(57)【要約】【解決手段】甘草の中性乃至アルカリ性水抽出液を酸処理することにより生成した沈殿物のエタノール抽出液の活性炭脱色液より、グリチルリチンを晶析させた後の晶析母液からなることを特徴とする、魚病原因菌に対する抗菌剤。【効果】本発明によれば、甘草抽出物由来の魚病原因菌に対する抗菌剤を得ることができ、特に、ビブリオ病、細菌性腸管白濁症、潰瘍病、桿菌性壊死症、カラムナリス病、冷水病、滑走細菌症、ノカルジア症、類結節症、乳酸桿菌症、ブドウ球菌症、菌血症、せっそう病又は連鎖球菌症における予防及び治療に有効である。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
甘草の中性乃至アルカリ性水抽出液を酸処理することにより生成した沈殿物のエタノール抽出液の活性炭脱色液より、グリチルリチンを晶析させた後の晶析母液からなることを特徴とする、魚病原因菌に対する抗菌剤。
【請求項２】
魚病が、ビブリオ病、細菌性腸管白濁症、潰瘍病、桿菌性壊死症、カラムナリス病、冷水病、滑走細菌症、ノカルジア症、類結節症、乳酸桿菌症、ブドウ球菌症、菌血症、せっそう病又は連鎖球菌症であることを特徴とする請求項１記載の抗菌剤。
【請求項３】
甘草を中性乃至アルカリ性下で水抽出し、この抽出液を酸処理することにより得られる沈殿物をエタノール抽出し、得られたエタノール抽出液に対し活性炭脱色処理を施した後、グリチルリチンを晶析させた後の晶析母液を採取することを特徴とする魚病原因菌に対する抗菌剤の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、甘草抽出物由来の魚病原因菌に対する抗菌剤及びその製造方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
甘草及びその成分のグラム陽性菌に対する抗菌作用については、既に種々知られている（非特許文献１：築山良一  「食品と開発」、２００２年、３７巻  ６号  ｐ５９−６１、非特許文献２：Ｋｅｎｚｏ  Ｏｋａｄａ  「Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．」１９８９年、Ｖｏｌ．３７、Ｎｏ．９、ｐ２５２８−２５３０、非特許文献３：Ｓａｃｈｉｏ  Ｄｅｍｉｚｕ  「Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．」１９８８年、Ｖｏｌ．３６、Ｎｏ．９、ｐ３４７４−３４７９参照）。また、甘草又は甘草抽出物を含有する養魚用飼料についても既に使用されている（特許文献１：特公昭４７−１００１３号公報参照）。さらに、甘草又は甘草抽出物による魚類の感染症予防方法（特許文献２：特開平３−１７３８２７号公報、３：特許第２５５０４１１号公報、４：特開平３−１７５９３４号公報参照）、連鎖球菌症の予防及び治療剤として甘草等の数種類の生薬を用いる方法（特許文献５：特許第２８４０８５１号公報参照）、ウイルス病の予防及び治療剤として甘草等の数種類の生薬を用いる方法（特許文献６：特許第２５３５５５５号公報参照）が知られている。
しかしながら、魚病原因菌に対して、さらなる抗菌作用を有するものが望まれていた。
【０００３】
【特許文献１】
特公昭４７−１００１３号公報
【特許文献２】
特開平３−１７３８２７号公報
【特許文献３】
特許第２５５０４１１号公報
【特許文献４】
特開平３−１７５９３４号公報
【特許文献５】
特許第２８４０８５１号公報
【特許文献６】
特許第２５３５５５５号公報
【特許文献７】
特開２０００−２６２２２６号公報
【非特許文献１】
築山良一  「食品と開発」２００２年、３７巻、６号、ｐ５９−６１
【非特許文献２】
Ｋｅｎｚｏ  Ｏｋａｄａ  「Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．」
１９８９年、Ｖｏｌ．３７、Ｎｏ．９、ｐ２５２８−２５３０
【非特許文献３】
Ｓａｃｈｉｏ  Ｄｅｍｉｚｕ  「Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．」１９８８年、Ｖｏｌ．３６、Ｎｏ．９、ｐ３４７４−３４７９
【非特許文献４】
「第十四改正日本薬局方解説書」廣川書店、平成１３年６月２７日出版
【非特許文献５】
「食品添加物公定書解説書」第７版、廣川書店、平成１１年６月９日出版
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は上記事情に鑑みなされたもので、広範囲にわたる魚病原因菌への抗菌作用を有し、魚介類に適用して魚病の予防及び治療をすることができる甘草抽出物由来の魚病原因菌に対する抗菌剤及びその製造方法を提供することを目的とする。
【０００５】
【課題を解決するための手段及び発明の実施の形態】
本発明者は、上記目的を達成するため、養殖業において問題になっている数種の魚病原因菌に対する抗菌作用について鋭意研究を重ねてきた。その結果、甘草を中性乃至アルカリ性下で水抽出し、この抽出液を酸処理することにより得られる沈殿物をエタノール抽出し、得られたエタノール抽出液に対し活性炭脱色処理を施した後、グリチルリチンを晶析させた後の晶析母液に抗菌作用を見出し、本発明をなすに至ったものである。
【０００６】
従来、一般の甘草抽出物といわれているものは、熱水又は含水アルコール抽出によるものであり、グリチルリチン含量として５〜２５重量％程度、フラボノイド含量として１〜５重量％程度のものが多い（非特許文献４：第十四改正日本薬局方解説書）、廣川書店、平成１３年６月２７日出版、非特許文献５：「食品添加物公定書解説書」、第７版、廣川書店、平成１１年６月９日出版参照）。また、グリチルリチンの誘導体を製造するために使用されている方法は、アルカリ抽出を行い、晶析を行った結晶物を使用し、結晶物を取り除いた母液は廃棄されるのが通常であった。これに対し、これまで廃棄されていた母液が、微生物に起因する魚病原因菌に対して抗菌作用を有することは、本発明者による新知見である。
【０００７】
従って、甘草の中性乃至アルカリ性水抽出液を酸処理することにより生成した沈殿物のエタノール抽出液の活性炭脱色液より、グリチルリチンを晶析させた後の晶析母液からなることを特徴とする、魚病原因菌に対する抗菌剤及び甘草を中性乃至アルカリ性下で水抽出し、この抽出液を酸処理することにより得られる沈殿物をエタノール抽出し、得られたエタノール抽出液に対し活性炭脱色処理を施した後、グリチルリチンを晶析させた後の晶析母液を採取することを特徴とする魚病原因菌に対する抗菌剤の製造方法を提供する。即ち、本発明は、グリチルリチン含量としては、水産飼料用で使われている従来の甘草抽出物と比較して同程度であるが、高含量のフラボノイド類を含有しているため、抗菌活性が高いものである。このため、微生物に起因する魚病、例えば、ビブリオ病、細菌性腸管白濁症、潰瘍病、桿菌性壊死症、カラムナリス病、冷水病、滑走細菌症、ノカルジア症、類結節症、乳酸桿菌症、ブドウ球菌症、菌血症、せっそう病又は連鎖球菌症における予防及び治療をすることができる抗菌剤（甘草抽出物）を提供することができる。
【０００８】
以下、本発明につきさらに詳しく説明する。
本発明の抗菌剤の原料となる甘草は、マメ科Ｇｌｙｃｙｒｒｉｈｉｚａ属に属する植物で、例えば、Ｇ．ｇｌａｂｒａ、Ｇ．ｕｒａｌｅｎｓｉｓ、Ｇ．ｉｎｆｌａｔａ等が使用可能であるが、本発明においては、特にはＧ．ｉｎｆｌａｔａを使用することが好ましい。また、使用部位は根、根茎、葉、茎のいずれの部位でも原料として使用することができるが、根及び／又は根茎を原料として使用することが好ましい。また、これらは生のものを使用しても乾燥させたものを使用してもよいが、工業的に製造されているグリチルリチンの抽出原料となっている乾燥根及び乾燥根茎を原料として使用することができる。なお、甘草は生産地の名前を冠して呼ばれることが多く、例えば、東北甘草、西北甘草、新疆甘草、モンゴル産甘草、ロシア産甘草、アフガニスタン産甘草等を挙げることができる。
【０００９】
本発明の抗菌剤を得るための抽出条件としては、上記の甘草に対し中性乃至アルカリ性下で水抽出するが、通常、水抽出液のｐＨは７〜１１、特に９〜１０が好ましく、抽出温度は、冷水、温水又は熱水いずれでもよいが、５〜１００℃、特に５０〜１００℃が好ましい。ｐＨの調整には、アンモニア、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等を用いることができる。抽出時間は抽出温度によって異なるが、通常１〜７２時間であり、特に２〜２４時間が好ましい。
【００１０】
次に、上記抽出液を酸処理することにより得られる沈殿物をエタノール抽出し、得られたエタノール抽出液に対し活性炭脱色処理を施した後、グリチルリチンを晶析させた後の晶析母液を得る。
【００１１】
酸処理は、硫酸、塩酸、硝酸等の酸性溶液にて、ｐＨ２〜４の酸性で析出処理を行い、グリチルリチン等を沈殿させる。濾過により沈殿物と濾液に分ける。得られた沈殿物１００重量部に対して２〜１０重量部のエタノールを加え、エタノール抽出液を得る。この抽出液を撹拌し、濾過する。得られた濾液に対して２〜１０重量％の活性炭を加え、還流抽出を行う。その後、セライト、珪藻土、パーライト等の濾過助剤を用いて濾過を行い、アンモニア水、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等のアルカリ水を加えてｐＨ４．０〜７．０、好ましくはｐＨ５．０〜５．５に調整する。さらに、３〜１０℃、好ましくは５℃で１〜５日間、好ましくは２日間静置することでグリチルリチンを晶析させた後、濾過して、晶析したグリチルリチンを除去する。
【００１２】
この場合、上記エタノール抽出液を乾燥して得られた抽出物中のグリチルリチン量は、固形あたり１０〜３０重量％である。上記晶析工程で、このグリチルリチンの２０〜５０重量％、特に３０〜４０重量％が晶析され、除去されるように晶析を行い、晶析工程後の晶析母液を乾燥して得られた抽出物中のグリチルリチン含有量は、固形あたり５〜２０重量％、特に８〜１５重量％であることが好ましい。
【００１３】
本発明の抗菌剤は上記晶析母液からなるものであるが、晶析母液をそのまま使用することもでき、さらに、常法により濃縮して使用することもできる。また、適当な方法で抽出液を乾燥させることにより、黄褐色の甘草抽出物の粉末又は固形物として用いることもできる。
【００１４】
本発明の抗菌剤のグリチルリチン含有量は、固形あたり５〜２０重量％、特に８〜１５重量％が好ましく、フラボノイド類の含有量は、固形あたり５〜２５重量％、特に１０〜２０重量％が好ましい。本発明の抗菌剤のフラボノイド類含量は水産飼料用で使われている従来の甘草抽出物と比較して２〜２０倍程度、高含量である。
【００１５】
本発明の抗菌剤は、魚病原因菌に対する抗菌剤である。本発明において、魚病原因菌としては、ビブリオ  ダムセラ（Ｖｉｂｒｉｏ  ｄａｍｓｅｌａ）、ビブリオ  ハーベイ（Ｖｉｂｒｉｏ  ｈａｒｖｅｙｉ）、ビブリオ  オーダリー（Ｖｉｂｒｉｏ  ｏｒｄａｌｌｉ）、ビブリオ  ペスシダ（Ｖｉｂｒｉｏ  ｐｅｎａｅｉｃｉｄａ）、ビブリオ  スプレンディダス（Ｖｉｂｒｉｏ  ｓｐｌｅｎｄｉｄｕｓ）、ビブリオ  バルニフィカス（Ｖｉｂｒｉｏ  ｖｕｌｎｉｆｉｃｕｓ）、ビブリオ  アンギラルム（Ｖｉｂｒｉｏ  ａｎｇｕｉｌｌａｒｕｍ）［以上、ビブリオ病］、ビブリオ  イチオエンテリー（Ｖｉｂｒｉｏ  ｉｃｈｔｈｙｏｅｎｔｅｒｉ）［細菌性腸管白濁症］、ビブリオ  パラヘモリティカス（Ｖｉｂｒｉｏ  ｐａｒａｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｓ）［潰瘍病］、ビブリオ  トゥビアッシ（Ｖｉｂｒｉｏ  ｔｕｂｉａｓｈｉｉ）［桿菌性壊死症］、フラボバクテリウム  カラムナレ（Ｆｌａｖｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｃｏｌｕｍｎａｒｅ）［カラムナリス病］、フレキシバクター  サイクロフィラム（Ｆｌｅｘｉｂａｃｔｅｒｐｓｙｃｈｒｏｐｈｉｌｕｍ）［冷水病］、フレキシバクター  マリティマス（Ｆｌｅｘｉｂａｃｔｅｒ  ｍａｒｉｔｉｍｕｓ）［滑走細菌症］、ノカルディア  アステロイデス（Ｎｏｃａｒｄｉａ  ａｓｔｅｒｏｉｄｅｓ）［ノカルジア症］、フォトバクテリウム  ダムセラ（Ｐｈｏｔｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄａｍｓｅｌａ）［類結節症］、カーノバクテリウム  ピシコラ（Ｃａｒｎｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｐｉｓｃｉｃｏｌａ）［乳酸桿菌症］、スタフィロコッカス  エピデルミデス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｅｉｓ）［ブドウ球菌症］、ラクトコッカス  ガービア（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｇａｒｖｉｅａｅ）［菌血症］、エロモナス  サルモニシダ（Ａｅｒｏｍｏｎａｓ  ｓａｌｍｏｎｉｃｉｄａ）［せっそう病］、エンテロコッカス種（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｐ．）［連鎖球菌症］等が挙げられ、これらに甘草抽出物の抗菌作用が確認されており、これらを原因とする魚病の予防及び治療に有効である。
【００１６】
上記の魚病は、ハマチ、ブリ、タイ、ヒラメ、スズキ、フグ、エビ、アジ、サケ、カンパチ、アユ、ウナギ、ニジマス、サクラマス、ヤマメ、イワナ、コイ、カキ、アサリ、ハマグリ等の広範囲な種類の魚介類に発生し、これらの魚介類に発生する上記記載の魚病に有効である。
【００１７】
本発明の甘草抽出液は、稚魚から成魚に投与することができ、投与方法は経口投与又は非経口投与が可能である。経口投与する場合は、甘草抽出液をそのまま又は任意の魚用飼料と混合し投与することも可能である。また、その投与量は、通常、魚体重１ｋｇあたり５〜５０ｍｇである。
【００１８】
本発明の抗菌剤は、甘草から得られる抽出物を用いるため、抗生物質による薬剤耐性菌の出現や副作用の問題がなく、安心して投与することができる。さらに、薬剤の残留による人体へ影響の心配がないため、特に、養殖魚に対する魚病の予防剤及び治療剤として用いることができる。
【００１９】
【実施例】
以下、実施例及び比較例を示し、本発明を具体的に説明するが、本発明は下記の実施例に制限されるものではない。なお、下記の例において特に明記のない場合は、「％」は重量％を示す。
【００２０】
［実施例１］
甘草（Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ  ｉｎｆｌａｔａ）の根茎を粉砕し、チップ状にした。この甘草チップ１．０ｋｇを１０Ｌの３％アンモニア水（ｐＨ１０）で一晩抽出した後、固液分離した。得られた抽出液に対し、１％硫酸溶液により酸性析出処理を行い、グリチルリチン等を沈殿させ、濾過により沈殿物及び抽出濾液に分けた。この内、沈殿物にエタノール１Ｌを加え、常温で１時間、撹拌し、セライトを用いて濾過を行った。得られた濾液に活性炭６０ｇを加え、常温で１時間、還流抽出を行った。その後、セライトを用いた濾過を行った。得られた濾液にアンモニア水を加えてｐＨ５．０〜５．５に調整した。濾液を５℃で２日間、静置することでグリチルリチンを晶析させた後、遠心分離することで結晶と濾液に分けた。得られた濾液を減圧濃縮し、炭酸ナトリウムを用いてｐＨ７．０程度に中和し、さらに減圧濃縮し、噴霧乾燥させることで、１５０ｇの黄褐色抽出物粉末である甘草抽出物を得た。この甘草抽出物のグリチルリチン含量は１１％であり、フラボノイド類含量は１５％であった。得られた甘草抽出物について、下記方法で抗菌作用を評価した。結果を表１に示す。
【００２１】
［比較例１］
甘草（Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ  ｉｎｆｌａｔａ）の根茎を粉砕し、チップ状にした。この甘草チップ１．０ｋｇを１０Ｌの水で一晩抽出した後、固液分離し減圧濃縮後、噴霧乾燥させることで２５０ｇの褐色抽出物粉末である甘草抽出物を得た。この甘草抽出物のグリチルリチン含量は１０％であり、フラボノイド類含量は１．５％であった。得られた甘草抽出物について、下記方法で抗菌作用を評価した。結果を表１に示す。
【００２２】
＜抗菌作用の評価＞
甘草抽出物を用いた抗菌作用の測定には、微量液体希釈法を用いて、最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）で評価を行った。
ＭＩＣの測定用培地として、甘草抽出物を３２，６４，１２８，２５６，５１２，１０２４μｇ／ｍＬの各濃度に調整した１％ＮａＣｌ添加（ミューラー  ヒントン（Ｍｕｌｌｅｒ−Ｈｉｎｔｏｎ））培地（ベクトン  ディッキンソン  マイクロバイオロジー  システム（Ｂｅｃｋｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  Ｓｙｓｔｅｍ））を用いた。ただし、フラボバクテリウムカラムナレ（Ｆｌａｖｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｃｏｌｕｍｎａｒｅ）は、フラボアクテリウム  カラムナレ（Ｆｌａｖｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｃｏｌｕｍｎａｒｅ）培地（０．２％トリプトン，０．０５％牛エキス，０．０５％酵母エキス，０．０２％酢酸ナトリウム，１．０％寒天／蒸留水，ｐＨ７．２）、フラボバクテリウム  サイクロフィラム（Ｆｌｅｘｉｂａｃｔｅｒ  ｐｓｙｃｈｒｏｐｈｉｌｕｍ）は、エンリッチド  サイトファーガ（Ｅｎｒｉｃｈｅｄ  Ｃｙｔｏｐｈａｇａ）培地（０．２％トリプトン，０．０５％牛エキス，０．０５％酵母エキス，０．０２％酢酸ナトリウム，１．５％寒天／蒸留水，ｐＨ７．２）、フラボバクテリウム  マリティマス（Ｆｌｅｘｉｂａｃｔｅｒ  ｍａｒｉｔｉｍｕｓ）は、マリーン  サイトファーガ（Ｍａｒｉｎｅ  Ｃｙｔｏｐｈａｇａ）培地（０．２％トリプトン，０．０５％牛エキス，０．０５％酵母エキス，０．０２％酢酸ナトリウム，１．５％寒天／海水，ｐＨ７．２）、ラクトコッカス  ガービア（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｇａｒｖａｅ）はブレイン  ハート  インフュージョン（Ｂｒａｉｎ  Ｈｅａｒｔ  Ｉｎｆｕｓｉｏｎ）培地を用いた。
【００２３】
培養温度は、フラボバクテリウム  カラムナレ（Ｆｌａｖｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｃｏｌｕｍｎａｒｅ）及びフレキシバクター（Ｆｌｅｘｉｂａｃｔｅｒ）属では２０℃、ビブリオ（Ｖｉｂｒｉｏ）属、ノカルディア  アステロイデス（Ｎｏｃａｒｄｉａ  ａｓｔｅｒｏｉｄｅｓ）、フォトバクテリウム  ダムセラ（Ｐｈｏｔｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄａｍｓｅｌａ）、カーノバクテリウム  ピシコラ（Ｃａｒｎｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｐｉｓｃｉｃｏｌａ）及びエロモナス  サルモニシダ（Ａｅｒｏｍｏｎａｓ  ｓａｌｍｏｎｉｃｉｄａ）では２５℃、スタフィロコッカス  エピデリミデス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｅｉｓ）、ラクトコッカス  ガービア（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｇａｒｖｉｅａｅ）及びエンテロコッカス種（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｐ．）では３０℃とした。
【００２４】
菌液は、ミューラー  ヒントン（Ｍｕｌｌｅｒ−Ｈｉｎｔｏｎ）培地でマックファーランド（ＭｃＦａｒｌａｎｄ）  Ｎｏ．５の濁度になるまで増菌した菌液を生理食塩水もしくは、ＮＦＵ水（０．３ＭＮａＣｌ，０．０２ＭＭｇＳＯ４，０．０１ＭＣａＣｌ２，０．０１ＭＫＣｌ）で１０倍希釈し調製した。調製した菌液は、１白金耳量を測定用培地に接種した。培養は、各温度で１６〜２０時間後に判定した。ただし、フラボバクテリウム  カラムナレ（Ｆｌａｖｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｃｏｌｕｍｎａｒｅ）属又はフレキシバクター（Ｆｌｅｘｉｂａｃｔｅｒ）属は、２〜４日後に判定を行った。
【００２５】
魚病菌株としては、ビブリオ  ダムセラ（Ｖｉｂｒｉｏ  ｄａｍｓｅｌａ）、ビブリオ  ハーベイ（Ｖｉｂｒｉｏ  ｈａｒｖｅｙｉ）、ビブリオ  オーダリー（Ｖｉｂｒｉｏ  ｏｒｄａｌｌｉ）、ビブリオ  ペネシダ（Ｖｉｂｒｉｏ  ｐｅｎａｅｉｃｉｄａ）、ビブリオ  スプレンディダス（Ｖｉｂｒｉｏ  ｓｐｌｅｎｄｉｄｕｓ）、ビブリオ  バルニフィカス（Ｖｉｂｒｉｏ  ｖｕｌｎｉｆｉｃｕｓ）、ビブリオ  アンギラルム（Ｖｉｂｒｉｏ  ａｎｇｕｉｌｌａｒｕｍ）［以上、ビブリオ病］、ビブリオ  イチオエンテリー（Ｖｉｂｒｉｏ  ｉｃｈｔｈｙｏｅｎｔｅｒｉ）［細菌性腸管白濁症］、ビブリオ  パラヘモリティカス（Ｖｉｂｒｉｏ  ｐａｒａｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｓ）［潰瘍病］、ビブリオ  トゥビアッシ（Ｖｉｂｒｉｏ  ｔｕｂｉａｓｈｉｉ）［桿菌性壊死症］、フラボバクテリウム  コロムナレ（Ｆｌａｖｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｃｏｌｕｍｎａｒｅ）［カラムナリス病］、フレキシバクター  サイクロフィラム（Ｆｌｅｘｉｂａｃｔｅｒ  ｐｓｙｃｈｒｏｐｈｉｌｕｍ）［冷水病］、フレキシバクター  マリティマス（Ｆｌｅｘｉｂａｃｔｅｒ  ｍａｒｉｔｉｍｕｓ）［滑走細菌症］、ノカルディア  アステロエデス（Ｎｏｃａｒｄｉａ  ａｓｔｅｒｏｉｄｅｓ）［ノカルジア症］、フォトバクテリウム  ダムセラ（Ｐｈｏｔｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄａｍｓｅｌａ）［類結節症］、カーノバクテリウム  ピスシコラ（Ｃａｒｎｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｐｉｓｃｉｃｏｌａ）［乳酸桿菌症］、スタフィロコッカスエピデルミデス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｅｉｓ）［ブドウ球菌症］、ラクトコッカス  ガービア（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｇａｒｖｉｅａｅ）［菌血症］、エロモナス  サルモニシダ（Ａｅｒｏｍｏｎａｓｓａｌｍｏｎｉｃｉｄａ）［せっそう病］、エンテロコッカス種（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｐ．）［連鎖球菌症］を用いた。
【００２６】
【表１】
2004292385.tif 000002
【００２７】
表１より、実施例１の甘草抽出物におけるＭＩＣは、比較例１の甘草抽出物におけるＭＩＣと比較して有意に低い。この結果より、実施例１の甘草抽出物においては、比較例１の甘草抽出物と比較して、有意に強い抗菌作用を有していることが確認された。
【００２８】
【発明の効果】
本発明によれば、甘草抽出物由来の魚病原因菌に対する抗菌剤を得ることができ、特に、ビブリオ病、細菌性腸管白濁症、潰瘍病、桿菌性壊死症、カラムナリス病、冷水病、滑走細菌症、ノカルジア症、類結節症、乳酸桿菌症、ブドウ球菌症、菌血症、せっそう病又は連鎖球菌症における予防及び治療に有効である。