(57)【要約】【課題】本発明は、真皮マトリックス産生を促進する真皮マトリックス産生促進剤を提供することを目的とする。【解決手段】真皮マトリックス産生促進を有するα−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールを真皮マトリックス産生促進剤として用いる。また、コラーゲン産生促進作用を有するα−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールをコラーゲン産生促進剤として用いる。さらに、ヒアルロン酸産生促進作用を有するα−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールをヒアルロン酸産生促進剤として用いる。【選択図】          なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールを有効成分とする真皮マトリックス産生促進剤。
【請求項２】
真皮マトリックス産生促進剤がコラーゲン産生促進剤である請求項１記載の真皮マトリックス産生促進剤。
【請求項３】
真皮マトリックス産生促進剤がヒアルロン酸産生促進剤である請求項１記載の真皮マトリックス産生促進剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、真皮のマトリックス成分の産生を促進する真皮マトリックス産生促進剤に関する。さらに詳しくは、α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールを有効成分とし、コラーゲンやヒアルロン酸の産生を促進する真皮マトリックス産生促進剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
シワやタルミといった皮膚症状は、加齢や紫外線等の外来ストレスによって真皮線維芽細胞の機能低下や真皮線維芽細胞が産生する真皮マトリックス成分の減少など様々な要因によって惹き起こされる。シワやタルミの改善のためには、細胞賦活剤によって真皮線維芽細胞を直接賦活する方法も非常に有効な方法ではあるが、同様にコラーゲンやヒアルロン酸などの真皮マトリックス成分の産生を促進させる方法も非常に有効であると考えられており、これまでにも様々な真皮マトリックス成分の産生促進剤の検討がなされている。これまでに報告されているコラーゲン産生促進剤としては、ブナ科ブナ属植物の木の芽からの抽出物（特許文献１参照）、エンドウの種子に含まれる物質（特許文献２参照）等が挙げられ、ヒアルロン酸産生促進剤としては、カタバミ科ゴレンシの抽出物及び／又はショウガ科月桃の抽出物（特許文献３参照）、キダチアロエの極性溶媒による抽出物（特許文献４参照）等が挙げられ
なお、本発明に係るα−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールは、既知の物質であり、低褐変性、低メイラード反応性、加熱安定性、非う食性、難消化性、高い保湿性を有し、食品、化成品、医薬品に利用できることが報告されている（特許文献５参照）。しかし、α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールの真皮マトリックス産生促進作用に関してはこれまで全く知られていなかった。
【０００３】
【特許文献１】
特開平１０−２０３９５２号公報
【特許文献２】
特開平１１−３１５００７号公報
【特許文献３】
特開２００３−５５２４４号公報
【特許文献４】
特開２０００−１４３５２７号公報
【特許文献５】
特開平１１−２２２４９６号公報
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
従来用いられている真皮マトリックス産生促進剤は、その真皮マトリックス産生促進作用が必ずしも十分ではないために、有効な効果を得るには製剤中にかなりの高濃度を配合しなければならず、製剤に好ましくない色や臭いを付与してしまう場合があるなど、作用効果や安定性の面ですべてを満足できるものが少ないのが現状であった。このため、より優れた真皮マトリックス産生促進剤の開発が期待されており、本発明はこのような事情に鑑みてなされたものである。従って、本発明の目的は、優れた効果を発揮する真皮マトリックス産生促進剤を提供することにある。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、優れた効果を発揮する真皮マトリックス産生促進剤を見出すために、種々の物質について真皮マトリックス産生促進作用に関する検討を行った。その結果、α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールが真皮線維芽細胞におけるコラーゲンとヒアルロン酸の産生促進作用に優れていることを見出し、さらに検討を重ね、本発明を完成するに至った。
【０００６】
すなわち、本発明は、α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールを有効成分とする真皮マトリックス産生促進剤、コラーゲン産生促進剤、ヒアルロン酸産生促進剤に関するものである。なお、これらの真皮マトリックス産生促進剤、コラーゲン産生促進剤、ヒアルロン酸産生促進剤は、皮膚外用剤や食品などに配合することにより、真皮マトリックス産生促進用、コラーゲン産生促進用、ヒアルロン酸産生促進用の皮膚外用剤や食品などを得ることができる。
【０００７】
【発明の実施の形態】
本発明に用いられるα−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールには、（２Ｒ）−１−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロール（化１），（２Ｓ）−１−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロール（化２），２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロール（化３）の３成分が知られており、これらの１種又は２種以上の混合物を用いることができる。
【０００８】
【化１】
2004331579.tif 000002
【０００９】
【化２】
2004331579.tif 000003
【００１０】
【化３】
2004331579.tif 000004
【００１１】
α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールを得る方法としては、カビ類のα−グルコシダーゼをグリセロール溶液中で糖類の基質に作用させる方法、清酒，味噌，みりん等の醸造物から抽出，精製する方法、イソマルトース，マルチトールなどを四酢酸鉛や過ヨウ素酸塩でグリコール開裂したものを還元する方法、あるいはＫｏｅｎｉｇｓ−Ｋｎｏｒｒ反応により合成したβ−グルコシドをアノメリゼーションした後、β−グルコシダーゼでβ−グルコシドを加水分解する方法などが挙げられるが、カビ類のα−グルコシダーゼをグリセロール溶液中で糖類の基質に作用させる方法が最も効率が良い。
【００１２】
α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールは、そのままでも使用することができるが、水や極性溶媒に希釈したり、変性や分解のない範囲で脱色，脱臭の精製処理を行ったり、カラムクロマトグラフィー等による分画処理を行った後に用いてもよい。また、リポソーム等のベシクルやマイクロカプセル等に内包させて用いることもできる。
【００１３】
本発明に係るα−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールを有効成分とする真皮マトリックス産生促進剤は、種々の真皮マトリックス成分の産生促進に対して使用することが出来るが、特にコラーゲンやヒアルロン酸の産生促進に対して高い効果を発揮する。
【００１４】
また、α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールを有効成分とする真皮マトリックス産生促進剤は、皮膚外用剤や食品など種々の組成物に配合することが可能であり、これらに配合することにより、真皮マトリックス産生促進作用を有する組成物を得ることが出来る。得られた真皮マトリックス産生促進作用を有する組成物は、真皮マトリックス産生促進作用に基づく美容効果を期待することができる。
【００１５】
本発明におけるα−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールを有効成分とする真皮マトリックス産生促進剤の皮膚外用剤や食品への配合量は、皮膚外用剤や食品の種類や目的等によって調整することができるが、真皮マトリックス産生促進効果や使用性等の点から、全量に対して０．０００１〜７５．０重量％が好ましく、より好ましくは、０．０１〜５０．０重量％であり、最も好ましくは、０．１〜２５．０重量％である。
【００１６】
α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールを配合する皮膚外用剤の剤型は任意であり、例えば、ローションなどの可溶化系、クリームや乳液などの乳化系，カラミンローション等の分散系として提供することができる。さらに、噴射剤と共に充填したエアゾール，軟膏剤，粉末，顆粒などの種々の剤型で提供することもできる。
【００１７】
なお、α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールを有効成分とする真皮マトリックス産生促進剤を配合する皮膚外用剤には、α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールの他に、必要に応じて、通常医薬品，医薬部外品，皮膚化粧料，毛髪用化粧料及び洗浄料に配合される、油性成分，保湿剤，粉体，色素，乳化剤，可溶化剤，洗浄剤，紫外線吸収剤，増粘剤，薬剤，香料，樹脂，防菌防黴剤，アルコール類等を適宜配合することができる。また、本発明の効果を損なわない範囲において、他の真皮マトリックス産生促進剤との併用も可能である。
【００１８】
また、α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールを有効成分とする真皮マトリックス産生促進剤を配合する食品は、ガムやキャンディーのような口腔用組成物、かまぼこ，ちくわ等の水産練り製品、ソーセージ，ハム等の畜産製品、洋菓子類、和菓子類、生麺，ゆで麺等の麺類、ソース，しょう油，たれなどの調味料、漬け物、総菜、清涼飲料水等一般的な飲食品の剤型とすることができる。その際、本発明の効果を損なわない範囲内で、食品に一般的に用いられる各種成分、例えば、砂糖，練乳，小麦粉，ショートニング，食塩，ブドウ糖，鶏卵，バター，マーガリン，水飴，カルシウム，鉄分，調味料，香辛料等と共に配合し、併用して用いることができる。
【００１９】
【実施例】
さらに実施例により、本発明の特徴について詳細に説明する。まず、本発明のα−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールの製造例を示す。
【００２０】
［製造例１］
マルトース５％，グリセロール３５％の水溶液１０００ｍＬに、０．１２５Ｕ／ｍＬ（１Ｕ：ｐＨ５．０，３７℃，５ｍＭｐ−ＮＰＧから１分間に１μｍｏｌのｐ−ＮＰを遊離する酵素量）のＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｇｅｒ由来の酵素であるα−グルコシダーゼ（トランスグルコシダーゼＬ−アマノ，天野エンザイム製）を加え、４０℃，反応ｐＨ５．０の条件で２４時間反応させ、その後マルトースを１０回連続的に添加・反応させ、反応液を得た。得られた反応液を活性炭クロマトグラフィーにより精製し、α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールを得た。得られたα−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールをＧＣ−ＭＳ分析により確認すると、（２Ｒ）−１−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロール（化１），（２Ｓ）−１−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロール（化２），２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロール（化３）の３成分の混合物であった。
【００２１】
［製造例２］
清酒１０００ｍＬをＳｈｉｍ−ｐａｃｋ  ＳＣＲ−１０１（Ｎ）（７．９×３００ｍｍ）カラム（カラム温度；５０℃，溶離液；水，流速；０．６ｍＬ／ｍｉｎ）により分画し、α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールを得た。得られたα−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールをＧＣ−ＭＳ分析により確認すると、（２Ｒ）−１−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロール（化１），（２Ｓ）−１−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロール（化２），２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロール（化３）の３成分の混合物であった。
【００２２】
［製造例３］
１ｍＬの４％マルチトール水溶液に１０ｍＬの２％の過ヨウ素酸を添加し、室温にて４分間反応させた。反応終了後、塩化バリウムを添加し、生じた過ヨウ素酸バリウムの沈殿をろ別、除去した。さらに、イオン交換カラムで脱塩後、水素化ホウ素酸ナトリウムで還元し、活性炭クロマトグラフィーとＨＰＬＣにより分画精製し、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロール（化３）を得た。
【００２３】
次に、α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールのコラーゲン産生促進作用を示す。試料には、製造例１にて調製したα−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールを用いた。
【００２４】
評価は、以下の手順で行った。正常ヒト真皮線維芽細胞を１ウェル当たり２．０×１０４個となるように９６穴マイクロプレートに播種し、各試験濃度の試料を添加した１．０容量％牛胎仔血清添加ダルベッコ修正基礎培地（ＤＭＥＭ）にて３７℃で２４時間培養し、培養上清のコラーゲン量をＥｎｚｙｍｅ−ｌｉｎｋｅｄ  ｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔ  ａｓｓａｙ（ＥＬＩＳＡ）により測定した。同時に線維芽細胞数を計測し、細胞当たりのコラーゲン産生量を算出して、試料を含有しない対照の細胞当たりのコラーゲン産生量を１００とした相対値にて表１に示した。評価結果を、試料無添加のブランクにおける細胞賦活作用を１００とした相対値にて表１に示す。なお、表中の＊及び＊＊は、ｔ検定における有意確率Ｐ値に対し、有意確率５％未満（Ｐ＜０．０５）を＊で、有意確率１％以内（Ｐ＜０．０１）を＊＊で表したものである。
【００２５】
【表１】
2004331579.tif 000005
【００２６】
表１より明らかなように、α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールを０．０６〜１．０ｍｇ／ｍＬ添加した培地では、有意なコラーゲン産生促進作用が認められた。特に、α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールを０．１３〜１．０ｍｇ／ｍＬ添加した場合には、危険率１％未満で有意なコラーゲン産生促進作用が認められた。このことから、α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールは、優れたコラーゲン産生促進作用を有することが明らかとなった。
【００２７】
次に、α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールのヒアルロン酸産生促進作用について示す。試料には、製造例１にて調製したα−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールを用いた。
【００２８】
評価は、以下の手順で行った。正常ヒト真皮線維芽細胞を１ウェル当たり２．０×１０４個となるように９６穴マイクロプレートに播種し、各試験濃度の試料を添加した０．５容量％牛胎仔血清添加ダルベッコ修正基礎培地（ＤＭＥＭ）にて３７℃で５日間培養し、培養上清のヒアルロン酸量をＥｎｚｙｍｅ−ｌｉｎｋｅｄ  ｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔ  ａｓｓａｙ（ＥＬＩＳＡ）により測定した。同時に線維芽細胞数を計測し、細胞当たりのヒアルロン酸産生量を算出して、試料を含有しないブランクの細胞当たりのヒアルロン酸産生量を１００とした相対値にて表２に示した。なお、表中の＊及び＊＊は、ｔ検定における有意確率Ｐ値に対し、有意確率１％未満の危険率（Ｐ＜０．０１）で有意差が認められたものを＊＊で表したものである。
【００２９】
【表２】
2004331579.tif 000006
【００３０】
表２より、α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールを０．０６〜１．０ｍｇ／ｍＬ添加した場合に、ブランクと比較して、危険率１％未満で有意なヒアルロン酸産生促進作用が認められた。このことから、α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールは、優れたヒアルロン酸産生促進作用を有することが明らかとなった。
【００３１】
以上のことから、α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールは、優れたコラーゲン産生促進作用とヒアルロン酸産生促進作用を有し、真皮マトリックスの産生を促進することが明らかとなった。
【００３２】
続いて、本発明に係るα−Ｄ−グルコピラノシルグリセロールを有効成分とする真皮マトリックス産生促進剤、コラーゲン産生促進剤、ヒアルロン酸産生促進剤を配合した真皮マトリックス産生促進用、コラーゲン産生促進用、ヒアルロン酸産生促進用の皮膚外用剤や食品の処方例を例示するが、真皮マトリックス産生促進剤、コラーゲン産生促進剤、ヒアルロン酸産生促進剤としての利用は、これらに限定されるものではない。
【００３３】
［処方例１］乳液
2004331579.tif 000007
製法：（１）〜（６）の油相成分を８０℃にて加熱溶解する。一方（７）〜（１０）の水相成分を８０℃にて加熱溶解する。これに前記油相成分を攪拌しながら加え、ホモジナイザーにより均一に乳化する。乳化終了後、冷却を開始し、（１１）と（１２）を順次加え、均一に混合する。
【００３４】
［処方例２］化粧水
（１）エタノール                                      １５．０（重量％）
（２）ポリオキシエチレン（４０Ｅ．Ｏ．）硬化ヒマシ油    ０．３
（３）香料                                              ０．１
（４）精製水                                          ７８．３８
（５）クエン酸                                          ０．０２
（６）クエン酸ナトリウム                                ０．１
（７）グリセリン                                        １．０
（８）ヒドロキシエチルセルロース                        ０．１
（９）α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロール［製造例３］  ５．０
製法：（１）に（２）及び（３）を溶解する。溶解後、（４）〜（８）を順次添加した後、十分に攪拌し、（９）を加え、均一に混合する。
【００３５】
［処方例３］クリーム
（１）スクワラン                                      １０．０（重量％）
（２）ステアリン酸                                      ２．０
（３）水素添加パーム核油                                ０．５
（４）水素添加大豆リン脂質                              ０．１
（５）セタノール                                        ３．６
（６）親油型モノステアリン酸グリセリン                  ２．０
（７）グリセリン                                      １０．０
（８）パラオキシ安息香酸メチル                          ０．１
（９）アルギニン（２０重量％水溶液）                  １５．０
（１０）精製水                                          ４０．７
（１１）カルボキシビニルポリマー（１重量％水溶液）      １５．０
（１２）α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロール［製造例１］  １．０
製法：（１）〜（６）の油相成分を８０℃にて加熱溶解する。一方（７）〜（１０）の水相成分を８０℃にて加熱溶解する。これに前記油相成分を攪拌しながら加え、ホモジナイザーにより均一に乳化する。乳化終了後、（１１）を加え、冷却を開始し、４０℃にて（１２）を加え、均一に混合する。
【００３６】
［処方例４］美容液
2004331579.tif 000008
製法：（１）〜（６）の水相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解する。一方、（７）〜（１４）の油相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解する。次いで、上記水相成分に油相成分を添加して予備乳化を行った後、ホモミキサーにて均一に乳化する。乳化終了後に冷却を開始し、５０℃にて（１５）を加える。さらに４０℃まで冷却し、（１６）を加え、均一に混合する。
【００３７】
［処方例５］水性ジェル
（１）カルボキシビニルポリマー                          ０．５（重量％）
（２）精製水                                          ８６．７
（３）水酸化ナトリウム（１０重量％水溶液）              ０．５
（４）エタノール                                      １０．０
（５）パラオキシ安息香酸メチル                          ０．１
（６）香料                                              ０．１
（７）α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロール［製造例４］  ２．０
（８）ポリオキシエチレン（６０Ｅ．Ｏ．）硬化ヒマシ油    ０．１
製法：（１）を（２）に加え、均一に攪拌した後、（３）を加える。均一に攪拌した後，（４）に予め溶解した（５）を加える。均一に攪拌した後、予め混合しておいた（６）〜（８）を加え、均一に攪拌混合する。
【００３８】
［処方例６］クレンジング料
（１）スクワラン                                      ８１．０（重量％）
（２）イソステアリン酸ポリオキシエチレングリセリル    １５．０
（３）精製水                                            ３．０
（４）α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロール［製造例４］  １．０
製法：（１）と（２）を均一に溶解する。これに、（３）と（４）を順次加え、均一に混合する。
【００３９】
［処方例７］洗顔フォーム
（１）ステアリン酸                                    １６．０（重量％）
（２）ミリスチン酸                                    １６．０
（３）親油型モノステアリン酸グリセリン                  ２．０
（４）グリセリン                                      ２０．０
（５）水酸化ナトリウム                                  ７．５
（６）ヤシ油脂肪酸アミドプロピルベタイン                １．０
（７）精製水                                          ３６．５
（８）α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロール［製造例３］  １．０
製法：（１）〜（４）の油相成分を８０℃にて加熱溶解する。一方（５）〜（７）の水相成分を８０℃にて加熱溶解し、油相成分と均一に混合撹拌する。冷却を開始し、４０℃にて（８）を加え、均一に混合する。
【００４０】
［処方例８］メイクアップベースクリーム
（１）スクワラン                                      １０．０（重量％）
（２）セタノール                                        ２．０
（３）グリセリントリ−２−エチルヘキサン酸エステル      ２．５
（４）親油型モノステアリン酸グリセリル                  １．０
（５）プロピレングリコール                            １１．０
（６）ショ糖脂肪酸エステル                              １．３
（７）精製水                                          ７０．４
（８）酸化チタン                                        １．０
（９）ベンガラ                                          ０．１
（１０）黄酸化鉄                                          ０．４
（１１）香料                                              ０．１
（１２）α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロール［製造例２］  ０．２
製法：（１）〜（４）の油相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解する。一方、（５）〜（７）の水相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解し、これに（８）〜（１０）の顔料を加え、ホモミキサーにて均一に分散させる。この水相成分に前記油相成分を加え、ホモミキサーにて乳化する。乳化終了後に冷却を開始し、４０℃にて（１１）と（１２）の成分を加え、均一に混合する。
【００４１】
［処方例９］乳液状ファンデーション
2004331579.tif 000009
製法：（１）〜（６）の油相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解する。一方、（７）〜（１０）の水相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解し、これに（１１）〜（１５）の顔料を加え、ホモミキサーにて均一に分散する。油相成分を加え、乳化を行う。乳化終了後に冷却を開始し、４０℃にて（１６）と（１７）の成分を順次加え、均一に混合する。
【００４２】
［処方例１０］パック
（１）精製水                                          ５８．９（重量％）
（２）ポリビニルアルコール                            １２．０
（３）エタノール                                      １０．０
（４）グリセリン                                        ５．０
（５）ポリエチレングリコール（平均分子量１０００）      ２．０
（６）α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロール［製造例２］  １２．０
（７）香料                                              ０．１
製法：（２）と（３）を混合し、８０℃に加温した後、８０℃に加温した（１）に溶解する。均一に溶解した後、（４）と（５）を加え、攪拌しながら冷却を開始する。４０℃まで冷却し、（６）と（７）を加え、均一に混合する。
【００４３】
［処方例１１］入浴剤
（１）香料                                              ０．３（重量％）
（２）α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロール［製造例１］  １．０
（３）炭酸水素ナトリウム                              ５０．０
（４）硫酸ナトリウム                                  ４８．７
製法：（１）〜（４）を均一に混合する。
【００４４】
［処方例１２］飲料
（１）α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロール［製造例１］  ５．０（重量％）
（２）エリスリトール                                    １．０
（３）クエン酸                                          ０．１
（４）ステビア                                          ０．０１
（５）精製水                                          ９３．８９
製法：（１）〜（５）を均一に混合する。
【００４５】
［処方例１３］キャンディー
（１）白糖                                            ５０．０（重量部）
（２）水飴                                            ２４．９
（３）α−Ｄ−グルコピラノシルグリセロール［製造例１］  ２５．０
（４）香料                                              ０．１
製法：（１）〜（２）を加熱混合均一化した後冷却し、７０℃で（３）〜（４）の成分を添加し、混合均一化した後成型する。
【００４６】
【発明の効果】
以上詳述したように、本発明によれば、コラーゲン産生促進作用とヒアルロン酸産生促進作用を有し、真皮のマトリックス産生を促進する真皮マトリックス産生促進剤を提供することができる。