(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
６−ヒドロキシブスピロン（６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ）又はその薬学的に許容可能な塩を含有してなる、Ｌ−ＤＯＰＡ誘発性運動異常症（ＬＩＤ）又は遅発性ジスキネジーの治療に用いるための医薬組成物。
【請求項２】
６−ＯＨ−Ｂｕｓｐが、６−ＯＨ−Ｂｕｓｐのラセミ体、６−ＯＨ−ＢｕｓｐのＳ体及び６−ＯＨ−ＢｕｓｐのＲ体からなる群から選ばれる、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
６−ＯＨ−Ｂｕｓｐが、６−ＯＨ−Ｂｕｓｐのラセミ体である、請求項１又は２に記載の組成物。
【請求項４】
医薬組成物が、薬学的に許容可能なものである、請求項１〜３のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項５】
第２薬学的活性成分を更に含む、請求項１〜４のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項６】
第２薬学的活性成分が、医薬組成物と別々に、順次又は同時に投与される、請求項１〜５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項７】
第２薬学的活性成分が、２つ以上の５−ＨＴ１Ｂ、５−ＨＴ１Ｄ及び５−ＨＴ１Ｆ受容体のアゴニストである、請求項１〜６のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項８】
２つ以上の５−ＨＴ１Ｂ、５−ＨＴ１Ｄ及び５−ＨＴ１Ｆ受容体のアゴニストが、トリプタンである、請求項１〜７のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項９】
２つ以上の５−ＨＴ１Ｂ、５−ＨＴ１Ｄ及び５−ＨＴ１Ｆ受容体のアゴニストが、ゾルミトリプタン、リザトリプタン、スマトリプタン、ナラトリプタン、アルモトリプタン、フロバトリプタン、アビトリプタン、アルニジタン及びエレトリプタンからなる群から選ばれる、請求項１〜８のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１０】
第２薬学的活性成分が、選択的５−ＨＴ１Ｂ受容体アゴニスト、選択的５−ＨＴ１Ｄ受容体アゴニスト、選択的５−ＨＴ１Ｅ受容体アゴニスト及び選択的５−ＨＴ１Ｆ受容体アゴニストからなる群から選ばれる、請求項１〜９のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１１】
第２薬学的活性成分が、グルタミン酸神経伝達調節剤である、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１２】
第２薬学的活性成分が、グルタミン酸受容体アンタゴニストである、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１３】
第２薬学的活性成分が、ＮＭＤＡ受容体アンタゴニスト、ＡＭＰＡ受容体アンタゴニスト、カイナイト受容体アンタゴニスト、ＡＭＰＡＲ／カイナイト受容体アンタゴニスト、ｍＧｌｕＲグループ１アンタゴニスト、ｍＧｌｕＲグループ２アゴニスト及びｍＧｌｕＲグループ３アゴニストからなる群から選ばれる、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１４】
第２薬学的活性成分が、グルタミン酸放出抑制剤である、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１５】
第２薬学的活性成分が、イオン−チャネルアンタゴニストである、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１６】
第２薬学的活性成分が、カルシウムチャネルアンタゴニスト、Ｔ型のカルシウムチャネルアンタゴニスト、Ｌ型のカルシウムチャネルアンタゴニスト、Ｋ＋チャネルアンタゴニスト及び／又はＮａ＋チャネルアンタゴニストからなる群から選ばれる、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１７】
第２薬学的活性成分が、ＫＣＮＱチャネル調節剤である、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１８】
１つ以上のさらなる薬学的活性成分を更に含む、請求項１〜１７のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１９】
１つ以上のさらなる薬学的活性成分が、医薬組成物と別々に、順次又は同時に投与される、請求項１〜１８のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項２０】
さらなる薬学的活性成分が、シナプス間隙のドーパミン濃度を増加させる薬剤；パーキンソン病治療に用いられる薬剤；ドーパミン；ドーパミンプロドラッグ、例えば、Ｌ−ＤＯＰＡ又はレボドパ；ドーパミン受容体アゴニスト、例えば、ブロモクリプチン、ペルゴリド、プラミペキソール、ロピニロール、ピリベジル、カベルゴリン、アポモルヒネ、リスリド；デカルボキシラーゼ抑制剤、例えば、カルビドパ又はベンセラジド；ＣＯＭＴ抑制剤、例えば、トルカポン、エンタカポン及びニテカポン；ＭＡＯ−Ｂ抑制剤、例えば、セレギリン及びラサギリン；セロトニン受容体調節剤；カッパオピオイド受容体アゴニスト、例えば、ＴＲＫ−８２０；ＧＡＢＡ調節剤；及びニューロンカリウムチャネル調節剤、例えば、フルピルチン及びレチガビン；又はこれらの薬学的に許容可能な塩又はエステルからなる群から選ばれる、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項２１】
医薬組成物が、６−ヒドロキシブスピロン（６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ）及び任意に第２薬学的活性成分を含み、ドーパミンプロドラッグ、例えば、Ｌ−ＤＯＰＡ又はレボドパを更に含む、請求項１〜２０のいずれか１項に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ブスピロン代謝産物、特に６−ヒドロキシブスピロンを含む、運動障害の治療に用いるための組成物に関するものである。ブスピロン代謝産物は、単独又は他の化合物、例えば、前記運動障害の治療のために用いられる化合物と組み合わせて使用することができる。
【背景技術】
【０００２】
運動障害は、身体の動きを作り出し制御する能力に影響する疾患群であり、神経機能障害に関連する神経学的障害又は状態を伴うことが多い。運動障害は、運動の異常な熟練性又は速度、過度又は不随意運動、或いは随意的運動の遅延又は欠如として現れる場合がある。
【０００３】
運動障害は、ドーパミン神経伝達の調節障害が原因となる場合が多い。パーキンソン病(ＰＤ)は、ドーパミン神経伝達の調節不全に関連する運動障害の一例であり、調節不全は、ドーパミンニューロンの進行性変性により生じる。遅発性ジスキネジアも、ドーパミン神経伝達の調節不全に関連する運動障害の別の例である。
【０００４】
失われたドーパミンを置き換えるため、ＰＤは、現在、例えばレボドパ(Ｌ−ＤＯＰＡ、ドーパミンの前駆物質)により処置される。残念なことに、Ｌ−ＤＯＰＡによるＰＤの処置は、シナプスにおける過剰なドーパミンレベルにより生じるＬ−ＤＯＰＡ誘発ジスキネジア(ＬＩＤ)と呼ばれる特定の種類のジスキネジアを発生させることが多い。
【０００５】
ドーパミンの放出及び再取り込みは、セロトニン（５−ＨＴ）を含む多数の神経伝達物質により調節される。セロトニンは、多数の異なるセロトニン受容体と結合することにより作用し、一部のセロトニン受容体のアゴニスト及びアンタゴニストは、運動障害の処置のために研究されてきた。
【０００６】
セロトニン(５−ＨＴ)神経伝達のモジュレータは、個別に、ＬＩＤを改善又は防止することが証明されている。その一例に、５−ＨＴ１Ａアゴニストであり、ドーパミン受容体アンタゴニストであるサリゾタンがある(非特許文献１)。予備臨床及び臨床試験において、サリゾタンは、ＬＩＤを減少させた。しかしながら、第２ｂ相試験及び第３相試験において、サリゾタンは、プラセボと比較して有意な効果を示すことができなかった。サリゾタンは、遅発性ジスキネジーの予備臨床試験モデルにおいても効果が立証された（非特許文献２）。ドーパミンＤ４受容体の選択アンタゴニストが、また非ヒト霊長類モデルにおいてＬＩＤを減少させた（非特許文献３）。
【０００７】
ブスピロン及び５−ＨＴ１Ａアゴニストは、一般にパーキンソン病のＬ−ＤＯＰＡ治療と関連した異常不随意運動（Ｌ−ＤＯＰＡ誘発性運動障害、ＬＩＤ）（レビュー例：非特許文献４）及び精神分裂症の神経弛緩剤治療と関連した遅発性ジスキネジー（ＴＤ）を減少させるものとして立証された（例えば、非特許文献５、６）。
【０００８】
パーキンソン病に対する５−ＨＴ１Ａアゴニストブスピロンの効果が、小規模開放研究で研究された（非特許文献７）。不安に苦しむ患者を治療するために通常用いられる用量（１０−６０ｍｇ／日）は、パーキンソン病又は運動異常症に対し何ら効果がなかったことが判明された。高用量（１００ｍｇ／日）では、ブスピロンは運動異常症を減少させたが、障害等級を非常に悪化させることが観察された。これは、高用量のブスピロンがパーキンソン病に関連した無動症（akinesia）を悪化させる可能性があることを示した。他の研究では、予備臨床研究においてブスピロンがＬ−ＤＯＰＡ誘発性運動異常症を減少させることが示されている（非特許文献８）。ブスピロンは、また、遅発性ジスキネジーの臨床研究において効果があることが示されている（非特許文献９）。
【０００９】
高用量で提供された５−ＨＴ１Ａアゴニストは、セロトニン症候群の発生又は中毒の一形態であるセロトニン毒性につながり得る。したがって、セロトニン症候群の重症度のために、５−ＨＴ１Ａアゴニストの低露出を維持することが重要である。
【００１０】
セロトニン症候群は、５−ＨＴ１Ａ及び５−ＨＴ２Ａ受容体の活性化増加によって引き起こされる。セロトニン症候群は、定義上、精神的な変化、自律神経系の機能不全及び神経筋の痛みとして現れる一連の症状である。患者は、混乱、動揺、下痢、発汗、震え、高血圧、発熱、白血球数の増加、協調運動失調、反射神経の顕著な増加、筋肉痙攣、振戦、深刻な硬直、発作及びさらに昏睡を呈することがある。変化の重症度は、軽度から致命的までの範囲である。
【００１１】
動物モデルにおいてＬＩＤを減少させる際の５−ＨＴ１Ａアゴニストの効能を高めるために、５−ＨＴ１Ａと５−ＨＴ１Ｂアゴニストの組み合わせが試験された（例えば、非特許文献１０、１１）。組み合わせた５−ＨＴ１Ａ及び５−ＨＴ１Ｂアゴニストであるエルトプラジンは、またＬＩＤの治療のために提案されただけでなく（特許文献１）、５−ＨＴ１Ａアゴニストと組み合わせた２種以上の５−ＨＴ１Ｂ、５−ＨＴ１Ｄ及び５−ＨＴ１Ｆ受容体のアゴニストをＬＩＤに対する動物モデルにおいて分析されたとき、治療指数を効果的に増加させた（特許文献２）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１２】
【特許文献１】ＷＯ２００９／１５６３８０
【特許文献２】ＷＯ２０１２／０４８７１０
【非特許文献】
【００１３】
【非特許文献１】Gregoire et al: Parkinsonism Relat Disord. 2009; 15(6): 445-52
【非特許文献２】Rosegarten et al: Progress in Neuro-Psychopharmacology & Biological Psychiatry 30(2006) 273-279
【非特許文献３】P. Huot et al: JPET 342: 576-585, 2012
【非特許文献４】P. Huot et al: Pharmacol Rev 65: 171-222, 2013
【非特許文献５】Eur J Pharmacol. 2001, 28; 428(1): 81-6
【非特許文献６】Creed et al: The Journal of Neuroscience, 2012, 32(28): 9574-9581
【非特許文献７】Ludwig et al: Clin Neuropharmacol. 1986; 9(4):373-8
【非特許文献８】Bonifati et. al., 1994, Kleedorfer et al., 1991
【非特許文献９】Moss et. al., 1993
【非特許文献１０】Munoz et al: Brain. 2008; 131: 3380-94
【非特許文献１１】Munoz et al: Experimental Neurology 219 (2009) 298-307
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
経口投与されたブスピロンは、親化合物の生体利用率を制限する（ヒトにおいて４％）広範囲一次通過代謝を受ける。これは、潜在的に化合物の作用期間を減少させて、より高いか、又は複数の投与の利用を必要とする。ブスピロンは、シトクロムＰ４５０酵素によって代謝される。これは潜在的に普通複数の薬剤を投与される運動障害の患者と特に関連した薬物−薬物相互作用のリスクを増加させる可能性がある。
【課題を解決するための手段】
【００１５】
本発明者らは、驚くべきことに、ブスピロン代謝産物が特定の運動障害と関連する異常な不随意運動を減少させることができ、ブスピロン代謝産物の有益な効果が中枢神経伝達物質の活性に影響を及ぼす薬物によって強化され得ることを見出した。ブスピロン代謝産物は、単独又は中枢ニューロン伝達物質の活性に積極的に影響を及ぼす他の薬物と組み合わせられ、正常な運動機能に重要な脳の神経伝達物質の水準に効果的に影響を及ぼす。この知見は、例えば、Ｌ−ＤＯＰＡ誘発性運動異常症及び遅発性ジスキネジーを含む運動障害であるので、変化した又は弱化されたシナプスドーパミンレベルに関連する疾患の治療に有用である。
【００１６】
本発明の一側面は、ブスピロン代謝産物、又はこれの薬学的に許容可能な誘導体を含む、運動障害の治療、予防又は緩和に用いるための医薬組成物又は要素のキットを提供するものである。
【００１７】
一具体例において、前記ブスピロン代謝産物は、６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ、Ｏｘａ−Ｂｕｓｐ、３−ＯＨ−Ｂｕｓｐ、５−ＯＨ−Ｂｕｓｐ、５，６−ジ−ＯＨ−Ｂｕｓｐ、ＢｕｓｐＮ−オキシド、５−ＯＨ−１−ＰＰ及び１−ＰＰからなる群から選ばれ；これらのラセミ体、Ｓ体及び／又はＲ体を含む。
【００１８】
一具体例において、前記組成物は、第２活性成分を更に含む。本発明に係るブスピロン代謝産物及び第２活性成分の組み合わせは、一具体例において、ブスピロン代謝産物そのものの使用と比較して相加的又は相乗効果を提供し、及び／又は、活性成分の単独使用と比較するとき、各成分のいずれか一つ又は両者の治療効果を増強させる。
【００１９】
一具体例において、第２活性成分は５−ＨＴ１Ｂ、５−ＨＴ１Ｄ及び５−ＨＴ１Ｆ受容体、例えばトリプタン、選択的５−ＨＴ１Ｂ受容体アゴニスト、選択的５−ＨＴ１Ｄアゴニスト、選択的５−ＨＴ１Ｅ受容体アゴニスト又は選択的５−ＨＴ１Ｆ受容体アゴニストの２種以上のアゴニストである。
【００２０】
一具体例において、第２活性成分は、グルタミン酸神経伝達調節剤、グルタミン酸受容体アンタゴニスト、ＮＭＤＡ受容体アンタゴニスト、ＡＭＰＡ受容体アンタゴニスト、カイナイト受容体アンタゴニスト、ＡＭＰＡＲ／カイナイト受容体アンタゴニスト、ｍＧｌｕＲグループ１アンタゴニスト、ｍＧｌｕＲ４グループ２アゴニスト、ｍＧｌｕＲグループ３アゴニスト及びシナプス前グルタミン酸放出抑制剤である。
【００２１】
一具体例において、第２活性成分は、イオンチャネルアンタゴニスト、例えば、Ｔ型のカルシウムチャネルアンタゴニスト、Ｌ型のカルシウムチャネルアンタゴニスト、Ｋ＋チャネルアンタゴニスト及び／又はＮａ＋チャネルアンタゴニスト；又はＫＣＮＱチャネル調節剤である。
【００２２】
一具体例において、ブスピロン代謝産物及び任意に第２活性成分を含む本発明の組成物は、パーキンソン病のような関連運動障害の治療のために用いられる薬剤のような一つ以上のさらなる活性成分を更に含む。
【００２３】
一具体例において、本発明の運動障害は、変更又は弱化されたシナプスドーパミンレベルに関連した運動障害；パーキンソン病；運動緩徐、無動症及び運動異常症のようなパーキンソン病関連運動障害；Ｌ−ＤＯＰＡ誘発性運動異常症（ＬＩＤ）；遅発性ジスキネジー及び静座不能である。
【００２４】
定義
「アゴニスト」という用語は、本明細書において、（1つ又は複数の）受容体に結合して活性化させることが可能な物質を示す。したがって、５−ＨＴ１Ａ受容体アゴニスト（５−ＨＴ１Ａアゴニスト）は、５−ＨＴ１Ａ受容体に結合して活性化させることが可能である。５−ＨＴ１Ｂ、５−ＨＴ１Ｄ、及び５−ＨＴ１Ｆ受容体のうち２つ以上に対するアゴニスト（５−ＨＴ１Ｂ／Ｄ／Ｆアゴニスト）は、５−ＨＴ１Ｂ、５−ＨＴ１Ｄ、及び５−ＨＴ１Ｆ受容体のうち２つ又は３つに結合して活性化させることが可能である。「５−ＨＴ１アゴニスト」、「５−ＨＴ１受容体アゴニスト」、及び「５−ＨＴ１受容体のアゴニスト」という用語は、本明細書において相互に交換可能に使用される。
【００２５】
「アンタゴニスト」という用語は、本明細書において、受容体アゴニストの効果を阻害することが可能な物質を示す。
【００２６】
「部分アゴニスト」という用語は、本発明において、与えられた受容体と結合し、これを活性化することが可能であるが、「全体アゴニスト」に比べて受容体で部分的な効能のみを有する化合物である。部分アゴニストは、受容体占有に対し全体アゴニストと競争する場合と全体アゴニスト単独で観察された効果又は活性化に比べて受容体活性化の純（net）減少を算出する場合、アンタゴニストとして作用することができる。
【００２７】
「選択的アゴニスト」という用語は、本発明において、選択的であり、したがって、主に１種類の受容体に結合し、これを活性化する化合物である。したがって、選択的５−ＨＴ１１受容体アゴニストは５−ＨＴ１１受容体に対して選択的であり、選択的５−ＨＴ１Ｂ受容体アゴニストは５−ＨＴ１Ｂ受容体に対して選択的であり、選択的５−ＨＴ１Ｄ受容体アゴニストは５−ＨＴ１Ｄ受容体に対して選択的であり、選択的５−ＨＴ１Ｆ受容体アゴニストは５−ＨＴ１Ｆ受容体に対して選択的である。
【００２８】
「アロステリック調節剤」という用語は、本発明において、標的タンパク質、例えば、受容体においてアゴニスト又はインバースアゴニストの効果に間接的に影響（変調）を及ぼす化合物である。アロステリック調節剤は、オルトステリクアゴニスト結合部位のものと異なる部位に結合する。普通、これらはタンパク質構造内で形態学的変化を誘導する。また、アロステリック増強剤という陽性アロステリック調節剤（ＰＡＭ）は、アゴニスト効果の増幅を誘導する。陰性アロステリック調節剤（ＮＡＭ）は、オルソステリックリガンドの効果を減少させるが、オルソステリックリガンドの部材で非活性である。
【００２９】
インバースアゴニストは、アゴニストと同じ構成的活性受容体に結合するが、アゴニストと反対となる薬理反応を誘導する製剤である。ニュートラルアンタゴニストは、アゴニスト又はインバースアゴニストの部材で活性がないが、両活性を遮断することができる。
【００３０】
「ドーパミン」、「ＤＡ」及び「４−（２−アミノエチル）ベンゼン−１，２−ジオール」という用語は、カテコールアミン神経伝達物質及びホルモンを指す。ドーパミンは、アドレナリン（エピネフリン）及びノルアドレナリン（ノルエピネフリン）の前駆体であり、５種類のドーパミン受容体−Ｄ１、Ｄ２、Ｄ３、Ｄ４、及びＤ５−及びそれらの変異体を活性化する。
【００３１】
「Ｌ−ＤＯＰＡ」又は「３，４−ジヒドロキシフェニルアラニン」は、神経伝達物質ドーパミン、ノルエピネフリン（ノルアドレナリン）、エピネフリン（アドレナリン）に対する前駆体である。Ｌ−ＤＯＰＡは、血液−脳関門を通過可能であり、ＤＯＰＡデカルボキシラーゼ（ＤＤＣ）として知らされる酵素である芳香族Ｌ−アミノ酸デカルボキシラーゼ（ＡＡＤＣ）によりドーパミンに転換される。Ｌ−ＤＯＰＡは、パーキンソン病の治療に用いられる。
【００３２】
「薬学的に許容可能な誘導体」という用語は、本明細書において、患者に対して無害の塩を示す薬学的に許容可能な塩を含む。こうした塩は、薬学的に許容可能な塩基又は酸付加塩、更に、薬学的に許容可能な金属塩、アンモニウム塩、及びアルキル化アンモニウム塩を含む。薬学的に許容可能な誘導体は、更に、生物学的に活性化合物へと代謝し得る化合物のエステル、プロドラッグ、又は他の前駆物質、或いは化合物の結晶形を含む。
【００３３】
本明細書で使用される、化合物の「治療的有効量」という用語は、特定疾患又は障害及びその合併症の臨床的症状を治癒、緩和、予防、リスク低減、又は部分的な阻止にとって十分な量を示す。
【００３４】
本明細書で使用される、「治療」及び「治療する」という用語は、状態、疾患又は障害に対抗することを目的とした患者の管理及びケアを指し示す。この用語は、患者が被っている特定の状態に対するあらゆる範囲の治療を含むものであり、例として、症状又は合併症の緩和又は軽減と、状態、疾患、又は障害の進行の遅延と、状態、疾患、又は障害の治癒又は排除と、及び／又は、状態、疾患、又は障害の予防とを目的とした活性化合物の投与を含み、「予防する(こと)」又は「予防」とは、状態、疾患、又は障害の発生を妨げることを目的とした患者の管理及びケアを示すと理解されるべきであり、症状又は合併症の発生のリスクを予防又は低減するための活性化合物の投与を含む。治療対象の患者は、好ましくは哺乳動物、特にヒトである。
【図面の簡単な説明】
【００３５】
【図１】ブスピロン（８−［４−（４−ピリミジン−２−イルピペラジン-１−イル）ブチル］−８−アザスピロ［４．５］デカン−７,９-ジオン）及びその代謝産物６−ヒドロキシブスピロン（６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ；６−ヒドロキシ−８−［４−［４−（２−ピリミジニル）−１−ピペラジニル］ブチル−８−アザスピロ（４，５）−デカン−７，９−ジオン］。
【図２】ヒト肝ミクロソームでブスピロンの代謝経路。ヒトの肝ミクロソームで各主要代謝経路に関与する主なＰ４５０酵素も列挙された（M. Zhu et al: Drug Metabolism Disposition, 33:500-507, 2005）。
【図３】運動障害ラットに、Ｌ−ＤＯＰＡ注射後１０分から１９０分までのＡＵＣとして測定されたＡＩＭに対する６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ（６−ＨＢ）の効果。データは、平均±ＳＥＭ、＊＊＊＊ｐ＜０．０００１、＊ｐ＜０．０５体ビヒクル群、一方向（実施例１２参照）として示された。
【図４】運動障害ラットに、Ｌ−ＤＯＰＡ注射後９０分に測定されたＡＩＭに対する６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ（６−ＨＢ）及びフェノバム（Ｆｅｎ）の効果。データは、平均±ＳＥＭ、＊＊ｐ＜０．０１、＊ｐ＜０．０５対ビヒクル群、一元配置ＡＮＯＶＡフィッシャーＬＳＤ検定、ｎ＝８〜９（実施例１４参照）として示された。
【発明を実施するための形態】
【００３６】
本発明は、運動障害の治療のためのブスピロン代謝産物の使用に関するものである。
【００３７】
高用量のブスピロンに関連するセロトニン症候群の危険及び障害等級悪化を防止するために、本発明は、ブスピロンの低い露出を維持し、臨床的関連効能を維持するための要求を満たす解決策を提供する。
【００３８】
運動障害の治療のためのブスピロン代謝産物の提供は、投与量当たり、より高い露出を可能にすると同時に、薬物−薬物相互作用の危険を低減させる。
【００３９】
運動障害に対するブスピロンの効果が報告されたが、その効果は、その代謝産物と共に、ブスピロンそのものによって媒介される。親化合物及び個別代謝産物が与えられた条件についてブスピロンの効果に寄与する程度は知らされていない。
【００４０】
ブスピロン及びその代謝産物
ブスピロン（８−［４−（４−ピリミジン−２−イルピペラジン−１−イル）ブチル］−８−アザスピロ［４．５］デカン−７，９−ジオン）は、不安障害の治療のために承認されたアザピロン化学系統の薬物である。ブスピロンは、抗不安及び抗うつ効果を媒介すると考えられるセロトニン５−ＨＴ１Ａ受容体部分アゴニストである。また、これは、Ｄ２、Ｄ３及びＤ４受容体でシナプス前ドーパミンアンタゴニスト及び部分α１受容体アゴニストである。
【００４１】
ブスピロンは、生体内で、例えば、６−ヒドロキシブスピロン（６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ；６−ヒドロキシ−８−［４−［４−（２−ピリミジニル）−１−ピペラジニル］ブチル−８−アザスピロ（４，５）−デカン−７，９−ジオン；Ｍ６）に速かに代謝され；その代謝産物は、親化合物よりもわずかに強力でないが、同様の類似の方式で５−ＨＴ１Ａ受容体に影響を及ぼす。６−ＯＨ−Ｂｕｓｐはまた、ドーパミンＤ４受容体アゴニストであり、５−ＨＴ１Ａ受容体と同じ大きさの親和性を有する。
【００４２】
不安及びうつ病の臨床前モデル（ＵＳ２００５／０１３７２０６；ＵＳ２００３／００５５０６３；ＵＳ２００３／００２２８９９）；及びパラセタモールと組み合わせた痛み（ＵＳ２００２／０１９３３８０）での６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ（ラセミ体又は精製されたエナンチオマーとして）の効果が記載されている。これら研究において、６−ＯＨ−Ｂｕｓｐは、鎮静作用を引き起こさない用量でＩＰ及びＳＣ投与後、活性を示す。
【００４３】
ブスピロンの代謝
ブスピロンは、５％未満の生体利用率でヒトにおいて広範囲な一次通過代謝を受ける。放射性標識されたブスピロンの投与後に変更されるがブスピロンは、ヒト血漿で総放射能２％未満を占める（Gammans et al: Am J Med 80, 41-51, 1986）。ブスピロンの齧歯類及びヒトの代謝は、試験管内及び生体内で特定化された（参照例：Zhu et al: Drug Metabolism Disposition, 33:500-507, 2005）。全般的に代謝は、ヒト及びラットにおいて同一であり、１−ピリミジニルピペラジン（１−ＰＰ）、６−ヒドロキシブスピロン（６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ）、５−ＯＨ−Ｂｕｓｐ及び複数の二次代謝産物を形成する（図２及び表１参照）。
【００４４】
【表１】
0006634445.tif 000002
【００４５】
６−ＯＨ−Ｂｕｓｐは、ＣＹＰ３Ａ４（シトクロムＰ４５０  ３Ａ４）−ブスピロンの触媒化ヒドロキシル化を通して形成された主な代謝産物である。ＣＹＰ３Ａ４は、ブスピロンの代謝を触媒化して潜在的に薬物−薬物相互作用の危険性を増加させる。生体内でブスピロンと、例えば、イトラコナゾール（トリアゾール抗真菌剤）、リファンピシン（殺菌性抗生薬物）、ネファゾドン（抗うつ剤）、ハロペリドール（抗精神病剤）、カルバマゼピン（抗痙攣剤及び気分安定剤）及びグレープフルーツの間に相互作用が観察された。
【００４６】
ヒトボランティアへの経口投与後のブスピロン、ラセミ６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ及び６−ＯＨ−ＢｕｓｐのＲ−及びＳ−エナンチオマーの薬物動態学的パラメーターが記載されている（R. C. Dockens et al: Biopharm. Drug Dispos. 28: 393-402 (2007)）。この研究では、Ｓ体の形成（又は維持）を優先するエナンチオマー間の相互転換があることが示されている。経口投与時、ブスピロンは、６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ（両方のエナンチオマー）に代謝されて親化合物を露出するが、合計６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ（Ｃｍａｘ：９．１２ｎｇ／ｍＬ；ＡＵＣ０−ＩＮＦ（ｎｇｘｈ／ｍＬ）：５２．９３）より低い（Ｃｍａｘ：１．３９ｎｇ／ｍＬ；ＡＵＣ０−ＩＮＦ（ｎｇｘｈ／ｍＬ）:３．９３）。これに比べて、ラセミ６−ＯＨ−Ｂｕｓｐの経口投与は、６−ＯＨ−Ｂｕｓｐの露出が遥かに高い（Ｃｍａｘ：２５．６３ｎｇ／ｍＬ；ＡＵＣ０−ＩＮＦ（ｎｇｘｈ／ｍＬ）：１３１．５２）。親ブスピロン又は６−ＯＨ−Ｂｕｓｐの投与後、６−ＯＨ−Ｂｕｓｐの半減期（Ｔ１／２）がブスピロンの半減期よりも長いが、２つのエナンチオマー間に半減期の有意差はないように見える。
【００４７】
６−ＯＨ−Ｂｕｓｐの−試験管内−薬理学
ブスピロン代謝産物のいくつかは、中枢受容体（例えば、セロトニン５−ＨＴ１Ａ及びドーパミンＤ２、Ｄ３及びＤ４受容体）に対するその親和性に関して特性化された。６−ＯＨ−Ｂｕｓｐは、５−ＨＴ１ＡとドーパミンＤ３及びＤ４受容体との両方に高親和性で結合する最も強力な代謝産物の一つである。ヒト組み換え５−ＨＴ１Ａ受容体に対するブスピロン及びその代謝産物の親和性に関しては、ＵＳ２００５／０１３７２０６号に記載されている。下記表２は、ブスピロンが試験管内で５−ＨＴ１Ａ受容体に高親和性を有し（Ｋｉ＝１５ｎＭ）、６−ＯＨ−Ｂｕｓｐは僅かに弱い（Ｋｉ＝５７ｎＭ）ことを示す。ブスピロンの他の代謝産物はあまり効能的でなかった。本明細書に記載された５−ＨＴ１Ａ受容体に対するブスピロン及び８−ＯＨ−ＤＰＡＴの親和性は、他の文献に記述されたのと同じ程度の大きさを有している。
【００４８】
【表２】
0006634445.tif 000003
【００４９】
６−ＯＨ−Ｂｕｓｐは、ラセミ体である。２つのエナンチオマーは試験管内でヒト組み換え５−ＨＴ１Ａ及びドーパミンＤ２受容体に及ぼす影響について試験されており、データは、米国特許第６，６８６，３６１に提示されている（表３）。２つのエナンチオマーは、５−ＨＴ１受容体に対して類似の親和性を有する。研究はＲ体及びＳ体が生体内でラセミ化することが示されている（下記参照）。
【００５０】
【表３】
0006634445.tif 000004
【００５１】
ヒト組み換えドーパミン（Ｄ２、Ｄ３及びＤ４）受容体に対するブスピロンの主な代謝産物の効果が、バーグマン（Bergman）等によって決定された（J.Bergman et al: International Journal of Neuropsychopharmacology (2013), 16, 445-458）。ドーパミンＤ４に対する６−ＯＨ−Ｂｕｓｐの親和性は、ブスピロンのそれと同様であり、ドーパミンＤ３及びＤ２に対する親和性よりも遥かに強い。Ｄ４に対する親和性は、５−ＨＴ１ＡＲと同じ次数又は僅かに低い。ドーパミン受容体に対するブスピロン及びその代謝産物の効能はドーパミンの飽和濃度を用いて測定した。
【００５２】
【表４】
0006634445.tif 000005
【００５３】
要約すると、有効データは、６−ＯＨ−Ｂｕｓｐが強力にセロトニン５−ＨＴ１Ａ及びドーパミンＤ４受容体に結合し、６−ＯＨ−Ｂｕｓｐは５−ＨＴ１受容体のアゴニストであり、ドーパミン受容体のアンタゴニストであることを示す。
【００５４】
６−ＯＨ−Ｂｕｓｐの−生体内−薬理学
ラットにおける６−ＯＨ−Ｂｕｓｐの薬物動態学及び生体内効能が調査された（Wong et al: Drug Metabolism Disposition 35:1387-1392, 2007）。生体利用率は、ブスピロン（１．４％）に比して、６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ（１９％）に対してさらに高く、血漿半減期は、ブスピロン（０．９±０．４時間）より６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ（１．２±０．２時間）がより長い。
【００５５】
血漿に定常水準で静脈注入した後、６−ＯＨ−ブスピロン及びブスピロンは、濃度−依存方式でセロトニン５−ＨＴ１Ａ受容体占有率を増加させ、ＥＣ５０値は、それぞれ、背側縫線において、１．０±０．３及び０．３８±０．０６μＭ、及び海馬で４．０±０．６及び１．５±０．３μＭであった。両化合物は、海馬におけるシナプス後受容体より海馬におけるシナプス前５−ＨＴ１Ａ受容体を占有するのに、約４倍強力であることが分かった。
【００５６】
ラットにブスピロンの経口投与は、６−ＯＨ−ブスピロン及びブスピロンの別の主な代謝産物である１−（２−ピリミジニル）−ピペラジン（１−ＰＰ）の露出につながり（濃度−時間プロファイルの下の領域）、親化合物の露出より１２倍（６−ＯＨ−ブスピロン）及び４９倍（１−ＰＰ）高い。
【００５７】
ドーパミンＤ３優先リガンドを用いたＰＥＴ研究（Kim et al: International Journal of Neuropsychopharmacology, 2014）において、経口ブスピロンは、治療的関連用量でドーパミンＤ３受容体を遮断することが判明された。ブスピロンの６−ＯＨ−Ｂｕｓｐへの迅速な代謝及びヒトドーパミンＤ３受容体に対するこのような代謝産物の効果に基づいて、Ｄ３受容体の生体内受容体遮断は、６−ＨＯ−Ｂｕｓｐによって媒介されると仮定した。また、６−ＯＨ−Ｂｕｓｐが、これら受容体のより強力な抑制剤であるため、経口ブスピロンがドーパミンＤ４受容体を遮断するとの仮説が立てられた。経口ブスピロンはＤ２受容体の遮断を引き起こさなかった。
【００５８】
治療方法
ブスピロン代謝産物は、単独又は他の中枢アゴニスト物と組み合わせて以前に運動障害の治療のために使用されていなかった。
【００５９】
本発明の一側面は、運動障害の治療に用いるためのブスピロン代謝産物を含む組成物を提供することである。
【００６０】
ブスピロン代謝産物を含む組成物は、一具体例において、運動障害の治療、予防又は緩和のために用いられる。
【００６１】
一具体例において、本発明は、運動障害治療用薬剤の製造のためのブスピロン代謝産物を含む組成物の使用に関するものである。
【００６２】
一具体例において、本発明は、これを必要とする個体にブスピロン代謝産物を含む組成物を投与することを含む、運動障害を治療する方法に関するものである。
【００６３】
一具体例において、本発明に係るブスピロン代謝産物を含む組成物は、本願に記述されたような一つ以上の第２活性成分を更に含むと理解しなければならない。
【００６４】
ブスピロン代謝産物を含む組成物及び治療される運動障害が、以下で説明される。
【００６５】
本発明に係る組成物
本発明に係る組成物は、一具体例において、医薬組成物、薬学的に許容可能な組成物及び／又は薬学的に安全な組成物である。本発明に係る組成物は、少なくとも２つの活性成分を含み、好ましい具体例で、この活性成分はブスピロン代謝産物である。
【００６６】
一具体例において、本発明に係る組成物は一つの活性成分を含む。一具体例において、本発明に係る組成物は２つの活性成分を含み、そのうちの１つはブスピロン代謝産物である。一具体例において、本発明に係る組成物は、３つの活性成分を含み、そのうちの１つはブスピロン代謝産物である。
【００６７】
一具体例において、ブスピロン代謝産物は、親ブスピロンより高い経口生体利用率を有する。
【００６８】
一具体例において、ブスピロン代謝産物は、６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ、Ｏｘａ−Ｂｕｓｐ、３−ＯＨ−Ｂｕｓｐ、５−ＯＨ−Ｂｕｓｐ、５，６−ジ−ＯＨ−Ｂｕｓｐ、Ｂｕｓｐ  Ｎ−オキシド、５−ＯＨ−１−ＰＰ及び１−ＰＰからなる群から選ばれ；これらのラセミ体及び個別エナンチオマー（Ｓ体及び／又はＲ体）を含む。
【００６９】
一具体例において、６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ、Ｏｘａ−Ｂｕｓｐ、３−ＯＨ−Ｂｕｓｐ、５−ＯＨ−Ｂｕｓｐ、５，６−ジ−ＯＨ−Ｂｕｓｐ、Ｂｕｓｐ  Ｎ−オキシド、５−ＯＨ−１−ＰＰ及び１−ＰＰからなる群から選ばれるブスピロン代謝産物を含む、運動障害の治療に用いるための組成物が提供される。
【００７０】
一具体例において、ブスピロン代謝産物は、６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ、３−ＯＨ−Ｂｕｓｐ、５，６−ジ−ＯＨ−Ｂｕｓｐ又はＯｘａ−Ｂｕｓｐ、６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ、３−ＯＨ−Ｂｕｓｐ、５，６−ジ−ＯＨ−Ｂｕｓｐ又はＯｘａ−Ｂｕｓｐの１つ以上のラセミ体、６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ、３−ＯＨ−Ｂｕｓｐ、５，６−ジ−ＯＨ−Ｂｕｓｐ又はＯｘａ−ＢｕｓｐのＳ体及び／又は６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ、３−ＯＨ−Ｂｕｓｐ、５，６−ジ−ＯＨ−Ｂｕｓｐ又はＯｘａ−ＢｕｓｐのＲ体である。
【００７１】
好ましい具体例で、ブスピロン代謝産物６−ＯＨ−Ｂｕｓｐである。
【００７２】
好ましい具体例で、ブスピロン代謝産物は６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ、６−ＯＨ−Ｂｕｓｐの１つ以上のラセミ体、６−ＯＨ−ＢｕｓｐのＳ体及び／又は６−ＯＨ−ＢｕｓｐのＲ体である。
【００７３】
一具体例において、運動障害の治療に用いるための６−ＯＨ−Ｂｕｓｐを含む組成物が提供される。
【００７４】
併用療法
一具体例において、ブスピロン代謝産物及び第２活性成分を含む、運動障害の治療に用いるための組成物が提供される。
【００７５】
本発明に係るブスピロン代謝産物及び第２活性成分の組み合わせは、一具体例において、ブスピロン代謝産物そのものの使用に比べて相加的効果を提供する。
【００７６】
本発明に係るブスピロン代謝産物及び第２活性成分の組み合わせは、一具体例において、ブスピロン代謝産物そのものの使用と比較して相乗効果を提供する。
【００７７】
本発明に係るブスピロン代謝産物及び第２活性成分の組み合わせは、一具体例において、いずれかの成分単独の使用と比較したとき、各成分の一方又は両方の治療効果が増強させる。
【００７８】
ブスピロン代謝産物及び第２活性成分は、一具体例において、薬学的組成物のように同じ組成物に組み合わせられる。
【００７９】
ブスピロン代謝産物及び第２活性成分は、一具体例において、別の医薬組成物のように分離された（又は異なる）組成物に含まれる。
【００８０】
ブスピロン代謝産物及び第２活性成分は、一具体例において、同時に、別々に又は順次投与される。
【００８１】
ブスピロン代謝産物は、一具体例において、第２活性成分の投与後に投与される。別の具体例では、ブスピロン代謝産物は第２活性成分の投与前に投与される。別の具体例では、ブスピロン代謝産物は第２活性成分と共に投与される。
【００８２】
・組み合わせられた５−ＨＴ１アゴニスト
本発明に係る第２活性成分は、一具体例において、２つ以上の５−ＨＴ１Ｂ、５−ＨＴ１Ｄ及び５−ＨＴ１Ｆ受容体のアゴニストである。
【００８３】
一具体例において、ブスピロン代謝産物及び２つ以上の５−ＨＴ１Ｂ、５−ＨＴ１Ｄ及び５−ＨＴ１Ｆ受容体のアゴニストを含む、運動障害の治療に用いるための組成物が提供される。
【００８４】
２つ以上の５−ＨＴ１Ｂ、５−ＨＴ１Ｄ及び５−ＨＴ１Ｆ受容体のアゴニストは、５−ＨＴ１Ｂ、５−ＨＴ１Ｄ、及び５−ＨＴ１Ｆ受容体からなる群から選ばれる２又は３個のセロトニン受容体のアゴニスト；例えば、５−ＨＴ１Ｂ受容体及び５−ＨＴ１Ｄ受容体の組み合わせアゴニスト、又は５−ＨＴ１Ｂ受容体及び５−ＨＴ１Ｆ受容体の組み合わせアゴニスト、又は５−ＨＴ１Ｄ受容体及び５−ＨＴ１Ｆ受容体の組み合わせアゴニスト、又は５−ＨＴ１Ｂ受容体、５−ＨＴ１Ｄ受容体及び５−ＨＴ１Ｆ受容体の組み合わせアゴニストである。一具体例において、前記２つ以上の５−ＨＴ１Ｂ、５−ＨＴ１Ｄ及び５−ＨＴ１Ｆ受容体のアゴニストはまた、５−ＨＴ１Ａ受容体（全体又は部分）のアゴニストである。
【００８５】
一具体例において、２つ以上の５−ＨＴ１Ｂ、５−ＨＴ１Ｄ及び５−ＨＴ１Ｆ受容体のアゴニストは５−ＨＴ１Ｂ受容体より５−ＨＴ１Ｄ受容体に対してより高い親和性及び／又は受容体活性効能を有するか、又は５−ＨＴ１Ｂ及び５−ＨＴ１Ｆ受容体より５−ＨＴ１Ｄ受容体に対してより高い親和性及び／又は受容体活性効能を有する。
【００８６】
一具体例において、２つ以上の５−ＨＴ１Ｂ、５−ＨＴ１Ｄ及び５−ＨＴ１Ｆ受容体のアゴニストはトリプタンである。本発明の文脈における「トリプタン」は、治療時に偏頭痛及び群発性頭痛の進行を防ぐ薬物として用いられたトリプタミン系薬物の化合物部分である。トリプタンは、種々のセロトニン受容体のアゴニストであり、異なる５−ＨＴ１受容体サブタイプ、主に５−ＨＴ１Ｂ、５−ＨＴ１Ｄ、５−ＨＴ１Ｅ及び／又は５−ＨＴ１Ｆ受容体に対して異なる効能を有する。
【００８７】
２つ以上の５−ＨＴ１Ｂ、５−ＨＴ１Ｄ及び５−ＨＴ１Ｆ受容体のアゴニストは、一具体例において、ゾルミトリプタン（（Ｓ）−４−（｛３−［２−（ジメチルアミノ）エチル］−１Ｈ−インドール−５−イル｝メチル）−１，３−オキサゾリジン−２−オン）、リザトリプタン（Ｎ，Ｎ−ジメチル−２−［５−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］エタンアミン）、スマトリプタン（１−［３−（２−ジメチルアミノエチル）−１Ｈ−インドール−５−イル］−Ｎ−メチル−メタンスルホンアミド）、ナラトリプタン（Ｎ−メチル−２−［３−（１−メチルピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−イル］エタンスルホンアミド）、アルモトリプタン（Ｎ，Ｎ−ジメチル−２−［５−（ピロリジン−１−イルスルホニルメチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−エタンアミン）、フロバトリプタン（（＋）−（Ｒ）−３−メチルアミノ−６−カルボキサミド−１，２，３，４−テトラヒドロカルバゾール）及びエレトリプタン（（Ｒ）−３−［（−１−メチルピロリジン−２−イル）メチル］−５−（２−フェニルスルホニルエチル）−１Ｈ−インドール）、又はこれらの薬学的に許容可能な誘導体からなる群から選ばれる。
【００８８】
一具体例において、トリプタンはゾルミトリプタン、リザトリプタン、スマトリプタン、ナラトリプタン、アルモトリプタン、フロバトリプタン、アビトリプタン、アルニジタン及びエレトリプタン、及びこれらの薬学的に許容可能な誘導体からなる群から選ばれる。
【００８９】
一具体例において、運動障害の治療に用いるためのブスピロン代謝産物及び２つ以上の５−ＨＴ１Ｂ、５−ＨＴ１Ｄ及び５−ＨＴ１Ｆ受容体のアゴニストを含む組成物が提供され、前記２つ以上の５−ＨＴ１Ｂ、５−ＨＴ１Ｄ及び５−ＨＴ１Ｆ受容体のアゴニストは、ブスピロン代謝産物の投与前、又は投与前及び投与中に投与される。
【００９０】
一具体例において、次を含む薬学剤形が提供される：
ａ．２つ以上の５−ＨＴ１Ｂ、５−ＨＴ１Ｄ及び５−ＨＴ１Ｆ受容体のアゴニストである薬学的活性成分を含む、これら薬学的活性成分の持続放出を提供するためのマトリックス構成成分、及び
ｂ．ブスピロン代謝産物である薬学的活性成分を含む、この薬学的活性成分の速放出を提供するための構成成分。
【００９１】
一具体例において、前記薬学製剤は固体投与形態、例えば、錠剤のような投与形態である。一具体例において、前記投与形態は、構成成分ａ．及びｂ．を別途の区画又は層；例えば、内部コアマトリックス及び外部コーティング；又は二重層錠剤に含む。別の具体例において、それぞれの前記構成成分は、カプセルに共に提供され、前記カプセルは、構成成分ａ．及びｂ．を別途の顆粒又はペレットとして含む。一具体例において、持続放出を提供するマトリックス構成成分及び即放出を提供する構成成分を含む薬学剤形は、２０１３年４月１８日に出願されたＷＯ２０１３／１５６０３５号に詳しく説明されている（その全体が参考として援用される）。
【００９２】
・５−ＨＴ１Ｂ、５−ＨＴ１Ｄ、５−５−ＨＴ１Ｆに対する選択的アゴニスト
本発明に係る第２活性成分は、一具体例において、選択的５−ＨＴ１Ｂ受容体アゴニスト、選択的５−ＨＴ１Ｄ受容体アゴニスト、選択的５−ＨＴ１Ｅ受容体アゴニスト及び選択的５−ＨＴ１Ｆ受容体アゴニストからなる群から選ばれる。選択的アゴニストは部分的であってもよく、部分アゴニストでなくてもよい。
【００９３】
一具体例において、ブスピロン代謝産物及び選択的５−ＨＴ１Ｂ受容体アゴニスト、選択的５−ＨＴ１Ｄ受容体アゴニスト、選択的５−ＨＴ１Ｅ受容体アゴニスト及び選択的５−ＨＴ１Ｆ受容体アゴニストからなる群から選ばれる第２活性成分を含む、運動障害の治療に用いるための組成物が提供される。
【００９４】
一具体例において、選択的５−ＨＴ１Ｄ受容体アゴニストは、（Ｓ）−（−）−１−｛２−［４−（４−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］エチル｝−Ｎ−メチル−イソクロマン−６−カルボキサミド（ＰＮＵ  １０９２９１）；（Ｓ）−（−）−３，４−ジヒドロ−１−［２−［４−（４−アミノカルボニル）−フェニル］−１−ピペラジニル］エチル−Ｎ−メチル−１Ｈ−２−ベンゾピラン−６−カルボキサミド（ＰＮＵ  １４２６３３）；３−［４−（３−クロロフェニル）ピペラジン−１−イル］−１，１−ジ（フェニル）プロパン−２−オール（ＢＲＬ１５５７２）；３−［［（２Ｒ）−１−メチル−２−ピロリジニル］メチル］−Ｎ−（３−ニトロ−２−ピリジニル）−１Ｈ−インドール−５−アミン（ＣＰ  １３５８０７）；３−［３−（２−ジメチルアミノエチル）−１Ｈ−インドール−５−イル］−Ｎ−（４−メトキシベンジル）アクリルアミド（ＧＲ  ４６６１１）；及びＮ，Ｎ−ジメチル−５−［（５−メチル−１，１−ｄｉｏｘｏｄｏ−１，２，５−チアジアゾリジン−２−イル）メチル］−１Ｈ−インドール−３−エタンアミンスクシネート（Ｌ−７０３，６６４スクシネート）、又はこれらの薬学的に許容可能な誘導体からなる群から選ばれる。
【００９５】
一具体例において、選択的５−ＨＴ１Ｂ受容体アゴニストは、ＳＢ  ２１６６４１（Ｎ−［３−（２−ジメチルアミノエトキシ）−４−メトキシフェニル］−４−［２−メチル−４−（５−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）フェニル］ベンズアミド）；ＣＰ−９４，２５３（３−（１，２，５，６−テトラヒドロ−４−ピリジル）−５−プロポキシピロロ［３，２−ｂ］ピリジン）；アンピルトリン塩酸塩（６−クロロ−２−［ピペリジニル−４−チオ］ピリジン塩酸塩）；ＣＧＳ  １２０６６Ｂジマレイン酸塩（７−トリフルオロメチル−４−（４−メチル−１−ピペラジニル）ピロロ［１，２−a］−キノキサリンジマレイン酸塩）；ＣＰ  ９３１２９ジ塩酸塩（１,４−ジヒドロ−３−（１，２，３，６−テトラヒドロ−４−ピリジニル）−５Ｈ−ピロール［３，２−ｂ］ピリジン−５−オンジ塩酸塩）；ＣＰ  ９４２５３塩酸塩（５−プロポキシ−３−（１，２，３，６−テトラヒドロ−４−ピリジニル）−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｂ］ピリジン塩酸塩）；ＧＲ  ４６６１１（３−［３−（２−ジメチルアミノエチル）−Ｈ−インドール−５−イル］−Ｎ−（４−メトキシベンジル）アクリルアミド）；Ｌ  ６９４２４７（２−｛５−［３−（４−メチルスルホニルアミノ）ベンジル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル］−１Ｈ−インドール−３−イル｝エチルアミン）；及びＳＫＦ  ９９１０１Ｈ（１'−メチル−５−｛［２'−メチル−４'−（５−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）ビフェニル−４−イル］カルボニル｝−２，３，６，７−テトラヒドロスピロ−［フロ［２，３−ｆ］インドール−３，４'−ピペリジン）、又はこれらの薬学的に許容可能な誘導体からなる群から選ばれる。
【００９６】
一具体例において、選択的５−ＨＴ１Ｆ受容体アゴニストは、ＣＯＬ−１４４（ラスミジタン（lasmiditan））、ＬＹ５７３１４４（２，４，６−トリフルオロ−Ｎ−［６−［（１−メチルピペリジン−４−イル）カルボニル］ピリジン−２−イル］ベンズアミド））、ＬＹ３３４３７０（４−フルオロ−Ｎ−［３−（１−メチルピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−イル］ベンズアミド）及びＬＹ３４４８６４（Ｎ−（６−ジメチルアミノ−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−カルバゾール−３−イル）−４−フルオロベンズアミド）、又はこれらの薬学的に許容可能な誘導体からなる群から選ばれる。
【００９７】
一具体例において、ブスピロン代謝産物及び２つ以上の５−ＨＴ１Ｂ、５−ＨＴ１Ｄ及び５−ＨＴ１Ｆ受容体のアゴニストである第２活性成分及び第３活性成分を含む、運動障害の治療に用いるための組成物が提供される。
【００９８】
・グルタミン酸神経伝達調節剤
本発明に係る第２活性成分は、一具体例において、グルタミン酸神経伝達調節剤である。
【００９９】
一具体例において、運動障害の治療に用いるための、ブスピロン代謝産物及びグルタミン酸神経伝達調節剤を含む組成物が提供される。
【０１００】
グルタミン酸は、哺乳動物の中枢神経系で興奮信号の重要な媒介体であり、認識、記憶及び学習をはじめとする正常な脳機能の多くの様相に関連する。グルタミン酸は、細胞表面グルタミン酸受容体に結合し、それを活性化することによって、シグナル伝達機能を発揮する。グルタミン酸受容体の種々の亜型が同定された：ＮＭＤＡ受容体（Ｎ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸受容体；ＮＭＤＡＲ）、ＡＭＰＡ受容体（α−アミノ−３−ヒドロキシ−５−メチル−４−イソオキサゾールプロピオン酸受容体、キスカル酸受容体、ＡＭＰＡＲ）、代謝型グルタミン酸受容体（ｍＧｌｕＲ）及びカイナイト受容体。ＮＭＤＡＲ、ＡＭＰＡＲ及びカイニン酸受容体は、イオン性受容体（リガンド開口型イオンチャネル）である反面、代謝型グルタミン酸受容体ではない。
【０１０１】
脳細胞外液内グルタミン酸濃度は、グルタミン酸の細胞吸収によって調節される。グルタミン酸吸収は、ポンプ役割をする特別輸送タンパク質類によって媒介される。グルタミン酸は、グリア細胞及び神経終末の両方に吸収される。前者は定量的な観点でさらに重要であると考えられている。星状膠細胞によって吸収されたグルタミン酸は、グルタミン酸受容体を活性化することができないので非活性であるグルタミンに変換され、グリア細胞から細胞外液に放出される。神経終末は、グルタミンを吸収し、グルタミンを再びグルタミン酸に変換させる。この過程は、グルタミン酸をグリア細胞によって非活性化して、非活性の形態で再びニューロンに輸送することを可能にする。
【０１０２】
グルタミン酸神経伝達は、当業者に公知された任意方式で、本発明により調節することができる。一具体例において、グルタミン酸神経伝達調節剤は、グルタミン酸受容体調節剤である。
【０１０３】
一具体例において、グルタミン酸神経伝達調節剤は、シナプス後グルタミン酸受容体アンタゴニストのようなグルタミン酸受容体アンタゴニストである。
【０１０４】
一具体例において、グルタミン酸神経伝達調節剤は、シナプス前グルタミン酸受容体アゴニストのようなグルタミン酸受容体アゴニストである。
【０１０５】
別の具体例において、グルタミン酸神経伝達調節剤は、直接又は間接的に細胞外グルタミン酸の濃度に影響を与える製剤である。
【０１０６】
一具体例において、グルタミン酸神経伝達調節剤は、グルタミン酸放出を抑制する製剤である。
【０１０７】
一具体例において、グルタミン酸神経伝達調節剤は、グルタミン酸の吸収を増加させる（例えば、グルタミン酸輸送剤を刺激する）製剤である。
【０１０８】
・ａ）グルタミン酸受容体調節剤
一具体例において、運動障害の治療に用いるための、ブスピロン代謝産物及びグルタミン酸受容体調節剤を含む組成物が提供される。
【０１０９】
一具体例において、前記グルタミン酸受容体調節剤は、そのシナプス後受容体上の天然グルタミン酸の効果を抑制及び／又はグルタミン酸のシナプス前放出を抑制する。
【０１１０】
一具体例において、前記グルタミン酸受容体調節剤は、グルタミン酸受容体アンタゴニスト及び陰性アロステリック調節剤（ＮＡＭ）を含む。別の具体例において、グルタミン酸受容体調節剤は、グルタミン酸受容体アゴニスト及び陽性アロステリック調節剤（ＰＡＭ）を含む。
【０１１１】
一具体例において、ブスピロン代謝産物、及びＮＭＤＡ受容体アンタゴニスト、ＡＭＰＡ受容体アンタゴニスト、カイナイト受容体アンタゴニスト、ＡＭＰＡＲ／カイナイト受容体アンタゴニスト、グループ１ｍＧｌｕＲアンタゴニスト及びグループ２／３ｍＧｌｕＲアゴニストからなる群から選ばれるグルタミン酸受容体調節剤を含む組成物が提供される。
【０１１２】
一具体例において、運動障害の治療に用いるための、ブスピロン代謝産物及びグルタミン酸受容体アンタゴニスト及び／又は陰性アロステリック調節剤を含む組成物が提供される。
【０１１３】
ＮＭＤＡ受容体は、２つのＧｌｕＮ１と２つのＧｌｕＮ２サブユニット（サブユニットは、前述したようにＮＲ１及びＮＲ２に表示した）の間に、ヘテロ四量体を形成する。ＮＲ１サブユニットの８個の変移体とＮＲ２サブユニットの４個の異なるアイソフォームがある。一具体例において、ＮＭＤＡＲアンタゴニストは、ＮＭＤＡサブユニット中の一つ以上に特異的に又は優先的に結合する。
【０１１４】
ＮＭＤＡ受容体アンタゴニストは、一具体例において、非選択的又は広範囲アンタゴニスト、又はＮＲ２Ａサブユニット優先又は選択的アンタゴニスト、又はＮＲ２Ｂサブユニット優先又は選択的アンタゴニストである。
【０１１５】
一具体例において、ＮＭＤＡ受容体アンタゴニストは、アマンタジン、メマンチン、ＭＫ−８０１（ジゾシルピン）、ＣＰＰ（ミダフォテル（midafotel））、フェンサイクリジン（ＰＣＰ）、レマセミド、ＬＹ−２３５，９５９、イフェンプロジル、トラキソプロジル（ＣＰ−１０１，６０６）、ベソンプロジル、ｒｏ−２５６９８１、Ｒｏ−６３１９０８、ケタミン、Ｓ−（＋）−ケタミン、メトキセタミン（３−ＭＥＯ−２−オキソ−ＰＣＥ）、デキストロメトルファン、デキストロルファン、ＡＰ５（ＡＰＶ；（２Ｒ）−アミノ−５−ホスホノ吉草酸）；リルゾール、デキサナビノール（ＨＵ−２１１）；コナントキン（Ｃｏｎ−Ｇ、Ｃｏｎ−Ｔ、Ｃｏｎ−Ｒ、Ｃｏｎ−Ｌ、Ｃｏｎ−Ｐｒ１、Ｃｏｎ−Ｐｒ２、Ｃｏｎ−Ｐｒ３、Ｃｏｎ−Ｐ、Ｃｏｎ−Ｅ、Ｃｏｎ−Ｒ１−Ａ、Ｃｏｎ−Ｂｒ）、フペルジンＡ、アトモキセチン、ケトベミドン、メタドン、デキストロプロポキシフェン、トラマドール、クラトム（kratom）アルカロイド及びイボガイン、又はこれらの誘導体からなる群から選ばれる。
【０１１６】
ＡＭＰＡＲは、四量体を形成するように結合するＧｌｕＲ１、ＧｌｕＲ２、ＧｌｕＲ３及びＧｌｕＲ４として指定された４種のサブユニットで構成される。ＡＭＰＡＲの各サブユニットは、グルタミン酸に対する結合部位を有している。一具体例において、ＡＭＰＡＲアンタゴニストは、ＡＭＰＡＲサブユニット中の一つ以上に特異的に又は優先的に結合する。
【０１１７】
一具体例において、ＡＭＰＡ受容体アンタゴニストは、テザンパネル（tezampanel）（ＬＹ−２９３，５５８；（３Ｓ，４ａＲ，６Ｒ，８ａＲ）−６−［２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル］デカヒドロイソキノリン−３−カルボン酸）；タランパネル（ＧＹＫＩ  ５３７７７３；ＬＹ３００１６４；（８Ｒ）−７−アセチル−５−（４−アミノフェニル）−８,９−ジヒドロ−８−メチル−７Ｈ−１，３−ジオキソロ［４，５−ｈ］［２，３］ベンゾジアゼピン）；ペランパネル（５’−（２−シアノフェニル）−１’−フェニル−２，３’−ビピリジニル−６’（１’Ｈ）−オン）；ＧＹＫＩ−５３，６５５；ＧＹＫＩ−５２，４６６；ＮＢＱＸ（２，３−ジヒドロキシ−６−ニトロ−７−スルファモイル−ベンゾ［f］キノキサリン−２，３−ジオン）；ＣＮＱＸ（６−シアノ−７−ニトロキノキサリン−２，３−ジオン）；ＤＮＱＸ（６,７−ジニトロキノキサリン−２，３−ジオン）；トピラマート、エタノール、Ｌ−テアニン及びキヌレン酸、又はこれらの誘導体からなる群から選ばれる。
【０１１８】
異なる方式で配列されて四量体を形成することができ、ＡＭＰＡ及びＮＭＤＡ受容体サブユニットと類似な５つ類型のカイニン酸受容体サブユニット、ＧｌｕＲ５、ＧｌｕＲ６、ＧｌｕＲ７、ＫＡ１及びＫＡがある。一具体例において、カイニン酸受容体アンタゴニストは、１つ以上のカイニン酸受容体サブユニットに特異的に又は優先的に結合する。
【０１１９】
一具体例において、カイニン酸受容体アンタゴニストは、ＣＮＱＸ（６−シアノ−７−ニトロキノキサリン−２，３−ジオン）；ＤＮＱＸ（６，７−ジニトロキノキサリン−２，３−ジオン）；テザンパネル（tezampanel）（ＬＹ−２９３，５５８；（３Ｓ，４ａＲ，６Ｒ，８ａＲ）−６−［２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル］デカヒドロイソキノリン−３−カルボン酸）；ＮＳ１０２（５−ニトロ−６，７，８，９−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｇ］インドール−２，３−ジオン３−オキシム）；トピラマート、エタノール及びキヌレン酸、又はこれらの誘導体からなる群から選ばれる。
【０１２０】
一部化合物は、ＡＭＰＡＲ／カイナイト受容体アンタゴニストであり、即ち、これらは２つの類型の受容体を全部標的にする（例えば、トピラマート）。
【０１２１】
ｍＧｌｕＲは、グループ１ｍＧｌｕＲ（ｍＧｌｕＲ１、ｍＧｌｕＲ５）、グループ２ｍＧｌｕＲ（ｍＧｌｕＲ２、ｍＧｌｕＲ３）及びグループ３ｍＧｌｕＲ（ｍＧｌｕＲ４、ｍＧｌｕＲ６、ｍＧｌｕＲ７、ｍＧｌｕＲ８）に分類することができる７ＴＭＧ−タンパク質結合受容体である。ｍＧｌｕＲはその構造、分布及び生理に基づいて特定される。
【０１２２】
グループ１ｍＧｌｕＲは、シナプス後である反面、グループ２及びグループ３ｍＧｌｕＲは、グルタミン酸又は他の神経伝達物質の放出を主に調節するシナプス前である。
【０１２３】
本発明に係るグルタミン酸受容体調節剤は、一具体例において、ｍＧｌｕＲを調節する。
【０１２４】
本発明に係るグルタミン酸受容体調節剤は、一具体例において、シナプス後ｍＧｌｕＲアンタゴニストである。
【０１２５】
本発明に係るグルタミン酸受容体調節剤は、一具体例において、シナプス前ｍＧｌｕＲアゴニストである。
【０１２６】
本発明に係るグルタミン酸受容体調節剤は、一具体例において、グループ１ｍＧｌｕＲ（受容体アンタゴニスト又はＮＡＭ）を抑制する。
【０１２７】
本発明に係るグルタミン酸受容体調節剤は、一具体例において、グループ２及び／又はグループ３ｍＧｌｕＲ（受容体アゴニスト又はＰＡＭ）からグルタミン酸の放出を調節／抑制する。
【０１２８】
一具体例において、本発明に係るグルタミン酸受容体調節剤は、ｍＧｌｕＲアンタゴニスト、例えば、グループ１ｍＧｌｕＲアンタゴニストである。一具体例において、グループ１ｍＧｌｕＲアンタゴニストは、ｍＧｌｕＲ１アンタゴニスト又はｍＧｌｕＲ５アンタゴニストである。
【０１２９】
一具体例において、本発明に係るグルタミン酸受容体調節剤は、ｍＧｌｕＲアゴニスト、例えば、グループ２／３ｍＧｌｕＲアゴニストである。一具体例において、グループ２／３ｍＧｌｕＲアゴニストは、ｍＧｌｕＲ２アゴニスト、ｍＧｌｕＲ３アゴニスト、ｍＧｌｕＲ４アゴニスト、ｍＧｌｕＲ６アゴニスト、ｍＧｌｕＲ７アゴニスト及びｍＧｌｕＲ８はアゴニスト（又はＰＡＭ）からなる群から選ばれる。
【０１３０】
一具体例において、グループ１ｍＧｌｕＲアンタゴニスト（ｍＧｌｕＲ５アンタゴニスト）は、マボグルラント（ＡＦＱ０５６）、ジプラグルラント、２−メチル−６−（フェニルエチニル）ピリジン（ＭＰＥＰ）；３−（（２−メチル−４−チアゾリル）エチニル）ピリジン（ＭＴＥＰ）；フェノバム（１−（３−クロロフェニル）−３−（３−メチル−５−オキソ−４Ｈ−イミダゾール−２−イル）ウレア）；及びこれらの誘導体からなる群から選ばれる。
【０１３１】
一具体例において、グループ２、ｍＧｌｕＲアゴニスト（ｍＧｌｕＲ２／３アゴニスト）は、ＬＹ３７９２６８、ＤＣＧ−ＩＶ、ＡＰＩＣＡ（１−アミノ−５−ホスホノインダン−１−カルボン酸）及びＥＧＬＵ（（２Ｓ）−α−エチルグルタミン酸）、及びこれらの誘導体からなる群から選ばれる。
【０１３２】
一具体例において、グループ３ｍＧｌｕＲアゴニスト（ｍＧｌｕＲ４アゴニスト）はエグルメガド（ＬＹ３５４７４０）；ＬＹ５４４３４４；ＬＳＰ−１３０８１；ＬＳＰ−１２１１１；ＬｕＡＦ−２１９３４；ＶＵ−４００１９５及びＶＵ−０３５４７７０、及びこれらの誘導体からなる群から選ばれる。
【０１３３】
・ｂ）グルタミン酸放出抑制剤
一具体例において、運動障害の治療に用いるための、ブスピロン代謝産物及び皮質−線条体受容体からのグルタミン酸の放出抑制剤を含む組成物が提供される
【０１３４】
一具体例において、グルタミン酸放出を抑制する製剤は、リルゾールである。一具体例において、グルタミン酸放出を抑制する製剤は抗てんかん剤である。一具体例において、グルタミン酸放出を抑制する製剤はトピラマートである。
【０１３５】
・イオンチャネル抑制剤
特定のニューロンイオンチャネル調節剤は、神経伝達物質の放出又は神経伝達物質受容体の活性に影響を及ぼすと知られている。生物学的膜を介してイオンフラックスを減少させるか、抑制して、膜電位を変更させるイオンチャネルのアンタゴニストは、神経伝達物質の放出、吸収又は受容体活性に影響を及ぼし得る。
【０１３６】
本発明に係る第２活性成分は、一具体例において、イオンチャネル抑制剤又はイオンチャネル遮断剤又はイオンチャネルアンタゴニストである。これら用語は、本願において、相互互換的に用いられる。
【０１３７】
一具体例において、運動障害の治療に用いるための、ブスピロン代謝産物及びイオンチャネル抑制剤を含む組成物が提供される。
【０１３８】
一具体例において、イオンチャネル抑制剤は、カルシウムチャネルアンタゴニスト、カリウムチャネルアンタゴニスト又はナトリウムチャネルアンタゴニスト、又はカリウムチャネル及びナトリウムチャネルアンタゴニストの組み合わせである。
【０１３９】
一具体例において、イオンチャネル抑制剤は、Ｔ型のカルシウムチャネル、Ｌ型のカルシウムチャネル、Ｋ＋チャネル及びＮａ＋チャネルからなる群から選ばれたニューロンイオンチャネルに結合する。
【０１４０】
一具体例において、イオンチャネルアンタゴニストは、Ｔ型のカルシウムチャネルアンタゴニスト、Ｌ型のカルシウムチャネルアンタゴニスト、Ｋ＋チャネルアンタゴニスト及びＮａ＋チャネルアンタゴニストからなる群から選ばれる。イオンチャネルアンタゴニストは、１つの特定イオンチャネルに影響を及ぼし得るか、又は少なくとも２つの異なるイオンチャネルのように複数のことに影響を及ぼし得る。
【０１４１】
一具体例において、イオンチャネルアンタゴニストは、ゾニサミドである。一具体例において、イオンチャネルアンタゴニストは、トピラマートである。
【０１４２】
カルシウムチャネルアンタゴニストは、カルシウムチャネルを介したカルシウム（Ｃａ２＋）の移動を妨害する多くの薬物である。カルシウムチャネル遮断剤は、主に抗高血圧薬水として用いられる。
【０１４３】
一具体例において、イオンチャネル抑制剤は、ゾニサミド、エトスクシミド、ミベフラジル、フルナリジン、トリメタジオン、Ｚ９４４及びＺ１２３２１２からなる群から選ばれるＴ型のカルシウムチャネルである。
【０１４４】
一具体例において、カルシウムチャネルアンタゴニストは、ジヒドロピリジンカルシウムチャネル遮断剤であり、一具体例において、ニモジピン（ニモトップ）、アムロジピン（ノルバスク）、アラニジピン（サプレスタ）、アゼルニジピン（カルブロック）、バルニジピン（ヒポカ）、ベニジピン（コニール）、シルニジピン（アテレック、シナロング、シスカード）、クレビジピン（クレビプレックス）、イスラジピン（ダイナシルク、Ｐｒｅｓｃａｌ）、エホニジピン（ランデル）、フェロジピン（プレンジール）、ラシジピン（モテンズ、ラシピル）、レルカニジピン（ザニジップ）、マニジピン（カルスロット、Ｍａｄｉｐｉｎｅ）、ニカルジビン（カーデン、カーデンＳＲ）、ニフェジピン（プロカジア、アダラート）、ニルバジピン（ニバジール）、ニモジピン（ニモトップ）、ニソルジピン（バイミカード、Ｓｕｌａｒ、Ｓｙｓｃｏｒ）、ニトレンジピン（カルディプ、ニトレピン、バイロテンシン）、プラニジピン（Ａｃａｌａｓ）からなる群から選ばれる。
【０１４５】
一具体例において、カルシウムチャネルアンタゴニストは、非−ジヒドロピリジンカルシウムチャネル遮断剤であり、一具体例において、ベラパミル（カラン、イソプチン）、ガロパミル及びフェンジリンをはじめとするフェニルアルキルアミンカルシウムチャネル遮断剤；ジルチアゼム（カーディゼム）をはじめとするベンゾチアゼピンカルシウムチャネル遮断剤；ジコノチド；及びミベフラジル、ベプリジル、フルナリジン、フルスピリレン及びフェンジリンなどの非選択的カルシウムチャネルアンタゴニストからなる群から選ばれる。
【０１４６】
カリウムチャネル遮断剤は、カリウムチャネルを介した伝導を妨害する製剤である。
【０１４７】
一具体例において、カリウムチャネルアンタゴニストは、アミオダロン、ドフェチリド、ソタロール、イブチリド、アジミリド、ブレチリウム、クロフィリウム、Ｅ−４０３１、ニフェカラント、テジサミル、セマチリド、ダルファムプリジン及びスルホニルウレアからなる群から選ばれる。
【０１４８】
一具体例において、ナトリウムチャネルアンタゴニストは、レマセミド、ゾニサミド及びトピミレートからなる群から選ばれる。
【０１４９】
一具体例において、イオンチャネルアンタゴニストは、カバインのようなカバラクトンからなる群から選ばれる。
【０１５０】
一具体例において、ブスピロン代謝産物及びＫＣＮＱチャネル調節剤を含む組成物が提供される。
【０１５１】
Ｋｖ７とも呼ばれるＫＣＮＱチャネルは、サブユニットＫｖ７．１−Ｋｖ７.５をコードする遺伝子が現在の特定されている電圧依存性カリウムチャネル系である。５つのＫｖ７遺伝子のうち４つの変異が心臓部静脈、聴覚障害及びてんかんを含む疾患の根底にあることが示されている。すべてのＫＣＮＱチャネルは、４つのサブユニットによって形成された機能性チャネルからなる典型的な位相設計を共有し；それぞれは、Ｓ１〜Ｓ６と呼ばれる６つの膜貫通セグメントを含む。ＫＣＱＮチャネルは、同じタイプのサブユニットによって形成されたホモマー又は異なるタイプのサブユニットを含むヘテロマーであってもよい。
【０１５２】
ＫＣＮＱ活性化剤は、ＫＣＮＱチャネルに結合し、例えば、チャネルの開放形態安定化及びチャネル開放のための一連の形態的変化、チャネル開放時間増加及び最長密閉時間減少が容易なようにする一つ以上の効果を触発することができる。このような効果の結果として、チャネルを通るイオン輸送が増加する。多数のＫＣＮＱ活性化化合物が当業界に記述されている（例えば、Wulff al. Nat Rev Drug Discov. 2009;8(12):982-1001 and Xiong et al. Trends Pharmacol Sci. 2008;29(2):99-107）。
【０１５３】
さらに好ましい具体例において、ＫＣＮＱ活性化剤は、Ｋｖ７．２、Ｋｖ７．３、Ｋｖ７．４、Ｋｖ７．５サブユニットを含むＫＣＮＱチャネルから選ばれるホモマーＫＣＮＱチャネル、又はＫｖ７．２及びＫｖ７．３サブユニット（Ｋｖ７．２／３チャネル）を含むか、Ｋｖ７．３及びＫｖ７．４サブユニット（Ｋｖ７．３／４チャネル）を含むか、又はＫｖ７．３及びＫｖ７．５サブユニット（Ｋｖ７．３／５チャネル）を含むＫＣＮＱチャネルグループから選ばれるヘテロマーＫＣＮＱチャネルから選ばれる一つ以上のＫＣＮＱチャネルを活性化する。
【０１５４】
本発明のさらに別の具体例において、ＫＣＮＱチャネル活性化剤は、レチガビン（Ｎ−（２−アミノ−４−（４−フルオロベンジルアミノ）−フェニルカルバミン酸）エチルエステル）；フルピルチン（エチル−（２−アミノ−６−［（４−フルオロベンジル）アミノ］ピリジン−３−イル）カルバメート）:ＩＣＡ−２７２４３（Ｎ−（６−クロロ−ピリジン−３−イル）−３，４−ジフルオロ−ベンズアミド）；Ｍａｘｉｐｏｓｔ（ＢＭＳ−２０４３５２のラセミ混合物（（Ｒ／Ｓ）−（５−クロロ−２−メトキシフェニル）−３−フルオロ−６−（トリフルオロメチル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−２−オン［（Ｒ）−３−（５−クロロ−２−メトキシフェニル）−３−フルオロ−６−（トリフルオロメチル）−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−インドール−２−オン］））；ＢＭＳ−２０４３５２のＳエナンチオマー（Ｓ）−（５−クロロ−２−メトキシフェニル）−３−フルオロ−６−（トリフルオロメチル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−２−オン［（Ｒ）−３−（５−クロロ−２−メトキシフェニル）−３−フルオロ−６−（トリフルオロメチル）−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−インドール−２−オン］）；ＷＯ２００６／０９２１４３号及びＷＯ２０１１／０２６８９０号（二つとも本願に参照で援用される）に記載されたことと同じ置換されたピリジン；アクリルアミド（Ｓ）−１（（Ｓ）−Ｎ−［１−（３−モルホリン−４−イル−フェニル）−エチル］−３−フェニル−アクリルアミド）；アクリルアミド（Ｓ）−２；Ｎ−フェニルアントラニル酸誘導体、例えばジクロフェナック、フルフェナム酸、メクロフェナム酸、ＮＨ６、及びニフルミン酸；Ｌ−３６４３７３；ジンクピリチオン（ビス（１−ヒドロキシ−２（１Ｈ）−ピリディンセルロネイト−Ｏ，Ｓ）亜鉛）；及びＩＣＡ−１０５６６５；又はこれらの薬学的に許容可能な誘導体からなる群から選ばれる。
【０１５５】
本発明に係る運動障害
本発明は、運動障害の治療に用いるためのブスピロン代謝産物を含む組成物に関するものである。本発明に係る治療という用語は治療、予防／防止（危険の減少）及び改善を含む。
【０１５６】
一具体例において、運動障害は変更又は弱化されたシナプスドーパミンレベルに関連する障害である。
【０１５７】
一具体例において、本発明に係る運動障害はパーキンソン病、パーキンソン病と関連する運動障害、運動緩徐、無動症、運動異常症、Ｌ−ＤＯＰＡ誘発運動異常症、遅発性ジスキネジー、協調運動失調（ataxia）、静座不能（akathisia）、ジストニー（dystonia）、本態性振戦（essential tremor）、ハンチントン病（Huntington's disease）、ミオクローヌス、レット症候群（Rett syndrome）、トゥレット・シンドローム（Tourettes yndrome）、ウィルソン病（Wilson's disease）、舞踏病（chorea）、マチャド・ジョセフ病（Machado-Joseph disease）、下肢静止不能症候群（restless leg syndrome）、痙性斜頸（spasmodic torticollis）、顎の痙攣（geniospasm）又はこれらと関連した運動障害からなる群から選ばれる。
【０１５８】
本発明に係る運動障害はまた、神経弛緩薬の使用、特発性疾患、遺伝的機能障害、感染病又は基底核の機能障害に引き起こす及び／又は変化したシナプスドーパミンレベルの変更につながる他の症状に関連したものであってもよい。
【０１５９】
パーキンソン病は、筋硬直、振戦、姿勢異常（postural abnormality）、歩行異常（gait abnormality）、身体運動の鈍化（運動緩徐）、及び極端な場合、身体運動の喪失（無動症）と関連する。ＰＤは、黒質緻密部（pars compacta）のドーパミン作動性ニューロンの変成及び死滅によって引き起こされ、ドーパミン神経伝達の調節機能障害につながる。
【０１６０】
本発明の特定一具体例において、運動障害はパーキンソン病である。本発明の特定一具体例において、運動障害はパーキンソン病又は関連する運動障害者無動症、運動異常症及び運動緩徐、又はＬ−ＤＯＰＡ誘発運動異常症のようなパーキンソン病関連運動障害である。本発明の好ましい一具体例において、運動障害は、遅発性ジスキネジーである。
【０１６１】
本発明のさらに別の具体例において、運動障害は、ハロペリドール、ドロペリドール、ピモジド、トリフロペラジン、アミスルピリド、リスペリドン、アリピプラゾール、アセナピン、及びズクロペンチキソールのような抗精神病剤、フルオキセチン、パロキセチン、ベンラファキシン、及びトラゾドンのような抗うつ剤、ドーパミン遮断剤、例えば、メトクロプラミド（レグラン（reglan））及びプロクロルペラジン（コンパジン（compazine））のような制吐剤によって引き起こされるか、これらと関連する。
【０１６２】
本発明のさらに別の具体例において、運動障害は、オピオイド、バルビツレート、コカイン、ベンゾジアゼピン、アルコール、又はアンフェタミンの禁断によって引き起こされるか、これらと関連する。
【０１６３】
本発明の一側面は、運動障害の治療方法に使用するための本願に定義されたような組成物を提供することである。
【０１６４】
本発明の一側面は、運動障害治療用薬剤の製造のための本願に定義されたような組成物を提供することである。
【０１６５】
一具体例において、運動障害の治療方法に使用するための本願に定義されたことのような組成物はこれを必要とする個体に投与される。
【０１６６】
本願に言及する必要のある個体は、本発明に係る化合物又は医薬組成物の投与から利益を得ることができる個体である。このような個体は、運動障害に罹患しているか、又は運動障害に罹患する危険性がある。個体は、任意のヒト、男性又は女性、乳児、中年又は高齢者であってもよい。個体において、治療又は予防される運動障害は、個体の年齢、個体の全般的な健康状態、個体を治療するために用いられる薬物及び個体が疾患又は障害に罹患した過去の病歴を有するかどうか、個体において運動障害を有しているか、又は引き起こしている可能性がある。
【０１６７】
本発明は、運動障害を罹患する危険（例えば、危険増加）を有する個体に投与されることを特徴とする、運動障害の予防に使用するためのブスピロン代謝産物を含む組成物に関するものである。一具体例において、運動障害を罹患する危険を有する前記個体は、Ｌ−ＤＯＰＡ（例:レボドパ）のようなドーパミンプロドラッグで治療されているか、治療されるべきヒトである。
【０１６８】
さらなる活性成分
本発明の化合物又は医薬組成物は、他の治療化合物（薬学的活性成分）又はその薬学的に許容可能な誘導体として理解される一つ以上のさらなる活性成分と共に組み合わせるか、又はこれを含むことができる。
【０１６９】
一具体例において、ブスピロン代謝産物の外に、さらなる活性成分が投与される。別の具体例において、ブスピロン代謝産物及び第２活性成分の外に、さらなる追加活性成分が投与される。
【０１７０】
本発明に係るさらなる活性成分は、シナプス間隙でドーパミン濃度を増加させる薬剤、ドーパミン、ドーパミンプロドラッグ、Ｌ−ＤＯＰＡ（例えば、レボドパ）、ブロモクリプチン、ペルゴリド、プラミペキソール、ロピニロール、ピリベジル、カベルゴリン、アポモルヒネ、リスリドを含むが、これらに限定されないドーパミン受容体アゴニスト又はこれらの誘導体からなる群から選ばれた一つ以上の薬剤であってもよい。
【０１７１】
さらなる活性成分はまた、ＰＤ症状を改善するか、ＰＤの治療に用いられる化合物、例えば、Ｌ−ＤＯＰＡ（又は他のドーパミンプロドラッグ）のドーパミンでの変換に対する末梢抑制剤、例えば、カルビドパ（ロドシン）又はベンセラジドのようなＤＯＰＡデカルボキシラーゼ抑制剤、例えば、トルカポン、エンタカポン及びニテカポンのようなカテコール−Ｏ−メチルトゥレンスポラジェ（ＣＯＭＴ）抑制剤、例えば、セレギリン及びラサギリンのようなＭＡＯ−Ｂ抑制剤、セロトニン受容体調節剤、例えば、ＴＲＫ−８２０（（Ｅ）−Ｎ−［１７−シクロプロピルメチル）−４，５α−エポキシ−３，１４−ジヒドロキシモルフィナン−６β−イル］−３−（フラン−３−イル）−Ｎ−メチルプロプ−２−エンアミドモノヒドロ塩酸塩）のようなカッパオピオイド受容体アゴニストからなる群から選ばれるが、これらに限定されない。
【０１７２】
本発明の好ましい具体例において、さらなる活性成分はＬ−ＤＯＰＡのようなドーパミンプロドラッグ又はこれの薬学的に許容可能な誘導体である。したがって、好ましい一具体例において、ドーパミンプロドラッグ、例えば、Ｌ−ＤＯＰＡ（例えば、レボドパ）が本発明に係るブスピロン代謝産物を含む組成物と組み合わせて用いられる。
【０１７３】
本発明の一具体例において、化合物又は薬学的組成物は、２つ以上のさらなる活性成分と組み合わせられる。このような２つのさらなる活性成分は、デカルボキシラーゼ抑制剤と組み合わせられたＬ−ＤＯＰＡのようなドーパミンプロドラッグである。したがって、本発明の一具体例において、２つ以上のさらなる活性成分は、Ｌ−ＤＯＰＡ及びカルビドパ、又はＬ−ＤＯＰＡ及びベンセラジドのようなドーパミンプロドラッグを含む。
【０１７４】
また別の具体例で、このような２つのさらなる活性成分は、ＣＯＭＴ抑制剤と組み合わせられたＬ−ＤＯＰＡのようなドーパミンプロドラッグであり、ここで、ＣＯＭＴ抑制剤は、一具体例において、トルカポン、エンタカポン又はニテカポンである。
【０１７５】
本発明に係るさらなる活性成分はまた、例えば、Ｌ−ＤＯＰＡ／ベンセラジド及びカルビドパ／レボドパ（時には、Ｌｅｖｏｃａｒｂとも呼ばれる）剤形、シネメット、パルコパ、マドパー、キンソン、Ａｔａｍｅｔ又はＬ−ＤＯＰＡ／ＣＯＭＴ抑制剤製剤、例えば、スタレボ（カルビドパ／レボドパ及びＥｎｔｅｃａｐｏｎｅ）のように同じ剤形に含まれてもよい。
【０１７６】
一具体例において、本発明に係る組成物は、分離されたＬ−ＤＯＰＡ又はＬ−ＤＯＰＡ／ベンセラジド製剤との組み合わせで、別途に、同時に又は順次投与される。特定具体例において、前記組成物は、分離されたＬ−ＤＯＰＡ又はＬ−ＤＯＰＡ／ベンセラジド製剤の処理前又はこれと同時に投与される。
【０１７７】
一具体例において、本発明は、個体におけるドーパミンプロドラッグ、例えば、Ｌ−ＤＯＰＡ又はレボドパの効果を増加させるため及び／又は個体におけるドーパミンプロドラッグ、例えば、Ｌ−ＤＯＰＡ又はレボドパの経時効果減少を低下させるための本願に定義されるブスピロン代謝産物を含む組成物に関する。ここで、個体は運動障害を有しているか、又は有する危険性がある。
【０１７８】
投薬量
本発明により、ブスピロン代謝産物は、薬学的有効量又は治療的有効量で治療が必要な個体に投与される。本発明に係る化合物の治療的有効量は、与えられた疾患又は運動障害及びそれらの合併症の臨床的兆候を治癒するか、予防するか、これらの危険を減少させるか、緩和するか、部分的に阻止するために十分な量である。特定治療目的のために有効な量は、運動障害の重症度及び種類だけでなく、対象の体重及び一般的な状態により変わる。本発明の化合物又は組成物は、１日に１回〜数回、例えば、１日に１〜２回、１日に２〜３回、１日に３〜４回、１日に４〜５回、１日に５〜６回投与され、１日に１〜３回の投与が好ましい。また別の具体例において、本発明の化合物又は組成物は、１日に１回未満、例えば、１日おきに１回、３日に１回、４日に１回、５日に１回、６日に１回、７日に１回、又は２週に１回投与される。
【０１７９】
本発明に係る化合物、医薬組成物及び第２又は追加活性成分の投与は、治療の多様な時点に個体に投与することができる。治療は１つの継続期間にわたって行われるか、又はその間に本発明に係る化合物、医薬組成物及び追加活性成分の投与が中断されるか、減少されるか、又は変更される間隔で行われていてもよい。このような治療期間又は非治療期間は長さによって異なってもよく、１日〜４２日、例えば、１〜２日、２〜３日、３〜４日、４〜５日、５〜６日、６〜７日、７〜１４日、１４〜２１日、２１〜２８日、２８〜３５日又は３５〜４２日である。
【０１８０】
一具体例において、ブスピロン代謝産物及び／又は第２活性成分は、０．５ｍｇ／日〜１０００ｍｇ／日、例えば０．５ｍｇ／日〜１ｍｇ／日、例えば１〜２ｍｇ／日、例えば２〜３ｍｇ／日、例えば３〜４ｍｇ／日、例えば４〜５ｍｇ／日、例えば５〜６ｍｇ／日、例えば６〜７ｍｇ／日、例えば７〜８ｍｇ／日、例えば８〜９ｍｇ／日、例えば９〜１０ｍｇ／日、例えば１０〜１５ｍｇ／日、例えば１５〜２０ｍｇ／日、例えば２０〜２５ｍｇ／日、例えば２５〜３０ｍｇ／日、例えば３０〜４０ｍｇ／日、例えば４０〜５０ｍｇ／日、例えば５０〜７５ｍｇ／日、例えば７５〜１００ｍｇ／日、例えば１００〜１５０ｍｇ／日、例えば１５０〜２００ｍｇ／日、例えば２００〜２５０ｍｇ／日、例えば２５０〜３００ｍｇ／日、例えば３００〜４００ｍｇ／日、例えば４００〜５００ｍｇ／日、例えば５００〜６００ｍｇ／日、例えば６００〜７００ｍｇ／日、例えば７００〜８００ｍｇ／日、例えば８００〜９００ｍｇ／日、例えば９００〜１０００ｍｇ／日の用量で投与される。
【０１８１】
本発明の一具体例において、ブスピロン代謝産物及び／又は第２活性成分の単回用量が投与され、０．０５ｍｇ／ｋｇ体重〜１００ｍｇ／ｋｇ体重、例えば０．０５〜０．１ｍｇ／ｋｇ体重、例えば０．１〜０．２ｍｇ／ｋｇ体重、例えば０．２〜０．５ｍｇ／ｋｇ体重、例えば０．５〜１ｍｇ／ｋｇ体重、例えば１〜２ｍｇ／ｋｇ体重、例えば２〜３ｍｇ／ｋｇ体重、例えば３〜４ｍｇ／ｋｇ体重、例えば４〜５ｍｇ／ｋｇ体重、例えば５〜１０ｍｇ／ｋｇ体重、例えば１０〜１５ｍｇ／ｋｇ体重、例えば１５〜２０ｍｇ／ｋｇ体重、例えば２０〜３０ｍｇ／ｋｇ体重、例えば３０〜４０ｍｇ／ｋｇ体重、例えば４０〜５０ｍｇ／ｋｇ体重、例えば５０〜７５ｍｇ／ｋｇ体重、例えば７５〜１００ｍｇ／ｋｇ体重を含むことができる。
【０１８２】
一具体例において、本発明の組成物は、運動障害又は運動障害の発生危険増加が存在する間投与される。
【０１８３】
投与経路
好ましい投与経路は、治療対象の一般的な状態及び年齢、処理する状態の特性、体内で治療される組織の位置及び活性成分に依存することが理解される。
【０１８４】
本発明の一具体例において、投与経路は、薬剤の血液−脳障壁通過することを許容する。
【０１８５】
全身治療
本発明に係る全身治療は、最終的に所望する作用部位に標的化するために、化合物又は組成物を血流内に導入することができる。
【０１８６】
全身治療は、腸内経路と経口、直腸、鼻腔、膣、直腸、肺、気管支、口腔、舌下、経皮、局所、嚢内、腹腔内、皮下、筋肉内、硬膜内、静脈内及び皮内投与を含む非経口的経路を介した投与を含む。このような投与に適した剤形は、通常の技術によって製造される。
【０１８７】
局所治療
本発明に係る薬剤は、局所治療剤として、即ち、作用部位に直接導入することができる。したがって、薬剤は皮膚又は粘膜に直接適用してもよく、又は薬剤は作用部位、例えば、病変組織又は病変組織に直接的に導く抹消終動脈（海綿内、硝子体内、関節内、脳内、髄腔内、硬膜外）に注入してもよい。
【実施例】
【０１８８】
実施例１
後記するような６−ＯＨＤＡラットモデルは、パーキンソン病及びＬＩＤと関連する運動障害の治療のためのブスピロン代謝産物の評価に有用である。
【０１８９】
６−ＯＨＤＡラットモデル
６−ＯＨＤＡ（６−ヒドロキシドーパミン）は、ドーパミン作動性及びノルアドレナリン作動性ニューロンを選択的に殺し、脳のドーパミンレベル減少を誘導する神経毒素である。一方的な６−ＯＨＤＡ−病変ラットに、Ｌ−ＤＯＰＡの投与は、異常不随意運動（ＡＩＭ）を誘導する。これは病変同側である体側のみに発生する軸性運動、四肢運動及び経口の動きである。ＡＩＭラットモデルは、ヒトにおける運動異常症（ＰＤ含む）を抑制することが示されている多数の薬物に反応するため、有用であることが明らかにされてきた。
【０１９０】
試験手順:
動物：体重２００〜２５０ｇの実験的−ナイーブ（naive）ＳＤ雄ラット９０匹を行動実験の少なくとも１週前に実験室に到着させる。ラットをケージ当たりｎ＝２の群で飼育する。動物が標準齧歯類飼料と水に自由に接近するようにする。動物飼育室及び試験室は、制御された環境条件下で保持され、互いのすぐ近くに置かれる。動物飼育室は、１２時間明暗周期され、午前６時に点灯し、７０゜Ｆ／２１℃（範囲：６８−７２゜Ｆ／２０−２２℃）で２０〜４０％の湿度範囲で維持される。試験室は、６８−７２゜Ｆで２０〜４０％の湿度範囲で維持される。
【０１９１】
上行黒質線条体路（nigrostriatal pathway）に６−ＯＨＤＡの単独注射によってＤＡ（ドーパミン）−神経切断病変を行う。ラットをペントバルビタールナトリウム４０ｍｇ／ｋｇ（腹腔内）で麻酔し、定位フレームに配置する。６−ＯＨＤＡをブレグマ（bregma）及び硬膜表面に関して、次の座標（ｍｍ単位）で右側上行ＤＡバンドル（bundle）で注射する：（１）トゥースバー（tooth bar）位置  −２．３、Ａ＝−４．４、Ｌ＝１．２、Ｖ＝７．８、（７．５μｇ  ６−ＯＨＤＡ）、（２）トゥースバー位置  ＋３．４、Ａ＝−４．０、Ｌ＝０．８、Ｖ＝８．０ｍｍ（６μｇ  ６−ＯＨＤＡ）。神経毒素注射を１μＬ／分の速度で行い、その後、注射カニューレ（cannula）を追加２−３分の間定位に置く。手術２週間後に、ほとんど完全な（＞９０％）病変を有するラットをアンフェタミン−誘導回転テストの手段で選択する。動物をプラスチックパースペクス（Perspex）器（直径３０ｃｍ）に位置させて回転の行動（３６０°転換）を２．５ｍｇ／ｋｇ  ｄ−アンフェタミン硫酸塩の腹腔内注射後、９０分間、自動化ロタメーター（rotometer）で記録する。ＤＡ欠乏の側面で５６回の全身回転／分を示す動物が研究に含まれる。その後、動物を、均衡をなす（well−matched）２つの部分の群に割り当て（アンフェタミン回転により）毎日治療を受けるようにする。
【０１９２】
薬物及び治療療法
薬物処理：
Ｌ−ＤＯＰＡメチルエステル（Sigma-Aldrich社製、ドイツ）を１５ｍｇ／ｋｇのベンセラジドＨＣｌ（Sigma-Aldrich社製、ドイツ）と組み合わせて、６ｍｇ／ｋｇの用量で提供する。この用量のＬ−ＤＯＰＡ及びベンセラジドでの慢性治療を異常運動−類似な動きの漸進的発達を誘導するために３週間良好な病変を有する全てのラットに提供する。その後、運動異常症が発生しなかったラットを研究から外し、５回のテスト期間の間、２８点以上の累積ＡＩＭスコアを有するラットに安定したＡＩＭスコアを維持するために、一週間に少なくとも２回のＬ−ＤＯＰＡ／ベンセラジド注射の薬物治療療法を継続する。選ばれたラットをそれぞれ９−１２匹の動物群に割り当て、これはＡＩＭ重症度に対して均衡をなす。その次、動物を下記説明された薬物及び薬物の組み合わせで治療する。
【０１９３】
予防：
予防研究でラットをブスピロン又は６−ＯＨブスピロン（０．５〜１０ｍｇ／ｋｇ）及び場合により、また、組み合わせ薬剤（例えば、ゾルミトリプタン）（０．５ｍｇ／ｋｇ−２０ｍｇ／ｋｇ腹腔内）と組み合わせたＬ−ＤＯＰＡメチルエステル（６ｍｇ／ｋｇ腹腔内＋ベンセラジド１５ｍｇ／ｋｇ）で３週間治療する。この治療（治療期間１）の終了時に、動物に低用量のアポモルヒネ（０．０２ｍｇ／ｋｇ、皮下）を投与し、ＤＡ受容体の減作状態を調査するために、アポモルヒネ誘導されたＡＩＭに対してテストする。その後、動物がさらに２週間（治療期間２）Ｌ−ＤＯＰＡのみで治療されるように治療を継続する。動物に毎日注射し、実験期間１及び２の間、Ｌ−ＤＯＰＡ誘発性運動異常症について１日おきにテストし、ＤＡ、セロトニン及び代謝産物のＨＰＬＣ分析のために犠牲にする。
【０１９４】
ブスピロン代謝産物の特定用量の効果を決定するために、以下の群設定を用いることができる:
ビヒクル:（食塩水、腹腔内又は皮下、Ｌ−ＤＯＰＡ３０分前、ｎ＝６）
ブスピロン（０．５ｍｇ／ｋｇ、腹腔内又は皮下、ｎ＝６）
６−ＯＨブスピロン（１ｍｇ／ｋｇ腹腔内又は皮下）
６−ＯＨブスピロン（５ｍｇ／ｋｇ腹腔内又は皮下）
ブスピロン及び６−ＯＨブスピロンは、Ｌ−ＤＯＰＡ３０分前に与えられる。
【０１９５】
Ｌ−ＤＯＰＡ誘発性ＡＩＭ及び薬物スクリーニング（screening）テスト
ＡＩＭ評価は、各ラットに投与された薬学的治療を知らない研究員によって行われる（実験的に盲検）。ＡＩＭの重症度を定量化するために、ラットをＩ−ＤＯＰＡの注射後２０〜１８０分で２０分毎に標準ケージで個別的に観察する。ＡＩＭを４つのサブタイプに分類される：
【０１９６】
（Ａ）軸性ＡＩＭ、即ち、病変反対側での胴体及び頸部のジストニー又は舞踏病様捻じれ。軽度の症例では、病変反対側での首の側屈又は上胴の捻じれ運動。Ｌ−ＤＯＰＡを繰り返し注射すると、この動きは、顕著で持続的なジストニー様の軸捻じれに発展することがある。
【０１９７】
（Ｂ）四肢のＡＩＭ、即ち、病変反対側の前足の痙攣様の動き（jerky movements）及び／又はジストニー運動（dystonic movements）。軽度の症例では、過運動性、病変反対側の前足の急激な歩行（stepping）動き、又は鼻に出入する前足の小さい円形運動。運動異常症の重症度が増加するにつれ（通常、Ｌ−ＤＯＰＡの繰り返された投与で生じる）、異常運動の振幅が増加し、混合型ジストニー及び過運動性の特徴を仮定する。ジストニー運動はアゴニスト／アンタゴニストの筋肉の持続的な同時収縮によって引き起こされる；それらは遅く、体節を不自然な姿勢にする。過運動性動きは、速度と方向が不規則的で、速い。時には、前足は痙攣様の動きが見られないが、継続したジストニー姿勢をとれば、これをまた、発現時間に従ってスコアをつける。
【０１９８】
（Ｃ）口舌のＡＩＭ、即ち、口腔顔面筋の痙攣、及び病変反対側での舌の突出と共に突然の空咀嚼運動。この形態の運動異常症は、顔面、舌、及び咀嚼筋に影響を及ぼす。それは、突然の空咀嚼運動で認識可能であり、変動が激しい程度の開口、顎の側面転位、顔面筋の痙攣、及び病変反対側での舌の突出を伴う。非常に激しい重症状態では、この運動異常症のサブタイプは、目につく強度で前記すべての筋肉群をもたらし、病変反対側の前足の皮膚の自己犠牲的な咬合によって複雑になることもある（皮膚の毛がなくなった丸い斑点によって容易に認識可能）。
【０１９９】
（Ｄ）移動性のＡＩＭ、即ち、対側部位バイアス（bias）で移動性増加。後者のＡＩＭサブタイプをラットＡＩＭスケールについての原記載に沿って記録したが、移動性ＡＩＭは、運動異常症の特定尺度を提供するのではなく、齧歯類で対側性回転の行動と一方的６−ＯＨＤＡ病変の相関関係を提供するということが、後ほど確立された。
【０２００】
４つのサブタイプそれぞれに対して０〜４の重症度スケールでスコアされ、ここで０＝不在、１＝半分未満の観察時間の間存在、２＝半分超過の観察時間の間存在、３＝常に存在するが外部刺激によって阻害可能、及び４＝常に存在して、外部刺激によって阻害不可能である。軸性、四肢及び口舌のＡＩＭはテストされたすべての物質によって類似な方式で調節されるものと観察される。
【０２０１】
ラットを統計分析のためにテストセッション当たり移動性（ＬＯ）、経口軸性（ＡＸ）、四肢（ＬＩ）、及び口舌（ＯＬ）のＡＩＭスコアの合計を用いて、ＡＩＭに対しテストする。結果は、化合物がＬ−ＤＯＰＡ誘発性運動異常症を大きく減少させることを明らかにする。
【０２０２】
実施例２
本研究は、ブスピロン及び６−ＯＨＢｕｓｐ；６−ＯＨＤＡラットモデルにおいて、６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ及びフェノバムの組み合わせ、及び６−ＯＨＤＡラットモデルにおいて、６−ＯＨＢｕｓｐ及びゾルミトリプタンの組み合わせの評価を説明する。
【０２０３】
動物：Shanghai SLAC Co. Ltdから入手した体重２００〜２５０ｇの９週齢ＳＤ雄ラット６７匹（試験機関内で飼育された、元はSLAC Laboratory Animal Co. Ltdに由来する）を、行動実験最小１週間前に実験室に到着させる。ラットをケージ当たりｎ＝２のグループで飼育する。動物らが標準齧歯類飼料と水に自由に接近するようにする。動物飼育室及び試験室は、制御された環境条件下で維持され、互いにすぐ近くに置かれる。動物飼育室は、１２時間明暗周期され、午前６時に点灯し、７０゜Ｆ／２１℃（範囲：６８−７２゜Ｆ／２０−２２℃）で２０〜４０％の湿度範囲で維持される。試験室は、６８−７２゜Ｆで２０〜４０％の湿度範囲で維持される。
【０２０４】
６−ＯＨＤＡ病変手術：ドーパミン（ＤＡ）−神経切断病変を実施例１で説明された通りに、上行黒質線条体路に６−ＯＨＤＡの一方的注射によって行う。手術から回復後、ほとんど完全な（＞９０％）病変を有するラットをアポモルヒネ−誘導回転テストの手段によって選択する。食塩水のうち０．５ｍｇ／ｋｇアポモルヒネ−ＨＣｌ（Sigma社製）の腹腔内注射は、対側性回転を引き起こしており、これは病変側でＤＡ受容体の神経除去された過敏症の結果と判断される。ＤＡアゴニストに反応する回転の行動は病変の重症度と密接な相関関係がある。回転反応の定量をラットで３０分間回転をカウントすることにより行う。回転スコアが６回転／分以上のラットを次のテストのために選択する。その後、動物を、均衡をなす２つの部分群に割り当て（アンフェタミン回転により）、下記説明された通り毎日治療する。
【０２０５】
薬物及び治療療法：ベンセラジドＨＣｌと組み合わせたＬ−ＤＯＰＡメチルエステルを実施例１で詳細に説明された通りに投与する。
【０２０６】
Ｌ−ＤＯＰＡ誘発性ＡＩＭ及び薬物スクリーニングテスト
ラットを前記実施例１で説明された通りに、ＡＩＭに対しテストする。ブスピロン及び６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ、及び６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ及びフェノバムの組み合わせの特定用量の効果を決定するために以下の群設定を用いた：
１．Ｌ−ＤＯＰＡ６ｍｇ／ｋｇ（テスト２０分前）；ビヒクル:（１０％  ｔｗｅｅｎ８０、腹腔内、テスト３０分前、ｎ＝８）
２．Ｌ−ＤＯＰＡ６ｍｇ／ｋｇ（テスト２０分前）；ブスピロン（１ｍｇ／ｋｇ、腹腔内、テスト３０分前、ｎ＝８）
３．Ｌ−ＤＯＰＡ６ｍｇ／ｋｇ（テスト２０分前）；６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ（１ｍｇ／ｋｇ、腹腔内、テスト３０分前、ｎ＝８）
４．Ｌ−ＤＯＰＡ６ｍｇ／ｋｇ（テスト２０分前）；６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ（５ｍｇ／ｋｇ、腹腔内、テスト３０分前、ｎ＝８）
５．Ｌ−ＤＯＰＡ６ｍｇ／ｋｇ（テスト２０分前）；６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ（１ｍｇ／ｋｇ、腹腔内、テスト３０分前、ｎ＝８）＋フェノバム（１０ｍｇ／ｋｇ、腹腔内、テスト３０分前、ｎ＝８）
６．Ｌ−ＤＯＰＡ６ｍｇ／ｋｇ（テスト２０分前）；６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ（５ｍｇ／ｋｇ、腹腔内、テスト３０分前、ｎ＝８）＋フェノバム（１０ｍｇ／ｋｇ、腹腔内、テスト３０分前、ｎ＝８）
ラットを無作為で５つの群に割り当て、これらはプレスクリーニング試験からのそれらの総ＡＩＭスコアとバランスさせる。
【０２０７】
６−ＯＨＢｕｓｐ及びゾルミトリプタンの組み合わせの効果を決定するために以下の群設定を用いた:
７．Ｌ−ＤＯＰＡ６ｍｇ／ｋｇ（テスト２０分前）；６−ＯＨＢｕｓｐ（１ｍｇ／ｋｇ、腹腔内、テスト３０分前、ｎ＝８）＋ゾルミトリプタン（１０ｍｇ／ｋｇ、腹腔内、テスト３０分前、ｎ＝８）
８．Ｌ−ＤＯＰＡ６ｍｇ／ｋｇ（テスト２０分前）；６−ＯＨＢｕｓｐ（５ｍｇ／ｋｇ、腹腔内、テスト３０分前、ｎ＝８）＋ゾルミトリプタン（１０ｍｇ／ｋｇ、腹腔内、テスト３０分前、ｎ＝８）
【０２０８】
薬物スクリーニングテストの結果から、６−ＯＨＢｕｓｐ、６−ＯＨＢｕｓｐとフェノバムの組み合わせ、及び／又は６−ＯＨＢｕｓｐとゾルミトリプタンの組み合わせがＡＩＭ及びＬ−ＤＯＰＡ誘発性運動異常症を大きく減少させるかどうかを決定することができる。
【０２０９】
実施例３
本研究は、６−ＯＨＤＡラットモデルにおいて、同時に又は順次投与された、６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ及びフェノバム又はゾルミトリプタンの評価を説明する。
【０２１０】
動物：体重３９０−５３５ｇのＳＤ雄ラット４５匹（家で飼育される、本来SLAC Laboratory Animal Co.Ltd製）をｎ＝２／ケージの群に飼育する。動物が標準齧歯類飼料と水に自由に接近するようにする。
【０２１１】
投薬手順は、ＡＩＭの評価に関与しない指定された科学者によって実行される。フェノバムを群設定によりＡＩＭ評価前の１１分、２時間、及び５時間に皮下注射によって個別的に投与する。６−ＯＨ−Ｂｕｓｐを皮下注射によってＡＩＭ評価前の１１分に投与する。Ｌ−ＤＯＰＡ（８ｍｇ／ｋｇ）及びベンセラジド（１５ｍｇ／ｋｇ）の混合物をＡＩＭ評価１０分前に投与する。ラットの背中両側に皮下注射する。
【０２１２】
ＡＩＭ評価を実施例１で詳細に説明された通りに行う。各ラットに対し、スコアを各時点で各ＡＩＭサブタイプ（Ｌｏ、Ｌｉ、Ａｘ及びＯｌ）に与える。総ＡＩＭを各時点でＬｉ、Ａｘ及びＯｌのスコアから合算する。すべての時点の総ＡＩＭを合算することによって総ＡＩＭの合計を計算する。データを平均±ＳＥＭで表現し、一方向ＡＮＯＶＡに次いで事後（post hoc）Ｎｅｗｍａｎ−Ｋｅｕｌｓ検定又は対応がないｔ検定（unpaired t test）で分析する。データをＧｒａｐｈ  Ｐａｄ  Ｐｒｉｓｍ５によって分析し、グラフ化する。
【０２１３】
実施例４
本研究は、実施例１及び２に説明されたような６−ＯＨＤＡラットモデルにおいて、ゾニサミド、リザトリプタン及び６−ＯＨ−Ｂｕｓｐの評価を説明する。
【０２１４】
Ｌ−ＤＯＰＡ誘発性ＡＩＭ及び薬物スクリーニングテスト
ラットを前記実施例１に説明された通りにテストする。６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ及びゾニサミド又はリザトリプタンの組み合わせの投与時間の効果を決定するために以下の群設定を用いる：
１．Ｌ−ＤＯＰＡ（６ｍｇ／ｋｇ、皮下、テスト２０分前）；ビヒクル:（１０％tween８０,皮下、テスト２５分前、ｎ＝６）。
２．Ｌ−ＤＯＰＡ（６ｍｇ／ｋｇ、皮下、テスト２０分前）；６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ（１ｍｇ／ｋｇ、皮下、テスト２５分前、ｎ＝６）＋ゾニサミド（３ｍｇ／ｋｇ、皮下、テスト４５分前、ｎ＝６）.
３．Ｌ−ＤＯＰＡ（６ｍｇ／ｋｇ、皮下、テスト２０分前）；６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ（１ｍｇ／ｋｇ、皮下、テスト２５分前、ｎ＝６）＋ゾニサミド（３ｍｇ／ｋｇ、皮下、テスト６０分前、ｎ＝６）。
４．Ｌ−ＤＯＰＡ（６ｍｇ／ｋｇ、皮下、テスト２０分前）；６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ（１ｍｇ／ｋｇ、皮下、テスト２５分前、ｎ＝６）＋ゾニサミド（３ｍｇ／ｋｇ、皮下、テスト２５分前、ｎ＝６）。
５．Ｌ−ＤＯＰＡ（６ｍｇ／ｋｇ、皮下、テスト２０分前）；６−ＯＨＢｕｓｐ（１ｍｇ／ｋｇ、皮下、テスト２５分前、ｎ＝６）＋リザトリプタン（３ｍｇ／ｋｇ、皮下、テスト４５分前、ｎ＝６）。
６．Ｌ−ＤＯＰＡ（６ｍｇ／ｋｇ、皮下、テスト２０分前）；６−ＯＨＢｕｓｐ（１ｍｇ／ｋｇ、皮下、テスト２５分前、ｎ＝６）＋リザトリプタン（３ｍｇ／ｋｇ、皮下、テスト６０分前、ｎ＝６）。
７．Ｌ−ＤＯＰＡ（６ｍｇ／ｋｇ、皮下、テスト２０分前）；６−ＯＨＢｕｓｐ（１ｍｇ／ｋｇ、皮下、テスト２５分前、ｎ＝６）＋リザトリプタン（３ｍｇ／ｋｇ、皮下、テスト２５分前、ｎ＝６）。
ラットを無作為で４つの群に割り当て、これらはプレスクリーニング試験からのそれらの総ＡＩＭスコアとバランスさせる。
薬物スクリーニングテストの結果から、ゾニサミド又はリザトリプタンの組み合わせ時６−ＯＨ−ＢｕｓｐがＬ−ＤＯＰＡ誘発性運動異常症を大きく減少させるかどうかを決定することができる。
【０２１５】
実施例５
本研究は、実施例１及び２に説明されたような６−ＯＨＤＡラットモデルにおいて、トピラマート及び６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ、及びゾルミトリプタン及び６−ＯＨ−Ｂｕｓｐの評価を説明する。
【０２１６】
Ｌ−ＤＯＰＡ誘発性ＡＩＭ及び薬物スクリーニングテスト
ラットを前記実施例１に説明された通りにＡＩＭに対しテストする。
６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ及びトピラマートの組み合わせ；又は６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ及びゾルミトリプタンの組み合わせの投与時間の効果を決定するために、以下の群設定を用いる：
１．Ｌ−ＤＯＰＡ６ｍｇ／ｋｇ＋１５ｍｇ／ｋｇベンセラジド、皮下、テスト１０分前；
２．６−ＯＨＢｕｓｐ１ｍｇ／ｋｇ、皮下；Ｌ−ＤＯＰＡ６ｍｇ／ｋｇ＋１５ｍｇ／ｋｇベンセラジド、皮下；すべての化合物テスト１０分前。
３．６−ＯＨＢｕｓｐ１ｍｇ／ｋｇ、皮下＋トピラマート１０ｍｇ／ｋｇ、皮下；Ｌ−ＤＯＰＡ６ｍｇ／ｋｇ＋１５ｍｇ／ｋｇベンセラジド、皮下；すべての化合物テスト１０分前。
４．トピラマート３ｍｇ／ｋｇ、皮下、テスト２時間前＋６−ＯＨＢｕｓｐ１ｍｇ／ｋｇ、皮下、テスト１０分前；Ｌ−ＤＯＰＡ６ｍｇ／ｋｇ＋１５ｍｇ／ｋｇベンセラジド、皮下；テスト１０分前.
５．６−ＯＨＢｕｓｐ１ｍｇ／ｋｇ、皮下＋ゾルミトリプタン１０ｍｇ／ｋｇ、皮下；Ｌ−ＤＯＰＡ６ｍｇ／ｋｇ＋１５ｍｇ／ｋｇベンセラジド、皮下；すべての化合物テスト１０分前.
６．ゾルミトリプタン３ｍｇ／ｋｇ、皮下、テスト２時間前＋６−ＯＨＢｕｓｐ１ｍｇ／ｋｇ、皮下、テスト１０分前；Ｌ−ＤＯＰＡ６ｍｇ／ｋｇ＋１５ｍｇ／ｋｇベンセラジド、皮下；テスト１０分前.
【０２１７】
ラットを無作為で４つの群に割り当て、これらはプレスクリーニング試験からのそれらの総ＡＩＭスコアとバランスさせる。
【０２１８】
薬物スクリーニングテスト１．〜４．の結果から、６−ＯＨＢｕｓｐと組み合わせ時トピラマートがＬ−ＤＯＰＡ誘発性運動異常症を大きく減少させるかどうか、そして６−ＯＨＢｕｓｐ前に投与されたトピラマートがＡＩＭをさらに減少させるか、どうかを決定することができる。
【０２１９】
薬物スクリーニングテスト１、２、５及び６の結果から、６−ＯＨＢｕｓｐと組み合わせのとき、ゾルミトリプタンがＬ−ＤＯＰＡ誘発性運動異常症を大きく減少させるかどうか、そして６−ＯＨＢｕｓｐ前に投与されたゾルミトリプタンがＡＩＭをさらに減少させるかどうかを決定することができる。
【０２２０】
実施例６
本発明の薬物の投与後時間の関数として血漿の濃度は、薬物動力学的研究によって決定される。
【０２２１】
雄ＳＤラット（２００−３００g）を、到着後５日間適応した後、薬物動力学的研究に用いる。
【０２２２】
ｉ）６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ（０．０４ｍｇ／ｍＬ）及びフェノバム（２．０ｍｇ／ｍＬ）を水性１０％ヒドロキシル−プロピルβシクロデキストリン、ｐＨ６で構成された別個の剤形で溶解させる。フェノバム（１０ｍｇ／ｋｇ）をラットに０分時点に皮下投与し、後に６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ（０．２ｍｇ／ｋｇ）を３０分時点に皮下投与する。
【０２２３】
ｉｉ）６−ＯＨＢｕｓｐ（０．０４ｍｇ／ｍＬ）及びゾルミトリプタン（２．０ｍｇ／ｍＬ）を水性１０％ヒドロキシル−プロピルβシクロデキストリン、ｐＨ６で構成された別個の剤形で溶解させる。ゾルミトリプタン（１０ｍｇ／ｋｇ）をラットに０分時点に皮下投与し、後に６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ（０．２ｍｇ／ｋｇ）を３０分時点に皮下投与する。
【０２２４】
６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ及びフェノバム、又は６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ及びゾルミトリプタンの血漿濃度−時間プロファイルをラットの頸動脈に手術によって移植されたカテーテル（catheter）から段階的に採った血液サンプルで決定する。フェノバム又はゾルミトリプタンの投与後、９つの段階的血液サンプル（〜２００μＬ）を１０、２０、３０、４５、６０、１２０、１８０、２４０、３６０分時点に各ラットから採取する。
【０２２５】
血液サンプルをＥＤＴＡ−コーティングされたチューブに収集し、４℃で１０分間遠心分離した後、血漿を新しいバイアル（vial）に移し、−８０℃で保存する。
【０２２６】
６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ及びフェノバム又はゾルミトリプタンの定量を液体クロマトグラフィー、この中で、質量分光器（ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ）で行う。標準曲線は、定量に使用されたＬＣ−ＭＳ／ＭＳ方法に対する８個の補正標準（それぞれ６−ＯＨ−Ｂｕｓｐに対し、１〜５００ｎｇ／ｍＬ及びフェノバム又はゾルミトリプタンに対し、１−３０００ｎｇ／ｍＬ）で構成される。
【０２２７】
実施例７
本研究は、パーキンソン病症状の効果に対する足踏み試験において、６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ及びフェノバム又はゾルミトリプタンの組み合わせの評価を説明する。
【０２２８】
足踏み試験（Schallert et al., 1992）をほとんど変形させることなく、［Kirik et al., 2001］によって説明された通りに行う。要約すれば、実験者が片手でラットの後足を掴み、他方の手で観察しない前足を掴む一方、拘束されなかった前足はテーブルに触れるようにする。適応ステップの数を計算する一方、ラットの両方の前足を前進及び後進方向に、テーブル表面に沿って横に移動させて（５秒に９０ｃｍ）、２方向のステップ平均を検討する。足踏み試験における動物の能力をそれぞれＬ−ＤＯＰＡ、６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ及びフェノバム又はゾルミトリプタン＋又はＬ−ＤＯＰＡ単独投与後、Ｌ−ＤＯＰＡ、６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ及びフェノバム−又はゾルミトリプタン−処理された群及びナイーブラットの群において、治療段階１の間（訓練セッション及び安定した能力への到達後まで）評価する。テスト日に（治療期間１の第５日目）Ｌ−ＤＯＰＡ、６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ及びフェノバム−又はゾルミトリプタン−処理ラット及びナイーブラットをベースライン条件で２回及び薬物の投与６０分後、２回以上テストする。値は薬物有無の２つのセッションの平均として報告される。本研究は、６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ（１ｍｇ／ｋｇ皮下）がフェノバム（１０ｍｇ／ｋｇ  ｓ．ｃ．、Ｌ−ＤＯＰＡ誘発性運動異常症を大きく減少）又はゾルミトリプタン（１０ｍｇ／ｋｇ腹腔内、Ｌ−ＤＯＰＡ誘発性運動異常症を大きく減少）と組み合わせのとき、運動機能を改善するＬ−ＤＯＰＡの能力を損傷させないかどうかを決定することができる。
【０２２９】
実施例８
本研究は、遅発性ジスキネジー効果に対するＶＣＭテストにおいて、６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ及びフェノバム又はゾルミトリプタンの組み合わせの評価に対して説明する。
【０２３０】
ＴＤ顔面麻痺の効果に対する慢性の無意識的咀嚼運動モデル（ＶＣＭモデル）がＭｅａｇｈａｎ  Ｃ．Ｃｒｅｅｄなどによって記載された手順（The Journal of Neuroscience, 2012; 32(28): 9574 -9581）により設定される。
【０２３１】
要約すれば；１１０匹の雄 ラット（２００〜２２０ｇ）をハロペリドール（デカン酸塩；２１ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｍ．）で全研究を通して３週間に１回処理してＶＣＭを誘導と維持する。１２週間後、ハロペリドールに誘導されたＶＣＭを評価する。各ＶＣＭ評価のために、ラットを静かな箱に入れて１０分間適応させる。各ラットに対するＶＣＭを５分間記録する。評価を３週間連続して毎週（週に１回）行う。ＶＣＭは舌突出を伴うか否かにかかわらず、特定対象に向けられない垂直平面での顎運動として定義される。顎振戦の不連続バーストは一つのＶＣＭとして計算される。毛づくろいが始まると計算を中断し、毛づくろいが終わると計算が再開される。５分間、ＶＣＭの数を各ラットに対して記録する。データをＧｒａｐｈ  ＰａｄＰｒｉｓｍ  ６によって分析してグラフで示した。３連続テストのうち、５分当たりのＶＣＭの数が≧１８であるラットが化合物試験に用いられる。
【０２３２】
化合物テストのために、投与手順は、ＡＩＭの評価に関与しない指定された科学者によって実行される。ハロペリドール（１ｍｇ／ｋｇ）をＶＣＭ評価する３０分前に投与する。薬物は、群設定により個別的に皮下注射によって個別的にハロペリドール投与０．５分後に投与する。皮下注射は、ラットの背中両側で行う。ＶＣＭの評価は、実験的に薬物処理条件に盲検である訓練された観察者によって静かな部屋で行われる。
【０２３３】
６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ、及び６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ及びフェノバムの組み合わせ（すべての化合物は皮下に与えられる）の特定用量の効果を決定するために、以下の群設定を用いる：
１．ハロペリドール（１ｍｇ／ｋｇ）；ビヒクル:（１０％  ｔｗｅｅｎ８０、ｎ＝８）
２．ハロペリドール（１ｍｇ／ｋｇ）；フェノバム（１０ｍｇ／ｋｇ、ｎ＝８）
３．ハロペリドール（１ｍｇ／ｋｇ）；６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ（１ｍｇ／ｋｇ、ｎ＝８）
４．ハロペリドール（１ｍｇ／ｋｇ）；６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ（５ｍｇ／ｋｇ、ｎ＝８）
５．ハロペリドール（１ｍｇ／ｋｇ）；６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ（１ｍｇ／ｋｇ、ｎ＝８）＋フェノバム（１０ｍｇ／ｋｇ、ｎ＝８）
６．ハロペリドール（１ｍｇ／ｋｇ）；６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ（５ｍｇ／ｋｇ、ｎ＝８）＋フェノバム（１０ｍｇ／ｋｇ、ｎ＝８）
【０２３４】
６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ、及び６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ及びゾルミトリプタンの組み合わせの特定用量の効果を決定するために、以下の群設定を用いる：
１．ハロペリドール（１ｍｇ／ｋｇ）；ビヒクル:（１０％  ｔｗｅｅｎ８０、腹腔内、ｎ＝８）
２．ハロペリドール（１ｍｇ／ｋｇ）；ゾルミトリプタン（１０ｍｇ／ｋｇ、腹腔内、ｎ＝８）
３．ハロペリドール（１ｍｇ／ｋｇ）；６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ（１ｍｇ／ｋｇ、腹腔内、ｎ＝８）
４．ハロペリドール（１ｍｇ／ｋｇ）；６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ（５ｍｇ／ｋｇ、腹腔内、ｎ＝８）
５．ハロペリドール（１ｍｇ／ｋｇ）；６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ（１ｍｇ／ｋｇ、腹腔内、ｎ＝８）＋ゾルミトリプタン（１０ｍｇ／ｋｇ、腹腔内、ｎ＝８）
６．ハロペリドール（１ｍｇ／ｋｇ）；６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ（５ｍｇ／ｋｇ、腹腔内、ｎ＝８）＋ゾルミトリプタン（１０ｍｇ／ｋｇ、腹腔内、ｎ＝８）
【０２３５】
ラットを無作為で５つの群に割り当て、これらはプレスクリーニング試験からのそれらの総ＡＩＭスコアとバランスさせる。
【０２３６】
本研究は、フェノバム又はゾルミトリプタンと組み合わせた６−ＯＨ−ＢｕｓｐがラットＶＣＭモデルにおいて、ハロペリドールで誘発された遅発性ジスキネジーを減少させるかどうかを決定することができる。
【０２３７】
実施例９
本研究は、遅発性ジスキネジー効果に対するＶＣＭテストで６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ及びトピラマート又はリザトリプタンの組み合わせの評価に対して説明する。
【０２３８】
ＴＤ顔面麻痺効果に対するＶＣＭモデルは実施例８に記述されたように確立される。
【０２３９】
６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ、及び６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ及びトピラマートの組み合わせの特定用量の効果を決定するために、以下の群設定を用いる：
１．ハロペリドール（１ｍｇ／ｋｇ）；ビヒクル:（１０％  ｔｗｅｅｎ８０、腹腔内、ｎ＝８）
２．ハロペリドール（１ｍｇ／ｋｇ）；トピラマート（１０ｍｇ／ｋｇ、腹腔内、ｎ＝８）
３．ハロペリドール（１ｍｇ／ｋｇ）；６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ（１ｍｇ／ｋｇ、腹腔内、ｎ＝８）
４．ハロペリドール（１ｍｇ／ｋｇ）；６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ（５ｍｇ／ｋｇ、腹腔内、ｎ＝８）
５．ハロペリドール（１ｍｇ／ｋｇ）；６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ（１ｍｇ／ｋｇ、腹腔内、ｎ＝８）＋トピラマート（３ｍｇ／ｋｇ、腹腔内、ｎ＝８）
６．ハロペリドール（１ｍｇ／ｋｇ）；６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ（１ｍｇ／ｋｇ、腹腔内、ｎ＝８）＋トピラマート（１０ｍｇ／ｋｇ、腹腔内、ｎ＝８）
【０２４０】
６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ、及び６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ及びリザトリプタンの組み合わせの特定用量の効果を決定するために、以下の群設定を用いる：
１．ハロペリドール（１ｍｇ／ｋｇ）；ビヒクル:（１０％  ｔｗｅｅｎ８０、腹腔内、ｎ＝８）
２．ハロペリドール（１ｍｇ／ｋｇ）；リザトリプタン（３ｍｇ／ｋｇ、皮下、ｎ＝８）
３．ハロペリドール（１ｍｇ／ｋｇ）；６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ（１ｍｇ／ｋｇ、腹腔内、ｎ＝８）
４．ハロペリドール（１ｍｇ／ｋｇ）；６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ（５ｍｇ／ｋｇ、腹腔内、ｎ＝８）
５．ハロペリドール（１ｍｇ／ｋｇ）；６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ（１ｍｇ／ｋｇ、腹腔内、ｎ＝８）＋リザトリプタン（３ｍｇ／ｋｇ、皮下、ｎ＝８）
６．ハロペリドール（１ｍｇ／ｋｇ）；６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ（１ｍｇ／ｋｇ、腹腔内、ｎ＝８）＋リザトリプタン（３ｍｇ／ｋｇ、皮下、ｎ＝８）
【０２４１】
ラットを無作為で４つの群に割り当て、これらはプレスクリーニング試験からのそれらの総ＡＩＭスコアとバランスさせる。
【０２４２】
本研究は、トピラマート又はリザトリプタンと組み合わせた６−ＯＨ−ＢｕｓｐがラットＶＣＭモデルにおいて、ハロペリドールで誘発された遅発性ジスキネジーを減少させるかどうかを決定することができる。
【０２４３】
実施例１０
本研究は、遅発性ジスキネジー効果に対するレセルピンテストにおいて、６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ及びフェノバム又はゾルミトリプタンの組み合わせの評価に対して説明する。
【０２４４】
マウスで６−ＯＨ−Ｂｕｓｐと組み合わせで提供されるフェノバム又はゾルミトリプタンをレセルピン−誘発遅発性ジスキネジーに対する活性に対し評価する。１ｍｇ／ｋｇのレセルピンを、遅発性ジスキネジーを誘発するために、１日目及び３日目に皮下で注射する。２回目のレセルピン注射２４時間後に、フェノバムと６−ＯＨ−Ｂｕｓｐの組み合わせを皮下で提供するか、２回目のレセルピン注射２４時間後に、ゾルミトリプタンと６−ＯＨ−Ｂｕｓｐの組み合わせを腹腔内に（ｉ．ｐ．）提供する。４日目にテスト化合物の２回目の注射１時間後１０分の間、ＶＣＭ（無意識的咀嚼活動）を測定する。２０％  Ｔｗｅｅｎ２０／０．９％ＮａＣｌに溶解／懸濁された６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ及びフェノバム又はゾルミトリプタンを１０ｍＬ／ｋｇの投与体積で腹腔内に投与する。すべてのテスト物質は使用前に新しく製造する。
【０２４５】
３６±２ｇ重量の雄ＩＣＲマウスを５匹のマウスに対し、２９×１８×１３ｃｍの空間が割り当てられた動物ケージで飼育する。すべてのマウスは、使用前に少なくとも３日間、１２時間の明暗周期があり、制御された温度（２０℃〜２４℃）、湿度（５０〜８０％）下に衛生的な環境で維持される。標準実験室飼料及び水道水に自由に接近できるようにする。動物の飼育、実験及び廃棄を含む、この作業のすべての様態を一般に実験動物の管理と使用に関する指針書である（Guide for the Care and Use of Laboratory Animals (National Academy Press, Washington, D. C., 1996）に従って行う。
【０２４６】
３６±２ｇ重量（到着時）の１０匹の雄ＩＣＲマウス群を用いる。すべての動物は、遅発性ジスキネジーを誘発するために、１日目にレセルピンの１回目の投与（１ｍｇ／ｋｇ皮下）後、３日目に４８時間に区分されるレセルピンの２回目の投与を行う。４日目にレセルピンの２回目の投与２４時間後、ビヒクル及びテスト物質を腹腔内に注射する。２回目の投与の１時間後に、無意識的咀嚼活動に対する行動観察を行う。
【０２４７】
行動評価のために、動物をプレキシグラスケージ（１３ｃｍ×２３ｃｍ×１３ｃｍ）に個別的に配置する。動物が観察者から顔をそらしたとき、口腔動きを観察することができるようにケージの底の下に鏡を配置した。５分の鈍感化期間後、無意識的咀嚼活動（ＶＣＭ）の発生をさらに１０分間計算する。ＶＣＭは、物理的な物質に向けられない垂直面内の１回の口の開口として定義される。ＶＣＭが毛手入れ期間中に生じる場合、それらは計算に入れない。
【０２４８】
ＶＣＭの各群の合計数を記録し、各群に対する平均±ＳＥＭを決定する。一元配置ＡＮＯＶＡ後、ダネットの検定をビヒクル対照群と治療群と間の比較に適用する。差はＰ＜０．０５（＊）で有意とみなされる。
【０２４９】
本研究は、６−ＯＨ−Ｂｕｓｐがフェノバム又はゾルミトリプタンと組み合わせた場合、マウスでレセルピン誘発された遅発性ジスキネジーを減少させるかどうかに対して決定することができる。
【０２５０】
実施例１１（モデル生成）
後記するような６−ＯＨＤＡラットモデルは、パーキンソン病及びＬＩＤと関連する運動障害の治療に対してブスピロン代謝産物の評価に有用である。
【０２５１】
６−ＯＨＤＡラットモデル
６−ＯＨＤＡ（６−ヒドロキシドーパミン）は、ドーパミン作動性及びノルアドレナリン作動性ニューロンを選択的になくし、脳のドーパミンレベル減少を誘導する神経毒素である。一方的な６−ＯＨＤＡ−病変ラットにＬ−ＤＯＰＡの投与は異常不随意運動（ＡＩＭ）を誘導する。これは病変同側である体側のみで発生する軸性運動、四肢運動及び経口運動である。ＡＩＭラットモデルは、ヒトにおいて運動異常症（ＰＤ含む）を抑圧するものとして立証された多数の薬物に反応するために、有用なものとして明らかにされた。
【０２５２】
試験手順:
動物：体重２００〜２５０ｇの実験的−ナイーブ（naive）９週齢ＳＤ雄ラット８０匹を行動実験最小１週間前に実験室に到着させる。ラットをケージ当たりｎ＝２のグループで飼育した。動物が標準齧歯類飼料と水に自由に接近するようにした。動物飼育室及び試験室は、制御された環境条件下に維持され、互いにすぐ近くに置かれた。動物飼育室は、１２時間明暗周期にされ、午前６時に点灯し、７０゜Ｆ／２１℃（範囲：６８−７２゜Ｆ／２０−２２℃）で２０〜４０％の湿度範囲で維持された。試験室を６８−７２゜Ｆで２０〜４０％の湿度範囲で維持した。上行黒質線条体路（nigrostriatal pathway）に６−ＯＨＤＡの単独注射によってＤＡ（ドーパミン）−神経切断病変を行った。ラットをペントバルビタールナトリウム４０ｍｇ／ｋｇ（腹腔内）で麻酔し、定位フレームに配置した。６−ＯＨＤＡをブレグマ（bregma）及び硬膜表面に関して、次の座標（ｍｍ単位）で右側上行ＤＡバンドル（bundle）で注射した：Ａ（前後方）、Ｌ（側面）、Ｖ（背腹）:Ａ−１．８、Ｌ−２．０、Ｖ−８．６、トゥースバー０．０。
【０２５３】
神経毒素注射を１μＬ／分の速度で行い、その後、注射カニューレを更に２−３分間定位置に置いた。手術２週後に、０．５ｍｇ／ｋｇのアポモルヒネ硫酸塩を皮下注射した後、対側性全身回転を３０分間記録した。動物をプラスチックパースペクス器（直径３０ｃｍ）に位置させ、回転の行動（３６０°転換）を０．５ｍｇ／ｋｇのアポモルヒネ硫酸塩の皮下注射後、９０分間自動化ロタメーターで記録した。アポモルヒネ（０．５ｍｇ／ｋｇ、皮下注射）は、一方的な６−ＯＨＤＡ病変ラットにおいて反対側回転を誘導した。黒質線条体経路の＞９０％ＤＡ病変を示す≧１８０／３０分の回転を有する７３匹のラットを慢性Ｌ−ＤＯＰＡ処理用ＰＤモデルラットで選択した。
【０２５４】
薬物及び治療療法
薬物治療：
アポモルヒネ−誘導回転テスト後、１日から開始して、６−ＯＨＤＡ−病変ラットをＬ−ＤＯＰＡ（Sigma-Aldrich社製、ドイツ）（８ｍｇ／ｋｇ＋ベンセラジド１５ｍｇ／ｋｇ、皮下）で毎日２１日間処理した。ラットを寝具材料なしで透明プラスチックケージに個別に配置し、Ｌ−ＤＯＰＡを注入した後、運動異常症の全時間過程（１２０分）２０分ごとに記録した。ＡＩＭを歩行、前足、軸性及び口舌の行動のような局所的形態分布により４つのサブタイプに分類した。各ＡＩＭサブタイプの重症度は、０〜４のスコアを用いて評価した（１：時折、即ち５０％未満の時間；２：頻繁、即ち５０％以上；３：連続的で、強い感覚刺激によって中断される；４：連続的で、強い感覚刺激によって中断されない）。この研究では、ＡＩＭが≧２８であるラットを高度な運動異常症を有するものとし、ＡＩＭが＜２８であるラットを、運動異常症を有していないか少ないものとみなした。
【０２５５】
２１日間、ＰＤラットに慢性的なＬ−ＤＯＰＡ処置後、４２匹のＬＩＤモデルラット（３４８ｇ〜５０１ｇ、１５週齢）が総ＡＩＭスコア（Ｌｏ＋Ｌｉ＋ＡＸ＋Ｏｌ）≧２８点の基準で成功裏に生成された。
【０２５６】
Ｌ−ＤＯＰＡ誘発性ＡＩＭ及び薬物スクリーニングテスト
ＡＩＭ評価は、各ラットに投与された薬学的治療を知らない研究員によって行われた（実験的に盲検）。ＡＩＭの重症度を定量化するために、ラットをＩ−ＤＯＰＡの注射後、２０−１８０分に２０分ごとにそれらの標準ケージで個別に観察した。ＡＩＭを４つのサブタイプで分類した：
【０２５７】
（Ａ）軸性ＡＩＭ、即ち、病変反対側での胴体及び頸部のジストニー又は舞踏病様捻じれ。軽度の症例では、病変反対側での首の側屈又は上胴の捻じれ運動。Ｌ−ＤＯＰＡを繰り返し注射すると、この動きは、顕著で持続的なジストニー様の軸捻じれに発展することがある。
【０２５８】
（Ｂ）四肢のＡＩＭ、即ち、病変反対側の前足の痙攣様の動き（jerky movements）及び／又はジストニー運動（dystonic movements）。軽度の症例では、過運動性、病変反対側の前足の急激な歩行（stepping）動き、又は鼻に出入する前足の小さい円形運動。運動異常症の重症度が増加するにつれ（通常、Ｌ−ＤＯＰＡの繰り返された投与で生じる）、異常運動の振幅が増加し、混合型のジストニー及び過運動性の特徴とみなされる。ジストニー運動はアゴニスト／アンタゴニストの筋肉の持続的な同時収縮によって引き起こされる；それらは遅く、体節を不自然な姿勢にする。過運動性動きは、速度と方向が不規則的で、速い。時には、前足は痙攣様の動きが見られないが、継続したジストニー姿勢をとれば、これをまた、発現時間に従ってスコアをつける。
【０２５９】
（Ｃ）口舌のＡＩＭ、即ち、口腔顔面筋の痙攣、及び病変反対側での舌の突出と共に突然の空咀嚼運動。この形態の運動異常症は、顔面、舌、及び咀嚼筋に影響を及ぼす。それは、突然の空咀嚼運動で認識可能であり、変動が激しい程度の開口、顎の側面転位、顔面筋の痙攣、及び病変反対側での舌の突出を伴う。非常に激しい重症状態では、この運動異常症のサブタイプは、目につく強度で前記すべての筋肉群をもたらし、病変反対側の前足の皮膚の自己犠牲的な咬合によって複雑になることもある（皮膚の毛がなくなった丸い斑点によって容易に認識可能）。
【０２６０】
（Ｄ）移動性のＡＩＭ、即ち、対側部位バイアス（bias）で移動性増加。後者のＡＩＭサブタイプをラットＡＩＭスケールの原記載により記録したが、移動性ＡＩＭは、運動異常症の特定尺度を提供するのではなく、齧歯類で対側性回転の行動と一方的６−ＯＨＤＡ病変の相関関係を提供するということが、後ほど確立された。
【０２６１】
４つのサブタイプそれぞれに対して０〜４の重症度スケールでスコアされ、ここで０＝不在、１＝半分未満の観察時間の間存在、２＝半分超過の観察時間の間存在、３＝常に存在するが外部刺激によって阻害可能、及び４＝常に存在して、外部刺激によって阻害不可能である。軸性、四肢及び口舌のＡＩＭはテストされたすべての物質によって類似な方式で調節されるものと観察される。
【０２６２】
ラットを統計分析のためにテストセッション当たり移動性（ＬＯ）、経口軸性（ＡＸ）、四肢（ＬＩ）、及び口舌（ＯＬ）のＡＩＭスコアの合計を用いて、ＡＩＭに対しテストした。結果は、化合物がＬ−ＤＯＰＡ誘発性運動異常症を大きく減少させることを明らかにした。
【０２６３】
実施例１２
本研究は、６−ＯＨＤＡラットモデルでブスピロン及び６−ＯＨＢｕｓｐの効果を評価する（図３）。
【０２６４】
化合物テスト１日前に、４２匹の雄ＬＩＤモデルラット（３６２ｇ〜５１０ｇ、１６週齢）でＡＩＭ基準線をテストした。ブスピロン（１ｍｇ／ｋｇ）、３回投与量（０．３、１及び３ｍｇ／ｋｇ）の６−ＨＢをそれぞれＡＩＭ評価１１分前に投与した。Ｌ−ＤＯＰＡ（８ｍｇ／ｋｇ）及びベンセラジド（１５ｍｇ／ｋｇ）の混合物をＡＩＭ評価１０分前に投与した。投薬手順は、ＡＩＭ評価に関与しない指定の科学者によって行われた。試験化合物又はビヒクルをＡＩＭ評価１１分前に皮下注射で投与した。Ｌ−ＤＯＰＡ（８ｍｇ／ｋｇ）／ベンセラジド（１５ｍｇ／ｋｇ）混合物をＡＩＭ評価１０分前に皮下注射で投与した。ラットの背中両側に皮下注射した。
【０２６５】
ＡＩＭ評価は、実験的に薬物処理条件に盲検であるよく訓練された観察者によって静かな部屋で行われた。ラットを寝具材料なしで透明プラスチックケージに個別に配置した。それぞれのラットをＬ−ＤＯＰＡを注入した後、１９０分間、２０分ごとに１分ずつ評価した。ＡＩＭのサブタイプを次のような４つのサブタイプに分類した:（１）移動性ＡＩＭ（Ｌｏ）、即ち、対側部位バイアス（bias）で移動性増加；（２）四肢ＡＩＭ（Ｌｉ）、すなわち、病変反対側前足の痙攣様動き（jerky movements）及び／又はジストニー運動（dystonic movements）；（３）軸性ＡＩＭ（Ax）、すなわち、病変反対側での胴及び首のジストニー又は舞踏病様捩じり；（４）口舌ＡＩＭ（Ｏｌ）、即ち、口腔顔面筋の震え、及び病変反対側での舌の突出と共に突然の空咀嚼運動。４のサブタイプをそれぞれ１分の観察期間の間運動異常症の行動の期間及び持続性に基づいてスコア化した。重症度等級尺度は、０〜４であり、０＝不在、１＝半分未満の観察時間の間存在、２＝半分超過の観察時間の間存在、３＝常に存在するが、外部刺激によって阻害可能、４＝常に存在し、外部刺激によって阻害不可能であった。
【０２６６】
薬物及び治療療法：
１．Ｌ−ＤＯＰＡ；ビヒクル:（１０％  ｔｗｅｅｎ８０、皮下）（ｎ＝８）
２．Ｌ−ＤＯＰＡ；ブスピロン（１ｍｇ／ｋｇ、皮下）（ｎ＝８）
３．Ｌ−ＤＯＰＡ；６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ（０．３ｍｇ／ｋｇ、皮下）（ｎ＝８）
４．Ｌ−ＤＯＰＡ；６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ（１ｍｇ／ｋｇ、皮下）、（ｎ＝９）
５．Ｌ−ＤＯＰＡ；６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ（３ｍｇ／ｋｇ、皮下）、（ｎ＝９）
【０２６７】
陽性対照群として、ブスピロン（１ｍｇ／ｋｇ、皮下）は、ビヒクル対照群に比べて５０分、７０分、９０分、１１０分、１３０分、１５０分、１７０分及び１９０分の時点で、ＬＩＤラットの総ＡＩＭを非常に減衰させ、１０分〜１９０分に総ＡＩＭのＡＵＣを低下させた。
【０２６８】
Ｌ−ＤＯＰＡ注入後、３０分、５０分、７０分、９０分、１１０分、１３０分、１５０分、１７０分及び１９０分の時点に、６−ＯＨ−ＢｕｓｐはＬＩＤラットのＡＩＭを用量依存的で減少させた。
【０２６９】
６−ＯＨ−Ｂｕｓｐは、１０分〜１９０分に総ＡＩＭの合計及びＡＵＣを用量依存的で減少させた。
【０２７０】
研究期間中、全ての試験化合物に対して明白な行動副作用は発見されなかった。
【０２７１】
実施例１３
本研究の目的は、Ｌ−ＤＯＰＡ誘発性運動異常症（ＬＩＤ）モデルラットにおいて、異常不随意運動（ＡＩＭ）を減衰するための６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ及びゾルミトリプタンの組み合わせの効果を評価するためであった。
【０２７２】
化合物テスト１日前に、４２匹の雄ＬＩＤモデルラット（３６９ｇ〜５２１ｇ、１７週齢）でＡＩＭ基準線をテストした。１ｍｇ／ｋｇ及び３ｍｇ／ｋｇ（皮下）二つの用量のＯＨ−Ｂｕｓｐ、１０ｍｇ／ｋｇ（皮下）用量のゾルミトリプタン、及び６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ（１ｍｇ／ｋｇ）及びゾルミトリプタン（１０ｍｇ／ｋｇ）の混合物をそれぞれＡＩＭ評価１１分前に投与した。Ｌ−ＤＯＰＡ（８ｍｇ／ｋｇ）及びベンセラジド（１５ｍｇ／ｋｇ）の混合物をＡＩＭ評価１０分前に皮下投与で投与した。
【０２７３】
各ラットに対して、各時点でそれぞれのＡＩＭサブタイプ（Ｌｏ、Ｌｉ、Ａｘ及びＯｌ）に対してスコアをつけた。総ＡＩＭは、各時点でＬｉ、Ａｘ及びＯｌのスコアを合算したものであった。総ＡＩＭの合計は、すべての時点の総ＡＩＭを合算して計算した。ＡＵＣ（曲線の下面積）は１０分〜１３０分に総ＡＩＭ（Ｌｉ＋Ａｘ＋Ｏｌ）の生データをプロットして計算された。データはＳＥＭ±平均で表示し、一元配置ＡＮＯＶＡとそれに続く事後フィッシャーのＬＳＤ検定で分析した。データをＧｒａｐｈ  Ｐａｄ  Ｐｒｉｓｍ６によって分析してグラフで示した。
【０２７４】
３ｍｇ／ｋｇ用量のＯＨ−Ｂｕｓｐは５０分、７０分、９０分、１１０分、１３０分、１５０分、１７０分及び１９０分でＬＩＤラットのＡＩＭを顕著に減少させた。
【０２７５】
ゾルミトリプタン（１０ｍｇ／ｋｇ）と組み合わせのとき、１ｍｇ／ｋｇ用量の６−ＯＨ−Ｂｕｓｐは、Ｌ−ＤＯＰＡ注入後、５０分、７０分、９０分、１１０分、１３０分、１５０分、１７０分及び１９０分の時点でＡＩＭだけでなく総ＡＩＭの合計をビヒクル群に比べて顕著に減衰させた。
【０２７６】
１ｍｇ／ｋｇ用量のＯＨ−Ｂｕｓｐは、Ｌ−ＤＯＰＡ注入後、５０分及び７０分でＡＩＭを顕著に減少させなかった。
【０２７７】
１０ｍｇ／ｋｇ皮下用量のゾルミトリプタンはどの時点においても、ＡＩＭに対して何ら効果も示すことができなかった。これを総合すれば、ゾルミトリプタンは、ＡＩＭに対する６−ＯＨ−Ｂｕｓｐの効果を強化させる可能性があることを示唆する。
【０２７８】
実施例１４
本研究の目的は、Ｌ−ＤＯＰＡ誘発性運動異常症（ＬＩＤ）モデルラットにおいて、異常不随意運動（ＡＩＭ）を減衰するための６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ及びフェノバムの組み合わせの効果を評価するためのものであった（図４）
【０２７９】
化合物テスト１日前に、４２匹の雄ＬＩＤモデルラット（３８０ｇ〜５６０ｇ、１９週齢）でＡＩＭ基準線をテストした。１５ｍｇ／ｋｇ腹腔内及び３０ｍｇ／ｋｇ腹腔内２つの用量のフェノバムをそれぞれＡＩＭ評価２０分前に投与した。１ｍｇ／ｋｇ皮下用量の６−ＯＨ−ＢｕｓｐをＡＩＭ評価１１分前にそれぞれ投与した。Ｌ−ＤＯＰＡ（８ｍｇ／ｋｇ）及びベンセラジド（１５ｍｇ／ｋｇ）の混合物をＡＩＭ評価１０分前に皮下投与で投与した。
【０２８０】
各ラットに対して、各時点でそれぞれのＡＩＭサブタイプ（Ｌｏ、Ｌｉ、Ａｘ及びＯｌ）に対してスコアをつけた。総ＡＩＭは各時点でＬｉ、Ａｘ及びＯｌのスコアを合算したものであった。総ＡＩＭの合計は、すべての時点の総ＡＩＭを合算して計算した。ＡＵＣ（曲線の下面積）は、１０分〜１３０分に総ＡＩＭ（Ｌｉ＋Ａｘ＋Ｏｌ）の生データをプロットして計算された。データはＳＥＭ±平均で表示し、一元配置ＡＮＯＶＡとそれに続いて事後フィッシャーのＬＳＤ検定で分析した。データをＧｒａｐｈ  Ｐａｄ  Ｐｒｉｓｍ６によって分析してグラフで示した。
【０２８１】
フェノバム（１５ｍｇ／ｋｇ又は３０ｍｇ／ｋｇ、腹腔内）と組み合わせのとき、１ｍｇ／ｋｇ用量の６−ＯＨ−ＢｕｓｐはＬ−ＤＯＰＡ注入後、９０分及び１１０分の時点でＡＩＭだけでなく総ＡＩＭの合計をビヒクル群に比べて顕著に減衰させた。Ｌ−ＤＯＰＡ注入後、９０分及び１１０分で１ｍｇ／ｋｇ用量の６−ＯＨ−Ｂｕｓｐは、ＬＩＤラットのＡＩＭに有意的な効果を示さなかった。
【０２８２】
フェノバム（３０ｍｇ／ｋｇ、皮下）はどの時点でもＬＩＤラットのＡＩＭに有意的な効果を示さなかった。
【０２８３】
研究期間中に、すべての試験化合物に対して明白な行動副作用は発見されなかった。
【０２８４】
実施例１５
本研究は、パーキンソン病症状の効果に対する足踏み試験で６−ＯＨ−Ｂｕｓｐの評価を説明する。
【０２８５】
足踏み試験（Schallert et al., 1992）をほとんど変形させることなく、［Kirik et al., 2001］によって説明された通りに行った。要約すれば、実験者が片手でラットの後足を掴み、他方の手で観察しない前足を掴む一方、拘束されなかった前足はテーブルに触れるようにした。適応ステップの数を計算する一方、ラットの両方の前足を前進及び後進方向に、テーブル表面に沿って横に移動させて（５秒に９０ｃｍ）、２方向のステップ平均を検討した。
【０２８６】
３０匹の雄ＰＤラットモデルを以下の群にして適応ステップに使用した：
１．ビヒクル１＋ビヒクル２（ｎ＝７）
２．ビヒクル１＋Ｌ−ＤＯＰＡ（１０ｍｇ／ｋｇ、皮下）（ｎ＝７）
３．６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ（３ｍｇ／ｋｇ、皮下）＋ビヒクル２（ｎ＝８）
４．６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ（３ｍｇ／ｋｇ、皮下）＋Ｌ−ＤＯＰＡ（１０ｍｇ／ｋｇ、皮下）
【０２８７】
ＰＤラットを３日連続処理した。ビヒクル１又は６−ＯＨ−Ｂｕｓｐを適応足踏み試験６１分前に投与した。ビヒクル２又はＬ−ＤＯＰＡ／ベンセラジドを適応足踏み試験６０分前に投与した。テスト日に、ラットの後足と非テスト前足の両方を掴んだ。テスト前足を平たい表面に置いて５秒間前進方向に９０ｃｍ距離を引っ張った。後進及び前進移動方向の両側足に対して適応ステップの数を計算した。病変前足に対する総ステップ数の合計を非病変前足に対する総ステップ数で割り、その結果に１００をかけて完全な足踏みパーセントのスコアを導き出した。データをＧｒａｐｈ  Ｐａｄ  Ｐｒｉｓｍ５によって分析してグラフ化した。
【０２８８】
データは、Ｌ−ＤＯＰＡ（１０ｍｇ／ｋｇ、皮下）が抗パーキンソン病効果を裏付ける適応ステップ数を増加させることを明らかにした。Ｌ−ＤＯＰＡ（１０ｍｇ／ｋｇ）に６−ＯＨ−Ｂｕｓｐ（３ｍｇ／ｋｇ）を添加することには有意に異なる効果はなく、これは６−ＯＨ−ＢｕｓｐがＬ−ＤＯＰＡの効能を損傷させないことを示唆した。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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