(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
化合物１および１個だけのトリグリセリドの共結晶を含む医薬組成物であって、ここで、トリグリセリドがグリセリルトリオレアート、グリセリルトリステアレート、グリセロールトリデカノエート、グリセロールトリヘキサノエート、グリセリルトリトリデカノエート、グリセロールトリオクタノエート、グリセリルトリミリステート、グリセリルトリパルミテート、グリセリルトリブチレート、グリセリルトリリノレアート、グリセリルトリドデカノエート、グリセリルデカノアート、グリセリルパルミトオレアート、グリセロールトリエルケート、グリセリルトリプロピオネート、パルミトジオレイン、トリアラキドニン、グリセリルトリリノレネート、トリエルシン、グリセロールトリアラキデート、グリセリルトリ(ｃｉｓ−１３−ドコセノエート)、グリセリルトリペトロセリネート、グリセリルトリベヘネート、グリセリルトリエライデートおよびトリアセチンから選択され、化合物１が次の構造式
【化１】
0006746569.tif 000098
で表されるものであり、経口投与用固体形態に製剤化されている、医薬組成物。
【請求項２】
トリグリセリドがグリセロールトリオクタノエート、グリセリルトリオレアート、グリセリルトリリノレアート、グリセリルトリステアレート、グリセリルトリパルミテート、グリセリルトリドデカノエート、グリセリルトリミリステートおよびグリセロールトリデカノエートから選択され、共結晶が２シータ±０.２度で表して、３.５、６.９および１０.９の位置に特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
トリグリセリドがグリセロールトリオクタノエート、グリセリルトリオレアート、グリセリルトリリノレアート、グリセリルトリステアレート、グリセリルトリパルミテート、グリセリルトリドデカノエートおよびグリセロールトリデカノエートから選択され、共結晶が２シータ±０.２度で表して、３.５、６.９、９.２、１０.９、１６.９、１８.０および２３.８の位置に特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項４】
トリグリセリドがグリセロールトリオクタノエート、グリセリルトリオレアート、グリセリルトリリノレアート、グリセリルトリステアレートおよびグリセロールトリデカノエートから選択され、共結晶がppm±０.１で表して、１７８.６、１５５.０および１１９.４の位置に特徴的ピークを有する１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルを有するとして特徴付けられる、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項５】
トリグリセリドがグリセロールトリオレアートおよびグリセリルトリリノレアートから選択され、共結晶がppm±０.１で表して、１７８.６、１５５.０、１３０.５および１１９.４の位置に特徴的ピークを有する１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルを有するとして特徴付けられる、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項６】
共結晶における化合物１対トリグリセリドの化学量論比が３：１である、請求項１〜５のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項７】
共結晶における化合物１対トリグリセリドの化学量論比が６：１である、請求項１〜５のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項８】
化合物１が共結晶において六量体を形成し、さらにトリグリセリドがグリセリルトリオレアート、グリセリルトリステアレート、グリセロールトリデカノエート、グリセロールトリヘキサノエート、グリセリルトリトリデカノエート、グリセロールトリオクタノエート、グリセリルトリミリステート、グリセリルトリパルミテート、グリセリルトリブチレート、グリセリルトリリノレアート、グリセリルトリドデカノエート、グリセリルデカノアート、グリセリルパルミトオレアート、グリセロールトリエルケート、グリセリルトリプロピオネート、パルミトジオレイン、トリアラキドニン、グリセリルトリリノレネート、トリエルシン、グリセロールトリアラキデート、グリセリルトリ(ｃｉｓ−１３−ドコセノエート)、グリセリルトリペトロセリネート、グリセリルトリベヘネート、グリセリルトリエライデートおよびトリアセチンから選択される、請求項１〜７のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項９】
共結晶が喫食時人工腸液(ＦｅＳＳＩＦ)に溶解して０.４mg／mLを超える化合物１の濃度を与え、該濃度が少なくとも１０時間維持される、請求項１〜８のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１０】
治療有効量の化合物１および薬学的に許容される担体または添加物を含む医薬組成物であって、化合物１が次の構造式
【化２】
0006746569.tif 000099
により表され、さらに、化合物１の少なくとも３０％が化合物１とトリグリセリドを含む共結晶として存在し、トリグリセリドがグリセリルトリオレアート、グリセリルトリステアレート、グリセロールトリデカノエート、グリセロールトリヘキサノエート、グリセリルトリトリデカノエート、グリセロールトリオクタノエート、グリセリルトリミリステート、グリセリルトリパルミテート、グリセリルトリブチレート、グリセリルトリリノレアート、グリセリルトリドデカノエート、グリセリルデカノアート、グリセリルパルミトオレアート、グリセロールトリエルケート、グリセリルトリプロピオネート、パルミトジオレイン、トリアラキドニン、グリセリルトリリノレネート、トリエルシン、グリセロールトリアラキデート、グリセリルトリ(ｃｉｓ−１３−ドコセノエート)、グリセリルトリペトロセリネート、グリセリルトリベヘネート、グリセリルトリエライデートおよびトリアセチンから選択されるものであり、経口投与用固体形態に製剤化されている、医薬組成物。
【請求項１１】
さらに粘液溶解剤、気管支拡張剤、抗生物質、抗感染剤、抗炎症剤、化合物１以外のＣＦＴＲモジュレーターまたは栄養剤またはこれらの組み合わせから選択されるさらなる治療剤を含む、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
さらなる治療剤が化合物１以外のＣＦＴＲモジュレーターである、請求項１１に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
ＣＦＴＲモジュレーターが(３−(６−(１−(２,２−ジフルオロベンゾ[ｄ][１,３]ジオキソール−５−イル)シクロプロパンカルボキサミド)−３−メチルピリジン−２−イル)安息香酸または(Ｒ)−１−(２,２−ジフルオロベンゾ[ｄ][１,３]ジオキソール−５−イル)−Ｎ−(１−(２,３−ジヒドロキシプロピル)−６−フルオロ−２−(１−ヒドロキシ−２−メチルプロパン−２−イル)−１Ｈ−インドール−５−イル)シクロプロパンカルボキサミドである、請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
患者における疾患を処置するまたは重症度を軽減するために使用する、請求項１〜１３のいずれかに記載の医薬組成物であって、該疾患が嚢胞性線維症、遺伝性気腫、ＣＯＰＤまたはドライアイ疾患から選択される、医薬組成物。
【請求項１５】
疾患が嚢胞性線維症である、請求項１４に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
１以上のさらなる治療剤と共投与される、請求項１４または１５に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
１以上のさらなる治療剤が(３−(６−(１−(２,２−ジフルオロベンゾ[ｄ][１,３]ジオキソール−５−イル)シクロプロパンカルボキサミド)−３−メチルピリジン−２−イル)安息香酸または(Ｒ)−１−(２,２−ジフルオロベンゾ[ｄ][１,３]ジオキソール−５−イル)−Ｎ−(１−(２,３−ジヒドロキシプロピル)−６−フルオロ−２−(１−ヒドロキシ−２−メチルプロパン−２−イル)−１Ｈ−インドール−５−イル)シクロプロパンカルボキサミドを含む、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
１以上のさらなる治療剤を、医薬組成物と同時に、前にまたは後に投与する、請求項１６または１７に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
化合物１とトリグリセリドを含む共結晶を製造する方法であって、
ここで、化合物１は次の構造式
【化３】
0006746569.tif 000100
により表され、トリグリセリドはグリセリルトリオレアート、グリセリルトリステアレート、グリセロールトリデカノエート、グリセロールトリヘキサノエート、グリセリルトリトリデカノエート、グリセロールトリオクタノエート、グリセリルトリミリステート、グリセリルトリパルミテート、グリセリルトリブチレート、グリセリルトリリノレアート、グリセリルトリドデカノエート、グリセリルデカノアート、グリセリルパルミトオレアート、グリセロールトリエルケート、グリセリルトリプロピオネート、パルミトジオレイン、トリアラキドニン、グリセリルトリリノレネート、トリエルシン、グリセロールトリアラキデート、グリセリルトリ(ｃｉｓ−１３−ドコセノエート)、グリセリルトリペトロセリネート、グリセリルトリベヘネート、グリセリルトリエライデートおよびトリアセチンから選択され；
(ａ)化合物１とトリグリセリドを含む混合物を調製し；そして
(ｂ)混合物を加熱する
工程を含む、方法。
【請求項２０】
経口投与用に製剤化されている固体がカプセル剤、錠剤、丸剤、散剤または顆粒である、請求項１〜１３のいずれかに記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、引用によりその全体を本明細書に包含させる、米国仮出願６２／０６０,８２８号(２０１４年１０月７日出願)に対する優先権を主張する。
【０００２】
技術分野
本発明は、一般に、Ｎ−[２,４−ビス(１,１−ジメチルエチル)−５−ヒドロキシフェニル]−１,４−ジヒドロ−４−オキソキノリン−３−カルボキサミド(化合物１)の共結晶、その医薬組成物およびさらに方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
背景
嚢胞性線維症(ＣＦ)は、米国で約３０,０００名の小児および成人に、そして欧州で約３０,０００名の小児および成人に影響する劣性遺伝子疾患である。ＣＦの処置が進歩しているにも関わらず、治癒はない。
【０００４】
ＣＦは、種々の組織における塩および水の吸収と分泌の制御の補助を担う、上皮性塩素イオンチャネルをコードする嚢胞性線維症膜貫通コンダクタンス制御因子(ＣＦＴＲ)遺伝子における変異が原因である。ＣＦＴＲチャネル開口の確率を上げる増強剤として知られる小分子薬物は、ＣＦを処置する一つの可能性のある治療戦略である。このタイプの増強剤は、引用によりその全体を本明細書に包含させるＷＯ２００６／００２４２１号に開示されている。他の可能性のある治療戦略は、ＣＦＴＲチャネルの数および機能を増加させるＣＦ補正因子として知られる小分子薬物を含む。このタイプの補正因子は、引用によりその全体を本明細書に包含させるＷＯ２００５／０７５４３５号に開示される。
【０００５】
特に、ＣＦＴＲは、膜を超えるアニオン流動ならびに他のイオンチャネルおよびタンパク質の活性を制御する、吸収性および分泌性上皮細胞を含む多様な細胞型に発現されるｃＡＭＰ／ＡＴＰ介在アニオンチャネルである。上皮細胞において、ＣＦＴＲの正常機能は、呼吸組織および消化組織を含む、体内の電解質輸送の維持に重要である。ＣＦＴＲは、各々６膜貫通ヘリックスおよびヌクレオチド結合ドメインを含む、膜貫通ドメインのタンデム反復からなるタンパク質をコードする約１４８０アミノ酸からなる。２膜貫通ドメインは、チャネル活性および細胞輸送を制御する複数リン酸化部位を有する、大きな、極性、制御性(Ｒ)ドメインにより連結される。
【０００６】
ＣＦＴＲをコードする遺伝子は、同定され、配列決定されている(Gregory, R. J. et al. (1990) Nature 347:382-386; Rich, D. P. et al. (1990) Nature 347:358-362, Riordan, J. R. et al. (1989) Science 245:1066-1073参照)。この遺伝子における欠損が、ヒトにおける最も一般的な致死的遺伝子疾患である嚢胞性線維症(“ＣＦ”)を引き起こす、ＣＦＴＲにおける変異の原因である。嚢胞性線維症は、米国で乳児約２,５００名あたり１名が発症する。米国の一般集団において、最大１０００万名が、明らかな病的影響なしに、欠損遺伝子の単一コピーを担持する。対照的に、ＣＦ関連遺伝子の２コピーを有する個体は、慢性肺疾患を含む、ＣＦの衰弱性かつ致死的な影響に苦しむ。
【０００７】
ＣＦを有する患者において、呼吸器上皮に内因性に発現されるＣＦＴＲにおける変異が、頂端アニオン分泌を減少させ、イオンおよび流体輸送のアンバランスを引き起こす。結果として生じるアニオン輸送減少は、肺の粘液蓄積と、ＣＦ患者の最終的な死亡原因である随伴する微生物感染の増加に貢献する。呼吸器疾患に加えて、ＣＦ患者は、一般に消化器問題および膵臓機能不全を有し、未処置のままだと、死に至る。さらに、嚢胞性線維症を有する男性の大部分は不妊であり、嚢胞性線維症を有する女性の受胎能力は低い。ＣＦ関連遺伝子の２コピーの重篤な影響とは対照的に、１コピーのＣＦ関連遺伝子を有する個体は、コレラにおよび下痢に起因する脱水に対する抵抗性の増加を示す  −  おそらく、人口におけるＣＦ遺伝子の比較的高い頻度を説明する。
【０００８】
ＣＦ染色体のＣＦＴＲ遺伝子の配列分析は、多様な疾患原因変異を確認している(Cutting, G. R. et al. (1990) Nature 346:366-369; Dean, M. et al. (1990) Cell 61:863:870; and Kerem, B-S. et al. (1989) Science 245:1073-1080; Kerem, B-S et al. (1990) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87:8447-8451)。今日まで、ＣＦ遺伝子における１０００を超える疾患原因変異が同定されている(http://www.genet.sickkids.on.ca/cftr/app)。最も優勢な変異は、ＣＦＴＲアミノ酸配列の５０８位のフェニルアラニン欠失であり、一般にΔＦ５０８−ＣＦＴＲと呼ばれる。この変異は、嚢胞性線維症例の約７０％で生じ、重篤な疾患と関連する。
【０００９】
ΔＦ５０８−ＣＦＴＲにおける残基５０８の欠失は、新生タンパク質が正しく折りたたまれることを阻害する。これは、変異体タンパク質がＥＲを出て、原形質膜に輸送されることを不可能とする。その結果、膜に存在するチャネル数は、野生型ＣＦＴＲを発現する細胞で見られるよりはるかに少なくなる。障害された輸送に加えて、本変異は、不完全チャネルゲーティングをもたらす。合わせて、膜におけるチャネル減少および欠損ゲーティングは、不完全イオンおよび流体輸送を生じる上皮を通過するアニオン輸送の減少に至る(Quinton, P. M. (1990), FASEB J. 4: 2709-2727)。しかしながら、研究により、膜における減少した数の△Ｆ５０８−ＣＦＴＲが、野生型ＣＦＴＲより低いが、機能的であることが示されている(Dalemans et al. (1991), Nature Lond. 354: 526-528; Denning et al., supra; Pasyk and Foskett (1995), J. Cell. Biochem. 270: 12347-50)。ΔＦ５０８−ＣＦＴＲに加えて、ＣＦＴＲにおける不完全輸送、合成および／またはチャネルゲーティングをもたらす他の疾患原因変異が、上方または下方制御され、アニオン分泌を変え、疾患進行および／または重症度を修飾する。
【００１０】
ＣＦＴＲは、アニオンに加えて多様な分子を輸送するが、この役割(アニオンの輸送)が、上皮を通過するイオンおよび水の輸送の重要な機構における１要素を表すことは明らかである。他の要素は、クロライドの細胞への取り込みを担う、上皮性Ｎａ＋チャネル(ＥＮａＣ)、Ｎａ＋／２Ｃｌ−／Ｋ＋共輸送体、Ｎａ＋−Ｋ＋−ＡＴＰａｓｅポンプおよび基底膜Ｋ＋チャネルを含む。
【００１１】
これらの要素は、一体となって働き、細胞内の選択的発現および局在化を経て上皮を貫通する指向性輸送を達成する。クロライド吸収は、頂端膜に存在するＥＮａＣとＣＦＴＲおよび細胞の側底表面に発現されるＮａ＋−Ｋ＋−ＡＴＰａｓｅポンプとＣｌ−チャネルの協調的活性により起こる。管腔側からのクロライドの二次的能動的輸送は細胞内クロライドの蓄積をもたらし、次いで、これが、細胞から受動的にＣｌ−チャネルを経て離れ、指向性輸送をもたらし得る。基底表面のＮａ＋／２Ｃｌ−／Ｋ＋共輸送体、Ｎａ＋−Ｋ＋−ＡＴＰａｓｅポンプおよび基底膜Ｋ＋チャネルと管腔側のＣＦＴＲの配置が、管腔側のＣＦＴＲを経るクロライドの分泌に協調する。水は、それ自体受動的に輸送されることはおそらくないため、上皮を超えるその輸送は、ナトリウムおよびクロライドの総体流により産生される、小さい経上皮性浸透圧勾配による。
【００１２】
上記のように、ΔＦ５０８−ＣＦＴＲにおける残基５０８の欠損は、新生タンパク質が正しく折りたたまれることを阻害し、この変異体タンパク質がＥＲを出て、原形質膜に輸送されることを不可能とする。その結果、原形質膜に存在する成熟タンパク質の量は不十分であり、上皮性組織におけるクロライド輸送が顕著に低下する。実際、ＥＲ機構によるＡＢＣ輸送体のＥＲ処理欠損のこの細胞現象は、ＣＦ疾患だけでなく、広範な他の孤立性および遺伝性疾患の根底であることが示されている。
【００１３】
Ｎ−[２,４−ビス(１,１−ジメチルエチル)−５−ヒドロキシフェニル]−１,４−ジヒドロ−４−オキソキノリン−３−カルボキサミド(化合物１)は、ヒトＣＦＴＲの野生型および変異体(例えば、ΔＦ５０８  ＣＦＴＲ、Ｒ１１７Ｈ  ＣＦＴＲ、Ｇ５５１Ｄ  ＣＦＴＲ、Ｇ１７８Ｒ  ＣＦＴＲ、Ｓ５４９Ｎ  ＣＦＴＲ、Ｓ５４９Ｒ  ＣＦＴＲ、Ｇ５５１Ｓ  ＣＦＴＲ、Ｇ９７０Ｒ  ＣＦＴＲ、Ｇ１２４４Ｅ  ＣＦＴＲ、Ｓ１２５１Ｎ  ＣＦＴＲ、Ｓ１２５５Ｐ  ＣＦＴＲおよびＧ１３４９Ｄ  ＣＦＴＲを含むが、これらに限定されない)形態の強力かつ選択的ＣＦＴＲ増強剤である。Ｎ−[２,４−ビス(１,１−ジメチルエチル)−５−ヒドロキシフェニル]−１,４−ジヒドロ−４−オキソキノリン−３−カルボキサミドは、嚢胞性線維症を有するかつＣＦＴＲ遺伝子における次のＧ５５１Ｄ  ＣＦＴＲ、Ｇ１２４４Ｅ  ＣＦＴＲ、Ｇ１３４９Ｄ  ＣＦＴＲ、Ｇ１７８Ｒ  ＣＦＴＲ、Ｇ５５１Ｓ  ＣＦＴＲ、Ｓ１２５１Ｎ  ＣＦＴＲ、Ｓ１２５５Ｐ  ＣＦＴＲ、Ｓ５４９Ｎ  ＣＦＴＲ、Ｓ５４９Ｒ  ＣＦＴＲまたはＲ１１７Ｈ  ＣＦＴＲの変異の一つを有する６歳以上の患者の処置に有用である。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
従って、Ｎ−[２,４−ビス(１,１−ジメチルエチル)−５−ヒドロキシフェニル]−１,４−ジヒドロ−４−オキソキノリン−３−カルボキサミドの共結晶を含む、容易に製造できる化合物１の安定な生物学的に利用可能な形態およびその医薬組成物が、ＣＦを有する患者の処置のための製品および／または方法の開発に有用であり得る。
【００１５】
ある面において、本発明は、化合物１と共形成剤を含む共結晶を提供し、ここで、化合物１は次の式
【化１】
0006746569.tif 000002
により表され、共形成剤は、次の構造式
【化２】
0006746569.tif 000003
〔式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、独立してＣ１−２９脂肪族である。〕
から選択される。
【００１６】
ある態様において、共結晶は単離される。
【００１７】
ある態様において、共結晶において、化合物１対共形成剤の化学量論比は、２：１〜６：１の範囲である。
【００１８】
ある態様において、共結晶における化合物１対共形成剤の化学量論比は、６：１である。
【００１９】
ある態様において、共結晶における化合物１対共形成剤の化学量論比は、約６：約１である。
【００２０】
ある態様において、共結晶における化合物１対共形成剤の化学量論比は、３：１である。
【００２１】
ある態様において、共結晶における化合物１対共形成剤の化学量論比は、約３：約１である。
【００２２】
ある態様において、化合物１は、共結晶において六量体超分子(六量体)を形成し、ここで、六量体の各々は、図１に示すように、水素結合により結合された６分子の化合物１を含む。
【００２３】
ある態様において、共結晶は、喫食時人工腸液(ＦｅＳＳＩＦ)に溶解したとき、０.４mg／mLを超える化合物１の濃度をもたらすことができる。
【００２４】
ある態様において、共結晶は、喫食時人工腸液(ＦｅＳＳＩＦ)に溶解したとき、０.４mg／mLを超える化合物１の濃度をもたらすことができ、この濃度は少なくとも１０時間維持される。
【００２５】
ある態様において、共結晶は、２シータ±０.２度で表して、次の３.５、６.９および１０.９の位置に特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。
【００２６】
さらにある態様において、共結晶は、ppm±０.１で表して、次の１７８.６、１５５.０および１１９.４の位置に特徴的ピークを有する１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルを有するとして特徴付けられる。
【００２７】
他のある態様において、共結晶は、ppm±０.１で表して、次の１７８.６、１５５.０、１３０.５および１１９.４の位置に特徴的ピークを有する１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルを有するとして特徴付けられる。
【００２８】
本発明の他の面は、治療有効量の化合物１および薬学的に許容される担体または添加物を含む医薬組成物を提供し、ここで、化合物１の少なくとも３０％が、ここに開示する共結晶の形態で存在する。
【００２９】
ある態様において、医薬組成物は、さらに、さらなる治療剤を含む。
【００３０】
例えば、ある態様において、さらなる治療剤は、粘液溶解剤、気管支拡張剤、抗生物質、抗感染剤、抗炎症剤、化合物１以外のＣＦＴＲモジュレーターまたは栄養剤またはこれらの組み合わせから選択される。他の態様において、さらなる治療剤は化合物１以外のＣＦＴＲモジュレーターである。
【００３１】
さらなる例として、ある態様において、ＣＦＴＲモジュレーターは、(３−(６−(１−(２,２−ジフルオロベンゾ[ｄ][１,３]ジオキソール−５−イル)シクロプロパンカルボキサミド)−３−メチルピリジン−２−イル)安息香酸または(Ｒ)−１−(２,２−ジフルオロベンゾ[ｄ][１,３]ジオキソール−５−イル)−Ｎ−(１−(２,３−ジヒドロキシプロピル)−６−フルオロ−２−(１−ヒドロキシ−２−メチルプロパン−２−イル)−１Ｈ−インドール−５−イル)シクロプロパンカルボキサミドである。
【００３２】
他の面において、本発明は、患者における疾患を処置するまたは重症度を低減する方法を提供し、ここで、該疾患は、嚢胞性線維症、遺伝性気腫、ＣＯＰＤまたはドライアイ疾患から選択され、方法は、患者にここに示す共結晶のいずれかの有効量を投与する過程を含む。例えば、ある態様において、疾患は嚢胞性線維症である。
【００３３】
ある態様において、方法は、さらに、対象に１以上のさらなる治療剤を共投与することを含む。例えば、ある態様において、さらなる治療剤は、(３−(６−(１−(２,２−ジフルオロベンゾ[ｄ][１,３]ジオキソール−５−イル)シクロプロパンカルボキサミド)−３−メチルピリジン−２−イル)安息香酸または(Ｒ)−１−(２,２−ジフルオロベンゾ[ｄ][１,３]ジオキソール−５−イル)−Ｎ−(１−(２,３−ジヒドロキシプロピル)−６−フルオロ−２−(１−ヒドロキシ−２−メチルプロパン−２−イル)−１Ｈ−インドール−５−イル)シクロプロパンカルボキサミドである。他の態様において、さらなる治療剤を、共結晶と同時に、前にまたは後に投与する。
【００３４】
本発明の他の面は、化合物１と共形成剤を含む共結晶を製造する方法を提供し、ここで、化合物１は次の構造式
【化３】
0006746569.tif 000004
により表され、共形成剤は次の構造式
【化４】
0006746569.tif 000005
〔式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、独立してＣ１−２９脂肪族である。〕
から選択され、
化合物１と共形成剤を、共結晶を形成するように合わせる工程を含む。
【００３５】
本発明のある面は、化合物１と共形成剤を含む共結晶を製造する方法を提供し、ここで、化合物１は次の構造式
【化５】
0006746569.tif 000006
により表され、共形成剤は次の構造式
【化６】
0006746569.tif 000007
〔式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、独立してＣ１−２９脂肪族である。〕
から選択される。
【００３６】
本発明の他の面は、化合物１と共形成剤を含む共結晶を製造する方法を提供し、ここで、化合物１は次の構造式
【化７】
0006746569.tif 000008
により表され、共形成剤は次の構造式
【化８】
0006746569.tif 000009
〔式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、独立してＣ１−２９脂肪族である。〕
から選択され、
(ａ)化合物１と共形成剤を含む混合物を調製し；
(ｂ)混合物を８０℃に加熱する
工程を含む。
【００３７】
さらに本発明の他の面は、化合物１と共形成剤を含む共結晶を製造する方法を提供し、ここで、化合物１は次の構造式
【化９】
0006746569.tif 000010
により提供され、共形成剤は次の構造式
【化１０】
0006746569.tif 000011
〔式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、独立してＣ１−２９脂肪族である。〕
から選択され、
(ａ)化合物１と共形成剤を含む混合物を調製し；
(ｂ)混合物を、共形成剤の融点より約５〜１０℃高い温度に加熱する
工程を含む。
【００３８】
本発明のある面は、化合物１と共形成剤を含む共結晶を製造する方法を提供し、ここで、化合物１は次の構造式
【化１１】
0006746569.tif 000012
により表され、共形成剤は、次の構造式
【化１２】
0006746569.tif 000013
〔式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、独立してＣ１−２９脂肪族である。〕
から選択され；
(ａ)化合物１と共形成剤を含む混合物を調製し；
(ｂ)混合物を加熱し；
(ｃ)混合物を冷却し；そして
(ｄ)工程(ｂ)および(ｃ)を繰り返す
工程を含む。
【００３９】
本発明の他の面は、化合物１と共形成剤を含む共結晶を製造する方法を提供し、ここで、化合物１は次の構造式
【化１３】
0006746569.tif 000014
により表され、共形成剤は次の構造式
【化１４】
0006746569.tif 000015
〔式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、独立してＣ１−２９脂肪族である。〕
から選択され、
(ａ)化合物１と共形成剤を含む混合物を調製し；
(ｂ)混合物を８０℃に加熱し；
(ｃ)混合物を４０℃に冷却し；そして
(ｄ)工程(ｂ)および(ｃ)を繰り返す
工程を含む。
【００４０】
ある態様において、化合物１と共形成剤を含む混合物を、１２時間加熱する。他の態様において、化合物１と共形成剤を含む混合物を、少なくとも１２時間加熱する。ある態様において、化合物１と共形成剤を含む混合物を、２４時間加熱する。他の態様において、化合物１と共形成剤を含む混合物を、少なくとも２４時間加熱する。
【００４１】
ある態様において、化合物１：トリグリセリド共結晶のようなここに開示する共結晶は、いくつかの利点を示し得る。例えば、化合物１：トリグリセリド共結晶は、長期に亘り、化合物１の無添加(neat)非晶質および固体非晶質分散形態(化合物１  ＳＤＤ)の両者の過飽和の良好な維持を示し得る。さらなる例として、インビボで、化合物１：トリグリセリド共結晶は小腸で脂質エステラーゼ(リパーゼ)により消化され、これは、トリグリセリドを効率的に除去し、ルシャトリエの原理に従い化合物１濃度をさらに押し上げる。
【００４２】
ある態様において、化合物１：トリグリセリド共結晶のようなここに開示する共結晶は、化合物１の固体非晶質分散形態(化合物１  ＳＤＤ)を超える、次の利点を有し得る：(１)共結晶を、それらが熱力学的に安定な条件下で製剤、保存および使用でき；(２)不純物の潜在的レベルを低減できる制御結晶化を開発でき(不純物は、溶媒を含むが、これに限定されない)；(３)より効率的かつ費用効果的な製造工程を開発でき(例えば、使用する溶媒が少なくてよく、噴霧乾燥より費用が低減される方法を開発できる)；そして(４)共結晶の製剤に安定化ポリマーが必要でなくなり得る。
【図面の簡単な説明】
【００４３】
【図１】ある態様における化合物１：トリグリセリド共結晶の構造特性を示す。図１(左)は、化合物１：トリグリセリド共結晶に存在する六量体(６分子の化合物１)を示す。図１(右)は、各々３分子の化合物１(三量体Ａ：Ａ１、Ａ２およびＡ３；ならびに三量体Ｂ：Ｂ１、Ｂ２およびＢ３)により形成される２三量体(ＡおよびＢ)からなる六量体を示す。
【００４４】
【図２】ある態様における化合物１：トリグリセリド共結晶の水素結合を示す。図２(左)は、化合物１の三量体Ａおよび三量体内の化合物１の複数分子(Ａ１、Ａ２およびＡ３)間に存在し得る水素結合[Ｒ３,３(１８)＞ｂ＞ｂ＞ｂ]を示す。図２(右)は、化合物１の１分子内に存在し得る水素結合[Ｓ１,１(６)ａ]および２三量体(ＡおよびＢ)からの化合物１の２分子間に存在し得る水素結合[Ｒ２,２(２０)＞ｃ＞ｃ]を示す。三量体ＡおよびＢは六量体を形成する。
【００４５】
【図３】化合物１：グリセリルトリオクタノエートのＸ線粉末回折(ＸＲＰＤ)パターンの例である。
【００４６】
【図４】化合物１：グリセリルトリオクタノエートの１３Ｃ固体核磁気共鳴スペクトロスコピー(１３Ｃ  ｓｓＮＭＲ)スペクトルの例である。
【００４７】
【図５】化合物１：グリセリルトリオクタノエートの熱重量分析(ＴＧＡ)トレースの例である。
【００４８】
【図６】化合物１：グリセリルトリオクタノエートの示差走査熱量測定(ＤＳＣ)サーモグラムの例である。
【００４９】
【図７】化合物１：グリセリルトリオクタノエートのＤＭＳＯ−ｄ６中の１Ｈ核磁気共鳴(１Ｈ  ＮＭＲ)スペクトルの例である。
【００５０】
【図８】化合物１：グリセリルトリオレアートのＸＲＰＤパターンの例である。
【００５１】
【図９】化合物１：グリセリルトリオレアートの１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルの例である。
【００５２】
【図１０】化合物１：グリセリルトリオレアートのＴＧＡトレースの例である。
【００５３】
【図１１】化合物１：グリセリルトリオレアートのＤＳＣサーモグラムの例である。
【００５４】
【図１２】化合物１：グリセリルトリオレアートのアセトン−ｄ６中の１Ｈ  ＮＭＲスペクトルの例である。
【００５５】
【図１３】化合物１：グリセリルトリリノレートのＸＲＰＤパターンの例である。
【００５６】
【図１４】化合物１：グリセリルトリリノレートの１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルの例である。
【００５７】
【図１５】化合物１：グリセリルトリリノレートのＴＧＡトレースの例である。
【００５８】
【図１６】化合物１：グリセリルトリリノレートのＤＳＣサーモグラムの例である。
【００５９】
【図１７】化合物１：グリセリルトリリノレートのアセトン−ｄ６中の１Ｈ  ＮＭＲスペクトルの例である。
【００６０】
【図１８】化合物１とグリセリルトリアセテートの共結晶のＸＰＲＤ回折パターンの例である。
【００６１】
【図１９】化合物１：トリアセチンの１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルの例である。
【００６２】
【図２０】化合物１：トリアセチングリセリルのＤＳＣサーモグラムの例である。
【００６３】
【図２１】化合物１とグリセリルトリブチレートの共結晶のＸＰＲＤ回折パターンの例である。
【００６４】
【図２２】化合物１とグリセリルトリステアレートの共結晶のＸＲＰＤ回折パターンの例である。
【００６５】
【図２３】化合物１：グリセリルトリステアレートの１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルの例である。
【００６６】
【図２４】化合物１：グリセリルトリステアレートのＤＳＣサーモグラムの例である。
【００６７】
【図２５】化合物１とグリセリルトリパルミテートの共結晶のＸＲＰＤ回折パターンの例である。
【００６８】
【図２６】化合物１：グリセリルトリパルミテートの１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルの例である。
【００６９】
【図２７】化合物１：グリセリルトリパルミテートのＤＳＣサーモグラムの例である。
【００７０】
【図２８】化合物１とグリセリルトリドデカノエートの共結晶のＸＲＰＤ回折パターンの例である。
【００７１】
【図２９】化合物１：グリセリルトリドデカノエートの１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルの例である。
【００７２】
【図３０】化合物１とグリセリルトリミリステートの共結晶のＸＲＰＤ回折パターンの例である。
【００７３】
【図３１】化合物１：グリセリルトリミリステートの１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルの例である。
【００７４】
【図３２】化合物１：グリセリルトリミリステートのＤＳＣサーモグラムの例である。
【００７５】
【図３３】化合物１とグリセリルトリヘキサノエートの共結晶のＸＲＰＤ回折パターンの例である。
【００７６】
【図３４】化合物１とグリセリルトリデカノエートのＸＲＰＤ回折パターンの共結晶の例である。
【００７７】
【図３５】化合物１：グリセリルトリデカノエートの１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルの例である。
【００７８】
【図３６】ＦｅＳＳＩＦにおける化合物１：グリセリルトリオクタノエート(黒丸)、化合物１：グリセリルトリオレアート(黒四角)および化合物１：グリセリルトリリノレート(黒三角)と、非晶質化合物１(黒菱形)、化合物１噴霧乾燥分散(ＳＤＤ)(黒逆三角)の例示的溶解プロファイルの比較である。
【００７９】
【図３７】化合物１と種々の純粋トリグリセリドの共結晶および初期製剤と化合物１の混合物から単離した共結晶のＸＲＰＤ回折パターンの例である。
【発明を実施するための形態】
【００８０】
態様の詳細な記載
定義
ここで使用する限り、特に断らない限り次の定義を適用すべきである。
【００８１】
ここで使用する単数表現および“少なくとも１”は、各々、“１または１以上”を意味する。
【００８２】
ここで使用する用語“ＡＢＣ輸送体”は、結合ドメインを含むＡＢＣ輸送体タンパク質またはそのフラグメントを意味し、ここで、該タンパク質またはそのフラグメントは、インビボまたはインビトロで存在する。ここで使用する用語“結合ドメイン”は、モジュレーターと結合できるＡＢＣ輸送体上のドメインを意味する。例えば、Hwang, T. C. et al., J. Gen. Physiol. (1998): 111(3), 477-90参照。
【００８３】
ここで使用する“ＣＦＴＲ”は、嚢胞性線維症膜貫通コンダクタンス制御因子を意味する。
【００８４】
ここで使用する“変異”は、ＣＦＴＲ遺伝子またはＣＦＴＲタンパク質における変異をいう。“ＣＦＴＲ変異”はＣＦＴＲ遺伝子における変異をいい、“ＣＦＴＲ変異”はＣＦＴＲタンパク質における変異をいう。一般に、遺伝子欠損もしくは変異または遺伝子におけるヌクレオチドの変化は、その遺伝子から翻訳されるＣＦＴＲタンパク質の変異をもたらす。遺伝子欠損または変異は、ΔＦ５０８  ＣＦＴＲ、Ｒ１１７Ｈ  ＣＦＴＲ、Ｇ５５１Ｄ  ＣＦＴＲ、Ｇ１７８Ｒ  ＣＦＴＲ、Ｓ５４９Ｎ  ＣＦＴＲ、Ｓ５４９Ｒ  ＣＦＴＲ、Ｇ５５１Ｓ  ＣＦＴＲ、Ｇ９７０Ｒ  ＣＦＴＲ、Ｇ１２４４Ｅ  ＣＦＴＲ、Ｓ１２５１Ｎ  ＣＦＴＲ、Ｓ１２５５Ｐ  ＣＦＴＲおよびＧ１３４９Ｄ  ＣＦＴＲまたはΔＦ５０８  ＣＦＴＲ、Ｒ１１７Ｈ  ＣＦＴＲ、Ｇ５５１Ｄ  ＣＦＴＲ、Ｇ１７８Ｒ  ＣＦＴＲ、Ｓ５４９Ｎ  ＣＦＴＲ、Ｓ５４９Ｒ  ＣＦＴＲ、Ｇ５５１Ｓ  ＣＦＴＲ、Ｇ９７０Ｒ  ＣＦＴＲ、Ｇ１２４４Ｅ  ＣＦＴＲ、Ｓ１２５１Ｎ  ＣＦＴＲ、Ｓ１２５５Ｐ  ＣＦＴＲおよびＧ１３４９Ｄ  ＣＦＴＲを含むが、これらに限定されない(例えば、ＣＦＴＲ変異についてhttp://www.genet.sickkids.on.ca/appを参照のこと)。
【００８５】
ここで使用する“ΔＦ５０８変異”または“Ｆ５０８ｄｅｌ変異”は、ＣＦＴＲタンパク質内の特定の変異である。本変異は、５０８位のアミノ酸フェニルアラニンに対するコドンを含む３ヌクレオチドの欠失をいい、このフェニルアラニン残基を欠くＣＦＴＲタンパク質をもたらす。変異ＣＦＴＲタンパク質は、一般に、“Ｆ５０８ｄｅｌ”と称される。
【００８６】
ここで使用する用語“ＣＦＴＲゲーティング変異”は、優勢欠損が、正常ＣＦＴＲと比較して低チャネル開放可能性である、ＣＦＴＲタンパク質の産生をもたらすＣＦＴＲ変異をいう(Van Goor, F., Hadida S. and Grootenhuis P., “Pharmacological Rescue of Mutant CFTR function for the Treatment of Cystic Fibrosis”, Top. Med. Chem. 3: 91-120 (2008))。ゲーティング変異は、Ｇ５５１Ｄ、Ｇ１７８Ｒ、Ｓ５４９Ｎ、Ｓ５４９Ｒ、Ｇ５５１Ｓ、Ｇ９７０Ｒ、Ｇ１２４４Ｅ、Ｓ１２５１Ｎ、Ｓ１２５５ＰおよびＧ１３４９Ｄを含むが、これらに限定されない。
【００８７】
ここで使用する特定の変異、例えばＦ５０８ｄｅｌが“ホモ接合性”である患者は、各アレルに同じ変異を有する。
【００８８】
ここで使用する特定の変異、例えばＦ５０８ｄｅｌが“ヘテロ接合性”である患者は、一方のアレルにこの変異を有し、他のアレルに異なる変異を有する。
【００８９】
ここで使用する用語“モジュレーター”は、タンパク質のような化合物の活性を増加させる化合物をいう。例えば、ＣＦＴＲモジュレーターは、ＣＦＴＲの活性を増加させる化合物である。ＣＦＴＲモジュレーターによりもたらされる活性増加は、補正因子機構、増強剤機構またはデュアル補正因子および増強剤機構を経るものであり得る。
【００９０】
ここで使用する用語“ＣＦＴＲ補正因子”は、イオン輸送を増強させる、細胞表面への機能的ＣＦＴＲタンパク質の量を増加させる化合物をいう。
【００９１】
ここで使用する用語“ＣＦＴＲ増強剤”は、イオン輸送を増強させる、細胞表面に位置するＣＦＴＲタンパク質のチャネル活性を増加させる化合物をいう。
【００９２】
用語“結晶”は、規則正しい幾何パターンまたは格子で配置された原子、分子および／またはイオンを含む固体物質をいう。結晶固体は、明確な融点を示し、固定された長距離秩序を有する。
【００９３】
ここで使用する用語“共結晶”は、化学量論比または非化学量論比で少なくとも２分子を含む、結晶物をいう。共結晶は、さらにイオンを含んでよい。
【００９４】
共結晶は、一般に活性医薬成分(ＡＰＩ)と共形成剤を含む。共形成剤は、一般にＡＰＩに直接水素結合していても、ＡＰＩに結合するさらなる分子に水素結合していてもよい。パイ・スタッキング、ゲスト・ホスト錯体形成およびファンデルワールス相互作用を含む、分子認識の他のモードも存在し得る。
【００９５】
ここで使用する用語“共形成剤”または代替的に“共結晶形成剤”は、ＡＰＩ以外の共結晶におけるトリグリセリドのような分子をいう。共形成剤は、ＡＰＩとの共結晶形成後、何らかの変化を受けても受けなくてもよい。
【００９６】
“化合物１：トリグリセリド”は、化合物１とトリグリセリドを含む共結晶をいう。例えば、“化合物１：グリセリルトリオクタノエート”は、ここでは、化合物１とグリセリルトリオクタノエートを含む共結晶をいうために使用される。“化合物１：グリセリルトリオレアート”は、ここでは、化合物１とグリセリルトリオレアートを含む共結晶をいうために使用される。“化合物１：グリセリルトリリノレート”は、ここでは、化合物１とグリセリルトリリノレートを含む共結晶をいうために使用される。
【００９７】
ここで使用する用語“活性医薬成分”または“ＡＰＩ”は、生物学的に活性な化合物をいう。
【００９８】
ここで使用する用語“純粋”は、化学的に純粋または日常的化学分析、例えばＨＰＬＣで検出可能な不純物がないことをいう。
【００９９】
ここで使用する“実質的に純粋”は、混合物内の標的物質の少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９７％、９８％または９９％純度をいう。
【０１００】
単離共結晶におけるような、ここで使用する用語“単離”は、ＸＲＰＤのような日常的分析により、標的共結晶と区別し得る、他の結晶物質のような他の物質から分離されている共結晶をいう。ある態様において、共結晶は、濾過または遠心分離により他の物質から単離または分離され得る。ある態様において、単離共結晶は少なくとも５０％純粋であり得る。ある態様において、単離共結晶は、共結晶から除くことが困難であり得る、非限定的例として、残存する共形成剤、溶媒または共結晶を産生した媒体に存在した他の物質のような、不純物を含み得る。他の態様において、単離共結晶は実質的に純粋であり得る。
【０１０１】
ここで使用する用語“脂肪族”は、置換または非置換アルキル基、アルケニル基およびアルキニル基をいう。“アルキル”基は、１〜２９炭素原子を含む飽和脂肪族炭化水素基をいう。アルキル基は直鎖でも分枝鎖でもよい。ここで使用する“アルケニル”基は、２〜２９炭素原子および二重結合を含む脂肪族炭素基をいう。アルキル基同様、アルケニル基は直鎖でも分枝鎖でもよい。ここで使用する“アルキニル”基は、２〜２９炭素原子を含み、三重結合を有する脂肪族炭素基をいう。アルキニル基は直鎖でも分枝鎖でもよい。
【０１０２】
ＣＦＴＲ活性の誘発におけるような、ここで使用する用語“誘発”は、補正因子、増強剤または他の機構のいずれによるものであれ、ＣＦＴＲ活性の増加をいう。
【０１０３】
ここで使用する用語“調節”は、測定可能な量での、例えば、活性の、増加または減少を意味する。
【０１０４】
ここで使用する用語“ＣＦＴＲ低減”または“ＣＦＴＲ機能低下”は、正常より少ないＣＦＴＲまたは正常より低いＣＦＴＲ機能を意味する。
【０１０５】
“患者”、“対象”または“個体”は、相互交換可能に使用し、ヒトまたは非ヒト動物をいう。本用語は、ヒトのような哺乳動物を含む。
【０１０６】
用語“有効用量”または“有効量”は、ここでは相互交換可能に使用し、投与したものに対して所望の効果を生じる量をいう(例えば、ＣＦもしくはＣＦの症状の改善またはＣＦもしくはＣＦの症状の重症度の低減)。正確な量は、処置の目的により、既知技術を使用して、当業者により確認され得る(例えば、Lloyd (1999) The Art, Science and Technology of Pharmaceutical Compounding参照)。
【０１０７】
ここで使用する用語“処置”、“処置する”などは、一般に対象におけるＣＦもしくはその症状の改善またはＣＦもしくはその症状の重症度の低減をいう。ここで使用する“処置”は、次のものを含むが、これらに限定されない：対象の成長増加、体重増加の増加、肺における粘液減少、膵臓および／または肝臓機能改善、胸部感染の発生率減少および／または咳もしくは息切れの低減。これらの状態のいずれかの改善または重症度低減は、当分野で知られる標準的方法および技術に従い、容易に評価できる。
【０１０８】
ここで使用する用語“組み合わせて”は、２以上の化合物または薬剤に言及するとき、投与順番が、化合物または薬剤が、患者に互いに前に、同時にまたは後に投与されることを含むことを意味する。
【０１０９】
共結晶
本発明は、構造式
【化１５】
0006746569.tif 000016
を有する、Ｎ−[２,４−ビス(１,１−ジメチルエチル)−５−ヒドロキシフェニル]−１,４−ジヒドロ−４−オキソキノリン−３−カルボキサミド(化合物１)を含む共結晶を提供する。
【０１１０】
化合物１は、国際ＰＣＴ公開ＷＯ２００６００２４２１号に記載され、Ｃ２４Ｈ２８Ｎ２Ｏ３の分子式を有する。
【０１１１】
ある面において、本発明は、化合物１と共形成剤を含む共結晶を提供し、ここで、共形成剤は、次の構造式
【化１６】
0006746569.tif 000017
〔式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、独立してＣ１−２９脂肪族である。〕
から選択される。
【０１１２】
ある態様において、共結晶は単離される。
【０１１３】
ある態様において、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、独立してＣ７−２９脂肪族である。
【０１１４】
ある態様において、共形成剤は、４７０〜１４００Daの範囲の平均分子量を有する。
【０１１５】
ある態様において、共形成剤は、グリセリルトリオレアート、グリセリルトリステアレート、グリセリルトリヘキサノエート、グリセリルトリデカノエート、グリセリルトリオクタノエート、グリセリルトリミリステート、グリセリルトリパルミテート、グリセリルトリブチレート、グリセリルトリリノレート、グリセリルトリドデカノエート、グリセリルトリパルミトオレアート、グリセリルトリエルケート、グリセリルトリプロピオネート、パルミトジオレイン、トリアラキドニン、グリセリルトリリノレネート、トリエルシン、グリセロールトリアラキデート、グリセリルトリ(ｃｉｓ−１３−ドコセノエート)、グリセリルトリペトロセリネート、グリセリルトリベヘネート、グリセリルトリエライデート、グリセリルトリアセテート(トリアセチン)、グリセリルトリブチレートから選択される。
【０１１６】
ある態様において、共形成剤は、
【化１７】
0006746569.tif 000018
から選択される。
【０１１７】
ある態様において、共形成剤は、グリセリルトリオレアート、グリセリルトリステアレート、グリセリルトリヘキサノエート、グリセリルトリデカノエート、グリセロールトリオクタノエート、グリセリルトリミリステート、グリセリルトリパルミテート、グリセリルトリリノレート、グリセリルトリドデカノエート、グリセリルトリパルミトオレアート、グリセロールトリエルケート、パルミトジオレイン、トリアラキドニン、グリセリルトリリノレネート、トリエルシン、グリセロールトリアラキデート、グリセリルトリ(ｃｉｓ−１３−ドコセノエート)、グリセリルトリペトロセリネート、グリセリルトリベヘネートおよびグリセリルトリエライデートから選択される。
【０１１８】
ある態様において、共形成剤は、グリセリルトリオクタノエート、グリセリルトリオレアート、グリセリルトリリノレート、グリセリルトリヘキサノエート、グリセリルトリステアレート、グリセリルトリデカノエート、グリセリルトリパルミテート、グリセリルトリミリステート、グリセリルトリパルミテート、グリセリルトリステアレートおよびグリセリルトリドデカノエートから選択される。
【０１１９】
ある態様において、共形成剤は、グリセリルトリアセテートおよびグリセリルトリブチレートから選択される。
【０１２０】
ある態様において、共形成剤が１個だけ共結晶に存在する。非限定的例として、化合物１の共結晶はグリセリルトリオクタノエートのみ、グリセリルトリオレアートのみ、グリセリルトリリノレートのみ、グリセリルトリヘキサノエートのみ、グリセリルトリステアレートのみ、グリセリルトリデカノエートのみ、グリセリルトリパルミテートのみ、グリセリルトリドデカノエートのみ、グリセリルトリアセテートのみまたはグリセリルトリブチレートのみを含む。
【０１２１】
ある態様において、２、３、４、５または６のような１を超えるトリグリセリドが共結晶に存在する。非限定的例として、化合物１の共結晶は、(ｉ)グリセリルトリオクタノエートとグリセリルトリオレアート；(ii)グリセリルトリオレアートとグリセリルトリリノレート；または(iii)グリセリルトリオクタノエートとグリセリルトリリノレートのような２トリグリセリドを含む。
【０１２２】
ある態様において、共結晶において、化合物１対共形成剤の化学量論比は、２：１〜６：１の範囲である。ある態様において、共結晶において、化合物１対共形成剤の化学量論比は３：１〜６：１の範囲である。ある態様において、共結晶において、化合物１対共形成剤の化学量論比は４：１〜６：１の範囲である。ある態様において、共結晶において、化合物１対共形成剤の化学量論比は５：１〜６：１の範囲である。
【０１２３】
ある態様において、共結晶において、化合物１対共形成剤の化学量論比は、約６：約１である。ある態様において、共結晶において、化合物１対共形成剤の化学量論比は、６：１である。
【０１２４】
非限定的例として、化合物１の共結晶は、グリセリルトリオレアート、グリセリルトリリノレート、グリセリルトリステアレートおよびグリセリルトリパルミテートから選択される共形成剤を含み、共結晶における化合物１対共形成剤の化学量論比は、約６：約１である。さらなる非限定的例として、ある態様において、共結晶は化合物１およびグリセリルトリオレアートを含み、化合物１対グリセリルトリオレアートの化学量論比は、約６：約１である。他の態様において、共結晶は化合物１およびグリセリルトリリノレートを含み、ここで、化合物１対グリセリルトリリノレートの化学量論比は、約６：約１である。他の態様において、共結晶は化合物１およびグリセリルトリステアレートを含み、ここで、化合物１対グリセリルトリステアレートの化学量論比は、約６：約１である。他の態様において、共結晶は化合物１およびグリセリルトリパルミテートを含み、ここで、化合物１対グリセリルトリパルミテートの化学量論比は、約６：約１である。上記態様のいずれかにおいて、化合物１：トリグリセリドにおける化合物１対共形成剤の比または化学量論比は、６：１である。
【０１２５】
ある態様において、共結晶における化合物１対共形成剤の化学量論比は、約３：約１である。ある態様において、共結晶における化合物１対共形成剤の化学量論比は、３：１である。
【０１２６】
非限定的例として、化合物１の共結晶は、グリセリルトリオクタノエート、グリセリルトリドデカノエートおよびグリセリルトリデカノエートから選択される共形成剤を含み、共結晶における化合物１対トリグリセリドの化学量論比は、約３：約１である。
【０１２７】
さらなる非限定的例として、ある態様において、本発明は化合物１とグリセリルトリオクタノエートを含む共結晶を提供し、ここで、化合物１対グリセリルトリオクタノエートの化学量論比は、約３：約１である。他の態様において、本発明は、化合物１とグリセリルトリドデカノエートを含む共結晶を提供し、ここで、化合物１対グリセリルトリドデカノエートの化学量論比は、約３：約１である。他の態様において、本発明は、化合物１とグリセリルトリデカノエートを含む共結晶を提供し、ここで、化合物１対グリセリルトリデカノエートの化学量論比は、約３：約１である。上記態様のいずれかにおいて、化合物１：トリグリセリドにおける化合物１対トリグリセリド共形成剤の比または化学量論比は、３：１である。
【０１２８】
ある態様において、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、独立してＣ７−２９脂肪族であり、化合物１は、共結晶において六量体の形で存在し得る。
【０１２９】
ある態様において、化合物１は、共結晶において六量体の形で存在でき、ここで、六量体の各々は、図１に示すように、水素結合により結合された６分子の化合物１を含む。
【０１３０】
ある態様において、化合物１は、共結晶において六量体の形で存在でき、ここで、六量体の各々は、図１に示すように、水素結合により結合された６分子の化合物１を含み、さらに、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、独立してＣ７−２９脂肪族である。
【０１３１】
非限定的例として、図２(左)に示すように、ある態様において、３分子の化合物１(Ａ１、Ａ２、Ａ３)が３水素結合により結合されて、化合物三量体を形成でき、２個の化合物１の三量体がさらに、例えば、６のようなさらなる水素結合により結合されて、化合物１の六量体を形成でき、ここで、図２(右)に示すように、ある三量体における化合物１分子の各々は、第二の三量体における対応する化合物１分子に、２水素結合により結合される。ある態様において、図２(右)に示すように、分子内水素結合が、化合物１の六量体に存在する。
【０１３２】
ある態様において、化合物１の複数分子は、次の水素結合の１以上で結合して、六量体を形成し得る。
Ｓ１,１(６)ａ；
Ｒ２,２(２０)＞ｃ＞ｃ；
Ｒ３,３(１８)＞ｂ＞ｂ＞ｂ；
Ｒ４,４(２８)＞ｂ＞ｃ＞ｂ＞ｃ；
Ｒ４,４(３０)＞ｂ＞ｃ＞ｂ＜ｃ；
Ｒ４,４(３２)＞ｂ＜ｃ＞ｂ＜ｃ；
Ｒ５,５(３６)＞ｂ＞ｂ＜ｃ＜ｂ＜ｃ；
Ｒ５,５(３６)＞ｂ＞ｂ＜ｃ＜ｂ＞ｃ；
Ｒ５,５(３６)＞ｂ＞ｂ＞ｃ＜ｂ＜ｃ；
Ｒ５,５(３６)＞ｂ＞ｂ＞ｃ＜ｂ＞ｃ；
Ｒ６,６(４０)＞ｂ＞ｂ＞ｃ＞ｂ＞ｂ＞ｃ；
Ｒ６,６(４２)＞ｂ＞ｂ＞ｃ＞ｂ＞ｂ＜ｃ；
Ｒ６,６(４４)＞ｂ＞ｂ＜ｃ＞ｂ＞ｂ＜ｃ。
【０１３３】
グラフセット表記法の記載は、Bernstein, J., Davis, R. E., Shimoni, L. & Chang, N.-L, “Patterns in Hydrogen Bonding: Functionality and Graph Set Analysis in Crystals,” Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 34, 1555-1573 (1995); W. D. S. Motherwell, G. P. Shields, and F. H. Allen, “Automated assignment of graph-set descriptors for crystallographically symmetric molecules,” Acta. Cryst. B56, 466-473 (2000)およびM. C. Etter, “Encoding and decoding hydrogen-bond patterns of organic compounds,” Acc. Chem. Res., 23, 120-126 (1990)に見ることができる。
【０１３４】
さらに他の態様において、化合物１：トリグリセリド共結晶における化合物１の六量体は、トリグリセリド共形成剤の存在により安定化される。
【０１３５】
ある態様において、共結晶は、喫食時人工腸液(ＦｅＳＳＩＦ)に溶解したとき、０.４mg／mLより高い化合物１の濃度をもたらすことができる。
【０１３６】
ある態様において、共結晶は、喫食時人工腸液(ＦｅＳＳＩＦ)に溶解したとき、０.４mg／mLより高い化合物１の濃度をもたらすことができ、濃度は少なくとも１０時間維持される。
【０１３７】
ある態様において、共結晶は、２シータ±０.２度で表して、次の３.５、６.９および１０.９の位置に特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。
【０１３８】
ある態様において、共結晶は、２シータ±０.２度で表して、次の３.５、６.９、９.２、１０.９、１６.９および１８.０の位置に特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。
【０１３９】
ある態様において、共結晶は、２シータ±０.２度で表して、次の３.５、６.９、９.２、１０.９、１６.９、１８.０および２３.８の位置に特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。
【０１４０】
さらにある態様において、共結晶は、ppm±０.１で表して、次の１７８.６、１５５.０および１１９.４の位置に特徴的ピークを有する１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルを有するとして特徴付けられる。
【０１４１】
さらにまた別のある態様において、共結晶は、ppm±０.１で表して、次の１７８.６、１５５.０、１３０.５および１１９.４の位置に特徴的ピークを有する１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルを有するとして特徴付けられる。
【０１４２】
本発明はまた化合物１と、グリセリルトリオクタノエート、グリセリルトリオレアートおよびグリセリルトリリノレートからなる群から選択される共結晶形成剤を含む共結晶を提供し、ここで、化合物１は次の構造式
【化１８】
0006746569.tif 000019
により表される。
【０１４３】
ある態様において、直前の段落に記載した共結晶を、喫食時人工腸液(ＦｅＳＳＩＦ)に溶解して、０.４mg／mLを超える化合物１の濃度を得て、本濃度は、少なくとも１０時間維持される。
【０１４４】
ある態様において、共結晶形成剤はグリセリルトリオクタノエートである。
【０１４５】
ある態様において、化合物１対グリセリルトリオクタノエートの化学量論比は、３：１である。
【０１４６】
ある態様において、共結晶は、２シータ±０.２度で表して、次の３.５、６.９および１０.９の位置に特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。
【０１４７】
ある態様において、共結晶は、２シータ±０.２度で表して、次の３.５、６.０、６.９、９.１、１０.９、１６.９、１８.０および２３.８の位置に特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。
【０１４８】
ある態様において、共結晶は、ppm±０.１で表して、次の１７８.６、１５５.０および１１９.４の位置に特徴的ピークを有する１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルを有するとして特徴付けられる。
【０１４９】
ある態様において、共結晶は、示差走査熱量測定(ＤＳＣ)において、１８６.７±０.５℃に吸熱ピークを有するとして特徴付けられる。
【０１５０】
ある態様において、共結晶形成剤はグリセリルトリオレアートである。
【０１５１】
ある態様において、化合物１対グリセリルトリオレアートの化学量論比は、６：１である。
【０１５２】
ある態様において、共結晶は、２シータ±０.２度で表して、次の３.５、６.９および１０.９の位置に特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。
【０１５３】
ある態様において、共結晶は、２シータ±０.２度で表して、次の３.５、６.９、９.２、１０.９、１６.９、１８.１および２３.８の位置に特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。
【０１５４】
ある態様において、共結晶は、ppm±０.１で表して、次の１７８.６、１５５.０、１３０.５および１１９.４の位置に特徴的ピークを有する１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルを有するとして特徴付けられる。
【０１５５】
ある態様において、共結晶は、示差走査熱量測定(ＤＳＣ)において、１９７.５±０.５℃に吸熱ピークを有するとして特徴付けられる。
【０１５６】
ある態様において、共結晶形成剤はグリセリルトリリノレートである。
【０１５７】
ある態様において、化合物１対グリセリルトリリノレートの化学量論比は、６：１である。
【０１５８】
ある態様において、共結晶は、２シータ±０.２度で表して、次の３.５、６.９および１０.９の位置に特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。
【０１５９】
ある態様において、共結晶は、２シータ±０.２度で表して、次の３.５、６.０、６.９、９.２、１０.９、１７.０、１８.１および２３.８の位置に特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。
【０１６０】
ある態様において、共結晶は、ppm±０.１で表して、次の１７８.５、１５５.０、１３０.６および１１９.３の位置に特徴的ピークを有する１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルを有するとして特徴付けられる。
【０１６１】
ある態様において、共結晶は、示差走査熱量測定(ＤＳＣ)において、１８２.３±０.５℃に吸熱ピークを有するとして特徴付けられる。
【０１６２】
別の態様において、重水素(２Ｈ)を、一次速度論的同位体効果の方法で化合物の酸化的代謝を操作するために、化合物１に取り込み得る。一次速度論的同位体効果は、同位体核種の交換に起因する化学反応の速度の変化であり、これは、同様にこの同位体交換後の共有結合形成に必要な基底状態エネルギーの変化によってもたらされる。重い同位体の交換は、通常化学結合のための基底状態エネルギーの低下をもたらし、ゆえに、律速的結合破壊の減少をもたらす。結合破壊が、多生成物反応の協調に添って鞍点領域でまたはその近くで生じるならば、生成物分布比は、実質的に変わり得る。説明として：重水素が、非交換可能位置で炭素原子に結合しているならば、kM／kD＝２〜７の速度差が典型的である。この速度差を化合物１に成功裏に適用するならば、インビボでの本化合物のプロファイルは、劇的に修飾され、薬物動態特性改善にいたり得る。さらなる記載について、本明細書にその全体を引用により包含させる、S. L. Harbeson and R. D. Tung, Deuterium In Drug Discovery and Development, Ann. Rep. Med. Chem. 2011, 46, 403-417を参照のこと。
【０１６３】
治療剤を発見および開発するとき、当業者は、望ましいインビトロ性質を維持しながら、薬物動態パラメータを最適化することを望む。薬物動態プロファイルが悪い多くの化合物が酸化的代謝に感受性であると推定するのは合理的である。現在利用可能なインビトロ肝臓ミクロソームアッセイは、このタイプの酸化的代謝の経過に価値ある情報を提供し、これは、続いて、このような酸化的代謝への抵抗性により、安定性が改善された化合物１の重水素化化合物の合理的設計を可能にする。化合物１の薬物動態プロファイルにおける顕著な改善がそれにより得られ、インビボ半減期(ｔ１／２)、最大治療効果の濃度(Ｃｍａｘ)、用量応答曲線下面積(ＡＵＣ)およびバイオアベイラビリティの増加に関して、そしてクリアランス、用量および製造費の低減に関して、定量的に示すことができる。
【０１６４】
例えば、ある代替的態様において、化合物１における少なくとも１水素原子を重水素原子に置き換えて、重水素化化合物を提供する。ある代替的態様において、化合物１におけるｔ−ブチル基の一方または両方をｄ９−ｔ−ブチルに置き換える。他の代替的態様において、化合物１におけるＯＨ基に隣接したｔ−ブチル基をｄ９−ｔ−ブチルに置き換える(化合物２)。化合物２の共結晶は、ここに記載する方法を使用して形成され得る。当業者は、化合物２とトリグリセリドの共結晶またはこれらの代替的態様における何らかの他の重水素化化合物とトリグリセリドの共結晶のＸＲＰＤパターンが、化合物１：トリグリセリド共結晶と同じ特徴的ピークを有することを理解する。半減期決定が、酸化的代謝に対する抵抗性が改善された程度の好ましいかつ正確な決定を可能にする。
【０１６５】
ある代替的態様において、化合物１における重水素−水素交換を、望ましくない毒性代謝物を減少または排除するために、出発化合物の代謝物スペクトルの好ましい修飾を達成するためにも使用できる。例えば、毒性代謝物が酸化的炭素−水素(Ｃ−Ｈ)結合開裂を経て生じるならば、その特定の酸化が律速段階でなくても、重水素化化合物が、望まれない代謝物を大きく減少または排除すると推定することは合理的であり得る。重水素−水素交換に関する最新技術に関するさらなる情報は、例えばHanzlik et al., J. Org. Chem. 55, 3992-3997, 1990, Reider et al., J. Org. Chem. 52, 3326-3334, 1987, Foster, Adv. Drug Res. 14, 1-40, 1985, Gillette et al, Biochemistry 33(10) 2927-2937, 1994およびJarman et al. Carcinogenesis 16(4), 683-688, 1993に見ることができる。
【０１６６】
化合物１：グリセリルトリオクタノエート
化合物１とグリセリルトリオクタノエートを含む共結晶を、以後、“化合物１：グリセリルトリオクタノエート”と称する。
【０１６７】
化合物１：グリセリルトリオクタノエートの特徴付けは、後に実施例部分で詳述する。図３は、化合物１：グリセリルトリオクタノエートのＸ線粉末回折(ＸＲＰＤ)パターンの例である。図４は、化合物１：グリセリルトリオクタノエートの１３Ｃ固体核磁気共鳴スペクトロスコピー(１３Ｃ  ｓｓＮＭＲ)スペクトルの例である。図５は、化合物１：グリセリルトリオクタノエートの熱重量分析(ＴＧＡ)トレースの例である。図６は、化合物１：グリセリルトリオクタノエートの示差走査熱量測定(ＤＳＣ)サーモグラムの例である。図７は、化合物１：グリセリルトリオクタノエートのＤＭＳＯ−ｄ６中の１Ｈ核磁気共鳴(１Ｈ  ＮＭＲ)スペクトルの例である。
【０１６８】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリオクタノエートは、２シータ±０.２度で表して、次の３.５、６.０、６.９、９.１、１０.９、１２.０、１２.５、１３.２、１３.７、１５.０、１６.２、１６.９、１８.０、１９.３、２０.２、２１.７、２２.５、２３.８、２５.８、２７.０、２７.６、２８.３、３０.０、３１.０および３２.６の位置に１以上の特徴的ピークを有するＸ線粉末回折(ＸＲＰＤ)パターンを有するとして特徴付けられる。
【０１６９】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリオクタノエートは、２シータ±０.２度で表して、次の３.５、６.９および１０.９の位置に特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。
【０１７０】
他の態様において、化合物１：グリセリルトリオクタノエートは、２シータ±０.２度で表して、次の３.５、６.０、６.９、９.１、１０.９、１６.９、１８.０および２３.８の位置に特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。
【０１７１】
さらに他の態様において、化合物１：グリセリルトリオクタノエートは、２シータ±０.２度で表して、次の３.５、６.０、６.９、９.１、１０.９、１２.０、１２.５、１３.２、１３.７、１５.０、１６.２、１６.９、１８.０、１９.３、２０.２、２１.７、２２.５、２３.８、２５.８、２７.０、２７.６、２８.３、３０.０、３１.０および３２.６の位置に特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。
【０１７２】
他の態様において、化合物１：グリセリルトリオクタノエートは、実質的に図３示すのと同じＸ線粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。Ｘ線粉末回折パターンは、室温で、Ｃｕ  Ｋアルファ照射を使用して得る。
【０１７３】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリオクタノエートは、ppm±０.１で表して、次の１７８.６、１７２.９、１７１.６、１６９.９、１６５.１、１５５.０、１４３.２、１３９.４、１３７.３、１３４.６、１３３.０、１２６.０、１１９.４、１１７.７、１１２.１、６７.３、６４.０、６２.０、５９.６、５４.２、３５.８、３４.８、３１.７、３０.５、２３.５および１４.６から選択される１以上の特徴的ピークを有する１３Ｃ固体核磁気共鳴(１３Ｃ  ｓｓＮＭＲ)スペクトルを有するとして特徴付けられる。
【０１７４】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリオクタノエートは、ppm±０.１で表して、次の１７８.６、１５５.０および１１９.４の位置に特徴的ピークを有する１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルを有するとして特徴付けられる。
【０１７５】
他の態様において、化合物１：グリセリルトリオクタノエートは、ppm±０.１で表して、次の１７８.６、１５５.０、１３４.６、１２６.０、１１９.４および３５.８の位置に特徴的ピークを有する１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルを有するとして特徴付けられる。
【０１７６】
さらに他の態様において、化合物１：グリセリルトリオクタノエートは、ppm±０.１で表して、次の１７８.６、１７２.９、１７１.６、１６９.９、１６５.１、１５５.０、１４３.２、１３９.４、１３７.３、１３４.６、１３３.０、１２６.０、１１９.４、１１７.７、１１２.１、６７.３、６４.０、６２.０、５９.６、５４.２、３５.８、３４.８、３１.７、３０.５、２３.５および１４.６の位置に特徴的ピークを有する１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルを有するとして特徴付けられる。
【０１７７】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリオクタノエートは、示差走査熱量測定(ＤＳＣ)において、１８６.７℃に吸熱ピークを有するとして特徴付けられる。他の態様において、化合物１：グリセリルトリオクタノエートは、示差走査熱量測定(ＤＳＣ)において、１８６.７±０.２℃に吸熱ピークを有するとして特徴付けられる。他の態様において、化合物１：グリセリルトリオクタノエートは、示差走査熱量測定(ＤＳＣ)において、１８６.７±０.５℃に吸熱ピークを有するとして特徴付けられる。
【０１７８】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリオクタノエートにおける化合物１対グリセリルトリオクタノエートの比または化学量論比は３：１である。ある態様において、化合物１：グリセリルトリオクタノエートにおける化合物１対グリセリルトリオクタノエートの比または化学量論比は、約３：約１である。
【０１７９】
化合物１：グリセリルトリオレアート
化合物１とグリセリルトリオレアートを含む共結晶を、以後、“化合物１：グリセリルトリオレアート”と称する。
【０１８０】
化合物１：グリセリルトリオレアートの特徴付けは、後に実施例部分で詳述する。図８は、化合物１：グリセリルトリオレアートのＸＲＰＤパターンの例である。図９は、化合物１：グリセリルトリオレアートの１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルの例である。図１０は、化合物１：グリセリルトリオレアートのＴＧＡトレースの例である。図１１は、化合物１：グリセリルトリオレアートのＤＳＣサーモグラムの例である。図１２は、化合物１：グリセリルトリオレアートのアセトン−ｄ６中の１Ｈ  ＮＭＲスペクトルの例である。
【０１８１】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリオレアートは、２シータ±０.２度で表して、次の３.５、６.９、９.２、９.８、１０.４、１０.９、１２.０、１２.７、１３.３、１３.８、１５.１、１６.３、１６.９、１８.１、１８.５、１９.４、１９.９、２０.２、２１.２、２１.８、２２.６、２３.８、２６.０、２７.０、２７.８、２８.５、３０.０、３０.７および３２.７の位置に１以上の特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。
【０１８２】
ある特定の態様において、化合物１：グリセリルトリオレアートは、２シータ±０.２度で表して、次の３.５、６.９および１０.９の位置に特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。
【０１８３】
他の態様において、化合物１：グリセリルトリオレアートは、２シータ±０.２度で表して、次の３.５、６.９、９.２、１０.９、１６.９、１８.１および２３.８の位置に特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。
【０１８４】
さらに他の態様において、化合物１：グリセリルトリオレアートは、２シータ±０.２度で表して、次の３.５、６.９、９.２、９.８、１０.９、１２.０、１２.７、１３.３、１３.８、１５.１、１６.３、１６.９、１８.１、１８.５、１９.４、１９.９、２０.２、２１.２、２１.８、２２.６、２３.８、２６.０、２７.０、２７.８、２８.５、３０.０、３０.７および３２.７の位置に特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。ある態様において、化合物１：グリセリルトリオレアートは、２シータ±０.２度で表して、次の３.５、６.９、９.２、９.８、１０.４、１０.９、１２.０、１２.７、１３.３、１３.８、１５.１、１６.３、１６.９、１８.１、１８.５、１９.４、１９.９、２０.２、２１.２、２１.８、２２.６、２３.８、２６.０、２７.０、２７.８、２８.５、３０.０、３０.７および３２.７の位置に特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。
【０１８５】
他の態様において、化合物１：グリセリルトリオレアートは、実質的に図８に示すのと同じＸＲＰＤ粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。Ｘ線粉末回折パターンは、室温で、Ｃｕ  Ｋアルファ照射を使用して得る。
【０１８６】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリオレアートは、ppm±０.１で表して、次の１７８.６、１７２.９、１７１.６、１６９.９、１６５.０、１５５.０、１４２.９、１３９.３、１３７.４、１３４.５、１３３.０、１３０.５、１２７.３、１２６.０、１１９.４、１１７.７、１１２.１、６７.２、６３.９、５９.６、３５.８、３４.８、３１.７、３０.５、２８.２、２４.６、２３.６および１４.７から選択される１以上の特徴的ピークを有する１３Ｃ固体核磁気共鳴(１３Ｃ  ｓｓＮＭＲ)スペクトルを有するとして特徴付けられる。
【０１８７】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリオレアートは、ppm±０.１で表して、次の１７８.６、１５５.０、１３０.５および１１９.４の位置に特徴的ピークを有する１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルを有するとして特徴付けられる。
【０１８８】
他の態様において、化合物１：グリセリルトリオレアートは、ppm±０.１で表して、次の１７８.６、１５５.０、１３４.５、１３０.５、１２６.０、１１９.４および３５.８の位置に特徴的ピークを有する１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルを有するとして特徴付けられる。
【０１８９】
さらに他の態様において、化合物１：グリセリルトリオレアートは、ppm±０.１で表して、次の１７８.６、１７２.９、１７１.６、１６９.９、１６５.０、１５５.０、１４２.９、１３９.３、１３７.４、１３４.５、１３３.０、１３０.５、１２７.３、１２６.０、１１９.４、１１７.７、１１２.１、６７.２、６３.９、５９.６、３５.８、３４.８、３１.７、３０.５、２８.２、２４.６、２３.６および１４.７の位置に特徴的ピークを有する１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルを有するとして特徴付けられる。
【０１９０】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリオレアートは、示差走査熱量測定(ＤＳＣ)において、１９７.５℃に吸熱ピークを有するとして特徴付けられる。他の態様において、化合物１：グリセリルトリオレアートは、示差走査熱量測定(ＤＳＣ)において、１９７.５±０.２℃に吸熱ピークを有するとして特徴付けられる。他の態様において、化合物１：グリセリルトリオレアートは、示差走査熱量測定(ＤＳＣ)において、１９７.５±０.５℃に吸熱ピークを有するとして特徴付けられる。
【０１９１】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリオレアートにおける化合物１対グリセリルトリオレアートの比または化学量論比は、６：１である。ある態様において、化合物１：グリセリルトリオレアートにおける化合物１対グリセリルトリオレアートの比または化学量論比は、約６：約１である。
【０１９２】
化合物１：グリセリルトリリノレート
化合物１とグリセリルトリリノレートを含む共結晶を、以後、“化合物１：グリセリルトリリノレート”と称する。
【０１９３】
化合物１：グリセリルトリリノレートの特徴付けは、後に実施例部分で詳述する。図１３は、化合物１：グリセリルトリリノレートのＸＲＰＤパターンの例である。図１４は、化合物１：グリセリルトリリノレートの１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルの例である。図１５は、化合物１：グリセリルトリリノレートのＴＧＡトレースの例である。図１６は、化合物１：グリセリルトリリノレートのＤＳＣサーモグラムの例である。図１７は、化合物１：グリセリルトリリノレートのアセトン−ｄ６中の１Ｈ  ＮＭＲスペクトルの例である。
【０１９４】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリリノレートは、２シータ±０.２度で表して、次の３.５、６.０、６.９、９.２、１０.９、１２.０、１２.５、１３.８、１５.１、１６.３、１７.０、１８.１、１９.４、２０.２、２１.８、２２.６、２３.８、２５.９、２７.１、２７.８、２８.４および３２.７の位置に１以上の特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。
【０１９５】
ある特定の態様において、化合物１：グリセリルトリリノレートは、２シータ±０.２度で表して、次の３.５、６.９および１０.９の位置に特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。
【０１９６】
他の態様において、化合物１：グリセリルトリリノレートは、２シータ±０.２度で表して、次の３.５、６.０、６.９、９.２、１０.９、１７.０、１８.１および２３.８の位置に特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。
【０１９７】
さらに他の態様において、化合物１：グリセリルトリリノレートは、２シータ±０.２度で表して、次の３.５、６.０、６.９、９.２、１０.９、１２.０、１２.５、１３.８、１５.１、１６.３、１７.０、１８.１、１９.４、２０.２、２１.８、２２.６、２３.８、２５.９、２７.１、２７.８、２８.４および３２.７の位置に特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。
【０１９８】
他の態様において、化合物１：グリセリルトリリノレートは、実質的に図１３に示すのと同じＸＲＰＤ粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。Ｘ線粉末回折パターンは、室温で、Ｃｕ  Ｋアルファ照射を使用して得る。
【０１９９】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリリノレートは、ppm±０.１で表して、次のも１７８.６、１７２.８、１７１.５、１６９.８、１６５.１、１５５.０、１４２.９、１３９.３、１３７.４、１３４.４、１３３.１、１３０.６、１２６.０、１１９.４、１１７.６、１１２.０、８６.５、６７.２、６３.９、５９.７、３５.８、３４.８、３１.７、３０.６、２８.２および１４.８から選択される１以上の特徴的ピークを有する１３Ｃ固体核磁気共鳴(１３Ｃ  ｓｓＮＭＲ)スペクトルを有するとして特徴付けられる。
【０２００】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリリノレートは、ppm±０.１で表して、次の１７８.６、１５５.０、１３０.６および１１９.４の位置に特徴的ピークを有する１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルを有するとして特徴付けられる。
【０２０１】
他の態様において、化合物１：グリセリルトリオレアートは、ppm±０.１で表して、次の１７８.６、１５５.０、１３４.４、１３０.６、１２６.０、１１９.４および３５.８の位置に特徴的ピークを有する１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルを有するとして特徴付けられる。
【０２０２】
さらに他の態様において、化合物１：グリセリルトリリノレートは、ppm±０.１で表して、次の１７８.６、１７２.８、１７１.５、１６９.８、１６５.１、１５５.０、１４２.９、１３９.３、１３７.４、１３４.４、１３３.１、１３０.６、１２６.０、１１９.４、１１７.６、１１２.０、８６.５、６７.２、６３.９、５９.７、３５.８、３４.８、３１.７、３０.６、２８.２および１４.８の位置に特徴的ピークを有する１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルを有するとして特徴付けられる。
【０２０３】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリリノレートは、示差走査熱量測定(ＤＳＣ)において、１８２.３℃に吸熱ピークを有するとして特徴付けられる。他の態様において、化合物１：グリセリルトリリノレートは、示差走査熱量測定(ＤＳＣ)において、１８２.３±０.２℃に吸熱ピークを有するとして特徴付けられる。他の態様において、化合物１：グリセリルトリリノレートは、示差走査熱量測定(ＤＳＣ)において、１８２.３±０.５℃に吸熱ピークを有するとして特徴付けられる。
【０２０４】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリリノレートにおける化合物１対グリセリルトリリノレートの比または化学量論比は、６：１である。ある態様において、化合物１：グリセリルトリリノレートにおける化合物１対グリセリルトリリノレートの比または化学量論比は、約６：約１である。
【０２０５】
化合物１：トリアセチン
化合物１とグリセリルトリアセテート(トリアセチン)を含む共結晶を、以後、“化合物１：グリセリルトリアセテート”または“化合物１：トリアセチン”と称する。
【０２０６】
化合物１：トリアセチンの特徴付けは、後に実施例部分で詳述する。図１８は、化合物１：トリアセチンのＸＲＰＤパターンの例である。図１９は、化合物１：トリアセチンの１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルである。図２０は、化合物１：トリアセチンのＤＳＣサーモグラム。
【０２０７】
ある態様において、化合物１：トリアセチンは、２シータ±０.２度で表して、次の４.９、９.５、９.８および１４.７の位置に１以上の特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。
【０２０８】
ある態様において、化合物１：トリアセチンは、２シータ±０.２度で表して、次の４.９、９.５、９.８、１４.７、１６.５、１８.２および２３.１の位置に１以上の特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。
【０２０９】
他の態様において、化合物１：トリアセチンは、実質的に図１８に示すのと同じＸＲＰＤ粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。Ｘ線粉末回折パターンは、室温で、Ｃｕ  Ｋアルファ照射を使用して得る。
【０２１０】
ある態様において、化合物１：トリアセチンは、ppm±０.１で表して、次の１７８.２、１５５.１、１５４.８、１１９.７および１１９.２の位置に特徴的ピークを有する１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルを有するとして特徴付けられる。
【０２１１】
ある態様において、化合物１：トリアセチンは、ppm±０.１で表して、次の１７８.２、１５５.１、１５４.８、１３４.１、１２５.９、１２５.６、１１９.７、１１９.２および３５.３の位置に特徴的ピークを有する１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルを有するとして特徴付けられる。
【０２１２】
ある態様において、化合物１：トリアセチンは、ppm±０.１で表して、次の１７８.２、１６５.４、１６４.３、１５５.１、１５４.８、１５４.１、１４９.４、１４６.８、１４５.６、１４０.０、１３４.１、１３３.２、１３２.３、１２７.０、１２５.９、１２５.６、１２４.３、１２０.６、１１９.７、１１９.２、１１８.３、１１７.６、１１１.９、１１１.１、１１０.４、３５.３、３５.０、３１.８、２９.８、２１.９、２０.４および１８.９の位置に特徴的ピークを有する１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルを有するとして特徴付けられる。
【０２１３】
ある態様において、化合物１：トリアセチンは、示差走査熱量測定(ＤＳＣ)において、化合物１：グリセリルトリトリアセチン共結晶の融解に対応する、１２３.９℃(ピーク)に吸熱ピークを有するとして特徴付けられる。この事象の後、１４１.９℃のもう一つの吸熱および１９３.８℃のさらにもう一つの吸熱がある。
【０２１４】
化合物１：グリセリルトリブチレート
化合物１とグリセリルトリブチレートを含む共結晶を、以後、“化合物１：グリセリルトリブチレート”と称する。
【０２１５】
化合物１：グリセリルトリブチレートの特徴付けは、後に実施例部分で詳述する。図２１は、化合物１：グリセリルトリブチレートのＸＲＰＤパターンの例である。
【０２１６】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリブチレートは、２シータ±０.２度で表して、次の６.８、９.５および２２.６の位置に１以上の特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。
【０２１７】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリブチレートは、２シータ±０.２度で表して、次の４.８、４.９、６.８、９.５、９.６、１４.３、１８.０、１９.０、１９.８、２１.４、２２.６および２３.８の位置に１以上の特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。
【０２１８】
他の態様において、化合物１：グリセリルトリブチレートは、実質的に図２１に示すのと同じＸＲＰＤ粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。Ｘ線粉末回折パターンは、室温で、Ｃｕ  Ｋアルファ照射を使用して得る。
【０２１９】
化合物１：グリセリルトリステアレート
化合物１とグリセリルトリステアレートを含む共結晶を、以後、“化合物１：グリセリルトリステアレート”と称する。
【０２２０】
化合物１：グリセリルトリステアレートの特徴付けは、後に実施例部分で詳述する。図２２は、化合物１：グリセリルトリステアレートのＸＲＰＤパターンの例である。図２３は、化合物１：グリセリルトリステアレートの１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルである。図２４は、化合物１：グリセリルトリステアレートのＤＳＣサーモグラムである。
【０２２１】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリステアレートは、２シータ±０.２度で表して、次の３.６、６.９および１１.０の位置に１以上の特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。
【０２２２】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリステアレートは、２シータ±０.２度で表して、次の３.６、６.２、６.９、９.３、１１.０、１７.０および１８.２の位置に１以上の特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。
【０２２３】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリステアレートは、２シータ±０.２度で表して、次の３.６、５.４、６.２、６.９、９.３、１１.０、１２.１、１２.６、１３.４、１３.９、１５.４、１６.４、１７.０、１８.２、１８.５、１９.４、２０.０、２０.４、２１.８、２３.８、２６.０、２７.０、２８.４、２９.１、２９.９、３１.２および３２.８の位置に１以上の特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。
【０２２４】
他の態様において、化合物１：グリセリルトリステアレートは、実質的に図２２に示すのと同じＸＲＰＤ粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。Ｘ線粉末回折パターンは、室温で、Ｃｕ  Ｋアルファ照射を使用して得る。
【０２２５】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリステアレートは、ppm±０.１で表して、次の１７８.５、１５５.０および１１９.５の位置に特徴的ピークを有する１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルを有するとして特徴付けられる。
【０２２６】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリステアレートは、ppm±０.１で表して、次の１７８.５、１５５.０、１３４.４、１２６.１、１１９.５および３５.７の位置に特徴的ピークを有する１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルを有するとして特徴付けられる。
【０２２７】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリステアレートは、ppm±０.１で表して、次の１７８.５、１７２.９、１７１.６、１６９.９、１６５.０、１５５.０、１４３.６、１３９.４、１３７.２、１３５.１、１３４.４、１３３.０、１２７.３、１２６.１、１１９.５、１１７.６、１１２.０、６７.３、６４.１、５９.６、３５.７、３４.７、３１.７、３０.６、２３.６および１４.８の位置に特徴的ピークを有する１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルを有するとして特徴付けられる。
【０２２８】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリステアレートは、示差走査熱量測定(ＤＳＣ)において、化合物１：グリセリルトリステアレート共結晶およびグリセリルトリステアレートの共晶融解に対応する、５５.１℃に吸熱ピークを有するとして特徴付けられる。この事象の後、無添加グリセリルトリステアレートの融解に対応する７１.３℃にもう一つの吸熱がある。２０１.３℃の重複吸熱および２０８.１℃の発熱は、それぞれ、無添加化合物１の共結晶融解および結晶化に対応する。２８４.７℃でのもう一つの吸熱は、無添加形態の化合物１の融解に対応する。
【０２２９】
化合物１：グリセリルトリパルミテート
化合物１とグリセリルトリパルミテートを含む共結晶を、以後、“化合物１：グリセリルトリパルミテート”と称する。
【０２３０】
化合物１：グリセリルトリパルミテートの特徴付けは、後に実施例部分で詳述する。図２５は、化合物１：グリセリルトリパルミテートのＸＲＰＤパターンの例である。図２６は、化合物１：グリセリルトリパルミテートの１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルである。図２７は、化合物１：グリセリルトリパルミテートのＤＳＣサーモグラムである。
【０２３１】
他の態様において、化合物１：グリセリルトリパルミテートは、２シータ±０.２度で表して、次の３.５、６.９および１１.０の位置に１以上の特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。
【０２３２】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリパルミテートは、２シータ±０.２度で表して、次の３.５、６.０、６.９、９.３、１７.０、１８.２および２３.７の位置に１以上の特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。
【０２３３】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリパルミテートは、２シータ±０.２度で表して、次の３.５、６.０、６.９、９.３、１１.０、１３.８、１５.１、１６.３、１７.０、１８.２、１９.４、１９.９、２０.３、２１.８および２３.７の位置に１以上の特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。
【０２３４】
他の態様において、化合物１：グリセリルトリパルミテートは、実質的に図２５に示すのと同じＸＲＰＤ粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。Ｘ線粉末回折パターンは、室温で、Ｃｕ  Ｋアルファ照射を使用して得る。
【０２３５】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリパルミテートは、ppm±０.１で表して、次の１７８.４、１５５.０、１４４.０および１１９.６の位置に特徴的ピークを有する１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルを有するとして特徴付けられる。
【０２３６】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリパルミテートは、ppm±０.１で表して、次の１７８.４、１５５.０、１３４.５、１２６.０、１１９.６および３５.７の位置に特徴的ピークを有する１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルを有するとして特徴付けられる。
【０２３７】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリパルミテートは、ppm±０.１で表して、次の１７８.４、１７３.０、１６９.９、１６５.０、１５５.０、１４４.０、１３９.５、１３７.２、１３４.５、１３３.０、１２７.２、１２６.０、１１９.６、１１７.５、１１２.０、６７.２、６４.０、５９.７、３５.７、３４.６、３１.７、３０.６、２３.７および１４.８の位置に特徴的ピークを有する１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルを有するとして特徴付けられる。
【０２３８】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリパルミテートは、示差走査熱量測定(ＤＳＣ)において、アイバカフトール：グリセリルトリパルミテート共結晶およびグリセリルトリパルミテートの共晶融解に対応する４７.７℃(ピーク)に吸熱ピークを有するとして特徴付けられる。この事象の後、無添加グリセリルトリパルミテートの融解に対応する６３.０℃(ピーク)のもう一つの吸熱がある。１７４.９℃(ピーク)の重複吸熱および１８６.７℃(ピーク)の発熱は、それぞれ、無添加アイバカフトールの共結晶融解および結晶化に対応する。２６６.２℃(ピーク)のもう一つの吸熱は、無添加形態のアイバカフトールの融解に対応する。
【０２３９】
化合物１：グリセリルトリドデカノエート
化合物１とグリセリルトリドデカノエートを含む共結晶を、以後、“化合物１：グリセリルトリドデカノエート”と称する。
【０２４０】
化合物１：グリセリルトリドデカノエートの特徴付けは、後に実施例部分で詳述する。図２８は、化合物１：グリセリルトリドデカノエートのＸＲＰＤパターンの例である。図２９は、化合物１：グリセリルトリドデカノエートの１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルである。
【０２４１】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリドデカノエートは、２シータ±０.２度で表して、次の３.５、４.４、６.１、６.９、８.６、９.３、１１.０、１２.１、１２.６、１３.２、１３.８、１５.０、１６.３、１７.０、１８.１、１９.５、２０.３、２１.９、２３.３、２３.９、２４.８および３０.２の位置に１以上の特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。
【０２４２】
他の態様において、化合物１：グリセリルトリドデカノエートは、２シータ±０.２度で表して、次の３.５、６.９および１１.０の位置に１以上の特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。
【０２４３】
他の態様において、化合物１：グリセリルトリドデカノエートは、２シータ±０.２度で表して、次の３.５、６.１、６.９、９.３、１１.０、１７.０、１８.１および２３.３の位置に１以上の特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。
【０２４４】
他の態様において、化合物１：グリセリルトリドデカノエートは、実質的に図２８に示すのと同じＸＲＰＤ粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。Ｘ線粉末回折パターンは、室温で、Ｃｕ  Ｋアルファ照射を使用して得る。
【０２４５】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリドデカノエートは、ppm±０.１で表して、次の１７８.４、１５５.０および１１９.６の位置に特徴的ピークを有する１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルを有するとして特徴付けられる。
【０２４６】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリドデカノエートは、ppm±０.１で表して、次の１７８.４、１５５.０、１３４.６、１２６.１、１１９.６および３５.６の位置に特徴的ピークを有する１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルを有するとして特徴付けられる。
【０２４７】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリドデカノエートは、ppm±０.１で表して、次の１７８.４、１７３.１、１７１.５、１６９.８、１６５.０、１５５.０、１４３.０、１３９.４、１３７.２、１３４.６、１３３.０、１２７.３、１２６.１、１１９.６、１１７.６、１１２.１、６７.１、６３.９、５９.７、３５.６、３１.７、３０.６および２３.６の位置に特徴的ピークを有する１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルを有するとして特徴付けられる。
【０２４８】
化合物１：グリセリルトリミリステート
化合物１とグリセリルトリミリステートを含む共結晶を、以後、“化合物１：グリセリルトリミリステート”と称する。
【０２４９】
化合物１：グリセリルトリミリステートの特徴付けは、後に実施例部分で詳述する。図３０は、化合物１：グリセリルトリミリステートのＸＲＰＤパターンの例である。図３１は、化合物１：グリセリルトリミリステートの１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルである。図３２は、化合物１：グリセリルトリミリステートのＤＳＣサーモグラムである。
【０２５０】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリミリステートは、２シータ±０.２度で表して、次の３.５、６.８および１０.９の位置に１以上の特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。
【０２５１】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリミリステートは、２シータ±０.２度で表して、次の３.５、６.０、６.８、９.２、１０.９、１６.９および１８.０の位置に１以上の特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。
【０２５２】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリミリステートは、２シータ±０.２度で表して、次の３.５、６.０、６.８、７.４、８.３、９.２、９.９、１０.９、１２.０、１２.５、１３.２、１３.７、１４.９、１６.２、１６.９、１７.６、１８.０、１８.５、１９.４、２０.０、２１.２、２２.１、２３.２、２４.１、２５.１、２６.４、２７.２、２７.７、２８.３、２９.２、２９.７、３１.０および３２.７の位置に１以上の特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。
【０２５３】
他の態様において、化合物１：グリセリルトリミリステートは、実質的に図３０に示すのと同じＸＲＰＤ粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。Ｘ線粉末回折パターンは、室温で、Ｃｕ  Ｋアルファ照射を使用して得る。
【０２５４】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリミリステートは、ppm±０.１で表して、次の１７８.１、１５５.０および１１９.９の位置に特徴的ピークを有する１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルを有するとして特徴付けられる。
【０２５５】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリミリステートは、ppm±０.１で表して、次の１７８.１、１５５.０、１３４.６、１２６.０、１１９.９および３５.６の位置に特徴的ピークを有する１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルを有するとして特徴付けられる。
【０２５６】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリミリステートは、ppm±０.１で表して、次の１７８.１、１７１.４、１６９.８、１６５.０、１５５.０、１４２.９、１３９.５、１３７.２、１３４.６、１３３.１、１２７.３、１２６.０、１１９.９、１１７.４、１１２.０、６７.０、６３.７、６１.４および３５.６の位置に特徴的ピークを有する１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルを有するとして特徴付けられる。
【０２５７】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリミリステートは、示差走査熱量測定(ＤＳＣ)において、グリセリルトリミリステートの融解に対応する、５９.２℃に吸熱ピークを有するとして特徴付けられる。この事象に続いて、吸熱と重複する１３４.４℃でのブロードの発熱が起こる。この事象の後、無添加化合物１の結晶化に対応する１７１.３℃での発熱がある。２８０.１℃でのもう一つの吸熱は、無添加形態の化合物１の融解に対応する。
【０２５８】
化合物１：グリセリルトリヘキサノエート
化合物１とグリセリルトリヘキサノエートを含む共結晶を、以後、“化合物１：グリセリルトリヘキサノエート”と称する。
【０２５９】
化合物１：グリセリルトリヘキサノエートの特徴付けは、後に実施例部分で詳述する。図３３は、化合物１：グリセリルトリヘキサノエートのＸＲＰＤパターンの例である。
【０２６０】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリヘキサノエートは、２シータ±０.２度で表して、次の６.５、９.２および２１.４の位置に１以上の特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。
【０２６１】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリヘキサノエートは、２シータ±０.２度で表して、次の４.７、６.５、９.２、１４.５、１７.４、１８.７、１９.９、２１.４および２４.４の位置に１以上の特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。
【０２６２】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリヘキサノエートは、２シータ±０.２度で表して、次の４.７、６.５、９.２、９.９、１１.８、１２.５、１４.５、１５.１、１５.６、１７.４、１８.７、１９.９、２１.４、２３.０、２４.４、２５.２、２６.５、２８.３、２９.１、３０.５および３５.６の位置に１以上の特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。
【０２６３】
他の態様において、化合物１：グリセリルトリヘキサノエートは、実質的に図３３に示すのと同じＸＲＰＤ粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。Ｘ線粉末回折パターンは、室温で、Ｃｕ  Ｋアルファ照射を使用して得る。
【０２６４】
化合物１：グリセリルトリデカノエート
化合物１とグリセリルトリデカノエートを含む共結晶を、以後、“化合物１：グリセリルトリデカノエート”と称する。
【０２６５】
化合物１：グリセリルトリデカノエートの特徴付けは、後に実施例部分で詳述する。図３４は、化合物１：グリセリルトリデカノエートのＸＲＰＤパターンの例である。図３５は、化合物１：グリセリルトリデカノエートの１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルである。
【０２６６】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリデカノエートは、２シータ±０.２度で表して、次の３.５、６.９および１０.９の位置に１以上の特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。
【０２６７】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリデカノエートは、２シータ±０.２度で表して、次の３.５、６.１、６.９、９.２、１０.９、１６.９、１８.１および２３.９の位置に１以上の特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。
【０２６８】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリデカノエートは、２シータ±０.２度で表して、次の３.５、６.１、６.９、９.２、１０.９、１１.８、１２.１、１２.６、１３.２、１３.８、１４.９、１６.３、１６.９、１８.１、１８.５、１９.４、１９.８、２０.３、２１.７、２３.４、２３.９、２５.２、２５.８、２７.２および２８.４の位置に１以上の特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。
【０２６９】
他の態様において、化合物１：グリセリルトリデカノエートは、実質的に図３４に示すのと同じＸＲＰＤ粉末回折パターンを有するとして特徴付けられる。Ｘ線粉末回折パターンは、室温で、Ｃｕ  Ｋアルファ照射を使用して得る。
【０２７０】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリデカノエートは、ppm±０.１で表して、次の１７８.５、１５５.０および１１９.５の位置に特徴的ピークを有する１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルを有するとして特徴付けられる。
【０２７１】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリデカノエートは、ppm±０.１で表して、次の１７８.５、１５５.０、１３４.９、１２６.１および３５.７の位置に特徴的ピークを有する１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルを有するとして特徴付けられる。
【０２７２】
ある態様において、化合物１：グリセリルトリデカノエートは、ppm±０.１で表して、次の１７８.５、１７１.６、１６９.９、１６５.０、１５５.０、１４３.３、１３９.５、１３７.２、１３４.９、１３３.０、１２７.３、１２６.１、１１９.５、１１７.６、１１２.１、６７.２、６４.０、５９.８、３５.７、３４.７、３１.７、３０.５および２５.８、２３.５の位置に特徴的ピークを有する１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルを有するとして特徴付けられる。
【０２７３】
溶解比較
化合物１：グリセリルトリオクタノエート、化合物１：グリセリルトリオレアートおよび化合物１：グリセリルトリリノレートと、非晶質化合物１および化合物１  ＳＤＤ(ＨＰＭＣＡＳ(ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートスクシネートまたはヒプロメロースアセテートスクシネート)に分散させた非晶質化合物１(すなわち、噴霧乾燥分散(ＳＤＤ))のＦｅＳＳＩＦにおける溶解プロファイルの比較を、図３６に示す。化合物１は、溶解度律速経口バイオアベイラビリティを有し、ＦｅＳＳＩＦにおける高溶液濃度の維持が、経口剤形開発を実行可能とするために、あらゆる固体形態の化合物１で必要である。化合物１：トリグリセリド共結晶は、溶解速度およびＦｅＳＳＩＦにおける高溶液濃度維持の点で、互いに類似する性能を有する。化合物１：トリグリセリド共結晶はまた長期間にわたり、化合物１の無添加非晶質および固体非晶質分散形態(化合物１  ＳＤＤ)の両者よりも優れた過飽和の維持を示す。さらに、インビボで、化合物１：トリグリセリド共結晶は、小腸で脂質エステラーゼ(リパーゼ)により代謝され、これが、トリグリセリドを効率的に除去し、ルシャトリエの原理に従い化合物１の濃度をさらに押し上げる。
【０２７４】
さらに、結晶化合物１：トリグリセリド共結晶は、化合物１の固体非晶質分散形態(化合物１  ＳＤＤ)を超える次の利点を有し得る：(１)共結晶を、それらが熱力学的に安定な条件下で製剤、保存および使用でき；(２)不純物の潜在的レベルを低減できる制御結晶化を開発でき(不純物は、溶媒を含むが、これに限定されない)；(３)より効率的かつ費用効果的な製造工程を開発でき(例えば、使用する溶媒が少なくてよく、噴霧乾燥より費用が低減される方法を開発できる)；そして(４)共結晶の製剤に安定化ポリマーを必要としなくなる。
【０２７５】
ある態様において、共結晶を喫食時人工腸液(ＦｅＳＳＩＦ)に溶解して、０.４mg／mLを超える化合物１の濃度を得る。他の態様において、共結晶を喫食時人工腸液(ＦｅＳＳＩＦ)に溶解して、０.４mg／mLを超える化合物１の濃度を得て、本濃度は、少なくとも１０時間維持される。他の態様において、共結晶を、喫食時人工腸液(ＦｅＳＳＩＦ)に３７℃の温度で溶解して、０.４mg／mLを超える化合物１の濃度を得て、濃度は、少なくとも１０時間維持される。ある態様において、共結晶を、喫食時人工腸液(ＦｅＳＳＩＦ)に溶解して、２時間以内に０.４mg／mLを超える化合物１の濃度を得る。他の態様において、共結晶を、喫食時人工腸液(ＦｅＳＳＩＦ)に溶解して、０.４mg／mLを超える化合物１の濃度を得て、本濃度は、安定化ポリマーを必要とせず、少なくとも１０時間維持される。ある態様において、安定化ポリマーはＨＰＭＣＡＳである。
【０２７６】
共結晶形態
ある面において、本発明は、化合物１と共形成剤を含む共結晶を製造する方法に関し、ここで、共形成剤は次の構造式
【化１９】
0006746569.tif 000020
〔式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、独立してＣ１−２９脂肪族である。〕
から選択され、ここで、化合物１は次の構造式
【化２０】
0006746569.tif 000021
により表され、
化合物１および共形成剤を撹拌または混合して、共結晶を形成する
工程を含む。
【０２７７】
ある態様において、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、独立してＣ７−２９脂肪族である。
【０２７８】
ある態様において、共形成剤は、４７０〜１４００Daの平均分子量を有する。
【０２７９】
ある態様において、共形成剤は、グリセリルトリオレアート、グリセリルトリステアレート、グリセロールトリデカノエート、グリセロールトリヘキサノエート、グリセリルトリトリデカノエート、グリセロールトリオクタノエート、グリセリルトリミリステート、グリセリルトリパルミテート、グリセリルトリブチレート、グリセリルトリリノレアート、グリセリルトリドデカノエート、グリセリルデカノアート、グリセリルトリパルミトオレアート、グリセロールトリエルケート、グリセリルトリプロピオネート、パルミトジオレイン、トリアラキドニン、グリセリルトリリノレネート、トリエルシン、グリセロールトリアラキデート、グリセリルトリ(ｃｉｓ−１３−ドコセノエート)、グリセリルトリペトロセリネート、グリセリルトリベヘネート、グリセリルトリエライデートおよびトリアセチンから選択される。
【０２８０】
ある態様において、共形成剤は、
【化２１】
0006746569.tif 000022
から選択される。
【０２８１】
ある態様において、化合物１は、無添加非晶質である。他の態様において、共形成剤は、無添加である。ある態様において、化合物１と共形成剤を、少なくとも０.５時間撹拌する。他の態様において、化合物１と共形成剤を、１８時間撹拌する。さらに他の態様において、化合物１と共形成剤を、少なくとも１８時間撹拌する。ある態様において、化合物１と共形成剤を、０.５時間を超えて(１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間、１１時間、１２時間、１３時間、１４時間、１５時間、１６時間、１７時間または１８時間を含むが、これらに限定されない)撹拌する。他の態様において、化合物１と共形成剤を、４０℃で撹拌する。他の態様において、化合物１と共形成剤を、約４０℃で撹拌する。さらに他の態様において、化合物１と共形成剤を、３５〜４５℃(例えば、３５℃、３６℃、３７℃、３８℃、３９℃、４０℃、４１℃、４２℃、４３℃、４４℃または４５℃)で撹拌する。ある態様において、化合物１と共形成剤を、少なくとも１８時間、４０℃で撹拌する。ある態様において、化合物１と共形成剤を、少なくとも０.５時間、４０℃で撹拌する。ある態様において、化合物１と共形成剤を、少なくとも１８時間、４０℃で撹拌する。
【０２８２】
非限定的例として、ある態様において、化合物１とグリセリルトリオクタノエートを、少なくとも０.５時間撹拌する；さらにある態様において、化合物１とグリセリルトリオクタノエートを、０.５時間撹拌する；さらに他の態様において、化合物１とグリセリルトリオクタノエートを、少なくとも０.５時間、４０℃で撹拌する；またさらに他の態様において、化合物１とグリセリルトリオクタノエートを、０.５時間、４０℃で撹拌する。
【０２８３】
ある態様において、本発明は、化合物１と共形成剤を含む共結晶を製造する方法を提供し、ここで、化合物１は次の構造式
【化２２】
0006746569.tif 000023
により表され、共形成剤は、次の構造式
【化２３】
0006746569.tif 000024
〔式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、独立してＣ１−２９脂肪族である。〕
から選択され、
(ａ) 共結晶を形成させるために、化合物１と共形成剤を含む混合物を調製し；そして
(ｂ)共結晶を濾過により回収する
工程を含む。
【０２８４】
他の態様において、方法は、所望により、さらに、
(ｃ)母液を回収し；
(ｄ)化合物１と回収した母液を少なくとも１８時間撹拌し；そして
(ｅ)共結晶を回収する
工程を含む。
【０２８５】
本発明のある面は、化合物１と共形成剤を含む共結晶を製造する方法を提供し、ここで、化合物１は次の構造式
【化２４】
0006746569.tif 000025
により表され、共形成剤は、次の構造式
【化２５】
0006746569.tif 000026
〔式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、独立してＣ１−２９脂肪族である。〕
から選択され；
(ａ)化合物１と共形成剤を含む混合物を調製し；そして
(ｂ)混合物を加熱する
工程を含む。
【０２８６】
ある態様において、化合物１と共形成剤を、約８０℃に加熱する。ある態様において、化合物１と共形成剤を、８０℃に加熱する。他の態様において、化合物１と共形成剤を約８０℃に１２時間加熱する。さらに他の態様において、化合物１と共形成剤を、８０℃で１２時間加熱する。他の態様において、化合物１と共形成剤を、約８０℃に２４時間加熱する。さらに他の態様において、化合物１と共形成剤を、８０℃に２４時間加熱する。
【０２８７】
本発明のある面は、化合物１と共形成剤を含む共結晶を製造する方法を提供し、ここで、化合物１は次の構造式
【化２６】
0006746569.tif 000027
により表され、共形成剤は、次の構造式
【化２７】
0006746569.tif 000028
〔式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、独立してＣ１−２９脂肪族である。〕
から選択され、
(a)化合物１と共形成剤を含む混合物を調製し；そして
(b)混合物を８０℃に加熱する
工程を含む。
【０２８８】
さらに他の態様において、化合物１と共形成剤を、８０℃で１２時間加熱する。さらに他の態様において、化合物１と共形成剤を、８０℃に２４時間加熱する。
【０２８９】
さらに本発明の他の面は、化合物１と共形成剤を含む共結晶を製造する方法を提供し、ここで、化合物１は次の構造式
【化２８】
0006746569.tif 000029
により表され、共形成剤は、次の構造式
【化２９】
0006746569.tif 000030
〔式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、独立してＣ１−２９脂肪族である。〕
から選択され、
(ａ)化合物１と共形成剤を含む混合物を調製し；そして
(ｂ)混合物を共形成剤の融点より約５〜１０℃高い温度に加熱する
工程を含む。
【０２９０】
本発明のある面は、化合物１と共形成剤を含む共結晶を製造する方法を提供し、ここで、化合物１は次の構造式
【化３０】
0006746569.tif 000031
により表され、共形成剤は次の構造式
【化３１】
0006746569.tif 000032
〔式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、独立してＣ１−２９脂肪族である。〕
から選択され、
(ａ)化合物１と共形成剤を含む混合物を調製し；
(ｂ)混合物を加熱する；
(ｃ)混合物を冷却し；そして
(ｄ)工程(ｂ)および(ｃ)を繰り返す
工程を含む。
【０２９１】
ある態様において、化合物１と共形成剤を、約８０℃に加熱する。他の態様において、化合物１と共形成剤を約８０℃に加熱し、約４０℃に冷却する。ある態様において、化合物１と共形成剤を、８０℃に加熱する。他の態様において、化合物１と共形成剤を８０℃に加熱し、４０℃に冷却する。他の態様において、化合物１と共形成剤を８０℃で１２時間加熱する。他の態様において、化合物１と共形成剤を８０℃に２４時間加熱する。さらに他の態様において、化合物１と共形成剤を８０℃に１２時間加熱し、約４０℃に冷却する。他の態様において、化合物１と共形成剤を８０℃に１２時間加熱する。さらに他の態様において、化合物１と共形成剤を８０℃に２４時間加熱し、約４０℃に冷却する。上記態様のいずれかにおいて、加熱および冷却の工程を繰り返す。
【０２９２】
本発明の他の面は、化合物１と共形成剤を含む共結晶を製造する方法を提供し、ここで、化合物１は次の構造式
【化３２】
0006746569.tif 000033
により表され、共形成剤は次の構造式
【化３３】
0006746569.tif 000034
〔式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、独立してＣ１−２９脂肪族である。〕
から選択され、
(ａ)化合物１と共形成剤を含む混合物を調製し；
(ｂ)混合物を約８０℃に加熱し；
(ｃ)混合物を冷却し；そして
(ｄ)工程(ｂ)および(ｃ)を繰り返す
工程を含む。
【０２９３】
他の態様において、化合物１および共形成剤を４０℃に冷却する。
【０２９４】
本発明の他の面は、化合物１と共形成剤を含む共結晶を製造する方法を提供し、ここで、化合物１は次の構造式
【化３４】
0006746569.tif 000035
により表され、共形成剤は次の構造式
【化３５】
0006746569.tif 000036
〔式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、独立してＣ１−２９脂肪族である。〕
から選択され、
(ａ)化合物１およびトリグリセリドを添加し；
(ｂ)約８０℃に加熱し；
(ｃ)約４０℃に冷却し；そして
(ｄ)工程(ｂ)および(ｃ)を繰り返す
工程を含む。
【０２９５】
ある態様において、共結晶を、例えば：化合物１と共形成剤を共粉砕することにより、化合物１と共形成剤を共粉砕して、少量の適当な溶媒を添加することにより、化合物１と共形成剤を共粉砕し、続いてアニールすることにより、化合物１と共形成剤を共粉砕し、続いて高温でアニールすることにより、化合物１と共形成剤を共粉砕し、続いて高湿度でアニールすることにより、化合物１と共形成剤を共粉砕し、続いて高温かつ高湿度でアニールすることにより、少なくとも共形成剤が液体である温度で化合物１と共形成剤を混合することにより、少なくとも共形成剤が液体である温度で化合物１と共形成剤を混合し、続いて結晶化期間後冷却することにより、共結晶がおよび共形成剤が安定である温度で化合物１および共形成剤を押し出すことによりまたは適当な溶媒中に化合物１および共形成剤を溶解し、溶媒を蒸発させることにより、三成分状態図において共結晶が安定であるスラリー組成で適当な溶媒に化合物１および共形成剤をスラリー化することにより製造できる。共結晶を、類似する方法で、複数の共形成剤と製造できる。
【０２９６】
ある態様において、共結晶を、共形成剤の融解温度を超える温度で遠心濾過により回収する。
【０２９７】
他の態様において、共結晶を濾過後洗浄して、過剰の共形成剤を除去する。
【０２９８】
上記のいずれかの方法で製造された共結晶を単離または精製する。共結晶は、ＨＰＬＣで測定して純粋である。ある態様において、共結晶は、９９％(ｗ／ｗ)を超える。他の態様において、化合物１：トリグリセリド共結晶は、９９.５％(ｗ／ｗ)を超える。ある態様において、化合物１：トリグリセリド共結晶は９９.５％(ｗ／ｗ)である。他の態様において、化合物１：トリグリセリド共結晶は９９.６％(ｗ／ｗ)である。他の態様において、化合物１：トリグリセリド共結晶は９９.７％(ｗ／ｗ)である。他の態様において、化合物１：トリグリセリド共結晶は９９.８％(ｗ／ｗ)である。他の態様において、化合物１：トリグリセリド共結晶は９９.９％(ｗ／ｗ)である。ある態様において、化合物１：グリセリルトリオクタノエート共結晶は９９.９％(ｗ／ｗ)である。他の態様において、化合物１：グリセリルトリオレアート共結晶は９９.９％(ｗ／ｗ)である。さらに他の態様において、化合物１：グリセリルトリリノレート共結晶は９９.５％(ｗ／ｗ)である。ＨＰＬＣによる不純物の検出限界は０.００５％である。
【０２９９】
本発明はまた化合物１と、グリセリルトリオクタノエート、グリセリルトリオレアートおよびグリセリルトリリノレートからなる群から選択される共結晶形成剤を含む共結晶を製造する方法を提供し、ここで、化合物１は次の構造式
【化３６】
0006746569.tif 000037
により表され、
化合物１および共結晶形成剤を撹拌して、共結晶を形成する
工程を含む。
【０３００】
ある態様において、共結晶形成剤はグリセリルトリオクタノエートである。
【０３０１】
ある態様において、共結晶形成剤はグリセリルトリオレアートである。
【０３０２】
ある態様において、共結晶形成剤はグリセリルトリリノレートである。
【０３０３】
本発明はまた化合物１と、グリセリルトリオクタノエート、グリセリルトリオレアートおよびグリセリルトリリノレートからなる群から選択される共結晶形成剤を含む共結晶を製造する方法を提供し、ここで、化合物１は次の構造式
【化３７】
0006746569.tif 000038
により表され、
化合物１および共形成剤を一緒に添加し；そして
加熱する
工程を含む。
【０３０４】
使用、製剤および投与
薬学的に許容される組成物
本発明のある面において、薬学的に許容される組成物が提供され、ここで、これらの組成物は、上記態様のいずれかの共結晶および薬学的に許容される担体または添加物を含む。
【０３０５】
ある態様において、薬学的に許容される組成物に存在する化合物１の少なくとも３０％が、ここに記載する化合物１：トリグリセリド共結晶の形態である。非限定的例として、化合物１の少なくとも３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９２.５％、９５％、９７.５％、９８％または９９％が、ここに記載する化合物１：トリグリセリド共結晶の形態で存在する。
【０３０６】
ある態様において、これらの組成物は、所望により１以上のさらなる治療剤をさらに含む。
【０３０７】
上記のように、本発明の薬学的に許容される組成物は、さらに薬学的に許容される担体、アジュバントまたは媒体を含み、これは、ここで使用する限り、所望の特定の剤形に適合する限り、任意かつすべての溶媒、希釈剤または他の液体媒体、分散または懸濁助剤、表面活性剤、等張剤、肥厚または乳化剤、防腐剤、固体結合剤、滑沢剤などを含む。Remington’s Pharmaceutical Sciences, Sixteenth Edition, E. W. Martin(Mack Publishing Co., Easton, Pa., 1980)は、薬学的に許容される組成物の製剤に使用する多様な担体およびその製造のために既知技術を開示する。何らかの慣用の担体媒体が、何らかの望ましくない生物学的効果を生じるか、他に有害な方法で薬学的に許容される組成物中の何らかの他の成分と相互作用するなどにより、本発明の化合物と不適合でない限り、本発明の範囲内であることが意図される。薬学的に許容される担体として役立ち得る物質のいくつかの例は、イオン交換体、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、血清タンパク質、例えばヒト血清アルブミン、緩衝物質、例えばリン酸、グリシン、ソルビン酸またはソルビン酸カリウム、飽和植物脂肪酸の部分的グリセリド混合物、水、塩または電解質、例えば硫酸プロタミン、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩、コロイド状シリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、ポリアクリル酸、蝋、ポリエチレン−ポリオキシプロピレンブロックポリマー、羊毛脂、ラクトース、グルコースおよびスクロースのような糖；デンプン、例えばトウモロコシデンプンおよびジャガイモデンプン；セルロースおよびその誘導体、例えばカルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロースおよび酢酸セルロース；粉末化トラガカント；麦芽；ゼラチン；タルク；添加物、例えばカカオバターおよび坐薬蝋；油、例えばピーナツ油、綿実油；紅花油；ゴマ油；オリーブ油；トウモロコシ油およびダイズ油；グリコール；例えばプロピレングリコールまたはポリエチレングリコール；エステル、例えばオレイン酸エチルおよびラウリン酸エチル；寒天；緩衝剤、例えば水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウム；アルギン酸；発熱性物質除去水；等張食塩水；リンゲル液；エチルアルコールおよびリン酸緩衝溶液ならびに他の非毒性適合性滑沢剤、例えばラウリル硫酸ナトリウムおよびステアリン酸マグネシウムを含むがこれらに限定されず、同様に着色剤、放出剤、コーティング剤、甘味剤、風味剤および芳香剤、防腐剤および抗酸化剤も、製剤者の判断により、組成物に存在してよい。
【０３０８】
化合物および薬学的に許容される組成物の使用
嚢胞性線維症に加えて、ＣＦＴＲ活性の調節は、ＣＦＴＲが介在する分泌性疾患および他のタンパク質折りたたみ疾患のような、ＣＦＴＲにおける変異により直接引き起こされない他の疾患にも有利であり得る。これらは、慢性閉塞性肺疾患(ＣＯＰＤ)、ドライアイ疾患およびシェーグレン症候群を含む。ＣＯＰＤは、進行性であり、完全に可逆性ではない吸気制限(airflow limitation)により特徴付けられる。吸気制限は、粘液過分泌、気腫および細気管支炎による。変異体または野生型ＣＦＴＲのアクティベーターは、ＣＯＰＤに一般的である粘液過分泌および粘液線毛クリアランス障害の処置の可能性を提供する。特に、ＣＦＴＲを通過するアニオン分泌増加は、気道表面液体への流体輸送を促進し、粘液を水和し、繊毛流体粘性を最適化し得る。これは、粘液線毛クリアランスの促進と、ＣＯＰＤと関係する症状の軽減に至る。ドライアイ疾患は、涙液産生減少および異常な涙液膜脂質、タンパク質およびムチンプロファイルにより特徴付けられる。ドライアイには多くの原因があり、そのいくつかは、加齢、レーシック眼手術、関節炎、投薬、化学的／熱的熱傷、アレルギーならびに嚢胞性線維症およびシェーグレン症候群のような疾患を含む。ＣＦＴＲを通るアニオン分泌の増加は、角膜内皮細胞および眼周囲の分泌腺からの流体輸送を増強し、角膜水和を増加させる。これは、ドライアイ疾患と関係する症状の軽減に役立つ。シェーグレン症候群は、免疫系が眼、口腔、皮膚、呼吸組織、肝臓、膣および腸を含む、体内の湿気産生腺を攻撃する自己免疫性疾患である。症状は、ドライアイ、口渇および膣乾燥ならびに肺疾患を含む。本疾患はまたリウマチ性関節炎、全身性狼瘡、全身性硬化症および多発筋炎／皮膚筋炎とも関係する。タンパク質輸送欠損がこの疾患の原因と考えられ、それに対する処置選択肢は限られる。ＣＦＴＲ活性の増強因子または誘導因子は、本疾患に冒された多様な臓器を水和し、関連症状軽減に役立つ。
【０３０９】
ある面において、本発明は、患者に上記の態様のいずれかの共結晶を投与することを含む、該患者における疾患を処置するまたは重症度を軽減する方法を提供し、該疾患は、嚢胞性線維症、喘息、喫煙誘導性ＣＯＰＤ、慢性気管支炎、鼻副鼻腔炎、便秘、膵炎、膵臓機能不全、先天性両側輸精管欠損(ＣＢＡＶＤ)による男性不妊症、軽度肺疾患、特発性膵炎、アレルギー性気管支肺アスペルギルス症(ＡＢＰＡ)、肝疾患、遺伝性気腫、遺伝性ヘモクロマトーシス、凝血−線維素溶解欠損、例えば、プロテインＣ欠損、１型遺伝性血管浮腫、脂質処理欠損、例えば、家族性高コレステロール血症、１型カイロミクロン血症、無ベータリポタンパク血症、リソソーム蓄積疾患、例えば、Ｉ細胞病／偽性ハーラー、ムコ多糖症、サンドホッフ／テイ・サックス、クリグラー・ナジャー症候群II型、多腺性内分泌障害／高インスリン血症、糖尿病、ラロン小人症、骨髄ルオキシダーゼ欠損、原発性副甲状腺機能低下症、黒色腫、glycanosis CDG type 1、先天性甲状腺機能亢進症、骨形成不全症、遺伝性低フィブリノーゲン血症、ＡＣＴ欠損、尿崩症(ＤＩ)、神経下垂体性ＤＩ、腎性ＤＩ、シャルコー・マリー・トゥース症候群、ペリツェウス・メルツバッハ病、神経変性疾患、例えばルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、進行性核上性麻痺、ピック病、いくつかのポリグルタミン神経学障害、例えばハンチントン、脊髄小脳失調症Ｉ型、球脊髄性筋萎縮症、歯状核赤核淡蒼球ルイ体萎縮症および筋緊張性ジストロフィーならびに海綿状脳症、例えば遺伝性クロイツフェルト・ヤコブ病(プリオンタンパク質処理欠損による)、ファブリー病、ストロイスラー・シャインカー症候群、ＣＯＰＤ、ドライアイ疾患またはシェーグレン疾患、骨粗鬆症、骨減少症、骨治癒および骨成長(骨修復、骨再生、骨差異吸収減少および骨沈着増加を含む)、ゴーハム症候群、クロライドチャネル病、例えば先天性筋強直症(トムソンおよびベッカー型)、バーター症候群III型、デント病、てんかん、過剰驚愕症、リソソーム蓄積疾患、アンジェルマン症候群および原発性線毛機能不全(ＰＣＤ)(内臓逆位を伴うＰＣＤ(カルタゲナー症候群としても知られる)、内臓逆位および毛様体形成不全を伴わないＰＣＤを含む、繊毛の構造および／または機能の遺伝性障害をいう用語である)から選択される。ある態様において、共結晶は、ここに記載するような、化合物１：トリグリセリド共結晶である。
【０３１０】
ある態様において、方法は、患者に上記の態様のいずれかの共結晶を投与することを含む、該患者における嚢胞性線維症の処置または重症度低減を含む。ある態様において、共結晶は、ここに記載するような、化合物１：トリグリセリド共結晶である。ある態様において、患者は、ヒトＣＦＴＲの変異体形態を有する。他の態様において、患者は、ヒトＣＦＴＲにおける次の変異ΔＦ５０８、Ｒ１１７ＨおよびＧ５５１Ｄの１以上を含む。ある態様において、方法は、患者に、ここに記載する化合物１：トリグリセリド共結晶を投与することを含む、ヒトＣＦＴＲのΔＦ５０８変異を有する患者における嚢胞性線維症の処置または重症度低減を含む。ある態様において、方法は、患者に、ここに記載する化合物１：トリグリセリド共結晶を投与することを含む、ヒトＣＦＴＲのＧ５５１Ｄ変異を有する患者における嚢胞性線維症の処置または重症度低減を含む。ある態様において、方法は、患者に、ここに記載する化合物１：トリグリセリド共結晶を投与することを含む一アレルにヒトＣＦＴＲのΔＦ５０８変異を有する患者における嚢胞性線維症の処置または重症度低減を含む。ある態様において、方法は、患者に、ここに記載する化合物１：トリグリセリド共結晶を投与することを含む、両アレルにヒトＣＦＴＲのΔＦ５０８変異を有する患者における嚢胞性線維症の処置または重症度低減を含む。ある態様において、方法は、患者に、ここに記載する化合物１：トリグリセリド共結晶を投与することを含む、アレルにヒトＣＦＴＲのＧ５５１Ｄ変異を有する患者における嚢胞性線維症の処置または重症度低減を含む。ある態様において、患者に、ここに記載する化合物１：トリグリセリド共結晶を投与することを含む、両アレルにヒトＣＦＴＲのＧ５５１Ｄ変異を有する患者における嚢胞性線維症の処置または重症度低減を含む。
【０３１１】
さらに他の面において、本発明は、ＣＦＴＲ変異が関与する状態、疾患または障害を処置するまたは重症度を低減する方法を提供する。ある態様において、本発明は、ＣＦＴＲ活性の欠損が関与する状態、疾患または障害を処置する方法を提供し、本方法は、処置を必要とする対象、好ましくは哺乳動物に、上記の態様のいずれかの共結晶を含む組成物を投与することを含む。ある態様において、共結晶は、ここに記載するような、化合物１：トリグリセリド共結晶である。
【０３１２】
ある態様において、本発明は、ＣＦＴＲをコードする遺伝子における変異または環境的因子(例えば、喫煙)によるＣＦＴＲ機能低下と関係する疾患を処置する方法を提供する。これらの疾患は、嚢胞性線維症、慢性気管支炎、再発性気管支炎、急性気管支炎、先天性両側輸精管欠損(ＣＢＡＶＤ)による男性不妊症、先天性の子宮および膣欠損(ＣＡＵＶ)による女性不妊症、特発性慢性膵炎(ＩＣＰ)、特発性再発性膵炎、特発性急性膵炎、慢性鼻副鼻腔炎、原発性硬化性胆管炎、アレルギー性気管支肺アスペルギルス症、糖尿病、ドライアイ、便秘、アレルギー性気管支肺アスペルギルス症(ＡＢＰＡ)、骨疾患(例えば、骨粗鬆症)および喘息を含み、患者に上記の態様のいずれかの共結晶を投与することを含む。ある態様において、共結晶は、ここに記載するような、化合物１：トリグリセリド共結晶である。
【０３１３】
ある態様において、本発明は、正常ＣＦＴＲ機能と関係する疾患を処置する方法を提供する。これらの疾患は、慢性閉塞性肺疾患(ＣＯＰＤ)、慢性気管支炎、再発性気管支炎、急性気管支炎、鼻副鼻腔炎、便秘、慢性膵炎、再発性膵炎および急性膵炎を含む膵炎、膵臓機能不全、先天性両側輸精管欠損(ＣＢＡＶＤ)による男性不妊症、軽度肺疾患、特発性膵炎、肝疾患、遺伝性気腫、胆石、胃食道逆流性疾患、消化器悪性腫瘍、炎症性腸疾患、便秘、糖尿病、関節炎、骨粗鬆症および骨減少症を含み、該患者に上記の態様のいずれかの共結晶を投与することを含む。ある態様において、共結晶は、ここに記載するような、化合物１：トリグリセリド共結晶である。
【０３１４】
ある態様において、本発明は、有効量の上記態様のいずれかの共結晶の有効量を該哺乳動物に投与する過程を含む、遺伝性ヘモクロマトーシス、凝血−線維素溶解欠損、例えば、プロテインＣ欠損、１型遺伝性血管浮腫、脂質処理欠損、例えば、家族性高コレステロール血症、１型カイロミクロン血症、無ベータリポタンパク血症、リソソーム蓄積疾患、例えば、Ｉ細胞病／偽性ハーラー、ムコ多糖症、サンドホッフ／テイ・サックス、クリグラー・ナジャー症候群II型、多腺性内分泌障害／高インスリン血症、糖尿病、ラロン小人症、骨髄ルオキシダーゼ欠損、原発性副甲状腺機能低下症、黒色腫、glycanosis CDG type 1、先天性甲状腺機能亢進症、骨形成不全症、遺伝性低フィブリノーゲン血症、ＡＣＴ欠損、尿崩症(ＤＩ)、神経下垂体性ＤＩ、腎性ＤＩ、シャルコー・マリー・トゥース症候群、ペリツェウス・メルツバッハ病、神経変性疾患、例えばアルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、進行性核上性麻痺、ピック病、いくつかのポリグルタミン神経学障害、例えばハンチントン、脊髄小脳失調症Ｉ型、球脊髄性筋萎縮症、歯状核赤核淡蒼球ルイ体萎縮症および筋緊張性ジストロフィーならびに海綿状脳症、例えば遺伝性クロイツフェルト・ヤコブ病(プリオンタンパク質処理欠損による)、ファブリー病、ストロイスラー・シャインカー症候群、ゴーハム症候群、クロライドチャネル病、先天性筋強直症(トムソンおよびベッカー型)、バーター症候群III型、デント病、てんかん、過剰驚愕症、リソソーム蓄積疾患、アンジェルマン症候群、原発性線毛機能不全(ＰＣＤ)、内臓逆位を伴うＰＣＤ(カルタゲナー症候群としても知られる)、内臓逆位および毛様体形成不全を伴わないＰＣＤまたはシェーグレン疾患を含む、正常ＣＦＴＲ機能と関係する疾患を処置する方法を提供する。ある態様において、共結晶は、ここに記載するような、化合物１：トリグリセリド共結晶である。
【０３１５】
代替的態様によって、本発明は、該哺乳動物にここに記載する化合物１：トリグリセリド共結晶を含む組成物の有効量を投与する過程を含む、嚢胞性線維症を処置する方法を提供する。
【０３１６】
本発明によって、化合物１：トリグリセリド共結晶またはその薬学的に許容される組成物の“有効量”は、上記疾患、障害または状態の１以上を処置するまたは重症度を低減するのに有効な量である。
【０３１７】
ここに記載する化合物１：トリグリセリド共結晶またはその薬学的に許容される組成物を、上記疾患、障害または状態の１以上を処置するまたは重症度を低減するのに有効なあらゆる量およびあらゆる投与経路で投与してよい。
【０３１８】
ある態様において、ここに記載する化合物１：トリグリセリド共結晶またはその薬学的に許容される組成物は、呼吸器および非呼吸器上皮の頂端膜に残存ＣＦＴＲ活性を示す患者における嚢胞性線維症の処置または重症度低減に有用である。上皮性表面の残存ＣＦＴＲ活性の存在は、当分野で知られる方法、例えば、標準電気生理学的、生化学的または組織化学的技術を使用して、容易に検出できる。このような方法は、インビボまたはエクスビボ電気生理学的技術、汗または唾液Ｃｌ−濃度の測定または細胞表面密度をモニターするためのエクスビボ生化学的または組織化学的技術使用して、ＣＦＴＲ活性を同定する。このような方法を使用して、残存ＣＦＴＲ活性は、最も一般的変異、ΔＦ５０８についてホモ接合性またはヘテロ接合性である患者を含む、多様な種々の変異についてヘテロ接合性またはホモ接合性である患者において、容易に検出できる。
【０３１９】
他の態様において、ここに記載する化合物１：トリグリセリド共結晶またはその薬学的に許容される組成物は、薬理学的方法または遺伝子治療を使用して誘発または増強された残存ＣＦＴＲ活性を有する患者における嚢胞性線維症の処置または重症度低減に有用である。このような方法は、細胞表面に存在するＣＦＴＲの量を増加させ、それにより患者に従前存在しなかったＣＦＴＲ活性を誘発するかまたは患者における残存ＣＦＴＲ活性の既存レベルを増強する。
【０３２０】
ある態様において、ここに記載する化合物１：トリグリセリド共結晶またはその薬学的に許容される組成物は、残存ＣＦＴＲ活性を示すある遺伝子型内、例えば、クラスIII変異(制御またはゲーティング障害)、クラスIV変異(コンダクタンス改変)またはクラスＶ変異(合成減少)の患者における嚢胞性線維症の処置または重症度低減に有用である(Lee R. Choo-Kang, Pamela L., Zeitlin, Type I, II, III, IV, and V cystic fibrosis Transmembrane Conductance Regulator Defects and Opportunities of Therapy; Current Opinion in Pulmonary Medicine 6:521 - 529, 2000)。残存ＣＦＴＲ活性を示す他の患者遺伝子型は、これらのクラスの一つにホモ接合性であるまたはクラスＩ変異、クラスII変異または分類を欠く変異を含む何らかの他のクラスの変異とヘテロ接合性である患者を含む。
【０３２１】
ある態様において、ここに記載する化合物１：トリグリセリド共結晶またはその薬学的に許容される組成物は、一般に上皮の頂端膜における残存ＣＦＴＲ活性の量と相関するある臨床的表現型、例えば、中度から軽度臨床的表現型内の患者における嚢胞性線維症の処置または重症度低減に有用である。このような表現型は、膵臓機能不全を示す患者または特発性膵炎および先天性両側輸精管欠損または軽度肺疾患を有すると診断された患者を含む。
【０３２２】
必要な正確な量は、対象の種、年齢および一般的状態、疾患または障害の重症度、特定の薬剤、その投与方法などにより、対象毎に変わる。本発明の化合物は、好ましくは投与の容易さおよび用量の均一性のために、用量単位形態で製剤する。ここで使用する表現“用量単位形態”は、処置する患者に適する薬剤の物理的に分離した単位をいう。しかしながら、本発明の化合物および組成物の全体的日々の使用は、合理的医学的判断の範囲内で処置医が決定する。ある特定の患者または生物に対する特定の有効用量レベルは、処置する障害および障害の重症度；用いる特定の化合物の活性；用いる特定の組成物；患者の年齢、体重、一般的健康、性別および食習慣；投与の時間、投与経路および用いる特定の化合物の排泄速度；処置の期間；用いる特定の化合物と組み合わせてまたは同時に使用される薬物および医学分野で知られる類似する因子を含む、多様な因子による。ここで使用する用語“患者”は、動物、好ましくは哺乳動物、最も好ましくはヒトを意味する。
【０３２３】
本発明の薬学的に許容される組成物は、ヒトおよび他の動物に、処置する疾患または障害の重症度により、経口、直腸、非経腸、嚢内、膣内、腹腔内、局所的(粉末、軟膏、液滴またはパッチとして)、経口または経鼻スプレーとして口腔になどで投与できる。ある態様において、本発明の化合物を、所望の治療効果を得るために、経口的または非経腸的に、１日あたり約０.０１mg／kg〜約５０mg／kgおよび好ましくは約０.５mg／kg〜約２５mg／kg対象体重の用量レベルで、１日１回以上投与し得る。
【０３２４】
経口投与用液体投与形態は、薬学的に許容されるエマルジョン剤、マイクロエマルジョン剤、溶液剤、懸濁液剤、シロップ剤およびエリキシル剤を含むが、これらに限定されない。活性化合物に加えて、液体投与形態は、当分野で一般的に使用される不活性希釈剤、例えば、水または他の溶媒、可溶化剤および乳化剤、例えば、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１,３−ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド、油(特に、綿実油、ピーナッツ油、トウモロコシ油、胚芽油、オリーブ油、ヒマシおよびゴマ油)、グリセロール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレングリコールおよびソルビタンの脂肪酸エステルおよびそれらの混合物を含み得る。不活性希釈剤以外に、経口組成物はまた湿潤剤、乳化剤および懸濁化剤のようなアジュバント、甘味剤、風味剤および芳香剤も含み得る。
【０３２５】
注射可能製剤、例えば、無菌注射可能水性または油性懸濁液を、適当な分散または湿潤剤および懸濁化剤を使用して、当分野で知られるように製剤し得る。無菌注射可能製剤はまた、例えば、１,３−ブタンジオール中の溶液のような、非毒性非経腸的許容される希釈剤または溶媒中の無菌注射可能溶液、懸濁液またはエマルジョンでもよい。優れた用い得る許容される媒体および溶媒は、水、リンゲル液、Ｕ.Ｓ.Ｐ.および等張塩化ナトリウム溶液である。さらに、無菌の不揮発性油は、溶媒または懸濁媒体として慣用的に用いられる。この目的で、合成モノまたはジグリセリドを含むあらゆる無刺激不揮発性油を使用できる。さらに、オレイン酸のような脂肪酸は注射可能物の製造に使用される。
【０３２６】
注射可能製剤は、例えば、細菌保持フィルターでの濾過によりまたは使用前に無菌水または他の無菌注射可能媒体に溶解もしくは分散できる無菌固体組成物の形態の滅菌剤を取り込むことにより、滅菌できる。
【０３２７】
本発明の化合物の効果を持続させるために、皮下または筋肉内注射からの化合物の吸収を遅延させることがしばしば望ましい。これは、難水溶性の結晶または非晶質物質の液体懸濁液の使用により達成され得る。その時点で化合物の吸収速度はその溶解速度に依存し、これは、次に、結晶サイズおよび結晶形態による。あるいは、非経腸的に投与された化合物形態の吸収遅延は、油媒体に化合物を溶解または懸濁することにより達成される。注射可能デポー形態は、ポリラクチド−ポリグリコリドのような生分解性ポリマー中の化合物のマイクロカプセルマトリクスの形成により製造される。化合物対ポリマー比および用いる特定のポリマーの性質により、化合物放出速度を制御できる。他の生分解性ポリマーの例は、ポリ(オルトエステル)およびポリ(無水物)を含む。デポー注射可能製剤はまた、身体組織と適合性であるリポソームまたはマイクロエマルジョンに化合物を封入することによっても製造される。
【０３２８】
直腸または膣投与用組成物は、本発明の化合物と、好ましくは、環境温度で固体であるが、体温で液体であり、それゆえに、直腸または膣腔で融解し、活性化合物を放出する、カカオバター、ポリエチレングリコールまたは坐薬蝋のような適当な非刺激性添加物または担体の混合により製造できる坐薬である。
【０３２９】
経口投与用の固体投与形態は、カプセル剤、錠剤、丸剤、散剤および顆粒剤を含む。このような固体投与形態において、活性化合物を、クエン酸ナトリウムまたはリン酸二カルシウムのような不活性な薬学的に許容される添加物または担体および／またはａ)デンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトールおよびケイ酸のような充填剤またはエクステンダー、ｂ)例えば、カルボキシメチルセルロース、アルギネート、ゼラチン、ポリビニルピロリジノン、スクロースおよびアカシアのような結合剤、ｃ)グリセロールのような湿潤剤、ｄ)寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモまたはタピオカデンプン、アルギン酸、ある種のシリケートおよび炭酸ナトリウムのような崩壊剤、ｅ)パラフィンのような溶解遅延剤、ｆ)四級アンモニウム化合物のような吸収加速剤、ｇ)例えば、セチルアルコールおよびモノステアリン酸グリセロールのような湿潤剤、ｈ)カオリンおよびベントナイトクレイのような吸収剤およびｉ)タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固形ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウムのような滑沢剤およびそれらの混合物と混合する。カプセル剤、錠剤および丸剤の場合、本投与形態は緩衝剤も含み得る。
【０３３０】
類似タイプの固体組成物はまた、ラクトースまたは乳糖ならびに高分子量ポリエチレングリコールなどのような添加物を使用する、軟または硬充填ゼラチンカプセルの充填剤としても用い得る。錠剤、糖衣錠剤、カプセル剤、丸剤および顆粒の固体投与形態は、腸溶性コーティングおよび他の製剤分野で周知のコーティングのようなコーティングおよび殻を備えてもよい。それらは、所望により不透明剤を含んでよく、また、所望により、遅延方式で、腸管のある部分にのみまたはそこに優先的に活性成分を放出する組成のものでもあり得る。使用できる包埋組成物は、高分子物質および蝋を含む。類似タイプの固体組成物はまた、ラクトースまたは乳糖ならびに高分子量ポリエチレングリコールなどのような添加物を使用する、軟または硬充填ゼラチンカプセルの充填剤としても用い得る。
【０３３１】
活性化合物はまた、上記のような１以上の添加物とのマイクロカプセル化形態でもよい。錠剤、糖衣錠剤、カプセル剤、丸剤および顆粒剤の固体投与形態は、腸溶性コーティング、放出制御コーティングおよび他の製剤分野で周知のコーティングのようなコーティングおよび殻を備えてよい。このような固体投与形態において、活性化合物を、スクロース、ラクトースまたはデンプンのような不活性希釈剤と混合し得る。このような投与形態はまた不活性希釈剤以外のさらなる物質、例えば、打錠滑沢剤および他の打錠助剤、例えばステアリン酸マグネシウムおよび微結晶セルロースも含み得る。カプセル剤、錠剤および丸剤の場合、本投与形態はまた緩衝剤も含み得る。それらは、所望により不透明剤を含んでよく、また、所望により、遅延方式で、腸管のある部分にのみまたはそこに優先的に活性成分を放出する組成のものでもあり得る。使用できる包埋組成物の例は、高分子物質および蝋を含む。
【０３３２】
本発明の化合物の局所または経皮投与用投与形態は、軟膏剤、ペースト剤、クリーム剤、ローション剤、ゲル剤、散剤、溶液剤、スプレー剤、吸入剤またはパッチ剤を含む。活性成分を、無菌条件下、薬学的に許容される担体および、何らかの必要な防腐剤または緩衝液と混合する。眼製剤、点耳剤および点眼剤も、本発明の範囲内として企図される。さらに、本発明は、化合物の体への制御送達を提供する付加的利点を有する、経皮パッチの使用を企図する。このような投与形態は、化合物を適当な媒体に溶解または分散することにより製造する。吸収増強剤も、皮膚を通る化合物の流れを増加するために使用できる。速度制御膜の提供によりまたはポリマーマトリクスまたはゲルに化合物を分散させることにより、速度を制御できる。
【０３３３】
上記の態様のいずれかの共結晶(例えば、ここに記載する化合物１：トリグリセリド共結晶)またはその薬学的に許容される組成物を、組み合わせ治療において用いることができること、すなわち、上記態様のいずれかの共結晶(例えば、ここに記載する化合物１：トリグリセリド共結晶)またはその薬学的に許容される組成物を、１以上の他の所望の治療剤または医療処置と同時に、前にまたは後に投与できることも認められる。組み合わせレジメンにおいて用いるための治療(治療剤または手技)の特定の組み合わせは、所望の治療剤および／または手技の適合性ならびに達成すべき所望の治療効果を考慮する。用いる治療は、同じ障害に所望の効果を達成するか(例えば、本発明化合物を、同じ障害を処置するために他の薬剤と同時に投与し得る)、または異なる効果を達成する(例えば、何らかの有害作用の制御)ものであり得ることも認識される。特定の疾患または状態の処置または予防のために通常投与されるここで使用するさらなる治療剤は、“処置する疾患または状態に適する”として知られる。
【０３３４】
ある態様において、さらなる治療剤は、粘液溶解剤、気管支拡張剤、抗生物質、抗感染剤、抗炎症剤、本発明の化合物以外のＣＦＴＲモジュレーターまたは栄養剤から選択される。
【０３３５】
ある態様において、さらなる治療剤は、肝細胞増殖因子(ＨＧＦ)が一例である、Ｒａｃ１シグナル伝達のアクティベーターのような細胞表面でＣＦＴＲの存在を安定化する化合物である。
【０３３６】
ある態様において、さらなる治療剤は抗生物質である。ここで有用な抗生物質の例は、トブラマイシン(トブラマイシン吸入用散剤(ＴＩＰ)を含む)、アジスロマイシン、cayston、アズトレオナム(エアロゾル化形態のアズトレオナムを含む)、アミカシン(そのリポソーム製剤を含む)、シプロフロキサシン(その吸入による投与に適する製剤を含む)、レボフロキサシン(そのエアロゾル化製剤を含む)および２抗生物質の組み合わせ、例えば、ホスホマイシンとトブラマイシンを含む。
【０３３７】
他の態様において、さらなる治療剤は、粘液溶解剤である。ここで有用な粘液溶解剤の例は、プルモザイム(登録商標)を含む。
【０３３８】
他の態様において、さらなる治療剤は、気管支拡張剤である。気管支拡張剤の例は、アルブテロール、硫酸メタプロテレノール、酢酸ピルブテロール、サルメテロールまたは硫酸テトラブリンを含む。
【０３３９】
他の態様において、さらなる治療剤は、肺気道表面液体の回復に有効である。このような薬剤は、細胞内外への塩の移動を改善し、肺気道における粘液を水和させ、それゆえに、より容易に浄化させる。このような薬剤の例は、高張食塩水、デヌホソルテトラナトリウム([[(３Ｓ,５Ｒ)−５−(４−アミノ−２−オキソピリミジン−１−イル)−３−ヒドロキシオキソラン−２−イル]メトキシ−ヒドロキシホスホリル][[[(２Ｒ,３Ｓ,４Ｒ,５Ｒ)−５−(２,４−ジオキソピリミジン−１−イル)−３、４−ジヒドロキシオキソラン−２−イル]メトキシ−ヒドロキシホスホリル]オキシ−ヒドロキシホスホリル]ハイドロジェンホスフェート)またはブロンキトール(マンニトール吸入製剤)を含む。
【０３４０】
他の態様において、さらなる治療剤は抗炎症剤、すなわち、肺における炎症を低減できる薬剤である。ここで有用なこのような薬剤は、イブプロフェン、ドコサヘキサン酸(ＤＨＡ)、シルデナフィル、吸入グルタチオン、ピオグリタゾン、ヒドロキシクロロキンまたはシンバスタチンを含む。
【０３４１】
他の態様において、さらなる治療剤は、化合物１の共結晶以外のＣＦＴＲ活性を増強または誘発する化合物である。このような薬剤の例は、アタルレン(“ＰＴＣ１２４(登録商標)”；３−[５−(２−フルオロフェニル)−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル]安息香酸)、シナプルチド、ランコブチド、デペレスタット(ヒト組み換え好中球エラスターゼ阻害剤)およびコビプロストン(７−{(２Ｒ,４ａＲ,５Ｒ,７ａＲ)−２−[(３Ｓ)−１,１−ジフルオロ−３−メチルペンチル]−２−ヒドロキシ−６−オキソオクタヒドロシクロペンタ[ｂ]ピラン−５−イル}ヘプタン酸)を含む。
【０３４２】
他の態様において、さらなる治療剤は栄養剤である。栄養剤の例は、パンクレアーゼ(登録商標)、Pancreacarb(登録商標)、Ultrase(登録商標)またはCreon(登録商標)を含むパンクレリパーゼ(膵臓酵素置換)、Liprotomase(登録商標)(以前はTrizytek(登録商標))、Aquadeks(登録商標)またはグルタチオン吸入を含む。ある態様において、さらなる栄養剤はパンクレリパーゼである。
【０３４３】
他の態様において、さらなる治療剤は、ゲンタマイシン、クルクミン、シクロホスファミド、４−フェニルブチラート、ミグルスタット、フェロジピン、ニモジピン、Philoxin B、ゲニステイン、アピゲニン、ロリプラム、シルデナフィル、ミルリノン、タダラフィル、アムリノン、イソプロテレノール、アルブテロールおよびサルメテロールのようなｃＡＭＰ／ｃＧＭＰ増強因子または誘導因子、デオキシスペルグアリン、ＨＳＰ  ９０阻害剤、ＨＳＰ  ７０阻害剤、エポキソマイシン、ラクタシスチンのようなプロテオソーム阻害剤などから選択される化合物である。
【０３４４】
他の態様において、さらなる治療剤は、上皮性ナトリウムチャネルブロッカー(ＥＮａＣ)の活性を、そのチャネル遮断により直接的にまたはＥＮａＣ活性を増加させるプロテアーゼ(例えば、セリンプロテアーゼ、チャネル活性化プロテアーゼ)の調節により間接的に低減させる。このような薬剤の例は、カモスタット(トリプシン様プロテアーゼ阻害剤)、ＱＡＵ１４５、５５２−０２、ＧＳ−９４１１、ＩＮＯ−４９９５、Aerolyticおよびアミロライドを含む。上皮性ナトリウムチャネルブロッカー(ＥＮａＣ)の活性を低減できるさらなる治療剤は、例えば、ＰＣＴ公開ＷＯ２００９／０７４５７５号に見ることができ、その全内容を、引用によりその全体を本明細書に包含させる。
【０３４５】
ここに記載する他の疾患の中で、ここに記載する化合物１：トリグリセリド共結晶のようなＣＦＴＲモジュレーターと、ＥＮａＣの活性を低減させる薬剤の組み合わせは、リドル症候群、嚢胞性線維症、原発性線毛機能不全、慢性気管支炎、慢性閉塞性肺疾患、喘息、呼吸器感染、肺癌、口内乾燥および乾性角結膜炎、呼吸器感染(急性および慢性；ウイルスおよび細菌)および肺癌の処置に使用される。
【０３４６】
ここに記載する化合物１：トリグリセリド共結晶のようなＣＦＴＲモジュレーターとＥＮａＣの活性を低減する薬剤の組み合わせはまた、おそらく表面上の保護的表面液体の異常生理学が関係する、上皮を通過する異常流体制御と関係する呼吸器疾患以外の疾患、例えば、口内乾燥(口渇)または乾性角結膜炎(ドライアイ)も含む、上皮性ナトリウムチャネルの遮断が介在する疾患の処置にも有用である。さらに、腎臓における上皮性ナトリウムチャネル遮断は、利尿の促進、およびそれゆえに、降圧効果の誘発に使用される。
【０３４７】
慢性閉塞性肺疾患は、慢性気管支炎またはそれと関連する呼吸困難、気腫ならびに他の薬物療法、特に、他の吸入薬物療法の結果としての気道反応性亢進の増悪を含む。ある態様において、ここに記載する化合物１：トリグリセリド共結晶のようなＣＦＴＲモジュレーターとＥＮａＣの活性を低減する薬剤の組み合わせは、例えば、急性、アラキジン性、カタル性、クループ性、慢性または結核様気管支炎を含む、どんなタイプまたは起源であれ、気管支炎の処置に有用である。
【０３４８】
他の態様において、さらなる治療剤は、ここに記載する化合物１：トリグリセリド共結晶以外のＣＦＴＲモジュレーター、すなわち、ＣＦＴＲ活性調節効果を有する薬剤である。このような薬剤の例は、アタルレン(“ＰＴＣ１２４(登録商標)”；３−[５−(２−フルオロフェニル)−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル]安息香酸)、シナプルチド、ランコブチド、デペレスタット(ヒト組み換え好中球エラスターゼ阻害剤)、コビプロストン(７−{(２Ｒ,４ａＲ,５Ｒ,７ａＲ)−２−[(３Ｓ)−１,１−ジフルオロ−３−メチルペンチル]−２−ヒドロキシ−６−オキソオクタヒドロシクロペンタ[ｂ]ピラン−５−イル}ヘプタン酸)、(３−(６−(１−(２,２−ジフルオロベンゾ[ｄ][１,３]ジオキソール−５−イル)シクロプロパンカルボキサミド)−３−メチルピリジン−２−イル)安息香酸または(Ｒ)−１−(２,２−ジフルオロベンゾ[ｄ][１,３]ジオキソール−５−イル)−Ｎ−(１−(２,３−ジヒドロキシプロピル)−６−フルオロ−２−(１−ヒドロキシ−２−メチルプロパン−２−イル)−１Ｈ−インドール−５−イル)シクロプロパンカルボキサミドを含む。ある態様において、さらなる治療剤は、(３−(６−(１−(２,２−ジフルオロベンゾ[ｄ][１,３]ジオキソール−５−イル)シクロプロパンカルボキサミド)−３−メチルピリジン−２−イル)安息香酸または(Ｒ)−１−(２,２−ジフルオロベンゾ[ｄ][１,３]ジオキソール−５−イル)−Ｎ−(１−(２,３−ジヒドロキシプロピル)−６−フルオロ−２−(１−ヒドロキシ−２−メチルプロパン−２−イル)−１Ｈ−インドール−５−イル)シクロプロパンカルボキサミドである。他の態様において、さらなる治療剤は、(３−(６−(１−(２,２−ジフルオロベンゾ[ｄ][１,３]ジオキソール−５−イル)シクロプロパンカルボキサミド)−３−メチルピリジン−２−イル)安息香酸である。他の態様において、さらなる治療剤は、(Ｒ)−１−(２,２−ジフルオロベンゾ[ｄ][１,３]ジオキソール−５−イル)−Ｎ−(１−(２,３−ジヒドロキシプロピル)−６−フルオロ−２−(１−ヒドロキシ−２−メチルプロパン−２−イル)−１Ｈ−インドール−５−イル)シクロプロパンカルボキサミドである。
【０３４９】
ある態様において、さらなる治療剤は、本発明の化合物以外のＣＦＴＲモジュレーターである。
【０３５０】
本発明の組成物に存在するさらなる治療剤の量は、その治療剤を唯一の活性剤として含む組成物で通常投与される量を超えない。好ましくは、本発明の組成物におけるさらなる治療剤の量は、唯一の治療活性剤としてその薬剤を含む組成物に通常存在する量の約５０％〜１００％である。
【０３５１】
上記態様のいずれかの共結晶(例えば、ここに記載する化合物１：トリグリセリド共結晶)またはその薬学的に許容される組成物は、プロテーゼ、人工弁、血管移植、ステントおよびカテーテルのようなインプラント可能医療装置をコーティングするための組成物にも取り込まれ得る。従って、本発明は、他の面において、一般に上におよびここのクラスおよびサブクラスで記載する本発明の化合物およびインプラント可能装置のコーティングに適する担体を含む、インプラント可能装置をコーディングするための組成物を提供する。さらに他の面において、本発明は、一般に上におよびここのクラスおよびサブクラスで記載する本発明の化合物およびインプラント可能装置のコーティングに適する担体を含む組成物でコーティングされた、インプラント可能装置を提供する。適当なコーティングおよび被覆インプラント可能デバイスの一般的製造は、米国特許６,０９９,５６２号；５,８８６,０２６号；および５,３０４,１２１号に記載されている。コーティングは、一般にヒドロゲルポリマー、ポリメチルジシロキサン、ポリカプロラクトン、ポリエチレングリコール、ポリ乳酸、エチレンビニルアセテートおよびそれらの混合物のような生体適合性高分子物質である。コーティングは、所望によりさらに、組成物に制御放出特性を付与する、フルオロシリコーン、ポリサッカライド、ポリエチレングリコール、リン脂質またはこれらの組み合わせの適当なトップコートで被覆され得る。
【０３５２】
ある態様において、本発明は、本発明の錠剤および別の治療剤またはその医薬組成物を含むキットに関する。ある態様において、さらなる治療剤は、ＣＦＴＲ補正因子である「。他の態様において、治療剤は、(３−(６−(１−(２,２−ジフルオロベンゾ[ｄ][１,３]ジオキソール−５−イル)シクロプロパンカルボキサミド)−３−メチルピリジン−２−イル)安息香酸または(Ｒ)−１−(２,２−ジフルオロベンゾ[ｄ][１,３]ジオキソール−５−イル)−Ｎ−(１−(２,３−ジヒドロキシプロピル)−６−フルオロ−２−(１−ヒドロキシ−２−メチルプロパン−２−イル)−１Ｈ−インドール−５−イル)シクロプロパンカルボキサミドである。他の態様において、治療剤は、(３−(６−(１−(２,２−ジフルオロベンゾ[ｄ][１,３]ジオキソール−５−イル)シクロプロパンカルボキサミド)−３−メチルピリジン−２−イル)安息香酸である。他の態様において、治療剤は、(Ｒ)−１−(２,２−ジフルオロベンゾ[ｄ][１,３]ジオキソール−５−イル)−Ｎ−(１−(２,３−ジヒドロキシプロピル)−６−フルオロ−２−(１−ヒドロキシ−２−メチルプロパン−２−イル)−１Ｈ−インドール−５−イル)シクロプロパンカルボキサミドである。他の態様において、錠剤および治療剤は別の容器にある。他の態様において、本発明のキットは、本発明の化合物または医薬組成物および１以上のさらなる治療剤が別の容器にあるキットを企図する。ある態様において、別々の容器はビンである。他の態様において、別々の容器はバイアルである。他の態様において、別々の容器はブリスターパックである。他の態様において、容器は、ビン、バイアルまたはブリスターパックまたはそれらの組み合わせである。
【０３５３】
本発明の他の面は、生体サンプルまたは患者(例えば、インビトロまたはインビボ)でのＣＦＴＲ活性の調節に関し、方法は、上記態様のいずれかの共結晶(例えば、ここに記載する化合物１：トリグリセリド共結晶)またはその薬学的に許容される組成物を患者に投与するかまたは該生体サンプルと接触させることを含む。ここで使用する用語“生体サンプル”は、細胞培養物またはその抽出物；哺乳動物から得た生検物質またはその抽出物；および血液、唾液、尿、糞便、精液、涙または他の体液またはその抽出物を含むが、これらに限定されない。
【０３５４】
生体サンプルにおけるＣＦＴＲの調節は、当業者に知られる多様な目的のために有用である。このような目的の例は、生物学的および病理学的現象におけるＣＦＴＲの研究；およびＣＦＴＲの新規モジュレーターの比較評価を含むが、これらに限定されない。
【０３５５】
さらに他の態様において、インビトロまたはインビボでアニオンチャネルの活性を調節する方法が提供され、該チャネルと、ここに記載する化合物１：トリグリセリド共結晶またはその薬学的に許容される組成物を接触させる過程を含む。ある態様において、アニオンチャネルはクロライドチャネルまたは重炭酸イオンチャネルである。他の態様において、アニオンチャネルはクロライドチャネルである。
【０３５６】
代替的態様によって、本発明は、細胞の膜における機能的ＣＦＴＲの数を増加させる方法を提供し、該細胞と、上記の態様のいずれかの共結晶(例えば、ここに記載する化合物１：トリグリセリド共結晶)またはその薬学的に許容される組成物を接触させることを含む。
【０３５７】
他の態様によって、ＣＦＴＲの活性は、膜貫通ボルテージ・ポテンシャルの測定により測定する。生体サンプルにおける膜を通過するボルテージ・ポテンシャルを測定する手段は、光学膜電位アッセイまたは他の電気生理学的方法のような当分野で知られる方法のいずれかを用い得る。
【０３５８】
光学膜電位アッセイは、Gonzalez and Tsien(Gonzalez, J. E. and R. Y. Tsien (1995) “Voltage sensing by fluorescence resonance energy transfer in single cells.” Biophys J 69(4): 1272-80およびGonzalez, J. E. and R. Y. Tsien (1997); “Improved indicators of cell membrane potential that use fluorescence resonance energy transfer” Chem Biol 4(4): 269-77参照)に記載される電圧感受性ＦＲＥＴセンサーを、電圧／イオンプローブリーダー(ＶＩＰＲ)のような蛍光変化を測定する装置と組み合わせて利用する(Gonzalez, J. E., K. Oades, et al. (1999) “Cell-based assays and instrumentation for screening ion-channel targets” Drug Discov Today 4(9): 431-439参照)。
【０３５９】
これらの電圧感受性アッセイは、膜可溶性、電圧感受性色素、ＤｉＳＢＡＣ２(３)と、原形質膜の外小葉に結合し、ＦＲＥＴドナーとして働く蛍光リン脂質の間の、蛍光共鳴エネルギー移動(ＦＲＥＴ)の変化に基づく。膜電位(Ｖｍ)変化は、負帯電ＤｉＳＢＡＣ２(３)を原形質膜を通って再分配させ、それに応じてＣＣ２−ＤＭＰＥからのエネルギー移動を変化させる。蛍光発光の変化を、９６または３８４ウェルマイクロタイタープレートにおける細胞ベースのスクリーニングを実施するために設計された統合された液体ハンドラーおよび蛍光検出器である、VIPRTM IIを使用してモニターできる。
【０３６０】
他の面において、本発明は、インビトロまたはインビボで生体サンプルにおけるＣＦＴＲまたはそのフラグメントの活性を測定するために使用する、(ｉ)上記態様の共結晶(例えば、ここに記載する化合物１：トリグリセリド共結晶)のいずれかを含む組成物；および(ii)ａ)組成物と生体サンプルを接触させ、ｂ)該ＣＦＴＲまたはそのフラグメントの活性を測定するための指示を含む、キットを提供する。ある態様において、キットは、さらに、ａ)さらなる組成物と生体サンプルを接触させ；ｂ)該さらなる化合物の存在下、該ＣＦＴＲまたはそのフラグメントの活性を測定し、そしてｃ)該さらなる化合物存在下のＣＦＴＲの活性と、上記態様のいずれかの共結晶(例えば、ここに記載する化合物１：トリグリセリド共結晶)の存在下のＣＦＴＲの活性を比較する、指示を含む。ある態様において、キットをＣＦＴＲの密度の測定に使用する。
【０３６１】
他の面において、本発明は、インビトロまたはインビボで生体サンプルにおけるＣＦＴＲまたはそのフラグメントの活性を測定するための：
(ｉ)上記態様のいずれかの共結晶(例えば、化合物１：トリグリセリド共結晶)を含む組成物；
(ii)
(ａ)該組成物と生体サンプルを接触させ；
(ｂ)該ＣＦＴＲまたはそのフラグメントの活性を測定する
指示を含む、
キットを低級する。
【０３６２】
ある態様において、キットは、さらに
ｉ. さらなる組成物と生体サンプルを接触させ；
ii. 該ＣＦＴＲまたはそのフラグメントの活性を、該さらなる化合物存在下で測定し；そして
iii. 該さらなる化合物存在下のＣＦＴＲまたはそのフラグメントの活性と、上記態様のいずれかの共結晶(例えば、化合物１：トリグリセリド共結晶)存在下のＣＦＴＲまたはそのフラグメントの活性を比較する、
指示を含む。
【０３６３】
他の態様において、該ＣＦＴＲまたはそのフラグメントの活性を比較する工程は、該ＣＦＴＲまたはそのフラグメントの密度の指標を提供する。
【０３６４】
本発明がより完全に理解得るように次の実施例を提供する。これらの実施例は単に説明目的であり、いかなる方法でも本発明を限定すると解釈してはならないことは理解すべきである。
【実施例】
【０３６５】
化合物１の当初の製造
化合物１を、引用により本明細書に包含させるＷＯ２０１０／１８１６２号、ＵＳ２０１０／０２６７７６８号およびＵＳ８,４７６,４４２号に記載のように製造した。製造を下にも記載する。
【化３８】
0006746569.tif 000039
【０３６６】
化合物Ａ(１.０当量)および化合物Ｂ(１.１当量)を、反応装置に仕込んだ。２−ＭｅＴＨＦ(４.０容積、化合物Ａに対する)、続いてＥｔＯＡｃ(２.５当量)中Ｔ３Ｐ(登録商標)５０％溶液を添加した。Ｔ３Ｐを仕込んだ溶液を２−ＭｅＴＨＦ(３.５容積)で洗浄した。次いでピリジン(２.０当量)を仕込んだ。得られた懸濁液を４５.０〜５０.０℃に加熱し、その温度で１５時間維持した。サンプルを採り、ＨＰＬＣで完了を確認した。完了したら、得られた混合物を２０.０℃±５.０℃に冷却した。２−ＭｅＴＨＦ(１２.５容積)を添加して、混合物を希釈した。反応混合物を水(１０.０容積)で３回洗浄した。２−ＭｅＴＨＦを添加して、総反応容積を４０.０容積とした(約１６.５容積添加)。残存する水を、カール・フィッシャー法を使用する工程内管理試験が、水含量が１.０％ｗ／ｗを超えないことを示すまで、２−ＭｅＴＨＦと共に３５.０℃±５℃で４０容積から３０容積まで連続蒸留により除去した。溶液を２０.０℃±５.０℃に冷却した。この溶液にＮａＯＭｅ／ＭｅＯＨ(１.７当量)を添加し、炭酸の加水分解を実施した。反応物を１.０時間以上撹拌し、ＨＰＬＣで完了を確認した。完了したら、１Ｎ  ＨＣｌ／Ｈ２Ｏ(１０.０容積)で反応停止させ、０.１Ｎ  ＨＣｌ(１０.０容積)で洗浄した。有機溶液をポリッシュフィルターして、あらゆる粒子を除去し、第二のフラスコに入れた。濾過溶液を２５.０℃±５.０℃で、減圧下２０容積まで濃縮した。ＣＨ３ＣＮを４０容積まで添加し、溶液を２５.０℃±５.０℃で２０容積まで濃縮した。ＣＨ３ＣＮ添加と濃縮をさらに２回、計３回ＣＨ３ＣＮ添加および４回２０容積への濃縮をした。２０容積への最終濃縮後、１６.０容積のＣＨ３ＣＮ、続いて４.０容積のＨ２Ｏを添加して、化合物Ａに対して４０容積の１０％Ｈ２Ｏ／ＣＨ３ＣＮの最終濃度とした。このスラリーを、５時間還流した。スラリーを２０.０℃±５℃に冷却し、濾過した。ケーキをＣＨ３ＣＮ(５容積)で２回洗浄した。得られた固体を真空オーブンで５０.０℃±５.０℃で、一定重量が達成されるまで乾燥させた。
【０３６７】
無添加非晶質化合物１の製造
次の溶液を、表Ａにしたがい、上記のように製造した化合物１を９０％ＭＥＫ／１０％水中で撹拌することにより製造した。
【表１】
0006746569.tif 000040
【０３６８】
噴霧乾燥を、表Ｂで使用するパラメータを使用して、除湿器Ｂ−２９６およびイナートループＢ−２９５を備えたBuchiミニスプレードライヤーＢ−２９０で実施した。系を、スプレーする溶媒で飽和させ、入口温度および出口温度を、噴霧乾燥前に平衡化させた。回収容器およびサイクロンからの粉末を浅い皿に合わせ、真空オーブンでわずかな窒素パージと共に７日乾燥させた。次いで、非晶質物質を、真空オーブンで７５〜８０℃で約０.１mmHgで、ＭＥＫ濃度が１Ｈ  ＮＭＲで＜１.０％ｗ／ｗとなるまで減量した(５０時間)。本物質を、Ｎ２下、５０℃に冷却後、真空オーブンから取り出した。
【表２】
0006746569.tif 000041
【０３６９】
化合物１の共結晶の製造
方法１：すべての純粋化合物１共結晶を、HEL Polyblock合成装置中、無添加トリグリセリド中で無添加非晶質化合物１を、５％〜１０％ｗ／ｖ固体充填で、少なくとも１８時間、４０℃でまたはトリグリセリド融点より５℃〜１０℃上でスラリー化または撹拌することにより製造した。変換の完了を、偏光顕微鏡で懸濁粒子の複屈折により決定した。粗製共結晶を、ミリポア２ml遠心分離デバイスを使用する遠心濾過により単離した。
【０３７０】
いくつかの場合、母液を、トリグリセリドに対する収率を増加させるために、さらなる化合物１共結晶の製造のために回収した。これは、母液中、５％〜１０％重量対容積比で、少なくとも１８時間、無添加非晶質化合物１をスラリー化または撹拌することにより達成した。母液を、さらなる変換に２回を超えては使用しなかった。その後の変換の粗製共結晶を２ml遠心分離デバイスに合わせ、ヘプタンを１.５〜２容積対重量比で添加した。混合物を短くボルテックス処理した後、ヘプタンを遠心濾過により濾過し、固体を回収した。過剰のヘプタンを、減圧下、４０〜４５℃で少なくとも１８時間乾燥させることにより除去した。ヘプタン含量を、定期的に１Ｈ溶液ＮＭＲで確認し、ヘプタンが許容されるレベルになるまで、例えば、重複トリグリセリドおよびヘプタンＣＨ３共鳴のさらなる減少が観察されなくなるまで乾燥を続けた。
【０３７１】
方法２：約５０mgの無添加非晶質化合物１を、約１ｇのトリグリセリドに添加し、８０℃に加熱し、その温度を少なくとも１時間維持した。次いで溶液をトリグリセリドの融点を超える温度に冷却し、化合物１共結晶を結晶化させた。結晶品質およびサイズを改善するために、系を８０℃に加熱し、冷却した。温度循環を、分析に適するサイズの結晶が得られるまで繰り返した。すべての化合物１共結晶を、トリグリセリドの融点を超える温度で遠心濾過により単離した。
【０３７２】
化合物１共結晶の特徴付け
使用技術の特徴付け：
Ｘ線粉末回折(ＸＰＲＤ)分析：ＸＲＰＤパターンを、室温で、反射モードで、Pananalytical Empyrean IIまたはBruker D8 Advance回折計を使用して獲得した。粉末サンプルをPananalyticalステンレススチールサンプルホルダーまたはBruker浅キャビティサンプルホルダーに入れ、それぞれ１５rpmで回転させた。装置パラメータを、下記表に挙げる。
【表３】
0006746569.tif 000042
【０３７３】
１３Ｃ固体核磁気共鳴スペクトロスコピー(１３Ｃ  ｓｓＮＭＲ)：Bruker-Biospin 4mm HFXプローブを備えたBruker-Biospin 400 MHz大孔径AVance IIIスペクトロメーターを、全１３Ｃ  ｓｓＮＭＲ実験で使用した。サンプルを４mm  ＺｒＯ２ローターに封入し、マジック角回転(ＭＡＳ)条件下、回転速度１２.５kHzで回転させた。炭素ＣＰＭＡＳ実験のＣＰ接触時間は２ミリ秒に設定した。直線傾斜(５０％〜１００％)のＣＰプロトンパルスを用いた。ハートマン・ハーンマッチを、外部参照サンプル(グリシン)で最適化した。ＴＰＰＭ１５デカップリング配列を、約１００kHzの場強度と共に使用した。緩和遅延を、全１３Ｃ  ＣＰＭＡＳ実験で５秒に設定した。１Ｈ  Ｔ１値を、飽和回復配列使用して測定した。全スペクトルを、２９.５ppmでのアダマンチンの高磁場共鳴に対して外的に参照させた。サンプル温度を２７５Ｋに制御した。
【０３７４】
熱重量分析(ＴＧＡ)：熱重量分析(ＴＧＡ)を、TA InstrumentsモデルQ5000 V3.8熱重量分析器で行った。約５〜１５mgの固体サンプルを白金サンプルパンに入れ、６０mL／分サンプルおよび４０mL／分平衡窒素流中、１０℃／分で環境から３５０℃まで加熱した。全サーモグラムを、TA Instruments Universal Analysis 2000ソフトウェアV4.4Aを使用して分析した。
【０３７５】
示差走査熱量測定(ＤＳＣ)：ＤＳＣトレースを、Universal Analysis 2000ソフトウェアを備えたTA Instruments DSC Q2000を使用して得た。０.５〜２mgの量の化合物１共結晶をアルミニウムパンに計り入れ、ピンホール蓋で密閉した。サンプルを環境から３５０℃または３００℃に１０℃／分で加熱した。
【０３７６】
１Ｈ溶液核磁気共鳴スペクトロスコピー(１Ｈ  ＮＭＲ)：Bruker-Biospin 5mm広帯域プローブを備えたBruker狭口径400MHz Avance III Nanobayスペクトロメーターを全実験に使用した。約０.５〜２mgの化合物１共結晶サンプルを、５mm  ＮＭＲチューブ中、０.６５mlアセトン−ｄ６(化合物１：グリセリルトリオレアートおよび化合物１：グリセリルトリリノレート用)またはＤＭＳＯ−ｄ６(化合物１：グリセリルトリオクタノエート用)に溶解した。６０秒の緩和遅延を選択して、化合物１およびトリグリセリド上の異なるプロトン位置の間の１Ｈの異なった緩和を最小化した。全スペクトルを、０.０ppmでテトラメチルシラン内部標準を使用して基準とした。
【０３７７】
全１Ｈ  ＮＭＲ溶液スペクトルは、化合物１および各トリグリセリド共形成剤両者の存在により、化学的に純粋な共結晶に一致する。個々に純粋成分のスペクトルと比較したとき、化合物１およびトリグリセリド両者について溶解した共結晶のスペクトルに顕著なシフトはない。これは、溶液における共結晶成分の解離の証拠を提供し、固体における化合物１とトリグリセリドの弱い結合を確認する。１Ｈ  ＮＭＲスペクトルにおける化合物１：グリセリルトリオクタノエートのプロトンの積分強度の比は、共結晶における３：１(化合物１：トリグリセリド)の化学量論比を、一方、化合物１：グリセリルトリオレアートの積分強度および化合物１：グリセリルトリリノレート積分強度は、各共結晶における６：１(化合物１：トリグリセリド)化学量論比を示した。溶液１Ｈ  ＮＭＲで決定した化学量論比は、化合物１：グリセリルトリオクタノエート共結晶について熱重量分析で決定した化学量論比と一致する。
【０３７８】
１Ｈ  ＮＭＲ結果は、共結晶の高速液体クロマトグラフィー分析と一致する。アッセイ値を、化合物１：グリセリルトリオクタノエート、化合物１：グリセリルトリオレアートおよび化合物１：トリリノレアート共結晶について７２.１％(ｗ：ｗ)、７２.４％(ｗ：ｗ)および６８.６％(ｗ：ｗ)化合物１と決定した。ＵＶ検出を使用して、不純物は、計０.５％より少ないことが判明した。
【０３７９】
マススペクトロメトリー分析：マススペクトロメトリー分析を、各複合体について下記に概説するように実施した。
【０３８０】
単結晶Ｘ線結晶学：単結晶を、５６mgの非晶質化合物１を８０℃に設定したオーブン中１０００mgのトリグリセリドに溶解することにより製造した。結晶化したら、単結晶Ｘ線分析のために数個の結晶を採った。回折データを、１００Ｋ温度で波長０.７０１５８Åを有するＥＳＦＲシンクロトロン源で獲得した(参照番号Phil Pattison 130813)。ＳＨＥＬＸプログラム(Sheldrick, G.M., Acta Cryst., (2008) A64, 112-122)を使用して、構造を解明し、精緻化した。
【０３８１】
化合物１：グリセリルトリオクタノエートの特徴付け
化合物１：グリセリルトリオクタノエートのＸＲＰＤ：
図３における化合物１：グリセリルトリオクタノエートのＸ線粉末回折(ＸＲＰＤ)パターン例を、Panalytical Empyrean II回折計を使用して取得した。ＸＲＰＤパターンにおいて観察される化合物１：グリセリルトリオクタノエートのＸＲＰＤ代表ピークを、下記表Ｃに提供する。下記の全ピークは、最大ピーク強度の５％より大きい。
【表４】
0006746569.tif 000043
【０３８２】
化合物１：グリセリルトリオクタノエートの１３Ｃ  ｓｓＮＭＲ：
化合物１：グリセリルトリオクタノエートの１３Ｃ固体核磁気共鳴スペクトロスコピー(１３Ｃ  ｓｓＮＭＲ)スペクトルの例を図４に示す。化合物１：グリセリルトリオクタノエートの１３Ｃ  ｓｓＮＭＲピークのいくつかのリストを、下記表Ｄに提供する。
【表５】
0006746569.tif 000044
【０３８３】
化合物１：グリセリルトリオクタノエートのＴＧＡ：
化合物１：グリセリルトリオクタノエートの熱重量分析(ＴＧＡ)トレースの例を図５に示す。グリセリルトリオクタノエートの蒸発に対応する２８.３％の重量減少が、化合物１：グリセリルトリオクタノエートについて１５０℃〜３００℃で観察された。物質の重量減少に基づき計算された化合物１対グリセリルトリオクタノエートモル比は、１：３.１である。
【０３８４】
化合物１：グリセリルトリオクタノエートのＤＳＣ：
化合物１：グリセリルトリオクタノエートの示差走査熱量測定(ＤＳＣ)サーモグラムの例を図６に示す。サーモグラムは、化合物１：グリセリルトリオクタノエートの融解に対応する１８６.７℃での吸熱を示した。サーモグラム測定の誤差は±０.２℃である。この吸熱の後、無添加形態の化合物１への再結晶化に対応する発熱があり、続いて、後の吸熱事象で融解した。
【０３８５】
化合物１：グリセリルトリオクタノエートの１Ｈ  ＮＭＲ：
化合物１：グリセリルトリオクタノエートのＤＭＳＯ−ｄ６中１Ｈ核磁気共鳴(１Ｈ  ＮＭＲ)スペクトルの例を図７に示す。
表Ｅおよび表Ｆは１Ｈ  ＮＭＲデータを要約し、化合物１およびグリセリルトリオクタノエート水素をそれぞれ割り当てる。化合物１における水素の割り当てに使用したナンバリング法は次のとおりである。
【化３９】
0006746569.tif 000045
【０３８６】
グリセリルトリオクタノエートにおける水素の割り当てに使用したナンバリング法は次のとおりである。
【化４０】
0006746569.tif 000046
【０３８７】
【表６】
0006746569.tif 000047
【０３８８】
【表７】
0006746569.tif 000048
【０３８９】
積分は、化合物１の３位および６位について合算した積分強度が２.００単位となるよう調整した。
【０３９０】
マススペクトロメトリー分析：化合物１：グリセリルトリオクタノエートの測定精密質量は、Agilent 6210飛行時間型マススペクトロメーターで決定した。サンプルをＭｅＯＨに約０.１mg／mlまで溶解し、シリンジポンプを使用して、直接フローインジェクションにより注入した。０容積ブランクナットを、直接注入分析を実施するために使用した。
【０３９１】
次の質量が判明し、化合物１：グリセリルトリオクタノエートの分子成分の同一性を確認した：
化合物１：ＨＲＭＳ  (ＥＳＩ−ＴＯＦ)  ｍ／ｚ：Ｃ２４Ｈ２９Ｎ２Ｏ３＋の[Ｍ＋Ｈ]＋計算値  ３９３.２１７３；実測値３９３.２１７９。
グリセリルトリオクタノエート：ＨＲＭＳ  (ＥＳＩ−ＴＯＦ)  ｍ／ｚ：Ｃ２７Ｈ５４ＮＯ６＋の[Ｍ＋ＮＨ３]＋計算値  ４８８.３９４７；実測値４８８.３９５１
【０３９２】
化合物１：グリセリルトリオクタノエートの分子イオンおよび計算精密質量：
【化４１】
0006746569.tif 000049
【０３９３】
化合物１：グリセリルトリオレアートの特徴付け
化合物１：グリセリルトリオレアートのＸＲＰＤ：
図８に示す化合物１：グリセリルトリオレアートのＸＲＰＤパターンの例を、Panalytical Empyrean II回折計を使用して取得した。ＸＲＰＤパターンで観察された化合物１：グリセリルトリオレアートの代表的ピークを下記表Ｇに提供する。下記の全ピークは、最大ピーク強度の５％より大きい。
【表８】
0006746569.tif 000050
【０３９４】
化合物１：グリセリルトリオレアートの１３Ｃ  ｓｓＮＭＲ：
化合物１：グリセリルトリオレアートの１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルの例を図９に示す。化合物１：グリセリルトリオレアートの１３Ｃ  ｓｓＮＭＲピークのいくつかのリストを下記表Ｈに提供する。
【表９】
0006746569.tif 000051
【０３９５】
化合物１：グリセリルトリオレアートのＴＧＡ：
化合物１：グリセリルトリオレアートのＴＧＡトレースの例を図１０に示す。１.１％の重量減少が、化合物１：グリセリルトリオレアートについて１５０℃から３００℃で観察された。グリセリルトリオレアートの蒸発は、その高い沸点のために観察されなかった。
【０３９６】
化合物１：グリセリルトリオレアートのＤＳＣ：
化合物１：グリセリルトリオレアートのＤＳＣサーモグラムの例を図１１に示す。サーモグラムは、化合物１：グリセリルトリオレアートの融解に対応する、１９７.５℃での吸熱を示した。吸熱測定における誤差は±０.２℃である。この吸熱事象の後、無添加形態の化合物１の結晶化に対応する発熱があった。この無添加形態の化合物１の融解に対応するもう一つの吸熱が観察された。第二の無添加形態の化合物１へのもう一つの後の発熱再結晶化が観察された。後の吸熱は、この第二の形態の化合物１の融解に対応した。
【０３９７】
化合物１：グリセリルトリオレアートの１Ｈ  ＮＭＲ：
化合物１：グリセリルトリオレアートの１Ｈ  ＮＭＲスペクトルの例を図１２に示す。
表Ｉおよび表Ｊは１Ｈ  ＮＭＲデータを要約し、化合物１およびグリセリルトリオレアート水素をそれぞれ割り当てる。化合物１における水素の割り当てに使用したナンバリング法は先に上記したとおりであった。
【０３９８】
グリセリルトリオレアートにおける水素の割り当てに使用したナンバリング法は次のとおりである。
【化４２】
0006746569.tif 000052
【０３９９】
【表１０】
0006746569.tif 000053
【０４００】
【表１１】
0006746569.tif 000054
【０４０１】
積分は、化合物１の３位および６位について合算した積分強度が２.００単位となるよう調整した。化合物１の２２位の緩徐Ｈ−Ｄ交換は、化合物１について、Ｈ２３の二重項(２２位Ｈ)および一重項(２２位Ｄ)の観察をもたらした。
【０４０２】
化合物１：グリセリルトリオレアートのマススペクトロメトリー分析：
この複合体の測定精密質量は、Thermo LTQ Orbi Trap XLマススペクトロメーターで決定した。サンプルをＭｅＯＨに約０.１mg／mlまで溶解し、５０μl／秒の速度でシリンジポンプを使用する直接フローインジェクションにより注入した。３００００解像度設定でＦＴＭＳ分析器を使用して、５０走査を集めた。
【０４０３】
次の質量が判明し、化合物１：グリセリルトリオレアートの分子成分の同一性を確認した：
化合物１：ＨＲＭＳ  (ＥＳＩ−ＴＯＦ)  ｍ／ｚ：Ｃ２４Ｈ２９Ｎ２Ｏ３＋の[Ｍ＋Ｈ]＋計算値  ３９３.２１７３；実測値３９３.２１７０。
グリセリルトリオレアート：ＨＲＭＳ  (ＥＳＩ−ＴＯＦ)  ｍ／ｚ：Ｃ８１Ｈ１３３Ｎ２Ｏ９＋の[Ｍ＋化合物１＋Ｈ]＋計算値  １２７８.０００６；実測値１２７７.９９９１。
【０４０４】
化合物１：グリセリルトリオレアートの分子イオンおよび計算精密質量：
【化４３】
0006746569.tif 000055
【０４０５】
化合物１：グリセリルトリリノレートの特徴付け
化合物１：グリセリルトリリノレートのＸＲＰＤ：
図１３に示す化合物１：グリセリルトリリノレートのＸＲＰＤパターンの例を、Panalytical Empyrean II回折計を使用して取得した。ＸＲＰＤパターンで観察される化合物１：グリセリルトリリノレートの代表的ピークを、下記表Ｋに提供する。下記の全ピークは、最大ピーク強度の５％より大きい。
【表１２】
0006746569.tif 000056
【０４０６】
化合物１：グリセリルトリリノレートの１３Ｃ  ｓｓＮＭＲ
化合物１：グリセリルトリリノレートの１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルの例を図１４に示す。化合物１：グリセリルトリリノレートの１３Ｃ  ｓｓＮＭＲピークのいくつかのリストを下記表Ｌに提供する。
【表１３】
0006746569.tif 000057
【０４０７】
化合物１：グリセリルトリリノレートのＴＧＡ：
化合物１：グリセリルトリリノレートのＴＧＡトレースの例を図１５に示す。１.７％の重量減少が、化合物１：グリセリルトリリノレートについて４０℃から１９０℃で観察された。グリセリルトリリノレートの蒸発は、その高い沸点のために観察されなかった。
【０４０８】
化合物１：グリセリルトリリノレートのＤＳＣ：
化合物１：グリセリルトリリノレートのＤＳＣサーモグラムの例を図１６に示す。図１６における化合物１：グリセリルトリリノレートのサーモグラムは、化合物１：グリセリルトリリノレートの融解に対応する１８２.３℃での吸熱を有した。吸熱測定における誤差は±０.２℃である。この吸熱事象の後に、無添加形態の化合物１の結晶化に対応する発熱があった。この無添加形態の融解に対応するもう一つの吸熱が観察された。第二の無添加形態の化合物１へのもう一つの後の発熱再結晶化が観察された。後の吸熱は、この第二の形態の化合物１の融解に対応する。
【０４０９】
化合物１：グリセリルトリリノレートの１Ｈ  ＮＭＲ：
化合物１：グリセリルトリオレアートの１Ｈ  ＮＭＲスペクトルの例を図１７に示す。
表Ｍおよび表Ｎは１Ｈ  ＮＭＲデータを要約し、化合物１およびグリセリルトリオレアート水素をそれぞれ割り当てる。化合物１における水素の割り当てに使用したナンバリング法は先に上記したとおりであった。積分は、化合物１の３位および６位について合算した積分強度が２.００単位となるよう調整した。
【０４１０】
グリセリルトリオレアートにおける水素の割り当てに使用したナンバリング法は次のとおりである。
【化４４】
0006746569.tif 000058
【０４１１】
【表１４】
0006746569.tif 000059
【０４１２】
【表１５】
0006746569.tif 000060
【０４１３】
積分は、化合物１の３位および６位について合算した積分強度が２.００単位となるよう調整した。化合物１の２２位の緩徐Ｈ−Ｄ交換は、化合物１について、Ｈ２３の二重項(２２位Ｈ)および一重項(２２位Ｄ)の観察をもたらした。
【０４１４】
化合物１：グリセリルトリリノレートのマススペクトロメトリー分析：
この複合体の測定精密質量を、LTQ Orbi Trap XLマススペクトロメーターで決定した。サンプルをＭｅＯＨに約０.１mg／mlまで溶解し、２μl／秒の速度でシリンジポンプを使用する直接フローインジェクションにより注入した。３００００解像度設定でＦＴＭＳ分析器を使用して、５０走査を集めた。
【０４１５】
次の質量が判明し、化合物１：グリセリルトリリノレートの分子成分の同一性を確認した：
化合物１：ＨＲＭＳ  (ＥＳＩ−ＴＯＦ)  ｍ／ｚ：Ｃ２４Ｈ２９Ｎ２Ｏ３＋の[Ｍ＋Ｈ]＋計算値  ３９３.２１７３；実測値３９３.２１７６。
グリセリルトリリノレート：ＨＲＭＳ  (ＥＳＩ−ＴＯＦ)  ｍ／ｚ：Ｃ８１Ｈ１２７Ｎ２Ｏ９＋の[Ｍ＋化合物１＋Ｈ]＋計算値  １２７１.９５３６；実測値１２７１.９５４１
【０４１６】
化合物１：グリセリルトリリノレートの分子イオンおよび計算精密質量：
【化４５】
0006746569.tif 000061
【０４１７】
化合物１：トリアセチンの特徴付け
化合物１：トリアセチンのＸＲＰＤ：
図１８に示す化合物１：トリアセチンのＸＲＰＤパターンの例を、Panalytical Empyrean II回折計を使用して取得した。ＸＲＰＤパターンで観察される化合物１：トリアセチンの代表的ピークを、下記表Ｏに提供する。下記の全ピークは、最大ピーク強度の５％より大きい。
【表１６】
0006746569.tif 000062
【０４１８】
化合物１：トリアセチンの１３Ｃ  ｓｓＮＭＲ：
化合物１：トリアセチンの１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルの例を図１９に示す。化合物１：グリセリルトリアセテートの１３Ｃ  ｓｓＮＭＲピークのいくつかのリストを下記表Ｐに提供する。
【表１７】
0006746569.tif 000063
【０４１９】
化合物１：トリアセチンのＤＳＣ：
化合物１：トリアセチンのＤＳＣサーモグラムの例を図２０に示す。化合物１：トリアセチンのサーモグラムは、化合物１：グリセリルトリトリアセチン共結晶の融解に対応する１２３.９℃の吸熱を有する。この事象の後、１４１.９℃のもう一つの吸熱および１９３.８℃にさらに他の吸熱がある。
【０４２０】
化合物１：グリセリルトリブチレートの特徴付け
化合物１：グリセリルトリブチレートのＸＲＰＤ：
図２１に示す化合物１：グリセリルトリブチレートのＸＲＰＤパターンの例を、Panalytical Empyrean II回折計を使用して取得した。ＸＲＰＤパターンで観察される化合物１：グリセリルトリブチレートの代表的ピークを下記表Ｑに提供する。下記の全ピークは、最大ピーク強度の５％より大きい。
【表１８】
0006746569.tif 000064
【０４２１】
化合物１：グリセリルトリステアレートの特徴付け
化合物１：グリセリルトリステアレートのＸＲＰＤ：
図２２に示す化合物１：グリセリルトリステアレートについてのＸＲＰＤパターンの例を、Bruker D8 Advance回折計を使用して取得した。ＸＲＰＤパターンで観察される化合物１：グリセリルトリステアレートの代表的ピークを、下記表Ｒに提供する。下に挙げるすべてのピークは、最大ピーク強度の１％以上である。
【表１９】
0006746569.tif 000065
【０４２２】
化合物１：グリセリルトリステアレートの１３Ｃ  ｓｓＮＭＲ：
化合物１：グリセリルトリステアレートの１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルの例を図２３に示す。化合物１：グリセリルトリステアレートの１３Ｃ  ｓｓＮＭＲピークのいくつかのリストを、下記表Ｓに提供する。
【表２０】
0006746569.tif 000066
【０４２３】
化合物１：グリセリルトリステアレートのＤＳＣ：
化合物１：グリセリルトリステアレートのＤＳＣサーモグラムの例を、図２４に示す。図２４における化合物１：グリセリルトリステアレートのサーモグラムは、化合物１：グリセリルトリステアレート共結晶およびグリセリルトリステアレートの共晶融解に対応する、５５.１℃の吸熱を有する。この事象の後、無添加グリセリルトリステアレートの融解に対応する、７１.３℃の他の吸熱がある。２０１.３℃での重複吸熱および２０８.１℃(ピーク)での発熱は、それぞれ無添加化合物１の共結晶融解および結晶化に対応する。２８４.７℃の他の吸熱は、無添加形態の化合物１の融解に対応する。
【０４２４】
化合物１：グリセリルトリパルミテートの特徴付け
化合物１：グリセリルトリパルミテートのＸＲＰＤ：
図２５に示す化合物１：グリセリルトリパルミテートのＸＲＰＤパターンの例を、Bruker D8 Advance回折計を使用して取得した。ＸＲＰＤパターンで観察される化合物１：グリセリルトリパルミテートの代表的ピークを、下記表Ｔに提供する。下に挙げるすべてのピークは、最大ピーク強度の１％を超える。
【表２１】
0006746569.tif 000067
【０４２５】
化合物１：グリセリルトリパルミテートの１３Ｃ  ｓｓＮＭＲ：
化合物１：グリセリルトリパルミテートの１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルの例を図２６に示す。化合物１：グリセリルトリパルミテートの１３Ｃ  ｓｓＮＭＲピークのいくつかのリストを、下記表Ｕに提供する。
【表２２】
0006746569.tif 000068
【０４２６】
化合物１：グリセリルトリパルミテートのＤＳＣ：
化合物１：グリセリルトリパルミテートのＤＳＣサーモグラムの例を図２７に示す。図２７における化合物１：グリセリルトリパルミテートのサーモグラムは、化合物１：グリセリルトリパルミテート共結晶およびグリセリルトリパルミテートの共晶融解に対応する４７.７℃の吸熱を有する。この事象の後、無添加グリセリルトリパルミテートの融解に対応する６３.０℃の他の吸熱がある。１７４.９℃での重複吸熱および１８６.７℃での発熱は、それぞれ、無添加化合物１の共結晶融解および結晶化に対応する。２６６.２℃の他の吸熱は、無添加形態の化合物１の融解に対応する。
【０４２７】
化合物１：グリセリルトリドデカノエートの特徴付け
化合物１：グリセリルトリドデカノエートのＸＲＰＤ：
図２８に示す化合物１：グリセリルドデカノアートのＸＲＰＤパターンの例を、Bruker D8 Advance回折計を使用して取得した。ＸＲＰＤパターンで観察される化合物１：グリセリルトリドデカノエートの代表的ピークを、下記表Ｖに提供する。下に挙げるすべてのピークは、最大ピーク強度の１％以上である。
【表２３】
0006746569.tif 000069
【０４２８】
化合物１：グリセリルトリドデカノエートの１３Ｃ  ｓｓＮＭＲ：
化合物１：グリセリルトリドデカノエートの１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルを図２９に示す。化合物１：グリセリルトリドデカノエートの１３Ｃ  ｓｓＮＭＲピークのいくつかのリストを、下記表Ｗに提供する。
【表２４】
0006746569.tif 000070
【０４２９】
化合物１：グリセリルトリドデカノエートの単結晶Ｘ線結晶学
化合物１：グリセリルトリドデカノエートの代表的単結晶ｘ線結晶学データを、表Ｘ−ｉ〜Ｘ−viiに提供する。
【０４３０】
【表２５】
0006746569.tif 000071
【０４３１】
【表２６】
0006746569.tif 000072
【０４３２】
【表２７】
0006746569.tif 000073
【０４３３】
【表２８】
0006746569.tif 000074
【０４３４】
【表２９】
0006746569.tif 000075
【表３０】
0006746569.tif 000076
【表３１】
0006746569.tif 000077
【０４３５】
【表３２】
0006746569.tif 000078
【０４３６】
【表３３】
0006746569.tif 000079
【表３４】
0006746569.tif 000080
シンメトリーコード：(ｉ)−ｙ＋１、ｘ−ｙ＋１、ｚ；(ii)−ｘ＋ｙ、−ｘ＋１、ｚ。
【０４３７】
化合物１：グリセリルトリミリステートの特徴付け
化合物１：グリセリルトリミリステートのＸＲＰＤ：
図３０に示す化合物１：グリセリルトリミリステートのＸＲＰＤパターンの例を、Panalytical Empyrean II回折計を使用して取得した。ＸＲＰＤパターンにおいて観察される化合物１：グリセリルトリミリステートの代表的ピークを、下記表Ｘに提供する。下に挙げるすべてのピークは、最大ピーク強度の１％を超える。
【表３５】
0006746569.tif 000081
【０４３８】
化合物１：グリセリルトリミリステートの１３Ｃ  ｓｓＮＭＲ：
化合物１：グリセリルトリミリステートの１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルの例を図３１に示す。化合物１：グリセリルトリミリステートの１３Ｃ  ｓｓＮＭＲピークのいくつかのリストを、下記表Ｙに提供する。
【表３６】
0006746569.tif 000082
【０４３９】
化合物１：グリセリルトリミリステートのＤＳＣ：
化合物１：グリセリルトリステアレートのＤＳＣサーモグラム例を図３２に示す。図３２における化合物１：グリセリルトリミリステートのサーモグラムは、グリセリルトリミリステートの融解に対応する５９.２℃の吸熱を有する。この事象の後、吸熱と重複する１３４.４℃の幅広の発熱がある。この事象の後、無添加化合物１の結晶化に対応する１７１.３℃での発熱がある。２８０.１℃での他の吸熱は、無添加形態の化合物１の融解に対応する。
【０４４０】
化合物１：グリセリルトリヘキサノエートの特徴付け
化合物１：グリセリルトリヘキサノエートのＸＲＰＤ：
図３３に示す化合物１：グリセリルトリヘキサノエートのＸＲＰＤパターンの例を、Panalytical Empyrean II回折計を使用して取得した。ＸＲＰＤパターンにおいて観察される化合物１：グリセリルトリヘキサノエートの代表的ピークを、下記表Ｚに提供する。下に挙げるすべてのピークは、最大ピーク強度の１％を超える。
【表３７】
0006746569.tif 000083
【０４４１】
化合物１：グリセリルトリデカノエートの特徴付け
化合物１：グリセリルトリデカノエートのＸＲＰＤ：
図３４に示す化合物１：グリセリルトリデカノエートのＸＲＰＤパターンの例を、Bruker D8 Advance回折計を使用して取得した。ＸＲＰＤパターンにおいて観察される化合物１：グリセリルトリデカノエートの代表的ピークを、下記表ＡＡに提供する。下に挙げるすべてのピークは、最大ピーク強度の１％を超える。
【表３８】
0006746569.tif 000084
【０４４２】
化合物１：グリセリルトリデカノエートの１３Ｃ  ｓｓＮＭＲ：
化合物１：グリセリルトリデカノエートの１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルの例を図３５に示す。化合物１：グリセリルトリドデカノエートの１３Ｃ  ｓｓＮＭＲピークのいくつかのリストを、下記表ＡＢに提供する。
【表３９】
0006746569.tif 000085
【０４４３】
化合物１−トリグリセリド共結晶のＨＰＬＣ分析
サンプル調製
３０mgの化合物１−トリグリセリド共結晶サンプルを秤量し、１００mL琥珀色メスフラスコに定量的に移した。５０mlの希釈剤を添加し、サンプル調製物を１５分音波処理した。次いで各サンプル調製物を、ロータップ・シェーカーで、３０分、２００運動／秒で振盪させた。さらに４０mlの希釈剤を添加し、サンプル調製物を、ロータップ・シェーカーで３０分、２００運動／秒で振盪させた。完全に溶解した化合物１−グリセリルトリオクタノエートサンプル調製物を室温に戻し、次いで、希釈剤で一定容積まで希釈し、十分混合した。化合物１−グリセリルトリオレアートおよび化合物１−グリセリルトリリノレートサンプル調製物は完全には溶解しなかった。これらの２サンプル調製物を、各々１５分音波処理し、次いで３０分、２００運動／秒で振盪させた。２サンプル調製物はまだ溶解しなかった。８mlのアセトニトリルをそれぞれに添加し、サンプル調製物を１５分音波処理し、３０分、２００運動／秒で振盪させた。２サンプル調製物はまだ溶解しなかった。１mlのメタノールをそれぞれに添加し、２サンプル調製物を１５分音波処理し、次いで３０分、２００運動／秒で振盪させた。２サンプル調製物はまだ溶解しなかった。サンプル調製物を室温に戻し、メタノールで一定容積まで希釈し、十分混合した。両方のサンプル調製物は濁っていた。溶液の一定量を０.４５μmワットマンＰＶＤＦフィルターで濾過した。濾液の最初の２mLを廃棄し、その後琥珀色ＨＰＬＣバイアルに分析用に採取した。
【０４４４】
サンプル調製物は、下記ＨＰＬＣ法用であった。
【０４４５】
ＨＰＬＣ法
サンプルを、下記方法パラメータを使用して分析した。移動相Ａは０.１％リン酸水溶液であった。移動相Ｂは０.１％リン酸アセトニトリル溶液であった。下記表ＡＣは使用した勾配プログラムを記載する。
【表４０】
0006746569.tif 000086
【０４４６】
ＨＰＬＣを、Agilent 1260 HPLC装置上、Waters Symmetry Shield RP18、４.６×５０mm、３.５μmカラム(P/N 186000177)を使用して行った。希釈剤は７０：３０アセトニトリル：水であった。流速は１.５mL／分であった。カラム温度は３５℃であった。使用したニードルウォッシュは９０：１０(アセトニトリル：水)であった。注入容積は１０μLであった。検出器波長は２３５nMであった。データ収集時間は１０.０分であった。バイアル温度は環境または２５℃であった。ランタイムは１６分であった。使用したシリンジフィルターは、０.４５μm  ＰＶＤＦシリンジフィルターであった。サンプルおよび標準安定性はいずれも２日であった。化合物１の２標品を調製し、使用した(２５０mLの希釈剤中７５.１２mgの化合物１および２５０mLの希釈剤中７５.２９mgの化合物１)。
【０４４７】
不純物ピークの相対的積分強度を合算し、１００％から減ずることにより、各共結晶の純度を決定した。化合物１：グリセリルトリオクタノエート共結晶および化合物１：グリセリルトリオレアート共結晶は各々９９.９％(ｗ／ｗ)であった。化合物１：グリセリルトリリノレート共結晶は９９.５％(ｗ／ｗ)であった。ＨＰＬＣによる不純物の検出限界は０.００５％である。
【０４４８】
各共結晶の化学量論比も、このＨＰＬＣアッセイから決定した。下記表ＡＤに締めusように、決定した化学量論比は、溶液１Ｈ  ＮＭＲおよび熱重量分析の結果と一致した。
【表４１】
0006746569.tif 000087
【０４４９】
活性アッセイ
Ａ. プロトコール１
化合物のΔＦ５０８−ＣＦＴＲ増強性質を検出および測定するためのアッセイ
化合物のΔＦ５０８−ＣＦＴＲ調節性質をアッセイするための膜電位光学法
本アッセイは、ＮＩＨ  ３Ｔ３細胞における機能的ΔＦ５０８−ＣＦＴＲの増加に関する読み出しとして、蛍光プレートリーダー(例えば、FLIPR III、Molecular Devices, Inc.)を使用して、膜電位の変化を測定するために蛍光電圧感知色素を使用する。応答の駆動力は、細胞が予め化合物で処理され、その後電圧感知色素を負荷された後の、一液体添加工程による、チャネル活性化と組み合わせたクロライドイオン勾配の創成である。
【０４５０】
増強因子化合物の同定
ΔＦ５０８−ＣＦＴＲの増強因子を同定するために、二重添加ＨＴＳアッセイ形態を開発した。このＨＴＳアッセイは、温度補正ΔＦ５０８  ＣＦＴＲ  ＮＩＨ  ３Ｔ３細胞におけるΔＦ５０８  ＣＦＴＲのゲーティング(コンダクタンス)の増加の指標として、FLIPR IIIにおける膜電位の変化を測定するための蛍光電圧感知色素を使用する。応答の駆動力は、細胞が予め増強因子化合物(またはＤＭＳＯ媒体対照)で処理され、その後再分布色素を負荷された後、FLIPR IIIのような蛍光プレートリーダーを使用する、一液体添加工程による、フォルスコリンでのチャネル活性化と組み合わせたＣｌ−イオン勾配の創成である。
【０４５１】
溶液
浴溶液＃１：(mMで)ＮａＣｌ  １６０、ＫＣｌ  ４.５、ＣａＣｌ２  ２、ＭｇＣｌ２  １、ＨＥＰＥＳ  １０、ＮａＯＨでｐＨ７.４。
無クロライド浴溶液：浴溶液＃１(上記における)クロライド塩を、グルコネート塩に置き換える。
【０４５２】
細胞培養
ΔＦ５０８−ＣＦＴＲを安定に発現するＮＩＨ３Ｔ３マウス線維芽細胞を、膜電位の光学測定に使用する。細胞を、３７℃で、５％ＣＯ２および９０％湿度に、１７５cm２培養フラスコ中、２mM  グルタミン、１０％ウシ胎児血清、１×ＮＥＡＡ、β−ＭＥ、１×ｐｅｎ／ｓｔｒｅｐおよび２５mM  ＨＥＰＥＳ添加ダルベッコ改変イーグル培地で維持する。すべての光学アッセイについて、細胞を、３８４ウェルマトリゲル被覆プレート中約２０,０００／ウェルで播種し、２時間、３７℃で培養し、２７℃で２４時間培養した。ｆｏｒ  ｔｈｅ増強因子アッセイ。補正アッセイのために、細胞を、化合物存在下および非存在下、１６〜２４時間、２７℃または３７℃で培養する。
【０４５３】
化合物のΔＦ５０８−ＣＦＴＲ調節性質をアッセイするための電気生理学的アッセイ
ウッシングチャンバーアッセイ
ウッシングチャンバー実験を、光学アッセイで同定されたΔＦ５０８−ＣＦＴＲモジュレーターをさらに特徴付けるために、ΔＦ５０８−ＣＦＴＲを発現する極性化気道上皮細胞で実施した。非ＣＦおよびＣＦ気道上皮を、先に記載された(Galietta, L.J.V., Lantero, S., Gazzolo, A., Sacco, O., Romano, L., Rossi, G.A., & Zegarra-Moran, O. (1998) In vitro Cell. Dev. Biol. 34, 478-481)ように培養した気管支組織から単離し、ＮＩＨ３Ｔ３条件培地で予め被覆したCostar(登録商標)SnapwellTMフィルターに播種した。４日後、頂端培地を除去し、細胞を、使用前＞１４日空気液体界面で増殖させた。これにより、気道上皮の特徴である線毛性の十分に分化した円柱状細胞の単層がもたらされた。非ＣＦ  ＨＢＥを、あらゆる既知肺疾患を有しなかった非喫煙者から単離した。ＣＦ−ＨＢＥを、ΔＦ５０８−ＣＦＴＲについてホモ接合性の患者から単離した。
【０４５４】
Costar(登録商標)SnapwellTM細胞培養インサートで増殖させたＨＢＥをウッシングチャンバー(Physiologic Instruments, Inc., San Diego, CA)にマウントし、基底から頂端Ｃｌ−勾配(ＩＳＣ)存在下の経上皮抵抗性および短絡電流を、電位固定系(Department of Bioengineering, University of Iowa, IA)を使用して測定した。簡潔にいうと、ＨＢＥを、電位固定記録条件(Ｖhold＝０mV)下、３７℃で試験した。基底溶液は(mMで)１４５  ＮａＣｌ、０.８３  Ｋ２ＨＰＯ４、３.３  ＫＨ２ＰＯ４、１.２  ＭｇＣｌ２、１.２  ＣａＣｌ２、１０  グルコース、１０  ＨＥＰＥＳ(ＮａＯＨでｐＨ７.３５に調節)を含み、頂端溶液は(mMで)１４５  グルコン酸Ｎａ、１.２  ＭｇＣｌ２、１.２  ＣａＣｌ２、１０  グルコース、１０  ＨＥＰＥＳ(ＮａＯＨでｐＨ７.３５に調節)を含んだ。
【０４５５】
増強因子化合物の同定
典型的プロトコールは、基底から頂端膜Ｃｌ−濃度勾配を含んだ。この勾配を設定するために、ノーマルリンゲルを基底膜に使用し、一方頂端ＮａＣｌを当モルグルコン酸ナトリウム(ＮａＯＨでｐＨ７.４に滴定)に置き換えて、上皮を通過する大きなＣｌ−濃度勾配を得た。フォルスコリン(１０μM)および全試験化合物を、細胞培養インサートの頂端側に添加した。推定ΔＦ５０８−ＣＦＴＲ増強因子の有効性を、既知増強因子、ゲニステインのものと比較した。
【０４５６】
パッチクランプ記録
ΔＦ５０８−ＮＩＨ３Ｔ３細胞における総Ｃｌ−電流を、先に記載先に記載されたような穿孔パッチ記録配置を使用してモニターした(Rae, J., Cooper, K., Gates, P., & Watsky, M. (1991) J. Neurosci. Methods 37, 15-26)。電位固定記録を、２２℃で、Axopatch 200Bパッチクランプ増幅器(Axon Instruments Inc., Foster City, CA)を使用して実施した。ピペット溶液は(mMで)１５０  Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン(ＮＭＤＧ)−Ｃｌ、２  ＭｇＣｌ２、２  ＣａＣｌ２、１０  ＥＧＴＡ、１０  ＨＥＰＥＳおよび２４０μg／mL  アンホテリシン−Ｂ(ＨＣｌでｐＨ７.３５に調節)を含んだ。細胞外培地は(mMで)１５０  ＮＭＤＧ−Ｃｌ、２  ＭｇＣｌ２、２  ＣａＣｌ２、１０  ＨＥＰＥＳ(ＨＣｌでｐＨ７.３５に調節)を含んだ。パルス発生、データ獲得および分析を、Clampex 8(Axon Instruments Inc.)と組み合わせたDigidata 1320 A/Dインターフェースを備えたＰＣを使用して実施した。ΔＦ５０８−ＣＦＴＲを活性化するために、１０μMフォルスコリンおよび２０μMゲニステインを浴に添加し、電流−電圧相関を３０秒毎にモニターした。
【０４５７】
増強因子化合物の同定
ΔＦ５０８−ＣＦＴＲ増強因子がΔＦ５０８−ＣＦＴＲを安定に発現するＮＩＨ３Ｔ３細胞における巨視的ΔＦ５０８−ＣＦＴＲ  Ｃｌ−電流を増加させる能力も、穿孔パッチ記録技術を使用して試験した。光学アッセイから同定された増強因子は、光学アッセイで観察されたのと類似する効力および有効性で、ＩΔＦ５０８の用量依存的増加を誘発した。試験した全細胞で、ポテンシエーター適用前および適用中の逆転電位は約−３０mVであり、これは、計算されたＥＣｌ(−２８mV)である。
【０４５８】
細胞培養
ΔＦ５０８−ＣＦＴＲを安定に発現するＮＩＨ３Ｔ３マウス線維芽細胞を、全細胞記録に使用する。細胞を、３７℃で、５％ＣＯ２および９０％湿度に、１７５cm２培養フラスコ中、２mM  グルタミン、１０％ウシ胎児血清、１×ＮＥＡＡ、β−ＭＥ、１×ｐｅｎ／ｓｔｒｅｐおよび２５mM  ＨＥＰＥＳ添加ダルベッコ改変イーグル培地で維持する。全細胞記録のために、２,５００〜５,０００細胞をポリ−Ｌ−リシン−被覆カバーガラスに播種し、２４〜４８時間、２７℃で培養して、増強因子の活性に使用し、補正因子活性の測定のために、補正化合物存在下または非存在下３７℃でインキュベートした。
【０４５９】
単一チャネル記録
ＮＩＨ３Ｔ３細胞で発現されるｗｔ−ＣＦＴＲおよび温度補正ΔＦ５０８−ＣＦＴＲのゲーティング活性を、先に記載(Dalemans, W., Barbry, P., Champigny, G., Jallat, S., Dott, K., Dreyer, D., Crystal, R.G., Pavirani, A., Lecocq, J-P., Lazdunski, M. (1991) Nature 354, 526 - 528)のように、切除裏返し膜パッチ記録を使用して、Axopatch 200Bパッチクランプ増幅器(Axon Instruments Inc.)を使用して観察した。ピペットは(mMで)：１５０  ＮＭＤＧ、１５０  アスパラギン酸、５  ＣａＣｌ２、２  ＭｇＣｌ２および１０  ＨＥＰＥＳ(Ｔｒｉｓ塩基でｐＨ７.３５に調節)を含んだ。浴は(mMで)：１５０  ＮＭＤＧ−Ｃｌ、２  ＭｇＣｌ２、５  ＥＧＴＡ、１０  ＴＥＳおよび１４  Ｔｒｉｓ塩基(ＨＣｌでｐＨ７.３５に調節)を含んだ。切除後、ｗｔおよびΔＦ５０８−ＣＦＴＲの両者を、１mM  Ｍｇ−ＡＴＰ、７５nMの触媒的サブユニットのｃＡＭＰ依存性タンパク質キナーゼ(ＰＫＡ；Promega Corp. Madison, WI)および電流減弱を阻止したタンパク質ホスファターゼを阻害するための１０mM  ＮａＦの添加により活性化した。ピペット電位を８０mVに維持した。チャネル活性を、≦２活性チャネルを含む膜パッチから分析した。同時開口の最大数は、実験中の活性チャネル数を決定した。単一チャネル電流振幅を測定するために、１２０秒のΔＦ５０８−ＣＦＴＲ活性から記録したデータを１００Hzで“オフライン”でフィルタリングし、Bio-Patch Analysisソフトウェア(Bio-Logic Comp. France)を使用して、マルチガウス関数を備えた、全点増幅ヒストグラムを構築するのに使用した。総顕微鏡的電流および開確率(Ｐｏ)を、１２０秒のチャネル活性から決定した。ＰｏをBio-Patchソフトウェアまたは相関Ｐｏ＝Ｉ／ｉ(Ｎ)から得て、ここで、Ｉ＝平均電流、ｉ＝単一チャネル電流振幅およびＮ＝パッチ中の活性チャネル数である。
【０４６０】
細胞培養
ΔＦ５０８−ＣＦＴＲを安定に発現するＮＩＨ３Ｔ３マウス線維芽細胞を、切除膜パッチクランプ記録に使用する。細胞を、３７℃で、５％ＣＯ２および９０％湿度に、１７５cm２培養フラスコ中、２mM  グルタミン、１０％ウシ胎児血清、１×ＮＥＡＡ、β−ＭＥ、１×ｐｅｎ／ｓｔｒｅｐおよび２５mM  ＨＥＰＥＳ添加ダルベッコ改変イーグル培地で維持する。単一チャネル記録のために、２,５００〜５,０００細胞をポリ−Ｌ−リシン−被覆カバーガラスに播種し、２４〜４８時間、２７℃で培養して、使用した。
【０４６１】
化合物１の活性
本発明の化合物は、ＡＴＰ結合カセット輸送体のモジュレーターとして有用である。下の表ＡＤは、表１におけるある態様のＥＣ５０および相対的有効性を記載する。下の表ＡＥにおいて、次の意味を適用する。ＥＣ５０：“＋＋＋”は＜１０μMを意味する；“＋＋”は１０μM〜２５μMを意味する；“＋”は２５μM〜６０μMを意味する。有効性％：“＋”は＜２５％を意味する；“＋＋”は２５％〜１００％を意味する；“＋＋＋”は＞１００％を意味する。
【表４２】
0006746569.tif 000088
【０４６２】
Ｂ. プロトコール２
化合物のΔＦ５０８−ＣＦＴＲ増強性質を検出および測定するためのアッセイ
化合物のΔＦ５０８−ＣＦＴＲ調節性質をアッセイするための膜電位光学法
本アッセイは、ＮＩＨ  ３Ｔ３細胞における機能的ΔＦ５０８−ＣＦＴＲの増加に関する読み出しとして、蛍光プレートリーダー(例えば、FLIPR III、Molecular Devices, Inc.)を使用して、膜電位の変化を測定するための蛍光電圧感知色素を使用する。応答の駆動力は、細胞が予め化合物で処理され、その後電圧感知色素を負荷された後の、一液体添加工程による、チャネル活性化と組み合わせたクロライドイオン勾配の創成である。
【０４６３】
増強因子化合物の同定
ΔＦ５０８−ＣＦＴＲの増強因子を同定するために、二重添加ＨＴＳアッセイ形態を開発した。このＨＴＳアッセイは、温度補正ΔＦ５０８  ＣＦＴＲ  ＮＩＨ  ３Ｔ３細胞におけるΔＦ５０８  ＣＦＴＲのゲーティング(コンダクタンス)の増加の指標として、FLIPR IIIにおける膜電位の変化を測定するための蛍光電圧感知色素を使用する。応答の駆動力は、細胞が予め増強因子化合物(またはＤＭＳＯ媒体対照)で処理され、その後再分布色素を負荷された後、FLIPR IIIのような蛍光プレートリーダーを使用する、一液体添加工程による、フォルスコリンでのチャネル活性化と組み合わせたＣｌ−イオン勾配の創成である。
【０４６４】
溶液
浴溶液＃１：(mMで)ＮａＣｌ  １６０、ＫＣｌ  ４.５、ＣａＣｌ２  ２、ＭｇＣｌ２  １、ＨＥＰＥＳ  １０、ＮａＯＨでｐＨ７.４。
無クロライド浴溶液：浴溶液＃１(上記における)クロライド塩を、グルコネート塩に置き換える。
【０４６５】
細胞培養
ΔＦ５０８−ＣＦＴＲを安定に発現するＮＩＨ３Ｔ３マウス線維芽細胞を、膜電位の光学測定に使用する。細胞を、３７℃で、５％ＣＯ２および９０％湿度に、１７５cm２培養フラスコ中、２mM  グルタミン、１０％ウシ胎児血清、１×ＮＥＡＡ、β−ＭＥ、１×ｐｅｎ／ｓｔｒｅｐおよび２５mM  ＨＥＰＥＳ添加ダルベッコ改変イーグル培地で維持する。すべての光学アッセイについて、細胞を、３８４ウェルマトリゲル被覆プレート中約２０,０００／ウェルで播種し、２時間、３７℃で培養し、増強因子アッセイのために２７℃で２４時間培養した。補正アッセイのために、細胞を、化合物存在下および非存在下、１６〜２４時間、２７℃または３７℃で培養する。
【０４６６】
化合物のΔＦ５０８−ＣＦＴＲ調節性質をアッセイするための電気生理学的アッセイ
ウッシングチャンバーアッセイ
ウッシングチャンバー実験を、光学アッセイで同定されたΔＦ５０８−ＣＦＴＲモジュレーターをさらに特徴付けるために、ΔＦ５０８−ＣＦＴＲを発現する極性化気道上皮細胞で実施した。非ＣＦおよびＣＦ気道上皮を、先に記載(Galietta, L.J.V., Lantero, S., Gazzolo, A., Sacco, O., Romano, L., Rossi, G.A., & Zegarra-Moran, O. (1998) In vitro Cell. Dev. Biol. 34, 478-481)のように培養した気管支組織から単離し、ＮＩＨ３Ｔ３条件培地で予め被覆したCostar(登録商標)SnapwellTMフィルターに播種した。４日後、頂端培地を除去し、細胞を、使用前＞１４日空気液体界面で増殖させた。これにより、気道上皮の特徴である線毛性の十分に分化した円柱状細胞の単層がもたらされた。非ＣＦ  ＨＢＥを、あらゆる既知肺疾患を有しなかった非喫煙者から単離した。ＣＦ−ＨＢＥを、ΔＦ５０８−ＣＦＴＲについてホモ接合性の患者から単離した。
【０４６７】
Costar(登録商標)SnapwellTM細胞培養インサートで増殖させたＨＢＥをウッシングチャンバー(Physiologic Instruments, Inc., San Diego, CA)にマウントし、基底から頂端Ｃｌ−勾配(ＩＳＣ)存在下の経上皮抵抗性および短絡電流を、電位固定系(Department of Bioengineering, University of Iowa, IA)を使用して測定した。簡潔にいうと、ＨＢＥを、電位固定記録条件(Ｖhold＝０mV)下、３７℃で試験した。基底溶液は(mMで)１４５  ＮａＣｌ、０.８３  Ｋ２ＨＰＯ４、３.３  ＫＨ２ＰＯ４、１.２  ＭｇＣｌ２、１.２  ＣａＣｌ２、１０  グルコース、１０  ＨＥＰＥＳ(ＮａＯＨでｐＨ７.３５に調節)を含み、頂端溶液は(mMで)１４５  グルコン酸Ｎａ、１.２  ＭｇＣｌ２、１.２  ＣａＣｌ２、１０  グルコース、１０  ＨＥＰＥＳ(ＮａＯＨでｐＨ７.３５に調節)を含んだ。
【０４６８】
増強因子化合物の同定
典型的プロトコールは、基底から頂端膜Ｃｌ−濃度勾配を含んだ。この勾配を設定するために、ノーマルリンゲルを基底膜に使用し、一方頂端ＮａＣｌを当モルグルコン酸ナトリウム(ＮａＯＨでｐＨ７.４に滴定)に置き換えて、上皮を通過する大きなＣｌ−濃度勾配を得た。フォルスコリン(１０μM)および全試験化合物を、細胞培養インサートの頂端側に添加した。推定ΔＦ５０８−ＣＦＴＲ増強因子の有効性を、既知増強因子、ゲニステインのものと比較した。
【０４６９】
パッチクランプ記録
ΔＦ５０８−ＮＩＨ３Ｔ３細胞における総Ｃｌ−電流を、先に記載先に記載されたような穿孔パッチ記録配置を使用してモニターした(Rae, J., Cooper, K., Gates, P., & Watsky, M. (1991) J. Neurosci. Methods 37, 15-26)。電位固定記録を、２２℃で、Axopatch 200Bパッチクランプ増幅器(Axon Instruments Inc., Foster City, CA)を使用して実施した。ピペット溶液は、(mMで)１５０  Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン(ＮＭＤＧ)−Ｃｌ、２  ＭｇＣｌ２、２  ＣａＣｌ２、１０  ＥＧＴＡ、１０  ＨＥＰＥＳおよび２４０μg／mL  アンホテリシン−Ｂ(ＨＣｌでｐＨ７.３５に調節)を含んだ。細胞外培地は(mMで)１５０  ＮＭＤＧ−Ｃｌ、２  ＭｇＣｌ２、２  ＣａＣｌ２、１０  ＨＥＰＥＳ(ＨＣｌでｐＨ７.３５に調節)を含んだ。パルス発生、データ獲得および分析を、Clampex 8(Axon Instruments Inc.)と組み合わせたDigidata 1320 A/Dインターフェースを備えたＰＣを使用して実施した。ΔＦ５０８−ＣＦＴＲを活性化するために、１０μMフォルスコリンおよび２０μMゲニステインを浴に添加し、電流−電圧相関を３０秒毎にモニターした。
【０４７０】
増強因子化合物の同定
ΔＦ５０８−ＣＦＴＲ増強因子がΔＦ５０８−ＣＦＴＲを安定に発現するＮＩＨ３Ｔ３細胞における巨視的ΔＦ５０８−ＣＦＴＲ  Ｃｌ−電流を増加させる能力も、穿孔パッチ記録技術を使用して試験した。光学アッセイから同定された増強因子は、光学アッセイで観察されたのと類似する効力および有効性で、ＩΔＦ５０８の用量依存的増加を誘発した。試験した全細胞で、ポテンシエーター適用前および適用中の逆転電位は約−３０mVであり、これは、計算されたＥＣｌ(−２８mV)である。
【０４７１】
細胞培養
ΔＦ５０８−ＣＦＴＲを安定に発現するＮＩＨ３Ｔ３マウス線維芽細胞を、全細胞記録に使用する。細胞を、３７℃で、５％ＣＯ２および９０％湿度に、１７５cm２培養フラスコ中、２mM  グルタミン、１０％ウシ胎児血清、１×ＮＥＡＡ、β−ＭＥ、１×ｐｅｎ／ｓｔｒｅｐおよび２５mM  ＨＥＰＥＳ添加ダルベッコ改変イーグル培地で維持する。全細胞記録のために、２,５００〜５,０００細胞をポリ−Ｌ−リシン−被覆カバーガラスに播種し、２４〜４８時間、２７℃で培養して、増強因子の活性に使用し、補正因子活性の測定のために、補正化合物存在下または非存在下３７℃でインキュベートした。
【０４７２】
単一チャネル記録
ＮＩＨ３Ｔ３細胞で発現されるｗｔ−ＣＦＴＲおよび温度補正ΔＦ５０８−ＣＦＴＲのゲーティング活性を、先に記載(Dalemans, W., Barbry, P., Champigny, G., Jallat, S., Dott, K., Dreyer, D., Crystal, R.G., Pavirani, A., Lecocq, J-P., Lazdunski, M. (1991) Nature 354, 526 - 528)のように、切除裏返し膜パッチ記録を使用して、Axopatch 200Bパッチクランプ増幅器(Axon Instruments Inc.)を使用して観察した。ピペットは(mMで)：１５０  ＮＭＤＧ、１５０  アスパラギン酸、５  ＣａＣｌ２、２  ＭｇＣｌ２および１０  ＨＥＰＥＳ(Ｔｒｉｓ塩基でｐＨ７.３５に調節)を含んだ。浴は(mMで)：１５０  ＮＭＤＧ−Ｃｌ、２  ＭｇＣｌ２、５  ＥＧＴＡ、１０  ＴＥＳおよび１４  Ｔｒｉｓ塩基(ＨＣｌでｐＨ７.３５に調節)を含んだ。切除後、ｗｔおよびΔＦ５０８−ＣＦＴＲの両者を、１mM  Ｍｇ−ＡＴＰ、７５nMの触媒的サブユニットのｃＡＭＰ依存性タンパク質キナーゼ(ＰＫＡ；Promega Corp. Madison, WI)および電流減弱を阻止したタンパク質ホスファターゼを阻害するための１０mM  ＮａＦの添加により活性化した。ピペット電位を８０mVに維持した。チャネル活性を、≦２活性チャネルを含む膜パッチから分析した。同時開口の最大数は、実験中の活性チャネル数を決定した。単一チャネル電流振幅を測定するために、１２０秒のΔＦ５０８−ＣＦＴＲ活性から記録したデータを１００Hzで“オフライン”でフィルタリングし、Bio-Patch Analysisソフトウェア(Bio-Logic Comp. France)を使用して、マルチガウス関数を備えた、全点増幅ヒストグラムを構築するのに使用した。総顕微鏡的電流および開確率(Ｐｏ)を、１２０秒のチャネル活性から決定した。ＰｏをBio-Patchソフトウェアまたは相関Ｐｏ＝Ｉ／ｉ(Ｎ)から得て、ここで、Ｉ＝平均電流、ｉ＝単一チャネル電流振幅およびＮ＝パッチ中の活性チャネル数である。
【０４７３】
細胞培養
ΔＦ５０８−ＣＦＴＲを安定に発現するＮＩＨ３Ｔ３マウス線維芽細胞を、切除膜パッチクランプ記録に使用する。細胞を、３７℃で、５％ＣＯ２および９０％湿度に、１７５cm２培養フラスコ中、２mM  グルタミン、１０％ウシ胎児血清、１×ＮＥＡＡ、β−ＭＥ、１×ｐｅｎ／ｓｔｒｅｐおよび２５mM  ＨＥＰＥＳ添加ダルベッコ改変イーグル培地で維持する。単一チャネル記録のために、２,５００〜５,０００細胞をポリ−Ｌ−リシン−被覆カバーガラスに播種し、２４〜４８時間、２７℃で培養して、使用した。
【０４７４】
溶解
喫食時人工腸液(ＦｅＳＳＩＦ)への溶解
化合物１共結晶の溶解試験を、ジャケット付き容器に入れた５０ml琥珀色ビンで行った。ジャケット付き容器の温度を、Iso Temp 360水浴／冷却装置で制御し、３７℃に設定した。２０mlの喫食時人工腸液をビンに入れ、３７℃で１時間平衡化させ、その間、１２５rpmで撹拌した。次いで、予め秤量した量(表ＡＤ参照、化合物１の標的濃度約１mg／ml)の化合物１：トリグリセリド共結晶を各ビンに添加し、３７℃で溶解試験の時間撹拌した。１mlサンプルを、選択した時点(５分および３０分ならびに１時間、２時間、３時間、４時間、６時間、１６時間および２４時間)に採取した。サンプルを、Millex(登録商標)-LH  ０.４５μm  ＰＴＦＥシリンジフィルターを使用して濾過し、濃度レベルについてＨＰＬＣで分析した。
【０４７５】
化合物１  ＳＤＤおよび化合物１非晶質の溶解試験を、Varian VK700溶解系で実施した。溶解浴温度を制御し、３７℃に設定した。５００mlの喫食時人工腸液を溶解容器に入れ、撹拌しながら３７℃で平衡化させた。次いで、予め秤量した量(化合物１の標的濃度約１mg／mL)の化合物１を各容器に添加し、３７℃で溶解試験の時間撹拌した。３mlサンプルを選択した時点(０.５時間、１時間、１.５時間、３時間、６時間、９時間、１２時間、１８時間、２４時間、４８時間)に採取した。サンプルを、ワットマン２５mmと０.４５μm  ＰＴＦＥシリンジフィルターを使用して濾過し、濃度レベルについてＨＰＬＣで分析した。
【０４７６】
【表４３】
0006746569.tif 000089
【０４７７】
図３６は、ＦｅＳＳＩＦにおける化合物１：グリセリルトリオクタノエート、化合物１：グリセリルトリオレアートおよび化合物１：グリセリルトリリノレートと、非晶質化合物１および化合物１  ＳＤＤの２４時間までの溶解プロファイルの比較を示す。
【０４７８】
初期製剤および非晶質化合物１の混合物から単離した固体物質
Abbot鉄強化初期製剤を、約７％ｗ／ｖ固体比(すなわち、１００mlの再構成製剤中７ｇの非晶質化合物１)で非晶質化合物１と混合した。懸濁液を環境条件でスラリー化し、固体を吸引濾過により単離した。回収された固体を少なくとも１時間空気乾燥させて、分析した。
【０４７９】
図３７は、化合物１との種々の純粋トリグリセリドの共結晶および初期製剤と化合物１の混合物から単離した固体物質の小角ＸＲＰＤパターンの例を示す。図３７に示すデータに基づくと、初期製剤と化合物１の混合物から単離した固体物質は、種々の化合物１：トリグリセリドの共結晶の混合物かまたは結晶構造に一定範囲のトリグリセリドを伴う化合物１の共結晶であり得る。
【０４８０】
さらに、１３Ｃ  ＣＰＭＡＳスペクトルにおける芳香族化合物１シグナル強度に基づき、化合物１の平均２２％の量が、１時間〜２４時間の範囲の接触時間中の初期製剤の混合物から単離された固体物質形態で存在した。
さらに、本発明は次の態様を包含する。
１. 化合物１および１個だけのトリグリセリドを含む共結晶であって、ここで、トリグリセリドが次の構造式
【化４６】
0006746569.tif 000090
〔式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、独立してＣ１−２９脂肪族である。〕
から選択され、化合物１が次の構造式
【化４７】
0006746569.tif 000091
で表される、共結晶。
２. ２シータ±０.２度で表して、３.５、６.９および１０.９の位置に特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンで特徴付けられる、項１に記載の共結晶。
３. ２シータ±０.２度で表して、３.５、６.９、９.２、１０.９、１６.９、１８.０および２３.８の位置に特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンで特徴付けられる、項１に記載の共結晶。
４. ppm±０.１で表して、１７８.６、１５５.０および１１９.４の位置に特徴的ピークを有する１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルで特徴付けられる、項１に記載の共結晶。
５. ppm±０.１で表して、１７８.６、１５５.０、１３０.５および１１９.４の位置に特徴的ピークを有する１３Ｃ  ｓｓＮＭＲスペクトルで特徴付けられる、項１に記載の共結晶。
６. 化合物１対トリグリセリドの化学量論比が３：１である、項１〜５のいずれかに記載の共結晶。
７. 化合物１対トリグリセリドの化学量論比が６：１である、項１〜５のいずれかに記載の共結晶。
８. 化合物１が共結晶において六量体を形成し、さらにＲ１、Ｒ２およびＲ３が独立してＣ７−２９脂肪族である、項１〜７のいずれかに記載の共結晶。
９. 共結晶が喫食時人工腸液(ＦｅＳＳＩＦ)に溶解して０.４mg／mLを超える化合物１の濃度を与え、該濃度が少なくとも１０時間維持される、項１〜８のいずれかに記載の共結晶。
１０. トリグリセリドがグリセリルトリオレアート、グリセリルトリステアレート、グリセロールトリデカノエート、グリセロールトリヘキサノエート、グリセリルトリトリデカノエート、グリセロールトリオクタノエート、グリセリルトリミリステート、グリセリルトリパルミテート、グリセリルトリブチレート、グリセリルトリリノレアート、グリセリルトリドデカノエート、グリセリルデカノアート、グリセリルトリパルミトオレアート、グリセロールトリエルケート、グリセリルトリプロピオネート、パルミトジオレイン、トリアラキドニン、グリセリルトリリノレネート、トリエルシン、グリセロールトリアラキデート、グリセリルトリ(ｃｉｓ−１３−ドコセノエート)、グリセリルトリペトロセリネート、グリセリルトリベヘネート、グリセリルトリエライデートおよびトリアセチンから選択される、項１〜８のいずれかに記載の共結晶。
１１. 化合物１とトリグリセリドを含む共結晶であって、トリグリセリドが次の構造式
【化４８】
0006746569.tif 000092
〔式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、独立してＣ１−２９脂肪族である。〕
から選択され、化合物１が次の構造式
【化４９】
0006746569.tif 000093
で表され、
化合物１と共形成剤を、共結晶が形成されるように合わせる
ことを含む方法により製造される、共結晶。
１２. 治療有効量の化合物１および薬学的に許容される担体または添加物を含む医薬組成物であって、化合物１が次の構造式
【化５０】
0006746569.tif 000094
により表され、さらに、化合物１の少なくとも３０％が化合物１とトリグリセリドを含む共結晶として存在し、トリグリセリドが次の構造式
【化５１】
0006746569.tif 000095
〔式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、独立してＣ１−２９脂肪族である。〕
から選択される、医薬組成物。
１３. さらに粘液溶解剤、気管支拡張剤、抗生物質、抗感染剤、抗炎症剤、化合物１以外のＣＦＴＲモジュレーターまたは栄養剤またはこれらの組み合わせから選択されるさらなる治療剤を含む、項１２に記載の医薬組成物。
１４. さらなる治療剤が化合物１以外のＣＦＴＲモジュレーターである、項１３に記載の医薬組成物。
１５. ＣＦＴＲモジュレーターが(３−(６−(１−(２,２−ジフルオロベンゾ[ｄ][１,３]ジオキソール−５−イル)シクロプロパンカルボキサミド)−３−メチルピリジン−２−イル)安息香酸または(Ｒ)−１−(２,２−ジフルオロベンゾ[ｄ][１,３]ジオキソール−５−イル)−Ｎ−(１−(２,３−ジヒドロキシプロピル)−６−フルオロ−２−(１−ヒドロキシ−２−メチルプロパン−２−イル)−１Ｈ−インドール−５−イル)シクロプロパンカルボキサミドである、項１４に記載の医薬組成物。
１６. 患者における疾患を処置するまたは重症度を軽減する方法であって、該疾患は嚢胞性線維症、遺伝性気腫、ＣＯＰＤまたはドライアイ疾患から選択され、患者に項１〜１１のいずれかに記載の共結晶の治療有効量を投与することを含む、方法。
１７. 疾患が嚢胞性線維症である、項１６に記載の方法。
１８. １以上のさらなる治療剤を対象に共投与することをさらに含む、項１６または１７に記載の方法。
１９. さらなる治療剤が(３−(６−(１−(２,２−ジフルオロベンゾ[ｄ][１,３]ジオキソール−５−イル)シクロプロパンカルボキサミド)−３−メチルピリジン−２−イル)安息香酸または(Ｒ)−１−(２,２−ジフルオロベンゾ[ｄ][１,３]ジオキソール−５−イル)−Ｎ−(１−(２,３−ジヒドロキシプロピル)−６−フルオロ−２−(１−ヒドロキシ−２−メチルプロパン−２−イル)−１Ｈ−インドール−５−イル)シクロプロパンカルボキサミドである、項１８に記載の方法。
２０. さらなる治療剤を、共結晶と同時に、前にまたは後に投与する、項１９に記載の方法。
２１. 化合物１とトリグリセリドを含む共結晶を製造する方法であって、
ここで、化合物１は次の構造式
【化５２】
0006746569.tif 000096
により表され、トリグリセリドは次の構造式
【化５３】
0006746569.tif 000097
〔式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、独立してＣ１−２９脂肪族である。〕
から選択され；
(ａ)化合物１とトリグリセリドを含む混合物を調製し；そして
(ｂ)混合物を加熱する
工程を含む、方法。
【図１】
0006746569.tif 000101
【図２】
0006746569.tif 000102
【図３】
0006746569.tif 000103
【図４】
0006746569.tif 000104
【図５】
0006746569.tif 000105
【図６】
0006746569.tif 000106
【図７】
0006746569.tif 000107
【図８】
0006746569.tif 000108
【図９】
0006746569.tif 000109
【図１０】
0006746569.tif 000110
【図１１】
0006746569.tif 000111
【図１２】
0006746569.tif 000112
【図１３】
0006746569.tif 000113
【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
0006746569.tif 000116
【図１７】
0006746569.tif 000117
【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８】
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【図２９】
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【図３０】
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【図３１】
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【図３２】
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【図３３】
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【図３４】
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【図３５】
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【図３６】
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【図３７】
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