(57)【要約】【構成】ホエイの蛋白質分解酵素処理物を吸着剤と接触させたのち、エチルアルコール溶液を用いて吸着成分を該吸着剤から溶出して得られるホエイの酵素処理物および乳製品用テイストフレーバー。【効果】苦みや蛋白分解物特有の不快な味が無くなると共に、優れた低アレルギー性を示し、一般食品、栄養食品等の食品素材として広く用いることができる優れたホエイの酵素処理物を簡便な手段で得ることができる。また本乳製品用フレーバーは、乳製品にコク味やボリューム感などを付与すると共に、フレーバーのトップを押し上げるエンハンス効果も兼ね備え、更に脱脂粉乳臭のマスキングにも優れたものである。更に、本発明の方法によれば、食品廃棄物のリサイクル利用に寄与することができる。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ホエイを蛋白質分解酵素で分解処理し、得られた酵素分解処理物を吸着剤と接触させたのち、エチルアルコール溶液を用いて該吸着剤に吸着した吸着成分を該吸着剤から溶出することを特徴とする酵素処理物の製造法。
【請求項２】
請求項１記載の製造法で得られたホエイの酵素処理物からなる乳製品用天然系テイストフレーバー。
【請求項３】
請求項２記載の乳製品用天然系テイストフレーバーで賦香された乳製品。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、酵素処理物の製造法、乳製品用天然系テイストフレーバー及びそれで賦香された乳製品に関する。
【０００２】
【従来の技術】
チーズを製造する過程で大量の副産物としてホエイが生成される。ホエイは各種の用途に利用されてはいるが、再利用率は未だ不十分であり、大量のホエイが食品廃棄物として処分されている。ホエイの有効利用について、本出願人はホエイを吸着剤と接触させたのち、エチルアルコール溶液を用いて吸着成分を該吸着剤から溶出して乳製品フレーバーを得る技術を出願した（特願２００１−３７０８２１）。該技術により呈味性に優れたフレーバーが得られたが、更なる呈味性の向上を求めて鋭意研究を行った。
また、ホエイ等の蛋白の酵素分解処理物をフレーバー付与剤として用いる場合、酵素分解で生じる苦味ペプチド由来の苦味問題がある。この問題を解決するために、プロテアーゼ処理後、麹酵素により熟成させる技術があるが（特許文献１）、製造工程が煩雑であり、熟成に１５日間を要しており、十分とは言えない。また、乳清蛋白質（ホエイ）のプロテアーゼ処理物および乳脂のリパーゼ処理物を有効成分として含有する飲食品の風味改良剤が提案されているが、２種の処理物を製造しなければならず、更に乳清蛋白質（ホエイ）のプロテアーゼ処理物には苦味があり、十分とは言えない（特許文献２）。
この苦みを除去する技術として、加水分解液を吸着性樹脂で処理する方法がある。しかし、これら技術は、苦み成分を樹脂に吸着させ、加水分解液は樹脂を通過させて、苦みのないペプチド混合物を得るものである（特許文献３、４）。
【０００３】本出願の発明に関する先行技術文献としては次のものがある。
【特許文献１】特許第２６７４６９５号公報
【特許文献２】特開平９−３７７３５号公報
【特許文献３】特開２００１−９５４９６号公報
【特許文献４】特開平５−２７６８９６号公報
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、ホエイを原料とした、乳製品にコク味やボリューム感などを付与すると共に、フレーバーのトップをおしあげるエンハンス効果をも併せて兼ね備え、更に脱脂粉乳臭のマスキングにも優れた乳製品用フレーバー及び前記フレーバーで賦香されたコク味やボリューム感が改善された嗜好性の高い乳製品を提供することを目的とするものである。
更に、苦みや蛋白分解物特有の不快な味が無くなると共に、非常に優れた低アレルギー性を示し、一般食品、栄養食品、またアレルギー患者用の食品素材として広く用いることができる優れたホエイの酵素処理物を、簡便な手段で得ることができる製造法を提供することを目的とするものである。
更にまた、食品廃棄物のリサイクル利用に寄与しつつ、付加価値の高い酵素処理物または乳製品用フレーバーを、安価にかつ比較的簡便に得られる製造法を提供することを目的とするものである。
【０００５】
【課題を解決するための手段】本発明は、ホエイを蛋白質分解酵素で分解処理し、得られた酵素分解処理物を吸着剤と接触させたのち、エチルアルコール溶液を用いて該吸着剤に吸着した吸着成分を該吸着剤から溶出することを特徴とする酵素処理物の製造法である。また、本発明は、前記の製造法で得られたホエイの酵素処理物からなる乳製品用天然系テイストフレーバーである。更にまた、本発明は、前記の乳製品用天然系テイストフレーバーで賦香された乳製品である。
【０００６】
【発明の実施の形態】以下、本発明を詳細に説明する。
本発明に用いられるホエイは特に限定はない。産業上の利用の観点からは、各種のチーズ製造の過程でカードを分離した後に廃棄物として残る水性成分（乳清）を使用するのが好ましいが、ヨーグルトおよびカゼインの製造時に生じるホエイを使用することも可能である。尚、チーズ等の製造に用いられる原料乳は、特に限定されるものではなく、例えば牛乳、山羊乳、羊乳、水牛乳、ロバ乳等が挙げられる。
前記チーズには、モッツアレラチーズ、カラージチーズ、クリームチーズ等の非熟成タイプ、ブルーチーズ、カマンベールチーズ、ゴルゴンゾーラチーズ等のカビ熟成タイプ、パルメザンチーズ、ゴーダチーズ、チェダーチーズ等の細菌熟成タイプが挙げられる。
またホエイには、加工したホエイ粉末、ホエイ蛋白質濃縮物（ＷＰＣ）、ホエイ蛋白質分離物（ＷＰＩ）等の各溶液も用いられる。
更に、牛乳・脱脂乳を４０〜５０℃に加温後、ＵＦ膜（例えば分画分子量５万）で濃縮したプレチーズに乳酸菌を添加して発酵させるナチュラルチーズの製造過程において、前記ＵＦ膜を通過したホエイがある。通常の前記のチーズホエイは、使用する乳酸菌の種類や発酵程度、チーズの種類等によって、得られるホエイの品質が変動することがあるが、このＵＦ膜通過ホエイは、品質が安定している為、好ましく用いることができる。
以上は、動物性ホエイを例示したが、豆乳等の植物性ホエイも用いることができる。
【０００７】本発明に用いられる蛋白質分解酵素は、プロテアーゼまたはペプチターゼとも呼ばれ、ペプチド結合の加水分解反応を触媒する酵素の総称である。この酵素には、セリンプロテアーゼ、シスチンプロテアーゼ、アスパルティックプロテアーゼ、金属プロテアーゼなどのエンドペプチダーゼおよびアミノペプチダーゼ、ジペプチダーゼ、ジペプジルアミノペプチダーゼ、ジペプジルカルボキシペプチダーゼ、セリンカルボキシペプチダーゼ、金属カルボキシペプチダーゼなどのエキソプチダーゼが挙げられる。これらの酵素は大部分が市販されており、容易に入手が可能である。例えば、オリエンターゼＯＮＳ、オリエンターゼ２０Ａ、オリエンターゼ９０Ｎ、オリエンターゼ１０ＮＬ、ヌクレイシン（以上、阪急バイオインダストリー社製）、トリプシン、フレーバーザイム１，０００Ｌ、アルカラーゼ２．４Ｌ、ニュートラーゼ０．５Ｌ（以上、ノボノルディスクバイオインダストリー社製）、コクラーゼＰ（三共社製）、パパインＷ−４０、ブロメラインＦ、プロレザー、パンクレアチンＦ、プロテアーゼＭ「アマノ」、プロテアーゼＡ「アマノ」、プロテアーゼＮ「アマノ」、プロテアーゼＰ「アマノ」、ウマミザイムＧ、ヌクレアーゼ「アマノ」（以上、天野エンザイム社製）、ビオプラーゼＳＰ−１５ＦＧ、パパイン、デナチームＡＰ、デナプシン１０Ｐ（以上、ナガセケムテックス社製）、プロチンＡＹ−１０、プロチンＮＹ−１０、サモアーゼＹ−１０（大和化成社製）などが挙げられる。
本発明においては、蛋白質分解酵素に加えて乳糖分解酵素を併用するのが好ましい。乳糖分解酵素は、ラクターゼあるいはβガラクトシダーゼとも呼ばれ、乳糖の加水分解反応を触媒する酵素の総称である。この酵素は市販されているので、容易に入手が可能である。例えば、ラクターゼＦ（天野エンザイム社製）、ラクトレスＬ−３、ラクトレスＬ−１０（以上、大和化成社製）などが挙げられる。
【０００８】蛋白質分解酵素は単独でも用いられるが、２種以上組み合わせて用いるのが良い。特に好ましくは、パンクレアチンＦ、トリプシン等の動物由来の酵素、ブロメラインＦ、パパイン等の植物由来の酵素およびウマミザイムＧ、プロテアーゼＭ等の微生物由来の酵素をそれぞれ少なくとも１つを含む３種以上の酵素を組み合わせて用いるのが、うま味、コク味およびボリューム感が増大する点で良い。また、乳糖分解酵素の併用は、すっきりとした甘味及びすっきりとしたコク味が向上する点で良い。また酵素は、一度に添加しても良いが、２￣３回に分けて添加し、酵素反応を行っても良い。
【０００９】蛋白質分解酵素の使用量は、酵素の種類あるいは酵素活性などによって異なるが、ホエイ中の蛋白質１ｇに対して一般に約１００ｕｎｉｔ〜約５００万ｕｎｉｔ、好ましくは約１，０００ｕｎｉｔ〜約１００万ｕｎｉｔの範囲内を例示することができる。また、併用する乳糖分解酵素の使用量は、ホエイ中の乳糖１ｇに対して一般に約０〜約１万ｕｎｉｔ、好ましくは約０〜約１，０００ｕｎｉｔであり、また蛋白質分解酵素ｕｎｉｔに対しては、約０〜約１０ｕｎｉｔ％、好ましくは約０〜約０．１ｕｎｉｔ％の範囲内を例示することができる。
【００１０】ホエイを前記の酵素で分解処理する場合、ホエイと酵素とを混合するが、これらの混合順序は特に限定されない。ホエイはそのまま、あるいは濃縮したものなどあらゆる形態で用いられ、特に限定はされない。酵素処理条件は、温度、約２０℃〜約６０℃、処理時間、約１時間〜約２４時間が適当である。なお、ＰＨ条件も酵素反応が進行する限り特に限定されないが、好ましい範囲としてＰＨ約４〜９が挙げられる。前記酵素処理において、ホエイは酵素の作用を受けてペプチド、遊離アミノ酸等に分解される。酵素処理終了後、酵素処理液は、例えば７５〜１００℃に加熱して酵素を失活させることが好ましい。得られた酵素処理液は、濾過、遠心分離などの方法により変性蛋白質などの固形物から分離される。
【００１１】また、本発明に用いられる吸着剤には、活性炭、カーボンブラック、珪藻土、多孔性重合樹脂またはシリカゲル等が挙げられるが、これらの中でも多孔性重合樹脂が好ましい。多孔性重合樹脂としては、例えば、イオン交換樹脂や無官能基型合成吸着樹脂が挙げられるが、これらの中でも無官能基型合成吸着樹脂が好ましい。イオン交換樹脂としては、強酸性と弱酸性の陽イオン交換樹脂並びに強塩基性と弱塩基性の陰イオン交換樹脂が挙げられる。また、無官能基型合成吸着樹脂としては、スチレン・ジビニルベンゼン系とメタクリル酸エステル系等がある。本発明の酵素処理物およびフレーバーを好ましく得るのに用いられる市販の無官能基型合成吸着樹脂としては、ダイヤイオンＨＰ、ＳＰシリーズやアンバーライトＸＡＤシリーズ等が挙げられる。
尚、限外濾過やゲル濾過等は吸着・脱着の原理でなく、細孔の通過速度の原理が働いているので、本発明の吸着剤には該当しない。
【００１２】これらの吸着剤とホエイ酵素処理液を接触させる方法としては特に限定はなく、例えばカラムに吸着剤を充填し、ホエイ酵素処理液を通液させる方法（以下、カラム法ともいう）あるいはタンクにホエイ酵素処理液と吸着剤とを入れ攪拌して接触させる方法（以下、バッチ法ともいう）等がある。しかしながら繰り返し使用できる点からカラム法が好ましい。前記吸着剤とホエイ酵素処理液を接触させる場合の温度は、特に限定はないが約２５℃以下が好ましく、ホエイ酵素処理液は水で希釈して用いても良い。
【００１３】更に、カラム法でのホエイ酵素処理液の通液速度は、空間速度ＳＶ＝１〜２００の範囲が好ましい。なお、ＳＶとは、１時間に樹脂容積の何倍の容量の処理物を流すかを示した値である。必要により上部から加圧あるいは下部から吸引しても良いが、このときの加圧は１平方センチ当たり１ｋｇ、減圧の場合は１００ｍｍＨｇを限度とするのが、製造上好ましい。また、バッチ法の場合、吸着剤とホエイ酵素処理液との接触時間は、吸着剤の種類と量等によって異なるが一般的には１〜５時間で十分である。吸着剤の使用量はホエイ酵素処理液の固形分重量の１／２〜１／２０が好ましい。
【００１４】ホエイ酵素処理液との接触が終了した吸着剤は、バッチ法においては濾過等でホエイ酵素処理液と分離された後、水で洗浄され、カラム法においても水を通液することにより洗浄される。洗浄時の水の使用量は吸着剤量の２〜１０倍程度である。この洗浄は、蛋白質等の成分を除去して、製造時の取り扱い上の操作性を確保するために行われる。
【００１５】次に吸着剤に吸着した吸着成分は溶液中に溶出されて本発明の酵素処理物またはフレーバーが得られる。吸着成分を溶出するのに用いられる溶液は、エチルアルコールを主とする溶液であれば特に限定はないが、中でもエチルアルコールと水との混合溶液、該溶液とプロピレングリコールまたはグリセリンとの混合溶液が好ましい。特に好ましくは、エチルアルコールと水との混合溶液で、エチルアルコールの重量％（以下、％ともいう）が２０〜９９％の溶液、好ましくは３０〜６０％の溶液を用いるのが良い。
【００１６】エチルアルコール溶液の溶出液の使用量には特に限定はないが、通液したホエイ酵素処理液量の１０分の１乃至３００分の１が好ましい。
以上からわかるように、吸着剤に吸着した吸着成分を該吸着剤から溶出する方法は、疎水クロマトグラフィー（逆相系クロマトグラフィーの一種とも理解される）が好ましく、特に無官能基型合成吸着樹脂を用いた疎水クロマトグラフィーが好ましい。
得られた本発明の酵素処理物およびフレーバーは、香気を有する茶黄色の液体であり、一般的には、これらの固形分は０．５〜６．０％、蛋白質は０．４〜４．０％の値を示す。
【００１７】本発明の酵素処理物は、苦みや蛋白分解物特有の不快な味が無くなると共に、非常に優れた低アレルギー性を示し、一般食品、栄養食品等、アレルギー患者用の食品素材として広く用いることができる。食品素材としての利用法、および添加量等には、特に制限が無く、公知の方法および添加量を採用することができる。
また、本発明のフレーバーは、苦みや蛋白分解物特有の不快な味が無くなると共に、乳製品にコク味やボリューム感などを付与すると共に、フレーバーのトップをおしあげるエンハンス効果をも併せて兼ね備え、更に脱脂粉乳臭のマスキングに優れた乳製品用フレーバーである。
本発明の製造法によれば、吸着剤に吸着した苦みや蛋白分解物特有の不快な味は溶出せず、前記の有用な酵素処理物およびテイストフレーバー部分のみを溶出させることができ、極めて有用な技術である。
【００１８】本発明の、フレーバーは、これを単独で使用することも可能であり、またミルク、クリーム、バターおよびチーズ等の乳製品フレーバーに０．１〜１０％配合して用いることが好ましい。
【００１９】本発明のフレーバーは、単独でまたは他の香料と組み合わせて、乳製品に用いられる。ここで乳製品とは、クリーム類（生クリーム、植物性油脂を含有するホイップクリーム、クリームソース等を含む）、バター類（植物性油脂を含有するデイリースプレッド等を含む）、チーズ類（プロセスチーズ、チーズフード等を含む）、アイスクリーム類（ラクトアイス等を含む）、濃縮乳類（脱脂濃縮乳、全脂濃縮乳、加糖脱脂濃縮乳等を含む）、全粉乳、脱脂粉乳、クリームパウダー類、調整粉乳類、牛乳、発酵乳、乳酸菌飲料、乳飲料及び、これら乳製品等を主要原料とする食品をいう。
前記乳製品への本発明のフレーバー配合量としては、乳製品の種類や剤形によって異なるが、例えば０．００００１〜１％、好ましくは０．０００１〜０．１％の範囲を例示することができる。また、本発明のフレーバー中の固形分換算での配合量として０．００１〜１００ｐｐｍ、好ましくは０．０１〜１０ｐｐｍの範囲を例示することができる。
【００２０】
【実施例】以下、実施例によりこの発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれにより制限されるものではない。
【００２１】試験例１  推定分子量分布の測定方法
本発明の酵素処理物およびフレーバーの推定分子量分布は、以下のような条件でゲル濾過ＨＰＬＣを行い、そのクロマトグラムを描いた。そのゲル濾過カラムは、ＴＳＫ−ＧＥＬ  Ｇ２０００ＳＷＸＬ（東ソー社製。内径７．８ｍｍ、長さ３００ｍｍ）を用いて、０．１％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）を含む４５％アセトニトリルの移動相により流速０．５ｍｌ／分で溶出した。検出器は、紫外分光光度計を用いて、２１０ｎｍの吸光度で検出した。データ解析は、ＧＰＣソフトウエア（島津製作所製）を使用した。分子量マーカーとしてβ―ラクトグロブリン、α―ラクトアルブミン、ヒトインシュリン、バシトラシン、グルタチオンおよびグリシンの分子量（対数目盛）と溶出時間から得られた分子量分布の検量線から、分子量１０，０００、５，０００、１，０００、５００および１００に相当する溶出時間を求めた。
【００２２】試験例２    アレルギー性の評価（ＥＬＩＳＡ  による残存抗原性の評価）
原料ホエイは０．５Ｍ炭酸ナトリウム（ｐＨ９．６）を用い、１０−２から１０−９まで１０  倍ずつ階段希釈した。本発明のフレーバーは同様に１０−１から１０−４まで１０倍ずつ階段希釈した。これらはイムノマイクロプレート（９６ウエル、Ｎｕｎｃ社製）に１００μｌずつ入れ、３７℃で１時間放置した。ウエルを蒸留水で２回洗浄した後、２％フィッシュゼラチンを含むＰＢＳ（−）を３００μｌずつウエルに加え、３７℃で１時間放置した。ウエルを蒸留水で１回洗浄した後、０．０２％Ｔｗｅｅｎ２０を含むＰＢＳ（−）で１０，０００  倍希釈したウサギ抗乳清蛋白抗血清（Ｓｉｇｍａ社製）を１００μｌずつ入れ、３７℃で２時間放置した。ウエルを０．０２％Ｔｗｅｅｎ２０を含むＰＢＳ（−）で１０回洗浄した後、０．０２％Ｔｗｅｅｎ２０を含むＰＢＳ（−）で１，０００  倍希釈した西洋ワサビパーオキシダーゼ標識ヤギ抗ウサギＩｇＧ抗体（Ｓｉｇｍａ社製）を１００μｌずつ入れ、３７℃で１時間放置した。ウエルを０．０２％Ｔｗｅｅｎ２０を含むＰＢＳ（−）で１０回洗浄した後、０．００６％過酸化水素を含む０．２Ｍクエン酸ナトリウム（ｐＨ４．０）、蒸留水、６ｍｇ／ｍｌアミノ−ビスエチルベンゾチアゾリンスルホン酸を１０：９：１の割合で混合した発色液を１００μｌずつ入れ、３７℃で５分間放置した。１．５％シュウ酸を１００μｌずつ入れ、発色を停止した後、４０５ｎｍにおける吸光度を測定した。残存抗原性は以下のように求めた。原料ホエイの１０−３から１０−５までの吸光度より得られた検量線を用い、本発明のフレーバーの１０−１における吸光度に相当するホエイ濃度を求め、その濃度比を残存抗原性とした。
【００２３】実施例１
固形分５．５％、蛋白質０．４％、糖分３．５％、ＰＨ６．２のＵＦ膜通過ホエイ（オーム乳業製。殺菌済み）４ｋｇを５Ｌコルベンに仕込んで、攪拌しながら５０℃になるまで加温した。なお、攪拌は、１００ｒｐｍで行った。そのコルベンにブロメラインＦ（天野エンザイム製）０．３ｇ（２４万ｕｎｉｔ）、トリプシン（ノボザイム製）０．３ｇ（３７万ｕｎｉｔ）、ウマミザイムＧ（天野エンザイム製）０．３ｇ（２０ｕｎｉｔ）およびラクターゼＦ（天野エンザイム製）０．０３ｇ（３００ｕｎｉｔ）を加えて、１５時間の酵素反応を行った。その後、熱失活して、その温度を室温まで下げた。
三菱化学製ダイヤイオンＨＰ−２０充填剤４０ｍｌを内径３．５ｃｍ、高さ５２ｃｍのガラスカラムに充填し、イオン交換水、９５％エチルアルコール（９５ＡＬ、以下同様）、イオン交換水の順で各々２００ｍｌづつ流して、充填剤を洗浄した。次に、上記の酵素分解物を空間速度ＳＶ＝５０でカラムに通液した後、イオン交換水１２０ｍｌで洗浄し、５９ＡＬ１２０ｍｌで吸着成分を溶出させた。吸着成分の採取は、溶出液の匂いや淡黄色への着色し始めるポイントを参考にして開始して、本発明のホエイの酵素処理物であり、また本発明の乳製品用フレーバーである溶出液４０ｇを得た。
本酵素処理物中の固形分は１．４％、蛋白質は０．９％であった。本酵素処理物のアレルギー性を評価したところ、残存抗原性はホエイを１００として０．０００３５と極めて大きく減少していた。
【００２４】得られた本発明の酵素処理物であり、また本発明のフレーバーのゲル濾過ＨＰＬＣによるクロマトグラムを図１に示す。図１から、分子量１，０００〜５，０００と分子量５００〜１，０００と分子量１００〜５００の比率は、３：２：５であり、その平均分子量は４００であった。
【００２５】比較例１
前記ＵＦ膜通過ホエイを、実施例１と全く同じ条件で酵素反応を行い、その後、熱失活して、その温度を室温まで下げてホエイの酵素処理液を得た。
【００２６】比較例２
前記ＵＦ膜通過ホエイを、実施例１と全く同じ条件で酵素反応を行って得た酵素処理液を、実施例１と全く同じ条件でガラスカラムに通液して、ホエイ酵素処理液のカラム通過液を得た。
【００２７】実施例２
前記ＵＦ膜通過ホエイ２０ｋｇを３０Ｌタンクに仕込んで、攪拌しながら５０℃になるまで加温した。なお、攪拌は、１２０ｒｐｍで行った。そのタンクにブロメラインＦ（天野エンザイム製）６ｇ（４８０万ｕｎｉｔ）、プロテアーゼＭ（天野エンザイム製）６ｇ（３万３０００ｕｎｉｔ）およびウマミザイムＧ（天野エンザイム製）６ｇ（４２０ｕｎｉｔ）を加えて、４時間の酵素反応を行った。その後、熱失活して、その温度を室温まで下げた。
三菱化学製ダイヤイオンＨＰ−２０充填剤２００ｍｌを９５ＡＬ２００ｍｌに浸せき後、内径４．８ｃｍ、高さ２５ｃｍのステンレスカラムに充填し、９５ＡＬ４００ｍｌ、精製水６００ｍｌを流して、充填剤を洗浄した。次に、上記の酵素分解物を空間速度ＳＶ＝４８でカラムに通液した後、精製水６００ｍｌで洗浄し、３０ＡＬ６００ｍｌで吸着成分を溶出させ、実施例１と同様にして、本発明のホエイの酵素処理物であり、また本発明のフレーバー２２０ｇを得た。
【００２８】実施例３
前記ＵＦ膜通過ホエイ２ｋｇを３Ｌコルベンに仕込んで、攪拌しながら５０℃になるまで加温した。なお、攪拌は、１１０ｒｐｍで行った。そのコルベンにブロメラインＦ（天野エンザイム製）０．６７ｇ（５０万ｕｎｉｔ）を加えて１時間反応し、更に、ウマミザイムＧ（天野エンザイム製）０．６７ｇ（４５ｕｎｉｔ）を加えて１時間反応し、更に、ラクターゼＦ（天野エンザイム製）０．０７ｇ（７００ｕｎｉｔ）を加えて、１時間の酵素反応を継続した。その後、熱失活して、その温度を室温まで下げた。三菱化学製ダイヤイオンＨＰ−２０充填剤２０ｍｌを内径２．２ｃｍ、高さ５２ｃｍのガラスカラムに充填し、イオン交換水、９５ＡＬ、イオン交換水の順で各々１００ｍｌづつ流して、充填剤を洗浄した。次に、上記の酵素分解物を空間速度ＳＶ＝４９でカラムに通液した後、イオン交換水６０ｍｌで洗浄し、５９ＡＬ６０ｍｌで吸着成分を溶出させ、実施例１と同様にして、本発明のフレーバー２２ｇを得た。
【００２９】実施例４
実施例１で得られたテイストフレーバーとミルクフレーバーの混合物（１：９９の組成）を、１０％脱脂粉乳液に０．１％賦香して３名のパネリストで評価した結果、フレーバーのトップを押し上げるエンハンス効果とボリューム感やコク味を付与する呈味改善に優れていた。
【００３０】実施例５
実施例１で得られた本発明のテイストフレーバーを用いて、下記表１に示す処方によりラクトアイスを調製して、本発明のフレーバー無添加系を対照にして、５名でパネルテストを行った。
【００３１】
【表１】
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この結果から、本発明のフレーバーはラクトアイスに対して乳の底味が広がり、ボリューム感に優れた呈味性を付与すると同時に、脱脂粉乳のマスキング効果にも優れている事が分かった。
【００３２】なお、比較例１で得たホエイの酵素処理液のみを、表１に示す処方中の実施例１のフレーバーに代えて使用した場合、力価が弱く改善効果は全く認められなかった。また、苦みがあり、丸みやまろやかさを付加することができなかった。また、比較例２のホエイ酵素処理液のカラム通過液を表１に示す処方中の実施例１のフレーバーに代えて使用した場合、呈味、香気共に力価が弱い為に改善効果が余り認められなかった。更に、比較例１および比較例２は、水溶液の為に菌発生の危険があって、殺菌する必要があるなどの問題があった。
【００３３】実施例６
実施例２で得られた本発明のテイストフレーバーを用いて、下記表２に示す処方によりホイップクリームを調整し、ホイップマシーンにて気泡させコントロールを対照にして、１０名でのパネルテストを行った。その結果から、添加量が多くなるにしたがって、ホイップクリームに対して、乳のコクが強く感じられ、ボリューム感が増していることが判明した。更に、０．０００１％（１ｐｐｍ）の少量添加においても、全てのパネラーが違いを認識した。
【００３４】
【表２】
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【００３５】
【発明の効果】
本発明の製造法によって、優れたホエイの酵素処理物を簡便な手段で得ることができる。得られた酵素処理物は、苦みや蛋白分解物特有の不快な味が無くなると共に非常に優れた低アレルギー性を示し、一般食品、栄養食品等、アレルギー患者用の食品素材として広く用いることができる。
また本発明のフレーバーは、乳製品にコク味やボリューム感などを付与すると共に、フレーバーのトップをおしあげるエンハンス効果をも併せて兼ね備え、更に脱脂粉乳臭のマスキングに優れた乳製品用フレーバーである。
更に、本発明の方法によれば、食品廃棄物のリサイクル利用に寄与しつつ、付加価値の高い酵素処理物または乳製品用フレーバーが安価にかつ比較的簡便に得られる。
【００３６】
【図面の簡単な説明】
【図１】図１は、実施例１で得た本発明の酵素処理物であり、また本発明のフレーバーの推定分子量分布を測定するためのクロマトグラムを示した図である。
【図１】
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