(57)【要約】【課題】高精度で予知確率の高い冠動脈形成術後再狭窄の遺伝的リスクを診断する手段を提供する。【解決手段】以下の工程を含んでなる方法により冠動脈形成術後再狭窄のリスク診断を行う。（ｉ）バルーン拡張術後再狭窄との関連が認められた６個の遺伝子多型、又はステント挿入後再狭窄との関連が認められた５個の遺伝子多型から二つ以上の多型を解析する工程、（ｉｉ）前記工程によって得られる多型情報から核酸試料の遺伝子型を決定する工程、及び（ｉｉｉ）決定された遺伝子型から冠動脈形成術後再狭窄の遺伝的リスクを求める工程。【選択図】　　図１６
2004065203.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の工程（ａ）を含んでなる、核酸試料の遺伝子型を検出する方法、
（ａ）核酸試料における、以下の（１）〜（６）からなるグループより選択される二つ以上の多型を解析する工程、
（１）アポリポプロテインＥ遺伝子の塩基番号３９３２位の多型、
（２）グリコプロテインＩａ遺伝子の塩基番号１６４８位の多型、
（３）腫瘍壊死因子α遺伝子の塩基番号−８６３位の多型、
（４）Ｇ−プロテインβ３サブユニット遺伝子の８２５位の多型、
（５）アポリポプロテインＣ−ＩＩＩ遺伝子の塩基番号−４８２位の多型、及び
（６）アンギオテンシノーゲン遺伝子の塩基番号−６位の多型。
【請求項２】
以下の工程（ｂ）を含んでなる、核酸試料の遺伝子型を検出する方法、
（ｂ）核酸試料における、以下の（７）〜（１１）からなるグループより選択される二つ以上の多型を解析する工程、
（７）トロンボスポンジン４遺伝子の塩基番号１１８６位の多型、
（８）腫瘍壊死因子α遺伝子の塩基番号−８６３位の多型、
（９）トロンボモジュリン遺伝子の塩基番号２１３６位の多型、
（１０）トロンボポイエチン遺伝子の塩基番号５７１３位の多型、及び
（１１）血小板活性化因子アセチルヒドロラーゼ遺伝子の塩基番号９９４位の多型。
【請求項３】
以下の工程（ｃ）を含んでなる、核酸試料の遺伝子型を検出する方法、
（ｃ）核酸試料における、以下の（１２）〜（１７）からなるグループより選択される二つ以上の多型を解析する工程、
（１２）Ｅ−セレクチン遺伝子の塩基番号５６１位の多型、
（１３）脂肪酸結合タンパク質２遺伝子の塩基番号２４４５位の多型、
（１４）グリコプロテインＩｂα遺伝子の塩基番号１０１８位の多型、
（１５）プラスミノーゲン活性化因子インヒビター１遺伝子の塩基番号−６６８位の多型、
（１６）パラオキソナーゼ遺伝子の塩基番号５８４位の多型、及び
（１７）アポリポプロテインＥ遺伝子の塩基番号３９３２位の多型。
【請求項４】
以下の工程（ｄ）を含んでなる、核酸試料の遺伝子型を検出する方法、
（ｄ）核酸試料における、以下の（１８）〜（２２）からなるグループより選択される二つ以上の多型を解析する工程、
（１８）プラスミノーゲン活性化因子インヒビター１遺伝子の塩基番号−６６８位の多型、
（１９）アポリポプロテインＣ−ＩＩＩ遺伝子の塩基番号−４８２位の多型、
（２０）パラオキソナーゼ遺伝子の塩基番号５８４位の多型、
（２１）グリコプロテインＩｂα遺伝子の塩基番号１０１８位の多型、及び
（２２）アポリポプロテインＥ遺伝子の塩基番号３９３２位の多型。
【請求項５】
以下の工程（ｉ）〜（ｉｉｉ）を含んでなる、冠動脈形成術後再狭窄のリスク診断方法、
（ｉ）核酸試料における、以下の（１）〜（６）からなるグループより選択される二つ以上の多型を解析する工程、
（１）アポリポプロテインＥ遺伝子の塩基番号３９３２位の多型、
（２）グリコプロテインＩａ遺伝子の塩基番号１６４８位の多型、
（３）腫瘍壊死因子α遺伝子の塩基番号−８６３位の多型、
（４）Ｇ−プロテインβ３サブユニット遺伝子の８２５位の多型、
（５）アポリポプロテインＣ−ＩＩＩ遺伝子の塩基番号−４８２位の多型、及び
（６）アンギオテンシノーゲン遺伝子の塩基番号−６位の多型、
（ｉｉ）前記工程によって得られる多型情報から核酸試料の遺伝子型を決定する工程、及び
（ｉｉｉ）決定された遺伝子型から冠動脈形成術後再狭窄の遺伝的リスクを求める工程。
【請求項６】
以下の工程（ｉｖ）〜（ｖｉ）を含んでなる、冠動脈形成術後再狭窄のリスク診断方法、
（ｉｖ）核酸試料における、以下の（７）〜（１１）からなるグループより選択される二つ以上の多型を解析する工程、
（７）トロンボスポンジン４遺伝子の塩基番号１１８６位の多型、
（８）腫瘍壊死因子α遺伝子の塩基番号−８６３位の多型、
（９）トロンボモジュリン遺伝子の塩基番号２１３６位の多型、
（１０）トロンボポイエチン遺伝子の塩基番号５７１３位の多型、及び
（１１）血小板活性化因子アセチルヒドロラーゼ遺伝子の塩基番号９９４位の多型、
（ｖ）前記工程によって得られる多型情報から核酸試料の遺伝子型を決定する工程、及び
（ｖｉ）決定された遺伝子型から冠動脈形成術後再狭窄の遺伝的リスクを求める工程。
【請求項７】
以下の工程（ｖｉｉ）〜（ｉｘ）を含んでなる、冠動脈形成術後再狭窄のリスク診断方法、
（ｖｉｉ）核酸試料における、以下の（１２）〜（１７）からなるグループより選択される二つ以上の多型を解析する工程、
（１２）Ｅ−セレクチン遺伝子の塩基番号５６１位の多型、
（１３）脂肪酸結合タンパク質２遺伝子の塩基番号２４４５位の多型、
（１４）グリコプロテインＩｂα遺伝子の塩基番号１０１８位の多型、
（１５）プラスミノーゲン活性化因子インヒビター１遺伝子の塩基番号−６６８位の多型、
（１６）パラオキソナーゼ遺伝子の塩基番号５８４位の多型、及び
（１７）アポリポプロテインＥ遺伝子の塩基番号３９３２位の多型、
（ｖｉｉｉ）前記工程によって得られる多型情報から核酸試料の遺伝子型を決定する工程、及び
（ｉｘ）決定された遺伝子型から冠動脈形成術後再狭窄の遺伝的リスクを求める工程。
【請求項８】
以下の工程（ｘ）〜（ｘｉｉ）を含んでなる、冠動脈形成術後再狭窄のリスク診断方法、
（ｘ）核酸試料における、以下の（１８）〜（２２）からなるグループより選択される二つ以上の多型を解析する工程、
（１８）プラスミノーゲン活性化因子インヒビター１遺伝子の塩基番号−６６８位の多型、
（１９）アポリポプロテインＣ−ＩＩＩ遺伝子の塩基番号−４８２位の多型、
（２０）パラオキソナーゼ遺伝子の塩基番号５８４位の多型、
（２１）グリコプロテインＩｂα遺伝子の塩基番号１０１８位の多型、及び
（２２）アポリポプロテインＥ遺伝子の塩基番号３９３２位の多型、
（ｘｉ）前記工程によって得られる多型情報から核酸試料の遺伝子型を決定する工程、及び
（ｘｉｉ）決定された遺伝子型から冠動脈形成術後再狭窄の遺伝的リスクを求める工程。
【請求項９】
以下の（１）〜（６）からなるグループより選択される二つ以上の核酸を含んでなる遺伝子型検出用キット、
（１）アポリポプロテインＥ遺伝子の塩基番号３９３２位の多型を解析するための核酸、
（２）グリコプロテインＩａ遺伝子の塩基番号１６４８位の多型を解析するための核酸、
（３）腫瘍壊死因子α遺伝子の塩基番号−８６３位の多型を解析するための核酸、
（４）Ｇ−プロテインβ３サブユニット遺伝子の８２５位の多型を解析するための核酸、
（５）アポリポプロテインＣ−ＩＩＩ遺伝子の塩基番号−４８２位の多型を解析するための核酸、及び
（６）アンギオテンシノーゲン遺伝子の塩基番号−６位の多型を解析するための核酸。
【請求項１０】
以下の（７）〜（１１）からなるグループより選択される二つ以上の核酸を含んでなる遺伝子型検出用キット、
（７）トロンボスポンジン４遺伝子の塩基番号１１８６位の多型を解析するための核酸、
（８）腫瘍壊死因子α遺伝子の塩基番号−８６３位の多型を解析するための核酸、
（９）トロンボモジュリン遺伝子の塩基番号２１３６位の多型を解析するための核酸、
（１０）トロンボポイエチン遺伝子の塩基番号５７１３位の多型を解析するための核酸、及び
（１１）血小板活性化因子アセチルヒドロラーゼ遺伝子の塩基番号９９４位の多型を解析するための核酸。
【請求項１１】
以下の（１２）〜（１７）からなるグループより選択される二つ以上の核酸を含んでなる遺伝子型検出用キット、
（１２）Ｅ−セレクチン遺伝子の塩基番号５６１位の多型を解析するための核酸、
（１３）脂肪酸結合タンパク質２遺伝子の塩基番号２４４５位の多型を解析するための核酸、
（１４）グリコプロテインＩｂα遺伝子の塩基番号１０１８位の多型を解析するための核酸、
（１５）プラスミノーゲン活性化因子インヒビター１遺伝子の塩基番号−６６８位の多型を解析するための核酸、
（１６）パラオキソナーゼ遺伝子の塩基番号５８４位の多型を解析するための核酸、及び
（１７）アポリポプロテインＥ遺伝子の塩基番号３９３２位の多型を解析するための核酸。
【請求項１２】
以下の（１８）〜（２２）からなるグループより選択される二つ以上の核酸を含んでなる遺伝子型検出用キット、
（１８）プラスミノーゲン活性化因子インヒビター１遺伝子の塩基番号−６６８位の多型を解析するための核酸、
（１９）アポリポプロテインＣ−ＩＩＩ遺伝子の塩基番号−４８２位の多型を解析するための核酸、
（２０）パラオキソナーゼ遺伝子の塩基番号５８４位の多型を解析するための核酸、（２１）グリコプロテインＩｂα遺伝子の塩基番号１０１８位の多型を解析するための核酸、及び
（２２）アポリポプロテインＥ遺伝子の塩基番号３９３２位の多型を解析するための核酸。
【請求項１３】
以下の（１）〜（７）からなるグループより選択される二つ以上の核酸が不溶性支持体に固定されてなる固定化核酸、
（１）アポリポプロテインＥ遺伝子の塩基番号３９３２位の多型を解析するための核酸、
（２）グリコプロテインＩａ遺伝子の塩基番号１６４８位の多型を解析するための核酸、
（３）腫瘍壊死因子α遺伝子の塩基番号−８６３位の多型を解析するための核酸、
（４）Ｇ−プロテインβ３サブユニット遺伝子の８２５位の多型を解析するための核酸、
（５）アポリポプロテインＣ−ＩＩＩ遺伝子の塩基番号−４８２位の多型を解析するための核酸、及び
（６）アンギオテンシノーゲン遺伝子の塩基番号−６位の多型を解析するための核酸。
【請求項１４】
以下の（７）〜（１１）からなるグループより選択される二つ以上の核酸が不溶性支持体に固定されてなる固定化核酸、
（７）トロンボスポンジン４遺伝子の塩基番号１１８６位の多型を解析するための核酸、
（８）腫瘍壊死因子α遺伝子の塩基番号−８６３位の多型を解析するための核酸、
（９）トロンボモジュリン遺伝子の塩基番号２１３６位の多型を解析するための核酸、
（１０）トロンボポイエチン遺伝子の塩基番号５７１３位の多型を解析するための核酸、及び
（１１）血小板活性化因子アセチルヒドロラーゼ遺伝子の塩基番号９９４位の多型を解析するための核酸。
【請求項１５】
以下の（１２）〜（１７）からなるグループより選択される二つ以上の核酸が不溶性支持体に固定されてなる固定化核酸、
（１２）Ｅ−セレクチン遺伝子の塩基番号５６１位の多型を解析するための核酸、
（１３）脂肪酸結合タンパク質２遺伝子の塩基番号２４４５位の多型を解析するための核酸、
（１４）グリコプロテインＩｂα遺伝子の塩基番号１０１８位の多型を解析するための核酸、
（１５）プラスミノーゲン活性化因子インヒビター１遺伝子の塩基番号−６６８位の多型を解析するための核酸、
（１６）パラオキソナーゼ遺伝子の塩基番号５８４位の多型を解析するための核酸、及び
（１７）アポリポプロテインＥ遺伝子の塩基番号３９３２位の多型を解析するための核酸。
【請求項１６】
以下の（１８）〜（２２）からなるグループより選択される二つ以上の核酸が不溶性支持体に固定されてなる固定化核酸、
（１８）プラスミノーゲン活性化因子インヒビター１遺伝子の塩基番号−６６８位の多型を解析するための核酸、
（１９）アポリポプロテインＣ−ＩＩＩ遺伝子の塩基番号−４８２位の多型を解析するための核酸、
（２０）パラオキソナーゼ遺伝子の塩基番号５８４位の多型を解析するための核酸、（２１）グリコプロテインＩｂα遺伝子の塩基番号１０１８位の多型を解析するための核酸、及び
（２２）アポリポプロテインＥ遺伝子の塩基番号３９３２位の多型を解析するための核酸。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は冠動脈形成術後の再狭窄に関連する遺伝子を利用した検出方法に関する。詳しくは冠動脈形成術後の再狭窄に関連する複数の遺伝子の多型を利用した検出方法及び該方法に用いられるキットに関する。冠動脈形成術後の再狭窄のリスク診断として本発明を利用することができる。
【０００２】
【従来の技術】
冠動脈形成術は冠動脈疾患の治療として広く行われているが、再狭窄が大きな問題である（ＭｃＢｒｉｄｅ　Ｗ，　Ｌａｎｇｅ　ＲＡ，　Ｈｉｌｌｉｓ　ＬＤ．　Ｒｅｓｔｅｎｏｓｉｓ　ａｆｔｅｒ　ｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌ　ｃｏｒｏｎａｒｙ　ａｎｇｉｏｐｌａｓｔｙ．　Ｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ．　Ｎ　Ｅｎｇｌ　Ｊ　Ｍｅｄ　１９９８；３１８：１７３４−７．）。冠動脈内ステントの使用により再狭窄の頻度は減少したが、依然として１０−２０％の再狭窄が認められる（Ｓｅｒｒｕｙｓ　ＰＷ，　ｄｅ　Ｊａｅｇｅｒｅ　Ｐ，　Ｋｉｅｍｅｎｅｉｊ　Ｆ，　ｅｔ　ａｌ．　Ａ　ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ　ｏｆ　ｂａｌｌｏｏｎ−ｅｘｐａｎｄａｂｌｅ−ｓｔｅｎｔ　ｉｍｐｌａｎｔａｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　ｂａｌｌｏｏｎ　ａｎｇｉｏｐｌａｓｔｙ　ｉｎ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｃｏｒｏｎａｒｙ　ａｒｔｅｒｙ　ｄｉｓｅａｓｅ．　Ｂｅｎｅｓｔｅｎｔ　Ｓｔｕｄｙ　Ｇｒｏｕｐ．　Ｎ　Ｅｎｇｌ　Ｊ　Ｍｅｄ　１９９４；３３１：４８９−９５．）。高血圧・糖尿病・高脂血症・不安定狭心症・高度冠動脈狭窄および長い狭窄病変などの多くの臨床所見・血管造影所見が冠動脈形成術後再狭窄のリスクを増加させることが報告されてきたが（Ｈｉｒｓｈｆｅｌｄ　ＪＷ　Ｊｒ，　Ｓｃｈｗａｒｔｚ　ＪＳ，　Ｊｕｇｏ　Ｒ，　ｅｔ　ａｌ．　Ｒｅｓｔｅｎｏｓｉｓ　ａｆｔｅｒ　ｃｏｒｏｎａｒｙ　ａｎｇｉｏｐｌａｓｔｙ：　ａ　ｍｕｌｔｉｖａｒｉａｔｅ　ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ　ｍｏｄｅｌ　ｔｏ　ｒｅｌａｔｅ　ｌｅｓｉｏｎ　ａｎｄ　ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ　ｖａｒｉａｂｌｅｓ　ｔｏ　ｒｅｓｔｅｎｏｓｉｓ．　Ｔｈｅ　Ｍ−ＨＥＡＲＴ　Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｏｒｓ．　Ｊ　Ａｍ　Ｃｏｌｌ　Ｃａｒｄｉｏｌ　１９９１；１８：６４７−５６．；　Ｗｅｉｎｔｒａｕｂ　ＷＳ，　Ｋｏｓｉｎｓｋｉ　ＡＳ，　Ｂｒｏｗｎ　ＣＬ　３ｒｄ，　Ｋｉｎｇ　ＳＢ　３ｒｄ．Ｃａｎ　ｒｅｓｔｅｎｏｓｉｓ　ａｆｔｅｒ　ｃｏｒｏｎａｒｙ　ａｎｇｉｏｐｌａｓｔｙ　ｂｅ　ｐｒｅｄｉｃｔｅｄ　ｆｒｏｍ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｖａｒｉａｂｌｅｓ？　Ｊ　Ａｍ　Ｃｏｌｌ　Ｃａｒｄｉｏｌ　１９９３；２１：６−１４．；　Ｓｔｅｉｎ　Ｂ，　Ｗｅｉｎｔｒａｕｂ　ＷＳ，　ＧｅｂｈａｒｔＳＰ，　ｅｔ　ａｌ．　Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ　ｏｆ　ｄｉａｂｅｔｅｓ　ｍｅｌｌｉｔｕｓ　ｏｎ　ｅａｒｌｙ　ａｎｄ　ｌａｔｅ　ｏｕｔｃｏｍｅ　ａｆｔｅｒ　ｐｅｒｃｕｔａｎｅｏｕｓ　ｔｒａｎｓｌｕｍｉｎａｌ　ｃｏｒｏｎａｒｙ　ａｎｇｉｏｐｌａｓｔｙ．　Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ　１９９５；９１：９７９−８９．；　Ｖｉｏｌａｒｉｓ　ＡＧ，　Ｍｅｌｋｅｒｔ　Ｒ，　Ｓｅｒｒｕｙｓ　ＰＷ．　Ｌｏｎｇ−ｔｅｒｍ　ｌｕｍｉｎａｌ　ｒｅｎａｒｒｏｗｉｎｇ　ａｆｔｅｒ　ｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌ　ｅｌｅｃｔｉｖｅ　ｃｏｒｏｎａｒｙ　ａｎｇｉｏｐｌａｓｔｙ　ｏｆ　ｔｏｔａｌ　ｏｃｃｌｕｓｉｏｎｓ．　Ａ　ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　ａｎｇｉｏｇｒａｐｈｉｃ　ａｎａｌｙｓｉｓ．　Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ　１９９５；９１：２１４０−５０．）、再狭窄の分子メカニズムは未だ不明である。ヒトの血管内超音波による研究から、バルーン拡張術では慢性リモデリング（血管収縮）が主要なメカニズムであり（Ｍｉｎｔｚ　ＧＳ，　Ｐｏｐｍａ　ＪＪ，　Ｐｉｃｈａｒｄ　ＡＤ，　ｅｔ　ａｌ．　Ａｒｔｅｒｉａｌ　ｒｅｍｏｄｅｌｉｎｇ　ａｆｔｅｒ　ｃｏｒｏｎａｒｙ　ａｎｇｉｏｐｌａｓｔｙ：　ａ　ｓｅｒｉａｌ　ｉｎｔｒａｖａｓｃｕｌａｒ　ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄ　ｓｔｕｄｙ．　Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ　１９９６；９４：３５−４３．）、ステント内再狭窄では新生内膜の肥厚が最も重要なメカニズムであることが報告された（Ｈｏｆｆｍａｎｎ　Ｒ，　Ｍｉｎｔｚ　ＧＳ，　Ｄｕｓｓａｉｌｌａｎｔ　ＧＲ，　ｅｔ　ａｌ．　Ｐａｔｔｅｒｎｓ　ａｎｄ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ　ｏｆ　ｉｎ−ｓｔｅｎｔ　ｒｅｓｔｅｎｏｓｉｓ．　Ａ　ｓｅｒｉａｌ　ｉｎｔｒａｖａｓｃｕｌａｒ　ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄ　ｓｔｕｄｙ．　Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ　１９９６；９４：１２４７−５４．）。冠動脈形成術後再狭窄を予防するための一つの方法は再狭窄感受性遺伝子を同定することである。　今までにゲノム疫学的研究によりアンギオテンシン変換酵素（Ａｍａｎｔ　Ｃ，　Ｂａｕｔｅｒｓ　Ｃ，　Ｂｏｄａｒｔ　Ｊ−Ｃ，　ｅｔ　ａｌ．　Ｄ　ａｌｌｅｌｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ　Ｉ−ｃｏｎｖｅｒｔｉｎｇ　ｅｎｚｙｍｅ　ｉｓ　ａ　ｍａｊｏｒ　ｒｉｓｋ　ｆａｃｔｏｒ　ｆｏｒ　ｒｅｓｔｅｎｏｓｉｓ　ａｆｔｅｒ　ｃｏｒｏｎａｒｙ　ｓｔｅｎｔｉｎｇ．　Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ　１９９７；９６：５６−６０．；　Ｒｉｂｉｃｈｉｎｉ　Ｆ，　Ｓｔｅｆｆｅｎｉｎｏ　Ｇ，　Ｄｅｌｌａｖａｌｌｅ　Ａ，　ｅｔ　ａｌ．　Ｐｌａｓｍａ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ａｎｄ　ｉｎｓｅｒｔｉｏｎ／ｄｅｌｅｔｉｏｎ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ　ｏｆ　ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ　Ｉ−ｃｏｎｖｅｒｔｉｎｇ　ｅｎｚｙｍｅ：　ａ　ｍａｊｏｒ　ｒｉｓｋ　ｆａｃｔｏｒ　ａｎｄ　ａ　ｍａｒｋｅｒ　ｏｆ　ｒｉｓｋ　ｆｏｒ　ｃｏｒｏｎａｒｙ　ｓｔｅｎｔ　ｒｅｓｔｅｎｏｓｉｓ．　Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ　１９９８；９７：１４７−１５４．）、アンギオテンシノーゲン（Ｖｏｌｚｋｅ　Ｈ，　Ｈｅｒｔｗｉｇ　Ｓ，　Ｒｅｔｔｉｇ　Ｒ，　Ｍｏｔｚ　Ｗ．　Ｔｈｅ　ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎｏｇｅｎ　ｇｅｎｅ　２３５Ｔ　ｖａｒｉａｎｔ　ｉｓ　ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈ　ａｎ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｒｉｓｋ　ｏｆ　ｒｅｓｔｅｎｏｓｉｓ　ａｆｔｅｒ　ｐｅｒｃｕｔａｎｅｏｕｓ　ｔｒａｎｓｌｕｍｉｎａｌ　ｃｏｒｏｎａｒｙ　ａｎｇｉｏｐｌａｓｔｙ．　Ｃｌｉｎ　Ｓｃｉ　２０００；９９：１９−２５．）、アポリポタンパクＥ（ｖａｎ　Ｂｏｃｋｘｍｅｅｒ　ＦＭ，　Ｍａｍｏｔｔｅ　ＣＤＳ，　Ｇｉｂｂｏｎｓ　ＦＲ，　Ｔａｙｌｏｒ　ＲＲ．　Ａｐｏｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ　ε４　ｈｏｍｏｚｙｇｏｓｉｔｙ−ａ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｎｔ　ｏｆ　ｒｅｓｔｅｎｏｓｉｓ　ａｆｔｅｒ　ｃｏｒｏｎａｒｙ　ａｎｇｉｏｐｌａｓｔｙ．　Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ　１９９４；１１０：１９５−２０２．）、血小板糖タンパクＩＩＩａ（Ｗａｌｔｅｒ　ＤＨ，　Ｓｃｈａｃｈｉｎｇｅｒ　Ｖ，　Ｅｌｓｎｅｒ　Ｍ，　Ｄｉｍｍｅｌｅｒ　Ｓ，　Ｚｅｉｈｅｒ　ＡＭ．　Ｐｌａｔｅｌ���ｔ　ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ　ＩＩＩａ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ　ａｎｄ　ｒｉｓｋ　ｏｆ　ｃｏｒｏｎａｒｙ　ｓｔｅｎｔ　ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ．　Ｌａｎｃｅｔ　１９９７；３５０：１２１７−１２１９．）、ストロメライシン−１（Ｈｕｍｐｈｒｉｅｓ　Ｓ，　Ｂａｕｔｅｒｓ　Ｃ，　Ｍｅｉｒｈａｅｇｈｅ　Ａ，　Ｌｕｏｎｇ　Ｌ，　Ｂｅｒｔｒａｎｄ　Ｍ，　Ａｍｏｕｙｅｌ　Ｐ．　Ｔｈｅ　５Ａ６Ａ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｐｒｏｍｏｔｅｒ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｓｔｒｏｍｅｌｙｓｉｎ−１　（ＭＭＰ３）　ａｓ　ａ　ｒｉｓｋ　ｆａｃｔｏｒ　ｆｏｒ　ｒｅｓｔｅｎｏｓｉｓ．　Ｅｕｒ　Ｈｅａｒｔ　Ｊ　２００２；２３：７２１−７２５．）などの遺伝子多型とバルーン拡張術後再狭窄あるいはステント内再狭窄との関連が報告されているが、再狭窄感受性遺伝子は未だ十分に同定されていない。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】
以上のように、今までに数多くの遺伝子多型と冠動脈形成術後再狭窄との関連解析が行われてきた。しかし多くの研究についてはその意義について一定の見解は得られていない。その主な理由は多くの研究においては対象集団の大きさが十分でないことと、遺伝子多型のみならず環境因子が人種間で異なっていることに起因する。さらに、たとえ再狭窄との関連が認められたとしても、大規模集団における解析では相対危険度（オッズ比）が低いのが一般的である。
本発明は以上の背景に鑑みなされたものであって、その目的は高精度で予知確率の高い冠動脈形成術後再狭窄の遺伝的リスクを診断する手段を提供することである。
【０００４】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、以上の目的を達成するために数種類の公的データベースを用いて冠動脈硬化、冠動脈攣縮、高血圧、糖尿病、高脂血症などとの関連が推定される７１遺伝子を抜粋し、遺伝子の機能変化との関連が予想されるものなどを中心に１１２多型を選択した。続いて、この７１遺伝子１１２多型に関して心筋梗塞との関連解析を心筋梗塞４４５例と対照４６４例について行い、男性で１９個、女性で１８個の一塩基多型（ＳＮＰ：ｓｉｎｇｌｅ　ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ）が心筋梗塞発症と関連することを見出したが（Ｙａｍａｄａ　Ｙ，　Ｉｚａｗａ　Ｈ，　Ｉｃｈｉｈａｒａ　Ｓ，　ｅｔ　ａｌ．　Ｇｅｎｅｔｉｃ　ｒｉｓｋ　ｄｉａｇｎｏｓｉｓ　ｓｙｓｔｅｍ　ｆｏｒ　ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ　ｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ　ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ　ｂｙ　ａ　ｌａｒｇｅ　ａｃａｌｅ　ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ　ｓｔｕｄｙ　ｏｆ　１１２　ｇｅｎｅ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ　ｉｎ　５０６１　ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｓ（ｉｎ　ｐｒｅｓｓ）．）、それらの多型群の中には冠動脈形成術後再狭窄の候補遺伝子も含まれていた。そこで、これらのＳＮＰと冠動脈形成術後再狭窄との関連について大規模関連解析を行った。その結果、冠動脈形成術後再狭窄と関連するＳＮＰを男性で１０個、女性で７個同定することに成功した。更に、これらの多型を組み合わせて解析することにより、多因子ロジスティック回帰分析のｓｔｅｐｗｉｓｅ　ｆｏｒｗａｒｄ　ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄによって、冠動脈形成術後再狭窄の最大オッズ比が、バルーン拡張術後再狭窄においては男性で１５．０９、女性で４４．５４を呈し、ステント内再狭窄では男性で６．６４、女性で１１７．８３を呈し、過去に報告された関連解析の中で最大のオッズ比を示した。この結果から、これらのＳＮＰの中から複数のＳＮＰを選択し、各ＳＮＰを解析した結果を組み合わせて用いれば、信頼性が高く、予知確率の高い冠動脈形成術後再狭窄のリスク診断が行えるとの知見が得られた。本発明は以上の知見に基づくものであって、次の構成を提供する。
［１］　　以下の工程（ａ）を含んでなる、核酸試料の遺伝子型を検出する方法、
（ａ）核酸試料における、以下の（１）〜（６）からなるグループより選択される二つ以上の多型を解析する工程、
（１）アポリポプロテインＥ遺伝子の塩基番号３９３２位の多型、
（２）グリコプロテインＩａ遺伝子の塩基番号１６４８位の多型、
（３）腫瘍壊死因子α遺伝子の塩基番号−８６３位の多型、
（４）Ｇ−プロテインβ３サブユニット遺伝子の８２５位の多型、
（５）アポリポプロテインＣ−ＩＩＩ遺伝子の塩基番号−４８２位の多型、及び
（６）アンギオテンシノーゲン遺伝子の塩基番号−６位の多型。
［２］　以下の工程（ｂ）を含んでなる、核酸試料の遺伝子型を検出する方法、
（ｂ）核酸試料における、以下の（７）〜（１１）からなるグループより選択される二つ以上の多型を解析する工程、
（７）トロンボスポンジン４遺伝子の塩基番号１１８６位の多型、
（８）腫瘍壊死因子α遺伝子の塩基番号−８６３位の多型、
（９）トロンボモジュリン遺伝子の塩基番号２１３６位の多型、
（１０）トロンボポイエチン遺伝子の塩基番号５７１３位の多型、及び
（１１）血小板活性化因子アセチルヒドロラーゼ遺伝子の塩基番号９９４位の多型。
［３］　以下の工程（ｃ）を含んでなる、核酸試料の遺伝子型を検出する方法、
（ｃ）核酸試料における、以下の（１２）〜（１７）からなるグループより選択される二つ以上の多型を解析する工程、
（１２）Ｅ−セレクチン遺伝子の塩基番号５６１位の多型、
（１３）脂肪酸結合タンパク質２遺伝子の塩基番号２４４５位の多型、
（１４）グリコプロテインＩｂα遺伝子の塩基番号１０１８位の多型、
（１５）プラスミノーゲン活性化因子インヒビター１遺伝子の塩基番号−６６８位の多型、
（１６）パラオキソナーゼ遺伝子の塩基番号５８４位の多型、及び
（１７）アポリポプロテインＥ遺伝子の塩基番号３９３２位の多型。
［４］　以下の工程（ｄ）を含んでなる、核酸試料の遺伝子型を検出する方法、
（ｄ）核酸試料における、以下の（１８）〜（２２）からなるグループより選択される二つ以上の多型を解析する工程、
（１８）プラスミノーゲン活性化因子インヒビター１遺伝子の塩基番号−６６８位の多型、
（１９）アポリポプロテインＣ−ＩＩＩ遺伝子の塩基番号−４８２位の多型、
（２０）パラオキソナーゼ遺伝子の塩基番号５８４位の多型、
（２１）グリコプロテインＩｂα遺伝子の塩基番号１０１８位の多型、及び
（２２）アポリポプロテインＥ遺伝子の塩基番号３９３２位の多型。
［５］　以下の工程（ｉ）〜（ｉｉｉ）を含んでなる、冠動脈形成術後再狭窄のリスク診断方法、
（ｉ）核酸試料における、以下の（１）〜（６）からなるグループより選択される二つ以上の多型を解析する工程、
（１）アポリポプロテインＥ遺伝子の塩基番号３９３２位の多型、
（２）グリコプロテインＩａ遺伝子の塩基番号１６４８位の多型、
（３）腫瘍壊死因子α遺伝子の塩基番号−８６３位の多型、
（４）Ｇ−プロテインβ３サブユニット遺伝子の８２５位の多型、
（５）アポリポプロテインＣ−ＩＩＩ遺伝子の塩基番号−４８２位の多型、及び
（６）アンギオテンシノーゲン遺伝子の塩基番号−６位の多型。
（ｉｉ）前記工程によって得られる多型情報から核酸試料の遺伝子型を決定する工程、及び
（ｉｉｉ）決定された遺伝子型から冠動脈形成術後再狭窄の遺伝的リスクを求める工程。
［６］　以下の工程（ｉｖ）〜（ｖｉ）を含んでなる、冠動脈形成術後再狭窄のリスク診断方法、
（ｉｖ）核酸試料における、以下の（７）〜（１１）からなるグループより選択される二つ以上の多型を解析する工程、
（７）トロンボスポンジン４遺伝子の塩基番号１１８６位の多型、
（８）腫瘍壊死因子α遺伝子の塩基番号−８６３位の多型、
（９）トロンボモジュリン遺伝子の塩基番号２１３６位の多型、
（１０）トロンボポイエチン遺伝子の塩基番号５７１３位の多型、及び
（１１）血小板活性化因子アセチルヒドロラーゼ遺伝子の塩基番号９９４位の多型。
（ｖ）前記工程によって得られる多型情報から核酸試料の遺伝子型を決定する工程、及び
（ｖｉ）決定された遺伝子型から冠動脈形成術後再狭窄の遺伝的リスクを求める工程。
［７］　以下の工程（ｖｉｉ）〜（ｉｘ）を含んでなる、冠動脈形成術後再狭窄のリスク診断方法、
（ｖｉｉ）核酸試料における、以下の（１２）〜（１７）からなるグループより選択される二つ以上の多型を解析する工程、
（１２）Ｅ−セレクチン遺伝子の塩基番号５６１位の多型、
（１３）脂肪酸結合タンパク質２遺伝子の塩基番号２４４５位の多型、
（１４）グリコプロテインＩｂα遺伝子の塩基番号１０１８位の多型、
（１５）プラスミノーゲン活性化因子インヒビター１遺伝子の塩基番号−６６８位の多型、
（１６）パラオキソナーゼ遺伝子の塩基番号５８４位の多型、及び
（１７）アポリポプロテインＥ遺伝子の塩基番号３９３２位の多型、
（ｖｉｉｉ）前記工程によって得られる多型情報から核酸試料の遺伝子型を決定する工程、及び
（ｉｘ）決定された遺伝子型から冠動脈形成術後再狭窄の遺伝的リスクを求める工程。
［８］　以下の工程（ｘ）〜（ｘｉｉ）を含んでなる、冠動脈形成術後再狭窄のリスク診断方法、
（ｘ）核酸試料における、以下の（１８）〜（２２）からなるグループより選択される二つ以上の多型を解析する工程、
（１８）プラスミノーゲン活性化因子インヒビター１遺伝子の塩基番号−６６８位の多型、
（１９）アポリポプロテインＣ−ＩＩＩ遺伝子の塩基番号−４８２位の多型、
（２０）パラオキソナーゼ遺伝子の塩基番号５８４位の多型、
（２１）グリコプロテインＩｂα遺伝子の塩基番号１０１８位の多型、及び
（２２）アポリポプロテインＥ遺伝子の塩基番号３９３２位の多型、
（ｘｉ）前記工程によって得られる多型情報から核酸試料の遺伝子型を決定する工程、及び
（ｘｉｉ）決定された遺伝子型から冠動脈形成術後再狭窄の遺伝的リスクを求める工程。
［９］　以下の（１）〜（６）からなるグループより選択される二つ以上の核酸を含んでなる遺伝子型検出用キット、
（１）アポリポプロテインＥ遺伝子の塩基番号３９３２位の多型を解析するための核酸、
（２）グリコプロテインＩａ遺伝子の塩基番号１６４８位の多型を解析するための核酸、
（３）腫瘍壊死因子α遺伝子の塩基番号−８６３位の多型を解析するための核酸、
（４）Ｇ−プロテインβ３サブユニット遺伝子の８２５位の多型を解析するための核酸、
（５）アポリポプロテインＣ−ＩＩＩ遺伝子の塩基番号−４８２位の多型を解析するための核酸、及び
（６）アンギオテンシノーゲン遺伝子の塩基番号−６位の多型を解析するための核酸。
［１０］　以下の（７）〜（１１）からなるグループより選択される二つ以上の核酸を含んでなる遺伝子型検出用キット、
（７）トロンボスポンジン４遺伝子の塩基番号１１８６位の多型を解析するための核酸、
（８）腫瘍壊死因子α遺伝子の塩基番号−８６３位の多型を解析するための核酸、
（９）トロンボモジュリン遺伝子の塩基番号２１３６位の多型を解析するための核酸、
（１０）トロンボポイエチン遺伝子の塩基番号５７１３位の多型を解析するための核酸、及び
（１１）血小板活性化因子アセチルヒドロラーゼ遺伝子の塩基番号９９４位の多型を解析するための核酸。
［１１］　以下の（１２）〜（１７）からなるグループより選択される二つ以上の核酸を含んでなる遺伝子型検出用キット、
（１２）Ｅ−セレクチン遺伝子の塩基番号５６１位の多型を解析するための核酸、
（１３）脂肪酸結合タンパク質２遺伝子の塩基番号２４４５位の多型を解析するための核酸、
（１４）グリコプロテインＩｂα遺伝子の塩基番号１０１８位の多型を解析するための核酸、
（１５）プラスミノーゲン活性化因子インヒビター１遺伝子の塩基番号−６６８位の多型を解析するための核酸、
（１６）パラオキソナーゼ遺伝子の塩基番号５８４位の多型を解析するための核酸、及び
（１７）アポリポプロテインＥ遺伝子の塩基番号３９３２位の多型を解析するための核酸。
［１２］　以下の（１８）〜（２２）からなるグループより選択される二つ以上の核酸を含んでなる遺伝子型検出用キット、
（１８）プラスミノーゲン活性化因子インヒビター１遺伝子の塩基番号−６６８位の多型を解析するための核酸、
（１９）アポリポプロテインＣ−ＩＩＩ遺伝子の塩基番号−４８２位の多型を解析するための核酸、
（２０）パラオキソナーゼ遺伝子の塩基番号５８４位の多型を解析するための核酸、（２１）グリコプロテインＩｂα遺伝子の塩基番号１０１８位の多型を解析するための核酸、及び
（２２）アポリポプロテインＥ遺伝子の塩基番号３９３２位の多型を解析するための核酸。
［１３］　以下の（１）〜（７）からなるグループより選択される二つ以上の核酸が不溶性支持体に固定されてなる固定化核酸、
（１）アポリポプロテインＥ遺伝子の塩基番号３９３２位の多型を解析するための核酸、
（２）グリコプロテインＩａ遺伝子の塩基番号１６４８位の多型を解析するための核酸、
（３）腫瘍壊死因子α遺伝子の塩基番号−８６３位の多型を解析するための核酸、
（４）Ｇ−プロテインβ３サブユニット遺伝子の８２５位の多型を解析するための核酸、
（５）アポリポプロテインＣ−ＩＩＩ遺伝子の塩基番号−４８２位の多型を解析するための核酸、及び
（６）アンギオテンシノーゲン遺伝子の塩基番号−６位の多型を解析するための核酸。
［１４］　以下の（７）〜（１１）からなるグループより選択される二つ以上の核酸が不溶性支持体に固定されてなる固定化核酸、
（７）トロンボスポンジン４遺伝子の塩基番号１１８６位の多型を解析するための核酸、
（８）腫瘍壊死因子α遺伝子の塩基番号−８６３位の多型を解析するための核酸、
（９）トロンボモジュリン遺伝子の塩基番号２１３６位の多型を解析するための核酸、
（１０）トロンボポイエチン遺伝子の塩基番号５７１３位の多型を解析するための核酸、及び
（１１）血小板活性化因子アセチルヒドロラーゼ遺伝子の塩基番号９９４位の多型を解析するための核酸。
［１５］　以下の（１２）〜（１７）からなるグループより選択される二つ以上の核酸が不溶性支持体に固定されてなる固定化核酸、
（１２）Ｅ−セレクチン遺伝子の塩基番号５６１位の多型を解析するための核酸、
（１３）脂肪酸結合タンパク質２遺伝子の塩基番号２４４５位の多型を解析するための核酸、
（１４）グリコプロテインＩｂα遺伝子の塩基番号１０１８位の多型を解析するための核酸、
（１５）プラスミノーゲン活性化因子インヒビター１遺伝子の塩基番号−６６８位の多型を解析するための核酸、
（１６）パラオキソナーゼ遺伝子の塩基番号５８４位の多型を解析するための核酸、及び
（１７）アポリポプロテインＥ遺伝子の塩基番号３９３２位の多型を解析するための核酸。
［１６］　以下の（１８）〜（２２）からなるグループより選択される二つ以上の核酸が不溶性支持体に固定されてなる固定化核酸、
（１８）プラスミノーゲン活性化因子インヒビター１遺伝子の塩基番号−６６８位の多型を解析するための核酸、
（１９）アポリポプロテインＣ−ＩＩＩ遺伝子の塩基番号−４８２位の多型を解析するための核酸、
（２０）パラオキソナーゼ遺伝子の塩基番号５８４位の多型を解析するための核酸、（２１）グリコプロテインＩｂα遺伝子の塩基番号１０１８位の多型を解析するための核酸、及び
（２２）アポリポプロテインＥ遺伝子の塩基番号３９３２位の多型を解析するための核酸。
【０００５】
【発明の実施の形態】
本発明の第１の局面は核酸試料の遺伝子型を検出する方法に関し、その一態様は以下の（１）〜（６）からなるグループより選択される二つ以上の多型を解析する工程を含むことを特徴とする。他の態様としては、以下の（７）〜（１１）からなるグループより選択される二つ以上の多型を解析する工程を含むことを特徴とする。更に他の態様としては、以下の（１２）〜（１７）　からなるグループより選択される二つ以上の多型を解析する工程を含むことを特徴とする。更に他の態様としては、以下の（１８）〜（２２）　からなるグループより選択される二つ以上の多型を解析する工程を含むことを特徴とする。尚、以上の工程の結果得られる多型情報から核酸試料の遺伝子型を決定することにより冠動脈形成術後再狭窄の遺伝的リスクを求めることができる。
（１）アポリポプロテインＥ（Ａｐｏｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ　Ｅ）遺伝子の塩基番号３９３２位の多型：３９３２Ｔ→Ｃ（以下、「ＡｐｏＥ（３９３２Ｔ→Ｃ）多型」ともいう）
（２）グリコプロテインＩａ（Ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ　Ｉａ）遺伝子の塩基番号１６４８位の多型：１６４８Ａ→Ｇ（以下、「ＧＰＩａ（１６４８Ａ→Ｇ）多型」ともいう）
（３）腫瘍壊死因子α（Ｔｕｍｏｒ　ｎｅｃｒｏｓｉｓ　ｆａｃｔｏｒ−α）遺伝子の塩基番号−８６３位の多型：−８６３Ｃ→Ａ（以下、「ＴＮＦα（−８６３Ｃ→Ａ）多型」ともいう）
（４）Ｇ−プロテインβ３サブユニット（Ｇ−ｐｒｏｔｅｉｎ　β３　ｓｕｂｕｎｉｔ）遺伝子の塩基番号８２５位の多型：８２５Ｃ→Ｔ（以下、「Ｇ−プロテインβ３（８２５Ｃ→Ｔ）多型」ともいう）
（５）アポリポプロテインＣ−ＩＩＩ（Ａｐｏｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ　Ｃ−ＩＩＩ）遺伝子の塩基番号−４８２位の多型：−４８２Ｃ→Ｔ（以下、「ＡｐｏＣ−ＩＩＩ（−４８２Ｃ→Ｔ）多型」ともいう）
（６）アンギオテンシノーゲン（Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎｏｇｅｎ）遺伝子の塩基番号−６位の多型：−６Ｇ→Ａ（以下、「ＡＧＴ（−６Ｇ→Ａ）多型」ともいう）
（７）トロンボスポンジン４（Ｔｈｒｏｍｂｏｓｐｏｎｄｉｎ　４）遺伝子の塩基番号１１８６位の多型：１１８６Ｇ→Ｃ（以下、「ＴＳＰ４（１１８６Ｇ→Ｃ）多型」ともいう）
（８）腫瘍壊死因子α（Ｔｕｍｏｒ　ｎｅｃｒｏｓｉｓ　ｆａｃｔｏｒ−α）遺伝子の塩基番号−８６３位の多型：−８６３Ｃ→Ａ（以下、「ＴＮＦα（−８６３Ｃ→Ａ）多型」ともいう）
（９）トロンボモジュリン（Ｔｈｒｏｍｂｏｍｏｄｕｌｉｎ）遺伝子の塩基番号２１３６位の多型：２１３６Ｃ→Ｔ（以下、「ＴＭ（２１３６Ｃ→Ｔ）多型」ともいう）
（１０）トロンボポイエチン（Ｔｈｏｔｏｍｂｏｐｏｉｅｔｉｎ）遺伝子の塩基番号５７１３位の多型：５７１３Ａ→Ｇ（以下、「ＴＰＯ（５７１３Ａ→Ｇ）多型」ともいう）
（１１）血小板活性化因子アセチルヒドロラーゼ（Ｐｌａｔｅｌｅｔ−ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ　ｆａｃｔｏｒ　ａｃｅｔｙｌｈｙｄｒｏｌａｓｅ）遺伝子の塩基番号９９４位の多型：９９４Ｇ→Ｔ（以下、「ＰＡＦ−ＡＨ（９９４Ｇ→Ｔ）多型」ともいう）
（１２）Ｅ−セレクチン（Ｅ−ｓｅｌｅｃｔｉｎ）遺伝子の塩基番号５６１位の多型：５６１Ａ→Ｃ（以下、「Ｅセレクチン（５６１Ａ→Ｃ）多型」ともいう）
（１３）脂肪酸結合タンパク質２（Ｆａｔｔｙ　ａｃｉｄ−ｂｉｎｄｉｎｇ　ｐｒｏｔｅｉｎ　２）遺伝子の塩基番号２４４５位の多型：２４４５Ｇ→Ａ（以下、「ＦＡＢＰ２　（２４４５Ｇ→Ａ）多型」ともいう）
（１４）グリコプロテインＩｂα（Ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ　Ｉｂα）遺伝子の塩基番号１０１８位の多型：１０１８Ｃ→Ｔ（以下、「ＧＰＩｂα（１０１８Ｃ→Ｔ）多型」ともいう）
（１５）プラスミノーゲン活性化因子インヒビター１（Ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎ　ａｃｔｉｖａｔｏｒ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ−１）遺伝子の塩基番号−６６８位の多型：−６６８／４Ｇ→５Ｇ（以下、「ＰＡＩ１（−６６８／４Ｇ→５Ｇ）多型」ともいう）
（１６）パラオキソナーゼ（Ｐａｒａｏｘｏｎａｓｅ）遺伝子の塩基番号５８４位の多型：５８４Ｇ→Ａ（以下、「ＰＯＮ（５８４Ｇ→Ａ）多型」ともいう）
（１７）アポリポプロテインＥ（Ａｐｏｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ　Ｅ）遺伝子の塩基番号３９３２位の多型：３９３２Ｔ→Ｃ（以下、「ＡｐｏＥ（３９３２Ｔ→Ｃ）多型」ともいう）
（１８）プラスミノーゲン活性化因子インヒビター１（Ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎ　ａｃｔｉｖａｔｏｒ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ−１）遺伝子の塩基番号−６６８位の多型：−６６８／４Ｇ→５Ｇ（以下、「ＰＡＩ１（−６６８／４Ｇ→５Ｇ）多型」ともいう）
（１９）アポリポプロテインＣ−ＩＩＩ（Ａｐｏｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ　Ｃ−ＩＩＩ）遺伝子の塩基番号−４８２位の多型：−４８２Ｃ→Ｔ（以下、「ＡｐｏＣ−ＩＩＩ（−４８２Ｃ→Ｔ）多型」ともいう）
（２０）パラオキソナーゼ（Ｐａｒａｏｘｏｎａｓｅ）遺伝子の塩基番号５８４位の多型：５８４Ｇ→Ａ（以下、「ＰＯＮ（５８４Ｇ→Ａ）多型」ともいう）
（２１）グリコプロテインＩｂα（Ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ　Ｉｂα）遺伝子の塩基番号１０１８位の多型：１０１８Ｃ→Ｔ（以下、「ＧＰＩｂα（１０１８Ｃ→Ｔ）多型」ともいう）
（２２）アポリポプロテインＥ（Ａｐｏｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ　Ｅ）遺伝子の塩基番号３９３２位の多型：３９３２Ｔ→Ｃ（以下、「ＡｐｏＥ（３９３２Ｔ→Ｃ）多型」ともいう）
【０００６】
以上において３９３２Ｔ→Ｃのような表記は、当該塩基番号位置の多型が矢印の前又は後の塩基である二つの遺伝子型からなることを意味する。但し、−６６８／４Ｇ→５Ｇは塩基番号−６６８位から３’方向にＧ（グアニン）が連続して４個存在する遺伝子型と５個存在する遺伝子型からなる多型を意味する。
【０００７】
各遺伝子における塩基番号は公共のデータベースであるＧｅｎＢａｎｋ（ＮＣＢＩ）に登録されている公知の配列を基準として表される。尚、配列番号１の塩基配列（Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ　Ｎｏ．　Ｍ１００６５　Ｊ０３０５３　Ｊ０３０５４：Ｈｕｍａｎ　ａｐｏｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ　Ｅ　（ｅｐｓｉｌｏｎ−４　ａｌｌｅｌｅ）　ｇｅｎｅ，　ｃｏｍｐｌｅｔｅ　ｃｄｓ）において３９３２番目の塩基がアポリポプロテインＥ遺伝子の３９３２位塩基に相当する。同様に配列番号２の塩基配列（Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ　Ｎｏ．　Ｘ１７０３３　Ｍ２８２４９：Ｈｕｍａｎ　ｍＲＮＡ　ｆｏｒ　ｉｎｔｅｇｒｉｎ　ａｌｐｈａ−２　ｓｕｂｕｎｉｔ）において１６４８番目の塩基がグリコプロテインＩａ遺伝子の１６４８位塩基に相当し、配列番号３の塩基配列（Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ　Ｎｏ．　Ｌ１１６９８：Ｈｏｍｏ　ｓａｐｉｅｎｓ　ｔｕｍｏｒ　ｎｅｃｒｏｓｉｓ　ｆａｃｔｏｒ　ａｌｐｈａ　ｇｅｎｅ，　ｐｒｏｍｏｔｅｒ　ｒｅｇｉｏｎ）において１９７番目の塩基が腫瘍壊死因子α遺伝子の−８６３位塩基に相当し、配列番号４の塩基配列（Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ　Ｎｏ．　Ｍ３１３２８：Ｈｕｍａｎ　ｇｕａｎｉｎｅ　ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ−ｂｉｎｄｉｎｇ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｂｅｔａ−３　ｓｕｂｕｎｉｔ　ｍＲＮＡ，　ｃｏｍｐｌｅｔｅ　ｃｄｓ）において８３１番目の塩基がＧ−プロテインβ３サブユニット遺伝子の８２５位塩基に相当し、配列番号５の塩基配列（Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ　Ｎｏ．　Ｘ１３３６７：Ｈｕｍａｎ　ＤＮＡ　ｆｏｒ　ａｐｏｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ　Ｃ−ＩＩＩ　５’−ｆｌａｎｋ）において９３６番目の塩基がアポリポプロテインＣ−ＩＩＩ遺伝子の−４８２位塩基に相当し、配列番号６の塩基配列（Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ　Ｎｏ．　Ｘ１５３２３：Ｈ．ｓａｐｉｅｎｓ　ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎｏｇｅｎ　ｇｅｎｅ　５’ｒｅｇｉｏｎ　ａｎｄ　ｅｘｏｎ　１）において４６３番目の塩基がアンギオテンシノーゲン遺伝子の−６位塩基に相当し、配列番号７の塩基配列（Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ　Ｎｏ．　Ｚ１９５８５：Ｈ．ｓａｐｉｅｎｓ　ｍＲＮＡ　ｆｏｒ　ｔｈｒｏｍｂｏｓｐｏｎｄｉｎ−４）において１１８６番目の塩基がトロンボスポンジン４遺伝子の１１８６位塩基に相当し、配列番号８の塩基配列（Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ　Ｎｏ．　Ｄ００２１０：Ｈｏｍｏ　ｓａｐｉｅｎｓ　ｇｅｎｅ　ｆｏｒ　ｔｈｒｏｍｂｏｍｏｄｕｌｉｎ　ｐｒｅｃｕｒｓｏｒ，　ｃｏｍｐｌｅｔｅ　ｃｄｓ）において２１３６番目の塩基がトロンボモジュリン遺伝子の２１３６位塩基に相当し、配列番号９の塩基配列（Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ　Ｎｏ．　Ｌ３６０５１：Ｈｕｍａｎ　ｔｈｒｏｍｂｏｐｏｉｅｔｉｎ　ｇｅｎｅ，　ｃｏｍｐｌｅｔｅ　ｃｄｓ）において５７５３番目の塩基がトロンボポイエチン遺伝子の５７１３位塩基に相当し、配列番号１０の塩基配列（Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ　Ｎｏ．　Ｕ２０１５７：Ｈｕｍａｎ　ｐｌａｔｅｌｅｔ−ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ　ｆａｃｔｏｒ　ａｃｅｔｙｌｈｙｄｒｏｌａｓｅ　ｍＲＮＡ，　ｃｏｍｐｌｅｔｅ　ｃｄｓ）において９９６番目の塩基が血小板活性化因子アセチルヒドロラーゼ遺伝子の９９４位塩基に相当し、配列番号１１の塩基配列（��ｃｃｅｓｓｉｏｎ　Ｎｏ．　Ｍ２４７３６：Ｈｕｍａｎ　ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ　ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ　ａｄｈｅｓｉｏｎ　ｍｏｌｅｃｕｌｅ　１　（ＥＬＡＭ−１）　ｍＲＮＡ，　ｃｏｍｐｌｅｔｅ　ｃｄｓ）において５６１番目の塩基がＥ−セレクチン遺伝子の５６１位塩基に相当し、配列番号１２の塩基配列（Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ　Ｎｏ．　Ｍ１８０７９　Ｊ０３４６５：Ｈｕｍａｎ，　ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ　ｆａｔｔｙ　ａｃｉｄ　ｂｉｎｄｉｎｇ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｇｅｎｅ，　ｃｏｍｐｌｅｔｅ　ｃｄｓ，　ａｎｄ　ａｎ　Ａｌｕ　ｒｅｐｅｔｉｔｉｖｅ　ｅｌｅｍｅｎｔ．）において２４４５番目の塩基が脂肪酸結合タンパク質２遺伝子の２４４５位塩基に相当し、配列番号１３の塩基配列（Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ　Ｎｏ．　Ｊ０２９４０：Ｈｕｍａｎ　ｐｌａｔｅｌｅｔ　ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ　Ｉｂ　ａｌｐｈａ　ｃｈａｉｎ　ｍＲＮＡ，　ｃｏｍｐｌｅｔｅ　ｃｄｓ）において５２４番目の塩基がグリコプロテインＩｂα遺伝子の１０１８位塩基に相当し、配列番号１４の塩基配列（Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ　Ｎｏ．　Ｘ１３３２３：Ｈｕｍａｎ　ｇｅｎｅｆｏｒ　ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎ　ａｃｔｉｖａｔｏｒ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ　１　（ＰＡＩ−１）　５’−ｆｌａｎｋ　ａｎｄ　ｅｘｏｎ　１）において１３１番目の塩基がプラスミノーゲン活性化因子インヒビター１遺伝子の−６６８位塩基に相当し、配列番号１５の塩基配列（Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ　Ｎｏ．　Ｍ６３０１２：Ｈ．ｓａｐｉｅｎｓ　ｓｅｒｕｍ　ｐａｒａｏｘｏｎａｓｅ　（ＰＯＮ）　ｍＲＮＡ，　ｃｏｍｐｌｅｔｅ　ｃｄｓ）において５８４番目の塩基がパラオキソナーゼ遺伝子の５８４位塩基に相当する。
【０００８】
本発明において「多型を解析する」とは、解析対象の遺伝子多型について核酸試料がどのような遺伝子型を有するかを調べることを意味し、多型が存在する位置の塩基（塩基配列）を調べることと同義である。典型的には、ＡｐｏＥ（３９３２Ｔ→Ｃ）多型の解析を例に採れば、核酸試料におけるアポリポプロテインＥの遺伝子型がＣＣ（３９３２位塩基が両アレル共にＣのホモ接合体）、ＴＣ（３９３２位塩基がＴのアレルとＣのアレルとのヘテロ接合体）、及びＴＴ（３９３２位塩基が両アレル共にＴのホモ接合体）の中のいずれであるかを調べることを意味する。
【０００９】
上記の（１）〜（６）の多型は、後述の実施例で示されるように、バルーン拡張術を受けた日本人男性を対象とした解析において冠動脈形成術後再狭窄の遺伝的リスクの判定に利用することが特に有効と認められた多型である。従ってこれらの多型を解析対象とすることは、冠動脈形成術としてバルーン拡張術を対象とし、被験者として男性（特に日本人男性）を採用するときに、より高精度で予知確率の高い診断を可能とする。
同様に、上記の（７）〜（１１）の多型は、後述の実施例で示されるように、ステント挿入を行った日本人男性を対象とした解析において冠動脈形成術後再狭窄の遺伝的リスクの判定に利用することが特に有効と認められた多型である。従ってこれらの多型を解析対象とすることは、冠動脈形成術としてステント挿入を対象とし、被験者として男性（特に日本人男性）を採用するときに、より高精度で予知確率の高い診断を可能とする。
【００１０】
同様に、上記の（１２）〜（１７）の多型は、後述の実施例で示されるように、バルーン拡張術を受けた日本人女性を対象とした解析において冠動脈形成術後再狭窄の遺伝的リスクの判定に利用することが特に有効と認められた多型である。従ってこれらの多型を解析対象とすることは、冠動脈形成術としてバルーン拡張術を対象とし、被験者として女性（特に日本人女性）を採用するときに、より高精度で予知確率の高い診断を可能とする。
同様に、上記の（１８）〜（２２）の多型は、後述の実施例で示されるように、ステント挿入を行った日本人女性を対象とした解析において冠動脈形成術後再狭窄の遺伝的リスクの判定に利用することが特に有効と認められた多型である。従ってこれらの多型を解析対象とすることは、冠動脈形成術としてステント挿入を対象とし、被験者として女性（特に日本人女性）を採用するときに、より高精度で予知確率の高い診断を可能とする。
【００１１】
ここで、原則的には解析する多型の数の増加に比例して核酸試料の遺伝子型がより細かく分類され、これによって一層予知確率の高い冠動脈形成術後再狭窄の遺伝的リスクの診断を行うことができる。かかる見地から、上記の（１）〜（６）の多型の中でより多くの多型を解析して遺伝子型を検出することが好ましい。従って、（１）〜（６）のすべての多型を解析することが最も好ましい。五つ以下の多型を組み合わせて遺伝子型の検出を行う場合には、後述の実施例で示されるオッズ比の高い多型を優先的に選択して用いることが好ましい。例えば五つの多型を組み合わせて用いるのであれば、オッズ比が上位である五つの多型、即ち（１）、（２）、（３）、（４）、及び（５）を選択することが好ましい。同様に、例えば四つの多型を組み合わせて用いるのであれば（１）、（３）、（４）、及び（５）を選択することが好ましい。同様に、例えば三つの多型を組み合わせて用いるのであれば（１）、（３）、及び（４）を選択することが好ましい。
【００１２】
（７）〜（１１）の多型から選択される二つ以上の多型を解析する場合も同様に、これらすべての多型、即ち五つの多型を解析することが最も好ましい。四つ以下の多型を組み合わせて遺伝子型の検出を行う場合には、後述の実施例で示されるオッズ比の高い多型を優先的に選択して用いることが好ましい。例えば四つの多型を組み合わせて用いるのであれば、オッズ比が上位である四つの多型、即ち（７）、（８）、（９）、及び（１０）を選択することが好ましい。同様に、例えば三つの多型を組み合わせて用いるのであれば（７）、（８）、及び（９）を選択することが好ましい。同様に、例えば二つの多型を組み合わせて用いるのであれば（７）及び（８）を選択することが好ましい。
【００１３】
（１２）〜（１７）の多型から選択される二つ以上の多型を解析する場合も同様に、これらすべての多型、即ち六つの多型を解析することが最も好ましい。五つ以下の多型を組み合わせて遺伝子型の検出を行う場合には、後述の実施例で示されるオッズ比の高い多型を優先的に選択して用いることが好ましい。例えば五つの多型を組み合わせて用いるのであれば、オッズ比が上位である五つの多型、即ち（１２）、（１３）、（１４）、（１５）、及び（１６）を選択することが好ましい。同様に、例えば四つの多型を組み合わせて用いるのであれば（１２）、（１３）、（１４）、及び（１５）を選択することが好ましい。同様に、例えば三つの多型を組み合わせて用いるのであれば（１２）、（１３）、及び（１４）を選択することが好ましい。
【００１４】
（１８）〜（２２）の多型から選択される二つ以上の多型を解析する場合も同様に、これらすべての多型、即ち五つの多型を解析することが最も好ましい。四つ以下の多型を組み合わせて遺伝子型の検出を行う場合には、後述の実施例で示されるオッズ比の高い多型を優先的に選択して用いることが好ましい。例えば四つの多型を組み合わせて用いるのであれば、オッズ比が上位である四つの多型、即ち（１８）、（１９）、（２０）、及び（２１）を選択することが好ましい。同様に、例えば三つの多型を組み合わせて用いるのであれば（１８）、（１９）、及び（２０）を選択することが好ましい。同様に、例えば二つの多型を組み合わせて用いるのであれば（１８）及び（１９）を選択することが好ましい。
【００１５】
各遺伝子多型を解析する方法は特に限定されるものではなく、例えばアリル特異的プライマー（及びプローブ）を用い、ＰＣＲ法による増幅、及び増幅産物の多型を蛍光又は発光によって解析する方法や、ＰＣＲ（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ　ｃｈａｉｎ　ｒｅａｃｔｉｏｎ）法を利用したＰＣＲ−ＲＦＬＰ（ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎ　ｆｒａｇｍｅｎｔ　ｌｅｎｇｔｈ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ：制限酵素断片長多型）法、ＰＣＲ−ＳＳＣＰ（ｓｉｎｇｌｅ　ｓｔｒａｎｄ　ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ：単鎖高次構造多型）法（Ｏｒｉｔａ，Ｍ．　ｅｔ　ａｌ．，　Ｐｒｏｃ．　Ｎａｔｌ．　Ａｃａｄ．　Ｓｃｉ．，　Ｕ．Ｓ．Ａ．，　８６，　２７６６−２７７０（１９８９）等）、ＰＣＲ−ＳＳＯ（ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ｓｅｑｕｅｎｃｅ　ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ：特異的配列オリゴヌクレオチド）法、ＰＣＲ−ＳＳＯ法とドットハイブリダイゼーション法を組み合わせたＡＳＯ（ａｌｌｅｌｅ　ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ：アレル特異的オリゴヌクレオチド）ハイブリダイゼーション法（Ｓａｉｋｉ，　Ｎａｔｕｒｅ，　３２４，　１６３−１６６（１９８６）等）、又はＴａｑＭａｎ−ＰＣＲ法（Ｌｉｖａｋ，　ＫＪ，　Ｇｅｎｅｔ　Ａｎａｌ，１４，１４３（１９９９），Ｍｏｒｒｉｓ，　Ｔ．　ｅｔ　ａｌ．，　Ｊ．　Ｃｌｉｎ．　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．，３４，２９３３（１９９６））、Ｉｎｖａｄｅｒ法（Ｌｙａｍｉｃｈｅｖ　Ｖ　ｅｔ　ａｌ．，　Ｎａｔ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ，１７，２９２（１９９９））、プライマー伸長法を用いたＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ／ＭＳ（ｍａｔｒｉｘ）法（Ｈａｆｆ　ＬＡ，　Ｓｍｉｒｎｏｖ　ＩＰ，　Ｇｅｎｏｍｅ　Ｒｅｓ　７，３７８（１９９７））、ＲＣＡ（ｒｏｌｌｉｎｇ　ｃｙｃｌｅ　ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ）法（Ｌｉｚａｒｄｉ　ＰＭ　ｅｔ　ａｌ．，　Ｎａｔ　　Ｇｅｎｅｔ　１９，２２５（１９９８））、ＤＮＡチップ又はマイクロアレイを用いた方法（Ｗａｎｇ　ＤＧ　ｅｔ　ａｌ．，　Ｓｃｉｅｎｃｅ　２８０，１０７７（１９９８）等）、プライマー伸長法、サザンブロットハイブリダイゼーション法、ドットハイブリダイゼーション法（Ｓｏｕｔｈｅｒｎ，Ｅ．，　Ｊ．　Ｍｏｌ．　Ｂｉｏｌ．　９８，　５０３−５１７（１９７５））等、公知の方法を採用できる。さらに、解析対象の多型部分を直接シークエンスすることにより解析してもよい。尚、これらの方法を任意に組み合わせて多型解析を行ってもよい。
【００１６】
核酸試料が少量の場合には、検出感度ないし精度の面からＰＣＲ法を利用した方法（例えば、ＰＣＲ−ＲＦＬＰ法）により解析することが好ましい。また、ＰＣＲ法又はＰＣＲ法を応用した方法などの遺伝子増幅法により核酸試料を予め増幅（核酸試料の一部領域の増幅を含む）した後、上記いずれかの解析方法を適用することもできる。
一方、多数の核酸試料を解析する場合には、アリル特異的ＰＣＲ法、アリル特異的ハイブリダイゼーション法、ＴａｑＭａｎ−ＰＣＲ法、Ｉｎｖａｄｅｒ法、プライマー伸長法を用いたＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ／ＭＳ（ｍａｔｒｉｘ）法、ＲＣＡ（ｒｏｌｌｉｎｇ　ｃｙｃｌｅ　ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ）法、又はＤＮＡチップ又はマイクロアレイを用いた方法等、多数の検体を比較的短時間で解析することが可能な解析方法を用いることが特に好ましい。
【００１７】
以上の方法では、各方法に応じたプライマーやプローブ等の核酸（本発明において、「多型解析用核酸」ともいう）が使用される。多型解析用核酸の例としては、解析対象の多型を含む遺伝子において、当該多型部位を含む一定領域（部分ＤＮＡ領域）に相補的な配列を有する核酸を挙げることができる。また、解析対象の多型を含む遺伝子において、当該多型部位を含む一定領域（部分ＤＮＡ領域）に相補的な配列を有し、当該多型部分を含むＤＮＡフラグメントを特異的に増幅できるように設計された核酸（プライマー）を挙げることができる。このような核酸としては、例えばアポリポプロテインＥ遺伝子の３９３２位の多型が解析対象の場合には、３９３２位の塩基がＴ（チミン）であるアポリポプロテインＥ遺伝子の３９３２位塩基を含む部分ＤＮＡ領域に相補的な配列を有する核酸、又は３９３２位の塩基がＣ（シトシン）であるアポリポプロテインＥ遺伝子の３９３２位塩基を含む部分ＤＮＡ領域に相補的な配列を有する核酸が該当する。
【００１８】
多型解析用核酸の他の具体例としては、解析対象の多型部位がいずれかの遺伝子型である場合にのみ、当該多型部位を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セットを挙げることができる。より具体的には、解析対象の多型部位を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セットであって、多型部位がいずれかの遺伝子型であるアンチセンス鎖の当該多型部位を含む部分ＤＮＡ領域に対して特異的にハイブリダイズするセンスプライマーとセンス鎖の一部領域に対して特異的にハイブリダイズするアンチセンスプライマーからなる核酸セットを例示することができる。このような核酸セットとしては、アポリポプロテインＥ遺伝子の３９３２位の多型が解析対象の場合には、アポリポプロテインＥ遺伝子の３９３２位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セットであって、３９３２位塩基がＴ（チミン）であるアポリポプロテインＥ遺伝子のアンチセンス鎖において３９３２位塩基を含む部分ＤＮＡ領域、に対して特異的にハイブリダイズするセンスプライマーとセンス鎖の一部領域に対して特異的にハイブリダイズするアンチセンスプライマーからなる核酸セット、又は３９３２位塩基がＣ（シトシン）であるアポリポプロテインＥ遺伝子のアンチセンス鎖において３９３２位塩基を含む部分ＤＮＡ領域、に対して特異的にハイブリダイズするセンスプライマーとセンス鎖の一部領域に対して特異的にハイブリダイズするアンチセンスプライマーからなる核酸セットが該当する。ここで、増幅される部分ＤＮＡ領域の長さはその検出に適した範囲で適宜設定され、例えば５０ｂｐ〜２００ｂｐ、好ましくは８０ｂｐ〜１５０ｂｐである。より具体的には、例えばＡｐｏＥ（３９３２Ｔ→Ｃ）多型解析用の核酸プライマーとして次の配列を有するものを例示できる。尚、以下の配列の下線部は多型に対応する部分を表す。また、配列中のＮはＡ、Ｔ、Ｃ、及びＧのいずれかであることを意味する。
アンチセンスプライマー
ＧＧＡＣＡＴＧＧＡＧＧＡＣＧＴＮＣＧ：配列番号１６、又は
ＣＧＧＡＣＡＴＧＧＡＧＧＡＣＧＴＮＴＧ：配列番号１７
センスプライマー
ＣＧＣＧＧＴＡＣＴＧＣＡＣＣＡＧＧＣ：配列番号１８
【００１９】
同様に、ＧＰＩａ（１６４８Ａ→Ｇ）多型解析用の核酸プライマーとして次の配列を有するものを例示できる。
センスプライマー
ＧＡＧＴＣＴＡＣＣＴＧＴＴＴＡＣＴＡＴＣＡＡＮＡＡ：配列番号１９、又は
ＧＡＧＴＣＴＡＣＣＴＧＴＴＴＡＣＴＡＴＣＡＡＮＧＡ：配列番号２０
アンチセンスプライマー
ＡＣＣＡＧＴＡＣＴＡＡＡＧＣＡＡＡＴＴＡＡＡＣＴ：配列番号２１
【００２０】
同様に、ＴＮＦα（−８６３Ｃ→Ａ）多型解析用の核酸プライマーとして次の配列を有するものを例示できる。
アンチセンスプライマー
ＧＧＣＣＣＴＧＴＣＴＴＣＧＴＴＡＡＮＧＧ：配列番号２２、又は
ＡＴＧＧＣＣＣＴＧＴＣＴＴＣＧＴＴＡＡＮＴＧ：配列番号２３
センスプライマー
ＣＣＡＧＧＧＣＴＡＴＧＧＡＡＧＴＣＧＡＧＴＡＴＣ：配列番号２４
【００２１】
同様に、Ｇ−プロテインβ３（８２５Ｃ→Ｔ）多型解析用の核酸プライマーとして次の配列を有するものを例示できる。
センスプライマー
ＴＣＴＧＣＧＧＣＡＴＣＡＣＧＴＮＣＧ：配列番号２５、又は
ＴＣＴＧＣＧＧＣＡＴＣＡＣＧＴＮＴＧ：配列番号２６
アンチセンスプライマー
ＧＡＡＴＡＧＴＡＧＧＣＧＧＣＣＡＣＴＧＡ：配列番号２７
【００２２】
同様に、ＡｐｏＣ−ＩＩＩ（−４８２Ｃ→Ｔ）多型解析用の核酸プライマーとして次の配列を有するものを例示できる。
センスプライマー
ＣＧＧＡＧＣＣＡＣＴＧＡＴＧＣＮＣＧ：配列番号２８、又は
ＣＧＧＡＧＣＣＡＣＴＧＡＴＧＣＮＴＧ：配列番号２９
アンチセンスプライマー
ＴＧＴＴＴＧＧＡＧＴＡＡＡＧＧＣＡＣＡＧＡＡ：配列番号３０
【００２３】
同様に、ＡＧＴ（−６Ｇ→Ａ）多型解析用の核酸プライマーとして次の配列を有するものを例示できる。
アンチセンスプライマー
ＣＧＧＣＡＧＣＴＴＣＴＴＣＣＣＮＣＧ：配列番号３１、又は
ＣＧＧＣＡＧＣＴＴＣＴＴＣＣＣＮＴＧ：配列番号３２
センスプライマー
ＣＣＡＣＣＣＣＴＣＡＧＣＴＡＴＡＡＡＴＡＧＧ：配列番号３３
【００２４】
同様に、ＴＳＰ４（１１８６Ｇ→Ｃ）多型解析用の核酸プライマーとして次の配列を有するものを例示できる。
センスプライマー
ＣＧＡＧＴＴＧＧＧＡＡＣＧＣＡＣＮＣＴ：配列番号３４、又は
ＣＧＡＧＴＴＧＧＧＡＡＣＧＣＡＣＮＧＴ：配列番号３５
アンチセンスプライマー
ＧＧＴＣＴＧＣＡＣＴＧＡＣＡＴＴＧＡＴＧＡＧ：配列番号３６
【００２５】
同様に、ＴＭ（２１３６Ｃ→Ｔ）多型解析用の核酸プライマーとして次の配列を有するものを例示できる。
センスプライマー
ＣＣＣＧＡＣＴＣＧＧＣＣＣＴＴＮＣＣ：配列番号３７、又は
ＣＣＣＧＡＣＴＣＧＧＣＣＣＴＴＮＴＣ：配列番号３８
アンチセンスプライマー
ＧＴＣＡＣＡＧＴＣＧＧＴＧＣＣＡＡＴＧＴ：配列番号３９
【００２６】
同様に、ＴＰＯ（５７１３Ａ→Ｇ）多型解析用の核酸プライマーとして次の配列を有するものを例示できる。
センスプライマー
ＣＣＧＡＣＡＴＣＡＧＣＡＴＴＧＴＣＴＮＡＴ：配列番号４０、又は
ＣＣＧＡＣＡＴＣＡＧＣＡＴＴＧＴＣＴＮＧＴ：配列番号４１
アンチセンスプライマー
ＣＴＧＣＡＧＧＧＡＡＧＧＧＡＧＣＴＧＴ：配列番号４２
【００２７】
同様に、ＰＡＦ−ＡＨ（９９４Ｇ→Ｔ）多型解析用の核酸プライマーとして次の配列を有するものを例示できる。
センスプライマー
ＴＴＣＴＴＴＴＧＧＴＧＧＡＧＣＡＡＣＮＧＴ：配列番号４３、又は
ＡＴＴＣＴＴＴＴＧＧＴＧＧＡＧＣＡＡＣＮＴＴ：配列番号４４
アンチセンスプライマー
ＴＣＴＴＡＣＣＴＧＡＡＴＣＴＣＴＧＡＴＣＴＴＣＡ：配列番号４５
【００２８】
同様に、Ｅセレクチン（５６１Ａ→Ｃ）多型解析用の核酸プライマーとして次の配列を有するものを例示できる。
アンチセンスプライマー
ＡＣＡＴＴＣＡＣＣＧＴＧＧＣＣＡＮＴＧ：配列番号４６、又は
ＣＡＴＴＣＡＣＣＧＴＧＧＣＣＡＮＧＧ：配列番号４７
センスプライマー
ＡＧＣＴＧＣＣＴＧＴＡＣＣＡＡＴＡＣＡＴＣＣ：配列番号４８
【００２９】
同様に、ＦＡＢＰ２　（２４４５Ｇ→Ａ）多型解析用の核酸プライマーとして次の配列を有するものを例示できる。
センスプライマー
ＴＣＡＣＡＧＴＣＡＡＡＧＡＡＴＣＡＡＧＮＧＣ：配列番号４９、又は
ＡＴＴＣＡＣＡＧＴＣＡＡＡＧＡＡＴＣＡＡＧＮＡＣ：配列番号５０
アンチセンスプライマー
ＣＡＡＡＡＡＣＡＡＣＴＴＣＡＡＴＧＴＴＴＣＧＡ：配列番号５１
【００３０】
同様に、ＧＰＩｂα（１０１８Ｃ→Ｔ）多型解析用の核酸プライマーとして次の配列を有するものを例示できる。
センスプライマー
ＣＣＣＡＧＧＧＣＴＣＣＴＧＮＣＧ：配列番号５２、又は
ＣＣＣＣＡＧＧＧＣＴＣＣＴＧＮＴＧ：配列番号５３
アンチセンスプライマー
ＴＧＡＧＣＴＴＣＴＣＣＡＧＣＴＴＧＧＧＴＧ：配列番号５４
【００３１】
同様に、ＰＡＩ１（−６６８／４Ｇ→５Ｇ）多型解析用の核酸プライマーとして次の配列を有するものを例示できる。
センスプライマー
ＧＧＣＡＣＡＧＡＧＡＧＡＧＴＣＴＧＧＡＣＡＣＧ：配列番号５５
アンチセンスプライマー
ＧＧＣＣＧＣＣＴＣＣＧＡＴＧＡＴＡＣＡ：配列番号５６
【００３２】
同様に、ＰＯＮ（５８４Ｇ→Ａ）多型解析用の核酸プライマーとして次の配列を有するものを例示できる。
センスプライマー
ＡＣＣＣＡＡＡＴＡＣＡＴＣＴＣＣＣＡＧＧＡＮＣＧ：配列番号５７、又は
ＡＡＣＣＣＡＡＡＴＡＣＡＴＣＴＣＣＣＡＧＧＮＣＴ：配列番号５８
アンチセンスプライマー
ＧＡＡＴＧＡＴＡＴＴＧＴＴＧＣＴＧＴＧＧＧＡＣ：配列番号５９
【００３３】
一方、プローブの具体例として以下のものを挙げることができる。
ＡｐｏＣ−ＩＩＩ（−４８２Ｃ→Ｔ）多型解析用プローブとして
ＡＧＣＣＡＣＴＧＡＴＧＣＮＣＧＧＴＣＴ：配列番号６０、又は
ＡＧＣＣＡＣＴＧＡＴＧＣＮＴＧＧＴＣＴ：配列番号６１。
【００３４】
Ｅセレクチン（５６１Ａ→Ｃ）多型解析用プローブとして
ＣＡＣＣＧＴＧＧＣＣＡＮＴＧＣＡＧＧＡＴ：配列番号６２、又は
ＣＡＣＣＧＴＧＧＣＣＡＮＧＧＣＡＧＧＡＴ：配列番号６３。
【００３５】
ＦＡＢＰ２　（２４４５Ｇ→Ａ）多型解析用プローブとして
ＧＡＡＴＣＡＡＧＮＧＣＴＴＴＴＣＧＡＡＡＣＡＴＴ：配列番号６４、又は
ＧＡＡＴＣＡＡＧＮＡＣＴＴＴＴＣＧＡＡＡＣＡＴＴ：配列番号６５。
【００３６】
ＰＡＩ１（−６６８／４Ｇ→５Ｇ）多型解析用プローブとして
ＴＧＧＡＣＡＣＧＴＧＧＧＧＧＡＧＴＣＡＧ：配列番号６６、又は
ＴＧＧＡＣＡＣＧＴＧＧＧＧＡＧＴＣＡＧＣ：配列番号６７。
【００３７】
以上の核酸プライマー、核酸プローブは単なる一例であって、核酸プライマーであれば目的の増幅反応を支障なく行える限度において、他方核酸プローブであれば目的のハイブリダイゼーション反応を支障なく行える限度において一部の塩基配列に改変が施されたものであってもよい。ここでの「一部の改変」とは、塩基の一部が欠失、置換、挿入及び／又は付加されていることを意味する。改変にかかる塩基数は、例えば１〜７個、好ましくは１〜５個、更に好ましくは、１〜３個である。尚、このような改変は、原則として多型部位に対応する塩基以外の部分において行われる。ただし、解析対象の多型がＰＡＩ１（−６６８／４Ｇ→５Ｇ）多型の場合には、多型部位に対応する塩基の一部を改変して得られる核酸をプライマー又はプローブとして用いることも可能である。
【００３８】
多型解析用核酸（プローブ、プライマー）には、解析方法に応じて適宜ＤＮＡ断片又はＲＮＡ断片が用いられる。多型解析用核酸の塩基長はそれぞれの機能が発揮される長さであればよく、プライマーとして用いられる場合の塩基長の例としては１０〜５０ｂｐ程度、好ましくは１５〜４０ｂｐ程度、更に好ましくは１５〜３０ｂｐ程度である。
尚、プライマーとして用いられる場合には増幅対象に特異的にハイブリダイズし、目的のＤＮＡフラグメントを増幅することができる限り鋳型となる配列に対して多少のミスマッチがあってもよい。プローブの場合も同様に、検出対象の配列と特異的なハイブリダイズが行える限り、検出対象の配列に対して多少のミスマッチがあってもよい。ミスマッチの程度としては、１〜数個、好ましくは１〜５個、更に好ましくは１〜３個である。
多型解析用核酸（プライマー、プローブ）はホスホジエステル法など公知の方法によって合成することができる。尚、多型解析用核酸の設計、合成等に関しては成書（例えば、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｃｌｏｎｉｎｇ，Ｔｈｉｒｄ　Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｃｏｌｄ　Ｓｐｒｉｎｇ　Ｈａｒｂｏｒ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　Ｐｒｅｓｓ，　Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ）を参考にすることができる。
【００３９】
本発明における多型解析用核酸を予め標識物質で標識しておくことができる。このような標識化核酸を用いることにより、例えば増幅産物の標識量を指標として多型の解析を行うことができる。また、多型を構成する各遺伝子型の遺伝子における部分ＤＮＡ領域をそれぞれ特異的に増幅するように設計された２種類のプライマーを互いに異なる標識物質で標識しておけば、増幅産物から検出される標識物質及び標識量によって核酸試料の遺伝子型を判別できる。このような標識化プライマーを用いた検出方法の具体例としては、多型を構成する各遺伝子型のセンス鎖にそれぞれ特異的にハイブリダイズする２種類の核酸プライマー（アリル特異的センスプライマー）をフルオレセインイソチオシアネートとテキサスレッドでそれぞれ標識し、これら標識化プライマーとアンチセンス鎖に特異的にハイブリダイズするアンチセンスプライマーとを用いて多型部位を含む部分ＤＮＡ領域を増幅し、得られた増幅産物における各蛍光物質の標識量を測定して多型を検出する方法を挙げることができる。尚、ここでのアンチセンスプライマーを例えばビオチンで標識しておけば、ビオチンとアビジンとの特異的な結合を利用して増幅産物の分離を行うことができる。
【００４０】
多型解析用核酸の標識に用いられる標識物質としては３２Ｐなどの放射性同位元素、フルオレセインイソチオシアネート、テトラメチルローダミンイソチオシアネート、テキサスレッドなどの蛍光物質を例示でき、標識方法としてはアルカリフォスファターゼ及びＴ４ポリヌクレオチドキナーゼを用いた５’末端標識法、Ｔ４　ＤＮＡポリメラーゼやＫｌｅｎｏｗ断片を用いた３’末端標識法、ニックトランスレーション法、ランダムプライマー法（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｃｌｏｎｉｎｇ，Ｔｈｉｒｄ　Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｃｈａｐｔｅｒ　９，Ｃｏｌｄ　Ｓｐｒｉｎｇ　Ｈａｒｂｏｒ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　Ｐｒｅｓｓ，　Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ）などを例示できる。
【００４１】
以上の多型解析用核酸を不溶性支持体に固定化した状態で用いることもできる。固定化に使用する不溶性支持体をチップ状、ビーズ状などに加工しておけば、これら固定化核酸を用いて多型の解析をより簡便に行うことができる。
【００４２】
核酸試料は、被験者の血液、皮膚細胞、粘膜細胞、毛髪等から公知の抽出方法、精製方法を用いて調製することができる。多型解析対象の遺伝子を含むものであれば、任意の長さのゲノムＤＮＡを核酸試料として用いることができる。また、必ずしも解析対象の遺伝子のすべてが一の核酸上に存在する核酸試料を用いる必要はない。即ち、本発明の核酸試料としては、解析対象の遺伝子のすべてが一の核酸上に存在しているもの、解析対象の遺伝子が二以上の核酸上に分かれて存在しているもののいずれをも用いることができる。尚、核酸試料において解析対象の遺伝子が完全な状態（即ち、遺伝子の全長が存在する状態）でなくても、少なくとも解析される多型部位が存在している限りにおいて断片的、部分的な状態であってもよい。
【００４３】
各遺伝子多型の解析は遺伝子多型ごとに、又は複数若しくは全部を同時に行う。前者の場合としては、例えば被験者から得た核酸試料を解析対象の多型の数に合わせて分注し、各多型の解析を個別に行う。後者の場合としては、例えばＤＮＡチップまたはマイクロアレイによって行うことができる。尚、ここでいう同時とは解析過程のすべての操作が同時に行われることのみを意味するのではなく、一部の操作（例えば、核酸増幅操作、プローブのハイブリダイズ、又は検出）が同時に行われる場合も含む。
【００４４】
解析対象の遺伝子の転写産物であるｍＲＮＡを利用して各遺伝子の多型を解析することもできる。例えば、被験者の血液、尿等から解析対象である遺伝子のｍＲＮＡを抽出、精製した後、ノーザンブロット法（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｃｌｏｎｉｎｇ，　Ｔｈｉｒｄ　Ｅｄｉｔｉｏｎ，７．４２，Ｃｏｌｄ　Ｓｐｒｉｎｇ　Ｈａｒｂｏｒ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　Ｐｒｅｓｓ，　Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ）、ドットブロット法（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｃｌｏｎｉｎｇ，　Ｔｈｉｒｄ　Ｅｄｉｔｉｏｎ，７．４６，Ｃｏｌｄ　Ｓｐｒｉｎｇ　Ｈａｒｂｏｒ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　Ｐｒｅｓｓ，　Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ）、ＲＴ−ＰＣＲ法（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｃｌｏｎｉｎｇ，　Ｔｈｉｒｄ　Ｅｄｉｔｉｏｎ，８．４６，Ｃｏｌｄ　Ｓｐｒｉｎｇ　Ｈａｒｂｏｒ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　Ｐｒｅｓｓ，　Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ）、ＤＮＡチップ（ＤＮＡアレイ）を用いた方法などを実行することにより、ｍＲＮＡを出発材料として多型解析を行うことができる。
【００４５】
さらに、上記の多型の中でアミノ酸の変化を伴うものについては、解析対象の遺伝子の発現産物を用いて多型解析を行うこともできる。この場合、多型部位に対応するアミノ酸を含んでいる限り、部分タンパク質、部分ペプチドであっても解析用試料として用いることができる。
【００４６】
このような遺伝子の発現産物を用いて解析する方法としては、多型部位のアミノ酸を直接分析する方法、又は立体構造の変化を利用して免疫学的に分析する方法などが挙げられる。前者としては、周知のアミノ酸配列分析法（エドマン法を利用した方法）を用いることができる。後者としては、多型を構成するいずれかの遺伝子型を有する遺伝子の発現産物に特異的な結合活性を有するモノクローナル抗体又はポリクローナル抗体を用いた、ＥＬＩＳＡ法（酵素結合免疫吸着定量法）、ラジオイムノアッセイ、免疫沈降法、免疫拡散法等などを用いることができる。
【００４７】
以上説明した本発明の検出方法を実行することにより得られる多型情報は、冠動脈形成術後再狭窄の遺伝的リスクの診断に利用することができる。即ち、本発明は以上の検出方法によって得られる多型情報から核酸試料の遺伝子型を決定する工程、及び決定された核酸試料の遺伝子型から遺伝的リスクを求める工程を含んでなる、冠動脈形成術後再狭窄のリスク診断方法も提供する。ここでの遺伝子型の決定は、典型的には、検出対象の多型に関して核酸試料の両アレルがいずれの遺伝子型をそれぞれ有するかを決定することである。ＡｐｏＥ（３９３２Ｔ→Ｃ）多型が検出対象である場合を例に採れば、典型的には核酸試料におけるアポリポプロテインＥの遺伝子型がＴＴ（３９３２位塩基が両アレル共にＴのホモ接合体）、ＣＴ（３９３２位塩基がＴのアレルとＣのアレルとのヘテロ接合体）、及びＣＣ（３９３２位塩基が両アレル共にＣのホモ接合体）の中のいずれであるかを決定することである。
【００４８】
後述の実施例で得られた結果を考慮すれば、高精度かつ予知確率の高い冠動脈形成術後再狭窄の遺伝的リスクの診断を可能とするために、例えばＡｐｏＥ（３９３２Ｔ→Ｃ）多型であれば核酸試料の遺伝子型がＣＣ又はＴＣのいずれかであるか、それともＴＴであるかが決定される。同様に、ＧＰＩａ（１６４８Ａ→Ｇ）多型であればＧＧであるか、それともＡＧ又はＡＡのいずれかであるか、ＴＮＦα（−８６３Ｃ→Ａ）多型であればＡＡ又はＣＡのいずれかであるか、それともＣＣであるか、Ｇ−プロテインβ３（８２５Ｃ→Ｔ）多型であればＴＴであるか、それともＣＴ又はＣＣのいずれかであるか、ＡｐｏＣ−ＩＩＩ（−４８２Ｃ→Ｔ）多型であればＴＴ又はＣＴのいずれかであるか、それともＣＣであるか、或はＴＴであるか、それともＣＴ又はＣＣのいずれかであるか、ＡＧＴ（−６Ｇ→Ａ）多型であればＡＡ又はＧＡのいずれかであるか、それともＧＧであるか、ＴＳＰ４（１１８６Ｇ→Ｃ）多型であればＣＣ又はＧＣのいずれかであるか、それともＧＧであるか、ＴＭ（２１３６Ｃ→Ｔ）多型であればＴＴ又はＣＴのいずれかであるか、それともＣＣであるか、ＴＰＯ（５７１３Ａ→Ｇ）多型であればＧＧであるか、それともＡＧ又はＡＡのいずれかであるか、ＰＡＦ−ＡＨ（９９４Ｇ→Ｔ）多型であればＴＴ又はＧＴのいずれかであるか、それともＧＧであるか、Ｅセレクチン（５６１Ａ→Ｃ）多型であればＣＣ又はＡＣのいずれかであるか、それともＡＡであるか、ＦＡＢＰ２　（２４４５Ｇ→ＡであればＡＡ又はＧＡのいずれかであるか、それともＧＧであるか、ＧＰＩｂα（１０１８Ｃ→Ｔ）多型であればＴＴ又はＣＴのいずれかであるか、それともＣＣであるか、ＰＡＩ１（−６６８／４Ｇ→５Ｇ）多型であれば５Ｇ／５Ｇ又は４Ｇ／５Ｇのいずれかであるか、それとも４Ｇ／４Ｇであるか、ＰＯＮ（５８４Ｇ→Ａ）多型であればＡＡ又はＧＡのいずれか、それともＧＧであるかが決定される。
【００４９】
冠動脈形成術後再狭窄の遺伝的リスクを診断することにより、冠動脈形成術後に再狭窄を生ずるおそれの程度（生じ易さ）が予測される。即ち、本発明の診断方法によって冠動脈形成術後に再狭窄を生ずるリスクの評価が行える。このような評価を行えることは、事前に適切な治療法の選択を可能とすることから臨床上極めて有意義である。
【００５０】
本発明で得られる再狭窄の発生に関連する遺伝情報を利用して、冠動脈形成術後の再狭窄発生率を低下させることができる。例えば、本発明の診断方法を実施した結果、解析対象の多型が再狭窄の発生リスクを高める遺伝子型であった場合に、当該多型について発症リスクの低い遺伝子型を有する遺伝子を生体内に導入すれば、当該遺伝子の発現によって再狭窄の発生リスクが低減することを期待できる。再狭窄発生リスクの高い遺伝子型を有する遺伝子のｍＲＮＡに対するアンチセンス鎖を導入し、当該ｍＲＮＡの発現を抑制することによっても同様の効果が期待される。
【００５１】
このような遺伝子等の生体への導入は、例えば遺伝子導入用プラスミド又はウイルスベクターを用いた方法、エレクトロポーレーション（Ｐｏｔｔｅｒ，Ｈ．　ｅｔ　ａｌ．，　Ｐｒｏｃ．　Ｎａｔｌ．　Ａｃａｄ．　Ｓｃｉ．　Ｕ．Ｓ．Ａ．　８１，　７１６１−７１６５（１９８４））、超音波マイクロバブル（Ｌａｗｒｉｅ，　Ａ．，　ｅｔ　ａｌ．　Ｇｅｎｅ　Ｔｈｅｒａｐｙ　７，　２０２３−２０２７　（２０００））、リポフェクション（Ｆｅｌｇｎｅｒ，　Ｐ．Ｌ．　ｅｔ　ａｌ．，　　Ｐｒｏｃ．　Ｎａｔｌ．　Ａｃａｄ．　Ｓｃｉ．　Ｕ．Ｓ．Ａ．　８４，７４１３−７４１７（１９８４））、マイクロインジェクション（Ｇｒａｅｓｓｍａｎｎ，Ｍ．　＆　Ｇｒａｅｓｓｍａｎｎ，Ａ．，　Ｐｒｏｃ．　Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．　Ｓｃｉ．　Ｕ．Ｓ．Ａ．　７３，３６６−３７０（１９７６））等の方法により行うことができる。これらの方法を利用した遺伝子等の導入は生体に対して直接的（ｉｎ　ｖｉｖｏ法）又は間接的（ｅｘ　ｖｉｖｏ法）に行うことができる。
また、予め遺伝子等をコーティングした（遺伝子導入用プラスミドやウイルスベクターに保持させたものなどをコーティングしてもよい）ステント等の器具を用いて冠動脈形成術と同時に、又は冠動脈形成後に以上のような遺伝子導入を行うこともできる。
【００５２】
本発明の第２の局面は、上述した本発明の検出方法又は診断方法に使用されるキット（遺伝子型検出用キット、又は冠動脈形成術後再狭窄診断用キット）を提供する。かかるキットには上記の（１）〜（６）の多型からなるグループより選択される二つ以上の多型を解析するための核酸（多型解析用核酸）が含まれる。他の態様としては上記の（７）〜（１１）の多型からなるグループより選択される二つ以上の多型を解析するための核酸（多型解析用核酸）を含んでキットが構築される。更に他の態様としては上記の（１２）〜（１７）の多型からなるグループより選択される二つ以上の多型を解析するための核酸（多型解析用核酸）を含んでキットが構築される。更に他の態様としては上記の（１８）〜（２２）の多型からなるグループより選択される二つ以上の多型を解析するための核酸（多型解析用核酸）を含んでキットが構築される。
多型解析用核酸は、それが適用される解析方法（上述したアリル特異的核酸等を用いたＰＣＲ法を利用する方法、ＰＣＲ−ＲＦＬＰ法、ＰＣＲ−ＳＳＣＰ、ＴａｑＭａｎ−ＰＣＲ法、Ｉｎｖａｄｅｒ法等）において、解析対象の多型部分を含むＤＮＡ領域又はそれに対応するｍＲＮＡを特異的に増幅できるもの（プライマー）又は特異的に検出できるもの（プローブ）として設計される。以下に本発明において提供されるキットの具体例を示す。
【００５３】
以下の（１）〜（６）からなるグループより選択される二つ以上の核酸を含んでなる遺伝子型検出用キット、
（１）３９３２位塩基がＴであるアポリポプロテインＥ遺伝子の３９３２位塩基を含む部分ＤＮＡ領域に相補的な配列を有する核酸、又は３９３２位塩基がＣであるアポリポプロテインＥ遺伝子の３９３２位塩基を含む部分ＤＮＡ領域に相補的な配列を有する核酸、
（２）１６４８位塩基がＡであるグリコプロテインＩａ遺伝子の１６４８位塩基を含む部分ＤＮＡ領域に相補的な配列を有する核酸、又は１６４８位塩基がＧであるグリコプロテインＩａ遺伝子の１６４８位塩基を含む部分ＤＮＡ領域に相補的な配列を有する核酸、
（３）−８６３位塩基がＣである腫瘍壊死因子α遺伝子の−８６３位塩基を含む部分ＤＮＡ領域に相補的な配列を有する核酸、又は−８６３位塩基がＡである腫瘍壊死因子α遺伝子の−８６３位塩基を含む部分ＤＮＡ領域に相補的な配列を有する核酸、
（４）８２５位塩基がＣであるＧ−プロテインβ３サブユニット遺伝子の８２５位塩基を含む部分ＤＮＡ領域に相補的な配列を有する核酸、又は８２５位塩基がＴであるＧ−プロテインβ３サブユニット遺伝子の８２５位塩基を含む部分ＤＮＡ領域に相補的な配列を有する核酸、
（５）−４８２位塩基がＣであるアポリポプロテインＣ−ＩＩＩ遺伝子の−４８２位塩基を含む部分ＤＮＡ領域に相補的な配列を有する核酸、又は−４８２位塩基がＴであるアポリポプロテインＣ−ＩＩＩ遺伝子の−４８２位塩基を含む部分ＤＮＡ領域に相補的な配列を有する核酸、及び
（６）−６位塩基がＧであるアンギオテンシノーゲン遺伝子の−６位塩基を含む部分ＤＮＡ領域に相補的な配列を有する核酸、又は−６位塩基がＡであるアンギオテンシノーゲン遺伝子の−６位塩基を含む部分ＤＮＡ領域に相補的な配列を有する核酸。
以上では、（１）〜（６）からなるグループから二つ以上の核酸を選択してキットを構成しているが、（１）〜（６）の二つ以上を任意に選択してグループとし、かかるグループから二つ以上の核酸を選択してキットを構成してもよい。例えば、（１）〜（５）からなるグループ（後述の実施例においてオッズ比とＰ値を考慮して選択される上位５位までの多型を解析するための核酸セット）より二つ以上の核酸を選択してキットを構成したり、（１）、（３）、（４）、及び（５）からなるグループ（後述の実施例においてオッズ比が上位４位までの多型を解析するための核酸）より二つ以上の核酸を選択してキットを構成することができる。
【００５４】
以下の（７）〜（１１）からなるグループより選択される二つ以上の核酸を含んでなる遺伝子型検出用キット、
（７）１１８６位塩基がＧであるトロンボスポンジン４遺伝子の１１８６位塩基を含む部分ＤＮＡ領域に相補的な配列を有する核酸、又は１１８６位塩基がＣであるトロンボスポンジン４遺伝子の１１８６位塩基を含む部分ＤＮＡ領域に相補的な配列を有する核酸、
（８）−８６３位塩基がＣである腫瘍壊死因子α遺伝子の−８６３位塩基を含む部分ＤＮＡ領域に相補的な配列を有する核酸、又は−８６３位塩基がＡである腫瘍壊死因子α遺伝子の−８６３位塩基を含む部分ＤＮＡ領域に相補的な配列を有する核酸、
（９）２１３６位塩基がＣであるトロンボモジュリン遺伝子の２１３６位塩基を含む部分ＤＮＡ領域に相補的な配列を有する核酸、又は２１３６位塩基がＴであるトロンボモジュリン遺伝子の２１３６位塩基を含む部分ＤＮＡ領域に相補的な配列を有する核酸、
（１０）５７１３位塩基がＡであるトロンボポイエチン遺伝子の５７１３位塩基を含む部分ＤＮＡ領域に相補的な配列を有する核酸、又は５７１３位塩基がＧであるトロンボポイエチン遺伝子の５７１３位塩基を含む部分ＤＮＡ領域に相補的な配列を有する核酸、及び（１１）９９４位塩基がＧである血小板活性化因子アセチルヒドロラーゼ遺伝子の９９４位塩基を含む部分ＤＮＡ領域に相補的な配列を有する核酸、又は９９４位塩基がＴである血小板活性化因子アセチルヒドロラーゼ遺伝子の９９４位塩基を含む部分ＤＮＡ領域に相補的な配列を有する核酸。
以上では、（７）〜（１１）からなるグループから二つ以上の核酸を選択してキットを構成しているが、（７）〜（１１）の二つ以上を任意に選択してグループとし、かかるグループから二つ以上の核酸を選択してキットを構成してもよい。例えば、（７）〜（１０）からなるグループ（後述の実施例においてオッズ比が上位４位までの多型を解析するための核酸）より二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成したり、（７）〜（９）からなるグループ（後述の実施例においてオッズ比が上位３位までの多型を解析するための核酸）より二つ以上の核酸を選択してキットを構成することができる。
【００５５】
以下の（１２）〜（１７）からなるグループより選択される二つ以上の核酸を含んでなる遺伝子型検出用キット、
（１２）５６１位塩基がＡであるＥ−セレクチン遺伝子の５６１位塩基を含む部分ＤＮＡ領域に相補的な配列を有する核酸、又は５６１位塩基がＣであるＥ−セレクチン遺伝子の５６１位塩基を含む部分ＤＮＡ領域に相補的な配列を有する核酸、
（１３）２４４５位塩基がＧである脂肪酸結合タンパク質２遺伝子の２４４５位塩基を含む部分ＤＮＡ領域に相補的な配列を有する核酸、又は２４４５位塩基がＡである脂肪酸結合タンパク質２遺伝子の２４４５位塩基を含む部分ＤＮＡ領域に相補的な配列を有する核酸、（１４）１０１８位塩基がＣであるグリコプロテインＩｂα遺伝子の１０１８位塩基を含む部分ＤＮＡ領域に相補的な配列を有する核酸、又は１０１８位塩基がＴであるグリコプロテインＩｂα遺伝子の１０１８位塩基を含む部分ＤＮＡ領域に相補的な配列を有する核酸、（１５）−６６８位から３’方向に連続して４個のＧが存在するプラスミノーゲン活性化因子インヒビター１遺伝子の該配列部分を含む部分ＤＮＡ領域に相補的な配列を有する核酸、又は−６６８位から３’方向に連続して５個のＧが存在するプラスミノーゲン活性化因子インヒビター１遺伝子の該配列部分を含む部分ＤＮＡ領域に相補的な配列を有する核酸、
（１６）５８４位塩基がＧであるパラオキソナーゼ遺伝子の５８４位塩基を含む部分ＤＮＡ領域に相補的な配列を有する核酸、又は５８４位塩基がＡであるパラオキソナーゼ遺伝子の５８４位塩基を含む部分ＤＮＡ領域に相補的な配列を有する核酸、及び
（１７）３９３２位塩基がＴであるアポリポプロテインＥ遺伝子の３９３２位塩基を含む部分ＤＮＡ領域に相補的な配列を有する核酸、又は３９３２位塩基がＣであるアポリポプロテインＥ遺伝子の３９３２位塩基を含む部分ＤＮＡ領域に相補的な配列を有する核酸。
以上では、（１２）〜（１７）からなるグループから二つ以上の核酸を選択してキットを構成しているが、（１２）〜（１７）の二つ以上を任意に選択してグループとし、かかるグループから二つ以上の核酸を選択してキットを構成してもよい。例えば、（１２）〜（１６）からなるグループ（後述の実施例においてオッズ比が上位５位までの多型を解析するための核酸）より二つ以上の核酸を選択してキットを構成したり、（１２）〜（１５）からなるグループ（後述の実施例においてオッズ比が上位４位までの核酸）より二つ以上の核酸を選択してキットを構成することができる。
【００５６】
以下の（１８）〜（２２）からなるグループより選択される二つ以上の核酸を含んでなる遺伝子型検出用キット、
（１８）−６６８位から３’方向に連続して４個のＧが存在するプラスミノーゲン活性化因子インヒビター１遺伝子の該配列部分を含む部分ＤＮＡ領域に相補的な配列を有する核酸、又は−６６８位から３’方向に連続して５個のＧが存在するプラスミノーゲン活性化因子インヒビター１遺伝子の該配列部分を含む部分ＤＮＡ領域に相補的な配列を有する核酸
（１９）−４８２位塩基がＣであるアポリポプロテインＣ−ＩＩＩ遺伝子の−４８２位塩基を含む部分ＤＮＡ領域に相補的な配列を有する核酸、又は−４８２位塩基がＴであるアポリポプロテインＣ−ＩＩＩ遺伝子の−４８２位塩基を含む部分ＤＮＡ領域に相補的な配列を有する核酸、
（２０）５８４位塩基がＧであるパラオキソナーゼ遺伝子の５８４位塩基を含む部分ＤＮＡ領域に相補的な配列を有する核酸、又は５８４位塩基がＡであるパラオキソナーゼ遺伝子の５８４位塩基を含む部分ＤＮＡ領域に相補的な配列を有する核酸、
（２１）１０１８位塩基がＣであるグリコプロテインＩｂα遺伝子の１０１８位塩基を含む部分ＤＮＡ領域に相補的な配列を有する核酸、又は１０１８位塩基がＴであるグリコプロテインＩｂα遺伝子の１０１８位塩基を含む部分ＤＮＡ領域に相補的な配列を有する核酸、及び
（２２）３９３２位塩基がＴであるアポリポプロテインＥ遺伝子の３９３２位塩基を含む部分ＤＮＡ領域に相補的な配列を有する核酸、又は３９３２位塩基がＣであるアポリポプロテインＥ遺伝子の３９３２位塩基を含む部分ＤＮＡ領域に相補的な配列を有する核酸。
以上では、（１８）〜（２２）からなるグループから二つ以上の核酸を選択してキットを構成しているが、（１８）〜（２２）の二つ以上を任意に選択してグループとし、かかるグループから二つ以上の核酸を選択してキットを構成してもよい。例えば、（１８）〜（２１）からなるグループ（後述の実施例においてオッズ比が上位４位までの多型を解析するための核酸）より二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成したり、（１８）〜（２０）からなるグループ（後述の実施例においてオッズ比が上位３位までの多型を解析するための核酸）より二つ以上の核酸を選択してキットを構成することができる。
【００５７】
以下の（１）〜（６）からなるグループより選択される二つ以上の核酸セットを含んでなる遺伝子型検出用キット、
（１）核酸試料中のアポリポプロテインＥ遺伝子の３９３２位塩基がＴである場合にのみ、該アポリポプロテインＥ遺伝子の３９３２位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セット、又は核酸試料中のアポリポプロテインＥ遺伝子の３９３２位塩基がＣである場合にのみ、該アポリポプロテインＥ遺伝子の３９３２位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セット、
（２）核酸試料中のグリコプロテインＩａ遺伝子の１６４８位塩基がＡである場合にのみ、該グリコプロテインＩａ遺伝子の１６４８位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セット、又は核酸試料中のグリコプロテインＩａ遺伝子の１６４８位塩基がＧである場合にのみ、該グリコプロテインＩａ遺伝子の１６４８位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セット、
（３）核酸試料中の腫瘍壊死因子α遺伝子の−８６３位塩基がＣである場合にのみ、該腫瘍壊死因子α遺伝子の−８６３位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セット、又は核酸試料中の腫瘍壊死因子α遺伝子の−８６３位塩基がＡである場合にのみ、該腫瘍壊死因子α遺伝子の−８６３位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セット、
（４）核酸試料中のＧ−プロテインβ３サブユニット遺伝子の８２５位塩基がＣである場合にのみ、該Ｇ−プロテインβ３サブユニット遺伝子の８２５位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セット、又は核酸試料中のＧ−プロテインβ３サブユニット遺伝子の８２５位塩基がＴである場合にのみ、該Ｇ−プロテインβ３サブユニット遺伝子の８２５位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セット、
（５）核酸試料中のアポリポプロテインＣ−ＩＩＩ遺伝子の−４８２位塩基がＣである場合にのみ、該アポリポプロテインＣ−ＩＩＩ遺伝子の−４８２位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セット、又は核酸試料中のアポリポプロテインＣ−ＩＩＩ遺伝子の−４８２位塩基がＴである場合にのみ、該アポリポプロテインＣ−ＩＩＩ遺伝子の−４８２位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セット、及び
（６）核酸試料中のアンギオテンシノーゲン遺伝子の−６位塩基がＧである場合にのみ、該アンギオテンシノーゲン遺伝子の−６位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セット、又は核酸試料中のアンギオテンシノーゲン遺伝子の−６位塩基がＡである場合にのみ、該アンギオテンシノーゲン遺伝子の−６位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セット。以上では、（１）〜（６）からなるグループから二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成しているが、（１）〜（６）の二つ以上を任意に選択してグループとし、かかるグループから二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成してもよい。例えば、（１）〜（５）からなるグループ（後述の実施例においてオッズ比とＰ値を考慮して選択される上位５位までの多型を解析するための核酸セット）より二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成したり、（１）、（３）、（４）、及び（５）からなるグループ（後述の実施例においてオッズ比が上位４位までの多型を解析するための核酸セット）より二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成することができる。
【００５８】
以下の（７）〜（１１）からなるグループより選択される二つ以上の核酸セットを含んでなる遺伝子型検出用キット、
（７）核酸試料中のトロンボスポンジン４遺伝子の１１８６位塩基がＧである場合にのみ、該トロンボスポンジン４遺伝子の１１８６位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セット、又は核酸試料中のトロンボスポンジン４遺伝子の１１８６位塩基がＣである場合にのみ、該トロンボスポンジン４遺伝子の１１８６位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セット、
（８）核酸試料中の腫瘍壊死因子α遺伝子の−８６３位塩基がＣである場合にのみ、該腫瘍壊死因子α遺伝子の−８６３位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セット、又は核酸試料中の腫瘍壊死因子α遺伝子の−８６３位塩基がＡである場合にのみ、該腫瘍壊死因子α遺伝子の−８６３位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セット、
（９）核酸試料中のトロンボモジュリン遺伝子の２１３６位塩基がＣである場合にのみ、該トロンボモジュリン遺伝子の２１３６位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セット、又は核酸試料中のトロンボモジュリン遺伝子の２１３６位塩基がＴである場合にのみ、該トロンボモジュリン遺伝子の２１３６位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セット、
（１０）核酸試料中のトロンボポイエチン遺伝子の５７１３位塩基がＡである場合にのみ、該トロンボポイエチン遺伝子の５７１３位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セット、又は核酸試料中のトロンボポイエチン遺伝子の５７１３位塩基がＧである場合にのみ、該トロンボポイエチン遺伝子の５７１３位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セット、及び
（１１）核酸試料中の血小板活性化因子アセチルヒドロラーゼ遺伝子の９９４位塩基がＧである場合にのみ、該血小板活性化因子アセチルヒドロラーゼ遺伝子の９９４位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セット、又は核酸試料中の血小板活性化因子アセチルヒドロラーゼ遺伝子の９９４位塩基がＴである場合にのみ、該血小板活性化因子アセチルヒドロラーゼ遺伝子の９９４位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セット。
以上では、（７）〜（１１）からなるグループから二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成しているが、（７）〜（１１）の二つ以上を任意に選択してグループとし、かかるグループから二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成してもよい。例えば、（７）〜（１０）からなるグループ（後述の実施例においてオッズ比が上位４位までの多型を解析するための核酸セット）より二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成したり、（７）〜（９）からなるグループ（後述の実施例においてオッズ比が上位３位までの多型を解析するための核酸セット）より二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成することができる。
【００５９】
以下の（１２）〜（１７）からなるグループより選択される二つ以上の核酸セットを含んでなる遺伝子型検出用キット、
（１２）核酸試料中のＥ−セレクチン遺伝子の５６１位塩基がＡである場合にのみ、該Ｅ−セレクチン遺伝子の５６１位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セット、又は核酸試料中のＥ−セレクチン遺伝子の５６１位塩基がＣである場合にのみ、該Ｅ−セレクチン遺伝子の５６１位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セット、
（１３）核酸試料中の脂肪酸結合タンパク質２遺伝子の２４４５位塩基がＧである場合にのみ、該脂肪酸結合タンパク質２遺伝子の２４４５位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セット、又は核酸試料中の脂肪酸結合タンパク質２遺伝子の２４４５位塩基がＡである場合にのみ、該脂肪酸結合タンパク質２遺伝子の２４４５位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セット、
（１４）核酸試料中のグリコプロテインＩｂα遺伝子の１０１８位塩基がＣである場合にのみ、該グリコプロテインＩｂα遺伝子の１０１８位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セット、又は核酸試料中のグリコプロテインＩｂα遺伝子の１０１８位塩基がＴである場合にのみ、該グリコプロテインＩｂα遺伝子の１０１８位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セット、（１５）核酸試料中のプラスミノーゲン活性化因子インヒビター１遺伝子において−６６８位から３’方向にＧが４個連続して存在する場合にのみ、プラスミノーゲン活性化因子インヒビター１遺伝子の該配列部分を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セット、又は核酸試料中のプラスミノーゲン活性化因子インヒビター１遺伝子において−６６８位から３’方向にＧが５個連続して存在する場合にのみ、該プラスミノーゲン活性化因子インヒビター１遺伝子の該配列部分を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セット、
（１６）核酸試料中のパラオキソナーゼ遺伝子の５８４位塩基がＧである場合にのみ、該パラオキソナーゼ遺伝子の５８４位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セット、又は核酸試料中のパラオキソナーゼ遺伝子の５８４位塩基がＡである場合にのみ、該パラオキソナーゼ遺伝子の５８４位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セット、及び
（１７）核酸試料中のアポリポプロテインＥ遺伝子の３９３２位塩基がＴである場合にのみ、アポリポプロテインＥ遺伝子の３９３２位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セット、又は核酸試料中のアポリポプロテインＥ遺伝子の３９３２位塩基がＣである場合にのみ、該アポリポプロテインＥ遺伝子の３９３２位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セット。
以上では、（１２）〜（１７）からなるグループから二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成しているが、（１２）〜（１７）の二つ以上を任意に選択してグループとし、かかるグループから二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成してもよい。例えば、（１２）〜（１６）からなるグループ（後述の実施例においてオッズ比が上位５位までの多型を解析するための核酸セット）より二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成したり、（１２）〜（１５）からなるグループ（後述の実施例においてオッズ比が上位４位までの多型を解析するための核酸セット）より二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成することができる。
【００６０】
以下の（１８）〜（２２）からなるグループより選択される二つ以上の核酸セットを含んでなる遺伝子型検出用キット、
（１８）核酸試料中のプラスミノーゲン活性化因子インヒビター１遺伝子において−６６８位から３’方向にＧが４個連続して存在する場合にのみ、プラスミノーゲン活性化因子インヒビター１遺伝子の該配列部分を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セット、又は核酸試料中のプラスミノーゲン活性化因子インヒビター１遺伝子において−６６８位から３’方向にＧが５個連続して存在する場合にのみ、該プラスミノーゲン活性化因子インヒビター１遺伝子の該配列部分を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セット、
（１９）核酸試料中のアポリポプロテインＣ−ＩＩＩ遺伝子の−４８２位塩基がＣである場合にのみ、該アポリポプロテインＣ−ＩＩＩ遺伝子の−４８２位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セット、又は核酸試料中のアポリポプロテインＣ−ＩＩＩ遺伝子の−４８２位塩基がＴである場合にのみ、該アポリポプロテインＣ−ＩＩＩ遺伝子の−４８２位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セット、
（２０）核酸試料中のパラオキソナーゼ遺伝子の５８４位塩基がＧである場合にのみ、該パラオキソナーゼ遺伝子の５８４位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セット、又は核酸試料中のパラオキソナーゼ遺伝子の５８４位塩基がＡである場合にのみ、該パラオキソナーゼ遺伝子の５８４位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セット、
（２１）核酸試料中のグリコプロテインＩｂα遺伝子の１０１８位塩基がＣである場合にのみ、該グリコプロテインＩｂα遺伝子の１０１８位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セット、又は核酸試料中のグリコプロテインＩｂα遺伝子の１０１８位塩基がＴである場合にのみ、該グリコプロテインＩｂα遺伝子の１０１８位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セット、及び
（２２）核酸試料中のアポリポプロテインＥ遺伝子の３９３２位塩基がＴである場合にのみ、該アポリポプロテインＥ遺伝子の３９３２位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セット、又は核酸試料中のアポリポプロテインＥ遺伝子の３９３２位塩基がＣである場合にのみ、該アポリポプロテインＥ遺伝子の３９３２位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セット。
以上では、（１８）〜（２２）からなるグループから二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成しているが、（１８）〜（２２）の二つ以上を任意に選択してグループとし、かかるグループから二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成してもよい。例えば、（１８）〜（２１）からなるグループ（後述の実施例においてオッズ比が上位４位までの多型を解析するための核酸セット）より二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成したり、（１８）〜（２０）からなるグループ（後述の実施例においてオッズ比が上位３位までの多型を解析するための核酸セット）より二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成することができる。
【００６１】
以下の（１）〜（６）からなるグループより選択される二つ以上の核酸セットを含んでなる遺伝子型検出用キット、
（１）アポリポプロテインＥ遺伝子の３９３２位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セットであって、３９３２位塩基がＴであるアポリポプロテインＥ遺伝子において３９３２位塩基を含む部分ＤＮＡ領域、に対して特異的にハイブリダイズするセンスプライマー及び／又は３９３２位塩基がＣであるアポリポプロテインＥ遺伝子において３９３２位塩基を含む部分ＤＮＡ領域、に対して特異的にハイブリダイズするセンスプライマーと、アポリポプロテインＥ遺伝子の一部領域に対して特異的にハイブリダイズするアンチセンスプライマーと、からなる核酸セット、
（２）グリコプロテインＩａ遺伝子の１６４８位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セットであって、１６４８位塩基がＡであるグリコプロテインＩａ遺伝子において１６４８位塩基を含む部分ＤＮＡ領域、に対して特異的にハイブリダイズするセンスプライマー及び／又は１６４８位塩基がＧであるグリコプロテインＩａ遺伝子において１６４８位塩基を含む部分ＤＮＡ領域、に対して特異的にハイブリダイズするセンスプライマーと、グリコプロテインＩａ遺伝子の一部領域に対して特異的にハイブリダイズするアンチセンスプライマーと、からなる核酸セット、（３）腫瘍壊死因子α遺伝子の−８６３位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セットであって、−８６３位塩基がＣである腫瘍壊死因子α遺伝子において−８６３位塩基を含む部分ＤＮＡ領域、に対して特異的にハイブリダイズするアンチセンスプライマー及び／又は−８６３位塩基がＡである腫瘍壊死因子α遺伝子において−８６３位塩基を含む部分ＤＮＡ領域、に対して特異的にハイブリダイズするアンチセンスプライマーと、腫瘍壊死因子α遺伝子の一部領域に対して特異的にハイブリダイズするセンスプライマーと、からなる核酸セット、
（４）Ｇ−プロテインβ３サブユニット遺伝子の８２５位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セットであって、８２５位塩基がＣであるＧ−プロテインβ３サブユニット遺伝子において８２５位塩基を含む部分ＤＮＡ領域、に対して特異的にハイブリダイズするセンスプライマー及び／又は８２５位塩基がＴであるＧ−プロテインβ３サブユニット遺伝子において８２５位塩基を含む部分ＤＮＡ領域、に対して特異的にハイブリダイズするセンスプライマーと、Ｇ−プロテインβ３サブユニット遺伝子の一部領域に対して特異的にハイブリダイズするアンチセンスプライマーと、からなる核酸セット、
（５）アポリポプロテインＣ−ＩＩＩ遺伝子の−４８２位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セットであって、−４８２位塩基がＣであるアポリポプロテインＣ−ＩＩＩ遺伝子において−４８２位塩基を含む部分ＤＮＡ領域、に対して特異的にハイブリダイズするセンスプライマー及び／又は−４８２位塩基がＴであるアポリポプロテインＣ−ＩＩＩ遺伝子において−４８２位塩基を含む部分ＤＮＡ領域、に対して特異的にハイブリダイズするセンスプライマーと、アポリポプロテインＣ−ＩＩＩ遺伝子の一部領域に対して特異的にハイブリダイズするアンチセンスプライマーと、からなる核酸セット、及び
（６）アンギオテンシノーゲン遺伝子の−６位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セットであって、−６位塩基がＧであるアンギオテンシノーゲン遺伝子において−６位塩基を含む部分ＤＮＡ領域、に対して特異的にハイブリダイズするアンチセンスプライマー及び／又は−６位塩基がＡであるアンギオテンシノーゲン遺伝子において−６位塩基を含む部分ＤＮＡ領域、に対して特異的にハイブリダイズするアンチセンスプライマーと、アンギオテンシノーゲン遺伝子の一部領域に対して特異的にハイブリダイズするセンスプライマーと、からなる核酸セット。
以上では、（１）〜（６）からなるグループから二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成しているが、（１）〜（６）の二つ以上を任意に選択してグループとし、かかるグループから二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成してもよい。例えば、（１）〜（５）からなるグループ（後述の実施例においてオッズ比とＰ値を考慮して選択される上位５位までの多型を解析するための核酸セット）より二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成したり、（１）、（３）、（４）、及び（５）からなるグループ（後述の実施例においてオッズ比が上位４位までの多型を解析するための核酸セット）より二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成することができる。
【００６２】
以下の（７）〜（１１）からなるグループより選択される二つ以上の核酸セットを含んでなる遺伝子型検出用キット、
（７）トロンボスポンジン４遺伝子の１１８６位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セットであって、１１８６位塩基がＧであるトロンボスポンジン４遺伝子において１１８６位塩基を含む部分ＤＮＡ領域、に対して特異的にハイブリダイズするセンスプライマー及び／又は１１８６位塩基がＣであるトロンボスポンジン４遺伝子において１１８６位塩基を含む部分ＤＮＡ領域、に対して特異的にハイブリダイズするセンスプライマーと、トロンボスポンジン４遺伝子の一部領域に対して特異的にハイブリダイズするアンチセンスプライマーと、からなる核酸セット、
（８）腫瘍壊死因子α遺伝子の−８６３位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セットであって、−８６３位塩基がＣである腫瘍壊死因子α遺伝子において−８６３位塩基を含む部分ＤＮＡ領域、に対して特異的にハイブリダイズするアンチセンスプライマー及び／又は−８６３位塩基がＡである腫瘍壊死因子α遺伝子において−８６３位塩基を含む部分ＤＮＡ領域、に対して特異的にハイブリダイズするアンチセンスプライマーと、腫瘍壊死因子α遺伝子の一部領域に対して特異的にハイブリダイズするセンスプライマーと、からなる核酸セット、
（９）トロンボモジュリン遺伝子の２１３６位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セットであって、２１３６位塩基がＣであるトロンボモジュリン遺伝子において２１３６位塩基を含む部分ＤＮＡ領域、に対して特異的にハイブリダイズするセンスプライマー及び／又は２１３６位塩基がＴであるトロンボモジュリン遺伝子において２１３６位塩基を含む部分ＤＮＡ領域、に対して特異的にハイブリダイズするセンスプライマーと、トロンボモジュリン遺伝子の一部領域に対して特異的にハイブリダイズするアンチセンスプライマーと、からなる核酸セット、（１０）トロンボポイエチン遺伝子の５７１３位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セットであって、５７１３位塩基がＡであるトロンボポイエチン遺伝子において５７１３位塩基を含む部分ＤＮＡ領域、に対して特異的にハイブリダイズするセンスプライマー及び／又は５７１３位塩基がＧであるトロンボポイエチン遺伝子において５７１３位塩基を含む部分ＤＮＡ領域、に対して特異的にハイブリダイズするセンスプライマーと、トロンボポイエチン遺伝子の一部領域に対して特異的にハイブリダイズするアンチセンスプライマーと、からなる核酸セット、及び
（１１）血小板活性化因子アセチルヒドロラーゼ遺伝子の９９４位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セットであって、９９４位塩基がＧである血小板活性化因子アセチルヒドロラーゼ遺伝子において９９４位塩基を含む部分ＤＮＡ領域、に対して特異的にハイブリダイズするセンスプライマー及び／又は９９４位塩基がＴである血小板活性化因子アセチルヒドロラーゼ遺伝子において９９４位塩基を含む部分ＤＮＡ領域、に対して特異的にハイブリダイズするセンスプライマーと、血小板活性化因子アセチルヒドロラーゼ遺伝子の一部領域に対して特異的にハイブリダイズするアンチセンスプライマーと、からなる核酸セット。
以上では、（７）〜（１１）からなるグループから二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成しているが、（７）〜（１１）の二つ以上を任意に選択してグループとし、かかるグループから二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成してもよい。例えば、（７）〜（１０）からなるグループ（後述の実施例においてオッズ比が上位４位までの多型を解析するための核酸セット）より二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成したり、（７）〜（９）からなるグループ（後述の実施例においてオッズ比が上位３位までの多型を解析するための核酸セット）より二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成することができる。
【００６３】
以下の（１２）〜（１７）からなるグループより選択される二つ以上の核酸セットを含んでなる遺伝子型検出用キット、
（１２）Ｅ−セレクチン遺伝子の５６１位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セットであって、５６１位塩基がＡであるＥ−セレクチン遺伝子において５６１位塩基を含む部分ＤＮＡ領域、に対して特異的にハイブリダイズするアンチセンスプライマー及び／又は５６１位塩基がＣであるＥ−セレクチン遺伝子において５６１位塩基を含む部分ＤＮＡ領域、に対して特異的にハイブリダイズするアンチセンスプライマーと、Ｅ−セレクチン遺伝子の一部領域に対して特異的にハイブリダイズするセンスプライマーと、からなる核酸セット、
（１３）脂肪酸結合タンパク質２遺伝子の２４４５位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セットであって、２４４５位塩基がＧである脂肪酸結合タンパク質２遺伝子において２４４５位塩基を含む部分ＤＮＡ領域、に対して特異的にハイブリダイズするセンスプライマー及び／又は２４４５位塩基がＡである脂肪酸結合タンパク質２遺伝子において２４４５位塩基を含む部分ＤＮＡ領域、に対して特異的にハイブリダイズするセンスプライマーと、脂肪酸結合タンパク質２遺伝子の一部領域に対して特異的にハイブリダイズするアンチセンスプライマーと、からなる核酸セット、
（１４）グリコプロテインＩｂα遺伝子の１０１８位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セットであって、１０１８位塩基がＣであるグリコプロテインＩｂα遺伝子において１０１８位塩基を含む部分ＤＮＡ領域、に対して特異的にハイブリダイズするセンスプライマー及び／又は１０１８位塩基がＴであるグリコプロテインＩｂα遺伝子において１０１８位塩基を含む部分ＤＮＡ領域、に対して特異的にハイブリダイズするセンスプライマーと、グリコプロテインＩｂα遺伝子の一部領域に対して特異的にハイブリダイズするアンチセンスプライマーと、からなる核酸セット、
（１５）プラスミノーゲン活性化因子インヒビター１遺伝子の−６６８位における多型部分を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された一組のプライマーと、並びに−６６８位から３’方向にＧが４個連続して存在するプラスミノーゲン活性化因子インヒビター１遺伝子において該配列部分を含む部分ＤＮＡ領域、に対して特異的にハイブリダイズするプローブ及び／又は−６６８位から３’方向にＧが５個連続して存在するプラスミノーゲン活性化因子インヒビター１遺伝子において該配列部分を含む部分ＤＮＡ領域、に対して特異的にハイブリダイズするプローブと、からなる核酸セット、
（１６）パラオキソナーゼ遺伝子の５８４位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セットであって、５８４位塩基がＧであるパラオキソナーゼ遺伝子において５８４位塩基を含む部分ＤＮＡ領域、に対して特異的にハイブリダイズするセンスプライマー及び／又は５８４位塩基がＡであるパラオキソナーゼ遺伝子において５８４位塩基を含む部分ＤＮＡ領域、に対して特異的にハイブリダイズするセンスプライマーと、パラオキソナーゼ遺伝子の一部領域に対して特異的にハイブリダイズするアンチセンスプライマーと、からなる核酸セット、及び
（１７）　アポリポプロテインＥ遺伝子の３９３２位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セットであって、３９３２位塩基がＴであるアポリポプロテインＥ遺伝子において３９３２位塩基を含む部分ＤＮＡ領域、に対して特異的にハイブリダイズするセンスプライマー及び／又は３９３２位塩基がＣであるアポリポプロテインＥ遺伝子において３９３２位塩基を含む部分ＤＮＡ領域、に対して特異的にハイブリダイズするセンスプライマーと、アポリポプロテインＥ遺伝子の一部領域に対して特異的にハイブリダイズするアンチセンスプライマーと、からなる核酸セット。
以上では、（１２）〜（１７）からなるグループから二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成しているが、（１２）〜（１７）の二つ以上を任意に選択してグループとし、かかるグループから二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成してもよい。例えば、（１２）〜（１６）からなるグループ（後述の実施例においてオッズ比が上位５位までの多型を解析するための核酸セット）より二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成したり、（１２）〜（１５）からなるグループ（後述の実施例においてオッズ比が上位４位までの多型を解析するための核酸セット）より二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成することができる。
【００６４】
以下の（１８）〜（２２）からなるグループより選択される二つ以上の核酸セットを含んでなる遺伝子型検出用キット、
（１８）プラスミノーゲン活性化因子インヒビター１遺伝子の−６６８位における多型部分を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された一組のプライマーと、並びに−６６８位から３’方向にＧが４個連続して存在するプラスミノーゲン活性化因子インヒビター１遺伝子において該配列部分を含む部分ＤＮＡ領域、に対して特異的にハイブリダイズするプローブ及び／又は−６６８位から３’方向にＧが５個連続して存在するプラスミノーゲン活性化因子インヒビター１遺伝子において該配列部分を含む部分ＤＮＡ領域、に対して特異的にハイブリダイズするプローブと、からなる核酸セット、
（１９）アポリポプロテインＣ−ＩＩＩ遺伝子の−４８２位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セットであって、−４８２位塩基がＣであるアポリポプロテインＣ−ＩＩＩ遺伝子において−４８２位塩基を含む部分ＤＮＡ領域、に対して特異的にハイブリダイズするセンスプライマー及び／又は−４８２位塩基がＴであるアポリポプロテインＣ−ＩＩＩ遺伝子において−４８２位塩基を含む部分ＤＮＡ領域、に対して特異的にハイブリダイズするセンスプライマーと、アポリポプロテインＣ−ＩＩＩ遺伝子の一部領域に対して特異的にハイブリダイズするアンチセンスプライマーと、からなる核酸セット、
（２０）パラオキソナーゼ遺伝子の５８４位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セットであって、５８４位塩基がＧであるパラオキソナーゼ遺伝子において５８４位塩基を含む部分ＤＮＡ領域、に対して特異的にハイブリダイズするセンスプライマー及び／又は５８４位塩基がＡであるパラオキソナーゼ遺伝子において５８４位塩基を含む部分ＤＮＡ領域、に対して特異的にハイブリダイズするセンスプライマーと、パラオキソナーゼ遺伝子の一部領域に対して特異的にハイブリダイズするアンチセンスプライマーと、からなる核酸セット、
（２１）グリコプロテインＩｂα遺伝子の１０１８位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セットであって、１０１８位塩基がＣであるグリコプロテインＩｂα遺伝子において１０１８位塩基を含む部分ＤＮＡ領域、に対して特異的にハイブリダイズするセンスプライマー及び／又は１０１８位塩基がＴであるグリコプロテインＩｂα遺伝子において１０１８位塩基を含む部分ＤＮＡ領域、に対して特異的にハイブリダイズするセンスプライマーと、グリコプロテインＩｂα遺伝子の一部領域に対して特異的にハイブリダイズするアンチセンスプライマーと、からなる核酸セット、及び
（２２）アポリポプロテインＥ遺伝子の３９３２位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された核酸セットであって、３９３２位塩基がＴであるアポリポプロテインＥ遺伝子において３９３２位塩基を含む部分ＤＮＡ領域、に対して特異的にハイブリダイズするセンスプライマー及び／又は３９３２位塩基がＣであるアポリポプロテインＥ遺伝子において３９３２位塩基を含む部分ＤＮＡ領域、に対して特異的にハイブリダイズするセンスプライマーと、アポリポプロテインＥ遺伝子の一部領域に対して特異的にハイブリダイズするアンチセンスプライマーと、からなる核酸セット。
以上では、（１８）〜（２２）からなるグループから二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成しているが、（１８）〜（２２）の二つ以上を任意に選択してグループとし、かかるグループから二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成してもよい。例えば、（１８）〜（２１）からなるグループ（後述の実施例においてオッズ比が上位４位までの多型を解析するための核酸セット）より二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成したり、（１８）〜（２０）からなるグループ（後述の実施例においてオッズ比が上位３位までの多型を解析するための核酸セット）より二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成することができる。
【００６５】
以下の（１）〜（６）からなるグループより選択される二つ以上の核酸セットを含んでなる遺伝子型検出用キット、
（１）３９３２位塩基がＴであるアポリポプロテインＥ遺伝子のアンチセンス鎖において３９３２位塩基に対応する塩基を含む部分領域、に対して特異的にハイブリダイズし且つ第１の標識物質で標識された第１核酸と、３９３２位塩基がＣであるアポリポプロテインＥ遺伝子のアンチセンス鎖において３９３２位塩基に対応する塩基を含む部分領域、に対して特異的にハイブリダイズし且つ第２の標識物質で標識された第２核酸と、及びアポリポプロテインＥ遺伝子のセンス鎖の一部領域に対して特異的にハイブリダイズし且つ前記第１核酸／又は前記第２核酸とともに使用されてアポリポプロテインＥ遺伝子の３９３２位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅することが可能な第３核酸と、からなる核酸セット、
（２）１６４８位塩基がＡであるグリコプロテインＩａ遺伝子のアンチセンス鎖において１６４８位塩基を含む部分領域、に対して特異的にハイブリダイズし且つ第１の標識物質で標識された第１核酸と、１６４８位塩基がＧであるグリコプロテインＩａ遺伝子のアンチセンス鎖において１６４８位塩基を含む部分領域、に対して特異的にハイブリダイズし且つ第２の標識物質で標識された第２核酸と、及びグリコプロテインＩａ遺伝子のセンス鎖の一部領域に対して特異的にハイブリダイズし且つ前記第１核酸／又は前記第２核酸とともに使用されてグリコプロテインＩａ遺伝子の１６４８位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅することが可能な第３核酸と、からなる核酸セット、
（３）−８６３位塩基がＣである腫瘍壊死因子α遺伝子のセンス鎖において−８６３位塩基を含む部分領域、に対して特異的にハイブリダイズし且つ第１の標識物質で標識された第１核酸と、−８６３位塩基がＡである腫瘍壊死因子α遺伝子のセンス鎖において−８６３位塩基を含む部分領域、に対して特異的にハイブリダイズし且つ第２の標識物質で標識された第２核酸と、及び腫瘍壊死因子α遺伝子のアンチセンス鎖の一部領域に対して特異的にハイブリダイズし且つ前記第１核酸／又は前記第２核酸とともに使用されて腫瘍壊死因子α遺伝子の−８６３位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅することが可能な第３核酸と、からなる核酸セット、
（４）８２５位塩基がＣであるＧ−プロテインβ３サブユニット遺伝子のアンチセンス鎖において８２５位塩基を含む部分領域、に対して特異的にハイブリダイズし且つ第１の標識物質で標識された第１核酸と、８２５位塩基がＴであるＧ−プロテインβ３サブユニット遺伝子のアンチセンス鎖において８２５位塩基を含む部分領域、に対して特異的にハイブリダイズし且つ第２の標識物質で標識された第２核酸と、及びＧ−プロテインβ３サブユニット遺伝子のセンス鎖の一部領域に対して特異的にハイブリダイズし且つ前記第１核酸／又は前記第２核酸とともに使用されてＧ−プロテインβ３サブユニット遺伝子の８２５位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅することが可能な第３核酸と、からなる核酸セット、
（５）−４８２位塩基がＣであるアポリポプロテインＣ−ＩＩＩ遺伝子のアンチセンス鎖において−４８２位塩基に対応する塩基を含む部分領域、に対して特異的にハイブリダイズし且つ第１の標識物質で標識された第１核酸と、−４８２位塩基がＴであるアポリポプロテインＣ−ＩＩＩ遺伝子のアンチセンス鎖において−４８２位塩基に対応する塩基を含む部分領域、に対して特異的にハイブリダイズし且つ第２の標識物質で標識された第２核酸と、及びアポリポプロテインＣ−ＩＩＩ遺伝子のセンス鎖の一部領域に対して特異的にハイブリダイズし且つ前記第１核酸／又は前記第２核酸とともに使用されてアポリポプロテインＣ−ＩＩＩ遺伝子の−４８２位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅することが可能な第３核酸と、からなる核酸セット、及び
（６）−６位塩基がＧであるアンギオテンシノーゲン遺伝子のセンス鎖において−６位塩基を含む部分領域、に対して特異的にハイブリダイズし且つ第１の標識物質で標識された第１核酸と、−６位塩基がＡであるアンギオテンシノーゲン遺伝子のセンス鎖において−６位塩基を含む部分領域、に対して特異的にハイブリダイズし且つ第２の標識物質で標識された第２核酸と、及びアンギオテンシノーゲン遺伝子のアンチセンス鎖の一部領域に対して特異的にハイブリダイズし且つ前記第１核酸／又は前記第２核酸とともに使用されてアンギオテンシノーゲン遺伝子の−６位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅することが可能な第３核酸と、からなる核酸セット。
以上では、（１）〜（６）からなるグループから二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成しているが、（１）〜（６）の二つ以上を任意に選択してグループとし、かかるグループから二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成してもよい。例えば、（１）〜（５）からなるグループ（後述の実施例においてオッズ比とＰ値を考慮して選択される上位５位までの多型を解析するための核酸セット）より二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成したり、（１）、（３）、（４）、及び（５）からなるグループ（後述の実施例においてオッズ比が上位４位までの多型を解析するための核酸セット）より二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成することができる。
【００６６】
以下の（７）〜（１１）からなるグループより選択される二つ以上の核酸セットを含んでなる遺伝子型検出用キット、
（７）１１８６位塩基がＧであるトロンボスポンジン４遺伝子のアンチセンス鎖において１１８６位塩基に対応する塩基を含む部分領域、に対して特異的にハイブリダイズし且つ第１の標識物質で標識された第１核酸と、１１８６位塩基がＣであるトロンボスポンジン４遺伝子のアンチセンス鎖において１１８６位塩基に対応する塩基を含む部分領域、に対して特異的にハイブリダイズし且つ第２の標識物質で標識された第２核酸と、及びトロンボスポンジン４遺伝子のセンス鎖の一部領域に対して特異的にハイブリダイズし且つ前記第１核酸／又は前記第２核酸とともに使用されてトロンボスポンジン４遺伝子の１１８６位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅することが可能な第３核酸と、からなる核酸セット、
（８）−８６３位塩基がＣである腫瘍壊死因子α遺伝子のセンス鎖において−８６３位塩基を含む部分領域、に対して特異的にハイブリダイズし且つ第１の標識物質で標識された第１核酸と、−８６３位塩基がＡである腫瘍壊死因子α遺伝子のセンス鎖において−８６３位塩基を含む部分領域、に対して特異的にハイブリダイズし且つ第２の標識物質で標識された第２核酸と、及び腫瘍壊死因子α遺伝子のアンチセンス鎖の一部領域に対して特異的にハイブリダイズし且つ前記第１核酸／又は前記第２核酸とともに使用されて腫瘍壊死因子α遺伝子の−８６３位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅することが可能な第３核酸と、からなる核酸セット、
（９）２１３６位塩基がＣであるトロンボモジュリン遺伝子のアンチセンス鎖において２１３６位塩基を含む部分領域、に対して特異的にハイブリダイズし且つ第１の標識物質で標識された第１核酸と、２１３６位塩基がＴであるトロンボモジュリン遺伝子のアンチセンス鎖において２１３６位塩基を含む部分領域、に対して特異的にハイブリダイズし且つ第２の標識物質で標識された第２核酸と、及びトロンボモジュリン遺伝子のセンス鎖の一部領域に対して特異的にハイブリダイズし且つ前記第１核酸／又は前記第２核酸とともに使用されてトロンボモジュリン遺伝子の２１３６位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅することが可能な第３核酸と、からなる核酸セット、
（１０）５７１３位塩基がＡであるトロンボポイエチン遺伝子のアンチセンス鎖において５７１３位塩基を含む部分領域、に対して特異的にハイブリダイズし且つ第１の標識物質で標識された第１核酸と、５７１３位塩基がＧであるトロンボポイエチン遺伝子のアンチセンス鎖において５７１３位塩基を含む部分領域、に対して特異的にハイブリダイズし且つ第２の標識物質で標識された第２核酸と、及びトロンボポイエチン遺伝子のセンス鎖の一部領域に対して特異的にハイブリダイズし且つ前記第１核酸／又は前記第２核酸とともに使用されてトロンボポイエチン遺伝子の５７１３位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅することが可能な第３核酸と、からなる核酸セット、及び
（１１）９９４位塩基がＧである血小板活性化因子アセチルヒドロラーゼ遺伝子のアンチセンス鎖において９９４位塩基に対応する塩基を含む部分領域、に対して特異的にハイブリダイズし且つ第１の標識物質で標識された第１核酸と、９９４位塩基がＴである血小板活性化因子アセチルヒドロラーゼ遺伝子のアンチセンス鎖において９９４位塩基に対応する塩基を含む部分領域、に対して特異的にハイブリダイズし且つ第２の標識物質で標識された第２核酸と、及び血小板活性化因子アセチルヒドロラーゼ遺伝子のセンス鎖の一部領域に対して特異的にハイブリダイズし且つ前記第１核酸／又は前記第２核酸とともに使用されて血小板活性化因子アセチルヒドロラーゼ遺伝子の９９４位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅することが可能な第３核酸と、からなる核酸セット。
以上では、（７）〜（１１）からなるグループから二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成しているが、（７）〜（１１）の二つ以上を任意に選択してグループとし、かかるグループから二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成してもよい。例えば、（７）〜（１０）からなるグループ（後述の実施例においてオッズ比が上位４位までの多型を解析するための核酸セット）より二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成したり、（７）〜（９）からなるグループ（後述の実施例においてオッズ比が上位３位までの多型を解析するための核酸セット）より二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成することができる。
【００６７】
以下の（１２）〜（１７）からなるグループより選択される二つ以上の核酸セットを含んでなる遺伝子型検出用キット、
（１２）５６１位塩基がＡであるＥ−セレクチン遺伝子のセンス鎖において５６１位塩基に対応する塩基を含む部分領域、に対して特異的にハイブリダイズし且つ第１の標識物質で標識された第１核酸と、５６１位塩基がＣであるＥ−セレクチン遺伝子のセンス鎖において５６１位塩基に対応する塩基を含む部分領域、に対して特異的にハイブリダイズし且つ第２の標識物質で標識された第２核酸と、及びＥ−セレクチン遺伝子のアンチセンス鎖の一部領域に対して特異的にハイブリダイズし且つ前記第１核酸／又は前記第２核酸とともに使用されてＥ−セレクチン遺伝子の５６１位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅することが可能な第３核酸と、からなる核酸セット、
（１３）２４４５位塩基がＧである脂肪酸結合タンパク質２遺伝子のアンチセンス鎖において２４４５位塩基を含む部分領域、に対して特異的にハイブリダイズし且つ第１の標識物質で標識された第１核酸と、２４４５位塩基がＡである脂肪酸結合タンパク質２遺伝子のアンチセンス鎖において２４４５位塩基を含む部分領域、に対して特異的にハイブリダイズし且つ第２の標識物質で標識された第２核酸と、及び脂肪酸結合タンパク質２遺伝子のセンス鎖の一部領域に対して特異的にハイブリダイズし且つ前記第１核酸／又は前記第２核酸とともに使用されて脂肪酸結合タンパク質２遺伝子の２４４５位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅することが可能な第３核酸と、からなる核酸セット、
（１４）１０１８位塩基がＣであるグリコプロテインＩｂα遺伝子のアンチセンス鎖において１０１８位塩基に対応する塩基を含む部分領域、に対して特異的にハイブリダイズし且つ第１の標識物質で標識された第１核酸と、１０１８位塩基がＴであるグリコプロテインＩｂα遺伝子のアンチセンス鎖において１０１８位塩基に対応する塩基を含む部分領域、に対して特異的にハイブリダイズし且つ第２の標識物質で標識された第２核酸と、及びグリコプロテインＩｂα遺伝子のセンス鎖の一部領域に対して特異的にハイブリダイズし且つ前記第１核酸／又は前記第２核酸とともに使用されてグリコプロテインＩｂα遺伝子の１０１８位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅することが可能な第３核酸と、からなる核酸セット、
（１５）プラスミノーゲン活性化因子インヒビター１遺伝子の−６６８位における多型部分を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された一組の核酸（第１核酸及び第２核酸）と、−６６８位から３’方向にＧが４個連続して存在するプラスミノーゲン活性化因子インヒビター１遺伝子を鋳型とし且つ前記一組の核酸を用いて増幅される核酸に対して特異的にハイブリダイズする第３核酸と、及び−６６８位から３’方向にＧが５個連続して存在するプラスミノーゲン活性化因子インヒビター１遺伝子を鋳型とし且つ前記一組の核酸を用いて増幅される核酸に対して特異的にハイブリダイズする第４核酸と、からなる核酸セット、
（１６）５８４位塩基がＧであるパラオキソナーゼ遺伝子のアンチセンス鎖において５８４位塩基に対応する塩基を含む部分領域、に対して特異的にハイブリダイズし且つ第１の標識物質で標識された第１核酸と、５８４位塩基がＡであるパラオキソナーゼ遺伝子のアンチセンス鎖において５８４位塩基に対応する塩基を含む部分領域、に対して特異的にハイブリダイズし且つ第２の標識物質で標識された第２核酸と、及びパラオキソナーゼ遺伝子のセンス鎖の一部領域に対して特異的にハイブリダイズし且つ前記第１核酸／又は前記第２核酸とともに使用されてパラオキソナーゼ遺伝子の５８４位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅することが可能な第３核酸と、からなる核酸セット、及び
（１７）３９３２位塩基がＴであるアポリポプロテインＥ遺伝子のアンチセンス鎖において３９３２位塩基に対応する塩基を含む部分領域、に対して特異的にハイブリダイズし且つ第１の標識物質で標識された第１核酸と、３９３２位塩基がＣであるアポリポプロテインＥ遺伝子のアンチセンス鎖において３９３２位塩基に対応する塩基を含む部分領域、に対して特異的にハイブリダイズし且つ第２の標識物質で標識された第２核酸と、及びアポリポプロテインＥ遺伝子のセンス鎖の一部領域に対して特異的にハイブリダイズし且つ前記第１核酸／又は前記第２核酸とともに使用されてアポリポプロテインＥ遺伝子の３９３２位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅することが可能な第３核酸と、からなる核酸セット。
以上では、（１２）〜（１７）からなるグループから二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成しているが、（１２）〜（１７）の二つ以上を任意に選択してグループとし、かかるグループから二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成してもよい。例えば、（１２）〜（１６）からなるグループ（後述の実施例においてオッズ比が上位５位までの多型を解析するための核酸セット）より二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成したり、（１２）〜（１５）からなるグループ（後述の実施例においてオッズ比が上位４位までの多型を解析するための核酸セット）より二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成することができる。
【００６８】
以下の（１８）〜（２２）からなるグループより選択される二つ以上の核酸セットを含んでなる遺伝子型検出用キット、
（１８）プラスミノーゲン活性化因子インヒビター１遺伝子の−６６８位における多型部分を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅するように設計された一組の核酸（第１核酸及び第２核酸）と、−６６８位から３’方向にＧが４個連続して存在するプラスミノーゲン活性化因子インヒビター１遺伝子を鋳型とし且つ前記一組の核酸を用いて増幅される核酸に対して特異的にハイブリダイズする第３核酸と、及び−６６８位から３’方向にＧが５個連続して存在するプラスミノーゲン活性化因子インヒビター１遺伝子を鋳型とし且つ前記一組の核酸を用いて増幅される核酸に対して特異的にハイブリダイズする第４核酸と、からなる核酸セット、
（１９）−４８２位塩基がＣであるアポリポプロテインＣ−ＩＩＩ遺伝子のアンチセンス鎖において−４８２位塩基に対応する塩基を含む部分領域、に対して特異的にハイブリダイズし且つ第１の標識物質で標識された第１核酸と、−４８２位塩基がＴであるアポリポプロテインＣ−ＩＩＩ遺伝子のアンチセンス鎖において−４８２位塩基に対応する塩基を含む部分領域、に対して特異的にハイブリダイズし且つ第２の標識物質で標識された第２核酸と、及びアポリポプロテインＣ−ＩＩＩ遺伝子のセンス鎖の一部領域に対して特異的にハイブリダイズし且つ前記第１核酸／又は前記第２核酸とともに使用されてアポリポプロテインＣ−ＩＩＩ遺伝子の−４８２位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅することが可能な第３核酸と、からなる核酸セット、
（２０）５８４位塩基がＧであるパラオキソナーゼ遺伝子のアンチセンス鎖において５８４位塩基に対応する塩基を含む部分領域、に対して特異的にハイブリダイズし且つ第１の標識物質で標識された第１核酸と、５８４位塩基がＡであるパラオキソナーゼ遺伝子のアンチセンス鎖において５８４位塩基に対応する塩基を含む部分領域、に対して特異的にハイブリダイズし且つ第２の標識物質で標識された第２核酸と、及びパラオキソナーゼ遺伝子のセンス鎖の一部領域に対して特異的にハイブリダイズし且つ前記第１核酸／又は前記第２核酸とともに使用されてパラオキソナーゼ遺伝子の５８４位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅することが可能な第３核酸と、からなる核酸セット、
（２１）１０１８位塩基がＣであるグリコプロテインＩｂα遺伝子のアンチセンス鎖において１０１８位塩基に対応する塩基を含む部分領域、に対して特異的にハイブリダイズし且つ第１の標識物質で標識された第１核酸と、１０１８位塩基がＴであるグリコプロテインＩｂα遺伝子のアンチセンス鎖において１０１８位塩基に対応する塩基を含む部分領域、に対して特異的にハイブリダイズし且つ第２の標識物質で標識された第２核酸と、及びグリコプロテインＩｂα遺伝子のセンス鎖の一部領域に対して特異的にハイブリダイズし且つ前記第１核酸／又は前記第２核酸とともに使用されてグリコプロテインＩｂα遺伝子の１０１８位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅することが可能な第３核酸と、からなる核酸セット、及び
（２２）３９３２位塩基がＴであるアポリポプロテインＥ遺伝子のアンチセンス鎖において３９３２位塩基に対応する塩基を含む部分領域、に対して特異的にハイブリダイズし且つ第１の標識物質で標識された第１核酸と、３９３２位塩基がＣであるアポリポプロテインＥ遺伝子のアンチセンス鎖において３９３２位塩基に対応する塩基を含む部分領域、に対して特異的にハイブリダイズし且つ第２の標識物質で標識された第２核酸と、及びアポリポプロテインＥ遺伝子のセンス鎖の一部領域に対して特異的にハイブリダイズし且つ前記第１核酸／又は前記第２核酸とともに使用されてアポリポプロテインＥ遺伝子の３９３２位塩基を含む部分ＤＮＡ領域を特異的に増幅することが可能な第３核酸と、からなる核酸セット。
以上では、（１８）〜（２２）からなるグループから二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成しているが、（１８）〜（２２）の二つ以上を任意に選択してグループとし、かかるグループから二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成してもよい。例えば、（１８）〜（２１）からなるグループ（後述の実施例においてオッズ比が上位４位までの多型を解析するための核酸セット）より二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成したり、（１８）〜（２０）からなるグループ（後述の実施例においてオッズ比が上位３位までの多型を解析するための核酸セット）より二つ以上の核酸セットを選択してキットを構成することができる。
【００６９】
以上のキットにおいては、キットの使用方法に応じた一又は二以上の試薬（バッファー、反応用試薬、検出用試薬など）などを組み合わせてもよい。
以下、実施例を用いて本発明をより詳細に説明する。
【００７０】
【実施例】
＜実施例１＞　遺伝子多型の選択
ＰｕｂＭｅｄ［Ｎａｔｉｏｎａｌ　Ｃｅｎｔｅｒ　ｆｏｒ　Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ　（ＮＣＢＩ）］，　Ｏｎｌｉｎｅ　Ｍｅｎｄｅｌｉａｎ　ｉｎｈｅｒｉｔａｎｃｅ　ｉｎ　Ｍｅｎ　（ＮＣＢＩ），　Ｓｉｎｇｌｅ　Ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ　Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ　（ＮＣＢＩ）などの数種類の公的データベースを用いて、今までに報告された遺伝子の中から血管生物学、血小板・白血球生物学、凝固線溶系、脂質・糖・その他の代謝因子などの総合的側面から冠動脈硬化、冠動脈攣縮、高血圧、糖尿病、高脂血症などとの関連が推定される７１遺伝子を抜粋した。さらにこれらの遺伝子に存在する多型の中でプロモーター領域やエクソンに存在するもの、あるいはスプライスドナー部位やアクセプター部位に位置し、遺伝子産物の機能変化との関連が予想されるものを中心に１１２多型を選択した（図１及び図２）。
【００７１】
＜実施例２＞　遺伝子多型の決定
対象は１９９８年７月から２００１年１２月の間に冠動脈形成術（バルーン拡張術またはステント挿入）のために入院した日本人１８６９例（男性１３１３例、女性５５６例）である。バルーン拡張術を行った冠動脈狭窄病変１３９０箇所（男性９１０箇所、女性４８０箇所）およびステント挿入を行った１００１箇所（男性７１０箇所、女性２９１箇所）について検討した。経過観察の冠動脈造影は冠動脈形成術後６か月で行った。バルーン拡張術後の急性閉塞あるいは亜急性ステント内血栓を生じた冠動脈狭窄病変は解析から除外した。定量的冠動脈計測は拡張末期で行い、再狭窄は冠動脈形成術を行った部位の最小血管内径狭窄が５０％以上と定義した。
【００７２】
それぞれの対象から静脈血７ｍＬを５０ｍｍｏｌ／Ｌ　ＥＤＴＡ−２Ｎａを含むチューブに採血し、ゲノムＤＮＡをＤＮＡ抽出キット（Ｑｉａｇｅｎ，　Ｃｈａｔｓｗｏｒｔｈ，　ＣＡ）を用いて抽出した。一塩基多型の遺伝子型の決定は蛍光・発光法によるアリル特異的プライマー・プローブ測定システム（東洋紡ジーンアナリシス、敦賀、日本）により行った（図３及び図４を参照）。多型部位を含むＤＮＡ断片は５’末端にフルオレセインイソチオシオネート（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎ　ｉｓｏｔｈｉｏｃｙａｎａｔｅ：ＦＩＴＣ）またはテキサスレッド（Ｔｅｘａｓ　ｒｅｄ：ＴｘＲ）で標識した２種類のアリル特異的センス（またはアンチセンス）プライマーと５’末端をビオチンで標識したアンチセンス（またはセンス）プライマーを用いてｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ　ｃｈａｉｎ　ｒｅａｃｔｉｏｎ　（ＰＣＲ）　により増幅した。また別法として、多型部位を含むＤＮＡ断片は２種類のアリル特異的センス（またはアンチセンス）プライマーと５’末端をビオチンで標識したアンチセンス（またはセンス）プライマーを用いて、またはセンスプライマーと５’末端をビオチンで標識したアンチセンスプライマーを用いてＰＣＲにより増幅した。反応溶液　（２５ｍＬ）　には２０ｎｇのＤＮＡ、５ｐｍｏｌの各プライマー、０．２ｍｍｏｌ／Ｌの各デオキシヌクレオシド三リン酸、１−４　ｍｍｏｌ／Ｌの塩化マグネシウム、　１ＵのＤＮＡポリメラーゼ（ｒＴａｑ　ｏｒ　ＫＯＤｐｌｕｓ；　東洋紡、大阪、日本）を含み、それぞれのＤＮＡポリメラーゼ緩衝液を用いた。増幅プロトコールは初期変性が９５℃で５分、３５−４５サイクルで変性が９５℃で３０秒、　アニーリングが５５−６７．５℃で３０秒、伸展が７２℃で３０秒、そして最終伸展が７２℃で２分とした。
【００７３】
蛍光法による遺伝子型の決定では、増幅したＤＮＡ　を９６穴プレートの各ウェルでストレプトアビジン結合磁気ビーズを含む溶液中で室温インキュベートした。このプレートを磁気スタンド上に置き、各ウェルから上清を採取し、０．０１Ｍ　ＮａＯＨを含む９６穴プレートの各ウェルに移した後、マイクロプレートリーダーによりＦＩＴＣは励起・蛍光波長が４８５ｎｍと５３８ｎｍ、ＴｘＲは励起・蛍光波長が５８４ｎｍと６１２　ｎｍで蛍光を測定した。また発光法による遺伝子型の決定では、増幅したＤＮＡ　を０．３Ｍ　ＮａＯＨで変性させ、９６穴プレートの各ウェルの底面に固定したいずれかのアリル特異的補足プローブと３５−４０　％ホルムアミドを含むハイブリダイゼーション緩衝液で３７℃、３０分間ハイブリダイゼーションを行った。ウェルを十分に洗浄した後、アルカリフォスファターゼ結合ストレプトアビジンを各ウェルに加え、プレートを３７℃、１５分間振騰した。ウェルを再度洗浄し、０．８ｍＭ　２−（４−ｉｏｄｏｐｈｅｎｙｌ）−３−（４−ｎｉｔｒｏｐｈｅｎｙｌ）−５−（２，４−ｄｉｓｕｌｆｏｐｈｅｎｙｌ）−２Ｈ−ｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ　（ｍｏｎｏｓｏｄｉｕｍ　ｓａｌｔ）と０．４ｍＭ　５−ｂｒｏｍｏ−４−ｃｈｌｏｒｏ−３−ｉｎｄｏｌｙｌ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅ　ｐ−ｔｏｌｕｉｄｉｎｅ　ｓａｌｔを含む溶液を加えた後、４５０ｎｍでの吸光度を測定した。
本方法による遺伝子型決定の精度を確認するために、５０人のＤＮＡサンプルを無作為に選びＰＣＲ−制限酵素断片長多型法またはＰＣＲ産物の直接塩基配列決定法を行った。いずれのサンプルにおいてもアリル特異的プライマー・プローブ測定システムにより決定された遺伝子型はＰＣＲ−制限酵素断片長多型法またはＤＮＡ塩基配列決定法によって決定されたものと同一であった。
【００７４】
尚、以下の関連解析における統計解析は次のように行った。臨床データは再狭窄病変と非再狭窄病変との間でｕｎｐａｉｒｅｄ　Ｓｔｕｄｅｎｔ’ｓ　ｔ　ｔｅｓｔ　または　Ｍａｎｎ−Ｗｈｉｔｎｅｙ　Ｕ　ｔｅｓｔを用いて比較した。定性的データは　ｃｈｉ−ｓｑｕａｒｅ　ｔｅｓｔで検定した。アリル頻度は　ｇｅｎｅ　ｃｏｕｎｔｉｎｇ　ｍｅｔｈｏｄにより推定し、Ｈａｒｄｙ−Ｗｅｉｎｂｅｒｇ平衡から逸脱しているかどうかはｃｈｉ−ｓｑｕａｒｅ　ｔｅｓｔ　によって検定した。本発明者らは危険因子を補正した多項ロジスティック回帰分析を行った。再狭窄を従属因子とし、年齢、ｂｏｄｙ　ｍａｓｓ　ｉｎｄｅｘ　（ＢＭＩ）、喫煙状況　（０＝非喫煙，１＝喫煙）、代謝因子　（０＝糖尿病・高コレステロール血症・高尿酸血症の経歴なし、１＝経歴あり）、各多型の遺伝子型を独立因子とした。それぞれの遺伝子型はｄｏｍｉｎａｎｔ（優性）、ｒｅｃｅｓｓｉｖｅ（劣性）、ａｄｄｉｔｉｖｅ（付加）遺伝モデルで解析し、Ｐ値、オッズ比、９５％信頼区間を算出した。組み合わせ遺伝子型解析では、ロジスティック回帰分析のｓｔｅｐｗｉｓｅ　ｆｏｒｗａｒｄ　ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ　によりそれぞれの遺伝子型についてのオッズ比を算出した。
【００７５】
＜実施例３＞　冠動脈形成術後再狭窄に関連する多型の選択、及び冠動脈形成術後再狭窄診断方法の開発
本発明者らは先の報告において７１候補遺伝子１１２多型と心筋梗塞との関連解析を男性４５１例（心筋梗塞２１９例、対照２３２例）と女性４５８例（心筋梗塞２２６例、対照２３２例）について行った（Ｙａｍａｄａ　Ｙ，　Ｉｚａｗａ　Ｈ，　Ｉｃｈｉｈａｒａ　Ｓ，　ｅｔ　ａｌ．　Ｇｅｎｅｔｉｃ　ｒｉｓｋｄｉａｇｎｏｓｉｓ　ｓｙｓｔｅｍ　ｆｏｒ　ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ　ｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ　ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ　ｂｙ　ａ　ｌａｒｇｅ　ａｃａｌｅ　ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ　ｓｔｕｄｙ　ｏｆ　１１２　ｇｅｎｅ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ　ｉｎ　５０６１　ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｓ（ｉｎ　ｐｒｅｓｓ）．）。この研究により男性で１９個、女性で１８個の一塩基多型が心筋梗塞発症と関連することを見出したが、それらの多型群の中には冠動脈形成術後再狭窄の候補遺伝子も含まれていた（図１、図２、図５を参照）。本実施例ではこれらの一塩基多型とバルーン拡張術後再狭窄あるいはステント内再狭窄との関連について２３９１冠動脈病変の大規模関連解析を行った。
【００７６】
検討した全２３９１冠動脈病変（男性１６２０病変、女性７７１病変）の背景データを図６と図７に示す。男性では、バルーン形成術においては、高血圧と糖尿病の頻度が非再狭窄病変に比較し再狭窄病変で有意に高く、年齢が非再狭窄病変に比較し再狭窄病変で有意に低かった。ステント挿入においては、喫煙、糖尿病と高尿酸血症の頻度が非再狭窄病変に比較し再狭窄病変で有意に高く、年齢が非再狭窄病変に比較し再狭窄病変で有意に低かった（図６）。女性では、バルーン形成術においては、年齢、喫煙と糖尿病の頻度が非再狭窄病変に比較し再狭窄病変で有意に高かった。ステント挿入においては、年齢、糖尿病の頻度が非再狭窄病変に比較し再狭窄病変で有意に高く、喫煙、高血圧と高尿酸血症の頻度が非再狭窄病変に比較し再狭窄病変で有意に低かった（図７）。また女性においては、バルーン形成術においては、右冠動脈の頻度が非再狭窄病変に比較し再狭窄病変で有意に高く、左回旋枝の頻度が非再狭窄病変に比較し再狭窄病変で有意に低かった。ステント挿入においては、左前下行枝の頻度が非再狭窄病変に比較し再狭窄病変で有意に高かった（図７）。
【００７７】
男性１９多型、女性１８多型と冠動脈形成術後再狭窄との関連解析において、年齢、ＢＭＩ、および喫煙、高血圧、糖尿病、高コレステロール血症、高尿酸血症の頻度を補正した多項ロジスティック回帰分析により男女それぞれにバルーン拡張術で６個、ステント挿入で５個の多型が再狭窄と有意な関連を示した（ｄｏｍｉｎａｎｔまたはｒｅｃｅｓｓｉｖｅ遺伝モデルのいずれかがＰ＜０．０５）　（図８は男性例、図９は女性例のデータを示す）。
本発明者らは多項ロジスティック回帰分析のｓｔｅｐｗｉｓｅ　ｆｏｒｗａｒｄ　ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄを行った（図１０、図１１）。本法では、図８と図９に示したそれぞれの多型の冠動脈形成術後再狭窄との関連におけるＰ値（より低いＰ値）に基づいてｄｏｍｉｎａｎｔまたはｒｅｃｅｓｓｉｖｅ遺伝モデルを採用した。これらの遺伝子の染色体上の遺伝子座を図１０と図１１に示す。腫瘍壊死因子α遺伝子と血小板活性化因子アセチルヒドロラーゼ遺伝子の遺伝子座は近接しているが、両者の多型における遺伝子型の分布には関連を認めなかった。同様に、プラスミノーゲン活性化因子インヒビター１遺伝子とパラオキソナーゼ遺伝子の遺伝子座は近接しているが、両者の多型における遺伝子型の分布には関連を認めなかった。Ｓｔｅｐｗｉｓｅ　ｆｏｒｗａｒｄ　ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄにより算出した組み合わせ遺伝子型によるバルーン拡張術またはステント挿入後再狭窄のオッズ比を、男性については図１２、図１３と図１６Ａに、女性については図１４、図１５と図１６Ｂに示す。男性では、５個の多型の組み合わせ遺伝子型（ＡｐｏＥ（３９３２Ｔ→Ｃ）多型、ＧＰＩａ（１６４８Ａ→Ｇ）多型、ＴＮＦα（−８６３Ｃ→Ａ）多型、Ｇ−プロテインβ３（８２５Ｃ→Ｔ）多型、及びＡｐｏＣ−ＩＩＩ（−４８２Ｃ→Ｔ）多型）により、バルーン拡張術後再狭窄の最大オッズ比が１０．５５となった（図１２、図１６Ａ）。さらにもう一つの多型（ＡＧＴ（−６Ｇ→Ａ）多型）を加えた６個の多型の組み合わせ遺伝子型により、バルーン拡張術後再狭窄の最大オッズ比が１５．０９となった（図１６Ａ）。同じく男性では、５個の多型の組み合わせ遺伝子型（ＴＳＰ４（１１８６Ｇ→Ｃ）多型、ＴＮＦα（−８６３Ｃ→Ａ）多型、ＴＭ（２１３６Ｃ→Ｔ）多型、ＴＰＯ（５７１３Ａ→Ｇ）多型、及びＰＡＦ−ＡＨ（９９４Ｇ→Ｔ）多型）により、ステント内再狭窄の最大オッズ比が６．６４となった（図１３、図１６Ａ）。女性では、５個の多型の組み合わせ遺伝子型（Ｅセレクチン（５６１Ａ→Ｃ）多型、ＦＡＢＰ２　（２４４５Ｇ→Ａ）多型、ＧＰＩｂα（１０１８Ｃ→Ｔ）多型、ＰＡＩ１（−６６８／４Ｇ→５Ｇ）多型、及びＰＯＮ（５８４Ｇ→Ａ）多型）により、バルーン拡張術後再狭窄の最大オッズ比が３７．４３となった（図１４、図１６Ｂ）。さらにもう一つの多型（ＡｐｏＥ（３９３２Ｔ→Ｃ）多型）を加えた６個の多型の組み合わせ遺伝子型により、バルーン拡張術後再狭窄の最大オッズ比が４４．５４となった（図１６Ｂ）。同じく女性では、５個の多型の組み合わせ遺伝子型（ＰＡＩ１（−６６８／４Ｇ→５Ｇ）多型、ＡｐｏＣ−ＩＩＩ（−４８２Ｃ→Ｔ）多型、ＰＯＮ（５８４Ｇ→Ａ）多型、ＧＰＩｂα（１０１８Ｃ→Ｔ）多型、及びＡｐｏＥ（３９３２Ｔ→Ｃ）多型）により、ステント内再狭窄の最大オッズ比が１１７．８３となった（図１５、図１６Ｂ）。
【００７８】
以上のように、多項ロジスティック回帰分析により男女共に６個の一塩基多型がバルーン拡張術後再狭窄と、５個の一塩基多型がステント内再狭窄と関連した。即ち、本発明者らは男性で１９個、女性で１８個の一塩基多型と冠動脈形成術後再狭窄との関連について２３９１冠動脈病変について大規模関連解析を行い、男女それぞれにおいてバルーン拡張術後再狭窄と関連する多型を６個、ステント内再狭窄と関連する多型を５個同定した。さらに、多項ロジスティック回帰分析のｓｔｅｐｗｉｓｅ　ｆｏｒｗａｒｄ　ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄにより最大オッズ比が男性のバルーン拡張術後再狭窄では１５．０９、ステント内再狭窄では６．６４、女性のバルーン拡張術後再狭窄では４４．５４、ステント内再狭窄では１１７．８３を呈する組み合わせ遺伝子型を用いた冠動脈形成術後再狭窄の遺伝子リスク診断法を開発した。
【００７９】
バルーン拡張術再狭窄の主要な原因は冠動脈の慢性リモデリングであり、ステント内再狭窄の主要な原因は新生内膜肥厚である（Ｍｉｎｔｚ　ＧＳ，　Ｐｏｐｍａ　ＪＪ，　Ｐｉｃｈａｒｄ　ＡＤ，　ｅｔ　ａｌ．　Ａｒｔｅｒｉａｌ　ｒｅｍｏｄｅｌｉｎｇ　ａｆｔｅｒ　ｃｏｒｏｎａｒｙ　ａｎｇｉｏｐｌａｓｔｙ：　ａ　ｓｅｒｉａｌ　ｉｎｔｒａｖａｓｃｕｌａｒ　ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄ　ｓｔｕｄｙ．　Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ　１９９６；９４：３５−４３．；　Ｈｏｆｆｍａｎｎ　Ｒ，　Ｍｉｎｔｚ　ＧＳ，　Ｄｕｓｓａｉｌｌａｎｔ　ＧＲ，　ｅｔ　ａｌ．　Ｐａｔｔｅｒｎｓ　ａｎｄ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ　ｏｆ　ｉｎ−ｓｔｅｎｔ　ｒｅｓｔｅｎｏｓｉｓ．　Ａ　ｓｅｒｉａｌ　ｉｎｔｒａｖａｓｃｕｌａｒ　ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄ　ｓｔｕｄｙ．　Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ　１９９６；９４：１２４７−５４．）。本発明者らは血管生物学、血小板・白血球生物学、線溶系、脂質・糖・その他の代謝因子などの包括的視点に基づいて男性１９個、女性１８個の一塩基多型と冠動脈形成術後再狭窄との関連について検討した。実際、再狭窄と関連した遺伝子群はその病態において多彩な役割を有していた。バルーン拡張術後再狭窄と関連した遺伝子は血管生物学（Ｇ−プロテインβ３サブユニット及びＥ　セレクチン）、血管の炎症（腫瘍壊死因子）、高血圧（アンギオテンシノーゲン）、脂質代謝（アポリポプロテインＥ、アポリポプロテインＣ−ＩＩＩ、脂肪酸結合タンパク質２、及びパラオキソナーゼ）、血小板機能（グリコプロテインＩａ、及びグリコプロテインＩｂα）、線溶系（プラスミノーゲン活性化因子インヒビター１）などに役割を有していた。また、ステント内再狭窄と関連した遺伝子は血管生物学（トロンボスポンジン４）、血管の炎症（腫瘍壊死因子α、及び血小板活性化因子アセチルヒドロラーゼ）、脂質代謝（アポリポプロテインＥ、アポリポプロテインＣ−ＩＩＩ　、及びパラオキソナーゼ）、血小板機能（トロンボモジュリン、トロンボポイエチン、及びグリコプロテインＩｂα）、線溶系（プラスミノーゲン活性化因子インヒビター１）などに役割を有していた。男性においては１個の多型（腫瘍壊死因子α遺伝子）がバルーン拡張術後再狭窄とステント内再狭窄の両者に関連し、女性においては４個の多型（プラスミノーゲン活性化因子インヒビター１遺伝子　、パラオキソナーゼ遺伝子、グリコプロテインＩｂα遺伝子、及びアポリポプロテインＥ遺伝子）がバルーン拡張術後再狭窄とステント内再狭窄の両者に関連した。本発明の遺伝子リスク診断方法は冠動脈形成術後再狭窄の最大オッズ比が、バルーン拡張術再狭窄においては男性で１５．０９、女性で４４．５４を呈し、ステント内再狭窄では男性で６．６４、女性で１１７．８３を呈し、今までに報告された関連解析の中で最大のオッズ比を示した。
【００８０】
冠動脈形成術後再狭窄と関連した１５個の多型のうち、アポリポプロテインＥ（ｖａｎ　Ｂｏｃｋｘｍｅｅｒ　ＦＭ，　Ｍａｍｏｔｔｅ　ＣＤＳ，　Ｇｉｂｂｏｎｓ　ＦＲ，　Ｔａｙｌｏｒ　ＲＲ．　Ａｐｏｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ　ε４　ｈｏｍｏｚｙｇｏｓｉｔｙ−ａ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｎｔ　ｏｆ　ｒｅｓｔｅｎｏｓｉｓ　ａｆｔｅｒ　ｃｏｒｏｎａｒｙ　ａｎｇｉｏｐｌａｓｔｙ．　Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ　１９９４；１１０：１９５−２０２．）、アンギオテンシノーゲン（Ｖｏｌｚｋｅ　Ｈ，　Ｈｅｒｔｗｉｇ　Ｓ，　Ｒｅｔｔｉｇ　Ｒ，　Ｍｏｔｚ　Ｗ．　Ｔｈｅ　ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎｏｇｅｎ　ｇｅｎｅ　２３５Ｔ　ｖａｒｉａｎｔ　ｉｓ　ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ａｎ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｒｉｓｋ　ｏｆ　ｒｅｓｔｅｎｏｓｉｓ　ａｆｔｅｒ　ｐｅｒｃｕｔａｎｅｏｕｓ　ｔｒａｎｓｌｕｍｉｎａｌ　ｃｏｒｏｎａｒｙ　ａｎｇｉｏｐｌａｓｔｙ．　Ｃｌｉｎ　Ｓｃｉ　２０００；９９：１９−２５．）、プラスミノーゲン活性化因子インヒビター１（Ｏｒｔｌｅｐｐ　ＪＲ，　Ｈｏｆｆｍａｎｎ　Ｒ，　Ｋｉｌｌｉａｎ　Ａ，　Ｌａｕｓｃｈｅｒ　Ｊ，　Ｍｅｒｋｅｌｂａｃｈ−Ｂｒｅｓｅ　Ｓ，　Ｈａｎｒａｔｈ　Ｐ．　Ｔｈｅ　４Ｇ／５Ｇ　ｐｒｏｍｏｔｅｒ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎ　ａｃｔｉｖａｔｏｒ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ−１　ｇｅｎｅ　ａｎｄ　ｌａｔｅ　ｌｕｍｉｎａｌ　ｌｏｓｓ　ａｆｔｅｒ　ｃｏｒｏｎａｒｙ　ｓｔｅｎｔ　ｐｌａｃｅｍｅｎｔ　ｉｎ　ｓｍｏｋｉｎｇ　ａｎｄ　ｎｏｎｓｍｏｋｉｎｇ　ｐａｔｉｅｎｔｓ．　Ｃｌｉｎ　Ｃａｒｄｉｏｌ　２００１；２４：５８５−５９１．）、及びＥセレクチン（Ｒａｕｃｈｈａｕｓ　Ｍ，　Ｇｒｏｓｓ　Ｍ，　Ｓｃｈｕｌｚ　Ｓ，　ｅｔ　ａｌ．　Ｔｈｅ　Ｅ−ｓｅｌｅｃｔｉｎ　ＳＥＲ１２３ＡＲＧ　ｇｅｎｅ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ　ａｎｄ　ｒｅｓｔｅｎｏｓｉｓ　ａｆｔｅｒ　ｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌ　ｃｏｒｏｎａｒｙ　ａｎｇｉｏｐｌａｓｔｙ．　Ｉｎｔ　Ｊ　Ｃａｒｄｉｏｌ　２００２；８３：２４９−２５７．）の遺伝子多型については再狭窄との関連が今までに報告されている。グリコプロテインＩａ遺伝子（ｖｏｎ　Ｂｅｃｋｅｒａｔｈ　Ｎ，　Ｋｏｃｈ　Ｗ，　Ｍｅｈｉｌｌｉ　Ｊ，　ｅｔ　ａｌ．　Ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ　Ｉａ　Ｃ８０７Ｔ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ　ａｎｄ　ｒｉｓｋ　ｏｆ　ｒｅｓｔｅｎｏｓｉｓ　ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ　ｃｏｒｏｎａｒｙ　ｓｔｅｎｔｉｎｇ．　Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ　２００１；１５６：４６３−４６８．）とＧ−プロテインβ３サブユニット（ｖｏｎ　Ｂｅｃｋｅｒａｔｈ　Ｎ，　Ｋａｓｔｒａｔｉ　Ａ，　Ｋｏｃｈ　Ｗ，　ｅｔ　ａｌ．　Ｇ　ｐｒｏｔｅｉｎ　β３　ｓｕｂｕｎｉｔ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ　ａｎｄ　ｒｉｓｋ　ｏｆ　ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ　ａｎｄ　ｒｅｓｔｅｎｏｓｉｓ　ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ　ｃｏｒｏｎａｒｙ　ｓｔｅｎｔ　ｐｌａｃｅｍｅｎｔ．　Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ２０００；１４９：１５１−１５５．）遺伝子は再狭窄の機序において重要であると考えられるが（Ｍａｔｓｕｎｏ　Ｈ，　Ｋｏｚａｗａ　Ｏ，　Ｎｉｗａ　Ｍ，　Ｕｅｍａｔｓｕ　Ｔ．　Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｏｆ　ｖｏｎ　Ｗｉｌｌｅｂｒａｎｄ　ｆａｃｔｏｒ　ｂｉｎｄｉｎｇ　ｔｏ　ｐｌａｔｅｌｅｔ　ＧＰ　Ｉｂ　ｂｙ　ａ　ｆｒａｃｔｉｏｎａｔｅｄ　ａｕｒｉｎｔｒｉｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ　ａｃｉｄ　ｐｒｅｖｅｎｔｓ　ｒｅｓｔｅｎｏｓｉｓ　ａｆｔｅｒ　ｖａｓｃｕｌａｒ　ｉｎｊｕｒｙ　ｉｎ　ｈａｍｓｔｅｒ　ｃａｒｏｔｉｄ　ａｒｔｅｒｙ．　Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ　１９９７；９６：１２９９−３０４．；　Ｉａｃｃａｒｉｎｏ　Ｇ，　Ｓｍｉｔｈｗｉｃｋ　ＬＡ，　Ｌｅｆｋｏｗｉｔｚ　ＲＪ，　Ｋｏｃｈ　ＷＪ．　Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ　Ｇβγｓｉｇｎａｌｉｎｇ　ｉｎ　ａｒｔｅｒｉａｌ　ｖａｓｃｕｌａｒ　ｓｍｏｏｔｈ　ｍｕｓｃｌｅ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ：　ａ　ｎｏｖｅｌ　ａｔｒａｔｅｇｙ　ｔｏ　ｌｉｍｉｔ　ｒｅｓｔｅｎｏｓｉｓ．　Ｐｒｏｃ　Ｎａｔｌ　Ａｃａｄ　Ｓｃｉ　ＵＳＡ　１９９９；９６：３９４５−５０．）、本発明者らの結果とは逆に、以前の報告ではそれらの多型と再狭窄との関連は認められなかった。その他の９個の多型については、冠動脈形成術後再狭窄と関連については検討されていない。それらの多型の中で、腫瘍壊死因子α（Ｃｌａｕｓｅｌｌ　Ｎ，　ｄｅ　Ｌｉｍａ　ＶＣ，　Ｍｏｌｏｓｓｉ　Ｓ，　ｅｔ　ａｌ．　Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｔｕｍｏｒ　ｎｅｃｒｏｓｉｓ　ｆａｃｔｏｒ　？　ａｎｄ　ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｆｉｂｒｏｎｅｃｔｉｎ　ｉｎ　ｃｏｒｏｎａｒｙ　ａｒｔｅｒｙ　ｒｅｓｔｅｎｏｔｉｃ　ｌｅｓｉｏｎｓ　ｒｅｔｒｉｅｖｅｄ　ｂｙ　ａｔｈｅｒｅｃｔｏｍｙ．　Ｂｒ　Ｈｅａｒｔ　Ｊ　１９９５；７３：５３４−９．）　とグリコプロテインＩｂα（Ｇａｗａｚ　Ｍ，　Ｎｅｕｍａｎｎ　ＦＪ，　Ｏｔｔ　Ｉ，　Ｍａｙ　Ａ，　Ｒｕｄｉｇｅｒ　Ｓ，　Ｓｃｈｏｍｉｇ　Ａ．　Ｃｈａｎｇｅｓ　ｉｎ　ｍｅｍｂｒａｎｅ　ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎｓ　ｏｆ　ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇ　ｐｌａｔｅｌｅｔｓ　ａｆｔｅｒ　ｃｏｒｏｎａｒｙ　ｓｔｅｎｔ　ｉｍｐｌａｎｔａｔｉｏｎ．　Ｈｅａｒｔ　１９９６；７６：１６６−７２．）　は再狭窄の病態において重要な役割を有すると考えられる。
【００８１】
本実施例で検討した多型のいくつかは、その近傍に存在する冠動脈形成術後再狭窄と真に関連する遺伝子の多型と連鎖不平衡にある可能性がある。しかしながら、本発明者らの結果は男性で１０個、女性で７個の遺伝子が日本人の冠動脈形成術後再狭窄感受性遺伝子座であることを示した。さらに、これらの遺伝子多型の組み合わせ遺伝子型はバルーン拡張術後再狭窄またはステント内再狭窄の遺伝的リスク診断に有用であることも示した。本発明の遺伝子リスク診断方法は冠動脈形成術後再狭窄の予知および最も適切な治療法の選択に有用な情報を提供することにより、冠動脈疾患患者の生活の質の改善のみならず医療費の削減に貢献できると考えられる。
【００８２】
この発明は、上記発明の実施の形態及び実施例の説明に何ら限定されるものではない。特許請求の範囲の記載を逸脱せず、当業者が容易に想到できる範囲で種々の変形態様もこの発明に含まれる。
【００８３】
【発明の効果】
本発明によれば冠動脈形成術後の再狭窄に関連する遺伝子多型が解析され、そして核酸試料の遺伝子型が検出される。この遺伝子型の検出によって得られる多型情報を用いることにより、冠動脈形成術後の再狭窄について高精度で予知確率の高いリスク診断を行うことができる。即ち、本発明は特定の冠動脈形成術を施した後に再狭窄が生ずるリスクを事前に知る有効な手段となる。従って、本発明は最適な治療法を選択するための有用な情報を提供することとなり、適切な治療法の選択を可能とし、もって高い治療効果の実現、及び冠動脈疾患患者の生活の質の向上を図ることができる。更には、不適切な治療を繰り返すことによる治療費の増大といった問題を解決することができ、即ち医療経済への多大な貢献が期待される。一方で本発明は、再狭窄が生ずるメカニズムを解明する上での有用な情報を提供することから、再狭窄の予防法の確立にとって極めて重要な一手段ともなる。
【００８４】
【配列表】
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【図面の簡単な説明】
【図１】図１は実施例におけるスクリーニング関連解析において検討した１１２遺伝子多型をまとめた表である。
【図２】図２は同じく実施例におけるスクリーニング関連解析において検討した１１２遺伝子多型をまとめた表である。
【図３】図３は実施例において遺伝子型を決定するために使用されるプライマー（上から順に配列番号３１、３２、３３、２８、２９、３０、１６、１７、１８、４６、４７、４８、４９、５０、５１、２５、２６、２７、１９、２０、２１、５２、５３、５４、５７、５８、５９、５５、５６）、プローブ（上から順に配列番号６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７）及びその他の条件をまとめた表である。図中、ＦＩＴＣはフルオレセインイソチオシアネートを、ＴｘＲはテキサスレッドを、Ｂｉｏｔｉｎはビオチンをそれぞれ表す。
【図４】図４は同じく実施例において遺伝子型を決定するために使用されるプライマー（上から順に配列番号４３、４４、４５、３７、３８、３９、４０、４１、４２、３４、３５、３６、２２、２３、２４）及びその他の条件をまとめた表である。図中、ＦＩＴＣはフルオレセインイソチオシアネートを、ＴｘＲはテキサスレッドを、Ｂｉｏｔｉｎはビオチンをそれぞれ表す。
【図５】図５は実施例の関連解析において検討した一塩基多型をまとめた表である。
【図６】図６は実施例における関連解析の対象とした男性１６２０病変の背景データをまとめた表である。各データは平均±標準偏差、又は％で表される。表中、＊１はＰ＜０．０００１（再狭窄なしに対して）を、＊２はＰ＜０．００１（再狭窄なしに対して）を、＊３はＰ＜０．０５（再狭窄なしに対して）を、＊４はＰ＜０．００５（再狭窄なしに対して）をそれぞれ表す。
【図７】図７は実施例における関連解析の対象とした女性７７１病変の背景データをまとめた表である。各データは平均±標準偏差、又は％で表される。表中、＊１はＰ＜０．００５（再狭窄なしに対して）を、＊２はＰ＜０．０５（再狭窄なしに対して）を、＊３はＰ＜０．０００１（再狭窄なしに対して）を、＊４はＰ＜０．００１（再狭窄なしに対して）をそれぞれ表す。
【図８】図８は関連解析の対象とした遺伝子多型と多項ロジスティック回帰分析の結果（男性例）をまとめた表である。
【図９】図９は関連解析の対象とした遺伝子多型と多項ロジスティック回帰分析の結果（女性例）をまとめた表である。
【図１０】図１０は冠動脈形成術後再狭窄と関連のある遺伝子多型における多項ロジスティック回帰分析のｓｔｅｐ　ｆｏｒｗａｒｄ　ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄを行った結果（男性例）を示す表である。
【図１１】図１１は冠動脈形成術後再狭窄と関連のある遺伝子多型における多項ロジスティック回帰分析のｓｔｅｐ　ｆｏｒｗａｒｄ　ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄを行った結果（女性例）を示す表である。
【図１２】図１２は男性における５個の組合せ遺伝子多型を用いたバルーン拡張術後再狭窄の遺伝的リスク診断を行った結果を示す表である。
【図１３】図１３は男性における５個の組合せ遺伝子多型を用いたステント挿入後再狭窄の遺伝的リスク診断を行った結果を示す表である。
【図１４】図１４は、女性における５個の組合せ遺伝子多型を用いたバルーン拡張術後再狭窄の遺伝的リスク診断を行った結果を示す表である。
【図１５】図１５は女性における５個の組合せ遺伝子多型を用いたステント挿入後再狭窄の遺伝的リスク診断を行った結果を示す表である。
【図１６】図１６は冠動脈形成術後再狭窄の累積オッズ比と一塩基多型の数の関連を表したグラフである。バルーン拡張術後再狭窄は（○）で、ステント挿入後再狭窄は（●）で表され、（Ａ）は男性、（Ｂ）は女性における関連を示す。（Ａ）のバルーン拡張術後再狭窄における各ＳＮＰは、ＳＮＰ１：ＡｐｏＥ（３９３２Ｔ→Ｃ）多型、ＳＮＰ２：ＧＰＩａ（１６４８Ａ→Ｇ）多型、ＳＮＰ３：ＴＮＦα（−８６３Ｃ→Ａ）多型、ＳＮＰ４：Ｇ−プロテインβ３（８２５Ｃ→Ｔ）多型、ＳＮＰ５：ＡｐｏＣ−ＩＩＩ（−４８２Ｃ→Ｔ）多型、ＳＮＰ６：ＡＧＴ（−６Ｇ→Ａ）多型である。同様にステント挿入後再狭窄における各ＳＮＰは、ＳＮＰ１：ＴＳＰ４（１１８６Ｇ→Ｃ）多型、ＳＮＰ２：ＴＮＦα（−８６３Ｃ→Ａ）多型、ＳＮＰ３：ＴＭ（２１３６Ｃ→Ｔ）多型、ＳＮＰ４：ＴＰＯ（５７１３Ａ→Ｇ）多型、ＳＮＰ５：ＰＡＦ−ＡＨ（９９４Ｇ→Ｔ）である。（Ｂ）のバルーン拡張術後再狭窄における各ＳＮＰは、ＳＮＰ１：Ｅセレクチン（５６１Ａ→Ｃ）多型、ＳＮＰ２：ＦＡＢＰ２　（２４４５Ｇ→Ａ）多型、　ＳＮＰ３：　ＧＰＩｂα（１０１８Ｃ→Ｔ）多型、ＳＮＰ４：ＰＡＩ１（−６６８／４Ｇ→５Ｇ）多型、ＳＮＰ５：ＰＯＮ（５８４Ｇ→Ａ）多型、ＳＮＰ６：ＡｐｏＥ（３９３２Ｔ→ＣＰＡＩ１）多型である。同様にステント挿入後再狭窄における各ＳＮＰは、ＳＮＰ１：ＰＡＩ１（−６６８／４Ｇ→５Ｇ）多型、ＳＮＰ２：ＡｐｏＣ−ＩＩＩ（−４８２Ｃ→Ｔ）多型、ＳＮＰ３：ＰＯＮ（５８４Ｇ→Ａ）多型、ＳＮＰ４：ＧＰＩｂα（１０１８Ｃ→Ｔ）多型、ＳＮＰ５：ＡｐｏＥ（３９３２Ｔ→Ｃ）多型である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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