(57)【要約】【目的】慢性関節リウマチや若年性関節リウマチに対する新規な治療用薬剤を提供することを目的とする。【構成】主たる有効成分として高度に精製されたアンチトロンビンＩＩＩを含み、必要に応じてゼラチン、塩、糖またはアミノ酸などの好適な安定化剤、賦形剤を添加する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
アンチトロンビンＩＩＩ（以下、ＡＴＩＩＩと称することがある）を主たる有効成分とする関節リウマチ（Ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ  ａｒｔｈｒｉｔｉｓ：以下、ＲＡと称することがある）及び多関節型の若年性関節リウマチ（Ｊｕｖｅｎｉｌｅ  Ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ  ａｒｔｈｒｉｔｉｓ：以下、ＪＲＡと称することがある）で例示されるリウマチ様関節炎の治療剤。
【請求項２】
含有されるＡＴＩＩＩがゲル電気泳動において単一バンドを示す程度に精製されていることを要件とする請求項１記載のリウマチ様関節炎の治療剤。
【請求項３】
生理学的に許容し得るｐＨ及び許容し得る強度のイオン強度を有する水溶液である請求項１または請求項２のいずれかに記載のリウマチ様関節炎の治療剤。
【請求項４】
生理学的に許容し得る張度を溶液に与えるに充分な量で、炭水化物、糖、糖アルコールおよびアミノ酸より成る群から選ばれる物質を含有する請求項３記載のリウマチ様関節炎の治療剤。
【請求項５】
１回投与当たり５〜５００，０００単位のＡＴＩＩＩを含有する請求項１〜請求項４のいずれかに記載のリウマチ様関節炎の治療剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本願発明は、医療用医薬品の分野に関する。詳細には、関節リウマチ（Ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ  ａｒｔｈｒｉｔｉｓ：以下、ＲＡと称することがある）および若年性リウマチ（Ｊｕｖｅｎｉｌｅ  Ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ  ａｒｔｈｒｉｔｉｓ：以下、ＪＲＡと称することがある）等のリウマチ様関節炎に対する新規な治療用薬剤に関する。さらに詳細には、アンチトロンビンＩＩＩ（以下、ＡＴＩＩＩと称することがある）を本態とする関節リウマチおよび若年性関節リウマチの治療用薬剤に関する。
【０００２】
【従来の技術並びに発明が解決しようとする課題】
関節リウマチや若年性関節リウマチは、通常は免疫学的寛容の状態にある自己の抗原に対して応答するＴ細胞が何らかの原因で自己の組織内で活性化され、自己の抗原と応答するようになり、これが慢性的な炎症反応となって組織に障害を与えるようになることに起因する。この場合、抗原は自己の関節を構成しているＩＩ型コラーゲンである。これらの疾患の患者数は毎年微増の傾向にあるにも拘わらず、有効な治療薬は見出されていない。
現在これらの疾患の治療には、メトトレキシレート、サラゾピリン、６−アミノサリチル酸、アザチオプリン、６−ＭＰ、シクロスポリンＡ等の免疫抑制剤、抗ＴＮＦ−α抗体投与が対症療法的に使用されている（例えば、非特許文献１、非特許文献２、非特許文献３、非特許文献４、非特許文献５参照）。しかしながら、これらの薬剤は長期投与した場合、重篤な副作用の原因となり、より安全で、有効な治療法の開発が望まれている。
【０００３】
【非特許文献１】
市川陽一ら：慢性関節リウマチにおけるメトトレキサート及びサラゾスルファピリジン長期投与の検討、リウマチ、３５巻、ｐ．６６３−６７０、（１９９２）
【非特許文献２】
柏崎禎夫：慢性関節リウマチにおけるオーラノフィンとメトトレキサートによる併用療法の検討、リウマチ、３６巻、ｐ．５２８−５４４（１９９６）
【非特許文献３】
古谷武文ら：慢性関節リウマチにおける低用量メトトレキキレート療法の有害事象、リウマチ、３６巻、ｐ．７４６−７５２、（１９９６）
【非特許文献４】
八倉隆保：免疫抑制療法・自己免疫疾患の治療、総合臨床、３０巻、ｐ．２３−５８、（１９８１）
【非特許文献５】
都外川新ら：慢性関節リウマチにおけるメトトレキサート療法の検討−有効性のより高い投与方法を求めて−、リウマチ、３７巻、ｐ．６８１−６８７（１９９７）
【０００４】
【課題を解決するための手段、発明の構成】
本願発明により提供されるリウマチ様関節炎に対する新規な治療用薬剤は、その主たる構成成分としてアンチトロンビンＩＩＩを含有することに特徴がある。
ＡＴＩＩＩは、肝臓で合成される分子量５８，０００の糖タンパク質で、トロンビンだけでなく血液凝固系に関わる多くのセリンプロテアーゼを阻害する（今堀和友、山川民夫監修、生化学辞典第３版、ｐ．１１０、（１９９８）、東京化学同人）。したがってＡＴＩＩＩは抗凝固因子の一つとして血管内での不要な血液凝固を防ぐ役割を果たしていると考えられる。ＡＴＩＩＩ  欠損症では血管内凝固が起こり易くなることから補充療法的な治療薬としてのみ利用されてきた。
【０００５】
しかしながら、ＡＴＩＩＩ  の持つ他の作用については明らかになっていなかった。これらのタンパク質が持つ本来の機能からＡＴＩＩＩ  が抗炎症的な作用を有することが想像される。例えば、ＡＴＩＩＩ  はセリンプロテアーゼを阻害することから、血液凝固のみならず、セリンプロテアーゼによる切断によって起こる炎症のカスケードを抑制する可能性が考えられている。
【０００６】
本願発明はＲＡやＪＲＡのような難治性の自己免疫疾患に対して、長期間投与し、生体に害を及ぼすことなく炎症の拡大を抑制し、最終的には治癒をもたらす薬剤に関するものである。本願発明でもたらされる治療用薬剤を投与した場合、免疫抑制剤を投与したときに観られる広範な免疫抑制、例えばＴ細胞のマイトゲンに対する増殖応答の低下、あるいは肝臓、腎臓などの機能障害は認められない。また乳汁や血液中の成分であることから、他のタンパク質性薬剤のように生物活性を阻害するようなことは少ない。
【０００７】
本願発明におけるＡＴＩＩＩは、ヒトの血漿、あるいは遺伝子組換え技術によって発現された産物を含む原液から、ゲル電気泳動で単一バンドを示すくらいに公知の方法で高度に精製されたものであれば良く、特に精製法を限定するものではない。
【０００８】
調製されたＡＴＩＩＩの活性を最大限に維持するために、本願発明のＡＴＩＩＩは新鮮であるか、４℃で保存する場合には保存後１２ヶ月以内のものが好ましい。本願発明のＡＴＩＩＩはゼラチン、塩、糖、糖アルコールまたはアミノ酸などの好適な安定化剤と共に凍結乾燥もしくは液体の状態で保存することができるし、さらには、ＡＴＩＩＩ溶液を凍結し保存することも可能である。本願発明では、かかる有効成分としてのＡＴＩＩＩとその誘導体と公知の賦形剤を組合せ、公知の方法で本願発明のＲＡ及びＪＲＡの治療剤とすることができる。薬剤中のＡＴＩＩＩの含有量については、ＡＴＩＩＩ欠乏症や妊娠中毒症の注射用治療薬として販売されている薬剤と同じ濃度が好適であるが、本態を５単位〜５０，０００単位／ｍｌの濃度で含有する薬剤であればＲＡ及びＪＲＡの治療用薬剤として使用可能であり、投与量は１回投与当たり５〜５００，０００単位のＡＴＩＩＩが含有されることを標準とし、症状等に応じ適宜増減され得る。
【０００９】
本願発明の治療用薬剤をＲＡあるいはＪＲＡの治療に使用する場合、以下のような機構が想定される。
ＡＴＩＩＩは、セリンプロテアーゼ阻害剤であるので、セリンプロテアーゼによって切断されて活性型となるようなタンパク質には全て作用すると考えられる。ＲＡでは、オステオポンチンというサイトカインが関節での炎症亢進に関与していることが知られているが、オステオポンチン自体はその前駆体からセリンプロテアーゼの一つであるトロンビンで切断されることにより形成される（野田政樹ら、「オステオポンチンと関節炎」  臨床免疫３８（６）：ｐ６１７−６２０、２００２年）。したがって、関節腔にＡＴＩＩＩが存在した場合、トロンビンによる切断が阻害され、オステオポンチン形成されずに、炎症の亢進が起こらない可能性があり、それによって疾患の進行が抑制されるものと考えられる。またＡＴＩＩＩを他の薬剤と同時に投与した場合、その炎症抑制効果が増強され、疾患抑制効果が相乗的あるいは相加的に増加する可能性も考えられる。
【００１０】
【発明の効果】
本願発明によりもたらされた知見により、他の生物活性を阻害することなく安全性の高い新規なリウマチ様関節炎の治療剤を提供することができる。
【００１１】
以下に、実施例に従って本願発明を詳説するが、本願発明はこれら実施例に何等限定されるものではない。
【００１２】
【実施例】
実施例１
（ＡＴＩＩＩによるコラーゲン誘導関節炎の発症抑制）
６〜１６週齢のＤＢＡ／１Ｊ雌のマウスに０．１５ＭのＮａＣｌを含む５０ｍＭトリス塩酸（ｐＨ８．０）に溶解したウシＩＩ型コラーゲン（コラーゲン技術研修会製、以下ＣＩＩと略すことがある）をフロイント完全アジュバント（Ｆｒｅｕｎｄ’ｓ  ｃｏｍｐｌｅｔｅ  ａｄｊｕｖａｎｔ、以下ＦＣＡと略することがある）でエマルジョン化し、１匹当たり２００μｇの投与量で背部に皮内投与した。その３週間後にＣＩＩ２００μｇを溶液状態のままで腹腔内に投与した（ブースター免疫）。以後１週から３ヶ月間飼育することでコラーゲン誘導関節炎（ｃｏｌｌａｇｅｎ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ａｒｔｈｒｉｔｉｓ、以下ＣＩＡと略することがある，  Ｔｒｅｎｔｈａｍ，Ｄ．Ｅ．  ：Ｃｏｌｌａｇｅｎ  ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  ａｓ  ａ  ｒｅｌｅｖａｎｔ  ｍｏｄｅｌ  ｆｏｒ  ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ  ａｒｔｈｒｉｔｉｓ，Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ．  Ｒｈｅｕｍ．  ２５：９１１−９１６，１９８２）が発症した。ＣＩＡの評価は、四肢の関節の関節炎を重症度に応じて１〜４点でスコア化することにより行なった。ＣＩＡの重症度は、各実験群にいて関節炎宇コアの合計を個体数で割った値を用いた。
【００１３】
ＣＩＡは、ＣＩＩを腹腔内投与したあと１週間後に四肢の指の関節から発病し始め、１０〜１４日目にはほぼ１００％のマウスが発症した。最初の投与から約４週後にヒトＲＡ及びＪＲＡ様の症状を呈するようになり、その後の重症度は次第に上昇していった。このときＡＴＩＩＩを５０単位／マウスで投与していた群では重症度は低く（０．８〜１．０）推移した。これに比べてＰＢＳ投与群（Ｎｏｎｅ）ではブースター後１０日目からの重症度が０．８５〜３．８）であったので、ＡＴＩＩＩの腹腔内投与によりＣＩＡの重症度が抑制されていることが示された。（図１参照）。
【図面の簡単な説明】
【図１】リウマチ様関節炎発症モデルでのＡＴＩＩＩを本態とする薬剤の治療及び発症軽減効果を示す図である。
【図１】
2004231617.tif 000002