(57)【要約】      （修正有）【課題】重金属による大気汚染の有害作用から皮膚及び／又は毛髪を保護するための化粧料、衛生又は皮膚医薬組成物を提供する。【解決手段】重金属による大気汚染の有害作用に対して皮膚及び／又は毛髪を保護するための化粧料、衛生又は皮膚医薬組成物の製造において有効成分として、キレート化剤と組合せて、少なくとも１種のスフィンゴリピド又は同族体を使用する。該組成物は特に大気汚染によって生起される皮膚の迅速な老化及び毛髪の光沢のない外観の影響を防止するのに応用される。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ホスホン誘導体、ＤＴＰＡ、フィチン酸及びデフェロキサミンから選んだキレート化剤と組合せて、有効成分として少なくとも１種のスフィンゴリピド又はスフィンゴリピド同族体を０．０５〜２重量％の割合で含有することからなる、重金属による大気汚染の有害作用に対して皮膚及び／又は毛髪を保護するのに意図した化粧料、衛生又は皮膚医薬組成物。
【請求項２】
前記のスフィンゴリピドは天然スフィンゴリピドであることを特徴とする請求項１記載の組成物。
【請求項３】
前記のスフィンゴリピドはセラミド、セレブロシド、スフィンゴミエリン、サルファチド及びガングリオシドから選ばれることを特徴とする請求項２記載の組成物。
【請求項４】
前記のスフィンゴリピドは合成スフィンゴリピドであることを特徴とする請求項１記載の組成物。
【請求項５】
前記スフィンゴリピドは次式（Ｉ）：
Ｒ1ＣＯ−ＮＨＣＨ（ＣＨ2ＯＲ2）−ＣＨＯＨ−Ｒ3 （Ｉ）
（式中Ｒ1は９〜34個の炭素原子を有するアルキル、アルケニル、ヒドロキシアルキル又はヒドロキシアルケニル基を表わし、該ヒドロキシアルキル又はヒドロキシアルケニル基は９〜34個の炭素原子を有する随意に不飽和の脂肪酸によってエステル化されていることもでき、Ｒ2は水素又は単糖類、オサミン、少糖類又はホスホリルコリンの残基を表わし、該単糖類又は少糖類は場合によっては１個又は多数のサルフェート基又はシアリン酸残基によって置換されていても良く、Ｒ3は10〜25個の炭素原子を有する随意に不飽和の脂肪族基を表わし、該脂肪族基はそのα位でヒドロキシ基によって又はアシル部分が９〜34個の炭素原子を有する随意に不飽和の脂肪酸から誘導されたアシルオキシ基によって置換されていることもできる）に対応することを特徴とする請求項１〜４の何れかに記載の組成物。
【請求項６】
前記のホスホン誘導体はアミノトリ（メチレンホスホン）酸、（１−ヒドロキシエチリデン）−1，1−ジホスホン酸、エチレンジアミンテトラ（メチレンホスホン）酸、ヘキサメチレンジアミンテトラ（メチレンホスホン）酸及びジエチレントリアミンペンタ（メチレンホスホン）酸及びそれらの塩から選ばれることを特徴とする請求項１〜５の何れかに記載の組成物。
【請求項７】
前記の組成物は0.05〜１重量％のキレート化剤を含有することを特徴とする請求項１〜６のいずれかに記載の組成物。
【請求項８】
前記スフィンゴリピド又はスフィンゴリピド同族体は少なくとも１種のホスホリピドと組合せて用いることを特徴とする請求項１〜７の何れかに記載の組成物。
【請求項９】
前記のスフィンゴリピド又はスフィンゴリピド同族体を脂肪、アルコール、油／アルコール又は水性／アルコール相に溶解することを特徴とする請求項１〜８の何れかに記載の組成物。
【請求項１０】
前記の組成物はエマルジョン、ゲル化したエマルジョン、水性／アルコール又は油／アルコールローション、気泡分散液、２相組成物、スプレー又はエーロゾルフォームであることを特徴とする請求の項１〜９の何れかに記載の組成物。
【請求項１１】
場合によってはキレート化剤と組合せて少なくとも１種又はスフィンゴリピド又はスフィンゴリピド同族体を適当な担体に配合することを特徴とする、重金属による大気汚染の有害作用に対して皮膚及び／又は毛髪を保護するのに意図した化粧料、衛生又は皮膚医薬組成物の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明の目的は、キレート化剤と組合せてスフィンゴリピド又は同様な化合物を含有することからなる、重金属による大気汚染の有害作用即ち悪影響に対して皮膚及び毛髪を保護する新規な化粧料、衛生又は皮膚医薬組成物に関する。
【０００２】
ここに言う皮膚医薬組成物とは皮膚の疾病の処置又は防止を扱う組成物を意味し、衛生組成物とは、これを用いる主たる目的が皮膚又は毛髪の外観を改善する（即ち化粧料生成物の役割）のではなくまた皮膚の疾病を処置又は防止する（即ち皮膚医薬組成物の役割）のでもないことを考慮しながら、清潔さを維持し、皮膚又は毛髪を良好な状態に保つのに良い組成物を意味し、この例としてシャンプー、石けん及び制汗剤が挙げられる。
【背景技術】
【０００３】
細胞老化の原因の１つはフリーラジカルに対して及びこれが開始する酸化現象に対して防御する能力の弱体化であると専門家は最近考えている。  
二酸化硫黄、オゾン及び窒素酸化物の如き大気中のガス状汚染物の毒性は特に生命体における細胞損傷を生起するそれらのフリーラジカル開始活性に関連していることは知られいている；例えばH.MehlhornらのFree Rad. Res.Comms., Vol.3, No.1 , p. 193〜197(1987)参照。  
生細胞はフリーラジカルから防御する種々の手段を有する。特に、或る酵素系（例えばスーパーオキシド  ジスムターゼ即ちＳＯＤ及びグルタチオンレダクターゼ即ちＧＲ）はフリーラジカルを破壊する。  
更には、重金属（鉛、カドミウム、水銀）はその発生が特に都会又は産業環境で顕著に増大している大気汚染物であることは知られている。  
重金属に特有の或る毒性作用に加えて、重金属はフリーラジカルに対する細胞防御手段（ＳＯＤ，ＧＲ）の活性を低下させる特性を有する；例えばR.S.DwivediのJ.Toxicol-Cut. & Oculor Toxicol, 6 (3), 183, 191 (1987) 参照。
【０００４】
即ち、重金属は自然の防御手段の効率を低下させることによりガス状の大気汚染物の毒性作用を悪化させしかも細胞老化現象を促進させる。  
この事実は、外部の雰囲気と直接且つ絶えず接触している皮膚及び頭皮については特に真実である。  
重金属の有害作用は輝きの不足した顔色と共に皮膚の老化促進によって、しわの早過ぎる形成によって及びまた毛髪強度の低下及び毛髪の艶のない外観によって特に反映される。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明の目的は、重金属による大気汚染から生じ且つ審美的及び／又は健康の見地から有害なこれらの作用を克服することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明の要旨は、かくしてホスホン誘導体、ＤＰＴＡ、フィチン酸及びデフェロキサミンから選んだキレート化剤と組合せて有効成分として少なくとも１種のスフィンゴリピド又はスフィンゴリピド同族体を0.05〜2重量％の割合で含有することからなる、貴金属による大気汚染の有害作用に対して皮膚及び／又は毛髪を保護するのに意図した化粧料、衛生又は皮膚医薬組成物にある。
【０００７】
本発明により使用したスフィンゴリピドは天然又は合成のスフィンゴリピドであり得る。天然のスフィンゴリピドは種々の種類の化合物：セラミド、スフィンゴミエリン、セレブロシド、スルファチド及びガングリオシドを含有してなることは公知である。
【０００８】
天然のスフィンゴリピドのうちでは、表皮の角質層の脂質の最も重要な成分であると知られいているセラミドが挙げられ；セレブロシド、スフィンゴミエリン、サルファチド及びガンギリオシドは哺乳類の細胞膜に特に存在する。市販のセラミド及びセレブロシドも存在する。天然のスフィンゴリピドは植物、動物の皮膚（特に豚の皮膚）、牛の脳、卵、血液細胞等から特に抽出される。スフィンゴリピドは日本特許出願第86/260008号及び第87/120308号に記載された方法による抽出によって特に製造し得る。
【０００９】
本発明により用いたスフィンゴリピドは特に次式
（Ｉ）：
Ｒ1ＣＯ−ＮＨＣＨ（ＣＨ2ＯＲ2）−ＣＨＯＨ−Ｒ3 （Ｉ）
（式中Ｒ1は９〜３４個の炭素原子を有すアルキル、アルケニル、ヒドロキシアルキル又はヒドロキシアルケニル基を表わし、該ヒドロキシアルキル及びヒドロキシアルケニル基は９〜３４個の炭素原子を有する随意に不飽和の脂肪酸によってエステル化されることができ；Ｒ2は水素又は単糖類、オサミン少糖類又はホスホリルコリンの残基を表わし、該単糖類又は少糖類は１個又は多数のサルフェート基又はシアリン酸残基によって随意に置換されており；Ｒ3は１０〜２５個の炭素原子を有する随意に不飽和の脂肪族基を表わし、該脂肪族基はそのα位でヒドロキシル基により又はアシル部分が９〜３４個の炭素原子を有する随意に不飽和の脂肪酸から誘導されたアシルオキシ基により置換されていることもできる）に対応する化合物である。随意に不飽和の脂肪酸は例えばリノール酸である。単糖類又は糖類単位（一般に１〜４単位）は例えばグルコース、ガラクトース、スルホガラクトース又はＮ−アセチルガラクトサミンから選ばれる。式（Ｉ）に対応する或る合成スフィンゴリピドの製造は標題「セラミド、その製造法及び化粧品及び皮膚医薬品におけるその応用」で1991年２月21日付提出の本出願人のフランス特許出願第91 02091号に記載されている。これらの化合物はスフィンゴシン又はジヒドロスフィンゴシンのアミン官能基のアシル化によって製造される。アシル化は例えば酸クロライド、混合酸無水物、パラニトロフェノールエステル、Ｎ−ヒドロキシサクシンイミドエステル、ジシクロヘキシルカルボジイミドエステル、低級アルキルエステル又はイミダゾリド又はピラゾリドの如きアゾリドを用いて行なう。合成スフィンゴリピドとして、Ｎ−オレオイルジヒドロスフィンゴイシン（式ＩでＲ1＝Ｃ17Ｈ33，Ｒ2＝Ｈ及びＲ3＝Ｈ及びＲ3＝Ｃ15Ｈ31及びＮ−リノレオイルジヒドロスフィンゴシン（式  （Ｉ）で）
Ｒ1＝Ｃ17Ｈ31，Ｒ2＝Ｈ及びＲ3＝Ｃ15Ｈ31）を挙げることができ、これらの化合物は特に1991年２月21日付提出のフランス特許出願第91 02091号に記載の如く製造されることができる。
【００１０】
天然起源の市販スフィンゴリピドは種々の形式のスフィンゴリピドの混合物であるのが最も多く、追加的にホスホリピドを含有し得るものである。
【００１１】
本発明の組成物においては、スフィンゴリピドは少なくとも１種のホスホリピドと組合せ得る。
【００１２】
スフィンゴリピド同族体のうちでは、特に国際特許出願WO86/0015号、特許出願ＥＰ  277,641号及び特許出願ＦＲ86 09125号及び89 12423号に記載される化合物が挙げられる。
【００１３】
本発明により製造した組成物において、スフィンゴリピド又はスフィンゴリピド同族体は0.05〜2重量％の濃度で特に0.1〜0.5重量％の濃度で存在する。
【００１４】
本発明の別の要旨は、少なくとも１種のスフィンゴリピド又はスフィンゴリピド同族体を、場合によってはキレート化剤と組合せて、適当な担体中に配合することを特徴とする、重金属による大気汚染の有害作用に対して皮膚及び／又は毛髪を保護するのに意図した化粧料、衛生又は皮膚医薬組成物の製造方法である。
【００１５】
本発明の組成物を製造するには、スフィンゴリピド又はスフィンゴリピド同族体は特に適当な担体中に溶解させることができ、特に脂肪、アルコール又は水性／アルコール相に溶解させ得る。更には、所望ならば脂肪相を水性相と混合し又は水性相に分散させる。
【００１６】
得られた組成物は例えばエマルジョン、ゲル化したエマルジョン、水性／アルコール又は油／アルコールローション、気泡分散液、２相組成物、スプレー又はエーロゾルフォームである。
【００１７】
これらの組成物は常法により製造される。これらの組成物は特に皮膚又は毛髪を手入するミルク、クリーム又は２相組成物の形であるいはまたシャンプーの形で提供される。本発明により得られた組成物がミルク又はクリームの形で提供される時は、これらは油中水型又は水中油型のエマルジョンであるか又は包蔵化された水性相を含有する有機分子層によりなる脂質小球の水性分散物である。
【００１８】
本発明の組成物が２相組成物である時は、該組成物は下方の水性相と、スフィンゴリピドを含有してなる上方の油状相とよりなる。下方相と上方相との重量比は例えば３０：７０〜６０：４０である。
【００１９】
本発明により得られた組成物が気泡分散物の形で提供される時は、気泡の成分脂質はイオン性又は非イオン性の脂質又はこれらの混合物であり得る。
【００２０】
本発明の特定の具体例によると、スフィンゴリピド又はスフィンゴリピド同族体はキレート化剤と組合せて即ち金属カチオンと共に配位結合又はイオン結合の何れかを形成し得る薬剤と組合せて用いられる。金属カチオンのうちでは、鉛、水銀及びカドミウムを挙げ得る。金属カチオンと配位結合を形成するキレート化剤のうちでは、特にホスホン誘導体(phosphonic derivative)、ポリイミノ酢酸又はポリアミノ酢酸例えばＤＴＰＡ（ジエチレントリアミンペンタ酢酸）：フィチン酸：アミド例えばＮ’−〔５〔〔４−〔〔５−（アセチルヒドロキシアミノ）ペンチル〕アミノ〕−１，４−ジオキソブチル〕ヒドロキシアミノ〕ペンチル〕−Ｎ−（５−アミノペンチル）−Ｎ−ヒドロキシブタンジアミド又はデフェロキサミン、ポリチオ尿素及びポリエチレンイミンを挙げ得る。
【００２１】
ホスホン誘導体のうちでは、特にアミノトリ（メチレンホスホン）酸、（１−ヒドロキシエチリデン）−１，１−ジホスホン酸、エチレンジアミンテトラ（メチレンホスホン）酸、ヘキサメチレンジアミンテトラ（メチレンホスホン）酸及びエチレントリアミンペンタ（メチレンホスホン）酸及びそれらの塩が挙げられるものである。
【００２２】
金属カチオンとイオン結合を形成するキレート化剤のうちでは、アルギン酸塩好ましくはアルギン酸ナトリウム及びアガロースが挙げられる。
【００２３】
本発明により得られた組成物において、キレート化剤の含量は一般に１重量％以下である。  
該組成物は例えば0.05〜１重量％、特に0.1〜0.3重量％のキレート化剤を含有し得る。  
本発明により得られた組成物は常法により慣用の量で皮膚、頭皮及び毛髪に施用される。  
次の実施例により本発明を例示するが、本発明はこれに限定されるものではない。
【００２４】
実施例１ 皮膚の保護クリーム
次の重量組成のクリームを常法により製造した；ソルビタントリステアレート  ０．９
Nikkol社により商標名「モノグリセリルステアレートＭＧＳＢ」で市販のグリセリルモノ−ジ−トリ−パルミトステアレート                                          ３
ミリスチル  ミリステート                                                  ５
２−エチルヘキシル  パルミテート                                          ４
日本油脂社により商標名「ポリシンラン」で市販の水添イソパラフィン（６〜８モルのイソブチレン）                                                            ２．５
スフィンゴリピド                                                        ０．２５
ホスホン錯化剤（デクエスト：Dequest2046）                                ０．１
ユニオンカーバイド社により「揮発性シリコーン7158」の名称で市販のジメチルポリシロキサン                                                                      ５
セチルアルコール（９０％のＣ16）                                          ２．５
40モルのエチレンオキシドでポリオキシエチレン化した
ポリエチレングリコールステアレート                                        ２
防腐剤                                                                    十分量
芳香剤                                                                    十分量
殺菌脱塩水        全体を100とするに十分な量
スフィンゴリピドはワイタキ社によりグリコセル(Glycocer)の名称で市販される化合物である。  
ホスホン錯化剤デクエスト2046はモンサント社により市販のエチレンジアミンテトラ（メチレンホスホン）酸のナトリウム塩である。  
テクエスト2046の代りに次のキレート化剤：ＤＴＰＡ及びフィチン酸の１種を含有するクリームを同様な仕方で製造した。  
実施例２ ２相組成物
次の成分（重量部）を含有する５０％の油状相（Ａ）と５０％の水性相（Ｂ）とをフラスコに添加することにより２相生成物が得られた。
【００２５】
Ａ．油状相 
スフィンゴリピド（グリコセル」）                                          ０．１
オクチルドデカノール                                                    １０
ユニオンカーバイド社により「揮発性シリコーン7158」の名称で市販のジメチルポリシロキサン                                                                  ６０
イソプロピル  ミリステート                          全体を１００とするに十分な量
Ｂ．水性相
ＩＣＩ社により「シンペロニックＰＥ／Ｆ８７」の商標名で市販のエチレンオキシドとプロピレンオキシドとの縮合物                                             ０．５
リン酸二水素カリウム                                                      ０．１
無水のリン酸水素二カリウム                                                ０．３
無水の塩化ナトリウム                                                      ０．９
プロピレン  グリコール                                                        ５
デクエスト2046                                                            ０．３
脱塩水                                                 全体を100とするに十分な量
実施例３ 
２相組成物
実施例２の方法と同様であるが、スフィンゴリピドのグリコセルの代りに、0.1gのＮ−オレオイルジヒドロスフィンゴシンを用いた。
【００２６】
実施例４
重金属によって誘発される細胞毒性に関して保護役割の研究
この試験は線維芽細胞の培養物及び表皮角化細胞の培養物で実施した。  
重金属（カドミウム、鉛、水銀）の投与量を増大させて誘発される細胞毒性を測定する。  
細胞の生活力は生体染色剤、３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロミド即ちＭＴＴ、酸化状態で黄色の化合物によって測定し、該化合物は生細胞の種々の糸粒体酵素によって還元されて不溶性の紫青色ホルマザンとなる；F.Denizat 及び R.LangのJ.Immunol, Methods, 89, 271〜277(1986)参照。  
可溶性の塩の形（塩化物、硫酸塩又は酢酸塩）で研究中の有毒化合物を細胞培養物に添加した後に、細胞毒性を24時間後に評価した。
【００２７】
この評価を行うのに、ＭＴＴ（5mg/mlの濃度）を添加し、次いで細胞の溶解は、生じたホルマザンを溶解する0.04N HCl含有イソプロパノールを添加することにより生起される。生細胞によって専ら形成されるホルマザンの量は、570及び630nmでの分光法により評価される。
【００２８】
更には、細胞の膜攻撃を評価するのに、細胞内及び細胞外ラクトデヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）を分析する。細胞外ＬＤＨを分析するために、培地の一部を取出し、ベーリンガーキット（文献124907）を用いる。  
細胞内ＬＤＨを分析するために、培地を取出し、次いで細胞の溶解は０．２％のトリトン１００を用いて生起する。得られた溶解質はベーリンガーキットを用いて細胞内ＬＤＨを分析するのに用いる。  
研究したキレート化剤はモンサント社によって市販のデクエスト2046であった。  
スフィンゴリピドはワイタキ社によって市販のグリコセルであった。
【００２９】
試験結果
ａ）線維芽細胞について：
ＭＴＴ試験：
実施例１及び２で用いたグリコセルとして公知のスフィンゴリピドは、５．１０-4（重量／容量：市販生成物の重量（ｇ）／M.E.M.培地の容量(ml)）の装入量でカドミウム及び水銀に関して保護作用を有する。
【００３０】
Ｎ−オレオイルジヒドロスフィンゴシンは１．１０-6（重量／容量：合成生成物の重量（ｇ）／M.E.M.培地の容量（ｍｌ））の装入量でカドミウム及び鉛に関して保護作用を有する。
【００３１】
キレート化剤は５．１０-5（容量／容量：市販生成物の容量（ｍｌ）／M.E.M.培地の容量（ｍｌ））の装入量でカドミウムに関して保護作用を有する。
【００３２】
ＬＤＨ試験：
スフィンゴリピドのグリコセルは５．１０-4（重量／容量）の装入量でカドミウム、鉛及び水銀に関して保護作用を有する。  
キレート化剤は５．１０-5（容量／容量）の装入量でカドミウム及び鉛に関して保護作用を有する。  
ｂ）表皮角化細胞について：
ＭＴＴ試験：
スフィンゴリピドのグリコセルは前述した装入量でカドミウム及び水銀に関して保護作用を有する。  
キレート化剤は前述した装入量でカドミウムに関して保護作用を有する。  
ＬＤＨ試験：
前述した装入量では、スフィンゴリピドのグリコセルは研究した３種の重金属に関して保護作用を有し、キレート化剤はカドミウム及び鉛に関して保護作用を有する。