(57)【要約】【課題】本発明は、インビボにおいても極めて高い抗マラリア活性を有し、毒性が低い１，２−ジオキサン化合物を提供することを課題とする。【解決手段】本発明の１，２−ジオキサン化合物は、一般式【化１】2004292366.tif 000009［式中、Ｒ１は水素原子又は低級アルキル基を示す。Ｒ２は低級アルキル基を示す。ｎは１〜１０の整数を示す。但し、Ｒ１は水素原子を示す場合、Ｒ２はメチル基であってはならない。］で表される。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式
【化１】
2004292366.tif 000008
［式中、Ｒ１は水素原子又は低級アルキル基を示す。Ｒ２は低級アルキル基を示す。ｎは１〜１０の整数を示す。但し、Ｒ１は水素原子を示す場合、Ｒ２はメチル基であってはならない。］で表される１，２−ジオキサン化合物。
【請求項２】
請求項１に記載の１，２−ジオキサン化合物を含有するマラリア治療薬。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、１，２−ジオキサン化合物に関する。
【０００２】
【従来の技術】
マラリアは、プラスモジウム（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ）属に属する原虫の感染によって起こる伝染性疾患である。マラリアは、ハマダラ蚊を媒介として感染し、間欠的な熱発作、貧血、脾腫等の症状を引き起こす。
【０００３】
マラリアは、近年、自然や環境の変化に伴い猛威を振るい始めており、その推定感染患者数は年間３億〜５億人、年間死亡者数は１５０〜３００万人に達し、世界的にも重要な疾病である。
【０００４】
マラリアの治療には、現在、クロロキン、プリマキン、アルテミシニン、メフロキン、ピリメサミン等の薬剤が使用されている。しかしながら、上記薬剤は毒性の強いものが多く、しかもこれら薬剤に対する耐性原虫が出現しており、この薬剤耐性マラリアの拡散が化学療法の昨今の問題点となっている。
【０００５】
薬剤耐性マラリアに唯一有効な薬剤としてキニーネが存在するが、腎不全を引き起こす可能性が極めて高く、現在の医療水準から見てリスクの高い治療薬である。
【０００６】
このような状況から、抗マラリア活性が高く、且つ安全性の高い新薬の開発が望まれている。
【０００７】
非特許文献１には、一般式
【０００８】
【化２】
2004292366.tif 000002
【０００９】
［式中、Ｒ３及びＲ４は、各々水素原子又は−ＣＨ（ＣＨ３）−ＣＯＯＣＨ３基を示す。但し、Ｒ３が水素原子を示す場合、Ｒ４は−ＣＨ（ＣＨ３）−ＣＯＯＣＨ３基を示し、Ｒ３が−ＣＨ（ＣＨ３）−ＣＯＯＣＨ３基を示す場合、Ｒ４は水素原子を示すものとする。］で表される１，２−ジオキサン化合物が、抗マラリア活性を有していることが開示されている。
【００１０】
しかしながら、一般式（２）の１，２−ジオキサン化合物は、インビトロにおいて抗マラリア活性を有しているものの、インビボにおいては抗マラリア活性を有していない。
【００１１】
【非特許文献１】
Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ，  ４２（２００１），  ７２８１−７２８５
【００１２】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、インビボにおいても極めて高い抗マラリア活性を有し、低毒性の１，２−ジオキサン化合物を提供することを課題とする。
【００１３】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、このような課題を解決するために鋭意研究を重ねた結果、下記一般式（１）で表されるペルオキシド誘導体が極めて優れた抗マラリア活性を有することを見い出し、本発明を完成するに至った。
１．本発明は、一般式
【００１４】
【化３】
2004292366.tif 000003
【００１５】
［式中、Ｒ１は水素原子又は低級アルキル基を示す。Ｒ２は低級アルキル基を示す。ｎは１〜１０の整数を示す。但し、Ｒ１は水素原子を示す場合、Ｒ２はメチル基であってはならない。］で表される１，２−ジオキサン化合物である。
２．本発明は、上記１に記載の１，２−ジオキサン化合物を含有するマラリア治療薬である。
【００１６】
【発明の実施の形態】
本発明の一般式（ｌ）で表される１，２−ジオキサン化合物は、本発明者らが初めて合成に成功した文献未記載の新規化合物である。
【００１７】
上記一般式（１）において、Ｒ１及びＲ２で示される低級アルキル基としては、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル基等の炭素数１〜６の直鎖又は分枝鎖状のアルキル基を挙げることができる。
【００１８】
上記一般式（１）で表される１，２−ジオキサン化合物の中でも、Ｒ２がエチル基、ｎ−プロピル基又はイソプロピル基を示す化合物が好ましい。
【００１９】
上記一般式（１）で表される１，２−ジオキサン化合物の中でも、ｎが４を示す化合物が好ましい。
【００２０】
上記一般式（１）で表される１，２−ジオキサン化合物の中でも、Ｒ２がエチル基、ｎ−プロピル基又はイソプロピル基を示し、ｎが４を示す化合物がより好ましい。
【００２１】
本発明の一般式（ｌ）で表される１，２−ジオキサン化合物は、例えば、公知の式（３）で表される１，２−ジオキサンから製造される（下記反応式−１参照）。
反応式−１
【００２２】
【化４】
2004292366.tif 000004
【００２３】
［式中、Ｒ１、Ｒ２及びｎは前記に同じ。］
反応式−１における各反応の具体的な反応条件については、後記実施例で明らかにする。
【００２４】
上記各反応で得られる目的化合物は、この分野で慣用されている単離及び精製手段により反応混合物から容易に単離、精製することができる。斯かる単離及び精製手段としては、例えば、溶媒抽出法、希釈法、再結晶法、カラムクロマトグラフィー、プレパラテイブ薄層クロマトグラフィー等を挙げることができる。
【００２５】
本発明の一般式（１）で表される１，２−ジオキサン化合物は、通常の薬理的に許容される酸と容易に塩を形成し得る。斯かる酸としては、例えば硫酸、硝酸、塩酸、リン酸、臭化水素酸等の無機酸、酢酸、ｐ−トルエンスルホン酸、エタンスルホン酸、シュウ酸、マレイン酸、フマル酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、コハク酸、安息香酸等の有機酸を例示できる。本発明の一般式（１）の１，２−ジオキサン化合物には、このような塩を包含する。
【００２６】
本発明化合物は、優れた抗マラリア活性を有している。
【００２７】
本発明化合物が有効なマラリア原虫としては、例えば、ヒトに感染するマラリア原虫等が挙げられる。このようなヒトに感染するマラリア原虫としては、より具体的には、アフリカ、アジア、ラテンアメリカの熱帯地域全体に分布する熱帯熱マラリア原虫（Ｐ．ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ）、世界各地の熱帯と温帯の一部に分布する三日熱マラリア原虫（Ｐ．ｖｉｖａｘ）、世界各地に分布する四日熱マラリア原虫（Ｐ．ｍａｌａｒｉａｅ）、主として熱帯西アフリカに分布する卵形マラリア原虫（Ｐ．ｏｖａｌｅ）等やこれらのマラリア原虫であって薬剤耐性を有しているもの等が挙げられる。
【００２８】
一般式（１）の１，２−ジオキサン化合物は、通常、一般的な医薬製剤の形態で用いられる。
【００２９】
本発明のマラリア治療薬は、通常使用される充填剤、増量剤、結合剤、付湿剤、崩壊剤、表面活性剤、滑沢剤等の希釈剤あるいは賦形剤を用いて調製される。
【００３０】
本発明治療薬としては各種の形態が治療目的に応じて選択でき、その代表的なものとして錠剤、丸剤、散剤、液剤、懸濁剤、乳剤、顆粒剤、カプセル剤、坐剤、注射剤（液剤、懸濁剤等）等が挙げられる。
【００３１】
錠剤の形態に成形するに際しては、担体としてこの分野で従来よりよく知られている各種のものを広く使用することができる。その例としては、例えば乳糖、白糖、塩化ナトリウム、ブドウ糖、尿素、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、結晶セルロース、ケイ酸等の賦形剤、水、エタノール、プロパノール、単シロップ、ブドウ糖液、デンプン液、ゼラチン溶液、カルボキシメチルセルロース、セラック、メチルセルロース、リン酸カリウム、ポリビニルピロリドン等の結合剤、乾燥デンプン、アルギン酸ナトリウム、カンテン末、ラミナラン末、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリド、デンプン、乳糖等の崩壊剤、白糖、ステアリン、カカオバター、水素添加油等の崩壊抑制剤、第４級アンモニウム塩基、ラウリル硫酸ナトリウム等の吸収促進剤、グリセリン、デンプン等の保湿剤、デンプン、乳糖、カオリン、ベントナイト、コロイド状ケイ酸等の吸着剤、精製タルク、ステアリン酸塩、ホウ酸末、ポリエチレングリコール等の滑沢剤等を使用できる。さらに錠剤は必要に応じ通常の剤皮を施した錠剤、例えば糖衣錠、ゼラチン被包錠、腸溶被錠、フィルムコーティング錠あるいは二重錠、多層錠とすることができる。
【００３２】
丸剤の形態に成形するに際しては、担体としてこの分野で従来公知のものを広く使用できる。その例としては、例えばブドウ糖、乳糖、デンプン、カカオ脂、硬化植物油、カオリン、タルク等の賦形剤、アラビアゴム末、トラガント末、ゼラチン、エタノール等の結合剤、ラミナラン、カンテン等の崩壊剤等を使用できる。
【００３３】
坐剤の形態に成形するに際しては、担体として従来公知のものを広く使用できる。その例としては、例えばポリエチレングリコール、カカオ脂、高級アルコール、高級アルコールのエステル類、ゼラチン、半合成グリセライド等を挙げることができる。
【００３４】
カプセル剤は常法に従い通常有効成分化合物を上記で例示した各種の担体と混合して硬質ゼラチンカプセル、軟質カプセル等に充填して調製される。
【００３５】
注射剤として調製される場合、液剤、乳剤及び懸濁剤は殺菌され、且つ血液と等張であるのが好ましく、これらの形態に成形するに際しては、希釈剤としてこの分野において慣用されているものをすべて使用でき、例えば水、エチルアルコール、マクロゴール、プロピレングリコール、エトキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類等を使用できる。なお、この場合等張性の溶液を調製するに充分な量の食塩、ブドウ糖あるいはグリセリンを本発明治療薬中に含有せしめてもよく、また通常の溶解補助剤、緩衝剤、無痛化剤等を添加してもよい。
【００３６】
更に必要に応じて着色剤、保存剤、香料、風味剤、甘味剤等や他の医薬品を医薬製剤中に含有させることもできる。
【００３７】
本発明治療薬中に含有されるべき本発明化合物の量としては、特に限定されず広範囲から適宜選択される。その量は、通常０．１〜１００重量％、好ましくは０．１〜８０重量％、より好ましくは０．１〜５０重量％である。
【００３８】
本発明の治療薬の投与方法は特に制限はなく、各種製剤形態、患者の年齢、性別その他の条件、疾患の程度等に応じた方法で投与される。例えば錠剤、丸剤、液剤、懸濁剤、乳剤、顆粒剤及びカプセル剤の場合には、経口投与される。また注射剤の場合には単独で又はブドウ糖、アミノ酸等の通常の補液と混合して静脈内投与され、更に必要に応じて単独で筋肉内、皮内、皮下もしくは腹腔内投与される。坐剤の場合には直腸内投与される。
【００３９】
本発明治療薬の投与量は、用法、患者の年齢、性別その他の条件、疾患の程度等により適宜選択される。１日当り体重１ｋｇ当り、本発明化合物を、通常約１〜１００ｍｇ程度、好ましくは約５〜約３０ｍｇ程度、より好ましくは約１０〜約２０ｍｇ程度とするのがよい。本発明治療薬は、１回又は２〜４回程度に分けて投与するのがよい。
【００４０】
【発明の効果】
本発明の一般式（１）で表される１，２−ジオキサン化合物は、インビトロだけでなく、インビボにおいても極めて高い抗マラリア活性を有している。
【００４１】
本発明の一般式（１）で表される１，２−ジオキサン化合物は、薬剤耐性マラリアに対しても高い抗マラリア活性を有している。
【００４２】
本発明の一般式（１）で表される１，２−ジオキサン化合物は、低毒性で安全性が高く、マラリア治療薬として好適に使用され得る。
【００４３】
【実施例】
以下に参考例、製造例、製剤例及び試験例を掲げる。
【００４４】
参考例１
３−メトキシ−３−ｎ−ペンチル−６−ヒドロキシカルボニルメチル−１，２−ジオキサンの製造
３−メトキシ−３−ｎ−ペンチル−６−メトキシカルボニルメチル−１，２−ジオキサン１００ｍｇ（０．３８ミリモル）をリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）８．０ｍｌに溶解し、エステラーゼ（Ｐｏｒｃｉｎｅ  Ｌｉｖｅｒ  由来、Ｓｉｇｍａ  社製）（５０００ユニット）３０ｍｌを加えて３７℃で２４時間撹拌した。反応液に５％塩酸１．０ｍｌを添加し、クロロホルムで抽出し、抽出液を飽和食塩水で洗浄した。クロロホルム相を硫酸マグネシウムで乾燥した後、クロロホルムを留去し、得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出液；ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝３：１＋１％酢酸）で精製して、標記化合物７９ｍｇ（収率：８５％）を製造した。
【００４５】
参考例２
３−メトキシ−３−ｎ−ペンチル−６−ペンタフルオロフェノキシカルボニルメチル−１，２−ジオキサンの製造
３−メトキシ−３−ｎ−ペンチル−６−ヒドロキシカルボニルメチル−１，２−ジオキサン７０ｍｇ（０．２８ミリモル）をピリジン３．０ｍｌに溶解し、これにペンタフルオロフェノール６３ｍｇ（０．３４ミリモル）及び１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド・塩酸塩１０７ｍｇ（０．５６ミリモル）を加え、室温で１４時間撹拌した。ピリジンを留去し、得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出液；ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１０：１）で精製して、標記化合物９７ｍｇ（収率：８４％）を製造した。
【００４６】
製造例１
３−メトキシ−３−ｎ−ペンチル−６−エチルアミノカルボニルメチル−１，２−ジオキサンの製造
３−メトキシ−３−ｎ−ペンチル−６−ペンタフルオロフェノキシカルボニルメチル−１，２−ジオキサン５０ｍｇ（０．１２ミリモル）をピリジン１．６ｍｌに溶解し、これにエチルアミン・塩酸塩４９ｍｇ（０．６ミリモル）を加え、室温で１０分間撹拌した。ピリジンを留去し、得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出液；ベンゼン：アセトン＝５：１）で精製して、標記化合物３１ｍｇ（収率：９６％）を製造した。
【００４７】
無色固体
ＩＲスペクトル（ＫＢｒ）：１６５０，１５５０ｃｍ−１
１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δｐｐｍ：０．８８（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，ＣＨ３），１．１３（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，ＣＨ３），１．２５−１．３５（６Ｈ，ｍ），１．５０−１．８４（４Ｈ，ｍ），１．８６−１．９０（２Ｈ，ｍ），２．３１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１５．９Ｈｚ，Ｊ＝３．７Ｈｚ，Ｈａ−７），２．３５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１５．９Ｈｚ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，Ｈｂ−７），３．２０−３．３３（２Ｈ，ｍ），３．２６（３Ｈ，ｓ，３−ＯＣＨ３），４．３８（１Ｈ，ｍ，Ｈ−６），５．９６（１Ｈ，ｂｒｓ，ＮＨ）
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：２９６（Ｍ＋Ｎａ）＋
ＦＡＢ−ＨＲ  ｍ／ｚ：実測値２９６．１８３７，Ｃ１４Ｈ２７Ｏ４ＮＮａとしての計算値２９６．１８３８。
【００４８】
製造例２
３−メトキシ−３−ｎ−ペンチル−６−（ｎ−プロピルアミノ）カルボニルメチル−１，２−ジオキサンの製造
３−メトキシ−３−ｎ−ペンチル−６−ペンタフルオロフェノキシカルボニルメチル−１，２−ジオキサン５０ｍｇ（０．１２ミリモル）をピリジン１．６ｍｌに溶解し、これにｎ−プロピルアミン４９ｍｇ（０．６ミリモル）を加え、室温で１０分間撹拌した。ピリジンを留去し、得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出液；ベンゼン：アセトン＝５：１）で精製して、標記化合物３４ｍｇ（収率：９８％）を製造した。
【００４９】
無色固体
ＩＲスペクトル（ＫＢｒ）：１６５０，１５６０ｃｍ−１
１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δｐｐｍ：０．８８（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，ＣＨ３），０．９１（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，ＣＨ３），１．２７−１．４５（６Ｈ，ｍ），１．５５−１．７０（６Ｈ，ｍ），１．８１−１．９１（２Ｈ，ｍ），２．３３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１５．３Ｈｚ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，Ｈａ−７），２．３７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１５．３Ｈｚ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，Ｈｂ−７），３．１４−３．３０（２Ｈ，ｍ），３．２５（３Ｈ，ｓ，３−ＯＣＨ３），４．３８（１Ｈ，ｍ，Ｈ−６），６．０３（１Ｈ，ｂｒｓ，ＮＨ）
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：３１０（Ｍ＋Ｎａ）＋
ＦＡＢ−ＨＲ  ｍ／ｚ：実測値３１０．２００８，Ｃ１５Ｈ２９Ｏ４ＮＮａとしての計算値３１０．１９９５。
【００５０】
製造例３
３−メトキシ−３−ｎ−ペンチル−６−ジメチルアミノカルボニルメチル−１，２−ジオキサンの製造
３−メトキシ−３−ｎ−ペンチル−６−ペンタフルオロフェノキシカルボニルメチル−１，２−ジオキサン５０ｍｇ（０．１２ミリモル）をピリジン１．６ｍｌに溶解し、これにジメチルアミン・塩酸塩４９ｍｇ（０．６ミリモル）を加え、室温で１０分間撹拌した。ピリジンを留去し、得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出液；ベンゼン：アセトン＝５：１）で精製して、標記化合物３０ｍｇ（収率：９３％）を製造した。
【００５１】
無色油状物
ＩＲスペクトル（ＫＢｒ）：１６５０，１５６０ｃｍ−１
１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δｐｐｍ：０．８７（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，ＣＨ３），１．２５−１．４５（６Ｈ，ｍ），１．５５−１．８５（６Ｈ，ｍ），２．２８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１５．３Ｈｚ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，Ｈａ−７），２．５７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１５．３Ｈｚ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，Ｈｂ−７），２．９３（３Ｈ，ｓ，ＮＣＨ３），２．９８（３Ｈ，ｓ，ＮＣＨ３），３．２５（３Ｈ，ｓ，３−ＯＣＨ３），４．５３（１Ｈ，ｍ，Ｈ−６）
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：２９６（Ｍ＋Ｎａ）＋
ＦＡＢ−ＨＲ  ｍ／ｚ：実測値２９６．１８４３，Ｃ１４Ｈ２７Ｏ４ＮＮａとしての計算値２９６．１８３８。
【００５２】
製造例４
３−メトキシ−３−ｎ−ペンチル−６−ジエチルアミノカルボニルメチル−１，２−ジオキサンの製造
３−メトキシ−３−ｎ−ペンチル−６−ペンタフルオロフェノキシカルボニルメチル−１，２−ジオキサン５０ｍｇ（０．１２ミリモル）をピリジン１．６ｍｌに溶解し、これにジエチルアミン６２ｍｌ（０．６ミリモル）を加え、室温で１０分間撹拌した。ピリジンを留去し、得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出液；ｎ−ヘキサン：クロロホルム：メタノール＝１０：２：１）で精製して、標記化合物２３ｍｇ（収率：６３％）を製造した。
【００５３】
無色油状物
ＩＲスペクトル（ＫＢｒ）：１６５０，１５６０ｃｍ−１
１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δｐｐｍ：０．８７（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，ＣＨ３），１．１０（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，ＮＣＨ２ＣＨ３），１．１５（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，ＮＣＨ２ＣＨ３），１．２５−１．４５（６Ｈ，ｍ），１．５０−１．８５（６Ｈ，ｍ），２．２７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１５．４Ｈｚ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，Ｈａ−７），２．５４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１５．４Ｈｚ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，Ｈｂ−７），３．２４（３Ｈ，ｓ，３−ＯＣＨ３），３．２２−３．３８（４Ｈ，ｍ，ＮＣＨ２ＣＨ３），４．５４（１Ｈ，ｍ，Ｈ−６）
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：３２４（Ｍ＋Ｎａ）＋
ＦＡＢ−ＨＲ  ｍ／ｚ：実測値３２４．２１６９，Ｃ１６Ｈ３１Ｏ４ＮＮａとしての計算値３２４．２１５１。
【００５４】
製剤例１
本発明化合物                                    １５０ｇ
アビセル（商標名、旭化成社製）                                      ４０ｇ
コーンスターチ                                                                      ３０ｇ
ステアリン酸マグネシウム                                                      ２ｇ
ヒドロキシプロピルメチルセルロース                              １０ｇ
ポリエチレングリコール−６０００                                      ３ｇ
ヒマシ油                                                                                  ４０ｇ
エタノール                                                                              ４０ｇ
本発明化合物、アビセル、コーンスターチ及びステアリン酸マグネシウムを混合研磨後、糖衣Ｒ１０ｍｍのキネで打錠した。得られた錠剤をヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリエチレングリコール−６０００、ヒマシ油及びエタノールからなるフィルムコーティング剤で被覆を行い、フィルムコーティング錠を製造した。
【００５５】
製剤例２
本発明化合物                                    １５０        ｇ
クエン酸                                                                                      １．０ｇ
ラクトース                                                                              ３３．５ｇ
リン酸ニカルシウム                                                              ７０．０ｇ
プルロニックＦ−６８                                                          ３０．０ｇ
ラウリル硫酸ナトリウム                                                      １５．０ｇ
ポリビニルピロリドン                                                          １５．０ｇ
ポリエチレングリコール（カルボワックス１５００）      ４．５ｇ
ポリエチレングリコール（カルボワックス６０００）  ４５．０ｇ
コーンスターチ                                                                      ３０．０ｇ
乾燥ステアリン酸ナトリウム                                                  ３．０ｇ
乾燥ステアリン酸マグネシウム                                              ３．０ｇ
エタノール                                                                                        適量
本発明化合物、クエン酸、ラクトース、リン酸二カルシウム、プルロニックＦ−６８及びラウリル硫酸ナトリウムを混合した。
【００５６】
上記混合物をＮｏ．６０スクリーンでふるい、ポリビニルピロリドン、カルボワックス１５００及び同６０００を含むアルコール製溶液で湿式粒状化した。必要に応じてアルコールを添加して粉末をペースト状塊にした。コーンスターチを添加し、均一な粒子が形成されるまで混合を続けた。混合物をＮｏ．１０スクリーンを通過させ、トレイに入れ、１００℃のオープンで１２〜１４時間乾燥する。乾燥粒子をＮｏ．１６スクリーンでふるい、乾燥ラウリル硫酸ナトリウム及び乾燥ステアリン酸マグネシウムを加えて混合し、打錠機で所望の形状に圧縮する。
【００５７】
上記の芯部をワニスで処理し、タルクを散布し、湿気の吸収を防止した。芯部の周囲に下塗り層を被覆した。内服用のために充分な回数のワニス被覆を行った。錠剤を完全に丸く且つ平滑にするために更に下塗り層及び平滑被覆を施した。
所望の色合が得られるまで着色被覆を行った。乾燥後、被覆錠剤を磨いて均一な光沢の錠剤にした。
【００５８】
製剤例３
本発明化合物                                                                    ５        ｇ
ポリエチレングリコール（分子量：４０００）            ０．３ｇ
塩化ナトリウム                                                                    ０．９ｇ
ポリオキシエチレン−ソルビタンモノオレエート        ０．４ｇ
メタ重亜硫酸ナトリウム                                                    ０．１ｇ
メチル−パラベン                                                                ０．１８ｇ
プロピル−パラベン                                                            ０．０２ｇ
注射用蒸留水                                                                        １０．０ｍｌ
上記パラベン類、メタ重亜硫酸ナトリウム及び塩化ナトリウムを撹拌しながら８０℃で上記の約半量の蒸留水に溶解させた。得られた溶液を４０℃まで冷却し、本発明化合物、次いでポリエチレングリコール及びポリオキシエチレンソルビタンモノオレエートを、上記溶液中に溶解させた。次にその溶液に注射用蒸留水を加えて最終の容量に調製し、適当なフィルターペーパーを用いて滅菌濾過することにより滅菌して、注射剤を調製した。
【００５９】
試験例１
インビトロでの抗マラリア活性試験
マラリア原虫の感染率（０．５％、ヘマトクリット値４％）の赤血球を含む血清培地５０μｌを９６穴マイクロプレートに分注し、検体を溶解した２％ジメチルスルホキシドを含有する血清培地各々５０μｌずつを同時に加え、５％ＣＯ２、３７℃の条件下で４８時間培養した。赤血球の懸濁液をエッペルドルチューブに移し、遠心して血清８４μｌを除去した。血清１６μｌ中の赤血球を懸濁し、その懸濁液３μｌを用いて塗末標本を作製した。油浸による検鏡（１０×１００×１．２５倍）下、赤血球３０００個中の感染率を算出し、生育阻害率を求めて活性を評価した。なお、ポジティブコントロールとして、キニーネ（３３ｎｇ／ｍｌ、阻害率約４５％）を用いた。
【００６０】
結果を表１に示す。
【００６１】
【表１】
2004292366.tif 000005
【００６２】
試験例２
インビボでの抗マラリア活性試験
Ｐ．  ｂｅｒｇｈｅｉ  （ＮＫ６５系統）感染マウス（５週齢の雄性ＩＣＲマウス、体重２２〜２５ｇ）を用い、４日抑制試験により、インビボにおける抗マラリア活性を調べた。
【００６３】
４週齢の雄性ＩＣＲマウスを、２５℃で１２時間暗明の条件下で飼育して実験に用いた。感染率が約１５％まで上昇したドナーマウスからヘパリン処理したシリンジで心臓採血を行い、原虫を採取した。この血液の感染血球の最終濃度が０．２ｍｌ当たり１×１０７個になるように０．９％食塩水で希釈した。試験化合物をジメチルスルホキシドに溶解し、試験化合物濃度が１ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ及び３０ｍｇ／ｋｇのジメチルスルホキシド溶液を調製した。
【００６４】
マウス（１群５匹）に感染赤血球を尾静脈より投与した。２時間後に上記で調製した各濃度のジメチルスルホキシド溶液を腹腔内投与し、この時点を０日目として３日目まで毎日投与した。４日目に感染率を調べた。感染率は、マウスの尾から採血して塗末標本を作製し、顕微鏡を用いて感染赤血球を計数することにより求めた。４日目のコントロールマウス（ジメチルスルホキシドで処理した感染マウス５匹）の感染率は、１８〜２２％であった。
【００６５】
試験化合物による原虫の生育抑制率（％）を次式により求めた。
【００６６】
【数１】
2004292366.tif 000006
【００６７】
上記で求めた試験化合物の各濃度と生育抑制率（％）との関係から、生育を５０％抑制する有効投与量を算出した。結果を表２に示す。
【００６８】
【表２】
2004292366.tif 000007