(57)【要約】【課題】新規なβ−ガラクトシダーゼ阻害剤となる物質を得る。【解決手段】下記一般式（１）で表されるカルバ糖アミン誘導体をβ−ガラクトシダーゼ阻害剤として用いる。【化１】2004196659.tif 000033但し、Ｒ１及びＲ２はそれぞれ独立にＨ、アルキル基、アシル基、アリール基、又はアラルキル基を示す。但し、双方共にＨであることはない。Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６はそれぞれ独立にヒドロキシル基又は置換基を有するヒドロキシル基である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（１）で表されるカルバ糖アミン誘導体。
【化１】
2004196659.tif 000032
但し、Ｒ１及びＲ２はそれぞれ独立にＨ、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アシル基、アリール基、又はアラルキル基を示す。但し、双方共にＨであることはない。Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６はそれぞれ独立にヒドロキシル基又は置換基を有するヒドロキシル基である。
【請求項２】
Ｒ１及びＲ２はいずれか一方が直鎖又は分枝を有する炭素数１〜２３のアルキル基であって他方がＨであり、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６がそれぞれヒドロキシル基である請求項１記載のカルバ糖アミン誘導体。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明はβ−ガラクトシダーゼ阻害活性を有する擬似糖に関する。
【０００２】
【従来の技術】
糖脂質代謝異常症としては、従来ＧＭ１ガングリオシドーシス、ニーマン・ピック病、モルキオＢ病、クラッベ病、ファブリー病、ゴーシェ病、テイサックス病、サンドホフ病、フコシドーシスなどが知られている。これらの疾病は各種の糖分解酵素が変異を起こした結果生じる疾病である。その中でもＧＭ１ガングリオシドーシス、モルキオＢ病、クラッベ病はβ−ガラクトシダーゼが変異して酵素活性を失って生ずる疾病であるが、未だ有効な医薬は開発されていない。
【０００３】
ところで、ファブリー病はα−ガラクトシダーゼの変異によって生ずる疾病であるが、この疾病はα−ガラクトシダーゼ阻害剤が有効な治療薬となる可能性があることが知られている（Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ５（１）  １１２−１１５（１９９９））。上記酵素阻害剤が酵素の活性を取り戻すメカニズムは明らかにされていないが、強力な酵素阻害剤が細胞内で発現した変異酵素タンパク質を安定化させるためであると考えられる。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
酵素阻害剤が変異酵素タンパク質を安定化させ得るのであれば、β−ガラクトシダーゼが変異して惹起される疾病の治療薬として、β−ガラクトシダーゼ阻害剤が有効である可能性が高い。
しかし、ヒトのβ−ガラクトシダーゼを特異的且つ強力に阻害するβ−ガラクトシダーゼ阻害剤は得られていない。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは上記課題に鑑み、β−ガラクトシダーゼ活性を特異的に阻害する糖アナログを鋭意検索、検討した結果、特定のカルバ糖アミン誘導体が、強いβ−ガラクトシダーゼ阻害活性を示すことを発見し、本発明を完成した。
すなわち、本発明は下記一般式（１）で表されるカルバ糖アミン誘導体である。
【０００６】
【化２】
2004196659.tif 000002
【０００７】
但し、Ｒ１及びＲ２はそれぞれ独立にＨ、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アシル基、アリール基、又はアラルキル基を示す。但し、双方共にＨであることはない。Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６はそれぞれ独立にヒドロキシル基又は置換基を有するヒドロキシル基である。
【０００８】
【発明の実施の形態】
以下、発明の実施の形態により、本発明をより詳細に説明する。
本発明は、上記一般式（１）により表されるカルバ糖アミン誘導体（以下「本発明物質」とも記載する）である。
ここで、Ｒ１及びＲ２はそれぞれ独立にＨ、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アシル基、アリール基、又はアラルキル基等の修飾や側鎖の保護に用いられる官能基を示す。しかし、Ｒ１及びＲ２は特にいずれか一方がアルキル基であり、他方がＨであることが好ましい。
【０００９】
上記アルキル基としては例えば炭素数１〜２３、好ましくは２〜２０の直鎖又は分枝を有するアルキル基が挙げられ、炭素数２〜１８の直鎖のアルキル基を有することが最も好ましい。特にスフィンゴ糖脂質代謝異常症の治療剤として好ましいと考えられるガラクトシダーゼ阻害剤とする場合には、本発明物質はスフィンゴ糖脂質のアナログとなりうる方が好ましい。
【００１０】
またアルキル基は、下記式（２）で示すようなアルキルグリセロール由来の骨格を有するアルコキシアルキル基または、アシルグリセロール由来の骨格を有するアシルオキシアルキル基でもよい（下記構造式中ｌ，  ｍはそれぞれ独立に０〜１８の整数を示し、Ｘはそれぞれ独立にメチレン基またはカルボニル基を示す）。
【００１１】
【化３】
2004196659.tif 000003
【００１２】
上記アルケニル基及びアルキニル基は、炭素数１〜２３、好ましくは２〜２０であることが好ましく、炭素原子同士の二重結合、三重結合を複数有していてもよい。しかし、これらの炭素原子に結合した水素原子は、２以上のアミノ基又は置換基を有するアミノ基、及びヒドロキシル基又は置換基を有するヒドロキシル基に置換されているものは、その合成工程が煩雑化するため、好ましくない。
上記アシル基とは、一般に−ＣＯ−Ｒで表される基であればいずれでもよいが、アシル基全体で炭素数は１〜２３、好ましくは２〜２０である。尚、上記一般式においてＲは上述したアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、後述のアリール基、アラルキル基から選択されるいずれかの基である。
【００１３】
また、上記アリール基とは例えばフェニル基、ナフチル基等の芳香族炭化水素残基又は、更にアルキル基やアシル基等の置換基が芳香環の水素原子に置換している芳香族残基（例えばトリル基等）が例示される。
上記アラルキル基とは前記アリール基（Ａｒ）にアルキル基が結合したＡｒ−（ＣＨ２）ｎ−を一般式で表される残基であり、前記ｎは１〜２０が好ましく、２〜１８がより好ましい。このようなアラルキル基としては、例えばベンジル基、フェネチル基、α−メチルベンジル基等が例示される。
【００１４】
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、及びＲ６はヒドロキシル基又は置換基を有するヒドロキシル基を示すが、特にヒドロキシル基が好ましい。ここで、置換基とは、アラルキル基（ベンジル基、フェネチル基、α−メチルベンジル基等）、シリル基（トリメチルシリル基、トリエチルシリル基、トリイソプロピルシリル（ＴＩＰＳ）基、ｔ−ブチルジフェニルシリル（ＴＢＤＰＳ）基、ｔ−ブチルジメチルシリル（ＴＢＤＭＳ）基等）、アルカノイル基（アセチル基、ブチリル基等）、アロイル基（ベンゾイル基、トルオイル基、ナフトイル基等）、アルコキシアルキル基（メトキシメチル（ＭＯＭ）基等）、アラルキルオキシアルキル基（ベンジルオキシメチル（ＢＯＭ）基等）が例示されるが、その中では特にＭＯＭ基が、安定性、取り扱い及び脱離の容易性の観点から好ましいがこれに限定はされない。
尚、本発明物質は擬似糖の１種であるため、本明細書中における炭素番号の付与は、ヘキソースの例に従って下記構造式（３）に示す方法によって記載する。
【００１５】
【化４】
2004196659.tif 000004
【００１６】
また、本発明物質は、５ａ−カルバ−Ｄ−ヘキソピラノースの（５−５ａ）不飽和誘導体と見なせるため、一般式（１）中、ＮＲ１Ｒ２で示される置換アミノ基が六員環に対して上側にあるものをβ型、反対側にあるものをα型とし、本発明物質はβ型である。
従って、本発明物質の内、最も好ましい物質は下記構造式（４）で示される物質である。
【００１７】
【化５】
2004196659.tif 000005
【００１８】
ただし、ｎ＝０〜２２である。
本発明物質は、哺乳動物、特にヒト由来のβ−ガラクトシダーゼに対する阻害活性が高いため、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  又はｉｎ  ｖｉｖｏ（細胞、組織など）においてこれらの酵素を阻害するための試薬及びこのような酵素阻害作用に基づく医薬として使用することが可能であり、また、β−ガラクトシダーゼの変異によって惹起される疾病の病態研究などに使用することができる。
【００１９】
尚、β−ガラクトシダーゼに対する阻害活性は、β−ガラクトシダーゼと基質が存在する溶液中に、本発明物質を添加し、酵素活性を本発明物質無添加の場合と比較することで、その阻害活性を算出することが可能である。
【００２０】
本発明物質は、ヒト由来のβ−ガラクトシダーゼの活性に対し、１μＭ未満の５０％阻害濃度（ＩＣ５０）を有していることが好ましく、特にＩＣ５０は０．５μＭ未満であることが好ましい。
【００２１】
本発明物質の調製は、既知物質であるＤｉ−Ｏ−イソプロピリデン−β−バリエナミン（Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ  ＆  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｌｅｔｔｅｒｓ，  ６  （１９９６）  ９２９−９３２：下記（５））を用いて行うことができる（図１）。
【００２２】
【化６】
2004196659.tif 000006
【００２３】
例えば、ｄｉ−Ｏ−イソプロピリデン−β−バリエナミンのアミノ基を一般式Ｒ１’−ＣＯＣｌで表される酸クロリド等のアシル基の活性化体でアシル化して化合物２を得る。化合物２のアミド結合を水素化リチウムアルミニウムで還元して、化合物３とし、４位のヒドロキシル基をグルコース型配置からガラクトース型配置へ変換する反応の際に他の官能基への影響を防止するため、ヒドロキシル基およびアミノ基を適当な保護基で保護して化合物９とした後、４位のヒドロキシル基を酸化してケトン体（化合物１０）とし、カルボニル基の還元を行って、下記一般式６（式において−ＣＨ２−Ｒ１’はアシル基、アリール基以外である場合のＲ１に相当し、−ＣＯ−Ｒ２’はアシル基である−Ｒ２に相当する。以下「本発明物質１」という）を得ることができる。本発明物質１を脱保護することにより、下記一般式７（式において−ＣＨ２−Ｒ１’は一般式６におけるものと同様）で表される本発明物質２を得ることができ、また、本発明物質１のアミド結合を還元して、下記一般式８（式において−ＣＨ２−Ｒ１’は一般式６と同様、−ＣＨ２−Ｒ２’はアシル基、アリール基以外である場合のＲ２に相当する）で表される本発明物質３とした後、これを脱保護することによって、下記一般式９（式において−ＣＨ２−Ｒ１’及び−ＣＨ２−Ｒ２’は一般式８におけるものと同様）で表される本発明物質４を得ることができる（図１）。
【００２４】
【化７】
2004196659.tif 000007
【００２５】
【化８】
2004196659.tif 000008
【００２６】
【化９】
2004196659.tif 000009
【００２７】
【化１０】
2004196659.tif 000010
【００２８】
上記アシル化、水素化リチウムアルミニウムによる還元、保護基の変換、ヒドロキシル基の酸化、カルボニル基の還元、脱保護は当業者であれば容易に行うことができる。
【００２９】
具体的には、アシル化は一般式Ｒ１’−ＣＯＣｌで表される酸クロリド等のアシル基の活性化体またはＲ１’−ＣＯ−Ｏ−ＣＯ−Ｒ１’で表される酸無水物のようなアシル化剤を原料のアミンとピリジン等の塩基性有機溶媒中で反応させることによって行う。反応溶媒としてピリジンの代わりに、ジクロロメタン等の非活性溶媒を使用し、トリエチルアミン等の塩基の存在下で反応を行ってもよい。反応温度は氷冷下から室温にて行うのが一般的であるが、必要に応じ６０℃程度に加熱してもよい。反応時間は２０分から２０時間程度であるが、１〜２時間が好ましい。水素化リチウムアルミニウムによる還元は、通常テトラヒドロフラン等の無水有機溶媒中で行う。反応温度は氷冷下から室温が好ましいが、必要に応じて還流温度下で行う。反応時間は３０分から２４時間であるが、２時間程度が好ましい。
【００３０】
保護基としては、４位水酸基の酸化およびそれに引き続いたカルボニル基の還元に差し支えない保護基であればかまわないが、取り扱い易さおよび脱離のし易さの点から、ＴＢＤＭＳ基、ＭＯＭ基等を使用することができる。保護基の変換例を図１に従って説明する。化合物３をトリエチルアミンの存在下、ｄｉ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネートと反応させて、アミノ基をブトキシカルボニル基により保護してＮ−置換−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−１−デオキシ−２，３：４，６−ｄｉ−Ｏ−イソプロピリデン−  ５ａ−カルバ−β−Ｄ−ｘｙｌｏ−ヘキソ−５（５ａ）−エノピラノシルアミン（化合物４）を得ることができる。化合物４は、２，３位、及び４，５位で環状構造を形成しているが、この環状構造を開裂したＮ−置換−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−１−デオキシ−  ５ａ−カルバ−β−Ｄ−ｘｙｌｏ−ヘキソ−５（５ａ）−エノピラノシルアミン（化合物５）は化合物４を含水酢酸などの弱酸により処理することによって得ることが可能である。
【００３１】
化合物５にα，α−ジメトキシトルエン及びｐ−トルエンスルホン酸・Ｈ２Ｏを作用させることで、ベンジリデン化されたＮ−置換−  Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−４，６−Ｏ−ベンジリデン−  ５ａ−カルバ−β−Ｄ−ｘｙｌｏ−ヘキソ−５（５ａ）−エノピラノシルアミン（化合物６）を得、化合物６の２位及び３位のヒドロキシル基を例えば１，２−クロロメチルエーテル及びＮ、Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンと反応させることで保護基であるメトキシメチル（ＭＯＭ）基を結合させてＮ−置換−  Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−４，６−Ｏ−ベンジリデン−  ２，３−ｄｉ−Ｏ−メトキシメチル−  ５ａ−カルバ−β−Ｄ−ｘｙｌｏ−ヘキソ−５（５ａ）−エノピラノシルアミン（化合物７）とした後、含水酢酸などの弱酸により４，５，６位のベンジリデン環を開裂してＮ−置換−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−２，３−ｄｉ−Ｏ−メトキシメチル−  ５ａ−カルバ−β−Ｄ−ｘｙｌｏ−ヘキソ−５（５ａ）−エノピラノシルアミン（化合物８）を得ることができる。
【００３２】
化合物８とイミダゾール、ｔｅｒｔ−ブチルクロロジメチルシランとを反応させることで、６位ヒドロキシル基をｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル化し、Ｎ−置換−  Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−２，３−ｄｉ−Ｏ−メトキシメチル−６−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル−５ａ−カルバ−β−Ｄ−ｘｙｌｏ−ヘキソ−５（５ａ）−エノピラノシルアミン（化合物９）を得ることができる。
【００３３】
更に化合物９の４位水酸基を、ピリジニウムクロロクロメート等の酸化剤で処理した後、ｔｒｉ−ｓｅｃ−ブチル水素化ホウ素等の還元剤で還元することにより４位ヒドロキシル基を反転させてガラクトタイプの立体構造を形成させたＮ−置換−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−２，３−ｄｉ−Ｏ−メトキシメチル−６−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル−５ａ−カルバ−α−Ｌ−ａｒａｂｉｎｏ−ヘキソ−５（５ａ）−エノピラノシルアミン（図１の本発明物質１または、図６の本発明物質１７：下記式１０）を得た後、塩酸などの強酸で処理することにより６位ヒドロキシル基の保護基であるｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル基、及び１位アミノ基に結合した保護基であるブトキシカルボニル基を除去して最も好ましい本発明物質であるＮ−置換−５ａ−カルバ−α−Ｌ−ａｒａｂｉｎｏ−ヘキソ−５（５ａ）−エノピラノシルアミン（図１の本発明物質２または、図６の本発明物質１８：下記式１１）を得ることができる。
【００３４】
【化１１】
2004196659.tif 000011
【００３５】
【化１２】
2004196659.tif 000012
【００３６】
また、特開平８−４８６５８に記載されている化合物  １−アミノ−６−Ｏ−（ｔ−ブチルジメチルシリル）−５ａ−カルバ−１−デオキシ−２，３−ジメトキシメチル−α−Ｌ−アラビノ−ヘキソ−５−エノピラノース（図２および図３に示した化合物１１）を原料として、アシル化して本発明物質５（下記一般式１２）を得、さらに水素化リチウムアルミニウムによる還元、脱保護を上記と同様に行うことにより、本発明物質２を得ることができる（図２）。また、本発明物質７を原料に、アシル化、水素化リチウムアルミニウムによる還元、脱保護を順次組み合わせて行うことにより、本発明物質８、本発明物質３を順に経由して本発明化合物４を得ることができる。
【００３７】
【化１３】
2004196659.tif 000013
【００３８】
また、本発明物質５を酸性条件下で脱保護することにより、アシル誘導体である本発明物質６（下記一般式１３）が得られ、同様に本発明物質８（アシル誘導体：下記一般式１４）を処理することにより、本発明物質９（下記一般式１５）が得られる。
【００３９】
【化１４】
2004196659.tif 000014
【００４０】
【化１５】
2004196659.tif 000015
【００４１】
【化１６】
2004196659.tif 000016
【００４２】
また、原料化合物（例えば化合物１１）のアミノ基を一般式Ｒ１’−ＣＯＣｌで表される酸クロリドでアシル化する代わりに、一般式Ｒ１−Ｚ（但し、ここでＲ１は一般式（１）のアルキル基と同様、Ｚはハロゲン原子又はメシルオキシル基、トシルオキシル基等の活性化基を示す）で表されるハロゲン化アルキル、または、メシルオキシル基、トシルオキシル基等の活性化基を有するアルキル誘導体と反応させてＲ１を導入して本発明物質１０（下記一般式１６）とした後、同様に脱保護して本発明物質１２（下記一般式１７）を得ることができる（図３）。
【００４３】
【化１７】
2004196659.tif 000017
【００４４】
【化１８】
2004196659.tif 000018
【００４５】
また、本発明物質１０に対し、再度Ｒ２（但し、ここでＲ２は一般式（１）のアルキル基と同様）の結合および脱保護を行って、本発明物質１３（ジアルキル体：下記一般式１８：但し、一般式１８、１９、２０及び２１においてＲ１、Ｒ２、及びＲ２’はアルキル基を示す）を得ることも可能である。また、本発明物質１０に対し、同様にアシル化を行った後（本発明物質１４：下記一般式１９）、水素化リチウムアルミニウムによる還元（本発明物質１５：下記一般式２０）、脱保護を行って本発明物質１６（下記一般式２１）を得ることもできる。
【００４６】
【化１９】
2004196659.tif 000019
【００４７】
【化２０】
2004196659.tif 000020
【００４８】
【化２１】
2004196659.tif 000021
【００４９】
【化２２】
2004196659.tif 000022
【００５０】
【実施例】
以下、本発明を実施例により具体的に説明する。
＜１＞本発明物質（Ｎ−オクチル置換体：上記一般式（４）中ｎ＝７）の合成
（１）Ｎ−オクチル−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−１−デオキシ−２，３：４，６−ｄｉ−Ｏ−イソプロピリデン−  ５ａ−カルバ−β−Ｄ−ｘｙｌｏ−ヘキソ−５（５ａ）−エノピラノシルアミン（化合物１２）の合成
【００５１】
【化２３】
2004196659.tif 000023
【００５２】
式中：Ｂｏｃはｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基を示す。以下同様である。
Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ  ＆  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  ６  （１９９６）  ９２９−９３２に記載された方法で調製したＮ−オクチル−２，３：４，６−Ｄｉ−Ｏ−イソプロピリデン−  ５ａ−カルバ−β−Ｄ−ｘｙｌｏ−ヘキソ−５（５ａ）−エノピラノシルアミン（６４４ｍｇ、１．７５ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液（１３ｍｌ）にトリエチルアミン（０．９７ｍＬ，７．０１ｍｍｏｌ）とｄｉ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート（０．８１ｍＬ、３．５０ｍｍｏｌ）を添加し、１．５時間室温で攪拌した。トリエチルアミン（０．９７ｍＬ、７．０１ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート（０．８１ｍＬ、３．５０ｍｍｏｌ）を加えた後、更に１時間攪拌を継続した。反応混液を１８０ｍＬの酢酸エチルで希釈した後、溶液を６０ｍＬの炭酸水素ナトリウム溶液、その後６０ｍＬの食塩水で２回洗浄し、その後乾燥して濃縮した。
【００５３】
粗精製物はシリカゲルクロマトグラフィー（５０ｇ、濃度勾配溶出、１：１１→１：８  酢酸エチル／ヘキサン）で精製し、無色の油状物質として化合物１２を得た（８０７ｍｇ、収率９９％）。
【００５４】
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．４９（１：５  酢酸エチル／トルエン）
［α］２２Ｄ：−６１°（ｃ＝０．９０  クロロホルム）
ＩＲ（Ｎｅａｔ）：υ（ｃｍ−１）＝２９６０（ＣＨ３）、２９３０及び２８５５（ＣＨ２）、１６９５（アミド）
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、（ＣＤ３）２ＳＯ，  １１０℃）
δ＝５．２２（ｂｒ  ｓ，  １Ｈ，  Ｈ−５ａ），  ４．５９  （ｂｒ  ｄ，  １Ｈ，  Ｊ４，３＝９．３Ｈｚ，  ４−Ｈ），  ４．５７（ｂｒｄ，  １Ｈ，  Ｊ１，２＝９．３Ｈｚ，  １−Ｈ），  ４．４０  ａｎｄ  ４．１３  （２ｄ，  ｅａｃｈ  １Ｈ，  Ｊｇｅｍ＝１３．７Ｈｚ，  ６，６−Ｈ），  ３．７４  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ２，３＝９．３Ｈｚ，  ２−Ｈ），  ３．５９  （ｄｄ，  １Ｈ，  ３−Ｈ），  ３．１１  ａｎｄ  ２．９３  （２ｍ，  ｅａｃｈ  １Ｈ，  ＮＣＨ２），  １．５４−１．１８  （ｍ，  １２Ｈ，  ６×ＣＨ２），  １．４７，  １．３７，  １．３６  ａｎｄ  １．２９  （４ｓ，  ｅａｃｈ  ３Ｈ，  ２×ＣＭｅ２），  １．４０  （ｓ，  ９Ｈ，  ｔ−Ｂｕ），  ０．８６  （ｔ，  ３Ｈ，  Ｊ＝６．６Ｈｚ，  ＣＨ２ＣＨ３）
Ａｎａｌ．  Ｃａｌｃｄ  ｆｏｒ  Ｃ２６Ｈ４５ＮＯ６：  Ｃ，６６．７８；  Ｈ，９．７０；  Ｎ，  ３．００．
Ｆｏｕｎｄ：  Ｃ６６．５７；  Ｈ，  １０．１０；  Ｎ，  ３．１１．
【００５５】
（２）Ｎ−オクチル−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−１−デオキシ−  ５ａ−カルバ−β−Ｄ−ｘｙｌｏ−ヘキソ−５（５ａ）−エノピラノシルアミン（化合物１３）の合成
【００５６】
【化２４】
2004196659.tif 000024
【００５７】
化合物１２（７６８ｍｇ、１．６４ｍｍｏｌ）と６０％の酢酸溶液（１６ｍＬ）を６０℃で３０分間攪拌し、濃縮した。残渣をエタノールで３回エバポレートした。粗精製物はシリカゲル（４７ｇ）によりカラムクロマトグラフィー（濃度勾配溶出法、１：１０→１：４  エタノール／トルエン）により精製し（５３９ｍｇ、収率８５％）、無色の油状物質として化合物１３を得た。
【００５８】
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．５４（１：５  メタノール／クロロホルム）
［α］２０Ｄ：−８７°（ｃ＝１．１０  メタノール）
ＩＲ（ＫＢｒ−Ｄｉｓｋ）：υ（ｃｍ−１）＝３４４５（ＯＨ）、２９６０（ＣＨ３）、２９３０及び２８５５（ＣＨ２）
１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、１：２  ＣＤ３ＯＤ／ＣＤＣｌ３）
δ＝５．４２（ｂｒ  ｓ，  １Ｈ，  Ｈ−５ａ），  ４．３８−４．０５  （ｍ，  ２Ｈ，  Ｈ−１，  Ｈ−４），  ４．２０  ａｎｄ  ４．１０  （２ｄ，  ｅａｃｈ  １Ｈ，  Ｊｇｅｍ＝１３．４Ｈｚ，  ６，６−Ｈ），  ３．７２  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ１，２＝９．２Ｈｚ，  Ｊ２，３＝９．５Ｈｚ，  ２−Ｈ），  ３．３１  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ２，３＝９．５Ｈｚ，  Ｊ３，４＝８．０Ｈｚ，  ３−Ｈ），  ３．２６  （ｍ，  １Ｈ，  １’ａ−Ｈ），  ３．０１  （ｍ，  １Ｈ，  １’ｂ−Ｈ），  １．７３−１．１８  （ｍ，  １２Ｈ，  ＣＨ２×６：  Ｈ−２’−Ｈ−７’），  １．４７  （ｓ，  ９Ｈ，  ｔ−Ｂｕ：  Ｂｏｃ），  ０．８９  （ｔ，  ３Ｈ，  Ｊ＝６．４Ｈｚ，  ＣＨ２ＣＨ３）
【００５９】
（３）Ｎ−オクチル−  Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−４，６−Ｏ−ベンジリデン−  ５ａ−カルバ−β−Ｄ−ｘｙｌｏ−ヘキソ−５（５ａ）−エノピラノシルアミン（化合物１４）の合成
【００６０】
【化２５】
2004196659.tif 000025
【００６１】
化合物１３（２４２ｍｇ，  ０．６２４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（６ｍＬ）にα，α−ジメトキシトルエン（１１２μＬ，  ０．７４６ｍｍｏｌ）、ｐ−トルエンスルホン酸・Ｈ２Ｏ（１２ｍｇ，  ０．０６３ｍｍｏｌ）を添加し、減圧条件下４５℃で３．５時間攪拌した。更にα，α−ジメトキシトルエン（５０μＬ，  ０．３３３ｍｍｏｌ）を添加し、更に２時間攪拌した。反応混液を６０ｍＬの酢酸エチルで希釈し、この溶液を２０ｍＬの水、次に２０ｍＬの飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、更に２０ｍＬの水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過後濃縮した。この濃縮物を薄層クロマトグラフィーで分析した結果、２種類の成分が検出された（Ｒｆ  ０．３３及び０．７４：アセトン／トルエン、１：５；  Ｒｆ  ０．０５及び０．７０：酢酸エチル／トルエン、１：５）。
【００６２】
粗精製物をシリカゲルクロマトグラフィー（１６ｇ、濃度勾配溶出法、１：２４→１：３酢酸エチル／トルエン）を行い、無色の油状物質である２，３：４，６−ｄｉ−Ｏ−ベンジリデン化化合物（化合物１５：最初の溶出画分：１５９ｍｇ、収率４５％）及び無色の油状物質である化合物１４を得た（化合物１７：１６４ｍｇ、収率５５％）。
化合物１５を５ｍＬのメタノールに溶解した後、０℃でｐ−トルエンスルホン酸一水和物（３ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌ）を添加し、１０分間攪拌した後、トリエチルアミンを滴下して中和し、濃縮した。粗精製物をシリカゲルクロマトグラフィー（７ｇ、１：７アセトン／トルエン）で精製し、化合物１４を得た（１１０ｍｇ、化合物１６からの直接の反応生成物と合わせた収率８２％）。
【００６３】
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３３（１：５  アセトン／トルエン）
［α］２２Ｄ：−５７°（ｃ＝０．９７  クロロホルム）
ＩＲ（ｎｅａｔ）：υ（ｃｍ−１）＝３４２０（ＯＨ）、２９６０（ＣＨ３）、２９２５及び２８５５（ＣＨ２）、１６９５（アミド）
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、（ＣＤ３）２ＳＯ、１１０℃）
δ＝７．４６−７．２７（ｍ，  ５Ｈ，  Ｐｈ），  ５．６５  （ｓ，  １Ｈ，  ＣＨＰｈ），  ５．３１  （ｂｒ  ｓ，  １Ｈ，  ５ａ−Ｈ）、４．３９（ｂｒ  ｓ、２Ｈ、６，６−Ｈ），  ４．３６  （ｂｒ  ｄ，  １Ｈ，  Ｊ３，４＝７．６Ｈｚ，  ４−Ｈ），  ４．１６  （ｂｒ  ｓ，  １Ｈ，  １−Ｈ），  ３．６４  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ１，２＝  Ｊ２，３＝９．３Ｈｚ，  ２−Ｈ），  ３．５２  （ｄｄ，  １Ｈ，  ３−Ｈ），  ３．２５−２．８０  （ｍ，  ２Ｈ，  ＮＣＨ２），  １．５７−１．１７  （ｍ，  １２Ｈ，  ６×ＣＨ２），  １．３９  （ｓ，  ９Ｈ，  ＣＭｅ３），  ０．８７（ｔ，  ３Ｈ，  Ｊ＝６．２Ｈｚ，  ＣＨ２ＣＨ３）．
元素分析
計算値  Ｃ２７Ｈ４１ＮＯ６・０．５Ｈ２Ｏ：  Ｃ，６６．９２；  Ｈ，８．７３；  Ｎ，  ２．８９．
実測値：  Ｃ，  ６６．９４；  Ｈ，  ８．８５；  Ｎ，  ２．９１．
【００６４】
（４）Ｎ−オクチル−  Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−４，６−Ｏ−ベンジリデン−  ２，３−ｄｉ−Ｏ−メトキシメチル−  ５ａ−カルバ−β−Ｄ−ｘｙｌｏ−ヘキソ−５（５ａ）−エノピラノシルアミン（化合物１６）の合成
【００６５】
【化２６】
2004196659.tif 000026
【００６６】
化合物１４（２６９ｍｇ、０．５６６ｍｍｏｌ）の１，２−ジクロロエタン溶液（７ｍＬ）にクロロメチルエーテル（０．４３ｍＬ、５．６６ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１．９７ｍＬ、１１．３１ｍｍｏｌ）を添加し、６０℃で３時間攪拌した。反応混液を６０ｍＬのクロロホルムで希釈し、３０ｍＬの１Ｎ塩酸、３０ｍＬの飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、３０ｍＬの水で順に洗浄し、濃縮した。粗精製物をシリカゲルクロマトグラフィー（２０ｇ、濃度勾配溶出、１：１４→１：９  酢酸エチル／トルエン）を行い、化合物１６を無色油状物質として得た（３１５ｍｇ、収率９９％）。
【００６７】
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．４４（１：５  酢酸エチル／トルエン）
［α］２１Ｄ：−１２６°（ｃ＝１．１０  クロロホルム）
ＩＲ（ｎｅａｔ）：υ（ｃｍ−１）＝２９６０（ＣＨ３）、２９２５及び２８５５（ＣＨ２）、１６９５（アミド）
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、（ＣＤ３）２ＳＯ、１１０℃）
δ＝７．４５−７．２８（ｍ，  ５Ｈ，  Ｐｈ），  ５．７０  （ｓ，  １Ｈ，  ＣＨＰｈ），  ５．３８  （ｂｒ  ｓ，  １Ｈ，  ５ａ−Ｈ）、４．７９  ａｎｄ  ４．７７（２ｄ，  ｅａｃｈ  １Ｈ，  Ｊｇｅｍ＝６．１Ｈｚ）ａｎｄ  ４．７５  ａｎｄ  ４．６３  （２ｄ，  ｅａｃｈ  １Ｈ，  Ｊｇｅｍ＝６．３Ｈｚ）（２×ＯＣＨ２），  ４．５７  （ｂｒ  ｄ，  １Ｈ，  Ｊ３，４＝７．７Ｈｚ，  ４−Ｈ），  ４．４３  （ｂｒ  ｓ，  ２Ｈ，  ６，６−Ｈ），  ４．２７  （ｂｒ  ｓ，  １Ｈ，  １−Ｈ），  ３．９９  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ１，２＝９．３Ｈｚ，  Ｊ２，３＝１０．０Ｈｚ，  ２−Ｈ），  ３．７８  （ｄｄ，  １Ｈ，  ３−Ｈ），  ３．２８−３．２７  （２ｓ，  ｅａｃｈ  ３Ｈ，  ２×ＯＭｅ），  ３．０７−２．８７  （ｍ，  ２Ｈ，  ＮＣＨ２），  １．６２−１．２０  （ｍ，  １２Ｈ，  ６×ＣＨ２），  １．３９  （ｓ，  ９Ｈ，  ｔ−Ｂｕ），  ０．８７  （ｔ，  ３Ｈ，  Ｊ＝６．５Ｈｚ，  ＣＨ２ＣＨ３）
元素分析
計算値  Ｃ３１Ｈ４９ＮＯ８：  Ｃ，６６．０５；  Ｈ，８．７６；  Ｎ，  ２．４８．
実測値：  Ｃ，  ６５．８０；  Ｈ，  ８．９９；  Ｎ，  ２．４２．
【００６８】
（５）Ｎ−オクチル−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−２，３−ｄｉ−Ｏ−メトキシメチル−  ５ａ−カルバ−β−Ｄ−ｘｙｌｏ−ヘキソ−５（５ａ）−エノピラノシルアミン（化合物１７）の合成
【００６９】
【化２７】
2004196659.tif 000027
【００７０】
化合物１６（３１５ｍｇ、０．５５９ｍｍｏｌ）の６０％酢酸水溶液（８ｍＬ）を６０℃で２時間攪拌して濃縮した。残渣をエタノールを用いて３回エバポレートした後、トルエンを用いて３回エバポレートした。化合物１７の粗精製物をシリカゲルクロマトグラフィー（２０ｇ、濃度勾配溶出、１：６→１：５  アセトン／トルエン）で無色の油状物質として化合物１７を得た（２１６ｍｇ、収率８３％）。
【００７１】
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．１３（１：５  アセトン／トルエン）
［α］２０Ｄ：−１４１°（ｃ＝１．１１  クロロホルム）
ＩＲ（ｎｅａｔ）：υ（ｃｍ−１）＝３４４０（ＯＨ）、２９５５（ＣＨ３）、２９２５及び２８５５（ＣＨ２）、１６９５（アミド）
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、（ＣＤ３）２ＳＯ、１１０℃）
δ＝５．３２  （ｂｒ  ｓ，  １Ｈ，  Ｈ−５ａ）、４．８３  ａｎｄ  ４．７６（２ｄ，  ｅａｃｈ  １Ｈ，  Ｊｇｅｍ＝５．６Ｈｚ，  ＣＨ２：ＭＯＭ），  ４．７３  ａｎｄ  ４．６１  （２ｄ，  ｅａｃｈ  １Ｈ，  Ｊｇｅｍ＝５．９Ｈｚ，  ＣＨ２：ＭＯＭ），  ４．２３  （ｂｒ  ｓ，  １Ｈ，１−Ｈ），  ４．１０  （ｂｒ  ｓ，  １Ｈ，  ４−Ｈ），  ３．９９  （ｂｒ  ｓ，  ２Ｈ，  ６，６−Ｈ），  ３．８４  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ１，２＝８．８Ｈｚ，  Ｊ２，３＝９．５Ｈｚ，  ２−Ｈ），  ３．５２  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ２，３＝９．５Ｈｚ，  Ｊ３，４＝７．８Ｈｚ，  ３−Ｈ），  ３．３６  ａｎｄ  ３．２６  （２ｓ，  ｅａｃｈ  ３Ｈ，  ２×ＣＨ３：  ＭＯＭ），  ３．２６−２．８３  （ｍ，  ２Ｈ，  Ｈ−１’ａ，  １’ｂ−Ｈ），  １．６３−１．１７  （ｍ，  １２Ｈ，  ＣＨ２×６：  Ｈ−２’−Ｈ−７’），  １．３８  （ｓ，  ９Ｈ，  ｔ−Ｂｕ：  ＢＯＣ），  ０．８６  （ｔ，３Ｈ，  Ｊ＝６．１Ｈｚ，  ＣＨ２ＣＨ３）
【００７２】
（６）Ｎ−オクチル−  Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−２，３−ｄｉ−Ｏ−メトキシメチル−６−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル−５ａ−カルバ−β−Ｄ−ｘｙｌｏ−ヘキソ−５（５ａ）−エノピラノシルアミン（化合物１８）の合成
【００７３】
【化２８】
2004196659.tif 000028
【００７４】
化合物１７（１５９ｍｇ、０．３３４ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ’−ジメチルホルムアミド（以下「ＤＭＦ」と記載する）溶液（５ｍＬ）にイミダゾール（９１ｍｇ、１．３４ｍｍｏｌ）及びｔｅｒｔ−ブチルクロロジメチルシラン（１００ｍｇ、０．６７０ｍｍｏｌ）を添加し、室温で１時間攪拌した。反応混液を６０ｍＬの酢酸エチルで希釈し、２０ｍＬの水で３回洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥、ろ過後、濃縮した。化合物１８の粗精製物は、シリカゲルクロマトグラフィーグラフィー（２０ｇ、１：６  酢酸エチル／トルエン）により無色の油状物質として化合物１８が得られた（１９４ｍｇ、収率９８％）。
【００７５】
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．２４（１：５  酢酸エチル／トルエン）
［α］２３Ｄ：−１０１°（ｃ＝０．９５  クロロホルム）
ＩＲ（ｎｅａｔ）：υ（ｃｍ−１）＝３４４５（ＯＨ）、２９５５（ＣＨ３）、２９２５及び２８５５（ＣＨ２）、１６９５（アミド）
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、（ＣＤ３）２ＳＯ、１１０℃）
δ＝５．３６  （ｂｒ  ｓ，  １Ｈ，  ５ａ−Ｈ）、４．８３  ａｎｄ  ４．７６（２ｄ，  ｅａｃｈ  １Ｈ，  Ｊｇｅｍ＝６．１Ｈｚ）ａｎｄ  ４．７３  ａｎｄ  ４．６０  （２ｄ，  ｅａｃｈ  １Ｈ，  Ｊｇｅｍ＝６．３Ｈｚ）（２×ＯＣＨ２），  ４．２１  ａｎｄ  ４．１１（ＡＢｑ，  Ｊｇｅｍ＝１３．９Ｈｚ，  ６，６−Ｈ），  ４．１２−４．０４  （ｍ，  ２Ｈ，  １−Ｈ，  ４−Ｈ），  ３．８７  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ１，２＝９．３Ｈｚ，  Ｊ２，３＝９．９Ｈｚ，  ２−Ｈ），  ３．５３  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ３，４＝７．９Ｈｚ，  ３−Ｈ），  ３．３５  ａｎｄ  ３．２６  （２ｓ，  ｅａｃｈ  ３Ｈ，  ２×ＯＣＨ３），  ３．０５−２．８８  （ｍ，  ２Ｈ，  ＮＣＨ２），  １．６０−１．２０  （ｍ，  １２Ｈ，  ６×ＣＨ２），  １．３８  （ｓ，  ９Ｈ，  ＯＣＭｅ３），  ０．８９  （ｓ，  ９Ｈ，  ＣＣＭｅ３），  ０．８６  （ｔ，  ３Ｈ，  Ｊ＝６．８Ｈｚ，  ＣＨ２ＣＨ３），０．０５  （ｓ，  ６Ｈ，  ＳｉＭｅ２）．
元素分析
計算値  Ｃ３０Ｈ５９ＮＯ８Ｓｉ：  Ｃ，６１．０８；  Ｈ，１０．０８；  Ｎ，  ２．３７．
実測値：  Ｃ，  ６０．８２；  Ｈ，  １０．３８；  Ｎ，  ２．４５．
【００７６】
（７）Ｎ−オクチル−  Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−２，３−ｄｉ−Ｏ−メトキシメチル−６−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル−５ａ−カルバ−α−Ｌ−ａｒａｂｉｎｏ−ヘキソ−５（５ａ）−エノピラノシルアミン（本発明物質１７）の合成
【００７７】
【化２９】
2004196659.tif 000029
【００７８】
化合物１８（７５ｍｇ、０．１２７ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液（２ｍＬ）に粉末状の４Åモレキュラーシーブ（７５ｍｇ）とピリジニウムクロロクロメート（４１ｍｇ、０．１９０ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間攪拌した。ピリジニウムクロロクロメート（４１ｍｇ、０．１９０ｍｍｏｌ）を更に加え、１時間更に攪拌した。セライトフィルターを通した後、短いシリカゲルカラムに通した（溶出液：ジエチルエーテル）。溶出液をエバポレートし、粗精製のケトンを得た後、ケトン体をテトラヒドロフラン（以下「ＴＨＦ」と記載する）（０．７ｍＬ）に溶解し、１Ｍリチウム−ｔｒｉ−ｓｅｃ−ブチル水素化ホウ素／ＴＨＦ溶液（０．５１ｍＬ、０．５１ｍｍｏｌ）で、アルゴン雰囲気下−７８℃で３０分間処理した。反応混液を０℃まで暖め、飽和塩化アンモニウムにより反応を停止した。この反応混液に硫酸マグネシウムを添加した後、セライトろ過した。溶出液をエバポレートし、シリカゲルクロマトグラフィー（７ｇ、濃度勾配溶出、１：９→１：６  酢酸エチル／トルエン）により無色の油状物質として本発明物質１７を得た（４９．１ｍｇ、収率６６％）。
【００７９】
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．１６（１：５  酢酸エチル／トルエン）
［α］２３Ｄ：−６８°（ｃ＝１．１３  クロロホルム）
ＩＲ（ｎｅａｔ）：υ（ｃｍ−１）＝３４６０（ＯＨ）、２９５５（ＣＨ３）、２９３０及び２８５５（ＣＨ２）、１６９５（アミド）
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、（ＣＤ３）２ＳＯ、１１０℃）
δ＝５．３６  （ｂｒ  ｓ，  １Ｈ，  ５ａ−Ｈ）、４．７１  ａｎｄ  ４．５９（２ｄ，  ｅａｃｈ  １Ｈ，  Ｊｇｅｍ＝５．６Ｈｚ，）ａｎｄ４．７５−４．６６  （ｍ，  ２Ｈ）（２×ＯＣＨ２），  ４．３８  （ｂｒ  ｓ，  １Ｈ，  １−Ｈ），  ４．１９  ａｎｄ  ４．１２  （２ｄ，  ｅａｃｈ  １Ｈ，  Ｊｇｅｍ＝１３．２Ｈｚ，  ６，６−Ｈ），  ４．１３−４．０２  （ｍ，  ２Ｈ，  ２−Ｈ，  ４−Ｈ），  ３．４６  （ｄｄ，  １Ｈ，Ｊ２，３＝１０．３Ｈｚ，  Ｊ３，４＝２．０Ｈｚ，  ３−Ｈ），  ３．３３  ａｎｄ  ３．２５  （２ｓ，  ｅａｃｈ  ３Ｈ，  ２×ＯＭ２），  ３．１０−２．８６  （ｍ，  ２Ｈ，  １’，１’−Ｈ），  １．６２−１．１６  （ｍ，  １２Ｈ，  ６×ＣＨ２），  １．３９  （ｓ，  ９Ｈ，  ＣＣＭｅ３），  ０．８９  （ｓ，  ９Ｈ，  ＳｉＣＭｅ３），  ０．８６  （ｔ，  ３Ｈ，  Ｊ＝７．３Ｈｚ，  ＣＨ２ＣＨ３），  ０．０５  （ｓ，  ６Ｈ，  ＳｉＭｅ２）．
元素分析
計算値  Ｃ３０Ｈ５９ＮＯ８Ｓｉ：  Ｃ，６１．０８；  Ｈ，１０．０８；  Ｎ，  ２．３７．
実測値：  Ｃ，  ６０．８０；  Ｈ，  １０．３７；  Ｎ，  ２．５３．
【００８０】
（８）Ｎ−オクチル−５ａ−カルバ−α−Ｌ−ａｒａｂｉｎｏ−ヘキソ−５（５ａ）−エノピラノシルアミン（一般式（１）（Ｒ１＝オクチル基、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５＝ヒドロキシル基）の本発明物質１８）の合成
【００８１】
【化３０】
2004196659.tif 000030
【００８２】
ＴＨＦ（０．５ｍＬ）に溶解した本発明物質１７（２９ｍｇ、０．０４９ｍｍｏｌ）に４Ｎの塩酸（１．５ｍＬ）を添加し、６５℃で１．５時間攪拌し、濃縮した。残渣をエタノールで３回エバポレートした。生成物をイオン交換カラム（Ｄｏｗｅｘ  ５０−Ｘ２（Ｈ＋））により精製した。溶出には１％メタノール性アンモニウムを用い、本発明物質１８を白色固体として得た（１２．８ｍｇ、収率９１％）。
【００８３】
融点：１２６〜１２８℃
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．７６（３５：６０：５メタノール／クロロホルム／水）
［α］２３Ｄ：＋１６°（ｃ＝０．６４  メタノール）
ＩＲ（ＫＢｒ−Ｄｉｓｋ）：υ（ｃｍ−１）＝３４８５（ＯＨ）、３２５０（アミン）、２９６０（ＣＨ３）、２９２５及び２８５５（ＣＨ２）
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、１：２  ＣＤ３ＯＤ／ＣＨＣｌ３）
δ＝５．７３  （ｄ，  １Ｈ，  Ｊ１，５ａ  ＝１．８Ｈｚ、５ａ−Ｈ）、４．１６  （ｄ，  １Ｈ，  Ｊ３，４＝４．２Ｈｚ，  ４−Ｈ），  ４．１６  （ｂｒ  ｓ，  ２Ｈ，  ６，６−Ｈ），  ３．６４  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ１，２＝８．１Ｈｚ，  Ｊ２，３＝１０．０Ｈｚ，  ２−Ｈ），  ３．４８（ｄｄ，  １Ｈ，  ３−Ｈ），  ３．１２  （ｄｄ，  １Ｈ，  １−Ｈ），  ２．７８（ｄｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ１’ａ，２’＝７．４Ｈｚ，  Ｊｇｅｍ＝１１．２Ｈｚ）ａｎｄ  ２．５７  （ｄｄｄ，  １Ｈ）（ＮＣＨ２），  １．６４−１．２１（ｍ，  １２Ｈ，  ６×ＣＨ２），  ０．８９  （ｔ，  ３Ｈ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，  ＣＨ２ＣＨ３）．
元素分析
計算値  Ｃ１５Ｈ２９ＮＯ４：  Ｃ，６２．６９；  Ｈ，１０．１７；  Ｎ，  ４．８７．
実測値：  Ｃ，  ６２．６７；  Ｈ，  １０．４７；  Ｎ，  ５．０１．
【００８４】
＜２＞ガラクトシダーゼ阻害活性の測定
ヒト正常β−ガラクトシダーゼ（ＧＰ８）ｃＤＮＡ（Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｂｉｏｐｈｙｓ．  Ｒｅｓ．  Ｃｏｍｍｕｎ．，  １５７（１），  ２３８−２４４，  １９８８）を導入し、ＳＶ４０ウイルス遺伝子で不死化したノックアウトマウス皮膚線維芽細胞を３７℃、５％ＣＯ２、１０％  牛胎児血清（以下「ＦＣＳ」と記載する）を含むダルベッコ改変イーグル培地（以下「ＤＭＥＭ」と記載する：ギブコ社製）で培養し、８割コンフルエントになった状態で１０ｍＭ  のＮＨ４Ｃｌを含む  ＦＣＳ非添加ＤＭＥＭに培地交換した。２４時間培養した後、培養上清を回収し、１０ｍＭ  リン酸緩衝液（ｐＨ＝６．５）で４時間透析した。その後、ＶＩＶＡＰＯＲＥ−２０（Ｖｉｖａｐｏｒｅ社製）で濃縮し、酵素源として使用した。蛍光基質として４−メチルウンベリフェリル−β−Ｄ−ガラクトピラノシドを使用し、被検物質の存在下及び非存在下で、３０分間の酵素活性を測定した（表１）。本発明物質１８の最終濃度は、０．０５、０．１２５、０．２５、０．５、１、２．５、５μＭとした。
【００８５】
【表１】
表１
2004196659.tif 000031
【００８６】
【発明の効果】
本発明によりβ−ガラクトシダーゼ阻害活性を有する新規な擬似糖が提供される。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明物質１〜４の一般的な合成スキームを示す図である。
【図２】本発明物質２〜９の一般的な合成スキームを示す図である。
【図３】本発明物質１０〜１６の一般的な合成スキームを示す図である。
【図４】本発明物質１８の合成中間体である化合物１４の合成スキームを示す図である。
【図５】本発明物質１８の合成中間体である化合物１８を化合物１４から合成するスキームを示す図である。
【図６】化合物１８から本発明物質１７及び１８を合成するスキームを示す図である。
【図１】
2004196659.tif 000034
【図２】
2004196659.tif 000035
【図３】
2004196659.tif 000036
【図４】
2004196659.tif 000037
【図５】
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【図６】
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