(57)【要約】【課題】  新規な抗ウイルス剤の提供。【解決手段】  化１で表わされるβ−Ｌヌクレオチド化合物。    【化１】2004244422.tif 000017【選択図】      なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記の構造式：
【化１】
2004244422.tif 000016
（Ｘはハロゲン原子である）
で表される、β−Ｌヌクレオシド化合物。
【請求項２】
請求項１に記載の化合物を、医薬として許容される添加剤、担体又は賦形剤と組み合わせて含んで成る医薬組成物。
【請求項３】
請求項１に記載の化合物にＢ型肝炎ウイルス（HBV）を生体外で暴露することを含んで成る、Ｂ型肝炎ウイルスの増殖又は複製を阻害する方法。
【請求項４】
請求項１に記載の化合物を含んで成る、Ｂ型肝炎ウイルスの増殖又は複製阻害剤。
【請求項５】
請求項１に記載の化合物を含んで成る、Ｂ型肝炎ウイルスにより惹起される感染を有する患者の治療剤。
【請求項６】
請求項１に記載の化合物にヒト免疫不全ウイルス（HIV）を生体外で暴露することを含んで成る、ヒト免疫不全ウイルスの増殖又は複製を阻害する方法。
【請求項７】
請求項１に記載の化合物を含んで成る、ヒト免疫不全ウイルスの増殖又は複製阻害剤。
【請求項８】
請求項１に記載の化合物を含んで成る、ヒト免疫不全ウイルスにより惹起される感染を有する患者の治療剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ジデオキシヌクレオシド類似体に関する。この化合物はレトロウイルス（特にＢ型肝炎ウイルス）に対して有意な活性を示す。本発明はまた、これらの化合物を含有する薬剤組成物、Ｂ型肝炎ウイルスの増殖または複製の阻害方法、および動物（特にヒト）におけるその感染の治療方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
Ｂ型肝炎ウイルス(HBV) 感染症は、世界中で大きな医療問題である。 HBVはＢ型肝炎の急性および慢性型の病原因子である。全世界で２億人以上が HBVの慢性キャリーアーであると推定されている。
HBVはヘパドナウイルス (Hepadnaviridae) 科に属し、これは、主に小さな齧歯類に感染する多くの関連ウイルスを含む。ヘパドナウイルス (Hepadnaviridae) 科の多くのメンバーは、形態学的外観、抗原性の構成および DNAサイズや構造などの共通の特徴がある。この科のメンバーによる感染後の病理学的症状は非常によく似ている。研究では、この科のウイルスの複製と拡散は、 RNA中間体の逆転写酵素に依存している。
【０００３】
HBV自身は２本鎖 DNAウイルスである。その DNAポリメラーゼは、 DNA依存性および RNA依存性 RNA合成の双方を触媒する。 HBVの生活環は、その DNA複製に逆転写酵素が関与する。現在 HBV感染症の治療の有効な薬剤は存在しない。
Ｂ型肝炎ウイルス感染症の最適な防御法は、ワクチン接種である。しかし免疫化計画が登場しても、この疾患はいまだに世界中の重大な問題である。急性Ｂ型肝炎ウイルス感染症は一般に自己制限的であるが、多くの例でこの疾患は慢性状態に進展する。Ｂ型肝炎ウイルス感染症はまた、劇症肝炎の危険を引き起こす。さらにＢ型肝炎ウイルス感染症は、肝細胞癌に密接に関連している。
【０００４】
慢性Ｂ型肝炎ウイルス感染症の現在の治療法は、インターフェロンアルファの投与、およびアデノシンアラビノシドまたはその一リン酸塩(ara-AMP) のような種々のヌクレオシド類似体の投与がある。これらの治療法はあまり成功していない。肝炎の治療のために AZT、アシクロビルおよびホスカーネット (foscarnet) (劇症肝炎の場合) も使用されているが、ほとんどうまくいっていない。文献には培養中のＢ型肝炎ウイルスに対して強力な活性を示すいくつかの２’，３’−ジデオキシヌクレオシド類似体が報告されている。
【０００５】
特に、ヌクレオチド類似体（＋）および（−）−２’，３’−ジデオキシ−３’−チアシチジン((±）SddC) は、Ｂ型肝炎ウイルスの強力な阻害物質であることが証明されており、（−）異性体は、その強力な活性とともに比較的毒性が低い点で特に興味深い。５−フルオロ類似体((±）５−FSddC)も、強力な活性を示すことが証明された（チャン(Chang) ら、Jour.Biol.Chem., 267, 222414, 1992およびチャン(Chang) ら、Jour.Biol.Chem., 267, 13938, 1992)。
【０００６】
最近さかんに研究されているがその治療がうまく行っていない疾患は、AIDSである。AIDSは、ヒトＴリンパ球親和性ウイルス III型(HTLVIII) 、リンパ節障害関連ウイルス(LAV) 、またはヒト免疫不全症ウイルス(HIV) として知られている、ヒトに対する病原性レトロウイルスにより引き起こされる一般的に致死性の疾患である。
【０００７】
他のＴリンパ球親和性レトロウイルスであるHTLVＩやHTLVIIに比較して、HTLVIII (HIV) やリンパ節障害関連ウイルスは、不死化活性を有さない非形質転換性細胞変性ウイルスである。AIDSの進展においてウイルスの複製反応が重要な過程であると考えられている。さらに HIVの合成や生活環、従って疾患の進展において、逆転写酵素が基本的な役割を果たしていると考えられている。従って、未感染の宿主細胞にはこの酵素が存在しないため、この酵素はAIDSに対する薬剤の開発のための、特に適した標的であると考えられている。最近研究者達は、抗AIDS剤として可能性のあるいくつかの抗ウイルス剤（特に、リバビリン(ribavirin) やスラミン(suramin) を含む）を検討した。
【０００８】
HIV感染症において多くのヌクレオシドが重要な役割を果たしてきた。最近の報告でその有効性に対して疑問視されているが、３’−アジド−３’デオキシチミジン(AZT) はその第一の例である。また多くの２’，３’−ジデオキシヌクレオシドがヒト免疫不全症ウイルス(HIV) に対して有意な活性を示す：その例としては、３’−デオキシ−２’，３’−ジデヒドロチミジン(D4T) 、２’，３’−ジデオキシ−２’，３’−ジデヒドログアノシンの炭素環式類似体（カルボビル(Carbovir)) 、２’，３’−ジデオキシシチジン(DDC) 、３’−アジド−２’，３’−ジデオキシグアノシン(AZG) 、２’，３’−ジデオキシイノシン(DDI) 、２’，３’−ジデオキシ−２’，３’−ジデヒドロシチジン(D4C) 、３’−フルオロ−２，３−ジデオキシアデノシン、３’−フルオロ−３’−デオキシチミジンおよび３’−アジド−２’，３’−ジデオキシウリジンなどがある。ラーダー (Larder) ら、Antimicrob.Agents Chemother., 34, 436 (1990)を参照。これらの類似体のあるもの(ddCを含む）は、現在抗 HIV剤として使用されている。ジデオキシヌクレオシドの中では、 ddCが HIVの最も強力な阻害物質であることが証明されている。
【０００９】
HBVや HIVに対する有効な治療プロトコールの発見に研究が集中して行われており、いくつかの強力な抗 HBVヌクレオシドや抗 HIVヌクレオシド類似体が合成され性状解析されているが、理想的な薬剤はまだ見つかっていない。
レトロウイルス感染症(HBVおよび HIVを含む) に対する治療プロトコールを最適化するための大きな問題は、良好な抗ウイルス活性を有する一方、抗ウイルスヌクレオシドが示す可能性のある宿主細胞に対する毒性や抗ミトコンドリア DNA作用を最小にすることである。
【００１０】
本発明は、強力な抗ウイルス活性（特に、抗 HBV活性および抗 HIV活性）を示し、宿主細胞に対する毒性が有意に小さい合成ヌクレオシドに関する。先行技術の化合物と比較すると、本発明の類似体は HBV感染に対する実行可能な治療アプローチであり、 HIV感染症やAIDSの治療に対して改善されたアプローチである。
【発明の開示】
【００１１】
本発明は、Ｌ−型 (L-configuration) (天然に存在するＤ−型とは反対のもの）のジデオキシリボフラノシル残基を含有するある種のジデオキシヌクレオシド類似体が、Ｂ型肝炎ウイルス(HBV) に対して予想外の活性を示すという、驚くべき発見に関する。特に本発明の化合物は、ウイルスの複製を強力に阻害するとともに宿主細胞（すなわち、動物またはヒト組織）に対する毒性が非常に小さい。これは予想外の結果である。
【００１２】
本発明の化合物は、 HBV、 HIVおよび他のレトロウイルス（最も好適にはHBV)の増殖または複製を阻害する物質として主要な有用性を示す。これらの物質のある種のものは、他のウイルスの増殖または複製の阻害、または他のウイルス感染症、ある種の糸状菌感染症、微生物感染症および／または関連疾患状態の治療にも有用である。さらに、これらの物質のある種のものは、関連する化学物質の産生または合成の中間体として有用である。
【００１３】
本発明の化合物は、動物（特に、Ｂ型肝炎ウイルス感染症に罹っているヒト）をおそうウイルス感染症を防ぐのに特に有用である。現在真の治療法がない疾患（慢性 HBV感染症）に対する治療薬として、本発明の化合物は大きな可能性を有する。本発明の化合物は、単独でまたは他の治療法と組合せて使用することができる。
本発明の化合物は、Ｌ−型（天然の糖残基のＤ−型に対して）のジデオキシリボフラノシル残基を含有するジデオキシヌクレオシド類似体である。アデニン、グアニン、シトシン、チミンそしてウラシル、およびこれらの塩基の置換誘導体を含有する天然または合成核酸を含む本発明の化合物が開示される。本発明の化合物はまた、リボフラノシル残基のいくつかの修飾物質を含有する。
【００１４】
本発明はまた、少なくとも１つの開示されたＬ−２’，３’−ジデオキシヌクレオシド類似体の阻害的有効量または濃度に、ウイルスを暴露することよりなる、 HBVの増殖または複製を阻害する方法に関する。本発明は、関連する抗 HBV化合物の活性の測定、および本発明の化合物の１つに対する患者の HBV感染に対する感受性の測定のような比較試験で使用することができる。本発明はまた、ウイルス感染症を治療するのに使用することもできる。
【００１５】
本発明の治療的側面は、治療すべき動物またはヒト患者のウイルスの増殖または複製を阻害するために、抗ウイルス的に有効量の本発明の化合物を投与することよりなる、動物またはヒト患者のレトロウイルス感染症（特に、ヒトの HBVまたは HIV感染症）の治療法に関する。
これらの新規の化合物に基づく薬剤組成物は、薬剤学的に許容される添加剤、担体または賦形剤と随時組合せた、ウイルス感染症（好ましくはＢ型肝炎ウイルス、そしてある場合には HIV感染症）を治療するのに、治療的有効量の前述の化合物よりなる。
【００１６】
薬剤投与型の化合物のあるものは、ウイルス感染の増殖または複製を阻害するために、予防薬として使用することができる。これらは抗 HBV剤または抗 HIV剤として特に適している。ある薬剤投与型では、本発明の化合物のプロドラッグ型が好適である。
理論に限定されるつもりではないが、本発明の化合物は HBVおよび HIVの逆転写酵素の抗代謝物として機能することにより、 HBVまたは HIVの増殖または複製に対する阻害効果を誘導すると考えられている。
本発明の化合物は当業者に公知の合成方法により用意に産生され、種々の化学合成法を含む。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１７】
本発明を記載するのに以下の定義が使用される。
「ジデオキシ」という用語は、本明細書において本化合物の糖の２’および３’位にヒドロキシではなく水素を有するリボフラノシル残基を説明するのに使用される。
「ジデヒドロ」という用語は、本明細書において２重結合を有するリボフラノシル残基を説明するのに使用される。例えば、２’，３’−ジデヒドロは、糖の２’と３’炭素の間の２重結合を含有するリボフラノシル残基を説明するのに使用される。
【００１８】
「阻害的有効濃度」または「阻害的有効量」という用語は、感受性のあるウイルス（特に HBVまたは HIVを含む）の増殖または複製を実質的にまたはかなり阻害する、本発明の化合物の濃度または量を説明するのに使用される。
「治療的有効量」という用語は、レトロウイルス感染症（特にヒトの HBVまたは HIV感染症）を治療するのに治療的に有効な本発明の化合物の濃度または量を説明するのに使用される。
【００１９】
「Ｌ−型」(L-configuration) という用語は、本発明の化合物のジデオキシリボフラノシル残基の化学的配置を説明するのに使用される。本発明の化合物の糖残基のＬ−型は、天然に存在するヌクレオシドであるシチジン、アデノシン、チミジン、グアノシンおよびウリジンのＤ−型のリボース糖残基と反対のものである。
【００２０】
本発明は、Ｌ−型（天然に存在するＤ−型とは反対のもの）のジデオキシリボフラノシル残基を含有するジデオキシヌクレオシド類似体は、Ｂ型肝炎ウイルス(HBV) に対して予想外の活性を示すという、驚くべき発見に関する。特に本発明の化合物は、ウイルスの複製に対して強力な阻害を示し、宿主細胞（すなわち、動物またはヒト組織）に対して毒性が非常に小さい。
【００２１】
本発明はまた、特に現在入手できる最も有効な抗 HIV化合物の１つとして使用されている１−（２，３−ジデオキシ−ベータ−Ｄ−リボフラノシル）シトシン（ジデオキシシチジンまたはddC)と比較して、１−（２，３−ジデオキシ−ベータ−Ｌ−リボフラノシル）−５−フルオロシトシン（β−Ｌ−FddC）は比較的毒性の小さい極めて有効な抗 HIV剤であるという、予想外の発見に関する。β−Ｌ−FddCは、特に類似の化合物の抗 HIV活性と比較した時、非常に優れた抗 HIV活性と宿主に対する比較的限定された毒性を示すであろう。
【００２２】
本発明は、構造：
【化１】
2004244422.tif 000002
【００２３】
ＲはＦ、Cl、Br、Ｉまたは CH3である）
の第１の群の化合物に関する。
この第１群の化合物において、Ｒは好ましくはＨまたはＦである。
【００２４】
この発明はまた、構造：
【化２】
2004244422.tif 000003
【００２５】
（式中、ＲはＨ、Ｆ、Cl、Br、Ｉまたは CH3である）
の第２の群の化合物にも関する。
この第２の群の化合物において、Ｒは好ましくはＨまたはＦ、最も好ましくはＨである。
【００２６】
本発明はまた、構造：
【化３】
2004244422.tif 000004
【００２７】
（式中、ＸはＨ、Ｆ、Cl、Br、Ｉ、 CH3、−Ｃ・CH、−HC＝CH2 または
【化４】
2004244422.tif 000005
である）の第３の群の化合物に関する。
この第３の群の化合物において、Ｘは好ましくはＨ、Ｆまたは CH3、最も好ましくは CH3である。
【００２８】
本発明はまた、構造：
【化５】
2004244422.tif 000006
【００２９】
Ｒ’はＨまたは CH3であり；
Ｒ''はＨまたは CH3であり；
Ｒ’とＲ''がＨである時、Ｙ''はＨ、Ｆ、Br、Cl、または NH2であり、
Ｒ’またはＲ''の少なくとも１つが CH3である時、Ｙ''はＨであり；
そしてＺはＨまたは NH2である）
の第４の群の化合物に関する。
【００３０】
この本発明の第４の群の化合物において、Ｒ’およびＲ''は好ましくはＨであり、Ｙ''は好ましくはＨまたはＲであり、最も好ましくはＨである。Ｚは好ましくは NH2である。
本発明はまた、構造：
【００３１】
【化６】
2004244422.tif 000007
【００３２】
（式中、ＷはＨまたは NH2である）を有する化合物に関する。
第１の面において、本発明は、構造：
【００３３】
【化７】
2004244422.tif 000008
ＲはＨ、Ｆ、Cl、Br、Ｉまたは CH3である）
【００３４】
の化合物の阻害的有効濃度に、ウイルスを暴露させることよりなる、Ｂ型肝炎ウイルスの増殖または複製を阻害するための方法に関する。
この第１の方法の面において、Ｒは好ましくはＨまたはＦである。
本発明のＢ型肝炎ウイルスの増殖または複製を阻害するための第２の方法の面は、構造：
【００３５】
【化８】
2004244422.tif 000009
の化合物の阻害的有効濃度に、ウイルスを暴露させることよりなる。
【００３６】
この第２の方法の面において、ＸはＨ、Ｆまたは CH3であり、最も好ましくは CH3である。
本発明のＢ型肝炎ウイルスの増殖または複製を阻害するための第３の方法の面は、構造：
【００３７】
【化９】
2004244422.tif 000010
【００３８】
Ｒ’はＨまたは CH3であり；
Ｒ''はＨまたは CH3であり；
Ｒ’とＲ''がＨである時、Ｙ''はＨ、Ｆ、Cl、Br、または NH2であり、
Ｒ’またはＲ''の少なくとも１つが CH3である時、Ｙ''はＨであり；
そしてＺはＨまたは NH2である）
の化合物の阻害的有効濃度に、ウイルスを暴露させることよりなる。
この本発明の第３の方法の面において、Ｒ’およびＲ''は好ましくはＨであり、Ｚは好ましくはＨまたは NH2である。
【００３９】
本発明のＢ型肝炎ウイルスの増殖または複製を阻害するための第４の方法の面は、構造：
【化１０】
2004244422.tif 000011
【００４０】
（式中、ＴはＨ、Ｆ、Cl、Brまたは NH2である）の化合物の阻害濃度に、ウイルスを暴露させることよりなる。
この第４の方法の面において、Ｔは好ましくはＨまたはＦであり、最も好ましくはＨである。
【００４１】
本発明のＢ型肝炎ウイルスの増殖または複製を阻害するための第５の方法の面は、構造：
【化１１】
2004244422.tif 000012
（式中、ＷはＨまたは NH2である）の化合物の阻害濃度に、ウイルスを暴露させることよりなる。
【００４２】
本発明のヒト免疫不全症ウイルスの増殖または複製を阻害するための本発明の第６の方法の面は、構造：
【化１２】
2004244422.tif 000013
ＲはＦである）の化合物の阻害濃度に、ウイルスを暴露させることよりなる。
【００４３】
本発明はまた、構造：
【化１３】
2004244422.tif 000014
【００４４】
ＲはＦである）の化合物の治療的有効濃度を、患者に投与することよりなる、ヒト免疫不全症ウイルスにより引き起こされる感染症に罹っている患者を治療するための方法に関する。
【００４５】
本発明の化合物は、主にその抗レトロウイルス活性および特にその抗 HBVまたは抗 HIV活性に有用である。本化合物はまた、抗真菌剤または抗菌剤としてのその生物活性により有用である。さらにこれらの組成物はまた、治療薬または他の目的に有用な他のヌクレオシドまたはヌクレオチド類似体の化学合成の中間体としても使用できる。好ましくは、これらの組成物は新規の抗 HBV剤として、さらにβ−Ｌ−FddCの場合は抗 HIV剤としても使用される。
【００４６】
一般に、本発明の最も好ましい抗ウイルス化合物（特に、抗 HBVまたは抗 HIV化合物）は、宿主細胞への細胞毒性が小さくかつ標的ウイルスに対してより活性がある化合物である。薬剤投与型のある種の化合物は、予防薬として使用することができる。これらは抗ウイルス剤（特に、抗 HBV剤または抗 HIV剤）として特に適している。患者への毒性が非常に小さいため、β−Ｌ−FddCは HIVを阻害しAIDSを予防するのに特に有効な抗予防薬である。
【００４７】
本発明の化合物は、当業者に公知の方法により容易に産生され、後述の実施例にさらに詳述されている化学合成法を含む。一般に本発明の化合物は、適当な糖シントンにあらかじめ合成したヌクレオシド塩基を縮合させて合成し、これが最終的に目的のＬ−型ジデオキシリボフラノシル残基を有するヌクレオシド類似体を与える。ある場合には、特定のヌクレオシド類似体についての合成経路は一般的な合成経路からはずれることがある（例えば、実施例１および反応工程図３に記載の１−（２，３−ジデオキシ−ベータ−Ｌ−リボフラノシル）シトシンおよび１−（２，３−ジデオキシ−ベータ−Ｌ−リボフラノシル）ウラシル）。
【００４８】
本発明の種々の組成物の化学合成において、当業者は余分な実験をすることなく本発明を実施することができるであろう。特に当業者は、塩基の目的の位置に置換基、または糖残基上の目的の位置に置換基を導入するために実施すべき種々の工程は認識できるであろう。さらに官能基（特にヒドロキシ基またはアミノ基）を「保護」するため、およびこれらと同じ官能基を「脱保護」するためにとるべき化学工程も、合成の条件下で適宜理解できるであろう。
【００４９】
本発明の治療的側面は、治療すべき動物またはヒト患者のウイルスの増殖または複製を阻害するのに、抗ウイルス的に有効な量の本発明の化合物を投与することよりなる、動物またはヒト患者のレトロウイルス感染症（特に、ヒトの HBVまたは HIV感染症）の治療方法に関する。
【００５０】
これらの新規化合物に基づく薬剤組成物は、薬剤学的に許容される添加剤、担体または賦形剤と随時組合せた、ウイルス感染症（好ましくはＢ型肝炎ウイルスまたは HIV感染症）を治療するのに有効な量の前述の化合物よりなる。治療的有効量は、治療すべき感染症または症状、その重症度、使用される治療法、使用される薬剤の薬剤動力学、および治療すべき患者（動物またはヒト）により、変わることは理解するであろう。
【００５１】
本発明の薬剤的側面において、本発明の化合物は好ましくは薬剤学的に許容される担体と混合して製剤化される。一般に薬剤は経口投与できる型で投与することが好ましいが、いくつかの製剤は非経口、静脈内、筋肉内、経皮、口腔内、皮下、坐剤または他の投与経路を介して投与される。静脈内または筋肉内投与用製剤は、好ましくは無菌生理食塩水液として投与される。
【００５２】
もちろん当業者は、本明細書の記載内で、製剤を修飾して本発明の組成物を不安定にしたりその治療活性について妥協することなく、特定の投与経路用の多くの製剤を提供することができる。特に本化合物を例えば水や他の担体中により溶解しやすくする修飾は、小さな修飾（塩形成、エステル化など）により可能であり、これは当業者の技術の範囲内である。患者で最大の効果が得られるように本化合物の薬剤動力学を管理するために、投与経路や投与方法を修飾することも当業者の技術範囲内である。
【００５３】
ある薬剤投与型においては、本化合物のプロドラッグ（特に、本化合物のアシル化（アセチル化または他の）誘導体、ピリジンエステルおよび種々の塩の型）が好ましい。当業者は、宿主生物または患者の標的部位への活性化合物の送達を促進するために、本化合物をプロドラッグ型に容易に修飾する方法は理解できるであろう。当業者は、プロドラッグ型の薬剤動力学パラメータを最大限に利用して、宿主生物または患者の標的部位への本化合物を適宜送達して、本化合物の目的の効果を最大にすることもできるであろう。
【００５４】
本発明の治療活性のある製剤中に含まれる化合物の量は、その最も好適な実施態様において、 HBV感染症（また、β−Ｌ−FddCの場合は HIV感染症）のような感染症または症状を治療するのに有効な量である。一般に投与型の本化合物の治療的有効量は、通常約１mg／kgよりやや少ない量から約25mg／kg患者体重またはこれよりかなり多い量までの範囲であり、使用される化合物、治療すべき症状または感染症および投与経路に依存する。 HBV感染症の場合は、本化合物は好ましくは、約１mg／kgから約25mg／kgの範囲の量で投与される。この投与範囲は、患者の血液１ml当たり約0.04から約 100マイクログラム／mlの範囲の活性化合物の有効血中濃度を与える。
【００５５】
活性化合物の投与は、連続的（静脈内点滴）なものから、１日当たり数回の経口投与（例えば、１日４回）までの範囲であり、特に経口、局所、非経口、筋肉内、静脈内、皮下、経皮（これは貫通増強剤を含む）、口腔内および坐剤投与を含んでよい。
【００５６】
本発明の薬剤組成物を調製するためには、好ましくは投薬量を産生するための通常の薬剤混合法に従って、本発明の１つまたはそれ以上の貸せ化合物の治療的有効量を、薬剤学的に許容される担体と緊密に混合する。投与法（例えば経口投与または非経口投与）に適した製剤型に依存して、担体は広範囲の型を取ることができる。経口投与型の薬剤組成物を調製するには、任意の通常の薬剤媒体を使用することができる。
【００５７】
例えば懸濁剤、エリクシール剤および液剤のような液体の経口投与製剤については、適当な担体や添加剤（水、グリコール、油、アルコール、香味剤、保存剤、着色剤など）を使用することができる。粉末剤、錠剤またはカプセル剤のような固体経口投与製剤や坐剤のような固体製剤については、適当な担体や添加剤（デンプン、糖担体（ブドウ糖、マンニトール、乳糖および関連する担体を含む）、希釈剤、顆粒化剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤など）を使用することができる。必要であれば、錠剤やカプセル剤は、標準的方法により腸溶コーティングまたは徐放製剤にしてもよい。
【００５８】
非経口用製剤には、担体は通常無菌水または塩化ナトリウム水溶液よりなるが、他の成分（分散を助けるものを含む）を含有してもよい。もちろん、無菌水を使用し無菌に維持される場合は、組成物や担体も滅菌しなければならない。注射用懸濁液を調製することもでき、この場合適当な液体担体、懸濁剤などを使用することもできる。
【００５９】
本発明の特に好適な実施態様において、本化合物や組成物は、哺乳動物と特にヒトのレトロウイルス感染症を治療するのに使用される。最も好適な実施態様において、本化合物は HBV感染症（慢性 HBV感染症を含む）を治療するのに使用される。化合物β−Ｌ−FddCは、 HIV感染症（AIDSを含む）の治療に使用すると有効である。一般に HBVまたは HIV感染症を治療するには、組成物は好ましくは、約 250マイクログラムから約 500mgまでの量でまたはそれ以上の量で１日に４回までの経口投与型で投与される。本化合物は好ましくは経口投与されるが、非経口的、局所的または坐剤型で投与してもよい。
【００６０】
本発明の化合物は宿主細胞に対する毒性が予想外に小さいため、予防的に使用して感染症の防止またはウイルス感染症に関連した臨床症状の発生を防止することが有効である。例えば本発明は、ウイルス感染症（特に HBVまたは HIV感染症）の治療方法または予防方法を包含する。この予防方法は、治療の必要な患者に、ウイルス感染症を緩和および／または防止するのに有効な量の本発明の化合物を投与することよりなる。
【００６１】
本発明の予防方法において、使用される抗ウイルス化合物は毒性が小さく、好ましくは患者に対して無毒であることが好ましい。本発明のこの面において、使用される化合物はウイルスに対して最大限に有効であり、患者に対する毒性が最小であることが好ましい。β−Ｌ−FddCの場合は、この化合物は、治療のためには、 HIVの急速な増殖を防止するか、または患者のAIDSの発症を長引かせるための予防薬と同じ投与範囲（すなわち、約 250マイクログラムから約 500mgで、経口型で１日１回から４回）で投与される。
【００６２】
さらに本発明の化合物は、単独でまたは他の薬剤（特に本発明の他の化合物を含む）と一緒に投与してもよい。本発明のある化合物は、代謝を低下させ他の化合物を不活性化することにより、本発明のある薬剤の生物活性を増強するのに有効であり、そのためこの目的の効果を得るため同時投与される。β−Ｌ−FddCの場合、この化合物は、現在使用されている１つまたはそれ以上の標準的抗 HIV剤（特に、 AZT、 DDC、および DDIを含む) と組合せて投与することが有効である。
【００６３】
HBV感染症を治療するために特に好適な薬剤組成物と方法において、阻害的有効量の１−（２，３−ジデオキシ−ベータ−Ｌ−リボフラノシル）シトシンおよび／または１−（２，３−ジデオキシ−ベータ−Ｌ−リボフラノシル）５−フルオロシトシンは、 HBV感染症の症状を緩和するために、 HBV感染症に罹っている患者に投与される。
HIV感染症を治療するために特に好適な薬剤組成物と方法において、阻害的有効量の１−（２，３−ジデオキシ−ベータ−Ｌ−リボフラノシル）５−フルオロシトシンは、 HBV感染症および／またはAIDSの症状を緩和するために、そのような疾患に罹っている患者に投与される。
【００６４】
理論に限定されるつもりはないが、本発明の化合物は、ウイルスの逆転写酵素の抗代謝物として機能することにより、主に HBVまた HIVの増殖または複製に対して阻害効果を誘導すると考えられる。
純粋に例示を目的として、以下の実施例により本発明を説明する。これらの実施例は本発明を限定するものではなく、本発明の精神と範囲を逸脱することなく、その細部の変更が可能であることは当業者は理解できるであろう。
【実施例】
【００６５】
１．Ｌ−２’，３’−ジデオキシヌクレオシド類似体の化学合成
実施例１−９．
一般に本発明の化合物は後述の化学合成法により合成される。本化合物を合成するために使用される化学合成方法は、文献記載の方法を修飾したものである。本化合物を合成するために修飾した関連化学反応の文献は、後述の実施例に記載されている。
【００６６】
融点はメルテンプ(MelTemp) 装置を用いて測定し、補正はしていない。プロトン NMRスペクトルは、バリアン(Varian) EM390またはブルーカー(Bruker) WM250装置で記録し、(CH3)4Siから下へのppm(デルタ) として記録されている。紫外線スペクトルはベックマン25分光光度計で記録した。分析薄層クロマトグラフィー(TLC) は、メルク(Merck) EMシリカゲル60F254プレコートシートを用いて行なった。カラムクロマトグラフィーではメルク(Merck) EMシリカゲルを使用し、特に明示していない場合はアルファおよびベータアノマー混合物を分離するために標準的有機溶媒 (塩化メチレン／メタノールまたは塩化メチレン／酢酸エチルを種々の容量／容量比）を使用した。
【００６７】
実施例１．１−（２，３−ジデオキシ−ベータ−Ｌ−リボフラノシル）シトシン、１−（２，３−ジデオキシ−ベータ−Ｌ−リボフラノシル）−５−フルオロ−、−５−ブロモ−、−５−クロロ−、−５−ヨード−および−５−メチルシトシンの合成
Ｄ−リボース誘導体の合成のためのタグチ(Taguchi) らの方法(Tetrahedron, 30, 3532, 1974) とファリナ (Farina) らの方法(Tetrahedron Lett., 29, 1239, 1988) は、対応するＬ−リボース誘導体の合成への我々の合成アプローチのモデルを与えた。Ｄ−グルタミン酸（１）の亜硝酸アミノ化によりラクトン２が得られ、次にこの化合物２をエタノールと触媒量のｐ−トルエンスルホン酸で処理して、対応するエステル３に変換した（反応工程図１を参照）。
【００６８】
化合物３を NaBH4のエタノール液で還元して、（Ｒ）−４−（ヒドロキシメチル）−４−ブチロラクトン（４）を得た。化合物４のヒドロキシ基をイミダゾールを触媒として塩化メチレン中の塩酸tert−ブチルジメチルシリルで保護して、（Ｒ）−４−｛〔 (tert−ブチルジメチルシリル）オキシ｝メチル）−４−ブチロラクトン（５）を得て、次にこれを水素化ジイソブチアルミニウム(DIBAL) のトルエン溶液で−78℃で還元して、対応するラクトール６に変換した。
【００６９】
６を無水酢酸とトリエチルアミンでアセチル化して、主要な糖中間体である１−Ｏ−アセチル−５−Ｏ−（tert−ブチルジメチルシリル）−２’，３’−ジデオキシ−Ｌ−リボフラノース（７）をアルファとベータアノマーの混合物として得た：質量スペクトル、ｍ／ｅ 231(M+ -CH3CO) 、215 (M+ -CH3COO)；NMR (CDCl3))デルタ0.10 (s, 6H, SiMe2) 、0.95(s, 9H, tert−ブチル) 、1.85-2.15 (m, 7H, CH2CH2およびCOCH3)、3.50-3.65 (M, 2H, 5-H)、4.10-4.30 (m, 1H, 4-H)、6.20-6.30 (m, 1H, 1-H)。
【００７０】
ウラシル、５−フルオロ、５−ブロモ−、５−クロロ−および５−ヨードウラシルおよびチミンを、オカベ(Okabe) らの方法(J.Org.Chem., 53, 4780, 1988) を若干修飾して、酢酸塩７と結合させた。
【００７１】
５−フルオロウラシルから調製したシリル化５−フルオロウラシル(4.3ｇ、33mmol) を、酢酸塩７(8.3ｇ、30mmol) および二塩化エチルアルミニウム（トルエン中 1.8Ｍの16.7ml、30mmol) と塩化メチレン中で室温で３時間反応させ、 8.5ｇ (83％) の１−｛５−Ｏ（tert−ブチルジメチルシリル）−２，３−ジデオキシアルファ、ベータ、−Ｌ−リボフラノシル｝−５−フルオロウラシル（８、Ｒ＝Ｆ）を２：３のアルファ／ベータアノマー混合物として得た。アルファアノマーとベータアノマーはシリカゲルクロマトグラフィーで分離した。
【００７２】
ベータアノマー（９）：NMR (CDCl3) デルタ0.10 (s, 6H, SiMe2) 、0.95(s, 9H, tert−ブチル) 、1.80-2.45 (m, 4H, 2'-Hおよび3'-H）、3.50-3.70 (m, 1H, 4'-H) 、3.95-4.15 (m, 2H, 5'-H) 、5.90-6.05 (m, 1H, 1'-H) 、8.10-8.20 (d, 1H, 6-H)、9.30-9.50 (br, 1H, NH, D2O交換可能) ；アルファ異性体：NMR (CDCl3) デルタ0.10 (s, 6H, SiMe2) 、0.95(s, 9H, tert−ブチル) 、1.90-2.55 (m, 4H, 2'-Hおよび3'-H）、3.60-3.65 (m, 2H, 5'-H) 、4.30-4.50 (m, 1H, 4'-H) 、5.90-6.05 (m, 1H, 1'-H) 、7.30-7.40 (d, 1H, 6-H)、9.00-9.30 (br, 1H, NH, D2O交換可能) 。
【００７３】
無水ピリジン（60ml）中の４−クロロフェニルホスホロジクロリデート(6.2ml、37.8mmol) と１、２、４−トリアゾール(7.9ｇ、114mmol)で、ベータアノマー(9.3ｇ、8.7mmol)で室温で処理して、４−トリアゾリルピリミジノン誘導体10を得た。粗生成物10を水酸化アンモニウム／ジオキサン（１：３、ｖ／ｖ）の混合物で処理して２’，３’−ジデオキシシチジン誘導体11(1.2ｇ、40％) を得て、次にこれを THF中のフッ化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウムで室温で20分間反応させて脱保護して、標的化合物１−（２，３−ジデオキシ−ベータ−Ｌ−リボフラノシル）−５−フルオロシトシン（12、Ｒ＝Ｆ、L-FDDC) を得た：融点 147−149 ℃：NMR (DMSO-d6) デルタ1.85-2.35 (m, 4H, 2'-Hおよび3'-H）、3.60-3.82 (m, 2H, 5'-H) 、4.25 (m, 1H, 4'-H ）、5.15(t, 1H, 5'-OH, D2O交換可能) 、5.95-6.15 (m, 1H, 1'-H) 、7.45(br, s, 2H, 4-NH2, D2O交換可能) 、8.22 (d, 1H, 6-H) 。
【００７４】
１−（２，３−ジデオキシ−ベータ−Ｌ−リボフラノシル）シトシン、１−（２，３−ジデオキシ−ベータ−Ｌ−リボフラノシル）−５−ブロモ−、−５−クロロ−、−５−ヨード−、または−５−メチルシトシンを合成するために、５−フルオロ誘導体を合成するのに使用した方法と類似の方法を使用した。結合反応のために、５−フルオロウラシルの代わりに対応するシリル化５−ブロモ−、−５−クロロ−、−５−ヨード−、または−５−メチルシトシンを使用した。他のすべての工程は、５−フルオロ誘導体12（Ｒ＝Ｆ）の合成の方法と類似である。
【００７５】
化合物９を THF中のフッ化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウムで処理して、対応するウラシル誘導体13を得た。
化合物12（Ｒ＝Ｈ、Ｆ、Cl、ＩおよびCH3)は別の方法（反応工程図２を参照）でも合成し、ここでは対応するシトシン（14、Ｒ＝Ｈ）およびその誘導体14（Ｒ＝Ｈ、Ｆ、Cl、ＩおよびCH3)から調製したシリル化化合物15（Ｒ＝Ｆ、Cl、ＩおよびCH3)を、酢酸塩７と直接結合させ、次にアルファアノマーとベータアノマー16を分離して、保護基を除去した。
【００７６】
化合物12（Ｒ＝Ｈ）も立体特異的アプローチ（反応工程図３を参照）により合成し、アルファアノマーを産生する可能性を排除した。Ｏ−２，２' −アンヒドロウリジン19をホリー (Holy) らの方法(Collection Czechoslov. Chem.Commun., 37, 4072, 1972) により、Ｌ−アラビノース（17）から中間体オキサゾリン誘導体18を経由して調製した。化合物19をピリジン中の塩化tert−ブチルジメチルシリルで処理して、保護クロロ誘導体である１−〔５−Ｏ（−tert−ブチルジメチルシリル）−２−クロロ−２−デオキシ−ベータ−Ｌ−リボフラノシル〕ウラシル（20、Ｒ＝Ｈ）を得た。対応する２’，３’−不飽和ヌクレオシド22への化合物20の変換は、以前開発された方法（リン(Lin) ら、Tetrahedron Lett., 31, 3829, 1991)により行なった。
【００７７】
化合物20をアセトニトリル中のフェニルクロロチオノカーボネートと４−ジメチルアミノピリジンで窒素下で室温で処理して２' −クロロ−３' −フェノキシチオカルボニル誘導体21を得た。これは２' と３’位に２つの隣接基を有する。化合物21を無水トルエン中の水素化トリ−ｎ−ブチルスズとアゾビスイソブチロニトリル (AIBN) で60−70℃で４時間還元して、２’，３’−不飽和誘導体22を泡状物質として得た：NMR (CDCl3) デルタ0.10 (s, 6H, SiMe2) 、0.95(s, 9H, tert−ブチル) 、3.90 (m, 2H, 5'-H)、4.90 (m, 1H, 4'-H)、5.65-5.75 (d, 1H, 5-H)、5.80-5.90 (d, 1H, 3'-H) 、6.25-6.35 (d, 1H, 2'-H) 、7.05-7.10 (m, 1H, 1'-H) 、7.75-7.85 (d, 1H, 6H) 、9.55 (s, 1H, -NH, D2O 交換可能) 。
【００７８】
化合物22を触媒水素化し、次に４−クロロフェニルホスホロジクロリデートと１，２，４−トリアゾールで処理して４−トリアゾリルピリミジノン誘導体24を得て、次にこれを塩化アンモニウム／ジオキサンで処理し、次に前述のように５' −保護基を脱保護して、目的の１−（２，３−ジデオキシ−ベータ−Ｌ−リボフラノシル）シトシン12（Ｒ＝Ｈ、L-DDC)に変換した。
【００７９】
化合物12（Ｒ＝Ｈ、L-DDC)：融点 194-196℃；NMR (DMSO-d6) 1.74-2.24(m, 4-H, 2'-Hおよび3'-H）、3.49-3.65 (m, 2H, 5'-H) 、3.98-3.99 (m, 1H, 4'-H) 、4.95-5.00 (t, 1H, 5'-OH, D2O交換可能) 、5.65-5.68 (d, 1H, 5-H)、5.85-5.93 (m, 1H, 1'-H) 、7.01-7.06(m, 2H, -NH2, D2O交換可能) 、7.87-7.90 (d, 1H, 6-H)。
【００８０】
化合物23を THF中のフッ化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウムで処理して、対応するウラシル誘導体13（Ｒ＝Ｈ）を得た：1HNMR (DMSO-d6) デルタ1.80-2.05(m, 4-H, 2'-Hおよび3'-H）、3.45-3.60 (m, 2H, 5'-H) 、3.85-4.05 (m, 1H, 4'-H) 、4.85-5.00 (t, 1H, 5'-OH, D2O交換可能) 、5.45-5.55 (d, 1H, 5-H)、5.80-6.00 (m, 1H, 1'-H) 、7.80-7.90(d, 1H, 6-H) 、11.10(s, 1H, NH, D2O交換可能) 。
【００８１】
実施例２．２’，３’−ジデオキシ−、２’，３’−ジデオキシ−Ｎ−メチル−および２’，３’−ジデオキシ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−ベータ−Ｌ−アデノシン、および２’，３’−ジデオキシ−Ｌ−イノシンおよび２’，３’−ジデオキシ−ベータ−Ｌ−グアノシン
２’，３’−ジデオキシ−、２’，３’−ジデオキシ−６−Ｎ−メチル−および２’，３’−ジデオキシ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−ベータ−Ｌ−アデノシン、および２’，３’−ジデオキシ−ベータ−Ｌ−イノシンおよび２’，３’−ジデオキシ−ベータ−Ｌ−グアノシンの合成（反応工程図４を参照）は、プリン２' −デオキシヌクレオシドについてフジモリ (Fujimori) らが報告した方法(Nucleoside & Nucleotides, 11, 341, 1992) に基いて行なった。
【００８２】
６−クロロプリンを無水アセトニトリル中のNaH(油中60％、ｎ−ヘキサンで洗浄）と酢酸塩７でアルゴン下で処理して、６−クロロ−９−〔（５−Ｏ−tert−ブチルジメチルシリル）−２，３−ジデオキシ−ベータ−Ｌ−エリスロ−ペントフラノシル〕プリン（26）を、対応するＮ−７グリコシル異性体とともに得て、これをシリカゲルのクロマトグラフィーにより分離した。
【００８３】
続いて化合物26を NH3／CH3OH 、CH3NH2／CH3OH 、または(CH3)2NH／CH3OH で高温で処理し、次に THF中のフッ化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウムで脱保護して、それぞれ２’，３’−ジデオキシ−Ｌ−アデノシン（27、Ｒ＝Ｒ' ＝Ｈ）、２’，３’−ジデオキシ−Ｎ−メチル−ベータ−Ｌ−アデノシン（27、Ｒ＝Ｈ、Ｒ' ＝CH3)、および２’，３’−ジデオキシ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−ベータ−Ｌ−アデノシン（27、Ｒ＝Ｒ' ＝CH3)を得た。
【００８４】
化合物26を THF中のフッ化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウムで処理して、次に脱保護ヌクレオシド（28）を２Ｎ KOH／ジオキサン（１：１、ｖ／ｖ）でアルカリ加水分解をして、２’，３’−ジデオキシ−Ｌ−イノシン（29）を得た。同様に２−アミノ−６−クロロプリンを無水アセトニトリル中のNaH(油中60％、ｎ−ヘキサンで洗浄）と酢酸塩７でアルゴン下で処理して、２−アミノ−６−クロロ−９−〔（５−Ｏ−tert−ブチルジメチルシリル）−２，３−ジデオキシ−ベータ−Ｌ−エリスロ−ペントフラノシル〕プリン（30）を得た。最終生成物２’，３’−ジデオキシ−ベータ−Ｌ−グアノシン（32）への化合物30の変換は、中間体31を経由して、 THF中のフッ化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウムで脱保護して、２Ｎ KOH／ジオキサン（１：１、ｖ／ｖ）でアルカリ加水分解して行なった。
【００８５】
実施例３．２−クロロ−、２−ブロモ−、２−アミノ−、および２−フルオロ−２’，３’−ジデオキシ−ベータ−Ｌ−アデノシン
これらの化合物は、実施例２で使用した反応工程図５に記載したように合成した。エリオンとヒチング (Elion and Hitching) の記載した方法 (J.Am.Chem.Soc., 78, 3508, 1956) により調製した２，６−ジクロロプリンを、無水アセトニトリル中のNaH(油中60％、ｎ−ヘキサンで洗浄）と酢酸塩７でアルゴン下で処理して、２，６−ジクロロ−９−〔（５−Ｏ−tert−ブチルジメチルシリル）−２，３−ジデオキシ−ベータ−Ｌ−エリスロ−ペントフラノシル〕プリン（33）と対応するＮ−７グリコシル異性体を得て、これをシリカゲルのクロマトグラフィーにより分離した。
【００８６】
続いて化合物33を NH3／CH3OH で高温で処理し、次に THF中のフッ化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウムで脱保護して、２−クロロ−２’，３’−ジデオキシ−Ｌ−アデノシン（34）を得た。ジブロモプリンを、無水アセトニトリル中のNaH(油中60％、ｎ−ヘキサンで洗浄）と酢酸塩７でアルゴン下で処理して、６−ブロモ−９−〔（５−Ｏ−tert−ブチルジメチルシリル）−２，３−ジデオキシ−ベータ−Ｌ−エリスロ−ペントフラノシル〕プリン（31）と対応するＮ−７グリコシル異性体を得て、これをシリカゲルのクロマトグラフィーにより分離した。
【００８７】
続いて化合物31を NH3／CH3OH で高温で処理し、次に THF中のフッ化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウムで脱保護して、６−ブロモ−（２’，３’−ジデオキシ−ベータ−Ｌ−エリスロ−ペントフラノシル〕プリン（41）を得た。ダボルとロウイー(Davoll and Lowy) の記載した方法 (J.Am.Chem.Soc., 73, 1650, 1951) により調製した２，６−ビス（ベンザミド）プリンを、無水アセトニトリル中のNaH(油中60％、ｎ−ヘキサンで洗浄）と酢酸塩７でアルゴン下で処理して、２，６−ビス（ベンザミド）−９−〔（５−Ｏ−tert−ブチルジメチルシリル）−２，３−ジデオキシ−ベータ−Ｌ−エリスロ−ペントフラノシル〕プリン（37）を得て、これを次に THF中のフッ化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウムとエタノール中のナトリウムエトキシドに反応させて脱保護して、２−アミノ−２’，３’−ジデオキシ−ベータ−Ｌ−アデノシン（38を）得た。化合物38を亜硝酸ナトリウムと48−50％フルオロホウ酸で−10℃以下で処理して、２−フルオロ−２’，３’−ジデオキシ−ベータ−Ｌ−アデノシン（39）を得た。
【００８８】
実施例４．１−（２，３−ジデヒドロ−ジデオキシ−ベータ−Ｌ−リボフラノシル）シトシン、１−（２，３−ジデヒドロ−ジデオキシ−ベータ−Ｌ−リボフラノシル）−５−フルオロ、−５−ブロモ−、−５−クロロ−、−５−ヨード−、および−５−メチルシトシン
これらの化合物は、関連するＤ−異性体の合成について開発された方法（リン(Lin) ら、 Biochem.Pharmacol., 36, 311, 1987；リン(Lin) ら、Organic Preparations and Procedures Intl., 22, 265, 1990) により反応工程図６に示すように合成した。
【００８９】
ホリー (Holy) らの方法 (Collection Czechoslov.Chem.Commun., 37, 4072, 1972) により調製した２' −デオキシ−Ｌ−ウリジン（40、Ｒ＝Ｈ）を、無水ピリジン中の２当量の塩化メタンスルホニルで−５〜０℃で処理して、３' ，５' ジ−Ｏ−メシル誘導体（41、Ｒ＝Ｈ）を得た。ホルウィッツ(Horwitz) らの方法 (J Org.Chem., 32, 817, 1967) に従って１N NaOHで処理して、中間体アンヒドロヌクレオシド42（Ｒ＝Ｈ）を介して化合物41（Ｒ＝Ｈ）を２' −デオキシ−３' −５' −エポキシ−ベータ−Ｌ−ウリジン（43、Ｒ＝Ｈ）に変換した。
【００９０】
化合物43（Ｒ＝Ｈ）を無水ピリジン中の１，２，４−トリアゾールと４−クロロフェニルホスホロジクロリデートで処理して、４−トリアゾリルピリミジノン44（Ｒ＝Ｈ）を得て、次にこれを水酸化アンモニウム／ジオキサンと反応させて、シチジン誘導体45（Ｒ＝Ｈ）を得た。
【００９１】
化合物45（Ｒ＝Ｈ）をDMSO中のカリウムｔ−ブトキシドで処理して、最終生成物１−（２，３−ジデヒドロ−２，３−ジデオキシ−ベータ−Ｌ−リボフラノシル）シトシン（46、Ｒ＝Ｈ）を得た。：1HNMR (DMSO-d6) デルタ3.50 (m, 2H, 5'-H)、4.72 (m, 1H, 4'-H)、4.92(br, s, 1H, 5'-OH, D2O交換可能) 、5.64 (d, 1H, 5-H) 、5.83 (m, 1H, 3'-H)、6.30 (m, 1H, 2'-H)、6.85 (m, 1H, 1'-H)、7.09-7.15(br d, 2H, 4-NH2, D2O交換可能) 、7.64 (D, 1H, 6-H) 。
【００９２】
実施例５．２’，３’−ジデヒドロ−２’，３’−ジデオキシ−ベータ−Ｌ−アデノシン
反応工程図７に記載したように、Ｄ−異性体の調製に関するバートン (Barton) らの方法 (Tetrahedron, 49, 2793, 1993)とチュー(Chu) らの方法 (J.Org.Chem., 54, 2217, 1989)に従い、２’，３’−ジデヒドロ−２’，３’−ジデオキシ−ベータ−Ｌ−アデノシン (51) を合成した。
【００９３】
Ｌ−アデノシン（47）を、水分を排除した無水 DMF中の塩化tert−ブチルジメチルシリルとイミダゾールで20時間処理して５' −Ｏ−（tert−ブチルジメチルシリル）−ベータ−Ｌ−アデノシン（48）を得て、次にこれを CS2、５N NaOH溶液、およびDMSO中のCH3Iと反応させて、２’，３’−Ｏ−ビス（ジチオカーボネート）誘導体49を得た。アルゴン下で49をトリエチルシランと過酸化ベンゾイルで脱酸素を行い、次にオレフィン誘導体50を THF中のフッ化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウムで脱保護して最終生成物51を得た。
【００９４】
対応する２’，３’−ジデヒドロ−２’，３’−ジデオキシ−ベータ−Ｌ−グアノシンと２’，３’−ジデヒドロ−２’，３’−ジデオキシ−ベータ−Ｌ−イノシン類似体の合成は、それぞれＬ−グアノシンとＬ−イノシンから出発して同じ方法を用いて行なった。
【００９５】
実施例６．１−（２，３−ジデオキシ−４−チオ−ベータ−Ｌ−リボフラノシル）シトシン、１−（２，３−ジデオキシ−４−チオ−ベータ−Ｌ−リボフラノシル）−５−フルオロ−、−５−クロロ−、−５−ブロモ−、−５−ヨード−、および−５−メチルシトシン
１−２’，３’−ジデオキシ−４−チオ−ベータ−Ｌ−ヌクレオシド類似体の合成（反応工程図８を参照）に対する我々の合成アプローチについて、２’，３’−ジデオキシ−４' −チオ−Ｄ−ヌクレオシドの合成に関するセクリスト(Secrist) らの方法(J.Med.Chem. 35, 533, 1922) は、有用な例を提供した。
【００９６】
Ｄ−グルタミン酸（１）を塩酸中の亜硝酸ナトリウムで処理し、（Ｒ）−１，４−ブチロラクトン−４−カルボン酸（２）を得た。次に化合物２を THF中のボラン−ジメチルスルフィド錯塩で還元して、対応する（Ｒ）−４−（ヒドロキシメチル）−４−ブチロラクトン（４）を得て、次にこれをイミダゾールを触媒として用いて塩化メチレン中の塩化tert−ブチルジフェニルシリルで処理して、（Ｒ）−５−Ｏ−tert−ブチルジフェニルシリル−４−ヒドロキシメチル−１，４−ブチロラクトン（53）を得た。保護ラクトン53をエタノール中の水酸化ナトリウムで開環し、次にジメチルスルホキシド中の硫酸ジメチルと反応させて、５−〔（tert−ブチルジフェニルシリル）オキシ〕−４−（Ｒ）−ヒドロキシペンタン酸のメチルエステル（54）に変換した。
【００９７】
化合物54をトリフェニルホスフィン、イミダゾールおよびヨードで処理して、５−〔（tert−ブチルジフェニルシリル）オキシ〕−４−（Ｒ）−ヨードペンタン酸のメチルエステル（55）に変換した。化合物55中のヨード基をトルエン中のチオアセテートで置換して、４−（Ｒ）−（アセチルチオ）−５−〔（tert−ブチルジフェニルシリル）オキシ〕ペンタン酸のメチルエステル（56）を得た。次に化合物56をトルエン中の２当量の水素化ジイソブチルアルミニウム(DIBAL) で処理して還元的に糖を脱保護して、メチルエステルをアルデヒドに還元し、こうして自発的環化によりチオラクトールを得た。
【００９８】
このチオラクトールをピリジン中の無水酢酸でアセチル化して、１−Ｏ−アセチル−５−Ｏ−（tert−ブチルジメチルシリル）−２’，３’−ジデオキシ−４−チオ−Ｌ−リボフラノース（57）を得た：1HNMR (CDCl3) デルタ7.67 (m, 4H, ArH) 、7.40 (m, 6H, ArH) 、6.10 (m, 1H, 1-H) 、3.70 (m, 1H, 4-H) 、3.52 (m, 2H, 5-H) 、2.20 (m, 2H, CH2) 、2.00 (2 s, 3H, CH3CO-)、1.92 (m, 2H, CH2) 、1.08(s, 9H, tert−ブチル) 。
【００９９】
ボルブルゲンとベヌア(Vorbruggen and Bennua) の方法(J.Org.Chem., 39, 3654, 1974) を若干修飾して、シトシン、５−フルオロシトシン、および他の５−置換シトシン誘導体を酢酸塩57と結合させた。無水アセトニトリル中のシトシン（0.42ｇ、3.80mmol) 、ヘキサメチルジシラザン (HMDS、0.54ml、2.52mmol) 、クロロトリメチルシラン (TMSCl 1.48ml、11.6mmol) 、カリウムノナフルオロブタンスルホネート (3.08ｇ、8.9mmol)、および酢酸塩57 (1.04ｇ、2.52mmol) の混合液を、室温で一晩攪拌して、0.65ｇ (55％) の１−〔５−Ｏ−（tert−ブチルジフェニルシリル）−２，３−ジデオキシ−４−チオ−アルファ、ベータ−Ｌ−リボフラノシル〕シトシン（58  Ｘ＝Ｈ）を４：３のアルファ／ベータ混合物として得た。
【０１００】
このアルファおよびベータアノマーをシリカゲルのカラムクロマトグラフィーにより分離した。58（ベータアノマー）を脱保護して、１−（２，３−ジデオキシ−４−チオ−ベータ−Ｌ−リボフラノシル）シトシン（59  Ｘ＝Ｈ）を収率60％で得た：質量スペクトル  ｍ／ｅ 228 (Ｍ+ ＋1)；1HNMR (DMSO-d6) デルタ8.05 (d, 1H, H-6）、7.08(br, d, 2H, NH2, D2O交換可能) 、6.10 (m, 1H, 1'-H)、5.70 (d, 1H, H-5）、5.20 (br d, 1H, 5'-OH, D2O交換可能) 、3.58 (m, 1H, 5'-H)、3.52 (m, 2H, 4'-H-および5'-H) 、2.20 (m, 1H, 2'-H)、2.04(m, 2H, 2'-Hおよび3'-H) 、1.88 (m, 1H, 3'-H)。
【０１０１】
実施例７．１−（２，３−ジデオキシ−４−チオ−ベータ−Ｌ−リボフラノシル）−５−メチル−、−５−エチル、−５−ビニル−、−５−ブロモビニル−、−５−エチニル−、−５−フルオロ−、−５−クロロ−、−５−ブロモ−、−５−ヨードウラシル、および１−（２，３−ジデオキシ−４−チオ−ベータ−Ｌ−リボフラノシル）ウラシル
実施例６に記載の方法と同じ方法を使用して、チミン、ウラシル、−５−エチル、−５−ビニル−、−５−ブロモビニル−、−５−エチニル−、−５−フルオロ−、−５−クロロ−、−５−ブロモ−、−５−ヨードウラシルおよび他の５−置換ウラシル誘導体を、１−Ｏ−アセチル−５−Ｏ−（tert−ブチルジフェニルシリル）−２，３−ジデオキシ−４−チオ−Ｌ−リボフラノース（57）と結合させて、それぞれの５−置換ピリミジンヌクレオシドを得た。
【０１０２】
無水アセトニトリル中の酢酸塩57（1.40ｇ、3.32mmol) 、チミン (0.52ｇ、4.20mmol) 、HMDS (0.70ml、3.32mmol) 、TMSCl(1.60ml、12.8mmol) およびカリウムノナフルオロブタンスルホネート (3.50ｇ、10.16mmol)の混合液を、窒素下で25℃で一晩攪拌して、1.18ｇ (74％) の１−〔５−Ｏ−（tert−ブチルジフェニルシリル）−２，３−ジデオキシ−４−チオ−アルファ、ベータ−Ｌ−リボフラノシル〕チミン（60、Ｘ＝CH3)を４：３のアルファ／ベータアノマー混合物として得た。このアルファおよびベータアノマーをシリカゲルのカラムクロマトグラフィーにより分離した。
【０１０３】
ベータアノマー60を脱保護して、１−（２，３）−ジデオキシ−４−チオ−ベータ−Ｌ−リボフラノシル）チミン（61  Ｘ＝CH3)を収率55％で得た：質量スペクトル  ｍ／ｅ 243（Ｍ+ ＋1)；1HNMR (DMSO-d6) デルタ11.5 (br s, 1H, NH) 、7.74 (s, 1H, 6-H) 、6.11 (m, 1H, 1'-H)、5.00 (t, 1-H, 5'-OH, D2O交換可能) 、3.70 (m, 1H, 4'-H)、3.65 (m, 2H, 5'-CH2)、2.20-1.80 (m, 4H, 2'-CH2および3'-CH2) 、1.79 (s, 3H, 5-CH3) 。
【０１０４】
実施例８．２’，３’−ジデオキシ−４' −チオ−ベータ−Ｌ−アデノシン、２’，３’−ジデオキシ−４' −チオ−Ｎ−メチル−ベータ−Ｌ−、−Ｎ，Ｎ−ジメチル−ベータ−Ｌ−アデノシン、２’，３’−ジデオキシ−４' −チオ−ベータ−Ｌ−イノシン、および２’，３’−ジデオキシ−４' −チオ−ベータ−Ｌ−グアノシン
２’，３’−ジデオキシ−４' −チオ−ベータ−Ｌ−アデノシン、２’，３’−ジデオキシ−４' −チオ−Ｎ−メチル−ベータ−Ｌ−アデノシン、２’，３’−ジデオキシ−４' −チオ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−ベータ−Ｌ−アデノシン、２’，３’−ジデオキシ−４' −チオ−ベータ−Ｌ−イノシン、および２’，３’−ジデオキシ−４' −チオ−ベータ−Ｌ−グアノシンは、２’，３’−ジデオキシ−４' −チオ−Ｄ−ヌクレオシドの合成に関するセクリスト(Secrist) らの方法(J.Med.Chem. 35, 533, 1922) と類似の方法により、合成した。
【０１０５】
ニードバラとボブルゲン(Niedballa and Vobruggen) の方法(J.Org.Chem., 39, 3654, 1974) により、アセトニトリル(150ml) 中の塩化ジエチルアルミニウム(5.9ml、10.6mmol) の存在下で、糖57(4.3ｇ、10.4mmol) を６−クロロプリン(2.4ｇ、15.6mmol) と反応させて、2.81ｇ (53％) の９−〔５−Ｏ−（tert−ブチルジフェニルシリル）−２，３−ジデオキシ−４−チオ−アルファ、ベータ−Ｌ−リボフラノシル〕−６−クロロプリンを１：１のアルファ／ベータアノマーの混合物として得た。
【０１０６】
アルファアノマーとベータアノマーはシリカゲルのカラムクロマトグラフィーにより分離した。ベータアノマー62を飽和アンモニア／メタノールで処理して、次に１Ｍフッ化テトラブチルアンモニウムと THFで脱保護して２’，３’−ジデオキシ−４' −チオ−ベータ−Ｌ−アデノシン（63、Ｒ' ＝Ｒ''＝Ｈ）を得た：1HNMR (DMSO-d6) デルタ8.30 (s, 1H, 2-H）、8.10 (s, 1H, 8-H）、7.30(s, 2H, NH2, D2O交換可能) 、6.12 (m, 1H, 1'-H)、5.11 (br s, 1H, 5'-OH, D2O交換可能) 、3.70 (m, 3H, 5'-CH2, 4'-H)、2.42 (m, 2H, 2'-CH2)、2.13 (m, 1H, 3'-H)、2.00 (m, 1H, 3'-H)。
【０１０７】
化合物62を１Ｍフッ化テトラブチルアンモニウムと THFで脱保護して、９−（２’，３’−ジデオキシ−４' −チオ−ベータ−Ｌ−リボフラノシル）−６−クロロプリン（64）を得た。化合物64の６−クロロ残基をアルカリ加水分解（フジモリ (Fujimori) ら、Nucleosides & Nucleosides, 11, 341, 1992) して、２’，３’−ジデオキシ−４' −チオ−ベータ−Ｌ−イノシン（65）を収率45％で得た：質量スペクトル  ｍ／ｅ 253（Ｍ+ ＋1)；1HNMR (D2O) デルタ8.52 (s, 1H, 2-H）、8.19(s, 1H, 8-H)、6.10 (m, 1H, 1'-H)、3.94 (m, 1-H, 5'-H) 、3.75 (m, 2H, 5'-H, 4'-H)、2.52 (m, 2H, 2'-CH2)、2.30(m, 1H, 3'-H) 、1.92 (m, 1H, 3'-H)。
【０１０８】
化合物65の合成について記載した方法と類似の方法により、酢酸塩（57）から２’，３’−ジデオキシ−４' −チオ−ベータ−Ｌ−グアノシン（68）を合成した：質量スペクトル  ｍ／ｅ 268（ｍ+ ＋1)；1HNMR (DMSO-d6) デルタ10.7 (br s, 1H, NH2, D2O交換可能) 、8.01 (s, 1H, 8-H) 、6.55(s, 2H, NH2, D2O交換可能) 、5.90 (m, 1H, 1'-H)、5.09 (br s, 5'-OH, D2O交換可能) 、3.70 (m, 1H, 4'-H)、3.50 (m, 2H, 5'-H)、2.36 (m, 2H, 2'-H)、2.17(m, 1H, 3'-H) 、1.93 (m, 1H, 3'-H)。
【０１０９】
実施例９．２’，３’−ジデオキシ−４' −チオ−２−クロロ−ベータ−Ｌ−アデノシン、−２−アミノ−ベータ−Ｌ−アデノシン、−２−フルオロ−ベータ−Ｌ−アデノシン、−２−クロロ−Ｎ−メチル−ベータ−Ｌ−アデノシン、−２−クロロ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−ベータ−Ｌ−アデノシン、−２−ブロモ−ベータ−Ｌ−アデノシン、−２−ブロモ−Ｎ−メチル−ベータ−Ｌ−アデノシンおよび−２−ブロモ−Ｎ、Ｎ−ジメチル−ベータ−Ｌ−アデノシン
２’，３’−ジデオキシ−４' −チオ−２−クロロ−ベータ−Ｌ−アデノシン、２−アミノ−ベータ−Ｌ−アデノシン、−２−フルオロ−ベータ−Ｌ−アデノシン、−２−クロロ−Ｎ−メチル−ベータ−Ｌ−アデノシン、−２−クロロ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−ベータ−Ｌ−アデノシン、−２−ブロモ−ベータ−Ｌ−アデノシン、−２−ブロモ−Ｎ−メチル−ベータ−Ｌ−アデノシンおよび−２−ブロモ−Ｎ、Ｎ−ジメチル−ベータ−Ｌ−アデノシンそして他のベータ−Ｌ−アデノシン誘導体は、反応工程図11に記載のように合成した。
【０１１０】
化合物62の合成について記載された方法と類似の方法により、酢酸塩57と２，６−ジクロロプリンから、９−〔５−Ｏ−（tert−ブチルジフェニルシリル）−２，３−ジデオキシ−４−チオ−ベータ−Ｌ−リボフラノシル〕−２，６−ジクロロプリン（69）を約２：３のアルファ／ベータアノマー比で、収率60％で得た。アルファアノマーとベータアノマーはシリカゲルのカラムクロマトグラフィーにより分離した。
【０１１１】
化合物69を飽和アンモニア／メタノールで処理して、次に１Ｍフッ化テトラブチルアンモニウムと THFで脱保護して２’，３’−ジデオキシ−４' −チオ−２−クロロ−ベータ−Ｌ−アデノシン（70、Ｒ' ＝Ｒ''＝Ｈ）を収率52％で得た：質量スペクトル  ｍ／ｅ 286（ｍ+ ＋1)；1HNMR (DMSO-d6) デルタ8.46 (s, 1H, 2-H）、7.82 (br s, 2H, NH2, D2O交換可能) 、6.10 (m, 1H, 1'-H)、5.10(m, 1H, 5'-OH, D2O交換可能) 、3.74 (m, 1H, 4'-H)、3.60 (m, 2H, 5'-H)、2.42 (m, 2H, 2'-H)、2.13(m, 1H, 3'-H) 、2.02 (m, 1H, 3'-H)。
【０１１２】
酢酸塩57と２，６−ジブロモプリンを結合させて２’，３’−ジデオキシ−４' −チオ−２−ブロモ−アルファ、ベータ−Ｌ−アデノシン（72、Ｒ' ＝Ｒ''＝Ｈ）を合成し、次にそれぞれのアミンを化合物70の合成について記載された方法と同じ方法により処理した。
【０１１３】
化合物69をアジ化リチウムで処理してジアジドヌクレオシド73を得て、次にこれを水素化リチウムアルミニウム(LAH) により還元して、９−〔５−Ｏ−（tert−ブチルジフェニルシリル）−２，３−ジデオキシ−４−チオ−アルファ、ベータ−Ｌ−リボフラノシル〕−２，６−ジアミノプリン（74）を得た。化合物74を THF中のフッ化テトラブチルアンモニウムて脱保護して、２’，３’−ジデオキシ−４' −チオ−２−アミノ−アルファ、ベータ−Ｌ−アデノシン（75）を得て、次にこれを亜硝酸ナトリウムとHBF4と反応させて、２’，３’−ジデオキシ−４' −チオ−２−フルオロ−アルファ、ベータ−Ｌ−アデノシン（76）に変換した。
【０１１４】
II．生物活性
Ａ．抗 HBV作用
本化合物の生物活性は、ヅーング（Doong, S-L) ら、Proc.Natl.Acad.Sci.USA 88, 8495-8499 (1991) が記載したように評価した。ジー・アクス(G.Acs) 博士により供与された HBVを有するヒト肝癌細胞株 (2.2.15を呼ぶ) を試験に使用した。プライス(Price) ら、Proc.Natl.Acad.Sci.USA 86, 8541 (1989)。簡単に説明すると、６日齢の培養物を、培地（アール (Earl) 塩と10％胎児牛血清を含有する最小基本培地）中の異なる濃度の薬剤で処理した。
【０１１５】
薬剤を培地中に３日間放置して、その後培地を吸引して、同じ薬剤濃度を含有する新鮮な培地に加えた。次の３日間の最後に、培地を採取した。ポリエチレングリコール沈殿法（ヅーング（Doong, S-L) ら、前述）により、培地を処理してウイルス粒子を得た。こうして分泌された粒子から回収されたウイルス DNAを、サザン解析をした。ウイルス複製の阻害は、薬剤処理したウイルス DNAと薬剤処理していない対照培養物のウイルス DNAを比較して求めた。
【０１１６】
本化合物の細胞毒性を測定するために、Ｔ−リンパ芽球細胞株(CEM) を使用した。細胞を種々の濃度の薬剤に暴露させ、チェンとチェン (Chen, C-H and Chen Y-C) の記載した方法(J.Biol.Chem., 264, 11934 (1989)) により処理した３日後に細胞数を測定した。個々の薬剤濃度に対応する細胞数から作成したプロットにより、細胞集団の50％を死滅させる薬剤の濃度を求めた。
【０１１７】
ミトコンドリアDNA (mtDNA) に対する種々の薬剤濃度の影響を、チェンとチェン(Chen and Chen) の記載した方法（前述）により評価した。種々の濃度の薬剤で処理した CEM細胞を、遠心分離により集めた。リン酸緩衝化生理食塩水で細胞を洗浄してから、10mMトリス−塩酸(pH7.0) に懸濁して凍結融解サイクルを繰り返すことにより、細胞を溶解させた。次に得られた細胞を、RNaseA処理 (最終酵素濃度10μｇ／ml) 、次にプロテイナーゼＫ(100μｇ／ml) で１時間処理した。
【０１１８】
この方法により得られた DNAを次に、 0.8部の NaIを添加して10分間沸騰させた後、ナイロン膜にイムノブロットした。ヅーング（Doong, S-L) の方法（前述）に従い、得られた DNAを mtDNA特異的プローブにハイブリダイズさせ、オートラジオグラフィーも行なった。走査デンシトメーターにより定量値を得た。ブロットから mtDNAプローブを除去し、再びヒト Alu配列プローブにハイブリダイズさせて、 DNAの量を求めて標準化と mtDNAの絶対量の推定を行なった。
【０１１９】
Ｂ．抗 HIV作用
MT-2細胞中の HIVに対する本発明の化合物の有効性を試験するための薬剤感受性試験は、メローズ(Mellors) らが記載した測定法 (Molecular Pharmacology, 41, 446 (1992)) を修飾したものである。ウイルス誘導性細胞毒性の薬剤介在阻害は、MTT(臭化〔３−Ｉ  ４，５−ジメチルチアゾール−２−イル〕−２，３−ジフェニルテトラゾリウム)(シグマ(Sigma) M-2128) のＡ595 により測定した。１×104 MT2 細胞 (AIDS保存所 (AIDS repository)) を含有する96ウェルプレートの３重ウェルに、感染多重度0.01TCID50／細胞でHIV-1 (HTLV-IIIB株−R.C.Gallo)を感染させた。10％の透析胎児牛血清と 100μｇ／mlのカナマイシンを補足したRPMI1640培地中のMT-2細胞にウイルスを感染させ、連続希釈した薬剤にすぐ加えた。
【０１２０】
５日後、各ウェルに20μｌの MTT色素(PBS中 2.5mg／ml) を加えた。４時間のインキュベート後、 NP-40非イオン性界面活性剤を含有する酸性化２−プロパノール 150μｌを加えた。色素の結晶が溶解後（通常１〜２日後）、マイクロプレートリーダーでプレートを読んだ。この MTT−色素還元法（ラーダー (Larder) らが記載、Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 34, 436 (1990))を用いて、式〔（ａ−ｂ／ｓ−ｂ）×100 〕（ここでａ＝薬剤処理した細胞のＡ595 であり、ｂは非薬剤処理細胞の数であり、ｃは非薬剤処理細胞のＡ595 である）から保護の割合を求めた。
化合物β−Ｌ−FddCと他の化合物の抗 HIV活性のLD50を、以下の表１に示す。
【０１２１】
Ｃ．生物学的試験の結果
分泌された粒子からの HBVのウイルス複製の解析により、β−Ｌ−ddC とβ−Ｌ−FddCのいずれも DNA複製を効率的に阻害することが明らかになった。これらの化合物によりウイルス複製を阻害するために必要なID50濃度は0.01μＭであった。 ddCと比較したこれらの化合物の細胞性細胞毒性もまた、かなり小さかった（以下の表１に示す）。これらの化合物は HBVに対して数倍活性が高く細胞毒性は最小であることは注目すべきであり、これは予想外の結果である。一方 ddCは、β−Ｌ−ddC またはβ−Ｌ−FddCのいずれよりもはるかに毒性が高かった。さらに ddCは宿主ミトコンドリア DNAに対してかなり影響を及ぼすことが証明された。
【０１２２】
本測定において 100μＭという高い濃度のβ−Ｌ−ddC またはβ−Ｌ−FddCは阻害作用がなかったため、ミトコンドリア DNAに対する副作用は ddCよりも有意に小さいことが予測される。 ddCは用量限定性の毒性を示して、重症の神経障害（少なくとも一部は宿主のミトコンドリア DNAの阻害により引き起こされると考えられている症状）を引き起こすため、この結果は特に重要である。これらの結果に基づき、β−Ｌ−ddC またはβ−Ｌ−FddCは、有意な抗 HBV活性を示す極めて興味深い化合物であり、これは当該分野において明白な進歩である。β−Ｌ−ddC またはβ−Ｌ−FddCの抗 HBV作用のデータは、以下の表１に要約されている。
【０１２３】
別に、前述の方法を用いて抗 HIV活性についてβ−Ｌ−FddCをスクリーニングした。β−Ｌ−FddCを試験し、他の化合物（特に、 DDC、β−Ｌ−ddC 、アルファ−Ｌ−FddC、β−Ｌ−ddSCおよびアルファ−Ｌ−ddSC）と比較した。結果は以下の表１に要約される。
【０１２４】
表１に記載の結果に基づくと、β−Ｌ−FddCは、公知の抗 HIV剤である ddCよりさらに有意に有効であった。この測定法においてウイルス複製を阻害するのに必要なβ−Ｌ−FddCのID50濃度は 0.007マイクロモルであった。 ddCについてはID50濃度は 0.028マイクロモル（４倍の差）であった。以下の表１のデータに示すように、β−Ｌ−FddCの細胞性細胞毒性も ddCに比較してかなり小さかった。この化合物は HIVに対して数倍高い活性を有し、かなり低い細胞毒性を示すことは注目すべきであり、これは予想外の結果である。一方 ddCはβ−Ｌ−FddCより細胞毒性が強く、 HIVに対する活性は小さかった。
【０１２５】
さらに ddCは、宿主のミトコンドリア DNAに対して強い影響を示すことが証明され、一方β−Ｌ−FddCは比較的影響が小さかった。本測定において 100μＭという高い濃度のβ−Ｌ−FddCが阻害作用がなかったため、ミトコンドリア DNAに対する副作用は ddCよりも有意に小さいことが予測される。β−Ｌ−FddCの影響に対するデータは以下の表１に要約され、 ddC、β−Ｌ−ddC 、アルファ−Ｌ−FddC、β−ddSCおよびアルファ−ddSCと比較される。ここに示した結果は、β−Ｌ−FddCは非常に優れた抗 HIV活性を示し、用量限定性の神経障害が事実上ないことを証明しているため、抗 HIV剤としてのβ−Ｌ−FddCの意味は明らかである。これは現在入手できる ddCとは対照的である。
【０１２６】
【表１】
2004244422.tif 000015
【０１２７】
ddC −  １−（２，３−ジデオキシ−ベータ−Ｄ−リボフラノシル）シトシン
β-L-ddC−  １−（２，３−ジデオキシ−ベータ−Ｌ−リボフラノシル）シトシン
β-L-FddC −  １−（２，３−ジデオキシ−ベータ−Ｌ−リボフラノシル）−５−フルオ              ロシトシン
アルファ-L-ddC−  １−（２，３−ジデオキシ−アルファ−Ｌ−リボフラノシル）−５−                  フルオロシトシン
β-L-ddSC −  １−（２，３−ジデオキシ−４−チオ−ベータ−Ｌ−リボフラノシル）シ              トシン
アルファ-L-ddSC −  １−（２，３−ジデオキシ−４−チオ−アルファ−Ｌ−リボフラノ                    シル）シトシン
【０１２８】
前述の説明と実施例は本発明の実施を例示するものであり、決して本発明を限定するものではないことは、当業者は容易に理解されるであろう。請求の範囲に記載の本発明の精神と範囲を逸脱することなく、本発明の変更が可能である。
【図面の簡単な説明】
【０１２９】
【図１−１】図１−１（反応工程図１−１）は、本発明の化合物を合成するのに使用される合成化学工程を記載する。特定の組成物の合成に関する反応工程図は、本明細書中の後述の実施例に参照されている。
【図１−２】図１−２（反応工程図１−２）は、本発明の化合物を合成するのに使用される合成化学工程を記載する。特定の組成物の合成に関する反応工程図は、本明細書中の後述の実施例に参照されている。
【図２】図２（反応工程図２）は、本発明の化合物を合成するのに使用される合成化学工程を記載する。特定の組成物の合成に関する反応工程図は、本明細書中の後述の実施例に参照されている。
【図３−１】図３−１（反応工程図３−１）は、本発明の化合物を合成するのに使用される合成化学工程を記載する。特定の組成物の合成に関する反応工程図は、本明細書中の後述の実施例に参照されている。
【図３−２】図３−２（反応工程図３−２）は、本発明の化合物を合成するのに使用される合成化学工程を記載する。特定の組成物の合成に関する反応工程図は、本明細書中の後述の実施例に参照されている。
【図４】図４（反応工程図４）は、本発明の化合物を合成するのに使用される合成化学工程を記載する。特定の組成物の合成に関する反応工程図は、本明細書中の後述の実施例に参照されている。
【図５】図５（反応工程図５）は、本発明の化合物を合成するのに使用される合成化学工程を記載する。特定の組成物の合成に関する反応工程図は、本明細書中の後述の実施例に参照されている。
【図６】図６（反応工程図６）は、本発明の化合物を合成するのに使用される合成化学工程を記載する。特定の組成物の合成に関する反応工程図は、本明細書中の後述の実施例に参照されている。
【図７】図７（反応工程図７）は、本発明の化合物を合成するのに使用される合成化学工程を記載する。特定の組成物の合成に関する反応工程図は、本明細書中の後述の実施例に参照されている。
【図８−１】図８−１（反応工程図８−１）は、本発明の化合物を合成するのに使用される合成化学工程を記載する。特定の組成物の合成に関する反応工程図は、本明細書中の後述の実施例に参照されている。
【図８−２】図８−２（反応工程図８−２）は、本発明の化合物を合成するのに使用される合成化学工程を記載する。特定の組成物の合成に関する反応工程図は、本明細書中の後述の実施例に参照されている。
【図９】図９（反応工程図９）は、本発明の化合物を合成するのに使用される合成化学工程を記載する。特定の組成物の合成に関する反応工程図は、本明細書中の後述の実施例に参照されている。
【図１０】図１０（反応工程図１０）は、本発明の化合物を合成するのに使用される合成化学工程を記載する。特定の組成物の合成に関する反応工程図は、本明細書中の後述の実施例に参照されている。
【図１１】図１１（反応工程図１１）は、本発明の化合物を合成するのに使用される合成化学工程を記載する。特定の組成物の合成に関する反応工程図は、本明細書中の後述の実施例に参照されている。
【図１−１】
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【図１−２】
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【図２】
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【図３−１】
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【図３−２】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８−１】
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【図８−２】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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