(57)【要約】【目的】慢性関節リウマチや若年性関節リウマチに対する新規な治療用薬剤を提供することを目的とする。【構成】主たる有効成分として高度に精製されたラクトフェリンを含み、必要に応じてゼラチン、塩、糖またはアミノ酸などの好適な安定化剤、賦形剤を添加する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ラクトフェリン（以下、ＬＦと称することがある）を主たる有効成分とする関節リウマチ（Ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ  ａｒｔｈｒｉｔｉｓ：以下、ＲＡと称することがある）及び多関節型の若年性関節リウマチ（Ｊｕｖｅｎｉｌｅ  Ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ  ａｒｔｈｒｉｔｉｓ：以下、ＪＲＡと称することがある）で例示されるリウマチ様関節炎の治療剤。
【請求項２】
含有されるＬＦがゲル電気泳動において単一バンドを示す程度に精製されていることを要件とする請求項１記載のリウマチ様関節炎の治療剤。
【請求項３】
生理学的に許容し得るｐＨ及び許容し得る強度のイオン強度を有する水溶液である請求項１または請求項２のいずれかに記載のリウマチ様関節炎の治療剤。
【請求項４】
生理学的に許容し得る張度を溶液に与えるに充分な量で、炭水化物、糖、糖アルコールおよびアミノ酸より成る群から選ばれる物質を含有する請求項３記載のリウマチ様関節炎の治療剤。
【請求項５】
１回投与当たり１μｇ〜１０ｍｇ、好ましくは１０μｇ〜１ｍｇのＬＦを含有する請求項１〜請求項４のいずれかに記載のリウマチ様関節炎の治療剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本願発明は、医療用医薬品の分野に関する。詳細には、関節リウマチ（Ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ  ａｒｔｈｒｉｔｉｓ：以下、ＲＡと称することがある）および若年性リウマチ（Ｊｕｖｅｎｉｌｅ  Ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ  ａｒｔｈｒｉｔｉｓ：以下、ＪＲＡと称することがある）等のリウマチ様関節炎に対する新規な治療用薬剤に関する。さらに詳細には、ラクトフェリン（以下、ＬＦと称することがある）を本態とする関節リウマチおよび若年性関節リウマチの治療用薬剤に関する。
【０００２】
【従来の技術並びに発明が解決しようとする課題】
関節リウマチや若年性関節リウマチは、通常は免疫学的寛容の状態にある自己の抗原に対して応答するＴ細胞が何らかの原因で自己の組織内で活性化され、自己の抗原と応答するようになり、これが慢性的な炎症反応となって組織に障害を与えるようになることに起因する。この場合、抗原は自己の関節を構成しているＩＩ型コラーゲンである。これらの疾患の患者数は毎年微増の傾向にあるにも拘わらず、有効な治療薬は見出されていない。
現在これらの疾患の治療には、メトトレキシレート、サラゾピリン、６−アミノサリチル酸、アザチオプリン、６−ＭＰ、シクロスポリンＡ等の免疫抑制剤、抗ＴＮＦ−α抗体投与が対症療法的に使用されている（例えば、非特許文献１、非特許文献２、非特許文献３、非特許文献４、非特許文献５参照）。しかしながら、これらの薬剤は長期投与した場合、重篤な副作用の原因となり、より安全で、有効な治療法の開発が望まれている。
【０００３】
【非特許文献１】
市川陽一ら：慢性関節リウマチにおけるメトトレキサート及びサラゾスルファピリジン長期投与の検討、リウマチ、３５巻、ｐ．６６３−６７０、（１９９２）
【非特許文献２】
柏崎禎夫：慢性関節リウマチにおけるオーラノフィンとメトトレキサートによる併用療法の検討、リウマチ、３６巻、ｐ．５２８−５４４（１９９６）
【非特許文献３】
古谷武文ら：慢性関節リウマチにおける低用量メトトレキキレート療法の有害事象、リウマチ、３６巻、ｐ．７４６−７５２、（１９９６）
【非特許文献４】
八倉隆保：免疫抑制療法・自己免疫疾患の治療、総合臨床、３０巻、ｐ．２３−５８、（１９８１）
【非特許文献５】
都外川新ら：慢性関節リウマチにおけるメトトレキサート療法の検討−有効性のより高い投与方法を求めて−、リウマチ、３７巻、ｐ．６８１−６８７（１９９７）
【０００４】
【課題を解決するための手段、発明の構成】
本願発明により提供されるリウマチ様関節炎に対する新規な治療用薬剤は、その主たる構成成分としてラクトフェリンを含有することに特徴がある。
ラクトフェリンは、哺乳動物の乳汁中に含まれる可溶性の鉄結合性の糖タンパク質で、分子量はウシで８６，０００、ヒトで８８，０００である。溶液中から鉄イオンを奪うことによって、抗菌活性を示す（今堀和友、山川民夫監修、生化学辞典第３版、ｐ．１４５７、東京化学同人、１９９８年）。したがって、治療薬よりもむしろ健康食品の中の成分として利用されてきた。しかしながら、ＬＦの持つ他の作用については明らかになっていなかった。このタンパク質が持つ本来の機能からＬＦが抗炎症的な作用を有することが想像される。例えばＬＦは、その抗菌作用から、細菌感染による炎症の惹起を抑制し激しい感染症から生体を防御するという役割を果たしている。
【０００５】
本願発明はＲＡやＪＲＡのような難治性の自己免疫疾患に対して、長期間投与し、生体に害を及ぼすことなく炎症の拡大を抑制し、最終的には治癒をもたらす薬剤に関するものである。本願発明でもたらされる治療用薬剤を投与した場合、免疫抑制剤を投与したときに観られる広範な免疫抑制、例えばＴ細胞のマイトゲンに対する増殖応答の低下、あるいは肝臓、腎臓などの機能障害は認められない。また乳汁や血液中の成分であることから、他のタンパク質性薬剤のように生物活性を阻害するようなことは少ない。
【０００６】
本願発明におけるＬＦは、ウシ、ヒトの乳汁あるいは遺伝子組換え技術によって発現された産物を含む原液からゲル電気泳動で単一バンドを示すくらいに公知の方法で高度に精製されたものであれば良く、特に調製法及び精製法を限定するものではない。
【０００７】
調製されたＬＦの活性を最大限に維持するために、本願発明の本態であるＬＦは新鮮であるか、４℃で保存する場合には保存後２ヶ月以内のものが好ましい。また凍結乾燥粉末として保存することもできる。本願発明のＬＦはゼラチン、塩、糖、糖アルコールまたはアミノ酸などの好適な安定化剤と共に凍結乾燥もしくは液体の状態で保存することができるし、さらには、ＬＦ溶液を凍結し保存することも可能である。本願発明では、かかる有効成分としてのＬＦとその誘導体と公知の賦形剤を組み合わせ、公知の方法で本願発明のＲＡ及びＪＲＡの治療用薬剤とすることができる。また本態となるＬＦもしくはその誘導体を市販の飲料水に溶解し経口的に摂取することも考えられ得る。薬剤中のＬＦの含有量については、１回の投与当たり０．１ｍｇ〜１０ｇ／Ｋｇ、好ましくは、１ｍｇ〜１ｇ／ＫｇのＬＦを含有する薬剤が好適である。
【０００８】
本願発明の治療用薬剤をＲＡあるいはＪＲＡの治療に使用する場合、以下のような機構が想定される。本願発明の本態であるＬＦは、培地から鉄イオンを奪うことによって細菌の増殖を抑制するという抗菌作用を示すことが知られているが、その他にもグラム陰性菌の細胞壁成分であるリポ多糖類（ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ、以下、ＬＰＳと略することがある）と結合し、その活性を阻害することで抗炎症作用を発揮する。このような抗炎症作用は、間接的に単球や樹状細胞からの炎症性サイトカインの産生を抑制する。したがって、ＬＦを全身または関節腔に投与することでＲＡ及びＪＲＡの体内で起こっている炎症を抑制し、最終的に疾患の拡大を抑制する、また炎症を抑制することで新たなる自己反応性Ｔ細胞の活性化を抑制し疾患の拡大を抑えるものと推測できる。
【０００９】
【発明の効果】
本願発明によりもたらされた知見により、他の生物活性を阻害することなく安全性の高い新規なリウマチ様関節炎の治療剤を提供することができる。
【００１０】
以下に、実施例に従って本願発明を詳説するが、本願発明はこれら実施例に何等限定されるものではない。
【００１１】
【実施例】
実施例１
（ＬＦによるコラーゲン誘導関節炎の発症抑制）
６〜１６週齢のＤＢＡ／１Ｊ雌のマウスに０．１５ＭのＮａＣｌを含む５０ｍＭトリス塩酸（ｐＨ８．０）に溶解したウシＩＩ型コラーゲン（コラーゲン技術研修会製、以下ＣＩＩと略すことがある）をフロイント完全アジュバント（Ｆｒｅｕｎｄ’ｓ  ｃｏｍｐｌｅｔｅ  ａｄｊｕｖａｎｔ、以下ＦＣＡと略することがある）でエマルジョン化し、１匹当たり２００μｇの投与量で背部に皮内投与した。その３週間後にＣＩＩ２００μｇを溶液状態のままで腹腔内に投与した（ブースター免疫）。以後１週から３ヶ月間飼育することでコラーゲン誘導関節炎（ｃｏｌｌａｇｅｎ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ａｒｔｈｒｉｔｉｓ、以下ＣＩＡと略することがある，  Ｔｒｅｎｔｈａｍ，Ｄ．Ｅ．  ：Ｃｏｌｌａｇｅｎ  ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  ａｓ  ａ  ｒｅｌｅｖａｎｔ  ｍｏｄｅｌ  ｆｏｒ  ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ  ａｒｔｈｒｉｔｉｓ，Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ．  Ｒｈｅｕｍ．  ２５：９１１−９１６，１９８２）が発症した。ＣＩＡの評価は、四肢の関節の関節炎を重症度に応じて１〜４点でスコア化することにより行なった。ＣＩＡの重症度は、各実験群にいて関節炎スコアの合計を個体数で割った値を用いた。
【００１２】
ＣＩＡは、ＣＩＩを腹腔内投与したあと１週間後に四肢の指の関節から発病し始め、１０〜１４日目にはほぼ１００％のマウスが発症した。最初の投与から約４週後にヒトＲＡ及びＪＲＡ様の症状を呈するようになり、その後の重症度は次第に上昇していった。このときマウスにＬＦを２ｍｇ／マウスの投与量で腹腔内投与しておいた実験群では、重症度は低く（０．８〜１．１）推移した。これに比べてＰＢＳ投与群（Ｎｏｎｅ）ではブースター後１０日目からの重症度が０．８５〜３．８であったので、ＬＦの腹腔内投与によりＣＩＡの重症度が抑制されていることが示された（図１参照）。
【図面の簡単な説明】
【図１】リウマチ様関節炎発症モデルでのラクトフェリンを本態とする薬剤の治療及び発症軽減効果を示す図である。
【図１】
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