(57)【要約】【課題】親水性高分子構造部分と疎水性ポリアミノ酸構造部分からなるブロック共重合体とアンスラサクリン系抗癌剤を含有する臨床応用可能な注射用固型製剤が望まれている。【解決手段】親水性高分子構造部分と疎水性ポリアミノ酸構造部分からなるブロック共重合体、アンスラサイクリン系抗癌剤、糖類、及び塩基を含有する臨床応用可能な注射用固型製剤を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
親水性高分子構造部分と疎水性ポリアミノ酸構造部分とからなるブロック共重合体、アンスラサイクリン系抗癌剤、糖類、及び塩基を含有する注射用固型製剤。
【請求項２】
アンスラサイクリン系抗癌剤がドキソルビシン又はその塩であり、糖類が二糖類である、請求項１に記載の注射用固型製剤。
【請求項３】
二糖類がスクロース、トレハロース、マルトース、又はラクトースよりなる群から選ばれる１種又は２種以上である、請求項１又は２に記載の注射用固型製剤。
【請求項４】
塩基が炭酸水素ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、クエン酸ナトリウム、又は水酸化ナトリウムよりなる群から選ばれる１種又は２種以上である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の注射用固型製剤。
【請求項５】
ブロック共重合体における親水性高分子構造部分がポリエチレンオキサイド誘導体であり、疎水性ポリアミノ酸構造部分が側鎖にアンスラサイクリン系抗癌剤が結合したポリアスパラギン酸である、請求項１〜４のいずれか１項に記載の注射用固型製剤。
【請求項６】
疎水性ポリアミノ酸構造部分における側鎖に結合したアンスラサイクリン系抗癌剤がドキソルビシンである、請求項５に記載の注射用固型製剤。
【請求項７】
各成分の含有量が、親水性高分子構造部分と疎水性ポリアミノ酸構造部分からなるブロック共重合体１００重量部に対し、アンスラサイクリン系抗癌剤５〜１００重量部、糖類１０〜５００重量部、及び塩基０．１〜１０重量部である、請求項１に記載の注射用固型製剤。
【請求項８】
各成分が次の割合からなる請求項１記載の注射用固型製剤。
親水性高分子構造部分と疎水性ポリアミノ酸構造部分と
からなるブロック共重合体　　　　　　　　　　　　　　１０〜８５重量％
アンスラサイクリン系抗癌剤　　　　　　　　　　　　　　１〜５０重量％
糖類　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　５〜８０重量％
塩基　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．０５〜　５重量％
【請求項９】
アンスラサイクリン系抗癌剤がドキソルビシン又はその塩であり、糖類がスクロース、トレハロース、マルトース、又はラクトースであり、塩基が炭酸水素ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、クエン酸ナトリウム、又は水酸化ナトリウムである、請求項８に記載の注射用固型製剤。
【請求項１０】
注射用固型製剤が凍結乾燥製剤である請求項１〜９のいずれかに記載の製剤。
【請求項１１】
請求項１〜１０のいずれかに記載の注射用固型製剤を輸液類に溶解することにより得られる、疎水性内核にアンスラサイクリン系抗癌剤を含む親水性高分子構造部分と疎水性ポリアミノ酸構造部分からなるブロック共重合体ミセル製剤。
【請求項１２】
親水性高分子構造部分とアンスラサイクリン系抗癌剤が結合した疎水性ポリアミノ酸構造部分とからなるブロック共重合体、アンスラサイクリン系抗癌剤、糖類、及び塩基を含む、ｐＨ４〜９のブロック共重合体ミセル溶液。
【請求項１３】
親水性高分子構造部分と疎水性ポリアミノ酸構造部分とからなるブロック共重合体、アンスラサイクリン系抗癌剤、糖類、及び塩基を水に溶解した後、乾燥し固体とすることを特徴とする、注射用固型製剤の製造方法。
【請求項１４】
親水性高分子構造部分と疎水性ポリアミノ酸構造部分からなるブロック共重合体を水に溶解する際に、塩基を添加し加熱することを特徴とする、請求項１３に記載の注射用固型製剤の製造方法。
【請求項１５】
加熱温度が５０〜８０℃である、請求項１４に記載の注射用固型製剤の製造方法。
【請求項１６】
親水性高分子構造部分と疎水性ポリアミノ酸構造部分とからなるブロック共重合体、アンスラサイクリン系抗癌剤、糖類、及び塩基を水に溶解した後、メンブレンフィルター濾過を行うことを特徴とする、請求項１３〜１５のいずれか１項に記載の注射用固型製剤の製造方法。
【請求項１７】
メンブレンフィルターがセルロース系又は合成高分子系であり、その孔径が０．０５〜０．５μｍである、請求項１６に記載の注射用固型製剤の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、親水性高分子構造部分と疎水性ポリアミノ酸構造部分からなるブロック共重合体と、悪性腫瘍の治療薬として有用なアンスラサイクリン系抗癌剤を含有する注射用固型製剤、及びその製造法に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
ポリエチレンオキシドを主鎖とする親水性高分子構造部分と、側鎖に脂溶性置換基を有するポリアミノ酸構造部分からなるブロック共重合体が形成する高分子ミセルに、アンスラサイクリン系抗癌剤を含有させた製剤についてはいくつか知られている。
【０００３】
例えば、特開平７−６９９００号公報には、ポリエチレンオキシド類とドキソルビシン残基の結合したポリアスパラギン酸からなるブロック共重合体とドキソルビシンの、ミセル製剤水溶液について記載がある。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
しかしながら該公報には、臨床適用可能な固型注射剤として具体的な記載はない。また、上記水溶液の製造方法の問題点として、工業化が難しい超音波照射や透析の工程や、ブロック共重合体とドキソルビシンを溶解する際のジメチルホルムアミドやブロック共重合体を沈析する際のイソプロピルエーテル等の有機溶媒の使用があった。有機溶媒を使用した場合は、溶媒の完全な除去や、使用した溶媒に対する耐腐食性、及び爆発防止性を備えた装置が必要となり、また、溶媒蒸気に対する作業員の安全性にも考慮が必要であるため、注射剤の製造設備としては非常に特殊なものとなる。従って、有機溶媒は、注射剤製造工場においてはあまり使用されない。
【０００５】
従って、悪性腫瘍の治療薬として有用な、親水性高分子構造部分と疎水性ポリアミノ酸構造部分からなるブロック共重合体とアンスラサイクリン系抗癌剤を含有する臨床適用可能な注射用製剤であって、長期間安定性を示し、添加剤の安全性が高く、透析工程が不要で有機溶媒を使用しない通常の製造装置にて製造できる注射用固型製剤が望まれている。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
本発明者は、上記課題を解決するために鋭意検討した結果、新規注射用固型製剤及びその製造法を見出し、本発明を完成した。
【０００７】
すなわち、本発明は、
（１）　親水性高分子構造部分と疎水性ポリアミノ酸構造部分とからなるブロック共重合体、アンスラサイクリン系抗癌剤、糖類、及び塩基を含有する注射用固型製剤；
（２）アンスラサイクリン系抗癌剤がドキソルビシン又はその塩であり、糖類が二糖類である、上記（１）に記載の注射用固型製剤；
（３）二糖類がスクロース、トレハロース、マルトース、又はラクトースよりなる群から選ばれる１種又は２種以上である、請求項１又は２に記載の注射用固型製剤；
（４）塩基が炭酸水素ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、クエン酸ナトリウム、又は水酸化ナトリウムよりなる群から選ばれる１種又は２種以上である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の注射用固型製剤；
（５）ブロック共重合体における親水性高分子構造部分がポリエチレンオキサイド誘導体であり、疎水性ポリアミノ酸構造部分が側鎖にアンスラサイクリン系抗癌剤が結合したポリアスパラギン酸である、上記（１）〜（４）のいずれかに記載の注射用固型製剤；
（６）疎水性ポリアミノ酸構造部分における側鎖に結合したアンスラサイクリン系抗癌剤がドキソルビシンである、上記（５）に記載の注射用固型製剤；
（７）各成分の含有量が、親水性高分子構造部分と疎水性ポリアミノ酸構造部分からなるブロック共重合体１００重量部に対し、アンスラサイクリン系抗癌剤１０〜１００重量部、糖類１０〜５００重量部、及び塩基０．１〜１０重量部である、上記（１）に記載の注射用固型製剤；
（８）各成分が次の割合からなる上記（１）記載の注射用固型製剤：
親水性高分子構造部分と疎水性ポリアミノ酸構造部分と
からなるブロック共重合体　　　　　　　　　　　　　　１０〜８５重量％
アンスラサイクリン系抗癌剤　　　　　　　　　　　　　　１〜５０重量％
糖類　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　５〜８０重量％
塩基　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．０５〜　５重量％；
（９）アンスラサイクリン系抗癌剤がドキソルビシン又はその塩であり、糖類がスクロース、トレハロース、マルトース、又はラクトースであり、塩基が炭酸水素ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、クエン酸ナトリウム、又は水酸化ナトリウムである、上記（８）に記載の注射用固型製剤；
（１０）注射用固型製剤が凍結乾燥製剤である上記（１）〜（９）のいずれかに記載の製剤；
（１１）上記（１）〜（１０）のいずれかに記載の注射用固型製剤を輸液類に溶解することにより得られる、疎水性内核にアンスラサイクリン系抗癌剤を含む親水性高分子構造部分と疎水性ポリアミノ酸構造部分からなるブロック共重合体ミセル製剤；
（１２）親水性高分子構造部分とアンスラサイクリン系抗癌剤が結合した疎水性ポリアミノ酸構造部分とからなるブロック共重合体、アンスラサイクリン系抗癌剤、糖類、及び塩基を含む、ｐＨ４〜９のブロツク共重合体ミセル溶液；
（１３）親水性高分子構造部分と疎水性ポリアミノ酸構造部分とからなるブロック共重合体、アンスラサイクリン系抗癌剤、糖類、及び塩基を水に溶解した後、乾燥し固体とすることを特徴とする、注射用固型製剤の製造方法；
（１４）親水性高分子構造部分と疎水性ポリアミノ酸構造部分からなるブロック共重合体を水に溶解する際に、塩基を添加し加熱することを特徴とする、上記（１３）に記載の注射用固型製剤の製造方法；
（１５）加熱温度が５０〜８０℃である、上記（１４）に記載の注射用固型製剤の製造方法；
（１６）親水性高分子構造部分と疎水性ポリアミノ酸構造部分とからなるブロック共重合体、アンスラサイクリン系抗癌剤、糖類、及び塩基を水に溶解した後、メンブレンフィルター濾過を行うことを特徴とする、上記（１３）〜（１５）に記載の注射用固型製剤の製造方法；
（１７）メンブレンフィルターがセルロース系又は合成高分子系であり、その孔径が０．０５〜０．５μｍである、上記（１６）に記載の注射用固型製剤の製造方法；
（１８）アンスラサイクリン系抗癌剤がドキソルビシン又はその塩であり、糖類が二糖類である、上記（１２）に記載のミセル溶液；
（１９）二糖類がスクロース、トレハロース、マルトース、又はラクトースよりなる群から選ばれる１種又は２種以上である、上記（１８）に記載のミセル溶液；
（２０）塩基が炭酸水素ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、クエン酸ナトリウム、又は水酸化ナトリウムよりなる群から選ばれる１種又は２種以上である、上記（１２）に記載のミセル溶液；
（２１）アンスラサイクリン系抗癌剤がドキソルビシン又はその塩であり、糖類がスクロース、トレハロース、マルトース、又はラクトースであり、塩基が炭酸水素ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、クエン酸ナトリウム、又は水酸化ナトリウムである、上記（１２）に記載のミセル溶液；
（２２）ブロック共重合体が、親水性高分子構造部分とアンスラサイクリン系抗癌剤が結合した疎水性ポリアミノ酸構造部分とからなる、上記（１２）に記載のミセル溶液；
（２３）ブロック共重合体における親水性高分子構造部分がポリエチレンオキサイド誘導体であり、疎水性ポリアミノ酸構造部分が側鎖にアンスラサイクリン系抗癌剤が結合したポリアスパラギン酸である、上記（２２）に記載のミセル溶液；
（２４）疎水性ポリアミノ酸構造部分における側鎖に結合したアンスラサイクリン系抗癌剤がドキソルビシンである、上記（２２）または（２３）に記載のミセル溶液；
（２５）上記（１８）〜（２４）のいずれかに記載のミセル溶液を乾燥させた注射用固型製剤；
に関する。
【０００８】
【発明の実施の形態】
本発明の注射用固型製剤は、親水性高分子構造部分と疎水性ポリアミノ酸構造部分とからなるブロック共重合体、アンスラサイクリン系抗癌剤、糖類、及び塩基を含有することを特徴とする。
【０００９】
本発明の注射用固型製剤に使用されるアンスラサイクリン系抗癌剤としては、抗癌作用を有するアンスラサイクリン系化合物であれば特に限定されないが、具体的には、癌治療の臨床に用いられているアンスラサイクリン系抗生物質及びその誘導体等が挙げられ、例えば、ダウノルビシン、ドキソルビシン、ピラルビシン、アクラルビシン、エピルビシン、イダルビシン等である。特に好ましくはドキソルビシンが挙げられる。
【００１０】
本発明に使用されるアンスラサイクリン系抗癌剤が、酸又は塩基と塩を形成し得るアンスラサイクリン系抗癌剤である場合は、そのような塩の使用も本発明の範囲に含まれる。塩としては酸付加塩が好ましく、酸付加塩を形成させる酸としては、例えば、塩酸、硫酸、硝酸、及び臭化水素酸等が挙げられる。
【００１１】
本発明における親水性高分子構造部分を構成する高分子としては、通常知られている親水性を示すものは全て含まれるが、具体的には例えば、ポリエチレンオキシド、ポリサッカライド、ポリアクリル酸、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール等又はそれらの誘導体等が挙げられ、特にポリエチレンオキシド誘導体が好ましい。
【００１２】
本発明における疎水性ポリアミノ酸構造部分とは、疎水性を示すα−アミノ酸又はβ−アミノ酸等若しくはそれらの誘導体等であれば特に限定されないが、側鎖にアンスラサイクリン系抗癌剤が結合したポリアミノ酸が好ましく、特に、ドキソルビシンの結合したポリアスパラギン酸が好ましい。
【００１３】
【化１】
2004010479.tif 000002
【００１４】
本発明に使用される親水性高分子構造部分と疎水性ポリアミノ酸構造部分からなるブロック共重合体は、例えば下記の方法により製造される。この方法で製造されるブロック共重合体は、例えば上記一般式（Ｉ）で表されるものと推定される。なお、式中Ｒは水酸基又はアンスラサイクリン系抗癌剤残基であり、Ｒ１は水素原子又は低級アルキル基、好ましくは低級アルキル基であり、Ｒ２は低級アルキレン基であり、Ｒ３はメチレン基又はエチレン基であり、Ｒ４は水素原子又は低級アシル基、好ましくは低級アシル基である。ｎは５〜１０００の整数を示し、ｍは２〜３００の整数を示し、ｘ＋ｙは０〜３００の整数を示し、好ましくは、ｎが８０〜３００であり、ｍが２０〜５０であり、ｘ＋ｙが０〜５０であり、但し、ｘ＋ｙはｍより大きくなることはない。ｘ及びｙは上記条件を満たす整数であれば、０を含む如何なる値も取り得る。
【００１５】
Ｒとしてのアンスラサイクリン系抗癌剤残基におけるアンスラサイクリン系抗癌剤としては、上記の本発明の注射用固型製剤に使用されるアンスラサイクリン系抗癌剤として挙げられたアンスラサイクリン系抗癌剤と同様であり、具体的に挙げられるアンスラサイクリン系抗癌剤も上記と同様であり、好ましいアンスラサイクリン系抗癌剤も上記と同じくドキソルビシンである。ブロック共重合体１分子中の疎水性ポリアミノ酸構造部分におけるアンスラサイクリン系抗癌剤残基の重量割合は２０％〜７０％であり、好ましくは２５％〜６０％である。
【００１６】
Ｒ１における低級アルキル基としては、炭素数１〜４の直鎖又は分岐アルキル基が挙げられ、具体的には、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、ｉ−プロピル基、ｎ−ブチル基、ｔ−ブチル基等が挙げられ、好ましくはメチル基である。
【００１７】
Ｒ２における低級アルキレン基としては、炭素数１〜４の直鎖又は分岐アルキレン基が挙げられ、具体的には、メチレン基、エチレン基、トリメチレン基、２−メチルトリメチレン基、テトラメチレン基等が挙げられ、好ましくはトリメチレン基である。
【００１８】
Ｒ３はメチレン基又はエチレン基であって、好ましくはメチレン基である。
【００１９】
Ｒ４における低級アシル基としては、炭素数１〜４のアシル基が挙げられ、具体的には、ホルミル基、アセチル基、プロピオニル基、ブチリル基等が挙げられ、好ましくはアセチル基である。
【００２０】
一般式（Ｉ）のアンスラサイクリン系抗癌剤残基とポリアミノ酸側鎖との結合様式は特に限定されないが，好ましくはアンスラサイクリン系抗癌剤のアミノ基又は水酸基と，ポリアミノ酸のカルボン酸側鎖によるアミド結合又はエステル結合が挙げられ，特に好ましくはアンスラサイクリン系抗癌剤のアミノ糖部分の１級アミノ基とポリアミノ酸のカルボン酸側鎖によるアミド結合が挙げられる。
【００２１】
本発明における親水性高分子構造部分と疎水性ポリアミノ酸構造部分からなるブロック共重合体として特に好ましくは、Ｒ１がメチル基、Ｒ２がトリメチレン基、Ｒ３がメチレン基、Ｒ４がアセチル基、ｎが８０〜３００、ｍが２０〜５０、ｘ＋ｙがｍより大きくない０〜５０であるブロック共重合体が挙げられる。
【００２２】
本発明に使用される親水性高分子構造部分と疎水性ポリアミノ酸構造部分からなるブロック共重合体は，例えば特開平７−６９９００号公報等に記載の方法に準じて製造されるものでもよい。即ち、片末端メトキシ片末端アミノプロポキシポリエチレングリコールとβ−ベンジル−Ｌ−アスパルテート−Ｎ−カルボン酸無水物を反応させ、得られるブロック共重合体の末端アミノ基をアシル化、側鎖ベンジルエステルをアルカリ加水分解し、生じる側鎖の遊離カルボン酸とアンスラサイクリン系抗癌剤を縮合剤と反応助剤を用いて縮合して得られる。
【００２３】
本発明の注射用固型製剤に使用される糖類としては、安定化剤、溶解補助剤、又は賦形剤として使用可能な糖類であれば特に限定されないが、好ましい糖類としては二糖類が挙げられ、具体的には、スクロース、マルトース、ラクトース、トレハロース等が挙げられ、スクロース、トレハロースがより好ましい。また、これらの二糖類を２種類以上組み合わせて用いてもよい。更に、糖アルコール類を１種以上組み合わせて用いてもよい。糖アルコール類としては、具体的には、イノシトール、キシリトール、ソルビトール、マンニトール等が挙げられる。
【００２４】
本発明の注射用固型製剤に使用される塩基としては、ブロック共重合体を水に溶解するときの溶解補助剤となり得るものであれば特に限定されず、そのような塩基としては、プロトン受容能があり水に溶解したときにアルカリ性を示すものが挙げられる。具体的には、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、弱酸のアルカリ金属塩（例えば炭酸、リン酸、酢酸、乳酸、クエン酸等のナトリウム塩やカリウム塩等）、アンモニア、トリエタノールアミン等のアミン類が好ましく、炭酸水素ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、クエン酸ナトリウム、及び水酸化ナトリウムがより好ましい。
【００２５】
本発明の注射用固型製剤中の、親水性高分子構造部分と疎水性ポリアミノ酸構造部分からなるブロック共重合体の配合割合は、製剤全量に対して１０％〜８５％、好ましくは３０％〜６０％である。
【００２６】
本発明の注射用固型製剤中のアンスラサイクリン系抗癌剤の量は、ブロック共重合体１００重量部に対し５〜１００重量部、好ましくは１０〜５０重量部、製剤中における配合割合は、製剤全量に対して１％〜５０％、好ましくは５％〜２０％である。
【００２７】
本発明の注射用固型製剤中における糖類の量は、ブロック共重合体１００重量部に対し１０〜５００重量部、好ましくは２０〜２００重量部、製剤中における配合割合は、製剤全量に対して５％〜８０％、好ましくは２５％〜６５％である。
本発明の製剤中における塩基の量は、ブロック共重合体１００重量部に対し０．１〜１０重量部、好ましくは１〜４重量部、製剤中における配合割合は、製剤全量に対しては０．０５％〜５％、好ましくは０．５％〜２％である。
次に、本発明の注射用固型製剤の製造方法について説明する。
【００２８】
まず親水性高分子構造部分と疎水性ポリアミノ酸構造部分とからなるブロック共重合体と塩基を水に加え、必要に応じて加熱することにより溶解する。ブロック共重合体の濃度は０．０１％〜５０％、好ましくは０．１％〜２５％である。塩基の量は、ｐＨが６〜１３、好ましくはｐＨが７〜１０になる量であり、ブロック共重合体１００重量部に対して０．１〜１０重量部、好ましくは１〜４重量部である。塩基はあらかじめ水に溶解しておいてもよく、ブロック共重合体と同時に又は後から添加してもよい。加熱は５０〜８０℃、好ましくは６０〜７０℃となるように実施する。溶解後は４０℃以下に速やかに冷却する。加熱時間は、ブロック共重合体の分解を最小限に抑えるため、可能な限り短いことが好ましく、特に１時間以内が好ましい。
【００２９】
このブロック共重合体溶液にアンスラサイクリン系抗癌剤及び糖類を添加し溶解する。溶解は５〜５０℃、好ましくは１５〜４０℃で行う。アンスラサイクリン系抗癌剤の量は、ブロック共重合体１００重量部に対して５〜１００重量部、好ましくは１０〜５０重量部である。糖類の量は、１０〜５００重量部、好ましくは２０〜２００重量部である。アンスラサイクリン系抗癌剤及び／又は糖類を別に水に溶解し、溶液同士を混合してもよい。必要に応じｐＨを調整して、ブロック共重合体−アンスラサイクリン系抗癌剤複合体の水溶液とする。これらの混合・撹拌操作には、プロペラ撹拌機、ホモミキサー、ディスパーサー等が使用できる。また、ホモジナイザー、高圧ホモジナイザー等、ミセル・乳化・懸濁のための専用機を使用してもよい。
【００３０】
水溶液のｐＨは、必要に応じ４〜９、好ましくは５〜８に調整する。ｐＨ調整剤としては、塩酸、硝酸、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、アンモニア、トリエタノールアミン等のアミン類、並びに、クエン酸、酢酸、酒石酸、炭酸、乳酸、硫酸、リン酸及びそのナトリウム塩やカリウム塩等のアルカリ金属塩、アンモニウム塩が好ましく、塩酸、水酸化ナトリウムがより好ましい。このようにして得られる水溶液も本発明に含まれる。
【００３１】
注射剤に用いるため、ブロック共重合体−アンスラサイクリン系抗癌剤複合体の水溶液は無菌操作にて調製するか、調製後に無菌濾過することが好ましい。又、ブロック共重合体−アンスラサイクリン系抗癌剤複合体のミセルの粒径の大きさを揃えるために、無菌濾過の前に１回以上濾過してもよい。濾過操作は加圧して行ってもよい。この操作は、無菌濾過用のフィルターを装着したフィルターと同時に装着して１回の濾過操作で行ってもよい。ミセルの粒径の大きさを揃えるための濾過には、通常のセルロース系及び合成高分子系等のメンブレンフィルターが使用でき、最小の孔径としては０．０５〜０．５μｍが好ましい。
【００３２】
濾過した水溶液は通常の方法により乾燥し固型粉末とする。乾燥法としては、例えば、凍結乾燥法、噴霧乾燥法等が挙げられるが、凍結乾燥法が好ましい。通常医薬製剤製造に用いられる凍結乾燥機が使用可能であり、バイアル瓶又はアンプル管に充填し、凍結乾燥し、密封し注射用固型製剤を得る。
【００３３】
又、本発明には上記製造方法によって製造された注射用固型製剤も含まれる。
本発明の注射用固型製剤が凍結乾燥製剤であるものも本発明に含まれる。
【００３４】
更に、本発明には、上記注射用固型製剤を輸液類に溶解することにより得られる、疎水性内核にアンスラサイクリン系抗癌剤を含む親水性高分子構造部分と疎水性ポリアミノ酸構造部分とからなるブロック共重合体ミセルの水溶液製剤も含まれる。
【００３５】
本発明における輸液類としては、注射用水、生理食塩液、ブドウ糖液等の通常使用される輸液等が挙げられる。そのｐＨは４〜９、好ましくは５〜８である。また、本発明の水溶液製剤は、溶解した液を所望のｐＨ及び浸透圧にするために用いる製剤学的に許容されるｐＨ調整剤及び等張化剤を含んでもよい。
【００３６】
上記ｐＨ調整剤としては、塩酸、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、アンモニア、トリエタノールアミン等のアミン類、並びに、クエン酸、酢酸、酒石酸、炭酸、乳酸、硫酸、リン酸及びそのナトリウム塩やカリウム塩等のアルカリ金属塩及びアンモニウム塩が挙げられ、緩衝作用のある酸及びその塩を含む組み合わせが好ましく、クエン酸、リン酸及びその塩を含む組み合わせがより好ましい。前記ｐＨ調整剤により、溶液のｐＨを４〜９、好ましくは５〜８とする。
【００３７】
上記等張化剤としては、塩化ナトリウム、グリセリン、ブドウ糖、果糖、マンニトール、キシリトール等の単糖類、及びマルトース等の二糖類が挙げられ、塩化ナトリウム、グリセリン、及びマンニトールが好ましい。等張化剤は、溶解液の生理食塩液に対する浸透圧比が０〜３、好ましくは０．５〜２程度になるような濃度で使用する。その濃度としては、塩化ナトリウム０．５％〜１．８％、グリセリン１．３％〜５％、マンニトール２．５％〜１０％が好ましい。
【００３８】
又、親水性高分子構造部分とアンスラサイクリン系抗癌剤が結合した疎水性ポリアミノ酸構造部分とからなるブロック共重合体、アンスラサイクリン系抗癌剤、糖類、及び塩基を、水又は塩を含む水溶液に溶解したｐＨ４〜９のブロック共重合体ミセル水溶液も本発明に含まれる。該水溶液中では、ブロック共重合体は親水性高分子構造部分を外側に、アンスラサイクリン系抗癌剤が結合した疎水性ポリアミノ酸構造部分を内側にするミセルを形成し、その疎水性内核にアンスラサイクリン系抗癌剤を主に内包している。ブロック共重合体、アンスラサイクリン系抗癌剤、糖類、及び塩基については、上記注射用固型製剤に用い得るものと同様なものが挙げられ、その量又は量比も上記した範囲が挙げられる。
【００３９】
【実施例】
以下に本発明の効果を実施例及び試験例をあげて具体的に説明するが、本発明はこれらのみに限定されるものではない。
【００４０】
実施例１
後記の参考例に従い得られるブロック共重合体１０００ｍｇ、及び炭酸水素ナトリウム１８．５ｍｇを注射用水２０ｍＬに加え、６０〜７０℃で撹拌溶解した後、室温まで冷却した。別に、塩酸ドキソルビシン２００ｍｇ、及びスクロース１０００ｍｇを注射用水４０ｍＬに撹拌溶解した。両液を合わせ、水酸化ナトリウムと塩酸にてｐＨ６とした後、注射用水にて全量を１００ｍＬとした。孔径０．４５μｍのメンブレンフィルターで濾過した後、孔径０．２μｍのメンブレンフィルターで濾過滅菌した。バイアル瓶に５ｍＬずつ充填し、凍結乾燥後封栓して注射用固型製剤を得た。この製剤に注射用水５ｍＬを加えて再溶解し、ブロック共重合体−ドキソルビシン複合体の水溶液を得た。動的光散乱法によるこの複合体の平均ミセル径は２７ｎｍであった。
【００４１】
実施例２
ブロック共重合体（実施例１に同じ）１０００ｍｇ、及び水酸化ナトリウム８．８ｍｇを注射用水２０ｍＬに加え、６０〜７０℃で撹拌溶解した後、室温まで冷却した。別に、塩酸ドキソルビシン２００ｍｇ、及びトレハロース８００ｍｇを注射用水４０ｍＬに撹拌溶解した。両液を合わせ、水酸化ナトリウムと塩酸にてｐＨ６とした後、注射用水にて全量を１００ｍＬとした。孔径０．４５μｍのメンブレンフィルターで濾過した後、孔径０．２μｍのメンブレンフィルターで濾過滅菌した。バイアル瓶に５ｍＬずつ充填し、凍結乾燥後封栓して注射用固型製剤を得た。この製剤に注射用水５ｍＬを加えて再溶解し、ブロック共重合体−ドキソルビシン複合体の水溶液を得た。動的光散乱法によるこの複合体の平均ミセル径は２８ｎｍであった。
【００４２】
実施例３
ブロック共重合体（実施例１に同じ）１０００ｍｇ、及び炭酸水素ナトリウム１８．５ｍｇを注射用水２０ｍＬに加え、６０〜７０℃で撹拌溶解した後、室温まで冷却した。別に、塩酸ドキソルビシン２００ｍｇ、及びマルトース１０００ｍｇを注射用水４０ｍＬに撹拌溶解した。両液を合わせ、水酸化ナトリウムと塩酸にてｐＨ６とした後、注射用水にて全量を１００ｍＬとした。孔径０．４５μｍのメンブレンフィルターで濾過した後、孔径０．２μｍのメンブレンフィルターで濾過滅菌した。バイアル瓶に５ｍＬずつ充填し、凍結乾燥後封栓して注射用固型製剤を得た。この製剤に注射用水５ｍＬを加えて再溶解し、ブロック共重合体−ドキソルビシン複合体の水溶液を得た。動的光散乱法によるこの複合体の平均ミセル径は２９ｎｍであった。
【００４３】
実施例４
ブロック共重合体（実施例１に同じ）１０００ｍｇ、及び水酸化ナトリウム９．６ｍｇを注射用水２０ｍＬに加え、６０〜７０℃で撹拌溶解した後、室温まで冷却した。別に、塩酸ドキソルビシン２００ｍｇ、及びラクトース８００ｍｇを注射用水４０ｍＬに撹拌溶解した。両液を合わせ、水酸化ナトリウムと塩酸にてｐＨ６とした後、注射用水にて全量を１００ｍＬとした。孔径０．４５μｍのメンブレンフィルターで濾過した後、孔径０．２μｍのメンブレンフィルターで濾過滅菌した。バイアル瓶に５ｍＬずつ充填し、凍結乾燥後封栓して注射用固型製剤を得た。この製剤に注射用水５ｍＬを加えて再溶解し、ブロック共重合体−ドキソルビシン複合体の水溶液を得た。動的光散乱法によるこの複合体の平均ミセル径は２５ｎｍであった。
【００４４】
実施例５
式（１）のブロック共重合体（実施例１に同じ）１０００ｍｇ、及び炭酸水素ナトリウム２０ｍｇを注射用水２０ｍＬに加え、６０〜７０℃で撹拌溶解した後、室温まで冷却した。別に、塩酸ドキソルビシン２００ｍｇ、及びスクロース６００ｍｇを注射用水４０ｍＬに撹拌溶解した。両液を合わせ、水酸化ナトリウムと塩酸にてｐＨ５．５とした後、注射用水にて全量を１００ｍＬとした。孔径０．４５μｍのメンブレンフィルターで濾過した後、孔径０．１μｍのメンブレンフィルターで濾過滅菌した。バイアル瓶に５ｍＬずつ充填し、凍結乾燥後封栓して注射用固型製剤を得た。この製剤に注射用水５ｍＬを加えて再溶解し、ブロック共重合体−ドキソルビシン複合体の水溶液を得た。動的光散乱法によるこの複合体の平均ミセル径は３６ｎｍであった。
【００４５】
実施例６
式（１）のブロック共重合体（実施例１に同じ）１０００ｍｇ、及び炭酸水素ナトリウム２０ｍｇを注射用水２０ｍＬに加え、６０〜７０℃で撹拌溶解した後、室温まで冷却した。別に、塩酸ドキソルビシン２００ｍｇ、及びスクロース１５００ｍｇを注射用水４０ｍＬに撹拌溶解した。両液を合わせ、水酸化ナトリウムと塩酸にてｐＨ５．５とした後、注射用水にて全量を１００ｍＬとした。孔径０．４５μｍのメンブレンフィルターで濾過した後、孔径０．１μｍのメンブレンフィルターで濾過滅菌した。バイアル瓶に５ｍＬずつ充填し、凍結乾燥後封栓して注射用固型製剤を得た。この製剤に注射用水５ｍＬを加えて再溶解し、ブロック共重合体−ドキソルビシン複合体の水溶液を得た。動的光散乱法によるこの複合体の平均ミセル径は３５ｎｍであった。
【００４６】
比較例１
ブロック共重合体（実施例１に同じ）１０００ｍｇ、及び炭酸水素ナトリウム２０ｍｇを注射用水２０ｍＬに加え、６０〜７０℃で撹拌溶解した後、室温まで冷却した。別に、塩酸ドキソルビシン２００ｍｇを注射用水４０ｍＬに撹拌溶解した。両液を合わせ、水酸化ナトリウムと塩酸にてｐＨ６とした後、注射用水にて全量を１００ｍＬとした。孔径０．４５μｍのメンブレンフィルターで濾過した後、孔径０．２μｍのメンブレンフィルターで濾過滅菌した。バイアル瓶に５ｍＬずつ充填し、凍結乾燥後封栓して注射用固型製剤を得た。この製剤に注射用水５ｍＬを加えて再溶解し、ブロック共重合体−ドキソルビシン複合体の水溶液を得た。動的光散乱法によるこの複合体の平均ミセル径は１６５ｎｍであった。
【００４７】
試験例１（再溶解性）
実施例１〜４の本発明の注射用固型製剤と比較例１の注射用固型製剤を４０℃で１週間保存し、注射用水５ｍＬを加え再溶解した時の再溶解時間を比較した。試験は杉原らの方法（杉原正泰著「医薬品包装の使用性とその評価」、ｐ１３８、講談社、１９９６）に準じて行った。また再溶解後の平均ミセル径を動的光散乱法により測定した。結果を表１に示した。本発明の実施例１〜４の注射用固型製剤は熱による溶解性の変化及び平均ミセル径の変化がなく安定であった。糖類を含まない比較例１の製剤は熱により再溶解しないものとなった。
【００４８】
試験方法
▲１▼　実施例及び比較例のバイアル製剤に２０℃の注射用水５ｍＬを添加する。
▲２▼　４０ｃｍの振幅、２往復／秒の速度にて手で１５秒間振盪し、５秒間静置して溶解状態を観察する。
▲３▼　１５秒間振盪、５秒間静置を繰り返し、振盪時間の合計を再溶解時間とする。
【００４９】
【表１】
2004010479.tif 000003
【００５０】
試験例２（安定性）
実施例１の本発明の注射用固型製剤を２５℃で６箇月保存し、保存後の外観、残存率、再溶解時間、及び平均ミセル径により安定性を検討した。結果を表２に示した。本発明の注射用固型製剤は長期保存においても安定であり、臨床適応可能であると判断された。
【００５１】
【表２】
2004010479.tif 000004
【００５２】
参考例
片末端メトキシ−片末端３−アミノプロポキシルポリエチレングリコール　２３．３２ｇをジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）４６６ｍＬに溶解し、３５℃に加温する。β−ベンジル−Ｌ−アスパルテート−Ｎ−カルボン酸無水物（ＢＬＡ−ＮＣＡ）４２．８７ｇを加え、２２時間反応を行う。反応混合物をジイソプロピルエーテル（ＩＰＥ）　３．７３リットルとエタノール（ＥｔＯＨ）　０．９３リットルの混合溶媒中に滴下し、析出した沈澱を、ろ過し、ＩＰＥとＥｔＯＨの混合溶液（４：１）およびＩＰＥで洗浄したのち、真空乾燥し片末端メトキシポリエチレングリコール−ポリ（β−ベンジル　Ｌ−アスパルテート）共重合体　５４．２９ｇ（アスパラギン酸ユニット（単位）数２９．０）を得る。
【００５３】
得られた片末端メトキシポリエチレングリコール−ポリ（β−ベンジル　Ｌ−アスパルテート）共重合体　５２．８５ｇをジメチルホルムアミド　５２９ｍＬに溶解し、３５℃に加温する。無水酢酸　２．５０ｍＬを加え、３時間反応を行う。反応混合物をジイソプロピルエーテル（ＩＰＥ）　４．７６リットルとエタノール（ＥｔＯＨ）　０．５３リットルの混合溶媒中に滴下し、析出した沈澱を、ろ過し、ＩＰＥとＥｔＯＨの混合溶液（９：１）およびＩＰＥで洗浄したのち、真空乾燥し片末端メトキシポリエチレングリコール−ポリ（β−ベンジルＬ−アスパルテート）共重合体　Ｎ−アセチル化物　５１．６７ｇを得る。
【００５４】
得られた片末端メトキシポリエチレングリコール−ポリ（β−ベンジル　Ｌ−アスパルテート）共重合体　Ｎ−アセチル化物　５０．１９ｇをアセトニトリル７５３ｍＬおよび０．２規定水酸化ナトリウム溶液　２．１６リットルで５時間反応させる。反応混合物を２規定塩酸で中和後、減圧下濃縮してアセトニトリルを除去したのち、酢酸エチル　１．２リットルで３回抽出を行う。水層を濃縮したのち、ＨＰ−２０　ＳＳカラム及びＤｏｗｅｘ　５０Ｗ８カラムにて精製し、さらに減圧下濃縮したのち凍結乾燥する。得られた凍結乾燥品をジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）３２０ｍＬに溶解し、ヘキサン　２．５６リットルと酢酸エチル　０．６４リットルの混合溶媒中に滴下する。析出した沈澱を、ろ過し、ヘキサンと酢酸エチルの混合溶液（４：１）およびヘキサンで洗浄したのち、真空乾燥し片末端メトキシポリエチレングリコール−ポリアスパラギン酸共重合体　Ｎ−アセチル化物　３３．２０ｇを得る。
【００５５】
得られた片末端メトキシポリエチレングリコール−ポリアスパラギン酸共重合体Ｎ−アセチル化物２８．８５ｇをジメチルホルムアミド５７７ｍＬに溶解し、３５℃に加温する。ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）１９．７５ｇ、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（ＨＯＳｕ）１１．０１ｇを加え、１時間反応させる。生成したジシクロヘキシルウレアを綿栓ろ過する。得られたろ液を酢酸エチル２．３リットルで希釈したのち、ヘキサン３．５リットルを添加する。析出した沈殿をろ過し、ヘキサン：酢酸エチル（３：１）溶液で洗浄後、真空乾燥することで、片末端メトキシポリエチレングリコール−ポリアスパラギン酸共重合体Ｎ−アセチル化物−ＨＯＳｕ活性エステル体３３．８２ｇを得る。
【００５６】
得られた片末端メトキシポリエチレングリコール−ポリアスパラギン酸共重合体Ｎ−アセチル化物−ＨＯＳｕ活性エステル体３３．７３ｇをジメチルホルムアミド１．３５リットルに溶解し、３５℃に加温する。塩酸ドキソルビシン２６．１３ｇを粉末のまま添加し、反応液に懸濁させた後、トリエチルアミン８．１６ｍＬを添加し、１時間反応を行なう。反応混合物を酢酸エチル４．０リットル、ヘキサン１６．０リットルの混合溶媒中に滴下し、析出した沈殿をろ過し、ヘキサン：酢酸エチル（３：１）溶液で洗浄後、真空乾燥する。次に得られた沈殿をアセトニトリル５９０ｍＬに懸濁させた後、水１７８０ｍＬを加え、３５℃で加温攪拌する。沈殿が溶解したことを確認してから１時間攪拌を続けた後、反応溶液を減圧下濃縮しアセトニトリルを除去し、凍結乾燥する。得られた凍結乾燥品を更に精製し、片末端メトキシポリエチレングリコール−ポリアスパラギン酸共重合体Ｎ−アセチル化物−ドキソルビシン縮合体４５．３９ｇを得る。このブロック共重合体のドキソルビシンの結合している割合は、およそ４７％であった。
【００５７】
【発明の効果】
本発明により、臨床上有用な抗癌剤であるドキソルビシンを含有するミセル医薬製剤の注射用固型製剤であって、長期間安定で且つ再溶解性が良好であり、添加剤の安全性が高く、臨床適用可能な、親水性高分子構造部分と疎水性ポリアミノ酸構造部分からなるブロック共重合体の注射用固型製剤と、有機溶媒や超音波照射や透析のための特殊な装置を必要としない、通常の製造工程の組み合わせで製造できる工業化可能なその製造方法が初めて提供された。
【００５８】
上記注射用固型製剤は、ブロック共重合体とアンスラサイクリン系抗癌剤によるブロック共重合体−アンスラサイクリン系抗癌剤複合体を固型組成物としたものであり、使用時に輸液類で溶解することによりブロック共重合体−アンスラサイクリン系抗癌剤複合体のミセルの水溶液とするものである。