(57)【要約】【課題】心筋血流製剤の骨格を利用することにより、心臓に集積しやすく、ＭＩＢＧやグアネチジンと同様の挙動を示す化合物を提供する。【解決手段】ＭＸ（Ｙ）３Ｚで示される放射性遷移金属錯体。Ｍは放射性遷移金属。Ｘは（Ｒ１Ｏ）（Ｒ２Ｏ）Ｂ−Ｒ３−Ｒ４−ＮＨＣ（＝ＮＨ）−ＮＨ２（式中、Ｒ１，Ｒ２は水素、直鎖アルキル、分枝アルキルもしくはアリール、またはＲ１とＲ２が相互に結合して二価の炭化水素基を形成し、Ｒ３は二価の炭化水素基、Ｒ４は−（ＣＨ２）ｎ−、−（ＣＨ２）ｎ−ＣＨ（ＯＨ）−（ＣＨ２）−または−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯ−（ＣＨ２）ｍ−（ｎ，ｍ＝０〜３））。ＹはＨＯ−Ｎ＝ＣＲ５−ＣＲ６＝Ｎ−ＯＨ（式中、Ｒ５，Ｒ６は水素、アルキルまたはアリール、またはＲ５とＲ６が相互に結合してアルキレンを形成する）。Ｚはアニオン。【選択図】　　　なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（１）で示される放射性遷移金属錯体：
ＭＸ（Ｙ）３Ｚ　　−−−（１）
式（１）中、
Ｍは、テクネチウム−９９ｍ、レニウム−１８６またはレニウム−１８８、
Ｘは、下記式（２）の化合物：
（Ｒ１Ｏ）（Ｒ２Ｏ）Ｂ−Ｒ３−Ｒ４−ＮＨＣ（＝ＮＨ）−ＮＨ２　　−−−（２）
（式（２）中、
Ｒ１およびＲ２は、それぞれ独立に水素、直鎖アルキル、分枝アルキルもしくはアリールであるか、またはＲ１とＲ２が相互に結合して二価の炭化水素基を形成し、
Ｒ３は、二価の炭化水素基であり、
Ｒ４は、−（ＣＨ２）ｎ−、−（ＣＨ２）ｎ−ＣＨ（ＯＨ）−（ＣＨ２）−または−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯ−（ＣＨ２）ｍ−であり、このときｎおよびｍは独立に０から３の整数である。）、
Ｙは、下記式（３）のジオキシム化合物：
ＨＯ−Ｎ＝ＣＲ５−ＣＲ６＝Ｎ−ＯＨ　　−−−（３）
（式（３）中、
Ｒ５およびＲ６は、それぞれ独立して水素、アルキルもしくはアリールであるか、またはＲ５とＲ６が相互に結合してアルキレンを形成する。）、
Ｚは、アニオンである。
【請求項２】
下記式（１）で示される請求項１に記載の放射性遷移金属錯体：
ＭＸ（Ｙ）３Ｚ　　−−−（１）
式（１）中、
Ｍは、テクネチウム−９９ｍ、レニウム−１８６またはレニウム−１８８、
Ｘは、下記式（２）の化合物：
（Ｒ１Ｏ）（Ｒ２Ｏ）Ｂ−Ｒ３−Ｒ４−ＮＨＣ（＝ＮＨ）−ＮＨ２　　−−−（２）
（式（２）中、Ｒ１およびＲ２は水素、Ｒ３はアリーレン、Ｒ４は−（ＣＨ２）ｎ−であり、このときｎは１である。）、
Ｙは、下記式（３）のジオキシム化合物：
ＨＯ−Ｎ＝Ｃ（ＣＨ３）−Ｃ（ＣＨ３）＝Ｎ−ＯＨ　　−−−（３）
Ｚは、アニオンである
【請求項３】
Ｘが、２−ボロノベンジルグアニジン、３−ボロノベンジルグアニジンまたは４−ボロノベンジルグアニジンである請求項１に記載の錯体。
【請求項４】
９９ｍＴｃ（Ｃｌ）（ジメチルグリオキシム）３（２−ボロノベンジルグアニジン）、９９ｍＴｃ（Ｃｌ）（ジメチルグリオキシム）３（３−ボロノベンジルグアニジン）または９９ｍＴｃ（Ｃｌ）（ジメチルグリオキシム）３（４−ボロノベンジルグアニジン）である請求項１に記載の錯体。
【請求項５】
下記式（４）で示される化合物：
（Ｒ１Ｏ）（Ｒ２Ｏ）Ｂ−Ｒ３−Ｒ４−ＮＨＣ（＝ＮＲ７）−ＮＨＲ８　　−−−（４）
式（４）中、
Ｒ１およびＲ２は、それぞれ独立に水素、直鎖アルキル、分枝アルキルもしくはアリールであるか、またはＲ１とＲ２が相互に結合して二価の炭化水素基を形成し、
Ｒ３は、二価の炭化水素基であり、
Ｒ４は、−（ＣＨ２）ｎ−、−（ＣＨ２）ｎ−ＣＨ（ＯＨ）−（ＣＨ２）−または−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯ−（ＣＨ２）ｍ−であり、このときｎおよびｍは独立に０から３の整数であり、
Ｒ７およびＲ８は水素または保護基である。
【請求項６】
Ｎ，Ｎ´−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ”−（２−ボロノベンジル）グアニジン、Ｎ，Ｎ´−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ”−（３−ボロノベンジル）グアニジンまたはＮ，Ｎ´−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ”−（４−ボロノベンジル）グアニジンである請求項５に記載の化合物。
【請求項７】
下記式（５）で示される化合物：
（ＨＯ）２Ｂ−Ｒ３−Ｒ４−ＮＨＣ（＝ＮＨ）−ＮＨ２　　−−−（５）
式（５）中、
Ｒ３は、二価の炭化水素基であり、
Ｒ４は、−（ＣＨ２）ｎ−、−（ＣＨ２）ｎ−ＣＨ（ＯＨ）−（ＣＨ２）−または−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯ−（ＣＨ２）ｍ−であり、このときｎおよびｍは独立に０から３の整数である。
【請求項８】
２−ボロノベンジルグアニジン、３−ボロノベンジルグアニジンまたは４−ボロノベンジルグアニジンである請求項７に記載の化合物。
【請求項９】
請求項１乃至４の何れか１項に記載の放射性遷移金属錯体または請求項５乃至８の何れか１項に記載の化合物からなる核医学診断用薬剤。
【請求項１０】
請求項１乃至４の何れか１項に記載の放射性遷移金属錯体または請求項５乃至８の何れか１項に記載の化合物からなる心筋交感神経機能評価用薬剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、グアニジノ基を有する放射性遷移金属錯体、詳しくはテクネチウム−９９ｍなどの放射性遷移金属で標識されたグアニジノ基含有化合物、その標識前駆化合物及びその化合物の製法、並びに核医学診断手法における化合物の使用及びこれらの化合物を含有する医薬に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
１９１３年にＨｅｖｅｒｓｙらが開発した放射性トレーサーの原理は１９２０年代から生理、生化学機能の評価に応用され、核医学と呼ばれる新しい専門分野を誕生させた。ヨウ素−１３１、テクネチウム−９９ｍ、タリウム−２０１、ガリウム−６７等で標識した様々な化合物が放射性医薬品として使用され、シンチグラフィと呼ばれる機能画像を提供してきた（非特許文献１参照）。
【０００３】
生化学の分野では、炭素−１４、トリチウム（Ｈ−３）といった核種で標識された化合物がトレーサー実験に用いられている。これらの核種は軟β線放出核種で、半減期も長いことから基礎研究の分野ではよく用いられている。これに対し、核医学の分野では体外から測定できるγ線放出核種が好ましく、半減期は人体に影響のない様、適当に短いほうがよい。核医学診断で用いられる生体構成元素の同位体は炭素−１１、窒素−１３、酸素−１５等であるが、これらの核種は半減期がそれぞれ２０分、１０分、２分と極めて短いため、病院内にサイクロトロンをもち、かつその場でトレーサーへの標識を行わねばならない等、その使用には制限がある。
【０００４】
現在、商業的に広範囲の地域へ供給可能で、かつ画像診断上有用な核種としてはヨウ素−１２３、テクネチウム−９９ｍ、タリウム−２０１、ガリウム−６７、インジウム−１１１等がある。これらの核種で標識された核医学診断剤のほとんどは、追跡の対象となる物質そのものではないが、類似物質としてトレーサーの機能を有する。
現在までに、これらの商業的に供給可能な放射性核種で標識された多くの生体成分に類似の化合物が研究開発されてきた。
タリウム−２０１（以下　Ｔｌ−２０１）は、心筋血流シンチグラフィ用薬剤として開発された。Ｔｌ−２０１は一価の陽イオンでカリウムと同様の挙動を示して、心筋細胞内にナトリウム−カリウムポンプにより能動的に摂取されるといわれていることから、心筋の血流分布を反映した画像診断剤として用いられている（例えば、非特許文献２参照）。その他にも、近年は、物理学的特性や利便性に優れた核種であるテクネチウム−９９ｍ（以下Ｔｃ−９９ｍ）を用いた放射性薬剤が数多く開発されている。例えば、Ｔｃ−９９ｍ―イソニトリル錯体（ＭＩＢＩ）、マイオビュー（Ｔｃ−９９ｍ−テトロフォスミン）（例えば、非特許文献３参照）、Ｔｃ−９９ｍ―Ｔｅｂｏｒｏｘｉｍｅ（特許文献１参照）等が心筋血流製剤として見出された。
【０００５】
神経伝達物質であるノルエピネフリンの類似物質は古くから種々の化合物が研究されているが、核医学の分野においては、１９８０年代に、その類似物質を用いた交感神経イメージング剤として、ヨウ素−１２３（以下Ｉ−１２３）標識メタヨードベンジルグアニジンが開発された。
Ｗｉｅｌａｎｄによって見出された、Ｉ−１２３標識メタヨードベンジルグアニジン（以下ＭＩＢＧ）は、神経伝達物質ノルエピネフリンと同様の挙動で交感神経末端に集積する機序をもつグアネチジンの類似物質の放射性ヨウ素標識体である（非特許文献４参照）。Ｉ−１３１標識ＭＩＢＧ或いはＩ−１２３標識ＭＩＢＧは、当初、副腎髄質イメージングを目的として検討されていたが、心臓へも高い集積性を示すことから、核医学診断での心臓イメージング剤としての有用性も示唆された。その取り込みは、レセルピンによる心筋集積阻害実験の結果から、主として取り込み−１機構により心筋へ取り込まれることが確認された。また、ＭＩＢＧは主なる心筋への集積機序として心交感神経終末のノルエピネフリン貯蔵顆粒へ取り込まれることが推定され、核医学診断の手法によって心筋内カテコールアミン量の評価が行える可能性が示唆された。
ＭＩＢＧはノルエピネフリンと質的に同様の摂取、貯蔵、放出を示すと考えられている。即ち、ニューロンの特異的な取り込み機構であるナトリウム依存性の取り込み−１機構により神経内に摂取され、ノルエピネフリン貯蔵顆粒に貯蔵され、開口分泌により神経外に放出されるといわれている。また、ＭＩＢＧはモノアミンオキシダーゼ（ＭＡＯ）やカテコラミン−Ｏ−メチルトランスフェラーゼ（ＣＯＭＴ）による代謝を受けないこと等のノルエピネフリンと異なる性質も持っているが、上記の如く、大体においてノルエピネフリンと同様の挙動を示すことが評価され、Ｉ−１２３標識ＭＩＢＧは心臓での局所交感神経分布や交感神経機能の評価に用いられ、現在、種々の心疾患の診断に採用されている（例えば、非特許文献５参照）。
【０００６】
ところで、以上に述べた様に、画像診断のイメージングに使用されている放射性標識化合物は、生理活性物質を種々の放射性核種で標識したものが用いられるが、その好ましい放射性同位元素として、ガンマ線放出核種であるＩ―１２３及びＴｃ−９９ｍ等が挙げられる。特にＴｃ−９９ｍの優れた物理学的特性は核医学診断の用途としては最適であり、当該元素を利用した画像診断薬の研究の進歩は著しい。
【０００７】
このような放射性ヨウ素標識からＴｃ−９９ｍ標識への展開につれて、レセプター化合物等のＴｃ−９９ｍ標識化合物が研究されて久しいが、なかでもＫｕｎｇらの開発したド−パミントランスポーターイメージング剤であるトロパン誘導体はこの代表例といえる（例えば、非特許文献６参照）。この化合物は、コカインと類似の性質をもち、ドーパミントランスポーターに結合能を有する既存のＩ−１２３標識トロパン誘導体であるβ−ＣＩＴ−ＦＰおよびβ−ＣＩＴの有する性質をＴｃ−９９ｍ標識体にして置き換えたものである。このＴｃ−９９ｍ標識トロパン誘導体は、種々の化合物で試みられているＩ−１２３標識化合物のＴｃ−９９ｍ標識化合物への置き換えが特に成功した例といえよう。
【０００８】
この様な状況に鑑み、ＫｕｎｇらはさらにＩ−１２３標識ＭＩＢＧのＴｃ−９９ｍ標識体の研究を行った（非特許文献７参照）。しかしながら、この化合物はＴｃ−９９ｍ標識に用いる基本骨格ビスアミノビスチオール部分の脂溶性の高さから、ＭＩＢＧの性質と似た化合物とはいえず、臨床に応用できる様な心臓集積性を得ることができなかった。
【０００９】
【特許文献１】米国特許第５，３８７，４０９号明細書
【非特許文献１】佐々木，新医療，４，ｐ．７９（１９９９）
【非特許文献２】久田欣一、最新臨床核医学、金原出版、１９９９年、改訂第３版一刷、１８４ページ
【非特許文献３】久田欣一、最新臨床核医学、金原出版、１９９９年、改訂第３版一刷、１９６ページ
【非特許文献４】Ｗｉｅｌａｎｄ，Ｄ．Ｍ．ら、Ｊ．　Ｎｕｃｌｅａｒ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，２７，８４−８９（１９８６）
【非特許文献５】久田欣一、最新臨床核医学、金原出版、１９９９年、改訂第３版一刷、２３３−２４３ページ
【非特許文献６】Ｋｕｎｇ，ＨＦ．，ｅｔ　ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，４０，１，９−１７（１９９７）
【非特許文献７】Ｚｈｕａｎｇ，ＺＰ．，　ｅｔ　ａｌ．，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ　Ｃｈｅｍ．，１０，２，１５９−１６８（１９９９）
【００１０】
【発明が解決しようとする課題】
以上の状況を鑑みると、脳のレセプター化合物とは異なり、心臓イメージング剤としてのノルエピネフリンアナログのＴｃ−９９ｍ製剤化に求められる条件としては、生理活性物質に結合させるＴｃ−９９ｍ錯体部分が、化合物の性質や、脂溶性を大きく変化させるような構造を持たないことが重要であると考えられる。
【００１１】
【課題を解決するための手段】
本発明者は、以上の事柄を踏まえ鋭意研究し、種々の錯体化合物の中から適当な脂溶性に調節された化合物を選択し、さらに、心筋血流製剤の骨格を利用することにより、心臓に集積しやすく、その後ＭＩＢＧやグアネチジンと同様の挙動を示す化合物を探索した。その結果、グアネチジン、ＭＩＢＧと同等の骨格と脂溶性を有する化合物を見出した。
【００１２】
すなわち、本発明によれば、
下記式（１）で示される放射性遷移金属錯体が提供される。
【００１３】
ＭＸ（Ｙ）３Ｚ　　−−−（１）
式（１）中、
Ｍは、テクネチウム−９９ｍ、レニウム−１８６およびレニウム−１８８から選ばれる放射性遷移金属、
Ｘは、下記式（２）の化合物：
（Ｒ１Ｏ）（Ｒ２Ｏ）Ｂ−Ｒ３−Ｒ４−ＮＨＣ（＝ＮＨ）−ＮＨ２　　−−−（２）
（式（２）中、
Ｒ１およびＲ２は、それぞれ独立に水素、直鎖アルキル、分枝アルキルもしくはアリールであるか、またはＲ１とＲ２が相互に結合して二価の炭化水素基を形成し、
Ｒ３は、二価の炭化水素基であり、
Ｒ４は、−（ＣＨ２）ｎ−、−（ＣＨ２）ｎ−ＣＨ（ＯＨ）−（ＣＨ２）−または−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯ−（ＣＨ２）ｍ−であり、このときｎおよびｍは独立に０から３の整数である。）、
Ｙは、下記式（３）のジオキシム化合物：
ＨＯ−Ｎ＝ＣＲ５−ＣＲ６＝Ｎ−ＯＨ　　−−−（３）
（式（３）中、
Ｒ５，Ｒ６は、それぞれ独立して水素、アルキルもしくはアリールであるか、またはＲ５とＲ６が相互に結合してアルキレンを形成する。）、
Ｚは、アニオンである。
【００１４】
一般式（２）で表されるＸ部分は、ベンジルグアニジン、ベンゾイルグアニジンまたはグアネチジン等の生理活性化合物の骨格を有していてもよいが、有していなくてもよい。即ち、一般式（２）のＸが生理活性のない化合物であっても、一般式（１）すなわちＭＸ（Ｙ）３Ｚで示される錯体全体として生理活性化合物の類似構造を有していればよい。
一般式（２）中、Ｒ１とＲ２が相互に結合して形成する二価の炭化水素基は、好ましくは、直鎖アルキレンおよび分枝アルキレンから選ばれたものである。Ｒ３の二価の炭化水素基は、好ましくは、脂肪族及び芳香族炭化水素基から選ばれ、特に好ましくは、アルキレン、アルケニレン、アルキニレン、アリーレンおよびアラルキレンから選ばれる。
一般式（２）中、Ｒ１およびＲ２は水素が好ましく、Ｒ３は炭素数１〜６のアルキレン又はフェニレンなどのアリーレンが好ましく、Ｒ４は、−（ＣＨ２）ｎ−（ｎは０又は１）が好ましい。
【００１５】
一般式（２）の好ましい具体例としては、芳香族化合物として４−ボロノベンジルグアニジン、３−ボロノベンジルグアニジン、２−ボロノベンジルグアニジン等、アルキル型化合物として２−ボロノエチルグアニジン、３−ボロノプロピルグアニジン、４−ボロノブチルグアニジン等が挙げられるが、これらに限定されるものではない。これらのうち、４−ボロノベンジルグアニジン、３−ボロノベンジルグアニジン、２−ボロノベンジルグアニジンが最も好ましい。
【００１６】
一般式（３）で示されるＹは錯体を形成する構成成分であり、Ｒ５及びＲ６がメチルであるジメチルグリオキシムが一般的に使用されるが、Ｒ５及びＲ６はその他の置換基であってもよい。
【００１７】
Ｚとしては、塩素、臭素、ヨウ素等のハロゲン原子が好ましいが、他のアニオンでもよい。
【００１８】
【発明の実施の形態】
以下、本発明の実施の形態について説明する。
本発明の好ましい実施態様によれば、下記一般式（１）で示される放射性遷移金属錯体が提供される。
【００１９】
ＭＸ（Ｙ）３Ｚ　　−−−（１）
式（１）中、
Ｍは、テクネチウム−９９ｍ、レニウム−１８６またはレニウム−１８８、
Ｘは、下記式（２）の化合物：
（Ｒ１Ｏ）（Ｒ２Ｏ）Ｂ−Ｒ３−Ｒ４−ＮＨＣ（＝ＮＨ）−ＮＨ２　　−−−（２）
（式（２）中、Ｒ１およびＲ２は水素、Ｒ３はアリーレン、Ｒ４は−（ＣＨ２）ｎ−であり、このときｎは１である。）、
Ｙは、下記式（３）のジオキシム化合物：
ＨＯ−Ｎ＝Ｃ（ＣＨ３）−Ｃ（ＣＨ３）＝Ｎ−ＯＨ　　−−−（３）
Ｚは、アニオンである
【００２０】
本発明の特に好ましい実施態様によれば、一般式ＭＸ（Ｙ）３Ｚで示される化合物は、９９ｍＴｃ（Ｃｌ）（ジメチルグリオキシム）３（２−ボロノベンジルグアニジン）、９９ｍＴｃ（Ｃｌ）（ジメチルグリオキシム）３（３−ボロノベンジルグアニジン）または９９ｍＴｃ（Ｃｌ）（ジメチルグリオキシム）３（４−ボロノベンジルグアニジン）である。なお、本発明の一般式（１）で示される化合物は、具体的には、下記構造式で示される錯体構造を形成していると考えられる（Ｌｉｎｄｅｒ　ｅｔ　ａｌ．，　”Ｔｅｃｈｎｅｔｉｕｍ　ａｎｄ　Ｒｈｅｎｉｕｍ　ｉｎ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ａｎｄ　Ｎｕｃｌｅａｒ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ”　Ｃｏｒｔｉｎａ　Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｎａｌ，　Ｉｔａｌｙ，１９９０，　ｐ．１９５参照）。
【００２１】
【化１】
2004115447.tif 000002
（式中、Ｒはグアニジノ基を有する基であり、上記式（２）中の−Ｒ３−Ｒ４−ＮＨＣ（＝ＮＨ）−ＮＨ２に対応する。）
【００２２】
以下、本発明の放射性遷移金属錯体の製造方法について説明する。
本発明の放射性遷移金属錯体、および、その錯体を構成するリガンドＸ（式（２））及びＹ（式（３））の各化合物の製造方法は、種々考えられるが、その一例を下記に示す。
リガンドＸ（式（２））は、例えば、下記の反応経路によって合成できる。
【００２３】
【化２】
2004115447.tif 000003
【００２４】
すなわち、Ｘのグアニジノ基は、出発原料であるアミン化合物に、１，３−ビス−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−２−メチル−２−チオシュードウレアを反応させることにより、Ｂｏｃ基で保護されたグアニジノ基として結合させることができる。また、Ｘのボロノ基は、上記アミン化合物のハロゲン化物にブチルリチウムを反応させ、リチウム塩とした後、ホウ酸トリメチル等のホウ酸化合物を反応させることにより結合させることができる。ブチルリチウムとホウ酸化合物を用いた系の代わりに、ｐｉｎａｃｏｌ　ｂｏｒａｎｅ，　ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）／ｄｐｐｆ（８ｍｏｌ％），　ＫＯＡｃ，ｄｉｏｘａｎｅ，　８００とｓｏｄｉｕｍ　ｐｅｒｉｏｄａｔｅ／ＮＨ４ＯＡｃ　ｄｐｐｆ：　１，１’−ｂｉｓ（ｄｉｐｈｅｎｙｌｐｈｏｓｐｈｉｎｏ）ｆｅｒｒｏｃｅｎｅとからなる系を使用することもできる。
【００２５】
上記反応経路に示される以外の一般式（２）の化合物も、上記スキームと同様に、グアニジノ基の合成反応及びボロノ化反応を適当な順で行うことにより合成可能である。この際、グアニジノ基及びボロノ基は保護基を有していなくてもよい。また、保護基を有する化合物のまま保存し、錯体調製時に保護基を脱離させかつ錯体を形成させる反応を同時に行うこともできる。
【００２６】
ここで、一般式（２）に示される標識用のボロノ化合物およびその保護基で保護されたボロノ化合物は新規化合物である。したがって、本発明によれば、下記一般式（４）および（５）で示される新規化合物が提供される：
【００２７】
（Ｒ１Ｏ）（Ｒ２Ｏ）Ｂ−Ｒ３−Ｒ４−ＮＨＣ（＝ＮＲ７）−ＮＨＲ８　　−−−（４）
（式（４）中、
Ｒ１，Ｒ２は、それぞれ独立に水素、直鎖アルキル、分枝アルキルもしくはアリールであるか、またはＲ１とＲ２が相互に結合して二価の炭化水素基を形成し、Ｒ３は、二価の炭化水素基であり、
Ｒ４は、−（ＣＨ２）ｎ−、−（ＣＨ２）ｎ−ＣＨ（ＯＨ）−（ＣＨ２）−または−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯ−（ＣＨ２）ｍ−であり、このときｎおよびｍは独立に０から３の整数であり、
Ｒ７およびＲ８は水素または保護基である。）
【００２８】
（ＨＯ）２Ｂ−Ｒ３−Ｒ４−ＮＨＣ（＝ＮＨ）−ＮＨ２　　−−−（５）
（式（５）中、
Ｒ３は、二価の炭化水素基であり、
Ｒ４は、−（ＣＨ２）ｎ−、−（ＣＨ２）ｎ−ＣＨ（ＯＨ）−（ＣＨ２）−または−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯ−（ＣＨ２）ｍ−であり、このときｎおよびｍは独立に０から３の整数である。）
【００２９】
一般式（４）中、Ｒ１とＲ２が相互に結合して形成する二価の炭化水素基は、好ましくは、直鎖アルキレンおよび分枝アルキレンから選ばれたものである。一般式（４）及び（５）中、Ｒ３の二価の炭化水素基は、好ましくは、脂肪族及び芳香族炭化水素基から選ばれ、特に好ましくは、アルキレン、アルケニレン、アルキニレン、アリーレンおよびアラルキレンから選ばれる。
一般式（４）中、Ｒ１およびＲ２は水素が好ましい。一般式（４）及び（５）中、Ｒ３は炭素数１〜６のアルキレン又はフェニレンなどのアリーレンが好ましく、Ｒ４は、−（ＣＨ２）ｎ−（ｎは０又は１）が好ましい。
【００３０】
一般式（４）の化合物の特に好ましい具体例としては、Ｎ，Ｎ´−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ”−（２−ボロノベンジル）グアニジン、Ｎ，Ｎ´−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ”−（３−ボロノベンジル）グアニジン、Ｎ，Ｎ´−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ”−（４−ボロノベンジル）グアニジンなどが挙げられる。
【００３１】
一般式（５）の化合物の特に好ましい具体例としては、２−ボロノベンジルグアニジン、３−ボロノベンジルグアニジン、４−ボロノベンジルグアニジンなどが挙げられる。
【００３２】
本発明の放射性遷移金属錯体を製造する場合、式（５）の化合物を直接用いてもよいが、グアニジノ基に保護基を有する式（４）の化合物のほうが、保存のみならず製造時の取り扱いが容易であるので、この保護された化合物を、エタノール等に溶解し、適宜標識時に一定量を用いてもよい。
【００３３】
リガンドＹ（式（３））としては、例えば、ジメチルグリオキシムや１，２−シクロヘキサンジオンジオキシムなどが挙げられる。これらのリガンドは市販さており、東京化成工業（株）やアルドリッチ社などの試薬メーカから容易に入手できる。
【００３４】
Ｔｃ−９９ｍ−テボロキシムなどの一般式（１）で示される本発明の錯体の調製は、例えば、Ｎｕｎｎら（米国特許第５，３８７，４０９号明細書）が報告している方法により行うことができ、すなわち、上記のボロノ基を有する化合物及びグリオキシム化合物の溶液中に、Ｔｃ−９９ｍ−過テクネチウム酸ナトリウム溶液を加え、塩化第一スズの存在下に適宜加熱することによりＴｃ−９９ｍ標識反応を行う。
この場合、標識に用いるボロノ化合物、グリオキシム化合物等の試薬は、予め一定組成に調製してバイアル等に分注しておき、標識反応時に適宜バイアルから一定量取り出して用いるようにしてもよい。
【００３５】
上記製造方法によって標識されたＴｃ−９９ｍ錯体などの放射性遷移金属錯体は、ＨＰＬＣ（高速液体クロマトグラフィー）によって精製し、より高純度のものとすることができる。また、ＨＰＬＣ精製を行うことに関する最も重要な点は、Ｔｃ−９９ｍなどの放射性遷移金属で標識された錯体から、標識に用いられなかった余剰の（未反応の）グアニジン化合物Ｘを分離することにある。交感神経系に作用する薬剤として、ＭＩＢＧもまた、用量依存性があることが認められているため、特異的な取り込みのためには、過剰の類似物質の存在は好ましくない。
【００３６】
ＨＰＬＣによる精製の場合、精製後の溶液を生理学的に認容な溶液に調製する必要があるため、生理学的に認容な溶液を用いて、ＨＰＬＣ精製を行うことは、より簡便な薬剤の調製操作を行う上で有用である。
この場合の使用可能な溶液としては、生理食塩液、各種の生理学的に認容な緩衝液及びこれらとエタノールの混合液が好ましい。
【００３７】
なお、本発明の放射性遷移金属錯体の製造方法における詳細な反応条件は、後述の実施例に記載したとおりである。
【００３８】
【作用】
本発明のＴｃ−９９ｍ標識錯体などの放射性遷移金属錯体及びその前駆化合物は、ベンジルグアニジン、グアネチジン、ノルエピネフリン様の分子構造を持ち、これらと脂溶性が類似の化合物であることから、核医学診断用薬剤、心筋交感神経機能評価用薬剤などの薬剤として核医学診断において有用である。
【００３９】
即ち、本発明の放射性遷移金属錯体は、ベンジルグアニジン、グアネチジン、ノルエピネフリン様の分子構造を持つことによって、これらに類似した性質を達成したことにより、Ｉ―１２３標識のベンジルグアニジンよりも物理学的性質の好ましいＴｃ−９９ｍなどの放射性遷移金属標識化合物を用いて診断することができ、また、Ｔｃ−９９ｍはテクネチウムジェネレーターからＴｃ−９９ｍ過テクネチウム酸として用時溶出できるので、これを用い標識し薬剤として調製することにより、緊急時の診断が可能となる。
【００４０】
【実施例】
以下、実施例により本発明を具体的に説明するが、本発明はそれらに限定されるものではない。
【００４１】
実施例１
Ｎ，Ｎ´−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ”−（３−ブロモベンジル）グアニジン（ＮＭＴＭ−１）の合成。
３−ブロモベンジルアミン塩酸塩４．４５ｇ（分子量２２２．５、２６ｍｍｏｌｅ）にテトラヒドロフラン１００ｍｌ及び４Ｎ水酸化ナトリウム溶液１０ｍｌを加え溶解した。この溶液へ１，３−ビス−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−２−メチル−２−チオシュードウレア６．３６ｇ（分子量２９０．３８、２２ｍｍｏｌｅ）のテトラヒドロフラン溶液を加え、加熱還流した。４時間還流後テトラヒドロフランを蒸散し、エーテル抽出により９．０４ｇの白色固体を得た。シリカゲルカラム精製（ヘキサン／酢酸エチル＝１０／１）を行い、１．９２ｇの白色固体の目的物を得た（１７％収率）。
【００４２】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）ｐｐｍ：１．４９，１．５１（ｓ，ｓ，９Ｈ，９Ｈ，ｔ−Ｂｕ，ｔ−Ｂｕ），　４．６（ｄ，２Ｈ，Ａｒ−ＣＨ２−），　７．１８−７．４８（ｍ，４Ｈ，Ａｒ−Ｈ），　８．６（ｂ，１Ｈ），　１１．６（ｂ，１Ｈ）．
【００４３】
実施例２
Ｎ，Ｎ´−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ”−（３−ボロノベンジル）グアニジン（ＮＭＴＭ−２）の合成。
アルゴンガスで置換した２つ口フラスコに実施例１で合成したＮ，Ｎ´−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ”−（３−ヨードベンジル）グアニジン（ＮＭＴＭ−１）５２０ｍｇ（分子量４２８、１．２ｍｍｏｌｅ）を入れ，無水テトラヒドロフラン２０ｍｌに溶解した。この溶液を−８０℃に冷却し、ブチルリチウムの１．６Ｍヘキサン溶液１．８ｍｌ（２．８８ｍｍｏｌｅ，２．４ｅｑ．）を滴下した。次に、−７８℃で１時間攪拌したホウ酸トリメチル２ｍｌ（約１０ｅｑ．）を滴下し、−７８℃から室温にもどしながら４時間攪拌した。その後、飽和塩化アンモニウム溶液を加え、室温で攪拌した後、クロロホルムを加え抽出した。有機層を乾燥後溶媒留去し、０．５０１ｇの白色固体を得た。シリカゲルカラムで精製（溶離液：酢酸エチル）を行い、０．１３６ｇの白色固体を得た（収率２９％）。
【００４４】
精製物は１Ｈ−ＮＭＲ分析結果により目的物と同定した。ボロノ化合物は芳香環部分のプロトンが単一ではないため、ボロノベンゼン、ヨードベンゼン等の化合物を代表例として、ハロゲン化物のボロノ化前後の変化と比較し、その生成を同定した。
【００４５】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）ｐｐｍ：１．５，１．５４（ｓ，ｓ，９Ｈ，９Ｈ，ｔ−Ｂｕ，ｔ−Ｂｕ），４．６−４．８（ｄ＋ｄ，２Ｈ，Ａｒ−ＣＨ２−），　７．３−７．２（ｍ，４Ｈ，Ａｒ−Ｈ），　８．６（ｂ，１Ｈ），　１１．６（ｂ，１Ｈ）．
【００４６】
実施例３
Ｎ，Ｎ´−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ”−（４−ブロモベンジル）グアニジン（ＮＭＴＰ−１）の合成。
４−ブロモベンジルアミン塩酸塩２ｇ（分子量２２２．５２、８．９９ｍｍｏｌｅ）にテトラヒドロフラン２００ｍｌ及び４Ｎ水酸化ナトリウム溶液４．５ｍｌを加え溶解した。この溶液へ１，３−ビス−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−２−メチル−２−チオシュードウレア　３．１９ｇ（分子量２９０．３８、１１ｍｍｏｌｅ）のテトラヒドロフラン溶液を加え、加熱還流した。６時間還流後テトラヒドロフランを蒸散し、エーテル抽出により４．３１７ｇの白色固体を得た。シリカゲルカラムで精製（１００％ヘキサン→ヘキサン／酢酸エチル＝１０／１）を行い、１．５６ｇの白色固体の目的物を得た（４０％収率）。
精製物は１Ｈ−ＮＭＲ分析結果より目的物と同定した。
【００４７】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）ｐｐｍ：１．４９（ｓ，９Ｈ，ｔ−Ｂｕ），　１．５２（ｓ，９Ｈ，ｔ−Ｂｕ），　４．５８（ｄ，２Ｈ，Ａｒ−ＣＨ２−），　７．１９　（ｄ，Ｊ＝８．５６，２Ｈ，Ａｒ−Ｈ），　７．４６　（ｄ，Ｊ＝８．５６，２Ｈ，Ａｒ−Ｈ），　８．６（ｂ，１Ｈ），　１１．５（ｂ，１Ｈ）．ＴＬＣ分析（ヘキサン／酢酸エチル　＝４／１　Ｒｆ＝０．６）。
【００４８】
実施例４
Ｎ，Ｎ´−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ”−（４−ボロノベンジル）グアニジン（ＮＭＴＰ−２）の合成。
アルゴンガスで置換した２つ口フラスコに実施例３で合成したＮ，Ｎ´−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ”−（４−ブロモベンジル）グアニジン（ＮＭＴＰ−１）５２０ｍｇ（分子量４２９、１．２１ｍｍｏｌｅ）を入れ、テトラヒドロフラン２０ｍｌに溶解した。この溶液を−８０℃に冷却し、ブチルリチウムの１．６Ｍヘキサン溶液１．８ｍｌ（２．８８ｍｍｏｌｅ）を滴下した。次に、−７８℃で２０分間攪拌した。これにホウ酸トリメチル２ｍｌ（約２２ｅｑ．）を滴下し、−７８℃から徐々に室温にもどしながら４時間攪拌した。その後、飽和塩化アンモニウム溶液を加え、室温で１５分間攪拌した後、クロロホルムを加え抽出した。有機層を乾燥後溶媒を留去し、０．５６２ｇの白色固体を得た。シリカゲルカラムで精製（（ヘキサン／酢酸エチル＝１０／１〜クロロホルム〜クロロホルム／メタノール＝５／１）を行い、０．１３ｇの白色固体を得た。また、０．３１２ｇの原料を回収した。
精製物は１Ｈ−ＮＭＲ分析結果により目的物と同定した。
【００４９】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）ｐｐｍ：１．４６−１．５２（ｓ＋ｓ，ｓ＋ｓ，９Ｈ，９Ｈ，ｔ−Ｂｕ，ｔ−Ｂｕ），　４．６−４．８（ｄ＋ｄ，２Ｈ），　７．１５−８．２（ｄ，ｄ，ｄ，ｄ，４Ｈ，Ａｒ−Ｈ），　８．６−８．８（ｂ，１Ｈ），　１１．５（ｂ，１Ｈ）．
【００５０】
実施例５
Ｎ，Ｎ´−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ”−（２−ブロモベンジル）グアニジン（ＮＭＴＯ−１）の合成。
２−ブロモベンジルアミン塩酸塩２ｇ（分子量２２２．５２、８．９９ｍｍｏｌｅ）にテトラヒドロフラン２００ｍｌ及び４Ｎ水酸化ナトリウム溶液４．５ｍｌを加え溶解した。この溶液へ１，３−ビス−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−２−メチル−２−チオシュードウレア３．１９ｇ（分子量２９０．３８、１１ｍｍｏｌｅ）のテトラヒドロフラン溶液を加え、加熱還流した。７時間還流後テトラヒドロフランを蒸散し、エーテル抽出により４．９７ｇの白色固体を得た。これをシリカゲルカラムで精製（ヘキサン→ヘキサン／酢酸エチル＝２０／１〜１０／１）し、１．４５６ｇの白色固体の目的物を得た（３８％収率）。
精製物は１Ｈ−ＮＭＲ分析結果により目的物と同定した。
【００５１】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）ｐｐｍ：１．４８（ｓ，９Ｈ，ｔ−Ｂｕ），　１．５１（ｓ，９Ｈ，ｔ−Ｂｕ），　４．７（ｄ，２Ｈ，Ａｒ−ＣＨ２−），　７．１２−７．１８（ｄｔ，１Ｈ，Ａｒ−Ｈ），　７．２６−７．３３（ｄｔ，１Ｈ，Ａｒ−Ｈ），　７．４０（ｄ，１Ｈ，Ａｒ−Ｈ），　７．５５（ｄ，１Ｈ，Ａｒ−Ｈ），　８．６（ｂ，１Ｈ），　１１．５（ｂ，１Ｈ）．
【００５２】
実施例６
Ｎ，Ｎ´−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ”−（２−ボロノベンジル）グアニジン（ＮＭＴＯ−２）の合成。
アルゴンガスで置換した２つ口フラスコに実施例５で合成したＮ，Ｎ´−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ”−（２−ブロモベンジル）グアニジン（ＮＭＴＯ−１）１．０４ｇ（分子量４２８、２．４ｍｍｏｌｅ）を入れ、テトラヒドロフラン３０ｍｌに溶解した．この溶液を−８０℃に冷却し、ブチルリチウムの１．６Ｍヘキサン溶液３．６ｍｌ（５．７６ｍｍｏｌｅ）を滴下した。−７８℃で３０分間攪拌した後、ホウ酸トリメチル４ｍｌ（ｃａ．１０ｅｑ．）を滴下し、−７８℃から徐々に室温にもどしながら３．５時間攪拌した。その後、飽和塩化アンモニウム溶液を加え、室温で１０分間攪拌した後、クロロホルムを加え抽出した。有機層を乾燥後溶媒留去し、０．９５ｇの淡桃色固体を得た。さらに、シリカゲルカラムで精製（溶離液：酢酸エチル）を行い、９６ｍｇの淡黄色固体を得た。
精製物は１Ｈ−ＮＭＲ分析結果により目的物と同定した。
【００５３】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）ｐｐｍ：　１．４６，１．５２（ｓ，ｓ，９Ｈ，９Ｈ，ｔ−Ｂｕ，ｔ−Ｂｕ），　４．５４（ｄ＋ｄ，２Ｈ），　７．３−６（ｍ，４Ｈ，Ａｒ−Ｈ），　９．３（ｂ，１Ｈ），　１１．５（ｂ，１Ｈ）．
【００５４】
参考例１
Ｔｃ−９９ｍ−テボロキシムの合成標識。
Ｎｕｎｎら（米国特許第５，３８７，４０９号明細書）の方法に基づいてＴｃ−９９ｍ−テボロキシムの合成標識を行った。
３．５ｍｌのガラスバイアルにジメチルグリオキシムエタノール溶液１６ｍｇ／ｍｌ（１４μｍｏｌｅ／０．１５ｍｌ）を０．１５ｍｌ、ベンゼンボロン酸４０ｍｇ／ｍｌ（３３μｍｏｌｅ／０．１ｍｌ）を０．１ｍｌ及びクエン酸・塩化ナトリウム・ＤＴＰＡ混合溶液０．１ｍｌを加え、アルゴンガスを５分間バブリングすることにより、ガス置換した。このバイアルへ、塩化第一スズ二水和物の５Ｎ塩酸溶液６ｍｇ／ｍｌ（０．５３μｇ／０．０２ｍｌ）を０．０２ｍｌ加えたのち、Ｔｃ−９９ｍジェネレーターより溶出したＴｃ−９９ｍ過テクネチウム酸ナトリウム溶液０．５ｍｌを加えた。このバイアルを、密封系で１００℃１０分間加熱することにより標識を行った。標識物は、標識率を調べるために、薄層クロマトグラフィーによる分析を行った（分析系：シリカゲル６０Ｆ２５４、　クロロホルム／メタノール／トリエチルアミン＝５０／１０／１）。
【００５５】
なお、上記クエン酸・塩化ナトリウム・ＤＴＰＡ混合溶液は、クエン酸１ｇ、塩化ナトリウム１０ｇ、ジエチレントリアミン五酢酸　１００ｍｇを水に溶解し全量を５０ｍｌとして得られたものであり、この混合溶液０．１ｍｌ中（１回使用量）に、クエン酸２ｍｇ（１０．４μｍｏｌｅ）、　塩化ナトリウム２０ｍｇ（０．３４ｍｍｏｌｅ）、　ジエチレントリアミン五酢酸０．２ｍｇ（０．５１μｍｏｌｅ）を含む。
【００５６】
実施例７
ボロノベンジルグアニジン化合物を用いたＴｃ−９９ｍ−テボロキシム骨格の錯体の標識反応（ＮＭＴＭ−３の合成）
参考例１と同様の方法で、実施例２で合成したメタ−ボロノベンジルグアニジン化合物（Ｎ，Ｎ´−（ビス−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ”−（３−ボロノベンジル）グアニジン）を用いて、Ｔｃ−９９ｍ錯体化合物（以下ＮＭＴＭ−３）を合成した。この際、参考例１に記載のＴｃ−９９ｍ−テボロキシム合成と同条件で生成物が得られるように、標識方法について、試薬の添加量を若干検討し、最終的に以下の試薬量で標識、精製反応を行った。また、錯体の標識後の安定性は表１の通りであった。
【００５７】
バイアルに、ジメチルグリオキシムエタノール溶液１６ｍｇ／ｍｌ（１４μｍｏｌｅ／０．１５ｍｌ）　０．１５ｍｌ、Ｎ，Ｎ´−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ”−（３−ボロノベンジル）グアニジン６．５ｍｇ／０．１ｍｌ　（１７μｍｏｌｅ／０．１ｍｌ）０．１ｍｌ及び前出のクエン酸・塩化ナトリウム・ＤＴＰＡ混合溶液０．１ｍｌを加え、アルゴンガス置換を５分間行った。このバイアルへ、塩化第一スズ二水和物／５Ｎ塩酸３ｍｇ／ｍｌ（０．３３μｍｏｌｅ／０．０２５ｍｌ）０．０２５ｍｌ及びジェネレーターより溶出したＴｃ−９９ｍ過テクネチウム酸ナトリウム溶液０．５ｍｌを加え、１００℃で３０分間標識反応を行った。標識反応後、標識率をＴＬＣにより分析測定した（標識率：７１．６％）。標識後、ＨＰＬＣより溶離液を分取することにより精製を行った。
【００５８】
ＨＰＬＣ条件；
カラム：Ｗａｔｅｒｓ　μＢｏｎｄａｐａｋ　Ｃ１８（３．９ｍｍ　Ｉ．Ｄ．ｘ３００ｍｍ）；
溶離液：エタノール／生理食塩液＝４／６；
流速：０．６ｍｌ／ｍｉｎ；
検出：ＵＶ２５４ｎｍ及び放射能検出器。
【００５９】
フラクション（目的物放射能ピークは２０．５７分）の一部０．５ｍｌをとり、添加物溶液０．２ｍｌ及び生理食塩液０．７ｍｌを加え、希釈し最終溶液（１４％エタノール溶液）を調製した。
ＴＬＣ分析の結果、放射化学的純度は９３．１％であった（シリカゲル６０Ｆ２５４、クロロホルム／メタノール／トリエチルアミン＝５０／１０／１）。最終精製物の電気泳動分析（定電圧泳動２１０Ｖ、３０分間通電）の結果、生成物はマイナス側へ５ｍｍ移動したことから、＋の電荷を持つことが観察された。
【００６０】
目的錯体形成の確認実験
ボロノ化合物が錯体形成に関与していることの確認実験
得られた上記錯体ＮＭＴＭ−３の形成にボロノ基が関与していることを確認するために、ボロノベンジルグアニジン化合物を加えずにブランク溶液として同量のエタノールを反応溶液に加えた。その他の試薬、条件等は参考例１及びＮＭＴＭ−３の錯体生成と同じ条件で反応を行った。ボロノ基化合物のボロノベンジルグアニジン化合物の代わりに、ボロノ基の非存在下では、参考例１及びＮＭＴＭ−３の錯体生成で得られたものと同じ錯体が生成しないことが確認された。従って、本発明で得られたＮＭＴＭ−３錯体の形成にはボロノ基が関与していると考えられ、目的錯体であることが確認された。
【００６１】
グアニジノ基が錯体形成に関与していないことの確認実験。
以上の方法で得られた錯体（ＮＭＴＭ−３）の形成にグアニジノ基が関与していないことを確認するために、ボロノベンジルグアニジン化合物（Ｎ，Ｎ´−（ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ”−（３−ボロノベンジル）グアニジン（ＮＭＴＭ−２））の代わりに同モルのブロモ体化合物即ちボロノ基部分が臭素であるＮ，Ｎ´−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ”−（３−ブロモベンジル）グアニジンを添加し用いた。その他の試薬、条件等は参考例１と同じ条件で反応を行った。ボロノ基の代わりにブロモ基の存在下では参考例１及びＮＭＴＭ−３生成で得られたものと同じ錯体が生成しないことが確認された。従って、得られた錯体を形成するには、その成分としてボロノグアニジン化合物のボロノ基が関与しているのであり、グアニジノ基部分ではないことが推定された。
【００６２】
実施例８
パラ−ボロノベンジルグアニジン化合物の錯体形成反応（ＮＭＴＰ−３の合成）。
実施例７と同様の方法でパラ−ボロノベンジルグアニジン化合物（Ｎ，Ｎ´−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ”−（４−ボロノベンジル）グアニジン）（ＮＭＴＰ−２）を用いて、錯体化合物（以下ＮＭＴＰ−３）を合成した。３．５ｍｌバイアルにジメチルグリオキシムエタノール溶液１６ｍｇ／ｍｌ（１４μｍｏｌｅ／０．１５ｍｌ）０．１５ｍｌ、及びＮ，Ｎ´−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ”−（４−ボロノベンジル）グアニジン（ＮＭＴＰ−２）６．５ｍｇ／０．１ｍｌ（１７μｍｏｌｅ／０．１ｍｌ）０．１ｍｌを加え、さらにクエン酸・塩化ナトリウム・ＤＴＰＡ混合溶液０．１ｍｌを加え良く攪拌した。アルゴンガス置換を５分間行い、塩化第一スズ二水和物の５Ｎ塩酸溶液３ｍｇ／ｍｌ（０．３３μｍｏｌｅ／０．０２５ｍｌ）０．０２５ｍｌを加え、さらにジェネレータより溶出したＴｃ−９９ｍ過テクネチウム酸ナトリウム溶液０．５ｍｌを加え、１００℃　で３０分間加熱し標識反応を行った。反応後、薄層クロマトフラフィーにより分析を行い、標識率を求めた。標識率は５２．８％であった。この標識溶液０．５ｍｌをとりＨＰＬＣ装置に注入し、目的フラクションを分取した。
【００６３】
ＨＰＬＣ分取条件；
カラム：Ｗａｔｅｒｓ　μＢｏｎｄａｐａｋ　Ｃ１８（３．９ｍｍ　Ｉ．Ｄ．ｘ３００ｍｍ）；
溶離液：エタノール／生理食塩液＝４／６；
流速：０．６ｍｌ／ｍｉｎ；
検出：ＵＶ２５４ｎｍ及び放射能検出器。
【００６４】
目的のフラクションの一部（目的物のピークは１１．９８分）をとり希釈調製を行った。添加物溶液０．２ｍｌ及び生理食塩液０．７ｍｌをバイアルにとり、これへ分取溶液０．５ｍｌを加え良く攪拌した。
ＴＬＣ分析により精製物の放射化学的純度は８６．２％であった。最終精製物の電気泳動分析（定電圧泳動２１０Ｖ、３０分間通電）によりマイナス側へ５ｍｍ移動したことにより、＋の電荷を持つことが観察された。
【００６５】
実施例９
オルト−ボロノベンジルグアニジン化合物の錯体形成反応。
実施例７と同様の方法でオルト−ボロノベンジルグアニジン化合物（Ｎ，Ｎ´−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ”−（２−ボロノベンジル）グアニジン）（ＮＭＴＯ−２）を用いて、錯体化合物（以下ＮＭＴＯ−３）を合成した。
３．５ｍｌバイアルにジメチルグリオキシムエタノール溶液の１６ｍｇ／ｍｌ（１４μｍｏｌｅ／０．１５ｍｌ）０．１５ｍｌ、及びＮ，Ｎ´−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ”−（２−ボロノベンジル）グアニジン６．５ｍｇ／０．１ｍｌ（１７μｍｏｌｅ／０．１ｍｌ）０．１ｍｌを加え、さらにクエン酸・塩化ナトリウム・ＤＴＰＡ混合溶液０．１ｍｌを加え良く攪拌した。アルゴンガス置換を５分間行い塩化第一スズ二水和物・５Ｎ塩酸溶液３ｍｇ／ｍｌ（０．３３μｍｏｌｅ／０．０２５ｍｌ）０．０２５ｍｌを加え、さらにＴｃ−９９ｍ過テクネチウム酸ナトリウム溶液０．５ｍｌを加え、１００℃　で３０分間加熱し標識反応を行った。反応後、ＴＬＣ分析を行い、標識率を求めた。標識率は５５．７％であった。この標識溶液０．５ｍｌをとりＨＰＬＣ装置に注入し、目的フラクションを分取した。
【００６６】
ＨＰＬＣ分取条件；
カラム：Ｗａｔｅｒｓ　μＢｏｎｄａｐａｋ　Ｃ１８（３．９ｍｍ　Ｉ．Ｄ．ｘ３００ｍｍ）；
溶離液：エタノール／生理食塩液＝４／６；
流速：０．６ｍｌ／ｍｉｎ；
検出：ＵＶ２５４ｎｍ及び放射能検出器。
【００６７】
目的のフラクションの一部（目的物放射能ピークは２０．６２分）をとり希釈調製を行った。添加物溶液０．２ｍｌ及び生理食塩液０．７ｍｌをバイアルにとり、これへ分取溶液０．５ｍｌを加え良く攪拌した。
ＴＬＣ分析により放射化学的純度は８１．４％であった。最終精製物の電気泳動分析（定電圧泳動２１０Ｖ、３０分間通電）の結果、生成物はマイナス側へ５ｍｍ移動したことから、＋の電荷を持つことが観察された。
【００６８】
実施例７，実施例８及び実施例９で調整したＴｃ−９９ｍ錯体の調整時及び調製後の放射化学的純度を表１に示す。
【００６９】
【表１】
2004115447.tif 000004
【００７０】
実施例１０
Ｔｃ−９９ｍ錯体のｌｏｇＰの測定。
実施例７、実施例８及び実施例９で調製した錯体のオクタノール抽出率或いはｌｏｇＰの測定はＣｏｕｌａｉｓら（Ｃｏｕｌａｉｓ，Ｙ．ら、Ｎｕｃｌ．　Ｍｅｄ．　Ｂｉｏｌ．、２１，２，２６３−２６８（１９９４））の方法をもとに行った。
試験管にオクタノール２ｍｌ、生理食塩液２ｍｌ及び被験液２５μｌをとりボルテックスミキサーで１分間攪拌した。遠心分離機にかけ１０００ｒｐｍ、１０分間遠心し、分離させた。分離した水層を取り除き、オクタノール層へ生理食塩液２ｍｌを加えた。ボルテックスミキサーで１分間攪拌し、遠心分離機にかけるこの操作を３回繰り返した。３回目の水層とオクタノール層の各々０．５ｍｌずつをとりシングルチャネルアナライザーで放射能をカウントした。測定は１日被験液につき３検体ずつ実施し、それぞれのカウントを求め、その平均値を算出した。結果を、表２にまとめた。
【００７１】
【表２】
2004115447.tif 000005
【００７２】
ｌｏｇＰの測定値から、ベンジルグアニジンの芳香族環のオルト、メタ、パラ位にＴｃ−９９ｍ錯体を持つ化合物の間でオクタノール抽出率或いはｌｏｇＰ値に差が認められた。ｌｏｇＰ値から、脂溶性は、ＮＭＴＯ−３、ＮＭＴＭ−３、ＮＭＴＰ−３の順に高かった。ＨＰＬＣ精製時の保持時間からも同様の傾向が示されていた。
また、これらの、Ｔｃ−９９ｍ錯体の脂溶性ｌｏｇＰの値はＬｅｏの報告する計算方法により求めたＭＩＢＧ、グアネチジン等の値とほぼ同程度であった。
【００７３】
参考例２
Ｔｃ−９９ｍ−ＨＭＰＡＯのｌｏｇＰ測定。
比較対照物として脳血流診断剤であるＴｃ−９９ｍ−ＨＭＰＡＯのｌｏｇＰを測定した。実施例１０で示した方法と同様にしてｌｏｇＰを計算した。結果を表３に示す。
Ｔｃ−９９ｍ−ＨＭＰＡＯのｌｏｇＰは上掲Ｃｏｕｌａｉｓらによると１．９とされており、今回の実験の値１．９５とほぼ一致したので、Ｃｏｕｌａｉｓらの手順で、生理食塩液を用いて行った今回の測定方法は妥当であると考えられた。
【００７４】
【表３】
2004115447.tif 000006
【００７５】
表２および表３から、上掲Ｃｏｕｌａｉｓらの方法による各々の化合物の脂溶性は、Ｔｃ−９９ｍ−ＮＭＴＭ−３は０．８６、Ｔｃ−９９ｍ−ＮＭＴＰ−３は０．７６、Ｔｃ−９９ｍ−ＮＭＴＯ−３は１．１４であった。また、比較対照である脳血流診断剤Ｔｃ−９９ｍ−ＨＭＰＡＯの脂溶性は１．９５であった。また、ノルエピネフリン、グアネチジン、ＭＩＢＧ等の既知化合物の脂溶性（ｌｏｇＰ値）は、計算値（Ｌｅｏ，Ａ．Ｊ．，Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｒｅｖｉｅｗｓ，９３，４，１２８１−１３０６（１９９３））によると、ノルエピネフリンは−０．９９、グアネチジンは１．３７、ＭＩＢＧは１．３９、オルトヨードベンジルグアニジンは１．０９である。以上のことから、本発明の錯体は従来の錯体よりも脂溶性が抑えられた錯体であり、その値は、ノルエピネフリンとＭＩＢＧ化合物の中間の脂溶性をもつことが示唆された。
【００７６】
【発明の効果】
本発明によれば、ベンジルグアニジン、グアネチジン、ノルエピネフリン様の分子構造を持つことによって、これらに類似した脂溶性等の性質を保有するとともに、Ｔｃ−９９ｍなどの放射性遷移金属との錯体形成によっても化合物の性質に大きな変化が生じないため、核医学における心臓イメージング剤として有用なノルエピネフリンアナログが提供される。かくして、従来の放射性ハロゲン標識化合物をＴｃ−９９ｍ製剤化するあたって極めて有用な技術が提供される。これにより、たとえば、Ｉ―１２３標識のベンジルグアニジンよりも物理学的性質の好ましいＴｃ−９９ｍで診断することが可能となり、また、Ｔｃ−９９ｍはテクネチウムジェネレーターからＴｃ−９９ｍを用時溶出し、標識し調製することにより、緊急時の診断も可能となる。