(57)【要約】【課題】本発明の目的は、安価で効率的に、メタンを炭素源として用いてメタン資化細菌を培養する方法を提供することである。更に、本発明の目的は、安価で効率的に生産でき、栄養価が高い飼料を提供することである。【解決手段】メタン資化細菌の培養方法において、メタン資化細菌として好熱性メタン資化細菌を用い、培養槽中に培地の供給及び培養液の抜き取りを行うことによって、培養液中の該細菌濃度の制御及び培養液の温度上昇の抑制を行う。更に、該培養方法で得られる好熱性メタン資化細菌を飼料として利用する。【選択図】なし。【特許請求の範囲】
【請求項１】
メタン資化細菌を培養する方法であって、メタン資化細菌として好熱性メタン資化細菌を用い、培養槽中に培地の供給及び培養液の抜き取りを行うことによって、培養液中の該細菌濃度の制御及び培養液の温度上昇の抑制を行うことを特徴とする、培養方法。
【請求項２】
メタンの通気供給、培養槽中に培地の供給及び培養液の抜き取りを行うことによって培養槽中の熱量バランスをとることを特徴とする、請求項１に記載の培養方法。
【請求項３】
好熱性メタン資化細菌が寄託番号ＦＥＲＭ  Ｐ−１８６４５として入手される細菌である、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
請求項１乃至３のいずれかに記載の方法で得られる好熱性メタン資化細菌を有する飼料。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、メタン資化細菌の培養方法に関する。また、本発明は、栄養価が高く、安価で効率的に生産される飼料に関する。
【０００２】
【従来の技術】
地球人口の増加により、２１世紀には食糧不足が深刻となることが予測される。
穀物類は、太陽光、土地、時間を必要とするため、食糧が不足したとしても、直ちに増産することはできない。そのような場合、必然的に、家畜等の飼料用の穀物類が人間の食品として使用されることになり、家畜や養殖魚等の飼育や養殖に必要な飼料が不足することが懸念される。
【０００３】
１９７０年代、太陽に依存しない炭素源として、石油や天然ガスが注目された。これを炭素源として微生物を生産し、その微生物をそのまま飼料とする技術（Ｓｉｎｇｌｅ  Ｃｅｌｌ  Ｐｒｏｔｅｉｎ，  以下ＳＣＰという。）が開発された。石油系のＳＣＰとして、パラフィンを炭素源として用いて生産した微生物を飼料として利用することが実用化されている。しかしながら、今後食糧が不足する時期と、石油が不足する時期はほぼ同じ時期であると予測されるため、石油系ＳＣＰが世界の食糧事情を救うとは考えにくい。また、石油系ＳＣＰのタンパク質含有量は６２〜６４％であり（例えば、非特許文献１参照。）、タンパク質含量の点でも満足できるものではない。
【０００４】
一方、石油より豊富に存在する天然ガスであるメタンを炭素源として用いてＳＣＰを製造できれば、飼料として極めて有用である。しかしながら、これまでに見つかっているメタン資化細菌は生育温度が中温（３０−３５℃）のものがほとんどであり（例えば、非特許文献２参照。）、しかもメタン資化細菌はメタン資化の際メタン１ｍｏｌ当たり１０１ｋｃａｌという大量の熱を発生するため、常温で生育するメタン資化細菌を用いると除熱のために大規模な冷却設備が必要となり、実用化は困難であった（例えば、非特許文献３参照。）。また、従来のメタン資化細菌は増殖速度が０．０８／ｈ程度と遅く、産業利用するには十分でなかった（例えば、非特許文献４参照。）。
【０００５】
このような従来技術を背景として、メタン資化細菌を飼料として利用するために、安価で効率的に、メタンを炭素源として用いてメタン資化細菌を培養する技術の開発が求められていた。
【０００６】
【非特許文献１】
Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ｂｉｏｍａｓｓ、Ａ．  Ｖｉｎａｒｏｖ  ｅｔ  ａｌ、「Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ  ｏｎ  Ｂｉｏｍａｓｓ  ｆｏｒ  Ｅｎｅｒｇｙ，  Ｉｎｄｕｓｒｙ  ａｎｄ  Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ  （６ｔｈ）  Ａｔｈｅｎｓ」、１９９２年、ｐ．５６６−５６９
【０００７】
【非特許文献２】
Ｍｅｔｈａｎｏｔｒｏｐｈｉｃ  Ｂａｃｔｅｒｉａ、Ｒ．  Ｈａｎｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ、「Ｍｉｃｒｏｂｉｏｒｏｇｉｃａｌ  Ｒｅｖｉｅｗｓ」、アメリカ、１９９６年６月、第６０巻、第２号、ｐ．４３９−４７１
【０００８】
【非特許文献３】
Ｄ．Ｗａｎｇ、「Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｅｎｇｏｎｅｅｒｉｎｇ」、アメリカ、１９６８年、第１５巻、第９９号、
【０００９】
【非特許文献４】
Ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  Ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ  ａｎｄ  Ｐｒｅｓｓｕｒｅ  ｏｎ  Ｇｒｏｗｔｈ  ａｎｄ  Ｍｅｔｈａｎｅ  Ｕｔｉｌｉｚｔｉｏｎ  ｂｙＳｅｖｅｒａｌ  Ｍｅｔｈａｎｏｔｒｏｐｈｉｃ  Ｃｕｌｔｕｒｅｓ、Ｂ．  Ｓｏｎｉ  ｅｔ  ａｌ、「Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ」アメリカ、１９９８年、ＰａｒｔＡ  ｖｏｌ７０／７２、ｐ．７２９−７３８
【００１０】
【発明が解決しようとする課題】
そこで本発明の目的は、上記のような従来の問題を解決することである。より詳細には、本発明は、安価で効率的に、メタンを炭素源として用いてメタン資化細菌を培養する方法を提供することを目的とするものである。更に、本発明は、安価で効率的に生産でき、栄養価が高い飼料を提供することを目的とするものである。
【００１１】
【課題を解決するための手段】
前記目的を達成するために本発明者は研究を重ねたところ、▲１▼メタン資化細菌を培養する際、好熱性メタン資化細菌、特に５０℃以上で良好に生育する好熱性メタン資化細菌を用い、培養槽中に培地の供給及び培養液の抜き取りを行うことによって、培養液中の該細菌濃度の制御及び培養液の温度上昇の抑制が可能であること、▲２▼好熱性メタン資化細菌としてメチロカルダム属Ｔ−０２５株（Ｍｅｔｈｙｌｏｃａｌｄｕｍ  ｓｐ．  Ｔ−０２５、ＦＥＲＭ  Ｐ−１８６４５）は、従来のメタン資化細菌に比して増殖速度が速く、有用であること、及び▲３▼上記培養方法で得られたメタン資化細菌は含有タンパク質含量が高く、飼料として有用であることを見出した。本発明は、かかる知見に基づいて完成したものである。
【００１２】
即ち、本発明は下記に掲げるメタン資化細菌の培養方法である：
項１．  メタン資化細菌を培養する方法であって、メタン資化細菌として好熱性メタン資化細菌を用い、培養槽中に培地の供給及び培養液の抜き取りを行うことによって、培養液中の該細菌濃度の制御及び培養液の温度上昇の抑制を行うことを特徴とする、培養方法。
項２．  メタン資化細菌を培養する方法であって、メタン資化細菌として好熱性メタン資化細菌を用い、メタンの通気供給、培養槽中に培地の供給及び培養液の抜き取りを行うことによって培養槽中の熱量バランスをとることを特徴とする、培養方法。
項３．  好熱性メタン資化細菌が寄託番号ＦＥＲＭ  Ｐ−１８６４５として入手される細菌である、項１又は２に記載の方法。
【００１３】
更に、本発明は、下記に掲げる飼料である：
項４．  項１乃至３のいずれかに記載の方法で得られる好熱性メタン資化細菌を有する飼料。
【００１４】
【発明の実施の形態】
本発明のメタン資化細菌の培養方法は、メタン資化細菌として好熱性メタン資化細菌を用い、培養槽中に培地の供給及び培養液の抜き取りを行うことによって、培養液中の該細菌濃度の制御及び培養液の温度上昇の抑制を行うことを特徴とするものである。
【００１５】
本発明で使用する好熱性メタン資化細菌とは、メタンを炭素源として生育可能であって、高温条件下で生育可能な細菌のことである。当該好熱性メタン資化細菌の生育可能温度として、具体的には、通常４０℃程度以上、好ましくは５０℃程度以上、更に好ましくは６０℃程度以上の範囲を挙げることができる。このように高温条件下で生育する好熱性メタン資化細菌を用いることにより培養温度を高温に設定できるので、培養槽内でメタン資化により生じる熱量を、メタンの供給、培地の供給及び培養液の抜き取りを行うことによって相殺することが可能となる。
【００１６】
また、本発明に使用する好熱性メタン資化細菌は、該細菌の高生産性の観点からは、高い比増殖速度で増殖可能な細菌であることが望ましい。高い比増殖速度で増殖可能な好熱性メタン資化細菌として、具体的には、生育至適環境条件下で、比増殖速度（μ）が０．１／時間以上、好ましくは０．１５／時間以上程度で増殖可能な細菌を挙げることができる。
【００１７】
特に、生育至適温度が５０〜６５℃で比増殖速度（μ）が０．１／時間以上、好ましくは生育至適温度が５０〜６５℃で比増殖速度（μ）が０．１５／時間以上のメタン資化細菌を使用することが望ましい。かかるメタン資化細菌を使用することによって、培養温度を高温に設定でき、更に該細菌の高い増殖速度を保つように培地の供給・培養液の抜き取り速度を高めることができるので、メタン資化細菌の培養で問題となるメタン資化に起因する培養液の温度の上昇を培地の供給による吸熱及び培養液の抜き取りによる除熱等により効果的に抑制できるので、一層効率的なメタン資化細菌の培養が可能となる。
【００１８】
本発明に使用できる好熱性メタン資化細菌は、例えば、温泉等の高温環境から分離することができ、また従来公知のメタン資化細菌を変異処理することによっても得ることもできる。
【００１９】
上記好熱性メタン資化細菌としては、具体的には、メチロカルダム（Ｍｅｔｈｙｌｏｃａｌｄｕｍ）属、メチロサーマス（Ｍｅｔｈｙｌｏｔｈｅｒｍｕｓ）属、メチロモナス（Ｍｅｔｈｙｌｏｍｏｎａｓ）属、メチロバクター（Ｍｅｔｈｙｌｏｂａｃｔｅｒ）属、メチロコッカス（Ｍｅｔｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ）属、メチロシナス（Ｍｅｔｈｙｌｏｓｉｎｕｓ）属、メチロシスチス（Ｍｅｔｈｙｌｏｃｙｓｔｉｓ）属に属する好熱性の細菌を挙げることができる。
【００２０】
特に、本発明において、該好熱性メタン資化細菌として、産業技術総合研究所特許生物寄託センターに寄託番号ＦＥＲＭ  Ｐ−１８６４５として寄託されている微生物（メチロカルダム属Ｔ−０２５株（Ｍｅｔｈｙｌｏｃａｌｄｕｍ  ｓｐ．  Ｔ−０２５））を好適に使用することができる。該微生物は、５０℃で生育可能であり、比増殖速度も高いという点で、有利である。
【００２１】
かかる好熱性メタン資化細菌の培養に使用する培養槽としては、例えば、通常の微生物培養槽に、メタンと空気の混合ガス供給装置或いは供給機構を備えているものが例示される。
【００２２】
好熱性メタン資化細菌の培養に使用する培地は、微生物の生育に通常必要とされる窒素、リン、硫黄、カリウム、マグネシウム、一定量の銅イオン、鉄イオン、その他対象メタン資化細菌に特有の微量元素を含む無機塩培地を用いることができ、合成培養液、天然培養液のいずれも用いることができる。尚、培養液中にメタンが供給されるため、その他の炭素源の添加は必須ではない。
【００２３】
本発明の培養方法においてメタン資化細菌の炭素源であるメタンは、メタンと空気との混合ガスとして培養液中に通気供給される。供給する該混合ガス中のメタン濃度は、通常１〜８０容量％、好ましくは５〜５０容量％、更に好ましくは２０容量％程度である。メタンは、その採取源については特に限定されず、例えば天然ガス田から産出されるメタン、液化天然ガス中のメタン、都市ガス中のメタン、廃水・廃棄物等のメタン発酵により得られるメタン等を使用できる。また、培養槽から排出されるガス中に培養液中に溶解せずに排出されたメタンが含まれている場合には、該排出ガスをそのまま或いは必要に応じてメタンを補充して、再度培養液中に通気供給することもできる。また、混合ガスは、空気の代わりに酸素を混合したものでもよい。
【００２４】
尚、メタンと空気（又は酸素）を混合することによる爆発の恐れを避けるために、混合ガスの代わりに、メタンと空気（又は酸素）を交互に供給してもよい。
【００２５】
本発明のメタン資化細菌の培養方法は、培養槽中に培地の供給及び培養液の抜き取りを実施することによって、培養液中の該細菌濃度の制御及び培養液の温度上昇の抑制を行う。即ち、該培養方法は、培養槽中に培地の供給及び培養液の抜き取りを行うことによって、培養液中のメタン資化細菌濃度を制御して効率的な培養を行い、併せて培養槽中でメタン資化により不可避的に生じる培養液の温度の上昇を培地の供給による吸熱及び培養液の抜き取りによる除熱によって抑制するものである。
【００２６】
かかる培養方法の一つの実施態様として、培地の供給、培養液の抜き取り及びメタンの通気供給を行うことによって、培養液中で所定範囲の細菌濃度を保ちつつ、更に培養槽中でメタン資化により生じる熱量を、培地の供給による吸熱及び培養液の抜き取りによる除熱に加えて、通気供給された混合ガスによる吸熱及び培養液の自然放熱によって相殺して培養槽中の熱量バランスを保持する培養方法を挙げることができる。ここでいう培養槽中の「熱量バランスをとる」或いは「熱量バランスを保持する」とは、培養液の温度に劇的な変化を与えない程度で熱量バランスを保つことであり、例えば培養液の温度が設定培養温度の±５℃程度、好ましくは±２℃程度、更に好ましくは±１℃程度の範囲内となるように熱量バランスを保つことである。このような範囲内で熱量バランスをとることによって、例えば一つの実施態様として、培養槽に大規模な冷却装置を要することなく、メタン資化細菌の培養が可能となる。
【００２７】
培養槽中への培地の供給及び培養液の抜き取り方法としては、例えば、培養を行いながら培養液の抜き取り及び培地の供給を逐次実施する方法や、培養を行いながら培養液の抜き取り及び培地の供給を同時に実施する方法等を挙げることができる。また例えば、培地の供給量と培養液の抜き取り量を全体として等しくなるように設定すると、培養を継続的に実施できる点で有利である。
【００２８】
尚、供給する培地の温度は、培養温度未満であればよいが、メタン資化により生じる培養液の温度の上昇抑制という観点からは、常温又はそれ以下であることが望ましい。
【００２９】
培地の供給及び培養液の抜き取り速度又は量は、所定範囲の菌体濃度を保持する範囲内で、メタン資化により生じる培養液の温度の上昇を抑制できるように設定される。好ましくは、培地の供給及び培養液の抜き取り速度又は量は、所定範囲の菌体濃度を保持する範囲内で、培養槽内でメタン資化により生じる熱量を、培地の供給による吸熱、培養液の抜き取りによる除熱、通気供給された混合ガスによる吸熱及び培養液の自然放熱によって相殺できるように、設定される。具体的には、かかる培地の供給及び培養液の抜き取り速度又は量は、その供給・抜き取り方法、使用する細菌の種類、培養液中の細菌濃度、メタン資化速度、培養温度、供給する培地の温度、混合ガスの供給方法及び量、培養液量、培養液の自然放熱量等に応じて適宜設定される。
【００３０】
例えば、培地の供給及び培養液の抜き取り速度又は量の目安として、培養液中のメタン資化細菌濃度が乾燥菌体重量に換算して１ｇ／ｍＬ以上、好ましくは５〜１５ｇ／ｍＬ程度となる範囲内で保たれるように、培養液の抜き取り及び培地の供給速度を設定することを挙げることができる。このような細菌濃度となるように制御することによって、より効率的な培養を行うことが可能となる。
【００３１】
また、例えば、培地の供給及び培養液の抜き取り速度又は量の目安として、滞留時間が、０．５〜１０日、好ましくは０．５〜５日、更に好ましくは１〜３日程度となる範囲を挙げることができる。
【００３２】
前述するように、培養液中に供給される混合ガスは、培養液への炭素源の供給に加えて、該混合ガスの吸熱によってメタン資化により生じる熱量の相殺にも寄与する。このようにメタン資化により生じる熱量を相殺するように混合ガスを供給するには、該混合ガスの供給速度を培養液量、培養槽の深さ、ガス中のメタンの混合割合、ガス分散の方法、培養温度、メタン資化細菌のメタン（及び酸素）利用速度等に応じて適宜設定すればよい。一例として、混合ガスの供給速度として、１Ｌの培養液に対して１日当たり供給ガス量が０．１〜１０Ｌ、好ましくは０．２〜５Ｌ、更に好ましくは０．４〜２Ｌとなる速度を挙げることができる。
【００３３】
培養液中に該混合ガスを通気供給する方法は特に制限されないが、メタン及び酸素の溶解効果及びメタン資化により生じる熱量の相殺効果の観点からは、培地中で微細な気泡を形成するように培養槽の深い位置から供給し、更に培養槽内部を激しく攪拌することが好ましい。
【００３４】
尚、培養槽中における培地の供給位置については特に制限されず、例えば培養槽中の培養液の水位より上部であってもよいし、また該水位より下部であってもよい。更に、培養液の抜き取り位置についても特に制限されず、例えば培養槽中の培養液の水位の上部、中部、又は下部のいずれであってもよい。好ましい一つの実施態様として、供給した培地が培養液中に拡散する前に抜き取られることのないように、培地供給位置及び培養液抜き取り位置が設定さているものが例示される。
【００３５】
培養温度は、使用する好熱性メタン資化細菌の生育可能温度又は生育至適温度、培養槽中の熱量バランス等に応じて適宜設定すればよい。一例として、培養温度が３０〜６５℃、好ましくは４０〜６５℃、更に好ましくは５０〜６５℃を挙げることができる。
【００３６】
また、培養中の培地のｐＨ、培養槽中の攪拌条件等のその他のパラメータについても、使用する好熱性メタン資化細菌の特性に応じて適宜調整することができる。
【００３７】
尚、効率的な培養という観点からは、メタン資化細菌の培養条件は、培養槽中の熱量バランスが保たれる範囲内で、培養槽中で培養するメタン資化細菌が高い比増殖速度を保持するように各種パラメータを設定することが望ましい。
【００３８】
斯くして培養されたメタン資化細菌は、タンパク質が菌体内に乾燥重量比で７０〜７５重量％程度と高い割合で含有されており、栄養価が高いので、飼料として有用である。故に、上記好熱性メタン資化細菌の培養液、該培養液から遠心分離や膜分離等の公知の菌体分離手段を用いて水分を分離したペースト状の菌体、該ペースト状の菌体を乾燥した乾燥菌体、或いは更に該乾燥菌体を破砕、粉砕又はペレット化等の加工したものを飼料として使用することができる。飼料の保存性や易運搬性の観点からは、乾燥状態のものが好ましい。
【００３９】
当該飼料は、給餌対象とする動物は特に制限されず、例えば、牛や豚等の家畜、家禽、養殖魚等の飼料として使用することができる。
【００４０】
また、当該飼料は、タンパク質含有量が高く、その栄養価が高いので、そのまま単独で飼料として使用してもよく、また配合飼料の一成分として配合して使用してもよい。
【００４１】
【実施例】
以下、実施例及び試験例により本発明をより詳細に説明する。ただし、本発明はかかる実施例等によって何ら制限されるものではない。
【００４２】
試験例１
メタン資化細菌として、Ｍｅｔｈｙｌｏｃａｌｄｕｍ属Ｔ−０２５株（ＦＥＲＭ  Ｐ−１８６４５）を用いて、該細菌の生育可能温度を検討するために、下記試験を行った。
【００４３】
１５ｍｌのＬ字型試験管に、下表１に示す無機塩培地７．２５ｍｌ及びＭｅｔｈｙｌｏｃａｌｄｕｍ属Ｔ−０２５株の前培養液０．２５ｍｌを添加し、試験管内の空気を空気：メタン＝４：１の混合ガスと置換後、密栓した。上記試験管を１１本準備し、各々を４８℃から５６℃の温度域で振とうしながら培養し、２０時間後の培地の濁度（ＯＤ）を測定した。
【００４４】
【表１】
2004208538.tif 000002
【００４５】
得られた結果を表２に示す。この結果、Ｍｅｔｈｙｌｏｃａｌｄｕｍ属Ｔ−０２５株は、４８〜５４℃の温度領域で良好に増殖できることが明らかとなった。
【００４６】
また、本試験において得られた菌体のタンパク質含有割合を測定した結果、乾燥重量比で７６重量％であった。従来飼料として用いられる菌体の一般的なタンパク質含有割合は乾燥重量比で６２〜６４重量％であるので、Ｍｅｔｈｙｌｏｃａｌｄｕｍ属Ｔ−０２５株は、タンパク質含有割合が高く、飼料として有用であることが確認された。
【００４７】
【表２】
2004208538.tif 000003
【００４８】
試験例２
Ｍｅｔｈｙｌｏｃａｌｄｕｍ属Ｔ−０２５株の比増殖速度を評価するために下記試験を行った。５００ｍｌ容量の三角フラスコに、１００ｍｌの表１に示す無機塩培地及びＭｅｔｈｙｌｏｃａｌｄｕｍ属Ｔ−０２５株の前培養液１ｍｌを入れ、フラスコ内の空気を空気：メタン＝４：１の混合ガスと置換後、密栓した。菌の生育に伴い消費されるメタン及び酸素を補うために、酸素：メタン＝１：１の混合ガスを２Ｌのガスバッグに入れ、これを三角フラスコに接続し、５０℃で３日間振とう培養を行った。比較として、同じ装置で、常温菌の代表株であるＭｅｔｈｙｌｏｓｉｎｕｓ  ｔｒｉｃｈｏｓｐｏｒｉｕｍ  ＯＢ３ｂ株（ＡＴＣＣ  Ｎｏ．  ３５０７０）を用いて、３０℃で３日間振とう培養を行った。両培養における対数増殖期の１時間当たりの比増殖速度（μ）を測定した。
【００４９】
この結果、Ｍｅｔｈｙｌｏｃａｌｄｕｍ属Ｔ−０２５株の培養では、比増殖速度（μ）が０．１７／時間であったのに対して、Ｍｅｔｈｙｌｏｓｉｎｕｓ  ｔｒｉｃｈｏｓｐｏｒｉｕｍ  ＯＢ３ｂ株の培養では比増殖速度（μ）が０．０８／時間であることが確認された。この結果から、Ｍｅｔｈｙｌｏｃａｌｄｕｍ属Ｔ−０２５株を利用すると比増殖速度が常温菌に比して２倍程度であり、該細菌は優れた増殖特性を有していることが明らかとなった。
【００５０】
実施例１
１００ｍｌの培養槽を用いて、下記条件でＭｅｔｈｙｌｏｃａｌｄｕｍ属Ｔ−０２５株の培養を行うと、定常状態では１日当たりの総メタン資化量は５００ｍｇ程度となり、培養液中の菌濃度が乾燥菌体重量で約１０ｇ／Ｌとなる。
【００５１】
培地：  無機塩培地（表１）１００ｍ３
混合ガス：  メタン：空気＝１：５
混合ガス供給速度：０．２Ｌ／日
培養温度：  ５０℃
滞留時間：  １日（１００ｍｌ／日の速度で連続的に培地の供給及び抜き取りを行う。）
本培養における供給する培地を５０℃まで昇温するのに必要な１日当たりの熱量は１００×（５０−２０）＝３０００ｃａｌ程度であるのに対して、メタン資化により発生する１日当たりの熱量（１日当たり資化されるメタンの量は５００ｍｇ程度）は５００／１６×１０１＝３１５６ｃａｌ程度であるので、両者の熱量の差は１５０ｃａｌ程度と、混合ガスの供給による吸熱や自然放熱で相殺される程度の熱量の差である。このように、本培養では、培養槽内の熱量バランスが保たれるので、特段の冷却装置を使用することなく、培養温度を制御することが可能である。
【００５２】
比較例１
生育温度３０℃である通常のメタン資化細菌（Ｍｅｔｈｙｌｏｓｉｎｕｓ  ｔｒｉｃｈｏｓｐｏｒｉｕｍ  ＯＢ３ｂ株（ＡＴＣＣ  Ｎｏ．  ３５０７０））を用いて、培養温度を３０℃とする以外は実施例１と同様の培養を行うと、培養槽内の熱量バランスをとることができず、その結果、培養液の温度の顕著な上昇がみられるため、冷却装置を使用して培養温度を制御する必要がある。
【００５３】
本培養における熱量バランスとしては、供給する培地を３０℃まで昇温するのに必要な１日当たりの熱量は１００×（３０−２０）＝１０００ｃａｌ程度であるのに対して、メタン資化により発生する１日当たりの熱量（１日当たり資化されるメタンの量は５００ｍｇ程度）は５００／１６×１０１＝３１５６ｃａｌ程度である。故に、メタン資化による発熱量と培地の供給による吸熱量の差は２５００ｃａｌ程度と、混合ガスの供給による吸熱や自然放熱で相殺できる熱量の範囲を超えており、該熱量差を相殺するのに多大なエネルギー（冷却）を要する。
【００５４】
【発明の効果】
本発明のメタン資化細菌の培養方法によれば、培養槽中に培地の供給及び培養液の抜き取りを行うことによって、培養液中の該細菌濃度を制御して培養効率を向上させることができる。更に、本発明のメタン資化細菌の培養方法によれば、培養槽中に培地の供給及び培養液の抜き取りを行うことによって、細菌濃度の制御と供に、メタン資化細菌の培養で問題となる培養液の温度上昇を抑制することができる。そして更に、本発明の培養方法によれば、培養槽中でメタン資化により生じる熱量を、通気供給された混合ガスによる吸熱、供給された培地による吸熱、培養液の抜き取りによる除熱及び培養液の自然放熱で相殺して、培養槽中の熱量バランスをとることができる。従って、本発明の一つの実施態様として、大規模な冷却装置を使用することなく、メタン資化細菌を効率的に培養することが可能となる。
【００５５】
また、本発明の培養方法で得られるメタン資化細菌は、タンパク質含量が乾燥重量で通常７０〜７６重量％程度と高い割合で含有されており、栄養価が高いため飼料として有用であり、飼料効率（増体重効果）の高い飼料として期待される。
【００５６】
更に、本発明の飼料は、地球上に豊富に存在し、また量的にも価格的にも安定して供給される天然ガスを原料として生産されるという点においても有用がある。