(57)【要約】【解決しようとする課題】アナフィラトキシンC5aを不活化するペプチドを有効成分とする炎症病態の予防剤や治療剤等を提供すること。【課題の解決手段】補体フラグメントであるC5aのアミノ末端３７番目から５３番目のアミノ酸から成るペプチド部分に対する相補性ペップチドを設計合成して、C5aに結合してC5aのアナフィラトキシン活性を不活化するペプチドを創生した。【選択図】４【特許請求の範囲】
【請求項１】
アナフィラトキシンC5aに結合し、C5aの活性を阻害する作用を有するペプチドであって、アミノ酸配列がアミノ酸1文字記号で表記するとASGAPAPGPAGPLRPMFである17アミノ酸から成るペプチド。
【請求項２】
アナフィラトキシンC5aに結合し、C5aの活性を阻害する作用を有するペプチドであって、アミノ酸配列がアミノ酸1文字記号で表記するとASGAPAPGPAGPLRPMFである17個のアミノ酸からなるペプチドで、該ペプチドのアミノ末端のアラニンがアセチル化されていることを特徴とするペプチド。
【請求項３】
アミノ酸配列において、１若しくは2個のアミノ酸が欠失、置換、修飾、若しくは付加され、かつC5aの活性を阻害する作用を有する請求項１又は請求項２に記載のペプチド。
【請求項４】
請求項１から請求項３のいずれかに記載のペプチド、又は該ペプチドの薬学的に許容されるその塩を含有することを特徴とする抗炎症剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
ショック、アレルギー、血管炎、多臓器不全などを含む炎症病態の起因物質のひとつとして働くC5aを不活性化する新規ペプチド、及び治療薬に関する。
【背景技術】
【０００２】
C5aは74個のアミノ酸を含み、約11,000の分子量を有する糖タンパク質である。C5コンバーターゼであるC4b2aC3bやC3bBbC3bによってC5aとC5bに分解されることによって生成される。これはC5のＮ末端、すなわち補体の５番目の成分のタンパク質分解性切断により生成される（Ntlsson et al.，J．Immunol．114：815-822(1975)）。C5a の生物学的性質は、急性及び慢性炎症工程の両者に関与する多数の細胞及び組織を通して拡大する（Hugli，CRC Crit．Rev．Immunol.，１：321-366(1981)）。それらの性質のうち多くは免疫学的に有益である。C5a は、種々の病理学的状態に応答して宿主の防御機構を仲介することが見出されている。C5a は、炎症応答、たとえば平滑微収縮、血管透過性の上昇、ヒト皮膚中に注入される場合、膨疹及び発赤の発生、肥満細胞からのヒスタミン放出、及び多形核白血球（PMNL）からの酸化群発及びリソソーム酵素放出の誘発に通常、関連する広範囲の種類の特定の生物学的機能に関与する。C5a は、好塩基球、好酸球、単球及び好中球を包含するあらゆる循環する白血球細胞からの測定できる応答を刺激する（Hugli、前記；Bautsch et al.，Immunobiol．185：41-52(1992)）。
【０００３】
C5aと多形核白血球ならびに他の標的細胞および標的組織との相互作用は、増大したヒスタミン放出、血管透過性、平滑筋収縮、ならびに好中球、好酸球、および好塩基球を含む炎症細胞の組織への流入を生ずる（Hugli，T.E.，Springer, Semin．Immunopathol.，7:193-219(1981)）。C5aはまた、慢性炎症部位に蓄積する食作用性単核細胞の炎症効果の媒介において重要な役割を果たす（Allison, A.C.ら、H.U．Agents and Actions，8:27(1978)）。C5aは、単球において走化性を誘導し得、そしてこれらの因子により誘起される好中球の応答と類似の方法で、単球にリソゾームの酵素を放出させ得る。C5aは抗体を増強することにより、特に炎症部位で免疫調節の役割を有する（Morgan，E.L.ら、J．Exp．Med.，155:1412(1982)）ことが知られている。
【０００４】
それ故に、強い炎症反応に起因する血管炎や多臓器不全などではC5aの制御が治療法の１つとして期待されている。また、喘息や種々のアレルギー反応の増悪因子としてもC5aが働く場合があるので、C5aの制御が治療法の手段の一つとして期待されている。さらに、種々のショック症状にもアナフィラトキシンとしてC5aが関与する場合があるので、その場合にはC5aの制御が重要な治療法の1つとなる。したがって、C5aを不活化する作用を持つ本発明の相補性ペプチドを上記の病態などを含む種々の急性疾患等の治療薬として活用することができる。この目的のために、C5aを阻害する薬剤としてはC5aレセプターの阻害剤の開発や、C5aに直接働き作用を阻害するものとしてはC5aに対する抗体が開発されている。
【０００５】
例えば、特表平９−５０６２５８の発明では、C5a 類似体は、C5a(１−74)のＣ−末端領域：Ｎ′−Asn(64)-Ile(65)-Ser(66)-His(67)-Lys(68)-Asp(69)-Met(70)-Gln(71)-Leu(72)-Gly(73)-Arc(74)−Ｃ′（配列番号５）（C5a(１−74)のアミノ酸配列の内64−74）が開示されている。
【０００６】
しかし、未だC5aを制御して喘息や種々のアレルギー反応の増悪因子を押さえることができるものではなく、その出現が望まれている。
【特許文献１】特表平９−５０６２５８号公報明細書
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、C5aに直接結合してC5aの活性を阻害するペプチド、及びC5aが関与する病態の治療剤を提供する。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は、上記事実に鑑み、C5aの活性に大きな役割を果たすと考えられるアミノ末端３７番目から５３番目のアミノ酸にかけての１７個のアミノ酸より成るペプチドのアミノ酸配列を標的ペプチドとして用い、このペプチドに相補性値の高いペプチドを設計したものである。
【０００９】
本発明の特徴は、アナフィラトキシンC5aに結合し、C5aの活性を阻害するペプチドであって、アミノ酸配列がアミノ酸1文字記号で表記するとASGAPAPGPAGPLRPMFである17アミノ酸から成るペプチドである。
【００１０】
C5aのアミノ末端から３７番目から５３番目のペプチド（PL37と命名）がC5aのアゴニストとして働くと共に、そのペプチドをMAPペプチドとして多荷にするとC5aレセプターを持つ細胞などにアポトーシスを誘導する作用を持つことを発見した。この部分（PL37)に対する相補性ペプチドを設計し、アミノ酸1文字記号で記載した場合ASGAPAPGPAGPLRPMFとなるアミノ酸配列からなるペプチド（mimetic"A"と命名）を得た。このPepAはC5aに結合してC5aの活性を阻害することができる。
【００１１】
本発明の別の特徴は、アナフィラトキシンC5aに結合し、C5aの活性を阻害する作用を有するペプチドであって、アミノ酸配列がアミノ酸1文字記号で表記するとASGAPAPGPAGPLRPMFである17個のアミノ酸からなるペプチドで、該ペプチドのアミノ末端のアラニンがアセチル化されていることを特徴とするペプチドである。ペプチドのアミノ末端のアラニンをアセチル化することによって、ペプチドの安定性を増すことが出来る。
【００１２】
本発明の別の特徴は、アミノ酸配列において、１若しくは2個のアミノ酸が欠失、置換、修飾、若しくは付加され、かつC5aの活性を阻害する作用を有する請求項１又は請求項２に記載のペプチドである。本発明ペプチドを化学修飾したり、アミノ酸を置換するなどによって、より活性が高く安定なペプチドを得ることが出来る。さらに、本発明ペプチドを直接薬剤として用いることも可能であるが、本発明ペプチドをプロトタイプペプチドとして高次構造を解析して、それより得られる知見にもとづいて、類似構造を有する化学合成薬剤の開発などに用いることもできる。
【発明の効果】
【００１３】
C5aを不活化する必要がある病態は、急性の炎症性病態が想定され、その中には、アナフィラキシーショック、血管炎、多臓器不全、DIC (Disseminated Intravascular Coagulation)など重篤な病態が含まれている。  mimetic"A"（PepA）は、C5aを生体内でも不活化する作用があるので、このようなC5aが病因として関与する病態に対して治療剤として用いることが出来る。
【００１４】
上記の病態の急性期の患者を救命するには緊急に大量の薬剤を投与する必要があるが、Pep-Aのようなペプチド剤は体内での分解が速いので、大量に投与しても投与を中止すれば速やかに分解消失すると考えられる。従って、薬剤蓄積などの副作用や後遺症の懸念が少なく、緊急時に患者を救命するために本薬剤は有用な手段を提供することが出来る。さらに、薬理効果を有する当該ペプチドの高次構造をシュミレートして、その構造を模倣した化学合成薬剤を作製するプロトタイプとして応用することもできる効果を有している。
【００１５】
Pep-Aは皮内の酵素により速やかに分解されてしまうのに対して、アセチル化されたA-Pep-Aは酵素による分解を受けにくく、皮内でC5aに対する抑制作用が継続して、抗炎症作用を発揮する。A-Pep-Aは抗炎症剤として期待される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１６】
以下、本発明を具体的に説明する。本発明で使用するアミノ酸と一文字表記は以下に示すものである。すなわち、天然には、２０種類のアミノ酸が存在し、この２０種類のアミノ酸はアルキル基の構造によって、親水性アミノ酸、疎水性アミノ酸及び中間型アミノ酸に分けることができる。親水性アミノ酸は、グルタミン（Gln;Q）、グルタミン酸（Glu;E）、リジン（Lys;K）、アスパラジン（Asn;N）、アスパラジン酸（Asp;D）、タイロシン（Tyr;Y）及びヒスチジン（His;H）である。疎水性アミノ酸としてはバリン（Val;V）、ロイシン（Leu;L）、イソロイシン（Ile:I）、フェニルアラニン（Phe;F）、及びメチオニン（Met;M）が含まれる。中間型のアミノ酸は、トリプトファン（Trp;W）、アルギニン（Arg;R）、グリシン（Gly;G）、システイン（Cys;C）、セリン（Ser;S）、プロリン（Pro;P）、アラニン（Ala;A）、及びスレオニン（Thr;T）である。
【００１７】
C5aのアミノ末端から３７番目から５３番目のペプチド（PL37と命名）がC5aのアゴニストとして働くと共に、そのペプチドをMAPペプチドとして多荷にするとC5aレセプターを持つ細胞などにアポトーシスを誘導する作用を持つことを発見した。そこで、この部分（PL37)に対する相補性ペプチドを設計し、アミノ酸1文字記号で記載するとASGAPAPGPAGPLRPMFとなるアミノ酸配列からなるペプチド（mimetic"A"と命名）を得た。
【００１８】
このようにして得られたペプチドは、注射剤、経口投与用の錠剤、粉末剤等の形態でヒトに投与することができる。この場合、上記ペプチドの他に、防腐剤、安定化剤などを含んでもよく。上記ペプチドは、他の生物製剤で使用される適当な賦形剤、吸着防止剤などとともに処理して、それぞれの投与形態として投与することができる。例えば、所望量の上記ペプチドと防腐剤、安定化剤、賦形剤、吸着防止剤等を適宜混合して、一定量ずつアンプルに充填・封入し、治療用注射剤とすることができる。あるいは、所望量の上記ペプチドを抗原性を有しないタンパク成分と水溶液の状態で混合し、一定量ずつバイアルに分注して凍結乾燥し、凍結乾燥製剤としてもよい。このような製剤の製造は、通常のペプチド製剤を製造する工程と同様に行うことができる。
【実施例１】
【００１９】
mimetic"A"（アミノ酸配列：ASGAPAPGPAGPLRPMF）とコントロールペプチドとしてのmimetic"B"（アミノ酸配列：ASTAPARAGLPRLPKFF）を用いて以下の実験を行った。
【００２０】
C5aレセプター陽性のTGW細胞株を標的細胞として用い、パッチクランプ法で、検討を行った。その結果、TGW細胞に、PL37をリジンで分岐させたMAP(Multiple Antigen Peptide)に結合させて８個のPL37がMAPに結合したPL37-MAPを作用させると、TGW細胞に刺激が入り、時間をおくとアポトーシスを誘導するに至る。
【００２１】
TGW細胞にPL37-MAPを500 nM作用させると図１左上段に示すごとく膜電位の変化が起こることがパッチクランプ法で検出できる。このとき500 mM PL37-MAPに50マイクロモルのmimetic"A" を添加しておくと膜電位の変化は全く起こらなくなり、完全にPL37MAPの作用が押さえられてしまう（図１：右上）。これに対し、コントロールのmimetic"B"では50マイクロモルを加えてもその様な抑制は起こらない（図１：左中段）。
【００２２】
１０マイクロモルのmimetic"A"でも明らかな抑制が認められた（図１：右中段）が１マイクロモルでは抑制を認めなかった（図2）。それらの結果を纏めたのが図２であるが、図２に示すように、50マイクロモルのmimetic"A"で有意な抑制活性が認められた。
【実施例２】
【００２３】
ヒト末梢血を静脈から採血し、比重遠心法などを用いて、好中球を分離した。
この分離した好中球に蛍光指示薬（Fula2）を取り込ませ、好中球にC5aを作用させたときに起こるカルシュウムインフラックスの測定を浜松フォトニックスのアルガス装置で検出した。
【００２４】
その結果、700 pMのC5aを作用させると、C5aの刺激によって起こるカルシュウムインフラックスが蛍光シグナルとして検出される（図３：左上）。この700 pMのC5aにmimetic"A"を※700 nM（図３：右上）あるいは350 nM〔図３：左2段目〕添加するとC5aの活性を完全に抑制した。70 nMおよび7 nMでもある程度の抑制が認められた（図３：右2段目、左３段目）。これに対し、コントロールペプチドのmimetic"B"では700 nMおよび70 nMでも全く抑制が認められなかった。繰り返し行った実験を纏めたのが図４であるが、700 pM (0.7 nM)のC5aに対し、7 nM 以上のmimetic"A"ペプチドで明瞭な抑制効果が認められた。
【実施例３】
【００２５】
体重約250ｇの雄ラットを0.05 mg/kgのLPSで感作しておいて20時間後にラットの種特異的補体制御膜因子であるCrryに対するモノクローナル抗体（5I2抗体)を0.75mg/kg静脈内に投与すると３０分以内にショック死を起こす。
【００２６】
この5I2抗体投与10分前に4 mg/kgのmimetic"A"（簡単にPep-Aとも略称）を静脈内に投与しておくと全てのラットがショック死を免れた。0.5 mg/kgや2 mg/kgのPep-Aではショック死を起こすラットもあったが、救命できたものもあった。これに対し、Pep-Aの代わりにコントロールのmimetic"B"(Pep-Bと略称)を4 mg/kg投与したものや、生理食塩水だけを投与したラットは全てショック死した。
（表１）ラットにLPS(0.05 mg/kg)を皮下投与しておき、20時間後に種特異的補体制御膜因子である5I2抗体(0.75 mg/kg)を静脈内に投与すると30分以内にショック死を起こす。5I2抗体投与の10分前にmimetic"A"(Pep-A)を４ mg/kg投与すると全例生存するようになる。対照の※mimetic"B"(Pep-B)や生理食塩水のみでは救命できない。
【００２７】
【表１】
2004269520.tif 000002
以上の結果から、mimetic"A"（Pep-A)は生体内でもC5aを不活化してショック死を防ぐ作用を持つことが明らかとなった。
【実施例４】
【００２８】
マウスにCandida albicans 由来のCAWS（Candida albicans water solubule extract）を静脈内に投与するとマウスは補体活性化を伴う急性炎症を起こして死亡する。これに先立ち１０分前にmimetic”A” (Pep-A) を投与しても救命することができなかった。マウスの体内でPep-Aが速やかに分解を受けてしますためと考えた。そこで、Pep-Aの蛋白分解酵素などに対する安定性を増すために、アミノ末端のアラニンをアセチル化したアセチル化Pep-A（A-Pep-A）を作成した。
（表２）アセチル化Pep-A（A-Pep-A）のＣＡＷＳ致死に与える影響を調べるために、雄性ICRマウス，5週令を用い、ＣＡＷＳ投与10分前に生理食塩水、又はA-Pep-Aを投与したICRマウスに， CAWSを静脈内投与した。その結果，CAWSをマウス当たり 200μgを投与した系では抑制は見られなかったが、CAWSをマウス当たり100μg投与した系では、マウスのA-Pep-A 静脈内（i.v.）前処置群で致死の抑制が観察された。したがって、アミノ末端のアラニンをアセチル化するなどの化学修飾を施すことにより、Pep-Aの治療効果を高めることができる。
【００２９】
【表２】
2004269520.tif 000003
【実施例５】
【００３０】
ラット（Wistar/STオス、８週齢、体重約250グラム）の背部皮内に補体制御膜因子であるCrryに対するモノクローナル抗体（5I2抗体）を投与して惹起する炎症反応に対するPep-Aおよびアミノ末端のアラニンをアセチル化したA-Pep-Aの作用を解析した。炎症反応の指標としては、5I2抗体投与の１時間前にEvans Blue 液（生理食塩水に8 mg/mlの濃度に溶解）を0.5 ml尾静脈より注射しておき、炎症局所への色素の漏出で判定した（Nishikawa, K., Matsuo, S., Okada, N., Morgan, B.P. and Okada, H.J. Immunol. 156: 1182-1188 (1996)）。色素は血漿タンパク質に結合するので、局所炎症反応が起こることにより血漿タンパク質が毛細血管からもれ出た事の指標となる。
（表３）
５μｇの5I2抗体（40μｌの生食に溶解）を皮内に接種するときに、4μｇのA-Pep-Aを混合しておくと30分後の色素漏出を抑えることができ、40μｇのA-Pep-Aを加えておいたときには、２時間後でも明瞭な抑制が認められた。これに対し、Pep-Aでは40μｇを用いても色素漏出の抑制は３０分目でも認められなかった。Pep-AをA-Pep-Aにすることにより、炎症抑制作用が極めて高まることが示された。Pep-Aは皮内の酵素により速やかに分解されてしまうのに対して、アセチル化されたA-Pep-Aは酵素による分解を受けにくいために皮内でC5aに対する抑制作用が継続し、炎症抑制作用が強く現れたと解釈できた。したがって、A-Pep-Aは炎症抑制剤として強い効果を発揮すると考えられる。
【００３１】
【表３】
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薬物製剤
治療的有効量の１つまたは複数の識別された上記の作用物質を含む薬学的に許容し得る製剤が、１つまたは複数の薬学的に許容し得る担体（添加剤）および／または希釈剤とともに処方される。以下で詳細に説明するように、本発明の薬学的組成物は、以下のことに適応したものを含めて、固体または液体での投与のために具体的に処方され得る：（１）経口投与、例えば、水薬（水溶液もしくは非水溶液または懸濁液）、錠剤、巨丸剤、粉末薬、顆粒剤、舌に塗布するためのペースト；（２）非経口投与、例えば滅菌溶液もしくは懸濁液として例えば皮下、筋内もしくは静脈内注射による；（３）局所応用、例えば皮膚に応用されるクリーム、軟膏またはスプレーとして；または（４）膣内または直腸内に、例えば膣座薬、クリームまたは発泡剤として。しかし、いくつかの実施形態では、本発明の化合物を単に滅菌水に溶解または懸濁してもよい。
【００３２】
「治療的有効量」という句は、本明細書で使用される場合、いずれの医療にも適用可能な妥当な便益／リスク比で、何らかの所望の治療効果を生じるために有効な作用物質または組成物の量を意味する。
【００３３】
「薬学的に許容し得る」という句は、本明細書では、正しい医学的判断の範囲内で、妥当な便益／リスク比に見合って、過剰な毒性、刺激、アレルギー反応等の問題や合併症なしに、人間および動物の組織に接触しての使用に好適な、化合物、材料、組成物、および／または投薬形態を指すために使用される。
【００３４】
「薬学的に許容し得る担体」という句は、本明細書で使用される場合、体の一器官または一部から体の別の器官または一部へ本発明のアンタゴニストを運搬または輸送することに関与する液体または固体の充填剤、希釈剤、補形薬、溶剤またはカプセル化材料のような、薬学的に許容し得る材料、組成物または賦形剤を意味する。各担体は、剤形の他の成分と適合し、患者に有害でないという意味で「許容し得る」ものでなければならない。薬学的に許容し得る担体として働き得る材料のいくつかの例には以下のものがある：（１）ラクトース、グルコースおよびスクロースのような糖；（２）トウモロコシデンプンおよびバレイショデンプンのようなデンプン；（３）カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロースおよび酢酸セルロースのようなセルロースおよびその誘導体；（４）粉末トラガカント；（５）麦芽；（６）ゼラチン；（７）タルク；（８）ココアバターおよび座薬ワックスのような補形薬；（９）落花生油、綿実油、ベニバナ油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油およびダイズ油のような油；（１０）プロピレングリコールのようなグリコール；（１１）グリセリン、ソルビトール、マンニトールおよびポリエチレングリコールのようなポリオール；（１２）オレイン酸エチルおよびラウリン酸エチルのようなエステル；（１３）寒天；（１４）水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウムのような緩衝剤；（１５）アルギン酸；（１６）パイロジェンフリー水；（１７）等張食塩液；（１８）リンガー溶液；（１９）エチルアルコール；（２０）リン酸緩衝溶液；ならびに（２１）薬物処方で使用される他の非毒性の適合物質。いくつかの実施形態では、薬物製剤は非発熱性である。すなわち、患者の体温を上昇させない。
【００３５】
この点で「薬学的に許容し得る塩」という用語は、本発明の化合物の比較的非毒性の無機または有機酸付加塩を指す。これらの塩は、本発明の化合物の最終的な単離および精製中にｉｎ  ｓｉｔｕで調製してもよく、または本発明の精製された化合物をその遊離塩基形態で好適な有機または無機酸と別個に反応させ、こうして形成された塩を単離することによって調製してもよい。代表的な塩としては、臭化水素酸塩、塩酸塩、硫酸塩、硫酸水素塩、リン酸塩、硝酸塩、酢酸塩、吉草酸塩、オレイン酸塩、パルミチン酸塩、ステアリン酸塩、ラウリン酸塩、安息香酸塩、乳酸塩、リン酸塩、トシル酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、ナフチル酸塩、メシル酸塩、グルコヘプトン酸塩、ラクトビオン酸塩、およびラウリルスルホン酸塩等がある。（例えば、Berge et al. (1977), J. Pharm. Sci. 66:1-19、を参照されたい。）
本発明の作用物質の薬学的に許容し得る塩としては、例えば非毒性の有機または無機酸からの、化合物の従来の非毒性塩または第四アンモニウム塩がある。例えば、このような従来の非毒性塩としては、塩酸、臭化水素酸、硫酸、スルファミン酸、リン酸、硝酸等のような無機酸から誘導されたもの；ならびに酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、ステアリン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、パルミチン酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、フェニル酢酸、グルタミン酸、安息香酸、サリチル酸、スルファニル酸、２−アセトキシ安息香酸、フマル酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、エタンジスルホン酸、シュウ酸、イソチオン酸等のような有機酸から調製された塩がある。
【００３６】
他の場合、本発明の作用物質は、１つまたは複数の酸性官能基を含んでもよく、したがって、薬学的に許容し得る塩基と薬学的に許容し得る塩を形成することが可能である。これらの例で「薬学的に許容し得る塩」という用語は、本発明の化合物の比較的非毒性の無機または有機塩基付加塩を指す。これらの塩も同様に、作用物質の最終的な単離および精製中にｉｎ  ｓｉｔｕで調製してもよく、または精製された作用物質をその遊離酸形態で、薬学的に許容し得る金属カチオンの水酸化物塩、炭酸塩または炭酸水素塩のような好適な塩基と、アンモニアと、または薬学的に許容し得る有機第一、第二または第三アミンと別個に反応させることによって調製してもよい。代表的なアルカリまたはアルカリ土類塩としては、リチウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、およびアルミニウム塩等がある。塩基付加塩の形成に有用な代表的な有機アミンとしては、エチルアミン、ジエチルアミン、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペラジン等がある。（例えば、Berge et al. (1977)、前掲、を参照されたい。）
ラウリル硫酸ナトリウムおよびステアリン酸マグネシウムのような湿潤剤、乳化剤および潤滑剤、ならびに着色剤、放出剤、被覆剤、甘味料、香味剤および香料、保存料および酸化防止剤もまた組成物中に存在してもよい。
【００３７】
薬学的に許容し得る酸化防止剤の例には以下のものがある：（１）アスコルビン酸、塩酸システイン、硫酸水素ナトリウム、二亜硫酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウム等のような水溶性酸化防止剤；（２）パルミチン酸アスコルビル、ブチルヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチルヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、レシチン、没食子酸プロピル、α−トコフェロール等のような油溶性酸化防止剤；ならびに（３）クエン酸、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ソルビトール、酒石酸、リン酸等のような金属キレート剤。
【００３８】
本発明の剤形は、経口、経鼻、局所（口内および舌下を含む）、直腸、膣および／または非経口投与に好適なものを含む。剤形は、単位投薬形態で都合よく差し出されてもよく、薬学分野で周知のいかなる方法によって調製されてもよい。担体材料と組み合わせて単一投薬形態を作製することができる活性成分の量は、治療されるホスト、特定の投与方式に応じて変わるであろう。担体材料と組み合わせて単一投薬形態を作製することができる活性成分の量は一般に、治療効果を生じる化合物の量であろう。一般に、１００パーセントのうち、この量は、約１％から約９９％まで、好ましくは約５％から約７０％まで、最も好ましくは約１０％から約３０％までの範囲の活性成分である。
【００３９】
これらの剤形または組成物を調製する方法は、本発明の１つまたは複数の作用物質を担体と、および随意に１つまたは複数の副成分と結びつけるステップを含む。一般に、剤形は本発明の１つまたは複数の作用物質を液体担体、もしくは微粉化した固体担体、またはその両方と均一かつ緊密に結びつけ、必要であれば製品を整形することによって調製される。
【００４０】
経口投与に好適な本発明の剤形は、カプセル、カシェ、丸薬、錠剤、ロゼンジ（味付けされた主薬、通常はスクロースおよびアラビアゴムまたはトラガカント、を用いる）、粉末、顆粒、の形態でもよく、または水性もしくは非水性液体中の溶液もしくは懸濁液として、または水中油もしくは油中水液体乳剤として、またはエリキシルもしくはシロップとして、または香錠（ゼラチンおよびグリセリン、またはスクロースおよびアラビアゴムのような不活性基剤を用いる）および／または含嗽剤等としてでもよく、それぞれ活性成分として所定量の本発明の化合物を含む。本発明の作用物質は、巨丸剤、舐剤、またはペーストとして投与されてもよい。
【００４１】
経口投与のための本発明の固体投薬形態（カプセル、錠剤、丸薬、糖衣錠、粉末薬、顆粒剤等）では、活性成分は、クエン酸ナトリウムまたはリン酸二カルシウムのような１つまたは複数の薬学的に許容し得る担体、および／または以下のもののいずれかと混合される：（１）デンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール、および／またはケイ酸のような充填剤または増量剤；（２）例えばカルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、スクロースおよび／またはアラビアゴムのような粘結剤；（３）グリセロールのような保湿剤；（４）寒天、炭酸カルシウム、バレイショまたはタピオカデンプン、アルギン酸、ある特定のケイ酸塩、および炭酸ナトリウムのような崩壊剤；（５）パラフィンのような溶解遅延剤；（６）４級アンモニウム化合物のような吸収促進剤；（７）セチルアルコールおよびモノステアリン酸グリセロールのような湿潤剤；（８）カオリンおよびベントナイト粘土のような吸収剤；（９）タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム、およびそれらの混合物のような潤滑剤；ならびに（１０）着色剤。カプセル、錠剤および丸薬の場合、薬物組成物は緩衝剤を含んでもよい。同様の種類の固体組成物が、ラクトースまたは乳糖のような補形薬と、高分子量ポリエチレングリコール等とを用いたソフトおよびハード充填ゼラチンカプセル内の充填剤としても使用可能である。
【００４２】
錠剤は、圧縮または成形によって、随意に１つまたは複数の副成分とともに、作製され得る。圧縮された錠剤は、粘結剤（例えば、ゼラチンもしくはヒドロキシプロピルメチルセルロース）、潤滑剤、不活性希釈剤、保存料、崩壊剤（例えば、グリコール酸ナトリウムデンプンもしくは架橋型カルボキシメチルセルロースナトリウム）、表面活性剤または分散剤を用いて調製され得る。成形タブレットは、不活性液体希釈剤で湿潤化された粉末化合物の混合物を好適な機械で成形することによって作製され得る。
【００４３】
糖衣錠、カプセル、丸薬および顆粒剤のような、本発明の薬物組成物の錠剤等の固体投薬形態は、随意に、刻み目を付けられ、または薬物調剤分野において周知の腸溶性被膜等の被膜のような被膜および殻を用いて調製されてもよい。それらは、例えば、所望の放出プロファイルを提供するための種々の比率でのヒドロキシプロピルメチルセルロース、他のポリマーマトリックス、リポソームおよび／またはミクロスフェアを用いて、内部の活性成分の緩徐なまたは制御された放出を提供するように調剤されてもよい。それらは、例えば、細菌保持フィルターを通す濾過によって、または使用直前に滅菌水等の滅菌注射可能媒質に溶解することができる滅菌固体組成物の形態で滅菌剤を組み込むことによって、滅菌してもよい。これらの組成物は、随意に乳白剤を含んでもよく、胃腸管のある特定の部分のみで、またはそこで優先的に、随意に遅延したやり方で、１つまたは複数の活性成分を放出する組成であってもよい。使用可能な埋込み組成物の例として、ポリマー物質およびワックスがある。活性成分は、適当であれば１つまたは複数の上記の補形薬とともに、マイクロカプセル化された形態であってもよい。
【００４４】
本発明の化合物の経口投与のための液体投薬形態としては、薬学的に許容し得る乳剤、マイクロエマルジョン、溶液、懸濁液、シロップおよびエリキシルがある。液体投薬形態は、活性成分に加えて、例えば水や他の溶媒のような当技術分野で一般に使用される不活性希釈剤、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブタジエングリコール、油（特に、綿実油、落花生油、トウモロコシ油、胚油、オリーブ油、ヒマシ油およびゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフリルアルコール、ポリエチレングリコールおよびソルビタンの脂肪酸エステルのような可溶化剤および乳化剤、およびそれらの混合物を含んでもよい。
【００４５】
不活性希釈剤の他に、経口組成物は、湿潤剤、乳化剤および懸濁剤、甘味料、香味剤、着色剤、香料および保存剤のような補助薬を含んでもよい。
【００４６】
懸濁液は、活性化合物に加えて、例えば、エトキシル化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトールおよびソルビタンエステル、微結晶セルロース、メタ水酸化アルミニウム、ベントナイト、寒天およびトラガカント、ならびにそれらの混合物のような懸濁剤を含んでもよい。
【００４７】
直腸または膣投与のための本発明の薬物組成物の剤形は、座薬として提示され得る。この座薬は、例えば、ココアバター、ポリエチレングリコール、座薬ワックスまたはサリチル酸塩を含む１つまたは複数の好適な非刺激性補形薬または担体と、本発明の１つまたは複数の作用物質を混合することによって調製することが可能であり、室温で固体であるが、体温では液体であるため、直腸または膣腔で融解し、活性化合物を放出することになる。
【００４８】
膣投与に好適な本発明の剤形はまた、当技術分野で適当であることが知られているような担体を含むペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、発泡またはスプレー剤形も含む。
【００４９】
本発明の１つまたは複数の作用物質の局所的または経皮的投与の投薬形態は、粉末、スプレー、軟膏、ペースト、クリーム、ローション、ゲル、溶液、パッチおよび吸入薬を含む。活性作用物質は、薬学的に許容し得る基材と、および必要であれば保存料、緩衝液、または推進剤と、滅菌条件下で混合してもよい。
【００５０】
軟膏、ペースト、クリームおよびゲルは、本発明の活性化合物に加えて、動物または植物脂、油、ワックス、パラフィン、デンプン、トラガカント、セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、シリコーン、ベントナイト、ケイ酸、タルクおよび酸化亜鉛、またはそれらの混合物のような補形薬を含んでもよい。
【００５１】
粉末およびスプレーは、本発明の化合物に加えて、ラクトース、タルク、ケイ酸、水酸化アルミニウム、ケイ酸カルシウムおよびポリアミド粉末、またはこれらの物質の混合物のような補形薬を含んでもよい。スプレーは、塩化フッ化炭化水素や、ブタンおよびプロパンのような揮発性非置換炭化水素のような通例の高圧ガスをさらに含んでもよい。
【００５２】
経皮的パッチは、本発明の作用物質を、体に制御して配送するという更なる利点を有する。このような投薬形態は、適当な媒質に本発明の化合物を溶解または分散させることによってなされ得る。吸収増進剤を用いて、皮膚を横切る本発明の作用物質のフラックスを上昇させることも可能である。このようなフラックスの速さは、速さ制御膜を設けるか、またはポリマーマトリックスもしくはゲル中に化合物を分散させるかのいずれかによって制御することができる。
【図面の簡単な説明】
【００５３】
【図１】TGW細胞にPL37MAPを作用させた膜電位の変化を示す図面である。
【図２】TGW細胞にPL37MAPを作用させた膜電位の変化を纏めた図面である。
【図３】C5aの刺激によって起こるカルシュウムインフラックスを示す図面である。
【図４】C5aの刺激によって起こるカルシュウムインフラックスのデータを纏めた図面である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【配列表】
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