(57)【要約】【課題】アガリクス茸の菌糸体だけでなく、他の有用なキノコ類の菌糸体も同時に効率よく培養して、有効成分を豊富に含む飲食用キノコ組成物を製造できるようにする。【解決手段】キノコ類の菌糸体の培養に必要な栄養源を含む液体培地に、アガリクス・ブラゼイ・ムリル（Ａｇａｒｉｃｕｓ  ｂｌａｚｅｉ  Ｍｕｒｉｌｌ）の菌糸体と、培養することによって培地が酸性化する傾向がある酸生成キノコ類の菌糸体とを接種して混合培養し、得られた培養物を原料として飲食用キノコ組成物を製造する。前記酸生成キノコ類としては、メシマコブ（Ｐｈｅｌｌｉｎｕｓ  ｌｉｎｔｅｕｓ）が好ましく、前記キノコ類の菌糸体の培養容器の底部内径と、該培養容器に充填された培養液の高さとの比が、１：０．３５〜１となるようにして培養を行なうことが好ましい。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
キノコ類の菌糸体の培養に必要な栄養源を含む液体培地に、アガリクス・ブラゼイ・ムリル（Ａｇａｒｉｃｕｓ  ｂｌａｚｅｉ  Ｍｕｒｉｌｌ）の菌糸体と、培養することによって培地が酸性化する傾向がある酸生成キノコ類の菌糸体とを接種して混合培養し、得られた培養物を原料として用いることを特徴とする飲食用キノコ組成物の製造方法。
【請求項２】
前記酸生成キノコ類が、メシマコブ（Ｐｈｅｌｌｉｎｕｓ  ｌｉｎｔｅｕｓ）である請求項１に記載の飲食用キノコ組成物の製造方法。
【請求項３】
前記キノコ類の菌糸体の培養容器の底部内径と、該培養容器に充填された培養液の高さとの比が、１：０．３５〜１となるようにして培養を行なう請求項１又は２に記載の飲食用キノコ組成物の製造方法。
【請求項４】
培養後に、前記アガリクス・ブラゼイ・ムリル（Ａｇａｒｉｃｕｓ  ｂｌａｚｅｉ  Ｍｕｒｉｌｌ）の菌糸体と、前記酸生成キノコ類の菌糸体とを分別回収し、それぞれの菌糸体を所定の配合比で混合して原料とする請求項１〜３のいずれか１つに記載の飲食用キノコ組成物の製造方法。
【請求項５】
前記キノコ類の菌糸体の培養液から、前記アガリクス・ブラゼイ・ムリル（Ａｇａｒｉｃｕｓ  ｂｌａｚｅｉ  Ｍｕｒｉｌｌ）の菌糸体と、前記酸生成キノコ類の菌糸体とを回収し、この菌糸体を粉砕して乾燥する請求項１〜４のいずれか１つに記載の飲食用キノコ組成物の製造方法。
【請求項６】
前記キノコ類の菌糸体の培養液から前記菌糸体を回収した残液を濃縮し、乾燥粉末化する請求項１〜５のいずれか１つに記載の飲食用キノコ組成物の製造方法。
【請求項７】
前記キノコ類の菌糸体の培養液中に含まれる酵素及び／又は外部から添加した酵素によって、前記菌糸体を分解させた後、有効成分を採取する請求項１〜４のいずれか１つに記載の飲食用キノコ組成物の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、飲食用キノコ組成物の製造方法に関し、更に詳しくは、２種類以上のキノコ類の菌糸体を混合培養して得られる培養物を原料として飲食用キノコ組成物を製造する方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
従来より、キノコ類には様々な生理活性効果があることが知られている。例えば、アガリクス・ブラゼイ・ムリル（Ａｇａｒｉｃｕｓ  ｂｌａｚｅｉ  Ｍｕｒｉｌｌ、日本名「ハラタケ科ハラタケ属カワリハラタケ。以下、アガリクス茸という。）は、抗ガン作用、血糖降下作用、血圧降下作用等を有しており、メシマコブは、抗腫瘍活性を有していることが知られている。
【０００３】
従来、アガリクス茸やメシマコブの人工栽培は難しく、非常に高価な素材であったため、それらを原料とする健康食品も高価なものとなっていた。このため、近年、これらのキノコ類の菌糸体培養物を原料として製造された健康食品が市販されるようになり、広く利用されるようになってきた。
【０００４】
例えば、特許文献１には、特定の培養液中で特定の条件下に曝気、ろ過を繰り返しながらアガリクス茸の菌糸を培養して、アガリクス・ブラゼイ・ムリルの菌糸体のエキスを製造する方法について開示されている。
【０００５】
また、特許文献２には、（１）液体培地にメシマコブ菌糸体を摂取して、２２℃〜３５℃で培養すること、（２）液体培地の炭素源として、グルコース、マンノース、ガラクトース、スクロース、トレハロース、セロビオース、マルトース、ラクトース、ラフィノースから選択される１以上の糖類を使用すること、（３）好気的条件下で培養すること、（４）培養開始時の培地のｐＨを４．５〜６．５とすること、という条件を採用することを特徴とするメシマコブ菌糸体の培養方法について開示されている。
【０００６】
【特許文献１】
特開平１１−２３５１６２号公報
【特許文献２】
特開２００１−１７８４４８号公報
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】
しかしながら、キノコ類の菌糸体を液体培地で培養した場合、培養期間が長くなるにしたがって、キノコ類の産生する代謝産物によって培養液のｐＨが変化してしまい、菌糸体の成長が阻害されてしまうという問題があった。例えば、アガリクス茸の菌糸体を液体培地で培養した場合、アガリクス茸の産生する代謝産物によって培養液のｐＨが上昇してしまい、菌糸体の培養至適ｐＨから外れてしまうという問題があった。
【０００８】
また、従来より、アガリクス茸、メシマコブ等の有用なキノコ類の複数種類を混合することにより、それらの成分の相乗効果を期待した健康食品も市販されているが、キノコ類の種類ごとに菌糸体を別々に培養していたため、複数の培養容器を用いて培養するか、同じ培養器を用いて１種類ずつ培養することが必要であり、製造コストや製造時間がかかってしまうという問題があった。
【０００９】
したがって、本発明の目的は、アガリクス茸の菌糸体を液体培地で培養する際に、培養液のｐＨの変化による菌糸体の成長阻害を防止してアガリクス茸の菌糸体を効率よく培養すると共に、アガリクス茸の菌糸体だけでなく、他の有用なキノコ類の菌糸体も同時に効率よく培養できるようにし、それによって有効成分を豊富に含む飲食用キノコ組成物を効率よく製造できるようにした飲食用キノコ組成物の製造方法を提供することにある。
【００１０】
【課題を解決するための手段】
上記目的を達成するため、本発明の飲食用キノコ組成物の製造方法は、キノコ類の菌糸体の培養に必要な栄養源を含む液体培地に、アガリクス・ブラゼイ・ムリル（Ａｇａｒｉｃｕｓ  ｂｌａｚｅｉ  Ｍｕｒｉｌｌ）の菌糸体と、培養することによって培地が酸性化する傾向がある酸生成キノコ類の菌糸体とを接種して混合培養し、得られた培養物を原料として用いることを特徴とする。
【００１１】
本発明の培養方法によれば、アガリクス茸の菌糸体と、菌糸体を培養した際に培地が酸性になる酸生成キノコ類の菌糸体とを混合して培養することにより、アガリクス茸が産生するアルカリ性の代謝産物が、酸生成キノコ類が産生する酸性の代謝産物によって中和されるので、培養期間中の培養液のｐＨの変化を抑制することができる。その結果、アガリクス茸の菌糸体と、酸生成キノコ類の菌糸体との両方を効率よく培養することができる。そして、こうして得られた培養物を原料として、飲食用キノコ組成物を製造することにより、アガリクス茸だけでなく、酸生成キノコ類が有する生理活性も期待できる健康食品素材を提供することができる。
【００１２】
本発明においては、前記酸生成キノコ類が、メシマコブ（Ｐｈｅｌｌｉｎｕｓ  ｌｉｎｔｅｕｓ）であることが好ましい。メシマコブは、培養中に酸性の代謝産物を生成し、培養液を酸性にする傾向があるため、アガリクス茸が生成するアルカリ性の代謝産物を効果的に中和することができる。また、メシマコブは、サルノコシカケ科のキノコの中でも最も高い抗腫瘍効果が認められているものであり、アガリクス茸と併用することによって、より優れた抗ガン作用が期待できる。更に、アガリクス茸の菌糸体は培養容器の底に沈殿する傾向があるのに対し、メシマコブ等の酸生成キノコ類の菌糸体の多くは、培養液の表面に浮き上がる傾向があるので、デカンテーションレベルでほぼ定量的に、両者を分別回収することが可能となる。
【００１３】
また、前記キノコ類の菌糸体の培養容器の底部内径と、該培養容器に充填された培養液の高さとの比が、１：０．３５〜１となるようにして培養を行なうことが好ましい。これによれば、培養液の表面に浮き上がる傾向のあるアガリクス茸と、例えばメシマコブのように培養容器の底に沈殿する傾向があるキノコ類とを組み合わせた場合に、両者の分別回収をより容易に行うことができる。
【００１４】
培養物から飲食用キノコ組成物を調製する方法としては、培養後に、前記アガリクス・ブラゼイ・ムリル（Ａｇａｒｉｃｕｓ  ｂｌａｚｅｉ  Ｍｕｒｉｌｌ）の菌糸体と、前記酸生成キノコ類の菌糸体とを分別回収し、それぞれの菌糸体を所定の配合比で混合して原料とすることが好ましい。これによれば、アガリクス茸の菌糸体と、酸生成キノコ類の菌糸体とを、一定の比率で混合した製品を作ることが可能となる。
【００１５】
また、前記キノコ類の菌糸体の培養液から、前記アガリクス・ブラゼイ・ムリル（Ａｇａｒｉｃｕｓ  ｂｌａｚｅｉ  Ｍｕｒｉｌｌ）の菌糸体と、前記酸生成キノコ類の菌糸体とを回収し、この菌糸体を粉砕して乾燥することが好ましい。これによれば、β−１，３グルカンなどの生理活性を有する成分を豊富に含む健康食品素材を得ることができる。
【００１６】
あるいは、前記キノコ類の菌糸体の培養液から前記菌糸体を回収した残液を濃縮し、乾燥粉末化する方法も好ましい。これによれば、キノコ類の菌糸体が生産する代謝産物や、培地原料がキノコ類の菌糸体によって分解されたものなどを豊富に含む生理活性効果に優れた健康食品素材を得ることができる。
【００１７】
更には、前記キノコ類の菌糸体の培養液中に含まれる酵素及び／又は外部から添加した酵素によって、前記菌糸体を分解させた後、有効成分を採取する方法も好ましく採用される。これによれば、菌糸体の酵素分解物や、菌糸体が生産した代謝産物や、培地原料が酵素によって分解されたものなど、培養物全体に含まれる生理活性成分を含む健康食品素材を得ることができる。
【００１８】
【発明の実施の形態】
以下、本発明の培養方法について詳細に説明する。
本発明においてキノコ類とは、正確には担子菌（Ｂａｓｉｄｉｏｍｙｃｅｔｅｓ）に属する菌類であって食用可能なものを意味する。このキノコ類としては、アガリクス茸の他に、例えばメシマコブ、霊芝、シイタケ、エノキタケ、マツタケ、マイタケ、ヒラタケなどが挙げられる。
【００１９】
本発明で用いられるアガリクス茸は、既に健康食品等として広く利用されており、当業者が容易に入手することができる。
【００２０】
また、菌糸体を培養した際に培地が酸性になるキノコ類（以下、酸生成キノコ類という。）としては、メシマコブ、シイタケ、ハナビラタケ等が挙げられ、これらのキノコ類も当業者が容易に入手できるものである。
【００２１】
本発明において、アガリクス茸及び酸生成キノコ類の菌糸体を培養する際に用いる液体培地としては、キノコ類の菌糸体の培養に必要な栄養源を含むものであれば特に限定されず、例えば炭素源として、ブドウ糖、蜂蜜、シュークロース等が用いられ、窒素源として、ペプトン、ポリペプトン、イーストエキストラクト等が用いられ、その他の成分として、リン酸ナトリウム、リン酸カリウム等のｐＨ調整剤、ＭｇＳＯ４等の無機塩などを含むものが好ましく採用される。液体培地のｐＨは、上記キノコ類の菌糸体の増殖に適したｐＨであれば特に限定されないが、通常は、ｐＨ５．８〜６．５程度に調整することが好ましい。
【００２２】
本発明のキノコ類の菌糸体の液体培養方法は、例えば、以下のようにして行なうことができる。なお、培養における各操作は、全て無菌的に行なうことが好ましい。
【００２３】
すなわち、例えばフラスコ、ジャーファーメンター等の培養容器に上記液体培地を入れて滅菌するか、あるいは予め滅菌された上記培養容器に滅菌された上記液体培地を入れ、アガリクス茸の菌糸体の前培養液と、酸生成キノコ類の菌糸体の前培養液を接種し、好ましくは２２〜２６℃で、好ましくは２０〜３０日間培養する。なお、通常、キノコ類は好気的であるため、効率よく菌糸体を培養するために、培養期間中は、振とうしたり、通気攪拌（エアレーション）したりして、好気的条件下で培養することが好ましい。
【００２４】
本発明においては、上記フラスコ、ジャーファーメンター等の培養容器の底部内径と、培養液を充填したときの高さとの比が、好ましくは１：０．３５〜１、より好ましくは１：０．４〜０．７となるように、適宜培養液量を調整したり、培養容器の形状を適宜変えて培養を行なうことが好ましい。
【００２５】
このような条件で培養することにより、アガリクス茸の菌糸体は、球状（マリモ状）になって培養容器の底部に沈降する傾向があり、メシマコブ等の酸生成キノコ類の菌糸体は、菌膜状になって培養容器の上部に浮く傾向があるため、培養後に静置しておくと、アガリクスの菌糸体が底部に沈降し、メシマコブ等の酸生成キノコ類の菌糸体が上部に浮き上がって、両者を分別回収しやすくなる。その結果、それぞれの菌糸体を所定の配合比で混合して原料とし、アガリクス茸の菌糸体と酸生成キノコ類の菌糸体とを、一定の比率で混合した製品を作ることが可能となる。
【００２６】
なお、培養容器の底部内径と培養液の高さの比が１：０．３５未満であると、アガリクス茸の菌糸体と酸生成キノコ類の菌糸体とを分別回収しにくくなり、培養容器中の培養液の底辺と高さの比が１：１を超えると、培養液中に菌糸体が存在しない中間層ができるため、培養効率が低下する。
【００２７】
なお、アガリクス茸の菌糸体と酸生成キノコ類の菌糸体との比率を正確に配合する必要がない場合には、上記菌糸体が分別不可能に混合されてもよい。
【００２８】
そして、培養期間中、培養液の液部は、振とうやエアレーション等によって適度に撹拌されているので、アガリクス茸が産生するアルカリ性の代謝産物と、酸生成キノコ類が産生する酸性の代謝産物とが混合、中和され、培養液全体のｐＨの変化が抑制される。したがって、各菌糸体の成長がｐＨの変化によって阻害されることがなく、効率よく培養することができる。
【００２９】
所定期間培養して十分に菌糸体が成長したら、培養を終了し、この培養物を原料として飲食用キノコ組成物を調製する。培養物の処理方法としては、各種の方法が採用できるが、例えば以下のような方法が好ましく採用される。
【００３０】
その１つの方法は、前記キノコ類の菌糸体の培養液から、アガリクス茸の菌糸体と、メシマコブ等の酸生成キノコ類の菌糸体とを回収し、この菌糸体を粉砕して乾燥する方法である。
【００３１】
菌糸体の回収は、例えばアガリクス茸の菌糸体を含む培養液と、メシマコブ等の酸生成キノコ類の菌糸体を含む培養液とをデカンテーションによって分別して回収し、それぞれの分別した培養液から遠心分離等の固液分離手段で菌糸体を回収することによって行うことができる。また、各菌糸体を分別する必要がない場合には、培養液全体をそのまま遠心分離等にかけることにより、全ての菌糸体を混合した状態で回収することができる。
【００３２】
こうして回収した菌糸体は、必要に応じて湿式粉砕処理や酵素処理等を行なった後、そのまま、あるいは乾燥して、飲食用キノコ組成物を得ることができる。この組成物は、必要に応じて他の原料と組合せることにより、錠剤状、顆粒状、粉末状、カプセル状、液状の健康食品を製造するのに利用することができる。なお、酵素としては、セルラーゼ、ヘミセルラーゼ、グルカナーゼ、キチナーゼ、プロテアーゼ、アミラーゼ等が使用できる。
【００３３】
また、上記において、菌糸体を回収した後の残液には、アガリクス茸の代謝産物や酵素、酸生成キノコ類の代謝産物や酵素、培地成分の分解物等が含まれているので、この残液もそのまま、あるいは濃縮し、更には凍結乾燥や噴霧乾燥等の手段によって粉末化して、健康食品素材として利用することができる。なお、酵素を失活させないためには、凍結乾燥がより好ましい。
【００３４】
更に、培養が終了した培養液を所定の温度で放置することにより、各キノコの菌糸体が生産した酵素によって菌糸体等を自己消化させたり、あるいは前記のような酵素を外部から添加して菌糸体等を分解させた後、遠心分離等により固形分を除去し、その上清（抽出液）を濃縮し、必要に応じて更に乾燥したものを、健康食品素材として利用することもできる。また、上記のように酵素を作用させて菌糸体等を分解させた培養物をそのまま全部乾燥させて、健康食品素材として利用することもできる。
【００３５】
以上のように、本発明によれば、アガリクス茸の菌糸体やその代謝産物だけでなく、酸生成キノコ類の菌糸体やその代謝産物を含み、それらの成分の相乗効果が期待できる健康食品素材等を簡単に調製することができる。
【００３６】
【実施例】
以下、実施例を挙げて本発明を具体的に説明する。
実施例１〜３、比較例１、２
下記表１の組成からなる液体培地４５０ｍＬを、培養液の底辺と高さの比が表１に示すようになるように調整した各種大きさの容器に入れ、各培地にアガリクス茸の菌糸体の前培養液及び／又はメシマコブの菌糸体の前培養液を１ｍＬ添加して、２５℃で３０日間、１００ｒｐｍにて回転振とう培養を行なった。具体的には、表２に示す条件でそれぞれ培養を行なった。なお、培養における各操作は全て無菌的に行なった。
【００３７】
【表１】
2004208641.tif 000002
【００３８】
【表２】
2004208641.tif 000003
【００３９】
培養期間中、３日毎に培養液のｐＨを測定した。その結果を図１に示す。図１から、アガリクス茸とメシマコブを一緒に培養した実施例１の培養液のｐＨは、培養開始時のｐＨ（ｐＨ６．０）から大きく外れることはなく、培養終了時までほぼ一定（ｐＨ５．６８〜６．９０）していることが分かる。一方、実施例１の混合培養に比較して、アガリクス茸のみを培養した比較例１では、培養するにしたがって培養液のｐＨが上昇しており、メシマコブのみを培養した比較例２においては、培養液のｐＨが低下していることが分かる。
【００４０】
そして、培養終了の２４時間前に、振とう（及びエアレーション）を止めて、静置して培養液の状態（アガリクス茸の菌糸体とメシマコブの菌糸体の分離状態）を観察した。また、培養液から菌糸体を回収して乾燥した後、それぞれ重さを測定し、培養液４５０ｍＬ当たりの菌糸体の収量を計算した。それらの結果を表３に示す。
【００４１】
【表３】
2004208641.tif 000004
【００４２】
表３から、アガリクス茸とメシマコブとを混合培養した実施例１〜３は、アガリクス茸のみの比較例１や、メシマコブだけの比較例２に比べて、合計の収量が増大することが分かる。
【００４３】
また、培養液の底辺と高さの比が１：０．７の実施例１及び１：０．５の実施例２においては、アガリクス茸とメシマコブとを分別回収することができたが、培養液の底辺と高さの比が１：０．３の実施例３では、両者を分別回収することが困難であった。
【００４４】
【発明の効果】
以上説明したように本発明によれば、アガリクス茸の菌糸体と、酸生成キノコ類の菌糸体とを混合して培養することにより、アガリクス茸の産生するアルカリ性の代謝産物を、酸生成キノコ類の産生する酸性の代謝産物によって中和できるので、培養期間中の培養液のｐＨの変化を抑制することができる。その結果、アガリクス茸の菌糸体だけでなく、酸生成キノコ類の菌糸体も効率よく培養することができる。
【００４５】
特に、前記酸生成キノコ類としてメシマコブを用いることにより、様々な生理活性効果を有するアガリクス茸の菌糸体と、優れた抗腫瘍効果を有するメシマコブの菌糸体を一つの培養容器で同時に効率よく培養することができる。
【００４６】
本発明によって得られる飲食用キノコ組成物は、アガリクス茸の菌糸体やその代謝産物だけでなく、メシマコブ等の有用なキノコ類の菌糸体やその代謝産物を含むので、それらの相乗効果が期待でき、健康食品素材として有用である。
【図面の簡単な説明】
【図１】アガリクス茸の菌糸体及び／又はメシマコブの菌糸体を培養した際の培養液のｐＨの変化を示す図表図である。
【図１】
2004208641.tif 000005