(57)【要約】【課題】本発明の課題は、唾液などの生物学的試料中に存在するアミラーゼ活性をより簡便に測定する手段を提供するものであり、特に、高濃度にアミラーゼを含有する試料を測定する手段（測定用試薬、測定方法、装置）を提供しようとするものである。【解決手段】修飾オリゴ糖基質を用いた酵素法において、オリゴ糖基質を支持体に担持させることで、高活性値のアミラーゼ試料のアミラーゼ活性を極めて簡便に測定する手段（測定用試薬、測定方法、装置）を見いだし、本発明に到達した。【特許請求の範囲】
【請求項１】
基質である修飾オリゴ糖を支持体に担持してなるアミラーゼ測定用試薬。
【請求項２】
支持体が、水不溶性の有機又は無機担体である請求項１に記載のアミラーゼ測定用試薬。
【請求項３】
支持体の形状が、薄膜である請求項１又は２に記載のアミラーゼ測定用試薬。
【請求項４】
薄膜の厚さが、１００〜５００μｍである請求項３に記載のアミラーゼ測定用試薬。
【請求項５】
薄膜が、白色である請求項３または４に記載のアミラーゼ測定用試薬。
【請求項６】
薄膜が、光の乱反射が制御されている請求項３〜５の何れか一に記載のアミラーゼ測定用試薬。
【請求項７】
修飾オリゴ糖の支持体への担持量が、修飾オリゴ糖基質を２〜５００ｍｍｏｌ／Ｌを含有する溶液中に支持体を約１〜５分間含浸させてえられる相当量である請求項１〜６の何れか一に記載のアミラーゼ測定用試薬。
【請求項８】
基質である修飾オリゴ糖が、Ｇ２〜７から選ばれるオリゴ糖であって、還元末端を色原体で修飾されている請求項１〜７の何れか一に記載のアミラーゼ測定用試薬。
【請求項９】
色原体が、４−ニトロフェノール（ＰＮＰ）、２−クロロ−４−ニトロフェノール（ＣＮＰ）、２，４−ジクロロフェノール（Ｃｌ２Ｐ）から選ばれる請求項８に記載のアミラーゼ測定用試薬。
【請求項１０】
修飾オリゴ糖が、以下から選ばれる請求項１〜７の何れか一に記載のアミラーゼ測定用試薬；
２−クロロ−４−ニトロフェノール−４−Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピラノシルマルトサイド（以下　ＧＡＬ−Ｇ２−ＣＮＰ）、ＧＡＬ−Ｇ４−ＣＮＰ、ＧＡＬ−Ｇ５−ＣＮＰ、Ｇ５−ＣＮＰ、Ｇ６−ＣＮＰ、Ｇ７−ＣＮＰ、Ｇ５−ＰＮＰ、Ｇ７−ＰＮＰ。
【請求項１１】
請求項１〜１０の何れか一に記載のアミラーゼ測定用試薬を、アミラーゼを含有する生物学的試料と接触させ、遊離する修飾物質を測定することを特徴とするアミラーゼ活性の測定方法。
【請求項１２】
生物学的試料が、ヒト唾液、血液又はそれらの由来物である請求項１１に記載の測定方法。
【請求項１３】
遊離する修飾物質の発色反応を色判別センサーを用いて測定する請求項１１又は１２に記載の測定方法。
【請求項１４】
支持体からの反射光又は支持体の透過光を測定する請求項１３に記載の測定方法。
【請求項１５】
光源である発光手段が発光ダイオード、レーザ、ハロゲンランプ、タングステンランプから選ばれる請求項１３又は１４に記載の測定方法。
【請求項１６】
反射光を計測する角度が０〜４５度、測定対象との距離が１０〜３０ｍｍ、スポット径が１〜５ｍｍである請求項１３〜１５の何れか一に記載の測定方法。
【請求項１７】
請求項１３〜１６の何れか一に記載の測定方法に使用するアミラーゼ活性の測定用装置。
【請求項１８】
以下の機能を担持するアミラーゼ活性の測定用装置；
１）基質である修飾オリゴ糖を支持体に担持してなるアミラーゼ測定用試薬から遊離する修飾物質の発色反応を色判別センサーを用いて測定する。
２）支持体からの反射光又は支持体の透過光を測定する。
３）光源である発光手段が発光ダイオード、レーザ、ハロゲンランプ、タングステンランプから選ばれる。
４）反射光を計測する角度が０〜４５度、測定対象との距離が１０〜３０ｍｍ、スポット径が１〜５ｍｍである。
【請求項１９】
請求項１１〜１６の何れか一に記載の測定方法によって人唾液中のアミラーゼ活性を測定することを含む、被験者のストレスレベルの検定方法。
【請求項２０】
基質である修飾オリゴ糖を支持体に担持してなるアミラーゼ測定用試薬に対し光を照射する発光手段と、前記測定用試薬からの反射光を受光する受光手段と、受光した反射光に基づき前記測定用試薬の発色を判別する色判別手段と、色判別結果に基づいてストレス度合を検出するストレス検出手段とを有することを特徴とするストレス測定装置。
【請求項２１】
請求項２０において、
前記発光手段は一または複数色の光を発し、前記色判別手段は各色の光を前記測定用試薬に照射した際の反射光の強度に基づいて色判別を行う、
ことを特徴とするストレス測定装置。
【請求項２２】
請求項２１において、
前記発光手段から発せられる光は、測定用試薬によって発色される色の補色または補色に近い色の光を含む、
ことを特徴とするストレス測定装置。
【請求項２３】
基質である修飾オリゴ糖を支持体に担持してなるアミラーゼ測定用試薬に対し光を照射する発光手段と、測定用試薬からの反射光を受光する受光手段と、受光した反射光の強度とストレス度合との関係を規定する情報を記憶する第１のメモリ手段と、前記受光した反射光の強度と前記第１のメモリに記憶された情報とを参照しストレス度合を示す情報を生成するストレス情報生成手段とを有することを特徴とするストレス測定装置。
【請求項２４】
請求項２３において、
前記第１のメモリに記憶されている情報は、前記受光した反射光の強度とストレス度合とを対応付けた変換テーブルである、
ことを特徴とするストレス測定装置。
【請求項２５】
請求項２３において、
前記第１のメモリに記憶されている情報は、前記受光した反射光の強度に基づいてストレス度合を算出するための演算処理情報である、
ことを特徴とするストレス測定装置。
【請求項２６】
請求項２３から２５の何れかにおいて、
外部温度を検出する温度センサを更に有し、前記ストレス情報生成手段は、検出された温度に基づいて前記ストレス度合を補正する、
ことを特徴とするストレス測定装置。
【請求項２７】
請求項２３から２６の何れかにおいて、
前記測定用試薬の反応時間を計測する計測手段を更に有し、前記ストレス情報生成手段は、計測された反応時間に基づいて前記ストレス度合を補正する、
ことを特徴とするストレス測定装置。
【請求項２８】
請求項２３から２７の何れかにおいて、
前記発光手段は一または複数色の光を発し、前記第１のメモリ手段は、受光した各色の光の反射光強度とストレス度合との関係を規定する情報を記憶する、
ことを特徴とするストレス測定装置。
【請求項２９】
請求項２８において、
前記発光手段から発せられる光は、測定用試薬によって発色される色の補色または補色に近い色の光を含む、
ことを特徴とするストレス測定装置。
【請求項３０】
請求項２０から２９の何れかにおいて、
前記ストレス度合に関する情報を測定履歴情報として記憶する第２のメモリ手段を有する、
ことを特徴とするストレス測定装置。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明はアミラーゼ活性の測定に使用する試薬に関し、特に、被験者の唾液中のアミラーゼ活性の測定のための試薬、その試薬をつかったアミラーゼ活性の測定方法及びそのための測定用装置に関する。さらには、測定した唾液アミラーゼ活性値より、被験者のストレスを測定する方法に関する。
【０００２】
【従来技術】
アミラーゼ（酵素番号ＥＣ３．２．１．１）は膵・唾液腺などで分泌され、主に唾液腺・膵に分布し、その他にも筋肉・卵巣・卵管などに存在していることが知られており、組織から逸脱したアミラーゼが血中や尿中に存在していることも知られている。一部の膵臓・唾液腺、腎・肝機能障害、腫瘍などの疾患においては、血清中や尿中・膵液中のアミラーゼ値が高値を示すことが知られている。
これらのアミラーゼ活性の測定方法としては、修飾オリゴ糖基質を用いた酵素法などが知られており、分光光度計や自動分析機などを用いてその吸光度変化から測定を行っていた。
【０００３】
近年の研究より、唾液アミラーゼ活性値が、被験者のストレスと相関しているとの報告がされており〔医用電子と生体工学　３９（３），　ｐ２３４−２３９（２００１）、山口昌樹　他〕、唾液試料中のアミラーゼ活性値を測定する方法が望まれている。
しかしながら、従来の自動分析機などを用いた測定は、測定装置が高価であり、測定にも様々な準備が必要であり、測定自体にも数１０分かかるという問題点があった。
【０００４】
【発明が解決しようとしている課題】
本発明の課題は、唾液などの生物学的試料中に存在するアミラーゼ活性をより簡便に短時間に測定する手段を提供するものであり、そのための試薬、測定方法、測定用装置、加えてこれらを利用した被験者のストレスを測定する方法を提供しようとするものである。
【０００５】
【課題を解決する方法及び手段】
本発明者らは、修飾オリゴ糖基質を用いた酵素法において、オリゴ糖基質を支持体に担持するという手段を導入し、支持体上でアミラーゼ反応を行わせ、色判別センサーで発色を読みとることにより、数１０秒という短時間で簡便にアミラーゼ活性を測定することが可能であることを見いだし、本発明に至った。
【０００６】
すなわち、本発明は、
「１．基質である修飾オリゴ糖を支持体に担持してなるアミラーゼ測定用試薬。
２．支持体が、水不溶性の有機又は無機担体である前項１に記載のアミラーゼ測定用試薬。
３．支持体の形状が、薄膜である前項１又は２に記載のアミラーゼ測定用試薬。
４．薄膜の厚さが、１００〜５００μｍである前項３に記載のアミラーゼ測定用試薬。
５．薄膜が、白色である前項３または４に記載のアミラーゼ測定用試薬。
６．薄膜が、光の乱反射が制御されている前項３〜５の何れか一に記載のアミラーゼ測定用試薬。
７．修飾オリゴ糖の支持体への担持量が、修飾オリゴ糖基質を２〜５００ｍｍｏｌ／Ｌを含有する溶液中に支持体を約１〜５分間含浸させてえられる相当量である前項１〜６の何れか一に記載のアミラーゼ測定用試薬。
８．基質である修飾オリゴ糖が、Ｇ２〜７から選ばれるオリゴ糖であって、還元末端を色原体で修飾されている前項１〜７の何れか一に記載のアミラーゼ測定用試薬。
９．色原体が、４−ニトロフェノール（ＰＮＰ）、２−クロロ−４−ニトロフェノール（ＣＮＰ）、２，４−ジクロロフェノール（Ｃｌ２Ｐ）から選ばれる前項８に記載のアミラーゼ測定用試薬。
１０．修飾オリゴ糖が、以下から選ばれる前項１〜７の何れか一に記載のアミラーゼ測定用試薬；
２−クロロ−４−ニトロフェノール−４−Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピラノシルマルトサイド（以下　ＧＡＬ−Ｇ２−ＣＮＰ）、ＧＡＬ−Ｇ４−ＣＮＰ、ＧＡＬ−Ｇ５−ＣＮＰ、Ｇ５−ＣＮＰ、Ｇ６−ＣＮＰ、Ｇ７−ＣＮＰ、Ｇ５−ＰＮＰ、Ｇ７−ＰＮＰ。
１１．前項１〜１０の何れか一に記載のアミラーゼ測定用試薬を、アミラーゼを含有する生物学的試料と接触させ、遊離する修飾物質を測定することを特徴とするアミラーゼ活性の測定方法。
１２．生物学的試料が、ヒト唾液、血液又はそれらの由来物である前項１１に記載の測定方法。
１３．遊離する修飾物質の発色反応を色判別センサーを用いて測定する前項１１又は１２に記載の測定方法。
１４．支持体からの反射光又は支持体の透過光を測定する前項１３に記載の測定方法。
１５．光源である発光体が発光ダイオードである前項１３又は１４に記載の測定方法。
１６．反射光を計測する角度が０〜４５度、測定対象との距離が１０〜３０ｍｍ、スポット径が１〜５ｍｍである前項１３〜１５の何れか一に記載の測定方法。
１７．前項１３〜１６の何れか一に記載の測定方法に使用するアミラーゼ活性の測定用装置。
１８．以下の機能を担持するアミラーゼ活性の測定用装置；
１）基質である修飾オリゴ糖を支持体に担持してなるアミラーゼ測定用試薬から遊離する修飾物質の発色反応を色判別センサーを用いて測定する。
２）支持体からの反射光又は支持体の透過光を測定する。
３）光源としての発光手段が発光ダイオード、レーザ、ハロゲンランプ、タングステンランプから選ばれる。
４）反射光を計測する角度が０〜４５度、測定対象との距離が１０〜３０ｍｍ、スポット径が１〜５ｍｍである。
１９．前項１１〜１６の何れか一に記載の測定方法によって人唾液中のアミラーゼ活性を測定することを含む、被験者のストレスレベルの検定方法」
２０．基質である修飾オリゴ糖を支持体に担持してなるアミラーゼ測定用試薬に対し光を照射する発光手段と、測定用試薬からの反射光を受光する受光手段と、受光した反射光に基づき測定用試薬の発色を判別する色判別手段と、色判別結果に基づいてストレス度合を検出するストレス検出手段とを有することを特徴とするストレス測定装置。
２１．前項２０において、前記発光手段は一または複数色の光を発し、前記色判別手段は各色の光を前記測定用試薬に照射した際の反射光の強度に基づいて色判別を行うことを特徴とするストレス測定装置。
２２．前項２１において、前記発光手段から発せられる光は、測定用試薬によって発色される色の補色または補色に近い色の光を含むことを特徴とする。
２３．基質である修飾オリゴ糖を支持体に担持してなるアミラーゼ測定用試薬に対し光を照射する発光手段と、測定用試薬からの反射光を受光する受光手段と、受光した反射光の強度とストレス度合との関係を規定する情報を記憶する第１のメモリ手段と、前記受光した反射光の強度と前記第１のメモリに記憶された情報とを参照しストレス度合を示す情報を生成するストレス情報生成手段とを有することを特徴とするストレス測定装置。
２４．前項２３において、前記第１のメモリに記憶されている情報は、前記受光した反射光の強度とストレス度合とを対応付けた変換テーブルであることを特徴とするストレス測定装置。
２５．前項２３において、前記第１のメモリに記憶されている情報は、前記受光した反射光の強度に基づいてストレス度合を算出するための演算処理情報であることを特徴とするストレス測定装置。
２６．前項２３から２５の何れかにおいて、外部温度を検出する温度センサを更に有し、前記ストレス情報生成手段は、検出された温度に基づいて前記ストレス度合を補正することを特徴とするストレス測定装置。
２７．前項２３から２６の何れかにおいて、前記測定用試薬の反応時間を計測する計測手段を更に有し、前記ストレス情報生成手段は、計測された反応時間に基づいて前記ストレス度合を補正することを特徴とするストレス測定装置。
２８．前項２３から２７の何れかにおいて、前記発光手段は一または複数色の光を発し、前記第１のメモリ手段は、受光した各色の光の反射光強度とストレス度合との関係を規定する情報を記憶することを特徴とするストレス測定装置。
２９．前項２８において、前記発光手段から発せられる光は、測定用試薬によって発色される色の補色または補色に近い色の光を含むことを特徴とするストレス測定装置。
３０．前項２０から２９の何れかにおいて、前記ストレス度合に関する情報を測定履歴情報として記憶する第２のメモリ手段を有することを特徴とするストレス測定装置。
からなる。
【０００７】
【発明の実施の形態】
本発明においてアミラーゼとは、主にヒト唾液腺や膵腺より分泌されるα−アミラーゼが代表的である。アミラーゼはデンプン、アミロースなどの多糖類を加水分解する分子量５４，０００〜６２，０００の消化酵素である。唾液中のアミラーゼ活性値は、体調による変動や、個人差が非常に大きい事が知られている。正常値は数万ＩＵ／Ｌ程度であるが、体調や、体質によっては、健常人においても１０万ＩＵ／Ｌを越える事があることが知られている。
【０００８】
本発明において使用されるアミラーゼ活性測定のための基質は、修飾オリゴ糖が使用される。修飾とは、オリゴ糖の末端、還元末端に識別標識化合物が結合されていることを意味し、アミラーゼ又は共役酵素によって遊離されうる。修飾オリゴ糖の糖数はＧ２〜Ｇ７であり、好ましくはＧ２〜Ｇ５である。修飾化合物は、色原体といわれるものが一般的に使用でき、好適な基としては、４−ニトロフェノール（ＰＮＰ）、２−クロロ−４−ニトロフェノール（ＣＮＰ）、２，４−ジクロロフェノール（Ｃｌ２Ｐ）が例示される。このような色原体で修飾されたオリゴ糖の具体例としては、２−クロロ−４−ニトロフェノール−４−Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピラノシルマルトサイド（以下　ＧＡＬ−Ｇ２−ＣＮＰ）、ＧＡＬ−Ｇ４−ＣＮＰ、ＧＡＬ−Ｇ５−ＣＮＰ、Ｇ５−ＣＮＰ（２−クロロ−４−ニトロフェニル−マルトペンタオース）、Ｇ７−ＣＮＰ、Ｇ５−ＰＮＰ（ｐ−ニトロフェニル−マルトペンタオース）、Ｇ６−ＣＮＰ（２−クロロ−ｐ−ニトロフェニルマルトテトラオース）、Ｇ７−ＰＮＰがあげられる。このうち、特に、アミラーゼによる加水分解時の切断箇所が１箇所に限定されるＧＡＬ−Ｇ２−ＣＮＰやＧＡＬ−Ｇ４−ＣＮＰなどが好ましい。
【０００９】
修飾オリゴ糖を一般式で表すと以下となる。
【化１】
2004121214.tif 000002
【００１０】
式中のＲ１、Ｒ２はそれぞれ水素原子あるいは保護基を意味する。保護基は格別限定されるものではないが、例えば、非置換または置換の低級アルキル基、低級アルコキシル基またはフェニル基、アジド基、ハロゲン原子、Ｎ−モノアルキルカルバモイルオキシ基、アルキル若しくはアリールスルホニルオキシ基またはアルキルオキシ基、α−グルコシル基、α−マルトシル基、β−ガラクトシル基であり、Ｒ１、Ｒ２は互いに架橋していてもよく、該架橋基にはさらに置換基を有していてもよい。Ｒ３はシグナル発生基、例えば光学的にシグナルを検出可能な基（好適には発色性芳香族基）であり、ｎは０〜５である。上記式では−ＯＲ３は、還元性末端グルコースの１位にβ−結合したものであるが、α−結合したものであってもよい。
【００１１】
本発明のアミラーゼ測定用試薬は、基質が支持体に担持されている状態である。支持体に担持とは、水不溶性の有機又は無機担体に基質と競合阻害剤が固定化又はトラップされている状態をいう。そして支持体の形状は、薄膜が好適であり、厚さ１００〜５００μｍ、好ましくは１５０〜４００μｍである。薄膜は、一般的に遊離する修飾物質の発色を色判別センサーで測定することから、光の乱反射が制御されたものが好ましく、膜表面が出来る限り均一なものが良い。薄膜は白色が好ましい。薄膜の材質は、紙、ニトロセルロース、ナイロン、多孔性ガラス等が好適に例示されるがこれに限定されず、本発明で定義する基質を効率的に担持又は保持できるものであれば広く利用可能である。
【００１２】
修飾オリゴ糖の支持体への担持量は、一定に調節されることが好ましい。簡便な方法としては、修飾オリゴ糖基質を２〜５００ｍｍｏｌ／Ｌを含有する溶液中に支持体を約１〜５分間含浸させ、それを乾燥させて得る方法があり、これによりえられる相当量が例示される。
【００１３】
本発明の測定方法における測定は、基質の修飾物質であるＣＮＰやＰＮＰ等の色原体の遊離による、試料支持体の発色による吸光度変化を量的にとらえアミラーゼ活性を決定する。例えば、ＣＮＰは４０５ｎｍの吸光度で測定する。通常は、大過剰のアミラーゼの作用のみによって、この色原体の遊離は可能であるが、所望により、アミラーゼの加水分解反応後に、アミラーゼとα−グルコシダーゼ、β−グルコシダーゼ等によって色原体を遊離させる反応を含んだ共役酵素法が用いられることもある。この場合は、追加の酵素を試薬として添加する手段の導入が必要となる。さらに、所望により、反応の促進のために、公知のα−アミラーゼの活性化剤を用いてもよい。
【００１４】
本発明の測定方法における反応温度は、特に限定されないが、好ましくは約２５〜４０℃である。反応時間は、１〜１０数分で十分であるが、基質および所望により使用される共役酵素の種類に依存する。
【００１５】
発色による変化の測定は、色判別センサーが好適に利用される。支持体による発色の変化は反射光又は透過光によって測定することが便宜である。光源としての発光手段は発光ダイオード、レーザ、ハロゲンランプ、タングステンランプ等が好適に選ばれるがこれに限定されるものではない。反射光を計測する場合には角度が０〜４５度好ましくは１０〜３５度より好ましくは１５〜３０度、測定対象との距離が１０〜３０ｍｍ好ましくは１５〜２５ｍｍより好ましくは１８〜２２ｍｍ、試料スポット径が１〜５ｍｍ好ましくは２〜４ｍｍより好ましくは２．５〜３．５ｍｍの条件を満足する測定装置が好適に用いられる。本発明装置と試薬の概念を図３に示した。
【００１６】
かくして提供される本発明の試薬を利用したアミラーゼの測定方法は、生物学的試料として、高濃度にアミラーゼを含有する試料に適している。例えば、唾液、血液、尿等がサンプルになりうるが、唾液がもっとも好ましい。
【００１７】
人唾液中のアミラーゼ活性を簡便に測定することを可能とする本発明は、被験者のストレスレベルの検定方法のための簡便・効果的な手段を可能とする。具体的には、被験者の安静時に採取した唾液中のα−アミラーゼ活性を測定し、その活性値を記録、記憶して基準値とする。その後に被験者の任意の状態におけるα−アミラーゼ活性を測定し、安静時に記録、記憶した基準値と比較する。基準値より酵素活性が大きければ、不快なストレス（ｄｉｓｔｒｅｓｓ）を受けていると判定し、小さければ、快適なストレス（ｅｕｓｔｒｅｓｓ）を受けていると判定できる。また、基準値との差が大きいほど、受けているストレスも大きく、身体または精神に受けているストレスの程度も判定できる。
【００１８】
また、連続してα−アミラーゼ活性を測定することにより経時的なストレスの変化を捉えることができる。不快なストレスを受けると唾液中のα−アミラーゼ活性が上昇する。この際の正の時間勾配の大きさによってストレスの大きさの程度を判定することができる。逆に快適なストレスを受けている場合はα−アミラーゼの酵素活性が低下するので、負の時間勾配として現れ、同様にその大きさの程度も判定できる。
【００１９】
更には経時的にα−アミラーゼ活性を測定し、測定時間内に加えられた任意のストレスによる酵素活性変化を捉え、ストレス負荷前の値（基準値）に戻るまでの時間・変化の大きさからストレスの大きさの程度を判定することができる。
【００２０】
【実施例】
以下に本発明を実施例により詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではなく、基質である修飾オリゴ糖を支持体に担持する酵素法によるアミラーゼ測定法に関する限り全て本発明の技術思想に包含される。
【００２１】
【実施例１】
試薬▲１▼（試験紙）の調製
１４　ｍｍｏｌ／ＬのＧａｌ−Ｇ２−ＣＮＰ、７００　ｍｍｏｌ／ＬのＫＳＣＮを溶解した溶液に、Ａｄｖａｎｔｅｃ　Ｆｉｌｔｅｒ　Ｐａｐｅｒ　５１４Ａ（東洋濾紙社）を３分間含浸させた後に乾燥させた。この試験紙を７ｍｍｘ７ｍｍに切断した。
【００２２】
【実施例２】
以下の調製方法で基質と競合阻害剤を支持体に担持させた試薬（試験紙）を調製した。
７０　ｍｍｏｌ／ＬのＧａｌ−Ｇ２−ＣＮＰ、３．５　ｍｏｌ／ＬのＫＳＣＮ、１　ｍｏｌ／Ｌのマルトテトラオースをバッファーに溶解した溶液に、Ａｄｖａｎｔｅｃ　Ｆｉｌｔｅｒ　Ｐａｐｅｒ　５１４Ａ（東洋濾紙社）を３分間含浸させた後に乾燥させた。この試験紙を７ｍｍｘ７ｍｍに切断した。
【００２３】
【実施例３】
以下の調製方法で基質と競合阻害剤を支持体に担持させた試薬（試験紙）を調製した。
１４０　ｍｍｏｌ／ＬのＧａｌ−Ｇ２−ＣＮＰ、７　ｍｏｌ／ＬのＫＳＣＮ、０．５　ｍｏｌ／Ｌのマルトペンタオースをバッファーに溶解した溶液に、Ａｄｖａｎｔｅｃ　Ｆｉｌｔｅｒ　Ｐａｐｅｒ　５１４Ａ（東洋濾紙社）を３分間含浸させた後に乾燥させた。この試験紙を７ｍｍｘ７ｍｍに切断した。
【００２４】
【試験例１】
以下の処理により、実施例１の試薬を使ってアミラーゼ活性の測定をおこなった。
１．　健常人より唾液試料を採取したａ〜ｅの５試料のアミラーゼ活性値を、アミラーゼ測定用試薬エスパ・アミラーゼ・リキッドＩＩ（ニプロ株式会社）で測定した。エスパ・アミラーゼ・リキッドＩＩは、Ｇａｌ−Ｇ２−ＣＮＰを用いた酵素法によるアミラーゼ測定用試薬であり、２０００ＩＵ／Ｌまでのアミラーゼを測定できる。測定には自動分析装置７１７０（日立）を用いた。検体ｅは測定限界を超えるため、そのままでは測定できなかったので、各試料を１％（Ｗ／Ｖ）ＢＳＡ（牛血清アルブミンの１％（Ｗ／Ｖ）生理食塩水溶液を意味する。以下同様）で１０倍希釈したものを代わりに測定した。測定結果は表１に示した。
【００２５】
【表１】
2004121214.tif 000003
【００２６】
２．　ＫＥＹＥＮＣＥ社の色判別センサーＣＺ−Ｖ１を、反射光の角度２２．５°、測定対象との距離２０ｍｍ、スポット径　２ｍｍとなるように調節した。測定にはＣモードを用いた。装置図は図３に示した。
【００２７】
３．　試薬▲１▼を用いて１．の試料のアミラーゼ活性値の測定を行った。測定には２．で調節した装置を用いた。試薬▲１▼に３μＬの試料を滴下し、反応前と反応１分後の装置の測定値の差を計測した。結果は表２に示した。
【００２８】
【表２】
2004121214.tif 000004
【００２９】
エスパ・アミラーゼ・リキッドＩＩによる測定結果と、試薬▲１▼による測定結果の相関は図１に示した。ｒ＝０．９８となり高い相関が示された。試薬▲１▼の測定値を４４倍すれば、従来法とほぼ等しい値となる。つまり、本発明試薬は、直接試料中のアミラーゼ活性値を測定できる事が示された。
【００３０】
【試験例２】
以下の処理により、実施例２の試薬を使ってアミラーゼ活性の測定をおこなった。
１．　健常人より唾液試料を採取した試料ｆを１％（Ｗ／Ｖ）ＢＳＡで０．２，　０．４，　０．６，　０．８倍に希釈した。
２．　上記試料、および陰性対照試料（生理食塩水）のアミラーゼ活性値を、アミラーゼ測定用試薬エスパ・アミラーゼ・リキッドＩＩ（ニプロ株式会社）で測定した。測定には自動分析装置７１７０（日立）を用いた。そのままでは測定限界を超えるため測定できないので、各試料を１％（Ｗ／Ｖ）ＢＳＡで１０倍希釈したものを代わりに測定した。測定結果は表３に示した。
【００３１】
【表３】
2004121214.tif 000005
【００３２】
３．　実施例１で用いた試薬▲１▼を用いて各試料のアミラーゼ活性値の測定を行った。測定には実施例１で用いた装置を用いた。試薬▲１▼に３μＬの試料を滴下し、反応前と反応１分後のセンサーの測定値の差を計測した。結果は表４に示した。
【００３３】
【表４】
2004121214.tif 000006
【００３４】
エスパ・アミラーゼ・リキッドＩＩによる１０倍希釈試料の測定結果と、試薬▲１▼による測定結果の相関は図２に示した。ｒ＝０．９９となり高い直線性が示された。
試薬▲１▼の測定値を４３倍すれば、従来法とほぼ等しい値となる。つまり本発明試薬は、直接試料中のアミラーゼ活性値を測定できる事が示された。
【００３５】
【実施例４】
次に、上記測定方法を利用したストレス測定装置の構成例について説明する。図４に測定装置の外観構成を示す。測定装置本体１には、その中央部に開口２が形成されていると共に、その左側側面に電源スイッチ３が配されている。また、測定装置本体１の前面には、表示パネル４、操作ボタン部５およびスロット形成部６が配されており、さらにスロット形成部６には、測定用試薬８を挿入するためのスロット７が形成されている。
なお、測定用試薬８は細長い板状紙片によって形成されており、その中央部に、試薬を折り曲げるための折り目が形成されている。この折り目によって測定用試薬を折り畳むと、その先端部が、測定用試薬８の試薬保持部に接触する。かかる測定用試薬８の試薬保持部は、唾液との反応前は、白色である。唾液と反応した後は、ストレス度合に応じて所定の色が濃く発色される。上記測定例では、この発色は黄色である。上記シグナル発生基によっては、その他の色の発色とすることも可能である。
ストレス測定を行う場合には、実際の測定操作に先立って、まず、ゼロ点調整のための初期操作が、以下の手順に従って行われる。まず、電源スイッチ３を操作して電源を導通させた後、基準紙（白色）をスロット７に挿入する。しかる後、操作ボタン部５のゼロ点調節用ボタンを操作する。これにより、内部のストレス判別センサによって基準紙の色判別がなされ、その判別結果が初期値として内部メモリに設定される。初期値の設定が完了すると、表示パネル４にその旨の表示がなされる。しかる後、基準紙をスロット７から抜きとり、これにより、初期操作が完了する。
ストレス測定は、以下のようにして行われる。まず、測定用試薬８の先端部を舐めて唾液を含浸させた後、測定用試薬８を折り目に沿って折り畳む。次に、試薬保持部の位置を一定時間だけ指で挟み、唾液を試薬保持部に含浸させる。しかる後、折り畳まれた測定用試薬８を元の位置に戻し、試薬保持部が図４の左側を向くようにして、先端部からスロット７に挿入する。かかる挿入により、試薬保持部の色判別が内部のストレス判別センサによって行われる。この色判別結果は、上記基準紙による初期設定値と比較される。そして、その比較結果に応じてストレス値が算出され、これが表示パネル４上に表示される。
次に、上記測定装置の具体的構成例について、図５〜図７を参照して説明する。
まず、図５に、測定装置の内部構造を示す。なお、図５（ａ）は、上記図４に示す測定装置の上蓋とスロット形成部６とを取り外した状態の上面図、同図（ｂ）は、その正面図である。
図において、１１は電源供給用のバッテリ、１２は上蓋を保持するための鉤部、１３はストレス判別センサ、１４はストレス判別センサ１３の光カップリング端子と光ヘッド１５とを光学的に連結する光ファイバ、１５は上記測定用試薬８の試薬保持部に光（例えば発光手段は発光ダイオード、レーザ、ハロゲンランプ、タングステンランプから選ばれる）を照射すると共にその反射光を受光する光ヘッドである。
１６は測定装置本体１の基部に形成された扇形状の凹部、１７は螺子１８を支軸として凹部１６に回動可能に配された支持板、１９は支持板１７に形成された案内溝、２０は支持板１７の回動端を上方から押えるようにして凹部１６に嵌着された押え板、２１は押え板２０に形成された目盛り、２２は押え板２０に形成された案内溝、２３は支持板１７を所定の目盛り位置に固定するための螺子である。
２４は支持板１７の案内溝１９に沿って摺動する光ヘッド保持板、２５は光ヘッド保持板２４を所定の位置に固定するための螺子、２６はスロット形成部６を案内するためのガイド板、２７はスロット形成部６を装着位置に保持するためにガイド板２６に形成された円柱状の突起である。
電源スイッチ３をＯＮにすると、バッテリ１１の電源がストレス判別センサ１３に供給され、ストレス判別センサ１３から光が出射される。この光は光ファイバ１４を介して光ヘッド１５に供給され、光ヘッド１５の先端部から出射される。かかる光は、上記の如くしてスロット６から挿入された測定用試薬の試薬保持部に照射される。かかる光は、試薬保持部にて吸収、散乱ないし反射され、その反射光の一部が、光ヘッド１５の光軸を逆行して光ヘッド１５に受光される。このようにして受光された光は、光ファイバ１４を介してストレス判別センサ１３に伝送される。ストレス判別センサ１３はかかる反射光の強度を、後述の如くして分析・演算処理し、これによりストレス値を算出する。
図６に、上記スロット形成部６の構造を示す。スロット形成部６の正面に形成されたスロット７の背面側にはガイド６１が形成されている。このガイド６１は、同図の上面図に示すように、途中から所定の曲率にてカーブするように形成されている。よって、測定用試薬８をスロット７からガイド６１の終端まで挿入すると、測定用試薬８はこのカーブに従って撓み、その復元力によって、ガイド６１内の底部に圧接される。これにより、測定用試薬８はその面に垂直な方向および前後左右方向に変位することなく、ガイド６１底部の所定の位置に位置決めされる。
図６の左側面図に示すように、ガイド６１には切欠き６２が形成されている。かかる切欠き６２は、測定用試薬８をガイド６１の終端まで挿入したときに、試薬保持部が位置付けられる位置の近傍に形成されている。かかる切欠き６２により、光ヘッド１５からの光をガイドにて遮光することなく試薬保持部に導くことができる。また、ガイド６１には、上記カーブ位置のやや手前からガイド終端に到るまで、背板６３が固着されている。この背板６３は、上記カーブによって生じる測定用試薬８の復元力に抗して、測定用試薬８の先端を上記カーブに沿ってガイド終端まで導くためのものである。
また、スロット形成部６の背面には、先端部に鉤部を有する１対の突出部６４が形成されている。かかる突出部６４はスロット形成部６を測定装置本体１に装着する際のガイドおよび抜け止めとして機能する。スロット形成部６を測定装置本体１に装着する場合には、同図の上面図に示す突出部と外壁との間の隙間に図５のガイド板２６が挿入されるようにして、スロット形成部６を測定装置本体１の前面から押し進める。すると、突出部６４の先端がガイド板２６の突起２７に当接し、一対の突出部６４が撓んで押し広げられる。そして、スロット形成部６が装着位置まで押し進められると、これら一対の突出部６４が元の位置に弾性復帰し、その先端に形成された鉤部とガイド板２６の突起２７とが係合する。これにより、スロット形成部６の脱落が防止され、よって、スロット形成部６が測定装置本体１に装着される。
図６の右側面図および背面図に示す窪み６４は、スロット形成部６を測定装置本体１から取り外す際に、指掛かりとして機能するものである。スロット形成部６を測定装置本体１から取り外す場合には、この窪み６５に指を引っ掛けて、スロット形成部６を前方に引っ張る。これにより、上記突出部６４先端の鉤部とガイド板２６の突起２７との係合が解除され、スロット形成部６を測定装置本体１から取り外すことができる。
なお、上記図５に示した構成中、凹部１６〜螺子２５の構成は、光ヘッド１５の光軸の測定用試薬８に対する傾斜角度（光の入射角度）の調整と、光ヘッド１５と測定用試薬８との間の距離および測定用試薬８上の光のスポット径の調整とを行うための調整機構として機能するものである。
上記の如くしてスロット形成６を測定装置本体１の装着した後、測定用試薬８をスロット６から挿入すると、測定用試薬８の試薬保持部は光ヘッド１５の光軸上に位置するように位置付けられると共に、測定用試薬８はガイド板２６に並行となるように位置付けられる。したがって、支持板１７を回動させると、測定用試薬８に対する光ヘッド１５の光軸の角度（光の入射角度）を変化させることができ、また、光ヘッド保持板２４を案内溝１９に沿って摺動させると、光ヘッド１５と測定用試薬８との間の距離および測定用試薬８上における光のスポット径を変化させることができる。
ストレス測定の際には、かかる調整機構によって、測定動作が最適となるよう、上記傾斜角度、距離およびスポット径を適宜調節するのが好ましい。あるいは、測定用試薬毎に好ましい設定値が異なる場合には、測定用試薬を変更する際に、適宜、上記調整を行う必要がある。
次に、上記ストレス判別センサ１３の構成例について図７を参照して説明する。なお、図中、１０１〜１１０は光学系の構成例、２０１〜２１１は回路系の構成例である。
図において、１０１は赤（Ｒ）、緑（Ｇ）、青（Ｂ）の光を出射する半導体レーザ、１０２は出射された光を並行光に変換するコリメータレンズ、１０３は上記３つの光（Ｒ、Ｇ、Ｂ）の光軸を一致させるミラー素子、１０４は上記光を光カップリング素子１０５の入射口に収束させる集束レンズ、１０５は上記光ファイバ１４の一端に接続され上記光を光ファイバ１４に入射せしめる光カップリング素子である。
１０６は測定用試薬８からの反射光を導く光ファイバーの端部に接続された光カップリング素子、１０７は光カップリング素子１０６から出射された上記反射光を並行光にする収束レンズ、１０８は反射鏡、１０９は上記反射光を光検出器１１０上に収束させる収束レンズ、１１０は収束された反射光の強度に応じた電気信号を出力する光検出器である。
２０１は半導体レーザ１０１を駆動するレーザ駆動回路、２０２は上記表示パネル４を含むと共にコントローラ２０４によって算出されたストレス値に応じた表示を出力するディスプレイ部、２０３は上記操作ボタン部５を含むと共に操作ボタンに応じた指令をコントローラ２０４に入力する操作入力部である。
２０４は各部を制御すると共に比較演算部２０８からの比較演算結果および温度センサ２０９からの温度情報やＲＯＭ２１０からの統計情報に基づいてストレス値（ストレスの度合）を算出するコントローラである。かかるコントローラ２０４は内部に時計回路を有しており、測定用試薬８が挿入された後の経過時間をかかる時計回路によって計測する。なお、測定用試薬８が挿入されたことの検出処理および時計回路による計時動作の詳細については後述する。
２０５は光検出器１１０からのアナログ電気信号を増幅および波形整形すると共に所定のサンプリング周期にてアナログ電気信号をデジタル信号に変換するＡ／Ｄ変換部、２０６は一定期間の間にＡ／Ｄ変換回路２０５から供給されたサンプリング値を平均化して当該期間の平均値を算出する平均化部、２０７は上記基準紙（白色）をスロット６に挿入した際に平均化部２０６にて算出された平均値を基準値として保持する基準値メモリ、２０８はストレス測定時に平均化部２０６にて算出された平均値と基準値メモリ２０７に保持された基準値とを比較し、両者の差を算出する比較演算部である。
２０９は測定用試薬８の挿入部近傍に配され（図５、図６では省略）、当該挿入部位近傍の温度を検出してその検出結果をコントローラ２０４に供給する温度センサ、２１０は比較演算部２０８からの比較演算結果とストレス値との換算テーブルや、温度情報によって当該換算テーブルのストレス値を補正するための補正テーブル、あるいは反応時間に対する上記比較演算結果の推移に関する情報等の統計データを保持するＲＯＭ（Ｒｅａｄ−Ｏｎｌｙ−Ｍｅｍｏｒｙ）、２１１はストレス値の測定履歴を記憶するメモリである。
次に、かかるストレス判別センサ１３の動作について説明する。
まず、上記初期操作（ゼロ点調整）の際の動作について説明する。上記初期操作において、基準紙（白色）がスロット６から挿入された後、初期設定用のボタンが操作されると、半導体レーザ１０１のうち、半導体レーザ（Ｒ）が一定時間Ｔだけ駆動され、赤色の光（Ｒ）が出射される。かかる光（Ｒ）は、コリメータレンズ１０２から光カップリング素子１０５までの光学系および上記図５の光ファイバー１４、光ヘッド１５を介して基準紙に照射される。しかして、基準紙に光（Ｒ）が照射されると、当該光（Ｒ）は基準紙によって散乱、反射され、その一部が、上記光ヘッド１５および光ファイバ１４の光路を逆行し、光カップリング素子１６から出射される。そして、収束レンズ１０７から集束レンズ１０９の光学系を介して光検出器１１０上に収束される。
かかる反射光を受光した光検出器１１０はその強度に応じた電気信号をＡ／Ｄ変換部２０５に送る。Ａ／Ｄ変換部２０５は上記期間Ｔの間、当該電気信号のサンプリングを繰り返し、これを平均化部２０６に送る。平均化部２０６は当該サンプリング値を期間Ｔにて平均化し、その算出結果を基準値メモリ２０７に送る。基準値メモリ２０７は、当該平均値を光（Ｒ）に対する基準値として保持する。これにより、光（Ｒ）に対する初期値の設定が完了する。
このようにして光（Ｒ）に対する基準値が保持されると、次に、半導体レーザ（Ｇ）が一定期間Ｔだけ駆動され、緑色の光（Ｇ）が出射される。そして、上記と同様にして光（Ｇ）の反射光が光検出器１１０に受光され、その強度に応じた電気信号が出力される。かかる電気信号は、上記と同様にして処理され、これにより基準値メモリ２０７に、光（Ｇ）に対する基準値が保持される。これにより、光（Ｇ）に対する初期値の設定が完了する。さらにその後、半導体レーザ（Ｂ）が一定期間Ｔだけ駆動され、上記と同様にして、光（Ｇ）に対する基準値が基準値メモリ２０７に保持される。これにより、全ての光に対する初期設定が完了する。
次に、ストレス測定時の動作について説明する。
上記初期設定動作が終了すると、レーザ駆動部２０１は、上記期間Ｔずつ、半導体レーザ（Ｒ）（Ｇ）（Ｂ）を順番に繰り返し駆動するよう、半導体レーザ１０１を駆動する。すなわち、半導体レーザ１０１からは、３Ｔの繰り返し周期にて、各色の光が出射される。かかる状態（測定待機状態）において、上記各色の光は上記図６に示すスロット形成部６のガイド６１に対して照射される。しかしながら、光が照射されるガイド６１の部位（図６の切欠き６２近傍部分）のガイド底部には背板６３が配されていないため、これら光はガイド６１によって反射されず、したがって、その反射光が図７の光検出器１１０に収束されることはない。よって、Ａ／Ｄ変換部２０５からコントローラ２０４に供給されるサンプリング値は、その値がゼロ近傍となっている。
しかる後、測定用試薬８がスロット６から挿入されると、上記各色の光が測定用試薬の先端部によって反射され、光センサ１１に反射光が収束される。これにより、Ａ／Ｄ変換部２０５からコントローラ２０４に供給されるサンプリング値の内容が、ゼロから一定の値に立ち上がる。コントローラ２０４は、かかるサンプリング値の立ち上がりによって測定用試薬の挿入を検出し、以下、ストレス測定動作を行うべく、各部を制御する。
レーザ駆動回路２０１に対しては、上記と同様、期間Ｔずつ各色の光を繰り返し出射せしめる。これら各色の光は、測定用試薬８の試薬保持部にて吸収、散乱、反射され、その反射光の各期間Ｔにおける強度平均値が、比較演算部２０８にて当該色の基準値と比較される。そして、その色の光の比較演算結果が、順次、コントローラ２０４に供給される。
たとえば、上記測定用試薬８の挿入がコントローラ２０４にて検出された後に到来する上記期間ＴをＴ１、Ｔ２、Ｔ３、Ｔ４、…とし、そのタイミング期間に出射される光の色をＲ→Ｇ→Ｂ→Ｒ…、その際の反射光強度の平均値をＡ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、…、その比較演算結果をＤ１、Ｄ２、Ｄ３、Ｄ４、…とすると、Ｔ１期間では平均値Ａ１と光（Ｒ）の基準値とが比較され、その差がＤ１としてコントローラ２０４に出力される。同様に、Ｔ２期間では平均値Ａ２と光（Ｇ）の基準値とが比較され、その差がＤ２としてコントローラ２０４に出力され、Ｔ３期間では平均値Ａ３と光（Ｂ）の基準値とが比較され、その差がＤ３としてコントローラ２０４に出力される。
コントローラ２０４は、このようにして送られてくる一連の比較演算結果Ｄ１、Ｄ２、Ｄ３、Ｄ４、…と、温度センサ２０９からの温度情報およびＲＯＭ２１０中のストレス変換テーブルおよび補正テーブル（温度、経過時間）に基づいて、ストレス値を算出する。具体的には、上記ＲＯＭ２１０に記憶されている補正テーブルおよび統計データを参照し、Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３、Ｔ４、…の各タイミングにおける温度および反応経過時間に基づいて、参照すべきストレス補正値を決定する。そして、当該比較演算結果（Ｄ１、Ｄ２、Ｄ３、Ｄ４、…）に対応するストレス値を変換テーブルから読み出し、これに上記補正値を加減算して、各タイミングのストレス値を算出する。そして、算出したストレス値を、一定期間（たとえば、Ｔ１〜Ｔ９９）にて平均化処理し、当該平均化したストレス値を、当該測定における最終ストレス値として決定する。
たとえば、１組のＲ、Ｇ、Ｂの光に対する比較演算結果とストレス値との関係が換算テーブルとして上記ＲＯＭ２１０に記憶されている場合、比較演算結果Ｄ１、Ｄ２、Ｄ３の組み合わせに対するストレス値を換算テーブルから読み出す。そして、このストレス値に上記ストレス補正値を加減算して、期間Ｔ１〜Ｔ３に対するストレス値Ｓ１を算出する。ここで、上記ストレス補正値を決定するためのタイミングは、たとえば、中間のＴ２のタイミングとする。同様に、期間Ｔ４〜Ｔ６、Ｔ７〜Ｔ９、…、Ｔ９７〜Ｔ９９のストレス値Ｓ２、Ｓ３、…、Ｓ３３を算出する。そして、Ｓ１〜Ｓ３３のストレス値を平均化処理し、これを当該測定における最終ストレス値とする。
あるいは、比較演算結果をそのままストレス値として採用する場合には、Ｄ１〜Ｄ３を加算してストレス値を算出し、これに上記ストレス補正値を加減算して、期間Ｔ１〜Ｔ３に対するストレス値Ｓ１を算出する。同様に、期間Ｔ４〜Ｔ６、Ｔ７〜Ｔ９、…、Ｔ９７〜Ｔ９９のストレス値Ｓ２、Ｓ３、…、Ｓ３３を算出し、これらＳ１〜Ｓ３３のストレス値を平均化処理し、これを当該測定におけるストレス値とする。かかる場合には、上記変換テーブルは不要となる。ただし、上記演算を行うための処理プロセスをＲＯＭ２１０に記憶させておく必要がある。なお、演算処理は、上記Ｄ１〜Ｄ３の加算の他、測定用試薬の発色の度合を判別するための種々の演算処理を採用できる。
このようにして決定されたストレス値は、ディスプレイ部２０２に表示される。また同時に、個人の測定履歴としてメモリ２１１に記録される。なお、メモリ２１１に記憶された測定履歴は、操作入力部２０３を操作することにより適宜読み出してディスプレイ２０２上に表示することができる。
ディスプレイ部２０２に表示されるストレス値は、具体的な数値として表示される形態の他、ストレス値を一定の数値範囲毎に区分して、該当区分毎に、漫画（静止画または動画）や文字によって表示するようにしても良い。
次に、上記ストレス測定装置の種々の変形例について図面を参照して説明する。
【００３６】
【実施例５】
図８は、光ヘッド１５の変形例である。本実施例では、上記光ヘッド１５に代えて、対向型の光ヘッド１１１を配してある。すなわち、出射光の光軸と反射光の光軸とを整合させると共に、両光軸の測定用試薬８に対する傾き角度が一致するように光ヘッド１１１の出射端と入射端とを配してある。これにより、測定用試薬８からの反射光をより多く光検出器１１０に導くことができ、よって、比較演算部２０８からの演算出力をよりダイナミックにすることができる。よって、ストレス判別精度をより向上させることができる。
【００３７】
【実施例６】
図９は、上記メモリ２１１の変形例である。本実施例では、上記メモリ２１１に代えて、メモリカードインタフェース２１２とメモリカード２１３を配してある。上記ストレス測定履歴は、メモリカードインタフェース２１２を介してメモリカード２１３に記憶される。かかるメモリカード２１３は、着脱自在である。よって、測定者毎にメモリカード２１３を保持することにより、測定履歴を各人のみで管理することができるようになる。また、１つのストレス測定装置を複数人で使用することができるようになる。
【００３８】
【実施例７】
図１０は、さらにパーソナルコンピュータ（パソコン）転送用のインタフェース２１４を配した実施例である。同図は、測定履歴記憶用の媒体としてメモリカード２１３を利用した例を示してあるが、図８のように装置内のメモリに測定履歴を記憶するような場合にも適用可能である。メモリカード２１３またはメモリ２１１に記憶されている測定履歴は、インタフェース２１４を介してパソコンに転送できる。これにより、パソコン上で転送履歴を加工処理したり、測定履歴をメールに添付して医療機関等に送信することが可能となる。なお、パソコンへのインタフェースを配する代わりに、電話通信等の通信手段を配するようにしても良い。
【００３９】
【実施例８】
図１１および図１２は、半導体レーザ１０１の変形例である。図１１の実施例では、半導体レーザ１０１から赤色と青色の光のみが出射される。また、図１２の実施例では、半導体レーザ１０１から青色の光のみが出射される。これらは、唾液との反応により測定用試薬が黄色に発色する場合に用いて好適なものである。黄色に発色する場合、青色光は測定用試薬によって吸収され易く、よって青色光に対する比較演算結果に大きな変化が現れる。よって、青色光のみ、あるいは青色光と赤色光の組み合わせや、青色光と緑色光との組み合わせによっても、ストレス度合を比較的精度良く算出できる。ただし、測定用試薬の発色が黄色である場合に、赤色光と緑色光のみを利用すると、ストレス度合の判別精度が低下してしまう。これらの光は測定用試薬による吸収が小さいため、比較演算結果がダイナミックに変化しないためである。よって、３色のうち１色または２色の光を用いる場合には、測定用試薬の発色の補色となる光を含む用に組み合わせ等を設定するのが好ましい。
以上、本発明に係る種々の実施形態につき説明したが、本発明はかかる実施の形態に限定されるものではない。たとえば、上記実施例ではディスプレイ部２０２の表示パネルにてストレス度合を視覚的に出力するようにしたが、これに代えて、またはこれと共に、音声によるストレス度合の表示や、プリントアウトによる表示も採用できる。
この他、本発明の実施の形態は、本発明の技術的思想の範囲内において、適宜、種々の変更が可能である。
【００４０】
【発明の効果】
上記したごとく本発明によれば、基質である修飾オリゴ糖を支持体に担持させた酵素法によるアミラーゼ測定用試薬を提供し、この試薬を使ってアミラーゼ活性を測定すれば、きわめて簡便に迅速に効果的にアミラーゼ活性を測定可能であり、その結果、その場で短時間に被検者のストレスを判定する技術を確立することができた。
【図面の簡単な説明】
【図１】エスパ・アミラーゼ・リキッドＩＩによる測定結果と、試薬▲１▼による測定結果の相関を示す。
【図２】エスパ・アミラーゼ・リキッドＩＩによる１０倍希釈試料の測定結果と、試薬▲１▼による測定結果の相関を示す。
【図３】本発明の測定用装置と試薬の概念図を示す。
【図４】実施の形態に係るストレス測定装置の概観を示す図
【図５】実施の形態に係るストレス測定装置の内部構造を示す図
【図６】実施の形態に係るスロット保持部の構成を示す図
【図７】実施の形態に係るストレス判別センサの一の構成例を示す図
【図８】実施の形態に係るストレス判別センサの他の構成例を示す図
【図９】実施の形態に係るストレス判別センサの他の構成例を示す図
【図１０】実施の形態に係るストレス判別センサの他の構成例を示す図
【図１１】実施の形態に係るストレス判別センサの他の構成例を示す図
【図１２】実施の形態に係るストレス判別センサの他の構成例を示す図
【符号の説明】
１　測定装置本体
６　スロット形成部
７　スロット
８　測定用試薬
１３　ストレス判別センサ
１５　光ヘッド
１７　支持板
２０　押え板
２４　光ヘッド保持板
２６　ガイド板
２７　突起
６１　ガイド
６４　突出部
１０１　半導体レーザ
１１０　光検出器
２０１　レーザ駆動部
２０４　コントローラ
２０８　比較演算部
２０９　温度センサ
２１０　ＲＯＭ
２１１　メモリ
１１１　光ヘッド
２１３　メモリカード
【図１】
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【図２】
2004121214.tif 000008
【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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