(57)【要約】【課題】逆相系分離基材により簡便にグルカンを分離・分画する方法を提供する。【解決手段】グルカンの水溶液を逆相系分離基材に溶融させてグルカンを該基材に吸着させ次いでアルコールと水の混合溶媒で吸着成分を溶離せしめてグルカンを分離・分画する方法。この方法により特定の重合度分布を有するグルカンを製造することもできる。【選択図】      なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
グルカンの水溶液を逆相系分離基材に接触させてグルカンを該基材に吸着させ、次いでアルコールおよび水の混合溶媒で所定の重合度を持つ吸着成分を溶離せしめる、ことを特徴とするグルカンの分離または分画方法。
【請求項２】
グルカンの水溶液を逆相系分離基材に接触させてグルカンを該基材に吸着させ、次いで、アルコールおよび水の混合溶媒で、アルコール濃度を連続的に変えながら、あるいは、アルコール濃度の異なる混合溶媒で断続的に処理して、重合度に応じて吸着成分を溶離せしめる、ことを特徴とするグルカンの分離または分画方法。
【請求項３】
グルカンがデンプン、グリコーゲンまたは、デンプン、グリコーゲンを酸または酵素で分解せしめることによって得られたものである、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
逆相系分離基材が長鎖アルキル基が化学結合された担体を有するものである、請求項１または２に記載の方法。
【請求項５】
長鎖アルキル基がオクチル基、デシル基、ドデシル基、テトラデシル基、ヘキサデシル基およびオクタデシル基のうちのいずれかである請求項４に記載の方法。
【請求項６】
アルコールが、メタノール、１−プロパノール、２−プロパノール１−ブタノール、２−ブタノール、２−メチル−１−プロパノールおよび２−メチル−２−プロパノールよりなる群から選ばれる少なくとも１種である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項７】
請求項１の方法を用いて、特定の重合度分布を有するグルカンを製造する方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、グルカンを逆相系分離基材に接触させ、該基材との相互作用を利用することにより重合度に応じて分離するグルカンの新規かつ簡便な分離・分画方法に関する。また、デンプンの枝きり酵素分解物（枝きりデンプン）を重合度別に分離・分画することによってデンプンの構造を簡便に構造解析することができる方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
デンプンはα−１，４−グルカンからなる単位鎖がα−１，６−結合で分岐した構造をしている。このデンプンを構成する単位鎖の分布は植物種や品種によって様々であり、デンプンの機能特性と大きく関係していることから、デンプンの特性を評価する上で非常に重要な情報となる。
【０００３】
一般的なデンプンの単位鎖の分析法は、プルラナーゼやイソアミラーゼによりデンプン分子を各単位鎖に加水分解して枝きりデンプンを調製し、それをゲル濾過クロマトグラフィーに供する。このクロマトグラフィーによる溶出曲線が、その単位鎖の分布を表す。この測定には、適当なゲル担体を詰めたカラムによる分離・分画後、各画分の全糖量を求める必要があるが、煩雑な作業かつ長時間の分析を要するという欠点がある。また、高速液体ゲル濾過クロマトグラフィーと示差屈折計を用いた機器分析も行われているが、これも、分析に長時間を費やすことや、高価な機器を要することが難点である。一方で、デンプンの構造に関する情報は、植物種の品種改良の場や食品工業では重要な情報であるため、より簡便且つ安価なデンプン構造の分析法が望まれている。
【０００４】
グルカンにはさまざまな重合度を持つものがあり、その重合度により物性が大きく異なる。例えば、デンプンをα−アミラーゼで分解すると低分子化するが、それに伴ってそのデンプン分解物水溶液の粘度は小さくなる。また、α−１，４−グルカンは脂質と相互作用することが知られているが、その相互作用も重合度によって大きく異なる。これらグルカンを利用する場合には、目的とする機能を高めるために、特定の重合度を持つグルカンを分離・分画する必要があるが、簡便かつ高精度な分離・分画方法が無いのが現状である。
【０００５】
デンプン分子は、ヨウ素やブタノール、脂質などの直鎖状低分子化合物と相互作用をすることが知られている。この作用は、デンプン性製品の品質に影響を与えることから多くの研究がなされている。
【０００６】
脂質の疎水部分と同様の構造を有する逆相系分離基材は、担体に疎水性官能基が結合したものであり、その疎水性を利用して特定成分の分離や濃縮に利用されている。例えば、この基材をカートリッジに充填したものが市販されており、混合液をカートリッジに注入し基材と接触させることで、蛋白質、芳香族などの疎水性を有する物質の除去、あるいは、濃縮、精製が可能となり、幅広く使用されている。
【０００７】
また、この逆相系樹脂は高速液体クロマトグラフィー用のカラムの充填剤として、オリゴ糖などの分析に広く用いられている。この基材としては、表面官能基としてオクタデシル基（Ｃ１８）や、オクチル基（Ｃ８）がシリカに結合したカラム等が広く利用されている。他の逆相系分離基材としては、官能基としてポリスチレンなどが結合したものも市販されている。
【０００８】
しかし、これまで、このような逆相系基材とグルカンとの相互作用については明らかにされておらず、グルカンの分離やデンプン単位鎖の分析の目的で逆相系基材が利用された例は知られていない。
【０００９】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の目的は、グルカンの逆相系分離基材への吸着特性を利用することによって、重合度に応じて、より簡便に精度良く分離または分画する方法を提供することにある。
【００１０】
本発明の他の目的は、上記方法を用いてデンプン構造を解析する方法を提供することにある。
【００１１】
さらに本発明の他の目的は、特定の重合度分布を有するグルカンを製造する方法を提供することにある。
【００１２】
本発明のさらに他の目的および利点は、以下の説明から明らかになろう。
【００１３】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、逆相系分離基材とグルカンの相互作用について研究を行い、その過程においてグルカンが逆相系分離基材に吸着されること、さらにはデンプンの単位鎖である直鎖α−１，４−グルカンが吸着し、その吸着性が重合度に依存することを見出し、その究明事実に基づき本発明に到達した。
【００１４】
すなわち、本発明によれば、本発明の上記目的および利点は、第１に、グルカンを逆相系分離基材に接触させて吸着させた後、水およびアルコールの混合溶媒で処理することを特徴とする、グルカンの分離・分画方法によって達成される。
【００１５】
また、本発明によれば、本発明の上記目的および利点は、第２に、上記分離方法において、基材に吸着した枝きりデンプンをアルコール溶液で濃度勾配溶出することで、デンプンの単位鎖を重合度に応じて分離・分画し、各画分の全糖量を測定することによって達成される。
【００１６】
また、本発明によれば、本発明の上記目的および利点は、第３に、上記の分離・分画方法を利用して、特定の重合度を有するグルカンを製造することによって達成される。
【００１７】
【発明の好ましい実施形態】
これについて以下に詳述する。
【００１８】
逆相系分離基材として、オクチル基が化学結合されたシリカゲルを充填したカートリッジ（Ｃ８カートリッジと略す）またはオクタデシル基が化学結合されたシリカゲルを充填したカートリッジ（Ｃ１８カートリッジと略す）を用い、グルカンの吸着特性を以下の方法で調べた。
【００１９】
アミロースまたはアミロペクチン（１０ｍｇ）を１Ｍの水酸化ナトリウム（１００μｌ）に溶解し、適量の蒸留水で希釈した後、１Ｍの酢酸（３００μｌ）で中和しｐＨ４．０−４．３とした。２％アジ化ナトリウム（１ｍｌ）を加えて、蒸留水で１００ｍｌに定容した。溶液は２０℃に保ち、実験に用いた。
【００２０】
シリンジを用いて、アミロースまたはアミロペクチン溶液（５ｍｌ）を流速約２ｍｌ／ｍｉｎでカートリッジに通した。この時、カートリッジ内に残留する溶液は空気を注入して回収した。この操作を繰り返し、各画分について、その全糖量をフェノール・硫酸法により測定した。吸着量はカートリッジ通過前後の全糖量の差とした。
【００２１】
図１は加えたアミロースとアミロペクチンに対して各カートリッジに吸着された量を示したものである。図１中、Ｃ８カートリッジについての吸着曲線は、黒塗りの記号で、Ｃ１８カートリッジについての記号はシロ抜きの記号で示されている。また、丸記号はアミロースについてのものであり、三角記号はアミロペクチンについてのものである。いずれのグルカンもカートリッジに明らかに吸着された。吸着量はＣ１８カートリッジがＣ８カートリッジより約３倍多いことが明かとなった。
【００２２】
次に、アルコール水溶液を用いて、Ｃ１８カートリッジに吸着したグルカンの離脱条件を検討した。アルコールとしてはメタノールを用いた。まず、グルカンをカートリッジに吸着後、５％、１０％、２０％、３０％メタノール水溶液で順次溶出した結果、１０％メタノールで溶出した時にアミロースが２４％、アミロペクチンが４７％回収され、最も回収率が良かった。
【００２３】
また、その他のアルコール（エタノール、プロパノールまたはブタノール）の水溶液を用いた場合、回収率はアミロースで２３−２４％、アミロペクチンで２０−２５％であり、他のアルコールでも回収することが可能であった。
【００２４】
先にアミロースとアミロペクチンの吸着性に相違が認められたので、次に、重合度の異なるα−１，４−グルカンおよびグルコースを用いて次の方法で吸着性を調べた。α−１，４−グルカンとして、マルトース、マルトヘプタオース、重合度６３、２１５、４３８、７２２、１９５３の直鎖アミロースを使用した。
【００２５】
グルコースおよびα−１，４−グルカン（１０ｍｇ）を１Ｍ水酸化ナトリウム（１００μｌ）に溶解し、１Ｍ酢酸（３００μｌ）で中和した。２％アジ化ナトリウム（１００μｌ）を加えて，蒸留水で１０ｍｌに定容した。
【００２６】
試料溶液（２．５ｍｌ）を前述の方法と同様に流速約２ｍｌ／ｍｉｎでカートリッジに通した後、蒸留水、１０％メタノール水溶液の順で流速約４ｍｌ／ｍｉｎで通液した。用いた溶液はいずれも２０℃に保った。各画分の全糖量をフェノール・硫酸法により測定し、回収率とした。
【００２７】
図２および図３はα−１，４−グルカン、グルコースをカートリッジに通した後の回収率を示す。図２および図３中、□、
【００２８】
【外１】
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【００２９】
および■はそれぞれ未吸着画分、水洗滌画分および１０％メタノール画分を示している。Ｃ８カートリッジの場合（図２）、グルコースとマルトース、マルトヘプタオースは試料注入と蒸留水洗浄画分にほとんど回収され、これらは吸着されないことがわかった。直鎖アミロースは未吸着画分と水洗滌画分の回収量が減少し、重合度１９５３以外では残留するアミロースが１０％メタノール洗浄画分に回収された。Ｃ１８カートリッジでは（図３）、グルコースとマルトースは実質上吸着されず、一方、直鎖アミロースは完全に吸着された。重合度６３と２１５のアミロースは１０％メタノール洗浄画分に完全に回収され、それより長いアミロースの回収率は重合度の増大とともに減少した。これらの結果は、α−１，４−グルカンの逆相カートリッジ吸着性に重合度依存性があることを示唆し、本発明者らは、このことを用いて直鎖アミロースを重合度に基づいて分画することが可能であることを確認した。
【００３０】
次に、Ｃ１８カートリッジによる枝きりデンプンの分画方法の検討を行った。ジメチルスルフォキシド溶解とエタノール沈殿を３回繰り返し行うことによって脱脂トウモロコシデンプンを調製した。このデンプン１０ｍｇを糊化し、それに１ユニット（５μｌ）のイソアミラーゼ（Ｍｅｇａｚｙｍｅ社製）を加え、１０ｍｌに定容し、４５度で１６時間反応させた後、１０分間煮沸させて枝きりデンプン溶液を調製した。
【００３１】
この枝きりデンプン溶液をＣ１８カートリッジに通液後、蒸留水または異なる濃度（２％、３％、４％、６％、８％、１０％）のメタノール水溶液で連続的に分画し、それぞれの溶出画分について単位鎖分布を高性能陰イオン交換クロマトグラフィーにより分析した。高性能陰イオン交換クロマトグラフィーは、陰イオン交換樹脂が充填されたカラム（ＣａｒｂｏＰａｃ  ＰＡ１）を用い、検出にはパルスドアンペロメトリー検出器を用いた。試料中のアルコールはカラムを劣化させる恐れがあるため、試料はいったん乾固し、１５０ｍＭ水酸化ナトリウムとなるように再溶解してから分析した。
【００３２】
図４はカートリッジに通液していない枝きりトウモロコシデンプン溶液（未処理デンプン）の単位鎖分布（Ａ）と、枝きりデンプン溶液の注入後メタノール水溶液で洗浄した画分の単位鎖分布を示したものである。図４中、Ｂは水洗滌画分、Ｃは２％メタノール洗滌画分、Ｄは３％メタノール洗滌画分、Ｅは４％メタノール洗滌画分、Ｆは６％メタノール洗滌画分、Ｇは８％メタノール洗滌画分そしてＨは１０％メタノール洗滌画分である。
【００３３】
未処理デンプンの単位鎖分布は，重合度６から検出され，分析６０分付近には二つの長鎖画分が溶出された。分画された枝きりデンプンのクロマトグラムにおいて，試料注入後蒸留水で洗浄した画分は重合度６から１９の単位鎖が検出され，試料注入後２％メタノールで洗浄した画分は重合度６から２６の単位鎖，試料注入後３％メタノールで洗浄した画分は重合度６から３１の単位鎖が検出された。未処理の枝きりデンプンに認められる長鎖画分は６％メタノールにより洗浄したときに初めて溶出され、以後はこの画分の回収量が増加した。このようにメタノール濃度を高くするにつれ，回収される単位鎖の重合度が増大することが明らかとなった。すなわち、分離溶出に用いるメタノール水溶液の濃度を設定することにより、枝切りデンプンの重合度別分画溶出が可能であることを確認した。
【００３４】
次に、５種の枝きりデンプン（トウモロコシデンプン、モチトウモロコシデンプン、コムギデンプン、サツマイモデンプン、ジャガイモデンプン）、枝きりグリコーゲンについて、その水溶液をＣ１８カートリッジに注入後、連続的に３％、８％、１０％メタノールでそれぞれ溶出した。ここでカートリッジを通過した未吸着画分と３％メタノール溶出画分はひとつの画分としてまとめた。図５は、それぞれの枝きりデンプンおよび枝きりグリコーゲンの分画前水溶液と、カートリッジ分画による各画分のゲルろ過溶出曲線を示したものである。図５中、Ａはトウモロコシデンプン、Ｂはコムギデンプン、Ｃはサツマイモデンプン、Ｄはジャガイモデンプン、Ｅはモチトウモロコシデンプン、Ｆはグリコーゲンについてのものである。また、図５中、実線は分画前水溶液、各記号は、３％メタノール溶出画分（○）、８％メタノール溶出画分（△）、１０％メタノール溶出画分（□）である。また、縦の点線は鎖長によってクロマトグラムを画分１，２および３に分けるラインである。
【００３５】
なお、ゲル濾過クロマトグラフィーはＳｅｐｈａｄｅｘ  Ｇ７５Ｆ（Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）を充填したカラム（１．４×６６ｃｍ）を用いて行った。カラムは０．２％塩化ナトリウムを含む２０ｍＭ水酸化ナトリウムを流速３０ｍｌ／ｈｒで溶出し、各画分（２ｍｌ）について全糖量をフェノール・硫酸法で測定した。カラムの較正には、合成直鎖アミロース（重合度＝２１５．６３）、枝きりグリコーゲン（重合度＝１１．２）、マルトヘプタオース、マルトース、グルコースを用いた。
【００３６】
表１に上記枝きりデンプンおよび枝きりグリコーゲンのカラム分離による各画分の割合を示す。うるち種のデンプンの溶出曲線は、高分子画分（表１および図５の画分１）と二つの低分子画分（表１および図５の画分２と画分３）に分けられ、それぞれ主にアミロース由来（画分１）とアミロペクチンを構成する長鎖（画分２）と短鎖由来（画分３）とされている。モチトウモロコシデンプンとグリコーゲンにはアミロース画分は認められなかった。
【００３７】
【表１】
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【００３８】
ゲルろ過分析により、未吸着画分と３％メタノール溶出画分に含まれる単位鎖はアミロペクチン由来の短鎖画分（図５の画分３）に対応すること、８％メタノール溶出画分はアミロペクチンの長鎖画分（図５の画分２）に対応すること、１０％メタノール画分は一部のアミロース画分（図５の画分１）に対応することが明らかとなった。
【００３９】
枝切りデンプンは１０％メタノールで完全に回収することはできないが、これは天然のデンプンに長い単位鎖が存在することと一致した。また、コムギデンプンの１０％メタノール画分の回収量はトウモロコシデンプンのものより多く、別のゲルろ過Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ  ＣＬ−４Ｂにより、このコムギデンプンのアミロース画分の単位鎖はトウモロコシデンプンより短いことを検証した。さらにサツマイモやジャガイモデンプンのアミロースは平均重合度が穀類デンプンより大きいことが知られており、両デンプンの１０％メタノール回収量が少ないことに矛盾がない。このように１０％メタノール画分の回収量はデンプンを構成する長鎖単位鎖、特にアミロースに関する情報を与えた。
【００４０】
上述の通り、本発明の手法を用いることで、グルカンをその重合度に応じて、簡便に分離・分画することが可能となる。
【００４１】
本発明の分離・分画方法において、分離するグルカンの種類等によって異なるが、使用できる逆相系分離基材としては例えば、表面官能基として長鎖のアルキル基が化学結合されたものが挙げられる。その長鎖アルキル基の中でも例えば、オクチル基、デシル基、ドデシル基、テトラデシル基、ヘキサデシル基、オクタデシル基等が挙げられるが、好ましくは、オクタデシル基、オクチル基である。
【００４２】
また、使用されるアルコールは、グルカンの種類や重合度合いによって異なるが、例えば、低級アルコール、例えばメタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール、２−メチル−１−プロパノール、２−メチル−２−プロパノールが挙げられる。その中でも好ましくは、メタノール、エタノールである。
【００４３】
次に、本発明を実施例によりさらに詳述する。なお、本発明はこれらに何ら限定されるものではない。
【００４４】
【実施例】
【００４５】
実施例１
本発明の手法を用いて１３種類の枝きりデンプン（１〜１３）の構造解析を行った。各デンプン溶液をイソアミラーゼにより単位鎖に分解（枝きり処理）した後、Ｃ１８カートリッジに通液し、次いで連続的に３％、８％，１０％メタノールで溶出した。このとき、カートリッジを通過した未吸着画分と３％メタノール溶出画分はひとつにとりまとめた（画分Ａ）。そして各溶出画分、すなわち画分Ａ、８％メタノール溶出画分（画分Ｂ）、１０％メタノール溶出画分（画分Ｃ）の全糖量をフェノール・硫酸法を用いて求めた。また溶出不可能な画分（画分Ｄ）は注入した糖量と溶出した糖量から計算して求めた。その結果を表２に示す。
【００４６】
【表２】
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【００４７】
また、並行して従来のデンプン構造解析方法であるゲルろ過クロマトグラフィーにより解析し、溶出したピークを図５と同様に３画分に分け、各画分について全糖量を求めた。その結果を表３に示す。
【００４８】
【表３】
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【００４９】
図６は、表３に示されるパラメーターの相関を見たものである。ゲル濾過による画分１、２、３の割合は，それぞれカートリッジ分画法による１０％メタノール画分と溶出不可能な画分の合計（画分Ｃ＋画分Ｄ）、８％メタノール画分（画分Ｂ），未吸着画分と３％メタノール画分（画分Ａ）と良好な正相関を示し、本発明によるデンプンの構造解析方法が従来方法と同様にデンプンの構造解析に使用できることが確かめられた。さらに、アミロペクチンの構造指標である画分３と画分２の比は、画分Ａと画分Ｂの比と相関関係を示した。
【００５０】
すなわち、試料の注入後，適切な濃度のメタノール溶液でステップワイズ溶出することにより、ゲル濾過法と同様に、見かけのアミロース含量やアミロペクチンを構成する短鎖と長鎖の割合を知ることが可能であることがわかった。
【００５１】
実施例２
デンプンをα−アミラーゼで分解してマルトデキストリンを調製する際に分解率が低いと、直鎖状の高分子α−１，４−グルカンが僅かに残存し、それが製品の保存中に会合することで白濁が生じ商品価値が無くなることがある。そこで、このマルトデキストリンをオクタデシル基が化学結合した担体を充填したカラムに通液することにより、マルトデキストリン中の微量に存在する高分子α−１，４−グルカンを取り除くことを試みた。
【００５２】
まず、マルトデキストリンの１０％溶液１００Ｌを樹脂が充填した容積１Ｌのカラムに１０℃で、流速１０Ｌ／ｈｒで通液した。
【００５３】
このカラム通液したものとその原液を濃度５０％まで濃縮し、４℃で１０日間保存し、その後、白濁の有無を目視により確認した。その結果、カラムに通液していない原液は白濁が生じたのに対して、カラム通液した方に白濁は認められ無かった。従って、逆相系分離基材を充填したカラムにマルトデキストリンを通液することにより、白濁の原因となっている直鎖状の高分子α−１，４−グルカンを除去することができた。
【００５４】
実施例３
トウモロコシデンプンをイソアミラーゼで枝きりして得た枝きりデンプンの２．５％水溶液１０ｍｌをオクタデシル基が結合した担体が充填されたカラム（容積１００ｍｌ）に流速１ｍｌ／分で通液したのち、蒸留水で洗浄した。次にそのカラムに２％メタノール１０ｍｌを通液し吸着した枝きりデンプンを回収した。それの重合度を分析したところ２０−２６の範囲の重合度をもつ枝きりデンプンであった。
【００５５】
実施例４
タピオカデンプンをα−アミラーゼで分解して得たマルトデキストリン（分解率１０％）を１０ｍｇ／ｍｌになるように水に溶解し、その溶液２ｍｌをＣ１８カートリッジへ注入した。
【００５６】
未吸着画分（カートリッジ素通り画分）を回収した後、次いで５％エタノール溶液２ｍｌを注入し通過した液を回収した。
【００５７】
原液（分画前）、未吸着画分、５％エタノール溶出画分を高速液体ゲル濾過クロマトグラフィーで分析した。その結果を図７に示す。本方法により、マルトデキストリンを重合度によって分離分画することができた。
【００５８】
実施例５
トウモロコシデンプンをα−アミラーゼ、プルラナーゼ、グルコアミラーゼで分解して得たグルコース高含有糖液を１０ｍｇ／ｍｌになるように水で溶解し、Ｃ１８カートリッジに注入した後、原液（Ｃ１８カートリッジ通液前のぶどう糖溶液）とカートリッジ通過液（Ｃ１８カートリッジ通過後のぶどう糖溶液）の糖組成を高速液体クロマトグラフィーで分析した。その結果を図８に示す。原液は重合度４以上のものが、０．５％含まれていたのに対して、カートリッジ通過液は０．２％に減少していた。それに伴って、グルコース含有量は原液が９５．８％であったのに対して、通過液は９６．１％であり、Ｃ１８カートリッジを通すことによりグルコース含有量を高めることが可能となった。
【００５９】
【発明の効果】
本発明によれば、逆相系分離基材を用いて、グルカンの吸着特性を利用することによって、より簡便且つ安価にグルカンを分離・分画することができる。また、重合度に応じてデンプンの単位鎖を分離することが可能なため、デンプンの構造解析に利用できる。
【図面の簡単な説明】
【図１】Ｃ８カートリッジとＣ１８カートリッジに対するアミロースとアミロペクチンの吸着曲線。
【図２】逆相カートリッジ（Ｃ８カートリッジ）へのグルコースおよびα−１，４−グルカンの吸着性。各水溶液をＣ８カートリッジに注入し、水洗浄後１０％メタノールで溶出した。
【図３】逆相カートリッジ（Ｃ１８カートリッジ）へのグルコースおよびα−１，４−グルカンの吸着性。各水溶液をＣ１８カートリッジに注入し、水洗後１０％メタノールで溶出した。
【図４】Ｃ１８カートリッジから溶出されたデンプン単位鎖の鎖長分布。
【図５】セファデックスＧ７５ゲルろ過カラムによる枝切りデンプンの鎖長分布とＣ１８カートリッジ分画後の鎖長分布。
【図６】ゲルろ過法とカートリッジ分画法により求めた鎖長分布の相関図。
（画分３／画分２）と（画分Ａ／画分Ｂ）の関係の場合はグリコーゲンの値は省いた。一方、内部の図はグリコーゲンの値を含む。
【図７】Ｃ１８カートリッジによるデンプン分解物の分画。
【図８】Ｃ１８カートリッジによるぶどう糖溶液中に含有する高分子の除去。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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