(57)【要約】【課題】固相パラレル合成法を用いた６−アミノ−２，２−ジメチル−３，４，６−トリ置換ベンゾピラン誘導体【解決手段】本発明は、新規６−アミノ−２，２−ジメチル−３，４，６−トリ置換ベンゾピラン誘導体と、組合せ化学合成技術中の一つである固相パラレル合成法を用いて前記新規化合物を高効率で合成する方法、および前記新規化合物の優れた脂質過酸化抑制効果による、脂質過酸化の促進または酸化物質の蓄積によって誘発される疾患の予防および治療剤としての用途に関する。【選択図】　　　　なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（５）で表されることを特徴とする、６−アミノ−２，２−ジメチル−３，４，６−トリ置換ベンゾピラン誘導体：
【化１】
2004026837.tif 000158
（式中、
Ｒ１は、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基、アリル基、ベンジル基または置換されたベンジル基、またはフェネチル基を示し；Ｒ２はＣ１〜Ｃ１０アルキル基、ベンジル基または置換されたベンジル基、またはフェネチル基を示し；Ｒ３は水素原子、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基、Ｃ２〜Ｃ１０アルケニル基、Ｃ２〜Ｃ１０アルキニル基、ベンジル基または置換されたベンジル基、ナフチルメチル基、または−Ｃ（Ｏ）Ｒ４を示し；Ｒ４はＣ１〜Ｃ１０アルキル基、フェニル基または置換されたフェニル基、または酸素および硫黄原子の中から選ばれたヘテロ原子を含む５員〜７員のヘテロ環を示し、そして前記置換されたフェニル基または置換されたベンジル基はハロゲン原子、ニトロ基、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ基およびＣ１〜Ｃ１０ハロアルキル基の中から選ばれた置換基が１〜４個置換されていてもよく；但し、Ｒ３が水素原子であり、かつＲ１がＣ１〜Ｃ１０アルキル基である化合物は除く。）
【請求項２】
下記式（１）で表されるカルバメートリンカーで連結されたベンゾピランの窒素原子に、選択的にアルキル置換基の導入反応を行って下記式（２）で表されるＮ−アルキル置換されたカルバメート樹脂を合成する過程；
前記式（２）で表される化合物にメタクロロ過安息香酸（ｍ−ＣＰＢＡ）とアルコールを同時に入れてエポキシ化反応とアルコキシ付加反応をともに行って下記式（３）で表される２，２−ジメチル−３−ヒドロキシ−６−アルキルアミノベンゾピラン形態の樹脂を合成する過程；
前記式（３）で表される化合物の３−ヒドロキシ基に置換基Ｒ３を導入して下記式（４）で表される２，２−ジメチル−３−置換−４−アルコキシ−６−アルキルアミノベンゾピラン誘導体を合成する過程；および前記式（４）で表される化合物をトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）を含むジクロロメタン溶液または有機酸を含む有機溶媒を用いて脱離して下記式（５）で表される６−アミノ−２，２−ジメチル−３，４，６−トリ置換ベンゾピラン誘導体を合成する過程を含むことを特徴とする製造方法：
【化２】
2004026837.tif 000159
（式中、Ｒ１はＣ１〜Ｃ１０アルキル基、アリル基、ベンジル基または置換されたベンジル基、またはフェネチル基を示し；Ｒ２はＣ１〜Ｃ１０アルキル基、ベンジル基または置換されたベンジル基、またはフェネチル基を示し；Ｒ３は水素原子、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基、Ｃ２〜Ｃ１０アルケニル基、Ｃ２〜Ｃ１０アルキニル基、ベンジル基または置換されたベンジル基、ナフチルメチル基、または−Ｃ（Ｏ）Ｒ４を示し；Ｒ４はＣ１〜Ｃ１０アルキル基、フェニル基または置換されたフェニル基、または酸素および硫黄原子の中から選ばれたヘテロ原子を含む５員〜７員のヘテロ環を示し、そして前記置換されたフェニル基または置換されたベンジル基はハロゲン原子、ニトロ基、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ基およびＣ１〜Ｃ１０ハロアルキル基の中から選ばれた置換基が１〜
2004026837.tif 000160
タクリル酸−ジメチルアクリルアミドおよびヒドロキシメタクリル酸の中から選ばれた高分子重合体形態の固体支持体を示す。）
【請求項３】
下記式（５）で表される６−アミノ−２，２−ジメチル−３，４，６−トリ置換ベンゾピラン誘導体が含まれている薬剤組成物：
【化３】
2004026837.tif 000161
（式中、Ｒ１はＣ１〜Ｃ１０アルキル基、アリル基、ベンジル基または置換されたベンジル基、またはフェネチル基を示し；Ｒ２はＣ１〜Ｃ１０アルキル基、ベンジル基または置換されたベンジル基、またはフェネチル基を示し；Ｒ３は水素原子、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基、Ｃ２〜Ｃ１０アルケニル基、Ｃ２〜Ｃ１０アルキニル基、ベンジル基または置換されたベンジル基、ナフチルメチル基、または−Ｃ（Ｏ）Ｒ４を示し；Ｒ４はＣ１〜Ｃ１０アルキル基、フェニル基または置換されたフェニル基、または酸素および硫黄原子の中から選ばれたヘテロ原子を含む５員〜７員のヘテロ環を示し、そして前記置換されたフェニル基または置換されたベンジル基はハロゲン原子、ニトロ基、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ基およびＣ１〜Ｃ１０ハロアルキル基の中から選ばれた置換基が１〜
2004026837.tif 000162
タクリル酸−ジメチルアクリルアミドおよびヒドロキシメタクリル酸の中から選ばれた高分子重合体形態の固体支持体を示す。）
【請求項４】
下記式（５）で表される６−アミノ−２，２−ジメチル−３，４，６−トリ置換ベンゾピラン誘導体が含まれていて脂質過酸化抑制活性を有することを特徴とする薬物：
【化４】
2004026837.tif 000163
（式中、Ｒ１はＣ１〜Ｃ１０アルキル基、アリル基、ベンジル基または置換されたベンジル基、またはフェネチル基を示し；Ｒ２はＣ１〜Ｃ１０アルキル基、ベンジル基または置換されたベンジル基、またはフェネチル基を示し；Ｒ３は水素原子、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基、Ｃ２〜Ｃ１０アルケニル基、Ｃ２〜Ｃ１０アルキニル基、ベンジル基または置換されたベンジル基、ナフチルメチル基、または−Ｃ（Ｏ）Ｒ４を示し；Ｒ４はＣ１〜Ｃ１０アルキル基、フェニル基または置換されたフェニル基、または酸素および硫黄原子の中から選ばれたヘテロ原子を含む５員〜７員のヘテロ環を示し、そして前記置換されたフェニル基または置換されたベンジル基はハロゲン原子、ニトロ基、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ基およびＣ１〜Ｃ１０ハロアルキル基の中から選ばれた置換基が１〜
2004026837.tif 000164
タクリル酸−ジメチルアクリルアミドおよびヒドロキシメタクリル酸の中から選ばれた高分子重合体形態の固体支持体を示す。）
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、新規６−アミノ−２，２−ジメチル−３，４，６−トリ置換ベンゾピラン誘導体と、組合せ化学合成技術中の一つである固相パラレル合成法を用いて前記新規化合物を高効率で合成する方法、および前記新規化合物の優れた脂質過酸化抑制効果による、脂質過酸化の促進または酸化物質の蓄積によって誘発される疾患の予防および治療剤としての用途に関する。
【０００２】
【従来の技術】
神経細胞の損傷または死滅は、脳卒中、脳外傷、アルツハイマー病、パーキンソン病に至る様々な神経系疾患の主原因として知られている［Ｇ．Ｊ．Ｚｏｐｐｏ　ｅｔ　ａｌ．，Ｄｒｕｇｓ５４，９（１９９７）；Ｉ．Ｓｚｉｒａｋｉ　ｅｔ　ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．８５，１１０１（１９９８）］。神経細胞を損傷させる要因としてはいくつか知られており、代表的には、神経細胞内の鉄濃度の増加、活性酸素の増加、酸化物質の増加などを挙げることができる［Ｍ．Ｐ．Ｍａｔｔｓｏｎ　ｅｔ　ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｃｅｌｌ　Ｂｉｏｌ．４６，１８７（１９９５）；Ｙ．Ｇｏｏｄｍａｎ　ｅｔ　ａｌ．，Ｂｒａｉｎ　Ｒｅｓ．７０６，３２８（１９９６）］。
【０００３】
神経細胞内の鉄濃度が増加すると、ＮＯなどの酸素遊離基（ｏｘｙｇｅｎｆｒｅｅ　ｒａｄｉｃａｌ）が形成され、酸素遊離基が過度に生成する場合、それによって脂質過酸化が促進され、酸化物質が増加して細胞内に蓄積される。細胞内に蓄積された酸化物質は前記のような神経系疾患の他に関節炎などの炎症性疾患、心筋梗塞症、痴呆などを引起こすだけでなく、虚血性疾患において再灌流時組織が損傷するか、細菌が感染して臓器が内毒素によって損傷するなど、各種の急慢性組織または臓器の損傷を引起こすと知られている。
【０００４】
したがって、神経細胞内の鉄濃度の増加による神経細胞の損傷を防止し、脂質過酸化を防止し、内毒素などによるＮＯの生成を抑制する物質を開発することにより、神経細胞の損傷または死滅に基づく種々の疾病を予防または治療できる。現在、抗酸化物質が神経細胞内の鉄による神経細胞の損傷と死滅を緩和させるという結果が報告されており、酸化的ストレスによる神経細胞の損傷を防ぐ薬物を開発しようとする努力が引き続いている［Ｙ．Ｚｈａｎｇ　ｅｔ　ａｌ．，Ｊ．Ｃｅｒｅｂ．Ｂｌｏｏｄ　Ｆｌｏｗ　Ｍｅｔａｂ．１３，３７８（１９９３）］。
【０００５】
ベンゾピランを骨格とする天然物および合成物は抗酸化活性を保持しており、神経疾患治療剤、高血圧治療剤および糖尿病治療剤などの薬理的効能を有する化合物を開発するにおいて基本骨格構造として広く知られており、また、幅広く活用されている。
一方、組合せ化学合成技術を用いて様々な置換基を有するベンゾピランライブラリーを構築することは新薬開発の初期段階における生物学的有効化合物（ｈｉｔ　ｃｏｍｐｏｕｎｄ）および先導物質（ｌｅａｄ　ｃｏｍｐｏｕｎｄ）の探索に有用に利用できる。
特に、分子内に様々な置換基の導入が可能であり、かつリピンスキー（Ｌｉｐｉｎｓｋｙ）の５規則（ｒｕｌｅ　ｏｆ　５）の範囲を大きく外れない有機低分子化合物を組合せ化学合成技術によって大量で集中ライブラリーを効率的に構築することは先導物質の探索に有用な分子多様性を確保する次元から重要である。
【０００６】
組合せ化学合成（ｃｏｍｂｉｎａｔｏｒｉａｌ　ｃｈｅｍｉｃａｌ　ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ）は、新物質開発の新たな合成技術であって、従来の古典的な有機合成技術が１回の反応で一つの化合物を合成するのに対し、組合せ化学合成技術はより多様で多数の化合物を同時に合成するか、多段階の合成工程を自動化できる高効率化学物質合成法であるといえる。このような組合せ化学合成の導入によって新しい構造の生物学的有効化合物（ｈｉｔ　ｃｏｍｐｏｕｎｄ）および先導物質（ｌｅａｄ　ｃｏｍｐｏｕｎｄ）の探索とその構造および活性を最適化することが容易となった。
【０００７】
また、組合せ化学合成技術は大部分が固体支持体上で反応工程が行われるので、連続的な多段階反応および反応工程の自動化が可能であり、生成物の分離精製工程が非常に簡単であるため、高効率薬効検定（Ｈｉｇｈ　Ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ　Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ；ＨＴＳ）が可能であるという長所がある。
【０００８】
このように組合せ化学合成技術が従来の合成技術の非経済性および非効率性を克服した新たな合成技術であるにもかかわらず、これを有機合成分野に容易に適用できなかったいくつかの理由がある。その代表的な原因中の一つは固体支持体上の化学反応の大部分が反応試薬を過量使用するため、場合に応じては、副反応を起こすことと、選択使用される固体支持体の物理的特性による使用可能な溶媒の制限性によって反応条件の選択幅が極めて狭いということである。固相組合せ化学合成分野には固体支持体としてメリフィールド樹脂（Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄｒｅｓｉｎ）とワン樹脂（Ｗａｎｇ　ｒｅｓｉｎ）が広く使用されているが、これらの支持体は、アルコールおよび水などのように極性の大きい溶媒で膨潤効果（ｓｗｅｌｌｉｎｇ　ｅｆｆｅｃｔ）が極めて低く、反応に必要な溶媒の選択に多くの制限を受ける。したがって、固相化学反応を用いて様々な誘導体を合成するためには、固体支持体および反応試薬の選択と反応条件の探索が重要な要素として作用する。
【０００９】
【発明が解決しようとする課題】
本発明者らは、抗酸化剤、神経疾患治療剤、高血圧治療剤および糖尿病治療剤などの薬理的効能を有する化合物の合成にベンゾピラン誘導体が有用であることに着目し、固相で組合せ化学合成技術を用いて効率的にベンゾピランライブラリーを構築できる方法を開発するために研究努力した。その結果、一般的に液相の古典的な化学反応では毎段階ごとに反応、反応後処理精製、および構造確認作業を経る方法で目標化合物を合成するのに対し、本発明者らは固相パラレル合成法を用いた組合せ化学合成技術によって４段階の反応を連続的に行った後、容易な反応後処理過程を経て短期間で効率的に大量の目標化合物である６−アミノ−２，２−ジメチル−３，４，６−トリ置換されたベンゾピランライブラリーを高収率で得ることにより本発明を完成した。
【００１０】
したがって、本発明は、医薬品の合成に有効な新規６−アミノ−２，２−ジメチル−３，４，６−トリ置換ベンゾピラン誘導体を提供することにその目的がある。
また、本発明は、固相パラレル合成法を用いることにより、連続的な多段階反応工程の自動化と最終化合物の化学的構造分析が容易であり、製造収率が優れているなどの長所を有する固相パラレル合成法による６−アミノ−２，２−ジメチル−３，４，６−トリ置換ベンゾピラン誘導体の合成方法を提供することに他の目的がある。
【００１１】
さらに、本発明は、脂質過酸化抑制活性に優れるので、脂質過酸化の促進または酸化物質の蓄積により誘発される疾患の予防および治療剤として６−アミノ−２，２−ジメチル−３，４，６−トリ置換ベンゾピラン誘導体を用いる用途を提供することにまた他の目的がある。
【００１２】
【課題を解決するための手段】
本発明は、下記式（５）で表される６−アミノ−２，２−ジメチル−３，４，６−トリ置換ベンゾピラン誘導体をその特徴とする。
【化５】
2004026837.tif 000002
（式中、
Ｒ１は、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基、アリル基、ベンジル基または置換されたベンジル基、またはフェネチル基を示し；Ｒ２はＣ１〜Ｃ１０アルキル基、ベンジル基または置換されたベンジル基、またはフェネチル基を示し；Ｒ３は水素原子、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基、Ｃ２〜Ｃ１０アルケニル基、Ｃ２〜Ｃ１０アルキニル基、ベンジル基または置換されたベンジル基、ナフチルメチル基、または−Ｃ（Ｏ）Ｒ４を示し；Ｒ４はＣ１〜Ｃ１０アルキル基、フェニル基または置換されたフェニル基、または酸素および硫黄原子の中から選ばれたヘテロ原子を含む５員〜７員のヘテロ環を示し、そして前記置換されたフェニル基または置換されたベンジル基はハロゲン原子、ニトロ基、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ基およびＣ１〜Ｃ１０ハロアルキル基の中から選ばれた置換基が１〜４個置換されていてもよい。）
一方、本発明の目的とする下記式（５）で表される６−アミノ−２，２−ジメチル−３，４，６−トリ置換ベンゾピラン誘導体は光学異性体化合物であって、通常の分離方法によって各々の異性体化合物に分離できる。
【００１３】
【発明の実施の形態】
以下、本発明をさらに詳細に説明する。
本発明は、前記式（５）で表される６−アミノ−２，２−ジメチル−３，４，６−トリ置換ベンゾピラン誘導体と、前記新規ベンゾピラン誘導体を液相化学反応ではなく固相パラレル合成法を用いて効率的に構築できる組合せ化学合成技術法による製造方法、および前記新規化合物を脂質過酸化の促進または酸化物質の蓄積によって誘発される疾患の予防および治療剤として用いる用途をその特徴とする。
【００１４】
本発明に係る前記式（５）で表される６−アミノ−２，２−ジメチル−３，４，６−トリ置換ベンゾピラン誘導体を組合せ化学合成技術法によって製造する反応を簡略に示すと下記反応式１の通りである。
【００１５】
【化６】
2004026837.tif 000003
2004026837.tif 000004
リスチレン−ジビニルベンゼン、メタクリル酸−ジメチルアクリルアミドおよびヒドロキシメタクリル酸の中から選ばれた高分子重合体形態の固体支持体を示す。）
本発明に係る製造方法中に合成される反応中間体として、前記式（３）で表される２，２−ジメチル−３−ヒドロキシ−４−アルコキシ−６−アルキルアミノカルバメート樹脂および前記式（４）で表される２，２−ジメチル−３−置換−４−アルコキシ−６−アルキルアミノベンゾピラン樹脂は光学異性体であるが、必要に応じて各々の異性体化合物に分離してもよい。
【００１６】
前記反応式１に係る本発明の製造方法は次のような過程が含まれる：前記式（１）で表されるカルバメートリンカーで連結されたベンゾピランの窒素原子に、選択的にアルキル置換基の導入反応を行って前記式（２）で表されるＮ−アルキル置換されたカルバメート樹脂を合成する第１段階反応；
前記式（２）で表される化合物にメタクロロ過安息香酸（ｍ−ＣＰＢＡ）とアルコールをともに入れてエポキシ化反応とアルコキシ付加反応をともに行って前記式（３）で表される２，２−ジメチル−３−ヒドロキシ−６−アルキルアミノベンゾピラン形態の樹脂を合成する第２段階反応；前記式（３）で表される化合物の３−ヒドロキシ基に種々の置換基（Ｒ３）を導入して前記式（４）で表される２，２−ジメチル−３−置換−４−アルコキシ−６−アルキルアミノベンゾピラン誘導体を合成する第３段階反応；および、前記式（４）で表される化合物をトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）を含むジクロロメタン溶液または有機酸を含む有機溶媒を用いて脱離することにより前記式（５）で表される６−アミノ−２，２−ジメチル−３，４，６−トリ置換ベンゾピラン誘導体を合成する第４段階反応。
【００１７】
本発明者らの実験結果によれば、前記式（１）で表される固体支持体上のカルバメート形態のベンゾピラン樹脂をＮ−アルキル化反応と、ヒドロキシアルコキシ化反応およびアルキルエーテル反応を連続的に行う場合、古典的な液相反応では４回行う精製過程を１回に大幅減らすことにより、短期間で様々な６−アミノ−２，２−ジメチル−３，４，６−トリ置換ベンゾピラン誘導体を合成できた。本発明に係る反応工程、溶媒系の組成および反応条件の選択範囲を具体的に説明すると次の通りである。
【００１８】
本発明において、溶媒としてはワン樹脂（Ｗａｎｇ　ｒｅｓｉｎ）やメリフィールド樹脂（Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ　ｒｅｓｉｎ）などの膨潤効果（ｓｗｅｌｌｉｎｇ　ｅｆｆｅｃｔ）に優れた有機溶媒が用いられる。
第１段階反応では、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）またはテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）を溶媒として用いる。この反応においては、塩基とＲ１置換基を各々約３当量使用することがよく、好ましくは、約２当量内外の範囲で使用することが経済性に優れる。この際、塩基としては、リチウムｔ−ブトキシド（ＬｉＯｔＢｕ）などを代表的に使用してもよく、Ｒ１置換基としてはアルキルハライド、ベンジルハライドなどのハライド類を使用してもよい。
【００１９】
第２段階反応においては、メタクロロ過安息香酸（ｍ−ＣＰＢＡ）酸化反応の際に生成する副産物である３−クロロ安息香酸の付加反応を抑制するためにｍ−ＣＰＢＡを３当量以内で投入し、特に、ｍ−ＣＰＢＡを投入する前にアルコキシ基前駆体であるアルコール類を予め過量投入し、１５分以上十分に振って混合した後、酸化剤を投入することが好ましい。その理由は、アルコキシ基が酸化反応後、生成する３−クロロ安息香酸の量より絶対優位にあるようにして副産物の生成を抑制するためである。アルコキシ前駆体としてのアルコール類は、脂肪族アルコール類を指すものであって、たとえば、メタノール、エタノール、イソプロピルアルコール、ベンジルアルコール、置換されたベンジルアルコール、または側鎖に脂肪族アルコールが存在し、アミン基とカルボン酸部分が保護基で保護されたアミノ酸類を指す。
【００２０】
第３段階反応においては、生成した３−ヒドロキシ基に親電子体としてハロゲン化アルキル類またはカルボニル誘導体を反応させてＲ３基を導入して２，２−ジメチル−３−置換形態に転換する。たとえば、３−アルキルエーテル形態に転換するための反応は親電子体としてハロゲン化アルキル類を用いてジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）溶媒条件とリチウムｔ−ブトキシドの存在下で行ってもよい。この際、ハロゲン化アルキル類は、ハロゲン化メタン、ハロゲン化エタン、ハロゲン化プロパン、ハロゲン化イソプロパン、ハロゲン化ブタン、ベンジルハライド、置換されたベンジルハライドなどを含んでもよい。たとえば、３−エステル形態に転換するための反応は親電子体としてＲ４基を含むカルボニルハライド化合物を用いてジクロロメタン溶媒条件と塩基の存在下で行ってもよい。この際、カルボニル誘導体は、アセチルハライド、ｔ−ブチルアセチルハライド、シクロヘキサンカルボニルハライド、３，３−ジメチルアクリロイルハライド、ベンゾイルハライド、ｐ−トルイルハライド、４−アニソイルハライド、４−ハロベンゾイルハライド、２−チオフェンカルボニルハライド、２−プロイルハライドなどが含まれる。
【００２１】
第４段階反応においては、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）を含むジクロロメタン溶液または有機酸を含む有機溶媒を用いる脱離反応を行って本発明の目的とする前記式（５）で表される６−アミノ−２，２−ジメチル−３，４，６−トリ置換されたベンゾピランライブラリーを得る。
また、本発明に係る前記式（５）で表される６−アミノ−２，２−ジメチル−３，４，６−トリ置換されたベンゾピランライブラリーが生成したか否かを確認するために、反応後最終段階で前記式（４）で表される２，２−ジメチル−３−置換−４−アルコキシ−６−アルキルアミノベンゾピラン樹脂から脱離された目的化合物を多重カラム装備を用いてフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製分離した後、ＮＭＲおよびＭａｓｓスペクトルで構造を分析および確認した。反応中間体である式（１）、（２）、（３）、および（４）で表される樹脂はＡＴＲ−ＦＴＩＲを測定することにより反応の進行程度を確認した。
【００２２】
一方、本発明の化合物は鉄による脂質過酸化を抑制する活性に優れるため、脂質過酸化抑制剤として使用してもよく、脂質過酸化が促進され、酸化物質が蓄積されて誘発される各種疾患の予防および治療剤として有用に使用できる。すなわち、本発明の化合物は、細胞膜の主要成分である脂質を攻撃して細胞毒性を有する過酸化脂質を生成するか、細胞膜を破壊することにより誘発される癌、動脈硬化、糖尿、脳卒中、痴呆、パーキンソン病、老化などの疾患を予防または治療する薬物として使用できる。
【００２３】
したがって、本発明は、６−アミノ−２，２−ジメチル−３，４，６−トリ置換ベンゾピラン誘導体または薬剤学的に許容可能なこれらの塩が有効成分として含有されており、脂質過酸化の促進または酸化物質の蓄積によって誘発される各種疾患の予防および治療剤として有効な薬剤組成物を含む。
本発明において、薬剤学的に許容可能な塩は当該技術分野における通常の方法によって製造できるものであって、たとえば、塩酸、臭化水素、硫酸、硫酸水素ナトリウム、リン酸、炭酸などの無機酸との塩、またはギ酸、酢酸、シュウ酸、安息香酸、クエン酸、酒石酸、グルコン酸、ゲスチス酸、フマル酸、ラクトビオン酸、サリチル酸、またはアセチルサリチル酸（アスピリン）のような有機酸とともに薬剤学的に許容可能なこれらの酸の塩を形成するか、またはナトリウム、カリウムなどのアルカリ金属イオンと反応してこれらの金属塩を形成するか、またはアンモニウムイオンと反応してまた他の形態の薬剤学的に許容可能な塩を形成してもよい。
【００２４】
また、本発明の薬剤組成物は６−アミノ−２，２−ジメチル−３，４，６−トリ置換ベンゾピラン誘導体または薬剤学的に許容可能なこれらの塩に通常の無毒性の薬剤学的に許容可能な担体、補強剤および賦形剤などを添加して薬剤学的分野における通常の製剤、たとえば、錠剤、カプセル剤、トローチ剤、液剤、懸濁剤などの経口投与用製剤または非経口投与用製剤に製剤化できる。また、本発明に係る化合物の人体に対する投与容量は患者の年令、体重、性別、投与形態、健康状態および疾患の程度によって異なり、体重が７０ｋｇである成人患者を基準として一般的に０．０１〜１０００ｍｇ／日であり、医師または薬剤師の判断によって一定の時間間隔で１日１回〜数回にわたって投与できる。
【００２５】
（実施例）
以下、本発明を実施例によってさらに詳しく説明するが、本発明はこれらの実施例によって限定されない。
実施例Ｉ：２，２−ジメチル−３−（４−フルオロベンジル）エーテル−４−メトキシ−６−（４−メトキシベンジル）アミノベンゾピランの合成
（Ｉ−１）：オレフィン樹脂１のＮ−４−メトキシベンジル化反応
【化７】
2004026837.tif 000005
式（１）で表されるベンゾピラン形態のカルバメート樹脂（２００．００ｍｇ，０．１１ｍｍｏｌ）をジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ；３ｍｌ）に入れ、室温で１０分間攪拌した後、１モルのテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）溶液にリチウムｔ−ブトキシド（ＬｉＯｔＢｕ）（０．３３ｍｌ，０．３３ｍｍｏｌ）を加えた後、同じ温度で２０分間振って混合した後、４−メトキシベンジルクロリド（４−ＭｅＯＢｎＣｌ；０．０４５ｍｌ，０．３３ｍｍｏｌ）を加えた後、３５℃で１５時間振って反応させた。反応終了後、反応混合物を濾過し、ＤＭＦ、ＭＣ、ＭＣ／ＭｅＯＨ、ＭｅＯＨで反復洗浄して式（２ａ）で表される淡褐色固体状のＮ−４−メトキシベンジル置換カルバメート樹脂を得た（ＡＴＲ−ＦＴＩＲ分析結果；Ｎ−４−ｍｅｔｈｏｘｙ　ｂｅｎｚｙｌａｔｉｏｎ　ｃａｒｂａｍａｔｅ：１７００ｃｍ−１）。
【００２６】
（Ｉ−２）：Ｎ−４−メトキシベンジル置換されたオレフィン樹脂（２ａ）のヒドロキシメトキシ付加反応
【化８】
2004026837.tif 000006
式（２ａ）で表されるＮ−４−メトキシベンジル置換カルバメート樹脂（２００ｍｇ，０．１１ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（３ｍｌ）とメタノール（３ｍｌ）との混合溶液に入れて３０分間振り、メタクロロ過安息香酸（ｍ−ＣＰＢＡ，８１ｍｇ，０．５５ｍｍｏｌ）を室温で加えた後、室温で１２時間振って反応させた。反応終了後、反応混合物を濾過し、ＤＭＦ、ＭＣ、ＭＣ／ＭｅＯＨ、ＭｅＯＨで反復洗浄して式（３ａ−１）で表される淡黄色固体状の樹脂を得た。
【００２７】
【化９】
2004026837.tif 000007
式（３ａ−１）で表されるカルバメートリンカーで連結された２，２−ジメチル−３−ヒドロキシ−６−（４−メトキシベンジル）−アミノベンゾピラン樹脂（２００．０ｍｇ，０．１１ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（３ｍｌ）溶液に入れ、室温で３０分間振り、１モルのＴＨＦ溶液にリチウムｔ−ブトキシド（ＬｉＯｔＢｕ；１．１ｍｌ，１．１ｍｍｏｌ）を加えた後、室温で３０分間振った後、４−フルオロベンジルブロミド（０．２７４ｍｌ，０．２２ｍｍｏｌ）を加えた後室温で６時間振って反応させた。反応終了後、反応混合物を濾過し、ＤＭＦ、ＭＣ、ＭＣ／ＭｅＯＨ、ＭｅＯＨで反復洗浄して式（４ａ−１）で表される淡褐色固体状の樹脂を得た。
【００２８】
（Ｉ−４）：２，２−ジメチル−３−（４−フルオロベンジル）エーテル−４−メ
トキシ−６−（４−メトキシベンジル）アミノベンゾピランの脱離反応
【化１０】
2004026837.tif 000008
式（４ａ−１）で表される樹脂（２００ｍｇ）をジクロロメタン（５ｍｌ）溶液に入れて振り、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ，１ｍｌ）を加えた後室温で３時間振り混ぜた。反応終了後、反応混合物を濾過し、濾過物をジクロロメタンとメタルアルコールで反復洗浄し、濾液を合せて濃縮した。濃縮した混合物に酢酸エチル（３ｍｌ）を加えた後、強力な陰イオン交換樹脂（ＳＡＸ）で濾過し、酢酸エチルで反復洗浄して残りのＴＦＡを除去した。濾液を減圧濃縮した後、ヘキサン／酢酸エチル（４／１，ｖ／ｖ）の混合溶媒下でシリカゲル状のカラムクロマトグラフィーで分離精製して式（５−３３８）で表される淡黄色オイル（２２．７５ｍｇ、収率＝４５．８％；樹脂１から４　ｓｔｅｐ　ｏｖｅｒａｌｌ　ｙｉｅｌｄ；樹脂１のｌｏａｄｉｎｇ　ｃａｐａｃｉｔｙ＝０．５５ｍｍｏｌ／ｇ）を得た。
【００２９】
１Ｈ　ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ６．９５〜７．４０（ｍ，８Ｈ），６．７５（ｍ，３Ｈ），４．８３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１１．４Ｈｚ），４．６５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１１．４Ｈｚ），４．１５（ｓ，２Ｈ），４．２８（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），３．６７（ｓ，３Ｈ），３．５３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），３．５０（ｓ，３Ｈ），１．４０（ｓ，３Ｈ），１．２３（ｓ，３Ｈ）；Ｍａｓｓ，ｍ／ｚ：４５１．５４
【００３０】
前記実施例１と同様に固相パラレル合成法で合成された６−アミノ−２，２−ジメチル−３，４，６−トリ置換ベンゾピラン誘導体を下記表１に示す。
下記表１のライブラリーを完成するために、各置換基の組合せを行うために用いられた前駆体は次の通りである。たとえば、Ｒ１前駆体としては、ＣＨ３Ｉ、Ｃ２Ｈ５Ｉ、ｔＢｕＩ、４−ＢｕＩ、４−Ｆ−Ｃ４Ｈ９Ｉ、４−Ｍｅ−Ｃ４Ｈ９Ｉ、２−ＣＨ３−Ｃ４Ｈ９Ｉ、３−Ｃｌ−Ｃ４Ｈ９Ｉ、４−ｔＢｕ−Ｃ４Ｈ９Ｉ、３−Ｆ−Ｃ４Ｈ９Ｉを用い、Ｒ２前駆体としては、ＣＨ３ＯＨ、Ｃ２Ｈ５ＯＨ、ｉＰｒＯＨ、ｔＢｕＯＨ、Ｃ４Ｈ９ＯＨ、２−Ｐｈ−ＥｔＯＨ、２−シクロヘキシル−ＥｔＯＨを用い、Ｒ３前駆体としてはＣ４Ｈ９Ｂｒ、４−Ｆ−Ｃ４Ｈ９Ｂｒ、４−ｔＢｕ−Ｃ４Ｈ９Ｂｒ、３−Ｆ−Ｃ４Ｈ９Ｂｒ、２−ＣＨ３−Ｃ４Ｈ９Ｂｒ、２−Ｃｌ−Ｃ４Ｈ９Ｂｒ、３−Ｃｌ−Ｃ４Ｈ９Ｂｒ、４−ＣＨ３−Ｃ４Ｈ９Ｂｒ、４−Ｂｒ−２−Ｆ−Ｃ４Ｈ９Ｂｒ、β−ＣＨ３Ｂｒ−ＮａＯＨ、３，５−ＣＦ３−Ｃ４Ｈ９Ｂｒ、ＣＨ３ＯＨ、Ｃ５Ｈ１１Ｉ、１−ブロモ−２−ブテン、３−ブロモプロフェン、３−ブロモプロフィン（Ｐｒｏｐａｒｇｙｌ　Ｂｒ）を用いた。
【００３１】
【表１】
2004026837.tif 000009
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【００３２】
実施例ＩＩ：Ｎ−メチル置換されたオレフィン樹脂（２ａ）のヒドロキシアルコキシ付加反応および脱離反応
【化１１】
2004026837.tif 000101
【００３３】
（ＩＩ−１）：Ｎ−メチル置換されたオレフィン樹脂（２ａ）のヒドロキシメトキシ付加反応および脱離反応
【化１２】
2004026837.tif 000102
式（２ａ）で表されるＮ−メチル置換されたオレフィン樹脂（２００．００ｍｇ，０．１１ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（３ｍｌ）とメタノール（３ｍｌ）との混合溶液に入れて３０分間振り、メタクロロ過安息香酸（ｍ−ＣＰＢＡ）（８１ｍｇ，０．５５ｍｍｏｌ）を室温で加えた後、室温で１５時間振って反応させた。反応終了後、反応混合物を濾過し、ＤＭＦ、ＭＣ、ＭＣ／ＭｅＯＨ、ＭｅＯＨで反復洗浄して式（３−１）で表される淡黄色固体状の樹脂（２０８．６ｍｇ）を得た。得られた樹脂（３−１）をジクロロメタン（５ｍｌ）溶液に入れて振り、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）（１ｍｌ）を加えた後、室温で４時間振り混ぜた。反応終了後、反応混合物を濾過し、濾過物をＣＨ２Ｃｌ２とＭｅＯＨで反復洗浄し、濾液を合せて濃縮した。濃縮した混合物に酢酸エチル（３ｍｌ）を加えた後強力な陰イオン交換樹脂（ＳＡＸ　ｒｅｓｉｎ；ｓｔｒｏｎｇ　ａｎｉｏｎｅｘｃｈａｎｇｅ　ｒｅｓｉｎ）で濾過し、酢酸エチルで反復洗浄して残りのトリフルオロ酢酸を除去した。濾液を減圧濃縮した後、ヘキサン／酢酸エチル（４／１，ｖ／ｖ）の混合溶媒下でシリカゲル状のカラムクロマトグラフィーで分離精製して化合物番号（５−１１２１）で表される淡黄色オイル（１６．３ｍｇ）樹脂１；ｌｏａｄｉｎｇ　ｃａｐａｃｉｔｙ　０．５５ｍｍｏｌ／ｇからｙｉｅｌｄ＝６３％）を得た。
【００３４】
１Ｈ　ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ（ＰＰＭ）６．６９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．２Ｈｚ），６．６５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．７Ｈｚ），６．５８（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，Ｊ＝１．７Ｈｚ），４．３４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．４Ｈｚ），３．８４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．４Ｈｚ），３．４９（ｓ，３Ｈ），２．８２（ｓ，３Ｈ），１．４３（ｓ，３Ｈ），１．２６（ｓ，３Ｈ）；１３Ｃ（７５ＭＨｚ）δ１４５．４９，１４３．００，１２１．３３，１１７．８４，１１５．５０，１１１．７０，７８．１６，７１．９９，５５．７０，３１．９０，２５．６８，２０．０４；Ｍ／Ｓ　２３７．３０
【００３５】
（ＩＩ−２）：Ｎ−メチル置換されたオレフィン樹脂（２ａ）のヒドロキシエトキシ付加反応および脱離反応
【化１３】
2004026837.tif 000103
式（２ａ）で表されるＮ−メチル置換されたオレフィン樹脂（２００．００ｍｇ，０．１１ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（３ｍｌ）とエタノール（３ｍｌ）との混合溶液に入れて３０分間振り、メタクロロ過安息香酸（ｍ−ＣＰＢＡ）（８１ｍｇ，０．５５ｍｍｏｌ）を室温で加えた後、室温で１５時間振って反応させた。反応終了後、反応混合物を濾過し、ＤＭＦ、ＭＣ、ＭＣ／ＭｅＯＨ、ＭｅＯＨで反復洗浄して式（３−２）で表される淡黄色固体状の樹脂（２０７．４ｍｇ）を得た。得られた樹脂（３−２）をジクロロメタン（５ｍｌ）溶液に入れて振り、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）（１ｍｌ）を加えた後、室温で４時間振り混ぜた。反応終了後、反応混合物を濾過し、濾過物をＣＨ２Ｃｌ２とＭｅＯＨで反復洗浄し、濾液を合せて濃縮した。濃縮した混合物に酢酸エチル（３ｍｌ）を加えた後、陰イオン交換樹脂（ＳＡＸ　ｒｅｓｉｎ；ｓｔｒｏｎｇ　ａｎｉｏｎ　ｅｘｃｈａｎｇｅｒｅｓｉｎ）で濾過し、酢酸エチルで反復洗浄して残りのトリフルオロ酢酸を除去した。濾液を減圧濃縮した後、ヘキサン／酢酸エチル（４／１，ｖ／ｖ）の混合溶媒下でシリカゲル状のカラムクロマトグラフィーで分離精製して化合物番号（５−１１２２）で表される淡黄色オイル（１６．７ｍｇ、樹脂１；ｌｏａｄｉｎｇ　ｃａｐａｃｉｔｙ　０．５５ｍｍｏｌ／ｇからｙｉｅｌｄ＝６０％）を得た。
【００３６】
１Ｈ　ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ（ＰＰＭ）６．７０〜６．５０（ｍ，３Ｈ），４．３６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．４Ｈｚ），３．８２〜３．６７（ｍ，３Ｈ），２．８１（ｓ，３Ｈ），１．４３（ｓ，３Ｈ），１．３２〜１．２５（ｍ，６Ｈ）；Ｍ／Ｓ　２５１．３３
【化１４】
2004026837.tif 000104
2004026837.tif 000105
式（２ａ）で表されるＮ−メチル置換されたオレフィン樹脂（２００．００ｍｇ，０．１１ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（３ｍｌ）と２−プロパノール（３ｍｌ）との混合溶液に入れて３０分間振り、メタクロロ過安息香酸（ｍ−ＣＰＢＡ）（８１ｍｇ，０．５５ｍｍｏｌ）を室温で加えた後、室温で１５時間振って反応させた。反応終了後、反応混合物を濾過し、ＤＭＦ、ＭＣ、ＭＣ／ＭｅＯＨ、ＭｅＯＨで反復洗浄して式（３−３）で表される淡黄色固体状の樹脂（２０６．８ｍｇ）を得た。得られた樹脂（３−３）をジクロロメタン（５ｍｌ）溶液に入れて振り、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ，１ｍｌ）を加えた後、室温で４時間振り混ぜた。反応終了後、反応混合物を濾過し、濾過物をＣＨ２Ｃｌ２とＭｅＯＨで反復洗浄し、濾液を合せて濃縮した。濃縮した混合物に酢酸エチル（３ｍｌ）を加えた後、陰イオン交換樹脂（ＳＡＸ　ｒｅｓｉｎ；ｓｔｒｏｎｇ　ａｎｉｏｎ　ｅｘｃｈａｎｇｅｒｅｓｉｎ）で濾過し、酢酸エチルで反復洗浄して残りのトリフルオロ酢酸を除去した。濾液を減圧濃縮した後、ヘキサン／酢酸エチル（４／１，ｖ／ｖ）の混合溶媒下でシリカゲル状のカラムクロマトグラフィーで分離精製して化合物番号（５−１１２３）で表される淡黄色オイル（１４．８ｍｇ、樹脂１；ｌｏａｄｉｎｇ　ｃａｐａｃｉｔｙ　０．５５ｍｍｏｌ／ｇからｙｉｅｌｄ＝５６％）を得た。
【００３７】
Ｍ／Ｓ　２６５．３６
（ＩＩ−４）：Ｎ−メチル置換されたオレフィン樹脂（２ａ）のヒドロキシブトキシ付加反応および脱離反応
【化１５】
2004026837.tif 000106
式（２ａ）で表されるＮ−メチル置換されたオレフィン樹脂（２００．００ｍｇ，０．１１ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（３ｍｌ）とブタノール（３ｍｌ）との混合溶液に入れて３０分間振り、メタクロロ過安息香酸（ｍ−ＣＰＢＡ）（８１ｍｇ，０．５５ｍｍｏｌ）を室温で加えた後、室温で１５時間振って反応させた。反応終了後、反応混合物を濾過し、ＤＭＦ、ＭＣ、ＭＣ／ＭｅＯＨ、ＭｅＯＨで反復洗浄して式（３−４）で表される淡黄色固体状の樹脂（２０８．３ｍｇ）を得た。得られた樹脂（３−４）をジクロロメタン（５ｍｌ）溶液に入れて振り、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）（１ｍｌ）を加えた後、室温で４時間振り混ぜた。反応終了後、反応混合物を濾過し、濾過物をＣＨ２Ｃｌ２とＭｅＯＨで反復洗浄し、濾液を合せて濃縮した。濃縮した混合物に酢酸エチル（３ｍｌ）を加えた後、陰イオン交換樹脂（ＳＡＸ　ｒｅｓｉｎ；ｓｔｒｏｎｇ　ａｎｉｏｎ　ｅｘｃｈａｎｇｅｒｅｓｉｎ）で濾過し、酢酸エチルで反復洗浄して残りのトリフルオロ酢酸を除去した。濾液を減圧濃縮した後、ヘキサン／酢酸エチル（４／１，ｖ／ｖ）の混合溶媒下でシリカゲル状のカラムクロマトグラフィーで分離精製して化合物番号（５−１１２４）で表される淡黄色オイル（１９．１ｍｇ、樹脂１；ｌｏａｄｉｎｇ　ｃａｐａｃｉｔｙ　０．５５ｍｍｏｌ／ｇからｙｉｅｌｄ＝６２％）を得た。
【００３８】
１Ｈ　ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ（ＰＰＭ）６．７０〜６．５０（ｍ，３Ｈ），４．３５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），３．８０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）３．６７（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．２Ｈｚ），２．８１（ｓ，３Ｈ），１．６７〜１．５３（ｍ，２Ｈ），１．４９〜１．３０（ｍ，２Ｈ），１．４２（ｓ，３Ｈ），１．２５（ｓ，３Ｈ），０．９４（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）；Ｍ／Ｓ　２７９．３８
【００３９】
前記実施例ＩＩと同様に固相パラレル合成法で合成された６−アミノ−２，２−ジメチル−３，４，６−トリ置換ベンゾピラン誘導体を下記表２に示す。
下記表２のライブラリーを完成するために、各置換基の組合せを行うために用いられた前駆体は次の通りである。たとえば、Ｒ１前駆体としては、ＣＨ３Ｉ、Ｃ２Ｈ５Ｉ、ｔＢｕＩ、４−ＢｕＩ、４−Ｆ−Ｃ４Ｈ９Ｉ、４−Ｍｅ−Ｃ４Ｈ９Ｉ、２−ＣＨ３−Ｃ４Ｈ９Ｉ、３−Ｃｌ−Ｃ４Ｈ９Ｉ、４−ｔＢｕ−Ｃ４Ｈ９Ｉ、３−Ｆ−Ｃ４Ｈ９Ｉを用い、Ｒ２前駆体としては、ＣＨ３ＯＨ、Ｃ２Ｈ５ＯＨ、ｉＰｒＯＨ、ｔＢｕＯＨ、Ｃ４Ｈ９ＯＨ、２−Ｐｈ−ＥｔＯＨ、２−シクロヘキシル−ＥｔＯＨを用いた。
【００４０】
【表２】
2004026837.tif 000107
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【００４１】
実施例ＩＩＩ：固相パラレル合成法を用いた２，２−ジメチル−３−アセチルエステル−４−メトキシ−６−メチルアミノベンゾピランの合成
（ＩＩＩ−１）：オレフィン樹脂（式１）のＮ−メチル化反応
【化１６】
2004026837.tif 000122
式（１）で表されるベンゾピラン形態のカルバメート樹脂（２００．００ｍｇ，０．１２ｍｍｏｌ）をジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ；３ｍｌ）に入れて室温で１０分間攪拌した後、１Ｍリチウムｔ−ブトキシド溶液（ＬｉＯｔＢｕ／ＴＨＦ；０．３６ｍｌ、０．３６ｍｍｏｌ）を加えた後、同じ温度で２０分間振って混合した後、ヨウ化メタン（ＭｅＩ；０．０５１ｍｌ、０．３６ｍｍｏｌ）を加え、３５℃で１５時間振って反応させた。反応終了後、反応混合物を濾過し、ＤＭＦ、ＭＣ、ＭＣ／ＭｅＯＨ、ＭｅＯＨで反復洗浄して式（２ａ）で表される淡褐色固体状のＮ−メチル置換カルバメート樹脂を得た（ＡＴＲ−ＦＴＩＲ；Ｎ−ｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ　ｃａｒｂａｍａｔｅ：１７００ｃｍ−１）。
【００４２】
（ＩＩＩ−２）：Ｎ−メチル置換されたオレフィン樹脂（式２ａ）のヒドロキシメトキシ付加反応
【化１７】
2004026837.tif 000123
式（２ａ）で表されるＮ−メチル置換カルバメート樹脂（２００ｍｇ，０．１２ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（３ｍｌ）とメタノール（３ｍｌ）との混合溶液に入れて３０分間振り、メタクロロ過安息香酸（ｍ−ＣＰＢＡ；１０３ｍｇ，０．６０ｍｍｏｌ）を室温で加えた後、室温で１２時間振って反応させた。反応終了後、反応混合物を濾過し、ＤＭＦ、ＭＣ、ＭＣ／ＭｅＯＨ、ＭｅＯＨで反復洗浄して式（３ａ）で表される淡黄色固体状の樹脂を得た。
【００４３】
（ＩＩＩ−３）：Ｎ−メチル置換されたヒドロキシメトキシ樹脂（式３ａ）のエステル化反応
【化１８】
2004026837.tif 000124
式（３ａ）で表されるカルバメートリンカーで連結された２，２−ジメチル−３−ヒドロキシ−４−メトキシ−６−メチルアミノベンゾピラン樹脂（２００ｍｇ，０．１２ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（３ｍｌ）に入れて室温で１０分間振った後、ピリジン（０．１３６ｍｌ，１．６８ｍｍｏｌ）を加え、３０分間振って反応させた。アセチルクロリド（０．１１９ｍｌ，１．６８ｍｍｏｌ）と４−ジメチルアミノピリジン（０．０１３７ｇ，０．１１２ｍｍｏｌ）を加えた後、室温で１２時間反応させた。反応終了後、反応混合物を濾過し、ＤＭＦ、ＭＣ、ＭＣ／ＭｅＯＨ、ＭｅＯＨで反復洗浄して式（４ａ）で表される淡褐色固体状の樹脂を得た。
【００４４】
【化１９】
2004026837.tif 000125
離反応
式（４ａ）で表される樹脂（２００ｍｇ）をジクロロメタン（４ｍｌ）に入れて振り、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ，１ｍｌ）を加えた後、室温で３時間振り混ぜた。反応終了後、反応混合物を濾過し、濾過物をジクロロメタンとメチルアルコールで反復洗浄し、濾液を合せて濃縮した。濃縮した混合物に酢酸エチル（３ｍｌ）を加えた後、強力な陰イオン交換樹脂（ＳＡＸ）で濾過し、酢酸エチルで反復洗浄して残りのトリフルオロ酢酸を除去した。濾液を減圧濃縮した後、ヘキサン／酢酸エチル（４／１，ｖ／ｖ）の混合溶媒下でシリカゲル状のカラムクロマトグラフィーで分離精製して化合物番号（５−１４８１）で表される淡黄色オイル（１７．４２ｍｇ、収率５１．９７％；樹脂１から４ｓｔｅｐ　ｏｖｅｒａｌｌ；樹脂１のｌｏａｄｉｎｇ　ｃａｐａｃｉｔｙ＝０．５５ｍｍｏｌ／ｇ）の目的化合物を得た。
前記実施例ＩＩＩと同様に、固相パラレル合成法で合成された２，２−ジメチル−３−エステル−４−アルコキシ−６−アルキルアミノベンゾピラン誘導体を下記表３に示す。
【００４５】
下記表３のライブラリーを完成するために、各置換基の組合せを行うために用いられた前駆体は次の通りである。たとえば、Ｒ１前駆体としては、ＭｅＩ、ＥｔＩ、ＢｎＢｒ、４−ＭｅＯ−ＢｎＣｌ、４−Ｆｅ−ＢｎＢｒ、４−Ｍｅ−ＢｎＢｒなどを用い、Ｒ２前駆体としては、ＭｅＯＨ、ＥｔＯＨ、ｉＰｒＯＨ、ｉＢｕＯＨ、ＢｎＯＨ、ＰｈＥｔＯＨ、ｃＨｅｘＥｔＯＨなどを用い、Ｒ３前駆体としては、アセチルクロリド、ｔ−ブチルアセチルクロリド、シクロヘキサンカルボニルクロリド、３，３−ジメチルアクリロイルクロリド、ベンゾイルクロリド、ｐ−トルイルクロリド、４−アニソイルクロリド、４−フルオロベンゾイルクロリド、２−チオフェンカルボニルクロリド、２−プロイルクロリドなどを用いた。
【００４６】
【表３】
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【００４７】
次に、本発明に係る化合物を活性成分として含む製剤化方法の例を示すが、本発明はこれに限定されない。
製剤１：錠剤（直接加圧）
活性成分５．０ｍｇを篩にかけた後、ラクトース１４．１ｍｇ、クロスポビドンＵＳＮＦ０．８ｍｇおよびステアリン酸マグネシウム０．１ｍｇを混合し、加圧して錠剤に製造した。
【００４８】
製剤２：錠剤（湿式造粒）
活性成分５．０ｍｇを篩にかけた後、ラクトース１６．０ｍｇと澱粉４．０ｍｇを混合した。ポリソルベート８０　０．３ｍｇを純水に溶解した後、この溶液を適当量添加した後、微粒化した。乾燥後、微粒を篩にかけた後、コロイダルシリコンジオキシド２．７ｍｇおよびステアリン酸マグネシウム２．０ｍｇと混合した。微粒を加圧して錠剤に製造した。
【００４９】
製剤３：粉末とカプセル剤
活性成分５．０ｍｇを篩にかけた後、ラクトース１４．８ｍｇ、ポリビニルピロリドン１０．０ｍｇ、ステアリン酸マグネシウム０．２ｍｇとともに混合した。混合物を適当な装置を用いて硬いＮｏ．５ゼラチンカプセルに充填した。
【００５０】
製剤４：注射剤
活性成分１００ｍｇを含有させ、その他にマンニトール１８０ｍｇ、Ｎａ２ＨＰＯ４　１２Ｈ２Ｏ　２６ｍｇおよび蒸留水２９７４ｍｇを含有させて注射剤を製造した。
【００５１】
また、本発明に係る化合物の鉄によって誘発される脂質過酸化を抑制する効果を調べるために、次のような実験を行った。
【００５２】
実験例：脂質過酸化抑制効果
ラット（ｒａｔ）の脳をクレブス（Ｋｒｅｂｓ）緩衝液（１５ｍＭ　ＨＥＰＥＳ、１０ｍＭ　ｇｌｕｃｏｓｅ、１４０ｍＭ　ＮａＣｌ、３．６ｍＭ　ＫＣｌ、１．５ｍＭ　ＣａＣｌ２、１．４ｍＭ　ＫＨ２ＰＯ４、０．７ｍＭ　ＭｇＣｌ２、ｐＨ７．４）に入れて均質化した後１２，０００ｒｐｍで１０分間遠心分離して上澄液である脳均質物を脂質の原料として用いた。脳均質物に最終濃度が４００μｍになるようにＦｅＣｌ２を加え、３７℃で３０分間放置して酸化を促進させた。この際、試験物質を１２．５μｍずつ加え、対照群としては、溶媒としてジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）のみを加えたものを用いた。
【００５３】
脳均質物に鉄を添加する場合、酸化が促進されて脂質過酸化産物であるマロンジアルデヒド（Ｍａｌｏｎｄｉａｌｄｅｈｙｄｅ，ＭＤＡ）の量が増加するので、ＭＤＡ定量法で脂質過酸化程度を判断した。ＭＤＡ定量法は、試料をＴＢＡ（２−ｔｈｉｏｂａｒｂｉｔｕｒｉｃ　ａｃｉｄ）と反応させて５３０ｎｍにおける吸光度を測定することが一般的であるが、沸かす段階を含むため、大容量の試料を処理するのに適しない。したがって、本発明では、ＴＢＡの代わりに発色試薬であるＮ−メチル−２−フェニルインドル（Ｎ−ｍｅｔｈｙｌ−２−ｐｈｅｎｙｌｉｎｄｏｌｅ）を用いた。この場合、ＭＤＡ一分子とＮ−メチル−２−フェニルインドル二分子が反応して発色体を形成し、この発色体は５８６ｎｍで最大吸光度を示し、沸かす過程を必要としない（Ｂｉｏｘｙｔｅｃｈ　ＬＰ０−５８６　Ｋｉｔで吸光度を測定）。試験物質の脂質過酸化抑制効果は対照群のＭＤＡ量を基準としてＭＤＡの量が減少した程度を％で計算した。阻害効果が８０％以上である試験物質は様々な濃度で対照群のＭＤＡ量を基準としてＭＤＡ量の減少率を計算して濃度−脂質過酸化阻害効果反応曲線を求め、最少線形回帰（ｌｅａｓｔ　ｌｉｎｅａｒ　ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ）分析を通じて薬物投与による５０％阻害濃度であるＩＣ５０を算出し、その結果を表４に示す。
【００５４】
また、現在市販されている代表的な抗酸化剤、たとえば、プロメタジン（Ｐｒｏｍｅｔｈａｚｉｎｅ）、トロロックス（Ｔｒｏｌｏｘ）、プロブコール（Ｐｒｏｂｕｃｏｌ）およびＮ−プロピルガレート（Ｎ−ｐｒｏｐｙｌ　ｇａｌｌａｔｅ）を対照薬剤として用いて前記と同様な方法で５０％阻害濃度（ＩＣ５０）を算出して下記表４に示す。
【００５５】
【表４】
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【００５６】
前記表４から、本発明の化合物は、鉄による脂質過酸化の抑制活性を有し、いくつかの化合物は２．０μｍ以下の抑制率を示したので、鉄による脂質過酸化の抑制効果が非常に優れていることが分かる。
【００５７】
【発明の効果】
以上、述べたように、一般的に多段階工程の反応を液相で行い、数回の反応後処理工程および精製工程を経なければならないのに対し、本発明に係る固相パラレル合成法を用いた６−アミノ−２，２−ジメチル−３，４，６−トリ置換ベンゾピラン誘導体の製造方法は、反応後の処理工程および精製工程を１回に大幅減らすことにより、短期間で大量のライブラリーを構築できる。特に、本発明に係る反応を行うことに当たり、第１段階における式（２）で表されるＮ−置換されたカルバメート樹脂の生成反応、第２段階における式（３）で表される２，２−ジメチル−３−ヒドロキシ−４−アルコキシ−６−アルキルアミノベンゾピラン樹脂の生成反応、第３段階における式（４）で表される２，２−ジメチル−３−置換−４−アルコキシ−６−アルキルアミノベンゾピラン樹脂の生成反応、および第４段階におけるＴＦＡを含むジクロロメタン溶液または有機酸を含む有機溶媒を用いて式（５）で表される目的化合物である６−アミノ−２，２−ジメチル−３，４，６−トリ置換ベンゾピラン誘導体の大量合成に非常に有用である。
【００５８】
したがって、本発明は、固相パラレル合成法を用いた６−アミノ−２，２−ジメチル−３，４，６−トリ置換されたベンゾピランライブラリーの構築技術を確立することにより、組合せ化学合成技術の応用性を高めることができるが、これにより、脂質過酸化の促進および神経細胞内の酸化物質の蓄積によって誘発される疾患、たとえば、脳卒中、痴呆などのような脳神経系疾患だけでなく、関節炎などの炎症性疾患、心筋梗塞症、急慢性組織損傷の予防剤または治療剤の開発に有用な新たな構造の先導物質（ｌｅａｄ　Ｃｏｍｐｏｕｎｄ）の探索および構造と機能の最適化をさらに容易に図ることができる。