(57)【要約】【課題】即時相反応の抑制、加えて遅発相反応の抑制である好酸球浸潤抑制作用のある薬剤、即ちＩ型アレルギー疾患の即時相反応及び遅発相反応の両反応を抑制するアレルギー疾患治療薬、特にアレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、気管支喘息等のアレルギー疾患の治療に対して優れた効果を有するアレルギー性疾患治療薬を提供することにある。【解決手段】チョウジ及びセキショウブから選ばれる１種または２種を有効成分とするアレルギー疾患治療薬である。【選択図】　　なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
チョウジ及びセキショウブから選ばれる１種または２種を有効成分とするアレルギー疾患治療薬。
【請求項２】
アレルギー疾患がＩ型アレルギー疾患に由来する請求項１記載のアレルギー疾患治療薬。
【請求項３】
アレルギー疾患がアレルギー性鼻炎である請求項１記載のアレルギー疾患治療薬。
【請求項４】
アレルギー疾患が皮膚炎である請求項１記載のアレルギー疾患治療薬。
【請求項５】
アレルギー疾患が気管支喘息である請求項１記載のアレルギー疾患治療薬。
【請求項６】
皮膚炎がアトピー性皮膚炎である請求項４記載のアレルギー疾患治療薬。
【請求項７】
経口製剤である請求項１〜６記載のアレルギー疾患治療薬。
【請求項８】
チョウジ又はセキショウブが、経口製剤中に原生薬換算量として、０．０１〜１０ｇ配合される請求項７記載のアレルギー疾患治療薬。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、アレルギー疾患の治療薬、詳しくはＩ型アレルギーの即時相反応及び遅発相反応の抑制に有用なアレルギー疾患治療薬、具体的にはアレルギー性鼻炎、皮膚炎特にアトピー性皮膚炎、気管支喘息等のＩ型アレルギー疾患の治療薬である。
【０００２】
【従来の技術】
アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、気管支喘息等のアレルギー疾患は病態の発症にＩ型アレルギー反応が強く関与する疾患であり即時相反応と遅発相反応を呈する。アレルギー性鼻炎であれば、花粉等による抗原惹起直後にくしゃみ、鼻水、鼻づまりを誘発する即時相反応と惹起後４〜２４時間に鼻づまりを誘発する遅発相反応の２相性反応を示すことが知られている。従来、アレルギー性疾患の治療には抗ヒスタミン作用を主作用とする抗アレルギー薬が投与されているが、即時相反応は抑制するが遅発相反応において効果が弱いとされている。この遅発相反応の発症には、抗原惹起４〜２４時間後に組織中に浸潤してくる好酸球が重要な役割を果たすことが知られている。従って、有効な治療には即時相反応の抑制のみでは不十分であり、加えて遅発相反応の抑制をターゲットとする好酸球浸潤抑制作用のある薬剤、即ち、Ｉ型アレルギー疾患の即時相反応及び遅発相反応の両反応を抑制するアレルギー疾患治療薬の開発が望まれている。
【０００３】
チョウジとセキショウブは、胃腸薬の処方に配合され用いられている生薬である。
【０００４】
しかしながら、チョウジ、セキショウブのアレルギー疾患に対する治療効果は全く知られていない。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、アレルギー疾患に対する治療に優れた効果を有するアレルギー疾患治療薬を提供することである。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
本発明者は、かかる課題を解決するために鋭意研究した結果、チョウジ及びセキショウブが、アレルギー疾患の治療、特にアレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎及び気管支喘息等のＩ型アレルギーの即時相反応及び遅発相反応の抑制に優れた効果を有することを見出し、本発明を完成した。
【０００７】
すなわち、本発明は、チョウジ及びセキショウブから選ばれる１種または２種を有効成分とするアレルギー疾患治療薬である。
アレルギー疾患治療薬として、詳しくはＩ型アレルギーの即時相反応及び遅発相反応の抑制に有用なアレルギー疾患治療薬、具体的にはアレルギー性鼻炎、皮膚炎特にアトピー性皮膚炎、気管支喘息等のＩ型アレルギー疾患の治療薬である。
【０００８】
本発明で、チョウジ及びセキショウブの有効量は、経口では原生薬換算量として、１日量あたり、０．０１〜１００ｇ、好適には０．０１〜１０ｇ、さらに好適には０．１〜１０ｇがよい。チョウジ及びセキショウブは、実際には、生薬末、生薬エキス等の形で製剤に配合される。
【０００９】
本発明のアレルギー疾患治療薬は、経口又は非経口投与製剤に調整され、経口投与製剤としては、錠剤、丸剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、チュアブル錠などの固形製剤、シロップ剤、ドリンク剤などの液剤であり、慣用的な方法で製造される。固形製剤として調整する場合には、必要に応じて、賦形剤、滑沢剤、崩壊剤等を使用することができる。液剤として調整する場合には、必要に応じて、界面活性剤、溶解補助剤、緩衝剤等を使用することができる。
また、他に保存剤、香料、色素、甘味剤、嬌味剤、清涼化剤等を使用することができる。
【００１０】
非経口投与製剤としては、貼付剤、粉末剤、液剤、スプレー剤等で鼻粘膜、気管、皮膚等へ投与される。
【００１１】
本発明のアレルギー疾患治療薬は、１日１回又は２〜６回に分けて投与することができる。
【００１２】
【実施例】
以下に、実施例及び試験例を示し、本発明をさらに詳細に説明する。
【００１３】
実施例１
チョウジ末１５００ｇ、結晶セルロース１５０ｇ、白糖７５ｇ、マンニトール３１．５ｇ、ヒドロキシプロピルセルロース３００ｇ、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース４５０ｇ、軽質無水ケイ酸４５ｇ、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム１３５ｇを混合し、攪拌造粒機にて精製水で造粒し、流動層乾燥機にて乾燥し、ステアリン酸マグネシウム１３．５ｇを加えて混合し、ロータリー打錠機により１錠３００ｍｇの錠剤を得た。
【００１４】
実施例２
チョウジエキス末１０００ｇ、結晶セルロース９００ｇ、白糖３００ｇ、マンニトール１１１０ｇ、ヒドロキシプロピルセルロース９００ｇ、軽質無水ケイ酸９０ｇ、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム１５５ｇを混合し、流動層造粒乾燥機にて水／エタノール混液（３：７）で造粒、乾燥し、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム４５ｇを加えて混合し、１包１．５ｇの散剤を得た。
【００１５】
実施例３
チョウジ末１０００ｇ、リン酸水素カルシウム４２８ｇ、バレイショデンプン３６０ｇ、結晶セルロース３６０ｇ、ヒドロキシプロピルセルロース１２０ｇ、軽質無水ケイ酸３６ｇ、ステアリン酸マグネシウム２４ｇ、ケイ酸マグネシウム７２ｇを混合し、乾式造粒機にて造粒し、１カプセル４００ｍｇのカプセル剤を得た。
【００１６】
実施例４
セキショウブ末１５００ｇ、結晶セルロース２００ｇ、白糖３０ｇ、マンニトール２８ｇ、ヒドロキシプロピルセルロース２４０ｇ、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース２４０ｇ、軽質無水ケイ酸３０ｇ、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム１２０ｇを混合し、攪拌造粒機にて精製水で造粒し、流動層乾燥機にて乾燥し、ステアリン酸マグネシウム１２ｇを加えて混合し、ロータリー打錠機により１錠４００ｍｇの錠剤を得た。
【００１７】
実施例５
セキショウブ末１５００ｇ、結晶セルロース４００ｇ、白糖３００ｇ、マンニトール１１１０ｇ、ヒドロキシプロピルセルロース９００ｇ、軽質無水ケイ酸９０ｇ、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム１５５ｇを混合し、流動層造粒乾燥機にて水／エタノール混液（３：７）で造粒、乾燥し、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム４５ｇを加えて混合し、１包１．５ｇの散剤を得た。
【００１８】
実施例６
セキショウブ末１５００ｇ、リン酸水素カルシウム１２８ｇ、バレイショデンプン１６０ｇ、結晶セルロース３６０ｇ、ヒドロキシプロピルセルロース１２０ｇ、軽質無水ケイ酸３６ｇ、ステアリン酸マグネシウム２４ｇ、ケイ酸マグネシウム７２ｇを混合し、乾式造粒機にて造粒し、１カプセル４００ｍｇのカプセル剤を得た。
【００１９】
試験例１：卵白アルブミン（ＯＶＡ）惹起マウス鼻腔内好酸球湿潤反応試験
１．動物
ＢＡＬＢ／ｃマウス（雄、５ｗｅｅｋ）を１週間の予備飼育後に実験に供した。
【００２０】
２．試薬及び被験薬物
試薬として、ＯＶＡ、硫酸カリウム・アルミニウム、被験薬物は、チョウジ及びセキショウブを使用した。
【００２１】
３．抗原感作
３−１　水酸化アルミニウムゲル（Ａｌｕｍ）の作成
１０％硫酸カリウム・アルミニウム水溶液（ストック溶液）６０．８ｍＬを純水６００ｍＬに添加し、ｐＨ７．０に調製して水酸化アルミニウム懸濁液を作成した。この懸濁液をリン酸緩衝溶液（ＰＢＳ）を使用し遠心操作（２０００ｒｐｍ，　１０ｍｉｎ）することで３回洗浄した。洗浄した水酸化アルミニウムの沈殿物をＰＢＳにより最終２００ｍＬにメスアップし再懸濁する事でＡｌｕｍ溶液（５ｍｇ／ｍＬ）を作成した。
【００２２】
３−２　感作
感作はＢＡＬＢ／ｃマウスにＯＶＡ−Ａｌｕｍ溶液（ＯＶＡ　５μｇ／Ａｌｕｍ５ｍｇ／ｍＬ）を２００μＬ腹腔内投与する事で行った。感作は初回感作（０ｄａｙ）及び追加感作（４，１３，２６ｄａｙ）の４回行った。
【００２３】
４．抗原惹起、被験薬物の調整及び投与方法、及び評価
最終感作７日後より隔日に４回、ＯＶＡ（２５μｇ／ｍｌ，２０μｌ）の点鼻惹起を行った。被験薬物として、チョウジ、セキショウブのそれぞれ１００及び５００ｍｇ／ｋｇを用いた。また、コントロールとして、０．５％カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）溶液を用いた。チョウジ１００ｍｇ／ｋｇ群は、マウスｎ＝９　、チョウジ５００ｍｇ／ｋｇ群は、ｎ＝８　、セキショウブ１００ｍｇ／ｋｇ群は、ｎ＝９　、セキショウブ５００ｍｇ／ｋｇ群は、ｎ＝９　、コントロール群は、ｎ＝１２であった。被験薬物を、０．５％ＣＭＣ溶液に溶解又は懸濁し、初回惹起１日前より最終惹起日まで１日１回、経口投与により、８日間連投した。なお、点鼻惹起当日の投与は、惹起の１時間前に行った。最終惹起６時間後に鼻腔組織を回収し、ホルマリン固定後、定法に従ってＬｕｎａ染色した。各値は鼻腔組織Ｌｅｖｅｌ２病理切片当たりの好酸球数をｍｅａｎ±ｓｅで示した。多群間の平均値の差の検定はＤｕｎｎｅｔｔの多重比較検定法を用いた。
【００２４】
５．結果
チョウジの結果を図１に示した。セキショウブの結果を図２に示した。チョウジ及びセキショウブは、鼻腔内好酸球浸潤反応をｃｏｎｔｒｏｌに対して有意に抑制した。また、その抑制は、投与量依存的であった。
【００２５】
従って、チョウジ及びセキショウブから選ばれる１種または２種を有効成分とするアレルギー疾患治療剤は、アレルギー性鼻炎の慢性炎症化及び鼻炎症状、特に鼻閉の治療に有効であることが示された。
【００２６】
試験例２：ＯＶＡ惹起マウス皮膚好酸球湿潤反応試験
１．動物
ＢＡＬＢ／ｃマウス（雄、５ｗｅｅｋ）を１週間の予備飼育後に実験に供した。
【００２７】
２．試薬及び被験薬物
試薬として、ＯＶＡ、硫酸カリウム・アルミニウム、被験薬物は、チョウジ及びセキショウブを使用した。
【００２８】
３．抗原感作
３−１　Ａｌｕｍの作成
１０％硫酸カリウムアルミニウム水溶液（ストック溶液）６０．８ｍＬを純水６００ｍＬに添加し、ｐＨ７．０に調製して水酸化アルミニウム懸濁液を作成した。この懸濁液をリン酸緩衝溶液（ＰＢＳ）を使用し遠心操作（２０００ｒｐｍ，　１０ｍｉｎ）することで３回洗浄した。洗浄した水酸化アルミニウムの沈殿物をＰＢＳにより最終２００ｍＬにメスアップし再懸濁する事でＡｌｕｍ溶液（５ｍｇ／ｍＬ）を作成した。
【００２９】
３−２　感作
感作はＢＡＬＢ／ｃマウスにＯＶＡ−Ａｌｕｍ溶液（ＯＶＡ　５μｇ／Ａｌｕｍ５ｍｇ／ｍＬ）を２００μＬ腹腔内投
与する事で行った。感作は初回感作（０ｄａｙ）及び追加感作（４，１３，２６ｄａｙ）の４回行った。
【００３０】
４．抗原惹起、被験薬物の調整及び投与方法、及び評価
惹起は最終感作６日後にＯＶＡ（１０μｇ／ｍｌ，５０μｌ）を皮内投与することで行った。被験薬物はチョウジ、セキショウブのそれぞれ１０００ｍｇ／ｋｇを用いた。また、コントロール群は０．５％カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）溶液を用いた。チョウジ１０００ｍｇ／ｋｇ群は、マウスｎ＝８　、セキショウブ１０００ｍｇ／ｋｇ群は、ｎ＝８　、コントロール群は、ｎ＝１０であった。被験薬物の投与は０．５％ＣＭＣ溶液に溶解又は懸濁し、初回惹起１日前及び１時間前、惹起後６時間に経口投与により行った。惹起２４時間後に惹起部位の皮膚を回収し、ホルマリン固定後、定法に従ってＬｕｎａ染色した。各値は皮膚病理切片の１ｃｍ当たりの好酸球数をｍｅａｎ±ｓｅで示した。２群間の検定はｔ−ｔｅｓｔ検定法を用いた。
【００３１】
５．結果
結果を図３に示した。チョウジ及びセキショウブは、皮膚好酸球浸潤反応をｃｏｎｔｒｏｌに対して有意に抑制した。
【００３２】
従って、チョウジ及びセキショウブから選ばれる１種または２種を有効成分とするアレルギー疾患治療剤は、アトピー性皮膚炎の増悪因子である好酸球を強力に抑制しアトピー性皮膚炎の治療に有効であることが示された。
【００３３】
試験例３：マウス受動感作皮膚アナフラキシー（ＰＣＡ）反応試験
１．動物
ＩＣＲマウス（雄、６ｗｅｅｋ）を１週間の予備飼育後に実験に供した。
【００３４】
２．試薬及び被験薬物
被験薬物は、チョウジ及びセキショウブを使用した。
【００３５】
３．抗原感作
感作はマウス耳介にｒａｔ　ａｎｔｉ−ＤＮＰ−ＡＳ（コスモバイオ株式会社）をＰＢＳにより１００倍希釈し、エーテル麻酔下において１０μＬを皮内注射した。
【００３６】
４．抗原惹起、被験薬物の調整及び投与方法、及び評価
反応の惹起は感作２４時間後にＤＮＰ−ＡＳ（１ｍｇ／ｍｌ）を含有した１％ポンタミンスカイブルーを１匹あたり０．２５ｍＬを静脈内投与することで行った。被験薬物はチョウジ、セキショウブのそれぞれ１０００ｍｇ／ｋｇを用いた。また、コントロール群は０．５％カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）溶液を用いた。チョウジ１０００ｍｇ／ｋｇ群は、マウスｎ＝１０、セキショウブ１０００ｍｇ／ｋｇ群は、ｎ＝１０、コントロール群は、ｎ＝１１であった。被験薬物の投与は０．５％ＣＭＣ溶液に溶解又は懸濁し、絶食下において惹起の１時間前に経口投与で行った。反応を惹起したマウスは惹起３０分後に屠殺し、耳介を回収し定法に従って漏出した色素を抽出した。また、反応強度の判定は６２０ｎｍの吸光度を測定し色素量を定量することで行った。各値は惹起した耳介に漏出した色素量（μｇ／ｓｉｔｅ）をｍｅａｎ±ｓｅで示した。２群間の検定はｔ−ｔｅｓｔ検定法を用いた。
【００３７】
５．結果
結果を図４に示した。チョウジ及びセキショウブは、ＰＣＡ反応をｃｏｎｔｒｏｌに対して有意に抑制し、Ｉ型アレルギーの特に即時相反応を強力に抑制する抗アレルギー作用を有することが判明した。
【００３８】
従って、チョウジ及びセキショウブから選ばれる１種または２種を有効成分とするアレルギー疾患治療剤は、Ｉ型アレルギー反応が病態の発症に強く関与する、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、気管支喘息等のアレルギー疾患の治療に対して有用なアレルギー疾患治療薬となることが示された。
【００３９】
試験例４：アトピー性皮膚炎モデルのＮＣ／Ｎｇａマウス塩化ピクリル塗布惹起皮膚炎反応試験
【００４０】
１．動物
ＮＣ／Ｎｇａマウス（雄、５週齢）を３週間の予備飼育後実験に供した。
【００４１】
２．試薬及び被験薬物
試薬として塩化ピクリル、被験薬物として、セキショウブ及び比較薬物としてデキサメタゾンを用いた。
【００４２】
３．感作
感作は予め、悌毛したＮＣ／Ｎｇａマウスの腹部及びフットパットへ５％塩化ピクリル（溶媒はエタノール、アセトン４：１）１８０μＬを塗布することで行った。
【００４３】
４．皮膚炎誘発
皮膚炎の誘発は感作４日後のＮＣ／Ｎｇａマウスに０．８％塩化ピクリル（溶媒はアセトン、オリーブオイル３：１）１５０μＬ　を予め悌毛した背部、頭部及び耳介に塗布することで行った。また、同様の皮膚炎誘発は一週間に一度、５週間にわたり行った。
【００４４】
５．皮膚炎症反応の評価
皮膚炎症反応の評価は肉眼所見により行い、１．発赤、出血、２．浮腫、３．擦傷、組織欠損、４．痂皮形成、乾燥、について４段階の評点化（０：無症状、１：軽度、２：中等度、３：高度）を行い、その合計を炎症反応スコアーとした。また、炎症反応の評価は各炎症反応誘発の直前に行った。
【００４５】
６．皮膚バリア機能評価（皮膚水分蒸散量測定）
皮膚水分蒸散量の測定はＴＥＷＡＭＥＴＥＲ　ＴＭ−１２０（Ｃｏｕｒａｇｅ＋Ｋｈａｚａｋａ　Ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃ　ＧｍｂＨ製）を使用し、皮膚炎症反応誘発の直前に測定した。
【００４６】
７．被験薬物の投与方法
被験薬物として、セキショウブは５００ｍｇ／ｋｇを用い週５回、経口投与した（ｎ＝１２）。また、コントロールとして、０．５％カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）溶液を用いた（ｎ＝１２）。また、比較薬剤のデキサメタゾンは１ｍｇ／ｋｇを用い週３回、経口投与した（ｎ＝１１）。なお、皮膚炎誘発当日の投与は、惹起の１時間前に行った。
【００４７】
８．統計学的方法
各値はｍｅａｎ±ｓｅで示した。また、有意差検定は対照群と各投与群間の２群間比較を行った（＊ｐ＜０．０５　＊＊ｐ＜０．０１　ｖｓ　ｃｏｎｔｒｏｌ）。
【００４８】
９．試験結果
対症群は塩化ピクリル塗布回数に伴い感作後１８日をピークとする皮膚炎症とその後、塗布３９目以降をｍａｘとする皮膚炎症反応の増強が確認された。本炎症反応をデキサメタゾンは３２〜３９日の炎症を有意に抑制した。一方、セキショウブは感作後、１８日目のピークの炎症及び３９日目の炎症を強力に有意に抑制した（図５）。従って、セキショウブはアトピー性皮膚炎を反映する皮膚炎症反応に対して、ステロイドである高用量デキサメタゾンに匹敵する強力な抑制作用を有することが見出された。
【００４９】
皮膚バリア機能の指標となる皮膚水分蒸散量は対照群と比較し、デキサメタゾン群及びセキショウブ群は有意な抑制作用を示した（図６）。従って、セキショウブにアトピー性皮膚炎治療において重要な皮膚バリア機能の改善作用が示された。
【発明の効果】
本発明のアレルギー疾患治療剤は、Ｉ型アレルギーの即時相反応及び遅発相反応を強力に抑制することでアレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、気管支喘息等のアレルギー疾患の治療に対して優れた抑制効果を有する。
【図面の簡単な説明】
【図１】チョウジのＯＶＡ惹起マウス鼻腔内好酸球浸潤反応抑制作用を示す病理切片当たりの好酸球数をｍｅａｎ±ｓｅで示した図面。
【図２】セキショウブのＯＶＡ惹起マウス鼻腔内好酸球浸潤反応抑制作用を示す病理切片当たりの好酸球数をｍｅａｎ±ｓｅで示した図面。
【図３】チョウジ及びセキショウブのＯＶＡ惹起マウス皮膚好酸球浸潤反応抑制作用を示す皮膚病理切片の１ｃｍ当たりの好酸球数をｍｅａｎ±ｓｅで示した図面。
【図４】チョウジ及びセキショウブのＰＣＡ反応抑制作用を示す惹起した耳介に漏出した色素量（μｇ／ｓｉｔｅ）をｍｅａｎ±ｓｅで示した図面。
【図５】セキショウブのアトピー性皮膚炎モデルのＮＣ／Ｎｇａマウス塩化ピクリル塗布惹起皮膚炎反応試験の結果をスコアー示した図面。
【図６】セキショウブのアトピー性皮膚炎モデルのＮＣ／Ｎｇａマウス塩化ピクリル塗布惹起皮膚炎反応試験時の皮膚水分蒸散量を示した図面。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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