚外用剤、優れた効果を有する細胞賦活剤、及び優れた効果を有する抗酸化剤を得ることが出来た。