(57)【要約】【課題】コーヒー抽出残渣を有効利用するためにコーヒー抽出残渣を主原料とし、且つ、食用キノコの安定栽培が可能なキノコ栽培用培地の製造方法を提供する。【解決手段】コーヒー抽出残渣由来の可溶性固形分が培地全体の０．５％以下となるように、前記コーヒー抽出残渣を添加する添加工程を有するキノコ栽培用培地の製造方法。【選択図】　　　　なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
コーヒー抽出残渣由来の可溶性固形分が培地全体の０．５％以下となるように、前記コーヒー抽出残渣を添加する添加工程を有するキノコ栽培用培地の製造方法。
【請求項２】
前記添加工程より先に、前記コーヒー抽出残渣に含まれる可溶性固形分の少なくとも一部を水抽出する洗浄工程を有する請求項１に記載のキノコ栽培用培地の製造方法。
【請求項３】
前記添加工程より先に、下記数１に示す関係式を使用して前記可溶性固形分量を算定する算定工程を有する請求項２に記載のキノコ栽培用培地の製造方法。
【数１】
2004033005.tif 000006
【請求項４】
その水分含有率を６０〜７０％に調整する調整工程を有する請求項１〜３の何れか１項に記載のキノコ栽培用培地の製造方法。
【請求項５】
請求項１〜４の何れか１項に記載されたキノコ栽培用培地の製造方法を用いて製造される、コーヒー抽出残渣を含むキノコ栽培用培地。
【請求項６】
請求項５に記載のコーヒー抽出残渣を含むキノコ栽培用培地を用いる請求項７に記載のキノコ生産方法。
【請求項７】
前記キノコがエリンギである請求項６に記載のキノコ生産方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、キノコ栽培用培地の製造方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
近年、缶、ＰＥＴ、紙等の容器詰め飲料の普及によって、コーヒー飲料の生産量が増大し、コーヒー飲料の２００１年度の生産量は、約８７０万ｋＬに達している。これに伴って、コーヒー飲料の製造工程において、大量のコーヒー抽出残渣が発生している。このコーヒー抽出残渣は、焙煎したコーヒー豆を粉砕し水を加えてコーヒーを抽出して残るものである。
【０００３】
環境保護の観点から、このようなコーヒー抽出残渣を資源として再利用する方法が種々提案されてきた。例えば、消臭剤、飼料、堆肥、又は活性炭としての利用が挙げられる。また、食用キノコ（子実体）の栽培用培地として、前記コーヒー抽出残渣を再利用する方法も提案されている。しかしながら、これらの提案のうち、一部は商業的な規模で実施されていたが、まだ、このコーヒー抽出残渣の大部分は焼却処分されたり、残業廃棄物として埋め立てに使用されたりしているのが現状であった。
【０００４】
ところで、食用キノコの培地には、通常、おが屑を基材として、ここに米糠などの栄養分を添加したものが使用されるが、コーヒー抽出残渣を食用キノコの培地に使用することも提案されていた。例えば、木粉培地にコーヒー抽出残渣を添加した培地を用いたシイタケ栽培方法が提案されていた（特開平２−１５６８２８号公報参照）。又、コーヒー抽出残渣を主原料とするキノコの栽培培地が提案されていた（特開平９−１０３１９３号公報参照）。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
しかしながら、特開平２−１５６８２８号公報で提案された方法では、コーヒー抽出残渣はシイタケの生育を抑制するとして、その添加量は制限されている。従って、前記コーヒー抽出残渣が培地の主材料として用いられておらず、むしろ、シイタケ子実体の発芽本数を抑制する発芽抑制剤として少量添加されるに過ぎない。従って、この方法では、コーヒー抽出残渣を大量に利用することは困難であった。
【０００６】
又、特開平９−１０３１９３号公報で提案されたキノコ栽培培地においては、コーヒー抽出残渣を一旦発酵させなければキノコ子実体の発芽を阻害するとされている。ここで、前記コーヒー抽出残渣を発酵させるために、自然条件下で１年、発酵処理剤を使用した場合で２ヶ月ほど要するため、前記コーヒー抽出残渣を利用するために非常に長い期間を要するという問題点があった。更に、前記発酵処理剤は微生物を含んでいるので、この処理剤に含まれる微生物が滅菌工程において完全に滅菌されなかった場合、キノコ栽培時に前記キノコの生育を阻害するおそれがあった。そこで、菌床の殺菌には細心の注意を払わなければならないという問題点があった。
【０００７】
従って、本発明の目的は、上記問題点に鑑み、コーヒー抽出残渣を有効利用するためにコーヒー抽出残渣を主原料とし、且つ、食用キノコの安定栽培が可能なキノコ栽培用培地の製造方法を提供することにある。
【０００８】
【課題を解決するための手段】
この目的を達成するための本発明のキノコ栽培用培地の製造方法の特徴手段は、請求項１に記載してあるように、コーヒー抽出残渣由来の可溶性固形分が培地全体の０．５％以下となるように、前記コーヒー抽出残渣を添加する添加工程を有する点にある。
更に、上記特徴手段において、請求項２に記載してあるように、前記添加工程より先に、前記コーヒー抽出残渣に含まれる可溶性固形分の少なくとも一部を水抽出する洗浄工程を有することが好ましい。
更に、上記特徴手段において、請求項３に記載してあるように、前記添加工程より先に、下記数２に示す関係式を使用して前記可溶性固形分量を算定する算定工程を有することが好ましい。
【０００９】
【数２】
ｙ　＝　０．４８９６　×　ｘ　＋　０．０６０４
ｘ：洗浄工程で発生した洗浄廃液の４２０ｎｍにおける吸光度
ｙ：洗浄廃液中の可溶性固形分濃度（重量％）
【００１０】
又、この目的を達成するための本発明のキノコ栽培用培地の特徴構成は、請求項４に記載してあるように、その水分含有率を６０〜７０％に調整する調整工程を有する点にある。
又、この目的を達成するための本発明のキノコ栽培用培地の特徴構成は、請求項５に記載してあるように、請求項１〜４の何れか１項に記載されたキノコ栽培用培地の製造方法を用いて製造される点にある。
又、この目的を達成するための本発明のキノコ生産方法の特徴手段は、請求項６に記載してあるように、請求項５に記載のコーヒー抽出残渣を含むキノコ栽培用培地を用いる点にある。
上記特徴手段において、請求項７に記載してあるように、前記キノコがエリンギであることが好ましい。
そして、これらの作用効果は、以下の通りである。
【００１１】
コーヒー抽出残渣を有効利用するために、本願発明者らは、コーヒー抽出残渣がキノコの生育を阻害する原因について種々の検討を行なった。そして、鋭意研究を行なった結果、以下に示すように、前記コーヒー抽出残渣の可溶性固形分の濃度を指標とすることによって、従来使用されてきたおが屑と比較して、キノコの生育を少なくとも阻害しないコーヒー抽出残渣を得る技術を想到するに至った。
【００１２】
表１に、本試験に使用したコーヒー抽出残渣の粒度分布を示す。このコーヒー抽出残渣は、ＵＣＣ上島珈琲株式会社の工場において、コーヒー飲料の製造に使用したものである（以下のすべての実験に、このコーヒー抽出残渣を使用した）。このコーヒー抽出残渣の粒度分布は、ＪＩＳ　Ｚ　８８０１（１９９４）に準じて測定した。１４〜２０メッシュの粒子がコーヒー抽出残渣全体の約８５％を占めており、保水性に富んでいる。
尚、コーヒー飲料製造ラインから排出された直後の状態のコーヒー抽出残渣は、６０％以上の水分を含んでいた。
【００１３】
【表１】
2004033005.tif 000002
【００１４】
〔コーヒー抽出残渣由来の可溶性固形分の調製〕
このコーヒー抽出残渣（気乾状態：水分含有率約９．６５％）と、重量比で２０倍の熱水（約７０℃）とを混合し、これを室温で攪拌しながら１時間保持し、前記コーヒー抽出残渣の可溶性成分を抽出した抽出液を得た。前記抽出液は、コーヒー抽出残渣から濾別され、更に室温で減圧濃縮した。得られた濃縮液を、更に１００℃の乾熱器で乾燥させて、コーヒー抽出残渣由来の可溶性固形分（粉末状）を得た。
【００１５】
〔栽培〕
ポテトデキストロース寒天培地（ＰＤＡ培地／日水製）を、キノコ栽培用の培地に用いた。直径９０ｍｍのシャーレに、前記可溶性固形分を加えた前記ＰＤＡ培地を入れて平板培地を準備し、ここに、下記４種の代表的な食用キノコを夫々接種した。前記可溶性固形分の添加量は、重量比で、０．１，０．２，０．３，０．５，１．０，２．０、及び４．０％とした。尚、酵母エキス・麦芽エキス寒天培地（ＭＹＡ培地）で２４℃、１０日間平板培養したものをコルクボーラ（直径５ｍｍ）で打ち抜いた菌糸体を接種源とした。
【００１６】
〔供試菌〕
（１）供試菌Ａ
ヒラタケ（菌興１号（財団法人日本きのこセンター））
（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓ　ｏｓｔｒｅａｔｕｓ（Ｊａｃｑ．：Ｆｒ．）Ｋｕｍｍｅｒ）
（２）供試菌Ｂ
ブナシメジ（ＵＣＣ上島珈琲株式会社　Ｒ＆Ｄセンター保存株）
（Ｈｙｐｓｉｚｉｇｕｓ　ｍａｒｍｏｒｅｕｓ（Ｐｅｃｋ．）Ｂｉｇｅｌｏｗ）
（３）供試菌Ｃ
タモギタケ（有限会社大貫菌蕈）
（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓ　ｃｏｒｎｕｃｏｐｉａｅ（Ｐａｕｌｅｔ）Ｒｏｌｌａｎｄ　ｖａｒ．ｃｉｔｒｉｎｏｐｉｌｅａｔｕｓ（ｓｉｎｇ）Ｏｈｉｒａ）
（４）供試菌Ｄ
エリンギ（財団法人福島県きのこ振興センター）
（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓ　ｅｒｙｎｇｉｉ（ＤＣ．：Ｆｒ）Ｑｕｅｌ）
【００１７】
〔菌糸体伸長〕
夫々の供試菌毎に５検体（平板培地）を準備し、２３℃、暗黒下で、１０日間栽培した。夫々の検体のコロニーの直径を測定した。
【００１８】
〔菌糸体重量〕
夫々の供試菌毎に５検体（平板培地）を準備し、２３℃、暗黒下で、１０日間栽培した。夫々の検体となる培地を熱水で溶解し、菌糸体を濾別し、温水・冷水で順次洗浄後、菌糸体の乾燥重量を測定した。
【００１９】
〔結果〕
図１〜４に、前記可溶性固形分の添加量に対する、供試菌Ａ〜Ｄの菌糸体伸長量及び菌糸体重量の変化を示す。
これらの結果から、可溶性固形分の添加量が増えるほど、即ち、培地中の可溶性固形分濃度が高まるほど、供試菌のコロニー直径は小さくなり、又、菌糸体重量も減少することがわかった。又、発明者らの観察によって、前記可溶性固形分の濃度が上昇するに従って、上記４種の供試菌の菌糸が空気中に伸びていく傾向が強くなることがわかった。よって、コーヒー抽出残渣のうち、可溶性固形分にキノコ菌糸体の生育を阻害する物質が含まれていると考えた。
【００２０】
これらの結果に基づいて、発明者らは、前記コーヒー抽出残渣から可溶性固形分を除去することによって、キノコ栽培用の培地にコーヒー抽出残渣を高比率で配合することができると考えた。よって、前記コーヒー抽出残渣から前記可溶性固形分を除去する程度及びその処理方法について検討した。ここで、前記４種の供試菌における前記可溶性固形分の添加許容量（寒天平板培地に対する重量／容積比）が、ヒラタケ（供試菌Ａ）で２．０％未満、ブナシメジ（供試菌Ｂ）では０．５％未満、タモギタケ（供試菌Ｃ）では１．０％未満、エリンギ（供試菌Ｄ）では１．０％未満であったことから（図１〜４参照）、３種の供試菌で良好な生育を許容した添加許容量０．５％、より好ましくは４種すべての供試菌で良好な生育を許容した０．３％を基準として、以下の実験を行なった。
【００２１】
〔コーヒー抽出残渣の調製方法の検討〕
通常、キノコの培地は、水分を６０〜７０％、米糠などの栄養分を０〜２０％、培地の保形及び保水を主目的とする基材を４０〜１０％含む。従って、コーヒー抽出残渣に含まれる可溶性固形分を０．５％以下又は０．３％以下になるようにコーヒー抽出残渣に含まれる前記可溶性固形分を除去すると、キノコの生育を阻害しない培地が得られると考えた。そこで、発明者らは、コーヒー抽出残渣に含まれる可溶性固形分を０．５％以下又は０．３％以下にする手段について検討した。
【００２２】
種々の手段について検討を行なった結果、発明者らは、水又は熱水を用いて前記可溶性固形分を抽出除去することによって、容易且つ安価に、キノコ生育培地に適するようにコーヒー抽出残渣を改変することができることを見出した。
【００２３】
例えば、コーヒー抽出残渣が浸る程度に、前記コーヒー抽出残渣（水分９．６５％）に７０℃の熱水を加えてウォーターバスで１０分間保持し、その後、前記コーヒー抽出残渣と熱水とを濾別し（洗浄工程）、これを１６回繰り返して洗浄済コーヒー抽出残渣を得る実験を行なった。抽出された洗浄廃液中の可溶性固形分は、上述したように、１００℃の乾熱器で乾燥させて重量を測定した。洗浄回数０回で残存している可溶性固形分、即ち、全可溶性固形分は、コーヒー抽出残渣を２０倍量の熱水で１時間還流抽出（洗浄）を行い、この洗浄廃液を適宜アルミ皿にとり、常圧で１００℃に加熱し、恒量になるまで乾燥しその重量を測定し、コーヒー抽出残渣の重量（乾物）に対する比で表わした。
【００２４】
【表２】
2004033005.tif 000003
【００２５】
表２及び図５は、上記実験の結果として、前記コーヒー抽出残渣からの前記可溶性固形分の抽出・残存比率（重量比）と、キノコ栽培用菌床を構成する培地の代表的な組成（重量比で、基材約２５％、栄養分（米ぬか）約１０％、水分６５％）における前記可溶性固形分の存在比とを示す。この結果によれば、４回洗浄することによって、前記コーヒー抽出残渣に残存している可溶性固形分を前記コーヒー抽出残渣全体に対して約２％にまで低減することができ、前記可溶性固形分を０．５％以下にまで低減した培地により構成される菌床を作成することができる。又、１１回洗浄することによって、前記コーヒー抽出残渣に残存している可溶性固形分を前記コーヒー抽出残渣全体に対して約１．２％にまで低減することができ、前記可溶性固形分を約０．３％以下にまで低減した培地により構成される菌床を作成することができ、前記コーヒー抽出残渣に含まれる生育阻害物質に対して感受性の高いキノコの栽培に使用することができる。
【００２６】
更に、本願発明者らは、下記数３に示すように、先ほどのコーヒー抽出残渣の洗浄に使用した洗浄廃液の４２０ｎｍにおける吸光度が、前記コーヒー抽出残渣から抽出されて前記洗浄廃液に移行した前記可溶性固形分の濃度と非常高い相関関係にあることを見出した。
【００２７】
【数３】
ｙ　＝　０．４８９６　×　ｘ　＋　０．０６０４
ｘ：洗浄廃液の４２０ｎｍにおける吸光度
ｙ：洗浄廃液中の可溶性固形分濃度（重量％）
【００２８】
図６は、グラフ化したその相関関係を表わす。このような、非常に高い相関関係を利用することによって、前記洗浄廃液の吸光度に基づいて、抽出された前記可溶性固形分の濃度（量）を直接導き出すことができるようになった。
【００２９】
尚、前述した特開平１０−９８９３９号公報に記載されたように、「コーヒー抽出残渣を７０℃に加熱した溶液に浸漬し１時間後に脱水した」場合、下記表３に示すように、少なくとも、菌床に対して約０．７重量％の可溶性固形分が残存することになり、キノコの生育が阻害される虞れがある。
【００３０】
【表３】
2004033005.tif 000004
【００３１】
従って、請求項１に記載されているように、添加工程において、コーヒー抽出残渣由来の可溶性固形分が培地全体の０．５％以下となるように、前記コーヒー抽出残渣を添加することによって、キノコの生育阻害を防ぐことができる。このように、前記コーヒー抽出残渣の成分を指標に直接的にコーヒー抽出残渣の混合割合を設定する技術は、従来なかった。よって、本発明によって、キノコの生育阻害を確実に防止し、且つ、短期で子実体を成長させ、その収量をも増加させるキノコ栽培用培地を製造することができる。
尚、「培地全体」とは水分をも含むと解し、固形分（例えば、基材、栄養分等）を先に混合し、ここに水を注入して培地を調製する場合には、水を注入した後の培地で０．５％以下となるようにする。
又、キノコの人工栽培の際には、培地を容器に詰めて滅菌して「菌床」を作成するので、本発明の「培地」の組成と「菌床」の組成とは、ほぼ等しいと解する。
【００３２】
又、請求項２に記載されているように、前記添加工程より先に洗浄工程を設けて、この洗浄工程においてコーヒー抽出残渣に含まれる可溶性固形分の少なくとも一部を水抽出すると、前記コーヒー抽出残渣に含まれる可溶性固形分が減少する。これによって、コーヒー抽出残渣単位容積又は単位重量あたりのキノコの生育阻害の程度が下げることができる。よって、より高い比率でコーヒー抽出残渣を培地に配合することができる。従って、前記コーヒー抽出残渣の有効に、特に大量に、利用することができる。
【００３３】
又、請求項３に記載してあるように、前記添加工程より先に算定工程を設けて、この算定工程において、前記数２に示す関係式を使用することによって、前記可溶性固形分量を算定することができる。この方法で前記可溶性固形分を定量すると、わざわざ洗浄廃液を乾燥させ、抽出された前記可溶性固形分の重量を測定する必要が無くなる。従って、容易に且つ迅速に前記コーヒー抽出残渣の可溶性固形分除去を行うことができる。
【００３４】
更に、請求項４に記載されているように、調整工程において、水分含有率を６０〜７０％に調整することによって、キノコ子実体の形成に適した培地（環境）を提供することができる。
【００３５】
従って、請求項５に記載してあるように、請求項１〜４の何れか１項に記載された方法によって製造されたキノコ栽培用培地は、確実にキノコの生育を阻害しないで、前記コーヒー抽出残渣の含有比率を高めることができる。従って、高価で貴重なおが屑を基材とした従来の培地と比べて、非常に低いコストで得られ、且つ、資源（おが屑）利用を抑制することができる。
【００３６】
ここで、請求項６に記載してあるように、請求項５に記載されたコーヒー抽出残渣含むキノコ栽培用培地を用いてキノコを栽培すると、少なくとも従来の培地でキノコを栽培した場合と同等のキノコ子実体収量が得られる。更に、下記実験例に示すように、従来の培地に比べて、子実体収穫までに要する期間を短縮することができると共に、その収量も増加させることができる。
【００３７】
又、請求項７に記載してあるように、コーヒー抽出残渣に含まれる可溶性固形分の少なくとも一部を水抽出する洗浄工程を経て得られた洗浄済コーヒー抽出残渣は、容積・重量あたりの可溶性固形分が減少している。そのため、添加工程において、コーヒー抽出残渣由来の可溶性固形分が培地全体の０．５％以下となるように添加する際に、その配合比率を増加させることができ、前記コーヒー抽出残渣の有効利用及びキノコ栽培に係るコストの削減に貢献する。
【００３８】
又、請求項８に記載してあるように、前記キノコがエリンギであると、後述するように、培地重量あたり子実体収量の増加が著しい。
【００３９】
【発明の実施の形態】
以下に本発明の実施の形態を説明する。
図７は、キノコ栽培用培地に使用するためのコーヒー抽出残渣洗浄のフローを示す。コーヒー抽出残渣は、コーヒー飲料の製造に使用したものを使用することができる。このコーヒー抽出残渣に水（ここでは熱水であるが、常温水でもよい。）を添加する（Ｓ１）。更に一定時間（例えば、０．５〜２４時間）、このコーヒー抽出残渣を前記熱水に浸漬し（Ｓ２）、前記コーヒー抽出残渣に含まれる可溶性固形分を抽出する。この後、前記熱水（洗浄廃液）を排出して、必要に応じて脱水する（Ｓ３）。これらの工程（Ｓ１〜Ｓ３）は、前記コーヒー抽出残渣に残存する前記可溶性固形分が所定量（例えば、水分含量９．６５％の前記コーヒー抽出残渣に対して重量比で１．１７％以下）に減少するまで繰り返され、洗浄処理済のコーヒー抽出残渣が得られる。
【００４０】
ここで、下記数４に示す式を用いると、前記洗浄廃液に含まれる可溶性固形分含有率を、簡単に算定することができる。
【００４１】
【数４】
ｙ　＝　０．４８９６　×　ｘ　＋　０．０６０４
ｘ：洗浄廃液の４２０ｎｍにおける吸光度
ｙ：洗浄廃液中の可溶性固形分濃度（重量％）
【００４２】
そして、下記数５に示す式を用いると、前記コーヒー抽出残渣から除去された可溶性固形分の比率を算出することができる。
【００４３】
【数５】
ｆ＝ｙ÷１００×ｂ÷ｅ×１００
ｆ：洗浄によってコーヒー抽出残渣から除去された可溶性固形分（コーヒー抽出残渣に対する重量％）
ｅ：洗浄したコーヒー抽出残渣の重量（ｋｇ）
ｂ：洗浄に使用した熱水量（ｋｇ）
【００４４】
又、別途、洗浄廃液から褐色が観察されなくなるまで洗浄を繰り返して（例えば、２０倍量の熱水で１時間還流抽出）、前記コーヒー抽出残渣に含まれる全可容積固形分濃度（ｄ）を算出する。そして、ａ％のコーヒー抽出残渣と水分と、必要に応じて栄養分とを含む培地を想定した場合、下記数６に示す式を満たすと、培地全体に対する可溶性固形分の存在比を０．５％以下にすることができる。
【００４５】
【数６】
ａ÷１００×（ｄ−ｆ）　≦　０．５
ａ：培地中のコーヒー抽出残渣の存在比率（重量％）
【００４６】
上記数４〜６に示す式と培地作成上の考慮すべきパラメータとを考慮すると、プールした洗浄廃液の吸光度が下記数７に示す関係を満たす場合、培地全体に対する可溶性固形分の存在比を０．５％以下にすることができる。
【００４７】
【数７】
2004033005.tif 000005
【００４８】
尚、前記吸光度を用いた可溶性固形分濃度の算定は、洗浄廃液を交換するごとに行ってもよく、或いは、すべての洗浄廃液を一旦プールしてこのプールした液の吸光度を測定して行ってもよい。
【００４９】
図８は、前記洗浄処理済コーヒー抽出残渣を用いたキノコ栽培のフローを示す。本発明は、例えば、非限定的に、ヒラタケ、ブナシメジ、タモギタケ、エリンギ、マイタケ、シイタケ、エノキタケ、ナメタケ等の人工栽培が可能な食用キノコの栽培に適しているが、その適用範囲は食用キノコの栽培に限定されない。好ましくは、おが屑を基材として生育可能なキノコの栽培において、前記おが屑の少なくとも一部と置換して利用する。特に、エリンギの栽培に使用することによって、栽培期間の短縮、収量（培地重量ベース）の増加をもたらすので好ましい。
【００５０】
前記洗浄済コーヒー抽出残渣は、他の培地材料と組み合わせることによって培地を形成する（Ｓ４）。培地は、主に、水分、基材、栄養分からなる。水分は、キノコ（菌糸体及び子実体）の形成に重要な要因である。食用キノコの場合、通常、６０〜７０％となるように添加される。基材は、菌床の形状維持、保水などのために要する。通常は、おが屑を使用するが、これに代えて、前記洗浄済コーヒー抽出残渣を用いる。前記基材は、例えば、培地の２０〜３０％になるように添加する。栄養分は、前記菌糸体や子実体の成長のために必要である。米ぬかが用いられることが多い。他にも、これらに限定されるものではないが、フスマ、おから、コーンブラン、ビートパルプ、又はモルトフィード等を用いることができる。ここで、前記基材となる成分を分解し栄養分とするキノコもあるので、前記基材と前記栄養分とはその機能によって区別されるものであって、成分によって区別されるものではない。よって、キノコの種類によっては、前記米ぬか等の一般的な栄養分を添加しないで、前記コーヒー抽出残渣を栄養分及び基材とする培地を調製することができる。
【００５１】
このようにして調製した培地は、ビンに詰められて菌床を形成する。そして、殺菌される（Ｓ５）。例えば、ガラス、ポリプロピレン等のビンに培地を詰めて、オートクレーブ殺菌（約１２１℃）することができる。殺菌後のビンを冷まし、前記菌床に、食用キノコの種菌を接種する（Ｓ６）。
【００５２】
種菌を接種した菌床内で菌糸が成長しビン内に菌糸が張り巡らされたら（菌回り、Ｓ７）、菌糸に栄養を吸収させるために熟成させる（Ｓ８）。熟成後、菌床表面の菌糸膜を掻きとり（菌掻き）、温度を低温側に移行して子実体発芽を促す（Ｓ９）。子実体が生育し（Ｓ１０）、所定の大きさになったら、採取し（Ｓ１１）、梱包等をした後に出荷する（Ｓ１２）。
【００５３】
尚、おが屑に代えて前記洗浄処理済コーヒー抽出残渣を使用する以外には、原則的には、通常のキノコ栽培方法の操作手順と異なるところはない。従って、各ステップにおける水分・湿度・温度管理等は、通常のキノコ栽培の条件を使用することができ、栽培対象菌によって、適宜改変することができる。その具体例は、下記実験例に示されている。
【００５４】
【実施例】
以下に本発明の実施例を説明する。
コーヒー抽出残渣（気乾状態、水分含有率約９．６５％）と、重量比で２０倍の熱水（約７０℃）とを混合し、これを室温で攪拌しながら１時間保持し、前記コーヒー抽出残渣の可溶性成分を抽出した。コーヒー抽出残渣を洗浄廃液から濾別した。目視観察で抽出液が褐色を呈しなくなったと認められるまで、熱水抽出から濾別に至る工程を３回繰り返した。これらの操作によって、その可溶性固形分含有率が１．０５％にまで減少したコーヒー抽出残渣を、この後、１００℃の乾熱器で乾燥し、洗浄処理済コーヒー抽出残渣（水分含有率９．５％）を得た。この洗浄処理済コーヒー抽出残渣を、以下の実験に供した。
【００５５】
〔実験例１〕
前記供試菌Ａ（ヒラタケ）の菌糸体成長を検討した。
対照区（ブナおが屑）、コーヒー抽出残渣（未洗浄）、コーヒー抽出残渣（洗浄済）の３種の培地基材を準備した。夫々の培地基材に対して米ぬかを２０重量％添加し、最終的に水分が６５重量％になるように水を添加した（基材：米ぬか：水＝２８：７：６５）。このようにして調製した培地を１２０ｇとり、２５０ｍｌ容ガラスビン（直径６．３ｃｍ、高さ１５ｃｍ）に充填した。これを、１２１℃で４０分加熱し殺菌した。これを、一晩放置して冷却して得た菌床（高さ１２．５ｃｍ）に、前記供試菌Ａを接種した。尚、酵母エキス・麦芽エキス寒天培地（ＭＹＡ培地）で２４℃、１０日間平板培養したものをコルクボーラ（直径５ｍｍ）で打ち抜いた菌糸体を接種源とした。
上述したように作成した検体（試験区毎に１０検体）を、２３℃、湿度６５％、暗黒下で栽培し、菌糸が菌床全体に蔓延した時点で、この菌糸の成長速度を測定した。
【００５６】
図９に示すように、対照区（ブナおが屑）では、ヒラタケ菌糸体の伸長速度は１．０８ｃｍ／日（標準偏差±０．０７１）であった。コーヒー抽出残渣（未洗浄）では、ヒラタケ菌糸体の伸長速度は０．６０ｃｍ／日（標準偏差±０．０２７）であった。コーヒー抽出残渣（洗浄済）では、ヒラタケ菌糸体の伸長速度は１．１３ｃｍ／日（標準偏差±０．０９１）であった。
【００５７】
これらの結果から、従来の報告にも有るように、未洗浄のコーヒー抽出残渣が含まれるため、コーヒー抽出残渣由来の可溶性固形分を１．０４％含む培地では、菌糸体の成長が阻害されることがわかる。一方で、洗浄処理によってコーヒー抽出残渣由来の可溶性固形分を０．２９％にまで低減した培地では、菌糸体の成長は対照区より良好であった。
〔実験例２〕
前記供試菌Ａ（ヒラタケ）のキノコ（子実体）収量を検討した。
ブナおが屑に代えてクヌギおが屑を用いた以外は前記実験例１と同じ条件で作成した菌床に、同じ接種源を用いてヒラタケを接種した。
上述したように作成した検体（試験区毎に１０検体）を、２４℃、湿度６５％、暗黒下で栽培した。菌回り終了後（菌糸が菌床全体に蔓延後）、菌掻きを行なって２時間冠水処理を施した。この後、１４℃±２℃、湿度９０％以上に保ってヒラタケの子実体形成を促した。カサの最大直径が３ｃｍになった株を採取し、子実体生重量を測定した。
【００５８】
図１０に示すように、対照区（ブナおが屑）では、培地重量あたりのヒラタケ子実体収率（重量％）は１５．０５％（標準偏差±２．５４）であった。コーヒー抽出残渣（未洗浄）では、培地重量あたりのヒラタケ子実体収率は１４．４７（標準偏差±３．８７）であった。コーヒー抽出残渣（洗浄済）では、培地重量あたりのヒラタケ子実体収率は１８．８３％（標準偏差±４．９２）であった。
【００５９】
未洗浄のコーヒー抽出残渣が含まれる培地（コーヒー抽出残渣由来の可溶性固形分を１．０４％含む）では、対照区よりやや子実体収率が悪かった。一方で、洗浄処理によってコーヒー抽出残渣由来の可溶性固形分を０．２９％にまで低減した培地では、対照区と同等の栽培期間にもかかわらず、培地重量あたりの子実体収量が対照区と比べて約３０％増加した。しかも、その味、肉質等は対照区で発生したヒラタケ子実体と変わるところが無く、コーヒー抽出残渣の匂いがヒラタケ子実体に付着することもなかった。
このように、おが屑に代えて洗浄済コーヒー抽出残渣を使用することによって、おが屑から発生したものと同じ品質のヒラタケ子実体を増産することができた。
【００６０】
〔実験例３〕
前記供試菌Ｄ（エリンギ）の菌糸体成長を検討した。
対照区（ブナおが屑：スギおが屑＝１：１（重量比））、コーヒー抽出残渣（未洗浄）、コーヒー抽出残渣（洗浄済）の３種の培地基材を準備した。夫々の培地基材に対して米ぬかを３０重量％添加し、最終的に水分が６５重量％になるように水を添加した（基材：米ぬか：水＝２４．５：１０．５：６５）。このようにして調製した培地を約５００ｇとり、７５０ｍｌ容ポリプロピレンビン（直径８．５ｃｍ、高さ１３．０ｃｍ）に充填した。これを、１２１℃で６０分加熱し殺菌した。これを、一晩放置して冷却して得た菌床（高さ１２．０ｃｍ）に、前記供試菌Ｄを接種した。尚、種菌として市販されているエリンギ（財団法人福島県きのこ振興センター）を接種源として、１ビン当り５ｇ用いた。
上述したように作成した検体（試験区毎に２５検体）を、２２℃、湿度６５％、暗黒下で栽培した。菌回り終了後、菌掻きを行なった。この後、１６℃±２℃、湿度９０％以上に保ってヒラタケの子実体形成を促した。カサの最大直径が５ｃｍになった株を採取し、子実体生重量を測定した。
【００６１】
図１１に示すように、対照区（ブナ及びスギおが屑）では、培地重量あたりのエリンギ子実体収率（重量％）は１８．８３％（標準偏差±１．３８）であった。コーヒー抽出残渣（未洗浄）では、培地重量あたりのエリンギ子実体収率は１４．５１（標準偏差±３．５０）であった。コーヒー抽出残渣（洗浄済）では、培地重量あたりのエリンギ子実体収率は２６．４０％（標準偏差±２．５４）であった。
【００６２】
未洗浄のコーヒー抽出残渣が含まれる培地（コーヒー抽出残渣由来の可溶性固形分を０．９１％含む）では、対照区と比べて子実体収率が約２０％悪かった。一方、洗浄処理によってコーヒー抽出残渣由来の可溶性固形分を０．２９％にまで低減した培地では、対照区と同等の栽培期間にもかかわらず、培地重量あたりの子実体収量は対照区と比べて約４０％増加した。
このように、おが屑に代えて洗浄済コーヒー抽出残渣を使用することによって、エリンギ子実体を増産することができることができた。
【図面の簡単な説明】
【図１】コーヒー抽出残渣由来の可溶性固形分添加量に対する、ヒラタケ（供試菌Ａ）の菌糸体伸長量及び菌糸体重量の変化を示すグラフ
【図２】コーヒー抽出残渣由来の可溶性固形分添加量に対する、ブナシメジ（供試菌Ｂ）の菌糸体伸長量及び菌糸体重量の変化を示すグラフ
【図３】コーヒー抽出残渣由来の可溶性固形分添加量に対する、タモギタケ（供試菌Ｃ）の菌糸体伸長量及び菌糸体重量の変化を示すグラフ
【図４】コーヒー抽出残渣由来の可溶性固形分添加に対する、エリンギ（供試菌Ｄ）の菌糸体伸長量及び菌糸体重量の変化を示すグラフ
【図５】コーヒー抽出残渣の熱水抽出と、可溶性固形分の除去量との相関関係を表わすグラフ
【図６】洗浄廃液に含まれる可溶性固形分の濃度と４２０ｎｍにおける吸光度との相関関係を表わすグラフ
【図７】コーヒー抽出残渣の洗浄工程を表わすフローチャート
【図８】キノコ栽培方法を表わすフローチャート
【図９】種々の菌床で生育させたヒラタケ（供試菌Ａ）の菌糸体の成長速度を示すグラフ
【図１０】種々の菌床で生育させたヒラタケ（供試菌Ａ）の子実体収量を示すグラフ
【図１１】種々の菌床で生育させたエリンギ（供試菌Ｄ）の子実体収量を示すグラフ
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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