(57)【要約】      （修正有）【課題】患者のリポタンパク質アフェレーシス治療の必要性を低減又は除去するための方法を提供する。【解決手段】ＰＣＳＫ９阻害剤を含む医薬組成物を患者に投与することを含む。特定の実施形態では、ＰＣＳＫ９阻害剤とは抗ＰＣＳＫ９抗体であって、リポタンパク質アフェレーシス（例えば、ＬＤＬアフェレーシス又はＬｐ（ａ）アフェレーシス）を含む治療レジメンで現在治療をうけている患者の高脂血症及びそれに関連する状態の治療に有用である。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
目標とするリポタンパク質レベルを達成するために患者が必要とするリポタンパク質アフェレーシス療法を除去する又は患者が必要とするリポタンパク質アフェレーシス治療の頻度を低減する方法であって、初期の頻度（治療前）でリポタンパク質アフェレーシス療法を実施している又は実施していた、高コレステロール血症である患者を選択し、次いで、ＰＣＳＫ９阻害剤を一回又はそれ以上の用量で患者に投与し、それにより、患者の血清中の少なくとも１種のリポタンパク質のレベルを低減して、目標とするリポタンパク質レベルを達成するために患者が必要とするリポタンパク質アフェレーシスの頻度を低減することを含む方法。
【請求項２】
アフェレーシスの初期（治療前）頻度が、週に１回又は２週間に１回である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
ＰＣＳＫ９阻害剤を１回又はそれ以上の用量で投与した後のアフェレーシスの頻度が、３週間に１回、４週間に１回、５週間に１回、又は５週間に１回未満の頻度である、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
ＰＣＳＫ９阻害剤を１回又はそれ以上の用量で投与した後、患者は、もはや目標とするリポタンパク質レベルを維持するためのアフェレーシスを必要としない、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項５】
ＰＣＳＫ９阻害剤により１回又はそれ以上の用量で治療する前に、患者を、ヘテロ接合性家族性高コレステロール血症（ＨｅＦＨ）又はホモ接合性家族性高コレステロール血症（ＨｏＦＨ）及び／又は高リポタンパク質（ａ）（Ｌｐ（ａ））であると診断する、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
リポタンパク質アフェレーシス療法が、カスケード濾過、免疫吸着、ヘパリン誘導ＬＤＬ沈殿、ＬＤＬ吸着（デキストラン硫酸）リポソーバー、ＬＤＬ血液灌流、及びＬＤＬ−血液灌流（リポソーバーＤ）からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
ＰＣＳＫ９阻害剤により１回又はそれ以上の用量で治療する前又はその時点で、患者が、ＰＣＳＫ９阻害剤の最初の用量を投与する前少なくとも２週間前、初期（治療前）頻度でリポタンパク質アフェレーシスを安定した予定で行っている、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
患者が、ＰＣＳＫ９阻害剤による１回又はそれ以上の用量の投与を受ける前、安定したバックグラウンドで脂質変性療法（ＬＭＴ）を受けている、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
患者が、ＰＣＳＫ９阻害剤による１回又はそれ以上の用量の投与をうけるのと並行して、安定したバックグラウンドで脂質変性療法（ＬＭＴ）を受けている、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
安定なバックグラウンドのＬＭＴが、低、中、又は高用量のスタチン療法である、請求項８又は９に記載の方法。
【請求項１１】
ＰＣＳＫ９阻害剤による１回又はそれ以上の用量の投与後に患者の血清中で低下するリポタンパク質が、ＬＤＬ−Ｃ、ＡｐｏＢ、非−ＨＤＬ−Ｃ、総コレステロール、及びＬｐ（ａ）から成る群から選択される１種又はそれ以上のリポタンパク質である請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
目標とするリポタンパク質レベルが、２００ｍｇ／ｄＬ未満、１３０ｍｇ／ｄＬ未満、１００ｍｇ／ｄＬ未満、又は７０ｍｇ／ｄＬ未満の血清ＬＤＬ−Ｃレベルである、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
ＰＣＳＫ９阻害剤が、ＰＣＳＫ９に特異的に結合する抗体又はその抗原結合性断片である、請求項１〜１２の何れか１項に記載の方法。
【請求項１４】
ＰＣＳＫ９に特異的に結合する抗体又は抗原結合タンパク質約７５ｍｇ用量を、２週間に１回の頻度で患者に投与する、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
ＰＣＳＫ９に特異的に結合する抗体又は抗原結合タンパク質約１５０ｍｇ用量を、２週間に１回の頻度で患者に投与する、請求項１３に記載の方法。
【請求項１６】
ＰＣＳＫ９に特異的に結合する抗体又は抗原結合タンパク質約３００ｍｇの用量を、４週間に１回の頻度で患者に投与する、請求項１３に記載の方法。
【請求項１７】
ＰＣＳＫ９に特異的に結合する抗体又は抗原結合タンパク質を、２週間に１回の頻度で約１４０ｍｇの用量を患者に投与する、請求項１３に記載の方法。
【請求項１８】
ＰＣＳＫ９に特異的に結合する抗体又は抗原結合タンパク質を、４週間に１回の頻度で約４２０ｍｇの用量を患者に投与する、請求項１３に記載の方法。
【請求項１９】
抗体又は抗原結合断片が、アリロクマブ、エボロクマブ、ボコシズマブ、ロデルシズマブ及びラルパンシズマブからなる群から選択される、請求項１３〜１８の何れか１項に記載の方法。
【請求項２０】
抗体又は抗原結合タンパク質がアリロクマブである、請求項１４〜１６の何れか１項に記載の方法。
【請求項２１】
抗体又は抗原結合タンパク質がエボロクマブである、請求項１７又は１８に記載の方法。
【請求項２２】
抗体又はその抗原結合断片が、配列番号１／６を有するＨＣＶＲ／ＬＣＶＲアミノ酸配列対の重鎖及び軽鎖ＣＤＲを含む、請求項１３〜１８の何れか１項に記載の方法。
【請求項２３】
抗体又はその抗原結合断片が、配列番号２，３，４，７，８及び１０を有する重鎖及び軽鎖ＣＤＲアミノ酸配列を含む、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
抗体又はその抗原結合断片が、配列番号１のアミノ酸配列を有するＨＣＶＲ及び配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＶＲを含む、請求項２３に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、高レベルの脂質及びリポタンパク質に関連する疾患及び障害の治療的処置の分野に関する。より具体的には、本発明は、高脂血症及び関連する状態を有し、現在、リポタンパク質アフェレーシス（例えば、ＬＤＬアフェレーシス又はＬｐ（ａ）アフェレーシス）を含む治療レジメンで治療している患者を治療するためのＰＣＳＫ９阻害剤の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
高脂血症とは、血液中の上昇したレベルの脂質及び／又はリポタンパク質により、特徴付けられるか、又は関連付けられる疾患及び障害を包含する一般的用語である。高脂血症には、高コレステロール血症、高トリグリセリド血症、高脂血症と高リポタンパク質ａ（Ｌｐ（ａ））との組合わせが含まれる。多くの集団において特に流行している高脂血症の形態は、高コレステロール血症である。多くの集団において、蔓延している高脂血症の特定の形態は、高コレステロール血症である。
【０００３】
高コレステロール血症、特に低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）コレステロール（ＬＤＬ−Ｃ）レベルの上昇は、アテローム性動脈硬化症及び冠状動脈性心疾患（ＣＨＤ）の発症の主要リスクを構成する（非特許文献１）。低密度リポタンパク質コレステロールは、コレステロール低下療法の主要な標的として同定され、有効な代替治療エンドポイントとして一般に受け入れられている。多くの研究で、ＬＤＬ−Ｃレベルを低下させると、ＬＤＬ−ＣレベルとＣＨＤイベントとの間の直接的で強い関係で、ＣＨＤのリスクが低下することを実証しており、ＬＤＬ−Ｃの１ｍｍｏｌ／Ｌ（約４０ｍｇ／ｄＬ）の減少につき、心血管疾患（ＣＶＤ）の死亡率及び罹患率が２２％低下する。ＬＤＬ−Ｃの減少が大きいほど、より大きなイベントの減少を産み出し、しかも、標準的なスタチン治療との集中的な比較データは、ＬＤＬ−Ｃレベルが低いほど、心血管（ＣＶ）リスクが非常に高い患者の利益がより大きくなることを示唆している。
【０００４】
家族性高コレステロール血症（ＦＨ）は、先天的な脂質代謝障害であり、このような人はより早い時期から心臓血管疾患（ＣＶＤ）にかかりやすくなる。低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）コレステロール（ＬＤＬ−Ｃ）の肝クリアランスに関与するタンパク質をコードする少なくとも３種の異なる遺伝子が欠損すると、ＦＨを引き起こし得る。そのような欠損の例としては、循環からＬＤＬ−Ｃを除去するＬＤＬ受容体（ＬＤＬＲ）をコードする遺伝子、及びＬＤＬ粒子の主要タンパク質であるアポリポタンパク質（Ａｐｏ）Ｂの遺伝子、における突然変異が挙げられる。ある種のＦＨの場合、ＬＤＬＲの分解に関与する酵素（機能変異の獲得）であるプロタンパク質転換酵素サブチリシン／ケキシン９型（ＰＣＳＫ９）をコードする遺伝子が変異されている。すべての症例において、ＦＨは、出生からの血漿中のＬＤＬ−Ｃの蓄積、及び腱のキサントーマ、キサンテラスマ、アテローム、及びＣＶＤのその後の発生を特徴とする。ＦＨは、個体が有する遺伝子に関連するコピーの遺伝的欠陥を１つの（ヘテロ接合性）又は両方の（ホモ接合性）に有するかどうかに応じて、ヘテロ接合ＦＨ（ｈｅＦＨ）又はホモ接合ＦＨ（ｈＦＨ）の何れかに分類することができる。
【０００５】
現在のＬＤＬ−Ｃ低下薬には、スタチン、コレステロール吸収阻害薬、フィブラート、ナイアシン、及び胆汁酸封鎖剤が挙げられる。スタチンは、ＬＤＬ−Ｃ低下のために一般的に処方される治療である。しかし、このような脂質低下療法が利用可能であるにもかかわらず、多くの高リスク患者は、それらのガイドラインの目標としてのＬＤＬ−Ｃレベル
に達することができない（非特許文献２）。利用可能な脂質改変治療（ＬＭＴ）にもかかわらず、依然としてＬＤＬ−Ｃのガイドラインの目標とするレベルを達成できない患者のために、リポタンパク質アフェレーシス（例、ＬＤＬアフェレーシス）によるＬＤＬ−Ｃの機械的除去が時々処方される。リポタンパク質アフェレーシスは、血液からアポタンパク質Ｂ１００含有リポタンパク質を除去する。これは、進行性心血管疾患と永続的に上昇したＬＤＬ−Ｃを有する患者のための最後の頼みの綱として一般的に見なされている。
【０００６】
然しながら、ＬＤＬアフェレーシスは、患者にとって侵襲的であり、負担の大きい高価な手順である。アフェレーシスは、一般に、患者からの機械的除去血液を含み、血液は体外で、遠心分離にかけ、ろ過又は他の分離工程に付し、望ましくない成分を除去し、次いで患者に再導入される。リポタンパク質アフェレーシスは、ＬＤＬ−Ｃ濃度を５０−７５％まで急激に低下させ、これは、アフェレーシス実施間の時間平均で約３０％ＬＤＬ−Ｃ低下に換算出来る。通常のアフェレーシスプロセスは、血清リポタンパク質濃度が一時的に低下し、引き続く時間の間に、リポタンパク質レベルは、上昇した「ベースライン」レベルにほぼ直線的に戻ることを特徴とする。リポタンパク質アフェレーシス療法の特徴であるリポタンパク質レベルのこの変動パターンは、一つの個体の生涯にわたり必要とする周期的アフェレーシス処置の必要性を説明する。更に、地理上の所在地に関してはアフェレーシス施設の多くがまばらであるため、多くの患者はこの処置のために、相当な距離を旅行し、患者のＬＤＬ−Ｃレベルと心臓血管のリスクにも依るが、通常３時間以上にわたり、毎週から４週間毎に投与を受けなければならない。更に、この処置には、頻繁な血管利用のためのシャントを設置する必要もある。低密度リポタンパク質アフェレーシスは、一般に良く許容されてはいるが、低血圧、低カルシウム血症、アレルギー反応、及び血清タンパク質レベルの急激な低下をもたらし得る。脂質低下薬のみで治療した患者と比較すると、脂質低下薬の他にアフェレーシスを受けている患者が生活の質（ＱＯＬ）（アンケートにより決定されるＱｏＬ）が、より低いことが報告されている（非特許文献３）。従って、最適化したＬＭＴ療法を受けたにもかかわらず、ＬＤＬ−Ｃ目標に達していない患者、及びＬＤＬ−Ｃを低下させるためのアフェレーシスを必要とする患者は、アフェレーシスの必要性を低減又は除去する能力のある代替ＬＤＬ−Ｃ低下療法に、多大な恩恵を受けるであろう。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Ｓｈａｒｒｅｔｔら、２００１、Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ  １０４：１１０８−１１１３
【非特許文献２】Ｇｉｔｔら、２０１０、Ｃｌｉｎ  Ｒｅｓ  Ｃａｒｄｉｏｌ  ９９（１１）：７２３−７３３
【非特許文献３】Ｓｃｈｉｅｌら、１９９５、Ｉｎｔ  Ｊ  Ａｒｔｉｆ  Ｏｒｇａｎｓ  １８：７８６−７９３
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は、リポタンパク質アフェレーシス療法を受けている患者における高脂血症の治療方法を提供する。本発明の治療方法は、血清リポタンパク質のレベルの低下をもたらし、それにより、患者のリポタンパク質アフェレーシスの必要性を除去又は低減するのに役立つ。特定の実施形態において、目標とするリポタンパク質のレベル（例、目標ＬＤＬ−Ｃレベル）を達成するために患者が必要とするアフェレーシス治療の頻度は、本発明の治療方法を適用することにより低減される。特定の実施形態において、本発明の治療方法を患者に適用することにより、目標とするリポタンパク質レベル（例えば、目標ＬＤＬ−Ｃレベル）を達成するためのアフェレーシスの必要性が除去される。      
【０００９】
一態様によれば、本発明の方法は、リポタンパク質アフェレーシスで治療している、若しくは（最近６ヶ月以内に）治療してきた患者に、ＰＣＳＫ９阻害剤の１種又はそれ以上の用量を投与することを含み、ここで、患者へのＰＣＳＫ９阻害剤の投与が、患者の血清中のリポタンパク質の少なくとも１種のレベルの低下をもたらし、結果として、患者によるリポタンパク質アフェレーシス治療の必要性を低減又は除去する。
【００１０】
別の態様によれば、本発明の方法は、初期（治療前）の頻度でリポタンパク質アフェレーシスで治療しているか又は治療してきた高コレステロール血症患者を選択すること、及び１回又はそれ以上のＰＣＳＫ９阻害剤を投与することを含み、それにより、患者の血清中のリポタンパク質の少なくとも１種のレベルを低下させ、結果として、目標とするリポタンパク質レベルを達成するために患者が必要とするリポタンパク質アフェレーシスの頻度を低下させる。
【００１１】
本発明の方法により治療する又は治療可能な患者としては、例えば、家族性高コレステロール血症（ＦＨ）の患者を含む高コレステロール血症の患者が含まれる。特定の実施形態では、本発明の方法により治療する又は治療可能な患者は、ホモ接合ＦＨ（ｈｏＦＨ）又はヘテロ接合ＦＨ（ｈｅＦＨ）と診断された（又は、そうでなければ有することが既知の）患者である。
【００１２】
本発明の特定の実施形態によれば、ＰＣＳＫ９阻害剤は、患者における既存の脂質低下治療（例えば、患者のバックグラウンドであるスタチン療法のその上）へのアドオン療法として患者に投与される。
【００１３】
本発明は又、リポタンパク質アフェレーシス治療の必要性を低減又は除去するために使用するか、又は患者によるリポタンパク質アフェレーシス治療の頻度を低減するために使用するためのＰＣＳＫ９阻害剤を含む医薬組成物を提供する。
【００１４】
本発明の方法の観点で使用し得る代表的なＰＣＳＫ９阻害剤には、例えば、抗ＰＣＳＫ９抗体、小分子ＰＣＳＫ９阻害剤、及び骨格をベースとするＰＣＳＫ９結合分子が含まれる。
【００１５】
本発明の他の実施形態は、以下に続く詳細な説明を概観することで明らかになるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】図１は、本明細書の実施例２に記載された試験の全体計画を示す図である。  この試験には、２週間のスクリーニング期間、１８週間の二重盲検治療期間、及び場合により８週間の追跡調査／非盲検の延長期間を含む。
【図２】図２は、プラセボ及びアリロクマブ治療患者群（ＩＴＴ集団）における７週目から１８週目までのアフェレーシス治療における個々の患者の減少の割合を示す滝プロットである。ポイントオブケア毎に休んだアフェレーシス治療のＬＤＬ−Ｃ値のみを、「アフェレーシスが起こらない」ものとしてカウントする。第７週から第１８週までのアフェレーシス処置情報の欠落（何らかの理由で）は、来院時に「起こった」アフェレーシス処置の結果に起因するものとする。
【図３】図３は、プラセボ及びアリロクマブ治療患者群における第７週〜第１８週の標準化したアフェレーシスの割合を示す。アフェレーシスの割合は、ｘ軸に沿って示されている。ｙ軸は、対応するアフェレーシス割合範囲を示す患者のパーセンテージを示す。
【図４】図４は、第７週から第１８週までの試験の種々の時点で、プラセボ及びアリロクマブで治療した患者のうちの、アフェレーシスを受けた患者の割合を示す。この表に示した患者は、試験開始時はアフェレーシスを毎週（ＱＷ）受けていた患者である。
【図５】図５は、第７週から第１８週までの試験の種々の時点で、プラセボ及びアリロクマブで治療した患者のうちの、アフェレーシスを受けた患者の割合を示す。この表に示した患者は、試験開始時はアフェレーシスを２週間毎に受けていた患者（Ｑ２Ｗ）である。
【図６】図６は、第７週から第１８週までの試験の種々の時点で、プラセボ及びアリロクマブで治療した患者のうちの、アフェレーシスを受けた患者の割合を示す。この表に示した患者は、研究に登録した全患者を表す。
【図７】図７は、試験計画の全期間中の種々の時点での、プラセボ及びアリロクマブ治療の患者群におけるベースラインからのＬＤＬ−Ｃパーセント変化の計算値を示す。「アフェレーシス変動」と表示された黒い矢印は、ＬＤＬ−Ｃレベルに基づいて個々の患者についてアフェレーシス頻度を前に進める時点を示す。この時点に先立ち、患者は、個々の患者のために確立したスケジュールに基づき一定の頻度でアフェレーシスを受けた。
【図８】図８は、試験期間中の種々の時点でのプラセボ及びアリロクマブ治療患者群における計算したＬＤＬ−Ｃレベル（ＬＳ平均（＋／−ＳＥ）ｍｇ／ｄＬで表される）を示す。「アフェレーシス変動」と表示された黒い矢印は、ＬＤＬ−Ｃレベルに基づいて個々の患者についてアフェレーシス頻度を前に進める時点を示す。この時点に先立ち、患者は、個々の患者のために確立したスケジュールに基づき一定の頻度でアフェレーシスを受けた。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
発明の詳細な説明
本発明を記載する前に、本発明は、方法及び条件が変わる可能性があるため、記載した特定の方法及び実験条件に限定するものではないことを理解されたい。又、本明細書で使用する用語は、特定の実施形態のみを説明するためのものであり、かつ、限定することを意図するものではないことも理解されたい、なぜなら、本発明の範囲は添付した特許請求の範囲によってのみ限定するつもりであるからである。
【００１８】
他に定義されない限り、本明細書で使用される全ての技術用語及び科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者が一般的に理解するのと同じ意味を有する。本明細書で使用する場合、「約」という用語は、列挙した特定の数値に関して使用する場合、その値は列挙した値から１％以下だけ変化し得ることを意味する。例えば、本明細書で使用する表現「約１００」は、９９及び１０１ならびにその間のすべての値（例えば、９９．１，９９．２，９９．３，９９．４など）を含む。
【００１９】
本発明の実施において、本明細書に記載されているものと類似又は等価な方法及び材料を任意に使用することができるが、ここでは好ましい方法及び材料を以下に記載する。本明細書中で言及した全ての刊行物は、その全体を記載するために参照により本明細書に組み込まれる。
【００２０】
リポタンパク質アフェレーシスの必要性を低減又は除去するための方法
本発明は、一般に、血清リポタンパク質レベル（例、ＬＤＬ−Ｃ及び／又はＬｐ（ａ））を低下させるために、リポタンパク質アフェレーシスを受けているか、又は受けてきた（例、最近６ヶ月以内又はそれ以上）患者のリポタンパク質レベルを低下させるための方法及び組成物に関する。特定の実施形態によれば、本発明の方法は、そのような患者の血清中のリポタンパク質レベルの低下をもたらし、その結果、リポタンパク質アフェレーシスの必要性を低減又は除去する。
【００２１】
本明細書で使用する「リポタンパク質」という用語は、タンパク質と脂質の両方を含む生体分子粒子を意味する。リポタンパク質の例としては、例えば、低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）、超低密度リポタンパク質（ＶＬＤＬ）、中密度リポタンパク質（ＩＤＬ）及
びリポタンパク質（ａ）（Ｌｐ（ａ））が含まれる。
【００２２】
本発明に関連して使用される場合、「リポタンパク質アフェレーシス」とは、患者から機械的な血液除去を行い、続いて患者の血液から、濾過、吸着、沈殿、等の工程を経て、リポタンパク質（例、ＬＤＬ−Ｃ及び／又はＬｐ（ａ））を除去し、そして最後に処理した血液を患者の血流の中に再導入することを含む治療工程を意味する。本開示の目的のために、「ＬＤＬアフェレーシス」及び「Ｌｐ（ａ）アフェレーシス」は、アフェレーシスの類型と見做し、従って、より一般的な定義「リポタンパク質アフェレーシス」の定義に包含される。
【００２３】
本発明の観点の中に包含されるリポタンパク質アフェレーシスの特定の類型としては、例えば、二重膜濾過、免疫吸着、ヘパリン誘発ＬＤＬ沈殿、脂質の直接吸着、デキストラン硫酸−セルロース吸着（血漿又は全血）、ヘパリン体外ＬＤＬ沈降（ＨＥＬＰ）システム、ＤＦＰＰ及び熱濾過血漿交換、及び血液灌流が挙げられる。
【００２４】
本発明は、特定の実施形態によれば、リポタンパク質アフェレーシス療法の必要性を除去する方法を含む。本明細書で使用する特定の患者の「リポタンパク質アフェレーシス療法の必要性」は、患者の血清中で測定、又は検出される１種又はそれ以上のリポタンパク質（例、ＬＤＬ−Ｃ及び／又はＬｐ（ａ））のレベルに基づいて、医師、医師の助手、診断医、又は医療専門家により、決定される。患者の「リポタンパク質アフェレーシス療法の必要性」は又、他の要因、例えば、患者の家族歴、医学的バックグラウンド、現在の治療療法の状況、並びに一般に受容され、若しくは流行している、全米医師会（ｎａｔｉｏｎａｌ  ｍｅｄｉｃａｌ  ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｓ）及び医師集団によって採用された目標とするリポタンパク質により、決定され得る、又は影響を受け得る。例えば、特定の状況において、約７０ｍｇ／ｄＬに等しいかそれ以上のＬＤＬ−Ｃレベルは、患者による「リポタンパク質アフェレーシス療法の必要性」を示す。他の状況では、約１００ｍｇ／ｄＬに等しいかそれ以上のＬＤＬ−Ｃレベルは、患者による「リポタンパク質アフェレーシス療法の必要性」を示す。特定の状況では、約１５０ｍｇ／ｄＬ、２００ｍｇ／ｄＬ、２５０ｍｇ／ｄＬ、３００ｍｇ／ｄＬ、４００ｍｇ／ｄＬに等しいかそれ以上のＬＤＬ−Ｃレベルは、患者による「リポタンパク質アフェレーシス療法の必要性」を示す。更に、他の観点では、ＬＤＬ−Ｃ又はＬｐ（ａ）レベルの減少が特定のパーセンテージに合致しているかどうかにかかわらず、特定の開始点「ベースライン」における患者のＬＤＬ−Ｃ又はＬｐ（ａ）レベルとの相対比較を、患者が「リポタンパク質アフェレーシス療法の必要性」を有するかどうかを決定するために使用しても良い。例えば、ベースラインから５０％未満（例、４０％未満、３５％未満、３０％未満、２５％未満等）のＬＤＬ−Ｃ又はＬｐ（ａ）の減少は、「リポタンパク質アフェレーシス療法の必要性」を意味する。
【００２５】
本発明は、特定の実施形態によれば、患者のリポタンパク質アフェレーシス療法の頻度を減少させる方法を含む。当業者には理解されるように、特定のリポタンパク質目標（例、ＬＤＬ−Ｃレベル１００ｍｇ／ｄＬ未満、又はＬＤＬ−Ｃレベル７０ｍｇ／ｄＬ未満）を達成するために、患者を特定の頻度によるリポタンパク質アフェレーシス療法で治療しても良い。所定の頻度は、患者がリポタンパク質目標を達成し、かつ、維持するために、特定期間（例、毎週、毎月など）に患者が必要とするアフェレーシス治療の回数に基づいて決定される。代表的なリポタンパク質アフェレーシス頻度としては、例えば、週１回、２週間に１回、３週間に１回、４週間に１回、５週間に１回、１ヶ月に１回、１ヶ月に２回、２ヶ月に１回等が挙げられる。本発明は  １回又はそれ以上の用量のＰＣＳＫ９阻害剤を患者に投与することにより、患者におけるリポタンパク質アフェレーシス療法の頻度を低減する方法を含む。本発明の特定の実施形態によれば、１回又はそれ以上のＰＣＳＫ９阻害剤の投与後のアフェレーシスの頻度は、患者の治療前アフェレーシス頻度から少なくとも５０％は減少する。例えば、ＰＣＳＫ９阻害剤による治療をする前の患者が、リポ
タンパク質アフェレーシス治療レジメン上、１週間に１回の頻度（ＱＷ）であり、ＰＣＳＫ９阻害剤による治療をした後の患者に関するアフェレーシス頻度が２週間に１回（Ｑ２Ｗ）に減少した場合、患者は治療後にリポタンパク質アフェレーシス頻度の５０％減少を達成したと言う。特定の実施形態では、本発明によるＰＣＳＫ９阻害剤を１回又はそれ以上投与した後のアフェレーシスの頻度は、７５％、又は１００％低減した（即ち、治療後のリポタンパク質アフェレーシスの必要性の除去）。
【００２６】
本発明との関連において、リポタンパク質アフェレーシス頻度は、治療前頻度及び治療後頻度の面から表しても良い。「治療前頻度」とは、ＰＣＳＫ９阻害剤の投与を含む治療レジメンの開始前に、目標とする特定のリポタンパク質レベルを達成及び／又は維持するために患者に必要とされていたアフェレーシス療法の頻度を意味する。「治療後頻度」とは、ＰＣＳＫ９阻害剤の投与を含む治療レジメンの開始後に、目標とする特定のリポタンパク質レベルを達成及び／又は維持するために患者に必要とされるアフェレーシス療法の頻度を意味する。特定の患者にとっての、目標とする特定のリポタンパク質レベルを達成及び／又は維持するために必要とされるアフェレーシス療法の頻度は、好ましくは、当業界で普遍的に受容されている、低減又は制御を望むリポタンパク質の血清レベル、を含む判定基準に基づき有資格医療専門家により決定される。
【００２７】
従って、本発明は、１回又はそれ以上の用量のＰＣＳＫ９阻害剤を患者に投与することを含む治療方法であって、患者のリポタンパク質アフェレーシスの治療後頻度が、患者のリポタンパク質アフェレーシスの治療前頻度より少ない。例えば、本発明は、ＰＣＴＫ９阻害剤の１回又はそれ以上の用量を、例えば週１回の治療前頻度でリポタンパク質アフェレーシス療法を受けているか又は受けていた患者に投与することを含む治療方法を含み、ここで、ＰＣＴＫ９阻害剤の１回又はそれ以上の用量を受けた後、目標とする特定のリポタンパク質レベル（すなわち、治療後頻度）を達成及び／又は維持するために患者に必要とされるリポタンパク質アフェレーシスの頻度は、例えば、２週間に１回、３週間に１回、又は４週間に１回、又はより少ない頻度である。いくつかの例では、目標とする特定のリポタンパク質レベルを達成及び／又は維持するために患者が必要とするリポタンパク質アフェレーシスの必要性は、ＰＣＳＫ９阻害剤の１回又はそれ以上の用量を投与後に完全に除去される。
【００２８】
特定の実施形態によれば、本発明は、リポタンパク質アフェレーシス治療の必要性を低減又は除去する方法であって、その方法は、最近月に、最近２ヶ月間に、最近３ヶ月間、最近４ヶ月間、最近５ヶ月間、最近６ヶ月間、又はより長い期間にわたり、リポタンパク質アフェレーシスで治療を受けている高脂血症（例えば高コレステロール血症）の患者を選出し、１回又はそれ以上の用量のＰＣＳＫ９阻害剤を投与することを含む。本発明のこの態様による方法は、患者の血清中の少なくとも１種のリポタンパク質のレベルを低下させ、結果として、患者によるリポタンパク質アフェレーシス療法の必要性を低減又は除去することが可能になる。例えば、本発明の特定の実施形態では、１回又はそれ以上の用量のＰＣＳＫ９阻害剤の投与後、目標とする特定のリポタンパク質レベルを達成及び／又は維持するために患者に必要なリポタンパク質アフェレーシス療法の治療後頻度が低下するように、又はリポタンパク質アフェレーシスがもはや必要ないと結論付けられるように、患者の血清ＬＤＬ−Ｃレベルを所定のレベル未満（例、１００ｍｇ／ｄＬ未満又は７０ｍｇ／ｄＬ未満）に低下させる。
【００２９】
特定の実施形態において、アフェレーシスの割合（又は頻度）は、目標とする特定のリポタンパク質レベルを達成及び／又は維持するために患者に必要なアフェレーシスの正規化率として表される。本明細書中で使用される場合、特定の患者のアフェレーシスの正規化率は、抗ＰＣＳＫ９治療レジメンの開始後の定義された期間に亘り患者が受けた実際のアフェレーシス治療の回数を、抗ＰＣＳＫ９治療レジメンの開始前に同等の期間に亘り患
者が受けたアフェレーシス治療の回数で割ったものして定義する。例えば、抗ＰＣＳＫ９抗体の投与を含む治療レジメンを開始する前に、患者が８週間にわたり（例、週に１回）８回のアフェレーシス治療を受け、抗ＰＣＳＫ９治療レジメンを開始した後、患者が  ８週間にわたり（例、４週間毎に１回）に２回のアフェレーシス処置を受けた場合、患者のアフェレーシスの正規化率は２／８＝０．２５である。本発明は、ＰＣＳＫ９阻害剤を投与した後の患者のアフェレーシスの正規化率が、例えば０．９未満、０．８未満、０．７未満、０．６未満、０．５未満、０．４未満、０．３未満、０．２未満、又は０．１未満である方法を含む。
【００３０】
特定の実施形態によれば、本発明の方法により治療可能な患者は、高コレステロール血症（例、７０ｍｇ／ｄＬ若しくは、それ以上の血清ＬＤＬ−Ｃ濃度、又は１００ｍｇ／ｄＬ若しくは、それ以上の血清ＬＤＬ−Ｃ濃度）を有する。特定の実施形態において、患者の高コレステロール血症は、スタチン療法では不適切に制御される。例えば、本発明は、患者によるリポタンパク質アフェレーシス療法の頻度を低減又は除去する方法であり、その患者はアトルバスタチン（アトルバスタチン＋エゼチミブを含む）、ロスバスタチン、セリバスタチン、ピタバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、シンバスタチン（シンバスタチン＋エゼチミブを含む）、プラバスタチン、及びそれらの組合わせから成る群から選択されたスタチンの毎日の用量により不適切に制御される高コレステロール血症を有する。本発明は又、高コレステロール血症を有し、スタチン不耐性を示すか、又はスタチン療法に対して他の経験または望ましくない反応を経験（例、骨格筋痛、疼痛、衰弱又は痙攣（例えば、筋肉痛、筋障害、横紋筋融解症など））した患者によるリポタンパク質アフェレーシス療法の頻度を低減又は除去する方法を含む。
【００３１】
脂質病変の治療法
本発明は更に、高コレステロール血症の身体徴候を治療し、復帰し又は回復するための方法及び組成物に関する。特定の実施形態によれば、本発明は、高コレステロール血症に関連する脂質病変を有する患者を治療するための方法を提供する。例えば、本発明は、１つ又はそれ以上のキサンテラスマ（ｘａｎｔｈｅｌａｓｍａｔａ．）を有する患者を治療するための方法を提供する。本発明のこの態様による方法及び組成物は、１回又はそれ以上の用量のＰＣＳＫ９阻害剤を、それを必要とする患者に投与することを含み、ＰＣＳＫ９阻害剤による治療の前に患者に存在していた脂質病変が、１回又はそれ以上の用量のＰＣＳＫ９阻害剤を患者に投与した後に、減少し、回復し若しくは除去する。特定の実施形態によれば、本発明は、高コレステロール血症に関連する脂質病変を有する患者を治療する方法であって、脂質病変（例えば、キサンテン）を有する患者の選択と、患者への１回又はそれ以上の用量のＰＣＳＫ９阻害剤の投与を含む。
【００３２】
患者の選出
本発明は、リポタンパク質アフェレーシスを受けているか、又は最近（例、最近６ヶ月以内、最近１２週間以内、最近８週間以内、最近６週間以内、最近４週間以内、最近２週間以内など）受けた患者を治療するのに有用な方法及び組成物を含む。本発明の方法によって治療可能な患者は又、１つ又はそれ以上の更なる選択基準を示すこともできる。例としては、患者が、例えば、ヘテロ接合性家族性高コレステロール血症（ｈｅＦＨ）、ホモ接合性家族性高コレステロール血症（ＨＩＦＨ）、常染色体優性高コレステロール血症（ＡＤＨ、例、ＰＣＳＫ９遺伝子における１つ又はそれ以上の機能獲得変異に関連するＡＤＨ）、常染色体劣性高コレステロール血症（ＡＲＨ、例、ＬＤＬＲＡＰ１における変異に関連するＡＲＨ）並びに、家族性高コレステロール血症（非ＦＨ）とは明確に異なる高コレステロール血症の発生等の高コレステロール血症状態が発生するリスクが有ると診断又は同定された場合、患者は本発明の方法による治療を選択しても良い。家族性高コレステロール血症（例えば、ｈｅＦＨ又はｈｏＦＨ）の診断は、遺伝子型解析及び／又は臨床基準によって行うことができる。遺伝子型が決定されていない患者の場合、臨床診断は、明
確なＦＨの基準を有するＳｉｍｏｎ  Ｂｒｏｏｍｅ基準又はスコア＞８点を有するＷＨＯ／オランダの脂質ネットワーク基準の何れかに基づくことができる。
【００３３】
特定の実施形態によれば、患者は、冠状動脈性心疾患（ＣＨＤ）の病歴を有することに基づいて選出しても良い。本明細書で使用される「ＣＨＤの病歴」（又は「ＣＨＤの既往歴」）としては、（ｉ）急性心筋梗塞（ＭＩ）（ｉｉ）無症候性ＭＩ（ｉｉｉ）不安定狭心症（ｉｖ）冠動脈血管再建術（例えば、経皮的冠動形成術（ＰＣＩ）又は冠動脈バイパス移植手術（ＣＡＢＧ））、及び／又は（ｖ）侵襲的又は非侵襲的検査（冠動脈造影、トレッドミルによるストレス検査、負荷心エコー検査又は核医学イメージング（ｎｕｃｌｅａｒ  ｉｍａｇｉｎｇ）など）によって診断された臨床的に有意なＣＨＤ等、の内の一つ又はそれ以上を含む。
【００３４】
特定の実施形態によれば、患者は、非冠状動脈性心疾患心血管疾患（「非ＣＨＤ  ＣＶＤ」）を有することに基づいて選出しても良い。本明細書で使用される「非ＣＨＤ  ＣＶＤ」としては、（ｉ）以前の既往歴であり、アテローム血栓性起源であると考えられ、２４時間を超えて持続した局所虚血性神経学的欠損を有する虚血性脳卒中（ｉｉ）末梢動脈疾患（ｉｉｉ）腹部大動脈瘤；（ｉｖ）アテローム性動脈硬化性腎動脈狭窄及び／又は（ｖ）頸動脈疾患（一過性虚血発作又は頸動脈の５０％超の閉塞）のうちの一つ又はそれ以上を含む。
【００３５】
特定の実施形態によれば、患者は、以下の（ｉ）〜（ｉｉｉ）の内の１つ又はそれ以上の更なるリスク因子を有することに基づいて選出しても良く、例えば、（ｉ）３ヶ月又はそれ以上３０≦ｅＧＦＲ＜６０ｍＬ／ｍＬ／ｍｉｎ／１．７３ｍ２であることで定義されるような、中程度の慢性腎疾患（ＣＫＤ）の既往歴、（ｉｉ）標的臓器損傷（例えば、網膜症、腎症、微小アルブミン尿症）の有無には関わりなく、１型又は２型真性糖尿病、（ｉｉｉ）算出した１０年間の致命的ＣＶＤリスクスコアが５％以上である（異常脂質血症の管理のためのＥＳＣ／ＥＡＳガイドライン、Ｃｏｎｒｏｙ  ｅｔ  ａｌ、２００３、ＥｕＨｅａｒｔ  Ｊ．２４：９８７−１００３）である。
【００３６】
特定の実施形態によれば、患者は、年齢（例、４０歳、４５歳、５０歳、５５歳、６０歳、６５歳、７０歳、７５歳、又は８０歳）人種、出身国、性別（男性又は女性）、運動習慣（例、定期的な運動者、非運動者）、他の既存の病状（例、ＩＩ型糖尿病、高血圧等）、及び現在の投薬状態（例、現時点で摂取しているベータ遮断剤、ナイアシン、エゼチミブ、フィブラート、オメガ−３脂肪酸、胆汁酸樹脂など）から成る群から選ばれた一つ又はそれ以上の追加的リスクを有していることに基づき選出しても良い。
【００３７】
本発明によれば、患者は、前述の選択基準又は治療特性のうちの１つ又はそれ以上の組合わせに基づいて選出しても良い。例えば、特定の実施形態によれば、本発明の方法での治療に適した患者は、リポタンパク質アフェレーシスを受けている、又は最近受けた（例えば、最近の６ヶ月以内に）外に、更に、（ｉ）既往歴としてのＣＨＤ（ｉｉ）非ＣＨＤ
ＣＶＤ、及び／又は（ｉｉｉ）標的臓器損傷を有する真性糖尿病と組み合わせて、ＦＨ又は非ＦＨを有することに基づいて選出しても良く、そのような患者はまた、７０ｍｇ／ｄＬ以上の血清ＬＤＬ−Ｃ濃度を有することに基づいて選択しても良い。
【００３８】
特定の他の実施形態によれば、本発明の方法による治療に適した患者は、毎日の中程度の用量の治療用スタチン計画によって適切に制御されない高コレステロール血症を有する外に、更に、ＣＨＤ又は非ＣＨＤ  ＣＶＤ無しのＦＨ又は非ＦＨ、を有することに基づいて選出しても良く、然し（ｉ）算出された１０年間の致命的ＣＶＤリスクＳＣＯＲＥ≧５％であるか又は（ｉｉ）標的臓器損傷のない真性糖尿病のどちらか、そのような患者もまた、１００ｍｇ／ｄＬ又はそれ以上の血清ＬＤＬ−Ｃ濃度を有することに基づいて選択し
ても良い。
【００３９】
アドオン療法としてのＰＣＳＫ９阻害剤の投与
本発明は、リポタンパク質アフェレーシスを受けている患者、又は最近受けていた患者に、特定の投与量及び頻度に従ってＰＣＳＫ９阻害剤を投与し、かつＰＣＳＫ９阻害剤を、患者が既に実施している毎日の治療用スタチンレジメンにアドオンするように、患者が既に実施している毎日の脂質低下療法（適用出来る場合）へのアドオンとして投与する治療方法を含む。
【００４０】
例えば、本発明の方法は、ＰＣＳＫ９阻害剤を、アドオン療法として、患者がＰＣＳＫ９阻害剤を受ける前に実施している、同じ安定した毎日の治療用スタチンレジメン（即ち、スタチンの投与量は同じ）に投与するアドオン治療レジメンを含む。他の実施形態では、ＰＣＳＫ９阻害剤は、ＰＣＳＫ９阻害剤を投与する前に患者が実施していたスタチンの用量より多い又は少ない量のスタチンを含む治療用スタチンレジメンへのアドオン療法として投与する。例えば、特定の投薬頻度及び量で投与されるＰＣＳＫ９阻害剤を含む治療レジメンを開始した後、患者に投与又は処方されるスタチンの１日用量は、ＰＣＳＫ９阻害剤治療レジメンを開始する前に患者の治療ニーズに応じて、患者が摂取していた毎日のスタチン用量と比較して（ａ）同量を維持するか（ｂ）増加するか、又は（ｃ）減少して（例えば、アップタイトレーション又はダウンタイトレション）も良い。
【００４１】
治療効果    
本発明の方法は、ＬＤＬ−Ｃ、ＡｐｏＢ１００、非ＨＤＬ−Ｃ、総コレステロール、ＶＬＤＬ−Ｃ、トリグリセリド、Ｌｐ（ａ）及び残存コレステロールからなる群から選択される１種又はそれ以上の脂質成分の血清レベルでの低下をもたらす。従って、本発明の治療レジメンのリポタンパク質低下効果は、患者が目標とするリポタンパク質のレベルを達成するためのリポタンパク質アフェレーシスの頻度を低減し、又は必要性を無くす。例えば、本発明の特定の実施形態によれば、ＰＣＳＫ９阻害剤を含む医薬組成物を、リポタンパク質アフェレーシスを受けているか、又は最近受けた患者に投与すると、血清中の低密度リポタンパク質コレステロール（ＬＤＬ−Ｃ）のベースラインからの平均減少率が少なくとも約２５％、３０％、４０％、５０％、６０％、又はそれ以上、ＡｐｏＢ１００中のベースラインからの平均減少率が少なくとも約２５％、３０％、４０％、５０％、６０％、又はそれ以上、非ＨＤＬ−Ｃ中のベースラインからの平均減少率が少なくとも約２５％、３０％、４０％、５０％、６０％、又はそれ以上、総コレステロール中のベースラインからの平均減少率が少なくとも約１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％又はそれ以上、ＶＬＤＬ−Ｃ中のベースラインからの平均減少率が少なくとも約５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％又はそれ以上、トリグリセリド中のベースラインからの平均減少率が；少なくとも約５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％又はそれ以上、及び／又は、Ｌｐ（ａ）中のベースラインからの平均減少率が少なくとも約５％、１０％、１５％、２０％、２５％又はそれ以上という結果をもたらす。
【００４２】
本発明は、高コレステロール血症を有する患者を治療する方法であって、その方法は、複数回用量の抗ＰＣＳＫ９抗体を１用量あたり約７５〜１５０ｍｇの投薬量で、及び２週間毎に約１回の投薬頻度、患者に投与すること（又は本明細書の他の箇所に記載されているようなアップタイトレーション投与レジメンに従う投与レジメン）を含み、ここで、患者はリポタンパク質アフェレーシスを受けているか、又は最近受けたことがあり、抗ＰＣＳＫ９抗体による治療の後、約１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４又はそれ以上の週に、患者は、ＬＤＬ−Ｃレベルがベースラインから少なくとも５０％の低下を示し、従って、患者によるリポタンパク質アフェレーシスの頻度が減少し又は、必要性の除去をもたらす。ある実施形態では、抗ＰＣＳＫ９抗体での治療後１週間又はそれ以上の後、患者は、ベースラインから約５５％、６０％、７０％、又はそれ以上のＬＤＬ−Ｃレベルの
低下を示す。
【００４３】
ＰＣＳＫ９  阻害剤
本発明の方法は、ＰＣＳＫ９阻害剤を含む治療用組成物を患者に投与することを含む。本明細書で使用する場合、「ＰＣＳＫ９阻害剤」は、ヒトＰＣＳＫ９に結合し、又は相互作用し、インビトロ又はインビボでＰＣＳＫ９の正常な生物学的機能を阻害する任意の薬剤である。ＰＣＳＫ９阻害剤に分類される例としては、小分子ＰＣＳＫ９アンタゴニスト、ＰＣＳＫ９発現又は活性の核酸ベース阻害剤（例、ｓｉＲＮＡ又はアンチセンス）、ＰＣＳＫ９と特異的に相互作用するペプチドベースの分子（例、ペプチボディ）、ＰＣＳＫ９と特異的に相互作用する受容体分子、ＬＤＬ受容体のリガンド結合部分を含むタンパク質、ＰＣＳＫ９結合骨格分子（例えば、ＤＡＲＰｉｎｓ、ＨＥＡＴリピートタンパク質、ＡＲＭリピートタンパク質、テトラリコペプチドリピートタンパク質、フィブロネクチンベースの骨格構築物、及び天然由来のリピートタンパク質ベースの他の骨格（例、Ｂｏｅｒｓｍａ  ａｎｄ  Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ、２０１１、Ｃｕｒｒ。Ｏｐｉｎ。Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ。２２：８４９−８５７及び、その中に引用された参考文献参照］）、及び抗ＰＣＳＫ９アプタマー又はその一部を挙げられるが、これらに限定する訳ではない。特定の実施形態によれば、本発明の観点で使用出来る、ＰＣＳＫ９阻害剤は、抗ＰＣＳＫ９抗体、又はヒトＰＣＳＫ９に特異的に結合する抗体の抗原結合断片である。
【００４４】
本明細書中で使用する場合、用語「ヒトプロタンパク質転換酵素サブチリシン／ケキシン９型」又は「ヒトＰＣＳＫ９」若しくは「ｈＰＣＳＫ９」は、配列番号１９７に示される核酸配列を有するＰＣＳＫ９及び配列番号１９８のアミノ酸配列、又はその生物学的に活性な断片を意味する。
【００４５】
本明細書で使用する用語「抗体」は、ジスルフィド結合によって相互に連結された２本の重（Ｈ）鎖及び２本軽（Ｌ）鎖である４本のポリペプチド鎖を含む、免疫グロブリン分子、並びにその多量体（例えば、ＩｇＭ）を指すことを意図している。各重鎖は、重鎖可変領域（本明細書ではＨＣＶＲ又はＶＨと略記）及び重鎖定常領域を含む。重鎖定常領域は、３つのドメイン、ＣＨ１、ＣＨ２及びＣＨ３を含む。各軽鎖は、軽鎖可変領域（本明細書ではＬＣＶＲ又はＶＬと略記）及び軽鎖定常領域を含む。軽鎖定常領域は、１つのドメイン（ＣＬ１）を含む。ＶＨ及びＶＬ領域は、相補性決定領域（ＣＤＲ）と呼ばれる超可変領域に更に細分し、フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれる、より保存される領域に散在させることが出来る。ＶＨ及びＶＬの各々は、３つのＣＤＲと４つのＦＲから構成され、アミノ末端からカルボキシ末端にＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４の順で配置されている。本発明の種々の実施形態において、抗ＰＣＳＫ９抗体（又はその抗原結合部分）のＦＲは、ヒト生殖系列配列と同一であっても、又は天然に若しくは人工的に変性してあっても良い。アミノ酸コンセンサス配列は、２つ以上のＣＤＲの並列分析に基づいて定義することが出来る。
【００４６】
本明細書で使用する「抗体」という用語は、完全抗体分子の抗原結合断片も含む。本明細書中で使用する抗体の「抗原結合部分」、抗体の「抗原結合断片」等の用語は、抗原に特異的に結合し複合体を形成する、天然に存在し、酵素的に入手可能な、合成された、又は遺伝子操作されたポリペプチド、又は糖タンパク質の何れをも含む。抗体の抗原結合断片は、例えば、タンパク質消化、又は抗体可変及び場合により定常ドメインをコードするＤＮＡの操作及び発現を含む組換え遺伝子工学技術などの適切な標準技術の何れかを使用して完全抗体分子から誘導しても良い。このようなＤＮＡは公知であり、及び／又は例えば商業的供給源から、ＤＮＡライブラリー（例えばファージ−抗体ライブラリーを含む）から容易に入手可能であり、又は合成しても良い。ＤＮＡは、化学的に、又は分子生物学技術を用いて配列決定及び操作することができ、例えば、１つ又はそれ以上の可変及び／又は定常ドメインを適切な配置に並べ、又はコドンを導入し、又は、システイン残基を作
製し、アミノ酸を変性し、付加又は削除、等、しても良い。
【００４７】
限定する訳ではないが、抗原結合断片の例としては、（ｉ）Ｆａｂ断片（ｉｉ）Ｆ（ａｂ’）２断片（ｉｉｉ）Ｆｄ断片（ｉｖ）Ｆｖ断片（ｖ）一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）分子（ｖｉ）ｄＡｂ断片、及び（ｖｉｉ）抗体の超可変領域（例えば、ＣＤＲ３ペプチドのような単離された相補性決定領域（ＣＤＲ））を模倣するアミノ酸残基からなる最小認識単位、又は拘束ＦＲ３−ＣＤＲ３−ＦＲ４ペプチドが挙げられる。ドメイン特異的抗体、単一ドメイン抗体、ドメイン欠失抗体、キメラ抗体、ＣＤＲグラフト抗体、ダイアボディ、トリアボディ、テトラボディ、ミニボディ、ナノボディ（例えば、一価ナノボディ、二価ナノボディ等）小モジュラー免疫薬剤（ＳＭＩＰ）、及びサメ可変ＩｇＮＡＲドメイン等、他の改変分子も又、本明細書中で使用する「抗原結合断片」という表現内に包含する。
【００４８】
抗体の抗原結合断片は、通常は、少なくとも１つの可変ドメインを含むものである。可変ドメインは、任意のサイズ又はアミノ酸組成物でも良く、一般に、少なくとも１つのＣＤＲを含み、１つ又はそれ以上のフレームワーク配列に隣接するか、又はフレーム内にある。ＶＬドメインと会合したＶＨドメインを有する抗原結合断片において、ＶＨドメイン及びＶＬドメインは、任意の適切な配置で互いに相対して位置し得る。例えば、可変領域は二量体であり、ＶＨ−ＶＨ、ＶＨ−ＶＬ又はＶＬ−ＶＬ二量体を含んでも良い。或いは又、抗体の抗原結合断片は、単量体ＶＨ又はＶＬドメインを含んでも良い。
【００４９】
特定の実施形態では、抗体の抗原結合断片は、少なくとも１つの定常ドメインに共有結合した少なくとも１つの可変ドメインを含み得る。本発明の抗体の抗原結合断片内に見出され得る可変ドメイン及び定常ドメインの代表的配置には、これに限定する訳ではないが、以下の（ｉ）ＶＨ−ＣＨ１（ｉｉ）ＶＨ−ＣＨ２（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＨ３（ｉｖ）ＶＨ−ＣＨ１−ＣＨ２（ｖ）ＶＨ−ＣＨ１−ＣＨ２−ＣＨ３（ｖｉ）ＶＨ−ＣＨ２−ＣＨ３（ｖｉｉ）ＶＨ−ＣＬ（ｖｉｉｉ）ＶＬ−ＣＨ１（ｉｘ）ＶＬ−ＣＨ２（ｘ）ＶＬ−ＣＨ３（ｘｉ）ＶＬ−ＣＨ１−ＣＨ２（ｘｉｉ）ＶＬ−ＣＨ１−ＣＨ２−ＣＨ３（ｘｉｉｉ）ＶＬ−ＣＨ２−ＣＨ３（ｘｉｖ）ＶＬ−ＣＬが含まれる。上記に挙げた代表的な配置の何れかを含む、可変ドメイン及び定常ドメインの何れかの配置において、可変ドメイン及び定常ドメインは、互いに直接連結していても良く、又は完全若しくは部分ヒンジ又はリンカー領域により連結していても良い。ヒンジ領域は、少なくとも２つ（例えば、５、１０、１５、２０、４０、６０又はそれ以上）のアミノ酸から成っていても良く、それは単一のポリペプチド分子内で、隣接する可変ドメイン及び／又は定常ドメインとの間で可撓性又は半可撓性の連結をもたらす。更に、本発明の抗体の抗原結合断片は、相互に非共有結合的に会合して、及び／又は１つ以上の単量体ＶＨ又はＶＬドメイン（例、ジスルフィド結合によって）と共に、上記に列挙した任意の可変及び不変ドメイン配置のホモ二量体又はヘテロ二量体（又は他の多量体）を含んでいても良い。
【００５０】
完全抗体分子と同様に、抗原結合断片は、単一特異性又は多重特異性（例えば、二重特異性）であり得る。抗体の多重特異性抗原結合断片は、通常少なくとも２つの異なる可変ドメインを含み、可変ドメイン各々は、別々の抗原又は同じ抗原上の異なるエピトープに特異的に結合する能力を有する。本明細書中に開示する代表的な二重特異性抗体形式を含む任意の多重特異性抗体形式は、当該分野で利用可能な日常的な技術を使用して、本発明の抗体の抗原結合断片の観点で適合させ使用しても良い。
【００５１】
抗体の定常領域は、抗体が補体を固定し、細胞依存性細胞毒性を媒介する能力において重要である。従って、抗体のアイソタイプは、抗体が細胞毒性を媒介することが望ましいかどうかに基づいて選択され得る。
【００５２】
本明細書で使用する用語「ヒト抗体」とは、ヒト生殖系列免疫グロブリン配列に由来す
る可変領域及び定常領域を有する抗体を含むことを意図している。それにもかかわらず、本発明のヒト抗体は、例えばＣＤＲ中で、及び特にＣＤＲ３中で、ヒト生殖系列免疫グロブリン配列（例、インビトロでのランダム又は部位特異的突然変異誘発又はインビボでの体細胞突然変異により導入された変異）によっては、コードされないアミノ酸残基を含んでも良い。然しながら、本明細書で使用する用語「ヒト抗体」は、マウスなどの別の哺乳動物種の生殖細胞系に由来するＣＤＲ配列がヒトフレームワーク配列上に移植された抗体を含まないことを意図している。
【００５３】
本明細書中で使用する場合、用語「組換えヒト抗体」とは、組換え手段により、調製、発現、作製又は単離されるヒト抗体の全てを含むことを意図し、例えば、宿主細胞にトランスフェクトされた組換え発現ベクターを用いて発現された抗体（更に後述する）、組換えした組合せヒト抗体ライブラリーから単離した抗体（更に後述する）、ヒト免疫グロブリン遺伝子による遺伝子組換え動物（例えば、マウス）から単離した抗体（例、Ｔａｙｌｏｒら（１９９２）Ｎｕｃｌ。Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ。２０：６２８７−６２９５を参照）又は、ヒト免疫グロブリン遺伝子配列と他のＤＮＡ配列との継合わせを含む任意の他の手段によって調製、発現、作製又は単離された抗体を含むことを意図している。そのような組換えヒト抗体は、ヒト生殖系列免疫グロブリン配列に由来する可変領域及び定常領域を有する。然しながら、特定の実施形態では、このような組換えヒト抗体は、インビトロ突然変異誘発（又は、ヒトＩｇ配列の遺伝子組換動物が使用する場合、インビボでの体細胞突然変異誘発）に供され、従って、組換え抗体のＶＨ及びＶＬ領域のアミノ酸配列は、ヒト生殖細胞系のＶＨ及びＶＬ配列に由来し、かつ関連するが、インビボでのヒト抗体生殖系列レパートリー内に天然では存在しない配列である。
【００５４】
ヒト抗体は、ヒンジ異質性に関連する２つの形態で存在することができる。１つの形態では、免疫グロブリン分子は、約１５０〜１６０ｋＤａの安定な４本鎖構築物を含み、ここで二量体は鎖間重鎖ジスルフィド結合によって一緒に保持されている。第２の形態では、二量体は鎖間ジスルフィド結合を介して連結されず、共有結合した軽鎖及び重鎖（半抗体）から構成される約７５〜８０ｋＤａの分子が形成されている。これらの形態は、アフィニティ精製後でさえ、分離することが極めて困難であった。
【００５５】
種々のインタクトなＩｇＧアイソタイプにおける第２の形態の出現頻度は、抗体のヒンジ領域アイソタイプに関連する構造的差異に起因するが、これに限定する訳ではない。ヒトＩｇＧ４ヒンジのヒンジ領域における単一のアミノ酸置換により、第２の形態（Ａｎｇａｌら（１９９３）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  ３０：１０５）の出現を、ヒトＩｇＧ１ヒンジを用いて通常観察されるレベルまで顕著に低下させることが出来る。本発明は、ヒンジ、ＣＨ２又はＣＨ３領域内に１つ又はそれ以上の変異を有する抗体を包含しても良く、これは、例えば、産生時にて所望する形態の抗体の収率を改善するために、望ましい。
【００５６】
本明細書で使用する「単離された抗体」とは、同定され、その自然環境の少なくとも１つの成分から分離及び／又は回収された抗体を意味する。例えば、生物の少なくとも１つの成分から、又は抗体が天然に存在するか若しくは天然に産生する組織若しくは細胞から、分離又は除去された抗体が、本発明の目的のための「単離された抗体」である。単離された抗体はまた、組換え細胞内のインシチュの抗体を含む。単離された抗体は、少なくとも１回の精製又は単離工程に供された抗体である。特定の実施形態によれば、単離された抗体は、他の細胞材料及び／又は化学物質を実質的に含み得ない。
【００５７】
「特異的に結合する」などの用語は、抗体又はその抗原結合断片が、生理学的条件下で比較的安定な抗原と複合体を形成することを意味する。抗体が抗原に特異的に結合するかどうかを決定するための方法は、当技術分野で周知であり、例えば、平衡透析、表面プラ
ズモン共鳴などが挙げられる。例えば、本発明の観点で使用されるＰＣＳＫ９に「特異的に結合する」抗体としては、ＰＣＳＫ９又はその一部に結合する抗体を表面プラズモン共鳴アッセイで測定したＫＤが約１０００ｎＭ未満、約５００ｎＭ未満、約３００ｎＭ未満、約２００ｎＭ未満、約１００ｎＭ未満、約９０ｎＭ未満、約８０ｎＭ未満、約７０ｎＭ未満、約６０ｎＭ未満、約５０ｎＭ未満、約４０ｎＭ未満、約３０ｎＭ未満、約２０ｎＭ未満、約１０ｎＭ未満、約５ｎＭ未満、約４ｎＭ未満、約３ｎＭ未満、約２ｎＭ未満、約１ｎＭ未満、又は約０．５ｎＭ未満のものを含む。然しながら、ヒトＰＣＳＫ９に特異的に結合する単離された抗体は、他の（非ヒト）種由来のＰＣＳＫ９分子のような他の抗原に対して交差反応性を有する。
【００５８】
本発明の方法に有用な抗ＰＣＳＫ９抗体は、抗体の由来する対応する生殖系列配列と比較対照して、重鎖及び軽鎖可変ドメインのフレームワーク及び／又はＣＤＲ領域における１つ又はそれ以上のアミノ酸置換、挿入及び／又は欠失を含んでも良い。そのような突然変異は、本明細書中に開示されるアミノ酸配列を、例えば公的抗体配列データベースから入手可能な生殖系列配列と比較することによって容易に確認し得る。本発明は、本明細書に開示したアミノ酸配列の何れかに由来する抗体及びその抗原結合断片の使用に関わる方法を含み、１つ又はそれ以上のフレームワーク及び／又はＣＤＲ領域内の１つ又はそれ以上のアミノ酸が、抗体が由来する生殖系列配列の対応する残基に、又は別のヒト生殖系列配列の対応する残基に、又は対応する生殖系列残基の保存的アミノ酸置換に変異する（そのような配列の変化を本明細書において集合的に「生殖系列突然変異」と呼ぶ）。当業者が、本明細書に開示される重鎖及び軽鎖可変領域配列から始めると、１つ又はそれ以上の個別の生殖系列突然変異又はそれらの組合わせを含む多数の抗体及び抗原結合断片を容易に産生することができる。特定の実施形態では、ＶＨ及び／又はＶＬドメイン内のフレームワーク及び／又はＣＤＲ残基の全てが、抗体が由来した起源の生殖細胞系配列に見出される残基に戻って突然変異する。他の実施形態では、特定の残基のみ、例えばＦＲ１の最初の８アミノ酸内又はＦＲ４の最後の８アミノ酸内に見出される突然変異残基のみ、又はＣＤＲ１、ＣＤＲ２若しくはＣＤＲ３内に見出される突然変異残基のみ、が元の生殖系列配列に戻って突然変異する。他の実施形態では、フレームワーク及び／又はＣＤＲ残基の１つ又はそれ以上が、異なる生殖系列配列（即ち、抗体が由来する生殖系列配列とは異なる生殖系列配列）の対応する残基に突然変異する。更に、本発明の抗体は、フレームワーク及び／又はＣＤＲ領域内に２つ以上の生殖系列突然変異の組合わせの何れかを含んでも良く、例えば、特定の個々の残基が特定の生殖系列配列の対応する残基に突然変異し、一方、元の生殖系列配列とは異なる特定の他の残基は維持されるか、異なる生殖系列配列の対応する残基に突然変異される。１つ又はそれ以上の生殖系列突然変異を含む抗体及び抗原結合断片は、一度得られれば、結合特異性の向上、結合親和性の増加、アンタゴニスト又はアゴニストとしての生物学的特性（場合による）の向上又は増強、免疫原性の低減、等の望ましい特性の１つ又はそれ以上を容易に試験できる。この一般的方法で得た抗体及び抗原結合断片の使用は、本発明に包含される。
【００５９】
本発明は、又、１つ又はそれ以上の保存的置換を有し、本明細書中で開示したＨＣＶＲ、ＬＣＶＲ、及び／又はＣＤＲアミノ酸配列の何れかの変異体を有する抗ＰＣＳＫ９抗体の使用に関わる方法も含む 。例えば本発明は、抗ＰＣＳＫ９抗体の有する、保存的アミ
ノ酸置換が、本明細書中に開示したＨＣＶＲ、ＬＣＶＲ、及び／又はＣＤＲアミノ酸配列の何れかと比較して、例えば１０個又はそれ以下、８個又はそれ以下、６個又はそれ以下、４個又はそれ以下である抗ＰＣＳＫ９抗体の使用を含む。
【００６０】
本明細書で使用する「表面プラズモン共鳴」という用語は、例えばＢＩＡｃｏｒｅ（登録商標）システム（Ｂｉａｃｏｒｅ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ｄｉｖｉｓｉｏｎ  ｏｆ  ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ，  Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，  ＮＪ）．を使用して、バイオセンサーマトリックス内のタンパク質濃度の変化を検出することにより、リアルタ
イムでの相互作用を分析することが可能な光学現象を意味する。
【００６１】
本明細書で使用する用語「ＫＤ」とは、特定の抗体−抗原相互作用の平衡解離定数を指すものとする。
【００６２】
「エピトープ」という用語は、パラトープとして知られる抗体分子の可変領域内の特異的抗原結合部位と相互作用する抗原決定基を指す。単一の抗原は１つ以上のエピトープを有し得る。従って、異なる抗体は、抗原上の異なる領域に結合し、異なる生物学的効果を有し得る。エピトープは、高次構造的又は線状の何れかであり得る。高次構造エピトープは、線状ポリペプチド鎖の異なる部分からのアミノ酸を空間的に並置することにより産生する。線状エピトープは、ポリペプチド鎖の隣接するアミノ酸残基によって産生されるものである。特定の環境において、エピトープは、糖類、ホスホリル基又は抗原上のスルホニル基の一部を含み得る。
【００６３】
特定の実施形態によれば、本発明の方法において使用される抗ＰＣＳＫ９抗体は、ｐＨ依存性の結合特性を有する抗体である。本明細書中で使用する場合、「ｐＨ依存性結合」という表記は、抗体又はその抗原結合断片が「中性ｐＨと比較して酸性ｐＨではＰＣＳＫ９への結合性が減少する」を表すことを意味する（本開示の目的としては、両方の表記を交換可能に使用しても良い）。例えば、「ｐＨ依存性結合特性を有する」抗体としては、酸性ｐＨより中性ｐＨで高い親和性でＰＣＳＫ９に結合する抗体及びその抗原結合断片が含まれる。特定の実施形態では、本発明の抗体及び抗原結合断片は、中性ｐＨでは酸性ｐＨよりも、少なくとも３、５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００倍又はそれ以上の、高い親和性で、ＰＣＳＫ９に結合する。
【００６４】
本発明のこの態様によれば、ｐＨ依存性結合特性を有する抗ＰＣＳＫ９抗体は、親抗ＰＣＳＫ９抗体に比較すると、１つ又はそれ以上のアミノ酸変異を有し得る。例えば、ｐＨ依存性結合特性を有する抗ＰＣＳＫ９抗体は、例えば親抗ＰＣＳＫ９抗体の１つ又はそれ以上のＣＤＲ中に１つ又はそれ以上のヒスチジン置換又は挿入を含み得る。従って、本発明の特定の実施形態によれば、親の抗体の１つ又はそれ以上のＣＤＲの１つ又はそれ以上のアミノ酸がヒスチジン残基で置換されていることを除いて、親抗ＰＣＳＫ９抗体のＣＤＲアミノ酸配列と同一であるＣＤＲアミノ酸配列（例、重鎖および軽鎖のＣＤＲ）を含む抗ＰＣＳＫ９抗体を投与することを含む方法を提供する。ｐＨ依存性結合を有する抗ＰＣＳＫ９抗体は、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９個、又はそれ以上のヒスチジン置換を有することが出来、それは親抗体の単一のＣＤＲ内に、又は親の抗ＰＣＳＫ９抗体の（例えば、２、３、４、５又は６つの）ＣＤＲ全体を通して多重に分布している。例えば、本発明は、ｐＨ依存性結合を有し、親抗ＰＣＳＫ９抗体のＨＣＤＲ１における１つ又はそれ以上のヒスチジン置換、ＨＣＤＲ２における１つ又はそれ以上のヒスチジン置換、ＨＣＤＲ３における１つ又はそれ以上のヒスチジン置換、ＬＣＤＲ１における１つ又はそれ以上のヒスチジン置換、ＬＣＤＲ２における１つ又はそれ以上のヒスチジン置換、及び／又はＬＣＤＲ３における１つ又はそれ以上のヒスチジン置換、を含む抗ＰＣＳＫ９抗体の使用を含む。
【００６５】
本明細書で使用する「酸性ｐＨ」という表記は、ｐＨ６．０又はそれ以下（例、約６．０未満、約５．５未満、約５．０未満等）を意味する。「酸性ｐＨ」という表記は、ｐＨ値が、約６．０、５．９５、５．９０、５．８５、５．８、５．７５、５．７、５．６５、５．６、５．５５、５．５、５．４５、５．４、５．３５、５．３、５．２５、５．２、５．１５、５．１、５．０５、５．０又は、それ以下を含む。本明細書中で使用する「中性ｐＨ」という表記は、ｐＨが約７．０〜約７．４を意味する。「中性ｐＨ」という表記は、ｐＨ値が約７．０、７．０５、７．１、７．１５、７．２、７．２５、７．３、７
．３５、及び７．４を含む。
【００６６】
本発明の観点において使用し得る抗ＰＣＳＫ９抗体の例としては、これに限定する訳ではないが例えば、アリロクマブ、エボロクマブ、ボコシズマブ、ロデルシズマブ、ラルパンシズマブ、又は前述の抗体の抗原結合部分の何れかを挙げられる。
【００６７】
ヒト抗体の調製
遺伝子組換えマウスにおいてヒト抗体を調製する方法は、当技術分野で公知である。このような既知の方法の何れかを本発明の観点で使用して、ヒトＰＣＳＫ９に特異的に結合するヒト抗体を作製しても良い。
【００６８】
モノクローナル抗体を生成するためのＶＥＬＯＣＩＭＭＵＮＥ（登録商標）技術（例えば、米国特許第６，５９６，５４１号、Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ社参照）又は他の既知の方法を使用して、ＰＣＳＫ９に対して高親和性の、ヒト可変領域及びマウス定常領域を有するキメラ抗体を最初に単離した。このＶＥＬＯＣＩＭＭＵＮＥ（登録商標）技術は、遺伝子組換えマウスの作製を含み、そのマウスは抗原性刺激に応答してヒト可変領域及びマウス定常領域を含む抗体を産生するように、内因性マウス定常領域座に作動可能に連結されたヒト重鎖及び軽鎖可変領域を含むゲノムを有する。抗体の重鎖及び軽鎖の可変領域をコードするＤＮＡを単離し、ヒト重鎖及び軽鎖定常領域をコードするＤＮＡに作動可能に連結させる。次いで、完全ヒト抗体を発現することが出来る細胞中でＤＮＡを発現させる。
【００６９】
一般には、ＶＥＬＯＣＩＭＭＵＮＥ（登録商標）マウスに対象の抗原を感作し、抗体を発現しているマウスからリンパ細胞（例えば、Ｂ細胞）を回収する。リンパ細胞をミエローマ細胞株と融合させて不死ハイブリドーマ細胞株を調製し、そのようなハイブリドーマ細胞株をスクリーニングし、次いで選択し、対象とする抗原に特異的な抗体を産生するハイブリドーマ細胞株を同定する。重鎖及び軽鎖の可変領域をコードするＤＮＡを単離し、次いで、重鎖及び軽鎖の望ましいアイソタイプ定常領域に連結しても良い。このような抗体タンパク質は、ＣＨＯ細胞などの細胞内で産生しても良い。或いは、抗原特異的キメラ抗体をコードするＤＮＡ、又は軽鎖及び重鎖の可変ドメインを、抗原特異的リンパ球から直接単離しても良い。
【００７０】
最初に、ヒト可変領域及びマウス定常領域を有する高親和性キメラ抗体を単離する。抗体は、当業者に知られた標準的な手順を使用して、親和性、選択性、エピトープなどを含む所望の特性について特徴付けし、選択する。マウス定常領域を、所望のヒト定常領域で置換し、本発明の完全ヒト抗体、例えば野生型又は変性ＩｇＧ１又はＩｇＧ４．を産生する。選択する定常領域は具体的用途に応じて変化し得るが、高親和性抗原結合及び標的特異性は可変領域に存在する。
【００７１】
一般に、本発明の方法で使用し得る抗体は、固相上に固定化された抗原、又は溶液相中の抗原の何れかに結合することにより測定する場合、上記のように高い親和性を有する。マウス定常領域は、所望のヒト定常領域で置換して、本発明の完全ヒト抗体を産生する。選択される定常領域は具体的用途に応じて変化し得るが、高親和性抗原結合及び標的特異性は可変領域に存在する。
【００７２】
本発明の方法の観点において使用し得るＰＣＳＫ９に特異的に結合するヒト抗体又は抗体の抗原結合断片の具体的な例としては、重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）内に含まれる３つの重鎖ＣＤＲ（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３）を有し、配列番号１及び１１、又は、その配列と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％の配列同一性を有する実質的に類似の配列からなる群から選択されるアミノ酸配列
を有する任意の抗体又は抗原結合断片を挙げることが出来る。或いは、本発明の方法の観点において使用し得るＰＣＳＫ９に特異的に結合する抗体のヒト抗体又は抗原結合断片の具体的な例としては、重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）内に含まれる３つの重鎖ＣＤＲ（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３）を有し、配列番号３７、４５、５３、６１、６９、７７、８５、９３、１０１、１０９、１１７、１２５、１３３、１４１、１４９、１５７、１６５、１７３、１８１、及び１８９、又は、その配列と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％の配列同一性を有する配列と実質的に類似の配列からなる群から選択されるアミノ酸配列を有する  任意の抗体又は抗原結合断片を挙げることが出来る。抗体又はその抗原結合断片は、配列番号６及び１５、又はその配列と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％の配列同一性を有する実質的に類似の配列からなる群から選択されるアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）内に含まれる３つの軽鎖ＣＤＲ（ＬＣＶＲ１、ＬＣＶＲ２、ＬＣＶＲ３）を含み得る。或いは、抗体又はその抗原結合断片は、配列番号４１、４９、５７、６５、７３、８１、８９、９７、１０５、１１３、１２１、１２９、１３７、１４５、１５３、１６１、１６９、１７７、１８５、及び１９３、又はその配列と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％の配列同一性を有する実質的に類似の配列からなる群から選択されるアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）内に含まれる３つの軽鎖ＣＤＲ（ＬＣＶＲ１、ＬＣＶＲ２、ＬＣＶＲ３）を含み得る。
【００７３】
２つのアミノ酸配列間の配列同一性は、参照アミノ酸配列の全長にわたって決定され、即ち、配列番号で同定したアミノ酸配列を、最良の配列アラインメントを用いて、及び／又は２つのアミノ酸配列間の最良の配列アラインメントの領域に亘って使用し、ここで、最良の配列アラインメントは、公知のツール、例えば  標準設定を用いるＡｌｉｇｎ、好ましくはＥＭＢＯＳＳ：針、マトリックス：Ｂｌｏｓｕｍ６２、Ｇａｐ  Ｏｐｅｎ  １０．０、Ｇａｐ  Ｅｘｔｅｎｄ  ０．５を用いて、得ても良い。
【００７４】
本発明の特定の実施形態では、抗体又は抗原結合タンパク質は、配列番号１／６及び１１／１５からなる群から選択される、重鎖及び軽鎖可変領域アミノ酸配列対（ＨＣＶＲ／ＬＣＶＲ）由来の６つのＣＤＲ（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２およびＬＣＤＲ３）を含む。或いは、本発明の特定の実施形態では、抗体又は抗原結合タンパク質は、配列番号３７／４１、４５／４９、５３／５７、６１／６５、６９／７３、７７／８１、８５／８９、９３／９７、１０１／１０５、１０９／１１３、１１７／１２１、１２５／１２９、１３３／１３７、１４１／１４５、１４９／１５３、１５７／１６１、１６５／１６９、１７３／１７７、１８１／１８５及び１８９／１９３からなる群から選択される、重鎖及び軽鎖可変領域アミノ酸配列対（ＨＣＶＲ／ＬＣＶＲ）由来の６つのＣＤＲ（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２およびＬＣＤＲ３）を含む。
【００７５】
本発明の特定の実施形態では、本発明の方法で使用し得る抗ＰＣＳＫ９抗体又は抗原結合タンパク質は、配列番号２／３／４／７／８／１０（ｍＡｂ３１６Ｐ（「ＲＥＧＮ７２７」又は「アリロクマブ」とも称す））及び１２／１３／１４／１６／１７／１８（ｍＡｂ３００Ｎ）（米国特許公開第２０１０／０１６６７６８号参照）から選択されるＨＣＤＲ１／ＨＣＤＲ２／ＨＣＤＲ３／ＬＣＤＲ１／ＬＣＤＲ２／ＬＣＤＲ３アミノ酸配列を有し、ここで、配列番号１６は、アミノ酸残基３０（Ｌ３０Ｈ）におけるロイシンのヒスチジンの置換を含む。
【００７６】
本発明の特定の実施形態では、抗体又は抗原結合タンパク質は、配列番号１／６及び１１／１５からなる群から選択されたＨＣＶＲ／ＬＣＶＲアミノ酸配列対を含む。特定の代表的な実施形態では、抗体又は抗原結合タンパク質は、配列番号１のＨＣＶＲアミノ酸配
列、及び配列番号６のＬＣＶＲアミノ酸配列を含む。特定の代表的な実施形態では、抗体又は抗原結合タンパク質は、配列番号１１のＨＣＶＲアミノ酸配列及び配列番号１５のＬＣＶＲアミノ酸配列を含む。特定の例示的な実施形態では、抗体又は抗原結合タンパク質は、配列番号１１のＨＣＶＲアミノ酸配列、及びアミノ酸残基３０（Ｌ３０Ｈ）におけるロイシンのヒスチジン置換を有する配列番号１５のＬＣＶＲアミノ酸配列を含む。
【００７７】
医薬組成物及び投与方法
本発明は、ＰＣＳＫ９阻害剤を患者に投与することを含む方法であり、ここでＰＣＳＫ９阻害剤が医薬組成物内に含まれている。本発明の医薬組成物は、好適な担体、賦形剤、及び適切な移動、送達、耐容性などを付与する他の薬剤と共に処方される。製薬化学者全てに知られている処方集には、多くの適切な製剤を見出すことが出来る。Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ、Ｅａｓｔｏｎ、ＰＡ。これらの製剤としては、例えば、粉末、ペースト、軟膏、ゼリー、ワックス、油、脂質、ベシクル（ＬＩＰＯＦＥＣＴＩＮ  （登録商標）等）を含む脂質（カチオン性又はアニオン性）、ＤＮＡコンジュゲート、無水吸収ペースト、  水中油及び油中水エマルジョン、エマルジョンｃａｒｂｏｗａｘ（様々な分子量のポリエチレングリコール）、半固体ゲル、及びｃａｒｂｏｗａｘ含有半固体混合物を挙げることが出来る。Ｐｏｗｅｌｌ  ｅｔ  ａｌ．“Ｃｏｍｐｅｎｄｉｕｍ  ｏｆ
ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ  ｆｏｒ  ｐａｒｅｎｔｅｒａｌ  ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｓ”
ＰＤＡ（１９９８）Ｊ  Ｐｈａｒｍ  Ｓｃｉ  Ｔｅｃｈｎｏｌ  ５２：２３８−３１１．も参照のこと。  
【００７８】
本発明の観点で使用出来る抗ＰＣＳＫ９抗体を含む代表的な医薬製剤には、米国特許第８，７９５，６６９号（就中、アリロクマブを含む代表的な製剤を記載）、又は国際特許第２０１３／１６６４４８号、又は国際特許第２０１２／１６８４９１号に記載されている何れかの製剤を挙げられる。
【００７９】
種々の送達系が知られており、例えば、リポソーム中にカプセル化、微粒子、マイクロカプセル、突然変異ウイルスを発現出来る組換え細胞、受容体依存性エンドサイトーシス（例、Ｗｕ  ｅｔ.  １９８７、Ｊ．Ｂｉｏｌ。Ｃｈｅｍ。２６２：４４２９−４４３２
参照）。投与方法としては、皮内、筋肉内、腹腔内、静脈内、皮下、鼻腔内、硬膜外及び経口経路が挙げられるが、これらに限定する訳ではない。組成物は、都合のよい任意の経路、例えば、注入又は大量投与により、上皮又は粘膜皮膚内層（例えば、口腔粘膜、直腸及び腸粘膜等）を通じた吸収により、投与しても良く、及び他の生物学的に活性な薬剤と共に投与しても良い。
【００８０】
本発明の医薬組成物は、標準針及び注射器を用いて皮下又は静脈内に送達することができる。更に、本発明の医薬組成物を皮下送達するには、ペン送達装置を手軽に適用できる。このようなペン送達装置は、再使用可能又は使い捨て可能なもので良い。再使用可能なペン送達装置には、一般に、医薬組成物を含有する交換可能なカートリッジを利用する。カートリッジ内の医薬組成物を全て投与し、カートリッジが空になると、空のカートリッジは容易に廃棄出来、医薬組成物を含有する新しいカートリッジと交換する。その後、ペン送達装置を再使用出来る。使捨て型ペン送達装置の中には、交換可能なカートリッジはない。むしろ、使捨て型ペン送達装置は、医薬組成物が装置内のリザーバに保持されて予め充填されて売られている。リザーバの医薬組成物が一度空になれば、装置全体を廃棄する。
【００８１】
多くの再使用可能なペン型及び自己注射器送達装置を本発明の医薬組成物の皮下送達に適用し得る。例としては、これに限定する訳ではないが、ほんの僅かな商品名を挙げるならば、ＡＵＴＯＰＥＮ（登録商標）（Ｏｗｅｎ  Ｍｕｍｆｏｒｄ、Ｉｎｃ．、Ｗｏｏｄｓ
ｔｏｃｋ，ＵＫ）、ＤＩＳＥＴＲＯＮＩＣ（登録商標）ペン（Ｄｉｓｅｔｒｏｎｉｃ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、Ｂｅｒｇｄｏｒｆ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）、ＨＵＭＡＬＯＧ  ＭＩＸ  ７５／２５（登録商標）ペン、ＨＵＭＡＬＯＧ（登録商標）ペン、ＨＵＭＡＬＩＮ  ７０／３０（登録商標）ペン（Ｅｌｉ  Ｌｉｌｌｙ  ａｎｄ  Ｃｏ．，Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ，ＩＮ），  ＮＯＶＯＰＥＮ（登録商標）Ｉ，ＩＩ  及びＩＩＩ（Ｎｏｖｏ  Ｎｏｒｄｉｓｋ，  Ｃｏｐｅｎｈａｇｅｎ，Ｄｅｎｍａｒｋ），、ＮＯＶＯＰＥＮ  ＪＵＮＩＯＲ（登録商標）（Ｎｏｖｏ  Ｎｏｒｄｉｓｋ、Ｃｏｐｅｎｈａｇｅｎ，Ｄｅｎｍａｒｋ）、ＢＤ（登録商標）ペン（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ，Ｆｒａｎｋｌｉｎ  Ｌａｋｅｓ，ＮＪ），、ＯＰＴＩＰＥＮ（登録商標）、ＯＰＴＩＰＥＮ  ＰＲＯ（登録商標）、ＯＰＴＩＰＥＮ  ＳＴＡＲＬＥＴ（登録商標）、及びＯＰＴＩＣＬＩＫ（登録商標）（ｓａｎｏｆｉ−ａｖｅｎｔｉｓ，Ｆｒａｎｋｆｕｒｔ，Ｇｅｒｍａｎｙ）等挙げられる。使い捨てペン送達装置を本発明の医薬組成物の皮下送達に適用し得る例としては、これに限定する訳ではないが、ほんの僅かな商品名を挙げるならば、ＳＯＬＯＳＴＡＲ（登録商標）ペン（ｓａｎｏｆｉ−ａｖｅｎｔｉｓ）、ＦＬＥＸＰＥＮ（登録商標）（Ｎｏｖｏ  Ｎｏｒｄｉｓｋ）、及びＫＷＩＫＰＥＮ（登録商標）（Ｅｌｉ  Ｌｉｌｌｙ）、ＳＵＲＥＣＬＩＣＫ（登録商標）自動注射器（ＡＡｍｇｅｎ，Ｔｈｏｕｓａｎｄ  Ｏａｋｓ，ＣＡ）、ＰＥＮＬＥＴ（登録商標）（Ｈａｓｅｌｍｅｉｅｒ、Ｓｔｕｔｔｇａｒｔ、Ｇｅｒｍａｎｙ）、ＥＰＩＰＥＮ（Ｄｅｙ、ＬＰ）及び、ＨＵＭＩＲＡ（登録商標）ペン（Ａｂｂｏｔｔ  Ｌａｂｓ、Ａｂｂｏｔｔ  Ｐａｒｋ  ＩＬ）等挙げられる。
【００８２】
特定の状況において、医薬組成物は制御放出系で送達し得る。一実施形態では、ポンプを使用しても良い（上記Ｌａｎｇｅｒ、Ｓｅｆｔｏｎ、１９８７、ＣＲＣ  Ｃｒｉｔ。Ｒｅｆ。Ｂｉｏｍｅｄ。Ｅｎｇ。１４：２０１参照）。別の実施形態では、ポリマー材料を使用しても良い。Ｍｅｄｉｃａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ，Ｌａｎｇｅｒ  ａｎｄ  Ｗｉｓｅ（ｅｄｓ．），１９７４，ＣＲＣ  Ｐｒｅｓ．，Ｂｏｃａ  Ｒａｔｏｎ，Ｆｌｏｒｉｄａ．を参照のこと。更に別の実施形態では、制御放出系を組成物の標的近傍に配置することができるので、全身投与量のほんの一部しか必要としない（例、Ｇｏｏｄｓｏｎ、１９８４、Ｍｅｄｉｃａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ、ｐｐ。１１５−１３８参照）。他の制御放出系は、Ｌａｎｇｅｒ、１９９０、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４９：１５２７−１５３３の総説で議論されている。
【００８３】
注射用製剤は、静脈内、皮下、皮内及び筋肉内注射、点滴剤等用の剤形を含み得る。これらの注射用製剤は、公知の方法によって調製出来る。例えば、従来から注射用に使用されている滅菌水性媒体又は油性媒体中で、上記の抗体又はその塩を、溶解、懸濁又はエマルジョン化することにより、注射用製剤を調製しても良い。注射用の水性媒体としては、例えば、生理食塩水、グルコースを含む等張液等の補助剤等が挙げられ、適当な可溶化剤、例えばアルコール（例えば、エタノール）、多価アルコール（例えば、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール）、非イオン性界面活性剤（（例、ポリソルベート８０、ＨＣＯ−５０（硬化ヒマシ油のポリオキシエチレン（５０モル）付加物））等と組合せて使用しても良い。油性媒体としては、例えば、ゴマ油、大豆油等を採用し、それらは安息香酸ベンジル、ベンジルアルコール等の可溶化剤と併用しても良い。このようにして調製した注射剤は、好ましくは適切なアンプルに充填する。
【００８４】
好都合には、上記の経口又は非経口使用のための医薬組成物は、有効成分の用量に合致するのに適する単位用量の剤形で調製される。このような単位用量の剤形としては、例えば、錠剤、丸剤、カプセル化剤、注射剤（アンプル）、坐剤などが挙げられる。
【００８５】
投薬量
本発明の方法に従って被験者に投与されるＰＣＳＫ９阻害剤（例、抗ＰＣＳＫ９抗体）
の量は、一般に治療有効量である。本明細書中で使用する場合、語句「治療有効量」とは、ＬＤＬ−Ｃ、ＡｐｏＢ１００、非ＨＤＬ−Ｃ、総コレステロール、ＶＬＤＬ−Ｃ、トリグリセリド、Ｌｐ（ａ）および残余コレステロールからなる群から選択される１種又はそれ以上のパラメーターにおいて、検出可能な減少（ベースラインから、少なくとも約５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％又はそれ以上）をもたらすＰＣＳＫ９阻害剤の用量、又は患者のリポタンパク質アフェレーシスの必要性を低減又は除去する量、又は（本明細書の他の場所で定義されているように）患者の正規化アフェレーシス割合を低下させる量を意味する。
【００８６】
抗ＰＣＳＫ９抗体の場合、治療有効量は、約０．０５ｍｇから約６００ｍｇであれば良く、例えば、約０．０５ｍｇ、約０．１ｍｇ、約１．０ｍｇ、約１．５ｍｇ、約２．０ｍｇ、約１０ｍｇ、約２０ｍｇ、約３０ｍｇ、約４０ｍｇ、約５０ｍｇ、約６０ｍｇ、約７０ｍｇ、約８０ｍｇ、約９０ｍｇ、約１００ｍｇ、約１１０ｍｇ、約１２０ｍｇ、約１３０  ｍｇ、約１４０ｍｇ、約１５０ｍｇ、約１６０ｍｇ、約１７０ｍｇ、約１８０ｍｇ、約１９０ｍｇ、約２００ｍｇ、約２１０ｍｇ、約２２０ｍｇ、約２３０ｍｇ、約２４０ｍｇ、約２５０ｍｇ、約２６０ｍｇ、約２７０ｍｇ、約２８０ｍｇ、約２９０ｍｇ、約３００ｍｇ、約３１０ｍｇ、約３２０ｍｇ、約３３０ｍｇ、約３４０ｍｇ、約３５０ｍｇ、約３６０ｍｇ、約３７０ｍｇ、約３８０ｍｇ、約３９０ｍｇ、約４００ｍｇ、約４１０ｍｇ、約４２０ｍｇ、約４３０ｍｇ、約４４０ｍｇ、約４５０ｍｇ、約４６０ｍｇ、約４７０ｍｇ、約４８０ｍｇ、約４９０ｍｇ、約５００ｍｇ、約５１０ｍｇ、約５２０ｍｇ、約５３０ｍｇ、約５４０ｍｇ、約５５０ｍｇ、約５６０ｍｇ、約５７０ｍｇ、約５８０ｍｇ、約５９０ｍｇ、又は約６００ｍｇの抗ＰＣＳＫ９抗体で良い。本発明の特定の代表的な実施形態によれば、抗ＰＣＳＫ９抗体の治療有効量は、７５ｍｇ、１５０ｍｇ若しくは３００ｍｇ（例、アリロクマブの場合）又は１４０ｍｇ若しくは４２０ｍｇ（例、エボロクマブの場合）。ＰＣＳＫ９阻害剤の他の投与量は、当業者には、明らかになるであろうし、本発明の範囲内であると考えられる。
【００８７】
個々の用量内に含有する抗ＰＣＳＫ９抗体の量は、患者の体重１キログラム当たりの抗体のミリグラム（即ち、ｍｇ／ｋｇ）で表し得る。例えば、抗ＰＣＳＫ９抗体は、患者の体重あたり約０．０００１〜約１０ｍｇ／ｋｇの用量で患者に投与し得る。
【００８８】
併用療法
本明細書の他の箇所に記載したように、本発明の方法は、患者がそれ以前に、処方を受けた脂質低下療法と組合わせて、「その上に」ＰＣＳＫ９阻害剤を患者に投与することを含み得る。例えば、リポタンパク質アフェレーシスの必要性を低減又は除去するという観点において、ＰＣＳＫ９阻害剤を、毎日の安定したスタチン治療レジメンと組み合わせて患者に投与しても良い。本発明の観点においてＰＣＳＫ９阻害剤を併用して投与しても良い代表的な一日のスタチン治療レジメンとしては、例えば、アトルバスタチン（毎日１０、２０、４０又は８０ｍｇ）、（アトルバスタチン／エゼチミブ毎日１０／１０又は４０／１０ｍｇ）、ロスバスタチン（毎日５，１０又は２０ｍｇ）、セリバスタチン（毎日０．４又は０．８ｍｇ）、ピタバスタチン（毎日１，２又は４ｍｇ）、フルバスタチン（毎日２０，４０又は８０ｍｇ）、シンバスタチン（毎日５，１０，２０，４０又は８０ｍｇ）、  シンバスタチン／エゼチミブ（毎日１０／１０，２０／１０，４０／１０又は８０／１０ｍｇ）、ロバスタチン（毎日１０，２０，４０又は８０ｍｇ）、プラバスタチン（毎日１０，２０，４０又は８０ｍｇ）、およびこれらの組み合わせが挙げられる。本発明の観点においてＰＣＳＫ９阻害剤を併用して投与しても良い他の脂質低下療法としては、例えば、（１）コレステロール摂取及び／又は胆汁酸再吸収を阻害する薬剤（例えば、エゼチミブ）、（２）リポタンパク異化作用を増加させる薬剤（ナイアシンなど）及び／又は（３）２２−ヒドロキシコレステロールのようなコレステロール除去において役割を果
たすＬＸＲ転写因子の活性化剤。
【００８９】
本発明の特定の実施形態によれば、ＰＣＳＫ９阻害剤（例、アリロクマブ、エボロクマブ、ボコシズマブ、ロデルシズマブ、又はラルパンシズマブなどの抗ＰＣＳＫ９抗体）をアンジオポエチン様タンパク質３の阻害剤（例、ＲＥＧＮ１５００のような抗ＡＮＧＰＴＬ３抗体）、アンジオポエチン様タンパク質４の阻害剤（例、米国特許第９，１２０，８５１号で「Ｈ１Ｈ２６８Ｐ」又は「Ｈ４Ｈ２８４Ｐ」を指す抗ＡＮＧＰＴＬ４抗体などの抗ＡＮＧＰＴＬ４抗体）、又はアンジオポエチン様タンパク質８の阻害剤（例、抗ＡＮＧＰＴＬ８抗体）と組合わせて、患者に投与することを含む方法を提供する。
【００９０】
本発明の方法の観点において、追加的な治療有効成分、例えば上に列挙した薬剤又はその誘導体の何れかは、ＰＣＳＫ９阻害剤の投与の直前、同時、又は直後に投与しても良い（本開示の目的にとって、このような投与レジメンは、ＰＣＳＫ９阻害剤を追加的な治療有効成分と「併用して」投与すると見做す）。本発明は、ＰＣＳＫ９阻害剤を、本明細書の他の箇所に記載したように１又はそれ以上の追加的な治療有効成分と同時処方した医薬組成物及びその使用方法を含む。
【００９１】
投与レジメン
本発明の特定の実施形態によれば、被験者にＰＣＳＫ９阻害剤（即ち、ＰＣＳＫ９阻害剤を含む医薬組成物）を多数回用量で、所定の時間の経過に亘り（例えば、毎日のスタチン治療レジメン又は他のバックグラウンドとなる脂質低下療法のその上に）投与を行なって良い。本発明のこの態様による方法は、被験者に多数回用量のＰＣＳＫ９阻害剤を順次投与することを含む。本明細書で使用される「順次投与する」とは、ＰＣＳＫ９阻害剤の各用量を、異なる時点に、例えば、所定の間隔（例、時間、日、週又は月）で隔てた異なる日に被験者に投与することを意味する。本発明は、患者にＰＣＳＫ９阻害剤を単一初期投与用量で投与し、次いで、ＰＣＳＫ９阻害剤を１回又はそれ以上の二次的投与用量で、及び場合により、引き続きＰＣＳＫ９阻害剤を１回又はそれ以上の３次的投与用量を順次投与することを含む方法を挙げられる。
【００９２】
用語「初回用量」、「二次用量」及び「三次用量」は、ＰＣＳＫ９阻害剤を含む医薬組成物の個々の用量の経時的な投与順序を指す。従って、「初回用量」は、治療レジメンの開始時に投与する用量（「ベースライン用量」とも称す）であり、「二次用量」とは、初回用量の後に投与する用量であり、次に「三次用量」は、二次用量の後に投与する用量である。初回用量、二次用量及び三次用量は全て同量のＰＣＳＫ９阻害剤を含有しても良いが、一般的に投与頻度という点では互いに異なっても良い。然しながら、特定の実施形態において、初回用量、二次用量及び／又は三次用量に含まれるＰＣＳＫ９阻害剤の量は、治療過程の間で互いに異なる（例、適切に上下に調整する）。特定の実施形態では、２回又はそれ以上の（例、２，３，４又は５）用量が、「負荷用量」として治療レジメンの開始時に投与され、引き続き、より低い頻度を基準とする用量で投与される（例、「維持用量」）。
【００９３】
本発明の代表的な実施形態によれば、二次及び／又は三次用量の各々は、直前の投与用量の１〜２６週間後（例えば、１、１1/2、２、２1/2、３、３1/2、４、４1/2、５、５1/2、６、６1/2、７、７1/2、８、８1/2、９、９1/2、１０、１０1/2、１１、１１1/2、１
２、１２1/2、１３、１３1/2、１４、１４1/2、１５、１５1/2、１６、１６1/2、１７、
１７1/2、１８、１８1/2、１９、１９1/2、２０、２０1/2、２１、２１1/2、２２、２２1/2、２３、２３1/2、２４、２４1/2、２５、２５1/2、２６、２６1/2、又はそれ以上）に投与される。本明細書中で使用する「直前の投与用量」という語句は、多数回投与の順序において、介在する投与を挟むことない順序において將に次の用量投与の前に患者に投与される抗原結合分子の用量を意味する。
【００９４】
本発明のこの態様による方法は、ＰＣＳＫ９阻害剤の任意の回数で二次及び／又は三次用量を患者に投与することを含み得る。例えば、特定の実施形態では、単回の二次用量のみが患者に投与される。他の実施形態では、２回又はそれ以上（例、２、３、４、５、６、７、８回又はそれ以上の）二次用量が患者に投与される。同様に、特定の実施形態では、単回の三次用量のみが患者に投与される。他の実施形態では、２回又はそれ以上（例、２、３、４、５、６、７、８回又はそれ以上）の三次用量が患者に投与される。
【００９５】
多数回の二次用量を含む実施形態では、二次用量の各々は、他の二次用量と同じ頻度で投与しても良い。例えば、二次用量の各々は、直前用量の１から２、４、６、８週又はそれ以上の週の後に患者に投与しても良い。同様に、多数回の三次用量を含む実施形態では、三次用量の各々は、他の三次用量と同じ頻度で投与しても良い。例えば、三次用量の各々は、直前用量の１から２，４，６，８週又はそれ以上の週の後に患者に投与しても良い。或いは、二次及び／又は三次用量を患者に投与する頻度は、治療レジメンの全過程に亘って変化しても良い。投与頻度は、臨床検査後の個々の患者の必要性に応じて、医師による治療過程の間に調整しても良い。
【００９６】
本発明は、アップタイトレーションオプション（本明細書では「用量修正」とも称す）を含む投与レジメンを含む。本明細書で使用する「アップタイトレーションオプション」は、特定の回数のＰＣＳＫ９阻害剤を受けた後に、患者が１種又はそれ以上の定義した治療パラメータにおいて特定の減少を達成しない場合、ＰＣＳＫ９阻害剤の用量を、その後増量したことを意味する。例えば、７５ｍｇ用量の抗ＰＣＳＫ９抗体を２週間に１回の頻度で患者に投与することを含む治療レジメンの場合、もし８週間後に（即ち、０週目、２週目、及び４週目、６週目及び８週目に５回投与をする場合）、患者が７０ｍｇ／ｄＬ未満の血清ＬＤＬ−Ｃ濃度を達成していない場合、抗ＰＣＳＫ９抗体の用量は、その後、例えば２週間に１回１５０ｍｇに増加する（例えば、第１０週又は第１２週又はそれ以降に開始する）。
【００９７】
特定の実施形態では、抗ＰＣＳＫ９抗体を、２週間毎に約７５ｍｇの用量で、被験者に投与し、例えば、少なくとも３回の用量の間（又は、日、週、月又は年に及ぶ治療レジメンの全過程に亘り）。
【００９８】
特定の実施形態では、抗ＰＣＳＫ９抗体を、２週間毎に約１５０ｍｇの用量で、被験者に投与し、例えば、少なくとも３回の用量の間（又は、日、週、月又は年に及ぶ治療レジメンの全過程に亘り）。
【００９９】
いくつかの実施形態では、抗体を、被験者に、２週間毎に約７５ｍｇの用量で１２週間投与し、８週目に被験者のＬＤＬ−Ｃ値が１００ｍｇ／ｄｌ未満であり、ＬＤＬ−Ｃが３０％減少であった場合、用量は２週間毎に約７５ｍｇのままである。
【０１００】
他の実施形態では、抗体を、被験者に、２週間毎に約７５ｍｇの用量で１２週間投与し、８週目に被験者のＬＤＬ−Ｃ値は１００ｍｇ／ｄｌ又はそれ以上であるなら、用量は２週間毎に約１５０ｍｇにアップタイトレーションする。
【０１０１】
いくつかの実施形態では、抗体を、被験者に、２週間毎に約７５ｍｇの用量で１２週間投与し、８週目に被験者のＬＤＬ−Ｃ値７０ｍｇ／ｄｌ未満であり、ＬＤＬ−Ｃが３０％減少であるなら、２週間毎に約７５ｍｇの用量はそのままとする。
【０１０２】
別の実施形態では、抗体を、被験者に、４週間毎に約３００ｍｇの用量で投与する。
【０１０３】
更なる実施形態では、抗体を、被験者に、４週間毎に約３００ｍｇの用量で合計３回の用量を投与し、８週目に、被験者が所定の治療目標を達成しなかったか、又は被験者のＬＤＬ−Ｃがベースラインから少なくとも３０％の減少を有しなかった場合、用量を２週間毎に約１５０ｍｇの用量で追加の３６週間投与に変更する。
【０１０４】
特定の実施形態では、抗ＰＣＳＫ９抗体を、被験者に４週間毎に約１５０ｍｇの用量で少なくとも３回の用量を投与する。
【０１０５】
いくつかの実施形態において、抗体を、被験者に４週間毎に約１５０ｍｇの用量で１２週間投与し、８週目に、被験者のＬＤＬ−Ｃ値  が１００ｍｇ／ｄｌ未満であり、かつＬＤＬ−Ｃが３０％減少であるなら、４週間毎に約１５０ｍｇの用量はそのままとする。
【０１０６】
他の実施形態では、抗体を、被験者に、４週間毎に約１５０ｍｇの用量で１２週間投与し、８週目に被験者のＬＤＬ−Ｃ値が１００ｍｇ／ｄｌに等しいか、又はそれ以上であるなら、２週間毎に約３００ｍｇの用量にアップタイトレーションする。
【０１０７】
いくつかの実施形態では、抗体を、被験者に、４週間毎に約１５０ｍｇの用量で１２週間投与し、８週目に、被験者のＬＤＬ−Ｃ値  が７０ｍｇ／ｄｌ未満であり、かつＬＤＬ−Ｃが３０％減少であるなら、４週間毎に約１５０ｍｇの用量は、そのままとし、追加の１２週とする。
【０１０８】
別の実施形態において、抗体を、被験者に、４週間毎に約３００ｍｇの用量で投与する。
【０１０９】
更なる実施形態では、抗体を、被験者に、４週間毎に約３００ｍｇの用量で合計３回の用量で投与し、８週目に、被験者が所定の治療目標を達成しなかったか、又は被験者のＬＤＬ−Ｃがベースラインから少なくとも３０％の減少を有しなかった場合、用量を２週間毎に約１５０ｍｇの用量で追加の３６週間投与に変更する。     
【実施例】
【０１１０】
以下の実施例は、当業者に本発明の組成物、製造方法及び使用方法の完全な開示及び説明を提供するために提示され、かつ、発明者らが自分の発明と見做している範囲を限定することを意図するものではない。使用した数値（例、量、温度等）に関しては、正確さを保つための努力はしているが、いくらかの実験誤差及び偏差は考慮されるべきである。他に示さない限り、部は重量部であり、分子量は平均分子量であり、温度は摂氏であり、圧力は大気圧又はそれに近い。
【０１１１】
実施例１．  ヒトＰＣＳＫ９に対するヒト抗体の生成
ヒト抗ＰＣＳＫ９抗体を、米国特許第８，０６２，６４０号に記載されているように生成した。以下の実施例で使用される代表的なＰＣＳＫ９阻害剤は、「ｍＡｂ３１６Ｐ」と称するヒト抗ＰＣＳＫ９抗体であり、「ＲＥＧＮ７２７」又は「アリロクマブ」としても知られている。ｍＡｂ３１６Ｐは、以下のアミノ酸配列の特徴、即ち、配列番号５を含む重鎖及び配列番号９を含む軽鎖、配列番号１を含む重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）及び配列番号６を含む軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）、配列番号２を含む重鎖相補性決定領域１（ＨＣＤＲ１）、配列番号３を含むＨＣＤＲ２、配列番号４を含むＨＣＤＲ３、配列番号７を含む軽鎖相補性決定領域１（ＬＣＤＲ１）配列番号８を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１０を含むＬＣＤＲ３、を有する。
【０１１２】
実施例２．  脂質アフェレーシス療法を受けているヘテロ接合性家族性高コレステロール血症患者におけるアリロクマブの有効性及び安全性を評価するための無作為化二重盲検プ
ラセボ対照並行群研究
緒言
本研究の目的は、ＬＤＬアフェレーシス療法を受けているＨｅＦＨ患者におけるＬＤＬアフェレーシス治療の頻度に及ぼす、２週間毎に１回投与する（「Ｑ２Ｗ」）アリロクマブ１５０ｍｇの効果をプラセボと比較して評価することであった。
【０１１３】
ＨｅＦＨと診断され、ＬＤＬアフェレーシス療法を毎週１回又は２週間に１回の頻度で受けている成人男性及び成人女性を、この研究に登録した。被験者のＬＭＴによるバックグラウンド治療は、研究全体を通して維持した。そのような患者では、対照としてのプラセボの選択が本研究の目的にとって適切である、といいうのはアリロクマブの有効性及び安全性について最も左右されにくい評価を提供するからである。
【０１１４】
アフェレーシスの技術及び期間に依るが、ＬＤＬ−Ｃ値の平均的低減は３０％〜７５％の範囲である（Ｂａｍｂａｕｅｒら、Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｗｏｒｌｄ  Ｊｏｕｒｎａｌ、２０１２、２０１２：１〜１９）。毎週又は隔週の治療で、ＬＤＬ−Ｃレベルを４０〜５０％低下させることが出来る。本研究では、来診時のＬＤＬ−Ｃ値がベースライン（アフェレーシス前）のＬＤＬ−Ｃ値より３０％以上低い場合、アフェレーシスは実施しなかった。ＬＤＬ−Ｃレベルは、各アフェレーシス手順後にベースラインに向かって上昇するが、元のレベルには達しない。毎週又は隔週のアフェレーシスを繰り返すと、プラトーに達するまでベースラインレベルは低下し続ける（Ｔｈｏｍｐｓｅｎら、Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ、２００６，１８９：３１−３８）。このように、ＬＤＬ−Ｃレベルの３０％低下に基づいて、アフェレーシスの必要性を判断するという基準は、理に適っていると言える、というのは、アリロクマブを投与して観察した場合、この低下は、アフェレーシスによる手順の場合とほぼ同等レベルのＬＤＬ−Ｃの低下を達成する時間経過と矛盾なく一致するからである。
【０１１５】
アリロクマブＱ２Ｗ（７５ｍｇ及び１５０ｍｇ  ＳＣ）及びＱ４Ｗ（１５０ｍｇ及び３００ｍｇ  ＳＣ）投薬レジメンを、アリロクマブの他の第三相試験で評価した。用量発見のための２回の試験結果に基づき、１５０ｍｇ  Ｑ２Ｗ投薬によって提供される１２週目に最大の有効性を有する、Ｑ２Ｗ投薬レジメンを選択し、すべての患者において、投与インターバルの間の全体に亘り、一定のＬＤＬ−Ｃ低下を維持した。ヘテロ接合性家族性高コレステロール血症患者は、一般に高いベースラインＬＤＬ−Ｃレベルを有する。これらの患者が生涯にわたり、高いＬＤＬ−Ｃに曝露されることを考慮すると、その目標とするＬＤＬ−Ｃは、ＣＶＤ又は他の危険因子の病歴にも依るが、１００ｍｇ／ｄＬ又は７０ｍｇ／ｄＬの何れかである。彼らの目標とするＬＤＬ−Ｃに到達し、維持するために、そのような患者は、アリロクマブの最も強力な用量と、投与間隔の終了時に、この効果を維持するのに要した頻度、を必要としている可能性が非常に高いと推測された。従って、この研究のために１５０ｍｇのＱ２Ｗ用量を選択した。
【０１１６】
この研究の二重盲検治療期間において、１週間又は２週間毎にアフェレーシスを必要とするＨｅＦＨ患者にアリロクマブ１５０ｍｇをＱ２Ｗで１８週間投与しＬＤＬ−Ｃを低下させ、スクリーニングする前の８週間の頻度と比較して、第７週〜第１８週のアフェレーシスの頻度を低減する能力を評価した。患者には、非盲検治療期間中、７６週目までアリロクマブＱ２Ｗ  １５０ｍｇを投与した。
【０１１７】
第２相試験、ＤＦＩ１１５６５、ＤＦＩ１１５６６、及びＲ７２７  ＣＬ１００３からの予備的薬物動態（ＰＫ）データは、アリロクマブへの曝露が、二重盲検処置期間に続いて行なう８週間の追跡期間中に減少し、アリロクマブの総血清濃度は依然として検出可能であるが、非常に低いレベルであることを示した。従って、十分に低く、効果のない血清中のアリロクマブの濃度を確定するために、患者を８週間の追跡期間（即ち、最後の投与
から１０週間）に追跡した。
【０１１８】
研究目的
研究の第一の目的は、毎週又は隔週毎にＬＤＬアフェレーシス療法を受けているＨｅＦＨ患者のＬＤＬアフェレーシス治療の頻度に及ぼす、アリロクマブ１５０ｍｇＱ２Ｗの効果を、プラセボと比較して、評価することであった。
【０１１９】
この研究の第２の目的は以下の通りである。（ａ）ＬＤＬアフェレーシス療法を受けているＨｅＦＨ患者のＬＤＬ−Ｃレベルに及ぼす、アリロクマブ１５０ｍｇ  Ｑ２Ｗの効果の評価。（ｂ）研究期間中にＬＤＬアフェレーシス療法を受けているＨｅＦＨ患者における以下のパラメータ、ＡｐｏＢ、非ＨＤＬ−Ｃ、総コレステロール、Ｌｐ（ａ）、ＨＤＬ−Ｃ、ＴＧ及びＡｐｏＡ−１に及ぼす、アリロクマブ１５０ｍｇＱ２Ｗの効果の評価。（ｃ）ＬＤＬアフェレーシス療法を受けているＨｅＦＨ患者におけるアリロクマブ１５０  ｍｇ  Ｑ２Ｗの安全性及び耐用性の評価。（ｄ）ＬＤＬアフェレーシス療法を受けているＨｅＦＨ患者（ＱＷ対Ｑ２Ｗ）におけるアリロクマブ１５０ｍｇＱ２ＷのＰＫの評価。（ｅ）抗アリロクマブ抗体の開発の評価。（ｆ）アリロクマブ療法ならびにアフェレーシス前後に対応するＰＣＳＫ９レベルの評価。及び（ｇ）これらの患者の生活の質（ＱＯＬ）の評価。
【０１２０】
研究デザイン
本研究は、１週間又は２週間毎にＬＤＬアフェレーシス療法を受けているＨｅＦＨ患者の無作為化二重盲検プラセボ対照並行群試験であった。
【０１２１】
試験は、スクリーニング、二重盲検治療期間、非盲検治療期間、及び追跡調査の４つの期間からなっていた。二重盲検治療期間は、２つの間隔を含み、１日〜６週目（１日目、１５日目、及び２９日目に試験薬剤の投与を予定）、この時に、個々の患者の確立された計画にアフェレーシス頻度を固定することになる、及び、７週目〜１８週目（４３，５７，７１，７５，９９及び１１３日目に試験薬剤の投与を予定）、この時に、アフェレーシス頻度を患者の治療に対する反応に基づいて調整する。
【０１２２】
スクリーニング：スクリーニング来院（２週目）前の少なくとも４週間安定なアフェレーシス施設で（７日又は１４日毎に）安定なアフェレーシス計画を受けていて、及び、スクリーニング来院（２週目）前の少なくとも８週間（２週目）、安定なバックグラウンド医療ＬＭＴを受けている患者が、２週間のスクリーニング期間に入った。
【０１２３】
二重盲検治療：すべての包含基準を満たし、除外基準が全くない患者を、２：１の比で無作為に割り当て、１８週間の治療、アリロクマブ１５０ｍｇ  ＳＣ  Ｑ２Ｗ、又は、アリロクマブＳＣ  Ｑ２Ｗの代わりのプラセボ、を受けさせた。
【０１２４】
二重盲検治療期間中の治療用注射は、無作為化の日（第０週（１日目）／訪問２回目）からＱ２Ｗで投与を開始した。最初の投与後３０分間は、臨床現場で患者を監視した。ＬＤＬアフェレーシスが試験薬剤投与と一致した場合、試験薬剤はＬＤＬアフェレーシス手順を完了した直後に投与した。
【０１２５】
第１日から第６週まで、アフェレーシス頻度は、個々の患者に確立されたスケジュール（ＱＷ又はＱ２Ｗ）に固定された。７週目から、ＬＤＬアフェレーシスをその来院時のＬＤＬ−Ｃ値に基づいて投与した（ポイントオブケア試験により決定）。ＬＤＬアフェレーシスは、その来院時のＬＤＬ−Ｃ値が、アフェレーシスの前のベースライン（１日目）ＬＤＬ−Ｃ値よりも少なくとも３０％低い場合には投与しなかった。ＬＤＬ−Ｃレベルの３０％低下に基づいて、アフェレーシスの必要性を判断するという基準は、理に適っている
と言える、というのは、アリロクマブを投与して観察した場合、この低下は、アフェレーシスによる手順の場合とほぼ同等レベルのＬＤＬ−Ｃの低下を達成する時間経過と矛盾なく一致するからである。研究責任医師は、ＬＤＬ−Ｃのポイントオブケア実験値に対して盲検化されたままであり、ＬＤＬアフェレーシスが投与されるべきかどうかについて警告を受けただけであった。
【０１２６】
非盲検治療：非盲検治療期間中、患者にアリロクマブ１５０ｍｇ  ＳＣ  Ｑ２Ｗを投与した。治療は、二重盲検処置期間（第１６週の最後の投与）の研究薬剤の最後の投与から第１８週（非盲検治療期間の第１回投与）迄、通して、第７６週迄中断せず継続した。
【０１２７】
非盲検治療期間中の最初の注射を、患者への注射訓練の一部として１８週の来院時（非盲検治療期間の最初の来院）に投与した。その後の注射は、患者又は指定の介護者（配偶者、親戚など）により、患者の好む場所（例、家又は仕事先）で投与した。患者は、又、Ｑ２Ｗサイトに戻ることを選択し、研究スタッフによる注射の投与を受けることも出来た。
【０１２８】
アフェレーシス治療は、研究の非盲検治療期間には必要ではなかった。研究責任医師の裁量で、患者は必要に応じてアフェレーシス治療を受け続けることが許可された。計画していたアフェレーシス手順が診療所訪問又はアリロクマブ投薬日と一致した場合、試験の評価はアフェレーシスの前に行い、アフェレーシス後にアリロクマブを投与した。
【０１２９】
追跡調査：患者は第８６週の研究訪問終了時に面会した。
【０１３０】
研究全般：臨床検査室（脂質及び脂質専門班）のための全試料及びＰＫ評価は、ＬＤＬアフェレーシス手順の直前及び直後（ＬＤＬアフェレーシスがその来院時に投与される場合）及び研究薬剤投与の前に得た。
【０１３１】
来院時にＬＤＬアフェレーシスを受けない患者については、臨床検査評価のための全試料は、試験薬剤の投与前に得た。
【０１３２】
全体の安全性は、所定の時点で、ＴＥＡＥ、身体検査、バイタルサイン（脈拍数及び血圧）、心電図（ＥＣＧ）、及び臨床安全試験室の監視／評価により評価した。抗アリロクマブ抗体の発生潜在力を評価した。アフェレーシス前後のＰＣＳＫ９レベルを評価した。
【０１３３】
スタチン、エゼチミブ、フィブラート、ナイアシン、及び胆汁酸樹脂（但し、これに限定する訳ではない）を含む、血清脂質を変化させることが知られている全ての医薬品と栄養補助食品（赤酵母製品の摂取を含む）の使用はその治療がスクリーニング来院（第２週）前の少なくとも８週間安定していれば許可された。患者は、スクリーニングの開始を通じ治療終了時の来院まで、研究全期間中、バックグラウンドの医療ＬＭＴを継続して実施するように指示を受けた。
【０１３４】
患者の食事は、スクリーニングから開始して治療期間終了時の来院迄の、研究全期間中、安定を維持した。
【０１３５】
患者の運動計画は、スクリーニングから開始して治療期間終了時の来院迄の、研究全期間中、安定を維持した。
【０１３６】
患者の選別
研究プロトコルのために、米国及びドイツにおいて、高々１５診療所、約６３人の患者が登録されることが必要であった。患者は以下の通りに、無作為化された。登録患者の約
３分の１（約２１人）がプラセボを受け、登録患者の約３分の２（約４２人）がアリロクマブを受けた。
【０１３７】
集団は、ＨｅＦＨと診断された成人男性及び女性で構成され、１週間又は２週間毎のＬＤＬアフェレーシス療法を実施中であった。
【０１３８】
無作為化は、以下に従って層別化した。アフェレーシス頻度：ＱＷ対Ｑ２Ｗ、及びベースラインＬｐ（ａ）レベル：正常（３０ｍｇ／ｄＬ未満）対上昇（３０ｍｇ／ｄＬ）。ＬＤＬ−Ｃの上昇している一部の患者はＬｐ（ａ）レベルも上昇していたため、層別化によりプラセボ／治療群で適切な表現を確実にした。
【０１３９】
包含基準：この研究に登録される患者は、本研究に包含されるための条件１〜６（下記）を満たし、適格となる必要があった。
【０１４０】
（１）スクリーニング来院時に１８歳以上の男性及び女性。
【０１４１】
（２）ＨｅＦＨの診断；（注ＨｅＦＨの診断は、遺伝子タイピングにより又は臨床基準により、行った。遺伝子型が同定されていない患者の臨床診断は、確定的なＦＨについての基準を用いるＳｉｍｏｎ  Ｂｒｏｏｍｅの基準、又はＷＨＯ／Ｄｕｔｃｈ  Ｌｉｐｉｄ
Ｎｅｔｗｏｒｋ基準でスコア＞８点の何れかに基づいて行うことが出来よう。）
【０１４２】
（３）スクリーニング来院前（２週目）に、ＬＤＬアフェレーシス療法をＱＷで少なくとも４週間、又はＱ２Ｗで少なくとも８週間、現に受けており、かつ、アフェレーシス治療をその前の少なくとも５ヶ月前に開始していた。（注：受容可能なアフェレーシス技術としては、二重膜濾過、免疫吸着、ヘパリン誘発ＬＤＬ沈殿、脂質の直接吸着、デキストラン硫酸吸着（血漿）、デキストラン硫酸吸着（全血））。
【０１４３】
（４）診療所訪問及び研究関連手順に喜んで従うことが出来ること。
【０１４４】
（５）署名入りインフォームドコンセントを提供し、そして
【０１４５】
（６）研究関連のアンケートを理解し、完了することが出来ること。
【０１４６】
除外基準：以下の基準の何れかを満たした前向きの患者を研究から除外した。
【０１４７】
（１）ホモ接合型ＦＨ；
【０１４８】
（２）スクリーニング来院（２週目）の前の、バックグラウンド医療ＬＭＴ（該当する場合）が少なくとも８週間安定していなかった。
【０１４９】
（３）毎週アフェレーシスを受けている患者で、スクリーニング来院（２週目）前に少なくとも４週間、及び、隔週アフェレーシスを受けている患者で、スクリーニング来院（２週目）前に少なくとも８週間、ＬＤＬアフェレーシ計画／アフェレーシス設定が安定的ではなかった。
【０１５０】
（４）ＱＷ〜Ｑ２Ｗ以外のＬＤＬアフェレーシ計画。
【０１５１】
（５）スクリーニング来院（２週目）前、８週間以内に新しい運動プログラムを開始したか、又は運動していたが安定していない場合。
【０１５２】
（６）スクリーニング来院（２週目）前の８週間以内に新しいダイエットを開始したか、又はダイエットをしていたが安定していない場合。
【０１５３】
（７）スクリーニング来院（２週目）前、又はスクリーニング時の訪問と無作為化の時の訪問との間の少なくとも８週間前に、脂質に悪影響を及ぼすことが知られている栄養補助食品又は店頭薬療法を安定しない用量又は量で使用した場合。
【０１５４】
（８）血清脂質又はリポタンパク質に影響を及ぼすことが知られている臨床的に有意な制御されない内分泌疾患の存在；
【０１５５】
（９）甲状腺機能低下症の徴候及び症状（甲状腺置換療法が可能）；
【０１５６】
（１０）スクリーニング来院前１２ヶ月以内の肥満外科手術歴（２週目）。
【０１５７】
（１１）スクリーニング来院前２ヶ月以内の不安定な体重（変動＞５ｋｇ）（２週目）
【０１５８】
（１２）新しく診断された真性糖尿病（無作為化のための来院（第１日目）前３ヶ月以内に）又は制御不能な糖尿病（ヘモグロビンＡ１ｃ［ＨｂＡ１ｃ］＞９％）。
【０１５９】
（１３）全身性副腎皮質ステロイドの使用、但し無作為化の前、少なくとも６週間下垂体／副腎疾患の置換治療として安定したレジメンで使用される場合を除く。局所、関節内、鼻内、吸入及び眼科用ステロイド療法は、「全身性」とはみなさず、許容される。
【０１６０】
（１４）スクリーニング来院（２週目）前、６週間から治療レジメンが安定していなくても、エストロゲン又はテストステロン療法を使用し、かつ試験中にそのレジメンを変更する予定がない場合。
【０１６１】
（１５）スクリーニング来院時（２週目）又は無作為化のための来院時（１日目）の最高血圧＞１６０ｍｍＨｇ又は最低血圧＞１００ｍｍＨｇ［注：試験適格性についての血圧評価は、患者がアフェレーシス計画のためのスクリーニング時又は無作為化時に来院した２回の訪問の間の、所定の高血圧薬を服用せず、又は服用する予定がない場合の訪問時に得ても良い。
【０１６２】
（１６）心筋梗塞（ＭＩ）、入院に至る不安定狭心症、冠動脈バイパス移植手術（ＣＡＢＧ）、経皮的冠動脈インターベンション（ＰＣＩ）、制御不能な心臓不整脈、頸動脈手術又はステント挿入、脳卒中、一過性虚血、又は、スクリーニング来院前の３ヶ月以内（２週目）の頸動脈血管再生術、又はスクリーニング来院前の１ヶ月以内に（２週目）血管内処置若しくは末梢血管疾患のための外科的インターベンションの病歴。
【０１６３】
（１７）スクリーニング来院前、１２ヶ月以内の、ニューヨーク心臓協会の分類する心不全ＩＩＩ期又はＩＶ期の病歴。
【０１６４】
（１８）出血性脳卒中の既往歴
【０１６５】
（１９）過去５年間の癌の病歴、但し適切に治療された基底細胞皮膚癌、扁平上皮細胞癌、又はｉｎ  ｓｉｔｕ子宮頸癌を除く。
【０１６６】
（２０）ヒト免疫不全ウイルスの陽性試験の既往歴；
【０１６７】
（２１）スクリーニングの１ヶ月、又は５半減期以内の何れか長い方の、有効な任意の
治験薬の使用。
【０１６８】
（２２）他の何れかの臨床研究においてアリロクマブ又は他の何れかの抗ＰＣＳＫ９モノクローナル抗体を少なくとも１回投与され治療を受けた患者；
【０１６９】
（２３）以下のような条件／状況。（ａ）スクリーニングの時点で臨床的に有意な異常であると特定された異常は、研究責任医師または副研究責任医師の判断で、研究の安全な完了やエンドポイントの評価の制約を排除する。例えば主要な全身性疾患、平均余命が短い患者。又は、（ｂ）本研究のために不適切であると研究責任医師又は研究責任医師の何れかが考える何らかの理由、例えば、（ｉ）予定通りの来院等の特定の実施要項の要件を満たすことが出来ないとみなされる。（ｉｉ）患者又は研究責任医師によって、注射に耐えられないとみなされる。（ｉｉｉ）研究責任医師又は副研究責任医師、薬剤師、研究進行者、その他の試験スタッフ又はその実施要項の実施に直接関与する関係者等。（ｉｖ）調査の期間中の患者の参加を束縛又は制限すると研究責任医師が、実際に又は予想されると、感じるその他の条件の存在（例えば、地理的又は社会的）
【０１７０】
（２４）スクリーニング期間中の臨床検査所見（無作為化検査を含まない）（ａ）Ｂ型肝炎表面抗原及び／又はＣ型肝炎抗体の陽性検査（ｂ）出産可能な女性の陽性血清β−ｈＣＧ又は尿妊娠試験（ｃ）ＴＧ＞５００ｍｇ／ｄＬ＞５．６５ｍｍｏｌ／Ｌ）（１回の反復検査が可能）（ｄ）４変数でのダイエット変更による腎疾患研究式に基づく（Ｃｅｎｔｒａｌ  Ｌａｂによって計算された）数値がｅＧＦＲ＜１５ｍＬ／分／１．７３ｍ２；（ｅ）アラニンアミノ転移酵素（ＡＬＴ）又はアスパラギン酸アミノ転移酵素（ＡＳＴ）＞３ｘ、正常な上限値の３倍以上（ＵＬＮ）（１回の反復実験が可能）（ｆ）ＣＰＫ＞３×ＵＬＮ（１回の反復実験が可能）。
【０１７１】
（２５）モノクローナル抗体治療薬又は医薬品の何れかの成分に対する既知の過敏症。
【０１７２】
（２６）妊婦又は授乳中の女性；
【０１７３】
（２７）有効性の高い受胎調節の方法（インフォームドコンセントフォーム［ＩＣＦ］及び／又は地方毎の要項補遺に定義されている）により、保護されていない、及び／又は妊娠検査が不本意でるか若しくは出来ない出産可能な女性。閉経後の女性は少なくとも１２ヶ月間無月経でなければならない。
【０１７４】
研究治療
研究治療は、自動注入器又は充填済注射器中に入った１５０ｍｇ用量のアリロクマブ又はプラセボの１ｍＬを単回でＳＣ注入し、腹部、大腿部、に投与し、又は上腕部外側領域にＱ２Ｗ投与した。
【０１７５】
二重盲検治療期間（第１日〜第１８週）中に、適格な患者を無作為化して、アリロクマブ１５０ｍｇ  ＳＣ  Ｑ２Ｗ、又はアリロクマブＳＣ  Ｑ２Ｗの代わりのプラセボを受けさせた。
【０１７６】
非盲検治療期間中、患者は、アリロクマブ１５０ｍｇ  ＳＣ  Ｑ２Ｗを非盲検で受け、これは第１８週に開始し、第７６週に最後の用量を投与した。
【０１７７】
滅菌アリロクマブ薬剤を、ヒスチジン、ｐＨ６．０、ポリソルベート２０及びショ糖中、の１５０ｍｇ／ｍＬの濃度で自動注射器又は充填済注射器に入れて供給した。
【０１７８】
プラセボ適合性アリロクマブを、アリロクマブと同じ製剤でタンパク質の添加はなしに
、自動注射器又は充填済注射器中に入れて供給した。
【０１７９】
投薬日に病院の外で治験薬を注射するように選ばれた全ての患者及び／又は介護者は、注射を投与する前に研究スタッフによる訓練を受けた。患者／介護者は、１８週目の来院時に治験薬の投与を指示され、１８週目の来院時には、非盲検治療期間の初回投与を自己投与した。その後の注射は、患者（自己注射）又は指定された介護者（配偶者、親戚など）により、患者の好みの場所（例えば、家又は仕事場）において、Ｑ２Ｗで投与した。
【０１８０】
患者は、施設Ｑ２Ｗに戻り、試験担当者に注射を投与してもらうという選択肢も与えられた。  
【０１８１】
治療割当て方法
患者は無作為に、プラセボ又はアリロクマブ１５０ｍｇＱ２Ｗを１：２の比率で投与するように割り当てられ、治療割り当ての均等な分布を確保するために置換ブロック設計を実施した。無作為化は、アフェレーシス治療の頻度（７又は１４日ごと）及びＬｐ（ａ）レベル（正常又は上昇）に従って層別化した。患者の２／３以上がアフェレーシスを受けないように登録は制限を設けた。
【０１８２】
二重盲検治療期間における割当て治療に関係なく、すべての患者は、非盲検治療期間中にアリロクマブ１５０ｍｇ  Ｑ２Ｗを受けた。
【０１８３】
併用療法
インフォームドコンセントの時点から追跡期間／最終研究来院の終了まで投与される何れの治療も、併用療法とみなされる。これには、試験前に開始され、かつ試験中に実施していた薬剤が含まれる。研究中の併用薬は最小限に維持した。患者の福祉のために必要であり、治験薬を妨害する可能性が低いと考えられる場合、（研究中に禁じられているものを除く）併用薬は、研究責任医師の裁量で、安定した投与量（可能な場合）で投与することを認めた。
【０１８４】
禁止薬物：スクリーニング来院前の少なくとも８週間（第２週）安定していないバックグラウンド医療ＬＭＴは何れも禁止される。
【０１８５】
許可薬物：血清脂質を変化させることが知られている、スタチン、エゼチミブ、フィブラート、ナイアシン、及び胆汁酸樹脂を含む、但しこれに限定する訳ではない、全ての薬物及び栄養補助食品（赤酵母製品の摂取を含む）の使用は、スクリーニング来院前の少なくとも８週間（２週目）安定した治療である限り、許可される。患者は、スクリーニング時の開始から治療終了の訪問まで、研究全期間中、バックグラウンドの医療ＬＭＴを継続して行うように指示を受けた。
【０１８６】
患者の食事は、スクリーニング時の開始から治療終了時の来院に至る、研究の全期間を通じて安定したままであった。
【０１８７】
患者の運動プログラムは、スクリーニング時の開始から治療終了時の来院に至る、研究の全期間を通じて安定したままであった。
【０１８８】
研究のエンドポイント
ベースライン特性には、標準的な人口統計学（例、年齢、人種、体重、身長など）、病歴を含む疾患の特徴、及び各患者の投薬履歴を含む。
【０１８９】
一次有効性エンドポイント：一次有効性エンドポイントは、週−１０から週−２の、ス
クリーニング時の各患者の確立されたスケジュール、に従って計画されたアフェレーシス治療の回数で正規化された、７週目から１８週目までの１２週間の間のアフェレーシス治療の割合である。
【０１９０】
アフェレーシスの正規化割合は、各患者について、７週目から１８週目に受けた実際のアフェレーシス治療の回数を、ベースライン時の無作為化層ごとに計画していたアフェレーシス治療の回数で割ったものとして定義される（Ｑ２Ｗについては６、ＱＷについては１２）。
【０１９１】
１８週前に患者が離脱した場合、実際のアフェレーシス手順の回数（７週目から１８週目）は、分子の無作為化の階層に従って計画された残りのアフェレーシス治療の帰属数に加える。
【０１９２】
計画しているアフェレーシス治療に対する正規化の影響は、ベースラインで確立した各患者の計画に従って、異なるアフェレーシス計画（即ち、アフェレーシスがＱＷ、又はＱ２Ｗ）で研究に参入した患者について、同じ割合の尺度に均質化することを可能にする。
【０１９３】
二次有効性エンドポイント：二重盲検治療期間中のベースラインから特定のポストベースライン到達へのパーセント変化等の以下の脂質エンドポイントについては、アフェレーシス手順の前後で２つの時点を定義する。重要な有効性エンドポイントについては、各アフェレーシス手順の前に収集された評価を用いて脂質パラメーターを分析する。要項で指定した来院時にアフェレーシスが行われない場合、収集のために計画した単一の臨床検査評価を、両方の時点（即ち、主要有効性エンドポイントを含む）に使用する。ベースライン値は、治験薬剤の最初の二重盲検投与前の各パラメータについて、最後に入手可能な値として定義する。
【０１９４】
本研究の二次エンドポイントは以下の通りであった。
【０１９５】
（１）治療への遵守に関係なく、ＬＤＬ−Ｃ（アフェレーシス前）のベースラインから第６週までのパーセント変化。
【０１９６】
（２）一次有効性エンドポイントと同様に定義された、１５週目から１８週目までの４週間の期間におけるアフェレーシス治療の標準化した割合。
【０１９７】
（３）治療への遵守に関係なく、ＡｐｏＢ（アフェレーシス前）のベースラインから第６週迄のパーセント変化。
【０１９８】
（４）治療への遵守に関係なく、非ＨＤＬ−Ｃ（アフェレーシス前）のベースラインから第６週迄のパーセント変化。
【０１９９】
（５）治療への遵守に関係なく、総コレステロール（アフェレーシス前）のベースラインから第６週迄のパーセント変化。
【０２００】
（６）治療への遵守に関係なく、ＡｐｏＡ−１（アフェレーシス前）のベースラインから第６週迄のパーセント変化。
【０２０１】
（７）治療への遵守に関係なく、第６週において、ＬＤＬ−Ｃ（アフェレーシス前）が３０％以上減少した患者の割合；
【０２０２】
（８）治療への遵守に関係なく、第６週において、ＬＤＬ−Ｃ（アフェレーシス前）が
５０％以上減少した患者の割合；
【０２０３】
（９）治療への遵守に関係なく、ＬＤＬ−Ｃ（アフェレーシス前）のベースラインから１８週までのパーセント変化。
【０２０４】
（１０）治療への遵守に関係なく、ＡｐｏＢ（アフェレーシス前）のベースラインから１８週までのパーセント変化。
【０２０５】
（１１）治療への遵守に関係なく、非ＨＤＬ−Ｃ（アフェレーシス前）のベースラインから第１８週までのパーセント変化。
【０２０６】
（１２）治療への遵守に関係なく、総コレステロール（アフェレーシス前）のベースラインから第１８週までのパーセント変化。
【０２０７】
（１３）治療への遵守に関係なく、ＡｐｏＡ−１（アフェレーシス前）のベースラインから１８週までのパーセント変化。
【０２０８】
（１４）治療への遵守に関係なく、第１８週にＬＤＬ−Ｃ（アフェレーシス前）が３０％以上減少した患者の割合。
【０２０９】
（１５）治療への遵守に関係なく、第１８週にＬＤＬ−Ｃ（アフェレーシス前）が５０％以上減少した患者の割合。
【０２１０】
（１６）治療への遵守に関係なく、ベースラインから第１８週までのＷ−ＢＱ２２指標スコアの変化。
【０２１１】
（１７）治療への遵守に関係なく、Ｌｐ（ａ）（アフェレーシス前）のベースラインから第６週までのパーセント変化。
【０２１２】
（１８）治療への遵守に関係なく、ＨＤＬ−Ｃ（アフェレーシス前）のベースラインから第６週までのパーセント変化。
【０２１３】
（１９）治療への遵守に関係なく、ＴＧレベル（アフェレーシス前）のベースラインから第６週までのパーセント変化。
【０２１４】
（２０）治療への遵守に関係なく、Ｌｐ（ａ）（アフェレーシス前）のベースラインから第１８週までのパーセント変化。
【０２１５】
（２１）治療への遵守に関係なく、ＨＤＬ−Ｃ（アフェレーシス前）のベースラインから第１８週までのパーセント変化。
【０２１６】
（２２）治療への遵守に関係なく、ＴＧレベル（アフェレーシス前）のベースラインから第１８週までのパーセント変化。
【０２１７】
（２３）治療への遵守に関係なく、ベースラインから第６週までのＡｐｏＢ／ＡｐｏＡ−１比（アフェレーシス前）の変化。
【０２１８】
（２４）治療への遵守に関係なく、ベースラインから第１８週までのＡｐｏＢ  ／ＡｐｏＡ−１比（アフェレーシス前）の変化。
【０２１９】
（２５）７週目から１０週目までの４週間の期間におけるアフェレーシス治療の標準化された割合は、従って一次有効性エンドポイントとして定義される。
【０２２０】
（２６）第１１週から第１４週までの４週間の期間におけるアフェレーシス治療の標準化された割合は、従って一次有効性エンドポイントとして定義される。
【０２２１】
（２７）第７週の初めから第１８週の終わりまでの１２週間のアフェレーシス頻度及びＬＤＬ−Ｃ値の総合評価（ＬＤＬ−Ｃ値及びアフェレーシス率に従ってランク付けした患者；全ての患者の平均ランクを決定し、各治療患者のＬＤＬ−Ｃレベル又はアフェレーシス率とその変数に関する平均ランクからの差異をパーセンテージとして表し、その２変数の患者ベースごとのパーセンテージ差異を加算し、累積したパーセント差異を提供する。治療群ごとに組合わせて分析すると、得られた数値は低ＬＤＬ−Ｃ及び／又はアフェレーシス率の低下を示す）。
【０２２２】
（２８）治療への遵守に関係なく、６週目のアフェレーシスの前に、ＬＤＬ−Ｃレベルが＜２００ｍｇ／ｄＬ、＜１３０ｍｇ／ｄＬ、＜１００ｍｇ／ｄＬ及び＜７０ｍｇ／ｄＬを達成した患者の割合。
【０２２３】
（２９）治療への遵守に関係なく、１８週目のアフェレーシスの前に、ＬＤＬ−Ｃレベルが＜２００ｍｇ／ｄＬ、＜１３０ｍｇ／ｄＬ、＜１００ｍｇ／ｄＬ及び＜７０ｍｇ／ｄＬを達成した患者の割合。
【０２２４】
（３０）治療への遵守に関係なく、二重盲検治療期間における、ベースラインから各々到達した両時点までの、生の値、並びにパーセント及びＬＤＬ−Ｃ及び他の脂質の絶対変化。
【０２２５】
（３１）治療への遵守に関係なく、非盲検治療期間における、ベースラインから各到達点までの、生の値、並びにパーセント及びＬＤＬ−Ｃ及び他の脂質の絶対変化。
【０２２６】
（３２）研究を通して評価した安全性パラメーター（ＡＥ（宣告を受けた心血管イベントを含む）、臨床検査データ、バイタルサイン、及びＥＣＧ）。
【０２２７】
他のエンドポイント：（１）試験を通して評価した抗アリロクマブ抗体（２）高感受性Ｃ反応性タンパク質（ｈｓ−ＣＲＰ）及びＨｂＡ１ｃのベースラインから１８週及び６週までのパーセント変化（３）アフェレーシス前及びアフェレーシス後の血清中の総アリロクマブの濃度（４）アフェレーシス前及びアフェレーシス後の遊離の又は全ＰＣＳＫ９レベル。
【０２２８】
試験手順
研究薬剤の用量を投与する前に、すべての実験室試料は収集した。血液試料は、来院する全ての脂質研究班のために、可能であれば絶食状態（例、一晩（少なくとも１０時間の絶食）、水のみ）の患者から収集した。空腹時は、好ましいとは言え、脂質パネルの試料の必須条件ではなかった。４８時間以内のアルコール摂取と喫煙、又は採血前の２４時間以内の激しい運動は許可しなかった。
【０２２９】
総Ｃ、ＨＤＬ−Ｃ、ＴＧ、ＡｐｏＢ、ＡｐｏＡ−１及びＬｐ（ａ）は、中央検査室で直接測定した。ＬＤＬ−ＣはＦｒｉｅｄｅｗａｌｄ式を用いて計算した。ＴＧ値が４００ｍｇ／ｄＬ（４．５２ｍｍｏｌ／Ｌ）を超えた場合、ＬＤＬ−Ｃを計算するのではなく、中央検査室で再帰的に（β定量法によって）ＬＤＬ−Ｃを測定した。非ＨＤＬ−Ｃは、総−Ｃ  からＨＤＬ−Ｃを減じて計算した。ＡｐｏＢ／ＡｐｏＡ−１の比を算出した。
【０２３０】
脂質研究班（絶食）：脂質研究班の血液試料（総−Ｃ、ＴＧ、ＨＤＬ−Ｃ、及び計算したＬＤＬ−Ｃ）を、予め指定された時点で少なくとも１０時間絶食後に採取した。
【０２３１】
脂質専門研究班（絶食）：予め指定された時点で少なくとも１０時間絶食後に、特殊脂質研究班（ＡｐｏＢ、ＡｐｏＡ−１、及びＬｐ［ａ］）の血液試料を採取した。
【０２３２】
幸福感アンケート：Ｗ−ＢＱ２２を使用して、特定の時点での高コレステロール血症と治療の幸福感に及ぼす影響を評価した。
【０２３３】
血圧及び心拍数：予め指定された時点で血圧及び心拍数を評価した。血圧は、標準的な座位状態で、ほぼ同じ日に、同じ腕、同じ装置（患者が座位で少なくとも５分間快適に休息した後）測定することが好ましい。最初のスクリーニング来院時に、両腕で血圧を測定した。最高の拡張期血圧を有する腕をこの来院時に決定し、血圧はこの研究全体を通してこの腕で測定した。この最高値は、電子的症例報告書（ｅＣＲＦ）に記録した。心拍数は血圧の測定の時に測定した。
【０２３４】
身体検査：事前に指定された時点に十分で完全な身体検査を行った。
【０２３５】
体重及び身長：体重は、患者が下着又は非常に軽い服を着用し、靴を着用せず、膀胱を空にし状態で得た。研究全体を通して、同じ測定具を用いるのが好ましい。可能であれば、校正済みの天秤ばかりの使用を推奨する。
【０２３６】
心電図：血液採取を必要とする来院中の採血前に心電図記録を実施した。事前に指定された時点に、標準の１２誘導ＥＣＧを実施した。１２誘導ＥＣＧは、少なくとも１０分間の休息後に仰臥位で行われた。各電極は、研究全体のＥＣＧ記録について、可能な限り同一場所に配置した。ＥＣＧは調査者が、施設毎に解釈した。ＥＣＧパラメータの新規な及び／又は臨床的に有意な変化は、関係する患者のための如何なる決定も、それを下す前に直ちに再確認した。臨床的に有意な異常は、何れもＡＥ／ＳＡＥとして適宜文書化した。トレースの各々は、スクリーニング時に記録したトレースと比較して分析した。ＥＣＧトレースの全てを、ソースデータとして保持した。心室拍動数から心拍数を記録し、ＰＲ、ＱＲＳ、ＲＲ及びＱＴ間隔を記録した。
【０２３７】
検査室検査：すべての検査試料（ＰＫ及びＡＤＡ試料を含む）は、評価実施後、かつ、投薬日に対応する来院時に研究薬剤の用量を投与する前に、収集した。
【０２３８】
心血管イベントの宣告：宣告した心臓血管イベントには、積極的に宣告したすべての心臓血管ＡＥを含ませた。宣告した分類は以下の通りであった。（１）ＣＨＤ死（２）致命的でないＭＩ（３）致命的及び非致命的な虚血性脳卒中（４）入院を必要とする不安定狭心症（５）入院を必要とするうっ血性心不全（６）虚血駆動冠動脈再建術（ＰＣＩ、ＣＡＢＧ）。
【０２３９】
統計分析
患者６３人（アリロクマブ４２：プラセボ２１）の試料サイズで、両側有意水準を用い、かつ、標準偏差を４０％と仮定した時、少なくとも８５％の検出力（ｐｏｗｅｒ）を有し、平均アフェレーシス率は３３％の差を有するだろうと推定した。
【０２４０】
一次有効性分析集団は、全患者が無作為化されているとして定義された一次治療企図（ＩＴＴ）集団であった。二次的有効性分析集団は、試験薬物の最初の投与の前に少なくとも１回のアフェレーシス前の計算ＬＤＬ−Ｃ値を有し（又は患者が如何なる試験薬物を受
けなかった場合は無作為化）及び、第６週までのアフェレーシス前分析窓の１つにおいて、少なくとも１つの計算ＬＤＬ−Ｃ値を有する無作為化患者に基づいている。統計分析は、最後の患者が１８週目に全ての有効性評価を完了した時に実施した。ＬＤＬ−Ｃデータは、６〜１８週目（アフェレーシス療法の中止の可能性が生じた後）のＬＤＬ−Ｃの区間平均を評価するためのＫｒｏｏｎ式を使用して、事後、分析した。
【０２４１】
アフェレーシスの標準化した割合は、１２週間の期間（７週目〜１８週目）に受けた治療の回数を、計画した治療の回数で割り、（隔週（Ｑ２Ｗ）は６回、毎週は１２回）、共分散（ＡＮＣＯＶＡ）モデルのランク付け分析を使用して分析する。標準化したアフェレーシス割合は０〜１の範囲であり、０は、患者が７〜１８週目の計画したアフェレーシス治療を全て休んだことを示し、１は患者が計画した治療を全て受けたことを示す。０．７５の割合は、患者が計画したアフェレーシス治療の７５％を受けた（及び計画した治療の２５％を休んだ）ことを示した。患者の離脱は、所定の基準に従って説明した。治療の中央値の差をＨｏｄｇｅｓ−Ｌｅｈｍａｎｎ推定及び、Ｍｏｓｅｓ分布のない信頼区間を用いる９５％信頼区間（ＣＩ）を用いて、決定した。
【０２４２】
階層的推論アプローチを用いて、第１種過誤（α過誤）を制御した。一次エンドポイント分析は５％αレベルで有意であったため、主要な二次有効エンドポイントを順次試験した。
【０２４３】
結果
ベースライン特性
研究に登録した患者のベースライン特性を表１〜４に要約する。
【０２４４】
【表１】
2022000443.tif 000002
【０２４５】
【表２】
2022000443.tif 000003
【０２４６】
【表３】
2022000443.tif 000004
【０２４７】
【表４】
2022000443.tif 000005
【０２４８】
ｈｅＦＨを有し、定期的に毎週又はＱ２Ｗでリポタンパク質アフェレーシスを受けている７６人の患者から、参加の同意の提供を受け、スクリーニングを行った。表１−４に要約したように、合計６２人の患者（年齢：平均±ＳＤ年齢、５８．７±９．７歳）を無作為化した。無作為化した患者の５８．１％が男性であった。スクリーニング時の来院では、２８人の患者が耐用性のためにスタチンを受けておらず、３４人の患者が毎日スタチンを摂取していることを示し、内１９人が最大毎日用量を摂取していた。全患者がアテローム性動脈硬化症（冠状動脈及び／又は脳血管及び／又は末梢）を有し、かつ、５６．５％
は冠状動脈性心疾患の家族歴があった。平均的な患者は、（平均±ＳＤ）７．６±７．７年の間、定期的にリポタンパク質アフェレーシスを受けていた。中央値（最小：最大）は４．９（０．５：３２．９）年である。アフェレーシス頻度はＱ２Ｗ（５６．５％）及びＱＷ（４３．５％）であった。患者の１６．１％が糖尿病を有していた。患者の１．６％が慢性腎疾患を有していた。ベースラインの平均ＬＤＬ−Ｃは４．７ｍｍｏｌ／Ｌ（１８０．７ｍｇ／ｄＬ）であり、中央値（最小：最大）が４．７（１．４：８．２）ｍｍｏｌ／Ｌ（１７９．５（５３．０：３１６．０）ｍｇ／ｄＬ）であった。ベースライン平均Ｌｐ（ａ）は４３．９ｍｇ／ｄＬ（中央値（最小：最大）は１９．０（１．５：２８５．０）ｍｇ／ｄＬ）であった。
【０２４９】
６０人の患者が６週間の二重盲検治療期間（アリロクマブ群の内の４０［９７．６％］人、プラセボ群の内の２０［９５．２％］人）を完了し（即ち、この時、患者の確立したスケジュールによってアフェレーシスの割合が決定された）、及び５７人が１８週の二重盲検治療期間（それぞれ３７［９０．２％］人、及び２０［９５．２％］人）を完了し、この時、以前に達成したＬＤＬ−Ｃ値により、アフェレーシス計画を決定した。試験治療を早期に中止した５人（８．１％）の患者のうち、１人（４．８％）がプラセボ（有害イベントにより中止）を受け、４人（９．８％）がアリロクマブを受けた（２人が有害イベント、１人は遵守性に乏しく、１人の患者が同意を撤回した）。
【０２５０】
集団の平均±標準偏差（ＳＤ）年齢は、５８．７±９．７歳であり、３６人（５８．１％）の患者が男性であり、６０人（９６．８％）が白人であった。研究開始前のアフェレーシス治療継続時間の中央値（最小、最大）は４．９（０．５，３２．９）年であった。
【０２５１】
ベースライン特性は、治療群の間で均衡していた。計算したベースラインＬＤＬ−Ｃ値の平均（試験開始時）は、アリロクマブ群では４．５±１．４ｍｍｏｌ／Ｌ（１７５．１ｍｇ／ｄＬ）であり、プラセボ群では５．０±１．８ｍｍｏｌ／Ｌ（１９１．６ｍｇ／ｄＬ）であった（Ｐ＝０．３５  ）。ベースライン時に毎週のアフェレーシス計画に従った患者は２７人（４３．５％）、Ｑ２Ｗ計画に従った患者は３５人（５６．５％）で有った。アフェレーシスを毎週受けている患者の平均ＬＤＬ−Ｃ値は、３．９±１．３ｍｍｏｌ／Ｌ（１５１．３±５１．３ｍｇ／ｄＬ）であり、これに対して、アフェレーシスをＱ２Ｗで受けている患者においては５．３±１．４ｍｍｏｌ／Ｌ（２０４．９±５５．７ｍｇ／ｄＬ）であった。３８人（６１．３％）の患者は正常なベースラインリポタンパク質（ａ）レベル（３０ｍｇ／ｄＬ未満）を有し、及び２４（３８．７％）人は上昇したレベルを有した。スクリーニング時にスタチンを服用していた患者は３４人（５４．８％）であり、その内の１９人（５５．９％）が最大毎日用量を受けていた。ベースラインＬＤＬ−Ｃ値はスタチンで治療中の患者で４．０±１．４ｍｍｏｌ／Ｌ（１５５．０±５４．６ｍｇ／ｄＬ）であったのに比べ、スタチンを服用していない患者では５．４±１．４ｍｍｏｌ／Ｌ２０８．０±５３．２ｍｇ／ｄＬ）であった。３０人（４８．４％）の患者がドイツから、そして、３２人（５１．６％）が米国からであった。
【０２５２】
注射による曝露の平均±ＳＤ持続時間は、アリロクマブ群では１７．４±２．３週（８．６±１．３回注射）、プラセボ群では１７．５±３．１週（８．４±１．７回注射）であった。
【０２５３】
有効性の結果
有効性の結果を表５〜８にまとめた。
【０２５４】
表５に、第７週〜第１８週のアフェレーシスの標準化された割合を示した。
【０２５５】
【表５】
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【０２５６】
【表６】
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【０２５７】
一次有効性エンドポイントは、アリロクマブで治療した患者に統計的に有意な利益を達成し、対プラセボ０．７５（９５％信頼区間：０．６７−０．８３）の治療差のＨｏｄｇｅｓ−Ｌｅｈｍａｎｎ中央値推定値を得た。従って、アリロクマブ治療患者は、プラセボ治療患者と比較して、アフェレーシス治療の標準化率において０．７５（７５％）の追加的な減少を有した（Ｐ＜０．０００１）。以前に達成したＬＤＬ−Ｃ濃度により、アフェレーシス治療を決定した、第７週〜第１８週のアフェレーシス治療の標準化された割合における治療差中央値は、毎週アフェレーシスを受けた患者について０．７５（９５％ＣＩ
０．５８−０．９２）であり、Ｑ２Ｗ計画での患者ではアリロクマブのために、０．６
７（９５％ＣＩ  ０．５０−１．００）であった。
【０２５８】
４週間（第１５週〜第１８週）にわたるアフェレーシス治療の標準化された割合の中央値治療差は、アリロクマブのために０．５０（９５％ＣＩ  ０．５０〜１．００；Ｐ＜０．０００１）であり、アフェレーシス治療の標準化された割合は、対プラセボで５０％の低下を示した。
【０２５９】
表５に示すように、アリロクマブで治療した患者におけるアフェレーシス治療の平均割合は０．１２８であったが、プラセボ群でのアフェレーシス治療の平均割合は０．８０６であった。 １２週間にわたるプラセボ群の個々の患者と比較した個々のアリロクマブ治
療患者のアフェレーシス治療の割合の減少パーセントの描図を図２に示す。この期間中、アリロクマブ患者の６３．４％はアフェレーシス処置を行わず、９２．７％は処置の少なくとも半分をしなくて済すんだ。即ち、アリロクマブ治療群の２６人の患者が、アフェレーシス治療の割合を１００％減少させた。対照的に、プラセボ群の患者のうち、アフェレーシス治療の割合が１００％低下した患者はいなかった。これらの結果はまた、表６および図３〜６に反映され、試験の第７週〜第１８週のプラセボおよびアリロクマブ治療群における患者のアフェレーシス治療の割合を示す。 結果は、既存治療レジメンにアリロク
マブを添加した患者が、標準化したアフェレーシス治療の頻度をプラセボと比較して１２週間にわたって７５％有意に減少させることを示した（Ｐ＜０．０００１）。
【０２６０】
表７及び図７及び８は、全試験中の血清ＬＤＬ−Ｃレベルの変化に関して、プラセボと比較したアリロクマブ治療の効果を示す。全体的に、アリロクマブ治療患者は、第６週でベースラインからＬＤＬ−Ｃが平均５０％を超える減少を示し、一方、プラセボ群の患者は如何なる、有意な程度のＬＤＬ−Ｃ低下も示さなかった。
【０２６１】
【表７】
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【０２６２】
プラセボ及びアリロクマブで治療した患者の重要な二次的有効性の結果を表８にまとめ
た。
【０２６３】
【表８】
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【０２６４】
【表９】
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【０２６５】
アフェレーシス前平均ＬＤＬ−Ｃ値は、アリロクマブ群において、ベースライン時の４．５ｍｍｏｌ／Ｌ（１７５ｍｇ／ｄＬ）から６週目での２．３ｍｍｏｌ／Ｌ（９０ｍｇ／ｄＬ）に減少し、対応するプラセボ群の患者のデータは、５．０ｍｍｏｌ／Ｌ１９２ｍｇ／ｄＬ）及び４．８ｍｍｏｌ／Ｌ（１８５ｍｇ／ｄＬ）である（図８）。第６週目のベースラインからのアフェレーシス前のＬＤＬ−Ｃ値における、ＬＳ平均±ＳＥ（９５％ＣＩ）のパーセント変化は、アリロクマブ群で−５３．７±２．３（−５８．２から−４９．２）であり、プラセボ群で１．６±３．１（-４．７から７．９）（ＬＳ平均±ＳＥパー
セント差−５５．３±３．９、９５％Ｃ  −６３．１から−４７．５、Ｐ＜０．０００１）。第１８週までに、アリロクマブ群のＬＤＬ−Ｃ平均値は２．９ｍｍｏｌ／Ｌ（１１０ｍｇ／ｄＬ）まで僅かに上昇し、これと比較してプラセボ群（ＬＳ平均±  ＳＥパーセント差  −４６．４±７．９、９５％ＣＩ  −６２．３から−３０．５。Ｐ＜０．０００１）は４．９ｍｍｏｌ／Ｌ（１９１ｍｇ／ｄＬ）であった。
【０２６６】
ポイントオブケアのＬＤＬ−Ｃ値と中央検査室値とを比較する交差検証は、両方の測定値が非常に相関していることを示した（ピアソン相関０．８６）。
【０２６７】
第１８週までの、リポタンパク質（ａ）のベースラインからパーセント変化は、正常ベースライン値を有する患者において、アロロクマブについて−５．７％対プラセボに対して−３．０％、そして、ベースライン値が上昇している患者において、それぞれ、４．９％対７．６％であった。アフェレーシス治療を取止めることができ得る時の７〜１８週の間、アリロクマブ治療は、より低い平均±ＳＤ時間平均ＬＤＬ−Ｃ値（Ｋｒｏｏｎ式１８を使用）に関連しており、（潜在的な）アフェレーシス間隔の全体にわたり、２．４±１．３（９２．７±５０．２ｍｇ／ｄＬ）であり、これに対し、プラセボでは３．８±１．７ｍｍｏｌ／Ｌ（１４６．７±６５．６ｍｇ／ｄＬ）であった（Ｐ＜０．０００１）。
【０２６８】
事後分析では、アリロクマブ治療患者の時間平均ＬＤＬ−Ｃ値は、プラセボ治療患者のそれよりも一貫して低かった。
【０２６９】
安全性
ＴＥＡＥは、アリロクマブ群の患者の７５．６％及びプラセボ群の患者の７６．２％によって報告されたが、何れも致命的ではなかった。重篤な有害イベント（アリロクマブで９．８％、プラセボで９．５％）及び治療中止に至るイベント（それぞれ４．９％と４．８％）の割合も両群で同等であった。
【０２７０】
アリロクマブ群の３人の患者（７．３％）、及びプラセボ群ではいなかった、は２つの連続した前アフェレーシスでのＬＤＬ−Ｃ値＜０．７ｍｍｏｌ／Ｌ（２５ｍｇ／ｄＬ）を有していた。これらの患者の内の２人に少なくとも１つの有害イベントがあり、その内の一人には数種の重篤な有害イベント（肺炎、急性心筋梗塞、急性呼吸不全、心不全性うっ血、敗血症及び大動脈弁狭窄症）があった。アフェレーシス後の患者２７人（アリロクマブ投与群２３人（５６．１％）、プラセボ投与群４人（１９．０％］）は、アフェレーシス後の２つのＬＤＬ−Ｃ値が０．７ｍｍｏｌ／Ｌ未満であり、そのうち１５人（６５．２％）及び２人（５０．０％）は  それぞれ有害イベントを有していた。いずれのイベントも重篤ではなかったが、１人の患者（４．３％）はアリロクマブによる治療を中止した。
【０２７１】
総括及び結論
本研究は、アリロクマブを投与した患者は、プラセボを投与した患者と比較して、アフェレーシス治療の割合が低下し、研究全過程にわたり、アフェレーシス治療の回数が減少したことを示している。特に、アリロクマブ治療は、プラセボ治療と比較して、アフェレーシス治療を、中央値推定で０．７５又は７５％より高い割合で低減するという結果を得た（ｐ＜０．０００１）。
【０２７２】
本研究はまた、アリロクマブで治療した患者の６３．４％は、アフェレーシスを実施しなかったのに対し、プラセボで治療した患者については０％であったことを示した（即ち、プラセボ治療群の患者はアフェレーシス治療無しで済ますことは全く出来なかったが、一方で、アリロクマブ治療で装備した群の患者の６３．４％は、アリロクマブ治療後にアフェレーシス治療を完全に無くすことが出来た）。加えて、アリロクマブで治療した患者の９２．７％は、アフェレーシス頻度が少なくとも５０％減少し、これに対しプラセボ治療患者では１４．３％であった。更に、アリロクマブは６週目に、１７５ｍｇ／ｄｌから８９．５ｍｇ／ｄｌまでＬＤＬ−Ｃを５５％（ＰＢＯに対して）低下させた。アリロクマブで治療した患者では、ａｐｏＢ、非ＨＤＬ−Ｃ及びＴＣにおいても、有意な減少が観察された。  アリロクマブ治療は、アフェレーシス治療の標準化した割合を１５週から１８週に減少させた。
【０２７３】
安全性に関して、１週間又は２週間ごとにＬＤＬアフェレーシス治療を受けているＨｅＦＨ患者におけるアリロクマブの皮下投与は、一般に安全で十分に許容された。ＴＥＡＥ全体及びＡＥＳＩを報告している患者の数は、治療群間で同等であった。
【０２７４】
この研究の全ての患者は心血管リスクが高く、スタチンを含めて、ＬＬＴを以前に服用していた。スクリーニングでは、患者の５４．８％のみがスタチンを服用し、５５．９％が最大耐用量であった。全集団の大部分は、耐用性の問題（４３．５％）によりスタチン治療をダウンタイトレーションしたという既往歴があり、６２．９％は異なるスタチンに変更したという既往歴があった。スタチンを服用しないこと又は１日最大用量を服用しないことの理由としては、筋肉症状から副作用に関する不安、及び地域習慣／局所的標識化に至るまで、様々に挙げられ、これはアフェレーシスを実施しているｈｅＦＨの患者は、治療に関して選択肢が限定され、多様でかつ治療困難な集団を代表していることを示している。
【０２７５】
米国の患者は、ドイツの患者とは異なる特徴を示し、ベースラインＬＤＬ−Ｃが高く、スタチン不耐用性がより蔓延し、しかも、アフェレーシスレジメンはより少ない。米国では、ｈｅＦＨのためのリポタンパク質アフェレーシスは、６ヶ月後に最大許容薬物療法に対する適切な応答を持たず、ＬＤＬ−Ｃの外に他の心血管リスク因子が高くなっている患者に対してのみ考慮されることが多い。アフェレーシスセンターがより一般的であるドイツでは、１２ヶ月以内の食事療法及びＬＬＴの失敗、及びＬＤＬ−Ｃ閾値がより低い時、アフェレーシスが考慮され、更に、Ｑ２Ｗより毎週のアフェレーシスが好ましいとされる。更に、欧州からのＬＤＬ−Ｃの低減に関する勧告は、リスクを層別化した、目標達成に向けた治療手法に基づいているが、米国のガイドラインは用量適応手法を主張している。欧州ガイドラインの手法の観点では、目標とするＬＤＬ−Ｃ値が＜１．８ｍｍｏｌ／Ｌ（７０ｍｇ／ｄＬ）であり、この目標値を上回るＬＤＬ−Ｃを有するアリロクマブを受けているドイツ人患者は依然としてアフェレーシスの基準を満たしていることになる。その結果、アリロクマブを含むＬＬＴは、非常に高いＬＤＬ−Ｃを有する患者又はＬＤＬ−Ｃの目標値を満たしていない患者において、リポタンパク質アフェレーシスと相補的であることを証明することができる。
【０２７６】
結論として、この研究は一次有効性エンドポイントにおける有意な低減を達成し、アリロクマブのようなＰＣＳＫ９阻害剤が、患者のリポタンパク質アフェレーシス治療の必要性を低減若しくは除去し、又はそのような治療の必要性を遅延する有効な治療選択肢であることを実証した。
【０２７７】
本発明は、本明細書に記載の特定の実施形態によって範囲を限定するものではない。実際、本明細書に記載したものの他に、当業者には、本発明の様々な改変が、前述の説明及び添付図面から明らかになるであろう。そのような改変も、添付した特許請求の範囲の視野の範囲内に入ることを企図している。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
2022000443.tif 000017
【図８】
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【配列表】
2022000443000001.app
【外国語明細書】
2022000443000001.pdf