(57)【要約】      （修正有）【課題】化学的安定性に優れた新規なレニエラマイシン系化合物を提供すること。【解決手段】下記の一般式（Ｉ）で表される新規レニエラマイシン（Ｒｅｎｉｅｒａｍｙｃｉｎ）系化合物。2004231552.tif 000016［式中、下記の部分構造（１）は、下記の部分構造（２）または部分構造（３）を示す。Ｚ１とＺ２は、それぞれ独立して、水素原子、水酸基、Ｃ１〜６アルコキシル基、アセトキシル基のいずれかを示す（但し、Ｚ１とＺ２の一方が水酸基、Ｃ１〜６アルコキシル基、アセトキシル基のいずれかである場合、他方は水素原子である）。Ｚ１とＺ２が一緒になって酸素原子を示してもよい。］2004231552.tif 000017【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記の一般式（Ｉ）で表される新規レニエラマイシン（Ｒｅｎｉｅｒａｍｙｃｉｎ）系化合物。
【化１】
2004231552.tif 000012
［式中、下記の部分構造（１）は、下記の部分構造（２）または部分構造（３）を示す。Ｚ１とＺ２は、それぞれ独立して、水素原子、水酸基、Ｃ１〜６アルコキシル基、アセトキシル基のいずれかを示す（但し、Ｚ１とＺ２の一方が水酸基、Ｃ１〜６アルコキシル基、アセトキシル基のいずれかである場合、他方は水素原子である）。Ｚ１とＺ２が一緒になって酸素原子を示してもよい。］
【化２】
2004231552.tif 000013
【化３】
2004231552.tif 000014
【化４】
2004231552.tif 000015
【請求項２】
ゼストスポンギア種（Ｘｅｓｔｏｓｐｏｎｇｉａ ｓｐ．）に属する青色海綿を均質化（ホモジナイズ）した後、リン酸緩衝液を用いてｐＨを５．５〜７．５に保ちながらシアン化カリウムで処理し、そのメタノール抽出液からクロマトグラフィー法により分離精製することによる請求項１記載の新規レニエラマイシン系化合物の取得方法。
【請求項３】
請求項１記載の新規レニエラマイシン系化合物を有効成分とする抗癌剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、新規レニエラマイシン系化合物、その取得方法およびその用途に関する。
【０００２】
【従来の技術】
２０世紀後半より、新規薬用資源を海洋生物に求めて世界的な調査・探索研究が実施されてきた。レニエラマイシン（Ｒｅｎｉｅｒａｍｙｃｉｎ）系化合物は、１９８２年に米国のファルクナー（Ｆａｕｌｋｎｅｒ）教授によりメキシコ湾岸で採取されたレニエラ種（Ｒｅｎｉｅｒａ ｓｐ．）に属する海綿から極微量に見出されたイソキノリンキノン系化合物であり、下記の構造式（ＩＩ）で表されるレニエラマイシンＡをはじめとする数種の化合物が、その抗菌活性試験結果を含めて下記の非特許文献１などに記載されている。
しかしながら、レニエラマイシン系化合物は、天然から極微量にしか取得することができないことに加え、下記の構造式（ＩＩＩ）で表されるレニエラマイシンＥなどは、２１位が水酸基でありα−アミノアルコール構造を有していることから化学的に不安定な物質である。従って、これまでレニエラマイシン系化合物の大量供給は必ずしも容易なことではなかった。
【０００３】
【化５】
2004231552.tif 000002
【０００４】
【化６】
2004231552.tif 000003
【０００５】
【非特許文献１】
フリンク  ジェイ  エム（Ｆｒｉｎｃｋｅ，Ｊ．Ｍ．）；ファルクナー  ディー  ジェイ（Ｆａｕｌｋｎｅｒ，Ｄ．Ｊ．），  ジャーナル  オブ  アメリカン  ケミカル  ソサイエティー（Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．），１９８２年，１０４巻，ｐ．２６５−２６９
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
そこで、本発明においては、化学的安定性に優れた新規なレニエラマイシン系化合物を提供することを目的とする。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは上記の点に鑑みて種々の検討を行った結果、シアン化カリウムを用いた化学処理を採用することで、ゼストスポンギア種（Ｘｅｓｔｏｓｐｏｎｇｉａ ｓｐ．）に属する青色海綿から新規なレニエラマイシン系化合物をグラムスケールで取得することに成功し、本発明を完成するに至った。
【０００８】
即ち、本発明は、請求項１記載の通り、下記の一般式（Ｉ）で表される新規レニエラマイシン（Ｒｅｎｉｅｒａｍｙｃｉｎ）系化合物である。
【化７】
2004231552.tif 000004
［式中、下記の部分構造（１）は、下記の部分構造（２）または部分構造（３）を示す。Ｚ１とＺ２は、それぞれ独立して、水素原子、水酸基、Ｃ１〜６アルコキシル基、アセトキシル基のいずれかを示す（但し、Ｚ１とＺ２の一方が水酸基、Ｃ１〜６アルコキシル基、アセトキシル基のいずれかである場合、他方は水素原子である）。Ｚ１とＺ２が一緒になって酸素原子を示してもよい。］
【化８】
2004231552.tif 000005
【化９】
2004231552.tif 000006
【化１０】
2004231552.tif 000007
また、本発明は、請求項２記載の通り、ゼストスポンギア種（Ｘｅｓｔｏｓｐｏｎｇｉａ ｓｐ．）に属する青色海綿を均質化（ホモジナイズ）した後、リン酸緩衝液を用いてｐＨを５．５〜７．５に保ちながらシアン化カリウムで処理し、そのメタノール抽出液からクロマトグラフィー法により分離精製することによる請求項１記載の新規レニエラマイシン系化合物の取得方法である。
また、本発明は、請求項３記載の通り、請求項１記載の新規レニエラマイシン系化合物を有効成分とする抗癌剤である。
【０００９】
【発明の実施の形態】
本発明の新規レニエラマイシン系化合物は、ゼストスポンギア種（Ｘｅｓｔｏｓｐｏｎｇｉａ ｓｐ．）に属する青色海綿を均質化（ホモジナイズ）した後、リン酸緩衝液を用いてｐＨを５．５〜７．５に保ちながらシアン化カリウムで処理し、そのメタノール抽出液からクロマトグラフィー法により分離精製することにより取得される。クロマトグラフィー法は、例えば、カラムクロマトグラフィーや薄層クロマトグラフィーなど、天然有機化合物の分離精製のために通常使用されるものを使用して行われる。カラムクロマトグラフィーにおいては、例えば、順相系であるＴＳＫ−Ｇ３０００Ｓ、ダイヤイオンＨＰ−２０、セファデックスＬＨ−２０、ＤＥＡＥセファデックス、逆相系のＲＰ−１８などが使用できる。また、薄層クロマトグラフィーにおいてはシリカゲルのほか、ＲＰ−１８などが使用できる。
【００１０】
以下、本発明を実施例にて詳細に説明するが、本発明は以下の記載に何ら限定されるものではない。
【００１１】
【実施例】
実験１：レニエラマイシンＭとレニエラマイシンＮの単離構造決定
２００１年１２月、タイ国バンコク東側に位置するシーシャン島（Ｓｃｈａｎｇ  Ｉｓｌａｎｄ）付近の水深３ｍ〜５ｍからゼストスポンギア種（Ｘｅｓｔｏｓｐｏｎｇｉａ ｓｐ．）に属する青色海綿（湿重量８．４ｋｇ）を採取した。これをメタノール中で均質化（ホモジナイズ）した後、リン酸緩衝液を添加してｐＨが７．０のホモジナイズド溶液９Ｌを得た。この溶液に対し、１０％シアン化カリウム溶液６０ｍＬを滴下した後、５時間攪拌した。その後、５Ｌのメタノールを加えて抽出処理を行ってからろ過してろ液を得た。この操作を合計３回行い、得られた３回分のろ液をまとめて減圧濃縮した。こうして得られた含水メタノール抽出溶液８００ｍＬに酢酸エチル５００ｍＬを加えて分配して酢酸エチル抽出液を得た。この操作を合計４回行い、得られた４回分の酢酸エチル抽出液を濃縮して酢酸エチル抽出物１６．２ｇを得た。
【００１２】
上記の酢酸エチル抽出物をメタノールで咀嚼することで、オレンジ色の沈殿物として下記の構造式（ＩＶ）で表される新規なレニエラマイシンＭを６８１ｍｇ得た。また、母液を減圧濃縮することで得られた残留物１３．９ｇをヘキサン−酢酸エチル溶媒（７：３〜１：１）を用いたシリカゲルクイックカラムクロマトグラフィーにてレニエラマイシンＭを１．１４１ｇ得た（合計１．８２２ｇ：酢酸エチル抽出物から１２．０４％収率）。さらに、ヘキサン−酢酸エチル１：１溶媒で溶出することでオレンジ色の結晶柱として下記の構造式（Ｖ）で表される新規なレニエラマイシンＮを２４７ｍｇ得た。
【００１３】
【化１１】
2004231552.tif 000008
【００１４】
【化１２】
2004231552.tif 000009
【００１５】
レニエラマイシンＭの物理化学的性状は以下の通りである。
酢酸エチルから暗黄色結晶柱として得られる。ｍｐ  １９４．５−１９７ｏＣ；  ［α］２０Ｄ  −４９．５  （ｃ  １．０，  ＣＨＣｌ３）；  ＣＤ  Δεｎｍ  （ｃ  ６８  μＭ，  ｍｅｔｈａｎｏｌ，  ２２ｏＣ）  −５．２  （３５９），  −１．９  （３０５），  −８．７  （２８２），  ０  （２７０），  ＋９．５  （２５８），  ０  （２４３），  −２．２  （２３２），  ０  （２２３），  ＋１０．５  （２１１）；  ＩＲ  （ＫＢｒ）  ３２７０，  ２９４０，  ２３２０ｗ，  １７０５，  １６９０，  １６５０，  １６４０，  １６０５  ｃｍ−１；  ＵＶ  λｍａｘ  （ｌｏｇ  ε）  ２６９  （４．６３），  ３７０  （３．１１）  ｎｍ；  １Ｈ  ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３，  ５００  ＭＨｚ）  δ  ５．９２  （１Ｈ，  ｑｑ，  Ｊ  ＝  ６．８，  １．５  Ｈｚ，  ２６−Ｈ），  ４．５５  （１Ｈ，  ｄｄ，  Ｊ  ＝  １２．０，  ３．０  Ｈｚ，１−ＣＨ），  ４．１２  （１Ｈ，  ｄｄ，  Ｊ  ＝  １２．０，  ３．０  Ｈｚ，  １−ＣＨ），  ４．１１  （１Ｈ，  ｄ，  Ｊ  ＝  ２．０  Ｈｚ，  １１−Ｈ），  ４．０２，  ３．９９  （ｅａｃｈ  ３Ｈ，  ｓ，  ＯＣＨ３），  ４．００−３．９９  （２Ｈ，  ｍ，  ２１−Ｈ  ａｎｄ  １−Ｈ）＊，  ３．４０  （１Ｈ，  ｄｄｄ，  Ｊ  ＝  ７．７，  ３．９，  ０．９  Ｈｚ，  １３−Ｈ），  ３．１２  （１Ｈ，  ｄｄｄ，  Ｊ  ＝  １１．６，  ２．８，  ２．８  Ｈｚ，  ３−Ｈ），  ２．９０  （１Ｈ，  ｄｄ，  Ｊ  ＝  １７．２，  ２．３  Ｈｚ，  ４−Ｈα），  ２．７６  （１Ｈ，  ｄｄ，  Ｊ  ＝  ２１．２，  ７．７  Ｈｚ，  １４−Ｈα），  ２．３１  （１Ｈ，  ｄ，  Ｊ  ＝  ２１．２  Ｈｚ，  １４−Ｈβ），  ２．２７  （３Ｈ，  ｓ，ＮＣＨ３），  １．９４，  １．９０  （ｅａｃｈ  ３Ｈ，  ｓ，  ６−ＣＨ３  ａｎｄ  １６−ＣＨ３），  １．８２  （３Ｈ，  ｄｑ，  Ｊ  ＝  ６．８，  １．６  Ｈｚ，  ２６−ＣＨ３），  １．５７  （３Ｈ，  ｄｄ，  Ｊ  ＝  １．６，  １．５  Ｈｚ，  ２５−ＣＨ３），  １．３７  （１Ｈ，  ｄｄｄ，  Ｊ  ＝  １６．２，  １１．６，  ２．７  Ｈｚ，  ４−Ｈβ）  （＊ｔｈｅ  ｓｉｇｎａｌ  ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ  ｗｉｔｈ  ｍｅｔｈｙｌ  ｓｉｇｎａｌｓ）；  １３Ｃ  ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３，  １２５  ＭＨｚ）  δ  １８５．８  （Ｃ−１５），  １８５．４  （Ｃ−５），  １８２．４  （Ｃ−１８），  １８０．９  （Ｃ−８），  １６６．５  （Ｃ−２４），  １５５．８  （Ｃ−７），  １５５．２  （Ｃ−１７），  １４２．０  （Ｃ−２０），  １４１．３  （Ｃ−１０），  １４０．５  （Ｃ−２６），  １３５．７  （Ｃ−９），  １３５．０  （Ｃ−１９），  １２８．４  （Ｃ−６），  １２６．５  （Ｃ−１６），  １２６．２  （Ｃ−２５），  １１６．９  （２１−ＣＮ），  ６１．９  （Ｃ−２２），  ６１．０  （ＯＣＨ３），  ６０．９  （ＯＣＨ３），  ５８．４  （Ｃ−２１），  ５６．２  （Ｃ−１），  ５４．５  （Ｃ−１３），  ５４．２  （Ｃ−１１），  ５４．１  （Ｃ−３），  ４１．４  （ＮＣＨ３），  ２５．４  （Ｃ−４），  ２１．３  （Ｃ−１４），  ２０．３  （Ｃ−２８），  １５．７  （Ｃ−２７），  ８．７  （６−ＣＨ３），  ８．５  （１６−ＣＨ３）；  ＥＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  （％）  ５７５  （Ｍ＋，  ３），  ４６４  （４），  ４６２  （��），  ２６０  （１１），  ２２１  （２２），  ２２０  （１００），  ２１９  （１６），  ２１８  （２５），  ２０４  （１１），  ８３  （１１），  ５５  （１４）；  ａｎａｌ．  Ｃ  ６４．５２％，  Ｈ  ５．８４％，  Ｎ  ７．１１％，  ｃａｌｃｄ  ｆｏｒ  Ｃ３１Ｈ３３Ｎ３Ｏ８，  Ｃ  ６４．６８％，  Ｈ  ５．７８％，  Ｎ７．３０％．
【００１６】
レニエラマイシンＮの物理化学的性状は以下の通りである。
エチルアルコールから薄黄色結晶柱として得られる。ｍｐ  １６２．５−１６４ｏＣ；  ［α］２０Ｄ  −２４．７  （ｃ  ０．０１５，  ｍｅｔｈａｎｏｌ）；  ＣＤ  Δεｎｍ  （ｃ  ４５  μＭ，  ｍｅｔｈａｎｏｌ，  ２２ｏＣ）  ０  （３９８），  −１．０  （３５５），  ０  （３１０），  ＋０．５  （３００），  ０  （２８７），  −１．７  （２６６），  ０  （２４８），  ＋１１．８  （２２２），  ＋２５．２  （２０６）；  ＩＲ  （ＫＢｒ）  ３７００−３０７０，  ２２３０ｗ，  １７４０，  １７２０，  １６５５，  １６３０  ｃｍ−１；  ＵＶ  λｍａｘ  （ｌｏｇ  ε）  ２７３  （３．９９），  ３７０  （２．７０）  ｎｍ；  １Ｈ  ＮＭＲ  （ｐｙｒｉｄｉｎｅ−ｄ５，  ２７０  ＭＨｚ）  δ  １０．６８  （１Ｈ，  ｂｒ  ｓ，  ＯＨ），  ９．３０，  ７．６０  （ｅａｃｈ  １Ｈ，  ｂｒ  ｓ，  ＯＨ），  ５．７０  （１Ｈ，  ｑｑ，  Ｊ  ＝  ７．３，  １．３  Ｈｚ，  ２６−Ｈ），  ５．１８  （１Ｈ，  ｓ，  １４−Ｈβ），  ４．９４  （１Ｈ，  ｄ，  Ｊ  ＝  ２．６Ｈｚ，  ２１−Ｈ），  ４．７４  （１Ｈ，  ｄ，  Ｊ  ＝  ２．０  Ｈｚ，  １１−Ｈ），  ４．５８  （１Ｈ，  ｄｄ，  Ｊ  ＝  １１．６，  ２．６  Ｈｚ，  １−ＣＨ），  ４．５１  （１Ｈ，  ｄｄ，  Ｊ  ＝  １１．６，  ２．０  Ｈｚ，  １−ＣＨ），  ４．３７  （１Ｈ，  ｄｄｄ，  Ｊ  ＝  ２．６，  ２．６，  ２．０  Ｈｚ，  １−Ｈ），  ３．９６  （１Ｈ，  ｄｄ，  Ｊ  ＝  ２．６，  ２．０  Ｈｚ，  １３−Ｈ），  ３．９４  （３Ｈ，  ｓ，  ７−ＯＣＨ３），  ３．７４  （３Ｈ，  ｓ，  １７−ＯＣＨ３），  ３．６０  （１Ｈ，  ｄｄ，  Ｊ  ＝  １７．８，  ２．６  Ｈｚ，  ４−Ｈα），  ３．４４  （１Ｈ，  ｄｄｄ，  Ｊ  ＝  １１．２，  ２．６，  ２．６  Ｈｚ，  ３−Ｈ），  ２．７０  （３Ｈ，  ｓ，  ＮＣＨ３），  ２．４０  （３Ｈ，  ｓ，  １６−ＣＨ３），  ２．２０  （１Ｈ，  ｄｄｄ，  Ｊ  ＝  １７．８，  １１．２，  ２．６  Ｈｚ，  ４−Ｈβ），  １．９２  （３Ｈ，  ｓ，  ６−ＣＨ３），  １．７４  （３Ｈ，  ｄｑ，  Ｊ  ＝  ７．３，  １．７  Ｈｚ，  ２６−ＣＨ３），  １．４４  （３Ｈ，  ｄｑ，  Ｊ  ＝  １．７，１．３  Ｈｚ，  ２５−ＣＨ３）；  １３Ｃ  ＮＭＲ  （ｐｙｒｉｄｉｎｅ−ｄ５，  ６７．５  ＭＨｚ）  δ  １８３．６  （Ｃ−５），  １７９．１  （Ｃ−８），  １６４．８  （Ｃ−２４），  １５３．８  （Ｃ−７），  １４５．２  （Ｃ−１５），  １４４．２  （Ｃ−１７），  １４０．３  （Ｃ−１０），  １３９．４  （Ｃ−１８），  １３６．５  （Ｃ−２６），  １３３．９  （Ｃ−９），  １２５．４  （Ｃ−２５），  １２４．９  （Ｃ−６），  １１７．８  （２１−ＣＮ），  １１５．９  （Ｃ−１９），  １１５．７  （Ｃ−１６），  １１４．７  （Ｃ−２０），  ６３．１  （Ｃ−１３），  ６２．０  （Ｃ−１４），  ６０．５  （Ｃ−２２），  ５８．３  （１７−ＯＣＨ３），  ５７．７  （７−ＯＣＨ３），  ５５．２  （Ｃ−２１），  ５４．６（Ｃ−１１），  ５４．４  （Ｃ−１），  ５３．１  （Ｃ−３），  ４０．８  （ＮＣＨ３），  ２２．９  （Ｃ−４），  １７．７  （Ｃ−２８），  １３．１  （Ｃ−２７），  ７．３  （１６−ＣＨ３），  ６．３  （６−ＣＨ３）；  ＥＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  （％）  ５９３  （��＋，  ０．１），  ４５５  （４），  ３１５  （１０），  ２４５  （５０），  ２４４  （１７），  ２４３  （１００），  ２０４  （１２），  １００  （１８），  ８３  （２５），  ８２  （１５），  ５７  （１２），  ５５  （４２），  ４５  （１９），  ４３  （６６）；  ａｎａｌ．  Ｃ  ６１．００％，  Ｈ  ６．０７％，Ｎ  ６．６８％，  ｃａｌｃｄ  ｆｏｒ  Ｃ３１Ｈ３５Ｎ３Ｏ９−Ｈ２Ｏ，  Ｃ  ６０．８８％，  Ｈ  ６．１０％，  Ｎ  ６．８７％．
【００１７】
実験２：レニエラマイシンＮの酸化によるレニエラマイシンＯの取得
レニエラマイシンＮの酢酸エチル溶液５ｍＬ（レニエラマイシンＮ２３．７ｍｇ，０．０４ｍｍｏｌ）と５％炭酸水素ナトリウム溶液５ｍＬを混合し、２５℃で一晩攪拌した。その後、反応液を５ｍＬの水で希釈し、酢酸エチル５ｍＬで合計３回分画した。３回分の酢酸エチル溶液をまとめてから１０ｍＬの水で洗浄した後、乾燥し、減圧濃縮した。得られた残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにアプライし、ヘキサン−酢酸エチル３：１溶媒を用いて分離精製することにより、下記の構造式（ＶＩ）で表されるキノン化合物である新規なレニエラマイシンＯを薄黄色アモルファスとして得た（１６．３ｍｇ，収率６９％）。
【００１８】
【化１３】
2004231552.tif 000010
【００１９】
レニエラマイシンＯの物理化学的性状は以下の通りである。
［α］２０Ｄ  −１３４．４  （ｃ  ０．７，  ＣＨＣｌ３）；  ＣＤ  Δεｎｍ  （ｃ  ８８  μＭ，  ｍｅｔｈａｎｏｌ，  ２２ｏＣ）  ０  （３８０），  −０．５  （３５２），  ０  （３１０），  −１．９  （２７８），  −０．４  （２４６），  ０  （２４１），  ＋７．１  （２１３）；ＩＲ  （ＣＨＣｌ３）  ３５１３，  １７２０，  １６７０，  １６３０  ｃｍ−１；  ＵＶ  λｍａｘ  （ｌｏｇ  ε）  ２６９  （４．６２），  ３７０  （３．１０）  ｎｍ；  １Ｈ  ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３，  ５００  ＭＨｚ）  δ  ５．９８  （１Ｈ，  ｑｑ，  Ｊ  ＝  ７．３，  １．７  Ｈｚ，  ２６−Ｈ），  ４．５３  （１Ｈ，  ｄｄ，  Ｊ  ＝  １１．６，  ３．０  Ｈｚ，  １−ＣＨ），  ４．３７  （１Ｈ，  ｓ，  １４−Ｈ），  ４．２３  （１Ｈ，  ｄ，  Ｊ  ＝  ２．６  Ｈｚ，  ２１−Ｈ），  ４．０９  （１Ｈ，  ｄｄ，  Ｊ  ＝  １１．１，  ３．４  Ｈｚ，  １−ＣＨ），  ４．０９  （１Ｈ，  ｄｄ，  Ｊ  ＝  ３．３，  １．３  Ｈｚ，  １１−Ｈ），  ４．０３，  ４．０２  （ｅａｃｈ  ３Ｈ，  ｓ，  ７−ＯＣＨ３  ａｎｄ  １７−ＯＣＨ３），  ３．９８  （１Ｈ，  ｍ，  １−Ｈ），  ３．５２  （１Ｈ，  ｂｒ  ｓ，  ＯＨ），  ３．４２  （１Ｈ，  ｂｒ  ｓ，  １３−Ｈ），  ３．０５  （１Ｈ，  ｄｄｄ，  Ｊ  ＝  １１．６，  ３．３，  ２．３  Ｈｚ，  ３−Ｈ），  ２．８７  （１Ｈ，  ｄｄ，  Ｊ  ＝  １７．２，  ２．３  Ｈｚ，  ４−Ｈα），  ２．４６  （３Ｈ，  ｓ，  ＮＣＨ３），  １．９４，  １．９２  （ｅａｃｈ  ３Ｈ，  ｓ，  ６−ＣＨ３  ａｎｄ  １６−ＣＨ３），  １．８２  （３Ｈ，  ｄｑ，  Ｊ  ＝  ７．３，  １．３  Ｈｚ，  ２６−ＣＨ３），  １．５７  （３Ｈ，  ｄｑ，  Ｊ  ＝  １．７，  １．３  Ｈｚ，  ２５−ＣＨ３），  １．２７  （１Ｈ，  ｄｄｄ，  Ｊ  ＝  １７．２，  １１．６，  ２．６  Ｈｚ，  ４−Ｈβ）；  １３Ｃ  ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３，  １２５ＭＨｚ）  δ  １８７．８  （Ｃ−１５），  １８５．４  （Ｃ−５），  １８２．８  （Ｃ−１８），  １８０．８  （Ｃ−８），  １６６．５  （Ｃ−２４），  １５５．８  （Ｃ−１７），  １５５．６  （Ｃ−７），  １４１．１  （Ｃ−１０），  １４１．０  （Ｃ−２０），  １４０．６  （Ｃ−２６），  １３５．７  （Ｃ−９），  １３５．３  （Ｃ−１９），  １２８．６  （Ｃ−６），  １２８．４  （Ｃ−１６），  １２６．２  （Ｃ−２５），  １１６．３  （２１−ＣＮ），  ６２．４  （Ｃ−１３），  ６２．１  （Ｃ−２２），  ６２．０  （Ｃ−１４），  ６１．１  （７−ＯＣＨ３），  ６１．１  （１７−ＯＣＨ３），  ５６．４  （Ｃ−１），  ５６．４  （Ｃ−２１），  ５５．０  （Ｃ−１１），  ５３．４  （Ｃ−３），  ４２．４  （ＮＣＨ３），  ２５．３  （Ｃ−４），  ２０．３  （Ｃ−２８），  １５．７  （Ｃ−２７），  ８．７  （６−ＣＨ３），  ８．４  （１６−ＣＨ３）；  ＥＩ−ＭＳｍ／ｚ  （％）  ５９１  （Ｍ＋，  ３），  ５７７  （７），  ５７５  （６），  ５６６  （７），  ４７６  （９），  ４６４  （５），  ４６２  （８），  ４６０  （８），  ３１５  （７），  ２６０  （１４），  ２４３  （４３），  ２３６  （１８），  ２３５  （２５），  ２２１  （２４），  ２２０  （１００），  ２１９  （２３），  ２１８  （５０），  ２０５  （１１），  ２０４  （２４），  ８３  （１４），  ５５  （１１）；  ＨＲ−ＥＩＭＳ  ｍ／ｚ  ５９１．２２２２  ［Ｍ＋］  （ｃａｌｃｄ  ｆｏｒ  Ｃ３１Ｈ３３Ｎ３Ｏ９，  ５９１．２２１７）．
【００２０】
実験３：レニエラマイシンＭからレニエラマイシンＥへの変換
レニエラマイシンＭをアセトニトリル−水３：２溶媒２．５ｍＬに溶解し（レニエラマイシンＭ２３．８ｍｇ，０．０１ｍｍｏｌ）、続いて硝酸銀１４０ｍｇ（０．８ｍｍｏｌ，２０当量）を加えて室温で４８時間攪拌した。その後、反応液に飽和塩化ナトリウム溶液−飽和炭酸ナトリウム溶液１：１混合溶液４０ｍＬを添加し、ジクロロメタン２０ｍＬで合計３回分画した。３回分のジクロロメタン溶液をまとめてからこれを乾燥し、セルロースパウダーのパッドに通してろ過した。得られたろ液を濃縮することで黄色固形物としてレニエラマイシンＥを得た（１４．５ｍｇ，収率６４％）。このレニエラマイシンＥの物理化学的性状は、以下のレニエラマイシンＥ標準品のデータと完全に一致した。
【００２１】
ＩＲ  （ＣＨＣｌ３）  ３３９０，  １７００，  １６５５，  １６１５  ｃｍ−１；  ＵＶ  λｍａｘ  （ｌｏｇ  ε）  ２６９  （４．６３），  ３７０  （３．１１）  ｎｍ；  １Ｈ  ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３，  ３００  ＭＨｚ）  δ  ５．９２  （１Ｈ，  ｑｑ，  Ｊ  ＝  ７．３，  １．４  Ｈｚ，２６−Ｈ），  ４．４５  （１Ｈ，  ｄｄ，  Ｊ  ＝  １１．２，  ３．１  Ｈｚ，  １−ＣＨ），  ４．４４  （２Ｈ，  ｍ，  １−Ｈ  ａｎｄ  ２１−Ｈ），  ４．１５  （１Ｈ，  ｄｄ，  Ｊ  ＝  １１．２，  ３．１  Ｈｚ，  １−ＣＨ），  ４．００，  ３．９８  （ｅａｃｈ  ３Ｈ，  ｓ，  ７−ＯＣＨ３ａｎｄ  １７−ＯＣＨ３），  ３．９２  （１Ｈ，  ｄｄ，  Ｊ  ＝  ２．５，  １．０  Ｈｚ，  １１−Ｈ），  ３．２１  （１Ｈ，  ｂｒ  ｄ，  Ｊ  ＝７．３  Ｈｚ，  １３−Ｈ），  ３．１６  （１Ｈ，  ｄｄｄ，  Ｊ  ＝  １１．０，  ２．７，  ２．５  Ｈｚ，  ３−Ｈ），  ２．７５  （１Ｈ，  ｄｄ，  Ｊ  ＝  １６．２，  ２．７  Ｈｚ，  ４−Ｈα），  ２．６６  （１Ｈ，  ｄｄ，  Ｊ  ＝  ２０．９，  ７．３  Ｈｚ，  １４−Ｈα），  ２．２５  （３Ｈ，  ｓ，  ＮＣＨ３），  ２．２１  （１Ｈ，  ｄ，  Ｊ  ＝  ２０．９  Ｈｚ，  １４−Ｈβ），  １．９１，  １．９１  （ｅａｃｈ  ３Ｈ，ｓ，  ６−ＣＨ３  ａｎｄ  １６−ＣＨ３），  １．８０  （３Ｈ，  ｄｑ，  Ｊ  ＝  ７．３，  １．４  Ｈｚ，  ２６−ＣＨ３），  １．５７  （３Ｈ，ｄｑ，  Ｊ  ＝  １．４  Ｈｚ，  ２５−ＣＨ３），  １．３１  （１Ｈ，  ｄｄｄ，  Ｊ  ＝  １６．２，  １１．０，  ２．０  Ｈｚ，  ４−Ｈβ）；１３Ｃ  ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３，  ７５  ＭＨｚ）  δ  １８６．０  （Ｃ−１５），  １８４．０  （Ｃ−５），  １８２．５  （Ｃ−１８），  １８１．０  （Ｃ−８），  １６６．５  （Ｃ−２４），  １５８．０  （Ｃ−１７），  １５６．０  （Ｃ−７），  １４２．０  （Ｃ−１０），  １４１．８  （Ｃ−２０），  １４０．０  （Ｃ−２６），  １３８．５  （Ｃ−９），  １３３．０  （Ｃ−１９），  １２８．８  （Ｃ−６），  １２８．２  （Ｃ−１６），  １２６．５  （Ｃ−２５），  ８３．０  （Ｃ−２１），  ６３．６  （Ｃ−２２），  ６１．０  （７−ＯＣＨ３），  ６１．０  （１７−ＯＣＨ３），  ５８．０  （Ｃ−１３），  ５４．２  （Ｃ−１），  ５３．５  （Ｃ−１１），  ５１．０  （Ｃ−３），  ４１．８  （ＮＣＨ３），  ２６．１  （Ｃ−４），  ２０．９  （Ｃ−１４），  ２０．８  （Ｃ−２８），  １５．８  （Ｃ−２７），  ８．７  （６−ＣＨ３），  ８．７  （１６−ＣＨ３）；  ＨＲ−ＦＡＢＭＳ  ｍ／ｚ  ５４９．２２４７  ［Ｍ  ＋  Ｈ  −  Ｈ２Ｏ］  （ｃａｌｃｄ  ｆｏｒ  Ｃ３０Ｈ３３Ｎ２Ｏ９，  ５４９．２２５０）．
【００２２】
実験３から、レニエラマイシンＭはレニエラマイシンＥの安定等価体であり、これまで天然から極微量にしか取得することができなかったレニエラマイシンＥをレニエラマイシンＭから大量に供給することができることがわかった。
【００２３】
実験４：レニエラマイシンＭ，Ｎ，Ｏの抗腫瘍活性
１０％ウシ胎児血清を含むＭｃＣｏｙ’ｓ  ５Ａ培地を用いてインビトロ培養により維持したヒト大腸癌細胞株ＨＣＴ１１６（ＡＴＣＣより入手）のシングルセルサスペンジョンをマイクロプレート中に注入し（２×１０３ｃｅｌｌ／ｗｅｌｌ）、ここに各種濃度のレニエラマイシンＭ，Ｎ，Ｏを加え、４日間培養した後、細胞計測キット（同仁化学研究所社製）を用いて細胞増殖の程度を測定し、対照群と比較して細胞増殖を５０％阻害する濃度（ＩＣ５０）を求めた。また、同様にしてヒト肺癌細胞株ＱＧ５６、ヒト肺癌細胞株ＮＣＩ−Ｈ４６０、ヒト大腸癌細胞株ＤＬＤ１に対するＩＣ５０を求めた。結果を表１に示す。
【００２４】
【表１】
2004231552.tif 000011
【００２５】
表１から明らかなように、レニエラマイシンＭ，Ｎは特にヒト肺癌細胞株ＱＧ５６に対して強力な抗腫瘍活性を示した。
【００２６】
【発明の効果】
本発明によれば、化学的安定性に優れた新規なレニエラマイシン系化合物が提供される。