(57)【要約】【課題】励起光の照射時間又は照射量に対して蛍光強度が振動する蛍光特性を有する発光性微粒子又はその集合体の提供。【解決手段】第１の粒子及び該第１の粒子に接合する化合物を有してなる発光性微粒子からなる集合体であって、励起光の照射時間又は照射量に対して蛍光強度が振動する蛍光特性を有する発光性微粒子又はその集合体により、上記課題を解決する。【選択図】    なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
励起光の照射時間又は照射量に対して蛍光強度が振動する蛍光特性を有する、発光性微粒子の集合体。
【請求項２】
前記発光性微粒子は、その幾何学的サイズが０．５〜１００ｎｍである請求項１記載の集合体。
【請求項３】
前記集合体における前記発光性微粒子の平均粒子中心間距離が該微粒子直径の１０倍以内である請求項１又は２記載の集合体。
【請求項４】
前記集合体は、その幾何学的サイズが１〜１００００ｎｍである請求項１〜３のいずれか１項記載の集合体。
【請求項５】
前記発光性微粒子は、粒径０．５〜５０ｎｍの第１の粒子、及び該粒子に接合する化合物を有する請求項１〜４のいずれか１項記載の集合体。
【請求項６】
前記第１の粒子は、粒径０．５〜２０ｎｍのコア粒子及び該コア粒子を被覆する厚さ０．０１〜３０ｎｍのシェルからなる請求項５記載の集合体。
【請求項７】
前記蛍光特性は、前記集合体の周囲環境の生物物理化学的変化によって変動する請求項１〜６のいずれか１項記載の集合体。
【請求項８】
前記周囲環境の生物物理化学的変化は、生体物質濃度、化学物質濃度、ｐＨ、温度、圧力、電場、磁場、誘電率、及び粘度からなる群から選ばれる１種又は２種以上の変化である請求項７記載の集合体。
【請求項９】
前記化合物は、その一端が第１の粒子に接合する接合基を有する請求項５〜８のいずれか１項記載の集合体。
【請求項１０】
前記化合物の一部又は全部は、その他端が親分散媒性を有する親分散媒基を有し、これにより前記発光性粒子又は集合体が分散媒に分散する請求項９記載の集合体。
【請求項１１】
前記発光性微粒子が無機化合物及び有機化合物からなる群から選ばれる少なくとも１種を含有する請求項１〜１０のいずれか１項記載の集合体。
【請求項１２】
前記コア粒子が無機半導体又は有機半導体であり、前記シェルが無機化合物又は有機化合物であって且つ半導体又は不導体である請求項５〜１０のいずれか１項記載の集合体。
【請求項１３】
請求項１〜１２のいずれか１項記載の発光性微粒子の集合体を１×１０−６重量％以上含有する試薬。
【請求項１４】
第１の粒子及び該第１の粒子に接合する化合物を有してなる発光性微粒子からなる集合体であって、前記第１の粒子は０．５〜５０ｎｍを有し、前記発光性微粒子はその幾何学的サイズが０．５〜１００ｎｍであり、各発光性微粒子間距離は、その平均粒子中心間距離が該微粒子直径の１０倍以内であり、且つ前記集合体の幾何学的サイズが１〜１００００ｎｍである、上記集合体。
【請求項１５】
第１の粒子及び該第１の粒子に接合する化合物を有する発光性微粒子からなる集合体；及び該集合体を分散させる分散媒；を有する分散体であって、前記第１の粒子は０．５〜５０ｎｍを有し、前記発光性微粒子はその幾何学的サイズが０．５〜１００ｎｍであり、各発光性微粒子間距離は、その平均粒子中心間が該微粒子直径の１０倍以内であり、前記集合体の幾何学的サイズが１〜１００００ｎｍであり、前記化合物はその一端が前記第１の粒子表面と接合する接合基を有し、前記化合物の一部又は全部は、その他端に親分散媒性基を有し、該親分散媒性基により前記発光性微粒子又は前記集合体が分散媒中に分散される分散体。
【請求項１６】
前記分散体は、励起光の照射時間又は照射量に対して蛍光強度が振動する蛍光特性を有する請求項１５記載の分散体。
【請求項１７】
前記第１の粒子は、粒径０．５〜２０ｎｍのコア粒子及び該コア粒子を被覆する厚さ０．０１〜３０ｎｍのシェルからなる請求項１５又は１６記載の分散体。
【請求項１８】
前記蛍光特性は、前記集合体の周囲環境の生物物理化学的変化によって変動する請求項１５〜１７のいずれか１項記載の分散体。
【請求項１９】
前記周囲環境の生物物理化学的変化は、生体物質濃度、化学物質濃度、ｐＨ、温度、圧力、電場、磁場、誘電率、及び粘度からなる群から選ばれる１種又は２種以上の変化である請求項１８記載の分散体。
【請求項２０】
前記第１の粒子が無機化合物及び有機化合物からなる群から選ばれる少なくとも１種である請求項１５〜１９のいずれか１項記載の分散体。
【請求項２１】
前記コア粒子が無機半導体又は有機半導体であり、前記シェルが無機化合物又は有機化合物であって且つ半導体又は不導体である請求項１７〜２０のいずれか１項記載の集合体。
【請求項２２】
前記分散媒が、水及び水溶液；並びに有機溶媒及び溶媒として有機物を用いる溶液；からなる群から選ばれる１種である請求項１５〜２１のいずれか１項記載の分散体。
【請求項２３】
前記分散体が検査用試薬である請求項１５〜２２のいずれか１項記載の分散体。
【請求項２４】
前記分散体中、発光性微粒子の集合体が１×１０−６重量％以上含まれる請求項１５〜２３のいずれか１項記載の分散体。
【請求項２５】
励起光の照射時間又は照射量に対して蛍光強度が振動する蛍光特性を有する、発光性微粒子の集合体；及び該集合体を分散させる分散媒を有する分散体。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、発光性微粒子及び該発光性微粒子の集合体に関し、特に励起光の照射時間又は照射量に対して蛍光強度が振動する蛍光特性を有する、発光性微粒子の集合体に関する。
【０００２】
【従来の技術】
近年、粒径により蛍光波長を制御可能である半導体ナノ粒子の研究が盛んに行われている。半導体ナノ粒子は、蛍光波長の制御性、高耐光性、表面修飾の自由度の高さなどを有することから、生体内外の蛍光マーカとして応用が期待され、研究されている。
【０００３】
例えば、米国特許第６，２５１，３０３号は、あるバンドギャップを有するコア部；該コア部を覆うオーバーコート部；及び該オーバーコート部に付着し親水性基を有する化合物を有してなる水溶性半導体ナノ粒子を開示している。
また、米国特許第６，３２６，１４４号は、ある化合物と結合し且つ発光する半導体ナノ粒子を開示している。また、同特許は、該発光により生物学的状態に関しての情報が提供されることを開示している。
さらに、既存の有機系蛍光色素に代わって、制御可能な蛍光波長を有する半導体ナノ粒子を、トレーサー化合物として用いる研究も種々なされている（例えば、Ｘ．  Ｍｉｃｈａｌｅｔら、Ｓｉｎｇｌｅ  Ｍｏｌ．，  ２００１，  ２，  ２６１−２７６を参照のこと）。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
半導体ナノ粒子が蛍光を発し且つ該蛍光波長を制御できること、その蛍光を用いて種々のトレーサー化合物として用いることは、種々の文献で開示されているが、半導体ナノ粒子が、励起光の照射時間又は照射量に対して蛍光強度が振動する蛍光特性を有することは未だ開示も示唆もなされていない。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、半導体ナノ粒子について研究した結果、半導体ナノ粒子又はその集合体が、励起光の照射時間又は照射量に対して蛍光強度が振動する蛍光特性を有することを見出した。
したがって、本発明は、励起光の照射時間又は照射量に対して蛍光強度が振動する蛍光特性を有する発光性微粒子又はその集合体を提供することを目的とする。
【０００６】
具体的には、本発明者らは、次の発明を見出した。
＜１＞  励起光の照射時間又は照射量に対して蛍光強度が振動する蛍光特性を有する、発光性微粒子の集合体。
＜２＞  上記＜１＞において、蛍光特性は、７７Ｋ以上の温度における蛍光寿命が１×１０−１２秒以上であるのがよい。
＜３＞  上記＜１＞又は＜２＞において、蛍光強度の振動の時定数が１×１０−６秒以上であるのがよい。
【０００７】
＜４＞  上記＜１＞〜＜３＞のいずれかにおいて、発光性微粒子は、その幾何学的サイズが０．５〜１００ｎｍであるのがよい。
＜５＞  上記＜１＞〜＜４＞のいずれかにおいて、集合体における前記発光性微粒子の平均粒子中心間距離が該微粒子直径の１０倍以内であるのがよい。
＜６＞  上記＜１＞〜＜５＞のいずれかにおいて、集合体は、その幾何学的サイズが１〜１００００ｎｍであるのがよい。
【０００８】
＜７＞  上記＜１＞〜＜６＞のいずれかにおいて、発光性微粒子は、粒径０．５〜５０ｎｍの第１の粒子、及び該第１の粒子に接合する化合物を有するのがよい。
＜８＞  上記＜７＞において、第１の粒子は、粒径０．５〜２０ｎｍのコア粒子及び該コア粒子を被覆する厚さ０．０１〜３０ｎｍのシェルからなるのがよい。
＜９＞  上記＜１＞〜＜８＞のいずれかにおいて、蛍光特性は、前記集合体の周囲環境の生物物理化学的変化によって変動するのがよい。
＜１０＞  上記＜９＞において、周囲環境の生物物理化学的変化は、生体物質濃度、化学物質濃度、ｐＨ、温度、圧力、電場、磁場、誘電率、及び粘度からなる群から選ばれる１種又は２種以上の変化であるのがよい。
【０００９】
＜１１＞  上記＜７＞〜＜１０＞のいずれかにおいて、化合物は、その一端が第１の粒子に接合する接合基を有するのがよい。化合物は、有機物、特に直鎖、分岐鎖及び／又は環を有する有機物であるのがよい。
＜１２＞  上記＜１１＞において、化合物の一部又は全部は、その他端が親分散媒性を有する親分散媒基を有し、これにより前記発光性粒子又は集合体が分散媒に分散するのがよい。化合物は、有機物、特に直鎖、分岐鎖及び／又は環を有する有機物であるのがよい。
＜１３＞  上記＜１２＞において、分散媒は極性溶媒であるのがよく、特に、水及び水溶液；並びに有機溶媒からなる極性溶媒群から選ばれるのがよく、親分散媒基は、極性基であるのがよい。
【００１０】
＜１４＞  上記＜１＞〜＜１３＞のいずれかにおいて、発光性微粒子が無機化合物及び有機化合物からなる群から選ばれる少なくとも１種を含有するのがよい。
＜１５＞  上記＜８＞〜＜１３＞のいずれかにおいて、コア粒子が無機半導体又は有機半導体であり、シェルが無機化合物又は有機化合物であって且つ半導体又は不導体であるのがよい。特に、コア粒子が無機半導体であり、シェルが無機半導体であるのがよい。
＜１６＞  上記＜１＞〜＜１５＞のいずれかに記載の発光性微粒子の集合体を１×１０−６重量％以上含有する試薬
【００１１】
＜１７＞  第１の粒子及び該第１の粒子に接合する化合物を有してなる発光性微粒子からなる集合体であって、第１の粒子はその粒径が０．５〜５０ｎｍを有し、発光性微粒子はその幾何学的サイズが０．５〜１００ｎｍであり、各発光性微粒子間距離は、その平均粒子中心間距離が該微粒子直径の１０倍以内であり、且つ集合体の幾何学的サイズが１〜１００００ｎｍである、集合体。
＜１８＞  上記＜１７＞において、第１の粒子は、粒径０．５〜２０ｎｍのコア粒子及び該コア粒子を被覆する厚さ０．０１〜３０ｎｍのシェルからなるのがよい。
【００１２】
＜１９＞  上記＜１７＞又は＜１８＞において、集合体は、励起光の照射時間又は照射量に対して蛍光強度が振動する蛍光特性を有するのがよい。
＜２０＞  上記＜１９＞において、蛍光特性は、７７Ｋ以上の温度における蛍光寿命が１×１０−１２秒以上であるのがよい。
【００１３】
＜２１＞  上記＜１９＞又は＜２０＞において、蛍光強度の振動の時定数が１×１０−６秒以上であるのがよい。
＜２２＞  上記＜１９＞〜＜２１＞のいずれかにおいて、蛍光特性は、前記集合体の周囲環境の生物物理化学的変化によって変動するのがよい。
＜２３＞  上記＜２２＞において、周囲環境の生物物理化学的変化は、生体物質濃度、化学物質濃度、ｐＨ、温度、圧力、電場、磁場、誘電率、及び粘度からなる群から選ばれる１種又は２種以上の変化であるのがよい。
【００１４】
＜２４＞  上記＜１７＞〜＜２３＞のいずれかにおいて、化合物は、その一端が第１の粒子に接合する接合基を有するのがよい。化合物は、有機物、特に直鎖、分岐鎖及び／又は環を有する有機物であるのがよい。
＜２５＞  上記＜２４＞において、化合物の一部又は全部は、その他端が親分散媒性を有する親分散媒基を有し、これにより前記発光性粒子又は集合体が分散媒に分散するのがよい。化合物は、有機物、特に直鎖、分岐鎖及び／又は環を有する有機物であるのがよい。
【００１５】
＜２６＞  上記＜２５＞において、分散媒は極性溶媒であるのがよく、特に、水及び水溶液；並びに有機溶媒からなる極性溶媒群から選ばれるのがよく、親分散媒基は、極性基であるのがよい。
＜２７＞  上記＜１８＞〜＜２６＞のいずれかにおいて、コア粒子が無機半導体又は有機半導体であり、シェルが無機化合物又は有機化合物であって且つ半導体又は不導体であるのがよい。特に、コア粒子が無機半導体であり、シェルが無機半導体であるのがよい。
＜２８＞  上記＜１７＞〜＜２７＞のいずれかに記載の発光性微粒子の集合体を１×１０−６重量％以上含有する試薬。
【００１６】
＜２９＞  第１の粒子及び該第１の粒子に接合する化合物を有する発光性微粒子を有してなる集合体；及び該集合体を分散させる分散媒；を有する分散体であって、前記第１の粒子は０．５〜５０ｎｍを有し、前記発光性微粒子はその幾何学的サイズが０．５〜１００ｎｍであり、各発光性微粒子間距離は、その平均粒子中心間が該微粒子直径の１０倍以内であり、且つ前記集合体の幾何学的サイズが１〜１００００ｎｍであり、前記化合物の一端が第１の粒子表面と接合する接合基を有し、前記化合物の一部又は全部は、その他端が親分散媒性基を有し、該親分散媒性基により発光性微粒子又は集合体が分散媒中に分散される分散体。
＜３０＞  上記＜２９＞において、分散体は、励起光の照射時間又は照射量に対して蛍光強度が振動する蛍光特性を有するのがよい。
【００１７】
＜３１＞  上記＜２９＞又は＜３０＞において、第１の粒子は、粒径０．５〜２０ｎｍのコア粒子及び該コア粒子を被覆する厚さ０．０１〜３０ｎｍのシェルからなるのがよい。
＜３２＞  上記＜３０＞又は＜３１＞において、蛍光特性は、集合体の周囲環境の生物物理化学的変化によって変動するのがよい。
【００１８】
＜３３＞  上記＜３０＞〜＜３２＞のいずれかにおいて、周囲環境の生物物理化学的変化は、生体物質濃度、化学物質濃度、ｐＨ、温度、圧力、電場、磁場、誘電率、及び粘度からなる群から選ばれる１種又は２種以上の変化であるのがよい。
【００１９】
＜３４＞  上記＜３１＞〜＜３３＞のいずれかにおいて、コア粒子が無機半導体又は有機半導体であり、シェルが無機化合物又は有機化合物であって且つ半導体又は不導体であるのがよい。特に、コア粒子が無機半導体であり、シェルが無機半導体であるのがよい。
＜３５＞  上記＜２９＞〜＜３４＞のいずれかにおいて、分散媒が極性溶媒であるのがよく、特に、水及び水溶液；並びに有機溶媒；からなる極性溶媒群から選ばれる１種であるのがよく、親分散媒基は極性基であるのがよい。
【００２０】
＜３６＞  上記＜２９＞〜＜３５＞のいずれかにおいて、分散体が検査用試薬であるのがよい。
＜３７＞  上記＜２９＞〜＜３６＞のいずれかにおいて、分散体中、発光性微粒子の集合体が１×１０−６重量％以上含まれるのがよい。
【００２１】
＜３８＞  発光性微粒子の集合体；及び該集合体を分散させる分散媒を有する分散体であって、発光性微粒子、又はその集合体、又はその分散体は、励起光の照射時間又は照射量に対して蛍光強度が振動する蛍光特性を有する、上記分散体。
＜３９＞  上記＜３８＞において、蛍光特性は、７７Ｋ以上の温度における蛍光寿命が１×１０−１２秒以上であるのがよい。
＜４０＞  上記＜３８＞又は＜３９＞において、蛍光強度の振動の時定数が１×１０−６秒以上であるのがよい。
【００２２】
＜４１＞  上記＜３８＞〜＜４０＞のいずれかにおいて、発光性微粒子は、その幾何学的サイズが０．５〜１００ｎｍであるのがよい。
＜４２＞  上記＜３８＞〜＜４１＞のいずれかにおいて、集合体における発光性微粒子の平均粒子中心間距離が該微粒子直径の１０倍以内であるのがよい。
＜４３＞  上記＜３８＞〜＜４２＞のいずれかにおいて、集合体は、その幾何学的サイズが１〜１００００ｎｍであるのがよい。
【００２３】
＜４４＞  上記＜３８＞〜＜４３＞のいずれかにおいて、発光性微粒子は、粒径０．５〜５０ｎｍの第１の粒子、及び該第１の粒子に接合する化合物を有するのがよい。
＜４５＞  上記＜４４＞において、第１の粒子は、粒径０．５〜２０ｎｍのコア粒子及び該コア粒子を被覆する厚さ０．０１〜３０ｎｍのシェルからなるのがよい。
【００２４】
＜４６＞  上記＜３８＞〜＜４５＞のいずれかにおいて、蛍光特性は、集合体の周囲環境の生物物理化学的変化によって変動するのがよい。
＜４７＞  上記＜４６＞において、周囲環境の生物物理化学的変化は、生体物質濃度、化学物質濃度、ｐＨ、温度、圧力、電場、磁場、誘電率、及び粘度からなる群から選ばれる１種又は２種以上の変化であるのがよい。
【００２５】
＜４８＞  上記＜４４＞〜＜４７＞のいずれかにおいて、化合物は、その一端が第１の粒子に接合する接合基を有するのがよい。化合物は、有機物、特に直鎖、分岐鎖及び／又は環を有する有機物であるのがよい。
＜４９＞  上記＜４８＞において、化合物の一部又は全部は、その他端が親分散媒性を有する親分散媒基を有し、これにより発光性粒子又は集合体が分散媒に分散するのがよい。化合物は、有機物、特に直鎖、分岐鎖及び／又は環を有する有機物であるのがよい。
【００２６】
＜５０＞  上記＜４９＞において、分散媒は極性溶媒であるのがよく、特に、水及び水溶液；並びに有機溶媒からなる極性溶媒群から選ばれるのがよく、親分散媒基は、極性基であるのがよい。
＜５１＞  上記＜３８＞〜＜５０＞のいずれかにおいて、発光性微粒子が無機化合物及び有機化合物からなる群から選ばれる少なくとも１種を含有するのがよい。
【００２７】
＜５２＞  上記＜４５＞〜＜５１＞のいずれかにおいて、コア粒子が無機半導体又は有機半導体であり、シェルが無機化合物又は有機化合物であって且つ半導体又は不導体であるのがよい。特に、コア粒子が無機半導体であり、シェルが無機半導体であるのがよい。
＜５３＞  上記＜３８＞〜＜５２＞のいずれかにおいて、分散体が発光性微粒子の集合体を１×１０−６重量％以上含有するのがよい。
＜５４＞  上記＜３８＞〜＜５３＞のいずれかにおいて、分散体が検査用試薬であるのがよい。
【００２８】
【発明の実施の形態】
以下、本発明を詳細に説明する。
本発明は、発光性微粒子からなる集合体、該集合体を有してなる分散体を提供する。
【００２９】
本発明の集合体は、発光性微粒子からなる。
本発明の集合体における発光性微粒子間の平均粒子中心間距離は、発光性微粒子直径の１０倍以内、好ましくは２倍以内、具体的には平均粒子間距離は、１〜１０００ｎｍ、好ましくは２〜１００ｎｍであるのがよい。この平均粒子間距離を変化させることにより、後述の蛍光特性、特に蛍光強度増加率、振動振幅、及び振動周期、並びに周囲環境の生物物理化学的変化に対する応答性などを変動させることができる。
なお、発光性微粒子間の平均粒子中心間距離は、凍結抽出レプリカ法ＴＥＭ観察などにより測定することができる。
【００３０】
本発明の集合体は、その幾何学的サイズが１〜１００００ｎｍ、好ましくは２〜５００ｎｍ、より好ましくは１０〜２５０ｎｍであるのがよい。集合体の幾何学的サイズを変更することにより、後述の蛍光特性、特に蛍光強度、蛍光強度増加率、振動振幅、振動周期、及び周囲環境の生物物理化学的変化に対する応答性などを変化させることができる。
なお、集合体の幾何学的サイズは、動的光散乱測定又は凍結抽出レプリカ法ＴＥＭ観察などにより測定することができる。
【００３１】
本発明の集合体に含まれる発光性微粒子は、無機化合物、及び有機化合物からなる群から選ばれる１種のみから成っていても、２種以上からなっていてもよい。また、他の面として、本発明の集合体に含まれる発光性微粒子は、導体、半導体、及び不導体からなる群から選ばれる１種のみから成っていても、２種以上から成っていてもよい。例えば、本発明の発光性微粒子は、無機化合物の半導体と有機化合物とからなっていてもよい。なお、本明細書において、「無機化合物」には、金属単体も含まれる。
【００３２】
本発明の集合体に含まれる発光性微粒子は、無機、有機に関わらず、半導体を含有するのがよく、特に無機半導体を含有するのがよい。
半導体として、ＩＩ−ＶＩ族化合物半導体、ＩＩＩ−Ｖ族化合物半導体、及びＩＶ族半導体を含む半導体を挙げることができ、特にＺｎＳ、ＺｎＳｅ、ＺｎＴｅ、ＣｄＳ、ＣｄＳｅ、ＣｄＴｅ、ＧａＮ、ＧａＰ、ＧａＡｓ、ＧａＳｂ、ＩｎＰ、ＩｎＡｓ、ＩｎＳｂ、ＡｌＳ、ＡｌＰ、ＡｌＡｓ、ＰｂＳ、ＰｂＳｅ、Ｇｅ及びＳｉ、並びにこれらの混合物を用いることができる。
【００３３】
発光性微粒子の幾何学的サイズは、０．５〜１００ｎｍ、好ましくは０．５〜６０ｎｍ、より好ましくは２〜２０ｎｍであるのがよい。
発光性微粒子の幾何学的サイズを変動することにより、集合体の蛍光特性、特に吸収スペクトルおよび蛍光スペクトルを変化させることができる。
なお、発光性微粒子の幾何学的サイズは、動的光散乱測定又はＴＥＭ観察などにより測定することができる。
【００３４】
発光性微粒子は、第１の粒子と該第１の粒子に接合する化合物とを有するか又はこれらのみから成るのがよい。ここで「接合」とは、第１の粒子表面と化合物とが物理吸着又は化学吸着などにより、近接していることをいう。なお、発光性微粒子又はその集合体が分散媒又は溶媒中にある場合、化合物は、ある条件下で、その一部又は全部が第１の粒子表面近傍から解離又は遊離してもよい。
【００３５】
また、第１の粒子は、無機化合物；及び有機化合物からなる群から選ばれる１種のみからなっていても、２種以上の組合せから成っていてもよい。
例えば、第１の粒子は、コア粒子及び該コア粒子を覆うシェルのみから成る構造を有するのがよいが、第１の粒子が２種以上の組み合わせから成る場合、第１の粒子はこの構造に限定されず、種々の構造を採ることができる。
【００３６】
第１の粒子がコア−シェル構造を有する場合、コア粒子が無機半導体又は有機半導体であり、シェルが無機化合物又は有機化合物であって且つ半導体又は不導体であるのがよい。特に、コア粒子が無機半導体であり、シェルが無機半導体であるのがよい。なお、シェルは、上述の化合物と化学吸着又は物理吸着する特性を有するのがよい。
【００３７】
発光性微粒子が第１の粒子と化合物とを有する場合、該化合物は有機物、特に直鎖、分岐鎖及び／又は環を有する有機物であるのがよい。直鎖、分岐鎖及び／又は環を有する有機物は、炭素数６以上の鎖を有するのがよい。化合物、例えば有機物、特に直鎖、分岐鎖及び／又は環を有する有機物は、その一端が第１の粒子と接合する接合基を有するのがよい。また、化合物、例えば有機物、特に直鎖、分岐鎖及び／又は環を有する有機物は、その他端の全部又は一部が、親分散媒基であるのがよい。親分散媒基を有することにより、本発明の発光性微粒子又はその集合体を、所望の分散媒に分散させることができる。
【００３８】
本発明に分散媒を用いる場合、該分散媒は極性溶媒であるのがよく、特に水及び水溶液；並びに有機溶媒からなる極性溶媒群から選ばれるのがよい。したがって、親分散媒基は、極性基であるのがよい。
親分散媒基は、用いる分散媒に依存する。例えば分散媒が水又は水溶液である場合、親分散媒基として極性基であるのがよく、例えばカルボン酸基、スルホン酸基、水酸基、リン酸基、エステル基、アミド基、エーテル基、及びそれらの塩などを挙げることができる。
また、例えば分散媒がアルコールなどの有機極性溶媒である場合、親分散媒基として、エステル基などを挙げることができる。
【００３９】
接合基は、第１の粒子表面に依存するが、該粒子表面に、物理吸着、化学吸着、化学結合などのいずれかにより接合しうる基であるのがよい。接合基は、第１の粒子表面に依存するが、例えばＰ又はＰ＝Ｏを有する基、Ｓを有する基、もしくはＮを有する基を挙げることができるが、これらに限定されない。例えば第１の粒子表面がＺｎＳである場合、接合基としてチオール基（−ＳＨ）などを挙げることができる。
【００４０】
好ましい態様として、化合物は、ＨｚＸ（（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ）ｙで表される化合物であるのがよい。ここで、ＸはＳ、Ｎ、Ｐ又はＯ＝Ｐであり；ｎ≧６であり；ｙ及びｚは、Ｘの価数を満たすために選択される数である。
他の好ましい態様として、化合物は、以下の一般式Ｉ又はＩＩで表される化合物であるのがよい。
【００４１】
【化１】
2004161928.tif 000002
【００４２】
一般式Ｉ又はＩＩ中、Ｘ、Ｘ’及びＸ”は同じであっても異なってもよくＳ、Ｎ、Ｐ又はＯ＝Ｐであり；Ｘ、Ｘ’及びＸ”は価数を満たすための他の置換基を含んでもよく；Ｘ、Ｘ’及びＸ”とを結ぶ原子群は第１の粒子の表面との接合の際、５員環〜８員環を形成するように選択され；Ｙは極性基、例えば親水性基であり；Ｚは少なくとも６個の原子を有する主鎖を有する基である。
【００４３】
Ｘ、Ｘ’及びＸ”に含まれる置換基はとして、例えば、アミン類、チオール類、ホスフィン、及びホスフィンオキサイド類など、並びにこれらを水素又は水酸基又は他の有機化合物によって置換されたものなどを挙げることができる。
Ｘ、Ｘ’及びＸ”とを結ぶ原子群は、典型的には炭素であるが、他の元素、例えば酸素、窒素、ケイ素及びイオウなどを有してしても、これらのみからなってもよい。
【００４４】
Ｙは極性基、例えば親水性基であり、例えばカルボキシル基類、スルホン酸基類、ホスフェート基類、ポリエチレングリコール、及びアンモニウム塩などを挙げることができる。
Ｚは、典型的にはアルキル基又はアルケニル基であるが、他の原子、例えば酸素、ケイ素又は窒素を含んでもよい。Ｚはさらに、他の置換基を有してもよい。
【００４５】
さらに、ある態様として、化合物は、以下の一般式ＩＩＩで表されるブロック共重合体であるのがよい。ブロック共重合体は、第１の粒子と接合する機能を有する第１のブロックと、極性又は親水性を示す第２のブロックとを少なくとも含むのがよい。
【００４６】
【化２】
2004161928.tif 000003
【００４７】
一般式ＩＩＩ中、Ｘは各ブロックそれぞれで同じであっても異なってもよくＳ、Ｎ、Ｐ又はＯ＝Ｐであり；Ｘは価数を満たすための他の置換基を含んでもよく；Ｙは極性基、例えば親水性基であり；ｍは３〜２００、好ましくは３〜１００であり；ｎは３〜１００であり；Ｒ及びＲ’は有機基である。
【００４８】
具体的には、化合物は、ＨＳ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨで表されるメルカプトカルボン酸、Ｈ２Ｎ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨで表されるアミノカルボン酸、Ｐ（（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ）３で表されるホスフィノカルボン酸及びその酸化物Ｏ＝Ｐ（（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ）３であるのがよい。ここで、ｎは６以上、好ましくは８以上、より好ましくは１０〜１２であるのがよい。
【００４９】
また、化合物は、極性基又は親水基を２以上有してもよい。例えば、ジヒドロリポ酸ＨＳＣＨ２ＣＨ２ＣＨ（ＳＨ）（ＣＨ２）４ＣＯＯＨを含むＨＳＣＨ２ＣＨ２ＣＨ（ＳＨ）（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ（式中、ｎは１〜１０）を挙げることができる。さらに、カルボジイミドカップリング法による、ＨＳＣＨ２ＣＨ２ＣＨ（ＳＨ）（ＣＨ２）４ＣＯＮＨ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨを挙げることができる。また、Ｈ２ＮＣＨ２ＣＨ２ＣＨ（ＮＨ２）（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ；（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）ｎ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２ＮＨ（（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ）などのエチレンジアミンの誘導体；（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）ｎ）２ＰＣＨ２ＣＨ２Ｐ（（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ）２などのジホスフィン類；及び対応するジホスフィンオキサイド類（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）ｎ）２Ｐ（Ｏ）ＣＨ２ＣＨ２Ｐ（Ｏ）（（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ）２を挙げることができる。
【００５０】
化合物、例えば有機物、特に直鎖、分岐鎖及び／又は環を有する有機物の一部又は全部は、その他端に、発光性微粒子の幾何学的サイズ又は発光性微粒子集合体の幾何学的サイズを制御するサイズ制御基を有することもできる。サイズ制御基は、嵩高さを有する基、例えばウシ血清アルブミン（ＢＳＡ：約６．２ｎｍの大きさのタンパク質）などの有機物質を用いることができる。
【００５１】
化合物、例えば直鎖、分岐鎖及び／又は環を有する有機物の一部又は全部は、発光性微粒子の集合体が存在する環境から影響を受ける１種又は２種以上の機能性基を有することができる。該機能性基により、ある化合物のみに選択的に応答し、蛍光特性を変化させることができる。発光性微粒子の集合体がこのような作用を有することにより、環境に存在する化合物の量、量の変化、状態の変化などを、検出することができる。
【００５２】
本発明は、発光性微粒子からなる集合体を分散媒に分散してなる分散体も提供する。ここで、分散媒は、上述のように、種々の媒体を用いることができ、極性溶媒を用いるのがよく、例えば、水又は水溶液などの水系の媒体；もしくは有機溶媒系を用いることができる。水系の媒体又は有機溶媒系において、溶液には、集合体の他に種々の成分を含んでもよい。例えば、その他の成分として、集合体以外の有機化合物、酸又はアルカリ、各種の電解質などを挙げることができる。
【００５３】
本発明の分散体に含まれる発光性微粒子は、第１の粒子及び該粒子に接合する化合物のみからなるのがよい。完全な理論に基づくものではないが、この場合に励起光を受光した分散体は、第１の粒子に接合していた化合物の一部又は全部が分散媒に解離又は遊離した集合体；解離又は遊離した化合物又はそのイオン；イオン化した第１の粒子；分散媒に含まれるイオン；などを有するものと考えられる。励起光を連続照射されることによって、分散体中のこれらの成分の組成比が変化することにより、上述した蛍光特性がもたらされるものと考えられる。
なお、本発明の集合体又は分散体を後述する検査用試薬として用いる場合、所望により、上記の他の成分を適宜含めることができる。
【００５４】
本発明の発光性微粒子の集合体又は該集合体を分散する分散体は、励起光の照射時間又は照射量により蛍光強度が振動する蛍光特性を有する。
蛍光特性は、７７Ｋ以上の温度における蛍光寿命が１×１０−１２秒以上、好ましくは１×１０−１１秒以上、より好ましくは１×１０−９秒以上であるのがよい。
また、蛍光強度の振動の時定数は、１×１０−６秒以上、好ましくは１×１０−３秒以上、より好ましくは１秒以上であるのがよい。
【００５５】
蛍光特性は、集合体又は分散体の周囲環境の生物物理化学的変化によって変動するのがよい。周囲環境の生物物理化学的変化は、生体物質濃度、化学物質濃度、ｐＨ、温度、圧力、電場、磁場、誘電率、及び粘度からなる群から選ばれる１種又は２種以上の変化であるのがよい。このような特性を用いることにより、本発明の集合体又は分散体は、その蛍光特性の変動によって周囲環境に生物物理化学的変化が生じていることを検知する検査用試薬として用いることができる。
【００５６】
なお、検査用試薬として用いる場合、検査対象は、種々の液状物質を挙げることができる。例えば検査対象としてヒト及びヒト以外の動物の生体液を挙げることができ、本発明の分散体はこれらの診断試薬、バイオセンサー、化学センサーなどに用いることができる他、各種液状物質を対象とする検査試薬などに用いることができる。
検査用試薬として用いる場合、本発明の集合体は、分散体又は溶液として用いるのがよい。分散体又は溶液中の本発明の集合体は、その量が１×１０−６重量％以上、好ましくは１×１０−３重量％以上、より好ましくは１×１０−２重量％以上であるのがよい。
【００５７】
なお、本発明の集合体又は分散体の蛍光特性、例えば蛍光スペクトル、吸収スペクトル、蛍光強度の振動、蛍光寿命などは、従来より公知の測定方法により、測定することができる。
【００５８】
本発明の集合体又は分散体は、次の方法により調製することができる。即ち、本発明の集合体の調製方法は、ａ）発光性微粒子の調製工程；及びｂ）発光性微粒子の集合体の調製工程；を有する。なお、本発明の集合体をある溶媒中で調製した場合、所望の溶媒を用いることにより、上記ｂ）により、所望の分散媒を用いた分散体を得ることもできる。
【００５９】
ａ）発光性微粒子の調製工程は、従来より公知の方法により得ることができる。なお、発光性微粒子が第１の粒子及び該第１の粒子に接合する化合物を有してなる場合、上記ａ）工程は、ａ−１）第１の粒子の調製工程；ａ−２）第１の粒子とは別途、化合物を準備する工程；及びａ−３）化合物を第１の粒子に接合する工程を有してなる。
【００６０】
ｂ）発光性微粒子の集合体の調製工程は、上記で得られた発光性微粒子を１×１０−６重量％以上、好ましくは１×１０−３重量％以上、より好ましくは１×１０−２重量％以上含むように分散体を調製する。なお、分散媒として、所望により、水又は水溶液；もしくは有機溶媒；を用いることができる。
得られた発光性微粒子の分散体を、温度−１０〜１００℃、圧力１〜１００００ｋＰａ、２×１０−４〜５０００時間、静置する、好ましくは暗所で静置することにより、上述した形態を有する集合体が得られる。
【００６１】
【実施例】
以下、実施例を用いて本発明を具体的に説明するが、本発明は実施例によって限定されるものではない。
【００６２】
（実施例１）
発光性微粒子として親水性ＣｄＳｅ／ＺｎＳコアシェル型ナノ粒子を用いた。親水性ＣｄＳｅ／ＺｎＳコアシェル型ナノ粒子は、１）ＣｄＳｅコアナノ粒子の合成、２）ＺｎＳシェル成長、３）トリオクチルホスフィンオキサイド（ＴＯＰＯ）から１１−メルカプトウンデカン酸（ＭＵＡ）への表面修飾剤交換、４）精製、５）乾燥、の手順で合成した（Ｊ．Ｅ．Ｂ．  Ｋａｔａｒｉ，  Ｖ．Ｌ．Ｃｏｌｖｉｎ，  ａｎｄ  Ａ．Ｐ．  Ａ１ｉｖｉｓａｔｏｓ，  Ｊ．  Ｐｈｙｓ．  Ｃｈｅｍ．，  １９９４，  ９８，  ４１０９；  Ｘ．  Ｐｅｎｇ，  Ｊ．  Ｗｉｃｋｈａｍ，  ａｎｄ  Ａ．Ｐ．  Ａ１ｉｖｉｓａｔｏｓ，  Ｊ．  Ａｍ．  Ｃｈｅｍ．  Ｓｏｃ．，  １９９８，  １２０，  ５３４３；  Ｐ．Ｏ．  Ｄａｂｂｏｕｓｉ，  Ｊ．  Ｒｏｄｒｉｇｕｅｚ−Ｖｉｅｊｏ，  Ｆ．Ｖ．Ｍｉｋｕｌｅｃ，  Ｊ．Ｒ．  Ｈｅｉｎｅ，  Ｈ．  Ｍａｌｌｏｕｓｉ，  Ｒ．  Ｏｂｅｒ，  Ｋ．Ｆ．  Ｊｅｎｓｅｎ，  ａｎｄＭ．Ｇ．  Ｂａｗｅｎｄｉ，  Ｊ．  Ｐｈｙｓ．  Ｃｈｅｍ．  Ｂ，  １９９７，  １０１，  ９４６３；  Ｈ．  Ｍａｔｔｏｕｓｉ，  Ｊ．Ｍ．  Ｍａｕｒｏ，  Ｅ．Ｒ．  Ｇｏ１ｄｍａｎ，  Ｇ．Ｐ．  Ａｎｄｅｒｓｏｎ，  Ｖ．Ｃ．  Ｓｕｎｄａｒ，  Ｆ．Ｖ．Ｍｉｋｕｌｅｃ，  ａｎｄ  Ｍ．Ｇ．  Ｂａｗｅｎｄｉ，  Ｊ．  Ａｍ．  Ｃｈｅｍ．  Ｓｏｃ．，  ２０００，  １２２，  １２１４２（なお、これらの文献の内容はすべて参考として本明細書に含まれる））。その結果として、親水性である平均粒径４．２ｎｍのＭＵＡ被覆ＣｄＳｅ／ＺｎＳコアシェル型ナノ粒子（以下「ＭＵＡ−ｃａｐｐｅｄナノ粒子」と称する）を得た。なお、図１に、ＭＵＡ−ｃａｐｐｅｄナノ粒子の模式図を示す。
【００６３】
該ＭＵＡ−ｃａｐｐｅｄナノ粒子を純水に再分散させ、赤色透明なＭＵＡ−ｃａｐｐｅｄナノ粒子水分散液を調製した。調製直後の分散液は、目視によっても動的光散乱（ＬＥＺＡ−６００Ｓ、大塚電子製）による粒径分布測定においても、凝集体の形成は確認されなかった。図２は、調製直後の分散液の吸収および蛍光スペクトルを示す。図２からわかるように、調製直後の分散液の吸収および蛍光スペクトルのピーク波長は、それぞれ５３０ｎｍと５５８ｎｍであった。
【００６４】
前述のように調製した粒子濃度１０ｗｔ％のＭＵＡ−ｃａｐｐｅｄナノ粒子水分散液を、温度２５℃で暗所にて１ヶ月間保存することによって、ナノ粒子同士を緩やかに凝集させた。その結果、動的光散乱測定による平均粒径約１００ｎｍのＭＵＡ−ｃａｐｐｅｄナノ粒子凝集体を含む水分散液（以下「ストック液」と称する）を得た。該ストック液を２０分間超音波分散器にかけ、純水で粒子濃度０．３ｗｔ％になるように希釈した。希釈後のストック液においても動的光散乱測定及び抽出レプリカ法ＴＥＭ観察によって平均粒径約１００ｎｍの凝集体の存在が確認された。図３に抽出レプリカ法によるＴＥＭ像を示す。該希釈ストック液のｐＨは８．０±０．２であった。蛍光スペクトルおよび蛍光強度時間変化測定は、蛍光分光光度計（ＦＰ−６５００、日本分光製）を用いた。
【００６５】
該希釈ストック液２ｃｍ３をポリスチレン製ディスポーザブルセルに分取し、蛍光光度計内の水冷式温度制御セルホルダーにセットした。励起波長は４４２ｎｍに固定し、その際の励起光強度は１．２×１０−５Ｗ／ｃｍ２であった。励起光照射断面積は、１２ｍｍ２、照射体積は１２６ｍｍ３（全液量の体積の６．３％）であった。ストック液の蛍光ピーク波長は５６７ｎｍであり、調製直後のＭＵＡ−ｃａｐｐｅｄナノ粒子水分散液のピーク波長から９ｎｍレッドシフトしていた。セル温度を２８℃、２９℃、３０℃、３１℃としたときの蛍光強度時問変化測定結果を図４に示す。２９℃および３０℃の際に異なる波形の蛍光強度振動が見られた。
【００６６】
（実施例２〜３）
実施例１と全く同様に調製した希釈ストック液に、ＮａＯＨを添加することによって、ｐＨ値がそれぞれ８、９、１０の異なる３つのサンプル；ｐＨ８：Ｍｐ８ｓ０，ｐＨ９：Ｍｐ９ｓ０，ｐＨ１０：Ｍｐ１０ｓ０を調製した。なお、粒子濃度はすべて０．３ｗｔ％であった。動的光散乱法による凝集体の平均粒径は全サンプルに於いて約１００ｎｍであった（表１参照のこと）。
【００６７】
また、塩濃度依存性を調べるため、ＮａＯＨの代わりにＮａＣｌを添加することによって、塩濃度の異なる３つのサンプル：ＮａＣｌ濃度０ｍＭ：Ｍｐ８ｓ０，ＮａＣｌ濃度１ｍＭ：Ｍｐ８ｓ１，ＮａＣｌ濃度１０ｍＭ：Ｍｐ８ｓ１０を調製した。なお、粒子濃度は全て０．３ｗｔ％であり、ｐＨは全て８であった。動的光散乱法による凝集体の平均粒径はそれぞれ、約１００ｎｍ、約２６０ｎｍ、沈殿のため測定不能、であった（表１参照のこと）。
【００６８】
該希釈ストック液２ｍｌをポリスチレン製ディスポーザブルセルに分取し、蛍光光度計内の水冷式温度制御セルホルダーにセットした。励起波長は４４２ｎｍに固定し、その際の励起光強度は１．２×１０−５Ｗ／ｃｍ２であった。励起光照射断面積は１２ｍｍ２、照射体積は１２６ｍｍ３（全液体積の６．３％）であった。セル温度を３０℃に固定したときの蛍光強度時間変化測定結果を図５に示す。図５から、ｐＨ値が大きいほど蛍光強度増加率が大きく、振動波形もｐＨによって異なることがわかる。また、図６から、塩濃度が高いほど蛍光強皮増加率が大きく、振動波形も塩濃度によって異なることがわかる。さらに、図７にそれぞれのｐＨ値の場合の振動波形のアトラクタを示す。ｐＨ値によってアトラクタに顕著な差違が認められ、フラクタル次元やリアプノフ指数などの指標を用いてそれぞれの振動波形を定量化可能であることが明示された。尚、実験に使用したサンプルの詳細を表１に示す。
【００６９】
【表１】
2004161928.tif 000004
【００７０】
（実施例４）
実施例１と全く同様に合成したＭＵＡ−ｃａｐｐｅｄナノ粒子に、凝集体中に於けるナノ粒子の平均粒子間距離を拡大する目的で、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ、和光純薬工業製）を以下の手順で接合した。ＢＳＡは、約６．２ｎｍの大きさのタンパク質である（Ｊｒ．  Ｔ．  Ｐｅｔｅｒ，  ｉｎ  Ａｌｌ  ａｂｏｕｔ  Ａｌｂｕｍｉｎ．  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  ａｎｄ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，  Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，  ＣＡ：  Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，  １９９６）。該ＭＵＡ−ｃａｐｐｅｄナノ粒子を純水に再分散させ、赤色透明なＭＵＡ−ｃａｐｐｅｄナノ粒子水分散液を調製した。調製直後のＭＵＡ−ｃａｐｐｅｄナノ粒子水分散液は、目視によっても動的光散乱による粒径分布測定においても、凝集体の形成が確認されなかった。
【００７１】
該ＭＵＡ−ｃａｐｐｅｄナノ粒子水分散液２０μｌ（粒子濃度０．１４ｗｔ％）、ＢＳＡ（２ｍｇ）、及び１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロビル）−カルボジイミドヒドロクロライド（ＥＤＣ）（１０ｍｇ）を２−（Ｎ−モルフォリノ）エタンスルホン酸（ＭＥＳバッファ、ｐＨ４．８）６８０μｌ中で２時間振とう混和し、ＭＵＡとＢＳＡとの間にペプチド結合を形成させた（Ｈ．  Ｍａｔｔｏｕｓｉ，  Ｊ．Ｍ．  Ｍａｕｒｏ，  Ｅ．Ｒ．  Ｇｏｌｄｍａｎ，  Ｇ．Ｐ．  Ａｎｄｅｒｓｏｎ，  Ｖ．Ｃ．  Ｓｕｎｄａｒ，  Ｆ，Ｖ．  Ｍｉｋｕｌｅｃ，  ａｎｄ  Ｍ．Ｇ．  Ｂａｗｅｎｄｉ，Ｊ．  Ａｍ．  Ｃｈｅｍ．  Ｓｏｃ．，  ２０００，  １２２，  １２１４２）。その後、低分子量物質は遠心濾過（Ｍｉｃｒｏｃｏｎ  ＹＭ−１００，  Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ製）によって除去し、ＢＳＡ結合ＣｄＳｅ／ＺｎＳコアシェル型ナノ粒子（以下「ＢＳＡ−ｃｏｕｐｌｅｄナノ粒子」と称する）の濃縮分散液を得た。その後、該ＢＳＡ−ｃｏｕｐｌｅｄナノ粒子濃縮分散液を初期体積と同等となる２０μｌまで希釈した。なお、図８に、ＢＳＡ−ｃｏｕｐｌｅｄナノ粒子の模式図を示す。
【００７２】
調製直後のＢＳＡ−ｃｏｕｐｌｅｄナノ粒子水分散液は、目視によっても動的光散乱による粒径分布測定においても、凝集体の形成は碓認されなかった。図９に、ＢＳＡ−ｃｏｕｐｌｅｄナノ粒子水分散液の吸収および蛍光スペクトルを示す。図９によると、各スペクトルの形状並びにピーク波長はともに、ＭＵＡ−ｃａｐｐｅｄナノ粒子水分散液の場合と同じであった。即ち、ＢＳＡの結合による光学スペクトル変化は無いことがわかった。
【００７３】
調製したＢＳＡ−ｃｏｕｐｌｅｄナノ粒子水分散液を二分し、一方を温度４℃、他方を温度２５℃で暗所にて２ケ月間保存した。その結果、温度２５℃で保存したストック液ＢＳＡ−Ａは、動的光散乱測定及び抽出レプリカ法ＴＥＭ観察で平均粒径約１００ｎｍのＢＳＡ−ｃｏｕｐｌｅｄナノ粒子凝集体を含んでいることが確認された。なお、図１０には、抽出レプリカ法によるＴＥＭ像を示す。一方、温度４℃で保存したストック液ＢＳＡ−Ｄは、２ヶ月後もナノ粒子を良く分散しており、動的光散乱測定で凝集体の存在は確認されなかった。
ＢＳＡ−Ａの場合、抽出レプリカ法によるＴＥＭ写真から測定した凝集体内における平均粒子中心間距離は２４ｎｍであり、ＭＵＡ−ｃａｐｐｅｄナノ粒子（実施例１）の場合と比べて凝集体内での平均粒子中心間距離が拡大していることが確認された。
【００７４】
該ストック液２ｃｍ３をポリスチレン製ディスポーザブルセルに分取し、蛍光光度計内の水冷式温度制御セルホルダーにセットした。励起波長は４４２ｎｍに固定し、その際の励起光強度は１．２×１０−５Ｗ／ｃｍ２であった。励起光照射断面積は１２ｍｍ２、照射体積は１２６ｍｍ３（全液体積の６．３％）であった。ＢＳＡ−Ｄ及びＢＳＡ−Ａの蛍光ピーク波長はそれぞれ、５５８ｎｍ及び５６３ｎｍであり、調製直後のＢＳＡ−ｃｏｕｐｌｅｄナノ粒子水分散液のピーク波長からそれぞれ０ｎｍ及び５ｎｍレッドシフトしていた。セル温度を３０℃に固定したときの蛍光強度時間変化測定結果を図１１に示す。図１１から、凝集体内での平均粒子中心間距離が小さいほど蛍光強度増加率及び振動振幅が大きいことがわかる。なお、ＢＳＡ−Ｄの場合、平均粒子間距離は無限大とみなせ、その場合、蛍光強度増加率及び振動振幅は共にほぼ０であった。実験に使用したサンプルの詳細を以下の表２に示す。
【００７５】
【表２】
2004161928.tif 000005
【００７６】
【発明の効果】
本発明により、励起光の照射時間又は照射量により蛍光強度が振動する蛍光特性を有する発光性微粒子又はその集合体を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】実施例１〜３のＭＵＡ−ｃａｐｐｅｄナノ粒子の模式図である。
【図２】実施例１のＭＵＡ−ｃａｐｐｅｄナノ粒子の吸収スペクトル（実線）及び発光スペクトル（破線）である。
【図３】抽出レプリカ法による実施例１のＭＵＡ−ｃａｐｐｅｄナノ粒子凝集体のＴＥＭ像である。
【図４】実施例１のＭＵＡ−ｃａｐｐｅｄナノ粒子分散液の蛍光強度時問変化測定結果であって、セル温度を（ａ）２８℃、（ｂ）２９℃、（ｃ）３０℃、（ｄ）３１℃と変化させたときの測定結果である。
【図５】実施例２のＭＵＡ−ｃａｐｐｅｄナノ粒子分散液の蛍光強度時問変化測定結果であって、ｐＨ値を８、９、１０と変化させたときの測定結果である。
【図６】実施例３のＭＵＡ−ｃａｐｐｅｄナノ粒子分散液の蛍光強度時問変化測定結果であって、ＮａＣｌ濃度を０ｍＭ、１ｍＭ、１０ｍＭと変化させたときの測定結果である。
【図７】実施例２のｐＨ値を８、９、１０と変化させたときの振動波形のアトラクタを示す図である。
【図８】実施例４のＢＳＡ−ｃｏｕｐｌｅｄナノ粒子の模式図である。
【図９】実施例４のＢＳＡ−ｃｏｕｐｌｅｄナノ粒子の吸収スペクトル（実線）及び発光スペクトル（破線）である。
【図１０】抽出レプリカ法による実施例４のＢＳＡ−ｃｏｕｐｌｅｄナノ粒子凝集体のＴＥＭ像である。
【図１１】実施例４のＭＵＡ−ｃａｐｐｅｄナノ粒子分散液ＢＳＡ−Ａ及びＢＳＡ−Ｄの蛍光強度時問変化測定結果を実施例２で得た分散液Ｍｐ８ｓ０と比較した図である。
【符号の説明】
１  ＣｄＳｅコア、２  ＺｎＳシェル、３  ＭＵＡ分子、４  ＢＳＡ分子。
【図１】
2004161928.tif 000006
【図２】
2004161928.tif 000007
【図３】
2004161928.tif 000008
【図４】
2004161928.tif 000009
【図５】
2004161928.tif 000010
【図６】
2004161928.tif 000011
【図７】
2004161928.tif 000012
【図８】
2004161928.tif 000013
【図９】
2004161928.tif 000014
【図１０】
2004161928.tif 000015
【図１１】
2004161928.tif 000016