(57)【要約】【課題】魚介類を原料とし、原料の乾燥手段を用いることなく、工業的に効率良く、短縮された設備で、高品質のリン脂質を製造する方法を提供する。【解決手段】魚介類を原料とし、アセトンと水の混合溶剤で抽出することを特徴とする、魚介類由来のリン脂質の製造方法。【選択図】　選択図なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
魚介類を原料とし、アセトンと水の混合溶剤（アセトンの水に対する重量比が２．０以上１０以下）で抽出することを特徴とする、魚介類由来のリン脂質の製造方法。
【請求項２】
混合溶剤が、アセトンの水に対する重量比で２．５以上７．０以下である請求項１記載の魚介類由来リン脂質の製造方法。
【請求項３】
原料の魚介類が水産加工廃棄物である請求項１または２記載の魚介類由来リン脂質の製造方法。
【請求項４】
魚介類が青背の魚、頭足類、貝類である請求項１〜３のいずれかに記載の魚介類由来リン脂質の製造方法。
【請求項５】
原料がホタテガイである請求項１〜４のいずれかに記載の魚介類由来リン脂質の製造方法。
【請求項６】
リン脂質の構成脂肪酸の３０％以上がω−３高度不飽和脂肪酸である請求項１〜５のいずれかに記載の魚介類由来リン脂質の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は魚介類からリン脂質を高品質にしかも安価に製造する方法に関し、詳しくは、魚介類から特定重量比のアセトンと水の混合溶剤を用いて前記リン脂質を抽出することを特徴とする魚介類由来リン脂質の製造方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
リン脂質は食品や化粧品業界などにおける天然乳化剤ばかりでなく、その生理機能作用から医薬品や健康食品として広く利用されている。中でも、ＤＨＡやＥＰＡなどのω―３高度不飽和脂肪酸を含有するリン脂質は、その高い生理活性が解明されつつあり、近年とみに注目を集めている物質である。
魚介類に含まれるリン脂質にはω−３高度不飽和脂肪酸が多く含まれることが知られている。魚介類由来のω―３高度不飽和脂肪酸を多く含むリン脂質を製造する方法としては、マグロをはじめとするカツオ、アジ、サバ、イワシ等青背の魚の頭部、腹部，内臓各部或いは全体から抽出する方法（特開昭６４−５０８９０号公報、特公平６−７７５０５号公報）や、イカの皮から抽出する方法（特開平６−３２１９７０号公報、特開平７−６８１５７号公報）、イカミールから抽出する方法（特開２０００−６０４３２号公報）、イカ皮やカツオ巣卵から抽出する方法（開平８−３２５１９２号公報）等が報告されている。
【０００３】
しかしながら、前記の先行技術の全てには、原料の抽出前の処理方法として、凍結乾燥や低温乾燥が共通の工程として記載されているのが特徴的である。これは、溶剤による抽出をより効率的に行うために採用せざるをえない工程といえる。一方、天然の生原料中に元来７０％〜９０％含まれる大量の水を除去するのに必要な凍結乾燥或いは低温乾燥機器等の運転コストは莫大であり、また、製品の生産能力上、長時間を要する凍結乾燥或いは低温乾燥等にかかる設備投資はどうしても過重になる。それらの理由により、原料を乾燥処理に付して水分含量を低下させる前処理を工業的製法に採用することは多大な不利益を招かざるを得ないという欠点があった。
【０００４】
近年、原料の乾燥にかかる負荷を改善する目的で、特開平９−７７７８２号公報では、原料をアセトンで洗浄して効率良く水分を除去する方法が開示されている。この方法は、アセトンの脱水作用、および、リン脂質の定義のひとつにアセトン不溶物とあることから理解できるように原料に含まれるリン脂質がアセトンで溶出して損われることがないことに基づいている。この方法によれば、短時間に効率良く原料から水分を除去できるが、原料の洗浄・脱水処理のために多量のアセトンを必要とするため未だ十分な方法といえるものではなかった。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の目的は魚介類を原料とし、原料の乾燥手段を用いることなく、工業的に効率良く、短縮された設備で、高品質のリン脂質を製造する方法を提供するものである。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
本発明者は、上記の課題を解決するために鋭意研究した結果、意外にも特定重量比のアセトンと水の混合溶剤を用いて、魚介類からリン脂質を選択的に効率よく、しかも原料を乾燥することなく抽出できること、更には、魚介類由来リン脂質をアセトンのみの単一溶剤で一貫して製造できることを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００７】
即ち、本発明は、
（１）魚介類を原料とし、アセトンと水の混合溶剤（アセトンの水に対する重量比が２．０以上１０以下）で抽出することを特徴とする、魚介類由来のリン脂質の製造方法、
（２）混合溶剤が、アセトンの水に対する重量比で２．５以上７．０以下である（１）に記載の魚介類由来リン脂質の製造方法、
（３）原料の魚介類が水産加工廃棄物である（１）または（２）に記載の魚介類由来リン脂質の方法、
（４）魚介類が青背の魚、頭足類、貝類である（１）〜（３）のいずれかに記載の魚介類由来リン脂質の製造方法、
（５）原料がホタテガイである（１）〜（４）のいずれかに記載の魚介類由来リン脂質の製造方法、
（６）リン脂質の構成脂肪酸の３０％以上がω−３高度不飽和脂肪酸である（１）〜（５）のいずれかに記載の魚介類由来リン脂質の製造方法、を提供するものである。
【０００８】
通常リン脂質はヘキサン等の良溶媒に溶解し、その溶解液にアセトンなどの貧溶媒を添加すると析出する性質を有する事が良く知られている。この性質がレシチン（リン脂質）の性状試験に使われている事も周知の通りである。従って、常識では、レシチンの貧溶媒であるアセトンに水を特定量混合する事により抽出性が向上するなどとは、夢想だに出来ない事であった。
【０００９】
【発明の実施の形態】
以下に本発明を、その好ましい態様を中心に、詳細に説明する。本発明において用いられる原料としては、リン脂質、特にω―３高度不飽和脂肪酸を多く含むリン脂質を多量に含むことが知られている青背の魚、頭足類、貝類等の魚介類が利用可能である。前記原料は食用に供せられるものであっても良いが、水産加工廃棄物を用いても高品質のリン脂質を得ることが可能であり、資源の再利用、経済性の面からも廃棄物を用いるのが好ましい。これらの原料の内、ホタテガイの水産廃棄物であるホタテウロは、リン脂質を湿重量当たり０．５〜２．０％と多量に含有し、且つ年間排出量８〜９万トンと安定に入手できる面から特に好ましい。
【００１０】
これら原料の形状は、特に限定はしないが、適度に粉砕して表面積を増やしたものが、抽出処理をより円滑に進めることができるために好ましく用いられる。また、原料を予め蛋白分解酵素等で処理して細かくしておくことも可能である。これらの原料は、抽出を行う前に、乾燥処理や酵素処理等の前処理をして減容処理したものを用いることもできる。
本発明において、魚介類からリン脂質の抽出処理を行う際には、抽出を容易にするため、撹拌した状態で処理することが好ましい。
【００１１】
本発明において、原料に加えるアセトンと水の混合溶剤は、アセトンの水に対する重量比が２．０以上１０以下、好ましくは２．５以上７．０以下、より好ましくは３．０以上５．０以下、更に好ましくは３．５以上４．０以下となるように調整する。アセトンの水に対する重量比が２．０未満の場合にはリン脂質の溶解度が著しく低いために抽出されるリン脂質量が少なく、逆にリン脂質より極性の大きなアミノ酸や遊離脂肪酸などの不純物が大量に混入してしまうため好ましくない。アセトンの水に対する重量比が１０をこえる場合にもリン脂質の溶解度が著しく低いために抽出されるリン脂質量が少なく、逆にリン脂質より極性の小さなトリグリセリドなどの中性脂質が大量に混入してしまうため好ましくない。上記範囲においてのみリン脂質を選択的に且つ高濃度に抽出することが可能となる。上記範囲でリン脂質を抽出することにより、ホタテウロのような中性脂質を多量に含有する原料からも、中性脂質の混入を抑え、リン脂質を選択的に抽出することが出来る。従って、中性脂質を取り除く精製負荷も低減し、精製時のリン脂質のロスを防ぐことが可能となる。また、抽出をアセトンと水の混合溶剤で行うことにより、溶剤を回収する際、アセトンは水を含んでいても良く、溶剤回収かかる負荷、コストを抑えることが可能となる。
【００１２】
魚介類に加えるアセトンと水の混合溶剤の量は、該原料の重量に対して好ましくは０．５倍量以上２０倍量以下、より好ましくは１倍以上１０倍以下である。リン脂質の収率の点で０．５倍以上、コストパフォーマンスの点で２０倍以下が好ましい。
また、抽出は一度に全量で行っても良いが、数次に分けて行っても良い。抽出効率を高めるためには数次に分けて行うのが好ましい。
抽出処理は１０℃以上７０℃以下が好ましく、より好ましくは２０℃以上５０℃以下、更に好ましくは２５℃以上４０℃以下で行われる。アセトンと水の混合溶剤に対するリン脂質の溶解度の点で、１０℃以上、魚介類由来リン脂質の熱に対する安定性の点で７０℃以下が好ましい。
また、抽出されるリン脂質の酸化を防ぐために、抽出溶液にトコフェロール等の抗酸化剤を加えたり、抽出操作を嫌気状態で行うことも好ましく行われる。
【００１３】
抽出に要する時間は２分以上１８０分以下が好ましく、より好ましくは１０分以上１２０分以下である。リン脂質の十分な抽出のために２分以上、コストパフォーマンスの点で１８０分以下が好ましい。
所定時間抽出処理を行った後の原料と抽出液との分離は、遠心分離法や加・減圧濾過法等の、通常の工業的手法のいずれのものも使用できる。
上記操作で得られた抽出液から溶剤を蒸発乾固することでリン脂質を得ることができる。この際、抽出溶剤の蒸発乾固はリン脂質の安定性を考慮して７０℃以下で行われるのが好ましい。また、リン脂質の酸化を予防するために、トコフェロール等の抗酸化剤を添加したり、嫌気状態で行うのが好ましい。
【００１４】
また、用いる原料によっては得られる魚介類由来リン脂質の色が食品に添加するには好まれない場合もあるが、溶剤を蒸発乾固する前に、必要に応じて活性炭、活性白土、けいそう土等、公知の方法で着色成分を吸着除去することで、淡い黄色から濃い橙褐色の魚介類由来リン脂質を得ることができる。
このようにして得られる魚介類由来リン脂質は、使用目的に応じて直接そのまま用いてもよく、あるいは公知のアセトン分別法やカラムクロマトグラフィーにより更に濃度を高めて用いることもできる。
【００１５】
以下、実施例により更に詳しく本発明の説明を行うが、これら実施例は本発明を限定するものではない。
【００１６】
【実施例１】
重量１ｋｇ（水分７８％）のホタテウロ（貝柱以外の軟体部）を家庭用ミキサーで粉砕した。この粉砕後のホタテウロに、アセトンの水に対する重量比が３．５となるように、２．７ｋｇのアセトンを加え、室温で１時間攪拌した後、吸引ろ過により抽出液をろ別した。得られた抽出液を真空エバポレーターを用い、４０℃で溶剤留去したところ、８ｇの脂質が得られた。この脂質の構成成分のうち、リン脂質含量はイアトロスキャン分析によると４８％であった。また、構成脂肪酸をガスクロマトグラフィーにより求めたところ、ＤＨＡが１８％、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）が２５％であった。
【００１７】
【実施例２】
重量１ｋｇ（水分７４％）のホタテ中腸腺（ホタテウロから中腸腺のみを選別したもの）を家庭用ミキサーで粉砕した。この粉砕後のホタテ中腸腺に、アセトンの水に対する重量比が３．５となるように、２．６ｋｇのアセトンを加え、室温で１時間攪拌した後、吸引ろ過により抽出液をろ別した。得られた抽出液を真空エバポレーターを用い、４０℃で溶剤を留去したところ、２２ｇの脂質が得られた。この脂質の構成成分のうち、リン脂質含量はイアトロスキャン分析によると４９％であった。また、構成脂肪酸をガスクロマトグラフィーにより求めたところ、ＤＨＡが１７％、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）が２５％であった。
【００１８】
【実施例３】
重量１ｋｇ（水分７４％）のホタテ中腸腺（ホタテウロから中腸腺のみを選別したもの）を家庭用ミキサーで粉砕した。この粉砕後のホタテ中腸腺に、アセトンの水に対する重量比が３．５となるように、２．６ｋｇのアセトンを加え、室温で１時間攪拌した後、吸引ろ過により抽出液をろ別した。得られた抽出液に粉末活性炭２０ｇを加え、室温で１時間攪拌した後、吸引ろ過により活性炭を除去し、脱色抽出液を得た。得られた脱色抽出液を真空エバポレーターを用い、４０℃で溶剤を留去したところ、１７ｇの脂質が得られた。この脂質の構成成分のうち、リン脂質含量はイアトロスキャン分析によると５３％であった。また、構成脂肪酸をガスクロマトグラフィーにより求めたところ、ＤＨＡが１８％、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）が２７％であった。
【００１９】
【比較例１】
重量１ｋｇ（水分７４％）のホタテ中腸腺（ホタテウロから中腸腺のみを選別したもの）を家庭用ミキサーで粉砕した。この粉砕後のホタテ中腸腺に１．１ｋｇのアセトンを加え、室温で１時間攪拌した後、吸引ろ過により抽出液を残さからろ別した。抽出時のアセトンの水に対する重量比は１．５であった。得られた抽出液を真空エバポレーターを用い、４０℃で溶剤を留去したところ、７ｇの脂質が得られた。この脂質の構成成分のうち、リン脂質含量は１２％と低く、５０％以上がアミノ酸等の極性物質であった（イアトロスキャン分析）。
【００２０】
【比較例２】
重量１ｋｇ（水分７４％）のホタテ中腸腺（ホタテウロから中腸腺のみを選別したもの）を家庭用ミキサーで粉砕した。この粉砕後のホタテ中腸腺に１５ｋｇのアセトンを加え、室温で１時間攪拌した後、吸引ろ過により抽出液を残さからろ別した。抽出時のアセトンの水に対する重量比は２０であった。得られた抽出液を真空エバポレーターを用い、４０℃で溶剤を留去したところ、５６ｇの脂質が得られた。この脂質の構成成分のうち、リン脂質の含量は２％と低く、９３％が中性脂質であった。
【００２１】
【実施例４】
実施例３で得られたリン脂質１０ｇにヘキサン５０ｇを加えて溶解した。次いでこの溶液を冷却下、攪拌しながらアセトン１００ｇを加え、得られた沈殿物をろ過により捕集し、凍結乾燥したところ、８ｇの脂質が得られた。この脂質の構成成分のうち、リン脂質含量はイアトロスキャン分析によると８９％であった。また、構成脂肪酸をガスクロマトグラフィーにより求めたところ、ＤＨＡが２２％、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）が３２％であった。
【００２２】
【実施例５】
重量１ｋｇ（水分７４％）のホタテ中腸腺（ホタテウロから中腸腺のみを選別したもの）に水１ｋｇと酵素製剤スミチームＭＰ５ｇ（新日本化学株式会社製）を加え、４５℃で５時間攪拌した後、遠心分離（３０００Ｇ×１０分）により沈殿した固形分２６０ｇ（水分率７０％）を得た。得られた固形分に、アセトンの水に対する重量比が３．５となるように、アセトン６３７ｇを加え、室温で１時間攪拌した後、吸引ろ過により抽出液をろ別した。残さにアセトンの水に対する重量比が３．５のアセトンと水の混合溶剤を８００ｇ加え、室温で１時間攪拌した後、吸引ろ過により抽出液をろ別した。前記２回の抽出操作で得られた抽出液を合わせ、真空エバポレーターを用い、４０℃で溶剤を留去したところ、２０ｇの脂質が得られた。この脂質の構成成分のうち、ω−３系高度不飽和脂肪酸含有リン脂質の含量はイアトロスキャン分析によると５０％であった。また、構成脂肪酸をガスクロマトグラフィーにより求めたところ、ＤＨＡが１７％、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）が２５％であった。
【００２３】
【実施例６】
重量１ｋｇ（水分９０％）のムラサキイカの皮を家庭用ミキサーで粉砕した。この粉砕後のムラサキイカの皮に、アセトンの水に対する重量比が３．５となるように、３．２ｋｇのアセトンを加え、室温で１時間攪拌した後、吸引ろ過により抽出液をろ別した。得られた抽出液を真空エバポレーターを用い、４０℃で溶剤を留去したところ、２２ｇの脂質が得られた。得られた脂質にヘキサン４４ｇを加えて溶解した。次いでこの溶液を冷却下、攪拌しながらアセトン８８ｇを加え、得られた沈殿物をろ過により捕集し、凍結乾燥したところ、１０ｇの脂質が得られた。この脂質の構成成分のうち、リン脂質含量はイアトロスキャン分析によると９５％であった。また、構成脂肪酸をガスクロマトグラフィーにより求めたところ、ＤＨＡが３６％、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）が１０％であった。
【００２４】
【実施例７】
重量１ｋｇカツオ頭部（水分７０％）を家庭用ミキサーで粉砕した。この粉砕後のカツオ頭部に、アセトンの水に対する重量比が３．５となるように、２．５ｋｇのアセトンを加え、室温で１時間攪拌した後、吸引ろ過により抽出液をろ別した。得られた抽出液を真空エバポレーターを用い、４０℃で溶剤を留去したところ、２１ｇの脂質が得られた。得られた脂質にヘキサン４２ｇを加えて溶解した。次いでこの溶液を冷却下、攪拌しながらアセトン８４ｇを加え、得られた沈殿物をろ過により捕集し、凍結乾燥したところ、１０ｇの脂質が得られた。この脂質の構成成分のうち、リン脂質含量はイアトロスキャン分析によると９４％であった。また、構成脂肪酸をガスクロマトグラフィーにより求めたところ、ＤＨＡが３０％、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）が１５％であった。
【００２５】
【実施例８】
重量１ｋｇサケ頭部（水分７１％）を家庭用ミキサーで粉砕した。この粉砕後のカツオ頭部に、アセトンの水に対する重量比が３．５となるように、２．５ｋｇのアセトンを加え、室温で１時間攪拌した後、吸引ろ過により抽出液をろ別した。得られた抽出液を真空エバポレーターを用い、４０℃で溶剤を除去したところ、１８ｇの脂質が得られた。得られた脂質にヘキサン３６ｇを加えて溶解した。次いでこの溶液を冷却下、攪拌しながらアセトン７２ｇを加え、得られた沈殿物をろ過により捕集し、凍結乾燥したところ、７ｇの脂質が得られた。この脂質の構成成分のうち、リン脂質含量はイアトロスキャン分析によると９０％であった。また、構成脂肪酸をガスクロマトグラフィーにより求めたところ、ＤＨＡが２４％、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）が９％であった。
【００２６】
【発明の効果】
本発明により魚介類由来リン脂質を効率よく生産することができる。魚介類由来の原料を乾燥することなく直接抽出することができ、更には抽出から精製に至るまで有機溶剤としてアセトンのみの単一溶剤を用いて行うことができるため、従来の魚介類由来リン脂質の製造方法に比べて設備・工程数を大幅に削減し、効率的に製造することが可能となった。従って、優れた生理活性を有する魚介類由来リン脂質を経済的に供給することが可能となった。