(57)【要約】【課題】ユリ科（Ｌｉｌｉａｃｅａｅ）ツクバネソウ属（Ｐａｒｉｓ）植物に含有される新規なステロイドサポニン化合物及び前記化合物を利用してなる胃粘膜保護剤。【解決手段】ユリ科（Ｌｉｌｉａｃｅａｅ）ツクバネソウ属（Ｐａｒｉｓ）植物から抽出された分子式がＣ５０ＯＨ８２Ｏ２２で示され、かつ、下記の＜構造式（１）＞で示される新規なステロイドサポニン化合物。＜構造式（１）＞【化１】2004143125.tif 000019【選択図】　図１
2004143125.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
分子式がＣ５０ＯＨ８２Ｏ２２で示され、かつ、下記の＜構造式（１）＞で示されるステロイドサポニン化合物。
＜構造式（１）＞
【化１】
2004143125.tif 000016
【請求項２】
分子式がＣ５０ＯＨ８２Ｏ２２　で示され、かつ、下記の＜構造式（１）＞で示されるステロイドサポニン化合物から成ることを特徴とする胃粘膜保護剤。
＜構造式（１）＞
【化２】
2004143125.tif 000017
【請求項３】
分子式Ｃ５０ＯＨ８２Ｏ２２　で示され、かつ、下記の＜構造式（１）＞で示されるステロイドサポニン化合物を、ユリ科（Ｌｉｌｉａｃｅａｅ）ツクバネソウ属（Ｐａｒｉｓ）植物よりアルコール抽出により得ることを特徴とする前記ステロイドサポニン化合物の抽出方法。
＜構造式（１）＞
【化３】
2004143125.tif 000018
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、天然植物から抽出した新規なステロイドサポニン化合物、及び前記新規化合物をベースとした胃粘膜保護剤、並びに前記新規化合物の抽出方法に関する。
【０００２】
更に詳しくは、本発明は、天然植物から胃粘膜保護作用を有する有用資源の開発研究の過程において、ユリ科（Ｌｉｌｉａｃｅａｅ）ツクバネソウ属（Ｐａｒｉｓ）植物から見い出された新規なステロイドサポニン化合物、前記化合物をベースとした胃粘膜保護剤、並びに前記化合物の抽出法に関する。
【０００３】
【従来の技術】
本発明者らは、天然植物に由来した有用資源の開発にとりくんでいる。今日まで種々の効能・効果を有する植物資源を開発して来ている。
【０００４】
天然植物を利用した製品の開発分野の１つとして、合成品に代替する生体安全性に優れ、かつ、副作用のない胃粘膜保護剤の開発がある。
消化性潰瘍治療剤は大きく大別して攻撃因子抑制剤と防御因子増強剤の２つに区分され、胃粘膜保護剤は後者の区分に属する。胃や腸といった消化器官の粘膜が損傷をきたした種々の消化性潰瘍は、粘膜の防御能力が弱くなることと胃液などの攻撃因子の分泌などが多くなり、そのバランスがくずれたことに起因することが多い。
従来の消化性潰瘍治療には、Ｈ２　受容体拮抗剤のガスターやプトロンポンプ阻害剤などの攻撃因子抑制剤が広く用いられてきた。一方、治療・改善のみならず、予防的効果も期待される防御因子増強剤としては、セトラキセートなどの胃粘膜微少循環改善剤やスクラルファートなどの潰瘍病巣部位保護剤などが用いられてきたが、その比率は前記攻撃因子抑制剤と比較して少ないものであった。加えて、近年増加の一途をたどる高齢者に対しては身体機能が低下しているために、様々な代謝や排泄が遅くなり、攻撃因子抑制剤の使用では作用が強く現れる可能性が高く、むしろ防御因子増強剤の方が適していると言える。
しかし、これまで知られている防御因子増強剤は胃潰瘍の治療に高用量（例えばスクラルファートは、１回１〜１．２ｇを１日３回：１日量として３〜３．６ｇ、セトラキセートは、１回２００ｍｇを１日３〜４回：１日量として６００〜８００ｍｇ）が必要であり、より安全で効果の高い防御因子増強剤が求められている。
【０００５】
前記した胃粘膜保護剤の開発に関連して、本発明者は、先に胃粘膜保護作用を有する多数のトリテルペンサポニン（ｔｒｉｔｅｒｐｅｎｏｉｄ　ｓａｐｏｎｉｎ）を明らかにしている。これらの研究成果は、例えば、Ｌｉｆｅ　Ｓｃｉ．，６３，ＰＬ２４５〜２５０（１９９８）；Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，３７３，６３〜７０（１９９９）；ｃｈｅｍ．ｐｈｒａｍ．Ｂｕｌｌ．，４９，８６３〜８７０（２００１）に報告されている。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
本発明者らは、天然植物を利用した胃粘膜保護剤の開発において、更に有用な利用植物を求めて鋭意、検討を進めている。
この結果、ユリ科（Ｌｉｌｉａｃｅａｅ）ツクバネソウ属（Ｐａｒｉｓ）植物であり、ヒマラヤから中国南部、台湾にかけて分布する「重楼」の根茎の抽出エキスにエタノール誘発胃粘膜損傷に対して強い抑制作用があることを見い出した。
【０００７】
そして、この抽出エキス成分について検討したところ、胃粘膜損傷の抑制に有効な成分が、前記したトリテルペンサポニンとは異質のステロイドサポニン（ｓｔｅｒｏｉｄ　ｓａｐｏｎｉｎ）であることを見い出した。
更に検討を進めた結果、重楼から抽出、単離された各種のステロイドサポニン化合物の中に、全く新規のステロイドサポニン系の化合物が含まれていることをつきとめた。
【０００８】
本発明は、前記知見をベースにして完成されたものである。
本発明により、新規なステロイドサポニン化合物、前記化合物を利用しを合成品に代替し、生体安全性に優れ、かつ経済性に優れる胃粘膜保護剤、並びに前記化合物の抽出方法が提供される。
【０００９】
【課題を解決するための手段】
本発明を概説すれば、本発明は、単離分子式がＣ５０ＯＨ８２Ｏ２２で示され、かつ、下記の＜構造式（１）＞で示されるステロイドサポニン化合物に関するものである。
＜構造式（１）＞
【化４】
2004143125.tif 000003
【００１０】
以下、本発明の技術的構成について詳しく説明する。
【００１１】
本発明の前記化学式Ｃ５０ＯＨ８２Ｏ２２　で示され、かつ、＜構造式（１）＞で示される新規なステロイドサポニン化合物は、ツクバネソウ属（Ｐａｒｉｓ）植物から抽出、単離されたステロイドサポニン（ｓｔｅｒｏｉｄ　ｓａｐｏｎｉｎ）であることから、以下、パリサポニン（ｐａｒｉｓａｐｏｎｉｎ）と略称されることがある。また、以下の説明において、種々のステロイドサポニン系の化合物が説明されるが、前記新規な化合物は化合物１として位置づけるものである。
【００１２】
前記したように、本発明の前記＜構造式（１）＞で示される化合物１は、胃粘膜保護剤として有用な天然植物の探索中、重楼などのユリ科（Ｌｉｌｉａｃｅａｅ）ツクバネソウ属（ｐａｒｉｓ）植物の抽出物の中の種々のステロイドサポニン化合物の中から新たに見い出されたものである。
そこで、本発明の新規なステロイドサポニン化合物１の理解に資するために、まず最初に、本発明をユリ科ツクバネソウ属植物に含有される各種のステロイドサポニン成分を利用した胃粘膜保護剤という用途面から説明することにする。
これは、ユリ科ツクバネソウ属植物から抽出、単離された化合物１を含む各種のステロイドの効能効果を評価しているうちに、構造不明であった化合物１にも胃粘膜保護作用であり、この化合物１の構造決定がなされて本発明が完成したという経緯に照らして、本発明の理解が得られやすいと思うためである。
【００１３】
本発明の胃粘膜保護作用を有する新規化合物は、前記したようにユリ科（Ｌｉｌｉａｃｅａｅ）ツクバネソウ属（Ｐａｒｉｓ）植物を起源とするものである。ユリ科ツクバネソウ属植物である蚤休、重楼、王孫などは、中国伝総医学では天然薬物として位置付けられている。例えば、蚤休の薬効としては、解毒、鎮咳、強壮、強精などが伝承されており、また、癰腫、疔瘡、瘰癧、慢性器管炎、小児のひきつけの治療、疲労回復を目的に内服されたり、神経症皮膚炎、痔、ヘビの咬傷の治療に外用されたりしている。重楼の薬効は、膏薬にして腫瘍中毒に外用されている。また、王孫の薬効は、鎮痛、強壮、消腫などの薬効が伝承されており、衰弱疲労に内服されている。
しかしながら、これらの伝承薬効を科学的に証明するような医薬学的評価はほとんど行われておらず、ましてやユリ科ツクバネソウ属植物に胃粘膜保護に関する作用が認められたという報告はない。
【００１４】
前記胃粘膜保護剤に利用することができる植物は、ユリ科（Ｌｉｌｉａｃｅａｅ）ツクバネソウ属（Ｐａｒｉｓ）に属するものであれば特に限定されるものではない。例えば、蚤休（Ｐａｒｉｓ　ｐｏｌｙｐｈｙｌｌａ）、重楼（Ｐａｒｉｓ　ｐｅｔｉｏｌａｔａ）、王孫（Ｐａｒｉｓ　ｔｅｔｒａｐｈｙｌｌａ）等を挙げることができる。
【００１５】
以下、本発明に利用することができる具体的な植物について、植物名、学名、産地（中国における省など）、を示す。
蚤休：七葉一枝花（学名：Ｐａｒｉｓ　ｐｏｌｙｐｈｙｌｌａ　ＳＭＩＴＨｖａｒ．ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ　ＦＲＡＮＣＨ．、産地：江蘇、浙江、福建江西、安徴、湖北、四川、貴州、雲南、広東、広西など）、闊弁蚤休（Ｐａｒｉｓ　ｐｏｌｙｐｈｙｌｌａ　ＳＭＩＴＨ　ｖａｒ．ｐｌａｔｙｐｅｔａｌａ　ＦＲＡＮＣＨ．、四川、雲南）、毛脈蚤休（Ｐａｒｉｓ　ｐｏｌｙｐｈｙｌｌａ　ＳＭＩＴＨ　ｖａｒ．ｐｕｂｅｓｓｅｎｓ　ＨＡＮＤＭＡＺＺ．、四川、雲南）、狭葉蚤休（Ｐａｒｉｓ　ｐｏｌｙｐｈｙｌｌａ　ＳＭＩＴＨ　ｖａｒ．ｓｔｅｎｏｐｈｙｌｌａ　ＦＲＡＮＣＨ．、四川、雲南）、金線重楼（Ｐａｒｉｓ　ｐｏｌｙｐｈｙｌｌａ　ＳＭＩＴＨ、貴州、雲南、四川、チベットなど）、雲南重楼（Ｐａｒｉｓ　ｐｏｌｙｐｈｙｌｌａ　ＳＭＩＴＨ　ｖａｒ．ｙｕｎｎａｎｅｎｓｉｓ　ＦＲＡＮＣＨ．、ＨＡＮＤ−ＭＡＺＺ．、雲南）、クルマバツクバネソウ（Ｐａｒｉｓ　ｑｕａｄｒｉｆｏｌｉａ　Ｌ．＝Ｐａｒｉｓ　ｖｅｒｔｉｃｉｌｌａｔａ．、山西など、日本、朝鮮、サハリン、シベリア）、重楼：具柄王孫（ｐａｒｉｓ　ｐｅｔｉｏｌａｔａ　ＢＡＫ　ｅｘ　ＦＯＲＢ．、四川、広西など）、王孫：ツクバネソウ（Ｐａｒｉｓ　ｔｅｔｒｐｈｙｌｌａ　Ａ．ＧＲＡＹ．、江蘇、浙江、江西、安徴、四川など、日本、朝鮮）などがある（「中薬大辞典」小学館編参照）。
【００１６】
これらの植物は、種類や産地などによって、その中に含有される成分の量や種類に若干の差異があるが、中国、朝鮮、日本、サハリン、シベリアなどの産地のほか、いずれの地域に生育しているものでも使用することができる。
前記植物の利用部位、根茎などの地下部のみならず、葉など、ツクバネソウ属植物の全ての部位を利用することができる。
【００１７】
前記胃粘膜保護剤は、ユリ科ツクバネソウ属植物に含有される前記化学式Ｃ５０ＯＨ８２Ｏ２２で示され、かつ、＜構造式（１）＞で示されるステロイドサポニン（ｓｔｅｒｏｉｄ　ｓａｐｏｎｉｎ）化合物１を有効成分とするものである。
前記ユリ科ツクバネソウ属植物から有効成分であるステロイドサポニン化合物１を抽出するには、所望の抽出法を採用すればよい。後述するように、抽出により前記化合物１を含めて各種のステロイドサポニンが得られる。
一般的な抽出法としては、刻加工あるいは粉末化した植物を水あるいは低級アルコール（例えばメタノール、エタノール、ブタノール、イソプルパノールなど）あるいはそれらの混合溶媒にて、通常植物の約１０倍量以上の溶媒量にて、（１）室温下、冷浸抽出であれば一昼夜、（２）沸騰水浴下熱時抽出であれば２〜３時間、の抽出時間にて抽出すればよい。そして、抽出物を得るには、抽出液をろ別後、残渣に更に同量の溶媒を加え、同様の操作を２〜３回くり返し、抽出液をあわせて減圧下濃縮し、抽出物を得ればよい。
【００１８】
前記胃粘膜保護剤において、ユリ科ツクバネソウ属植物の抽出物は、有効成分である前記化学式Ｃ５０ＯＨ８２Ｏ２２　で示され、かつ、前記＜構造式（１）＞で示されるステロイドサポニン化合物１を含有しているものであれば有効であり、例えば重楼をメタノールで抽出したもの、更に溶媒分画して得たもの、更に精製したものなど、いずれであってもよい。
【００１９】
得られた抽出物は、本発明の新規ステロイドサポニン化合物１のみから成るもの、あるいは他の抽出成分（他のステロイドサポニン）との混合体であるものという形態をとったり、これらを濃縮して用いてもよい。濃縮は、低温減圧下で行うことが好ましい。また、この濃縮は乾固するまで行ってもよい。なお、濃縮する前にろ過し、ろ液を濃縮してもよい。
また、得られた抽出物は、精製処理に付してもよい。精製処理方法としては、クロマトグラフ法、イオン交換樹脂を使用する溶離法などを単独又は組み合せて使用する方法が挙げられる。
【００２０】
前記したクロマトグラフ法としては、順相クロマトグラフィー、逆相クロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィー、遠心液体クロマトグラフィー、カラムクロマトグラフィー、薄層クロマトグラフィー等のいずれか又はそれらを組み合せて使用する方法が挙げられる。その際の担体、溶出溶媒などの精製条件は、各種クロマトグラフィーに対応して適宜選択することができる。例えば、順相クロマトグラフィーの場合にはクロロホルム−メタノール系の溶媒、逆相クロマトグラフィーの場合には水−メタノール系の溶媒を使用することができる。
【００２１】
また、前記したイオン交換樹脂を使用する溶離法としては、得られた抽出液を、水又は低級アルコールに希釈／溶解させ、この溶液をイオン交換樹脂に接触させて吸着させた後、低級アルコール又は水で溶離する方法が挙げられる。この際に使用される低級アルコールとしては種々のものを使用することができるが、メタノールが好ましい。イオン交換樹脂としては、通常、当該分野の精製処理に使用されるものであれば特に限定されるものではなく、例えば、巨大網状構造で多孔性の架橋されたポリスチレン系樹脂、アーバンライト、セルローズ等が挙げられる。
【００２２】
ユリ科ツクバネソウ属植物の抽出物から単離された本発明の新規ステロイドサポニン化合物１は、医薬的に受容な塩、賦形剤、保存剤、着色剤、矯味剤等とともに、医薬品又は食品の製造分野において公知の方法によって、顆粒、錠剤、カプセル剤などの種々の形態で使用することができる。
【００２３】
ユリ科ツクバネソウ属植物の抽出物から単離された前記新規ステロイドサポニン化合物１及びこれを有効成分とする胃粘膜保護剤の使用量は、例えば化合物１を含む抽出物の使用量は、含有される他のステロイドサポニンの種類や含有量、精製の度合、水分含有量、あるいは年齢、症状等によって異なる。例えば、予防のために用いる場合には、化合物１を含有する抽出物を成人１回につき１０〜２００ｍｇ程度、好ましくは１０〜５０ｍｇ程度が挙げられ、食前３０分位に１日３回服用するのが望ましい。
【００２４】
【実施例】
以下、本発明を実施例により更に詳しく説明する。
なお、本発明は実施例のものに限定されないことはいうまでもないことである。
１．重楼の抽出及び単離（分離）：
中国雲南省山の重楼（Ｐａｒｉｓ　ｐｏｌｙｐｈｙｌｌａ　ｖａｒ．　ｙｕｎｎａｎｅｎｓｉｓ）の乾燥根茎２．５ｋｇを利用して有効成分の抽出を行った。なお、抽出・分画スキームの全体像を図１に示す。
【００２５】
以下、重楼の具体的な抽出法を説明する。
重楼（Ｐａｒｉｓ　ｐｏｌｙｐｈｙｌｌａ　ｖａｒ．　ｙｕｎｎａｎｅｎｓｉｓ）の乾燥根茎２．５ｋｇを細断し、約１０倍量のメタノール（約２５Ｌ、ナカライテスク社製、特級）を加え、加熱還流下、３時間抽出した。抽出液をひだ折りろ紙（アドバンテック社製、Ｎｏ．２ろ紙）にてろ別した後、残査にメタノールを加え、同様の抽出操作を合計３回繰り返した。抽出液を合わせ、ロータリーエバポレーターにて減圧下、溶媒留去し、メタノール抽出エキス３１１ｇ（１２．４％生薬からの収率）を得た。
【００２６】
得られたメタノール抽出エキスをダイアイオンＨＰ−２０カラム（日本練水社製、移動相：水→メタノール）に付し、水溶出部２２０ｇ（８．８％）およびメタノール溶出部９１ｇ（３．６％）を得た。
前記メタノール溶出部８０ｇを順相シリカゲルカラムクロマトグラフィー［（ＳｉＯ２　ＢＷ−２００、富士シリシア社製、移動相：クロロホルム（ナカライテスク社製、特級）−メタノール（１０：１）→クロロホルム−メタノール−水（１０：３：０．５→７：３：０．５）→メタノール］にてＦｒ．１（７．７ｇ）、Ｆｒ．２（１．５ｇ）、Ｆｒ．３（１５．２ｇ）、Ｆｒ．４（４９．６ｇ）、Ｆｒ．５（３．５ｇ）を得た。
【００２７】
前記Ｆｒ．３を逆相シリカゲルカラムクロマトグラフィー［ＯＤＳクロマトレックス、富士シリシア社製、移動相：メタノール−水］および高速液体クロマトグラフィー［ＨＰＬＣ、探知器：ＲＩＤ−６Ａ、島津製作所社製；ポンプ：ＬＣ−１０ＡＳ、島津製作所社製；カラム：ＹＭＣ−Ｐａｃｋ　ＯＤＳ−ＡＬ　２５０×２０ｍｍ　ｉ．ｄ．，ＹＭＣ社製、移動相：アセトニトリル（東京化成社製、ＨＰＬＣ大量分取用）−水］または順相シリカゲルカラムクロマトグラフィー［ＳｉＯ２　ＢＷ−２００，移動相：クロロホルム−メタノール−水（１０：３：１、下層）→メタノール］にて分離・精製し、
１．ｐａｒｉｓａｐｏｎｉｎ（１，０．０１３％），
２．ｐｅｎｎｏｇｅｎｉｎ　３−Ｏ−α−Ｌ−ｒｈａｍｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ−（１→２）−〔α−Ｌ−ａｒａｂｉｎｏｆｕｒａｎｏｓｙｌ−（１→４）〕−β−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ（２，０．０１４％），
３．ｐｅｎｎｏｇｅｎｉｎ　３−Ｏ−α−Ｌ−ｒｈａｍｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ−（１→４）−α−Ｌ−ｒｈａｍｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→４）−〔α−Ｌ−ｒｈａｍｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ−（１→２）〕−β−ｇｒｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ（３，０．０１９％），
４．ｄｉｏｓｇｅｎｉｎ　３−Ｏ−α−Ｌ−ｒｈａｍｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ−（１→２）−〔α−Ｌ−ａｒａｉｎｏｆｕｒａｎｏｓｙｌ−（１→４）〕−β−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ（４，０．１０％）〕，
５．ｄｉｏｓｇｅｎｉｎ　３−Ｏ−α−Ｌ−ｒｈａｍｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ−（１→４）−α−Ｌ−ｒｈａｍｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ−（１→４）−〔α−Ｌ−ｒｈａｍｎｏｐｙｒａｎｏｙｌ−（１−２）〕−β−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ（５，０．１０％），
６．ｔｒｉｇｏｆｏｅｎｏｓｉｄｅ　Ａ（６，０．０１４％），
９．ｅｄｙｓｔｅｒｏｎｅ（９，０．１８％），
を得た。
【００２８】
前記Ｆｒ．４を逆相シリカゲルカラムクロマトグラフィー〔ＯＤＳ　クロマトレックス、富士シリシア社製、移動相：メタノール−水〕および高速液体クロマトグラフィー〔ＨＰＬＣ，検知器：ＲＩＤ−６Ａ；ポンプ：ＬＣ−１０ＡＳ；カラム：Ｄｅｖｅｌｏｓｉｌ　Ｃ３０ＵＧ−５　２５０×２０ｍｍ　ｉ．ｄ．（野村化学社製）、移動相：アセトニトリル−水〕または順相シリカゲルカラムクロマトグラフィー〔ＳｉＯ２　ＢＷ−２００，移動相：クロロホルム−メタノール水（１５：３：１、下層）→メタノール〕にて分離・精製し、ｄｉｏｓｇｅｎｉｎ　３−Ｏ−α−Ｌ−ｒｈａｍｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ−（１→２）−〔α−Ｌ−ａｒａｂｎｏｆｕｒａｎｏｓｙｌ−（１→４）〕−β−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ（４，０．０１８％），ｄｉｏｓｇｅｎｉｎ　３−Ｏ−α−Ｌ−ｒｈａｍｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ−（１→４）−α−Ｌ−ｒｈａｍｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ−（１→４）−〔α−Ｌ−ｒｈａｍｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ−（１→２）〕−β−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｉｓｉｄｅ（５，０．０１２％），ｐｒｏｔｏｇｒａｃｉｌｌｉｎ（７，０．１１％），ｄｉｃｈｏｔｏｍｉｎ（８，０．１６％）を得た。
【００２９】
前記抽出・単離（分画）されて得られた化合物１〜化合物９において、化合物１は、構造解析がなされていない新規化合物である。なお、化合物２〜化合物９の化学構造式２〜９は、後述する。
【００３０】
２．化合物１の構造決定
分離精製した新規化合物１について構造決定を行った。常法に従って元素分析によりその化学組成を求めて実験式を決め、別途に分子量を測定（質量分析）して分子式を求めた。
次に、分子中の原子の結合配列の様式を表わす構造式を決定するために、Ｘ線解析、比旋光度の測定、ＩＲ（赤外線吸収スペクトル）分析、ＮＭＲ（核磁気共鳴スペクトル）分析を行った。
結果を以下に示す。
【００３１】
（１）．分子式：Ｃ５０Ｈ８２Ｏ２２
（２）．分子量（質量分析）：Ｈｉｇｈ−ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ　ＦＡＢ−ＭＳ，Ｃ５０Ｈ８２Ｏ２２　Ｎａ（Ｍ＋Ｎａ）＋　で計算した値。１０５７．５１９５（Ｆｏｕｎｄ　１０５７．５１７９）。
Ｐｏｓｉｔｉｖｅ−ｉｏｎ　ＦＡＢ−ＭＳ　ｍ／ｚ　１０５７（Ｍ＋Ｈ）＋．
Ｎｅｇａｔｉｖｅ−ｉｏｎ　ＦＡＢ−ＭＳ　ｍ／ｚ　１０３３（Ｍ−Ｈ）−．
【００３２】
（３）．比旋光度：〔α〕Ｄ２６＝−４１．３°（Ｃ＝１．１０、ＭｅＯＨ）
【００３３】
（４）．ＩＲ分析：ＩＲ（ＫＢｒ）の分析結果は次の通りである。３４３０（−ＯＨ）、２９３６（−ＣＨ２−）、１０７４（−Ｏ−）、１０５５（−Ｏ−）、７５６ｃｍ（−（ＣＨ２　）ｎ−）。
【００３４】
（５）．１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ｐｒｉｄｉｎｅ−ｄ５）δ：０．８９，１．０５（３Ｈ　ｅａｃｈ，ｂｏｔｈ　ｓ，１８，１９−Ｈ３），０．９８（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．７　Ｈｚ，２７−Ｈ３），１．３０（３Ｈ，ｄ，ｊ＝６．７Ｈｚ，２１−Ｈ３），１．７１（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．１　Ｈｚ，６´´−Ｈ３）、〔３．５９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５．８，９．２Ｈｚ），３．９２（１Ｈ，ｍ），２６−Ｈ２〕，４．７４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１´´´´−Ｈ），４．８８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３　Ｈｚ，１´−Ｈ），５．３１（１Ｈ，ｂｒ　ｓ，６−Ｈ），５．８１（１Ｈ，Ｂｒ　ｓ，１´´´−Ｈ），６．１５（１Ｈ，Ｂｒｓ，１´´−Ｈ）。
（６）．１３ＣＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ｐｒｉｄｉｎｅ−ｄ５）δｃ：３７．４（Ｃ−１），３０．１（Ｃ−２），７８．２（Ｃ−３），３８．９（Ｃ−４），１４０．６（Ｃ−５），１２１．５（Ｃ−６），３２．３（Ｃ−７），３１．６（Ｃ−８），５０．３（Ｃ−９），３７．０（Ｃ−１０），２１．０（Ｃ−１１），３９．９（Ｃ−１２），４０．７（Ｃ−１３），５６．５（Ｃ−１４），３２．４（Ｃ−１５），８０．９（Ｃ−１６），６３．７（Ｃ−１７），１６．４（Ｃ−１８），１９．３（Ｃ−１９），４０．５（Ｃ−２０），１６．３（Ｃ−２１），１１０．４（Ｃ−２２），３７．０（Ｃ−２３），２８．２（Ｃ−２４），３４．１（Ｃ−２５），７５．０（Ｃ−２６），１７．３（Ｃ−２７），１００．０（Ｃ−１´），７８．３（Ｃ−２´），７７．１（Ｃ−３´），７６．４（Ｃ−４´）、７７．７（Ｃ−５´），６２．４（Ｃ−６´），１０１．５（Ｃ−１´´），７２．５（Ｃ−２´´），７２．１（Ｃ−３´´），７３．９（Ｃ−４´´），６９．２（Ｃ−５´´），１８．５（Ｃ−６´´），１０９．４（Ｃ−１´´´），８２．４（Ｃ−２´´´），７７．３（Ｃ−３´´´），８６．５（Ｃ−４´´´），６１．３（Ｃ−５´´´），１０４．５（Ｃ−１´´´´），７４．９（Ｃ−２´´´´），７８．０（Ｃ−３´´´´），７１．５（Ｃ−４´´´´），７８．０（Ｃ−５´´´´），６２．７（Ｃ−６´´´´）．
【００３５】
以上の分析結果により、前記ステロイドサポニン化合物１は、次の＜構造式（１）＞で示される新規化合物である
＜構造式（１）＞
【化５】
2004143125.tif 000004
【００３６】
前記新規化合物１のＮＭＲ分析におけるプロトン・カーボン・ロングレンジカップリングの解析結果（ＨＭＢＣ）（１Ｈ−ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｍｕｌｔｉｐｌｅ−ｂｏｎｄ　ｈｅｔｅｒｏｎｕｃｌｅａｒ　ｍｕｌｔｉｐｌｅ　ｑｕａｎｔｕｍ　ｃｏｈｅｒｒｅｎｃｅ　ｓｐｅｃｔｒｕｍ）を下記の化６に示す。
【００３７】
【化６】
2004143125.tif 000005
【００３８】
前記抽出・分画スキーム（図１参照）により得られた化合物１以外の化合物２〜９の化学構造式は、下記の化７〜化１４で示されるものである。なお、下記の化７〜化１４は前記化合物２〜９に対応するものである。
【００３９】
【化７】
2004143125.tif 000006
【００４０】
【化８】
2004143125.tif 000007
【００４１】
【化９】
2004143125.tif 000008
【００４２】
【化１０】
2004143125.tif 000009
【００４３】
【化１１】
2004143125.tif 000010
【００４４】
【化１２】
2004143125.tif 000011
【００４５】
【化１３】
2004143125.tif 000012
【００４６】
【化１４】
2004143125.tif 000013
【００４７】
前記化合物１〜８のステロイドサポニンにおいて、化合物２〜５はスピロスタン型ステロイドサポニン、化合物１、６〜８はフロスタン型ステロイドサポニンといわれるものである。なお、前記化合物９はステロールといわれるものである。
【００４８】
３．化合物１の胃粘膜保護作用の検証：
前記抽出・分画スキーム（図１参照）により得られた各種のステロイドサポニンの胃粘膜保護作用について検証した。
胃粘膜保護作用の有無について、次の二つのモデルをラットに適用して行った。
（１）．エタノール誘発胃粘膜損傷モデル
２４〜２６時間絶食させたＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ系雄性ラット（体重約２５０ｇ）に被験物質を経口投与し、１時間後に９９．５％エタノール（１．５ｍｌ／匹）を経口投与した。１時間後にエーテル麻酔下、頚椎脱臼により安楽死させ、直ちに胃を摘出した。１．５％ホルマリン１０ｍｌを胃内に注入し固定した後、大彎に沿って切り開き、損傷の長さ（ｍｍ）を測定し、損傷係数とした（参考文献　Ｍａｔｓｕｄａ　Ｈ．ｅｔ．ａｌ．，Ｌｉｆｅ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，６３、ＰＬ　２４５−２５０（１９９８））。
（２）．インドメタシン誘発胃粘膜損傷モデル
２４〜２６時間絶食させたＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ系雄性ラット（体重約２５０ｇ）に被験物質を経口投与し、１時間後にインドメタシンを２０ｍｇ／ｋｇの用量で経口投与した。４時間後にエーテル麻酔下、頚椎脱臼により安楽死させ、直ちに胃を摘出した。１．５％ホルマリン１０ｍｌを胃内に注入し固定した後、大彎に沿って切り開き、損傷の長さ（ｍｍ）を測定し、損傷係数とした。
【００４９】
３−（１）．化合物１のエタノール誘発胃粘膜損傷抑制効果：
化合物１のエタノール誘発胃粘膜抑制効果について調べた。結果を下記の表１に示す。
表１から、化合物１が胃粘膜保護剤として有効であることがわかる。
【００５０】
【表１】
2004143125.tif 000014
【００５１】
３−（２）．化合物１のインドメタシン誘発胃粘膜損傷抑制効果：
化合物１のインドメタシン誘発胃粘膜損傷抑制効果について調べた。
結果を表２に示す。
表２から、化合物１が胃粘膜保護剤として有効であることがわかる。
【００５２】
【表２】
2004143125.tif 000015
【００５３】
（４）．急性毒性試験
体重約２０〜２５ｇのｄｄＹ系マウスを雌、雄とも各一群１０匹とし、化合物１を５００ｍｇ／ｋｇを経口投与し、エサ、水を自由に与え、２ｗｅｅｋｓ、生死を観察した。その結果、死亡例や行動の異常なものは全く観察されず、本発明の胃粘膜保護剤が安全であることがわかった。
【００５４】
【発明の効果】
本発明により、新規なステロイドサポニン化合物が提供される。本発明の前記新規化合物は従来のオメパラゾール（ｏｍｅｐａｒａｚｏｌｅ）等の合成医薬品系の胃粘膜保護剤に代る天然植物系の生体安全性と経済性に優れる胃粘膜保護剤として有効である。
即ち、本発明の、ユリ科（Ｌｉｌｉａｃｅａｅ）ツクバネソウ属（Ｐａｒｉｓ）植物から抽出・単離された新規のステロイドサポニン化合物は生体安全性と経済性に優れる天然植物系の胃粘膜保護剤として有効なものである。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明の胃粘膜保護剤の主成分であるステロイドサポニンを重楼から抽出するための抽出・分画スキームを示す図である。
【図１】
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