(57)【要約】【課題】この発明は、ヒスタミン遊離抑制剤の開発を目的とする。【解決手段】（１）ＲＮＡ由来のヌクレオシドを含有することを特徴とするヒスタミン遊離抑制剤。（２）ＲＮＡ由来のヌクレオシドが、アデノシンである請求項１記載のヒスタミン遊離抑制剤。（３）ＲＮＡ由来のヌクレオシドが、グアノシンである請求項１記載のヒスタミン遊離抑制剤。（４）ＲＮＡ由来のヌクレオシドが、シティジンである請求項１記載のヒスタミン遊離抑制剤。（５）ＲＮＡ由来のヌクレオシドが、ウリディンである請求項１記載のヒスタミン遊離抑制剤。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＲＮＡ由来のヌクレオシドを含有することを特徴とするヒスタミン遊離抑制剤。
【請求項２】
ＲＮＡ由来のヌクレオシドが、アデノシンである請求項１記載のヒスタミン遊離抑制剤。
【請求項３】
ＲＮＡ由来のヌクレオシドが、グアノシンである請求項１記載のヒスタミン遊離抑制剤。
【請求項４】
ＲＮＡ由来のヌクレオシドが、シティジンである請求項１記載のヒスタミン遊離抑制剤。
【請求項５】
ＲＮＡ由来のヌクレオシドが、ウリディンである請求項１記載のヒスタミン遊離抑制剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
この発明は、ＲＮＡ由来のヌクレオシドを含有することを特徴とするヒスタミン遊離抑制剤に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
従来から、ヒスタミン遊離抑制作用を有する物質として、下記の物質が知られている。
▲１▼トリカフェオイルキナ酸等（特開２００２−８０３６０）
▲２▼トマト抽出物（特開２００２−８０３８７）
▲３▼アピゲニン等（特開２０００−８６５１０）
▲３▼ニッケイ、ヤマモモ等の樹皮抽出物（特開平１０−２８７５８２）
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】
しかしながら、ＲＮＡ由来のヌクレオシドについてのヒスタミン遊離抑制作用は知られていない。
そこで発明者は、アデノシン（Ａｄｅｎｏｓｉｎｅ）、グアノシン（Ｇｕａｎｏｓｉｎｅ）、シティジン（Ｃｙｔｉｄｉｎｅ）、ウリディン（Ｕｒｉｄｉｎｅ）の薬理効果として、ヒスタミン遊離抑制作用に着目して鋭意研究したところ、これらの物質には、顕著なヒスタミン遊離抑制作用が存在することを知り本発明を完成した。
【０００４】
【課題を解決するための手段】
本願発明は、下記の請求項（１）〜請求項（５）により構成されている。
（１）ＲＮＡ由来のヌクレオシドを含有することを特徴とするヒスタミン遊離抑制剤。
（２）ＲＮＡ由来のヌクレオシドが、アデノシンである請求項１記載のヒスタミン遊離抑制剤。
（３）ＲＮＡ由来のヌクレオシドが、グアノシンである請求項１記載のヒスタミン遊離抑制剤。
（４）ＲＮＡ由来のヌクレオシドが、シティジンである請求項１記載のヒスタミン遊離抑制剤。
（５）ＲＮＡ由来のヌクレオシドが、ウリディンである請求項１記載のヒスタミン遊離抑制剤。
【０００５】
本願発明を以上のように構成する理由は、ＲＮＡ由来のヌクレオシド、すなわち、▲１▼アデノシン（Ａｄｅｎｏｓｉｎｅ）、▲２▼グアノシン（Ｇｕａｎｏｓｉｎｅ）、▲３▼シティジン（Ｃｙｔｉｄｉｎｅ）、▲４▼ウリディン（Ｕｒｉｄｉｎｅ）等は、従来から核酸関連物質として既知の物質であるが、これらの物質に関し、ヒスタミン遊離抑制作用が知られていなかったことによる。
【０００６】
【発明の実施の形態】
＜ヒスタミン遊離抑制効果の確認＞
（１）下記の物質について、マスト細胞からのヒスタミン遊離抑制効果を調べることによって、Ｉ型アレルギー反応抑制効果を調べた。
▲１▼  アデノシン（Ａｄｅｎｏｓｉｎｅ）
【０００７】
【化１】
2004331618.tif 000002
【０００８】
▲２▼  グアノシン（Ｇｕａｎｏｓｉｎｅ）
【０００９】
【化２】
2004331618.tif 000003
【００１０】
▲３▼  シティジン（Ｃｙｔｉｄｉｎ）
【００１１】
【化３】
2004331618.tif 000004
【００１２】
▲４▼  ウリディン（Ｕｒｉｄｉｎｅ）
【００１３】
【化４】
2004331618.tif 000005
【００１４】
（２）被験動物及び細胞の調製方法
（ａ）被験動物には、Ｗｉｓｔｅｒ系ラット雄（６〜８週齢）を用いた。
（ｂ）細胞の調製方法
ラットをエーテルで麻酔させ、脱血死させた後、ラットの腹腔内に  Ｔｙｒｏｄｅ  Ｂｕｆｆｅｒ  １５ｍｌを注入し、腹腔内液を回収した。更にラットの腹腔内にＴｙｒｏｄｅＢｕｆｆｅｒ  １０ｍｌを注入し、更に腹腔内液を回収して先に採取した腹腔内液と混合した。この腹腔内液を、８００ｒｐｍ・４℃・１０分間遠心分離を行い、上澄を除去してフィルターをかけた。
更に、Ｔｙｒｏｄｅ  Ｂｕｆｆｅｒ  を加えた細胞懸濁液を、８００ｒｐｍ・４℃・１０分間遠心分離を行い、上清を除去して、細胞を均一にした。この細胞懸濁液を血球計算盤で測定し、８×１０６  ｃｅｌｌｓ  ／ｍｌに調製して用いた。
【００１５】
（３）生物検定の実験方法およびヒスタミンの分析方法
（ａ）生物検定の実験方法
１．２ｍｌのマイクロチューブに分注した、細胞懸濁液３７０μｌを３７℃のウォーターバスでプレインキュベートした。
１０分後、各濃度に設定したサンプル２０μｌを添加した。
更に、１０分後、アレルギー誘発剤であるｃｏｍｐｏｕｎｄ４８  ／  ８０  （マスト細胞刺激用試薬：和光純薬）１０μｌ（０．５μｇ／ｍｌ）  を添加した。
１５分後、氷上で反応を停止した。
更に、マスト細胞を除去するため、１３．０００ｒｐｍ  ・４℃・１５分間遠心分離し、上清を回収した。
この上清を、ＨＰＬＣ分析のジアゾ化するサンプルとした。
【００１６】
（ｂ）ヒスタミンジアゾ化誘導体の調製
等量の２０ｍＭ  ｐ  −ニトロアニリン塩酸溶液と２００ｍＭ  亜硝酸ナトリウム水溶液をよく混合した  （ジアゾ試薬）  。
ジアゾ試薬１０μｌに、前記（ヒスタミン）ジアゾ化用サンプル２０μｌを加え、ボルテックスミキサーでよく混合した。
更に、１０％  炭酸ナトリウムエタノール溶液３０μｌを加え、ボルテックスミキサーでよく混合した。
この溶液の２０μｌをＨＰＬＣ分析に用いた。
【００１７】
（ｃ）ヒスタミンの分析は、ジアゾ化法により行った（Ｓｐｅｃｉｆｉｃ  Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｈｉｓｔａｍｉｎｅ  ｉｎ  Ｆｉｓｈ  ｂｙ  Ｈｉｇｈ−ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  Ｌｉｑｕｉｄ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ  ａｆｔｅｒ  Ｄｉａｚｉ  Ｃｏｕｐｌｉｎｇ  ：  Ｂｉｏｓｃｉ．  Ｂｉｏｔｅｃｈ．  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  ５９（７），  １２０８−１２１０（１９９５）  ）。
生物検定におけるヒスタミンのＨＰＬＣ分析条件〈ジアゾ法）は、表１のとおりである。
【００１８】
【表１】
2004331618.tif 000006
【００１９】
（４）▲１▼アデノシン、▲２▼グアノシン、▲３▼シティジン、▲４▼ウリディン（何れも和光純薬製）のヒスタミン抑制剤の一定濃度におけるマスト細胞からのヒスタミン遊離の抑制効果の試験結果（何れもｎ＝３の平均値）を表２に示す。
【００２０】
【表２】
2004331618.tif 000007
【００２１】
抑制値は下記の計算式によった。
計算式：
（１−サンプルのピーク積分値／コントロールのピーク積分値）×１００
【００２２】
【発明の効果】
本願発明によれば、既知の物質である▲１▼アデノシン、▲２▼グアノシン、▲３▼シティジン、▲４▼ウリディンを用いて、ヒスタミン遊離抑制剤を得ることができるという効果を有する。