(57)【要約】【課題】真皮層線維芽細胞における有効なコラーゲン産生促進剤及び有効なコラーゲン産生促進剤を配合する皮膚外用剤、美容食品を提供する。【解決手段】ホウライシダ（Ａｄｉａｎｔｕｍ  ｃａｐｉｌｌｕｓ−ｖｅｎｅｒｉｓ  Ｌ．）、カミメボウキ（Ｏｃｉｍｕｍ  ｓａｎｃｔｕｍ  Ｌ．）、ムユウジュ（Ｓａｒａｃａ  ａｓｏｃａ  Ｄｅ  Ｗｉｌｄｅ）よりなる群の１種又は２種以上の溶媒抽出物に優れたコラーゲン産生促進作用を有することを見出した。【選択図】    なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ホウライシダ（Ａｄｉａｎｔｕｍ  ｃａｐｉｌｌｕｓ−ｖｅｎｅｒｉｓ  Ｌ．）、カミメボウキ（Ｏｃｉｍｕｍ  ｓａｎｃｔｕｍ  Ｌ．）、ムユウジュ（Ｓａｒａｃａ  ａｓｏｃａ  Ｄｅ  Ｗｉｌｄｅ）よりなる群の１種又は２種以上の溶媒抽出物を有効成分とするコラーゲン産生促進剤。
【請求項２】
請求項１のコラーゲン産生促進剤を含有することを特徴とする皮膚外用剤。
【請求項３】
請求項１のコラーゲン産生促進剤を含有することを特徴とする美容食品。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、特定の植物抽出物による真皮層の線維芽細胞によるコラーゲン産生を活性化させる作用を有するコラーゲン産生促進剤並びにコラーゲン産生促進作用を有する皮膚外用剤及び美容食品に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
老化皮膚では、線維芽細胞の活性低下に伴い、真皮マトリックス成分であるコラーゲン線維、エラスチン線維、酸性ムコ多糖の質的、量的な変化が起こる。コラーゲン線維は異常な老化架橋が形成されるため硬直化し、本来の弾力性に富む張りが失われる。エラスチン線維は変性崩壊し、変わってアミノ酸組成の異なるエラスチンが代償性に生産されて機能障害が進行する。その結果皮膚は柔軟性を失って、シワやたるみが発生する。これら生理的皮膚老化を予防する目的で、コラーゲン産生促進剤が開発されている（特開平１１−３３５２９３、特開２０００−１９１４９８、特開２０００−３０９５２１、特開２００１−３１６２４０）特開２００２−０８０３４０、特開２００２−０８７９７４）。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】
しかしながら、これまでのコラーゲン産生促進剤の効果は必ずしも十分でなく製品への配合では、有効な結果を得るに至っていない。本発明は、真皮層線維芽細胞における有効なコラーゲン産生促進剤及び有効なコラーゲン産生促進剤を配合する皮膚概要剤、美容食品を提供する。
【０００４】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、以上のような現状に鑑み、広く種々の物質についてコラーゲン産生促進作用を調べた結果、ホウライシダ（Ａｄｉａｎｔｕｍ  ｃａｐｉｌｌｕｓ−ｖｅｎｅｒｉｓ  Ｌ．）、カミメボウキ（Ｏｃｉｍｕｍ  ｓａｎｃｔｕｍ  Ｌ．）、ムユウジュ（Ｓａｒａｃａ  ａｓｏｃａ  Ｄｅ  Ｗｉｌｄｅ）よりなる群の１種又は２種以上の溶媒抽出物に優れたコラーゲン産生促進作用を有することを見出し、本発明を完成するに至った。ホウライシダ（Ａｄｉａｎｔｕｍ  ｃａｐｉｌｌｕｓ−ｖｅｎｅｒｉｓ  Ｌ．）抽出物に関しては、コウジ酸及び／又はその誘導体との組み合わせ配合の美白用皮膚外用剤（特開平７−１７８４５）、カミメボウキ（Ｏｃｉｍｕｍ  ｓａｎｃｔｕｍ  Ｌ．）に関しては、メラニン生成抑制剤およびその用途（特開平１１−１１６４９２）、抗菌剤（特開２０００−１３６１４１、特開２０００−２２９８０４）、血圧降下剤（特開２０００−１６９３８１）、抗酸化剤（特開平７−１３８１２６）、ヒアルロニダーゼ阻害剤（特開平７−１３８１８０）が検討されている。ホウライシダ（Ａｄｉａｎｔｕｍ  ｃａｐｉｌｌｕｓ−ｖｅｎｅｒｉｓ  Ｌ．）抽出物、カミメボウキ（Ｏｃｉｍｕｍ  ｓａｎｃｔｕｍ  Ｌ．）抽出物、ムユウジュ（Ｓａｒａｃａ  ａｓｏｃａ  Ｄｅ  Ｗｉｌｄｅ）抽出物のコラーゲン産生促進作用に関する報告はこれまでになく、コラーゲン産生促進剤としての皮膚外用剤、美容食品への応用も全く知られていない。本発明者らは上記の知見に基づいて本発明を完成するに至った。
【０００５】
本発明は、ホウライシダ（Ａｄｉａｎｔｕｍ  ｃａｐｉｌｌｕｓ−ｖｅｎｅｒｉｓ  Ｌ．）、カミメボウキ（Ｏｃｉｍｕｍ  ｓａｎｃｔｕｍ  Ｌ．）、ムユウジュ（Ｓａｒａｃａ  ａｓｏｃａ  Ｄｅ  Ｗｉｌｄｅ）よりなる群の１種又は２種以上の溶媒抽出物を有効成分とするコラーゲン産生促進剤である。本発明のコラーゲン産生促進剤は、皮膚外用剤、美容食品に配合し抗老化剤であることを好適とする。
【０００６】
以下、本発明の構成について詳述する。本発明で使用されるホウライシダとは、シダ植物、ホウライシダ科クジャクシダ属の植物で、学名Ａｄｉａｎｔｕｍ  ｃａｐｉｌｌｕｓ−ｖｅｎｅｒｉｓ  Ｌ．である。熱帯から亜熱帯にかけて広く分布している。民間では、頭髪の成長促進や消炎利尿、去痰剤として利用されてきた（世界有用植物辞典：平凡社）。本発明での使用部位は、葉である。
【０００７】
カミメボウキとは、シソ科メボウキ属の植物で、学名Ｏｃｉｍｕｍ  ｓａｎｃｔｕｍ  Ｌ．（＝Ｏｃｉｍｕｍ  ｔｅｎｕｉｆｌｏｒｕｍ  Ｌ．）である。インドや東南アジアで栽培され、料理の香付けなどにも使用される。本発明での使用部位は、地上部である。
【０００８】
ムユウジュとは、マメ科ムユウジュ属の植物で、学名Ｓａｒａｃａ  ａｓｏｃａ  Ｄｅ  Ｗｉｌｄｅである。インド、スリランカに野生する。アショーカノキの別名があり、ヒンドゥー教の聖木とされる。民間療法では、消化不良、血液の病気、胆汁異常、潰瘍などに用いられてきた。本発明において使用する部位は、樹皮である。
【０００９】
本発明で用いられる抽出物の調製方法は特に限定されないが、生又は乾燥した生薬を種々の溶媒を用い、低温から加温下において抽出する方法があげられる。
【００１０】
具体的に抽出溶媒としては、水、メタノール、エタノール等の低級一価アルコール、グリセリン、プロピレングリコール、ジプロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール等の液状多価アルコール、酢酸エチル等の低級アルキルエステルが例示され、これらの一種又は二種以上の混合溶媒を用いることができる。
【００１１】
本発明で使用する抽出物は、そのまま用いてもよいが、必要に応じてろ過、濃縮してもよい。また、抽出物をカラムクロマト法、向流分配法等により、分画、精製して用いることもできる。
【００１２】
更に、上記のものを減圧乾燥又は凍結乾燥した後、粉末又はペースト状に調製し、適宜製剤化して用いることもできる。
【００１３】
（抽出物製造例１）
ホウライシダの葉２０ｇに５０ｖｏｌ％エタノール溶液３００ｇを加え、５０℃にて８時間抽出し、冷後、ろ過して抽出物を製する。製品の蒸発残留物は、２．１３％であった。
【００１４】
（抽出物製造例２）
カミメボウキの地上部２０ｇに５０ｖｏｌ％エタノール３００ｇを加え、室温で５日間抽出する。これをろ過し、濃縮乾固する。５０重量％（以下、単に「％」とする）１，３−ブチレングリコール溶液３００ｇに加温溶解し、抽出物を製する。製品の蒸発残留物は、２．０６％であった。
【００１５】
（抽出物製造例３）
ムユウジュの樹皮２００ｇに５０ｖｏｌ％エタノール溶液３０００ｇを加え、５０℃にて８時間抽出する。冷後ろ過した後、濃縮し、合成吸着体ダイヤイオンＨＰ−２０を充填したカラムに通液する。水洗後、５０ｖｏｌ％エタノール溶液にて溶出し、溶出液を減圧乾固後、５０％１，３−ブチレングリコール溶液５００ｇに溶解し、抽出物を製する。製品の蒸発残留物は、２．１７％であった。
【００１６】
（抽出製造例４）
ホウライシダの葉、カミメボウキの地上部、ムユウジュの樹皮各２００ｇにそれぞれ精製水３０００ｇを加え、７０℃にて８時間攪拌抽出を行い、冷後ろ過した後、濃縮、凍結乾燥し、ホウライシダエキス末５８．３ｇ、カミメボウキエキス末５７．６ｇ、ムユウジュエキス末３８．４ｇを製した。
【００１７】
（抽出物製造例５）
ホウライシダの葉、カミメボウキの地上部、ムユウジュの樹皮各２００ｇにそれぞれ５０ｖｏｌ％エタノール溶液３０００ｇを加え、５０℃にて８時間攪拌抽出を行い、冷後ろ過した後、濃縮、凍結乾燥し、ホウライシダエキス末４０．２ｇ、カミメボウキエキス末３８．４ｇ、ムユウジュエキス末３２．７ｇを製した。
【００１８】
本発明の抽出物の配合量は、配合する製品の種類、性状、品質、期待する効果の程度により異なるが、乾燥固形物に換算して好ましくは、０．０００１〜１０．０％、特に０．００１〜５．０％が効果の面から好ましい。
【００１９】
本発明のコラーゲン産生促進剤を皮膚外用剤に用いる場合、上記成分に加えて、さらに必要により、本発明の効果を損なわない範囲内で、通常化粧品、医薬部外品、医薬品等の皮膚外用剤に用いられる成分、例えば界面活性剤、油分、保湿剤、増粘剤、酸化防止剤、紫外線防御剤、アルコール類、粉末成分、色剤、香料、水性成分、水、各種皮膚栄養剤等を必要に応じて適宜配合することができる。
【００２０】
さらに、金属イオン封鎖剤、防腐抗菌剤、細胞賦活剤、皮脂分泌調整剤、消炎剤、収斂剤、美白剤、活性酸素抑制剤、抗アレルギー剤、老化防止剤等、さらに生理活性作用を有する植物抽出物及びこれらの抽出分画、精製物等も適宜配合することができる。
【００２１】
本発明のコラーゲン産生促進剤及びこれを配合してなる皮膚外用剤は、一般皮膚化粧料に限定されるものではなく、医薬品、医薬部外品、薬用化粧料等を包含するものである。本発明の皮膚外用剤の剤型は、可溶化系、乳化系、粉末分散系等何れでもよく、用途も、化粧水、乳液、クリーム、パック等の基礎化粧料、ファンデーション等のメークアップ化粧料、シャンプー、リンス、石けん、ボディーシャンプーなどのトイレタリー製品、浴用剤等を問わない。
【００２２】
また、本発明のコラーゲン産生促進剤を美容食品に用いる場合には、活性を妨げない範囲で任意の食品に配合することができる。ここで、美容食品とは、皮膚の老化防止、改善を図ることを目的とする任意の飲食物をいう。任意の飲食物には、穀物加工食品、油脂加工食品、食肉加工食品、水産加工食品、乳製品、果実加工食品、野菜加工食品、各種飲料、調味料等の他、本発明のコラーゲン産生促進剤を主成分とする健康補助食品等があるが、限定されるものではない。
【００２３】
本発明の美容食品における、本発明のコラーゲン産生促進剤の配合量は、形態により、それぞれ異なるが、当該美容食品の一般的な摂取量を考慮して、成人１日当たり１〜５００ｍｇになるように設定するのが好ましい。
【００２４】
次に実施例をあげて説明するが、本発明は、これらの実施例に限定されるものではない。
【００２５】
（試験例１）コラーゲン産生促進作用の評価
試験試料は、製造例４及び製造例５にて調製したものを使用した。ヒト皮膚由来線維芽細胞の濃度を１０％ウシ胎児血清（以下ＦＢＳと略記）を含むＭＥＭ培地にて調製し、９６穴プレートに２×１０４個／穴ずつ播種し、３７℃、５％炭酸ガス下、２４時間培養した。２４時間培養後、ＰＢＳ（−）にて２回洗浄後、試験試料を添加した無血清培地（５ｇ／ＬのＢＳＡ、０．０１ｍｇ／ＬのＥＧＦ、１ｍｇ／Ｌのインシュリン及び１ｍｇ／Ｌのハイドロコーチゾンを添加したＭＥＭ培地）にて、４８時間同条件にて培養した。培養後、１００μＬの培養上清をＥＬＩＳＡ用プレートに添加し、１８時間室温中に保管した。０．０５％Ｔｗｅｅｎ−２０を含むＰＢＳ（ＰＢＳ−Ｔ）で洗浄後、１％スキムミルク含有ＰＢＳ−Ｔを加え、室温にて２時間ブロッキングした。抗ヒトＩ型コラーゲン抗体、ペルオキシダーゼ標準抗ラットＩｇＧ抗体で処理し、ペルオキシダーゼ用発色キットを用いて発色させた。４５０ｎｍの吸光度から培養上清中に含まれるＩ型コラーゲン量を求めた。コントロールのＩ型コラーゲン量を１００％とし、単位蛋白当たりにて算出した。蛋白定量は、Ｌｏｗｒｙ法を用いた。結果を表１に記す。
【００２６】
【表１】
2004182710.tif 000002
【００２７】
（試験例２）皮膚の抗老化試験
皮膚の抗老化効果を調べるために、下記実施例１、比較例１に示す組成の化粧料を用いて、以下の方法により、しわに対する改善効果と、肌のはり、たるみに対する改善効果について評価試験を行った。
【００２８】
無作為に抽出した年齢４０〜５０歳の健常な女性３０名を被験者とし、実施例及び比較例化粧料を顔面皮膚に連日２ケ月使用した後、しわに対する改善効果と肌のはり、たるみに対する改善効果について調べた。
【００２９】
（実施例１）クリーム
下記成分（１）〜（１０）、別に下記成分（１１）〜（１８）を７５℃に加温溶解しそれぞれＡ液及びＢ液とした。Ａ液にＢ液を加えて乳化し、攪拌しながら５０℃まで冷却し、成分（１９）を加え、クリームを調製した。
2004182710.tif 000003
【００３０】
（比較例１）
クリーム実施例１において、ホウライシダ抽出物、カミメボウキ抽出物、ムユウジュ抽出物を精製水５．０％に代えた以外は、実施例１と同様にしてクリームを調製した。
【００３１】
「しわに対する改善効果」
目尻のしわの状態を視覚評価した。
（判定基準）
有効    ：しわがかなり目立たなくなった
やや有効：しわが以前より目立たなくなった
効果なし：変化なし
「肌のはり、たるみに対する改善効果」
肌のはり、たるみを視覚評価した。
（判定基準）
有効    ：使用前に比べ肌にはりがあり、たるみがない
やや有効：使用前に比べ肌にややはりがあり、たるみが減少した
効果なし：変化なし
【００３２】
【表２】
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【００３３】
表２から明らかなように、実施例１のクリームを用いた場合には、比較例１のクリームを用いた場合よりも、目尻のしわ及び肌のはり、たるみの点で改善されていることが認められた。これにより、本発明抽出物を配合した化粧料には、抗老化作用のあることが確認された。
【００３４】
（試験例３）皮膚粘弾性試験
皮膚の粘弾性に対する美容食品の効果調べるために、表３に示す実施例の組成の美容食品を用いて、以下の方法により、皮膚粘弾性試験を行った。
【００３５】
無作為に抽出した年齢３０〜４０歳の健常な女性３０名（無作為に５名ずつ６グループした）を被験者とし、実施例の美容食品を連日朝夕各１錠３ケ月服用した。皮膚粘弾性測定器（ＣＵＴＯＭＥＴＥＲ  ＳＥＭ４７４：日本ユーロテック製）にて、被験者の目の下の皮膚粘弾性を測定し、服用を開始する前の値を比較した。被験者グループの平均を測定数値とした。常法により塑性度と弾力度を求めた。結果を表３に記す。
【００３６】
【表３】
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【００３７】
以下にさらに、本発明の処方例を示す。
【００３８】
（実施例２）化粧水
下記成分（５）〜（８）を混合溶解させＡ液とし、これとは別に下記成分（１）〜（４）及び（９）を混合溶解させてＢ液とし、Ａ液とＢ液を均等に混合し、化粧水を調整した。
2004182710.tif 000006
【００３９】
（実施例３）乳液
下記成分（１）〜（１０）、別に（１１）〜（１４）及び（１６）を７５℃で加熱溶解させてそれぞれＡ液及びＢ液とし、Ａ液にＢ液を加えて乳化し、攪拌しながら５０℃まで冷却し、成分（１５）を加え、乳液を調製した。
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【００４０】
（実施例４）石けん
石けん製造の定法により下記成分を混合し製した。
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【００４１】
（実施例５）クレンジングジェル
下記成分（１）〜（３）、別に（４）〜（６）及び（８）を７０℃に加熱溶解させてそれぞれＡ液及びＢ液とし、Ａ液にＢ液を加えて均一になるまで攪拌した。攪拌しながら５０℃まで冷却し、成分（７）を加えてクレンジングジェルを製した。
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【００４２】
（実施例６）パック剤
Ａ相、Ｂ相、Ｃ相をそれぞれ均一に溶解し、Ａ相にＢ相を加えて可溶化し、次いでＣ相を加えて均一に溶解し、製した。
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【００４３】
（実施例７）乳化型ファンデーション
下記成分（１）〜（６）を充分に混合粉砕した粉末部をＡとし、（７）（８）をＢ液、（９）〜（１２）及び（１４）をＣ液とする。Ｃ液を加熱撹拌後、Ａを添加しホモミキサー処理し、さらに過熱混合したＢ液を加えてホモミキサー処理した。撹拌しながら５０℃まで冷却し、（１３）を加え、さらに室温まで冷却して製した。
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【００４４】
（実施例８）固形ファンデーション
下記成分（１）〜（７）をブレンダーで均一に混合し、これに（８）〜（１４）を加え、よく混練して製した。
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【００４５】
（実施例９）ヘアートニック
下記成分（５）に（１）〜（４）及び（７）を加え、攪拌溶解した後、（６）及び（８）を加えてさらに攪拌して製した。
2004182710.tif 000013
【００４６】
（実施例１０）健康補助食品
下記の混合物を打錠して、錠剤状の健康補助食品を製した。
（１）コラーゲン                                        ２０．０％
（２）ホウライシダ抽出物（製造例４）                    ３０．０％
（３）ムユウジュ抽出物（製造例４）                      ２０．０％
（４）ムコ多糖蛋白                                      １０．０％
（５）粉糖                                              ２０．０％
【００４７】
（実施例１１）健康補助食品
下記の混合物を打錠して、錠剤状の健康補助食品を製した。
（１）セラミド                                            ２．０％
（２）シルクフィブロイン                                  ８．０％
（３）ムユウジュ抽出物（製造例４）                      ２０．０％
（４）カミメボウキ抽出物（製造例４）                    １０．０％
（５）Ｎ−アセチルグルコサミン                          ２０．０％
（６）デキストリン                                      ３０．０％
（７）グリセリン脂肪酸エステル                          １０．０％
【００４８】
【発明の効果】
以上に説明したように、本発明のホウライシダ（Ａｄｉａｎｔｕｍ  ｃａｐｉｌｌｕｓ−ｖｅｎｅｒｉｓ  Ｌ．）、カミメボウキ（Ｏｃｉｍｕｍ  ｓａｎｃｔｕｍ  Ｌ．）、ムユウジュ（Ｓａｒａｃａ  ａｓｏｃａ  Ｄｅ  Ｗｉｌｄｅ）よりなる群の１種又は２種以上の溶媒抽出物は、優れたコラーゲン産生促進作用を有し、これらを配合した皮膚外用剤、美容食品は、皮膚の老化防止に有効である。