(57)【要約】【課題】ヒトの体内のエストロゲン含量が低下することにより引き起こされる疾患・症状、例えば、女性の月経前症候群及び／又は心冠疾患、骨粗鬆症、脂質代謝異常、更年期障害、性機能低下等を含む閉経期及び／又は閉経後障害の症状、及び男性の前立腺癌、前立腺肥大症、脱毛症等にたいして治療・予防効果を有するエストロゲン様活性剤を提供する。【解決手段】マンネンタケ（Ｇａｎｏｄｅｒｍａ  ｌｕｃｉｄｕｍ）の抽出物を含有することを特徴とするエストロゲン様活性剤。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
マンネンタケ（Ｇａｎｏｄｅｒｍａ  ｌｕｃｉｄｕｍ）の抽出物を含有することを特徴とするエストロゲン様活性剤。
【請求項２】
請求項１記載のエストロゲン様活性剤を有効量投与することにより、成人女性における月経前症候群及び／又は心冠疾患と骨粗鬆症含む閉経期及び／又は閉経後障害の症状を抑制する方法。
【請求項３】
請求項１記載のエストロゲン様活性剤を有効量投与することにより、成人男性の前立腺癌、前立腺肥大症の症状を抑制する方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、マンネンタケ（霊芝）（Ｇａｎｏｄｅｒｍａ  ｌｕｃｉｄｕｍ）の抽出物を含有するエストロゲン様活性剤及び該活性剤を有効量投与することによる、成人女性における月経前症候群及び／又は心冠疾患と骨粗鬆症含む閉経期及び／又は閉経後障害の症状、又は成人男性の前立腺癌、前立腺肥大症の症状を抑制する方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
【特許文献１】特開２００３−０１２５３３号公報
【特許文献２】特開２００１−１２２８７１号公報
【０００３】
エストロゲンは、ステロイド性の発情ホルモンであり、天然のみならず合成的にも多数の物質が知られている。ヒトに存在するエストロゲンは、主として卵巣によって生成され、女性の二次性徴の発達、子宮内膜の増殖、性機能の調節、骨代謝の調節、脂質代謝の調節等において重要な役割を果たしている。そのため、卵巣機能が低下する女性の閉経前、閉経期、閉経後には、体内のエストロゲン含量が低下し、月経前症候群、閉経期及び／又は閉経後障害の症状、例えば、自律神経失調症、更年期障害、性機能低下、心冠疾患、骨粗鬆症等の種々の症状、疾患が引き起こされる。これらの症状、疾患を予防、治療するためにエストロゲンの補充療法が行なわれる。
【０００４】
植物由来のエストロゲン様活性を有する物質が種々知られている。例えば、特許文献１には、植物セイヨウニンジンボクの乾燥粉砕果実抽出物が、エストロゲン受容体と直接相互作用し、上記症状を緩和できることが記載されている。また、特許文献２には、豆科クズ属植物のＰｕｅｒａｒｉａ  ｍｉｒｉｆｉｃａの根部から抽出されたデオキシミロエステロールが強いエストロゲン活性を有し、エストロゲンに依存する各種症状、疾患の治療に有効であることが記載されている。
【０００５】
一方、マンネンタケ（霊芝）には数々の薬効が伝承されており、特にガンに効くキノコとして知られている他、様々な生理作用を及ぼす物質が存在することが知られている。しかしながら、マンネンタケ抽出物が、エストロゲン様活性を有することは、未だ知られていなかった。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、エストロゲン様活性を有するマンネンタケ（霊芝）の抽出物を提供することを課題とする。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、マンネンタケ（霊芝）（Ｇａｎｏｄｅｒｍａ  ｌｕｃｉｄｕｍ）の抽出物の薬効、生理作用を種々検討した結果、該抽出物を、エストロゲン依存的に増殖することが知られているヒト乳がん由来のＭＣＦ−７細胞に用いたとき、該細胞が顕著に増殖することを見出し、本発明を完成した。
すなわち本発明は、マンネンタケ（Ｇａｎｏｄｅｒｍａ  ｌｕｃｉｄｕｍ）の抽出物を含有することを特徴とするエストロゲン様活性剤である。
【０００８】
本発明に係るエストロゲン様活性剤は、体内のエストロゲン含量の低下によって引き起こされる疾患・症状、例えば、女性の月経前症候群及び／又は心冠疾患と骨粗鬆症含む閉経期及び／又は閉経後障害の症状、男性の前立腺癌、前立腺肥大症等の治療・予防効果を有する。
【０００９】
【発明の実施の形態】
以下、本発明について詳細に説明する。
本発明のエストロゲン様活性剤は、一般的に霊芝といわれるマンネンタケ（Ｇａｎｏｄｅｒｍａ  ｌｕｃｉｄｕｍ）の抽出物である。
本発明に用いるマンネンタケ（万年茸）（Ｇａｎｏｄｅｒｍａ  ｌｕｃｉｄｕｍ）は、ヒダナシタケ目サルノコシカケ科に属する担子菌であり、古来中国では霊芝又は芝草と呼ばれ、日本ではレイシ、サイワイタケと呼ばれている、マンネンタケ目（Ｇａｎｏｄｅｒｍａ  ｔａｌｅｓ）に属するマンネンタケ科（Ｇａｎｏｄｅｒｍａ  ｔａｃｅａｅ）中のマンネンタケ属（Ｇａｎｏｄｅｒｍａ）のキノコである。
【００１０】
本発明に用いるマンネンタケの抽出については、メタノール、ｎ−ヘキサン、エタノール、エーテル、酢酸エチル等の有機溶媒や水が用いられ、これらに含浸させ放置することにより抽出する有機溶媒抽出法ならびにソックスレー抽出器を用いた加熱還流によるソックスレー抽出法が適用可能であるが、これらの方法に限定されるものではない。
【００１１】
例えば、メタノール抽出法については、マンネンタケ（Ｇａｎｏｄｅｒｍａ  ｌｕｃｉｄｕｍ）の子実体を粉砕し、メタノールを加え、室温で一日放置し、抽出液を取り出し、残渣にさらにメタノールを加えて抽出する方法である。この操作を計３回行い、得られた抽出液を合わせて濃縮・乾固させることにより、抽出物を調製することができる。
本発明の抽出過程において、活性炭等による脱色、脱臭処理をしてもよいし、加熱滅菌を施してもよい。
【００１２】
本発明に係るエストロゲン様活性剤は、製薬的に許容される担体等の添加剤を含有し得る。具体的には、製剤素材として慣用の各種有機あるいは無機担体物質が用いられ、固形製剤における賦形剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤、増粘剤；液状製剤における溶剤、分散剤、溶解補助剤、懸濁化剤、等張化剤、緩衝剤、無痛化剤等として配合される。また必要に応じて、防腐剤、抗酸化剤、着色剤、甘味剤等の添加物を用いることもできる。
【００１３】
賦形剤の好適な例としては、例えば乳糖、白糖、Ｄ−マンニトール、デンプン、結晶セルロース、軽質無水ケイ酸等が挙げられる。滑沢剤の好適な例としては、例えばステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、タルク、コロイドシリカ等が挙げられる。
結合剤の好適な例としては、例えば結晶セルロース、白糖、Ｄ−マンニトール、デキストリン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドン等が挙げられる。崩壊剤の好適な例としては、例えばデンプン、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、クロスカルメロースナトリウム、カルボキシメチルスターチナトリウム等が挙げられる。
【００１４】
増粘剤の好適な例としては、例えば天然ガム類、セルロース誘導体、アクリル酸重合体等が挙げられる。
溶剤の好適な例としては、例えば注射用水、アルコール、プロピレングリコール、マルクゴール、ゴマ油、トウモロコシ油等が挙げられる。
分散剤の好適な例としては、例えば、ツイーン（Ｔｗｅｅｎ）８０、ＨＣＯ  ６０、ポリエチレングリコール、カルボキシメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム等が挙げられる。
溶解補助剤の好適な例としては、例えばポリエチレングリコール、プロピレングリコール、Ｄ−マンニトール、安息香酸ベンジル、エタノール、トリスアミノメタン、コレステロール、トリエタノールアミン、炭酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム等が挙げられる。
【００１５】
懸濁化剤の好適な例としては、例えばステアリルトリエタノールアミン、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリルアミノプロピオン酸、レシチン、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、モノステアリン酸クセリセリン等の界面活性剤；例えばポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース等の親水性高分子等が挙げられる。
等張化剤の好適な例としては、例えば塩化ナトリウム、グリセリン、Ｄ−マンニトール等が挙げられる。
緩衝剤の好適な例としては、例えばリン酸塩、酢酸塩、炭酸塩、クエン酸塩等の緩衝液等が挙げられる。
【００１６】
無痛化剤の好適な例としては、例えばベンジルアルコール等が挙げられる。
防腐剤の好適な例としては、例えばパラオキシ安息香酸エステル類、クロロブタノール、ベンジルアルコール、フェネチルアルコール、デヒドロ酢酸、ソルビン酸等が挙げられる。
抗酸化剤の好適な例としては、例えば亜流酸塩、アスコルビン酸等が挙げられる。
【００１７】
本発明のエストロゲン様活性剤は、例えば、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、ドリンク剤等の経口投与の他、静脈内点滴もしくは注射等の全身経路による投与、あるいは筋肉内注射等の非経口投与、経腸投与、局所投与し得る。医薬製剤の具体例を以下に示す。
（１）錠剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤：本発明の医薬組成物に、例えば賦形剤、崩壊剤、結合剤または滑沢剤等を添加して圧縮成型し、次いで必要により、味のマスキング、腸溶性あるいは持続性の目的のためのコーティングを行うことにより製造することができる。
【００１８】
（２）注射剤：本発明の阻害剤を、例えば分散剤、保存剤、等張化剤等と共に水性注射剤として、あるいはオリーブ油、ゴマ油、綿実油、コーン油等の植物油、プロピレングリコール等に溶解、懸濁あるいは乳化して油性注射剤として成型することにより製造することができる。
（３）外用剤：本発明の阻害剤を固状、半固状または液状の組成物とすることにより製造される。例えば、上記固状の組成物は、該阻害剤をそのまま、あるいは賦形剤、増粘剤などを添加、混合して粉状とすることにより製造される。
上記液状の組成物は、注射剤の場合とほとんど同様で、油性あるいは水性懸濁剤とすることにより製造される。半固状の組成物は、水性または油性のゲル剤、あるいは軟膏状のものがよい。また、これらの組成物は、いずれも緩衝剤、防腐剤などを含んでいてもよい。
【００１９】
（４）座剤：本発明の阻害剤を油性または水性の固状、半固状あるいは液状の組成物とすることにより製造される。このような組成物に用いる油性基剤としては、例えば、高級脂肪酸のグリセリド（例えば、カカオ脂、ウイテプゾル類等）、中級脂肪酸（例えば、ミグリオール類等）、あるいは植物油（例えば、ゴマ油、大豆油、綿実油等）等が挙げられる。水性ゲル基剤としては、例えば天然ガム類、セルロース誘導体、ビニール重合体、アクリル酸重合体等が挙げられる。
【００２０】
本発明のエストロゲン様活性剤は、一般に体重１ｋｇ当たり１．０ｍｇ〜１００ｍｇの１日当たり投与量で、１乃至数回に分けて投与されるが、薬学的な有効量及び投与方法又は投与手段、治療期間は対象患者や動物の病理状態に左右される。
【００２１】
本発明にかかるマンネンタケ（Ｇａｎｏｄｅｒｍａ  ｌｕｃｉｄｕｍ）からの抽出物は、エストロゲン様活性を有するので、哺乳動物、特にヒトの体内のエストロゲン含量が低下することにより引き起こされる疾患・症状、例えば、女性の月経前症候群及び／又は心冠疾患、骨粗鬆症、脂質代謝異常、更年期障害、性機能低下等を含む閉経期及び／又は閉経後障害の症状にたいして治療・予防効果を有する。加えて、男性の前立腺癌、前立腺肥大症、脱毛症等の治療・予防効果を有する。
【００２２】
【実施例】
実施例１
マンネンタケ（Ｇａｎｏｄｅｒｍａ  ｌｕｃｉｄｕｍ）の子実体１０ｇを粉砕し、マンネンタケ粉を得、これをメタノール２５０ｍｌに懸濁し、室温でときどき攪拌しながら一晩浸漬した。これを濾過し、抽出液を得た。濾過残は新たにメタノール２５０ｍｌに懸濁し上記の抽出を繰り返した。この操作を３回行い、抽出液を集めエバポレーターで濃縮、乾固して、マンネンタケ抽出物を１．８ｇを得た。これの一部をジメチルスフォキシド（ＤＭＳＯ）に溶解して、所定の濃度のマンネンタケ抽出物ＤＭＳＯ溶液を得た。
一方、ヒト乳ガン由来ＭＣＦ−７細胞を、直径９０ｍｍ培養シャーレ中の１０％ＦＢＳ（ｆｅｔａｌ  ｂｏｖｉｎｅ  ｓｅｒｕｍ）を添加したｐｈｅｎｏｌ−ｒｅｄ−ｆｒｅｅのＲＰＭＩ１６４０で前培養した。培地を除去してＦＢＳで２回洗浄し、０．２％ｔｒｉｐｓｉｎ／ＦＢＳで細胞を剥離し回収した後、培地で４×１０４ｃｅｌｌｓ／ｍｌに調整し、１ｍｌ／ｗｅｌｌで２４ｗｅｌｌ  ｐｌａｔｅに播種した。２４時間培養後、血清無添加の培地で培地交換し、さらに２４時間培養後に１％ｃＦＢＳ（ｃｈａｒｃｏｌ−ｔｒｅａｔｅｄ  ＦＢＳ）ＰＲＦ  ＲＰＭＩ１６４０で培地交換した。培地交換と同時にマンネンタケ抽出物ＤＭＳＯ溶液を、培地に対して抽出物の濃度で０．０１〜１０ｐｐｍ（ｗ／ｖ）になるよう添加した。さらに５日間培養後（２日に１回培地交換）、血球計算盤を用いた細胞数測定を行い、細胞増殖を評価した。またｐｏｓｉｔｉｖｅ  ｃｏｎｔｒｏｌにはエストロゲンである１７β−ｅｓｔｒａｄｉｏｌ（Ｅ２）を用いた。
測定を３回繰り返し、その平均値を図１に示した。図１において、ｐｏｓｉｔｉｖｅ  ｃｏｎｔｒｏｌとして用いたＥ２では、最大でｃｏｎｔｒｏｌの１７５％まで細胞増殖を促進した。それに対し、マンネンタケ抽出物では、１０ｐｐｍにおいてはｃｏｎｔｒｏｌよりも低い活性を示し、細胞毒性が示唆されたが、０．０１〜１ｐｐｍでは細胞増殖を促進した。特に０．１ｐｐｍにおいてはＥ２と同程度の活性が見られ、エストロゲン様活性を示した。
【００２３】
【発明の効果】
本発明に係るマンネンタケ抽出物を含有するエストロゲン様活性剤は、哺乳動物、特にヒトの体内のエストロゲン含量が低下することにより引き起こされる疾患・症状、例えば、女性の月経前症候群及び／又は心冠疾患、骨粗鬆症、脂質代謝異常、更年期障害、性機能低下等を含む閉経期及び／又は閉経後障害の症状にたいして治療・予防効果を有する。加えて、男性の前立腺癌、前立腺肥大症、脱毛症等の治療・予防効果を有する。
【図面の簡単な説明】
【図１】マンネンタケ抽出物がＭＣＦ−７細胞の細胞増殖に与える影響を示す図である。
【図１】
2004292330.tif 000002