(57)【要約】【課題】測定の目的等に応じて、それらに適した方法によりニードルの洗浄を行うことができるオートサンプラを提供する。【解決手段】洗浄液が貯留された状態で浸漬することでニードルを洗浄する第１洗浄槽２１と、洗浄中に洗浄液が入れ替えられる状態で浸漬することでニードルを洗浄する第２洗浄槽２２を用い、用途に応じてこれら２つの洗浄槽を使い分ける。即ち、クロスコンタミネーションを防ぐ場合等、高い洗浄能力を必要とする場合には、より線上能力が高い第２洗浄槽を用いる。一方、スループットを重視する場合等には、第１洗浄槽２１を用いて短時間で洗浄を行う。【選択図】  図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
液体クロマトグラフのカラムに連通する試料導入部へ試料を注入するオートサンプラにおいて、
ａ）試料液槽から試料を吸引して前記試料導入部へ注入するニードルと、
ｂ）ニードルを洗浄液に浸漬することで該ニードルを洗浄する洗浄手段であって、該洗浄中に洗浄液の入れ替えを行わない第１洗浄手段と、
ｃ）ニードルを洗浄液に浸漬することで該ニードルを洗浄する洗浄手段であって、該洗浄中に洗浄液の入れ替えを行う第２洗浄手段と、
を備え、
前記第１洗浄手段及び第２洗浄手段から選択された少なくとも一方の洗浄手段により該ニードルを洗浄することを特徴とするオートサンプラ。
【請求項２】
前記第２洗浄手段で使用する洗浄液を複数の洗浄液から選択する切り替え手段を備えることを特徴とする請求項１に記載のオートサンプラ。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、液体クロマトグラフに試料を導入するために用いられる自動試料注入装置（オートサンプラ）に関する。
【０００２】
【従来の技術】
液体クロマトグラフ（ＬＣ）においては、所定の量の試料をカラムに導入するためにオートサンプラが用いられる。オートサンプラを用いた試料注入動作としては、まず、試料が入れられた容器にニードルを挿入し、所定量の試料をニードルを介してサンプルループ等に吸引して保持する。次に、ニードルをＬＣのカラムに連なるインジェクションポート上に移動し、保持しておいた試料をインジェクションポートに注入する。
【０００３】
ある試料の注入操作を行う際に、前の測定時の試料の残渣がニードルに付着していると、クロスコンタミネーションにより測定誤差が生じる原因となる。そのため、試料の注入操作を行う前にニードルを洗浄する。この洗浄は通常、特許文献１に従来技術として記載されているように、洗浄液を洗浄槽に貯留して、この洗浄液にニードルを浸漬することにより行われる。
【０００４】
【特許文献１】
特開平９−１２７０７８号公報（［０００４］〜［０００５］、図２）
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
この方法によれば、ニードルを洗浄液に浸漬すればよいだけなので、短時間で洗浄が終了するという利点がある。その反面、洗浄液で希釈された試料液がニードルに付着して残る可能性があるため、この残渣により次の測定に誤差等を生じる恐れが生じる。
【０００６】
こうしたオートサンプラでは、測定の目的等に応じて、スループットを重視する場合や、ある程度スループットを犠牲にして洗浄性能を高めることにより高精度の測定を行いたい場合等、様々な場合が考え得る。前記従来の装置では、こうした要求に応えられない。
【０００７】
本発明はこのような課題を解決するために成されたものであり、その目的とするところは、測定の目的等に応じて、それらに適した方法によりニードルの洗浄を行うことができるオートサンプラを提供することにある。
【０００８】
【課題を解決するための手段】
上記課題を解決するために成された本発明に係るオートサンプラは、液体クロマトグラフのカラムに連通する試料導入部へ試料を注入するものであって、
ａ）試料液槽から試料を吸引して前記試料導入部へ注入するニードルと、
ｂ）ニードルを洗浄液に浸漬することで該ニードルを洗浄する洗浄手段であって、該洗浄中に洗浄液の入れ替えを行わない第１洗浄手段と、
ｃ）ニードルを洗浄液に浸漬することで該ニードルを洗浄する洗浄手段であって、該洗浄中に洗浄液の入れ替えを行う第２洗浄手段と、
を備え、
前記第１洗浄手段及び第２洗浄手段から選択された少なくとも一方の洗浄手段により該ニードルを洗浄することを特徴とする。
【０００９】
【発明の実施の形態】
本発明のオートサンプラにおいては、独立した２つの洗浄手段を設ける。第１洗浄手段では、例えば洗浄槽（第１洗浄槽）に洗浄液（第１洗浄液）を貯留して、ニードルを浸漬することによりニードルの洗浄を行う。この洗浄中には、第１洗浄槽中の洗浄液の入れ替えは行われない。この入れ替えは、洗浄が行われていない間の所定の時に、新しい洗浄液を第１洗浄槽に注入されることにより行えばよい。一方、第２洗浄手段では、例えば洗浄槽（第２洗浄槽）にニードルを挿入後、洗浄液（第２洗浄液）を第２洗浄槽に供給することによりニードルの洗浄を行う。この洗浄液の供給により、第２洗浄槽内の古い洗浄液は、第２洗浄槽の排出口から排出される。従って、第２洗浄槽では洗浄中に第２洗浄液の入れ替えがなされる。
【００１０】
第１洗浄手段では、洗浄前に第１洗浄槽に第１洗浄液を予め貯留しておき、その中に所定の洗浄時間浸漬するだけであるため、第２洗浄手段を用いる場合よりも洗浄時間を短くすることができる。また、１回の洗浄で消費する洗浄液の量は、第２洗浄手段を用いる場合よりも少なくて済む。
【００１１】
一方、第２洗浄手段では、洗浄中に試料で汚染された洗浄液は速やかに第２洗浄槽の排出口から排出され、清浄な洗浄液が新たに供給される。そのため、洗浄液中の残留試料が再度ニードルに付着することを防ぎ、第１洗浄手段を用いる場合よりも洗浄性能を高めることができる。
【００１２】
このように、第１洗浄手段と第２洗浄手段はそれぞれ、互いに相補的な利点を有する。これらの利点を活かすように、用途に応じて第１洗浄手段と第２洗浄手段を使い分ける。即ち、クロスコンタミネーションによる誤差があまり問題とならない場合や、その誤差よりもスループットを優先する場合等には第１洗浄手段を用いればよい。一方、クロスコンタミネーションが敏感に影響を及ぼす場合等には、洗浄性能を優先して、第２洗浄手段を用いればよい。
【００１３】
各洗浄手段の特徴が前記のように洗浄中の動作（洗浄液の入れ替えの有無）にあるため、これらの特徴をそのまま利用する場合には、第１洗浄液と第２洗浄液は同種のものであってもよい。更に第１洗浄液と第２洗浄液にそれぞれ異種のものを用いることにより、前記洗浄動作と洗浄液の種類とを組み合わせて、より適切な洗浄を行うことができる。
【００１４】
また、１回の洗浄中に、両方の洗浄手段を組み合わせて用いてもよい。即ち、一方の洗浄槽で洗浄を行った後に、続けて他方の洗浄槽で洗浄を行う。例えば、複数の成分を含む試料がニードルに付着している場合に、まず第１の洗浄槽で一部の成分を除去した後、ニードルに残った成分を第２の洗浄槽で除去する。
【００１５】
更に、本発明のオートサンプラーは、第２洗浄手段で使用する洗浄液を複数の洗浄液から選択する切り替え手段を備えるようにしてもよい。これは、第２洗浄手段における洗浄を、ニードルに付着した試料の種類等により、２種類以上の洗浄液を使い分けて行いたい場合に、第２洗浄液を変更できる構成とするものである。この切り替え手段には、例えば三方バルブ等を用いることができる。
【００１６】
【発明の効果】
本発明により、２種の洗浄手段を使い分けて、測定の目的等に応じた、より適切な洗浄方法でニードルを洗浄することができるようになる。即ち、スループット等を優先する場合には、第１洗浄手段を用いて短時間でニードルの洗浄を行うことができ、クロスコンタミネーションによる誤差を小さくすること等を優先する場合には、第２洗浄手段を用いて高い能力でニードルの洗浄を行うことができる。また、第２洗浄手段で使用する洗浄液の種類を切り替えて、ニードルに付着した試料の種類等に応じた洗浄液でニードルの洗浄を行うことができる。
【００１７】
【実施例】
（１）本発明に係るオートサンプラの一実施例の構成
本発明に係るオートサンプラの一実施例について説明する。図１は本実施例のオートサンプラの概略構成図である。７ポート６ポジションバルブから成る第１バルブ１１は７つのポート１１ａ〜１１ｇを有する。ポート１１ａには計量シリンジ１２が接続される。また、ポート１１ｂには第１洗浄液タンク１３が、ポート１１ｅには第１洗浄槽２１が、それぞれ接続される。六方バルブから成る第２バルブ１４は、６つのポート１４ａ〜１４ｆを有し、切り替え操作により隣接するポート同士を選択的に接続するものである。ポート１４ａには液体クロマトグラフのカラムへ試料を送液するための送液管１５が、ポート１４ｂには前記カラムへ移動相を供給するための送液管１６が、それぞれ接続される。ポート１４ｄ及び１４ｅにはそれぞれ第１バルブ１１のポート１１ｄ及び１４ｃが接続される。ポート１４ｃにはサンプルループ１７の一端が接続され、このサンプルループ１７の他端にはニードル１８が接続される。また、ポート１４ｆにはインジェクションポート１９が接続される。ニードル１８は、インジェクションポート１９、試料容器２０、第１洗浄槽２１、第２洗浄槽２２の間を移動すると共にそれぞれの液中に挿入する可動機構を有する。
【００１８】
第１洗浄槽２１には、計量シリンジ１２、ポート１１ａ、ポート１１ｅを介して、第１洗浄液タンク１３中の第１洗浄液を注入して貯留することができる。その第１洗浄液の注入動作については後述する。第２洗浄槽２２には、第２洗浄液を第２洗浄液タンク２４から第２洗浄槽に注入するためのポンプ２５が接続される。
【００１９】
（２）本実施例の試料注入動作
本発明の特徴であるニードルの洗浄について説明する前に、まず、本実施例のオートサンプラにおける試料の注入動作を説明する。まず、第２バルブ１４は図１の実線で示す接続状態に切り替えられる。ニードル１８はインジェクションポート１９上の位置に配置される。移動相が送液管１６からサンプルループ１７、ニードル１８、インジェクションポート１９を通って送液管１５へ送られ、この流路内が移動相で満たされる。
【００２０】
次に、第２バルブ１４は図１の破線で示す接続状態に、第１バルブ１１は図１の破線で示す接続状態に、それぞれ切り替えられる。これにより、計量シリンジ１２とニードル１８が、ポート１１ａ、１１ｄ、１４ｄ、１４ｃ、サンプルループ１７を経由して接続される。ニードル１８は試料容器２０上に移動し、容器２０中に挿入される。計量シリンジ１２の吸引動作により、所定量の試料が試料容器２０からサンプルループ１７へ吸引されて保持される。
【００２１】
試料吸引の完了後、ニードル１８はインジェクションポート１９上の位置に戻される。第２バルブ１４は図１の実線の接続状態に戻される。これにより、移動相が送液管１６からサンプルループ１７、ニードル１８、インジェクションポート１９を通って送液管１５へ送られる。こうして、サンプルループ１７に保持されていた試料が移動相と共に液体クロマトグラフのカラムへ供給される。
【００２２】
ここでニードル１８の外部には試料が付着しているため、後述するように、次の試料注入動作の開始前までの適切な時点でニードル１８の洗浄を行う。
【００２３】
（３）本実施例のニードル洗浄動作
次に、本発明の特徴であるニードルの洗浄動作について説明する。測定開始前に、測定者は所定の操作により、ニードルの洗浄条件についての以下の項目を設定する。まず、ニードルの「洗浄タイミング」を、
（ｉ）試料注入動作の前、
（ｉｉ）試料注入動作の後、
（ｉｉｉ）試料注入動作の前後両方、
（ｉｖ）洗浄しない、
の中から選択する。「洗浄タイミング」について（ｉ）〜（ｉｉｉ）を選択した場合には、更に「使用する洗浄槽」を、
（ｉ）第１洗浄槽のみ使用、
（ｉｉ）第２洗浄槽のみ使用、
（ｉｉｉ）第１洗浄槽と第２洗浄槽を連続して使用、
（ｉｖ）試料の種類を変更する時のみ第２洗浄槽のみ使用してそれ以外は第１洗浄槽を使用、
の中から選択する。なお、前記「洗浄タイミング」について（ｉｉｉ）を選択した場合には、前記「使用する洗浄槽」の選択は、試料注入動作の前及び後のそれぞれについて行うようにしてもよい。次に、洗浄時間を設定する。この洗浄時間は、ニードル１８を洗浄液に浸漬する時間を設定する。
【００２４】
こうして設定されたニードル洗浄の条件に従い、以下のようにニードルの洗浄を行う。第１洗浄槽により洗浄を行う場合には、まず、第１バルブ１１は図１の二重線で示す接続状態に切り替えられる。計量シリンジ１２は第１洗浄液タンク１３から所定量の第１洗浄液を吸引する。次に、第１バルブ１１は図１の実線で示す接続状態に切り替えられる。計量シリンジ１２中の第１洗浄液は、ポート１１ａ、１１ｃ、１４ｅ、１４ｄ、１１ｄ、１１ｅを経由して第１洗浄槽２１に供給される。第１洗浄槽に残存していた使用済みの洗浄液及び余分に注入した洗浄液は排出口２３から排出される。その後、ニードル１８は、第１洗浄槽２１内に挿入され、設定された時間だけ第１洗浄液に浸漬される。（図２（ａ））。これによりニードル１８が洗浄される。なお、洗浄中には第１洗浄槽２１への第１洗浄液の供給、即ち第１洗浄液の入れ替えは行われない。前記設定時間が経過後、ニードル１８を所定の位置に移動させ、洗浄を終了する。ここで、前記「使用する洗浄槽」について（ｉ）又は（ｉｖ）を選択した場合には、前記所定の位置はインジェクションポート１９又は試料容器２０である。一方、前記「使用する洗浄槽」について（ｉｉｉ）を選択した場合には、前記所定の位置は第２洗浄槽２２であり、引き続き下記の第２洗浄槽による洗浄を行う。
【００２５】
第２洗浄槽２２により洗浄を行う場合には、ニードル１８を第２洗浄槽２２に挿入した後、ポンプ２５を稼働して、第２洗浄槽２２内に第２洗浄液を流入させる。設定された前記洗浄時間だけニードル１８を第２洗浄液に浸漬することにより、ニードル１８が洗浄される（図２（ｂ））。この間、第２洗浄槽２２内では、第２洗浄液が流入し、また、排出口２３から排出される。そのため、ニードル１８に付着していた試料は第２洗浄液と共に排出口２３から排出される。こうして、洗浄液中の残留試料がニードル１８に再付着することが防止されるため、第２洗浄槽においてはニードル１８を高い能力で洗浄することができる。前記洗浄時間の経過後、ニードル１８を所定の位置に移動させ、洗浄を終了する。
【００２６】
（４）洗浄槽の使い分けの例
前記のように、第１洗浄槽は洗浄を簡便に行う際に有効であり、第２洗浄槽は高い洗浄能力を必要とする際に有効である。そのため、それぞれの利点を活かして両洗浄槽を使い分けることが望ましい。以下の（ａ）〜（ｃ）に、その使い分けの例を示し、前記のニードルの洗浄条件についての設定項目である、「使用する洗浄槽」と「洗浄タイミング」の望ましい設定を示す。
【００２７】
（ａ）洗浄性能よりもスループットを優先する場合
この場合には、洗浄時間をより短くすることができるように、「使用する洗浄槽」は（ｉ）を選択する。「洗浄タイミング」は（ｉ）〜（ｉｉｉ）のいずれでもよい。
【００２８】
（ｂ）洗浄液により試料が変質する場合
例えばタンパク質等の成分が付着したニードルを洗浄する際に、この成分が洗浄液により変質してニードルに固着することがある。この場合、「使用する洗浄槽」として（ｉｉｉ）を選択することが有効である。ここで、第１洗浄液には試料が変質しないもの（洗浄効果が比較的低くてもよい）を、第２洗浄液には洗浄効果が高いもの（試料が変質するものでもよい）を用いる。即ち、第１洗浄槽において、変質しやすい成分をニードルから除去した後、第２洗浄槽においてその他の成分を十分に除去する。これにより、試料の変質に伴う固着と、その他の成分の残留を共に防ぐことができる。「洗浄タイミング」は（ｉ）〜（ｉｉｉ）のいずれでもよい。
【００２９】
（ｃ）異種の試料の混入を防止することを重視する場合
測定する試料の種類を変更しながら測定する場合には、「使用する洗浄槽」は（ｉｖ）を選択すればよい。これは、同種の試料を測定している間は第１洗浄槽を用いて高いスループットでニードルを洗浄し、異種の試料の測定に移行する際にのみ第２洗浄槽を用いて、より高性能の洗浄を行う。これにより、異種の試料の混入を防ぎつつ、スループットの向上等の洗浄の簡便化を図ることができる。
【００３０】
（５）変形例
本実施例では、更に２種類以上の第２洗浄液を使い分けて洗浄を行うことができるように、第２洗浄液の切り替えバルブを設けることができる。その一構成例を図３に示す。図１の装置との違いは、第２洗浄槽に供給する第２洗浄液を複数種類用いるために複数の第２洗浄液タンク２４１，２４２，．．．を設けたこと、及びそれらの第２洗浄液タンクとポンプ２５とを接続するために第２洗浄液切り替えバルブ２６を設けたことである。この第２洗浄液切り替えバルブ２６により、第２洗浄槽に供給する第２洗浄液を切り替えることができる。
【００３１】
これにより、第２洗浄槽における洗浄の際に、用いた試料毎に最適な第２洗浄液を用いるように前記切り替えを行い、洗浄能力を更に高めることができる。例えば、酸性の試料に対しては塩基性の洗浄液を、塩基性の試料に対しては酸性の洗浄液を用いるとよい。また、水溶性の試料には水性洗浄液を、油溶性の試料には有機溶媒等を用いるとよい。
【００３２】
また、この変形例の構成を用いる場合には、前記ニードルの洗浄条件の設定において、「使用する洗浄槽」について（ｉｉ）〜（ｉｖ）を選択した際に、測定者が更に測定する試料毎に第２洗浄液を選択するようにすればよい。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明に係るオートサンプラの一実施例の概略構成図。
【図２】本実施例におけるニードルの洗浄動作を説明する図。
【図３】第２洗浄液の切り替えバルブを設けた実施例の概略構成図。
【符号の説明】
１１…第１バルブ
１２…計量シリンジ
１３…第１洗浄液タンク
１４…第２バルブ
１５、１６…送液管
１７…サンプルループ
１８…ニードル
１９…インジェクションポート
２０…試料容器
２１…第１洗浄槽
２２…第２洗浄槽
２３…排出口
２４、２４１、２４２…第２洗浄液タンク
２５…ポンプ
２６…第２洗浄液切り替えバルブ
【図１】
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【図２】
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【図３】
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