(57)【要約】【課題】免疫機能の増強、細胞増殖能の増強、細胞のＡＴＰ含有量の上昇といった細胞を活性化する効果を有し、人体などの生体に有益な効果をもたらす機能水の製造装置及び製造方法を提供すること【解決手段】所定空間を該空間の外部から遮磁して遮磁空間を形成するための遮磁手段と、前記遮磁空間内に被処理水を保持するための貯水容器と、前記貯水容器内の被処理水に対して定常的な直流磁場及び低周波微小磁場を同時に印加して機能水を得るための直流磁場印加手段及び低周波微小磁場印加手段と、前記直流磁場の方向と一致する第１の軸と前記低周波微小磁場の方向と一致する第２の軸との間の角度が所定の角度となるように直流磁場印加手段と低周波微小磁場印加手段とを保持するための角度調整手段と、を備えることを特徴とする機能水製造装置。【選択図】  図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
所定空間を該空間の外部から遮磁して遮磁空間を形成するための遮磁手段と、
前記遮磁空間内に被処理水を保持するための貯水容器と、
前記貯水容器内の被処理水に対して定常的な直流磁場及び低周波微小磁場を同時に印加して機能水を得るための直流磁場印加手段及び低周波微小磁場印加手段と、
前記直流磁場の方向と一致する第１の軸と前記低周波微小磁場の方向と一致する第２の軸との間の角度が所定の角度となるように直流磁場印加手段と低周波微小磁場印加手段とを保持するための角度調整手段と、
を備えることを特徴とする機能水製造装置。
【請求項２】
前記遮磁空間が該空間の外部から遮光された遮光空間となっていることを特徴とする請求項１に記載の機能水製造装置。
【請求項３】
前記貯水容器内の被処理水に対して所定の波長を有する光を照射する光照射手段をさらに備えることを特徴とする請求項２に記載の機能水製造装置。
【請求項４】
外部から遮磁されている遮磁空間内の貯水容器に被処理水を導入する水導入工程と、
直流磁場の方向と一致する第１の軸と低周波微小磁場の方向と一致する第２の軸との間の角度が０±２０度又は９０±２０度となるようにして、前記貯水容器内の被処理水に対して定常的な直流磁場及び低周波微小磁場を同時に印加して機能水を得る磁場印加工程と、
を備えることを特徴とする機能水の製造方法。
【請求項５】
前記遮磁空間が該空間の外部から遮光された遮光空間となっていることを特徴とする請求項４に記載の機能水の製造方法。
【請求項６】
前記磁場印加工程において、前記貯水容器内の被処理水に対して所定の波長を有する光を照射することを特徴とする請求項５に記載の機能水の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、低周波微小磁場の印加による機能水の製造装置及び製造方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
従来、生体的あるいは生化学的に有益な効果を生じる水を製造する方法として、被処理水に周期的に強さの変化する磁力および／または周期的に強さの変化する光を照射する方法（特許文献１）や味覚の向上を意図した機能性水の製造方法として、被処理水に磁場を掛けながら通電する方法（特許文献２）が知られている。
【０００３】
また、最近では、被処理水に低周波微小磁場を印加して機能水とする方法が提案され、磁気的に開放された空間において低周波微小磁場を印加した緩衝液を用いると好中球の異物貪食能が２〜３倍に増強される（免疫増強効果）ことが報告されている（非特許文献１）。
【０００４】
【特許文献１】
特公平８−２２４３７号公報
【特許文献２】
特開平７−６８２６６号公報
【非特許文献１】
毛利、福島、「地磁気サイクロトロン共振による水分子クラスタの増殖的活性化と生体効果（磁気陽子工学への入り口）」、電気学会論文誌Ａ（基礎・材料・共通部門誌）２００２年５月号、第１２２−Ａ巻、第５号、ｐ．４３３−４３９
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
しかしながら、上記の従来の方法により得られる機能水では、免疫増強効果などの機能水の有する効果が未だ十分でないという課題を有していた。
【０００６】
本発明は、上記従来技術の有する課題に鑑みてなされたものであり、免疫機能の増強、細胞増殖能の増強、細胞のＡＴＰ含有量の上昇といった細胞を活性化する効果を有し、人体などの生体に有益な効果をもたらす機能水の製造装置及び製造方法を提供することを目的とする。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、上記目的を達成すべく鋭意研究を重ねた結果、被処理水を遮磁空間内の貯水容器に導入し、貯水容器内の被処理水に直流磁場を印加しつつ、直流磁場の方向に対して所定の角度で低周波微小磁場を印加することによって得られる機能水には、免疫機能の増強、細胞増殖能の増強、細胞のＡＴＰ含有量の上昇といった細胞を活性化する効果が著しいことを見出し、本発明に到達した。
【０００８】
すなわち、本発明の機能水製造装置は、所定空間を該空間の外部から遮磁して遮磁空間を形成するための遮磁手段と、遮磁空間内に被処理水を保持するための貯水容器と、貯水容器内の被処理水に対して定常的な直流磁場及び低周波微小磁場を同時に印加して機能水を得るための直流磁場印加手段及び低周波微小磁場印加手段と、直流磁場の方向と一致する第１の軸と低周波微小磁場の方向と一致する第２の軸との間の角度が所定の角度となるように直流磁場印加手段と低周波微小磁場印加手段とを保持するための角度調整手段と、を備えることを特徴とする。
【０００９】
また、本発明の機能水の製造方法は、外部から遮磁されている遮磁空間内の貯水容器に被処理水を導入する水導入工程と、直流磁場の方向と一致する第１の軸と低周波微小磁場の方向と一致する第２の軸との間の角度が０±２０度又は９０±２０度となるようにして、貯水容器内の被処理水に対して定常的な直流磁場及び低周波微小磁場を同時に印加して機能水を得る磁場印加工程と、を備えることを特徴とする。
【００１０】
ここで、定常的な直流磁場とは交流磁場やパルス磁場ではないことをいい、低周波微小磁場とは周波数０．１〜１０Ｈｚ、磁場強度１〜１０ｍＧの交流磁場又はパルス磁場であることが好ましい。
【００１１】
上記本発明の機能水製造装置及び製造方法においては、被処理水への地磁気等の外部磁場が及ぼす影響を排除した状態で被処理水に定常的な直流磁場と低周波微小磁場とが所定の角度をなすように同時に印加することにより、驚くべきことに細胞を活性化する効果が飛躍的に向上した機能水が得られる。
【００１２】
上記本発明においては、前記遮磁空間が外部から遮光された遮光空間となっていることが好ましい。このように遮光状態において被処理水に磁場を印加すると、細胞活性化効果の高い機能水を製造することができる傾向にある。
【００１３】
また、本発明においては、貯水容器内の被処理水に対して所定の波長を有する光を照射することがより好ましい。このように被処理水に所定の波長を有する光を照射しつつ磁場を印加すると、さらに細胞活性化効果の高い機能水を製造することができる傾向にある。
【００１４】
【発明の実施の形態】
以下、図面を参照しながら本発明の好適な実施形態について詳細に説明する。なお、図面中、同一又は相当部分には同一符号を付することとする。
【００１５】
［第１実施形態］
図１は、本発明の機能水の製造装置の好適な一実施形態を示す一部切り欠き概略斜視図である。図１に示す機能水の製造装置１０は、遮磁空間を形成するための遮磁手段２と、被処理水を保持するための貯水容器３と、被処理水に直流磁場を印加する直流磁場印加手段４と、被処理水に低周波微小磁場を印加する低周波微小磁場印加手段５と角度調整手段６と被処理水に所定の波長を有する光を照射する光照射手段７とを備えている。
【００１６】
遮磁手段２としては、例えばパーマロイ素材の磁気シールドを用いることが可能である。また、遮磁手段２は同時に遮光手段を兼ねていても良い。パーマロイ素材の磁気シールドの筐体を用いれば、遮磁及び遮光の機能を同時に果たすことが可能である。
【００１７】
遮磁手段２の内部に設置された貯水容器３は被処理水を保持できるものであれば特に限定されず、例えば、タンク状のものを使用することができる。貯水容器３の素材は遮磁効果のないものであれば特に限定されず、例えば、樹脂やガラスなどを用いることが可能である。また、本発明は被処理水に所定の波長の光を照射しつつ磁場を印加することが好ましいことから、貯水容器３の素材は当該所定の波長の光を透過するものであることが好ましい。
【００１８】
遮磁手段２の内部に設置され、貯水容器３に導入された被処理水に直流磁場を印加する直流磁場印加手段４としては、例えば、Ｎ極とＳ極が対向するように設置した２つの永久磁石などを用いることが可能である。２つの永久磁石の間に発生する直流磁場の中に貯水容器を設置すれば、貯水容器内の被処理水に直流磁場を印加することが可能となる。直流磁場の磁場強度は特に限定されないが、１００ｍＧ〜１０００ｍＧが好ましく、４００ｍＧ〜６００ｍＧがより好ましい。磁場強度が１００ｍＧ未満の場合に得られる機能水は細胞活性化効果が不十分となる傾向にあり、１０００ｍＧよりも大きい場合に得られる機能水の細胞活性化効果が不十分となる傾向にある。
【００１９】
遮磁空間２の内部に設置され、貯水容器３に導入された被処理水に低周波微小磁場を印加する低周波磁場印加手段５としては、例えば、貯水容器の外周を覆うように設置した鉄棒等のコアを中心に導線を巻いた電磁コイルとその導線に接続された低周波微小電圧発生回路（図示せず）などを用いることが可能である。低周波微小電圧発生回路により交流電圧又はパルス電圧を発生させることにより、電磁コイル内の貯水容器内に保持された被処理水に低周波微小磁場を印加することが可能となる。
【００２０】
ここで、低周波微小磁場とは、周波数０．１〜１０Ｈｚ、磁場強度１〜１０ｍＧの交流磁場又はパルス磁場であることが好ましい。周波数が０．１Ｈｚ未満の場合に得られる機能水は細胞活性化効果に関して変化が無くなる傾向にあり、１０Ｈｚよりも高い場合に得られる機能水は細胞活性化効果が不十分となる傾向にある。また、磁場強度が１ｍＧ未満の場合に得られる機能水は細胞活性化効果が不十分となる傾向にあり、１０ｍＧよりも大きい場合に得られる機能水は細胞活性化効果が不十分となる傾向にある。
【００２１】
角度調整手段６について図３を用いて説明する。図３において、直流磁場印加手段４により直流磁場１１が発生している。また、低周波微小磁場印加手段５により、低周波微小磁場１２が発生している。ここで、直流磁場の方向と一致する第１の軸とは１３に相当し、低周波微小磁場の方向と一致する第２の軸とは１４に相当する。したがって、直流磁場の方向と一致する第１の軸と低周波微小磁場の方向と一致する第２の軸との間の角度とはαに相当する。角度調整手段６とは、このαを０±２０度又は９０±２０度のいずれかの角度に、好ましくは０±１０度又は９０±１０度のいずれかの角度に設定できるものであれば特に限定されない。例えば、図１に示したように低周波微小磁場印加手段５の外側面に回転可能な軸を取り付ければ、軸を回転させることにより所定の角度に調整することが可能である。
【００２２】
光照射手段７は、遮磁手段２の内部に設置され、貯水容器３に導入された被処理水に所定の波長を有する光を照射できるものであれば特に限定されない。ここで、所定の波長とは、４００〜２０００ｎｍの波長であることが好ましく、９００〜１１００ｎｍの波長であることがより好ましい。４００ｎｍ未満の波長を有する光を照射した場合に得られる機能水は細胞活性化効果が不十分となる傾向にあり、２０００ｎｍよりも長い波長を有する光を照射した場合に得られる機能水は細胞活性化効果に変化が無くなる傾向にある。例えば、光源としてキセノンランプを、干渉フィルターとして１０００ｎｍ、半値幅２００ｎｍを用いることにより９００〜１１００ｎｍの波長を有する光を照射することが可能である。
【００２３】
次に、上記の機能水製造装置１０を用いた機能水の製造方法について説明する。
【００２４】
まず、機能水とすべき被処理水を貯水容器３に導入する。ここで、被処理水は水分子を含む液体であれば特に限定されるものではなく、水道水、蒸留水などの水はもちろん、ビールや醤油などの食品、生理食塩水、緩衝液、細胞培養用液体培地なども含まれる。
【００２５】
次に、角度調整手段６を調整することにより、αが０±２０度又は９０±２０度となるように、好ましくは０±１０度又は９０±１０度となるように設定する。αを上記範囲外の角度に設定した場合に得られる機能水は、細胞活性化効果が不十分となる傾向にある。
【００２６】
そして、電磁コイルに交流電圧又はパルス電圧を印加することにより、コイル内に低周波微小磁場を発生させることができ、被処理水に直流磁場を印加しつつ低周波微小磁場を印加することにより機能水を得ることができる。なお、より細胞活性化効果の高い機能水を得るために、被処理水に所定の波長を有する光を照射しながら磁場を印加するのが好ましい。
【００２７】
磁場の印加時間は特に限定されないが、好ましくは１時間〜４８時間である。１時間未満では得られる機能水の細胞活性化効果が不十分となる傾向にあり、４８時間よりも長い時間印加しても得られる機能水の細胞活性化効果に変化が見られなくなる傾向にあるからである。
【００２８】
また、磁場を印加する時の温度は特に限定されるものではなく、被処理水の凝固点〜沸点の範囲であればよい。
【００２９】
［第２実施形態］
図２は、本発明に係る機能水の製造装置の第２実施形態を示す一部切り欠き概略斜視図である。以下、図２に示す機能水製造装置２０について説明する。なお、上述の図１に示した機能水製造装置１０に関して説明した要素と同一の要素については同一の符号を付し、重複する説明は省略する。
【００３０】
図２に示した角度調整手段６は、固定した貯水容器３及び低周波微小磁場印加手段５の周りに取り付けられた回転可能な枠である。そして、枠の内側には直流磁場印加手段４である２つの永久磁石がＮ極とＳ極が対向するように取り付けられている。枠を回転させることにより、直流磁場と低周波微小磁場の所定の角度に調整することが可能である。
【００３１】
以上、本発明の好適な実施形態について説明したが、本発明は上記実施形態に限定されるものではない。
【００３２】
例えば、本発明はバッチ式のものに限定されず、フロー式のものであっても構わず、貯水容器３としてタンクの代わりに長い管を巻いたものを利用してもよい。
【００３３】
また、遮磁手段２は装置全体を外部磁場から遮磁するものでなくても構わず、例えば、地磁気の方向に対してのみパーマロイ素材の磁気シールドを設置したものであってもよい。
【００３４】
また、直流磁場印加手段４は２つの対向して設置された永久磁石に限定されず、直流の電磁石を使用しても構わない。
【００３５】
さらに、角度調整手段６は図１や図２に示した可変型のものに限定されず、αが０±２０度又は９０±２０度となるように設置されるのであれば単なる平坦な台であっても構わず、遮磁手段２がそれを兼ねていても構わない。
【００３６】
本発明により得られる機能水は、免疫機能の増強、細胞増殖能の増強、細胞のＡＴＰ含有量上昇といった細胞を活性する効果をもち、人体などの生体に有益な効果をもたらす。従って、本発明により得られる機能水の用途は多岐にわたり、例えば、細胞機能を活性化するための活性飲料や点滴用の生理食塩水として使用したり、創傷治癒のための水として使用したり、再生医療において効果的に細胞増殖を促す培地として使用したり、植物の発育を助長する植物成長用水として使用したり、養殖魚や観賞魚の成長を促したり健康を維持したりするために水槽内の水として使用するといった用途がある。
【００３７】
【実施例】
以下、実施例及び比較例に基づいて本発明をより具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例に何ら限定されるものではない。
【００３８】
好中球の貪食能向上試験
（実施例１〜３及び比較例１）
まず、以下の方法でリン酸緩衝液（ＰＢＳ（＋）：ＧｉｂｃｏＢＲＬ製）を図１に示す本発明の製造装置用いて機能水とした。すなわち２０ｍＬのＰＢＳ（＋）を容量５０ｍＬのポリプロピレン（及びポリスチレン）チューブに入れた後、以下の条件で１時間磁場を印加して機能水化したＰＢＳ（＋）を得た。磁場の印加は、直流磁場は０ｍＧ（比較例１）、１００ｍＧ（実施例１）、５００ｍＧ（実施例２）又は１０００ｍＧ（実施例３）の磁場強度を有する磁場とし、低周波微小磁場は周波数６Ｈｚ、磁場強度１０ｍＧのパルス磁場とし、角度αを９０度に設定して遮光下で行った。
【００３９】
また、別途、以下の方法により好中球の調製を行った。２３歳男性被験者の末梢血液を採取し、モノ・ポリ分離溶液（ＭＰＲＭ：大日本製薬製）を３ｍＬ入れた１５ｍＬの遠沈管の上に採取した血液３．５ｍＬを重層した。１８００ｒｐｍにて３０分間遠心を行い、好中球層を採取した。採取した好中球層を１０ｍＬのＲＰＭＩ１６４０で希釈し、１２００ｒｐｍにて１０分間遠心を行った後、上清を捨て好中球を得た。細胞数を計数後、１×１０７ｃｅｌｌ／ｍＬとなるようにＲＰＭＩ１６４０を用いて希釈し好中球の細胞懸濁液を得た。
【００４０】
次に、機能水化したＰＢＳ（＋）について、以下の方法にて好中球の貪食能の測定を行った。まず、好中球の細胞懸濁液０．５ｍＬに機能水化したＰＢＳ（＋）を０．５ｍＬ加え、室温にて１時間インキュベーションした。その後、細胞懸濁液を９６穴マイクロタイタープレートに２００μＬ分注し、３７℃で１０分間インキュベーションした。次に、ＰＢＳ（＋）で１０倍に希釈したＬｕｍｉｓｐｈｅｒｅ（東レリサーチセンター製）溶液を５０μＬ分注し、５分間隔で３０分間発光量を測定して、好中球の貪食能を測定した。なお、発光量の測定には、ＦＤＳＳ６０００／ＣＬ（浜松ホトニクス製）を用いた。得られた結果を図４に示す。
【００４１】
（比較例２）
機能水化したＰＢＳ（＋）の代わりに未処理のＰＢＳ（＋）を用いたこと以外は実施例１と同様にして好中球の貪食能の測定を行った。得られた結果を図４に示す。
【００４２】
（比較例３）
磁気的に開放された空間でＰＢＳ（＋）に周波数６Ｈｚ、磁場強度１０ｍＧのパルス磁場を印加して機能水化したＰＢＳ（＋）を得、得られたＰＢＳ（＋）を用いて実施例１と同様にして好中球の貪食能の測定を行った。得られた結果を図４に示す。
【００４３】
図４に示した結果から明らかなように、本発明により得られた機能水（実施例１〜３）を用いると、直流磁場を印加しなかった場合（比較例１）や未処理のＰＢＳ（＋）を用いた場合（比較例２）や低周波微小磁場のみの印加により得られた機能水を用いた場合（比較例３）に比べて、好中球の貪食能が増強されることが確認された。また、その増強効果は磁場強度が５００ｍＧの直流磁場を印加したときに最も強いことが確認された。
【００４４】
（実施例４〜６）
まず、以下の方法でＰＢＳ（＋）を図１に示す本発明の製造装置用いて機能水とした。すなわち２０ｍＬのＰＢＳ（＋）を容量５０ｍＬのポリプロピレン（及びポリプロピレン）チューブに入れた後、以下の条件で１時間磁場を印加して機能水化したＰＢＳ（＋）を得た。磁場の印加は、直流磁場は５００ｍＧの磁場強度を有する磁場とし、低周波微小磁場は周波数６Ｈｚ、磁場強度１０ｍＧのパルス磁場とし、角度αを９０度に設定し、５２０ｎｍ以上（実施例４）、１０００ｎｍ（実施例５）又は１６００ｎｍ（実施例６）の波長の光を照射しながら行った。
【００４５】
なお、５２０ｎｍ以上のの波長の光の照射には、光源としてキセノン光源を用い５２０ｎｍ以上の光を透過する透過フィルター（５２０ＬＰ）を用いた。１０００ｎｍの波長の光の照射には、光源としてキセノン光源を用い、９００−１１００ｎｍの波長の光を透過する干渉フィルター（１０００ｎｍ、半値幅２００ｎｍ）を用いた。１６００ｎｍの波長の光の照射には、光源としてキセノン光源を用い、１５００−１７００ｎｍの波長の光を透過する透過フィルター（１６００ｎｍ、半値幅２００ｎｍ）を用いた。
【００４６】
好中球の調製は３７歳男性被験者の血液を使用したこと以外は実施例１と同様に行い、好中球の貪食能の測定については実施例１と同様に行った。得られた結果を図５に示す。
【００４７】
（比較例４）
機能水化したＰＢＳ（＋）の代わりに未処理のＰＢＳ（＋）を用いたこと以外は実施例４と同様にして好中球の貪食能の測定を行った。得られた結果を図５に示す。
【００４８】
図５に示した結果から明らかなように、本発明により得られた機能水（実施例４〜６）を用いると、未処理のＰＢＳ（＋）を用いた場合（比較例４）に比べて、好中球の貪食能が増強されることが確認された。また、その増強効果は１０００ｎｍの波長を有する光を照射しながら磁場を印加したときに最も強いことが確認された。
【００４９】
ＮＫ細胞活性の向上試験
（実施例７及び８）
まず、以下の方法でＰＢＳ（＋）を図１に示す本発明の製造装置用いて機能水とした。すなわち２０ｍＬのＰＢＳ（＋）を容量５０ｍＬのポリプロピレンチューブに入れた後、以下の条件で１時間磁場を印加して機能水化したＰＢＳ（＋）を得た。磁場の印加は、直流磁場は５００ｍＧの磁場強度を有する磁場とし、低周波微小磁場は周波数６Ｈｚ、磁場強度１０ｍＧのパルス磁場とし、角度αを０度（実施例７）又は９０度（実施例８）に設定して１０００ｎｍの波長を有する光を照射しながら行った。
【００５０】
また、別途、ＮＫ細胞を以下の方法により調製した。３７歳男性被験者の末梢血液を採取し、同量のＲＰＭＩ１６４０を用いて２倍に希釈した。ＭＰＲＭ培地を４ｍＬ入れた１５ｍＬの遠沈管の上に希釈した血液を２ｍＬ重層した。１８００ｒｐｍにて３０分間遠心を行い、リンパ球層を採取した。採取したリンパ球層を１０ｍＬのＲＰＭＩ１６４０で希釈し、１２００ｒｐｍにて１０分間遠心を行った後、上清を捨てリンパ球を得た。細胞数を計数後、１×１０７ｃｅｌｌ／ｍＬとなるようにＲＰＭＩ１６４０を用いて希釈した。
【００５１】
次に、Ｔａｒｇｅｔ細胞であるＭＯＬＴ−４（ヒト白血病Ｔ細胞）の調製を以下の方法で行った。培養したＭＯＬＴ−４を遠心して回収し、５μＭのＣａｌｃｅｉｎ−ＡＭ（同仁化学）を２０分間ローディングする。その後、ＲＰＭＩ１６４０を用いて３回洗浄を行い、培地中の蛍光色素を完全に除去した。細胞数を計数後、１×１０７ｃｅｌｌ／ｍＬとなるようにＲＰＭＩ１６４０を用いて希釈した。
【００５２】
次に、機能水化したＰＢＳ（＋）について、以下の方法でＮＫ細胞活性の評価を行った。まず、リンパ球の細胞懸濁液０．５ｍＬに機能水化したＰＢＳ（＋）を０．５ｍＬ加え、３７℃で１時間インキュベーションした。次に、９６穴マイクロタイタープレート（ＩＷＡＫＩ製、Ｕ底透明）にＭＯＬＴ−４の細胞懸濁液１００μＬ及びリンパ球の細胞懸濁液２０μＬを分注し、４時間ＣＯ２インキュベーター内でインキュベーションする。なお、陰性対照としてＭＯＬＴ−４の細胞懸濁液１００μＬにリンパ球を含まないＰＢＳ（＋）を２０μＬを分注したものを、陽性対照としてＭＯＬＴ−４の細胞懸濁液１００μＬに２０％（ｗ／ｖ）のＴｒｉｔｏｎ−Ｘを含むＰＢＳ（＋）を２０μＬを分注したものを用いた。インキュベーション後、マイクロタイタープレートを１０００ｒｐｍで５分間遠心を行い、上澄を１５０μＬ回収した。回収した上澄は９６穴Ｂｌａｃｋ／Ｃｌｅａｒマイクロタイタープレートに分注し、ＦＤＳＳ６０００／ＦＬ（浜松ホトニクス製）を用いて蛍光量（励起波長４８０ｎｍ、蛍光波長５４０ｎｍ）を測定し、ＮＫ細胞活性を評価した。なお、評価は、陰性対照の蛍光量を０％、陽性対照の蛍光量を１００％とする相対評価とした。得られた結果を図６に示す。
【００５３】
（比較例５）
機能水化したＰＢＳ（＋）の代わりに未処理のＰＢＳ（＋）を用いたこと以外は実施例７と同様にしてＮＫ細胞の活性を評価した。得られた結果を図６に示す。
【００５４】
（比較例６）
磁気的に開放された空間でＰＢＳ（＋）に周波数６Ｈｚ、磁場強度１０ｍＧのパルス磁場を印加して機能水化したＰＢＳ（＋）を得、得られたＰＢＳ（＋）を用いて実施例７と同様にしてＮＫ細胞の活性を評価した。得られた結果を図６に示す。
【００５５】
図６に示した結果から明らかなように、本発明により得られた機能水（実施例７及び８）を用いると、未処理のＰＢＳ（＋）を用いた場合（比較例５）や低周波微小磁場のみの印加により得られた機能水を用いた場合（比較例６）に比べて、ＮＫ細胞の活性が増強されることが確認された。また、その増強効果は角度αが９０度（実施例８）の場合に特に強いことが確認された。
【００５６】
リンパ球細胞及び繊維芽細胞の細胞増殖能の向上試験
（実施例９及び１０）
まず、以下の方法で培養液（１０％（ｖ／ｖ）ＦＢＳを含むＲＰＭＩ１６４０）を図１に示す本発明の製造装置用いて機能水とした。すなわち２０ｍＬの培養液を容量５０ｍＬのポリプロピレン（及びポリスチレン）チューブに入れた後、以下の条件で１時間磁場を印加して機能水化した培養液を得た。磁場の印加は、直流磁場は５００ｍＧの磁場強度を有する磁場とし、低周波微小磁場は周波数６Ｈｚ、磁場強度１０ｍＧのパルス磁場とし、角度αを０度（実施例９）又は９０度（実施例１０）に設定して１０００ｎｍの波長を有する光を照射しながら行った。
【００５７】
次に、別途、リンパ球細胞を以下の方法により調製した。２４歳女性被験者の末梢血液を採取し、ＭＰＲＭを３ｍＬ入れた１５ｍＬの遠沈管の上に採取した血液３．５ｍＬを重層した。１８００ｒｐｍにて３０分間遠心を行い、リンパ球層を採取した。採取したリンパ球層を１０ｍＬのＲＰＭＩ１６４０で希釈し、１２００ｒｐｍにて１０分間遠心を行った後、上清を捨てリンパ球を得た。細胞数を計数後、１×１０７ｃｅｌｌ／ｍＬとなるようにＲＰＭＩ１６４０を用いて希釈した。
【００５８】
次に、機能水化した培養液について、以下の方法でリンパ球の細胞増殖能の評価を行った。９６穴のマイクロタイタープレートに希釈した細胞懸濁液を１００μＬ分注し、そこに機能水化した培養液を１００μＬ添加し、ＣＯ２インキュベーター内で４８時間培養を行った。その後、各ウェルにＡｌａｍａｒＢｌｕｅ（大日本製薬製）を１００μＬ添加し、ＣＯ２インキュベーター内で４時間インキュベーションを行い、マイクロプレートリーダー（ＮｕｌｇｅＮｕｎｃ）を用いて５７０−６００ｎｍの吸光度を測定し、細胞数を計測した。得られた結果を図７に示す
【００５９】
（比較例７）
機能水化した培養液の代わりに未処理の培養液を用いたこと以外は実施例９と同様にしてリンパ球の細胞増殖能を評価した。得られた結果を図７に示す。
【００６０】
（比較例８）
磁気的に開放された空間で培養液に周波数６Ｈｚ、磁場強度１０ｍＧのパルス磁場を印加して機能水化した培養液を得、得られた培養液を用いて実施例９と同様にしてリンパ球の細胞増殖能の評価を行った。得られた結果を図７に示す。
【００６１】
図７に示した結果から明らかなように、本発明により得られた機能水（実施例９及び１０）を用いると、未処理の培養液を用いた場合（比較例７）や低周波微小磁場のみの印加により得られた機能水を用いた場合（比較例８）に比べて、リンパ球細胞の細胞増殖能が増強されることが確認された。また、その増強効果は角度αが９０度の場合（実施例１０）に特に強いことが確認された。
【００６２】
（実施例１１及び１２）
まず、以下の方法で培養液（１０％（ｖ／ｖ）ＦＢＳを含むＤＭＥＭ／Ｆ１２）を図１に示す本発明の製造装置用いて機能水とした。すなわち２０ｍＬの培養液を容量５０ｍＬのポリプロピレンチューブに入れた後、以下の条件で１時間磁場を印加して機能水化した培養液を得た。磁場の印加は、直流磁場は５００ｍＧの磁場強度を有する磁場とし、低周波微小磁場は周波数６Ｈｚ、磁場強度１０ｍＧのパルス磁場とし、角度αを０度（実施例１１）又は９０度（実施例１２）に設定して１０００ｎｍの波長を有する光を照射しながら行った。
【００６３】
次に、機能水化した培養液について、以下の方法でヒト繊維芽細胞の細胞増殖能の評価を行った。
【００６４】
まず、ヒト繊維芽細胞を１０％（ｖ／ｖ）ＦＢＳを含むＤＭＥＭ／Ｆ１２で培養した。培養した繊維芽細胞を９６穴マイクロタイタープレートに１×１０４ｃｅｌｌ／ウェルとなるように分注し、さらに機能水化した培養液を１００μＬ添加し、ＣＯ２インキュベーター内で２４時間培養した。その後、各ウェルにＡｌａｍａｒＢｌｕｅ（大日本製薬製）を１００μＬ添加し、ＣＯ２インキュベーター内で４時間インキュベーションを行い、マイクロプレートリーダー（ＮｕｌｇｅＮｕｎｃ）を用いて５７０−６００ｎｍの吸光度を測定し、細胞数を計測した。得られた結果を図８に示す。
【００６５】
（比較例９）
機能水化した培養液の代わりに未処理の培養液を用いたこと以外は実施例１１と同様にして繊維芽細胞の細胞増殖能を評価した。得られた結果を図８に示す。
【００６６】
（比較例１０）
磁気的に開放された空間で培養液に周波数６Ｈｚ、磁場強度１０ｍＧのパルス磁場を印加して機能水化した培養液を得、得られた培養液を用いて実施例１１と同様にして繊維芽細胞の細胞増殖能の評価を行った。得られた結果を図８に示す。
【００６７】
図８に示した結果から明らかなように、本発明にかかる製造装置及び製造方法により得られた機能水（実施例１１及び１２）を用いると、未処理の培養液を用いた場合（比較例９）や低周波微小磁場のみの印加により得られた機能水を用いた場合（比較例１０）に比べて、繊維芽細胞の細胞増殖能が増強されることが確認された。また、その増強効果は角度αが９０度の場合（実施例１２）に特に強いことが確認された。
【００６８】
リンパ球細胞及びヒト平滑筋細胞のＡＴＰ含有量増加試験
（実施例１３及び１４）
まず、以下の方法で培養液（１０％（ｖ／ｖ）ＦＢＳを含むＲＰＭＩ１６４０）を図１に示す本発明の製造装置用いて機能水とした。すなわち２０ｍＬの培養液を容量５０ｍＬのポリプロピレンチューブに入れた後、以下の条件で１時間磁場を印加して機能水化した培養液を得た。磁場の印加は、直流磁場は５００ｍＧの磁場強度を有する磁場とし、低周波微小磁場は周波数６Ｈｚ、磁場強度１０ｍＧのパルス磁場とし、角度αを０度（実施例１３）又は９０度（実施例１４）に設定して１０００ｎｍの波長を有する光を照射しながら行った。
【００６９】
次に、別途、前記実施例９と同様にしてリンパ球細胞の調整を行い、細胞懸濁液（１×１０７ｃｅｌｌ／ｍＬ）を得た。
【００７０】
次に、機能水化した培養液について、以下の方法でリンパ球のＡＴＰ含有量の測定を行った。９６穴マイクロタイタープレートの各ウェルに細胞懸濁液を１００μＬ分注し、そこに機能水化した培養液を１００μＬ添加し、ＣＯ２インキュベーター内で２時間インキュベーションした。その後、マイクロタイタープレートを１０００ｒｐｍで５分間遠心を行い、上澄を取り除き、ルシフェリン−ルシフェラーゼ発光キット（キッコーマン製；商品名「ルシフェール」）を用いてＡＴＰの定量を行った。なお、発光量の測定には、ＦＤＳＳ６０００／ＣＬを使用した。得られた結果を図９に示す。
【００７１】
（比較例１１）
機能水化した培養液の代わりに未処理の培養液を用いたこと以外は実施例１１と同様にしてリンパ球細胞のＡＴＰ含有量の測定を行った。得られた結果を図９に示す。
【００７２】
（比較例１２）
磁気的に開放された空間で培養液に周波数６Ｈｚ、磁場強度１０ｍＧのパルス磁場を印加して機能水化した培養液を得、得られた培養液を用いて実施例１１と同様にしてリンパ球細胞のＡＴＰ含有量の測定を行った。得られた結果を図９に示す。
【００７３】
図９に示した結果から明らかなように、本発明により得られた機能水（実施例１３及び１４）を用いると、未処理の培養液を用いた場合（比較例１１）や低周波微小磁場のみの印加により得られた機能水を用いた場合（比較例１２）に比べて、リンパ球細胞のＡＴＰ含有量が増加することが確認された。また、その増加量は角度αが９０度の場合（実施例１４）に特に強いことが確認された。
【００７４】
（実施例１５及び１６）
まず、以下の方法で培養液（１０％（ｖ／ｖ）ＦＢＳを含むＤＭＥＭ／Ｆ１２）を図１に示す本発明の製造装置用いて機能水とした。すなわち２０ｍＬの培養液を容量５０ｍＬのポリプロピレンチューブに入れた後、以下の条件で１時間磁場を印加して機能水化した培養液を得た。磁場の印加は、直流磁場は５００ｍＧの磁場強度を有する磁場とし、低周波微小磁場は周波数６Ｈｚ、磁場強度１０ｍＧのパルス磁場とし、角度αを０度（実施例１５）又は９０度（実施例１６）に設定して１０００ｎｍの波長を有する光を照射しながら行った。
【００７５】
次に、機能水化した培養液について、以下の方法でヒト平滑筋細胞のＡＴＰ含有量の測定を行った。
【００７６】
まず、ヒト平滑筋細胞を１０％（ｖ／ｖ）ＦＢＳを含むＤＭＥＭ／Ｆ１２で培養した。培養した繊維芽細胞を９６穴マイクロタイタープレートに１×１０４ｃｅｌｌ／ウェルとなるように分注し、ＣＯ２インキュベーター内で２４時間培養した。次に、機能水化した培養液を１００μＬ添加し、ＣＯ２インキュベーター内で２時間培養した。その後は、実施例１３と同様にして平滑筋細胞のＡＴＰ含有量を測定した。得られた結果を図１０に示す。
【００７７】
（比較例１３）
機能水化した培養液の代わりに未処理の培養液を用いたこと以外は実施例１５と同様にして平滑筋細胞のＡＴＰ含有量の測定を行った。得られた結果を図１０に示す。
【００７８】
（比較例１４）
磁気的に開放された空間で培養液に周波数６Ｈｚ、磁場強度１０ｍＧのパルス磁場を印加して機能水化した培養液を得、得られた培養液を用いて実施例１５と同様にして平滑筋細胞のＡＴＰ含有量の測定を行った。得られた結果を図１０に示す。
【００７９】
図１０に示した結果から明らかなように、本発明により得られた機能水（実施例１５及び１６）を用いると、未処理の液体培地を用いた場合（比較例１２）や低周波微小磁場のみの印加により得られた機能水を用いた場合（比較例１３）に比べて、ヒト平滑筋細胞のＡＴＰ含有量が増加することが確認された。
【００８０】
【発明の効果】
以上説明したように、本発明の機能水の製造装置及び製造方法によれば、免疫機能の増強、細胞増殖能の増強、細胞のＡＴＰ含有量の上昇といった細胞を活性化する効果を有し、人体などの生体に有益な効果をもたらす機能水を得ることができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明の機能水製造装置の第１実施形態を示す一部切り欠き概略斜視図である。
【図２】本発明の機能水製造装置の第２実施形態を示す一部切り欠き概略斜視図である。
【図３】図１に示す本発明の機能水製造装置の第１実施形態の縦断面図。
【図４】実施例１〜３及び比較例１〜３において得られた好中球の貪食能向上試験の結果を表わすグラフである。
【図５】実施例４〜６及び比較例４において得られた好中球の貪食能向上試験の結果を表わすグラフである。
【図６】実施例７〜８及び比較例５〜６において得られたＮＫ細胞の活性向上試験の結果を表わすグラフである。
【図７】実施例９〜１０及び比較例７〜８において得られたリンパ球の細胞増殖能向上試験の結果を表わすグラフである。
【図８】実施例１１〜１２及び比較例９〜１０において得られた繊維芽細胞の細胞増殖能向上試験の結果を表わすグラフである。
【図９】実施例１３〜１４及び比較例１１〜１２において得られたリンパ球のＡＴＰ含有量上昇試験の結果を表わすグラフである。
【図１０】実施例１５〜１６及び比較例１３〜１４において得られた平滑筋細胞のＡＴＰ含有量上昇試験の結果を表わすグラフである。
【符号の説明】
２…遮磁手段、３…貯水容器、４…直流磁場印加手段、５…低周波微小磁場印加手段、６…角度調製手段、７…光照射手段、１０、２０…機能水製造装置、１１…直流磁場の方向、１２…低周波微小磁場の方向、１３…直流磁場の方向と一致する第１の軸、１４…低周波微小磁場と一致する第２の軸、α…１３と１４の間の角度。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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