(57)【要約】【課題】リパーゼ阻害作用のような生理活性を有する化合物を用い、肥満を防止したり、あるいは高脂血症状を抑制する又は、プロピオニバクテリウム　アクネスなどの皮膚常在菌が産生するリパーゼを阻害することによりニキビなどの皮膚疾患を予防あるいは治療に有効であり、しかも連用しても副作用の恐れがない、効果的で安全性の高い医薬、食品、化粧料としての用途を提供すること。【解決手段】下記式（１）【化５】2004043373.tif 000010（式中、Ｒ１は、水素原子又は水酸基が保護されていてもよい糖残基を表わし、Ｒ２は、水素原子又は水酸基を表わす。）で示される化合物を含む、医薬、食品、化粧料、リパーゼ阻害剤、これを含む、脂質吸収阻害剤、抗肥満剤、高脂血症改善剤、にきび改善剤。【選択図】　　　　なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（１）
【化１】
2004043373.tif 000008
（式中、Ｒ１は、水素原子又は水酸基が保護されていてもよい糖残基を表わし、Ｒ２は、水素原子又は水酸基を表わす。）
で示される化合物を含む医薬。
【請求項２】
下記式（２）
【化２】
2004043373.tif 000009
（式中、Ｒ３は、水素原子、−αＡｒａ２−αＲｈａ３−βＸｙｌ、−αＡｒａ２−αＲｈａ、又は−αＡｒａ２−αＲｈａ３　−αＡｒａを表わし、Ｒ４は、水素原子又は水酸基を表わす。ここで、−Ａｒａは、Ｌ−アラビノピラノシル基、Ｒｈａは、Ｌ−ラムノピラノシル基、Ｘｙｌは、Ｄ−キシロピラノシル基を表わす。）で示される化合物を含む医薬。
【請求項３】
請求項１記載の式（１）で示される化合物を含む、リパーゼ阻害剤。
【請求項４】
請求項１記載の式（１）で示される化合物を含む、脂質吸収阻害剤。
【請求項５】
請求項１記載の式（１）で示される化合物を含む、抗肥満剤。
【請求項６】
請求項１記載の式（１）で示される化合物を含む、高脂血症改善剤。
【請求項７】
請求項１記載の式（１）で示される化合物を含む、ニキビ改善剤。
【請求項８】
化合物が、請求項２記載の式（２）で示される化合物である、請求項３〜７のいずれかに記載の剤。
【請求項９】
請求項１記載の式（１）で示される化合物を含む、食品。
【請求項１０】
請求項１記載の式（１）で示される化合物を含む、化粧料。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明が属する技術分野】本発明は、医薬、特に、リパーゼ阻害剤として有用なトリテルペノイド型サポニン化合物の用途に関する。さらに、本発明は、トリテルペノイド型サポニン化合物を含む、リパーゼ阻害剤に関し、更に詳しくは、生体内での脂質の消化吸収をにない肥満症、高脂血症の鍵を握る膵リパーゼを有効に阻害して肥満や高脂血症の抑制や予防に寄与し得ると共に、細菌性リパーゼに起因するニキビ、皮膚炎、ふけなどの皮膚疾患の予防、治療に有効な安全性の高いリパーゼ阻害剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】トリテルペノイド型サポニンは、落葉性小低木であるウコギ科ウコギから抽出単離される化合物として、報告されている（Ｈ．Ｓａｗａｄａら，Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｖｏｌ．３４，Ｎｏ．４，１１１７〜１１２１ページ，１９９３年）ものの、リパーゼ阻害のような生理活性については報告されていない。
【０００３】
また、従来、からだの脂肪組織及び種々の臓器に異常な脂肪沈着を来し、その結果起こる肥満、あるいは血清脂質が異常に高い症状を示す高脂血症は、高血圧、動脈硬化、糖尿病などの各種生活習慣病の発症に密接に関与していると考えられている。肥満は、体質的因子、食餌性因子、精神的因子、中枢性因子、代謝性因子、運動不足などが要因となり、結果的にカロリー摂取が消費カロリーを上回り、脂肪が蓄積して起こると言われている。食餌中の脂質は、膵臓のリパーゼで分解されて小腸から吸収される。そこで脂質の吸収を抑制するべく、リパーゼ作用の活性阻害機能を有するリパーゼ阻害剤を用い、肥満を防止したり、あるいは高脂血症状を抑制することが可能であると考えられている。
【０００４】
この様な観点から、特に日常的に摂取しうる種々の天然物由来の成分で、強いリパーゼ阻害活性を有する成分、すなわち脂質吸収抑制活性を有する天然成分の探索が精力的に行われている。これまでに、ホスファチジルコリン（Ｋ．Ｔａｎｉｇｕｔｉら、Ｂｕｌｌ．Ｆａｃｕｌ．　Ａｇｒｉｃ．　Ｍｅｉｊｉ　Ｕｎｉｖ．　７３巻、９〜２６頁（１９８６年））、大豆蛋白（Ｋ．Ｓａｔｏｕｃｈｉら、Ａｇｒｉｃ．　Ｂｉｏｌ．　Ｃｈｅｍ．　３８巻、９７〜１０１頁（１９７４年）；Ｋ．Ｓａｔｏｕｃｈｉら、Ａｇｒｉｃ．　Ｂｉｏｌ．　Ｃｈｅｍ．　４０巻、８８９〜８９７頁（１９７６年））、タンニン（Ｓ．Ａｈｉｍｕｒａら、日食工、４１巻、５６１〜５６４頁（１９９４年））、シャクヤク、オオレン、オオバク、ボタンピ、ゲンノショウコウ、チャ、クジンなどの生薬の溶媒抽出エキス（特開昭６４−９０１３１号公報）、ピーマン、かぼちゃ、しめじ、まいたけ、ふじき、緑茶、紅茶及びウーロン茶の水抽出物（特開平３−２１９８７２号公報）、ドッカツ、リョウキョウ、ビンロウシ、ヨバイヒ、ケツメイシの抽出物（特開平５−２５５１００号公報）などがリパーゼ阻害活性を有するものとして報告されているが、物質自身の性状や効果の面で未だ十分ではない。さらに、このような探索においては、原料中の含有量が多く、工業的生産に適した物質が期待されているが、これまでにこのような条件を十分に満たす物質は未だ見出されていない。
【０００５】
また、人体における細菌性リパーゼには、皮膚表層に常在する微生物（プロピオニバクテリウム　アクネス：Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ａｃｎｅｓ、ピティロスポラム　オバール：Ｐｉｔｙｒｏｓｐｏｒｕｍ　ｏｖａｌｅ、マイクロコッカス属：Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ　ｓｐ．など）が産生するリパーゼがあり、これらのリパーゼが皮脂中に含まれるトリグリセライドを分解し遊離脂肪酸を産生する。遊離脂肪酸は、皮膚に対して刺激性の炎症反応を起こし、ニキビ、皮膚炎、ふけなどの皮膚疾患の要因の一つとして考えられている。特に、ニキビの原因とされるプロピオニバクテリウム　アクネスの菌数と産生する遊離脂肪酸量には相関関係があり、毛包壁に対して、刺激性の炎症反応とそれに伴う過角化、コメドの形成を引き起こすと考えられている（ＭｃＧｉｎｌｅｙ，　Ｋ，　Ｊ．ら、Ｊ．　Ｃｌｉｎ．　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．　１２巻、６７２〜６７５頁（１９８０年））。
【０００６】
しかし、細菌性リパーゼを阻害して疾患を抑制または予防する薬剤の開発は未だあまり進められておらず、２−Ｐｙｒｉｄｙｌｍｅｔｈｙｌ−２−（Ｐ−（２−ｍｅｔｈｙｌｐｒｏｐｙｌ）−ｐｈｅｎｙｌ）ｐｒｏｐｉｎａｔｅ（慣用名：イブプロフェンピコノール）（西日皮膚、４７巻、５号、８８８〜８９８、８９９〜９０８頁（１９８５年）、テトラサイクリンおよび金属塩（特開昭５９−１８６９１９号公報）や植物抽出物としてビワ葉抽出物（特開平１０−２６５３６４号公報）やコラ・デ・カバロ抽出物（特開平１１−２２８３３８号公報）などが報告されているが、他の配合成分との関係からリパーゼ阻害作用を発揮できなかったり、局所適用における安全性、有効性の点で必ずしも満足し得るものではない。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】本発明の課題は、トリテルペノイド型サポニン化合物についての新たな用途を見出し、これを含む食品、医薬および化粧料を提供すること、リパーゼ作用の活性阻害機能を有するリパーゼ阻害剤を用い、肥満を防止したり、あるいは高脂血症状を抑制する又は、プロピオニバクテリウム　アクネスなどの皮膚常在菌が産生するリパーゼを阻害することによりニキビなどの皮膚疾患を予防あるいは治療に有効であり、しかも連用しても副作用の恐れがない、効果的で安全性の高いリパーゼ阻害剤、抗肥満剤、高脂血症改善剤、ニキビ用皮膚改善剤を提供することにある。
【０００８】
【課題を解決するための手段】本発明者は、うこぎ科の落葉低木で、漢方では葉および根皮を乾燥させたものを、滋養強壮、鎮痛剤として腹痛、疲労回復、冷え症などに用いられ、また山形県米沢地方では救荒作物として栽培され、その葉は食用としても利用されているウコギ（Ａｃａｎｔｈｏｐａｎａｘ　ｓｉｅｂｏｌｄｉａｎｕｓ）に強いリパーゼ阻害活性を有することを見出し、特許を出願した（特願２０００−３８１２４８）。さらに鋭意研究を進めた結果、ウコギから抽出単離される化合物であるトリテルペノイド型サポニンがリパーゼ阻害活性のような医薬、食品、化粧品として使用できる性質を有することを見出し、本発明を完成させた。
【０００９】
すなわち、本発明は、下記式（１）
【００１０】
【化３】
2004043373.tif 000002
（式中、Ｒ１は、水素原子又は水酸基が保護されていてもよい糖残基を表わし、Ｒ２は、水素原子又は水酸基を表わす。）
で示される化合物、下記式（２）
【００１１】
【化４】
2004043373.tif 000003
（式中、Ｒ３は、水素原子、−αＡｒａ２−αＲｈａ３−βＸｙｌ、−αＡｒａ２−αＲｈａ、又は−αＡｒａ２−αＲｈａ３　　−αＡｒａを表わし、Ｒ４は、水素原子又は水酸基を表わす。）ここで、−Ａｒａは、Ｌ−アラビノピラノシル基、Ｒｈａは、Ｌ−ラムノピラノシル基、Ｘｙｌは、Ｄ−キシロピラノシル基を表わし、α、βは、それぞれ糖の結合のタイプを、上付きの２、３の数字は、結合している糖類の水酸基の位置を表わす。例えば、−αＡｒａ２−αＲｈａ３−βＸｙｌは、β−Ｄ−キシロピラノシル（１−３）−α−Ｌ−ラムノピラノシル（１−２）−α−Ｌ−アラビノピラノシル基を表わす。）
で示される化合物から成る群より選ばれる少なくとも１種を含有する、医薬、リパーゼ阻害剤、脂質吸収阻害剤、抗肥満剤、高脂血症改善剤、ニキビ用皮膚改善剤、更には食品、化粧料に関する。
【００１２】
【発明の実施の形態】式（１）で示される化合物において、Ｒ１は、水素原子又は水酸基が保護されていてもよい糖残基を表し、Ｒ２は、水素原子又は水酸基を表わす。糖残基としては、二糖類糖残基又は三糖類残基が好ましく、このような糖残基を構成する糖残基としては、具体的には、アラビノピラノシル基、ラムノピラノシル基及びキシロピラノシル基を挙げることができる。また、糖残基における水酸基の保護基としては、メチル基、アセチル基などを挙げることができる。
【００１３】
前記式（１）又は式（２）で示される化合物の中、Ｒ１又はＲ３が−αＡｒａ２−αＲｈａ３−βＸｙｌ、Ｒ２又はＲ４が−ＯＨである化合物は、サピンドシドＢ（Ｓａｐｉｎｄｏｓｉｄｅ　Ｂ）であり、Ｒ１又はＲ３が−αＡｒａ２−αＲｈａ３　−αＡｒａ残基、Ｒ２又はＲ４が−ＯＨである化合物は、サポニンＡ（Ｓａｐｏｎｉｎ　Ａ）である。Ｒ１又はＲ３が−αＡｒａ２−αＲｈａ、Ｒ２又はＲ４が−ＯＨである化合物は、カロパナックス−サポニンＢ（Ｋａｌｏｐａｎａｘ−ｓａｐｏｎｉｎ　Ｂ）であり、Ｒ１又はＲ３が−αＡｒａ２−αＲｈａ３−βＸｙｌ、Ｒ２又はＲ４が−Ｈである化合物は、ＣＰ３、Ｒ１又はＲ３が−Ｈ、Ｒ２又はＲ４が−Ｈである化合物は、オレアノイック酸（Ｏｌｅａｎｏｌｉｃ　ａｃｉｄ）である。Ｒ１又はＲ３が−Ｈ、Ｒ２又はＲ４が−ＯＨ残基である化合物は、ヘデラゲニン（Ｈｅｄｅｒａｇｅｎｉｎ）である。
【００１４】
これらの化合物は、ウコギ（Ａｃａｎｔｈｏｐａｎａｘ　ｓｉｅｂｏｌｄｉａｎｕｓ）を適当な溶媒で抽出し、その抽出溶媒より精製して得ることができる。抽出溶媒としては、水又は水と混和する有機溶媒の混合液、メタノール、エーテル、アセトン、アセトニトリル、ｎ−ブタノール、酢酸エチル、クロロホルムなどを用いることができる。好適な例としては０〜３０％（ｖ／ｖ）の含水エタノールが挙げられる。原料と抽出溶媒の割合は、１：０．５〜１：１０（重量比）が望ましく、また抽出は常温、加圧、攪拌下で１〜１０時間程度行うことが望ましい。ろ過により抽出液を得ることができるが、その際必要があればパーライトなどのろ過助剤を用いることもできる。
【００１５】
こうして得られた抽出液は、減圧濃縮、凍結乾燥など通常の方法により濃縮する。本発明の化合物は水溶性であるが酢酸エチルに抽出される性質を有することから、この様な性質を利用して、次のような精製を行うことができる。抽出溶媒が水などの場合、濃縮する前にエーテル、石油エーテル、ヘキサン、クロロホルムなどの酢酸エチルより脂溶性の高い溶媒で洗浄し、余剰物を除くこともできる。抽出溶媒に有機溶媒が含まれる場合は、濃縮後、残査を水に転溶し、エーテル、石油エーテル、ヘキサン、クロロホルムなどの酢酸エチルより脂溶性の高い溶媒で洗浄し、余剰物を除くことが望ましい。
【００１６】
洗浄後の水溶液は減圧濃縮、凍結乾燥など通常の方法により濃縮し、そのまま分画精製に供するか、水溶液を酢酸エチルで抽出し、酢酸エチル画分を濃縮後、分画精製することにより、本発明の化合物を得ることもできる。分画精製の方法としては、順相クロマトグラフィー、逆相クロマトグラフィーなど通常の方法を用いることができるが、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を用いた逆相クロマトグラフィーで分画することが望ましい。その際には、精製した画分のリパーゼ阻害活性を指標にして精製を進めることが望ましい。精製した画分は減圧濃縮、凍結乾燥など通常の方法により濃縮し、本発明の化合物を得ることができる。
【００１７】
また、Ｈ．ＳＡＷＡＤＡらの方法（Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，３４，１１１７−１１２１（１９９３））に従って、本発明の化合物を得ることもできる。
【００１８】
すなわち、乾燥させたウコギ（Ａｃａｎｔｈｏｐａｎａｘ　ｓｉｅｂｏｌｄｉａｎｕｓ）を熱メタノールを用いて抽出する。エバポレーターを用いてメタノールを留去させる。残った抽出物を蒸留水を用いて懸濁させた後に、ヘキサンを用いて脱脂する。その後水層を高極性多孔質樹脂ＤＩＡＩＯＮ　ＨＰ−２０（三菱化学社製）に供し、蒸留水、メタノール、３−ペンタノンを用いて順次溶出させ、これにより得られたメタノール画分を減圧濃縮、凍結乾燥など通常の方法により濃縮することにより、本発明の化合物を得ることができる。
【００１９】
さらに、本発明の化合物の一つであるオレアノイック酸（Ｏｌｅａｎｏｌｉｃ　ａｃｉｄ）及びヘデラゲニン（Ｈｅｄｅｒａｇｅｎｉｎ）は、サピンドシドＢ（Ｓａｐｉｎｄｏｓｉｄｅ　Ｂ）、サポニンＡ（Ｓａｐｏｎｉｎ　Ａ）、カロパナックス−サポニンＢ（Ｋａｌｏｐａｎａｘ−ｓａｐｏｎｉｎ　Ｂ）、ＣＰ３から、常法に従って塩酸や硫酸などの酸を用いて酸加水分解することにより、容易に得ることができる。
【００２０】
これらの本発明の化合物を含有する抽出物をそのままリパーゼ阻害剤、脂質吸収阻害剤、抗肥満剤、高脂血症改善剤、ニキビ用皮膚改善剤として用いても良く、さらに高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、シリカゲルカラムクロマトグラフィーなど慣用の精製手段を用いて精製したものを用いても良い。
【００２１】
これらの本発明の化合物に、リパーゼ阻害活性のような生理活性を有することは、従来から全く知られておらず、本発明により得られた新知見である。
【００２２】
本発明における化合物は、卓越したリパーゼ阻害活性を有しており、これらを含有する食品、医薬及び化粧料として、さらに、抗肥満剤、高脂血症改善剤、ニキビ用皮膚改善剤として使用可能である。
【００２３】
本発明の化合物を、リパーゼ阻害剤、抗肥満剤、高脂血症改善剤、ニキビ用皮膚改善剤及びこれらを含有する食品、医薬及び化粧料として製造することができる。
【００２４】
医薬としての適用方法としては、経口投与又は非経口投与のいずれも採用することができる。投与に際しては、有効成分を経口投与、直腸内投与、注射などの投与方法に適した固体又は液体の医薬用無毒性担体と混合して、慣用の医薬製剤の形態で投与することができる。このような製剤としては、例えば、錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤などの固形剤、溶液剤、懸濁剤、乳剤などの液剤、凍結乾燥製剤などが挙げられ、これらの製剤は製剤上の常套手段により調製することができる。上記の医薬用無毒性担体としては、例えば、グルコース、乳糖、ショ糖、澱粉、マンニトール、デキストリン、脂肪酸グリセリド、ポリエチレングルコール、ヒドロキシエチルデンプン、エチレングリコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、アミノ酸、ゼラチン、アルブミン、水、生理食塩水などが挙げられる。また、必要に応じて、安定化剤、湿潤剤、乳化剤、結合剤、等張化剤などの慣用の添加剤を適宜添加することもできる。
【００２５】
食品としては、そのまま、又は種々の栄養成分を加えて、若しくは飲食品中に含有せしめて、高脂血症あるいは肥満の治療及び予防に有用な保健用食品又は食品素材として食される。例えば、上述した適当な助剤を添加した後、慣用の手段を用いて、食用に適した形態、例えば、顆粒状、粒状、錠剤、カプセル、ペーストなどに成形して食用に供してもよく、また種々の食品、例えば、ハム、ソーセージなどの食肉加工食品、かまぼこ、ちくわなどの水産加工食品、パン、菓子、バター、粉乳、発酵乳製品に添加して使用したり、水、果汁、牛乳、清涼飲料などの飲料に添加して使用してもよい。
【００２６】
本発明の化合物の有効投与量は、患者の年齢、体重、症状、患者の程度、投与経路、投与スケジュール、製剤形態、素材の阻害活性の強さなどにより、適宜選択・決定されるが、例えば、経口投与の場合、一般に１日当たり０．００１〜１０００ｍｇ／ｋｇ体重程度、サピンドサイドＢ（Ｓａｐｉｎｄｏｓｉｄｅ　Ｂ）の場合、１日当たり５〜３００ｍｇ／ｋｇ体重程度とされ、１日に数回に分けて投与してもよい。
【００２７】
また、本発明の化合物を含有せしめて、化粧料または化粧料素材として使用する場合、例えば、サポニンＡ（Ｓａｐｏｎｉｎ　Ａ）を小麦胚芽油あるいはオリーブ油に添加してリパーゼ阻害剤含有組成物とし、これを化粧料素材として使用することができる。本発明の化合物の添加量は、特に限定されるものではないが、一例としてあげると、小麦胚芽油あるいはオリーブ油の重量に対して０．１質量％以上６０質量％以下、好ましくは、０．５質量％以上５０質量％以下が適当である。
【００２８】
さらに、直接、化粧料成分として使用し、リパーゼ阻害作用を有する化粧料を製造することができる。化粧料としては特に限定されるものではないが、機能面からは、例えば乳液、化粧液、フェイスクリーム、ハンドクリーム、ローション、エッセンス、シャンプー、リンスなどが好ましい。
【００２９】
このような化粧料は、常法に従って製造することができる。化粧料における本発明の化合物の添加量は、特に限定されるものではないが、一例としてあげると、化粧料全重量の０．０１質量％以上２０質量％以下程度が適当である。
【００３０】
本発明の化合物は、天然物であるためその毒性は低く、例えば、カロパナックス−サポニンＢ（Ｋａｌｏｐａｎａｘ−ｓａｐｏｎｉｎ　Ｂ）を毎日１０００ｍｇ／ｋｇ、１００日間という長期間に亘ってラットに経口投与しても、死亡例は認められず、体重変化も観察されなかった。
【００３１】
【実施例】以下に実施例を挙げて、具体的に説明するが、これに限定されるものではない。
【００３２】
［製造例］各種サポニンの抽出
サポニンの抽出は、Ｈ．ＳＡＷＡＤＡらの方法（Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，３４，１１１７−１１２１（１９９３））に従って行った。
【００３３】
すなわち、乾燥させたウコギ（Ａｃａｎｔｈｏｐａｎａｘ　ｓｉｅｂｏｌｄｉａｎｕｓ）の葉１ｋｇを熱メタノール３Ｌを用いて抽出した。得られた抽出液をエバポレーターを用いてメタノールを留去させ、残った抽出物２３５ｇを蒸留水２７．２ｋｇを用いて懸濁させた後に、同量のヘキサン２７．２ｋｇを用いて脱脂した。その後水層を高極性多孔質樹脂ＤＩＡＩＯＮ　ＨＰ−２０（三菱化学社製）（カラムサイズ：Φ２ｃｍ×２０ｃｍ）に供し、蒸留水（９９．７ｇ）、メタノール（７５．１ｇ）、３−ペンタノン（３．４１ｇ）を用いて順次溶出させた。これにより得られたメタノール溶出画分（１０ｇ）をカラム担体としてシリカゲルを用いたケイ酸カラムクロマトグラフィーに供し、溶出溶媒としてクロロホルム：メタノール：水＝１０：５：１（ｖ／ｖ／ｖ）を用いて溶出することにより、７つの画分（以下、Ｆｒ．１〜Ｆｒ．７と名付ける）を得た。得られた各フラクションの重量はそれぞれ、Ｆｒ．１　３６０ｍｇ、Ｆｒ．２　１２９０ｍｇ、Ｆｒ．３　４５０ｍｇ、Ｆｒ．４　１１６０ｍｇ、Ｆｒ．５　４０６０ｍｇ、Ｆｒ．６　２０９０ｍｇ、Ｆｒ．７　２０ｍｇであった。
【００３４】
次ぎに、上述にして得られたＦｒ．２（１２９０ｍｇ）を、ケイ酸カラムクロマトグラフィーに供し、溶出溶媒としてクロロフルム：メタノール：水＝１０：５：１（ｖ／ｖ／ｖ）、５０：１０：１（ｖ／ｖ／ｖ）、酢酸エチル：エタノール：水＝１０：２：１（ｖ／ｖ／ｖ）を用いて順次溶出させ、その後、ＯＤＳ（Ｃ１８）カラムクロマトグラフィーに供し、溶出溶媒として８０％メタノールを用いて溶出することにより、カロパナックス−サポニンＢ（Ｋａｌｏｐａｎａｘ−ｓａｐｏｎｉｎ　Ｂ）（１８３ｍｇ）、ＣＰ３（２５ｍｇ）を得た。また、Ｆｒ．３（４５０ｍｇ）をケイ酸カラムクロマトグラフィーに供し、溶出溶媒としてクロロフルム：メタノール：水＝１０：５：１（ｖ／ｖ／ｖ）、５０：１０：１（ｖ／ｖ／ｖ）、酢酸エチル：エタノール：水＝８：２：１（ｖ／ｖ／ｖ）、１０：２：１を用いて順次溶出させることにより、サピンドシドＢ（Ｓａｐｉｎｄｏｓｉｄｅ　Ｂ）（９７ｍｇ）、サポニンＡ（Ｓａｐｏｎｉｎ　Ａ）（２５ｍｇ）を得た。
【００３５】
得られた本発明の化合物の化学的特性を、以下に示す。
【００３６】
［サピンドシドＢ（Ｓａｐｉｎｄｏｓｉｄｅ　Ｂ）］
収率：０．０７％、粉末、［α］２１Ｄ　＋４．４゜（ｃ１．２０）、ＩＲ　νｍａｘ　ｃｍ−１：３４３０（ＯＨ）、１６９０（ＣＯＯＨ）．１Ｈ　ＮＭＲ（ａｎｏｍｅｒｉｃ　ｐｒｏｔｏｎ）：δ５．１２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６　Ｈｚ，ＡｒａＨ−１）、５．４０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．７　Ｈｚ，Ｘｙｌ　Ｈ−１）、６．４０（１Ｈ，ｓ，Ｒｈａ　Ｈ−１）．ＦＡＢ−ＭＳ（ｐｏｓｉｔｉｖｅ）ｍ／ｚ：８８３　［Ｍ＋Ｈ］＋、７５１［Ｍ−Ｘｙｌ＋Ｈ］＋、６０５［Ｍ−（Ｒｈａ−Ｘｙｌ）＋Ｈ］＋．
【００３７】
［サポニンＡ（Ｓａｐｏｎｉｎ　Ａ）］
収率：０．０２％、粉末、［α］２１Ｄ　＋１０．６゜（ｃ０．６７）、ＩＲ　νｍａｘ　ｃｍ−１：３４２５（ＯＨ）、１６９５（ＣＯＯＨ）．１Ｈ　ＮＭＲ（ａｎｏｍｅｒｉｃ　ｐｒｏｔｏｎ）：δ５．１１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６　Ｈｚ，Ａｒａ　Ｈ−１）、５．３７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．０　Ｈｚ，Ａｒａ　Ｈ−１）、６．４０（１Ｈ，ｓ，Ｒｈａ　Ｈ−１）．ＦＡＢ−ＭＳ（ｐｏｓｉｔｉｖｅ）ｍ／ｚ：８８３　［Ｍ＋Ｈ］＋．
【００３８】
［カロパナックス−サポニンＢ（Ｋａｌｏｐａｎａｘ−ｓａｐｏｎｉｎ　Ｂ）］
収率：０．１４％、針状結晶（ＭｅＯＨ）、ｍｐ．　２５３−２５６℃（ｄｅｃｏｍｐ．）、［α］１９Ｄ　＋１８．６゜（ｃ０．５９）、ＩＲ　νｍａｘ　ｃｍ−１：３４３０（ＯＨ）、１６９５（ＣＯＯＨ）．１Ｈ　ＮＭＲ（ａｎｏｍｅｒｉｃ　ｐｒｏｔｏｎ）：δ５．１６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．２　Ｈｚ，Ａｒａ　Ｈ−１）、６．２９（１Ｈ，ｓ，Ｒｈａ　Ｈ−１）．ＦＡＢ−ＭＳ（ｐｏｓｉｔｉｖｅ）ｍ／ｚ：７５１　［Ｍ＋Ｈ］＋．
【００３９】
［ＣＰ３］
収率：０．０２％、粉末、［α］２４Ｄ　−４．９゜（ｃ０．７１）、ＩＲ　νｍａｘ　ｃｍ−１：３４２５（ＯＨ）、１６９０（ＣＯＯＨ）．１Ｈ　ＮＭＲ（ａｎｏｍｅｒｉｃ　ｐｒｏｔｏｎ）：δ４．９３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０　Ｈｚ，ＡｒａＨ−１）、５．４１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．７　Ｈｚ，Ｘｙｌ　Ｈ−１）、６．３３（１Ｈ，ｓ，Ｒｈａ　Ｈ−１）．ＦＡＢ−ＭＳ（ｐｏｓｉｔｉｖｅ）ｍ／ｚ：８６７　［Ｍ＋Ｈ］＋．
【００４０】
［実施例］リパーゼ阻害活性試験
［基質（１０％大豆油／アラビアゴムエマルジョン）の調製］
アラビアゴム１ｇを約５ｍｌの蒸留水に溶かし、５Ｌの蒸留水で一晩透析する。その後、透析チューブからアラビアゴムを２０ｍｌメートルグラスに出し、共洗いをしながら、２０ｍｌにする。また、大豆油１ｇを５０ｍｌビーカーに秤り取る。これに、前述の５％アラビアゴム１０ｍｌを加え、スターラーでよく攪拌した。
【００４１】
［銅混合液の調製］
６．４５％　硝酸銅（ＩＩ）三水和物１００ｍｌ、１Ｍ　トリエタノールアミン９０ｍｌ、１Ｎ　酢酸　１０ｍｌを加えて、銅混合液２００ｍｌを調製した。
【００４２】
［発色試薬（０．１％ＤＥＤＣ）の調製］
Ｎ，Ｎ−ジエチルジチオカルバミン酸ナトリウム三水和物１０ｍｇを、１０ｍｌのブタノールに溶解させた。
【００４３】
［阻害活性試験］
リパーゼ阻害活性の測定は、Ｋ．Ｓａｔｏｕｃｈｉらの方法（Ａｇｒｉｃ．　Ｂｉｏｌ．　Ｃｈｅｍ．　４０巻、８８９〜８９７頁（１９７６年））に従い、Ｄｕｎｃｏｍｂｅ法により測定した。
【００４４】
すなわち、０．５ＭＴｒｉｓ−ＨＣｌ　（ｐＨ７．４）緩衝液５０μｌに、基質として１０％大豆油エマルジョン５０μｌ、５ｍＭ　酢酸カルシウム１００μｌ、製造例で得られたそれぞれのサポニンの各種濃度（１、０．５、０．１、０．０５、０．０１、０．００５、０．００１ｍｇ／ｍｌ）の水溶液１００μｌを加えた後、蒸留水を加えて４５０μｌとする。これを３７℃、６５ｒ．ｐ．ｍ．で５分間、プレインキュベーションした後、リパーゼ（シグマ社製、ブタ膵臓由来）（１ｍｇ／ｍｌ）を５０μｌ加えて、３７℃、１２５ｒ．ｐ．ｍ．で２０分間、インキュベーションした。その後、クロロホルム３．５ｍｌを加え上層を除去し、残りの下層に銅混合液１．５ｍｌを加え、コンセントレーターで１５分間攪拌した後、上層を除去する。残りの下層に発色試薬（０．１％ＤＥＤＣ）を０．５ｍｌ加えた後、遊離した脂肪酸の量を４４０ｎｍでの吸光度を測定することにより、リパーゼ阻害活性を測定し、ＩＣ５０値（酵素活性を５０％阻害する濃度（μｇ／０．５ｍｌ））で表した結果を表１に示した。
【００４５】
また、比較例として、すでにリパーゼ阻害活性を有すると報告されているケツメイシ、コラ・デ・カバロについても同様の試験を行った。その結果を併せて表１に示す。
【００４６】
【表１】
2004043373.tif 000004
表１からもわかるように、本発明のサポニン、すなわち、サピンドシドＢ（Ｓａｐｉｎｄｏｓｉｄｅ　Ｂ）、サポニンＡ（Ｓａｐｏｎｉｎ　Ａ）、カロパナックス−サポニンＢ（Ｋａｌｏｐａｎａｘ−ｓａｐｏｎｉｎ　Ｂ）、ＣＰ３、オレアノイック酸（Ｏｌｅａｎｏｌｉｃ　ａｃｉｄ）、ヘデラゲニン（Ｈｅｄｅｒａｇｅｎｉｎ）に高いリパーゼ阻害活性を有することがわかる。
【００４７】
以下に、本発明の有効成分を使用した処方例を記載する。
【００４８】
［錠剤の製造］
製造例で得られたサピンドシドＢ（Ｓａｐｉｎｄｏｓｉｄｅ　Ｂ）を用いて、常法に従って、下記の組成の錠剤を製造した。
2004043373.tif 000005
【００４９】［ジュースの製造］
製造例で得られたサポニンＡ（Ｓａｐｏｎｉｎ　Ａ）を用いて、常法に従って、下記の組成のジュースを製造した。
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【００５０】
［フェイスクリームの製造］
製造例で得られたカロパナックス−サポニンＢ（Ｋａｌｏｐａｎａｘ−ｓａｐｏｎｉｎ　Ｂ）を用いて、常法に従って、下記の組成のフェイスクリームを製造した。
2004043373.tif 000007
【００５１】
【発明の効果】本発明の化合物は、リパーゼ阻害活性のような酵素阻害作用を有し、医薬、食品、化粧料として使用できる。さらに、リパーゼ活性を強力に阻害することから、肥満や高脂血症の抑制や予防に寄与し得ると共に、細菌性リパーゼに起因するニキビや皮膚炎、ふけなどの皮膚疾患の予防、治療に有効である。このリパーゼ阻害剤は、長期に連用しても安全で効果的であるから、健康食品のような食品としても提供できる。