(57)【要約】【課題】吸湿性が低く、流動性を失い難い安定な結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドとこれを含有する糖質並びにそれらの製造方法及び用途を提供することを課題とする。【解決手段】融点が１１９℃乃至１２３℃である結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドとこれを含有する糖質、α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドを含有する溶液から結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドを晶出させ、これを採取することを特徴とする結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド又はこれを含有する糖質の製造方法、非晶質α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドを水分存在下で結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドに変換する方法、及び結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドとこれを含有する糖質を含有せしめた各種組成物を確立することにより、前記課題を解決する。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
融点が１１９℃乃至１２３℃である結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド。
【請求項２】
ＣｕＫα線をＸ線とする粉末Ｘ線回折法で分析したとき、少なくとも、回折角（２θ）１３．４°、１７．４°、１９．７°及び２２．３°にピークを有する請求項１記載の結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド。
【請求項３】
示差走査熱量計で分析したとき、約１１８℃乃至約１３８℃の範囲に吸熱ピークを有する請求項１又は２記載の結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド。
【請求項４】
結晶が、１含水結晶である請求項１乃至３のいずれかに記載の結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド。
【請求項５】
請求項１乃至４のいずれかに記載の結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドを含んでなる、結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドを含有する糖質。
【請求項６】
α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドを含有する溶液から請求項１乃至４のいずれかに記載の結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドを晶出させ、これを採取することを特徴とする請求項１乃至５のいずれかに記載の結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド又はこれを含有する糖質の製造方法。
【請求項７】
溶液が、水溶液である請求項６記載に記載の結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド又はこれを含有する糖質の製造方法。
【請求項８】
α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドが、β−Ｄ−グルコース−１リン酸及び／又はその塩とＤ−ガラクトースに、トレハロースホスホリラーゼを作用させることにより生成したものである、請求項６又は７記載の結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド又はこれを含有する糖質の製造方法。
【請求項９】
β−Ｄ−グルコース−１リン酸及び／又はその塩が、無機リン酸及び／又はその塩の存在下で、α，α−トレハロースにトレハロースホスホリラーゼを作用させて生成させたものである請求項８記載の結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド又はこれを含有する糖質の製造方法。
【請求項１０】
アルカリ処理法、酵母発酵法、及びカラムクロマトグラフィー法から選ばれる１種又は２種以上の方法で夾雑糖質を除去してα−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドの純度を高める工程を含む、請求項６乃至９のいずれかに記載の結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド又はこれを含有する糖質の製造方法。
【請求項１１】
α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドを含有する溶液を乾燥して非晶質α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドとし、これを水分存在下で請求項１乃至４のいずれかに記載の結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドに変換させ、これを採取することを特徴とする請求項１乃至５のいずれかに記載の結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド又はこれを含有する糖質の製造方法。
【請求項１２】
α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドを含有する溶液を乾燥して非晶質α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドとし、これを水分存在下で請求項１乃至４のいずれかに記載の結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドに変換させることを特徴とする、非晶質α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドを結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドに変換する方法。
【請求項１３】
請求項１乃至５のいずれかに記載の結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド又はこれを含有する糖質を含有せしめた組成物。
【請求項１４】
請求項１乃至５のいずれかに記載の結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド又はこれを含有する糖質を含有せしめることを特徴とする組成物の製造方法。
【請求項１５】
組成物が、飲食物、化粧品、医薬部外品、医薬品、生活用品、農林水産用品、試薬又は化学工業用品であることを特徴とする請求項１３記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、融点が１１９℃乃至１２３℃である結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドとこれを含有する糖質及びこれらの製造方法並びに用途、更には、非晶質α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドを結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドに変換する方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
【特許文献１】特開平１０−３０４８８１号公報
【非特許文献１】シイ・ケイ・リー（Ｃ．Ｋ．Ｌｅｅ）ら、『カーボハイドレート・リサーチ（Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ）』、第５０巻、１５２頁乃至１５７頁（１９７６年）
【非特許文献２】アール・ダブリュー・バシリー（Ｒ．Ｗ．Ｂａｓｓｉｌｙ）ら、『カーボハイドレート・リサーチ（Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ）』、第２３９巻、１９７頁乃至２０７頁（１９９３年）
【０００３】
α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドはグルコースとガラクトースとがα，α−１，１結合した非還元性の二糖であり、α，α−トレハロース（以下、単に「トレハロース」と言う。）の異性体である。本糖質に関しては、有機合成により得られたものが非特許文献１及び非特許文献２に開示され、加えて、非特許文献２においては、融点が１６５℃乃至１７０℃であるα−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドの１含水結晶についても記載されている。しかしながら、その製造方法は、煩雑な有機合成であって収率も低く、大量に調製することが難しく、その工業的生産はもとより用途開発に至っては全く検討されていなかった。その後、本出願と同じ出願人によって、トレハロースホスホリラーゼを用いた酵素法によるα−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドの合成が特許文献１に開示され、大量調製への道が開かれた。
【０００４】
α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドは味質良好な甘味を有し、また、浸透圧調節性、保湿性、照付与性、他糖の結晶防止性、澱粉老化防止性などの諸性質を有し、また、抗う蝕性、ビフィズス菌増殖促進性、ミネラル吸収促進性などの機能をも兼備していることから、飲食物、嗜好物、飼料、餌料、化粧品、医薬部外品、医薬品などに、更には、生活用品、農林水産用品、試薬、化学工業用品などの各種組成物への用途が期待されている。しかしながら、非晶質のα−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドは、それ自体はもとより、これを含有する糖質においても、吸湿性が大きく、雰囲気中の水分を吸収して、容易に固結したり、潮解したり、また流動性を失い易いなど、安定性に問題があった。そのため、種々の有用性が期待されながら、α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドの各種分野への応用はなかなか進展しないというのがこれまでの状況であった。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、吸湿性が低く、流動性を失い難い安定な結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドとこれを含有する糖質並びにそれらの製造方法及び用途を提供することを目的とする。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、吸湿性が低く、固結や潮解を起こし難く、流動性を失い難い、保存安定性の優れたα−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドを確立することを目的として鋭意研究する中、前記の酵素法によりα−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドの結晶（以下、「結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド」と言う。）を得てその物理化学的性質を調べたところ、意外にも、この結晶の融点が１１９℃乃至１２３℃であり、アール・ダブリュー・バシリー（Ｒ．Ｗ．Ｂａｓｓｉｌｙ）らによって非特許文献２に開示されている結晶とは全く異なることを見出した。この結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドは、α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドを含有する溶液から晶出させるか、非晶質α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド固体を水分存在下で結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドに変換させて得ることのできる新規な結晶である。当該結晶は、ＣｕＫα線をＸ線とする粉末Ｘ線回折法で分析したとき、少なくとも、回折角（２θ）１３．４°、１７．４°、１９．７°及び２２．３°にピークを有する結晶である。また、当該結晶は、示差走査熱量計で分析したとき、約１１８℃乃至約１３８℃の範囲に吸熱ピークを有する結晶である。さらに、当該結晶はカールフィッシャー法でその水分含量を分析したとき、結晶の結合水として１含水に相当する水分が検出され、また、ＫＢｒ錠剤法で赤外線吸収スペクトルを測定したとき、図１に示すスペクトルを示す結晶である。
【０００７】
本発明の結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドの製造方法について述べるに、原料として用いるα−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドの由来は問わず、例えば、有機合成法、醗酵法、酵素法などによって製造されたものであっても、また、微生物、動植物など天然物からの抽出法によって製造されたものであってもよい。一般的には、安全性や経済性の観点から、酵素法によって製造されたものが好ましく、例えば、特許文献１に記載されている、基質としてのβ−Ｄ−グルコース−１−リン酸（糖供与体）とＤ−ガラクトース（糖受容体）とにトレハロースホスホリラーゼを作用させて得られるα−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドは好適に用いることができる。
【０００８】
本発明は、α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドを原料として用いるも、α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド自体の製造方法に関する発明ではないことから、斯かる製造方法の詳細は割愛するが、酵素法によるその概略を述べれば、以下のとおりである。
【０００９】
α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドを製造するために用いるトレハロースホスホリラーゼは、α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド生成能を有するトレハロースホスホリラーゼであればよく、例えば、特許文献１に開示された、サーモアナエロビウム（Ｔｈｅｒｍｏａｎａｅｒｏｂｉｕｍ）属に属する微生物であるサーモアナエロビウム・ブロッキイ（Ｔｈｅｒｍｏａｎａｅｒｏｂｉｕｍｂｒｏｃｋｉｉ）（ＡＴＣＣ  ３５０４７）由来のトレハロースホスホリラーゼが、高い耐熱性を有する酵素であって、酵素反応を比較的高温で行うことができることから、酵素反応を効率的に実施できるとともに、微生物汚染を回避できる利点を有している。前記特許文献１に開示されたトレハロースホスホリラーゼは、下記に示す理化学的性質を有する酵素である。
（１）作用
（ａ）無機リン酸存在下でトレハロースを分解してＤ−グルコース及びβ−Ｄ−グルコース−１リン酸を生成する。
（ｂ）β−Ｄ−グルコース−１リン酸とＤ−グルコースとからトレハロースと無機リン酸を生成し、更にβ−Ｄ−グルコース−１リン酸を糖供与体として、他の糖質にグルコシル基の転移を触媒する。
（２）分子量
ＳＤＳ−ゲル電気泳動法で、８８，０００±５，０００ダルトン。
（３）等電点（ｐＩ）
アンフォライン含有電気泳動法で、５．４±０．５。
（４）至適温度
ｐＨ７．０、３０分間反応で７０℃付近に至適温度を有する。
（５）至適ｐＨ
６０℃、３０分間反応でｐＨ７．０乃至７．５付近に適ｐＨを有する。
（６）温度安定性
ｐＨ７．０、１時間保持の条件で６０℃付近まで安定。
（７）ｐＨ安定性
４℃、２４時間保持の条件でｐＨ約６．０乃至９．０で安定。
（８）活性促進、安定化
本酵素活性は、１ｍＭのジチオスレイトールで促進される。
（９）阻害
本酵素活性は、１ｍＭＣｕ＋＋、Ｐｂ＋＋、Ｚｎ＋＋、Ｈｇ＋＋、Ｍｇ＋＋、又はＭｎ＋＋で阻害される。
【００１０】
トレハロースホスホリラーゼを用いてα−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドを製造する酵素反応に於いては、通常、β−Ｄ−グルコース−１リン酸を糖供与体とし、またＤ−ガラクトースを糖受容体として、これにトレハロースホスホリラーゼを作用させることにより、Ｄ−ガラクトースにグルコシル基を転移して、α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドを生成する。糖供与体としてのβ−Ｄ−グルコース−１リン酸は、市販品をそのまま用いてもよく、また、無機質のリン酸及び／又はその塩の存在下で、トレハロースホスホリラーゼ、マルトースホスホリラーゼ、スクロースホスホリラーゼ、セロビオースホスホリラーゼなどのホスホリラーゼを、それらの基質としての糖質に作用させ、生成させることもできる。α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドの生成率は、酵素反応に用いる基質の種類、濃度、反応条件などによって異なるが、一例として、無機リン酸存在下で、１０％（ｗ／ｗ）のトレハロースと５％（ｗ／ｗ）のＤ−ガラクトースを基質として用いた場合のα−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドの生成率は、原料固形物当り３０％（ｗ／ｗ）程度である。
【００１１】
また、得られる反応液中のα−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド含量を高めるための微生物、酵素等を用いるＤ−グルコース分解除去法や、生成したα−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドの純度を高めるための酵母発酵法、また、アルカリ処理法、膜濾過法、カラムクロマトグラフィー法などよって、α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドの純度を高めることができる。更に、必要に応じて、常法により、濾過、脱色、脱塩などの精製工程を経た後、濃縮し、乾燥して、シラップ状又は粉末状α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド含有糖質とすることもできる。斯くして得られたα−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド含有糖質は、通常、α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドを固形物当たり５〜９９．９％（ｗ／ｗ）含有している。
【００１２】
本発明の結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドは、前記したα−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドを後述する適宜溶媒に溶解して、α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド含有溶液、具体的には、その過飽和溶液とし、この過飽和溶液から結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドを晶出させる。この際用いるα−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド含有溶液の固形分当りのα−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドの純度、固形分濃度、溶媒の種類、温度等は、α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド過飽和溶液が得られる限り特に制限はない。本発明の結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドの製造方法に於いて用いるα−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドを含有する溶液の形態は、α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドの結晶が生成する形態、即ち、溶けている状態であればよく、部分的に不溶物が混在した懸濁状であってもよい。更に、α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドを含有する粉末を吸湿させて粉末表面が潮解した溶液状であってもよい。α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドを溶解する溶媒としては、通常、水が好適に用いられるが、必要に応じて、メタノール、エタノール、アセトン、ピリジンなどの水と相溶性を有する溶媒、又は、これら１種又は２種以上の有機溶媒と水とを組み合わせて用いることも随意である。本発明の結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドの製造方法は、例えば、固形物当り、純度６０％（ｗ／ｗ）以上、濃度６５乃至９０％（ｗ／ｗ）のα−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド含有溶液を助晶缶にとり、必要に応じて、０．１乃至２０％（ｗ／ｗ）の結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド種晶共存下で、温度９５℃以下、望ましくは、１０乃至９０℃の範囲で、攪拌しつつ徐冷し、結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドを含有するマスキットとする。また、減圧濃縮しながら結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドを晶出させる連続晶析法を採用することも有利に実施できる。マスキットから結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド又はこれを含有する含蜜結晶を製造する方法としては、例えば、分蜜法、ブロック粉砕法、流動造粒法、噴霧乾燥法など公知の方法を採用すればよい。
【００１３】
分蜜法の場合には、通常、マスキットをバスケット型遠心分離機にかけ、結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドと蜜（母液）とを分離し、必要により、当該結晶に少量の冷水をスプレーして洗浄して不純物を除去して、より高純度の結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドを製造することができる。噴霧乾燥法の場合には、通常、濃度７０乃至８５％（ｗ／ｗ）、晶出率５乃至６０％程度のマスキットを、例えば、高圧ポンプでノズルから噴霧、又は回転円盤で噴霧し、結晶粉末が溶解しない温度、例えば、６０乃至１００℃の熱風で乾燥し、次いで、２０乃至６０℃の温風で約１乃至約４８時間熟成することにより、低吸湿性の含蜜結晶を容易に製造できる。また、ブロック粉砕法の場合には、通常、水分５乃至２０％（ｗ／ｗ）、晶出率１０乃至６０％（ｗ／ｗ）程度のマスキットを、約０．１乃至約７日間静置して全体をブロック状に晶出固化させ、これを粉砕又は切削などの方法によって粉末化し乾燥することにより、低吸湿性の含蜜結晶を容易に製造できる。
【００１４】
また、本発明の結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドの他の製造方法は、非晶質α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドから結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドを製造する方法である。この方法は、水分の存在下で、温度約２０乃至約６０℃にコントロールした環境下に、非晶質α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドを含有する粉末を約０．１乃至約７日間、静置又は攪拌しながら非結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドを結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドに変換させ、これをそのまま、又は、粉砕又は切削などして再粉末化して乾燥することにより、低吸湿性の結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド粉末又はこれを含有する糖質を容易に製造できる。なお、この方法における、水分の存在下とは、非晶質α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドをα−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド含水結晶に変換するために必要な水分が供給される環境であれば、特に制限はなく、通常は、相対湿度を約５０乃至約７０％にコントロールした環境をいう。
【００１５】
斯して得られる本発明の結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド及びこれを含有する糖質は、通常、結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドを固形物当たり５０％（ｗ／ｗ）以上、望ましくは、６０〜９９．９９％（ｗ／ｗ）含有している。
【００１６】
本発明の結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド及びこれを含有する糖質は、固体状、粉末状態で吸湿性が著しく低く、取り扱いが容易で、安定で、しかも、味質良好な甘味を有し、浸透圧調節性、保湿性、照付与性、他糖の結晶防止性、澱粉老化防止性などの諸性質を有し、また、抗う蝕性、ビフィズス菌増殖促進性、ミネラル吸収促進性などの機能を有し、広く飲食物、嗜好物、飼料、餌料、化粧品、医薬部外品、医薬品などに、更には、生活用品、農林水産用品、試薬、化学工業用品などの各種組成物に有利に利用できる。
【００１７】
本発明の結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド及びこれを含有する糖質は、そのまま甘味付けのための調味料として使用することができる。必要ならば、例えば、粉飴、ブドウ糖、マルトース、トレハロース、蔗糖、異性化糖、蜂蜜、メイプルシュガー、ソルビトール、マルチトール、ラクチトール、ジヒドロカルコン、ステビオシド、α−グリコシルステビオシド、レバウディオシド、グリチルリチン、Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル、スクラロース、アセスルファムＫ、サッカリン、グリシン、アラニンなどのような他の甘味料の一種又は二種以上と適宜の割合で混合して用いることができる。また、必要ならば、デキストリン、澱粉、乳糖などの一種又は二種以上の増量剤と適宜の割合で混合して用いることもできる。
【００１８】
また、本発明の結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド及びこれを含有する糖質の呈味は、酸味、塩から味、渋味、旨味、苦味などの他の呈味を有する各種物質とよく調和し、耐酸性、耐熱性も大きいので、飲食物一般の甘味付け、呈味改良に、また品質改良などに有利に利用できる。前記各種飲食物としては、例えば、醤油、粉末醤油、味噌、粉末味噌、もろみ、ひしお、ふりかけ、マヨネーズ、ドレッシング、食酢、三杯酢、粉末すし酢、中華の素、天つゆ、麺つゆ、ソース、ケチャップ、たくあん漬の素、白菜漬の素、焼肉のタレ、カレールウ、シチューの素、スープの素、ダシの素、複合調味料、みりん、新みりん、テーブルシュガー、コーヒーシュガーなどの各種調味料を例示できる。
【００１９】
また、本発明の結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド及びこれを含有する糖質は、例えば、せんべい、あられ、おこし、餅類、まんじゅう、ういろう、あん類、羊羮、水羊羮、錦玉、ゼリー、カステラ、飴玉などの各種和菓子、パン、ビスケット、クラッカー、クッキー、パイ、プリン、バタークリーム、カスタードクリーム、シュークリーム、ワッフル、スポンジケーキ、ドーナツ、チョコレート、チューインガム、キャラメル、キャンデーなどの洋菓子、アイスクリーム、シャーベットなどの氷菓、果実のシロップ漬、氷蜜などのシロップ類、フラワーペースト、ピーナッツペースト、フルーツペースト、スプレッドなどのペースト類、ジャム、マーマレード、シロップ漬、糖果などの果実、野菜の加工食品類、福神漬、べったら漬、千枚漬、らっきょう漬などの漬物類、ハム、ソーセージなどの畜肉製品類、魚肉ハム、魚肉ソーセージ、かまぼこ、ちくわ、天ぷらなどの魚肉製品、ウニ、イカの塩辛、酢こんぶ、さきするめ、ふぐみりん干しなどの各種珍味類、のり、山菜、するめ、小魚、貝などで製造されるつくだ煮類、煮豆、ポテトサラダ、こんぶ巻などの惣菜食品、乳製品、魚肉、畜肉、果実、野菜のビン詰、缶詰類、清酒、合成酒、リキュール、洋酒などの酒類、紅茶、コーヒー、ココア、ジュース、炭酸飲料、乳酸飲料、乳酸菌飲料などの清涼飲料水、プリンミックス、ホットケーキミックス、即席しるこ、即席スープなどの即席食品、更には、離乳食、治療食、ドリンク剤、米飯、麺類、冷凍食品などの各種飲食物への甘味付に、呈味改良に、また、物性改良などに有利に利用できる。
【００２０】
また、本発明の結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド及びこれを含有する糖質は、優れた保湿性を有することから、溶液系、可溶化系、乳化系、粉末分散系、水−油二層系、水−粉体二層系、水−油−粉末三層系などのどのような剤型の化粧品や医薬部外品の原料としても有利に利用できる。また、これらの化粧品や医薬部外品の用途も任意であり、例えば、化粧水、ローション、乳液、クリーム、軟膏、練り剤、懸濁剤、乳剤、ペースト、チック、固型、半固型、粉末、固型粉末、ゼリー、ジェル、エアゾール、トローチ、パック、フェイスマスクなどの形態で、基礎化粧品、洗浄用化粧品、化粧水、クリーム、乳液、パック、ファンデーション、白粉打粉、口紅、眉目頬化粧品、香水、浴用化粧品、浴用剤、口腔化粧品、日焼け・日焼け止め化粧品、メークアップ化粧品、フェーシャル化粧品、化粧油、芳香化粧品、ボディー用化粧品、頭髪用化粧品、洗髪用化粧品、石けん、薬用石けん、洗剤、歯みがき、口中清涼剤、腋臭防止剤、てんか粉、育毛・養毛剤、ひげそり用剤、日やけ止め剤、さらには、炎症、感染症、アレルギー、アトピー、潰瘍、腫瘍などの各種疾患の予防、治療剤などとして用いることができる。具体的には、洗顔クリーム、洗顔フォーム、クレンジングクリーム、クレンジングミルク、クレンジングローション、クレンジングオイル、マッサージクリーム、コールドクリーム、モイスチャークリーム、モイスチャーローション、乳液、化粧水、リキッドファンデーション、パウダーファンデーション、リップスティック、リップクリーム、パック、アフターシェービングクリーム、ローション、アフターシェービングローション、日焼け止めクリーム、日焼け用オイル、ボディシャンプー、ヘアシャンプー、ヘアリンス、ヘアートリートメント、養毛料、育毛料、チック、ヘアクリーム、ヘアリキッド、セットローション、ヘアスプレー、ヘアムース、ヘアダイ、ヘアブリーチ、カラーリンス、カラースプレー、パーマネントウェーブ液、プレスパウダー、ルースパウダー、アイシャドー、ハンドクリーム、脱毛クリーム、オーデコロン、デオドラント浴用剤、バスオイル、口中清涼剤、口中香剤、うがい剤、マウスウオッシュ、練歯磨、外傷治療用軟膏、抗菌クリーム、ステロイド軟膏、台所用洗剤などとして使用できる。
【００２１】
また、本発明の結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド及びこれを含有する糖質は、安定な糖質であることから、通常、化粧品や医薬部外品に使用される、糖質、血行促進作用を有する物質、抗炎症作用を有する物質、抗菌作用を有する物質、保湿作用を有する物質、美白作用を有する物質、抗酸化作用を有する物質、感光素、紫外線吸収作用を有する物質、紫外線散乱作用を有する物質、乳化作用を有する物質から選ばれる何れか１種又は２種以上の物質との、任意の組合せ及び／又は配合割合で使用することが出来る。さらに、必要に応じて、例えば、化粧品原料基準、化粧品原料外成分基準、化粧品種別配合規格、医薬部外品原料規格、日本薬局方、日本薬局方外医薬品規格、医薬品添加物規格、日本薬局方外生薬規格、食品添加物公定書などに収載された成分や『最新化粧品科学  改訂増補ＩＩ』、株式会社薬事日報社発行（平成４年７月１０日発行）や『最新化粧品学』、株式会社南山堂発行（平成１４年１月１８日発行）などに記載されている、上記作用を有する成分、及び／又は、上記作用を有する成分以外の通常医薬品、医薬部外品、化粧品などに用いられる物質やその配合処方に準じて、例えば、医薬品、賦形剤、基剤、エモリエント剤、冷感剤、収斂剤、分散剤、可溶化剤、溶剤、アルカリ剤、粘度調節剤、増粘剤、起泡剤、消泡剤、着香剤、着色剤、安定剤、防腐剤、殺菌剤、退色防止剤、酸化防止剤、毛髪処理剤、湿潤剤、毛髪保護剤、帯電防止剤、助剤、溶剤、溶解剤、溶解補助剤、流動化剤、懸濁剤、緩衝剤、甘味剤、清涼化剤、矯味剤、結合剤、吸着剤、噴射剤、コーティング剤、咀嚼剤、充填剤、軟化剤、調整剤、金属封鎖剤、褪色防止剤、油脂、油溶性高分子、無機及び有機顔料、シリコーン又はフッ素化合物で処理された無機及び有機顔料、有機染料などの色剤、ルミンなどの感光色素、ロウ、制汗剤、消臭剤、抗シワ剤、皮脂抑制剤、抗脂漏剤、角質剥離剤、鎮痛剤、抗プラスミン剤などの成分から選ばれる１種又は２種以上を適宜使用することも随意である。
【００２２】
その他、本発明の結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド及びこれを含有する糖質は、家畜、家禽、魚などの飼育動物のために飼料、餌料などの嗜好性を向上させる目的で使用することもできる。その他、固状、ペースト状、液状などの形態で、タバコ、練歯磨、口紅、リップクリーム、内服液、錠剤、トローチ、肝油ドロップ口中清涼剤、口中香剤、うがい剤などの嗜好物、医薬品などへの甘味剤として、又は呈味改良剤、矯味剤として、更には、品質改良剤として有利に利用できる。
【００２３】
また、α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドは、α−Ｄ−ガラクトシル基を有する糖質であることから、同じくα−Ｄ−ガラクトシル基を有するガラクトビオース、メリビオース又はラフィノースの場合と同様に、例えば、制癌、ナチュラル・キラー（ＮＫ）細胞の活性化、アトピー性皮膚炎の改善、免疫賦活、病原性大腸菌Ｏ−１５７ベロ毒素の中和、肝性脳症治療、ウシ精液の冷凍保存安定化、移植用臓器の輸送時の安定化などの作用効果及びこれら分野への用途が期待され、本発明の結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド及びこれを含有する糖質は、これらの目的で使用することも有利に実施できる。
【００２４】
更に、本発明の結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド及びこれを含有する糖質は、品質改良剤、安定剤として、有効成分の活性などを失い易い各種生理活性物質又はこれを含む健康食品、化粧品、医薬部外品、医薬品などにも有利に適用できる。例えば、インターフェロン−α、インターフェロン−β、インターフェロン−γ、ツモア・ネクロシス・ファクター−α、ツモア・ネクロシス・ファクター−β、マクロファージ遊走阻止因子、コロニー刺激因子、トランスファーファクター、インターロイキン１、インターロイキン２、インターロイキン６、インターロイキン１２、及びインターロイキン１５などのサイトカイン含有液、インシュリン、成長ホルモン、プロラクチン、エリトロポエチン、組織プラスミノーゲンアクチベーター、卵細胞刺激ホルモン、胎盤ホルモンなどのホルモン含有液、ＢＣＧワクチン、日本脳炎ワクチン、はしかワクチン、ポリオ生ワクチン、痘苗、破傷風トキソイド、ハブ抗毒素、ヒト免疫グロブリンなどの生物製剤含有液、ペニシリン、エリスロマイシン、クロラムフェニコール、テトラサイクリン、ストレプトマイシン、硫酸カナマイシンなどの抗生物質含有液、チアミン、リボフラビン、Ｌ−アスコルビン酸、肝油、カロチノイド、エルゴステロール、トコフェロール、などのビタミン含有液、リパーゼ、エラスターゼ、ウロキナーゼ、プロテアーゼ、β−アミラーゼ、イソアミラーゼ、グルカナーゼ、ラクターゼなどの酵素含有液、薬用人参エキス、スッポンエキス、クロレラエキス、アロエエキス、プロポリスエキスなどのエキス類、ウイルス、乳酸菌、酵母などの生菌、ロイヤルゼリーなどの各種生理活性物質に本発明の結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド及びこれを含有する糖質を適量配合することにより、それらの有効成分の活性を失うことなく、安定で高品質の健康食品、化粧品、医薬部外品や医薬品などを容易に製造できる。
【００２５】
本発明でいう組成物は、経口的又は非経口的に用いられる飲食物、化粧品、医薬部外品、医薬品の他、生活用品、農林水産用品、試薬、化学工業用品などの各種組成物を包含する。
【００２６】
また、これら組成物に、本発明の結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド又はこれを含有する糖質を含有せしめる方法は、その製品が完成するまでの工程で含有せしめればよく、例えば、混和、溶解、浸漬、浸透、散布、塗布、噴霧、注入、固化などの公知の方法が適宜選ばれる。これら各種組成物に配合する結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドの量は、通常、組成物全重量当たり０．０１％（ｗ／ｗ）以上、望ましくは、０．１％（ｗ／ｗ）以上、より望ましくは、１〜９９．９９％（ｗ／ｗ）とする。
【００２７】
次に実験により本発明を更に具体的に説明する。
【００２８】
【実験１】
＜トレハロースホスホリラーゼの生産＞
炭素源として０．５％（ｗ／ｖ）グルコースに代えて０．５％（ｗ／ｖ）トレハロースを用いたこと以外は全て『ＡＴＣＣカタログ・オブ・バクテリア・アンド・バクテリオファージズ、第１８版』（アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション発行、１９９２年）、４５２乃至４５６頁に記載のサーモアナエロビウム・ブロッキイ培地の調製法に従って調製した培地を１００ｍｌ容耐圧ボトルに１００ｍｌずつ入れた後、サーモアナエロビウム・ブロッキイ（ＡＴＣＣ  ３５０４７）を接種し、６０℃、４８時間静置培養したものを種培養液とした。
【００２９】
容量１１Ｌのステンレスボトル４本に、種培養で用いたのと同じ組成の培地を約１０Ｌずつ入れて、加熱滅菌し、冷却して６０℃とした後、前記種培養液をこの培地体積当たり１％（ｖ／ｖ）接種し、６０℃で、約４０時間静置培養した。
【００３０】
全培養液約４０Ｌを遠心分離して、培養菌体９２ｇを得た。菌体を１０ｍＭリン酸緩衝液に懸濁し、超音波破砕した後、遠心分離して菌体破砕上清を得た。培養液ｍｌ当たりのトレハロースホスホリラーゼ活性は、０．３単位／ｍｌであった。この菌体破砕上清をＵＦ膜濃縮し、トレハロースホスホリラーゼをｍｌ当たり約３０単位含む濃縮酵素液約３６０ｍｌを得た。
【００３１】
なお、トレハロースホスホリラーゼ活性は次のようにして測定した。即ち、基質として１．０％（ｗ／ｖ）トレハロースを含む２０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）２ｍｌに酵素液０．２ｍｌを加え、６０℃で３０分間反応させた後、反応液０．５ｍｌを１００℃、１０分加熱して反応を停止させた。この反応停止液にＤ−グルコースオキシダーゼ／パーオキシダーゼ試薬０．５ｍｌを添加し、撹拌し、４０℃で３０分放置した後、５Ｎ−塩酸２．５ｍｌを添加し、攪拌した後、５２５ｎｍにおける吸光度を測定した。トレハロースホスホリラーゼ活性１単位は、上記反応条件下で、１分間当たり１μｍｏｌのＤ−グルコースを生成する酵素量と定義した。
【００３２】
【実験２】
＜トレハロースホスホリラーゼの精製＞
実験１で得られた濃縮酵素液３００ｍｌを１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）に対して２４時間透析し、遠心分離して不溶物を除いた。その透析液上清（３８０ｍｌ）を、『ＤＥＡＥ−トヨパール  ６５０ゲル』（東ソー株式会社製）を用いたイオン交換カラムクロマトグラフィー（ゲル量３８０ｍｌ）にかけた。
【００３３】
トレハロースホスホリラーゼをＤＥＡＥ−トヨパール  ６５０ゲルに吸着させ、食塩濃度が０Ｍから０．５Ｍまで上昇するリニアグラジエント（食塩水）により、カラムから溶出させた。食塩濃度約０．１Ｍで溶出される酵素活性画分を回収した後、この画分を以下の方法で更に精製した。１．５Ｍ硫安を含む１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）に対して透析し、その透析液を遠心分離して不溶物を除き、次に、『ブチルトヨパール  ６５０ゲル』（東ソー株式会社製）を用いる疎水カラムクロマトグラフィー（ゲル量１００ｍｌ）を行った。吸着したトレハロースホスホリラーゼを硫安濃度１．５Ｍから０．５Ｍまで低下するリニアグラジエントにより、カラムから溶出させ、酵素活性画分を回収した。次いで、『ウルトロゲル  ＡｃＡ４４』（フランス、セプラコル社製）を用いてゲル濾過クロマトグラフィー（ゲル量３００ｍｌ）を行い、カラムから溶出した酵素活性画分を回収した。
【００３４】
以上の精製手段により得られた精製酵素標品の回収率は、トレハロースホスホリラーゼ活性換算で、菌体破砕上清に対して約２５％であり、精製酵素標品の比活性は、蛋白質ｍｇ当たり７８．２単位であった。
【００３５】
精製酵素標品を濃度７．５％（ｗ／ｖ）のポリアクリルアミドを含むゲル電気泳動により当該酵素標品の純度を検定したところ、単一の蛋白バンドを有する高純度標品であった。
【００３６】
【実験３】
＜α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドの調製＞
トレハロースを４．５％（ｗ／ｗ）、Ｄ−ガラクトースを２．５％（ｗ／ｗ）及び５ｍＭのリン酸二水素ナトリウムを含む水溶液をｐＨ５．０に調整し、これに実験２の方法で調製した精製トレハロースホスホリラーゼをトレハロース１ｇ当たり１７単位となるように加えて、６０℃で９６時間反応させた。この反応液を９０℃で３０分間加熱し、酵素を失活させた後、冷却した。この反応液中のα−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド純度を調べるために、反応液の一部を乾固し、ピリジンに溶解した後、トリメチルシリル化し、ガスクロマトグラフィー（以下、『ＧＣ』と略称する。）に供した。ＧＣカラムは、２％シリコンＯＶ−１７／クロモゾルブＷ（ジー・エル・サイエンス株式会社製）を充填したステンレスカラム（３ｍｍφ×２ｍ）、キャリアーガスは、窒素ガスを流量４０ｍｌ／分、カラムオーブン温度は、１６０℃から３２０℃まで７．５℃／分の昇温速度とし、検出は、水素炎イオン化検出器を用いて分析したところ、当該反応液は、固形分当りα−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドを約３０％（ｗ／ｗ）含有していた。この反応液に市販パン酵母を固形物重量当たり湿重量で３０％になるように加えて、濃度１Ｍの水酸化ナトリウム水溶液を用いて反応液をｐＨ５乃至６に制御しながら、２７℃で６時間保持し、反応液中のＤ−グルコースを資化させた。その後、パン酵母を遠心分離により除き、得られる上清を、濃度１Ｍの水酸化ナトリウム水溶液を用いてｐＨ７．５に調整した後、『応用糖質科学会誌』、第４２巻、２３１乃至２３６頁（１９９５年）に記載の方法により調製したバチルス・エスピー（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｐ．）Ｔ３由来のトレハラーゼを、固形物１グラム当り１０単位加え、４５℃で２４時間反応させて、溶液中のトレハロースをＤ−グルコースに加水分解した。次いで、得られた反応液を約１００℃に加熱し、粒状の水酸化ナトリウムを少量、小分けして添加し、ｐＨを１０乃至１１に保ちながら、約１００℃で１時間保持し、Ｄ−グルコースなどの還元糖を分解した。得られる溶液を塩酸で中和した後、常法に従って活性炭で脱色し、濾過し、Ｈ型及びＯＨ型イオン交換樹脂により脱塩して精製し、更に濃縮して固形物濃度約８０％（ｗ／ｗ）のシラップを原料固形物当たり収率約２５％で得た。ＧＣ法で分析したところ、本シラップ中には、固形分当りα−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドを８８．１％（ｗ／ｗ）、グリセロールを７．５％（ｗ／ｗ）、トレハロースを１．０％（ｗ／ｗ）及びその他の糖質を３．４％（ｗ／ｗ）含有していた。本シラップをガラス板上に広げ、それを恒温器内に入れ、常圧下、４０℃で２日間放置したところ、図２の写真に示すような柱状の結晶状物質が生成した。この結晶状物質を含む試料の全量をガラス製乳鉢にとり、更に、１００ｍｌの８５％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液を加え、結晶状物質を砕きながら洗浄した。これをガラス製フィルター上に移し、吸引濾過し、フィルター上に残った結晶状物質を、更に、１００ｍｌの８５％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液で洗浄し、吸引濾過した。フィルター上の結晶状物質を回収し、４０℃で１６時間真空乾燥して、粉末状の結晶状物質を原料固形分当り収率約１７％で得た。得られた結晶状粉末をＧＣ法で分析したところ、固形分当りα−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドを９８．４％（ｗ／ｗ）含有していた。
【００３７】
【実験４】
＜粉末Ｘ線回折による分析＞
実験３で得たα−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドの結晶状粉末を試料として、粉末Ｘ線回折装置（商品名『ガイガーフレックス  ＲＡＤ−ＩＩ  Ｘ』、理学電機株式会社製造）を用いて、ＣｕＫα線をＸ線とする粉末Ｘ線回折法で分析し、少なくとも、回折角（２θ）１３．４°、１７．４°、１９．７°及び２２．３°にピークを有するＸ線回折スペクトル（図３）を得た。本Ｘ線回折装置に付属するコンピュータプログラム『Ｒｕｌａｎｄ法による結晶化度解析プログラム』を用いて、当該粉末の結晶化度を計算したところ、約７２．５％であった。これらの結果から、本粉末は、ＣｕＫα線をＸ線とする粉末Ｘ線回折法で分析したとき、少なくとも、回折角（２θ）１３．４°、１７．４°、１９．７°及び２２．３°にピークを有する結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドであることが判明した。
【００３８】
【実験５】
＜水分測定＞
実験３で得た結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド粉末を試料として、カールフィッシャー法で水分を測定したところ、その水分は５．４％（ｗ／ｗ）であった。結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド１含水結晶としての理論水分値が５％（ｗ／ｗ）であることから、実験３で得た結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドは、１含水結晶であると結論された。
【００３９】
【実験６】
＜融点測定＞
実験３で得た結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド粉末を試料として、融点測定装置（商品名『ＭＰ−２１』、ヤマト科学株式会社製造）を用いて融点を測定したところ、その融点は、１１９℃乃至１２３℃であることが判明した。この値は非特許文献２に開示されたα−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドの結晶の融点である１６５℃乃至１７０℃とは明らかに異なることから、実験３で得た結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドと非特許文献２に開示された結晶とは全く異なるものであるといえる。
【００４０】
【実験７】
＜赤外線吸収スペクトル測定＞
実験３で得た結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド粉末を試料として、赤外分光光度計（商品名『ＦＴＩＲ−８２００』、株式会社島津製作所製造）を用いて、ＫＢｒ錠剤法で測定したところ、図１に示す赤外線吸収スペクトルが得られた。
【００４１】
【実験８】
＜示差走査熱量計（ＤＳＣ）による分析＞
実験３で得たα−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドの結晶状粉末４．４ｍｇをアルミニウム容器に入れて密封し、示差走査熱量計（商品名『ＤＳＣ  ２２００』、セイコーインスツルメンツ株式会社製造）を用いてＤＳＣ分析を行った。ＤＳＣ分析は、３０℃から２００℃までの温度範囲で毎分１０℃ずつ昇温させる温度プログラムにて行った。得られた分析結果を図４に示した。本粉末は、上記条件下でＤＳＣ分析したとき、約１１８℃乃至約１３８℃の範囲に吸熱ピークを有することが判明した。
【００４２】
【実験９】
＜水に対する飽和濃度＞
蒸留水１０ｍｌに、実験３で得た結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド粉末を過剰量入れ、２５℃又は４０℃で４８時間攪拌した後、水溶液中の未溶解物を０．４５μｍフィルターで濾別し、濾液（飽和溶液）をそれぞれ回収した。得られた二種類の飽和溶液の水分量を『食品衛生検査指針』（厚生省監修、（社）日本食品衛生協会出版、１９９１年）に記載の乾燥助剤法を用いて測定することにより、α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドの飽和濃度を求めた。その結果、α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドの水に対する飽和濃度は、無水物換算で、２５℃で６８．９％（ｗ／ｗ）、４０℃で７１．８％（ｗ／ｗ）であることが判明した。
【００４３】
【実験１０】
＜結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドの吸湿試験＞
予め精秤しておいた複数のアルミ製秤量缶に、実験３で得た結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド粉末を約０．５ｇずつ入れてそれぞれ精秤し、その全重量から秤量缶の重量を差し引いた重量を、結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド粉末の試験開始重量とした。結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド粉末の入った秤量缶を、予め相対湿度３３％乃至９０％に調湿しておいたガラス製デシケーター内にそれぞれ入れ、所定の湿度に保ちながら、２５℃で１乃至７日間保存した。吸湿試験終了後、各秤量缶を精秤して、試験開始重量に対する重量増加分を計算し、吸湿量（％）を求めた。また、吸湿試験中、結晶粉末の性状を肉眼観察した。それらの結果を表１にまとめた。
【００４４】
【表１】
2004269488.tif 000002
【００４５】
表１の結果から明らかなように、結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド粉末は、相対湿度９０％及び８４％の保存条件下では吸湿して、潮解又は固結したけれども、相対湿度７５％以下の保存条件下では吸湿せず、結晶粉末の性状に変化が見られなかった。この結果と、後述する実験１１の表２に示す非晶質α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド粉末の吸湿試験結果とを対比すると、結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド粉末は、非晶質α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド粉末と比べ、吸湿し難い安定な結晶粉末であることが解る。
【００４６】
【実験１１】
＜非晶質α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドの吸湿試験＞
実験３で得た結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド粉末を水に溶解して濃度３０％（ｗ／ｗ）水溶液とした後、凍結乾燥して、非晶質α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド粉末を調製した。得られた非晶質粉末を実験１０の方法と同様にして、複数のアルミ秤量缶に入れ、予め相対湿度４３％乃至９０％に調湿しておいたガラス製デシケーターにそれぞれ入れ、所定の湿度に保ちながら、２５℃で１乃至７日間保存した。吸湿試験終了後、実験１０と同様にして、吸湿量（％）を求めた。また、吸湿試験中、各々の粉末の性状を肉眼観察した。さらに、保存７日目の試料については、実験４に記載の粉末Ｘ線回折法により、各々の粉末の性状を確認し、結晶が認められたものはその結晶化度を測定した。それらの結果を表２にまとめた。
【００４７】
【表２】
2004269488.tif 000003
【００４８】
表２の結果から明らかなように、非晶質α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド粉末は、結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド粉末とは違って、相対湿度４３〜９０％の保存条件下で著しく吸湿し、固結、湿潤、固化又は潮解して、粉末の性状が経時的に大きく変化することが判明した。詳細には、相対湿度６０％及び５３％の保存条件下では、保存１日目において粉末表面が湿潤し、保存７日目では粉末全体が固化していた。固化した試料を分析したところ、非晶質α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドが、α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド１含水結晶に変化していることが判明した。この結晶の融点を測定したところ、１１９℃乃至１２３℃であった。また、相対湿度４３％では、非晶質α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド粉末は、吸湿し粉末全体が固結していたが、非晶質の状態は保たれていた。なお、本実験において認められたα−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドの結晶は、水分を吸収して結晶に変換したこと、及び、そのＸ線解析のパターンが、実験４で測定したα−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド１含水結晶のそれと一致したことから、１含水結晶であると結論された。
【００４９】
以上の結果から、結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド粉末は、相対湿度７５％以下の条件下に於いて、実質的に吸湿せず、性状が安定しており、取り扱いが容易であることが判明した。即ち、結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド粉末は、従来の非晶質α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド粉末と比べ、優れた耐吸湿性を有していることが判明した。
【００５０】
以下、実施例Ａにより本発明の結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドの製造方法を説明する。
【００５１】
【実施例Ａ−１】
＜結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド粉末＞
トレハロースを５％（ｗ／ｗ）、Ｄ−ガラクトースを２．５％（ｗ／ｗ）及び５ｍＭのリン酸二水素ナトリウムを含む水溶液をｐＨ５．０に調整し、これに実験１の方法で調製したトレハロースホスホリラーゼをトレハロース１ｇ当たり１５単位になるように加え、６０℃で７２時間反応させた。得られた反応液を９５℃で３０分間加熱し、酵素を失活させた後、温度４５℃に冷却し、ｐＨを７．５に調整し、これにバチルス・エスピー（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｐ．）Ｔ３由来のトレハラーゼ（株式会社林原生物化学研究所製造）を固形物１グラム当り１０単位加え、４５℃で２４時間反応させた。得られた反応液を９０℃で３０分間加熱し、酵素を失活させた後、市販パン酵母を固形物重量当たり湿重量で５％となるように加えて、１Ｎ−水酸化ナトリウム溶液を用いて反応液をｐＨ５乃至６に制御しながら、２７℃で６時間保ち、反応液中のＤ−グルコースを資化させた。パン酵母を遠心分離により取り除いた上清を、常法に従って、活性炭で脱色し、濾過し、Ｈ型及びＯＨ型イオン交換樹脂により脱塩して精製し、更に濃縮して、固形物濃度約４５％（ｗ／ｗ）の糖液を得た。本糖液中のα−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド含有率を高めるため、アルカリ金属型強酸性カチオン交換樹脂（ローム・アンド・ハース・ジャパン株式会社製、商品名『ＸＴ−１０１６』、Ｎａ型、架橋度４％）を使用し、内径３ｃｍ、長さ１ｍのジャケット付きステンレス製カラム４本に水に懸濁して充填し、直列につなぎ、樹脂層全長が約４ｍになるようにした。カラム内温度を４０℃に維持しつつ、糖液を樹脂に対して５％（ｖ／ｖ）加え、これに４０℃の温水をＳＶ０．１５の流速で流して分画し、α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド高含有画分を採取し、これを、濃度約８５％（ｗ／ｗ）に濃縮して助晶機にとり、種晶としての本発明のα−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド１含水結晶粉末を約１％（ｗ／ｗ）加え、攪拌しつつ徐冷し、α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドを晶出させた。次いで、バスケット型遠心分離機で分蜜し、結晶を少量の水でスプレーして洗浄し、乾燥して、結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド粉末を原料固形物当たり収率約１０％で得た。
【００５２】
本品は、固形物当たり結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドを約９９％（ｗ／ｗ）含有する結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド粉末であり、融点を測定したところ、１１９℃乃至１２３℃であった。本品は吸湿性が低く、取り扱いが容易で、実質的に還元性を示さず、安定で、味質良好な甘味、適度の粘度、保湿性を有し、甘味剤、呈味改良剤、安定剤、ビフィズス菌増殖促進剤、ミネラル吸収促進剤などとして、広く飲食物、化粧品、医薬部外品、医薬品、生活用品、農林水産用品、試薬、化学工業用品など各種組成物に有利に利用できる。
【００５３】
【実施例Ａ−２】
＜結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド粉末＞
トレハロース及びＤ−ガラクトースをそれぞれ５％（ｗ／ｗ）及び５ｍＭのリン酸二水素ナトリウムを含む水溶液をｐＨ５．０に調整し、これに実験１の方法で調製したトレハロースホスホリラーゼをトレハロース１ｇ当たり１５単位となるように加え、６０℃で７２時間反応させた。得られた反応液を９５℃で３０分間加熱し、酵素を失活させた後、４５℃に冷却し、ｐＨを７．５に調整し、これにバチルス・エスピー（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｐ．）Ｔ３由来のトレハラーゼ（株式会社林原生物化学研究所製造）を固形物１グラム当り１０単位加え、４５℃で２４時間反応させた。その反応液に水酸化ナトリウムを加えてｐＨ１０以上のアルカリ性に保ちながら１００℃で加熱した後、冷却し、常法に従って活性炭で脱色、濾過し、Ｈ型及びＯＨ型イオン交換樹脂により脱塩して精製し、更に濃縮して、固形物濃度約４５％（ｗ／ｗ）の糖液を得た。本糖液のα−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド含有率を高めるため、実施例Ａ−１に記載のアルカリ金属型強酸性カチオン交換樹脂によるカラム分画を行い、α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド高含有画分を採取し、これを精製し、更に、濃度約８５％（ｗ／ｗ）に濃縮して助晶機にとり、種晶としてのα−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド１含水結晶粉末約２％（ｗ／ｗ）を加えて徐冷し、晶出率約１０％のマスキットを得た。本マスキットを乾燥塔上のノズルより１５０ｋｇ／ｃｍ２の高圧にて噴霧した。これと同時に、８０℃の熱風を乾燥塔の上部より送風して底部に設けた移送網コンベア上に捕集し、コンベアの下より４０℃の温風を送りつつ、金網コンベア上に捕集した結晶粉末を乾燥塔外に徐々に移動させ取り出した。この取り出した結晶粉末を、熟成塔に充填して温風を送りつつ１０時間熟成させ、結晶化と乾燥を完了し、結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド粉末を原料固形物当たり収率約１２％で得た。
【００５４】
本品は、結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドを固形物当たり約９８％含有する粉末であり、融点を測定したところ、１１９℃乃至１２３℃で、ＤＳＣ分析において約１１８℃乃至約１３８℃の範囲に吸熱ピークを示した。また、本品は、吸湿性が低く、取り扱いが容易で、還元性がなく、安定で、味質良好な甘味、適度の粘度、保湿性を有し、甘味剤、呈味改良剤、安定剤、ビフィズス菌増殖促進剤、ミネラル吸収促進剤などとして、広く飲食物、化粧品、医薬部外品、医薬品、生活用品、農林水産用品、試薬、化学工業用品など各種組成物に有利に利用できる。
【００５５】
【実施例Ａ−３】
＜結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド含有糖質粉末＞
トレハロース４％（ｗ／ｗ）、Ｄ−ガラクトース６％（ｗ／ｗ）及び５ｍＭのリン酸二水素ナトリウムを含む水溶液をｐＨ５．０に調整し、これに実験１の方法で調製したトレハロースホスホリラーゼをトレハロース１ｇ当たり２０単位となるように加え、６０℃で７２時間反応させた。得られた反応液を９５℃で３０分間加熱し、酵素を失活させた後、温度４５℃に冷却し、ｐＨを７．５に調整し、それにバチルス・エスピー（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｐ．）Ｔ３由来のトレハラーゼ（株式会社林原生物化学研究所製造）を固形物１グラム当り２０単位加え、４５℃で２４時間反応させた後、温度２７℃に冷却した。続いて市販パン酵母を固形物重量当たり湿重量で１０％となるように加えて、１Ｎ−水酸化ナトリウム溶液を用いて当該反応液をｐＨ５乃至６に制御しながら、２７℃で１２時間保ち、反応液中のＤ−グルコースを資化させた。パン酵母を遠心分離により取り除いた後、得られる上清を常法に従って活性炭で脱色し、濾過し、Ｈ型及びＯＨ型イオン交換樹脂により脱塩して精製し、更に濃縮して、固形物濃度約４５％（ｗ／ｗ）の糖液を得た。本糖液のα−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド含有率を高めるため、実施例Ａ−１に記載のアルカリ金属型強酸性カチオン交換樹脂によるカラム分画を行い、α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド含有画分を採取し、これを、濃度約８５％（ｗ／ｗ）に濃縮して助晶機にとり、種晶としてのα−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド１含水結晶粉末約１％混合した後、バットにとり、２５℃で５日間静置してα−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドを晶出固化させ、次いで切削機にて粉砕し、乾燥して、結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド含有糖質粉末を原料固形物当たり収率約１３％で得た。
【００５６】
本品は、結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドを固形物当たり約８８％含有する粉末状糖質で、ＤＳＣ分析において、約１１８℃乃至約１３８℃の範囲に吸熱ピークを示した。この特徴は、融点１１９℃乃至１２３℃を有する本発明の結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドの特徴と一致していた。また、本品は、吸湿性が低く、取り扱いが容易で、還元性がほとんどなく、安定で、味質良好な甘味、適度の粘度、保湿性を有し、甘味剤、呈味改良剤、安定剤、ビフィズス菌増殖促進剤、ミネラル吸収促進剤などとして、広く飲食物、化粧品、医薬部外品、医薬品、生活用品、農林水産用品、試薬、化学工業用品など各種組成物に有利に利用できる。
【００５７】
【実施例Ａ−４】
＜結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド含有糖質粉末＞
トレハロースを１０％（ｗ／ｗ）、Ｄ−ガラクトースを５％（ｗ／ｗ）及び５ｍＭのリン酸二水素ナトリウムを含む水溶液をｐＨ５．０に調整し、これに実験１の方法で調製したトレハロースホスホリラーゼをトレハロース１ｇ当たり３０単位となるように加え、６０℃で９０時間反応させた。得られた反応液を９５℃で３０分間加熱し、酵素を失活させた後、温度４５℃に冷却し、ｐＨを７．５に調整し、それにバチルス・エスピー（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｐ．）Ｔ３由来のトレハラーゼ（株式会社林原生物化学研究所製造）を固形物１グラム当り２０単位加え、４５℃で２４時間反応させた。得られた反応液を９０℃で３０分間加熱し、酵素を失活させた後、冷却し、常法に従って活性炭で脱色し、濾過し、Ｈ型及びＯＨ型イオン交換樹脂により脱塩して精製し、更に濃縮して固形物濃度約４５％（ｗ／ｗ）の糖液を得た。本糖液のα−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド含有率を高めるため、実施例Ａ−１に記載のアルカリ金属型強酸性カチオン交換樹脂によるカラム分画を行い、α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド含有画分を採取し、常法に従って活性炭で脱色し、濾過し、Ｈ型及びＯＨ型イオン交換樹脂により脱塩して精製し、真空乾燥し、粉砕し、得られた非晶質α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド含有粉末をアルミ製バットに広げて、２５℃で相対湿度６０％の恒温調湿室に５日間静置して、粉末中のα−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドを結晶化させ、結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド含有糖質粉末を原料固形物当たり収率約２０％で得た。
【００５８】
本品は、結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドを固形物当たり約７０％含有する粉末状糖質であり、ＤＳＣ分析において、約１１８℃乃至約１３８℃の範囲に吸熱ピークを示した。この特徴は、融点１１９℃乃至１２３℃を有する本発明の結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドの特徴と一致していた。また、本品は、吸湿性が低く、取り扱いが容易で、味質良好な甘味、適度の粘度、保湿性を有し、甘味剤、呈味改良剤、安定剤、ビフィズス菌増殖促進剤、ミネラル吸収促進剤などとして、広く飲食物、化粧品、医薬部外品、医薬品、生活用品、農林水産用品、試薬、化学工業用品など各種組成物に有利に利用できる。
【００５９】
次に、実施例Ｂにより、本発明の結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド又はこれを含有する糖質を含有せしめた組成物について説明する。
【００６０】
【実施例Ｂ−１】
＜甘味剤＞
実施例Ａ−２の方法で得た結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド粉末１重量部に対し、α−グリコシルステビオシド（東洋精糖株式会社製造、商品名『α−Ｇスィート』）０．０５重量部を加えて均一に混合して粉末甘味剤を製造した。本品は、上品な甘味で、砂糖の約２倍の甘味を有し、カロリーは甘味度当たり砂糖の約２分の１である。したがって、本品は、低カロリー甘味料として、カロリーの摂取を制限している人、例えば、肥満者、糖尿病者用の低カロリー飲食物への味付けに好適に用いることができる。また、本品は、虫歯誘発菌による酸の生成も少なく、不溶性グルカンの生成も少ないことから、虫歯を抑制する飲食物などの味付けにも好適に用いることができる。
【００６１】
【実施例Ｂ−２】
＜ハードキャンディー＞
実施例Ａ−４の方法で得た結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド含有糖質２０重量部に対し、還元麦芽糖水飴（水分２５％（ｗ／ｗ））８０重量部及び適当量の水を加えて混合し溶解し、減圧下で水分が２％（ｗ／ｗ）未満になるまで濃縮し、これにクエン酸１重量部及び適量のレモン香料と着色料とを混和し、次いで、常法に従って成形してハードキャンディーを製造した。本品は、上品な甘味を有し、吸湿性少なく、ダレを起こしにくい歯切れの良いハードキャンディーである。
【００６２】
【実施例Ｂ−３】
＜チューインガム＞
実施例Ａ−３の方法で得た結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド含有糖質４重量部に対し、Ｄ−グルコース３重量部及び、柔らかくなる程度に加熱溶融したガムベース２重量部を加えて混合し、更に適量のハッカ香料を混合した後、常法に従ってロールにより練り合わせて成形してチューインガムを製造した。本品は、テクスチャー、風味ともに優れた製品である。
【００６３】
【実施例Ｂ−４】
＜チョコレート＞
実施例Ａ−４の方法で得た結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド含有糖質１５重量部に対し、カカオペースト４０重量部、カカオバター１０重量部、蔗糖１０重量部及び全脂粉乳１５重量部を加えて混合し、レファイナーを通した。そして粒度を下げた後、コンチェに入れ、レシチン０．５重量部を加えて、５０℃で二昼夜練り上げた。次いで、常法に従い成型機に流し込み成型固化してチョコレートを製造した。本品は、ファットブルーム、シュガーブルームの恐れがなく、舌にのせた時の融け具合、風味ともに良好である。
【００６４】
【実施例Ｂ−５】
＜カスタードクリーム＞
実施例Ａ−４の方法で得た結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド含有糖質４００重量部に対し、コーンスターチ５００重量部、マルトース５００重量部及び食塩５重量部を加え、篩いを通して充分に混合し、更に鶏卵１，４００重量部を加えて撹拌し、これに沸騰した牛乳５，０００重量部を徐々に加えた後、とろ火にかけて撹拌を続け、コーンスターチが完全に糊化して全体が半透明になったとき火を止め、次いで、冷却して少量のバニラ香料を加えてカスタードクリームを製造した。本品は、なめらかで光沢を有し、甘味が強すぎず美味である。
【００６５】
【実施例Ｂ−６】
＜ういろう＞
実施例Ａ−４の方法で得た結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド含有糖質７０重量部に対し、米粉９０重量部、コーンスターチ２０重量部、砂糖２０重量部、抹茶粉末１重量部及び水の適量を加えて混練した後、これを容器に入れて６０分間蒸して抹茶ういろうを製造した。本品は、照り、口当たり良好で、風味もよいものであった。また、澱粉の老化も抑制され、長期間安定であった。
【００６６】
【実施例Ｂ−７】
＜べったら漬＞
実施例Ａ−３の方法で得た結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド含有糖質１重量部に対し、マルトース３重量部、甘草製剤０．０５重量部、リンゴ酸０．００８重量部、グルタミン酸ナトリウム０．０７重量部、ソルビン酸カリウム０．０３重量部及びプルラン０．２重量部を均一に混合してべったら漬の素を製造した。大根３０ｋｇを常法に従って食塩により下漬けし、次いで砂糖で中漬けしたものを、ここで得たべったら漬の素４ｋｇで調製した調味液に漬けて、べったら漬を製造した。本品は、色艶、香気ともに良好で、適度の甘味を有し歯切れも良かった。
【００６７】
【実施例Ｂ−８】
＜乳酸菌飲料＞
実施例Ａ−４の方法で得た結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド含有糖質１００重量部に対し、脱脂粉乳１７５重量部及びラクトスクロース高含有粉末（株式会社林原商事販売、登録商標『乳果オリゴ』）５０重量部を、水１，２００重量部に溶解し、６５℃で３０分間殺菌し、４０℃に冷却後、これに、常法に従って、乳酸菌スターターを３０重量部植菌し、３７℃で８時間培養して乳酸菌飲料を得た。本品は、オリゴ糖を含有し、乳酸菌を安定に保持するだけでなく、ビフィズス菌増殖促進作用を有する風味良好な乳酸菌飲料である。
【００６８】
【実施例Ｂ−９】
＜石けん＞
重量比４対１の牛脂及びヤシ油を通常のけん化・塩析法に供して得られるニートソープ９６．５重量部に、実施例Ａ−３の方法で得た結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド含有糖質１．５重量部、Ｌ−アスコルビン酸２−グルコシド０．５重量部、白糖０．５重量部、糖転移ルチン（東洋精糖株式会社販売、商品名「αＧルチン」）０．５重量部、マルチトール１重量部、感光素２０１号０．０００１重量部と、適量の香料を加え、均一に混合した後、枠に流し込み、冷却・固化させて石鹸を製造した。本品は、Ｌ−アスコルビン酸２−グルコシドによる美白効果に優れ、さらに、α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド含有糖質を含有しているので、使用後も肌がかさつくこともなく、使用感に優れた石けんである。
【００６９】
【実施例Ｂ−１０】
＜入浴剤＞
硫酸ナトリウム４４重量部、炭酸水素ナトリウム１４重量部、炭酸ナトリウム７重量部、コハク酸２１重量部、Ａ−４の方法で得た結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド含有糖質５重量部と、適量の滑沢剤、色素及び香料を加え、均一に混合した後、打錠して入浴剤を製造した。本品は、浴槽に入れると発生する炭酸ガスによる血行促進効果に優れ、さらに、α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド含有糖質を含有しているので、入浴後も肌がべた付くこともなく、保湿性もよい、使用感に優れた浴用剤である。
【００７０】
【実施例Ｂ−１１】
＜ヘアトニック＞
エタノール５０重量部、ポリオキシエチレン（８モル）オレエート１．５重量部、ヒノキチオール０．１重量部、グリチルリチン１．０重量部、感光素３０１号０．０１重量部、トレハロース５重量部、実施例Ａ−１の方法で得た結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド粉末８重量部、エチルパラベン０．１重量部、香料０．０５重量部、精製水適量を加えて、常法によりヘアトニックを調製した。本品は、α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドを含有しているので保湿性に優れ、使用後も肌がべた付くこともなく、使用感に優れヘアトニックである。
【００７１】
【実施例Ｂ−１２】
＜日焼け止め用ジェル＞
約５５℃に加温した適量の精製水に、ポリアクリル酸系高分子（住友精化株式会社販売、商品名「アクペックＨＶ５０５」）１．０重量部を分散させ、４０℃以下に冷却後、Ｌ−アスコルビン酸２−グルコシド２．０重量部を適量の水に溶解したものを添加し、水酸化カリウム０．９重量部を加えて、ｐＨ６．３とした。これに、実施例Ａ−２の方法で得た結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド粉末１．０重量部、濃グリセリン６．０重量部、１，３−ブチレングリコール２．０重量部、ジプロピレングリコール３．０重量部、ソルビトール１．３重量部、ポリエチレングリコール（４００）１．５重量部、１，２−ペンタンジオール３．１重量部を加えて溶解し、精製水を加えて総量を１００重量部として、日焼け止め用ゲルを調製した。本品は美白効果に優れたゲル化粧品である。また、本品は、α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドを含有していることから保湿性に優れている。さらに、ジプロピレングリコールとポリエチレングリコールを配合し、ｐＨが５．９〜７．０の間に保持することにより、Ｌ−アスコルビン酸２−グルコシドを配合したジェルで見られる塗布後のヨレや垢の発生もなく、透明で塗り心地もよく、塗布後のもベタ付き感がなく、使用感に優れている。また、本品は、長期間保存しても、ｐＨ変化、粘度低下、着色の認められない安定なジェルである。
【００７２】
【実施例Ｂ−１３】
＜化粧水＞
グリチルリチン酸ジカリウム０．２重量部、クエン酸０．１重量部、クエン酸ナトリウム０．３重量部、実施例Ａ−４の方法で得た結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド含有糖質２．０重量部、エタノール５．０重量部、感光素２０１号０．０００１重量部、エチルパラベン０．１重量部、水を加えて総量を１００重量部とし、混合溶解し、化粧水を調製した。本品は、α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド含有糖質を含有しているので、保湿性に優れている上、皮膚に対する刺激性が低いので、過敏症を懸念することなく、肌荒れ、皮膚刺激やかゆみの予防などに利用できる。また、皮膚に塗布してもべた付き感のない、使用感に優れた、化粧水である。
【００７３】
【実施例Ｂ−１４】
＜リンス＞
流動パラフィン２．５重量部、ミリスチン酸０．５重量部、セタノール１．５重量部、モノステアリン酸グリセリン３重量部、ラウロイルグルタミン酸ポリオキシエチレンオクチルドデシルエーテルジエステル１重量部、ピログルタミン酸イソステアリン酸ポリオキシエチレングリセリル０．５重量部を加熱混合したものに、実施例Ａ−３の方法で得た結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド含有糖質３重量部、１，３−ブチレングリコール３重量部、感光色素３０１号０．０１重量部、ラウロイル−Ｌ−リジン２．５重量部、脂肪酸ｌ−アルギニンエチルピロリドンカルボン酸塩０．５重量部、塩化ステアリルトリメチルアンモニウム０．５重量部、糖転移ルチン０．１重量部、ピロリドンカルボン酸ナトリウム１重量部、センブリエキス１重量部に精製水７４重量部を加えて加熱混合したものを混合し、常法により、乳化してリンスを調製した。本品は、α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド含有糖質を含有しているので、グリセリンを使用していないにもかかわらず、保湿性に優れている上、ベタ付き感のない、使用感に優れたリンスである。
【００７４】
【実施例Ｂ−１５】
＜スキンクリーム＞
実施例Ａ−１の方法で得た結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド粉末４重量部に対し、モノステアリン酸ポリオキシエチレングリコール２重量部、自己乳化型モノステアリン酸グリセリン５重量部、α−グリコシルルチン２重量部、流動パラフィン１重量部、トリオクタン酸グリセリル１０重量部、及び防腐剤の適量を加え、これを常法に従って加熱溶解し、更に１，３−ブチレングリコール５重量部、及び精製水６６重量部を加え、ホモゲナイザーにかけて乳化し、適量の香料を加えて撹拌混合し、スキンクリームを製造した。本品は、α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドを含有しているので、保湿性に優れ、伸びのよいクリームで、日焼け止め、美肌剤、色白剤などとして有利に利用できる。
【００７５】
【実施例Ｂ−１６】
＜練歯磨＞
実施例Ａ−２の方法で得た結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド粉末１２重量部に対し、第二リン酸カルシウム４５重量部、ラウリル硫酸ナトリウム１．５重量部、グリセリン２５重量部、ポリオキシエチレンソルビタンラウレート０．５重量部、サッカリン０．０２重量部、防腐剤０．０５重量部、及び水１６重量部とを混合して練歯磨を得た。本品は、本品は、α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドを含有しているので、適度の粘度を有し、使用感に優れ、しかも、光沢、洗浄力も良好な練歯磨である。
【００７６】
【実施例Ｂ−１７】
＜経管栄養剤＞
実施例Ａ−１の方法で得た結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド粉末８０重量部と、乾燥卵黄１９０重量部、脱脂粉乳２０９重量部、塩化ナトリウム４．４重量部、塩化カリウム１．８５重量部、硫酸マグネシウム４重量部、チアミン０．０１重量部、アスコルビン酸ナトリウム０．１重量部、ビタミンＥアセテート０．６重量部、及びニコチン酸アミド０．０４重量部からなる配合物を調製した。この配合物を２５ｇずつラミネートアルミ製小包に充填し、ヒートシールして製品を得た。本品は、１袋分を約１５０乃至３００ｍｌの水に溶解して栄養補給液とし、経管方法により、鼻腔、食道、胃などへ投与して使用する。
【００７７】
【実施例Ｂ−１８】
＜外傷治療用軟膏＞
マクロゴール（４００）４５０質量部、カルボキシビニルポリマー３質量部、プルラン１質量部、イソプロパノール４００質量部に対してグルコン酸クロルヘキシジン液１質量部を加えて、真空混合撹拌し、これに、実施例Ａ−１の方法で得た結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド粉末７０質量部、水酸化ナトリウム３質量部、精製水７７質量部を加えて混合し、適度の伸び、付着性を有する外傷治療用軟膏を得た。本品は、α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドを含有していることから、保湿性に優れ、使用後のベタ付きもなく、塗り心地もよく、創面に直接塗布するか、ガーゼ等に塗るなどして患部に使用することにより、切傷、擦り傷、火傷、水虫、しもやけ等の外傷を治療することができる。
【００７８】
【発明の効果】
本発明の結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドとこれを含有する糖質は、著しく吸湿性が低い優れた特徴を有している。したがって、結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドとこれを含有する糖質は、吸湿性が低く、固結や潮解を起こし難く、流動性を失い難く、保存安定性に優れている。また、本発明の結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシド及びこれを含有する糖質は、上品な甘味の甘味剤、呈味改良剤、品質改良剤、ボディー付与剤、粘度調節剤、保湿剤、照付与剤などとして、更には、栄養補給剤などとして、広く飲食物、化粧品、医薬部外品、医薬品、生活用品、農林水産用品、試薬、化学工業用品などの各種組成物に有利に用いることができる。
【００７９】
また、本発明の製造方法及び変換方法によれば、結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドとこれを含有する糖質を工業的に大量かつ安価に製造することができる。
【００８０】
このように、本発明は、食品、化粧品、医薬部外品、医薬品分野のみならず、生活用品、農林水畜産用品、試薬、化学工業用品等の各種分野に貢献すること誠に多大な意義ある発明である。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明の結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドの赤外線吸収スペクトルである。
【図２】本発明の結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドの柱状結晶写真である。
【図３】本発明の結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドの粉末Ｘ線回折スペクトルである。
【図４】本発明の結晶α−Ｄ−グルコシルα−Ｄ−ガラクトシドの示差走査熱量計分析図である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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