(57)【要約】【課題】本発明は腫瘍疾患もしくは腫瘍形成、例えば癌腫、肉腫、リンパ腫、白血病を予防し、かつ／または、治療、緩和のためまたは対症的に処置するための医薬品の提供を課題とする。【解決手段】該医薬品は抗腫瘍もしくは抗増殖有効成分として、Ｒ１がドデシル残基であり、Ｒ２がデシル残基であり、ｎは０，１または２に等しくてよく、Ｒ４およびＲ５が水素を示し、Ｒ３がヒドロキシ基を意味し、さらに、Ｂが５−フルオルウラシル残基を意味する一般式Ｉ：【化１】2004026727.tif 000014のリン脂質誘導体、好ましくは非天然ヌクレオシドならびにその生理学的に受容可能な塩、ステレオ異性体または互変体を、単一治療薬もしくは単一予防薬として、また他の予防様式または治療様式との自由なまたは固定的な組み合わせにおいて含有する。【選択図】　　　なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式Ｉ：
【化１】
2004026727.tif 000009
の化合物ならびに該化合物の生理学的に受容可能な塩、ステレオ異性体または互変体であって、
該式Ｉにおいて、
Ｒ１はドデシル残基であり、
Ｒ２はデシル残基であり、ｎは０，１または２に等しくてよく、
Ｒ４およびＲ５は水素を示し、
Ｒ３はヒドロキシ基であり、さらに、
Ｂは５−フルオルウラシル残基を意味する、
ことを特徴とする、化合物ならびに該化合物の生理学的に受容可能な塩、ステレオ異性体または互変体。
【請求項２】
一般式ＩＩａおよびＩＩｂ：
【化２】
2004026727.tif 000010
の化合物ならびに該化合物の生理学的に受容可能な塩、ステレオ異性体または互変体であって、
該式ＩＩａおよびＩＩｂにおいて、
Ｒ１はドデシル残基であり、
Ｒ２はデシル残基であり、ｎは０，１または２に等しくてよく、
Ｒ４およびＲ５は水素を示し、
Ｒ３はヒドロキシ基を意味し、さらに、
Ｂは５−フルオルウラシル残基を意味する、
ことを特徴とする、化合物ならびに該化合物の生理学的に受容可能な塩、ステレオ異性体または互変体。
【請求項３】
ｎが０または１に等しい、請求項１または２記載の化合物。
【請求項４】
５−フルオル−２’−デスオキシウリジン−５’−リン酸−（３−ドデシル−チオ−２−デシルオキシ）プロピルエステルならびにその塩、および光学活性体および光学異性体混合物全体。
【請求項５】
腫瘍疾患、例えば癌腫、肉腫または血腫形成を予防し、かつ／または処置するための医薬品であって、該医薬品が、一般的な担体物質および佐剤の他に、請求項１から４までのいずれか１項記載の化合物ならびにその生理学的に受容可能な塩、ステレオ異性体または互変体を含有することを特徴とする、医薬品。
【請求項６】
請求項１から４までのいずれか１項記載の化合物を製造する方法であって、
Ｒ１およびＲ２が上記意味を有する一般式Ｖの化合物：
【化３】
2004026727.tif 000011
を、
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５が上記意味を有するか、または、慣用の酸素保護基で保護されたヒドロキシ基を示す一般式ＶＩの化合物：
【化４】
2004026727.tif 000012
と、
活性化酸塩化物、例えば２，４，６−トリイソプロピルベンゾールスルホン酸−クロリドおよび第三窒素塩基、例えばピリジンまたはルチジンの存在において、不活性溶剤中、例えばトルオール中で、または、直接に無水（ａｂｓ．）ピリジン中で反応させ、加水分解を行った後、場合によっては、ヌクレオシド化学において一般的な方法に応じて、酸素保護基を分離するか、または、
２）Ｒ１およびＲ２が上記意味を有する一般式ＶＩＩの化合物：
【化５】
2004026727.tif 000013
を、Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５およびＢが上述の意味を有する一般式ＶＩの化合物と、ストレプトミセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）由来のホスホリパーゼＤの存在において不活性溶剤中で、酵素分解に適した緩衝液の存在において反応させ、加水分解を行った後、場合によっては、ヌクレオシド化学において一般的な方法に応じて、酸素保護基を分離し、
さらに、得られた化合物を、場合によっては生理学上受容可能な塩に変化させ、
ｎが出発化合物において０を意味する場合、最終生成物を適切な酸化剤、特に過酸化水素または過酸化安息香酸のような過酸化物で酸化することにより、ｎ＝１または２の化合物に変化させることができる、
ことを特徴とする、化合物の製造方法。
【請求項７】
腫瘍疾患もしくは腫瘍形成、例えば癌腫、特に結腸直腸癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、肺癌または脾臓癌、肉腫、リンパ腫、白血病を予防し、かつ／または、治療、緩和のためまたは対症的に処置するための医薬品を製造するための、請求項１から４までのいずれか１項記載の化合物の使用。
【請求項８】
抗腫瘍医薬品の有効成分として使用するための、請求項１から４までのいずれか１項記載の一般式の化合物の薬理学上受容可能な塩。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明の対象は、一般式Ｉ：
【化６】
2004026727.tif 000002
のリン脂質誘導体、ならびに、該誘導体の薬理学上受容可能なアルカリまたはアルカリ土類塩および光学活性体であり、この式Ｉにおいて、
Ｒ１はデシル基を示し、
Ｒ２はドデシル基を示し、
ｎは０〜２の整数値を示し、
Ｒ３はヒドロキシ基を示し、
Ｒ４およびＲ５はそれぞれ水素を示し、
さらに、
Ｂは５−フルオルウラシル残基を意味する。
【０００２】
ヌクレオシドのリン脂質誘導体は、ヨーロッパ特許第５４５９６６号明細書から公知である。これらの化合物は抗ウィルス作用物質として記載されている。抗ウィルス作用物質は特に、ＤＮＡウィルス、例えば単純ヘルペスウィルス、サイトメガロウィルス、パポバウィルス、水痘−帯状疱疹ウィルスまたはエプスタイン−バーウィルス、またはＲＮＡウィルス、例えばトガウィルスまたは特別なレトロウィルス、例えば腫瘍ウィルスＨＴＬＶ−ＩおよびＨＴＬＶ−ＩＩ、ならびにレンチウィルス、ビスナおよびヒト免疫不全ウィルスＨＩＶ−１およびＨＩＶ−２に起因する感染症の治療および予防に適している。上記特許明細書ではさらに、一般式Ｉの化合物が特にヒトにおけるレトロウィルス性ＨＩＶ感染の臨床的な発現の処置、例えば持続的な全身性のリンパ節腫脹（ＰＧＬ）、ＡＩＤＳ関連症候群（ＡＲＣ）の進行期およびＡＩＤＳの臨床的な全身症状の処置に適していることが強調されている。この場合化合物は、ウィルス特異的なＤＮＡ−もしくはＲＮＡの転写段階におけるＤＮＡもしくはＲＮＡウィルスの増殖を阻害するようになっている。Ｐｒｏｃ．　Ｎａｔｌ．　Ａｃａｄ．　Ｓｃｉ．　ＵＳＡ　８３，　１９１１，　１９８６およびＮａｔｕｒｅ　３２５，　７７３，　１９８７からは、上述の物質が逆転写酵素の阻害を介して、レトロウィルスの増殖を抑圧できることが公知である。治療上特に重要なのは、免疫不全疾患ＡＩＤＳを引き起こすＨＩＶに対する前記化合物の阻害作用である。ヨーロッパ特許第５４５９６６号明細書においては、記載された化合物がその抗ウィルス作用もしくは抗レトロウィルス作用を発揮し、しかも薬理学上適切な用量において細胞障害性ではないことを明確に示唆している。
【０００３】
国際公開第９５／３２９８４号パンフレットにも、やはりヌクレオシド−一リン酸塩の脂質エステルが記載されている。ただしこのエステルは抗腫瘍作用を有している。本発明による化合物は、上記特許出願明細書には記載されていない。
【０００４】
驚くべきことに、本発明による全ての新規のリン酸脂質誘導体が極めて高価値の薬理学的特性を有することが判った。これらの物質は特に悪性腫瘍、例えばマリグノーマ、腫瘍形成、癌腫、肉腫、または血腫疾患、たとえば白血病の予防および／または治療に適している。さらに、化合物は抗腫瘍作用もしくは抗増殖作用を有し、しかもこの場合、薬理学上適切な用量においては、他の器官系、例えば骨髄または胃腸管に対して非特異的毒作用を及ぼさない。
【０００５】
ｎが０，１または２に等しい種々異なる酸化数によって特徴付けられる硫黄は、チオエーテル、スルホキシドまたはスルホンである。この場合チオエーテルおよびスルホキシドが特に好ましい。
【０００６】
一般式Ｉの化合物の好ましい塩は、アルカリ塩およびアルカリ土類塩である。特に好ましいのはナトリウム塩、カルシウム塩およびマグネシウム塩である。
【０００７】
一般式Ｉの化合物を製造する１つの方法が、ヨーロッパ特許第０５４５９６６号明細書に記載されている。好ましくはこれらの化合物は、周知の通り、
【０００８】
１）Ｒ１およびＲ２が上記意味を有する一般式Ｖの化合物：
【化７】
2004026727.tif 000003
を、
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５が上記意味を有するか、または、慣用の酸素保護基で保護されたヒドロキシ基を示す一般式ＶＩの化合物：
【化８】
2004026727.tif 000004
と、
活性化酸塩化物、例えば２，４，６−トリイソプロピルベンゾールスルホン酸−クロリドおよび第三窒素塩基、例えばピリジンまたはルチジンの存在において、不活性溶剤中、例えばトルオール中で、または、直接に無水（ａｂｓ．）ピリジン中で反応させ、加水分解を行った後、場合によっては、ヌクレオシド化学において一般的な方法に応じて、酸素保護基を分離するか、または、
２）Ｒ１およびＲ２が上記意味を有する一般式ＶＩＩの化合物：
【化９】
2004026727.tif 000005
【０００９】
を、Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５およびＢが上述の意味を有する一般式ＶＩの化合物と、ストレプトミセス由来のホスホリパーゼＤの存在において不活性溶剤中で、酵素分解に適した緩衝液の存在において反応させ、加水分解を行った後、場合によっては、ヌクレオシド化学において一般的な方法に応じて、酸素保護基を分離し、
【００１０】
さらに、得られた化合物を、場合によっては生理学上受容可能な塩に変化させることによって製造される。
【００１１】
ｎが出発化合物において０を意味する場合、最終生成物は適切な酸化剤、特に過酸化水素または過酸化安息香酸のような過酸化物で酸化することにより、ｎ＝１または２の化合物に変化させることができる。
【００１２】
悪性腫瘍形成もしくは腫瘍の処置に従来用いられる化学療法薬と比べて、本発明による化合物は、より高い薬理学的・医学的な効力、より良好な作用および／または著しく低い毒性を有しており、ひいてはｉｎ　ｖｉｖｏでのより大きい治療の幅を有している。一般式Ｉの化合物の臨床上・実地上の利点は、これらの化合物を含有する医薬品をより長い時間にわたって連続的に投与できることである。現在薬物による腫瘍治療に細胞成長抑止剤もしくは化学療法薬を使用する場合極めてしばしば一般的であり、もしくは、多大な不所望な副作用のためにしばしばどうしても必要となる投与中断または間欠的な投与を、抗腫瘍作用を有する一般式Ｉの化合物を含有する医薬品を投与することにより、回避することができる。本発明による化合物が良好な適合性を有していることにより、このような物質の連続的な腸または腸管外での投与がほぼ初めて可能になる。
【００１３】
一般式Ｉの化合物は非対称的な炭素原子を含有する。このような化合物の光学活性体およびラセミ混合物全体もやはり本発明の対象である。
【００１４】
特に重要なのは、このような関連において一般式ＩＩａおよびＩＩｂのジアステレオ異性体である：
【化１０】
2004026727.tif 000006
【００１５】
これらの一般式ＩＩａおよびＩＩｂにおいて、Ｒ１，Ｒ２，ｎ，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５およびＢは一般式Ｉの上述の意味を有し、これらのジアステレオ異性体は場合によってはその塩の形で存在してよい。
【００１６】
さらに、本発明による化合物の互変体、および、無機および有機の酸もしくは塩基の生理学上受容可能な塩も、本発明により一緒に包含されている。これらも選択的な抗腫瘍もしくは抗増殖特性を示す。
【００１７】
新規の物質はさらに、国際公開第９５／３２９８４号パンフレットから公知のような従来公知の化合物と比べて、著しく減じられた用量において抗腫瘍もしくは抗増殖作用を示すか、または、ｉｎ　ｖｉｔｒｏまたはｉｎ　ｖｉｖｏでの実質的により大きな治療の幅を有する。
【００１８】
本発明の化合物またはその製薬学的な調製は、適切な他の医薬品もしくは有効成分と自由にまたは固定的に組み合わせて、腫瘍疾患もしくは腫瘍形成の治療処置、緩和処置または対症的な処置に利用することもできる。
【００１９】
このような医薬品の例としては、他の細胞成長抑制剤もしくは化学療法薬、例えばシクロホスファミド、白金誘導体、例えばシスプラチンまたはカルボプラチン、パクリタキセルまたはドセタキセルが挙げられる。
【００２０】
本発明による化合物の組み合わせの相手としては、単独の、または自由なまたは固定的に組み合わせた形の、特に以下のフルオロピリミジンもしくはフルオロピリミジン配合物が考えられる。
【００２１】
・　ＵＦＴ、固定モル比４：１の、ウラシルとテガフル（１−［２−テトラヒドロフラニル］−５−フルオロウラシル）との組み合わせ、
【００２２】
・　Ｓ−１（ＢＭＳ　２４７６１７）、テガフル、２つの５−フルオロウラシル・モジュレータ、つまりＣＤＨＰ（クロロ−２，４−ジヒドロキシピリミジン、強力ＤＰＤ阻害剤）およびカリウム−オキソネートから成る組み合わせ、
・　ＢＯＦ−Ａ２（エミテフル）、１−エトキシメチル−５−フルオロウラシル（ＥＭ−ＦＵ）および３−シアノ−２，６−ジヒドロキシピリジン（ＣＮＤＰ）、強力ＤＰＤ阻害剤から成る医薬品、
・　エニルウラシル（５−エチニル−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ピリミジンジオン）、強力かつ不可逆性のＤＰＤ阻害剤、
・　テガフル（１［２−テトラヒドロフラニル］−５−フルオロウラシル）
・　カペシタビン、エノシタビンまたはガロシタビン
【００２３】
本発明による式Ｉの化合物は、その抗腫瘍効力が高いと同時にその適合性も極めて良好なので、特異的または非特異的な能動的免疫治療の適用様式、もしくは、体液または細胞の受動的免疫治療の適用様式と組み合わせた、腫瘍疾患もしくは腫瘍形成の予防および／または治療に適している。
【００２４】
特異的な能動的免疫治療の例としては、例えば照射された腫瘍細胞または腫瘍関連抗原の注射もしくは投与、または、遺伝子変化させられた腫瘍細胞、例えばサイトカイン−遺伝子トランスフェクタント、またはウィルスで標識付けされた腫瘍細胞による免疫化が挙げられる。非特異的な能動的免疫治療は、このような関連において、例えば免疫刺激もしくは免疫モジュレータ物質、例えばＢＣＧ、イスカドール（Ｉｓｃａｄｏｒ）、Ｏｋ−４３２、レバミゾール（Ｌｅｖａｍｉｓｏｌ）、ユベニメックス（Ｕｂｅｎｉｍｅｘ）、レンチナム（Ｌｅｎｔｉｎａｍ）、ベスタチン（Ｂｅｓｔａｔｉｎ）、ＭＥＲ、ＭＴＰ−ＰＥの投与を含む。
【００２５】
腫瘍疾患もしくは腫瘍形成の予防および／または治療のための式Ｉの化合物を含有する本発明による医薬品は、液体または固体の形で腸または腸管外に投与することができる。この場合、一般的な投与形態、例えば錠剤、カプセル、糖衣錠、シロップ、溶液、スプレイまたは懸濁液の形態が考えられる。注射媒質としては、水が使用され、この水が注射溶液において一般的な添加物、例えば安定剤、可溶化剤、および緩衝液を含有することが好ましい。このような添加物は、例えば酒石酸塩またはクエン酸塩の緩衝液、エタノール、錯化剤、例えばエチレンジアミン酢酸およびその非毒性の塩、高分子ポリマー、例えば粘性を調整するための液状ポリエチレンオキシドである。注射溶液のための液状担体物質は滅菌性でなければならず、アンプルに充填されるのが好ましい。固形担体物質は、例えば澱粉、ラクトース、マンニット、メチルセルロース、タルカム、高分散珪酸、高分子脂肪酸、例えばステアリン酸、ゼラチン、寒天、リン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、動物性および植物性油脂、固形高分子ポリマー、例えばポリエチレングリコールなどである。経口投与に適した配合物は、所望の場合には調味料または甘味剤を含有することができる。
【００２６】
用量は種々のファクタ、例えば投与形式、種類、年齢または個体の状態に依存する。本発明による化合物は一般的に、一日につき体重１ｋｇ当たり０．１〜１００ｍｇ、好ましくは一日につき体重１ｋｇ当たり０．２〜８０ｍｇの用量で投与される。一日の用量を２〜５回の投与に分けることが好ましく、各投与時には、０．５〜５００ｍｇの有効成分含量を有する１〜２個の錠剤もしくはアンプルが投与される。錠剤は徐放化されていてよく、これにより一日当たりの投与数は１〜３錠に減らされる。徐放化された錠剤の有効成分含量は２〜１０００ｍｇであってよい。有効成分は１〜３回の経口投与によって、または継続的な輸液によって投与することもでき、この場合には、一日当たりの量は５〜１０００ｍｇで通常は充分である。
【００２７】
式Ｉの化合物と、１つまたは複数の別の有効成分とを組み合わせる場合には、有効物質は、同一投与形態、例えば錠剤またはアンプルの形態で固定的に組み合わせて調製するか、または、１つまたは複数の種々異なる投与形態で調製することができる。異なる投与形態での調製は、組み合わせようとする有効成分が例えば貯蔵時に反応するという理由から、例えば互いに適合できない場合に必要である。もちろん３つ以上の有効成分の組み合わせにおいても、これらの有効成分はすべて、固定的に組み合わせて１つの投与形態で製造することができ、または、２つ以上の投与形態で製造して自由な組み合わせで投与することもできる。
【００２８】
以下の例により、本発明をわかり易く説明するが、これらの例は本発明の範囲を限定するものではない。
【００２９】
例１
ＭｅｔｈＡ−線維肉腫モデルにおける５−フルオル−２’−デスオキシウリジン−５’−リン酸−（３−ドデシルメルカプト−２−デシルオキシ）プロピルエステル（物質Ａ）および３’−アジド−３’−デスオキシチミジン−５’−リン酸−（３−ドデシルメルカプト−２−デシルオキシ）プロピルエステル（物質Ｂ）
これらの物質、５−フルオル−２’−デスオキシウリジン−５’−リン酸−（３−ドデシルメルカプト−２−デシルオキシ）プロピルエステル（物質Ａ）および３’−アジド−３’−デスオキシチミジン−５’−リン酸−（３−ドデシルメルカプト−２−デシルオキシ）プロピルエステル（物質Ｂ）を、特にマウスのＭｅｔｈＡ−線維肉腫モデルにおいて、ｉｎ　ｖｉｖｏで、これらの物質の抗腫瘍性もしくは抗増殖性の効力および作用について検査した。
【００３０】
ＭｅｔｈＡ−線維肉腫細胞を、雌のＣＢ６Ｆ１−マウス（Ｃｈａｒｌｅｓ　Ｒｉｖｅｒ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，　ドイツ国Ｓｕｌｚｆｅｌｄ）において腹水腫瘍として、腹膜内（ｉ．ｐ）に増殖させた。これらの動物を、２３±１℃の室温、５５±１５％の相対空気湿度、および１２時間の明暗リズムで層流条件下で、マクロロン・ケージ内で全試験期間中にわたって飼育した。マウスには標準的な食餌を与え、飲料水は自由に採れるようにした。各実験への受け入れ前に、動物を１４日間順応させた。マウスウィルスによる感染症に関して、動物を定期的に検査した。
【００３１】
作用物質をテストするために、生後６〜８週の雌のＣＢ６Ｆ１−マウスに、１マウス当たり１　ｘ　１０５のＭｅｔｈＡ−線維肉腫細胞を皮下（ｓ．ｃ．）接種した。対照群のマウスならびに作用物質で処理された群の動物における腫瘍の成長を、互いに直角に位置する両腫瘍直径を測定することにより、一週間の間隔を置いて規則的に求めた。このような測定は、Ｈｅｒｍａｎｎ　Ｄ．　Ｂ．　Ｊ．，　Ｐａｈｌｋｅ　Ｗ．，　Ｏｐｉｔｚ　Ｈ．−Ｇ．およびＢｉｃｋｅｒ　Ｕ．，　Ｃａｎｃｅｒ　Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　Ｒｅｖｉｅｗｓ，　１７，　２４７−２５２，　１９９０に記載されている通りである。このような検体は用量に応じて試験し、一週に一度、リン酸塩で緩衝された生理食塩水（ＰＢＳ）中でｉ．ｐ．投与した。対照群の動物はプラシーボ（ＰＢＳ）で処理した。
【００３２】
表１は、ｉｎ　ｖｉｖｏにおけるＭｅｔｈＡ−線維肉腫モデル中の腫瘍成長に対する物質ＡおよびＢの作用を示す。腫瘍細胞接種して２１及び２８日目腫瘍容積を試験群当たり１０匹の中央値として表示。
【００３３】
【表１】
2004026727.tif 000007
【００３４】
ａ　中央値；１群当たり１０匹；括弧内は第１群の対照値に対する抑制百分率（＋は上昇を意味する）
ｂ　プラシーボ：リン酸塩で緩衝された生理食塩水（ＰＢＳ）
＊ｐ≦０．０５、＊＊ｐ≦０．０１；マンホイットニー検定
この結果は、本発明による物質Ａが驚くべきことに用量および時間に関連して極めて顕著に腫瘍の成長を抑制する、すなわち、抗腫瘍作用もしくは抗増殖作用を有することを示す。
【００３５】
物質Ｂ（ヨーロッパ特許第５４５９６６号の例１ａ）は、いかなる抗腫瘍特性または抗増殖特性をも示さない。
【００３６】
例２
ｉｎ　ｖｉｖｏでの５−フルオル−２’−デスオキシウリジン−５’−リン酸−（３−ドデシルメルカプト−２−デシルオキシ）プロピルエステル（物質Ａ）の適合性
物質Ａを適合性に関して雌のＮＭＲＩマウスでテストした。動物飼育条件は、例１に記載した条件と同じであった。
【００３７】
このために、生後６〜８週の雌のＮＭＲＩマウスを（Ｃｈａｒｌｅｓ　Ｒｉｖｅｒ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，　ドイツ国Ｓｕｌｚｆｅｌｄ）、１ｇもしくは１．５ｇ／ｋｇの物質Ａで、咽頭ゾンデにより経口処理した。次いで以下の毒性パラメータを測定した。
【００３８】
・　白血球濃度（ＷＢＣ）、赤血球濃度（ＲＢＣ）、ヘモグロビン（ＨＢ）、ヘマトクリット（ＨＣＴ）、血小板濃度（ＰＬＴ）、平均赤血球容積（ＭＣＶ）、平均赤血球ヘモグロビンおよび平均赤血球ヘモグロビン濃度（ＭＣＨＣ）を含む血液値、
・　骨髄細胞性、すなわち、１大腿骨当たりの骨髄細胞数（Ｍ／Ｆｅｍｕｒ）、
・　体重
・　結腸、心臓、脳、腸、肺、肝臓、胃、脾臓、腎臓、卵巣を含む器官重量。
表２は、このような実験の結果を示す。
表２　ｉｎ　ｖｉｖｏでの５−フルオル−２’−デスオキシウリジン−５’−リン酸−（３−ドデシルメルカプト−２−デシルオキシ）プロピルエステル（物質Ａ）の適合性ａ
【００３９】
【表２】
2004026727.tif 000008
【００４０】
ａ　平均値±ＳＥＭ；１群当たり１０匹
ｂ　プラシーボ：リン酸塩で緩衝された生理食塩水（ＰＢＳ）
ｃ　中央値
これらのデータは、物質Ａの用量が極めて高くても、すなわち、１ｇもしくは１．５ｇ／体重ｋｇであっても、プラシーボ（飲料水）で処理された対照群と比較して、上述の適合性パラメータにおいて顕著な減小をもたらすことはないことを明らかにする。これらの結果は、物質Ａの用量が極めて高くても、ｉｎ　ｖｉｖｏにおいて非特異的毒特性を有さないことを示す。物質Ａの用量が極めて高くても、骨髄抑制、血液毒性または非特異的毒性の器官不適合が引き起こされることはない。
【００４１】
要約すると、例１および例２の結果は、一般式Ｉの本発明による化合物が驚くべきことにｉｎ　ｖｉｖｏにおいて極めて良好な抗腫瘍作用もしくは抗増殖作用を有し、しかもこの場合、非特異的毒特性、例えば骨髄抑制、血液毒性または器官毒性を有することはない。ヨーロッパ特許第５４５９６６号明細書に記載した、式Ｉには属さない他の化合物はこのような薬理学的特性を示さない。
【００４２】
例３
５−フルオル−２’−デスオキシウリジン−５’−リン酸−（３−ドデシルメルカプト−２−デシルオキシ）プロピルエステルの製造
国際公開第９５／３２９８４号パンフレットに記載されたように、５２ｇの未精製のラク−（３−ドデシルメルカプト−２−デシルオキシ）プロピル−二水素リン酸塩、および、５３．３ｇの２，４，６−トリイソプロピルベンゾールスルホクロリドを６００ｍｌの無水ピリジン中で１時間室温で、アルゴン下で攪拌した。次いで２７．４ｇの３’−アセチル−２’−デスオキシ−５−フルオルウリジンを添加し、その混合物をさらに１６時間攪拌した。
【００４３】
次いで１００ｍｌの水を添加し、懸濁液を１０分間攪拌した。溶液を真空中で取り除き、残留物を２回、それぞれ２００ｍｌのトルオールで後蒸留し、残留したビスコースオイルを７００ｍｌのＭＴＢＥ中で懸濁した。４０℃に加熱し、超音波浴中で超音波処理し、２０℃に冷却した後、沈殿物をろ別し、１００ｍｌのＭＴＢで洗浄した。ろ液を３回、１５０ｍｌの２Ｎ塩酸で抽出し、有機相を蒸発させ、残留物を４００ｍｌのメタノール中に溶解した。４２ｍｌの３０％ナトリウムメチレート溶液（ｐＨ＝１）を添加し、短時間攪拌し、５ｍｌの氷酢酸を添加したあと、低沸点溶剤を真空中で蒸留除去した。
【００４４】
残留物を７００ｍｌのＭＴＢＥ中に溶解し、２回それぞれ１００ｍｌの２Ｎ塩酸で抽出した。有機層を蒸発させ、１００ｍｌのトルオールで後蒸留した。
【００４５】
残留物中には、表題化合物が未精製オイルの形で遊離酸として存在した。
【００４６】
例４
５−フルオル−２’−デスオキシウリジン−５’−リン酸−（３−ドデシル−チオ−２−デシルオキシ）プロピルエステルのカルシウム塩の製造
最後の反応の未精製生成物を５０℃で１ｌのアセトン中に溶解した。３０ｇの酢酸カルシウムを７５ｍｌの水中に攪拌しながらゆっくりと滴下し、１時間にわたって室温に冷却することにより、カルシウム塩を沈殿させることができた。
【００４７】
沈殿物を吸い取り、アセトンで洗浄し、真空内で乾燥させる。収量：１０６ｇの未精製カルシウム塩。
【００４８】
例５
５−フルオル−２’−デスオキシウリジン−５’−リン酸−（３−ドデシルメルカプト−２−デシルオキシ）プロピルエステルのクロマトグラフィー精製
最後の反応のカルシウム塩を６００ｍｌのＭＴＢＥおよび２００ｍｌの２Ｎ塩酸中に懸濁した。有機層を分離し、真空中で蒸発させた。収量：６７．４ｇ。
【００４９】
未精製生成物を４０℃で１４０ｍｌのメタノール中に溶解し、３６ｍｌのトリエチルアミンおよび２０ｍｌの水と混合した。
【００５０】
生成物を部分毎に分取ＨＰＬＣ、ＬｉＣｈｒｏｐｒｅｐ　ＲＰ１８、２５〜４０μｍ（カラム５０ｍｍφ、２００ｍｍ長）によって、溶離剤としてメタノール／０．０４Ｍ　酢酸ナトリウム溶液８０／２０で精製した。
【００５１】
生成物を含有する画分を１つに集め、真空中で元の容積の３０％に濃縮した。攪拌しながら２０ｇの酢酸カルシウムを４０ｍｌの水に滴下し、懸濁液を１時間、後攪拌した。沈殿物を吸い取り、真空中で乾燥させた。収量：４２．２ｇのカルシウム塩。
【００５２】
例６
５−フルオル−２’−デスオキシウリジン−５’−リン酸−（３−ドデシル−チオ−２−デシルオキシ）プロピルエステルのナトリウム塩の製造
４２．２ｇのカルシウム塩を４００ｍｌのＭＴＢＴおよび２００ｍｌの２Ｎ塩酸中に懸濁した。有機層を分離し、珪藻土によってろ過し、真空中で蒸発させた。残留物を２回、それぞれ１００ｍｌのトルオールで後蒸留し、８０ｍｌのトルオール中に４０℃で溶解した。３０％のナトリウムメチレート溶液を添加することにより、攪拌下でｐＨを７に調節し、溶液を５０℃で１．４ｌのアセトン中に滴下した。
【００５３】
１時間の攪拌後、沈殿物を吸い取り、アセトンで洗浄し、真空中で乾燥させた。収量：４１．２ｇ、Ｆｐ：１７５℃（分解）。
【００５４】
例７
５−フルオル−２’−デスオキシウリジン−５’−リン酸−［（２Ｒ）−（３−ドデシル−チオ−２−デシルオキシ）プロピルエステルの製造
例３〜６と同様に、（Ｒ）−（３−ドデシルチオ−２−デシルオキシ）プロピル−二水素リン酸塩を使用することにより、共役化合物５−フルオル−２’−デスオキシウリジン−５’−リン酸−［（２Ｒ）−（３−ドデシルチオ−２−デシルオキシ）プロピルエステルを遊離酸、カルシウム塩、およびナトリウム塩として製造することができた。
【００５５】
薄層クロマトグラムにおいて、信頼性の高いプローブと比較して同一性を証明することができた。
【００５６】
例８
５−フルオル−２’−デスオキシウリジン−５’−リン酸−［（２Ｓ）−（３−ドデシル−チオ−２−デシルオキシ）プロピルエステルの製造
例３〜６と同様に、（Ｓ）−（３−ドデシルチオ−２−デシルオキシ）プロピル−二水素リン酸塩を使用することにより、共役化合物５−フルオル−２’−デスオキシウリジン−５’−リン酸−［（２Ｓ）−（３−ドデシルチオ−２−デシルオキシ）プロピルエステルを遊離酸、カルシウム塩、およびナトリウム塩として製造することができた。
【００５７】
薄層クロマトグラムにおいて、信頼性の高いプローブと比較して同一性を証明することができた。
【００５８】
光学異性体的に見て純粋な（Ｒ）−（３−ドデシルチオ−２−デシルオキシ）プロピル−二水素リン酸塩もしくは（Ｓ）−（３−ドデシルチオ−２−デシルオキシ）プロピル−二水素リン酸塩を、ラセミ混合物を分離することにより、ジアステレオマー塩を介して製造した。
【００５９】
例９
（５−フルオルウリジン）−５’−リン酸（３−ドデシルスルフィニル−２−デシルオキシ）プロピルエステル
５ｇの（５−フルオルウリジン）−５’−リン酸（３−ドデシルチオ−２−デシルオキシ）プロピルエステルを、５０ｍｌの氷酢酸中に懸濁し、５ｍｌの３０％過酸化水素を添加したあと、４時間室温で攪拌した。
【００６０】
次いで溶剤をロータリ・エバポレータ内で除去し、残留物を分取カラムクロマトグラフィ、ＲＰ１８によって、メタノール／０．１Ｍ　緩衝酢酸溶液を溶離剤として用いて精製した。
【００６１】
生成物を含有する画分を蒸発させ、残留物をアセトンとともに攪拌し、沈殿物を吸い取った。真空乾燥ボックス中で４０℃で乾燥させたあと、４．５ｇのスルホオキシドを分離した。融点（Ｓｃｈｍｐ．）２１４〜２１６℃（分解）、Ｒｆ＝０．２７（ＢｕＯＡｃ／ｉＰｒＯＨ／Ｈ２Ｏ／ＮＨ４ＯＨ　３／５／１／１）、３１Ｐ−ＮＭＲ：δ＝０．０２７ｐｐｍ。
【００６２】
例１０
（５−フルオルウリジン）−５’−リン酸（３−ドデシルスルフィニル−２−デシルオキシ）プロピルエステル
【００６３】
１０ｇの（５−フルオルウリジン）−５’−リン酸（３−ドデシルチオ−２−デシルオキシ）プロピルエステルを、１００ｍｌの氷酢酸中に懸濁し、２５ｍｌの３０％過酸化水素を添加したあと、６時間５０℃で攪拌した。次いでさらに１３ｍｌの過酸化水素を添加し、さらに７時間攪拌した。
【００６４】
次いで、溶剤をロータリ・エバポレータ内で除去し、残留物を分取カラムクロマトグラフィ、ＲＰ１８によって、メタノール／０．１Ｍ　緩衝酢酸溶液を溶離剤として用いて精製した。
【００６５】
生成物を含有する画分を蒸発させ、残留物をアセトンとともに攪拌し、沈殿物を吸い取った。真空乾燥ボックス中で４０℃で乾燥させたあと、８．５ｇのスルホオキシドを分離した。融点（Ｓｃｈｍｐ．）２０４〜２０７℃（分解）、Ｒｆ＝０．２９（ＢｕＯＡｃ／ｉＰｒＯＨ／Ｈ２Ｏ／ＮＨ４ＯＨ　３／５／１／１）、３１Ｐ−ＮＭＲ：δ＝０．０７３ｐｐｍ。
【００６６】
例１１
錠剤の製法
１．　有効成分（５−フルオル−２’−デスオキシウリジン−５’−リン酸−（
３−ドデシル−チオ−２−デシルオキシ）プロピルエステル）　　　２００ｍｇ
２．　高分散二酸化珪素　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１４ｍｇ
３．　ラクトース　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　２５７ｍｇ
４．　ポリビニルピロリドン　Ｋ２５　　　　　　　　　　　　　　２０ｍｇ
５．　微結晶性セルロース　　　　　　　　　　　　　　　　　　１７０ｍｇ
６．　架橋ポリ（ビニルピロリドン）　　　　　　　　　　　　　　３５ｍｇ
７．　高分散二酸化珪素　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　４ｍｇ
８．　ステアリン酸マグネシウム　　　　　　　　　　　　　　　　２０ｍｇ
最終重量　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　７２０ｍｇ
有効成分を位置２〜５の佐剤と混合し、次いで水を添加しながらグラニュエータ内で造粒する。
【００６７】
次いで、湿った顆粒を乾燥器内で乾燥させ、機械幅０．８ｍｍの篩を介して供給する。
【００６８】
篩にかけた顆粒を、適切な混合器内で、位置６〜８から成る外相と混合し、次いで錠剤機上で圧縮して７２０ｍｇ重量の錠剤にする。
【００６９】
例１２
差込カプセル
１．　有効成分（５−フルオル−２’−デスオキシウリジン−５’−リン酸−（
３−ドデシル−チオ−２−デシルオキシ）プロピルエステル）　１００．０ｍｇ
２．　ポリビニルピロリドン　Ｋ２９−３２　　　　　　　　　１３．２ｍｇ
３．　乳糖　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１５０．８ｍｇ
４．　アエロジル（Ａｅｒｏｓｉｌ）２００（二酸化珪素）　　２４．０ｍｇ
５．　トウモロコシ澱粉　　　　　　　　　　　　　　　　　　　４．０ｍｇ
６．　ラウリル硫酸ナトリウム　　　　　　　　　　　　　　　　８．０ｍｇ
７．　微結晶性セルロース　　　　　　　　　　　　　　　　　２６．０ｍｇ
８．　ステアリン酸マグネシウム　　　　　　　　　　　　　　　４．０ｍｇ
カプセル充填重量　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　３３０．０ｍｇ
【００７０】
篩にかけた有効成分を、適切な混合器内で、篩にかけた佐剤と混合し、次いで自動カプセル充填・封鎖機上で差込カプセル内に充填する。カプセル表面をつやだし機内で粉塵除去し、次いでガラスまたはプラスチック容器内に充填するか、またはアルミニウムフォイルで密封する。
【００７１】
注射溶液
１０．０ｇの５−フルオル−２’−デスオキシウリジン−５’−リン酸−（３−ドデシル−チオ−２−デシルオキシ）プロピルエステルのナトリウム塩を５００ｍｌの生理食塩水中に溶解し、アンプル内に５ｍｌまで充填し、滅菌する。溶液を静脈内に適用することができる。