(57)【要約】【課題】  活性に優れ、しかも副作用の少ない抗菌剤を提供する。【解決手段】  有効活性成分として、次式【化１】2004224802.tif 000015（式中のＲ1は水素原子、メチル基、または１−ヒドロキシエチル基であり、Ｒ2およびＲ3は、水素原子またはヒドロキシル基である）で表されるフラノナフトキノン誘導体を有効活性成分として含有する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
次式
【化１】
2004224802.tif 000014
（式中のＲ1は水素原子、メチル基、または１−ヒドロキシエチル基であり、Ｒ2およびＲ3は、水素原子またはヒドロキシル基である）
で表されるフラノナフトキノン誘導体を有効活性成分として含有することを特徴とする抗菌剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
この発明は、抗菌剤に関するものである。さらに詳しくは、この発明は、優れた活性を有するフラノナフトキノン誘導体を有効成分とする新規な抗菌剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
ＲＮＡウイルスの感染によって起こる疾患には、日本脳炎、デング熱、麻疹、流行性耳下腺炎、風疹、インフルエンザ、Ａ型肝炎、Ｃ型肝炎、黄熱病、出血熱、髄膜炎、小児性下痢症、狂犬病、エボラ出血熱、ラッサ熱、ポリオ、セントルイス脳炎、成人Ｔ細胞白血病、エイズ等があり、さらにＲＮＡウイルス感染が原因と推定されている難治性疾患としては、慢性関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、多発性硬化症、亜急性硬化性全脳炎、アルツハイマー病、潰瘍性大腸炎、クローン病、川崎病、糖尿病等があることが知られている。しかしながら、現状においては、ＲＮＡウイルス感染病に対して有効な化学治療薬はほとんど見出されていない。
【０００３】
実際にも、たとえば日本脳炎、インフルエンザ、麻疹、風疹、流行性耳下腺炎、ポリオ等の関連ウイルスが特定されているものについては、不活化ワクチンや生ワクチンを用いる予防治療がなされるのみであり（狂犬病は血清療法）、発症した場合の治療効果は低いのが実情である。また、非特異的な生体内抵抗物質であるインターフェロン（ＩＦＮ）が現在最も有効な抗ウイルス剤として知られているが、このものは宿主細胞に対する毒性があり、発熱、全身倦怠感、頭痛、食欲不振、白血球血小板減少、中枢神経障害等の副作用が大きいという問題がある。
【０００４】
さらに、抗ＲＮＡウイルス化学療法剤としてはリバビリン、アマンタジンが知られているが、その効果は低く、細胞毒性に伴う不眠、神経過敏等の副作用が強い。このため、ＲＮＡウイルス感染病に対して優れた抗ウイルス活性を有し、しかも、細胞、生体組織に対する副作用の少ない有効な治療薬の出現が待たれている状況にある。
【０００５】
そして、さらには、ＲＮＡウイルス感染病だけでなく、細菌感染に対しての防御性、つまり抗菌活性をも有し、広い範囲の感染病に対して有効な化学治療剤の出現が待たれてもいた。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
このため、ＲＮＡウイルス感染病に対して優れた抗ウイルス活性を有し、しかも、細胞、生体組織に対する副作用の少ない有効な治療薬の出現が待たれている状況にある。
【０００７】
そして、さらには、ＲＮＡウイルス感染病だけでなく、細菌感染に対しての防御性、つまり抗菌活性をも有し、広い範囲の感染病に対して有効な化学治療剤の出現が待たれてもいた。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
この発明は、上記のとおりの課題を解決するものとして、次式
【０００９】
【化２】
2004224802.tif 000002
【００１０】
（式中のＲ1は水素原子、メチル基、または１−ヒドロキシエチル基であり、Ｒ2およびＲ3は、水素原子またはヒドロキシル基である）
で表されるフラノナフトキノン誘導体を有効活性成分として含有することを特徴とする抗菌剤を提供する。
【発明の効果】
【００１１】
この発明により、抗菌活性に優れ、しかも副作用の少ないフラノナフトキノン誘導体からなる抗菌剤が提供される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１２】
上記のとおりのフラノナフトキノン誘導体を有効活性成分とするこの発明の抗菌剤については、広範囲のフラノナフトキノン誘導体が用いられることになる。これらを例示すると、たとえば、２−メチルナフト〔２，３−ｂ〕フラン−４，９−ジオン、２−アセチルナフト〔２，３−ｂ〕フラン−４，９−ジオン、２−（１−ヒドロキシエチル）ナフト〔２，３−ｂ〕フラン−４，９−ジオン、ナフト〔２，３−ｂ〕フラン−４，９−ジオン、５（または８）−ヒドロキシ−２−（１−ヒドロキシエチル）ナフト〔２，３−ｂ〕フラン−４，９−ジオン、５（または８）−ヒドロキシナフト〔２，３−ｂ〕フラン−４，９−ジオン、２−メチル−５（または８）−ヒドロキシ−２−メチルナフト〔２，３−ｂ〕フラン−４，９−ジオン、１，３−ジメチルイソフラノナフトキノン、２−（アセチルエチレンアセタール）ナフト〔２，３−ｂ〕フラン−４，９−ジオン、８−ヒドロキシ−７−メトキシナフト〔２，３−ｂ〕フラン−４，９−ジオン、３−アセチル−５，８−ジメトキシ−２−メチルナフト〔２，３−ｂ〕フラン−４，９−ジオン等々が挙げられる。もちろん、これら例示に何ら限定されることなく、前記の式により表わされる様々な態様がこの発明には可能である。そして、前記式におけるアルキル基、ヒドロキシアルキル基、アルコキシアルキル基については、活性を阻害しない限り、他の任意の置換基、たとえばアルケニル基、シクロアルキル基、シクロアルケニル基、アリール基、ハロゲン原子、アミノ基、ニトロ基、シアノ基、チオール基、チオエーテル基、カルボキシル基、エステル基、アミド基、スルホニル基、ハロホルミル基、複素環基等々が結合されていてもよい。
【００１３】
これらの各種の化合物は、これまで公知の様々な化学的合成の手法、あるいは天然物としての樹皮等からのフラノナフトキノン類の抽出等によって製造することができる。
【００１４】
そして、この発明の抗菌剤は、広い対象を有し、真菌類、グラム陰性菌等々について優れた抗菌作用を示す。
【００１５】
このようなこの発明の抗菌剤は、液剤、固形剤等の様々な剤形において、経口、皮下、静脈、外用等の各種の方法によって処方することができる。当然、その際には、従来公知の配合成分を添加し、塩、エステル等の保護剤をはじめ各種の態様として薬剤組成を構成することができる。
【００１６】
そこで、以下、実施例を示し、この実施例に沿ってさらに詳しくこの発明について説明する。
【実施例】
【００１７】
実施例１
（２−（１−ヒドロキシエチル）ナフト〔２，３−ｂ〕フラン−４，９−ジオンの製造）
ｓｅｃ−ＢｕＬｉを用いたメタレーション反応により合成した。すなわち、Ｎ，Ｎ−ジエチルベンズアミドに、エーテル中（又はＴＨＦ中）、−７８℃でｓｅｃ−ＢｕＬｉ（１ｅｑ．）とＴＭＥＤＡ（１ｅｑ．）を１時間反応させる。次に−７８℃で５−（１−ヒドロキシエチル）−３−フルアルデヒド誘導体（１ｅｑ．）を滴下し、さらにｓｅｃ−ＢｕＬｉ（４ｅｑ．）を加え徐々に室温にもどし、１晩攪拌を続ける。水を加えクロロホルム抽出し、クロロホルム層を飽和ＮａＣｌ水で洗った後、乾燥留去する。残渣をＰＴＬＣ（クロロホルム：アセトン＝１００：１）により分離精製し、保護基を除去し、次式の化合物の黄色結晶を得た。
【００１８】
【化３】
2004224802.tif 000003
【００１９】
実施例２
（２−メチルナフト〔２，３−ｂ〕フラン−４，９−ジオンの製造）
２−ヒドロキシ−１，４−ナフトキノンとプロピオンアルデヒドから合成した２−ヒドロキシ−３−（２−プロペニル）−１，４−ナフトキノン（１５０ｍｇ）とＤＤＱ（２００ｍｇ）をベンゼン（２０ｍｌ）中攪拌、還流する。２〜３時間後、冷却し、濾過して濾液を留去する。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル３０ｇ、ベンゼン）にかけ、最初の黄色分画より目的の次式化合物を黄色結晶として得た（３５％）。
【００２０】
【化４】
2004224802.tif 000004
【００２１】
【表１】
2004224802.tif 000005
【００２２】
実施例３
（Ａ）８−ヒドロキシナフト〔２，３−ｂ〕フラン−４，９−ジオン、および（Ｂ）８−ヒドロキシ−２−メチルナフト〔２，３−ｂ〕フラン−４，９−ジオンの製造）
塩化アルミニウム（２．５ｇ）と無水３−ヒドロキシフタル酸（１ｇ）をニトロベンゼン（５ｍｌ）に加え、アセチルフラン（０．７ｇ）または２−アセチル−５−メチルフランを滴下し１００℃で一晩加熱する。その後、クロロホルム抽出しニトロベンゼンを減圧留去した後カラムクロマトグラフィー（シリカゲル５０ｇ、ベンゼン）にかけ、精製し、次式化合物の黄色結晶を得た（〜５％）。
【００２３】
【化５】
2004224802.tif 000006
【００２４】
【表２】
2004224802.tif 000007
【００２５】
【化６】
2004224802.tif 000008
【００２６】
【表３】
2004224802.tif 000009
【００２７】
実施例４
（５−ヒドロキシ−２−（１−ヒドロキシエチル）ナフト〔２，３−ｂ〕フラン−４，９−ジオンの製造）
Tecomaipe 乾燥樹皮（ブラジル産）１０ｋｇを純メタノール１０ｌ宛で３０分３回加温還流下に抽出し、溶媒を減圧留去した。抽出物（１．４５ｋｇ）をクロロホルム４ｌ宛で３回冷浸し、クロロホルム層を水洗後、硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒を留去して抽出物１０ｇを得た。これをトルエン・酢酸エチルエステル（４：１）を展開溶媒としてシリカゲル６０Ｆ254 を用いて分離薄層クロマトグラフィーを反復して行い、Ｒｆ＝０．２４のスポットを抽出、クロロホルム−メタノール（９：１）で抽出し計８ｍｇの次式化合物を得た（融点１８１℃）。
【００２８】
【化７】
2004224802.tif 000010
【００２９】
実施例５
（抗菌剤）
＜Ａ＞試験材料
白癬菌のTrichophyton rubrum とカンジダ真菌Candida albicansを用いた。
＜Ｂ＞試験方法
白癬菌の増殖阻止試験：サブローブドウ糖寒天培地に一定量の薬剤を加え、２５℃で７日間培養したとき、寒天培地表面に生じる白癬菌コロニー数を計測し、５０％成長阻止する薬剤濃度（ＬＤ50）を算定した。
【００３０】
カンジダ菌の増殖阻止試験：サブローブドウ糖ブイヨン培地に一定量の薬剤を加え、２５℃で５日間培養したとき、増殖する菌量を濁度法にて計測し、５０％成長阻止する薬剤濃度（ＬＤ50）を算定した。
＜Ｃ＞試験結果
前記実施例３Ｂと実施例４の化合物を用いた場合の結果を示したものが表７および表８である。
【００３１】
この表７および表８に示したとおり、両化合物は、濃度依存性に白癬菌の増殖を阻止した。５０％増殖を阻止するＬＤ50値は、実施例４の化合物が０．０７０μｇ／ｍｌ、実施例３Ｂの化合物が０．８１μｇ／ｍｌと微量で有効であり、Candida 菌に対する実施例４の化合物のＬＤ50値４３μｇ／ｍｌ、実施例３Ｂの化合物の４９８μｇ／ｍｌに比べ、約６００倍白癬菌に対し強い抗菌作用を有している。
【００３２】
【表４】
2004224802.tif 000011
【００３３】
【表５】
2004224802.tif 000012
【００３４】
以上のとおり、この発明のフラノナフトキノン誘導体は真菌に対し抗菌作用を示した。特に、この発明の化合物は、皮膚糸状真菌である白癬菌に対する抗菌作用に優れており、皮膚痒癬症に対する治療薬として有用であることがわかる。
実施例６
（抗菌剤）
＜Ａ＞試験材料
病原菌として、
ヘリコバクター・ピロリ  Helicobacter pylori ＮＣＴＣ１１６３７（ヒト）
ヘリコバクター・フィリス  Helicobacter feris（ネコ）
カンピロバクター・ジェジュニ  Campylobacter jejuni
白癬菌Ｔ．メンタグロフィテス  Trichophyton mentagrophytes 
白癬菌Ｔ．ルブルム  Trichophyton rubrum 
を用いた。
【００３５】
コントロールの常在菌として、
大腸菌  Escherichia coli
表層ブドウ球菌   Staphylococcus epidermis 
カンジダ真菌  Candida albicans
を用いた。
＜Ｂ＞試験方法
馬血清５％を含むBrucella寒天培地に一定量の薬剤を加え、２４ウエルプレートに固めた後、１ウエル当たり約１０5 菌を接種した。ガスパック法で３７℃、２日間培養後、５５０ｎｍの吸光度によりコントロールに対する培殖率を測定し、菌の増殖を１００％抑制する薬剤の最小濃度ＭＩＣ（minimum inhibitory concentration）を算定した。
【００３６】
実施例２、実施例４、そして実施例３Ａ、３Ｂの化合物を用いた結果を示したものが表９である。
【００３７】
この表９に示したとおり、実施例２および実施例３Ａ、３Ｂの化合物は、極低濃度（０．０３５〜０．０７μｇ／ｍｌ）でヘリコバクターの増殖を完全に抑制し、０．６３〜１．２５μｇ／ｍｌでカンピロバクターの増殖を完全に抑制した。また、実施例２および実施例３Ａ、３Ｂの化合物は、６．２５μｇ／ｍｌで白癬菌の増殖を完全に抑制し、実施例４の化合物は０．５μｇ／ｍｌで増殖を完全に抑制した。
【００３８】
コントロールの大腸菌、表層ブドウ球菌の増殖を完全に抑制するには実施例２および実施例３Ｂの化合物とも２５〜１００μｇ／ｍｌを要した。
【００３９】
以上の結果から、この発明のフラノナフトキノン誘導体はヘリコバクター、カンピロバクター、白癬菌に対し強い選択的抗菌作用を有すること明らかになった。
【００４０】
【表６】
2004224802.tif 000013
【００４１】
カンピロバクターは腸炎の原因菌であり、ヘリコバクターは最近胃炎、胃潰瘍、十二指腸潰瘍、胃癌の原因菌としての可能性が指摘されており、白癬菌は水虫の原因菌でありこれら疾患の予防治療の両面からフラノナフトキノン誘導体の抗菌作用は重要である。
【００４２】
胃液には数ｍＭの尿素が含まれており胃や十二指腸内の生理的環境の保全に役立っているが、ヘリコバクターが胃に感染すると、この菌がもつ強いウレアーゼ活性が尿素を分解しアンモニアを生成することで菌周囲の胃酸を中和し、そこに定着する。その結果、定着したヘリコバクターが生成するアンモニアが胃や十二指腸粘膜を障害して潰瘍や胃癌の発生原因を作るとともに、血中アンモニア濃度が高まり、肝障害患者においてはその障害を助長する。現在プロトンポンプ阻害剤オメプラゾール、ランソプラゾールなどがヘリコバクター感染の胃炎、胃潰瘍、カンピロバクター腸炎の除菌治療薬として用いられているが、それらのＭＩＣは数μｇ／ｍｌと高く、副作用（じんま疹、肝障害、下痢、便秘、悪心、嘔吐、頭痛、胎児毒性等）があるが、この発明の場合にはこのような心配は顕著に軽減される。
【００４３】
実際、この発明のフラノナフトキノン誘導体の培養ヒト正常細胞の増殖を完全に抑制する濃度は２０〜５０μｇ／ｍｌであって、ヘリコバクター、カンピロバクター、白癬菌に比べ約２０分の１〜１００分の１と低い。このため、細胞毒性の低いフラノナフトキノン誘導体の有用性が期待される。