(57)【要約】【課題】核酸との静電気的相互作用を利用した染色剤であり、かつ肉眼でも検出可能な染色剤を提供すると共に、該染色剤を利用した核酸の染色・脱色方法を提供する。【解決手段】塩基性色素もしくはその誘導体を少なくとも１種類含有してなることを特徴とする染色剤。また、上記染色剤を用いた染色方法及び脱色方法。【選択図】  図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
塩基性色素を有効成分として少なくとも１種類を含有してなることを特徴とする染色剤。
【請求項２】
プラス電荷を有する塩基性色素誘導体を有効成分として少なくとも１種類を含有してなることを特徴とする請求項１に記載の染色剤。
【請求項３】
プラス電荷を有する塩基性色素及び塩基性色素誘導体の混合物を有効成分として含有してなることを特徴とする請求項１に記載の染色剤。
【請求項４】
電気泳動用担体上の試料に前記染色剤を添加した後、加熱することで、試料を着色する請求項１，２，３に記載の染色剤の使用方法。
【請求項５】
前記着色剤を用いて着色した電気泳動担体を、電解質溶液に浸積することで脱色する請求項１，２，３に記載の染色剤の使用方法。
【請求項６】
前記塩基性色素が、トルイジンブルーＯである請求項１乃至５に記載の染色剤及び当該染色剤の使用方法。
【請求項７】
前記塩基性色素は、その有効成分を全組成中の０．００１重量％以上含有する請求項１乃至６に記載の染色剤及び当該染色剤の使用方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、塩基性色素もしくはその誘導体を利用した核酸染色剤、及び染色方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
アガロースゲル電気泳動後の核酸の染色にはインターカレート型色素であるｅｔｈｉｄｉｕｍ  ｂｒｏｍｉｄｅ等が多く使用されている。しかし、発ガン性の高さから、最近は発ガン性が低く、感度のよい色素の開発が盛んに行われている。また、これらの色素の多くは蛍光色素であり、その励起には紫外線が広く利用されている。しかしながら、紫外線による被爆や、核酸の変異などの問題がある。
特開昭５０−５２２２８号公報には、連鎖球菌のＤＮＡに対する抗体、抗ストレプトドルナーゼの定量的測定に際し、その抗体濃度を検出するための着色剤としてトルイジンブルーＯを含む基質が示されている。しかしながら、着色対称が高分子量デスオキシリボ核酸に止まっており、電気泳動用試料としての核酸を着色するまでには至っていない。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、上記のような現状に鑑み、核酸との静電気的相互作用を利用した染色剤であり、かつ肉眼でも検出可能な染色剤を提供すると共に、該染色剤を利用した核酸の染色・脱色方法を提供することを目的とする。
【０００４】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意研究の結果、従来は細胞内の染色体を検出する色素であるｔｏｌｕｉｄｉｎｅ  ｂｌｕｅ  Ｏが、色調、染色性に優れ、核酸の染色成分として非常に優れた性質を有すること、並びに当該色素が塩基性である為、静電気的相互作用により核酸を染色することを見出し、これらの知見により本発明を完成した。
【０００５】
即ち、本発明の第一は、塩基性色素もしくはその誘導体を有効成分として含有することを特徴とする染色剤である。本発明の第二は、塩基性色素もしくはその誘導体により染色することを特徴とする染色方法である。本発明の第三は、塩基性色素もしくはその誘導体により染色した電気泳動担体の脱色方法である。
【０００６】
【発明の実施の形態】
以下、上記発明を各発明ごとに説明する。
（１）染色剤  本発明の染色剤は、塩基性色素もしくはその誘導体（以下、単に「塩基性色素等」という）を有効成分として少なくとも１種類含有する。ここで用いられる塩基性色素には、ｔｏｌｕｉｄｉｎｅ  ｂｌｕｅ  Ｏやｍｅｔｈｙｌｅｎｅ  ｂｌｕｅ、ｍｅｔｈｙｌ  ｇｒｅｅｎなどを例示することができ、これらの中でもｔｏｌｕｉｄｉｎｅ  ｂｌｕｅ  Ｏが好ましい。また、ここで用いられる塩基性色素の誘導体は、塩基性色素としての特徴であるプラス電荷を持つものであれば特に限定されないが、電気泳動担体の脱色後の検出を考慮し、青紫色を呈するものが特に好ましい。さらに、塩基性色素等を数種類含有する染色剤を用いてもよい。
【０００７】
本発明の染色剤は、水溶液に溶解させて使用する。ここで用いる水溶液としては、蒸留水、トリス緩衝液等を例示することができ、これらの溶液のｐＨは染色したいサンプルが完全に解離し、マイナス荷電を持つようになるものであれば良い。また、溶液中のイオン強度は染色剤の解離度に影響を与える為、なるべく低い物が望ましい。以上の条件を考慮し、蒸留水が一般的な使用には好ましい。水溶液中に溶解させる塩基性色素等の量は、染めようとするサンプルの分子量や濃度、染色しようとする電気泳動担体の厚さや濃度、染色時間などに応じて決めればよいが、水溶液中の塩基性色素等の濃度が０．００１〜１．０重量％程度になるようにするのが好ましい。
塩基性色素の場合は０．００１重量％以下だと、着色性の点で好ましくなく、又１．０  重量％以上だと塩基性色素の溶解性や脱色性の点で好ましくない。しかしながら、塩基性色素誘導体で、蛍光を発するものはこの限りではない。
又、当該染色剤は静電気的相互作用によってサンプルと結合している為、通電によってサンプルとの結合を切断することが可能である。この性質を利用して染色剤とサンプルを分離することが容易になる。
本発明の染色剤は、例えば、デオキシリボ核酸やリボ核酸のアガロースゲル電気泳動後の染色に使用することができる。  染色時間は、染めようとする核酸の分子量や濃度、染色しようとするアガロースゲルの厚さや濃度、染色時間などに応じて決めればよいが、通常は、３０秒〜５分程度とするのが好ましい。通常用いられているｅｔｈｉｄｉｕｍ  ｂｒｏｍｉｄｅによる染色では、５分〜６０分の染色が必要であり、これに比べて格段に染色時間が短縮された。本発明の染色剤は、サンプルとの静電気的な相互作用を利用して染色している為、ｅｔｈｉｄｉｕｍ  ｂｒｏｍｉｄｅのようなインターカレート型染色とは異なり、染色時に完全にサンプルとの相互作用をする必要が無い。この為、その後に続く脱色過程での電気泳動担体への染色剤の浸透及び、サンプルとの相互作用を行うことが可能である。よって、染色時には電気泳動担体表層に浸透させる程度の染色でも十分にサンプルを染色することが可能となる。また、本染色剤を用いて、蛋白質を染色することも可能である。変性蛋白質の染色を行う場合、蛋白質の変性剤としてはＳｏｄｉｕｍ  ｄｏｄｅｃｙｌ  ｓｕｌｆａｔｅ（ＳＤＳ）やｕｒｅａ等が例示されるが、その中でも、染色剤との相互作用を起こしにくいという理由から、電荷を持たない変性剤が好ましい。
【０００８】（２）染色方法  本発明の染色方法は、塩基性色素等を用いて染色する。ここで用いられる塩基性色素等は、「（１）染色剤」の欄で述べたものと同様のものが使用できる。具体的な染色方法としては、アガロースゲル電気泳動後の染色法を例示することができる。しかしながら、あらかじめゲルに含有させる場合や、サンプルと結合させておく場合もある。
【０００９】アガロースゲル電気泳動後の染色法は、核酸の電気泳動後のアガロースゲルを染色剤に浸漬することにより染色を行う方法である。ここで、染色することのできる核酸としては、デオキシリボ核酸、リボ核酸等を例示することができる。浸漬時間は、染めようとする核酸の分子量や濃度、染色しようとするアガロースゲルの厚さや濃度等に応じて決めればよいが、３０秒〜５分程度程度が適当である。また、電子レンジを用いた染色時間の短縮も可能であり、５００Ｗの電子レンジであれば、２秒間で染色することが可能である。さらに、この染色時間は「（１）染色剤」の欄で述べた理由により、従来法より短縮されている。電子レンジは、加熱手段の一例であって、その他の加熱手段、例えば、湯へ浸す、導電性部材との組み合わせによるインダクションヒーテイングの利用等であってもよい。
【００１０】（３）脱色方法  脱色方法は、染色後の電気泳動担体を食塩水やアルコール等で例示される、電解質溶液に浸漬することにより脱色する方法である。ここで用いられるアルコールとしてはメタノール、エタノール等を例示することができ、これらの中でもエタノールが好ましい。アルコールの濃度は、３０％〜９９％程度になるようにするのが好ましい。浸漬時間は染めようとするサンプルの分子量や濃度、脱色しようとする電気泳動担体の厚さや濃度等に応じて決めればよいが、１分〜２分程度が適当である。また、脱色に際しては、脱色補助剤を併用することもできる。さらに、アルコールによる脱色後に、蒸留水に浸漬することでさらに鮮明な電気泳動像を得ることも可能である。この場合、浸漬時間は染めようとするサンプルの分子量や濃度、脱色しようとする電気泳動担体の厚さや濃度等に応じて決めればよいが、１分〜１０分程度が適当である。また、染色から脱色まで全てでかかる時間は５分〜２０分であり、従来行われている方法と同等、もしくはより短時間での染色が可能である。
【００１１】
【実施例】以下、本発明を実施例を挙げて具体的に説明するが、本発明はこれらに何ら限定されるものではない。
【００１２】
〔実施例１〕  ｔｏｌｕｉｄｉｎｅ  ｂｌｕｅ  Ｏによるデオキシリボ核酸の染色
塩基性色素として、０．１％ｔｏｌｕｉｄｉｎｅ  ｂｌｕｅ  Ｏ（蒸留水１００ｍＬ、ｔｏｌｕｉｄｉｎｅ  ｂｌｕｅ  Ｏ  （ＳＩＧＭＡ社）０．１ｇ）を利用した。また、核酸の電気泳動には、ＴＡＥ緩衝液（トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン４０ｍＭ、エチレンジアミン四酢酸２０ｍＭ、酢酸２０ｍＭを蒸留水１Ｌに溶解）、１％アガロースゲル（ＴＡＥ緩衝液１００ｍＬ、ＳｅａｋｅｍＧＴＧアガロース（ＢＭＡ社）１ｇ）を加熱溶解し、ゲルトレイに流し込んで平板としたものを用い、左からレーン１〜８までを使用した。電気泳動するサンプルは、λ／ＥｃｏＲＩ＋ＨｉｎｄＩＩＩ  ｄｏｕｂｌｅ  ｄｉｇｅｓｔ（ＴＯＹＯＢＯ社）を使用した。各レーンの添加量は表１の通りである。また、電気泳動装置はＭＵＰＩＤ−Ｓ（株式会社アドバンス製）を利用し、１００Ｖで約１５分間電気泳動を行った。表１は、λ／ＥｃｏＲＩ＋ＨｉｎｄＩＩＩ  ｄｏｕｂｌｅ  ｄｉｇｅｓｔを電気泳動する際にアプライしたサンプル量を示す表である。
【表１】
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【００１３】ｅｔｈｉｄｉｕｍ  ｂｒｏｍｉｄｅ染色とｔｏｌｕｉｄｉｎｅ  ｂｌｕｅ  Ｏ染色を同時に行った。ｅｔｈｉｄｉｕｍ  ｂｒｏｍｉｄｅ染色の場合、１０ｍｇ／ｍＬのｅｔｈｉｄｉｕｍ  ｂｒｏｍｉｄｅをＴＡＥ緩衝液で１／１００００希釈した溶液に電気泳動後のアガロースゲルを５分間浸漬した。その後、ＭＵＰＩＤ−Ｓｃｏｐｅ（株式会社アドバンス製）により検出した。ｔｏｌｕｉｄｉｎｅ  ｂｌｕｅ  Ｏの場合は、０．１％染色剤溶液に電気泳動後のアガロースゲルを浸漬し、２分間染色した。その後、７０％エタノールに２分間浸漬し、蒸留水に３分間浸漬することで脱色を行った。検出には白色光源を用い、肉眼での検出を行った。
【００１４】ｅｔｈｉｄｉｕｍ  ｂｒｏｍｉｄｅ染色による電気泳動像は図１、ｔｏｌｕｉｄｉｎｅ  ｂｌｕｅ  Ｏ染色による電気泳動像は図２であり、検出限界は表２の通りであった。表２からわかるように１．３７５ｋｂｐ及び０．５６４ｋｂｐのバンドにおいてはｅｔｈｉｄｉｕｍ  ｂｒｏｍｉｄｅより感度良く染色され、他のバンドではｅｔｈｉｄｉｕｍ  ｂｒｏｍｉｄｅと同等の感度であった。
【表２】
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【００１５】
〔実施例２〕  ｔｏｌｕｉｄｉｎｅ  ｂｌｕｅ  Ｏによるデオキシリボ核酸の染色
塩基性色素として、０．１％ｔｏｌｕｉｄｉｎｅ  ｂｌｕｅ  Ｏ（蒸留水１００ｍＬ、ｔｏｌｕｉｄｉｎｅ  ｂｌｕｅ  Ｏ  （ＳＩＧＭＡ社）０．１ｇ）を利用した。また、核酸の電気泳動には、ＴＡＥ緩衝液（トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン４０ｍＭ、エチレンジアミン四酢酸２０ｍＭ、酢酸２０ｍＭを蒸留水１Ｌに溶解）、２％アガロースゲル（ＴＡＥ緩衝液１００ｍＬ、ＳｅａｋｅｍＧＴＧアガロース（ＢＭＡ社）２ｇ）を加熱溶解し、ゲルトレイに流し込んで平板としたものを用いた。電気泳動するサンプルは、λ／ＥｃｏＲＩ＋ＨｉｎｄＩＩＩ  ｄｏｕｂｌｅ  ｄｉｇｅｓｔ（ＴＯＹＯＢＯ社）を使用し、各レーンの添加量は表１の通りである。また、電気泳動装置はＭＵＰＩＤ−Ｓ（株式会社アドバンス製）を利用し、１００Ｖで約１７分間電気泳動を行った。
【００１６】ｅｔｈｉｄｉｕｍ  ｂｒｏｍｉｄｅ染色とｔｏｌｕｉｄｉｎｅ  ｂｌｕｅ  Ｏ染色を同時に行った。ｅｔｈｉｄｉｕｍ  ｂｒｏｍｉｄｅ染色の場合、１０ｍｇ／ｍＬのｅｔｈｉｄｉｕｍ  ｂｒｏｍｉｄｅをＴＡＥ緩衝液で１／１００００希釈した溶液に電気泳動後のアガロースゲルを５分間浸漬した。その後、ＭＵＰＩＤ−Ｓｃｏｐｅ（株式会社アドバンス製）により検出した。ｔｏｌｕｉｄｉｎｅ  ｂｌｕｅ  Ｏの場合は、０．１％染色剤溶液に電気泳動後のアガロースゲルを浸漬し、２分間染色した。その後、７０％エタノールに２分間浸漬し、蒸留水に３分間浸漬することで脱色を行った。検出には白色光源を用い、肉眼での検出を行った。
【００１７】ｅｔｈｉｄｉｕｍ  ｂｒｏｍｉｄｅ染色による電気泳動像は図３、ｔｏｌｕｉｄｉｎｅ  ｂｌｕｅ  Ｏ染色による電気泳動像は図４であり、検出限界は表３の通りであった。表３からわかるように１．３７５ｋｂｐ、０．９４７ｋｂｐ、０．８３１ｋｂｐ及び０．５６４ｋｂｐのバンドにおいてはｅｔｈｉｄｉｕｍ  ｂｒｏｍｉｄｅより感度良く染色され、他のバンドではｅｔｈｉｄｉｕｍ  ｂｒｏｍｉｄｅと同等の感度であった。
表３は、  ２％アガロースゲルを用いて核酸（λ／ＥｃｏＲＩ＋ＨｉｎｄＩＩＩ  ｄｏｕｂｌｅ  ｄｉｇｅｓｔ）の電気泳動を行った際の検出限界を示す表である。
【表３】
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【００１８】
〔実施例３〕  ｔｏｌｕｉｄｉｎｅ  ｂｌｕｅ  Ｏによるデオキシリボ核酸の染色
塩基性色素として、０．１％ｔｏｌｕｉｄｉｎｅ  ｂｌｕｅ  Ｏ（蒸留水１００ｍＬ、ｔｏｌｕｉｄｉｎｅ  ｂｌｕｅ  Ｏ  （ＳＩＧＭＡ社）０．１ｇ）を利用した。また、核酸の電気泳動には、ＴＡＥ緩衝液（トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン４０ｍＭ、エチレンジアミン四酢酸２０ｍＭ、酢酸２０ｍＭを蒸留水１Ｌに溶解）、２％アガロースゲル（ＴＡＥ緩衝液１００ｍＬ、ＳｅａｋｅｍＧＴＧアガロース（ＢＭＡ社）２ｇ）を加熱溶解し、ゲルトレイに流し込んで平板としたものを用いた。電気泳動するサンプルは、１００ｂｐ  ＤＮＡ  Ｌａｄｄｅｒ（ＴａＫａＲａ社）を使用し、各レーンの添加量は表４の通りである。また、電気泳動装置はＭＵＰＩＤ−Ｓ（株式会社アドバンス製）を利用し、１００Ｖで約１７分間電気泳動を行った。
表４は、１００ｂｐ  ＤＮＡ  Ｌａｄｄｅｒを電気泳動する際にアプライしたサンプル量を示す表である。
【表４】
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【００１９】
ｅｔｈｉｄｉｕｍ  ｂｒｏｍｉｄｅ染色とｔｏｌｕｉｄｉｎｅ  ｂｌｕｅ  Ｏ染色を同時に行った。ｅｔｈｉｄｉｕｍ  ｂｒｏｍｉｄｅ染色の場合、１０ｍｇ／ｍＬのｅｔｈｉｄｉｕｍ  ｂｒｏｍｉｄｅをＴＡＥ緩衝液で１／１００００希釈した溶液に電気泳動後のアガロースゲルを５分間浸漬した。その後、ＭＵＰＩＤ−Ｓｃｏｐｅ（株式会社アドバンス製）により検出した。ｔｏｌｕｉｄｉｎｅ  ｂｌｕｅ  Ｏの場合は、０．１％染色剤溶液に電気泳動後のアガロースゲルを浸漬し、２分間染色した。その後、７０％エタノールに２分間浸漬し、蒸留水に３分間浸漬することで脱色を行った。検出には白色光源を用い、肉眼での検出を行った。
【００２０】ｅｔｈｉｄｉｕｍ  ｂｒｏｍｉｄｅ染色による電気泳動像は図５、ｔｏｌｕｉｄｉｎｅ  ｂｌｕｅ  Ｏ染色による電気泳動像は図６であり、検出限界は表５の通りであった。表５からわかるように全てのバンドにおいて、ｅｔｈｉｄｉｕｍ  ｂｒｏｍｉｄｅと同等の感度であった。表５は、１００ｂｐ  ＤＮＡ  Ｌａｄｄｅｒを用いて核酸（λ／ＥｃｏＲＩ＋ＨｉｎｄＩＩＩ  ｄｏｕｂｌｅ  ｄｉｇｅｓｔ）の電気泳動を行った際の検出限界を示す表である。
表５からわかるように全てのバンドにおいて、ｅｔｈｉｄｉｕｍ  ｂｒｏｍｉｄｅと同等の感度であった。
【表５】
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【００２１】
〔実施例４〕  ｔｏｌｕｉｄｉｎｅ  ｂｌｕｅ  Ｏによるリボ核酸の染色
塩基性色素として、０．１％ｔｏｌｕｉｄｉｎｅ  ｂｌｕｅ  Ｏ（蒸留水１００ｍＬ、ｔｏｌｕｉｄｉｎｅ  ｂｌｕｅ  Ｏ  （ＳＩＧＭＡ社）０．１ｇ）を利用した。また、核酸の電気泳動には、ＴＡＥ緩衝液（トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン４０ｍＭ、エチレンジアミン四酢酸２０ｍＭ、酢酸２０ｍＭを蒸留水１Ｌに溶解）、１％アガロースゲル（ＴＡＥ緩衝液１００ｍＬ、ＳｅａｋｅｍＧＴＧアガロース（ＢＭＡ社）１ｇ）を加熱溶解し、ゲルトレイに流し込んで平板としたものを用いた。電気泳動するサンプルは、Ｒｉｂｏｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ  ｆｒｏｍ  ｙｅａｓｔ（ＷＡＫＯ社）を使用し、各レーンの添加量は表６の通りである。
表６は、Ｒｉｂｏｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ  ｆｒｏｍ  ｙｅａｓｔを電気泳動する際にアプライしたサンプル量を示す表である。また、電気泳動装置はＭＵＰＩＤ−Ｓ（株式会社アドバンス製）を利用し、１００Ｖで約１７分間電気泳動を行った。
【表６】
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【００２２】
ｅｔｈｉｄｉｕｍ  ｂｒｏｍｉｄｅ染色とｔｏｌｕｉｄｉｎｅ  ｂｌｕｅ  Ｏ染色を同時に行った。ｅｔｈｉｄｉｕｍ  ｂｒｏｍｉｄｅ染色の場合、１０ｍｇ／ｍＬのｅｔｈｉｄｉｕｍ  ｂｒｏｍｉｄｅをＴＡＥ緩衝液で１／１００００希釈した溶液に電気泳動後のアガロースゲルを５分間浸漬した。その後、ＭＵＰＩＤ−Ｓｃｏｐｅ（株式会社アドバンス製）により検出した。ｔｏｌｕｉｄｉｎｅ  ｂｌｕｅ  Ｏの場合は、０．１％染色剤溶液に電気泳動後のアガロースゲルを浸漬し、２分間染色した。その後、７０％エタノールに２分間浸漬し、蒸留水に３分間浸漬することで脱色を行った。検出には白色光源を用い、肉眼での検出を行った。
【００２３】
ｅｔｈｉｄｉｕｍ  ｂｒｏｍｉｄｅ染色による電気泳動像は図７、ｔｏｌｕｉｄｉｎｅ  ｂｌｕｅ  Ｏ染色による電気泳動像は図８であった。図７、図８からわかるように、ｅｔｈｉｄｉｕｍ  ｂｒｏｍｉｄｅではほとんど染色されなかったが、ｔｏｌｕｉｄｉｎｅ  ｂｌｕｅ  Ｏ染色でははっきり染色することが出来た。これは染色方式がインターカレート型ではなく静電気的相互作用を利用しているため、一本鎖のサンプルに対しても良好な染色を行うことが出来るためである。
【００２４】
【発明の効果】
本発明の染色剤によって、従来用いられているｅｔｈｉｄｉｕｍ  ｂｒｏｍｉｄｅ染色よりも、短時間で感度良く染色することが可能になった。また、検出の際に紫外線を利用しない為、皮膚や眼の紫外線被爆の危険がなく、紫外線被爆を防ぐための保護器具を装着する手間も省かれる。また、サンプルの紫外線による変異を防ぐことが可能になった。さらに、ｅｔｈｉｄｉｕｍ  ｂｒｏｍｉｄｅでは染色されにくいリボ核酸や一本鎖の核酸も染色することが可能である。さらに、蛋白質などマイナス荷電を有する生体物質の染色にも応用することが出来る。
【図面の簡単な説明】
【図１】１％アガロースゲルを用いて核酸（λ／ＥｃｏＲＩ＋ＨｉｎｄＩＩＩ  ｄｏｕｂｌｅ  ｄｉｇｅｓｔ）の電気泳動を行い、ｅｔｈｉｄｉｕｍ  ｂｒｏｍｉｄｅにより染色した結果を示す図である。
【図２】１％アガロースゲルを用いて核酸（λ／ＥｃｏＲＩ＋ＨｉｎｄＩＩＩ  ｄｏｕｂｌｅ  ｄｉｇｅｓｔ）の電気泳動を行い、ｔｏｌｕｉｄｉｎｅ  ｂｌｕｅ  Ｏにより染色した結果を示す図である。
【図３】２％アガロースゲルを用いて核酸（λ／ＥｃｏＲＩ＋ＨｉｎｄＩＩＩ  ｄｏｕｂｌｅ  ｄｉｇｅｓｔ）の電気泳動を行い、ｅｔｈｉｄｉｕｍ  ｂｒｏｍｉｄｅにより染色した結果を示す図である。
【図４】２％アガロースゲルを用いて核酸（λ／ＥｃｏＲＩ＋ＨｉｎｄＩＩＩ  ｄｏｕｂｌｅ  ｄｉｇｅｓｔ）の電気泳動を行い、ｔｏｌｕｉｄｉｎｅ  ｂｌｕｅ  Ｏにより染色した結果を示す図である。
【図５】２％アガロースゲルを用いて核酸（１００ｂｐ  ＤＮＡ  Ｌａｄｄｅｒ）の電気泳動を行い、ｅｔｈｉｄｉｕｍ  ｂｒｏｍｉｄｅにより染色した結果を示す図である。
【図６】２％アガロースゲルを用いて核酸（１００ｂｐ  ＤＮＡ  Ｌａｄｄｅｒ）の電気泳動を行い、ｔｏｌｕｉｄｉｎｅ  ｂｌｕｅ  Ｏにより染色した結果を示す図である。
【図７】１％アガロースゲルを用いて核酸（Ｒｉｂｏｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ  ｆｒｏｍ  ｙｅａｓｔ）の電気泳動を行い、ｅｔｈｉｄｉｕｍ  ｂｒｏｍｉｄｅにより染色した結果を示す図である。
【図８】１％アガロースゲルを用いて核酸（Ｒｉｂｏｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ  ｆｒｏｍ  ｙｅａｓｔ）の電気泳動を行い、ｔｏｌｕｉｄｉｎｅ  ｂｌｕｅ  Ｏにより染色した結果を示す図である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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