(57)【要約】　【課題】　梅木の有効利用に寄与でき、様々な医薬となり得る梅抽出物を提供する。　【解決手段】　梅葉茎部、梅仁および梅の花から、５倍体積量のメタノールを用いて、抽出物を調製する。この抽出物は、抗酸化作用、胃粘膜損傷抑制作用、アルドース還元酵素阻害作用、血糖値上昇抑制作用、血小板凝集促進作用、アルコール吸収抑制作用、抗炎症作用などを有する。【選択図】　図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
梅木の幹、梅木の枝、梅木の葉、梅木の茎、梅木の根、梅肉、梅の種殻および梅の仁からなる群から選択された少なくとも一つから抽出された薬効を有する梅抽出物であって、血小板凝集促進剤として使用される梅抽出物。
【請求項２】
梅抽出物が、梅木の葉および梅木の茎の少なくとも一方からの抽出物である請求項１記載の梅抽出物。
【請求項３】
梅抽出物が、下記の化学式（化１）〜（化６）で表される６種類の物質からなる群から選択された少なくとも一つの物質を含有する請求項１または２記載の梅抽出物。
【化１】
2004115542.tif 000017
【化２】
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【化３】
2004115542.tif 000019
【化４】
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【化５】
2004115542.tif 000021
【化６】
2004115542.tif 000022
【請求項４】
梅抽出物が、有機溶媒抽出物である請求項１〜３のいずれか一項に記載の梅抽出物。
【請求項５】
有機溶媒抽出物が、アルコール抽出物である請求項４記載の梅抽出物。
【請求項６】
アルコール抽出物が、エタノール抽出物およびメタノール抽出物の少なくとも一方の抽出物である請求項５記載の梅抽出物。
【請求項７】
アルコール抽出物がメタノール抽出物である請求項５記載の梅抽出物。
【請求項８】
梅抽出物が、乾留抽出物である請求項１〜７のいずれか一項に記載の梅抽出物。
【請求項９】
梅抽出物の形態が粉末状である請求項１〜８のいずれか一項に記載の梅抽出物。
【請求項１０】
梅抽出物の形態が液状である請求項１〜８のいずれか一項に記載の梅抽出物。
【請求項１１】
請求項１〜１０のいずれか一項に記載の梅抽出物を含有する組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
　本発明は、薬効を有する梅抽出物およびそれを含有する組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
　従来から、食用の梅を得るために多数の梅木が栽培されている。しかし、梅肉や青梅エキス以外の梅木の部分は、産業廃棄物として処理されているのが現状である。例えば、梅木の栽培において、毎年秋には徒長枝が剪定されるが、この量は、年間、数千から数万トンの莫大な量である。剪定された枝は、廃棄物として焼却処理される。また、青梅エキスや梅肉を採取した後の種殻についても、そのほとんどが廃棄されている。これでは、資源の有功利用や環境保全の観点から望ましいものではない。
【０００３】
　他方、医薬等の分野において、化学的に合成された医薬よりも、自然界の生物由来の医薬（いわゆる漢方薬や生薬を含む）が注目されている。これは、合成医薬が、その効能が優れるとしても副作用の問題があるからである。これに対し、自然界に存在する生物、特に古来より人間が食してきた生物から分離された物質は、その安全性が優れると考えられる。また、生物は、その生存環境などに応じ多種多様であり、それらから分離される物質は医薬として未知の可能性を秘めており、特に、梅は、古来より人間の健康によいとされ、また宗教行事にも使用さるなど神聖視される植物であるから、何らかの薬効成分が期待できる。これによって、現在重要な問題となっている疾患に対する医薬が開発できれば、社会的な貢献にもなる。
【０００４】
【非特許文献１】中村アツコ他、梅肉エキスに含まれる抗酸化性物質の検索、東京家政学院大学紀要、１９９９年７月３１日、第３９号、ｐｐ２３−２８
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
　したがって、本発明の目的は、梅の有効利用に貢献することが可能な薬効を有する梅抽出物およびそれを含有する組成物を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
　本発明者らは、前記目的を達成するために、梅の様々な部分からの抽出物の薬効について一連の研究を重ねた。その結果、以下に示すような優れた薬効を有する梅抽出物を得ることができた。
【０００７】
　すなわち、本発明の第１の梅抽出物は、梅木の幹、梅木の枝、梅木の葉、梅木の茎、梅木の根、梅肉、梅の種殻および梅の仁からなる群から選択された少なくとも一つから抽出された薬効を有する梅抽出物であって、抗酸化剤、胃粘膜損傷抑制剤、アルドース還元酵素阻害活性を有する糖尿病性白内障予防剤、アルドース還元酵素阻害活性を有する糖尿病性神経疾患予防剤、血糖値上昇抑制剤、アルコール吸収抑制剤、血小板凝固促進剤、肝臓炎症抑制剤、抗炎症剤およびチロシナーゼ阻害活性を有するメラニン色素生成抑制剤として使用される梅抽出物である。
【発明の効果】
【０００８】
　以上のように、本発明は、前記種々の薬効を有する梅抽出物を提供する。したがって、本発明により、梅の有効利用に寄与できるとともに、社会的に問題になっている疾患に有用な医薬の提供が可能となる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
　このなかでも、梅の葉および梅木の茎の少なくとも一方からの抽出物は、抗酸化剤、糖尿病性白内障予防剤、糖尿病性神経疾患予防剤、血小板凝集促進剤、抗炎症剤またはメラニン色素生成抑制剤として極めて優れており、好ましい。なお、梅木の茎とは、葉と枝との間に存在する葉を支持する部分をいう。以下、葉と茎とを合わせて葉茎部という。
【００１０】
　前記第１の抽出物において、胃粘膜損傷抑制剤またはアルコール吸収抑制剤として使用される場合は、梅抽出物は、梅の仁からの抽出物であることが好ましい。この抽出物が、前記薬効に優れるからである。前記第１の抽出物において、前記梅抽出物が血糖値上昇抑制剤または肝臓炎症抑制剤として使用される場合は、梅の仁および葉茎部のいずれの抽出物であっても優れた薬効を示す。
【００１１】
　前記第１の抽出物は、下記化学式（化１）〜（化６）で表される６種類の物質からなる群から選択された少なくとも一つの物質を含有することが好ましい。これらの物質が前記種々薬効に関与していると推察されるからである。以下、下記化学式（化１）の物質をＰＭ−１、下記化学式（化２）の物質をＰＭ−２、下記化学式（化３）の物質をＰＭ−３、下記化学式（化４）の物質をＰＭ−４、下記化学式（化５）の物質をＰＭ−５、下記化学式（化６）の物質をＰＭ−６と、それぞれいう。また、これらの物質の名称は、以下のとおりである。
【化１】
2004115542.tif 000003
【化２】
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【化３】
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【化４】
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【化５】
2004115542.tif 000007
【化６】
2004115542.tif 000008
【００１２】
ＰＭ−１　：　３β−ｈｙｄｒｏｘｙ−１２−ｏｌｅａｎ−２８−ｏｉｃ
　　　　　　　ａｃｉｄ
ＰＭ−２　：　２α，３β−ｄｉｈｙｄｒｏｘｙ−１２−ｕｒｓｅｎ−２８−
　　　　　　　ｏｉｃ　ａｃｉｄ
ＰＭ−３　：　３β，１９α−ｄｉｈｙｄｒｏｘｙ−２−ｏｘｏ−１２−
　　　　　　　ｕｒｓｅｎ−２８−ｏｉｃ　ａｃｉｄ
ＰＭ−４　：　３β−ｈｙｄｒｏｘｙ−１２−ｕｒｓｅｎ−２８−ｏｉｃ
　　　　　　　ａｃｉｄ
ＰＭ−５　：　２α，３β−ｄｉｈｙｄｒｏｘｙ−１２−ｏｌｅａｎ−２８−
　　　　　　　ｏｉｃ　ａｃｉｄ
ＰＭ−６　：　２α，３α−ｄｉｈｙｄｒｏｘｙ−１２−ｏｌｅａｎ−２８−
　　　　　　　ｏｉｃ　ａｃｉｄ
【００１３】
　つぎに、本発明の第２の抽出物は、梅の花からの抽出物であって、アルドース還元酵素阻害活性を有する糖尿病性白内障予防剤、アルドース還元酵素阻害活性を有する糖尿病性神経疾患予防剤、抗炎症剤、抗酸化剤、チロシナーゼ阻害活性を有するメラニン色素生成抑制剤および血小板凝集抑制剤として使用される抽出物である。なお、本発明において、梅の花とは、梅の生殖器官をさし、雌蕊、雄蕊、花弁、がく片、花柄、苞等から構成されている部分をいう。
【００１４】
　前記第２の抽出物は、下記化学式（化７）〜（化１４）で表される８種類の物質からなる群から選択された少なくとも一つの物質を含有することが好ましい。これらの物質が前記種々薬効に関与していると推察されるからである。以下、下記化学式（化７）の物質をＰＭ−７、下記化学式（化８）の物質をＰＭ−８、下記化学式（化９）の物質をＰＭ−９、下記化学式（化１０）の物質をＰＭ−１０、下記化学式（化１１）の物質をＰＭ−１１、下記化学式（化１２）の物質をＰＭ−１２、下記化学式（化１３）の物質をＰＭ−１３、下記化学式（化１４）の物質をＰＭ−１４と、それぞれいう。また、これらの物質の名称は、以下のとおりである。
【化７】
2004115542.tif 000009
【化８】
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【化９】
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【化１０】
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【化１１】
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【化１２】
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【化１３】
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【化１４】
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【００１５】
ＰＭ−７　：　２'''−Ｏ−Ａｃｅｔｙｌｒｕｔｉｎ
ＰＭ−８　：　Ｉｓｏｒｈａｍｎｅｔｉｎ　３−ｒｈａｍｎｏｓｉｄｅ
ＰＭ−９　：　Ｒｕｔｉｎ
ＰＭ−１０：　Ｑｕｗｒｃｅｔｉｎｅ　３−Ｏ−ｒｈａｍｎｏｐｙｒａｎｏｓ
　　　　　　　ｙｌ（１→６）ｇａｌａｃｔｏｓｉｄｅ
ＰＭ−１１：　Ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ　３−Ｏ−ｎｅｏｈｅｓｐｅｒｉｄｏｓｉ
　　　　　　　ｄｅ
ＰＭ−１２：　Ｅｕｇｅｎｙｌｇｌｕｃｏｓｉｄｅ
ＰＭ−１３：　Ｂｅｎｚｙｌ　Ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ
ＰＭ−１４：　Ｂｅｚｙｌ　ａｌｃｏｈｏｌ　ｘｙｌｏｓｙｌ（１→６）
　　　　　　　ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ
【００１６】
　本発明において、前記梅抽出物は、有機溶媒抽出物であることが好ましく、特に好ましくはアルコール抽出物である。前記アルコール抽出物としては、エタノール抽出物およびメタノール抽出物の少なくとも一方であることが好ましく、特に好ましいのはメタノール抽出物である。この他、前記梅抽出物は、乾留抽出物であることが好ましい。
【００１７】
　本発明において、前記梅抽出物の形態は、特に制限されず、例えば、粉末状であってもよいし、液状（ペースト状を含む）であってもよい。
【００１８】
　つぎに、本発明の組成物は、前記本発明の梅抽出物を含有する。この組成物は、主成分あるいは有効成分として前記本発明の梅抽出物を含有すれば、その他の成分については、特に制限されず、その用途に応じ適宜決定される。例えば、組成物が医薬の場合、その剤形は、前記梅抽出物を主成分若しくは有効成分とし、固体若しくは液体の賦形剤よりなり、内服剤の場合、通常、散剤、錠剤、カプセル剤、茶剤、顆粒剤、液剤（酒精剤、チンキ剤、流エキス剤、シロップ剤等）の形がある。また、注射剤、軟膏剤、液剤、湿布剤、生薬、噴霧剤、滋養浣腸剤、乳剤などの形がある。前記賦形剤としては、当該分野の公知のもが使用できる。例えば、散剤、顆粒剤、カプセル剤、錠剤などの内服用粉末剤の賦形剤としては、乳糖、澱粉、デキストリン、リン酸カルシウム、炭酸カルシウム、合成若しくは天然ケイ酸アルミニウム、酸化マグネシウム、乾燥水酸化アルミニウム、ステアリン酸マグネシウム、重炭酸ナトリウム、乾燥酵母などがあげられる。また、外用散剤の賦形剤としては、例えば、酸化亜鉛、タルク、澱粉、カキリン、ホウ酸粉末、ステアリン酸亜鉛、ステアリン酸マグネシウム、次没食子酸ビスマス、硫酸アルミニウムカリウム末などがあげられる。液剤における賦形剤としては、水、グリセリン、プロピレングリコール、シロップ、エタノール、脂肪酸、エチレングリコール、ポリエチレングリコール、ソルビトールなどがあげられる。軟膏における賦形剤としては、脂肪、脂肪油、ラノリン、ワセリン、グリセリン、ミツロウ、モクロウ、パラフィン、流動パラフィン樹脂、高級アルコール、プラスチック、グリコール類、水、界面活性剤などを組み合わせて調製した疎水性基剤若しくは親水性基剤（乳剤性基剤、水溶性基剤、懸濁性基剤を含む）があげられる。
【００１９】
　また、健康食品や食品添加物として、前記本発明の前記組成物を使用する場合、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、液剤等の形で使用できるが、医薬品と明確に区別し得る形で使用することが好ましい。また、この場合の賦形剤としては、前述のものが使用できる。
【００２０】
　本発明の組成物において、梅抽出物の含有割合は、組成物全体に対し、例えば、１〜６０重量％の範囲であり、好ましくは１０〜４０重量％の範囲である。
【００２１】
　つぎに、本発明の梅抽出物は、例えば、以下のようにして製造できる。
【００２２】
　まず、有機溶媒で抽出する場合、梅木の枝や葉茎部等をフレーク状に加工する。この加工は、梅木の幹、枝、根などの硬い部分は、木材用カッターなどを用いて行うことができ、梅の花や葉茎部などの柔らかい部分は、調理用カッターやミキサー等を用いて行うことができる。
【００２３】
　そして、フレーク状の梅木の枝等を、有機溶媒に浸漬して抽出を行う。前記有機溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、ヘキサン、アセトン、酢酸エチル、グリセリン、プロピレングリコール、ｎ−ブタノール等があげられる。このなかで、前述したように、メタノール若しくはエタノールが好ましく、特に好ましくはメタノールである。また、これら有機溶媒は、一種類のみを使用してもよく、二種類以上を併用してもよい。また、有機溶媒の使用量は、通常、前記フレークの５〜１０倍体積量使用され、好ましくは約５倍体積量である。浸漬（抽出処理）は、１回でもよいが、２回以上行うことが好ましい。また、抽出は、加熱還流が好ましい。この場合、抽出に要する時間は、通常、１時間〜３時間であり、好ましくは約３時間であり、有機溶媒温度は、その溶媒の種類により適宜決定されるが、抽出溶媒の還流が起こる温度が好ましく、具体的には約５０〜８０℃の範囲が好ましい。また、室温で抽出を行う場合は、抽出時間は、一昼夜が好ましい。この抽出により、梅木の枝、葉茎部、梅の花等から薬効成分が有機溶媒中に抽出される。そして、フィルターなどで、梅木の枝などのフレークを分離し、抽出液を回収する。
【００２４】
　そして、前記抽出液をそのまま用いてもよいし、有機溶媒を蒸発（減圧乾燥等）させて粉末若しくはペースト状にして用いてもよい。
【００２５】
　次に、乾留による場合は、まず、前記と同様にして梅木の枝や葉茎部等をフレーク状に加工する。そして、これを空気を遮断して加熱処理（乾留）する。この時の加熱温度は、通常、９０〜３００℃であり、加熱時間は、通常、１〜３時間である。この乾留には、例えば、レトルト釜や乾留用の釜が使用できる。この乾留により流出する液を抽出液として、前記枝等と選別して回収する。この乾留抽出液は、そのまま使用してもよいし、乾燥させて粉末状またはペースト状にして使用してもよい。
【００２６】
　本発明に使用する梅の種類は、特に制限されないが、例えば、南高梅、小粒南高、古城、改良内田、白加賀、養青、林州、鴬宿、甲州小梅、紅さし、皆平等が使用できる。
【実施例１】
【００２７】
　つぎに、本発明の実施例について説明する。なお、以下の実施例に供した梅は、南高梅である。
【００２８】
（実施例１）
　この実施例は、梅の仁および葉茎部のメタノール抽出物の胃粘膜損傷抑制作用について確認した例である。
【００２９】
（葉茎部抽出物の調製）
　細かく粉砕した梅の葉茎部５．１ｋｇを、その５倍体積量のメタノールで３時間加熱還流して抽出を行った。抽出液を濾過した後、残査について、再度メタノールで前記同様に加熱還流し抽出を行った。そして、得られた抽出液を合わせ、減圧乾燥し、３３８ｇの抽出物を得た。この物性を以下に示す。
【００３０】
　（外観および性状）
　黒褐色ペースト状でわずかな特異臭を有する。
【００３１】
　（薄層クロマトグラフィー）
（１）　条件
担体：シリカゲル（６０Ｆ２５４、メルク社製）
展開溶媒：クロロホルム：メタノール：水＝１０：３：１の混合液（体積比）
発色：１０％硫酸セリウムと１０％硫酸水溶液で加熱
（２）Ｒｆ値
　スポット１：０．７０（赤色）
　スポット２：０．６３（茶色）
【００３２】
（赤外線吸収スペクトル）
（１）測定機器：Shimadzu　FT−IR　DR-8000 spectrometer
（２）測定結果（単位：ｃｍ-1）
　３４３２（水酸基）、２９３６（メチル基、メチレン基、メタン基）、１７３６（カルボニル基）、１６５５（不飽和結合）、１３８３（メチル基、メチレン基、メタン基）、１１０９、１０８２、１０３７（水酸基、エーテル結合）、７９２、７６０（不飽和結合）に特徴的吸収を有する。この結果を、図３のチャートに示す。
【００３３】
（梅仁抽出物の調製）
　細かく粉砕した梅の仁２．５ｋｇを、その５倍体積量のメタノールで３時間加熱還流して抽出を行った。抽出液を濾過した後、残査について、再度メタノールで前記同様に加熱還流し抽出を行った。そして、得られた抽出液を合わせ、減圧乾燥し、２２３ｇの抽出物を得た。この物性を以下に示す。
【００３４】
　（外観および性状）
　茶褐色ペースト状でわずかな特異臭を有する。
【００３５】
　（薄層クロマトグラフィー）
（１）条件は、前記と同じ。
（２）Ｒｆ値
　スポット１：０．１０（茶色）
　スポット２：０．９５（茶色）
【００３６】
（赤外線吸収スペクトル）
（１）測定機器：前記と同じ。
（２）測定結果（単位：ｃｍ-1）
　３４５３（水酸基）、２９２８（メチル基、メチレン基、メタン基）、２５００〜２０００（フェノール性水酸基、カルボキシル基）、１７４６（カルボニル基）、１６５５（不飽和結合）、１０７２、１０５１（水酸基、エーテル結合）に特徴的吸収を有する。また、この結果を、図４のチャートに示す。
【００３７】
（胃粘膜損傷抑制効果の確認）
　ＳＤ雄性ラット（体重約２５０ｇ）を約２４時間絶食させた後、前記メタノール抽出物を経口投与した。その１時間経過後、メタノールを１．５ｍｌ／匹の割合で経口投与し、さらにその１時間経過後、胃を摘出した。胃をホルマリン処理し、腺胃部で発生した損傷部の最大直径（損傷係数（ｍｍ））および下記基準によるスコアー（０〜９）を求めた。また、対照として、前記メタノール抽出物を投与しなかったラットについても、同様に損傷係数（ｍｍ）およびスコアー（０〜９）を求めた。また、抑制率（％）は、下記式により求めた。これらの結果を、下記の表１に示す。なお、同表において、値は、平均値±標準誤差で示し（有意差：＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１）、それ以外の表も同様である。
【００３８】
　抑制率（％）＝１００−［（Ｃ／Ａ）×１００］
　　　　　Ａ：メタノール抽出物投与ラットの損傷係数
　　　　　Ｃ：対照ラットの損傷係数
【００３９】
　（スコアー）
０：損傷なし
１：全長５ｍｍ以下幅２ｍｍ以下のわずかな損傷が５個未満
２：全長５ｍｍ以下幅２ｍｍ以下のわずかな損傷が５個以上
３：全長５ｍｍ以上幅２ｍｍ以下の中程度損傷が５個未満
４：全長５ｍｍ以上幅２ｍｍ以下の中程度損傷が５個以上
５：全長５ｍｍ以下幅２ｍｍ以上の中程度損傷の出血性バンドが１ないし３個
６：全長５ｍｍ以下幅２ｍｍ以上の中程度損傷の出血性バンドが４個以上
７：全長５ｍｍ以上幅２ｍｍ以上の激しい損傷の出血性バンドが１ないし３個
８：全長５ｍｍ以上幅２ｍｍ以上の激しい損傷の出血性バンドが４ないし６個
９：全長５ｍｍ以上幅２ｍｍ以上の激しい損傷の出血性バンドが７個以上
【００４０】
（表１）
梅抽出物種類　　用量　　　Ｎ　　　損傷係数　　　　抑制率　　スコアー
　　　　　　（mg/kg）　（匹）　　（ｍｍ）　　　　（％）　　　　　　　　
　　対照　　　　−　　　　８　　173.4±16.9　　　　−　　　7.8±0.2
　梅葉茎部　　 250　　　　６　　 92.8±22.8＊＊　 46.5 　　5.7±0.7＊
　梅葉茎部　　 500　　　　６　　 24.0±12.4＊＊　 86.2 　　2.2±0.7＊＊
　　梅仁　　　 250　　　　６　　 46.1±4.4 ＊＊　 73.4 　　3.5±0.8＊＊
　　梅仁　　　 500　　　　６　　 25.8±11.7＊＊　 85.1 　　1.7±0.7＊＊
　　（＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１）
【００４１】
　前記表１から明らかなように、梅メタノール抽出物を与えることにより、胃粘膜損傷が抑制され、この効果は梅仁の方が優れていた。
【００４２】
（実施例２）
　この実施例は、梅葉茎部のメタノール抽出部の抗酸化作用について確認した例である。なお、葉茎部のメタノール抽出物の調製は、実施例１と同様に行った。
【００４３】
（抗酸化作用の確認方法）
　安定ラジカル1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl（ＤＰＰＨ）のエタノール溶液は、青色５１７ｎｍに吸収を持ち、ラジカル補足物質を加えると、添加量に応じて退色するのを利用した。まず、エタノール１ｍｌ、前記抽出物のエタノール溶液（濃度０〜１００μｇ／ｍｌ）１ｍｌ、０．２Ｍ酢酸緩衝液（ｐＨ５．５）２ｍｌおよびＤＰＰＨ溶液（２．０×１０-7ｍｏｌ／ｍｌエタノール溶液）１ｍｌを混合し、３０分間放置した。その後、この混合液の５１７ｎｍの吸光度を測定した。一方、ＤＰＰＨ溶液に代えてエタノール１ｍｌを用いた混合液をブランクとし、この５１７ｎｍの吸光度を前記と同様にして測定した。そして、吸光度が１／２になるのに必要な前記抽出物の量を算出し、これを抗酸化の指標とした。また、比較例として、前記抽出物に代えてα―トコフェロールおよび緑茶を用い、その抗酸化力も調べた。これらの結果を、下記表２に示す。
【００４４】
（表２）
　　サンプル　　　　　　　　　　　　　　　　　抗酸化力　　　
　梅葉茎部抽出物　　　　　　　　　　　　　　　１０μｇ
　α−トコフェロール　　　　　　　　　　　　　２１μｇ
　緑茶　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　２０μｇ
（抗酸化力：1.0×10-7ｍｏｌ　ＤＰＰＨを捕捉するのに要した量）
【００４５】
　前記表２から明らかなように、梅葉茎部抽出物は、優れた抗酸化力を有しており、それは食品などの酸化防止剤として使用されているα―トコフェロールの2倍以上の強さであった。
【００４６】
（実施例３）
　この実施例は、梅の仁および葉茎部の血糖値上昇抑制作用を確認した例である。この例において、梅仁メタノール抽出物および梅葉茎部メタノール抽出物は、実施例１と同一の方法で調製した。
【００４７】
（血糖値上昇抑制作用の確認）
　約２０時間絶食させたWistar系雄性ラット（体重１５０〜１８０ｇ）に前記抽出物（５００ｍｇ／ｋｇ）を経口投与し、その３０分後にショ糖（１．０ｇ／ｋｇ）を経口投与した。その３０分後、１時間後および２時間後に、眼窩静脈より約０．２ｍｌ採血した。採血した血液を３０００ｒｐｍで遠心分離して血清を得、市販キット（グルコースＣIIテストワコー、和光純薬社製）を用いたグルコースオキシダーゼ法により血糖値を測定した。また、正常群として、前記抽出物およびショ糖を投与しなかった前記ラットの血糖値を同様に測定し、対照群として前記抽出物を投与せずショ糖のみを投与した前記ラットの血糖値を測定した。これらの結果を、下記の表３に示す。なお、実験に供したラットは、それぞれの処置群において６匹である。
【００４８】
（表３）
処置群　　　　　　　　　　　　　　血糖値（mg/100ml）
　　　　　　　　　０．５ｈ　　　　 １．０h 　　　　２．０ｈ　　　
正常群　　　　　73.1±4.6＊＊　　81.9±6.8＊＊　　80.2±5.3＊＊
対照群　　　　 182.0±5.7 　　　163.1±4.5       109.4±3.5
　梅仁　　　　 172.7±4.8 　　　155.8±9.5       107.8±4.4
梅葉茎部　　　 174.5±9.7 　　　157.5±4.5 　　　109.8±4.6
【００４９】
　前記表３から明らかなように、梅の仁および葉茎部の抽出物の投与により、血糖値の上昇が抑制された。また、この効果については、仁と葉茎部との間に大差はないと思われた。
【００５０】
（実施例４）
　この実施例は、梅仁メタノール抽出物および葉茎部メタノール抽出物のアルコール吸収抑制作用について確認した例である。なお、前記各メタノール抽出物は、実施例１と同様にして調製した。
【００５１】
（アルコール吸収抑制作用の確認）
　約２０時間絶食させたＷｉｓｔａｒ系雄性ラット（体重約２１０〜２４０ｇ）に前記抽出物（５００ｍｇ／ｋｇ）を経口投与し、その３０分後にエタノール（２０％（ｖ／ｖ），５ｍｌ／ｋｇ）を経口投与した。その３０分後、１時間後および２時間後に眼窩静脈より約０．５ｍｌ採血し、血中エタノール濃度を酵素法（ベーリンガーマンハイム社製の市販測定キットである血中アルコールテスト「ＢＭＹ」を用いた。）により測定した。また、対照群として、前記抽出物を投与せずにエタノールを投与したラットについて、同様に血液中のエタノール濃度を測定した。これらの結果を下記の表４に示す。なお、実験に供したラットは、それぞれの処置群において５匹である。
【００５２】
（表４）
　処置群　　　　　　　　　　　血液中エタノール濃度（mg/ml）
　　　　　　　　　　０．５ｈ　　　　 １．０ｈ　　　　 ２．０ｈ　　
対照群　　　　　　0.825±0.051     0.671±0.022     0.337±0.003
　梅仁　　　　　　0.571±0.154     0.586±0.079     0.332±0.029
葉茎部　　　　　　0.783±0.147     0.760±0.086     0.512±0.067
【００５３】
　前記表４から明らかなように、梅仁メタノール抽出物および葉茎部メタノール抽出物の投与により、アルコール吸収が抑制された。また、この効果は、梅仁の抽出物の方が優れていた。
【００５４】
（実施例５）
　この実施例は、梅仁メタノール抽出物および葉茎部メタノール抽出物のラットレンズ由来アルドース還元酵素阻害活性を確認した例である。アルドース還元酵素は、糖尿病性白内障および糖尿病性神経疾患に関与する酵素である。前記各メタノール抽出物は、実施例１と同様にして調製した。
【００５５】
　（アルドース還元酵素液の調製）
　Wistar系雄性ラット（６週齢）のレンズ５ｇをリン酸緩衝液（１３５ｍＭ、ｐＨ７．０、１０ｍＭメルカプトエタノール含有）２０ｍｌ中でホモジナイズし、１０００００×ｇで３０分間遠心分離し、得られた上清を酵素液として用いた。
【００５６】
（アルドース還元酵素阻害活性の確認）
　１ｍＭ　ＤＬ−グリセルアルデヒド、０．０３ｍＭ　ＮＡＤＰＨ、０．１Ｍ　硫酸リチウム、前記ラットレンズ由来アルドース還元酵素液および前記抽出物ＤＭＳＯ溶液（濃度０〜３０μｇ／ｍｌ）を含有する１３５ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）を３０℃で３０分間インキュベートした。反応は、ＮＡＤＰＨを添加することにより開始させ、塩酸を加えて停止させた。反応が停止した反応液を強アルカリで処理した後、６０℃で１０分間加熱し室温になるまで放置した。その後、前記反応液の蛍光強度を測定した（励起波長：３６０ｎｍ、放射波長：４６０ｎｍ）。アルドース還元酵素阻害活性は、活性を５０％まで低下させる前記抽出物の量（ＩＣ50（μｇ／ｍｌ））として評価した。
【００５７】
　その結果、梅葉茎部抽出物は、ＩＣ50が４．９６μｇ／ｍｌであり、極微量で阻害活性を示した。また梅仁抽出物は、３０μｇ／ｍｌの濃度で２９．３％の阻害活性を示した。
【００５８】
（実施例６）
　この実施例は、梅葉茎部メタノール抽出物の血小板凝集促進作用を確認した例である。梅葉茎部メタノール抽出物は、実施例１と同様にして調製した。
【００５９】
　まず、日本白色種雄性ウサギの全血から洗浄血小板（５×１０5cells／ｍｌ）を常法により調製し、３７℃、１ｍｌＣａ2+存在下、梅葉茎部メタノール抽出物（１００μｇ／ｍｌ）で刺激し、その時の光透過率の変化を測定した（血小板凝集計：Ｍｏｄｅｌ　ＰＡＴ−４Ａ、二光バイオサイエンス社製）。また、ポジティブコントロールとして、前記抽出物に代えて血小板活性化因子（ＰＡＦ）で刺激して、同様に光透過率の変化を測定した。そして、梅葉茎部メタノール抽出物の血小板凝集促進作用は、前記ポジティブコントロールの凝集率を１００％とし、これに対する相対比率で表した。この結果を、図１のチャートに示す。なお、このチャートにおいて、Ｃａは、Ｃａ2+の添加時、Ｓは、凝集刺激開始時をそれぞれ示す。
【００６０】
　図１から明らかなように、梅葉茎部メタノール抽出物を添加すると、血小板凝集が、ただちに起こり、1分後には相対凝集率が約４５％まで上昇した。
【００６１】
（実施例７）
　この実施例は、梅仁メタノール抽出物および葉茎部メタノール抽出物の肝臓炎症抑制作用を確認した例である。前記各メタノール抽出物は実施例１と同様にして調製した。
【００６２】
（Ｄ−ガラクトサミン／ＬＰＳ誘発性急性肝臓炎症の抑制の確認）
　約２０時間絶食させたｄｄＹ系雄性マウス（１０匹、体重２５〜３０ｇ）に、前記梅抽出物を１０００ｍｇ／ｋｇの割合で経口投与し、１時間後に、Ｄ−ガラクトサミン、リポ多糖（ＬＰＳ）をそれぞれ３５０ｍｇ／ｋｇおよび１０μｇ／ｋｇの割合で腹腔内投与した。１０時間後に、採血し、遠心分離（３０００ｒｐｍ、１０分間、４℃）により血清を得、血清中のトランスアミナーゼ（ｓ−ＧＰＴ，ｓ−ＧＯＴ）活性を市販キット（エス、ティーエーテストワコー、和光純薬社製）を用いて測定した。また、前記梅抽出物を投与しなかった以外は同様の処置を行ったマウス（１０匹）をコントロール群とした。そして、このコントロール群に対する前記梅抽出物投与マウスの前記トランスアミナーゼ活性の割合を抑制率（％）として算出した。この結果を、下記の表５に示す。
【００６３】
(表５)
　　　　　　　　　　　　　　　　　ｓ−ＧＰＴ　　　ｓ−ＧＯＴ　
抑制率（％）　　　　　　　　　　　26.6±15.8　　　32.6±11.7
【００６４】
（ラット初代培養肝細胞におけるＤ−ガラクトサミン誘発急性肝炎抑制作用）
　Wistar系雄性ラット（体重１２０〜１５０ｇ）からコラゲナーゼ灌流法により採取した肝実質細胞を１０％仔牛血清（ＣＧ）含有William's培地に懸濁し、９６穴平底マイクロプレートに４×１０4cells／ml播種し、４時間インキュベートした。ついで、前記培地を１ｍＭ　Ｄ−ガラクトサミンおよび前記梅抽出物（濃度：３，１０，３０，１００，３００μｇ／ｍｌ）を含む培地と交換し、４４時間インキュベートした後、５ｍｇ／ｍｌ　３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロミド（ＭＴＴ）を１０μｌづつ添加し、４時間インキュベートした。つぎに、培地を除去し、０．０４Ｎ　ＨＣｌ含有２−プロパノールでフォルマザンを抽出し、その吸光度を測定した（測定波長：５７０ｎｍ，参照波長：６５５ｎｍ）。また、前記梅抽出物を培地に加えない他は前記同様の操作を行ったものをコントロールとした。そして、前記コントロールに対する前記梅抽出物を添加した場合の測定値の割合を抑制率（％）として算出した。この結果を、下記表６に示す。
【００６５】
(表６)
抽出物濃度
（μｇ/ｍｌ）　　　　３　　　１０　　　 ３０　　　１００　　３００　　
抑制率（％）　　　5.2±0.5  9.4±0.8  15.4±1.0  7.9±0.7  2.8±0.2
【００６６】
　前記表５および表６から明らかなように、梅抽出物の投与により急性肝炎が抑制された。
【００６７】
（実施例８）
　この実施例は、梅葉茎部メタノール抽出物の炎症抑制作用を確認した例である。梅葉茎部メタノール抽出物は、実施例１と同様にして調製した。
【００６８】
（炎症抑制作用の確認）
　炎症抑制作用は、ＬＰＳ（１０μｇ／ｍｌ）刺激によるマウス腹腔内マクロファージからのＮＯ産生を調べて評価した。
【００６９】
（マクロファージのＮＯの測定）
　ｄｄＹ系雄性マウス（体重約３０ｇ）の腹腔から採取したマクロファージを１０％牛胎児血清（ＦＣＳ）含有ＲＰＭＩ−１６４０培地に懸濁し、９６穴平底マイクロプレートに５×１０5cells／ｍｌ播種し、1時間インキュベートした（３７℃、５％ＣＯ2）。つづいて、前記培地を１０μｇ／ｍｌＬＰＳおよび前記梅抽出物（濃度：３，１０，３０，１００，３００μｇ／ｍｌ）を含む培地と交換し、２０時間インキュベートした。ＮＯは、不安定で直接測定が困難なため、ＮＯの代謝産物であるＮＯ2をグリース（Griess）試薬を用いて定量した（Griess法）。すなわち、前記培養上清と同量のグリース試薬（１％スルファニルアミド／０．１％Ｎ−１−ナフチルエチレンジアミン／５％リン酸）とを混合し、室温にて１０分間放置した後、吸光度を測定し（測定波長：５７０ｎｍ，参照波長：６５５ｎｍ）、前記培地で希釈したＮａＮＯ2をスタンダードとして定量した。また、前記梅抽出物を添加しなかった以外は前記同様の操作をおこなったものをコントロールとした。そして、このコントロールに対する前記梅抽出物を添加した場合の測定値の割合を抑制率（％）として算出した。この結果を、下記の表７に示す。
【００７０】
(表７)
抽出物濃度
（μｇ/ｍｌ）　　　 ３　　　１０　　　３０　　　１００　　　３００　
抑制率（％）　　26.8±2.2  2.7±1.7  5.7±1.6  13.5±1.4  30.5±0.9
【００７１】
　前記表７から明らかなように、梅抽出物の投与により、炎症が抑制された。
【００７２】
（実施例９）
　この実施例は、梅葉茎部メタノール抽出物のメラニン色素生成抑制作用を確認した例である。梅葉茎部メタノール抽出物は、実施例１と同様にして調製した。
【００７３】
（メラニン色素生成抑制作用の確認）
　マッシュルーム由来チロシナーゼに対する阻害活性により評価した。すなわち、４０ｍＭ　リン酸緩衝液（ｐＨ６．８）に前記梅抽出物（濃度：３０、１００，３００μｇ／ｍｌ）と基質（Ｌ−ドーパ）とを含む混合液（１．９ｍｌ）に、０．２５ｍｇ／ｍｌチロシナーゼ（マッシュルーム由来）を０．１ｍｌ添加し、２５℃で５分間インキュベートした。その後、４７５ｎｍにおける吸光度を測定した。また、前記梅抽出物を添加しなかった以外は前記同様の操作を行ったものをコントロールとした。そして、このコントロールに対する前記梅抽出物を添加した場合の測定値の割合を抑制率（％）として算出した。この結果を、下記の表８に示す。
【００７４】
（表８）
抽出物濃度
（μｇ／ｍｌ）　　　　　３０　　　１００　　　３００　　
抑制率（％）　　　　　　3.4        10.5        34.3
【００７５】
　前記表８から明らかなように、梅抽出物の投与により、メラニン色素の生成が抑制された。
【００７６】
（実施例１０）
　この実施例は、前記種々薬効に寄与すると推察される物質の精製の例である。
【００７７】
　まず、実施例１と同様にして、梅葉茎部のメタノール抽出物（３３８．０ｇ）を調製した。そして、この抽出物３２６．７ｇを酢酸エチル（ＡｃＯＥｔ）１０リットルと蒸留水（Ｈ2Ｏ）１０リットルとを用いて分配抽出し、ＡｃＯＥｔ可溶性画分（９３．４ｇ）と水可溶性画分（２３３．３ｇ）とに分画した。そして、ＡｃＯＥｔ可溶性画分（８０．０ｇ）をシリカカラムクロマトグラフィーを用いて８つの画分（Ｆｒ．１〜Ｆｒ．８）に分画した。この分画では、最初にヘキサン（Ｈｅｘ）―ＡｃＯＥｔの混合液（体積比、１０：１→５：１→３：１）を用い、ついでＣＨＣｌ3−メタノール（ＭｅＯＨ）の混合液（体積比、１０：１→５：１→３：１）を用い、最後にＭｅＯＨ液を用いた。その結果、Ｆｒ．４（ＣＨＣｌ3：ＭｅＯＨ＝１０：１）の画分において、ＰＭ−１（４９ｍｇ）、ＰＭ−２（６１ｍｇ）、ＰＭ−３（２５ｍｇ）およびＰＭ−４（８１ｍｇ）が得られ、またＦｒ．５（ＣＨＣｌ3：ＭｅＯＨ＝５：１）の画分において、ＰＭ−５（３８ｍｇ）およびＰＭ−６（２０ｍｇ）が得られた。なお、これらの精製過程を、図２に示す。
【００７８】
（実施例１１）
　この実施例は、梅の花のメタノール抽出物のラットレンズ由来アルドース還元酵素阻害活性を確認した例である。アルドース還元酵素は、糖尿病性白内障および糖尿病性神経疾患に関与する酵素である。前記梅の花のメタノール抽出物は、以下のようにして調製し、これを用いて以下のようにしてアルドース還元酵素阻害活性を調べた。
【００７９】
（梅の花メタノール抽出物の調製）
　細かく粉砕した梅の花３．０ｋｇを、その５倍体積量のメタノールで３時間加熱還流して抽出を行った。抽出液を濾過した後、残査について、再度メタノールで前記同様に加熱還流し抽出を行った。そして、得られた抽出液を合わせ、減圧乾燥し、２５０．１ｇの抽出物を得た。この物性を以下に示す。
【００８０】
　（外観および性状）
　黒褐色粉末状でわずかな特異臭を有する。
【００８１】
　（薄層クロマトグラフィー）
（１）　条件
担体：シリカゲル（６０Ｆ２５４、メルク社製）
展開溶媒：クロロホルム：メタノール：水＝１０：３：１の混合液（体積比）
発色：１０％硫酸セリウムと１０％硫酸水溶液で加熱
（３）Ｒｆ値
　スポット１：０．７０（黄色）
　スポット２：０．６３（黄色）
【００８２】
　（アルドース還元酵素液の調製）
　Wistar系雄性ラット（６週齢）のレンズ５ｇをリン酸緩衝液（１３５ｍＭ、ｐＨ７．０、１０ｍＭメルカプトエタノール含有）２０ｍｌ中でホモジナイズし、１０００００×ｇで３０分間遠心分離し、得られた上清を酵素液として用いた。
【００８３】
（アルドース還元酵素阻害活性の確認）
　１ｍＭ　ＤＬ−グリセルアルデヒド、０．０３ｍＭ　ＮＡＤＰＨ、０．１Ｍ　硫酸リチウム、前記ラットレンズ由来アルドース還元酵素液および前記抽出物ＤＭＳＯ溶液（濃度：１、３、１０、３０μｇ／ｍｌ）、１３５ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）を混合し、３０℃で３０分間インキュベートした。反応は、ＮＡＤＰＨを添加することにより開始させ、塩酸を加えて停止させた。反応が停止した反応液を強アルカリで処理した後、６０℃で１０分間加熱した後、蛍光法（励起波長：３６０ｎｍ、放射波長：４６０ｎｍ）により生成したＮＡＤＰを定量し、得られた値を下記式に代入してアルドース還元酵素の阻害率を算出した。この結果を、下記の表９に示す。
【００８４】
　阻害率（％）＝［（Ａ−Ｂ）／Ａ］×１００
　　　　　Ａ：抽出物無添加の場合のＮＡＤＰ生成量
　　　　　Ｂ：抽出物添加の場合のＮＡＤＰ生成量
【００８５】
(表９)
抽出物濃度（μｇ／ｍｌ）　　　１　　　　３　　　　１０　　　　３０　
阻害率（％）　　　　　　　２９．９　　５１．２　７６．８　　８９．６
【００８６】
　前記表９からわかるように、梅の花メタノール抽出物は、優れたアルドース還元酵素阻害活性を有していた（ＩＣ50＝３μｇ／ｍｌ）。
【００８７】
（実施例１２）
　この実施例は、梅の花メタノール抽出物の炎症抑制作用を確認した例である。梅の花メタノール抽出物は、実施例１１と同様にして調製した。
【００８８】
（炎症抑制作用の確認）
　炎症抑制作用は、ＬＰＳ（１０μｇ／ｍｌ）刺激によるマウス腹腔内マクロファージからのＮＯ産生を調べて評価した。
【００８９】
（マクロファージのＮＯの測定）
　ｄｄＹ系雄性マウス（体重約３０ｇ）の腹腔から採取したマクロファージを１０％牛胎児血清（ＦＣＳ）含有ＲＰＭＩ−１６４０培地に懸濁し、９６−ウェルマイクロプレートに５×１０5cells／ｍｌ播種し、１時間インキュベートした（３７℃、５％ＣＯ2）。つづいて、前記培地を１０μｇ／ｍｌ　ＬＰＳおよび前記梅抽出物（濃度：３，１０，３０，１００，３００μｇ／ｍｌ）を含む培地と交換し、２０時間インキュベートした。ＮＯは、不安定で直接測定が困難なため、ＮＯの代謝産物であるＮＯ2をグリース（Griess）試薬を用いて定量した（Griess法）。すなわち、前記培養上清と同量のグリース試薬（１％スルファニルアミド／０．１％Ｎ−１−ナフチルエチレンジアミン／５％リン酸）とを混合し、室温にて１０分間放置した後、吸光度を測定し（測定波長：５７０ｎｍ，参照波長：６５５ｎｍ）、前記培地で希釈したＮａＮＯ2をスタンダードとして定量した。また、前記梅抽出物を添加しなかった以外は前記同様の操作をおこなったものをコントロールとした。そして、このコントロールに対する前記梅抽出物を添加した場合の測定値の割合を抑制率（％）として算出した。この結果を、下記の表１０に示す。
【００９０】
（表１０）
抽出物濃度
（μｇ/ｍｌ）　　　　３　　　１０　　　３０　　　１００　　　３００　
抑制率（％）　　　8.0±4.5  1.7±4.8  5.0±3.8  51.6±6.0*　94.8±1.2*
【００９１】
　前記表１０から分かるように、梅の花メタノール抽出物は優れた炎症抑制効果（ＩＣ50＝１００μｇ／ｍｌ）を示した。
【００９２】
　（実施例１３）
　この実施例は、梅の花メタノール抽出物のメラニン色素生成抑制作用を確認した例である。梅の花メタノール抽出物は、実施例１１と同様にして調製した。
【００９３】
（メラニン色素生成抑制作用の確認）
　マッシュルーム由来チロシナーゼに対する阻害活性により評価した。すなわち、前記梅抽出物のＤＭＳＯ溶液（濃度：１、３、１０、３０、１００、３００、１０００μｇ／ｍｌ）、０．１ｍｇ／ｍｌのＬ−ドーパおよび５００Ｕ／ｍｌチロシナーゼ（マッシュルーム由来）を含む４０ｍＭ　リン酸緩衝液（ｐＨ６．８）を２５℃で５分間インキュベートした。その後、４７５ｎｍにおける吸光度を測定した。また、前記梅抽出物を添加しなかった以外は前記同様の操作を行ったものをコントロールとした。そして、このコントロールに対する前記梅抽出物を添加した場合の測定値の割合を抑制率（％）として算出した。この結果を、下記の表１１に示す。
【００９４】
（表１１）
抽出物濃度
（μｇ／ｍｌ）　　１　　３　　１０　　３０　 １００　３００　１０００
抑制率（％）　　 2.3　 7.5  　11.3  　24.1  　46.3    63.5  　77.5
【００９５】
　前記表１１から明らかなように、梅抽出物の投与により、メラニン色素の生成が抑制された。
【００９６】
　（実施例１４）
　この実施例は、梅の花メタノール抽出物の抗酸化作用を確認した例である。梅の花メタノール抽出物は、実施例１１と同様にして調製した。
【００９７】
（抗酸化作用の確認方法）
　０．１Ｍ酢酸−酢酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ５．５）１．０ｍｌ、エタノール０．５ｍｌ、２．０×１０-4ＭのＤＰＰＨエタノール溶液０．５ｍｌおよび梅の花メタノール抽出物のエタノール溶液０．５ｍｌを混合し、３０分間室温にて放置した後、５１７ｎｍの吸光度を測定した。得られた値から、２．０×１０-7ＭのＤＰＰＨラジカルを５０％減少させるのに必要な前記抽出物量を算出した。その結果、前記ＤＰＰＨラジカルを５０％減少させるのに必要な前記抽出物量は４４μｇであった。この結果から、梅の花抽出物は、優れた抗酸化力を有するといえる。
【００９８】
（実施例１５）
　この実施例は、梅の花メタノール抽出物の血小板凝集抑制作用を確認した例である。梅の花メタノール抽出物は、実施例１１と同様にして調製した。
【００９９】
　まず、日本白色種雄性ウサギの耳介動脈より全血を採血した後、遠心分離により多血小板血漿を得た。これを０．４ｍＭのＥＧＴＡ含有Ｔｙｒｏｄｅ−Ｈｅｐｅｓ溶液で洗浄し、洗浄血小板（５×１０5cells／ｍｌ）を調製した。そして、梅の花エタノール抽出物の存在下、０．０５Ｕ／ｍｌのトロンビンで５分間刺激し、その時の光透過率の変化を前記血小板凝集計で測定した。この測定値を下記式に代入して、血小板凝集の阻害率（％）を算出した。この結果を下記の表１２および図５のチャートに示す。
【０１００】
　阻害率（％）＝［（Ａ−Ｂ）／Ａ］×１００
　　　　　Ａ：抽出物無添加の場合の最大凝集率
　　　　　Ｂ：抽出物添加の場合の最大凝集率
【０１０１】
　さらに、前記梅の花メタノール抽出物を酢酸エチルおよび水で分配し、酢酸エチル相および水相の血小板凝集抑制作用を前記の方法で調べた。この結果を下記表１２および図６のチャート図に示す。そして、前記水相をさらにｎ−ブタノールに移行させて、ｎ−ブタノール相の血小板凝集抑制作用を前記の方法で調べた。この結果を、下記の表１２および図７のチャート図に示す。なお、図５、図６および図７において、サンプルとあるのは、前記抽出物もしくは各相を添加した時点を示し、トロンビンとあるのは、トロンビンを添加した時点を示す。
【０１０２】
(表１２)
濃度（μｇ／ｍｌ）　　　　　　１０　　　　３０　　　　１００　　　
　（阻害率（％））
メタノール抽出物　　　　　　　　０　　　　１０　　　　　２８
酢酸エチル相　　　　　　　　　　−　　　　　−　　　　　　５
水相　　　　　　　　　　　　　１１　　　　２７　　　　　８９
ｎ−ブタノール相　　　　　　　９６　　　　８７　　　　　９６
【０１０３】
　前記表１２と、図５、図６および図７のチャートから分かるように、梅の花メタノール抽出物の血小板凝集抑制作用が確認された。また、このメタノール抽出物を酢酸エチルおよび水で分配したとき、酢酸エチル相では、血小板凝集抑制作用が確認されなかったが、水相では、顕著な血小板凝集抑制作用が確認できた。さらに、前記水相をｎ−ブタノールで抽出したとき、ｎ−ブタノール相では活性の集約がみられた。一方、梅の花メタノール抽出物は、血小板活性化因子（ＰＡＦ）による血小板凝集をほとんど抑制しなかった（図示せず）。以上の結果から、梅の花の抽出物は、トロンビン凝集を特異的に抑制することが確認できた。これらの結果から、梅の花抽出物は、心筋梗塞や脳梗塞などの血栓症に起因する病態に対し、予防・改善効果があるといえる。
【０１０４】
（実施例１６）
　この実施例は、梅の花メタノール抽出物中の前記種々物質の精製の例である。
【０１０５】
（梅の花メタノール抽出物の調製）
　細かく粉砕した梅の花３．０ｋｇを、その５倍体積量のメタノールで３時間加熱還流して抽出を行った。抽出液を濾過した後、残査について、再度メタノールで前記同様に加熱還流し抽出を行ない、濾過した。そして、得られた濾液を合わせ、減圧乾燥を行なって、梅の花のメタノール抽出物２５０．１ｇを調製した。そして、この抽出物２５０．１ｇを酢酸エチル（ＡｃＯＥｔ）１０リットルとブタノール（ＢｕＯＨ）１０リットルと蒸留水（Ｈ2Ｏ）１０リットルとを用いて分配抽出し、ＡｃＯＥｔ可溶性画分（３９．２ｇ）とＢｕＯＨ可溶性画分（５１．２ｇ）と水可溶性画分（１５０．０ｇ）とに分画した。そして、ＢｕＯＨ可溶性画分（２５．１ｇ）を、順相シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて１６画分（Ｆｒ．１〜Ｆｒ．１６）に分画した。この分画では、溶媒として、最初にクロロホルム（ＣＨＣｌ3）−ＭｅＯＨの混合液（体積比、１０：１→５：１）を用い、ついでＣＨＣｌ3−ＭｅＯＨ−Ｈ2Ｏの混合液（体積比、６：４：１）を用い、最後にＭｅＯＨ液を用いた。その結果、Ｆｒ．７（ＣＨＣｌ3：ＭｅＯＨ＝５：１）の画分において、ＰＭ−１２（Ｅｕｇｅｎｙｌｇｌｕｃｏｓｉｄｅ：１４１ｍｇ）およびＰＭ−１３（Ｂｅｎｚｙｌ　ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ：５４ｍｇ）が得られ、Ｆｒ．１０（ＣＨＣｌ3：ＭｅＯＨ：Ｈ2Ｏ＝６：４：１）の画分において、ＰＭ−７（２’’’−Ｏ−Ａｃｅｔｙｌｒｕｔｉｎ：６３ｍｇ）、ＰＭ−８（ｉｓｏｒｈａｍｎｅｔｉｎ：３６ｍｇ）、ＰＭ−１０（Ｑｕｅｒｃｅｔｉｎｅ　３−Ｏ−ｒｈａｍｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→６）ｇａｌａｃｔｏｓｉｄｅ：４８ｍｇ）およびＰＭ−１４（Ｂｅｚｙｌ　ａｌｃｏｈｏｌ　ｘｙｌｏｓｙｌ（１→６）ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ：１４ｍｇ）が得られ、Ｆｒ．１２（ＣＨＣｌ3：ＭｅＯＨ：Ｈ2Ｏ＝６：４：１）の画分において、ＰＭ−９（Ｒｕｔｉｎ：２０ｍｇ）およびＰＭ−１１（Ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ　３−Ｏ−ｎｅｏｈｅｓｐｅｒｉｄｏｓｉｄｅ：６９ｍｇ）が得られた。なお、これらの精製過程を、図８に示す。
【産業上の利用可能性】
【０１０６】
　以上のように、本発明は、前記種々の薬効を有する梅抽出物を提供する。したがって、本発明により、梅の有効利用に寄与できるとともに、社会的に問題になっている疾患に有用な医薬の提供が可能となる。
【図面の簡単な説明】
【０１０７】
【図１】本発明の一実施例の梅抽出物の血小板凝集促進作用を確認したチャートである。
【図２】本発明のその他の実施例における梅抽出物中の薬効成分の精製過程を示す図である。
【図３】本発明のさらにその他の実施例における梅抽出物の赤外線吸収スペクトルを測定したチャートである。
【図４】本発明のさらにその他の実施例における梅抽出物の赤外線吸収スペクトルを測定したチャートである。
【図５】本発明のさらにその他の実施例の梅抽出物の血小板凝集促進作用を確認したチャートである。
【図６】本発明のさらにその他の実施例の梅抽出物の血小板凝集促進作用を確認したチャートである。
【図７】本発明のさらにその他の実施例の梅抽出物の血小板凝集促進作用を確認したチャートである。
【図８】本発明のさらにその他の実施例における梅抽出物中の薬効成分の精製過程を示す図である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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