(57)【要約】【課題】黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）に対して、高い抗菌作用を有し、黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）によるアトピー性皮膚炎の増悪防止又は軽減、黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）が起炎菌となる各種炎症の予防又は治療、黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）による食中毒の予防に有用な、抗黄色ブドウ球菌剤、ならびにこれを含有して成る、アトピー性皮膚炎増悪防止又は緩和剤、抗炎症剤、食中毒予防剤、及び食品添加物を提供する。【解決手段】マウンテンブルーベリー（Ｖａｃｃｉｎｉｕｍ ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｍ）及びエバーグリーンブルーベリー（Ｖａｃｃｉｎｉｕｍ ｏｖａｔｕｍ）から選択される１種又は２種の果実を有効成分とする抗黄色ブドウ球菌剤、ならびにかかる抗黄色ブドウ球菌剤を含有して成る、アトピー性皮膚炎増悪防止又は緩和剤、抗炎症剤、食中毒予防剤、及び食品添加物。【選択図】          なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
マウンテンブルーベリー（Ｖａｃｃｉｎｉｕｍ ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｍ）及びエバーグリーンブルーベリー（Ｖａｃｃｉｎｉｕｍ ｏｖａｔｕｍ）から選択される１種又は２種の果実を有効成分とする抗黄色ブドウ球菌剤。
【請求項２】
請求項１に記載の抗黄色ブドウ球菌剤を含有して成る、アトピー性皮膚炎増悪防止又は緩和剤。
【請求項３】
請求項１に記載の抗黄色ブドウ球菌剤を含有して成る、抗炎症剤。
【請求項４】
請求項１に記載の抗黄色ブドウ球菌剤を含有して成る、食中毒予防剤。
【請求項５】
請求項１に記載の抗黄色ブドウ球菌剤を含有して成る、食品添加物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）に対して、高い抗菌作用を有し、黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）によるアトピー性皮膚炎の増悪防止又は軽減、黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）が起炎菌となる各種炎症の予防又は治療、黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）による食中毒の予防に有用な、抗黄色ブドウ球菌剤、ならびにこれを含有して成る、アトピー性皮膚炎増悪防止又は緩和剤、抗炎症剤、食中毒予防剤、及び食品添加物に関する。
【０００２】
【従来の技術】
黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）は、嘔吐を伴う食中毒や、各種炎症、例えば皮膚化膿症，結膜炎，副鼻腔炎，中耳炎，膀胱炎，肺炎，骨髄炎，関節炎，内臓膿瘍等の起炎菌となる、グラム陽性菌である。またこれにより産生されるエンテロトキシン（腸管毒）は、食中毒の原因となるほか、エンテロトキシンＢや毒性ショック症候群トキシン−１（ＴＳＳＴ−１）のように、スーパー抗原として、アトピー性皮膚炎の増悪などアレルギー性疾患に関与するものが知られている。
【０００３】
上記のように、黄色ブドウ球菌の食中毒，各種炎症などへの関与が明らかになるにつれ、黄色ブドウ球菌に対し、抗菌もしくは殺菌作用を有する薬剤のスクリーニングが活発に行われている。かかる薬剤として、最近ではマンネンタケ子実体傘部抽出物（特許文献１参照）、クローブ，オールスパイス，オレガノ等の抗菌性香辛料（特許文献２参照）、クジン抽出物（特許文献３参照）、ジャックフルーツ抽出物（特許文献４参照）、アルトカルピン及びソフォラフラバノンＧ（特許文献５参照）、キサントン誘導体（特許文献６参照）、カバノタケ抽出物（特許文献７参照）、キトサン誘導体（特許文献８参照）、光触媒活性を有する微粒子酸化チタン（特許文献９参照）、ステビア抽出物（特許文献１０参照）、アルケニルイソチオシアナート化合物（特許文献１１参照）などが開示されている。
【０００４】
また、黄色ブドウ球菌の除去を目的とするＮ−アシルグルタミン酸塩を含有する洗浄剤（特許文献１２参照）や、鉄結合型ラクトフェリンを含有する細菌性エンテロトキシン中和剤（特許文献１３参照）、黄色ブドウ球菌エンテロトキシンの産生を抑制するホップ等の植物抽出物（特許文献１４参照）も知られている。
【０００５】
しかしながら、これらの作用はあまり高いものではなく、そのものだけでは抗菌力が発揮できなかったり、有効量を配合すると、好ましくない色調や香調を与えてしまうものがあった。
【０００６】
マウンテンブルーベリー（Ｖａｃｃｉｎｉｕｍ ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｍ）及びエバーグリーンブルーベリー（Ｖａｃｃｉｎｉｕｍ ｏｖａｔｕｍ）は、ツツジ科（Ｅｒｉｃａｃｅａｅ）スノキ属（ＶａｃｃｉｎｉｕｍＬ．）に属する双子葉植物で、その果実はブルーベリー，ハックルベリーの名称で食用として栽培されている。スノキ属植物の抗菌作用としては、クランベリー果汁の抗菌効果（特許文献１５参照）や、コケモモ抽出物の微生物リパーゼ阻害作用（特許文献１６参照）等が、知られている。しかしながら、マウンテンブルーベリー（Ｖａｃｃｉｎｉｕｍ ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｍ）及びエバーグリーンブルーベリー（Ｖａｃｃｉｎｉｕｍ ｏｖａｔｕｍ）に、抗菌作用、特に黄色ブドウ球菌に対して高い抗菌作用があることは、これまで全く知られていなかった。
【０００７】
【特許文献１】
特開平６−１１６１６２号公報
【特許文献２】
特開平７−２６７８７３号公報
【特許文献３】
特開平８−７３３６４号公報
【特許文献４】
特開平８−７３３６８号公報
【特許文献５】
特開平８−７３３７２号公報
【特許文献６】
特開平９−１１０６８８号公報
【特許文献７】
特開平１０−１２０５８９公報
【特許文献８】
特開平１０−１５８３０５号公報
【特許文献９】
特開平１１−５７２９号公報
【特許文献１０】
特開平１１−４３４４３号公報
【特許文献１１】
特開平１１−１３７９４９号公報
【特許文献１２】
特開平１１−８０７８１号公報
【特許文献１３】
特開平１１−２７９０７６号公報
【特許文献１４】
特開２００１−２２６２８０号公報
【特許文献１５】
特表２００１−５１６５６５号公報
【特許文献１６】
特開２００２−９７１４７号公報
【０００８】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は以上のような状況に鑑みてなされたものであって、その目的は黄色ブドウ球菌に対して有効な抗菌剤を提供することにある。
【０００９】
【課題を解決するための手段】
本発明者は、先の課題を解決するために鋭意検討を行った結果、マウンテンブルーベリー（Ｖａｃｃｉｎｉｕｍ ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｍ）及びエバーグリーンブルーベリー（Ｖａｃｃｉｎｉｕｍ ｏｖａｔｕｍ）から選択される１種又は２種の果実が、黄色ブドウ球菌に対して、高い抗菌作用を発揮すること、またこれを抗黄色ブドウ球菌剤として含有して成る、アトピー性皮膚炎増悪防止又は緩和剤、抗炎症剤、食中毒予防剤、及び食品添加物は、アトピー性皮膚炎の増悪防止又は軽減、黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）が起炎菌となる各種炎症の予防又は治療、黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）による食中毒の予防に有効であることを見いだし、本発明を完成するに至った。
【００１０】
【発明の実施の形態】
本発明の実施の形態を説明する。
【００１１】
本発明で用いるマウンテンブルーベリー（Ｖａｃｃｉｎｉｕｍ ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｍ）及びエバーグリーンブルーベリー（Ｖａｃｃｉｎｉｕｍ ｏｖａｔｕｍ）の果実（以下まとめてハックルベリーと略す）は、通常市販されている果実をそのまま用いても良く、大きさ，虫食い等により規格外になった果実を用いても良い。また、果実を搾った果汁やその搾り滓、果実，果汁，搾り滓の乾燥物を用いることもできる。さらには、それらから溶媒で抽出して得られる抽出物を用いることもできる。
【００１２】
抽出物として用いる場合について詳細に説明する。
【００１３】
抽出物を得る抽出溶媒としては、水、エタノール，メタノール，イソプロパノール，イソブタノール，ｎ−ヘキサノール，メチルアミルアルコール，２−エチルブタノール，ｎ−オクチルアルコールなどのアルコール類、グリセリン，エチレングリコール，エチレングリコールモノメチルエーテル，エチレングリコールモノエチルエーテル，プロピレングリコール，プロピレングリコールモノメチルエーテル，プロピレングリコールモノエチルエーテル，トリエチレングリコール，１，３−ブチレングリコール，１，２−ペンタンジオール，ヘキシレングリコール等の多価アルコール又はその誘導体、アセトン，メチルエチルケトン，メチルイソブチルケトン，メチル−ｎ−プロピルケトンなどのケトン類、酢酸エチル，酢酸イソプロピルなどのエステル類、エチルエーテル，イソプロピルエーテル，ｎ−ブチルエーテル等のエーテル類などの極性溶媒から選択される１種又は２種以上の混合溶媒が好適に使用でき、また、リン酸緩衝生理食塩水をも用いることができるが、特に限定はされない。本発明の目的には、抗菌活性の点から、極性溶媒が好ましく、さらには、メタノール，エタノール，１，３−ブチレングリコール，１，２−ペンタンジオール，水から選択される１種又は２種以上の混合溶媒、特に水を溶媒とすることが好ましい。
【００１４】
抽出方法としては、室温，冷却又は加温した状態で浸漬させて抽出する方法、水蒸気蒸留等の蒸留法を用いて抽出する方法等が例示され、これらの方法を単独で、又は２種以上を組み合わせて抽出を行う。
【００１５】
ハックルベリーの上記溶媒による抽出物は、そのままでも本発明に係る抗黄色ブドウ球菌剤として用いることができるが、濃縮，乾固したものを水や極性溶媒に再度溶解したり、或いは抗黄色ブドウ球菌作用を損なわない範囲で脱色，脱臭，脱塩等の精製処理を行ったり、カラムクロマトグラフィーによる分画処理を行った後に用いてもよい。また保存のため、精製処理の後凍結乾燥し、用時に溶媒に溶解して用いることもできる。本発明においては、ハックルベリーの上記溶媒による抽出物又は前記処理物をそのまま、或いは水，低級アルコール等の水性担体、乳剤，ゲル，クリーム，軟膏等の基剤に含有させたり、粉末化或いは顆粒化して抗色ブドウ球菌剤とする。また、リポソーム等のベシクルやマイクロカプセル等に内包させることもできる。
【００１６】
本発明に係る抗黄色ブドウ球菌剤は、必要に応じてデンプン，乳糖，微結晶セルロース，メタケイ酸アルミン酸マグネシウム等の賦形剤、ステアリン酸マグネシウム，タルク等の滑沢剤、ゼラチン，セラック，ポリビニルピロリドン，メチルセルロース，ヒドロキシエチルセルロース等の結合剤、カルボキシメチルセルロースカルシウム等の崩壊剤、ソルビトール，グリセリン等の保湿剤、ジブチルヒドロキシトルエン，ブチルヒドロキシアニソール，トコフェロール等の抗酸化剤、吸収促進剤、界面活性剤、等張化剤等とともに公知の方法によって、軟カプセル剤，硬カプセル剤，錠剤，丸剤，顆粒剤，散剤，懸濁剤，液剤，シロップ剤，乳濁剤，エリキシル剤等の経口剤、注射剤、坐剤、ペッサリー又は外用剤として提供され得る。
【００１７】
本発明に係る抗黄色ブドウ球菌剤は、低刺激性で毒性及び感作性を示さないため、特に経口的に服用したり、又は皮膚において局所的に外用するのに適しており、アトピー性皮膚炎の増悪など、スーパー抗原の関与するアレルギー性疾患の増悪防止又は症状緩和や、食中毒や炎症の予防を目的とした経口剤又は食品添加物として有用で、さらに安定性にも優れるものである。
【００１８】
ハックルベリー及びその抽出物の配合量は、その配合形態，配合目的によって異なるが、概ね０．００１重量％以上で抗菌効果を発揮する。配合量の上限は特にない。なお、ハックルベリーを抗黄色ブドウ球菌有効成分として配合する際には、抽出物として用いることが、抗黄色ブドウ球菌作用の点から有利である。
【００１９】
【実施例】
さらに本発明の特徴について、実施例により詳細に説明する。
【００２０】
本発明におけるハックルベリーの抗黄色ブドウ球菌作用について示す。
【００２１】
生のマウンテンブルーベリー果実（実施例１），凍結乾燥したマウンテンブルーベリー果実（実施例２），凍結乾燥したエバーグリーンブルーベリー果実（実施例３），凍結乾燥したマウンテンブルーベリー果実，エバーグリーンブルーベリー果実混合物を粉砕し１０重量倍量の５０重量％エタノール水溶液にて２５℃で１週間浸漬後濾過した上清（実施例４）、の４種について、黄色ブドウ球菌に対する抗菌作用を評価した。
【００２２】
抗菌作用は、滅菌トリス緩衝生理食塩水（ｐＨ７．４）にて所定濃度に希釈した各実施例１０ｇに、黄色ブドウ球菌を１０５個植菌し、３７℃で２４時間培養後の生菌数を測定することにより評価した。なお、同時に対照としてハックルベリー果実を添加せず培養し、生菌数を測定した。その結果、表１のとおり、ハックルベリー果実は、黄色ブドウ球菌に対して、高い抗菌作用を示した。
【００２３】
【表１】
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【００２４】
続いて本発明の他の実施例を示す。
【００２５】
［実施例５］  アトピー性皮膚炎緩和剤２
実施例１の果汁を搾汁した後滅菌した。この搾汁液３００ｍｌにシロップ２００ｍｌを加え、次いで精製水を加えて１．０リットルとし、経口のアトピー性皮膚炎緩和剤２を得た。
【００２６】
［実施例６］  アトピー性皮膚炎緩和剤１
実施例２を５．０ｇ，乳糖５０．０ｇ，コーンスターチ２０．０ｇ，カルボキシメチルセルロースカルシウム５．０ｇ，セルロース２０．０ｇを混合し、顆粒化した後打錠して、一錠０．２ｇの錠剤を得て、経口のアトピー性皮膚炎緩和剤１とした。
【００２７】
［実施例７］  アトピー性皮膚炎増悪防止剤１
（１）ジプロピレングリコール                    １０．０（重量％）
（２）カルボキシビニルポリマー                    ０．５
（３）水酸化カリウム                              ０．１
（４）パラオキシ安息香酸メチル                    ０．１
（５）精製水                                    ８７．３
（６）実施例４                                    ２．０
製法：（５）に（２）を均一に溶解した後、（１）に（４）を溶解して添加し、次いで（３）を加えて増粘させ、（６）を添加して、均一化する。
【００２８】
［実施例８］  アトピー性皮膚炎増悪防止剤２
（１）ミツロウ                                    ６．０（重量％）
（２）セタノール                                  ５．０
（３）還元ラノリン                                ８．０
（４）スクワラン                                ２７．５
（５）グリセリル脂肪酸エステル                    ４．０
（６）親油型グリセリルモノステアリン酸エステル    ２．０
（７）ポリオキシエチレン（２０Ｅ．Ｏ．）ソルビタン        ５．０
モノラウリン酸エステル
（８）１，３−ブチレングリコール                      ５．０
（９）パラオキシ安息香酸メチル                    ０．１
（１０）精製水                                    ３５．４
（１１）実施例４                                    ２．０
製法：（１）〜（７）の油相成分を混合，溶解して７５℃とする。一方、（８）〜（１０）の水相成分を混合，溶解して７５℃に加熱する。次いで、この水相成分に前記油相成分を添加して予備乳化した後ホモミキサーにて均一に乳化し、冷却後４０℃で（１１）を添加する。
【００２９】
［実施例９］  アトピー性皮膚炎増悪防止剤３
（１）白色ワセリン                              ２５．０（重量％）
（２）ステアリルアルコール                      ２５．０
（３）グリセリン                                １２．０
（４）ラウリル硫酸ナトリウム                      １．０
（５）パラオキシ安息香酸メチル                    ０．１
（６）精製水                                    ３４．９
（７）実施例４                                    ２．０
製法：（１）〜（４）の油相成分を混合，加熱して均一に溶解し、７５℃とする。一方、（５），（６）の水相成分を混合，加熱して均一とし、７５℃とする。この水相成分に前記油相成分を撹拌しながら徐々に添加して乳化し、冷却後（７）を添加混合する。
【００３０】
本発明の上記実施例１〜実施例３及び実施例５，実施例６について臨床試験を行った。掻痒感及び乾燥等の皮膚症状を呈するアトピー性皮膚炎患者２０名を１群とし、各群に実施例及び比較例をブラインドにて、１日３回、３日間内服させて、掻痒感及び皮膚症状の改善状況を評価した。比較例としては、実施例１〜実施例３及び実施例５においては、ブドウ糖液を比較例１とし、実施例６においては、実施例２に係る部分をブドウ糖液に代替したものを比較例２として評価した。掻痒感及び皮膚症状の改善状況は、使用開始前の状態に比べて、それぞれ「改善」，「やや改善」，「変化なし」，「悪化」の４段階にて評価し、各評価を得たパネラー数にて表２に示した。
【００３１】
実施例７〜実施９についても同様に臨床試験を行った。掻痒感及び乾燥等の皮膚症状を呈するアトピー性皮膚炎患者２０名を１群とし、各群に実施例及び比較例をブラインドにて、実施例５〜実施例７については１日２回、３日間患部に塗布させて、掻痒感及び皮膚症状の改善状況を評価した。比較例としては、実施例７〜実施例９において、本発明に係る抗黄色ブドウ球菌剤をグルコン酸クロルヘキシジン液に代替したものを比較例３〜比較例５とした。掻痒感及び皮膚症状の改善状況は、使用開始前の状態に比べて、それぞれ「改善」，「やや改善」，「変化なし」，「悪化」の４段階にて評価し、各評価を得たパネラー数にて表２に示した。
【００３２】
【表２】
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【００３３】
表２より明らかなように、本発明の実施例使用群においては、全群で掻痒感及び皮膚症状の悪化を示したパネラーは存在せず、これら症状の改善傾向も見られていた。これに対し、比較例１，比較例２使用群では、掻痒感及び皮膚症状について改善傾向を示したパネラー殆どおらず、５０％以上のパネラーにおいて悪化が認められていた。比較例３〜比較例５使用群では、掻痒感及び皮膚症状の改善傾向を示すパネラーも相当数認められたが、症状の悪化したパネラーも少数存在していた。
【００３４】
なお、上記実施例１〜実施例３及び実施例５，実施例６については、経口毒性，感作性及び催奇形性は認められず、実施例７〜実施例９についても、皮膚一次刺激性及び皮膚感作性は全く認められなかった。また、本発明の実施例２〜実施例９は、２５℃で６カ月間保存した場合においても製剤の状態変化は認められず、抗黄色ブドウ球菌作用の低下も認められなかった。
【００３５】
【発明の効果】
以上詳述したように本発明は、黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）に対して高い抗菌作用を有し、黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）によるアトピー性皮膚炎の増悪防止又は軽減、黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）が起炎菌となる各種炎症の予防又は治療、黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）による食中毒の予防に有用である。