(57)【要約】【課題】テストサイト内への接着剤の付着が抑制あるいは防止された検査チップを提供する。【解決手段】検査チップ１００は、多孔質基板１１０と、多孔質基板１１０を保持し補強している二枚の保持部材１２０と、多孔質基板１１０と保持部材１２０とを接着している接着剤層１３０とから構成されている。保持部材１２０はテストサイトを規定する開口１２２を有しており、保持部材１２０の開口１２２を通して見える多孔質基板１１０の一部１１２がテストサイトとなる。テストサイト１１２には、後の工程において、生体関連物質と反応するプローブが固相化される。接着剤層１３０は、保持部材１２０の開口１２２に対応した開口１３２を有しており、接着剤層１３０の開口１３２は保持部材１２０の開口１２２よりも大きい。【選択図】    図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
生体関連物質の検出に用いられる検査チップであり、
生体関連物質と反応するプローブが固定される多孔質基板と、
多孔質基板を保持している保持部材と、
多孔質基板と保持部材とを接着している接着剤層とから構成されており、
保持部材はテストサイトを規定する開口を有し、接着剤層は保持部材の開口に対応した開口を有し、接着剤層の開口は保持部材の開口よりも大きい、検査チップ。
【請求項２】
請求項１において、接着剤層の開口の縁は保持部材の開口の縁から０．１ｍｍ以上離れている、検査チップ。
【請求項３】
請求項１において、接着剤層の外側の縁は保持部材の外側の縁から０．１ｍｍ以上内側に位置している、検査チップ。
【請求項４】
生体関連物質の検出に用いられる検査チップであり、
生体関連物質と反応するプローブが固定される多孔質基板と、
多孔質基板を保持している保持部材と、
多孔質基板と保持部材とを接着している接着剤層とから構成されており、
保持部材はテストサイトを規定する開口を有しており、接着剤層は、検査チップの処理において使用される溶液に対して耐性を有している接着剤で構成されている、検査チップ。
【請求項５】
生体関連物質の検出に用いられる検査チップであり、
生体関連物質と反応するプローブが固定される多孔質基板と、
多孔質基板を保持している保持部材とから構成されており、
保持部材はテストサイトを規定する開口を有しており、多孔質基板と保持部材とは溶着によって接合されている、検査チップ。
【請求項６】
請求項５において、多孔質基板と保持部材とが、少なくとも、熱、超音波、高周波、レーザーのいずれかひとつを用いた溶着によって接合されている、検査チップ。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれかひとつにおいて、生体関連物質の検出が遺伝子検査である、検査チップ。
【請求項８】
請求項１〜６のいずれかひとつにおいて、多孔質基板が陽極酸化膜で構成されている、検査チップ。
【請求項９】
生体関連物質の検出に用いられる検査チップの作製方法であり、
生体関連物質と反応するプローブが固定される多孔質基板を用意し、
多孔質基板を保持する保持部材と、多孔質基板と保持部材を接着する接着剤層とから成る構造体であり、保持部材がテストサイトを規定する開口を有し、接着剤層が保持部材の開口を取り囲む開口を有している構造体を用意し、
保持部材と接着剤層とから成る構造体を多孔質基板に貼り合わせる、検査チップの作製方法。
【請求項１０】
請求項９において、保持部材と接着剤層とから成る構造体を、保持部材の母材シートとその片側の全面に形成された接着剤層とから成る構造体を用意し、その構造体にテストサイトを規定する保持部材の開口となる穴を形成し、穴の周辺部分の接着剤層を取り除くことにより得る、検査チップの作製方法。
【請求項１１】
請求項９において、保持部材と接着剤層とから成る構造体を、保持部材の母材シートと接着剤シートを用意し、母材シートにテストサイトを規定する保持部材の開口となる穴を形成し、接着剤シートに母材シートの穴よりも大きい穴を形成し、接着剤シートの穴と母材シートの穴を位置合わせして、接着剤シートを母材シートに貼り合わせることにより得る、検査チップの作製方法。
【請求項１２】
請求項９において、保持部材と接着剤層とから成る構造体を、テストサイトを規定する保持部材の開口となる穴を有する保持部材の母材シートを用意し、母材シートの片側にその穴を塞ぐマスクを設け、母材シートとマスクに接着剤を塗布して接着剤層を形成し、マスクとその上に位置する一部の接着剤層とを取り除くことにより得る、検査チップの作製方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、生体関連物質の検出に用いられる検査チップに関する。
【０００２】
【従来の技術】
生体関連物質の検出に用いられる検査チップのひとつとして、遺伝子の発現量や変異などの情報を網羅的に解析するためのＤＮＡマイクロアレイがある。ＤＮＡマイクロアレイは、基板と、基板上に整列された核酸プローブの微小な多数のスポットとを有している。ひとつのスポットの核酸プローブは、特定の遺伝子とハイブリダイズ反応する。
【０００３】
ＤＮＡマイクロアレイには、蛍光標識された遺伝子を含む溶液が与えられる。ハイブリダイズ反応を起こした核酸プローブには、蛍光標識された遺伝子が結合している。ＤＮＡマイクロアレイを蛍光観察して、それぞれの核酸プローブのスポットの蛍光の輝度を調べることにより、遺伝子の検査を行なうことができる。
【０００４】
このようなＤＮＡマイクロアレイにおいては、反応時間の短縮、核酸プローブのスポットの高密度化、感度と再現性の向上、安定した品質が求められている。
【０００５】
反応時間の短縮を目的として、”ＭＩＣＲＯＡＲＲＡＹＳ  ＡＮＤ  ＭＩＣＲＯＣＨＩＰＳ  ＪＡＰＡＮ”  Ｊｕｎｅ４−５，２００１・ｋｅｉｏｐｌａｚａ  Ｉｎｔｅｒ−Ｃｏｎｔｉｎｅｎｔａｌ  Ｔｏｋｙｏ  Ｊａｐａｎ  Ｓｐｏｎｓｏｒｉｎｇ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓにおいて、陽極酸化膜基板を用いた三次元マイクロアレイにより、簡便に短時間で遺伝子を検査し得る遺伝子検査装置と遺伝子検出方法が提案されている。
【０００６】
陽極酸化膜製の多孔質基板は、割れ易いため、通常、樹脂フィルム等の保持部材によって保持され補強される。一般に、多孔質基板は、その上下面に貼り合わされる二枚の保持部材によって保持され補強される。保持部材は多孔質基板を部分的に露出させる開口を有している。保持部材の開口は、核酸プローブのスポットが形成される領域すなわちテストサイトを規定する。
【０００７】
このような検査チップは、保持部材に複数の開口を形成することにより、容易にひとつの検査チップ中に複数のテストサイトを形成し得るので、生産効率の向上やコストの低減に有益である。
【０００８】
【発明が解決しようとする課題】
これまでの検査チップでは、多孔質基板と保持部材の貼り合わせは接着によって行なわれており、接着は保持部材の全面に塗布された接着剤によって成されている。このため、多孔質基板と保持部材の間に存在する接着剤層は、検査チップのテストサイトすなわち保持部材の開口の極近傍にまで存在している。すなわち、保持部材と接着剤層は同じ大きさと同じ形状の開口を持ち、保持部材の開口の縁と接着剤層の開口の縁とが一致している。
【０００９】
このため、核酸プローブを多孔質基板に固定（固相化）する処理の前処理の最中に接着剤が溶け出し、溶けた接着剤がテストサイト内に付着することがある。また、ハイブリダイズ反応時に接着剤が溶液と反応して溶け出し、溶けた接着剤がテストサイト内に付着することがある。一般に接着剤は蛍光を発する。このため、テストサイトの内側に付着した接着剤は、検査チップの検査すなわち蛍光観察にとってノイズの原因となる。
【００１０】
本発明は、このような実状を考慮して成されたものであり、その主な目的は、テストサイト内への接着剤の付着が抑制あるいは防止された検査チップを提供することである。そのため、本発明の副次的な目的は、そのような検査チップを作製する方法を提供することである。
【００１１】
【課題を解決するための手段】
本発明は、ひとつには、生体関連物質の検出に用いられる検査チップに向けられている。
【００１２】
本発明の検査チップは、生体関連物質と反応するプローブが固定される多孔質基板と、多孔質基板を保持している保持部材と、多孔質基板と保持部材とを接着している接着剤層とから構成されており、保持部材はテストサイトを規定する開口を有し、接着剤層は保持部材の開口に対応した開口を有し、接着剤層の開口は保持部材の開口よりも大きい。
【００１３】
本発明の別の検査チップは、生体関連物質と反応するプローブが固定される多孔質基板と、多孔質基板を保持している保持部材と、多孔質基板と保持部材とを接着している接着剤層とから構成されており、保持部材はテストサイトを規定する開口を有しており、接着剤層は、検査チップの処理において使用される溶液に対して耐性を有している接着剤で構成されている。
【００１４】
本発明の別の検査チップは、生体関連物質と反応するプローブが固定される多孔質基板と、多孔質基板を保持している保持部材とから構成されており、保持部材はテストサイトを規定する開口を有しており、多孔質基板と保持部材とは溶着によって接合されている。
【００１５】
本発明は、ひとつには、生体関連物質の検出に用いられる検査チップの作製方法に向けられている。本発明の検査チップの作製方法は、生体関連物質と反応するプローブが固定される多孔質基板を用意し、多孔質基板を保持する保持部材と、多孔質基板と保持部材を接着する接着剤層とから成る構造体であり、保持部材がテストサイトを規定する開口を有し、接着剤層が保持部材の開口を取り囲む開口を有している構造体を用意し、保持部材と接着剤層とから成る構造体を多孔質基板に貼り合わせる。
【００１６】
【発明の実施の形態】
以下、図面を参照しながら本発明の実施の形態について説明する。
【００１７】
第一実施形態
図１と図２は本発明の第一実施形態の検査チップを示している。検査チップ１００は、生体関連物質の検出に用いられるものであり、例えば遺伝子検査のためのＤＮＡチップであるが、特にこれに限定されるものではなく、抗原や抗体、または、たんぱく質等をプローブとしたチップにも適用することができる。
【００１８】
図１と図２から分かるように、検査チップ１００は、多孔質基板１１０と、多孔質基板１１０を保持し補強している二枚の保持部材１２０と、多孔質基板１１０と保持部材１２０とを接着している接着剤層１３０とから構成されている。
【００１９】
保持部材１２０はテストサイトを規定する開口１２２を有しており、保持部材１２０の開口１２２を通して見える多孔質基板１１０の一部１１２がテストサイトとなる。テストサイト（すなわち多孔質基板１１０の一部）１１２には、後の工程において、生体関連物質と反応するプローブが固定すなわち固相化される。
【００２０】
接着剤層１３０は、保持部材１２０の開口１２２に対応した開口１３２を有しており、接着剤層１３０の開口１３２は保持部材１２０の開口１２２よりも大きい。つまり、接着剤層１３０は、保持部材１２０の開口１２２を取り囲む開口１３２を有している。
【００２１】
好ましくは、接着剤層１３０の開口１３２の縁は、保持部材１２０の開口１２２の縁から０．１ｍｍ以上離れている。従って、接着剤層１３０はテストサイト１１２から０．１ｍｍ以上離れている。
【００２２】
このような検査チップ１００においては、プローブを固相化するための前処理やハイブリダイズ反応（ハイブリダイゼーション）の最中に不所望に溶液と反応して溶け出した接着剤は、接着剤層１３０の開口１３２の縁と保持部材１２０の開口１２２の縁の間のギャップ部分で止まり、テストサイト１１２の領域の中までには到達しない。
【００２３】
その結果、蛍光観察の際、テストサイト１１２の領域内において、ハイブリダイズ反応を起こした生体物質以外の物質が蛍光を発することがなくなる。つまり、不所望なノイズの発生がなくなる。
【００２４】
図３は、実験により求められた、接着剤層１３０の開口１３２の縁と保持部材１２０の開口１２２の縁の間隔に対する、プローブの固相化とハイブリダイゼーションの後の検査チップ１００のテストサイトの状態を示している。図３から、接着剤層１３０の開口１３２の縁が保持部材１２０の開口１２２の縁から０．１ｍｍ以上離れている検査チップであれば、ハイブリダイゼーション後に、良好な状態のテストサイトが得られることが分かる。
【００２５】
検査チップ１００は、前述した保持部材１２０と接着剤層１３０とから成る二つの構造体１４０を、多孔質基板１１０の上下面に貼り合わせることにより作製される。以下、このような構造体１４０のいくつかの作製方法について述べる。しかし、構造体１４０の作製方法はそれらに限定されるものではない。
【００２６】
第一の作製方法
図４は、保持部材１２０と接着剤層１３０とから成る構造体１４０の第一の作製方法を示している。
【００２７】
最初に、保持部材の母材シート１５２と、その片側の全面に形成された接着剤層１５４とから成る構造体１５０を用意する。母材シート１５２は、これに限定されないが、例えば、厚さ０．１ｍｍの東レ社製のルミラーＸ３１を横１０ｍｍ縦１０ｍｍに加工して形成される。構造体１５０は、例えば、両面テープ等、接着剤をシート状にしたものを位置合わせして母材シート１５２に貼り合わせることにより形成される。より好ましくは、構造体１５０は、スプレーまたはディスペンサーで接着剤を母材シート１５２の全面に塗布することにより形成される。塗布する接着剤は、これに限定されないが、例えば、３Ｍ社製アクリル系４６７ＭＰである。
【００２８】
次に、構造体１５０に、テストサイトを規定する保持部材の開口となる穴１５６を形成する。穴１５６は、これに限定されないが、例えば、プレス機で構造体１５０の一部を打ち抜くことにより形成される。穴１５６は、これに限定されないが、例えば、５．０ｍｍの直径を有する。
【００２９】
続いて、穴１５６の周辺部分の接着剤層１５８を取り除くことにより、保持部材１２０と接着剤層１３０とから成る構造体１４０が完成する。取り除かれる穴１５６の周辺部分の接着剤層１５８は、これに限定されないが、例えば、５．２ｍｍの直径を有する。接着剤層１５８の除去は、切り取り、溶液でのふき取り、レーザーによるカットなどによって行なわれる。
【００３０】
第二の作製方法
図５は、保持部材１２０と接着剤層１３０とから成る構造体１４０の第二の作製方法を示している。
【００３１】
最初に、保持部材の母材シート１６２と、接着剤シート１６４を用意する。母材シート１６２は、これに限定されないが、例えば、厚さ０．１ｍｍの東レ社製のルミラーＸ３１を横１０ｍｍ縦１０ｍｍに加工して形成される。接着剤シート１６４は、これに限定されないが、例えば、両面テープである。
【００３２】
次に、母材シート１６２に、テストサイトを規定する保持部材の開口となる穴１６６を形成する。また、接着剤シート１６４に、母材シート１６２の穴１６６よりも一回り大きい穴１６８を形成する。穴１６６と穴１６８は、これに限定されないが、例えば、母材シート１６２と接着剤シート１６４の一部をプレス機で打ち抜くことにより形成される。これに限定されないが、例えば、穴１６６は５．０ｍｍの直径を有し、穴１６８は５．２ｍｍの直径を有する。
【００３３】
続いて、接着剤シート１６４の穴１６８と母材シート１６２の穴１６６を位置合わせして、接着剤シート１６４を母材シート１６２に貼り合わせることにより、保持部材１２０と接着剤層１３０とから成る構造体１４０が完成する。
【００３４】
第三の作製方法
図６は、保持部材１２０と接着剤層１３０とから成る構造体１４０の第二の作製方法を示している。
【００３５】
最初に、テストサイトを規定する保持部材の開口となる穴１７４を有する保持部材の母材シート１７２を用意し、母材シート１７２の片側に穴１７４を塞ぐマスク１７６を設ける。穴１７４を有する母材シート１７２は、これに限定されないが、例えば、母材シート１７２の一部をプレス機で打ち抜くことにより形成される。母材シート１７２は、これに限定されないが、例えば、厚さ０．１ｍｍの東レ社製のルミラーＸ３１を横１０ｍｍ縦１０ｍｍに加工し形成される。これに限定されないが、例えば、穴１７４は５．０ｍｍの直径を有し、マスク１７６は５．２ｍｍの直径を有する。
【００３６】
次に、スプレーまたはディスペンサーで接着剤を母材シート１７２とマスク１７６の全面に塗布して接着剤層１７８を形成する。塗布する接着剤は、これに限定されないが、例えば、３Ｍ社製アクリル系４６７ＭＰである。あるいは、両面テープ等、接着剤をシート状にしたものを位置合わせして母材シート１７２とマスク１７６に貼り付けて接着剤層１７８を形成する。
【００３７】
続いて、マスク１７６とその上に位置する一部の接着剤層１７８とを取り除くことにより、保持部材１２０と接着剤層１３０とから成る構造体１４０が完成する。
【００３８】
上述した第一〜第三の作製方法に従って形成された保持部材１２０と接着剤層１３０とから成る構造体１４０を多孔質基板１１０の上下面の各々に貼り合わせることにより検査チップ１００が完成する。
【００３９】
貼り付き防止
これまでに説明した保持部材１２０と接着剤層１３０とから成る構造体１４０は、保持部材１２０の外周と接着剤層１３０の外周の縁とが一致している。このような構造体１４０を多孔質基板１１０に貼り合わせて検査チップ１００を作製する場合、貼り合わせの際の上下の構造体１４０の位置ずれのために接着剤層の縁部が露出したり、検査チップ１００の端面から接着剤がはみ出したりすることがある。
【００４０】
このような接着剤の露出やはみ出しは、他の検査チップや検査チップ以外の部材と接触したときやハンドリングの際に、検査チップが他の部材に貼り付いてしまう原因となる。このような他の部材への貼り付きは、検査チップの取り扱いを悪くする。また、他の部材に貼り付いた検査チップは、引き剥がす際に多孔質基板が割れたりすることもある。つまり、検査チップの他の部材への貼り付きは、多孔質基板の割れを誘発する原因ともなる。
【００４１】
このような他の部材への不所望な貼り付きを避けるため、図７に示されるように、接着剤層１３０の外側の縁は保持部材１２０の外側の縁の内側に位置しているとよい。接着剤層１３０の外側の縁は保持部材１２０の外側の縁は、目安としては、０．１ｍｍ以上離れているとよい。
【００４２】
実際、本発明者は、接着剤層の外側の縁が保持部材の外側の縁の内側に位置している検査チップと、接着剤層の外側の縁と保持部材の外側の縁とが一致している検査チップとを用意し、それらをオリゴＤＮＡを固相化するインクジェット式のスポッターのＳＵＳ製ステージ上に並べて当て付けた。接着剤層の外側の縁が保持部材の外側の縁の内側に位置している検査チップは、ステージに貼り付くことなく、容易に取り外すことができた。一方、接着剤層の外側の縁と保持部材の外側の縁とが一致している検査チップは、ステージに貼り付き、容易に取り外すことができなかった。
【００４３】
接着剤層１３０の外側の縁は保持部材１２０の外側の縁の内側に位置している構造体は、これに限定されないが、例えば、次のようにして形成される。まず、保持部材の母材シートに縁部を覆うマスクを設ける。マスクは縁から０．１ｍｍ以上の部分を覆っているとよい。次に、母材シートとマスクの全面に、スプレーまたはディスペンサーで接着剤を塗布する。あるいは、接着剤シートを位置合わせをして母材シートとマスクに貼り合わせる。最後に、マスクを剥がして母材シートの縁部に位置している接着剤を取り除いて、接着剤層１３０の外側の縁は保持部材１２０の外側の縁の内側に位置している構造体が完成する。
【００４４】
第二実施形態
図８は本発明の第二実施形態の検査チップの断面を示している。検査チップ２００は、生体関連物質の検出に用いられるものであり、例えばＤＮＡチップであるが、特にこれに限定されるものではない。
【００４５】
図８から分かるように、検査チップ２００は、多孔質基板２１０と、多孔質基板２１０を保持し補強している二枚の保持部材２２０と、多孔質基板２１０と保持部材２２０とを接着している接着剤層２３０とから構成されている。
【００４６】
保持部材２２０はテストサイトを規定する開口２２２を有しており、保持部材２２０の開口２２２を通して見える多孔質基板２１０の一部２１２がテストサイトとなる。テストサイト（すなわち多孔質基板２１０の一部）２１２には、後の工程において、生体関連物質と反応するプローブが固定すなわち固相化される。
【００４７】
接着剤層２３０は、保持部材２２０の開口２２２と同じ大きさの開口２３２を有している。接着剤層２３０の開口２３２の縁は、保持部材２２０の開口２２２の縁と一致している。接着剤層２３０は、後の工程で使用される溶液に対して耐性を有する（すなわち溶け出すことのない）接着剤で形成されている。ここで、後の工程で使用される溶液とは、多孔質基板２１０にプローブを固相化する際に使用される溶液、テストサイトの洗浄液、ハイブリダイゼーションにおいて使用する溶液を含む。
【００４８】
プローブの固相化において使用される溶液は、例えば、アセトン、エタノール、ｐｏｌｙ−Ｌ−ｌｙｓｉｎｅ、アミノプロピルトリメキシシランなどである。また、テストサイトの洗浄液、ハイブリダイゼーションにおいて使用する溶液は、例えば、ＰＢＳ、ＳＳＰＥ、Ｔｗｅｅｎ２０プローブ溶液である。従って、使用する接着剤は、これらの溶液に対して耐性を有しているエポキシ系またはゴム系またはシリコーン系の接着剤がよい。特に、接着性で優れているシリコーン系の接着剤が好適である。
【００４９】
このような検査チップ２００においては、プローブを固相化するための前処理やハイブリダイズ反応（ハイブリダイゼーション）の最中に接着剤層２３０の接着剤が溶液と反応して溶け出すことがない。従って、テストサイト２１２の領域の中に不所望な接着剤が付着することはない。
【００５０】
その結果、蛍光観察の際、テストサイト２１２の領域内において、ハイブリダイズ反応を起こした生体物質以外の物質が蛍光を発することがなくなる。つまり、不所望なノイズの発生がなくなる。
【００５１】
検査チップ２００は、保持部材２２０と接着剤層２３０とから成る構造体２４０を、多孔質基板２１０の上下面の各々に貼り合わせることにより作製される。保持部材２２０と接着剤層２３０とから成る構造体２４０は、これに限定されないが、例えば、次のようにして形成される。
【００５２】
厚さ０．１ｍｍの東レ社製のルミラーＸ３１を横１０ｍｍ縦１０ｍｍに加工して保持部材の母材シートを形成し、シリコーン系接着剤である日東電工製Ｎｏ５９１５耐溶剤性接着剤をスプレーして母材シートの全面に塗布して接着剤層を形成し、接着剤層と母材シートとを貫通する直径５ｍｍの穴をプレス機であけて、保持部材２２０と接着剤層２３０とから成る構造体２４０が完成する。
【００５３】
このように形成された保持部材２２０と接着剤層２３０とから成る構造体２４０を多孔質基板２１０の上下面の各々に貼り合わせることにより検査チップ２００が完成する。
【００５４】
第三実施形態
図９は本発明の第三実施形態の検査チップの断面を示している。検査チップ３００は、生体関連物質の検出に用いられるものであり、例えばＤＮＡチップであるが、特にこれに限定されるものではない。
【００５５】
図９から分かるように、検査チップ３００は、多孔質基板３１０と、多孔質基板３１０を保持し補強している二枚の保持部材３２０から構成されている。多孔質基板３１０は、これに限定されないが、例えば、陽極酸化膜基板である。
【００５６】
保持部材３２０はテストサイトを規定する開口３２２を有しており、保持部材３２０の開口３２２を通して見える多孔質基板３１０の一部３１２がテストサイトとなる。テストサイト（すなわち多孔質基板３１０の一部）３１２には、後の工程において、生体関連物質と反応するプローブが固定すなわち固相化される。
【００５７】
多孔質基板３１０と保持部材３２０は溶着により結合されている。すなわち、多孔質基板３１０と保持部材３２０は、後述する溶着工程によって保持部材３２０の溶融した部分３２４によって結合されている。多孔質基板３１０と保持部材３２０は、保持部材３２０の溶融した部分３２４を図示すために図９では間隔をおいて描かれているが、それらは実際には接触している。
【００５８】
このような検査チップ３００においては、接着剤を用いていないので、プローブを固相化するための前処理やハイブリダイズ反応（ハイブリダイゼーション）の最中に溶液と反応して溶け出す物質を有していない。従って、テストサイト３１２の領域の中に不所望な物質が付着することはない。
【００５９】
その結果、蛍光観察の際、テストサイト３１２の領域内において、ハイブリダイズ反応を起こした生体物質以外の物質が蛍光を発することがなくなる。つまり、不所望なノイズの発生がなくなる。
【００６０】
以下、多孔質基板３１０と保持部材３２０とを結合するいくつかの溶着方法について述べる。しかし、溶着方法にそれらに限定されるものではない。
【００６１】
熱溶着
保持部材３２０は、ポリプロピレンやポリエステルやポリエチレン等を使用することが可能であり、これらの樹脂フィルムに穴をあけて形成される。なかでも、ポリエチレンの樹脂フィルムは、溶液に対する耐性が高く、溶着性に優れており、特に好適である。二枚の保持部材３２０で陽極酸化膜基板を挟み込み、熱溶着機で保持部材３２０の一部を加熱して陽極酸化膜基板を溶着する。熱溶着は、これに限定されないが、例えば、保持部材３２０の縁部を一周して行なわれる。熱溶着は、溶着時にしか電気を使わないため、ローコストで作業ができる。
【００６２】
超音波溶着
保持部材３２０は、ポリプロピレンやポリエステルやポリエチレン等を使用することが可能であり、これらの樹脂フィルムに穴をあけて形成される。なかでも、ポリエチレンの樹脂フィルムは、溶液に対する耐性が高く、溶着性に優れており、特に好適である。二枚の保持部材３２０で陽極酸化膜基板を挟み込み、超音波溶着装置で保持部材３２０の一部を加熱して陽極酸化膜基板を溶着する。超音波溶着は、高熱を出せるので、溶着性が良く、生産に優れている。
【００６３】
高周波溶着
保持部材３２０は、ポリプロピレンやポリエステルやポリエチレン等を使用することが可能であり、これらの樹脂フィルムに穴をあけて形成される。なかでも、ポリエチレンの樹脂フィルムは、溶液に対する耐性が高く、溶着性に優れており、特に好適である。二枚の保持部材３２０で陽極酸化膜基板を挟み込み、高周波溶着装置で保持部材３２０の一部を加熱して陽極酸化膜基板に溶着する。高周波溶着は、加熱したい部分以外を加熱せずに溶着できるので、溶着の位置精度が向上し、温度の制御も容易であり、処理を行なった基板に対しても、処理を損なうことなく溶着できるので好適である。また、大きい保持部材にも対応することができる。
【００６４】
レーザー溶着
保持部材３２０は、ポリプロピレンやポリエステルやポリエチレン等を使用することが可能であり、これらの樹脂フィルムに穴をあけて形成される。なかでも、ポリエチレンの樹脂フィルムは、溶液に対する耐性が高く、溶着性に優れており、特に好適である。より具体的には、保持部材３２０は、これに限定されないが、例えば、厚さ０．１ｍｍのポリエチレンフィルムを横１０ｍｍ縦１０ｍｍに加工し、直径５．０ｍｍの穴をプレス機で直径５ｍｍの穴をあけて形成される。二枚の保持部材３２０で多孔質基板３１０を挟み込み、レーザー溶着装置で保持部材３２０の一部を例えば１１０℃で２秒間加熱して陽極酸化膜基板に溶着する。レーザー溶着は、狭い範囲の溶着が可能で、小さい保持部材にも対応できる。また、非接触で溶着ができるので、もろい陽極酸化膜に対して好適である。
【００６５】
本実施形態では、樹脂フィルム製の保持部材を例にあげて説明したが、これに限定されるものではなく、厚いものであってもよい。特に、樹脂フィルム製の保持部材を有する反応チップは、反応容器への組み込む際の取り扱いが容易である。
【００６６】
本実施形態においては、多孔質基板として、陽極酸化膜を例にあげて説明したが、これに限定されるものではない。特に、陽極酸化膜基板は、取り扱いが難しいため、溶着による結合は好適である。
【００６７】
第一実施形態〜第三実施形態の検査チップの検証１
第一実施形態〜第三実施形態の検査チップとこれまでの検査チップとに対してオリゴＤＮＡを固相化するための処理を行なって比較した。オリゴＤＮＡを固相化するための処理は次のように行なった。
【００６８】
ビーカーを用意し、アミノトリメキシシランを入れ、検査チップを入れる。ビーカーをアルミホイルで遮光し、回転浸透させる。溶液を捨て検査チップの入ったビーカーにアセトンを入れ、かき混ぜる。溶液を捨てエーテルを入れかき混ぜる。溶液を捨て純水を入れかき混ぜ、検査チップを取り出し乾燥させる。
【００６９】
処理を行なった後に、検査チップを乾燥させインクジェット式のスポッターで塩基配列の分かっている蛍光色素標識のオリゴＤＮＡをテストサイトの所定の位置に固相化し、それぞれテストサイトの観察を蛍光顕微鏡で行なった。
【００７０】
第一実施形態〜第三実施形態の検査チップには、テストサイトに接着剤の付着が見られることはなく、オリゴＤＮＡと多孔質基板との区別を容易に確認することができた。
【００７１】
従来の検査チップでは、テストサイトに接着剤が付着しており、多孔質基板とオリゴの蛍光を区別することができなかった。
【００７２】
第一実施形態〜第三実施形態の検査チップの検証２
事前にオリゴＤＮＡを固相化するための前処理を行なった陽極酸化膜基板を用いて、第一実施形態〜第三実施形態に従って作製した検査チップとこれまでの作製方法に従って作製した検査チップとに対して、ハイブリダイゼーション処理を行なって比較した。ハイブリダイゼーション処理は次のように行なった。
【００７３】
ＰＢＳとＴｗｅｅｎ２０を混合した溶液をテストサイトに投入する。ポンプにより溶液を駆動して（陽極酸化膜基板を繰り返し通過させて）洗浄を行なう。溶液を回収し塩基配列の分かっている蛍光色素標識オリゴＤＮＡをテストサイトに投入する。ポンプを駆動させてハイブリダイゼーション処理を行なう。溶液を回収した後、ＳＳＰＥ溶液を投入して洗浄を行なう。
【００７４】
その後、検査チップを乾燥させて、蛍光顕微鏡で観察した。
【００７５】
第一実施形態〜第三実施形態に従って作製した検査チップでは、テストサイト上に接着剤の付着がなく、オリゴＤＮＡハイブリシグナルの検査を良好に行なえた。図１０は、第一実施形態〜第三実施形態に従って作製した検査チップの代表例の蛍光観察画像を示している。
【００７６】
これまでの作製方法に従って作製した検査チップでは、テストサイトに接着剤が付着しており、ノイズとなってハイブリシグナルと基板の区別をすることができなかった。図１１は、これまでの作製方法に従って作製した検査チップの蛍光観察画像を示している。
【００７７】
これまで、図面を参照しながら本発明の実施の形態を述べたが、本発明は、これらの実施の形態に限定されるものではなく、その要旨を逸脱しない範囲において様々な変形や変更が施されてもよい。
【００７８】
【発明の効果】
本発明によれば、テストサイト内への接着剤の付着が抑制あるいは防止された検査チップが提供される。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明の第一実施形態の検査チップの分解斜視図である。
【図２】図１に示される検査チップの断面を示している。
【図３】実験により求められた、接着剤層の開口の縁と保持部材の開口の縁の間隔に対する、プローブの固相化とハイブリダイゼーションの後の検査チップのテストサイトの状態を示している。
【図４】図１と図２に示された保持部材と接着剤層とから成る構造体の第一の作製方法を示している。
【図５】図１と図２に示された保持部材と接着剤層とから成る構造体の第二の作製方法を示している。
【図６】図１と図２に示された保持部材と接着剤層とから成る構造体の第二の作製方法を示している。
【図７】図１と図２に示された検査チップに関して、他の部材への不所望な貼り付きを避けるのに好適な接着剤層の領域を示している。
【図８】本発明の第二実施形態の検査チップの断面を示している。
【図９】本発明の第三実施形態の検査チップの断面を示している。
【図１０】第一実施形態〜第三実施形態に従って作製した検査チップの代表例の蛍光観察画像を示している。
【図１１】これまでの作製方法に従って作製した検査チップの蛍光観察画像を示している。
【符号の説明】
１００…検査チップ、１１０…多孔質基板、１１２…テストサイト、１２０…保持部材、１２２…開口、１３０…接着剤層、１３２…開口。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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