(57)【要約】【課題】極性・分子量の異なる種々の試料に対して、当該試料中のカルボニル含有量の指標値を安全かつ容易に求めることができ、カルボニル含有量の少ない試料であっても、当該指標値を適正に求めることができるカルボニル含有量の指標化方法（カルボニル価の測定方法）を提供することにある。【解決手段】本発明のカルボニル含有量の指標化方法は、試料中のカルボニル類と、２，４−ジニトロフェニルヒドラジンとを反応させて得られる反応溶液を分析して、当該試料中のカルボニル含有量の指標値を求める方法であって、前記反応の反応溶媒として、アルデヒド・ケトンの総量が３ｐｐｍ以下のアルコールを使用することを特徴とする。【選択図】　　なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
試料中のカルボニル類と、２，４−ジニトロフェニルヒドラジンとを反応させて得られる反応溶液を分析することにより、当該試料中のカルボニル含有量を指標化する方法であって、
前記反応の反応溶媒として、アルデヒド・ケトンの総量が３ｐｐｍ以下のアルコールを使用することを特徴とするカルボニル含有量の指標化方法。
【請求項２】
試料中のカルボニル類と、２，４−ジニトロフェニルヒドラジンとを反応させて得られる反応溶液の吸光度から、当該試料のカルボニル価を求める方法であって、
前記反応の反応溶媒として、アルデヒド・ケトンの総量が３ｐｐｍ以下のアルコールを使用するとともに、希釈溶媒としてアルコールを使用することを特徴とするカルボニル価の測定方法。
【請求項３】
前記反応の反応溶媒として、アルデヒド・ケトンの総量が３ｐｐｍ以下のアルコールと、水とを使用することを特徴とする請求項２に記載のカルボニル価の測定方法。
【請求項４】
下記の工程（１）〜（９）により測定される吸光度（Ａ１　）および吸光度（Ａ２　）を、数式：ＣＶ＝（Ａ１　−Ａ２　）／Ｂ〔但し、Ｂは、試料溶液５．０００ｇ中に含まれる試料の質量（ｇ）である。〕に代入してカルボニル価（ＣＶ）を求める方法であって、
下記の工程（１）、（７）および（９）で使用する後記溶媒が、アルデヒド・ケトンの総量が３ｐｐｍ以下のアルコールを含有することを特徴とする請求項２に記載のカルボニル価の測定方法。
〔工程〕
（１）試料を溶媒に溶解して試料溶液を調製する工程。
（２）前記試料溶液５．０００ｇに、トリクロロ酢酸のアルコール溶液〔４．３０％（ｗｔ／ｖｏｌ）〕３ｍＬを添加する工程。
（３）上記の工程（２）により得られた混合溶液に、２，４−ジニトロフェニルヒドラジンのアルコール溶液〔０．０２５％（ｗｔ／ｖｏｌ）〕５ｍＬを添加する工程。
（４）上記の工程（３）により得られた混合溶液を６０℃で３０分間加熱して、試料中のカルボニル類と２，４−ジニトロフェニルヒドラジンとを反応させる工程。
（５）上記の工程（４）により得られた反応溶液を室温で３０〜７０分間放置する工程。
（６）上記の工程（５）により放置された後の反応溶液に、水酸化カリウムのアルコール溶液〔４．０％（ｗｔ／ｖｏｌ）〕１０ｍＬを添加する工程。
（７）上記の工程（６）から５〜１０分経過後、当該反応溶液に溶媒を添加し、総量が５０ｍＬの反応溶液を調製する工程。
（８）上記の工程（６）から１０〜２０分経過後、上記の工程（７）で得られた反応溶液について、４３０ｎｍまたは４６０ｎｍの吸光度（Ａ１　）を測定する工程。
（９）空試験として、前記試料溶液に代えて溶媒５．０００ｇを使用し、上記の工程（２）〜（７）と同様の操作を行って得られた溶液について、４３０ｎｍまたは４６０ｎｍの吸光度（Ａ２　）を測定する工程。
【請求項５】
請求項４に記載のカルボニル価の測定方法において、
上記の工程（２）で添加するトリクロロ酢酸のアルコール溶液、上記の工程（３）で添加する２，４−ジニトロフェニルヒドラジンのアルコール溶液、上記の工程（６）で添加する水酸化カリウムのアルコール溶液の各々の溶媒であるアルコールが、アルデヒド・ケトンの総量が３ｐｐｍ以下のアルコールであることを特徴とするカルボニル価の測定方法。
【請求項６】
試料中のカルボニル濃度を測定する方法であって、
請求項２乃至請求項５の何れかに記載の方法によって、カルボニル濃度が既知である標準試料についてのカルボニル価を測定して検量線を得る工程と、
この検量線を得るために採用した方法と同一の方法によって、試料についてのカルボニル価を測定し、このカルボニル価および前記検量線から、当該試料中のカルボニル濃度を測定する工程とを含むことを特徴とするカルボニル濃度の測定方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、カルボニル含有量の指標化方法、カルボニル価の測定方法、およびカルボニル濃度の測定方法に関し、更に詳しくは、試料中のカルボニル類と、２，４−ジニトロフェニルヒドラジンとを反応させて得られる反応溶液を分析することによりカルボニル含有量を指標化する方法；試料中のカルボニル類と、２，４−ジニトロフェニルヒドラジンとを反応させて得られる反応溶液の吸光度からカルボニル価を求める測定方法；このような測定方法によって濃度既知の標準試料についてのカルボニル価を測定して検量線を得る工程を含むカルボニル濃度の測定方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
従来、試料中のカルボニル含有量を指標化する方法として、当該試料中のカルボニル類と、２，４−ジニトロフェニルヒドラジンとを反応させてなる反応溶液の吸光度からカルボニル価を測定する方法が知られている（例えば、非特許文献１参照）。この試験法にあっては、反応溶媒として、酸化されにくく安定性の良好なベンゼンを使用することが規定されている。
【０００３】
【非特許文献１】
基準油脂分析試験法（２．５．４−１９９６　カルボニル価）
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
しかしながら、反応溶媒として使用されるベンゼンは、人体に対する有害性が大きい。
このため、労働安全衛生法などの定めに従って、試料溶液および試薬の調製・２，４−ジニトロフェニルヒドラジンと、試料中のカルボニル類との反応（加熱操作）・反応溶液の吸光度測定の各操作は、局所排気装置を稼動させた状態の囲い式フード内で、保護具および保護メガネを着用した熟練の測定者が細心の注意を払って行う必要がある。
このように、上記の試験法は、誰もが安全かつ容易に測定ができるという方法ではなく、現実的にはきわめて利用し難いものであった。
【０００５】
また、試料の分子量や極性によっては、当該試料をベンゼンが溶解することができず、従って、当該試料についてはカルボニル価を測定することができない。
例えば、１，３−ブチレングリコールなどの極性の高い物質は、ベンゼンに不溶であるために、ベンゼンを溶媒とする試料溶液を調製することができず、当該物質については、カルボニル価を測定することができない。
【０００６】
このような事情から、本発明者らは、反応溶媒として、有害性が少なくて溶解性の良好なアルコールを使用することの可能性について鋭意検討を行った。
しかしながら、試薬特級エタノールのような比較的純度の高いアルコールであっても、微量（５〜１５ｐｐｍ程度）のアルデヒド・ケトンを不純物として含有している。そして、そのようなアルコールを反応溶媒として使用すると、当該アルコール中のアルデヒド・ケトンが２，４−ジニトロフェニルヒドラジンと反応する結果、試料のカルボニル価を適正に測定することができず、また、カルボニル含有量の少ない試料については、反応溶液の吸光度が空試験の吸光度より小さくなってカルボニル価を測定することができない。
【０００７】
本発明は以上のような事情に基いてなされたものである。
本発明の第１の目的は、極性・分子量の異なる種々の試料に対して、当該試料中のカルボニル含有量を安全かつ容易に指標化することができ、カルボニル含有量の少ない試料であっても、当該指標化を適正に行うことができるカルボニル含有量の指標化方法を提供することにある。
本発明の第２の目的は、極性・分子量の異なる種々の試料に対して、当該試料のカルボニル価を安全かつ容易に測定することができ、カルボニル含有量の少ない試料であっても、カルボニル価を適正（高精度）に求めることができるカルボニル価の測定方法を提供することにある。
本発明の第３の目的は、基準油脂分析試験法（２．５．４−１９９６　カルボニル価）と同様の手順で、しかも、安全かつ容易にカルボニル価を測定することができる測定方法を提供することにある。
本発明の第４の目的は、極性・分子量の異なる種々の試料に対して、当該試料中のカルボニル濃度を安全かつ容易に測定することができ、カルボニル含有量の少ない試料であっても、カルボニル濃度を適正（高精度）に求めることができるカルボニル濃度の測定方法を提供することにある。
【０００８】
【課題を解決するための手段】
請求項１に係るカルボニル含有量の指標化方法は、試料中のカルボニル類と、２，４−ジニトロフェニルヒドラジン（以下、「２，４−ＤＮＰＨ」と略記する。）とを反応させて得られる反応溶液を分析することにより、当該試料中のカルボニル含有量を指標化する方法であって、前記反応の反応溶媒として、アルデヒド・ケトンの総量が３ｐｐｍ以下のアルコール（以下、「超高純度アルコール」ともいう。）を使用することを特徴とする。
【０００９】
請求項２に係るカルボニル価の測定方法は、試料中のカルボニル類と、２，４−ＤＮＰＨとを反応させて得られる反応溶液の吸光度から、当該試料のカルボニル価を求める方法であって、前記反応の反応溶媒として超高純度アルコールを使用するとともに、希釈溶媒としてアルコールを使用することを特徴とする。
【００１０】
請求項３に係るカルボニル価の測定方法は、前記反応の反応溶媒として、超高純度アルコールと、水とを使用することを特徴とする。
【００１１】
請求項４に係るカルボニル価の測定方法は、下記の工程（１）〜（９）により測定される吸光度（Ａ１　）および吸光度（Ａ２　）を、数式：ＣＶ＝（Ａ１　−Ａ２　）／Ｂ〔但し、Ｂは、試料溶液５．０００ｇ中に含まれる試料の質量（ｇ）である。〕に代入してカルボニル価（ＣＶ）を求める方法であって、下記の工程（１）、（７）および（９）で使用する後記溶媒が超高純度アルコールを含有することを特徴とする。
【００１２】
〔工程〕
（１）試料を溶媒に溶解して試料溶液を調製する工程。
（２）前記試料溶液５．０００ｇに、トリクロロ酢酸のアルコール溶液〔４．３０％（ｗｔ／ｖｏｌ）〕３ｍＬを添加する工程。
（３）上記の工程（２）により得られた混合溶液に、２，４−ＤＮＰＨのアルコール溶液〔０．０２５％（ｗｔ／ｖｏｌ）〕５ｍＬを添加する工程。
（４）上記の工程（３）により得られた混合溶液を６０℃で３０分間加熱して、試料中のカルボニル類と２，４−ＤＮＰＨとを反応させる工程。
（５）上記の工程（４）により得られた反応溶液を室温で３０〜７０分間放置する工程。
（６）上記の工程（５）により放置された後の反応溶液に、水酸化カリウムのアルコール溶液〔４．０％（ｗｔ／ｖｏｌ）〕１０ｍＬを添加する工程。
（７）上記の工程（６）から５〜１０分経過後、当該反応溶液に溶媒（希釈溶媒）を添加し、総量が５０ｍＬの反応溶液を調製する工程。
（８）上記の工程（６）から１０〜２０分経過後、上記の工程（７）で得られた反応溶液について、４３０ｎｍまたは４６０ｎｍの吸光度（Ａ１　）を測定する工程。
（９）空試験として、前記試料溶液に代えて溶媒５．０００ｇを使用し、上記の工程（２）〜（７）と同様の操作を行って得られた溶液について、４３０ｎｍまたは４６０ｎｍの吸光度（Ａ２　）を測定する工程。
【００１３】
なお、「％（ｗｔ／ｖｏｌ）」は、溶媒の単位容量あたりの溶質の質量の単位を意味し、「％（ｗｔ／ｖｏｌ）」の単位で示される数値は、溶媒１００ｍＬに溶解されている溶質のグラム数と一致する。
【００１４】
請求項５に係るカルボニル価の測定方法は、請求項４に記載のカルボニル価の測定方法において、上記の工程（２）で添加するトリクロロ酢酸のアルコール溶液、上記の工程（３）で添加する２，４−ＤＮＰＨのアルコール溶液、上記の工程（６）で添加する水酸化カリウムのアルコール溶液の各々を構成する溶媒（アルコール）が超高純度アルコールであることを特徴とする。
【００１５】
請求項６に係るカルボニル価の測定方法は、試料中のカルボニル濃度を測定する方法であって、本発明の測定方法によって、カルボニル濃度が既知である標準試料についてのカルボニル価を測定して検量線を得る工程と、この検量線を得るために採用した方法と同一の方法によって、試料（カルボニル濃度が未知）についてのカルボニル価を測定し、このカルボニル価および前記検量線から、当該試料中のカルボニル濃度を測定する工程とを含むことを特徴とする。
【００１６】
【作用】
（１）カルボニル含有量の指標化方法において、超高純度アルコールを反応溶媒として使用することにより、カルボニル含有量を指標化するための各操作を、安全かつ容易に行うことができる。また、極性・分子量の異なる種々の試料について、カルボニル含有量を指標化することが可能になる。さらに、カルボニル含有量が少ない試料についても、その指標化を適正に行うことが可能となる。
【００１７】
（２）カルボニル価の測定方法において、反応溶媒として超高純度アルコールを使用するとともに、希釈溶媒としてアルコールを使用することにより、カルボニル価を求めるための各操作を、安全かつ容易に行うことができる。また、極性・分子量の異なる種々の試料について、カルボニル価を求めることが可能になる。さらに、カルボニル含有量が少ない試料についてもカルボニル価を適正に求めることが可能となる。
【００１８】
（３）カルボニル価の測定方法において、反応溶媒として、超高純度アルコールとともに水を使用することにより、アルデヒド重合物を含む試料についてのカルボニル価を高い精度で求めることができる。
【００１９】
【発明の実施の形態】
以下、本発明について詳細に説明する。
＜カルボニル含有量の指標化方法＞
本発明のカルボニル含有量の指標化方法は、試料中に含まれるカルボニル類と、２，４−ＤＮＰＨとを反応させて得られる反応溶液を分析することにより、当該試料中のカルボニル含有量を指標化する方法である。
ここに、「カルボニル含有量を指標化する方法」には、（ｉ）試料中に含まれるカルボニル類（アルデヒド・ケトン）の含有量と対応する数値（以下、「指標値」という。）を求める方法、（ｉｉ）試料中に含まれるカルボニル類の含有量の目安をつける方法（数値化されていなくてもよい。）が含まれる。
【００２０】
また、反応溶液の「分析」には、反応溶液の吸光度を測定する吸光光度分析、高速液体クロマトグラフィーなどを利用する分離分析などを挙げることができる。これらの分析により、カルボニル含有量の「指標値」を得ること（上記（ｉ）の指標化）ができる。
さらに、反応溶液の「分析」には目視による観察も含まれる。例えば、カルボニル含有量がそれぞれ異なる複数の標準試料について、反応溶液の外観（色調）を目視により観察するとともに、試料（カルボニル含有量が未知）に係る反応溶液の外観を観察し、当該試料の外観が、何れの標準試料に係る反応溶液の外観と近似しているかを対比観察することにより、当該試料のカルボニル含有量の目安を得ること（上記（ｉｉ）の指標化）ができる。
【００２１】
＜カルボニル価の測定方法＞
本発明のカルボニル価の測定方法は、試料中のカルボニル類と、２，４−ＤＮＰＨとを反応させて得られる反応溶液の吸光度から、当該試料のカルボニル価を求める方法である。
【００２２】
ここに、「カルボニル価」とは、カルボニル含有量の指標値であって、２，４−ＤＮＰＨを試料に反応させてなる反応溶液の吸光度（４３０ｎｍまたは４６０ｎｍの吸光度）を試料１ｇあたりに換算することにより求められる値をいう。
カルボニル類（アルデヒドおよび／またはケトン）の濃度（含有割合）が既知である標準試料についてのカルボニル価を測定して検量線を得ることにより、種々の試料（濃度未知試料）についてカルボニル類の濃度を測定することができる。
【００２３】
本発明のカルボニル価の測定方法は、酸の存在下にカルボニル類と２，４−ＤＮＰＨとを反応させて生成されたヒドラゾンが、塩基性でキノイドイオンとなって発色する性質を利用するものであり、発色の程度を示す４３０ｎｍ（その近傍に飽和カルボニルに由来の極大波長がある）または４６０ｎｍ（その近傍に不飽和カルボニルに由来の極大波長がある）の吸光度から、カルボニル含有量の指標値であるカルボニル価を求めるものである。
【００２４】
＜反応溶媒／希釈溶媒＞
本発明のカルボニル含有量の指標化方法は、反応溶媒として超高純度アルコールを使用する点に特徴を有する。
また、本発明のカルボニル価の測定方法は、反応溶媒として超高純度アルコールを使用するとともに、希釈溶媒としてアルコールを使用する点に特徴を有する。
【００２５】
本発明において「反応溶媒」とは、試料中のカルボニル類と、２，４−ＤＮＰＨとの反応系に存在する溶媒をいい、（ａ）試料溶液を調製するために使用した溶媒のほか、（ｂ）添加する酸の溶液を調製するために使用した溶媒、（ｃ）２，４−ＤＮＰＨの溶液を調製するために使用した溶媒などにより反応溶媒が構成される。なお、上記（ａ）乃至（ｃ）の溶媒のそれぞれが超高純度アルコールである必要はなく、これらを混合してなる反応溶媒が、超高純度アルコールとしての要件（アルデヒド・ケトンの総量が３ｐｐｍ以下）を具備していればよい。
【００２６】
本発明の測定方法における「希釈溶媒」とは、反応溶液の吸光度を測定する際に、その容量を一定にするために添加する溶媒をいうものとする。
【００２７】
反応溶媒を構成する超高純度アルコールおよび希釈溶媒を構成するアルコールとしては、一価の飽和アルコールを挙げることができる。不飽和アルコールは、安定性に劣り、その一部が酸化された結果生成されるカルボニルを含有することがあり、これが測定誤差の原因となる。
一価の飽和アルコールの具体例としては、メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール、１−ペンタノール、２−ペンタノール、３−ペンタノール、１−ヘキサノール、２−ヘキサノール、３−ヘキサノール、２−メチルヘキサノール、２−エチルヘキサノール、２−プロピルヘキサノール、２−ブチルヘキサノールなどを挙げることができ、これらは単独でまたは２種以上を組み合わせて使用することができる。これらのうち、試料の溶解性および安全性の観点から、エタノールおよび２−プロパノールが好ましい。
【００２８】
これらのアルコールは、ベンゼンのような有害性がなく、また、極性・分子量の異なる種々の物質を溶解することができる。従って、反応溶媒および希釈溶媒として、これらのアルコールを使用することにより、カルボニル価を求めるための各操作を安全かつ容易に行うことができるとともに、１，３−ブチレングリコールのような極性の高い物質、ポリオキシエチレン（２４０）ポリオキシプロピレン（６０）グリコールなどの高分子量の物質などを含む、極性・分子量の異なるあらゆる試料について、そのカルボニル価を求めることが可能となる。
【００２９】
反応溶媒として使用する超高純度アルコールに含まれるアルデヒド・　ケトンの総量は、３ｐｐｍ以下とされ、好ましくは２ｐｐｍ以下とされる。
反応溶媒として使用されるアルコールにおいて、アルデヒド・　ケトンの総量が３ｐｐｍを超える場合には、得られる反応溶液について吸光度を測定する際に、ベースラインが上昇し、また、カルボニル含有量が少ない試料を含む反応溶液について測定された吸光度が、空試験のための溶液（当該試料を含まない溶液）について測定された吸光度より小さくなるなど、適正な（精度の高い）指標値を得ることができない。
アルデヒド・　ケトンの総量が３ｐｐｍ以下である超高純度アルコールを、反応溶媒として使用することによりはじめて、カルボニル含有量が少ない（例えば、カルボニル価が３未満）試料についても、カルボニル価を適正に求めることができる。
【００３０】
超高純度アルコールの調製方法（精製方法）としては、精製すべきアルコールに、２，４−ＤＮＰＨおよび酸化作用を有しない酸（例えば塩酸やトリクロロ酢酸）を適量添加し、この系を数時間かけて加熱攪拌した後、常圧または減圧下にアルコールを蒸留する方法を挙げることができる。
なお、これらの精製処理は、反応溶液について吸光度の測定を行う前２４時間以内に実施することが好ましい。
【００３１】
また、超高純度アルコールとして、アルデヒド・　ケトンの総量が３ｐｐｍ以下となるまで精製された市販の高純度試薬を使用することが好ましい。
超高純度アルコールとして使用することのできる市販の高純度試薬としては、エタノール（９９．８％）インフィニティピュア、エタノール（９９．８％）精密分析用、エタノール（９９．５％）高速液体クロマトグラフ用、エタノール（９９．５％）分光分析用、２−プロパノール（９９．９％）インフィニティピュア、２−プロパノール（９９．９％）精密分析用、２−プロパノール（９９．５％）高速液体クロマトグラフ用、２−プロパノール（９９．５％）分光分析用、１−プロパノール（９９．８％）インフィニティピュア、１−プロパノール（９９．５％）高速液体クロマトグラフ用、メタノール（９９．８％）インフィニティピュア、メタノール（９９．８％）精密分析用、メタノール（９９．５％）高速液体クロマトグラフ用、メタノール（９９．５％）分光分析用、ｎ−ブチルアルコール高速液体クロマトグラフ用、ｎ−ブチルアルコール分光分析用（以上、和光純薬工業（株）製）などを例示することができる。
【００３２】
なお、上記のような高純度試薬であっても、アルデヒド・　ケトンの総量が経時的に増加してアルデヒド・ケトンの総量が３ｐｐｍを超えることがある。また、開封後においては比較的短い時間（例えば２４時間以内）で当該総量が３ｐｐｍを超えてしまう。
そこで、超高純度アルコールとしての必須要件（アルデヒド・　ケトンの総量が３ｐｐｍ以下）を満足させる観点から、市販の高純度試薬は、
（ａ）使用前６月以内に製造されたものであり、かつ、
（ｂ）使用前２４時間以内に開封されたものであることが好ましい。
【００３３】
上記（ａ）または（ｂ）の条件を具備しないアルコールは、酸化が進行して、アルデヒド・　ケトンの総量が３ｐｐｍを超えている可能性が高く、カルボニル含有量の適正な指標値を得ることができなくなるおそれがある。
【００３４】
ここに、あるロットのエタノール（９９．８）インフィニティピュアを製造後５月経過時に開封してアルデヒド・ケトンの総量を測定したところ２．８ｐｐｍであったが、これと同じロットのエタノール（９９．８）インフィニティピュアを製造後７月経過時に開封してアルデヒド・ケトンの総量を測定したところ５．０ｐｐｍ（超高純度アルコールとしての要件不備）であった。
【００３５】
本発明において、反応溶媒として使用する溶媒のすべてが超高純度アルコールである必要はなく、本発明の効果が損なわれない範囲において、反応溶媒の一部として、水および／または有機溶剤（その構造にカルボニル基を有さないものであって、有害性の少ないもの）を使用してもよい。
但し、反応溶媒の一部として、超高純度アルコール以外の溶剤を使用する場合には、当該溶剤（一部）と、超高純度アルコール（残部）とを混合してなる反応溶媒（全部）に含まれるアルデヒド・ケトンの総量が３ｐｐｍ以下であることが必要である。
【００３６】
また、反応溶媒として、超高純度アルコールと水とを使用することが好ましい。これにより、アセタールなどのアルデヒド重合物を含む試料であっても、そのカルボニル価を高い精度で確実に求めることができる。この理由としては明らかではないが、反応系に水が存在することにより、アルデヒド重合物が分解されて２，４−ＤＮＰＨとの反応が確実に行われるからであると推測される。
超高純度アルコールと水とからなる反応溶媒における両者の混合割合としては、超高純度アルコール：水（質量比）が９９．９：０．１〜５０：５０とされ、好ましくは９９：１〜７５：２５とされる。
【００３７】
本発明のカルボニル価の測定方法においては、希釈溶媒のすべてがアルコールである必要はなく、本発明の効果が損なわれない範囲において、反応溶媒の一部として、水および／または有機溶剤（その構造にカルボニル基を有さないものであって、有害性の少ないもの）を使用してもよい。
【００３８】
＜反応溶液の調製＞
本発明のカルボニル価の測定方法においては、試料を溶媒に溶解してなる試料溶液に酸および２，４−ＤＮＰＨを添加し、この系を加熱処理することによって試料中のカルボニル類と２，４−ＤＮＰＨとを反応させ、冷却後、この系にアルカリを添加し、次いで、希釈溶媒で一定の容量に調整することにより、塩基性の反応溶液（吸光度の測定に供される反応溶液）を調製することができる。
ここに、塩基性の反応溶液を調製するための容器としては、容量が１０〜１００ｍＬのメスフラスコを使用することが好ましい。
【００３９】
（１）試料溶液：
試料溶液を調製するために使用する溶媒は、そのまま反応溶媒を構成するものとなるので、かかる溶媒としては、通常、超高純度アルコールが使用される。
吸光度を測定するために使用する試料溶液（試料および溶媒）の質量としては、通常２〜６ｇ程度とされ、好ましくは５ｇ程度とされる。
試料溶液中に含める試料の質量としては、吸光度の測定に供される反応溶液の調製量（使用するメスフラスコの容量）、試料中のカルボニル含有量（カルボニル価）によっても異なるが、例えば５０ｍＬのメスフラスコを使用して反応溶液（吸光度の測定に供される反応溶液）を調製する場合、純分で５〜２５０ｍｇであることが好ましく、さらに好ましくは１０〜１５０ｍｇとされる。
【００４０】
（２）酸：
試料溶液に添加される酸としては、塩酸、希硫酸、希硝酸、燐酸などの鉱酸、トリクロロ酢酸、トリフロロ酢酸、ギ酸、酢酸、スルホン酸、フェノール酸などの有機酸、ＡｌＣｌ３　、ＦｅＣｌ３　、ＴｉＣｌ４　などのルイス酸などを挙げることができ、これらは単独でまたは２種以上を組み合わせて使用することができる。これらのうち、反応を促進する触媒としての作用が優れていることから、強酸を使用することが好ましい。また、本発明で使用する酸は、できるだけ高純度のもの（試薬特級またはそれ以上の純度のもの）であることが好ましい。
【００４１】
これらの酸は、試料溶液にそのまま添加してもよいが、正確な計量を行うなどの観点から、適宜の溶媒に溶解してなる溶液状態で添加することが好ましい。
なお、酸の溶液を調製するために使用する溶媒はそのまま反応溶媒を構成するものとなるので、かかる溶媒としては、水、アルコール、その他の有機溶剤（その構造にカルボニル基を有さないものであって、有害性の少ないもの）を使用することが好ましく、溶媒の一部または全部として超高純度アルコールを使用することが特に好ましい。
５０ｍＬのメスフラスコで反応溶液（純分で５〜２５０ｍｇの試料を含む反応溶液）を調製する場合に、酸の添加量は、純分で０．０３〜３．０ｇであることが好ましい。
【００４２】
（３）２，４−ＤＮＰＨ：
試料溶液に添加される２，４−ＤＮＰＨとしては、等量の水を含有する試薬特級またはそれ以上の純度のものを用いることが好ましい。また、再結晶などの精製操作により更に純度を高くしてもよい。
２，４−ＤＮＰＨは、試料溶液にそのまま添加してもよいが、正確な計量を行うなどの観点から、適宜の溶媒に溶解してなる溶液状態で添加することが好ましい。なお、２，４−ＤＮＰＨの溶液を調製するために使用する溶媒は、そのまま反応溶媒を構成するものとなるので、かかる溶媒としては、水、アルコール、その他の有機溶剤（その構造にカルボニル基を有さないものであって、有害性の少ないもの）を使用することが好ましく、溶媒の一部または全部として超高純度アルコールを使用することが特に好ましい。
５０ｍＬのメスフラスコで反応溶液（純分で５〜２５０ｍｇの試料を含む反応溶液）を調製する場合に、２，４−ＤＮＰＨの添加量は、純分で０．５〜１０ｍｇであることが好ましい。
【００４３】
（４）加熱処理：
試料、酸および２，４−ＤＮＰＨを含有する混合溶液の加熱処理条件としては、３０〜１２０℃（但し、反応溶媒の沸点よりも低い温度）で２０〜１８０分間とされる。
処理温度が３０℃未満では、試料中のカルボニル類と、２，４−ＤＮＰＨとの反応に長時間を要し効率的ではない。一方、１２０℃よりも高い温度で加熱すると、生成したヒドラゾンが分解するおそれがある。
処理時間が２０分間未満では、２，４−ＤＮＰＨとの反応を完結させることが困難となる。一方、処理時間が１８０分間を超えると、生成したヒドラゾンが分解するおそれがある。
【００４４】
（５）アルカリ：
試料中のカルボニル類と２，４−ＤＮＰＨとの反応による反応溶液に添加されるアルカリとしては、水酸化カリウム、水酸化ナトリウムなどの無機強塩基を用いることが好ましい。
これらのアルカリは、試料溶液にそのまま添加してもよいが、正確な計量を行うなどの観点から、適宜の溶媒に溶解してなる溶液状態で添加することが好ましい。かかる溶媒としては、アルカリを溶解することができ、その構造にカルボニル基を有さないものであって、反応溶媒として使用された溶媒との相溶性があり、有害性の少ないものの中から１種または２種以上を選択して使用することができ、具体的には、メタノール、エタノール、２−プロパノール、１−プロパノールなどの一価の飽和低級アルコール、または、これらに水および／またはその他の有機溶剤（その構造にカルボニル基を有さないものであって、有害性の少ないもの）を適量混合してなる混合溶媒を例示することができ、超高純度アルコール、または、超高純度アルコールと水との混合溶媒を使用することが好ましい。
５０ｍＬのメスフラスコで反応溶液（純分で５〜２５０ｍｇの試料を含む反応溶液）を調製する場合に、アルカリの添加量は、純分で０．０５〜５．０ｇであることが好ましい。
【００４５】
（６）希釈溶媒：
アルカリが添加された反応溶液は、アルコールを主体とする希釈溶媒で一定の容量（例えば５０ｍＬ）に調整される。希釈溶媒を構成するアルコールとしては、超高純度アルコールを使用することが好ましい。
【００４６】
（７）具体的な調製方法：
吸光度の測定に供される反応溶液の調製方法の一例を示せば、容量５０ｍＬのメスフラスコに、５〜２５０ｍｇの試料を超高純度アルコールで溶解してなる試料溶液５ｇを仕込み、次いで、０．０３〜３．０ｇの酸が超高純度アルコールに溶解された溶液と、０．５〜１０ｍｇの２，４−ＤＮＰＨが超高純度アルコールに溶解された溶液とを添加した後、このメスフラスコに栓をして、３０〜１２０℃で２０〜１８０分間かけて加熱処理することにより、試料中のカルボニル類と２，４−ＤＮＰＨを反応させ、これを室温まで冷却した後、このメスフラスコに、０．０５〜５．０ｇのアルカリがアルコールに溶解された溶液を添加し、その後、アルコールからなる希釈溶媒を添加して容量を５０ｍＬに調整する。
【００４７】
本発明のカルボニル価の測定方法においては、上記のようにして得られた塩基性の反応溶液について、４３０ｎｍまたは４６０ｎｍの吸光度を測定する。
ここに、試料中に含まれるカルボニルが、主に飽和カルボニルであると推定される場合には、当該反応溶液について４３０ｎｍの吸光度を測定し、試料中に含まれるカルボニルが、主に不飽和カルボニルであると推定される場合には、当該反応溶液について４６０ｎｍの吸光度を測定する。
吸光度の測定おいて、反応溶液を収容する吸収セルは石英製のものを使用することが好ましい。また、吸収セルにより規定される液層の長さ（厚さ）は１ｃｍであることが好ましい。
【００４８】
吸光度の測定は、試料中のカルボニル類と２，４−ＤＮＰＨとの反応による反応溶液にアルカリを添加してから１０分経過後乃至２０分経過前に実施することが好ましい。
アルカリを添加してから１０分が経過する前に測定される吸光度は安定性に欠けることがあり、また、アルカリを添加してから２０分が経過した後は、反応溶液が褪色して吸光度が低下する傾向がある。
種々の試料について実施した経験から、アルカリを添加してから１５分経過時に吸光度を測定すると、最も再現性のよい値が得られる。
【００４９】
＜カルボニル価の具体的な測定方法＞
以下、本発明のカルボニル価の測定方法の一例（請求項４に係る測定方法）について説明する。
この方法は、上記の工程（１）〜（９）によって吸光度（Ａ１　）および吸光度（Ａ２　）を測定し、それぞれの吸光度（Ａ１　，Ａ２　）を、数式：ＣＶ＝（Ａ１　−Ａ２　）／Ｂ〔但し、Ｂは、試料溶液５．０００ｇ中に含まれる試料の質量（ｇ）である。〕に代入してカルボニル価（ＣＶ）を求める方法であり、上記の工程（１）、（７）および（９）で使用する後記溶媒が超高純度アルコールである点に特徴を有する。
【００５０】
以下、各工程について説明する。
なお、反応溶液の調製に係る工程（２）〜（７）は、通常、５０ｍＬのメスフラスコを使用して行われる。
【００５１】
工程（１）は、超高純度アルコールからなる溶媒に試料を溶解して試料溶液を調製する工程である。
試料溶液における試料の割合は、当該試料について予測されるカルボニル価に応じて変更される。例えば、カルボニル価が６未満であると予測される試料では２〜３質量％（試料溶液５．０００ｇあたり１００〜１５０ｍｇ）、カルボニル価が６〜１５の範囲にあると予測される試料では０．８〜２質量％（試料溶液５．０００ｇあたり４０〜１００ｍｇ）、カルボニル価が１５〜３０の範囲にあると予測される試料では０．４〜０．８質量％（試料溶液５．０００ｇあたり２０〜４０ｍｇ）、カルボニル価が３０〜６０の範囲にあると予測される試料では０．２〜０．４質量％（試料溶液５．０００ｇあたり１０〜２０ｍｇ）、カルボニル価が６０を超えると予測される試料では０．２質量％未満（試料溶液５．０００ｇあたり１０ｍｇ未満）とすることが好ましい。
【００５２】
また、試料溶液を調製する場合には、試料を段階的に希釈することが好ましい。例えば、２質量％の試料溶液５．０００ｇを調製する方法として、先ず、試料２．００ｇを超高純度アルコール２３．００ｇに溶解させて、８質量％の溶液２５．００ｇを調製する。
次いで、５０ｍＬのメスフラスコに、８質量％の溶液１．２５０ｇと、超高純度アルコール３．７５０ｇとを正確に添加して４倍に希釈する方法を挙げることができる。
【００５３】
工程（２）は、上記の工程（１）により得られた２質量％の試料溶液５．０００ｇ（試料：０．１００ｇ）に、トリクロロ酢酸のアルコール溶液〔４．３０％（ｗｔ／ｖｏｌ）〕３ｍＬを、ホールピペットなどを用いて添加する工程である。
このトリクロロ酢酸のアルコール溶液の溶媒（アルコール）は、超高純度アルコールであることが好ましい。
トリクロロ酢酸のアルコール溶液は、超高純度アルコール１００ｍＬを収容する瓶を開封し、この瓶に、トリクロロ酢酸（試薬特級品）４．３０ｇを直接添加し、当該瓶に蓋をした後、振り混ぜることにより、当該瓶内でトリクロロ酢酸を完全に溶解させることにより調製することが好ましい。
また、トリクロロ酢酸のアルコール溶液は、反応溶液についての吸光度の測定前２４時間以内に調製することが好ましい。
【００５４】
工程（３）は、上記の工程（２）により得られた混合溶液に、２，４−ＤＮＰＨのアルコール溶液〔０．０２５％（ｗｔ／ｖｏｌ）〕５ｍＬを、ホールピペットなどを用いて添加する工程である。
この２，４−ＤＮＰＨのアルコール溶液の溶媒（アルコール）は、超高純度アルコールであることが好ましい。
２，４−ＤＮＰＨのアルコール溶液は、超高純度アルコール１００ｍＬを収容する瓶を開封し、この瓶に、２，４−ＤＮＰＨ（等量の水を含有する試薬特級品）５０ｍｇを直接添加し、当該瓶に蓋をした後、超音波洗浄機に５分間程度かけることにより、当該瓶内で２，４−ＤＮＰＨを完全に溶解させることにより調製することが好ましい。
また、２，４−ＤＮＰＨのアルコール溶液は、反応溶液についての吸光度の測定前２４時間以内に調製することが好ましい。
【００５５】
工程（４）は、上記の工程（３）により得られた混合溶液を６０℃で３０分間加熱して、試料中のカルボニル類と、２，４−ＤＮＰＨとを反応させる工程であり、これにより、ヒドラゾンを含有する反応溶液が得られる。
【００５６】
工程（５）は、工程（４）により得られた反応溶液を室温で３０〜７０分間放置して冷却する工程である。
【００５７】
工程（６）は、放置された後の反応溶液に、水酸化カリウムのアルコール溶液〔４．０％（ｗｔ／ｖｏｌ）〕１０ｍＬを、ホールピペットなどを用いて添加して混合する工程である。これにより、反応溶液が塩基性を示し、生成したヒドラゾンがキノイドイオンとなって発色する。
この水酸化カリウムのアルコール溶液の溶媒（アルコール）は、超高純度アルコールであることが好ましい。
水酸化カリウムのアルコール溶液は、超高純度アルコール１００ｍＬを収容する瓶を開封し、この瓶に、水酸化カリウム（ペレット状の試薬特級品）４．０ｇを直接添加し、当該瓶に蓋をし、ペレットが消失するまで振り混ぜた後、超音波洗浄機に５〜１０分間程度かけることにより、当該瓶内で水酸化カリウムを完全に溶解させることにより調製することが好ましい。
また、水酸化カリウムのアルコール溶液は、反応溶液についての吸光度の測定前２４時間以内に調製することが好ましい。
【００５８】
工程（７）は、上記の工程（６）から５〜１０分経過後、当該反応溶液に、超高純度アルコールからなる希釈溶媒を添加し、総量が５０ｍＬの反応溶液（塩基性の反応溶液）を調製する工程である。
【００５９】
工程（８）は、上記の工程（７）で得られた反応溶液について、４３０ｎｍ（試料中に含まれるカルボニルが主に飽和カルボニルであると推定される場合）または（試料中に含まれるカルボニルが主に不飽和カルボニルであると推定される場合）４６０ｎｍの吸光度（Ａ１　）を測定する工程である。
吸光度の測定は、上記の工程（６）の水酸化カリウムのアルコール溶液の添加時から１０分経過後乃至２０分経過前に実施することが必要とされ、水酸化カリウムのアルコール溶液の添加時から１５分経過時に吸光度を測定することが最も好ましい。
【００６０】
工程（９）は、空試験として、前記試料溶液に代えて、超高純度アルコール５．０００ｇを使用し、上記の工程（２）〜（７）と同様の操作（トリクロロ酢酸のアルコール溶液の添加；２，４−ＤＮＰＨのアルコール溶液の添加；得られる混合溶液の加熱および冷却；水酸化カリウムのアルコール溶液の添加；超高純度アルコールからなる希釈溶媒の添加）を行って得られた溶液について、４３０ｎｍまたは４６０ｎｍの吸光度（Ａ２　）を測定する工程である。
【００６１】
上記の工程（１）〜（８）により得られる吸光度（Ａ１　）と、上記の工程（９）により得られる吸光度（Ａ２　）を、それぞれ、数式：ＣＶ＝（Ａ１　−Ａ２　）／Ｂに代入することにより、カルボニル価（ＣＶ）を求めることができる。
上記の数式において、Ｂは、試料溶液５．０００ｇ中に含まれる試料の質量（ｇ）であり、２質量％の試料溶液においては、０．１（５．０００×０．０２）となる。
【００６２】
【発明の効果】
請求項１の発明によれば、極性・分子量の異なる種々の試料に対して、当該試料中のカルボニル含有量を安全かつ容易に指標化することができ、カルボニル含有量が少ない試料についても、その指標化を適正に行うことができる。
請求項２の発明によれば、極性・分子量の異なる種々の試料に対して、当該試料のカルボニル価を、安全かつ容易に測定することができ、カルボニル含有量が少ない試料についても、そのカルボニル価を適正（高精度）に求めることができる。
請求項３の発明によれば、アルデヒド重合物を含む試料についてのカルボニル価を高い精度で確実に求めることができる。
請求項４の発明によれば、基準油脂分析試験法（２．５．４−１９９６　カルボニル価）と同様の手順で、しかも、安全かつ容易に、カルボニル含有量の指標値として有効なカルボニル価を測定することができる。
請求項５の発明によれば、カルボニル含有量の指標値としてさらに高い精度のカルボニル価を測定することができる。
請求項６の発明によれば、極性・分子量の異なる種々の試料に対して、当該試料中のカルボニル濃度を安全かつ容易に測定することができ、カルボニル含有量の少ない試料であっても、その濃度を適正（高精度）に求めることができる。
【００６３】
【実施例】
以下、本発明の実施例を説明するが、本発明はこれらによって限定されるものではない。なお、以下の実施例および比較例において、反応溶媒および希釈溶媒を構成する溶媒として、以下の市販品（使用直前まで未開封品のもの）を使用した。
【００６４】
〔１〕超高純度アルコール（Ａ）：
・製造後４月経過した市販のエタノール「エタノール（９９．８）インフィニティピュア」（和光純薬工業（株）製）。
・アルデヒド・ケトンの総量＝１．７ｐｐｍ。
〔２〕比較用溶媒（Ｂ）：
・市販のベンゼン「ベンゼン（分光分析用）」（和光純薬工業（株）製）。
〔３〕比較用溶媒（Ｃ）：
・市販のエタノール「試薬特級エタノール」（和光純薬工業（株）製）。
・アルデヒド・ケトンの総量＝１２ｐｐｍ。
〔４〕比較用溶媒（Ｄ）：
・製造後７月経過した市販のエタノール「エタノール（９９．８）インフィニティピュア」（和光純薬工業（株）製）。
・アルデヒド・ケトンの総量＝５ｐｐｍ。
【００６５】
〔調製例１Ａ〕
超高純度アルコール（Ａ）１００ｍＬを収容する瓶を開封し、この瓶に、トリクロロ酢酸（試薬特級品）４．３０ｇを直接添加し、当該瓶に蓋をした後、振り混ぜることにより、超高純度アルコール（Ａ）によってトリクロロ酢酸を完全に溶解させて、４．３０％（ｗｔ／ｖｏｌ）のトリクロロ酢酸のアルコール溶液を調製した。以下、この溶液を「トリクロロ酢酸溶液（１Ａ）」とする。なお、この調製操作は、吸光度の測定前１時間以内に行った。
【００６６】
〔調製例１Ｂ〕
超高純度アルコール（Ａ）に代えて比較用溶媒（Ｂ）１００ｍＬを使用したこと以外は、調製例１Ａと同様にして、４．３０％（ｗｔ／ｖｏｌ）のトリクロロ酢酸のベンゼン溶液を調製した。以下、この溶液を「トリクロロ酢酸溶液（１Ｂ）」とする。
なお、この調製操作は、局所排気装置を稼動させた状態の囲い式フード内で、保護具および保護メガネを着用して行った。
また、この調製操作は、吸光度の測定前１時間以内に行った。
【００６７】
〔調製例１Ｃ〕
超高純度アルコール（Ａ）に代えて比較用溶媒（Ｃ）を使用したこと以外は、調製例１Ａと同様にして、４．３０％（ｗｔ／ｖｏｌ）のトリクロロ酢酸のアルコール溶液を調製した。以下、この溶液を「トリクロロ酢酸溶液（１Ｃ）」とする。なお、この調製操作は、吸光度の測定前１時間以内に行った。
【００６８】
〔調製例１Ｄ〕
超高純度アルコール（Ａ）に代えて比較用溶媒（Ｄ）を使用したこと以外は、調製例１Ａと同様にして、４．３０％（ｗｔ／ｖｏｌ）のトリクロロ酢酸のアルコール溶液を調製した。以下、この溶液を「トリクロロ酢酸溶液（１Ｄ）」とする。なお、この調製操作は、吸光度の測定前１時間以内に行った。
【００６９】
〔調製例２Ａ〕
超高純度アルコール（Ａ）１００ｍＬを収容する瓶を開封し、この瓶に、２，４−ＤＮＰＨ（等量の水を含有する試薬特級品）５０ｍｇを直接添加し、当該瓶に蓋をした後、超音波洗浄機に５分間かけることにより、超高純度アルコール（Ａ）によって２，４−ＤＮＰＨを完全に溶解させて、０．０２５％（ｗｔ／ｖｏｌ）の２，４−ＤＮＰＨのアルコール溶液を調製した。以下、この溶液を「２，４−ＤＮＰＨ溶液（２Ａ）」とする。なお、この調製操作は、吸光度の測定前１時間以内に行った。
【００７０】
〔調製例２Ｂ〕
超高純度アルコール（Ａ）に代えて比較用溶媒（Ｂ）を使用したこと以外は、調製例２Ａと同様にして、０．０２５％（ｗｔ／ｖｏｌ）の２，４−ＤＮＰＨのベンゼン溶液を調製した。以下、この溶液を「２，４−ＤＮＰＨ溶液（２Ｂ）」とする。
なお、この調製操作は、局所排気装置を稼動させた状態の囲い式フード内で、保護具および保護メガネを着用して行った。
また、この調製操作は、吸光度の測定前１時間以内に行った。
【００７１】
〔調製例２Ｃ〕
超高純度アルコール（Ａ）に代えて比較用溶媒（Ｃ）を使用したこと以外は、調製例２Ａと同様にして、０．０２５％（ｗｔ／ｖｏｌ）の２，４−ＤＮＰＨのアルコール溶液を調製した。以下、この溶液を「２，４−ＤＮＰＨ溶液（２Ｃ）」とする。なお、この調製操作は、吸光度の測定前１時間以内に行った。
【００７２】
〔調製例２Ｄ〕
超高純度アルコール（Ａ）に代えて比較用溶媒（Ｄ）を使用したこと以外は、調製例２Ａと同様にして、０．０２５％（ｗｔ／ｖｏｌ）の２，４−ＤＮＰＨのアルコール溶液を調製した。以下、この溶液を「２，４−ＤＮＰＨ溶液（２Ｄ）」とする。なお、この調製操作は、吸光度の測定前１時間以内に行った。
【００７３】
〔調製例３Ａ〕
超高純度アルコール（Ａ）１００ｍＬを収容する瓶を開封し、この瓶に、水酸化カリウム（ペレット状試薬特級品）４．０ｇを直接添加し、当該瓶に蓋をし、ペレットが消失するまで振り混ぜた後、超音波洗浄機に１０分間かけることにより、超高純度アルコール（Ａ）によって水酸化カリウムを完全に溶解させて、４．０％（ｗｔ／ｖｏｌ）の水酸化カリウムのアルコール溶液を調製した。以下、この溶液を「水酸化カリウム溶液（３Ａ）」とする。なお、この調製操作は、吸光度の測定前１時間以内に行った。
【００７４】
〔調製例３Ｃ〕
超高純度アルコール（Ａ）に代えて比較用溶媒（Ｃ）を使用したこと以外は、調製例３Ａと同様にして、４．０％（ｗｔ／ｖｏｌ）の水酸化カリウムのアルコール溶液を調製した。以下、この溶液を「水酸化カリウム溶液（３Ｃ）」とする。なお、この調製操作は、吸光度の測定前１時間以内に行った。
【００７５】
〔調製例３Ｄ〕
超高純度アルコール（Ａ）に代えて比較用溶媒（Ｄ）を使用したこと以外は、調製例３Ａと同様にして、４．０％（ｗｔ／ｖｏｌ）の水酸化カリウムのアルコール溶液を調製した。以下、この溶液を「水酸化カリウム溶液（３Ｄ）」とする。なお、この調製操作は、吸光度の測定前１時間以内に行った。
【００７６】
＜実施例１＞
試料として流動イソパラフィン２．００ｇと、超高純度アルコール（Ａ）２３．００ｇとを５０ｍＬの蓋付スクリュー管に仕込み、両者を混合して、試料濃度＝８質量％の試料溶液（Ｓａ）２５．００ｇを調製した。
【００７７】
得られた試料溶液（Ｓａ）１．２５０ｇと、超高純度アルコール（Ａ）３．７５０ｇとを５０ｍＬのメスフラスコに仕込み、両者を混合して、試料濃度＝２質量％の試料溶液（Ｓｂ）５．０００ｇを調製した。
【００７８】
試料溶液（Ｓｂ）５．０００ｇが収容されている当該メスフラスコに、調製例１Ａで得られたトリクロロ酢酸溶液（１Ａ）３ｍＬと、調製例２Ａで得られた２，４−ＤＮＰＨ溶液（２Ａ）５ｍＬとをホールピペットにより添加した。
次いで、当該メスフラスコに栓をし、そのまわりにテフロン（登録商標）シールを巻いて気密性を確保した後、当該メスフラスコを６０℃の恒温槽に入れて３０分間加熱することにより、試料（流動イソパラフィン）中に含まれるカルボニル類と、２，４−ＤＮＰＨとを反応させた。
次いで、当該メスフラスコを恒温槽から取出し、室温で３０分間放置した。
次いで、当該メスフラスコの栓を開けて、調製例３Ａで得られた水酸化カリウム溶液（３Ａ）１０ｍＬをホールピペットにより添加し、当該メスフラスコを振って混合した。
水酸化カリウム溶液（３Ａ）１０ｍＬを添加してから８分経過後、希釈溶媒として超高純度アルコール（Ａ）を添加し、総量が５０ｍＬの反応溶液（塩基性の反応溶液）を調製した。
水酸化カリウム溶液（３Ａ）１０ｍＬを添加してから１５分経過後、当該反応溶液を吸収セル（液層の長さ＝１ｃｍ）に入れ、吸光光度計「Ｕ−３２００　Ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｅｒ」（（株）日立製作所製）により、４３０ｎｍの吸光度（Ａ１　）を測定したところ０．０９９であった。
【００７９】
一方、空試験として、前記試料溶液（Ｓｂ）に代えて、超高純度アルコール５．０００ｇを使用し、上記と同様の操作〔トリクロロ酢酸溶液（１Ａ）の添加、２，４−ＤＮＰＨ溶液（２Ａ）の添加、得られた混合溶液の加熱および冷却、水酸化カリウム溶液（３Ａ）の添加、超高純度アルコール（Ａ）からなる希釈溶媒の添加〕を行って得られた溶液を吸収セル（液層の長さ＝１ｃｍ）に入れ、上記と同様にして４３０ｎｍの吸光度（Ａ２　）を測定したところ０．０９８であった。
以上のようにして得られた吸光度（Ａ１　）および吸光度（Ａ２　）を、数式：ＣＶ＝（Ａ１　−Ａ２　）／０．１に代入することにより求めたカルボニル価（ＣＶ）は０．０１〔＝（０．０９９−０．０９８）／０．１〕であった。
【００８０】
＜実施例２〜実施例８＞
下記表１に示す試料の各々について、実施例１と同様にして、吸光度（Ａ１　）および吸光度（Ａ２　）を測定し、カルボニル価（ＣＶ）を求めた。結果を下記表１に示す。
【００８１】
＜比較例１＞
実施例１で試料としたものと同一の流動イソパラフィン２．００ｇと比較用溶媒（Ｂ）２３．００ｇとを５０ｍＬの蓋付スクリュー管に仕込み、両者を混合して、試料濃度＝８質量％の試料溶液（Ｓａ）２５．００ｇを調製した。
得られた試料溶液（Ｓａ）１．２５０ｇと、比較用溶媒（Ｂ）３．７５０ｇとを５０ｍＬのメスフラスコに仕込み、両者を混合して、試料濃度＝２質量％の試料溶液（Ｓｂ）５．０００ｇを調製した。
なお、試料溶液（Ｓａ）および試料溶液（Ｓｂ）の調製操作は、局所排気装置を稼動させた状態の囲い式フード内で、保護具および保護メガネを着用して行った。
【００８２】
試料溶液（Ｓｂ）５．０００ｇが収容されている当該メスフラスコに、調製例１Ｂで得られたトリクロロ酢酸溶液（１Ｂ）３ｍＬと、調製例２Ｂで得られた２，４−ＤＮＰＨ溶液（２Ｂ）５ｍＬとをホールピペットにより添加した。
なお、トリクロロ酢酸溶液（１Ｂ）および２，４−ＤＮＰＨ溶液（２Ｂ）の添加操作は、局所排気装置を稼動させた状態の囲い式フード内で、保護具および保護メガネを着用して行った。
【００８３】
次いで、当該メスフラスコに栓をし、そのまわりにテフロン（登録商標）シールを巻いて気密性を確保した後、当該メスフラスコを、排気装置を備えた密閉式の恒温糟（６０℃）に入れ、当該排気装置を稼動させながら、３０分間加熱することにより、試料（流動イソパラフィン）中に含まれるカルボニル類と、２，４−ＤＮＰＨとを反応させた。
次いで、当該メスフラスコを恒温槽から取出し、室温で３０分間放置した。
【００８４】
次いで、当該メスフラスコの栓を開けて、調製例３Ａで得られた水酸化カリウム溶液（３Ａ）１０ｍＬをホールピペットにより添加し、当該メスフラスコを振って混合した。
水酸化カリウム溶液（３Ａ）１０ｍＬを添加してから８分経過後、希釈溶媒として比較用溶媒（Ｂ）を添加し、総量が５０ｍＬの反応溶液（塩基性の反応溶液）を調製した。
なお、この操作は、局所排気装置を稼動させた状態の囲い式フード内で、保護具および保護メガネを着用して行った。
【００８５】
水酸化カリウム溶液（３Ａ）１０ｍＬを添加してから１５分経過後、当該反応溶液を吸収セル（液層の長さ＝１ｃｍ）に入れ、吸光光度計により、４３０ｎｍの吸光度（Ａ１　）を測定したところ０．０６２であった。なお、吸光度の測定は、当該反応溶液を収容した吸収セルを完全に密栓・密封してから行った。
【００８６】
一方、空試験として、前記試料溶液（Ｓｂ）に代えて、比較用溶媒（Ｂ）５．０００ｇを使用し、上記と同様の操作〔トリクロロ酢酸溶液（１Ｂ）の添加、２，４−ＤＮＰＨ溶液（２Ｂ）の添加、得られた混合溶液の加熱および冷却、水酸化カリウム溶液（３Ａ）の添加、比較用溶媒（Ｂ）からなる希釈溶媒の添加〕を行って得られた溶液を吸収セル（液層の長さ＝１ｃｍ）に入れ、上記と同様にして４３０ｎｍの吸光度（Ａ２　）を測定したところ０．０４５であった。
以上のようにして得られた吸光度（Ａ１　）および吸光度（Ａ２　）を、数式：ＣＶ＝（Ａ１　−Ａ２　）／０．１に代入することにより求めたカルボニル価（ＣＶ）は０．１７〔＝（０．０６２−０．０４５）／０．１〕であった。
【００８７】
この比較例において、操作に要した時間は、実施例１の操作に要した時間のほぼ２倍であった。
【００８８】
＜比較例２〜比較例７＞
下記表１に示す試料の各々について、比較例１と同様にして、吸光度（Ａ１　）および吸光度（Ａ２　）を測定し、カルボニル価（ＣＶ）を求めた。結果を下記表１に示す。
【００８９】
＜比較例８＞
下記表１に示す１，３−ブチレングリコールについて、比較例１と同様にして、試料溶液（Ｓａ）の調製を試みたが、比較用溶媒（Ｂ）によって１，３−ブチレングリコールを溶解することができずに相分離を起こしたたため、以後の操作を中止した。
【００９０】
【表１】
2004132723.tif 000002
【００９１】
表１に示すように、本発明の測定方法（実施例１〜８）によれば、非常に低い極性を有する試料（流動イソパラフィン・デカメチルシクロペンタシロキサン）、中程度の極性を有する試料（食用サンフラワー油・食用とうもろこし油・２−エチルヘキサン酸セチル）、非常に高い極性を有する試料（１，３−ブチレングリコール）のすべてについて、カルボニル価を測定することができる。また、ポリオキシエチレン（２４０）ポリオキシプロピレン（６０）グリコールのような高分子量（Ｍｗ＞１４，０００）の物質であっても、そのカルボニル価を求めることができる。
これに対して、比較例８の結果から明らかなように、非常に高い極性を有する１，３−ブチレングリコールは、比較用溶媒（Ｂ）であるベンゼンに不溶であるため、当該試料についてはカルボニル価を測定することができない。
【００９２】
また、表１に示すように、実施例１〜７で測定されたカルボニル価は、比較例１〜７で測定されたカルボニル価〔基準油脂分析試験法（２．５．４−１９９６）に準拠した方法により測定されたカルボニル価〕よりも概して小さい数値であるものの、各測定試料間のカルボニル価の大小の傾向はほぼ一致している。
図１は、同一の測定試料について、実施例１〜７で測定されたカルボニル価と、比較例１〜７で測定されたカルボニル価との関係を示す線図である。同図に示されるように、実施例１〜７で測定されたカルボニル価と、比較例１〜７で測定されたカルボニル価との間には、ほぼ比例関係が成立している。
【００９３】
＜比較例９＞
実施例１で試料としたものと同一の流動イソパラフィン２．００ｇと比較用溶媒（Ｃ）２３．００ｇとを５０ｍＬの蓋付スクリュー管に仕込み、両者を混合して、試料濃度＝８質量％の試料溶液（Ｓａ）２５．００ｇを調製した。得られた試料溶液（Ｓａ）１．２５０ｇと、比較用溶媒（Ｃ）３．７５０ｇとを５０ｍＬのメスフラスコに仕込み、両者を混合して、試料濃度＝２質量％の試料溶液（Ｓｂ）５．０００ｇを調製した。
【００９４】
試料溶液（Ｓｂ）５．０００ｇが収容されている当該メスフラスコに、調製例１Ｃで得られたトリクロロ酢酸溶液（１Ｃ）３ｍＬと、調製例２Ｃで得られた２，４−ＤＮＰＨ溶液（２Ｃ）５ｍＬとをホールピペットにより添加した。
次いで、当該メスフラスコに栓をし、そのまわりにテフロン（登録商標）シールを巻いて気密性を確保した後、当該メスフラスコを６０℃の恒温槽に入れて３０分間加熱することにより、試料（流動イソパラフィン）中に含まれるカルボニル類と、２，４−ＤＮＰＨとを反応させた。
次いで、当該メスフラスコを恒温槽から取出し、室温で３０分間放置した。
次いで、当該メスフラスコの栓を開けて、調製例３Ｃで得られた水酸化カリウム溶液（３Ｃ）１０ｍＬをホールピペットにより添加し、当該メスフラスコを振って混合した。
水酸化カリウム溶液（３Ｃ）１０ｍＬを添加してから８分経過後、希釈溶媒として比較用溶媒（Ｃ）を添加し、総量が５０ｍＬの反応溶液（塩基性の反応溶液）を調製した。
水酸化カリウム溶液（３Ｃ）１０ｍＬを添加してから１５分経過後、当該反応溶液を吸収セル（液層の長さ＝１ｃｍ）に入れ、吸光光度計により、４３０ｎｍの吸光度（Ａ１　）を測定したところ０．６９であった。
【００９５】
一方、空試験として、前記試料溶液（Ｓｂ）に代えて、比較用溶媒（Ｃ）５．０００ｇを使用し、上記と同様の操作〔トリクロロ酢酸溶液（１Ｃ）の添加、２，４−ＤＮＰＨ溶液（２Ｃ）の添加、得られた混合溶液の加熱および冷却、水酸化カリウム溶液（３Ｃ）の添加、比較用溶媒（Ｃ）からなる希釈溶媒の添加〕を行って得られた溶液を吸収セル（液層の長さ＝１ｃｍ）に入れ、上記と同様にして４３０ｎｍの吸光度（Ａ２　）を測定したところ０．７０であり、カルボニル価（ＣＶ）が負の値となり、適正な指標値を得ることができなかった。
【００９６】
＜比較例１０＞
実施例１で試料としたものと同一の流動イソパラフィン２．００ｇと比較用溶媒（Ｄ）２３．００ｇとを５０ｍＬの蓋付スクリュー管に仕込み、両者を混合して、試料濃度＝８質量％の試料溶液（Ｓａ）２５．００ｇを調製した。得られた試料溶液（Ｓａ）１．２５０ｇと、比較用溶媒（Ｄ）３．７５０ｇとを５０ｍＬのメスフラスコに仕込み、両者を混合して、試料濃度＝２質量％の試料溶液（Ｓｂ）５．０００ｇを調製した。
【００９７】
試料溶液（Ｓｂ）５．０００ｇが収容されている当該メスフラスコに、調製例１Ｄで得られたトリクロロ酢酸溶液（１Ｄ）３ｍＬと、調製例２Ｄで得られた２，４−ＤＮＰＨ溶液（２Ｄ）５ｍＬとをホールピペットにより添加した。
次いで、当該メスフラスコに栓をし、そのまわりにテフロン（登録商標）シールを巻いて気密性を確保した後、当該メスフラスコを６０℃の恒温槽に入れて３０分間加熱することにより、試料（流動イソパラフィン）中に含まれるカルボニル類と、２，４−ＤＮＰＨとを反応させた。
次いで、当該メスフラスコを恒温槽から取出し、室温で３０分間放置した。
次いで、当該メスフラスコの栓を開けて、調製例３Ｄで得られた水酸化カリウム溶液（３Ｄ）１０ｍＬをホールピペットにより添加し、当該メスフラスコを振って混合した。
水酸化カリウム溶液（３Ｄ）１０ｍＬを添加してから８分経過後、希釈溶媒として比較用溶媒（Ｄ）を添加し、総量が５０ｍＬの反応溶液（塩基性の反応溶液）を調製した。
水酸化カリウム溶液（３Ｄ）１０ｍＬを添加してから１５分経過後、当該反応溶液を吸収セル（液層の長さ＝１ｃｍ）に入れ、吸光光度計により、４３０ｎｍの吸光度（Ａ１　）を測定したところ０．１９であった。
【００９８】
一方、空試験として、前記試料溶液（Ｓｂ）に代えて、比較用溶媒（Ｄ）５．０００ｇを使用し、上記と同様の操作〔トリクロロ酢酸溶液（１Ｄ）の添加、２，４−ＤＮＰＨ溶液（２Ｄ）の添加、得られた混合溶液の加熱および冷却、水酸化カリウム溶液（３Ｄ）の添加、比較用溶媒（Ｄ）からなる希釈溶媒の添加〕を行って得られた溶液を吸収セル（液層の長さ＝１ｃｍ）に入れ、上記と同様にして４３０ｎｍの吸光度（Ａ２　）を測定したところ０．２８であり、カルボニル価（ＣＶ）が負の値となり、適正な指標値を得ることができなかった。
【００９９】
＜実施例９＞
下記化学式（１）で示されるポリエーテル変性シリコーンであって、それぞれ製造ロットが異なる６種類の試料（ｉ）〜（ｖｉ）の各々について、以下のようにしてカルボニル価を測定した。結果を表２に示す。
一方、これらの試料（ｉ）〜（ｖｉ）の各々を、容量２０ｍＬのガラス瓶に１２ｇ秤りとり、０．１ｍｏｌ／Ｌの塩酸０．１２ｇを添加して当該ガラス瓶を密栓し、これを振り混ぜて均一に混合させた後、５０℃の恒温槽中で５時間静置した。その後、これを恒温糟から取り出して室温に戻し、発生した臭いの種類および強弱を評価した。結果を併せて表２に示す。
【０１００】
【化１】
2004132723.tif 000003
【０１０１】
〔試料（ｉ）〜（ｖｉ）についてのカルボニル価の測定〕
試料（ポリエーテル変性シリコーン）２．００ｇと、超高純度アルコール（Ａ）２．００ｇと、精製水２１．００ｇとを５０ｍＬの蓋付スクリュー管に仕込み、両者を混合して、試料濃度＝８質量％の試料溶液（Ｓａ）２５．００ｇを調製した。得られた試料溶液（Ｓａ）１．２５０ｇと、超高純度アルコール（Ａ）３．７５０ｇとを５０ｍＬのメスフラスコに仕込み、両者を混合して、試料濃度＝２質量％の試料溶液（Ｓｂ）５．０００ｇを調製した。
【０１０２】
試料溶液（Ｓｂ）５．０００ｇが収容されている当該メスフラスコに、調製例１Ａで得られたトリクロロ酢酸溶液（１Ａ）３ｍＬと、調製例２Ａで得られた２，４−ＤＮＰＨ溶液（２Ａ）５ｍＬとをホールピペットにより添加した。
次いで、当該メスフラスコに栓をし、そのまわりにテフロン（登録商標）シールを巻いて気密性を確保した後、当該メスフラスコを６０℃の恒温槽に入れて３０分間加熱することにより、試料（ポリエーテル変性シリコーン）中に含まれるカルボニル類と、２，４−ＤＮＰＨとを反応させた。
次いで、当該メスフラスコを恒温槽から取出し、室温で３０分間放置した。
次いで、当該メスフラスコの栓を開けて、調製例３Ａで得られた水酸化カリウム溶液（３Ａ）１０ｍＬをホールピペットにより添加し、当該メスフラスコを振って混合した。
水酸化カリウム溶液（３Ａ）１０ｍＬを添加してから８分経過後、希釈溶媒として超高純度アルコール（Ａ）を添加し、総量が５０ｍＬの反応溶液（塩基性の反応溶液）を調製した。
水酸化カリウム溶液（３Ａ）１０ｍＬを添加してから１５分経過後、当該反応溶液を吸収セル（液層の長さ＝１ｃｍ）に入れ、吸光光度計により、４３０ｎｍの吸光度（Ａ１　）を測定した。
【０１０３】
一方、空試験として、前記試料溶液（Ｓｂ）に代えて、超高純度アルコール（Ａ）３．８５０ｇと精製水１．１５０ｇとからなる混合溶媒５．０００ｇを使用し、上記と同様の操作〔トリクロロ酢酸溶液（１Ａ）の添加、２，４−ＤＮＰＨ溶液（２Ａ）の添加、得られた混合溶液の加熱および冷却、水酸化カリウム溶液（３Ａ）の添加、超高純度アルコール（Ａ）からなる希釈溶媒の添加〕を行って得られた溶液を吸収セル（液層の長さ＝１ｃｍ）に入れ、上記と同様にして４３０ｎｍの吸光度（Ａ２　）を測定した。
上記のようにして得られた吸光度（Ａ１　）および吸光度（Ａ２　）を、数式：ＣＶ＝（Ａ１　−Ａ２　）／０．１に代入することによりカルボニル価を求めた。
【０１０４】
【表２】
2004132723.tif 000004
（表２中、「参考例」は、ポリエーテル変性シリコーンに代えて精製水を使用した空試験の結果である。）
【０１０５】
表２に示すように、ポリエーテル変性シリコーンの臭いの主原因であるプロパナール臭が弱い試料はカルボニル価が小さく、プロパナール臭の強いものはカルボニル価が大きい（プロパナール臭が強くなるに従ってカルボニル価が増加する）という明確な相関が認められる。
このことから、本発明の測定方法によって測定されるカルボニル価は、試料のカルボニル含有量の指標値として非常に有効であるといえる。
【０１０６】
＜実施例１０＞
超高純度アルコール（Ａ）にプロパナールを溶解することにより、下記表３に示す５種類の標準試料（Ｉ）〜（Ｖ）を調製した。
標準試料（Ｉ）〜（Ｖ）の各々５．０００ｇを試料溶液（Ｓｂ）に代えて使用したこと以外は実施例１と同様にして、吸光度（Ａ１　）および吸光度（Ａ２　）を測定し、これらを数式：ＣＶ＝（Ａ１　−Ａ２　）／Ｂ〔但し、Ｂ＝５とした。〕に代入してカルボニル価（ＣＶ）を求めた。結果を表３および図２に示す。
【０１０７】
【表３】
2004132723.tif 000005
【０１０８】
図２に示すように、測定されたカルボニル価は、プロパナール濃度に依存しており、有効な検量線が得られた。従って、この検量線を利用することにより、種々の試料についてのプロパナール濃度を測定することができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】実施例１〜７で測定されたカルボニル価と、比較例１〜７で測定されたカルボニル価との関係を示す線図である。
【図２】実施例１０で得られた検量線（プロパナール濃度−カルボニル価）を示す線図である。
【図１】
2004132723.tif 000006
【図２】
2004132723.tif 000007