(57)【要約】【課題】蛋白、金属イオン、塩類、低分子のキチンおよびキントサンなどの夾雑物を除去した高純度のキトサン水溶液の製造方法を提供すること。【解決手段】キトサン粉末を塩酸または硫酸水溶液に溶解させる工程と，キトサン水溶液の除蛋白処理を行う工程と，除蛋白したキトサン水溶液のろ過を行った後、さらに精密ろ過を行う工程と，脱塩処理、分子量１０００以下の物質の除去及び濃縮を行う工程と，濃度を調整した後、ｐＨの調整を行う工程と，ｐＨ調整後のキトサン水溶液を減圧ろ過し、さらに精密ろ過を行う工程と，品質規格検査を行い合格したものについて加熱滅菌処理を行う工程と，から製造されることからなる。【選択図】  図２
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
キトサン粉末を塩酸または硫酸水溶液に溶解させる工程と，
キトサン水溶液の除蛋白処理を行う工程と，
除蛋白したキトサン水溶液のろ過を行った後、さらに精密ろ過を行う工程と，
脱塩処理、分子量１０００以下の物質の除去及び濃縮を行う工程と，
濃度を調整した後、ｐＨの調整を行う工程と，
ｐＨ調整後のキトサン水溶液を減圧ろ過し、さらに精密ろ過を行う工程と，
品質規格検査を行い合格したものについて加熱滅菌処理を行う工程と，
から製造されることを特徴とする高純度キトサン水溶液の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は高純度のキトサンの水溶液の製造方法関する。
【０００２】
【従来の技術】
キトサンの水溶液には優れた保湿効果があり、保湿化粧品として市販されている（例えば、特許文献１参照。）。保湿化粧品としての利点はその優れた使用感にある。従来からある保湿化粧水は使用後べたべたする感じがあるが、キトサンローションは使用後の感じがべとつかずさらっとしており、すべすべして感じがよい。一方、近年著しく増加しているアトピー性皮膚炎の治療法として、日常のスキンケア（皮膚の手入れ）が大切であり、特に皮膚の乾燥が患者の痒みの原因であることから保湿剤の適切な使用が推奨されている（例えば、非特許文献１参照。）。キトサンの水溶液には抗ヒスタミン作用と抗アレルギー作用が報告されており（例えば、非特許文献２参照。）、アトピー性皮膚炎の痒みに効果がある。キトサン水溶液の使用目的として保湿化粧水としてのみならずアトピー性皮膚炎の患者が痒みを和らげる目的で使用するケースも増えてきている。
【０００３】
キトサンは、キトサンの一般的な製造方法（例えば、非特許文献３参照。）を用いて、かにやえびの甲殻あるいはイカの中骨を原料として製造されている。即ち、原料を４０〜４５％の水酸化ナトリウム溶液を使用して８０から１２０℃で処理し、脱アセチル化してキトサンを得る方法である。
【０００４】
【特許文献１】
特開平９−１１０６３４（発明の詳細な説明［００１０］、［００１１］）
【非特許文献１】
今日の治療指針２０００、ｐ６９６、医学書院
【非特許文献２】
佐藤利夫著「アトピー痒みが瞬時に消えた」、現代書林、２０００
【非特許文献３】
奥田拓道著、キチン・キトサン  基礎と薬理、ｐ１０、薬局新聞社、１９９４
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
キトサン水溶液の保湿化粧品としての用途を考えるとその純度が極めて重要である。キトサンの原料製造過程において、原料に含まれていた蛋白、各種金属イオン、製造工程で使用した塩類、低分子のキチンおよびキントサンなどの夾雑物の存在が純度等に大きな影響を与え、大きな問題となっている。特に異種蛋白はアレルギーの原因物質であり如何に少量といえども抗原性の問題がある。一方、われわれは現在市販されているキトサンの純度を分析した結果、かなりの夾雑物の存在を認めた。そこでわれわれは高純度キトサン水溶液を得るための製造方法を研究した。
【０００６】
そこで、本発明は、前述の蛋白、金属イオン、塩類、低分子のキチンおよびキントサンなどの夾雑物を除去した高純度のキトサン水溶液の製造方法を提供することを目的とする。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
前記目的を達成するため、本発明の高純度のキトサン水溶液の製造方法は以下の通りである。
（１）除蛋白処理を行う工程。
原料のキトサン粉末を塩酸あるいは硫酸水溶液に溶解させ、キトサン水溶液を得る。次いで、イオン交換樹脂と吸着剤を使用してキトサン水溶液の除蛋白処理を行う。イオン交換樹脂は、アニオンおよびカチオン交換樹脂を使用し、Ｈ型で交換容量の比較的大きいものを使用し、かつ吸着剤には水蒸気活性タイプの活性炭をはじめ、ゼオライト、シリカ、ヒドロキシアパタイト等の比較的細孔容量の大きいものを使用する。使用方法は、カラム通液法あるいはバッチ法による。
（２）ろ過および精密ろ過を行う工程。
除蛋白したキトサン水溶液のろ過および精密ろ過を行う。ろ過は、Ｎｏ．２、５Ｃろ紙を使用した吸引ろ過を行った後、０．４５μのメンブレンフィルターろ過で精密ろ過を行う。
（３）脱塩処理および分子量１０００以下の物質の除去を行う工程。
脱塩処理はイオン交換樹脂と限外ろ過膜を用いた方法で行う。脱塩には、弱アニオン交換樹脂を使用し、キトサンが吸着しない状態まで処理を行い、さらに限外ろ過膜を使用し、分子量１０００以下をカットして脱塩と同時に濃縮も行う。
（４）濃縮、濃度調整およびｐＨ調整を行う工程。
濃縮は、キトサンの変性を避けるために、温度４５℃にてエバポレーターで減圧濃縮する。さらに、水を加えて濃度を調整した後、Ｌ−グルタミン酸を加えてｐＨの調整を行う。
（５）ろ過および精密ろ過を行う工程。
ｐＨ調整後のキトサン水溶液をＮｏ．２、５Ｃろ紙を使用して減圧吸引ろ過する。さらに、０．４５μおよび０．２μのメンブレンフィルターろ過で精密ろ過を行う。
（６）品質規格検査を行う工程。
ｐＨ、Ｃｏｎｔｅｎｔ、比重、一般生菌数等の項目について企画試験を行う。
（７）加熱滅菌処理および充填を行う工程。
企画試験の結果、合格したものについて８５℃４５分の加熱滅菌処理（充填容器は前日より滅菌しておく）を行い、容器に充填する。
【０００８】
【実施例】
以下本発明の実施例を記述する。
【０００９】
実施例１  高純度キトサンおよび市販他社品の分子量並びに純度の分析
［サンプル］
１．高純度キトサン
２．他社品Ａ−１（イカキトサン）
３．他社品Ａ−２（イカキトサン）
４．他社品Ａ−３（イカキトサン）
５．他社品Ｂ（１００％カニキトサン、韓国製）
６．他社品Ｃ（カニキトサン）
【００１０】
１．分子量測定
カラムは、ＴＳＫ−３０００ＸＬ（７．８φｘ３００ｍｍ）を使用し、昭和電工からプルラン標準品を購入して、分子量曲線を求めた（図１）。…検量線の作成
その後、全てのサンプルを０．２Ｗ／Ｗ％秤量し、ｐＨをグルタミン酸にて３．０に調整した水溶液でＧＰＣ（ゲルろ過分析）した。分析データを別紙Ｎｏ．２〜７に示す。
移動相は、リン酸１Ｋ＋リン酸バッファーでｐＨ３．０に調製した０．２Ｍ濃度液を使用した。（吸着や析出を発生しない条件を選定した。）また、検出器には、示差屈折率計（ＲＩ）を使用した。なお、クロマトグラムに認められるショックは、バッファー濃度とサンプル濃度の屈折率の差異から得られるものである。
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高純度キトサンは、比較的良好な分子量を示し、その分布領域も小さいことが解り、かつ他社品と比べても総じて高分子量と言える。他社品Ａは、そのＬｏｔ毎で大きく分子量が変動し、極大点が二つに分かれるものもあり、分子領域も極めて広いことが解った。他社品Ｂは、比較的溶解性が良いとされるキトサンであるが、これも分子量の分布が広くかつ低分子のものが多いことが確認された。他社品Ｃのデータは、ほぼ他社品Ｂに近似している。高純度キトサンは、分子量分布小さく、比較的分子量も大きいが溶解性も高い特徴を持つ。
【００１１】
２．ＨＰＬＣ分析結果
上記で使用したキトサン溶解液を以下の方法で処理し、ＨＰＬＣ分析を行った。
ＯＤＳカラムにて、キトサンが吸着を行うことから、この水溶液を予めディスポカラムに２ｍｌづつ通液し、その残液についての不純物成分を分析した。なお、水溶性成分の吸着を抑制する為に０．０２％ＴＦＡ（トリフルオロ酢酸）添加にて作業を行った。
分析方法及びクロマトチャートは、図２〜７に示す。
（使用したディスポカラム）
ＶＡＲＩＡＮ  社製  ＨＦ  ＢＯＮＤ  ＥＬＵＴ−Ｃ１８、５０００ＭＧ  ３  ＭＬのタイプである。
（結果と考察）
高純度キトサンは、不純物が顕著に少ないことが確認された。本ピークのショックはＴＦＡ添加、塩類の為のピークである。不純物の多さは、他社品Ｃ＞他社品Ａ（Ｌｏｔにより変動）＞他社品Ｂ＞＞高純度キトサンの順であった。
【００１２】
３．蛋白質のニンヒドリン呈色反応
ＨＰＬＣ分析に使用したＯＤＳ通液処理液に関して、蛋白質の呈色反応を行った。
その結果を別紙図８に示す。
高純度キトサンは、完全に除蛋白されていることが解るが、他社品では全て呈色した。なかでもカニ由来の他社品Ｃでは、相当量の蛋白質の残存が認められた。また、この結果は、ＨＰＬＣ分析データとも一致している。
【００１３】
実施例２  イカキトサンを原料とした高純度キトサンローションの製造
原料のイカキトサン粉末０．１５ｋｇを０．２７％塩酸水溶液に溶解させ、イカキトサン水溶液を得た。次いで、吸着剤セライトを使用してバッチ法により除蛋白処理を行った。
（１）ろ過および精密ろ過
除蛋白したイカキトサン水溶液をＮｏ．２、５Ｃろ紙を使用した吸引ろ過を行った後、０．４５μのメンブレンフィルターろ過で精密ろ過を行った。
（２）脱塩処理および分子量１０００以下の物質の除去
脱塩には、弱アニオン交換樹脂を使用し、キトサンが吸着しない状態まで処理を行い、さらに限外ろ過膜を使用し分子量１０００以下をカットした。
（３）濃縮、濃度調製およびｐＨ調製
温度４５℃にてエバポレーターで減圧濃縮した。更に、水を加えて濃度をイカキトサン０．１５％に調製した後、Ｌ−グルタミン酸を加えてｐＨを３．３〜３．８に調製した。
（４）ろ過および精密ろ過
Ｎｏ．２、５Ｃろ紙を使用して減圧吸引ろ過する。さらに、０．４５μおよび０．２μのメンブレンフィルターろ過で精密ろ過を行って、高純度イカキトサン溶液１００ｋｇを得た。
（５）品質規格検査および加熱滅菌処理および充填
ｐＨ、Ｃｏｎｔｅｎｔ、比重、一般生菌数等の項目について規格検査を行い規格に合格していることを確認した後、８５℃４５分の加熱滅菌処理（充填容器は前日より滅菌しておく）を行い、容器に充填した。
【００１４】
実施例３  高純度イカキトサンローションの試験例
１．４５歳、女性、主婦、敏感肌
敏感肌のため市販の化粧水はすべて刺激があり、イカキトサンローションについても現在市販されているものを使用したところ顔の皮膚が赤くなり痒みを感じた。今回、高純度イカキトサンローションを使用したところ刺激は全くなかった。化粧水として保水効果があり、使用直後のサラサラ感が気持ちがよかった。
２．２６歳、女性、秘書、アトピー性皮膚炎
アトピー性皮膚炎のため顔や腕に痒みがあり赤くなっていた。市販の化粧水は刺激があり使用できなかったが、高純度イカキトサンローションを使用したところ刺激は全くなく痒みもとれ肌の状態も改善された。毎日使用しているが特別な問題はなかった。
３．３０歳、女性、店員、化粧水として使用
つけた瞬間の気持ちよさは格別でさっぱりとした使い心地であった。イカキトサンローションだけだと多少のつっぱり感があった。
４．３２歳、女性、薬剤師、化粧水として使用
使用感はさらっとしていて伸びもよく、浸透性もよかった。使用後膜がはったような感じがあった。
【図面の簡単な説明】
【図１】分子量曲線を示す図である。
【図２】高純度キトサンの分析方法及びクロマトチャートを示す図である。
【図３】他社品Ａ−１  分析方法及びクロマトチャートを示す図である。
【図４】他社品Ａ−２  分析方法及びクロマトチャートを示す図である。
【図５】他社品Ａ−３  分析方法及びクロマトチャートを示す図である。
【図６】他社品Ｂ  分析方法及びクロマトチャートを示す図である。
【図７】他社品Ｃ  分析方法及びクロマトチャートを示す図である。
【図８】キトサンの中の蛋白質のニンヒドリン呈色反応を示す図である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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