(57)【要約】【課題】  キートセラス等の珪藻を高濃度、例えば４．０×１０１３セル／ｍ３以上の高濃度で安定して培養する。【解決手段】  珪藻を含む液体。その液体の成分としてリン、窒素およびケイ素を含有し、当該ケイ素および窒素の質量濃度比を表すケイ素／窒素が０．１８を超える値に設定されている。【選択図】      なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
珪藻を含む液体であって、
前記液体の成分として窒素およびケイ素を含有し、当該ケイ素および窒素の質量濃度比を表すケイ素／窒素が０．１８を超える値に設定されたことを特徴とする珪藻を含む液体。
【請求項２】
前記液体のｐＨが６．４以上であることを特徴とする請求項１記載の珪藻を含む液体。
【請求項３】
前記液体のｐＨが８．４以下であることを特徴とする請求項１または２記載の珪藻を含む液体。
【請求項４】
珪藻を含む液体であって、
前記液体の成分としてリン、窒素およびケイ素を含有し、当該リンおよび窒素の質量濃度比を表すリン／窒素と前記ケイ素および窒素の質量濃度比を表すケイ素／窒素とがそれぞれ０．１以上に設定されたことを特徴とする珪藻を含む液体。
【請求項５】
前記液体のｐＨが６．４以上であることを特徴とする請求項４記載の珪藻を含む液体。
【請求項６】
前記液体のｐＨが８．４以下であることを特徴とする請求項４または５記載の珪藻を含む液体。
【請求項７】
珪藻を含む液体であって、
前記液体の成分としてリン、窒素およびケイ素を含有し、当該液体のｐＨが６．４以上８．４以下であることを特徴とする珪藻を含む液体。
【請求項８】
前記リンおよび窒素の質量濃度比を表すリン／窒素が０．０６以上、および前記ケイ素および窒素の質量濃度比を表すケイ素／窒素が０．１８以上に設定されたことを特徴とする請求項７記載の珪藻を含む液体。
【請求項９】
前記リンおよび窒素の質量濃度比を表すリン／窒素および前記ケイ素および窒素の質量濃度比を表すケイ素／窒素がそれぞれ０．１以上に設定されたことを特徴とする請求項７記載の珪藻を含む液体。
【請求項１０】
前記液体成分として炭酸水素塩を含有することを特徴とする請求項１乃至９の内の何れか１項記載の珪藻を含む液体。
【請求項１１】
前記液体成分として炭酸水素アルカリ金属塩を含有することを特徴とする請求項１乃至９の内の何れか１項記載の珪藻を含む液体。
【請求項１２】
前記液体成分として炭酸水素ナトリウムを含有することを特徴とする請求項１乃至９の内の何れか１項記載の珪藻を含む液体。
【請求項１３】
前記珪藻は、前記液体に接種された所定量の珪藻が当該液体内において培養されたものであり、前記珪藻接種前の液体中のケイ素の濃度は、当該珪藻を培養した際に予め測定された培養前後のケイ素の濃度差に対応する前記珪藻のケイ素消費量と前記培養前後の窒素の濃度差に対応する前記珪藻の窒素消費量との比率に略一致するように決定されたことを特徴とする請求項１乃至１２の内の何れか１項記載の珪藻を含む液体。
【請求項１４】
前記珪藻は、前記液体に接種された所定量の珪藻が当該液体内において培養されたものであり、
前記珪藻接種前の液体中のリンの濃度は、当該珪藻を培養した際に予め測定された培養前後のリンの濃度差に対応する前記珪藻のリン消費量と前記培養前後の窒素の濃度差に対応する前記珪藻の窒素消費量との比率に略一致するように決定されたことを特徴とする請求項１乃至１２の内の何れか１項記載の珪藻を含む液体。
【請求項１５】
前記培養された珪藻のセル濃度は４．０×１０１３セル／ｍ３以上であることを特徴とする請求項１乃至１４の内の何れか１項記載の珪藻を含む液体。
【請求項１６】
前記珪藻がキートセラス属およびフェオダクチルム属の内の何れか一方の属に分類されることを特徴とする請求項１乃至１５の内の何れか１項記載の珪藻を含む液体。
【請求項１７】
液体成分として窒素およびケイ素を含有し、かつ当該ケイ素および窒素の質量濃度比を表すケイ素／窒素が０．１８を超える値に設定された液体中において培養されたことを特徴とする珪藻。
【請求項１８】
前記液体のｐＨが６．４以上８．４以下であることを特徴とする請求項１７記載の珪藻。
【請求項１９】
液体成分としてリン、窒素およびケイ素を含有し、かつ当該リンおよび窒素の質量濃度比を表すリン／窒素と前記ケイ素および窒素の質量濃度比を表すケイ素／窒素とがそれぞれ０．１以上に設定された液体中において培養されたことを特徴とする珪藻。
【請求項２０】
前記液体のｐＨが６．４以上８．４以下であることを特徴とする請求項１９記載の珪藻。
【請求項２１】
液体成分としてリン、窒素およびケイ素を含有し、当該液体のｐＨが６．４以上８．４以下である液体中に培養されたことを特徴とする珪藻。
【請求項２２】
前記リンおよび窒素の質量濃度比を表すリン／窒素が０．０６以上、および前記ケイ素および窒素の質量濃度比を表すケイ素／窒素が０．１８以上に設定されたことを特徴とする請求項２１記載の珪藻。
【請求項２３】
前記リンおよび窒素の質量濃度比を表すリン／窒素および前記ケイ素および窒素の質量濃度比を表すケイ素／窒素がそれぞれ０．１以上に設定されたことを特徴とする請求項２１記載の珪藻。
【請求項２４】
前記液体成分として炭酸水素塩を含有することを特徴とする請求項１７乃至２３の内の何れか１項記載の珪藻。
【請求項２５】
前記液体成分として炭酸水素アルカリ金属塩を含有することを特徴とする請求項１７乃至２３の内の何れか１項記載の珪藻。
【請求項２６】
前記液体成分として炭酸水素ナトリウムを含有することを特徴とする請求項１７乃至２３の内の何れか１項記載の珪藻。
【請求項２７】
前記培養された珪藻のセル濃度は４．０×１０１３セル／ｍ３以上であることを特徴とする請求項１７乃至２６の内の何れか１項記載の珪藻。
【請求項２８】
前記珪藻がキートセラス属およびフェオダクチルム属の内の何れか一方の属に分類されることを特徴とする請求項１７乃至２７の内の何れか１項記載の珪藻。
【請求項２９】
液体成分として窒素およびケイ素を含有し、当該ケイ素および窒素の質量濃度比を表すケイ素／窒素が０．１８を超える値に設定された液体を用意し、
用意された液体に所定のセル濃度を有する珪藻を接種し、当該接種された珪藻を当該液体内で培養することを特徴とする珪藻の培養方法。
【請求項３０】
液体成分としてリン、窒素およびケイ素を含有し、当該リンおよび窒素の質量濃度比を表すリン／窒素と前記ケイ素および窒素の質量濃度比を表すケイ素／窒素とがそれぞれ０．１以上に設定された液体を用意し、
用意された液体に所定のセル濃度を有する珪藻を接種し、当該接種された珪藻を当該液体内で培養することを特徴とする珪藻の培養方法。
【請求項３１】
液体成分として窒素およびケイ素を含有する珪藻培養用の液体を用いて珪藻を培養する珪藻の培養方法であって、
珪藻接種前の液体における窒素およびケイ素の濃度をそれぞれ測定し、
前記液体に珪藻を接種し、当該接種された珪藻を当該液体内で培養し、
所定のタイミングにおいて前記液体成分を前記液体内に追肥する際に、その追肥前における前記液体内の窒素およびケイ素の濃度をそれぞれ測定し、
前記珪藻接種前に測定された窒素濃度および前記追肥前において測定された窒素濃度の差と、前記珪藻接種前に測定されたケイ素濃度および前記追肥前において測定されたケイ素濃度の差とをそれぞれ求め、
前記追肥前における前記液体内の窒素濃度およびケイ素濃度の比率が一定になるように、前記求められた窒素濃度差およびケイ素濃度差に基づき追肥する液体の窒素量およびケイ素量をそれぞれ決定し、
前記追肥する液体を、前記決定した窒素量およびケイ素量となるように調製し、調製された液体を前記液体内に追肥する
ことを特徴とする珪藻の培養方法。
【請求項３２】
液体成分として窒素およびケイ素をそれぞれ所定濃度含有する珪藻培養用の液体内に接種された珪藻を培養する珪藻の培養方法であって、
所定のタイミングにおいて前記液体成分を含有した追肥用培養液を追肥する際に、その追肥前における前記液体内の窒素およびケイ素の濃度をそれぞれ測定し、
前記液体における前記窒素の所定濃度および前記追肥前において測定された窒素濃度の差と、前記液体における前記ケイ素の所定濃度および前記追肥前において測定されたケイ素濃度の差とをそれぞれ求め、
前記追肥前における前記液体内の窒素濃度およびケイ素濃度の比率が一定になるように、前記求められた窒素濃度差およびケイ素濃度差に基づき追肥する液体の窒素量およびケイ素量をそれぞれ決定し、
前記追肥する液体を、前記決定した窒素量およびケイ素量となるように調製し、調製された液体を前記液体内に追肥する
ことを特徴とする珪藻の培養方法。
【請求項３３】
液体成分として窒素およびケイ素を含有する珪藻培養用の液体を用いて珪藻を培養する珪藻の培養方法であって、
前記液体に珪藻を接種し、当該珪藻接種後の液体における窒素およびケイ素の濃度をそれぞれ測定し、
前記液体内に接種された珪藻を当該液体内で培養し、
所定のタイミングにおいて前記液体成分を前記液体内に追肥する際に、その追肥前における前記液体内の窒素およびケイ素の濃度をそれぞれ測定し、
前記珪藻接種後に測定された窒素濃度および前記追肥前において測定された窒素濃度の差と、前記珪藻接種後に測定されたケイ素濃度および前記追肥前において測定されたケイ素濃度の差とをそれぞれ求め、
前記追肥前における前記液体内の窒素濃度およびケイ素濃度の比率が一定になるように、前記求められた窒素濃度差およびケイ素濃度差に基づき追肥する液体の窒素量およびケイ素量をそれぞれ決定し、
前記追肥する液体を、前記決定した窒素量およびケイ素量となるように調製し、調製された液体を前記液体内に追肥する
ことを特徴とする珪藻の培養方法。
【請求項３４】
液体成分として窒素およびケイ素を含有する珪藻培養用の液体内に接種された珪藻を培養する珪藻の培養方法であって、
前記珪藻が接種された液体における窒素およびケイ素の濃度をそれぞれ測定し、
前記接種された珪藻を前記液体内で培養し、
所定のタイミングにおいて前記液体成分を前記液体内に追肥する際に、その追肥前における前記液体内の窒素およびケイ素の濃度をそれぞれ測定し、
前記珪藻接種後に測定された窒素濃度および前記追肥前において測定された窒素濃度の差と、前記珪藻接種後に測定されたケイ素濃度および前記追肥前において測定されたケイ素濃度の差とをそれぞれ求め、
前記追肥前における前記液体内の窒素濃度およびケイ素濃度の比率が一定になるように、前記求められた窒素濃度差およびケイ素濃度差に基づき追肥する液体の窒素量およびケイ素量をそれぞれ決定し、
前記追肥する液体を、前記決定した窒素量およびケイ素量となるように調製し、調製された液体を前記液体内に追肥する
ことを特徴とする珪藻の培養方法。
【請求項３５】
前記液体は該液体の成分としてリンを含んでおり、
前記窒素濃度およびケイ素濃度測定ステップは、前記液体における前記窒素およびケイ素の濃度に加えて、前記リンの濃度を測定するステップであり、
前記濃度の差を求めるステップは、前記窒素の濃度差および前記ケイ素の濃度差に加えて、前記窒素濃度およびケイ素濃度測定ステップにより測定されたリン濃度および前記追肥前において測定されたリン濃度の差を求めるステップであり、
前記決定ステップは、前記追肥前における前記液体内の窒素濃度およびケイ素濃度の比率、および前記追肥前における前記液体内の窒素濃度およびリン濃度の比率がそれぞれ一定になるように、前記求められた窒素濃度差、ケイ素濃度差およびリン濃度差から追肥する成分の窒素量、ケイ素量およびリン量をそれぞれ決定するステップであり、
前記追肥ステップは、前記追肥する液体を、前記決定した窒素量、ケイ素量およびリン量となるように調製し、調製された追肥用液体を前記液体内に追肥するステップであることを特徴とする請求項３１乃至３４の内の何れか１項記載の珪藻の培養方法。
【請求項３６】
前記液体内における前記ケイ素および窒素の濃度の比率と前記リンおよび窒素の濃度の比率とが、それぞれ０．１以上であることを特徴とする請求項３５記載の珪藻の培養方法。
【請求項３７】
前記接種された珪藻の培養を行うステップは、前記液体のｐＨを６．４以上８．４以下に維持しながら当該培養を行うステップであることを特徴とする請求項２９乃至３６の内の何れか１項記載の珪藻の培養方法。
【請求項３８】
前記液体は、前記液体成分として炭酸水素塩を含有することを特徴とする請求項２９乃至３７の内の何れか１項記載の珪藻の培養方法。
【請求項３９】
前記液体は、前記液体成分として炭酸水素アルカリ金属塩を含有することを特徴とする請求項２９乃至３７の内の何れか１項記載の珪藻の培養方法。
【請求項４０】
前記液体は、前記液体成分として炭酸水素ナトリウムを含有することを特徴とする請求項２９乃至３７の内の何れか１項記載の珪藻の培養方法。
【請求項４１】
前記接種された珪藻の培養を行うステップは、前記液体内に気体を通気しながら行うステップであることを特徴とする請求項２９乃至４０の内の何れか１項記載の珪藻の培養方法。
【請求項４２】
前記珪藻接種前の液体中のケイ素の質量濃度は、予め当該珪藻を培養した際に測定された培養前後のケイ素の濃度差に対応する前記珪藻のケイ素消費量と前記培養前後の窒素の濃度差に対応する前記珪藻の窒素消費量との比率に一致するように決定されたことを特徴とする請求項２９乃至４１の内の何れか１項記載の珪藻の培養方法。
【請求項４３】
前記珪藻接種前の液体中のリンの質量濃度は、予め当該珪藻を培養した際に測定された培養前後のリンの濃度差に対応する前記珪藻のリン消費量と前記培養前後の窒素の濃度差に対応する前記珪藻の窒素消費量との比率に一致するように決定されたことを特徴とする請求項３０、３５および３６記載の珪藻の培養方法。
【請求項４４】
前記培養された珪藻のセル濃度は４．０×１０１３セル／ｍ３以上であることを特徴とする請求項２９乃至４３の内の何れか１項記載の珪藻の培養方法。
【請求項４５】
前記珪藻がキートセラス属およびフェオダクチルム属の内の何れか一方の属に分類されることを特徴とする請求項２９乃至４３の内の何れか１項記載の珪藻の培養方法。
【請求項４６】
液体成分として窒素およびケイ素を含有する珪藻培養用の液体内に接種された珪藻を培養する珪藻の培養方法であって、
前記珪藻接種後の液体のセル濃度を所定のタイミング毎に測定し、
測定されたセル濃度が所定のセル濃度を越えた際に、前記液体内に追肥する追肥用液体を、その追肥用液体に含まれる窒素量およびケイ素量の比率が、予め求められた前記珪藻の窒素消費量とケイ素消費量との比率に略一致するように調製し、
調製された追肥用液体を前記液体内に追肥することを特徴とする珪藻の培養方法。
【請求項４７】
前記液体は該液体成分としてリンを含んでおり、
前記調製ステップは、前記液体内に追肥する追肥用液体を、その追肥用液体に含まれる窒素量とケイ素量との比率に加えて、該窒素量とリン量との比率が、予め求められた前記珪藻の窒素消費量とケイ素消費量との比率に略一致するように調製するステップであることを特徴とする請求項４６記載の珪藻の培養方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、カキ、アコヤ貝等の貝類、クルマエビ、ヨシエビ等の甲殻類、ナマコ、ウニ等の棘皮類等の水産種苗の餌料に用いられる微細藻類の珪藻、その珪藻を含む液体および珪藻の培養方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
貝類、甲殻類、棘皮類等の水産種苗を養殖する際の餌料として、近年、キートセラス（Chaetoceros）属、フェオダクチルム（Phaeodactylum）属等に分類される微細藻類の珪藻（例えば、キートセラス属のキートセラス・カルシトランス（calcitrans）、キートセラス・グラシリス（gracilis）等）に注目が集められている。
【０００３】
例えば、キートセラス・カルシトランスは、４つの角に１本の長い鞭毛を有しており、その直径（全長）は約３〜６μｍ程度と非常に小さく、水産種苗の幼生時における餌料に特に適している。
【０００４】
また、キートセラス属やフェオダクチルム属に分類される珪藻は、他の植物プランクトンに比べてミネラルバランスおよびビタミンバランスに優れていることに加えて、ＥＰＡ（エイコサペンタエン酸；多価不飽和脂肪酸）、ＤＨＡ（ドコサヘキサエン酸；多価不飽和脂肪酸）等の有用脂肪酸を蓄えていること等の理由から、餌料価値が非常に高いことが知られている。
【０００５】
しかしながら、キートセラス属やフェオダクチルム属に分類される珪藻は、安定して培養することが非常に困難である。
【０００６】
例えば、従来のキートセラス属のキートセラス・カルシトランス（以下、単にキートセラスと略記する）を培養して得られたセル濃度（細胞濃度）の上限として、約３．０×１０１３セル／ｍ３｛セル／ｍ３とは、１ｍ３あたりのセル数（細胞数）を表し、約３．０×１０１３セル／ｍ３とは、１ｍ３あたり約３．０×１０１３のセル数｝が報告されている（例えば、非特許文献１および２参照）。
【非特許文献１】「１  魚類増殖技術試験、（１）かん水種苗生産研究、生物餌料の培養」、愛知県水産試験場
【非特許文献２】「平成４年度  特定研究開発促進事業  微小藻類の大量培養技術開発研究報告書」、福島県水産種苗研究所
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
上述した従来のキートセラスの培養方法では、培養できるセル濃度の上限が約３．０×１０１３セル／ｍ３であり、十分な培養量とはいえなかった。このため、さらにキートセラスを高濃度で安定的に培養できる液体（培養液、培地）および培養方法が求められていた。
【０００８】
本発明は上述した事情に鑑みてなされたもので、キートセラス等の珪藻を高濃度で安定して培養することを可能にした珪藻を含む液体、珪藻および珪藻の培養方法を提供することをその目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
上述した目的を達成するために、本発明者等は、珪藻を培養する液体の成分の組成について鋭意研究した結果、液体中に含まれるケイ素および窒素の質量濃度比（この質量濃度比をケイ素／窒素と表す）と液体中に含まれるリンおよび窒素の質量濃度比（この質量濃度比をリン／窒素と表す）とをそれぞれ調整することにより、液体中の珪藻のセル濃度を増大させることができるという知見を得た。
【００１０】
また、本発明者等は、窒素、リンおよびケイ素を含有する珪藻培養用の培養液におけるｐＨを調整することにより、液体を培養する液体成分の沈殿を防止しながら珪藻を安定して培養できることの知見も得た。
【００１１】
本発明は、上記知見に基づいて完成されたものである。
【００１２】
すなわち、本発明の第１の態様は、珪藻を含む液体であって、前記液体の成分として窒素およびケイ素を含有し、当該ケイ素および窒素の質量濃度比を表すケイ素／窒素が０．１８を超える値に設定されている。
【００１３】
本発明の第１の態様に係わる珪藻を含む液体において、前記液体のｐＨが６．４以上である。
【００１４】
また、本発明の第１の態様に係わる珪藻を含む液体において、前記液体のｐＨが８．４以下である。
【００１５】
本発明の第２の態様は、珪藻を含む液体であって、前記液体の成分としてリン、窒素およびケイ素を含有し、当該リンおよび窒素の質量濃度比を表すリン／窒素と前記ケイ素および窒素の質量濃度比を表すケイ素／窒素とがそれぞれ０．１以上に設定されている。
【００１６】
本発明の第２の態様に係わる珪藻を含む液体において、前記液体のｐＨが６．４以上である。
【００１７】
本発明の第２の態様に係わる珪藻を含む液体において、前記液体のｐＨが８．４以下である。
【００１８】
本発明の第３の態様によれば、珪藻を含む液体であって、前記液体の成分としてリン、窒素およびケイ素を含有し、当該液体のｐＨが６．４以上８．４以下である。
【００１９】
本発明の第３の態様に係わる珪藻を含む液体において、前記リンおよび窒素の質量濃度比を表すリン／窒素が０．０６以上、および前記ケイ素および窒素の質量濃度比を表すケイ素／窒素が０．１８以上に設定されている。
【００２０】
本発明の第３の態様に係わる珪藻を含む液体において、前記リンおよび窒素の質量濃度比を表すリン／窒素および前記ケイ素および窒素の質量濃度比を表すケイ素／窒素がそれぞれ０．１以上に設定されている。
【００２１】
本発明の第４の態様は、液体成分として窒素およびケイ素を含有し、かつ当該ケイ素および窒素の質量濃度比を表すケイ素／窒素が０．１８を超える値に設定された液体中において培養された珪藻である。
【００２２】
本発明の第４の態様に係わる珪藻において、前記液体のｐＨが６．４以上８．４以下である。
【００２３】
本発明の第５の態様は、液体成分としてリン、窒素およびケイ素を含有し、かつ当該リンおよび窒素の質量濃度比を表すリン／窒素と前記ケイ素および窒素の質量濃度比を表すケイ素／窒素とがそれぞれ０．１以上に設定された液体中において培養された珪藻である。
【００２４】
本発明の第５の態様に係わる珪藻において、前記液体のｐＨが６．４以上８．４以下である。
【００２５】
本発明の第６の態様は、液体成分としてリン、窒素およびケイ素を含有し、当該液体のｐＨが６．４以上８．４以下である液体中に培養された珪藻である。
【００２６】
本発明の第６の態様において、前記リンおよび窒素の質量濃度比を表すリン／窒素が０．０６以上、および前記ケイ素および窒素の質量濃度比を表すケイ素／窒素が０．１８以上に設定されている。
【００２７】
本発明の第６の態様において、前記リンおよび窒素の質量濃度比を表すリン／窒素および前記ケイ素および窒素の質量濃度比を表すケイ素／窒素がそれぞれ０．１以上に設定されている。
【００２８】
本発明の第７の態様は、液体成分として窒素およびケイ素を含有し、当該ケイ素および窒素の質量濃度比を表すケイ素／窒素が０．１８を超える値に設定された液体を用意し、用意された液体に所定のセル濃度を有する珪藻を接種し、当該接種された珪藻を当該液体内で培養する珪藻の培養方法である。
【００２９】
本発明の第８の態様によれば、液体成分としてリン、窒素およびケイ素を含有し、当該リンおよび窒素の質量濃度比を表すリン／窒素と前記ケイ素および窒素の質量濃度比を表すケイ素／窒素とがそれぞれ０．１以上に設定された液体を用意し、用意された液体に所定のセル濃度を有する珪藻を接種し、当該接種された珪藻を当該液体内で培養する。
【００３０】
本発明の第９の態様によれば、液体成分として窒素およびケイ素を含有する珪藻培養用の液体を用いて珪藻を培養する珪藻の培養方法であって、珪藻接種前の液体における窒素およびケイ素の濃度をそれぞれ測定し、前記液体に珪藻を接種し、当該接種された珪藻を当該液体内で培養し、所定のタイミングにおいて前記液体成分を前記液体内に追肥する際に、その追肥前における前記液体内の窒素およびケイ素の濃度をそれぞれ測定し、前記珪藻接種前に測定された窒素濃度および前記追肥前において測定された窒素濃度の差と、前記珪藻接種前に測定されたケイ素濃度および前記追肥前において測定されたケイ素濃度の差とをそれぞれ求め、前記追肥前における前記液体内の窒素濃度およびケイ素濃度の比率が一定になるように、前記求められた窒素濃度差およびケイ素濃度差に基づき追肥する液体の窒素量およびケイ素量をそれぞれ決定し、前記追肥する液体を、前記決定した窒素量およびケイ素量となるように調製し、調製された液体を前記液体内に追肥する。
【００３１】
本発明の第１０の態様によれば、液体成分として窒素およびケイ素をそれぞれ所定濃度含有する珪藻培養用の液体内に接種された珪藻を培養する珪藻の培養方法であって、所定のタイミングにおいて前記液体成分を含有した追肥用培養液を追肥する際に、その追肥前における前記液体内の窒素およびケイ素の濃度をそれぞれ測定し、前記液体における前記窒素の所定濃度および前記追肥前において測定された窒素濃度の差と、前記液体における前記ケイ素の所定濃度および前記追肥前において測定されたケイ素濃度の差とをそれぞれ求め、前記追肥前における前記液体内の窒素濃度およびケイ素濃度の比率が一定になるように、前記求められた窒素濃度差およびケイ素濃度差に基づき追肥する液体の窒素量およびケイ素量をそれぞれ決定し、前記追肥する液体を、前記決定した窒素量およびケイ素量となるように調製し、調製された液体を前記液体内に追肥する。
【００３２】
本発明の第１１の態様によれば、液体成分として窒素およびケイ素を含有する珪藻培養用の液体を用いて珪藻を培養する珪藻の培養方法であって、前記液体に珪藻を接種し、当該珪藻接種後の液体における窒素およびケイ素の濃度をそれぞれ測定し、前記液体内に接種された珪藻を当該液体内で培養し、所定のタイミングにおいて前記液体成分を前記液体内に追肥する際に、その追肥前における前記液体内の窒素およびケイ素の濃度をそれぞれ測定し、前記珪藻接種後に測定された窒素濃度および前記追肥前において測定された窒素濃度の差と、前記珪藻接種後に測定されたケイ素濃度および前記追肥前において測定されたケイ素濃度の差とをそれぞれ求め、前記追肥前における前記液体内の窒素濃度およびケイ素濃度の比率が一定になるように、前記求められた窒素濃度差およびケイ素濃度差に基づき追肥する液体の窒素量およびケイ素量をそれぞれ決定し、前記追肥する液体を、前記決定した窒素量およびケイ素量となるように調製し、調製された液体を前記液体内に追肥する。
【００３３】
本発明の第１２の態様によれば、液体成分として窒素およびケイ素を含有する珪藻培養用の液体内に接種された珪藻を培養する珪藻の培養方法であって、前記珪藻が接種された液体における窒素およびケイ素の濃度をそれぞれ測定し、前記接種された珪藻を前記液体内で培養し、所定のタイミングにおいて前記液体成分を前記液体内に追肥する際に、その追肥前における前記液体内の窒素およびケイ素の濃度をそれぞれ測定し、前記珪藻接種後に測定された窒素濃度および前記追肥前において測定された窒素濃度の差と、前記珪藻接種後に測定されたケイ素濃度および前記追肥前において測定されたケイ素濃度の差とをそれぞれ求め、前記追肥前における前記液体内の窒素濃度およびケイ素濃度の比率が一定になるように、前記求められた窒素濃度差およびケイ素濃度差に基づき追肥する液体の窒素量およびケイ素量をそれぞれ決定し、前記追肥する液体を、前記決定した窒素量およびケイ素量となるように調製し、調製された液体を前記液体内に追肥する。
【００３４】
本発明の第９〜第１２の態様において、前記液体は該液体の成分としてリンを含んでおり、前記窒素濃度およびケイ素濃度測定ステップは、前記液体における前記窒素およびケイ素の濃度に加えて、前記リンの濃度を測定するステップであり、前記濃度の差を求めるステップは、前記窒素の濃度差および前記ケイ素の濃度差に加えて、前記窒素濃度およびケイ素濃度測定ステップにより測定されたリン濃度および前記追肥前において測定されたリン濃度の差を求めるステップであり、前記決定ステップは、前記追肥前における前記液体内の窒素濃度およびケイ素濃度の比率、および前記追肥前における前記液体内の窒素濃度およびリン濃度の比率がそれぞれ一定になるように、前記求められた窒素濃度差、ケイ素濃度差およびリン濃度差から追肥する成分の窒素量、ケイ素量およびリン量をそれぞれ決定するステップであり、前記追肥ステップは、前記追肥する液体を、前記決定した窒素量、ケイ素量およびリン量となるように調製し、調製された追肥用液体を前記液体内に追肥するステップである。
【００３５】
本発明の第７〜第１２の態様に係わる珪藻の培養方法において、前記接種された珪藻を液体内で培養を行うステップは、前記液体のｐＨを６．４以上８．４以下に維持しながら当該培養を行うステップである。
【００３６】
本発明の第１３の態様によれば、液体成分として窒素およびケイ素を含有する珪藻培養用の液体内に接種された珪藻を培養する珪藻の培養方法であって、前記珪藻接種後の液体のセル濃度を所定のタイミング毎に測定し、測定されたセル濃度が所定のセル濃度を越えた際に、前記液体内に追肥する追肥用液体を、その追肥用液体に含まれる窒素量およびケイ素量の比率が、予め求められた前記珪藻の窒素消費量とケイ素消費量との比率に略一致するように調製し、調製された追肥用液体を前記液体内に追肥する。
【００３７】
なお、本発明における「ｐｐｍ」とは、溶液の質量と該溶液に含まれる溶質の質量との比を表す。
【００３８】
本発明に係わる珪藻が分類される属は、水産種苗を養殖する際に餌料として用いることができる属であればよく、キートセラス属およびフェオダクチルム属に限定されない。
【００３９】
例えば、アクチノプティクス（Actinoptychus）属、アラクノイディクス（Arachnoidiscus）属、アステロンファルス（Asteromphalus）属、コスキノディスク（Coscinodiscus）属、ローデリア（Lauderia）属、メロシア（Melosira）属、プランクトニエラ（Planktoniella）属、ステファノピキシス（Stephanopyzis）属、タラシオシラ（Thalassiosira）属、バキラリア（Bacillaria）属、バクテリアスツルム（Bacteriastrum）属、ビッドゥルフィア（Biddulphia）属、カンピロディスクス（Campylodiscus）属、コレスロン（Corethron）属、ディティルム（Ditylum）属、ユーカンピア（Eucampia）属、グラマトフォラ（Grammatophora）属、イスミア（Isthmia）属、リクモフォラ（Licmophora）属、オドンテラ（Odontella）属、プレウロシグマ（Pleurosigma）属、ラブドネマ（Rhabdonema）属、リゾゾレニア（Rhizosolenia）属、スケレトネマ（Skeletonema）属、タブラリア（Tubularia）属等に分類される珪藻であってもよい。
【００４０】
前記リンおよび窒素の質量濃度比を表すリン／窒素およびケイ素／窒素は、それぞれ０．１以上であることが好ましく、特に、ケイ素／窒素は、０．１８を超える値であることがさらに好ましい。
【００４１】
そして、前記リン／窒素は０．１２以上および前記ケイ素／窒素は、０．３６以上であることが好ましく、さらに、前記リン／窒素は０．１４以上および前記ケイ素／窒素は０．４０以上であることがさらに好ましい。
【００４２】
前記液体のｐＨは６．４以上８．４以下、もしくは７．０以上８．４以下であることが好ましい。
【００４３】
前記珪藻のセル濃度は４．０×１０１３セル／ｍ３以上以上が好ましいが、８．０×１０１３セル／ｍ３以上、もしくは１．０×１０１４セル／ｍ３以上であることがさらに好ましい。
【発明の効果】
【００４４】
以上述べたように、本発明に係わる珪藻を含む液体、珪藻および珪藻の培養方法によれば、キートセラス属、フェオダクチルム属等に分類される珪藻を高濃度、例えば約４．０×１０１３セル／ｍ３以上の高濃度で安定して培養することが可能になり、水産種苗に対する餌料としての珪藻の実用性を向上させることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００４５】
本発明の実施の形態について詳細に説明する。
【００４６】
本発明を実施するにあたり、本発明者等は、液体（培養液）中に接種されたキートセラスの培養量の変化とその培養液を構成する成分の消費量との関係について着目した。
【００４７】
そこで、本発明者等は、所定の容量（例えば、約６５×１０−３ｍ３）を有する屋外用（自然光用）密閉型リアクタに入れられた下表１に示す培養液成分を有し、かつ成分組成を変えて調製された複数（１１パターン）の培養液(それぞれのパターンの培養液の容量は一定であるものとする）それぞれに既知のセル濃度を有するキートセラスを接種し、所定時間経過後のセル濃度（セル／ｍ３）、窒素（Ｎ）、リン（Ｐ）およびケイ素（Ｓｉ）の消費量をそれぞれ測定した。
【表１】
2004187675.tif 000002
なお、商品名シーライフ（株式会社マリン・テック製）は、水に溶解して人工海水となる成分である。また、人工海水となる成分であれば、シーライフ以外の成分を用いることも可能である。
【００４８】
さらに、人工海水にこだわることなく、オートクレーブ、ろ過滅菌、または薬品等を用いた滅菌処理等を施して有害な細菌が殺菌された天然海水、あるいは未殺菌の天然海水を用いることも可能である。
【００４９】
そして、それぞれの培養液中における特に培養において重要と推察される成分元素である窒素（Ｎ）、リン（Ｐ）およびケイ素（Ｓｉ）の消費量とキートセラスのセル濃度の変化（培養セル濃度−初期接種セル濃度；単位セル／ｍ３）とを培養液毎に測定した。
【００５０】
このとき、培養液の容量は一定であるため、窒素（Ｎ）の消費量は、消費された質量濃度（初期の培養液における窒素の質量濃度−残存した窒素の質量濃度）に換算できる。なお、窒素の質量濃度の単位は（ｐｐｍ）である。
【００５１】
また、リン（Ｐ）の消費量についても、培養液の容量が一定であるため、消費された質量濃度（初期の培養液におけるリンの質量濃度−残存したリンの質量濃度）に換算できる（単位：ｐｐｍ）。そして、ケイ素（Ｓｉ）の消費量についても、培養液の容量が一定であるため、消費された質量濃度（初期の培養液におけるケイ素の質量濃度−残存したケイ素の質量濃度）に換算できる（単位：ｐｐｍ）。
【００５２】
この測定結果、すなわち、第１回〜第１１回に対応する１１パターンの異なる成分組成を有する培養液毎のセル濃度の変化（セル／ｍ３）、窒素（Ｎ）、リン（Ｐ）およびケイ素（Ｓｉ）の消費量を下表２に示す。
【表２】
2004187675.tif 000003
また、上記測定結果に基づいて得られた、全窒素の消費量とキートセラスのセル濃度変化（増殖量）との関係、リンの消費量とキートセラスのセル濃度変化との関係およびケイ素の消費量とキートセラスのセル濃度変化との関係をそれぞれ図１（ａ）、図１（ｂ）および図１（ｃ）に示す。
【００５３】
上記試験結果に基づいて、窒素、リンおよびケイ素それぞれの消費量とセル濃度変化量（増殖量）との間には、図１（ａ）〜（ｃ）に二点鎖線で示すように、比例関係が成り立つことが判明した。
【００５４】
また、上述した非特許文献１および２には、キートセラスの培養液の成分組成における窒素、リンおよびケイ素それぞれの含有量が開示されている。すなわち、非特許文献１の培養液には、窒素量１３．８（ｐｐｍ）、リン量１．４（ｐｐｍ）およびケイ素量０．１５（ｐｐｍ）がそれぞれ含有されており、非特許文献２の培養液には、窒素量１０２（ｐｐｍ）、リン量１．４（ｐｐｍ）およびケイ素量８．０（ｐｐｍ）がそれぞれ含有されている。
【００５５】
このとき、本発明者等は、培養液の成分におけるリンと窒素との質量濃度比を表すリン（Ｐ）／窒素（Ｎ）の値およびケイ素と窒素との質量濃度比を表すケイ素（Ｓｉ）／窒素（Ｎ）値に着目した。
【００５６】
この点、非特許文献１におけるリン（Ｐ）／窒素（Ｎ）の値は０．１０、ケイ素（Ｓｉ）／窒素（Ｎ）の値は０．０１１、非特許文献２におけるリン（Ｐ）／窒素（Ｎ）の値は０．０１４、ケイ素（Ｓｉ）／窒素（Ｎ）の値は０．０７８である。
【００５７】
このため、本発明者等は、図１から得られた上記窒素、リンおよびケイ素それぞれの消費量とセル濃度変化量との間に成立する比例関係から、本実施形態の培養液として、その含有成分であるリン（Ｐ）／窒素（Ｎ）の値およびケイ素（Ｓｉ）／窒素（Ｎ）の値が非特許文献１および２の値以上、すなわち、少なくともそれぞれ０．１以上に設定された培養液を用いればキートセラスの増殖量の増大に寄与できるのではないかと推察した。
【００５８】
さらに、本発明者等は、図１（ａ）〜（ｃ）に破線で示すように、キートセラスの細胞濃度を約６．０×１０１３セル／ｍ３以上にするためには、全窒素の質量濃度を約１６０ｐｐｍ以上、リンの質量濃度を約２０ｐｐｍ以上およびケイ素の質量濃度を約６０ｐｐｍ以上含有した培養液を用いることが好ましいのではないか、という知見も得た。
【００５９】
そこで、本発明者等は、上記推察結果および知見を検証するために、図２に示す成分組成を有する培養液１〜培養液６を調製した。なお、図２に示す培養液７の成分組成は、非特許文献１において開示された培養液の成分組成であり、培養液８の成分組成は、非特許文献２において開示された培養液の成分組成である。
【００６０】
また、図３は、培養液１〜培養液８それぞれにおける窒素、リンおよびケイ素それぞれの質量濃度（ｐｐｍ）を示す図である。さらに、図３には、培養液１〜培養液８それぞれにおけるリンと窒素との質量濃度比を表すリン（Ｐ）／窒素（Ｎ）の値、およびケイ素と窒素との質量濃度比を表すケイ素（Ｓｉ）／窒素（Ｎ）の値がそれぞれ示されている。
【００６１】
すなわち、図３に示すように、本発明者等は、まず、上記知見結果よりもリンの質量濃度およびケイ素の質量濃度が小さい培養液として、全窒素量が１６６（ｐｐｍ）、リン量が１０（ｐｐｍ）およびケイ素量が３０（ｐｐｍ）となるように、硝酸ナトリウム（ＮａＮＯ３）、硫酸（（ＮＨ４）２ＳＯ４）、リン酸二水素カリウム（ＫＨ２ＰＯ４）およびメタ珪酸ナトリウム・９水和物（Ｎａ２ＳｉＯ３・９Ｈ２Ｏ）をそれぞれ他の成分と共に配合して、リン（Ｐ）／窒素（Ｎ）＝０．０６およびケイ素（Ｓｉ）／窒素（Ｎ）＝０．１８となる培養液１を調製した。
【００６２】
また、図３に示すように、本発明者等は、培養液１の成分組成に対して、リン量のみが２倍（リン量＝２０（ｐｐｍ）、リン（Ｐ）／窒素＝０．１２）となる培養液２、培養液１の成分組成に対して、ケイ素量のみが２倍（ケイ素量＝６０（ｐｐｍ）、ケイ素（Ｓｉ）／窒素（Ｎ）＝０．３６）となる培養液３、培養液１の成分組成に対して、リン量およびケイ素量がそれぞれ２倍（リン量＝２０（ｐｐｍ）、リン（Ｐ）／窒素（Ｎ）＝０．１２、ケイ素量＝６０（ｐｐｍ）、ケイ素（Ｓｉ）／窒素（Ｎ）＝０．３６）となる培養液４をそれぞれ調製した。
【００６３】
さらに、本発明者等は、培養液２の成分組成に対して、ケイ素量のみが３倍（ケイ素量＝９０（ｐｐｍ）、ケイ素（Ｓｉ）／窒素（Ｎ）＝０．５４）となる培養液５およびケイ素量のみが４倍（ケイ素量＝１２０（ｐｐｍ）、ケイ素（Ｓｉ）／窒素（Ｎ）＝０．７２）となる培養液６をそれぞれ調製した。
【００６４】
特に、培養液２〜培養液６においては、培養液７および培養液８と比べて、リン（Ｐ）／窒素（Ｎ）およびケイ素（Ｓｉ）／窒素（Ｎ）の比率が大きくなっており、培養液に添加されるリンおよびケイ素の量が増加している。
【００６５】
次に、本発明者等は、リンおよびケイ素の増加により培養液に生じる変化を調べるため、複数の培養液１〜６の中から、例えば培養液４に対して添加される炭素源としての炭酸水素ナトリウム（NaHCO３)の成分組成を変化させてそのｐＨを７．０〜９．０の間において変化させた際に培養液４に生じた加水分解量（溶液１ｍ３に対し沈殿した加水分解物の質量；ｋｇ／ｍ３）を測定した。なお、この測定の際には、培養液攪拌用の空気として、培養液内の生命維持に必要な成分である例えば３％の炭酸ガスが混合された空気を培養液４に対して供給し、培養液４を通気攪拌している。
【００６６】
図４にその測定結果をグラフとして示す。なお、図４における実線および破線は、異なる実験日において得られた加水分解量の変化をそれぞれ示しており、略一致した結果が得られた。
【００６７】
図４に示すように、培養液４のｐＨが８．５を超えると、加水分解量の変化が急峻となり、加水分解量（沈殿量）が増加することが判明した。また、ｐＨが８．５を超えると、その沈殿物の中にキートセラスが含まれて、増殖できないことも判明した。
【００６８】
次いで、本発明者等は、屋外に設置された密閉型リアクタに容量１１０×１０ー３ｍ３の培養液１を入れ、培養液温度を約１５℃〜約３５℃の範囲内における約２５℃付近に維持しながら、光量子量約１２００μｍｏｌ／ｍ２／ｓの強度を有する自然の太陽光を培養液１に照射した状態で、（１）培養液攪拌用の空気として、例えば３％の炭酸ガスが混合された空気を培養液１に通気して攪拌した場合｛炭酸水素ナトリウム（ＮａＨＣＯ３)無添加｝、（２）７．０×１０３ｐｐｍの炭酸水素ナトリウム（ＮａＨＣＯ３)を添加した場合（空気による通気攪拌あり）における培養液１内のキートセラスのセル濃度変化と培養液１内のｐＨの変化とをそれぞれ測定した。
【００６９】
この測定結果を図６にグラフとして示す。なお、実線が炭酸水素ナトリウム無添加の（１）の場合の培養液１のｐＨの変化を表しており、破線が炭酸水素ナトリウムを培養液１に添加して空気による通気攪拌を行った（２）の場合の培養液１のｐＨの変化を表している。
【００７０】
すなわち、図６に示すように、空気による通気攪拌と炭酸水素ナトリウムを添加した（２）の場合には、培養液１内のｐＨが８．５を超えた時に培養液１が沈殿し、その沈殿と共にキートセラスが沈んでしまった。
【００７１】
一方、炭酸水素ナトリウム無添加で炭酸ガス混合空気を通気攪拌した（１）の場合には、培養液１のｐＨは、次第に低下していくことが分かった。
【００７２】
上述した実験結果から、本発明者等は、培養液１に対して炭酸水素ナトリウムを添加した状態で炭酸ガスが混合された空気により培養液１を通気攪拌することにより、少なくとも培養液１内のｐＨを８．４以下に設定することができ、その培養液１の沈殿およびその沈殿と共にキートセラスが沈む（共沈する）ことをそれぞれ防止できることが確認できた。そして、培養液１と他の培養液２〜６とは、上記リン（Ｐ）／窒素（Ｎ）の値、および／またはケイ素（Ｓｉ）／窒素（Ｎ）の値が異なるものの、他の成分は同一であり溶解度上問題がないため、この結果から、他の培養液２〜６においても、上記炭酸ガス混合空気の通気攪拌および炭酸水素ナトリウムの添加により、沈殿およびキートセラス沈下をそれぞれ防止できることを推察した。
【００７３】
続いて、本発明者等は、培養液１内のｐＨの好ましい下限値および炭酸水素ナトリウム（ＮａＨＣＯ３)の好ましい添加量の範囲を調べるために、培養液１に対する炭酸水素ナトリウム（ＮａＨＣＯ３)の添加量を、炭酸ガスが混合された空気により培養液１を通気攪拌することにより、［１］０．０２×１０３ｐｐｍ、［２］０．０７×１０３ｐｐｍ、［３］０.１４×１０３ｐｐｍ、［４］０.２８×１０３ｐｐｍ、［５］０.５６×１０３ｐｐｍ、［６］１．０×１０３ｐｐｍ、［７］２．０×１０３ｐｐｍ、［８］７．０×１０３ｐｐｍと変化させた場合におけるそれぞれの培養液１に対するキートセラスの培養実験を行い、それぞれの培養液１内のセル濃度変化とｐＨの変化とをそれぞれ測定した。なお、再現性を確保するため、実験開始日を４回に分けた。
【００７４】
図７は、炭酸水素ナトリウムの添加量が［１］０．０２×１０３ｐｐｍ、［３］０.１４×１０３ｐｐｍ、［６］１．０×１０３ｐｐｍの場合の培養実験の測定結果であるキートセラスのセル濃度の経時変化をそれぞれ示すグラフである。図７中、Ｘ１は、炭酸水素ナトリウムの添加量が［１］０．０２×１０３ｐｐｍの培養液１内で培養されたキートセラスのセル濃度を表し、Ｘ２は、炭酸水素ナトリウムの添加量が［３］０．１４×１０３ｐｐｍの培養液１内で培養されたキートセラスのセル濃度を表す。また、Ｘ３は、炭酸水素ナトリウムの添加量が［６］１．０×１０３ｐｐｍの培養液１内で培養されたキートセラスのセル濃度を表す。
【００７５】
また、図８は、炭酸水素ナトリウムの添加量が［１］０．０２×１０３ｐｐｍ、［３］０.１４×１０３ｐｐｍ、［６］１．０×１０３ｐｐｍの場合の培養実験の測定結果である培養液１内のｐＨの経時変化をそれぞれ示すグラフである。図８中、ＸＡ１、ＸＡ２およびＸＡ３は、それぞれ図７におけるグラフＸ１、グラフＸ２およびグラフＸ３に対応する培養液１のｐＨを表す。
【００７６】
図９は、炭酸水素ナトリウムの添加量が［２］０．０７×１０３ｐｐｍ、［３］０.１４×１０３ｐｐｍ、［４］０．２８×１０３ｐｐｍ、［６］１．０×１０３ｐｐｍの場合の培養実験の測定結果であるキートセラスのセル濃度の経時変化をそれぞれ示すグラフである。図９中、Ｙ１は、炭酸水素ナトリウムの添加量が［２］０．０７×１０３ｐｐｍの培養液１内で培養されたキートセラスのセル濃度を表し、Ｙ２は、炭酸水素ナトリウムの添加量が［３］０．１４×１０３ｐｐｍの培養液１内で培養されたキートセラスのセル濃度を表し、Ｙ３は、炭酸水素ナトリウムの添加量が［４］０．２８×１０３ｐｐｍの培養液１内で培養されたキートセラスのセル濃度を表す。また、Ｙ４は、炭酸水素ナトリウムの添加量が［６］１．０×１０３ｐｐｍの培養液１内で培養されたキートセラスのセル濃度を表す。
【００７７】
また、図１０は、炭酸水素ナトリウムの添加量が［２］０．０７×１０３ｐｐｍ、［３］０.１４×１０３ｐｐｍ、［４］０．２８×１０３ｐｐｍ、［６］１．０×１０３ｐｐｍの場合の培養実験の測定結果である培養液１内のｐＨの経時変化をそれぞれ示すグラフである。図１０中、ＹＡ１、ＹＡ２、ＹＡ３およびＹＡ４は、それぞれ図９におけるグラフＹ１、Ｙ２、Ｙ３およびＹ４に対応する培養液１のｐＨを表す。
【００７８】
さらに、図１１は、炭酸水素ナトリウムの添加量が［４］０．２８×１０３ｐｐｍ、［５］０.５６×１０３ｐｐｍ、［６］１．０×１０３ｐｐｍ、［７］２．０×１０３ｐｐｍの場合の培養実験の測定結果であるキートセラスのセル濃度の経時変化をそれぞれ示すグラフである。図１１中、Ｚ１は、炭酸水素ナトリウムの添加量が［４］０．２８×１０３ｐｐｍの培養液１内で培養されたキートセラスのセル濃度を表し、Ｚ２は、炭酸水素ナトリウムの添加量が［５］０．５６×１０３ｐｐｍの培養液１内で培養されたキートセラスのセル濃度を表し、Ｚ３は、炭酸水素ナトリウムの添加量が［６］１．０×１０３ｐｐｍの培養液１内で培養されたキートセラスのセル濃度を表す。また、Ｚ４は、炭酸水素ナトリウムの添加量が［７］２．０×１０３ｐｐｍの培養液１内で培養されたキートセラスのセル濃度を表す。
【００７９】
また、図１２は、炭酸水素ナトリウムの添加量が［４］０．２８×１０３ｐｐｍ、［５］０.５６×１０３ｐｐｍ、［６］１．０×１０３ｐｐｍ、［７］２．０×１０３ｐｐｍの場合の培養実験の測定結果である培養液１内のｐＨの経時変化をそれぞれ示すグラフである。図１２中、ＺＡ１、ＺＡ２、ＺＡ３およびＺＡ４は、それぞれ図１１におけるグラフＺ１、Ｚ２、Ｚ３およびＺ４に対応する培養液１のｐＨを表す。
【００８０】
そして、図１３は、炭酸水素ナトリウムの添加量が［６］１．０×１０３ｐｐｍおよび［８]７.０×１０３ｐｐｍの場合の培養実験の測定結果であるキートセラスのセル濃度の経時変化をそれぞれ示すグラフである。図１３中、Ｗ１は、炭酸水素ナトリウムの添加量が［６］１．０×１０３ｐｐｍの培養液１内で培養されたキートセラスのセル濃度を表し、Ｗ２は、炭酸水素ナトリウムの添加量が［８］７．０×１０３ｐｐｍの培養液１内で培養されたキートセラスのセル濃度を表す。
【００８１】
また、図１４は、炭酸水素ナトリウムの添加量が［６］１．０×１０３ｐｐｍおよび［８］７.０×１０３ｐｐｍの場合の培養実験の測定結果である培養液１内のｐＨの経時変化をそれぞれ示すグラフである。図１４中、ＷＡ１およびＷＡ２は、それぞれ図１３におけるグラフＷ１およびグラフＷ２に対応する培養液１のｐＨを表す。
【００８２】
図７および図８におけるグラフＸ１およびＸＡ１に示されるように、炭酸水素ナトリウムの添加量が［１］０．０２×１０３ｐｐｍの場合には、培養液１内のｐＨが約６．５より低下し、培養から２００時間以上経過してキートセラスのセル濃度の増殖が止まることが分かった。
【００８３】
そして、図７〜図１４におけるグラフＸ２、Ｘ３、Ｙ１〜Ｙ４、Ｚ１〜Ｚ４およびＷ１、Ｗ２とグラフＸＡ２、ＸＡ３、ＹＡ１〜ＹＡ４、ＺＡ１〜ＺＡ４およびＷＡ１、ＷＡ２とから明らかなように、炭酸水素ナトリウムの添加量が［２］０．０７×１０３ｐｐｍ以上の場合には、培養液１内のｐＨが約６．４〜約８．１の範囲内に維持され、培養液１内のキートセラスのセル濃度も培養時間に応じて増大していくことが分かった。
【００８４】
上述した実験結果から、本発明者等は、培養液１に対する炭酸水素ナトリウムの添加量を０．０２×１０３ｐｐｍより多くし、培養液１内のｐＨを６．４以上に設定することにより、培養液１内のキートセラスの増殖を継続できることを確認した。そして、培養液１と他の培養液２〜６とは、上記リン（Ｐ）／窒素（Ｎ）の値、および／またはケイ素（Ｓｉ）／窒素（Ｎ）の値が異なるものの、他の成分は同一であるため、この結果から、他の培養液２〜６においても、炭酸水素ナトリウムの添加量を０．０２×１０３ｐｐｍより多くし、培養液１内のｐＨを６．４以上に設定することにより、培養液１内のキートセラスの増殖を継続可能であることを推察した。
【００８５】
以上の実験結果から、本発明者等は、各培養液１〜培養液６を用いてキートセラスの培養を行うにあたり、《１》［Ａ］各培養液１〜６のｐＨを８．４以下に設定することにより、ｐＨ増加により生成された加水分解物に起因したキートセラスの共沈の発生を抑制してキートセラスの増殖の低下を防止できること、［Ｂ］各培養液１〜６のｐＨを６．４以上に設定することにより、ｐＨ減少に伴うキートセラスの増殖低下を防止できること、および《１》に加えて、《２》０．０２×１０３ｐｐｍより多くの炭酸水素ナトリウムを添加し、各培養液１〜６内の生命維持に必要な成分である例えば３％の炭酸ガスが混合された空気により各培養液１〜６を通気攪拌することにより、キートセラスをより安定して培養できることが確認できた。
【００８６】
以上の《１》［Ａ］・［Ｂ］および《２》の条件を踏まえて、本発明者等は、上述した培養液１〜培養液６の中から最初に培養液１〜培養液４を用いて実際にキートセラスの培養を行った。
【００８７】
実施例１
実験室内に用意された図５に示す容量１．５×１０ー３ｍ３の扁平培養ビン１１に１．５×１０ー３ｍ３の培養液１を入れ、その培養液１内に例えば１．０×１０３ｐｐｍの炭酸水素ナトリウムを添加し、その培養液１内に所定量のキートセラスを接種した。そして、培養液温度を約２５℃〜約３５℃に維持し、かつ蛍光灯等を利用して、光量子量約２００μｍｏｌ／ｍ２／ｓの強度を有する光を培養液１に照射した状態で、３％の炭酸ガス混合空気を、ビン１１の栓１２を貫通するガラス管１３を介して培養液１に送り込み、その炭酸ガス混合空気により培養液１を通気攪拌しながらキートセラスの培養実験を行った。そして、培養液１内のキートセラスのセル濃度の経時変化および培養液１内のｐＨの経時変化をそれぞれ測定した。
【００８８】
実施例２
扁平培養ビン１１に１．５×１０ー３ｍ３の培養液２を入れて１．０×１０３ｐｐｍの炭酸水素ナトリウムを添加し、その培養液２内に実施例１と同一量のキートセラスを接種し、実施例１と略同一の条件下（培養液温度：約２５℃〜約３５℃、光量子量：蛍光灯による約２００μｍｏｌ／ｍ２／ｓ、３％の炭酸ガス混合空気の通気攪拌）においてキートセラスの培養実験を行い、培養液２内のキートセラスのセル濃度の経時変化および培養液２内のｐＨの経時変化をそれぞれ測定した。
【００８９】
実施例３
扁平培養ビン１１に１．５×１０ー３ｍ３の培養液３を入れて１．０×１０３ｐｐｍの炭酸水素ナトリウムを添加し、その培養液３内に実施例１と同一量のキートセラスを接種し、実施例１および実施例２と略同一の条件下（培養液温度：約２５℃〜約３５℃、光量子量：蛍光灯による約２００μｍｏｌ／ｍ２／ｓ、３％の炭酸ガス混合空気の通気攪拌）においてキートセラスの培養実験を行い、培養液３内のキートセラスのセル濃度の経時変化および培養液３内のｐＨの経時変化をそれぞれ測定した。
【００９０】
実施例４
扁平培養ビン１１に１．５×１０ー３ｍ３の培養液４を入れて１．０×１０３ｐｐｍの炭酸水素ナトリウムを添加し、その培養液４内に実施例１と同一量のキートセラスを接種し、実施例１〜実施例３と略同一の条件下（培養液温度：約２５℃〜約３５℃、光量子量：蛍光灯による約２００μｍｏｌ／ｍ２／ｓ、３％の炭酸ガス混合空気の通気攪拌）においてキートセラスの培養実験を行い、培養液４内のキートセラスのセル濃度の経時変化および培養液４内のｐＨの経時変化をそれぞれ測定した。
【００９１】
図１５は、実施例１〜実施例４の培養実験の測定結果であるキートセラスのセル濃度の経時変化をそれぞれ示すグラフである。図１５中、Ｃ１は、実施例１に対応する培養液１内で培養されたキートセラスのセル濃度を表し、Ｃ２は、実施例２に対応する培養液２内で培養されたキートセラスのセル濃度を表している。また、Ｃ３は、実施例３に対応する培養液３内で培養されたキートセラスのセル濃度を表し、Ｃ４は、実施例４に対応する培養液４内で培養されたキートセラスのセル濃度を表している。また、図１５中、符号Ａは、各培養液内に追肥成分（各培養液に含有された窒素、リン、ケイ素、ビタミン類、ミネラル類）を補給（追肥）したタイミングを示している。
【００９２】
また、図１６は、実施例１〜実施例４の測定結果である培養液１〜培養液４のｐＨの経時変化をそれぞれ示すグラフである。図１６中、Ｄ１は、実施例１に対応する培養液１のｐＨを表し、Ｄ２は、実施例２に対応する培養液２のｐＨを表している。また、Ｄ３は、実施例３に対応する培養液３のｐＨを表し、Ｄ４は、実施例４に対応する培養液４のｐＨを表している。
【００９３】
図１５におけるグラフＣ１とグラフＣ３との対比、およびグラフＣ１とグラフＣ４との対比からそれぞれ明らかなように、グラフＣ１に対応する培養液１（Ｓｉ／Ｎ＝０．１８）に対してケイ素量のみを２倍にした培養液３、すなわち、Ｓｉ／Ｎを上記０．１８を超えた値である０．３６に設定した培養液３（グラフＣ３に対応）、およびリン量とケイ素量とをそれぞれ２倍にした培養液４、すなわち、Ｐ／Ｎを０．１以上である０．１２およびＳｉ／Ｎを０．３６にそれぞれ設定した培養液４（グラフＣ４に対応）では、培養液１におけるキートセラスのセル濃度（約６．０×１０１３セル／ｍ３）よりも高いセル濃度（約８．０×１０１３セル／ｍ３）が得られることが判明した。
【００９４】
なお、培養液４に対応するセル濃度の測定結果は、その培養実験中において炭酸ガス混合空気の供給が不十分だった可能性があり、実際のものとは若干異なる可能性がある。
【００９５】
また、図１６に示すように、全ての培養液１〜培養液４において、そのｐＨは６．４以上８．５以下（詳しくは、約７．５以上約８．５以下）に維持された。
【００９６】
次に、本発明者等は、上記測定結果の再現性を調べるために、実施例１〜実施例４と同一の培養液１〜培養液４および同一量のキートセラスを用いた同一条件下による培養実験を追肥なしで再度実施し、各培養液１、２、３および４内のキートセラスのセル濃度の経時変化および各培養液１、２、３および４内のｐＨの経時変化を再度それぞれ測定した。
【００９７】
図１７は、上記再現性を調べるための培養実験の測定結果である培養液１〜培養液４のキートセラスのセル濃度の経時変化をそれぞれ示すグラフである。図１７中、Ｅ１は、培養液１内で培養されたキートセラスのセル濃度を表し、Ｅ２は、培養液２内で培養されたキートセラスのセル濃度を表している。また、Ｅ３は、培養液３内で培養されたキートセラスのセル濃度を表し、Ｅ４は、培養液４内で培養されたキートセラスのセル濃度を表している。
【００９８】
また、図１８は、再現性を調べるための培養実験の測定結果である培養液１〜培養液４のｐＨの経時変化をそれぞれ示すグラフである。図１８中、Ｆ１は、培養液１のｐＨを表し、Ｆ２は、培養液２のｐＨを表している。また、Ｆ３は、培養液３のｐＨを表し、Ｆ４は、培養液４のｐＨを表している。
【００９９】
図１７に示すように、今回の再現性実験の場合においては、グラフＥ１に対応する培養液１に対してリン量のみを２倍にすると（グラフＥ２に対応する培養液２）、培養液１におけるキートセラスのセル濃度より高いセル濃度が得られることが分かった。
【０１００】
また、グラフＥ１に対応する培養液１に対してケイ素量のみを２倍にした場合（グラフＥ３に対応する培養液３）、およびリン量およびケイ素量をそれぞれ２倍にした場合（グラフＥ４に対応する培養液４）では、培養液１におけるキートセラスのセル濃度よりも高いセル濃度が得られることが判明した。
【０１０１】
さらに、リン量およびケイ素量をそれぞれ２倍にした場合（グラフＥ４に対応する培養液４）の方が、ケイ素量のみを２倍にした場合（グラフＥ３に対応する培養液３）よりも高いセル濃度が得られることも判明した。そして、図１８に示すように、全ての培養液１〜培養液４のｐＨが６．４以上８．４以下（詳しくは約７．４以上約８．０以下）に維持される結果を再現できた。
【０１０２】
上記実施例１〜実施例４の測定結果および再現実験の測定結果に基づいて、本発明者等は、培養液１を基準とした際に、その培養液１のリン量と比べて、リン量を２倍以上にすること、そしてさらに、培養液１のケイ素量に比べて、ケイ素量を２倍以上にすることにより、キートセラスのセル濃度を約８．０×１０１３セル／ｍ３以上にすることができるものと推察し、この推察を立証するため、培養液１に対してリン量を２倍含有する培養液２および培養液４〜培養液５を用いて、さらにキートセラスの培養を行った。
【０１０３】
実施例５
実施例２と同様に、実験室内に用意された扁平培養ビン１１に１．５×１０ー３ｍ３の培養液２を入れて１．０×１０３ｐｐｍの炭酸水素ナトリウムを添加し、その培養液２内に所定量のキートセラスを接種し、実施例２と略同一の条件下（培養液温度：約２５℃〜約３５℃、光量子量：蛍光灯による約２００μｍｏｌ／ｍ２／ｓ、３％の炭酸ガス混合空気の通気攪拌）においてキートセラスの培養実験を行い、培養液２内のキートセラスのセル濃度の経時変化および培養液２内のｐＨの経時変化をそれぞれ測定した。
【０１０４】
実施例６
実施例４と同様に、扁平培養ビン１１に１．５×１０ー３ｍ３の培養液４を入れて１．０×１０３ｐｐｍの炭酸水素ナトリウムを添加し、その培養液４内に実施例５と同一量のキートセラスを接種し、実施例５と略同一の条件下（培養液温度：約２５℃〜約３５℃、光量子量：蛍光灯による約２００μｍｏｌ／ｍ２／ｓ、３％の炭酸ガス混合空気の通気攪拌）においてキートセラスの培養実験を行い、培養液４内のキートセラスのセル濃度の経時変化および培養液４内のｐＨの経時変化をそれぞれ測定した。
【０１０５】
実施例７
扁平培養ビン１１に１．５×１０ー３ｍ３の培養液５を入れて１．０×１０３ｐｐｍの炭酸水素ナトリウムを添加し、その培養液５内に実施例５と同一量のキートセラスを接種し、実施例５および実施例６と略同一の条件下（培養液温度：約２５℃〜約３５℃、光量子量：蛍光灯による約２００μｍｏｌ／ｍ２／ｓ、３％の炭酸ガス混合空気の通気攪拌）においてキートセラスの培養実験を行い、培養液５内のキートセラスのセル濃度の経時変化および培養液５内のｐＨの経時変化をそれぞれ測定した。
【０１０６】
図１９は、実施例５〜実施例７の培養実験の測定結果であるキートセラスのセル濃度の経時変化をそれぞれ示すグラフである。図１９中、Ｇ１は、実施例５に対応する培養液２内で培養されたキートセラスのセル濃度を表し、Ｇ２は、実施例６に対応する培養液４内で培養されたキートセラスのセル濃度を表し、Ｇ３は、実施例７に対応する培養液５内で培養されたキートセラスのセル濃度を表している。また、図１９中、符号Ａは、図１５と同様の追肥タイミングを示している。
【０１０７】
また、図２０は、実施例５〜実施例７の測定結果である培養液２、培養液４および培養液５のｐＨの経時変化をそれぞれ示すグラフである。図２０中、Ｈ１は、実施例５に対応する培養液２のｐＨを表し、Ｈ２は、実施例６に対応する培養液４のｐＨを表し、Ｈ３は、実施例７に対応する培養液５のｐＨを表している。なお、図２０中、符号Ｈ４は、実験室内の室温の経時変化を表し、符号Ｈ５は、培養ビン１１内の培養液の温度の経時変化を表している。
【０１０８】
図１９に示すように、グラフＧ１に対応する培養液２に対してケイ素量を２倍および３倍にした場合（グラフＧ２に対応する培養液４およびグラフＧ３に対応する培養液５）の何れにおいても、培養液２に対するキートセラスのセル濃度よりも高いセル濃度が得られることが分かった。
【０１０９】
そして、グラフＧ２とグラフＧ３との対比から明らかなように、培養液２に対してケイ素量を２倍にした培養液４およびケイ素量を３倍にした培養液５の間には、それぞれのキートセラスのセル濃度間において大きな差異はないことが分かった。また、今回の測定結果においても、図２０に示すように、全ての培養液２、培養液４および培養液５のｐＨが６．４以上８．４以下（詳しくは約７．４以上約８．２以下）に維持されることも確認できた。
【０１１０】
上記測定結果から、本発明者等は、培養液２、すなわち、培養液１に対してリン量を２倍含有する培養液２を基準とした場合、その培養液２のケイ素量に対して約２倍以上のケイ素量を有する培養液であれば、キートセラスのセル濃度の増大に有効であると推察した。その推察を立証するため、培養液２、４および５に加えて培養液６を用いて、実施例５〜７と同一条件下による培養実験を再度実施し、各培養液２、４、５および６内のキートセラスのセル濃度の経時変化および各培養液２、４、５および６内のｐＨの経時変化を再度それぞれ測定した。
【０１１１】
図２１は、培養液２、４、５および６に対する培養実験の測定結果であるキートセラスのセル濃度の経時変化をそれぞれ示すグラフである。図２１中、Ｉ１は、培養液２内で培養されたキートセラスのセル濃度を表し、Ｉ２は、培養液４内で培養されたキートセラスのセル濃度を表している。また、Ｉ３は、培養液５内で培養されたキートセラスのセル濃度を表し、Ｉ４は、培養液６内で培養されたキートセラスのセル濃度を表している。
【０１１２】
また、図２２は、上記培養液２、４、５および６のｐＨの経時変化をそれぞれ示すグラフである。図２２中、Ｊ１は、培養液２のｐＨを表し、Ｊ２は、培養液４のｐＨを表している。また、Ｊ３は、培養液５のｐＨを表し、Ｊ４は、培養液６のｐＨを表している。なお、図２２中、符号Ｊ５は、実験室内の室温の経時変化を表し、符号Ｊ６は、培養ビン１１内の培養液の温度の経時変化を表している。
【０１１３】
図２１に示すように、今回の測定結果においても、グラフＩ１に対応する培養液２に対してケイ素量を２倍〜４倍にした場合（グラフＩ２〜Ｉ４に対応する培養液４〜６）の何れにおいても、培養液２に対するキートセラスのセル濃度より高いセル濃度が得られることが分かった。
【０１１４】
そして、さらに、グラフＩ２〜Ｉ４間の対比から明らかなように、培養液２に対してケイ素量を２倍にした培養液４、ケイ素量を３倍にした培養液５およびケイ素量を４倍にした培養液６の間には、それぞれのキートセラスのセル濃度間において大きな差異はないことが確認できた。また、今回の測定結果においても、図２２に示すように、全ての培養液２および培養液４〜培養液６のｐＨが６．４以上８．４以下（詳しくは約７．３以上約８．１以下）に維持されることも確認できた。
【０１１５】
上述した結果から、本発明者等は、調製した培養液１〜培養液６の中で、特に培養液４〜培養液６の何れかを用いることにより、キートセラスのセル濃度を約８．０×１０１３セル／ｍ３〜約１．０×１０１４セル／ｍ３以上にまで増大させることができるとの確証を得た。
【０１１６】
言い換えれば、本発明者等は、培養液４〜培養液６に共通する条件（培養条件）である、リン（Ｐ）と窒素（Ｎ）との質量濃度比（リン（Ｐ）／窒素（Ｎ））が０．１２以上、およびケイ素（Ｓｉ）と窒素（Ｎ）との質量濃度比ケイ素（Ｓｉ）／窒素（Ｎ）が０．３６以上の培養液を用いてキートセラスを培養することにより、キートセラスのセル濃度を約８．０×１０１３セル／ｍ３／〜約１．０×１０１４セル／ｍ３以上にまで増大させることができるとの確証を得た。
【０１１７】
続いて、本発明者等は、その確証が得られた培養条件（リン（Ｐ）／窒素（Ｎ）≧０．１２、およびケイ素（Ｓｉ）／窒素（Ｎ）≧０．３６）が、連続培養時および異なる環境下（室内／室外）においても成立するか否かを調べるために、培養液４と培養液６を用いて下記の実施例８〜１０に基づく実験を実施した。
【０１１８】
実施例８
実験室内に用意された図５に示す扁平培養ビン１１に、予め測定された初期の培養液濃度（培養量）｛窒素＝１６６（ｐｐｍ）、リン＝２０（ｐｐｍ）、ケイ素＝６０（ｐｐｍ）｝を有する１．５×１０−３ｍ３の培養液４に１．０×１０３ｐｐｍの炭酸水素ナトリウムを添加し、その培養液４に所定量のキートセラスを接種し、実施例１等と略同一の条件下（培養液温度：約２５℃〜約３５℃、光量子量：蛍光灯による約２００μｍｏｌ／ｍ２／ｓ、３％の炭酸ガス混合空気の通気攪拌）においてキートセラスの培養実験を行った。このとき、上記実施例１〜７と同様に、培養液４内のキートセラスのセル濃度の経時変化および培養液４内のｐＨの経時変化をそれぞれ測定した。
【０１１９】
この際、上記キートセラスのセル濃度の経時変化の測定結果から、培養液４内に培養されたキートセラスのセル濃度が約６．０×１０１３セル／ｍ３以上になった時に培養液４を約２／３取り除き、その取り除いた量に対応する人工海水（シーライフが溶解された人工海水）に窒素、リン、ケイ素、ビタミン類等を含む追肥成分を溶かして追肥用培養液を調製し、調製した追肥用培養液を、扁平培養ビン１１内の培養液４内に補給（追肥）する、いわゆる半バッチ連続培養を実行する。
【０１２０】
この半バッチ連続培養の際、培養液４を２／３除去した後の追肥前の培養液（以下、追肥前培養液）４ａの内の窒素、リンおよびケイ素の濃度をそれぞれ測定し、測定した窒素、リンおよびケイ素の濃度と、上記珪藻接種前に測定された初期培養液４における窒素、リンおよびケイ素の濃度｛窒素＝１６６（ｐｐｍ）、リン＝２０（ｐｐｍ）、ケイ素＝６０（ｐｐｍ）｝との差をそれぞれ求める。
【０１２１】
そして、測定した窒素、リンおよびケイ素の濃度差に基づいて、追肥前培養液４ａ内におけるリンと窒素との質量濃度比（リン／窒素）、およびケイ素と窒素との質量濃度比（ケイ素／窒素）が初期培養液４内における「リン／窒素＝０．１２」および「ケイ素量／窒素＝０．３６」にそれぞれ一致、すなわち、追肥前後で培養液内の「リン／窒素およびケイ素／窒素」がそれぞれ一定になるように、該追肥成分の窒素量、リン量およびケイ素量を調整して追肥用培養液を調製し、調製した追肥用培養液を追肥前培養液４ａ内に追肥している。
【０１２２】
上述した半バッチ連続培養を繰り返しながら、培養液４内のキートセラスのセル濃度の経時変化、培養液４内のｐＨの経時変化をそれぞれ測定し、キートセラス１万セルあたりの窒素、リンおよびケイ素それぞれの消費量を求めた。
【０１２３】
実施例９
扁平培養ビン１１に１．５×１０ー３ｍ３の培養液６｛予め測定された初期の培養液濃度：窒素＝１６６（ｐｐｍ）、リン＝２０（ｐｐｍ）、ケイ素＝１２０（ｐｐｍ）｝を入れて１．０×１０３ｐｐｍの炭酸水素ナトリウムを添加し、その培養液６内に実施例８と同一量のキートセラスを接種し、実施例８と略同一の条件下（培養液温度：約２５℃〜約３５℃、光量子量：蛍光灯による約２００μｍｏｌ／ｍ２／ｓ、３％の炭酸ガス混合空気の通気攪拌）においてキートセラスの培養実験（実施例８と同様の半バッチ培養連続培養実験）を行った。そして、培養液６内のキートセラスのセル濃度の経時変化、培養液６内のｐＨの経時変化をそれぞれ測定し、キートセラス１万セルあたりの窒素、リンおよびケイ素それぞれの消費量を求めた。
【０１２４】
図２３は、実施例８および９の培養実験の測定結果である培養液４および培養液６のキートセラスのセル濃度の経時変化を示すグラフであり、図２３中、Ｋ１は、実施例８に対応する培養液４内で培養されたキートセラスのセル濃度を表し、Ｋ２は、実施例９に対応する培養液６内で培養されたキートセラスのセル濃度を表している。なお、符号Ａ１は、最初の測定時における培養液４および６の補給（追肥）タイミングを示しており、このときは、キートセラスのセル濃度は６．０×１０１３セル／ｍ３以上には達していないため、各培養液４および培養液６内に追肥成分（培養液４に含有された窒素、リン、ケイ素、ビタミン類、ミネラル類）を補給（追肥）したタイミングを示している。
【０１２５】
また、Ａ２〜Ａ７は、上記キートセラスのセル濃度が６．０×１０１３セル／ｍ３以上に達したとき、各培養液４および培養液６を約２／３取り除き、その取り除いた量に対応する各培養液４および培養液６を補給（追肥）したタイミングを示している。また、図２４は、実施例８および９の測定結果である培養液４および培養液６のｐＨの経時変化を示すグラフであり、Ｌ１は、実施例８に対応する培養液４のｐＨを表し、Ｌ２は、実施例９に対応する培養液６のｐＨを表している。
【０１２６】
ここで、キートセラスの所定セル（例えば１万セル）あたりの窒素、リンおよびケイ素それぞれの消費量は、次のように求められる。
【０１２７】
例えば、実施例８では、培養液４内においてキートセラスに消費された窒素の量は、図中の追肥タイミングＡ２において、前回（追肥タイミングＡ１）培養液４に加えられた窒素量（ＮADD）に初期培養液４内の窒素量（ＮFIR)を加えた値（ＮADD＋ＮFIR）から、上記追肥タイミングＡ２における培養液４内に残存する窒素の量（ＮREM）を引いた値ＮCOM（＝ＮADD＋ＮFIR−ＮREM）を求めることにより、その計算値ＮCOMを培養液４内における追肥タイミングＡ２までのキートセラスによる窒素の消費量として求めることができる。
【０１２８】
このとき、追肥タイミングＡ１における変化したキートセラスのセル濃度に対応するセル数により窒素消費量ＮCOMを除すことにより、キートセラス１セルあたりの窒素消費量も求めることができる。
【０１２９】
このようにして、初期培養液４内の窒素の量、半バッチ連続培養における各追肥タイミングＡ１〜Ａ７で加えた全ての窒素の量および連続培養終了時における培養液４内に残存する窒素の量から、半バッチ連続培養時におけるキートセラスの所定セルあたり（例えば１万セルあたり）の窒素の全消費量ＮALLを求めることができる。
【０１３０】
なお、半バッチ連続培養時における培養液４内におけるキートセラスの所定セルあたりのリンの全消費量ＰALLおよびケイ素の全消費量ＳｉALLについても、それぞれ窒素と同様に求めることができる。
【０１３１】
同様に、培養液６におけるキートセラスの所定セルあたりの窒素の全消費量、リンの全消費量およびケイ素の全消費量についても、それぞれ培養液４と同様の手法により求めることができる。
【０１３２】
ここで、下表３には、各実施例８および９における初期培養液濃度に基づくリンと窒素との質量濃度比（Ｐ／Ｎ比）および初期培養液濃度に基づく珪素と窒素との比（Ｓｉ／Ｎ比）がそれぞれ表示されている。
【０１３３】
そして、下表３には、測定されたキートセラスの１万セルあたりの窒素の全消費量の質量濃度、リンの全消費量の質量濃度およびケイ素の全消費量の質量濃度に基づいて求められたリンの全消費量と窒素の全消費量との比（ＰALL／ＮALL）およびケイ素の全消費量と窒素の全消費量との比（ＳｉALL／ＮALL）がそれぞれ表示されている。
【表３】
2004187675.tif 000004
実施例１０
屋外に設置された密閉型リアクタに６５×１０ー３ｍ３の培養液４｛予め測定された初期の培養液濃度：窒素＝１６６（ｐｐｍ）、リン＝２０（ｐｐｍ）、ケイ素＝６０（ｐｐｍ）｝を入れ、１．０×１０３ｐｐｍの炭酸水素ナトリウムを添加し、その培養液４内に所定量のキートセラスを接種した。そして、培養液温度を約１５℃〜約３５℃の範囲内において、なるべく２５℃に維持し、かつ自然の太陽光（光量子量：約０μｍｏｌ／ｍ２／ｓ（夜間）〜１２００μｍｏｌ／ｍ２／ｓの強度を有する）が培養液４に照射される状態において、３％の炭酸ガス混合空気をリアクタ内に送り込み、その炭酸ガス混合空気により培養液４を通気攪拌しながらキートセラスの培養実験を行った。
【０１３４】
この際、培養液４内に培養されたキートセラスのセル濃度が約５．０×１０１３セル／ｍ３〜約６．０×１０１３セル／ｍ３になった時に培養液４を約半分（３３×１０ー３ｍ３）取り除き、その取り除いた量に対応する人工海水に窒素、リン、ケイ素、ビタミン類等を含む追肥成分を溶かして追肥用培養液を調製し、調製した追肥用培養液を、リアクタ内の培養液４内に補給（追肥）する上述した半バッチ連続培養を実行する。
【０１３５】
この半バッチ連続培養の際、培養液４を約半分除去した後の追肥前培養液４ａの内の窒素、リンおよびケイ素の濃度をそれぞれ測定し、測定した窒素、リンおよびケイ素の濃度と、上記珪藻接種前に測定された初期培養液４における窒素、リンおよびケイ素の濃度｛窒素＝１６６（ｐｐｍ）、リン＝２０（ｐｐｍ）、ケイ素＝６０（ｐｐｍ）｝との差をそれぞれ求める。
【０１３６】
そして、測定した窒素、リンおよびケイ素の濃度差に基づいて、追肥前培養液４ａ内におけるリンと窒素との質量濃度比（リン／窒素）、およびケイ素と窒素との質量濃度比（ケイ素／窒素）が初期培養液４内における「リン／窒素＝０．１２」および「ケイ素量／窒素＝０．３６」にそれぞれ一致するように、該追肥成分の窒素量、リン量およびケイ素量を調整して追肥用培養液を調製し、調製した追肥用培養液を追肥前培養液４ａ内に追肥している。
【０１３７】
上述した半バッチ連続培養を繰り返しながら、培養液４内のキートセラスのセル濃度の経時変化、培養液４内のｐＨの経時変化をそれぞれ測定し、キートセラス１万セルあたりの窒素、リンおよびケイ素それぞれの消費量を求めた。
【０１３８】
図２５は、実施例１０の培養実験の測定結果である培養液４のキートセラスのセル濃度の経時変化を示すグラフである。なお、符号Ａ１１は、最初の測定時における培養液４の補給（追肥）タイミングを示しており、このときは、キートセラスのセル濃度は、５．０×１０１３セル／ｍ３〜６．０×１０１３セル／ｍ３には達していない。また、Ａ１２〜Ａ１７は、上記キートセラスのセル濃度が５．０×１０１３セル／ｍ３〜６．０×１０１３セル／ｍ３に達した際での培養液４の補給（追肥）タイミングを示している。また、図２６は、実施例１０の測定結果である培養液４のｐＨの経時変化を示すグラフである。
【０１３９】
ここで、実施例１０においても、実施例８と同様の方法により、キートセラスの所定セル（例えば１万セル）あたりの窒素、リンおよびケイ素それぞれの消費量が測定されている。
【０１４０】
したがって、本実施例１０においても、培養液４内における初期の窒素、リンおよびケイ素の量と、半バッチ連続培養における各追肥タイミングＡ１１〜Ａ１７で加えた全ての窒素の量、全てのリンの量および全てのケイ素の量を加え、連続培養終了時における培養液４内に残存する窒素の量、リンの量およびケイ素の量を引くことにより、半バッチ連続培養時におけるキートセラスの所定セルあたり（例えば１万セルあたり）の窒素の全消費量ＮALL、リンの全消費量ＰALLおよびケイ素の全消費量ＳｉALLをそれぞれ求めることができる。
【０１４１】
ここで、下表４には、測定されたキートセラスの１万セルあたりの窒素の全消費量の質量濃度、リンの全消費量の質量濃度およびケイ素の全消費量の質量濃度に基づいて求められたリンの全消費量と窒素の全消費量との比（ＰALL／ＮALL）およびケイ素の全消費量と窒素の全消費量との比（ＳｉALL／ＮALL）がそれぞれ表示されている。
【０１４２】
また、下表４には、実施例１０における初期培養液濃度に基づくリンと窒素との質量濃度比（Ｐ／Ｎ）および初期培養液濃度に基づく珪素と窒素との比（Ｓｉ／Ｎ）がそれぞれ表示されている。
【表４】
2004187675.tif 000005
図２３および図２５に示すように、実験室内（培養ビン１１）および屋外（密閉型リアクタ）の何れの場合であっても、約５．０×１０１３セル／ｍ３のセル濃度を有するキートセラスを繰り返し安定して培養することができた。また、図２４および図２６に示すように、培養液４内のｐＨが６．４以上８．５以下に維持されることも確認できた。
【０１４３】
特に、前掲表３に示すように、培養ビン１１および密閉型リアクタの何れの場合であっても、キートセラスの１万セルあたりのリンの全消費量と窒素の全消費量との比（ＰALL／ＮALL）およびケイ素の全消費量と窒素の全消費量との比（ＳｉALL／ＮALL）は、それぞれ初期培養液濃度に基づくリン／窒素（０．１２）およびケイ素／窒素（０．３６）に近接する値（約０．１４３および約０．４０２）となっている。
【０１４４】
したがって、初期培養濃度（Ｐ／ＮおよびＳｉ／Ｎ）が、予め上記リンの全消費量と窒素の全消費量との比（ＰALL／ＮALL＝約０．１４３）およびケイ素の全消費量と窒素の全消費量との比（ＳｉALL／ＮALL＝約０．４０２）に維持されるように設定された培養液４を用いて培養ビン１１によりキートセラスの増殖実験を行った場合、高セル濃度を有するキートセラスを繰り返し安定して培養できることが推定できた。
【０１４５】
同様に、前掲表４に示すように、初期培養濃度（Ｐ／ＮおよびＳｉ／Ｎ）が、予め上記リンの全消費量と窒素の全消費量との比（ＰALL／ＮALL＝約０．１３７）およびケイ素の全消費量と窒素の全消費量との比（ＳｉALL／ＮALL＝約０．４２３）に維持されるように設定された培養液４を用いて密閉型リアクタによりキートセラスの増殖実験を行った場合、高セル濃度を有するキートセラスを繰り返し安定して培養できることが推定できた。
【０１４６】
なお、実施例８〜１０における培養液４内の初期培養液濃度（培養量）の測定は、キートセラスの窒素およびケイ素の珪藻内への取り込み速度が遅いため、キートセラスの接種直後、あるいは例えば半日程度の相当の時間を経過した後において行ってもよい。他の培養液９および１０の場合でも同様である。
【０１４７】
また、本実施形態における実施例８〜１０において、培養液４内においてキートセラスに消費された窒素の消費量は、扁平培養ビン（あるいは密閉型リアクタ）において実際に培養している培養液に加えられた窒素量（ＮADD）に初期培養液４内の窒素量（ＮFIR)を加えた値（ＮADD＋ＮFIR）から、追肥タイミング、すなわち、キートセラスのセル濃度が６．０×１０１３セル／ｍ３以上に達した時における培養液４内に残存する窒素の量（ＮREM）を引いた値ＮCOM（＝ＮADD＋ＮFIR−ＮREM）を求めることにより、その計算値ＮCOMとして求められたが、本発明はこの構成に限定されるものではない。
【０１４８】
例えば、実際に培養している培養液とは異なる培養液（消費量測定用培養液）においてキートセラスを培養し、窒素の消費量を、消費量測定用培養液内の初期窒素量Ｎ１FIRと追加窒素量Ｎ１ADDとの和（＝Ｎ１ADD＋Ｎ１FIR）から、キートセラスのセル濃度が６．０×１０１３セル／ｍ３以上に達した時における消費量測定用培養液内に残存する窒素の量（Ｎ１REM）を引いた量値Ｎ１COM（＝Ｎ１ADD＋Ｎ１FIR−Ｎ１REM）として予め求めておくことができる。
【０１４９】
窒素と同様に、リンおよびケイ素の消費量も消費量測定用培養液を用いて予め求めておくことができる。
【０１５０】
そして、このようにして予め求めた窒素、リンおよびケイ素の消費量を用いることにより、実際の培養時において、キートセラスのセル濃度が６．０×１０１３セル／ｍ３以上に達した時（追肥タイミング）における培養液４内に残存する窒素の量、リンの量およびケイ素の量をそれぞれ測定することなく、培養液４内における上記追肥タイミングまでのキートセラスによる窒素、リンおよびケイ素それぞれの消費量を求めることができる。
【０１５１】
この結果、各追肥タイミングにおける窒素、リンおよびケイ素の追肥量を、その追肥する液体内のリンと窒素との追肥量の比（ＰADD／ＮADD）、および追肥液体内のケイ素と窒素との比（ＳｉADD／ＮADD）が、それぞれ消費量測定用培養液を用いて予め求められた消費量の比（ＰALL／ＮALL）｛＝０．１４３（培養ビン１１の場合）、＝０．１３７（密閉型リアクタの場合）｝および（ＳｉALL／ＮALL）｛＝０．４０２（培養ビン１１の場合）、＝０．４２３（密閉型リアクタの場合）｝を満足するように設定することが可能になり、追肥時の測定作業を省略して培養工程を簡単化することができる。
【０１５２】
なお、上記培養液４に対する追肥タイミングを、その培養液４内に培養されたキートセラスのセル濃度が約６．０×１０１３セル／ｍ３以上に達した時としたが、本発明はこの構成に限定されるものではなく、任意に設定することができる。
【０１５３】
以上述べたように、本実施形態によれば、培養液内のｐＨ、培養液内のリンと窒素との質量濃度比、および／または培養液内のケイ素と窒素との質量濃度比に着目することにより、上述した非特許文献で報告されている従来のセル濃度よりも高濃度である例えば約４．０×１０１３セル／ｍ３以上のセル濃度を有するキートセラスを安定して培養することができた。
【０１５４】
養殖業者の利点として、キートセラスの培養セル濃度向上に伴って、そのキートセラスの培養時における培養スペースおよび培養キートセラスの保管スペースを、従来の低濃度で培養されたキートセラスの保管スペースと比べてそれぞれ小さくすることができる。また、キートセラスの培養セル濃度向上により、より高濃度で培養されたキートセラスを、例えば貝類、甲殻類、棘皮類等の水産種苗を養殖するメーカ等へ輸送することができ、従来の低濃度で培養されたキートセラスを輸送する場合と比べて、キートセラスの輸送コストを低減することができる。
【０１５５】
さらに、本実施形態によれば、キートセラスの培養セル濃度向上により、キートセラス培養時の培養作業負荷も従来と比べて軽減することができる。
【０１５６】
そして、本実施形態によれば、キートセラスの培養セル濃度向上により、キートセラスを餌料とする水産種苗が存在する水槽に対してキートセラスの培養液を投入する際の容量を、従来の低セル濃度の培養液を投入する場合と比べて小さくすることができる。この結果、培養液投入時の作業員の作業負荷を軽減させることができ、さらに、余分な培養液を水槽に投入する必要がなくなる。
【０１５７】
さらにまた、本実施形態においては、培養開始時に接種量を変更することにより培養開始時のセル濃度を調整することが可能になり、この結果、所定の到達セル濃度にかかる時間を予測することができる。
【０１５８】
以上、本実施形態においては、液体（培養液）に接種して培養する珪藻をキートセラスとしたが、上述したように、他の属に分類される珪藻であってもよい。
【０１５９】
例えば、フェオダクチルム属に分類される珪藻（以下、フェオダクチルムと記載する）を培養する際の液体（培養液１０）の成分組成、その培養液１０の窒素、リンおよびケイ素それぞれの質量濃度（ｐｐｍ）を図２７にそれぞれ示す。さらに、図２７には、培養液１０におけるリンと窒素との質量濃度比を表すリン（Ｐ）／窒素（Ｎ）の値、およびケイ素と窒素との質量濃度比を表すケイ素（Ｓｉ）／窒素（Ｎ）の値がそれぞれ示されている。
【０１６０】
すなわち、培養液１０は、その成分組成が上述したキートセラスの培養において例示した培養液４と同一になるように調製されている。
【０１６１】
一方、図２７に示す培養液１１の成分組成は、フェオダクチルムの培養に用いられる公知の培養液の成分組成である。
【０１６２】
図２７に示すように、本実施形態に係わる培養液１０は、培養液４と同一の成分組成を有しており、そのリンと窒素との質量濃度比を表すリン（Ｐ）／窒素（Ｎ）が０．１２、ケイ素と窒素との質量濃度比を表すケイ素（Ｓｉ）／窒素（Ｎ）が０．３６にそれぞれ設定されている。
【０１６３】
一方、培養液１１には、ケイ素が含まれてはいないため、リン（Ｐ）／窒素（Ｎ）は１．２９である一方、ケイ素（Ｓｉ）／窒素（Ｎ）が０．００となっている。
【０１６４】
そして、本発明者等は、最初に培養液１０を用いて実際にフェオダクチルムの培養を行った。
【０１６５】
実施例１１
実験室内に用意された図５に示す容量１．５×１０ー３ｍ３の扁平培養ビン１１に１．５×１０ー３ｍ３の培養液１０を入れ、その培養液１０内に所定量のフェオダクチルムを接種した。そして、実施例１と略同一の条件下（培養液温度：約２５℃〜約３５℃、光量子量：蛍光灯による約２００μｍｏｌ／ｍ２／ｓ、３％の炭酸ガス混合空気の通気攪拌）においてフェオダクチルムの培養実験を行い、培養液１０内のフェオダクチルムのセル濃度の経時変化および培養液１０内のｐＨの経時変化をそれぞれ測定した。
【０１６６】
比較例
扁平培養ビン１１に１．５×１０ー３ｍ３の培養液１１を入れて１．０×１０３ｐｐｍの炭酸水素ナトリウムを添加し、その培養液１１内に実施例１１と同一量のフェオダクチルムを接種し、実施例１１と略同一の条件下（培養液温度：約２５℃〜約３５℃、光量子量：蛍光灯による約２００μｍｏｌ／ｍ２／ｓ、３％の炭酸ガス混合空気の通気攪拌）においてフェオダクチルムの培養実験を行い、培養液１１内のフェオダクチルムのセル濃度の経時変化および培養液１１内のｐＨの経時変化をそれぞれ測定した。
【０１６７】
図２８は、実施例１１および比較例の培養実験の測定結果であるフェオダクチルムのセル濃度の経時変化をそれぞれ示すグラフである。図２８中、Ｍ１は、実施例１１に対応する培養液１０内で培養されたフェオダクチルムのセル濃度を表し、Ｍ２は、比較例に対応する培養液１１内で培養されたフェオダクチルムのセル濃度を表している。
【０１６８】
また、図２９は、実施例１１および比較例の測定結果である培養液１０および培養液１１のｐＨの経時変化をそれぞれ示すグラフである。図２９中、Ｎ１は、実施例１１に対応する培養液１０のｐＨを表し、Ｎ２は、比較例に対応する培養液１１のｐＨを表している。
【０１６９】
図２８におけるグラフＭ１とグラフＭ２との対比から明らかなように、そのグラフＭ１に対応する培養液１０におけるフェオダクチルムのセル濃度は約１．２×１０１４セル／ｍ３を突破しており、これに対して、比較例のフェオダクチルムのセル濃度は、４．０×１０１３セル／ｍ３にも達していないことが分かった。
【０１７０】
また、図２９に示すように、培養液１０において、その培養液１０内のｐＨが６．４以上８．５以下に維持されることも確認できた。
【０１７１】
以上述べたように、培養液１０を用いてフェオダクチルムを培養することにより、従来の培養液１１と比較して、約１．２×１０１４セル／ｍ３以上の大きなセル濃度を有するフェオダクチルムを安定して培養できた。
【０１７２】
したがって、上述したキートセラスの場合と同様に、フェオダクチルム培養および保管スペースの低減、培養フェオダクチルムの輸送コスト低減およびフェオダクチルム培養作業負荷の軽減をそれぞれ実現することができる。
【０１７３】
なお、上記各実施例１〜１１においては、培養液のｐＨ調整用として、炭酸水素ナトリウムを添加したが、本発明は炭酸水素ナトリウムに限定されるものではなく、ナトリウム以外の１価のアルカリ金属｛Ｌｉ（リチウム）、Ｋ（カリウム）、Ｒｂ（ルビジウム）、Ｃｓ（セシウム）等｝を添加し、培養液内に炭酸水素塩を含むようにしてもよい。
【０１７４】
また、ｐＨ調整用として、２価のアルカリ土類金属を添加して、培養液内に炭酸水素アルカリ金属塩を含むようにしてもよい。
【０１７５】
さらに、培養液内に通気攪拌される気体として、３％の炭酸ガスが添加された空気を用いたが、培養液内の生命維持に必要な成分であれば、酸素、二酸化炭素等の成分が所定量添加された気体であればよい。
【０１７６】
さらにまた、本実施形態においては、珪藻培養の培養液におけるリン／窒素およびケイ素／窒素をそれぞれ調整したが、本発明はこの構成に限定されるものではなく、少なくともケイ素／窒素を調整すればよい。
【０１７７】
本発明は上記実施の形態および実施例に限定されるものではなく、本発明の要旨を逸脱しない範囲内において適宜変更して実施することができる。
【図面の簡単な説明】
【０１７８】
【図１】（ａ）は、全窒素（Ｎ）の消費量とキートセラスのセル濃度変化との関係を示す図、（ｂ）は、リンの消費量とキートセラスのセル濃度変化との関係を示す図、（ｃ）は、ケイ素の消費量とキートセラスのセル濃度変化との関係を示すグラフ。
【図２】本発明の実施の形態に係わる培養液の成分組成を表形式で示す図。
【図３】本発明の実施の形態に係わる培養液および従来の培養液それぞれの窒素、リンおよびケイ素それぞれの質量濃度を表形式で示す図。
【図４】本発明の実施の形態に係わる培養液４においてｐＨを変化させた場合の加水分解量の測定結果を示すグラフ。
【図５】本発明の実施の形態に係わる扁平培養ビンの構成を示す図。
【図６】本発明の実施の形態に係わる培養液１に３％の炭酸ガスが混合された空気を通気して攪拌した場合｛炭酸水素ナトリウム（ＮａＨＣＯ３)無添加｝、および７．０×１０３ｐｐｍの炭酸水素ナトリウム（ＮａＨＣＯ３)を添加した場合（空気による通気攪拌あり）における培養液１内のキートセラスのセル濃度変化と培養液１内のｐＨの変化とをそれぞれ測定した結果を示すグラフ。
【図７】本発明の実施の形態に係わる培養液１に対する炭酸水素ナトリウムの添加量が［１］０．０２×１０３ｐｐｍ、［３］０.１４×１０３ｐｐｍ、［６］１．０×１０３ｐｐｍの場合の培養実験の測定結果であるキートセラスのセル濃度の経時変化をそれぞれ示すグラフ。
【図８】本発明の実施の形態に係わる培養液１に対する炭酸水素ナトリウムの添加量が［１］０．０２×１０３ｐｐｍ、［３］０.１４×１０３ｐｐｍ、［６］１．０×１０３ｐｐｍの場合の培養実験の測定結果である培養液１内のｐＨの経時変化をそれぞれ示すグラフ。
【図９】本発明の実施の形態に係わる培養液１に対する炭酸水素ナトリウムの添加量が［２］０．０７×１０３ｐｐｍ、［３］０.１４×１０３ｐｐｍ、［４］０．２８×１０３ｐｐｍ、［６］１．０×１０３ｐｐｍの場合の培養実験の測定結果であるキートセラスのセル濃度の経時変化をそれぞれ示すグラフ。
【図１０】本発明の実施の形態に係わる培養液１に対する炭酸水素ナトリウムの添加量が［２］０．０７×１０３ｐｐｍ、［３］０.１４×１０３ｐｐｍ、［４］０．２８×１０３ｐｐｍ、［６］１．０×１０３ｐｐｍの場合の培養実験の測定結果である培養液１内のｐＨの経時変化をそれぞれ示すグラフ。
【図１１】本発明の実施の形態に係わる培養液１に対する炭酸水素ナトリウムの添加量が［４］０．２８×１０３ｐｐｍ、［５］０.５６×１０３ｐｐｍ、［６］１．０×１０３ｐｐｍ、［７］２．０×１０３ｐｐｍの場合の培養実験の測定結果であるキートセラスのセル濃度の経時変化をそれぞれ示すグラフ。
【図１２】本発明の実施の形態に係わる培養液１に対する炭酸水素ナトリウムの添加量が［４］０．２８×１０３ｐｐｍ、［５］０.５６×１０３ｐｐｍ、［６］１．０×１０３ｐｐｍ、［７］２．０×１０３ｐｐｍの場合の培養実験の測定結果である培養液１内のｐＨの経時変化をそれぞれ示すグラフ。
【図１３】本発明の実施の形態に係わる培養液１に対する炭酸水素ナトリウムの添加量が［６］１．０×１０３ｐｐｍおよび［８]７.０×１０３ｐｐｍの場合の培養実験の測定結果であるキートセラスのセル濃度の経時変化をそれぞれ示すグラフ。
【図１４】本発明の実施の形態に係わる培養液１に対する炭酸水素ナトリウムの添加量が［６］１．０×１０３ｐｐｍおよび［８］７.０×１０３ｐｐｍの場合の培養実験の測定結果である培養液１内のｐＨの経時変化をそれぞれ示すグラフ。
【図１５】本発明の実施の形態に係わる実施例１〜実施例４の培養実験の測定結果であるキートセラスのセル濃度の経時変化をそれぞれ示すグラフ。
【図１６】本発明の実施の形態に係わる実施例１〜実施例４の測定結果である培養液１〜培養液４のｐＨの経時変化をそれぞれ示すグラフ。
【図１７】実施例１〜実施例４の測定結果の再現性を確認するための培養実験の測定結果である培養液１〜培養液４のキートセラスのセル濃度の経時変化をそれぞれ示すグラフ。
【図１８】実施例１〜実施例４の測定結果の再現性を確認するための培養実験の測定結果である培養液１〜培養液４のｐＨの経時変化をそれぞれ示すグラフ。
【図１９】本発明の実施の形態に係わる実施例５〜実施例７の培養実験の測定結果である培養液２、培養液４および培養液５のキートセラスのセル濃度の経時変化をそれぞれ示すグラフ。
【図２０】本発明の実施の形態に係わる実施例５〜実施例７の測定結果である培養液２、培養液４および培養液５のｐＨの経時変化をそれぞれ示すグラフ。
【図２１】本発明の実施の形態に係わる培養液２、培養液４、培養液５および培養液６のキートセラスのセル濃度の経時変化をそれぞれ示すグラフ。
【図２２】本発明の実施の形態に係わる培養液２、培養液４、培養液５および培養液６のｐＨの経時変化をそれぞれ示すグラフ。
【図２３】本発明の実施の形態に係わる実施例８および９の培養実験の測定結果である培養液４および培養液６のキートセラスのセル濃度の経時変化を示すグラフ。
【図２４】本発明の実施の形態に係わる実施例８および９の測定結果である培養液４および培養液６のｐＨの経時変化を示すグラフ。
【図２５】本発明の実施の形態に係わる実施例１０の培養実験の測定結果である培養液４のキートセラスのセル濃度の経時変化を示すグラフ。
【図２６】本発明の実施の形態に係わる実施例１０の測定結果である培養液４のｐＨの経時変化を示すグラフ。
【図２７】本発明の実施の形態に係わるフェオダクチルム属に分類される珪藻を培養する際の液体の成分組成、その培養液の窒素、リンおよびケイ素それぞれの質量濃度、リンと窒素との質量濃度比を表すリン／窒素の値、およびケイ素と窒素との質量濃度比を表すケイ素／窒素の値をそれぞれ表形式で示す図。
【図２８】本発明の実施の形態に係わる実施例１１および比較例の培養実験の測定結果である培養液１０および培養液１１のフェオダクチルムのセル濃度の経時変化をそれぞれ示すグラフ。
【図２９】本発明の実施の形態に係わる実施例１１および比較例の測定結果である培養液１０および培養液１１のｐＨの経時変化をそれぞれ示すグラフ。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８】
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【図２９】
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