(57)【要約】【課題】  骨粗鬆症、血栓症、心筋梗塞、アテローム性動脈硬化症、炎症、溢血、狭心症および腫瘍の治療のための治癒剤、あるいは、破骨細胞形成の場合に細胞付着を阻害する薬剤、脈管形成および創傷の癒合を支持補助する薬剤としての利用に適している、細胞付着阻害剤として有用な環状ペプチドを含んでなる薬剤組成物の提供。【解決手段】  該薬剤組成物は、β3インテグリン（ｉｎｔｅｇｒｉｎ）リセプターリーガンド相互反応を特異的に阻害する化合物である、Ｉ  （ａ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ａｌａ）で代表される環状ペプチドまたはその塩の少なくとも一つを、細胞付着阻害を示す活性成分として含有する。【選択図】    なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
動物細胞の付着阻害に有効な量の式Ｉ（ａ）〜（ｒ）の環式ペプチドの少なくとも一つまたは生理学的に容認しうるそれらの塩および薬剤学的に容認しうる担体を含んでなる、薬剤組成物。
Ｉ  （ａ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ａｌａ）
（ｂ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｌａ）
（ｃ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ｄ−Ａｌａ）
（ｄ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ａｌａ）
（ｅ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ）
（ｆ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ）
（ｇ）  環式（−Ｄ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ａｌａ）
（ｈ）  環式（−Ｄ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ）
（ｉ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ）
（ｊ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ）
（ｋ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ａｌａ）
（ｌ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ａｌａ）
（ｍ）  環式（−Ｄ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ）
（ｎ）  環式（−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ）
（ｏ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ）
（ｐ）  環式（−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ）
（ｑ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｖａｌ）
（ｒ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ）
【請求項２】
該動物細胞が哺乳動物の体細胞であることを特徴とする、請求項１に記載の薬剤組成物。
【請求項３】
該動物細胞がガン細胞であることを特徴とする、請求項１に記載の薬剤組成物。
【請求項４】
該組成物が０．０５〜５００ｍｇの該環式ペプチドを含むことを特徴とする請求項１に記載の薬剤組成物。
【請求項５】
該組成物が０．５〜１００ｍｇの該環式ペプチドを含むことを特徴とする請求項１に記載の薬剤組成物。
【請求項６】
請求項１に記載の組成物を投与することからなる、血栓症、心筋梗塞、溢血、アテローム性動脈硬化症、炎症、狭心症および／または腫瘍の治療または予防の方法。
【請求項７】
該環状ペプチドの投与日用量が０．０１〜２ｍｇ／ｋｇ体重であることを特徴とする、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
請求項１に記載の組成物を対象者に投与することからなる、該対象者において付着リセプター拮抗作用を誘導する方法。
【請求項９】
該環状ペプチドの投与日用量が０．０１〜２ｍｇ／ｋｇ体重であることを特徴とする、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
該環式ペプチドが次の式で表される、請求項８に記載の方法。
環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ａｌａ）
環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｌａ）
環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ｄ−Ａｌａ）
環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ａｌａ）
環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ）
環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ）
環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ）
環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ）
環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ａｌａ）
環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ａｌａ）
環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ）または
環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｖａｌ）
【請求項１１】
該環式ペプチドが次の式で表される、請求項６に記載の方法。
環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ａｌａ）
環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｌａ）
環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ｄ−Ａｌａ）
環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ａｌａ）
環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ）
環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ）
環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ）
環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ）
環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ａｌａ）
環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ａｌａ）
環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ）または
環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｖａｌ）
【請求項１２】
次式Ｉ（ａ）〜（ｒ）の環式ペプチドの有効量を投与することからなる、β3インテグリンフィブロゲン結合をブロックする方法。
Ｉ  （ａ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ａｌａ）
（ｂ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｌａ）
（ｃ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ｄ−Ａｌａ）
（ｄ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ａｌａ）
（ｅ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ）
（ｆ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ）
（ｇ）  環式（−Ｄ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ａｌａ）
（ｈ）  環式（−Ｄ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ）
（ｉ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ）
（ｊ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ）
（ｋ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ａｌａ）
（ｌ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ａｌａ）
（ｍ）  環式（−Ｄ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ）
（ｎ）  環式（−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ）
（ｏ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ）
（ｐ）  環式（−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ）
（ｑ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｖａｌ）
（ｒ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ）
【請求項１３】
請求項１に記載の組成物を投与することからなる、骨粗鬆症の治療または予防方法。
【請求項１４】
請求項１に記載の組成物を投与することからなる、破骨細胞形成における細胞付着阻害の方法。
【請求項１５】
創傷癒合組成物において、式Ｉ（ａ）〜（ｒ）の環式ペプチドの少なくとも一つまたは生理学的に容認しうるその塩を含む該組成物からなる、改良物。
Ｉ  （ａ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ａｌａ）
（ｂ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｌａ）
（ｃ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ｄ−Ａｌａ）
（ｄ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ａｌａ）
（ｅ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ）
（ｆ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ）
（ｇ）  環式（−Ｄ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ａｌａ）
（ｈ）  環式（−Ｄ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ）
（ｉ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ）
（ｊ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ）
（ｋ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ａｌａ）
（ｌ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ａｌａ）
（ｍ）  環式（−Ｄ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ）
（ｎ）  環式（−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ）
（ｏ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ）
（ｐ）  環式（−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ）
（ｑ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｖａｌ）
（ｒ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ）
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、その内容において１９９２年７月６日米国出願の出願番号０７／９０９、３６７の一部継続出願にかかわるものである。
【０００２】
本発明は、次の式Ｉ（ａ）〜（ｒ）の環式ペプチドおよび生理学的に容認しうるそれらの酸付加塩に基づく新規の薬物組成物に関する。
Ｉ  （ａ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ａｌａ）
（ｂ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｌａ）
（ｃ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ｄ−Ａｌａ）
（ｄ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ａｌａ）
（ｅ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ）
（ｆ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ）
（ｇ）  環式（−Ｄ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ａｌａ）
（ｈ）  環式（−Ｄ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ）
（ｉ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ）
（ｊ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ）
（ｋ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ａｌａ）
（ｌ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ａｌａ）
（ｍ）  環式（−Ｄ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ）
（ｎ）  環式（−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ）
（ｏ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ）
（ｐ）  環式（−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ）
（ｑ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｖａｌ）
（ｒ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ）
上記および下記に示すアミノ酸基の略号は、次のようなアミノ酸の基を表す。
Ａｌａ    アラニン
Ａｒｇ    アルギニン
Ａｓｐ    アスパラギン酸
Ｇｌｙ    グリシン
Ｈｉｓ    ヒスチジン
Ｌｅｕ    ロイシン
Ｐｈｅ    フェニルアラニン
Ｐｒｏ    プロリン
Ｖａｌ    バリン
さらに、次の略号は以下の意味を有する。
ＢＯＣ    ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル
ＣＢＺ    ベンジルオキシカルボニル
ＤＣＣＩ  ジシクロヘキシルカルボジイミド
ＤＭＦ    ジメチルホルムアミド
ＦＡＢ    高速原子衝撃法
ＨＯＢｔ    １−ヒドロキシベンゾトリアゾール
Ｍ*        モリオンピーク
ＯＭｅ      メトキシ
【背景技術】
【０００３】
式Ｉ（ｍ）〜（ｒ）の化合物および生理学的に適合するそれらの酸付加塩は、公知である。それらはＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．  ２９１，  ５０−５４  （１９９１）  に記載されており、その全開示は引用文献としてここに示す。この文献中、それらの調製およびそれらの構造分析について記述されている。
【０００４】
β3インテグリン（ｉｎｔｅｇｒｉｎ）リセプターリーガンド相互反応を特異的に阻害する化合物（「付着リセプター拮抗物質」、「ＡＲＡ」）を骨粗鬆症、血栓症、心筋梗塞、アテローム性動脈硬化症、炎症、溢血、狭心症および腫瘍の治療のための治癒剤として用いることができることは公知である。さらに、これら化合物は、破骨細胞形成の場合に細胞付着を阻害し、脈管形成および創傷の癒合を支持補助する薬剤として適している。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明の目標は、上記の目的達成のためのよりよい医薬物を提供するために、β3インテグリンフィブリノーゲン結合をブロックすることができるＡＲＡを見出だすことにあった。
【０００６】
このように、本発明の一つの目的は、薬物として用いることができる新規の薬剤組成物を提供することである。さらに他の目的には、薬剤活性を発効させる方法が含まれる。
【０００７】
本明細書および特許請求の範囲をさらに理解することによって、本発明のさらなる目的および効果は当業者に明らかになるであろう。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
驚いたことに、一般式Ｉ（ａ）〜（ｒ）の化合物および生理学的に適合できるそれらの酸付加塩が、これら化合物について以前に記述されなかったそのような付着リセプター拮抗性を有することが見出だされた。
【０００９】
この効果は、Ｊ．Ｗ．  Ｓｍｉｔｈ  らの方法（Ｊ．Ｗ．  Ｓｍｉｔｈ，  Ｚ．Ｍ．  Ｒｕｇｇｅｒｉ，  Ｔ．Ｊ．  Ｋｕｎｉｃｋｉ  ａｎｄ  Ｄ．Ａ．  Ｃｈｅｒｅｓｈ，  Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．  ２６５，  １２２６７−１２２７１  （１９９０））を用いて見出だされた。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
発明の詳細を以下に記述する。
【００１１】
９６穴未処理平底プレートを、コーティング用緩衝液に溶かした１μｇ／ｍｌのリセプター（αIIbβ3、αVβ3：これらβはどちらも添え字である。）（１００μｌ／ウェル）でコーティングして、振盪器上で４℃で一晩インキュベートした。プレートを１回結合用緩衝液で洗浄して、次いでブロッキング緩衝液（１００μｌ／ウェル）を用いて３０℃で２時間ブロック処理した。結合用緩衝液でさらに洗浄した後に、ビオチン化したリーガンドおよび拮抗物を加えた。
【００１２】
リーガンドフィブリノーゲンを１μｇ／ｍｌの最終濃度で用いた。拮抗物を濃度を上げながら加えた。リーガンドおよび拮抗物はともに最終濃度の２倍に結合用緩衝液に希釈したものを５０μｌ／ウェルの容量で加えた。
【００１３】
プレートを蓋して、３０℃で３時間インキュベートした。結合しなかった物質を除去するために、プレートを結合用緩衝液（１００μｌ／ウェル）で３回洗浄した。
【００１４】
ヤギ抗ビオチン抗体アルカリホスファターゼ抱合体（１：２０００希釈物）の結合用緩衝液溶液を添加して（１００μｌ／ウェル）、プレートを３０℃で１時間インキュベートした。
【００１５】
プレートを結合用緩衝液で３回洗浄して、基質溶液を加えて、暗所で室温で１〜５分間反応させた。
【００１６】
１００μｌ／ウェルの０．４ＭのＮａＯＨの添加によって反応を停止させて、ＥＬＩＳＡリーダーで４０５ｎｍで測定を行った。
【００１７】
全処理を３回繰り返して行った。
【００１８】
次のようなＩＣ50値が得られた。
化合物                                      ＩＣ50  （μＭ）
αIIbβ3      αVβ3
環式（-Arg-Gly-Asp-D-Phe-Val-Ala）    ０．３２      ０．９０
環式（-Arg-Gly-Asp-D-Phe-Leu-Ala）    ０．７６      １．１０
環式（-Arg-Gly-Asp-Phe-Val-D-Ala）    １．５０      ０．２５
環式（-Arg-Gly-Asp-Phe-Leu-D-Ala）    ０．７６      ０．３１
環式（-Arg-Gly-Asp-D-Phe-Val-Gly）    ０．１３      ０．６２
環式（-Arg-Gly-Asp-D-Phe-Leu-Gly）    ０．０６      ０．５４
環式（-D-Arg-Gly-Asp-Phe-Val-Ala）  ２２．００      ４．５０
環式（-D-Arg-Gly-Asp-Phe-Val-Gly）  ２０．５０      １．５２
環式（-Arg-Gly-Asp-Phe-Pro-Gly）      １．５３      ０．１６
環式（-Arg-Gly-Asp-Phe-D-Pro-Gly）    １．５０      １．０６
環式（-Arg-Gly-Asp-Phe-Pro-Ala）      ０．６２      ０．４８
環式（-Arg-Gly-Asp-Phe-D-Pro-Ala）    ０．７４      ０．３７
環式（-D-Arg-Gly-Asp-Phe-Val）
環式（-Arg-D-Ala-Asp-Phe-Val）      ＞１００      ５２．００
環式（-Arg-Gly-D-Asp-Phe-Val）
環式（-Arg-Gly-Asp-D-Phe-Val）          ０．６０  ＜０．０５
環式（-Arg-Ala-Asp-D-Phe-Val）      ＞１００        ０．７７
環式（-Arg-Gly-Asp-Phe-D-Val）          ０．３０    ０．０５
本発明はまた、一般式Ｉの化合物および生理学的に容認しうるそれらの塩の、薬剤調製物の調製、とくに非化学的方法による、使用に関する。この目的のために、少なくとも一つの固体、液体および／または半固体担体または補助剤とともに、適当であれば、一つまたはそれ以上の他の活性成分と組み合わせて、適切な投薬成形物にそれらを変換することができる。
【００１９】
本発明はまた、少なくとも一つの一般式Ｉの化合物および／または生理学的に容認しうるその塩の一つを含む、調製物、とくに薬剤調製物に関する。
【００２０】
これら調製物は、ヒト用または動物用医薬物として用いることができる。適当な担体は、経腸的（例えば経口的）、非経腸的または局所的投与に適しており、かつ新規の化合物と反応しない有機または無機物質であって、例えば、水、植物油、ベンジルアルコール、アルキレングリコール、ポリエチレングリコール、トリアセチルグリセリン、ゼラチン、乳糖や澱粉など炭水化物、ステアリン酸マグネシウム、タルクおよびワセリンなどである。錠剤、丸薬、被覆錠剤、カプセル、粉末、顆粒、シロップ、液体またはドロップなどはとくに経口的投与に用いられ、座剤はとくに経直腸投与に用いられ、溶液、好ましくは油性または水性溶液、さらに懸濁液、乳濁液またはインプラントはとくに非経腸的投与に用いられ、軟膏、クリームまたは粉末はとくに局所的適用に用いられる。新規の化合物はまた、凍結乾燥することができ、得られる凍結乾燥物は、例えば注射用調製物の調製に用いられる。既述の調製物は、滅菌ができ、および／または、潤滑剤、保存剤、安定剤および／または湿潤剤、乳化剤、浸透圧に影響する塩、緩衝性物質および着色剤および／または香味剤および／または芳香剤などの補助剤を含むことができる。適宜、これらはまた、例えば一つまたはそれ以上のビタミンなどの、一つまたはそれ以上の他の活性化合物を含むことができる。
【００２１】
化合物は、ヒトおよび動物用医薬物における薬剤学的に活性の化合物として、とくに血栓症、心筋梗塞、狭心症、溢血の治療と予防、およびガン疾患を意味する腫瘍に対する治療と予防ために、利用することができる。
【００２２】
本発明はまた、一般式Ｉの化合物の疾患治癒のための使用に関し、とくに人体または動物体の治癒的処置のためのこれらの使用に関する。とくに、これらは細胞付着の阻害剤であり、例えば血液細胞および腫瘍細胞の凝集の阻害に有用である。このように、化合物は、例えば哺乳動物の体細胞またはガン細胞など動物細胞の付着を阻害するために用いることができる。
【００２３】
本発明の物質は、通常、市販の他の公知の調製物と同様にして、とくにＵＳ特許４、４７２、３０５に記載の化合物と同様にして、好ましくは用量単位当り約０．０５〜５００ｍｇ、とくに０．５〜１００ｍｇ、が投与される。日用量は、好ましくは約０．０１〜２ｍｇ／ｋｇ体重である。しかし、それぞれの対象患者に対する特定の用量は、多くの異なる要因、例えば、用いられる特定の化合物の活性、年齢、体重、一般的健康状態、性別、食餌、投与時間および方法、排泄回数、併用薬剤および治療対象の特定疾患の軽重などによって異なる。非経腸投与が好ましい。
【００２４】
当業者は、困難をともなうことなく以上の説明を用いて本発明を充分に実施利用することができると確信される。以下の好ましい特定の態様は、したがって、もっぱら説明を目的とするものであり、この発明の開示になお包含される内容を限定するものではない。
【００２５】
上記および下記において、全ての温度は摂氏で示され、とくに記載がなければパーセントは重量パーセントで表される。
【００２６】
上記および下記に引用する出願物、特許および出版物の全開示に関しては、参照文献として付記する。
【実施例】
【００２７】
［調製例］
２．０ｇのＢＯＣ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ａｌａ−ＯＭｅを６０ｍｌのメタノールに溶解して、１．５ｍｌの２Ｎ水酸化ナトリウム溶液を加えて、混合物を２０℃で３時間攪拌する。蒸発の後、残渣を水に溶解して、希塩酸でｐＨ３に酸性化して、酢酸エチルで抽出する。抽出物をＮａ2ＳＯ4上で乾燥して、再び蒸発させて、得られるＢＯＣ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ａｌａ−ＯＨを２０ｍｌの２Ｎ塩酸のジオキサン溶液とともに２０℃で２時間攪拌する。混合物を蒸発させて、得られるＨ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ａｌａ−ＯＨを１８００ｍｌのジクロロメタンと２００ｍｌのＤＭＦの混合液に溶解して、０℃に冷却して、０．５ｇのＤＣＣＩ、０．３ｇのＨＯＢｔおよび０．２３ｍｌのＮ−メチルモルホリンを攪拌しながら連続して加えて、混合物を０℃でさらに２４時間、２０℃で４８時間攪拌する。溶液を濃縮して、混合層イオン交換樹脂で処理して塩を除去する。次いでこれを濾過して、溶液を蒸発させて、残渣をクロマトグラフィーで精製する。環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ａｌａ）Ｍ*：６４６（ＦＡＢ）が得られる。
【００２８】
同様にして、次のペプチドが得られる。
環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｌａ）、Ｍ*：６６０
環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ｄ−Ａｌａ）、Ｍ*：６４６
環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ａｌａ）、Ｍ*：６６０
環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ）、Ｍ*：６３２
環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ）、Ｍ*：６４５
環式（−Ｄ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ａｌａ）、Ｍ*：６４６
環式（−Ｄ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ）、Ｍ*：６３２
環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ）、Ｍ*：６３０
環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ）、Ｍ*：６３０
環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ａｌａ）、Ｍ*：６４４
環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ａｌａ）、Ｍ*：６４４
環式（−Ｄ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ）、Ｍ*：５７５
環式（−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ）、Ｍ*：５８９
環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ）、Ｍ*：５７５
環式（−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ）、Ｍ*：５８９
環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｖａｌ）、Ｍ*：５７５
環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ）、Ｍ*：５７５
以下の実施例は、一般式Ｉの化合物またはそれらの酸付加塩を含む薬剤調製物に関する。
［実施例Ａ］：錠剤
１ｋｇの環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ａｌａ）、１０ｋｇの乳糖、６ｋｇの微結晶セルロース、６ｋｇポテト澱粉、１ｋｇのポリビニルピロリドン、０．８ｋｇのタルクおよび０．１ｋｇのステアリン酸マグネシウムの混合物を通常の方法で錠剤に圧縮して、各錠剤が１０ｍｇの活性化合物を含むように調製する。
［実施例Ｂ］：被覆錠剤
実施例Ａと同様にして錠剤を圧縮して、次いで通常の方法でショ糖、ポテト澱粉、タルク、トラガカントゴムおよび着色物質の被覆物で被覆する。
［実施例Ｃ］：カプセル
ハードゼラチンカプセルに、環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ａｌａ）を通常の方法で充填して、各カプセルが５ｍｇの活性化合物を含むように調製する。
［実施例Ｄ］：アンプル
１ｋｇの環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ）の３０リットルの１、２−プロパンジオール溶液を滅菌濾過して、この溶液をアンプルに充填して、滅菌シールする。各アンプルは２ｍｇの活性化合物を含む。
［実施例Ｅ］：軟膏
５００ｍｇの環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ）を９９．５ｇのペトロラタムと無菌条件下で混合する。
［実施例Ｆ］：注射用バイアル
１００ｇの環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ）と５ｇの燐酸水素二ナトリウムの３リットルの再蒸留水溶液を、２Ｎ塩酸でｐＨ６．５に調整して、滅菌濾過して、注射用バイアルに充填して、滅菌条件下で凍結乾燥して、バイアルを滅菌状態で密閉する。各注射用バイアルは５ｍｇの活性化合物を含む。
【００２９】
同様にして、一般式Ｉ（ａ）〜（ｑ）の他の活性化合物の一つおよび／または生理学的に容認しうるそれらの酸付加塩を含む薬剤調製物を得ることができる。
【００３０】
上記実施例は、上記実施例に用いられた本発明の総括的または特定的に記述された反応物および／または操作条件を置換することによって、同様な成果をもって反復することができる。
【００３１】
以上の記述から、当業者は本発明の本質的特徴を容易に理解することができ、本発明の精神と目的に反することなく、種々の変更および修飾によって種々の用途および条件に適用することができる。
【産業上の利用可能性】
【００３２】
本発明は、骨粗鬆症、血栓症、心筋梗塞、アテローム性動脈硬化症、炎症、溢血、狭心症および腫瘍の治療のための治癒剤、あるいは、破骨細胞形成の場合に細胞付着を阻害する薬剤、脈管形成および創傷の癒合を支持補助する薬剤としての利用に適している、細胞付着阻害剤として有用な環状ペプチドを含んでなる薬剤組成物を提供する。
【手続補正書】
【提出日】平成16年5月6日(2004.5.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
β3インテグリン（ｉｎｔｅｇｒｉｎ）リセプター・リーガンド相互作用を介する、対象体内における動物細胞の付着が、その起因、促進要因、あるいは、介在要因となる疾患に対する、治療または予防用途に有用な薬剤組成物であって、
前記動物細胞の付着阻害に有効な量の下記式Ｉ（ａ）、Ｉ（ｍ）〜I（ｒ）の環式ペプチドの少なくとも一つまたは生理学的に容認し得るそれらの塩、および薬剤学的に容認し得る担体を含んでなる
ことを特徴とする、薬剤組成物。
Ｉ（ａ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ａｌａ）
Ｉ（ｍ）  環式（−Ｄ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ）
Ｉ（ｎ）  環式（−Ａｒｇ−Ｄ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ）
Ｉ（ｏ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ）
Ｉ（ｐ）  環式（−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ）
Ｉ（ｑ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｖａｌ）
Ｉ（ｒ）  環式（−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ）
【請求項２】
前記動物細胞が哺乳動物の体細胞である
ことを特徴とする、請求項１に記載の薬剤組成物。
【請求項３】
前記動物細胞がガン細胞である
ことを特徴とする、請求項１に記載の薬剤組成物。
【請求項４】
前記組成物は、用量単位当たり、０．０５〜５００ｍｇの前記環式ペプチドを含む
ことを特徴とする、請求項１に記載の薬剤組成物。
【請求項５】
前記組成物は、用量単位当たり、０．５〜１００ｍｇの前記環式ペプチドを含む
ことを特徴とする、請求項１に記載の薬剤組成物。
【請求項６】
血栓症、心筋梗塞、溢血、アテローム性動脈硬化症、炎症、狭心症および／または腫瘍の治療または予防の用途に適合する
ことを特徴とする、請求項１に記載の薬剤組成物。