(57)【要約】【課題】癌の増殖抑制とがん細胞の悪性化を防止し、癌を予防・治療する。【解決手段】被覆ＳＯＤを主成分とする抗腫瘍剤であり、特にグリアジンで被覆したメロンＳＯＤを主成分とする。癌または腫瘍を予防・治療する方法に有効である。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
被覆ＳＯＤを主成分とする抗腫瘍剤。
【請求項２】
グリアジンで被覆したメロンＳＯＤを主成分とする請求項１に記載した抗腫瘍剤。
【請求項３】
経口または非経口投与による請求項１または２に記載の抗腫瘍剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は被覆ＳＯＤを主成分とする抗腫瘍剤であり、特にグリアジンで被覆したメロンＳＯＤを主成分とする抗腫瘍剤である。
【０００２】
【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】
ヒトの体は６０兆個もの細胞から構成される。細胞が遺伝的に変化して、不秩序な自己増殖性を獲得し、個体の生存を脅かす状態が癌である。正常な細胞が癌細胞になる過程が、化学発癌実験から、解明されつつあり、癌化には幾つもの遺伝子変異（多段階変異）が必要で、変異による細胞の生物学的変化の側面から、イニシエーション、プロモーション、プログレッションに分けて論じられる。イニシエーションは化学物質やその代謝活性化物が標的細胞のＤＮＡに永続的な変化を与える過程である。プロモーションとは、イニシエーションされた細胞の増殖を選択的に左右するその後のいろいろな事象を含んだ過程であるが、癌としては良性の段階である。プログレッションとは、悪性化即ち、無秩序で急速な増殖と浸潤、および転移能に結びつく遺伝的な変化をさらに身につけながらがん細胞が徐々に発達していく過程と表現されている。遺伝子の変異は化学発癌物質、放射線、活性酸素によって引き起こされることが知られているが、中でも好中球などの炎症細胞が産生する活性酸素が全ての癌の３分の１において、その進展に寄与していると推定されている（非特許文献１参照。）。
【０００３】
活性酸素は、突然変異を起こす要因として古くから注目されている。活性酸素とは、呼吸によって取り込んだ酸素の１〜３％が還元される過程で生成されるスーパーオキサイド（Ｏ２―）、過酸化水素（Ｈ２Ｏ２）そしてヒドロキシラジカル（・ＯＨ）と、これに一重項酸素（１Ｏ２）などを含めた酸素種をさす。活性酸素は酸化作用が強く、生物にとって有毒であるので、生体内で発生する活性酸素を無毒化するために、抗酸化酵素・抗酸化物質を細胞内に誘導・存在させるシステムを進化の過程で完成させた。従って、通常の呼吸を行う範囲内では、生じる活性酸素は無毒化されると考えられるが、細胞内に存在する抗酸化酵素等による消去能を上回る活性酸素が生じた場合には様々な傷害を起こす。生体内における過剰な活性酸素の産生部位は炎症局所にある。炎症局所に浸潤する活性化好中球・マクロファージや白血球などは活性酸素を大量しかも持続的に生成し、ＤＮＡの切断・塩基修飾、脂質・糖質の酸化、蛋白の変性や酵素の不活化反応を起こしてＤＮＡ傷害や生体膜損傷を起こすことが知られている。本発明者らは、炎症細胞とこれから発生する活性酸素ががん細胞のプログレッション過程に及ぼす影響を再現性良く、肉眼的に観察できる動物モデルを確立した（非特許文献２参照。）。
【０００４】
本発明者らは、Ｃ５７ＢＬ／６系マウスに化学発癌物質であるメチルコラントレンを皮下注射して発生した癌細胞クローン（ＢＭＴ‐１１ｃｌ−９）を樹立し、これに突然変異原物質のケルセチン５５μＭで処理後細胞クローンを複数得た。この中でＱＲ−３２と名づけたがん細胞系を単離した。このがん細胞は同系のＣ５７ＢＬ／６系マウスに皮下または静脈内に接種しても、ある一定数以下の細胞であれば増殖しない。しかし、このがん細胞はマウスの免疫能力を抑制した状態で移植すると致死増殖することから、がん細胞の形質を保持しており、従って潜伏癌、もしくは良性腫瘍に相当するものと考えられた。これを動物にとって異物であるゼラチンスポンジとともに移植すると増殖して腫瘤を形成した。この腫瘤を摘出して浮遊細胞とし、個々の細胞を増殖させて細胞系とし、これを同系マウスの皮下に移植すると、皮下腫瘍を形成し、静脈内に移植すると肺に転移巣を形成した。このことは、元のＱＲ−３２細胞はマウスにおいて増殖しえない形質の細胞であったが、この細胞を異物であるゼラチンスポンジとともに移植することにより、増殖性と転移性を獲得したことによって示されたごとく、がん細胞の形質がより悪性に変化したことを示した。悪性化の機序として、ゼラチンスポンジはマウスにとり異物であり、ゼラチンスポンジの移植により好中球などの炎症性細胞が浸出し、炎症性細胞が活性酸素を産生することによりＤＮＡの変異が引き起こされ、がん細胞のより悪性化をきたしたと考えられた。
【０００５】
一方、ガン治療に目を転じれば、がん治療の方法は、大別して外科手術、放射線療法、化学療法、免疫療法が知られている。治療は、これらの方法を組み合わせて行われる。外科的に摘出可能な癌組織は、摘出除去するのが原則であるが、外科的に摘出できない癌や転移巣の縮小には、放射線療法、化学療法、免疫療法が選択組み合わされて実施される。ところが、治療の過程で、がん細胞が遺伝的にさらに悪性化し、ホルモン依存性を喪失（前立腺癌、乳がん）、制癌剤に抵抗性を獲得し、転移性、増殖性がさらに活発になるなどのプログレッションの更なる進展の存在が考えられる。従って、治療を成功させるためには、治療過程で発生する悪性化を防止することが重要と考えられる。
【０００６】
従来活性酸素の消去によるがん細胞のプログレッションを防止する方法は知られていない。
【０００７】
ＳＯＤは活性酸素の一つであるスーパーオキサイドを過酸化水素に還元する抗酸化酵素で、生体を活性酸素傷害から防御するための中心的役割を有することで知られている。Ｐｏｓｔａｉｒｅ，　Ｅｒｉｃ　らはＳＯＤ分子を脂質や蛋白で覆う製剤（以下被膜ＳＯＤ製剤）を動物に経口または非経口投与するとＳＯＤ単独を投与した場合に比べて、生体のＳＯＤ活性レベルの増大が得られることを見出し、その製剤を開発した（特許文献１参照。）。
【０００８】
【非特許文献１】
Ａｍｅｓ　ｅｔ　ａｌ．　Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９０；７９１５−７９２２．１９９３
【０００９】
【非特許文献２】
Ｏｋａｄａ，　Ｆ．　ｅｔ　ａｌ．，　Ｂｒ　Ｊ　Ｃａｎｃｅｒ，　６６：　６３５−６３９　１９９２
【００１０】
【特許文献１】
米国特許第６，０４５，８０９号明細書
【００１１】
【課題を解決するための手段】
本発明は、小麦粉蛋白であるグリアジンを用いてメロン由来ＳＯＤを被覆したグリアジン（以下ＳＯＤ−Ｇと称する）を、マウスにおける炎症によるプログレッションモデルに用いたところ、癌の増殖抑制とがん細胞の悪性化を防止しうることを見出し、新しい癌の予防治療法を発明するに至った。
【００１２】
本発明は被覆ＳＯＤを主成分とする抗腫瘍剤、被覆ＳＯＤを薬理学上有効な量患者に投与することによる癌または腫瘍の治療方法または被覆ＳＯＤを抗腫瘍剤または抗癌剤の製造に用いる用途を提供する。
【００１３】
本発明により、活性酸素の消去によるがん細胞のプログレッションを防止することができる。
【００１４】
【発明の実施の形態】
被覆ＳＯＤはグリアジンで被覆したメロンＳＯＤが好ましい。
【００１５】
本発明の抗腫瘍剤は経口または非経口投与によることが好ましい。
【００１６】
本発明による被覆ＳＯＤ製剤は、特に限定されるものでないが、その形状は、粉末、固形状、懸濁液である。また、本発明の被膜ＳＯＤ製剤による癌の予防治療は、医薬品、飲食品として、一般に広く用いることが出来る。
【００１７】
人における用量は、服用の場合は一人当たり１日１０〜１０００ＩＵが好ましい。服用回数は１日１回乃至３回に分服する。
【００１８】
本発明が治療できる癌疾病は特定の臓器組織由来の癌に限定されることはない。即ち、脳腫瘍、上顎癌、上咽頭癌、肺癌、食道癌、直腸癌、大腸癌、肝臓癌、胃癌、胆嚢癌、膵臓癌、皮膚癌、乳癌、子宮癌、卵巣癌、前立腺癌、腎臓癌、膀胱癌、甲状腺癌、多発性骨髄腫、リンパ腫、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病などの治療に有効である。
【００１９】
本発明の被膜ＳＯＤは例えば次のように製造できる。ビーカーに８０％エタノールを２００ｍｌ入れ、４０℃に加温する。次いで、ソルビトール１．７ｇ、グリセロール０．７５ｇ、グリアジン５ｇ、メロン抽出ＳＯＤ　１０ｍｇ／ｍｌ水溶液の２００ｍｌをこの順序で加え、加温しながら透明に溶解するまで撹拌する。ビーカー内容物をガラス板上に撒き、３７℃、湿度２％で４８時間乾燥する。乾燥して得られたフィルム状個体を粉砕機にかけ、粉末とする。粉末にデキストリンを加えてメロン抽出ＳＯＤを２％に含む散剤とする。
【００２０】
【実施例】
（グリアジン被覆メロンＳＯＤの制癌作用）
マウス：２ないし４ヶ月齢のＣ５７ＢＬ／６系雌マウスを用いた。マウスは特定病原菌の無い飼育環境において飼育し実験に供した。
【００２１】
細胞培養：がん細胞の培養にはウシ胎仔血清を８％含有ＭＥＭ培地にピルビン酸ナトリウム、非必須アミノ酸、Ｌ−グルタミンを添加した培地を用い、５％炭酸ガス９５％空気中で３７℃で培養した。
【００２２】
ゼラチンスポンジ挿入とがん細胞の移植：マウスをエーテルで麻酔し、背部を７０％エタノールで消毒後、右背側部を１０ｍｍ切開し、１０×５×３ｍｍの大きさのゼラチンスポンジをマウス皮下に外科手術により挿入した。切開部をクリップで閉じた後、ゼラチンスポンジ挿入局所に癌細胞１×１０５個を含む細胞浮遊液０．１ｍｌを接種した。接種後腫瘍増殖の計測は週２回行った。
【００２３】
グリアジンで被覆したメロンＳＯＤの投与：グリアジンで被覆したメロンＳＯＤ（ＳＯＤ−Ｇ）は１ｇ中ＳＯＤ活性１０００ＩＵを含有する製剤（商品名オキシカイン）をもちいた。対照として、生理食塩液投与群及びグリアジン投与群を設けた。ＳＯＤ−Ｇおよび対照物は移植日を０日として、−２日から２７日まで連日経口１０ｍｇ／ｋｇ／Ｘｍｌ生理食塩液の用量で投与した。動物は各群１群７〜９匹を用いた。
【００２４】
結果１　腫瘍増殖の抑制
ゼラチンスポンジと同時移植した腫瘍の増殖に及ぼすの効果を表１の実験Ａに示した。
【００２５】
ＳＯＤ−Ｇ投与群の平均腫瘍増殖曲線を他の生理食塩液またはグリアジン処置群のそれと比較すると腫瘍増殖の抑制が見られた（図１）。
【００２６】
また、腫瘍の発生率は、生理食塩液群、グリアジン群は生理食塩液群８／９、グリアジン群８／８に対して、ＳＯＤ−Ｇ処置群は４／７で、抑制傾向を示した。
【００２７】
結果２　増殖腫瘍の転移能
ゼラチンスポンジとの同時移植によって増殖した癌がプログレッションにより悪性化した細胞か否かを調べるために、それぞれの増殖腫瘍を移植２７日に外科的に摘出し、培養株として樹立した。がん細胞を増やすとともに、宿主由来浸潤細胞を除き、増殖腫瘍の転移能を調べる実験を行った。培養がん細胞を新たなマウスの静脈内に、各細胞株の１×１０６個を３〜５匹のマウスに接種した。移植の２５日後に剖検し、肺その他の転移癌を肉眼的に観察し、肺転移マウスの発生率を、元の癌細胞ＱＲ３２の肺転移発生率０／１０と比較した。判定は、もとのＱＲ３２癌細胞の転移能獲得とゼラチンスポンジ移植において腫瘍形成しなかった個体を含めた動物をプログレッションした動物と判定した。結果はプログレッション率で表１の実験Ｂに示したごとくであり、生理食塩液投与群８／９に対し、ＳＯＤ−Ｇ投与群で１／７と有意なプログレッションの抑制であった。
【００２８】
表１はＳＯＤ−Ｇ（オキシカイン）による腫瘍増殖抑制とプログレッションの抑制を示す。
【００２９】
【表１】
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【００３０】
治療例
オキシカインが奏効したと判定された例について具体例をあげる。
【００３１】
患者Ａ．Ｋ、７２歳　男　は３年前結腸癌と診断され、結腸と盲腸を切除した。手術２年後の検査でＣＴスキャンにより径２ｃｍの肝転移巣一つが発見された。手術、化学療法を患者は希望しなかったので、オキシカイン１日５００ｍｇを１日１回服用し経過を観察した。オキシカイン服用開始時の腫瘍マーカーＣＥＡは１６であった。６ヶ月経過後のＣＥＡ値は６．８でＣＴスキャンによる腫瘤径は２ｃｍと変化がみられていない。腫瘤径の変化がみられないこと、およびＣＥＡ値の減少から、オキシカインが奏効した症例であると判定された。
【００３２】
患者　Ｓ．Ｔ、６９歳　男　は５年前立腺癌と診断され、根治的前立腺摘除術を行った。手術前の前立腺腫瘍マーカーＳＰＡ値は２６であったが、術後０．１になり、その後年２回の検査で正常値を維持していた。１年前の検査において、ＳＰＡ値は６．５に上昇し、ＣＴ撮影で転移巣を検索したが転移を発見できず、内分泌化学療法（リユープリン＋ＵＦＴ）を開始したが、治療３ヶ月後のＳＰＡ値７．５であった。期待した治療効果が得られなかったので、オキシカイン１日１回３００ｍｇの服用を追加し、６ヶ月後の現在ＳＰＡ値は６．５であった。腫瘍マーカーに抑制傾向が見られたため、オキシカインの併用により、腫瘍の増殖を抑えてしていると判定された。
【図面の簡単な説明】
【図１】実施例の腫瘍増殖抑制効果を示すグラフである。
【図１】
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