(57)【要約】【課題】本発明は、ＦＫＢＰ１２と結合する新規な化合物を提供すること。【解決手段】下記式【化３８】2004123556.tif 000040［式中、Ｘ及びＹはそれぞれ水素原子又はフッ素原子であり、Ｒ１はフェニル基、Ｃ１−５アルコキシ基の１〜３個で置換されたフェニル基、Ｃ４−９シクロアルキルカルボニル基又は式【化３９】2004123556.tif 000041（式中、Ｒ３はＣ１−８アルキル基、Ｃ３−８シクロアルキル基、Ｃ３−８シクロアルケニル基、フェニル基等であり、Ｒ４は水素原子若しくはＣ１−５アルキル基であるか、又はＲ３及びＲ４は隣接する炭素原子と一緒になってＣ３−８シクロアルキル基等であり、Ｒ５は水素原子、水酸基、Ｃ１−５アルコキシ基、Ｃ２−５アルカノイル基又はＣ１−５アルキルスルホニルオキシ基である。）で表される基であり、Ｒ２はフェニル基等であり、ｎは０〜３の整数である。］で表されるオキサジアゾール誘導体又はその医薬上許容される塩。【選択図】　なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式
【化１】
2004123556.tif 000038
［式中、Ｘ及びＹはそれぞれ水素原子又はフッ素原子であり、Ｒ１はフェニル基、Ｃ１−５アルコキシ基の１〜３個で置換されたフェニル基、Ｃ４−９シクロアルキルカルボニル基又は式
【化２】
2004123556.tif 000039
（式中、Ｒ３はＣ１−８アルキル基、Ｃ３−８シクロアルキル基、Ｃ３−８シクロアルケニル基、フェニル基、Ｃ１−５アルコキシ基の１〜３個で置換されたフェニル基、チエニル基又はノルボルナニル基であり、Ｒ４は水素原子若しくはＣ１−５アルキル基であるか、又はＲ３及びＲ４は隣接する炭素原子と一緒になってＣ３−８シクロアルキル基、「Ｃ１−５アルキル基、トリフルオロメチル基、Ｃ１−５アルコキシ基、オキソ基及びエチレンアセタール基」から選ばれる基の１〜４個で置換されたＣ３−８シクロアルキル基、Ｃ３−８シクロアルケニル基、ノルボルナニル基、ピペリジニル基、Ｎ−Ｃ２−５アルカノイルピペリジニル基、テトラヒドロピラニル基若しくはインダニル基を形成する基であり、Ｒ５は水素原子、水酸基、Ｃ１−５アルコキシ基、Ｃ２−５アルカノイル基又はＣ１−５アルキルスルホニルオキシ基である。）で表される基であり、Ｒ２はフェニル基、Ｃ１−５アルキル基の１〜３個で置換されたフェニル基、Ｃ３−８シクロアルキル基又はピリジル基であり、ｎは０〜３の整数である。］で表されるオキサジアゾール誘導体又はその医薬上許容される塩。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、ＦＫＢＰ１２と結合することにより各種医薬として有用な新規オキサジアゾール誘導体に関する。
【０００２】
【従来の技術】
近年、免疫抑制剤のＦＫ５０６（タクロリムス）がＰＣ１２細胞等で強力な神経突起伸長作用を有すること、及びＦＫ５０６やシクロスポリンＡ等の結合タンパク質であるイムノフィリン類が免疫系よりも神経系に多く発現することなどから、イムノフィリンリガンドの神経栄養因子としての作用が注目されている。
ＦＫ５０６結合タンパク質（以下ＦＫＢＰと略す）では、分子量１２ｋＤａのＦＫＢＰ１２が非常に高濃度に細胞質に偏在する主要なＦＫＢＰである。ＦＫ５０６は二つのドメイン（エフェクタードメインとＦＫＢＰ結合ドメイン）を有し、ＦＫＢＰ結合ドメインを介してＦＫＢＰ１２に結合した後、それぞれ異なる機構により免疫抑制作用と神経栄養活性を示す。免疫細胞では、ＦＫ５０６−ＦＫＢＰ１２複合体はエフェクタードメインを介してカルシニューリンに結合し免疫抑制作用を発現する。一方、神経細胞系ではＦＫ５０６はＦＫＢＰ１２に結合するがカルシニューリンを介することなく神経栄養活性を発現する。事実、ＦＫＢＰ結合ドメインよりデザインされた低分子のＦＫＢＰ１２リガンドは、カルシニューリンを阻害することなく神経栄養活性を示す。従って、このような低分子ＦＫＢＰ１２リガンドは、カルシニューリン阻害による免疫抑制を介する副作用を示すことのない各種神経変性疾患治療剤として有用である。
【０００３】
ＦＫＢＰ結合ドメインよりデザインされたＦＫＢＰ１２リガンドが、ＷＯ９２１９５９３、ＷＯ９６４０６３３、ＷＯ９９４５００６、ＷＯ９９６２５１１等に開示されているが、いずれも本発明の化合物と化学構造が異なる。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、ＦＫＢＰ１２と結合する新規な化合物を提供することを目的とする。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは前記課題を達成するために鋭意研究を進めた結果、ある種のオキサジアゾール誘導体がＦＫＢＰ１２と結合することを見い出し、本発明を完成した。すなわち、本発明の化合物は、下記式（１）
【０００６】
【化３】
2004123556.tif 000002
【０００７】
［式中、Ｘ及びＹはそれぞれ水素原子又はフッ素原子であり、Ｒ１はフェニル基、Ｃ１−５アルコキシ基の１〜３個で置換されたフェニル基、Ｃ４−９シクロアルキルカルボニル基又は式
【０００８】
【化４】
2004123556.tif 000003
【０００９】
（式中、Ｒ３はＣ１−８アルキル基、Ｃ３−８シクロアルキル基、Ｃ３−８シクロアルケニル基、フェニル基、Ｃ１−５アルコキシ基の１〜３個で置換されたフェニル基、チエニル基又はノルボルナニル基であり、Ｒ４は水素原子若しくはＣ１−５アルキル基であるか、又はＲ３及びＲ４は隣接する炭素原子と一緒になってＣ３−８シクロアルキル基、「Ｃ１−５アルキル基、トリフルオロメチル基、Ｃ１−５アルコキシ基、オキソ基及びエチレンアセタール基」から選ばれる基の１〜４個で置換されたＣ３−８シクロアルキル基、Ｃ３−８シクロアルケニル基、ノルボルナニル基、ピペリジニル基、Ｎ−Ｃ２−５アルカノイルピペリジニル基、テトラヒドロピラニル基若しくはインダニル基を形成する基であり、Ｒ５は水素原子、水酸基、Ｃ１−５アルコキシ基、Ｃ２−５アルカノイル基又はＣ１−５アルキルスルホニルオキシ基である。）で表される基であり、Ｒ２はフェニル基、Ｃ１−５アルキル基の１〜３個で置換されたフェニル基、Ｃ３−８シクロアルキル基又はピリジル基であり、ｎは０〜３の整数である。］で表されるオキサジアゾール誘導体又はその医薬上許容される塩である。
【００１０】
【発明の実施の形態】
本発明において、Ｃｘ−ｙとは炭素原子数をｘ〜ｙ個有することを意味する。
従って、Ｃ１−５アルキル基とは炭素原子数１〜５の直鎖状、分岐鎖状又は環状のアルキル基を含むアルキル基を意味し、例えば、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｔ−ブチル基、シクロプロピルメチル基、ペンチル基、イソペンチル基、シクロブチルメチル基、１，１−ジメチルプロピル基、１−エチルプロピル基などが挙げられる。Ｃ１−８アルキル基とは炭素原子数１〜８の直鎖状、分岐鎖状又は環状のアルキル基を含むアルキル基を意味し、例えば、前記の他ヘキシル基、イソヘキシル基、シクロペンチルメチル基、シクロヘキシルメチル基、１−エチルブチル基、ヘプチル基、オクチル基などが挙げられる。Ｃ３−８シクロアルキル基とは炭素原子数３〜８のシクロアルキル基を意味し、例えばシクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、シクロヘプチル基などが挙げられる。Ｃ３−８シクロアルケニル基とは炭素原子数３〜８のシクロアルケニル基を意味し、例えばシクロプロペニル基、シクロブテニル基、シクロペンテニル基、シクロヘキセニル基、シクロヘプテニル基などが挙げられる。Ｃ１−５アルコキシ基とは炭素原子数１〜５の直鎖状又は分岐鎖状のアルキル基を意味し、例えばメトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基、イソプロポキシ基、ブトキシ基、イソブトキシ基、ｔ−ブトキシ基、ペンチルオキシ基、イソペンチルオキシ基、１−エチルプロポキシ基などが挙げられる。
【００１１】
また、本発明において医薬上許容される塩としては、例えば硫酸、塩酸、燐酸などの鉱酸との塩、酢酸、シュウ酸、乳酸、酒石酸、フマール酸、マレイン酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸などの有機酸との塩、トリメチルアミン、メチルアミンなどのアミンとの塩、ナトリウムイオン、カリウムイオン、カルシウムイオンなどの金属イオンとの塩などが挙げられる。
本発明の化合物は単一の光学活性体であっても、あるいは立体異性体の混合物であってもよい。
【００１２】
本発明の化合物は、例えば下記に示す方法に従って製造することができる。
以下、本明細書中では、Ｂｏｃはｔ−ブトキシカルボニル基、ＷＳＣ・ＨＣｌは１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩、ＨＯＢｔは１−ヒドロキシベンゾトリアゾール、Ｔｓはｐ−トルエンスルホニル基、ＴＭＳはトリメチルシリル基、ＤＡＳＴはジエチルアミノサルファー　トリフルオライド、ＰＣＣはピリジニウム　クロロクロメートをそれぞれ表わす。
【００１３】
本発明の化合物（１）は、式１に示したようにオキサジアゾイルピロリジン誘導体（２）とジフルオロ酢酸誘導体（３）を縮合することにより合成できる。
【００１４】
【化５】
2004123556.tif 000004
【００１５】
この縮合では、ＷＳＣ・ＨＣｌなどの縮合剤を用いるか、あるいは酸クロライドを経由する方法を用いることができる。
【００１６】
また、オキサジアゾイルピロリジン誘導体（２）は、式２に示した方法により合成することができる。
【００１７】
【化６】
2004123556.tif 000005
【００１８】
すなわち、（Ｚ）−（２Ｓ）−１−ｔ−ブトキシカルボニル−２−シアノピロリジン（４）を炭酸ナトリウムなどのアルカリ存在下、ヒドロキシルアミンと反応させ、（Ｚ）−（２Ｓ）−１−ｔ−ブトキシカルボニル−２−［アミノ（ヒドロキシイミノ）メチル］ピロリジン（５）へ変換した後、対応するカルボン酸と縮合しエステル体（６）を得る。エステル体（６）を、トルエン、キシレンあるいはピリジンなどの溶媒中加熱することによりオキサジアゾールを閉環した後、脱保護することにより目的のオキサジアゾイルピロリジン誘導体（２）を得る。
【００１９】
また、ジフルオロ酢酸誘導体（３−１〜３−３２）は、式３に示すように、対応するケトンあるいはアルデヒドと亜鉛存在下ブロモジフルオロ酢酸エチルとレホマツスキー反応を行った後、エステルを加水分解することにより合成することができる。
【００２０】
【化７】
2004123556.tif 000006
【００２１】
その他のジフルオロ酢酸誘導体（３−３３〜３−４２）は式４−１〜４−９に示した方法により合成することができる。
【００２２】
【化８】
2004123556.tif 000007
【００２３】
【化９】
2004123556.tif 000008
【００２４】
【化１０】
2004123556.tif 000009
【００２５】
また、式１においてＲ１が４−ヒドロキシピペリジン−４−イル基である化合物（１−１７３）は、化合物（１−１９）を脱保護することにより得ることができる。
【００２６】
【化１１】
2004123556.tif 000010
【００２７】
また、式１においてＲ１がアセトキシ−シクロヘキシルメチル基である化合物（１−１７４）は、化合物（１−１）をアセチル化することにより得ることができる。
【００２８】
【化１２】
2004123556.tif 000011
【００２９】
以上の反応での試薬、時間、温度及び溶媒等の反応条件は、通常用いられる条件で行うことができる。
【００３０】
【実施例】
以下、実施例及び試験例を挙げて本発明を更に詳細に説明する。
参考例１
（２Ｓ）−１−ｔ−ブトキシカルボニル−２−シアノピロリジン（化合物４−１；８２．８ｇ，４２０ｍｍｏｌ）の水、メタノール（各３５０ｍｌ）の混合溶液に塩酸ヒドロキシルアミン（５８．８ｇ，８４０ｍｍｏｌ）及び炭酸ナトリウム（８９．７ｇ，８４０ｍｍｏｌ）を加え、９時間加熱還流した。反応後溶媒を減圧留去し、酢酸エチルを加え有機層を水、飽和食塩水で順次洗浄した。硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下溶媒留去し、残留物を酢酸エチルより再結晶し下記に構造を示した（Ｚ）−（２Ｓ）−１−ｔ−ブトキシカルボニル−２−［アミノ（ヒドロキシイミノ）メチル］ピロリジン（化合物５−１）の無色結晶（７８．５ｇ）を得た。
【００３１】
【化１３】
2004123556.tif 000012
【００３２】
参考例１と同様の方法により下記の化合物を合成した。
【００３３】
【化１４】
2004123556.tif 000013
【００３４】
参考例２
参考例１で得られた化合物５−１（２０ｇ，８７ｍｍｏｌ）、３−（３−ピリジル）プロピオン酸（１４．５ｇ，９６ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（３０ｍｌ，２２０ｍｍｏｌ）、４−ジメチルアミノピリジン（０．５３ｇ，４．４ｍｍｏｌ）及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾール一水和物（１４．１ｇ，１００ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２００ｍｌ）溶液に、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（２０．１ｇ，１００ｍｍｏｌ）を加え、室温下一晩攪拌した。溶媒留去後、酢酸エチルを加え、水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液及び飽和食塩水で順次洗浄した。硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下溶媒留去し、残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル）で精製し、下記に構造を示した（Ｚ）−（２Ｓ）−１−ｔ−ブトキシカルボニル−２−［アミノ［３−（３−ピリジル）プロピオニルオキシイミノ］メチル］ピロリジン（化合物６−１）の無色アモルファス（２４．２ｇ）を得た。
【００３５】
【化１５】
2004123556.tif 000014
【００３６】
参考例２と同様の方法により下記の化合物を合成した。
【００３７】
【化１６】
2004123556.tif 000015
【００３８】
化合物６−１１
【００３９】
【化１７】
2004123556.tif 000016
【００４０】
化合物６−１２
【００４１】
【化１８】
2004123556.tif 000017
【００４２】
参考例３
参考例２で得られた化合物６−１（２４．２ｇ，６７ｍｍｏｌ）のｏ−キシレン溶液を４時間加熱還流した。反応後、減圧下溶媒留去し（２Ｓ）−１−ｔ−ブトキシカルボニル−２−［５−［２−（３−ピリジル）エチル］−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル］ピロリジンの黄色油状物（２４．３ｇ）を得た。
ここで得られた化合物（２４．３ｇ）の酢酸エチル（４０ｍｌ）溶液に４Ｎ塩化水素−酢酸エチル溶液（６６ｍｌ）を加え、室温下一晩攪拌した。反応後、減圧下溶媒留去し残留物のエタノール（１００ｍｌ）溶液にトリエチルアミン（２７ｍｌ，２１０ｍｍｏｌ）を加えた。析出物をろ過しろ液を減圧下溶媒留去し、残留物をＮＨ−シリカゲル（富士シリシア化学社製）クロマトグラフィー（５０％酢酸エチル−ヘキサン）で精製し、下記に構造示した（２Ｓ）−２−［５−［２−（３−ピリジル）エチル］−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル］ピロリジン（化合物２−１）の黄色油状物（１２．５ｇ）を得た。
【００４３】
【化１９】
2004123556.tif 000018
【００４４】
参考例３と同様の方法により下記の化合物を合成した。
【００４５】
【化２０】
2004123556.tif 000019
【００４６】
化合物２−１１
【００４７】
【化２１】
2004123556.tif 000020
【００４８】
化合物２−１２
【００４９】
【化２２】
2004123556.tif 000021
【００５０】
参考例４
窒素置換下、亜鉛末（４．３４ｇ，６６ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（３０ｍｌ）溶液に１，２−ジブロモエタン及びトリメチルシリルクロライド（各数滴）を加え、３０分間加熱還流し活性化した。次いで加熱還流下、シクロヘキシルアルデヒド（６．２０ｇ，５５ｍｍｏｌ）及びブロモジフルオロ酢酸エチル（１２．４ｇ，６１ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（３０ｍｌ）溶液を２０分間で滴下し、１時間加熱還流した。反応後、酢酸エチルを加え飽和塩化アンモニウム水溶液、水及び飽和食塩水で洗浄し硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧下溶媒留去し、３−シクロヘキシル−２，２−ジフルオロ−３−ヒドロキシプロピオン酸エチルの無色油状物（１３．４ｇ）を得た。
【００５１】
ここで得られた化合物（１３．４ｇ）のメタノール（１２０ｍｌ）溶液に水酸化ナトリウム（２．３６ｇ，５７ｍｍｏｌ）の水溶液（１２ｍｌ）を加え、室温下一晩攪拌した。減圧下溶媒留去後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え酢酸エチルで洗浄した。水層に１０％塩酸を加え中和し酢酸エチルで抽出、水及び飽和食塩水で洗浄後、硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧下溶媒留去後、残留物をエーテル−ヘキサンより再結晶し、下記に構造を示した３−シクロヘキシル−２，２−ジフルオロ−３−ヒドロキシプロピオン酸（化合物３−１）の無色結晶（９．７１ｇ）を得た。
【００５２】
【化２３】
2004123556.tif 000022
【００５３】
参考例４と同様の方法により下記の化合物を合成した。
【００５４】
【化２４】
2004123556.tif 000023
【００５５】
【化２５】
2004123556.tif 000024
【００５６】
参考例５
窒素置換下、亜鉛末（２．１３ｇ，３３ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２０ｍｌ）溶液に１，２−ジブロモエタン及びトリメチルシリルクロライド（各数滴）を加え、加熱還流し活性化した。次いで加熱還流下、シクロヘキシルアルデヒド（２．８０ｇ，２５ｍｍｏｌ）及びブロモジフルオロ酢酸エチル（５．５８ｇ，２７．５ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２０ｍｌ）溶液を１０分間で滴下し、１時間加熱還流した。反応後、酢酸エチルを加え飽和塩化アンモニウム水溶液及び飽和食塩水で洗浄し硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧下溶媒留去し、３−シクロヘキシル−２，２−ジフルオロ−３−ヒドロキシプロピオン酸エチルの無色油状物（５．９ｇ）を得た。
【００５７】
ここで得られた化合物（１．８７ｇ，９．０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２５ｍｌ）溶液にピリジニウム　クロロクロメート（３．８８ｇ，１８．０ｍｍｏｌ）及びセライト（３．８８ｇ）を加え、続いて無水酢酸（６．８９ｇ，６７．５ｍｍｏｌ）を加え、室温下１時間攪拌した。反応終了後反応溶液をジエチルエーテルで希釈した後、セライトろ過を行った。減圧下溶媒留去し、残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル−ヘキサン）で精製し、３−シクロヘキシル−２，２−ジフルオロ−３−オキソプロピオン酸エチルの無色油状物（２．５１ｇ）を得た。
ここで得られた化合物（２．５１ｇ）のメタノール（９ｍｌ）溶液に１０％水酸化ナトリウム水溶液（９ｍｌ）を加え、室温下５時間攪拌した。反応溶液をヘキサンで洗浄後、水層に１Ｎ塩酸を加え中和し酢酸エチルで抽出、飽和食塩水で洗浄後、硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧下溶媒留去し、３−シクロヘキシル−２，２−ジフルオロ−３−オキソプロピオン酸（化合物３−３３）の無色油状物（１．４４ｇ）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：
１．１１−１．５６（５Ｈ，ｍ），１．６１−２．０２（５Ｈ，ｍ），２．８３−３．０３（１Ｈ，ｍ），６．５０−６．６８（１Ｈ，ｂｒ）
【００５８】
参考例６
窒素置換下、亜鉛末（２．１３ｇ，３３ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２５ｍｌ）溶液に１，２−ジブロモエタン及びトリメチルシリルクロライド（各数滴）を加え、加熱還流し活性化した。次いで加熱還流下、１−シクロヘキセン−１−カルボキシアルデヒド（２．７５ｇ，２５ｍｍｏｌ）及びブロモジフルオロ酢酸エチル（５．５８ｇ，２７．５ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２５ｍｌ）溶液を２０分間で滴下し、１時間加熱還流した。反応後、酢酸エチルを加え飽和塩化アンモニウム水溶液及び飽和食塩水で洗浄し硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧下溶媒留去し、３−（１−シクロヘキセニル）−２，２−ジフルオロ−３−ヒドロキシプロピオン酸エチルの黄色油状物（６．７４ｇ）を得た。
【００５９】
ここで得られた化合物（４．４５ｇ），トリエチルアミン（３．３６ｇ、３６．２ｍｍｏｌ）及び４−ジメチルアミノピリジン（０．４４ｇ，３．６２ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２０ｍｌ）溶液に，４−トルエンスルホニルクロライド（６．９０ｇ，３６．２ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２０ｍｌ）溶液を加え、室温下一晩攪拌した。反応後、酢酸エチルを加え飽和塩化アンモニウム水溶液及び飽和食塩水で洗浄し硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧下溶媒留去し、残留物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（５０％酢酸エチル−ヘキサン）で精製し、３−（１−シクロヘキセニル）−２，２−ジフルオロ−３−（４−トルエンスルホニロキシ）プロピオン酸エチルの黄色油状物（４．４５ｇ）を得た。
上記の操作で得られた３−（１−シクロヘキセニル）−２，２−ジフルオロ−３−（４−トルエンスルホニロキシ）プロピオン酸エチルの黄色油状物（４．４５ｇ）のエタノール（３０ｍｌ）溶液に１０％パラジウム−活性炭素（１．５ｇ，１．４１ｍｍｏｌ）を加え、水素置換下室温にて一晩攪拌した。反応溶液をセライトろ過し、減圧下溶媒留去した。残留物に酢酸エチルを加え飽和食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧下溶媒留去し３−シクロヘキシル−２，２−ジフルオロプロピオン酸エチルの黄色油状物（２．８１ｇ）を得た。
ここで得られた化合物（２．８１ｇ）のメタノール（１０ｍｌ）溶液に１０％水酸化ナトリウム水溶液（１０ｍｌ）を加え、室温下５時間攪拌した。反応溶液をヘキサンで洗浄後、水層に１Ｎ塩酸を加え中和し酢酸エチルで抽出、飽和食塩水で洗浄後、硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧下溶媒留去し、３−シクロヘキシル−２，２−ジフルオロプロピオン酸（化合物３−３４）の黄色油状物（１．８６ｇ）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：
０．８３−１．４３（５Ｈ，ｍ），１．４８−２．１８（８Ｈ，ｍ），７．１１−７．５２（１Ｈ，ｂｒ）
【００６０】
参考例７
窒素置換下、亜鉛末（２．７５ｇ，４２．０ｍｍｏｌ）のトリグリム（トリエチレングリコールジメチルエーテル）（２０ｍｌ）溶液にトリメチルシリルクロライド（各数滴）を加え活性化させた。次いでブロモジフルオロ酢酸エチル（１０．２ｇ，５０．４ｍｍｏｌ）のトリグリム（２０ｍｌ）溶液を加え、室温下３０分間攪拌した。シアン化銅（Ｉ）（３．７６ｇ，４２．０ｍｍｏｌ）を加えた後、更に室温で３０分間攪拌した。ここで３−ブロモシクロヘキセン（４．８３ｇ，３０ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（４０ｍｌ）溶液を加え、室温下一晩攪拌した。反応後、ジエチルエーテルを加え飽和塩化アンモニウム水溶液で洗浄後、多量の飽和食塩水で更に洗浄し硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧下溶媒留去し、残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（５０％酢酸エチル−ヘキサン）で精製し、（２−シクロヘキセニル）ジフルオロ酢酸エチルの無色油状物（４．２８ｇ）を得た。
ここで得られた化合物（４．２８ｇ）のメタノール（２０ｍｌ）溶液に１０％水酸化ナトリウム水溶液（２０ｍｌ）を加え、室温下一晩攪拌した。反応溶液をヘキサンで洗浄後、水層に１Ｎ塩酸を加え中和し酢酸エチルで抽出、飽和食塩水で洗浄後、硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧下溶媒留去し、（２−シクロヘキセニル）ジフルオロ酢酸（化合物３−３５）の橙色油状物（３．４９ｇ）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：
１．４３−１．９６（４Ｈ，ｍ），１．９６−２．１６（２Ｈ，ｍ），２．８０−３．１０（１Ｈ，ｍ），５．６５（１Ｈ，ｄｍ，Ｊ＝１１．３Ｈｚ），５．９２−６．０６（１Ｈ，ｍ），８．１７−８．４８（１Ｈ，ｂｒ）
【００６１】
参考例８
参考例７で得られた（２−シクロヘキセニル）ジフルオロ酢酸（２．００ｇ，１１．４ｍｍｏｌ）のエタノール溶液（２０ｍｌ）に１０％パラジウム−活性炭素（１．０ｇ，０．９４ｍｍｏｌ）を加え、水素置換下室温にて一晩攪拌した。反応溶液をセライトろ過後、減圧下溶媒留去し（シクロヘキシル）ジフルオロ酢酸（化合物３−３６）の橙色油状物（１．３８ｇ）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：
１．０９−１．６３（５Ｈ，ｍ），１．６３−２．２９（６Ｈ，ｍ），７．０７−７．５３（１Ｈ，ｂｒ）
【００６２】
参考例９
４−メチル−２−オキソ吉草酸（２．６０ｇ，２０．０ｍｍｏｌ）及びエタノール（４．６１ｇ，１００ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド（６０ｍｌ）溶液に１−ヒドロキシベンゾトリアゾール一水和物（２．９７ｇ，２２．０ｍｍｏｌ）及び４−ジメチルアミノピリジン（０．２４ｇ，２．０ｍｍｏｌ）を加えた。氷冷下１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（４．２２ｇ，２２．０ｍｍｏｌ）を加え、室温下一晩攪拌した。反応後、ジエチルエーテルを加え１Ｎ塩酸及び飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄後、硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧下溶媒留去し、残留物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（５０％酢酸エチル−ヘキサン）で精製し、４−メチル−２−オキソ吉草酸エチルの無色油状物（２．９４ｇ）を得た。
窒素置換下、上記操作で得られた化合物（２．５５ｇ，１６．１ｍｍｏｌ）にジエチルサルファートリフルオライド（２．３４ｍｌ，１７．８ｍｍｏｌ）を加え、６０℃で４時間次いで室温下一晩攪拌した。反応物を氷水に注ぎ、ジクロロメタンを加え抽出後飽和食塩水で更に洗浄し硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧下溶媒留去し、残留物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン）で精製し、４−メチル−２，２−ジフルオロ吉草酸エチルの黄色油状物（２．３８ｇ）を得た。
ここで得られた化合物（２．３８ｇ）のメタノール（１３ｍｌ）溶液に１０％水酸化ナトリウム水溶液（１３ｍｌ）を加え、室温下一晩攪拌した。反応溶液をヘキサンで洗浄後、水層に１Ｎ塩酸を加え中和し酢酸エチルで抽出、飽和食塩水で洗浄後、硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧下溶媒留去し、４−メチル−２，２−ジフルオロ吉草酸（化合物３−３７）の黄色油状物（２．０４ｇ）を得た。
１Ｈ−ＭＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：
１．０１（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ），１．８６−２．１３（３Ｈ，ｍ），７．５５−７．９３（１Ｈ，ｂｒ）
【００６３】
参考例１０
窒素置換下、亜鉛末（６．３８ｇ，９７．５ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（５０ｍｌ）溶液に１，２−ジブロモエタン及びトリメチルシリルクロライド（各数滴）を加え、加熱還流し活性化した。次いで加熱還流下、１，４−シクロヘキサンジオン　モノエチレンケタール（１１．７ｇ，７５．０ｍｍｏｌ）及びブロモジフルオロ酢酸エチル（１６．８ｇ，８２．５ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（５０ｍｌ）溶液を２０分間で滴下し、１時間加熱還流した。反応後、酢酸エチルを加え飽和塩化アンモニウム水溶液及び飽和食塩水で洗浄し硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧下溶媒留去し、ジフルオロ（８−ヒドロキシ−１，４−ジオサ−スピロ［４．５］デシ−８−イル）酢酸エチルの黄色油状物（２４．１ｇ）を得た。
上記操作で得られた化合物のテトラヒドロフラン（１０ｍｌ）溶液に１Ｎ塩酸（４０ｍｌ）を加え、室温下一晩攪拌した。酢酸エチルを加え飽和食塩水で洗浄し硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧下溶媒留去し、ジフルオロ（１−ヒドロキシ−４−オキソシクロヘキシル）酢酸エチルの黄色油状物（２．１７ｇ）を得た。
ここで得られた化合物（２．１７ｇ）のメタノール（１０ｍｌ）溶液に１０％水酸化ナトリウム水溶液（１０ｍｌ）を加え、室温下５分間攪拌した。反応溶液をヘキサンで洗浄後、水層に１Ｎ塩酸を加え中和し酢酸エチルで抽出、飽和食塩水で洗浄後、硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧下溶媒留去し、残留物をエーテル−ヘキサンより再結晶し、ジフルオロ（１−ヒドロキシ−４−オキソシクロヘキシル）酢酸（化合物３−３８）の無色結晶（０．８２ｇ）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：
１．２５（１Ｈ，ｂｒｓ），１．７４−２．２５（８Ｈ，ｍ）
【００６４】
参考例１１
窒素置換下、銅末（１．９１ｇ，３０．０ｍｍｏｌ）及び５−ヨード−１，２，３−トリメトキシベンゼン（２．９４ｇ，１０．０ｍｍｏｌ）のジメチルスルホキシド（１５ｍｌ）溶液を５５℃、１５分間加熱し、次いでブロモジフルオロ酢酸エチル（２．０３ｇ，１０．０ｍｍｏｌ）のジメチルスルホキシド（１５ｍｌ）溶液を加え、同温度下１２時間攪拌した。反応後、酢酸エチルを加え飽和塩化アンモニウム水溶液及び飽和食塩水で洗浄し硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧下溶媒留去し、ジフルオロ（３，４，５−トリメトキシフェニル）酢酸エチルの茶色油状物（３．５７ｇ）を得た。
【００６５】
ここで得られた化合物（３．５７ｇ）のメタノール（１０ｍｌ）溶液に１０％水酸化ナトリウム水溶液（１０ｍｌ）を加え、室温下３時間攪拌した。反応溶液をヘキサンで洗浄後、水層に１Ｎ塩酸を加え中和しクロロホルムで抽出、飽和食塩水で洗浄後、硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧下溶媒留去し、残留物をエーテル−ヘキサンより再結晶し、ジフルオロ（３，４，５−トリメトキシフェニル）酢酸（化合物３−３９）の黄色結晶（１．２１ｇ）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：
３．０４−３．７６（１Ｈ，ｂｒ），３．８８（３Ｈ，ｓ），３．９０（６Ｈ，ｓ），６．８５（２Ｈ，ｓ）
【００６６】
参考例１２
窒素置換下、亜鉛末（１．７０ｇ，２６．０ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２０ｍｌ）溶液に１，２−ジブロモエタン及びトリメチルシリルクロライド（各数滴）を加え、加熱還流し活性化した。次いで加熱還流下、シクロヘキサンカルボキシアルデヒド（２．２４ｇ，２０．０ｍｍｏｌ）及びブロモジフルオロ酢酸エチル（４．４５ｇ，２２．０ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２０ｍｌ）溶液を滴下し、１時間加熱還流した。反応後、酢酸エチルを加え飽和塩化アンモニウム水溶液及び飽和食塩水で洗浄し硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧下溶媒留去し、３−シクロヘキシル−２，２−ジフルオロ−３−ヒドロキシプロピオン酸エチルの黄色油状物（４．８６ｇ）を得た。
【００６７】
６０％油性水素化ナトリウム（０．９９ｇ，２３．６ｍｍｏｌ）をヘキサン（２０ｍｌ）で洗浄後、ジメチルホルムアミド（８ｍｌ）を加え、得られた化合物（２．７９ｇ）のジメチルホルムアミド（１７ｍｌ）溶液を滴下した。氷冷下よう化メチル（５．０３ｇ，３５．４ｍｍｏｌ）を加え、室温下１時間攪拌した。反応後、飽和塩化アンモニウム水溶液に反応溶液を注ぎ酢酸エチルを加えて抽出した。次いで飽和食塩水で洗浄し硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧下溶媒留去し、３−シクロヘキシル−２，２−ジフルオロ−３−メトキシプロピオン酸エチルの黄色油状物（３．０１ｇ）を得た。
【００６８】
ここで得られた化合物（３．０１ｇ）のメタノール（１２ｍｌ）溶液に１０％水酸化ナトリウム水溶液（１２ｍｌ）を加え、室温下一晩攪拌した。反応溶液をヘキサンで洗浄後、水層に１Ｎ塩酸を加え中和しクロロホルムで抽出、飽和食塩水で洗浄後、硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧下溶媒留去し、３−シクロヘキシル−２，２−ジフルオロ−３−メトキシプロピオン酸（化合物３−４０）の無色油状物質（２．４６ｇ）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：
１．０２−１．４３（５Ｈ，ｍ），１．５９−２．０３（６Ｈ，ｍ），３．３５−３．５５（１Ｈ，ｍ），３．５６（３Ｈ，ｓ），８．４１−８．７３（１Ｈ，ｂｒ）
【００６９】
参考例１３
窒素置換下、亜鉛末（２．１３ｇ，３２．５ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２０ｍｌ）溶液に１，２−ジブロモエタン及びトリメチルシリルクロライド（各数滴）を加え、加熱還流し活性化した。次いで加熱還流下、シクロヘキサンカルボキシアルデヒド（２．８０ｇ，２５．０ｍｍｏｌ）及びブロモジフルオロ酢酸エチル（５．５８ｇ，２７．５ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２０ｍｌ）溶液を滴下し、１時間加熱還流した。反応後、酢酸エチルを加え飽和塩化アンモニウム水溶液及び飽和食塩水で洗浄し硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧下溶媒留去し、３−シクロヘキシル−２，２−ジフルオロ−３−ヒドロキシプロピオン酸エチルの黄色油状物（５．９０ｇ）を得た。
【００７０】
ここで得られた化合物（１．４５ｇ），トリエチルアミン（１．４１ｇ，１３．９ｍｍｏｌ）及び４−ジメチルアミノピリジン（０．０８５ｇ，０．７０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１０ｍｌ）溶液に，メタンスルホニルクロライド（１．５９ｇ，１３．９ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１０ｍｌ）溶液を滴下し、室温下一晩攪拌した。反応後、酢酸エチルを加え飽和塩化アンモニウム水溶液及び飽和食塩水で洗浄し硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧下溶媒留去し、３−シクロヘキシル−２，２−ジフルオロ−３−メタンスルホニロキシプロピオン酸エチルの橙色油状物（１．９０ｇ）を得た。
【００７１】
ここで得られた化合物（０．３１ｇ）のメタノール（３ｍｌ）溶液に１０％水酸化ナトリウム水溶液（３ｍｌ）を加え、室温下一晩攪拌した。反応溶液をヘキサンで洗浄後、水層に１Ｎ塩酸を加え中和し酢酸エチルで抽出、飽和食塩水で洗浄後、硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧下溶媒留去し、３−シクロヘキシル−２，２−ジフルオロ−３−メタンスルホニロキシプロピオン酸（化合物３−４１）の無色油状物（０．２３ｇ）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：
１．０３−１．４１（５Ｈ，ｍ），１．５８−２．０１（６Ｈ，ｍ），３．１４（３Ｈ，ｓ），４．８１−５．００（１Ｈ，ｍ），６．２９−６．５７（１Ｈ，ｂｒ）
【００７２】
参考例１３と同様の方法により３−シクロヘキシル−２，２−ジフルオロ−３−イソプロパンスルホニロキシプロピオン酸（化合物３−４２）を合成した。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：
１．０１−２．０８（１１Ｈ，ｍ），１．４８（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ），３．２６−３．５１（１Ｈ，ｍ），４．９０（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝４．７，１２．４Ｈｚ），６．７９−７．０８（１Ｈ，ｂｒ）
【００７３】
実施例１
参考例３で得られた（２Ｓ）−２−［５−［２−（３−ピリジル）エチル］−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル］ピロリジン（１０．０ｇ，４１ｍｍｏｌ）、参考例４で得られた３−シクロヘキシル−２，２−ジフルオロ−３−ヒドロキシプロピオン酸（８．５２ｇ，４１ｍｍｏｌ）及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾール一水和物（６．６４ｇ，４９ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１００ｍｌ）溶液に、氷冷下１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（９．４４ｇ，４９ｍｍｏｌ）を加え、同温度下２時間攪拌した。反応後溶媒留去し酢酸エチルを加え水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液及び飽和食塩水で順次洗浄後、硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧下溶媒留去し、残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（８５％酢酸エチル−ヘキサン）で精製し、下記に構造を示した（２Ｓ）−１−（３−シクロヘキシル−２，２−ジフルオロ−３−ヒドロキシプロピオニル）−２−［５−［２−（３−ピリジル）エチル］−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル］ピロリジンの無色油状物（１３．２ｇ）を得た。
【００７４】
【化２６】
2004123556.tif 000025
【００７５】
実施例１と同様の方法により下記の化合物を合成した。
【００７６】
【化２７】
2004123556.tif 000026
【００７７】
【化２８】
2004123556.tif 000027
【００７８】
【化２９】
2004123556.tif 000028
【００７９】
【化３０】
2004123556.tif 000029
【００８０】
【化３１】
2004123556.tif 000030
【００８１】
【化３２】
2004123556.tif 000031
【００８２】
【化３３】
2004123556.tif 000032
【００８３】
【化３４】
2004123556.tif 000033
【００８４】
【化３５】
2004123556.tif 000034
【００８５】
実施例１７３
参考例３で得られた（２Ｓ）−２−［５−［２−（３−ピリジル）エチル］−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル］ピロリジン（０．２４ｇ，１．００ｍｍｏｌ）、参考例４で得られた（１−ベンジルオキシカルボニル−４−ヒドロキシピペリジン−４−イル）ジフルオロ酢酸（０．３８ｇ，１．０５ｍｍｏｌ）及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾール一水和物（０．１９ｇ，１．４０ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド（４ｍｌ）溶液に、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（０．２７ｇ，１．４０ｍｍｏｌ）を加え、室温下一晩攪拌した。反応後飽和塩化アンモニウム水溶液及び飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄し硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧下溶媒留去し、（２Ｓ）−１−（１−ベンジルオキシカルボニル−４−ヒドロキシピペリジン−４−イル）ジフルオロアセチル−２−［５−［２−（３−ピリジル）エチル］−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル］ピロリジンの橙色油状物（０．６１ｇ）を得た。
【００８６】
ここで得られた化合物（０．６１ｇ）のジクロロメタン（２ｍｌ）溶液に、トリメチルシリルヨージド（０．６０ｇ，３．０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２ｍｌ）溶液を加え、室温下一晩攪拌した。反応後メタノールを加え、減圧下溶媒留去し、残留物をＳＣＸ樹脂（バリアン社製）で精製し、下記に構造を示した（２Ｓ）−１−（４−ヒドロキシピペリジン−４−イル）ジフルオロアセチル−２−［５−［２−（３−ピリジル）エチル］−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル］ピロリジンの無色結晶（０．２９ｇ）を得た。
【００８７】
【化３６】
2004123556.tif 000035
【００８８】
実施例１７４
実施例１で得られた化合物（０．３６ｇ）のピリジン（０．２８ｇ，３．５５ｍｍｏｌ）溶液に氷冷下無水酢酸（０．１８ｇ，１．７８ｍｍｏｌ）を加え、室温下一晩攪拌した。反応後、酢酸エチルを加え飽和塩化アンモニウム水溶液及び飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄し硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧下溶媒留去後、残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（５０％酢酸エチル−ヘキサン）で精製し、下記に構造を示した（２Ｓ）−１−（３−アセトキシ−３−シクロヘキシル−２，２−ジフルオロプロピオニル）−２−［５−［２−（３−ピリジル）エチル］−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル］ピロリジンの無色油状物（０．３０ｇ）を得た。
【００８９】
【化３７】
2004123556.tif 000036
【００９０】
試験例「ＦＫＢＰ１２のロータマーゼ活性に対する阻害試験」
（酵素源）
ＦＫ−ＢＩＮＤＩＮＧ　ＰＲＯＴＥＩＮ（Ｈｕｍａｎ，Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ　Ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ　ｉｎ　Ｅ．ｃｏｌｉ）、ＳＩＧＭＡ社、Ｆ−５３９８をＦＫＢＰ−１２として使用した。
（反応基質）
Ｓｕｃ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−ｐＮＡ（ＢＡＣＨＥＭ社、Ｌ−１６０５）を　　０．５Ｍ　ＬｉＣｌ／トリフルオロエタノール溶液として用いた。本ペプチドはこの溶液中でシス型とトランス型の平衡状態をとる。
（試験方法）
ＨＥＰＥＳ緩衝液（ｐＨ７．８、１ｍｌ、氷温）に４４ｎＭ　ＦＫＢＰ−１２と０．４ｍｇ／ｍｌ　α−キモトリプシン、もしくは０．４ｍｇ／ｍｌ　α−キモトリプシンのみを添加した後、２４ｍＭ　Ｓｕｃ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−ｐＮＡ溶液を２μｌ添加して反応を開始させる。その後速やかに反応液を分光光度計のセル内へ移し、反応液の吸光度（３９０ｎｍ）の経時変化を測定した。
【００９１】
測定された吸光度の増加速度は、トランス型のＳｕｃ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−ｐＮＡからα−キモトリプシンによって遊離するｐ−ｎｉｔｒｏａｎｉｌｉｎｅの増加速度を示し、本系のようにα−キモトリプシン活性が十分高い条件ではトランス型のＳｕｃ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−ｐＮＡの生成速度、すなわちこのペプチドの異性化速度に比例する。この異性化は自発的に起こるため、ＦＫＢＰ１２を添加した場合の吸光度増加速度からＦＫＢＰ１２を添加しない場合の吸光度増加速度を引いた値をＦＫＢＰ１２が有するロータマーゼ活性（異性化促進活性）として評価した。
本活性に対する検体の作用を調べるためには、１μｌのＤＭＳＯ溶液として反応液中に添加（ＤＭＳＯの最終濃度は０．１％）して評価を行った。
その結果を表に示す。
【００９２】
【表１】
2004123556.tif 000037
【００９３】
【発明の効果】
本発明の化合物は、ＦＫＢＰ１２と結合することにより神経栄養活性を発現することから、臨床上有用である。