(57)【要約】【課題】美白効果、メラニン生成抑制効果に優れた有効成分を配合した皮膚外用剤を提供する。【解決手段】ナンバンヤナギ（Ｈｏｍｏｎｏｉａ  ｒｉｐａｒｉａ  Ｌｏｕｒ．）抽出物を有効成分とする皮膚外用剤を提供することにより上記課題を解決することを見出した。【選択図】    なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ナンバンヤナギ（Ｈｏｍｏｎｏｉａ  ｒｉｐａｒｉａ  Ｌｏｕｒ．）抽出物を含有することを特徴とする皮膚外用剤。
【請求項２】
前記抽出物の含有量が皮膚外用剤全量に対して０．０００１〜１０．０重量％であることを特徴とする請求項１記載の皮膚外用剤。
【請求項３】
前記皮膚外用剤が美白化用皮膚外用剤であることを特徴とする請求項１または２記載の皮膚外用剤。
【請求項４】
ナンバンヤナギ（Ｈｏｍｏｎｏｉａ  ｒｉｐａｒｉａ  Ｌｏｕｒ．）抽出物からなるメラニン生成抑制剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、皮膚外用剤に関する。さらに詳しくは、皮膚美白効果が著しく改良された安全性の高い皮膚外用剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
皮膚のしみの発生機序については、日光からの紫外線の刺激やホルモンの異常が原因となってメラニン色素が形成され皮膚内に異常沈着するものと考えられている。メラニン色素は、メラノサイト内のメラノソームにおいて産生される。メラノサイト内では、必須アミノ酸であるチロシンがチロシナーゼの作用によりドーパキノンとなり、これが酵素的又は非酵素的酸化作用により赤色色素及び無色色素を経て黒色のメラニンへ変化する。メラニンの生成を抑制する化合物としてはハイドロキノンがあるが、感作性があるため一般に使用できない。高級脂肪酸のモノエステルやアルキルエーテルなどの誘導体も検討されてきたが安全性上十分とはいえない。天然物由来のものとして、コウジ酸、エラグ酸、アルブチンなどが検討されてきた。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】
しかしながら、これらのものの多くは、安全性、安定性、匂い、有効性、コスト性等の面において問題があり、未だ充分に満足のいくものではなかった。
【０００４】
本発明者らは、以上のような現状に鑑み、真に優れた美白効果を有する皮膚外用剤を得るべく鋭意研究を重ねた結果、ナンバンヤナギ（Ｈｏｍｏｎｏｉａ  ｒｉｐａｒｉａ  Ｌｏｕｒ．）抽出物を配合する皮膚外用剤に優れた美白効果が得られることを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
すなわち、本発明は、ナンバンヤナギ（Ｈｏｍｏｎｏｉａ  ｒｉｐａｒｉａ  Ｌｏｕｒ．）抽出物を含有することを特徴とする皮膚外用剤を提供するものである。
【０００６】
また、本発明は、前記抽出物の含有量が皮膚外用剤全量に対して０．０００１〜１０．０重量％であることを特徴とする前記の皮膚外用剤を提供するものである。
【０００７】
さらに、本発明は、前記皮膚外用剤が美白用皮膚外用剤であることを特徴とする前記の皮膚外用剤を提供するものである。
【０００８】
また、本発明は、ナンバンヤナギ（Ｈｏｍｏｎｏｉａ  ｒｉｐａｒｉａ  Ｌｏｕｒ．）抽出物からなるメラニン生成抑制剤を提供するものである。
【０００９】
【発明の実施の形態】
以下、本発明の構成について詳述する。
【００１０】
本発明で使用されるナンバンヤナギ（Ｈｏｍｏｎｏｉａ  ｒｉｐａｒｉａ  Ｌｏｕｒ．）とは、トウダイグサ科ナンバンヤナギ属の植物で、インドから東南アジア、中国南部に分布する。
【００１１】
ナンバンヤナギ抽出物は、根を使用し、調製方法は特に限定されないが、生又は乾燥した根を種々の溶媒を用い、低温から加温下において抽出する方法があげられる。
【００１２】
具体的に抽出溶媒としては、水、メタノール、エタノール等の低級一価アルコール、グリセリン、プロピレングリコール、ジプロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール等の液状多価アルコール、酢酸エチル等の低級アルキルエステルが例示され、これらの一種又は二種以上の混合溶媒を用いることができる。
【００１３】
本発明で使用する抽出物は、そのまま用いてもよいが、必要に応じてろ過、濃縮してもよい。また、抽出物をカラムクロマト法、向流分配法等により、分画、精製して用いることもできる。
【００１４】
更に、上記のものを減圧乾燥又は凍結乾燥した後、粉末又はペースト状に調製し、適宜製剤化して用いることもできる。
【００１５】
抽出物の配合量は、特に限定はないが、一般に皮膚外用剤全量に対して、乾燥固形物に換算して０．０００１〜１０．０重量％、好ましくは０．００１〜５．０重量％、特に好ましくは０．０１〜３．０重量％である。配合量が０．０００１重量％未満では皮膚外用剤の美白効果が乏しくなる傾向にあり、逆に１０．０重量％を越えて配合しても効果の増加は実質上望めないし、皮膚外用剤への配合も難しくなる傾向にある。
【００１６】
本発明の皮膚外用剤は、上記抽出物の他に通常化粧品や医薬品等の皮膚外用剤に用いられる他の成分、例えば、油分、湿潤剤、紫外線防止剤、酸化防止剤、界面活性剤、防腐剤、保湿剤、香料、水、アルコール、増粘剤の他、細胞賦活剤、皮脂分泌調整剤、消炎剤、収斂剤、抗酸化剤、美白剤、活性酸素抑制剤、抗アレルギー剤等、さらに生理活性作用を有する動植物抽出物及びこれらの抽出分画、精製物を必要に応じて適宜配合し、剤型に応じて常法により製造することができる。
【００１７】
本発明の皮膚外用剤の剤型は、任意であり、化粧水などの可溶化系、乳液、クリームなどの乳化系、または、軟膏、分散液、粉末系などの従来皮膚外用剤に用いられる何れの剤型でもかまわない。また、一般皮膚化粧料に限定されるものではなく、医薬品、医薬部外品、薬用化粧料等を包含するものである。用途も、化粧水、乳液、クリーム、パック等の基礎化粧料、ファンデーション等のメークアップ化粧料、シャンプー、リンス、石けん、ボディーシャンプーなどのトイレタリー製品、浴用剤等を問わない。
【００１８】
次に実施例を挙げて本発明を詳しく説明するが、本発明は、これらの実施例に限定されるものではない。以下の実施例において重量％は、単に％とする。
【００１９】
（ナンバンヤナギ抽出物製造例１）
ナンバンヤナギの根の乾燥物２０ｇに５０ｖｏｌ％エタノール溶液３００ｇを加え、５０℃にて８時間抽出し、冷後、ろ過して抽出物を製した。製品の蒸発残留物は、１．２４％であった。
【００２０】
（ナンバンヤナギ抽出物製造例２）
ナンバンヤナギの根の乾燥物２０ｇに７０ｖｏｌ％エタノール３００ｇを加え、室温で５日間抽出した。これをろ過し、濃縮乾固する。５０％１，３−ブチレングリコール溶液３００ｇに加温溶解し、抽出物を製した。製品の蒸発残留物は、１．１２％であった。
【００２１】
（ナンバンヤナギ抽出物製造例３）
ナンバンヤナギの根の乾燥物２００ｇに５０ｖｏｌ％エタノール溶液３０００ｇを加え、５０℃にて８時間抽出した。冷後ろ過した後、濃縮し、合成吸着体ダイヤイオンＨＰ−２０を充填したカラムに通液した。水洗後、５０ｖｏｌ％エタノール溶液にて溶出し、溶出液を減圧乾固後、５０％１，３−ブチレングリコール溶液５００ｇに溶解し、抽出物を製した。製品の蒸発残留物は、３．１７％であった。
【００２２】
（ナンバンヤナギ抽出製造例４）
ナンバンヤナギの根の乾燥物２００ｇにエタノール３０００ｇを加え、室温にて５日間攪拌抽出を行い、冷後ろ過した後、濃縮乾固した。乾固物を３０ｖｏｌ％エタノール溶液５００ｇに溶解し、不溶物を除去した。さらに濃縮乾固し、７０ｖｏｌ％エタノール溶液５００ｇに溶解し抽出物を製した。製品の蒸発残留物は、２．３８％であった。
【００２３】
（ナンバンヤナギ抽出物製造例５）
ナンバンヤナギの根の乾燥物２００ｇに５０ｖｏｌ％エタノール溶液３０００ｇを加え、５０℃にて８時間抽出し、冷後、ろ過した後、濃縮、凍結乾燥しエキス末３５．１ｇを製した。
【００２４】
（試験例１）メラニン生成抑制効果試験
マウス由来Ｂ１６メラノーマ細胞を５％ＦＢＳ及びテオフィリン（０．５ｍＭ）を含むＤＭＥＭ培地を用いて、３５ｍｍのシャーレに５×１０４ｃｅｌｌｓずつ播種し、５％ＣＯ２にて３７℃２４時間培養した。その後、０．５ｍＭテオフィリン含有５％ＦＢＳ−ＤＭＥＭ２ｍＬと各濃度に溶解した試験試料（ナンバンヤナギ抽出物製造例３のエキス末をＤＭＳＯに１０％溶解し、さらにＰＢＳ（−）にて希釈して濃度調整）２０μＬ加え、さらに３７℃にて３日間培養した。培地を除去し、ＰＢＳ（−）で２回洗浄後、トリプシン−ＥＤＴＡを用いて細胞を剥離し、１．５ｍＬチューブに入れ、２５℃、１２０００回転、１０分間遠心操作し、細胞ペレットを作成した。コントロールには、２０μＬのＰＢＳ（−）を用いた。又、比較例としてチロシナーゼ活性阻害が高いことが知られているソウハクヒ抽出物（ナンバンヤナギ抽出物製造例５と同様に製造）についても上記と同様の試験を行った。評価は、下記の評価基準にて行なった。
【００２５】
＜評価基準＞
細胞ペレットの色調
０−コントロールと同様な黒色
１−コントロールに比べわずかに薄い黒色
２−コントロールに比べて明瞭に薄い黒色
３−灰色に近い黒色
４−灰色
５−白色
細胞ペレットの量
１−コントロールに比べ明瞭に少ない
２−コントロールに比べわずかに少ない
３−コントロールと同量
試験結果を表１に示す。
【００２６】
【表１】
2004182709.tif 000002
【００２７】
表１に示したように、ナンバンヤナギ抽出物にはメラニン生成抑制効果が見られ、細胞毒性も少なかったのに対して、ソウハクヒ抽出物には、メラニン生成抑制効果は認められず、細胞毒性も大きい結果であった。
【００２８】
（試験例２）チロシナーゼ活性阻害作用
試験試料は、抽出物製造例３を用い、精製水にて希釈して使用した。５％ＦＢＳ含有ＤＭＥＭ培地を用い、マウス由来Ｂ１６メラノーマ培養細胞を９６穴プレートに３×１０３ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌの密度で播種し、３７℃、５％ＣＯ２にて２４時間培養した後、試験試料の各濃度を添加し、３７℃、５％ＣＯ２にてさらに２４時間培養した。チロシナーゼ活性の測定前にｗｅｌｌ中の培地は除去し、ＰＢＳ（−）１００μＬで２回洗浄した。各ｗｅｌｌ中に４５μＬ１％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００を含むＰＢＳを加え、１分間プレートを振動させ、細胞膜を破壊し、その後、基質として１０ｍＭのＬ−ＤＯＰＡ溶液１００μＬを加えて、３７℃にて３時間反応させ、マイクロプレートリーダーにて波長４７５ｎｍにおける吸光度を測定し、生成したメラニン量を定量した。また同時にＬｏｗｒｙ法にて細胞の蛋白量を測定し、単位蛋白量あたりのメラニン量を算出した。対照として試料溶液を添加しない細胞を用い、式１にてチロシナーゼ活性抑制率とした。その結果を表２に記す。
【式１】
チロシナーゼ活性抑制率（％）＝（Ａ−Ｂ）／Ａ  ×１００
【００２９】
【表２】
2004182709.tif 000003
【００３０】
（試験例３）美白効果試験
夏期の太陽光に４時間（１日２時間２日間）晒された２０〜２５歳の健常な男女各２５名を被験者とし、左右上腕内側部皮膚を対象として太陽光に晒された日の５日後より、各皮膚外用剤を朝夕１回ずつ４週間塗布した。皮膚外用剤の処方は下記に示す。
【００３１】
（美白効果用皮膚外用剤）
下記成分（１）〜（１０）、別に下記成分（１１）〜（１６）を７５℃に加温溶解しそれぞれＡ液及びＢ液とする。Ａ液にＢ液を加えて乳化し、攪拌しながら冷却し、クリームを調製した。
2004182709.tif 000004
【００３２】
使用後の淡色化効果を下記の判定基準に基づいて判定した。
【００３３】
（判定基準）
有効    ：コントロールに比較して明らかな淡色化効果が認められた
やや有効：コントロールに比較して淡色化効果が認められた
効果なし：コントロールとほぼ同程度であった
なお、コントロールは薬剤無添加の場合とし、比較例として美白効果の認められているアルブチンを使用した。結果を表３に示す。
【００３４】
【表３】
2004182709.tif 000005
【００３５】
表４から明らかなように、比較例に比べてナンバンヤナギを配合した皮膚外用剤は、優れた皮膚美白効果を有することが認められた。
【００３６】
以下に、本発明による美白用皮膚外用剤の実施例を示す。いずれの実施例も美白効果を有し、安全性の高い皮膚外用剤であった。
【００３７】
下記成分（１）〜（１０）、別に下記成分（１１）〜（１７）を７５℃に加温溶解しそれぞれＡ液及びＢ液とする。Ａ液にＢ液を加えて乳化し、攪拌しながら５０℃まで冷却した後、（１８）を加え、クリームを調製した。
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【００３８】
（実施例２）化粧水
下記成分（６）〜（９）を混合溶解させＡ液とし、これとは別に下記成分（１）〜（５）及び（１０）を混合溶解させてＢ液とし、Ａ液とＢ液を均等に混合し、化粧水を調製した。
2004182709.tif 000007
【００３９】
（実施例３）乳液
下記成分（１）〜（１０）、別に（１１）〜（１４）及び（１６）を７５℃で加熱溶解させてそれぞれＡ液及びＢ液とし、Ａ液にＢ液を加えて乳化し、攪拌しながら５０℃まで冷却し、成分（１５）を加え、乳液を調製した。
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【００４０】
（実施例４）石けん
石けん製造の定法により下記成分を混合し製した。
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【００４１】
（実施例５）クレンジングジェル
下記成分（１）〜（３）、別に（４）〜（６）及び（８）を７０℃に加熱溶解させてそれぞれＡ液及びＢ液とし、Ａ液にＢ液を加えて均一になるまで攪拌する。攪拌しながら５０℃まで冷却し、成分（７）を加えてクレンジングジェルを製した。
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【００４２】
（実施例６）パック剤
Ａ相、Ｂ相、Ｃ相をそれぞれ均一に溶解し、Ａ相にＢ相を加えて可溶化し、次いでＣ相を加えて均一に溶解し、製する。
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【００４３】
（実施例７）乳化型ファンデーション
下記成分（１）〜（６）を充分に混合粉砕した粉末部をＡとし、（７）（８）をＢ液、（９）〜（１２）及び（１４）をＣ液とする。Ｃ液を加熱攪拌後、Ａを添加しホモミキサー処理し、さらに過熱混合したＢ液を加えてホモミキサー処理する。攪拌しながら５０℃まで冷却し、（１３）を加え、さらに室温まで冷却して製する。
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【００４４】
（実施例８）固形ファンデーション
下記成分（１）〜（８）をブレンダーで均一に混合し、これに（９）〜（１４）を加え、よく混練して製する。
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【００４５】
【発明の効果】
本発明のナンバンヤナギ抽出物は、優れたメラニン生成抑制効果を有し、これを配合した皮膚外用剤は、皮膚美白効果が著しく改良された安全性の高い皮膚外用剤である。