(57)【要約】【課題】本発明の課題は、各種農園芸作物等の植物の病害、特に灰色かび病及び菌核病に対して、一定して優れた防除能を有し、各種化学殺菌剤に低感受性であり、殺菌剤との混用もしくは体系防除が可能な微生物を含有する植物病害防除剤組成物や、これを用いて植物及び／又は土壌を処理する植物病害の防除方法を提供することにある。【解決手段】ゲオトリクム属（Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ）に属する微生物を含有することを特徴とする植物病害防除剤組成物および該組成物を用いた植物病害防除方法である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ゲオトリクム属（Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ）に属する微生物を含有することを特徴とする植物病害防除剤組成物。
【請求項２】
ゲオトリクム属（Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ）に属する微生物が、植物病害防除能を有し、かつ化学殺菌剤に低感受性な微生物であることを特徴とする請求項１記載の植物病害防除剤組成物。
【請求項３】
ゲオトリクム属（Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ）に属する微生物が、ゲオトリクム・キャンディダム（Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ  ｃａｎｄｉｄｕｍ）に属する微生物であることを特徴とする請求項１記載の植物病害防除剤組成物。
【請求項４】
ゲオトリクム・キャンディダム（Ｇ．ｃａｎｄｉｄｕｍ）に属する微生物が、ゲオトリクム・キャンディダム（Ｇ．ｃａｎｄｉｄｕｍ）ＨＡＩ−Ｃ−０３株であることを特徴とする請求項３記載の植物病害防除剤組成物。
【請求項５】
植物病害防除剤が、灰色かび病防除剤及び／又は菌核病防除剤であることを特徴とする請求項１〜４のいずれかに記載の植物病害防除剤組成物。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれかに記載の植物病害防除剤組成物を用いて、植物及び／又は土壌を処理することを特徴とする植物病害の防除方法。
【請求項７】
植物病害防除能を有し、かつ殺菌剤に低感受性であることを特徴とするゲオトリクム・キャンディダム（Ｇ．ｃａｎｄｉｄｕｍ）。
【請求項８】
植物病害防除能が、灰色かび病防除能及び／又は菌核病防除能であることを特徴とする請求項７記載のゲオトリクム・キャンディダム（Ｇ．ｃａｎｄｉｄｕｍ）。
【請求項９】
ゲオトリクム・キャンディダム（Ｇ．ｃａｎｄｉｄｕｍ）ＨＡＩ−Ｃ−０３株。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、ゲオトリクム属（Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ）に属する新規な微生物、特に各種農園芸作物の灰色かび病や菌核病等の植物病害防除能を有し、かつ殺菌剤に低感受性な新規な微生物や、かかる微生物を含有してなる植物病害防除剤組成物や、かかる植物病害防除剤組成物を用いた植物病害の防除方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
従来の合成殺菌剤による防除に代わるべき、あるいは併用すべき手段として、環境汚染が極めて少なく、生態系に調和し、かつ防除効果の優れたものとして生物農薬が知られている。農園芸作物の病害防除、特に灰色かび病に用いられてきた微生物として、トリコデルマ属、グリオクラディウム属、バチルス属、ペニシリウム属に属する微生物が挙げられ、これまでにこれらの微生物を含有する農園芸用殺菌剤組成物も数多く研究開発されてきた。（例えば特許文献１、特許文献２  参照）
また、本発明に係わるゲオトリクム属に属する菌は、チーズを熟成する上で有効に働くことや（例えば非特許文献１、非特許文献２  参照）、発酵乳酸飲食料品中でのビフィズス菌の生存性を高めたりする作用があり（特許文献３参照）、食品分野でも有効利用されている安全性も高い菌である。
【特許文献１】特開昭６３−２７３４７０号公報
【特許文献２】特開平２−２２２９９号公報
【非特許文献１】Ｉｎｔ．  Ｊ．  Ｆｏｏｄ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．  １９９８  Ｊｕｎ  ３０；４２（１−２）：９１−９
【非特許文献２】Ｊ．  Ｆｏｏｄ  Ｐｒｏｔ．  １９９８  Ａｕｇ；６１（８）：１０２３−９
【特許文献３】特開２００１−２９０６４
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】
従来の、バチルス属に属する細菌を応用した農園芸作物の病害防除方法では何れも持続性、定着性、安定性や対照の植物病原菌との生育適温の違い等、必ずしも十分であるとは言えなかった。また、上記のような真菌類を使用した場合、体系的に処理される化学殺菌剤により、処理した微生物が死滅し、十分に効果が発揮できないなどの問題点があった。
【０００４】
本発明は、かかる実情に鑑みてなされたものであり、本発明の課題は、各種農園芸作物等の植物の病害、特に灰色かび病及び菌核病に対して、一定して優れた防除能を有し、各種化学殺菌剤に低感受性であり、殺菌剤との混用もしくは体系防除が可能な新規な微生物、また、両病害の発病適温と本発明微生物の防除適温に大きなずれがなく、人畜に対し安全性の高い新規な微生物や、かかる微生物を含有することにより長期に亘り病害防除能を保持し、化学殺菌剤と併用してもその病害防除能が維持可能な植物病害防除剤組成物や、これを用いて植物及び／又は土壌を処理する植物病害の防除方法を提供することにある。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
上記の課題を解決するため、本発明者らは、人畜への安全性の実証されているチーズや発酵乳酸飲食料品等に利用されている微生物について各種農園芸作物の灰色かび病防除活性を有する微生物の選抜を行い、本発明の灰色かび病病原菌の生育を妨げ、且つ化学殺菌剤に低感受性である糸状菌を分離、選抜した。本発明に係わる糸状菌株の形態や菌学的性質は以下の通りであった。
【０００６】
菌糸は、隔壁を有し、幅の広い二股状に分枝する栄養菌糸と、幅がやや狭い分生子形成菌糸とに分かれる。分生子柄と菌糸の区別は不明瞭である。分生子は、文節型分生子で菌糸の切断により生じ、気中に連鎖あるいは培地表面に密着して連鎖し、最初は角張った円筒形、後に樽型、楕円形あるいは亜球形となる。２〜８×３〜５０μｍで無色である。菌叢は、平坦で白色、裏面は無色である。
【０００７】
かかる形態的特徴から上記糸状菌株をゲオトリクム属に属するゲオトリクム・キャンディダム（Ｇ．ｃａｎｄｉｄｕｍ）と同定し、この菌株をゲオトリクム・キャンディダムＨＡＩ−Ｃ−０３株と命名した。このＨＡＩ−Ｃ−０３株は、独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センターに寄託番号ＦＥＲＭ  Ｐ−１９２４９として寄託されている。そして、上記ゲオトリクム・キャンディダムＨＡＩ−Ｃ−０３株は、灰色かび病の他、菌核病に対しても優れた防除活性を有するばかりか、各種化学殺菌剤に対して極めて低感受性であることを見出したばかりでなく、食品分野でも有効利用されている安全性も高い菌である。
【０００８】
すなわち、本発明は、ゲオトリクム属（Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ）に属する微生物を含有することを特徴とする植物病害防除剤組成物（請求項１）や、ゲオトリクム属（Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ）に属する微生物が、植物病害防除能を有し、かつ殺菌剤に極めて低感受性な微生物であることを特徴とする請求項１記載の植物病害防除剤組成物（請求項２）や、ゲオトリクム属（Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ）に属する微生物が、ゲオトリクム・キャンディダム（Ｇ．ｃａｎｄｉｄｕｍ）に属する微生物であることを特徴とする請求項１記載の植物病害防除剤組成物（請求項３）や、ゲオトリクム・キャンディダム（Ｇ．ｃａｎｄｉｄｕｍ）に属する微生物が、ゲオトリクム・キャンディダム（Ｇ．ｃａｎｄｉｄｕｍ）ＨＡＩ−Ｃ−０３株であることを特徴とする請求項３記載の植物病害防除剤組成物（請求項４）や、植物病害防除剤が、灰色かび病防除剤及び／又は菌核病防除剤であることを特徴とする請求項１〜４のいずれか記載の植物病害防除剤組成物（請求項５）や、請求項１〜５のいずれか記載の植物病害防除剤組成物を用いて、植物及び／又は土壌を処理することを特徴とする植物病害の防除方法（請求項６）や、植物病害防除能を有し、かつ殺菌剤に極めて低感受性であることを特徴とするゲオトリクム・キャンディダム（Ｇ．ｃａｎｄｉｄｕｍ）（請求項７）や、植物病害防除能が、灰色かび病防除能及び／又は菌核病防除能であることを特徴とする請求項７記載のゲオトリクム・キャンディダム（Ｇ．ｃａｎｄｉｄｕｍ）（請求項８）や、ゲオトリクム・キャンディダム（Ｇ．ｃａｎｄｉｄｕｍ）ＨＡＩ−Ｃ−０３株（請求項９）に関する。
【０００９】
【実施の形態】
本発明の植物病害防除剤組成物としては、ゲオトリクム属に属する微生物を含有する組成物であれば、特に限定されるものではないが、上記ゲオトリクム属に属する微生物が、植物病害防除能を有し、かつ殺菌剤に極めて低感受性な微生物であることが好ましい。かかるゲオトリクム属に属する微生物として、ゲオトリクム・キャンディダムを例示することができ、より具体的にはゲオトリクム・キャンディダムＨＡＩ−Ｃ−０３株を挙げることができる。また、本発明の植物病害防除剤組成物は、灰色かび病や菌核病に対して特に有利に用いることができる。
【００１０】
本発明の植物病害防除剤組成物の製造には、ゲオトリクム属に属する微生物を固体培養あるいは液体培養等の公知の手段で増殖させた菌体を用いることができる。ゲオトリクム属に属する微生物は、例えばチーズからスクリーニングにより得ることができ、かかる微生物の増殖方法としては、菌体が増殖する方法であれば、特に培地の種類や培養条件等を問わず、いずれの方法でもよいが、例えば、固体培養の場合、ポテトデキストロース寒天培地、Ｃｚａｐｅｋ  Ｄｏｘ寒天培地、麦芽寒天培地、標準寒天培地等における２５℃での静置培養を、液体培養の場合、ポテトデキストロース液体培地、Ｃｚａｐｅｋ  Ｄｏｘ液体培地、麦芽液体培地、標準液体培地等における２５℃での振盪培養を挙げることができる。また、菌体の使用形態としては、菌体自体のほか、その懸濁液ないし培養液又はこれらの濃縮物、ペースト状物、乾燥物、希釈物等のいずれの形態であっても適用することができる。
【００１１】
本発明の病害防除剤組成物におけるゲオトリクム属に属する菌の濃度は、特に制限されるものではないが、１０００〜２０００倍に希釈した際に、分生胞子菌濃度に換算して、１×１０１０  〜１×１０３  ｃｆｕ／ｍｌ、好ましくは１×１０８  〜１×１０４  ｃｆｕ／ｍｌの範囲である。また、本発明の病害防除剤組成物には通常使用される担体、界面活性剤、分散剤、補助剤等を配合させることができ、その形態としては通常の農薬のとり得る形態、例えば、粉剤、水和剤、乳剤、フロアブル剤、粒剤等の形態を採用することができる。
【００１２】
上記担体としては、例えば、珪藻土、クレー、タルク、ベントナイト、ホワイトカーボン、カオリン、バーミキュライト、消石灰、珪砂、硫安、尿素等の固体担体を挙げることができる。界面活性剤及び分散剤としては、例えば、ポリオキシエチレンが付加したアルキルフェニルエーテル、ポリオキシエチレンが付加したアルキルエーテル、ポリオキシエチレンが付加した高級脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンが付加したソルビタン高級脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンが付加したトリスチリルフェニルエーテル等の非イオン性界面活性剤、ポリオキシエチレンが付加したアルキルフェニルエーテルの硫酸エステル塩、アルキルベンゼンスルホン酸金属塩、高級アルコールの硫酸エステル塩、アルキルナフタレンスルホン酸ナトリウム、リグニンスルホン酸ナトリウム、アルキルナフタレンスルホン酸ナトリウムのホルムアルデヒド縮合物、イソブチレン−無水マレイン酸の共重合体等のイオン性界面活性剤や、分散剤を挙げることができる。また、補助剤としては、例えば、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール、アラビアゴム、澱粉、乳糖等を挙げることができる。
【００１３】
本発明の病害防除剤組成物を乳剤として製造するには、採取・乾燥したゲオトリクム属の分生胞子を、界面活性剤を含有する有機溶剤中に混入させた懸濁液を調製することにより行うことができる。かかる界面活性剤としては、菌胞子の発芽・生長を阻害しない性状のものであればいずれのものも適用することができ、具体的には、ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート、ポリオキシエチレングリコールモノラウレート、ポリエチレングリコールモノオレエート等を挙げることができ、これらを１種単独あるいは２種以上を混合して用いることができる。また、有機溶剤としては、例えば、大豆油、ナタネ油、ひまし油、綿実油、パーム油、サフラワー油等の植物油、スピンドル油、ヘビーホワイトオイル、ライトホワイトオイル、ミネラルスピリット、ミネラルターペン、ナフテン油、パラフィン油、農薬用マシン油等の鉱物油、シリコーンオイル等を挙げることができ、これらは１種単独あるいは２種以上を混合して用いることができる。
【００１４】
本発明の植物病害の防除方法は、上記本発明の植物病害防除剤組成物を用いて植物病害を防除する方法であれば、特に制限されるものではなく、本発明の植物病害防除剤組成物を通常の化学農薬と同様、各種農園芸作物等の植物体や土壌に散布処理等する方法を挙げることができる。散布処理に当たっては、本発明の植物病害防除剤組成物を適当量の水等で希釈して使用することができ、散布量としては、ゲオトリクム属に属する菌の分生胞子濃度に換算して、通常１×１０１０  〜１×１０３  ｃｆｕ／ｍｌ、好ましくは１×１０８  〜１×１０４  ｃｆｕ／ｍｌの範囲である。
【００１５】
本発明はまた、植物病害防除能を有し、かつ殺菌剤に極めて低感受性なゲオトリクム・キャンディダム、特に灰色かび病防除能及び／又は菌核病防除能を有し、かつ殺菌剤に極めて低感受性なゲオトリクム・キャンディダム、より具体的には、ゲオトリクム・キャンディダムＨＡＩ−Ｃ−０３株（ＦＥＲＭ  Ｐ−１９２４９）を対象としている。これら微生物自体は、上述の植物病害防除剤組成物の製造に有利に用いることができる。
【００１６】
【実施例】
以下、本発明の植物病害防除剤組成物や、これを用いた植物病害防除方法を実施例により具体的に説明するが、本発明は以下の実施例に何ら限定されるものではなく、本発明の趣旨を逸脱しない範囲で、ゲオトリクム属の菌の種類、製剤の組成割合、剤型等を自由に変更することができる。また、以下の実施例では、ゲオトリクム属菌としてゲオトリクム・キャンディダムＨＡＩ−Ｃ−０３株（ＦＥＲＭ  Ｐ−１９２４９）を用いた。
【００１７】
実施例１：ゲオトリクム属菌分生胞子懸濁液の調製
３００ｍｌ容三角フラスコに胞子形成用培地（０．４ｗ／ｖ％ポテトエキス，１％グルコース，ｐＨ６．０）１５０ｍｌを入れ、加熱滅菌後、ゲオトリクム・キャンディダムＨＡＩ−Ｃ−０３株の前培養物１ｍｌを接種し、回転振盪器中２５℃、２５０ｒｐｍで１週間培養した。培養液を蒸留水あるいは緩衝液で洗浄する操作を３回繰り返し、最終的に１×１０９  ｃｆｕ／ｍｌとなるようにゲオトリクム属菌分生胞子懸濁液を調製した。
【００１８】
実施例２：植物病害防除剤組成物（粉剤）の製造
実施例１で調製したゲオトリクム属菌分生胞子懸濁液（１×１０９  ｃｆｕ／ｍｌ）２重量部の胞子ペレット、珪藻土１重量部及びクレー１重量部を均一に混合し乾燥した後、粉砕して粉剤Ａを得た。
【００１９】
実施例３：植物病害防除剤組成物（水和剤）の製造
実施例１で調製したゲオトリクム属菌分生胞子懸濁液（１×１０９  ｃｆｕ／ｍｌ）１重量部の胞子ペレットと、スキムミルク１０重量％及びグルタミン酸ナトリウム１重量％を含む水溶液１重量部とを均一に混合し、凍結後、乾燥して水和剤Ｂを得た。
【００２０】
実施例４：植物病害防除剤組成物（粉剤）の防除効果試験
実施例２で得られた粉剤Ａを水道水で１０００倍に希釈して処理液を調製した。その処理液をインゲンの花器に散布した。その後、２０℃でインキュベートし、２４時間後灰色かび病の病原菌であるボトリシス・シネレア（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ  ｃｉｎｅｒｅａ）の分生胞子懸濁液（２．０×１０７ｃｆｕ／ｍｌ）をインゲンの花器に散布した。散布処理後、２０℃で３日間インキュベートした。また、無処理を対照とし、ボトリシス・シネレア（Ｂ．  ｃｉｎｅｒｅａ）の分生胞子懸濁液（２．０×１０７ｃｆｕ／ｍｌ）のみを散布処理した。調査は、０：Ｂ．ｃｉｎｅｒｅａの菌糸の生育が認められない（発病なし），１：菌糸の生育がごく一部に認められる，２：菌糸の生育が５０％未満，３：花器全体に菌糸の生育が認められるの４段階で調査した。
発病度＝（（Σ（指数×該当花器数））／調査花器数×３）×１００
また、インゲン花器の下にインゲンの葉を敷き、病斑直径を計測した。
表から明らかなように、ゲオトリクム・キャンディダムはインゲン灰色かび病に対して防除効果を有することが認められた。
【００２１】
【表１】
2004292377.tif 000002
【００２２】
実施例５：各種殺菌剤に対する抗菌試験
殺菌剤として広い病害防除スペクトルを有するチオファネートメチル（ｔｈｉｏｐｈａｎａｔｅ−ｍｅｔｈｙｌ；日本曹達社製）や、灰色かび病防除剤の特効薬であるプロシミドン（ｐｒｏｃｙｍｉｄｏｎｅ；住友化学社製）、フルジオキシニル（ｆｌｕｄｉｏｘｏｎｉｌ；シンジェンタ社製）をそれぞれ０．１，１．０，１０，１００ｐｐｍとなるように添加したポテトデキストロース寒天培地（日本水産社製）にゲオトリクム・キャンディダム含菌寒天を置床した。これを２５℃暗黒下４日間静置培養した後、菌糸伸長量（ｍｍ）を測定し菌糸伸長阻止率を求めた。結果を表２に示す。表２から明らかなように、ゲオトリクム・キャンディダムに対して、チオファネートメチルは、１００ｐｐｍにおいても３２．４％、プロシミドンは２９．４％、フルジオキシニルは２３．５％とほとんど抗菌活性を示さなかった。これらのことから、本発明の植物病害防除剤組成物は、チオファネートメチルやプロシミドンおよびフルジオキシニル等の殺菌剤との混用あるいは体系防除が可能であることが示された。
【００２３】
【表２】
2004292377.tif 000003
【００２４】
【発明の効果】
本発明の植物病害防除剤組成物は、各種農園芸作物等の植物の病害、特に灰色かび病や菌核病に対して、一定して優れた防除能を有し、各種化学殺菌剤に極めて低感受性であり、これらの殺菌剤との混用もしくは体系防除が可能であり、かかる微生物を含有することにより長期に亘り病害防除能を保持し、各種化学殺菌剤と併用してもその病害防除能を維持することができ、かかる植物病害防除剤組成物を用いた本発明の植物病害の防除方法によれば、植物病害防除剤組成物を各種農園芸作物等の植物や、土壌に散布する等の方法により、植物の病害、特に灰色かび病及び菌核病に対して効果的に防除することができる。