(57)【要約】【課題】生体に含有される生理活性物質を効率よく有効に利用する。【解決手段】生理活性物質を含有する生体を、その生体の細胞の大きさ以下の微粒子に粉砕してなる。微粒子の粒径は、好ましくは２μｍ〜５０μｍで、特に好ましくは５μｍ〜２５μｍで、最も好ましくは５μｍ〜１０μｍ、又は３μｍ〜１５μｍである。生体は、植物体の葉、その茎、その根、その種子、藻類もしくはそれらの混合物又はそれらの組織培養物であることが好ましい。また、生体は、茸、担子菌等の子実体、その菌糸体もしくはそれらの混合物又はそれらの培養産物であることが好ましい。【選択図】　　　　なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
生理活性物質を含有する生体を、その生体の細胞の大きさ以下の微粒子に粉砕してなる生理活性体。
【請求項２】
前記微粒子の粒径が、２μｍ〜５０μｍである請求項１に記載の生理活性体。
【請求項３】
前記微粒子の粒径が、５μｍ〜２５μｍである請求項１に記載の生理活性体。
【請求項４】
前記微粒子の粒径が、５μｍ〜１０μｍである請求項１記載の生理活性体。
【請求項５】
前記微粒子の粒径が、３μｍ〜１５μｍである請求項１記載の生理活性体。
【請求項６】
前記生体が、植物体の葉、その茎、その根、その種子もしくはそれらの混合物又はそれらの組織培養物である請求項１乃至５のいずれか１項に記載の生理活性体。
【請求項７】
前記生体が、藻類又はその組織培養物である請求項１乃至５のいずれか１項に記載の生理活性体。
【請求項８】
前記生体が、茸、担子菌等の子実体、その菌糸体もしくはそれらの混合物又はそれらの培養産物である請求項１乃至５のいずれか１項に記載の生理活性体。
【請求項９】
前記請求項１乃至６に記載されている生理活性体を、１種類又は２種類以上含有する食品又は健康食品。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、生体に含有される生理活性物質を効率よく有効に利用する生理活性体、食品又は健康食品に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
植物体、藻類、茸、担子菌等の生体には、生理活性物質が含有されているものがある。例えば、茸類の中には、医薬品として認められているものがあり、また、優れた効能を期待してその子実体やその培養産物を人体内に容易に摂取できる食品素材の開発が種々行われている。
特に、アガリクスブラゼイは、β−Ｄ−グルカンのような多糖類、エルゴステロールのようなステロイドの生理活性物質を著量蓄積していることで知られている。β−Ｄ−グルカンは、免疫賦活能力が高く、ＮＫ（ナチュラルキラー）細胞などの免疫細胞を活性化させることにより、ガン細胞を攻撃して殺滅させる効果を有する。このため、アガリクスブラゼイは、ガンやその他の成人病などに対して優れた効果を有するため、健康食品の素材として用いられている。エルゴステロールは、抗腫瘍活性を有し腫瘍の縮小、消滅に効果があるとされている（非特許文献１、非特許文献２等）。
【０００３】
ところで、アガリクスブラゼイに含まれる生理活性物質であるβ−Ｄ−グルカンを利用する方法としては、酵素を利用してアガリクスブラゼイの菌糸体からエキス成分を抽出する方法が知られている（特許文献１、特許文献２等）。また、生理活性物質を生産する方法として、セルロースミクロファイバー法、クロマトグラフィー法が知られている。これらの方法により生理活性物質例えばβ−Ｄ−グルカンを生産することができるが、生産時間が長い、方法が複雑であり、収率が低い、安価に大量に生産できないということがある。また、エルゴステロールのような脂溶性物質を分離・抽出することができない。
【０００４】
このため、アガリクスブラゼイを微粉化して、得られた微粉体を例えば健康食品の素材としてそのまま用いることが研究開発されている。アガリクスブラゼイの微粉体を健康食品の素材としてそのまま用いれば、アガリクスブラゼイを粉砕するだけであるので、簡単に短時間で、安価に大量に生産することができる。しかし、例えばアガリクスブラゼイを粉砕した粉体を健康食品の素材として利用する場合、アガリクスブラゼイに含まれる例えばβ−Ｄ−グルカンが人体内に摂取される率が少ないことがある。すなわち、アガリクスブラゼイの粉体中のβ−Ｄ−グルカンの例えば約３０％が人体内に摂取され、残りは排出物中に含まれて排出されてしまい、β−Ｄ−グルカンを効率よく利用することができないことがある。
【０００５】
【非特許文献１】
Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　Ｌｅｔｔｅｒ，４０，３２９（１９９９）
【非特許文献２】
Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　Ｌｅｔｔｅｒ，４１，５１０７（２０００）
【特許文献１】
特開平５−２６８９０５号公報
【特許文献２】
特開平１１−３２７２３号公報
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
そこで、本発明は、このような実状に鑑みなされたものであり、その目的は、生体に含有される生理活性物質を効率よく有効に利用することができる生理活性体、食品又は健康食品を提供することにある。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
前記目的を達成するために、本発明の生理活性体は、生理活性物質を含有する生体を、その生体の細胞の大きさ以下の微粒子に粉砕してなるものである。
前記微粒子の粒径は、２μｍ〜５０μｍであることが好ましく、特に好ましくは５μｍ〜２５μｍで、最も好ましくは５μｍ〜１０μｍ、又は３μｍ〜１５μｍである。
【０００８】
前記生体が、植物体の葉、その茎、その根、その種子、藻類もしくはそれらの混合物又はそれらの組織培養物であることが好ましい。
また、前記生体が、茸、担子菌等の子実体、その菌糸体もしくはそれらの混合物又はそれらの培養産物であることが好ましい。
また、本発明の食品又は健康食品は、この生理活性体を、１種類又は２種類以上含有するものである。
【０００９】
【発明の実施の形態】
以下、本発明を詳細に説明する。
本発明の生理活性体は、生理活性物質を含有する生体を、その生体の細胞の大きさ以下の微粒子に粉砕してなるものである。
本発明における生体とは、生理活性物質を含有するものであり、具体的には植物体、藻類、茸、担子菌等である。
【００１０】
植物体としては、葉、茎、根、種子、それらの混合物又はこれらの組織培養物等が用いられ、具体的には例えば、しその葉、イチョウの葉等が用いられる。
藻類としては、具体的には例えばさらにスピルリナ等の藍藻類、クロレラ等の緑藻類が用いられる。
茸、担子菌としては、具体的には例えば、アガリクスブラゼイ、メシマコブ、冬中夏草、霊芝、マイタケ、シイタケ、マツタケ、エノキタケ等があげられ、その子実体、菌糸体、これらの混合物又はこれらの培養産物等が用いられる。
【００１１】
生理活性物質とは、生体の免疫活性、補体活性の賦活を調節できる活性断片、活性多糖類、ステロール等であり、具体的には例えば、β−グルカン、エルゴステロール等である。
【００１２】
微粒子の粒径は、生体の細胞の大きさ（細胞サイズ）以下であり、好ましくは２μｍ〜５０μｍで、特に好ましくは５μｍ〜２５μｍで、最も好ましくは５μｍ〜１０μｍ、又は３μｍ〜１５μｍである。
【００１３】
生体を粉砕する手段としては、生体をその細胞の大きさ以下の特定の大きさ例えば２μｍ〜５０μｍに粉砕することができるならばどのようなものを用いてもよく、例えば、同体摩擦粉砕機を用いて粉砕するようにしてもよい。
同体摩擦粉砕機は、図５に示すように、一対の対向する第１ローター２、第２ローター３を回転自在に支持する粉砕機本体４と、それら第１ローター２、第２ローター３をそれぞれ個別に高速回転させる第１、第２高速回転機構５，６とから主になる。
【００１４】
粉砕機本体４には、第１ローター２の第２ローター３とは反対側の面（反対面）に連通する導入口７が設けられている。また、粉砕機本体４には、第２ローター３の第１ローター２とは反対側の面（反対面）に連通する排出口８が設けられている。
【００１５】
第１ローター２、第２ローター３は、ほぼ円盤状にそれぞれ形成されている。第１ローター２、第２ローター３は、粉砕機本体４内に同軸上で対向し、かつ、第１ローター２、第２ローター３の間隔を任意の長さに設定し得るように対向するローター方向に沿って移動自在に配設されている。
【００１６】
第１高速回転機構である第１高速回転モータ５は、回転軸９を介して第１ローター２の反対面に連結されて、第１ローター２を高速で回転し得ると共に回転速度を調節し得るように構成されている。また、第２高速回転機構である第２高速回転モータ６は、回転軸１０を介して第２ローター３の反対面に連結されて、第２ローター３を高速で正逆回転し得ると共に回転速度を調節し得るように構成されている。
【００１７】
同体摩擦粉砕機１は、例えば第１ローター２を高速で回転させると共に第２ローター３を第１ローター２とは逆方向に回転させることにより、導入口７から導入された導入物の粒子同士の衝突による圧縮、衝撃、せん断力と、空気等の流体などの媒体を介した衝撃、せん断力とによって、導入口７から導入された生体を所定の大きさに粉砕するように構成されている。また、同体摩擦粉砕機１は、第１ローター２、第２ローター３の回転数や第１ローター２、第２ローター３の間隔を任意に可変させることにより粉砕粒度を調節することができるように構成されている。
【００１８】
この同体摩擦粉砕機１を用いて生体を粉砕することにより、シャープで細かな粒度分布の生理活性体が得られる。具体的には例えば、図６に示す生アガリクスブラゼイ子実体を同体摩擦粉砕機を用いて粉砕すると、図１に示すように粉砕され、その粒度分布は図２に示すようになった。この粉砕は、生アガリクスブラゼイ子実体２ｋｇを子実体の形態を保って−１２℃に予備凍結し、これを同体摩擦粉砕機を用いて行った。粉砕の条件は、同体摩擦粉砕機全体を液体窒素（ＬＮ２、−１９６℃）で冷却し、排出口の温度が−５０℃に保持されるように導入口から液体窒素（ＬＮ２、−１９６℃）を導入しつつ、ローターの回転数が第１ローター、第２ローターとも６０００ｒｐｍで、処理時間３０分である。
【００１９】
また、粉砕手段として同体摩擦粉砕機を用いることで、従来の乾燥粉砕法では実現が難しかった乾燥アガリクスブラゼイ子実体を細胞の大きさ以下に粉砕することができる。具体的には例えば、図７に示す乾燥アガリクスブラゼイ子実体を同体摩擦粉砕機を用いて粉砕すると、図３に示すように粉砕され、その粒度分布は図４に示すようになった。この粉砕は、乾燥アガリクスブラゼイ子実体２ｋｇを乾燥状態（含水率：３．５ｗｔ％）のままスライスして予備破砕し、これを同体摩擦粉砕機を用いて行った。粉砕の条件は、室温で、ロータの回転数が第１ローター、第２ローターとも６０００ｒｐｍで、処理時間３０分である。
【００２０】
また、本発明の生理活性体を食品関係に用いる場合には、粉砕する際に風味、栄養を損なわずに行うことが望まれ、その要因の一つとして温度がある。この温度については同体摩擦粉砕機では粉砕時に発熱が極めて少ないので、その心配は不要である。また、吸い込み空気や粉砕機本体の外周部を冷却することにより、簡単に冷間、冷却粉砕ができ、より低温での粉砕を行える。
【００２１】
このように、同体摩擦粉砕機は、温度調節を容易に行えるため、逆に、冷却能力を抑え、任意の温度の加熱粉砕も容易に行える。例えば、粉砕機本体を流通する空気温度を例えば大腸菌などの死滅温度以上であって、風味維持限界温度以下での加熱粉砕も簡単に行えるので、生体の状態や種類に応じた最適な温度で粉砕を行えることになる。
【００２２】
また、同体摩擦粉砕機は、第１ローター、第２ローター等を簡単に取り外し、分解することができるため、内部の清掃や第１ローター、第２ローターの交換等が容易であり、保守が簡単である。
また、同体摩擦粉砕機は、外部から多量の空気を供給することなく、高速の気流を発生させるべく第１ローター、第２ローターを回転駆動させているので、多量の空気を必要とせず、その分の余分なエネルギーを必要しない。また、同体摩擦粉砕機における第１ローター、第２ローターは、気流を発生させるだけで、第１ローター、第２ローター自身が生体の粉砕に関与しないので、第１、第２高速回転モータはローターを回転させるだけの負荷でよい。よって、同体摩擦粉砕機を用いることによりエネルギー効率の高い粉砕を行うことができる。
【００２３】
したがって、本発明の生理活性体は、生理活性物質を含有する生体を、その生体の細胞の大きさ以下の微粒子に粉砕してなるため、細胞は細胞壁が破砕されているので、細胞内に含まれる生理活性物質が効率よく人体等に摂取されやすい。このため、生理活性物質を効率よく有効に利用することができることになる。
【００２４】
また、本発明の生理活性体は、生理活性物質を効率よく有効に利用することができるため、経口摂取する成形体や食品、健康食品、発酵食品、加工食品例えば納豆、発酵胡麻、ヨーグルトとその混合食品の食品素材として有効なものとなる。このため、本発明の生理活性体を１種類又は２種類以上含んだ食品や健康食品は、多量の生理活性物質を摂取することができる。また、生理活性体は微粉化されているので、食品等に添加する場合、その含有量を簡単に調整できる。このため、生理活性体の種類や粉砕粒度（粒度分布）を調節することにより、生理活性物質の摂取量を調節することができ、生体の免疫活性、補体活性の賦活を調節する成形体や食品、健康食品を提供することができる。
【００２５】
また、本発明の生理活性体は微粉化されているため、軽量化されるので取り扱い及び持ち運びが便利となる。また、乾燥粉末化させることで細菌の繁殖や変敗の防止に対しても良好となる他、保存性が極めてよく熱にも安定である。また、生理活性体は水溶性であるので、粉末を水に溶かした状態で使うこともできるし、粉末化する前の溶液をそのまま利用することもできる。
【００２６】
乾燥粉末品はそのまま錠剤、細粒、トローチなどに加工し、あるいは多少の調味料などを加えて粉末の状態で服用あるいはふりかけペーストとして利用することができ、また調理に添加することもできる。それ自体が美味であるのでそのまま栄養剤として食品用に利用できる。また、生理活性体は、水あるいは水とアルコールとの混液に溶かすことができるので、茶、ソフトドリンク、酒類の添加物としても利用できる。また、賦型剤、増量剤、成形助剤等の食料加工原料具体的には例えば酵母菌体の粉末、でんぷん、グルコースなどを生理活性体の摂取量との関係から、適切な重量比率で混合して加工食品型の健康食品として製造することも可能である。たとえばブイヨンに添加混合してスープ、カレー、シチュウなどを製造したり、水飴などに混入して、飴を製造したり、そのほか豆腐、パン、うどん（めん類）や、かまぼこなどの水産加工品、ハム、ソーセージなどの畜産加工品など多種の食品に添加加工したり、冷凍食品類、インスタント食品類などにも利用できる。また、他の健康食品素材に加えより優れた健康食品への加工も可能である。いずれも各種細胞を賦活させ健康を保つのに有用な健康食品として価値の高い食品が得られる。
【００２７】
このように種々の食品に添加する場合、その添加量は１日当たり２〜６ｇの粉末量を摂食ないし飲用する程度が適当である。しかし、過剰に摂取したとしてもそれが原因となる障害はない。
【００２８】
【実施例】
以下、実施例および比較例に基づいて本発明をより具体的に説明するが、本発明はこれになんら限定されるものではない。
【００２９】
１．糖負荷試験
まず、糖尿病マウス（ＳＴＺ）を作出する。正常型マウスに糖尿病誘発剤であるＳＺＴ（ストレプトゾシン、Ｓｔｒｅｐｔｚｏｃｉｎ）を生理食塩水に溶解してマウスの腹腔内又は尾部の静脈に注射して作出した。つまりこのマウスは薬剤誘発糖尿病モデルである。
このように作出した糖尿病マウスに生アガリクスブラゼイ子実体を５μｍ〜１０μｍに粉砕した生理活性体（微粉化アガリクスブラゼイ）を経口投与した。投与量は５０ｍｇ／ｋｇ−個体である。
微粉化アガリクスブラゼイ投与後、糖分（グルコース）を経口投与し、マウスの血糖値（グルコース（ｍｇ／ｍｌ））を調べた。その結果を表１に示した。また、比較のため、糖尿病マウスに生アガリクスブラゼイ子実体を１００μｍに粉砕したもの（グラニュール状アガリクスブラゼイ（Ｇパウダー））を経口投与した場合、薬剤誘発糖尿病マウスの場合及び正常型マウスの場合について、それぞれ同様にマウスの血糖値を調べ、その結果を表１に示した。なお、血糖値は、眼底静脈から採血し遠心分離後の血清についてグルコースアナライザー（ｇｌｕｃｏｓｅ　ｏｘｉｄａｓｅ　法）で測定した。
【００３０】
【表１】
2004123635.tif 000002
【００３１】
表１に示した結果から、本発明の生理活性体（微粉化アガリクスブラゼイ）を経口投与した場合は、正常のマウスの次に血糖値が低かった。
【００３２】
２．ＳＯＤ活性の測定
下記のＮｉｔｒｉｔｅ法により生アガリクスブラゼイ子実体を５μｍ〜１０μｍに粉砕した生理活性体（微粉化アガリクスブラゼイ）の抗酸化能を調べた。その結果、ＳＯＤ活性（Ｎｉｔｒｉｔｅ　Ｕｎｉｔ／ｍｌ）は１１８６であり、抗酸化能は優れていることが分った。また、同様にして生アガリクスブラゼイ子実体を１００μｍに粉砕したもの（グラニュール状アガリクスブラゼイ（Ｇパウダー））の抗酸化能を調べた。その結果、ＳＯＤ活性（Ｎｉｔｒｉｔｅ　Ｕｎｉｔ／ｍｌ）は４５であった。
【００３３】
Ｎｉｔｒｉｔｅ法
まずＮｉｔｒｉｔｅ法について述べる。
生体内でアデニンの脱アミノ化で生成されるヒポキサンチン（６−ヒドロキシプリン）は、キサンチンオキシダーゼ（ＸＯＤ）の酵素反応によりキサンチンを経由して尿酸まで酸化されるが、その過程で酸素ラジカル（活性酸素、Ｏ２・）を生成する。これを消滅させるためにＳＯＤ（スーパーオキシドディスムスターゼ、Ｓｕｐｅｒ０ｘｉｄｅ　ｄｉｓｍｕｓｔａｓｅ）酵素が作用し、Ｈ２Ｏ２（過酸化水素）に変換させる機能が働く。
酸素ラジカル（活性酸素、Ｏ２・）とヒドロキシルアミン−Ｏ−スルフォン酸が反応すると亜硝酸塩（ＮＯ２−）が生成し、この系に２５％酢酸（ＡｃｅｔｉｃＡｃｉｄ）中でナフチルエチレンジアミンの塩酸塩とスファニル酸を加えると、アゾ基を持った化合物が生成する。
このアゾ化合物は酸性域でピンクに発色する。
【００３４】
したがって、ＳＯＤ酵素活性が高い場合、酸素ラジカル（活性酸素、Ｏ２・）がＨ２Ｏ２（過酸化水素）に変換されその残存量が少なくなり、ナフチルエチレンジアミンの塩酸塩とスルファニル酸を加えた場合、アゾ基を有する化合物の生成量が少ないため、発色（ピンク色）が薄くなる。このようにして酸素ラジカル（活性酸素、Ｏ２・）の残存状態を把握することによりＳＯＤの活性を間接的に把握できる。さらにＳＯＤ活性と生理活性物質との関係、すなわちＳＯＤ活性に及ぼす効果を評価できる。
【００３５】
このようにＮｉｔｒｉｔｅ法により、ＳＯＤ活性を評価することができるのて、このＮｉｔｒｉｔｅ法により微粉化アガリクスブラゼイのＳＯＤ活性を次のようにして調べた。
まず、微粉化アガリクスブラゼイ１５０ｍｇと３ｍｌの純水とを３０秒混合した。純水は、予備ろ過し、イオン交換してから逆浸透膜を介した水である。
混合後、遠心分離法で分離した。遠心分離は、回転数：３０００ｒｐｍ、時間１０分で行った。この遠心分離した液を０．２２μｍ（ミリポア社製）フィルターにてろ過して、ろ液を試料とした。
【００３６】
次に、このようにして得た試料０．１ｍｌと前記純水０．５ｍｌと基質（ＨＸ（ヒポキサンチン、６−ヒドロキシプリン））０．２ｍｌとをＴｕｂｅ（プラスチック製の遠心管）に入れて混合した。これを３７℃の浴槽で５分間温めた後、酵素液（Ｘａｎｔｈｉｎｅ　Ｏｘｙｄａｓｅ，１０μｌ／１ｍＭ　ＥＤＴＡ２Ｎａ，０．５ｍｌ／Ｂ−Ｐ　Ｂｕｌｌｅｒ，９．５ｍｌ）０．２ｍｌを入れて、混合してから３７℃の浴槽で５分間温めた。
温めた後に、発色液（スルファニル酸、２２５ｍｇ／　Ｎ−１−ナフチルエチレンジアミン・２ＨＣｌ、５ｍｌ　／酢酸，１２５ｍｌ　を　前記純水で５００ｍｌにメスアップした溶液）を入れてから、ＯＤ５５０ｎｍにて吸光度を測定した。また、コントロールとして、前記純水０．１ｍｌと前記純水０．５ｍｌと基質（ＨＸ（ヒポキサンチン、６−ヒドロキシプリン））０．２ｍｌとをＴｕｂｅ（プラスチック製の遠心管）に入れたものについても同様にして吸光度を測定した。
【００３７】
これらの測定値からＳＯＤ活性（Ｎｉｔｒｉｔｅ　Ｕｎｉｔ／ｍｌ）を求めた。これは、希釈液の阻害率（％）に変換し、阻止率　ｖｓ．　希釈率のキャリブレーションカーブを作製する。その５０％阻止率の希釈率をカーブから読み取り、その値のＸ２０の数値を計算して、ＳＯＤ活性（Ｎｉｔｒｉｔｅ　Ｕｎｉｔ／ｍｌ）を定量値として得たものである（Ｅｌｓｔｈｅｒ，Ｅ．Ｆ．、Ｈｅｕｐｅｌ，Ａ．，Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，７０，６１６（１９７６）、Ｙａｎａｇｉ，Ｙ．，Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，４，６３（１９８４）等参照）。
つまり、ＳＯＤ活性が十分得られると、ピンク色の発色は減少する。コントロールと比較して、５０％発色を阻害する希釈濃度を求め、１ｍｌ中のＮｉｔｒｉｔｅ　Ｕｎｉｔとした。
【００３８】
【発明の効果】
本発明により、生体に含有される生理活性物質を効率よく有効に利用することができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明の生理活性体の一例である生アガリクスブラゼイ子実体を粉砕した微粉化アガリクスブラゼイを示す走査型電子顕微鏡写真である。
【図２】生アガリクスブラゼイ子実体を同体摩擦粉砕機を用いて粉砕した粒度分布を示す図である。
【図３】本発明の生理活性体の一例である乾燥アガリクスブラゼイ子実体を粉砕した微粉化アガリクスブラゼイを示す走査型電子顕微鏡写真である。
【図４】乾燥アガリクスブラゼイ子実体を同体摩擦粉砕機を用いて粉砕した粒度分布を示す図である。
【図５】同体摩擦粉砕機の一例を示す構成図である。
【図６】生アガリクスブラゼイ子実体を示す走査型電子顕微鏡写真である。
【図７】乾燥アガリクスブラゼイ子実体を示す走査型電子顕微鏡写真である。
【符号の説明】
１　　同体摩擦粉砕機
２　　第１ローター
３　　第２ローター
４　　粉砕機本体
５　　第１高速回転モータ（第１高速回転機構）
６　　第２高速回転モータ（第２高速回転機構）
７　　導入口
８　　排出口
９　　回転軸
１０　回転軸
【図１】
2004123635.tif 000003
【図２】
2004123635.tif 000004
【図３】
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【図４】
2004123635.tif 000006
【図５】
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【図６】
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【図７】
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