(57)【要約】【課題】例えば泡沫化マクロファージの影響で異常増殖した血管平滑筋細胞の造影のためのＸ線造影剤として有用な化合物を提供する。【解決手段】下記の一般式（Ｉ）：【化１】2004292363.tif 000005（式中、Ａｒ１及びＡｒ２はそれぞれ独立に少なくとも１個のヨウ素原子を置換基として有するアリール基を示し；Ｌ１及びＬ２はそれぞれ独立に主鎖が２個以上の炭素原子を含む２価の連結基を示す）で表される化合物又はその塩。【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記の一般式（Ｉ）：
【化１】
2004292363.tif 000004
（式中、Ａｒ１及びＡｒ２はそれぞれ独立に少なくとも１個のヨウ素原子を置換基として有するアリール基を示し；Ｌ１及びＬ２はそれぞれ独立に主鎖が２個以上の炭素原子を含む２価の連結基を示す）で表される化合物又はその塩。
【請求項２】
Ａｒ１が少なくとも３個のヨウ素原子を置換基として有するフェニル基である請求項１に記載の化合物又はその塩。
【請求項３】
Ａｒ１及びＡｒ２がそれぞれ独立に少なくとも３個のヨウ素原子を置換基として有するフェニル基である請求項１に記載の化合物又はその塩。
【請求項４】
請求項１ないし３のいずれか１項に記載の化合物を膜構成成分として含むリポソーム。
【請求項５】
ホスファチジルコリン及びホスファチジルセリンを膜構成成分として含む請求項４に記載のリポソーム。
【請求項６】
請求項４又は５に記載のリポソームを含むＸ線造影剤。
【請求項７】
血管疾患の造影に用いるための請求項６に記載のＸ線造影剤。
【請求項８】
泡沫化マクロファージの影響で異常増殖した血管平滑筋細胞の造影に用いる請求項６に記載のＸ線造影剤。
【請求項９】
マクロファージが局在化する組織又は疾患部位の造影のための請求項６に記載のＸ線造影剤。
【請求項１０】
マクロファージが局在化する組織が肝臓、脾臓、肺胞、リンパ節、リンパ管、及び腎臓上皮からなる群から選ばれる請求項６に記載のＸ線造影剤。
【請求項１１】
マクロファージが局在化する疾患部位が腫瘍、炎症部位、及び感染部位からなる群から選ばれる請求項６に記載のＸ線造影剤。
【請求項１２】
少なくとも１つのヨード原子が放射性同位体である請求項１ないし３のいずれか１項に記載の化合物を膜構成成分として含むリポソーム。
【請求項１３】
請求項１２に記載のリポソームを含むシンチグラフィー造影剤。
【請求項１４】
泡沫化マクロファージの影響で異常増殖した血管平滑筋細胞の造影に用いる請求項１３に記載のシンチグラフィー造影剤。
【請求項１５】
マクロファージが局在化している組織又は疾患部位の造影に用いるための請求項１３に記載のシンチグラフィー造影剤。
【請求項１６】
対象とする組織が血管、肝臓、脾臓、肺胞、リンパ節、リンパ管、及び腎臓上皮からなる群から選ばれる請求項１３に記載のシンチグラフィー造影剤。
【請求項１７】
腫瘍、動脈硬化、炎症、及び感染からなる群から選ばれる疾患部位の造影に用いるための請求項１３に記載のシンチグラフィー造影剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、ヨードアリール基を有するリン酸エステル化合物に関する。この化合物はリポソームの膜構成成分として利用することができ、このリポソームはＸ線造影剤として用いることができる。
【０００２】
【従来の技術】
ヨード化合物を用いたＸ線血管造影の分野では、水溶性のヨード造影剤を投与することにより血液の流れを造影し、その流れが滞っている箇所をみつける技術がある。この方法は、ヨード造影剤が血流中にあり、血管内部の血流の変化を検出する方法であるところから、ヨード造影剤が病巣細胞に局在する場合に比べて正常組織との区別がつけにくい。このため、通常この方法では狭窄が５０％以上進んだ病巣しか検出することができず、虚血性疾患の発作が発症する前に病巣を検出することは困難である。
【０００３】
これとは別に、疎水性ヨード造影剤又は親水性造影剤を製剤化し、目的とする疾患部位に選択的に集積させる試みが報告されている。例えば、疎水性化合物であるＣｈｏｌｅｓｔｅｒｙｌ    Ｉｏｐａｎｏａｔｅの油滴分散液を注射することにより、該ヨード化合物が実験動物の動脈硬化部位に集積することが開示されている（非特許文献１参照）。また、Ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｙｌ  ＩｏｐａｎｏａｔｅをアセチルＬＤＬに取り込ませて投与することによって該ヨード化合物が実験動物の動脈硬化部位に集積することが開示されている（非特許文献２参照）。
【０００４】
さらに、Ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｙｌ  Ｉｏｐａｎｏａｔｅの油滴分散液を注射することによる肝臓や脾臓のＸ線造影の例（非特許文献３参照）や、ｄｉａｔｒｉｚｏｉｃ  ａｃｉｄ  のエステル体をリポソームに封入し、肝臓や脾臓の選択的造影を行う方法（特許文献１参照）、血管プールやリンパ系をイメージ化するための造影剤（特許文献２及び３参照）が知られている。しかしながら、これらの製剤方法は、血管疾患を選択的に造影する目的のためには、効率及び選択性ともに十分でなく、Ｘ線照射により血管疾患を画像化した例も報告されていない。
【０００５】
一方、２個の３−アミノ−２，４，６−トリヨードフェニル基を含むアルキルカルボン酸と飽和／不飽和脂肪酸からなるトリグリセリド化合物を、油滴分散（Ｌｉｐｉｄ  Ｅｍｕｌｓｉｏｎ）やＴｗｅｅｎ２０分散物として製剤化し、肝臓やＢｌｏｏｄ−ｐｏｏｌの造影を目的として用いる方法が報告されている（例えば、非特許文献４参照）。また、疎水性、かつ加水分解抵抗性の放射性ヨード造影剤をマイクロエマルジョン製剤化して、又はアセチルＬＤＬに取り込ませて実験動物に投与し、動脈硬化巣部位を放射性造影する例が開示されている（特許文献４参照）。また、上述のＣｈｏｌｅｓｔｅｒｙｌ  Ｉｏｐａｎｏａｔｅを用いて動脈硬化巣部位をＸ線造影する例が開示されているが（特許文献５参照）、この化合物は生体内で分解されず、生体臓器、特に肝臓に蓄積することが報告されている（非特許文献５参照）。このような化合物の性質は生体内に長期にわたって留まることを示しており、例えば、Ｘ線造影剤のような診断への用途を考えた場合には好ましい性質とはいえない。
【０００６】
化合物の観点からは、２個の３−アミノ−２，４，６−トリヨードフェニル基を含むアルキルカルボン酸からなるジアシル−１，３−グリセリド化合物についての記載がある（特許文献６及び非特許文献６参照）。しかし、合成中間体としての使用以外の用途は示されていない。また、２個の４−ヨードベンジルアルコールをリン酸エステル結合を介して結合した化合物の加水分解速度についての報告がある（非特許文献７参照）。
【特許文献１】米国特許第４５６７０３４号
【特許文献２】国際公開ＷＯ９６／２８４１４
【特許文献３】国際公開ＷＯ９６／０００８９
【特許文献４】国際公開ＷＯ０１／９３９１８
【特許文献５】国際公開ＷＯ０１／８２９７７
【特許文献６】米国特許第４８７３０７５号
【非特許文献１】Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，  ６（１２），  １０１１  （１９８９）
【非特許文献２】Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，  １６（３），  ４２０  （１９９９）
【非特許文献３】Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，  ７２（８），  ８９８  （１９８３）
【非特許文献４】Ｒａｄｉｏｌｏｇｙ，  ２１６（３），  ８６５  （２０００）
【非特許文献５】Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，  ２５，  １５００  （１９８２）
【非特許文献６】Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，  ２９，  ２４５７  （１９８６）
【非特許文献７】Ｓｃｉ．  Ｊ．  Ｓｈｉｖａｊｉ  Ｕｎｉｖ．，  １５，  １９５  （１９７５）
【０００７】
【発明が解決しようとする課題及び課題を解決するための手段】
本発明の課題は、病巣選択的造影のためのリポソーム化ヨード造影剤に適したヨード化合物を提供することにある。本発明者等は上記の課題を解決すべく研究を行った結果、下記の一般式（Ｉ）で表されるヨードアリール基を有するリン酸エステル化合物がＸ線造影剤の為のリポソームの膜構成成分として優れた性質を有しており、この化合物を含むリポソームを用いてＸ線造影することにより血管疾患の病巣を選択的に造影できることを見出した。本発明は上記の知見を基にして完成されたものである。
【０００８】
すなわち、本発明は、下記の一般式（Ｉ）：
【化２】
2004292363.tif 000002
（式中、Ａｒ１及びＡｒ２はそれぞれ独立に少なくとも１個のヨウ素原子を置換基として有するアリール基を示し；Ｌ１及びＬ２はそれぞれ独立に主鎖が２個以上の炭素原子を含む２価の連結基を示す）で表されるヨード化合物又はその塩を提供するものである。この発明の好ましい態様によれば、Ａｒ１が少なくとも３個のヨウ素原子を置換基として有するフェニル基である上記の化合物又はその塩；Ａｒ１及びＡｒ２がそれぞれ独立に少なくとも３個のヨウ素原子を置換基として有するフェニル基である上記の化合物又はその塩が提供される。
【０００９】
別の観点からは、本発明により、上記の化合物又はその塩を膜構成成分として含むリポソームが提供され、その好ましい態様によれば、ホスファチジルコリン及びホスファチジルセリンを膜構成成分として含む上記リポソームが提供される。
【００１０】
また、本発明により、上記のリポソームを含むＸ線造影剤が提供される。この発明の好ましい態様によれば、血管疾患の造影に用いる上記Ｘ線造影剤；泡沫化マクロファージの影響で異常増殖した血管平滑筋細胞の造影に用いる上記Ｘ線造影剤；マクロファージが局在化する組織又は疾患部位の造影に用いる上記のＸ線造影剤；マクロファージが局在化する組織が肝臓、脾臓、肺胞、リンパ節、リンパ管、及び腎臓上皮からなる群から選ばれる上記のＸ線造影剤が提供される。
【００１１】
さらに別の観点からは、上記Ｘ線造影剤の製造のための上記の化合物又はその塩の使用；Ｘ線造影法であって、上記の化合物を膜構成成分として含むリポソームをヒトを含む哺乳類動物に投与した後にＸ線を照射する工程を含む方法；血管疾患の病巣の造影方法であって、上記の化合物を膜構成成分として含むリポソームをヒトを含む哺乳類動物に投与した後にＸ線を照射する工程を含む方法が本発明により提供される。
【００１２】
また、本発明により、少なくとも１つのヨード原子が放射性同位体である上記の化合物又はその塩を膜構成成分として含むリポソーム、及び該リポソームを含むシンチグラフィー造影剤が本発明により提供される。この発明の好ましい態様によれば、泡沫化マクロファージの影響で異常増殖した血管平滑筋細胞の造影に用いる上記のシンチグラフィー造影剤；マクロファージが局在化する組織又は疾患部位の造影に用いる上記のシンチグラフィー造影剤；造影対象の組織が血管、肝臓、脾臓、肺胞、リンパ節、リンパ管、及び腎臓上皮からなる群から選ばれる上記のシンチグラフィー造影剤；腫瘍、動脈硬化巣、炎症部位、及び感染部位からなる群から選ばれる疾患部位の造影に用いる上記のシンチグラフィー造影剤が提供される。
【００１３】
さらに、上記シンチグラフィー造影剤の製造のための上記の化合物又はその塩の使用；シンチグラフィー造影法であって、上記の化合物を膜構成成分として含むリポソームをヒトを含む哺乳類動物に投与した後に該リポソームが発生する放射線を検出する工程を含む方法；血管疾患の病巣の造影方法であって、上記の化合物を膜構成成分として含むリポソームをヒトを含む哺乳類動物に投与した後に該リポソームが発生する放射線を検出する工程を含む方法が本発明により提供される。
【００１４】
【発明の実施の形態】
本明細書において、Ａｒ１及びＡｒ２はそれぞれ独立に少なくとも１個のヨウ素原子で置換されたアリール基を表す。アリール基の環上に置換するヨウ素原子の個数は１個以上であれば特に限定されないが、３個以上である場合が特に好ましい。該アリール基の種類は特に規定されないが、アントラセン基、ナフタレン基、フェニル基が好ましく、フェニル基が最も好ましい（本明細書中で言及する他のアリール基についても同様である）。Ａｒ１及びＡｒ２が示すアリール基の環上に存在するヨウ素原子の置換位置は特に限定されず、環上の任意の位置に存在することが可能である。該アリール基はヨウ素原子以外の置換基を有していてもよい。該アリール基がヨウ素原子以外の置換基を有する場合にはその置換基の種類、個数、及び置換位置は特に限定されない。
【００１５】
本明細書において、ある官能基について「置換又は無置換」又は「置換基を有していてもよい」という場合には、その官能基が１又は２以上の置換基を有する場合があることを示しているが、特に言及しない場合には、結合する置換基の個数、置換位置、及び種類は特に限定されない。ある官能基が２個以上の置換基を有する場合には、それらは同一でも異なっていてもよい。本明細書において、ある官能基が置換基を有する場合、置換基の例としては、ハロゲン原子（本明細書において「ハロゲン原子」という場合にはフッ素、塩素、臭素、又はヨウ素のいずれでもよい）、アルキル基（本明細書において「アルキル基」という場合には、直鎖状、分岐鎖状、環状、又はそれらの組み合わせのいずれでもよく、環状アルキル基にはビシクロアルキル基などの多環性アルキル基を含む。アルキル部分を含む他の置換基のアルキル部分についても同様である）、アルケニル基（シクロアルケニル基、ビシクロアルケニル基を含む）、アルキニル基、アリール基、ヘテロ環基、シアノ基、ヒドロキシル基、ニトロ基、カルボキシル基、アルコキシ基、アリールオキシ基、シリルオキシ基、ヘテロ環オキシ基、アシルオキシ基、カルバモイルオキシ基、アルコキシカルボニルオキシ基、アリールオキシカルボニルオキシ基、アミノ基（アニリノ基を含む）、アシルアミノ基、アミノカルボニルアミノ基、アルコキシカルボニルアミノ基、アリールオキシカルボニルアミノ基、スルファモイルアミノ基、アルキル及びアリールスルホニルアミノ基、メルカプト基、アルキルチオ基、アリールチオ基、ヘテロ環チオ基、スルファモイル基、スルホ基、アルキル及びアリールスルフィニル基、アルキル及びアリールスルホニル基、アシル基、アリールオキシカルボニル基、アルコキシカルボニル基、カルバモイル基、アリール及びヘテロ環アゾ基、イミド基、ホスフィノ基、ホスフィニル基、ホスフィニルオキシ基、ホスフィニルアミノ基、シリル基が挙げられる。
【００１６】
Ａｒ１及びＡｒ２が示すアリール基が有する好ましい置換基の例としては、ハロゲン原子、アルキル基、シアノ基、ヒドロキシル基、アルコキシ基、アミノ基、アシルアミノ基、アシル基、カルボキシル基、アルコキシカルボニル基、カルバモイル基が挙げられる。また、アリール基がヨウ素原子以外の置換基を有しない場合も好ましい。
【００１７】
Ａｒ１及びＡｒ２がそれぞれトリヨードフェニル基を表す場合、芳香環上における３個のヨウ素原子の置換位置は特に規定されないが、「２，４，６位」、「２，３，５位」、「３，４，５位」置換が好ましく、より好ましくは「２，４，６位」、「２，３，５位」置換であり、なかでも「２，４，６位」置換が最も好ましい。トリヨードフェニル基はさらに置換基を有していてもよい。該トリヨードフェニル基が置換基を有する場合、その好ましい置換基の例としては、Ａｒ１及びＡｒ２が示すアリール基について例示した置換基と同様のものが挙げられる。また、Ａｒ１及びＡｒ２が３個のヨウ素原子以外に置換基を有しない場合も好ましい。
【００１８】
Ｌ１及びＬ２はそれぞれ独立に、主鎖が２個以上の炭素原子を含む二価の連結基を示す。本明細書において、二価の連結基における「主鎖」とは、連結すべき他の官能基又は原子との結合に関与する連結基中の２個の原子及びそれら２個の原子を最小個数で結ぶ原子群からなる連結基中の原子群を意味している。より具体的には、Ｌ１の主鎖は、リン酸エステルを構成する酸素及びＡｒ１との連結に関与するＬ１中の２個の原子及びそれら２個の原子を最小個数で結ぶＬ１中の原子群からなる。Ｌ２の主鎖はＬ１の主鎖と同様である。
【００１９】
Ｌ１及びＬ２が示す二価の連結基は飽和の基であってもよいが、１個又は２個以上の不飽和結合を含んでいてもよい。また、主鎖中にヘテロ原子（本明細書において「ヘテロ原子」という場合には、窒素原子、酸素原子、硫黄原子など、炭素原子以外の任意の原子を意味する）を１個又は２個以上含んでいてもよい。主鎖中のヘテロ原子の個数については特に規定されないが５個以下であることが好ましく、より好ましくは３個以下であり、１個以下であるときが最も好ましい。主鎖中のヘテロ原子の位置についても特に規定されないが、ヘテロ原子の個数が１個であるときは、Ａｒ基から５原子以内であることが好ましい。
【００２０】
Ｌ１及びＬ２が示す二価の連結基はヘテロ原子を含む官能基を主鎖の部分構造として含んでいてもよい。  Ｌ１及びＬ２が示す二価の連結基の主鎖の部分構造である不飽和部分又はヘテロ原子を含む官能基としては、例えば、アルケニル基、アルキニル基、エステル基（カルボン酸エステル、炭酸エステル、スルホン酸エステル、スルフィン酸エステルを含む）、アミド基（カルボン酸アミド、ウレタン、スルホン酸アミド、スルフィン酸アミドを含む）、エーテル基、チオエーテル基、ジスルフィド基、アミノ基、又はイミド基などが挙げられる。上記の官能基はさらに置換基を有していてもよい。これらの官能基はＬ１及びＬ２の主鎖中に複数個存在してもよく、存在位置も特に限定されない。  Ｌ１及びＬ２の主鎖中に上記の官能基が複数個存在する場合には、それらは同一でも異なっていてもよい。
【００２１】
Ｌ１及びＬ２で表される二価の連結基の部分構造として、好ましくはアルケニル基、エステル基、アミド基、エーテル基、チオエーテル基、ジスルフィド基又はアミノ基を挙げることができ、さらに好ましくはアルケニル基、エステル基、エーテル基を挙げることができる。また、主鎖中及び／又は主鎖の部分構造である官能基中にヘテロ原子を含まない場合も好ましい。ヘテロ原子を含む場合、該へテロ原子は酸素原子又は硫黄原子が好ましく、酸素原子がもっとも好ましい。Ｌ１及びＬ２の炭素数は２〜３０が好ましく、４〜２５がより好ましく、最も好ましくは６〜１５である。Ｌ１及びＬ２の主鎖上にはさらに１個又は２個以上の置換基が存在していてもよい。Ｌ１及びＬ２の主鎖上に置換基が存在する場合、置換基の種類、個数、及び置換位置は特に限定されないが、置換基としては、例えば、ハロゲン原子、アルキル基、水酸基、又はオキソ基などが好ましい。また、Ｌ１及びＬ２の主鎖上に置換基が存在しない場合も好ましい。
【００２２】
Ｌ１及びＬ２の好ましい態様を以下に具体的に例示するが、本発明の化合物はこれらの連結基を有するものに限定されるものではない。以下に例示する連結基は、いずれも右側がＡｒ基と結合することを意味する。
−（ＣＨ２）ｎ−、−（ＣＨ２）ｎ−Ｏ−、−（ＣＨ２）ｍ−Ｏ  −ＣＨ２−、−（ＣＨ２）ｍ−（Ｃ＝Ｏ）Ｏ−、
−（ＣＨ２）ｍ−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ−、−（ＣＨ２）ｍ−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）−、−（ＣＨ２）ｍ−ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−、
−（ＣＨ２）ｐ−ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−（ＣＨ２）２−Ｏ−、−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−（ＣＨ２）ｑ−Ｏ−、
−（ＣＨ２）ｍ−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｏ−、−（ＣＨ２）ｍ−Ｓ−ＣＨ２−
［ｎは２から３０の任意の整数を示し；ｍは１から２９の任意の整数を示し；ｐは０から２８の任意の整数を示し；ｑは１から２７の任意の整数を示す］
【００２３】
本発明の化合物は１以上の不斉中心を有する場合があるが、この場合、不斉中心に基づく光学活性体又はジアステレオ異性体などの立体異性体が存在する。純粋な形態の任意の立体異性体、任意の立体異性体の混合物、ラセミ体などは、いずれも本発明の範囲に包含される。また、本発明の化合物はオレフィン性の二重結合を有する場合があるが、その配置はＥ又はＺのいずれであってもよく、両者の混合物として存在していてもよい。本発明の化合物は互変異性体として存在する場合もあるが、任意の互変異性体、又はそれらの混合物は本発明の範囲に包含される。さらに本発明の化合物は塩を形成する場合があり、遊離形態の化合物又は塩の形態の化合物が水和物又は溶媒和物を形成する場合もあるが、このような場合も本発明の範囲に包含される。塩の種類は特に限定されず、酸付加塩又は塩基付加塩のいずれであってもよい。
【００２４】
以下に本発明の化合物の好ましい例を示すが、本発明の化合物はこれらの例に限定されることはない。
【００２５】
【化３】
2004292363.tif 000003
【００２６】
以下に本発明の化合物の一般的な合成法について説明するが、本発明の化合物の合成法はこれらに限定されるものではない。本発明の化合物において用いられるヨードアリール基、とりわけトリヨードフェニル基に関する合成原料としては、通常市販されているものを使用してもよく、あるいは用途に応じて適宜合成してもよい。市販品としては、例えば２，４，６−トリヨードフェノールや安息香酸誘導体（例えば、３−ａｍｉｎｏ−２，４，６−ｔｒｉｉｏｄｏｂｅｎｚｏｉｃ  ａｃｉｄ，  ａｃｅｔｒｉｚｏｉｃ  ａｃｉｄ，  ｉｏｐｉｐａｍｉｄｅ，  ｄｉａｔｒｉｚｏｉｃ  ａｃｉｄ，  ｈｉｓｔｏｄｅｎｚ，  ５−ａｍｉｎｏ−２，４，６−ｔｒｉｉｏｄｏｉｓｏｐｈｔｈａｌｉｃ  ａｃｉｄ，  ２，３，５−ｔｒｉｉｏｄｏｂｅｎｚｏｉｃ  ａｃｉｄ，  ｔｅｔｒａｉｏｄｏ−２−ｓｕｌｆｏｂｅｎｚｏｉｃ  ａｃｉｄ）、ヨードパン酸（ｉｏｐａｎｏｉｃ  ａｃｉｄ）、ｉｏｐｈｅｎｏｘｉｃ  ａｃｉｄなどを用いることができる。合成により入手する場合には、例えばＲｉｃｈａｒｄ  Ｃ．  Ｌａｒｏｃｋ著、Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  ｏｒｇａｎｉｃ  ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ（ＶＣＨ）  に記載の方法により、芳香環上にヨード原子を導入し、原料として用いることができる。
【００２７】
上記のトリヨードフェニル誘導体は、通常、部分構造として水酸基やアミノ基、チオール基、カルボキシル基等の官能基を含有するため、これらの官能基と、カルボン酸、ハロゲン水酸基等を有するアルキルアルコールとを、エーテル連結／エステル連結／アミノ連結／アミド連結などを介して縮合してトリヨードフェニル基を有するアルコールとし、本発明の化合物の合成中間体として用いることもできる。これらの工程では、必要な場合には保護基を用いることもできるが、この場合の保護基とは、例えば、Ｔ．  Ｗ．  Ｇｒｅｅｎ  ＆  Ｐ．  Ｇ．  Ｍ．  Ｗｕｔｓ著、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  ｏｒｇａｎｉｃ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  ｓｏｎｃ，  ｉｎｃ．）に記載のものを用いることができる。カルボン酸を有するアルコールとしては、例えば、１０−ヒドロキシデカン酸、１２−ヒドロキシドデカン酸、１６−ヒドロキシヘキサデカン酸が挙げられ、ハロゲン化アルコール化合物としては、例えば、６−ブロモ−１−ヘキサノール、８−ブロモ−１−オクタノール、９−ブロモ−１−ノナノール、１０−ブロモ−１−デカノール、１１−ブロモ−１−ウンデカノール、１２−ブロモ−１−ドデカノールが挙げられるが、これらは単なる例示であり、これらに限定されるものではない。
【００２８】
本発明の化合物は任意の長さのアルキル鎖を有する場合があるが、適当な合成原料が存在しない場合には、適宜合成的に調製することができる。その合成法としては、例えば、Ｗｉｔｔｉｇ反応やＢａｒｂｉｅｒ−Ｗｉｅｌａｎｄ分解、Ａｒｎｄｔ−Ｅｉｓｔｅｒｔ合成、アセチリドを用いる方法（例えば、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．  ３５，  ９５０１  （１９９４）に記載の方法など）、クロロ蟻酸エステルを用いる方法（例えば、Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ４２７  （１９８６）に記載された方法など）、マロン酸ジエチルを用いる方法（例えば、Ａｒｃｈ．  Ｐｈａｒｍ．  （Ｗｅｉｎｈｅｉｍ）  ３２８，  ２７１  （１９９５）に記載された方法など）等が挙げられる。また、これらの方法で得られた化合物のカルボン酸／カルボン酸エステル構造を還元して水酸基に変換することも有効である。もっとも、これらの方法は単なる例示であり、これらに限定されるものではない。
【００２９】
これらのトリヨードフェニル基を有するアルコールを原料化合物として用い、適当な塩基（例えば水酸化ナトリウム、炭酸カリウム、水素化ナトリウム、ピリジン、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、テトラゾールなど）を用いて、適当なリン酸エステル前駆体（例えばオキシ塩化リン、ジクロロリン酸メチル、メチルジクロロフォスファイト、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルメチルフォスフォンアミディッククロリド、２−シアノエチルＮ，Ｎ−ジイソプロピルクロロフォスフォアミダイトなど）と反応することにより、本発明の化合物を合成することができる。もっとも、本発明の化合物の製造方法は、上記の方法に限定されるものではない。
【００３０】
本発明の化合物又はその塩はリポソームの膜構成成分として用いることができる。本発明の化合物又はその塩を用いてリポソームを調製する場合、本発明の化合物又はその塩の使用量は、膜構成成分の全質量に対して１０から９０質量％程度、好ましくは１０から８０質量％、さらに好ましくは２０から８０質量％である。本発明の化合物は膜構成成分として１種類を用いてもよいが、２種類以上を組み合わせて用いてもよい。
【００３１】
リポソームの他の膜構成成分としては、リポソームの製造に通常用いられている脂質化合物をいずれも用いることが可能である。例えば、Ｂｉｏｃｈｉｍ．  Ｂｉｏｐｈｙｓ．  Ａｃｔａ  １５０（４），  ４４  （１９８２）、Ａｄｖ．  Ｉｎ  Ｌｉｐｉｄ．  Ｒｅｓ．  １６（１），  １  （１９７８）、ＲＥＳＥＡＲＣＨ  ＩＮ  ＬＩＰＯＳＯＭＥＳ  （Ｐ．  Ｍａｃｈｙ，  Ｌ．  Ｌｅｓｅｒｍａｎ著、Ｊｏｈｎ  Ｌｉｂｂｅｙ  ＥＵＲＯＴＥＸＴ社）、「リポソーム」（野島、砂本、井上編、南江堂）等に記載されている。脂質化合物としてはリン脂質が好ましく、特に好ましいのはホスファチジルコリン（ＰＣ）類である。ホスファチジルコリン類の好ましい例としては、ｅｇｇＰＣ、ジミリストイルＰＣ（ＤＭＰＣ）、ジパルミトイルＰＣ（ＤＰＰＣ）、ジステアロイルＰＣ（ＤＳＰＣ）、ジオレイルＰＣ（ＤＯＰＣ）等が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００３２】
本発明の好ましい態様では、リポソームの膜構成成分として、ホスファチジルコリンとホスファチジルセリン（ＰＳ）を組合せて用いることができる。ホスファチジルセリンとしては、ホスファチジルコリンの好ましい例として挙げたリン脂質と同様の脂質部位を有する化合物が挙げられる。ホスファチジルコリンとホスファチジルセリンを組合せて用いる場合、ＰＣとＰＳの好ましい使用モル比はＰＣ：ＰＳ＝９０：１０から１０：９０の間であり、さらに好ましくは、３０：７０から７０：３０の間である。
【００３３】
本発明のリポソームの別の好ましい態様によると、膜構成成分として、ホスファチジルコリンとホスファチジルセリンとを含み、さらにリン酸ジアルキルエステルを含むリポソームが挙げられる。リン酸ジアルキルエステルのジアルキルエステルを構成する２個のアルキル基は同一であることが好ましく、それぞれのアルキル基の炭素数は６以上であり、１０以上が好ましく、１２以上がさらに好ましい。好ましいリン酸ジアルキルエステルの例としては、ジラウリルフォスフェート、ジミリスチルフォスフェート、ジセチルフォスフェート等が挙げられるが、これに限定されることはない。この態様において、ホスファチジルコリン及びホスファチジルセリンの合計質量に対するリン酸ジアルキルエステルの好ましい使用量は１から５０質量％までであり、さらに好ましくは１から３０質量％であり、特に好ましくは１から２０質量％である。
【００３４】
ホスファチジルコリン、ホスファチジルセリン、リン酸ジアルキルエステ及び本発明の化合物を膜構成成分として含むリポソームにおいて、上記成分の好ましい質量比は、例えば、ＰＣ：ＰＳ：リン酸ジアルキルエステル：本発明の化合物が５〜４０質量％：５〜４０質量％：１〜１０質量％：１５〜８０質量％の間で選択することができる。
【００３５】
本発明のリポソームの構成成分は上記４者に限定されず、他の成分を加えることができる。その例としては、コレステロール、コレステロールエステル、スフィンゴエミリン、ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．  ２２３，  ４２  （１９８７）；  Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．，  ＵＳＡ  ８５，  ６９４９  （１９８８）等に記載のモノシアルガングリオキシドＧＭ１誘導体、Ｃｈｅｍ．  Ｌｅｔｔ．  ２１４５  （１９８９）；  Ｂｉｏｃｈｉｍ．  Ｂｉｏｐｈｙｓ．  Ａｃｔａ  １１４８，  ７７  （１９９２）等に記載のグルクロン酸誘導体、Ｂｉｏｃｈｉｍ．  Ｂｉｏｐｈｙｓ．  Ａｃｔａ  １０２９，  ９１  （１９９０）；  ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．  ２６８，  ２３５  （１９９０）等に記載のポリエチレングリコール誘導体が挙げられるが、これに限られるものではない。
【００３６】
本発明のリポソームは、当業者が利用可能ないかなる方法で製造してもよい。製造法の例としては、先に挙げたリポソームの総説成書類の他、Ａｎｎ．  Ｒｅｖ．  Ｂｉｏｐｈｙｓ．  Ｂｉｏｅｎｇ．  ９，  ４６７  （１９８０）、”Ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ”  （Ｍ．  Ｊ．  Ｏｓｔｒｏ編、ＭＡＲＣＥＬＬ  ＤＥＫＫＥＲ、ＩＮＣ．）等に記載されている。具体例としては、超音波処理法、エタノール注入法、フレンチプレス法、エーテル注入法、コール酸法、カルシウム融合法、凍結融解法、逆相蒸発法等が挙げられるが、これに限られるものではない。本発明のリポソームのサイズは、上記の方法で作成できるサイズのいずれであっても構わないが、通常は平均が４００ｎｍ以下であり、２００ｎｍ以下が好ましい。リポソームの構造は特に限定されず、ユニラメラ又はマルチラメラなどのいずれの形態でもよい。また、リポソームの内部に適宜の薬物や他の造影剤の１種又は２種以上を配合することも可能である。
【００３７】
本発明のリポソームを造影剤として用いる場合には、好ましくは非経口的に投与することができ、より好ましくは静脈内投与することができる。例えば、注射剤や点滴剤などの形態の製剤を凍結乾燥形態の粉末状組成物として提供し、用時に水又は他の適当な媒体（例えば生理食塩水、ブドウ等輸液、緩衝液など）に溶解ないし再懸濁して用いることができる。本発明のリポソームを造影剤として用いる場合、投与量はリポソームのヨード含有量が従来のヨード造影剤のヨード含有量と同程度になるように適宜決定することが可能である。
【００３８】
いかなる特定の理論に拘泥するわけではないが、動脈硬化、若しくはＰＴＣＡ後の再狭窄等の血管疾患においては、血管の中膜を形成する血管平滑筋細胞が異常増殖を起こすと同時に内膜に遊走し、血流路を狭くすることが知られている。正常の血管平滑筋細胞が異常増殖を始めるトリガーはまだ完全に明らかにされていないが、マクロファージの内膜への遊走と泡沫化が重要な要因であることが知られており、その後に血管平滑筋細胞がフェノタイプ変換（収縮型から合成型）をおこすことが報告されている。
【００３９】
本発明のリポソームを用いると、泡沫化マクロファージの影響で異常増殖した血管平滑筋に対して疎水性ヨード化合物を選択的に取り込ませることができる。その結果、病巣と非疾患部位とをコントラストをつけて造影することが可能である。従って、本発明の造影剤は、特に血管疾患のＸ線造影に好適に使用でき、例えば、動脈硬化巣やＰＴＣＡ後の再狭窄等の造影を行うことができる。
【００４０】
また、例えばＪ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．，  ２６５，  ５２２６  （１９９０）に記載されているように、リン脂質よりなるリポソーム、特にＰＣとＰＳから形成されるリポソームが、スカベンジャーレセプターを介してマクロファージに集積しやすいことが知られている。従って、本発明のリポソームを使用することにより、本発明のヨード化合物をマクロファージが局在化している組織又は疾患部位に集積させることができる。本発明のリポソームを用いると、公知技術であるサスペンジョン又はオイルエマルジョンを用いる場合に比べて、より多くのヨード化合物をマクロファージに集積させることが可能である。
【００４１】
マクロファージの局在化が認められ、本発明の方法で好適に造影可能な組織としては、例えば、血管、肝臓、肺胞、リンパ節、リンパ管、腎臓上皮を挙げることができる。また、ある種の疾患においては、疾患部位にはマクロファージが集積していることが知られている。こうした疾患としては、腫瘍、動脈硬化、炎症、感染等を挙げることができる。従って、本発明のリポソームを用いることにより、これらの疾患部位を特定することができる。特に、アテローム性動脈硬化病変の初期過程において、スカベンジャーレセプターを介して変性ＬＤＬを大量に取り込んだ泡沫化マクロファージが集積していることが知られており（Ａｍ．  Ｊ．  Ｐａｔｈｏｌ．，  １０３，  １８１（１９８１）、Ａｎｎｕ．  Ｒｅｖ．  Ｂｉｏｃｈｅｍ．，  ５２，  ２２３（１９８３））、このマクロファージに本発明のリポソームを集積化させてＸ線造影をすることにより、他の手段では困難な動脈硬化初期病変の位置を特定することが可能である。
【００４２】
本発明のリポソームを用いた造影方法は特に限定されない。例えば、通常のＸ線造影剤を用いた造影方法と同様にしてＸ線を照射することにより造影を行うことができる。また、ヨードの放射線同位体を含む本発明の化合物を用いてリポソームを形成し、該リポソームをシンチグラフィー用造影剤として用いることにより、核医学的方法による造影を行うことも可能である。ヨードの放射性同位体は特に限定されないが、好ましい例としては１２２Ｉ、１２３Ｉ、１２５Ｉ及び１３１Ｉを挙げられ、特に好ましい例としては１２３Ｉ及び１２５Ｉをあげることができる。放射性ラベル化合物の合成は、対応する非ラベル化合物を合成した後に、Ａｐｐｌ．  Ｒａｄｉａｔ．  Ｉｓｏｔ．，  ３７（８），  ９０７  （１９８６）等に記載されている既知の方法で実施することができる。疎水性化合物がトリヨードベンゼン誘導体である場合、同一ベンゼン環上の３個のヨード原子のうち少なくとも１個が放射線同位体であることが好ましい。好ましくは２個以上が放射線同位体である化合物であり、最も好ましいのは３個のヨード原子が同一の放射線同位体である化合物である。
【００４３】
【実施例】
以下、実施例により本発明をさらに具体的に説明するが、本発明の範囲は下記の実施例に限定されることはない。なお、下記の実施例中の化合物番号は上記に示した化合物例の番号に対応している。また、実施例中の化合物の構造はＮＭＲスペクトルにより確認した。
【００４４】
例１
１０−ブロモ−１−デカノール２５．１ｇと２，４，６−トリヨードフェノール４５．０ｇ、炭酸カリウム１５．０ｇをジメチルホルムアミド５００ｍＬに加え、室温で２日攪拌した。反応物を５００ｍＬの水に注ぎ、生じた沈殿を濾別した。水、メタノールで順次洗浄した後、乾燥して１０−（２，４，６−トリヨードフェノキシ）−１−デカノールを５５．２ｇ（収率９２％）で得た。
１１−ブロモ−１−ウンデカノールより、１０−（２，４，６−トリヨードフェノキシ）−１−デカノールと同様の手法で１１−（２，４，６−トリヨードフェノキシ）−１−ウンデカノールを得た。
【００４５】
１１−（２，４，６−トリヨードフェノキシ）−１−ウンデカノール１．３ｇをジクロロメタン２０ｍＬに溶かし、トリエチルアミン０．６３ｇを加えて室温で撹拌し、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルメチルフォスフォンアミディッククロリド０．５３ｍＬを加えて室温でさらに７時間撹拌した。氷冷した飽和炭酸水素ナトリウム溶液を加えて、ジクロロメタンで３回抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、除媒し、淡黄色油状物を得た。この淡黄色油状物をジクロロメタン３０ｍＬに溶かし、１１−（２，４，６−トリヨードフェノキシ）−１−ウンデカノール１．２ｇとテトラゾール０．２１ｇを加えて室温で２時間撹拌した。３１％過酸化水素水３ｍＬを加えて室温でさらに３０分間撹拌した。飽和食塩水を加えて、クロロホルムで３回抽出し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、除媒した。得られた残渣をカラムクロマトグラフィーで精製し、ロウ状の固形物を１．７ｇ得た。
【００４６】
上記固形物１．７ｇをメチルエチルケトン２０ｍＬに溶かし、よう化ナトリウム１．２ｇを加えて９０分間撹拌した。系中に生じた結晶を濾別し、１規定塩酸を加えて、クロロホルム／メタノール（５／１）混合溶媒で２回抽出した。有機層を無水無水硫酸マグネシウムで乾燥後、除媒し、化合物３−６を１．６ｇ得た。
化合物３−６：
１Ｈ−ＮＭＲ  （３００ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  ：  ８．０５  （４Ｈ，  ｓ）    ４．０２  （４Ｈ，  ｑ）    ３．９３  （４Ｈ，  ｔ）    １．８９  （４Ｈ，ｑｕｉｎ）    １．６８  （４Ｈ，  ｑｕｉｎ）    １．６０−１．４８  （４Ｈ，  ｍ）    １．４７−１．２５  （２４Ｈ，  ｍ）
【００４７】
１０−（２，４，６−トリヨードフェノキシ）−１−デカノールより、化合物３−６と同様の方法により化合物３−５を得た。
化合物３−５：
１Ｈ−ＮＭＲ  （３００ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  ：  ８．０５  （４Ｈ，  ｓ）    ４．０２  （４Ｈ，  ｑ）    ３．９３  （４Ｈ，  ｔ）    １．８９  （４Ｈ，ｑｕｉｎ）    １．６８  （４Ｈ，  ｑｕｉｎ）    １．６０−１．４８  （４Ｈ，  ｍ）    １．４７−１．２５  （２０Ｈ，  ｍ）
【００４８】
試験例１：血管平滑筋細胞におけるヨード原子の取り込み量
下記に示した割合でジ・パルミトイル  ＰＣ（フナコシ社製、Ｎｏ．１２０１−４１−０２２５）、ジ・パルミトイル  ＰＳ（フナコシ社製、Ｎｏ．１２０１−４２−０２３７）をＪ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．，  ２５（１２），  １５００  （１９８２）記載の方法で、本発明のヨード化合物とナス型フラスコ内でクロロホルムに溶解して均一溶液とした後、溶媒を減圧で留去してフラスコ底面に薄膜を形成した。この薄膜を真空で乾燥後、０．９％生理食塩水（光製薬社製、Ｎｏ５１２）を適当量加え、超音波照射（Ｂｒａｎｓｏｎ社製、Ｎｏ．３５４２プローブ型発振器、０．１ｍＷ）を氷冷下５分実施することにより、均一なリポソーム分散液を得た。得られた分散液の粒径をＷＢＣアナライザー（日本光電社製、Ａ−１０４２）で測定した結果、粒子径は４０から６５ｎｍであった。この方法により調製した下記リポソーム製剤を国際公開ＷＯ  ０１／８２９７７に記載の血管平滑筋細胞とマクロファージとの混合培養系に添加し、３７℃、５％  ＣＯ２で２４時間培養した後、血管平滑筋細胞に取り込まれたヨード化合物を定量した。結果を以下に示す。本発明の化合物は効率よく血管平滑筋細胞に取り込ませることができ、Ｘ線造影剤のためのリポソームの構成脂質として優れた性質を有することが明らかである。
取り込み量
ＰＣ  ５０ｎｍｏｌ  ＋  ＰＳ  ５０ｎｍｏｌ  ＋  化合物３−５  ７５ｎｍｏｌ：    ２４．６×１０−３ｎｍｏｌ／μｇ  ｐｒｏｔｅｉｎ
ＰＣ  ５０ｎｍｏｌ  ＋  ＰＳ  ５０ｎｍｏｌ  ＋  化合物３−６  ７５ｎｍｏｌ：    ２０．８×１０−３ｎｍｏｌ／μｇ  ｐｒｏｔｅｉｎ
【００４９】
試験例２：  Ｓ９の作製及び分解試験
ＳＤラット雄６週齢（日本チャールスリバー社製）を購入し１週間馴化した。１週間馴化後、体重を測定し、断頭放血した。肝臓を摘出し、冷却した０．１５Ｍ  ＫＣｌで３回洗浄した。洗浄後、肝臓の湿重量を測定し、その重量の３倍の冷却した０．１５Ｍ  ＫＣｌを加え、ホモジナイザーに移した。氷冷中でホモジネイトし、その後、ホモジネイトを９０００ｇで１０分間冷却遠心した。この上清をＳ９と呼び、−８０℃以下で保存した。保存してあるＳ９を、流水中で溶解した。溶解したＳ９  ０．１ｍｌに、０．４Ｍ  ＭｇＣｌ２  ０．０２ｍｌ、１．６５Ｍ  ＫＣｌ  ０．０２ｍｌ、０．２Ｍ  Ｎａりん酸緩衝液（ｐＨ  ７．４）  ０．５ｍｌを加え、グルコース６りん酸（オリエンタル酵母社製）、ＮＡＤＰＨ（オリエンタル酵母社製）、ＮＡＤＨ（オリエンタル酵母社製）を４μＭになる様に添加し蒸留水を加え、全量を１ｍｌとした（これをＳ９Ｍｉｘと呼ぶ）。Ｓ９Ｍｉｘ  １ｍｌに被験物質を５μｇ／ｍｌになる様に添加し、３７℃で往復振盪した。Ｓ９Ｍｉｘ中の被験物質量（未変化体）を経時でＨＰＬＣを用い測定した。なお、被験物質はＤＭＳＯ（和光純薬社製）にて予め溶解した。結果には、Ｓ９Ｍｉｘに添加直後の未変化体量を１００とし、３０分後の未変化体量をその百分率に直して表記した。本発明の化合物はＳ９分解試験において効率的に分解されることが明らかであり、Ｘ線造影剤のためのリポソームの構成脂質として優れた性質を有することが明らかである。
化合物３−５：５０％；化合物３−６：４０％
【００５０】
試験例３：マウス３日間連続投与毒性試験  試験方法
ＩＣＲマウス雄６週齢（日本チャールスリバー）を購入し、１週間の検疫期間の後、クリーン動物舎内（空調：へパフィルター  クラス１０００室温：２０℃〜２４℃  湿度：３５％〜６０％）で１週間馴化した。その後、ＭＴＤ値を求めるため、尾静脈よりリポソーム製剤を投与した。リポソーム製剤は、生理食塩水（光製薬社製）又はグルコース溶液（大塚製薬社製）のいずれかを溶媒として投与した。次に求められたＭＴＤ値をもとに、その１／２量を３日間、尾静脈より３日間連続で投与した（ｎ＝３匹とする）。症状観察は各投与後６時間までとし、投与終了後剖検を行ない、主要臓器について所見を取った。血球検査としては、白血球数・赤血球・血小板数を測定し、血液生化学検査としては、ＧＯＴ・ＧＰＴ・ＢＵＮ・Ｃｒｅを測定した（測定：保健科学株式会社、神奈川県横浜市）。
化合物：ＭＴＤ（ｍｇ／ｋｇ）
化合物３−５：８００ｍｇ／ｋｇ；化合物３−６：８００ｍｇ／ｋｇ
【００５１】
【発明の効果】
本発明の化合物は、Ｘ線造影剤のためのリポソームの構成脂質として優れた性質を有しており、この化合物を含むリポソームを用いてＸ線造影することにより血管の病巣を選択的に造影できる。