(57)【要約】【課題】酵母菌と乳酸菌から選択された複数種の有益菌を特定の組合せで共生培養して得られた培養液の濾液の濃縮液からなるレトロウイルス感染症治療薬の提供。【解決手段】本発明は、生体内において先天性免疫応答を増強させることにより、生体抗菌ペプチドであるデフェンシン等を分泌させ、抗ウイルス作用を発現させることによるレトロウイルスに起因する感染症、特に後天性免疫不全症候群（エイズ：ＡＩＤＳ）あるいは成人Ｔ細胞性白血病（ＡＴＬ）の治療薬を提供する。【選択図】　　　　　図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
酵母菌と乳酸菌から選択された複数種の有益菌を特定の組合せで共生培養して得られた培養液の濾液の濃縮液からなるレトロウイルス感染症治療薬。
【請求項２】
レトロウイルス感染症が、ＨＩＶウイルス（ヒト免疫不全ウイルス）による後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）である請求項１に記載のレトロウイルス感染症治療薬。
【請求項３】
レトロウイルス感染症が、ＨＴＬＶ−Ｉ（成人Ｔ細胞性白血病ウイルス）による成人Ｔ細胞性白血病（ＡＴＬ）である請求項１に記載のレトロウイルス感染症治療薬。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、生体内において先天性免疫応答を増強させることにより、生体抗菌ペプチドであるデフェンシン等を分泌させ、抗ウイルス作用を発現させることによるレトロウイルスに起因する感染症、特に後天性免疫不全症候群（エイズ：ＡＩＤＳ）あるいは成人Ｔ細胞性白血病（ＡＴＬ）の治療薬に関する。
【０００２】
【従来の技術】
エイズ（ＡＩＤＳ）は、後天性免疫不全症候群（Ａｃｑｕｉｒｅｄ　Ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ　Ｓｙｎｄｒｏｍｅ）の略称であり、ウイルスの感染によって免疫を司る細胞の一種、ヘルパーＴ細胞が破壊される結果、免疫能が極端に低下することにより生ずる症候群である。エイズは、ヒトが生きてゆくための最も基本的な機能の一つである免疫を冒す疾患であり、この疾患の克服は、現代医学が解決するべき重要な一つの課題であるとされている。
【０００３】
エイズは、１９８０年代から短期間のうちに全世界に蔓延し、今日においても、いまだ広く流行しつつある疾患である。現在では、ＷＨＯ（世界保健機関）では、毎日およそ５，０００〜６，０００人の新たな感染者が発生しているであろうと推定しており、また、英国保健省の推定では、１６，０００人／日の新たな感染者が発生しているとされている。ＵＮＩＣＥＦの推計によれば、２０１０年までに４千万人の子供が、エイズで親を失うといわれている。取り分け、エイズ治療とＨＩＶ感染予防が不十分な東アフリカでは、４割の子供が、１５歳になるまでに、片親をエイズで亡くす悲惨な状況にあるという。
【０００４】
エイズ感染の診断方法は開発され、実用化されており、発展途上国においてもエイズの診断が可能になってきている。また、エイズ治療薬の開発も活発に行われており、感染後におけるエイズの発症の進行を遅らせることが可能になったが、治療薬の薬価が高いことから、発展途上国では、一部の患者にしかその恩恵が及んでいない問題がある。一方、先進国でも厄介な副作用の多いこの疾患を完全に解明したわけではなく、いまだ改善するべき点が多く、エイズワクチンの開発と共に、今後の課題として残されている。
【０００５】
ところでエイズは、レトロウイルス（Ｒｅｔｒｏｖｉｒｕｓ）というウイルス感染によって引き起こされる一種の疾患である。すなわち、エイズの病原体は、レトロウイルス科（Ｒｅｔｒｏｖｉｖｉｄａｅ）に属するＲＮＡウイルスであるヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ：Ｈｕｍａｎ　Ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ　Ｖｉｒｕｓ）であり、このＨＩＶはリンパ球に好んで感染してリンパ球を破壊するため、その減少による細胞性免疫不全（後天性）が生じ、エイズが発病する。
【０００６】
このリンパ球を中心とした後天性免疫機能を傷害されたエイズ患者にとっては、Ｉｎｎａｔｅ　Ｉｍｍｕｎｅ　Ｒｅｓｐｏｎｓｅ（先天性免疫応答）がより重要な役割を担うこととなる。すなわち、後天性免疫機能不全患者においては、意図的に免疫調整作用を有する物質を投与し、Ｉｎｎａｔｅ　Ｉｍｍｕｎｅ　Ｒｅｓｐｏｎｓｅ（先天性免疫応答）を効果的に働かせば、その物質は、細菌あるいはウイルス感染に対して免疫応答に基づく防御反応を発現し、これら細菌あるいはウイルスに起因する疾患に対する有効な治療剤となり得るものといえる。特に、かかる物質が生体にとって毒性が無く、安全に投与できるものであれば、臨床的に極めて効果的な、抗ウイルス剤となるものである。
【０００７】
ところで特開２０００−１２５８１０公報には、酵母菌と乳酸菌から選ばれた複数種の有益菌を特定の組合せで共生培養して得られた培養液の濾液の濃縮液が開示されており、この濃縮液には、抗炎症作用と共に、免疫調整・回復作用があることが開示されている。この濃縮液は、濃縮によってアミノ酸、ビタミン、ミネラルなどがバランスよく含有され、その免疫調整・回復作用により感染症防御作用があることを明らかにしている。
【０００８】
【特許文献１】
特開２０００−１２５８１０公報
【０００９】
したがって、今回本発明者らは、かかる濃縮液の感染症防御作用に着目し、このものには先天性免疫応答を増強させ、免疫機能が低下した例えばＡＩＤＳ患者に対して、有効な治療薬になるのではないかと考えた。すなわち、かかる濃縮液の感染症防御作用が、Ｉｎｎａｔｅ　Ｉｍｍｕｎｅ　Ｒｅｓｐｏｎｓｅ（先天性免疫応答）を積極的に働かせるものであれば、その作用は先天性免疫応答の担い手である生体内で産生される抗菌ペプチド、デフェンシンの分泌の誘導を行い、かかる抗菌ペプチドによる抗ウイルス活性が発現するのではないかと考えた。
【００１０】
そこで本発明者らは、ＨＩＶ感染症の動物モデルとして利用されるマウスのレトロウイルス感染症に対して当該濃縮液を投与し、その抗レトロウイルス活性を検討した。その結果、当該濃縮液は、極めて効果的に抗レトロウイルス活性を発揮していることを確認した。特にその効果は、レトロウイルス感染に基づく、急性期の発症を効果的に抑制するものであることが判明した。
【００１１】
【発明が解決しようとする課題】
したがって本発明は、かかる検討結果に基づき完成されたものであり、酵母菌と乳酸菌との醗酵生産物を有効成分とする、レトロウイルスに起因する感染疾患に対する治療剤を提供することを課題とする。
【００１２】
【課題を解決するための手段】
しかして本発明の基本的形態である請求項１に記載の発明は、酵母菌と乳酸菌から選択された複数種の有益菌を特定の組合せで共生培養して得られた培養液の濾液の濃縮液からなるレトロウイルス感染症治療薬である。
【００１３】
そのなかでも、より具体的な請求項２に記載の発明は、請求項１に記載の発明において、レトロウイルス感染症が、ＨＩＶウイルス（ヒト免疫不全ウイルス）による後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）であるレトロウイルス感染症治療薬である。
【００１４】
さらに、また別な請求項３に記載の発明は、請求項１に記載の発明において、レトロウイルス感染症が、ＨＴＬＶ−Ｉ（成人Ｔ細胞性白血病ウイルス）による成人Ｔ細胞性白血病（ＡＴＬ）であるレトロウイルス感染症治療薬である。
【００１５】
【発明の実施の形態】
本発明は、上記したように、生体において先天的免疫能を効果的に調整することにより、例えば、生体の防御機能を発揮する抗菌ペプチドの分泌を誘発させ、かかる抗菌ペプチドにより抗レトロウイルス活性を発揮し、レトロウイルスに起因する感染症の治療を行うべく、酵母菌と乳酸菌との醗酵生産物を有効成分とするレトロウイルス感染症治療薬である。
【００１６】
このようなレトロウイルスに起因する感染症としては、例えば、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶウイルス）による後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）、あるいは、成人Ｔ細胞性白血病ウイルス（ＨＴＬＶ−Ｉ）による成人Ｔ細胞性白血病（ＡＴＬ）等の疾患を挙げることができる。
【００１７】
そのなかでも、本発明が提供するレトロウイルス感染症治療薬は、当該レトロウイルス感染に基づく、急性期の発症を効果的に抑制するものであることが判明した。したがって、本発明のレトロウイルス感染症治療薬は、例えば、エイズ感染後の免疫不全に基づく、カリニ肺炎、カポジ肉腫などの発症初期における劇症的な症状を、効果的に抑制することができる。
【００１８】
本発明が提供するレトロウイルス感染症治療薬の有効成分である酵母菌と乳酸菌から選択された複数種の有益菌を特定の組合せで共生培養して得られた培養液の濾液の濃縮液は、具体的には、ヤング株式会社の出願に係る特開２０００−１２５８１０号公報に記載の方法で調製された濃縮液である。この濃縮液（以下、「ヤング抽出液」と記載する）は、当該ヤング株式会社から健康濃縮飲料水として市販されており、その濃縮飲料を分析すると、タンパク質、りん、鉄、カルシウム、サイアミン（ビタミンＢ１）、リボフラビン（ビタミンＢ６）などが含まれ、さらに、アミノ酸として、スレオニン、バリン、リジン、ロイシンなどの必須アミノ酸のほか、グルタミン酸、アスパラギン酸、アルギニンなど２０種に近いアミノ酸が含有されている。
【００１９】
本発明の有効成分であるヤング抽出液を構成する有益菌である酵母菌および乳酸菌としては、下記表１に記載のものがあげられる。
【００２０】
【表１】
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【００２１】
上記の複数種の有益菌（酵母菌および乳酸菌）の組合せグループとしては下記表２に示すような組合せである。なお、表中の数字は、表１中の数字を示す。
【００２２】
【表２】
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【００２３】
本発明の有効成分であるヤング抽出液の製造方法は、特開２０００−１２５８１０号公報に記載の製造方法が採用される。具体的には、以下の工程からなる製造方法である。
【００２４】
（１）第１工程（特殊寒天培養基の製造）：
精製された天然の寒天に、蒸留水により湯煎された牛肉、昆布から得られたスープと塩分と有益菌培養液とを加え、特殊寒天培養基を製造する。
【００２５】
（２）第２工程（有益菌の純粋培養）：
第１工程で製造された特殊寒天培養基に有益菌を各種類ごとに移植し、これを恒温器に入れて３９℃で４８〜５０時間培養する。
【００２６】
（３）第３工程（特殊豆乳培養基の製造）：
大豆より脂肪を除き、蒸留水を加えたものを７０〜１１０分煮沸後、濾過した豆乳の濾液に、塩、三温糖および有益菌培養液を加えて特殊豆乳培養基を製造する。
【００２７】
（４）第４工程（有益菌の特殊豆乳培養基による純粋培養）：
第３工程で製造された特殊豆乳培養基に、第２工程で純粋培養された有益菌を各種類ごとに移植し、恒温器に入れて３９℃で４８〜５０時間培養する。
【００２８】
（５）第５工程（有益菌の中量馴化培養）：
第３工程で得られた特殊豆乳培養基に、第４工程で製造された純粋培養された有益菌グループにより分け、そのグループごとに移植して３９℃で４８〜５０時間馴化培養する。
【００２９】
（６）第６工程（有益菌の工業共生培養）：
第３工程で得られた特殊豆乳培養基１３Ｌの中に、第５工程で製造されたグループに従って、馴化培養した生菌を一括移植し、４０℃で１００〜１２０時間一括共生培養を行う。
【００３０】
（７）第７工程（培養の停止と濃縮）：
第６工程で製造された共生培養液を１００℃で３０分間加熱することによって生菌の繁殖を止め、次に、生菌を分離除去し、得られた濾液を約１５分の１（９３〜９６％の水分を除く）にまで濃縮する。
【００３１】
（８）第８工程（熟成）：
第７工程により得られた濃縮液を、１７℃にて３月以上静置して熟成させる。
【００３２】
以上の工程により得られた生産物を容器に封入し、法定加熱を経てヤング抽出液が製造される。
【００３３】
かかるヤング抽出液を生体に経口投与することにより、先天性免疫応答の担い手である生体内で産生される抗菌ペプチドの分泌が促進され、その結果抗レトロウイルス活性を発現される。なおヤング抽出液は、すでに健康濃縮飲料水としてその安全性は十分確認されていることより、ある程度過剰量を投与しても、何ら悪影響をあたえるものではない。
【００３４】
【実施例】
以下に本発明が提供する、レトロウイルス感染症治療剤の抗レトロウイルス活性の詳細を説明することにより、本発明をさらに詳細に説明する。
【００３５】
レトロウイルス感染症の動物モデルとして利用されている、マウスのレトロウイルス感染症に対してヤング抽出液を投与して、その効果を確認した。
【００３６】
試験１：フレンド白血病ウイルス（Ｆｒｉｅｎｄ　ｌｅｕｋｅｍｉａ　ｖｉｒｕｓ）に対する、ヤング抽出液の効果試験
フレンド白血病ウイルス（Ｆｒｉｅｎｄ　ｌｅｕｋｅｍｉａ　ｖｉｒｕｓ）は、エーリッヒ腹水癌より分離されたレトロウイルスで、感受性マウスに接種すると、数日〜２週間程度で赤芽球症を起こし、脾臓の肥大を伴う白血病を発症する。したがって、かかるフレンド（Ｆｒｉｅｎｄ）白血病ウイルスは、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）や、成人Ｔ細胞性白血病ウイルス（ＨＴＬＶ−Ｉ）と同じレトロウイルスとして、ＨＩＶ感染症の治療薬であるＡＺＴなどの抗ウイルス活性の効果判定に使用されているレトロウイルスの代表的なウイルスである。なお発病は、マウスの脾臓の重量を比較することで容易に確認することができる。
【００３７】
方法：
フレンド（Ｆｒｉｅｎｄ）白血病ウイルスを、雄性Ｂａｌｂ／ｃマウス（一群：５匹）の腹腔内に接種して、白血病を発症させた。
ヤング抽出液を蒸留水で１００倍に希釈し、１００ｍｌずつマウスの給水瓶に入れ、経口摂取することにより投与した。溶液は、隔日で新しく調製したものと交換した。マウスの溶液の摂取量は、マウス１匹当り１日当り平均５ｍｌを内服した計算になる。
ヤング抽出液の投与は、フレンド（Ｆｒｉｅｎｄ）白血病ウイルスの接種感染前１日目より、連続１０日間行い、１０日目に脾臓を摘出し、重量を比較し、その効果を判定した。
【００３８】
なお、比較投与群（一群５匹）として、ヤング抽出液を投与せず、フレンド（Ｆｒｉｅｎｄ）白血病ウイルスの接種感染群を置き、対照群（１群３匹）として、無処置［フレンド（Ｆｒｉｅｎｄ）白血病ウイルスの接種感染なし／ヤング抽出液の投与なし］マウスを置いた。
【００３９】
結果：
下記表３中に摘出した脾臓の重量をまとめた。
【００４０】
【表３】
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【００４１】
グループ１（マウス＃１〜５）：
フレンド（Ｆｒｉｅｎｄ）白血病ウイルス感染（＋）：蒸留水摂取
グループ２（マウス＃６〜１０）：
フレンド（Ｆｒｉｅｎｄ）白血病ウイルス感染（＋）：ヤング抽出液内服
グループ１（マウス＃１１〜１３）：
フレンド（Ｆｒｉｅｎｄ）白血病ウイルス非感染（−）：蒸留水摂取
【００４２】
また、各試験マウスの摘出脾臓の写真を、図１に示した。
図に示すように、フレンド（Ｆｒｉｅｎｄ）白血病ウイルス感染したグループ１およびグループ２では、フレンド（Ｆｒｉｅｎｄ）白血病ウイルス感染処理をしないグループ３に比較して、感染後１０日で巨大な脾種を認め、白血病の発症が観察された。そのうちで、ヤング抽出液未処理群（グループ１）では脾臓重量は０．６７６±０．２２５ｇ（最大・最小値を除いたｎ＝３では、０．６６６±０．０８１ｇ）であったが、ヤング抽出液投与群（グループ２）では脾臓重量は０．４０５±０．１２３ｇ（最大・最小値を除いたｎ＝３では、０．３６７±０．０５８ｇ）と、４０％（最大・最小値を除いたｎ＝３では、４６％）と、著明な脾種の軽減が認められ、ヤング抽出液の投与はレトロウイルス感染症の進行を遅らせていることが判明した。
【００４３】
試験２：マウスエイズウイルス（ＭＡＩＤＳ）に対する、ヤング抽出液の効果試験
方法：
マウスエイズウイルス（ＭＡＩＤＳ）を、雄性Ｃ５７ＢＬ６マウス（一群：５匹）の腹腔内に接種して、エイズを発症させた。
ヤング抽出液を蒸留水で１００倍に希釈し、１００ｍｌずつマウスの給水瓶に入れ、経口摂取することにより投与した。溶液は、隔日で新しく調製したものと交換した。マウスの溶液の摂取量は、マウス１匹当り１日当り平均５ｍｌを内服した計算になる。
ヤング抽出液の投与は、マウスエイズウイルス（ＭＡＩＤＳ）の接種感染前１日目より、連続３ヶ月間行い、投与後３ヶ月目にその効果を判定した。
なお、比較投与群（一群５匹）として、ヤング抽出液を投与せず、マウスエイズウイルス（ＭＡＩＤＳ）接種感染群を置き、対照群（１群３匹）として、無処置［マウスエイズウイルス（ＭＡＩＤＳ）の接種感染なし／ヤング抽出液の投与なし］マウスを置いた。
【００４４】
結果
ヤング抽出液投与群マウスでは、比較投与群［ヤング抽出液を投与せず、マウスエイズウイルス（ＭＡＩＤＳ）接種感染群］に比較して、無処置対照群と同様の延命が認められた。
【００４５】
【発明の効果】
以上記載のように、本発明は、生体がウイルスの感染に対する先天的な防御機構として作用する生体抗菌ペプチドの分泌を誘発させることによりレトロウイルスに対して効果的な抗ウイルス活性を発揮させ、それによりレトロウイルス感染症を治療する、臨床的に有効なレトロウイルス感染症、特にエイズの治療薬を提供するものである。また、その有効成分である酵母菌と乳酸菌との醗酵生産物は、極めて安全性の高い物質であり、その副作用も無いことから、本発明の医療上の価値は多大なものであるといえる。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明の試験１における、各試験マウスの摘出脾臓の写真である。
【図１】
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