(57)【要約】　　　（修正有）【課題】アンドロゲン受容体複合体結合性タンパク質遺伝子を発現するトランスジェニック動物を提供する。【解決手段】そのゲノムが特定のアミノ酸配列をコードする核酸を含んだ導入遺伝子を含むトランスジェニック動物であって、野生型動物に比較して増大したアンドロゲン応答性を示すトランスジェニック動物が提供される。【選択図】　　なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
配列番号３に対して少なくとも７０％同一のアミノ酸配列を含む実質的に純粋なポリペプチドであって、アンドロゲン受容体に結合して、アンドロゲン応答性遺伝子をトランス活性化するアンドロゲン受容体の能力を増大させるポリペプチド。
【請求項２】
請求項１に記載のポリペプチドであって、前記アミノ酸配列は、配列番号３に対して少なくとも８０％同一であるポリペプチド。
【請求項３】
請求項２に記載のポリペプチドであって、前記アミノ酸配列は、配列番号３に対して少なくとも９０％同一であるポリペプチド。
【請求項４】
請求項３に記載のポリペプチドであって、前記アミノ酸配列は、配列番号３に対して少なくとも９５％同一であるポリペプチド。
【請求項５】
請求項４に記載のポリペプチドであって、前記アミノ酸配列は配列番号３であるポリペプチド。
【請求項６】
２０以下の保存的アミノ酸置換を含む配列番号３のアミノ酸配列を含む実質的に純粋なポリペプチドであって、アンドロゲン受容体に結合して、アンドロゲン応答性遺伝子をトランス活性化するアンドロゲン受容体の能力を増大させるポリペプチド。
【請求項７】
配列が配列番号２であるプローブに対してストリンジェントな条件下でハイブリダイズする核酸によってコードされる実質的に純粋なポリペプチドであって、アンドロゲン受容体に結合して、アンドロゲン応答性遺伝子をトランス活性化するアンドロゲン受容体の能力を増大させるポリペプチド。
【請求項８】
請求項１のポリペプチドをコードする単離された核酸。
【請求項９】
請求項８に記載の核酸であって、前記アミノ酸配列が配列番号３である核酸。
【請求項１０】
請求項６に記載のポリペプチドをコードする単離された核酸。
【請求項１１】
ストリンジェントな条件下において、配列が配列番号２である一本鎖または配列が配列番号２に相補的である一本鎖とハイブリダイズする鎖を含む、単離された核酸。
【請求項１２】
アンドロゲン受容体に結合して、アンドロゲン応答性遺伝子をトランス活性化するアンドロゲン受容体の能力を増大させるポリペプチドをコードする、請求項１１に記載の核酸。
【請求項１３】
請求項１２に記載の核酸であって、前記ポリペプチドのアミノ酸配列が配列番号３を含む核酸。
【請求項１４】
請求項１１に記載の核酸であって、前記鎖が少なくとも１５ヌクレオチドの長さである核酸。
【請求項１５】
請求項８の核酸を含むベクター。
【請求項１６】
請求項１５に記載のベクターであって、前記アミノ酸配列が配列番号３であるベクター。
【請求項１７】
請求項１０の核酸を含むベクター。
【請求項１８】
請求項１１の核酸を含むベクター。
【請求項１９】
請求項１８に記載のベクターであって、前記核酸は、アンドロゲン受容体に結合してアンドロゲン応答性遺伝子をトランス活性化するアンドロゲン受容体の能力を増大させるポリペプチドをコードするベクター。
【請求項２０】
請求項８の核酸を含む細胞。
【請求項２１】
請求項２０に記載の細胞であって、前記アミノ酸配列が配列番号３である細胞。
【請求項２２】
請求項１０の核酸を含む細胞。
【請求項２３】
請求項１１の核酸を含む細胞。
【請求項２４】
請求項２３に記載の細胞であって、前記核酸は、アンドロゲン受容体に結合してアンドロゲン応答性遺伝子をトランス活性化するアンドロゲン受容体の能力を増大させるポリペプチドをコードする細胞
【請求項２５】
そのゲノムが請求項８の核酸を含んだ導入遺伝子を含むトランスジェニック動物であって、野生型動物に比較して増大したアンドロゲン応答性を示すトランスジェニック動物。
【請求項２６】
前記動物が齧歯類である、請求項２５に記載のトランスジェニック動物。
【請求項２７】
前記動物がマウスである、請求項２６に記載のトランスジェニック動物。
【請求項２８】
前記アミノ酸配列亜が配列番号３である、請求項２５に記載のトランスジェニック動物。
【請求項２９】
前記動物が齧歯類である、請求項２８に記載のトランスジェニック動物。
【請求項３０】
前記動物がマウスである、請求項２９に記載のトランスジェニック動物。
【請求項３１】
そのゲノムが請求項１０の核酸を含んだ導入遺伝子を含むトランスジェニック動物であって、野生型動物に比較して増大したアンドロゲン応答性を示すトランスジェニック動物。
【請求項３２】
前記動物が齧歯類である、請求項３１に記載のトランスジェニック動物。
【請求項３３】
前記動物がマウスである、請求項３２に記載のトランスジェニック動物。
【請求項３４】
そのゲノムが請求項１１の核酸を含んだ導入遺伝子を含むトランスジェニック動物であって、野生型動物に比較して増大したアンドロゲン応答性を示すトランスジェニック動物。
【請求項３５】
前記動物が齧歯類である、請求項３４に記載のトランスジェニック動物。
【請求項３６】
前記動物がマウスである、請求項３５に記載のトランスジェニック動物。
【請求項３７】
ポリペプチドを製造する方法であって、請求項２０の細胞を培養することと、前記細胞内で前記ポリペプチドを発現させることと、該ポリペプチドを培養物から単離することとを含む方法。
【請求項３８】
転写物を製造する方法であって、請求項１１の核酸を細胞の中に導入することを含み、前記核酸から転写物が産生される方法。
【請求項３９】
配列番号３のアミノ酸配列を含むポリペプチドに結合する、単離された抗体。
【請求項４０】
動物サンプルが癌性細胞を含むかどうかを決定する方法であって：
動物からのサンプルを準備することと、
前記サンプル中におけるアンドロゲン受容体複合体結合性タンパク質遺伝子の発現レベルを決定することとを含み、
前記サンプル中における前記アンドロゲン受容体複合体結合性タンパク質遺伝子の発現レベルは、それが正常サンプルにおけるよりも高ければ、前記動物サンプルが癌性細胞を含むことを示す方法。
【請求項４１】
請求項４０に記載の方法であって、前記サンプルは血液サンプルである方法。
【請求項４２】
請求項４０に記載の方法であって、前記癌性細胞が肝臓腫瘍細胞である方法。
【請求項４３】
請求項４０に記載の方法であって、前記動物が齧歯類である方法。
【請求項４４】
請求項４３に記載の方法であって、前記動物がマウスである方法。
【請求項４５】
動物における癌を治療する方法であって：
アンドロゲン受容体複合体結合性タンパク質遺伝子を発現する癌細胞を有する動物を同定することと、
前記動物を、前記アンドロゲン受容体複合体結合性タンパク質のアンドロゲン受容体への結合を阻止し、またはアンドロゲン応答性遺伝子をトランス活性化するアンドロゲン受容体の能力を低下させる組成物で治療することとを含む方法。
【請求項４６】
請求項４５に記載の方法であって、前記組成物は請求項３９の抗体を含む方法。
【請求項４７】
請求項４５に記載の方法であって、前記組成物は請求項１１の核酸を含む方法。
【請求項４８】
請求項４５に記載の方法であって、前記癌は肝臓癌である方法。
【請求項４９】
請求項４５に記載の方法であって、前記動物は齧歯類である方法。
【請求項５０】
請求項４９に記載の方法であって、前記動物はマウスである方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【関連出願】
この出願は、２００１年２月１２日に出願された米国出願第０９／７８１，６９３号および２００１年１月１７日に出願された米国仮出願第６０／２６２，３１２号の一部継続出願であり、これらに基づく優先権を主張するものである。これら親出願を、本明細書の一部として本願に援用する。
【０００２】
【発明の背景】
健康な細胞に比較して、腫瘍細胞で過剰に発現する種々の遺伝子が同定されている。このような遺伝子の同定は、抗腫瘍薬の開発および癌診断のための薬物ターゲットを提供することが期待される。肝臓腫瘍細胞におけるステロイド受容体（例えばアンドロゲン受容体）の数は、それらに隣接した健康な肝臓細胞に比較して増大するように思える。
【０００３】
ステロイドホルモンは、一般に、それらの特異的核内受容体に結合して複合体を形成し、次いで該複合体が転写因子として作用することによって、その生理学的効果を発揮する。この複合体は、ステロイド応答性遺伝子のプロモータにおける特異的なヌクレオチド配列に結合して、これら遺伝子の転写を促進する。
【０００４】
【発明の概要】
本発明はアンドロゲン受容体複合体結合性タンパク質（ＡＲＣＡＰ）をコードするマウス遺伝子の発見に基づいており、これはヒトＡＲＣＡＰに対して８５％の同一性を有する。ヒトＡＲＣＡＰは、（隣接する正常細胞に比較して）肝細胞腫細胞で過剰発現され、アンドロゲン受容体に結合し、該受容体がアンドロゲン応答性遺伝子をトランス活性化する能力を増強することが分かっている。ヒトＡＲＣＡＰ遺伝子の相同体としてのマウスＡＲＣＡＰ遺伝子を使用して、癌（例えば肝臓癌）を治療する薬物を開発するための動物モデルとして役立つトランスジェニックマウスを創製することができる。
【０００５】
全長のマウスＡＲＣＡＰ・ｃＤＮＡ（配列番号１）を、開始コドンおよび停止コドンに下線を付して下記に示す。
【０００６】
2004065202.tif 000002
2004065202.tif 000003
2004065202.tif 000004
【０００７】
マウスＡＲＣＡＰタンパク質をコードするヌクレオチド配列（即ち、配列番号１のＡＴＧ開始コドンから停止コドンの直前のコドンまで）は、配列番号２で指定される。上記ｃＤＮＡによってコードされるマウスＡＲＣＡＰタンパク質（配列番号３で指定）を下記に示す。
【０００８】
2004065202.tif 000005
2004065202.tif 000006
【０００９】
従って、本発明は、配列番号３と少なくとも７０％（例えば少なくとも７５、８０、９０、９５、９８、または１００％）一致するアミノ酸配列を含む、実質上純粋なポリペプチドまたはタンパク質を特徴とする。もし、このポリペプチドが配列番号３と１００％一致する配列を含むならば、該ポリペプチドは、保存的なアミノ酸の置換を３０個まで含むことができる。本発明は、その配列が配列番号２からなるプローブとストリンジェントな条件下でハイブリダイズする核酸によってコードされる純粋なポリペプチドをも含む。このポリペプチドはアンドロゲン受容体と結合し、アンドロゲン受容体がもつアンドロゲン応答遺伝子をトランス活性化する能力を増強する。これらのポリペプチドは、ＡＲＣＡＰ抗体（モノクローナルでもポリクローナルでも）を製造するために使用することができる。これらの抗体は、組織および細胞区画におけるＡＲＣＡＰの存在および分布を検出するために有用である。例えば、このような抗体は、ＡＲＣＡＰ癌タンパク質が組織中で発現または過剰発現されているかどうかを決定することにより、癌性の肝臓組織を診断するために使用することができる。また、以下で述べるように、それらは癌（例えば肝臓癌）を治療するために使用することができる。
【００１０】
本発明は更に、本発明のポリペプチドをコードする単離された核酸、本発明の核酸を含むベクター、および本発明の核酸を含む細胞（動物モデル中または培養中の）を特徴とする。本発明の核酸の例には、その配列が配列番号２または配列番号２の相補的配列からなる一本鎖プローブとストリンジェントな条件下でハイブリダイズする一本鎖をもった、単離された核酸が含まれる。このような核酸は、少なくとも１５（例えば少なくとも３０、５０、１００、２００、５００、または１０００）ヌクレオチドの長さであればよい。これらの核酸、ベクター、及び細胞は、動物モデルを創製するため、癌（例えば肝臓癌）を診断するため、または本発明のポリペプチドを製造するために使用することができる。例えば、本発明の核酸は、ＡＲＣＡＰ・ｍＲＮＡが組織または細部中で発現されるかどうかを決定することによって、肝臓癌を診断するために使用することができる。該核酸は、ＰＣＲに基づく検出法におけるプライマーとして、または核酸ブロット（例えばノーザンブロット）におけるラベルされたプローブとして使用することができる。
【００１１】
更に、本発明は、そのゲノムが本発明の核酸を含む導入遺伝子を含み、野生型の動物に比較して増大したアンドロゲン応答性を示すトランスジェニック動物（例えばマウスのような齧歯類）をも特徴とする。このトランスジェニック動物は、核酸から転写物が産生され且つ該転写物がタンパク質に翻訳されるように、本発明の核酸を細胞に導入することによって創製される。これらのトランスジェニック動物は、癌（例えば肝臓癌）を治療する薬物を開発するためのモデルとして使用することができる。
【００１２】
本発明は更に、上記の細胞を培養し、該細胞内で上記ポリペプチドを発現し、培養物から上記ポリペプチドを単離することによって、本発明のポリペプチドを生産する方法をも特徴とする。
【００１３】
本発明は更に、動物サンプル（例えば血液サンプル）が癌性細胞を含んでいるかどうかを決定する方法を特徴とする。この方法は、動物（例えばマウスのような齧歯類）からサンプルを準備することと、該サンプル中におけるＡＲＣＡＰ遺伝子の発現レベルを決定することとを含む。サンプル中のＡＲＣＡＰ遺伝子の発現レベルが正常サンプルよりも高ければ、それは該動物サンプルが癌性細胞（例えば肝臓腫瘍細胞）を含むことを示す。この方法は、動物モデルにおける癌の診断、または癌治療のモニタリングのために使用することができる。
【００１４】
また、動物（例えばマウスのような齧歯類）における癌（例えば肝臓癌）を治療する方法も、本発明の範囲内である。この方法は、ＡＲＣＡＰ遺伝子を発現する癌細胞を有する動物を同定することと、該動物を、アンドロゲン受容体へのＡＲＣＡＰの結合をブロックしてアンドロゲン受容体がアンドロゲン応答性遺伝子をトランス活性化する能力を低下させる組成物で治療することとを含む。この組成物は、本発明の抗体または本発明のアンチセンス核酸を含むことができる。この方法は、薬物（遺伝子治療のために使用されるものを含む）をスクリーニングするため、および動物モデルにおけるそれらの薬効を試験するために使用することができる。
【００１５】
所定のポリペプチドに関して、ここで使用される「実質的に純粋な」の用語は、当該ポリペプチドが、他の生物学的高分子を実質上含まないことを意味する。実質的に純粋なポリペプチドは、乾燥重量で少なくとも７５％（例えば、少なくとも８０、８５、９５、または９９％）の純度である。純度は、適切な標準的方法の何れによって測定してもよく、例えばカラムクロマトグラフィー、ポリアクリルアミドゲル電気泳動、またはＨＰＬＣ分析によって測定すればよい。
【００１６】
「保存的アミノ酸置換」とは、あるアミノ酸残基が、化学的に類似した側鎖を持つ他の残基と置き換わることである。類似した側鎖を持つアミノ酸残基のファミリーは、当該技術において定義されている。これらのファミリーには、塩基性側鎖（たとえばリジン、アルギニン、ヒスチジン）、酸性側鎖（たとえばアスパラギン酸、グルタミン酸）、電荷を持たない側鎖（たとえばグリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、スレオニン、チロシン、システイン）、非極性側鎖（たとえばアラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン）、ベータ分岐側鎖（たとえばスレオニン、バリン、イソロイシン）、および芳香族側鎖（たとえばチロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジン）をもったアミノ酸が含まれる。
【００１７】
「ストリンジェントな条件」下のハイブリダイゼーションとは、６５℃、０．５×ＳＳＣでハイブリダイゼーションした後、４５℃、０．１×ＳＳＣで洗浄することを意味する。
【００１８】
二つのアミノ酸配列または二つの核酸配列の「一致性パーセント」は、ＫａｒｌｉｎおよびＡｌｔｓｃｈｌ（Ｐｒｏｃ．　Ｎａｔｌ．　Ａｃａｄ．　Ｓｃｉ．　ＵＳＡ　９０：５８７３−５８７７，１９９３）において改変された、ＫａｒｌｉｎおよびＡｌｔｓｃｈｌのアルゴリズム（Ｐｒｏｃ．　Ｎａｔｌ．　Ａｃａｄ．　Ｓｃｉ．　ＵＳＡ　８７：２２６４−２２６８，１９９０）を使用して決定される。このようなアルゴリズムは、Ａｌｔｓｃｈｕら（Ｊ，　Ｍｏｌ，　Ｂｉｏｌ，　２１５：４０３−４１０，１９９０）のＮＢＬＡＳＴおよびＸＢＬＡＳＴプログラムに組込まれている。ＢＬＡＳＴのヌクレオチド検索は、ＮＢＬＡＳＴプログラムのスコア＝１００、文字数＝１２で行われる。二つの配列の間にギャップが存在する場合には、Ａｌｔｓｃｈｕら（Ｎｕｃｌｅｉｃ　Ａｃｉｄ　Ｒｅｓ．２５：３３８９−３４０２，１９９７）に記載されたＧａｐｐｅｄ　ＢＬＡＳＴが利用される。ＢＬＡＳＴおよびＧａｐｐｅｄ　ＢＬＡＳＴプログラムが利用されるとき、それぞれのプログラム（例えば、ＸＢＬＡＳＴおよびＮＢＬＡＳＴ）のデフォルトのパラメーターが使用される。ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ．を参照されたい。
【００１９】
「単離された核酸」とは、その構造が天然に存在する如何なる核酸とも一致せず、または天然に存在する三つ以上の分離された遺伝子に亘るゲノム核酸の如何なる断片とも一致しない核酸である。従ってこの用語は、例えば、（ａ）天然に存在するゲノムＤＮＡ分子の一部の配列を有してはいるが、該ＤＮＡ分子が天然に存在している生物のゲノム内では当該分子の一部の両端に隣接しているコード配列の何れもが隣接位置に存在しないＤＮＡ。；（ｂ）得られる分子が天然に存在する如何なるベクターもしくはゲノムＤＮＡとも一致しないように、原核生物もしくは真核生物のゲノムＤＮＡ、またはベクターに組み込まれた核酸；（ｃ）ｃＤＮＡのような独立した分子、ゲノム断片、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）によって作製される断片、または制限断片；および（ｄ）ハイブリッド遺伝子の一部である組換え核酸配列（即ち、融合タンパク質）をコードする遺伝子をカバーする。この定義から特に除かれるものは、様々な（ｉ）ＤＮＡ分子、（ｉｉ）形質導入細胞、または（ｉｉｉ）クローン細胞の混合物中に存在する核酸、例えばｃＤＮＡのようなＤＮＡライブラリーもしくはゲノムＤＮＡライブラリーＤＮＡの中に存在するものである。
【００２０】
本発明の他の特徴または利点は、以下の詳細な記述および特許請求の範囲から明らかとなるであろう。
【００２１】
【詳細な記述】
本発明は、ＡＲＣＡＰ遺伝子を発現するトランスジェニック非ヒト動物、および肝臓癌を治療または予防する薬物を開発するために該動物を使用する方法に関する。
【００２２】
ここで使用する「トランスジェニック非ヒト動物」の用語は、創始トランスジェニック非ヒト動物および該創始動物の子孫、並びにこのような動物の細胞および組織を含むものである。トランスジェニック非ヒト動物は、ブタ、ヤギ、ヒツジ、ウシ、ウマおよびウサギのような家畜、ラット、モルモットおよびマウスのような齧歯類、並びにヒヒ、サルおよびチンパンジーのような非ヒト霊長類であることができる。トランスジェニックブタおよびトランスジェニックマウスが特に有用である。
【００２３】
本発明のトランスジェニック非ヒト動物は、そのゲノム内に組込まれたＡＲＣＡＰタンパク質をコードする核酸を含んでいる。ここで使用する「ＡＲＣＡＰタンパク質」の用語は、野生型ＡＲＣＡＰタンパク質またはその機能的に等価な変種、例えば当該全長タンパク質の断片を意味する。
【００２４】
それは、ゲノム中のイントロン配列（もしあれば）を同定し、これを、ＡＲＣＡＰタンパク質をコードする核酸の中に含めるために有用であり得ることが想定される。
【００２５】
本発明のトランスジェニック非ヒト動物において、当該核酸は、例えば肝臓においてＡＲＣＡＰ遺伝子の発現を促進し得る調節要素に動作可能に連結される。ここで、「動作可能に連結される」の用語は、当該核酸が転写されるような、当該調節要素および核酸の配置を意味する。調節要素は、ＰＥＰＣＫおよびアルブミンプロモータのような肝臓特異的なプロモータであることができる。
【００２６】
本発明はまた、本発明のトランスジェニック非ヒト動物を創製するのに適した発現ベクターをも特徴とする。
【００２７】
この発現ベクターは、上記のＡＲＣＡＰタンパク質をコードする核酸に動作可能に連結された、肝臓での発現を媒介できるプロモータを含むことができる。
【００２８】
発現ベクターを非ヒト動物に導入してトランスジェニック非ヒト動物の創始ラインを製造するために、当該技術で知られている種々の技術を使用することができる。このような技術には、前核マイクロインジェクション（米国特許第４，８７３，１９１号）、レトロウイルス媒介性の生殖系列への遺伝子導入（Ｖａｎ　ｄｅｒ　Ｐｕｔｔｅｎ　ｅｔａｌ．，　Ｐｒｏｃ．　Ｎａｔｌ．　Ａｃａｄ．　Ｓｃｉ．　ＵＳＡ，　８２：６１４８，　１９８５）、胚性幹細胞への遺伝子ターゲッティング（Ｔｈｏｍｐｓｏｎ　ｅｔ　ａｌ．，　Ｃｅｌｌ，　５６：３１３，　１９８９）、胚のエレクトロポレーション（Ｌｏ，　Ｍｏｌ．　Ｃｅｌｌ．　Ｂｉｏｌ．，　３：１８０３，　１９８３）、インビトロでの体細胞の形質変換およびこれに続く核移植（Ｗｉｌｍｕｔ　ｅｔ　ａｌ．，　Ｎａｔｕｒｅ，　３８５（６６１９）：８１０−８１３，　１９９７；　ａｎｄ　Ｗａｋａｙａｍａ　ｅｔ　ａｌ．，　Ｎａｔｕｒｅ，　３９４：３６９−３７４，　１９９８）が含まれるが、これらに限定されない。一例において、発現ベクターは非ヒト動物の卵子または胚の中にマイクロインジェクションされ、または非ヒト動物の胚性幹細胞の中にマイクロインジェクションされる。
【００２９】
トランスジェニック非ヒト動物が作製されたら（例えば、Ｃｕｒｒｅｎｔ　Ｐｒｏｔｏｃｏｌ　（Ｗｉｌｅｙ，　ＵＳＡ）およびＭａｎｕｐｌａｔｅ　ｔｈｅ　Ｍｏｕｓｅ　Ｅｍｂｒｙｏ　（Ｈｏｇａｎ　Ｂｅｄｄｉｎｇｔｏｎ　ａｎｄ　Ｃｏｓｔａｎｔｉｎｉ　Ｌａｃｙ，　ＣＳＨＬ　Ｐｒｅｓｓ）に従って作製されたトランスジェニックマウス）、標準の技術を使用して、ＡＲＣＡＰ遺伝子の発現を評価することができる。導入遺伝子の組み込みが起きたかどうかを決定するための最初のスクリーニングを、サザンブロット分析またはＰＣＲ技術によって達成することができる。サザン分析の説明については、例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ　ｅｔ　ａｌ．，　１９８９，　”Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｃｌｏｎｉｎｇ，　Ａ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　Ｍａｎｕａｌ”，　ｓｅｃｏｎｄ　ｅｄｉｔｉｏｎ，　Ｃｏｌｄ　Ｓｐｒｉｎｇ　Ｈａｒｂｏｒ　Ｐｒｅｓｓ，　Ｐｌａｉｎｖｉｅｗ；　ＮＹ，の９．３７節〜９．５２節を参照されたい。トランスジェニック非ヒト動物の組織におけるＡＲＣＡＰタンパク質をコードする核酸の発現は、当該動物から得た組織サンプルのノーザンブロット分析、インサイチューハイブリダイゼーション分析、および逆転写酵素ＰＣＲ（ＲＴ−ＰＣＲ）（これらに限定されない）を含む技術を使用して評価することができる。
【００３０】
本発明のトランスジェニック非ヒト動物は、肝臓癌のためのモデルとして使用することができる。特に、これらの動物は、肝臓癌の治療または予防のために有効な化合物または組成物を同定するために使用することができる。化合物または組成物は、被験化合物または被験組成物を本発明トランスジェニック非ヒト動物に投与することによって、または被験化合物または被験組成物を当該トランスジェニック非人動物から誘導された器官、組織（例えば肝臓）または細胞（例えば肝臓細胞）と接触させることによって同定することができる。これらトランスジェニック非ヒト動物、器官、組織または細胞に対する、被験化合物または被験組成物の効果が評価される。例えば、トランスジェニック非ヒト動物において、臨床病理学的同定による癌の大きさを評価することができる。癌症候群を軽減する被験化合物または組成物は、肝臓癌の治療または予防に有効である可能性がある。
【００３１】
被験化合物は、薬学的に許容可能な無毒の賦形剤もしくはキャリアと混合することによって薬学的組成物に処方し、何れかの経路によって本発明のトランスジェニック非ヒト動物に投与することができる。例えば、皮下、筋肉内、血管内、皮内、鼻腔内もしくは腹腔内投与のような非経腸的経路、並びに舌下、経口もしくは直腸内投与のような経腸的経路を使用することができる。
【００３２】
更なる詳細がなくても、当業者は、ここでの説明に基づいて本発明をその全範囲において利用できるものと思われる。ここで引用した全ての刊行物は、その全体が本明細書の一部をなすものとして本願に援用される。
【００３３】
＜他の実施例＞
この明細書に開示した全ての特徴は、如何なる組み合わせで組み合わせてもよい。この明細書に開示した夫々の特徴は、同一、均等、または類似の目的に資する別の特徴で置き換えてもよい。従って、特に述べない限り、開示された各特徴は均等または類似の特徴の一例に過ぎない。
【００３４】
上記の説明から、当業者は、本発明の本質的な特徴を容易に確認することができ、またその精神および範囲を逸脱することなく、種々の用途および条件に適合させるために本発明の種々の変更、改変を行うことができる。従って、他の実施例もまた冒頭の特許請求の範囲内にあるものである。