(57)【要約】【課題】ＡＮＣＡ関連血管炎への罹患またはその発病可能性を検査するためのキットおよび方法を提供すること。【解決手段】ＨＬＡ−ＤＲＢ１遺伝子の多型性を利用したＡＮＣＡ関連血管炎への罹患またはその発病可能性を検査するためのキットおよび方法。【選択図】　なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＨＬＡ−ＤＲＢ１遺伝子の多型性を検出することができる試薬を含む、ＡＮＣＡ関連血管炎への罹患またはその発病可能性を検査するためのキット。
【請求項２】
ＨＬＡ−ＤＲＢ１遺伝子の多型性がＨＬＡ−ＤＲＢ１　０９０１および／またはＨＬＡ−ＤＲＢ１　１１０１である請求項１記載のキット。
【請求項３】
ＡＮＣＡ関連血管炎が、顕微鏡的多発血管炎またはＣｈｕｒｇ−Ｓｔｒａｕｓｓ症候群である請求項１または２に記載のキット。
【請求項４】
被験者からのサンプルの核酸を用いて、ＡＮＣＡ関連血管炎への罹患またはその発病可能性を検査する方法であって、前記被験者のＨＬＡ−ＤＲＢ１遺伝子の多型性を検出することを含む、前記方法。
【請求項５】
ＨＬＡ−ＤＲＢ１遺伝子の多型性がＨＬＡ−ＤＲＢ１　０９０１および／またはＨＬＡ−ＤＲＢ１　１１０１である請求項４記載の方法。
【請求項６】
ＡＮＣＡ関連血管炎が、顕微鏡的多発血管炎またはＣｈｕｒｇ−Ｓｔｒａｕｓｓ症候群である請求項４または５に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、ＡＮＣＡ関連血管炎への罹患またはその発病可能性を検査するためキットおよび方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
ＨＬＡ−ｃｌａｓｓ　ＩＩ　抗原はヘルパーＴ細胞への抗原提示を介して抗体産生を調節しうることから、自己抗体と密接な関連を有するＡＮＣＡ関連血管炎との関連が想定される。ＡＮＣＡ関連血管炎とＨＬＡとの関連に関して、過去にいくつかの報告があり　（Ｓｐｅｎｃｅｒ　ＳＪＷ，　Ｂｕｒｎｓ　Ａ，　Ｇａｓｋｉｎ　Ｇ，　ｅｔ　ａｌ．　ＨＬＡ　ｃｌａｓｓ　ＩＩ　ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｉｅｓ　ｉｎ　ｖａｓｃｕｌｉｔｉｓ　ｗｉｔｈ　ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ　ｔｏ　ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌ　ｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃ　ａｎｔｉｇｅｎｓ．　Ｋｉｄｎｅｙ　Ｉｎｔ．　１９９２；　４１，　１０５９−１０６３．、Ｇｅｎｃｉｋ　Ｍ，　Ｂｏｒｇｍａｎｎ　Ｓ，　Ｚａｈｎ　Ｒ，　ｅｔ　ａｌ．　Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉｃ　ｒｉｓｋ　ｆａｃｔｏｒｓ　ｆｏｒ　ａｎｔｉ−ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌ　ｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃ　ａｎｔｉｂｏｄｙ　（ＡＮＣＡ）−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｓｙｓｔｅｍｉｃ　ｖａｓｃｕｌｉｔｉｓ．　Ｃｌｉｎ．　Ｅｘｐ．　Ｉｍｍｕｎｏｌ．　１９９９；　１１７，　４１２−４１７．、Ｐａｐｉｈａ　ＳＳ，　Ｍｕｒｔｙ　ＧＥ，　Ａｄ’Ｈｉａ　Ａ，　ｅｔ　ａｌ．　Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｗｅｇｅｎｅｒ’ｓ　ｇｒａｎｕｌｏｍａｔｏｓｉｓ　ｗｉｔｈ　ＨＬＡ　ａｎｔｉｇｅｎｓ　ａｎｄ　ｏｔｈｅｒ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｍａｒｋｅｒｓ．　Ａｎｎ．　Ｒｈｅｕｍ．　Ｄｉｓ．　１９９２；　５１，　２４６−２４８．、Ｈａｇｅｎ　ＥＣ，　Ｓｔｅｇｅｍａｎ　ＣＡ，　Ｄ’Ａｍａｒｏ　Ｊ，　ｅｔ　ａｌ．　Ｄｅｃｒｅａｓｅｄ　ｆｒｅｑｕｅｎｃｙ　ｏｆ　ＨＬＡ−ＤＲ１３ＤＲ６　ｉｎ　Ｗｅｇｅｎｅｒ’ｓ　ｇｒａｎｕｌｏｍａｔｏｓｉｓ．　Ｋｉｄｎｅｙ　Ｉｎｔ．　１９９５；　４８，　８０１−８０５．、Ｎａｋａｍｕｒａ　Ｙ，　Ｍａｇｕｃｈｉ　Ｓ，　Ｔａｋｉｚａｗａ　Ｍ，　ｅｔ　ａｌ．　Ｔｈｅ　ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｈｕｍａｎ　ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ　ａｎｔｉｇｅｎｓ　（ＨＬＡ）　ａｎｄ　ｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃ−ａｎｔｉｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌ　ｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃ　ａｎｔｉｂｏｄｙ　（ｃＡＮＣＡ）−ｐｏｓｉｔｉｖｅ　Ｗｅｇｅｎｅｒ’ｓ　ｇｒａｎｕｌｏｍａｔｏｓｉｓ　ｉｎ　ａ　Ｊａｐａｎｅｓｅ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ．　Ｒｈｉｎｏｌｏｇｙ　１９９６；　３４，　１６３−１６５．、Ｃｏｔｃｈ　ＭＦ，　Ｆａｕｃｉ　ＡＳ，　Ｈｏｆｆｍａｎ　ＧＳ．　ＨＬＡ　ｔｙｐｉｎｇ　ｉｎ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　Ｗｅｇｅｎｅｒ’ｓ　ｇｒａｎｕｌｏｍａｔｏｓｉｓ．　Ａｎｎ．　Ｉｎｔｅｒｎ．　Ｍｅｄ．　１９９５；１２２，　６３５．、Ｆｕｊｉｉ　Ａ，　Ｔｏｍｉｚａｗａ　Ｋ，　Ａｒｉｍｕｒａ　Ｙ，　ｅｔ　ａｌ．　Ｅｐｉｔｏｐｅ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｍｙｅｌｏｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ−（ＭＰＯ）　ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ａｎｔｉ−ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌ　ｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃ　ａｕｔｏａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ（ＡＮＣＡ）　ｉｎ　ＭＰＯ−ＡＮＣＡ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｇｌｏｍｅｒｕｌｏｎｅｐｈｒｉｔｉｓ．　Ｃｌｉｎ．　Ｎｅｐｈｒｏｌ．　２０００；　５３，　２４２−２５２．）、集団間で必ずしも一致した結果ではないが、複数の報告においてＤＲ４（Ｓｐｅｎｃｅｒ　ＳＪＷ，　Ｂｕｒｎｓ　Ａ，　Ｇａｓｋｉｎ　Ｇ，　ｅｔ　ａｌ．　ＨＬＡ　ｃｌａｓｓ　ＩＩ　ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｉｅｓ　ｉｎ　ｖａｓｃｕｌｉｔｉｓ　ｗｉｔｈ　ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ　ｔｏ　ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌ　ｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃ　ａｎｔｉｇｅｎｓ．　Ｋｉｄｎｅｙ　Ｉｎｔ．　１９９２；　４１，　１０５９−１０６３．、Ｇｅｎｃｉｋ　Ｍ，　Ｂｏｒｇｍａｎｎ　Ｓ，　Ｚａｈｎ　Ｒ，　ｅｔ　ａｌ．　Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉｃ　ｒｉｓｋ　ｆａｃｔｏｒｓ　ｆｏｒ　ａｎｔｉ−ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌ　ｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃ　ａｎｔｉｂｏｄｙ　（ＡＮＣＡ）−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｓｙｓｔｅｍｉｃ　ｖａｓｃｕｌｉｔｉｓ．　Ｃｌｉｎ．　Ｅｘｐ．　Ｉｍｍｕｎｏｌ．　１９９９；　１１７，　４１２−４１７．）、ＤＲ９（Ｎａｋａｍｕｒａ　Ｙ，　Ｍａｇｕｃｈｉ　Ｓ，　Ｔａｋｉｚａｗａ　Ｍ，　ｅｔ　ａｌ．　Ｔｈｅ　ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ　ｂｅｔｗｅｅｎｈｕｍａｎ　ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ　ａｎｔｉｇｅｎｓ　（ＨＬＡ）　ａｎｄ　ｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃ−ａｎｔｉｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌ　ｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃ　ａｎｔｉｂｏｄｙ　（ｃＡＮＣＡ）−ｐｏｓｉｔｉｖｅ　Ｗｅｇｅｎｅｒ’ｓ　ｇｒａｎｕｌｏｍａｔｏｓｉｓ　ｉｎ　ａ　Ｊａｐａｎｅｓｅ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ．　Ｒｈｉｎｏｌｏｇｙ　１９９６；　３４，　１６３−１６５．、Ｃｏｔｃｈ　ＭＦ，　Ｆａｕｃｉ　ＡＳ，　Ｈｏｆｆｍａｎ　ＧＳ．　ＨＬＡ　ｔｙｐｉｎｇ　ｉｎ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　Ｗｅｇｅｎｅｒ’ｓ　ｇｒａｎｕｌｏｍａｔｏｓｉｓ．　Ａｎｎ．　Ｉｎｔｅｒｎ．　Ｍｅｄ．　１９９５；　１２２，　６３５．、　Ｆｕｊｉｉ　Ａ，　Ｔｏｍｉｚａｗａ　Ｋ，　Ａｒｉｍｕｒａ　Ｙ，　ｅｔ　ａｌ．　Ｅｐｉｔｏｐｅ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｍｙｅｌｏｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ−（ＭＰＯ）　ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ａｎｔｉ−ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌ　ｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃ　ａｕｔｏａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ　（ＡＮＣＡ）　ｉｎ　ＭＰＯ−ＡＮＣＡ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｇｌｏｍｅｒｕｌｏｎｅｐｈｒｉｔｉｓ．　Ｃｌｉｎ．　Ｎｅｐｈｒｏｌ．　２０００；　５３，　２４２−２５２．）が増加傾向を、ＤＲ１３（Ｇｅｎｃｉｋ　Ｍ，　Ｂｏｒｇｍａｎｎ　Ｓ，　Ｚａｈｎ　Ｒ，　ｅｔａｌ．　Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉｃ　ｒｉｓｋ　ｆａｃｔｏｒｓ　ｆｏｒ　ａｎｔｉ−ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌ　ｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃ　ａｎｔｉｂｏｄｙ（ＡＮＣＡ）−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｓｙｓｔｅｍｉｃ　ｖａｓｃｕｌｉｔｉｓ．　Ｃｌｉｎ．　Ｅｘｐ．　Ｉｍｍｕｎｏｌ．　１９９９；　１１７，　４１２−４１７．、Ｈａｇｅｎ　ＥＣ，　Ｓｔｅｇｅｍａｎ　ＣＡ，　Ｄ’Ａｍａｒｏ　Ｊ，　ｅｔ　ａｌ．　Ｄｅｃｒｅａｓｅｄ　ｆｒｅｑｕｅｎｃｙ　ｏｆ　ＨＬＡ−ＤＲ１３ＤＲ６　ｉｎ　Ｗｅｇｅｎｅｒ’ｓ　ｇｒａｎｕｌｏｍａｔｏｓｉｓ．　Ｋｉｄｎｅｙ　Ｉｎｔ．　１９９５；　４８，　８０１−８０５．）が減少傾向を示しており、共通の傾向の存在がうかがわれる。
【０００３】
ＨＬＡ領域にはＴＮＦα遺伝子もコードされているが、ＴＮＦαが血管炎症候群において重要な役割を果たす可能性は多くの報告から示唆されている。例えば、ＴＮＦは血管内皮細胞に作用し、他のｐｒｏｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ　ｃｙｔｏｋｉｎｅ　産生、接着分子の発現、凝固因子やｉＮＯＳ産生を刺激する。また、好中球や単球はＴＮＦα刺激を受けるとＡＮＣＡ対応抗原を細胞表面に発現する（Ｆａｌｋ　ＲＪ，　Ｔｅｒｒｅｌｌ　ＲＳ，　Ｃｈａｒｌｅｓ　ＬＡ，　ｅｔ　ａｌ．Ａｎｔｉ−ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌ　ｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃ　ａｕｔｏａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ　ｉｎｄｕｃｅ　ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌｓ　ｔｏ　ｄｅｇｒａｎｕｌａｔｅ　ａｎｄ　ｐｒｏｄｕｃｅ　ｏｘｙｇｅｎ　ｒａｄｉｃａｌｓ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ．　Ｐｒｏｃ．　Ｎａｔｌ．　Ａｃａｄ．　Ｓｃｉ　ＵＳＡ　１９９０；　８７，　４１１５−４１１９．）。これに抗体（ｃＡＮＣＡ）がＦａｂ部分で結合し、かつ同じ抗体のＦｃ部分が同じ細胞のＦｃγ受容体に結合することにより、活性酸素やサイトカイン産生が誘導されることが報告されている（Ｒａｌｓｔｏｎ　ＤＲ，　Ｍａｒｓｈ　ＣＢ，　Ｌｏｗｅ　ＭＰ，　ｅｔ　ａｌ．　Ａｎｔｉｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌ　ｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃ　ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ　ｉｎｄｕｃｅ　ｍｏｎｏｃｙｔｅ　ＩＬ−８　ｒｅｌｅａｓｅ．　Ｒｏｌｅ　ｏｆ　ｓｕｒｆａｃｅ　ｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ−３，　α１−ａｎｔｉｔｒｙｐｓｉｎ，　ａｎｄ　Ｆｃγ　ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ．　Ｊ．　Ｃｌｉｎ．　Ｉｎｖｅｓｔ．　１９９７；　１００，　１４１６−１４２４．）。ＴＮＦαには、転写活性に影響をおよぼす可能性が指摘されているプロモーター領域の多型が存在することから、ひとつの可能性として、過去に報告されたＨＬＡとの関連は、ＴＮＦαプロモーターとの連鎖不平衡による二次的な関連である可能性が存在する。
【０００４】
本発明者らは日本人集団において、ＴＮＦαプロモーター上流領域（−１０３１／−８６３／−８５７）に４種類のアリルが存在し、ＤＲ４、ＤＲ９、ＤＲ１３がそれぞれ別のアリルと連鎖不平衡を示すこと（Ｍａｔｓｕｓｈｉｔａ　Ｍ，　Ｔｓｕｃｈｉｙａ　Ｎ，　Ｎａｋａｙａｍａ　Ｔ，　ｅｔ　ａｌ．　Ａｌｌｅｌｅ　ｔｙｐｉｎｇ　ｏｆ　ｈｕｍａｎ　ＴＮＦＡ　５’−ｆｌａｎｋｉｎｇ　ｒｅｇｉｏｎ　ｕｓｉｎｇ　ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ　ｃｈａｉｎ　ｒｅａｃｔｉｏｎ−ｐｒｅｆｅｒｅｎｔｉａｌ　ｈｏｍｏｄｕｐｌｅｘ　ｆｏｒｍａｔｉｏｎ　ａｓｓａｙ　（ＰＣＲ−ＰＨＦＡ）：　ｌｉｎｋａｇｅ　ｄｉｓｅｑｕｉｌｉｂｒｉｕｍ　ｗｉｔｈ　ＨＬＡ　ｃｌａｓｓ　Ｉ　ａｎｄ　ｃｌａｓｓ　ＩＩ　ｇｅｎｅｓ　ｉｎ　Ｊａｐａｎｅｓｅ．　Ｔｉｓｓｕｅ　Ａｎｔｉｇｅｎｓ　１９９９；５４，　４７８−４８４．、Ｓｈｉｂｕｅ　Ｔ，　Ｔｓｕｃｈｉｙａ　Ｎ，　Ｋｏｍａｔａ　Ｔ，　ｅｔ　ａｌ．　Ｔｕｍｏｒ　ｎｅｃｒｏｓｉｓ　ｆａｃｔｏｒ　α５’−ｆｌａｎｋｉｎｇ　ｒｅｇｉｏｎ，　ｔｕｍｏｒ　ｎｅｃｒｏｓｉｓ　ｆａｃｔｏｒ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ＩＩ，　ａｎｄ　ＨＬＡ−ＤＲＢ１　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ　ｉｎ　Ｊａｐａｎｅｓｅ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ　ａｒｔｈｒｉｔｉｓ．　Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ　Ｒｈｅｕｍ．　２０００；　４３，　７５３−７５７．）、また、Ｃｒｏｈｎ病では、この多型がＨＬＡ−ＤＲＢ１と独立の関連を示すこと（Ｋａｗａｓａｋｉ　Ａ，　Ｔｓｕｃｈｉｙａ　Ｎ，　Ｈａｇｉｗａｒａ　Ｋ　ｅｔ　ａｌ．　Ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ　ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｉｏｎ　ｏｆ　ＨＬＡ−ＤＲＢ１　ａｎｄ　ＴＮＦα　ｐｒｏｍｏｔｅｒ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ　ｔｏ　Ｃｒｏｈｎ’ｓ　ｄｉｓｅａｓｅ．　Ｇｅｎｅｓ　Ｉｍｍｕｎ．　２０００；　１，　３５１−３５７．）を報告した。
【０００５】
一方、ＴＮＦの受容体のひとつであるＴＮＦＲ２（ＴＮＦＲＳＦ１Ｂ）の過剰発現マウスにおいて、全身性の血管炎様の表現型が報告されている（Ｄｏｕｎｉ　Ｅ，　Ｋｏｌｌｉａｓ　Ｇ．　Ａ　ｃｒｉｔｉｃａｌ　ｒｏｌｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｐ７５　ｔｕｍｏｒ　ｎｅｃｒｏｓｉｓ　ｆａｃｔｏｒ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　（ｐ７５ＴＮＦ−Ｒ）　ｉｎ　ｏｒｇａｎ　ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ　ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ　ｏｆ　ＴＮＦ，　ｌｙｍｐｈｏｔｏｘｉｎ　α，　ｏｒ　ｔｈｅ　ｐ５５ＴＮＦ−Ｒ．　Ｊ．　Ｅｘｐ．　Ｍｅｄ．　１９９８；　１８８，　１３４３−１３５２．）。ヒトではこの遺伝子は第一染色体短腕の１ｐ３６に位置するが、筆者らはＴＮＦＲ２　ｐｏｓｉｔｉｏｎ　１９６　にアミノ酸置換を伴う多型（Ｍ１９６Ｒ）を見出し、ＳＬＥ患者において１９６Ｒアリルが有意に増加していることを報告した（Ｋｏｍａｔａ　Ｔ，　Ｔｓｕｃｈｉｙａ　Ｎ，　Ｍａｔｓｕｉｓｈｉｔａ　Ｍ，　ｅｔ　ａｌ．　Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｕｍｏｒ　ｎｅｃｒｏｓｉｓ　ｆａｃｔｏｒ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　２　（ＴＮＦＲ２）　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ　ｗｉｔｈ　ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ　ｔｏ　ｓｙｓｔｅｍｉｃ　ｌｕｐｕｓ　ｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓ．　Ｔｉｓｓｕｅ　Ａｎｔｉｇｅｎｓ　１９９９；　５３，　５２７−５３３．）。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
ＡＮＣＡ関連血管炎（ＡＮＣＡ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｖａｓｃｕｌｉｔｉｓ，　ＡＡＶ）の病因は未解明であるが、家系内多発例が稀ながら存在すること、集団によって有病率が異なることから、何らかの遺伝素因の存在が示唆される。これまでに、α１−ａｎｔｉｔｒｙｐｓｉｎ，　ＨＬＡ−ＤＲ，　ＴＮＦα，　Ｆｃγ受容体などの遺伝子の多型との関連に関する比較的少数の報告がなされているが、複数の集団において再現性を持って関連が検出された遺伝子はほとんどない。また、比較的欧米に多いＷｅｇｅｎｅｒ肉芽種症（Ｗｅｇｅｎｅｒ’ｓ　ｇｒａｎｕｌｏｍａｔｏｓｉｓ，　ＷＧ）に注目した研究が多く、顕微鏡的多発血管炎（ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｉｃ　ｐｏｌｙａｎｇｉｉｔｉｓ，　ＭＰＡ）に注目した研究はほとんどない。
【０００７】
かかる多因子疾患においては、遺伝的背景の異なる多数の集団におけるデータの比較が、本質的な疾患感受性遺伝子の解明上、大きな手がかりを与えることがある。また、日本人と欧米人との遺伝的背景の違いが、有病率・発症率の違いや疾患感受性遺伝子の違いに結びつく可能性も高く、日本人における診断・治療に有用な知見を得るためにも、日本人における検討は必須である。しかし、ＡＡＶの有病率の低さのために、過去の日本人集団における研究は、きわめて少数例における検討に限られていた。本発明は、多施設共同研究により、十分な検体数を得、有力な候補遺伝子群について、日本人ＡＡＶ感受性との関連を検討することを目的とする。
【０００８】
【課題を解決するための手段】
１５研究協力施設よりＡＮＣＡ陽性患者検体が８１検体送付された。これらを診断基準案（１９９８年研究班）に則って分類し、顕微鏡的多発血管炎（ＭＰＡ，　５０例）、Ｃｈｕｒｇ−Ｓｔｒａｕｓｓ症候群（ＣＳＳ，　１０例）、Ｗｅｇｅｎｅｒ肉芽腫（ＷＧ，　８例）、および、Ｐ−ＡＮＣＡ陽性例７１例について、ＨＬＡ−ＤＲＢ１，　ＴＮＦα，　ＴＮＦＲ２，　Ｆｃγ受容体ＩＩａ，　ＩＩｂ，　ＩＩＩａ，　ＩＩＩｂ，　ＣＴＬＡ−４を候補遺伝子として、患者対照法により、疾患感受性との関連を検討した。ＭＰＡとＨＬＡ−ＤＲＢ１＊０９０１との有意な関連が検出された（Ｐ＝０．００３７，　オッズ比２．４）。この関連は、ＭＰＡ全例を含むＰ−ＡＮＣＡ陽性群においても認められ、腎症状や呼吸器症状の有無による差は認められなかった。また、ＭＰＡにおけるＦＣＧＲ２Ａ−１３１Ｈ／Ｈ，　３Ａ−１７６Ｆ／Ｆという遺伝子型の組み合わせの増加、ＣＳＳにおけるＴＮＦαプロモーター−１０３１Ｔ，−８６３Ｃ，　−８５７Ｔハプロタイプの減少、ＣＳＳおよびＷＧにおけるＣＴＬＡ−４　３’非翻訳領域のＡＴリピート多型の偏りの傾向が検出された。本発明は、上記の知見により完成された。
【０００９】
すなわち、本発明の要旨は以下の通りである。
（１）ＨＬＡ−ＤＲＢ１遺伝子の多型性を検出することができる試薬を含む、ＡＮＣＡ関連血管炎への罹患またはその発病可能性を検査するためのキット。
（２）ＨＬＡ−ＤＲＢ１遺伝子の多型性がＨＬＡ−ＤＲＢ１　０９０１および／またはＨＬＡ−ＤＲＢ１　１１０１である（１）記載のキット。
（３）ＡＮＣＡ関連血管炎が、顕微鏡的多発血管炎またはＣｈｕｒｇ−Ｓｔｒａｕｓｓ症候群である（１）または（２）に記載のキット。
（４）被験者からのサンプルの核酸を用いて、ＡＮＣＡ関連血管炎への罹患またはその発病可能性を検査する方法であって、前記被験者のＨＬＡ−ＤＲＢ１遺伝子の多型性を検出することを含む、前記方法。
（５）ＨＬＡ−ＤＲＢ１遺伝子の多型性がＨＬＡ−ＤＲＢ１　０９０１および／またはＨＬＡ−ＤＲＢ１　１１０１である（４）記載の方法。
（６）ＡＮＣＡ関連血管炎が、顕微鏡的多発血管炎またはＣｈｕｒｇ−Ｓｔｒａｕｓｓ症候群である（４）または（５）に記載の方法。
【００１０】
【発明の実施の形態】
本発明において、利用したＨＬＡ−ＤＲＢ１遺伝子多型の配列が登録されているデータベースは、ＩＭＧＴ／ＨＬＡ　Ｄａｔａｂａｓｅ；　ｈｔｔｐ：ｗｗｗ．ｅｂｉ．ａｃ．ｕｋ／ｉｍｇｔ／ｈｌａ／ａｌｉｇｎ．ｈｔｍｌである。また、ＨＬＡ−ＤＲＢ１アレルのヌクレオチド配列を図１〜７に示す。図１〜７中、−は最上段、すなわち、ＨＬＡ−ＤＲＢ１＊０１０１の配列と同じである部分を示し、＊は配列がまだ調べられていないことを意味する。
【００１１】
ＨＬＡ−ＤＲＢ１遺伝子の遺伝子型の一つであるＨＬＡ−ＤＲＢ１　０９０１の塩基配列の一部を配列番号１に示す。
【００１２】
ＨＬＡ−ＤＲＢ１遺伝子の遺伝子型の一つであるＨＬＡ−ＤＲＢ１　１１０１の塩基配列の一部を配列番号２に示す。
【００１３】
ＨＬＡ−ＤＲＢ１遺伝子の遺伝子型の一つであるＨＬＡ−ＤＲＢ１　０１０１の塩基配列の一部を配列番号３に示す。
【００１４】
ＨＬＡ−ＤＲＢ１遺伝子の遺伝子型の一つであるＨＬＡ−ＤＲＢ１　１５０１の塩基配列の一部を配列番号４に示す。
【００１５】
ＨＬＡ−ＤＲＢ１遺伝子の遺伝子型の一つであるＨＬＡ−ＤＲＢ１　０３０１の塩基配列の一部を配列番号５に示す。
【００１６】
ＨＬＡ−ＤＲＢ１遺伝子の遺伝子型の一つであるＨＬＡ−ＤＲＢ１　０４０１の塩基配列の一部を配列番号６に示す。
【００１７】
ＨＬＡ−ＤＲＢ１遺伝子の遺伝子型の一つであるＨＬＡ−ＤＲＢ１　１２０１の塩基配列の一部を配列番号７に示す。
【００１８】
ＨＬＡ−ＤＲＢ１遺伝子の遺伝子型の一つであるＨＬＡ−ＤＲＢ１　１３０１の塩基配列の一部を配列番号８に示す。
【００１９】
ＨＬＡ−ＤＲＢ１遺伝子の遺伝子型の一つであるＨＬＡ−ＤＲＢ１　１４０１の塩基配列の一部を配列番号９に示す。
【００２０】
ＨＬＡ−ＤＲＢ１遺伝子の遺伝子型の一つであるＨＬＡ−ＤＲＢ１　０７０１の塩基配列の一部を配列番号１０に示す。
【００２１】
ＨＬＡ−ＤＲＢ１遺伝子の遺伝子型の一つであるＨＬＡ−ＤＲＢ１　０８０１の塩基配列の一部を配列番号１１に示す。
【００２２】
ＨＬＡ−ＤＲＢ１遺伝子の遺伝子型の一つであるＨＬＡ−ＤＲＢ１　１００１の塩基配列の一部を配列番号１２に示す。
【００２３】
本発明の方法において使用される「ＨＬＡ−ＤＲＢ１遺伝子の多型性を検出することができる試薬」は、好ましくは、ＨＬＡ−ＤＲＢ１　０９０１および／またはＨＬＡ−ＤＲＢ１　１１０１を検出することができる試薬である。「ＨＬＡ−ＤＲＢ１遺伝子の多型性を検出することができる試薬」としては、ＨＬＡ−ＤＲＢ１遺伝子の多型性を検出することができるプライマー、プローブ、制限酵素、および塩基配列決定法に用いられる試薬を例示することができる。
【００２４】
ＨＬＡ−ＤＲＢ１遺伝子の多型性を検出することができるプライマーは、ＨＬＡ−ＤＲＢ１遺伝子の変異が存在する部位を含む領域を特異的に増幅することができるプライマーであるとよい。本明細書において、「特異的に増幅する」とは、一般的な使用態様において、試料中に存在する標的核酸を増幅することができるが、試料中に存在する他の核酸を標的核酸との識別が不可能となる程度までにはあるいは標的核酸との識別が不可能な様式には増幅しないことを意味する。例えば、一般的な使用態様において、試料中に存在する標的核酸を増幅することができるが、試料中に存在する他の核酸を検出可能な程度までには増幅しないことを意味する。
【００２５】
ＨＬＡ−ＤＲＢ１　０９０１を検出することができるプライマーは、配列番号１のＤＮＡ配列中の２５番目、２６番目、３１番目、３２番目、７７番目、７８番目、８２番目、８４番目、８８番目のいずれかの部位を含むヌクレオチド配列を特異的に増幅できるものであるとよい。このようなプライマーの例としては、後述の実施例に記載のものを例示することができる。
【００２６】
ＨＬＡ−ＤＲＢ１　１１０１を検出することができるプライマーは、配列番号２のＤＮＡ配列中の７８番目、８４番目、８９番目、９１番目、１１０番目、１７３番目、１７４番目、１９９番目、２０７番目、２０８番目または２１０番目のいずれかの部位を含むヌクレオチド配列を特異的に増幅できるものであるとよい。このようなプライマーの例としては、後述の実施例に記載のものを例示することができる。
【００２７】
ＨＬＡ−ＤＲＢ１遺伝子の多型性を検出することができるプローブは、ＨＬＡ−ＤＲＢ１遺伝子の変異が存在する部位を含む領域に特異的にハイブリダイズすることができるプローブであるとよい。本明細書において、「特異的にハイブリダイズする」とは、一般的な使用態様において、試料中に存在する標的核酸とハイブリダイズすることができるが、試料中に存在する他の核酸を標的核酸との識別が不可能となる程度までにはハイブリダイズしないことを意味する。例えば、一般的な使用態様において、試料中に存在する標的核酸とハイブリダイズすることができるが、試料中に存在する他の核酸とは検出可能な程度までにはハイブリダイズしないことを意味する。
【００２８】
ＨＬＡ−ＤＲＢ１　０９０１を検出することができるプローブは、配列番号１のＤＮＡ配列中の２５番目、２６番目、３１番目、３２番目、７７番目、７８番目、８２番目、８４番目、８８番目のいずれかの部位を含むヌクレオチド配列と特異的にハイブリダイズすることができるものであるとよい。このようなプローブの例としては、後述の実施例に記載のものを例示することができる。
【００２９】
ＨＬＡ−ＤＲＢ１　１１０１を検出することができるプローブは、配列番号２のＤＮＡ配列中の７８番目、８４番目、８９番目、９１番目、１１０番目、１７３番目、１７４番目、１９９番目、２０７番目、２０８番目または２１０番目のいずれかの部位を含むヌクレオチド配列と特異的にハイブリダイズすることができるものであるとよい。このようなプローブの例としては、後述の実施例に記載のものを例示することができる。
【００３０】
上記のプライマーはアレル特異的プライマーであるとよい。プライマーの長さは、１０〜３０ヌクレオチドが適当であり、１５〜２５ヌクレオチドが好ましい。
【００３１】
上記のプローブはアレル特異的プローブであるとよい。プローブの長さは、１０〜３０ヌクレオチドが適当であり、１５〜２５ヌクレオチドが好ましい。
【００３２】
上記のプライマーおよびプローブは、公知の方法で合成することができる。必要により、検出を容易にするため、プライマーやプローブを標識することができる。
【００３３】
本発明の検査キットは、さらに、適当な緩衝剤、ヌクレオチド、およびポリメラーゼ（例えば、熱安定性ポリメラーゼ（例えば、ｔａｑポリメラーゼなど）などを含むことができる。また、本発明の検査キットは、説明書を含み、包装されていてもよい。
【００３４】
遺伝子多型は、被験者からのサンプルの核酸（例えば、被験者の血液、痰、皮膚、気管支肺胞洗浄液、その他の体液、組織試料などから抽出した核酸）を用いて、ＰＣＲ　−　ｍｉｃｒｏｔｉｔｒｅ　ｐｌａｔｅ　ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ　（ＭＰＨ）　（１），　ＬｉｇｈｔＣｙｃｌｅｒＴＭ　（ＲｏｃｈｅＤｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ，　Ｍａｎｎｈｅｉｍ，　Ｇｅｒｍａｎｙ）を用いたｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ　ｐｒｏｂｉｎｇ　（２，３）、ＰＣＲ−ＳＳＰ（３）法、ＧＥＮＥＳＣＡＮＴＭ（Ａｐｐｌｉｅｄ　Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，　Ｆｏｓｔｅｒ　Ｃｉｔｙ，　ＣＡ）などの方法により調べることができる。
【００３５】
ＨＬＡ−ＤＲＢ１遺伝子は、ＰＣＲ　−　ｍｉｃｒｏｔｉｔｒｅ　ｐｌａｔｅ　ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ　（ＭＰＨ）　（１）により、多型性を検出することが好ましい。
【００３６】
ＨＬＡ−ＤＲＢ１遺伝子のタイピング法は、Ｋａｗａｉ　Ｓ，　Ｍａｅｋａｗａｊｉｒｉ　Ｓ，　Ｔｏｋｕｎａｇａ　Ｋ，　Ｊｕｊｉ　Ｔ，　ａｎｄ　Ｙａｍａｎｅ　Ａ：　　Ａ　ｓｉｍｐｌｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｏｆ　ＨＬＡ−ＤＲＢ　ｔｙｐｉｎｇ　ｕｓｉｎｇ　ｅｎｚｙｍａｔｉｃａｌｌｙ　ａｍｐｌｉｆｉｅｄ　ＤＮＡ　ｉｍｍｏｂｉｌｉｚｅｄ　ｐｒｏｂｅｓ　ｏｎ　ｍｉｃｒｏｔｉｔｅｒ　ｐｌａｔｅ．　　Ｈｕｍａｎ　Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ　４１：　１２１−１２６，　１９９４．に記載されている。
【００３７】
ＨＬＡ−ＤＲＢ１遺伝子のタイピングは、市販のキット（例えば、ジーンカラーＨＬＡ−ＤＲ（登録商標）（湧永製薬株式会社））を用いて行うことができる。
【００３８】
ＨＬＡ−ＤＲＢ１遺伝子の多型性がＨＬＡ−ＤＲＢ１　０９０１および／またはＨＬＡ−ＤＲＢ１　１１０１であると評価された場合、ＡＮＣＡ関連血管炎に罹患している、あるいはその発症可能性があると判定できる。ＡＮＣＡ関連血管炎としては、顕微鏡的多発血管炎、Ｃｈｕｒｇ−Ｓｔｒａｕｓｓ症候群、Ｗｅｇｅｎｅｒ肉芽種症を例示することができるが、本発明の方法は、特に、顕微鏡的多発血管炎、Ｃｈｕｒｇ−Ｓｔｒａｕｓｓ症候群への罹患またはその発症可能性を検査するのに有効である。
【００３９】
【実施例】
以下、本発明を実施例によって具体的に説明する。なお、これらの実施例は、本発明を説明するためのものであって、本発明の範囲を限定するものではない。
【００４０】
Ａ．　研究方法
ＡＮＣＡ陽性患者の末梢血と、臨床情報の送付を研究協力施設に依頼した。末梢血白血球よりゲノムＤＮＡを調整し、以下の遺伝子多型につき、遺伝子型を決定した。
【００４１】
ＨＬＡ−ＤＲＢ１遺伝子は、ＰＣＲ　−　ｍｉｃｒｏｔｉｔｒｅ　ｐｌａｔｅ　ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ　（ＭＰＨ）　（１），　ＴＮＦαｐｒｏｍｏｔｅｒ　−１０３１，　−８６３，　−８５７多型、ＴＮＦＲ２−Ｍ１９６Ｒ　およびＦＣＧＲ２Ｂ−Ｉ２３２ＴはＬｉｇｈｔＣｙｃｌｅｒＴＭ　（Ｒｏｃｈｅ　Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ，　Ｍａｎｎｈｅｉｍ，　Ｇｅｒｍａｎｙ）を用いたｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ　ｐｒｏｂｉｎｇ　（２，３）により、ＦＣＧＲ２Ａ−Ｈ１３１ＲはＰＣＲ−ＲＦＬＰ，　３Ａ−Ｆ１７６ＶはＰＣＲ−ＳＳＣＰ，　３Ｂ−ＮＡ１／２はＰＣＲ−ＳＳＰ（３）法により、タイピングした。また、ＣＴＬＡ−４　３’非翻訳領域（３’−ｕｎｔｒａｎｓｌａｔｅｄ　ｒｅｇｉｏｎ，　３’−ＵＴＲ）のＡＴ　ｒｅｐｅａｔ　多型については、ＧＥＮＥＳＣＡＮＴＭ（Ａｐｐｌｉｅｄ　Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，　Ｆｏｓｔｅｒ　Ｃｉｔｙ，　ＣＡ）を用いてタイピングした。
ＰＣＲ　−　ｍｉｃｒｏｔｉｔｒｅ　ｐｌａｔｅ　ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ　（ＭＰＨ）に用いたプライマー・プローブ
【００４２】
【表１】
2004135574.tif 000002
【００４３】
ＤＲＢ１００７の塩基配列を配列番号１３および１４に、ＤＲＢ５７０３の塩基配列を配列番号１５および１６に、Ｐｒｉｍｅｒ　１の塩基配列を配列番号１７に、Ｐｒｉｍｅｒ　２の塩基配列を配列番号１８に示す。
【００４４】
対照群としては、東京周辺在住の日本人健常者集団３０３名（男性１６７名、女性１３６名、平均年齢３５．３）を用いた。ＨＬＡ−ＤＲＢ１についてのすでに報告した対照群データを用いた。
【００４５】
関連解析は、χ２検定を用いて行った。度数５以下のセルがあるときは、Ｆｉｓｈｅｒの直接確率計算法を用いた。
【００４６】
本研究計画は、東京大学医学部・大学院医学系研究科研究倫理審査委員会の承認を得て行われた。具体的には、各採血施設から送付された検体は、連結可能匿名化され、遺伝子解析はいっさい個人情報から切り離された形で行われた。
【００４７】
Ｂ．　研究結果
１．患者背景
計１５個所の研究協力施設から、計８１検体が送付された。添付された臨床情報に基づいて、当研究班により作製されたＭＰＡ，　Ｃｈｕｒｇ−Ｓｔｒａｕｓｓ　症候群（ＣＳＳ），　ＷＧ，　古典的結節性多発動脈炎（ｃｌａｓｓｉｃａｌ　ＰＮ，　ｃＰＮ）の１９９８年修正診断基準案に則って診断を統一した結果を表２に示す。
【００４８】
【表２】
2004135574.tif 000003
【００４９】
以下の感受性遺伝子解析は、関連解析に適当な検体数が得られたＭＰＡ、およびＭＰＡ全例を含むＰ−ＡＮＣＡ陽性例を主な対象とし、ＣＳＳ，　ＷＧについての予備的な解析を適宜追加した。
【００５０】
なお、大部分の症例について、ＭＰＯ−ＡＮＣＡあるいはＰＲ３−ＡＮＣＡがＥＬＩＳＡ法により測定されていたが、一部の症例ではＰ−ＡＮＣＡ，　Ｃ−ＡＮＣＡの免疫蛍光染色パターンのみの記載しかなかったため、ＭＰＯ−ＡＮＣＡはＰ−ＡＮＣＡに含め、ＰＲ３−ＡＮＣＡはＣ−ＡＮＣＡに含めて以下の解析を行った。
【００５１】
２．ＨＬＡ−ＤＲＢ１
ＨＬＡ−ＤＲＢ１遺伝子の解析結果を表３に示す。
【００５２】
【表３】
2004135574.tif 000004
【００５３】
ＭＰＡにおけるＨＬＡ−ＤＲＢ１＊０９０１の陽性率が５０．０％　（２５／５０）で、対照群の２９．１％　（７７／２６５）と比較して、有意に増加していた（Ｐ＝０．００３７，　オッズ比２．４４，　９５％信頼区間１．３３−４．４６）。ＤＲＢ１＊０９０１の増加は、Ｐ−ＡＮＣＡ陽性患者群全体でも認められた（３５／７１，　４９．３％，　Ｐ＝０．００１）。その内訳を見ると、Ｐ−ＡＮＣＡ陽性のＭＰＡ以外の血管炎においてもＤＲＢ１＊０９０１の増加傾向が認められた（表２）。一方、腎症状や呼吸器症状の有無によるＤＲＢ１＊０９０１陽性率の差は認められなかった（表４）。
【００５４】
【表４】
2004135574.tif 000005
【００５５】
このほか、ＭＰＡおよびＰ−ＡＮＣＡ陽性群におけるＤＲＢ１＊１１０１の増加傾向、ＤＲＢ１＊１４０５の減少傾向が観察された（表３）。
【００５６】
Ｃ．　考察
本研究は、ＡＡＶ疾患感受性遺伝子検出を目的とした、本邦初めての多施設共同研究である。過去に、日本人ＷＧ　（７），　ＭＰＯ−ＡＮＣＡ関連腎炎（８）におけるＨＬＡ−ＤＲ９との関連の報告があるが、血清学的検査に基づくものでＤＮＡ配列レベルの研究ではなく、症例数はそれぞれ１６，　１２と少なく、予備的な成績と言わざるを得なかった。今回、ＭＰＡ５０例、Ｐ−ＡＮＣＡ陽性例７１例という患者数を用いて、ＤＮＡレベルでＨＬＡ−ＤＲＢ１＊０９０１との関連が確認されたことは、意義深い知見である。さらに、ＨＬＡ−ＤＲＢ１＊０９０１は、アジア人集団では高頻度に存在するが、欧米人集団にはきわめて稀なアリルであり、日本人における研究においてこそ見出された知見であると考えられる。まだ、このような集団によるＨＬＡアリル構成の差が、欧米人と比較して日本人ではＷＧが少なくＭＰＡが多い傾向をもたらしている可能性があると思われる。
【００５７】
現時点では、ＤＲＢ１＊０９０１が疾患感受性に結びつく機序は不明である。ＭＰＡ以外のＰ−ＡＮＣＡ陽性例においてもＤＲＢ１＊０９０１が増加傾向にあることは、ＤＲＢ１＊０９０１が抗原提示を介してＰ−ＡＮＣＡ産生に関連することを示唆する知見であるが、その仮説の検証のためには、今後、Ｐ−ＡＮＣＡ陰性の血管炎における解析や、細胞免疫学的研究が必要である。
【００５８】
ＭＰＡにおいて、ＴＮＦα　プロモータ、ＴＮＦＲ２，　ＣＴＬＡ−４多型との関連は検出できなかった（データは示さず）。ＦＣＧＲ２Ａ−１３１Ｈ／Ｈ，　ＦＣＧＲ　３Ａ−１７６Ｆ／Ｆという遺伝子型の組み合わせの増加については、今後独立の患者対照群における確認を要するが、ＦｃγＲＩＩＩａが単球、ＮＫ細胞、ＦｃγＲＩＩａが好中球に主に発現する受容体であることから、単球による処理速度が低下した免疫複合体が好中球を活性化してＡＮＣＡ関連血管炎発症に寄与する、という解釈が可能かも知れない。
【００５９】
このほか、ＣＳＳ，　ＷＧについても、ＴＮＦＲ２，　ＦＣＧＲ２Ｂ，　ＣＴＬＡ−４と関連の傾向が認められた（データは示さず）が、今後多数の症例における検討が必要である。
【００６０】
Ｄ．　結論
日本人において、ＭＰＡとＨＬＡ−ＤＲＢ１＊０９０１との関連が見られることを多施設共同研究により確認した。
【００６１】
研究協力施設は以下の通りである。
国立療養所下志津病院、順天堂大学（膠原病内科、浦安病院）、天理よろず相談所病院、杏林大学、岡山大学、東京都老人医療センター、東京女子医大、兵庫医大、仙台社会保険病院、東京医大八王子医療センター、群馬大学、杏雲堂病院、国立大蔵病院、川崎市立川崎病院
【００６２】
参考文献
１）　Ｓｈｉｂｕｅ　Ｔ，　Ｔｓｕｃｈｉｙａ　Ｎ，　Ｋｏｍａｔａ　Ｔ，　Ｍａｔｓｕｓｈｉｔａ　Ｍ，　Ｓｈｉｏｔａ　Ｍ，　Ｏｈａｓｈｉ　Ｊ，　Ｗａｋｕｉ　Ｍ，　Ｍａｔｓｕｔａ　Ｋ，　Ｔｏｋｕｎａｇａ　Ｋ：　Ｔｕｍｏｒ　ｎｅｃｒｏｓｉｓ　ｆａｃｔｏｒ　α　５’−ｆｌａｎｋｉｎｇ　ｒｅｇｉｏｎ，　ＴＮＦ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ＩＩ　ａｎｄ　ＨＬＡ−ＤＲＢ１　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　Ｊａｐａｎｅｓｅ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ　ａｒｔｈｒｉｔｉｓ．　Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ　Ｒｈｅｕｍ　　４３：　７５３−７５７，　２０００．
２）　Ｔｓｕｃｈｉｙａ　Ｎ，　Ｋａｗａｓａｋｉ　Ａ，　Ｔｓａｏ　ＢＰ，　Ｋｏｍａｔａ　Ｔ，　Ｇｒｏｓｓｍａｎ　ＪＭ，　Ｔｏｋｕｎａｇａ　Ｋ：　Ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＨＬＡ−ＤＲＢ１　ａｎｄ　ＴＮＦＡ　ｐｒｏｍｏｔｅｒ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ　ｗｉｔｈ　ＳＬＥ　ｕｓｉｎｇ　ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ　ｄｉｓｅｑｕｉｌｉｂｒｉｕｍ　ｔｅｓｔ．　Ｇｅｎｅｓ　Ｉｍｍｕｎ　２：３１７−３２２，　２００１．
３）　Ｋｙｏｇｏｋｕ　Ｃ，　Ｄｉｊｓｔｅｌｂｌｏｅｍ　ＨＭ，　Ｔｓｕｃｈｉｙａ　Ｎ，　Ｈａｔｔａ　Ｙ，　Ｋａｔｏ　Ｈ，　Ｙａｍａｇｕｃｈｉ　Ａ，Ｆｕｋａｚａｗａ　Ｔ，　Ｊａｎｓｅｎ　ＭＤ，　Ｈａｓｈｉｍｏｔｏ　Ｈ，　ｖａｎ　ｄｅ　Ｗｉｎｋｅｌ　ＪＧＪ，　Ｋａｌｌｅｎｂｅｒｇ　ＣＧＭ，　Ｔｏｋｕｎａｇａ　Ｋ：　Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｆｃγ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ｇｅｎｅ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ　ｉｎ　Ｊａｐａｎｅｓｅ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｓｙｓｔｅｍｉｃ　ｌｕｐｕｓ　ｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓ：　Ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｉｏｎ　ｏｆ　ＦＣＧＲ２Ｂ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ　ｔｏ　ＳＬＥ．　Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ　Ｒｈｅｕｍ　４６：　１２４２−１２５４，　２００２．
４）　Ｋａｗａｓａｋｉ　Ａ，　Ｔｓｕｃｈｉｙａ　Ｎ，　Ｈａｇｉｗａｒａ　Ｋ，　Ｔａｋａｚｏｅ　Ｍ，　Ｔｏｋｕｎａｇａ　Ｋ．　Ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ　ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｉｏｎ　ｏｆ　ＨＬＡ−ＤＲＢ１　ａｎｄ　ＴＮＦα　ｐｒｏｍｏｔｅｒ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ　ｔｏ　Ｃｒｏｈｎ’ｓ　ｄｉｓｅａｓｅ．　Ｇｅｎｅｓ　Ｉｍｍｕｎ．　１：　３５１−３５７，　２０００．
５）　Ｋｏｍａｔａ　Ｔ，　Ｔｓｕｃｈｉｙａ　Ｎ，　Ｍａｔｓｕｓｈｉｔａ　Ｍ，　Ｈａｇｉｗａｒａ　Ｋ，　Ｔｏｋｕｎａｇａ　Ｋ：　Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｕｍｏｒ　ｎｅｃｒｏｓｉｓ　ｆａｃｔｏｒ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　２　（ＴＮＦＲ２）　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ　ｗｉｔｈ　ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ　ｔｏ　ｓｙｓｔｅｍｉｃ　ｌｕｐｕｓ　ｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓ．　Ｔｉｓｓｕｅ　Ａｎｔｉｇｅｎｓ　５３：　５２７−５３３，　１９９９．
６）　Ｈｕａｎｇ　Ｄ，　Ｇｉｓｃｏｍｂｅ　Ｒ，　Ｚｈｏｕ　Ｙ，　Ｌｅｆｖｅｒｔ　ＡＫ：　Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ　ｉｎ　ＣＴＬＡ−４　ｂｕｔ　ｎｏｔ　ｔｕｍｏｒ　ｎｅｃｒｏｓｉｓ　ｆａｃｔｏｒ−α　ｏｒ　ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ　１β　ｇｅｎｅｓ　ａｒｅ　ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　Ｗｅｇｅｎｅｒ’ｓ　ｇｒａｎｕｌｏｍａｔｏｓｉｓ．　Ｊ　Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ　２７：　３９７−４０１，　２０００．
７）　Ｎａｋａｍａｒｕ　Ｙ，　Ｍａｇｕｃｈｉ　Ｓ，　Ｔａｋｉｚａｗａ　Ｍ，　Ｆｕｋｕｄａ　Ｓ，　Ｉｎｕｙａｍａ　Ｙ．　Ｔｈｅ　ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｈｕｍａｎ　ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ　ａｎｔｉｇｅｎｓ　（ＨＬＡ）　ａｎｄ　ｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃ　−　ａｎｔｉｎｅｕｔｒｏｐｈｏｉｌ　ｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃ　ａｎｔｉｂｏｄｙ　（ｃＡＮＣＡ）　−　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　Ｗｅｇｅｎｅｒ’ｓ　ｇｒａｎｕｌｏｍａｔｏｓｉｓ　ｉｎ　ａＪａｐａｎｅｓｅ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ．　Ｒｈｉｎｏｌｏｇｙ　３４：　１６３−１６５，　１９９６．
８）　Ｆｕｊｉｉ　Ａ，　Ｔｏｍｉｚａｗａ　Ｋ，　Ａｒｉｍｕｒａ　Ｙ，　Ｎａｇａｓａｗａ　Ｔ，　Ｏｈａｓｈｉ　ＹＹ，　Ｈｉｙａｍａ　Ｔ，　Ｍｉｚｕｎｏ　Ｓ，　Ｓｕｚｕｋｉ　Ｋ．　Ｅｐｉｔｏｐｅ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｍｙｅｌｏｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ　（ＭＰＯ）　−　ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ａｎｔｉ−ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌ　ｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃ　ａｕｔｏａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ　（ＡＮＣＡ）　ｉｎ　ＭＰＯ−ＡＮＣＡ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｇｌｏｍｅｒｕｌｏｎｅｐｈｒｉｔｉｓ．　Ｃｌｉｎ　Ｎｅｐｈｒｏｌ　５３：　２４２−２５２，　２０００．
【００６３】
【発明の効果】
本発明により、ＡＮＣＡ関連血管炎への罹患およびその発症可能性の判定が可能になった。
【００６４】
【配列表】
2004135574.tif 000006
2004135574.tif 000007
2004135574.tif 000008
2004135574.tif 000009
2004135574.tif 000010
2004135574.tif 000011
2004135574.tif 000012
2004135574.tif 000013
2004135574.tif 000014
2004135574.tif 000015
2004135574.tif 000016
【００６５】
【配列表フリーテキスト】
配列番号１は、ＨＬＡ−ＤＲＢ１遺伝子の遺伝子型の一つであるＨＬＡ−ＤＲＢ１　０９０１の塩基配列の一部を示す。
【００６６】
配列番号２は、ＨＬＡ−ＤＲＢ１遺伝子の遺伝子型の一つであるＨＬＡ−ＤＲＢ１　１１０１の塩基配列の一部を示す。
【００６７】
配列番号３は、ＨＬＡ−ＤＲＢ１遺伝子の遺伝子型の一つであるＨＬＡ−ＤＲＢ１　０１０１の塩基配列の一部を示す。
【００６８】
配列番号４は、ＨＬＡ−ＤＲＢ１遺伝子の遺伝子型の一つであるＨＬＡ−ＤＲＢ１　１５０１の塩基配列の一部を示す。
【００６９】
配列番号５は、ＨＬＡ−ＤＲＢ１遺伝子の遺伝子型の一つであるＨＬＡ−ＤＲＢ１　０３０１の塩基配列の一部を示す。
【００７０】
配列番号６は、ＨＬＡ−ＤＲＢ１遺伝子の遺伝子型の一つであるＨＬＡ−ＤＲＢ１　０４０１の塩基配列の一部を示す。
【００７１】
配列番号７は、ＨＬＡ−ＤＲＢ１遺伝子の遺伝子型の一つであるＨＬＡ−ＤＲＢ１　１２０１の塩基配列の一部を示す。
【００７２】
配列番号８は、ＨＬＡ−ＤＲＢ１遺伝子の遺伝子型の一つであるＨＬＡ−ＤＲＢ１　１３０１の塩基配列の一部を示す。
【００７３】
配列番号９は、ＨＬＡ−ＤＲＢ１遺伝子の遺伝子型の一つであるＨＬＡ−ＤＲＢ１　１４０１の塩基配列の一部を示す。
【００７４】
配列番号１０は、ＨＬＡ−ＤＲＢ１遺伝子の遺伝子型の一つであるＨＬＡ−ＤＲＢ１　０７０１の塩基配列の一部を示す。
【００７５】
配列番号１１は、ＨＬＡ−ＤＲＢ１遺伝子の遺伝子型の一つであるＨＬＡ−ＤＲＢ１　０８０１の塩基配列の一部を示す。
【００７６】
配列番号１２は、ＨＬＡ−ＤＲＢ１遺伝子の遺伝子型の一つであるＨＬＡ−ＤＲＢ１　１００１の塩基配列の一部を示す。
【００７７】
配列番号１３および１４は、ＤＲＢ１００７の塩基配列を示す。
【００７８】
配列番号１５および１６は、ＤＲＢ５７０３の塩基配列を示す。
【００７９】
配列番号１７は、Ｐｒｉｍｅｒ　１の塩基配列を示す。
【００８０】
配列番号１８は、Ｐｒｉｍｅｒ　２の塩基配列を示す。
【図面の簡単な説明】
【図１】ＨＬＡ−ＤＲＢ１アレルのヌクレオチド配列を示す。
【図２】ＨＬＡ−ＤＲＢ１アレルのヌクレオチド配列（続き）を示す。
【図３】ＨＬＡ−ＤＲＢ１アレルのヌクレオチド配列（続き）を示す。
【図４】ＨＬＡ−ＤＲＢ１アレルのヌクレオチド配列（続き）を示す。
【図５】ＨＬＡ−ＤＲＢ１アレルのヌクレオチド配列（続き）を示す。
【図６】ＨＬＡ−ＤＲＢ１アレルのヌクレオチド配列（続き）を示す。
【図７】ＨＬＡ−ＤＲＢ１アレルのヌクレオチド配列（続き）を示す。
【図１】
2004135574.tif 000017
【図２】
2004135574.tif 000018
【図３】
2004135574.tif 000019
【図４】
2004135574.tif 000020
【図５】
2004135574.tif 000021
【図６】
2004135574.tif 000022
【図７】
2004135574.tif 000023