(57)【要約】【課題】還元剤が必要であった９９ｍＴｃＯ４−などの金属酸化物イオンの還元方法において、還元剤を用いずに還元する方法を提供する。【解決手段】溶液中の金属酸化物イオンを還元する方法であって、還元剤を添加することなく放射線存在下にて前記溶液から酸化種を除去することにより、前記金属酸化物イオンを還元する方法。酸化種は、例えば、前記溶液へ不活性ガスまたは窒素ガスを送ることにより除去できる。ガスを溶液中にバブリングさせ、それに次いで気相をガスフローさせることによって酸化種を除去することが好ましい。前記溶液が錯体形成のためのリガンドを含む場合、金属酸化物イオン還元体の錯体を生成する。【選択図】　　なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
溶液中の金属酸化物イオンを還元する方法であって、還元剤を添加することなく放射線存在下にて前記溶液から酸化種を除去することにより、前記金属酸化物イオンを還元する方法。
【請求項２】
酸化種は、前記溶液へ不活性ガスまたは窒素ガスを送ることにより除去される請求項１に記載の方法。
【請求項３】
金属酸化物イオンが放射性金属酸化物イオンである請求項１に記載の方法。
【請求項４】
金属酸化物イオンが、テクネチウム−９９ｍ、テクネチウム−９９、レニウム−１８６およびレニウム−１８８から選ばれた少なくとも１つである請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記溶液は、金属酸化物イオン及び放射性核種を含む溶液である請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記溶液に放射線を外部から照射または曝露させる請求項１に記載の方法。
【請求項７】
不活性ガスがアルゴンである請求項２に記載の方法。
【請求項８】
ガスを溶液中にバブリングさせ、それに次いで気相をガスフローさせることによって酸化種を除去する請求項２に記載の方法。
【請求項９】
前記溶液は還元を促進させるための薬剤を含有する請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記還元を促進させるための薬剤がアルコール類である請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
還元剤を添加することなく放射線存在下にて、錯体形成のためのリガンドおよび金属酸化物イオンを含む溶液から酸化種を除去することにより、前記金属酸化物イオンを還元するとともにリガンドと錯体を形成させる方法。
【請求項１２】
酸化種は、前記溶液へ不活性ガスまたは窒素ガスを送ることにより除去される請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
金属酸化物イオンが放射性金属酸化物イオンである請求項１１に記載の方法。
【請求項１４】
金属酸化物イオンが、テクネチウム−９９ｍ、テクネチウム−９９、レニウム−１８６およびレニウム−１８８から選ばれた少なくとも１つである請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記溶液は、金属酸化物イオン及び放射性核種を含む溶液である請求項１１に記載の方法。
【請求項１６】
前記溶液に放射線を外部から照射または曝露させる請求項１１に記載の方法。
【請求項１７】
不活性ガスがアルゴンである請求項１２に記載の方法。
【請求項１８】
ガスを前記溶液中にバブリングさせ、それに次いで気相をガスフローさせることによって酸化種を除去する請求項１２に記載の方法。
【請求項１９】
前記溶液は還元を促進させるための薬剤を含有する請求項１１に記載の方法。
【請求項２０】
前記還元を促進させるための薬剤がリガンドおよびアスコルビン酸から選ばれた少なくとも１つである請求項１９の方法。
【請求項２１】
還元剤を添加することなく放射線存在下にて、金属酸化物イオンを含む溶液から酸化種を除去することにより、前記金属酸化物イオンを還元するとともに、該溶液に錯体形成のためのリガンドを含む溶液を添加することにより錯体を形成させる方法。
【請求項２２】
酸化種は、前記金属酸化物イオンを含む溶液へ不活性ガスまたは窒素ガスを送ることにより除去される請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
金属酸化物イオンが放射性金属酸化物イオンである請求項２１に記載の方法。
【請求項２４】
金属酸化物イオンが、テクネチウム−９９ｍ、テクネチウム−９９、レニウム−１８６およびレニウム−１８８から選ばれた少なくとも１つである請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記金属酸化物イオンを含む溶液は、金属酸化物イオン及び放射性核種を含む溶液である請求項２１に記載の方法。
【請求項２６】
前記金属酸化物イオンを含む溶液に放射線を外部から照射または曝露させる請求項２１に記載の方法。
【請求項２７】
不活性ガスがアルゴンである請求項２２に記載の方法。
【請求項２８】
ガスを前記金属酸化物イオンを含む溶液中にバブリングさせ、それに次いで気相をガスフローさせることによって酸化種を除去する請求項２２に記載の方法。
【請求項２９】
前記金属酸化物イオンを含む溶液は還元を促進させるための薬剤を含有する請求項２１に記載の方法。
【請求項３０】
前記還元を促進させるための薬剤がリガンドおよびアスコルビン酸から選ばれた少なくとも１つである請求項２９の方法。
【請求項３１】
還元剤を添加することなく放射線存在下にて、金属酸化物イオンを含む溶液から酸化種を除去することにより、前記金属酸化物イオンを還元することによって得られた、還元剤及びその分解産物を実質的に含まない放射性薬剤。
【請求項３２】
酸化種は、前記溶液へ不活性ガスまたは窒素ガスを送ることにより除去された請求項３１に記載の薬剤。
【請求項３３】
還元剤を添加することなく放射線存在下にて、錯体形成のためのリガンドおよび金属酸化物イオンを含む溶液から酸化種を除去することにより、前記金属酸化物イオンを還元するとともにリガンドと錯体を形成させることによって得られた、還元剤及びその分解産物を実質的に含まない放射性薬剤。
【請求項３４】
酸化種は、前記溶液へ不活性ガスまたは窒素ガスを送ることにより除去された請求項３３に記載の薬剤。
【請求項３５】
還元剤を添加することなく放射線存在下にて、金属酸化物イオンを含む溶液から酸化種を除去することにより、前記金属酸化物イオンを還元するとともに、該溶液に錯体形成のためのリガンドを含む溶液を添加することにより錯体を形成させることによって得られた、還元剤及びその分解産物を実質的に含まない放射性薬剤。
【請求項３６】
酸化種は、前記溶液へ不活性ガスまたは窒素ガスを送ることにより除去された請求項３１に記載の薬剤。
【請求項３７】
スズを実質的に含まない請求項３１乃至３６の何れか１項に記載の放射性薬剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、放射性医薬品分野における放射性薬剤の製造に際して用いられる金属酸化物イオンの還元反応及び当該還元反応によって得られる還元体の錯体生成反応に関する。詳細には、本発明は、塩化スズ化合物等の無機還元剤、有機還元剤などの還元剤を添加することなく、放射線照射下で生成する還元種によって金属酸化物イオンを自動的に還元する方法に関し、特に、Ｔｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体の製造及びＴｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体によるＴｃ−９９ｍ錯体の製造に有用である。
【０００２】
【従来の技術】
放射性核種で標識された種々の化合物が放射性薬剤として開発され、多くの医療施設で核医学診断に用いられている。これらの薬剤は、診断に適切な半減期、エネルギー特性等をもった放射性核種で標識された化合物を主成分とする。標識に用いる放射性核種のなかでも、放射性遷移金属であるテクネチウム−９９ｍ（以下Ｔｃ−９９ｍ）は、とりわけ代表的な核種といえよう。これは、半減期６．０１時間のガンマ線放出核種であり、モリブデン−９９−テクネチウム−９９ｍジェネレーター装置から必要に応じ何時でも得ることができる。このＴｃ−９９ｍは、種々の標識放射性薬剤を医療現場において調製できるため簡便性を有しており、また、予め調製されたＴｃ−９９ｍ標識放射性薬剤も商業的に供給されており、多くのＴｃ−９９ｍで標識された錯体化合物が放射性薬剤として種々の臓器、疾患の診断目的に開発されてきた。
【０００３】
例えば、テクネチウムスズコロイド（Ｔｃ−９９ｍ）は、Ｔｃ−９９ｍ過テクネチウム酸ナトリウム（Ｔｃ−９９ｍ）注射液と塩化第一スズとを混合し、注射剤の製法により調製できる（放射性医薬品基準ハンドブック参照）。
このテクネチウムスズコロイド（Ｔｃ−９９ｍ）は、粒子径が１μｍから５μｍのコロイド状化合物である。このコロイド状化合物は、投与後、８０〜８５％が肝臓及び脾臓に集積する性質をもち、臨床においてコロイド肝シンチグラフィ用薬剤として、主としてＫｕｐｆｆｅｒ細胞の異物貪食能に基づくイメージング像を得るために用いられている（久田欣一ら、最新臨床核医学、金原出版、１９９１）。
【０００４】
一方、Ｔｃ−９９ｍ標識放射性薬剤の多くは、Ｔｃ−９９ｍ錯体自体からなる化合物、或いはＴｃ−９９ｍとの錯体形成部分を有する低分子化合物または高分子化合物である。即ち、Ｔｃ−９９ｍは、錯体形成能のある基を有するか当該基で修飾された化合物、すなわち、リガンドと錯体を形成させることにより、Ｔｃ−９９ｍ標識放射性薬剤として調製される。
一般に、Ｔｃ−９９ｍ錯体の製造は、ジェネレーターから溶出して得られるＴｃ−９９ｍ過テクネチウム酸塩イオン（以下９９ｍＴｃＯ４−）溶液を還元剤の存在下で、リガンドへ添加することにより行われる。
このようにして得られたＴｃ−９９ｍ錯体において、Ｔｃ−９９ｍ自身は種々の価数を有している。即ち、ジェネレーターより溶出された７価である９９ｍＴｃＯ４−は、必要な価数の形に還元され、種々の錯体を形成する。
上記方法の９９ｍＴｃＯ４−の還元によると、錯体はしばしばＴｃ＝Ｏ部分を含むＴｃ錯体へ導かれ、その場合のテクネチウムは＋４または＋５の酸化状態にある。このような放射性薬剤錯体の形成は往々にして［Ｔｃ（Ｖ）ＯＸ５］２−または［Ｔｃ（ＩＶ）Ｘ６］２−分子に対する置換反応を経て起こり、それは実用性のある合成経路であると認められた（非特許文献１及び特許文献１参照）。
【０００５】
放射性遷移金属標識を目的として錯体形成反応を行う際、過酸イオンである９９ｍＴｃＯ４−等の化学的還元に使用される還元剤としては、通常は、スズ、亜鉛、鉄などの金属もしくは塩化スズ、フッ化スズ、塩化クロム、酢酸クロム、水素化ホウ素ナトリウムなど、または、これらと有機酸もしくは無機酸との組み合わせが用いられる。
【０００６】
現在、Ｔｃ−９９ｍ標識用の還元剤として多用されているのは、塩化第一スズである。しかし、このような金属性の還元剤の使用については、幾つかの問題点が指摘されている。
【０００７】
Ｔｃ−９９ｍ−ヒドロキシメチレンジホスホン酸（以下Ｔｃ−９９ｍ−ＨＭＤＰ）やＴｃ−９９ｍ−メチレンジホスホン酸（Ｔｃ−９９ｍ−ＭＤＰ）などのＴｃ−９９ｍ−ジホスホネート製剤は、骨シンチグラフィ用の放射性薬剤として広く用いられている。例えばＴｃ−９９ｍ−ＨＭＤＰは、９９ｍＴｃＯ４−と、塩化第一スズ・ヒドロキシメチレンジホスホン酸とを混合し注射剤の製法により調製される（放射性医薬品基準ハンドブック参照）が、このＴｃ−９９ｍ−ジホスホネート製剤等は、その製法の性質上、溶液中に、Ｔｃ−９９ｍの錯体とスズの錯体が混在したり、また、多核錯体を形成するおそれがある。
また、Ｔｃ−９９ｍ−ジホスホネート製剤が、溶液中で単一純粋種でないことを示すという報告がある。この報告は、高速液体クロマトグラフィーによる分析において多くのピークが検出され、各々の同定結果から、この製剤が各成分の錯体混合物から成ることを示している（Ｐｉｎｋｅｒｔｏｎ、Ｄｅｕｔｓｃｈら，Ａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．５２，１１０６−１１１０（１９８０））。
【０００８】
また、Ｄｅｕｔｓｃｈらは、スズは、Ｔｃ−９９ｍ過テクネチウム酸の還元だけでなく、Ｔｃ−９９ｍ錯体の生成に深く関与していることを示した。即ち、ジメチルグリオキシム存在下で、Ｔｃ−９９ｍ過テクネチウム酸を塩化第一スズで還元し、錯体を生成させたとき、Ｔｃ−９９ｍ−スズ−ジメチルグリオキシム錯体が生成していること、即ち、スズが錯体形成に関与していることをＸ線構造解析により示した（Ｄｅｕｔｓｃｈら，Ｐｒｏｃ．　Ｎａｔｌ．　Ａｃａｄ．　Ｓｃｉ．　ＵＳＡ，７３，１２，４２８７−４２８９（１９７６））。
【０００９】
Ｔｃ−９９ｍ標識時に金属還元剤を使用するもう一つの問題として、還元剤添加時の問題がある。
テクネチウム−９９ｍ標識は、低分子のＴｃ−９９ｍ錯体化合物だけでなく、放射性医薬品として多くの生理活性物質の標識、例えば、タンパク質、ペプチド化合物及び核酸並びにそれらの誘導体の標識に応用されている。
しかしながら、このようなタンパク質などの生理活性物質に塩化第一スズ等の還元剤を添加して行われるＴｃ−９９ｍ錯体調製方法は、しばしば過剰の還元剤が用いられるために、還元剤自身の安全性及び還元剤による失活や副生成物の問題を生じることもある。還元剤の安全性は、医薬品としての使用時に問題となり、還元剤による失活や副生成物等の問題は、タンパク質、ペプチド及び核酸のような化合物をＴｃ−９９ｍ標識する際に特に問題となり、標識条件を細かく検討する必要がある。
【００１０】
Ｃａｂｒａｌらは、標識の際に用いられる塩化第一スズが誘発するＤＮＡの損傷について検討を行っている（Ｃａｂｒａｌら，Ｍｕｔａｔｉｏｎ　Ｒｅｓ．４０８，１２９−１３５（１９９８））。
【００１１】
また、かかる問題点を解決するために、塩化スズを結合させた樹脂もＴｃ−９９ｍ標識放射性薬剤の調製に用いられている。Ｎａｋａｙａｍａらは、タンパク質や抗体等の標識における塩化第一スズを用いることの短所を改善するために、アミノホスホン酸を有する樹脂とスズ（ＩＩ）との錯体を作成し、９９ｍＴｃＯ４−を還元し、標識に用いた。このように、スズ（ＩＩ）イオンが結合した樹脂を用いることにより、Ｔｃ−９９ｍ標識化合物の溶液中にスズの混入を最小とすることができることを説明している（非特許文献２参照）。
【００１２】
Ｌａｔｈａｍらは、ＴｃＯ４−を塩酸と反応させＴｃＣｌ６２−を形成し、該ＴｃＣｌ６２−をヒドロキシルアミン誘導体と反応させ［Ｔｃ（ＮＯ）Ｃｌ４］−を形成させ、リガンドとの反応に供する方法を開示している（特許文献１参照）。
【００１３】
この他にも、塩化第一スズを用いない９９ｍＴｃＯ４−の還元方法に関する先行技術として、放射性診断薬剤の製造分野ではないが以下の報告がある。
特開平６−２７２９４号公報では、放射能汚染金属からのテクネチウム放射能汚染物の抽出方法において、テクネチウムで汚染された金属を電解質中で溶解し、テクネチウムを電気精錬回路で直接除去する方法を開示している。この方法は、陽極液中のテクネチウム原子価をＴｃ（ＶＩＩ）７価からＴｃ（ＩＶ）４価へ減少させてＴｃＯ２を沈殿させることを特徴としている。このような還元反応を効率的に行うには、塩酸のような還元酸が用いられる。また、さらに還元を促進するには、塩化第一スズ、塩化鉄、塩化銅等の金属塩化物或いはＣＯ、Ｈ２Ｓ等の化学還元剤も使用される。
しかしながら、上記の方法で特定の放射性核種で標識された化合物を含有する放射性薬剤の中に、高濃度の塩酸、その他の化合物を添加することは、その応用に限界があるのは明白である。
【００１４】
過酸イオンの化学的還元に使用される還元剤は、金属化合物に限らず、非金属還元剤を用いることもできる。ジフェニルホスフィノベンゼン−３−スルホン酸ナトリウム、ホルムアミジンスルホン酸或いはグルコヘプタン酸等の非金属還元剤をＴｃ−９９ｍ標識に用いる方法は、我々の研究の一つにおいて既に述べた（特許文献３参照）。これは、専ら、錯体形成能のある基により、金属性の還元剤由来の金属がキレートされないことを目的としている。
【００１５】
ところで、放射線が物質に及ぼす影響については古くから種々の検討が行われている。放射線分解による種々の化合物の生成はよく知られている。一般に、放射線が物質内を通過する際、放射線は物質内の原子や分子との相互作用により、そのエネルギーを失う。このとき、放射線の化学作用には、放射線の吸収と、これに続いて起こるイオン化の過程がある。この反応には、中性活性分子種の他にイオン及び電子が関与する。
この過程で、放射線により水が分解されて生じる還元種は、Ｈ・、Ｈ２、ｅ（溶媒和電子）等があり、また、酸化種はＯＨ・、Ｈ２Ｏ２、Ｏ２等がある。
【００１６】
放射線分解の例を幾つか挙げる。原子炉一次冷却系では、炉水が、炉心近傍で中性子やガンマ線等の強い放射線照射場に曝される結果、水の放射線分解が起こり、水中に侵食性の酸素、過酸化水素をはじめとして種々のラジカルやイオンが形成される（特許文献４参照）。
【００１７】
一方、原子炉で扱われる放射能量ほどではないが、商業的に供給される放射性医薬品を製造する現場、即ち、研究レベル以上の放射能量が取り扱われる場合でも放射線分解が起こる。
放射線医学総合研究所では大型サイクロトロンによる核種の製造と高比放射能を有する陽電子放出核種画像診断装置（ＰＥＴ）による核医学的診断用放射性薬剤の開発研究を行っている。現在、ＰＥＴ用放射性薬剤である炭素−１１標識ＰＥＴ薬剤は比放射能として数キュリー／マイクロモルで得られているが、これまでの平均的比放射能をはるかに上回る５０キュリー／マイクロモルの超高比放射能を有する炭素−１１標識ＰＥＴ薬剤を得ることが可能となった。しかしながら、このような超高比放射能体では放射線による自己分解が問題となることを見出し、その機構として水和電子の関与が示され、ＮａＮＯ３の添加により放射性分解を抑制することができることを示した（非特許文献３参照）。
【００１８】
このように、炭素−１１標識ＰＥＴ薬剤の超高比放射能の溶液中で、化合物の放射線による自己分解が酸化剤である硝酸ナトリウムを添加することにより抑制できた事は、放射線によって還元種が生成したことを示している。
【００１９】
以上のように、高比放射能の溶液中では、酸化種、還元種等が生成すること、及び放射線分解が起こりうる状況が存在することを鑑みると、放射性医薬品の製造現場の条件によっては、放射能の溶液に含まれる少量のイオン特に過酸イオン、特に、９９ｍＴｃＯ４−の取り扱いの際には、放射線分解で生じた酸化種、還元種によるその化学形の変化を考慮しなければならない状況にあるといえる。
【００２０】
放射線分解産物の捕捉剤として、一般的に、プロトン捕捉剤（ＮＨ３、アミン類、アルコール類）、電子捕捉剤（ＳＦ６，Ｎ２Ｏ，ハロゲン化物）、ラジカル捕捉剤（オレフィン、ＮＯ，Ｉ２、Ｏ２）等がある。
しかしながら、前述の還元反応を行う際と同様に、放射性医薬品の分野では、放射線分解を防止するためとはいえ、特定の放射性核種で標識された化合物を含有する放射性薬剤の中に、これらの化合物を添加することには慎重でなければならない。
【００２１】
【特許文献１】特公平５−７６９５３号公報
【特許文献２】特開平６−２７２９４号公報
【特許文献３】特開２００１−１１４７９２号公報
【特許文献４】特開平５−１０００８７号公報
【非特許文献１】Ｄｅｕｔｓｃｈら，「テクネチウム化学及びテクネチウム放射性薬剤」、Ｐｒｏｇ．Ｉｎｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，１９８２年，第３０巻，１７５ページ
【非特許文献２】Ｎａｋａｙａｍａ，Ｍ．ら，“Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｉｎｓｏｌｕｂｌｅ　Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｓｎ（ＩＩ）　Ｃｏｍｐｌｅｘ　ａｎｄ　ｉｔｓ　Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｔｏ　ｔｈｅ　９９ｍＴｃ　Ｌａｂｅｌｉｎｇ　ｏｆ　Ｈｕｍａｎ　Ｓｅｒｕｍ　Ａｌｂｕｍｉｎ−ｂｅａｒｉｎｇ　Ｍｅｒｃａｐｔｏ　Ｇｒｏｕｐｓ”，Ａｐｐｌ．Ｒａｄｉａｔ．Ｉｓｏｔ．１９９４年，第４５巻，第１号，４１−４７ページ
【非特許文献３】間賀田泰寛ら，「がん内用放射線治療薬剤の開発研究の現状」，Ｉｓｏｔｏｐｅ　Ｎｅｗｓ，２００２年，４月，１２−１５ページ
【００２２】
【発明が解決しようとする課題】
以上に述べた状況を鑑みると、塩化スズのような化合物をＴｃ−９９ｍ放射性薬剤の標識に用いたとき、還元剤由来のスズ等の金属による錯体の形成、被標識体であるタンパク質等の変性や失活などの問題点を踏まえて、これらの影響のない放射性標識条件の検討が必要である。また、Ｔｃ−９９ｍ放射性薬剤の標識の際、高放射能の存在下では放射線によって生成する種々の還元種、酸化種等の物質が及ぼす影響に対して反応条件のコントロールを必要とする場合がある。
【００２３】
【課題を解決するための手段】
発明者らは、９９ｍＴｃＯ４−を還元しＴｃ−９９ｍ錯体を製造する条件を鋭意検討した結果、従来、塩化スズ等の還元剤が必要であった遷移金属の酸化物イオンの還元方法について、特に９９ｍＴｃＯ４−の還元において、還元剤を用いずに還元する方法を見出した。即ち、高放射能濃度の９９ｍＴｃＯ４−溶液中で水の放射線による酸化、還元反応で生成した酸化種及び還元種のうち、酸化種を除去して還元種のみを優勢に存在させる条件を作り出すことによって、９９ｍＴｃＯ４−を還元する方法を見出した。また、更には、本発明の還元方法によって生成したＴｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体を種々のリガンド化合物が捕捉し、錯体を形成することが認められた結果から、従来技術のような還元剤を用いない、Ｔｃ−９９ｍ標識錯体の自動的な製造方法を見出した。
【００２４】
かくして、本発明の一局面によれば、溶液中の金属酸化物イオンを還元する方法であって、還元剤を添加することなく放射線存在下にて前記溶液から酸化種を除去することにより、前記金属酸化物イオンを還元する方法が提供される。
【００２５】
また、本発明の別の局面によれば、還元剤を添加することなく放射線存在下にて、錯体形成のためのリガンドおよび金属酸化物イオンを含む溶液から酸化種を除去することにより、前記金属酸化物イオンを還元するとともにリガンドと錯体を形成させる方法が提供される。
【００２６】
また、本発明の更に別の局面によれば、還元剤を添加することなく放射線存在下にて、金属酸化物イオンを含む溶液から酸化種を除去することにより、前記金属酸化物イオンを還元するとともに、該溶液に錯体形成のためのリガンドを含む溶液を添加することにより錯体を形成させる方法が提供される。
【００２７】
本発明は、金属酸化物イオンを含む溶液を放射線存在下に置くことを特徴とする。本明細書において、「放射線存在下」なる用語は、溶液に含まれる金属酸化物イオンが放射性金属酸化物イオンそれ自体である場合、溶液に含まれる金属酸化物イオンが放射性金属酸化物イオンを含む場合、金属酸化物イオンを含む溶液が放射性同位元素を含む溶液である場合、及び、金属酸化物イオンを含む溶液に放射線を外部から照射または曝露させる場合のいずれの場合も包含する意味で用いられる。本発明において、「放射線存在下」なる状態を作り出すに必要な具体的な放射能量および放射能濃度は、製造条件によって異なるが、水の放射線による酸化・還元反応で還元種が生起するのに十分な量であればよく、Ｔｃ−９９ｍなどの場合、通常、自動還元開始時に放射能濃度が１０ＧＢｑ／ｍＬ以上、好ましくは２５ＧＢｑ／ｍＬ以上または放射能総量が８０ＧＢｑ以上であればよい。なお、本発明の方法は継続して数時間にわたり行われることもあるので、放射性金属酸化物イオンはその核種固有の物理学的半減期に従い、経時的に減衰してゆく。たとえば、Ｔｃ−９９ｍの物理学的半減期は６．０１時間であり、本発明の自動還元開始から６時間を経過するとＴｃ−９９ｍの放射能量および放射能濃度は開始時の０．５倍となっている。したがって、自動還元開始以後は上記数値以下の放射能量、放射能濃度の状態となることもあるが、その状態でも自動還元が行われていると考えられる。例えば、実験開始時に１０．５ＧＢｑ／ｍＬ〜１３．２ＧＢｑ／ｍＬの濃度の９９ｍＴｃＯ４−溶液１０ｍＬを用いた場合、あるいは実験開始時に２６．５ＧＢｑ／ｍＬの濃度の９９ｍＴｃＯ４−溶液３ｍＬを用いた場合でも、本発明の金属酸化物イオンの自動還元が認められた。
【００２８】
本発明は、金属酸化物イオンとして、特に放射性金属の酸化物イオンを用いる場合に有効であり、好適な放射性金属酸化物イオンとしては、例えば、テクネチウム−９９ｍ、テクネチウム−９９、レニウム−１８６、レニウム−１８８などの核種の酸化物イオンが挙げられる。
【００２９】
【発明の実施の形態】
以下、発明の実施の形態について説明する。
【００３０】
本発明の還元は、例えば、金属酸化物イオンを含む溶液を密閉または少なくとも気密である容器に充填し、次いで、放射線存在下、金属酸化物イオンを含む溶液へ不活性ガスまたは窒素ガスを送るなどの手段で溶液から酸化種を除去することにより行える。この溶液自体の放射能濃度が高いとき、或いは溶液自体に放射能を有しなくても放射線を照射するか曝露させるとき、放射線による水の分解が生じる。放射線による分解の結果、溶液中に酸化種と還元種が生成する。この酸化種を除去することにより、溶液中を還元種が優勢の状態にし、金属酸化物イオンの酸化還元の可逆的反応を還元側に移行させることができる。その結果、溶液中の金属酸化物イオンを還元することができ、即ち、金属酸化物イオンの還元体を製造することができる。
【００３１】
酸化種を除去するために、溶液へ不活性ガスまたは窒素ガスを送る手段としては、容器内の溶液中にガスを一定期間バブリングし、さらに続けて容器内の気相をガスフローさせるか、或いは、単に気相をガスフローさせる方法などが採用できる。
【００３２】
本発明により金属酸化物イオンを還元することにより生成する酸化物は４価であると推定される。例えば、７価の９９ｍＴｃＯ４−を還元して得られる還元体ＴｃＯ２は４価である。
【００３３】
以下に具体的操作手技を述べる。
放射線分解により生じた酸化種を除去するためには、先ず酸素をバイアル或いはボトル等の容器内から除去し、ついで放射線により生じる酸化種も除去する必要がある。この状態を達成するために、具体的には、これらの容器内の溶液中にアルゴン、窒素等のガスを吹き込む（バブリングするともいう）か、または、容器内の気相をこれらのガスでガスフローするのがよい。
バブリングとは、ガスを液相に送り込むための管を液相中に設け、一方、ガスを容器外に送り出すためのもう一つの管を液相に触れないように気相部分に設け、一定の流速でガスを送り込み、溶液をあわ立てることにより容器内を還元種優位にする方法である。
ガスフローとは、ガスを気相に送り込むための管を液相に触れないように設け、一方、ガスを容器外に送り出すためのもう一つの管を液相に触れないように気相部分に設け、一定の流速でガスを送り込み、容器内のガスを置換する方法である。
ガスで還元種を優位にする方法は、バブリングとガスフローの操作を組み合わせると有効である。また、バブリングとガスフローの順序は、一定時間ガスをバブリングさせた後、ガスフローを一定時間行うのがさらに好ましい。また、ガスフローのみやバブリングのみでも本発明の方法は達成可能である。
本発明の具体的な実施例において、１０分間バブリングし、次いで２時間ガスフローする条件を最もＴｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体の生成しやすい条件の例として示したが、当然ながら、その他にも種々の条件が可能であり、実施例中に示した条件に限定されるものではない。
ガスフローに用いるガスは特に限定されないが、アルゴン等の不活性ガス、窒素ガス等が用いられる。なお、不活性ガスや窒素ガスを流す操作により、ボトル内の水は若干蒸発し、液量の減少が認められる。
処理しようとする溶液の量や放射能量により、上記の流速、処理時間等の条件が異なることは当業者にとって明らかであるが、本発明の実施例においては、放射性医薬品の製造のスケールとして実施可能な標準的なものを例示した。しかしながら、本発明の方法は、実施例の条件だけに限られるものではない。
【００３４】
液量の変化に伴うＴｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体生成の割合については、水が少ないほうが放射線分解物の生成量が少なくなり、Ｔｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体の生成も少ないといえる。しかし、Ｔｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体の生成は、その他にも放射能量、液量等が相互に関係する。
【００３５】
本発明の方法は、バブリングやガスフロー操作を行うのに支障がない大きさであれば、容器の大きさには直接依存しないものと考えられるが、代表的なスケールである２５０ｍｌボトルを用いる場合、アルゴンガスのバブリングを１０分間行うことによってボトル内の空気を十分にアルゴンガスや窒素ガスに置き換え、さらにガスフローを２時間程度行うことが有効である。
【００３６】
本発明の方法により生成したＴｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体は、溶液を孔径０．１μｍのフィルターでろ過することにより除去されたことから、０．１μｍ以上の粒子径を有するコロイド状化合物である。また、このＴｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体の成分はほとんどが肝臓に集積する成分であることも示された。ＴｃＯ２の約９０％が肝臓及び脾臓に集積する性質はすでに報告されていること（最新臨床核医学−基礎編、朝倉書店参照）から、この実験により得られたＴｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体はＴｃＯ２であると推定される。
【００３７】
本発明の方法で製造されたＴｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体は、十分な時間ガスフローを行うことにより高率に得られるが、酸素により可逆的に酸化され、再び９９ｍＴｃＯ４−を生じる。従って、生成したＴｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体溶液の保存は密封された容器で行われることが好ましいが、錯体を生成させる等の使用時までアルゴン、窒素等のガスフローを行うことがさらに好ましい。
【００３８】
本発明の方法による金属酸化物イオンの還元は可逆的な反応であることが確認されているので、酸化反応をより阻害することにより、より多くの還元体を生成させる状態にすることがより効果的である。この一つの方法として、本発明の方法では、酸化種を除去して還元を促進させるために少量の添加剤を加えてもよい。例えばエタノールなどのアルコール類、アスコルビン酸等のような水酸基を有する化合物が、酸化反応の阻害に効果を示す。
例えば、エタノールを含有している溶液は、Ｔｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体をより多く生成させることが確認されている。このように、エタノールは水の放射線分解物の酸化種を除去し、可逆的に行われる９９ｍＴｃＯ４−の酸化反応を阻害する作用を有する。
アスコルビン酸は、還元作用を有するとされ、医薬品では抗酸化剤として用いられている。Ｔｃ−９９ｍ標識放射性薬剤の分野では、９９ｍＴｃＯ４−の錯体形成反応にアスコルビン酸が還元剤としてではなく、専ら添加剤として使用される。本発明の方法の条件下、アスコルビン酸は、還元を促進するための剤として添加することが有効である。
還元を促進させるためのこれらの添加剤は、いずれも薬剤として添加するのに容認される範囲で使用される。
【００３９】
還元を促進させるためには、還元体をＤＴＰＡ等のリガンドで捕捉することも有効な方法の一つである。
本発明の方法により得られたＴｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体は、用途に応じて保存され、または、次いで行われる錯体形成のためのリガンドとの錯体形成反応に供される。また、本発明の方法により得られたＴｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体は、錯体を形成することにより、可逆的な酸化と還元の平衡反応が還元側に移動することにより、更なる錯体形成反応に寄与すると考えられる。錯体を形成するためのリガンドは特に限定されない。かかるリガンドとしては、ジエチレントリアミン五酢酸（以下ＤＴＰＡ）、ヘキサメチレンプロピレンアミンオキシム（以下ＨＭＰＡＯ）、ヒドロキシメチレンジホスホン酸二ナトリウム（以下ＨＭＤＰ）などが挙げられる。
【００４０】
ジエチレントリアミン五酢酸（以下ＤＴＰＡ）を加えた９９ｍＴｃＯ４−溶液にアルゴンガスバブリングを１０分間行い、次いでアルゴンガスフローを２時間行った直後に分析すると７５％のＴｃ−９９ｍ−ＤＴＰＡが生成していた。コントロール実験として同様の操作を、ＤＴＰＡを添加せずに行うと、９９ｍＴｃＯ４−の還元体は１．０２％検出されたに過ぎなかった。
また、Ｔｃ−９９ｍ−ＤＴＰＡ錯体の調製１日後においては、その放射化学的純度は８８％であった。テクネチウムは水の放射線分解物により酸化還元を常時行っているが、還元されたＴｃ−９９ｍがＤＴＰＡとキレートを作ると、Ｔｃ−９９ｍ−ＤＴＰＡ中のＴｃ−９９ｍは酸化還元電位が変化して、容易に酸化されることなくＴｃ−９９ｍ−ＤＴＰＡが蓄積されたものと考えられる。
【００４１】
本発明の方法により９９ｍＴｃＯ４−を還元し、ヘキサメチレンプロピレンアミンオキシム（以下ＨＭＰＡＯ）リガンドを加えることによっても、Ｔｃ−９９ｍ還元体がリガンドに捕捉された錯体を形成できる。
【００４２】
従来のＴｃ−９９ｍ−ＨＭＤＰ錯体の調製方法は、９９ｍＴｃＯ４−溶液、リガンドであるＨＭＤＰ及び還元剤である塩化第一スズ等の試薬を添加することにより錯体を生成させものであった。これに対し、本発明の方法によると、ＨＭＤＰを予め、９９ｍＴｃＯ４−溶液に混合しておき、この溶液の入ったバイアルへ、アルゴンガスをバブリングさせ次いでガスフローを行う一段階の反応だけで、Ｔｃ−９９ｍ−ＨＭＤＰを調製できる。
【００４３】
以上のように、還元された金属イオンは、リガンドによって速やかに捕捉されるので、その結果、種々の金属錯体の生成が可能である。本発明では、リガンド添加の順の検討についても行った。Ｔｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体が生成したのちにリガンドを添加するよりも、Ｔｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体を生成させるためのガスバブリングと次いで行われるガスフロー操作の前に、予めリガンドを添加したほうが、生成した金属イオンの還元体を直ちにキレートさせることができ効率的である。尤も、試薬の添加順は、生成した錯体の収率、簡便性の他にもリガンドの性質を勘案し適宜決定されるべきである。
【００４４】
以上説明した如く、本発明によれば、溶液中の金属酸化物イオンを、還元剤を用いずに還元することが可能である。この還元方法によって得られた金属酸化物イオンの還元体を、速やかにリガンド化合物と反応させて錯体を形成することができる。あるいは、予め、リガンド化合物と金属酸化物イオンとを含む溶液を調製するだけで、還元剤を用いずに直接金属錯体を形成させることができる。このような還元方法によって得られた金属錯体は、金属性還元剤を用いた方法と異なり、還元剤由来の金属による錯体を含まない。また、還元剤が化合物に与える種々の影響、たとえば、化合物の変性、失活のみならず、医薬品分野においては毒性を考慮する必要がない。金属酸化物イオンを含む医薬品、または、金属酸化物イオンを還元して得られる金属錯体を含む医薬品においては、従来、製造過程で添加しなければならなかった還元剤を含まない新しい溶液である医薬品を提供することができ、産業上利用性大なる発明である。
【００４５】
本発明によれば、以上の方法により製造された放射性薬剤であって、ゆえに還元剤及びその分解産物を実質的に含まない新規な放射性薬剤が提供される。なお、本発明において、「還元剤及びその分解産物を実質的に含まない」とは、スズ等の還元剤を全く含まないか、または、還元剤としての有効量よりも少ない量しか含まないことを意味する。
【００４６】
かくして、本発明の他の局面によれば、還元剤を添加することなく放射線存在下にて、金属酸化物イオンを含む溶液から酸化種を除去することにより、前記金属酸化物イオンを還元することによって得られた、還元剤及びその分解産物を実質的に含まない放射性薬剤が提供される。
【００４７】
また、本発明の更に他の局面によれば、還元剤を添加することなく放射線存在下にて、錯体形成のためのリガンドおよび金属酸化物イオンを含む溶液から酸化種を除去することにより、前記金属酸化物イオンを還元するとともにリガンドと錯体を形成させることによって得られた、還元剤及びその分解産物を実質的に含まない放射性薬剤が提供される。
【００４８】
さらにまた、本発明の更に他の局面によれば、還元剤を添加することなく放射線存在下にて、金属酸化物イオンを含む溶液から酸化種を除去することにより、前記金属酸化物イオンを還元するとともに、該溶液に錯体形成のためのリガンドを含む溶液を添加することにより錯体を形成させることによって得られた、還元剤及びその分解産物を実質的に含まない放射性薬剤が提供される。
【００４９】
また、以上述べた薬剤には、還元剤以外の成分、例えば、安定剤、溶解剤、ｐＨ調製剤、防腐剤、賦形剤、乳化剤等の薬学的に許容できる調剤用薬または添加物を適宜含んでいてもよい。
また、本発明の薬剤は、例えば、注射剤等の剤形で提供することができる。
【００５０】
【実施例】
以下に、実施例を挙げて本発明を更に具体的に説明するが、本発明はこれら実施例により何ら限定されるものではない。
【００５１】
生成物の試験に用いた薄層クロマトグラフィー（以下ＴＬＣ）分析は、当業者周知の方法を使用して行った。即ち、ろ紙または薄層板に適量のサンプル液を塗布し、展開溶媒で展開したのち、放射能の分布をラジオクロマトスキャナで走査し検出された各放射能成分の割合から各々の成分の比率を求めた。
【００５２】
実施例中で用いた化合物の略号は、以下のとおりである。
Ｔｃ−９９ｍ過テクネチウム酸塩イオン溶液（９９ｍＴｃＯ４−溶液）
ヒドロキシメチレンジホスホン酸二ナトリウム（ＨＭＤＰ）
ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）
ヘキサメチレンプロピレンアミンオキシム（ＨＭＰＡＯ）
【００５３】
実施例１（Ｔｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体を生成させるための条件）
実施日１１時にＴｃ−９９ｍ過テクネチウム酸塩イオン（９９ｍＴｃＯ４−）溶液（翌日１２時において７４０ＭＢｑ／ｍＬ：なお、この濃度は、Ｔｃ−９９ｍの物理学的半減期が６．０１時間であるので、実験開始時において１０．５ＧＢｑ／ｍＬ〜１３．２ＧＢｑ／ｍＬの濃度に相当する。以下但し書がない限りこの濃度の溶液を用いる）１１０ｍＬを１０００ｍＬのボトル３本にそれぞれ加えた。以下Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ及びＥの操作をそれぞれ行った。
例（Ａ）：９９ｍＴｃＯ４−溶液を２時間静置した（１）。その後、アルゴンガスで１０分間のガスフローを行った（２）。
例（Ｂ）：９９ｍＴｃＯ４−溶液にアルゴンガスで２時間ガスフロー（３）ののち１０分間バブリングを行った（４）。
例（Ｃ）：９９ｍＴｃＯ４−溶液にアルゴンガスで１０分バブリング（５）ののち２時間ガスフローを行った（６）。
例（Ｄ）：９９ｍＴｃＯ４−溶液にアルゴンガスで２時間バブリングを行った（７）。
例（Ｅ）：実施日１１時に上記濃度のＴｃ−９９ｍ過テクネチウム酸塩イオン（９９ｍＴｃＯ４−）溶液１１０ｍＬを２５０ｍＬのボトルに入れた。９９ｍＴｃＯ４−溶液にアルゴンガスで３時間ガスフローを行った（８）。
アルゴンガスの流速は全ての例において１Ｌ／ｍｉｎで行った。
以上の操作を各々行った後の各段階（（１）から（８））の溶液中の９９ｍＴｃＯ４−の放射化学的純度をＴＬＣ分析により求めた。すなわち、サンプリングした溶液を薄層板Ｇ６０（Ｍｅｒｃｋ製）上に塗布し、メチルエチルケトンを展開溶媒として用い展開し、その放射能分布を当業者の通常用いる検出方法、即ち、ラジオクロマトスキャナで走査し検出することにより、９９ｍＴｃＯ４−の放射化学的純度を求めた。その分析結果を表１に示す。
【００５４】
【表１】
2004121912.tif 000002
【００５５】
種々のガスを通す方法を比べた表１の結果より、例（Ａ）の（１）、（１）＋（２）、及び（Ｂ）の（３）、（３）＋（４）、（Ｃ）の（５）の操作を行っても、９９ｍＴｃＯ４−の純度に変化はなかった。一方、例（Ｃ）では、１０分間のバブリングの後、２時間のアルゴンガスフローを行うこと（（５）＋（６））により、９９ｍＴｃＯ４−の純度は８０．５％に低下し、Ｔｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体１９．５％の生成が認められた。また、アルゴンガスフローを３時間行うだけでも７．９％のＴｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体が生成した。アルゴンガスバブリングを２時間行うことによっても、０．１％の若干のＴｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体が認められた。以上の結果より、種々の条件の組み合わせの中でも、先ずバブリングを行い、その後、アルゴンガスフローを行う操作の組み合わせが、最も好ましい条件であることが認められた。
【００５６】
実施例２（還元体成分の肝臓集積性）
９９ｍＴｃＯ４−溶液１１０ｍＬにアルゴンガスを流速ｌＬ／ｍｉｎで１０分間バブリングし、さらに２時間ガスフローさせ、この溶液の２ｍＬをサンプリングした。この溶液を密封し翌日まで室温で保存し、２ｍＬをサンプリングした。ガスフロー後及び翌日のそれぞれの時点でサンプリングした試料の放射化学的純度についてＴＬＣ分析を行った。ＴＬＣ系：ＴＬＣプレート　シリカゲルＧ６０（Ｍｅｒｃｋ製）、展開溶媒　メチルエチルケトン。分析結果を表２に示す。
【００５７】
また、この試料の適量をラットに投与し、体内分布実験を行った。体内分布実験は、当業者の行う通常の方法で行った。即ち、試料の０．２ｍＬを非絶食下のＳＤラットにラボナール麻酔下尾静脈に投与し、投与２時間後にラットを腹部大動脈より放血し屠殺し、各臓器を摘出しそれぞれの臓器の放射能カウント及び重量を測定し、体内分布を算出した。各臓器の放射能の割合を、臓器あたりの値である％投与量／臓器（以下％ＩＤ／臓器とする。ＩＤ：ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ　Ｄｏｓｅ）、またはグラムあたりの値である％投与量／ｇ臓器（以下％ＩＤ／ｇ臓器）で表した。体内分布の結果を表３に示す。
【００５８】
【表２】
2004121912.tif 000003
【００５９】
【表３】
2004121912.tif 000004
【００６０】
表２から、ガスフロー後に２６．６％のＴｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体が検出されたが、密封し翌日まで室温で放置すると、ほとんど９９ｍＴｃＯ４−に変化していることから、この還元は可逆的であることが確認された。ガスフロー後と翌日の溶液を試料として、ラットに投与し体内分布の実験を行うと、ガスフロー後のサンプルでは、表３のように２５．３２％ＩＤ／臓器の肝集積が認められた。また、翌日の試料を用いて体内分布実験を行うと、肝臓への集積はみられなかった。その体内分布の様相は、９９ｍＴｃＯ４−溶液を投与したときの体内分布の代表的な様相、即ち、胃への集積性等が認められた。このように、アルゴンガスバブリング及びガスフローの処理を通して還元体を生成させたものを１日放置することで、Ｔｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体が減少し、９９ｍＴｃＯ４−に戻っていることが、ＴＬＣ分析の結果からも、ラット体内分布実験結果からも確認された。また、表３の結果より、Ｔｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体は投与後２時間でそのほとんどが肝臓へ集積する化合物であることも確認された。
【００６１】
実施例３（還元に用いるガスの種類の検討）
９９ｍＴｃＯ４−溶液約５６ｍＬを１０００ｍＬボトルに加え、ボトル内を流速１Ｌ／ｍｉｎのアルゴンガスで１０分間バブリングし、次いで２時間アルゴンガスフローし、終了後２ｍＬをサンプリングし、サンプリング直後とその３時間後にＴＬＣ分析を行った。ＴＬＣ系：ＴＬＣプレート　シリカゲルＧ６０（Ｍｅｒｃｋ製）、展開溶媒　メチルエチルケトン。
また、以上の操作を、アルゴンガスを用いるかわりに窒素ガスを用いて同様に行い、同様にＴＬＣ分析を行った。
これらの両操作の結果得られた９９ｍＴｃＯ４−の放射化学的純度を表４に示した。
【００６２】
【表４】
2004121912.tif 000005
【００６３】
表４より、アルゴンガスまたは窒素ガスを用いたいずれの方法においても９９ｍＴｃＯ４−の放射化学的純度が低下した。即ち、窒素ガスバブリング１０分、次いで窒素ガスフローを２時間行っても、アルゴンガスを用いた場合よりも低いが、Ｔｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体が生成した。
【００６４】
実施例４（処理時間による変化）
２５０ｍＬボトルに９９ｍＴｃＯ４−溶液１１０ｍＬを加えた。このボトルに流速を１Ｌ／ｍｉｎに設定したアルゴンガスを１０分間バブリングし、次いでアルゴンガスフローを行った。アルゴンガスバブリング開始前、アルゴンガスフロー開始前、アルゴンガスフロー開始後１０分、３０分、１時間、２時間、４時間、６時間、８時間及び２５．５時間の時点でこの溶液から分析用試料をサンプリングし、各時点での放射化学的純度の変化をＴＬＣで分析した。ＴＬＣ系：ＴＬＣプレート　シリカゲルＧ６０（Ｍｅｒｃｋ製）、展開溶媒　メチルエチルケトン。
アルゴンガスバブリング、次いで行ったガスフローの各時間点における放射化学的成分の変化を表５に示した。
【００６５】
【表５】
2004121912.tif 000006
【００６６】
表５より、アルゴンガスフロー開始後２時間から４時間にかけてＴｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体は急速に増加し、６時間の時点で最も高い割合で存在した。４時間から８時間まではガスフローを続けることによりＴｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体はやや減少した。２５．５時間のアルゴンガスフロー工程の後、空気を１０分間ほどバブリングさせると約５％のＴｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体が減少し、９９ｍＴｃＯ４−に戻ることが確認された。
【００６７】
実施例５（ろ過実験）
２５０ｍＬボトルに９９ｍＴｃＯ４−溶液１１０ｍＬを加えた。このボトルに流速を１Ｌ／ｍｉｎに設定したアルゴンガスを１０分間バブリングし、次いでアルゴンガスフローを行った。アルゴンガスフローは開始６時間以降から０．５Ｌ／ｍｉｎにした。アルゴンガスバブリング開始前、アルゴンガスフロー開始前、アルゴンガスフロー開始後１時間、２時間、４時間、６時間、２４時間及び７２時間の時点でこの溶液から分析用試料をサンプリングし、各時点での放射化学的純度の変化をＴＬＣで分析した。結果を表６に示す。また、７２時間後にこの溶液を０．１μｍフィルター（ポリカーボネイト製、孔径０．１μｍ、フィルター径３ｍｍ、Ｗｈａｔｍａｎ製Ｎｕｃｌｅｏｐｏｒｅ）でろ過し、ろ過前後の放射能濃度及び放射化学的純度をＴＬＣで分析した。結果を表７に示す。ＴＬＣ系：ＴＬＣプレート　シリカゲルＧ６０（Ｍｅｒｃｋ製）、展開溶媒　メチルエチルケトン。
【００６８】
【表６】
2004121912.tif 000007
【００６９】
【表７】
2004121912.tif 000008
【００７０】
表６より、アルゴンガスフロー後１時間から２時間にかけて、Ｔｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体の生成が急速に増加した。アルゴンガスフロー後４時間がＴｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体の生成量が最高値を示した。このように、アルゴンガスフローを継続させることによって、長時間にわたりＴｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体を存在させることができた。
このＴｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体は、０．１μｍのフィルターでろ過することにより除去された。したがって、Ｔｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体は０．１μｍ以上の粒子径を有している。また、表７より、ろ過工程により放射能濃度の低下率は５０％であり、ろ液の成分は全て９９ｍＴｃＯ４−であるから、ろ過工程により除去されたのはＴｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体であるといえる。また、バブリング７２時間点で生成していた６２．３％のＴｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体のうち約１０％程度が、Ｔｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体から逆反応により９９ｍＴｃＯ４−に変化したといえる。
【００７１】
実施例６
１５ｍＬバイアルに９９ｍＴｃＯ４−溶液（検定日時において１４８０ＭＢｑ／ｍＬ）３ｍＬを入れ、流速０．５Ｌ／ｍｉｎでアルゴンガスを１０分間バブリングし、その後アルゴンガスフローを行った。アルゴンガスフロー開始後２時間、４時間及び６時間の時点で溶液をサンプリングし、ＴＬＣ分析により９９ｍＴｃＯ４−の純度及びＴｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体の割合を求めた。ＴＬＣ系（９９ｍＴｃＯ４−の分析系）：ＴＬＣプレート　シリカゲルＧ６０（Ｍｅｒｃｋ製）、展開溶媒　メチルエチルケトン。その結果を表８に示す（表８＊１参照）。
４本の２５０ｍＬボトルに、９９ｍＴｃＯ４−溶液をそれぞれ１０ｍＬ、２０ｍＬ、４０ｍＬ及び６０ｍｌ入れた。各々のボトルに流速１Ｌ／ｍｉｎでアルゴンガスを１０分間バブリングし、アルゴンガスフローを行った。上記と同様にして、ＴＬＣ分析により９９ｍＴｃＯ４−の純度及びＴｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体の割合を求めた。その結果を表８に示す（表８＊２参照）。
３本の１０００ｍＬボトルに、９９ｍＴｃＯ４−溶液をそれぞれ１１０ｍＬ、３００ｍＬ及び４５０ｍＬ入れた。各々のボトルに流速１Ｌ／ｍｉｎでアルゴンガスを１０分間バブリングし、アルゴンガスフローを行った。上記と同様にして、ＴＬＣ分析により９９ｍＴｃＯ４−の純度及びＴｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体の割合を求めた。その結果を表８に示す（表８＊３参照）。
【００７２】
【表８】
2004121912.tif 000009
【００７３】
表８より、各ボトルともアルゴンガスフローの時間経過とともに、Ｔｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体が生成してゆく様相が認められた。小分け量４５０ｍＬのボトルのサンプルではアルゴンガスフロー２時間から４時間にかけて、Ｔｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体が急速に増加し、ガスフロー６時間後においてＴｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体の割合が９８％を示した。
【００７４】
実施例７
２５０ｍＬのボトルに９９ｍＴｃＯ４−溶液５５ｍＬを加え、それぞれ０μＬ／ｍＬ、３２．２μＬ／ｍＬ、３２２μＬ／ｍＬ及び３２２０μＬ／ｍＬの濃度でエタノールを含む生理食塩液を１ｍＬ添加した。この溶液から１ｍＬをサンプリングし、ＴＬＣにより放射化学的純度試験を行った。次に、アルゴンガスを１０分間バブリングし、次いで２時間ガスフローを行った。この１ｍＬをサンプリングしＴＬＣ分析により放射化学的純度試験を行った。ＴＬＣ分析系：ＴＬＣプレート　シリカゲルＧ６０（Ｍｅｒｃｋ製）、展開溶媒　メチルエチルケトン。
各時点でのＴＬＣ分析結果を表９に示す。
【００７５】
【表９】
2004121912.tif 000010
【００７６】
表９の結果より、微量のエタノールの添加によって、アルゴンバブリングとガスフロー処理後の９９ｍＴｃＯ４−還元体生成量は非添加サンプルより増加しており、エタノールも水の放射線分解産物の酸化種を除去する役割を持つといえる。
【００７７】
実施例８（ＤＴＰＡによるＴｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体の捕捉によるＴｃ−９９ｍ−ＤＴＰＡ錯体の生成−実験（１））
ｐＨ４．５に調整されたＤＴＰＡ溶液１０ｍＬ（ＤＴＰＡ２５０ｍｇ含有）を２５０ｍＬボトルに入れ、その後、９９ｍＴｃＯ４−溶液１１０ｍＬを加えた。流速１Ｌ／ｍｉｎでアルゴンガスバブリング１０分間、次いでガスフローを２時間行った。この溶液をＴＬＣ分析した結果を表１０に示す。表１０に示されるとおり、Ｔｃ−９９ｍ−ＤＴＰＡ生成量は７５％であった。
【００７８】
実施例９（ＤＴＰＡによるＴｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体の捕捉によるＴｃ−９９ｍ−ＤＴＰＡ錯体の生成−実験（２））
ｐＨ４．５に調整されたＤＴＰＡ溶液４．６ｍＬ（ＤＴＰＡ２５０ｍｇ含有）を２５０ｍＬボトルにいれ、９９ｍＴｃＯ４−溶液１１０ｍＬを加えた。この９９ｍＴｃＯ４−溶液にアルゴンを流速１Ｌ／ｍｉｎで１０分間バブリング後、次いでアルゴンを２時間ガスフローし、２ｍＬをサンプリングした。残りの９９ｍＴｃＯ４−溶液を室温放置し、翌日に２ｍＬをサンプリングし、ＴＬＣ分析を行った。ＴＬＣ系（Ｔｃ−９９ｍ−ＤＴＰＡの分析系）：ろ紙５１Ｂ、展開溶媒　５０％アセトン。各時間点での分析結果を表１０に示す。表１０に示されるとおり、ガスフロー後６２．３％のＴｃ−９９ｍ−ＤＴＰＡが生成していることが認められ、翌日まで放置することにより、その割合は８８．４％まで増加した。
【００７９】
【表１０】
2004121912.tif 000011
【００８０】
実施例１０（ＨＭＰＡＯによるＴｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体の捕捉）
２５０ｍＬボトルに５５ｍｇのＨＭＰＡＯ粉末を入れ、９９ｍＴｃＯ４−溶液１１０ｍＬを加えた。この９９ｍＴｃＯ４−溶液に流速１Ｌ／ｍｉｎで１０分間アルゴンガスをバブリング後、アルゴンを２時間ガスフローし、２ｍＬをサンプリングした。残りの９９ｍＴｃＯ４−溶液を室温放置し、翌日に２ｍＬをサンプリングし、ＴＬＣ分析を行った。
なお、Ｔｃ−９９ｍＨＭＰＡＯの分析は以下（ａ）および（ｂ）の２系で行った。
薄層クロマトグラフィー（ａ）：ＩＴＬＣ、展開溶媒　生理食塩液、
ろ紙クロマトグラフィー（ｂ）：ろ紙　５１Ｂ、展開溶媒　５０％アセトニトリル。
分析結果を表１１に示した。
【００８１】
【表１１】
2004121912.tif 000012
【００８２】
表１１の２系の分析結果からＴｃ−９９ｍ−ＨＭＰＡＯ等各成分の割合を計算し、表１２に示した。ＨＭＰＡＯ錯体の割合の求め方は以下のとおりである。
Ａ％：９９ｍＴｃＯ４−；試験系ａ（溶媒先端付近）
Ｂ％：Ｔｃ−９９ｍ還元水解物；試験系ｂ（ＴＬＣ原点付近）
Ｃ％：Ｔｃ−９９ｍ−ＨＭＰＡＯ錯体；１００−（Ａ％＋Ｂ％）
【００８３】
【表１２】
2004121912.tif 000013
【００８４】
表１２より、Ｔｃ−９９ｍ−ＨＭＰＡＯ錯体の割合は、アルゴンガスフロー直後では、５８．３％、翌日は７８．０％と計算された。また、アルゴンガスフロー後では９９ｍＴｃＯ４−が１５．７％存在したのに対し、翌日には３．１％となり、９９ｍＴｃＯ４−以外の成分としての９６．９％は、９９ｍＴｃＯ４−が還元されたもので、錯体あるいは分解物として検出された。
【００８５】
実施例１１（Ｔｃ−９９ｍ−ＨＭＤＰ錯体生成）
０．８ｍｇのＨＭＤＰの入ったバイアルへ、９９ｍＴｃＯ４−溶液（検定日時において１４８０ＭＢｑ／ｍＬ）約３ｍＬを加えた。アルゴンガスを流速０．５Ｌ／ｍｉｎで１０分間バブリングし、ＴＬＣ分析を行った。分析の後、アルゴンガスフローを流量０．５Ｌ／ｍｉｎで行った。ガスフロー開始後３．５時間、５時間、８時間及び２４時間後にＴＬＣ分析試験を行った。
ＴＬＣ系（９９ｍＴｃＯ４−の分析系）：ＴＬＣプレートシリカゲル、展開溶媒　メチルエチルケトン。
ＴＬＣ系（Ｔｃ−９９ｍ−ＨＭＤＰの分析系）：薄層板　Ｋ２セルロース、展開溶媒　１０Ｍ尿素：２Ｍ塩化アンモニウム：酢酸＝４９：４９：２。
各時間点でのＴＬＣ分析結果を表１３に示した。
【００８６】
【表１３】
2004121912.tif 000014
＊９９ｍＴｃＯ４−と９９ｍＴｃ−ＨＭＤＰの分離計測不能のため、紙重量で比率を求めた。
＊＊２系からの計算値：ＨＭＤＰ分析系では９９ｍＴｃＯ４−と９９ｍＴｃ−ＨＭＤＰを分けて計測できないので、ＨＭＤＰ分析系でのピークから９９ｍＴｃＯ４−分析系での９９ｍＴｃＯ４−の値を引いたものを９９ｍＴｃ−ＨＭＤＰの割合として求めた。
【００８７】
表１３より、バブリング前の９９ｍＴｃＯ４−の放射化学的純度は１００％であった。９９ｍＴｃＯ４−とＴｃ−９９ｍ―ＨＭＤＰの比率から、アルゴンを１０分間バブリングさせただけで、Ｔｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体とＴｃ−９９ｍ−ＨＭＤＰの生成が認められた。
３．５時間後では９３．０％の９９ｍＴｃＯ４−が還元されていたといえる。また、ガスフロー８時間後では９９ｍＴｃＯ４−は４．１％と最も低く、９９ｍＴｃＯ４−はほとんど還元されている状態であった。この還元された９９ｍＴｃＯ４−はＨＭＤＰにトラップされ、Ｔｃ−９９ｍ−ＨＭＤＰを生成していることが確認された。表１３の２系の分析系から計算されたＴｃ−９９ｍ−ＨＭＤＰの生成量はガスフロー３．５時間後から８時間にかけてほぼ一定で７１％以上の割合で存在した。
以上のように、ガスフローの処理を行い還元した後は、さらにガスフローを継続することにより、その時間を通してほぼ一定で７１％以上の割合でＴｃ−９９ｍ−ＨＭＤＰを生成させることができた。
【００８８】
実施例１２（２段階ＨＭＤＰ調製法）
９９ｍＴｃＯ４−溶液１１０ｍＬを２５０ｍＬボトルに加え、ボトル内を流速１Ｌ／ｍｉｎに設定したアルゴンガスで１０分間バブリングし、次いで２時間アルゴンガスフローした。その後アルゴンガスフローを予め行ったＨＭＤＰ溶液（５９．８４ｍｇを注射用水１１０ｍＬに溶解した。ｐＨは５．５）を添加し、１分間アルゴンガスをバブリングした。この溶液をサンプリングし分析した後、翌日まで保存し、再度サンプリングして分析を行った。
Ｔｃ−９９ｍ−ＨＭＤＰ錯体その他の成分の割合を表１４に示した。
【００８９】
【表１４】
2004121912.tif 000015
【００９０】
表１４の結果より、アルゴンガス処理でのＴｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体の生成は２１．６％であった。次いで行われたＨＭＤＰとの錯体生成反応によって生成したＴｃ−９９ｍ−ＨＭＤＰの割合は１３．２％であった。９９ｍＴｃＯ４−の割合は２７．３％であり、それ以外の成分即ち原点成分はコロイド状化合物と考えられる。
Ｔｃ−９９ｍ−ＨＭＤＰ錯体の生成においては、還元体２１．６％がＨＭＤＰに捕捉されるものと、次いでコロイド状化合物として生成されるものとがあるといえる。したがって、実施例１１と実施例１２とを比較すると、一旦、アルゴンガス処理によりＴｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体を生成させてからリガンドを添加する２段階の操作を行うよりも、アルゴンバブリング開始時にリガンドを予め添加しておくほうが、アルゴンガス処理中に生成したＴｃ−９９ｍ過テクネチウム酸還元体を速やかに捕捉することができ、錯体の収率も良好である。
【００９１】
【発明の効果】
以上説明した如く、本発明によれば、溶液中の金属酸化物イオンを、還元剤を用いずに、還元体に変換することが可能である。また、この還元方法によって得られた金属酸化物イオンの還元体を速やかにリガンド化合物と反応させて錯体を形成することができる。あるいは、予め、リガンド化合物と金属酸化物イオンとを含む溶液を調製するだけで、還元剤を用いずに直接金属錯体を形成させることができる。このような還元方法は、還元剤による種々の化学的影響を考慮に入れることなく、目的の金属還元体や金属錯体化合物を得ることができ、特に放射性金属の酸化物イオンから放射性金属錯体を得る放射性医薬品の製造には最適であり、産業上利用性大なる発明である。