(57)【要約】【課題】本発明は、過剰な食物の摂取、運動不足、ストレスなどが原因で生じる肥満や高脂血症を始めとする様々な疾患を予防・改善するために、脂肪細胞における中性脂肪の蓄積抑制に優れた効果を発揮する中性脂肪蓄積抑制剤を提供することを目的とする。【解決手段】α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールを中性脂肪蓄積抑制剤として用いる。また、α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールを中性脂肪蓄積抑制剤として種々の組成物に配合する。【選択図】          なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールを有効成分とする中性脂肪蓄積抑制剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、優れた効果を発揮する中性脂肪蓄積抑制剤に関する。さらに詳しくは、α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールを有効成分とし、脂肪細胞における中性脂肪の蓄積を抑制する中性脂肪蓄積抑制剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
近年、過剰な食物の摂取、運動不足、ストレスなどが原因で生じる肥満や高脂血症を始めとする様々な疾患は、社会的に大きな問題となっており、このような肥満や疾患を予防・改善するために、様々な方法が従来から検討されている。例えば、食事制限や運動による方法、食物繊維の摂取、脂肪分解促進剤の利用などが挙げられるが、これらは主に既に体内に蓄積された脂肪を減少させる方法であり、根本的な改善としては不十分であると考えられた。
【０００３】
一方、生体内での脂肪の蓄積を抑制する方法は、体内での脂肪の蓄積を直接的に抑制するため、肥満や疾患の根本的な改善に優れており、また日常的な予防方法としても効果的である。このような生体内における脂肪の蓄積を抑制する脂肪蓄積抑制作用を有するものとしては、哺乳動物の乳由来のリン脂質（特許文献１参照），褐藻の酵素分解物（特許文献２参照）が知られている。
【０００４】
一方、本発明に係るα−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールは、既知の物質であり、低褐変性、低メイラード反応性、加熱安定性、非う食性、難消化性、高い保湿性を有し、食品、化成品、医薬品に利用できることが報告されている（特許文献３参照）。しかし、α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールの中性脂肪蓄積抑制作用に関してはこれまで全く知られていなかった。
【０００５】
【特許文献１】
特開２００１−２７５６１４号公報
【特許文献２】
特開平７−２７８００５号公報
【特許文献３】
特開平１１−２２２４９６号公報
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
従来用いられている脂肪蓄積抑制剤は、その脂肪蓄積抑制効果が必ずしも十分ではないなど、安定性、副作用、効果などの点から未だ十分なものは得られていない。本発明はこのような事情に鑑みてなされたものである。従って、本発明の目的は、脂肪細胞における中性脂肪の蓄積抑制に優れた効果を発揮する中性脂肪蓄積抑制剤を提供することにある。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、優れた効果を発揮する中性脂肪蓄積抑制剤を見出すために、種々の物質について、脂肪細胞における中性脂肪の蓄積抑制作用に関する検討を行った。その結果、α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールが、優れた中性脂肪の蓄積抑制作用を発揮することを見出し、さらに検討を重ね、本発明を完成するに至った。
【０００８】
すなわち、本発明は、α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールを有効成分とする中性脂肪蓄積抑制剤に関するものである。
【０００９】
【発明の実施の形態】
本発明に用いられるα−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールには、（２Ｒ）−１−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロール（化１），（２Ｓ）−１−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロール（化２），２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロール（化３）の３成分が知られており、これらの１種又は２種以上の混合物を用いることができる。
【００１０】
【化１】
2004331580.tif 000002
【００１１】
【化２】
2004331580.tif 000003
【００１２】
【化３】
2004331580.tif 000004
【００１３】
α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールを得る方法としては、カビ類のα−グルコシダーゼをグリセロール溶液中で糖類の基質に作用させる方法、清酒，味噌，みりん等の醸造物から抽出，精製する方法、イソマルトース，マルチトールなどを四酢酸鉛や過ヨウ素酸塩でグリコール開裂したものを還元する方法、あるいはＫｏｅｎｉｇｓ−Ｋｎｏｒｒ反応により合成したβ−グルコシドをアノメリゼーションした後、β−グルコシダーゼでβ−グルコシドを加水分解する方法などが挙げられるが、カビ類のα−グルコシダーゼをグリセロール溶液中で糖類の基質に作用させる方法が最も効率が良く特に好ましい。
【００１４】
α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールは、そのままでも使用することができるが、水や極性溶媒に希釈したり、変成や分解のない範囲で脱色，脱臭の精製処理を行ったり、カラムクロマトグラフィー等による分画処理を行った後に用いてもよい。また、リポソーム等のベシクルやマイクロカプセル等に内包させて用いることもできる。
【００１５】
本発明に係るα−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールを有効成分とする中性脂肪蓄積抑制剤は、脂肪細胞における中性脂肪の蓄積抑制に高い効果を示す。
【００１６】
中性脂肪の過剰な蓄積が原因として起こる疾患としては、高脂血症，動脈硬化，脂肪肝などが知られており、α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールを有効成分とする中性脂肪蓄積抑制剤は、肥満の予防・改善だけでなく、このような疾患の予防・改善にも効果を期待することができる。
【００１７】
α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールを有効成分とする中性脂肪蓄積抑制剤は、単独でも使用することが出来るが、中性脂肪蓄積抑制成分として医薬品，食品，化粧品，入浴料などの種々の組成物に配合することにより、中性脂肪蓄積抑制作用を有する組成物を得ることが出来る。得られた中性脂肪蓄積抑制剤を配合した組成物は、中性脂肪蓄積抑制用組成物として利用でき、中性脂肪の過剰な蓄積によっての惹き起こされる肥満や様々な疾患の予防・改善を目的に使用することが出来る。
【００１８】
本発明に係るα−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールを有効成分とする中性脂肪蓄積抑制剤を配合する中性脂肪蓄積抑制用組成物の剤型は任意であるが、皮膚外用剤，洗浄剤，浴用剤などの場合には、ローションなどの可溶化系，乳液などの乳化系，カラミンローションなどの分散系，噴射剤と共に充填したエアゾール，軟膏剤，粉末，顆粒などの種々の剤型として提供することができる。また、組成物が経口用医薬品や食品の場合には、ドリンク剤・点滴剤などの液剤，ガム・飴のような固形剤，カプセル，粉末，顆粒，錠剤などの一般的な剤型とすることができる。
【００１９】
α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールを有効成分とする中性脂肪蓄積抑制剤を配合する組成物には、α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールの他に、必要に応じて、通常医薬品，医薬部外品，皮膚化粧料，浴用剤，洗浄剤，食品などに配合される油性成分，保湿剤，粉体，色素，乳化剤，可溶化剤，洗浄剤，紫外線吸収剤，増粘剤，薬剤，香料，樹脂，アルコール類，栄養強化物質，調味料などを適宜配合することができ、さらに他の中性脂肪蓄積抑制剤との併用も可能である。
【００２０】
本発明に係るα−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールを有効成分とする中性脂肪蓄積抑制剤の種々の組成物への配合量は、組成物の種類や目的等によって調整することができるが、中性脂肪蓄積抑制効果や使用性等の点から、組成物の全量に対して０．０１重量％以上が好ましく、より好ましくは０．１重量％以上であり、最も好ましくは１．０重量％以上である。
【００２１】
【実施例】
さらに実施例により、本発明の特徴について詳細に説明する。まず、本発明のα−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールの製造例を示す。
【００２２】
［製造例１］
マルトース５％，グリセロール３５％の水溶液１０００ｍＬに、０．１２５Ｕ／ｍＬ（１Ｕ：ｐＨ５．０，３７℃，５ｍＭｐ−ＮＰＧから１分間に１μｍｏｌのｐ−ＮＰを遊離する酵素量）のＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｇｅｒ由来の酵素であるα−グルコシダーゼ（トランスグルコシダーゼＬ−アマノ，天野エンザイム製）を加え、４０℃，反応ｐＨ５．０の条件で２４時間反応させ、その後マルトースを１０回連続的に添加・反応させ、反応液を得た。得られた反応液を活性炭クロマトグラフィーにより精製し、α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールを得た。得られたα−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールをＧＣ−ＭＳ分析により確認すると、（２Ｒ）−１−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロール（化１），（２Ｓ）−１−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロール（化２），２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロール（化３）の３成分の混合物であった。
【００２３】
［製造例２］
清酒１０００ｍＬをＳｈｉｍ−ｐａｃｋ  ＳＣＲ−１０１（Ｎ）（７．９×３００ｍｍ）カラム（カラム温度；５０℃，溶離液；水，流速；０．６ｍＬ／ｍｉｎ）により分画し、α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールを得た。得られたα−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールをＧＣ−ＭＳ分析により確認すると、（２Ｒ）−１−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロール（化１），（２Ｓ）−１−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロール（化２），２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロール（化３）の３成分の混合物であった。
【００２４】
［製造例３］
１ｍＬの４％マルチトール水溶液に１０ｍＬの２％の過ヨウ素酸を添加し、室温にて４分間反応させた。反応終了後、塩化バリウムを添加し、生じた過ヨウ素酸バリウムの沈殿をろ別、除去した。さらに、イオン交換カラムで脱塩後、水素化ホウ素酸ナトリウムで還元し、活性炭クロマトグラフィーとＨＰＬＣにより分画精製し、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロール（化３）を得た。
【００２５】
次に、α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールの中性脂肪の蓄積抑制作用を評価した試験を示す。
【００２６】
［試験１：脂肪細胞における中性脂肪の蓄積抑制作用の評価］
試料には、製造例１にて調製したα−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールを用いた。評価は、以下の手順で行った。培養細胞としてマウス前駆脂肪細胞（３Ｔ３−Ｌ１）を使用し、１０％牛血清を含むＤＭＥ培地にて培養皿上が飽和状態になるまで細胞増殖を行った後、０．２５μＭキサメタゾン，０．５ｍＭイソブチルメチルキサンチン，６μｇ／ｍＬインスリンを含む培地で２日間培養した。培養終了後、インスリンのみを含む培地に任意の濃度となるように試料を添加し、１０日後に脂肪細胞中の脂肪滴の観察を行った。脂肪滴の観察は、１０％ホルマリンで細胞を固定した後、オイルレッドＯにて脂肪滴を染色し、５５０ｎｍにおける吸光度を測定して、中性脂肪の生成度合いを評価した。また、陽性コントロールとして４０ｍＭのグルコースを用い、同様に評価を行った。それぞれの濃度における評価結果を、試料無添加のブランクにおける脂肪蓄積量を１００とした相対値にて表１に示す。
【００２７】
【表１】
2004331580.tif 000005
【００２８】
表１より、α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールを添加した場合には、グルコースを添加した場合と比較して、中性脂肪の蓄積量が抑制されていることが分かった。このことから、α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールは、中性脂肪の蓄積抑制作用を有することが明らかとなった。
【００２９】
続いて、本発明に係るα−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールを有効成分とする中性脂肪蓄積抑制剤を配合した中性脂肪蓄積抑制用組成物の処方例を示す。
【００３０】
［処方例１］中性脂肪蓄積抑制用ジェル
（１）カルボキシビニルポリマー（１重量％水溶液）      １５．０（重量％）
（２）キサンタンガム（１重量％水溶液）                １０．０
（３）精製水                                          １００とする残余
（４）α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロール［製造例１］  １０．０
（５）パラオキシ安息香酸メチル                          ０．１
（６）エタノール                                        ５．０
（７）ポリオキシエチレン（４０Ｅ．Ｏ．）硬化ヒマシ油    ０．３
（８）香料                                              ０．１
（９）水酸化ナトリウム（１重量％水溶液）                ４．０
製法：（１）〜（４）を均一に攪拌後、予め均一にしておいた（５）〜（８）を添加した後、十分に攪拌し、（９）を加え、均一に混合し、水性ジェルを得た。
【００３１】
［処方例２］中性脂肪蓄積抑制用内服液
（１）α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロール［製造例１］  １３．０（重量％）
（２）クエン酸                                          ０．１
（３）ステビア                                          ０．０１
（４）精製水                                          ８４．８９
製法：（１）〜（５）を均一に混合し、中性脂肪蓄積抑制用内服液を得た。
【００３２】
［処方例３］中性脂肪蓄積抑制用錠剤
（１）α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロール［製造例１］  ０．１５（重量部）
（２）乳糖                                            ０．１５
（３）ステアリン酸マグネシウム                        ０．００５
製法：（１）〜（３）を打錠機にて打錠を行い、直径１０ｍｍ、重量３００ｍｇの中性脂肪蓄積抑制用錠剤を得た。
【００３３】
【発明の効果】
以上詳述したように、本発明によれば、優れた効果を有する中性脂肪蓄積抑制剤を提供することができる。また、該中性脂肪蓄積抑制剤を種々の組成物に配合することにより、中性脂肪蓄積抑制作用に優れた組成物を提供することができる。