(57)【要約】【課題】新たな前立腺癌の局所治療剤の提供。【解決手段】エタノール局所注入した後に併用されるための、エトポシド、カンプトテシン類縁体、ドキソルビシン類縁体、シスプラチン類縁体、タキサン類縁体、ブレオマイシン類縁体及びフルオロウラシル類縁体からなる群から選択される１種以上の制癌剤を有効成分とする前立腺癌の局所治療剤を開示する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
エタノール局所注入した後に併用されるための、エトポシド、カンプトテシン類縁体、ドキソルビシン類縁体、シスプラチン類縁体、タキサン類縁体、ビンカアルカロイド類縁体、ブレオマイシン類縁体及びフルオロウラシル類縁体からなる群から選択される１種以上の制癌剤を有効成分とする前立腺癌の局所治療剤。
【請求項２】
制癌剤がエトポシドである請求項１に記載の局所治療剤。
【請求項３】
エタノールが無水エタノールである請求項１に記載の局所治療剤。
【請求項４】
制癌剤がエタノール局所注入後３０秒〜３０分の間に局所投与される、請求項１に記載の局所治療剤。
【請求項５】
エタノールおよび、エタノール局所注入した後に併用されるための、エトポシド、カンプトテシン類縁体、ドキソルビシン類縁体、シスプラチン類縁体、タキサン類縁体、ビンカアルカロイド類縁体、ブレオマイシン類縁体及びフルオロウラシル類縁体からなる群から選択される１種以上の制癌剤とを含む前立腺癌の局所治療用キット。
【請求項６】
エタノールが無水エタノールであり、制癌剤がエトポシド製剤である請求項５に記載のキット。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は前立腺癌の局所治療剤に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
前立腺癌に対しては様々な治療法が試みられている。その中のひとつである化学療法の効果も一時的または一部に限られ、また放射線療法についても評価は一定しておらず、合併症も頻発する。局所療法としては、非侵襲性の切除術として局所凍結切除術も行なわれ、近年では、遺伝子治療も試みられている。
無水エタノールの局所注入療法は、既に一部の肝腫瘍や副甲状腺腫瘍に行われており、また尿閉をきたした局所浸潤性前立腺癌患者に無水エタノールを注入し排尿状態の改善を得たとの報告もされている（非特許文献１参照）。
【０００３】
また、Ｌｅｖｙらは、正常イヌ前立腺を用いて、無水エタノール単独および無水エタノールとＣａｒｍｕｓｔｉｎｅの混同溶液を経直腸的に注入し、注入１４日目に超音波による画像検査ならびに組織学的検討を行っている（非特許文献２参照）。その結果、前立腺組織には出血と凝固性壊死が見られたが２群間に差はなかったと述べている。しかし、これらはすべて正常イヌ前立腺組織に対する検討であり、前立腺癌に対する効果については何も解明されていない。
また、米国特許５，１６２，１１５においては、ラットの脳に移植した腫瘍に対し、エタノール単独、及びエタノールに溶かしたＢＣＮＵを局注している（特許文献１参照）。その結果、エタノール単独では治癒率は８％で無治療群に比較し有為ではなかったが、エタノールに溶かしたＢＣＮＵ局注すると治癒率が４３％まで向上したことが示されている。しかし、また、エタノールを制癌剤の溶媒として使用する利点としては、溶媒が腫瘍内部に染込む時に一緒に制癌剤を染み渡らせる事にあると述べられている。
【０００４】
【特許文献１】
米国特許第５，１６２，１１５号明細書
【非特許文献１】
天野裕之  他：局所浸潤性前立腺癌に対する無水エタノール注入療法の経験，泌尿器外科，２００１年、第１４巻，臨時増刊，ｐ．４８０．
【非特許文献２】
Ｌｅｖｙ  ＤＡ．  ｅｔ  ａｌ：Ｔｒａｓｒｅｃｔａｌ  ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄ−ｇｕｉｄｅｄ  ｉｎｔｒａｐｒｏｓｔａｔｉｃ  ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｂｓｏｌｕｔｅ  ｅｔｈａｎｏｌ  ｗｉｔｈ  ａｎｄ  ｗｉｔｈｏｕｔ  ｃａｒｍｕｓｔｉｎｅ：  ａ  ｆｅａｓｉｂｉｌｉｔｙ  ｓｔｕｄｙ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｃａｎｉｎｅ  ｍｏｄｅｌ，  Ｕｒｏｌｏｇｙ，５３（６），１２４５−１２５１，１９９９．
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
新たな前立腺癌の治療法において、患者に負担の少ない低侵襲性の治療法が望まれている。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは鋭意検討の結果、ホルモン抵抗性の前立腺癌の治療法において低侵襲性の治療法として、無水エタノール局所投与することによって腫瘍血管の変性及び塞栓を生じさせた後に、制癌剤を局注することにより治療効果が飛躍的に向上することを見いだした。
すなわち、本発明は次の（１）〜（６）に関するものである。
【０００７】
（１）エタノール局所注入した後に併用されるための、エトポシド、カンプトテシン類縁体、ドキソルビシン類縁体、シスプラチン類縁体、タキサン類縁体、ビンカアルカロイド類縁体、ブレオマイシン類縁体及びフルオロウラシル類縁体からなる群から選択される１種以上の制癌剤を有効成分とする前立腺癌の局所治療剤。
（２）制癌剤がエトポシドである（１）に記載の治療剤。
（３）エタノールが無水エタノールである（１）に記載の治療剤。
（４）制癌剤がエタノール局所注入してから３０秒〜１０分後に局所投与される、前記（１）に記載の治療剤。
（５）エタノールおよび、エタノール局所注入した後に併用されるための、エトポシド、カンプトテシン類縁体、ドキソルビシン類縁体、シスプラチン類縁体、タキサン類縁体、ビンカアルカロイド類縁体、ブレオマイシン類縁体及びフルオロウラシル類縁体からなる群から選択される１種以上の制癌剤とを含む前立腺癌の局所治療用キット。
（６）エタノールが無水エタノールであり、制癌剤がエトポシド製剤である（５）に記載のキット。
【０００８】
【発明の実施の形態】
本発明で用いられる制癌剤としては、医薬品として許可されているエトポシド、カンプトテシン類として塩酸イリノテカン、塩酸ノギテカンなど、ドキソルビシン類として塩酸ドキソルビシン、塩酸エピルビシン、塩酸アクラルビシン、塩酸イダルビシン、塩酸ダウノルビシン、塩酸ピラルビシン、塩酸アムルビシンなど、シスプラチン類としてシスプラチン、カルボプラチン、ネダプラチンなど、タキサン類縁体としてパクリタキセル、ドセタキセルなど、ビンカアルカロイド類として硫酸ビンクリスチン、硫酸ビンデシン、酒石酸ピノレルビンなど、ブレオマイシン類として塩酸ブレオマイシン、硫酸ぺプロマイシンなど、フルオロウラシル類として、フルオロウラシル、塩酸ゲムシタビン、リン酸フルダラビン等が挙げられる。本発明においては、これらの制癌剤の中で特に好ましくはエトポシドである。
これら本発明で用いられる制癌剤は、いずれも市販されており購入して得ることが出来る。
【０００９】
また、本発明において、腫瘍内に局所注入するエタノールは無水エタノールが好ましく局方のものをそのまま用いることができる。
無水エタノールの腫瘍内への適用量は、その腫瘍の大きさにより適宜増減されるが、通常、投与される量はおおよそ１回当り１〜５０ｍＬの範囲内で行なわれる。投与回数は、重篤な副作用が発現しない、または治療が有効と判断されている限り繰り返して継続して行なうことができる。
【００１０】
本発明においては、無水エタノールを局注した後に一定間隔をおいてから制癌剤を局注することが望ましく、その間隔は通常３０秒〜３０分程度である。無水エタノールを腫瘍に局注することにより、腫瘍組織は変性壊死を起こし、また腫瘍血管内の赤血球が凝集することにより血管閉塞を起こすことが認められた。このエタノールの血管閉塞を起こす現象により、一定間隔を経てから制癌剤を局注すれば、制癌剤は全身移行することなく、また腫瘍内の局所滞留性を増すことができることを見いだした。すなわち本発明は、副作用の軽減、治療効果の増大を図るうえで合理的、かつ効率的に目的が達成されるものである。
特に、本発明においては試験例で示されているように、無水エタノール＋エトポシド併用群は、無水エタノール単独群およびエトポシド単独群に比較して、腫瘍体積増加の点から期待値以上の増殖抑制効果が得られ、相乗的効果が得られたものである。この点については、前記した何れの文献からも全く示唆されないものである。
【００１１】
次に、本発明で用いられる制癌剤について、エトポシド、カンプトテシン類（塩酸イリノテカン、塩酸ノギテカン等）、ドキソルビシン類（塩酸ドキソルビシン、塩酸エピルビシン、塩酸アクラルビシン、塩酸イダルビシン、塩酸ダウノルビシン、塩酸ピラルビシン、塩酸アムルビシン等）、シスプラチン類（シスプラチン、カルボプラチン、ネダプラチン等）、タキサン類（パクリタキセル、ドセタキセル等）、ビンカアルカロイド類（硫酸ビンクリスチン、硫酸ビンデシン、酒石酸ピノレルビン等）、ブレオマイシン類（塩酸ブレオマイシン、硫酸ぺプロマイシン等）、フルオロウラシル類（フルオロウラシル、テガフール、塩酸ゲムシタビン、リン酸フルダラビン等）は各々注射用製剤もしくは溶液製剤が市販しておりこれらを用いることが可能である。
【００１２】
または、上記の各々の活性成分又はその薬理学上許容される塩を用いて、注射用製剤もしくは溶液製剤を作成することも可能である。製剤化の際は、医薬用に用いられる種々の医薬用添加剤、すなわち、担体やその他の助剤、例えば安定化剤、防腐剤、無痛化剤、乳化剤等が必要に応じて使用され得る。制癌剤の活性成分の含量は製剤形態等により広範囲に変えることが可能であり、一般的には０．０１〜７０％（重量）、好ましくは０．１〜５０％（重量）含有する。
【００１３】
制癌剤の活性成分またはその薬理学上許容される塩の投与量は、腫瘍の大きさ、症状によって異なるが、成人１人１日あたりエトポシドは１０〜５００ｍｇ程度、カンプトテシン類（塩酸イリノテカン、塩酸ノギテカン等）は１〜５００ｍｇ程度、ドキソルビシン類（塩酸ドキソルビシン、塩酸エピルビシン、塩酸アクラルビシン、塩酸イダルビシン、塩酸ダウノルビシン、塩酸ピラルビシン、塩酸アムルビシン等）は５〜５００ｍｇ程度、シスプラチン類（シスプラチン、カルボプラチン、ネダプラチン等）は１０〜１０００ｍｇ程度、タキサン類（パクリタキセル、ドセタキセル等）は５〜１０００ｍｇ程度、ビンカアルカロイド類（硫酸ビンクリスチン、硫酸ビンデシン、酒石酸ピノレルビン等）は５〜１０００ｍｇ程度、ブレオマイシン類（塩酸ブレオマイシン、硫酸ぺプロマイシン等）３〜８００ｍｇ程度、及びフルオロウラシル類（フルオロウラシル、テガフール、塩酸ゲムシタビン、リン酸フルダラビン等）は１〜５０００ｍｇ程度である。
【００１４】
また、本発明では、本発明での前記構成での治療法に適応される、エタノール及び前記した各制癌剤とのキットの形態も含まれる。好ましくは、無水エタノールとエトポシド製剤とのキットの形態が好ましい。
【００１５】
【実施例】
次に本発明の実施例として試験例および製剤例を示すが、本発明はこれらには特に限定されないものである。
試験例１
ヒトの抗腫瘍効果を評価するモデルとして、ヌードマウスの皮下にヒト腫瘍培養細胞株を移植し、治療するという系がある。そこで、本モデルを用いて、腫瘍に無水エタノール局所注入後に制癌剤であるエトポシドを局所注入するという併用治療を行ない、その併用効果を調べた。
【００１６】
（実験方法）
ヒト前立腺癌培養細胞ＰＣ−３の１×１０７個をヌードマウス（ＢＡＬＢ／ｃ−ｎｕ、♂、１０週齢）の背側部皮下に移植し、ＰＣ−３の腫瘍塊を径約１．５  ｃｍ大に発育させた。この腫瘍を約２  ｍｍ角に細切して、１０週齢の同様のマウスに皮下移植し、３週後に増殖した腫瘍に対し、無水エタノールおよびエトポシド（２０  ｍｇ／ｍＬ静注用製剤、溶剤：ポリエチレングリコール４００、トゥイーン８０等を含む）を針付き注射筒を用いて直接注入した。ヌードマウスは、腫瘍の大きさがほぼ同等になるように４群に群分けした。第１群には対照群（コントロール群）として、生理食塩液を１００μＬ局所注入した（ｎ＝７）。第２群には無水エタノール１００μＬを（ｎ＝６）、第３群にはエトポシドの静注用製剤（薬剤濃度：２０ｍｇ／ｍＬ）８０μＬ（１．６  ｍｇ）を投与した（ｎ＝５）。第４群には無水エタノール１００μＬを注入し、その約１分後にエトポシドの静注用製剤８０μＬを注入した（ｎ＝４）。
注入前、注入１日後、４日後、１週後、２週後、３週後まで観察し、各群の腫瘍の長径（Ｌ  ｍｍ）及び短径（Ｗ  ｍｍ）をキャリパーを用いて測定し、腫瘍体積（ｍｍ３）はＬＷ２／２（ｍｍ３）で計算した。また、一部の腫瘍については、病理標本を作製し病理学的検討も行なった。
【００１７】
（実験結果）
コントロール群、無水エタノール単独局注群、エトポシド単独局注群、及び無水エタノール局所注入後にエトポシドを局所注入するという併用群の平均腫瘍体積の変化を表１及び図１に示す。また、投与群の平均腫瘍体積をコントロール群の平均腫瘍体積で除してＴ／Ｃ値を求め、表１に記した。
【００１８】
【表１】
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【００１９】
表１及び図１に示されているように、コントロール群の腫瘍体積の増加率は４週間で約４．５倍増加したのに対して、無水エタノール単独投与群及びエトポシド単独投与群の４週間での腫瘍体積の増加率は約３倍及び約１．５倍であり、腫瘍増殖抑制効果が認められた。一方、無水エタノール局注後エトポシドを局注する併用群では腫瘍体積が初期値に比べて減少し、４週間で約１／３倍になった。その抗腫瘍効果は無水エタノール単独投与群及びエトポシド単独投与群に比べて明らかに増強していることが判る。
これを経時変化として、Ｍｉｘｅｄ  ｍｏｄｅｌ  ａｎａｌｙｓｉｓ（Ｇ．Ｖｅｒｂｅｋｅ他編（松山  裕  他編訳）：医学統計のための線形混合モデル−ＳＡＳによるアプローチ，  サンエンティスト社，  ２００１年）で統計的に解析すると、無水エタノール単独投与群と併用群のｐ値は０．００１未満、また、エトポシド単独投与群と併用群のｐ値も０．００１未満であり、統計学的有意差をもって無水エタノール単独群またはエトポシド単独群では得られない強い腫瘍縮小効果が無水エタノール局注後エトポシドを局注する併用によって得られた。
【００２０】
さらに、表１に示すように無水エタノール単独群、エトポシド単独群のコントロール群に対する第４週目の腫瘍増殖抑制率〔（１−Ｔ／Ｃ）×１００〕は各々３３％、６７％であり、これを乗じて期待値を算出すると、併用群では７８％程度の腫瘍抑制率が得られることになる。ところが、本発明での無水エタノール＋エトポシド併用群では実際にはコントロール群に対して９２％の腫瘍抑制率が得られ、このことは相乗的効果として発揮されたと判断される。
また、注入直後（０日）の無水エタノール局注群の病理学的検査では、腫瘍細胞の核の濃縮、消失、変性がみられ、組織の変性および壊死が存在した。また腫瘍血管内の赤血球凝集がみられ、血管閉塞が生じていた。したがって、無水エタノール局注後には、腫瘍血管の正常な働きが阻害されており、その後に、薬剤を局注することは、薬剤の全身への移行性を妨げ、薬剤の局所への滞留性を増し、更に全身に対する副作用発現も起こしにくいと判断される。
【００２１】
製剤例１（エトポシド注射剤）
下記液状組成物をバイアルに窒素ガスとともに充填し、１バイアル５ｍＬのエトポシド溶液製剤を得た。
エトポシド                          １００ｍｇ
ポリソルベート８０                  ４００ｍｇ
ポリエチレングリコール４００      ３０００ｍｇ
無水エタノール                            適量
【００２２】
【発明の効果】
本発明は、局所治療可能な前立腺癌に対して飛躍的な腫瘍効果が達成され、更には全身への副作用軽減がより一層期待される有用な治療剤を提供できるというものである。
【図面の簡単な説明】
【図１】対照群及び各投与群の腫瘍体積の経時変化を図示している。
【符号の説明】生理食塩液１００μＬ局注群（■）、無水エタノール１００μＬ局注群（◆）エトポシド８０μＬ局注群（▲）及び無水エタノール１００μＬ＋エトポシド８０μＬ併用局注群（●）。
【図１】
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