(57)【要約】【課題】  有用性を有するペプチド、特に、植物生理活性機能等の有用性を有するペプチドのアミノ酸配列の特定を行うとともに、このような有用性を有するペプチドの抽出・合成等を行う。また、生理活性ペプチドを含有する植物栽培用の肥料を提供する。【解決手段】  ＭＧＱで表されるアミノ酸配列からなるペプチドを、発芽ダイズ抽出物より分離し、逆相高速液体クロマトグラフィー（逆相HPLC）を用いて精製する。また、ＭＧＱ中に含まれるメチオニンを酸化することにより、Ｍ(Ｏ)ＧＱで表されるアミノ酸配列からなるペプチドを得る。拡散法及び均一濃度法により、これらのペプチドの花粉管伸長促進活性のアッセイを行うとともに、コマツナ根伸長促進活性のアッセイを行う。Ｍ（Ｏ）ＧＱで表されるアミノ酸配列からなるペプチドを、土壌中に添加あるいは葉面に散布することにより植物を栽培する。【選択図】  図１
2004331656.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＭＧＱで表されるアミノ酸配列からなるペプチド。
【請求項２】
Ｍ(Ｏ)ＧＱで表されるアミノ酸配列からなるペプチド。
【請求項３】
動物あるいは植物より抽出された請求項１または請求項２に記載のペプチド。
【請求項４】
ペプチド合成機により合成された請求項１または請求項２に記載のペプチド。
【請求項５】
植物成長促進成分として機能する請求項１から請求項４のうちいずれか１項に記載のペプチド。
【請求項６】
請求項１から請求項５のうちいずれか１項に記載のペプチドを含有する植物栽培用の肥料。
【請求項７】
請求項１から請求項５のうちいずれか１項に記載のペプチドを土壌中に添加することを特徴とする植物の栽培方法。
【請求項８】
請求項１から請求項５のうちいずれか１項に記載のペプチドを葉に散布することを特徴とする植物の栽培方法。
【請求項９】
請求項７または請求項８に記載の植物の栽培方法によって栽培された植物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、有用性を有する所定のアミノ酸配列からなるペプチドの特定・抽出・合成等に関し、特に、植物等の成長促進成分として機能し得る生理活性ペプチドに関する。また、生理活性ペプチドを含有する植物栽培用の肥料に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来、植物における生体機能の調節は、シグナル因子である植物ホルモン（例えばオーキシン等）に基づいて説明されている（例えば[非特許文献１]を参照）。
【０００３】
【非特許文献１】HansMohr, Peter Schopfer 著，「植物生理学」，シュプリンガー・フェアラーク東京株式会社，１９９８年１２月，ｐ．３７４−３７８
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
ところで、近年、植物ホルモン以外のシグナル因子の存在が明らかになっており、その一つとして、例えば生理活性ペプチド等が挙げられている。しかしながら、このような生理活性ペプチドの構造等は未だ十分に究明されておらず、有用性を有するペプチド構造のさらなる探求・究明が望まれていた。
【０００５】
本発明はこのような問題に鑑みてなされたものであって、その目的とするところは、有用性を有するペプチド、特に、植物生理活性機能等の有用性を有するペプチドのアミノ酸配列の特定を行うとともに、このような有用性を有するペプチドの抽出・合成等を行うことにある。また、生理活性ペプチドを含有する植物栽培用の肥料を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
上記課題を解決するため、特許請求範囲の各請求項に記載した発明が構成される。
請求項１にかかる発明は、ＭＧＱで表されるアミノ酸配列からなるペプチドである。ここで、ＭＧＱの各記号の意味は以下の通りである。
Ｍ：メチオニン（Ｍｅｔ）
Ｇ：グリシン（Ｇｌｙ）
Ｑ：グルタミン（Ｇｌｎ）
このようなアミノ酸配列からなるペプチドによれば、植物生理活性機能等の有用な機能を発現させることができる。このペプチドは様々な技術分野への適用可能性を有しており、例えば、植物肥料、食品、製薬等の様々な分野への適用可能性を有する。
【０００７】
請求項２にかかる発明は、Ｍ(Ｏ)ＧＱで表されるアミノ酸配列からなるペプチドである。一文字法による各記号の意味は上述の通りである。Ｍ(Ｏ)とあるのは、メチオニンの酸化物であることを意味しており、例えば過酸化水素等の酸化剤によって酸化することができる。
このようなアミノ酸配列からなるペプチドによれば、植物生理活性機能等の有用な機能を発現させることができる。このペプチドは様々な技術分野への適用可能性を有しており、例えば、植物肥料、動物飼料、食品、製薬等の様々な分野への適用可能性を有する。
【０００８】
請求項３にかかる発明は、動物あるいは植物より抽出された請求項１または請求項２に記載のペプチドである。動物より抽出されたペプチドとしては、例えば魚肉等の動物由来のタンパク質より抽出されたペプチドがある。植物より抽出されたペプチドとしては、例えば発芽ダイズより抽出されたペプチドがある。
【０００９】
請求項４にかかる発明は、ペプチド合成機により合成された請求項１または請求項２に記載のペプチドである。このような人工的な製法を用いることにより、有用なペプチドを量産することが可能になる。
【００１０】
請求項５にかかる発明は、植物成長促進成分として機能する請求項１から請求項４のうちいずれか１項に記載のペプチドである。このような機能を有するペプチドは、例えば植物肥料の主要な成分となりうるので極めて有用性が大である。
【００１１】
請求項６にかかる発明は、請求項１から請求項５のうちいずれか１項に記載のペプチドを含有する植物栽培用の肥料である。
請求項７にかかる発明は、請求項１から請求項５のうちいずれか１項に記載のペプチドを土壌中に添加することを特徴とする植物の栽培方法である。
請求項８にかかる発明は、請求項１から請求項５のうちいずれか１項に記載のペプチドを葉に散布することを特徴とする植物の栽培方法である。
請求項９にかかる発明は、請求項７または請求項８に記載の植物の栽培方法によって栽培された植物である。
【発明の効果】
【００１２】
本発明によれば、有用性を有するペプチド、特に、植物生理活性機能等の有用性を有するペプチドのアミノ酸配列の特定を行うとともに、このような有用性を有するペプチドの抽出・合成等を行うことができる。また、このような生理活性を示すペプチドを含有する植物栽培用の肥料を提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１３】
以下、本発明の実施の形態を図面を参照しながら説明する。
本実施の形態では、ＭＧＱで表されるアミノ酸配列からなるペプチド（以下、単に「ＭＧＱ」と称する場合がある）を、発芽ダイズから抽出・分離する例について説明する。また、発芽ダイズから抽出・分離した上記のペプチドを、チャ花粉管伸長促進活性及びコマツナ根伸長促進活性によりアッセイする例について説明する。
【００１４】
まず、本実施の形態における各種の実験手法、すなわち、「発芽ダイズからの抽出物の分離方法」、「チャ花粉管伸長促進活性のアッセイ法」、「活性画分の精製」、「構造解析及びペプチド合成」、「コマツナ根伸長促進活性のアッセイ法」について説明する。
【００１５】
〔発芽ダイズからの抽出物の分離方法〕
ダイズは、下記の［表１］に示す組成の培地を用いて２５℃、暗所条件下にて、１〜４日間かけて発芽させた。発芽したダイズから、以下の（ａ）〜（ｅ）に示す方法で抽出物を分離した。
（ａ）：発芽ダイズを２０mlの純水を用いて破砕・抽出する。
（ｂ）：（ａ）の抽出液を１０,０００rpmにて１０分間遠心分離する。
（ｃ）：（ｂ）の上澄み液を１５分間沸騰させる。
（ｄ）：（ｃ）の液を１０,０００rpmにて１０分間遠心分離する。
（ｅ）：（ｄ）の上澄み液を得る。
【００１６】
【表１】
2004331656.tif 000003
【００１７】
〔チャ花粉管伸長促進活性のアッセイ法〕
花粉管伸長促進活性はチャ花粉を用いて、拡散法と均一濃度法の２つの方法で検討した。両方法とも以下の［表２］に示す組成の培地を用いた。
【００１８】
【表２】
2004331656.tif 000004
【００１９】
（拡散法）
図１は、拡散法の概要を説明するための説明図である。図１に示すように、拡散法は、円形のシャーレに２０ml培地を流し込み、固化させ、シャーレ中央にチャ花粉を直線状に塗りつける。その線を中心とした対称の位置にウエルを２つ空け、一方に１００mMMES buffer（pH5.5）（２-（Ｎ-モルホリノ）エタンスルホン酸緩衝溶液）に溶かしたサンプルを、他方にbufferのみのコントロールを５０μlづつ注入する。２５℃で２４時間培養後、花粉管は２方向に伸長する。この伸長距離ａとｂを比較することによって伸長促進活性の有無を判定した。なお、本実施の形態において、活性の程度は次の計算式で算出した。
花粉管伸長促進活性（activity）＝
（サンプルの伸長距離(ｂ)/コントロールの伸長距離（ａ））×１００  ［％］
【００２０】
（均一濃度法）
添加したサンプルが、実際どの濃度で作用しているかを調べるためのアッセイ法が均一濃度法である。図２は、均一濃度法の概要を説明するための説明図である。図２に示すように、サンプルを直接添加した培地２０mlを円形のシャーレに流し込み固化させる。その上にチャ花粉を直線状に４本塗りつけ、２５ ℃で２４時間培養する。培養後、花粉管の伸長距離を計測し、コントロール培地上で培養した花粉管の伸長距離と比較することで活性の有無を判断した。
【００２１】
〔活性画分の精製〕
発芽ダイズ抽出物から活性物質を、逆相高速液体クロマトグラフィー（逆相HPLC）で２段階にわけて精製する。1段階目はODSカラム（Cosmosil 5C18-AR-II, 20×250 mm,Nacalai Tesque Inc.）を用いたHPLC（M600型ポンプ、日本ウォーターズ）、２段階目はPhAカラム（Cosmosil 5PE-MS,4.6×250 nm, Nacalai Tesque Inc.）を用いたHPLC（M510型ポンプ、日本ウォーターズ）により活性物質を精製した。溶媒には、０．１％TFAin 超純水、０．１％TFA in アセトニトリルを用い、Gradientは１％/minで直線的に行った。また、溶出はM600型ポンプで１０ml/min、M510型ポンプでは１ml/minで行った。
【００２２】
〔構造解析及びペプチド合成〕
構造解析は、プロテインシーケンサー（Applied Biosystems Inc.）を用いる。
ペプチド合成は、ペプチド合成機（PS-3, Aloka）を用いたF-moc法で行い、TFAを含む脱保護液で脱保護した後、ジエチルエーテルで沈殿させて粗ペプチドとする。その後、ODSカラム（Cosmosil5C18-AR-II, 20×250 mm, Nacalai Tesque Inc.）を用いたHPLC（M600型ポンプ、日本ウォーターズ）によって精製する。なお溶媒には、０．１％TFAin 超純水、０．１％TFA in アセトニトリルを用いた。また、Gradientは１％/minで直線的に行い、溶出は１０ml/minで行った。
【００２３】
〔コマツナ根伸長促進活性のアッセイ法〕
下記の［表３］に示す培地にてコマツナ根伸長促進活性のアッセイを行う。図３は、コマツナ根伸長促進活性のアッセイ法の概要を説明するための説明図である。図３に示すように、培地に直接サンプルを添加後、長方形のシャーレに４０ml流し込み、固化させる。発芽したコマツナの種子を培地上に植え、人工気象機（C型式、NS-280 FHV、高山製作所）内で１６〜１８時間静置したあと、培地表面が地面に対して垂直になるようにシャーレを立てかけ、４日間培養した。なお、温度は２５℃、明（10,000lux）/ 暗サイクルは8 h/16 hとした。培養後、根の伸長距離をノギスで計測し、コントロール培地上で生育した根の伸長距離と比較することによって活性の有無を判断した。
【００２４】
【表３】
2004331656.tif 000005
【００２５】
次に、上述の実験方法により得られた発芽ダイズ抽出物からの植物作用性物質の探索及び構造決定について説明する。
【００２６】
〔発芽ダイズ抽出物の花粉管伸長促進活性〕
発芽したダイズの抽出物に花粉管伸長促進活性があるかどうか、上述で説明した拡散法を用いて検討した。図４は、１〜４日目の発芽ダイズ抽出物の花粉管伸長促進作用を拡散法にて検討した結果を表したグラフである。図４に示すように、１〜４日間かけて発芽させたダイズの抽出物には、全ての日数において花粉管伸長促進活性が顕著に見られることが判明した。このことから、発芽ダイズ中には花粉管伸長促進活性を有する成分が含まれていることが確認された。
【００２７】
〔活性本体の単離、構造決定〕
そこで、４日目の発芽ダイズ抽出物に含まれる活性物質の単離を試みた。それぞれのフラクションの花粉管伸長促進活性は、拡散法を用いて判定した。図５は、発芽４日目のダイズ抽出物からの花粉管伸長促進物質を、HPLCにて精製した際の結果を表したグラフである。図５の上段にはODSカラムにて精製した際の結果を示し、下段にはPhAカラムにて精製した際の結果を示している。ODSカラムを用いてHPLCで分画した結果、fraction13に最も強い活性が見られた。そこで、fraction 13をさらにPhA カラムを用いたHPLCによって精製した。次にプロテインシーケンサーで、精製された活性フラクション中のペプチド構造を決定したところ、ＭＧＱで表されるアミノ酸配列を有していることが判明した。
【００２８】
次に、発芽ダイズ由来生理活性ペプチドの花粉管伸長に及ぼす効果について説明する。
【００２９】
〔ＭＧＱの花粉管伸長に及ぼす効果〕
ペプチド合成機にて化学合成したＭＧＱの花粉管伸長促進活性を、拡散法及び均一濃度法の両方法で検討した。図６は、ＭＧＱの濃度を変化させたときの花粉管伸長促進活性を示すグラフである。図６の左側には拡散法による結果を示し、右側には均一濃度法による結果を示している。
図６に示すように、拡散法では１０−４ MのＭＧＱ溶液をウエルに注入した際に、花粉管の伸長をコントロールに対して２８％促進し、活性は最大となった。一方、均一濃度法では、ＭＧＱは１０−６Mでその伸長を２３％促進し、最大活性を示した。この結果より、拡散法で注入したサンプルは培地中に拡散され、およそ1/100の濃度で作用していることが判明した。
【００３０】
〔ＭＧＱとエチレン基質L-メチオニンの花粉管伸長促進活性における比較〕
花粉管の伸長を制御する因子として、植物ホルモンの一種であるエチレンがある。エチレンは植物中において、L-メチオニンを基質として生合成されることが判明している。そこで、ＭＧＱから生じたL-メチオニンが、エチレン基質として花粉管の伸長を促進する可能性について検討するため、ＭＧＱとL-メチオニンの花粉管伸長促進活性における比較を、均一濃度法を用いて検討した。図７は、ＭＧＱとL-メチオニンのそれぞれの濃度を変化させたときの花粉管伸長距離を比較した結果を示すグラフである。図７に示すように、L-メチオニンは１０−６Mで花粉管の伸長を１０％促進し、最大活性を示した。しかし、同濃度における伸長促進活性に関しては、ＭＧＱの方に強い活性が認められた。また、L-メチオニンは高濃度域で花粉管の伸長を抑制したのに対して、ＭＧＱに同様な作用は認められなかった。つまり、花粉管の伸長促進活性に関しては、ＭＧＱから生じたL-メチオニンがエチレン基質として花粉管の伸長を促進しているのではなく、あくまでＭＧＱというアミノ酸配列からなるペプチドそのものが花粉管の伸長を促進していることが判明した。
【００３１】
〔MGQの花粉管伸長促進活性に及ぼすアミノペプチダーゼインヒビターの効果〕
アミノ酸が花粉管の伸長を促進することが報告されている。そのため、添加したMGQが分解して生じたアミノ酸が、花粉管の伸長を促進している可能性も考えられる。そこで、MGQの花粉管伸長促進活性に対して、アミノペプチダーゼインヒビター（aminopeptidase inhibitor）であるベスタチンがどのような効果を及ぼすかについて、均一濃度法を用いて検討した。図８は、ＭＧＱとＬ−メチオニンの花粉管伸長促進活性に対するアミノペプチダーゼインヒビターの効果を示すグラフである。図８に示すように、ベスタチンは花粉管の伸長自体をわずかに抑制したが、MGQの伸長促進活性に大きな変化は見られなかった。この結果から、アミノペプチダーゼの作用によってMGQから生じたアミノ酸が花粉管の伸長を促進しているとは考えにくい。このことからも、花粉管伸長促進活性がMGQというペプチド自体の作用であることが示唆された。
【００３２】
次に、発芽ダイズ由来生理活性ペプチドの根伸長に及ぼす効果について説明する。
【００３３】
〔ＭＧＱの根伸長に及ぼす効果〕3-1.  
ＭＧＱの根に対する作用についてコマツナを用いて検討した。図９は、ＭＧＱの濃度を変化させたときのコマツナ根伸長距離を示すグラフである。
図９に示すように、ＭＧＱは１０−７ Mという低濃度域で根の伸長を２３％促進した。
【００３４】
〔ＭＧＱとＭ(Ｏ)ＧＱの根伸長促進活性における比較〕
ＭＧＱとＭＧＱのMetを酸化して得たＭ(Ｏ)ＧＱの根の伸長に対する作用を比較した。図１０は、ＭＧＱ及びＭ(Ｏ)ＧＱのそれぞれの濃度を変化させたときのコマツナ根伸長距離を示すグラフである。図１０に示すように、Ｍ(Ｏ)ＧＱはＭＧＱの根伸長促進濃度の1/1000の濃度である１０−１０Mで根の伸長をＭＧＱと同程度促進した。この結果より、ペプチド添加培地に発芽した種子を植えて４日間培養するコマツナの実験系では、培地が長時間空気に接触するため、添加したＭＧＱ中に存在するMetの一部が酸化され、Ｍ(Ｏ)ＧＱとして作用している可能性がある。なお、Ｍ(Ｏ)ＧＱは、ＭＧＱ中に存在するMetを例えば０．３４Ｍ過酸化水素により３７℃で２０分間反応させて酸化させることでも得ることもできる。
【００３５】
なお、本発明は上記実施の形態に限定するものではなく、例えば以下の態様で実施することが可能である。
上記実施の形態では、ＭＧＱで表されるアミノ酸配列からなるペプチドを、発芽ダイズより抽出する例、あるいは、ペプチド合成機により人工的に合成する例を示したが、このような態様に限定するものではない。本発明にかかるペプチドは、例えば魚肉等の動物由来のタンパク質より抽出することもできる。
【００３６】
また、上記実施の形態では、ＭＧＱで表されるアミノ酸配列からなるペプチドを、植物の成長促進活性剤として抽出・利用・評価する例について説明したが、このような態様に限定するものではない。このＭＧＱもしくはＭ(Ｏ)ＧＱで表されるアミノ酸配列からなるペプチドは様々な技術分野への適用可能性を有しており、例えば、植物肥料の主要な成分として利用することができる。さらには、食品、製薬等の様々な分野への適用可能性を有する。
【実施例】
【００３７】
以下の実施例では、Ｍ（Ｏ）ＧＱで表されるアミノ酸配列からなるペプチドを、植物栽培用の肥料として使用した例について説明する。
【００３８】
本実施例において栽培する植物としては、冬期の栽培にも適したホウレンソウ（品種名「トライ」、タキイ種苗株式会社製）を選択した。このホウレンソウの種子を、培養土（株式会社カーマ製）が満たされているプランター（内容積20cm×60cm×15cm＝18L）で発芽させて本葉が２〜３枚になった後に、各プランターについて苗の大きさが均一となるように間引きを行った。
本実施例では、ホウレンソウの栽培条件が互いに異なる区域として、潅水区及び葉面散布区の２つの区域を設定した。潅水区のプランターでは、土壌中にペプチド溶液を添加した条件でホウレンソウの栽培を行った。一方、葉面散布区のプランターでは、ペプチド溶液を葉面に散布した条件でホウレンソウの栽培を行った。
【００３９】
潅水区のプランターでは、図１１に示すスケジュールに従ってホウレンソウの栽培を行った。すなわち、プランターにホウレンソウの種子を蒔いてから２５日間経過した後に、土壌中にペプチド溶液を添加した（１回目）。１回目にペプチド溶液を添加してから１週間経過した後に、再度土壌中にペプチド溶液を添加した（２回目）。そして、２回目にペプチド溶液を添加してから８日間経過した後に、ホウレンソウを収穫した。なお、添加するペプチド溶液としては、Ｍ（Ｏ）ＧＱで表されるアミノ酸配列からなるペプチドを、水道水に溶解させて所定の濃度に調整した溶液を使用した。この潅水区では、１つのプランターにつき、濃度毎に１リットルのペプチド溶液を土壌中に添加した。
葉面散布区のプランターでは、潅水区と同様に、図１１に示すスケジュールに従ってホウレンソウの栽培を行った。すなわち、プランターにホウレンソウの種子を蒔いてから２５日間経過した後に、葉面にペプチド溶液を散布した（１回目）。１回目にペプチド溶液を散布してから１週間経過した後に、再度葉面にペプチド溶液を散布した（２回目）。そして、２回目にペプチド溶液を散布してから８日間経過した後に、ホウレンソウを収穫した。なお、散布するペプチド溶液としては、Ｍ（Ｏ）ＧＱで表されるアミノ酸配列からなるペプチドを、水道水に溶解させて所定の濃度に調整した溶液を使用した。この葉面散布区では、１つのプランターにつき、濃度毎に１００ミリリットルのペプチド溶液を散布した。
潅水区及び葉面散布区で収穫されたホウレンソウについて、新鮮重量及び乾燥重量を測定した。測定結果を表４に示す。
【００４０】
【表４】
2004331656.tif 000006
【００４１】
表４中の潅水区の結果が示すように、土壌中に本発明のペプチド溶液を添加することにより、ホウレンソウの成長を促進できることが判明した。特に、濃度が０．３５ｐｐｂのペプチド溶液を添加した場合には、ペプチド溶液を添加しない場合（濃度０ｐｐｂの場合）と比較して、新鮮重量で約６０％、乾燥重量で約８０％の成長促進効果を確認することができた。また、発明者らによる目視によっても、ペプチド溶液を土壌中に添加したプランターでは、ペプチド溶液を添加しなかったプランターと比較して、ホウレンソウの成長速度に明らかな差異が現れることを確認することができた（図１２の写真を参照）。
【００４２】
表４中の葉面散布区の結果が示すように、葉面に本発明のペプチド溶液を散布することにより、ホウレンソウの成長を促進できることが判明した。特に、濃度が０．１７５ｐｐｂのペプチド溶液を散布した場合には、ペプチド溶液を散布しない場合（濃度０ｐｐｂの場合）と比較して、新鮮重量で約３０％、乾燥重量で約２０％の成長促進効果を確認することができた。また、発明者らによる目視によっても、ペプチド溶液を葉面に散布したプランターでは、ペプチド溶液を散布しなかったプランターと比較して、ホウレンソウの成長速度に明らかな差異が現れることを確認することができた（図１３の写真を参照）。
【００４３】
上記実施例の結果より、Ｍ（Ｏ）ＧＱで表されるアミノ酸配列からなるペプチドは、培養土のような微生物による汚染リスクが高い環境下においても、植物の成長を十分に促進できることが判明した。
また、Ｍ（Ｏ）ＧＱで表されるアミノ酸配列からなるペプチドは、土壌中に添加して根に吸収させるだけでなく、葉面に散布することによっても、植物の成長を十分に促進できることが判明した。
これらの結果より、本発明のペプチドは、植物成長促進用の肥料もしくはその成分として機能し得ることを確認することができた。
【００４４】
ホウレンソウの収穫量が増加したのは、本発明のペプチドを土壌中に添加あるいは葉面に散布することによって、ホウレンソウの根の成長が促進され、より効率良く養分吸収が行われるようになり、ホウレンソウの呼吸量が増加して二酸化炭素の同化が進み、地上部（葉）の成長促進につながったことが原因であると考えられる。なお、この考察は、本発明の範囲を何ら制限するものではない。
【００４５】
なお、本発明は、ＭＧＱあるいはＭ（Ｏ）ＧＱで表されるアミノ酸配列からなるペプチドを、土壌中に添加あるいは葉面に散布する工程を有する植物の栽培方法として実施することもできる。また、このような栽培方法によって栽培された植物（収穫物）も、本発明の範囲に含まれる。
【図面の簡単な説明】
【００４６】
【図１】拡散法の概要を説明するための説明図である。
【図２】均一濃度法の概要を説明するための説明図である。
【図３】コマツナ根伸長促進活性のアッセイ法の概要を説明するための説明図である。
【図４】１〜４日目の発芽ダイズ抽出物の花粉管伸長促進作用を拡散法にて検討した結果を表したグラフである。
【図５】発芽４日目のダイズ抽出物からの花粉管伸長促進物質を、HPLCにて精製した際の結果を表したグラフである。
【図６】ＭＧＱの濃度を変化させたときの花粉管伸長促進活性を示すグラフである。
【図７】ＭＧＱとL-メチオニンのそれぞれの濃度を変化させたときの花粉管伸長距離を比較した結果を示すグラフである。
【図８】ＭＧＱとＬ−メチオニンの花粉管伸長促進活性に対するアミノペプチダーゼインヒビターの効果を示すグラフである。
【図９】ＭＧＱの濃度を変化させたときのコマツナ根伸長距離を示すグラフである。
【図１０】ＭＧＱ及びＭ(Ｏ)ＧＱの濃度を変化させたときのコマツナ根伸長距離を示すグラフである。
【図１１】ホウレンソウの栽培スケジュールである。
【図１２】潅水区で栽培したホウレンソウの写真である。Ａはペプチド溶液を添加しなかった場合のホウレンソウの写真であり（濃度０ｐｐｂ）、Ｂはペプチド溶液の濃度が０．３５ｐｐｂである場合のホウレンソウの写真である。
【図１３】葉面散布区で栽培したホウレンソウの写真である。Ｃはペプチド溶液を散布しなかった場合のホウレンソウの写真であり（濃度０ｐｐｂ）、Ｄはペプチド溶液の濃度が０．１７５ｐｐｂである場合のホウレンソウの写真である。
【図１】
2004331656.tif 000007
【図２】
2004331656.tif 000008
【図３】
2004331656.tif 000009
【図４】
2004331656.tif 000010
【図５】
2004331656.tif 000011
【図６】
2004331656.tif 000012
【図７】
2004331656.tif 000013
【図８】
2004331656.tif 000014
【図９】
2004331656.tif 000015
【図１０】
2004331656.tif 000016
【図１１】
2004331656.tif 000017
【図１２】
2004331656.tif 000018
【図１３】
2004331656.tif 000019