(57)【要約】【課題】核酸を含有する試料から、高収率で安定的な核酸回収方法を実現する。【解決手段】シリカ含有の固相を核酸捕捉用担体として内蔵する核酸捕捉用チップを用いた核酸回収方法において、核酸を含有する混合溶液と核酸捕捉用担体とを接触させる際の気泡発生を防ぐために、消泡作用を持つ溶液で核酸捕捉用担体を湿潤、または核酸捕捉用担体の空気相を置換する。【選択図】  図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
核酸を捕捉できる固相を内蔵するチップを用いた核酸回収方法であって、前記固相と消泡液を接触させ、核酸を含む溶液をチップ内に吸引し、消泡液により湿潤した前記固相と該溶液とを接触させる核酸回収方法。
【請求項２】
請求項１記載の核酸回収方法であって、前記消泡液が、脂肪族アルコール、脂肪族エーテル、脂肪族エステル、又は脂肪族ケトンの化合物を含む核酸回収方法。
【請求項３】
請求項１記載の核酸回収方法であって、前記消泡液が、エタノール水溶液、又はジエチレングリコールジメチルエーテル水溶液を含む核酸回収方法。
【請求項４】
核酸を捕捉できる固相を内蔵するチップを用いた核酸回収方法であって、チップ先端に保持された消泡液と、核酸を含む溶液とを接触させ、前記消泡液と前記溶液をチップ内に吸引し、前記固相に前記溶液を接触させる核酸回収方法。
【請求項５】
請求項４記載の核酸回収方法であって、前記消泡液が、脂肪族アルコール、脂肪族エーテル、脂肪族エステル、又は脂肪族ケトンを含む核酸回収方法。
【請求項６】
請求項５記載の核酸回収方法であって、前記消泡液が、エタノール水溶液、又はジエチレングリコールジメチルエーテル水溶液を含む核酸回収方法。
【請求項７】
核酸を捕捉できる固相を内蔵するチップを用いた核酸回収方法であって、消泡液と核酸を含む溶液をチップ内に吸引し、該溶液と前記固相を接触させる核酸回収方法。
【請求項８】
請求項７記載の核酸回収方法であって、前記消泡液が、脂肪族アルコール、脂肪族エーテル、脂肪族エステル、又は脂肪族ケトンを含む核酸回収方法。
【請求項９】
請求項７記載の核酸回収方法であって、前記消泡液が、エタノール水溶液、又はジエチレングリコールジメチルエーテル水溶液を含む核酸回収方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は核酸を含有する試料からの核酸回収方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
従来技術における核酸を含有する生物試料から核酸を回収する方法として、特開平１１−１２７８５４号公報（特許文献１）では、カオトロピック物質の存在下でガラス表面に核酸が結合する性質を応用し、シリカ含有の固相を核酸捕捉用担体として内蔵する核酸捕捉用チップ用いた核酸抽出方法が報告されている。これは、核酸の核酸捕捉用担体への結合工程、捕捉物に含まれる不純物の洗浄工程、および核酸の核酸捕捉用担体からの溶離工程、の各工程が、各溶液が吸排される１つの核酸捕捉用チップにより行われ、自動化に適した核酸抽出方法である。
【０００３】
【特許文献１】
特開平１１−１２７８５４号公報（要約）
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
しかし、上記特開平１１−１２７８５４号公報で報告される方法では、核酸捕捉用チップによる各液体の吸排において、各溶液が核酸捕捉用担体と接触、通過する際、核酸捕捉用担体内部に空気相を巻き込み、気泡が捕捉用担体内部に残存することがある。このことは、液体と核酸捕捉用担体の接触可能な表面積を減少させ、また、液体吸排における通液抵抗の増大をもたらす。
【０００５】
特に、核酸を含む混合液と核酸捕捉用担体を接触させる核酸結合工程において、この状態が生じると、核酸回収効率の低下、また、核酸回収に要する時間の遅延が引き起こされる。
【０００６】
本発明の目的は、核酸回収の効率と安定性を高めることである。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
本発明は、核酸を捕捉できる核酸捕捉固相及び／又は核酸を含有する核酸含有溶液を、消泡作用を持つ消泡液により処理する工程を含む核酸回収方法である。
【０００８】
例えば、消泡液により核酸捕捉固相を湿潤する工程又は、核酸捕捉固相の空気層を消泡液により置換する工程を含む。これにより、核酸捕捉用固相を、消泡作用を持つ消泡液により湿潤させた状態で使用でき、核酸捕捉固相と核酸含有溶液が接触する際の気泡発生を効率的に低減できる。
【０００９】
また、例えば、消泡液を添加した核酸含有溶液を、核酸捕捉固相を内蔵する核酸捕捉用チップ内に吸引する工程を含む。これにより、核酸含有溶液をチップ内に吸引する際の気泡発生を効率的に低減できる。
【００１０】
また、好ましくは、核酸捕捉用チップは、固相を滅菌し、乾燥した状態で保管し、使用前に消泡液により処理する。これにより、核酸捕捉用固相を消泡液により湿潤し、又は核酸捕捉用固相の空気層を消泡液により置換した状態で核酸捕捉用チップを保管する場合と比較し、無菌状態の維持が容易となり、核酸捕捉用チップの製造工程も簡略となる。
【００１１】
以下、上記及びその他の本発明の新規な特徴と効果について、図面を参酌して説明する。
【００１２】
【発明の実施の形態】
本発明の１つの実施形態によれば、核酸と結合促進剤を含む混合液を核酸捕捉用チップで吸引し、核酸捕捉用担体とを接触させる際に生じる気泡発生を防ぐための上記核酸捕捉用担体の前処理工程を設けるものである。
【００１３】
本発明の核酸捕捉用担体の前処理工程を設けた核酸回収方法は、図１の核酸回収工程のフローチャートで示すように、遊離状態の核酸溶液に対して核酸の核酸捕捉用担体への結合を促進する物質を混合する第１工程、混合液と核酸捕捉用担体が接触する際の気泡発生を抑制するための核酸捕捉用担体を消泡液で湿潤させる第２工程、混合液と核酸捕捉用担体とを接触させる第３工程、核酸捕捉用担体と液体とを分離する第４工程、核酸が結合した核酸捕捉用担体から非特異的結合物を洗浄、除去する第５工程、核酸を核酸捕捉用担体から溶離する第６工程により構成される。
【００１４】
ただし、図２の核酸回収工程のフローチャートにおいては、気泡発生を抑制するために核酸捕捉用担体を消泡液で湿潤させる工程を第１工程として、遊離状態の核酸溶液に対して、核酸の核酸捕捉用担体への結合を促進する物質を混合する工程を第２工程とすることも出来る。また、この第１工程、第２工程は同時並行に実施することも出来る。
【００１５】
また、図３の核酸回収工程のフローチャートで示すように、遊離状態の核酸溶液に対して核酸の核酸捕捉用担体への結合を促進する物質を混合する第１工程、混合液と核酸捕捉用担体が接触する際の気泡発生を抑制するために核酸捕捉用担体の空気相を消泡液で置換する第２工程、混合液と核酸捕捉用担体とを接触させる第３工程、核酸捕捉用担体と液体とを分離する第４工程、核酸が結合した核酸捕捉用担体から非特異的結合物を洗浄、除去する第５工程、核酸を核酸捕捉用担体から溶離する第６工程により構成される。
【００１６】
ただし、図４の核酸回収工程のフローチャートに示すように、気泡発生を抑制するために核酸捕捉用担体の空気相を消泡液で置換する工程を第１工程として、遊離状態の核酸溶液に対して、核酸の核酸捕捉用担体への結合を促進する物質を混合する工程を第２工程とすることも出来る。また、この第１工程、第２工程は同時並行に実施することも出来る。
【００１７】
また、図７の核酸回収工程のフローチャートで示すように、遊離状態の核酸溶液に対して、核酸の核酸捕捉用担体への結合を促進する物質を混合す第１工程、混合液と核酸捕捉用担体が接触する際の気泡発生を抑制するために、混合液に消泡溶液を添加し均一に混合する第２工程、混合液と核酸捕捉用担体とを接触させる第３工程、核酸捕捉用担体と液体を分離する第４工程、核酸が結合した核酸捕捉用担体から非特異的結合物を洗浄、除去する第５工程、核酸を核酸結合用担体から溶離する第６工程により構成される。
【００１８】
遊離状態の核酸溶液としては、全血、血清、喀痰、尿等の生体試料や培養細胞、培養細菌等の生物学的な試料に対して、乳鉢、超音波、マイクロウエーブ等による物理的な方法、或いは、界面活性剤、変性剤等による化学的な方法或いは、タンパク質分解酵素などによる生化学的な方法及び、それらを組み合わせた方法により、試料に含まれる核酸を遊離する処理を行った物質または、ＰＣＲの反応産物や素精製状態の核酸を含む物質等を対象とすることができる。
【００１９】
なお、ここでの核酸とは、２本鎖、１本鎖、あるいは部分的に２本鎖もしくは１本鎖構造を有するデオキシリボ核酸、及びリボ核酸を含む。
【００２０】
核酸のシリカ含有固相への結合を促進する物質としては、ＮａＩ（ヨウ化ナトリウム）、ＫＩ（ヨウ化カリウム）、ＮａＣｌＯ４（過塩素酸ナトリウム）、ＮａＳＣＮ（チオシアン酸ナトリウム）、ＧｕＳＣＮ（チオシアン酸グアニジン）、ＧｕＨＣｌ（塩酸グアニジン）などのカオトロピック剤の使用が好適である。本発明においては、特異的に核酸を固相へ結合させるために、例えばＧｕＨＣｌを使用する場合には、最終濃度を、４ｍｏｌ／ｌ以上とするのが望ましい。
【００２１】
核酸捕捉用チップに核酸捕捉用担体として内蔵されるシリカ含有固相としては、ガラス粒子、シリカ粒子、石英濾紙、石英ウールあるいはそれらの破砕物、ケイソウ土など、酸化ケイ素を含有する物質であれば使用することができるが、チップ外へ固相が出ないようにするために、チップ先端部の内径を小さくし、且つ、固相をチップ先端部内径よりも大きな外径を持たせるか、チップ内の先端部付近に、固相の外径より孔径の小さい保持材を設置するなどにより、チップ内に試料を吸入したときに試料が固相に大きな接触面積で接触されるように固相がチップ内に保持される。
【００２２】
核酸捕捉用チップは、図５に示すように、頭部１が可動ノズル（図示しない）の先端に気密に装着される内径を有しており、下方が先端部に向けて徐々に内径が細くなるように形成される。チップは例えば、透明もしくは半透明な合成樹脂からなる。チップの先端４側には、固相が流出することを防止するための円板状の阻止部材８を挿入し、頭部の側にも円板状の阻止部材２を設ける。これらの阻止部材は、液体及び気体が容易に通過し得る多数の孔を有するが、その孔は固相の流出を阻止できる大きさである
この核酸捕捉用チップ頭部にピペッター、シリンジ、ポンプ等を直接、或いは間接的に気密状態で装着し、溶液を吸引、排出することで溶液と核酸捕捉用担体３とを接触させる。図６にシリンジ５を用いた核酸捕捉用チップによる溶液の吸引と排出の機構を示した。
【００２３】
混合液と核酸捕捉用担体が接触する際の気泡発生を抑制するために核酸捕捉用担体を消泡液７により湿潤させる工程は、核酸捕捉用チップで消泡液を吸引した後、排出することで行う。または、核酸捕捉チップ上部より消泡液を供給し、排出することで行う。
【００２４】
混合液と核酸捕捉用担体が接触する際の気泡発生を抑制するために核酸捕捉用担体の空気相を消泡液で置換する工程は、核酸捕捉用チップ６で、核酸捕捉用担体を含むチップ先端部全体の空気相と等容量以上の消泡液を吸引し、核酸捕捉用担体を含むチップ先端部全体が消泡液で満たされた状態を維持することで行う。
【００２５】
消泡液としては、脂肪族アルコール、脂肪族エーテル、脂肪族エステル、脂肪族ケトンなどから選ばれた２から１０個の炭素数を有する化合物の１種または２種以上の組み合わせが使用可能である。
【００２６】
脂肪族アルコールとして、好ましくは、エタノール、イソプロパノール、プロパノール、ブタノールが使用される。
【００２７】
脂肪族エーテルとして、好ましくは、エチレングリコールジメチルエーテル、エチレングリコールジエチルエーテル、プロピオングリコールジメチルエーテル、プロピオングリコールジエチルエーテル、ジエチレングリコールジメチルエーテル、ジエチレングリコールジエチルエーテル、テトラヒドロフラン及び１．４−ジオキサンが使用される。
【００２８】
脂肪族エステルとして、好ましくは、プロピレングリコールモノメチルエーテルアセテート、乳酸エチルが使用される。
【００２９】
脂肪族ケトンとして、好ましくは、アセトン、ヒドロキシアセトン、メチルケトンが使用される。
【００３０】
脂肪族アルコール、脂肪族エーテル、脂肪族エステル、脂肪族ケトンは、適切な濃度で使用することで核酸と核酸捕捉用担体との結合を阻害しない。
【００３１】
また、消泡液として、洗浄工程において洗浄溶液として用いる溶液を使用することもできる。
【００３２】
混合液と核酸捕捉用担体とを接触させる工程は、核酸捕捉用チップ先端部を混合溶液に浸した状態から、混合液を核酸捕捉用チップにより複数回、吸引、排出することで行う。ただし、核酸捕捉用担体の前処理として核酸捕捉用担体の空気相を消泡液に置換する工程を行った場合、核酸捕捉用チップの先端部が消泡液に満たされ、空気相を含まない状態で、混合液と核酸捕捉用担体とを接触させる工程を行う。好適には、核酸捕捉用チップ先端部を混合液に浸した状態で消泡液を排出し、チップ先端に残存する空気相を完全に排出してから、混合液と核酸捕捉用担体とを接触させる工程を行う。
【００３３】
また、混合液の吸引、排出時に核酸捕捉用担体内部に空気相を巻き込まないために、混合液を吸引する際は、混合液の下方の液面が核酸捕捉用担体の内部へ到達しないようにする。また、混合液を排出する際は、混合液の上方の液面が核酸捕捉用担体の内部へ到達しないようにする。
【００３４】
核酸捕捉用担体と液体を分離する工程は、核酸捕捉用チップに残存する混合液を排出することで行う。
【００３５】
核酸が結合した核酸捕捉用担体を洗浄する工程は、洗浄溶液を核酸捕捉用チップにより複数回、吸引、排出することで行う。核酸捕捉用担体の洗浄のために使用する液体は、核酸捕捉用担体に結合した核酸を溶離させないことが重要である。洗浄工程を効率的に行うには少なくとも７５％濃度のエタノール使用が好ましい。また、特開平１１−１２７８５４号公報（特許文献１）では、５０％濃度のエタノールに終濃度で２５ｍＭになるようにｐＨ５．０に調整した酢酸カリウムを添加した場合でも良好な結果が得られることが報告されている。
【００３６】
核酸を核酸捕捉用担体から溶離する工程は、溶離溶液を核酸捕捉用チップにより複数回、吸引、排出することで行う。これにより、核酸は核酸捕捉用担体から水相へと移行する。吸引、排出後、核酸捕捉用チップに残存する溶離溶液を完全に排出し、回収することで精製状態の核酸水溶液が得られる。
【００３７】
（実施例１）
８０％エタノール水溶液を消泡液として、図１の核酸回収工程のフローチャートに従った核酸回収方法。
【００３８】
遊離状態の核酸溶液として、市販精製品のλＤＮＡを３０μｇ／ｍｌとなるようにＴＥ緩衝液（ｐＨ８．０）により希釈した溶液を用いる。
【００３９】
第１工程は、核酸溶液に対して、核酸の核酸捕捉用担体への結合を促進する物質を混合する工程であり、１．５ｍｌ容量の反応容器内で、核酸水溶液１００μｌに対して６ＭＧｕＨＣｌ溶液９００μｌを添加し、ボルテクスミキサーにより攪拌した。
【００４０】
核酸捕捉用チップは核酸捕捉用担体部の内径が３ｍｍとなるようにポリプロピレンで成形した。核酸捕捉用担体としてシリカウール（東芝ケミカル  Ｂグレード）５ｍｇを３ｍｍ幅となるようにチップ先端部に充填し、ポリプロピレンにより成形した阻止部材で上下を挟んだ。これを、１ｍｌ用ピペッターに装着し、溶液の吸引と排出を行う。
【００４１】
第２工程は、核酸捕捉用チップにより消泡液を吸引後、排出し、核酸捕捉用チップに内蔵された核酸捕捉用担体を消泡液により湿潤させる工程であり、消泡液として８０％エタノール水溶液を用いた。核酸捕捉用チップにより８０％エタノール水溶液５０μｌを吸引後、排出し、核酸捕捉用担体を８０％エタノール水溶液により湿潤させた状態とした。
【００４２】
第３工程は、混合液と核酸捕捉用担体とを接触させる工程であり、核酸捕捉用チップにより、混合液を複数回の吸引と排出を繰り返すことで行った。混合液を吸引、排出する際に、核酸捕捉用担体内部に空気相を巻き込まないために、混合液を吸引する時は、混合液の下方の液面が核酸捕捉用担体の内部へ到達しないようにした。また、混合液を排出する際は、混合液の上方の液面が核酸捕捉用担体の内部へ到達しないようにした。
【００４３】
第４工程は、核酸が結合した核酸捕捉用担体と混合液を分離する工程であり、第３工程において複数回の吸引と排出を繰り返した後、混合液を排出、廃棄することで行った。
【００４４】
第５工程は、核酸が結合した核酸捕捉用担体を洗浄する工程であり、洗浄溶液として８０％エタノール水溶液５００μｌを核酸捕捉用チップにより複数回の吸引と排出を繰り返すことで行った。
【００４５】
第６工程は、核酸が結合した核酸捕捉用担体から核酸を溶離する工程であり、溶離液としてＴＥ緩衝液（ｐＨ  ８．０）１００μｌを核酸捕捉用チップにより複数回の吸引と排出を繰り返すことで行った。
【００４６】
溶離溶液の核酸含有量を分光光度計により定量し、第１工程での核酸量に基づき、核酸回収率を算出した。
【００４７】
実施例１の結果を表１に示す。
【００４８】
【表１】
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【００４９】
実施例１の結果は、第２工程の核酸捕捉用担体前処理を省いた場合と比較して、核酸回収率が向上し、第３工程に要する時間が短縮された。また、第２工程において消泡液として用いるエタノール水溶液５０μｌを混合溶液へ添加して核酸捕捉用担体前処理を省いた場合では、第２工程の核酸捕捉用担体前処理を省いた場合と同等の核酸回収結果であった。このことから、核酸捕捉用担体前処理は、より少量の消泡液で効果を持つことが示された。
【００５０】
（実施例２）
８０％エタノール水溶液を消泡液として、図３の核酸回収工程のフローチャートに従った核酸回収方法。
【００５１】
第２工程と第３工程以外は、実施例１と同様に行った。第２工程は、核酸捕捉用チップにより消泡液を吸引後、排出し、核酸捕捉用担体の空気相を消泡液で置換する工程であり、消泡液として、８０％エタノール水溶液を用いた。核酸捕捉用チップにより８０％エタノール水溶液５０μｌを吸引し、核酸捕捉用チップに内蔵された核酸捕捉用担体と、核酸捕捉用担体下部の核酸捕捉用チップ先端部全体の空気相を８０％エタノール水溶液に置換した状態とする。
【００５２】
第３工程は、混合液と核酸捕捉用担体とを接触させる工程であり、先ず、核酸捕捉用チップ先端部を混合溶液に浸した状態で１０μｌの８０％エタノール水溶液を排出し、チップ先端に残存する空気相を完全に排除してから混合液を吸引し、複数回、吸引と排出を繰り返すことで行った。混合液を吸引、排出する際に、核酸捕捉用担体内部に空気相を巻き込まないために、混合液を吸引する時は、混合液の下方の液面が核酸捕捉用担体の内部へ到達しないようにした。また、混合液を排出する際は、混合液の上方の液面が核酸捕捉用担体の内部へ到達しないようにした。
【００５３】
実施例２の結果を表２に示す。
【００５４】
【表２】
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【００５５】
実施例２の結果は、実施例１の結果と比較した場合、核酸回収率が向上し、第３工程に要する時間が短縮された。これは、核酸捕捉用担体の空気相を消泡液で置換する方法は、核酸捕捉用担体を消泡液で湿潤させる方法と比較し、より効果的に気泡発生を抑制し、また、エタノール容量の増加により、通液抵抗が軽減されたためである。
【００５６】
また、第２工程の核酸捕捉用担体前処理を省いた場合と比較して、核酸回収率が向上し、第３工程に要する時間が短縮された。このことから、実施例２における核酸捕捉用担体前処理は、より少量の消泡液で効果を持つことが示された。
【００５７】
（実施例３）
この実施例は、８０％ジエチレングリコールジメチルエーテル水溶液を消泡液として、図１の核酸回収工程のフローチャートＡに従った核酸回収方法である。
【００５８】
第２工程において用いる消泡液として、８０％ジエチレングリコールジメチルエーテル水溶液を用いた。それ以外は、実施例１と同様に行った。
【００５９】
実施例３の結果を表３に示す。
【００６０】
【表３】
2004321130.tif 000005
【００６１】
実施例３の結果を、実施例１の結果と比較した場合、核酸回収率はほぼ同等であったが、第３工程に要する時間が短縮された。これは、ジエチレングリコールジメチルエーテルの粘性係数がエタノールの粘性係数よりも小さく、混合溶液の粘性が低下し、通液抵抗が軽減されたためである。
【００６２】
また、第２工程において消泡液として用いるジエチレングリコールジメチルエーテル５０μｌを混合溶液へ添加して核酸捕捉用担体前処理を省いた場合は、第２工程の核酸捕捉用担体前処理を省いた場合と同等の核酸回収結果であった。このことから、実施例３における核酸捕捉用担体前処理は、より少量の消泡液で効果を持つことが示された。
【００６３】
（実施例４）
エタノールを消泡液として図７の核酸回収工程のフローチャートに従った核酸回収方法。第２工程以外は実施例１と同様に行った。
【００６４】
遊離状態の核酸溶液として、市販精製品のλＤＮＡを３０μｇ／ｍｌとなるようにＴＥ緩衝液（ｐＨ８．０）により希釈した溶液を用いる。
【００６５】
第１工程は、核酸溶液に対して、核酸の核酸捕捉用担体への結合を促進する物質を混合する工程であり、１．５ｍｌ容量の反応容器内で、上記核酸水溶液１００μｌに対して６ＭＧｕＨＣｌ溶液９００μｌを添加し、ボルテクスミキサーにより攪拌した。
【００６６】
核酸捕捉用チップは核酸捕捉用担体部の内径が３ｍｍとなるようにポリプロピレンで成形した。核酸捕捉用担体としてシリカウール（東芝ケミカル製Ｂグレード）５ｍｇを３ｍｍ幅となるようにチップ先端部に充填し、ポリプロピレンにより成形した阻止部材で上下を挟んだ。これを、１ｍｌ用ピペッターに装着し、溶液の吸引と排出を行う。
【００６７】
第２工程は、混合溶液に消泡液を添加する工程であり、消泡液としてエタノール３００μｌを添加して、ボルテクスミキサーにより攪拌した。
【００６８】
実施例４の結果を表４に示す。
【００６９】
【表４】
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【００７０】
実施例４の結果は、消泡液を添加する第２工程を省いた場合と比較して、核酸回収率が向上した。第３工程に要する時間については第２工程を省いた場合と同等であった。これは、消泡液を添加することにより溶液量は増加するが、通液抵抗が軽減されためと考えられる。
【００７１】
（実施例５）
ジエチレングリコールジメチルエーテルを消泡液として、図７の核酸回収工程のフローチャートに従った核酸回収方法。第２工程以外は全て（実施例４）と同じである。
【００７２】
第２工程は、混合溶液に消泡液を添加する工程であり、消泡液としてジエチレングリコールジメチルエーテル３００μｌを添加して、ボルテクスミキサーにより攪拌した。
【００７３】
実施例５の結果を表５に示す。
【００７４】
【表５】
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【００７５】
実施例５の結果は、消泡液を添加する第２工程を省いた場合と比較して、核酸回収率が向上した。第３工程に要する時間については第２工程を省いた場合と同等であった。これは、消泡液を添加することにより溶液量は増加するが、通液抵抗が軽減されためと考えられる。
【００７６】
【発明の効果】
本発明によれば、核酸捕捉用固相と核酸含有溶液が接触する際の気泡発生を低減できる。
【００７７】
【図面の簡単な説明】
【図１】核酸捕捉用担体を湿潤する核酸回収方法。
【図２】核酸捕捉用担体を湿潤する核酸回収方法の変形例。
【図３】核酸捕捉用担体の空気層を置換する核酸回収方法。
【図４】核酸捕捉用担体の空気層を置換する核酸回収方法の変形例。
【図５】核酸捕捉用チップの構造を示す線図。
【図６】シリンジを用いた核酸捕捉用チップによる溶液の吸排機構を示す線図。
【図７】実施例５，６の核酸回収工程のフローチャート。
【符号の説明】
１…チップ頭部、２、８…阻止部材、３…核酸捕捉用担体、４…チップ先端部、５…シリンジ、６…核酸捕捉用チップ、７…混合溶液。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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