(57)【要約】【課題】インフルエンザ菌並びにエリスロマイシン耐性肺炎球菌に対する強い抗菌力を有し、薬物相互作用の少ない新たなエリスロマイシン誘導体を提供すること。【解決手段】式【化３】2004331632.tif 000008で表される２−フルオロ−６−Ｏ−置換ケトライド誘導体又はその医薬上許容される塩である。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
式
【化１】
2004331632.tif 000007
で表される２−フルオロ−６−Ｏ−置換ケトライド誘導体又はその医薬上許容される塩。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、抗生物質エリスロマイシンの新規誘導体に関する。
【０００２】
【従来の技術】
エリスロマイシンＡはグラム陽性菌、マイコプラズマなどに起因する感染症の治療薬として広く使用されている抗生物質である。しかし、エリスロマイシンは胃酸で分解されるため、体内動態が一定しないという欠点があった。そこで酸に対する安定性を増した誘導体が検討され、その結果、クラリスロマイシン、アジスロマイシン、ロキシスロマイシンなどの体内動態の安定したマクロライド剤が開発されてきた。外来の呼吸器感染症を治療領域とするこれらマクロライド剤は、特に臨床分離頻度の高いインフルエンザ菌並びに肺炎球菌に対し強い抗菌活性を有する必要がある。更に、市中肺炎からマクロライド耐性の肺炎球菌が高頻度に分離されている事から耐性肺炎球菌に有効である事も重要となっている。
【０００３】
近年、広範な研究の結果、インフルンザ菌並びにエリスロマイシン耐性肺炎球菌の両方に対し有効なマクロライドとしてＡｇｏｕｒｉｄａｓらは１９９５年にＨＭＲ３６４７（テリスロマイシン，  ＥＰ６８０９６７）を、次いでＯｒらは１９９８年にＡＢＴ−７７３（セスロマイシン，  ＷＯ９８０９９７８）を相次いで見出した。その後、更に薬効増強が図られた２−フルオロケトライド（ＷＯ０２／３２９１９）が報告されている。一方、１４員環マクロライド抗生物質は、薬物相互作用を起こす事が知られている。従って、臨床において十分な治療効果を発揮することは勿論であるが、それと同時に薬物相互作用を起こし難いマクロライド剤である事も非常に重要となっている。１４員環マクロライド抗生物質が引き起こす薬物相互作用は、代謝に関与する分子種（Ｃｙｐ３Ａ４）が１４員環マクロライドを代謝し、この代謝されたマクロライドがＣｙｐ３Ａ４と不可逆的な結合をする事により引き起こされている。従って、ヒト型Ｃｙｐ３Ａ４に対して安定である事が重要とされている。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の目的は、インフルエンザ菌並びにエリスロマイシン高度耐性肺炎球菌に対する優れた抗菌活性を有し、ヒト型Ｃｙｐ３Ａ４代謝に対し安定である新たな２−フルオロ−６−Ｏ−置換ケトライドを提供することである。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
本発明者等は、ケトライド誘導体について種々検討した結果、６位にある特定の複素環基を有するプロパルギル基を導入し、更に２位にフッ素原子を導入したケトライドが優れた抗菌活性を有し、そしてヒト型Ｃｙｐ３Ａ４に対して安定であることを見出し、本発明を完成した。
【０００６】
本発明は、式
【０００７】
【化２】
2004331632.tif 000002
【０００８】
で表される２−フルオロ−６−Ｏ−置換ケトライド誘導体又はその医薬上許容される塩である。
【０００９】
【発明の実施形態】
本発明において、医薬上許容される塩とは、細菌感染症の化学療法および予防において使用される塩を意味する。それらは、たとえば酢酸、プロピオン酸、酪酸、ギ酸、トリフルオロ酢酸、マレイン酸、酒石酸、クエン酸、ステアリン酸、コハク酸、エチルコハク酸、ラクトビオン酸、グルコン酸、グルコヘプトン酸、安息香酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、パラトルエンスルホン酸、ラウリル硫酸、リンゴ酸、アスパラギン酸、グルタミン酸、アジピン酸、システイン、Ｎ−アセチルシステイン、塩酸、臭化水素酸、リン酸、硫酸、ヨウ化水素酸、ニコチン酸、シュウ酸、ピクリン酸、チオシアン酸、ウンデカン酸、アクリル酸ポリマー、カルボキシビニルポリマーなどの酸との塩を挙げることができる。
【００１０】
本発明の２−フルオロ−６−Ｏ−置換ケトライド誘導体は、経口投与又は非経口投与され、成人を治療する場合で５０〜１０００ｍｇであり、これを１日２〜３回に分けて投与する。この投与量は、患者の年齢、体重および症状によって適宜増減することができる。
【００１１】
経口投与する場合は、賦形剤、結合剤、滑沢剤、抗酸化剤、コーティング剤、界面活性剤、可塑剤、着色剤、矯味矯臭剤などを混合して、散剤、顆粒剤、カプセル剤、錠剤などの製剤として投与され、非経口投与する場合は、注射剤、点滴剤などの製剤として投与される。製剤化する際には、通常の製剤化の方法が使用できる。
【００１２】
【発明の効果】
本発明の化合物は、エリスロマイシン耐性肺炎球菌及びインフルエンザ菌に対して優れた抗菌活性を有し、感染動物を用いた治療効果にも優れていること、更にはヒト代謝酵素に対しても安定な事から、本発明の化合物はヒトにおけるエリスロマイシン耐性肺炎球菌及びインフルエンザ菌感染症の治療剤として極めて有用である。
【００１３】
【実施例】
次に、参考例、実施例及び試験例にて本発明を更に詳細に説明する。
【００１４】
参考例１
５−ヨード−３−（ピリミジン−２−イル）イソキサゾールの合成（２−シアノピリミジンを用いる方法）
（１）２−シアノピリミジン３ｇ（２８．５ｍｍｏｌ）、メタノール  ５０ｍｌ、ヒドロキシルアミン塩酸塩１．９８ｇ（２８．５ｍｍｏｌ）、ナトリウムメトキシド１．５４ｇ（２８．５ｍｍｏｌ）を順次加え、室温で２時間攪拌した。反応混合物を減圧濃縮の後残渣に水５０ｍｌを加え沈殿物を濾取、得られた粗生成物をエーテルで洗浄した後、減圧乾燥し、２−（Ｎ−ヒドロキシアミジノ）ピリミジン  ２．８ｇ（収率７１％）を得た。
【００１５】
ＭＳ（ＥＳＩ）  ｍ／ｚ  １６１．０［Ｍ＋Ｎａ］＋
１Ｈ−ＮＭＲ（２００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ（ｐｐｍ）：５．８３  （ｓ，  ２  Ｈ），７．５２  （ｔ，  Ｊ＝４．８３  Ｈｚ，  １  Ｈ），８．８５  （ｄ，  Ｊ＝４．８３  Ｈｚ，  ２  Ｈ），１０．１８  （ｓ，  １  Ｈ）
【００１６】
（２）２−（Ｎ−ヒドロキシアミジノ）ピリミジン２．７ｇ（１９．５ｍｍｏｌ）を水５４ｍｌに懸濁し、氷冷下濃塩酸２０ｍｌを徐々に加えた。さらに亜硝酸ナトリウム１．７ｇ（２４．２ｍｍｏｌ）を水９．３ｍｌに溶かした溶液を１０分かけて滴下した。その後氷冷下で２時間攪拌した後、反応混合物を炭酸水素ナトリウムにより中和した。析出した結晶を濾取し、減圧乾燥して２−（クロロ−Ｎ−ヒドロキシイミドイル）ピリミジン２．２８ｇ（収率７４％）を得た。
【００１７】
ＭＳ（ＥＳＩ）  ｍ／ｚ  １７９．９［Ｍ＋Ｎａ］＋
１Ｈ−ＮＭＲ（２００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ（ｐｐｍ）：７．６１  （ｔ，  Ｊ＝５．０５  Ｈｚ，  １  Ｈ），８．９３  （ｄ，  Ｊ＝４．８３  Ｈｚ，  ２  Ｈ），１２．９４  （ｓ，  １  Ｈ）
元素分析値（Ｃ５Ｈ４ＣｌＮ３Ｏ）  理論値：  Ｃ，３８．１２；Ｈ，２．５６；Ｎ，２６．６７；Ｃｌ，２２．５０，測定値：  Ｃ，３８．０１；Ｈ，２．５３；Ｎ，２６．７２；Ｃｌ，２２．３２
【００１８】
（３）エチニルトリ（ｎ−ブチル）スズ２５ｇ（７９．３ｍｍｏｌ）をＴＨＦ５０ｍｌに溶解し氷冷下ヨウ素２１．８ｇ（８６ｍｍｏｌ）を少しずつ加えた。このまま２０分攪拌した後、２−（クロロ−Ｎ−ヒドロキシイミドイル）ピリミジン２．０ｇ（１３．２ｍｍｏｌ）を一度に加え、続いてトリエチルアミン４．１ｍｌ（２９ｍｍｏｌ）をＴＨＦ１２ｍｌに溶かした溶液を５分かけて滴下した。反応混合物を室温で９０分攪拌し、これを６％チオ硫酸ナトリウム水溶液と酢酸エチルの混合物にあけ分液した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥後減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン−酢酸エチル＝３／１〜酢酸エチル）により精製して標題化合物１．７１ｇ（収率４９％）を得た。
【００１９】
ＭＳ（ＥＳＩ）  ｍ／ｚ  ２９５．８［Ｍ＋Ｎａ］＋
１Ｈ−ＮＭＲ（２００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ（ｐｐｍ）：７．１８  （ｓ，  １  Ｈ），７．３９  （ｔ，  Ｊ＝４．８３  Ｈｚ，  １  Ｈ），８．９０  （ｄ，  Ｊ＝４．８３  Ｈｚ，  ２  Ｈ）
【００２０】
参考例２
５−ヨード−３−（ピリミジン−２−イル）イソキサゾールの合成（２−メチルピリミジンを用いる方法）
（１）カリウムｔ−ブトキシド８．９ｇ（８０ｍｏｌ）をＴＨＦ  ５０ｍｌに溶解し氷冷下２−メチルピリミジン５ｇ（５３ｍｍｏｌ）をＴＨＦ１５ｍｌに溶かした溶液を約５分かけて滴下した。反応混合物を室温で１．５時間攪拌した後、氷冷下亜硝酸ｔ−ブチル  １２．６ｍｌ（１０６ｍｍｏｌ）をＴＨＦ１０ｍｌに溶かした溶液を約５分かけて滴下し、その後室温で１９時間攪拌した。反応混合物を減圧濃縮し水２０ｍｌを加え、その後４Ｎ−塩酸水溶液を加え中和した。この混合物を減圧濃縮し、析出した結晶を濾取して２−ピリミジンアルドキシムの高極性異性体  ２．７５ｇを得た。母液は塩析して酢酸エチルで抽出（５０ｍｌ×２）、有機層を硫酸マグネシウムで乾燥後減圧濃縮した。残渣にヘキサンを加え、得られた沈殿物を濾取して、２−ピリミジンアルドキシムの異性体混合物（低極性異性体：高極性異性体＝７：２）２．２３ｇを得た。合計４．９８ｇ（収率７６％）のオキシム体を得た。
【００２１】
低極性異性体
ＭＳ（ＥＳＩ）  ｍ／ｚ  １４５．９［Ｍ＋Ｎａ］＋
１Ｈ−ＮＭＲ（２００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  ｄ（ｐｐｍ）：７．５９  （ｔ，  Ｊ＝５．０５  Ｈｚ，  １  Ｈ），７．７８  （ｓ，  １  Ｈ），８．９６  （ｄ，  Ｊ＝４．８３  Ｈｚ，  ２  Ｈ），１３．４５  （ｓ，  １  Ｈ）
高極性異性体
ＭＳ（ＥＳＩ）  ｍ／ｚ  １４５．９［Ｍ＋Ｎａ］＋
１Ｈ−ＮＭＲ（２００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ（ｐｐｍ）：７．４７  （ｔ，  Ｊ＝５．０５  Ｈｚ，  １  Ｈ），８．１１  （ｓ，  １  Ｈ），８．８４  （ｄ，  Ｊ＝４．８３  Ｈｚ，  ２  Ｈ），１２．０１  （ｓ，  １  Ｈ）
【００２２】
（２）３００ｍｌナスフラスコに、上記２−ピリミジンアルドキシム異性体混合物４．９ｇ（４０ｍｍｏｌ）、酢酸エチル１００ｍｌ、トリブチルエチニルスズ１０．４ｇ（３３ｍｍｏｌ）、炭酸水素ナトリウム８．４ｇ（１００ｍｍｏｌ）、水５ｍｌ、Ｎ−クロロコハク酸イミド５．３ｇ（４０ｍｍｏｌ）を順次加え、室温で１６時間攪拌した。水５ｍｌをさらに加え４時間攪拌した後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液１００ｍｌを加え分液した。水層を酢酸エチルで抽出後有機層を合わせ、飽和食塩水で洗浄、硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧濃縮の後ヘキサンを加え析出した沈殿物を濾別し、母液を減圧濃縮してトリ−ｎ−ブチル−｛［３−（ピリミジン−２−イル）］イソキサゾール−５−イル｝スズの粗生成物１３．６ｇを得た。
【００２３】
この粗生成物１３．６ｇをＴＨＦ１００ｍｌに溶解し、ヨウ素７．９ｇ（３１．２ｍｍｏｌ）を一度に加えた。反応混合物を室温で３５分攪拌した後反応混合物を６％チオ硫酸ナトリウム水溶液にあけ、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄、硫酸マグネシウムで乾燥後減圧濃縮し、残渣にヘキサンを加え析出している結晶を濾取した。この結晶をヘキサンで洗浄、乾燥して標題化合物  ５．４４ｇ（収率６０％）を得た。
【００２４】
ＭＳ（ＥＳＩ）  ｍ／ｚ  ２９５．９［Ｍ＋Ｎａ］＋
１Ｈ−ＮＭＲ（３００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ（ｐｐｍ）：７．１８  （ｓ，  １  Ｈ），７．３８  （ｔ，  Ｊ＝４．９０  Ｈｚ，  １  Ｈ），８．８９  （ｄ，  Ｊ＝４．８２  Ｈｚ，  ２  Ｈ）
【００２５】
実施例１
５−Ｏ−デソサミニル−３，１１−ジデオキシ−２−フルオロ−１１−アミノ−６−Ｏ−［３−［３−（２−ピリミジル）イソキサゾリル−５−イル］−２−プロピニル］−３−オキソエリスロノリドＡ  １１，１２−サイクリックカーバメートの合成
ＷＯ９９２１８７１および米国特許第６１２４２６９号に記した方法により合成した５−Ｏ−デソサミニル−３，１１−ジデオキシ−２−フルオロ−１１−アミノ−３−オキソ−６−Ｏ−プロパルギルエリスロノリドＡ  １１，１２−サイクリックカーバメート５．５ｇ  （８．４ｍｍｏｌ）、５−ヨード−３−（２−ピリミジル）イソキサゾール２．４ｇ  （８．８ｍｍｏｌ）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウムクロリド（ＩＩ）  ０．２９ｇ  （０．４ｍｍｏｌ）、アセトニトリル４５ｍｌ、トリエチルアミン９ｍｌを混合し、系内をアルゴン置換した後室温で１時間、６０度で１４時間攪拌した。反応混合物を減圧濃縮して得られた残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール：２５％アンモニア水＝１９：１：０．１）、次いでＮＨ型シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル）により精製し、イソプロピルエーテルにて固化、濾取、乾燥して標記化合物  ５．６ｇ（収率８３％）を得た。
ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ（ｐｐｍ）：０．９３  （ｔ，  Ｊ＝７．４６  Ｈｚ，  ３  Ｈ），１．１３−１．１９  （ｍ，  ３  Ｈ），１．１８  （ｄ，  Ｊ＝７．０１  Ｈｚ，  ３  Ｈ），１．２０−１．７０  （ｍ，  ２  Ｈ），１．２５  （ｄ，  Ｊ＝６．０９  Ｈｚ，  ３  Ｈ），１．３４  （ｄ，  Ｊ＝７．３１  Ｈｚ，  ３  Ｈ），１．５２  （ｓ，  ３  Ｈ），１．５６  （ｓ，  ３  Ｈ），１．６２−２．０５  （ｍ，  ２  Ｈ），１．６８−１．８８  （ｍ，  ２  Ｈ），１．８１  （ｄ，  Ｊ＝２１．３２  Ｈｚ，  ３  Ｈ），２．２７  （ｓ，  ６  Ｈ），２．４６  （ｄｄｄ，  Ｊ＝１２．２６，  １０．２８，  ３．６５  Ｈｚ，  １  Ｈ），２．６９  （ｍ，  １  Ｈ），２．９４  （ｍ，  １  Ｈ），３．１９  （ｄｄ，  Ｊ＝１０．０５，  ７．３１  Ｈｚ，  １  Ｈ），３．５５  （ｍ，  １  Ｈ），３．６６  （ｍ，  １  Ｈ），３．７１  （ｓ，  １  Ｈ），３．８４  （ｄｄ，  Ｊ＝４４．７７，  １７．３６  Ｈｚ，  ２  Ｈ），４．１７  （ｄｄ，  Ｊ＝１０．２０，  １．３７  Ｈｚ，  １  Ｈ），４．３４  （ｄ，  Ｊ＝７．３１  Ｈｚ，  １  Ｈ），５．０７  （ｄｄ，  Ｊ＝１０．０５，  ２．７４  Ｈｚ，  １  Ｈ），５．６５  （ｓ，  １  Ｈ），７．３２  （ｓ，  １  Ｈ），７．３５  （ｔ，  Ｊ＝４．８７  Ｈｚ，  １  Ｈ），８．８９  （ｄ，  Ｊ＝４．８７  Ｈｚ，  ２  Ｈ）
【００２６】
試験例１：試験管内抗菌活性測定
被験化合物は、実施例１の化合物と比較化合物１としてＷＯ０２／３２９１９の実施例２３記載の化合物（５−Ｏ−デソサミニル−３，１１−ジデオキシ−２−フルオロ−１１−アミノ−６−Ｏ−［３−［３−（５−ピリミジル）イソキサゾリル−５−イル］−２−プロピニル］−３−オキソエリスロノリドＡ  １１，１２−サイクリックカーバメート）及び比較化合物２としてアジスロマイシンを選びエリスロマイシン耐性肺炎球菌及びインフルエンザ菌に対する抗菌活性を、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ  ｆｏｒ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｓｔａｎｄａｒｄｓ  （ＮＣＣＬＳ）  ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓに準じた微量液体希釈法による最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）で評価した。各々羊血液寒天培地およびチョコレート寒天培地で一夜培養した肺炎球菌及びインフルエンザ菌をＭｕｅｌｌｅｒ−Ｈｉｎｔｏｎ  ｂｒｏｔｈ  （ＭＨＢ）で０．５  ＭｃＦａｒａｎｄ相当に懸濁し、これらを１０倍に希釈（約１０７  ＣＦＵ／ｍｌ）して接種用菌液とした。これらの菌液５  ｍｌを３％馬溶血液添加の２価イオン濃度調整済みＭＨＢおよびＨａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｔｅｓｔ  ｍｅｄｉｕｍに約５×１０５  ＣＦＵ／ｍｌの菌量となるように感受性試験用マイクロプレートに接種した。これらを３５℃、通常環境下で２０時間培養後に各化合物のＭＩＣを測定した。これら試験の結果を表１に示す。実施例１の化合物はエリスロマイシン耐性肺炎球菌に対し比較化合物と同様強い抗菌活性を示した。インフルエンザ菌に対しては比較化合物２の１／２であって比較化合物１の２倍の抗菌活性を示した。本願発明の化合物は、エリスロマイシン耐性肺炎球菌及びインフルエンザ菌の両方に有用であることが示された。
【００２７】
【表１】
2004331632.tif 000003
【００２８】
試験例２：インフルエンザ菌による肺炎に対する治療効果
インフルエンザ菌による肺炎に対する治療効果について、インフルエンザ菌によるマウス肺炎モデルで評価した。被験化合物及びインフルエンザ菌は、試験例１と同様である。インフルエンザ菌を、５％馬脱繊維血液添加Ｂｒａｉｎ  Ｈｅａｒｔ  Ｉｎｆｕｓｉｏｎ  Ｂｒｏｔｈで３７℃一夜培養し、これを接種菌液（約５．０×１０８  ＣＦＵ／ｍｌ）とした。麻酔した体重１８〜２２  ｇのＩＣＲ系雄性マウスに接種菌液０．０５  ｍｌを経気道的に接種することにより、感染を惹起した。菌液接種１８および４２時間後に経口ゾンデを用いて各被験化合物１００ｍｇ／ｋｇを経口投与した（各群５匹）。各被験化合物は５％アラビアゴム溶液に用時懸濁し、希釈した。なお、コントロール群には５％アラビアゴム溶液のみを投与した。最終投与２４時間後にマウスを屠殺し、肺を摘出後、２  ｍｌの滅菌生理食塩液を加えてホモジナイズした。滅菌生理食塩液で１０倍希釈系列を作製し、チョコレート寒天培地に塗布して３７℃一夜培養後、生じたコロニー数から生菌数を算出した。なお、検出限界は２．３０  ｌｏｇ１０  ＣＦＵ／ｍｌである。これら試験の結果を表２に示す。被験化合物１００  ｍｇ／ｋｇの投与群において、本願発明の化合物である実施例１の化合物、比較化合物１及び比較化合物２はコントロールに比べいずれも強い抗菌活性を示した。よって、本願発明の化合物は、比較化合物１及び比較化合物２と同様にインフルエンザ菌による肺炎の治療に有用であることが示された。
【００２９】
【表２】
2004331632.tif 000004
【００３０】
試験例３
エリスロマイシン耐性肺炎球菌による肺炎に対する治療効果について、耐性肺炎球菌によるマウス肺炎モデルで評価した。被験化合物としては、実施例１の化合物及び比較化合物１としてＷＯ０２／３２９１９の実施例２３記載の化合物（５−Ｏ−デソサミニル−３，１１−ジデオキシ−２−フルオロ−１１−アミノ−６−Ｏ−［３−［３−（５−ピリミジル）イソキサゾリル−５−イル］−２−プロピニル］−３−オキソエリスロノリドＡ  １１，１２−サイクリックカーバメート）を用いた。試験例１で用いたエリスロマイシン耐性肺炎球菌を３０％馬血清添加Ｔｏｄｄ−Ｈｅｗｉｔｔ  Ｂｒｏｔｈで３７℃数時間培養後、同培地で３００倍に希釈し、接種菌液（約５×１０５  ＣＦＵ／ｍｌ）とした。麻酔した体重１８〜２２  ｇのＣＢＡ／Ｊ系雄性マウスに接種菌液０．０５  ｍｌを経鼻的に接種することにより、感染を惹起した。菌液接種４２および６８時間後に経口ゾンデを用いて各被験化合物１００  ｍｇ／ｋｇを経口投与した（各群５匹）。各被験化合物は５％アラビアゴム溶液に用時懸濁し、希釈した。なお、コントロール群には５％アラビアゴム溶液のみを投与した。最終投与２４時間後にマウスを屠殺し、肺を摘出後、２  ｍｌの滅菌生理食塩液を加えてホモジナイズした。滅菌生理食塩液で１０倍希釈系列を作製し、羊血液寒天培地に塗布して３７℃、５％炭酸ガス存在下で一夜培養後、生じたコロニー数から生菌数を算出した。なお、検出限界は１．３０  ｌｏｇ１０  ＣＦＵ／ｌｕｎｇである。これら試験の結果を表３に示す。
本願発明の化合物である実施例１の化合物は、１００ｍｇ／ｋｇ投与群において比較化合物と同程度の優れた治療効果を示した。
【００３１】
【表３】
2004331632.tif 000005
【００３２】
試験例４：ヒト型Ｃｙｐ阻害試験
Ｃｙｐ阻害試験は被験化合物を添加した後、蛍光基質を添加する前に４５分間のプレインキュベーションを行った。その他はＣｒｅｓｐｉらの方法（Ｃｒｅｓｐｉ  ＣＬ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｎａｌｙｔ．  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  １９９７，  ２４８，  １８８−１９０）に準拠して行った。
【００３３】
被験化合物としては、試験例３と同様である。コントロールとして、クラリスロマイシンを用いた。
【００３４】
【表４】
2004331632.tif 000006
【００３５】
実施例１の化合物の相互作用の強さはコントロールと比べほぼ同程度であったが、比較化合物の阻害作用は実施例１の化合物の約８６倍と非常に強かった。よって、比較化合物１に比べて、実施例１の化合物はＣｙｐ３Ａ４に対するＩＣ５０値が高く、薬物相互作用を起こす可能性が低いことが示された。