(57)【要約】【課題】抗病性形質を有する魚類の選抜方法および種苗の提供。【解決手段】抗病性形質、具体的にはヘテロボツリウム感染に対する抵抗性である抗病性形質を有する魚類、具体的にはフグ目魚類を選抜する方法であって、魚類の体表粘液のｐＨを測定し、特定範囲のｐＨを有することを基準として選抜する、具体的には体表粘液のｐＨが６．３以下あるいは６．６以上である魚類を選抜することを特徴とする方法。選抜対象の魚類が親魚として育成した魚類である。該魚類を親魚として抗病性形質を有する魚類の種苗を生産する方法。上記の選抜された魚類を親魚として得られる種苗、具体的には体表粘液のｐＨが６．３以下あるいは６．６以上である種苗、好ましくはヘテロボツリウム感染に対する抵抗性を有する種苗。【選択図】        図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
抗病性形質を有する魚類を選抜する方法であって、魚類の体表粘液のｐＨを測定し、特定範囲のｐＨを有することを基準として選抜することを特徴とする方法。
【請求項２】
体表粘液のｐＨが６．３以下あるいは６．６以上である魚類を選抜する請求項１の魚類を選抜する方法。
【請求項３】
抗病性形質がヘテロボツリウム感染に対する抵抗性である請求項１または２の魚類を選抜する方法。
【請求項４】
魚類がフグ目魚類である請求項１、２または３の魚類を選抜する方法。
【請求項５】
選抜対象の魚類が親魚として育成した魚類である請求項１ないし４のいずれかの魚類を選抜する方法。
【請求項６】
抗病性形質を有する魚類の種苗を生産する方法であって、請求項５の方法により選抜された魚類を親魚として種苗を生産することを特徴とする方法。
【請求項７】
生産対象の種苗が、体表粘液のｐＨが６．３以下あるいは６．６以上のものである請求項６の種苗を生産する方法。
【請求項８】
生産対象の種苗が、ヘテロボツリウム感染に対する抵抗性を有するものである請求項６または７の種苗を生産する方法。
【請求項９】
請求項５の方法により選抜された魚類を親魚として得られる種苗。
【請求項１０】
体表粘液のｐＨが６．３以下あるいは６．６以上である請求項９の種苗。
【請求項１１】
ヘテロボツリウム感染に対する抵抗性を有する請求項９または１０の種苗。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、魚類の体表粘液のｐＨを測定し、特定範囲のｐＨを有することを基準として選抜することを特徴とする、抗病性形質を有する魚類の選抜方法、および該選抜方法により選抜された魚類を親魚として得られる種苗およびその生産方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
トラフグは人工種苗生産技術の開発で人為的な選抜育種が可能になりつつある。トラフグ養殖において、寄生虫症や細菌症は安定生産の妨げとなるため、非常に大きな問題となっている。特に寄生虫が原因とされるヘテロボツリウム感染症は日本のどの漁場でも発生するため、最も問題とされている。
トラフグの寄生虫であるヘテロボツリウム〔単生類ディクリドフォラ科のＨｅｔｅｒｏｂｏｔｕｒｉｕｍ ｏｋａｍｏｔｏｉ（トラフグえらむし）〕は、トラフグに寄生して、鰓とその周辺より吸血を行うため、トラフグは貧血状態になり成長不良を起こす。本虫の生活史は、卵から孵化後４〜５ヶ月で一生を終えると考えられている。卵から孵化した幼生がまず鰓に寄生し、そこで幼虫となり、５〜６ｍｍ程度に成長する。鰓弁上の幼虫、鰓腔壁の成虫ともに、薬剤や浸透圧の変化にきわめて抵抗性が高く、現在までのところ、完全に駆虫できる方法は開発されていない。養殖現場での本虫に対する対策は、魚を定期的に８００ｐｐｍ前後のホルマリンで１時間程度薬浴することぐらいしかない。
しかし、この処理では幼虫を８０％程度しか駆除できず、さらに成虫に至っては駆除することができない。また、ホルマリンは発ガン性の物質であり、環境汚染等の点から問題が生じてくる。また、過酸化水素を主成分としたヘテロボツリウム症に対する薬浴剤も市販されているが、高水温時に使用すると魚にも悪影響を及ぼす場合があり、その使用には十分な注意が必要である。さらに前述のホルマリン薬浴同様に成虫に対しては駆除効果がない。
【０００３】
このことから、本虫や他の寄生虫に対し経口で効果があるような天然物質の開発が切望されており、本発明者らは人間の肝吸虫に対する寄生虫薬であるプラジカンテルが、トラフグの寄生虫であるヘテロボツリウムに有効であること（特許文献１参照）、ラクトフェリンをヘテロボツリウムに対して効果を有する天然生理活性物質として含有する魚類用飼料（特許文献２参照）、さらに炭素数６ないし１２の脂肪酸を魚類寄生虫に対して効果を有する天然生理活性物質として含有する魚類用飼料（特許文献３参照）等を見いだし既に特許出願している。また、本発明者らは環境を汚染することなく、寄生虫そのものを飼育環境から減少させる防除法（特許文献４参照）も特許出願している。この発明は、ヘテロボツリウム孵化幼生の宿主への定着にはｐＨが関与しており、ｐＨ６．４程度の物質に定着する性質を利用したもので、このｐＨを有する寒天などの障害物を飼育環境中に入れることで、遊泳する幼生の数を減少させるものである。
【０００４】
【特許文献１】
特開平１１−６０４８５号公報
【特許文献２】
特開平１１−１１３５０１号公報
【特許文献３】
国際公開第００／１０５５８号パンフレット
【特許文献４】
特開２０００−３００１０６号公報
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、抗病性形質を有する魚類の簡易な選抜方法の提供、ならびに該選抜方法により選抜された魚類を親魚として得られる抗病性形質を有する種苗の提供を目的とする。
【０００６】
【課題を解決しようとする手段】
本発明者らは、前述の従来法とは全く異なったアプローチで鋭意研究を進めた結果、魚類の体表粘液のｐＨとヘテロボツリウム感染症の相関を見いだし、本発明を完成するに至った。
【０００７】
すなわち、本発明は、抗病性形質、具体的にはヘテロボツリウム感染に対する抵抗性である抗病性形質を有する魚類、具体的にはフグ目魚類を選抜する方法であって、魚類の体表粘液のｐＨを測定し、特定範囲のｐＨを有することを基準として選抜する、具体的には体表粘液のｐＨが６．３以下あるいは６．６以上である魚類を選抜することを特徴とする方法を要旨とする。
【０００８】
選抜対象の魚類が親魚として育成した魚類であり、その場合、本発明は、抗病性形質、具体的にはヘテロボツリウム感染に対する抵抗性である抗病性形質を有する魚類、具体的にはフグ目魚類を選抜する方法であって、親魚として育成した魚類の体表粘液のｐＨを測定し、特定範囲のｐＨを有することを基準として選抜する、具体的には体表粘液のｐＨが６．３以下あるいは６．６以上である魚類を選抜することを特徴とする方法を要旨とする。
【０００９】
また、本発明は、抗病性形質を有する魚類の種苗を生産する方法であって、親魚として育成した魚類の体表粘液のｐＨを測定し、特定範囲のｐＨを有することを基準として選抜する、具体的には体表粘液のｐＨが６．３以下あるいは６．６以上である抗病性形質、具体的にはヘテロボツリウム感染に対する抵抗性である抗病性形質を有する魚類、具体的にはフグ目魚類を選抜し、選抜された魚類を親魚として種苗を生産する、具体的には体表粘液のｐＨが６．３以下あるいは６．６以上の種苗を生産する、好ましくはヘテロボツリウム感染に対する抵抗性を有する種苗を生産することを特徴とする方法。
【００１０】
また、本発明は、上記の選抜された魚類を親魚として得られる種苗、具体的には体表粘液のｐＨが６．３以下あるいは６．６以上である種苗、好ましくはヘテロボツリウム感染に対する抵抗性を有する種苗を要旨とする。
【００１１】
【発明の実施の形態】
本発明の魚類の選抜方法は、魚類の体表粘液のｐＨを測定することにより行われる。種苗から親魚を育成して選抜する時の種苗生産方法としては、通常行われる自然交配、あるいは雌性発生等を含む人工授精の方法が挙げられる。人工授精は常法により行えば良いが、より広範なｐＨを示す体表粘液を有する魚類を得るために、雌性発生をした方が好ましい。
【００１２】
ｐＨの測定は、ｐＨ試験紙やｐＨ計を用いる。例えば生きたままの魚類の頭部、腹部、尾柄部等、粘液に包まれている箇所の粘液にｐＨ計電極を当てて測定すれば良い。この時、ｐＨ計は特に限定されないが、その電極は平面測定用を用いるのが好ましい。このようにして魚類の体表粘液のｐＨを測定し、ｐＨが６．３以下あるいは６．６以上を示すものを選抜することにより、抗病性形質、特にヘテロボツリウム感染に対する抵抗性を有する魚類を選抜することができる。
【００１３】
さらに、上記の方法により得られた抗病性形質を有する魚類を親魚として次世代を作出することにより、抗病性形質を受け継いだ魚、すなわち種苗を得ることができる。体表粘液ｐＨを基準に、次世代に対し選抜を繰り返すことで、この形質が遺伝的に固定された系統を維持することができる。
【００１４】
本発明の魚類は、ヘテロボツリウムが感染する魚類に用いられるが、好ましくはフグ目魚類、特にトラフグが対象となる。
【００１５】
【作用】
本発明により、魚類の体表粘液のｐＨを測定し、特定範囲のｐＨを有することを基準として選抜することを特徴とする、抗病性形質を有する魚類の選抜方法、及び該選抜方法により選抜された魚類を親魚として得られる種苗が提供される。本発明により、抗病性形質を有する魚類として養殖現場に優良な種苗を提供することができる。
【００１６】
【実施例】
以下の実施例によって本発明をより詳細に説明するが、これらは単に例示したのみであり、これらによって本発明は何ら限定されるものではない。
【００１７】
実施例１
雌性発生トラフグの体表粘液ｐＨによるヘテロボツリウム感染性の影響
常法に従い、雌性発生トラフグ群を作出した。すなわち、１匹のトラフグの卵子に、０．４５Ｊ・ｃｍ２の紫外線下に９０秒曝露された不活化トラフグ精子を受精した。この受精卵を受精５分後に、フレンチプレス（５６１５型、大竹製作所製）を用いて静水圧６９ＭＰａ下５分に曝露することにより、雌性発生トラフグを作出した。これにより得た雌性発生魚のうち２３尾の雌性発生魚を抽出し、魚体重１００ｇ程度まで育成した。その後、個々のトラフグが識別可能なようにタグ標識し、各トラフグの体表粘液ｐＨ（頭部、腹部、及び尾柄部の粘液ｐＨ測定値の平均値）をｐＨメーター（ＬＡＢＦ−２２型、ｐＨメーター及び６２６２−１０型ｐＨ電極、堀場製作所製）により２週間おきに３回測定して、体表粘液ｐＨに従い３群に分けた。この３群の内容は、ｐＨ６．３以下が３尾（ｐＨ６．０〜６．３）、ｐＨ６．３〜６．６が１１尾、ｐＨ６．６以上（ｐＨ６．６〜７．２）が９尾であった。これらの魚を２００リットル水槽に収容し、７日間馴致させた。馴致後、７０００個体のヘテロボツリウム孵化幼生を入れ、１時間止水の状態で本虫を感染させた。その後１３日間継続して飼育した。試験期間中の水温は１８．８〜１９．８℃であった。尚、試験期間中の換水は２０回転／日とした。評価は飼育終了時に全ての魚をサンプリングし、その鰓に寄生している本虫の寄生数を比較することで行った。結果を図１に示す。
【００１８】
この結果、体表粘液ｐＨ６．３以下およびｐＨ６．６以上のトラフグの本虫寄生数は明らかにｐＨ６．３〜６．６の魚の本虫寄生数より有意に少ない結果となった。この結果より、体表粘液ｐＨ６．３以下およびｐＨ６．６以上の魚類を選抜することにより、ヘテロボツリウムに抵抗性を有する魚類を選抜することができることが明らかとなった。さらに、このような魚を選出し親魚にすることで、ヘテロボツリウムに対し抵抗性が高い次世代（種苗）を作出できることが示唆された。又、魚類細菌症の多くがｐＨ７〜８程度を増殖至適とすることから、ｐＨ６．３以下のトラフグを親にすることで、魚類細菌症に対しても高い抵抗性を有した魚が獲得できることも示唆された。
【００１９】
【発明の効果】
本発明により、魚類の体表粘液のｐＨを測定し、特定範囲のｐＨを有することを基準として選抜することを特徴とする、抗病性形質を有する魚類の選抜方法、及び該選抜方法により選抜された魚類を親魚として得られる種苗が提供される。本発明により、抗病性形質を有する魚類として養殖現場に優良な種苗を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】実施例１における、トラフグ体表粘液ｐＨとヘテロボツリウム感染性の関連を示す。
【図１】
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