(57)【要約】【課題】　本発明は、２０（Ｓ）−ジンセノシドＲｇ3と２０（Ｓ）−ジンセノシドＲｈ2の神経細胞に対する作用メカニズムとその効能を詳細に究明したことと、本発明の組成物が優れた神経毒性抑制または神経細胞保護効果を有することから、脳外傷、脳卒中、脳虚血、中風、癲癇、アルツハイマー病またはハンチントン病などの脳疾患治療に使用され得るグルタメート媒介神経毒性抑制効果を有する組成物の提供。【解決手段】　２０（Ｓ）−ジンセノシドＲｇ3、２０（Ｓ）−ジンセノシドＲｈ2及び２０（Ｓ）−ジンセノシドＲｇ3と２０（Ｓ）−ジンセノシドＲｈ2との混合物を含むグルタメート媒介神経毒性抑制組成物。【選択図】　　　なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
　２０（Ｓ）−ジンセノシドＲｇ3、２０（Ｓ）−ジンセノシドＲｈ2及び２０（Ｓ）−ジンセノシドＲｇ3と２０（Ｓ）−ジンセノシドＲｈ2との混合物からなる群から選択されるジンセノシドを含むグルタメート媒介神経毒性抑制組成物。
【請求項２】
　２０（Ｓ）−ジンセノシドＲｈ2を含む請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
　２０（Ｓ）−ジンセノシドＲｇ3と２０（Ｓ）−ジンセノシドＲｈ2との混合物を含む請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
　脳外傷、脳卒中、脳虚血、中風、癲癇、アルツハイマ−病またはハンチントン病治療用の請求項１に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
　本発明はグルタメート媒介神経毒性抑制効果を有する組成物に関する。具体的に、本発明は２０（Ｓ）−ジンセノシドＲｇ3、２０（Ｓ）−ジンセノシドＲｈ2及び２０（Ｓ）−ジンセノシドＲｇ３と２０（Ｓ）−ジンセノシドＲｈ2の混合物からなる群から選択されるジンセノシドを含むグルタメート媒介神経毒性抑制組成物を提供する。
【背景技術】
【０００２】
　パナックスジンセン（Panax ginseng C. A. Meyer(Araliaceae)）の根である人参はアジアだけでなく、世界的に最も多く使用される生薬中の一つである。このような人参の生物学的効能を有する成分はジンセノシドまたは人参サポニンとして知られた化合物で、３０種以上のジンセノシドが人参から分離されてその構造が知られている（非特許文献１、２）。その代表的例にジンセノシド−Ｒａ，−Ｒｂ1，−Ｒｂ2，−Ｒｃ，−Ｒｄ，−Ｒｅ，Ｒｆ，−Ｒｇ1，−Ｒｇ2，−Ｒｇ3，−Ｒｈ1，−Ｒｈ2などがある。
【０００３】
　生体内の人参サポニンの多様な効能中、最近の研究は中枢神経に対する人参の有益な効能等について報告し始めた。学習と記憶力に対する動物モデルにおいて人参は学習及び記憶力に効果を表すことが明らかになった。特にスコポールアミン（scopolamine）で損傷された動物モデルや年齢に応じて弱くなる記憶力、記憶形成に最も重要な部位として知らされている海馬（hippocampus）神経細胞の損傷による記憶力減退を人参が緩和させることが知らされている（非特許文献３、４及び５）。
【０００４】
　学習及び記憶力に対する効果以外に、脳出血、脳卒中、脳虚血のような脳疾患に重要な人参の有益な効果が報告されている。外部の脳損傷や脳血管の閉塞により誘発される脳損傷時には脳の代表的興奮性神経伝達物質であるグルタメートの恒常性が破壊されてグルタメート誘発神経毒性として神経細胞が死んでいく。心筋または全脳血管閉塞により誘発される　脳虚血動物モデルに人参を処理した結果、神経細胞死滅を防止するという報告がある（非特許文献６及び７）。
【０００５】
　このような人参の神経細胞保護効果は人参の成分中のひとつであるジンセノシドＲｂ1が脳虚血で最も損傷を受け易い海馬細胞の神経細胞死滅抑制効果と培養された皮質ニューロンにおけるグルタメートによる神経毒性をジンセノシドＲｂ1とＲｇ3が抑制するという事実から更にはっきりとされた（非特許文献８及び９）。
【０００６】
　しかしこのような人参の中枢神経における有益な効果が発表されたにもかかわらず、その詳細なメカニズムは現在まで明らかになっておらず、各成分の相異する効果が未だ明らかになっていない状態である。
【非特許文献１】Liu, C. X. など, J. Ethnopharmacol. 36, 27-38, 1996.
【非特許文献２】Baek, N. I.など, Planta Med. 1996, 62, 86-87, 1996.
【非特許文献３】Hsieh, M. T. など, Phytother. Res. 14, 375-377, 2000.
【非特許文献４】Wesnes, K. A., Ward など, Psychopharmacology(Berl) 152, 353-361, 2000.
【非特許文献５】Zhong, Y. M. など, Physiol. Behav. 69, 511-525, 2000.
【非特許文献６】Wen, T. C.など, Acta. Neuropathol. (Berl) 91, 15-22, 1996.
【非特許文献７】Maffei Facino, R.など, Planta Med. 65, 614-619, 1999.
【非特許文献８】Lim, J. H. など、Neurosci Res. 28, 191-200, 1997.
【非特許文献９】Kim, Y. C.など、J. Neurosci. Res. 53,426-432, 1998.
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
　本発明の目的は、人参のジンセノシドのグルタメート誘発神経毒性抑制基作を明らかにし、人参のジンセノシド中神経細胞においてグルタメート誘発神経毒性において最も重要なＮＭＤＡ受容体に対する優れた抑制効能を有するジンセノシドを直接スクリーニングしてこれを含むグルタメート媒介神経毒性抑制用組成物を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
　本発明者らはグルタメートの毒性抑制効能を有する人参のジンセノシドをスクリーニングするための研究を繰り返して２０（Ｓ）−ジンセノシドＲｇ3とジンセノシドＲｇ3の代謝産物である２０（Ｓ）−ジンセノシドＲｈ2及びこれらの混合物がグルタメート受容体の亜型であるＮＭＤＡ受容体に対する優れた抑制効能を持つという事実を確認して本発明を完成するに至った。
【０００９】
　したがって、本発明はグルタメート媒介神経毒性抑制効果を有する組成物、更に具体的に２０（Ｓ）−ジンセノシドＲｇ3，２０（Ｓ）−ジンセノシドＲｈ2及び２０（Ｓ）−ジンセノシドＲｇ3と２０（Ｓ）−ジンセノシドＲｈ2の混合物からなる群から選択されるジンセノシドを含むグルタメート媒介神経毒性抑制組成物を提供する。
【００１０】
　ＮＭＤＡ受容体を通じたグルタメート神経毒性は神経外傷、脳卒中、脳溢血時の神経細胞の死滅を誘発させて脳神経の非可逆的損傷をもたらす最も主要な要因であり（Skaper S. D.など, Ann N Y Acad Sci. 939, 11-22, 2001及びMassieu L.& Garcia O. Neurobiology (Bp)6, 99-108, 1998）、グルタメート媒介神経毒性抑制効果を有する本発明の組成物は外傷、脳卒中、脳虚血、中風を含む神経疾患及びグルタメート受容体過剰活性として誘発される癲癇やアルツハイマー病やハンチントン病のような脳疾患の治療に使用され得る。
【００１１】
　本発明は２０（Ｓ）−ジンセノシドＲｇ3、２０（Ｓ）−ジンセノシドＲｈ2及び２０（Ｓ）−ジンセノシドＲｇ3と２０（Ｓ）−ジンセノシドＲｈ2の混合物がグルタメート、特にＮＭＤＡ受容体の特異抑制剤への優れた効能を持つという事実を明らかにしたことで、本発明と最も近接した先行研究として培養された皮質細胞におけるジンセノシドＲｂ1とジンセノシドＲｇ3が神経細胞死滅を抑制するという結果が唯一あるが（Kim, Y. C. など,J. Neurosci. Res. 53, 426-432, 1998参照）、この先行研究では２０（Ｓ）−ジンセノシドＲｇ3と２０（Ｒ）−ジンセノシドＲｇ3の混合物に対してのみにその効果を試験しただけであり、本発明のように混合物でない２０（Ｓ）−ジンセノシドＲｇ3が優れたグルタメート媒介神経毒性抑制効果を持つということは提示したことがない。
【００１２】
　以下本発明を詳細に説明する。
【００１３】
　本発明では外部刺激による脳損傷や脳血管の閉塞により誘発される脳梗塞、脳出血、中風などに関与するグルタメート誘発神経毒性の初期メカニズムを人参の主要ジンセノシド１０種に対して調査した。照射システムは、病理的現象において神経細胞死滅が最初に観察され、学習と記憶力モデルにおいて最も重要な部位として知られる海馬神経細胞を白ねずみの胎児１８日から生後１日の状態から分離した後、１週間以上試験官内（in vitro）条件において培養させた海馬神経細胞を使用した。
【００１４】
　また、神経細胞において最も代表的な神経伝達物質であるグルタメートはＮＭＤＡ受容体、非ＮＭＤＡ受容体、代謝性グルタメート受容体３種を通じて作用する。グルタメート誘発神経毒性には細胞中へ過量のカルシウムを誘導するＮＭＤＡ受容体が最も重要なので、ジンセノシド成分についてＮＭＤＡ受容体活性時同伴されるカルシウム流入は細胞内Ｃａ2+−映像化技術で、ＮＭＤＡ受容体媒介イオン流入は全細胞パッチクランプ技術で初期メカニズムを調査した後、既存の神経毒性分析法である酵素分析法（MTT assay）の結果と確認した。
【００１５】
　本発明における確認したところによれば、２０（Ｓ）−ジンセノシドＲｇ3、２０（Ｓ）−ジンセノシドＲｈ2及びこれらの混合物がＮＭＤＡ受容体媒介カルシウム流入を効果的に抑制することと明るみになった。
【００１６】
　したがって、２０（Ｓ）−ジンセノシドＲｇ3及び（または）２０（Ｓ）−ジンセノシドＲｈ2を含むグルタメート媒介神経毒性抑制組成物は外傷、脳卒中、脳虚血、中風を含む神経疾患及びグルタメート受容体過剰活性として誘発される癲癇やハンチントン病のような脳疾患の治療に効果的に使用され得る。
【００１７】
　本発明の組成物は望ましくは薬剤学的である分野において通常的な方法に応じて経口投与に適合した単位投与型の製剤、注射剤、シロップ剤などの形態に剤形化させて投与する。
【００１８】
　適合した経口投与用剤形には硬質及び軟質カプセル剤、錠剤、散剤などが含まれる。このような経口投与用製剤には薬物学的活性成分以外に一つ以上の薬剤学的に不活性である通常的な担体、例えば澱粉、ラクトース、カオリンなどの賦形剤、水、ゼラチン、アラビアゴム、トラガンタゴムなどの結合剤、澱粉、ナトリウムアルギネートなどの崩解剤、タルク、ステアリン酸、マグネシウムステアレート、流動パラフィンなどの滑沢剤の追加添加剤成分が含まれることができる。
【００１９】
　また、本発明の医薬組成物は吸入薬、舌下錠、局所注入剤、局所塗布剤、筋肉注射剤、皮下注射剤、皮内注射剤としても使用可能である。
　本発明に応じた組成物の静脈投与組成物は通常の方法に応じて製剤化できる。例えば、本発明に応じた組成物は凍結乾燥結晶を生理食塩水、蒸溜水、燐酸緩衝液などに溶解させることによって静脈内投与製剤に作ることができ、脂肪乳剤、リポゾーム製剤でも使用可能である。
【００２０】
　本発明に応じた組成物の１日投与容量は投与対象の年齢、健康状態、合併症などの多様な要因に応じて変わるが、成人を基準とする時、一般的には活性成分５〜１０００ｍｇ、望ましくは１０〜５００ｍｇ、より望ましくは５０〜５００ｍｇを１日１〜２回分割して投与する。しかし、投与量は脳神経疾患分野の専門医の判断に応じて前記容量以外の投与量が投与できる。
【００２１】
　本発明の組成物に含まれるジンセノシドは生薬である人参から抽出した成分として人体に対する使用安全性を有するということは当業者に自明であるといえる。
【実施例】
【００２２】
実施例１：海馬神経細胞分離及び培養法
　胎児１８日から生後１日の白ねずみの海馬神経組織を解剖顕微鏡で分離して０．０５％のパパイン酵素をレイボビッツ（Leibovitz）Ｌ−１５培地に添加して３７℃で２０分間処理した。次いで、酵素溶液を数回洗滌した後、パステルピペットの空隙サイズを調節して機械的に分離した海馬単一神経細胞をポリ−Ｌ−リシン（０．５ｍｇ／ｍｌ）で処理したカバースリップに１．５Ｘ１０5細胞／ｍｌで培養した。
【００２３】
　細胞は０．５ｍＭＬ−グルタミン、２５μＭグルタメート、２５μＭ２−メルカプトエタノール、１００Ｕ／ｍｌペニシリン、１００μｇ／ｍｌストレプトマイシンが添加されたＮｅｕｒｏｂａｓｌａ／Ｂ２７培養溶液で培養した。１週間に２回ずつグルタメートが添加されない培地で１／２ずつ交換しながら培養して培養７−１５日後実験に使用した。
【００２４】
実施例２：細胞内カルシウム濃度測定
　アセトキシメチル−エステル形態のフラ−２（フラ−２／ＡＭ；分子プローブ、米国オレゴン州所在のユージン（Eugene）社製品）を蛍光性Ｃａ2+標識物に使用した。ＨＥＰＥＳ緩衝溶液（単位ｍＭ：１５０ＮａＣｌ、５ＫＣｌ、１ＭｇＣｌ2、２ＣａＣｌ2、１０ＨＥＰＥＳ、１０グルコース、ｐＨ７．４）で５μＭフラ−２／ＡＭと０．００１％フルロニック（Pluronic）Ｆ−１２７と共に海馬神経細胞を室温で４０〜６０分間１次培養して標識した後、ＨＥＰＥＳ緩衝溶液で数回洗浄した。１０分間安定化させた後に倒立顕微鏡を使用して細胞内カルシウムイオン濃度変化を測定した。
【００２５】
　具体的に、キセノンランプを照らしてコンピュータ制御フィルタフィール（computer-controlled filter wheel）（米国カリフォルニア州所在のシャッターインスルーマンス（Sutter Instruments）製品）により励起波長（３４０ｎｍ及び３８０ｎｍ）を選択的に細胞に露出させた。２秒ごとの間隔でデータを得、光が露出される間にシャッターを設置して細胞にあたえる光毒性を防止した。５１５ｎｍ高帯域通過ろ過波器（long-passfilter）を通過して入った放出蛍光（emitter fluorescence light）は冷却ＣＣＤカメラを経てデジタル蛍光分析器により比率値と細胞内遊離Ｃａ2+濃度（［Ｃａ2+］i）値に転換した。あらゆる映像データと分析はUniversal Imaging software（米国ペンシルバニア州所在のウェストチェスター（West Chester）製品）を利用した。
【００２６】
実施例３：電気生理学的方法を利用したＮＭＤＡ受容体媒介膜電類測定
　穿孔パッチランプ（perforated patch-clamp）技法を利用した全体細胞電圧クランプ記録を遂行した。室温で海馬神経細胞の細胞膜と電極間にキガオーム密封（gigaohm seal）が形成されて電流が外に流れないようにした後、膜電位を固定して１０分程度待った後、細胞膜電流を測定した。パッチ電極の抵抗値は３−４ＭΩを維持し、内部溶液を１２０グルコン酸カリウム、２０ＮａＣｌ、２ＭｇＣｌ2、１０ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．４（単位：ｍＭ）で満たした。
【００２７】
　細胞膜に１価イオンだけを通過するようにして電気が通じるようにする溶液としてニスタチン（Nystatin）原液（２５ｍｇ／ｍｌ）を２５０μｇ／ｍｌ濃度に希釈して内部溶液に添加した。細胞膜電流測定溶液（単位：ｍＭ、１５０Ｎａｃｌ、５ＫＣｌ、２ＣａＣｌ2、１０ＨＥＰＥＳ、１０グルコース、ｐＨ７．４）には必要に応じてＮＭＤＡ受容体活性のために０．００１ｍＭのグリシンを添加し、Ｍｇ2+を除去して使用した。細胞膜電圧記録はＥＰＣ−９増幅器とPulse/Pulsefit software（HEKA、Germany）を利用して測定した。
【００２８】
実施例４：ＮＭＤＡ受容体媒介カルシウム流入を利用したＮＭＤＡ受容体抑制剤検索
　海馬神経細胞においてＮＭＤＡ受容体活性を通じたＮＭＤＡ受容体抑制剤スクリーニング方法は実施例２で説明した通りｆｕｒａ−２／ＡＭというカルシウム依存性染料を使用したＣａ2+−映像化技術を利用した。
【００２９】
　短期的にＮＭＤＡを投与する時ごとにＮＭＤＡ受容体活性化は細胞内カルシウム流入を惹起する。したがって、４−５分ごとづつ１２回以上ＮＭＤＡを実施例１で準備した海馬神経細胞に投与して細胞内カルシウム流入を観察した結果、脱感覚なしに一定の値を維持し、公知のＮＭＤＡ受容体拮抗剤であるＤ−ＡＰＶと人参総サポニン成分（ＧＴＳ）を海馬神経細胞に処理した場合にはＣａ2+濃度が顕著に抑制されるため（図１）、人参成分のＮＭＤＡ受容体抑制剤スクリーニングシステムとして使用した。
【００３０】
　人参の主要サポニン成分中、１０種のジンセノシド（ジンセノシド−Ｒｂ1、−Ｒｂ2、−Ｒｃ、−Ｒｄ、−Ｒｅ、−Ｒｆ、−Ｒｇ2、−Ｒｇ3、−Ｒｈ1、−Ｒｈ2）を１次検索でＣ−２０位の異性質体を分離しない状態で検索した結果、ジンセノシドＲｇ3のＮＭＤＡ受容体抑制効能が異なるジンセノシド成分に比べて遥かに優れていることが明らかになった（図２ａ及び２ｂ）。
　ジンセノシドＲｇ3のＮＭＤＡ受容体抑制効能はカルシウムの流入だけでなくＮＭＤＡ受容体媒介電流流入を直接測定できる、実施例３に記載された電気生理学的全細胞パッチクランプ方法でも確認され、（図２ｄ）、ＩＣ50濃度が３．８μＭで濃度依存的に現れることが分かった（図２ｃ）。
【００３１】
　図２ａ〜２ｃの実験は前記で言及した通り、ＮＭＤＡを培養海馬細胞に投与した時（５−１０秒）ＮＭＤＡ活性として生じるカルシウム流入をＣａ2+−映像化技術で測定し、図２ｄはこのようなＣａ2+イオン流入以外にＮＭＤＡ受容体活性で細胞内にＮＡ+イオンなどの流入で形成された内向電流をジンセノシドＲｇ3が抑制することを表す結果として、図２の結果はジンセノシドＲｇ3がＮＭＤＡ受容体活性時に流入するイオンなどの流入を遮断することでその抑制作用を表すことを提示している。使用されたジンセノシド投与量は濃度依存的実験を除いて全ての場合１０μＭであった。
【００３２】
　神経細胞においてＮＭＤＡにより細胞興奮毒性による細胞の生存率を測定するため、３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロマイド（ＭＴＴ）分析を施行した。１次培養した白ねずみ海馬神経細胞を２４ウェルプレートに６−１４日間培養した後、１μＭのグリシンが含まれたＭｇ2+無添加緩衝液を使用して１分間ＧＴＳ（１００μｇ／ｍｌ）とＲｇ3（１０μＭ）を前処理した後、１０分間ＮＭＤＡを同時処理してまた正常培養液として交換した。処理２４時間後にＰＢＳ溶解したＭＴＴ（１ｍｇ／ｍｌ）を５０μｌずつ直接培養した細胞に処理した。ＭＴＴ処理４時間後、上澄液を除去して代謝されたホルマザンをジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）１００μｌに溶解させた。自動分光光度計プレート読み出し器（Automated spectrophotometric plate reader）を利用して５６０ｎｍの波長で吸光度を測定した。
【００３３】
　前記ＭＴＴ分析法で分析した結果、ＮＭＤＡ受容体拮抗剤であるＤ−ＡＰＶ、人参の総サポニン成分（ＧＴＳ）、ジンセノシドＲｇ3がＮＭＤＡ誘発神経毒性に対する細胞生存性を有効に増加させることが立証された（図３）。
【００３４】
　人参には３０余種のジンセノシドが自体に存在するが、その中の各種の成分はその前駆体によって生体内での代謝過程において追加生成されるため（図４）、このような１次結果を土台にヒトの胃腸に存在する微生物による代謝産物、特に紅参における特異的に存在する成分を中心にＣ−２０位の（Ｓ）−形態の純水化合物だけを海馬神経細胞のＮＭＤＡ受容体に対する効能を追加して調査した。
【００３５】
　ジンセノシド成分のＣ−２０位の（Ｓ）−形態の純水化合物検索には２０（Ｓ）−ジンセノシド−Ｒｂ1、−Ｒｄ、−Ｒｇ1、−Ｒｇ3、−Ｒｈ1、−Ｒｈ2、２０（Ｓ）−プロトパナクサジオール（protopanaxadiol）、２０（Ｓ）−　プロトパナクサトリオール（protopanaxatriol）及び化合物Ｋの総９種類の化合物を利用して図２ａ〜２ｃの実験方法と同じ方法で実験を遂行し、その中、ＮＭＤＡ受容体活性に最も優れたな効果を表す化合物は２０（Ｓ）−ジンセノシドＲｇ3と２０（Ｓ）−ジンセノシドＲｈ2であることが明らかになった（図５）。
【００３６】
　２０（Ｓ）−ジンセノシドＲｇ3と２０（Ｓ）−ジンセノシドＲｈ2の混合物の効果を調べるため、それぞれ１μＭの２０（Ｓ）−ジンセノシドＲｇ3と２０（Ｓ）−ジンセノシドＲｈ2を１：１の割合で混合した後、図２ａ〜２ｃの実験方法と同じ方法で実験を遂行した。その結果、図６に図示した通り前記混合物は各ジンセノシド単一成分より優れたＮＭＤＡ受容体抑制効能を表すことが明らかになった（図６ａは単一細胞に対して得られた結果であり、図６ｂは各細胞から得た結果と統計的類似性を表す（ｎ＞９））。
【００３７】
　下記表１は人参総サポニン成分（ＧＴＳ）、Ｃ−２０位の異性質体を分離しないジンセノシドＲｇ3とジンセノシドＲｈ2、２０（Ｓ）−ジンセノシドＲｇ3、２０（Ｓ）−ジンセノシドＲｈ2のＮＭＤＡ受容体媒介カルシウム流入抑制を比較したものであり、ジンセノシドＲｇ3はＣ−２０位の異性質体がＳ−型またはＲ−型でも、またはその混合物でも生体効能は同等な反面、ジンセノシドＲｈ2は混合物より２０（Ｓ）−型が遥かな効果を表した。
【００３８】
【表１】
2004143176.tif 000002
【産業上の利用可能性】
【００３９】
　本発明は２０（Ｓ）−ジンセノシドＲｇ3、２０（Ｓ）−ジンセノシドＲｈ2及びこれらの混合物の神経細胞に対する作用メカニズムとその効能を詳細に究明したことで、本発明の組成物は優れた神経毒性抑制または神経細胞保護効果を有するため脳該傷、脳卒中、脳虚血、中風、癲癇、アルツハイマー病またはハンチントン病などの脳疾患治療に使用され得る。
【図面の簡単な説明】
【００４０】
【図１ａ】図１ａはＣａ2+−映像化技術を利用して測定したＮＭＤＡ受容体活性測定グラフィックである。
【図１ｂ】図１ｂは同じ方法で人参総サポニン成分（ＧＴＳ）と既存に知れたＮＭＤＡ受容体拮抗剤であるＤ−ＡＰＶ（Ｄ（−）−２−アミノ−５−ホスフォノペンタン酸）を利用して測定したＮＭＤＡ受容体活性測定グラフである。
【図２ａ】図２ａは人参の主要ジンセノシド成分１０種（Ｃ−２０位の異性質体を分離しない状態）を図１の方法で検索した後、最も優れた成分を全細胞パッチクランプ（whole-cell patch-clamp）方法を利用したＮＭＤＡ受容体媒介流入電流で確認した結果を表すグラフである。
【図２ｂ】図２ｂは人参の主要ジンセノシド成分１０種（Ｃ−２０位の異性質体を分離しない状態）を図１の方法で検索した後、最も優れた成分を全細胞パッチクランプ（whole-cell patch-clamp）方法を利用したＮＭＤＡ受容体媒介流入電流で確認した結果を表すグラフである。
【図２ｃ】図２ｃは人参の主要ジンセノシド成分１０種（Ｃ−２０位の異性質体を分離しない状態）を図１の方法で検索した後、最も優れた成分を全細胞パッチクランプ（whole-cell patch-clamp）方法を利用したＮＭＤＡ受容体媒介流入電流で確認した結果を表すグラフである。
【図２ｄ】図２ｄは人参の主要ジンセノシド成分１０種（Ｃ−２０位の異性質体を分離しない状態）を図１の方法で検索した後、最も優れた成分を全細胞パッチクランプ（whole-cell patch-clamp）方法を利用したＮＭＤＡ受容体媒介流入電流で確認した結果を表すグラフである。
【図３】図３は酵素を利用した神経毒性分析法（MTT assay）におけるジンセノシドＲｇ3の神経細胞保護効果を表すグラフである。
【図４】図４は生体内に存在する微生物により代謝される２０（Ｓ）−ジンセノシドの分解図である。
【図５】図５は図４に図示された総９種の２０（Ｓ）−ジンセノシドのＮＭＤＡ受容体媒介カルシウム流入低下効果を表すグラフである。
【図６ａ】図６ａは２０（Ｓ）−ジンセノシド−Ｒｇ3と２０（Ｓ）−ジンセノシド−Ｒｈ2の混合物が各ジンセノシド単一成分より優れたＮＭＤＡ受容体抑制効能を表すグラフである。
【図６ｂ】図６ｂは２０（Ｓ）−ジンセノシド−Ｒｇ3と２０（Ｓ）−ジンセノシド−Ｒｈ2の混合物が各ジンセノシド単一成分より優れたＮＭＤＡ受容体抑制効能を表すグラフである。
【図１ａ】
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【図１ｂ】
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【図２ａ】
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【図２ｂ】
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【図２ｃ】
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【図２ｄ】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６ａ】
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【図６ｂ】
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