(57)【要約】【課題】試料に含まれる多数の被検生体高分子、例えばタンパク質、糖質、ＤＮＡなどを迅速にかつ一括して検出し、正確に同定できる検出方法を提供すること。【解決手段】試料中に存在する１種類以上の生体高分子を同定するに当たって、生体高分子を、その及び（又は）それらの生体高分子にそれぞれが特異的に結合可能な複数個のプローブで一括して捕捉し、同定するように、構成する。【選択図】      図２
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
試料中に存在する１種類以上の生体高分子を同定する方法において、
前記生体高分子を、その及び（又は）それらの生体高分子にそれぞれが特異的に結合可能な複数個のプローブで一括して捕捉し、同定することを特徴とする生体高分子の同定方法。
【請求項２】
前記生体高分子がタンパク質であることを特徴とする請求項１に記載の生体高分子の同定方法。
【請求項３】
前記プローブとして抗体又は人工抗体を使用することを特徴とする請求項１又は２に記載の生体高分子の同定方法。
【請求項４】
試料中に存在する１種類以上の生体高分子を同定する装置において、
前記生体高分子を、その及び（又は）それらの生体高分子にそれぞれが特異的に結合可能な複数個のプローブを備えてなることを特徴とする生体高分子の同定装置。
【請求項５】
前記生体高分子がタンパク質であることを特徴とする請求項４に記載の生体高分子の同定装置。
【請求項６】
前記プローブが抗体又は人工抗体であることを特徴とする請求項４又は５に記載の生体高分子の同定装置。
【請求項７】
ポリヌクレオチド２本鎖からなる結合手段と、その先端に固定された抗体とからなる前記プローブと、前記抗体に対する前記生体高分子の結合の有無を検出する検出ユニットとを組み合わせて備えることを特徴とする請求項４〜６のいずれか１項に記載の生体高分子の同定装置。
【請求項８】
カーボンナノチューブからなる結合手段と、その先端に固定された抗体とからなる前記プローブと、前記抗体に対する前記生体高分子の結合の有無を検出する検出ユニットとを組み合わせて備えることを特徴とする請求項４〜６のいずれか１項に記載の生体高分子の同定装置。
【請求項９】
周波数変換素子と、該周波数変換素子の電極上に直接的もしくは間接的に固定された抗体からなる前記プローブと、前記周波数変換素子の基本振動数の変化を検出することにより前記抗体に対する前記生体高分子の結合の有無を検出する検出ユニットとを組み合わせて備えることを特徴とする請求項４〜６のいずれか１項に記載の生体高分子の同定装置。
【請求項１０】
支持基板と、該支持基板の金属薄膜上に直接的もしくは間接的に固定された抗体からなる前記プローブと、前記支持基板の裏面に配置された、前記抗体に光を照射するための光照射ユニットと、表面プラズモン共鳴現象による反射光の強度が低下する角度等の変化を検出することにより前記抗体に対する前記生体高分子の結合の有無を検出する検出ユニットとを組み合わせて備えることを特徴とする請求項４〜６のいずれか１項に記載の生体高分子の同定装置。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、生体高分子の同定システムに関し、さらに詳しく述べると、タンパク質等の生体高分子を一括して迅速かつ正確に同定する方法及びその生体高分子同定方法を実施するための小型で構造簡単な装置に関する。
【０００２】
【従来の技術】
１９９０年代に入って進められてきたヒトゲノム計画は、各国が分担してヒトの遺伝暗号をすべて解読しようとする試みであり、２０００年夏にドラフト版が完成したことが公表された。今後、機能ゲノム科学や構造ゲノム科学の進展によって、解読されたヒトゲノム配列情報の各々の箇所がどのような機能に係わっているかが明らかにされていくものと予想される。
【０００３】
ところで、ヒトゲノム配列情報は、ＤＮＡ（デオキシリボ核酸）を構成するＡ（アデニン），Ｔ（チミン），Ｃ（シトシン）及びＧ（グアニン）の４個のアルファベットで表される塩基の並びの繰り返しで表現される。この中の１塩基の違い（一塩基変異多型；ＳＮＰｓ＝ｓｉｎｇｌｅ  ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ）が疾患に対するかかりやすさや薬の効きやすさに影響を及ぼすことから、塩基配列を解読するためのＤＮＡチップ等の装置が各社で開発されており、また、これらの装置を利用して個人個人に対応した「テーラーメード医療」「オーダーメイド医療」が近い将来実現されようとしており、国家プロジェクト「ミレニアムプロジェクト」では２００４年度中の実現が謳われている。（特許文献１及び２）
しかし、これらの方法は両親から遺伝された遺伝子情報をもとにして病気の発症を予想することから（人によっては発症するかどうか、またいつ発症するか不確定）あくまで予防的な治療方法である。実際に体内で機能しているのはタンパク質なので、体内に存在するタンパク質を検出して、それらの機能を解析する必要がある。タンパク質はＤＮＡの遺伝情報から合成されるが、その段階でｍ−ＲＮＡ（ｍｅｓｓｅｎｇｅｒ−ｒｉｂｏｎｕｃｌｅｉｃ  ａｃｉｄ；メッセンジャーリボ核酸）への転写、リボゾームによるｍ−ＲＮＡを設計図にしたタンパク質の合成がおこなわれるが、これらの工程は全く機械的になされることはなく、ＤＮＡとこれによって作製されるタンパク質は一対一対応ではない。このためにＤＮＡチップ等によってＤＮＡの配列を解読しても、このＤＮＡによって作製されるタンパク質を同定することはできない。
【０００４】
この問題を解決する方法の１つとして、各社でプロテインチップが開発されている。プロテインチップは、タンパク質（プロテイン）が体内で実際に機能する物質で、健康な人の体内及び病気の人の体内に存在するタンパク質をそれぞれプロテインチップで捕捉し、捕捉されたタンパク質を比較することにより、病気の原因のタンパク質を検出するものである。現在商業的に入手可能なプロテインチップは、主として、飛行時間型質量分析方式に基づくものと、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ；ｓｕｒｆａｃｅ  ｐｌａｓｍｏｎ  ｒｅｓｏｎａｎｃｅ）に基づくものの２種類である。飛行時間型質量分析方式に基づくプロテインチップは、例えば、検出対象のタンパク質を担持したプロテインチップに紫外線（ＵＶ）パルスレーザーを照射して、タンパク質をイオン化し、飛行させることによって行うことができる。次いで、イオン検知管に達するまでの飛行時間を計測し、その結果からタンパク質の質量数（分子量）を求める。求められた分子量をデータベースのデータと対比することで、被検タンパク質を同定することができる。また、ＳＰＲに基づくプロテインチップは、例えば、プローブをガラス基板上に形成した金電極上に固定し、さらにそのプローブに検出対象のタンパク質を付着させることによって行うことができる。次いで、タンパク質が付着したプロテインチップの裏面（タンパク質を有しない面）に光を照射すると、ＳＰＲ現象が発生し、反射光の強度が極小となる角度が変化する。この角度変化はチップ表面での質量変化に対応するものであるので、この角度からタンパク質の質量数（分子量）を求める。求められた分子量をデータベースのデータと対比することで、被検タンパク質を同定することができる。
【０００５】
上記したように、従来のプロテインチップはいずれも、タンパク質の質量数（分子量）を検出した後、データベースのデータから被検タンパク質を同定するものである。しかし、これらのプロテインチップでは、もしも同一分子量のタンパク質が１つの試料中に多数存在するような場合に、被検タンパク質を同定できないという問題がある。周知の通り、人体だけをとってみても、体内に含まれるタンパク質は無数に存在するからである。
【０００６】
また、タンパク質は、そのサイズが非常に大きく、かつ形状が多様化していることに関連して、重要な問題を有している。図１に機能を模式的に示すように、タンパク質７の輪郭は、その形状が異なる部分７ａ、７ｂ、７ｃ及び７ｄによって規定されている。このようなタンパク質７をプロテインチップ１０で検出し、同定したとする。ここで使用するプロテインチップ１０は、ごく一般的なものであり、シリコン基板のような担体１１の表面に、リンカー４を介して抗体５が固定されている。図示の例では、抗体５の凹部５ａにタンパク質７の凸部７ａが化学的に結合し、この限りにおいては、抗体５でタンパク質７を問題なく捕捉し、次の検出工程に進むことができる。しかし、タンパク質が無数に存在することを考慮した場合、この一箇所だけの検出結果は不正確である。同じ試料について繰り返し検出操作を行い、検出結果を保証するか、さもなければ、残された部分７ｂ、７ｃ及び７ｄについても、同様な検出操作を行うことが必要である。しかし、このような操作は煩雑で、時間がかかるばかりか、コストの増加も甘受しなければならない。
【０００７】
また、使用する抗体の調製に問題がある。現在一般的に使用されている調製技術では、タンパク質の認識に好適な抗体を調製するのに限界があり、検出精度を高めるためには高価な抗体を使用しなければならない。
【０００８】
さらに、使用するシステムの大きさや複雑さなどにも問題がある。例えばＳＰＲに基づくプロテインチップシステムは、チップによって捕捉されたタンパク質の質量数をリアルタイムに求めることができるというメリットがあるが、大きな光学系（プリズム）を装備することが必要であり、検出操作の都度、光学系の入念な調整を行うことも必要である。また、このシステムも、上記したように、タンパク質を１種類ずつ同定することを主眼としたものであるので、多数のタンパク質を一括して同定することは不可能である。
【０００９】
【特許文献１】
特開平１１−３３２５９５号公報（特許請求の範囲）
【特許文献２】
特開２００１−２３５４７４号公報（特許請求の範囲）
【００１０】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、上記したような従来の技術の問題点を解決すること、換言すると、試料に含まれる多数の被検生体高分子、例えばタンパク質、糖質、ＤＮＡなどを迅速にかつ一括して検出し、正確に同定できる、低コストで実施可能な生体高分子の同定方法を提供することにある。
【００１１】
また、本発明の目的は、商業的に一般的に入手可能で、価格的にも安価なプローブ（例えば、抗体）を使用しても、信頼性の高い同定結果をもたらすことのできる生体高分子の同定方法を提供することにある。
【００１２】
さらに、本発明の目的は、本発明方法を有利に実施できる、小型で構造が簡単な生体高分子の同定方法を提供することにある。
【００１３】
本発明の上記したような目的やその他の目的は、以下の詳細な説明から容易に理解することができるであろう。
【００１４】
【課題を解決するための手段】
本発明は、その１つの面において、試料中に存在する１種類以上の生体高分子を同定する方法において、
前記生体高分子を、その及び（又は）それらの生体高分子にそれぞれが特異的に結合可能な複数個のプローブで一括して捕捉し、同定することを特徴とする生体高分子の同定方法にある。
【００１５】
また、本発明は、そのもう１つの面において、試料中に存在する１種類以上の生体高分子を同定する装置において、
前記生体高分子を、その及び（又は）それらの生体高分子にそれぞれが特異的に結合可能な複数個のプローブを備えてなることを特徴とする生体高分子の同定装置にある。
【００１６】
【発明の実施の形態】
本発明は、試料中に存在する１種類以上の生体高分子を同定する方法及び装置にある。ここで、試料とは、検出し、同定されるべき生体高分子を含有する任意の液体を意味し、典型的には、人間や動物の体液、例えば血液、尿、汗、唾液など、あるいはその他の液体である。これらの液体は、そのままで使用してもよく、あるいは適当な溶媒に溶解して溶液の状態で使用してもよい。また、生体高分子は、試料に依存して多岐に及んでおり、一例を示すと、タンパク質、糖質、脂質、核酸などを挙げることができる。生体高分子は、例えば、異なるタイプのタンパク質の組み合わせであってもよく、さもなければ、１種類以上のタンパク質とその他の生体高分子、例えば、１種類以上のＤＮＡとの組み合わせであってもよい。また、生体高分子は、試料あるいはその溶液中でそのまま使用してもよく、さもなければ、標識処理を施した後に使用してもよい。標識処理は、蛍光染料などを使用して常法に従って行うことができる。
【００１７】
本発明の実施において、もしもプロテインチップを備えたシステムを作製するつもりであるならば、タンパク質が生体高分子として使用される。このような場合には、以下に説明するように、生体高分子としてタンパク質を使用するとともに、それと対で用いられるプローブとして抗体を使用することが、最も好適である。なお、本願明細書で使用した場合、「抗体」は、特に断りのない限り、人工抗体も包含する。
【００１８】
さらに説明すると、プロテインチップは、例えば糖尿病において肝細胞がインシュリンの受容状態に応じて細胞内グリコーゲン代謝を切り換えるなどの場合に、インシュリン受容体からグリコーゲン分解酵素に至る一連のタンパク質相互作用ネットワークの一部が低下ないし昂進していることを捉えようとするものである。プロテインチップに本発明を適用することによって、リン酸化や糖鎖付加などのいわゆる翻訳後修飾も含めて、タンパク質のポピュレーションを捉えることが可能になる。これにより、従来のように症状として現れた現象を大括りにして糖尿病と捉えるのではなく、相互作用ネットワークに係わるある特定のタンパク質の機能低下が糖代謝の不全を起こしているなどを把握できるようになり、機能不全の原因に対応して適切な診断と治療、並びに治療結果の検証が可能になる。また、疾病に関わるタンパク質を検出することによって、現時点では発症していない疾病の検出に使用すれば、予防治療も行うことができる。
【００１９】
もちろん同様の手法は、糖尿病に限らず、高血圧症、高脂血症、癌（細胞増殖制御不全）その他の多因子性疾患全般に対して適用が可能である。
【００２０】
本発明では、生体高分子に組み合わせて、生体高分子に特異的に結合可能な複数個のプローブを使用することが必要である。複数個のプローブでもって、多数の生体高分子を一括して捕捉し、同定するためである。
【００２１】
複数個のプローブを使用して多数の生体高分子を一括して捕捉するシステムは、簡単に示すと、図２に模式的に示す通りである。図示の例は、プロテインチップ１０を使用した例であり、チップの担体１１は、基板１とその上に所定のパターンで形成された電極２とからなる。タンパク質（図示せず）を受け取るプローブは抗体からなり、図では、便宜的に２個の抗体、第１の抗体５−１及び第２の抗体５−２が示されている。第１の抗体５−１及び第２の抗体５−２は、それぞれ、結合手段（ここでは、ポリヌクレオチド２本鎖）４−１及び４−２を介して担体１１に固定されている。図示のプロテインチップ１０はその担体１１の上で異なる抗体を有しているので、多数のタンパク質が試料中に含まれていても、それらを同時に検出し、同定することができる。同定には、以下に詳細に説明するように、いろいろな技法を有利に使用することができる。
【００２２】
上記からも理解されるように、本発明の典型例は、複数のプローブを用いて、試料中の複数のタンパク質を捕捉し、各プローブにどのタンパク質が捕捉されたかどうか調べることにより、タンパク質を同定するシステムにある。図３〜図５は、この同定システムをさらにわかりやすく説明するためのものである。
【００２３】
図３に示すように、担体１１を構成する基板（例えば、シリコン基板、ガラス基板等）１上の金電極２に２本鎖ヌクレオチド４を結合し、さらにその先端にプローブ５を固定する。なお、２本鎖ヌクレオチド４とプローブ５をあわせてプローブと呼ぶこともある。ここで使用したプローブ５は、抗体であり、図４に模式的に示すように、４種類のプローブ、すなわち、プローブａ、プローブｂ、プローブｃ、そしてプローブｄからなる。このような構成のプロテインチップ１０を測定セル（図示せず；キュベットやウエルなどであってもよい）に配置し、タンパク質７を含む試料溶液を流し込む。ここで使用したタンパク質７は、図５に示すように、合計して６種類である。すなわち、タンパク質Ｊ、タンパク質Ｋ、タンパク質Ｌ、タンパク質Ｍ、タンパク質Ｎ、そしてタンパク質Ｐがすべて、１つの試料溶液に含まれている。また、検出効率を高めるため、それぞれのタンパク質には蛍光標識が付与されている。なお、図４及び図５において、プローブやタンパク質の形状はタンパク質の持つ機能ドメイン（タンパク質の中の一部分でタンパク質が特定の機能を果たすための部品）を模式的に表現したもので、プローブとタンパク質の機能ドメインが同じ形のものが結合できることを意味しており、実際の形状とは異なっている。
【００２４】
測定セルに試料溶液を流し込むと、図示しないが、それぞれのプローブにそのプローブに対応するタンパク質が捕捉され、結合せしめられる。引き続いて洗浄を行い、捕捉されたタンパク質の蛍光を検出する。付属の検出器によってタンパク質とそれらが結合したプローブ（抗体）との関係をまとめると、下記の第１表に示すような検出結果が得られる。
【００２５】
【表１】
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【００２６】
第１表を参照すると、例えば、タンパク質Ｊは３種類の抗体ａ，ｂ，ｃに結合していることがわかる。このことから、このタンパク質Ｊにはこの３種類の抗体に対応した３つの機能ドメインがあることがわかる。従来のように１種類のプローブでは１つの機能の有無しかわからないことからすれば、本発明のシステムは非常に高機能である。また、第１表の検出結果を縦方向に見ていくと、例えばプローブａだけではタンパク質ＪとＫの区別ができないことがわかる。この例からも明らかなように、１つのプローブでは６種類のタンパク質を同定することができないが、４種類のプローブを使用して検出を行うことにより、６種類のタンパク質をすべて同定することができるようになる。
【００２７】
また、このシステムにより、各タンパク質の機能ドメインを検出することもできる。例えば、タンパク質Ｊには３つの機能ドメインがあることが明らかになる。
【００２８】
本発明の実施において、例えばタンパク質のような生体高分子と組み合わせて使用されるプローブは、特に限定されるものではない。生体高分子などを考慮して最適なプローブを選択し、使用することができる。好適なプローブの一例として、例えば、抗体（人工抗体を含む）あるいはその断片、生体高分子に対して親和性を有する有機化合物、被検生体高分子とは別の生体高分子などを挙げることができる。とりわけ抗体を、プローブとして有利に使用することができる。抗体には、例えば、ＩｇＧ抗体、モノクロナールな免疫グロブリンＩｇＧ抗体、ＩｇＭ抗体、ＩｇＤ抗体、ＩｇＡ抗体、ＩｇＥ抗体などがある。
【００２９】
プローブは、通常、担体上に固定して使用することができる。固定手段としては、常用の化学的手法などを使用することができる。担体は、チップの構成、検出手段などのファクタに応じていろいろに変更することができるが、通常、ガラス基板、半導体基板（例えば、シリコン基板）等の基板とその上にパターン状に形成された電極（例えば、金電極）とから構成される。光学的に生体高分子−プローブの結合状態を確認するような場合には、ガラス等の透明な基板を使用することもある。
【００３０】
プローブは、担体、一般的には電極上に直接的に固定してもよく、さもなければ、何らかの結合手段（いわゆるリンカー）を介して担体上に間接的に固定してもよい。ここで使用し得る結合手段としては、生体高分子の固定に一般的に使用されているいろいろな手段を使用することができる。適当な結合手段としては、以下に列挙するものに限定されるわけではないけれども、ポリヌクレオチド２本鎖、自己組織化分子膜などがある。
【００３１】
本発明は、その１つの面において、図３〜図５を参照してすでに一例を概説したような生体高分子の同定システム、すなわち、プローブが、ポリヌクレオチド２本鎖からなる結合手段と、その先端に固定された抗体とからなり、抗体に対する生体高分子の結合の有無を検出することを特徴とする生体高分子の同定方法及び装置にある。
【００３２】
さらに説明すると、この生体高分子の同定システムは、好ましくは、検出対象の生体高分子（例えば、タンパク質等）に対して特異的に結合する性質をもたせたプローブ（いわば、結合部）と、プローブの結合手段として機能するとともに、タンパク質等がプローブに結合したことを検出するための、ポリヌクレオチド２本鎖及び電荷分離原子団で構成される検出部と、タンパク質等の結合によって変化したポリヌクレオチド２本鎖の電導度ないし電荷移動量の変化を取り出す電極部とを備えている。
【００３３】
この生体高分子同定システムにおける結合部は、プローブなどのファクタに応じていろいろに構成することができる。例えば生体高分子がタンパク質である場合、結合部は、通常、タンパク質と特異的に結合する抗体又はそのような抗体を例えばタンパク質分解酵素で限定分解して得られる当該抗体の断片（フラグメント）、あるいはタンパク質に対して親和性を有する有機化合物又は生体高分子から構成される。抗体としては、例えば、モノクローナルな免疫グロブリンＩｇＧ抗体を使用することができる。また、ＩｇＧ抗体に由来する断片として、例えばＩｇＧ抗体のＦａｂフラグメントを使用することもできる。さらに、そのようなＦａｂフラグメントに由来する断片などを使用することもできる。タンパク質に対して親和性を有する有機化合物として使用可能な例を挙げると、アデノシン−５’−Ｏ−（３−チオトリフォスフェート）（別名ＡＴＰ−γ−Ｓ）等の酵素基質アナログや酵素活性阻害剤、神経伝達阻害剤（アンタゴニスト）などがある。また、タンパク質に対して親和性を有する生体高分子の例としては、当該タンパク質の基質又は触媒となるタンパク質、分子複合体を構成する要素タンパク質どうしなどを挙げることができる。結合部を構成する上記の如き物質が検出部を構成するポリヌクレオチド２本鎖に直接連結して固定することができない場合には、そのために有効な連結部分（一般には２価の原子団）を介在させることで固定するようにしてもよい。
【００３４】
検出部は、好ましくは、ポリヌクレオチド２本鎖と電荷分離原子団で構成されるナノ構造体として形成される。ポリヌクレオチド２本鎖の一端は上述の結合部に連結し、他端は後述の電極部に連結する。電荷分離原子団は、ポリヌクレオチド２本鎖に共有結合により付加されていてもよく、あるいはポリヌクレオチド２本鎖の構造中に含有（隣接する相補的結合の間に挿入（インターカレーション））されていてもよく、あるいは２本鎖を形成しているポリヌクレオチド鎖の一部に置換により組み込まれていてもよい。好ましくは、電荷分離原子団は上記電極の反対側、すなわち、ポリヌクレオチド２本鎖の結合部側の先端近傍に存在する。
【００３５】
ポリヌクレオチド２本鎖は、ヌクレオチドを構成する塩基の芳香環のパイ電子スタックにより鎖の長軸方向に導電性を有する。一方、このようなポリヌクレオチド２本鎖と組み合わされる電荷分離原子団は、電位差又は励起光などの作用を受けて電荷分離を起こす原子団であり、上述のようにポリヌクレオチド２本鎖中に含有される場合には化合物であってもよい。具体的には、電荷分離原子団は、試料溶液中の試薬（電荷受容体、例えば以下に記載するフェロシアンイオンなど）により電子の引き抜きを受けて正孔を発生する原子団、あるいは光励起を受けて電子と正孔を発生するものなどである。電荷分離原子団から電荷分離により生じた電子と正孔のうちのいずれか一方は、ポリヌクレオチド２本鎖を通しての電気的導通に関与して、ポリヌクレオチド２本鎖の一端につながる電極によりそれを検出することができる。言い換えれば、本発明のこの形態では、電荷分離原子団に電荷分離を起こさせている状態で、ポリヌクレオチド２本鎖による導電性を検出するようにする。電荷分離原子団としては、例えば、フェロセン化ポルフィリンなどを用いることができる。
【００３６】
光励起を受けた場合のように、電荷分離原子団から電子と正孔が発生する場合には、ポリヌクレオチド２本鎖を通しての導通に関与しない方の電子又は正孔は、試料溶液中に存在する電荷受容体に受け取らせるようにする。電荷受容体としては、例えばフェロシアンイオンなどのアニオンＭｍ−を用いることができる。このようなアニオンＭｍ−を用いる場合、電荷を受け取った後のアニオンをＭｎ−で表すと、それが電子を受け取るならばｍ＜ｎ、正孔を受け取るならばｍ＞ｎとなる。電荷受容体としてカチオンを用いる場合は、逆の関係が成り立つ。
【００３７】
本発明のこの形態では、ポリヌクレオチド２本鎖の一端の結合部へのタンパク質の結合によって変化したポリヌクレオチド２本鎖の電荷移動状態の変化、すなわちその電導度ないし電荷移動量の変化を、その他端が連結する電極部で検出する。検出部の電荷分離原子団が電荷分離を起している状態においてポリヌクレオチド２本鎖の長軸方向沿って発現する導電性は、ヌクレオチドを構成する塩基の芳香環のパイ電子スタックに依存している。ポリヌクレオチド２本鎖構造体は、その分子運動（分子構造の揺らぎ）のためにパイ電子スタックが一時的に崩れた場合に、導電性を失うことになる。この分子運動は、検出部の先端に位置する結合部に特定のタンパク質が結合すると、その質量の作用を受けて、タンパク質が結合していない場合に比べて緩慢になる。
【００３８】
また、ポリヌクレオチド２本鎖の構造に意図的に亀裂を導入することにより、例えば一方のポリヌクレオチド鎖の途中に中断箇所を１箇所以上導入することにより、２本鎖の構造の揺らぎを増進することができ、よって、２本鎖の構造の導電性喪失効果をより大きくすることもできる。ポリヌクレオチド鎖に中断箇所を導入するには、隣り合うヌクレオチド間をつなぐリン酸残基の一部を切断するのが有効である。あるいはまた、一本のポリヌクレオチド鎖と、このポリヌクレオチド鎖の配列と相補的な配列の一部のみを有する一つ以上の短いヌクレオチド鎖とを組み合わせることで自己組織的にポリヌクレオチド２本鎖を形成することによっても、ポリヌクレオチド鎖に中断箇所を有するものを得ることができる。
【００３９】
タンパク質の結合によって変化したポリヌクレオチド２本鎖の電導度ないし電荷移動量の変化を取り出すための電極部は、試料溶液中で安定な材料から作製される。複数種のタンパク質の検出・定量のためには、個々のタンパク質用にそれぞれの電極をパッド状に設け、各電極上に検出部のポリヌクレオチド２本鎖の一端を連結して配置し、その検出部の他端に各タンパク質用の抗体から構成される結合部を配置するのが好ましい。
【００４０】
ポリヌクレオチド２本鎖の電極部への連結は、一方のポリヌクレオチド鎖の一端に導入したメルカプト基をスペーサー（一般に−（ＣＨ２）ｎ−などが用いられる）を介して電極部に結合させることで行うことができる。こうして電極部に連結したポリヌクレオチド２本鎖の構造は、電極部の表面に対してほぼ一定の角度をなしてほぼ線状に延在する。
【００４１】
上記のタンパク質検出システムを構成する上記した以外の構成要素、すなわち、基準電極、参照電極、試料容器、測定ユニットなどは、試料溶液中に含まれる物質の導電性の測定に一般に用いられるものを使用することができる。
【００４２】
以上に説明した本発明のタンパク質同定システムを、再び図３を参照して説明する。
【００４３】
図示の実施形態では、一端にスペーサーを介してメルカプト基を導入した１本鎖ポリヌクレオチド４ａを合成し、これを同様に合成した相補的な１本鎖ポリヌクレオチド４ｂとハイブリダイズさせてポリヌクレオチド２本鎖４を形成する。次いで、このポリヌクレオチド２本鎖４を研磨した金電極２（シリコン基板１上に形成）と室温で２４時間反応させる。図示のように、ポリヌクレオチド２本鎖４が金電極２に結合する。
【００４４】
引き続いて、金電極２上に固定したポリヌクレオチド２本鎖４に対して、電荷分離を起こす電荷分離原子団（鉄ポルフィリン）６を、その鉄ポルフィリンを溶解した溶液を使ってポリヌクレオチド２本鎖４のパイ電子スタックに吸着（インターカレーション）させる。なお、この吸着処理に代えて、そのような電荷分離原子団に由来する原子団をポリヌクレオチド２本鎖に共有結合させてもよく、又はヌクレオチド塩基の一部をそのような色素由来の原子団で置換するなどの方法をとってもよい。次いで、プローブの完成のため、ポリヌクレオチド２本鎖４の先端にモノクローナルな免疫グロブリンＩｇＧのＦａｂフラグメント５を固定する。
【００４５】
このようにして作製されるタンパク質検出ユニットは、したがって、電極部２、検出部４、そして結合部５を備えるとともに、結合部５を構成する抗体は特定のタンパク質７のみと特異的に結合可能である。かかる検出ユニットは、また、プロテインチップとも言うことができる。
【００４６】
図示のタンパク質検出ユニットにおいて、電極２は、一般には、図示のように、基板１の上に配置され、担体を構成する。本発明では、単一の検出ユニット内に複数の電極２をアレイ状に設け、一つの電極に対応する結合部の抗体を別の電極に対応する結合部のそれとは異なるものにしているので、単一の検出ユニットで複数種のタンパク質の一括した検出・定量が可能になる。
【００４７】
図６は、図３に示したタンパク質検出ユニットを組み込んだタンパク質同定システムの好ましい１形態を模式的に示したものである。図示のタンパク質同定システムは、基板１、電極２、結合部（抗体）５、検出部（図示せず；図３を参照）等から構成される検出ユニットと、基準電極４１と、参照電極４３とを収容した試料容器４５を備える。試料容器４５は、必要ならば、ウエルや、試料溶液の流路などであってもよい。また、タンパク質同定システムは、電極２、４１及び４３のそれぞれにつながる測定ユニット４７を含むタンパク質検出デバイス４０を備える。試料容器４５内には、同定対象のタンパク質７を含有する試料溶液４８が入れられる。検出部の電荷分離原子団（図３を参照）が光励起を受けて電子と正孔を発生するタイプのものである場合には、励起光源４９が用意される。タンパク質検出デバイス４０の測定ユニット４７は、好ましくは測定データを処理するためのデータ処理装置５１につながれ、この処理装置５１には、測定結果表示装置５３、アレイ配置や検出ユニット２１の校正値などを記憶した記憶装置５５及び５５’が付属する。
【００４８】
また、本発明は、そのもう１つの面において、プローブが、カーボンナノチューブからなる結合手段（検出部）と、その先端に固定された抗体（結合部）とからなり、抗体に対する生体高分子の結合の有無を検出することを特徴とする生体高分子の同定方法及び装置にある。この生体高分子同定システムでは特に、ナノデバイスの分野で注目されているカーボンナノチューブ（ＣＮＴ）を結合手段として使用することにより、検出を高感度で実施できるといった効果を得ることができる。
【００４９】
図７は、かかる生体高分子同定システムの好ましい１形態（プロテインチップ）を模式的に示した断面図である。このプロテインチップの構成は、ポリヌクレオチド２本鎖に代えてＣＮＴを使用した違いを除いて、図３のプロテインチップに類似である。図示のプロテインチップ１０は、シリコン基板１の上に金電極２−１が形成されており、また、その金電極２−１の上に、触媒金属（ニッケル）３を介して形成された結合手段（検出部；ＣＮＴ）８を有している。ＣＮＴは、例えば、レーザーアブレーション（レーザー蒸発）法、アーク放電法、化学的気相成長法（ＣＶＤ法）などの常法に従って所望の長さで形成することができ、その直径は、通常、１０ｎｍ以下である。また、ここで使用するＣＮＴは、単層ＣＮＴでも、２層ＣＮＴ等の多層ＣＮＴでもよい。ＣＮＴ８は、その先端部にプローブ５（結合部；ここでは、抗体）が固定されている。シリコン基板１の上には、もう１つの金電極２−２も配置されている。
【００５０】
このような構成のプロテインチップ１０を測定セル（図示せず）に配置し、蛍光染料で標識処理したタンパク質７を含む試料溶液を流し込む。すると、それぞれのプローブ５にそのプローブに対応するタンパク質７が捕捉され、結合せしめられる。引き続いて洗浄を行い、捕捉されたタンパク質の蛍光を検出する。付属の検出器によってタンパク質とそれらが結合したプローブ（抗体）との関係をまとめ、最終的にタンパク質の同定を行うことができる。
【００５１】
さらに、本発明は、そのもう１つの面において、プローブが抗体からなり、その抗体を周波数変換素子の電極上に直接的もしくは間接的に固定して使用し、周波数変換素子の基本振動数の変化を検出することにより、抗体に対する生体高分子の結合の有無を検出することを特徴とする生体高分子の同定方法及び装置にある。周波数変換素子として、好ましくは水晶振動子（水晶発振器）を有利に使用することができる。
【００５２】
すなわち、この生体高分子同定システムでは、水晶振動子に代表される周波数変換素子上にプローブを配置することにより、そのプローブで生体高分子を捕捉した後、水晶振動子を振動させることにより、プローブ−生体高分子の結合による振動数の変化を測定し、その測定結果に基づいて所期の生体高分子同定を行うことができる。一般的に、水晶振動子の電極上への物質の付着は振動数の減少を引き起こし、振動数変化と付着物質の質量との比例関係はＳａｕｅｒｂｒｅｙ式によって表すことができるからである。これにより、振動数の変化を検出すれば付着物質の重さを求めることができる。
【００５３】
図８は、かかる生体高分子同定システムの好ましい１形態（プロテインチップ）を模式的に示した断面図である。図示のプロテインチップ１０は、水晶振動子２１の両側に金電極２２を有している。一方の金電極２２には、図示されるように、プローブ５（結合部；ここでは、抗体）が固定されている。プローブ５の固定は、そのプローブの種類に応じていろいろな方法を使用することができるが、通常、プローブの端に−ＳＨ基を結合させておくことにより、金電極とＳを介して固定（結合）を行わせることができる。
【００５４】
このような構成のプロテインチップ１０を測定プレート２３に開けたウエル２４に装着し、その電極２２を付属の振動数測定装置（図示せず）に接続する。次いで、タンパク質７を含む試料溶液２８をウエル２４に滴下する。すると、それぞれのプローブ５にそのプローブに対応するタンパク質７が捕捉され、結合せしめられる。洗浄を行った後、プロテインチップ１０を振動させ、振動数の変化を振動数測定装置で測定する。振動数の変化量からタンパク質の捕捉量を算出し、最終的にタンパク質の同定を行うことができる。
【００５５】
さらに、本発明は、そのもう１つの面において、プローブが抗体からなり、その抗体を支持基板の金属薄膜上に固定して使用し、支持基板の裏面から抗体に光を照射して、表面プラズモン共鳴現象による反射光の強度が低下する角度等の変化を検出することにより、抗体に対する生体高分子の結合の有無を検出することを特徴とする生体高分子の同定方法及び装置にある。
【００５６】
すなわち、この生体高分子同定システムでは、表面プラズモンが金属／液体界面で励起した場合におこる、いわゆる表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）の光学現象に基づいている。２分子間の結合と解離に伴ってプロテインチップ等のセンサーチップの表面で生じる僅かな質量変化をＳＰＲシグナルとして検出できるからである。例えば、プローブとして使用した抗体にタンパク質が捕捉されると、その結合反応の結果として質量変化（質量の増加）が発生し、その測定結果に基づいて所期のタンパク質同定を行うことができる。また、この同定システムの場合、生体高分子を標識することなく、リアルタイムに同定を行えるというメリットもある。
【００５７】
図９は、かかる生体高分子同定システムの好ましい１形態（プロテインチップ）を模式的に示した断面図である。図示のプロテインチップ１０は、光が透過可能な透明な支持基板３１（ここでは、ガラス基板）と、その片面に蒸着により形成された金薄膜３２を有している。金薄膜３２には、図示されるように、プローブ５（結合部；ここでは、抗体）が固定されている。プローブ５の固定は、そのプローブの種類に応じていろいろな方法を使用することができるが、通常、ポリマー材料を固定手段として有利に使用することができる。例えば、チオールを有するメルカプト結合を介してプローブの固定と集積化が可能である。固定手段は、プローブ５の自由度を高めたり、スペーサ−的な働きをすることができる。場合によっては、固定手段を省略して、プローブ５を直接的に金薄膜３２上に固定してもよい。
【００５８】
このような構成のプロテインチップ１０を、そのプローブ５が試料溶液３８を接触可能なようにフローセル３３に取り付ける。次いで、タンパク質７を含む試料溶液３８をフローセル３３に流し込み、矢印方向に流動させる。すると、それぞれのプローブ５にそのプローブに対応するタンパク質７が捕捉され、結合せしめられる。洗浄を行った後、プロテインチップ１０の上に配置されている検出器（図示せず）の光源から、金薄膜３２の裏面（プローブ５を有しない面）に光Ｌを全反射するように照射する。金薄膜３２の裏面で反射された光はプリズム３６を介して検出部３５に入射し、ここで質量変化をＳＰＲシグナルとして検出することができる。質量変化の測定量からタンパク質の捕捉量を算出し、最終的にタンパク質の同定を行うことができる。
【００５９】
【実施例】
引き続いて、本発明をその実施例を参照して説明する。なお、本発明は、下記の実施例によって限定されるものでないことは言うまでもない。
タンパク質の識別
図３を参照して先に説明した生体高分子同定システム（プロテインチップ）を使用して、下記の３種類のタンパク質：
（１）図１０に示すドメイン構造をもった、ヒトのフィブロネクチン
（２）ゼラチナーゼＡ
（３）アンギオテンシン変換酵素
の検出実験を行った。
【００６０】
図１０に示すようにフィブロネクチンにはコラーゲン結合ドメインとフィブリン結合ドメインが含まれるが亜鉛結合ドメインはない。これに対して、ゼラチナーゼＡには亜鉛結合ドメインとコラーゲン結合ドメインがあるがフィブリン結合ドメインがない。また、アンデオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）には亜鉛結合ドメインがあるが他の２つの結合ドメインはない。
【００６１】
これらのことを考慮して、本実験では、
Ａ：亜鉛結合ドメインを認識する抗体
Ｂ：コラーゲン結合ドメインを認識する抗体
Ｃ：フィブリン結合ドメインを認識する抗体
の３種類を用意し、それぞれの抗体を、ポリヌクレオチド２本鎖を介してプロテインチップの金電極に固定した。それぞれ亜鉛結合ドメイン認識する抗体、コラーゲン結合ドメインを認識する抗体又はフィブリン結合ドメインを認識する抗体を先端に付けた３種類のプローブが得られた。
【００６２】
別に、下記の組成の３種類のタンパク質標準液を調製した。
フィブロネクチン標準液：
フィブロネクチン（ヒトフィブロネクチンをＰＢＳ（リン酸バッファ）で希釈したもの）
ゼラチナーゼＡ標準液：
ゼラチナーゼＡ（ゼラチナーゼＡをＰＢＳで希釈したもの）
アンギオテンシン変換酵素標準液：
アンギオテンシン変換酵素；ＡＣＥ（アンギオテンシン変換酵素をＰＢＳで希釈したもの）
まず、フィブロネクチン標準液をそれぞれのプローブと反応させた。洗浄後、下記の組成の蛍光標識抗体液を加えてさらに反応させ、再び洗浄した。
蛍光標識抗体液：Ｃｙ３
次いで、ゼラチナーゼ標準液をそれぞれのプローブと反応させた。洗浄後、下記の組成の蛍光標識抗体液を加えてさらに反応させ、再び洗浄した。
蛍光標識抗体液：Ｃｙ５
さらに続けて、アンギオテンシン変換酵素標準液それぞれのプローブと反応させた。洗浄後、下記の組成の蛍光標識抗体液を加えてさらに反応させ、再び洗浄した。
蛍光標識抗体液：Ｃｙ２
以上の操作が完了した後、それぞれのプローブについて上記した３種類のタンパク質が結合しているか否かを確認した。この確認作業は、抗体に標識処理した蛍光を検出することにより容易に行うことができた。下記の第２表にまとめるような検出結果が得られた。
【００６３】
【表２】
2004170364.tif 000004
【００６４】
第２表の検出結果から理解できるように、本実験の場合、３種類のタンパク質が存在していたにもかかわらず、それぞれのタンパク質を認識可能な異なる抗体をプローブに固定したことで、３種類のタンパク質を一括して正確に識別することができた。
【００６５】
また、この応用として、例えば同様なタンパク質同定プロセスを健康なヒトの血液と疾病を疑われるヒトの血液について繰り返して実施すると、両者の検出結果の比較によって疾病の原因を突き止めることの一助となるであろう。
【００６６】
以上、本発明をその実施の形態及び実施例について詳細に説明した。ここで、本発明の好ましい態様を整理すると、次の通りである。
【００６７】
（付記１）試料中に存在する１種類以上の生体高分子を同定する方法において、
前記生体高分子を、その及び（又は）それらの生体高分子にそれぞれが特異的に結合可能な複数個のプローブで一括して捕捉し、同定することを特徴とする生体高分子の同定方法。
【００６８】
（付記２）前記生体高分子が、タンパク質、糖質、脂質及び核酸からなる群から選ばれた１員であることを特徴とする付記１に記載の生体高分子の同定方法。
【００６９】
（付記３）前記生体高分子がタンパク質であることを特徴とする付記１又は２に記載の生体高分子の同定方法。
【００７０】
（付記４）前記プローブを直接的もしくは間接的に担体上に固定して使用することを特徴とする付記１〜３のいずれか１項に記載の生体高分子の同定方法。
【００７１】
（付記５）前記プローブをポリヌクレオチド２本鎖を介して担体上に固定して使用することを特徴とする付記１〜４のいずれか１項に記載の生体高分子の同定方法。
【００７２】
（付記６）前記プローブとして、前記生体高分子と特異的に結合する抗体又はそのような抗体の断片、前記生体高分子に対して親和性を有する有機化合物及び前記生体高分子とは異なる生体高分子からなる群から選ばれる物質を使用することを特徴とする付記１〜５のいずれか１項に記載の生体高分子の同定方法。
【００７３】
（付記７）前記プローブとして抗体又は人工抗体を使用することを特徴とする付記１〜６のいずれか１項に記載の生体高分子の同定方法。
【００７４】
（付記８）前記プローブとして、ＩｇＧ抗体、モノクローナルな免疫グロブリンＩｇＧ抗体又はモノクローナルな免疫グロブリンＩｇＧ抗体のＦａｂフラグメント又はＦａｂフラグメントに由来する断片を使用することを特徴とする付記１〜６のいずれか１項に記載の生体高分子の同定方法。
【００７５】
（付記９）前記プローブが、ポリヌクレオチド２本鎖からなる結合手段と、その先端に固定された抗体とからなり、前記抗体に対する前記生体高分子の結合の有無を検出することを特徴とする付記１〜８のいずれか１項に記載の生体高分子の同定方法。
【００７６】
（付記１０）前記プローブが、カーボンナノチューブからなる結合手段と、その先端に固定された抗体とからなり、前記抗体に対する前記生体高分子の結合の有無を検出することを特徴とする付記１〜８のいずれか１項に記載の生体高分子の同定方法。
【００７７】
（付記１１）前記プローブが抗体からなり、前記抗体を周波数変換素子の電極上に直接的もしくは間接的に固定して使用し、前記周波数変換素子の基本振動数の変化を検出することにより、該抗体に対する前記生体高分子の結合の有無を検出することを特徴とする付記１〜８のいずれか１項に記載の生体高分子の同定方法。
【００７８】
（付記１２）前記周波数変換素子が水晶振動子であることを特徴とする付記１１に記載の生体高分子の同定方法。
【００７９】
（付記１３）前記プローブが抗体からなり、前記抗体を支持基板の金属薄膜上に固定して使用し、前記支持基板の裏面から前記抗体に光を照射して、表面プラズモン共鳴現象による反射光の強度が低下する角度等の変化を検出することにより、該抗体に対する前記生体高分子の結合の有無を検出することを特徴とする付記１〜８のいずれか１項に記載の生体高分子の同定方法。
【００８０】
（付記１４）前記生体高分子に標識処理を施しておくことを特徴とする付記１〜１３のいずれか１項に記載の生体高分子の同定方法。
【００８１】
（付記１５）試料中に存在する１種類以上の生体高分子を同定する装置において、
前記生体高分子を、その及び（又は）それらの生体高分子にそれぞれが特異的に結合可能な複数個のプローブを備えてなることを特徴とする生体高分子の同定装置。
【００８２】
（付記１６）前記生体高分子が、タンパク質、糖質、脂質及び核酸からなる群から選ばれた１員であることを特徴とする付記１５に記載の生体高分子の同定装置。
【００８３】
（付記１７）前記生体高分子がタンパク質であることを特徴とする付記１５又は１６に記載の生体高分子の同定装置。
【００８４】
（付記１８）前記プローブが担体上に直接的にもしくは間接的に固定されていることを特徴とする付記１５〜１７のいずれか１項に記載の生体高分子の同定装置。
【００８５】
（付記１９）前記プローブがポリヌクレオチド２本鎖を介して担体上に固定されていることを特徴とする付記１５〜１８のいずれか１項に記載の生体高分子の同定装置。
【００８６】
（付記２０）前記プローブが、前記生体高分子と特異的に結合する抗体又はそのような抗体の断片、前記生体高分子に対して親和性を有する有機化合物及び前記生体高分子とは異なる生体高分子からなる群から選ばれた物質であることを特徴とする付記１５〜１９のいずれか１項に記載の生体高分子の同定装置。
【００８７】
（付記２１）前記プローブが抗体であることを特徴とする付記１５〜２０のいずれか１項に記載の生体高分子の同定装置。
【００８８】
（付記２２）前記プローブが、ＩｇＧ抗体、モノクローナルな免疫グロブリンＩｇＧ抗体又はモノクローナルな免疫グロブリンＩｇＧ抗体のＦａｂフラグメント又はＦａｂフラグメントに由来する断片であることを特徴とする付記１５〜２０いずれか１項に記載の生体高分子の同定装置。
【００８９】
（付記２３）ポリヌクレオチド２本鎖からなる結合手段と、その先端に固定された抗体とからなる前記プローブと、前記抗体に対する前記生体高分子の結合の有無を検出する検出ユニットとを組み合わせて備えることを特徴とする付記１５〜２２のいずれか１項に記載の生体高分子の同定装置。
【００９０】
（付記２４）カーボンナノチューブからなる結合手段と、その先端に固定された抗体とからなる前記プローブと、前記抗体に対する前記生体高分子の結合の有無を検出する検出ユニットとを組み合わせて備えることを特徴とする付記１５〜２２のいずれか１項に記載の生体高分子の同定装置。
【００９１】
（付記２５）周波数変換素子と、該周波数変換素子の電極上に直接的もしくは間接的に固定された抗体からなる前記プローブと、前記周波数変換素子の基本振動数の変化を検出することにより前記抗体に対する前記生体高分子の結合の有無を検出する検出ユニットとを組み合わせて備えることを特徴とする付記１５〜２２のいずれか１項に記載の生体高分子の同定装置。
【００９２】
（付記２６）前記周波数変換素子が水晶振動子であることを特徴とする付記２５に記載の生体高分子の同定装置。
【００９３】
（付記２７）支持基板と、該支持基板の金属薄膜上に直接的もしくは間接的に固定された抗体からなる前記プローブと、前記支持基板の裏面に配置された、前記抗体に光を照射するための光照射ユニットと、表面プラズモン共鳴現象による反射光の強度が低下する角度等の変化を検出することにより前記抗体に対する前記生体高分子の結合の有無を検出する検出ユニットとを組み合わせて備えることを特徴とする付記１５〜２２のいずれか１項に記載の生体高分子の同定装置。
【００９４】
（付記２８）前記支持基板が透明なガラス基板であり、かつ前記金属薄膜が金薄膜であることを特徴とする付記２７に記載の生体高分子の同定装置。
【００９５】
（付記２９）前記生体高分子が、標識処理されたものであることを特徴とする付記１５〜２８のいずれか１項に記載の生体高分子の同定装置。
【００９６】
【発明の効果】
以上に詳細に説明したように、本発明によれば、試料に含まれる多数の被検生体高分子、例えばタンパク質、糖質、ＤＮＡなどを迅速にかつ一括して検出し、正確に同定できる、低コストで実施可能な生体高分子の同定方法及び装置を提供することができる。
【００９７】
また、本発明の方法及び装置を使用すると、商業的に一般的に入手可能で、価格的にも安価なプローブ（例えば、抗体）を使用しても、信頼性の高い同定結果を得ることができる。
【００９８】
さらに、本発明の装置は、本発明方法を有利に実施できるばかりでなく、小型で構造が簡単であり、しかも低コストで提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】従来のプロテインチップの機能を模式的に示した断面図である。
【図２】本発明による生体高分子の同定システムの１形態を模式的に示した断面図である。
【図３】本発明による生体高分子の同定システムで生体高分子及びプローブとしてそれぞれタンパク質及び抗体を用いた例を示した断面図である。
【図４】図３に示した生体高分子の同定システムでプローブとして用いられる４種類の抗体の模式図である。
【図５】図３に示した生体高分子の同定システムで生体高分子として用いられる６種類のタンパク質の模式図である。
【図６】図３に示した生体高分子の同定システムの全体構成を示した模式図である。
【図７】本発明による生体高分子の同定システムのもう１つの形態を模式的に示した断面図である。
【図８】本発明による生体高分子の同定システムのさらにもう１つの形態を模式的に示した断面図である。
【図９】本発明による生体高分子の同定システムのさらにもう１つの形態を模式的に示した断面図である。
【図１０】実施例で使用したフィブロネクチンのドメイン構造を示した模式図である。
【符号の説明】
１…基板
２…電極
４…結合手段（リンカー）
５…抗体
７…タンパク質
１０…プロテインチップ
１１…担体
【図１】
2004170364.tif 000005
【図２】
2004170364.tif 000006
【図３】
2004170364.tif 000007
【図４】
2004170364.tif 000008
【図５】
2004170364.tif 000009
【図６】
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【図７】
2004170364.tif 000011
【図８】
2004170364.tif 000012
【図９】
2004170364.tif 000013
【図１０】
2004170364.tif 000014