(57)【要約】【課題】殺菌した乳酸菌を多量に含有した乳酸菌生成物を得ることを目的にする。【解決手段】複数種の乳酸菌を混合培養する。そして、この混合培養した培養液中に含まれる乳酸菌を殺菌する。乳酸菌を殺菌したら、この培養液をろ過して、ろ過後の残渣を得るようにしたものである。あるいは、複数の乳酸菌を混合培養したら、これをろ過し、ろ過後の残渣に含まれる乳酸菌を殺菌するようにしたものである。したがって、いずれにしても上記残渣には死滅した乳酸菌が多量に含まれるようになる。【選択図】　なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
複数種の乳酸菌を混合培養した培養液をろ過するとともに、この乳酸菌をろ過前に殺菌するかあるいはろ過後に殺菌して得た残渣からなる乳酸菌生成物。
【請求項２】
乳酸菌として、連鎖球菌属、乳酸桿菌属、ビフィズス菌属を用いた請求項１記載の乳酸菌生成物。
【請求項３】
混合培養は、乳酸菌の少なくとも２種類を混合する第１次培養と、少なくともこの第１次培養した第１次培養菌を含む第２次培養と、少なくともこの第２次培養した第２次培養菌を含む第３次培養とを含む請求項１記載の乳酸菌生成物。
【請求項４】
複数種の乳酸菌を混合培養するとともに、その培養液中の乳酸菌を殺菌してからそれを自然ろ過し、そのろ過後の残渣をさらに圧搾した残渣からなる請求項１〜４のいずれかに記載の乳酸菌生成物。
【請求項５】
複数種の乳酸菌を混合培養し、その培養液を自然ろ過して得た残渣を圧搾して乾燥させ、それを粉末化する乳酸菌生成物の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
この発明は、複数の乳酸菌を培養して得られる乳酸菌生成物とその製造方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
乳酸菌は、腸内で腸内微生物の生育に大きな影響を与え、腸内環境を良好に保つことが知られている。この乳酸菌は人の腸内にいわゆる善玉菌として生息し、上記腸内環境を維持している。したがって、この乳酸菌数が低下したり、活性が低下したりすることによって上記腸内環境が崩れる原因になる。
そこで、近年乳酸菌の生菌を腸内に補給するために、その生菌を含むヨーグルトや飲料などが販売されている。そして、これらのヨーグルトや飲料を直接体内に取り入れて、腸内の乳酸菌量を増加させるようにしている。
なお、本願出願人は、先行技術調査をおこなうことなく、公知の技術を基に本願発明を開発したので、本件に係る先行技術文献情報はない。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】
しかし、上記生菌を含むヨーグルトや飲料などの食料品を摂取したとしても、その生菌が腸に到達するまでに、胃酸で分解されたり、消化されたりして、生菌のほとんどが死滅してしまう。つまり、ヨーグルトや飲料などから生菌を摂取したとしても、生きたまま腸に到達する乳酸菌はほんのわずかな量になってしまう。
したがって、乳酸菌による期待通りの整腸作用が得られないことが多い。
【０００４】
また、上記のように生菌の死滅を考慮すると、上記乳酸菌を含む食品を大量に摂取しなければならず、十分な整腸作用が得られない。しかしながら、ヨーグルトなどの飲食単位（ヨーグルト一瓶）に含まれている乳酸菌の量に限りがあるので、大量の乳酸菌を一度に摂取することは、かなり難しくなる。
この発明の目的は、発想を全く転換して、死滅した乳酸菌の機能に着目した乳酸菌生成物を提供することである。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
第１の発明は、複数種の乳酸菌を混合培養した培養液をろ過するとともに、この乳酸菌をろ過前に殺菌するかあるいはろ過後に殺菌して得た残渣からなる点に特徴を有する。
第２の発明は、乳酸菌として、連鎖球菌属、乳酸桿菌属、ビフィズス菌属を用いた点に特徴を有する。
【０００６】
第３の発明における混合培養は、乳酸菌の少なくとも２種類を混合する第１次培養と、少なくともこの第１次培養した第１次培養菌を含む第２次培養と、少なくともこの第２次培養した第２次培養菌を含む第３次培養とを含む点に特徴を有する。
【０００７】
第４の発明は、複数種の乳酸菌を混合培養するとともに、その培養液中の乳酸菌を殺菌してからそれを自然ろ過し、そのろ過後の残渣をさらに圧搾した残渣からなる点に特徴を有する。
第５の発明は、複数種の乳酸菌を混合培養し、その培養液を自然ろ過して得た残渣を圧搾して乾燥させ、それを粉末化する点に特徴を有する。
【０００８】
【発明の実施の形態】
本願出願人は、前記死滅した乳酸菌の機能に着目し、この乳酸菌生成物が免疫細胞の活性化に役立つものと考えた。例えば、食物は吸収されやすい低分子まで消化分解されて腸管上皮細胞から吸収される。しかし、殺菌された乳酸菌は、体内では消化分解されないで、細胞のまま腸まで到達する。このとき、腸内のパイエル板が、殺菌された乳酸菌を異物として認識し、そのまま取り込む。このようにしてパイエル板から異物を取り込むと、生体はその異物に対して、必要に応じて抗体を産生したり、白血球を活性化させたりして、防御機能を発揮する。
【０００９】
そこで、先ず、複数の乳酸菌を次のようにして継代培養したものである。すなわち、３２℃で１２時間培養した後、３７℃で１２時間培養し、さらにそれを４０℃で２４時間培養したものである。
上記のようにした乳酸菌の培養液を、高圧蒸気滅菌法を用いて６５℃で４０分間加熱して、最終培養液中の乳酸菌を殺菌した。そして、乳酸菌を殺菌した培養液を、自然ろ過してろ過後の残渣を得るとともに、その残渣を１０ｋｇのウエイトをかけて圧搾した。
【００１０】
このようにして得た残渣を、さらに１．２トンの圧力を作用させて、最終の残渣を得るとともに、それをスライスしてから乾燥させ、この乾燥物を粉砕し、６０メッシュほどの粉末にした。そして、それを油で練るとともにソフトカプセルに封入した。
このようにして得られた乳酸菌生成物には、多量のアミノ酸が検出された。
【００１１】
なお、上記複数の乳酸菌としては、次のものを用いた。
上記乳酸菌として連鎖球菌属、乳酸桿菌属、ビフィズス菌属を用いた。上記連鎖球菌属としては、Ｌ．ラクティス（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ　ｌａｃｔｉｓ　ｓｕｂｓｐ．ｌａｃｔｉｓ）、Ｌ．クレモリス（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ　ｌａｃｔｉｓ　ｓｕｂｓｐ．ｃｒｅｍｏｒｉｓ）、Ｅ．フェカリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ　ｆｅｃａｌｉｓ）、Ｓ．サーモフィラス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ　ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）を用いた。乳酸桿菌属としては、Ｌ．カゼイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ　ｃａｓｅｉ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ）、Ｌ．アシドフィラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ　ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ）、Ｌ．ファーメンタム（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ　ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ）、Ｌ．ブルガリクス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ）、Ｌ．ガセリ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ　ｇａｓｓｅｒｉ）、Ｌ．デルブリッキ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ　ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ）、Ｌ．プランタラム（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ　ｐｌａｎｔａｒｕｍ）を用いた。ビフィズス菌属としては、Ｂ．ロンガム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｌｏｎｇｕｍ）、Ｂ．ビフィダム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｂｉｆｉｄｕｍ）、Ｂ．ブレーベ（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｂｒｅｖｅ）、Ｂ．インファンティス（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｉｎｆａｎｔｉｓ）、Ｂ．アドレセンス（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ａｄｏｌｅｓｃｅｎｔｉｓ）を用いた。
【００１２】
【実施例】
この実施例では、乳酸菌として連鎖球菌属、乳酸桿菌属、ビフィズス菌属を用いた。また、上記連鎖球菌属としては、Ｌ．ラクティス（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ　ｌａｃｔｉｓ　ｓｕｂｓｐ．ｌａｃｔｉｓ）、Ｌ．クレモリス（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ　ｌａｃｔｉｓ　ｓｕｂｓｐ．ｃｒｅｍｏｒｉｓ）、Ｅ．フェカリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ　ｆｅｃａｌｉｓ）、Ｓ．サーモフィラス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ　ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）を用いた。乳酸桿菌属としては、Ｌ．カゼイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ　ｃａｓｅｉ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ　ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ）、Ｌ．アシドフィラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ　ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ）、Ｌ．ファーメンタム（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ　ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ）、Ｌ．ブルガリクス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ　ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ）、Ｌ．ガセリ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ　ｇａｓｓｅｒｉ）、Ｌ．デルブリッキ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ　ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ）、Ｌ．プランタラム（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ　ｐｌａｎｔａｒｕｍ）を用いた。ビフィズス菌属としては、Ｂ．ロンガム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｌｏｎｇｕｍ）、Ｂ．ビフィダム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｂｉｆｉｄｕｍ）、Ｂ．ブレーベ（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｂｒｅｖｅ）、Ｂ．インファンティス（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｉｎｆａｎｔｉｓ）、Ｂ．アドレセンス（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ａｄｏｌｅｓｃｅｎｔｉｓ）を用いた。
【００１３】
これら各乳酸菌は次のようにして継代培養したものである。すなわち、各乳酸菌を、３２℃で１２時間培養した後、３７℃で１２時間培養し、さらに４０℃で２４時間培養した。そして、これら継代培養したものを、すぐに共生培養しないときには、乳酸菌を５℃で冷蔵保存しておいた。
【００１４】
上記のようにして継代培養した各乳酸菌を用いて、図１に示す組み合わせの下で共生培養した。なお、この組み合わせ表に基づいて、各菌には１〜３５のナンバーを付したので、以下には、共生培養のステップをこのナンバーを用いて説明する。
【００１５】
Ｎｏ．１〜３５の各乳酸菌を用いて、８つのバルクスターターを生成したが、次に、これら第１〜第８のバルクスターターの生成ステップを説明する。
第１のバルクスターターは、Ｎｏ．１〜４の乳酸菌を用いて、これらを第１次〜第３次共生培養して得たものである。上記第１次共生培養は、Ｎｏ．１のＥ．フェカリスとＮｏ．２のＬ．カゼイを用いて行った。
第２次共生培養は、第１次共生培養液にＮｏ．３のＬ．アシドフィラスを添加して行った。第３次共生培養は、第２次共生培養液にＮＯ．４のＬ．ガセリを添加して行った。
【００１６】
第２のバルクスターターは、Ｎｏ．５〜８の乳酸菌を用いて、これらを第１次〜第３次共生培養して得たものである。上記第１次共生培養は、Ｎｏ．５のＬ．カゼイとＮｏ．６のＳ．サーモフィラスを用いて行った。
第２次共生培養は、第１次共生培養液にＮｏ．７のＬ．ラクティスを添加して行った。第３次共生培養は、第２次共生培養液にＮＯ．８のＬ．クレモリスを添加して行った。
【００１７】
第３のバルクスターターは、Ｎｏ．９〜１２の乳酸菌を用いて、これらを第１次〜第３次共生培養して得たものである。上記第１次共生培養は、Ｎｏ．９のＬ．カゼイとＮｏ．１０のＥ．フェカリスを用いて行った。
第２次共生培養は、第１次共生培養液にＮｏ．１１のＬ．アシドフィラスを添加して行った。第３次共生培養は、第２次共生培養液にＮＯ．１２のＢ．ロンガムを添加して行った。
【００１８】
第４のバルクスターターは、Ｎｏ．１３〜１６の乳酸菌を用いて、これらを第１次〜第３次共生培養して得たものである。上記第１次共生培養は、Ｎｏ．１３のＬ．デルブリッキとＮｏ．１４のＬ．ブルガリクスを用いて行った。
第２次共生培養は、第１次共生培養液にＮｏ．１５のＬ．アシドフィラスを添加して行った。第３次共生培養は、第２次共生培養液にＮＯ．１６のＢ．ビフィダムを添加して行った。
【００１９】
第５のバルクスターターは、Ｎｏ．１７〜２１の乳酸菌を用いて、これらを第１次〜第３次共生培養して得たものである。上記第１次共生培養は、Ｎｏ．１７のＢ．ロンガムとＮｏ．１８のＬ．アシドフィラスとの組み合わせと、Ｎｏ．１９のＬ．カゼイとＮｏ．２０のＢ．ブレーベとの組み合わせを用いて行った。
第２次共生培養は、上記２組の第１次共生培養液同士をさらに共生培養して行ったものである。第３次共生培養は、第２次共生培養液にＮｏ．２１のＢ．インファンティスを添加して行った。
【００２０】
第６のバルクスターターは、Ｎｏ．２２〜２６の乳酸菌を用いて、これらを第１次〜第３次共生培養して得たものである。上記第１次共生培養は、Ｎｏ．２２のＢ．ロンガムとＮｏ．２３のＢ．インファンティスとの組み合わせと、Ｎｏ．２４のＢ．ビフィダムとＮｏ．２５のＬ．ファーメンタムとの組み合わせを用いて行った。
第２次共生培養は、上記２組の第１次共生培養液同士をさらに共生培養して行ったものである。第３次共生培養は、第２次共生培養液にＮｏ．２６のＢ．ブレーベを添加して行った。
【００２１】
第７のバルクスターターは、Ｎｏ．２７〜３１の乳酸菌を用いて、これらを第１次〜第３次共生培養して得たものである。上記第１次共生培養は、Ｎｏ．２７のＢ．ロンガムとＮｏ．２８のＳ．サーモフィラスとの組み合わせと、Ｎｏ．２９のＢ．ブレーベとＮｏ．３０のＬ．プランタラムとの組み合わせを用いて行った。
第２次共生培養は、上記２組の第１次共生培養液同士をさらに共生培養して行ったものである。第３次共生培養は、第２次共生培養液にＮｏ．３１のＢ．ビフィダムを添加して行った。
【００２２】
第８のバルクスターターは、Ｎｏ．３２〜３５の乳酸菌を用いて、これらを第１次〜第３次共生培養して得たものである。上記第１次共生培養は、Ｎｏ．３２のＥ．フェカリスとＮｏ．３３のＢ．ビフィダムを用いて行った。
第２次共生培養は、第１次共生培養液にＮｏ．３４のＢ．ブレーベを添加して行った。第３次共生培養は、第２次共生培養液にＮｏ．３５のＢ．アドレセンスを添加して行った。
以上第１〜第８のバルクスターターをさらに最終共生培養して最終共生培養液を生成した。
【００２３】
なお、上記第１〜第３次共生培養および最終培養において、培地と培養条件は次の通りである。
第１次共生培養は、半流動培地を用い、３７℃でｐＨ４．６になるまで約６〜１２時間行った。第２次共生培養は、半流動培地を用い、３７℃でｐＨ４．６になるまで約４〜１０時間行った。第３次共生培養では、培地として豆乳と脱脂乳とを１：１で混合し、この混合液にブドウ糖０．５％（ｗ／ｖ）、酵母エキス０．５％（ｗ／ｖ）を添加したものを用いた。そして、３７℃でｐＨ４．５５になるまで約６〜１０時間培養を行った。
【００２４】
最終培養は、豆乳：脱脂乳を５：１の割合で混合し、この混合液に酵母エキス０．２％（ｗ／ｖ）、ブドウ糖０．５％（ｗ／ｖ）に調整した培地を用い、最初に３２℃で２４時間培養し、次に４０℃で４８時間培養し、さらに３７℃で２４時間培養し、最後に５３℃で１８時間培養した。
【００２５】
上記最終培養液は、高圧蒸気滅菌法を用いて６５℃で４０分間加熱し、最終培養液中の乳酸菌を殺菌した。このようにして殺菌した培養液を、３μｍメッシュのろ紙を用いてろ過した後、それに１０ｋｇのウエイトをかけてさらに搾った。そして、このろ過した残渣を、１．２トンの圧力を作用させて圧搾して固形化した。このように固形化した残渣を、さらにスライスした後、乾燥し、それを粉末精製機にかけて粒子が６０メッシュの粉末を得た。
上記のようにして得た粉末を油と混練して、それをソフトカプセルに封入した。
【００２６】
乳酸菌の生成物である上記粉末の成分を調べたところ、表１に示すようにアミノ酸が多量に含まれていることが判明した。これは、上記乳酸菌の周囲に培養液中のアミノ酸が付着したものと推測できる。なお、試験結果は、財団法人　日本食品分析センターに依頼したものである。
このアミノ酸の含有量は驚異的であり、人体に対しても好影響を及ぼすものと推測できる。なぜなら、上記アミノ酸は、免疫細胞の原料として非常に重要であるとともに、これら免疫細胞がガン細胞や細菌を攻撃するために産生する一酸化炭素や免疫グロブリンにも非常に重要となるからである。
【表１】
2004135535.tif 000002
【００２７】
なお、この実施例では、最終共生培養が終わったらこれを加熱殺菌して、培養液中の乳酸菌を死滅させている。しかし、ろ過をしてから上記加熱殺菌をして、残渣に含まれる乳酸菌を殺菌するようにしてもよい。
さらに、第３次共生培養および最終共生培養の培地として豆乳を用いているが、この豆乳は脱脂豆乳であってもよい。乳酸菌の生育には脂肪分は好ましくないので、上記脱脂豆乳を用いることによって、乳酸菌の増殖に対してより好条件を維持することができる。
【００２８】
【発明の効果】
第１〜４の発明の乳酸菌生成物は、死滅した乳酸菌が主成分になるので、免疫細胞の活性化に役立つものである。すなわち、殺菌された乳酸菌は、体内では消化分解されないで、細胞のまま腸まで到達する。このとき、腸内のパイエル板が、殺菌された乳酸菌を異物として認識し、そのまま取り込む。このようにしてパイエル板から異物を取り込むと、生体はその異物に対して、必要に応じて抗体を産生したり、白血球を活性化させたりして、防御機能を発揮する。
また、アミノ酸が多量に含有されているので、そのアミノ酸が腸内細菌に対する栄養素となって、腸内細菌の活性化にも役立つことになる。
第５の発明の製造方法によれば、殺菌された乳酸菌を多く含む生成物を簡単に製造することができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】乳酸菌の共生培養の組み合わせを示した図である。
【図１】
2004135535.tif 000003