(57)【要約】【課題】優れた抗炎症作用、抗酸化作用及びメラニン生成抑制作用などを有し、シワ、シミ、にきび、皮膚炎などの皮膚に生じる様々なトラブルを未然に防止又は抑制することができる化粧料組成物を提供すること。【解決手段】ヘマトコッカス属（Ｈａｅｍａｔｏｃｏｃｃｕｓ）に属する緑藻の抽出物と粗黒糖抽出物とを含有してなることを特徴とする化粧料組成物とする。前記ヘマトコッカス属（Ｈａｅｍａｔｏｃｏｃｃｕｓ）に属する緑藻の抽出物としては、アスタキサンチン及び／又はアスタキサンチンのエステル誘導体が好ましく、前記粗黒糖抽出物としては、メトキシフェニル−Ｏ−Ｄ−グルコースが好ましい。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヘマトコッカス属（Ｈａｅｍａｔｏｃｏｃｃｕｓ）に属する緑藻と粗黒糖抽出物とを含有してなることを特徴とする化粧料組成物。
【請求項２】
ヘマトコッカス属（Ｈａｅｍａｔｏｃｏｃｃｕｓ）に属する緑藻の抽出物と粗黒糖抽出物とを含有してなることを特徴とする化粧料組成物。
【請求項３】
前記ヘマトコッカス属（Ｈａｅｍａｔｏｃｏｃｃｕｓ）に属する緑藻の抽出物が、一般式１（化１）で示されるアスタキサンチン及び／又はアスタキサンチンのエステル誘導体であることを特徴とする請求項２に記載の化粧料組成物。
【化１】
2004331512.tif 000022
（但し、Ｒ１及びＲ２は水素原子又は炭素数１〜２０のアシル基である。）
【請求項４】
前記粗黒糖抽出物が一般式２（化２）で示されるメトキシフェニル−Ｏ−Ｄ−グルコースであることを特徴とする請求項１乃至３のいずれかに記載の化粧料組成物。
【化２】
2004331512.tif 000023
（但し、Ｒ３〜Ｒ７はメトキシ基又は水素原子であり、Ｒ３〜Ｒ７のうちの少なくとも一つはメトキシ基である。）
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は化粧料組成物に関し、その目的は、優れた抗炎症作用、抗酸化作用及びメラニン生成抑制作用などによる美肌効果を有し、シワ、シミ、にきび、皮膚炎などの皮膚に生じる様々なトラブルを未然に防止又は抑制することができる化粧料組成物を提供することにある。
【０００２】
【従来の技術】
脂漏性皮膚疾患の一種であるニキビは、程度の差こそあれ思春期男女の約８０％に発生がみられる。ニキビの発生原因は男性ホルモンの一種であるテストステロンの分泌量の増加による活発な皮脂分泌にあるとされる。そして、皮脂中に存在するアクネ桿菌の作用により炎症が発生し、また黄色ブドウ球菌の作用により化膿が発生して症状は悪化する。
【０００３】
ニキビの予防には、原因となる皮脂や汚れを除去するために入念な洗顔が求められる。また、ニキビ専用の外用剤も市販されており、このような外用剤には、毛孔の狭くなった角質を除去するための角質溶解・剥離剤、或いはアクネ桿菌や黄色ブドウ球菌等に対する殺菌剤等が配合されている。
【０００４】
また、近年、アトピー性皮膚炎を発症する患者の数が急増している。アトピー性皮膚炎は、アレルギー反応の一種であり、顕著な痒感を伴う。
アトピー性皮膚炎の治療には抗ヒスタミン剤の内服、或いは皮膚に対する副腎皮質ホルモン軟膏の塗布等が行われているが、いずれも副作用が伴い、また十分な効果を示さない場合がる。
【０００５】
上記したような様々な皮膚のトラブルの解消又はその症状の緩和には粗黒糖の天然黒色色素成分が有効であることが知られている。
粗黒糖の天然黒色色素成分を含有する化粧料としては、例えば、ショ糖から抽出した黒色色素成分と化粧料用基剤とからなる化粧料（特許文献１参照）や、ショ糖の黒色色素成分を含有する皮膚炎症用外用剤（特許文献２参照）などが知られている。
【０００６】
【特許文献１】
特公昭５９−４８８０９号公報
【特許文献２】
特公平４−６９６１３号公報
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】
しかしながら、上記した粗黒糖の色素成分を含有する化粧料には、以下のような問題が存在した。即ち、上記した粗黒糖の色素成分は、抗炎症抑制作用などを有するものであるが、その効果は依然として満足することができるものではなかった。
【０００８】
本発明者らは上記課題を解決すべく鋭意研究を行った結果、粗黒糖抽出物にヘマトコッカス属に属する緑藻を加えることにより、それぞれ単独で用いた場合と比較して、抗炎症作用、抗酸化作用及びメラニン生成抑制作用などが大幅に上昇することを見出し、本発明の完成に至った。
【０００９】
【課題を解決するための手段】
請求項１に係る発明は、ヘマトコッカス属（Ｈａｅｍａｔｏｃｏｃｃｕｓ）に属する緑藻と粗黒糖抽出物とを含有してなることを特徴とする化粧料組成物に関する。
請求項２に係る発明は、ヘマトコッカス属（Ｈａｅｍａｔｏｃｏｃｃｕｓ）に属する緑藻の抽出物と粗黒糖抽出物とを含有してなることを特徴とする化粧料組成物に関する。
請求項３に係る発明は、前記ヘマトコッカス属（Ｈａｅｍａｔｏｃｏｃｃｕｓ）に属する緑藻の抽出物が、一般式３（化３）で示されるアスタキサンチン及び／又はアスタキサンチンのエステル誘導体であることを特徴とする請求項２に記載の化粧料組成物に関する。
【化３】
2004331512.tif 000002
（但し、Ｒ１及びＲ２は水素原子又は炭素数１〜２０のアシル基である。）
請求項４に係る発明は、前記粗黒糖抽出物が一般式４（化４）で示されるメトキシフェニル−Ｏ−Ｄ−グルコースであることを特徴とする請求項１乃至３のいずれかに記載の化粧料組成物に関する。
【化４】
2004331512.tif 000003
（但し、Ｒ３〜Ｒ７はメトキシ基又は水素原子であり、Ｒ３〜Ｒ７のうちの少なくとも一つはメトキシ基である。）
【００１０】
【発明の実施の形態】
以下、本発明に係る化粧料組成物について詳述する。本発明に係る化粧料組成物は、ヘマトコッカス属に属する緑藻と粗黒糖抽出物とを必須成分として含有する。
本発明に係る化粧料組成物は、ヘマトコッカス属に属する緑藻と粗黒糖抽出物とを必須成分として含有することにより、優れた抗炎症作用、抗酸化作用及びメラニン生成抑制作用等を示すことができる。従って、本発明に係る化粧料組成物は、シワ、シミ、にきび、皮膚炎などの皮膚に生じる様々なトラブルを未然に防止又は抑制することができる。
【００１１】
本発明に係る化粧料組成物の第一の必須成分は、ヘマトコッカス属（Ｈａｅｍａｔｏｃｏｃｃｕｓ）に属する緑藻である。ヘマトコッカス属に属する緑藻は、クラミドモナス目（Ｃｈｌａｍｙｄｏｍｏｎａｄａｌｅｓ）に属する緑藻である。２本または４本の等長鞭毛をもち、葉緑体はクロロフィルやβ−カロチンを含む。
ヘマトコッカス属に属する緑藻としては、ヘマトコッカス・プルビアリス（Ｈａｅｍａｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｌｕｖｉａｌｉｓ）を例示することができる。
【００１２】
本発明では、ヘマトコッカス属に属する緑藻を含有すればよく、好ましくは、全藻の乾燥粉砕物が用いられる。
さらに、本発明では、ヘマトコッカス属に属する緑藻の抽出物を用いることもできる。ヘマトコッカス属に属する緑藻の抽出物（以下、ヘマトコッカス藻抽出物という場合がある。）を得る方法は特に限定されず、例えば、以下のような方法を例示することができる。
【００１３】
まず、ヘマトコッカス属に属する緑藻の乾燥粉砕物に、抽出溶媒を加えて、所要温度で所要時間抽出する。用いられる抽出溶媒は特に限定されず、水、メタノール、エタノール、イソプロパノール、イソブタノール、ｎ−ヘキサノール、メチルアミルアルコール、２−エチルブタノール、ｎ−オクタノール等のアルコール類、エチレングリコール、エチレングリコールモノメチルエーテル、エチレングリコールモノエチルエーテル、プロピレンブリコール、プロピレングリコールモノメチルエーテル、プロピレングリコールモノエチルエーテル、トリエチレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ヘキシレングリコール等の多価アルコール又はその誘導体、アセトン、メチルアセトン、メチルエチルケトン、メチルイソブチルケトン、メチル−ｎ−プロピルケトン等のケトン類、酢酸エチル、酢酸イソプロピル等エステル類、エチルエーテル、イソプロピルエーテル、ｎ−ブチルエーテル等のエーテル類、石油エーテル、ｎ−ヘキサン、ｎ−ペンタン、ｎ−ブタン、ｎ−オクタン、シクロヘキサン等の脂肪族炭化水素類などを例示することができる。
特に本発明では、水、エタノール、アセトン、ヘキサンのうちの二種以上の混合溶媒が好ましい。
【００１４】
抽出温度は特に限定されないが、室温から溶媒の沸点程度の温度域を例示することができ、室温程度の温度帯が好ましい。
また抽出時間も特に限定されるものではなく、抽出温度と抽出方法の態様によって適宜任意に設定すればよい。例えば、室温程度の温度域で攪拌抽出する場合、抽出時間は１時間から２４時間程度とされ、室温程度の温度域で浸漬抽出する場合、抽出時間は５時間から３０日程度とされる。
【００１５】
次に、濾過などによって抽出液を回収した後に、抽出溶媒を除去することによって、ヘマトコッカス藻抽出物を得ることができる。
抽出溶媒を除去する方法は、特に限定されず、例えば凍結乾燥、噴霧乾燥、減圧留去等を例示することができる。
【００１６】
特に本発明では、ヘマトコッカス藻抽出物として、一般式５（化５）に示されるアスタキサンチン及び／又はアスタキサンチンのエステル誘導体が含有されている抽出物を用いることが好ましい。
アスタキサンチンは、キサントフィル類に属するカロチノイドである。サケ、イクラ、スジコ、マス、エビ、カニなどの魚介類に含まれている赤色色素である。アスタキサンチンは抗酸化作用、活性酸素除去作用、抗炎症作用、色素沈着防止作用、メラニン生成抑制作用などを有しており、特にアスタキサンチンの抗酸化作用は、ビタミンＥの約１００〜１０００倍、β−カロチンの約３〜４０倍といわれている。
【化５】
2004331512.tif 000004
（但し、Ｒ１及びＲ２は水素原子又は炭素数２〜２０のアシル基である。）
【００１７】
ヘマトコッカス属に属する緑藻の含有量は特に限定されないが、化粧料組成物全量中、０．００１〜０．５重量％、より好ましくは０．０１〜０．１重量％とされる。０．００１重量％未満の含有量では、ヘマトコッカス属に属する緑藻の含有による効果が得られない場合がある。０．５重量％を超えて含有しても、それ以上の効果が得られない場合がある。
【００１８】
本発明に係る化粧料組成物の第二の必須成分は粗黒糖抽出物である。本発明では粗黒糖抽出物として、粗黒糖の色素成分を使用することが好ましい。
粗黒糖抽出物を調製する方法は特に限定されず、以下のような方法を例示することができる。
まず、原料である粗黒糖（ショ糖の未精製品（黒砂糖））を適当量の水に溶解して、これを吸着剤に接触させて色素成分を吸着させる。吸着剤を水洗して糖分を除去した後に、吸着した色素成分を溶離させることによって、粗黒糖の色素成分を抽出することができる。
【００１９】
粗黒糖抽出物を抽出する際に用いられる吸着剤は特に限定されず、非極性のポリスチレン系吸着剤を例示することができ、具体的には、アンバーライトＸＡＤ−１、アンバーライトＸＡＤ−２（いずれも商品名、ロームアンドハース社製）、セルバクロムＸＡＤ−２（商品名、セルバ社製）、ダイヤイオンＨＰ２０、ダイヤイオンＨＰ２１、セパビーズＳＰ８２５、セパビーズＳＰ８５０、セパビーズＳＰ７０、セパビーズＳＰ７００（いずれも商品名、三菱化学社製）等を例示することができる。
吸着剤の使用量は特に限定されず、色素成分の３０〜３００重量倍、より好ましくは５０〜２００重量倍程度とされる。
【００２０】
色素成分を溶離させる際に使用される溶媒としては、メタノール、エタノールなどの低級アルコール又は含水低級アルコールが好ましく用いられる。色素成分を溶離するには、まず、２０〜３０％程度の低濃度の低級アルコールで溶離を行い、溶離液の着色が殆ど認められなくなってから、９５〜９９％程度の高濃度の低級アルコールで溶離させることが好ましい。
回収した溶離液から溶媒を除去することで、粗黒糖抽出物を得ることができる。
【００２１】
色素成分を調製する別の方法について例示すると、まず粗黒糖を抽出液としてメタノール、エタノール等の低級アルコールに懸濁させて、不溶の糖分を濾過等によって除去する。次いで、抽出溶媒を除去することによって、色素成分を回収することができる。
【００２２】
特に本発明では、粗黒糖抽出物として、一般式６（化６）で示されるメトキシフェニル−Ｏ−Ｄ−グルコースを用いることが好ましい。
【化６】
2004331512.tif 000005
（但し、式中、Ｒ３〜Ｒ７はメトキシ基又は水素原子であり、Ｒ３〜Ｒ７のうちの少なくとも一つはメトキシ基である。）
【００２３】
メトキシフェニル−Ｏ−Ｄ−グルコースとしては、以下のようなメトキシフェニル−Ｏ−Ｄ−グルコースを例示することができる。
【００２４】
【化７】
2004331512.tif 000006
２，５−ジメトキシフェニル−Ｏ−Ｄ−グルコース
【００２５】
【化８】
2004331512.tif 000007
３，４−ジメトキシフェニル−Ｏ−Ｄ−グルコース
【００２６】
【化９】
2004331512.tif 000008
２，４，５−トリメトキシフェニル−Ｏ−Ｄ−グルコース
【００２７】
本発明において、粗黒糖抽出物として、上記したメトキシフェニル−Ｏ−Ｄ−グルコースの一種又は二種以上を含有することが好ましいが、２，５−ジメトキシフェニル−Ｏ−Ｄ−グルコースと３，４−ジメトキシフェニル−Ｏ−Ｄ−グルコースを含有することがより好ましく、三種類のメトキシフェニル−Ｏ−Ｄ−グルコースを含有することがさらに好ましい。
この理由は、二種又は三種のメトキシフェニル−Ｏ−Ｄ−グルコースを含有することにより、より高い抗炎症作用、抗酸化作用及びメラニン生成抑制作用を有するからである。
【００２８】
粗黒糖抽出物の含有量は特に限定されないが、化粧料組成物全量中、０．０００１〜０．５重量％、より好ましくは０．００１〜０．０１重量％とされる。０．０００１重量％未満の含有量では、粗黒糖抽出物の配合による効果が得られない場合がある。０．５重量％を超えて含有しても、それ以上の効果が得られない場合がある。
【００２９】
さらに、本発明に係る化粧料組成物では前記必須成分以外に、この発明の効果を損なわない範囲内で、ビタミン類、ヒアルロン酸ナトリウム等の保湿剤、増粘剤、界面活性剤、湿潤剤、香料、色素、防腐剤、紫外線吸収剤、酸化防止剤、アミノ酸類、各種動植物抽出物、胎盤抽出物などを適宜任意に組み合わせて配合することもできる。
【００３０】
本発明に係る化粧料組成物の剤型は特に限定されず、皮膚用化粧料や頭髪用化粧料などを例示することができる。具体的には、ローション、乳液、クレンジングクリーム、マッサージクリーム、エモリエントクリーム等のクリーム類、パック類等の基礎化粧品、或いはファンデーション、口紅、頬紅、アイシャドー、おしろい等のメークアップ化粧品等を例示することができる。また石鹸、洗顔クリーム、ボディローション、ボディーシャンプー、シャンプー、入浴剤等を例示することもできる。
【００３１】
【実施例】
以下、本発明を実施例に基づき説明するが、本発明はこれらの実施例に何ら限定されるものではない。
（試料の調製）
ポリスチレン系樹脂（アンバーライトＸＡＤ，２５００ｇ）を水１リットルに分散させて充填した内径８ｃｍのカラムに、黒砂糖５ｋｇを水２５リットルに溶解した溶液を注入して、２０ｍＬ／分の速度で流下させ黒砂糖の天然黒色成分を吸着させた。
次に、水を流下させ甘味の全くなくなるまで水洗した後、２０％メタノールを１０ｍＬ／分の速度で流下させ吸着剤から色素を溶離させた。流下液に着色がなくなるまで流下を続け展開液を混合し、６０℃以下で減圧蒸発乾固して、甘味の全くない褐色残留物約２０ｇを得た。
これを２リットルの純エタノールに加熱して溶解し、冷却後、析出した沈殿物を濾別し、濾液を６０℃以下で減圧濃縮し、その残留物を６０℃以下で乾燥することにより甘味の全くない黒砂糖の天然黒色成分からなる褐色粉末を得た。これを試料１とした。
得られた褐色粉末をさらにシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製、分離して２，５−ジメトキシフェニル−４’−Ｏ−Ｄ−グルコース、２，４，５−トリメトキシフェニル−４’−Ｏ−Ｄ−グルコース、３，４−ジメトキシフェニル−４’−Ｏ−Ｄ−グルコースを得た。２，５−ジメトキシフェニル−４’−Ｏ−Ｄ−グルコースを試料２とし、２，４，５−トリメトキシフェニル−４’−Ｏ−Ｄ−グルコースを試料３とし、３，４−ジメトキシフェニル−４’−Ｏ−Ｄ−グルコースを試料４とした。
また市販のヘマトコッカス藻抽出物を試料５とした。
【００３２】
試料１乃至５を表１に記載の割合で混合することにより、実施例１乃至７の試料を調製した。また試料１乃至５をそれぞれ比較例１乃至５の試料とした。
【表１】
2004331512.tif 000009
【００３３】
（試験例１；メラニン生成抑制試験）
以下に記載の方法に従って、メラニン生成抑制試験を行った。
試験方法は、まず、Ｂ１６メラノーマ細胞を２４時間培養し、この培養液を、各試料を添加した培養液（試料濃度；０．０２５％となるように調整）に交換した。尚、ブランクとしては、精製水を添加した。
３日間培養した後、この細胞をトリプシンで処理し、１０％ＤＭＳＯを含む１Ｎ−ＮａＯＨ溶液で加熱溶解して４２０ｎｍにおける吸光度を測定した。同時にＭＴＴ還元法にて細胞数を測定し、ブランク群と試料添加群の生存細胞数に差がないことを確認した上で、ブランク細胞のメラニン生成量に対する抑制率（％）を数１により求めた。結果を表２に記載する。
【００３４】
【数１】
2004331512.tif 000010
【００３５】
【表２】
2004331512.tif 000011
【００３６】
表２に示される通り、粗黒糖抽出物とヘマトコッカス藻抽出物を含有する各実施例の試料はいずれも、粗黒糖抽出物又はヘマトコッカス藻抽出物のみを含有する各比較例の試料に比べて、高いメラニン生成抑制能を有することが確認された。
【００３７】
（試験例２；抗炎症作用確認試験）
以下の試験方法によって、抗炎症作用確認試験を行った。尚、この試験は、血小板中に存在するシクロオキシゲナーゼ及びリポキシゲナーゼの作用を指標とした試験方法である。即ち、シクロオキシゲナーゼはアラキドン酸をＴＸＢ２及びＨＨＴに代謝し、リポキシゲナーゼはアラキドン酸を１２−ＨＥＴＥに代謝する。皮膚炎症が起きると、シクロオキシゲナーゼによるアラキドン酸の代謝産物であるＴＸＢ２及びＨＨＴの産生量が増加することが知られており、ＴＸＢ２及びＨＨＴの生成量によって、抗炎症作用の有無及びその程度を評価することができる。
【００３８】
試験方法は、Ｗｉｓｔｅｒ−Ｋｉｎｇ系ラット（２５０〜３５０ｇ）から血液を採取し、抗凝固剤としてＥＤＴＡ（５．８ｍＭ）を添加した。この血液を２２０ｇで１０分間遠心分離し、その上澄みをさらに１５００ｇで１０分間遠心分離した。沈殿した血小板を２ｍＭのＥＧＴＡを含むＨＥＰＥＳ−生食緩衝液（ＨＥＰＥＳ−２５ｍＭ，ＮａＣｌ−１３５ｍＭ，ｐＨ７．４）で二回洗浄した。この洗浄血小板液に対して実施例１乃至７及び比較例１乃至５の各試料を表３乃至８に記載の濃度（μｇ／ｍｌ）で加えたものを３７℃、５分間プレインキュベートした。その後、１−Ｃ１４−アラキドン酸を加えて５分間インキュベートした。ギ酸で反応を止めて酢酸エチルによりアラキドン酸代謝物を抽出した。抽出液を窒素ガスで乾固した。これに少量の酢酸エチルを加えてシリカゲル薄層クロマトグラフィーで分離して定量した。（展開液；クロロホルム：メタノール：酢酸：水＝９０：８：１：０．８）
放射活性物質はオートラジオグラフィーで検出しそのスポットを切り取り、放射活性を液体シンチレーションカウンターで定量した。実施例１乃至７及び比較例１乃至５の試料を添加しない場合を対照例として、対照例に対する各実施例及び比較例の試料を添加した場合の生成物の割合（％）を算出した。結果を表３乃至８に記載する。
【００３９】
【表３】
2004331512.tif 000012
【００４０】
【表４】
2004331512.tif 000013
【００４１】
【表５】
2004331512.tif 000014
【００４２】
【表６】
2004331512.tif 000015
【００４３】
【表７】
2004331512.tif 000016
【００４４】
【表８】
2004331512.tif 000017
【００４５】
表３乃至８に示される通り、各実施例の試料は、いずれもＴＸＢ２及びＨＨＴの生成を抑制しており、粗黒糖抽出物とヘマトコッカス藻抽出物を含有する各実施例の試料はいずれも、粗黒糖抽出物又はヘマトコッカス藻抽出物のみを含有する各比較例の試料に比べて、高い抗炎症作用を有することが確認された。
【００４６】
（試験例３；過酸化脂質生成抑制試験）
上記調製した実施例１〜７及び比較例１〜５の試料を用いて、以下の試験方法により過酸化脂質生成抑制試験を行った。以下の評価方法は、抗腫瘍薬の一種であるアドリアマイシンの副作用を利用した評価方法であり、具体的にはアドリアマイシンが心臓における脂質代謝を阻害して過酸化脂質を蓄積させるという副作用を利用した評価方法である。
まず実施例１〜７及び比較例１〜５の各試料を表９又は表１０に示す濃度となるように０．９％生理食塩水又は１％ツゥイーン８０含有０．９％生理食塩水に懸濁させたそれぞれの各試料溶液をＣＯＦ系雄性マウス（５週齢、体重２０〜２５ｇ）５匹づつに、体重１０ｇ当たり０．１０ｍｌの割合で５日間連続、毎日正午に腹腔内投与した。各試料溶液投与２日目から、アドリアマイシン（協和醗酵工業社製）を体重１０ｇ当たり０．１５ｍｌの割合で腹腔内投与した。
尚、アドリアマイシンは各試料溶液投与３時間後に投与した。また、対照例のマウスには各試料溶液の代わりに０．９％生理食塩水を投与した。過酸化脂質の測定は、各マウスを６日目に頸椎脱臼により屠殺した後に速やかに心臓及び肝臓を摘出し、湿重量を測定した。次に氷冷下ポッター型ホモジナイザーにより、０．９％生理食塩水を用いて２％ホモジネート液を調製した。この２％ホモジネート液０．２ｍｌに３％ラウリル硫酸ナトリウム水溶液０．５ｍｌを加え、約３０秒間振盪混合した。これに、酢酸緩衝液（ｐＨ３．６）１．５ｍｌ、０．８％チオバルビツウル酸溶液１．５ｍｌを加え、蒸留水を用いて全量を４．０ｍｌとした。約３０秒間よく振盪して混合した後、オイルバスを用いて９５℃、６０分間加熱し、５分間流水により冷却した。次に、０．２Ｎ塩酸１．０ｍｌ、ｎ−ブタノール：ピリジン（１５：１）混合溶液５．０ｍｌを加え、激しく振盪した後、１５分間、３０００ｒｐｍで遠心分離を行った。上層のｎ−ブタノール層を分取した後、蛍光分光光度計（Ｅｘ５１５ｎｍ，Ｅｍ５５３ｎｍ）を用いて蛍光度を測定した。前もってマロンアルデヒド標準液を用いて作成した検量線を用いて、過酸化脂質含有量を求め、次式２（数２）に基づいて過酸化脂質生成抑制率を算出した。結果を表９及び１０に記載する。
【数２】
2004331512.tif 000018
Ａ：何も投与しないグループの過酸化脂質濃度
Ｂ：対照例の過酸化脂質濃度
Ｃ：アドリアマイシン及び実施例の試料溶液を投与したグループの過酸化脂質濃度
【００４７】
【表９】
2004331512.tif 000019
【００４８】
【表１０】
2004331512.tif 000020
【００４９】
表９及び１０に示されるとおり、実施例１〜７の試料を投与したマウスは比較例１〜５の各試料を投与したマウスと比較して、大幅に過酸化脂質の生成量が低下しており、粗黒糖抽出物とヘマトコッカス藻抽出物を含有する各実施例の試料はいずれも、粗黒糖抽出物又はヘマトコッカス藻抽出物のみを含有する各比較例の試料に比べて、高い過酸化脂質の生成を抑制する作用を有することが分かる。
【００５０】
以下、本発明に係る化粧料組成物の処方例を示す。
（処方例１；乳液）
自己乳化型グリセロールモノステアレート        １．１１
ポリオキシエチレンセチールエーテル            １．８９
ＭＣステアリン酸                              ２．００
セタノール                                    １．００
イソプロピルミリステイト                      ２．００
パラオキシ安息香酸メチルエステル              ０．２０
粗黒砂糖の色素成分                            ０．０１
アスタキサンチン                              ０．０１
香料                                          適  量
防腐剤                                        適  量
精製水                                        残  部
合計                                      １００．０重量％
【００５１】
（処方例２；栄養クリーム）
スクワラン                                  ４．００
セチルイソオクタノレート                    ２．５０
セチルアルコール                            １．００
ステアリン酸                                １．００
ソルビタンモノオレート                      ０．５０
ポリオキシエチレンステアリン酸エステル      ２．５０
プロピレングリコール                        ８．００
ソルビノール                                ２．００
水酸化カリウム                              ０．１０
アスタキサンチン                            ０．０１
粗黒砂糖の色素成分                          ０．０１
香料                                        適  量
防腐剤                                      適  量
精製水                                      残  部
合計                                    １００．０重量％
【００５２】
（処方例３；乳化性パック）
流動パラフィン                              ５．００
ソルビタンモノオレエート                    １．００
ポリオキシエチレンモノオレーエート          １．５０
セタノール                                  １．００
エタノール                                  １．００
ポリビニルアルコール                      １４．００
ピロリドンカルボン酸ナトリウム塩            ５．００
アスタキサンチン                            ０．０１
粗黒砂糖の色素成分                          ０．０１
香料                                        適  量
防腐剤                                      適  量
精製水                                      残  部
合計                                    １００．０重量％
【００５３】
（処方例４；ボディシャンプー）
2004331512.tif 000021
【００５４】
（処方例５；薬用クレンジングクリーム）
軽質流動パラフィン                                    ３５．００
ミツロウ                                                ８．００
パルミチン酸セチル                                      ３．００
ラノリン                                                １．００
セスキオレイン酸ソルビタン                              ２．００
ポリオキシエチレン（２０）ソルビットミツロウ            ４．５０
７０％ソルビトール                                      ４．００
アスタキサンチン                                        ０．０１
２，５−ジメトキシフェニル−４’−Ｏ−Ｄ−グルコース      ０．００８
香料                                                    適  量
防腐剤・酸化防止剤                                      適  量
精製水                                                  残  部
合計                                                １００．００重量％
【００５５】
【発明の効果】
以上詳述した如く、本発明に係る化粧料組成物は、必須成分としてヘマトコッカス属に属する緑藻と粗黒糖抽出物とを含有するから、優れた抗炎症作用、抗酸化作用及びメラニン生成抑制作用などによる美肌効果を有し、シワ、シミ、にきび、皮膚炎などの皮膚に生じる様々なトラブルを未然に防止又は抑制することができる。