(57)【要約】【解決手段】（Ａ）極性脂質、（Ｂ）ＨＬＢ１〜９の非イオン性界面活性剤、（Ｃ）ＨＬＢが９を超え、２０までの非イオン性界面活性剤、及び水を含有し、（Ｃ）／（Ａ）＋（Ｂ）が重量比で０．８〜３．５である多層リポソーム、及び該多層リポソームに（Ｅ）生理活性物質を配合した多層リポソーム製剤。【効果】調製が容易で、経時的にも安定な高濃度の多層リポソームを簡単かつ安定に大量生産することが出来る。該多層リポソーム中には水溶性、油溶性、又は両親媒性の生理活性物質を封入することが出来るため、高機能素材として化粧品、医薬品等の外用剤、肥料、農薬用等の用途に使用できる。【選択図】　　　なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
（Ａ）極性脂質、（Ｂ）ＨＬＢ１〜９の非イオン性界面活性剤、（Ｃ）ＨＬＢが９を超え、２０までの非イオン性界面活性剤、及び水を含有し、（Ｃ）／［（Ａ）＋（Ｂ）］が重量比で０．８〜３．５である多層リポソーム。
【請求項２】
更に、（Ｄ）多層リポソーム形成助剤を含有し、（Ｄ）／［（Ａ）＋（Ｂ）］が重量比で０．０５〜０．６である請求項１記載の多層リポソーム。
【請求項３】
（Ｄ）成分がコレステロール類、該コレステロール類の脂肪酸エステル、及び該コレステロール類のアルキルエーテルから選ばれる多層リポソーム形成助剤である、請求項１又は２記載の多層リポソーム。
【請求項４】
請求項１〜３の何れか１項記載の多層リポソームに（Ｅ）生理活性物質を配合した多層リポソーム製剤。
【請求項５】
請求項１〜４の何れか１項記載の多層リポソーム又は多層リポソーム製剤を含有する外用剤。
【請求項６】
請求項１〜４の何れか１項記載の多層リポソーム又は多層リポソーム製剤を含有する肥料組成物。
【請求項７】
請求項１〜４の何れか１項記載の多層リポソーム又は多層リポソーム製剤を含有する農薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明が属する技術分野】
本発明は、多層リポソーム、又はこの中に種々の生理活性物質を封入した多層リポソーム製剤に関する。多層リポソーム又は多層リポソーム製剤は例えば、化粧品や医薬品等の外用剤、肥料、農薬等として有用である。
【０００２】
【従来の技術】
ドラッグデリバリーシステム（ＤＤＳ）という概念を用いて、効率的に薬剤を患部に輸送、又は吸収、保持させて、薬効を高めたり、持続したりする技術は、近年急速に拡大しており、実用化された例も数多く見られる。
ＤＤＳの中では、徐放性製剤、ＴＴＳ（Ｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌ　Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ　Ｓｙｓｔｅｍ：経皮投与法）、ターゲッティング剤、高齢者用製剤などの分野が注目されているが、技術的な面ではＴＴＳ関連の特許が最近最も多く出願されている。
ＴＴＳに用いられる基剤は、多糖、脂肪酸（エステル）、ビニルポリマー、ペプチド・蛋白質などであるが、細胞膜の構成成分であるリン脂質や脂肪酸グリセリド、また皮膚角質層の主要成分であるセラミドなども利用される。しかし、リン脂質やセラミドをリポソームの形態にするためには高度な技術が必要とされる。例えば特開平１０−３１６５５５号や特開２０００−６３２６５号には、皮膚の保護または治療用の外用剤として脂溶性薬物を含有するリポソームがクロロホルムなどの有機溶媒を用いて得られることが記載されている。
【０００３】
また、これまでに様々な油脂誘導体を用いて多層リポソームを製造する技術は数多く知られている。例えば、特開平８−５９４４９号のように、脂肪酸モノグリセリドとアルキルグリセリンエーテルの組み合わせで安定なリポソーム組成物を製造する方法が知られている、また、特開２０００−１８６０１３号などのように、特定の合成セラミドを使用することにより、牛脳などの天然物由来の原料ではなく、安全で比較的安価なリポソーム組成物の製造が試みられている。リン脂質を使用する技術としては、特開昭６２−９５１３４号や特開平３−２９３０２４号など、水素添加レシチンを用いて、リポソームを製造する技術が知られている。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
しかしながら、レシチン由来の臭いや色は、化粧品や医薬品にとって好ましくない。また、リオトロピック液晶のリポソーム製剤は、経時的に極性脂質の結晶化が進み、パフォーマンスの低下が問題となる。また、特開平１０−３１６５５５号や特開２０００−６３２６５号では有機溶媒を用い、操作が煩雑になるという欠点がある。
本発明は、調製が容易で、経時的にも安定な多層リポソーム及び多層リポソーム製剤を得ることを目的とする。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
本発明は、（Ａ）極性脂質、（Ｂ）ＨＬＢ１〜９の非イオン性界面活性剤、（Ｃ）ＨＬＢが９を超え、２０までの非イオン性界面活性剤、及び水を含有し、（Ｃ）／［（Ａ）＋（Ｂ）］が重量比で０．８〜３．５である多層リポソームを提供するものである。
本発明の多層リポソームは脂質２分子膜が何層にも重なり合ったタマネギ状の構造である。本発明の多層リポソームは、極性脂質と非イオン性界面活性剤と水とを特定の比率で組み合せることによって球状に集合したリオトロピック液晶として調製することができ、その形成は偏光顕微鏡でマルテーゼクロスと呼ばれる十字模様によって確認できる。
ＨＬＢはグリフィン（Ｇｒｉｆｆｉｎ）の式によって定義されるものであり、親水性−親油性バランスを示す。このグリフィンの式は、ＨＬＢ＝（親水基部分の分子量／界面活性剤の分子量）×（１００／５）で表されるものである（「新・界面活性剤入門」三洋化成工業株式会社、昭和６０年１１月１日発行、第１２８頁）。
本発明はまた、上記多層リポソームに（Ｅ）生理活性物質を配合した多層リポソーム製剤を提供するものである。本願で云う生理活性物質とは、ごく微量で作用し、生体の生理的機能に何らかの影響を与える化学物質を意味する。
本発明はまた、上記の多層リポソーム又は多層リポソーム製剤を含有する外用剤を提供するものである。
更に本発明は、上記の多層リポソーム又は多層リポソーム製剤を含有する肥料組成物を提供するものである。
更に本発明は、上記の多層リポソーム又は多層リポソーム製剤を含有する農薬組成物を提供するものである。
【０００６】
【発明の実施の形態】
本発明で用いられる（Ａ）成分の極性脂質とは、親水部と疎水部を併せ持ち、水には溶解しない室温（２５℃）で固形の物質であり、例えば、セラミド類及びその類縁体、スフィンゴ糖脂質、糖脂質、リン脂質、高級アルコール、脂肪酸、及びジグリセリドから選ばれる極性脂質が挙げられる。
セラミド類としては、例えば次の一般式（１）で表わされるアミド誘導体が挙げられる。
【０００７】
【化１】
2004059529.tif 000002
【０００８】
（式中、Ｒ１は炭素数１０〜２６の直鎖又は分岐鎖の飽和又は不飽和の炭化水素基を示し、Ｒ２は炭素数９〜２５の直鎖又は分岐鎖の飽和又は不飽和の炭化水素基を示す。）
【０００９】
本発明で使用する（Ａ）成分の極性脂質としては、特に制限はないが、多層リポソームを形成する基剤として、疎水部のそれぞれのアルキル若しくはアルケニル又はアシル炭素数８〜３０のものが好ましく、特に炭素数１２〜１８のものが好ましい。又、常温で固形であり、白色から淡黄色で安定供給可能なものが好ましい。
（Ａ）の含有量は、多層リポソーム調製上の観点から、０．１〜２５重量％が好ましく、０．５〜２０重量％であることがより好ましい。
【００１０】
（Ｂ）成分としては、モノグリセリド、ソルビタン脂肪酸エステル、プロピレングリコール脂肪酸エステル、ポリエチレングリコール脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステルなどが挙げられる。炭素数８〜３０のＨＬＢ１〜９の非イオン性界面活性剤なら何でもよいが、経時的な多層リポソーム構造の変化を抑制するために、炭素数８〜３０、特に１２〜１８の飽和又は不飽和のアルキル基を有するものを使用することが好ましい。
（Ｂ）成分の非イオン性界面活性剤は多層リポソームの安定性向上の観点からＨＬＢ１．５〜８が好ましく、ＨＬＢ２〜７がより好ましい。
（Ｂ）の含有量は、多層リポソーム調製上の観点から、０．１〜２５重量％が好ましく、０．５〜２０重量％がより好ましい。
【００１１】
（Ｃ）成分としては、アルキルポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリエチレングリコール脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン硬化ひまし油、ポリオキシエチレンアルキル又はアルケニルエーテル、テトラオレイン酸ポリオキシエチレンソルビットなどが挙げられる。極性脂質とリオトロピック液晶を形成させるために、非イオン性界面活性剤としてはＨＬＢ９を超えて、２０までのものなら何れでもよいが、親水基部分のエチレンオキシド（以下、ＥＯと略す。）平均付加モル数が４〜３０で、炭素数８〜２４の飽和又は不飽和の脂肪酸部分を有するポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル；親水基部分のＥＯ平均付加モル数が１〜２３で、炭素数８〜２４のアルキル又はアルケニル部分を有するポリオキシエチレンアルキル又はアルケニルエーテル；親水基部分のＥＯ平均付加モル数が８０〜３００で、炭素数８〜２４の飽和又は不飽和の脂肪酸部分を有するポリエチレングリコール脂肪酸エステル；ＥＯ平均付加モル数２０〜１００のポリオキシエチレン硬化ひまし油；親水基部分のＥＯ平均付加モル数が２０〜８０で、炭素数８〜２４の飽和又は不飽和の脂肪酸部分を有するテトラ脂肪酸ソルビットなどが好ましい。
親水基部分のＥＯ平均付加モル数が１５〜２０で、炭素数１２〜１８の脂肪酸部分を有するポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルや、親水基部分のＥＯ平均付加モル数が６〜１３で、炭素数１２〜１８のアルキル部分を有するポリオキシエチレンアルキルエーテル；親水基部分のＥＯ平均付加モル数が１４０〜２００で、炭素数１２〜１８の飽和脂肪酸部分を有するポリエチレングリコール脂肪酸エステル；ＥＯ平均付加モル数４０〜６０のポリオキシエチレン硬化ひまし油；親水基部分のＥＯ平均付加モル数が３０〜６０で、炭素数１２〜１８の不飽和脂肪酸部分を有するテトラ脂肪酸ソルビットなどが特に好ましい。
（Ｃ）成分の非イオン性界面活性剤は多層リポソームの安定性向上の観点からＨＬＢ１１〜１９が好ましく、ＨＬＢ１３〜１８がより好ましい。
（Ｃ）の含有量は、多層リポソーム調製上の観点から、０．４〜３０重量％が好ましく、１〜２５重量％がより好ましい。
【００１２】
本発明多層リポソーム中には水が含まれる。水は、多層リポソーム調製上の観点から多層リポソーム中に４０〜９９重量％、更に５０〜９０重量％含有されるのが好ましい。
本発明は、（Ａ）成分、（Ｂ）成分、（Ｃ）成分及び水に加えて更に（Ｄ）多層リポソーム形成助剤を含有し、（Ｄ）／［（Ａ）＋（Ｂ）］が重量比で０．０５〜０．６であるのが好ましい。
【００１３】
（Ｄ）成分としては、コレステロール、スチグマステロール、ラノステロール、エルゴステロールなどのコレステロール類、該コレステロール類の脂肪酸エステル、及び該コレステロール類のアルキルエーテルなどが挙げられる。コレステロール脂肪酸エステル及びコレステロールアルキルエーテル中のアルキル基は、多層リポソーム構造形成を助成するために炭素数１０〜２６のものが好ましく、特に炭素数１２〜２２の直鎖、又は分岐鎖のものが好ましい。
【００１４】
（配合比率）
リオトロピック液晶構造を形成させるために、（Ｃ）／［（Ａ）＋（Ｂ）］は重量比で０．８〜３．５であり、１．０〜３．０が好ましく、１．５〜２．５がより好ましい。
多層リポソーム構造を形成するために、（Ｄ）／［（Ａ）＋（Ｂ）］は重量比で０．０５〜０．６、更に０．１〜０．５、特に０．２〜０．４が好ましい。
（Ａ）と（Ｂ）の配合比は、多層リポソームの安定性向上の観点から、（Ａ）／（Ｂ）が重量比で０．０１〜１００、更に０．０５〜２０、特に０．１〜５であるのが好ましい。
［（Ａ）＋（Ｂ）］の含有量は、多層リポソーム調製上の観点から、多層リポソーム全体の０．５〜３０重量％、更に１〜２０重量％であるのが好ましい。
【００１５】
（Ｅ）成分としては、水溶性、油溶性、両親媒性のものなら何でも良いが、皮膚及び人体に対して安全なものが好ましい。例えば、保湿剤；抗炎症剤；抗酸化剤；抗菌剤；収斂剤；美白剤；抗老化剤；育毛剤；血流促進剤；細胞賦活剤；スリミング剤；抗アレルギー剤；活性酸素消去剤；５α−リダクターゼ阻害剤；後述する微量要素等の肥料；後述する殺菌剤、殺虫剤、殺ダニ剤、除草剤、植物成長調節剤等の農薬などの、天然物質又は化学合成物質由来の生理活性物質が挙げられる。これらの（Ｅ）成分は、多層リポソーム製剤中に０．０００１〜５重量％、更に０．００１〜１重量％含有されるのが好ましい。
【００１６】
多層リポソーム又は多層リポソーム製剤には、外用剤として用いる場合、上記必須成分（Ａ）〜（Ｅ）以外に、更に（Ａ）、（Ｂ）、（Ｃ）、（Ｄ）又は（Ｅ）成分以外の、油剤、保湿剤、粘度調整剤、ｐＨ調整剤、紫外線吸収剤、防腐剤、香料、溶剤、無機又は有機粉体、殺菌剤、着色剤等を適宜配合することができ、多層リポソーム又は多層リポソーム製剤を含有する外用剤が得られる。
【００１７】
また、多層リポソーム又は多層リポソーム製剤は、肥料に用いる場合、肥料成分を配合することができ、多層リポソーム又は多層リポソーム製剤を含有する肥料組成物が得られる。肥料成分としては、Ｎ、Ｐ、Ｋ、Ｃａ、Ｍｇ、Ｓ、Ｂ、Ｆｅ、Ｍｎ、Ｃｕ、Ｚｎ、Ｍｏ、Ｃｌ、Ｓｉ、Ｎａ等、特にＮ、Ｐ、Ｋ、Ｃａ、Ｍｇの供給源となる無機物及び有機物が挙げられる。そのような無機物としては、硝酸アンモニウム、硝酸カリウム、硫酸アンモニウム、塩化アンモニウム、リン酸アンモニウム、硝酸ソーダ、尿素、炭酸アンモニウム、リン酸カリウム、過リン酸石灰、熔成リン肥（３ＭｇＯ・ＣａＯ・Ｐ２Ｏ５・３ＣａＳｉＯ２）、硫酸カリウム、塩化カリウム、硝酸石灰、消石灰、炭酸石灰、硫酸マグネシウム、水酸化マグネシウム、炭酸マグネシウム等が挙げられる。また、有機物としては、鶏フン、牛フン、バーク堆肥、アミノ酸、ペプトン、ミエキ、発酵エキス、有機酸（クエン酸、グルコン酸、コハク酸等）のカルシウム塩、脂肪酸（ギ酸、酢酸、プロピオン酸、カプリル酸、カプリン酸、カプロン酸等）のカルシウム塩等が挙げられる。これら肥料成分は界面活性剤と併用することもできる。肥料成分は、稲や野菜の露地栽培のように、土壌中に元肥として肥料成分が十分施用されている場合にはあえて配合する必要はない。また、養液土耕や水耕栽培のように元肥の過剰施用を避け肥料成分をかん水と同じに与えるようなタイプの栽培形態には肥料成分を配合することが好ましい。
【００１８】
多層リポソーム又は多層リポソーム製剤は、農薬に用いる場合、農薬原体を配合することができ、多層リポソーム又は多層リポソーム製剤を含有する農薬組成物が得られる。農薬原体とは農薬の有効成分であり、例えば「農薬ハンドブック１９９８年版」（第１０版、平成１０年１２月１５日、社団法人日本植物防疫協会発行）に記載されたものが挙げられる。その具体例としては、殺菌剤、殺虫剤、殺ダニ剤、除草剤、植物成長調節剤などが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００１９】
殺菌剤としては、有機硫黄殺菌剤として、ジネブ剤、マンネブ剤、チウラム剤、マンゼブ剤、ポリカーバメート剤、プロピネブ剤等；ベンズイミダゾール系殺菌剤としてはベノミル剤、チオファネートメチル剤等；ジカルボン酸系殺菌剤としてはイプロジオン剤、プロシミドン剤等；その他の合成殺菌剤としてはトリアジン剤、イミノクタジン酢酸塩剤、イソプロチオラン剤、ＴＰＮ剤、プロベナゾール剤、キャプタン剤、フルオルイミド剤、ＤＰＣ剤、イミノクタジンアルベシル酢酸等；ステロール生合成阻害剤としては、トリフミゾール剤、ビテルタノール剤、ピフェノックス剤、フェナリモル剤、トリホリン剤、トリアジメホン剤、ミクロブタニル剤、ジフェノコナゾール剤、イミベンコナゾール剤等、酸アミド系殺菌剤としては、メタラキシル剤、メプロニル剤等、銅殺菌剤としては、無機銅剤、有機銅剤等；抗生物質殺菌剤としては、ストレプトマイシン剤、ポリオキシン剤、ブラストサイジンＳ剤、カスガマイシン剤、バリダマイシン、オキシテトラサイクリン剤等；土壌殺菌剤としては、エクロメゾール剤、ヒドロキシイソキサゾール剤等；メラミン生合成阻害剤としては、フサライド剤、カルプロパミド剤、有機リン系殺菌剤としては、ＩＢＰ剤、ＥＤＤＰ剤、ホセチル剤等；無機殺菌剤としては、無機硫黄剤、炭酸水素塩剤等；メトキシアクリレート系殺菌剤としては、アゾキシストロビン、クレソキシムメチル剤等；アニリノピリミジン系殺菌剤としては、メパニピリウム剤等；合成抗細菌剤としては、オキソリニック酸剤等；天然物殺菌剤としては大豆レシチン等；生物由来の殺菌剤としては、対抗菌剤等が挙げられる。
【００２０】
殺虫剤の場合、ピレスロイド系殺虫剤としては、フェンバレレート剤、シフルトリン剤、ペルメトリン剤、フルシトリネート、エトフェンプロックス剤等；有機リン系殺虫剤としては、ＤＤＶＰ剤、ＭＥＰ剤、マラソン剤、ジメトエート剤、ＰＡＰ剤、ＭＰＰ剤、ＤＭＴＰ剤、ＥＰＮ剤等；カーバメート系殺虫剤としては、ＢＰＭＣ剤、ＮＡＣ剤、ソメミル剤等；ネライストキシン系殺虫剤としては、カルタップ剤等；天然物系殺虫剤としては、除虫菊由来のピレトリン剤、ピペロニルブトキシド剤、マメ科のかん木デリス由来のロテノン剤、ニコチン剤、大豆レシチン剤、デンプン剤等が挙げられる。昆虫成長制御剤（ＩＧＲ剤）としては、ジフルベンズロン剤、テフルベンズロン剤、クロルフルアズロン剤、ブプロフェジン剤、イソプロチオラン剤、フルフェノクスロン剤等が挙げられる。
【００２１】
また殺ダニ剤としては、ケルセン剤、ＢＰＰＳ剤、酸化フェンブタスズ剤、ヘキシチアゾクス剤、アミトラスズ剤、フェンピロキシメート剤、テブフェンピラド剤、ハルフェンプロックス剤、ビアラホス剤等；クロロニコチニル系殺虫剤としては、イミダクロプリド剤等；その他の合成殺虫剤としては、オレイン酸ナトリウム剤、オレイン酸カリウム液剤等；殺線虫剤としては、Ｄ−Ｄ剤、タゾメット剤、ベノミル剤等；生物由来の殺虫剤としてはＢＴ剤等が挙げられる。
【００２２】
除草剤としては、酸アミド系除草剤としては、ＤＣＰＡ剤、アラクロール剤、アシュムラム剤等；尿素系除草剤として、ＤＣＭＵ剤、リニューロン剤等が挙げられる。ビピリジリウム系除草剤としては、例えばパラコート剤、ジクワット剤等が挙げられる。ダイアジン系除草剤としては、例えばブロマシル剤、レナシル剤等が挙げられる。Ｓ−トリアジン系除草剤としては、例えばＣＡＴ剤、シメトリン剤等が挙げられる。その他の有機除草剤としては、例えばＤＢＮ剤等のニトリル系除草剤、セトキシジム剤、クレトジム剤等が挙げられる。ジニトロアニリン系除草剤としては、例えばトリフルラリン剤、ペンディメタリン剤等が挙げられる。カーバメート系除草剤としては、ベンチカーブ剤等が挙げられる。芳香族カルボン酸系除草剤としては、例えばＭＤＢＡ剤等が挙げられる。フェノキシ酸系除草剤としては、２，４−ＰＡ剤、シハロホップブチル剤等が挙げられる。有機リン系除草剤としては、ピペロホス剤、ブタンミホス剤等が挙げられる。アミノ酸系除草剤としては、グリホサート剤、ビアラホス剤、グルホシネート剤等が挙げられる。脂肪酸系除草剤としては、ペラルゴン酸剤、ＤＰＡ剤等が挙げられる。スルホニル尿素系除草剤としては、チフェンスルフロンメチル剤、フラザルスルフロン剤、ベンスルフロンメチル剤等が挙げられる。ピリミジルオキシ安息香酸系除草剤としては、ビスピリバックナトリウム塩等が挙げられる。ダイアゾール系除草剤としては、ピラゾレート剤等が挙げられる。
【００２３】
これらの除草剤のうち、酸アミド系除草剤、ダイアジン系除草剤、ニトリル系除草剤、ジニトロアニリン系除草剤、芳香族カルボン酸系除草剤及びアミノ酸系除草剤が好ましく、特にアミノ酸系除草剤、中でもビアラホス剤、グルホシネート剤又はグリホサート剤が好ましい。
【００２４】
更に植物成長調節剤としては、オーキシン拮抗剤としては、マレイン酸ヒドラジド剤、ウニコナゾール剤等；オーキシン剤としては、インドール酪酸剤、１−ナフチルアセトアミド剤、４−ＣＰＡ剤等；サイトカイニン剤としては、ホルクロルフェニュロン剤等；ジベレリン剤としてはジベレリン剤等、その他のわい化剤としては、ダミノジット剤等；蒸散抑制剤としては、バラフィン剤等；その他の植物成長調整剤としては、コリン剤等；生物由来の植物成長調整剤としては、クロレラ抽出物剤、シイタケ菌糸体抽出物等；エチレン剤としては、エテホン剤等が挙げられる。
生理活性物質が化粧品や医薬品等の外用剤、肥料、農薬等の場合、多層リポソームに内添すること、外添すること、両方を併用することのいずれの方法をとることもできる。内添する場合に、肥料は水溶性のものが好ましく、外用剤は油溶性、両親媒性のものが好ましい。
【００２５】
（多層リポソーム組成物の製造方法）
まず、８０℃で（Ａ）成分、（Ｂ）成分、及び（Ｄ）成分の油相成分を完全に均一溶解混合する。（Ｅ）成分のうちで親油性、又は両親媒性の生理活性物質は、このときに加えて均一混合する。
次に、（Ｃ）成分の親水性の非イオン性界面活性剤などの水相成分を添加し、再び８０℃まで加温する。（Ｅ）成分のうちで親水性の生理活性物質はこのときに加えて均一溶解する。
油相成分が完全に融解したことを確認した後、攪拌を行ないながら、系内温度を徐々に４０℃前後まで冷却する。冷却の途中で、混合物は自己凝集によりリオトロピック液晶に相転移し、多層リポソーム組成物となる。
攪拌装置は、系内を均一に攪拌できるプロペラミキサーのようなものでも良いが、粘度が高いような場合は、アジホモミキサーなどを用いて均一攪拌を行なう。
尚、ここで多層リポソーム組成物は、多層リポソーム又は多層リポソーム製剤を意味する。
【００２６】
【実施例】
以下に実施例によって更に本発明を説明する。
実施例１〜６及び比較例１〜６
上記の多層リポソーム組成物の製造方法に基づいて、表１及び表２に示す実施例１〜６及び比較例１〜６の組成物を調製し、多層リポソーム構造の形成の有無と組成物の安定性を確認した。表１及び表２中の数値は重量％である。
【００２７】
【表１】
2004059529.tif 000003
【００２８】
【表２】
2004059529.tif 000004
【００２９】
多層リポソーム構造の形成は、偏光顕微鏡でマルテーゼクロスと呼ばれる十字模様が観察出来るかどうかで判断を行った。マルテーゼクロスが確認出来たものは、多層リポソーム構造をとっており、それ以外は多層リポソーム構造をとっていないと判断した。
評価基準は以下の通りである。
○：調製直後にマルテーゼクロスが全体的に確認できた。
△：調製直後にマルテーゼクロスが部分的に確認できた。
×：調製直後にマルテーゼクロスが全く確認できなかった。
また、調製した組成物は、４０℃、２５℃、−５℃でそれぞれ保存し、１ヶ月後に同様な偏光顕微鏡観察を行った。このとき、調製直後のマルテーゼクロスと同じような状態が確認出来たものは安定性良好とし、それ以外のものは安定性不良とした。
評価基準は以下の通りである。
○：１ヶ月後にマルテーゼクロスが全体的に確認できた。
×：１ヶ月後にマルテーゼクロスが全く確認できなかった。
【００３０】
（多層リポソーム構造の形成）
実施例１〜６の組成物は、すべてマルテーゼクロスが観察できた。比較例１、２及び４〜６の組成物は部分的にマルテーゼクロスが観察できたが、均一ではなく、部分的にしか多層リポソーム構造が形成されていないことが示唆された。比較例３の組成物は、調製直後からマルテーゼクロスが観察出来なかった。
【００３１】
（保存安定性）
実施例１〜６及び比較例１〜６の組成物を４０℃、２５℃、−５℃でそれぞれ１ヶ月保存したものについて偏光顕微鏡観察を行った。その結果、実施例１〜６の組成物は、いずれの温度でもマルテーゼクロスが観察され、多層リポソーム構造が安定に保たれていることが確認出来た。しかしながら、比較例１〜６の組成物は、マルテーゼクロスが全く観察されず、保存により、多層リポソーム構造が変化してしまっていることが示唆された。
【００３２】
2004059529.tif 000005
＊１：合成セラミドＳＬＥ６６（花王製）
＊２：（　　）内はＥＯの平均付加モル数を示す。
【００３３】
2004059529.tif 000006
＊１：合成セラミドＳＬＥ６６（花王製）
＊２：（　　）内はＥＯの平均付加モル数を示す。
【００３４】
2004059529.tif 000007
＊１：（　　）内はＥＯの平均付加モル数を示す。
【００３５】
2004059529.tif 000008
＊１：（　　）内はＥＯの平均付加モル数を示す。
【００３６】
2004059529.tif 000009
＊１：（　　）内はＥＯの平均付加モル数を示す。
【００３７】
2004059529.tif 000010
＊１：（　　）内はＥＯの平均付加モル数を示す。
【００３８】
2004059529.tif 000011
＊１：（　　）内はＥＯの平均付加モル数を示す。
【００３９】
実施例７〜１３に示されるような、多層リポソーム組成物を使用した化粧水、乳液、クリーム、軟膏、肥料組成物、農薬組成物を調製した。
多層リポソームの製造法に基づいて、常法通り、親油性及び両親媒性の材料は油相に、親水性の材料は水相に添加することにより、それぞれの組成物を得た。これらの組成物を実施例１〜６及び比較例１〜６に示したのと同じ方法で偏光顕微鏡観察した。結果は下記の表３の通りであった。
【００４０】
【表３】
2004059529.tif 000012
【００４１】
実施例７〜１３の組成物は、偏光顕微鏡観察により、いずれもマルテーゼクロスが観察され、経時的にも安定であったことから、化粧料や医薬品等の外用剤、肥料、農薬などとして使用できる。
【００４２】
【発明の効果】
本発明では、特定の極性脂質、低ＨＬＢ非イオン性界面活性剤及び高ＨＬＢ非イオン性界面活性剤を特定の割合で配合することにより、調製が容易で、経時的にも安定な多層リポソームを得ることが出来る。また、クロロホルムなどの有機溶剤を用いることなく、高濃度の多層リポソームを簡単かつ安定に大量生産することが出来る。
また、多層リポソーム中には水溶性、油溶性、又は両親媒性の生理活性物質を封入することが出来るため、高機能素材として化粧品、医薬品等の外用剤、肥料、農薬用等の用途に使用できる。
多層リポソームに生理活性物質が封入された多層リポソーム製剤は、生体へのとり込み促進や、少量で薬効効果がもたらされ、生理活性物質の効果を向上又は増強させることが期待される。
更に、多層リポソームにすることにより、多層リポソームを構成する極性脂質の効果が増強することも期待される。