(57)【要約】      （修正有）【課題】癌の治療のための、シチジン類似体薬剤及びアスパラギン酸又はグルタミン酸及びその類似体を含むコンジュゲートの薬学的に許容されうる塩、薬学的組成物の提供。【解決手段】下式の塩による。2022000463.tif 000053【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（１）：
【化１】
2022000463.tif 000046
の構造によって示され、Ｙは、塩酸（ＨＣｌ）、メタンスルホン酸、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）、硫酸（Ｈ２ＳＯ４）、リン酸（Ｈ３ＰＯ４）または硫酸水素ナトリウム（ＮａＨＳＯ４）から選択される、薬学的に許容されうる有機または無機酸または酸の残基である、薬学的に許容されうる塩。
【請求項２】
Ｙが塩酸（ＨＣｌ）であり、以下の構造で表される、請求項１に記載の薬学的に許容されうる塩。
【化２】
2022000463.tif 000047
【請求項３】
Ｙがメタンスルホン酸であり、以下の構造で表される、請求項１に記載の薬学的に許容されうる塩。
【化３】
2022000463.tif 000048
【請求項４】
Ｙがトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）であり、以下の構造で表される、請求項１に記載の薬学的に許容されうる塩。
【化４】
2022000463.tif 000049
【請求項５】
Ｙが硫酸（Ｈ２ＳＯ４）であり、以下の構造で表される、請求項１に記載の薬学的に許容されうる塩。
【化５】
2022000463.tif 000050
【請求項６】
Ｙがリン酸（Ｈ３ＰＯ４）であり、以下の構造で表される、請求項１に記載の薬学的に許容されうる塩。
【化６】
2022000463.tif 000051
【請求項７】
Ｙが硫酸水素ナトリウム（ＮａＨＳＯ４）であり、以下の構造で表される、請求項１に記載の薬学的に許容されうる塩。
【化７】
2022000463.tif 000052
【請求項８】
請求項１に記載の薬学的に許容されうる塩および薬学的に許容されうる賦形剤を含む、薬学的組成物。
【請求項９】
癌または前癌状態または障害の治療に使用するための、請求項１に記載の薬学的に許容されうる塩。
【請求項１０】
前記癌が転移癌である、請求項９に記載の薬学的に許容されうる塩。
【請求項１１】
前記癌が、非固形腫瘍または固形腫瘍またはその組み合わせである、請求項９に記載の薬学的に許容されうる塩。
【請求項１２】
前記非固形腫瘍が、白血病、リンパ腫、および多発性骨髄腫を含む、請求項１１に記載の薬学的に許容されうる塩。
【請求項１３】
前記白血病が、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）および急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）を含む、請求項１２に記載の薬学的に許容されうる塩。
【請求項１４】
前記固形腫瘍が、中枢神経系（ＣＮＳ）の腫瘍、肝臓癌、結腸直腸癌、乳癌、胃癌、膵臓癌、膀胱癌、子宮頸癌、頭頸部腫瘍、外陰部癌、皮膚科学的新生物を含む、請求項１１に記載の薬学的に許容されうる塩。
【請求項１５】
前記皮膚科学的新生物が、黒色腫、扁平上皮癌および基底細胞癌を含む、請求項１４に記載の薬学的に許容されうる塩。
【請求項１６】
前記癌が、血液学的癌である、請求項９に記載の薬学的に許容されうる塩。
【請求項１７】
前記血液学的癌が、白血病、リンパ腫および骨髄腫である、請求項１６に記載の薬学的に許容されうる塩。
【請求項１８】
前記癌が、骨髄性白血病、リンパ性白血病、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、またはワルデンストレームのマクログロブリン血症である、請求項１７に記載の薬学的に許容されうる塩。
【請求項１９】
前記前癌状態または障害が、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）である、請求項９に記載の薬学的に許容されうる塩。
【請求項２０】
被験体がヒトである、請求項９に記載の薬学的に許容されうる塩。
【請求項２１】
骨髄移植の候補者である個体の治療に使用するための、請求項１に記載の薬学的に許容されうる塩。
【請求項２２】
免疫学的疾患または障害を有する対象の腫瘍性疾患の治療に使用するための、請求項１に記載の薬学的に許容されうる塩。
【請求項２３】
臓器機能障害を有する被験者の腫瘍性疾患の治療に使用するための、請求項１に記載の薬学的に許容されうる塩。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、癌細胞によって容易に取り込まれる、化学療法薬剤およびアミノ酸またはその誘導体を含むコンジュゲートの薬学的に許容されうる塩に関する。特に、本発明は、シチジン類似体薬剤およびアスパラギン酸またはグルタミン酸およびその類似体のコンジュゲートの薬学的に許容されうる塩、これらのコンジュゲートを含む薬学的組成物、ならびに癌または前癌状態または障害の治療のためのその使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
抗増殖薬剤
抗増殖薬剤は、代謝拮抗剤、抗新生物剤および共有ＤＮＡ結合薬剤としても知られ、必須の代謝経路を阻害することによって作用し、悪性疾患の治療に一般的に用いられる。しかし、正常細胞に高い毒性を持ち、重度の副作用を示すことから、療法剤としての使用は限定されている。望ましくない副作用には、迅速に分裂している正常細胞、例えば骨髄中の幹細胞、腸管の上皮細胞、毛包細胞等に対して細胞傷害性の影響を有することによる、貧血、嘔吐および禿髪が含まれる。
【０００３】
抗増殖薬剤の別の主な問題は、薬剤に対する、腫瘍の生得的耐性または獲得耐性である。例えば、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）患者において、Ｌ−アスパラギナーゼでの治療後の最初の寛解率はかなり高いが、再発および関連薬剤耐性は大きな臨床的問題を課す。研究によって、アスパラギナーゼ耐性細胞において、アスパラギンシンテターゼ（ＡＳ）発現増加が立証されており、これはＡＳ活性上昇が、悪性細胞の薬剤耐性生存を可能にするという仮説につながる。
【０００４】
ヌクレオチド／ヌクレオシド類似体
ヌクレオシド類似体は、核酸内への取り込みに関して、生理学的対応物と競合し、急性白血病の治療において重要な位置を占めている。これらのうち最も重要なものは、アラビノースヌクレオシドであり；これは元来、海綿（Ｃｒｙｐｔｏｔｈｅｔｈｙａ  ｃｒｙｐｔａ）から単離されたが、現在では合成産生されている、代謝拮抗剤のユニークなクラスである。これらは、シトシンおよびアラビノシド糖の間のＮ−グリコシル結合に対して、シス立体配置の２’−ＯＨ基が存在する点が生理学的デオキシリボヌクレオシドとは異なる。いくつかのアラビノースヌクレオシドは、有用な抗腫瘍および抗ウイルス効果を有する。このクラスの最も活性である細胞傷害性剤は、シトシンアラビノシド（シタラビン）である。関連するヌクレオシド、アデニンアラビノシドもまた、抗腫瘍活性を示し、その類似体、リン酸フルダラビン（２−フルオロ−アラ−アデノシン一リン酸）は、リンパ腫および慢性リンパ球性白血病において、強い抗腫瘍活性を有する（Ｗａｒｒｅｌｌ  ＆  Ｂｅｒｍａｎ、１９８６）。グループの別のメンバーは、合成類似体の、アラビノシル−５−アザシチジンであり、これはクリニックでは失敗した（Ｄａｌａｌら、１９８６）。
【０００５】
シチジン代謝拮抗剤の分野における類似体開発の１つの目的は、ａｒａ−Ｃの阻害活性を保持するが、脱アミン化に耐性である化合物を見出すことであった。シクロ−シチジン（Ｈｏ  ＤＨＷ、１９７４）およびＮ４−ベヘノイルａｒａ−Ｃ（Ｋｏｄａｍａら、１９８９）を含むいくつかのデアミナーゼ耐性類似体が開発されてきており、これらはいくつかの臨床試験において抗白血病活性を示したが、望ましくない副作用を有した（Ｗｏｏｄｃｏｃｋら、１９８０）。他の代表的な化合物は、Ｎ４−パルミトイル−ａｒａ、２’−アジド−２’−デオキシａｒａ−Ｃ、ａｒａ−Ｃの５’−（コルチゾン２１−ホスホリル）エステル、ａｒａ−Ｃの５’−アシルエステル（例えば５’−パルミチン酸エステル）、Ｎ４ベヘノイル−ａｒａ−Ｃ、ポリ−Ｈ５（２−ヒドロキシエチル）−Ｌ−グルタミンとのＡｒａ−Ｃコンジュゲート、ジヒドロ−５−アザシチジン、５−アザ−アラビノシルシトシン、５−アザ２’−デオキシシチジンおよび２’−２’−ジフルオロデオキシシチジン（Ｈａｒｔｅｌら、１９９０およびＨｅｉｎｅｍａｎら、１９８８）である。
【０００６】
ゲムシタビン（２，２−ジフルオロデオキシシチジン、ｄＦｄＣ）は、ａｒａ−Ｃ以来の臨床試験に進行する最も重要なシチジン類似体である。これは、膵臓癌、肺癌、および膀胱の移行細胞癌患者の標準的な最初の療法に取り込まれるようになってきている。
【０００７】
ヌクレオチド類似体はまた、非癌適用にも用いられてきている。例えば、フッ素化シトシン類似体、フルシトシンは、抗真菌剤として用いられている。
【０００８】
アミノ酸および増殖性疾患
アスパラギンは、迅速に増殖している細胞に必要とされる非必須アミノ酸である。哺乳動物細胞は、ＡＴＰ依存性酵素、アスパラギンシンテターゼ（ＣＥ  ６．３．５．４）を用いて、アスパラギン酸からアスパラギンを合成可能であり、該酵素は：グルタミン＋アスパラギン酸＋ＡＴＰ＋Ｈ２Ｏ＝グルタミン酸＋アスパラギン＋ＡＭＰ＋ＰＰｉと示されうる反応において、グルタミンのアミドからアスパラギン酸のβ−カルボキシルにアミノ基をトランスファーする。
【０００９】
アスパラギンシンテターゼ不全は、特定の腫瘍において起こり、こうした腫瘍を、他の供給源、例えば血清からのアスパラギンの外部供給に頼るようにする。この観察は、化学療法剤としての酵素Ｌ−アスパラギナーゼ（ＣＥ−２型、ＣＥ  ３．５．１．１）の開発につながった。Ｌ−アスパラギナーゼは、Ｌ−アスパラギンをアスパラギン酸およびアンモニアに加水分解し、したがって、血清からＬ−アスパラギンを枯渇させ、そして腫瘍増殖を阻害する。Ｌ−アスパラギナーゼは、主に、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）の治療に用いられ、そして急性非リンパ球性白血病を含む他の血液学的癌に対してある程度の活性を示す。
【００１０】
クリニックで用いられるＬ−アスパラギナーゼは、細菌供給源から精製される２つの非変形（天然）型、およびＰＥＧ化化合物としてのもので入手可能である。米国特許第４，１７９，３３７号は、ＰＥＧ化Ｌ−アスパラギナーゼを解説し、この中で、該酵素は、約５００〜２０，０００ダルトンの分子量を有するＰＥＧにカップリングされる。
【００１１】
アスパラギンシンテターゼのｉｎ  ｖｉｖｏ下方制御は、腫瘍増殖を阻害するための効率的な機構を提供可能である。しかし、細胞は、アスパラギンシンテターゼ遺伝子の転写制御を伴う、アスパラギンシンテターゼｍＲＮＡ、タンパク質、および酵素活性の協調した増加によって、アミノ酸枯渇に反応する。
【００１２】
代謝アプローチは、まず、Ｌ−アスパラギンおよびＬ−アスパラギン酸類似体の生成によって、アスパラギンシンテターゼ活性を阻害するために用いられた。５−カルボキシアミド−４−アミノ−３−イソキサゾリドン（Ｓｔａｍｍｅｒら、１９７８）ならびにＮ−置換スルホンアミドおよびＮ’−置換スルホニルヒドラジドを含む類似体が、Ｌ−アスパラギンのイオウ類似体として調製されてきている（Ｂｒｙｎｅｓ  Ｓら、１９７８ａ；Ｂｒｙｎｅｓ  Ｓら、１９７８ｂ）。米国特許第４，３４８，５２２号は、抗腫瘍活性を示すことが知られており、現在、結腸直腸癌および膵臓癌の併用化学療法として臨床試験中である、ＰＡＬＡ、Ｎ−ホスホンアセチル−Ｌ−アスパラギン酸の塩を解説する。
【００１３】
ＣＤ４陽性細胞をターゲティングするためのペプチドＴ  Ａｒａ−Ｃコンジュゲートのさらなる合成のため、Ａｒａ−Ｃのアスパラギン酸類似体が原材料として用いられた（Ｍａｎｆｒｅｄｉｎｉら、２０００）。
【００１４】
生物学的利用能増加または部位特異性増加などの所望の特性を与えるためのプロドラッグの使用は、薬剤開発業においてよく知られる概念である。例えば、抗体への薬剤の直接または間接的コンジュゲート化は、薬剤の最小限の解離で、ターゲット部位に到達可能な、安定なコンジュゲートを生成する。薬剤ターゲティングは、最大強度のため、薬剤の選択的放出の機構と組み合わされることも可能である。
【００１５】
米国特許第４，２９６，１０５号は、アミノ酸残基のヒドロキシ基で、場合によって置換されたアミノ酸に連結されるドキソルビシン誘導体を記載し、これは、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで、ドキソルビシンよりも、より高い抗腫瘍活性およびより低い毒性を所持する。
【００１６】
米国特許第５，９６２，２１６号は、ターゲット細胞によって分泌される単数または複数の因子によって切断されるまで、細胞に進入不能である、腫瘍活性化プロドラッグを解説する。
【００１７】
米国特許第５，６５０，３８６号は、少なくとも１つの活性剤、および活性剤のキャリアーとして作用する少なくとも１つの変形非アルファアミノ酸またはポリアミノ酸を含む組成物を解説する。アミノ酸変形には、少なくとも１つの未結合アミン基のアシル化またはスルホン化が含まれる。
【００１８】
米国特許第６，６２３，７３１号、６，４２８，７８０号、および６，３４４，２１３号は、生物学的活性剤のキャリアーとして変形アミノ酸を含む非共有混合物を解説する。
【００１９】
米国特許第５，１０６，９５１号は、オリゴペプチド上の２つの芳香族側鎖の間に非共有的に挿入された芳香族薬剤、および癌細胞にターゲティングするため、オリゴペプチドに共有結合した抗体または抗体断片を含むコンジュゲートを開示する。
【００２０】
米国特許第６，６１７，３０６号は、キャリアーおよび療法剤がジスルフィド結合によって連結されている、療法剤のｉｎ  ｖｉｖｏ送達のためのキャリアーを解説する。この特許において、キャリアーは、チオール化合物のチオール基および療法剤のチオール基がジスルフィド結合を形成するように、ポリマー、およびポリマーにコンジュゲート化された少なくとも１つのチオール化合物を含む。
【００２１】
国際特許出願公報第ＷＯ  ００／３３８８８号は、ターゲット細胞に進入可能な療法剤、オリゴペプチド、安定化基および場合によるリンカーを含む、切断可能な抗腫瘍および抗炎症化合物を解説する。
【００２２】
本発明の発明者らの何人かに対する、国際特許出願公報第ＷＯ  ２００５／０７２０６１号および米国特許第７，９８９，１８８号は、新生物細胞に薬剤をターゲティングするために有用な官能基を含む側鎖を通じて、アミノ酸に共有結合した薬剤を含む化合物を記載する。
【００２３】
薬学的塩
薬剤の最適な薬学的塩の選択は、有効性を増加させ、薬剤の薬剤送達を改善することができる。こうした活性薬剤塩の確立は、ささいなことではなく、こうした塩の開発および分析においてユニークな方法を必要とする。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２４】
腫瘍をターゲティングしつつ、正常な組織への細胞傷害性の損傷を除去することが可能な化合物および組成物には、なお満たされていない医学的な必要性がある。
【００２５】
本発明の目的は、悪性および前悪性細胞に薬剤をターゲティングする一方、現在の薬剤療法に関連する副作用を減少させることである。
【課題を解決するための手段】
【００２６】
本発明は、第二の化学部分に共有結合した第一の化学部分を含むコンジュゲートの薬学的に許容されうる塩であって、第一の化学部分が、側鎖上に、アミノ基、カルボキシル基、スルフィドリル基およびヒドロキシル基からなる群より選択される、少なくとも１つの官能基を含むアミノ酸であり、そして第二の化学部分が、細胞傷害性剤、細胞分裂停止剤および化学療法剤からなる群より選択される抗癌薬剤である、前記塩を提供する。抗癌薬剤は、アミノ酸側鎖官能基を通じて、アミノ酸に付着される。アミノ酸は、好ましくは、抗癌薬剤、好ましくはヌクレオチド／ヌクレオシド類似体、例えばシタラビンまたはゲムシタビンに共有結合した、アスパラギン酸またはグルタミン酸あるいはその誘導体または類似体である。薬学的に許容されうる塩は、好ましくは、有機または無機酸または酸の残基（すなわちそのコンジュゲート塩基）より選択される。本発明はさらに、コンジュゲート塩を含む薬学的組成物、ならびに癌および前癌状態または障害を治療するためのその使用を提供する。本発明はさらに、本発明のコンジュゲートの塩型を調製するための、特に適切な塩を形成する、酸と保護前駆体化合物を反応させるための方法を提供する。
【００２７】
本発明の塩型は、薬剤が癌細胞による迅速な取り込みを経る、薬剤またはプロドラッグの送達ビヒクルとして働きうる。塩型はまた、コンジュゲートの安定性および可溶性を増加させるようにも働きうる。
【００２８】
本発明のコンジュゲートは、典型的には、感受性部分、例えばアミンまたはカルボン酸上に、１またはそれより多い保護基を含有する、前駆体から調製される。例えば、アミノ酸のアミノ基は、典型的には、ｔ−ブトキシカルボニル（ＢＯＣ）基によって保護される。ＢＯＣ基が、典型的には、酸媒体中でアミノ基から除去されることが周知であり、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）が最も一般的に用いられる脱保護剤である。ＴＦＡが除去困難であり、したがって、脱保護アミンは、通常、ＴＦＡの残留量を含有することがさらに知られる。その毒性の影響から、ＴＦＡを欠く化合物が薬学的使用に必要である。いくつかの態様において、本発明は、脱保護剤としてＴＦＡを用いる必要性を回避する。現在、予期せぬことに、本発明のコンジュゲートの塩は、最終的に塩を形成するものと同じ試薬を用いて、ＢＯＣ基を脱保護することによって調製可能であることが発見されている。現在、特定の薬学的に許容されうる酸は、一工程で、保護基（単数または複数）を除去し、同時に、本発明のコンジュゲートの塩を生成可能であり、それによって塩形成前のＴＦＡによる脱保護の中間工程を省略可能であることが開示されている。したがって、特定の態様において、本発明のコンジュゲートは、脱保護のため、ＴＦＡに曝露されず、したがって、本発明のコンジュゲート塩はＴＦＡ残留を含まない。生じる塩は、したがって、毒性ＴＦＡを欠くことにより好適であり、したがって、薬学的使用に適している。
【００２９】
第一の側面によれば、本発明は、化合物の薬学的に許容されうる塩であって、式（Ｉ）
Ａ−Ｄ・Ｙ  （Ｉ）
式中、
Ａは、側鎖上に、カルボキシル基、アミノ基、スルフィドリル基およびヒドロキシル基からなる群より選択される、少なくとも１つの官能基を含むアミノ酸を示し；
Ｄは、細胞傷害性剤、細胞分裂停止剤および化学療法剤からなる群より選択される薬剤の残基を示し、ここでＤは、Ａの側鎖官能基を通じてＡに付着され；そして
Ｙは、塩酸、酢酸、メタンスルホン酸、リン酸、クエン酸、乳酸、コハク酸、酒石酸、ホウ酸、安息香酸、トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、アスコルビン酸、硫酸、マレイン酸、ギ酸、マロン酸、ニコチン酸およびシュウ酸からなる群より選択される、薬学的に許容されうる有機または無機酸または酸の残基（すなわち、前記酸のコンジュゲート塩基）である
の構造によって示される、前記塩を提供し、薬学的に許容されうる塩は、不純物として、０．１％またはそれ未満のトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）を含有する。各々の可能性は、本発明の別個の態様に相当する。
【００３０】
アミノ酸（Ａ）は、α−アミノ酸（ＤまたはＬ）、β−アミノ酸、γ−アミノ酸、δ−アミノ酸またはε−アミノ酸でありうる。１つの現在好ましい態様において、アミノ酸（Ａ）は、α−アミノ酸（ＤまたはＬ）である。いくつかの態様において、アミノ酸（Ａ）は、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ）、アスパラギン（Ａｓｎ）、グルタミン（Ｇｌｎ）、α−アミノアジピン酸（Ａａｄ）、α−アミノピメリン酸、γ−カルボキシ−グルタミン酸、γ−ヒドロキシ−グルタミン酸、アミノグリシン、アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）、アルギニン（Ａｒｇ）、シトルリン（Ｃｉｔ）、システイン（Ｃｙｓ）、シスチン、ジアミノブタン酸、ジアミノ酪酸（Ｄａｂ）、ジアミノプロピオン酸（Ｄｐｒ）、ジヒドロキシフェニルアラニン、ジメチルアルギニン、ピログルタミン酸（ｐ−Ｇｌｕ）、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、１−メチル−ヒスチジン、３−メチル−ヒスチジン、ホモセリン（Ｈｓｅ）、ホモシトルリン、ヒドロキシプロリン（Ｈｙｐ）、リジン（Ｌｙｓ）、メチル−リジン、ジメチルリジン、トリメチルリジン、アジドリジン、メチオニン（Ｍｅｔ）、メチオニンスルホキシド、メチオニンスルホン、オルニチン（Ｏｒｎ）、ザルコシン（Ｓａｒ）、セレノシステイン（Ｓｅｃ）、セリン（Ｓｅｒ）、ホスホル−セリン、メチル−セリン、アミノセリン（Ａｍｓ）、チエニルアラニン（Ｔｈｉ）、スレオニン（Ｔｈｒ）、ホスホ−スレオニン、トリプトファン（Ｔｒｐ）、チロシン（Ｔｙｒ）、メチル−チロシン、ホスホル−チロシン、スルホ−チロシン、α−アミノスベリン酸、３，５−ジヨードチロシン、ペニシラミン（Ｐｅｎ）、４−エチルアミンフェニルグリシン、４−アミノフェニルグリシン、４−スルホフェニルアラニン、４−アミノフェニルアラニンおよび２−アミノ−４［４−（２−アミノ）−ピリミジニル］ブタン酸、３−アミノプロピオン酸、６−アミノヘキサン酸（ε−Ａｈｘ）、ｐ−アミノ安息香酸、イソニペコチン酸、スタチン（Ｓｔａ）、２−アミノ酪酸（Ａｂｕ）、および４−アミノ酪酸、ならびにその誘導体および類似体からなる群より選択される。各々の可能性は、本発明の別個の態様に相当する。
【００３１】
いくつかの態様において、アミノ酸（Ａ）は、アスパラギン酸、グルタミン酸、アスパラギン、グルタミン、ならびにその誘導体および類似体からなる群より選択される。１つの現在好ましい態様において、アミノ酸（Ａ）はアスパラギン酸である。別の現在好ましい態様において、アミノ酸（Ａ）はグルタミン酸である。
【００３２】
基（Ｄ）は、細胞傷害性剤、細胞分裂停止剤および化学療法剤からなる群より選択される任意の薬剤由来でありうる。いくつかの態様において、細胞傷害性剤、細胞分裂停止剤または化学療法剤Ｄは、ピリミジン類似体、プリン類似体、葉酸代謝拮抗剤、ヒドロキシ尿素、微小管阻害剤、アルキル化剤、抗腫瘍抗生物質、トポイソメラーゼターゲティング剤、代謝拮抗剤、ＤＮＡ結合剤およびＤＮＡアンタゴニストからなる群より選択される薬剤の残基である。
【００３３】
いくつかの態様において、細胞傷害性剤、細胞分裂停止剤または化学療法剤Ｄは、シトシンアラビノシド（ａｒａ−Ｃ、シタラビン）、ゲムシタビン、フルオロウラシル、５−フルオロデオキシウリジン（５−ＦＵＤＲ）、フトラフール（ｆｔｏｒａｆｕｒｅ）、カペシタビン、カルモフール、ＢＯＦ−Ａ２、５−クロロ−２，４−ジヒドロキシピリジン、デシタビン、レフルノミド、トリフルリジン、ヨードクスウリジン、ジドブジン、テルビブジン、トリメトプリム、フルオロシトシン、デオキシチミジンおよび５−アミノ−６−ニトロウラシルより選択されるピリミジン類似体の残基である。各々の可能性は本発明の別個の態様に相当する。１つの現在好ましい態様において、細胞傷害性剤、細胞分裂停止剤または化学療法剤Ｄは、シタラビンの残基である。別の現在好ましい態様において、細胞傷害性剤、細胞分裂停止剤または化学療法剤Ｄは、ゲムシタビンの残基である。
【００３４】
他の態様において、細胞傷害性剤、細胞分裂停止剤または化学療法剤Ｄは、クロファラビン、デカルバジン、クラドリビン、メルカプトプリン、ネララビン、ペントスタチン、チオグアニン、ゲフィチニブ、アザチオプリン、８−アザグアニン、イミュシリン−Ｇ、２−フルオロ−２’−デオキシアデノシン、９−ベータ−Ｄ−キシロフラノシル−アデニン、３−デオキシ（ｄｅｘｏｘｙ）グアニン、６−メチル−ホルミシンＡ、２−フルオロアデノシン、１−デアザ−アデノシン、Ｎ−エチル−５−カルボキシアミド−アデノシン、３’−オキソ−アデノシン、２−アミノ−アデノシン、６−Ｏ−シクロメチル−グアニン、フルダラビン、および８−ヨード−グアニンより選択されるプリン類似体の残基である。各々の可能性は、本発明の別個の態様に相当する。
【００３５】
他の態様において、細胞傷害性剤、細胞分裂停止剤または化学療法剤Ｄは、２，４−ジオキソ−５−フルオロピリミジン（５−ＦＵ）、アザシチジン（５−ＡＺＣ）、６−メルカプトプリン（６−ＭＰ）、６−チオグアニン（６−ＴＧ）、クロロデオキシアデノシン（２−ＣＤＡ）およびペントスタチン（ｄＣＦ）からなる群より選択される薬剤の残基である。各々の可能性は、本発明の別個の態様に相当する。
【００３６】
いくつかの態様において、式（Ｉ）の塩は、実質的に純粋な型で調製される。用語「実質的に純粋な」は、ＨＰＬＣによって決定した際の少なくとも９５％の純度、好ましくは少なくとも約９７％の純度、より好ましくは少なくとも９８％の純度、そして最も好ましくは少なくとも９９％の純度を指す。
【００３７】
上述のように、本発明のコンジュゲートにおいて、細胞傷害性剤、細胞分裂停止剤または化学療法剤Ｄは、（Ａ）の側鎖官能基を通じて、アミノ酸（Ａ）に付着する。こうしたコンジュゲートのいくつかの限定されない態様を以下に記載する。いくつかの態様によれば、アミノ酸（Ａ）は、アスパラギン酸およびグルタミン酸からなる群より選択され、そして化合物は式（ＩＩ）または（ＩＩＩ）：
【化１】
2022000463.tif 000002
式中、ＤおよびＹは上に定義する通りである
の構造によって示される。
【００３８】
式（ＩＩ）の特定の態様において、Ａはアスパラギン酸であり、Ｄはシタラビンの残基である。この態様において、化合物は、式（１）：
【化２】
2022000463.tif 000003
の構造によって示される塩である。
【００３９】
式（１）の１つの態様において、化合物は、式（ＩＡ）：
【化３】
2022000463.tif 000004
の構造によって示される、酢酸との塩（すなわち酢酸塩）である。
【００４０】
式（１）の別の態様において、化合物は、式（ＩＢ）：
【化４】
2022000463.tif 000005
の構造によって示される、塩酸との塩（すなわち塩酸塩）である。
【００４１】
式（ＩＩ）の別の特定の態様において、Ａはアスパラギン酸であり、Ｄはゲムシタビンの残基であり、そして化合物は式（２）：
【化５】
2022000463.tif 000006
の構造によって示される。
【００４２】
式（ＩＩＩ）の特定の態様において、Ａはグルタミン酸であり、Ｄはシタラビンの残基であり、そして化合物は、式（３）：
【化６】
2022000463.tif 000007
の構造によって示される。
【００４３】
式（ＩＩＩ）の別の特定の態様において、Ａはグルタミン酸であり、Ｄはゲムシタビンの残基であり、そして化合物は、式（４）：
【化７】
2022000463.tif 000008
の構造によって示される。
【００４４】
式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（１）、（２）、（３）および（４）の前述の化合物のいずれにおいても、Ｙは、酢酸、塩酸、メタンスルホン酸、リン酸、クエン酸、乳酸、コハク酸、酒石酸、ホウ酸、安息香酸、トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、アスコルビン酸、硫酸、マレイン酸、ギ酸、マロン酸、ニコチン酸およびシュウ酸からなる群より選択される、薬学的に許容されうる酸である。各々の可能性は、本発明の別個の態様に相当する。
【００４５】
１つの現在好ましい態様において、薬学的に許容されうる酸Ｙは、酢酸、すなわち有機酸である。別の現在好ましい態様において、薬学的に許容されうる酸Ｙは、塩酸（ＨＣｌ）、すなわち無機酸である。
【００４６】
当業者には、上述の薬学的に許容されうる酸の任意の１つが、本発明の化合物と薬学的に許容されうる塩を形成可能であることが理解される。いくつかの態様において、薬学的に許容されうる塩は：酢酸塩、塩酸塩、メタンスルホン酸塩、リン酸塩、クエン酸塩、乳酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、ホウ酸塩、安息香酸塩、トルエンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、アスコルビン酸塩、硫酸塩、マレイン酸塩、ギ酸塩、マロン酸塩、ニコチン酸塩およびシュウ酸塩からなる群より選択される。各々の可能性は、本発明の別個の態様に相当する。
【００４７】
１つの現在好ましい態様において、薬学的に許容されうる酸は、酢酸（ＣＨ３ＣＯＯＨ）である。この態様において、塩は酢酸塩である。別の好ましい態様において、薬学的に許容されうる塩は塩酸（ＨＣｌ）塩である。この態様において、塩は塩酸塩である。
【００４８】
別の側面において、本発明は、活性成分として、本明細書に記載するような式（Ｉ）の塩、またはこうした式によって含まれる任意の化合物、例えば化合物（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（１）、（１Ａ）、（１Ｂ）、（２）、（３）または（４）、および薬学的に許容されうるキャリアーまたは希釈剤を含む、薬学的組成物を提供する。
【００４９】
別の側面において、本発明は、転移を含む癌を治療する方法であって、治療が必要な被験体に、療法的に有効な量の本明細書に記載するような式（Ｉ）の塩、またはこうした式によって含まれる任意の化合物、例えば化合物（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（１）、（１Ａ）、（１Ｂ）、（２）、（３）または（４）を投与する工程を含む、前記方法を提供する。別の側面において、本発明は、転移を含む癌の治療に使用するための、本明細書に記載するような式（Ｉ）の塩、またはこうした式によって含まれる任意の化合物、例えば化合物（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（１）、（１Ａ）、（１Ｂ）、（２）、（３）または（４）を提供する。いくつかの態様において、癌は、非固形腫瘍または固形腫瘍またはその組み合わせによって特徴付けられる。
【００５０】
他の態様において、癌は血液学的癌である。他の特定の態様において、血液学的癌は、白血病、リンパ腫および多発性骨髄腫からなる群より選択される。いくつかの態様において、白血病は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）および急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）からなる群より選択される。いくつかの態様において、白血病は、再発性／難治性白血病である。他の態様において、白血病は、新規に診断された白血病である。
【００５１】
いくつかの特定の態様において、固形腫瘍によって特徴付けられる癌は、中枢神経系（ＣＮＳ）の腫瘍、肝臓癌、結腸直腸癌、乳癌、胃癌、膵臓癌、膀胱癌、子宮頸癌、頭頸部腫瘍、外陰部癌、ならびに黒色腫、扁平上皮癌および基底細胞癌を含む皮膚科学的新生物からなる群より選択される。
【００５２】
別の側面において、本発明は、前癌状態または障害を治療する方法であって、治療が必要な被験体に、療法的に有効な量の本明細書に記載するような式（Ｉ）の塩、またはこうした式によって含まれる任意の化合物、例えば化合物（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（１）、（１Ａ）、（１Ｂ）、（２）、（３）または（４）を投与する工程を含む、前記方法を提供する。
【００５３】
別の側面において、本発明は、前癌状態または障害の治療に使用するための、本明細書に記載するような式（Ｉ）の塩、またはこうした式によって含まれる任意の化合物、例えば化合物（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（１）、（１Ａ）、（１Ｂ）、（２）、（３）または（４）を提供する。
【００５４】
いくつかの態様において、前癌状態または障害は、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）である。
【００５５】
他の態様において、本発明は、骨髄移植の候補者である個体を治療する方法であって、移植の前に、前記個体を、本明細書に記載するような式（Ｉ）の塩、またはこうした式によって含まれる任意の化合物、例えば化合物（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（１）、（１Ａ）、（１Ｂ）、（２）、（３）または（４）で前治療する工程を含む、前記方法にも関する。
【００５６】
他の態様において、本発明は、骨髄移植前の前治療に使用するための、本明細書に記載するような式（Ｉ）の塩、またはこうした式によって含まれる任意の化合物、例えば化合物（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（１）、（１Ａ）、（１Ｂ）、（２）、（３）または（４）を提供する。
【００５７】
本発明の塩型は、任意の哺乳動物、好ましくはヒトを治療するために使用可能である。
【００５８】
本発明の式（Ｉ）によって示される化合物の薬学的に許容されうる塩を調製するための方法であって
（ａ）式（ＩＶ）：
（Ａ−Ｄ）−（Ｐ）ｎ    （ＩＶ）
式中、
ＡおよびＤは上に定義する通りであり；
ｎは１〜６の整数であり；そして
各Ｐは、各出現に際して、独立に、保護基であり；各Ｐは、アミノ酸（Ａ）、薬剤残基（Ｄ）またはアミノ酸（Ａ）および薬剤残基（Ｄ）の両方の保護のため、利用可能な任意の官能基に付着する
の化合物と
保護基（単数または複数）Ｐを除去可能な試薬を反応させる工程；および
（ｂ）式：
Ａ−Ｄ・Ｙ    （Ｉ）
式中、Ｙは上に定義する通りである
によって示される塩が生成されるように、基Ｙを導入可能な試薬を添加する工程
を含む、前記方法をさらに開示する。
【００５９】
１つの態様において、現在、予期せぬことに、本発明の塩は、最終的に塩を形成するものと同じ薬学的に許容されうる酸を用いて、前駆体化合物を脱保護することによって調製可能であることが発見されている。したがって、本発明の原理によれば、基Ｙを導入可能な薬学的に許容されうる酸Ｙは、一工程で、保護基（単数または複数）Ｐを除去し、同時に、式（Ｉ）の塩を生成可能であり、それによって塩形成前の脱保護の中間工程を省略可能である。この方式で、塩産物の純度レベルは、脱保護剤（すなわち不純物）の残留量が回避されるために、改善される。例えば、保護基、例えばｔ−ブトキシカルボニル（ＢＯＣ）は、典型的には、酸媒体中で、例えばトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）で除去される。しかし、ＴＦＡは除去困難であり、そしてしたがって、脱保護産物にはこの酸の残留量が含まれる。これは、不可避的に、最終塩型におけるＴＦＡ不純物レベルの増加を導き、これは薬剤開発の観点からは許容されえない。本発明は、最終的に塩を形成するものと同じ試薬（例えば酸）を用いて合成の最終工程を実行することによって、この問題に対する解決策を提供する。
【００６０】
したがって、１つの態様において、本発明のプロセスは、保護基（単数または複数）Ｐを除去し、同時に基Ｙ、例えば酸を導入することが可能な試薬の使用を伴う。この態様によれば、一工程で、保護基（単数または複数）Ｐは除去され、そして基Ｙが導入される。
【００６１】
いくつかの態様によれば、本発明のコンジュゲートの薬学的に許容されうる塩は、約５％またはそれ未満の残留ＴＦＡを含有する。さらなる態様によれば、本発明のコンジュゲートの薬学的に許容されうる塩は、約１％またはそれ未満の残留ＴＦＡを含有する。さらなる態様によれば、本発明のコンジュゲートの薬学的に許容されうる塩は、約０．１％またはそれ未満の残留ＴＦＡを含有する。特定の態様によれば、本発明のコンジュゲートの薬学的に許容されうる塩は、実質的に、不純物としてのＴＦＡを含まない。別の態様によれば、本発明のコンジュゲートの薬学的に許容されうる塩は、完全に、不純物としてのＴＦＡを含まない。
【００６２】
式（Ｉ）の化合物は、一般的に、薬剤部分とアミノ酸を、好ましくはカップリング剤の存在下でカップリングし、そして上述のプロセスによれば、塩型に変換することによって、調製可能である。このプロセスは、本明細書において、式（ＩＩ）および（ＩＩＩ）の化合物に関して例示される。
【００６３】
いくつかの態様において、本発明は、式（ＩＩ）の化合物を調製するためのプロセスであって：
（ａ）式（ｉ）の化合物を、式Ｄの薬剤と、または式Ｄ−（Ｐ３）ｎのその保護された誘導体と、カップリング試薬の存在下でカップリングして、式（ｉｉ）の中間体を得る工程；および
（ｂ）式（ＩＩ）によって示される塩が生成されるように、保護基Ｐ１、Ｐ２およびＰ３（存在する場合）を、酸（Ｙ）で、または脱保護剤の後、酸（Ｙ）で、除去する工程
【化８】
2022000463.tif 000009
式中、Ｐ１はカルボキシ保護基であり、Ｐ２はアミノ保護基であり、Ｐ３は薬剤Ｄ上の１またはそれより多い官能基上に位置する保護基であり、そしてｎは０、１、２または３である
を含む、前記プロセスを提供する。
【００６４】
他の態様において、本発明は、式（ＩＩＩ）の化合物を調製するためのプロセスであって：
（ａ）式（ｉｉｉ）の化合物を、式Ｄの薬剤と、または式Ｄ−（Ｐ３）ｎのその保護された誘導体と、カップリング試薬の存在下でカップリングして、式（ｉｖ）の中間体を得る工程；および
（ｂ）式（ＩＩ）によって示される塩が生成されるように、保護基Ｐ１、Ｐ２およびＰ３（存在する場合）を、酸（Ｙ）で、または脱保護剤の後、酸（Ｙ）で、除去する工程
【化９】
2022000463.tif 000010
式中、Ｐ１はカルボキシ保護基であり、Ｐ２はアミノ保護基であり、Ｐ３は薬剤Ｄ上の１またはそれより多い官能基上に位置する保護基であり、そしてｎは０、１、２または３である
を含む、前記プロセスを提供する。
【００６５】
１つの態様において、薬剤はシタラビンである。他の態様において、薬剤は、２’、３’および／または５’ヒドロキシル部分上に保護基を含む保護シタラビン、例えばトリフェニルメチル−シタラビン（ＣＡＳ  ７０７５−１３−０）、ベンゾイル−シタラビン（ＣＡＳ  ３４２７０−１０−５）、アドマントイル−シタラビン（ＣＡＳ  ２３１１３−０１−１）、およびトリメチルシリル−シタラビンである。他の態様において、薬剤はゲムシタビンである。他の態様において、薬剤は、３’および／または５’ヒドロキシル部分上に保護基を含む保護ゲムシタビン、例えばトリフェニルメチル−ゲムシタビン（ＣＡＳ  １６４２８６２−２４−５）である。
【００６６】
いくつかの態様において、保護基は、保護基を除去し、基Ｙを導入可能な酸を用いて、基Ｙの導入と同時に除去される。
【００６７】
本発明のこれらのおよび他の態様は、続く図、説明および請求項と組み合わせて明らかになるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００６８】
【図１】Ａｓｐ（シタラビン）・酢酸塩（Ｙ＝ＣＨ３ＣＯＯＨ）の質量分析。
【図２】Ａｓｐ（シタラビン）・メタンスルホン酸塩（Ｙ＝ＣＨ３ＳＯ３Ｈ）の質量分析。
【図３】Ａｓｐ（シタラビン）・ベンゼンスルホン酸塩（Ｙ＝Ｃ６Ｈ５ＳＯ３Ｈ）の質量分析。
【図４】精製ＢＯＣ−Ａｓｐ−ＯｔＢｕ−（シタラビン）の１Ｈ−ＮＭＲ。
【図５】Ａｓｐ（シタラビン）・ＨＣｌの１Ｈ−ＮＭＲ。
【発明を実施するための形態】
【００６９】
本発明は、療法剤に共有結合したアミノ酸のコンジュゲートの薬学的に許容されうる塩型を提供する。特に、本発明は、シチジン類似体薬剤およびアスパラギン酸またはグルタミン酸およびその類似体を含むコンジュゲートの薬学的に許容されうる塩、これらのコンジュゲートを含む薬学的組成物、ならびに癌または前癌状態または障害の治療のためのこれらの使用に関する。
【００７０】
当該技術分野は、直接転換法を用い、側鎖官能基を通じて、アミノ酸に共有結合した薬剤の酸付加塩型を生成するための方法を解説も示唆もしていない。本発明は、薬学的塩型を生成するために用いたものと同じ化合物（例えば酸）によって除去可能な保護基を有する薬剤コンジュゲートの前駆体から、薬学的塩が生成可能であることを開示する。
【００７１】
コンジュゲート
本発明のコンジュゲートは、癌細胞の増殖の阻害剤として、生物学的に活性である、コンジュゲートの薬学的に許容されうる塩型として提供される。塩型は、式（Ｉ）：
Ａ−Ｄ・Ｙ  （Ｉ）
式中、
Ａは、側鎖上に、カルボキシル基、アミノ基、スルフィドリル基およびヒドロキシル基からなる群より選択される、少なくとも１つの官能基を含むアミノ酸を示し；
Ｄは、細胞傷害性剤、細胞分裂停止剤および化学療法剤からなる群より選択される薬剤の残基を示し、ここでＤは、Ａの側鎖官能基を通じてＡに付着され；そして
Ｙは：薬学的に許容されうる有機または無機酸または酸の残基（すなわち前記酸のコンジュゲート塩基）、薬学的に許容されうる無機カチオン、薬学的に許容されうる有機アミン；およびアミノ酸からなる群より選択される
の構造によって示される。
【００７２】
薬学的塩
本明細書で用いられる用語「薬学的塩」は、ＩＵＰＡＣ慣例によれば、薬剤物質の「薬学的に許容されうる塩」を指す。薬学的塩は、薬剤と組み合わされた塩型の不活性成分である。本明細書で用いられる用語「薬学的に許容されうる塩」は、一般式（Ｉ）、式（ＩＩ）および式（ＩＩＩ）の化合物、例えば化合物（１）、（１Ａ）、（１Ｂ）、（２）、（３）または（４）の塩、あるいは一般式に含まれる任意の他の塩型であって、実質的に生存生物に非毒性である、前記塩を指す。典型的な薬学的に許容されうる塩には、本発明の化合物と、本明細書に記載するような薬学的に許容されうるミネラル、塩基、酸または塩の反応によって調製される塩が含まれる。酸塩はまた、酸付加塩としても公知である。
【００７３】
当該技術分野に公知のもの等の薬学的塩（その内容が本明細書にその全体が援用される、ＳｔａｈｌおよびＷｅｒｍｕｔｈ，２０１１，Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  ｓａｌｔｓ，第２版）は、いくつかの限定されない態様において、本明細書に以下に例示される。
【００７４】
本発明の化合物において、基Ｙは塩型を示す。Ｙは、任意の薬学的に許容されうる有機または無機酸または塩基であることも可能であり（またはそれに由来することも可能であり）、その限定されない例を以下に提供する：
【００７５】
（ｉ）酸付加塩：
１つの態様において、Ｙは、酢酸、塩酸、メタンスルホン酸、リン酸、クエン酸、乳酸、コハク酸、酒石酸、ホウ酸、安息香酸、２−（４−ヒドロキシベンゾイル）−安息香酸、トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、アスコルビン酸、硫酸、マレイン酸、ギ酸、マロン酸、ニコチン酸、シュウ酸、カンファースルホン酸、シクラミン酸、２，２−ジクロロ−酢酸、ジ（ｔ−ブチル）−ナフタレンスルホン酸、ジ（ｔ−ブチル）−ナフタレンジスルホン酸、ドデシル硫酸、エタン−１，２−ジスルホン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、ガラクタル（ムチン）酸、ゲンチジン酸、グルカル酸、グルコン酸、グリセロリン酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、２−ヒドロキシ−エタンスルホン（イセチオン）酸、１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸、メドロン（ビスホスホン）酸、メタリン酸、メチルボロン酸、ナフタレン−１，５−ジスルホン酸、ナフタレン−２−スルホン酸、硝酸、オロト酸、２−オキソ−グルタル（ケトグルタル）酸、パモ（エンボン）酸、ピルビン酸、サッカリン酸、サリチル酸、４−アミノ−サリチル酸、およびチオシアン酸からなる群より選択される、薬学的に許容されうる有機または無機酸または酸の残基である。各々の可能性は、本発明の別個の態様に相当する。
【００７６】
いくつかの現在好ましい態様において、Ｙは、酢酸、塩酸、メタンスルホン酸、リン酸、クエン酸、乳酸、コハク酸、酒石酸、ホウ酸、安息香酸、トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、アスコルビン酸、硫酸、マレイン酸、ギ酸、マロン酸、ニコチン酸およびシュウ酸からなる群より選択される薬学的に許容されうる酸である。各々の可能性は、本発明の別個の態様に相当する。
【００７７】
薬学的酸塩型の他の態様は、アセツル酸、４−アセトアミド−安息香酸、アジピン酸、アミノ馬尿酸、４−アミノ−サリチル酸、アルギン酸、アスパラギン酸、ホウ酸、酪酸、カプリン（デカン）酸、カプロイン（ヘキサン）酸、カルボン酸、カンフル酸、カンファースルホン酸、カプリル（オクタン）酸、シクラミン酸、桂皮酸、２，２−ジクロロ−酢酸、ジ（ｔ−ブチル）−ナフタレンスルホン酸、ジ（ｔ−ブチル）−ナフタレンジスルホン酸、デヒドロ酢酸、ジアトリゾ酸、ドデシル硫酸、エタン−１，２−ジスルホン酸、エデト酸、エタンスルホン酸、２−エチル−ヘキサン酸、エリソルビン酸、ギ酸、フマル酸、ガラクタル（ムチン）酸、ゲンチジン酸、グルコヘプタン酸、グルコン酸、グルクロン酸、グルタミン酸、グルタル酸、グリセロリン酸、グリコール酸、馬尿酸、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、２−（４−ヒドロキシベンゾイル）−安息香酸、２−ヒドロキシ−エタンスルホン（イセチオン）酸、１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸、イソ酪酸、乳酸、ラクトビオン酸、ラウリン酸、ヨードキサム酸、イソステアリン酸、マレイン酸、リンゴ酸、マロン酸、マンデル酸、メドロン酸、メタンスルホン酸、メタリン酸、メチルボロン酸、ミリスチン酸、ナフタレン−１，５−ジスルホン酸、ナフタレン−２−スルホン酸、ニコチン酸、オレイン酸、シュウ酸、パルミチン酸、ペンテト酸、プロピオン酸、プロパン酸、ピログルタミン酸、ピルビン酸、リン酸、セバシン酸、ソルビン酸、ステアリン（オクタデカン）酸、スベリン酸、コハク酸、硫酸、酒石酸、チアゾキシム酸（ｔｈｉａｚｏｘｉｍｉｃ）、チオシアン酸、トルエンスルホン酸、トリフルオロ酢酸およびウンデシレン（ウンデカ−１０−エン）酸を含む酸から生成可能である。各々の可能性は、本発明の別個の態様に相当する。
【００７８】
（ｉｉ）塩基付加塩：
１つの態様において、Ｙは、アルカリ金属、アルカリ土類金属、アルミニウム、亜鉛およびアンモニウムからなる群より選択される、薬学的に許容されうる有機または無機塩基または塩基の残基である。
【００７９】
いくつかの現在好ましい態様において、Ｙは、リチウム、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、アルミニウム、亜鉛およびアンモニウムからなる群より選択される薬学的に許容されうる無機カチオンである。各々の可能性は、本発明の別個の態様に相当する。
【００８０】
他の現在好ましい態様において、Ｙは、アンモニウム、一級アミン、二級アミン、三級アミン、四級アンモニウム化合物、アミノアルコールおよびアミノ糖からなる群より選択される薬学的に許容されうる有機アミンである。いくつかの現在好ましい態様において、Ｙは、ベネタミン、ベンザチン、ベタイン、ｔ−ブチルアミン（エルブミン）、デアノール、ジシクロヘキシルアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノ−エタノール、ジエタノールアミン、エタノールアミン、エチレンジアミン、ヒドラバミン、モルホリン、４−（２−ヒドロキシエチル）モルホリン、１−（２−ヒドロキシエチル）−ピロリジン（エポラミン）、イミダゾール、Ｎ−メチルグルカミン（メグルミン）、４−フェニルシクロヘキシルアミン、ピペラジン、およびトロメタミンからなる群より選択される有機アミン塩基である。各々の可能性は、本発明の別個の態様に相当する。
【００８１】
他の塩基性薬学的塩型は、水酸化アルミニウム、アンモニア、アルギニン、ベネタミン、ベンザチン、ベタイン、ｔ−ブチルアミン（エルブミン）、水酸化カルシウム、水酸化コリン、デアノール、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノ−エタノール、ジエタノールアミン、エタノールアミン、エチレンジアミン、ヒドラバミン、４−（２−ヒドロキシエチル）モルホリン、１−（２−ヒドロキシエチル）−ピロリジン（エポラミン）、イミダゾール、水酸化リチウム、リジン、Ｎ−メチルグルカミン（メグルミン）、水酸化マグネシウム、４−フェニルシクロヘキシラミン、ピペラジン、水酸化カリウム、水酸化ナトリウム、トロメタミン、および水酸化亜鉛を含む塩基から生成可能である。各々の可能性は、本発明の別個の態様に相当する。
【００８２】
当業者に理解されるように、前述の酸は、アミノ酸−薬剤コンジュゲート上の塩基性部分（例えばアミノ基）と反応して塩を形成することが可能である。例えば、酸がカルボン酸であり、そしてコンジュゲートが塩基性アミン部分を含む場合、塩は、構造Ｒ−ＣＯＯ−・Ｒ’−ＮＨ３＋によって示されうる。類似の酸−塩基反応産物は、本明細書に記載する他の酸のいずれで形成することも可能である。
【００８３】
（ｉｉｉ）アミノ酸との塩
他の現在好ましい態様において、Ｙは、塩型を形成可能なアミノ酸、例えばアルギニンまたはリジンである。各々の可能性は、本発明の別個の態様に相当する。
【００８４】
（ｉｖ）他の塩
他の薬学的塩型は、酢酸アンモニウム、硫酸アンモニウム、酢酸カルシウム、炭酸カルシウム、塩化カルシウム、グルセプト酸カルシウム、乳酸カルシウム、リン酸カルシウム、硫酸カルシウム、エデト酸カルシウム二ナトリウム、エデト酸二ナトリウム、エデト酸ナトリウム、ヨウ素、炭酸マグネシウム、塩化マグネシウム、硝酸マグネシウム、硫酸マグネシウム、酢酸カリウム、炭酸カリウム、クエン酸カリウム、メタ重亜硫酸カリウム、リン酸カリウム、ソルビン酸カリウム、酢酸ナトリウム、酸性ピロリン酸ナトリウム、アルギン酸ナトリウム、アルキル硫酸ナトリウム、アミノ安息香酸ナトリウム、アスコルビン酸ナトリウム、安息香酸ナトリウム、重炭酸ナトリウム、重硫酸ナトリウム、重硫酸ナトリウム、ホウ酸ナトリウム、炭酸ナトリウム、カラゲニン酸（ｃａｒｒａｇｅｎａｔｅ）ナトリウム、塩素酸ナトリウム、塩化ナトリウム、クエン酸ナトリウム、ジチオン酸ナトリウム、次亜塩素酸ナトリウム、ヨウ化ナトリウム、乳酸ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、リン酸ナトリウム、ピロリン酸ナトリウム、コハク酸ナトリウム、硫酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウム、酒石酸ナトリウム、チオグリコール酸ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム、塩化スズ、酢酸亜鉛、塩化亜鉛、および硫酸亜鉛を含む塩から生成可能である。各々の可能性は、本発明の別個の態様に相当する。
【００８５】
アミノ酸（Ａ）
１つの態様によれば、アミノ酸（Ａ）は、Ｌ立体配置、Ｄ立体配置またはその混合物である。各々の可能性は、本発明の別個の態様に相当する。
【００８６】
アミノ酸Ａは、α−アミノ酸、β−アミノ酸、γ−アミノ酸、δ−アミノ酸またはε−アミノ酸であってもよく、各々の可能性は、本発明の別個の態様に相当する。現在好ましいアミノ酸はα−アミノ酸である。
【００８７】
いくつかの態様において、アミノ酸（Ａ）は、アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）、アルギニン（Ａｒｇ）、アスパラギン（Ａｓｎ）、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、シトルリン（Ｃｉｔ）、システイン（Ｃｙｓ）、シスチン、ジアミノブタン酸、ジアミノ酪酸（Ｄａｂ）、ジアミノプロピオン酸（Ｄｐｒ）、ジヒドロキシフェニルアラニン、ジメチルアルギニン、グルタミン酸（Ｇｌｕ）、ピログルタミン酸（ｐ−Ｇｌｕ）、グルタミン（Ｇｌｎ）、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、１−メチル−ヒスチジン、３−メチル−ヒスチジン、ホモセリン（Ｈｓｅ）、ホモシトルリン、ヒドロキシプロリン（Ｈｙｐ）、リジン（Ｌｙｓ）、メチル−リジン、ジメチルリジン、トリメチルリジン、アジドリジン、メチオニン（Ｍｅｔ）、メチオニンスルホキシド、メチオニンスルホン、オルニチン（Ｏｒｎ）、ザルコシン（Ｓａｒ）、セレノシステイン（Ｓｅｃ）、セリン（Ｓｅｒ）、ホスホル−セリン、メチル−セリン、アミノセリン（Ａｍｓ）、チエニルアラニン（Ｔｈｉ）、スレオニン（Ｔｈｒ）、ホスホ−スレオニン、トリプトファン（Ｔｒｐ）、チロシン（Ｔｙｒ）、メチル−チロシン、ホスホル−チロシン、スルホ−チロシン、α−アミノスベリン酸、３，５−ジヨードチロシン、ペニシラミン（Ｐｅｎ）、４−エチルアミンフェニルグリシン、４−アミノフェニルグリシン、４−スルホフェニルアラニン、４−アミノフェニルアラニンおよび２−アミノ−４［４−（２−アミノ）−ピリミジニル］ブタン酸、３−アミノプロピオン酸、６−アミノヘキサン酸（ε−Ａｈｘ）、ｐ−アミノ安息香酸、イソニペコチン酸、スタチン（Ｓｔａ）、２−アミノ酪酸（Ａｂｕ）および４−アミノ酪酸、α−アミノアジピン酸（Ａａｄ）、α−アミノピメリン酸、γ−カルボキシ−グルタミン酸、γ−ヒドロキシ−グルタミン酸、アミノグリシン、ならびにその誘導体および類似体からなる群より選択される。各々の可能性は、本発明の別個の態様に相当する。
【００８８】
いくつかの態様において、アミノ酸（Ａ）は、アスパラギン、アスパラギン酸、グルタミン、グルタミン酸、ならびにその誘導体および類似体からなる群より選択される。１つの現在好ましい態様において、アミノ酸（Ａ）はグルタミン酸である。別の現在好ましい態様において、アミノ酸（Ａ）はアスパラギン酸である。
【００８９】
薬剤（Ｄ）
基Ｄは、細胞傷害性剤、細胞分裂停止剤および化学療法剤からなる群より選択される任意の薬剤由来でありうる。いくつかの態様において、細胞傷害性剤、細胞分裂停止剤または化学療法剤Ｄは、ピリミジン類似体、プリン類似体、葉酸代謝拮抗剤、ヒドロキシ尿素、微小管阻害剤、アルキル化剤、抗腫瘍抗生物質、トポイソメラーゼターゲティング剤、代謝拮抗剤、ＤＮＡ結合剤およびＤＮＡアンタゴニストからなる群より選択される任意の薬剤の残基である。
【００９０】
いくつかの態様において、細胞傷害性剤、細胞分裂停止剤または化学療法剤Ｄは、シトシンアラビノシド（ａｒａ−Ｃ、シタラビン）、ゲムシタビン、フルオロウラシル、５−フルオロデオキシウリジン、フトラフール、カペシタビン、カルモフール、ＢＯＦ−Ａ２、５−クロロ−２，４−ジヒドロキシピリジン、デシタビン、レフルノミド、トリフルリジン、ヨードクスウリジン、ジドブジン、テルビブジン、トリメトプリム、フルオロシトシン、デオキシチミジンおよび５−アミノ−６−ニトロウラシルからなる群より選択されるピリミジン類似体の残基である。各々の可能性は、本発明の別個の態様に相当する。
【００９１】
他の態様において、細胞傷害性剤、細胞分裂停止剤または化学療法剤Ｄは、クロファラビン、デカルバジン、クラドリビン、メルカプトプリン、ネララビン、ペントスタチン、チオグアニン、ゲフィチニブ、アザチオプリン、８−アザグアニン、イミュシリン−Ｇ、２−フルオロ−２’−デオキシアデノシン、９−ベータ−Ｄ−キシロフラノシル−アデニン、３−デオキシグアニン、６−メチル−ホルミシンＡ、２−フルオロアデノシン、１−デアザ−アデノシン、Ｎ−エチル−５−カルボキシアミド−アデノシン、３’−オキソ−アデノシン、２−アミノ−アデノシン、６−Ｏ−シクロメチル−グアニン、フルダラビン、および８−ヨード−グアニンより選択されるプリン類似体の残基である。各々の可能性は、本発明の別個の態様に相当する。
【００９２】
他の態様において、細胞傷害性剤、細胞分裂停止剤または化学療法剤Ｄは、２，４−ジオキソ−５−フルオロピリミジン（５−ＦＵ）、フルオロデオキシウリジン（５−ＦＵＤＲ）、アザシチジン（５−ＡＺＣ）、６−メルカプトプリン（６−ＭＰ）、６−チオグアニン（６−ＴＧ）、クロロデオキシアデノシン（２−ＣＤＡ）およびペントスタチン（ｄＣＦ）からなる群より選択される抗癌薬剤の残基である。各々の可能性は、本発明の別個の態様に相当する。
【００９３】
１つの現在好ましい態様において、細胞傷害性剤、細胞分裂停止剤または化学療法剤Ｄは、シタラビンの残基である。別の現在好ましい態様において、細胞傷害性剤、細胞分裂停止剤または化学療法剤Ｄは、ゲムシタビンの残基である。
【００９４】
本発明はまた、細胞傷害性剤、細胞分裂停止剤または化学療法剤薬剤Ｄが代謝拮抗剤であり、アスパラギンの代謝に関与する酵素を阻害可能な、アスパラギン−薬剤コンジュゲートにも関する。アスパラギン−薬剤コンジュゲートによって阻害されることが可能な１つの重要な酵素は、アスパラギンシンテターゼであり、該酵素は、哺乳動物細胞におけるアスパラギン合成に必須である。糖タンパク質の代謝に関与する他の酵素、特に限定されるわけではないが、グルコシダーゼＩ、グルコシダーゼＩＩ、カルネクシン、およびアルファ−グルコシルトランスフェラーゼを含むタンパク質中のアスパラギンアミノ酸に連結されたＮ−連結糖を有するものが、潜在的に、アスパラギン−薬剤コンジュゲートによって阻害されうる。Ｎ−グリカンタンパク質におけるＮ−グリコシル化は、コンセンサス配列Ａｓｎ−Ｘ−Ｓｅｒ／Ｔｈｒのアスパラギン上で起こり、グリコシル化代謝への干渉は、糖タンパク質のフォールディングおよび分泌を妨害する。必須糖タンパク質のグリコシル化の阻害は、細胞停止および細胞死を引き起こすであろう。
【００９５】
アスパラギン−薬剤コンジュゲートはまた、オルニチンなどの他のアミノ酸の代謝に影響を及ぼす可能性もあり、これはアスパラギンが、オルニチン脱カルボキシラーゼ誘導における膜Ｎａ＋／Ｈ＋対向輸送に関与することが示されているためである（ＦｏｎｇおよびＬａｗ、１９８８）。
【００９６】
アスパラギン−薬剤コンジュゲートは、アスパラギン酸およびグルタミン酸輸送体による迅速な取り込みを経ることが可能であり、これは、血液脳関門（ＢＢＢ）を通じたグルタミン酸／グルタミンおよびアスパラギン酸／アスパラギンアミノ酸の送達を仲介し、そして効率的な薬剤送達系として適用されて、化学療法薬剤を輸送して、ＣＮＳの腫瘍を治療することも可能である。アスパラギンの脳脊髄液（ＣＳＦ）および血漿レベルは、中枢神経系（ＣＮＳ）の原発性および続発性腫瘍の患者において、有意により低いことが示されてきている（Ｐｉｅｋら、１９８７）。
【００９７】
肝腫瘍癌細胞は、グルタミン輸送体を発現することが示されており、該輸送体は、ヒト肝腫瘍細胞において、はるかにより高いグルタミン取り込み速度を示し、そして正常肝細胞では示さず、したがって、グルタミン−薬剤コンジュゲートが肝臓癌治療に使用可能であることを示す。
【００９８】
上述のように、本発明のコンジュゲートにおいて、薬剤残基（Ｄ）は、（Ａ）の側鎖官能基を通じて、アミノ酸（Ａ）に付着される。こうしたコンジュゲートのいくつかの限定されない態様を以下に記載する。
【００９９】
特定の態様において、化合物は、プリン類似体およびピリミジン類似体からなる群より選択される薬剤にコンジュゲート化されたアミノ酸、アスパラギン酸またはグルタミン酸残基を含む。特定の態様において、薬剤は、シタラビンおよびゲムシタビンより選択される。特定の態様において、アミノ酸−薬剤コンジュゲートの塩型は、酢酸および塩酸より選択される酸塩型である。
【０１００】
理論に束縛されることは望ましくないが、本発明のアミノ酸コンジュゲート塩は、アミノ酸輸送体を通じて細胞内に輸送され、それによって、多剤耐性（ＭＤＲ）機構をバイパスし、内部から細胞増殖を停止するかまたは細胞を殺す。
【０１０１】
いくつかの態様によれば、アミノ酸（Ａ）は、アスパラギン酸およびグルタミン酸からなる群より選択され、そして化合物は式（ＩＩ）または（ＩＩＩ）
【化１０】
2022000463.tif 000011
式中、ＤおよびＹは上に定義する通りである
の構造によって示される。
【０１０２】
式（ＩＩ）の特定の態様において、Ａはアスパラギン酸であり、Ｄはシタラビンの残基であり、化合物は、式（１）：
【化１１】
2022000463.tif 000012
の構造によって示される。
【０１０３】
式（１）の１つの態様において、化合物は、式（ＩＡ）：
【化１２】
2022000463.tif 000013
の構造によって示される、酢酸との塩（すなわち酢酸塩）である。
【０１０４】
式（１）の別の態様において、化合物は、式（ＩＢ）：
【化１３】
2022000463.tif 000014
の構造によって示される、塩酸との塩（すなわち塩酸塩）である。
【０１０５】
式（ＩＩ）の別の特定の態様において、Ａはアスパラギン酸であり、Ｄはゲムシタビンの残基であり、そして化合物は式（２）：
【化１４】
2022000463.tif 000015
の構造によって示される。
【０１０６】
式（ＩＩＩ）の特定の態様において、Ａはグルタミン酸であり、Ｄはシタラビンの残基であり、そして化合物は、式（３）：
【化１５】
2022000463.tif 000016
の構造によって示される。
【０１０７】
式（ＩＩＩ）の別の特定の態様において、Ａはグルタミン酸であり、Ｄはゲムシタビンの残基であり、そして化合物は、式（４）：
【化１６】
2022000463.tif 000017
の構造によって示される。
【０１０８】
式（１）、（２）、（３）および（４）の前述の化合物のいずれにおいても、Ｙは、上述の選択肢のいずれであってもよく、好ましくは、酢酸、塩酸、メタンスルホン酸、リン酸、クエン酸、乳酸、コハク酸、酒石酸、ホウ酸、安息香酸、トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、アスコルビン酸、硫酸、マレイン酸、ギ酸、マロン酸、ニコチン酸およびシュウ酸からなる群より選択される、薬学的に許容されうる酸でありうる。
【０１０９】
定義
便宜および明確性のため、本明細書、実施例および請求項で使用する特定の用語をここに記載する。
【０１１０】
用語「薬剤の残基」は、アミノ酸−薬剤コンジュゲートＡ−Ｄを形成する際、アミノ酸に付着させるために用いた官能基を除く、薬剤を指す。
【０１１１】
用語「酸の残基」は、その酸のコンジュゲート塩基を指す。例えば、塩酸（ＨＣｌ）のコンジュゲート塩基はクロライド（Ｃｌ−）である。酢酸（ＣＨ３ＣＯＯＨ）のコンジュゲート塩基はアセテート（ＣＨ３ＣＯＯ−）である。
【０１１２】
用語「薬剤」は、過剰増殖細胞の細胞増殖を停止させるか、または細胞死を誘導することが可能な任意の薬理学的活性剤を示し、この中には、本明細書において、上に例示するような、当該技術分野に公知であるものなどの既知の細胞傷害性、細胞分裂停止、抗増殖薬剤が存在し、含まれる。本明細書において、薬剤の分類は、便宜のためにのみ行われ、列挙する特定の単数または複数の適用にいかなる構成要素も限定することも意図されない。
【０１１３】
本明細書で用いられる用語「細胞傷害性剤」は、細胞、例えば癌細胞に対して毒性であり、損傷を与え、そして／またはこれを破壊する剤を指す。化学療法薬剤による化学療法は、細胞傷害性療法の１つの形である。
【０１１４】
本明細書で用いられる用語「細胞分裂停止薬剤」は、細胞増殖および分裂を阻害する任意の物質を指す。
【０１１５】
本明細書で用いられる用語「化学療法剤」は、化学療法に用いられる薬剤を指す。
【０１１６】
本明細書で用いられるような、過剰増殖細胞、例えば新生物細胞の「細胞増殖を停止させる」および「細胞死を誘導する」は、増殖および転移を遅延させるか、中断させるか、停止させるかまたは止めることを指し、そして必ずしも新生物性増殖の完全な排除を示すわけではない。
【０１１７】
本発明で用いるアミノ酸は、商業的に入手可能であるかまたはルーチンの合成法によって入手可能であるものである。天然にコードされるアミノ酸およびその誘導体は、ＩＵＰＡＣ慣例にしたがった３文字コードによって表される。示さない場合、ＬまたはＤ異性体のいずれを用いることも可能である。Ｄ異性体は、残基略語の前の「Ｄ」によって示される。
【０１１８】
本明細書で用いられる用語「立体異性体」は、同じ結合によって結合されるが、異なる三次元構造を有する、同じ原子で作製される化合物を指し、これらは交換可能ではない。三次元構造は、立体配置と呼ばれる。本明細書で用いられる用語「鏡像異性体」は、その分子が互いに重ね合わせ不能である鏡像である、２つの立体異性体を指す。用語「キラル中心」は、４つの異なる基が付着する炭素原子を指す。本明細書で用いられる用語「ジアステレオマー」は、鏡像異性体ではない立体異性体を指す。さらに、１つのキラル中心のみで異なる立体配置を有する２つのジアステレオマーは、本明細書において、「エピマー」と称される。用語「ラセミ体」、「ラセミ混合物」または「ラセミ変形」は、鏡像異性体の等部の混合物を指す。本発明には、一般式（Ｉ）、（ＩＩ）および（ＩＩＩ）を有する化合物、ならびに本明細書記載の特定の化合物の鏡像異性体が含まれる。
【０１１９】
合成法
本発明によるコンジュゲートにおいて、薬剤は、アミノ酸またはアミノ酸類似体に共有結合している。当業者は、化合物内の適切な連結および薬剤部分の位置を最適化することが可能であろう。多様な懸念を考慮に入れて、当業者がこの決定を行う指針とすべきであり、これには、特定の薬剤の選択、誘導体の選択、薬剤種への付着の位置の選択、および薬剤活性化のための宿主細胞内酵素に関する必要性などがある。
【０１２０】
したがって、別の側面によれば、本発明は、式Ｉの構造によって示される薬学的に許容されうる塩を調製するための方法であって
（ａ）式（ＩＶ）：
（Ａ−Ｄ）−（Ｐ）ｎ    （ＩＶ）
式中、ＡおよびＤは上に定義する通りであり；
ｎは１〜６の整数であり；そして
各Ｐは、各出現に際して、独立に、保護基であり；各Ｐは、アミノ酸（Ａ）、薬剤残基（Ｄ）またはアミノ酸（Ａ）および薬剤残基（Ｄ）の両方の保護のため、利用可能な任意の官能基に付着する
の化合物と
保護基（単数または複数）Ｐを除去可能な試薬を反応させる工程；および
（ｂ）式：
Ａ−Ｄ・Ｙ    （Ｉ）
式中、Ｙは上に定義する通りである
によって示される塩が生成されるように、基Ｙを導入可能な試薬を添加する工程
を含む、前記方法を提供する。
【０１２１】
上述のように、現在、予期せぬことに、本発明の塩は、最終的に塩を形成するものと同じ試薬を用いて、１またはそれより多い保護基（Ｐ）を含有する前駆体化合物を脱保護することによって調製可能であることが発見されている。したがって、本発明の原理によれば、基Ｙを導入可能な試薬は、一工程で、保護基（単数または複数）Ｐを除去し、同時に、式（Ｉ）の塩を生成可能であり、それによって塩形成前の脱保護の中間工程を省略可能であり、最終的により高い純度の薬学的産物を導く。特に、ＢＯＣの脱保護のためのＴＦＡの使用が回避され、その塩が、毒性ＴＦＡを欠くかまたは含まない、式Ｉに示される本発明のコンジュゲートの塩の生成を導く。このプロセスの特定の態様を、本明細書において、以下に記載する。本明細書記載の化合物は、アミノ酸あるいはアミノ酸の誘導体または類似体にコンジュゲート化された抗癌薬剤の薬学的塩型を含む。本発明の化合物は、当業者に周知の方法によって、アミノ酸から容易に調製可能である。例えば、コンジュゲートまたはその前駆体は、その内容が本明細書に援用される、国際特許出願公報第ＷＯ  ２００５／０７２０６１号および米国特許第７，９８９，１８８号に開示される方法によって調製可能である。次いで、コンジュゲート（またはその保護された前駆体）は、式（Ｉ）の化合物を形成するように、基Ｙを導入可能な試薬（例えば試薬は酸または塩基である）と反応することも可能である。本発明の化合物を調製するために有用なさらなる方法は、とりわけ、例えば国際特許出願公報第ＷＯ９６／３００３６号およびＷＯ９７／３６４８０号、ならびに米国特許第５，６４３，９５７号および５，６５０，３８６号に記載される方法である。例えば、化合物は、単一のアミノ酸を、適切な触媒剤と反応させて、該触媒剤がアミノ酸中に存在する未結合部分と反応し、そしてこれを薬剤上の未結合部分にコンジュゲート化して、エステルまたはアミドを形成することによって、調製可能である。当業者に公知であるように、保護基を用いて、望ましくない副反応を回避することも可能である。上記参考文献の各々の内容は、本明細書に援用される。
【０１２２】
例えば、例示のためで限定ではなく、式（ＩＩ）のコンジュゲート（アスパラギン酸−薬剤コンジュゲート）または式（ＩＩＩ）のコンジュゲート（グルタミン酸−薬剤コンジュゲート）は、アミンおよびアルファカルボキシル上で保護されたアスパラギン酸またはグルタミン酸（スキーム１Ａおよび１Ｂ中の化合物（ｉ）および（ｉｉｉ））を、薬剤または活性化されそして／または保護されたその誘導体と、カップリング試薬の存在下で反応させ、その後、脱保護することによって調製可能である。薬剤（Ｄ）は、本明細書記載の保護基の任意の１つで、任意の利用可能な官能基（例えばＯＨ、ＮＨ２、ＳＨ、カルボキシル等）で脱保護または保護されることも可能である。例示的なプロセスを、スキーム１Ａおよび１Ｂに示す：
【化１７】
2022000463.tif 000018
式中、Ｐ１はカルボキシ保護基であり、Ｐ２はアミノ保護基であり、Ｐ３は薬剤Ｄ上の１またはそれより多い官能基上に位置する保護基であり、そしてｎは０、１、２または３である。薬剤上の官能基の数に応じて、ｎはまた４、５、６等でありうる。
【０１２３】
１つの態様において、薬剤はシタラビンである。他の態様において、薬剤は、２’、３’および／または５’ヒドロキシル部分上に保護基を含む保護シタラビン、例えばトリフェニルメチル−シタラビン（ＣＡＳ  ７０７５−１３−０）、ベンゾイル−シタラビン（ＣＡＳ  ３４２７０−１０−５）、アドマントイル−シタラビン（ＣＡＳ  ２３１１３−０１−１）、およびトリメチルシリル−シタラビンである。他の態様において、薬剤はゲムシタビンである。他の態様において、薬剤は、３’および／または５’ヒドロキシル部分上に保護基を含む保護ゲムシタビン、例えばトリフェニルメチル−ゲムシタビン（ＣＡＳ  １６４２８６２−２４−５）である。
【０１２４】
保護された薬剤の限定されない例は、保護されたシタラビンであり、２’、３’または５’ヒドロキシルの少なくとも１つが、上に定義するような基Ｐ３で保護されている。例示の目的のため、以下に示す１つの限定されない態様において、化合物は、式Ｅによって示され、式中、２’、３’または５’ヒドロキシルの各々は、基Ｐ３で保護される。
【化１８】
2022000463.tif 000019
【０１２５】
他の態様において、５’−ＯＨ基のみが保護される一方、２’および３’ヒドロキシルは保護されない。
【０１２６】
保護された薬剤の別の限定されない例は、保護されたゲムシタビンであり、３’または５’ヒドロキシルの少なくとも１つが、上に定義するような基Ｐ３で保護されている。例示の目的のため、以下に示す１つの限定されない態様において、化合物は、式Ｆによって示され、式中、３’または５’ヒドロキシルの各々は、基Ｐ３で保護される。
【化１９】
2022000463.tif 000020
【０１２７】
他の態様において、５’−ＯＨのみが保護される一方、３’ヒドロキシルは保護されない。
【０１２８】
１つの態様において、本明細書において「経路Ａ」と示される脱保護工程は、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）の存在下で行われ、その後、酸と反応させて、基Ｙが導入される。この態様によれば、本発明は、好ましくは残留不純物として約５％未満のＴＦＡ、好ましくは約１％未満のＴＦＡ、より好ましくは約０．１％未満のＴＦＡを含む、薬学的に許容されうる塩を提供する。最も好ましくは、本発明の塩は、不純物として、ＴＦＡを実質的に含まない。
【０１２９】
別の態様において、本明細書において「経路Ｂ」と示される脱保護工程は、基Ｙを導入可能な試薬（すなわち酸）で直接実行されて、本発明の塩を直接提供する。この態様によれば、保護基は、基Ｙの導入と同時に除去され、そして生じた薬学的に許容されうる塩は、不純物として、ＴＦＡを完全に含まない。
【０１３０】
保護基（Ｐ）
化合物（Ｉ）の前駆体には、１またはそれより多い保護基（Ｐ）が含まれることも可能であり、これらは上記にＰ１、Ｐ２、およびＰ３と例示され、当業者に公知である任意の保護基でありうる。用語「保護基」は、化学合成中に反応部位をブロックし、多官能化合物中の１つの反応部位で化学反応が選択的に実行されることを可能にし、他の反応部位が一時的にブロックされなければならない場合に用いられる化学残基を指す。これらの反応部位をブロックするために用いられる残基を保護基と呼ぶ。
【０１３１】
保護基は、ヒドロキシル保護基、アミノ保護基、カルボキシ保護基等でありうる。本明細書で用いられる用語「ＯＨ保護基」または「ヒドロキシ保護基」は、ヒドロキシル基に結合した容易に切断可能な基を指す。本明細書で用いられる用語「ＮＨ保護基」または「アミノ保護基」は、アミノ基に結合した容易に切断可能な基を指す。本明細書で用いられる用語「カルボキシ保護基」は、カルボキシ基に結合した容易に切断可能な基を指す。
【０１３２】
１つの態様によれば、保護基Ｐは、アセトアミドメチル（Ａｃｍ）、アセチル（Ａｃ）、アセトニド、アダマンチルオキシ（ＡｄａＯ）、アルファ−アリル（ＯＡｌｌ）、アロック、ベンゾイル（Ｂｚ）、ベンジル（Ｂｚｌ）、ベンジルオキシ（ＢｚｌＯ）、ベンジルオキシカルボニル（Ｚ）、ベンジルオキシメチル（Ｂｏｍ）、ビス−ジメチルアミノ（ＮＭｅ２）、２−ブロモベンジルオキシカルボニル（２−Ｂｒ−Ｚ）、ｔ−ブトキシ（ｔＢｕＯ）、ｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）、ｔ−ブトキシメチル（Ｂｕｍ）、ｔ−ブチル（ｔＢｕ）、ｔ−ブチルチオ（ｔＢｕｔｈｉｏ）、２−クロロベンジルオキシカルボニル（２−Ｃｌ−Ｚ）、２−クロロトリチル（２−Ｃｌ−Ｔｒｔ）、シクロヘキシルオキシ（ｃＨｘＯ）、１−シクロプロピル−１−メチル−エチル（Ｄｍｃｐ）、２，６−ジクロロベンジル、４，４’−ジメトキシベンズヒドリル（Ｍｂｈ）、１−（４，４−ジメチル−２，６−ジオキソ−シクロへキシリデン）−３−メチルブチル（ｉｖＤｄｅ）、４｛Ｎ−［１−（４，４−ジメチル−２，６−ジオキソ−シクロへキシリデン）−３−メチルブチル］−アミノ｝ベンジルオキシ（ＯＤｍａｂ）、２，４−ジニトロフェニル（Ｄｎｐ）、フルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）、ホルミル（Ｆｏｒ）、メシチレン−２−スルホニル（Ｍｔｓ）、４−メトキシベンジル、４−メトキシ−２，３，６−トリメチルベンゼンスルホニル（Ｍｔｒ）、４−メトキシトリチル（Ｍｍｔ）、４−メチル（ｍｅｔｈｙ）ベンジル（ＭｅＢｚｌ）、３−メチルペンタ−３−イル（Ｍｐｅ）、１−メチル−１−フェニル−エチル（ＰｈｉＰｒ）、メチル、４−メチルトリチル（Ｍｔｔ）、３−ニトロ−２−ピリジンスルフェニル（Ｎｐｙｓ）、２，２，４，６，７−ペンタメチル−ジヒドロベンゾフラン−５−スルホニル（Ｐｂｆ）、２，２，５，６，８−ペンタメチル−クロマン−６−スルホニル（Ｐｍｃ）、トシル（Ｔｏｓ）、トリフルオロアセチル（Ｔｆａ）、トリメチルアセトアミドメチル（Ｔａｃｍ）、トリフェニルメチル（トリチル、Ｔｒｔ）およびキサンチル（Ｘａｎ）の群より選択される。各々の可能性は、本発明の別個の態様に相当する。
【０１３３】
ヒドロキシル保護基の限定されない例は、アシル基（ＣＯＲ、式中、Ｒ＝アルキル、アリール等）である。現在好ましいアシル基はアセチル基（すなわちＯＲ’＝アセテート、ＯＡｃ）である。ヒドロキシ保護基の別の例はシリル基であり、これはアルキル（トリアルキルシリル）、アリール（トリアリールシリル）、またはその組み合わせ（例えばジアルキルフェニルシリル）で置換可能である。シリル保護基の好ましい例は、トリメチルシリル（ＴＭＳ）またはジ−ｔ−ブチルジメチルシリル（ＴＢＤＭＳ）、トリイソプロピルシリル（ＴＩＰＳ）、トリエチルシリル（ＴＥＳ）である。ヒドロキシ保護基の他の例には、例えば、Ｃ１−Ｃ４アルキル、−ＣＯ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）、−ＳＯ２−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）、−ＳＯ２−アリール、−ＣＯ−Ａｒ、式中、Ａｒは上に定義するようなアリール基である、および−ＣＯ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）Ａｒ（例えばカルボキシベンジル（Ｂｚ）基）が含まれる。
【０１３４】
アミノ保護基の例には、ｔ−ブトキシカルボニル（ＢＯＣ）、ベンジルオキシカルボニル、アセチル、フェニルカルボニル、あるいはシリル基であって、アルキル（トリアルキルシリル）、アリール（トリアリールシリル）、またはその組み合わせ（例えばジアルキルフェニルシリル）で置換可能なシリル基、例えばトリメチルシリル（ＴＭＳ）またはｔ−ブチルジメチルシリル（ＴＢＤＭＳ）が含まれる。ヒドロキシ保護基の他の例には、例えば、Ｃ１−Ｃ４アルキル（例えばメチル、エチル、プロピル、ブチル等）、−ＣＨ２Ｐｈ（ベンジルまたはｂｚｌ）、アリル（Ａｌｌ）、（アリル）−ＣＯ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）、−ＳＯ２−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）、−ＳＯ２−アリール、−ＣＯ−Ａｒ、式中、Ａｒは上に定義するようなアリール基である、および−ＣＯ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）Ａｒ（例えばカルボキシベンジル（Ｂｚ）基）が含まれる。ヒドロキシ保護基の他の例には、酸感受性保護基、例えばテトラヒドロピラニル（ＴＨＰ）、メトキシメチル（ＭＯＭ）、トリフェニルメチル（トリチル）およびジメトキシトリチル（ＤＭＴ）が含まれる。各々の可能性は、本発明の別個の態様に相当する。
【０１３５】
代表的なカルボキシ保護基には、限定されるわけではないが、メチル、エチル、ｔ−ブチル、ベンジル（Ｂｎ）、ｐ−メトキシベンジル（ＰＭＢ）、９−フルオレニルメチル（Ｆｍ）、トリメチルシリル（ＴＭＳ）、ｔ−ブチルジメチルシリル（ＴＢＤＭＳ）、ジフェニルメチル（ベンズヒドリル、ＤＰＭ）等が含まれる。保護基は、本発明の原理によれば、好ましくは薬学的塩部分と同じ脱保護剤によって除去可能である。特定の態様において、酸感受性保護基の除去に適した薬学的酸は：酢酸、アセツル酸、４−アセトアミド−安息香酸、アジピン酸、アミノ馬尿酸、４−アミノ−サリチル酸、アスコルビン酸、アルギン酸、アスパラギン酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、ホウ酸、酪酸、カプリン（デカン）酸、カプロイン（ヘキサン）酸、カルボン酸、クエン酸、カンフル酸、カンファースルホン酸、カプリル（オクタン）酸、シクラミン酸、桂皮酸、２，２−ジクロロ−酢酸、ジ（ｔ−ブチル）−ナフタレンスルホン酸、ジ（ｔ−ブチル）−ナフタレンジスルホン酸、デヒドロ酢酸、ジアトリゾ酸、ドデシル硫酸、エタン−１，２−ジスルホン酸、エデト酸、エタンスルホン酸、２−エチル−ヘキサン酸、エリソルビン酸、ギ酸、フマル酸、ガラクタル（ムチン）酸、ゲンチジン酸、グルカル酸、グルコヘプタン酸、グルコン酸、グルクロン酸、グルタミン酸、グルタル酸、グリセロリン酸、グリコール酸、馬尿酸、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、２−（４−ヒドロキシベンゾイル）−安息香酸、２−ヒドロキシ−エタンスルホン（イセチオン）酸、１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸、イソ酪酸、乳酸、ラクトビオン酸、ラウリン酸、ヨードキサム酸、イソステアリン酸、マレイン酸、リンゴ酸、マロン酸、マンデル酸、メドロン酸、メタンスルホン酸、メタリン酸、メチルボロン酸、ミリスチン酸、ナフタレン−１，５−ジスルホン酸、ナフタレン−２−スルホン酸、ニコチン酸、硝酸、オレイン酸、オロト酸、シュウ酸、２−オキソ−グルタル（ケトグルタル）酸、パルミチン酸、パモ（エンボン）酸、ペンテト酸、プロピオン酸、プロパン酸、ピログルタミン酸、ピルビン酸、リン酸、サッカリン酸、サリチル酸、セバシン酸、ソルビン酸、ステアリン（オクタデカン）酸、スベリン酸、コハク酸、硫酸、酒石酸、チアゾキシム酸、チオシアン酸、トルエンスルホン酸、トリフルオロ酢酸およびウンデシレン（ウンデカ−１０−エン）酸である。各々の可能性は、本発明の別個の態様に相当する。
【０１３６】
特定の態様において、式（ＩＶ）の前駆体化合物と反応し、保護基を除去する薬学的に許容されうる酸は、酢酸、メタンスルホン酸、塩酸、リン酸、クエン酸、乳酸、コハク酸、酒石酸、ホウ酸、安息香酸、トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、アスコルビン酸、硫酸、マレイン酸、ギ酸、マロン酸、ニコチン酸およびシュウ酸からなる群より選択される。こうした態様によれば、生じる塩は、酢酸塩、塩酸塩、メタンスルホン酸塩、リン酸塩、クエン酸塩、乳酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、ホウ酸塩、安息香酸塩、トルエンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、アスコルビン酸塩、硫酸塩、マレイン酸塩、ギ酸塩、マロン酸塩、ニコチン酸塩およびシュウ酸塩からなる群より選択される。各々の可能性は、本発明の別個の態様に相当する。
【０１３７】
特定の態様において、塩基感受性保護基の除去に適した薬学的塩基は：水酸化アルミニウム、アンモニア、アルギニン、ベネタミン、ベンザチン、ベタイン、ｔ−ブチルアミン（エルブミン）、水酸化カルシウム、水酸化コリン、デアノール、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノ−エタノール、ジエタノールアミン、エタノールアミン、エチレンジアミン、ヒドラバミン、４−（２−ヒドロキシエチル）モルホリン、１−（２−ヒドロキシエチル）−ピロリジン（エポラミン）、イミダゾール、水酸化リチウム、リジン、Ｎ−メチルグルカミン（メグルミン）、水酸化マグネシウム、４−フェニルシクロヘキシラミン、ピペラジン、水酸化カリウム、水酸化ナトリウム、トロメタミン、および水酸化亜鉛である。各々の可能性は、本発明の別個の態様に相当する。
【０１３８】
他の態様において、Ｈ２  Ｐｄ／Ｃは、保護基が例えばベンジルである場合、脱保護剤として使用可能である。
【０１３９】
保護基を含有する前駆体化合物は、一般的に、本明細書上記のスキーム１Ａおよび１Ｂに記載されうる。
【０１４０】
特定の態様において、前駆体は、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（シタラビン）−ＯｔＢｕ（式Ａ）であり、一方、保護基は酸によって除去可能であり、Ａｓｐ（シタラビン）・Ｙ（式１）を生じ、一方、Ｙは薬学的酸の酸塩型である。
【０１４１】
特定の態様において、前駆体は、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ゲムシタビン）−ＯｔＢｕ（式Ｂ）であり、一方、保護基は酸によって除去可能であり、Ａｓｐ（ゲムシタビン）・Ｙ（式２）を生じ、一方、Ｙは薬学的酸の酸塩型である。
【０１４２】
他の特定の態様において、前駆体は、Ｂｏｃ−Ｇｌｕ（シタラビン）−ＯｔＢｕ（式Ｃ）であり、一方、保護基は酸によって除去可能であり、Ｇｌｕ（シタラビン）・Ｙ（式３）を生じ、一方、Ｙは薬学的酸の酸塩型である。
【０１４３】
他の特定の態様において、前駆体は、Ｂｏｃ−Ｇｌｕ（ゲムシタビン）−ＯｔＢｕ（式Ｄ）であり、一方、保護基は酸によって除去可能であり、Ｇｌｕ（ゲムシタビン）・Ｙ（式４）を生じ、一方、Ｙは薬学的酸の酸塩型である。他の適切な保護基は、例えばその内容が本明細書に援用されるＷｕｔｓおよびＧｒｅｅｎｅ，２００７，”Ｇｒｅｅｎｅ’ｓ  ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  ｏｒｇａｎｉｃ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”，第４版に記載される。
【０１４４】
保護基が、薬学的塩を生成する化合物によって除去されることが好ましいが、本発明はこうした態様に限定されない。当業者には、保護基が他の脱保護剤によって除去可能であり、そして薬剤の塩型が別個の続く工程において生成可能であることが明らかである。
【０１４５】
薬剤はそのままで、あるいはその活性化されたまたは保護された誘導体として使用可能である。例えば、本発明の１つの態様には、ジ−アミノ酸−シタラビンまたはジ−アミノ酸−ゲムシタビン副産物（すなわちアラビノース部分の５’−ＯＨに第二のアミノ酸が付着している）の形成を防止するかまたは最小限にするように、糖部分（Ｃ２、Ｃ３および／またはＣ５）のヒドロキシル基上で保護されている、シタラビンまたはゲムシタビンの使用が含まれる。糖部分上の保護基は、上述の保護基のいかなる１つであることも可能であり、これらは本明細書に記載するような適切な脱保護剤で除去可能である。
【０１４６】
有機／アミノ酸付着部位、保護基、および薬学的塩型等の選択に適用される原理を、例示的化合物に関して、本明細書に詳述する。原理は、以下のように一般化可能である：
ａ）有機酸／アミノ酸またはアミノ酸誘導体または類似体の選択：アスパラギン酸／アスパラギンおよびグルタミン酸／グルタミンならびに悪性または癌細胞による迅速な取り込みを経ることが可能な誘導体または類似体のいずれかが適切であり、薬剤可溶性、安定性、生物学的利用能および患者コンプライアンスを改善する他の有機酸も同様である；
ｂ）有機酸／アミノ酸の保護基の選択：薬学的塩を生成する化合物によって除去可能な、有機酸／アミノ酸上の化学的官能基に適した保護基から、基を選択可能であり、他の除去可能な保護基も同様である；
ｃ）薬剤の選択：薬剤は、抗増殖剤、細胞傷害性剤および細胞分裂停止剤から選択可能である；
ｄ）薬剤の保護基の選択；薬学的塩を生成する化合物によって除去可能な、薬剤上の化学的官能基に適した保護基から、基を選択可能であり、他の除去可能な保護基も同様である；
ｅ）有機酸への薬剤のコンジュゲート化のための反応条件の選択：最適な溶媒、触媒、添加剤、ならびに多様な反応工程の時間および温度。
ｆ）保護基の除去のための条件の選択：薬学的塩または保護基の除去に適した他の化合物および当業者に公知であるスカベンジャー（ＷｕｔｓおよびＧｒｅｅｎｅ、２００７）による。
ｇ）薬学的塩の選択：塩は、ミネラル、酸付加塩、塩基塩およびその組み合わせより選択可能である。
ｈ）薬学的塩生成のための条件の選択：最適な溶媒／逆溶媒、濃度ならびに反応の時間および温度。
【０１４７】
コンジュゲート化反応のための化合物および条件を、限定されるわけではないが以下の構成要素によって例示する：
【０１４８】
溶媒：ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）、エタノール、ジエチルエーテル、エチルアセテート、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジクロロメタン（ＤＣＭ）、ジクロロエタン（ＤＣＥ）、ヘプタン、ヘキサン、ピリジン、２−プロパノール、メタノール、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、トリフルオロエタノール（ＴＦＥ）、水およびその組み合わせ。
【０１４９】
触媒／カップリング試薬：ＢＯＰ（ベンゾトリアゾール−１−イル−オキシ−トリス−（ジメチルアミノ）−ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート）、ＣＤＩ（Ｎ，Ｎ’−カルボニルジイミダゾール）、ＣＯＭＵ（１−［（１−（シアノ−２−エトキシ−２−オキソエチリデンアミノオキシ）ジメチルアミノモルホリノ）］ウロニウムヘキサフルオロホスフェート）、ＤＣＣ（Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド）、ＤＩＣ（Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド）、ＥＤＣ（１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド）、ＤＥＰＢＴ（３−（ジエトキシ−ホスホリルオキシ）−１，２，３−ベンゾ［ｄ］トリアジン−４（３Ｈ）−オン）、ＨＡＴＵ、ＨＢＴＵ（２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート）、ＨＣＴＵ（Ｏ−（１Ｈ−６−クロロベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート）、ＭＳＮＴ（１−（メシチレン−２−スルホニル）−３−ニトロ−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール）、ＰｙＢＯＰ（ベンゾトリアゾール−１−イル−オキシ−トリス−ピロリジノ−ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート）、ＰｙＢｒｏＰ（ブロモ−トリス−ピロリジノ−ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート）、ＴＢＴＵ（２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルアミニウムテトラフルオロボレート）、ＴＦＦＨ（テトラメチルフルオロホルムアミジニウムヘキサフルオロホスフェート）、ＴＯＴＵ（Ｏ−［（エトキシカルボニル）シアノメチレンアミノ］−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’，−テトラメチルウロニウム）。
【０１５０】
添加剤：ＤＩＰＥＡ（ジイソプロピルエチルアミン）、ＤＭＡＰ（ジメチルアミノピリジン）、ピリジン、トリエチルアミン、ＨＯＡｔ（Ｎ−ヒドロキシ−９−アザベンゾトリアゾール）、ＨＯＢｔ（Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール）、Ｏｘｙｍａピュア、ＮａｃｌＯ４、ＬｉＣｌ、ＫＳＣＮおよびＴｒｉｔｏｎ。
【０１５１】
約０℃〜約８０℃、好ましくは約４℃〜約２５℃の反応温度。
【０１５２】
約３分間〜約７２時間、好ましくは約３〜約２４時間の反応時間。
【０１５３】
保護基の除去のための化合物および条件は、限定されるわけではないが、以下の構成要素によって例示される：
【０１５４】
薬学的塩：薬学的に許容されうるミネラル、塩基、酸または塩を含む；保護基を除去するための好ましい酸および塩はｐＫａ≦３を有し、そして好ましい塩基および塩はｐＫａ＞９を有する。
【０１５５】
ｐＫａ≦３を有する保護基を除去するための好ましい酸は：ベンゼンスルホン酸、カンファースルホン酸、シクラミン酸、２，２−ジクロロ−酢酸、ジ（ｔ−ブチル）−ナフタレンスルホン酸、ジ（ｔ−ブチル）−ナフタレンジスルホン酸、ドデシル硫酸、エタン−１，２−ジスルホン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、ガラクタル（ムチン）酸、ゲンチジン酸、グルカル酸、グルコン酸、グリセロリン酸、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、２−ヒドロキシ−エタンスルホン（イセチオン）酸、１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸、マレイン酸、マロン酸、メドロン（ビスホスホン）酸、メタンスルホン酸、メタリン酸、メチルボロン酸、ナフタレン−１，５−ジスルホン酸、ナフタレン−２−スルホン酸、硝酸、オロト酸、シュウ酸、２−オキソ−グルタル（ケトグルタル）酸、パモ（エンボン）酸、ピルビン酸、リン酸、サッカリン酸、サリチル酸、硫酸、酒石酸、チオシアン酸、トルエンスルホン酸、およびトリフルオロ酢酸からなる群より選択される。
【０１５６】
他の保護基除去化合物には、限定されるわけではないが：ＴＭＳＢｒ、ＨＢＦ４、ＨＦ、ピペリジン、Ｐｄ（Ｐｈ３Ｐ）４、ＮＨ２ＮＨ２、Ｉ２、ならびにＴｌ、Ｈｇ、Ａｇ、およびＰｄの化合物が含まれる。
【０１５７】
スカベンジャー：Ｈ２Ｏ、ＴＩＳ、ＴＥＳ、ＥＤＴ、ｍ−クレゾール、チオアニソール、アニソール、フェノール。
【０１５８】
−２０℃から８０℃、好ましくは０℃〜２５℃の温度。
【０１５９】
１分間〜２４時間、好ましくは１〜３時間の時間。
【０１６０】
薬学的塩生成のための化合物および条件は、以下より選択される：
【０１６１】
薬学的酸で化合物を溶解するための溶媒：Ｈ２Ｏ、ジオキサン、エチルアセテート、メタノール、エタノール、イソプロパノール、ＤＭＳＯ、テトラヒドロホラン（ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｆｏｒａｎ）（ＴＨＦ）およびトリフルオロエタノール（ＴＦＥ）、またはその任意の組み合わせ。１つの現在好ましい態様において、溶媒はＨ２Ｏである。別の現在好ましい態様において、溶媒はジオキサンである。
【０１６２】
式（Ｉ）に示す産物を沈殿させるための逆溶媒：ジエチル−エーテル、ｔ−ブチル−メチル−エーテル（ｔＢＭＥ）、ヘキサン、ヘプタン、ＤＣＭ。
【０１６３】
１：１〜１：３０、好ましくは１：１．１〜１：３の化合物対薬学的塩のモル比、室温（２５℃）で１時間インキュベーション。
【０１６４】
本発明は、一般式（Ｉ）の薬学的に許容されうる塩の水和物をさらに開示する。
【０１６５】
１つの特定の態様において、薬学的に許容されうる酸はＨＣｌであり、使用される溶媒はＨ２Ｏまたはジオキサンである。予期せぬことに、ジオキサン／ＨＣｌを用いた場合、産物は脱保護反応中に沈殿し、別の沈殿工程の必要がないことが見出されてきている。
【０１６６】
薬学的組成物
本発明は、本発明の化合物の少なくとも１つおよび１またはそれより多い薬学的に許容されうる賦形剤または希釈剤を含む、薬学的組成物をさらに提供する。
【０１６７】
本発明の化合物を含む組成物は、選択された生物学的系への活性剤の送達に、そして送達剤を伴わない活性剤の投与に比較して、活性剤の増加したまたは改善された生物学的利用能に有用性を有する。送達は、ある期間に渡ってより多くの活性剤を送達することによって、または特定の期間（例えばより迅速なまたは遅延された送達を達成するため）に、または長期間に渡って（例えば持続送達）、活性剤を送達する際に、改善されうる。
【０１６８】
本発明の薬学的組成物は、当該技術分野に周知のプロセスによって、例えば従来の混合、溶解、顆粒化、粉砕、微粉砕、ドラジェ作製、湿式粉砕（ｌｅｖｉｇａｔｉｎｇ）、乳化、被包、捕捉または凍結乾燥プロセスによって製造可能である。
【０１６９】
本明細書で用いられる「薬学的組成物」は、本明細書記載の化合物の１またはそれより多く、あるいはその薬学的に許容されうる塩または溶媒と、他の化学的構成要素、例えば生理学的に適切なキャリアーおよび賦形剤の調製物を指す。薬学的組成物の目的は、被験体への化合物の投与を容易にすることである。
【０１７０】
本発明の薬学的組成物は、非経口および経口投与経路からなる群より選択される任意の適切な投与経路によって投与可能である。いくつかの態様によれば、投与経路は非経口投与を通じる。多様な態様において、投与経路は、静脈内、動脈内、筋内、皮下、腹腔内、脳内、脳室内、クモ膜下腔内または皮内投与経路である。例えば、薬学的組成物を、全身に、例えば静脈内（ｉ．ｖ．）または腹腔内（ｉ．ｐ．）注射または注入によって投与することも可能である。特定の態様によれば、薬学的組成物を、３０分間〜２時間、例えば１時間、静脈内注入によって投与する。本発明の組成物を局所投与することも可能であり、該組成物はさらに、さらなる活性剤および／または賦形剤を含むことも可能である。
【０１７１】
本発明による使用のための薬学的組成物は、したがって、活性化合物を薬学的に使用可能な調製物にプロセシングすることを容易にする、賦形剤および補助剤を含む、１またはそれより多い生理学的に許容されうるキャリアーを用いた従来の方式で、配合可能である。適切な配合物は、選択した投与経路に応じる。
【０１７２】
注射に関しては、本発明の化合物は、水溶液中、好ましくは生理学的に適合した緩衝剤、例えばハンクスまたはリンゲル溶液あるいは生理学的食塩水緩衝剤中で配合可能である。経粘膜および経皮投与に関しては、バリアに浸透するために適切な浸透剤を配合物中に用いることも可能である。例えばＤＭＳＯまたはポリエチレングリコールを含む、こうした浸透剤は、当該技術分野に公知である。
【０１７３】
経口投与に関しては、活性化合物と、当該技術分野に周知の薬学的に許容されうるキャリアーを合わせることによって、化合物を容易に配合可能である。こうしたキャリアーは、本発明の化合物が、患者による経口摂取のため、錠剤、ピル、ドラジェ、カプセル、液体、ゲル、シロップ、スラリー、懸濁物等として配合されることを可能にする。固形賦形剤を用いて、場合によって生じた混合物を粉砕し、そして所望である場合、適切な補助剤を添加した後に、顆粒混合物をプロセシングして、錠剤またはドラジェコアを得て、経口使用のための薬理学的調製物を作製することも可能である。適切な賦形剤は、特に、充填剤、例えばラクトース、スクロース、マンニトール、またはソルビトールを含む糖；セルロース調製物、例えばトウモロコシデンプン、小麦デンプン、コメデンプン、ジャガイモデンプン、ゼラチン、トラガカントガム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボメチルセルロースナトリウム；および／または生理学的に許容されうるポリマー、例えばポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）である。所望である場合、崩壊剤、例えば架橋ポリビニルピロリドン、寒天またはアルギン酸またはその塩、例えばアルギン酸ナトリウムを添加することも可能である。
【０１７４】
さらに、胃の環境に対する本発明の化合物の曝露を防止することが所望である場合には、溶腸コーティングが有用である。
【０１７５】
経口的に使用可能な薬学的組成物には、ゼラチン製のプッシュフィットカプセル、ならびにゼラチンおよび可塑化剤、例えばグリセロールまたはソルビトールでできた柔らかい密封カプセルが含まれる。プッシュフィットカプセルは、充填剤、例えばラクトース、結合剤、例えばデンプン、潤滑剤、例えばタルクまたはステアリン酸マグネシウム、および場合によって安定化剤と混合された活性成分を含有することも可能である。
【０１７６】
柔らかいカプセルにおいて、活性化合物は、適切な液体、例えば脂肪油、流動パラフィン、または液体ポリエチレングリコール中に溶解しているかまたは懸濁されていることも可能である。さらに、安定化剤を添加可能である。経口投与のためのすべての配合物は、選択した投与経路に適した投薬型であるべきである。
【０１７７】
頬側投与に関しては、組成物を、従来の方式で配合される錠剤またはロゼンジの形で摂取することも可能である。
【０１７８】
吸入による投与に関しては、本発明によって使用するための活性化合物は、加圧パックまたはネブライザーから、適切な噴霧剤、例えばジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロ−テトラフルオロエタンまたは二酸化炭素の使用で、エアロゾルスプレー提示の形で好適に送達される。加圧エアロゾルの場合、計測した量を送達するためのバルブを提供することによって、投薬単位を決定可能である。例えば吸入装置または注入装置で使用するためのゼラチンの、カプセルおよびカートリッジを、ペプチドの粉末混合物およびラクトースまたはデンプンなどの適切な粉末基剤を含有して、配合可能である。
【０１７９】
非経口投与のための薬学的組成物には、水溶型の活性成分の水溶液が含まれる。さらに、活性化合物の懸濁物は、適切な油性注射懸濁物として調製可能である。適切な親油性溶媒またはビヒクルには、脂肪油、例えばゴマ油、または合成脂肪酸エステル、例えばオレイン酸エチル、トリグリセリドまたはリポソームが含まれる。水性注射懸濁物は、懸濁物の粘性を増加させる物質、例えばカルボキシメチルセルロースナトリウム、ソルビトールまたはデキストランを含有することも可能である。場合によって、懸濁物はまた、化合物の可溶性を増加させて、非常に濃縮された溶液の調製を可能にする、適切な安定化剤または剤を含有することも可能である。
【０１８０】
本発明の活性化合物はまた、例えば従来の座薬基剤、例えばココアバターまたは他のグリセリドを用いて、直腸組成物、例えば座薬または停留浣腸剤に配合されることも可能である。
【０１８１】
治療しようとする状態の重症度および反応性に応じて、投薬はまた、数日から数週間持続する、あるいは治癒が達成されるかまたは疾患状態の減衰が達成されるまでの治療経過で、緩慢放出組成物の単回投薬でもありうる。投与される組成物の量は、もちろん、治療される被験体、苦痛の重症度、投与方式、処方医の判断を含む多くの要因に依存するであろう。
【０１８２】
特定の態様によれば、本発明の薬学的に許容されうる塩の配合物は、約３００ｍＯｓｍのモル浸透圧濃度および４〜８のｐＨを有する水性等張溶液として提供される。したがって、本発明の化合物の薬学的に許容されうるキャリアーは、約３００ｍＯｓｍのモル浸透圧濃度および４〜８のｐＨを有する、緩衝生理食塩水溶液、緩衝デキストロース溶液、または緩衝グリセロール溶液であることも可能である。
【０１８３】
他の態様において、緩衝溶液は、４〜８の範囲のイオン化ｐＫを有する、薬学的に許容されうる一イオン性緩衝剤系または多イオン性緩衝剤系であることも可能である。
【０１８４】
４〜８のｐＫを有する多様な緩衝剤が、本発明の薬学的に許容されうる塩を含有する溶液のｐＨを調整するために使用可能であり、例えば、ＡＣＥＳ（Ｎ−（アセタミド）−２−アミノエタンスルホン酸）；酢酸；Ｎ−（２−アセタミド）−２−イミノ二酢酸；ＢＥＳ（Ｎ，Ｎ−ビス［２−ヒドロキシエチル］−２−アミノエタンスルホン酸）；ビシン（２−（ビス（２−ヒドロキシエチル）アミノ）酢酸）；Ｂｉｓ−Ｔｒｉｓメタン（２−［ビス（２−ヒドロキシエチル）アミノ］−２−（ヒドロキシメチル）プロパン−１，３−ジオール）；Ｂｉｓ−Ｔｒｉｓプロパン（１，３−ビス（トリス（ヒドロキシメチル）メチルアミノ）プロパン）；炭酸；クエン酸；３，３−ジメチルグルタル酸；ＤＩＰＳＯ（３−［Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）アミノ］−２−ヒドロキシプロパンスルホン酸）；Ｎ−エチルモルホリン；グリセロール−２−リン酸；グリシン；グリシン−アミド；ＨＥＰＢＳ（Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−Ｎ’−４−ブタンスルホン酸）；ＨＥＰＥＳ（Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−Ｎ’−２−エタンスルホン酸）；ＨＥＰＰＳ（Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−Ｎ’−（３−プロパンスルホン酸））；ＨＥＰＰＳＯ（Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−Ｎ’−（２−ヒドロキシプロパンスルホン酸））；ヒスチジン；ヒドラジン；イミダゾール；マレイン酸；２−メチルイミダゾール；ＭＥＳ（２−（Ｎ−モルホリノ）エタンスルホン酸）；ＭＯＢＳ（４−（Ｎ−モルホリノ）−ブタンスルホン酸）；ＭＯＰＳ（３−（Ｎ−モルホリノ）−プロパンスルホン酸）；ＭＯＰＳＯ（３−（Ｎ−モルホリノ）−２−ヒドロキシ（ｈｙｄｒｏｙ）プロパンスルホン酸）；シュウ酸；リン酸；ピペラジン；ＰＩＰＥＳ（１，４−ピペラジン−ジエタンスルホン酸）；ＰＯＰＳＯ（ピペラジン−Ｎ，Ｎ’−ビス（２−ヒドロキシプロパンスルホン酸））；コハク酸；亜硫酸；ＴＡＰＳ（３−［［１，３−ジヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）プロパン−２−イル］アミノ］プロパン−１−スルホン酸）；ＴＡＰＳＯ（３−［［１，３−ジヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）プロパン−２−イル］アミノ］−２−ヒドロキシプロパン−１−スルホン酸）；酒石酸；ＴＥＳ（２−［［１，３−ジヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）プロパン−２−イル］アミノ］エタンスルホン酸）；ＴＨＡＭ（Ｔｒｉｓ）（２−アミノ−２−ヒドロキシメチル−プロパン−１，３−ジオール）；およびトリシン（Ｎ−（２−ヒドロキシ−１，１−ビス（ヒドロキシメチル）エチル）グリシン）である。
【０１８５】
いくつかの態様によれば、緩衝剤は、限定されるわけではないが、ＡＣＥＳ、ＢＥＳ、ＤＩＰＳＯ、ＨＥＰＢＳ、ＨＥＰＥＳ、ＨＥＰＰＳ、ＨＥＰＰＳＯ、ＭＥＳ、ＭＯＢＳ、ＭＯＰＳ、ＭＯＰＳＯ、ＰＩＰＥＳ、ＰＯＰＳＯ、亜硫酸、ＴＡＰＳ、ＴＡＰＳＯ、およびＴＥＳ緩衝剤を含む、スルホン酸誘導体緩衝剤である。
【０１８６】
さらなる態様によれば、緩衝剤は、限定されるわけではないが、酢酸、Ｎ−（２−アセトアミド）−２−イミノ二酢酸、２−（ビス（２−ヒドロキシエチル）アミノ）酢酸、炭酸、クエン酸、３，３−ジメチルグルタル酸、乳酸、マレイン酸、シュウ酸、コハク酸、および酒石酸緩衝剤を含む、カルボン酸誘導体緩衝剤である。
【０１８７】
さらなる態様によれば、緩衝剤は、限定されるわけではないが、ビシン、グリシン、グリシン−アミド、ヒスチジン、およびトリシン緩衝剤を含む、アミノ酸誘導体緩衝剤である。
【０１８８】
さらにさらなる態様によれば、緩衝剤は、限定されるわけではないが、グリセロール−２−リン酸およびリン酸緩衝剤を含む、リン酸誘導体緩衝剤である。
【０１８９】
あるいは、緩衝生理食塩水配合物は、例えばハンクス平衡塩溶液、アールの平衡塩溶液、ゲイの平衡塩溶液、ＨＥＰＥＳ緩衝生理食塩水、リン酸緩衝生理食塩水、Ｐｌａｓｍａ−ｌｙｔｅ、リンゲル溶液、リンゲル酢酸、リンゲル乳酸、クエン酸生理食塩水、またはＴｒｉｓ緩衝生理食塩水でありうる。
【０１９０】
緩衝デキストロース溶液配合物は、例えば、酸−クエン酸−デキストロース溶液またはエリオットのＢ溶液でありうる。
【０１９１】
例示的な態様によれば、注射用溶液は、Ｂａｘｔｅｒから購入したＰｌａｓｍａ−Ｌｙｔｅ  Ａまたは化合物、乳酸ナトリウムである。
【０１９２】
療法使用
本発明の化合物は、細胞増殖を停止させるか、または過剰増殖細胞の細胞死を誘導する際に有用であり、該化合物の中には、当該技術分野に公知であるような既知の細胞傷害性、細胞分裂停止、抗増殖薬剤が存在し、これらが含まれる。こうしたものとして、本発明の化合物は、多様な癌の治療および防止、ならびに骨髄移植前の前治療において有用である。
【０１９３】
したがって、いくつかの態様において、本発明は、転移、あるいは前癌状態または障害を含む癌を治療する方法であって、治療が必要な被験体に、療法的に有効な量の本明細書に記載するような式（Ｉ）の塩、またはこうした式によって含まれる任意の化合物、例えば化合物（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（１）、（１Ａ）、（１Ｂ）、（２）、（３）または（４）を投与する工程を含む、前記方法を提供する。
【０１９４】
他の態様において、本発明は、転移、あるいは前癌状態または障害を含む癌の治療に使用するための、本明細書に記載するような式（Ｉ）の塩、またはこうした式によって含まれる任意の化合物、例えば化合物（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（１）、（１Ａ）、（１Ｂ）、（２）、（３）または（４）を提供する。
【０１９５】
いくつかの態様において、癌は、非固形または固形腫瘍またはその組み合わせによって特徴付けられる。他の態様において、癌は血液学的癌である。
【０１９６】
いくつかの特定の態様において、癌は、白血病およびリンパ腫を含む、リンパ増殖性障害より選択される非固形腫瘍によって特徴付けられる。
【０１９７】
他の特定の態様において、固形腫瘍によって特徴付けられる癌は、中枢神経系（ＣＮＳ）の腫瘍、肝臓癌、結腸直腸癌、乳癌、胃癌、膵臓癌、膀胱癌、子宮頸癌、頭頸部腫瘍、外陰部癌、ならびに黒色腫、扁平上皮癌および基底細胞癌を含む皮膚科学的新生物からなる群より選択される。
【０１９８】
本発明の塩型は、任意の哺乳動物、好ましくはヒトを治療するために使用可能である。他の態様において、本発明は、骨髄移植の候補者である個体を治療する方法であって、移植の前に、前記個体を、本明細書に記載するような式（Ｉ）の塩、またはこうした式によって含まれる任意の化合物、例えば化合物（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（１）、（１Ａ）、（１Ｂ）、（２）、（３）または（４）で前治療する工程を含む、前記方法に関する。他の態様において、本発明は、骨髄移植前の前治療に使用するための、本明細書に記載するような式（Ｉ）の塩、またはこうした式によって含まれる任意の化合物、例えば化合物（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（１）、（１Ａ）、（１Ｂ）、（２）、（３）または（４）に関する。
【０１９９】
いくつかの態様において、癌は血液学的癌または非血液学的癌より選択可能である。
【０２００】
血液学的癌には、白血病、リンパ腫および骨髄腫が含まれ、限定されるわけではないが、骨髄性白血病、リンパ球性白血病、例えば急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ球性白血病（ＡＬＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、およびワルデンストレームのマクログロブリン血症が含まれる。血液学的癌は、再発性／難治性癌、または新規に診断された癌でありうる。
【０２０１】
固形腫瘍としてもまた公知である非血液学的癌には、限定されるわけではないが、肉腫、癌腫、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨肉腫、脊索腫、血液肉腫、内皮肉腫、中皮腫、ユーイング腫瘍、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、扁平上皮癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳頭癌、乳頭腺癌、嚢胞腺癌、髄様癌、気管支癌、腎細胞癌、肝腫瘍、胆管癌、絨毛癌、セミノーマ、胚癌、ウィルムス腫瘍子宮頸癌、精巣腫瘍、肺癌、小細胞肺癌、膀胱癌、上皮癌、星状腫、カポジ肉腫、および黒色腫が含まれる。各々の可能性は、本発明の別個の態様に相当する。
【０２０２】
非血液学的癌には、臓器の癌が含まれ、ここで臓器の癌には、限定されるわけではないが、乳癌、膀胱癌、結腸癌、直腸癌、子宮内膜癌、腎臓癌、肺癌、子宮頸癌、膵臓癌、前立腺癌、精巣癌、甲状腺癌、卵巣癌、上衣腫、神経膠腫、神経膠芽腫、髄芽腫、頭蓋咽頭腫、松果体腫を含む脳癌、聴覚神経腫、血管芽腫、乏突起神経膠腫、髄膜腫、神経芽腫、網膜芽細胞腫、およびその転移が含まれる。各々の可能性は、本発明の別個の態様に相当する。
【０２０３】
別の側面において、本発明は、前癌状態または障害を治療する方法であって、治療が必要な被験体に、療法的に有効な量の本明細書に記載するような式（Ｉ）の塩、またはこうした式によって含まれる任意の化合物、例えば化合物（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（１）、（１Ａ）、（１Ｂ）、（２）、（３）または（４）を投与する工程を含む、前記方法を提供する。
【０２０４】
別の側面において、本発明は、前癌状態または障害の治療に使用するための、本明細書に記載するような式（Ｉ）の塩、またはこうした式によって含まれる任意の化合物、例えば化合物（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（１）、（１Ａ）、（１Ｂ）、（２）、（３）または（４）を提供する。
【０２０５】
用語、前癌障害または状態には、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）が含まれる。用語「骨髄異形成症候群」（ＭＤＳ）は、血球減少症、無効な造血および過剰細胞性骨髄によって特徴付けられる造血性前悪性疾患の不均一な群を指す。ＭＤＳは、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）への転換が、症例のおよそ３０〜４０％で起こる、前白血病状態である。同種幹細胞移植が提供可能でない限り、ＭＤＳは、一般的に不治の状態と見なされる。
【０２０６】
本発明はさらに、癌を引き起こすウイルスであるウイルス性病原体によって引き起こされる感染の治療法であって、本明細書に記載するような式（Ｉ）の塩、またはこうした式によって含まれる任意の化合物、例えば化合物（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（１）、（１Ａ）、（１Ｂ）、（２）、（３）または（４）を投与する工程を含む、前記方法を提供する。したがって、本発明は、ウイルス性癌遺伝子によって引き起こされるウイルス感染の治療法を提供する。こうしたウイルスの限定されない例には、ヒト・パピローマウイルス、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、エプスタイン−バーウイルス、ヒトＴリンパ球指向性ウイルス、カポジ肉腫関連ヘルペスウイルス、およびメルケル細胞ポリオーマウイルスが含まれる。各々の可能性は、本発明の別個の態様に相当する。
【０２０７】
ウイルス性疾患は、限定されるわけではないが、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、および帯状疱疹ウイルス（ＶＺＶ）を含む他のウイルスによっても引き起こされうる。各々の可能性は、本発明の別個の態様に相当する。１つの態様によれば、ウイルス性疾患は、ヘルペスウイルス脳炎である。
【０２０８】
本発明の方法は、免疫学的疾患または障害を有する被験体において、新生物疾患を治療するために有用でありうる。免疫学的疾患または障害には、限定されるわけではないが、関節リウマチ（ＲＡ）、乾癬性関節炎、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、ループス腎炎、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、過敏性腸症候群、Ｉ型糖尿病、免疫血小板減少性紫斑病、多発性硬化症、シェーグレン症候群、橋本甲状腺炎、グレーブス病、原発性胆汁性肝硬変、ウェゲナーの肉芽腫、結核、およびワルデンストレームのマクログロブリン血症が含まれる。
【０２０９】
本発明の方法は、臓器機能不全、例えば肝機能不全、腎機能不全、膵臓機能不全、骨髄機能不全、および脳機能不全を有する被験体において、新生物疾患を治療するために有用でありうる。
【０２１０】
用語「肝機能不全」は、肝臓機能が正常状態に比較して減少している状態を指す。一般的に、肝機能不全は、肝臓機能の検査項目の任意の１またはそれより多い測定値（例えば血液ＡＳＴ、ＡＬＴ、ＡＬＰ、ＴＴＴ、ＺＴＴ、総ビリルビン、総タンパク質、アルブミン、乳酸デヒドロゲナーゼ、コリンエステラーゼ等のレベル）が、正常値（参照値）の範囲から逸脱していることで特徴付けられる状態である。肝機能不全は、例えば、劇症肝炎、慢性肝炎、ウイルス性肝炎、アルコール性肝炎、肝線維症、肝硬変、肝癌、自己免疫性肝炎、薬剤アレルギー性肝疾患、および原発性胆汁性肝硬変などの疾患の特徴である。
【０２１１】
腎機能不全は、例えば急性腎不全、糸球体腎炎、慢性腎不全、高窒素血症、尿毒症、免疫腎疾患、急性腎炎症候群、迅速進行性腎炎症候群、ネフローゼ症候群、ベルジェ病、慢性腎炎／タンパク尿症候群、尿細管間質性疾患、腎毒性障害、腎梗塞、アテローム塞栓性腎疾患、腎皮質壊死、悪性腎血管硬化症、腎静脈塞栓症、尿細管性アシドーシス、腎性糖尿、腎性尿崩症、バーター症候群、リドル症候群、多発性嚢胞腎、間質性腎炎、急性溶血性尿毒症症候群、髄質嚢胞腎、海綿腎、遺伝性腎炎、および爪膝蓋骨症候群などの疾患の特徴である。
【０２１２】
膵臓機能不全は、例えば糖尿病、高血糖、グルコース耐性不全、およびインスリン耐性などの疾患の特徴である。
【０２１３】
骨髄機能不全は、例えば骨髄炎、造血異常、イオン不全性貧血、悪性貧血、巨赤芽球症、溶血性貧血、および再生不良性貧血などの疾患の特徴である。
【０２１４】
脳機能不全は、例えば筋緊張低下、構音障害、測定障害、反復拮抗運動不全、反射不全、および企図振戦などの運動および神経行動学的障害の特徴である。
【０２１５】
１つの態様において、被験体は、抗癌剤、例えばシタラビンでの治療に感受性でない、医学的に損なわれた被験体である。医学的に損なわれた被験体は、高齢被験体、肝機能不全を有する被験体、腎機能不全を有する被験体、膵臓機能不全を有する被験体、骨髄機能不全を有する被験体、脳機能不全を有する被験体、免疫学的障害を有する被験体、難治性または再発性血液学的癌を有する被験体、およびその任意の組み合わせからなる群より選択されうる。
【０２１６】
本明細書記載の化合物の毒性および療法効果は、細胞培養または実験動物において、標準的薬学的方法によって、例えば対象化合物に関するＩＣ５０（５０％の細胞増殖阻害を提供する濃度）およびＭＴＤ（試験動物における最大許容用量）を決定することによって決定可能である。細胞培養アッセイおよび動物研究から得られたデータを、ヒト被験体において使用するためのある範囲の投薬量を配合する際に使用することも可能である。投薬量は、使用する投薬型、および利用する投与経路に応じて多様でありうる。正確な配合、投与経路、および投薬量は、患者の状態を考慮して、個々の医師によって選択可能である（例えばＦｉｎｇｌら，１９７５，”Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，”第１章、ｐｐ．１を参照されたい）。
【０２１７】
本発明の組成物中で用いる活性剤の量は、ターゲット徴候に関する特定の活性剤の目的を達成するために有効な量である。組成物中の活性剤の量は、典型的には、療法的、薬理学的、生物学的、または化学的に有効な量である。しかし、量は、組成物を投薬単位型で用いる場合の量よりも少ないことも可能であり、これは投薬単位型が、単一組成物中に、複数の化合物または活性剤を含有することも可能であるし、あるいは分割された薬理学的、生物学的、療法的、または化学的有効量を含有することも可能であるためである。次いで、総有効量を、総合して活性剤の有効量を含有する累積単位で投与することも可能である。
【０２１８】
本発明の塩を、約０．３ｇ／ｍ２〜約１０ｇ／ｍ２被験体表面積の範囲の一日用量で投与することも可能である。いくつかの態様によれば、塩を、約０．５ｇ／ｍ２〜約５ｇ／ｍ２被験体表面積の範囲の一日用量で投与することも可能である。いくつかの態様によれば、塩を、約０．５ｇ／ｍ２〜約４．５ｇ／ｍ２被験体表面積の範囲の一日用量で投与することも可能である。他の態様によれば、塩を、約０．３、０．５、０．８、１、１．５、２、２．３、２．５、３、３．５、４、４．５、５、６、７、８、９、１０ｇ／ｍ２被験体表面積の一日用量で投与する。各々の可能性は、本発明の別個の態様に相当する。
【０２１９】
いくつかの態様によれば、本発明の塩を、静脈内注入によって、０．３ｇ／ｍ２〜４．５ｇ／ｍ２被験体表面積の範囲の一日用量で投与する。
【０２２０】
いくつかの態様によれば、薬学的組成物は、１ヶ月に少なくとも１回投与される。さらなる態様によれば、薬学的組成物は、１ヶ月に少なくとも２回投与される。さらなる態様によれば、薬学的組成物は、１週間に少なくとも１回投与される。さらにさらなる態様によれば、薬学的組成物は、１週間に少なくとも２回投与される。さらにさらなる態様によれば、薬学的組成物は、少なくとも１週間、１日１回投与される。さらなる態様によれば、薬学的組成物は、少なくとも１週間または被験体が治癒するまで、少なくとも１日１回投与される。
【０２２１】
いくつかの態様によれば、薬学的組成物は、１日１回、少なくとも２、３、４、５、６、８、１０、１２日間、または少なくとも連続１４日間、１ヶ月に１回投与される。あるいは、薬学的組成物は、１日１回、少なくとも２、３、４、５、６、または１２日間、月２回投与されるか、さらにあるいは、薬学的組成物は、患者が治癒するまで、毎日または週２回投与される。
【０２２２】
いくつかの態様において、薬学的組成物を癌の再発の防止に用いる場合、薬学的組成物を、臨床医の指示によって、長期間、定期的に投与可能である。
【０２２３】
いくつかの場合、多量の初回量を投与した後、定期的に（例えば毎週）維持用量を治療期間に渡って投与することが好適である可能性もある。化合物はまた、緩慢放出送達系、ポンプ、および連続注入のための他の既知の送達系によって送達されることも可能である。投薬措置は、薬物動態学に基づいて、特定の化合物の所望の循環レベルを提供するために、多様でありうる。したがって、用量は、療法剤の所望の循環レベルが維持されるように計算される。
【０２２４】
典型的には、有効用量は、化合物の活性および有効性、ならびに被験体の状態、ならびに治療される被験体の体重または表面積によって決定される。用量および投薬措置はまた、特定の被験体における、化合物投与に付随する任意の副作用の存在、性質、および度合いによっても決定される。
【０２２５】
さらなる態様によれば、治療される被験体は、年齢５０歳またはそれより高齢、例えば６０歳、７０歳、７５歳またはそれ以上の年齢の被験体である。各々の可能性は、本発明の別個の態様に相当する。
【０２２６】
さらなる態様によれば、本発明の化合物は、シタラビン単独の治療用量の最大標準よりも、少なくとも２、３、５、１０、１５、２０、または少なくとも３０倍高い１日投薬量で投与される。各々の可能性は、本発明の別個の態様に相当する。以下の実施例は、単に例示とみなされ、まったく限定するものではない。本発明が関連する当業者には、本発明の範囲から逸脱することなく、多くの変形、並べ替え、および変動が実行可能であることが明らかであろう。
【０２２７】
実施例
以下の略語を実施例において用いる：
ＢＯＣ：ｔ−ブチルオキシカルボニル
ＤＣＣ：Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド
ＤＭＦ：ジメチルホルムアミド
ＤＣＭ：ジクロロメタン
ＤＩＣ：ジイソプロピルカルボジイミド
ＤＩＥＡ；ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＡＰ：ジメチルアミノピリジン
Ｆｍｏｃ：９−フルオレニルメチルオキシカルボニル
ＨＢＴＵ：２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート
ＨＯＢｔ：Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール
ＨＰＬＣ：高性能液体クロマトグラフィ
ＭＳ：質量分析
ＮＭＰ：Ｎ−メチル２−ピロリドン
ＯｔＢｕ：ｔ−ブチルエステル
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸
【０２２８】
実施例１：ＢＯＣ−Ａｓｐ（シタラビン）−ＯｔＢｕ（Ａ）の合成−塩型Ａｓｐ（シタラビン）・Ｙ（１）の保護前駆体
ＢＯＣ−Ａｓｐ−ＯｔＢｕ（２３．７ｇ）、ＥＤＣ（１５．７ｇ）、ＨＯＢＴ（１１．１ｇ）およびＡｒａ−Ｃ（２０ｇ）を４００ｍｌ  ＤＭＦ中に溶解し、室温で２４時間混合した。混合物を８０℃で蒸発させて、油性残渣を得た。残渣を、３００ｍｌ酢酸エチルに溶解し、連続して、５％  ＮａＨＣＯ３、０．１Ｍ  ＨＣｌ、５Ｍ  ＮａＣｌで抽出した。混合物を完全に蒸発させて、保護前駆体ＢＯＣ−Ａｓｐ（シタラビン）−ＯｔＢｕの固形産物を得た。前駆体を、アセトニトリル／Ｈ２Ｏ  ０．１％ＴＦＡの勾配で、ｐｒｉｍｅｓｅｐ  １００上でＨＰＬＣ混合様式クロマトグラフィによって分析して、２９．６分の保持時間でピークを生じた。産物前駆体の収量は、８０〜９０％であり、オフホワイト結晶で、ＨＰＬＣ純度≧９５％であった。
【０２２９】
【化２０】
2022000463.tif 000021
保護前駆体Ｂｏｃ−Ａｓｐ（シタラビン）−ＯｔＢｕ（Ａ）をさらに、最終産物Ａｓｐ（シタラビン）・Ｙ（Ｙ＝酸付加塩）の多様な塩型の生成のために用いる：
【化２１】
2022000463.tif 000022
【０２３０】
実施例２：Ａｓｐ（シタラビン）・アセテート（Ｙ＝ＣＨ３ＣＯＯＨ）、（式ＩＶ）の合成−脱保護のためのＴＦＡを用いた経路Ａ
保護前駆体ＢＯＣ−Ａｓｐ（シタラビン）−ＯｔＢｕ（実施例１由来）をＴＦＡによる切断に供した。保護基（ＢＯＣ、ＯｔＢｕ）の切断を、４００ｍｌ  ＴＦＡ＋２．５％Ｈ２Ｏ中、２．５時間行った。産物沈殿のため、溶液を１．６Ｌ  ｔＢＭＥに移した。沈殿物を乾燥させて、Ａｓｐ（シタラビン）・ＴＦＡのオフホワイト結晶を得た。ＴＦＡ塩型（Ｍ．Ｗ．＝４７２ｇ／ｍｏｌ）。完全に溶解するまで、Ａｓｐ（シタラビン）・ＴＦＡを濃酢酸中にさらに溶解した。産物をｔＢＭＥで沈殿させ、乾燥させてＡｓｐ（シタラビン）・アセテートを得た。産物の収率は７５〜８５％、白色結晶であった。未精製産物を、２４０ｎｍで、アセトニトリル／Ｈ２Ｏ  ０．１％ＴＦＡの勾配で、ｐｒｉｍｅｓｅｐ  １００上でＨＰＬＣ混合様式クロマトグラフィによって分析して、９．２分の保持時間、８５．３％の純度でピークを生じた。ＭＳ結果はＭ．Ｗ．＝３５９ｇ／ｍｏｌ（ＭＳ＋１Ｈ）を示す。ＭＳ結果を図１に提示する。２１３、２４５および２９８ｎｍの光学密度。ＮＭＲ結果：１Ｈ  ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−６ｄ）δ  ｐｐｍ  ２．９８（ｄｄ，１Ｈ），３．０８（ｄｄ，１Ｈ），３．６１（ｄ，１Ｈ），３．８４（ｄｄｄ，１Ｈ），３．９３（ｔｄ，１Ｈ），４．０６（ｔｄ，１Ｈ），４．２３（ｄｔｄ，１Ｈ），５．５０（ｓ，１Ｈ），６．０５（ｄ，１Ｈ），７．１２（ｄ，１Ｈ），８．０９（ｄ，１Ｈ），１１．１０（ｓ，１Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（１５１ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−６ｄ）δ  ｐｐｍ  ３６．６１（ｓ，１Ｃ），４８．２３（ｓ，１Ｃ），６１．０２（ｓ，１Ｃ），７４．５７（ｓ，１Ｃ），７６．１５（ｓ，１Ｃ），８５．８２（ｓ，１Ｃ），８７．０６（ｓ，１Ｃ），９４．３０（ｓ，１Ｃ），１４７．０１（ｓ，１Ｃ），１５４．３３（ｓ，１Ｃ），１６１．８４（ｓ，１Ｃ），１７０．００（ｓ，１Ｃ），１７０．０４（ｓ，１Ｃ）。ＮＭＲ結果は、予期された構造を確認する。
【０２３１】
９５〜１００％までのＡｓｐ（シタラビン）・アセテートの精製を以下のように行った：７ｇの未精製産物（８５．３％）を１５ｍｌ  Ｈ２Ｏに溶解し、表１に記載するような調製用ＨＰＬＣ上で、分離した。溶液Ａ−水に溶解した０．１％  ＴＦＡまたは１％酢酸。溶液Ｂ−アセトニトリル／水＝９／１に溶解した０．１％  ＴＦＡまたは１％酢酸。注入体積：１５ｍｌ、波長：２２０ｎｍ、流速：４０ｍｌ／分、カラム：ｐｒｉｍｅｓｅｐ  １００、寸法：６０ｘ３００ｍｍ、粒子サイズ：１０μｍ  １００Ａ、分画収集体積：３０ｍｌ。１８〜３６分で収集した分画はＡｓｐ（シタラビン）・アセテートの≧９５％の純度を示す。分画を凍結乾燥して、精製Ａｓｐ（シタラビン）・アセテートの粉末を得て、収量は３．１８ｇであった。
【表１】
2022000463.tif 000023
【０２３２】
実施例３：酸置換によるＡｓｐ（シタラビン）・メタンスルホネートの合成−脱保護にＴＦＡを用いた経路Ａ
２グラムの保護前駆体ＢＯＣ−Ａｓｐ（シタラビン）−ＯｔＢｕを、実施例１に記載するように、ＴＦＡによる切断に供した。完全に溶解するまで、１ｇ  Ａｓｐ（シタラビン）・ＴＦＡをＨ２Ｏ中の７０％メタンスルホン酸に溶解した。産物Ａｓｐ（シタラビン）・メタンスルホネートをイソプロパノール／ｔＢＭＥで沈殿させ、ペレットを乾燥させた。産物の収率は５１％であり、白色結晶であった。産物を、実施例２に記載するように、ＨＰＬＣおよびＭＳによって分析した。産物は１０．６分の保持時間でピークを生じ、８０．６％の純度であった。
【０２３３】
９５〜１００％までのＡｓｐ（シタラビン）・メタンスルホネートの精製を適宜行った：２０ｇのＧ−１０樹脂を、１００ｍｌ  Ｈ２Ｏ中で１時間膨張させた。膨張後、Ｇ−１０を焼結ガラスに移し、Ｈ２Ｏ中の２０％エタノール（ｘ３カラム体積）、Ｈ２Ｏ、およびＨ２Ｏ中の０．１％メタンスルホン酸で洗浄した。１グラムのＡｓｐ（シタラビン）・メタンスルホネート未精製粉末（８０．６％）を、５ｍｌ  Ｈ２Ｏに溶解した。溶液をＧ−１０樹脂上に装填し、Ｈ２Ｏ中の０．１％メタンスルホン酸で抽出した。５ｍｌの分画を収集した。精製Ａｓｐ（シタラビン）・メタンスルホネート分画は、９５％を超える純度を示す。
【０２３４】
実施例４：酸置換による塩型のＡｓｐ（シタラビン）・Ｙ変種の合成
経路Ａは、実施例２および３に記載するものと同じ方法によって、ＴＦＡを他の酸に置換することによって、多様な塩型に使用可能である。酸、例えば：ベンゼンスルホン酸、安息香酸、ホウ酸、クエン酸、エタンスルホン酸、ギ酸、塩酸、乳酸、マレイン酸、マロン酸、メタンスルホン酸、メタリン酸、ニコチン酸、シュウ酸、リン酸、サリチル酸、コハク酸、硫酸、酒石酸、およびトルエンスルホン酸である。選択した濃度および１：１〜１：２０の比の多様な酸を、置換反応に関して分析した。沈殿後、産物をＨＰＬＣおよびＭＳによって分析した。条件および結果を表２に示す。実施例２および３に記載する精製法を用いて、Ａｓｐ（シタラビン）・Ｙ産物をさらに精製する。
【表２】
2022000463.tif 000024
【０２３５】
実施例５：メタンスルホン酸切断による、Ａｓｐ（シタラビン）・メタンスルホネート塩型の合成−経路Ｂ
０．２５ｇのＢＯＣ−Ａｓｐ（シタラビン）−ＯｔＢｕ前駆体（実施例１由来）を、メタンスルホン酸による切断に供した。０．２５ｇ前駆体を、Ｈ２Ｏ中の１ｍｌの７０％ＭＳＡと共に添加した。２時間切断した後、溶液を１０ｍｌ  ｔＢＭＥに移し、産物、Ａｓｐ（シタラビン）・メタンスルホネートの沈降を形成した。産物をｔＢＭＥで洗浄し、乾燥した。産物の収率は６５％であり、白色結晶であった。産物を、２２０ｎｍで、アセトニトリル／Ｈ２Ｏ  ０．１％ＴＦＡの勾配で、ｐｒｉｍｅｓｅｐ  １００上でＨＰＬＣ混合様式クロマトグラフィによって分析して、９．６分の保持時間、５６％の純度でピークを生じた。Ａｓｐ（シタラビン）・メタンスルホネートのＭＳ結果は、Ｍ．Ｗ．＝４５３および４５４ｇ／ｍｏｌ（ＭＳ±１Ｈ）を示す。ＭＳ結果を図２に提示する。Ａｓｐ（シタラビン）・メタンスルホネートを実施例２および３に記載するように精製する。実施例２の精製法を用いる場合、溶液ＡおよびＢ内で使用する酸を酸付加塩に置換する。溶液Ａ−水に溶解した０．１％メタンスルホン酸。溶液Ｂ−アセトニトリル／水＝９／１に溶解した０．１％メタンスルホン酸。
【０２３６】
実施例６：ベンゼンスルホン酸切断による、Ａｓｐ（シタラビン）・ベンゼンスルホネート塩型の合成−経路Ｂ
Ａｓｐ（シタラビン）・ベンゼンスルホネート塩型を、実施例５に記載するように、ベンゼンスルホン酸切断によって、ＢＯＣ−Ａｓｐ（シタラビン）−ＯｔＢｕ前駆体から合成した。産物の収率は３１％であり、白色結晶であった。産物を実施例５に記載するように分析した。ＨＰＬＣ結果は、保持時間９．３および１４．７分で２つのピークを示し、それぞれ２０および４４％の純度であった。Ａｓｐ（シタラビン）・ベンゼンスルホネートのＭＳ結果は、Ｍ．Ｗ．＝５１５および５１６ｇ／ｍｏｌ（ＭＳ±１Ｈ）を示す。ＭＳ結果を図３に提示する。Ａｓｐ（シタラビン）・ベンゼンスルホネートを実施例２、３および５に記載するように精製する。
【０２３７】
実施例７：リン酸切断によるＡｓｐ（シタラビン）・ホスフェート塩型の合成−経路Ｂ
Ａｓｐ（シタラビン）・ホスフェート塩型を、実施例５に記載するように、濃リン酸切断によって、ＢＯＣ−Ａｓｐ（シタラビン）−ＯｔＢｕ前駆体から合成した。産物収率は３４％であり、白色結晶であった。産物を実施例５に記載するように分析した。ＨＰＬＣ結果は、９．０分の保持時間でピークを示し、８４．３％の純度であった。Ａｓｐ（シタラビン）・ホスフェートのＭＳ結果は、Ｍ．Ｗ．＝４５５および４５６ｇ／ｍｏｌ（ＭＳ±１Ｈ）を示す。Ａｓｐ（シタラビン）・ホスフェートを実施例２、３および５に記載するように精製する。
【０２３８】
実施例８：硫酸切断によるＡｓｐ（シタラビン）・サルフェート塩型の合成−経路Ｂ
Ａｓｐ（シタラビン）・ホスフェート塩型を、実施例５に記載するように、濃硫酸切断によって、ＢＯＣ−Ａｓｐ（シタラビン）−ＯｔＢｕ前駆体から合成した。産物収率は７７％であり、白色結晶、Ｍ．Ｗ．＝４５６ｇ／ｍｏｌであった。産物を実施例５に記載するように分析した。ＨＰＬＣ結果は、９．３分の保持時間でピークを示し、５３％の純度であった。Ａｓｐ（シタラビン）・サルフェートのＭＳ結果は、Ｍ．Ｗ．＝４５５および４５６ｇ／ｍｏｌ（ＭＳ±１Ｈ）を示す。Ａｓｐ（シタラビン）・サルフェートを実施例２、３および５に記載するように精製する。
【０２３９】
実施例９：塩酸切断によるＡｓｐ（シタラビン）・ヒドロクロリド塩型の合成−経路Ｃ
１ｇのＢＯＣ−Ａｓｐ（シタラビン）−ＯｔＢｕ前駆体（実施例１由来）を、ＨＣｌによる切断に供した。３ｍｌの３７％ＨＣｌ／Ｈ２Ｏを前駆体に添加し、ＢＯＣおよびＯｔＢｕ保護基の除去、ならびに塩型形成のため、１時間インキュベーションした。溶液を１Ｎ  ＮａＯＨで、ｐＨ＝５〜６に滴定した。滴定中、白色沈降が形成された。生じた沈降物を乾燥させ、２ｍｌ  Ｈ２Ｏ中に溶解し、凍結乾燥した。産物を実施例５に記載するように分析した。ＨＰＬＣ結果は、９．４６分の保持時間でピークを示し、７５．９％の純度であった。Ａｓｐ（シタラビン）・ヒドロクロリドを実施例２、３および５に記載するように精製する。
【０２４０】
実施例１０：酸切断による塩型のＡｓｐ（シタラビン）・Ｙ変種の合成
実施例５および９に記載するものと同じ方法によって、塩型を生じる、酸での切断によって、多様な塩型形成に、経路ＢおよびＣを用いることも可能である。保護基除去および塩型形成の両方に好ましい酸は、ｐＫａ≦３を有し、１：１〜３０：１（酸：前駆体）の比である。例えば、酸は、例えば：ベンゼンスルホン酸、カンファースルホン酸、シクラミン酸、２，２−ジクロロ−酢酸、ジ（ｔ−ブチル）−ナフタレンスルホン酸、ジ（ｔ−ブチル）−ナフタレンジスルホン酸、ドデシル硫酸、エタン−１，２−ジスルホン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、ガラクタル酸、ゲンチジン酸、グルカル酸、グルコン酸、グリセロリン酸、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、２−ヒドロキシ−エタンスルホン（イセチオン）酸、１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸、マレイン酸、マロン酸、メドロン（ビスホスホン）酸、メタンスルホン酸、メタリン酸、メチルボロン酸、ナフタレン−１，５−ジスルホン酸、ナフタレン−２−スルホン酸、硝酸、オロト酸、シュウ酸、２−オキソ−グルタル（ケトグルタル）酸、パモ（エンボン）酸、ピルビン酸、リン酸、サッカリン酸、サリチル酸、硫酸、酒石酸、チオシアン酸、トルエンスルホン酸およびトリフルオロ酢酸等である。１０％〜１００％（濃酸）の選択した濃度の多様な酸を、保護基除去および塩型形成のため、ＢＯＣ−Ａｓｐ（シタラビン）−ＯｔＢｕ前駆体の切断に用いた。産物をさらに、ＨＰＬＣおよびＭＳによって分析した。条件および結果を表３に示す。Ａｓｐ（シタラビン）・Ｙ産物を、実施例２、３および５に記載するように精製する。
【表３】
2022000463.tif 000025
【０２４１】
実施例１１：塩（例えばＮａＨ２ＰＯ４）を用いたＡｓｐ（シタラビン）・Ｙの付加塩の調製
ＢＯＣ−Ａｓｐ（シタラビン）−ＯｔＢｕ保護前駆体を実施例１に記載するように合成した。Ａｓｐ（シタラビン）・ＴＦＡを実施例２に記載するように合成した。完全に溶解するまで、０．２５ｇのＡｓｐ（シタラビン）・ＴＦＡを１ｍｌの１Ｍ  ＮａＨ２ＰＯ４にさらに溶解した。産物をｔＢＭＥで沈殿させ、乾燥させて、Ａｓｐ（シタラビン）・ホスフェート産物を得た。
【０２４２】
この反応を例えば、ＫＨ２ＰＯ４等の他の塩でも使用可能である。
【０２４３】
実施例１２：ＢＯＣ−Ａｓｐ（ゲムシタビン）−ＯｔＢｕ（Ｂ）の合成−塩型Ａｓｐ（ゲムシタビン）・Ｙ（２）の保護前駆体
ＢＯＣ−Ａｓｐ（ゲムシタビン）−ＯｔＢｕ保護前駆体を実施例１に記載するように合成した。
【化２２】
2022000463.tif 000026
【０２４４】
保護前駆体を、最終産物Ａｓｐ（ゲムシタビン）・Ｙ（Ｙ＝酸付加塩）（２）の多様な塩型の生成にもさらに用いる。
【化２３】
2022000463.tif 000027
【０２４５】
実施例１３：Ａｓｐ（ゲムシタビン）・アセテート塩型の合成
Ａｓｐ（ゲムシタビン）・アセテート塩型（Ｙ＝ＣＨ３ＣＯＯＨ）を、実施例２に記載するような酸置換によって、前駆体Ｂから合成した。
【０２４６】
実施例１４：Ａｓｐ（ゲムシタビン）・メタンスルホネート塩型の合成
Ａｓｐ（ゲムシタビン）・メタンスルホネート塩型（Ｙ＝ＣＨ３ＳＯ３Ｈ）を、実施例５に記載するようなメタンスルホン酸での切断によって、前駆体Ｂから合成した。
【０２４７】
実施例１５：ＢＯＣ−Ｇｌｕ（シタラビン）−ＯｔＢｕ（Ｃ）の合成−塩型Ｇｌｕ（シタラビン）・Ｙ（３）の保護前駆体
ＢＯＣ−Ｇｌｕ（シタラビン）−ＯｔＢｕ保護前駆体を実施例１に記載するように合成した。
【化２４】
2022000463.tif 000028
【０２４８】
保護前駆体を、最終産物Ｇｌｕ（シタラビン）・Ｙ（Ｙ＝酸付加塩）（３）の多様な塩型の生成にもさらに用いる。
【化２５】
2022000463.tif 000029
【０２４９】
実施例１６：Ｇｌｕ（シタラビン）・アセテート塩型の合成
Ｇｌｕ（シタラビン）・アセテート塩型（Ｙ＝ＣＨ３ＣＯＯＨ）を、実施例２に記載するような酸置換によって、前駆体Ｃから合成した。
【０２５０】
実施例１７：Ｇｌｕ（シタラビン）・メタンスルホネート塩型の合成
Ｇｌｕ（シタラビン）・メタンスルホネート塩型（Ｙ＝ＣＨ３ＳＯ３Ｈ）を、実施例５に記載するようにメタンスルホン酸での切断によって、前駆体Ｃから合成した。
【０２５１】
実施例１８：ＢＯＣ−Ｇｌｕ（ゲムシタビン）−ＯｔＢｕ（Ｄ）の合成−塩型Ｇｌｕ（ゲムシタビン）・Ｙ（４）の保護前駆体
ＢＯＣ−Ｇｌｕ（ゲムシタビン）−ＯｔＢｕ保護前駆体を実施例１に記載するように合成した。
【化２６】
2022000463.tif 000030
【０２５２】
保護前駆体ＢＯＣ−Ｇｌｕ（ゲムシタビン）−ＯｔＢｕ（Ｄ）を、最終産物Ｇｌｕ（ゲムシタビン）（４）・Ｙ（Ｙ＝酸付加塩）の多様な塩型の生成にさらに用いる。
【化２７】
2022000463.tif 000031
【０２５３】
実施例１９：Ｇｌｕ（ゲムシタビン）・アセテート塩型の合成
Ｇｌｕ（ゲムシタビン）・アセテート塩（Ｙ＝ＣＨ３ＣＯＯＨ）型を、実施例２に記載するような酸置換によって、前駆体Ｄから合成した。
【０２５４】
実施例２０：Ｇｌｕ（ゲムシタビン）・メタンスルホネート塩型の合成
Ｇｌｕ（ゲムシタビン）・メタンスルホネート塩型（Ｙ＝ＣＨ３ＳＯ３Ｈ）を、実施例５に記載するようにメタンスルホン酸での切断によって、前駆体Ｄから合成した。
【０２５５】
実施例２１：Ａｓｐ（シタラビン）・ＨＣｌ塩型（Ｙ＝ＨＣｌ）の合成
段階１：Ｂｏｃ−Ａｓｐ（シタラビン）−ＯｔＢｕの合成
【化２８】
2022000463.tif 000032
【０２５６】
シタラビン（０．５０ｇ、２．１ｍｍｏｌ）を５ｍＬ乾燥ＤＭＦ中に懸濁した。透明な溶液が得られるまで、混合物を７０℃に加熱した。Ｂｏｃ−Ａｓｐ−ＯｔＢｕ（０．４０ｇ、１．４ｍｍｏｌ）を室温で５ｍＬ乾燥ＤＭＦ中に溶解した。ＨＯＢｔ（０．２２ｇ、１．５ｍｍｏｌ）を添加し、溶解した後、ＥＤＣ（０．２８ｇ、１．５ｍｍｏｌ）を添加した。溶液を室温で３０分間攪拌する。
【０２５７】
４５℃で、活性化アミノ酸をシタラビン溶液に２時間に渡って１滴ずつ添加して、次いで４５℃で一晩攪拌した。
【０２５８】
溶媒を減圧下、６０℃で蒸発させた。油性残渣を酢酸エチル（５５ｍＬ）に溶解し、３ｘ５％ＮａＨＣＯ３、３ｘ０．１Ｍ  ＨＣｌおよび３ｘブラインで洗浄した（各洗浄１５ｍＬ）。硫酸ナトリウム上での乾燥およびろ過後、溶媒を蒸発させ、泡状固体として未精製産物を得た。未精製産物は、〜５−１５％（Ｂｏｃ−Ａｓｐ−ＯｔＢｕ）２−（シタラビン）不純物を含有する。
【０２５９】
段階２：Ｂｏｃ−Ａｓｐ（シタラビン）−ＯｔＢｕの精製
Ｂｉｏｔａｇｅ  Ｉｓｏｌｅｒａ（登録商標）精製系を用いて、未精製産物を精製する。以下の勾配を用い、４０ｍＬ／分の流速で、ＳＮＡＰカートリッジ、ＫＰ−ＳＩＬ  １００ｇシリカカラムを用いて（２５４ｎｍで監視）、３．９７ｇの未精製産物（１％未満の（Ｂｏｃ−Ａｓｐ−ＯｔＢｕ）２−シタラビン不純物を含有する）を精製した。
【表４】
2022000463.tif 000033
産物分画を合わせ、乾燥するまで蒸発させて、３．７８ｇの精製産物を得た。精製Ｂｏｃ−Ａｓｐ−ＯｔＢｕ−（シタラビン）の１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（ＭｅＯＤ）を図４に示す。
【０２６０】
段階３：Ａｓｐ（シタラビン）・ＨＣｌの合成
【化２９】
2022000463.tif 000034
Ｂｏｃ−Ａｓｐ−ＯｔＢｕ−（シタラビン）（３．６ｇ、７．０ｍｍｏｌ）を８．８ｍＬ乾燥ジオキサンに溶解した。透明な溶液が得られた後、ジオキサン中のＨＣｌ（４Ｍ、１７．５ｍＬ、７０ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で一晩攪拌した（１分後、白色固体が形成される）。Ｈ２Ｏ（０．２６ｍＬ、７．０ｍｍｏｌ）を１滴ずつ添加し、攪拌を３時間続ける。沈殿物をろ過し（焼結ガラスフィルター、ｐｏｒ．４）、乾燥ジオキサン（２ｘ２５ｍＬ）で洗浄した。得られた白色固体を、真空中、室温で乾燥させて、白色粉末（３．３４ｇ）を得た。Ａｓｐ（シタラビン）・ＨＣｌの１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（ＭｅＯＤ）を図５に示す。
【０２６１】
実施例２２：保護シタラビンからのＡｓｐ（シタラビン）・ＨＣｌ塩型（Ｙ＝ＨＣｌ）の合成
段階１：シタラビンの保護
２．４４ｇシタラビンおよび１．５ｇ  ｔ−ブチルジメチルシリルクロリド（ＴＢＤＭＳ−Ｃｌ）を２０ｍｌピリジンに溶解し、反応を１０時間混合した。溶液を蒸発させ、ペレットを水および酢酸エチルで洗浄して、ＴＢＤＭＳ−シタラビン（５’−ＯＨ保護）の白色固体を得た。
【０２６２】
段階２：Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＴＢＤＭＳ−シタラビン）−ＯｔＢｕの合成
１グラムのＴＢＤＭＳ−シタラビンを１０ｍＬ  ＤＭＦに溶解した。０．８ｇ  Ｂｏｃ−Ａｓｐ−ＯｔＢｕを５ｍＬ  ＤＭＦに溶解した。０．４４ｇ  ＨＯＢｔを添加し、溶解した後、０．５６ｇ  ＥＤＣを添加した。溶液を室温で３０分間攪拌する。活性化アミノ酸を、ＴＢＤＭＳ−シタラビン溶液に一滴ずつ添加し、次いで一晩攪拌した。溶媒を、減圧下、６０℃で蒸発させた。油性残渣を酢酸エチルに溶解し、５％ＮａＨＣＯ３、０．１Ｍ  ＨＣｌおよびブラインで洗浄した。溶媒の２／３を蒸発させ、未精製産物をヘキサンで沈殿させて、白色固体を得た。未精製産物は（Ｂｏｃ−Ａｓｐ−ＯｔＢｕ）２−（ＴＢＤＭＳ−シタラビン）不純物を含有せず、カラム精製は不要であった。
【０２６３】
段階３：Ａｓｐ（シタラビン）・ＨＣｌの合成
実施例２２の段階３に記載するものと同じプロセスを用いて、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＴＢＤＭＳ−シタラビン）−ＯｔＢｕをＡｓｐ（シタラビン）・ＨＣｌの合成に用いた。
【０２６４】
実施例２３：Ａｓｐ（シタラビン）・Ｙ塩型の生物学的活性、白血病癌細胞の増殖に対する影響
Ｌ１２１０白血病癌細胞を、１０％ドナーウマ血清、１％グルタミン、１％非必須アミノ酸、０．１％アンホテリシン、および０．１％ゲンタマイシンを含むＤＭＥＭ培地中で増殖させた。細胞を希釈し、９６ウェルプレート内に、ウェルあたり０．２ｍｌの体積中、２０００細胞／ｍｌ、４００細胞／ウェルで植え付けた。プレートを３７℃で１８０分間インキュベーションした。インキュベーション後、試験物質を、各６複製物で、生理食塩水中で配合した１μＭから１００ｎＭの増加する濃度で添加した。試験物質は、Ａｓｐ（シタラビン）・アセテート塩型、Ａｓｐ（シタラビン）・ヒドロクロリド塩型、Ａｓｐ（シタラビン）・メタンスルホネート塩型、Ａｓｐ（シタラビン）・ベンゼンスルホネート塩型およびＡｓｐ（シタラビン）・ホスフェート塩型であった。試験プレートにはまた、対照として、生理食塩水の６複製ウェルも含まれた。プレートを分析前に３７℃で７２時間インキュベーションした。曝露期間の終了時に、ＭＴＴ［３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロミド］アッセイを行った。各試験ウェルに、５ｍｇ／ｍｌの濃度のＭＴＴを０．０２ｍｌ体積中で添加した。プレートを３７℃で３時間インキュベーションし、次いで３５００ｒｐｍで６分間遠心分離し、上清を吸引した。ＭＴＴ結晶を含有するペレットを各０．２ｍｌ  ＤＭＳＯに溶解した。５７０ｎｍの波長でＥＬＩＳＡ読み取り装置を用いて、吸光度を決定した。得たＩＣ５０値を表４に要約する。
【表５】
2022000463.tif 000035
【０２６５】
実施例２４：Ａｓｐ（シタラビン）・アセテート塩型の生物学的活性、多様な細胞株の増殖に対する影響
多様なヒト白血病癌細胞を、１０％ウシ胎児血清、１％グルタミン、０．１％アンホテリシン、および０．１％ゲンタマイシンを含むＲＰＭＩ培地中で増殖させた。細胞を希釈し、実施例２３に記載するように植え付けた。Ａｓｐ（シタラビン）・アセテート塩型を、各３複製物で、生理食塩水中で配合した１μＭから１００ｎＭの増加する濃度で添加した。実施例２３に記載するように、ＭＴＴアッセイを行った。得たＩＣ５０値を表５に要約する。
【表６】
2022000463.tif 000036
【０２６６】
当業者には、本発明が、本明細書の上記に特に示し、記載するものによって限定されないことが認識される。むしろ、本発明の範囲には、本明細書の上記の多様な特徴の組み合わせおよびサブコンビネーションの両方、ならびに変更および変形が含まれる。したがって、本発明は、特に記載する態様に制限されるとは見なされず、本発明の範囲および概念は、続く請求項を参照することによって、より容易に理解されるであろう。
【０２６７】
参考文献
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Ｈｏ  ＤＨＷ，１９７４．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ｓｔｕｄｉｅｓ  ｏｎ  ｎｅｗ  ａｎｔｉｔｕｍｏｒ  ａｇｅｎｔ，Ｏ２−２’−ｃｙｃｌｏｃｙｔｔｉｄｉｎｅ．Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．；２３：１２３５．
Ｋｏｄａｍａ  Ｋ，Ｍｏｒｏｚｕｍｉ  Ｍ，Ｓａｉｔｏｈ  Ｋ，ｅｔ  ａｌ．１９８９．Ａｎｔｉｔｕｍｏｒ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ａｎｄ  ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ｏｆ  １−β−Ｄ−  ａｒａｂｉｎｏｆｕｒａｎｏｓｙｌｃｙｔｏｃｓｉｎｅ．Ｊｐｎ  Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．；８０：６７９．
Ｍａｎｆｒｅｄｉｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，２０００，Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｔ−ａｒａＣ  ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ：ｓｏｌｉｄ  ｐｈａｓｅ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ａｎｄ  ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  Ｎ４−（Ａｃｙｌｐｅｐｔｉｄｙｌ）ａｒａＣ，Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．８：５３９−５４７．
Ｐｉｅｋ  Ｊ，Ａｄｅｌｔ  Ｔ，Ｈｕｓｅ  Ｋ，Ｂｏｃｋ  ＷＪ．［Ｃｅｒｅｂｒｏｓｐｉｎａｌ  ｆｌｕｉｄ  ａｎｄ  ｐｌａｓｍａ  ａｍｉｎｏｇｒａｍ  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｐｒｉｍａｒｙ  ａｎｄ  ｓｅｃｏｎｄａｒｙ  ｔｕｍｏｒｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ＣＮＳ］，［ａｒｔｉｃｌｅ  ｉｎ  Ｇｅｒｍａｎ］，Ｉｎｆｕｓｉｏｎｓｔｈｅｒ  Ｋｌｉｎ  Ｅｒｎａｈｒ，１９８７  Ａｐｒ；１４（２）：７３−７７．
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Ｗａｒｒｅｌｌ  ＲＰ  Ｊｒ，ａｎｄ  Ｂｅｒｍａｎ  Ｅ，Ｐｈａｓｅ  Ｉ  ａｎｄ  ＩＩ  ｓｔｕｄｙ  ｏｆ  ｆｌｕｄａｒａｂｉｎｅ  ｐｈｏｓｐｈａｔｅ  ｉｎ  ｌｅｕｋｅｍｉａ：ｅｆｆｉｃａｃｙ  ｗｉｔｈ  ｄｅｌａｙｅｄ  ｃｅｎｔｒａｌ  ｎｅｒｖｏｕｓ  ｓｙｓｔｅｍ  ｔｏｘｉｃｉｔｙ．Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｏｎｃｏｌ，１９８６  Ｊａｎ；４（１）：７４−７９．
Ｗｏｏｄｃｏｃｋ  ＴＭ，Ｃｈｏｕ  ＴＣ，Ｔａｎ  ＣＴＣ，ｅｔ  ａｌ．１９８０．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ，ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ，ａｎｄ  ｐｈａｓｅ  Ｉ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｐｓｅｕｄｏｉｓｏｃｙｔｉｄｉｎｅ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．；４０：４２４２．
【０２６８】
本出願は以下の発明を含み得る。
（１）
化合物の薬学的に許容されうる塩であって、式（Ｉ）
Ａ−Ｄ・Ｙ  （Ｉ）
式中、
Ａは、側鎖上に、カルボキシル基、アミノ基、スルフィドリル基およびヒドロキシル基からなる群より選択される、少なくとも１つの官能基を含むアミノ酸を示し；
Ｄは、細胞傷害性剤、細胞分裂停止剤および化学療法剤からなる群より選択される薬剤の残基を示し、ここでＤは、Ａの側鎖官能基を通じてＡに付着され；そして
Ｙは、酢酸、塩酸、メタンスルホン酸、リン酸、クエン酸、乳酸、コハク酸、酒石酸、ホウ酸、安息香酸、トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、アスコルビン酸、硫酸、マレイン酸、ギ酸、マロン酸、ニコチン酸およびシュウ酸からなる群より選択される、薬学的に許容されうる有機または無機酸または酸の残基である
の構造によって示される、前記塩。
（２）
アミノ酸（Ａ）がα−アミノ酸（ＤまたはＬ）、β−アミノ酸、γ−アミノ酸、δ−アミノ酸またはε−アミノ酸である、（１）記載の薬学的に許容されうる塩。
（３）
アミノ酸（Ａ）が、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ）、アスパラギン（Ａｓｎ）、グルタミン（Ｇｌｎ）、α−アミノアジピン酸（Ａａｄ）、α−アミノピメリン酸、γ−カルボキシ−グルタミン酸、γ−ヒドロキシ−グルタミン酸、アミノグリシン、アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）、アルギニン（Ａｒｇ）、シトルリン（Ｃｉｔ）、システイン（Ｃｙｓ）、シスチン、ジアミノブタン酸、ジアミノ酪酸（Ｄａｂ）、ジアミノプロピオン酸（Ｄｐｒ）、ジヒドロキシフェニルアラニン、ジメチルアルギニン、ピログルタミン酸（ｐ−Ｇｌｕ）、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、１−メチル−ヒスチジン、３−メチル−ヒスチジン、ホモセリン（Ｈｓｅ）、ホモシトルリン、ヒドロキシプロリン（Ｈｙｐ）、リジン（Ｌｙｓ）、メチル−リジン、ジメチルリジン、トリメチルリジン、アジドリジン、メチオニン（Ｍｅｔ）、メチオニンスルホキシド、メチオニンスルホン、オルニチン（Ｏｒｎ）、ザルコシン（Ｓａｒ）、セレノシステイン（Ｓｅｃ）、セリン（Ｓｅｒ）、ホスホル−セリン、メチル−セリン、アミノセリン（Ａｍｓ）、チエニルアラニン（Ｔｈｉ）、スレオニン（Ｔｈｒ）、ホスホ−スレオニン、トリプトファン（Ｔｒｐ）、チロシン（Ｔｙｒ）、メチル−チロシン、ホスホル−チロシン、スルホ−チロシン、α−アミノスベリン酸、３，５−ジヨードチロシン、ペニシラミン（Ｐｅｎ）、４−エチルアミンフェニルグリシン、４−アミノフェニルグリシン、４−スルホフェニルアラニン、４−アミノフェニルアラニンおよび２−アミノ−４［４−（２−アミノ）−ピリミジニル］ブタン酸、３−アミノプロピオン酸、６−アミノヘキサン酸（ε−Ａｈｘ）、ｐ−アミノ安息香酸、イソニペコチン酸、スタチン（Ｓｔａ）、２−アミノ酪酸（Ａｂｕ）および４−アミノ酪酸、ならびにその誘導体および類似体からなる群より選択される、（２）記載の薬学的に許容されうる塩。
（４）
アミノ酸（Ａ）が、アスパラギン酸、グルタミン酸、アスパラギン、グルタミン、ならびにその誘導体および類似体からなる群より選択される、（２）記載の薬学的に許容されうる塩。
（５）
アミノ酸（Ａ）がアスパラギン酸である、（４）記載の薬学的に許容されうる塩。
（６）
アミノ酸（Ａ）がグルタミン酸である、（４）記載の薬学的に許容されうる塩。
（７）
細胞傷害性剤、細胞分裂停止剤または化学療法剤Ｄが、ピリミジン類似体、プリン類似体、葉酸代謝拮抗剤、ヒドロキシ尿素、微小管阻害剤、アルキル化剤、抗腫瘍抗生物質、トポイソメラーゼターゲティング剤、代謝拮抗剤、ＤＮＡ結合剤およびＤＮＡアンタゴニストからなる群より選択される薬剤の残基である、（１）記載の薬学的に許容されうる塩。
（８）
細胞傷害性剤、細胞分裂停止剤または化学療法剤Ｄが、シトシンアラビノシド（シタラビン）、ゲムシタビン、フルオロウラシル、５−フルオロデオキシウリジン、フトラフール（ｆｔｏｒａｆｕｒｅ）、カペシタビン、カルモフール、ＢＯＦ−Ａ２、５−クロロ−２，４−ジヒドロキシピリジン、デシタビン、レフルノミド、トリフルリジン、ヨードクスウリジン、ジドブジン、テルビブジン、トリメトプリム、フルオロシトシン、デオキシチミジンおよび５−アミノ−６−ニトロウラシルからなる群より選択されるピリミジン類似体の残基である、（７）記載の薬学的に許容されうる塩。
（９）
細胞傷害性剤、細胞分裂停止剤または化学療法剤Ｄが、シタラビンの残基である、（８）記載の薬学的に許容されうる塩。
（１０）
細胞傷害性剤、細胞分裂停止剤または化学療法剤Ｄが、ゲムシタビンの残基である、（８）記載の薬学的に許容されうる塩。
（１１）
細胞傷害性剤、細胞分裂停止剤または化学療法剤Ｄが、クロファラビン、デカルバジン、クラドリビン、メルカプトプリン、ネララビン、ペントスタチン、チオグアニン、ゲフィチニブ、アザチオプリン、ニタゾキサニド、ビダラビン、ノボビオシン、ガンシクロビル、リバビリン、ペンシクロビル、エンテカビル、８−アザグアニン、イミュシリン−Ｇ、２−フルオロ−２’−デオキシアデノシン、９−ベータ−Ｄ−キシロフラノシル−アデニン、３−デオキシ（ｄｅｘｏｘｙ）グアニン、６−メチル−ホルミシンＡ、２−フルオロアデノシン、ツベルシジン、１−デアザ−アデノシン、Ｎ−エチル−５−カルボキシアミド−アデノシン、３’−オキソ−アデノシン、２−アミノ−アデノシン、６−Ｏ−シクロメチル−グアニン、フルダラビン、および８−ヨード−グアニンからなる群より選択されるプリン類似体の残基である、（７）記載の薬学的に許容されうる塩。
（１２）
細胞傷害性剤、細胞分裂停止剤または化学療法剤Ｄが、２，４−ジオキソ−５−フルオロピリミジン（５−ＦＵ）、フルオロデオキシウリジン（５−ＦＵＤＲ）、アザシチジン（５−ＡＺＣ）、６−メルカプトプリン（６−ＭＰ）、６−チオグアニン（６−ＴＧ）、クロロデオキシアデノシン（２−ＣＤＡ）およびペントスタチン（ｄＣＦ）からなる群より選択される薬剤の残基である、（７）記載の薬学的に許容されうる塩。
（１３）
アミノ酸（Ａ）がアスパラギン酸およびグルタミン酸からなる群より選択され、化合物が式（ＩＩ）または（ＩＩＩ）
【化３０】
2022000463.tif 000037
式中、ＤおよびＹは（１）に定義される通りである
の構造によって示される、（１）記載の薬学的に許容されうる塩。
（１４）
Ａがアスパラギン酸であり、Ｄがシタラビンの残基であり、化合物が式（１）：
【化３１】
2022000463.tif 000038
の構造によって示される、（１３）記載の薬学的に許容されうる塩。
（１５）
式（ＩＡ）：
【化３２】
2022000463.tif 000039
の構造によって示される、（１４）記載の薬学的に許容されうる塩。
（１６）
式（ＩＢ）：
【化３３】
2022000463.tif 000040
の構造によって示される、（１４）記載の薬学的に許容されうる塩。
（１７）
Ａがアスパラギン酸であり、Ｄがゲムシタビンの残基であり、塩が式（２）：
【化３４】
2022000463.tif 000041
の構造によって示される、（１３）記載の薬学的に許容されうる塩。
（１８）
Ａがグルタミン酸であり、Ｄがシタラビンの残基であり、塩が式（３）：
【化３５】
2022000463.tif 000042
の構造によって示される、（１３）記載の薬学的に許容されうる塩。
（１９）
Ａがグルタミン酸であり、Ｄがゲムシタビンの残基であり、化合物が式（４）：
【化３６】
2022000463.tif 000043
の構造によって示される、（１３）記載の薬学的に許容されうる塩。
（２０）
Ｙが、酢酸、塩酸、メタンスルホン酸、リン酸、クエン酸、乳酸、コハク酸、酒石酸、ホウ酸、安息香酸、トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、アスコルビン酸、硫酸、マレイン酸、ギ酸、マロン酸、ニコチン酸およびシュウ酸からなる群より選択される薬学的に許容されうる酸である、（１）〜（１９）のいずれか一項記載の薬学的に許容されうる塩。
（２１）
Ｙが酢酸である、（２０）記載の薬学的に許容されうる塩。
（２２）
Ｙが塩酸である、（２０）記載の薬学的に許容されうる塩。
（２３）
塩が、酢酸塩、塩酸塩、メタンスルホン酸塩、リン酸塩、クエン酸塩、乳酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、ホウ酸塩、安息香酸塩、トルエンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、アスコルビン酸塩、硫酸塩、マレイン酸塩、ギ酸塩、マロン酸塩、ニコチン酸塩およびシュウ酸塩からなる群より選択される、（１）〜（１９）のいずれか一項記載の薬学的に許容されうる塩。
（２４）
塩が酢酸塩である、（２３）記載の薬学的に許容されうる塩。
（２５）
塩が塩酸塩である、（２３）記載の薬学的に許容されうる塩。
（２６）
不純物として、約５％またはそれ未満、好ましくは約１％またはそれ未満、そしてより好ましくは約０．１％またはそれ未満のトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）を含有する、先行するいずれか一項記載の薬学的に許容されうる塩。
（２７）
不純物として、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）を含まない、先行するいずれか一項記載の薬学的に許容されうる塩。
（２８）
活性成分として、先行するいずれか一項記載の薬学的に許容されうる塩および薬学的に許容されうる賦形剤を含む、薬学的組成物。
（２９）
転移、あるいは前癌状態または障害を含む癌を治療する方法であって、治療が必要な被験体に、療法的に有効な量の（１）〜（２７）のいずれか一項記載の薬学的に許容されうる塩、または（２８）記載の薬学的組成物を投与する工程を含む、前記方法。
（３０）
転移、あるいは前癌状態または障害を含む癌の治療に使用するための、（１）〜（２７）のいずれか一項記載の薬学的に許容されうる塩、または（２８）記載の薬学的組成物。
（３１）
癌が、非固形腫瘍または固形腫瘍またはその組み合わせによって特徴付けられる、（２９）記載の方法、または（３０）記載の薬学的に許容されうる塩。
（３２）
癌が、白血病、リンパ腫および多発性骨髄腫からなる群より選択される非固形腫瘍によって特徴付けられる、好ましくは、癌が、各々、難治性／再発性でありうるか、または新規に診断されうる、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）および急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）からなる群より選択される白血病である、（２９）記載の方法、または（３０）記載の薬学的に許容されうる塩。
（３３）
癌が血液学的癌である、（２９）記載の方法、または（３０）記載の薬学的に許容されうる塩。
（３４）
癌が、中枢神経系（ＣＮＳ）の腫瘍、肝臓癌、結腸直腸癌、乳癌、胃癌、膵臓癌、膀胱癌、子宮頸癌、頭頸部腫瘍、外陰部癌、ならびに黒色腫、扁平上皮癌および基底細胞癌を含む皮膚科学的新生物からなる群より選択される固形腫瘍によって特徴付けられる、（２９）記載の方法、または（３０）記載の薬学的に許容されうる塩。
（３５）
前癌状態または障害が、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）である、（２９）記載の方法、または（３０）記載の薬学的に許容されうる塩。
（３６）
被験体がヒトである、請求項（２９）〜（３５）のいずれか一項記載の方法または薬学的に許容されうる塩。
（３７）
骨髄移植の候補者である個体を治療する方法であって、移植の前に、前記個体を、（１）〜（２７）のいずれか一項記載の薬学的に許容されうる塩、または（２８）記載の薬学的組成物で前治療する工程を含む、前記方法。
（３８）
骨髄移植前の前治療に使用するための、（１）〜（２７）のいずれか一項記載の薬学的に許容されうる塩、または（２８）記載の薬学的組成物。
（３９）
（１）記載の薬学的に許容されうる塩を調製するためのプロセスであって
（ａ）式（ＩＶ）：
（Ａ−Ｄ）−（Ｐ）ｎ    （ＩＶ）
式中、ＡおよびＤは（１）に定義する通りであり；
ｎは１〜６の整数であり；そして
各Ｐは、各出現に際して、独立に、保護基であり；各Ｐはアミノ酸（Ａ）、薬剤残基（Ｄ）またはアミノ酸（Ａ）および薬剤残基（Ｄ）の両方の保護のため、利用可能な任意の官能基に付着する
の化合物と
保護基（単数または複数）Ｐを除去可能な試薬を反応させる工程；および
（ｂ）式：
Ａ−Ｄ・Ｙ    （Ｉ）
式中、Ｙは（１）に定義する通りである
によって示される塩が生成されるように、基Ｙを導入可能な試薬を添加する工程
を含む、前記プロセス。
（４０）
一工程で、保護基（単数または複数）Ｐが除去され、そして基Ｙが導入されるように、保護基（単数または複数）Ｐを除去可能な試薬が、基Ｙを導入可能な試薬と同じである、（３９）記載のプロセス。
（４１）
一工程で、保護基（単数または複数）Ｐが除去され、そして基Ｙが導入されるように、式（ＩＶ）の化合物を酸（Ｙ）と反応させる工程を含む、（４０）記載のプロセス。
（４２）
式（ＩＩ）の化合物を調製するためのプロセスであって：
（ａ）式（ｉ）の化合物を、式Ｄの薬剤と、または式Ｄ−（Ｐ３）ｎのその保護された誘導体と、カップリング試薬の存在下でカップリングして、式（ｉｉ）の中間体を得る工程；および
（ｂ）式（ＩＩ）によって示される塩が生成されるように、保護基Ｐ１、Ｐ２およびＰ３（存在する場合）を、酸（Ｙ）で、または脱保護剤の後、酸（Ｙ）で、除去する工程
【化３７】
2022000463.tif 000044
式中、Ｐ１はカルボキシ保護基であり、Ｐ２はアミノ保護基であり、Ｐ３は薬剤Ｄ上の１またはそれより多い官能基上に位置する保護基であり、そしてｎは０、１、２または３である
を含む、前記プロセス。
（４３）
式（ＩＩＩ）の化合物を調製するためのプロセスであって：
（ａ）式（ｉｉｉ）の化合物を、式Ｄの薬剤と、または式Ｄ−（Ｐ３）ｎのその保護された誘導体と、カップリング試薬の存在下でカップリングして、式（ｉｖ）の中間体を得る工程；および
（ｂ）式（ＩＩ）によって示される塩が生成されるように、保護基Ｐ１、Ｐ２およびＰ３（存在する場合）を、酸（Ｙ）で、または脱保護基の後、酸（Ｙ）で、除去する工程
【化３８】
2022000463.tif 000045
式中、Ｐ１はカルボキシ保護基であり、Ｐ２はアミノ保護基であり、Ｐ３は薬剤Ｄ上の１またはそれより多い官能基上に位置する保護基であり、そしてｎは０、１、２または３である
を含む、前記プロセス。
（４４）
Ｄがシタラビンまたはその残基である、（４２）または（４３）記載のプロセス。
（４５）
Ｄがゲムシタビンまたはその残基である、（４２）または（４３）記載のプロセス。
（４６）
Ｐ３が、シタラビンの２’、３’および／または５’−ＯＨ部分上、あるいはゲムシタビンの３’および／または５’−ＯＨ部分上に位置するヒドロキシル保護基である、（４４）または（４５）記載のプロセス。
【図１】
2022000463.tif 000054
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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