(57)【要約】【課題】腸管内からサルモネラを効果的に排除するための動物のサルモネラ感染症予防・治療剤を提供する。【解決手段】木を乾留して得られた粗木酢液から有害物質を除去した木酢精製液と、木を乾留して発生した残留炭素を粉砕して篩過した軟質炭素粉末とを、含有してなる添加粉剤を、家畜飼料に配合して成る動物のサルモネラ感染症予防・治療剤により課題を解決した。【選択図】        図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
木を乾留して得られた粗木酢液から有害物質を分離して精製した木酢精製液と、木を乾留して発生した残留炭素を粉砕して篩過した軟質炭素粉末とを、含有してなる添加粉剤を、家畜飼料に配合して成ることを特徴とする動物のサルモネラ感染症予防・治療剤。
【請求項２】
木は、広葉樹の樹皮を含む木片であることを特徴とする請求項１に記載の動物のサルモネラ感染症予防・治療剤。
【請求項３】
広葉樹は、カシ、タブ、サクラ、カエデ、シイ、クス、イス、ナラ、キハダ、ヤマモモ、カシワ、ケヤキ、クワ、キリ、ミズキ、ソヤのいずれか一種を含有することを特徴とする請求項２に記載の動物のサルモネラ感染症予防・治療剤。
【請求項４】
前記木酢精製液と前記軟質炭素粉末の含有重量比は、１：４であることを特徴とする請求項１〜３のいずれか１つの項に記載の動物のサルモネラ感染症予防・治療剤。
【請求項５】
前記添加粉剤を、前記家畜飼料に対し、１重量％〜３重量％配合して成ることを特徴とする請求項１〜４のいずれか１つの項に記載の動物のサルモネラ感染症予防・治療剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本願発明は、腸管内からサルモネラを効果的に排除するための動物のサルモネラ感染症予防・治療剤に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
最近、サルモネラによる汚染が急増している。特に、家禽類や家畜類を扱う養鶏業や畜産業等の分野では、深刻な問題となっており、生産現場においてサルモネラ保菌率の減少につながる新たな方策が急務となっている。
【０００３】
サルモネラに汚染された動物は、例えば、腸チフス、パラチフス、サルモネラ腸炎等による下痢、敗血症などの症状が起き、これらの症状が重い場合には、死に至る。
【０００４】
サルモネラによるこれらの病気は伝染病であるため、一旦発生すると次々に感染する。例えば、家禽類や家畜類は、通常、閉鎖空間内に入れられた集団飼育形態を採るため、サルモネラによる汚染が拡がり易い環境にあり、大きな被害も生じる危険性がある。
【０００５】
家禽類や家畜類の分野で問題とされているサルモネラ菌の血清型としては、サルモネラ・ティフィムリウム（ＳＴ）、サルモネラ・ダブリン（ＳＤ）、サルモネラ・エンテリティデス（ＳＥ）が代表的である。特に、ＳＴは牛の汚染菌としては、最も多く分離されている。ＳＤは、ＳＴに比較し発生牛数は少ないものの、腸管内から門脈を経て全身性の感染症になる確率が高く、敗血症、他臓器への侵襲を起こし死亡するケースがある。ＳＤ発生後は、糞便中から完全に排除されない限り、出荷の許可が得られず、出荷時期を逸するケースや排菌を確認する前に死亡するケースが多く、酪農経営上特に留意すべき菌種である。ＳＥは、牛よりもブロイラー、採卵鶏で問題になっており、環境汚染源として注意を要する菌種である。我が国ではこの数年来、ＳＥを原因とする食中毒がとくにクローズアップされている。
【０００６】
なお、鶏サルモネラ症は、鶏の急性敗血症性の消化器系伝染病である。感染はほとんど腸管に限られ、日齢の進んだものほど自然に回復する傾向が強いが、菌は内蔵、特に卵巣に潜伏し持続感染を起こす。そのため健康保菌鶏が多く、それにより汚染された食品（卵や肉など）がサルモネラ食中毒の原因となり、公衆衛生上重要な問題となっている。
【０００７】
サルモネラ感染症の予防や治療に当たっては、従来、禽舎や畜舎の飼育環境の消毒、抗生物質の投与、合成医薬の投与、不活化したサルモネラと特定の抗生物質の同時投与などがなされている。
【０００８】
しかし、消毒による方法は、有機物の混在による消毒力の低下などにより消毒漏れを招き易い。また、動物がサルモネラ感染症から運よく回復した場合であっても、感染した動物が保菌動物となって排菌し続けることが多いため、感染経路を完全に断つことは困難である。
【０００９】
また、抗生物質や合成医薬などの薬物の投与は、病気の予防や治療に効果的な感受性を有する有効な薬物の種類が限定される上に、耐性を生じ易く、またそれらの薬物が動物の体内に残留する結果、動物の肉などを摂取する人体への影響も心配されている。
【００１０】
【特許文献１】
特開平６−１９２１２６号公報
【００１１】
【特許文献２】
特開平１１−１２１８４号公報
【００１２】
【特許文献３】
特開平１１−２２５６８８号公報
【００１３】
【発明が解決しようとする課題】
上述の問題を解決するため、ワクチンによる免疫学的な方法が、色々検討され、使用されている。
【００１４】
しかし、サルモネラに対するワクチンは、動物の腸管内から体内へのサルモネラの移行を阻止することができるが、サルモネラの腸管内の定着・増殖を防止することができず、腸管内にサルモネラが残留してしまうという問題があった。
【００１５】
一方、食肉の製品市場では、低価格の輸入製品が流通しており、厳しい価格競争にさらされている。もし、家禽類や家畜類の腸管内にサルモネラが残留していれば、食肉として売ることができず、産業廃棄物となってしまう。それ故、腸管内にサルモネラが残留した家禽類や家畜類の発生を効果的に抑制することができなければ、国内の食肉の価格が上昇してしまい、海外との価格競争に敗れることになる。
【００１６】
本願発明の目的とするところは、腸管内からサルモネラを効果的に排除するための動物のサルモネラ感染症予防・治療剤を提供するものである。
【００１７】
【課題を解決するための手段】
本願発明者は、上記目的を達成すべく様々な検討を重ねた結果、木を乾留して得られた粗木酢液から有害物質を分離して精製した木酢精製液と、木を乾留して発生した残留炭素を粉砕して篩過した軟質炭素粉末とを、含有してなる添加粉剤を、家畜飼料に配合したものが上記目的を達成することを見い出し、本願発明をするに至った。
【００１８】
即ち、本願発明の動物のサルモネラ感染症予防・治療剤は、木を乾留して得られた粗木酢液から有害物質を分離して精製した木酢精製液と、木を乾留して発生した残留炭素を粉砕して篩過した軟質炭素粉末とを、含有してなる添加粉剤を、家畜飼料に配合して成る。
【００１９】
この発明の好適形態においては、前記木は、広葉樹の樹皮を含む木片であり、さらに、前記広葉樹は、カシ、タブ、サクラ、カエデ、シイ、クス、イス、ナラ、キハダ、ヤマモモ、カシワ、ケヤキ、クワ、キリ、ミズキ、ソヤのいずれか一種を含有する。また、前記木酢精製液と前記軟質炭素粉末の含有重量比が１：４である。さらに、前記添加粉剤を、前記家畜飼料に対し、１重量％〜３重量％配合して成る。
【００２０】
【発明の実施の形態】
本願発明の動物のサルモネラ感染症予防・治療剤は、木酢精製液と軟質炭素粉末を含有してなる添加粉剤を、家畜飼料に配合して成る。
【００２１】
本願発明に用いる添加粉剤の製造方法の一例を示す概略図を図１に示す。
【００２２】
木としては、発明の効果の観点から、広葉樹の樹皮を含む木片であるのが好ましいが、森林保護、廃物の有効活用という観点から、従来有効な用途が考えられなかったスギ、ヒノキ、カラマツなどの間伐材を用いることもできる。なお、処理熱効率などの観点から、樹皮を細かく砕いたバーグ材が好ましい。さらに、昔より漢方薬の原料として使用されていたという理由から、広葉樹は、カシ、タブ、サクラ、カエデ、シイ、クス、イス、ナラ、キハダ、ヤマモモ、カシワ、ケヤキ、クワ、キリ、ミズキ、ソヤのいずれか一種を含有するのがより好ましい。
【００２３】
乾留処理方法は、特に限定されないが、例えば、２００〜３８０℃で乾留処理する方法を例示することができる。
【００２４】
乾留の際にはガスが発生するが、そのガスを集めて冷却すると、粗木酢液を得ることができる。
【００２５】
この粗木酢液は３ヶ月以上放置すると、上層の軽質油、中間層の木酢液、下層の有害なタール分の三層に分離するため、この三層から中間層の木酢液を分離する。
【００２６】
分離された木酢液は、有害物質を含むため、蒸留して精製する。蒸留方法としては、１２０℃以下で反復蒸留する方法を挙げることができるが、これに限定されない。木酢液から有害物質を除去すると、木酢精製液が得られる。なお、有害物質としては、３−４ベンツピレンを例示することができる。
【００２７】
上述の製造方法により得られた木酢精製液の性質の一例を表１に示す。
【００２８】
【表１】
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【００２９】
乾留した後には残留炭素も発生する。この残留炭素は、粉砕して篩過する。篩過すると、軟質炭素粉末が得られる。軟質炭素粉末の粒子の大きさは、発明の効果の点から、１０００マイクロメートル以下が９５％以上であることが好ましい。
【００３０】
上述の製造方法により得られた軟質炭素粉末の性質の一例を表２に示す。
【００３１】
【表２】
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【００３２】
添加粉剤は、例えば、軟質炭素粉末に木酢精製液を少量ずつ加え、日本薬局方、製剤総則の散剤の項に従い、均等に混和することにより得られるが、特にこれに限定されない。
【００３３】
ここで、木酢精製液と軟質炭素粉末の含有重量比は、動物の飼料要求率が最良であるという理由から、１：４であることが好ましい。
【００３４】
上述の製造方法により得られた添加粉剤の性質の一例を表３に示す。
【００３５】
【表３】
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【００３６】
家畜飼料は一般に市販されている家畜飼料を用いることができ、その他、養鶏業や畜産業で用いられることがある飼料のいずれでも使用可能である。
【００３７】
家畜飼料に配合する添加粉剤の重量は、特に限定されないが、添加粉剤は、家畜飼料に対し、１重量％〜３重量％配合するのが好ましい。添加粉剤の重量が１重量％未満であっても、腸管内からサルモネラを排除する効果を得ることができるが、発現するまでに時間がかかるため、特に効果の即効性が要求されるブロイラーには適さないことから、好ましくないからであり、逆に、３重量％を超えても、腸管内からサルモネラを排除する効果は変わらないため、サルモネラ感染症予防・治療剤の製造コストの面から不利に働くことから、好ましくないからである。さらに、費用対効果という点で、添加粉剤は、家畜飼料に対し、１．５重量％〜２．５重量％配合するのがより好ましい。
【００３８】
なお、本願発明の動物のサルモネラ感染症予防・治療剤を動物に投与した場合におけるサルモネラ感染防御のメカニズムは、まだ不明な点が多いが、（１）軟質炭素粉末によるサルモネラの吸着効果、（２）木酢精製液のサルモネラに対する増殖抑制効果及び（３）木酢精製液の乳酸産生菌に対する増殖効果の結果としてのプロバイオティクス効果が相加的又は相乗的に作用しているものと考えられる。
【００３９】
【実施例】
（１）木酢精製液及び軟質炭素粉末の作成
（実施例１）
新鮮なカシ、シイ、タブ、サクラ及びカエデの樹皮を含む乾燥木片２５トンを原料として乾留炉に投入し、３５０℃で、１６８時間乾留を行った。
【００４０】
乾留の際に発生したガスを収集し、自然冷却により粗木酢液１ａを得た。
【００４１】
得られた粗木酢液１ａを分離槽に３ヶ月以上静置し、上層の軽質油、中間層の木酢液、下層の有害なタール分の三層に分離した分離粗木酢液１ｂを得た。
【００４２】
分離粗木酢液から中間層の木酢液を分離し、木酢液１ｃを得た。
【００４３】
この木酢液１ｃから有害物質が検出されなくなるまで１２０℃以下で反復蒸留して精製し、約１トンの木酢精製液１ｄを得た。
【００４４】
この木酢精製液１ｄは、無色透明の液体で、特異な焦臭と酸味があり、１８℃におけるｐＨをデジタルｐＨメーターで測定したところ、３．７であった。また、５ｍｌの木酢精製液１ｄに硫酸１ｍｌを加えて加熱したところ、酢酸のにおいを発した。さらに、５ｍｌの木酢精製液１ｄに水酸化ナトリウム試液を加えて中和し、塩化第二鉄試液を滴加したところ、液は赤褐色を呈し、煮沸したところ、赤褐色の沈殿を生じた。
【００４５】
一方、前記の乾留終了後、乾留残留物として残留炭素１ｅを得た。
【００４６】
残留炭素１ｅは、スイグハンマー式粉砕機で粉砕粒度篩過（４２号）し、粒子の大きさが３５０マイクロメートルである約５トンの軟質炭素粉末１ｆを得た。
【００４７】
この軟質炭素粉末１ｆは、黒色の粉末で、臭い及び味はなかった。また、０．５ｇの軟質炭素粉末１ｆを試験管に入れ、送風しながら直火で加熱したところ、火炎を生じないで燃焼し、発生するガスを水酸化カルシウム試液中に通じたところ、白濁が生じた。
【００４８】
（２）動物のサルモネラ感染症予防・治療剤の作成
（実施例２）
軟質炭素粉末１ｆに木酢精製液１ｄを少量ずつ加え、日本薬局方、製剤総則の散剤の項に従い、均等に混和して添加粉剤２ａを得た。
【００４９】
添加粉剤２ａは、しっとりとした黒色粉末で、臭い及び味はなく、１８℃におけるｐＨをデジタルｐＨメーターで測定したところ、７．９０であった。また、１ｇの添加粉剤２ａを１０５℃で４時間放置し、乾燥減量を赤外線じん速水分計で測定したところ、１６．２％であり、１ｇの添加粉剤２ａを強く熱し続け、強熱残分を測定したところ、３．８％であった。さらに、２０ｇの添加粉剤２ａに水３０ｍｌを加えて振り、これをろ過したろ液に水酸化ナトリウム試液を加えて中和し、塩化第二鉄試液を滴加したところ、液は赤褐色を呈し、煮沸したところ、赤褐色の沈殿を生じた。０．５ｇの添加粉剤２ａを試験管に入れ、送風しながら直火で加熱したところ、火炎を生じないで燃焼し、発生するガスを水酸化カルシウム試液中に通じたところ、白濁が生じた。
【００５０】
２ｇの添加粉剤２ａと１００ｇの家畜飼料２ｂ（ジェイエイ西日本くみあい飼料株式会社製くみあい配合飼料旭マッシュＩＰ後期春秋ＩＩ）を混合して本願発明となる動物のサルモネラ感染症予防・治療剤２を得た。
【００５１】
（３）サルモネラに対する木酢精製液の増殖抑制効果試験
（試験例１）
木酢精製液のサルモネラに対する効果を明らかにするため、サルモネラ・エンテリティデス（ＳＥ）を１０１６個接種した培地を５つ用意し、この５つの培地のそれぞれに、木酢精製液１ｄ：０重量％、木酢精製液１ｄ：１重量％、木酢精製液１ｄ：２重量％、酢酸：１重量％、酢酸：２重量％を加え、その後、それぞれのｐＨを７にして菌の増殖を調べた。その結果を図２に示す。
【００５２】
木酢精製液はサルモネラの増殖を抑制し、添加量の増加につれて、サルモネラの増殖抑制効果も増大したが、酢酸はサルモネラの増殖抑制に何らの影響を与えなかった。
【００５３】
これより、木酢精製液は、サルモネラに対して優れた増殖抑制効果を示すことが明らかとなった。
【００５４】
（４）乳酸産生菌に対する木酢精製液の増殖促進効果試験
（試験例２）
木酢液の正常細菌叢（乳酸産生菌）に対する影響を明らかにするため、Ｅ．ｆａｅｃｉｕｍを１０７個接種した培地を１３個用意し、これを９個と４個の２つのグループに分けた。９個の培地のそれぞれに、木酢精製液１ｄ：０重量％、木酢精製液１ｄ：０．２５重量％、木酢精製液１ｄ：０．５重量％、木酢精製液１ｄ：１重量％、木酢精製液１ｄ：２重量％、酢酸：０．２５重量％、酢酸：０．５重量％、酢酸：１重量％、酢酸：２重量％を加え、その後、それぞれのｐＨを７にして乳酸産生菌の増殖を調べた。また、４個の培地のそれぞれに、酢酸：０．２５重量％、酢酸：０．５重量％、酢酸：１重量％、酢酸：２重量％を加え、ｐＨを調整せずに乳酸産生菌の増殖を調べた。その結果を図３に示す。
【００５５】
木酢精製液の添加量が増加するにつれて、乳酸産生菌の増殖が促進されたが、酢酸は乳酸産生菌の増殖に何ら影響を与えず、むしろ増殖抑制効果を示した。
【００５６】
これより、木酢精製液は、乳酸産生菌に対して増殖促進効果を示すことが明らかとなった。
【００５７】
（５）サルモネラ感染に対する防御効果試験
（試験例３）
サルモネラ感染に対する防御効果を明らかにするため、鶏の糞便中における菌の状態を調べた。
【００５８】
即ち、動物のサルモネラ感染症予防・治療剤２を与えた鶏Ａ（本願発明投与）、市販のサルモネラワクチンを接種し、サルモネラに対し十分免疫応答を誘導した鶏Ｂ（市販ワクチン接種）、家畜飼料２ｂのみを与えた鶏Ｃ（無処理）の三種類のそれぞれにサルモネラ菌（サルモネラ・エンテリティデス（ＳＥ）：１×１０７個）を経口接種し、５日目、１０日目、１５日目についての糞便中の菌の数を調べた。その結果を図４に示す。
【００５９】
動物のサルモネラ感染症予防・治療剤２を与えた鶏Ａについては、菌接種後５日目には糞便１ｇ当たり数十個の菌が認められ、１０日目には糞便１ｇ当たり十数個の菌が認められたものの、１５日目には糞便中に菌は認められず、サルモネラの検出率は０％であった。
【００６０】
これに対し、市販のサルモネラワクチンを接種し、サルモネラに対し十分免疫応答を誘導した鶏Ｂについては、菌接種後５日目には糞便１ｇ当たり数万個の菌が認められ、１０日目には糞便１ｇ当たり数千個の菌が認められた。１５日目にも依然として糞便１ｇ当たり数百個の菌が認められ、サルモネラの検出率は５０％であった。
【００６１】
また、家畜飼料２ｂのみを与えた鶏Ｃについては、菌接種後５日目には糞便１ｇ当たり数万個の菌が認められ、１０日目には糞便１ｇ当たり数千個の菌が認められた。１５日目には、１０日目と同様、糞便１ｇ当たり数千個の菌が認められ、サルモネラの検出率は１００％であった。
【００６２】
以上の結果から、本願発明の動物のサルモネラ感染症予防・治療剤は、サルモネラ感染に対して十分な防御効果を発揮するが、市販のサルモネラワクチンは、サルモネラ感染に対して十分な防御効果を発揮しないといえることがわかった。
【００６３】
（６）腸管内のサルモネラ排除効果試験
（試験例４）
試験例１に用いた、鶏Ａ（本願発明投与）、鶏Ｂ（市販ワクチン接種）、鶏Ｃ（無処理）のそれぞれについて、さらに菌分離同定を行った。その結果を図５に示す。
【００６４】
鶏Ａについては、十二指腸、小腸、盲腸、直腸のいずれにおいても菌は分離されなかった。これに対し、鶏Ｂについては、盲腸において１００％の確率でサルモネラが分離され、直腸において５０％の確率でサルモネラが分離された。また、鶏Ｃについては、盲腸において１００％の確率でサルモネラが分離され、直腸において１００％の確率でサルモネラが分離された。
【００６５】
以上の結果から、本願発明の動物のサルモネラ感染症予防・治療剤は、腸管内からサルモネラを１００％排除することができる能力を持つと考えられるが、市販のサルモネラワクチンでは、腸管内にサルモネラ菌が残留してしまうことがわかった。
【００６６】
なお、本願発明の動物のサルモネラ感染症予防・治療剤を投与した鶏は、体内からサルモネラを完全に排除することができるため、この鶏が産生する卵は１００％サルモネラが含まれていないと推察されるが、市販のサルモネラワクチンを接種した鶏は、腸管内にサルモネラ菌が残留してしまうため、この鶏が産生する卵はサルモネラ汚染の危険性があると考えられる。
【００６７】
【発明の効果】
本願発明の動物のサルモネラ感染症予防・治療剤を動物に投与すれば、動物の腸管内からサルモネラを効果的に排除することができるため、サルモネラによる汚染を未然に防止することができ、サルモネラによる汚染の拡大を効果的に抑制することができる。
【００６８】
また、本願発明の動物のサルモネラ感染症予防・治療剤を動物に投与すれば、家禽類や家畜類の腸管内からサルモネラを効果的に排除することができるため、食肉として販売しても安全であり、食肉の生産コストの上昇防止にも寄与する。
【図面の簡単な説明】
【図１】本願発明に用いる添加粉剤の製造方法の一例を示す概略図。
【図２】サルモネラに対する木酢精製液の増殖抑制効果試験の結果を示すグラフ。
【図３】乳酸産生菌に対する木酢精製液の増殖促進効果試験の結果を示すグラフ。
【図４】サルモネラ感染に対する防御効果試験の結果を示すグラフ。
【図５】腸管内のサルモネラ排除効果試験の結果を示すグラフ。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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