(57)【要約】【課題】血圧上昇抑制作用、悪玉コレステロール抑制作用と善玉コレステロール上昇作用等の生活習慣病予防・改善用、ダイエット用等として用いられるエルカンプーレの有効成分であるキサントン系化合物の簡便で正確な定量方法を提供する。【解決手段】キサントン系化合物の標準サンプルの赤外線分光光度計スペクトルにおける、キサントン系化合物のケトン基に対応する波数のピーク強度から作成したキサントン系化合物の検量線と、エルカンプーレの６０〜１００％エタノール抽出物の赤外線分光光度計スペクトルにおけるキサントン系化合物のケトン基ピーク強度値と照合して、キサントン系化合物を算定するエルカンプーレの有効成分であるキサントン系化合物の簡便で正確な定量方法。【選択図】    なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
エルカンプーレの６０〜１００％アルコール抽出物の赤外線吸収スペクトルにおけるキサントン系化合物のケトン基ピーク強度を測定することを特徴とするエルカンプーレ成分の簡便な定量方法。
【請求項２】
キサントン系化合物の標準サンプルの赤外線吸収スペクトルにおける、キサントン系化合物のケトン基に対応するピーク強度を標準検量線とし、エルカンプーレの６０〜１００％アルコール抽出物の赤外線吸収スペクトルにおけるキサントン系化合物のケトン基ピーク強度値と照合することにより、キサントン系化合物を算定することを特徴とするキサントン系化合物の簡便な定量方法。
【請求項３】
キサントン系化合物のケトン基ピーク強度値として、波数１６５０ＣＭ−１におけるピーク強度を主として用いることを特徴とする請求項１又は２に記載のキサントン系化合物の簡便な定量方法。
【請求項４】
１００％エタノールを用いて抽出されたエルカンプーレの抽出物を使用する請求項１乃至３記載のキサントン系化合物の簡便な定量方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
この発明は、血圧上昇抑制作用、悪玉コレステロール抑制作用と善玉コレステロール上昇作用等の生活習慣病予防・改善に用いられるエルカンプーレの有効成分の簡便で且つ正確な定量方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
ペルーのアンデス地方の高地に生育している多年性の双子葉植物であるエルカンプーレが、古くプレインカ時代から万能薬として使用され、胃痛、慢性胃炎、肝機能障害抑制・改善等の効能が伝承、服用されてきている。一般には、その乾燥した全草を煎じて健康茶として服用されていた。
このエルカンプーレはまた、「ダイエットに効く」と云われ、ペルー国内だけでなく日本や欧米諸国でも関心が高まって来ている。
【０００３】
エルカンプーレ（Ｇｅｎｔｉａｎｅｌｌａ  ａｌｂｏｒｏｓｅａ（Ｇｉｌｇ）  Ｆａｂｒｉｓ）はアンデス山系の標高３５００から４０００ｍのプナといわれる寒冷な荒地に自生しているリンドウ科（Ｇｅｎｔｉａｍａｃｅａｅ）リンドウ属（Ｇｅｎｃｈｉａｎｅｌｌａ）の双子葉植物である。
エルカンプーレの有効成分は、根、葉、茎に含まれており、そのため、一般にその乾燥植物全体を煎じたり、アルコール抽出物をデキストリンなどの賦型剤乃至増量剤等と混合した粉末体がエキスパウダーと称して市販されている。
エルカンプーレが含有する生理活性成分としては、苦味成分のセコイリドイド配糖体、フラボノイド類、アルカロイド類、サポニン、タンニンなどがあるが、上述の薬理効果を示すものは主にキサントン骨格（式１）を持つ数種のキサントン誘導体（式２、式３、式４、式５、式６、式７）であると考えられている。
【０００４】
【化１】
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【０００５】
【化２】
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【０００６】
【化３】
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【０００７】
【化４】
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【０００８】
【化５】
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【０００９】
【化６】
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【００１０】
【化７】
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【００１１】
この一連の化合物は、抽出、精製、クロマトグラフィーなどといった常法の組み合わせにより分離・定量する方法が考えられるが、キサントン系化合物の定量には複雑な操作と時間を要し、それらの簡便で正確な定量法は未だ知られていない。
各種生理活性物質の混合物について常用されるＨＰＬＣによる方法によりキサントン系化合物の検出・定性は可能であるが、溶剤抽出物中のキサントン系化合物以外の成分も多く含まれており、キサントン系化合物の正確な定量法としては満足のいくものではない。
【００１２】
【発明が解決しようとする課題】
血圧上昇抑制作用、悪玉コレステロール抑制作用と善玉コレステロール上昇作用等の生活習慣病予防・改善用、ダイエット用等として用いられるエルカンプーレの有効成分であるキサントン系化合物の簡便で正確な定量方法を提供する。
【００１３】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、エルカンプーレの高濃度アルコール抽出物について、赤外線スペクトルにおける波数１６５０ＣＭ−１（ピーク１）、１６１０ＣＭ−１（ピーク２）、１４６０ＣＭ−１（ピーク３）、１３４０ＣＭ−１（ピーク４）及び７６０ＣＭ−１（ピーク５）がキサントン系化合物のケトン基に対応するピークであること及びそれらの強度が、キサントン化合物の含有量と極めて高い線形相関関係を有すること、及びこの相関関係を用いてキサントン系化合物を簡便且つ正確に定量出来ることを見出し、この知見に基づいて本発明を完成した。
【００１４】
本発明を実施するに当たっては、エルカンプーレの乾燥物、その全草（根、茎、葉）乾燥物を３０〜１００メッシュ程度に粉砕したものを、高濃度アルコールに室温で４８〜７２時間浸漬してエキス分を抽出する。抽出液はそのまま減圧下に濃縮乾固してもよく、抽出液にデキストリン、ソルビトール等の乾燥助剤を加えて噴霧乾燥してもよい。又、抽出・乾燥物を再度水に溶解し、活性炭、イオン交換樹脂処理等により更に精製してもよい。
【００１５】
本発明において用いられる高濃度アルコールは、エタノール、プロパノール等の脂肪族低級アルコールであり、通常６０〜１００％のエタノールが好ましく、特に１００％エタノールが最も好ましい。かくして、エルカンプーレのアルコール抽出エキス乾燥物が得られる。
【００１６】
キサントン系化合物が共通に持つケトン基は、その赤外線吸収スペクトルにおける波数１６５０ＣＭ−１（ピーク１）、１６１０ＣＭ−１（ピーク２）、１４６０ＣＭ−１（ピーク３）、１３４０ＣＭ−１（ピーク４）及び７６０ＣＭ−１（ピーク５）における各ピーク強度が、キサントン含量と高い線形相関関係を有することを見出し、このピーク強度を予め作成しておいたキサントン系化合物の標準サンプルの各ピーク強度から換算してキサントン系化合物を正確に測定できることを見出した。
なかでも、波数１６５０ＣＭ−１（ピーク１）におけるピーク強度は、最も信頼性の高い線形相関関係を有した。
又、ピーク２〜５は、キサントントン系化合物含量が０％のときにもそれぞれ僅かに吸収を示すことがあるが、通常含有量の場合は問題なく本発明を実施することが出来る。
従って、通常の含量である場合は、いずれのピークの検量線を使用してもエルカンプーレ抽出物中のキサントン系化合物を定量することが出来る。極めて高含量のエルカンプーレ中のキサントン系化合物を測定する場合には、適宜希釈した上で本発明の方法によって定量すればよい。
【００１７】
本発明を実施するに当たっては、予め式２〜７に示したキサントン系化合物の各標準サンプルの赤外線吸収スペクトルにおける特性基強度を測定して検量線を作成しておき、この検量線に被験検体の特性基実測値を照合して、被験検体試料中の総キサントン系化合物の含有量（重量％）を算出できる。
【００１８】
【実施例】
以下、実験例を用いて本発明を更に詳細に説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。
実施例１
標準サンプルによる検量線の作成
標準キサントン系化合物（シグマ  アルドリッチ社製  Ｘ６０−０Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｏ．）とデキストリンの混合物（標準キサントン系化合物含量  ０〜１００％）を十分に均一化して真空デシケーター中で１週間乾燥させた後普通のデシケーター中に保存しておいた。
これと臭化カリウムの１対５混合物をメノウ乳鉢で充分に粉砕して均一化した後、ミニプレースで錠剤を調製した。
本錠剤を赤外分光光度計（株式会社島津製作所製、ＦＴＩＲー８２００Ｄシステム）を用いてキサントン化合物のケトン基に対応するピーク強度を測定し、各ピークについて検量線を作成した。
各標準サンプルを用いて測定した赤外線吸収スペクトルにおけるキサントン系化合物赤外線スペクトルを図１に、またそのピーク１〜５についての検量線を図２〜図６に示す。
【００１９】
真空デシケーター中で１週間乾燥し、６０メッシュに粉砕したエルカンプーレの乾燥全草（根、茎、葉；トワ商事株式会社販売）１０ｇに、表１に示した各濃度のエタノール１００ｍｌ宛を加え、８０℃で１５分間加熱還流した。抽出液を室温で放冷後、１２０００ｒｐｍにて１０分間遠心分離し、上澄液を三角フラスコに移しておいた。一方、沈殿部に再度エタノール１００ｍｌ宛を加えて抽出操作を更に２回繰り返した。同様に遠心分離して得た抽出上澄液を合わせ、エバポレーターで濃縮乾固し、５０℃の湯浴上で２４時間乾燥した。更に真空デシケーター中で１週間乾燥させて重量を測定、表１に示した抽出物を得た。
【００２０】
標準サンプルと同様にして、抽出物から赤外分光光度計によるスペクトル測定用の錠剤を調製、赤外分光光度計スペクトルより特性基ピークの相対高度を測定し、図２のピーク１の検量線を用いて各抽出物試料中の総キサントン系化合物含量を算定した。結果を表１に示した。
【００２１】
【表１】
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【００２２】
【発明の効果】
以上の如く、本発明においては、エルカンプーレ乾燥物のアルコール抽出物について赤外線分光光度計スペクトルにおけるキサントン系化合物のケトン基ピーク強度を、予め作成した標準サンプルの値と照合することによって、エルカンプーレの有効成分を極めて簡便に又正確に定量することが出来る。
【図面の簡単な説明】
【図１】図１は、キサントン系化合物標準サンプルの赤外スペクトルである。
【図２】図２は、赤外線分光光度計のスペクトルから作成したキサントン系化合物標準サンプルのピーク１についての検量線である。
【図３】図３は、赤外線分光光度計スペクトルから作成したキサントン系化合物標準サンプルのピーク２についての検量線である。
【図４】図４は、赤外線分光光度計スペクトルから作成したキサントン系化合物標準サンプルのピーク３についての検量線である。
【図５】図５は、赤外線分光光度計スペクトルから作成したキサントン系化合物標準サンプルのピーク４についての検量線である。
【図６】図６は、赤外線分光光度計スペクトルから作成したキサントン系化合物標準サンプルのピーク５についての検量線である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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