(57)【要約】【課題】新規な抗菌性化合物およびその製造法の提供。【解決手段】下記の式（I）【化１】2004203783.tif 000007で表される化合物。ファンディバクター（Fundibacter）属に属し、式(I)の化合物を生産する能力を有する微生物を培養し、培養物中に式(I)の化合物を生成蓄積させ、該培養物から式(I)の化合物を採取することを特徴とする、式(I)の化合物の製造法。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記の式（I）
【化１】
2004203783.tif 000006
で表される化合物。
【請求項２】
ファンディバクター（Fundibacter）属に属し、請求項１記載の化合物を生産する能力を有する微生物を培養し、培養物中に請求項１記載の化合物を生成蓄積させ、該培養物から請求項１記載の化合物を採取することを特徴とする、請求項１記載の化合物の製造法。
【請求項３】
ファンディバクター（Fundibacter）属に属し、請求項１記載の化合物を生産する能力を有する微生物が、ファンディバクター・エスピー（Fundibacter sp.） MBIC 04549（FERM P-19125）、ファンディバクター・エスピーMBIC 04556（FERM P-19126）、ファンディバクター・エスピーMBIC 05570（FERM P-19127）およびファンディバクター・ジャデンシス（Fundibacter jadensis）T9T (DMS 12178T)）である、請求項２に記載の製造法。
【請求項４】
ファンディバクター（Fundibacter）属に属し、請求項１に記載の化合物を生産することを特徴とする微生物。
【請求項５】
ファンディバクター・エスピー（Fundibacter sp.） MBIC 04549（FERM P-19125）、ファンディバクター・エスピー MBIC 04556（FERM P-19126）およびファンディバクター・エスピー MBIC 05570（FERM P-19127）である、請求項４に記載の微生物。
【請求項６】
請求項１に記載の化合物を有効成分として含有することを特徴とする抗菌剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、微生物が生産する抗菌性化合物、その製造法、該化合物を生産する微生物、及びその用途に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
人類は、感染症の治療のため多くのペニシリンやストレプトマイシン等多くの抗生物質や抗菌剤を利用してきた。また、農作物に有害な微生物の除去のためにも多くの抗菌剤を農薬として用いてきた。また、近年の清潔指向の高まりから、多くの抗菌性を有する材料が開発されてきた。
【０００３】
しかしながら、医療現場における抗生物質の頻繁な使用は従来の抗菌剤に対する耐性菌の問題を生じ、常に新しい抗菌剤を開発し続ける必要が生じている。また、農業に使用される多くの抗菌性合成農薬は環境に対する悪影響が指摘されており、環境に悪影響を与えない抗菌剤の開発も望まれている。さらに、近年の清潔指向の高まりによって多くの抗菌性の材料が開発されてはいるが、十分な抗菌活性を有しているとはいい難い。
【０００４】
このような状況において、有用な抗菌剤を得ることを目的として、自然界に存在する微生物から有用な抗菌性化合物を得る方法が報告されている。
例えば、海洋性細菌では、バシラス・エスピー（Bacillus sp.） PP19-H3株の培養物よりマクロラクチンA、FおよびG〜Mが単離されている（非特許文献１、特許文献１及び特許文献２参照）。
【０００５】
また、シュードアルテロモナス・エスピー（Pseudoalteromonas sp.） F-420株の培養物からは、好塩性グラム陰性細菌の生育を特異的に阻害するコロールミシンが単離されている（非特許文献２及び特許文献３参照）。
【０００６】
その他、バシラス・エスピーの培養物からペプチド系の抗菌性化合物が単離された例も報告されている（非特許文献３参照）。
しかしながら、既に述べたような耐性菌出現の問題から、さらなる新たな抗菌剤の探索が求められている。
【０００７】
【特許文献１】
特開平9-255677号公報
【特許文献２】
特開平9-301970号公報
【特許文献３】
特開平10-306094号公報
【非特許文献１】
Kazuhiko Yoshikawa, Takahide Takadera, Kyoko Adachi, Miyuki Nishijima amd Hiroshi Sano; The Journal of Antibiotics, 50, 949-953 (1997)
【非特許文献２】
Tomokazu Nagao, Kyoko Adachi, Miho Sakai, Miyuki Nishijima and Hiroshi Sano; The Journal of Antibiotics, 54, 333-339 (2001)
【非特許文献３】
Barsby T., Kelly M. T., Gagne S. M. and Andersen R. J.; Organic Letters, 3, 437-440 (2001)
【０００８】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、上述した問題点を解決することを目的とし、新規な抗菌性化合物、その製造法、該化合物を生産する微生物、並びにその用途を提供するものである。
【０００９】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意検討を重ねた結果、ファンディバクター（Fundibacter）属に属する微生物の培養物から得られた化合物が、抗菌活性を示す従来全く知られていない化合物であることを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１０】
すなわち、本発明は以下の（１）〜（６）を提供するものである。
（１）  下記の式（I）
【化２】
2004203783.tif 000002
で表される化合物。
【００１１】
（２）  ファンディバクター（Fundibacter）属に属し、（１）に記載の化合物を生産する能力を有する微生物を培養し、培養物中に（１）に記載の化合物を生成蓄積させ、該培養物から（１）に記載の化合物を採取することを特徴とする、（１）に記載の化合物の製造法。
（３）  ファンディバクター（Fundibacter）属に属し、（１）に記載の化合物を生産する能力を有する微生物が、ファンディバクター・エスピー（Fundibacter sp.） MBIC 04549（FERM P-19125）、ファンディバクター・エスピーMBIC 04556（FERM P-19126）、ファンディバクター・エスピーMBIC 05570（FERM P-19127）およびファンディバクター・ジャデンシス（Fundibacter jadensis）T9T (DMS12178T)）である、（２）に記載の製造法。
（４）  ファンディバクター（Fundibacter）属に属し、（１）に記載の化合物を生産することを特徴とする微生物。
（５）  ファンディバクター・エスピー（Fundibacter sp.） MBIC 04549（FERMP-19125）、ファンディバクター・エスピー MBIC 04556（FERM P-19126）およびファンディバクター・エスピー MBIC 05570（FERM P-19127）である、（４）に記載の微生物。
（６）  （１）に記載の化合物を有効成分として含有することを特徴とする抗菌剤。
【００１２】
【発明の実施の形態】
以下に、本発明について更に詳細に説明する。
本発明の抗菌性化合物は、下記の式（I）
【００１３】
【化３】
2004203783.tif 000003
表される化合物である。
【００１４】
また、本発明の抗菌性化合物は、以下の（１）〜（９）の理化学的性質を示す。
（１）物質の色：淡褐色
（２）分子量：２１０
（３）分子式：C10H10O5
（４）質量分析：高分解能 FABMS  実測値  211.0606  （M + H）+  計算値  211.0607  （C10H11O5）
（５）紫外線吸収スペクトル（メタノール中）  λmax（ε）  262 nm（11000）
（６）1H-NMR（重クロロホルム／重メタノール（9/1）中で測定、500MHz）
δppm 1.92(d, 3H), 2.21(s, 3H), 6.23(d, 1H), 7.27(s, 1H)
（７）13C-NMR（重クロロホルム／重メタノール（9/1）中で測定、125MHz）
δppm 12.3, 21.7, 118.8, 119.4, 124.3, 128.8, 142.2, 156.2, 160.7, 170.9
（８）溶解性：メタノール、酢酸エチル、クロロホルムに可溶。ヘキサンに難溶。
（９）抗菌活性：ペーパーディスク法にて、１mgの本発明の抗菌性化合物を直径８mmのペーパーディスクに加えた時、バシラス・サブティリス（Bacillus subtilis IFO 3134）に対して直径１５mmの阻止円が形成された。
【００１５】
なお、本発明の抗菌性化合物には、上記の理化学的性質を示す化合物の生理学的に許容され得る塩も含まれる。そのような塩としては、例えば、塩酸塩、硫酸塩、リン酸塩、酢酸塩、フマル酸塩、クエン酸塩、ナトリウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩等が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００１６】
本発明の抗菌性化合物は、ファンディバクター（Fundibacter）属に属し、上記式(I)の化合物を生産する能力を有する微生物を培養し、培養物中に式(I)の化合物を生成蓄積させ、該培養物から式(I)の化合物を採取することを特徴とする製造法によって得ることができる。
【００１７】
ファンディバクター（Fundibacter）属に属し、上記式(I)の化合物を生産する能力を有する微生物とは、好気性海洋性細菌であるファンディバクター（Fundibacter）属に属し、式(I)の化合物を生産する能力を有する微生物であれば特に限定されないが、例えば、ファンディバクター・エスピー（Fundibacter sp.） MBIC 04549、ファンディバクター・エスピーMBIC 04556、ファンディバクター・エスピーMBIC 05570およびファンディバクター・ジャデンシス（Fundibacter jadensis）T9T (DMS 12178T)）等を挙げることができる。
【００１８】
なお、ファンディバクター・エスピー（Fundibacter sp.） MBIC 04549、ファンディバクター・エスピーMBIC 04556、ファンディバクター・エスピーMBIC 05570は、岩手県釜石市平田湾から採取した海水から単離した微生物であり、バージーズ・マニュアル・オブ・デターミネイティブ・バクテリオロジーの分類基準に従って公知の菌種と比較した結果、ファンディバクター属に属する新規な微生物と考えられ、ファンディバクター・エスピー（Fundibacter sp.）として同定されたものである。なお、上記微生物３株については、平成１４年１１月２９日付けで、独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センターにそれぞれFERMP-19125（ファンディバクター・エスピー  MBIC 04549）、FERM P-19126（ファンディバクター・エスピー  MBIC 04556）、FERM P-19127（ファンディバクター・エスピー  MBIC 05570）として寄託されている。
【００１９】
以下に、上記微生物３株の菌学的特徴を記載する。
（１） FERM P-19125（ファンディバクター・エスピー  MBIC 04549）
（ａ）形態的性質
細胞の形および大きさ：桿菌、1.6×0.3μｍ
細胞の多形性の有無：無し
運動性の有無：無し
鞭毛の着生状態：無し
胞子の有無：無し
（ｂ）培養的性質
寒天平板培養（Marine Agar 2216）：良好に生育、コロニーは透明、不規則、扁平状
寒天平板培養（ピルビン酸ナトリウム（0.5％）添加 Marine Agar 2216）：良好に生育、コロニーは白色、不規則、凸円、全縁
液体培養（Marine Broth 2216）：良好に生育、透明色
液体培養（ピルビン酸ナトリウム（0.5％）添加 Marine Broth 2216）：良好に生育、均質に濁る
マリンブロスゼラチン穿刺培養：液化しない
リトマスミルク：無変化
（ｃ）生理学的性質
グラム染色：陰性
硝酸塩還元：還元しない
MR テスト：陰性
VP テスト：陰性
インドールの生成：生成しない
硫化水素の生成：生成しない
デンプンの加水分解：分解しない
クエン酸の利用（Simmons培地）：利用しない
色素の生成：無し（マリンアガー培地）
ウレアーゼ活性：陰性
オキシダーゼ活性：陽性
カタラーゼ活性：陽性
生育の範囲（温度）：10-37℃
酸素に対する態度：好気性
O-Fテスト：糖を分解しない
酸及びガスの生成：
L-アラビノース    酸：生成しない、ガス：生成しない
D-キシロース      酸：生成しない、ガス：生成しない
D-グルコース      酸：生成しない、ガス：生成しない
D-マンノース      酸：生成しない、ガス：生成しない
D-フラクトース    酸：生成しない、ガス：生成しない
D-ガラクトース    酸：生成しない、ガス：生成しない
マルトース        酸：生成しない、ガス：生成しない
シュークロース    酸：生成しない、ガス：生成しない
ラクトース        酸：生成しない、ガス：生成しない
トレハロース      酸：生成しない、ガス：生成しない
D-ソルビトール    酸：生成しない、ガス：生成しない
D-マンニトール    酸：生成しない、ガス：生成しない
イノシトール      酸：生成しない、ガス：生成しない
グリセリン        酸：生成しない、ガス：生成しない
デンプン          酸：生成しない、ガス：生成しない
（ｄ）その他の性質
エスクリンの分解：分解しない
DNAの分解：分解しない
β-ガラクトシダーゼ：陰性
好塩性：有り（生育塩濃度範囲1〜10％）
GC 含量：57.6 mol％
【００２０】
（２）  FERM P-19126（ファンディバクター・エスピー  MBIC 04556）
（ａ）形態的性質
細胞の形および大きさ：桿菌、2.4×0.4μm
細胞の多形性の有無：無し
運動性の有無：無し
鞭毛の着生状態：無し
胞子の有無：無し
（ｂ）培養的性質
寒天平板培養（Marine Agar 2216）：良好に生育、コロニーは透明、不規則、扁平状
寒天平板培養（ピルビン酸ナトリウム（0.5％）添加 Marine Agar 2216）：良好に生育、コロニーは白色、不規則、凸円、全縁
液体培養（Marine Broth 2216）：良好に生育、透明色
液体培養（ピルビン酸ナトリウム（0.5％）添加 Marine Broth 2216）：良好に生育、均質に濁る
マリンブロスゼラチン穿刺培養：液化しない
リトマスミルク：無変化
（ｃ）生理学的性質
グラム染色：陰性
硝酸塩還元：還元しない
MR テスト：陰性
VP テスト：陰性
インドールの生成：生成しない
硫化水素の生成：生成しない
デンプンの加水分解：分解しない
クエン酸の利用（Simmons培地）：利用しない
色素の生成：無し（マリンアガー培地）
ウレアーゼ活性：陰性
オキシダーゼ活性：陽性
カタラーゼ活性：陽性
生育の範囲（温度）：10-37℃
酸素に対する態度：好気性
O-Fテスト：糖を分解しない
酸及びガスの生成：
L-アラビノース    酸：生成しない、ガス：生成しない
D-キシロース      酸：生成しない、ガス：生成しない
D-グルコース      酸：生成しない、ガス：生成しない
D-マンノース      酸：生成しない、ガス：生成しない
D-フラクトース    酸：生成しない、ガス：生成しない
D-ガラクトース    酸：生成しない、ガス：生成しない
マルトース        酸：生成しない、ガス：生成しない
シュークロース    酸：生成しない、ガス：生成しない
ラクトース        酸：生成しない、ガス：生成しない
トレハロース      酸：生成しない、ガス：生成しない
D-ソルビトール    酸：生成しない、ガス：生成しない
D-マンニトール    酸：生成しない、ガス：生成しない
イノシトール      酸：生成しない、ガス：生成しない
グリセリン        酸：生成しない、ガス：生成しない
デンプン          酸：生成しない、ガス：生成しない
（ｄ）その他の性質
エスクリンの分解：分解しない
DNAの分解：分解しない
β-ガラクトシダーゼ：陰性
好塩性：有り（生育塩濃度範囲1〜10％）
GC 含量：59.1 mol％
【００２１】
（３）  FERM P-19127（ファンディバクター・エスピー  MBIC 05570）
（ａ）形態的性質
細胞の形および大きさ：桿菌、1.7×0.3μｍ
細胞の多形性の有無：無し
運動性の有無：無し
鞭毛の着生状態：無し
胞子の有無：無し
（ｂ）培養的性質
寒天平板培養（Marine Agar 2216）：良好に生育、コロニーは透明、不規則、扁平状
寒天平板培養（ピルビン酸ナトリウム（0.5％）添加 Marine Agar 2216）：良好に生育、コロニーは白色、不規則、凸円、全縁
液体培養（Marine Broth 2216）：良好に生育、透明色
液体培養（ピルビン酸ナトリウム（0.5％）添加 Marine Broth 2216）：良好に生育、均質に濁る
マリンブロスゼラチン穿刺培養：液化しない
リトマスミルク：無変化
（ｃ）生理学的性質
グラム染色：陰性
硝酸塩還元：還元しない
MR テスト：陰性
VP テスト：陰性
インドールの生成：生成しない
硫化水素の生成：生成しない
デンプンの加水分解：分解しない
クエン酸の利用（Simmons培地）：利用しない
色素の生成：無し（マリンアガー培地）
ウレアーゼ活性：陰性
オキシダーゼ活性：陽性
カタラーゼ活性：陽性
生育の範囲（温度）：10-37℃
酸素に対する態度：好気性
O-Fテスト：糖を分解しない
酸及びガスの生成：
L-アラビノース    酸：生成しない、ガス：生成しない
D-キシロース      酸：生成しない、ガス：生成しない
D-グルコース      酸：生成しない、ガス：生成しない
D-マンノース      酸：生成しない、ガス：生成しない
D-フラクトース    酸：生成しない、ガス：生成しない
D-ガラクトース    酸：生成しない、ガス：生成しない
マルトース        酸：生成しない、ガス：生成しない
シュークロース    酸：生成しない、ガス：生成しない
ラクトース        酸：生成しない、ガス：生成しない
トレハロース      酸：生成しない、ガス：生成しない
D-ソルビトール    酸：生成しない、ガス：生成しない
D-マンニトール    酸：生成しない、ガス：生成しない
イノシトール      酸：生成しない、ガス：生成しない
グリセリン        酸：生成しない、ガス：生成しない
デンプン          酸：生成しない、ガス：生成しない
（ｄ）その他の性質
エスクリンの分解：分解しない
DNAの分解：分解しない
β-ガラクトシダーゼ：陰性
好塩性：有り（生育塩濃度範囲1〜10％）
GC 含量：57.6 mol%
【００２２】
また、ファンディバクター・ジャデンシス（Fundibacter jadensis）T9T (DMS12178T)は、Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen (DSM)から入手可能である。
【００２３】
本発明の製造法における上記微生物の培養は、上記微生物が生育及び／又は増殖可能な培養条件であれば特に限定されないが、通常の好気性細菌の培養方法を用いることができる。
【００２４】
具体的には、培地としては、資化可能な炭素源、窒素源、無機物並びに生育及び／又は生産促進物質を適宜含有する培地であれば合成培地、天然培地いずれでも使用可能である。炭素源としてはグルコース、澱粉、デキストリン、マンノース、フラクトース、シュクロース、ラクトース、キシロース、アラビノース、マンニトール、糖蜜、および有機酸などを単独または組み合わせて用いることができる。さらに、必要に応じて炭化水素、アルコール類、アミノ酸などを用いてもよい。窒素源としては塩化アンモニウム、硫酸アンモニウム、硝酸アンモニウム、硝酸ナトリウム、尿素、ペプトン、肉エキス、酵母エキス、乾燥酵母、コーン・スチープ・リカー、大豆粉、綿実かす、カザミノ酸などを単独または組み合わせて用いることができる。また、必要に応じて、食塩、塩化カリウム、硫酸マグネシウム、炭酸カルシウム、リン酸二水素カリウム、硫酸第一鉄、塩化カルシウム硫酸マンガン、硫酸亜鉛などの無機塩類を加えもよい。さらに、ファンディバクター属菌の生育や本発明の化合物の生産を促進する微量成分を適当に添加することができる。そのような成分としては、ピルビン酸ナトリウム等が挙げられる。
【００２５】
培養法としては、固体培養法、液体培養法のいずれも実施可能であるが、特に、液体培養法が好ましく、例えば、振盪培養や通気攪拌培養等を行うことができる。
培養温度は、２５〜３５℃が適当であり、培養中の培地のpHは７〜８に維持することが望ましい。
【００２６】
上記条件下で液体培養を行うと、通常５〜１０日間の培養で本発明の化合物が培養物中に生成蓄積される。なお、本発明において、培養物とは、培養液及び培養された微生物菌体を意味する。培養は、培養物中の生成量が最大に達した時に停止するのが好ましい。
【００２７】
培養物からの本発明の化合物の単離精製は、微生物代謝生産物をその培養物から単離精製するために常用される方法に従って行うことができる。例えば、培養物をろ過や遠心分離により培養濾液と微生物菌体に分け、微生物菌体をクロロホルム／メタノール（９／１）混合溶媒などで抽出する。培養濾液は酢酸エチル、クロロホルムなどで抽出する。菌体抽出物、培養濾液抽出物は単独で、または合わせて濃縮・精製し、本発明の化合物を得ることができる。精製には、例えば、カラムクロマトグラフィー、分取薄層クロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィーなどを実施することができる。
【００２８】
上記の方法により得られた本発明の化合物の抗菌活性は、ペーパーディスク法（生理活性物質のバイオアッセイ；池川信夫、丸茂晋吾、星元紀編、講談社）等によって測定することにより評価することが出来る。
【００２９】
本発明の抗菌剤は、本発明の抗菌性化合物を有効成分として含有する。すなわち、上記のようにして得られた本発明の化合物又はその塩は抗菌活性を有するので、本発明の化合物を単独で、あるいは適当な担体、希釈剤又はその他の添加剤と組み合わせて含有する抗菌剤は、医薬品及び農薬等として使用することができる。例えば、本発明の抗菌剤が有効である代表的な真菌性疾患の病原菌としてはブドウ球菌（Staphylococcus aureus等）、カンディダ属菌（Candida albicans等）、バシラス属菌（Bacillus subtilis等）などが挙げられ、また、植物病原性菌としてはイネいもち病菌等が挙げられる。本発明の抗菌剤中における本発明の化合物の有効成分としての含有量は、その使用目的、剤型及び使用状態等に応じて適宜変更され得るが、例えば、医薬品の場合、有効成分を10〜90重量％、農薬の場合、有効成分を10〜100重量％含有させることができる。
【００３０】
【実施例】
以下に本発明を実施例により具体的に説明する。ただし、本発明は実施例によりその技術的範囲が限定されるものではない。
［実施例１］ファンディバクター・エスピー MBIC 05570による抗菌性化合物の生産
培養の種菌としてファンディバクター・エスピーMBIC 05570を用いた。該菌株を１Ｌの液体培地（硝酸アンモニウム：0.1％、リン酸水素二カリウム：0.02％、クエン酸鉄（III）n水和物：0.002％、ピルビン酸ナトリウム：0.5％、自然海水（800mL、蒸留水200 mL、pH 7.8）を入れた３Ｌ三角フラスコ中で、３０℃、10日間、回転震盪（100rpm）培養した。培養中、培地のpHは特に制御しなかった。
【００３１】
得られた培養液４Ｌを遠心分離した。遠心分離によって得られた上澄み液は、pH２に調整後、酢酸エチルで抽出した。菌体は、クロロホルム／メタノール（９／１）100mLで抽出し、上澄み液の酢酸エチル抽出物とあわせ減圧濃縮した。得られた濃縮抽出物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ワコーゲル２００  50g、移動層：クロロホルム／メタノール／酢酸（90/10/0.5））で粗精製し、次いで、高速液体クロマトグラフィー（カラム：コスモシル５C１８-AR（直径10 mm長さ250 mm）、移動相：0.05％リン酸含有50％メタノール-水から0.05％リン酸含有100％メタノールまで30分のリニアグラジエント、流速２mL/min）にて精製し、下記の式で表される化合物(I)7.3 mgを得た。
【００３２】
【化４】
2004203783.tif 000004
【００３３】
また、化合物（I）は以下の理化学的性質を示した。
（１）物質の色：淡褐色
（２）分子量：２１０
（３）分子式：C10H10O5
（４）質量分析：高分解能 FABMS  実測値  211.0606  （M + H）+  計算値  211.0607  （C10H11O5）
（５）紫外線吸収スペクトル（メタノール中）  λmax（ε）  262 nm（11000）
（６）1H-NMR（重クロロホルム／重メタノール（9/1）中で測定、500MHz）
δppm 1.92(d, 3H), 2.21(s, 3H), 6.23(d, 1H), 7.27(s, 1H)
（７）13C-NMR（重クロロホルム／重メタノール（9/1）中で測定、125MHz）
δppm 12.3, 21.7, 118.8, 119.4, 124.3, 128.8, 142.2, 156.2, 160.7, 170.9
（８）溶解性：メタノール、酢酸エチル、クロロホルムに可溶。ヘキサンに難溶。
（９）抗菌活性：ペーパーディスク法にて、1mgの本発明化合物を直径８mmのペーパーディスクに加えた時、バシラス・サブティリス（Bacillus subtilis IFO 3134）に対して直径１５mmの阻止円が形成された。
【００３４】
［実施例２］ファンディバクター属菌４種による抗菌性化合物の生産
ファンディバクター・エスピーMBIC 04549、ファンディバクター・エスピーMBIC 04556、ファンディバクター・エスピーMBIC 05570、及びファンディバクター・ジャデンシスT9T(DMS 12178T)を用いて本発明の抗菌性化合物の生産性を調べた。
【００３５】
前記ファンディバクター属菌４種をそれぞれ100 mLの液体培地（硝酸アンモニウム：0.1％、リン酸水素二カリウム：0.02％、クエン酸鉄（III）n水和物：0.002％、ピルビン酸ナトリウム：0.5％、自然海水 800mL、蒸留水 200 mL、pH 7.8）を入れた300 mL三角フラスコ中で、30℃、10日間、回転震盪（100rpm）培養した。培養中、培地のpHは特に制御しなかった。10日後に遠心分離を行い、遠心分離によって得られた上澄み液は、pH２に調整後、酢酸エチルで抽出した。菌体は、クロロホルム／メタノール（９／１）20 mLで抽出し、上澄み液の酢酸エチル抽出物とあわせ減圧濃縮した。本画分のHPLC分析を行い、前記ファンディバクター属菌４種による本発明の抗菌性化合物の生産量を測定した。その結果を表１に示した。各菌ともに、良好な生産性を有していることが確認された。
【００３６】
【表１】
2004203783.tif 000005
【００３７】
［実施例３］抗菌活性の測定
ペーパーディスク法にて、１mgの本発明の抗菌性化合物を直径８mmのペーパーディスクに加えた時、バシラス・サブティリス（Bacillus subtilis IFO 3134）に対して直径１５mmの阻止円が形成された。また、0.5 mgの本発明の抗菌性化合物を直径６mmのペーパーディスクに加えた時、バシラス・サブティリス（Bacillus subtilis IFO 3134）に対して直径７mmの阻止円が形成された。スタフィロコッカス・アウレウス（Staphylococcus aureus IFO 12732）に対してもほぼ同様の活性を示した。さらに、0.5 mgの本発明の抗菌性化合物を直径６mmのペーパーディスクに加えた時、サリニビブリオ・コスティコーラ（Salinivibrio costicola ATCC 33508）に対して直径２２mmの阻止円が形成された。
【００３８】
【発明の効果】
本発明の新規化合物はすぐれた抗菌作用を有するので、医薬品及び農薬等として有用である。