(57)【要約】【課題】イオン交換法などの、煩雑になる精製工程を除き、穏やかな条件下で反応を行うことで、安全かつ、工程短縮、高収率、及び、高純度のテアニンを製造することを提供する。【解決手段】アミノ酸が塩を作らない条件下で脱保護、入手の容易な２−ニトロフェニルスルフェニル基（ＮＰＳ）を用い、テアニンの有用な中間体であるNPS−グルタミン酸−γ−エチルアミドを合成し、さらにチオアミド類を用いた脱保護工程を有する、テアニンを安全にかつ、高収率、高純度で製造する。【選択図】      なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
式１：
【化１】
2004203822.tif 000006
（式中、Ｅｔはエチル基を表す）で示される化合物。
【請求項２】
請求項１中の式１で示される化合物の製造方法であって、式２：
【化２】
2004203822.tif 000007
（式中、Ｒは、炭素数が１〜５の直鎖もしくは分岐したアルキル基またはベンジル基を表す）で示される化合物のα−アミノ基を２−ニトロフェニルスルフェニル基で保護し、式３：
【化３】
2004203822.tif 000008
（式中、Ｒは前記と同義である）で示される化合物とした後、エチルアミンを反応させ、式１で示される化合物を得る工程を含む製造方法。
【請求項３】
式４：
【化４】
2004203822.tif 000009
（式中、Ｅｔはエチル基を表す）で示されるテアニンの製造方法において、請求項１中の式１で示される化合物をチオアミド類で脱保護する工程を含むことを特徴とする方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、テアニンの有用な中間体となる新規な２−ニトロフェニルスルフェニル（以下、ＮＰＳという）−グルタミン酸−γ−エチルアミド及びその製造方法と、効率的なテアニンの製造方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
グルタミン酸−γ−エチルアミド、すなわちテアニンは、緑茶の旨味成分としてよく知られている。そのほかにも、リラクゼーション効果、抗ストレス作用、カフェイン興奮抑制作用、制癌剤増強作用等のさまざまな生理作用のあることが解明されてきたことから、食品業界、医薬業界などでその需要はますます高くなっている。しかし、茶葉中には０．５〜２．０重量％しかこの成分が含まれておらず、抽出法では昨今の需要をカバーすることは難しい。そのため、大量合成が可能な化学的合成が必要とされている。
【０００３】
これまでに開示されている化学的合成法としては、例えば、テアニンの合成出発原料として、Ｌ−ピロリドンカルボン酸の金属塩（特許文献１参照）、グルタミン酸−γ−ベンジルエステル（特許文献２参照）、ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−ピロリドンカルボン酸（特許文献３参照）、ターシャリーブチルオキシカルボニル−Ｌ−グルタミン酸（特許文献４参照）、ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−グルタミン酸の酸無水物（特許文献５参照）をそれぞれ重要な出発原料とし、エチルアミンを反応させた後Ｎ保護基を脱離させてテアニンを得る方法がある。
【０００４】
【特許文献１】
特公昭３７−１１６６１号公報
【特許文献２】
特許第２９４７４９２号公報
【特許文献３】
特開平１１−１１６５４２号公報
【特許文献４】
特開２０００−２６３８３号公報
【特許文献５】
特開２００１−２７８８４８号公報
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
しかしながら、従来の製法の多くは反応条件が過酷であるか、工程数が多く煩雑で、しかも収率が低い。
【０００６】
例えば、特許文献１では、無水の１００％エチルアミンを使用し、加圧、加熱条件下で行うため危険性を伴う。特許文献２、特許文献４では、酸性条件下で保護基の脱保護を行うため、得られたテアニンをイオン交換などの精製工程を必要とし煩雑である。また、特許文献３、特許文献５では、引火性の高い、水素を使用して脱保護を行うため、危険性を伴う。
【０００７】
そこで本発明は、上記問題点を解決すべく、より有用な中間体を発明し、さらに現行法より少ない工程で安全に高純度のテアニンの製造方法を提供せんとするものである。
【０００８】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、上記目的を達成するため、アミノ酸が塩を作らない条件下で脱保護を行うことのできる、有用な中間体を発明した。即ち、本発明（１）は、式１：
【化５】
2004203822.tif 000002
（式中、Ｅｔはエチル基を表す）で示される化合物（２−ニトロフェニルスルフェニル−グルタミン酸−γ−エチルアミド）である。
【０００９】
また、本発明者らは、上記の有用な中間体の製造方法を発明した。即ち、本発明（２）は、前記発明（１）中の式１で示される化合物（２−ニトロフェニルスルフェニル−グルタミン酸−γ−エチルアミド）の製造方法であって、式２：
【化６】
2004203822.tif 000003
（式中、Ｒは、炭素数が１〜５の直鎖もしくは分岐したアルキル基またはベンジル基を表す）で示される化合物のα−アミノ基を２−ニトロフェニルスルフェニル基で保護し、式３：
【化７】
2004203822.tif 000004
（式中、Ｒは前記と同義である）で示される化合物とした後、エチルアミンを反応させる工程を含む製造方法である。ここで、Ｒの例として、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、ベンジル基を挙げることができ、メチル、エチルが好適である。
【００１０】
更に、本発明者らは、上記の有用な中間体を利用しての、新規なテアニンの製造方法を発明した。即ち、本発明（３）は、式４：
【化８】
2004203822.tif 000005
（式中、Ｅｔはエチル基を表す）で示されるテアニンの製造方法において、前記発明（１）中の式１で示される化合物（２−ニトロフェニルスルフェニル−グルタミン酸−γ−エチルアミド）をチオアミド類で脱保護を行う工程を含むことを特徴とする方法である。この方法によれば、安全に高純度のテアニンを製造することが可能となる。
【００１１】
【発明の実施の形態】
まず、式１で示されるＮＰＳ−グルタミン酸−γ−エチルアミドの製造方法について説明する。原料である式２の化合物を、メタノール、エタノール、塩化メチレン、テトラヒドロフラン、酢酸エチルなどの一般的な各種有機溶媒中にて、１．０〜２．０倍当量の２−ニトロフェニルスルフェニルクロライドと、塩基としてトリエチルアミン、トリブチルアミン、もしくはピリジン等を作用させることにより、式３で示される、アミノ基の保護されたＮＰＳ−グルタミン酸−γ−メチルエステルを得ることができる。更に、式３で示される化合物に、エチルアミンを反応させることにより、新規なテアニンの有用な中間体としての、式１で示されるＮＰＳ−グルタミン酸−γ−エチルアミドが得られる。この際、エチルアミンは、１００％無水エチルアミンであってもよいが、常温で気体である為、取り扱いにくい。本発明においては、１００％無水エチルアミンでなくとも、例えば、３０〜７０％のエチルアミンの水溶液でも可能であり、そして反応効率からは、７０％程度のエチルアミン水溶液が好適である。
【００１２】
次に、式１で示されるＮＰＳ−グルタミン酸−γ−エチルアミドを用いての、テアニンの製造方法について説明する。ＮＰＳ−グルタミン酸−γ−エチルアミドに対して、１．０〜２．０倍当量のチオアミドを作用させることにより、速やかに反応し、テアニンが得られる。ＮＰＳ基は、塩酸、硫酸、酢酸などの酸を用いても容易に脱保護することができるが、その後イオン交換など煩雑な精製工程が必要となり、収率低下の原因となる。チオアミド類は、特に限定されず、例えば、チオアセトアミド、チオベンズアミド、チオ尿素、２−メルカプト−５−メチル−１，３，５−チアジアゾールなどが挙げられる。また、溶媒としては、水や、酢酸エチル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、メタノール、エタノールなどの一般的な有機溶媒を用いることができる。テアニンは水によく溶け、有機溶媒にはほとんど不溶であることを利用し、脱保護後は固相、有機相、水相のいずれかの２相系で分離容易なものを適宜選択することができる。
【００１３】
反応終了後は、濃縮、ろ過、乾燥を行えば高純度のテアニンを得ることができる。以下に本発明の実施例を示して、さらに具体的に説明する。
【００１４】
【実施例】
グルタミン酸−γ−メチルエステル１６．１ｇ（０．１mol）をメタノール８４mlに溶かし、トリエチルアミン２５．３ｇ（０．２５mol）と２−ニトロフェニルスルフェニルクロライド２２．８ｇ（０．１２mol）を加え、３時間反応させた。反応終了後、減圧下にてメタノールを濃縮し、酢酸エチルで抽出することにより、ＮＰＳ−グルタミン酸−γ−メチルエステル２７．８ｇ（８９％）を得た。
【００１５】
次に、得られたＮＰＳ−グルタミン酸−γ−メチルエステル２７．８ｇ（０．０９mol）に７０％−エチルアミン水溶液５８ｇ（０．９mol）を加え、１５時間反応させた。その後、過剰のエチルアミンを減圧下にて留去し、黄色結晶を得た。これを酢酸エチルで再結晶化し、テアニンの有用な中間体であるＮＰＳ−グルタミン酸−γ−エチルアミド２７．９ｇ（９５％）を得た。物理的特性は以下の通りである：
【００１６】
1H−NMR（４００MHz，CDCl３）δ  ８．２８（１H，ｄ，J＝８．２９Hz）、８．０２（１H，ｄ，J=８．２９Hz）、７．６７（１H，ｄｄ，J=８．４２，８．２９Hz）、７．２８（１H，ｄｄ，J=８．４２，８．２９Hz）、３．７１（３H，ｓ）、３．６６（１H，ｍ）、２．６０（２H，ｍ）、２．２３（２H，ｍ）
【００１７】
更に、ＮＳＰ−グルタミン酸−γ−エチルアミド１３．９ｇ（０．０４mol）をメタノール１１２mlに溶かし、チオアセトアミド３．５ｇ（０．０５mol）を加え、３０分間反応させた。その後、水５０mlを加え、不溶物を濾過し、濾液を減圧下にて留去すると、白色結晶が析出した。これを７０〜８０℃にて加熱し、熱水に溶かし、９９％エタノールを滴下し、析出する白色結晶を濾取した。これを乾燥することにより、テアニン５．４ｇ（７７％）を得た。得られたテアニンのＮＭＲ及び旋光度は以下の通りである：
【００１８】
１H−NMR（４００MHz，D２O）δ  ３．６５（１H，ｔ，J＝６．１Hｚ）、３．０９（２H，ｑ，J＝７．３Hz）、２．２９（２H，ｄｄｄ，J＝７．７，７．３，６．１Hz）、２．０３（２H，ｄｄ，J＝７．７，７．３Hz）、１．１１（３H，ｔ，J＝７．３Hz）、旋光度  ［α］D20＋８．０°（H2O）
【００１９】
上記ＮＭＲ及び旋光度の結果から得られたL−テアニンは、高純度であることがわかった。
【００２０】
【発明の効果】
以上説明したように、従来の方法によれば、イオン交換法による精製工程の手間およびそれに伴う収率の低下があり、効率の良い方法とはいえなかった。だが、本発明の方法によれば、新規なテアニンの有用な中間体であるＮＰＳ−グルタミン酸−γ−エチルアミドを利用して、穏やかな反応条件下で安全に高収率、高純度でテアニンを製造することができる。