(57)【要約】【課題】安全性が高い天然物を原料とし、優れた性能を有する新規なグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤、プラーク形成抑制剤、歯肉炎及び／または歯周病抑制剤、さらにはそれらを添加して、う食予防作用を付与した口腔用剤、う食予防剤、飲食物等を提供すること。【解決手段】本発明は、βグルカン及び／またはメバロン酸を有効成分として含有することを特徴とする、グルコシルトランスフェラーゼ阻害剤、プラーク形成抑制剤、歯肉炎及び／または歯周病抑制剤、さらにはそれらを添加して、う食予防作用を付与した口腔用剤、う食予防剤、飲食物である。【選択図】　　　なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
βグルカン及び／またはメバロン酸を有効成分として含有することを特徴とするグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤。
【請求項２】
βグルカン及び／またはメバロン酸を有効成分として含有することを特徴とするプラーク形成抑制剤。
【請求項３】
βグルカン及び／またはメバロン酸を有効成分として含有することを特徴とする、歯肉炎抑制剤及び／または歯周病抑制剤。
【請求項４】
βグルカンが、穀物由来、微生物類由来及び／または担子菌類由来である請求項１〜３記載のグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤、プラーク形成抑制剤、歯肉塩抑制剤及び／または歯周病抑制剤。
【請求項５】
請求項１〜４記載のグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤、プラーク形成抑制剤、歯肉炎抑制剤、歯周病抑制剤の群から選ばれる一種または二種以上を含有することを特徴とする口腔用剤。
【請求項６】
請求項１〜４記載のグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤、プラーク形成抑制剤、歯肉炎抑制剤、歯周病抑制剤の群から選ばれる一種または二種以上を含有することを特徴とする、う食予防剤またはう食予防性飲食物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、う蝕の原因となるグルカンを合成する酵素・グルコシルトランスフェラーゼの活性を阻害して虫歯の発生を防ぐ作用があるグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤、口腔内微生物の生育場所となるプラークの形成を抑制して歯周病を防ぐ作用があるプラーク形成抑制剤、歯肉塩、歯周病抑制剤ならびにう蝕予防作用を付与した口腔用剤及び飲食物に関するものである。また、この明細書では、人が飲食する物だけでなく、う蝕を起こすことがある家畜や愛玩動物の飼料または餌も包含する意味で飲食物という。
【０００２】
【従来の技術】
う蝕の発生には口腔内の微生物、特にストレプトコッカス・ミュータンスが産生する酵素・グルコシルトランスフェラーゼが関与している。すなわち、口腔内に残った飲食物中のショ糖の一部がグルコシルトランスフェラーゼの作用によって水不溶性かつ付着性の強いグルカンに変化し、それが口腔内微生物と共に歯の表面に付着してプラーク（歯垢）を形成する。そして、歯垢内の微生物が食物中の糖を代謝して酸を作り、この酸が歯のエナメル質を脱灰し侵食するのがう蝕である。
【０００３】
したがって、う蝕を防ぐには、歯の表面に付着した歯垢を歯磨き等を用いて除くだけでなく、口腔におけるストレプトコッカス・ミュータンスの増殖やグルコシルトランスフェラーゼの作用を阻害することによってグルカンの生成を防止し、ひいてはプラークが生じないようにするのが最も有効である。
【０００４】
このような観点から、近年、グルコシルトランスフェラーゼ阻害作用を有する物質やプラーク形成を抑制する物質を含有させることにより、う蝕予防作用を付与した口腔用剤や飲食物が提供されるようになった。このような用途に適したものとして従来知られているグルコシルトランスフェラーゼ阻害物質は、ムタステイン、生薬タンニン類、エラグ酸、緑茶ポリフェノール、ウーロン茶抽出物等である。また、口腔衛生上において、飲食物の残渣や各種微生物の繁殖など不潔な状態により生じる歯肉炎や歯槽膿漏などの歯周病を予防もしくは治療のためには睡液の分泌を促進させたり、エタノールや各種殺菌剤あるいは抗炎症剤等の使用があるが、その性能は十分とはいえなかった。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の目的は、安全性が高い天然物を原料とし、優れた性能を有する新規なグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤、プラーク形成抑制剤、歯肉炎及び／または歯周病抑制剤、さらにはそれらを添加して、う蝕予防作用を付与した口腔用剤、う蝕予防剤、飲食物等を提供することにある。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、鋭意検討を重ねた結果、βグルカンとメバロン酸が、う蝕予防作用、歯周病予防作用を有することを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００７】
すなわち本発明は、βグルカン及び／またはメバロン酸を有効成分として含有することを特徴とするグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤を提供するものである。
【０００８】
また本発明は、βグルカン及び／またはメバロン酸を有効成分として含有することを特徴とするプラーク形成抑制剤を提供するものである。
【０００９】
また本発明は、βグルカン及び／またはメバロン酸を有効成分として含有することを特徴とする、歯肉炎抑制剤及び／または歯周病抑制剤を提供するものである。
【００１０】
また本発明は、βグルカンが、穀物由来、微生物類由来及び／または担子菌類由来である前記グルコシルトランスフェラーゼ阻害剤、プラーク形成抑制剤、歯肉塩抑制剤及び／または歯周病抑制剤を提供するものである。
【００１１】
また本発明は、前記グルコシルトランスフェラーゼ阻害剤、プラーク形成抑制剤、歯肉炎抑制剤、歯周病抑制剤の群から選ばれる一種または二種以上を含有することを特徴とする口腔用剤を提供するものである。
【００１２】
また本発明は、前記グルコシルトランスフェラーゼ阻害剤、プラーク形成抑制剤、歯肉炎抑制剤、歯周病抑制剤の群から選ばれる一種または二種以上を含有することを特徴とする、う食予防剤またはう食予防性飲食物を提供するものである。
【００１３】
【発明の実施の形態】
本発明でいう、βグルカンは多糖類の一種であり、１−２−β−Ｄ−グルコピラノース結合、１−３−β−Ｄ−グルコピラノース結合、１−４−β−Ｄ−グルコピラノース結合、１−６−β−Ｄ−グルコピラノース結合のうちの少なくとも２種類以上の結合を有し、穀物由来のβグルカン、微生物類由来のβグルカン、担子菌類由来のβグルカンの群から選ばれる一種又は二種以上が好ましい例として挙げられる。
【００１４】
穀物由来のβグルカンについて説明すると、穀物としては、イネ科植物が好ましい。イネ科植物の例としては、米類、小麦類、トウモロコシ類、モロコシ類、ヒエ類、アワ類、キビ類、大麦類、オーツ麦類（カラス麦類）、ライ麦類等の穀類を挙げることができる。特にこれらイネ科植物から抽出によって得られたβグルカンが好ましい。本発明では、抽出によって得られたβグルカンを抽出βグルカンともいう。
【００１５】
このイネ科植物から抽出されたβグルカンは、その抽出方法に特に制限はなく、抽出原料となるイネ科植物に、抽出溶媒を添加し抽出すればよい。また、固液分離された場合の抽出液そのもの、あるいは、抽出液より公知の方法で抽出されたβグルカンを濃縮した液体や固体状のもの、あるいは、抽出液より公知の方法で精製し純度を上げた液体や固体状のもの等、いずれの製造方法で得たものでも、いずれの形態のものでも、いずれの純度のものでも使用可能である。もちろんβグルカン以外の抽出された成分が混合していても何ら問題はない。本発明では、これらを全てイネ科植物から抽出されたβグルカンという。
【００１６】
抽出には、植物全体を原料とできるが、βグルカンの含有量の比較的高い種子を用いるのが好ましい。全体を粉砕したもの（全粒粉）をはじめ、穀類の精製工程で得られる糠、フスマ、麦芽、胚芽、胚乳部位のいずれを用いてもよい。好ましくは大麦類やオーツ麦類の全粒粉や穀粒を外周部より搗精した胚乳部分やその際発生する糠、米糠、小麦やトウモロコシ類のフスマや胚芽等であり、更に好ましくは大麦類やオーツ麦類の全粒粉や穀粒を外周部より搗精した胚乳部分やその際発生する糠である。
【００１７】
また、イネ科植物から抽出されたβグルカンは、１−２−β−Ｄ−グルコピラノース結合、１−３−β−Ｄ−グルコピラノース結合、１−４−β−Ｄ−グルコピラノース結合、１−６−β−Ｄ−グルコピラノース結合を少なくとも２種類以上有するβグルカンが好ましく、１−３，１−４−β−Ｄ−グルコピラノース結合よりなるβグルカンを含有することが好ましい。
【００１８】
βグルカンのイネ科植物からの抽出方法を説明すると、イネ科植物中のβグルカンは、水溶性高分子として水溶液として溶解させることができ、例えばイネ科植物の穀類粉末に水、温水、熱水あるいは塩溶液、更には酸、アルカリ性の水溶液、有機溶媒等を用いて、対粉２〜１００倍量の溶媒にて任意の時間、任意の温度で抽出することができる。更に抽出液を固液分離してβグルカンを得ることができる。これらの中でも、水、温水又は熱水で抽出されたβグルカンが好ましく、温度８０℃以下４℃以上の温水で抽出されたβグルカンがより好ましい。更に抽出時に抽出促進剤等を加えてもよい。
【００１９】
具体的には、大麦から高分子量のβグルカンを得る方法としては、例えば、多ろう質大麦を原料とし、水抽出により製造する方法（特公平４−１１１９７号公報）、あるいは、大麦、オーツ麦を原料として、アルカリ抽出、中和、アルコール沈殿により、重量平均分子量１０万〜１００万のβグルカンを得る方法（特公平６−８３６５２号公報）、搗精歩留まり８２％以下の大麦糠類を原料として、８０〜９０℃の熱水にてβグルカンを抽出する方法（特開平１１−２２５７０６号公報）等で得られたβグルカン、またこれらの製造方法で得られたβグルカンを更に公知の方法で低分子化βグルカンとしたもの。例えば低分子化の方法としては、公知である多糖類の加水分解反応のいずれもが利用可能である。例えば、水溶性多糖類は、酸存在下に加圧加熱により加水分解することが知られており、これを利用して低分子化することができる。また、酵素による加水分解反応を利用した低分子化も有効で、酵素としては、１，３−βグルカナーゼ等を用いることができる。更にまた、ＷＯ９８／１３０５６号公報、特開２００２−９７２０３号公報等の方法により、原料穀物から直接抽出して得たβグルカンも用いることができる。また、特開２００２−１０５１０３号公報に記載の抽出促進剤等を使用してもよい。
【００２０】
本発明に用いられる穀物由来のβグルカンは、高分子体で、いずれの重量平均分子量を持つβグルカンも使用可能であるが、分子量の低下と共に水溶性が増すため、分子量３００万以下、好ましくは５０万以下、更に好ましくは１０万以下のものがよい。例えばイネ科植物から抽出して得たβグルカンは、水溶性が良くなるように、公知の方法で低分子化してもよく、直接低分子量のβグルカンを抽出してもよい。
【００２１】
微生物類由来のβグルカンについて説明すると、微生物類は、細胞自身がその細胞壁に多量のβグルカンを含有しており、微生物類をそれぞれの増殖培地に接種し菌体を増殖させることで得られる培養細胞をそのまま用いることができる。また、培養細胞を破砕し内容物を除去して得られた培養細胞壁残査、あるいは、培養細胞または培養細胞を破砕し内容物を除去して得られた培養細胞壁残査より抽出されたβグルカンをそのまま、あるいは精製したもののいずれでも用いることができるが、抽出されたβグルカンを用いることが好ましい。
【００２２】
また、菌体外に分泌生産されたβグルカンを利用することも可能であり、培養終了後の培養液をそのまま、あるいは培養液からβグルカンを単離・精製操作を行った後のβグルカンを用いることができるが、培養液からβグルカンを単離・精製操作を行なった後のβグルカンを用いるのが好ましい。
【００２３】
微生物類由来のβグルカンは、培養細胞または培養細胞を破砕し内容物を除去して得られた培養細胞壁残査より抽出されたβグルカンをそのまま、あるいは精製して用いるのが好ましく、さらに、微生物類の菌体外に分泌生産されたβグルカンを培養液とともに、あるいは培養液から精製したものを用いるのが最も好ましい。
【００２４】
微生物由来のβグルカンを得るに適した微生物類は、従来より食用に供せられている微生物類が安全性が高く適している。すなわち、酵母菌、乳酸菌、納豆菌、酢酸菌、麹菌、クロレラやスピルリナなどの藻類、アウレオバシジウム（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ）属の微生物類である。
【００２５】
酵母菌としては、ビール、焼酎、日本酒、ワイン、ウイスキーなどのアルコール醸造や製パン工程で使用されるサッカロマイセス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）属に分類される酵母類や圧搾パン酵母、醤油醸造で使用される酵母類、微生物蛋白質生産に使用されるキャンディダ（Ｃａｎｄｉｄａ）属などが挙げられる。
【００２６】
乳酸菌としては、桿菌のラクトバシラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属やビフィドバクテリウム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属、球菌のロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属、ペディオコッカッス（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ）属、ストレプトコッカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）属、ラクトコッカス（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ）属が通常使用されるが、その他、エンテロコッカス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ）属、バゴコッカス（Ｖａｇｏｃｏｃｃｕｓ）属、カルノバクテリウム（Ｃａｒｎｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属、アエロコッカス（Ａｅｒｏｃｏｃｃｕｓ）属、テトラゲノコッカス（Ｔｅｔｒａｇｅｎｏｃｏｃｃｕｓ）属の乳酸菌を利用することができる。具体的な乳酸菌株としては、ラクトバシルスブルガリス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ　ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ）、ラクトバシルスヘルベティカス（Ｌ．ｈｅｌｖｅｔｉｃｕｓ）、ラクトバシルスアシドフィルス（Ｌ．ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ）、ラクトバシルスラクティス（Ｌ．ｌａｃｔｉｓ）、ラクトバシルスカゼイ（Ｌ．ｃａｓｅｉ）、ラクトバシルスブレビス（Ｌ．ｂｒｅｖｉｓ）、ラクトバシルスプランタラム（Ｌ．ｐｌａｎｔａｒｕｍ）、ラクトバシルスサケ（Ｌ．ｓａｋｅ）、ストレプトコッカスサーモフィルス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ　ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）、ストレプトコッカスラクティス（Ｓ．ｌａｃｔｉｓ）、ストレプトコッカスクレモリス（Ｓ．ｃｒｅｍｏｒｉｓ）、ビフィドバクテリウムロンガム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｌｏｎｇｕｍ）、ビフィドバクテリウムビフィダム（Ｂ．ｂｉｆｉｄｕｍ）、ビフィドバクテリウムブレーベ（Ｂ．ｂｒｅｖｅ）、ビフィドバクテリウムインファンティス（Ｂ．ｉｎｆａｎｔｉｓ）、ロイコノストッククレモリス（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ　ｃｒｅｍｏｒｉｓ）、ロイコノストックメセンテロイデス（Ｌｎ．ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）、ロイコノストックオエノス（Ｌｎ．ｏｅｎｏｓ）、ペディオコッカスアシディラクティシ（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ　ａｃｉｄｉｌａｃｔｉｃｉ）、ペディオコッカスセレビシエ（Ｐ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）、ペディオコッカスペントサセウス（Ｐ．ｐｅｎｔｏｓａｃｅｕｓ）など従来使用されている乳酸菌の１種類または２種類以上を使用できる。これらは単品で使用してもよく、２種類以上を共生させてもよい。またビフィドバクテリウム菌の培養とその他乳酸菌の培養を別々に培養し混合してもよい。
【００２７】
アウレオバシジウム（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ）属に属する微生物としては、当該微生物を培養することによって菌体外にβ結合を有するグルコース重合体を生産する菌株であるならばいずれでもよく、その例としてはアウレオバシジウムプルランス（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ　ｐｕｌｌｕｌａｎｓ）の菌株であり、具体的にはＩＦＯ４４６６、ＩＦＯ６３５３、ＩＦＯ７７５７、ＡＴＣＣ９３４８、ＡＴＣＣ３０９２、ＡＴＣＣ４３３０２３等を用いることができる。
【００２８】
その他、納豆菌のバシルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）属菌株、酢酸菌であるアセトバクター（Ａｃｅｔｏｂａｃｔｏｒ）属の菌株、麹菌類であるアスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）属、ペニシリウム（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ）属、クロレラやスピルリナなどの藻類、乾燥クロレラ粉末、プルランを菌体外に分泌生産することが知られているアウレオバシジウム（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ）属の菌株、その他食品添加物として使用される増粘多糖類を生産することが知られているキサントモナス（Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓ）属、アエロモナス（Ａｅｒｏｍｏｎａｓ）属、アゾトバクター（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｏｒ）属、アルカリゲネス（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）属、エルウィナ（Ｅｒｗｉｎｉａ）属、エンテロバクター（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｏｒ）属、スクレロティウム（Ｓｃｌｅｒｏｔｉｕｍ）属、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属、アグロバクテリウム（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属、マクロホモプシス（Ｍａｃｒｏｐｈｏｍｏｐｓｉｓ）属の菌株を挙げることができる。
【００２９】
担子菌類由来のβグルカンについて説明すると、担子菌類は、子実体や菌糸が塊状に集合した菌核に多量のβグルカンを含有しており、微粉砕したもの、あるいは、粉砕物から抽出された抽出物、あるいは抽出物からβグルカンを精製したもの、などのいずれでも担子菌類由来のβグルカンとして使用できる。また、担子菌類の胞子を発芽させ、菌糸体をそれぞれの増殖培地に接種し菌体を増殖させることで得られる培養細胞をそのまま用いることができる。あるいは、培養細胞を破砕し内容物を除去して得られた培養細胞壁残査、あるいは、菌糸体培養細胞または菌糸体培養細胞を破砕し内容物を除去して得られた細胞壁残査より抽出されたβグルカンをそのまま、あるいは精製したものなど、いずれでも担子菌類由来のβグルカンとして用いることができる。また、菌体外に分泌生産されたβグルカンを利用する場合は、培養液をそのまま、あるいは、培養後の培地より分離・精製されたβグルカンを担子菌由来のβグルカンとして用いることができる。
【００３０】
これらのうち、子実体や菌核を微粉砕し、それらから抽出したβグルカンをそのまま、あるいは精製して、菌糸体培養細胞あるいは、菌糸体培養細胞を破砕し内容物を除去して得られた細胞壁残査より抽出されたβグルカンをそのまま、あるいは精製して用いるのが好ましい、さらに、菌体外に分泌生産されたβグルカンを培養液とともに、あるいは、培養液から精製したものを用いるのがさらに最も好ましい。
【００３１】
担子菌類としては栽培品種が最も好ましいが、商業生産に供せられていない端子菌類からのβグルカンも本発明に利用することができる。例としては、アガリクス・ブラゼイ、アミガサタケ、アミタケ、エゾハリタケ、エノキタケ、カンゾウタケ、キクラゲ、キヌガサタケ、クリタケ、サケツバタケ、ササクレヒトヨタケ、サンゴハリタケ、シイタケ、ショウロ、シロキクラゲ、シロタモギタケ、スギヒラタケ、タモギタケ、チョレイマイタケ、ツバヒラタケ、冬中夏草、ナメコ、ナラタケ、ナラタケモドキ、ニオウシメジ、ニカワウロコタケ、ニカワハリタケ、ヌメリスギタケ、ヌメリスギタケモドキ、ハツタケ、ヒラタケ、ブクリョウ、フクロタケ、ブナシメジ、ブナハリタケ、ホンシメジ、マイタケ、マスタケ、マツオウジ、マッシュルーム、マツタケ、マンネンタケ、ムキタケ、ムラサキシメジ、ヤマドリタケ、ヤマブシタケ、ヤナギマツタケなどが挙げられる。
【００３２】
微生物類や担子菌類の細胞壁残査をβグルカンとして単離する方法は、培養した微生物菌類や培養した菌糸体あるいは栽培した菌核や子実体に適当量の溶媒を加え、自己消化あるいは加水分解酵素の添加により細胞壁の一部を破壊し内容物を流去させて、残査成分を回収することで細胞壁残査をβグルカンとして単離することができる。また、フレンチプレスや超音波破砕機などの物理的力により微生物菌類や担子菌類の細胞にダメージを与え一部を破壊し、内容物を除去し、残査を回収することでβグルカンとして得ることができる。
【００３３】
微生物類、担子菌類のβグルカンの抽出方法は、特に制限はなく、抽出原料となる微生物類、担子菌類に、抽出溶媒を添加し抽出すればよい。抽出溶媒は、水、塩溶液、酸水溶液、アルカリ水溶液、有機性溶媒、などの一種又は二種以上の混合溶媒などを用いることができる。また細胞壁を分解する酵素を併用することで抽出効率を高めることができる。抽出物は、固液分離された場合の抽出液そのもの、あるいは、抽出液より公知の方法で抽出されたβグルカンを濃縮した液体や固体状のもの、あるいは、抽出液より公知の方法で精製し純度を上げた液体や固体状のもの等、いずれの製造方法で得たものでも、いずれの形態のものでも、いずれの純度のものでも使用可能である。もちろんβグルカン以外の抽出された成分が混合していても何ら問題はない。本発明では、これらを全て微生物類、担子菌類から抽出されたβグルカンという。更に、βグルカンの微生物類、担子菌類からの抽出方法を説明すると、本発明に係るβグルカンは、水溶性高分子として水溶液として溶解させることができ、例えば担子菌であり、一般に市販されているキノコを乾燥させ、粉砕した粉末に水、温水、熱水あるいは塩溶液、更には酸、アルカリ性の水溶液、有機溶媒等を用いて、対粉２〜１００倍量の溶媒にて任意の時間、任意の温度で抽出することができる。更に抽出液を固液分離してβグルカンを得ることができる。これらの中でも、水、温水又は熱水で抽出されたβグルカンが好ましく、温度８０℃以下４℃以上の温水で抽出されたβグルカンがより好ましい。更に抽出時に酵素溶液などの抽出促進剤等を加えてもよい。
【００３４】
また、微生物類、担子菌類由来のβグルカンは、１−２−β−Ｄ−グルコピラノース結合、１−３−β−Ｄ−グルコピラノース結合、１−４−β−Ｄ−グルコピラノース結合、１−６−β−Ｄ−グルコピラノース結合を少なくとも２種類以上有するβグルカンが好ましく、特に１−３−β−Ｄ−グルコピラノース結合、１−４−β−Ｄ−グルコピラノース結合よりなるβグルカン、あるいは、１−３−β−Ｄ−グルコピラノース結合、１−６−β−Ｄ−グルコピラノース結合よりなるβグルカン、あるいは、１−３−β−Ｄ−グルコピラノース結合，１−４−β−Ｄ−グルコピラノース結合，１−６−β−Ｄ−グルコピラノース結合よりなるβグルカンを含有することが好ましい。
【００３５】
本発明に用いられるβグルカンは水溶性のものが特に好ましい。う蝕の発生には口腔内の微生物、特にストレプトコッカス・ミュータンスが産生する酵素・グルコシルトランスフェラーゼが関与しており、口腔内に残った飲食物中のショ糖の一部がグルコシルトランスフェラーゼの作用によって水不溶性かつ付着性の強いグルカンに変化し、それが口腔内微生物と共に歯の表面に付着してプラーク（歯垢）を形成することがわかっている。本発明で用いられるβグルカンは、この口腔内での、水不溶性かつ付着性の強いグルカンの生成を抑える効果があると考えられる。
【００３６】
本発明に用いられる微生物類または担子菌類由来βグルカンは、高分子体で、いずれの重量平均分子量を持つβグルカンも使用可能であるが、分子量の低下と共に水溶性がよくなるため、分子量３００万以下、好ましくは５０万以下、更に好ましくは１０万以下のものがよい。微生物類または担子菌類類から得たβグルカンは、水溶性が良くなるように、公知の方法で低分子化してもよく、直接低分子量のβグルカンを抽出してもよい。
【００３７】
次にメバロン酸について説明する。本発明でいうメバロン酸とは、自然界において、極めて多くの生物のイソプレノイド関連物質生合成代謝に関与しているが、そのラクトン型をとったものがメバロノラクトンであり、メバロノラクトンは水溶液中ではメバロン酸として存在する。本明細書では、メバロン酸とメバロノラクトンは同義語として扱う。
【００３８】
メバロン酸の大量生産の方式としては例えば、微生物から生産する方法が知られており（特公平７−８９９３８号公報、特公平７−８９９３９号公報、特公平７−８９９４０号公報、特公平７−５１０６８号公報、特許第２７６３７８２号公報等参照）、この方法では、天然型であるＲ−メバロン酸が得られる。
【００３９】
また、化学合成によって得られたメバロン酸には２種の光学異性体、Ｒ−メバロン酸及びＳ−メバロン酸が存在するが、本発明では、これらのラセミ体をそのまま使用することができ、また、天然型のＲ−メバロン酸のみを分割して使用することもできる。もちろんＳ−メバロン酸のみを分割して使用することも可能である。
【００４０】
本発明で用いられるメバロン酸は、生体への適合性や安全性の点から天然型のＲ−メバロン酸が好ましい。
【００４１】
また、本発明ではメバロン酸として、メバロン酸の１価若しくは２価の金属塩、例えば、ナトリウム、カリウム、カルシウム等の塩、あるいは、アルコール類、例えば、メチルアルコール、エチルアルコール、ブチルアルコール、プロピレングリコール、グリセリン、イソプロピルアルコール等とのエステルを使用することもできる。塩においてはＲ−メバロン酸塩及びＳ−メバロン酸塩が存在し、エステルにおいてはＲ−メバロン酸エステル及びＳ−メバロン酸エステルが存在し、これらのラセミ体もそのまま使用できるが、生体への適合性や安全性の点から天然型のＲ−メバロン酸塩及びＲ−メバロン酸エステルが好ましい。
【００４２】
本発明のグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤、プラーク形成抑制剤、歯肉炎抑制剤、歯周病抑制剤は、前述したような、βグルカン、メバロン酸を有効成分として含有する。それぞれ、有効成分として、単独で配合してもよいが、併用することにより更に相乗効果が期待できる。その含有量は、特に限定されないが、βグルカンの場合、グルコシルトランスフェラーゼ阻害剤、プラーク形成抑制剤、歯肉炎抑制剤、歯周病抑制剤それぞれの全量に０．０１〜１００重量％が好ましい。メバロン酸の場合、あるいはβグルカンとメバロン酸を併用する場合も、それぞれ、グルコシルトランスフェラーゼ阻害剤、プラーク形成抑制剤、歯肉炎抑制剤、歯周病抑制剤それぞれの全量に０．０１〜１００重量％が好ましい。
【００４３】
本発明によるグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤には、βグルカン、メバロン酸以外に、他の公知のグルコシルトランスフェラーゼ阻害物質、任意の助剤、賦形剤、溶液として利用に供するための水または有機溶剤等を含有させることができる。同様に本発明のプラーク形成抑制剤、歯肉炎抑制剤、歯周病抑制剤には、βグルカン、メバロン酸以外に、他の公知のプラーク形成抑制剤、歯肉炎抑制剤、歯周病抑制剤、任意の助剤、賦形剤、溶液として利用に供するための水または有機溶剤等を含有させることができる。本発明のグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤、プラーク形成抑制剤、歯肉炎抑制剤、歯周病抑制剤は、単独、もしくは二種以上混合してもよい。
【００４４】
本発明によるグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤やプラーク形成抑制剤は、口腔用剤に添加して、その作用を口腔におけるグルカン生成の防止とプラーク形成の抑制に利用することができる。また、歯肉炎抑制剤や歯周病抑制剤は、口腔剤に添加して、歯肉炎、歯周病の抑制に利用することができる。
【００４５】
添加対象として適当な口腔用剤の例としては、各種歯磨き類、マウスウォッシュ、トローチ、チューインガム、口腔用パスタ、歯肉マッサージクリーム、うがい剤、口中清涼剤等がある。
【００４６】
本発明のグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤、プラーク形成抑制剤、歯肉炎抑制剤、歯周病抑制剤の添加により他の口腔用剤構成成分や口腔用剤製造法が制限されることはなく、他の構成成分や添加剤の例としては、たとえばリン酸水素カルシウム、炭酸カルシウム、不溶性メタリン酸ナトリウム、アルミノシリケート、無水ケイ酸、レジン等の研磨剤；長鎖アルキル硫酸ナトリウム、ラウリルスルホ酢酸ナトリウム、ラウリルジエタノールアマイド、ショ糖脂肪酸エステル等の界面活性剤；ＣＭＣ、ヒドロキシエチルセルロース、アルギン酸塩、カラギーナン、アラビアガム、ポリビニルアルコール等の粘結剤；ポリエチレングリコール、ソルビトール、グリセリン、プロピレングリコール等の粘稠剤；サッカリン、ステビオサイド類、グリチルリチン酸、ソーマチン、アスパルテーム等の甘味剤；デヒドロ酢酸、デヒドロ酢酸ナトリウム等の防腐剤；メントール、カルボン、オイゲノール、アネトール、ハッカ油、スペアミント油、ペパーミント油、ユーカリ油、ジンジャー油、アニス油等の香料；各種色素等、口腔用剤製造に通常使用される原料を製品の種類や用途に応じて任意に選択し、常法により製造することができる。
【００４７】
また、口腔用剤に、他の公知のグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤、プラーク形成抑制剤、歯肉炎抑制剤、歯周病抑制剤を併用してもよく、さらに、ストレプトコッカス・ミュータンスに対して有効な抗菌剤を添加してもよい。任意の抗炎症剤、抗菌剤、消臭剤等を添加することにより、口腔用剤として一層すぐれたものを提供することもできる。添加可能な抗炎症剤の例としては、アセンヤク、カンゾウ、ウワウルシ、オウゴン、コウキ、サイコ、サンザシ、シソ、シャクヤク、ソウハクヒ、キョウニン、タイソウ、チョウジ、トウニン、ニクズク、ボタンピ、クワの葉等の抽出物；アズレン、アラントイン、ウルソール酸、オレアノール酸、グリチルリチン酸、グリチルレチン酸またはその誘導体；トコフェロール、トラネキサム酸等を挙げることができ、また、添加可能な抗菌剤の例としては、ゴバイシ、サイシン、サンショ、ショウキョウ、ディル、タイム、ローズマリー、油溶性甘草エキス等の抽出物；アスコルビン酸、ムタスティン、フミン酸、リノール酸、リノレン酸等を挙げることができる。さらに、併用可能な消臭剤の例としては、アマチャ、ウイキョウ、ウラジロガシ、ケイヒ、コショウ、メース、セージ、シソ、イチョウ、カキ葉、緑茶、ウーロン茶、トウガラシ、タマリンドハスク等の抽出物；ロジン、カキ渋、アクチゾル、クロロフィリン誘導体、エラグ酸、クロルヘキシジン、メイラード反応物等を挙げることができる。
【００４８】
本発明のβグルカン及び／またはメバロン酸を有効成分とする、グルコシルトランスフェラーゼ阻害物質、プラーク形成抑制剤、歯肉炎抑制剤、歯周病抑制剤は、実用濃度では容易に水に溶ける。したがって、これを口腔用剤特に水性口腔溶剤に配合するのに特に困難な点はない。その好適添加率は活性の強さや添加対象物によって異なるが、口腔用剤全量に対して、有効成分であるβグルカンとメバロン酸の合計量が、約０．００１〜５．０重量％が適量であり、特に好ましい配合率は約０．１〜１．０重量％である。
【００４９】
本発明によるグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤、プラーク形成抑制剤、歯肉炎抑制剤、歯周病抑制剤は、口腔用剤として使用するだけでなく、飲食物、特にショ糖を含有する飲食物に添加して、口腔におけるグルカンおよびプラークの生成防止ひいてはう蝕の予防に利用される、う食予防剤、さらにはう食予防性飲食物とすることができる。う食予防剤の添加対象飲食物として適当なものの例には、清涼飲料、菓子、パン、キャンディー、チューインガム、グミ、ゼリー、チョコレート、錠菓、加工食品、ペットフード、飼料等があり、添加することにより、これらはう食予防性飲食物となる。
【００５０】
【実施例】
以下、実施例を示して本発明を説明する。
【００５１】
〔試験例１〕穀物由来のβグルカン含有量の測定
穀物由来のβグルカンの分析は、メガザイム社のβグルカン測定キットを用いて、ＭｃＣｌｅａｒｙ法（酵素法）にて行った。まず、測定サンプルが粉体の場合、５００μｍ（３０メッシュ）のふるいにかけ、水分含量を測定し、その１００ｍｇを１７ｍｌチューブに取り、５０％エタノール溶液を２００μｌ加え、分散させた。次に４ｍｌの２０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ６．５）を加え、よく混合した後、煮沸した湯浴中にて１分間加温した。よく混合し、更に２分間、湯浴中で加熱した。５０℃に冷却後、５分間放置してから、各チューブにリケナーゼ酵素溶液（キットに付属するバイアルを２０ｍｌの２０ｍＭリン酸緩衝液で希釈、残量は凍結保存）の２００μｌ（１０Ｕ）を加え、１時間、５０℃にて反応させた。チューブに２００ｍＭ酢酸緩衝液（ｐＨ４．０）を、５ｍｌ加えて、静かに混合した。室温に５分間放置し、遠心分離にて上清を得た。１００μｌを３本のチューブに取り、１本には１００μｌの５０ｍＭ酢酸緩衝液（ｐＨ４．０）を、他の２本には１００μｌ（０．２Ｕ）のβグルコシターゼ溶液（キットに付属するバイアルを２０ｍｌの５０ｍＭ酢酸緩衝液で希釈、残量は凍結保存）を加え、５０℃にて１０分間、反応させた。３ｍｌのグルコースオキシターゼ／ベルオキシターゼ溶液を加えて、５０℃にて２０分間反応させ、各サンプルの５１０ｎｍにおける吸光度（ＥＡ）を測定した。βグルカン含有量は、次式により求めた。
【００５２】
βｇｌｕｃａｎ（％，Ｗ／Ｗ）＝（ＥＡ）×（Ｆ／Ｗ）×８．４６
Ｆ＝（１００）／（グルコース１００μｇの吸光度）
Ｗ＝算出された無水物重量（ｍｇ）
【００５３】
また、測定サンプルがβグルカンを抽出した抽出液（液体）の場合は、以下のように抽出物（固体あるいは粉末）としてから含有量を測定すればよい。すなわち、βグルカン抽出液に２倍量のエタノールを添加しよく混合してから遠心分離にて沈殿を回収し、よく乾燥させ粉砕し、βグルカン抽出物（固体）とした。βグルカン抽出物は、水分含有量を測定後、メガザイム社のβグルカン測定キットを用いて、ＭｃＣｌｅａｒｙ法（酵素法）にて分析した。各沈殿サンプル５０ｍｇを１７ｍｌチューブに取り、５０％エタノール溶液を２００μｌ加え、分散させた。その後は上記と同様に測定した。
【００５４】
〔試験例２〕微生物類または担子菌類由来のβグルカン含有量の測定
βグルカンの分析は、アルコールによって沈殿する全多糖量をフェノール硫酸法にて測定し、引き続き沈殿させた多糖中のβグルカンの確認・定量を生化学工業（株）の（１−３）−β−Ｄ−結合を含むβグルカンの検出・測定用キットを用いて行った。まず、測定サンプル中の全多糖量をフェノール硫酸法にて測定した。すなわち、サンプル溶液３０μｌに蒸留水３０μｌを加え、ここに３００ｍＭのＮａＣｌを含むリン酸緩衝液（ｐＨ６．９）を１２０μｌ加え、さらにエタノール５４０μｌ（３倍量）を添加し、−１５℃に１０分間放置して多糖を沈殿させた。上清を除去後、１００μｌの蒸留水を添加して溶解させた。ここに５％フェノール水溶液の１００μｌ、硫酸５００μｌを加え、反応させた。サンフ゜ルを加えず蒸留水１００μｌにフェノール液、硫酸を加えたものをブランクとして、４９０ｎｍの吸光度を測定した。なお、プルランの１０ｍｇ／ｍｌから２倍希釈系列を作成したものを標準サンプルとして使用して検量線を作成し、多糖量の定量を実施した。
【００５５】
次に、全多糖量が１〜０．１ｍｇ／ｍｌ前後の溶液をまず、０．５ＭのＮａＯＨにて１０倍希釈し、引き続きβグルカンフリーの蒸留水にて希釈し、１０−１０まで希釈液を調製した。βグルカン希釈液の５０μｌをチューブにとり、主反応試薬　５０μｌを添加して、３７℃にて３０分間インキュベートした。続いて亜硝酸ナトリウム溶液５０μｌ、スルファミン酸アンモニウム５０μｌ、Ｎメチル２ピロリドン溶液５０μｌを加え、反応させた後、溶液の吸光度５４５ｎｍ（対象波長６３０ｎｍ）を測定した。なお、添付のβグルカン標準品で７．５〜６０ｐｇ／ｍｌのβグルカン溶液にて検量線を得て、各βグルカン溶液の濃度を算出した。
【００５６】
〔試験例３〕βグルカン分子量の測定
βグルカンの分子量測定は、以下の通りとした。すなわち、抽出物の５ｍｇをチューブに取り、０．５ｍｌの蒸留水を加えて、沸騰水中で溶解させた。０．２２μｍのフィルターを通してＨＰＬＣ用のサンプルとした。分離にはＨＰＬＣゲル濾過カラムであるＳｈｏｄｅｘのパックドカラムＫＳ−８０５（昭和電工社製）を用い、流速０．６ｍｌ／ｍｉｎ．、温度５０℃、検出にはＲＩ検出器、分離溶媒は水で実施した。分子量マーカーとしてはＳｈｏｄｅｘプルラン標準液Ｐ−８２（昭和電工社製）を用いて測定した。
【００５７】
抽出βグルカンが抽出液（液体）の場合は、まず、２倍量のエタノールを加え、−２０℃に冷却して１時間、放置し、沈殿を得た。得られた沈殿の５ｍｇをチューブに取り、以下、抽出物の場合と同様に操作して、分子量を測定した。
【００５８】
〔穀物由来βグルカン原料調製及び抽出促進剤の製造例〕
もち性裸大麦を研削式搗精機により削り、歩留まり８２％まで精麦した。このとき発生した糠を糠―１とした。歩留まり８２％まで精麦した大麦は、さらに研削式搗精機により削り、歩留まり５５％まで精麦した。このとき発生した糠を粉砕物−１とした。容器（５０Ｌ）に水道水２０Ｌを加え、撹拌しながら、１５℃に調温した。これに糠―１の６ｋｇを加え、２時間撹拌抽出し、連続遠心機にて固液分離後、上清を凍結乾燥し、抽出促進剤４５０ｇを得た。
【００５９】
製造例１〔穀物由来βグルカンの抽出例〕
容器（７０Ｌ）に水道水３０Ｌを加え、撹拌しながら、上記抽出促進剤を１５０ｇ加え、溶解後、上記粉砕物―１の７．５ｋｇを加えた。２時間、５０℃で撹拌抽出してから連続遠心機にて固液分離後、上清を得た。得られた上清を煮沸し、冷却後に１５Ｌのわずかに粘調なβグルカン液を得た。得られたβグルカン液に２倍量のエタノールを加えて沈殿を回収、乾燥させて、βグルカン４６０ｇ（サンプル１）を得た。試験例１に従い分析の結果、βグルカンの純度は９１％であった。試験例２に従い分析の結果、抽出物は、分子量２０万〜１万に検出され、最大ピークは、分子量４万であった。なお、試験例１の方法で最大ピークがβグルカンであることを確認した。
【００６０】
製造例２〔Ｒ−メバロン酸の製造〕
特公平７−８９９４０号公報の第３頁左欄１１行〜第４頁右欄４行に記載された方法に従い、Ｒ−メバロン酸（サンプル２）を製造した。
【００６１】
製造例３〔担子菌由来βグルカンの製造）
カワリハラタケの子実体を破砕し、粉砕して、その粉砕物１０ｋｇに熱水５０リットルを加え、煮沸条件下で穏やかに撹拌しながら３時間、熱水抽出処理した。熱水抽出処理した後、遠心分離して、その分離液を得た。分離液に３倍量の９９％エチルアルコールを加えて、沈殿物を得、凍結乾燥して、βグルカン１２００ｇ（サンプル３）を得た。サンプル３の１ｇ中に含まれるβグルカン量は、８６０ｍｇと算出された。また、最大ピークの分子量は１００万を示した。
【００６２】
製造例４〔微生物由来βグルカンの製造〕
市販の圧搾パン酵母より調製された細胞壁（酵母菌体細胞壁Ｅ）の１００ｇに２％水酸化ナトリウムの１Ｌを加えて、４℃にて２４時間撹拌抽出した。遠心分離した抽出液をＨＣｌで中和し、２倍量のエタノールで沈殿させ、βグルカン２０ｇ（サンプル４）を得た。サンプル４の１０ｍｇ中に含まれるβグルカン量は、４．２ｍｇと算出された。また、最大ピークの分子量は１６０万であった。
【００６３】
〔試験例４〕グルコシルトランスフェラーゼ阻害率
製造例１〜４で得られたサンプル１（βグルカン）、サンプル２（Ｒ−メバロン酸）、サンプル３（βグルカン）、サンプル４（βグルカン）について、下記の方法でグルコシルトランスフェラーゼ活性の阻害率を調べた。また、サンプル１とサンプル２の１：１（重量比）混合物をサンプル５として、同様に調べた。
【００６４】
グルコシルトランスフェラーゼ阻害率測定法：
２％ショ糖溶液（ｐＨ６．５の５０ｍＭリン酸カリウム緩衝液使用）１．０ｍｌ
１％アジ化ナトリウム　０．１ｍｌ
粗グルコシルトランスフェラーゼ液　５０μｌ
サンプル水溶液（濃度０．００５〜２ｍｇ／ｍｌ）　５０μｌ
５０ｍＭリン酸カリウム緩衝液（ｐＨ６．５）　０．１ｍｌ
上記各溶液を混合して得られた酵素反応液を試験管に入れ、試験管を３０度に傾けた状態にして、３７℃で２０時間静置する。その後、試験管をゆっくり傾けて反応上清を除き、酵素反応により生成して試験管に付着したグルカンを水で３回洗浄する。その後水２ｍｌを加え、超音波処理により上記グルカンを水中に分散させる。グルカン分散液および調製直後の上記酵素反応液について、波長５５０ｎｍの吸光度を測定する。また、コントロールとして、試料水溶液の代わりに水を加えた場合について同様の操作を行う。測定結果から、下記の計算式によりグルコシルトランスフェラーゼ活性の阻害率を算出する。
【００６５】
阻害率（％）＝〔１−（Ａ１−Ａ０）／（Ａ３−Ａ２）〕×１００
但し、
Ａ０：試料を添加した場合の吸光度；酵素反応開始前
Ａ１：試料を添加した場合の吸光度；グルカン分散液
Ａ２：コントロール（酵素反応開始前）
Ａ３：コントロール（グルカン分散液）
【００６６】
上記試験の結果から、阻害率が５０％になる試料濃度を内挿法により求め、ＩＣ５０値として表示する（ＩＣ５０値が小さいほど酵素活性阻害作用が強い）。
その結果、サンプル１は２０００μｇ／ｍｌ、サンプル２は２４００μｇ／ｍｌ、サンプル３は２２００μｇ／ｍｌ、サンプル４は２３００μｇ／ｍｌ、サンプル５は１７００μｇ／ｍｌとなった。
【００６７】
〔試験例５〕プラーク形成抑制作用
製造例１〜４で得られたサンプル１（βグルカン）、サンプル２（Ｒ−メバロン酸）、サンプル３（βグルカン）、サンプル４（βグルカン）について、下記の方法でプラーク形成抑制作用を調べた。また、サンプル１とサンプル２の１：１（重量比）混合物をサンプル５として同様に調べた。
【００６８】
プラーク形成抑制作用の試験：あらかじめ秤量した試験管にショ糖２％を含むブレインハートインフュージョンブロス（日水製薬製）５．３５ｍｌを加える。加熱滅菌処理後、試料溶液０．１５ｍｌおよびストレプトコッカス・ミュータンス６７１５の培養液０．５ｍｌを添加し、３７℃で２０分間培養を行う。培養終了後、上清を静かに除き、試験管管壁のプラーク状付着物をそのまま蒸留水で３回洗浄した後１０５℃で５時間乾燥する。最後に試験管ごとに秤量して、管内のプラーク状付着物の乾燥重量ｗを求める。別に、空試験として、試料溶液の代わりに試料溶液の溶媒を用いて上記と同様の操作を行い、プラーク状付着物の乾燥重量Ｗを求める。測定されたプラーク状付着物の重量ｗおよびＷより、次式によりプラーク形成抑制率を算出する。
【００６９】
プラーク形成抑制率（％）＝（１−ｗ／Ｗ）×１００
【００７０】
試料溶液の濃度を段階的に変更して上記測定を行い、抑制率が５０％になる試料溶液の濃度ＩＣ５０を内挿法により求める。
その結果、サンプル１は４００μｇ／ｍｌ、サンプル２は６３０μｇ／ｍｌ、サンプル３は４７０μｇ／ｍｌ、サンプル４は５００μｇ／ｍｌサンプル５は３２０μｇ／ｍｌとなった。
【００７１】
以下、本発明の口腔用組成物を配合した実施例を示す。下記の例は、いずれも歯周疾患予防効果、歯周疾患によるトラブルの改善効果に優れており、安全性も良好なものであった。
【００７２】
実施例１
下記の混合物を打錠機で打錠して、う蝕予防用口腔用剤を製造した。
〔配合〕
サンプル１（βグルカン）　　　１２０重量部
ラフィノース　　　　　　　　　１７２重量部
グリセリン脂肪酸エステル　　　　　８重量部
【００７３】
実施例２
下記の混合物を打錠機で打錠して、う蝕予防用口腔用剤を製造した。
〔配合〕
サンプル１（βグルカン）　　　１００重量部
サンプル２（Ｒ−メバロン酸）　　２０重量部
ラフィノース　　　　　　　　　１７２重量部
グリセリン脂肪酸エステル　　　　　８重量部
【００７４】
実施例３
下記の混合物を流動層造粒機で顆粒状に成形して、う蝕予防作用を有するインスタントティーを製造した。
〔配合〕
サンプル１（βグルカン）　　　３００重量部
ラフィノース　　　　　　　　　２９０重量部
ウーロン茶水抽出物　　　　　　１００重量部
難消化性デキストリン　　　　　８１０重量部
【００７５】
実施例４
小麦粉１ｋｇ、コーンスターチ１００ｇ、砂糖２５０ｇ、マーガリン１２５ｇ、食塩５ｇ、炭酸ソーダ２５ｇ、炭酸アンモニウム９ｇ、レシチン６ｇ、全卵７５ｇ、乳酸カルシウム５０ｇ、サンプル１（βグルカン）２ｇ、および水３５０ｇを混練してドウを調製し、以後、常法により延展、成形、焙焼を行なって、虫歯予防対策がなされたビスケットを製造した。
【００７６】
実施例５
異性化糖３３０ｇ、砂糖１４０ｇ、水２７０ｇを混合して加熱し、そこに、ゼラチン８０ｇおよびサンプル１（βグルカン）１０ｇを水１５０ｇに溶かした溶液ならびに濃縮レモン果汁８ｇを混合し、型に流し込んで冷却することにより、う蝕予防性グミキャンディーを製造した。
【００７７】
実施例６
チューインガム試作用ミキサーにガムベース２５重量部及び水あめ１４重量部を入れて混合し、さらに砂糖３５重量部、果糖２５重量部、サンプル１（βグルカン）１４重量部、ステビア甘味料・マルミロン（丸善製薬株式会社製品）０．４重量部の混合物を数回に分けて加え、よく練り合わせた。次いでグリセリン１重量部を加え、充分混合したのちミキサーから取り出し、ローラーで圧延して、う蝕予防作用を有するチューインガムを製造した。
【００７８】
実施例７
次に示す組成のマウスウォッシュＡを製造した。
〔配合〕
エタノール　　　　　　　　１５重量部
グリセリン　　　　　　　　１０重量部
アスコルビン酸　　　　　　　０．０５重量部
クエン酸ナトリウム　　　　　０．２重量部
安息香酸ナトリウム　　　　　０．２重量部
ラウリル硫酸ナトリウム　　　０．２重量部
サッカリンナトリウム　　　　０．０５重量部
サンプル１（βグルカン）　　０．２重量部
１−メントール　　　　　　　０．０５重量部
精製水　　　　　　　　　　残部
合計　　　　　　　　　　１００重量部
【００７９】
実施例８
次に示す組成のマウスウォッシュＢを製造した。
〔配合〕
エタノール　　　　　　　　　　１５重量部
グリセリン　　　　　　　　　　１０重量部
アスコルビン酸　　　　　　　　　０．０５重量部
クエン酸ナトリウム　　　　　　　０．２重量部
安息香酸ナトリウム　　　　　　　０．２重量部
ラウリル硫酸ナトリウム　　　　　０．２重量部
サッカリンナトリウム　　　　　　０．０５重量部
サンプル２（Ｒ−メバロン酸）　　０．２重量部
１−メントール　　　　　　　　　０．０５重量部
精製水　　　　　　　　　　　　残部
合計　　　　　　　　　　　　１００重量部
【００８０】
実施例９
次に示す組成のマウスウォッシュＣを製造した。
〔配合〕
エタノール　　　　　　　　１５重量部
グリセリン　　　　　　　　１０重量部
アスコルビン酸　　　　　　　０．０５重量部
クエン酸ナトリウム　　　　　０．２重量部
安息香酸ナトリウム　　　　　０．２重量部
ラウリル硫酸ナトリウム　　　０．２重量部
サッカリンナトリウム　　　　０．０５重量部
サンプル１（βグルカン）　　０．１重量部
サンプル２（Ｒ−メバロン酸）０．１重量部
１−メントール　　　　　　　０．０５重量部
精製水　　　　　　　　　　残部
合計　　　　　　　　　　１００重量部
【００８１】
実施例１０
次に示す組成の練歯磨Ａを製造した。
〔配合〕
無水ケイ酸（平均粒径＝１０μｍ）　　　　　　　　　２０．０重量％
ポリアクリル酸ナトリウム（重合度＝１５０００）　　　０．５重量％
キサンタンガム（Ｍｗ＝１００〜１５０万）　　　　　　０．５重量％
プロピレングリコール　　　　　　　　　　　　　　　　５．０重量％
７０％ソルビット液　　　　　　　　　　　　　　　　２０．０重量％
サッカリンナトリウム　　　　　　　　　　　　　　　　　０．１重量％
安息香酸ナトリウム　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．３重量％
ラウリル硫酸ナトリウム　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１．５重量％
サンプル１（βグルカン）　　　　　　　　　　　　　　０．５重量％
香料　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１．０重量％
精製水　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　残
計　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１００．０重量％
【００８２】
実施例１１
次に示す組成の練歯磨Ｂを製造した。
〔配合〕
無水ケイ酸（平均粒径＝１０μｍ）　　　　　　　　　２０．０重量％
ポリアクリル酸ナトリウム（重合度＝１５０００）　　　０．５重量％
キサンタンガム（Ｍｗ＝１００〜１５０万）　　　　　　０．５重量％
プロピレングリコール　　　　　　　　　　　　　　　　５．０重量％
７０％ソルビット液　　　　　　　　　　　　　　　　２０．０重量％
サッカリンナトリウム　　　　　　　　　　　　　　　　　０．１重量％
安息香酸ナトリウム　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．３重量％
ラウリル硫酸ナトリウム　　　　　　　　　　　　　　　１．５重量％
サンプル２（Ｒ−メバロン酸）　　　　　　　　　　　　０．５重量％
香料　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１．０重量％
精製水　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　残
計　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１００．０重量％
【００８３】
実施例１２
次に示す組成の練歯磨Ｃを製造した。
〔配合〕
無水ケイ酸（平均粒径＝１０μｍ）　　　　　　　　　２０．０重量％
ポリアクリル酸ナトリウム（重合度＝１５０００）　　　０．５重量％
キサンタンガム（Ｍｗ＝１００〜１５０万）　　　　　　０．５重量％
プロピレングリコール　　　　　　　　　　　　　　　　５．０重量％
７０％ソルビット液　　　　　　　　　　　　　　　　２０．０重量％
サッカリンナトリウム　　　　　　　　　　　　　　　　　０．１重量％
安息香酸ナトリウム　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．３重量％
ラウリル硫酸ナトリウム　　　　　　　　　　　　　　　１．５重量％
サンプル１（βグルカン）　　　　　　　　　　　　　　０．３重量％
サンプル２（Ｒ−メバロン酸）　　　　　　　　　　　　０．２重量％
香料　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１．０重量％
精製水　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　残
計　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１００．０重量％
【００８４】
実施例１３
次に示す組成の練歯磨Ｄを製造した。
〔配合〕
リン酸水素カルシウム・２水和物（平均粒径＝１０μｍ）　４５．０重量％
無水ケイ酸（平均粒径＝１０μｍ）　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　２．０重量％
カルボキシメチルセルロースナトリウム
置換度：０．７、Ｍｗ＝３０万）　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．３重量％
カルボキシメチルセルロースナトリウム
置換度：１．０、Ｍｗ＝３０万）　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．７重量％
カラギーナン（Ｍｗ＝５０万）　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．１重量％
プロピレングリコール　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　３．０重量％
６０％ソルビット液　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　２５．０重量％
パラオキシ安息香酸メチル　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．２重量％
安息香酸ナトリウム　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．５重量％
サッカリンナトリウム　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．２重量％
モノフルオロリン酸ナトリウム　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．７３重量％
トラネキサム酸　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．０５重量％
イソプロピルメチルフェノール　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．１重量％
ラウリル硫酸ナトリウム　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１．２重量％
ラウロイルサルコシンナトリウム　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．３重量％
サンプル１（βグルカン）　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．２重量％
香料　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１．０重量％
精製水　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　残
計　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１００．０重量％
【００８５】
実施例１４
次に示す組成の液状歯磨Ａを製造した。
〔配合〕
沈降性シリカ（平均粒径＝１０μｍ）　　　　　　　　　　２０．０重量％
パラオキシ安息香酸ブチル　　　　　　　　　　　　　　　　０．０１重量％
キサンタンガム（Ｍｗ＝１００〜１５０万）　　　　　　　　０．２重量％
ポリアクリル酸ナトリウム（Ｍｗ＝１５０００）　　　　　　０．１５重量％
プロピレングリコール　　　　　　　　　　　　　　　　　　２．０重量％
ソルビット　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　３５．０重量％
グリセリン　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　２５．０重量％
サッカリンナトリウム　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．１重量％
香料　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１．０重量％
色素（ブリリアントブルー）　　　　　　　　　　　　　　　０．００１重量％ラウリル硫酸ナトリウム　　　　　　　　　　　　　　　　　１．５重量％
モノラウリン酸デカグリセリル　　　　　　　　　　　　　　２．０重量％
サンプル１（βグルカン）　　　　　　　　　　　　　　　　０．１重量％
香料　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．２５重量％
精製水　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　残
計　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１００．０重量％
【００８６】
実施例１５
次に示す組成の液状歯磨Ｂを製造した。
〔配合〕
沈降性シリカ（平均粒径＝１０μｍ）　　　　　　　　　　２０．０重量％
パラオキシ安息香酸ブチル　　　　　　　　　　　　　　　　０．０１重量％
キサンタンガム（Ｍｗ＝１００〜１５０万）　　　　　　　　０．２重量％
ポリアクリル酸ナトリウム（Ｍｗ＝１５０００）　　　　　　０．１５重量％
プロピレングリコール　　　　　　　　　　　　　　　　　　２．０重量％
ソルビット　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　３５．０重量％
グリセリン　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　２５．０重量％
サッカリンナトリウム　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．１重量％
香料　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１．０重量％
色素（ブリリアントブルー）　　　　　　　　　　　　　　　０．００１重量％ラウリル硫酸ナトリウム　　　　　　　　　　　　　　　　　１．５重量％
モノラウリン酸デカグリセリル　　　　　　　　　　　　　　２．０重量％
サンプル２（Ｒ−メバロン酸）　　　　　　　　　　　　　　０．１重量％
香料　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．２５重量％
精製水　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　残
計　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１００．０重量％
【００８７】
実施例１６
次に示す組成の液状歯磨Ｃを製造した。
〔配合〕
沈降性シリカ（平均粒径＝１０μｍ）　　　　　　　　　　２０．０重量％
パラオキシ安息香酸ブチル　　　　　　　　　　　　　　　　０．０１重量％
キサンタンガム（Ｍｗ＝１００〜１５０万）　　　　　　　　０．２重量％
ポリアクリル酸ナトリウム（Ｍｗ＝１５０００）　　　　　　０．１５重量％
プロピレングリコール　　　　　　　　　　　　　　　　　　２．０重量％
ソルビット　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　３５．０重量％
グリセリン　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　２５．０重量％
サッカリンナトリウム　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．１重量％
香料　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１．０重量％
色素（ブリリアントブルー）　　　　　　　　　　　　　　　０．００１重量％ラウリル硫酸ナトリウム　　　　　　　　　　　　　　　　　１．５重量％
モノラウリン酸デカグリセリル　　　　　　　　　　　　　　２．０重量％
サンプル１（βグルカン）　　　　　　　　　　　　　　　　０．０７重量％
サンプル２（Ｒ−メバロン酸）　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．０３重量％
香料　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．２５重量％
精製水　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　残
計　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１００．０重量％
【００８８】
実施例１７
次に示す組成の液状歯磨Ｄを製造した。
［配合］
水酸化アルミニウム　　　　　　　　　　　　　　　　　２５．０重量％
ポリアクリル酸ナトリウム（重合度＝１５０００）　　　　　０．１重量％
カルボキシメチルセルロースナトリウム（Ｍｗ＝３０万）　　０．２重量％
プロピレングリコール　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　２．０重量％
ソルビット　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１５．０重量％
グリセリン　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　４０．０重量％
サッカリンナトリウム　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．１重量％
香料　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１．０重量％
ラウリル硫酸ナトリウム　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１．５重量％
モノラウリン酸デカグリセリル　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１．０重量％
サンプル１（βグルカン）　　　　　　　　　　　　　　　０．３重量％
香料　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．２５重量％
精製水　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　残
計　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１００．０重量％
【００８９】
実施例１８
次に示す組成の口中清涼剤を製造した。
［配合］
エタノール　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　５０．０重量％
グリセリン　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１５．０重量％
Ｐ．Ｏ．Ｅ（６０）硬化ヒマシ油　　　　　　　　　　　　３．０重量％
１−メントール　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１．０重量％
サンプル１（βグルカン）　　　　　　　　　　　　　　　０．２重量％
サンプル２（Ｒ−メバロン酸）　　　　　　　　　　　　　０．１重量％
香料　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．３重量％
精製水　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　残
計　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１００．０重量％
【００９０】
実施例１９
次に示す組成の口腔用パスタを製造した。
［配合］
セタノール　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１０．０重量％
スクワラン　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　２０．０重量％
沈降性シリカ　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　５．０重量％
Ｐ．Ｏ．Ｅ（４０）硬化ヒマシ油　　　　　　　　　　　　０．１重量％
ソルビタンモノオレイン酸エステル　　　　　　　　　　　１．０重量％
ラウリル硫酸ナトリウム　　　　　　　　　　　　　　　　０．２重量％
グリチルレチン酸　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．１重量％
サッカリンナトリウム　　　　　　　　　　　　　　　　　０．６重量％
サンプル１（βグルカン）　　　　　　　　　　　　　　　０．３重量％
サンプル２（Ｒ−メバロン酸）　　　　　　　　　　　　　０．２重量％
ε−アミノカプロン酸　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．５重量％
サリチル酸エチル　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．２重量％
イソオイゲノール　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．１重量％
メントン　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．０５重量％
香料　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．６重量％
精製水　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　残
計　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１００．０重量％
【００９１】
実施例２０
次に示す組成の口腔用トローチＡを製造した。
［配合］
乳糖　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　９７．０重量％
Ｐ．Ｏ．Ｅ（６０）モノステアレート　　　　　　　　　　０．２重量％
ラウリル硫酸ナトリウム　　　　　　　　　　　　　　　　０．０５重量％
クロルヘキシジングルコン酸塩　　　　　　　　　　　　　０．０２重量％
ステビア抽出物　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．２重量％
サンプル１（βグルカン）　　　　　　　　　　　　　　　０．３重量％
サリチル酸メチル　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．２重量％
イソオイゲノール　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．０５重量％
香料　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．０２重量％
ヒドロキシエチルセルロース（Ｍｗ＝１００万）　　　　　残
計　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１００．０重量％
【００９２】
実施例２１
次に示す組成の口腔用トローチＢを製造した。
［配合］
乳糖　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　９７．０重量％
Ｐ．Ｏ．Ｅ（６０）モノステアレート　　　　　　　　　　０．２重量％
ラウリル硫酸ナトリウム　　　　　　　　　　　　　　　　０．０５重量％
クロルヘキシジングルコン酸塩　　　　　　　　　　　　　０．０２重量％
ステビア抽出物　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．２重量％
サンプル２（Ｒ−メバロン酸）　　　　　　　　　　　　　０．３重量％
サリチル酸メチル　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．２重量％
イソオイゲノール　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．０５重量％
香料　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．０２重量％
ヒドロキシエチルセルロース（Ｍｗ＝１００万）　　　　　残
計　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１００．０重量％
【００９３】
実施例２２
次に示す組成の口腔用トローチＣを製造した。
［配合］
乳糖　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　９７．０重量％
Ｐ．Ｏ．Ｅ（６０）モノステアレート　　　　　　　　　　０．２重量％
ラウリル硫酸ナトリウム　　　　　　　　　　　　　　　　０．０５重量％
クロルヘキシジングルコン酸塩　　　　　　　　　　　　　０．０２重量％
ステビア抽出物　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．２重量％
サンプル１（βグルカン）　　　　　　　　　　　　　　　０．１５重量％
サンプル２（Ｒ−メバロン酸）　　　　　　　　　　　　　０．１５重量％
サリチル酸メチル　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．２重量％
イソオイゲノール　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．０５重量％
香料　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．０２重量％
ヒドロキシエチルセルロース（Ｍｗ＝１００万）　　　　　残
計　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１００．０重量％
【００９４】
〔臨床試験〕
上記実施例１０〜１３の練歯磨で、それぞれ５人の被験者に一定期間次のような条件の歯磨きを実行させた。具体的には、一日三回、毎食後、歯磨きを１ヶ月間実行させた。この試験の前後において、効果を、次の試験項目について評価した。
【００９５】
〔試験１〕う食関連要因の評価
（１）唾液分泌量の測定
被験者の唾液分泌量の測定は次のように行った。まず被験者を直立に座らせ、パラフィンを与えて咀嚼させた。３０秒後に一度唾液を飲み込ませ、その直後から５分間連続して、咀嚼しながら、目盛り付き試験管に漏斗を介して唾液を吐き出させ、５分間の唾液分泌量を測定した。結果を表１に示す。唾液分泌量が＋＋は３０％以上の増加が観察されたことを、また＋は５％以上〜３０％未満の増加が観察されたことを、０は±５％以内の増減を、−は５％よりも多く減少したことを意味する。
【００９６】
【表１】
表１
2004051603.tif 000002
【００９７】
（２）唾液緩衝能の測定
唾液緩衝能を測定可能なＤｅｎｔｏｂｕｆｆ　Ｓｔｒｉｐ　（株式会社モリムラ製）を用いて行った。Ｄｅｎｔｏｂｕｆｆ　Ｓｔｒｉｐ　によれば、唾液緩衝能を四段階に評価することができる。具体的な測定は、まず、唾液サンプルをピペットで取り、ストリップ上に落とし、５分後、ストリップの色とカラーチャートを比較した。なお、このキットにおいて、唾液の緩衝能は大きい順に、即青、青、緑、そして黄色のレベルに分類される。結果を表２に示す。
【００９８】
【表２】
表２
2004051603.tif 000003
【００９９】
（３）ｍｕｔａｎｓ　ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉ　の菌数の測定
口腔内のｍｕｔａｎｓ　ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉの菌数をＤｅｎｔｏｃｕｌｔ−ＳＭキット（株式会社モリムラ製）を用いて行った。ここでＤｅｎｔｏｃｕｌｔ−ＳＭは、唾液中のｍｕｔａｎｓ　ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉの菌数を調べることができる試験培地である。まず、キット中のバシトラシン錠を加えた培養液に、舌上で回転させたストリップを入れ、３７℃で、２日間培養した。ｍｕｔａｎｓ　ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉは、ストリップ上に、青色のコロニーとして表れ、ストリップ上のコロニーの密度と、モデルチャートを比較して、唾液１ｍｌ中の菌数を、それぞれおよそ、０個を◎、１０万個のレベルを○、５０万個を△、１００万個を×として判定した。
【０１００】
【表３】
表３
2004051603.tif 000004
【０１０１】
（４）Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ　の菌数の測定
口腔内のＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓの菌数の測定をＤｅｎｔｏｃｕｌｔ−ＬＢキット（株式会社モリムラ製）を用いて行った。ここで、Ｄｅｎｔｏｃｕｌｔ−ＬＢは、唾液中のＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓの菌数を調べることができる試験培地である。まず、唾液サンプルをキット中に培地が含浸されたスライドの両面に流し、３７℃で、４日間培養した。Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓは、スライド上に、白色のコロニーとして表れ、スライド上のコロニーの密度と、モデルチャートを比較して、その菌数を判定した。
【０１０２】
結果を表４に示す。表中、唾液１ｍｌ中の菌数がそれぞれおよそ１０００個（◎で示す）、１万個（○で示す）、１０万個（△で示す）、および１００万個（×で示す）の各レベルを意味する。
【０１０３】
【表４】
表４
2004051603.tif 000005
【０１０４】
〔試験２〕：口腔内細菌Ｃａｎｄｉｄａの測定
口腔内のＣａｎｄｉｄａの菌数を、Ｏｒｉｃｕｌｔ−Ｎ（株式会社モリムラ製）を用いて調べた。ニッカーソン培地を塗布したスライドの両面に採取した唾液サンプルを流し、３７℃で、２日間培養した。Ｃａｎｄｉｄａは、スライド上に、褐色のコロニーとして表れ、スライド上のコロニーの密度と、モデルチャートを比較して、その菌数を判定した。
【０１０５】
結果を表５に示す。表中、唾液１ｍｌ中の菌数がそれぞれおよそ１０００個（◎で示す）、１万個（○で示す）、１０万個（△で示す）、および１００万個（×で示す）の各レベルを意味する。
【０１０６】
【表５】
表５
2004051603.tif 000006
【０１０７】
〔試験３〕：歯周病関連要因の評価
成人性歯周炎の主たる病原菌といわれるＰｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ　ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ、Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ　ｄｅｎｔｉｃｏｌａ、およびＢａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ　ｆｏｒｓｙｔｈｕｓを、それが産生する酵素を特異的に検出する歯周病原菌検査薬（ペリオチェック、サンスター株式会社製）によって調べた。まず、歯周ポケットの最深部に３０秒間挿入したペーパーポイントを、基質・色源体剤を含むバイアル内に直接投入し、酵素溶液を加えた。３７℃で、１５分間、インキュベートした後、青色変化の程度を、標準色調（色見本）と比較して、これらの歯周病原菌由来のペプチターゼ活性を測定した。
【０１０８】
結果を表６に示す。表中、（−）は陰性、（＋）は陽性、（＋＋）は強陽性を意味する。
【０１０９】
【表６】
表６
2004051603.tif 000007
【０１１０】
【発明の効果】
本発明によれば、優れた性能を有するグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤、プラーク形成抑制剤、歯肉炎及び／または歯周病抑制剤、さらにはそれらを添加して、う蝕予防作用を付与した口腔用剤、う蝕予防剤、飲食物等を提供することができる。