(57)【要約】【課題】アマノリ属の藻体から短時間かつ簡単な操作により高純度のポルフィランを高収率で得る方法を提供する。【解決手段】アマノリ属の藻体乾燥物に含水エチルアルコールを加えて洗浄処理し、残留した固形分に水を加えて加熱沸騰させたのち、ろ過し、そのろ液を濃縮し、その濃縮液に塩酸又は乳酸のアルカリ金属塩若しくはアルカリ土類金属塩を添加後、エチルアルコールによる分別沈殿を行い、アルコール濃度５０％（ｖ／ｖ）までの画分の沈殿を回収し、洗浄及び乾燥する。【選択図】　なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
アマノリ属の藻体乾燥物に含水エチルアルコールを加えて洗浄処理し、残留した固形分に水を加えて加熱沸騰させたのち、ろ過し、そのろ液を濃縮し、その濃縮液に塩酸又は乳酸のアルカリ金属塩若しくはアルカリ土類金属塩を添加後、エチルアルコールによる分別沈殿を行い、アルコール濃度５０％（ｖ／ｖ）までの画分の沈殿を回収し、洗浄及び乾燥することを特徴とするポルフィランの製造方法。
【請求項２】
藻体乾燥物の質量に基づき、２００〜５００倍量のエチルアルコールを加えて洗浄処理する請求項１記載のポルフィランの製造方法。
【請求項３】
アルコール濃度４０〜５０％（ｖ／ｖ）の画分を分取する請求項１又は２記載のポルフィランの製造方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、アマノリ属の細胞間物質であり、その乾燥質量の約３０〜３５％を占めるポルフィランを高収率でしかも高純度で得る方法に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
ポルフィランは、紅藻類アマノリ属の藻体より抽出される硫酸基を含む高分子量多糖類の１種であり、種々の生理機能を有することから、食品、化粧品、医薬品などの分野での利用がはかられている。
【０００３】
このポルフィランの製造方法としては、これまでにアマノリ属の藻体乾燥物を熱水抽出したのち、この熱水抽出液に沈殿剤としてアルキルトリメチルアンモニウム化合物を加え、２晩放置して沈殿を生成させ、沈殿剤を除去後、エチルアルコールで再沈殿させる方法（特許文献１参照）、上記の熱水抽出液の濃縮液に酢酸及び酢酸カルシウムを加え、ｐＨ３〜６に調整したのち、エチルアルコールを加えて１晩放置し、沈殿を形成させ、この沈殿を８０％−エチルアルコールで洗浄後、１００％−エチルアルコールで脱水させる方法（特許文献２参照）、紅藻類アマノリ属の藻体を２０倍量の蒸留水で抽出し、ろ過後、濃度の異なるエチルアルコールを加えて分別沈殿したのち、蒸留水に溶かして透析処理し、次いでサイズ排除クロマトグラフィー処理してタンパク質きょう雑物を除き、さらに親油性物質の表面に吸着させ分離精製する方法（特許文献３参照）などが提案されている。
【０００４】
しかしながら、これらの方法は、いずれも煩雑な操作や長時間の処理を必要とする上に、純度の高い精製物を得ようとすれば収率が低下するのを免れないため、工業的に実施するには必ずしも適当なものとはいえない。
【０００５】
【特許文献１】
特開平１０−６０００２号公報（特許請求の範囲その他）
【特許文献２】
特開平１０−６０００３号公報（特許請求の範囲その他）
【特許文献３】
特開平１１−３１０６０３号公報（特許請求の範囲その他）
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、アマノリ属の藻体から短時間かつ簡単な操作により高純度のポルフィランを高収率で得る方法を提供することを目的としてなされたものである。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
本発明者は、アマノリ属の藻体から効率よくポルフィランを得る方法を開発するために鋭意研究を重ねた結果、アマノリ属の藻体乾燥物の熱エチルアルコール洗浄後の固形分を熱水で抽出し、その抽出液を濃縮後、特定の酸のアルカリ金属塩若しくはアルカリ土類金属塩の存在下、エチルアルコールにより分別沈殿し、特定の濃度画分における沈殿を分取し、洗浄及び乾燥することにより高純度のポルフィランが原料の藻体乾燥物質量に基づき３０〜３５％という高い収率で得られることを見出し、この知見に基づいて本発明をなすに至った。
【０００８】
すなわち、本発明は、アマノリ属の藻体乾燥物に含水エチルアルコールを加えて洗浄処理し、残留した固形分に水を加えて加熱沸騰させたのち、ろ過し、そのろ液を濃縮し、その濃縮液に塩酸又は乳酸のアルカリ金属塩若しくはアルカリ土類金属塩を添加後、エチルアルコールによる分別沈殿を行い、アルコール濃度５０％（ｖ／ｖ）までの画分の沈殿を回収し、洗浄及び乾燥することを特徴とするポルフィランの製造方法を提供するものである。
【０００９】
【発明の実施の形態】
本発明方法においては、原料としてアマノリ属の藻体を用いるが、ポルフィランは低級品のノリに多く含まれているので通常、食用に供される生ノリ、乾ノリ、焼ノリ、変色して商品とならない屑ノリなどを用いることができる。これらの原料は、常法に従い、乾燥し、粉砕して粉末として用いられる。この粉末の粒径としては、できるだけ小さい方が後続の抽出における抽出効率が高くなるが、あまり微細になると二次凝集を起したり、飛散して取り扱いにくくなるので、通常平均粒径１０〜５００μｍ、好ましくは３０〜１００μｍの範囲内で選ばれる。
【００１０】
本発明方法においては、先ず第一工程において、上記のアマノリ属の藻体から調製した乾燥粉末に含水エチルアルコールを加えて加熱還流させて洗浄処理する。この際の含水エチルアルコールとしては、体積に基づき水５〜１５％、好ましくは８〜１２％の水を含有するエチルアルコールを、ノリの乾燥粉末の質量に基づき２００〜５００倍量、好ましくは３５０〜４５０倍量の割合で用いる。
【００１１】
この第一工程における処理時間は、原料の種類、エチルアルコールの含水量により異なり、通常３０〜９０分間の範囲内であるが、多くの場合６０分程度で十分である。この第一工程は、アマノリ属の藻体の乾燥粉末からポルフィラン以外の不純分を抽出し、除去するための洗浄処理である。
【００１２】
次に第二工程において前記のようにして不純分を除いた固形分に、水、好ましくは蒸留水を加え、加熱沸騰させてこの中に含まれるポルフィランを抽出する。この抽出処理は、洗浄後の固形分に対し、その質量に基づき２００〜５００倍量、好ましくは３５０〜４５０倍量の水を加え、かきまぜながら加熱沸騰させることによって行われる。この際、抽出を促進させるために、所望に応じオートクレーブを用いて高温熱水処理することもできる。この抽出処理には、通常３０〜９０分間を要する。このようにして十分に熱水抽出したのち、抽出液をろ過し、固形残渣を除去する。
【００１３】
次に第三工程において、上記のろ過により得たろ液を、沈殿が生成しない程度、通常は体積に基づき１／５〜１／７になるまで濃縮する。この濃縮は慣用のエバポレーターを用いて行うことができる。
【００１４】
次いで、この濃縮液に塩酸又は乳酸のアルカリ金属塩若しくはアルカリ土類金属塩、例えば塩酸又は乳酸のナトリウム塩、カリウム塩若しくはカルシウム塩を０．３〜０．７モルの濃度で添加したのち、エチルアルコールを徐々に加えて分別沈殿させる。この際、エチルアルコール濃度が４０％（ｖ／ｖ）になるまでは、ほとんどポルフィランの沈殿は生成しないが４０〜５０％（ｖ／ｖ）の範囲に達すると、大量のポルフィランの沈殿を生じ、それ以上の濃度になると全く沈殿を生じなくなる。
この際、ｐＨは特に調整する必要はなく、弱アルカリ性から弱酸性の範囲で沈殿させることができるが、ｐＨを弱酸性に調整することにより回収率を若干向上させることができる。
【００１５】
次いで第四工程において、エチルアルコール濃度５０％（ｖ／ｖ）までの画分の沈殿を回収し、必要に応じ洗浄又は透析により精製したのち乾燥する。この乾燥は減圧下での加熱乾燥でもよいが、ポルフィランの分解を防止するためには、凍結乾燥するのが有利である。
【００１６】
エチルアルコール濃度が５０％（ｖ／ｖ）以上の上清中には、まだ全ポルフィランの１０〜１５質量％に相当するポルフィランが含まれているので、所望ならばこれを濃縮して同様に処理し、沈殿させ回収することができる。
このようにして、本発明方法によれば、原料の藻体乾燥粉末の質量に基づき、２５〜３０％の収率で高純度ポルフィランを得ることができる。
【００１７】
本発明方法においては、上記第三工程において、塩として塩酸又は乳酸のアルカリ金属塩若しくはアルカリ土類金属塩を用いることにより、例えば酢酸カリウム、酢酸アンモニウムのような酢酸塩を用いた場合に比べ、高い沈殿の回収率を得ることができる。
【００１８】
【実施例】
次に実施例により本発明をさらに詳細に説明する。
【００１９】
実施例１
乾ノリを超遠心粉砕機［レッツ（Ｒｅｔｓｃｈ）社製、製品名「ＺＭ−１００」、スクリーン０．２５ｍｍ）を用いて粉砕し、平均粒径８０μｍの粉末を調製した。
上記の粉末１ｇをフラスコに採り、９０％エチルアルコール４００ｍｌを加え、加熱沸騰させ６０分間還流したのち、ろ紙（アドバンテック社製、Ｎｏ．６）を用いてろ過し、固体分を捕集した。
次いでこの固体分に蒸留水４００ｍｌを加え、かきまぜながら６０分間加熱沸騰させたのち、同じろ紙を用いてろ過し、固体残渣を除去した。
このろ液をエバポレーターにより７０ｍｌまで濃縮したのち、この中へ塩化ナトリウム５．８５ｇを加え、かつ塩酸によりｐＨを調整し、次いでエチルアルコールを徐々に注入することにより分別沈殿を行わせた。この場合の各画分におけるポルフィランの生成量を表１に示す。
【００２０】
【表１】
2004027192.tif 000002
【００２１】
この表から明らかなように、ｐＨ５．０〜７．５の範囲で、かつエチルアルコール濃度４０〜５０％（ｖ／ｖ）の画分で、ほとんどのポルフィランが回収される。
【００２２】
実施例２
ノリ乾燥粉末５ｇをフラスコに採り、９０％エチルアルコール２リットルを加え、加熱沸騰させ６０分間還流したのち、ろ紙（アドバンテック社製、Ｎｏ．６）を用いてろ過し、固体分を捕集した。
次いでこの固体分に蒸留水２リットルを加え、かきまぜながら６０分間加熱沸騰させたのち、同じろ紙を用いてろ過し、固体残渣を除去した。
このろ液をエバポレーターにより３５０ｍｌまで濃縮したのち、この中へ塩化ナトリウム、塩化カリウム、乳酸ナトリウム又は塩化カルシウム０．５モル量を加え、かつ塩酸によりｐＨを５．０に調整し、次いでエチルアルコールを徐々に注入することにより分別沈殿を行わせた。
このようにして得た各エチルアルコール濃度画分のポルフィランの回収量を表２に示す。
【００２３】
【表２】
2004027192.tif 000003
【００２４】
この表から明らかなように、本発明方法によると、エチルアルコール濃度２０ｖ／ｖ％から５０ｖ／ｖ％までの画分でポルフィランがほとんど回収され、特に４０〜５０ｖ／ｖ％の画分における回収量が多く、この画分を分取すれば、高純度のポルフィランを得ることができる。
【００２５】
比較例
実施例２における塩化ナトリウム、塩化カリウム、乳酸ナトリウム又は塩化カルシウムの代りに、酢酸カリウム又は酢酸アンモニウムを用い、実施例２の操作を繰り返し、エチルアルコールの分別沈殿によりポルフィランを回収した。この結果を表３に示す。
【００２６】
【表３】
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【００２７】
この表から分るように、塩酸又は乳酸のアルカリ金属塩若しくはアルカリ土類金属塩を用いると、酢酸塩を用いた場合よりもエチルアルコール濃度４０〜５０ｖ／ｖ％におけるポルフィランの回収量が向上する。
【００２８】
【発明の効果】
本発明によるとアマノリ属の藻体乾燥物から簡単な操作で、高純度のポルフィランを高収率で得ることができる。