(57)【要約】【課題】天然抗菌剤の提供。【解決手段】バイオ新素材であって、食品、医薬品、化粧品、繊維、生活用品などで防腐および抗酸化、そして老化抑制機能を有することによって品質の安全性と安定性を高め、ヒトを含めた哺乳類にとって安全であり、耐性を誘発しながら適切な抗酸化および老化抑制機能まで保有しており、感染性疾病を治療、予防する効果をもつ天然抗菌剤を提供する。【選択図】　図３
2004059566.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
黄ゴン抽出物から分離精製したジメトキシテトラヒドロキシフラボンを主活性成分として含むことを特徴とする天然抗菌剤。
【請求項２】
前記ＤＴＦの含量が０．００１〜１．０重量％であることを特徴とする請求項１記載の天然抗菌剤。
【請求項３】
バイカリン０．１〜５．０重量％を含むことを特徴とする請求項１または２記載の天然抗菌剤。
【請求項４】
プロピレングリコール、グリセリン、１，３−ブチレングリコール、水、アルコールから選択される溶媒を含むことを特徴とする請求項３記載の天然抗菌剤。
【請求項５】
苦参抽出物、　金銀花抽出物、黄蓮抽出物、連翹抽出物、　牡丹皮抽出物、五倍子抽出物、にんにく抽出物または甘草抽出物から選択される少なくとも１種以上の生薬抽出物を少なくとも１０重量％含むことを特徴とする請求項４記載の天然抗菌剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、抗酸化機能と抗老化活性を有しながら抗菌力にも優れた天然抗菌剤に関し、さらに詳細には、黄ゴン抽出物から得られるジメトキシテトラヒドロキシフラボン（Ｄｉｍｅｔｈｏｘｙ　Ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｘｙ　Ｆｌａｖｏｎｅ：以下、ＤＴＦと称する）を主活性成分とし、抗酸化機能と抗老化活性を有し、抗菌力が高く、抗菌スペクトルが広範な多機能性天然抗菌剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
食品、医薬品、化粧品などの各種製品の品質を長期間保存するためには、微生物による腐敗を防ぐ防腐剤が必須であるが、特に、製品特性上、品質保存期限が比較的長く、微生物栄養源の多い化粧品は一層そうである。
【０００３】
しかし、既存の防腐剤のうち最も安全で、化粧品、医薬品に汎用されるパラベン類の防腐剤さえ皮膚アレルギー（Ａｎｄｒｅａ　Ｃｏｕｎｔｉなど、Ｃｏｎｔａｃｔ　Ｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ，１９９７，３７；３５−３６．）と環境ホルモンとしての可能性（Ｅｄｗｉｎなど、Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　Ａｐｐｌｉｅｄ　Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，　１９９８，１５３；１２−１９．）および耐性菌誘発という問題点を抱えていた。また、食品用防腐剤も、許容された基準内での使用さえ不信されており、持続的な体内蓄積による急、慢性毒性、突然変異誘発などの新たな問題可能性が浮彫りになっている（Ｄｏｎｇ−Ｈｗａ　Ｓｈｉｎ、食品科学と産業、１９９０，２３（４）　６８−７２）。
【０００４】
これらの問題点から、製品の安全性と経済性に優れた天然防腐剤に対する研究が行われつつあり、その結果、香辛料、牛乳および魚類などの食品類、精油、漢方材などから多くの天然抗菌性物質が報告された。
【０００５】
天然の抗菌性物質としてアルカロイド（ａｌｋａｌｏｉｄ）、フラボノイド（ｆｌａｖｏｎｏｉｄ）、フィトアレキシン（ｐｈｙｔｏａｌｅｘｉｎ）、抗菌ペプチドなどが知られており、有機酸と脂肪酸などの抗菌性に対するものも知られている。その大部分は、酸のｐＨによる効果とキレートによる効果が主メカニズムと推定される（ＥＩ−ｓｈｅｎａｗｙ、ＭＡなど、Ｊ．Ｆｏｏｄ　Ｐｒｏｔｅｃ．１９８９，５２（１１）：７７１−７７８）　（Ｂｉｚｒｉ，ＪＮ　など、Ｊ　Ｆｏｏｄ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９９４，５９（１），１３０−１３５）。
【０００６】
しかし、報告された天然抗菌性物質の大部分は、色臭、安定性低下、狭い抗菌スペクトル、剤形上の問題点などによって商用化されておらず、扁柏抽出物のヒノキチオール（Ｈｉｎｏｋｉｔｉｏｌ）、木蓮抽出物のメグノノール（Ｍｅｇｎｏｎｏｌ）、グレープフルーツ種子抽出物　ＤＦ−１００などごく一部だけが商用化してある。
【０００７】
この中で最も製品開発に進んだＤＦ−１００において、抗菌力は、ＤＦ−１００に含まれた有機酸および合成保存料である塩化ベンゼトニウム（ｂｅｎｚｅｔｈｏｎｉｕｍ　ｃｈｌｏｒｉｄｅ）のためと知られており、その他の天然抗菌剤などは経済性が低いか、狭い抗菌スペクトルまたは物性による使用範囲の制限性などの問題を抱えている状況なので、さらに進歩され製品化開発が可能な天然抗菌剤が切に求められている。
【０００８】
一方、現在一般製品に使用されている抗菌剤は、製品の品質を保持する次元に止まらず、微生物によるヒトおよび家畜における疾病発生を予防し、治療するために合成抗生剤が汎用されているが、その誤用および濫用によって各種の耐性菌株が出現しつつあり、その感染症を治療するために病院では高単位の抗生剤を使用しなければならない悪循環が続いている。また、家畜にとっても原因菌の感受性が劣り、抗生剤残留という公衆保健上重要な問題が台頭している。
【０００９】
特に、メチシリン抵抗性葡萄状球菌（Ｍｅｔｈｉｃｉｌｌｉｎ　Ｒｅｓｉｓｔａｎｔ　Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ；ＭＲＳＡ）　（Ｖｏｓｓ，Ａ等、Ｉｎｔ　Ｊ．　Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ，　１９９５，５：１０１−１０６）に対処するために２種類以上の抗生剤を複合的に使用するとか、バンコマイシン（Ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ）を使用しているが、バンコマイシンに対して抵抗性を有する腸内細菌（Ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ　ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｉ）　（Ｂｉｌｌｏｔ−ｋｌｅｉｎ　Ｄ，　Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．　Ａｇｅｎｔｓ．　Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ，１９９２，３６：１４８７−１４９０）のような耐性菌株が出現している。
【００１０】
そこで、最近は、抗生剤の感受性を高めるために、天然物でフラボノイドとともに使用して感受性を高めたという報告があり（ＩＡＩＮ　Ｘ，ＬＩＵ等、Ｊ．　Ｐｈａｒｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，２０００，５２：３６１−３６６）、抗菌ペプチド（Ｇｉａｃｏｍｅｔｔｉ　Ａ　等、Ｊ．　Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．　Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ　２０００　Ｎｏｖ；４６（５）：８０７−８１１）も併用効果のための代案として多く研究したが、抗菌ペプチドは抗菌性だけを示す制限性があり、経済的な大量生成方法に問題がある（Ｌｅｅ　ＪＨ等、　Ｐｒｏｔｅｉｎ．　Ｅｘｐｒ．　Ｐｕｒｉｆ，　１９９８　Ｆｅｂ；　１２（１），５３−６０）。
【００１１】
一方、生体外部または生体内における生化学的酸化反応によって発生するフリラジカルは、リューマチ性関節炎、心臓病、循環器障害、癌などの各種疾患の原因となっている。フリラジカルは、タンパク質、ＤＮＡ、免疫細胞など免疫系統の因子を損傷させて疾患を誘発し、細胞生体膜の不飽和脂肪酸を攻撃して過酸化脂質を蓄積させることによって、生体機能を低下させ、老化および成人病疾患を誘発するものとして知られている。
【００１２】
また、食品および化粧品、医薬品などの酸敗による品質低下は経済的損失を招くことは勿論、それを摂取したり塗ったりするヒトにまで影響するため、ヒトと関連のある食品、化粧品、医薬品および家畜の飼料などに抗酸化効果のある物質を添加するのが好ましい。
【００１３】
微生物による感染と抗酸化は不可分の関係にあるところ、グラム陰性菌のエンドトキシン（ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ）によってショックが誘発され、フリラジカルの内在的防御因子の　スーパーオキシドジスムターゼ（ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ　ｄｉｓｍｕｔａｓｅ）のような活性酸素消去剤の発現を減少させることも知られている（Ｌｅａｃｈ　Ｍ等、Ｂｒ　Ｊ．　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，　１９９８，　ｏｃｔ；１２５（４）：８１７−８２５）。
【００１４】
また、細菌と飲食物の相互作用で活性化された多形核白血球によって生成されたフリラジカルは、酸化還元剤活性のバランスを崩して歯根膜組織の破壊を誘導して炎症がさらに悪化する（Ｗａｄｄｉｎｇｔｏｎ　ＲＪ等、Ｏｒａｌ．　Ｄｉｓ、２０００，　Ｍａｙ；　６（３）：１３８−１５１）。この脈絡から、ビタミンＣは、重要な水溶性抗酸化剤の一つであって、エンドトキンシンショックと関連した症状を緩和させるという報告があるが（Ｖｉｃｔｏｒ　ＶＶ等、Ｉｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，　２０００　Ｊａｎ；４６（１）：８９−１０１）、事実上、感染症の適切な治療のために抗酸化剤を併用して投与する場合は稀である。
【００１５】
遠くから抗酸化剤としては酵素系列と比酵素系列の天然抗酸化物質が多く使用されてきたが、最も大きく実用化されたものの一つであるトコフェロール（ｔｏｃｏｐｈｅｒｏｌ）は、抗酸化効果が比較的低く、合成抗酸化剤は一定水準以上摂取すると各種疾病を誘発すると知られている。したがって、安全で効果の高い天然抗酸化剤が求められている実情である。
【００１６】
そこで、本発明者は、抗酸化機能とともに優れた抗菌力を発揮する天然抗菌剤に関する研究を行い続けた結果、天然抗菌剤に関する技術の一環として、韓国特許出願番号第２００１−６３７２号でキトオリゴ糖錯化合物と黄ゴン抽出物を含む天然抗菌剤に関する技術を開示するに至った。
しかし、前記本発明者によって提示された天然抗菌剤は、既存天然抗菌剤と同様に、安定性が低下され、狭い抗菌スペクトルを有するので、使用範囲に制限があるのみならず、剤形上の問題点によって商用化に難がある。
【００１７】
【発明が解決しようとする課題】
したがって、本発明は、黄ゴン抽出物から抗菌性を示す成分であるジメトキシテトラヒドロキシフラボン（ＤＴＦ）を分離精製し、これを抗菌剤組成物に活用することによって、抗菌力にごく優れており、広範囲のスペクトルを有しながら適切な抗酸化機能と老化抑制機能まで有する多機能性天然抗菌剤を提供することにその目的がある。
【００１８】
また、本発明は、抗菌力を極大化させるために、ＤＴＦとともにＤＴＦの抗菌活性を上昇させる物質を含む天然抗菌剤を提供することに他の目的がある。
【００１９】
【課題を解決するための手段】
前記目的を達成するために、本発明は、黄ゴン抽出物から分離精製したＤＴＦを主活性成分として含むことを特徴とする天然抗菌剤を提供する。
【００２０】
また、本発明は、ＤＴＦを主活性成分とし、前記ＤＴＦの抗菌活性を上昇させる、黄ゴン抽出物から分離精製したバイカリンをさらに含むことを特徴とする天然抗菌剤を提供する。
【００２１】
【発明の実施の形態】
以下、本発明をさらに詳細に説明する。
【００２２】
本発明は、黄ゴン抽出物から分離精製したＤＴＦを主活性成分とする天然抗菌剤を提供する。
【００２３】
黄ゴン抽出物は、黄ゴン（Ｓｃｕｔｅｌｌａｒｉａ　ｂａｉｃａｌｅｎｓｉｓ）乾固物から得られるものであって、解熱、胆汁分泌促進、胃液分泌抑制、動脈硬化防止、抗菌および抗真菌、抗ウィルスに効果があると知られている。その他にも、黄ゴンは、抗酸化、老化抑制（Ｓｈｉｅｈ　ＤＥ，　Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ，　２０００　Ｓｅｐ−Ｏｃｔ；２０（５Ａ）：　２８６１−２８６５）、抗炎および抗アレルギー効果（Ｗｉｌｌｉａｍｓｏｎ　ＥＭ等、　Ｐｏｔｔｅｒ’ｓ　Ｎｅｗ　Ｃｙｃｌｐａｅｄｉａ　ｏｆ　Ｂｏｔａｎｉｃａｌ　Ｄｒｕｇ　ａｎｄ　Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ，　ｒｅｖｉｓｅｄ　ｅｄｎ，１９８８，ｐ３６２，　Ｔｈｅ　Ｃ．Ｗ．Ｄａｎｉｅｌ　Ｃｏ．，Ｌｔｄ，　Ｕ．Ｋ）などの機能も知られている。
【００２４】
前記黄ゴン抽出物は、通常、植物から有効成分を抽出するために使用する各種の方法によって得られる。
【００２５】
その一例に、黄ゴン乾固物にエタノール、メタノールなどの極性溶媒またはそれらと精製水の混合溶液を粉砕物の１０倍（重量比）程加え、冷却コンデンサ付き抽出機で約８０℃の温度で２４時間加熱して抽出物を得、これをろ過し減圧濃縮させて濃縮抽出液を得る。得られた濃縮抽出液に、その２倍（重量比）に該当する精製水を加えた後、酢酸エチル、塩化メチレンなどの非極性溶媒を４倍（重量比）ほど添加し、強く振とうした後、上層の非極性溶媒層を分離して減圧濃縮すると黄ゴン抽出物が得られる。
【００２６】
他の例に、黄ゴン乾固物に精製水を２倍（重量比）加え、ここにエタノール、メタノールなどの極性溶媒またはそれらと精製水との混合溶液を粉砕物１００重量部に対する２０重量部を加えた後、冷却コンデンサ付き抽出機で６０℃の温度で１０時間加熱して抽出物を得、これをろ過し減圧濃縮して濃縮抽出液を得る。得られた濃縮抽出液に、その１０倍（重量比）に該当するエタノール、メタノールなどの極性溶媒またはそれらと精製水との混合溶液を加えて強く振とう抽出した後、ろ過して固形分を除去しろ過すると黄ゴン抽出液が得られる。
【００２７】
さらに他の例に、黄ゴン抽出物中の主要抗菌活性成分は、超臨界流体抽出技術を使用した下記のような抽出方法によって得られる。つまり、黄ゴン乾固物を超臨界抽出装置に詰めた後、７０〜９０℃、４，０００〜６，０００　ＰＳＩ圧力で二酸化炭素を用いて１次抽出した後、二酸化炭素１００体積部に対して２〜２０（ｖ／ｖ）％のジエチルアミンまたはトリエチルアミンが溶解されたメタノール、エタノール、水またはこれらの混合溶媒から選択された１種以上のアルカリ性共溶媒１〜２０体積部を反応器で混合して抽出した後、カラムクロマトグラフィを使用して選択的な黄ゴン抽出物分画が得られる。
【００２８】
以上の方法のほかにも様々な方法を通じて黄ゴン抽出物を得ることができ、得られた黄ゴン抽出物には、主成分のバイカレイン（ｂａｉｃａｌｅｉｎ）を含めてバイカリン（ｂａｉｃａｌｉｎ）、ＤＴＦ、オウゴニン（ｗｏｇｏｎｉｎ）、７−メトキシバイカレイン（７−ｍｅｔｈｏｘｙｂａｉｃａｌｅｉｎ）、　オロキシリン−Ａ（ｏｒｏｘｙｌｉｎ−Ａ）、ｓｋｕｌｌｃａｐｆｌａｖｏｎｅ　Ｉ、ＩＩなどのフラボノイドが含有されており、その他にも、ベータシトステロール（ｂｅｔａ−ｓｉｔｏｓｔｅｒｏｌ）、カンペステロール（ｃａｍｐｅｓｔｅｒｏｌ）などのステロール類と、スクロース（ｓｕｃｒｏｓｅ）、Ｄ−グルコース（Ｄ−ｇｌｕｃｏｓｅ）などの糖類、精油およびその他各種樹脂が含有されている。
【００２９】
通常の抽出方法で獲得される収率は、乾燥状態の原材料重量に対してバイカレイン、バイカリンが２〜３重量％程であり、その他オウゴニン、ＤＴＦなどは１重量％未満と知られているが、抽出方法と条件にしたがって各活性成分の収率は可変的である。
【００３０】
前述の黄ゴン抽出物において、その主成分となるバイカレイン（ｂａｉｃａｌｅｉｎ）はその含量は多いが、制限的抗菌力しか有しないに対し、黄ゴン抽出物に含有されているＤＴＦはその含量はごく微量であるが、抗菌活性に極めて優れている。
【００３１】
したがって、本発明では前記黄ゴン抽出物からＤＴＦを分離精製し、これを天然抗菌剤に使用したが、黄ゴン抽出物からＤＴＦを分離精製するのは通常のカラムクロマトグラフィで容易に分離精製することができる。
【００３２】
本発明では、黄ゴン抽出物をシリカゲルカラムを使用し、エタノール、メタノール、酢酸エチルまたは塩化メチレンなどから選択された溶媒を混合して濃度勾配方法で分画を施してＤＴＦを得た。
【００３３】
得られたＤＴＦは、その自体でも抗菌力が高く、抗菌スペクトルが広範囲で、高い抗酸化力と老化抑制活性を有するが、前記ＤＴＦはプロピレングリコール、グリセリン、１，３−ブチレングリコール、水またはアルコールから選択された溶媒に溶解させて抗菌剤として使用するか、その他各種物品に添加して抗菌力を有させることもできる。
【００３４】
ＤＴＦは、使用過程においてその含量が１重量％を超えると抗菌力がそれ以上大きく増加しないので、１重量％以内に添加するのが好ましく、その添加量が０．００１重量％未満の場合は充分な抗菌力が得られないので、ＤＴＦの含量は０．００１〜１．０重量％が好ましい。
【００３５】
本発明によれば、ＤＴＦに黄ゴン抽出物から分離精製したバイカリンを添加する場合、ＤＴＦの抗菌活性を上昇させてより極大化した抗菌力が得られるが、バイカリンが０．１〜５．０重量％の含量範囲でさらに極大化した上昇効果が得られる。つまり、ＤＴＦ　０．００１〜１．０重量％とバイカリン０．１〜５．０重量％を含む天然抗菌剤の場合、ＤＴＦの抗菌活性をバイカリンが上昇せしめてより優れた抗菌力が得られる。このとき、バイカリンの含量が０．１重量％未満の場合はＤＴＦの抗菌活性の上昇効果が充分得られなく、その含量が５重量％を超えても抗菌活性の上昇効果が比例的に増加することなく一定なので、バイカリンの含量は０．１〜５．０重量％が好ましい。
【００３６】
前記バイカリンは、ＤＴＦと同様に、黄ゴン抽出物をシリカゲルカラムを使用し、エタノール、メタノール、酢酸エチルまたは塩化メチレンなどから選択された溶媒を混合して濃度勾配方法で分画を施すと容易に得られる。
【００３７】
ＤＴＦとバイカリンを含む天然抗菌剤に、苦参抽出物、金銀花抽出物、黄蓮抽出物、連翹抽出物、牡丹皮抽出物、五倍子抽出物、にんにく抽出物または甘草抽出物から選択される少なくとも１種以上の生薬抽出物を少なくとも１０重量％添加する場合、高い抗酸化力と老化抑制活性を有するとともに、抗菌力が高く、抗菌スペクトルが広範囲な多機能性天然抗菌剤が得られる。
【００３８】
このとき、前記苦参抽出物、金銀花抽出物、黄蓮抽出物、連翹抽出物、牡丹皮抽出物、五倍子抽出物、にんにく抽出物または甘草抽出物は、前述した黄ゴン抽出物を獲得する過程と同様に、通常の抽出法によって抽出して使用することができる。また、効果的な抽出のために塩化ナトリウムを利用してタンニンを予め除去することができ、抽出条件は加熱でない室温で２〜７日間浸漬しておくのも可能である。
【００３９】
以下、本発明を下記の実施例と実験例を通じて詳細に説明するものの、これらは本発明の理解を助けるために提示されたものに過ぎなく、本発明がこれに限定されるのではない。
【００４０】
黄ゴン抽出物製造例
黄ゴン乾固粉砕物に精製水を２倍（重量比）加え、ここに、エタノール、メタノールなどの極性溶媒またはそれらと精製水との混合溶液を前記粉砕物１００重量部に対して２０重量部加えた後、冷却コンデンサ付き抽出機で６０℃の温度で１０時間加熱して抽出物を得、ろ過し減圧濃縮させて濃縮抽出液を得た。この抽出液重量の１０倍に該当するエタノール、メタノールなどの極性溶媒またはそれらと精製水との混合溶液を加えた後、強く振とう抽出しろ過して固形分を除去し、ろ過、乾燥させて粉末状の黄ゴン抽出物を得た。
【００４１】
活性成分分画および定性確認
前記黄ゴン抽出物製造例で獲得した抽出物をシリカゲルカラムで分画してバイカリンとＤＴＦおよびオウゴニン抗菌活性成分を得たし、得られたバイカリンとＤＴＦおよびオウゴニンの成分確認は、高圧液体クロマトグラフィ（カラム；マイクロボンダパック　Ｃ１８（Ｍｉｃｒｏｂｏｎｄａｐａｃｋ　Ｃ１８）、移動相；アセトニトリル０．５％リン酸を２７：７３（ｖ／ｖ）に混合した溶媒、流速；分当たり２ｍｌ、インジェクション量；１０ｕｌ、検出波長２８０ｎｍ）で確認した。その結果、バイカリンは１６分帯、オウゴニンは１８分帯、ＤＴＦは１７分帯でピークが検出されたし、これは、各標準物質による検出時間帯と一致する結果である。また、各の成分の１Ｈ　ＮＭＲまたは１３Ｃ　ＮＭＲ確認結果は下記のようであり、これは、標準物質と同一な１Ｈ　ＮＭＲまたは１３Ｃ　ＮＭＲ結果であることが分かった。
【００４２】
ＤＴＦ：１Ｈ　ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）　δ：　３．７４、３．７７（３Ｈ　ｅａｃｈ、ｓ、−ＯＭｅ）、６．３０、６．３５（１Ｈ　ｅａｃｈ、ｓ）、６．６１、６．９４（１Ｈ　ｅａｃｈ、ｄ、９．０、ａｒｏｍａｔｉｃ　Ｈ）、９．０、９．４０、１０．７２（１Ｈ　ｅｃｈ、ｂｒｓ、−ＯＨ）、１２．５６（１Ｈ、ｓ、ＯＨ５）
１３Ｃ　ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）　δ：１６１．７（ｓ、Ｃ２）、１１１．１（ｄ）、１８１．７（ｓ）、１５７．０（ｓ）、９９．０（ｄ）、１５０．４（ｓ）、１２７．６（ｓ）、１５６．３（ｓ）、１０３．７（ｓ）、１１４．８（ｓ、Ｃ１’）、１４８．２（ｓ）、１１１．６（ｄ）、　１１９．８（ｄ）、１４２．４（ｓ）、１４６．０（ｓ）、６０．８（ｑ、−ＯＣＨ３）、６０．４（ｑ、−ＯＣＨ３）
バイカリン：　１Ｈ　ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）　δ：　７．０１（１Ｈ、ｓ、Ｈ３　ｏｒ　８）、７．０７（１Ｈ、ｓ、Ｈ８　ｏｒ　３）、７．４０−７．７０（３Ｈ、ｍ、Ｈ３’、４’、５’）、７．９０−８．２０（２Ｈ、ｍ、Ｈ２’、６’）、１２．５９（１Ｈ、ｂｒ．ｓ、ＯＨ５）、５．１１（１Ｈ、ｄ、８．０、ａｎｏｍｅｒｉｃ　Ｈ）
１３Ｃ　ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）　δ：１６３．７、１０４．８、１８２．８、１４６．７、１３１．０、１５１．８、９４．３、１４９．４、　１０６．２、１３０．８、１２６．５、１２９．３、１３２．２、１２９．３、１２６．５、１０１．１、７３．２、７５．９、６９．８、７７．４、６０．７
オウゴニン：　１３Ｃ　ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）　δ：１６２．９、１０５．１、１８２．０、１５７．３、９９．２、１４９．６、１２７．８、１５６．２、１０３．８、１３０．９、１２６．２、１２９．１、１３１．９、１２９．１、１２６．２、６１．０前記のように黄ゴン抽出物から分画して得られたバイカリン、ＤＴＦ、オウゴニンおよび粉末状黄ゴン抽出物の抗菌力と特性を確認するために、下記の実施例を施した。
【００４３】
実験例１
黄ゴン抽出物から分画して得られたバイカリン、ＤＴＦ、オウゴニンおよび粉末状黄ゴン抽出物の抗菌力を測定するために、固体培養希釈法（Ａｇａｒ　Ｓｅｒｉａｌ　Ｄｉｌｕｔｉｏｎ　Ｍｅｔｈｏｄ）を利用して菌株を培養し使用し、細菌はミューラーヒントンブロス（Ｍｕｅｌｌｅｒ　Ｈｉｎｔｏｎ　ｂｒｏｔｈ）を使用し、培地に菌を接種して３７℃培養器で２０時間培養した。真菌培養には、サブローデキストロースブロス（Ｓａｂｏｕｒａｕｄ　ｄｅｘｔｒｏｓｅ　ｂｒｏｔｈ）を使用したし、培地に菌を接種して２５℃培養器で７日間培養し使用し、植物病原菌のフサリウムソラニ（Ｆｕｓａｒｉｕｍ　ｓｏｌａｎｉ）に対してはポテトデキストロースブロス培地を使用して２５℃で７日間培養したものを使用した。使用した菌株は、グラム陽性菌としてＢａｃｉｌｌｕｓ　ｓｕｂｔｉｌｉｓ　ＡＴＣＣ　６６３３、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ　ＡＴＣＣ　６５３８Ｐ、グラム陰性菌としてＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ　ＡＴＣＣ　１０５３６、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ　ＡＴＣＣ　１６３６、酵母としてＣａｎｄｉｄａ　ａｌｂｉｃａｎｓ　ＡＴＣＣ　１０２３１、真菌としてＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ　ｎｉｇｅｒ　ＡＴＣＣ　９０２９、Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ　ｍｅｎｔａｇｒｏｐｈｙｔｅｓ　ＫＣＴＣ　６０７７、Ｆｕｓａｒｉｕｍ　ｓｏｌａｎｉを使用した。
さらに具体的な抗菌試験は、まず、ミューラーヒントンブロスに菌を接種（２×１０６ＣＦＵ／ｍｌ）して３７℃で２４時間前培養する。一方、滅菌されたぺトリ皿に２倍数に３μｇ／ｍｌ濃度の抗菌剤溶液（５％　ＤＭＳＯ；Ｄｉｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆｏｘｉｄｅ生理食塩水溶液）２ｍｌずつを入れ、対照群は滅菌蒸留水２ｍｌを入れ、比較群はアモクラ（Ａｍｏｃｌａ：Ａｍｏｘｉｃｉｌｌｉｎ塩、Ｋｕｎｈｎｉｌ製薬（韓国））を２ｍｌ入れる。各ぺトリ皿に滅菌後５０℃に冷めたミューラーヒントン寒天融解培地を１８ｍｌずつ入れ、ぺトリ皿の底部を回転させてよく混ぜる。その後、前培養させた菌を白金耳を使用して５ｍｍ程度塗抹する。細菌は、３７℃で２４時間培養し、真菌および酵母は２２℃培養器で６日間培養した後、各区画内にコロニーの形成されたか否か観察して成長が認められない平板の最小抗菌剤濃度を最小阻害濃度（ＭＩＣ、Ｍｉｎｉｍｕｍ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ）とする。
【００４４】
【表１】
2004059566.tif 000003
【００４５】
前記表１の如く、黄ゴン抽出物から得られるＤＴＦは、最小阻害濃度が１６ｐｐｍ〜２５０ｐｐｍと抗菌力が最も高いものと確認されたが、オウゴニンの場合は、最小阻害濃度が１２５ｐｐｍ〜２，０００ｐｐｍであり、黄ゴン抽出物は、最小阻害濃度が１２５ｐｐｍ〜１，０００ｐｐｍと低い抗菌力を示すことがわかった。したがって、ＤＴＦだけでも充分に抗菌剤として使用され得ることが分かる。
【００４６】
実験例２
黄ゴン抽出物から分画して得られたバイカリン、ＤＴＦおよびオウゴニンの含量に従う抗菌力を確認するために、バイカリン、オウゴニンおよびＤＴＦを下記の表２に表した重量比率にするものの、残量をグリセリンになるように混合して天然抗菌剤を製造したし、また、このように製造された天然抗菌剤の抗菌力を測定するためにペーパーディスク固体培養法（ｐａｐｅｒ　ｄｉｓｋ　ａｇａｒ　ａｓｓａｙ　ｍｅｔｈｏｄ）を利用した。つまり、滅菌食塩水に用意した各菌液を１０８ｃｆｕ／ｍｌに準備し、菌液平板製造用培地であるミューラーヒントン寒天培地を１２１℃で１５分滅菌し、４５〜５０℃に冷めた培地に菌液を加えて１０６ｃｆｕ／ｍｌ菌濃度に製造した固体培地を使用する。ミューラーヒントン寒天菌液培地上に直径６ｍｍペーパーディスクを載せ、ここにバイカリン、オウゴニン、ＤＴＦを０．０００１〜１０重量％濃度に２５ｕｌずつ加えて３７℃で２４時間培養した後、菌生長阻害円の直径を測定して最適抗菌力範囲を評価した。
【００４７】
細菌はミューラーヒントンブロス（Ｍｕｅｌｌｅｒ　Ｈｉｎｔｏｎ　ｂｒｏｔｈ）を使用したし、培地に菌を接種して３７℃培養器で２０時間培養した。真菌培養にはサブローデキストロースブロス（Ｓａｂｏｕｒａｕｄ　ｄｅｘｔｒｏｓｅ　ｂｒｏｔｈ）を使用したし、培地に菌を接種して２２℃培養器で６日間培養して使用した。
使用した菌株には、グラム陽性菌としてＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ　ＡＴＣＣ　６５３８Ｐ、グラム陰性菌としてＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ　ＡＴＣＣ　１０５３６、酵母としてＣａｎｄｉｄａ　ａｌｂｉｃａｎｓ　ＡＴＣＣ　１０２３１、真菌としてＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ　ｎｉｇｅｒ　ＡＴＣＣ　９０２９を使用した。
【００４８】
【表２】
2004059566.tif 000004
【００４９】
前記表２の結果、バイカリンでは、０．１〜５．０重量％範囲が細菌、酵母および真菌に対して抗菌力を有する適正有効濃度であることが分かったし、オウゴニンは０．１〜２．０重量％、そしてＤＴＦは０．００１〜１．０重量％で適正有効抗菌活性を有することを確認した。
【００５０】
実施例１ないし５４
黄ゴン抽出物から得たＤＴＦ、バイカリンおよびオウゴニンと、前記黄ゴン抽出物の製造例と同方法で製造した生薬抽出物（苦参抽出物、金銀花抽出物、黄蓮抽出物、連翹抽出物、牡丹皮抽出物、五倍子抽出物、にんにく抽出物、甘草抽出物）を、下記表３及び表４に表した重量比率にするものの、残量をグリセリンになるように混合して天然抗菌剤を製造した。
【００５１】
【表３】
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【００５２】
【表４】
2004059566.tif 000006
【００５３】
実験例３
前記実施例１ないし５４で製造した天然抗菌剤を利用して前記実験例１と同方法で施して最小阻害濃度を測定した。このとき、使用した菌株は、グラム陽性菌としてＢａｃｉｌｌｕｓ　ｓｕｂｔｉｌｉｓ　ＡＴＣＣ　６６３３、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ　ＡＴＣＣ　６５３８Ｐ、Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ　ｌｕｔｅｕｓ　ＡＴＣＣ　９３４１、Ｍｅｔｈｉｃｉｌｌｉｎ　ｒｅｓｉｓｔａｎｔ　ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ（ＭＲＳＡ）　Ｃ２２０７、グラム陰性菌としてＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ　ＡＴＣＣ　１０５３６、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ　０１５７：Ｋ８８ａｃ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ　ＡＴＣＣ　１６３６、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ　ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ　ＡＴＣＣ　１００３１、酵母としてＣａｎｄｉｄａ　ａｌｂｉｃａｎｓ　ＡＴＣＣ　１０２３１、真菌としてＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｇｅｒ　ＡＴＣＣ　９０２９、Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ　ｍｅｎｔａｇｒｏｐｈｙｔｅｓ　ＫＣＴＣ　６０７７、Ｆｕｓａｒｉｕｍ　ｓｏｌａｎｉを使用した。
【００５４】
【表５】
2004059566.tif 000007
【００５５】
【表６】
2004059566.tif 000008
【００５６】
前記表３ないし表６に表すように、本発明の好ましい範囲内でＤＴＦを使用した場合、抗菌活性が非常に高いことが分かったし、また、バイカリンを０．１〜５．０重量％範囲内で添加した場合、ＤＴＦの抗菌活性上昇効果をもたらすことも確認できた。また、ＤＴＦとバイカリンに生薬抽出物をさらに投入した実施例は、それを投入しなかった実施例に比べて抗菌力がさらに向上されることが確認できた。
【００５７】
実験例４
前記実験例３の結果に基づいて本発明の好ましい範囲内で抗菌剤を製造した実施例４ないし６、実施例９ないし１１、実施例１５ないし１７、実施例２０ないし２２、実施例２６ないし２８、実施例３１ないし３３、実施例３７ないし３９、実施例４２ないし４４で製造した抗菌剤を利用して耐性誘発性を確認した。また、比較確認のために通常使用される抗生剤であるエリスロマイシンの耐性誘発性も確認した。実験に使用した菌株は大腸菌０１５７：Ｋ８８ａｃであり、乳糖ブイヨン培地（ｌａｃｔｏｓｅ　ｂｒｏｔｈ）（０．５％酵母抽出物、トリプトン、１％塩化ナトリウム）に接種して３７℃、１５０ｒｐｍで１２時間培養し、遠心分離（５００ｇ、４分）して菌を分離した後、リン酸緩衝溶液（０．１Ｍ、ｐＨ　７．０）で希釈して菌数を調整したし、乳糖ブイヨン培地２０ｍｌに致死濃度以下の実施例１６の抗菌剤を０．０５ｐｐｍを添加し、菌の濃度が２×１０６になるように接種した。エリスロマイシン（Ｅｒｙｔｈｒｏｍｙｃｉｎ）処理群は、エリスロマイシンを０．０５ｐｐｍになるように１２時間培養の後同一の方法で菌を遠心分離した後、同濃度の抗菌剤の入っている培養液に同じ濃度になるように接種した。このような過程を５回繰り返した後、初期状態の抗菌剤抗菌力と６回培養後の抗菌剤抗菌力を比較した。１２時間後培養液を１０ｕｌずつ分取して９９０ｕｌのリン酸緩衝液の含まれた試験管に入れ、５０ｕｌをマッコンキ寒天培地に塗抹して生存するコロニー数を比較した。
【００５８】
【表７】
2004059566.tif 000009
【００５９】
前記表７で、ＡＩ（Ａｄａｐｔａｔｉｏｎ　Ｉｎｄｅｘ；適応指数）＝継代培養後ＭＩＣ／継代培養前ＭＩＣを表す。前記表７に表すように、適応指数（ＡＩ）、つまり耐性誘発性は、本発明によって製造した天然抗菌剤の場合、６回継代培養の後にも最小阻害濃度に変化がなく全く耐性を誘発しなかったが、通常使用される抗生剤のエリスロマイシンの場合、初期最小阻害濃度が１５０ｐｐｍから６回継代後１，３００ｐｐｍに増加して適応指数が８．７となって耐性誘発性が高いことが確認できた。
【００６０】
実験例５
前記実験例３の結果に基づいて本発明の好ましい範囲内で抗菌剤を製造した実施例４ないし６、実施例９ないし１１、実施例１５ないし１７、実施例２０ないし２２、実施例２６ないし２８、実施例３１ないし３３、実施例３７ないし３９、実施例４２ないし４４で製造した抗菌剤を利用して下記のように抗酸化効果を確認し、その結果を下記表８に表した。
【００６１】
まず、ウサギから採取した血液を遠心分離（８，０００ｒｐｍ、５分）し洗浄して得た赤血球を生理食塩水で希釈して赤血球懸濁液（赤血球６千万個／４ｍｌ）を製造した。直径１．０ｃｍの１０ｍｌパイレックス（登録商標）試験管９個を準備し、各々に赤血球懸濁液を４ｍｌずつ入れる。９個の試験管のうち１個は対照群であってエタノール５０μｌを添加し、残り８個は処理群であって前記実施例で製造した抗菌剤試料を５０μｌずつ添加し、暗所で３０分間融和させた。融和が終わった後、光増減剤としてヘマトポルフィリン（Ｈｅｍａｔｏｐｏｒｐｈｙｒｉｎ）の水溶液（８０μＭ）５０μｌを添加し、入口をパラフィルムで封入した後、内部を黒く塗った５０ｃｍ×２０ｃｍ×２５ｃｍの直六面体の箱内に２０Ｗの蛍光灯を装置し、蛍光灯から５ｃｍ距離にそれらの試験管を配列させ、１５分間光照射した。光照射が終わった後、試験管を暗所に置き、１５分おきに７００ｎｍで吸光度を測定した。この波長で赤血球懸濁液の投光度の増加は赤血球の溶血に比例する。全実験を２７℃恒温室で実施したし、試料が活性酸素類から細胞を保護する活性は、前記の測定条件で添加された赤血球の５０％が光溶血するにかかる時間（分）で定義した。
【００６２】
【表８】
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【００６３】
前記表８で抗酸化効果は、各試料が赤血球の５０％を光溶血させるにかかる時間（分）で表したし、前記表８に示すように、本発明の好ましい範囲内で製造された天然抗菌剤は、従来の３％アスコビック酸と２％トコフェロールおよび残量が活性水からなる抗酸化剤に比べて最高３倍以上の抗酸化力を有することが確認できる。
【００６４】
実験例６
本発明による抗酸化剤の細胞株に対する老化抑制活性を調べるために、下記のように実施し、その結果を図１ないし図４に示した。実験に使用した細胞株、ＢＡＥ細胞株（Ｂｏｖｉｎｅ　Ａｏｒｔｉｃ　Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ　Ｃｅｌｌｓ）とＣＰＡＥ細胞株（Ｂｏｖｉｎｅ　ｐｕｌｍｏｎａｒｙ　ａｒｔｅｒｙ　ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ　ｃｅｌｌｓ）を使用した。細胞は、１０％　ｆｅｔａｌ　ｃａｌｆ　ｓｅｒｕｍ　（ＦＣＳ、ＧＩＢＣＯ　ＢＲＬ）が含まれたＤｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ　ｍｏｄｉｆｉｅｄ　Ｅａｇｌｅ’ｓ　Ｍｅｄｉｕｍ（ＤＭＥＭ、　ＧＩＢＣＯ　ＢＲＬ、　Ｇｒａｎｄ　Ｉｓｌａｎｄ、ＮＹ）を使用して３７℃時５％　ＣＯ２インキュベータで培養した。２４時間程度培養した細胞株に酸化剤として０．２μＭ　４−ヒドロキシ２，３−ノネナル（４−ＨＮＥ）を処理して１２時間培養した後、細胞をよく洗い酸化剤を除去して培養した。これを再び２４時間後に本発明による抗酸化剤（実施例４、実施例３９）１０μＭを添加して１２時間の後に回収した。その後、蛍光顕微鏡を使用して細胞観察をしたし、蛍光顕微鏡の使用は、蛍光ＤＮＡ結合染料の１００μｇ／ｍｌアクリジンオレンジと１００μｇ／ｍｌ臭化エチジウムを利用して生存した細胞と死んだ細胞を観察した。アクリジンオレンジは、細胞質は染色するが、ＤＮＡに挿入されて生きている細胞では緑色で観察され、臭化エチジウムは死んだ細胞でオレンジ色で表される。染色された細胞は蛍光反射顕微鏡（Ｏｌｙｍｐｕｓ，　Ｊａｐａｎ）で観察したし、図１に無処理対照群の細胞状態を表し、図２には酸化剤として４−ＨＮＥを使用して１２時間処理した後の細胞状態を表し、図３には抗菌剤としてＤＴＦを０．００１重量％含む抗菌剤（実施例４）を使用して１２時間処理した後の細胞状態を表し、図４には抗菌剤としてＤＴＦを１．０重量％含む抗菌剤（実施例３９）を使用して１２時間処理した後の細胞状態を表した。
【００６５】
図１ないし図４に示すように、細胞に酸化剤４−ＨＮＥを処理した図２の場合、細胞質にアポトーシス（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）による細胞死滅の跡が見えるが、かかるアポトーシス誘導細胞に本発明による抗菌剤を処理した結果、酸化剤無処理群の場合のように細胞質が緑色に観察された。これは、酸化剤によって死滅された死滅細胞を本発明による抗菌剤が再び活性化させて細胞機能を回復させたことを意味する結果であって、老化抑制活性を指す。
【００６６】
実験例７
本発明による抗菌剤の老化抑制活性作用を確認するために下記のように実施し、その結果を図５に示した。ウェスタンブロッテング（Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔｔｉｎｇ）を用いて老化進行と関連のあるｂｃｌ−２　タンパク質を分析した。細胞株としては　ＣＰＡＥ細胞株（Ｂｏｖｉｎｅ　ｐｕｌｍｏｎａｒｙ　ａｒｔｅｒｙ　ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ　ｃｅｌｌｓ）を使用したが、４−ヒドロキシ２，３−ノネナルに６時間露出させた後、本発明による抗酸化剤（実施例４、実施例３９）１０μＭで処理してタンパク質を細胞から集め、これをウェスタンブロッティング分析で確認した。培養した細胞を集めて遠心分離したし、タンパク質は１μｇ／ｍＬアプロチニン（ａｐｒｏｔｉｎｉｎ）と１００μｇ／ｍＬフェニルメチルスルホニルフルライド（ＰＭＳＦ）を含む溶解緩衝液（１％トリトンＸ−１００．　５０ｍＭトリスＨＣＬ、１５０ｍＭ塩化ソジウム、０．２％ソジウムアジド）で抽出した。細胞溶解は１２，０００ｒｐｍで１０分間遠心分離して集めたし、タンパク質濃度はＢＳＡアッセイで測定した。細胞タンパク質はＳＤＳ−ポリアクリルアミド電気泳動（ＳＤＳ−ＰＡＧＥ）で分離したし、ニトロセルローストランスファーメンブレーンでトランスファーさせた。４℃でトリス緩衝液にスキムミルクを入れてニトロセルロースメンブレーンをブロッキングして非特異性結合を防いだし、１次抗体としてはＢｃｌ−２抗体を１：１０００に希釈して使用したし、２次抗体としてはアンチ−マウスＩｇＧ抗体（１：１０００　ｄｉｌｕｔｉｏｎ）を使用した。このように形成された免疫複合体はＥＣＬ（ｅｎｈａｎｃｅｄ　ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ）検索キットで確認し、その結果を図５に表した。図５のＡは無処理対照群の細胞状態を表し、図５のＢは酸化剤として４−ＨＮＥを使用して１２時間処理した後の細胞状態を表し、図５のＣは抗菌剤としてＤＴＦを０．００１重量％含む抗菌剤（実施例４）を使用して１２時間処理した後の細胞状態を表し、図５のＤは抗菌剤としてＤＴＦを１．０重量％含む抗菌剤（実施例３９）を使用して１２時間処理した後の細胞状態を表す。
【００６７】
前記図５に示すように、酸化剤の４−ＨＮＥを処理したＢＰＡＥ細胞株（Ｂｏｖｉｎｅ　ｐｕｌｍｏｎａｒｙ　ａｒｔｅｒｙ　ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ　ｃｅｌｌｓ）では老化に関するＰ２１タンパク質が多量発現されたが（図５のＢ）、本発明による抗菌剤で処理した場合はＰ２１タンパク質発現が抑制され、老化抑制活性も持つことがわかった。
【００６８】
実験例８
実験例１のような方法で培養したＢａｃｉｌｌｕｓ　ｓｕｂｔｉｌｉｓ　ＡＴＣＣ　６６３３、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ　ＡＴＣＣ　１０５３６、Ｃａｎｄｉｄａ　ａｌｂｉｃａｎｓ　ＡＴＣＣ　１０２３１、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ　ｎｉｇｅｒ　ＡＴＣＣ　９０２９、Ｆｕｓａｒｉｕｍ　ｓｏｌａｎｉを同量混合した後、下記の表９のような組成を有する栄養化粧水剤形に接種して２×１０６　ＣＦＵ／ｇになるようにした。その後、時間経過による菌数の増減を観察して製品における防腐力を検討したし、その結果を下記の表１０に表した。
【００６９】
比較実験例１
前記実験例８と同様に実施するものの、抗菌剤として混合抗菌剤（ｍｅｔｈｙｌ　ｐａｒａｂｅｎ２．０％、ｐｒｏｐｙｌ　ｐａｒａｂｅｎ　１．０％、Ｇｅｒｍａｌ１１５　２．０％）を使用して防腐力を検討し、その結果を下記の表１０に表した。
【００７０】
比較実験例２
前記実験例８と同様に実施するものの、抗菌剤を投入せずに防腐力を検討し、その結果を下記の表１０に表した。
【００７１】
【表９】
2004059566.tif 000011
【００７２】
【表１０】
2004059566.tif 000012
【００７３】
前記表１０に表すように、本発明による天然抗菌剤の場合防腐力が非常に優れていることが確認された。
【００７４】
前述のように、本発明は、天然水から天然抗菌剤を製造するにも関わらず、抗菌力が高く、耐性を誘発しないながら耐性菌および真菌類にも高い抗菌力を示し、広範囲の抗菌スペクトルを表したし、適切な抗酸化機能の以外に、老化抑制活性までもっている天然素材であることが分かる。したがって、食品、医薬品、化粧品そして生活用品などで多機能性防腐剤として応用可能なことは勿論、ヒトを含めた哺乳類における老化抑制活性の多機能性天然抗菌剤として幅広く応用されると期待される。
【００７５】
【発明の効果】
以上の如く、本発明による多機能性天然抗菌剤は、バイオ新素材であって、食品、医薬品、化粧品、繊維、生活用品などで防腐および抗酸化、そして老化抑制機能を有することによって品質の安全性と安定性を高め、ヒトを含めた哺乳類にとって安全であり、耐性が誘発されないながらも適切な抗酸化および老化抑制機能まで保有しているので、感染性疾病を治療、予防できる効果がある。
【図面の簡単な説明】
【図１】細胞株に対する老化抑制活性実験結果を表す写真であって、無処理対照群の細胞状態を表す写真である。
【図２】細胞株に対する老化抑制活性実験結果を表す写真であって、酸化剤として４−ＨＮＥを使用して１２時間処理した後の細胞状態を表す写真である。
【図３】細胞株に対する老化抑制活性実験結果を表す写真であって、抗菌剤としてＤＴＦを０．００１重量％含む抗菌剤を使用して１２時間処理した後の細胞状態を表す写真である。
【図４】細胞株に対する老化抑制活性実験結果を表す写真であって、抗菌剤としてＤＴＦを１．０重量％含む抗菌剤を使用して１２時間処理した後の細胞状態を表す写真である。
【図５】老化抑制活性実験の結果を表す写真である。
【図１】
2004059566.tif 000013
【図２】
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【図３】
2004059566.tif 000015
【図４】
2004059566.tif 000016
【図５】
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