(57)【要約】【課題】【解決手段】本発明は、分析用支持体、特に例えば電気泳動用ゲルのような電気泳動支持体上に１つ以上の試薬を分配するためのマスクに関する。マスク（１０）（移動マスクと呼ぶ）はマスク保持具１２に保持され、分析用支持体上の規定の領域の上部を移動するように設計されており、分析用支持体上に試薬を分配するための貫通する穴３６を備えている。本発明は、例えば生体サンプル内に存在する成分の検出および特徴付けの分野で利用できる。特に検出は免疫固定により行われる。【選択図】　　図２
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
生体サンプルのための分析用支持体上に試薬を沈着および分配するためのマスクであって、
・マスクの厚さを構成する距離だけ離間した、少なくとも部分的に互いに平行な下表面および上表面と
・それぞれ水平面に対して傾斜を構成する部分を含む、マスクの下表面から突出する要素（突出要素）（３２）を備え、マスクの下表面の高さに配設された１つ以上の規定領域（レーン）と
・マスクの上表面上にある上側の穴（３６）からレーンの傾斜部の最下点の近傍にあるレーンの下側の穴（３４）までマスクの全厚さを貫通する、各レーンに伴う開口部と
を備え、
マスクが備える１または複数のレーンは、毛管作用により、マスクを配置したときにマスクが面する分析用支持体の表面とレーンとの間に、各開口部に充填されて分析用支持体上に沈着される試薬を保持することができるマスク。
【請求項２】
生体サンプルのための分析用支持体上に試薬を分配するのに適したマスクであって、
・マスクの厚さを構成する距離だけ離間した、少なくとも部分的に互いに平行な下表面および上表面と
・それぞれ水平面に対して傾斜を構成する部分を含む、マスクの下表面から突出する細長い形状の突出要素（３２）を、それぞれが備える１つ以上のレーンと
・マスクの上表面上にある上側の穴（３６）からレーンの傾斜部の最下点の近傍にあるレーンの下側の穴（３４）まで、マスクの全厚さを貫通する、各レーンに伴う開口部と
を備え、
マスクが備える１または複数のレーンは、毛管作用により、マスクを配置したときにマスクが面する分析用支持体の表面とレーンとの間に、各開口部に充填されて分析用支持体上に沈着される試薬を保持することができる請求項１に記載のマスク。
【請求項３】
生体サンプルのための分析用支持体上に試薬を分配するのに適したマスクであって、
・マスクの厚さを構成する距離だけ離間した、少なくとも部分的に互いに平行な下表面および上表面と
・平行六面体を切り取った形状の隆起から成り、水平面に対する傾斜を構成する部分を備える、マスクの下表面から突出する突出要素（３２）を、それぞれが備える１つ以上のレーンと
・マスクの上表面上にある上側の穴（３６）からレーンの傾斜部の最下点の近傍にあるレーンの下側の穴（３４）まで、マスクの全厚さを貫通する、各レーンに伴う開口部と
を備え、
マスクが備える１または複数のレーンは、毛管作用により、マスクを配置したときにマスクが面する分析用支持体の表面とレーンとの間に、各開口部に充填されて分析用支持体上に沈着される試薬を保持することができる請求項１に記載のマスク。
【請求項４】
生体サンプルのための分析用支持体上に試薬を沈着および分配するのに適したマスクであって、
・マスクの厚さを構成する距離だけ離間した、少なくとも部分的に互いに平行な下表面および上表面と
・それぞれがマスクの下表面および上表面に平行な上面および下面を有する、マスクの下表面から突出する要素（突出要素）（３２）を備えるマスクの下表面に配設された１つ以上の規定の領域（レーン）と
・マスクの上表面上にある上側の穴（３６）から、使用位置にあるときマスクを分析用支持体に対して傾けることによりレーンの傾斜部の最下点となる地点の近傍にあるレーンの下側の穴（３４）まで、マスクの全厚さを貫通する、各レーンに伴う開口部と
を備え、
マスクが備える１または複数のレーンは、毛管作用により、マスクを配置したときにマスクが面する分析用支持体の表面とレーンとの間に、各開口部に充填されて分析用支持体上に沈着される試薬を保持することができるマスク。
【請求項５】
マスクは硬質であるか、または補剛されていること特徴とする請求項１に記載のマスク。
【請求項６】
マスクは硬質であるか、または補剛されていること特徴とする請求項４に記載のマスク。
【請求項７】
開口部は、充填された試薬の貯留部を構成できるような容積を有する請求項１に記載のマスク。
【請求項８】
開口部は、充填された試薬の貯留部を構成できるような容積を有する請求項４に記載のマスク。
【請求項９】
各レーンの開口部は、突出要素（３２）の厚さを含むマスクの厚さを垂直方向に貫通しており、該開口部は円筒形の下側の穴（３４で終端する錐台形の部分（３８）を備えている請求項１に記載のマスク。
【請求項１０】
開口部は、充填された試薬の貯留部を構成できるような容積を有する請求項４に記載のマスク。
【請求項１１】
マスクの長さに亘って配設された複数の互いに平行なレーンを備える請求項１に記載のマスク。
【請求項１２】
マスクの長さに亘って配設された互いに平行な複数のレーンを備える請求項４に記載のマスク。
【請求項１３】
・第１の列に整列した互いに平行な第１組のレーンと
・第１の列に平行なで、第１の列からずれた第２の列に整列した互いに平行な第２組のレーンと
を備える請求項１１に記載のマスク。
【請求項１４】
・互いに平行に並んでいる第１列のレーンと
・第１の列に平行なで、第１の列からずれた第２の列に整列した互いに平行な第２組のレーンと
を備える請求項１２に記載のマスク。
【請求項１５】
各傾斜部の長さがレーンの長さに一致する請求項１に記載のマスク。
【請求項１６】
各傾斜部の長さがレーンの長さに一致する請求項４に記載のマスク。
【請求項１７】
マスクの分析用支持体から最も離れた地点と分析用支持体との距離が２ｍｍ以下、およびマスクの分析用支持体に最も近い地点と分析用支持体との距離が０．１以上から０．５ｍｍ以下の範囲となるようにマスクを配置したとき、マスクの各開口部内の４から１５ｍｌの範囲の量の各試薬を沈着させ、毛管作用により該試薬をマスクのレーンと分析用支持体の間に保持するための、請求項１に記載のマスク。
【請求項１８】
マスクの分析用支持体から最も離れた地点と分析用支持体との距離が２ｍｍ以下、およびマスクの分析用支持体に最も近い地点と分析用支持体との距離が０．１以上から０．５ｍｍ以下の範囲となるようにマスクを配置したとき、マスクの各開口部内の４から１５ｍｌの範囲の量の各試薬を沈着させ、毛管作用により該試薬をマスクのレーンと分析用支持体の間に保持するための、請求項４に記載のマスク。
【請求項１９】
レーンは１．５ｍｍ以上の距離で互いに離間している請求項１に記載のマスク。
【請求項２０】
レーンは１．５ｍｍ以上の距離で互いに離間している請求項４に記載のマスク。
【請求項２１】
レーンは、毛管作用によりマスクと分析用支持体の間に保たれる試薬が、該分析用支持体上に沈着および分配する間に相互作用しないような大きさおよび間隔を有する請求項１ないし４のいずれか１項に記載のマスク。
【請求項２２】
レーンの幅が２．５ｍｍである請求項１に記載のマスク。
【請求項２３】
各レーンの長さは６から７ｍｍの範囲である請求項１または４ないし１９のいずれか１項に記載のマスク。
【請求項２４】
固定剤のためのレーンは、隣接する第１のレーンに対して５から７ｍｍの距離だけずれている請求項１または４に記載のマスク。
【請求項２５】
各レーンの傾斜部は水平面に対して１度から１０度傾いている請求項１または４に記載のマスク。
【請求項２６】
マスクの各レーンは、
・長さ３から１５ｍｍ、
・幅１から１０ｍｍ、
・傾斜部の傾きが水平面に対し１度から１０度
である請求項１に記載のマスク。
【請求項２７】
分析用支持体上に試薬を沈着および分配するためにマスクが接近する分析用支持体の表面の近傍にマスクを保持する位置決め手段を伴う請求項１または４に記載のマスク。
【請求項２８】
１つ以上の試薬を生体サンプルのための分析用支持体上に沈着および分配するための装置であって、
ａ）請求項１に記載のマスク（１０）と
ｂ）マスクのレーンと一列に並ぶ分析用支持体の規定の領域それぞれに行き渡るように試薬を沈着および分配するために、マスクを分析用支持体の表面の近傍に保持でき、およびマスクが分析用支持体の表面をスイープするように支持体の表面に平行な水平面内を誘導できる、位置決めおよび誘導手段（１２、１４、１６）と
を備える装置。
【請求項２９】
１つ以上の試薬を生体サンプルのための分析用支持体上に沈着および分配するための装置であって、
ａ）請求項１に記載のマスク（１０）と
ｂ）マスクのレーンと一列に並ぶ分析用支持体の規定の領域それぞれに行き渡るように試薬を沈着および分配するために、マスクを分析用支持体の表面に近接する位置に保持でき、およびマスクが分析用支持体の表面をスイープできるように支持体の表面に対して傾いている平面内を誘導できる、位置決めおよび誘導手段（１２、１４、１６）と
を備える装置。
【請求項３０】
マスク（１０）の位置決めおよび誘導手段は、分析用支持体とこの支持体に最も近いマスク上の位置（傾斜部の最下点に一致）の間の距離を０．１ｍｍから０．５ｍｍの範囲に設定することができる請求項２８または２９に記載の装置。
【請求項３１】
位置決めおよび誘導手段は、分析用支持体に沿うマスク（１０）の移動を自動化できる請求項２８または２９に記載の装置。
【請求項３２】
１つ以上の試薬を生体サンプルを含む分析用支持体上に沈着および分配するための方法であって、
・請求項１に記載のマスク（１０）を分析用支持体の近傍に配置して分析用支持体上に１または複数の試薬を沈着させ、毛管作用により該支持体とマスクの１または複数のレーンの傾斜部との間に試薬を保持する段階と
・１または複数の試薬をマスク（１０）に充填して分析用支持体上に１または複数の試薬を沈着させ、毛管作用により該支持体とマスクの１または複数の傾斜部との間に試薬を保持する段階と
・分析用支持体の表面をスイープしてマスク（１０）を移動させ、分析用支持体上の生体サンプルの構成成分と相互作用するのに十分な量の１または複数の試薬を、分析用支持体上の規定の領域（定温培養領域と呼ぶ）に分配する段階と
を含む方法。
【請求項３３】
１つ以上の試薬を生体サンプルを含む分析用支持体上に沈着および分配するための方法であって、
・試薬をマスクに充填して分析用支持体上に試薬を沈着させ、該支持体と、マスクの１または複数のレーンもしくは傾斜部との間に毛管作用により試薬を保持する段階と
・請求項１に記載のマスク（１０）を分析用支持体の近傍に配置して分析用支持体上に１または複数の試薬を沈着させ、毛管作用により該支持体とマスクの１または複数のレーンの傾斜部との間に試薬を保持する段階と
・分析用支持体の表面をスイープしてマスクを移動させ、分析用支持体上の生体サンプルの構成成分と相互作用するのに十分な量の１または複数の試薬を、分析用支持体上の規定の領域（定温培養領域と呼ぶ）に分配する段階と
を含む方法。
【請求項３４】
生体サンプルの構成成分を含む分析用支持体の表面の領域から離してマスクに１または複数の試薬を充填する請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
支持体の近傍にマスクを配置する段階の前に、マスクに試薬を充填し、マスクに空気圧を加えた結果生じる衝撃により、または試薬と分析用支持体の間の機械的な連結部により、または試薬を支持体上に射出することにより、またはレーンの傾斜部の最下点でマスクと分析用支持体をわずかに接触させることにより、分析用支持体上に試薬を沈着させる請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
マスク（１０）への１または複数の試薬の充填、およびマスクの移動が自動化された請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
分析用支持体は、その上で１つ以上の生体サンプルの構成成分が電気泳動により分離される電気泳動支持体である、請求項３２または３３に記載の方法。
【請求項３８】
１または複数の試薬は、電気泳動により分離された生体サンプルの構成成分を免疫固定するためのものである請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
免疫固定により１つ以上の生体サンプルの構成成分を検出するための方法であって
・構成成分を分離するために１または複数の生体サンプルの電気泳動を電気泳動支持体上で行う段階と
・請求項３２、または３３ないし４４のいずれか１項に記載の方法を用いて、１または複数の試薬を電気泳動支持体上に沈着および分配をする段階と
・電気泳動により分離された生体サンプルを分配された１または複数の試薬とで定温培養し、免疫固定する段階と
を含む方法。
【請求項４０】
・１つ以上の請求項１に記載のマスクと
・１つ以上の分析用支持体と
を備えるキット。
【請求項４１】
・電気泳動により分離されたサンプルの構成成分を免疫固定するための試薬と
・　　　各サンプルの電気泳動により分離された構成成分の集合体を固定するための固定剤と
をさらに備える請求項４０に記載のキット。
【請求項４２】
マスクに充填された試薬を凍結乾燥された状態にする請求項１に記載のマスク。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、分析用支持体、特に例えばアガロースゲルのような電気泳動支持体上に、１つ以上の試薬を沈着および分配するためのマスクに関する。本発明は、例えば、生体サンプル内、特に血清、尿、または脳脊髄液といった生体液内に存在する構成成分の検出および特徴付けの分野で使用するのに適している。特に、例えば電気泳動を用い、生体サンプルから該構成成分を分離した後でそのような検出を行うことができる。とりわけ検出は、サンプルから分離された構成成分に試薬を接触させ、支持体の規定の領域内において生体サンプルから分離された構成成分と分析用試薬との免疫学的認識反応を生じさせるために定温培養することが必要な、周知の免疫固定技術を用いて行うことができる。
【０００２】
本発明は、特に臨床分析に関して行われる種類の、日常的な分析に有利に用いることができる。
本発明はまた、１つ以上の試薬を分析用支持体上に沈着および分配するためのマスクに関し、該マスクが取り付けられる装置は、試薬を沈着および分配するためにマスクを用いるとき、分析用支持体の近傍に、該支持体に対してマスクを位置付けることができる位置決め手段を有する。
【０００３】
また、該位置決め手段は、マスクが分析用支持体の近傍に配置されたとき、試薬とサンプルの構成成分とを定温培養するための領域を含む支持体の規定の領域に試薬を分配することが可能になるように、マスクを移動させることができる誘導手段を取り付けることができるか、または該誘導手段を備えることができる。
【０００４】
本発明による装置では、試薬を手動で沈着または分配することができる。また、これらの試薬を自動的に沈着させ、および随意で自動的に分配することもできる。
一部の実施形態では、試薬をマスクに充填する段階も、手動で、または自動的に行うことができる。有利なことに、本発明によるマスクは従来のマスクに比べて充填が容易である。
本発明の別の実施様態は、分析用支持体上に試薬を沈着および分配する方法を提供するものである。
本発明によるある特定の実施例では、本発明の方法を用いて試薬を沈着および分配し、免疫固定を行って生体サンプル内に含まれる特定の構成成分を検出および場合によっては定量する。該構成成分は、アガロースゲルのような支持体上における電気泳動により前もって分離しておく。
【０００５】
本発明は、前記マスクを用いる免疫固定方法にも関する。
他の実施態様では、本発明は、本発明によるマスクを含むキットを提供する。
本発明によるキットは、本発明のマスクを用いる免疫固定方法に有利に適用される。
本発明はまた、マスクの位置決め、および誘導手段にも関する。
免疫固定は、含有されるパラプロテインを分類するために生体サンプルを分析することができ、特に臨床分析を行う研究所で広く行われている日常的分析であることに注意されたい。
【０００６】
【従来の技術および発明が解決しようとする課題】
電気泳動と、電気泳動ゲル上での沈殿物の形成を組み合わせた技術は、かなり以前から知られている。その技術は特に、Ａｌｐｅｒ　ＣＡおよびＪｏｈｎｓｏｎ　ＡＭ共著、Ｖｏｘ．Ｓａｎｇ．　１７：　４４５　（１９６９年）、Ｃａｗｌｅｙ　ＬＰ他共著、Ｃｌｉｎ．　Ｃｈｅｍ．　２２：　１２６２　（１９７６年）、Ｒｉｔｃｈｉｅ　ＲＦおよびＳｍｉｔｈ　Ｒ共著、Ｃｌｉｎ．　Ｃｈｅｍ．　２２：　４９７，　１７３５，　１９８２　（１９７６年）などに開示されている。それによると、様々な生体サンプル内、特に血清、尿、または脳脊髄液といった生体液内の異常を識別することができる。
その技術は、主に：
１）ゲル、例えばアガロースゲルなどの支持体上で電気泳動を行い、試験用血清または液体からタンパク質構成成分を分離する段階、
２）該分離したタンパク質を特定の抗体と免疫的に反応させる段階、及び
３）形成された免疫学的複合体を明らかにする段階
を含む。
これらの段階を行う条件は、先行技術で開示されている。
使用する装置はまた、同じ電気泳動支持体上、特に同じゲル上に、基準レーン（トラック）を生成することができ、該基準レーンは、サンプル上に存在する分離されたタンパク質すべてを、例えば多価抗血清を含むタンパク質固定剤を用いてサンプル上に固定することにより得られる。
分析する生体サンプルの適用、制御温度における泳動、および試薬（例えば抗血清および固定剤を含む）の沈着のための新しい半自動式の技術は、感度および解像度を十分に維持したまま免疫固定のプロファイルを小型化できる。小型化により、多くのサンプルを同じ電気泳動用の支持体上、特に同じゲル上で分析することができる。
【０００７】
したがって、１枚の８×１０ｃｍの電気泳動ゲル上で（例えば、Ｈｙｄｒａｇｅｌ　９　ＩＦの登録商標でセビア（ＳＥＢＩＡ）から販売されている免疫固定キットを用いて）免疫固定できる数は、この数年で１から９に増えた。これにより、分析時間を節約でき、消費する試薬も減るので、分析コストが減少している。
そのような条件下で免疫固定を行うための試薬の沈着について、例えばＥＰ−Ｂ１−０５２６２７１号は、従来の技術による装置またはマスクが有する問題の一部を解決し、より安全且つ使用が容易な、試薬（通常は特定の抗血清および固定剤）を分配するためのマスクまたは装置を開示している。したがって、例えば欧州特許番号Ｂ１−０５２６２７１号に開示されたマスクを用い、９つの免疫固定、例えば同じ電気泳動ゲル上のそれぞれ３つのサンプルを含む３列の免疫固定を行う場合、各サンプルに対し、６つの試薬（固定剤、抗−ＩｇＧ抗血清、抗−ＩｇＡ抗血清、抗−ＩｇＭ抗血清、抗−ｋ抗血清、および抗−１抗血清）をピペットで導入する必要があるので、すなわち合計で５４回ピペット操作を行わなくてはならない。
これらの手動のピペット操作は反復投与ピペットを用いたとしても、時間がかかり、困難であることがわかる。
【０００８】
本発明の第１の目的は、試薬のピペット操作および使用する試薬の量を低減できるマスクを提供することにより、マスクを用いて分析用支持体上へ試薬の沈着および分配を行う条件を改善することである。本発明に関して提案した手段は、分析用支持体上への試薬の沈着を制御する必要があるいかなる分析技術にも用いることができる。この点において、電気泳動分離後の免疫固定、または、例えば乳酸デヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）またはクレアチンキナーゼ（ＣＫ）の検査のための、酵素を成長させるための特定の基材上への分配といった技術を挙げることができる。
本発明の第１の態様は、分析用支持体上の規定の領域に試薬を分配する段階を行うための移動を含めた使用を考慮して設計された、試薬を分析用支持体上に沈着および分配するためのマスクを提供する。したがって、本発明のマスクは使用中に移動可能なマスクと考えてよい。
本発明はまた、試薬、特に高価な製品である抗血清、および免疫固定反応の場合は固定剤の消費を制限するので、分析コストを低減できる。また、特にピペット操作回数の低減および／またはマスクへの充填の自動化により、マスク内への試薬の充填を容易にする。
【０００９】
さらに、提供されるマスクにより、操作条件が改善、または簡素化されることにより、結果に一定の質が保証される。特に、本発明による装置を用いて分配した試薬を定温培養した段階の後で、ＥＰ−Ｂ１−０５２６２７１号では除去する必要があったゲルとマスクの間に残った余分な試薬を、除去する必要がなくなる。
本発明のマスクを用いることにより、試薬を分散および分配すると、最初に導入された試薬全ては分析用支持体上に沈着するので、マスクと分析用支持体の間に試薬が残存することがなくなる。
このように、本発明は、生体サンプルを分析するための分析用支持体上に試薬を沈着および分配するためのマスクを提供するもので、該マスクは：
・マスクの厚さを構成する距離だけ離間した、少なくとも部分的に互いに平行な下表面および上表面と、
・それぞれ水平面に対して傾斜をなす部分を含む、マスクの下表面から突出する要素（突出要素）を備えており、マスクの下表面の高さに配設された１つ以上の規定領域（レーン）と、
・マスクの上表面上にある上側の穴から、レーンの傾斜部の最下点の近傍にあるレーンの下側の穴までマスクの全厚さを貫通する、各レーンに伴う開口部と
を備え、
マスクが備える１または複数のレーンは、毛管作用により、マスクを配置したときにマスクが面する分析用支持体の表面とレーンとの間に、各開口部に充填されて分析用支持体上に沈着される試薬を保持することができる。
【００１０】
本発明で用いている「マスク」という表現は、通常、試薬をマスク内に充填し規定の領域に接触させたときに、必要であれば関連する手段と協働して、試薬が沈着および分配される分析用支持体上の規定領域に揃うように位置決めが可能に設計された平板を指す。
本発明によるマスクの大きさは、操作のためにマスクを分析用支持体に近づけたとき、マスクに充填した試薬が沈着および分配される分析用支持体の全表面を覆わないような大きさである。マスクの幅（レーンの長さを含む）は、分析用支持体の電気泳動レーンの長さに比べて特に短いが、それはマスクのレーンの長さが分析用支持体の電気泳動レーンの長さに比べて短いからである。したがって、分析用支持体上でのマスクの移動（後述）、およびマスクのレーン構造により可能となる該支持体上での試薬の移動の結果として、これらのレーンに試薬が分配される。
したがって、本発明のマスクは、試薬の分配を可能にするために、分析用支持体上を移動するものである。
「各レーンに伴う」と述べた開口部は、本発明の場合、マスクの開口部に充填した試薬が、分析用支持体上に沈着され、毛管作用により支持体とレーンとの間に保持されるようにレーンの傾斜部に供給され、マスクが移動する間に分析用支持体上に分配されるように、下側の穴が位置していることを意味する。
【００１１】
前記開口部は、例えばマスクの上表面に垂直な、マスクの一方の表面から他の表面へと貫通する穴である。開口部の下側の穴は、傾斜部内の、該傾斜部の最下点近傍にあるのが望ましい。レーンの−水平面に対する−傾斜部の最下点「近傍」に位置していることにより、試薬がレーンに沿って上昇するので、開口部の下側の穴からレーン内の液体試薬を分配することが可能になる。
開口部の上側の穴を下側の穴の鉛直線上に配置できる。或いは、この試薬を分析用支持体上に沈着および分配するのに適する条件の下で、試薬が下側の穴に供給される限りにおいて、開口部の上側の穴をこの鉛直線に対して傾斜した面に沿って配置できる。
【００１２】
このレーンに伴う開口部は、マスクの上表面に垂直な、一方からもう一方へ貫通する穴であり、マスクの上表面の円形の穴の先端を切断した錐の形に延ばし、例えば、レーンの傾斜部の最下点の近傍に配置した穴を介してマスクの下表面に開口する円筒形部分で終端させるのが有利である。下側の穴に開口する円筒形部分の存在により、例えば試薬を充填するときピペットにより下側の穴の縁にかかるような圧力を分散させることができ、よってマスクの強度が向上する。
また、先端を切断した形の開口部は、充填ピペットを有利に誘導し、レーンと分析用支持体の間に試薬を注入するときピペットの終端とマスクの間をシールすることができる。
必要であれば、円の断面を有する円筒部分を介して錐部分が上側の穴まで延びるように上記の開口部を変更できる。
本発明の特定の実施例では、上述のように開示した開口部は、上側の穴を下側の穴より大きくすることができ、例えば穴が円形の場合、上側の穴の直径は下側の直径より大きい。
【００１３】
生体サンプルのための分析用支持体上へ試薬を分配するのに適した、上記に定義される特定のマスクは：
・マスクの厚さを構成する距離だけ離間した、少なくとも部分的に互いに平行な下表面および上表面と、
・水平面に対して傾斜をなす部分を備えた、マスクの下表面に突出した細長い形状の突出要素をそれぞれが備える１または複数のレーンと、
・上表面上にある上側の穴から、レーンの傾斜部の最も低い地点の近傍にある下側の穴までマスクの全厚さを貫通する、各レーンに伴う開口部と
を備え、
マスクが備える１または複数のレーンは、マスクを配置したときに、毛管作用により、各開口部に充填されて分析用支持体上に沈着される試薬をマスクが面する分析用支持体の表面とレーンとの間に保持することができると定義することができる。
【００１４】
マスクのレーンは細長い形状で、ランプとも呼ばれる。それらの傾斜部は全部同じ方向に傾いている。
該傾斜部は、上記に述べたように毛管作用によって試薬を保持するためのものであり、またマスクを移動させたときに試薬を分配するために試薬が傾斜部の最下点にくることを確実にするためのものである。
【００１５】
特に、上記に定義したような本発明によるさらに好適なマスクは：
・マスクの厚さを構成する距離だけ離間した、少なくとも部分的に互いに平行な下表面および上表面と、
・水平面に対して傾斜をなす部分を備えた、マスクの下表面に突出した平行六面体を切り取った形状の隆起から成る突出要素をそれぞれが備える１または複数のレーンと、
・上表面上にある上側の穴から、レーンの傾斜部の最も低い地点の近傍にある下側の穴までマスクの全厚さを貫通する、各レーンに伴う開口部と
を備え、
マスクが備える１または複数のレーンは、毛管作用により、各開口部に充填されて分析用支持体上に沈着される試薬をマスクを配置したときにマスクが面する分析用支持体の表面とレーンとの間に保持することができる。
【００１６】
突出要素が細長い形状の要素から構成される場合、または切り取られた平行六面体の形状の隆起から構成される場合、この突出要素は、該突出要素が配設されるマスクの下表面に一致する上面と、その上側の表面とは水平方向に対する１つ以上の傾斜部を隔てて離間する下面とを有し、各レーンの開口部の下側の穴の近傍に位置する傾斜部の最下点は、対面する分析用支持体に最も近い点であり、使用位置では分析用支持体の近傍に位置する。
【００１７】
マスクの下表面から突出し、傾斜部を備える突出要素は、この支持体に対して水平な平面内を、マスクの１または複数のレーンに対面する分析用支持体の領域に沿ってマスクを移動させることより、マスクに充填した試薬を有利に沈着および分配できる。
本発明の他の実施形態では、マスクは１以上のレーンを有し、該レーンのそれぞれはマスクの下表面の下方に突き出している突出要素を備え、該突出要素は、試薬で覆う分析用支持体の幅に適応する大きさの、試薬を受容するための半球形の空間を含み、該試薬は毛管作用により半球形の空間に保持されて、マスクを移動すると該半球部分に開けた穴から分析用支持体上に分配される。そのようなマスクもまた、細長い形状の突出要素について上記で定義した特徴を有する。
【００１８】
本発明の特定の実施形態では、マスクの下表面および上表面は互いに完全に平行で、レーンを構成する領域から離れている、すなわちレーンの傾斜部を構成する領域から離れている。
本発明による上述の実施形態では、突出要素の形状に関わらず、マスクの各レーンにおいて傾斜部は該レーンに一致する。
或いは、レーンの一部分のみが傾斜していてもよい。例示したように、その傾斜部の最下点に下側の穴を備えているレーンは、その傾斜部から、例えば水平方向にさらに延びていてもよい。他の変型形態では、傾斜部が複数の傾斜から構成されていてもよい。
本発明によるマスクを、例えば電気泳動ゲルのような支持体と共に用いて生体サンプルを分析するとき、このマスクを分析用支持体の「近傍」に近づける。すなわち、マスクは、試薬が沈着および分配される支持体の領域（試薬定温培養領域）と接触せず、またその支持体上に沈着した試薬は、毛管作用によりマスクのレーンと分析用支持体の間の保持され、よって支持体の上部で、分析用支持体と平行にマスクを移動させる間、マスクのレーンに対面する位置にある該分析用支持体の規定の領域全体に試薬を分配することができる。さらに詳細には、本発明の特定の実施形態では、上述の「接触しない」ということは、試薬を沈着および分配できるように試薬が降下し始めた後、それに続く接触が起こらないということである。本発明の特定の実施形態では、後述および図示するように、この降下に関して実際には分析用支持体とのわずかな接触が起こる。
【００１９】
マスクの各レーンの突出要素に形成された傾斜部は、その最下点と言われる地点が使用の際に分析用支持体が構成する水平面に最も接近する地点となるよう設計されている。このため、操作位置にあるとき、該レーンの傾斜部の最高点と言われる地点は、分析用支持体が構成する水平面から最も遠い地点である。したがって、支持体に面しているマスクの各レーンの下面は、水平面に対して傾いている。
分析用支持体上に沈着させた試薬を分配する間、分析用支持体を含む水平面に対するレーンの位置および各レーンに伴う開口部の下側の穴の位置のために、レーンの傾斜部の最下点において試薬にかかる毛管力が最大になるので、試薬がレーンの傾斜部の最下点へ確実に到達する。
試薬となる液体を、レーン全体にまたはレーンの一部にのみ充填することができる。
【００２０】
本発明によるマスクを用いて、１または複数の試薬を、マスクのレーンと分析用支持体を接触させることなく、分析用支持体の規定の領域全体に制御しながら沈着または分配することができる。
マスクが移動するときは、損傷を与えることなくこの分析用支持体に沿って支持体に平行に滑ることができるので、使用中にはマスクのレーンと一直線上にある分析用支持体の該領域から離れると、マスクと分析用支持体は接触することができる。
【００２１】
本発明の特定の実施形態の１つでは、分析用支持体に近接させて配設できるマスクの領域を除くと、使用中にマスクのいかなる地点も分析用支持体と接触しない。
分析用支持体の近傍にマスクを配置するためにマスクを支持する必要があるとき、該分析用支持体から離れて、例えば支持体が配置されている平面（またはプレート）上で達成されるのが好ましい。
マスク、レーンまたは傾斜部の上表面および下表面を考えるとき、これらの概念は、水平位置にある分析用支持体の上部にあるマスクの位置に関すると考える。言い換えれば、マスクが使用位置にあるとき、マスクの下表面および各レーンまたは各傾斜部の下表面は分析用支持体に面している。したがって、水平位置で使用するときは、突出要素の傾斜部の基準となる水平面は、分析用支持体の水平面でよい。
【００２２】
本発明はまた、本発明の原理を利用して分析用支持体上に試薬を沈着および分配するため、すなわち、毛管作用によりマスク内に規定された傾斜部と該レーンに面している分析用支持体上の領域の間に試薬を保持するために使用するマスクに関し、該マスクは、マスクの各レーンに構成されている傾斜部が、使用時に分析用支持体に対してマスクを傾けることにより生じる点が上記で詳細を述べたマスクとは異なる。この場合マスクの下表面と分析用支持体に面する突出要素の下面は平行で、マスクが分析用支持体に対して傾斜位置にあるために傾斜部ができる。
この特定の実施形態では、分析用支持体に対してマスクを傾けることにより傾斜部が構成されるとき、傾斜部がレーンに統合されているマスクに規定されたレーンの特徴は変型可能である。
レーンが細長い形状の場合、該レーンは平行六面体の形状を有することができ、その形状がレーンと分析用支持体の間で毛管作用により試薬を保持するための領域を規定する。使用の際、マスクを貫通する開口部は、分析用支持体に対するマスクの相対的な傾斜により形成される傾斜部の最下点の近傍の、レーンの一地点上に位置する。
【００２３】
本発明によるマスクの大きさは、例えば生体サンプルの構成成分を定温培養するために、試薬を沈着および分配する分析用支持体の大きさに適応し、このマスクのレーンの形状および大きさは、分析用支持体上に沈着および分配する液体試薬の容積ならびに試薬を沈着および分配する分析用支持体上の規定の領域の形状および大きさに適応する。
マスクおよび分析用支持体が互いに平行に配置されているとき、１つ以上の試薬を生体サンプル分析用支持体上に沈着および分配するには、分析用支持体の平面の上方の水平面内で、マスクを最初に配置した、試薬の最初の沈着点に対応する分析用支持体の領域から、マスクのレーンに面する分析用支持体の該領域上を移動させ、試薬を分配する。
マスクのレーンの傾斜部が、レーンの構造によるものでなく、分析用支持体に対してマスクを傾斜させた（または、マスクに対して分析用支持体が傾斜している）ことにより生じている場合、１つ以上の試薬をサンプル分析用支持体上に沈着および分配するには、構造的に傾斜を含むレーンを備えたマスクについて開示したものと同一の特徴を呈するように、マスクを所定の角度で傾斜させたまま移動させる。
【００２４】
マスクが、試薬を受容する分析用支持体の規定の領域全体の上部を通過する１回の移動を「スイープ」と呼ぶ。例えば、最初のスイープを電気泳動支持体の陽極に相当する領域から該支持体の陰極に相当する領域へ向かって、または陰極側から陽極側へ、つまり反対の方向へ行って、電気泳動支持体（例えばゲル）の場合には電気泳動レーンに対応する、試薬を受容するべき規定の領域全体を網羅することができる。ここまでの記載と同様に、以降の段落では、試薬を沈着させる位置または移動方向を指す場合に陽極と言った時、この位置または移動方向は反対に陰極でもよいと理解されたい。
【００２５】
よって、それぞれのレーンに伴う開口部から試薬を充填した後、分析用支持体の規定の表面をスイープにより移動している間、本発明によるマスクは、マスクの移動方向にある検査生体サンプル全部について、前記試薬を分析用支持体の規定の領域全体に及ぶように沈着および分配できる。
したがって、処理するサンプルそれぞれについて、各試薬のピペット操作を繰り返す必要がない。ピペット操作の数は、分析用支持体の一列上に沈着される試薬の数に一致し、したがってマスクの全レーンを使用するときは、通常マスクに配設された開口部の数に一致する。
さらに、分析用支持体上の各サンプルに対して各試薬を充填しなくてはならない場合に通常用いる試薬の量に比べて、マスク内に充填する各試薬の量をかなり減らすことができる。
【００２６】
一例として、すでに電気泳動により分離されている生体サンプルの特定の構成成分を検出するために免疫固定を行うために試薬を沈着および配置する目的で本発明のマスクを用いる場合、各検査サンプルに対し６つの試薬（すなわち、通常は、電気泳動支持体上に基準プロファイルを生成するためサンプルの構成成分を固定できる固定剤、および特定の抗−ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ｋおよびｌ抗血清）を用いるとき、ＥＰ−Ｂ１−０５２６２７１号で開示されているような固定マスクを用いて処理する各サンプルについて充填された量と比較して、マスク内に充填する各試薬の量は４．５分の１に低減される。
【００２７】
マスクの各レーンに充填される各試薬の量は、この試薬で覆う定温培養領域の大きさの関数として決まり、例えばマスクの移動方向にあるサンプルの列の数の関数として決まる。免疫固定のための試薬を沈着および分配するためにマスクを用いる場合、定温培養領域は、分析するサンプルのための電気泳動プロファイルを有する電気泳動支持体の領域を備えるか、または該領域に一致する。
一例として、１列に並ぶ６レーンの組を３組備えるマスクを用いて、９サンプル、さらには１２あるいは１８サンプル（例えば、３つの異なるサンプルの列をつくり、各サンプルが電気泳動のための分析用支持体上の、したがってマスクの、６レーンを占めるようにする）の免疫固定を行うことができる。
【００２８】
有利には、試薬が分配される分析用支持体上の規定の各領域に、１度のスイープで試薬が均一に行き渡るような試薬の量をマスクに充填する。各試薬について充填する量を決定するために、１スイープ毎の分析用支持体上のマスクの経路および分析用支持体上で覆われる領域の幅を考慮に入れる。通常、充填する各試薬の量は４ｍｌないし１５ｍｌの間で変化し、例えば試薬毎の量は１５、１０、８、６または４ｍｌである。
一例として、均一に、つまり分析用支持体に０．０２ｍｌ／ｍｍ２試薬を分配して分析用支持体の表面１７５ｍｍ２を覆うのに容積４ｍｌの試薬で十分であった。
【００２９】
好適には、本発明によるマスクは硬質のマスク、または例えばマスクの位置決めおよび／または案内を行うことのできる補剛手段で補剛されているマスクである。
マスクを製造するために用いる材料の選択は原則的には限定されない。
例えばマスクは滑らかな表面を生成するために、特にプラスチック材料のような鋳型形成される材料で製造することができる。
材料は透明または半透明でよく、そのような材料の例としてはポリカーボネート、ポリメタクリル酸メチル、ポリエチレン、結晶性ポリスチレン、およびプレキシグラスが挙げられる。
本発明によるマスクは使い捨てにもできる。
【００３０】
適切な位置決め手段および適当な誘導手段に、例えばスナップ締結などで取り付けられているとき、マスクは与えられた剛性により、分析用支持体に対して水平なまたは傾斜した所望の平面を移動できる。
本発明の好適な実施例では、上記に詳細を述べた特徴を有するマスクは、マスクの全長に亘り複数の互いに平行なレーンを備える。
最も多い事例であるが、マスクが互いに平行な複数のレーンを備える場合、レーンの間の距離（レーン間距離）はマスク上のレーン数の関数として、および試薬間、特に固定剤と抗血清の間の相互作用を防ぐ必要性を考慮して決定される。
平行なレーン間の距離は一定であるのが有利である。この距離は短くてよく、特に隣接するレーンの固定剤と抗血清の間の相互作用を防ぐために、例えば３ｍｍ未満、特に２．５ｍｍ程度、好適には２ｍｍ以下である。
【００３１】
各試薬を分配する分析用支持体の領域の幅は、該領域に面するマスクのレーンの幅以上である。
一例として、分析用支持体上の電気泳動プロファイルの分布に一致させることができるレーンの幅および定温培養表面の幅は、同じく約２．５ｍｍである。他の例では問題にしている幅は３．５ｍｍである。
隣りの試薬との相互作用を防ぐために、試薬を沈着する異なる領域が重ならないように、または分析用支持体上に沈着させた試薬の拡散領域が重ならないように、マスクのレーンを配置することができ、または相互作用の可能性がないように、試薬の充填および分析用支持体上への降下を行うことができる。試薬の充填および降下を可能にする一部の実施形態について後で述べるが、それらは必ずというわけではないが例えば分析用支持体から外れた位置での充填段階を含んでおり、そのような種類の相互作用を防ぐ一方、レーンを平行に、および整列させた状態で維持する。
【００３２】
上述の相互作用について、特に各サンプルについて基準プロファイルを生成するための試薬が、サンプルの特定構成成分の誤検出を招く特定の試薬（特に抗血清）との相互作用を確実に防ぐことが適切である。
このために、マスクの構造内に特定手段があるとき、マスクの全長に亘り一定間隔でならぶ互いに平行な複数レーンを備えるマスクの第１の実施形態では、該レーンは、マスクの全長に亘る互いに平行な第１のレーンの列と、第１のレーンに平行で互いに平行な第２のレーンの列とから成り、それらの下側の穴は同一水平面上にあって、この第２のレーンが並んでいる直線と第１のレーンが並ぶ直線はずれている。
【００３３】
変型形態のマスクでは、第２のレーンの列をずらす代わりに、第１のレーンの列と第２のレーンの列の間隔を増やしている。
第１のレーンに対して第２のレーンの列をずらすこと、または第１のレーンに対してこのレーンの列の間隔を開けるのは、分析用支持体上に試薬を沈着させる際に、第２のレーンの列の試薬と他のレーンの試薬の間の相互作用を防ぐためである。通常、これらのずらしたレーン、またはより間隔をあけたレーンは、免疫固定のための固定剤を入れるためのもので、基準プロファイルを生成するために電気泳動プロファイルのタンパク質を固定できる。
マスクに、ずれたレーンの列または他の列のレーンに比べて異なる間隔のレーンの列もない場合、問題となっている試薬間の相互作用は、必要に応じて、例えばこれらの試薬の充填および分析用支持体上への沈着を２回のスイープに分けて行うことによって避けることができる。
例として、固定剤を電気泳動支持体の陽極側に沈着させ、スイープして分配した後、例えば陽極側にずらした位置で、例えば第１の充填操作の位置に対して５ｍｍ陰極側に寄った位置で抗血清を充填する。或いは、抗血清を陰極側で充填することができる。
【００３４】
しかし２段階の充填がいつも必要とは限らず、特に試薬の充填操作によって試薬間の憂慮すべき相互作用が起こらないときは不要である。そのような相互作用は、例えば全試薬を憂慮すべき相互作用を引き起こすことなく分析用支持体上で同時に降下させることができる場合は、全試薬を分析用支持体表面の外側で同時に充填を行っても防ぐことができる。
レーンの傾斜部が、レーンの構造によるものでなく、分析用支持体に対してマスクが傾いているために生じている場合、レーンをずらすまたはレーンをグループに分ける必要はなく、試薬の性質によって数段階で試薬を充填および沈着できる。
本発明によるマスクは、複数のグループに分かれるレーンを備えるように製造することができ、例えば各グループの１つのレーンは整列した他のレーンに対してずれた位置にあり、整列したレーンより前方にある。
さらに、本発明のマスクは、その構造および必要に応じて使用条件によって、分析用支持体の異なる領域上への試薬の沈着および分配を相互作用なしに行うことができるようになっている。
【００３５】
特に、分析支持体上の最初に試薬を沈着させる領域では、分配の前に、分析用支持体上でこの試薬の局所的な拡散現象が有ることが観察されている。
試薬を沈着したことによる局所的な拡散現象の影響を避けるために、マスクにより試薬を沈着するときに、検査するサンプルの構成成分を含む可能性のある分析用支持体の領域、つまり例えば電気泳動プロファイルを備える領域から離して試薬を沈着させることを選ぶのが有利である。
免疫固定の場合には、例えば、電気泳動プロファイルに対応する位置から離れた位置にある領域、例えばこれらのプロファイルに対して支持体の陽極側にこの試薬を沈着させる。
本発明によるマスクでは、有利にはマスクの一方の表面から他方の表面へ貫通する開口部がマスクの上表面および下表面に対して垂直である。
マスクの開口部の形状は、マスクに試薬を再充填することなく、分析用支持体の規定の領域全体に試薬を沈着および分配するのに十分な量の試薬を内部に含有できなくてはならない。
【００３６】
さらに、この開口部の形状および位置は、分析支持体上に試薬を分配する操作の間に導入された量がなくなるまで、規定の量の試薬を毛管作用によってマスクのレーンと分析用支持体の間に沈着および保持するのに適している。
試薬を分析用支持体上に沈着させるとき、分析用支持体の上部においてマスクに試薬を充填するとき、マスクとピペットまたはマスク内に試薬を充填するための他の手段の終端との間を気密にするとよい。
開口部の容積は、分析用支持体の外側で試薬の充填ができるように設計されており、この場合、分析用支持体上に沈着されるまで、試薬全部が毛管作用により開口部内に保持される。この場合、その後マスクに含まれている試薬を確実に分析用支持体上に沈着できるように位置決めを行う。したがってこの位置決めは、液体と分析用支持体の間の接触を、場合によっては特定の機構を用いて確実にしなければならない。
各レーンの開口部は反応に必要な量の試薬以上の過剰な試薬を受容できるのが有利である。
【００３７】
本発明のマスクは、もっと少ない量、例えば約１５ｍｌまたは１０ｍｌの試薬を分配するのにも使用できる。しかし、これらの試薬を受容するためのマスクを貫通している開口部の大きさは、効果的な量の試薬より多い量の試薬を受容できるように決めることができる。例として、開口部は約３０ｍｌまでの量の試薬を受容できるような容積にすることができる。
マスクの幾何学的な特徴、特にレーンの数およびレーンの間の距離（レーン間距離）を、分析用支持体上に列状に形成される沈着の数、沈着の幅、およびこれらの沈着の間隔に合わせる。このように本発明のマスクは、列状に形成される複数のレーンを備えるために十分な長さを有し、操作中にマスクが移動するときこのレーンが面する分析用支持体の定温培養表面の電気泳動レーンの長さに対して限定された（それよりも小さい）幅を有している。
同一ゲル上に同数で大きさの特徴が同じ複数の沈着の列を生成するのに同じマスクを用いることができると理解されるべきで、そしてこれが本装置の特徴を構成する。分析用支持体上に沈着されるこれらの列は、互いに平行で、電気泳動の方向に垂直である。
【００３８】
本発明のマスクの形状は、マスクと分析用支持体の間の距離が２ｍｍ以下、好ましくは０．１から１．５ｍｍの間の場合、マスクの各レーンと分析用支持体の間に毛管作用により試薬を沈着および保持できる。マスクと分析用支持体の間のこの距離は考慮しているマスク上の位置により変わり、特に、この距離は支持体に最も近いマスク上の位置（マスクのレーンまたは傾斜部の最下点に一致する）で約０．１から０．５ｍｍであるのが好ましく、また、分析用支持体から最も遠いマスク上の位置（マスクのレーンまたは傾斜部の最高点に一致する）で、好ましくは２ｍｍ未満、有利には１．５ｍｍ以下である。
これらの範囲内で、傾斜部の傾きは、分析用支持体とマスクの間の距離によりレーンと分析用支持体の間に試薬を維持する毛管力が働くような傾きでなくてはならない。
【００３９】
一例として、本発明のマスクは、レーンが互いに１．５ｍｍ以上離れているように製造される。好ましくは、このレーン間の距離は２．５ｍｍである。このレーンの幅は２．５ｍｍであるのが有利である。
固定剤のために確保したマスクのレーンをずらすことができる。例えば、マスクが使用位置、つまり電気泳動ゲルにより構成される分析用支持体に近接しているとき、他のレーンよりも陽極に近い位置にする。
特定のマスクは、固定剤のためのレーンが他のレーンとは一直線上になく、他のレーンにより形成される列に対して約５ｍｍ、好ましくは６から７ｍｍずれていることを特徴とする。
【００４０】
本発明に適する特定のマスク、特に長さ１０ｃｍ、幅８ｃｍ（陽極と陰極の間隔）の電気泳動ゲルに用いるのに適している特定のマスクは、マスクの各レーンが次の様な大きさを有する：
・長さ３から１５ｍｍ、
・幅１から１０ｍｍ、
・傾斜部の傾きが水平面に対し１度から１０度。
上記のゲルに用いるのに適切な特に好ましいマスクは、マスクの各レーンが次のような大きさを有する：
・長さ７ｍｍ、
・幅２．５ｍｍ、
・傾斜部の傾きが水平面に対し５度。
【００４１】
これらの特定の実施形態において、上記のマスクの他の特徴を、必然的に前記の特徴に関連付けることができる。特に、レーン間の距離は有利には２．５ｍｍおよび／または特定の試薬のためのレーンの列と固定剤のためのレーンの列の間のずれは６から７ｍｍである。
本発明の１つの有利な実施形態では、上記の特徴を有するマスクを貫通する開口部が、角度約５０度を形成している円筒部分を有する。
本発明の他の実施形態では、マスクの厚さが１から１０ｍｍの範囲であるのが有利である。
【００４２】
本発明のマスクを電気泳動支持体上への試薬の沈着および分配に用いる場合、ここでも電気泳動支持体上で分離された生体サンプルの局在化の特徴に対応する特徴を有することができ、特にこのマスクは：
・マスクのレーンの列を電気泳動の方向に対して垂直になるように並べることができる。
・毛管作用によりマスクのレーンと分析用支持体の間に試薬を保持できるように、分析用支持体の近傍に位置することができる。
・分析用支持体上で行われる電気泳動の列とマスクレーンの列の位置が揃うように、電気泳動の方向と垂直に位置することができる。
【００４３】
複数の分析用支持体に用いるために、一例として、本発明によるマスクは１ないし２４の、好ましくは６ないし２４の、特に６、９、１２、１５または１８のレーンを備えることができる。
電気泳動分離の後の免疫固定反応に使用する場合、１８レーンを備えるマスクは、電気泳動支持体の同じ列を占めている３つの異なるサンプルに対して、および規定数（例えば２つ以上、特に３つまたは４つ）のサンプルに対して、基準プロファイルを生成するための固定剤、および特に抗−ＩｇＧ、抗−ＩｇＡ、抗−ＩｇＭ、抗ｋおよび抗ｌのような抗血清などの５つの特定の試薬を各サンプルに沈着させることができる。同じ特徴を利用して６または１２レーンのマスクを製造することもできる。
【００４４】
本発明は位置決め手段を備えた上記に詳細を述べたマスクにも関し、該位置決め手段は、分析用支持体上に試薬を沈着および分配する際にマスクを接近させるとき、分析用支持体の表面の近傍にマスクのレーンの下面を保持する。
適切な位置決め手段は、生体サンプルを含む定温培養表面から離して分析用支持体上に載せることができる受け部からなり、これらの受け部の大きさは、試薬の定温培養表面に相当する部分においてマスクが分析用支持体と接触しないような大きさにする。
位置決め手段はまた、前述のように、制御しながらマスクをして分析用支持体の上部を移動させることができる、マスクの誘導手段を伴うこともできる。
【００４５】
このように、さらなる特徴として、本発明は、１つ以上の試薬を生体サンプルの分析用支持体上に沈着および分配するための装置であって：
ａ）上記に詳細を述べたようなマスクと
ｂ）マスクのレーンと一列に並ぶ分析用支持体の規定の領域それぞれに行き渡るように試薬を沈着および分配するために、マスクを分析用支持体の表面の近傍に保持でき、およびマスクが分析用支持体の表面をスイープするように支持体の表面に平行な水平面内を誘導できる、位置決めおよび誘導手段と
を備える装置を提供する。
【００４６】
本発明の変型形態では、マスクを分析用支持体に対して傾けることによりレーンの傾斜部が生じるマスクを用いる。この場合、本発明は、１つ以上の試薬を生体サンプルの分析用支持体上に沈着および分配するための装置であって、
ａ）上記に詳細を述べたようなマスクと
ｂ）マスクのレーンと一列に並ぶ分析用支持体の規定の領域それぞれに行き渡るように試薬を沈着および分配するために、マスクを分析用支持体の表面の近傍に保持でき、およびマスクが分析用支持体の表面をスイープするように支持体の表面に対して傾いている規定の平面を誘導できる、位置決めおよび誘導手段と
を備える装置を提供する。
【００４７】
本発明の特定の実施形態では、上記に特徴を述べた装置におけるマスクの位置決めおよび誘導手段は、分析用支持体とこの支持体に最も近いマスク上の位置（傾斜部の最下点に一致）の間の距離を０．１ｍｍから０．５ｍｍの範囲に、およびマスクと、分析用支持体から最も遠い位置（傾斜部の最高点に一致）との間の距離を、２ｍｍ未満、好ましくは１．５ｍｍ以下に設定することができる。
分析用支持体と該支持体に最も近いマスク上の位置との距離は０．５ｍｍであるのが望ましい。
【００４８】
本発明のマスクの位置決めおよび誘導手段は、電気泳動装置内に取り付けるのにふさわしければ、任意の適切な手段でよい。例えば経路限定器を受け部とすることができる。
マスクの移動経路を限定するために、誘導手段は経路限定器を備えるのが有利である。
本発明の特定の実施形態では、位置決めおよび誘導手段により分析用支持体に沿ったマスクの移動を自動化できる。しかし、本発明のマスクは手動で容易に移動させることができ、スイープにより分析用支持体上の規定の領域全体をマスクに含まれる試薬で覆うことができる。これは、適切である限りにおいて、複数の往復移動により行われる。
【００４９】
本発明はまた、１つ以上の試薬を生体サンプルを含む分析用支持体上に沈着および分配するための方法に関し、その方法は：
・前記に詳細を述べたようなマスクまたは上記に述べたような装置を分析用支持体の近傍に配置する段階と
・１または複数の試薬をマスクに充填して分析用支持体上に試薬を沈着させ、毛管作用により該支持体とマスクのレーンの間に該試薬を保持する段階と
・分析用支持体をスイープしてマスクを移動させることにより、分析用支持体上の生体サンプルの構成成分と相互作用するのに十分な量の１または複数の試薬を、分析用支持体上の規定の領域に分配する段階と
を含む。
【００５０】
マスクのレーンが傾斜部分を備える場合、マスクは、分析用支持体の上部を該支持体に平行に、支持体の平面に対して水平な面内を移動する。
マスクのレーンが傾斜部を備えていない場合、つまり傾斜部を形成するためにマスクを分析用支持体に対して傾けて配設する場合、マスクの傾斜に関係なく水平な位置にある分析用支持体の面に平行にマスクは移動する。
マスクが分析用支持体の近傍に位置するとき、試薬が分析用支持体に接触するとすぐ、マスクは分析用支持体をスイープするように移動することができる。
【００５１】
分析用支持体の規定の領域、例えば生体サンプルの電気泳動レーンに一致する領域に分配されると、これらの領域は該サンプルの構成成分と試薬を定温培養する領域となる。
本発明のマスクを利用する１つの利点は、分配を終えた時点でマスクに充填された試薬全量が無くなっており、分析用支持体の定温培養領域を構成する規定の領域からすぐにマスクを取り除くことができるという点である。
本発明のマスクの使用に関する他の利点は、定温培養領域全体に、試薬を均一に分配できる点である。
【００５２】
サンプルの構成成分および試薬の定温培養が行われる分析用支持体の領域を覆うのに必要な量に対し、過剰な量の試薬を用いるのが有利である。過剰な量の試薬とは、分析用支持体上部を速度約２ｃｍ／ｓで１回通過（１スイープ）したときに分配される量よりも多い量の試薬ということである。
分析用支持体のスイープされた表面の単位面積当たりの試薬の残量は、表面面積、および特にスイープ長に依存する。スイープする速度が遅くなると試薬の残量は増える。
分析用支持体に対するマスクの移動速度は通常０．５から２ｃｍ／ｓの範囲である。
【００５３】
例として、試薬を陽極と陰極の間（スイープする長さに一致）に画定される幅８ｃｍの電気泳動支持体上に分配するために、それぞれが往復移動を含む２度の移動を行うことができ、それぞれの移動には約３秒を要する。この場合、沈着できる試薬の量はレーン当たり６ｍｌから１０ｍｌの範囲である。
もっと遅い速度、すなわち約０．５ｃｍ／ｓで、幅２．５ｍｍのレーンに分配を行うと、レーンの下に導入される３−４ｍｌの試薬は７０ｍｍ進んだ時点でなくなる。
２．５ｍｍ幅のレーンに対し、マスクが分析用支持体に対してスイープする経路が７０ｍｍであるとき、試薬の量をレーン当たり約８から１０ｍｌにするのが有利である。
【００５４】
最初のスイープを実行したとき、０．５ｃｍ／ｓでゆっくり移動させた場合、また特に平均速度２ｃｍ／ｓで移動させた場合は、いくらかの試薬がレーンの下に残る。
導入された試薬が完全に無くなるまで、さらにスイープする必要がある。スイープの回数は各レーンに導入された試薬の量の関数として変化する。
実際には、各試薬の量は、試薬を使い果たすのに４回のスイープで十分であるような量である。
それぞれの開口部に１０ｍｌ充填した場合、マスクは、例えば、２往復、距離７０ｍｍスイープする。これらの４回の通過で全試薬を表面上に分配した後、意図しない分配をする危険性を伴わずにマスクを取り除き、適切な定温培養段階を始める。
【００５５】
本発明による特定の実施形態では、分析用支持体上に試薬を分配するのに２度のスイープ（１往復）を行う。スイープした後に分析用支持体上に試薬が少量残っても、定温培養の前に除去する必要はない。マスクの操作状態により均一に分配される。
スイープ長が短い場合、レーン毎に分配される試薬の量を低減するのが有利である。
前述で、１つ以上の試薬を分析用支持体上に沈着および分配するための方法を実行するために用いるマスクでは、基準プロファイルを生成するために生体サンプルの構成成分を固定できる固定剤のためのレーンが、他のレーンに対してずれていると有利であるということを示唆した。
【００５６】
例えば特定の抗血清のためのレーンと、固定剤のレーンの間のこのずれにより、分析用支持体上に沈着される際の試薬間の相互作用を防止することができる。このずれは全ての試薬をマスクに充填して同時に沈着させる場合、特に有効である。
或いは、例えば固定剤のためのレーンがずれていない場合、マスクを２段階で充填し、最初に抗血清を、次いで固定剤を沈着させることができる。或いは、この２段階の充填は、最初に固定剤を充填および沈着し、その後特定の試薬を充填および沈着して実行することもできる。
また或いは、試薬間、特に特定の試薬と固定剤を使用する場合は固定剤の間の相互作用を引き起こすことなく分析用支持体上に試薬を沈着できる状態であれば、充填を１段階で行うことができる。
レーン内に傾斜部を形成するために、分析用支持体に対して傾けて使用しなくてはならないマスクの場合、レーンは互いにずれていないが、相互作用が許されない試薬（例えば固定剤と抗血清）の充填は、最初に充填した試薬をスイープにより分配してから第２段階の試薬を充填するという２段階で行うか、または試薬を分析用支持体上に沈着させるとき、憂慮すべき相互作用を避けることができるような状態で行う。
【００５７】
特定の実行例では、本発明の沈着および分配の方法は、、生体サンプルを含む分析用支持体の表面の領域から離れたところで、マスクに試薬を充填する。
多少の時間（３０秒から２分）を要するこの充填を行う。この位置において試薬で覆われる分析用支持体の領域は拡散の結果レーン自体より広くなる。明らかにしようとしているサンプルの構成成分のプロファイルを備える領域に対して充填が鉛直に行われると、この拡散はプロファイルの異常な拡大を引き起こすことがあり、それは試薬を生体サンプルとともに定温培養した後で明らかになる。
サンプルの構成成分を含む分析用支持体の領域から離してマスクを充填すると、試薬が沈着領域から拡散するというこの欠点は生じない。
分析用支持体の表面の大きさが許せば、該充填を該サンプルの電気泳動プロファイルが位置する領域外の陽極部分で行うことができる。或いは該充填を該サンプルの電気泳動プロファイルが位置する領域外の陰極部分で行うことができる
【００５８】
分析用支持体の表面の大きさのために、サンプル電気泳動プロファイルを含む領域外での沈着ができない場合、マスクを支持体表面外で、例えばプラスチックの薄いシート上で充填することができる。このシートは分析用支持体に接触しており、また該支持体表面と同一平面内にあるが、該支持体表面から外れて伸びている。
本発明はまた、生体サンプルを含む分析用支持体上に１つ以上の試薬を沈着および分配する方法であって：
・分析用支持体上に試薬を沈着させるため、試薬をマスクに充填し、該支持体とマスクのレーンの間に毛管作用により試薬を保持する段階と
・前記に詳細を述べたようなマスクまたは上記に述べたような装置を分析用支持体の近傍に配置する段階と
・分析用支持体をスイープしてマスクを移動させることにより、分析用支持体上の生体サンプルの構成成分と相互作用するのに十分な量の１または複数の試薬を、分析用支持体上の規定の領域に分配する段階と
を含む方法に関する。
【００５９】
沈着および分配方法を行う際の前述の特徴は、この場合にも当てはまる。
分析用支持体の上部で位置決めする前に充填を行う可動マスクの実行例では、全ての試薬はマスクの各レーンに伴う上側の穴から導入され、その後該穴は貯留部として機能する。各開口部は下側の穴を有しているにも関わらず、これらの試薬は毛管作用によって該開口部の内部に保持される。
上述の構成において、マスクを分析用支持体の上部で充填する場合、マスクを予め該支持体から規定の距離（最下点までは約０．５ｍｍ）だけ離れた位置に配設し、試薬をマスクのレーンと分析用支持体の間に直接導入する。
【００６０】
このために、ピペットのチップ部に保持されていた試薬を放出する段階では、このチップ部の終端とマスクの上側の穴の間を気密にする。例えばチップ部をマスクの開口部の下側の穴に近い錐部分の底部に軽くあて、ピペットを鉛直位置に保持する。下の錐部分が円筒部分となって延びており、この円筒部分の直径（例えば０．８ｍｍ）はピペットのチップ部が通過できない大きさである。これはレーンに伴う開口部の下側の穴から試薬が「外力により」放出されることを確実にし、この下側の穴から滴下する小滴が近傍の（０．５ｍｍ）分析用支持体と接触し、毛管作用によりレーンと支持体の間に分配される。ピペットのチップ部と上側の穴の間が気密でないときは、試薬は上側の穴に残り分析用支持体上に降下しない。
【００６１】
これはまさに、気密にはなっているが、下側の穴が分析用支持体の表面の近傍にない、すなわち分析用支持体から離れて充填を行う場合に当たる。
このような状態では、滴下し（しかし容積が１０ないし１５ｍｌと非常に小さいので落下しない）、毛管作用のために下側の穴の付近に付着したままの小滴は、ピペットを取り除くと、「チップ部分／上側の穴の接触」が無くなり、上側の穴により構成される貯め部分内へと上昇する。
充填してから分析用支持体の上部に配置するマスクを用いたこの特定の実施例は、自動で行うことができるという利点を有し、例えばＨｙｄｒａｐｌｕｓＳＥＢＩＡ自動化装置を用いると、手動でのピペット操作の必要性がなくなり、マスクの充填をさらに単純化する。
【００６２】
貯留部として機能する上側の穴の中に試薬を分配して充填したマスクは、使用前に湿潤空間内で数分から数時間保持することができる。
マスク内に充填された試薬を分析用支持体上に沈着させるための他の方法を考えることができる。
第１の実施形態では、異なる試薬を充填したマスクおよびマスク保持具組立体（マスク保持具はマスクの位置決めをする手段を構成している）を、誘導レールに取り付け、陽極位置の受け部に導いて分析用支持体の上部に配置する。マスク組立体は、上側の穴全部を覆い、マスクの周縁部に当接する（平らな表面が平らな表面を密閉している）小さなチャンバで覆われている（図３）。このチャンバは取り付け部品を伴い、それを通じて少量（５０から２００ｍｌ）の空気を素早く注入する（例えば注射器を用いて）。これにより密閉された空間の圧力が高まると、各試薬がマスクレーンの下に滴下し、次いでこれらの試薬はゲルに接触する。この分析用支持体との接触に続いて、それらは毛管作用によりマスクのレーンと分析用支持体の間に同時に分配される。その後分析用支持体の表面をスイープする。
【００６３】
他の実施形態では、前もって充填したマスクおよびマスク保持具組立体を、マスク保持具を案内レールに取り付け、陽極位置の受け部に導いて分析用支持体の上部に配置する。
マスクの下側の穴の直径（例えば０．５ｍｍ）より小さい直径を有する、親水性の材料（例えばステンレス鋼）からなる円筒形のロッドを、上側の穴それぞれの中に鉛直に導入し分析用支持体に接触させると、貯留部として機能しているマスクの上側の穴から分析用支持体上に試薬を落下させることができる。
このロッドは上側の穴に導入された液体と分析用支持体の間の接合を確立する。導入された液体全部は毛管作用によりロッドに沿って降下し、レーンと分析用支持体の間に分配される。
マスクの上側の穴それぞれにロッドを鉛直に且つ同時に導入すると、全試薬を同時に降下させることができる。これらのロッドは、同じ長さ（５から１０ｍｍ）の棒を、例えばマスクと同じ大きさの、マスクの穴の配置を正確に再現した構造を有する長方形のプレキシグラスプレートに挿入することにより、互いに一体形成したものである。全ての試薬がマスクのレーンと分析用支持体の間に分配されたら、ロッドを伴うプレキシグラスプレートを取り除き、ゲル表面に沿ってマスクをスイープする。
【００６４】
本発明の他の実施形態として、全試薬を同時にゲル上に滴下させることができる第３の方法は、分析用支持体の上部でマスクを受け部（特に陽極または陰極の受け部）に位置決めした後で、機械的な衝撃を加えることからなる。この衝撃は、例えば充填したマスクをマスク支持器にスナップ締結することにより得られる。
この衝撃により、それまで毛管作用によりマスクの貯留部内に保持されていた試薬に慣性が働き、滴として分析用支持体上に放出することができ、したがってレーンの下側の穴におけるマスクレーンの最下点と分析用支持体との間の接合が確立され、貯留部内の全試薬を毛管作用によりマスクレーンと分析用支持体の間に分配できる。その後、ゲル表面をスイープできる。
【００６５】
また他の実施例では、マスクを分析用支持体から離して充填する場合、試薬を上側の穴に分配しマスクを分析用支持体の上部に取り付けた後で、マスクのレーンの傾斜部の最下点を分析用支持体に少しの間接触させる。そのような接触の目的は、分配を始める前に、全試薬を分析用支持体の上に落下させるためである。
充填したマスクを前述の実施例のうちの１つの使用位置に配置し、すなわち各レーンが規定量の試薬を収容してから、誘導手段を用いてマスクを分析用支持体に平行に電気泳動の方向に移動させる。移動の結果、マスクのレーンと一直線になる分析用支持体の表面をスイープすることにより、マスクのレーンと分析用支持体の間にある液体は引き延ばされることになる。毛管作用によりマスクと分析用支持体の間に保持されている液体は、特に移動の間試薬を最下点にもたらすことができるレーンの傾斜部のために引きずられ、一定量の試薬はその後分析用支持体上に沈着し、浸透して留まる。スイープが進むにつれ、レーンの下方に含まれる液体は分析用支持体内に浸透するので消費され低減する。
【００６６】
本発明はまた、マスクに試薬を充填する段階が自動化された、試薬を分析用支持体上に沈着および分配する方法に関する。
本発明のさらなる実施例では、分析用支持体をスイープする段階が自動化されている。
本発明の方法は前もって電気泳動により分離された生体サンプルの構成成分を有利に検出する。この検出は場合によっては免疫固定を含み、この場合の試薬は特定の抗血清および好ましくは基準電気泳動プロファイルを生成するための固定剤である。
本発明のそのような方法は、電気泳動および免疫固定技術を行う通常の状態で行うことができる。用いる試薬は通常の試薬であるが、これらの試薬は通常用いられる試薬の量と比較して、本発明では少ない量を用いている点が有利である。
【００６７】
本発明はまた、免疫固定により１つ以上の生体サンプルの構成成分を検出するための方法を提供し、その方法は：
・１または複数の構成成分を分離するために生体サンプルの電気泳動を行う段階と
・電気泳動支持体、本発明の場合好ましくはアガロースゲル上に試薬を沈着および分配する方法を行う段階と
・免疫固定するために、電気泳動により分離された生体サンプルを分配された１または複数の試薬と共に定温培養する段階と
を含む。
そのような検出方法はまた、免疫固定された生体サンプルの構成成分を明らかにする段階と、適切であれば、明らかにされた構成成分の定量をする段階とをさらに含む。
これらの検出および定量化の段階は知られている方法を用いて行うことできる。
有利には、本発明において上記で規定した方法は、それぞれ１８、１２、または６つの分析用レーンを有するマスクを用いて、ｎを沈着の列の数を表す自然数とすると、それぞれ３ｎ、２ｎまたはｎ個の生体サンプルを同時に分析できる。ｎは２、３または４であるのが好ましい。
しかし、原理的にはマスク上のレーン数についての制限はない。
【００６８】
マスクの構造およびその使用の際の特徴により、マスクの各レーンに充填される試薬それぞれの量、すなわち各レーンの各開口部に導入されて毛管作用により各レーンの下に保持される量を、有利に低減することができ、例えば１レーンにつき１５ｍｌ未満にすることができる。１レーンあたりの量は１０ｍｌ未満であるのが好ましい。
試薬を分析用支持体上に沈着するとき、試薬は液体である。したがって、本発明はマスクを充填するための液体試薬の使用に関する。本発明はまた、液体試薬を充填したマスクを、沈着段階で試薬を溶解してマスクを用いるまで、マスクの開口部内に含まれる試薬を凍結乾燥するためにその後マスクを凍結乾燥するようなマスクの使用法に関する。
さらなる実施例では、本発明は：
・上記に詳細を述べたような１つ以上のマスクと
・　　　　　　　　　　　　　　　　　特に電気泳動支持体である、１つ以上の分析用支持体と
を備えるキットであって、
・電気泳動により分離されたサンプルの構成成分を免疫固定するための試薬と
・電気泳動により分離された構成成分の集合体である各サンプルを固定するための固定剤をさらに備えるキットを提供する。
該キットはまた、分析用支持体上にサンプルを沈着するための１つ以上の櫛を備えることができる。
【００６９】
電気泳動支持体から離してマスクを充填しなくてはならない場合、該キットは、例えば上記のような、マスク内の試薬を開口部から分析用支持体上に落下させる手段を備えることができる。
そのようなキットは、好ましくは、１８レーンを備えるマスクを用いて、各電気泳動支持体上で９またはさらに１２個のサンプルの分離を同時に行うのに適している。
好ましくは、そのようなキットは各電気泳動支持体上で１８サンプルを同時に分離できる。
本発明によるキットはまた、マスクに充填される試薬の量および／または、スイープ速度あるいは推奨されれるスイープの回数など、マスクの移動の条件に関する情報を含め、例えば使用の指示の形態で、本発明のマスクの使用に関する表示も含むことができる。
必要であれば、本発明によるキットの特定の実施例では、マスクは別に調達が可能な分析用支持体を伴わない。
【００７０】
本発明によるマスクは、有利には試薬で充填される。
さらに、本発明は少なくとも１列が３サンプルからなる３列９個の生体サンプルを分離するための電気泳動支持体に関し、免疫固定の場合は、該支持体は少なくとも１８泳動レーンを備え、該レーンは互いに２ｍｍ離れ、幅は３ｍｍで、泳動レーンの全長は６３ｍｍ以下である。
本発明の他の特徴、利点および詳細は、添付の図面を参照する以下の記述で明らかにする。
マスク貯め部分に充填された試薬が降下するように、マスク保持具に圧力をかける。それによりバネリーブ（ｓｐｒｉｎｇ　ｌｅａｖｅｓ）４７が曲がり、充填コンジットの下側の穴３４が位置するレーンの最下点が、ゲルと接触する（受け部システムにより、ゲルを破壊しないようにバネの曲がりを制限できる）。
ベアリング領域４６を開放すると、マスクは上昇して最初の位置に戻ることができ、該コンジット３６に含まれる試薬が毛管作用によりレーンの下の部分およびゲルの間に分配される。
その後ハンドル２６を用いてマスクを前後に移動させる。
【００７１】
図１ないし図３に示す装置は、支持アーム１２に着脱可能に取り付けられた概ねＣ字型の本発明によるマスク１０を備え、該マスクの支持アームは滑り面１６のレール１４に取り付けられて該レール上を平行移動するようにガイドされ、分析用支持体（例えばアガロースゲル）を搭載するプレート（図示せず）上で位置決めおよび固定される。
滑り面１６は、このプレートの一端に亘って電気泳動の方向と平行に伸び、貫通する２つの溝穴１８を有しており、該溝穴１８内にはプレートの端部と一体の別の滑り面２１に搭載される中空のピン２０が嵌合する。該ピン２０の中空部は泳動プレートから伸びる止め金（図示されていない）に嵌合し、それがネジ２２と協働して滑り面１６の横位、つまりプレートおよび分析用支持体に対するマスク１０の位置を調整する。この滑り面はまた、調整後に滑り面を固定できるネジ２４を備える。
【００７２】
レール１４は電気泳動の方向と平行に延び、アーム１２の一方の終端にある対応する溝と係合している。この終端はレール１４上で、一方向またはその反対方向への平行移動を行うためのハンドルまたはロッド２６を有する。
変型形態では、駆動軸がチェーンまたはベルトとそれぞれ協動する歯車またはプーリを駆動する電動モータをアーム１２に接続するなどして、アーム１２の移動を自動化するための動力手段を滑り面１６に取り付けることができる。
マスク１０は、例えば２８に示したような弾性スナップ締結のような、任意の適切な手段を用いてアーム１２に固定されており、横方向、すなわち電気泳動の方向に垂直に延びる、平坦で細長い概ね長方形の平板として形成される。
この平板は、アーム１２の下表面に形成または固定される突出ピンまたはブロック３０によって、分析用支持体上に、該支持体から規定の距離をおいて保持される。該ピンまたはブロック３０は、上述のプレートの縁に配設される。
【００７３】
マスク１０の下表面は、傾斜部を有する互いに平行な一連のレーン（またはランプ）３２を備え、該レーンは例示したように千鳥状に互いにずれて、横方向の２列に配設されている。このレーン（またはランプ）３２は電気泳動の方向と平行に延び、同一方向に傾いている。それらの最下点は分析用支持体上に試薬を沈着するための穴３４を備える。この穴３４は、マスク１０をその全厚さに亘って横断するコンジットまたは通路の下側の穴で、直径が下側の穴３４の直径よりはるかに大きい穴３６を経てマスクの上表面に開口している。
【００７４】
図４ないし図６に示す１つの実施形態では、これらの穴３４および３６は小さな円筒形のコンジットの端部であって円形の断面を有し、錐台形のコンジット３８を介して互いに連結されている。
マスク保持具１２およびスナップ締結されたマスク１０を誘導レール１４に取り付け、ネジ２２を用いて横方向の調整をすることにより、マスクのランプとサンプルの泳動レーンの縦方向の位置合わせを行うことができる。これは、沈着したサンプルにブロモフェノールブルーなどの適切な着色剤を添加して可視化できる。
マスクは、ハンドル２６を用いて手動で、または上述の動力手段を用いて、分析用支持体上をスイープできる。
【００７５】
図３で略図を示したように、マスク１０の上にカバー４０を配置しその上に固定して、マスク１０内に形成されたコンジット３４、３６、３８を概ね気密に封止することができる。カバー４０上のチューブ４２はこれらコンジットの上側の穴３６の上で開口しており、マスクとカバーの間に少量の空気を導入して、マスクのコンジット内にある試薬に圧力をかけ、コンジット内を落下させて分析用支持体と接触させることができる。
試薬を用いるには、試薬をマスク１０のコンジット内に充填し、これらのコンジットをカバー４０により実質的に気密となるように封止し、マスク１０／カバー４０組立体を異動して分析用支持体の上に配置する。
【００７６】
図７および図８は、マスク１０の２つの変型形態の略図を示しており：
・図７に示す変形形態は、互いに平行で千鳥状にずれた２列に配設された、１８個の貫通するコンジットを備え、
・図８に示す変形形態は、６個の貫通するコンジットからなるグループを２つ備え、該２つのグループはマスクの長さにわたって一列に並んでおり、各グループは１直線上にある５個のコンジットとずれた１個のコンジットを備える。
【００７７】
【発明の実施の形態】
例１
１８レーンを有する可動式マスク（図４）を用いた９サンプルの同時免疫固定
操作はセビア（ＳＥＢＩＡ）のＨｙｄｒａｓｙｓＲ電気泳動装置を用いて、大きさ０．７×８３×１０１ｍｍの免疫固定用のゲル上で行われた。
電気泳動支持体上にサンプルを沈着させるため、２ｍｍ間隔で配設された３ｍｍの歯を１８個備えるアプリケータ（仏国特許出願公開ＦＲ−Ａ−２６７１２９０号および欧州特許出願公開ＥＰ−Ａ−０４９３９９６号）を用いた。各サンプルを連続する６個の歯に充填した。したがって各アプリケータは３つの異なるサンプルを電気泳動ゲル上に沈着させることができるので、９つのサンプルを分析するために３つのアプリケータを使用した。ＨｙｄｒａｓｉｓＲ装置を用いて、ゲルの陰極端からそれぞれ１８、３８、５８ｍｍの距離にある平行な３列に、ゲル上への沈着を行った。電気泳動は、温度を２０℃に制御し、一定電力２０Ｗで、３１ボルト時間に亘って行った。
【００７８】
泳動が完了した後、レーンの幅２．５ｍｍ、長さ７ｍｍ、レーン間の距離２．５ｍｍ、レーン傾斜５度という幾何学的特徴を有する、１８レーンを備える本発明による可動式マスクを取り付けた。３レーンからなる（固定剤のための）列を、１５レーンからなる（抗血清のための）列に対して５．５ｍｍずらした。
ＨｙｄｒａｓｙｓＲ装置の泳動プレート上にある２つの止め金上に、誘導レールのピン２０内の中空を配置した。
誘導レールに取り付けたマスク保持装置１２に１８レーンのマスクをスナップ締結した。マスクおよびそのマスク保持装置を、高い位置、すなわちゲルの陽極側に当接させた。ゲル上に配置されたサンプルに、着色剤、ブロモフェノール・ブルーを取り込ませると、分析支持体上の電気泳動レーンの位置が見えるようになった。横方向の調整手段２０、２２を用いて、マスクのレーンまたはランプと、サンプルの泳動レーンの縦方向の位置を合わせた。
【００７９】
次いで免疫固定に必要な様々な試薬を、１レーン当たり１０ｍｌずつ、一般的な順、すなわち固定剤、抗ＩｇＧ、抗ＩｇＡ、抗ＩｇＭ、抗カッパ、抗ラムダの順にレーンの上側の開口部（３６）から導入してマスクを充填した。固定剤は３つの陽極側にずれたレーンの下に導入された。
これらの充填された試薬１０ｍｌは、レーンとゲルの間に導入された後、陽極側の、後述する検出領域から外れた位置に５−６ｍｍに、各レーンの下に分配された。
マスクを充填した後、ハンドル（２６）を用いて誘導レールに沿って滑らしながら移動させた。この移動は、ゲルの高い位置（陽極側）から低い位置（陰極側）へ向かって、経路６３ｍｍに亘る経路上を、反射動作なく概ね一定の速度で行なわれた。このスイープは約３秒で行った。
【００８０】
マスクが陰極位置側の受け面に当接した後、同じ条件で反対方向にスイープした。これらの２回のスイープを再び繰り返した。ここまでで、最初にレーンの下部に導入された試薬全部は、電気泳動領域の上のゲルに沈着した。２０℃で５分間行われるゲル上の試薬の定温培養の前に、マスクを取り除くことができた。
その後、通常の免疫固定プロトコルを用いて、吸水、乾燥、洗浄、染色、脱色、および乾燥段階を進めた。
【００８１】
例２
１８レーンを有する可動式マスク（図４）を用いた１２サンプルの同時免疫固定
前例の手順を繰り返したが、１８歯のアプリケータ４つそれぞれに、３つのサンプルを充填した。ＨｙｄｒａｓｙｓＲ装置を用い、ゲル上に、ゲルの陰極端からそれぞれ１８、３３、４８、６３ｍｍの距離にある平行な４列に沈着させた。泳動は、２０℃、一定電力２０Ｗで、２８ボルト時間に亘って行った。その方法は前の例で記述した。
【００８２】
例３
１２レーンを有する可動式マスク（図８）を用いた４サンプルの同時免疫固定
２ｍｍ間隔で配設された幅４ｍｍの歯１５個を具備するアプリケータを用いて、サンプルをゲル上に沈着させた。各アプリケータに２個のサンプルを充填した（サンプル番号１を歯２ないし７へ、およびサンプル番号２を歯９ないし１４へ充填）。
ＨｙｄｒａｓｙｓＲ装置を用い、ゲルの陰極端からそれぞれ２３および５３ｍｍの距離にある平行な２列に、ゲル上への沈着を行った。
泳動は、温度を２０℃に制御し、一定電力２０Ｗで、４２ボルト時間行った。
泳動が完了した後、レーンの幅３．５ｍｍ、レーンの長さ７ｍｍ、レーン間の距離２．５ｍｍ、レーンの傾斜５度という幾何学的特徴を有する、１２レーンを備える本発明による可動式のマスクを据え付けた。２レーン（固定剤を充填するためのレーン）から成る列は、１０レーン（抗血清を充填するためのレーン）から成る列から５．５ｍｍずれている。
【００８３】
ＨｙｄｒａｓｙｓＲ装置の泳動プレート上の２つの止め金上に誘導レールのピン２０内の空洞を配置した。誘導レールに取り付けられているマスク保持具１２に１２レーンのマスクをスナップ締結し、組立体を高い位置に当接させた。
横方向の調整手段を用いて、マスクのレーンをサンプルの電気泳動のレーンに位置合わせした（例１と同様）。
１レーン当たり１４ｍｌの試薬を導入してマスクを充填した。
前述の例で開示したように、マスクを４回スイープして試薬を分配した。
該分配により試薬全部がゲルの表面上に沈着しており、マスクを取り除いた。
その後、定温培養し、さらに通常の免疫固定プロトコルを用いて吸水、乾燥、洗浄、染色、脱色、および乾燥段階を進めた。
【００８４】
例４
１８レーンを有する可動式マスク（図４）を用いた３６ＩＦ　ｐｅｎｔａ技術の実行
ＩＦ　ｐｅｎｔａ技術は、単クローンまたはオリゴクローン免疫グロブリンバンドの形態の、分析されたサンプル中のパラプロテインの存在を検出するために日常的に用いられている。
この技術は、五価抗血清、すなわち抗ＩｇＧ、抗ＩｇＡ、抗ＩｇＭ、抗カッパおよび抗ラムダの特性を備えた抗血清を用いて免疫固定を行うことにより、総タンパク質のプロファイルおよび全免疫グロブリンのプロファイルを分析した各サンプルについて、並行発現を行うことにより実行される。
【００８５】
この例では、セビア（ＳＥＢＩＡ）のＨｙｄｒａｓｙｓＲ電気泳動装置を用いて、免疫固定用の大きさ０．７×８３×１０１ｍｍのアガロースゲルを用いて操作を行った。２ｍｍ間隔に配設された３ｍｍの歯１８個を有する櫛を用いた。分析する各サンプルには平行して２度沈着を行った。すなわち、１つのアプリケータにつき９サンプルの沈着を行った。
３６サンプルの沈着を行うために、４つのアプリケータを用いた。
ＨｙｄｒａｓｙｓＲ装置を用い、ゲルの陰極端からそれぞれ１８、３３、４８、および６３ｍｍの距離にある平行な４列にゲル上への沈着を行った。次いで、温度を２０℃に制御し、一定電力２０Ｗで、２８ボルト時間に亘って泳動を行った。その後、図７に示す本発明による１８レーンの可動式マスクを据え付けた。
【００８６】
このマスクはそれぞれ９レーンを有し、互いに５．５ｍｍずれている２列から構成される。陽極側の９レーンは固定剤を収容するため、他の９レーンは５価抗血清を収容するために使用した。各レーンは、幅２．５ｍｍ、長さ７ｍｍ、レーン間の距離２．５ｍｍで、５度の傾斜を有するものであった。
マスクをマスク保持具にスナップ締結し、陽極側の高い位置に当接させた。
１レーン当たり１０ｍｌの試薬を導入した。
その後例１ないし例３の手順を行った。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明によるマスク保持具装置を下から見た概略的な斜視図である。
【図２】本装置を上から見た概略的な斜視図である。
【図３】本装置、およびそのカバーを上から見た概略的な斜視図である。
【図４】本発明によるマスクを下から見た図である。
【図５】本発明によるマスクを横から見た図である。
【図６】図４の線ＶＩ−ＶＩにおける断面図である。
【図７】変型形態の概略的な斜視図である。
【図８】別の変型形態の概略的な斜視図である。
【図９】１列のみのレーンを有する本発明の別の実施形態であって、電気泳動支持体上でマスクの位置決めをするため、および該支持体上で、規定の方向ならびに回数でマスクの移動をするための誘導手段を上から見た図である。
【図１０】１列のみのレーンを有する本発明の別の実施形態であって、スライド４９によりレール１４上に取り付けられるキャリッジを上から見た図および下から見た図である。キャリッジは、電気泳動ゲルが配置される平面上で、ゲルのいずれかの側に配置される足３０を４つ備える。足３０はこの平面上を滑ることができる。
【図１１】１列のみのレーンを有する本発明の別の実施形態であって、切り欠き部４３およびバネ２８によりマスクを受容し保持するマスク保持具を上から見た図および下から見た図である。　マスク保持具は、マスクを動かしてゲルと接触させるために圧力をかけるベアリング領域４６を備える。
【図１２】１列のみのレーンを有する本発明の別の実施形態であって、リベット４８が保持する２つのバネリーブ４７により連結されたキャリッジとマスク保持具の組立体である。この組立体がスライド４９により誘導レール１４上に取り付けられると、マスクは、ゲルに接触することなくゲルの近傍で、ゲルに対して平行に保持される。
【図１３】１列のみのレーンを有する本発明の別の実施形態であって、キャリッジ、マスク保持具およびマスクを備える組立体を上から見た図である。
【図１４】１列のみのレーンを有する本発明の別の実施形態であって、電気泳動プレート上の位置決め棒５０に取り付けられたマスクおよび誘導組立体がスイープの端の位置にある状態を示す。
【図１５】１列のみのレーンを有する本発明の別の実施形態であって、電気泳動プレート上の位置決め棒５０に取り付けられたマスクおよび誘導組立体がスイープの端の位置にある状態を示す。
【図１６】１列のみのレーンを有する本発明の別の実施形態であって、電気泳動プレート上の位置決め棒５０に取り付けられたマスクおよび誘導組立体がスイープの端の位置にある状態を示す。
【図１７】１列のみのレーンを有する本発明の別の実施形態であって、電気泳動プレート上の位置決め棒５０に取り付けられたマスクおよび誘導組立体がスイープの端の位置にある状態を示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【外国語明細書】
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