(57)【要約】【課題】安全且つ優れたアレルギー抑制作用および免疫賦活作用を有する免疫調整剤を提供する。【解決手段】イソフラボンを有効成分とするアトピー等のアレルギーの抑制作用を有する免疫調整剤および該免疫調整剤を含有することを特徴とする食品。【選択図】　なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
イソフラボンを有効成分として含有することを特徴とする免疫調整剤。
【請求項２】
免疫調整が抗アレルギー作用である請求項１に記載の免疫調整剤。
【請求項３】
免疫調整がアトピー性皮膚炎抑制作用である請求項１または２に記載の免疫調整剤。
【請求項４】
免疫調整が、ＩｇＥ抗体産生抑制作用である請求項１から３のいずれか一項に記載の免疫調整剤。
【請求項５】
免疫調整が、遅延型アレルギーを抑制することを特徴とする請求項１から４のいずれか一項に記載の免疫調整剤。
【請求項６】
免疫調整が免疫賦活作用である請求項１に記載の免疫調整剤。
【請求項７】
免疫調整が、ＩｇＧ抗体産生促進作用である請求項１、２、３または６のいずれか一項に記載の免疫調整剤。
【請求項８】
免疫調整が、ＩｇＡ抗体産生促進作用である請求項１、２、３または６のいずれか一項に記載の免疫調整剤。
【請求項９】
請求項１から８のいずれかに記載の免疫調整剤を含有する食品。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、（１）アトピー性皮膚炎の発症を抑制し、（２）Ｉ型アレルギーの原因であるＩｇＥ抗体産生を抑制し、（３）外部の異物に対する抵抗力を増すＩｇＧ抗体産生を促進し、（４）粘膜、腸管などからの異物進入を阻止する作用を有するＩｇＡ抗体産生を促進する作用を有する免疫調整剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
大豆イソフラボンには、３種類のアグリコンであるダイゼイン（ｄａｉｄｚｅｉｎ）、グリシテイン（ｇｌｙｃｉｔｅｉｎ）、ゲニステイン（ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ）と３種類の配糖体であるダイジン（ｄａｉｄｚｉｎ）、グリシチン（ｇｌｙｃｉｔｉｎ）、ゲニスチン（ｇｅｎｉｓｔｉｎ）および配糖体が修飾された６’’−Ｏ−アセチルダイジン、６’’−Ｏ−マロニルダイジン、６’’−Ｏ−アセチルグリシチン、６’’−Ｏ−マロニルグリシチン、６’’−Ｏ−アセチルゲニスチン、６’’−Ｏ−マロニルゲニスチンなどの成分がある。また、納豆中には、納豆菌により修飾されたサクシニル化ダイジン、サクシニル化グリシチンおよびサクシニル化ゲニスチンなどの成分がある。大豆イソフラボンは、弱い女性ホルモン作用を持ち、閉経後のホルモンバランスの変化が関与しているとされる骨粗しょう症の予防［Ｎｕｔｒ．Ｒｅｓ．，１７，１６１７（１９９７）］、閉経後の不定愁訴などの緩和［Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ　Ｓｙｍｐ　Ｓｅｒ．，Ｎｏ．６６２，２７３（１９９７）］、動脈硬化に関与する脈管形成の阻害作用があるという報告もなされている［Ｊ．Ｎｕｔｒ．，１２５，２３０７（１９９５）］。大豆イソフラボンに免疫抑制作用があるという記載がある［特開平８−２１４７８７号公報］がその科学的根拠は不明である。また、大豆イソフラボンの成分であるゲニステインの誘導体に免疫抑制作用および抗腫瘍活性があるという記載がある［特開平９‐１８３７７４号公報］が、本発明に示される様な免疫調節作用については開示されていない。
【０００３】
抗体には、異物との免疫反応に中心的な働きをするＩｇＧ抗体、腸管や粘膜などで異物の進入を防止するＩｇＡ抗体の他、ＩｇＥ抗体などが存在する。異物の進入を除去したり排除し、病気に対する抵抗力を増加させる目的で、免疫賦活作用のあるβグルカンなどを含む食品成分の開発が行われてきた。
一方、近年においてはアトピー性皮膚炎などのアレルギー性疾患が深刻な問題となっている。アトピー性皮膚炎は、乾燥した苔癬状の湿疹が特徴で、強い痒みを有する難治性の慢性炎症疾患である。アトピー性皮膚炎の湿疹が形成される機序は、不明な点が多いが、Ｉ型アレルギーおよびＩＶ型アレルギー反応が関わっていることが明らかとなっている。Ｉ型アレルギーは主にＩｇＥ抗体が関与した即時型アレルギーで、マスト細胞や好塩基球上のＩｇＥとアレルギーの原因物質（アレルゲン）が反応すると、ヒスタミンやロイコトリエン等の化学伝達物質や酵素が遊離し、皮膚に炎症反応が起こる。ＩＶ型アレルギーは遅延型アレルギーあるいは細胞伝達型アレルギーと呼ばれ、リンパ球が関与する炎症反応で、感作されてから発症するまでに２４〜７２時間かかる。
【０００４】
このように、アトピー性皮膚炎の治療法として様々な試みがなされてきたが、満足な効果をあげていない。ＩｇＥ抗体の産生を抑制するために免疫抑制剤を利用すると、生体防御に重要な働きをするＩｇＧ抗体やＩｇＡ抗体の産生も抑制してしまう可能性があるなどの問題があった。副腎皮質ホルモン外用剤を用いた外用療法が主に行われているが、副作用等の問題を有している。また、抗ヒスタミン剤など即時型反応を抑制する薬剤も利用されているが、効果が十分でないことや、副作用等の問題がある。これらのことから、安全で且つ優れたアレルギー抑制作用および免疫賦活作用を同時に有する免疫調整剤が望まれていた。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、アトピー性皮膚炎治療に関する上述の問題点を克服し、安全且つ優れたアレルギー抑制作用および免疫賦活作用を有する免疫調整剤を提供せんとするものである。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、上記目的を達成するため食品成分中に免疫調整作用を有する物質を探索した。その結果、大豆などに含まれるイソフラボンに、アレルギー抑制効果、特に、ＩｇＥ抗体産生抑制効果とアトピー性皮膚炎抑制作用、さらには、免疫賦活作用であるＩｇＧ抗体産生増強作用ならびにＩｇＡ抗体産生増強作用があることを見出し、本発明にいたった。
従って本発明の免疫調整剤は、イソフラボンを有効成分として含有することを特徴とするものである。
本発明の免疫調整剤における「免疫調整」作用としては、抗アレルギー作用、アトピー性皮膚炎抑制作用、ＩｇＥ抗体産生抑制作用、遅延型アレルギー抑制作用、免疫賦活作用、ＩｇＧ抗体産生促進作用、ＩｇＡ抗体産生促進作用が挙げられる。また、本発明は上記免疫調整剤を含有する健康食品、健康飲料などの食品に関するものである。
イソフラボンは種々の食品に含まれているが、食品由来のイソフラボンに限定されることなく本発明の免疫調整剤として使用できる。入手の容易さの点から大豆イソフラボンが好ましい。
【０００７】
【発明の実施の形態】
［性能評価試験］
アトピー性皮膚炎モデルとして汎用されるＮＣ／Ｎｇａマウスにｈａｐｔｅｎを反復塗布することによって発症される皮膚炎に対して、飼料に混合した大豆イソフラボンの性能を評価した。
「方法」
６週齢のＮＣ／Ｎｇａ　Ｔｎｄ　Ｃｒｊ系オスマウス（日本チャールズ・リバー株式会社）を購入し２週間馴化し、一般状態の観察および体重測定を行い、健康と判断したマウスを実験に使用した。１群を９匹として、体重が均一になるように、３群に分けた。基本飼料として精製飼料（ＡＩＮ９３Ｇ、オリエンタル酵母株式会社）を使用した。表１に示した様に、第１群（コントロール群）には精製飼料のみを与え、第２群および第３群には各被験サンプルを添加した飼料を与えた。
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【０００８】
大豆イソフラボン配糖体は、（株）ホーネンコーポレーション製の豊年イソフラボン−８０（イソフラボン配糖体濃度８０％）を精製飼料に対して０．５％（Ｗ／Ｗ）、大豆イソフラボンアグリコンはキッコーマン製のソイアクト（イソフラボンアグリコン濃度３０％）を０．５％（Ｗ／Ｗ）使用した。
８週齢に達したマウスを以下の様に感作に用いた。すなわち、バリカンを用いてエーテル麻酔してマウス腹部の毛刈りを行ない、毛刈りした腹部および足蹠に感作用２，４，６−トリニトロクロロベンゼン（Ｐｉｃｒｙｌ　Ｃｈｌｏｒｉｄｅ；以下、ＰｉＣｌ）溶液（１５０μＬ／匹）を塗布した。この様にしたマウスを試験に用いた。
【０００９】
感作後４日目から誘発を開始した。以降、週１回、５週間誘発を繰り返した。すなわち、バリカンを用いてエーテル麻酔したマウス背部の毛刈りを行い、毛刈りした背部および左右の耳（内外両側）に誘発用ＰｉＣｌ溶液（１５０μＬ／匹）を塗布した。なお、誘発２回目以降の毛刈りについては、毛の生育度に応じて行った。アトピー性皮膚炎の状態を以下の様に観察した。誘発１回目の前日から、週２回皮膚の状態を観察し、ヒトのアトピー性皮膚炎の臨床症状の評価基準に基づき以下に示す項目について評点化する。なお、剖検日に写真撮影を行った。
【００１０】
１）観察項目
▲１▼　ｐｒｕｒｉｔｕｓ／ｉｔｃｈｉｎｇ（掻痒症）
▲２▼　ｅｒｙｔｈｅｍａ／ｈｅｍｏｒｒｈａｇｅ（発赤・出血）
▲３▼　ｅｄｅｍａ（浮腫）
▲４▼　ｅｘｃｏｒｉａｔｉｏｎ／ｅｒｏｓｉｏｎ（擦傷・組織欠損）
▲５▼　ｓｃａｒｉｎｇ／ｄｒｙｎｅｓｓ（痂皮形成・乾燥）
２）評点化
上記各観察項目について下記に示す程度により評点化した。
評点
０・・・・・・・・無症状
１・・・・・・・・軽度
２・・・・・・・・中等度
３・・・・・・・・高度
観察項目の各評点の合計点から皮膚炎スコアを求める。
【００１１】
血中の総ＩｇＥ濃度の測定は以下の様に行った。投与開始４日前および投与２９日（投与開始日を１日）に採血を行う。採血方法はヘパリン処理したキャピラリーを用いて眼窩静脈叢から２００μＬ採取する。得られた血液はチューブに入れ、遠心分離（約４℃、１６６０ｇ、１５分間）を行い、上清を用いて血中の総ＩｇＥ、総ＩｇＡ、総ＩｇＧ、総ＩｇＧ１濃度を酵素免疫測定法（ＥＩＡ：ｅｎｚｙｍｅ−ｌｉｎｋｅｄ　ｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔ　ａｓｓａｙ）により測定した。
群毎に皮膚炎スコア、血中総ＩｇＥ等および体重の平均値および標準誤差を算出し、有意差検定は、Ｓｔｕｄｅｎｔ　ｔ　ｔｅｓｔで行った。危険率５％未満を有意とし、５％未満（Ｐ＜０．０５）および１％未満（Ｐ＜０．０１）とに分けて表示する。
【００１２】
「結果および結果の説明」
皮膚炎スコアのデータを図１〜２に示した。コントロールと比較して、大豆イソフラボン配糖体投与群（図１）および大豆イソフラボンアグリコン投与群（図２）は皮膚炎スコアの悪化が有意に抑制され、アトピー性皮膚炎の予防効果が明確に認められた。また、即時型（Ｉ型）アレルギーの原因抗体であるＩｇＥについて、血中の総ＩｇＥ濃度を測定したところ、コントロールと比較して、大豆イソフラボン配糖体、大豆イソフラボンアグリコン投与群でともに有意にＩｇＥ濃度が減少した（図３：ＩｇＥ）。このことから、大豆イソフラボンにアレルギー抑制作用があることが明らかとなった。
さらに、生体防御で中心的な働きをすると考えられる血中総ＩｇＧ量が増加し（図３：ＩｇＧ）、ＩｇＧ抗体の主要なサブクラスであるＩｇＧ１濃度の増加も認められた（図３：ＩｇＧ１）。また、粘膜、腸管などからの異物進入を阻止する作用を有するＩｇＡ抗体濃度も有意に増加した（図３：ＩｇＡ）。これらのことから、大豆イソフラボンに免疫賦活作用があることが明らかとなった。
【００１３】
以上の様に、大豆イソフラボンは、アレルギー反応に関与するＩｇＥ抗体を抑制する一方で、生体防御反応に必須のＩｇＧ抗体およびＩｇＡ抗体産生を増強するという優れた免疫調整作用を有することがあきらかとなった。また、アレルギーのうちでも近年特に問題となっているアトピー性皮膚炎の発症を抑制することもわかった。
イソフラボンがアトピー性皮膚炎を抑制するメカニズムは明らかではないが、Ｉ型アレルギーの原因抗体であるＩｇＥ抗体の産生を抑制すること、遅延型アレルギーを抑制することによりアレルギー体質を改善すると考えられる。
本発明に用いるイソフラボンの起源および製法は特に限定されず、天然物由来あるいは化学合成品、酵素合成品いずれも使用できるが、大豆由来の大豆イソフラボンが最も適している。大豆イソフラボンとしては、大豆タンパク質製造時のホエーから製造したものや、大豆胚軸から製造したもの、配糖体を酵素あるいは微生物、酸で加水分解してアグリコンとしたものなどが利用できる。使用するイソフラボンの純度は限定されない。
【００１４】
【実施例】
以下に本発明の実施例を挙げるが、本発明は以下の実施例によって制限されない。
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これらを混合した後、ゼラチンを用いてカプセル化した。
＊豊年イソフラボン‐８０は、ホーネンコーポレーション製のものを用いた。この豊年イソフラボンは、高速液体クロマトグラフィーによって分析したところ、ダイジン３５％、グリシチン３７％、ゲニスチン１１％が含まれていた。
【００１５】
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これらを混合した後、打錠して錠剤にした。イソフラボン（ゲニステイン）は和光純薬製品を使用した。
【００１６】
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これらを混合した後、殺菌してイソフラボンのうちのダイジン入りの飲料を製造した。
ダイジンは和光純薬製品を使用した。
【図面の簡単な説明】
【図１】大豆イソフラボン配糖体の皮膚炎症状に対する効果を示すグラフである。
【図２】大豆イソフラボンアグリコンの皮膚炎症状に対する効果を示すグラフである。
【図３】ＮＣ／Ｎｇａマウスの血中抗体濃度に対する大豆イソフラボン投与の影響を示すグラフである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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