(57)【要約】　　　（修正有）【課題】歯垢の多少ではなく、歯の周面で乳酸を産生している部位を歯の周面で直接検知して特定する液及び方法の提供。【既決手段】Ａ）乳酸デヒドロゲナーゼ：２〜５００Ｕ／ｍＬ、Ｂ）還元型ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド：０．００００１〜０．１重量％、Ｃ）電子移動剤：０．０００１〜０．１重量％、Ｄ）還元されて呈色を示すテトラゾリウム塩：０．０００１〜１重量％、Ｅ）水：残部から成るか、Ｆ）乳酸オキシダーゼ：０．５〜３００Ｕ／ｍＬ、Ｇ）ペルオキシダーゼ：１〜３００Ｕ／ｍＬ、Ｈ）発色体：０．００００１〜０．１重量％、Ｅ）水：残部から成る水溶液を歯の周面で乳酸を産生している部位を特定する液とし、この液を口腔に含ませて洗口させるか、水溶液を筆や綿棒などを用いて歯の周面に塗布することにより水溶液を歯の周面で乳酸を産生している部位を特定する。【選択図】　　　　なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ａ）乳酸デヒドロゲナーゼ：２〜５００Ｕ／ｍＬ、
Ｂ）還元型ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド：０．００００１〜０．１重量％、
Ｃ）電子移動剤：０．０００１〜０．１重量％、
Ｄ）還元されて呈色を示すテトラゾリウム塩：０．０００１〜１重量％、
Ｅ）水：残部
から成ることを特徴とする歯の周面で乳酸を産生している部位を特定する液。
【請求項２】
Ｃ）電子移動剤が、メルドラブルー、１−メトキシフェナジンメトスルファート、フェナジンメトスルファート、フェナジンエトサルフェート、ローズインデュリン　２Ｇ、チオニン、クレシルブルーから選ばれる少なくとも１種である請求項１に記載の歯の周面で乳酸を産生している部位を特定する液。
【請求項３】
Ｄ）還元されて呈色を示すテトラゾリウム塩が、２−（４−ヨードフェニル）−３−（２，４−ジニトロフェニル）−５−（２，４−ジスルフォフェニル）−２Ｈ−テトラゾリウム１ナトリウム塩、３−３’−（１，１’−ビフェニル−４，４’−ジイル）−ビス（２，５−ジフェニル−２Ｈ−テトラゾリウムクロライド）、３，３’−［３，３’−ジメトキシ−（１，１’−ビフェニル）−４，４’−ジイル］−ビス［２−（４−ニトロフェニル）−５−フェニル−２Ｈ−テトラゾリムクロライド］、２−（４−ヨードフェニル）−３−（４−ニトロフェニル）−５−フェニル−２Ｈ−テトラゾリウムクロライド、３，３’−［３，３’−ジメトキシ−（１，１’−ビフェニル）−４，４’−ジイル］−ビス（２，５−ジフェニル−２Ｈ−テトラゾリウムクロライド、３−（４，５−ジメチル−２−チアゾリル）−２，５−ジフェニル−２Ｈ−テトラゾリウムブロマイドから選ばれる少なくとも１種である請求項１又は２に記載の歯の周面で乳酸を産生している部位を特定する液。
【請求項４】
Ｆ）乳酸オキシダーゼ：０．５〜３００Ｕ／ｍＬ、
Ｇ）ペルオキシダーゼ：１〜３００Ｕ／ｍＬ、
Ｈ）発色体：０．００００１〜０．１重量％、
Ｅ）水：残部
から成ることを特徴とする歯の周面で乳酸を産生している部位を特定する液。
【請求項５】
Ｈ）発色体が、Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’，Ｎ’’，Ｎ’’−ヘキサ（３−スルホプロピル）−４，４’，４’’−トリアミノトリフェニルメタン・ヘキサナトリウム塩、１０−メチル−９−（フェノキシカルボニル）アクリジニウム・フルオロスルフォネート、３，３’，５，５’−テトラメチルベンジジン、Ｎ−（３−スルホプロピル）−３，３’，５，５’−テトラメチルベンジジン・ナトリウム塩、３，３’，５，５’−テトラメチルベンジジン・２塩酸／２水和物、３，３’−ジアミノベンジジン・４塩酸、Ｎ，Ｎ’−ビス（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）トリジン・２ナトリウム塩、Ｎ，Ｎ’−ビス（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）トリジン・２ナトリウム塩／４水和物、４−（５，６−ジメトキシ−２−ベンゾチアゾリル）フタリルヒドラジド、２−（５−ブロモ−２−ピリジルアゾ）−５−［Ｎ−ｎ−プロピル−Ｎ−（３−スルホプロピル）アミノ］フェノール・２ナトリウム塩・２水和物、３−（４−ヒドロキシフェニル）プロピオン酸から選ばれる少なくとも１種である請求項４に記載の歯の周面で乳酸を産生している部位を特定する液。
【請求項６】
Ｈ）発色体が、Ｎ−エチル−Ｎ−（３−スルホプロピル）アニリン・ナトリウム塩、Ｎ−（３−スルホプロピル）−３，５−ジメトキシアニリン・ナトリウム塩・１水和物、Ｎ−（３−スルホプロピル）アニリン・ナトリウム塩・１水和物、Ｎ−エチル−Ｎ−（３−スルホプロピル）−３−メチルアニリン・ナトリウム塩・１水和物、Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）−３，５−ジメトキシアニリン・ナトリウム塩、Ｎ−エチル−Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）−３−メチルアニリン・ナトリウム塩・２水和物、Ｎ−エチル−Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）−３，５−ジメトキシアニリン・ナトリウム塩、Ｎ−エチル−Ｎ−（３−スルホプロピル）−３，５−ジメトキシアニリン・ナトリウム塩・１水和物、Ｎ−エチル−Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）−３，５−ジメチルアニリン・ナトリウム塩・１水和物、Ｎ−エチル−Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）−３−メトキシアニリン・ナトリウム塩・２水和物、Ｎ−エチル−Ｎ−（３−スルホプロピル）−３−メトキシアニリン・ナトリウム塩・１水和物から選ばれる１種又は２種以上の混合物と４−アミノアンチピリンとの混合物である請求項４に記載の歯の周面で乳酸を産生している部位を特定する液。
【請求項７】
歯の周面に、Ａ）乳酸デヒドロゲナーゼ：２〜５００Ｕ／ｍＬ、Ｂ）還元型ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド：０．００００１〜０．１重量％、Ｃ）電子移動剤：０．０００１〜０．１重量％、Ｄ）還元されて呈色を示すテトラゾリウム塩：０．０００１〜１重量％、Ｅ）水：残部から成る水溶液を適用し、テトラゾリウム塩の還元呈色により歯の周面で乳酸を産生している部位を特定する方法。
【請求項８】
歯の周面に、Ｆ）乳酸オキシダーゼ：０．５〜３００Ｕ／ｍＬ、Ｇ）ペルオキシダーゼ：１〜３００Ｕ／ｍＬ、Ｈ）発色体：０．００００１〜０．１重量％、Ｅ）水：残部から成る水溶液を適用し、発色体の酸化呈色により歯の周面で乳酸を産生している部位を特定する方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は、特定の成分から成る水溶液を患者の歯の周面に直接適用して乳酸がある部位を目視可能にするための液及びその液を使用して歯の周面で乳酸を産生している部位を特定する方法に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
齲蝕は歯という人体で最も硬い組織が口腔内に常在する齲蝕原生菌によって破壊される特異な細菌感染症であり、齲蝕原生菌がスクロースなどの糖を代謝し、そのとき産生された乳酸によって歯面のｐＨが低下して脱灰することによって齲蝕が発生する。
【０００３】
齲蝕は多くの人々の罹る疾患である。歯の周面に乳酸を多く放置しておくと将来齲蝕発生の可能性が非常に高い。そのためエリスロシンなどの染色剤を含んだ試薬を歯の周面に適用して歯垢を簡単に検知する方法（例えば、特許文献１参照。）によって歯垢が存在する位置を乳酸が多く存在する位置とする簡易な方法が従来採用されてきた。しかし、歯の表面の歯垢がそのまま乳酸の多い箇所であるわけではないことから歯垢の場所だけを特定したのでは齲蝕を完全に予防することはできなかった。また、同じ歯垢でも乳酸の多い箇所と少ない箇所が存在するが、従来の歯垢染色液ではその区別をすることができないため、乳酸の少ない歯垢が乳酸の多い歯垢より多い場合などには実際には有害な歯垢部分には注意が向けられ難いという問題があった。
【０００４】
そこで歯の周面で乳酸を産生している部位を特定することが重要なのであるが、乳酸を検出する手段としては、送液される試料中の乳酸を電気的に測定する装置（例えば、特許文献２〜４参照。）、採取した血液中の乳酸を電気的に測定する装置（例えば、特許文献５参照。）、採取した尿中の乳酸を電気的に測定する方法（例えば、特許文献６参照。）、採取した試料中の乳酸を電気化学的に測定するセンサ（例えば、特許文献７参照。）等が開示されている。
【０００５】
しかしながらこれらの装置や方法はいずれも採取してきた試料中の乳酸を測定する装置や方法に関するものであり、しかも電気的に乳酸を測定するものであるために口腔内に適用することができないため、歯の周面で乳酸を産生している部位を特定することができないものであった。
【０００６】
【特許文献１】
特許第２５７９７７７号公報
【特許文献２】
特開平６−１８４７８号公報
【特許文献３】
特開平６−１３３７９５号公報
【特許文献４】
特開平６−１６９７９８号公報
【特許文献５】
特開平１１−２４２０１１号公報
【特許文献６】
特開平５−３７９８号公報
【特許文献７】
特開平７−９２１３８号公報
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】
そこで本発明は、歯垢の多少ではなく、また歯の周面から試料を採取することなく、口腔内において歯の周面で乳酸を産生している部位を特定する液及び方法を提供することを課題とする。
【０００８】
【問題を解決するための手段】
本発明者は前記課題を解決すべく鋭意検討を重ねた結果、乳酸の検査方法として一般的な酵素を用いた方法に着目し、特定の検知用液を直接歯の周面に適用すれば前記課題を解決できることを究明して本発明を完成したのである。
【０００９】
即ち本発明は、
Ａ）乳酸デヒドロゲナーゼ：２〜５００Ｕ／ｍＬ、
Ｂ）還元型ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド：０．００００１〜０．１重量％、
Ｃ）電子移動剤：０．０００１〜０．１重量％、
Ｄ）還元されて呈色を示すテトラゾリウム塩：０．０００１〜１重量％、
Ｅ）水：残部
から成ることを特徴とする歯の周面で乳酸を産生している部位を特定する液（以下、第一の液と言う）と、
Ｆ）乳酸オキシダーゼ：０．５〜３００Ｕ／ｍＬ、
Ｇ）ペルオキシダーゼ：１〜３００Ｕ／ｍＬ、
Ｈ）発色体：０．００００１〜０．１重量％、
Ｅ）水：残部
から成ることを特徴とする歯の周面で乳酸を産生している部位を特定する液（以下、第二の液と言う）と、
これらの水溶液を歯の周面に適用し、第一の液の場合はテトラゾリウム塩の還元呈色により、第二の液の場合は発色体の酸化呈色により歯の周面で乳酸を産生している部位を特定する方法である。
【００１０】
そしてこのような歯の周面で乳酸を産生している部位を特定する液を構成する要素として、第一の液においては、Ｃ）電子移動剤が、メルドラブルー、１−メトキシフェナジンメトスルファート、フェナジンメトスルファート、フェナジンエトサルフェート、ローズインデュリン　２Ｇ、チオニン、クレシルブルーから選ばれる少なくとも１種であることが、またＤ）還元されて呈色を示すテトラゾリウム塩が、２−（４−ヨードフェニル）−３−（２，４−ジニトロフェニル）−５−（２，４−ジスルフォフェニル）−２Ｈ−テトラゾリウム１ナトリウム塩、３−３’−（１，１’−ビフェニル−４，４’−ジイル）−ビス（２，５−ジフェニル−２Ｈ−テトラゾリウムクロライド）、３，３’−［３，３’−ジメトキシ−（１，１’−ビフェニル）−４，４’−ジイル］−ビス［２−（４−ニトロフェニル）−５−フェニル−２Ｈ−テトラゾリムクロライド］、２−（４−ヨードフェニル）−３−（４−ニトロフェニル）−５−フェニル−２Ｈ−テトラゾリウムクロライド、３，３’−［３，３’−ジメトキシ−（１，１’−ビフェニル）−４，４’−ジイル］−ビス（２，５−ジフェニル−２Ｈ−テトラゾリウムクロライド、３−（４，５−ジメチル−２−チアゾリル）−２，５−ジフェニル−２Ｈ−テトラゾリウムブロマイドから選ばれる少なくとも１種であることが好ましい。
【００１１】
また第二の液においては、Ｈ）発色体が、Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’，Ｎ’’，Ｎ’’−ヘキサ（３−スルホプロピル）−４，４’，４’’−トリアミノトリフェニルメタン・ヘキサナトリウム塩、１０−メチル−９−（フェノキシカルボニル）アクリジニウム・フルオロスルフォネート、３，３’，５，５’−テトラメチルベンジジン、Ｎ−（３−スルホプロピル）−３，３’，５，５’−テトラメチルベンジジン・ナトリウム塩、３，３’，５，５’−テトラメチルベンジジン・２塩酸／２水和物、３，３’−ジアミノベンジジン・４塩酸、Ｎ，Ｎ’−ビス（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）トリジン・２ナトリウム塩、Ｎ，Ｎ’−ビス（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）トリジン・２ナトリウム塩／４水和物、４−（５，６−ジメトキシ−２−ベンゾチアゾリル）フタリルヒドラジド、２−（５−ブロモ−２−ピリジルアゾ）−５−［Ｎ−ｎ−プロピル−Ｎ−（３−スルホプロピル）アミノ］フェノール・２ナトリウム塩・２水和物、３−（４−ヒドロキシフェニル）プロピオン酸から選ばれる少なくとも１種であるか、Ｎ−エチル−Ｎ−（３−スルホプロピル）アニリン・ナトリウム塩、Ｎ−（３−スルホプロピル）−３，５−ジメトキシアニリン・ナトリウム塩・１水和物、Ｎ−（３−スルホプロピル）アニリン・ナトリウム塩・１水和物、Ｎ−エチル−Ｎ−（３−スルホプロピル）−３−メチルアニリン・ナトリウム塩・１水和物、Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）−３，５−ジメトキシアニリン・ナトリウム塩、Ｎ−エチル−Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）−３−メチルアニリン・ナトリウム塩・２水和物、Ｎ−エチル−Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）−３，５−ジメトキシアニリン・ナトリウム塩、Ｎ−エチル−Ｎ−（３−スルホプロピル）−３，５−ジメトキシアニリン・ナトリウム塩・１水和物、Ｎ−エチル−Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）−３，５−ジメチルアニリン・ナトリウム塩・１水和物、Ｎ−エチル−Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）−３−メトキシアニリン・ナトリウム塩・２水和物、Ｎ−エチル−Ｎ−（３−スルホプロピル）−３−メトキシアニリン・ナトリウム塩・１水和物から選ばれる１種又は２種以上の混合物と４−アミノアンチピリンとの混合物であることが好ましい。
【００１２】
【発明の実施の形態】
本発明に係る歯の周面で乳酸を産生している部位を特定する第一の液は、乳酸デヒドロゲナーゼを用いたものである。即ち、乳酸に乳酸デヒドロゲナーゼを作用させ乳酸をピルビン酸に、還元型ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド（ＮＡＤ＋）をニコチンアミドアデニンジヌクレオチド（ＮＡＤＨ）とし、このニコチンアミドアデニンジヌクレオチドに電子移動体を介してテトラゾリウム塩をホルマザンへ還元させ呈色する反応を利用したものである。
【００１３】
このような第一の液で使用するＡ）成分である乳酸デヒドロゲナーゼは、乳酸が存在するとピルビン酸に還元する機能を持つ。この乳酸デヒドロゲナーゼは、ニワトリ心臓由来，ブタ心臓由来，ウサギ筋肉由来などの酵素が市販されている脱水素酵素であり、従来からの乳酸検出方法に用いられている酵素が使用可能である。
【００１４】
このＡ）成分は第一の液中に２〜５００Ｕ／ｍＬ含まれている必要があり、２Ｕ／ｍＬ未満では十分な反応を得ることができず、５００Ｕ／ｍＬを超えて配合しても一般的には歯の周面にはその量に対応する乳酸が存在しないため効果が得られない。
【００１５】
第一の液に使用するＢ）成分である還元型ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド（ＮＡＤ＋）は、乳酸がピルビン酸に還元される反応と後述する特定のテトラゾリウム塩の還元反応の媒体となる物質である。乳酸がピルビン酸に還元される際の電子供給によりニコチンアミドアデニンジヌクレオチド（ＮＡＤＨ）へと変化し後述するＤ）成分である還元されて呈色するテトラゾリウム塩を還元して発色させるのである。前記Ａ）成分と同様にＢ）成分である還元型ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドも従来からの乳酸検出方法に用いられている物質が使用可能である。
【００１６】
このＢ）成分は第一の液中に０．００００１〜０．１重量％含まれている必要があり、０．００００１重量％未満では十分な反応を得ることができず、０．１重量％を超えて配合しても対応する乳酸の量又は後述するＤ）成分である還元されて呈色するテトラゾリウム塩の量に対応しないため十分な効果が得られない。
【００１７】
第一の液に使用するＣ）成分である電子移動剤は、Ｂ）成分である還元型ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドと後述するＤ）成分である還元されて呈色するテトラゾリウム塩間において電子を移動させる作用を持ち、Ｄ）成分である還元されて呈色するテトラゾリウム塩を還元してホルマザンとすることにより呈色させる作用を持つ。このＣ）成分である電子移動剤としては、同様の効果を得るものであれば特に限定されないが、反応の正確さから、メルドラブルー、１−メトキシフェナジンメトスルファート、フェナジンメトスルファート、フェナジンエトサルフェート、ローズインデュリン　２Ｇ、チオニン、クレシルブルーから選ばれる少なくとも１種であることが好ましい。
【００１８】
このＣ）成分は第一の液中に０．０００１〜０．１重量％含まれている必要があり、０．０００１重量％未満では十分な反応を得ることができず、０．１重量％を超えて配合しても対応する後述するＤ）成分である還元されて呈色するテトラゾリウム塩の量に対応しないため十分な効果が得られない。
【００１９】
第一の液に使用するＤ）成分である還元されて呈色を示すテトラゾリウム塩は、テトラゾリウム塩の中で還元されて呈色を示すものであり、例えば、２−（４−ヨードフェニル）−３−（２，４−ジニトロフェニル）−５−（２，４−ジスルフォフェニル）−２Ｈ−テトラゾリウム１ナトリウム塩、３−３’−（１，１’−ビフェニル−４，４’−ジイル）−ビス（２，５−ジフェニル−２Ｈ−テトラゾリウムクロライド）、３，３’−［３，３’−ジメトキシ−（１，１’−ビフェニル）−４，４’−ジイル］−ビス［２−（４−ニトロフェニル）−５−フェニル−２Ｈ−テトラゾリムクロライド］、２−（４−ヨードフェニル）−３−（４−ニトロフェニル）−５−フェニル−２Ｈ−テトラゾリウムクロライド、３，３’−［３，３’−ジメトキシ−（１，１’−ビフェニル）−４，４’−ジイル］−ビス（２，５−ジフェニル−２Ｈ−テトラゾリウムクロライド、３−（４，５−ジメチル−２−チアゾリル）−２，５−ジフェニル−２Ｈ−テトラゾリウムブロマイドを挙げることができる。これらのテトラゾリウム塩は１種のみ使用しても、２種以上の混合物として使用してもよい。
【００２０】
このＤ）成分は第一の液中に０．０００１〜１重量％含まれている必要があり、０．０００１重量％未満では十分な反応を得ることができず、１重量％を超えて配合しても対応する乳酸の量又は前述したＢ）成分である還元型ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドの量に対応しないため十分な効果が得られない。
【００２１】
本発明に係る歯の周面で乳酸を産生している部位を特定する第二の液は、乳酸オキシターゼとぺルオキシターゼを用いる液である。これは乳酸に乳酸オキシダーゼを作用させるとピルビン酸と過酸化水素を生成させ、ペルオキシダーゼ存在下で過酸化水素が発色体を酸化させ呈色させることにより乳酸を検出するものである。
【００２２】
第二の液に使用するＦ）乳酸オキシターゼは、乳酸からピルビン酸と過酸化水素を生成させる働きを持つ酵素である。この乳酸オキシターゼは、第二の液中に０．５〜３００Ｕ／ｍＬ配合されている必要があり、０．５Ｕ／ｍＬ未満であると効果がなく、３００Ｕ／ｍＬを超えて配合しても一般的には歯の周面にはその量に対応する乳酸が存在しないため効果が得られない。
【００２３】
第二の液に使用するＧ）ペルオキシターゼは、後述するＨ）成分である発色体を酸化させて発色させる作用を持つ酵素である。この酵素は過酸化水素に作用して発色体を酸化して呈色させる働きを持つ酵素である。このＧ）成分は、第二の液中に１〜３００Ｕ／ｍＬ配合されている必要があり、１Ｕ／ｍＬ未満であると効果がなく、３００Ｕ／ｍＬを超えて配合しても過酸化水素の量が対応しないため十分な効果を得ることができない。
【００２４】
第二の液に使用するＨ）発色体は、乳酸にＦ）成分である乳酸オキシダーゼを作用させることにより生成される過酸化水素によりＧ）成分であるペルオキシターゼの存在下で酸化され発色する物質である。具体的には、Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’，Ｎ’’，Ｎ’’−ヘキサ（３−スルホプロピル）−４，４’，４’’−トリアミノトリフェニルメタン・ヘキサナトリウム塩、１０−メチル−９−（フェノキシカルボニル）アクリジニウム・フルオロスルフォネート、３，３’，５，５’−テトラメチルベンジジン、Ｎ−（３−スルホプロピル）−３，３’，５，５’−テトラメチルベンジジン・ナトリウム塩、３，３’，５，５’−テトラメチルベンジジン・２塩酸／２水和物、３，３’−ジアミノベンジジン・４塩酸、Ｎ，Ｎ’−ビス（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）トリジン・２ナトリウム塩、Ｎ，Ｎ’−ビス（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）トリジン・２ナトリウム塩／４水和物、４−（５，６−ジメトキシ−２−ベンゾチアゾリル）フタリルヒドラジド、２−（５−ブロモ−２−ピリジルアゾ）−５−［Ｎ−ｎ−プロピル−Ｎ−（３−スルホプロピル）アミノ］フェノール・２ナトリウム塩・２水和物、３−（４−ヒドロキシフェニル）プロピオン酸から選ばれる１種又は２種以上の混合物を挙げることができる。
【００２５】
またこのＨ）成分である発色体は、前述の発色体に代えて、Ｎ−エチル−Ｎ−（３−スルホプロピル）アニリン・ナトリウム塩、Ｎ−（３−スルホプロピル）−３，５−ジメトキシアニリン・ナトリウム塩・１水和物、Ｎ−（３−スルホプロピル）アニリン・ナトリウム塩・１水和物、Ｎ−エチル−Ｎ−（３−スルホプロピル）−３−メチルアニリン・ナトリウム塩・１水和物、Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）−３，５−ジメトキシアニリン・ナトリウム塩、Ｎ−エチル−Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）−３−メチルアニリン・ナトリウム塩・２水和物、Ｎ−エチル−Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）−３，５−ジメトキシアニリン・ナトリウム塩、Ｎ−エチル−Ｎ−（３−スルホプロピル）−３，５−ジメトキシアニリン・ナトリウム塩・１水和物、Ｎ−エチル−Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）−３，５−ジメチルアニリン・ナトリウム塩・１水和物、Ｎ−エチル−Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）−３−メトキシアニリン・ナトリウム塩・２水和物、Ｎ−エチル−Ｎ−（３−スルホプロピル）−３−メトキシアニリン・ナトリウム塩・１水和物から選ばれる１種又は２種以上の混合物と４−アミノアンチピリンとの混合物であってもよい。
【００２６】
このようなＨ）成分である発色体は、第二の液中に０．００００１〜０．１重量％含まれている必要があり、０．００００１重量％未満では十分な反応を得ることができず、０．１重量％を超えて配合しても対応する過酸化水素の量が対応しないため十分な効果が得られない。
【００２７】
本発明に係る歯の周面で乳酸を産生している部位を特定する液は、酵素反応の最適値がｐＨ７付近であるために必要に応じて緩衝作用を与えることが好ましい。緩衝作用を得る方法としては、一般的なリン酸緩衝液やトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン緩衝液などを利用することができる。
【００２８】
本発明に係る歯の周面で乳酸を産生している部位を特定する方法は、前述の第一の液又は第二の液を歯の周面に適用し、テトラゾリウム塩の還元呈色又は発色体の酸化呈色により歯の周面で乳酸を産生している部位を特定する方法である。
【００２９】
本発明の歯の周面で乳酸を産生している部位を特定する液を用いる方法は、歯の周面への適用として水溶液を口腔に含ませて洗口で適用しても、水溶液を筆や綿棒などを用いて歯の周面に塗布してもよい。
【００３０】
【実施例】
以下に実施例により本発明を詳細に説明するが、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。
【００３１】
表１に示す組成の第一の液と、表２に示す組成の第二の液及び従来の歯垢染色液（比較例１）を調製した。
【００３２】
【表１】
2004113129.tif 000002
【００３３】
【表２】
2004113129.tif 000003
【００３４】
実施例１、２，３，６，７においては、第一の液又は第二の液を筆を用いて歯の周面に塗布した結果、隣接面や歯頸部が赤く発色した。また実施例４，５，８においては、第一の液又は第二の液を口腔内に含ませて洗口した処、同様に隣接面や歯頸部が赤く発色した。比較例１では歯垢及び歯肉などが赤く染まった。
【００３５】
各実施例で発色した箇所及び発色の少ない箇所の歯垢内のミュータンス連鎖球菌の数を測定した処、赤く染まった歯垢約１ｍｇ中のミュータンス連鎖球菌の数は平均２．１×１０５ＣＦＵで、殆ど染まらなかった歯垢約１ｍｇ中のミュータンス連鎖球菌の数は平均７．３×１０３ＣＦＵであった。
【００３６】
【発明の効果】
以上に詳述した如く、比較例である従来の歯垢染色液では歯の周面全体が染まってしまうため歯の周面で乳酸を産生している部位を特定することができず、その結果実際にミュータンス連鎖球菌が多く存在している箇所を特定することができないのに対し、本発明に係る歯の周面で乳酸を産生している部位を特定する液及びその液を使用して歯の周面で乳酸を産生している部位を特定する方法は、歯垢の多少ではなく歯の周面に存在する乳酸を直接検知して歯の周面で乳酸を産生している部位を特定することが可能であり、従って歯科医療に貢献するところの非常に大なるものである。