(57)【要約】      （修正有）【課題】誘導性Ｔ細胞共刺激因子（ＩＣＯＳ）に結合する抗体を提供する。【解決手段】ＩＣＯＳに結合する抗体を開示する。ＩＣＯＳに結合する抗体を形成することができる抗体の重鎖及び軽鎖も開示される。加えて、１つ以上の特定の相補性決定領域を含む、抗体、重鎖及び軽鎖が開示される。ＩＣＯＳに向かう抗体をコードするポリヌクレオチド、抗体の重鎖または軽鎖をコードするポリヌクレオチドも開示される。さらに、ＩＣＯＳに向かう抗体を産生及び／または精製する方法、ＩＣＯＳに向かう抗体を使用する治療方法も開示される。【選択図】図１５Ｂ
2022002520.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＩＣＯＳに結合する単離抗体であって、
ｉ）（ａ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号１４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、あるいは
ｉｉ）（ａ）配列番号４２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号４３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号４６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号４７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、あるいは
ｉｉｉ）（ａ）配列番号６２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号６３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号６４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号６５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号６６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号６７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、あるいは
ｉｖ）（ａ）配列番号２２、６２、７２、８２、９２、１０２及び１１２から選択されるアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号２３、６３、７３、８３、９３、１０３及び１１３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号２４、６４、７４、８４、９４、１０４及び１１４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号２５、６５、７５、８５、９５、１０５及び１１５から選択されるアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号２６、６６、７６、８６、９６、１０６及び１１６から選択されるアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、ならびに（ｆ）配列番号２７、６７、７７、８７、９７、１０７及び１１７から選択されるアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、あるいは
ｖ）（ａ）配列番号３２、１６２、１７２及び１８２から選択されるアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号３３、１６３、１７３及び１８３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号、３４、１６４、１７４及び１８４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号３５、１６５、１７５及び１８５から選択されるアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号３６、１６６、１７６及び１８６から選択されるアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、ならびに（ｆ）配列番号３７、１６７、１７７及び１８７から選択されるアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、あるいは
ｖｉ）（ａ）配列番号５２、１２２、１３２、１４２及び１５２から選択されるアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号５３、１２３、１３３、１４３及び１５３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号、５４、１２４、１３４、１４４及び１５４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号５５、１２５、１３５、１４５及び１５５から選択されるアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号５６、１２６、１３６、１４６及び１５６から選択されるアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、ならびに（ｆ）配列番号５７、１２７、１３７、１４７及び１５７から選択されるアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、あるいは
ｖｉｉ）（ａ）配列番号２２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号２３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号２４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号２５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号２６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号２７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、あるいは
ｖｉｉｉ）（ａ）配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号３４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号３５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号３６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、あるいは
ｉｘ）（ａ）配列番号５２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号５３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号５４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号５５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号５６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号５７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、あるいは
ｘ）（ａ）配列番号７２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号７３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号７４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号７５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号７６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号７７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、あるいは
ｘｉ）（ａ）配列番号８２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号８３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号８４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号８５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号８６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号８７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、あるいは
ｘｉｉ）（ａ）配列番号９２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号９３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号９４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号９５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号９６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号９７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、あるいは
ｘｉｉｉ）（ａ）配列番号１０２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１０３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号１０４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号１０５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１０６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１０７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、あるいは
ｘｉｖ）（ａ）配列番号１１２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１１３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号１１４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号１１５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１１６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１１７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、あるいは 
ｘｖ）（ａ）配列番号１２２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１２３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号１２４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号１２５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１２６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１２７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、あるいは
ｘｖｉ）（ａ）配列番号１３２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１３３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号１３４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号１３５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１３６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１３７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、または（ａ）配列番号１４２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１４３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１４６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１４７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、あるいは
ｘｖｉｉ）（ａ）配列番号１５２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１５３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号１５４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号１５５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１５６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１５７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、あるいは 
ｘｖｉｉｉ）（ａ）配列番号１６２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１６３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号１６４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号１６５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１６６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１６７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、あるいは
ｘｉｘ）（ａ）配列番号１７２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１７３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号１７４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号１７５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１７６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１７７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、あるいは
ｘｘ）（ａ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号１８５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１８６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１８７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３
を含む、前記抗体。
【請求項２】
重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、
ｉ）前記ＶＨが、配列番号１０のアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性があり、前記ＶＬが、配列番号１１のアミノ酸配列と９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性がある、あるいは
ｉｉ）前記ＶＨが、配列番号２０のアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性があり、前記ＶＬが、配列番号２１のアミノ酸配列と９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性がある、あるいは
ｉｉｉ）前記ＶＨが、配列番号３０のアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性があり、前記ＶＬが、配列番号３１のアミノ酸配列と９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性がある、あるいは
ｉｖ）前記ＶＨが、配列番号４０のアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性があり、前記ＶＬが、配列番号４１のアミノ酸配列と９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性がある、あるいは
ｖ）前記ＶＨが、配列番号５０のアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性があり、前記ＶＬが、配列番号５１のアミノ酸配列と９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性がある、あるいは
ｖｉ）前記ＶＨが、配列番号６０のアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性があり、前記ＶＬが、配列番号６１のアミノ酸配列と９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性がある、あるいは
ｖｉｉ）前記ＶＨが、配列番号７０のアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性があり、前記ＶＬが、配列番号７１のアミノ酸配列と９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性がある、あるいは
ｖｉｉｉ）前記ＶＨが、配列番号８０のアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性があり、前記ＶＬが、配列番号８１のアミノ酸配列と９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性がある、あるいは
ｉｘ）前記ＶＨが、配列番号９０のアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性があり、前記ＶＬが、配列番号９１のアミノ酸配列と９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性がある、あるいは
ｘ）前記ＶＨが、配列番号１００のアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性があり、前記ＶＬが、配列番号１０１のアミノ酸配列と９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性がある、あるいは
ｘｉ）前記ＶＨが、配列番号１１０のアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性があり、前記ＶＬが、配列番号１１１のアミノ酸配列と９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性がある、あるいは
ｘｉｉ）前記ＶＨが、配列番号１２０のアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性があり、前記ＶＬが、配列番号１２１のアミノ酸配列と９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性がある、あるいは
ｘｉｉｉ）前記ＶＨが、配列番号１３０のアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性があり、前記ＶＬが、配列番号１３１のアミノ酸配列と９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性がある、あるいは
ｘｉｖ）前記ＶＨが、配列番号１４０のアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性があり、前記ＶＬが、配列番号１４１のアミノ酸配列と９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性がある、あるいは
ｘｖ）前記ＶＨが、配列番号１５０のアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性があり、前記ＶＬが、配列番号１５１のアミノ酸配列と９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性がある、あるいは
ｘｖｉ）前記ＶＨが、配列番号１６０のアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性があり、前記ＶＬが、配列番号１６１のアミノ酸配列と９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性がある、あるいは
ｘｖｉｉ）前記ＶＨが、配列番号１７０のアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性があり、前記ＶＬが、配列番号１７１のアミノ酸配列と９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性がある、あるいは
ｘｖｉｉｉ）前記ＶＨが、配列番号１８０のアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性があり、前記ＶＬが、配列番号１８１のアミノ酸配列と９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性がある
請求項１に記載の抗体。
【請求項３】
重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、
ｉ）前記ＶＨが配列番号１０のアミノ酸配列を含み、前記ＶＬが配列番号１１のアミノ酸配列を含む、または
ｉｉ）ＶＨが配列番号２０のアミノ酸配列を含み、ＶＬが配列番号２１のアミノ酸配列を含む、または
ｉｉｉ）前記ＶＨが配列番号３０のアミノ酸配列を含み、前記ＶＬが配列番号３１のアミノ酸配列を含む、または
ｉｖ）前記ＶＨが配列番号４０のアミノ酸配列を含み、前記ＶＬが配列番号４１のアミノ酸配列を含む、または
ｖ）前記ＶＨが配列番号５０のアミノ酸配列を含み、前記ＶＬが配列番号５１のアミノ酸配列を含む、または
ｖｉ）前記ＶＨが配列番号６０のアミノ酸配列を含み、前記ＶＬが配列番号６１のアミノ酸配列を含む、または
ｖｉｉ）前記ＶＨが配列番号７０のアミノ酸配列を含み、前記ＶＬが配列番号７１のアミノ酸配列を含む、または
ｖｉｉｉ）前記ＶＨが配列番号８０のアミノ酸配列を含み、前記ＶＬが配列番号８１のアミノ酸配列を含む、または
ｉｘ）前記ＶＨが配列番号９０のアミノ酸配列を含み、前記ＶＬが配列番号９１のアミノ酸配列を含む、または
ｘ）前記ＶＨが配列番号１００のアミノ酸配列を含み、前記ＶＬが配列番号１０１のアミノ酸配列を含む、または
ｘｉ）前記ＶＨが配列番号１１０のアミノ酸配列を含み、前記ＶＬが配列番号１１１のアミノ酸配列を含む、または
ｘｉｉ）前記ＶＨが配列番号１２０のアミノ酸配列を含み、前記ＶＬが配列番号１２１のアミノ酸配列を含む、または
ｘｉｉｉ）前記ＶＨが配列番号１３０のアミノ酸配列を含み、前記ＶＬが配列番号１３１のアミノ酸配列を含む、または
ｘｉｖ）前記ＶＨが配列番号１４０のアミノ酸配列を含み、前記ＶＬが配列番号１４１のアミノ酸配列を含む、または
ｘｖ）前記ＶＨが配列番号１５０のアミノ酸配列を含み、前記ＶＬが配列番号１５１のアミノ酸配列を含む、または
ｘｖｉ）前記ＶＨが配列番号１６０のアミノ酸配列を含み、前記ＶＬが配列番号１６１のアミノ酸配列を含む、または
ｘｖｉｉ）前記ＶＨが配列番号１７０のアミノ酸配列を含み、前記ＶＬが配列番号１７１のアミノ酸配列を含む、または
ｘｖｉｉｉ）前記ＶＨが配列番号１８０のアミノ酸配列を含み、前記ＶＬが配列番号１８１のアミノ酸配列を含む請求項１または２に記載の抗体。
【請求項４】
前記抗体がモノクローナル抗体である、先行請求項のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項５】
前記抗体が、キメラ抗体またはヒト化抗体である、先行請求項のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項６】
前記抗体が、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、または（Ｆａｂ’）２フラグメントから選択される抗体フラグメントである、先行請求項のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項７】
前記抗体が完全長抗体である、先行請求項のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項８】
前記重鎖が配列番号１８８のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖が配列番号１８９のアミノ酸配列を含む、請求項７に記載の抗体。
【請求項９】
哺乳動物への前記抗体の投与が、前記哺乳動物においてエフェクターＴ（Ｔｅｆｆ）細胞の増加をもたらす、先行請求項のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項１０】
哺乳動物への前記抗体の投与が、前記哺乳動物においてエフェクターＴ（Ｔｅｆｆ）細胞の活性化をもたらす、先行請求項のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項１１】
前記Ｔｅｆｆ細胞がＣＤ４＋ＦｏｘＰ３−Ｔ細胞である、請求項９または請求項１０に記載の抗体。
【請求項１２】
前記Ｔｅｆｆ細胞が、ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３−Ｔ細胞及びＣＤ８＋  Ｔ細胞である、請求項９または請求項１０に記載の抗体。
【請求項１３】
前記Ｔｅｆｆ細胞がＣＤ８＋  Ｔ細胞である、請求項９または請求項１０に記載の抗体。
【請求項１４】
哺乳動物への前記抗体の投与が、前記哺乳動物において制御性Ｔ（Ｔｒｅｇ）細胞の減少をもたらす、先行請求項のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項１５】
前記Ｔｒｅｇ細胞がＣＤ４＋ＦｏｘＰ３＋Ｔ細胞である、請求項１４に記載の抗体。
【請求項１６】
請求項１〜１５、または６０〜９７、または１２７〜１３４のいずれか一項に記載の抗体をコードする、単離核酸。
【請求項１７】
請求項１６に記載の核酸を含む、ベクター。
【請求項１８】
請求項１７に記載のベクターを含む、宿主細胞。
【請求項１９】
請求項１〜１５、または６０〜９７、または１２７〜１３４のいずれか一項に記載の抗体を産生する、宿主細胞。
【請求項２０】
抗ＩＣＯＳ抗体を作製する方法であって、請求項１９に記載の宿主細胞を前記抗体の発現に適した条件下で培養することを含む、前記方法。
【請求項２１】
前記宿主により産生された前記抗体を回収することを更に含む、請求項２０の記載の方法。
【請求項２２】
請求項１〜１５または６０〜８２のいずれか一項に記載の抗ＩＣＯＳ抗体と、薬学的に許容される担体とを含む、薬学的組成物。
【請求項２３】
哺乳動物において癌を治療する方法であって、有効量の請求項１〜１５、もしくは６０〜９７、もしくは１２７〜１３４のいずれか一項に記載の抗ＩＣＯＳ抗体、または請求項２２に記載の薬学的組成物を投与することを含む、前記方法。
【請求項２４】
前記癌が、黒色腫、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、腎細胞癌（ＲＣＣ）、胃癌、膀胱癌、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、ホジキンリンパ腫、卵巣癌、頭頸部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）及び三種陰性乳癌（ＴＮＢＣ）から選択される、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記癌が、黒色腫、胃癌、頭頸部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）及び三種陰性乳癌（ＴＮＢＣ）から選択される、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
哺乳動物においてエフェクターＴ（Ｔｅｆｆ）細胞の数を増加させる方法であって、有効量の請求項１〜１５、もしくは６０〜９７、もしくは１２７〜１３４のいずれか一項に記載の抗ＩＣＯＳ抗体、または請求項２２に記載の薬学的組成物を投与することを含む、前記方法。
【請求項２７】
前記方法が、Ｔｅｆｆ細胞を活性化することを更に含む、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
哺乳動物においてエフェクターＴ（Ｔｅｆｆ）細胞を活性化する方法であって、有効量の請求項１〜１５、もしくは６０〜９７、もしくは１２７〜１３４のいずれか一項に記載の抗ＩＣＯＳ抗体、または請求項２２に記載の薬学的組成物を投与することを含む、前記方法。
【請求項２９】
前記Ｔｅｆｆ細胞がＣＤ４＋ＦｏｘＰ３−Ｔ細胞である、請求項２６〜２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３０】
前記Ｔｅｆｆ細胞が、ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３−Ｔ細胞及びＣＤ８＋  Ｔ細胞である、請求項２６〜２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３１】
前記Ｔｅｆｆ細胞がＣＤ８＋  Ｔ細胞である、請求項２６〜２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３２】
前記方法が、制御性Ｔ（Ｔｒｅｇ）細胞の数を減少させることを更に含む、請求項２６〜３１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３３】
哺乳動物において制御性Ｔ（Ｔｒｅｇ）細胞の数を減少させる方法であって、有効量の請求項１〜１５、もしくは６０〜９７、もしくは１２７〜１３４のいずれか一項に記載の抗ＩＣＯＳ抗体、または請求項２２に記載の薬学的組成物を投与することを含む、前記方法。
【請求項３４】
前記Ｔｒｅｇ細胞がＣＤ４＋  ＦｏｘＰ３＋  Ｔ細胞である、請求項３２または請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記哺乳動物がヒトである、請求項２３〜３４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３６】
前記哺乳動物に、少なくとも１つの追加の治療剤が投与される、請求項２３〜３５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３７】
前記追加の治療剤が、前記抗ＩＣＯＳ抗体と同時または順次に投与される、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記追加の治療剤が、抗ＰＤ−１抗体及び抗ＰＤ−Ｌ１抗体から選択される、請求項３６または請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
前記追加の治療剤が癌ワクチンである、請求項３６または請求項３７に記載の方法。
【請求項４０】
前記癌ワクチンが、ＤＮＡワクチン、改変ウイルスワクチン、改変腫瘍細胞ワクチン及び新生抗原の使用により開発された癌ワクチンから選択される、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
癌を治療する医薬の製造のための、請求項１〜１５、または６０〜９７、または１２７〜１３４のいずれか一項に記載の抗体の使用。
【請求項４２】
前記癌が、黒色腫、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、腎細胞癌（ＲＣＣ）、胃癌、膀胱癌、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、ホジキンリンパ腫、卵巣癌、頭頸部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）及び三種陰性乳癌（ＴＮＢＣ）から選択される、請求項４１に記載の使用。
【請求項４３】
前記癌が、黒色腫、胃癌、頭頸部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）及び三種陰性乳癌（ＴＮＢＣ）から選択される、請求項４２に記載の使用。
【請求項４４】
前記医薬が、少なくとも１つの追加の治療剤と共に投与される、請求項４１〜４３のいずれか一項に記載の使用。
【請求項４５】
前記追加の治療剤が、抗ＰＤ−１抗体及び抗ＰＤ−Ｌ１抗体から選択される、請求項４４に記載の使用。
【請求項４６】
前記追加の治療剤が癌ワクチンである、請求項４４に記載の使用。
【請求項４７】
前記癌ワクチンが、ＤＮＡワクチン、改変ウイルスワクチン、改変腫瘍細胞ワクチン及び新生抗原の使用により開発された癌ワクチンから選択される、請求項４６に記載の使用。
【請求項４８】
癌を治療するための、請求項１〜１５、もしくは６０〜９７、もしくは１２７〜１３４のいずれか一項に記載の抗体、または請求項２２に記載の薬学的組成物の使用。
【請求項４９】
前記癌が、黒色腫、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、腎細胞癌（ＲＣＣ）、胃癌、膀胱癌、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、ホジキンリンパ腫、卵巣癌、頭頸部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）及び三種陰性乳癌（ＴＮＢＣ）から選択される、請求項４８に記載の使用。
【請求項５０】
前記癌が、黒色腫、胃癌、頭頸部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）及び三種陰性乳癌（ＴＮＢＣ）から選択される、請求項４９に記載の使用。
【請求項５１】
癌を治療するための、請求項１〜１５、もしくは６０〜９７、もしくは１２７〜１３４のいずれか一項に記載の抗体、または請求項２２に記載の薬学的組成物及び少なくとも１つの追加の治療剤の使用。
【請求項５２】
前記追加の治療剤が、抗ＰＤ−１抗体及び抗ＰＤ−Ｌ１抗体から選択される、請求項５１に記載の使用。
【請求項５３】
前記追加の治療剤が癌ワクチンである、請求項５１に記載の使用。
【請求項５４】
前記癌ワクチンが、ＤＮＡワクチン、改変ウイルスワクチン、改変腫瘍細胞ワクチン及び新生抗原の使用により開発された癌ワクチンから選択される、請求項５３に記載の使用。
【請求項５５】
前記癌が、黒色腫、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、腎細胞癌（ＲＣＣ）、胃癌、膀胱癌、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、ホジキンリンパ腫、卵巣癌、頭頸部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）及び三種陰性乳癌（ＴＮＢＣ）から選択される、請求項５１〜５４のいずれか一項に記載の使用。
【請求項５６】
前記癌が、黒色腫、胃癌、頭頸部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）及び三種陰性乳癌（ＴＮＢＣ）から選択される、請求項５５に記載の使用。
【請求項５７】
癌の治療に使用される、請求項１〜１５、もしくは６０〜９７、もしくは１２７〜１３４のいずれか一項に記載の抗体、または請求項２２に記載の薬学的組成物。
【請求項５８】
前記癌が、黒色腫、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、腎細胞癌（ＲＣＣ）、胃癌、膀胱癌、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、ホジキンリンパ腫、卵巣癌、頭頸部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）及び三種陰性乳癌（ＴＮＢＣ）から選択される、請求項５８に記載の抗体。
【請求項５９】
前記癌が、黒色腫、胃癌、頭頸部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）及び三種陰性乳癌（ＴＮＢＣ）から選択される、請求項５８に記載の抗体。
【請求項６０】
ヒトＩＣＯＳに結合する単離抗体であって、マウスＩＣＯＳ及び／またはラットＩＣＯＳにも結合する、前記抗体。
【請求項６１】
前記抗体が、５ｎＭ未満の親和性（ＫＤ）でヒトＩＣＯＳに結合する、請求項６０に記載の単離抗体。
【請求項６２】
前記抗体が、１０ｎＭ未満の親和性（ＫＤ）でラットＩＣＯＳに結合する請求項６０または請求項６１に記載の単離抗体。
【請求項６３】
親和性が、バイオレイヤー干渉法を使用して決定される、請求項６１または請求項６２に記載の単離抗体。
【請求項６４】
前記抗体が、ヒトＩＣＯＳ、マウスＩＣＯＳ及びラットＩＣＯＳに結合する、請求項６０〜６３のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項６５】
前記抗体がカニクイザルＩＣＯＳに結合する、請求項６０〜６４のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項６６】
前記抗体がモノクローナル抗体である、請求項６０〜６５のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項６７】
前記抗体が、キメラ抗体またはヒト化抗体である、請求項６０〜６６のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項６８】
前記抗体が、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、または（Ｆａｂ’）２フラグメントから選択される抗体フラグメントである、請求項６０〜６７のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項６９】
前記抗体が完全長抗体である、請求項６０〜６７のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項７０】
哺乳動物への前記抗体の投与が、前記哺乳動物においてエフェクターＴ（Ｔｅｆｆ）細胞の増加をもたらす、請求項６０〜６９のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項７１】
哺乳動物への前記抗体の投与が、前記哺乳動物においてエフェクターＴ（Ｔｅｆｆ）細胞の活性化をもたらす、請求項６０〜７０のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項７２】
前記Ｔｅｆｆ細胞がＣＤ４＋ＦｏｘＰ３−Ｔ細胞である、請求項７０または請求項７１に記載の単離抗体。
【請求項７３】
前記Ｔｅｆｆ細胞が、ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３−Ｔ細胞及びＣＤ８＋  Ｔ細胞である、請求項７０または請求項７１に記載の単離抗体。
【請求項７４】
前記Ｔｅｆｆ細胞がＣＤ８＋  Ｔ細胞である、請求項７０または請求項７１に記載の単離抗体。
【請求項７５】
哺乳動物への前記抗体の投与が、前記哺乳動物において制御性Ｔ（Ｔｒｅｇ）細胞の減少をもたらす、請求項６０〜７４のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項７６】
前記Ｔｒｅｇ細胞がＣＤ４＋ＦｏｘＰ３＋Ｔ細胞である、請求項７５に記載の単離抗体。
【請求項７７】
前記哺乳動物が、マウス、ラット、カニクイザル及びヒトから選択される、請求項７０〜７６のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項７８】
前記抗体による肺腫瘍組織の治療の後、ＧＺＭａ、ＧＺＭｂ、ＣＳＦ２、ＩＬ２、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１及びＣＸＣＬ１３から選択される少なくとも１つのケモカイン及び／またはサイトカインのｍＲＮＡのレベルが、対照抗体による前記肺腫瘍組織の治療後の前記ケモカインのレベルの少なくとも２倍または少なくとも３倍である、請求項１〜１５または６０〜７７のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項７９】
前記ケモカインのレベルが、治療の１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、または６時間後に測定される、請求項７８に記載の抗体。
【請求項８０】
少なくとも１つのケモカインがＣＸＣＬ１１である、請求項７８に記載の抗体。
【請求項８１】
前記ケモカインのレベルが、治療の６時間、８時間、１０時間、１２時間、１４時間、１６時間、１８時間、２０時間、２２時間、２４時間、３６時間、または４８時間後に測定される、請求項８０に記載の抗体。
【請求項８２】
前記ケモカインのレベルが、治療の２４時間後に測定される、請求項８１に記載の抗体。
【請求項８３】
前記肺腫瘍組織がヒト肺腫瘍組織である、請求項７８〜８２のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項８４】
前記抗体が、ＧＺＭａ、ＧＺＭｂ、ＣＳＦ２、ＩＬ２、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１及びＣＸＣＬ１３から選択される少なくとも１つのケモカイン及び／またはサイトカインのｍＲＮＡのレベルを、前記抗体が投与された哺乳動物において、少なくとも２倍増加させる、請求項１〜１５または６０〜８３のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項８５】
前記ケモカインのレベルが、前記抗体の投与の１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、または６時間後に測定される、請求項８４に記載の抗体。
【請求項８６】
少なくとも１つのケモカインがＣＸＣＬ１１である、請求項８４に記載の抗体。
【請求項８７】
前記ケモカインのレベルが、前記抗体の投与の６時間、８時間、１０時間、１２時間、１４時間、１６時間、１８時間、２０時間、２２時間、２４時間、３６時間、または４８時間後に測定される、請求項８６に記載の抗体。
【請求項８８】
前記ケモカインのレベルが、前記抗体の投与の２４時間後に測定される、請求項８６に記載の抗体。
【請求項８９】
ＧＺＭａ、ＧＺＭｂ、ＣＳＦ２、ＩＬ２、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１及びＣＸＣＬ１３から選択される少なくとも１つのケモカイン及び／またはサイトカインのｍＲＮＡのレベルを、前記抗体が投与された哺乳動物において少なくとも２倍増加させる、作動薬抗ＩＣＯＳ抗体。
【請求項９０】
前記ケモカインのレベルが、前記抗体の投与の１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、または６時間後に測定される、請求項８９に記載の抗体。
【請求項９１】
少なくとも１つのケモカインがＣＸＣＬ１１である、請求項８９に記載の抗体。
【請求項９２】
前記ケモカインのレベルが、前記抗体の投与の６時間、８時間、１０時間、１２時間、１４時間、１６時間、１８時間、２０時間、２２時間、２４時間、３６時間、または４８時間後に測定される、請求項９１に記載の抗体。
【請求項９３】
前記ケモカインのレベルが、前記抗体の投与の２４時間後に測定される、請求項９１に記載の抗体。
【請求項９４】
前記哺乳動物がヒトである、請求項８４〜９３のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項９５】
前記ヒトが癌を有する、請求項９４に記載の抗体。
【請求項９６】
前記癌が、黒色腫、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、腎細胞癌（ＲＣＣ）、胃癌、膀胱癌、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、ホジキンリンパ腫、卵巣癌、頭頸部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）及び三種陰性乳癌（ＴＮＢＣ）から選択される、請求項９５に記載の抗体。
【請求項９７】
前記癌が、黒色腫、胃癌、頭頸部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）及び三種陰性乳癌（ＴＮＢＣ）から選択される、請求項９６に記載の抗体。
【請求項９８】
ＧＺＭａ、ＧＺＭｂ、ＣＳＦ２、ＩＬ２、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１及びＣＸＣＬ１３から選択される少なくとも１つのケモカイン及び／またはサイトカインのｍＲＮＡのレベルを哺乳動物において増加させる方法であって、請求項１〜１５、または６０〜９７、または１２７〜１３４のいずれか一項に記載の抗体を前記哺乳動物に投与することを含む、前記方法。
【請求項９９】
前記ケモカインのレベルが、前記抗体の投与の１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、または６時間後に測定される、請求項９８に記載の方法。
【請求項１００】
少なくとも１つのケモカインがＣＸＣＬ１１である、請求項９８に記載の方法。
【請求項１０１】
前記ケモカインのレベルが、前記抗体の投与の６時間、８時間、１０時間、１２時間、１４時間、１６時間、１８時間、２０時間、２２時間、２４時間、３６時間、または４８時間後に測定される、請求項１００に記載の方法。
【請求項１０２】
前記ケモカインのレベルが、前記抗体の投与の２４時間後に測定される、請求項１００に記載の方法。
【請求項１０３】
前記哺乳動物がヒトである、請求項９８〜１０２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０４】
前記ヒトが癌を有する、請求項１０３に記載の方法。
【請求項１０５】
前記癌が、黒色腫、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、腎細胞癌（ＲＣＣ）、胃癌、膀胱癌、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、ホジキンリンパ腫、卵巣癌、頭頸部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）及び三種陰性乳癌（ＴＮＢＣ）から選択される、請求項１０４に記載の方法。
【請求項１０６】
前記癌が、黒色腫、胃癌、頭頸部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）及び三種陰性乳癌（ＴＮＢＣ）から選択される、請求項１０４に記載の方法。
【請求項１０７】
Ｔｅｆｆ細胞が、前記抗ＩＣＯＳ抗体の投与後に活性化される、請求項２３〜２７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０８】
Ｔｅｆｆ細胞の数が、前記抗ＩＣＯＳ抗体の投与後に増加される、請求項２３〜２７及び１０７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０９】
前記Ｔｅｆｆ細胞がＣＤ４＋ＦｏｘＰ３−Ｔ細胞である、請求項１０７または請求項１０８に記載の方法。
【請求項１１０】
前記Ｔｅｆｆ細胞が、ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３−Ｔ細胞及びＣＤ８＋  Ｔ細胞である、請求項１０７〜１０９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１１】
前記Ｔｅｆｆ細胞がＣＤ８＋  Ｔ細胞である、請求項１０７〜１１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１２】
制御性Ｔ（Ｔｒｅｇ）細胞の数が、前記抗ＩＣＯＳ抗体の投与後に減少される、請求項２３〜２７及び１０７〜１１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１３】
前記Ｔｒｅｇ細胞がＣＤ４＋ＦｏｘＰ３＋Ｔ細胞である、請求１１２に記載の方法。
【請求項１１４】
前記哺乳動物がヒトである、請求項１０７〜１１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１５】
前記哺乳動物に、少なくとも１つの追加の治療剤が投与される、請求項１０７〜１１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１６】
前記追加の治療剤が、前記抗ＩＣＯＳ抗体と同時または順次に投与される、請求項１１５に記載の方法。
【請求項１１７】
前記追加の治療剤がＰＤ−１療法である、請求項１１６に記載の方法。
【請求項１１８】
前記追加の治療剤が、抗ＰＤ−１抗体及び抗ＰＤ−Ｌ１抗体から選択される、請求項１１５〜１１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１９】
前記追加の治療剤が癌ワクチンである、請求項１１５または請求項１１６に記載の方法。
【請求項１２０】
前記癌ワクチンが、ＤＮＡワクチン、改変ウイルスワクチン、改変腫瘍細胞ワクチン及び新生抗原の使用により開発された癌ワクチンから選択される、請求項１１９に記載の方法。
【請求項１２１】
前記癌の試料が、ＩＣＯＳを発現すると決定される、請求項２３〜２７及び１０７〜１２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２２】
前記試料が、免疫組織化学（ＩＨＣ）により１＋、２＋、または３＋のＩＣＯＳ染色を示す、請求項１２１に記載の方法。
【請求項１２３】
前記試料が、低レベルのＰＤ−Ｌ１を有すると決定される、請求項２３〜２７及び１０７〜１２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２４】
前記試料が、ＰＤ−Ｌ１陰性であると決定される、請求項２３〜２７及び１０７〜１２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２５】
前記試料が、高レベルのＰＤ−Ｌ１を有すると決定される、請求項２３〜２７及び１０７〜１２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２６】
ＰＤ−Ｌ１レベルが、ＩＨＣを使用して決定される、請求項１２３〜１２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２７】
ＩＣＯＳに結合する抗体であって、Ｔ細胞のＮＫｐ４６へのリガンド（ＮＫｐ４６−Ｌ）のレベルを増加させる、前記抗体。
【請求項１２８】
Ｔ細胞へのＮＫｐ４６−Ｌのレベルの前記増加が、フローサイトメトリーアッセイにおいて可溶性ＮＫｐ４６細胞外ドメインを使用して決定される、請求項１２７に記載の抗体。
【請求項１２９】
前記抗体が、Ｔｒｅｇ細胞へのＮＫｐ４６−Ｌのレベルを、前記抗体がＴｅｆｆ細胞へのＮＫｐ４６−Ｌのレベルを増加するよりも大きく増加する、請求項１２７または請求項１２８に記載の抗体。
【請求項１３０】
前記抗体が、ＮＫ細胞によるＣＤ１６のシェディング（ｓｈｅｄｄｉｎｇ）を増加する、請求項１２７〜１２９のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項１３１】
前記抗体が、Ｔ細胞のＮＫｐ４６へのリガンド（ＮＫｐ４６−Ｌ）のレベルを増加させる、請求項１〜１５または６０〜９７のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項１３２】
Ｔ細胞へのＮＫｐ４６−Ｌのレベルの前記増加が、フローサイトメトリーアッセイにおいて可溶性ＮＫｐ４６細胞外ドメインを使用して決定される、請求項１３１に記載の抗体。
【請求項１３３】
前記抗体が、Ｔｒｅｇ細胞へのＮＫｐ４６−Ｌのレベルを、前記抗体がＴｅｆｆ細胞へのＮＫｐ４６−Ｌのレベルを増加するよりも大きく増加する、請求項１３１または請求項１３２に記載の抗体。
【請求項１３４】
前記抗体が、ＮＫ細胞によるＣＤ１６のシェディングを増加する、請求項１３１〜１３３のいずれか一項に記載の抗体。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願
本出願は、２０１５年３月２３日出願の米国特許仮出願第６２／１３７，０３４号、２０１５年４月１４日出願の同第６２／１４７，４８４号、２０１５年５月４日出願の同第６２／１５６，５８８号、２０１５年１０月１６日出願の同第６２／２４２，４８９号及び２０１５年１１月１６日出願の同第６２／２５５，６３５号の優先権の利益を主張し、これらは、それぞれあらゆる目的においてその全体が参照として本明細書に組み込まれる。
【０００２】
配列表
本出願は、ＦＥＳ−Ｗｅｂを介してＡＳＣＩＩフォーマットで提供され、その全体が参照として本明細書に組み込まれる、配列表を含有する。前記ＡＳＣＩＩのコピーは、２０１６年３月１５日に作成され、２０１６−０３−２２＿０１１４０−０００１−００ＰＣＴ＿ＳＴ２５．ｔｘｔと呼ばれ、８１，９２５バイトのサイズである。
【０００３】
誘導性Ｔ細胞共刺激因子（ＩＣＯＳ）に結合する抗体が提供される。抗ＩＣＯＳ抗体を投与することを含む治療方法も提供される。
【背景技術】
【０００４】
ＩＣＯＳは、Ｂ７／ＣＤ２８／ＣＴＬＡ−４免疫グロブリンスーパーファミリーのメンバーであり、Ｔ細胞に特異的に発現する。Ｔ細胞に構造的に発現し、かつ静止Ｔ細胞の完全な活性化に必要な共刺激シグナルをもたらすＣＤ２８と異なり、ＩＣＯＳは、初期Ｔ細胞活性化の後にのみ発現する。
【０００５】
ＩＣＯＳは、Ｔ細胞応答の多様な局面に関与している（Ｓｉｍｐｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２２：３２６−３３２で総説されている）。胚中心の形成、Ｔ／Ｂ細胞の協力及び免疫グロブリンのクラス転換において役割を果たしている。ＩＣＯＳ欠乏マウスは、損なわれた胚中心の形成を示し、インターロイキンＩＬ−１０の産生が減少している。これらの欠損は、濾胞性ヘルパーＴ細胞の欠乏に特異的に関連している。
【０００６】
ＩＣＯＳは、Ｔｈ１、Ｔｈ２及びＴｈ１７を含む他のＴ細胞サブセットの発生及び機能においても役割を果たしている。注目すべきことに、ＩＣＯＳは、Ｔｈ１及びＴｈ２細胞の両方と関連してＴ細胞繁殖及びサイトカイン分泌を共刺激する。したがって、ＩＣＯＳ  ＫＯマウスは、糖尿病（Ｔｈ１）、気道炎症（Ｔｈ２）及びＥＡＥ神経炎症モデル（Ｔｈ１７）を含む、様々な疾患モデルの自己免疫性表現型の発生障害を示している。
【０００７】
エフェクターＴ（Ｔｅｆｆ）細胞機能の調節における役割に加えて、ＩＣＯＳは、制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）も調節する。ＩＣＯＳは、Ｔｒｅｇに高レベルで発現し、Ｔｒｅｇの恒常性及び機能性に関与している。
【０００８】
活性化されると、ジスルフィド連結ホモ二量体であるＩＣＯＳは、ＰＩ３Ｋ及びＡＫＴ経路を介してシグナルを誘導する。後に続くシグナル伝達事象は、系列特異的転写因子（例えば、Ｔ−ｂｅｔ、ＧＡＴＡ−３）の発現をもたらし、次にＴ細胞繁殖及び生存に影響を及ぼす。
【０００９】
ＩＣＯＳリガンド（ＩＣＯＳＬ、Ｂ７−Ｈ２、Ｂ７ＲＰ１、ＣＤ２７５、ＧＬ５０）もＢ７スーパーファミリーのメンバーであり、ＩＣＯＳの唯一のリガンドであり、Ｂ細胞、マクロファージ及び樹状細胞の細胞表面に発現する。ＩＣＯＳＬは、ＩＣＯＳとの相互作用において、細胞表面で非共有結合連結ホモ二量体として機能する。ヒトＩＣＯＳＬは、ヒトＣＤ２８及びＣＴＬＡ−４に結合するが、マウスＩＣＯＳＬは結合しないことが報告されている（Ｙａｏ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１，Ｉｍｍｕｎｉｔｙ，３４：７２９−７４０）。
【発明の概要】
【００１０】
いくつかの実施形態において、ＩＣＯＳに結合する単離抗体が提供され、ここで抗体は、ＣＤ４Ｔ細胞の作動薬（例えば、ＣＤ４エフェクターＴ（Ｔｅｆｆ）細胞）である。いくつかの実施形態において、ＩＣＯＳに結合する単離抗体が提供され、ここで抗体は、ＣＤ４Ｔ細胞の作動薬（例えば、ＣＤ４Ｔｅｆｆ細胞）であり、制御性Ｔ（Ｔｒｅｇ）細胞を枯渇させる。いくつかの実施形態において、ＩＣＯＳに結合する単離抗体が提供され、ここで抗体は、Ｔｒｅｇ細胞を枯渇させるが、Ｔｅｆｆ細胞は枯渇させない。いくつかの実施形態において、ＩＣＯＳに結合する単離抗体が提供され、ここで抗体は、ＣＤ４Ｔ細胞にｐＡＫＴシグナル伝達を誘導する。いくつかの実施形態において、ＩＣＯＳに結合する単離抗体が提供され、ここで抗体は、ＣＤ４Ｔ細胞にｐＡＫＴシグナル伝達を誘導し、Ｔｒｅｇ細胞を枯渇させる。いくつかの実施形態において、ＩＣＯＳに結合する単離抗体が提供され、ここで抗体は、以下を含む。
ｉ）（ａ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号１４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、あるいは
ｉｉ）（ａ）配列番号４２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号４３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号４６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号ｌ４７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、あるいは
ｉｉｉ）（ａ）配列番号６２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号６３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号６４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号６５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号６６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号６７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、あるいは
ｉｖ） （ａ）配列番号２２、６２、７２、８２、９２、１０２及び１１２から選択されるアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号２３、６３、７３、８３、９３、１０３及び１１３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号２４、６４、７４、８４、９４、１０４及び１１４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号２５、６５、７５、８５、９５、１０５及び１１５から選択されるアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号２６、６６、７６、８６、９６、１０６及び１１６から選択されるアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、ならびに（ｆ）配列番号２７、６７、７７、８７、９７、１０７及び１１７から選択されるアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、あるいは
ｖ）（ａ）配列番号３２、１６２、１７２及び１８２から選択されるアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号３３、１６３、１７３及び１８３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号、３４、１６４、１７４及び１８４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号３５、１６５、１７５及び１８５から選択されるアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号３６、１６６、１７６及び１８６から選択されるアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、ならびに（ｆ）配列番号３７、１６７、１７７及び１８７から選択されるアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、あるいは
ｖｉ）（ａ）配列番号５２、１２２、１３２、１４２及び１５２から選択されるアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号５３、１２３、１３３、１４３及び１５３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号、５４、１２４、１３４、１４４及び１５４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号５５、１２５、１３５、１４５及び１５５から選択されるアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号５６、１２６、１３６、１４６及び１５６から選択されるアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、ならびに（ｆ）配列番号５７、１２７、１３７、１４７及び１５７から選択されるアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、あるいは
ｖｉｉ）（ａ）配列番号２２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号２３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号２４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号２５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号２６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号２７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、あるいは
ｖｉｉｉ）（ａ）配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号３４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号３５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号３６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、あるいは
ｉｘ）（ａ）配列番号５２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号５３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号５４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号５５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号５６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号５７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、あるいは
ｘ）（ａ）配列番号７２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号７３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号７４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号７５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号７６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号７７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、あるいは
ｘｉ）（ａ）配列番号８２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号８３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号８４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号８５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号８６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号８７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、あるいは
ｘｉｉ）（ａ）配列番号９２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号９３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号９４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号９５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号９６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号９７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、あるいは
ｘｉｉｉ）（ａ）配列番号１０２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１０３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号１０４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号１０５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１０６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１０７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、あるいは
ｘｉｖ）（ａ）配列番号１１２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１１３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号１１４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号１１５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１１６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１１７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、あるいは 
ｘｖ）（ａ）配列番号１２２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１２３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号１２４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号１２５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１２６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１２７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、あるいは
ｘｖｉ）（ａ）配列番号１３２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１３３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号１３４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号１３５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１３６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１３７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、または（ａ）配列番号１４２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１４３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１４６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１４７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、あるいは
ｘｖｉｉ）（ａ）配列番号１５２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１５３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号１５４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号１５５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１５６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１５７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、あるいは 
ｘｖｉｉｉ）（ａ）配列番号１６２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１６３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号１６４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号１６５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１６６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１６７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、あるいは
ｘｉｘ）（ａ）配列番号１７２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１７３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号１７４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号１７５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１７６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１７７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、あるいは
ｘｘ）（ａ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号１８５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１８６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１８７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３。
【００１１】
いくつかの実施形態において、ＩＣＯＳと結合する抗体が提供され、ここで抗体は、重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、
ｉ）ＶＨは、配列番号１０のアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性があり、ＶＬは、配列番号１１のアミノ酸配列と９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性がある、あるいは
ｉｉ）ＶＨは、配列番号２０のアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性があり、ＶＬは、配列番号２１のアミノ酸配列と９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性がある、あるいは
ｉｉｉ）ＶＨは、配列番号３０のアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性があり、ＶＬは、配列番号３１のアミノ酸配列と９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性がある、あるいは
ｉｖ）ＶＨは、配列番号４０のアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性があり、ＶＬは、配列番号４１のアミノ酸配列と９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性がある、あるいは
ｖ）ＶＨは、配列番号５０のアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性があり、ＶＬは、配列番号５１のアミノ酸配列と９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性がある、あるいは
ｖｉ）ＶＨは、配列番号６０のアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性があり、ＶＬは、配列番号６１のアミノ酸配列と９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性がある、あるいは
ｖｉｉ）ＶＨは、配列番号７０のアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性があり、ＶＬは、配列番号７１のアミノ酸配列と９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性がある、あるいは
ｖｉｉｉ）ＶＨは、配列番号８０のアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性があり、ＶＬは、配列番号８１のアミノ酸配列と９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性がある、あるいは
ｉｘ）ＶＨは、配列番号９０のアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性があり、ＶＬは、配列番号９１のアミノ酸配列と９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性がある、あるいは
ｘ）ＶＨは、配列番号１００のアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性があり、ＶＬは、配列番号１０１のアミノ酸配列と９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性がある、あるいは
ｘｉ）ＶＨは、配列番号１１０のアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性があり、ＶＬは、配列番号１１１のアミノ酸配列と９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性がある、あるいは
ｘｉｉ）ＶＨは、配列番号１２０のアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性があり、ＶＬは、配列番号１２１のアミノ酸配列と９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性がある、あるいは
ｘｉｉｉ）ＶＨは、配列番号１３０のアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性があり、ＶＬは、配列番号１３１のアミノ酸配列と９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性がある、あるいは
ｘｉｖ）ＶＨは、配列番号１４０のアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性があり、ＶＬは、配列番号１４１のアミノ酸配列と９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性がある、あるいは
ｘｖ）ＶＨは、配列番号１５０のアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性があり、ＶＬは、配列番号１５１のアミノ酸配列と９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性がある、あるいは
ｘｖｉ）ＶＨは、配列番号１６０のアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性があり、ＶＬは、配列番号１６１のアミノ酸配列と９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性がある、あるいは
ｘｖｉｉ）ＶＨは、配列番号１７０のアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性があり、ＶＬは、配列番号１７１のアミノ酸配列と９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性がある、あるいは
ｘｖｉｉｉ）ＶＨは、配列番号１８０のアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性があり、ＶＬは、配列番号１８１のアミノ酸配列と９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性がある。
【００１２】
いくつかの実施形態において、ＩＣＯＳと結合する抗体が提供され、ここで抗体は、重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、
ｉ）ＶＨは配列番号１０のアミノ酸配列を含み、ＶＬは配列番号１１のアミノ酸配列を含む、または
ｉｉ）ＶＨは配列番号２０のアミノ酸配列を含み、ＶＬは配列番号２１のアミノ酸配列を含む、または
ｉｉｉ）ＶＨは配列番号３０のアミノ酸配列を含み、ＶＬは配列番号３１のアミノ酸配列を含む、または
ｉｖ）ＶＨは配列番号４０のアミノ酸配列を含み、ＶＬは配列番号４１のアミノ酸配列を含む、または
ｖ）ＶＨは配列番号５０のアミノ酸配列を含み、ＶＬは配列番号５１のアミノ酸配列を含む、または
ｖｉ）ＶＨは配列番号６０のアミノ酸配列を含み、ＶＬは配列番号６１のアミノ酸配列を含む、または
ｖｉｉ）ＶＨは配列番号７０のアミノ酸配列を含み、ＶＬは配列番号７１のアミノ酸配列を含む、または
ｖｉｉｉ）ＶＨは配列番号８０のアミノ酸配列を含み、ＶＬは配列番号８１のアミノ酸配列を含む、または
ｉｘ）ＶＨは配列番号９０のアミノ酸配列を含み、ＶＬは配列番号９１のアミノ酸配列を含む、または
ｘ）ＶＨは配列番号１００のアミノ酸配列を含み、ＶＬは配列番号１０１のアミノ酸配列を含む、または
ｘｉ）ＶＨは配列番号１１０のアミノ酸配列を含み、ＶＬは配列番号１１１のアミノ酸配列を含む、または
ｘｉｉ）ＶＨは配列番号１２０のアミノ酸配列を含み、ＶＬは配列番号１２１のアミノ酸配列を含む、または
ｘｉｉｉ）ＶＨは配列番号１３０のアミノ酸配列を含み、ＶＬは配列番号１３１のアミノ酸配列を含む、または
ｘｉｖ）ＶＨは配列番号１４０のアミノ酸配列を含み、ＶＬは配列番号１４１のアミノ酸配列を含む、または
ｘｖ）ＶＨは配列番号１５０のアミノ酸配列を含み、ＶＬは配列番号１５１のアミノ酸配列を含む、または
ｘｖｉ）ＶＨは配列番号１６０のアミノ酸配列を含み、ＶＬは配列番号１６１のアミノ酸配列を含む、または
ｘｖｉｉ）ＶＨは配列番号１７０のアミノ酸配列を含み、ＶＬは配列番号１７１のアミノ酸配列を含む、または
ｘｖｉｉｉ）ＶＨは配列番号１８０のアミノ酸配列を含み、ＶＬは配列番号１８１のアミノ酸配列を含む。
【００１３】
いくつかの実施形態において、抗体は、モノクローナル抗体である。いくつかの実施形態において、抗体は、キメラ抗体はヒト化抗体である。いくつかの実施形態において、抗体は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、または（Ｆａｂ’）２フラグメントから選択される抗体フラグメントである。いくつかの実施形態において、抗体は、完全長抗体である。
【００１４】
いくつかの実施形態において、ＩＣＯＳに結合する抗体が提供され、ここで抗体は、配列番号１８８のアミノ酸配列を含む重鎖と、配列番号１８９のアミノ酸配列を含む軽鎖とを含む。
【００１５】
いくつかの実施形態において、哺乳動物への抗体の投与は、哺乳動物においてエフェクターＴ（Ｔｅｆｆ）細胞の増加をもたらす。いくつかの実施形態において、哺乳動物への抗体の投与は、哺乳動物においてエフェクターＴ（Ｔｅｆｆ）細胞の活性化をもたらす。いくつかの実施形態において、哺乳動物への抗体の投与は、Ｔｅｆｆ細胞とＴｒｅｇ細胞の比を増加させる。いくつかの実施形態において、Ｔｅｆｆ細胞は、ＣＤ４＋  ＦｏｘＰ３−Ｔ細胞である。いくつかの実施形態において、Ｔｅｆｆ細胞は、ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３−  Ｔ細胞及びＣＤ８＋  Ｔ細胞である。いくつかの実施形態において、Ｔｅｆｆ細胞は、ＣＤ８＋Ｔ細胞である。いくつかの実施形態において、哺乳動物への抗体の投与は、哺乳動物において制御性Ｔ（Ｔｒｅｇ）細胞の減少をもたらす。いくつかの実施形態において、Ｔｒｅｇ細胞は、ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３＋  Ｔ細胞である。
【００１６】
いくつかの実施形態において、ヒトＩＣＯＳに結合する単離抗体が提供され、ここで抗体は、マウスＩＣＯＳ及び／またはラットＩＣＯＳにも結合する。いくつかの実施形態において、単離抗体は、５ｎＭ未満の親和性（ＫＤ）でヒトＩＣＯＳに結合する。いくつかの実施形態において、単離抗体は、１０ｎＭ未満の親和性（ＫＤ）でラットＩＣＯＳに結合する。いくつかの実施形態において、親和性は、バイオレイヤー干渉法（ｂｉｏｌａｙｅｒ  ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｍｅｔｒｙ）を使用して決定される（例えば、Ａｂｄｉｃｈｅ  ｅｔ  ａｌ．，２００８，Ａｎａｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ，３７７：２０９−２１７及びＦｏｒｔｅＢｉｏ  Ｏｃｔｅｔ（登録商標）システムを参照すること）。いくつかの実施形態において、抗体は、ヒトＩＣＯＳ、マウスＩＣＯＳ及びラットＩＣＯＳに結合する。いくつかの実施形態において、抗体は、カニクイザルＩＣＯＳに結合する。いくつかの実施形態において、抗体は、モノクローナル抗体である。いくつかの実施形態において、抗体は、キメラ抗体はヒト化抗体である。いくつかの実施形態において、抗体は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、または（Ｆａｂ’）２フラグメントから選択される抗体フラグメントである。いくつかの実施形態において、抗体は、完全長抗体である。いくつかの実施形態において、哺乳動物への抗体の投与は、哺乳動物においてエフェクターＴ（Ｔｅｆｆ）細胞の増加をもたらす。いくつかの実施形態において、哺乳動物への抗体の投与は、哺乳動物においてエフェクターＴ（Ｔｅｆｆ）細胞の活性化をもたらす。いくつかの実施形態において、Ｔｅｆｆ細胞は、ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３−  Ｔ細胞である。いくつかの実施形態において、Ｔｅｆｆ細胞は、ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３−Ｔ細胞及びＣＤ８＋  Ｔ細胞である。いくつかの実施形態において、Ｔｅｆｆ細胞は、ＣＤ８＋Ｔ細胞である。いくつかの実施形態において、哺乳動物への抗体の投与は、哺乳動物において制御性Ｔ（Ｔｒｅｇ）細胞の減少をもたらす。いくつかの実施形態において、Ｔｒｅｇ細胞は、ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３＋Ｔ細胞である。いくつかの実施形態において、哺乳動物は、マウス、ラット、カニクイザル及びヒトから選択される。
【００１７】
いくつかの実施形態において、本明細書に提供されている抗体による肺腫瘍組織の治療の後、ＧＺＭａ、ＧＺＭｂ、ＣＳＦ２、ＩＬ２、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１及びＣＸＣＬ１３から選択されるケモカインまたはサイトカインのレベルは、対照抗体による肺腫瘍組織の治療後のケモカインのレベルの少なくとも２倍または少なくとも３倍である。いくつかの実施形態において、レベルはｍＲＮＡレベルである。いくつかの実施形態において、レベルはタンパク質レベルである。いくつかの実施形態において、対照抗体は、無関係の抗原に結合し、かつケモカインレベルに影響を及ぼすと予測されないアイソタイプ適合抗体である。いくつかの実施形態において、ケモカインのレベルは、治療の１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、または６時間後に測定される。いくつかの実施形態において、ケモカインはＣＸＣＬ１１である。いくつかの実施形態において、ケモカインのレベルは、治療の６時間、８時間、１０時間、１２時間、１４時間、１６時間、１８時間、２０時間、２２時間、２４時間、３６時間、または４８時間後に測定される。いくつかの実施形態において、ケモカインのレベルは、治療の２４時間後に測定される。いくつかの実施形態において、肺腫瘍組織は、ヒト肺腫瘍組織である。
【００１８】
いくつかの実施形態において、本明細書に提供されている抗体は、ＧＺＭａ、ＧＺＭｂ、ＣＳＦ２、ＩＬ２、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１及びＣＸＣＬ１３から選択される少なくとも１つのケモカイン及び／またはサイトカインのレベルを、抗体が投与された哺乳動物において、少なくとも２倍増加させる。いくつかの実施形態において、ケモカインのレベルは、抗体が投与された１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、または６時間後に測定される。いくつかの実施形態において、レベルはｍＲＮＡレベルである。いくつかの実施形態において、レベルはタンパク質レベルである。いくつかの実施形態において、ケモカインはＣＸＣＬ１１である。いくつかの実施形態において、ケモカインのレベルは、抗体が投与された６時間、８時間、１０時間、１２時間、１４時間、１６時間、１８時間、２０時間、２２時間、２４時間、３６時間、または４８時間後に測定される。いくつかの実施形態において、ケモカインのレベルは、抗体が投与された２４時間後に測定される。
【００１９】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ作動薬抗体が提供され、ここで抗体は、ＧＺＭａ、ＧＺＭｂ、ＣＳＦ２、ＩＬ２、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１及びＣＸＣＬ１３から選択される少なくとも１つのケモカイン及び／またはサイトカインのレベルを、抗体が投与された哺乳動物において、少なくとも２倍増加させる。いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ作動薬抗体が提供され、ここで抗体は、ＧＺＭａ、ＧＺＭｂ、ＣＳＦ２、ＩＬ２、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０及びＣＸＣＬ１１から選択される少なくとも１つのケモカイン及び／またはサイトカインのレベルを、抗体が投与された哺乳動物において、少なくとも２倍増加させる。いくつかの実施形態において、ケモカインのレベルは、抗体が投与された１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、または６時間後に測定される。いくつかの実施形態において、レベルはｍＲＮＡレベルである。いくつかの実施形態において、レベルはタンパク質レベルである。いくつかの実施形態において、ケモカインはＣＸＣＬ１１である。いくつかの実施形態において、ケモカインのレベルは、抗体が投与された６時間、８時間、１０時間、１２時間、１４時間、１６時間、１８時間、２０時間、２２時間、２４時間、３６時間、または４８時間後に測定される。いくつかの実施形態において、ケモカインのレベルは、抗体が投与された２４時間後に測定される。いくつかの実施形態において、哺乳動物はヒトである。いくつかの実施形態において、ヒトは癌を有する。いくつかの実施形態において、癌は、黒色腫、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、腎細胞癌（ＲＣＣ）、胃癌、膀胱癌、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、ホジキンリンパ腫、卵巣癌、頭頸部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）及び三種陰性乳癌（ＴＮＢＣ）から選択される。いくつかの実施形態において、癌は、黒色腫、胃癌、頭頸部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）及び三種陰性乳癌（ＴＮＢＣ）から選択される。
【００２０】
いくつかの実施形態において、ＩＣＯＳに結合する抗体が提供され、ここで抗体は、Ｔ細胞のＮＫｐ４６へのリガンド（ＮＫｐ４６−Ｌ）のレベルを増加させる。いくつかの実施形態において、Ｔ細胞へのＮＫｐ４６−Ｌのレベルの増加は、フローサイトメトリーアッセイにおいて可溶性ＮＫｐ４６細胞外ドメインを使用して決定される。いくつかの実施形態において、抗体は、Ｔｒｅｇ細胞へのＮＫｐ４６−Ｌのレベルを、抗体がＴｅｆｆ細胞へのＮＫｐ４６−Ｌのレベルを増加するよりも大きく増加する。いくつかの実施形態において、抗体は、ＮＫ細胞によるＣＤ１６のシェディング（ｓｈｅｄｄｉｎｇ）を増加する。
【００２１】
いくつかの実施形態において、本明細書に記載されている抗体をコードする単離核酸が、提供される。いくつかの実施形態において、核酸を含むベクターが提供される。いくつかの実施形態において、ベクターを含む宿主細胞が提供される。いくつかの実施形態において、本明細書に記載されている抗体を産生する宿主細胞が、提供される。いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体を作製する方法であって、宿主細胞を抗体の発現に適した条件下で培養することを含む方法が提供される。いくつかの実施形態において、方法は、宿主細胞により産生された抗体を回収することを含む。
【００２２】
いくつかの実施形態において、薬学的組成物が提供され、これは、本明細書に記載されている抗ＩＣＯＳ抗体及び薬学的に許容される担体を含む。
【００２３】
いくつかの実施形態において、癌を治療する方法であって、有効量の本明細書に記載されている抗ＩＣＯＳ抗体または本明細書に記載されている薬学的組成物を投与することを含む方法が提供される。いくつかの実施形態において、癌は、黒色腫、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、腎細胞癌（ＲＣＣ）、胃癌、膀胱癌、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、ホジキンリンパ腫、卵巣癌、頭頸部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）及び三種陰性乳癌（ＴＮＢＣ）から選択される。いくつかの実施形態において、癌は、黒色腫、胃癌、頭頸部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）及び三種陰性乳癌（ＴＮＢＣ）から選択される。
【００２４】
いくつかの実施形態において、エフェクターＴ（Ｔｅｆｆ）細胞の数を哺乳動物において増加させる方法であって、有効量の本明細書に記載されている抗ＩＣＯＳ抗体または本明細書に記載されている薬学的組成物を投与することを含む方法が提供される。いくつかの実施形態において、方法は、Ｔｅｆｆ細胞を活性化することを更に含む。いくつかの実施形態において、エフェクターＴ（Ｔｅｆｆ）細胞を活性化する方法であって、有効量の本明細書に記載されている抗ＩＣＯＳ抗体または本明細書に記載されている薬学的組成物を投与することを含む方法が提供される。いくつかの実施形態において、Ｔｅｆｆ細胞とＴｒｅｇ細胞の比を、哺乳動物において増加させる方法であって、有効量の本明細書に記載されている抗ＩＣＯＳ抗体または本明細書に記載されている薬学的組成物を投与することを含む方法が提供される。いくつかの実施形態において、Ｔｅｆｆ細胞は、ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３−Ｔ細胞である。いくつかの実施形態において、Ｔｅｆｆ細胞は、ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３−Ｔ細胞及びＣＤ８＋  Ｔ細胞である。いくつかの実施形態において、Ｔｅｆｆ細胞は、ＣＤ８＋Ｔ細胞である。いくつかの実施形態において、方法は、制御的Ｔ（Ｔｒｅｇ）細胞の数を減少させることを更に含む。
【００２５】
いくつかの実施形態において、制御的Ｔ（Ｔｒｅｇ）細胞の数を哺乳動物において減少させる方法であって、有効量の本明細書に記載されている抗ＩＣＯＳ抗体または本明細書に記載されている薬学的組成物を投与することを含む方法が提供される。いくつかの実施形態において、Ｔｒｅｇ細胞は、ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３＋Ｔ細胞である。
【００２６】
いくつかの実施形態において、ＧＺＭａ、ＧＺＭｂ、ＣＳＦ２、ＩＬ２、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１及びＣＸＣＬ１３から選択される少なくとも１つのケモカイン及び／またはサイトカインのレベルを哺乳動物において増加させる方法であって、本明細書に提供されている抗体を哺乳動物に投与することを含む方法が提供される。いくつかの実施形態において、少なくとも１つのケモカインのレベルは、少なくとも２倍、または少なくとも３倍増加される。いくつかの実施形態において、ケモカインのレベルは、抗体が投与された１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、または６時間後に測定される。いくつかの実施形態において、レベルはｍＲＮＡレベルである。いくつかの実施形態において、レベルはタンパク質レベルである。いくつかの実施形態において、ケモカインはＣＸＣＬ１１である。いくつかの実施形態において、ケモカインのレベルは、抗体が投与された６時間、８時間、１０時間、１２時間、１４時間、１６時間、１８時間、２０時間、２２時間、２４時間、３６時間、または４８時間後に測定される。いくつかの実施形態において、ケモカインのレベルは、抗体が投与された２４時間後に測定される。いくつかの実施形態において、哺乳動物はヒトである。いくつかの実施形態において、ヒトは癌を有する。いくつかの実施形態において、癌は、黒色腫、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、腎細胞癌（ＲＣＣ）、胃癌、膀胱癌、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、ホジキンリンパ腫、卵巣癌、頭頸部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）及び三種陰性乳癌（ＴＮＢＣ）から選択される。いくつかの実施形態において、癌は、黒色腫、胃癌、頭頸部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）及び三種陰性乳癌（ＴＮＢＣ）から選択される。
【００２７】
いくつかの実施形態において、哺乳動物はヒトである。
【００２８】
いくつかの実施形態において、哺乳動物には、少なくとも１つの追加の治療剤が投与される。いくつかの実施形態において、追加の治療剤は、抗ＩＣＯＳ抗体と同時または順次に投与される。いくつかの実施形態において、追加の治療剤はＰＤ−１療法である。いくつかの実施形態において、追加の治療剤は、抗ＰＤ−１抗体及び抗ＰＤ−Ｌ１抗体から選択される。いくつかの実施形態において、本明細書に提供されている抗ＩＣＯＳ抗体は、ニボルマブと共に投与される。いくつかの実施形態において、本明細書に提供されている抗ＩＣＯＳ抗体は、ペムブロリズマブと共に投与される。いくつかの実施形態において、本明細書に提供されている抗ＩＣＯＳ抗体は、アテゾリズマブと共に投与される。いくつかの実施形態において、本明細書に提供されている抗ＩＣＯＳ抗体は、アベルマブと共に投与される。いくつかの実施形態において、本明細書に提供されている抗ＩＣＯＳ抗体は、デュルバルマブと共に投与される。
【００２９】
いくつかの実施形態において、追加の治療薬は癌ワクチンである。いくつかのそのような実施形態において、癌ワクチンは、新生抗原を使用して開発される。いくつかの実施形態において、癌ワクチンはＤＮＡワクチンである。いくつかの実施形態において、癌ワクチンは、ＰＲＯＳＴＶＡＣ（ｒｉｌｉｍｏｇｅｎｅ  ｇａｌｖａｃｉｒｅｐｖｅｃ／ｒｉｌｉｍｏｇｅｎｅ  ｇｌａｆｏｌｉｖｅｃ）などの癌抗原を含む改変ウイルスである。いくつかの実施形態において、癌ワクチンは、ＧＶＡＸなどの改変腫瘍細胞を含む。
【００３０】
いくつかの実施形態において、本明細書に提供されている抗ＩＣＯＳ抗体は、作動薬抗ＯＸ４０抗体と共に投与される。いくつかの実施形態において、本明細書に提供されている抗ＩＣＯＳ抗体は、抗ＣＴＬＡ４抗体と共に投与される。いくつかの実施形態において、本明細書に提供されている抗ＩＣＯＳ抗体は、イピリムマブと共に投与される。
【００３１】
いくつかの実施形態において、追加の治療薬は化学療法剤である。非限定的な例示の化学療法剤には、カペシタビン、シクロホスファミド、ダカルバジン、テモゾロミド、シクロホスファミド、ドセタキセル、ドキソルビシン、ダウノルビシン、シスプラチン、カルボプラチン、エピルビシン、エリブリン、５−ＦＵ、ゲムシタビン、イリノテカン、イクサベピロン、メトトレキセート、ミトキサントロン、オキサリプラチン、パクリタキセル、ｎａｂ−パクリタキセル、ＡＢＲＡＸＡＮＥ（登録商標）（タンパク質結合パクリタキセル）、ペメトレキセド、ビノレルビン及びビンクリスチンが含まれる。いくつかの実施形態において、本明細書に提供されている抗ＩＣＯＳ抗体は、ＡＢＲＡＸＡＮＥ（登録商標）（Ｃｅｌｇｅｎｅ）と共に投与される。いくつかの実施形態において、本明細書に提供されている抗ＩＣＯＳ抗体は、少なくとも１つのキナーゼ阻害剤と共に投与される。非限定的な例示のキナーゼ阻害剤には、エルロチニブ、アファチニブ、ゲフィチニブ、クリゾチニブ、ダブラフェニブ、トラメチニブ、ベムラフェニブ及びコビメチニブが含まれる。
【００３２】
いくつかの実施形態において、追加の治療剤はＩＤＯ阻害剤である。非限定的な例示のＩＤＯ阻害剤には、Ｉｎｄｏｘｉｍｏｄ（Ｎｅｗ  Ｌｉｎｋ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ）、ＩＮＣＢ０２４３６０（Ｉｎｃｙｔｅ  Ｃｏｒｐ）、１−メチル−Ｄ−トリプトファン（Ｎｅｗ  Ｌｉｎｋ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ）及びＧＤＣ−０９１９（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）が含まれる。いくつかの実施形態において、追加の治療剤は免疫修飾薬（ＩＭｉＤ）である。非限定的な例示のＩＭｉＤには、サリドマイド、レナリドミド及びポマリドミドが含まれる。
【００３３】
いくつかの実施形態において、哺乳動物は、本明細書に記載されている抗ＩＣＯＳ抗体の投与に加えて、ＣＡＲ−Ｔ療法を受ける。
【００３４】
いくつかの実施形態において、哺乳動物は、追加の治療剤を伴って、または伴うことなく、本明細書に記載されている抗ＩＣＯＳ抗体の投与に加えて、外科手術及び／または放射線療法を受ける。いくつかの実施形態において、哺乳動物は、追加の治療剤を伴って、または伴うことなく、本明細書に記載されている抗ＩＣＯＳ抗体の投与に加えて、放射線療法を受ける。
【００３５】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載されている抗体の使用が、癌を治療する医薬の製造のために提供される。いくつかの実施形態において、癌は、黒色腫、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、腎細胞癌（ＲＣＣ）、胃癌、膀胱癌、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、ホジキンリンパ腫、卵巣癌、頭頸部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）及び三種陰性乳癌（ＴＮＢＣ）から選択される。いくつかの実施形態において、癌は、黒色腫、胃癌、頭頸部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）及び三種陰性乳癌（ＴＮＢＣ）から選択される。いくつかの実施形態において、医薬は、少なくとも１つの追加の治療剤と共に投与される。いくつかの実施形態において、追加の治療剤は、抗ＰＤ−１抗体及び抗ＰＤ−Ｌ１抗体から選択される。
【００３６】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載されている抗体または本明細書に記載されている薬学的組成物の使用が、癌の治療のために提供される。いくつかの実施形態において、癌は、黒色腫、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、腎細胞癌（ＲＣＣ）、胃癌、膀胱癌、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、ホジキンリンパ腫、卵巣癌、頭頸部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）及び三種陰性乳癌（ＴＮＢＣ）から選択される。いくつかの実施形態において、癌は、黒色腫、胃癌、頭頸部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）及び三種陰性乳癌（ＴＮＢＣ）から選択される。
【００３７】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載されている抗体または本明細書に記載されている薬学的組成物及び少なくとも１つの追加の治療剤の使用が、癌の治療のために提供される。いくつかの実施形態において、追加の治療剤は、抗ＰＤ−１抗体及び抗ＰＤ−Ｌ１抗体から選択される。いくつかの実施形態において、癌は、黒色腫、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、腎細胞癌（ＲＣＣ）、胃癌、膀胱癌、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、ホジキンリンパ腫、卵巣癌、頭頸部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）及び三種陰性乳癌（ＴＮＢＣ）から選択される。いくつかの実施形態において、癌は、黒色腫、胃癌、頭頸部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）及び三種陰性乳癌（ＴＮＢＣ）から選択される。
【００３８】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載されている抗体または本明細書に記載されている薬学的組成物が、癌の治療における使用のために提供される。いくつかの実施形態において、癌は、黒色腫、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、腎細胞癌（ＲＣＣ）、胃癌、膀胱癌、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、ホジキンリンパ腫、卵巣癌、頭頸部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）及び三種陰性乳癌（ＴＮＢＣ）から選択される。いくつかの実施形態において、癌は、黒色腫、胃癌、頭頸部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）及び三種陰性乳癌（ＴＮＢＣ）から選択される。
【図面の簡単な説明】
【００３９】
【図１Ａ】複数のヒト腫瘍にわたるＩＣＯＳ  ｍＲＮＡのレベルである。Ａ）様々な適応症にわたる正規化ＩＣＯＳ  ｍＲＮＡレベルの平均強度及び７５％信頼区間がプロットされている。７５％信頼範囲外の強度を有する試料が示されている（点）。Ｂ）免疫組織化学（ＩＨＣ）により０、１＋、２＋、または３＋のＩＣＯＳ染色を示す、示された各種類の腫瘍の率である。
【図１Ｂ】複数のヒト腫瘍にわたるＩＣＯＳ  ｍＲＮＡのレベルである。Ａ）様々な適応症にわたる正規化ＩＣＯＳ  ｍＲＮＡレベルの平均強度及び７５％信頼区間がプロットされている。７５％信頼範囲外の強度を有する試料が示されている（点）。Ｂ）免疫組織化学（ＩＨＣ）により０、１＋、２＋、または３＋のＩＣＯＳ染色を示す、示された各種類の腫瘍の率である。
【図２】ＩＣＯＳ発現とＴ細胞浸潤との相関関係である。約４５０個のＮＨＳＣＣ腫瘍のＩＣＯＳ  ｍＲＮＡのレベルを、１２遺伝子Ｔ細胞関連ケモカイン符号スコア又はＦｏｘＰ３  ｍＲＮＡのレベルと比較した。それぞれの腫瘍の正規化ケモカイン符号またはＦｏｘＰ３  ｍＲＮＡのレベルが、Ｙ軸にプロットされており、ＩＣＯＳのｍＲＮＡのレベルが、Ｘ軸にプロットされている。スピアマンの相関関連性（Ｒ）が、グラフに示されている［Ｃｏｒｒ（Ｓ）］。＞０．７５の相関関係（スピアマンＲ）が、強力な相関関係のカットオフと見なされる。
【図３】ＩＣＯＳ  ｍＲＮＡ発現を、ＴＣＧＡ  ＲＮＡ配列決定データ（ＮＣＩ）を使用して約４５０個のＮＨＳＣＣ腫瘍において比較した。それぞれの腫瘍の正規化ＣＴＬＡ−４、またはＰＤ−１、またはＰＤ−Ｌ１のｍＲＮＡのレベルが、Ｙ軸にプロットされており、ＩＣＯＳのｍＲＮＡのレベルが、Ｘ軸にプロットされている。スピアマンの相関関連性（Ｒ）が、グラフに示されている［Ｃｏｒｒ（Ｓ）］。ＩＣＯＳ発現レベルは、チェックポイント分子ＣＴＬＡ−４、ＰＤ−１の発現と有意に相関した。ＩＣＯＳとＰＤ−Ｌ１の弱い相関関係が観察された。＞０．７５の相関関係（スピアマンＲ）が、強力な相関関係のカットオフと見なされる。
【図４】ヒトＮＳＣＬＣ腫瘍における様々な強度のＩＣＯＳ染色の代表的画像である。
【図５】ヒト腫瘍におけるＩＣＯＳ細胞密度の分布である。ＩＣＯＳ細胞密度がそれぞれのヒト腫瘍において決定され、各種類の腫瘍の平均ＩＣＯＳ密度がＹ軸にプロットされている［ＮＳＣＬＣ（Ｎ＝１００）；ＨＮＳＣＣ  （Ｎ＝１０２）；乳癌、主要なサブタイプ全て（Ｎ＝９４）；三種陰性乳癌、ＴＮＢＣ（Ｎ＝９５）；卵巣癌（Ｎ＝９４）］。統計分析は、ＡＮＯＶＡを使用して実施した。
【図６Ａ】ＮＳＣＬＣ試料におけるＩＣＯＳ細胞密度の多様性である。Ａ）ＩＣＯＳ発現の密度を肺腫瘍試料（Ｎ＝９８）のパネルにおいて評価し、腫瘍を陽性細胞／ｍｍ２のＩＣＯＳ＋密度に基づいてランク付けした。Ｂ）ＮＳＣＬＣ臨床試料（Ｎ＝２０４）の第２の独立群におけるＩＣＯＳ発現の多様性である。
【図６Ｂ】ＮＳＣＬＣ試料におけるＩＣＯＳ細胞密度の多様性である。Ａ）ＩＣＯＳ発現の密度を肺腫瘍試料（Ｎ＝９８）のパネルにおいて評価し、腫瘍を陽性細胞／ｍｍ２のＩＣＯＳ＋密度に基づいてランク付けした。Ｂ）ＮＳＣＬＣ臨床試料（Ｎ＝２０４）の第２の独立群におけるＩＣＯＳ発現の多様性である。
【図７Ａ】ヒト癌の異なるＴ細胞サブセットにおけるＩＣＯＳ細胞密度の分布である。Ａ）識別されるＴ細胞区画におけるＩＣＯＳ染色を描写している代表的な画像である。矢印は、ＩＣＯＳ＋  ＦＯＸＰ３＋  Ｔｒｅｇ細胞、またはＩＣＯＳ＋ＣＤ８−ＣＤ４エフェクターを指している。 Ｂ）個別の腫瘍におけるＩＣＯＳ細胞密度を、ＦＯｘＰ３陽性ＣＤ４Ｔｒｅｇ、またはＣＤ８陽性Ｔ細胞、またはＣＤ８陰性及びＦｏｘＰ３陰性ＣＤ４エフェクターにおいて分析した。平均ＩＣＯＳ密度及び各種類の腫瘍の標準偏差がプロットされている。［肺癌（Ｎ＝１００）；ＨＮＳＣＣ（Ｎ＝１０２）；三種陰性乳癌、ＴＮＢＣ（Ｎ＝９５）；卵巣癌（Ｎ＝９４）］。
【図７Ｂ】ヒト癌の異なるＴ細胞サブセットにおけるＩＣＯＳ細胞密度の分布である。Ａ）識別されるＴ細胞区画におけるＩＣＯＳ染色を描写している代表的な画像である。矢印は、ＩＣＯＳ＋  ＦＯＸＰ３＋  Ｔｒｅｇ細胞、またはＩＣＯＳ＋ＣＤ８−ＣＤ４エフェクターを指している。 Ｂ）個別の腫瘍におけるＩＣＯＳ細胞密度を、ＦＯｘＰ３陽性ＣＤ４Ｔｒｅｇ、またはＣＤ８陽性Ｔ細胞、またはＣＤ８陰性及びＦｏｘＰ３陰性ＣＤ４エフェクターにおいて分析した。平均ＩＣＯＳ密度及び各種類の腫瘍の標準偏差がプロットされている。［肺癌（Ｎ＝１００）；ＨＮＳＣＣ（Ｎ＝１０２）；三種陰性乳癌、ＴＮＢＣ（Ｎ＝９５）；卵巣癌（Ｎ＝９４）］。
【図８Ａ】図８Ａ及び図８Ｂは、高ＩＣＯＳ発現が、ＰＤ−Ｌ１高ＮＳＣＬＣ腫瘍において観察される。ＰＤ−Ｌ１／ＩＣＯＳ／ＰＤ−１多重ＩＨＣを利用して、本発明者たちは、一連のＮＳＣＬＣ腺癌（ｎ＝１５０）におけるＩＣＯＳ及びＰＤ−Ｌ１のレベルを評価した。Ａ）ＩＣＯＳ、ＰＤ−１及びＰＤ−Ｌ１で染色されたＰＤ−Ｌ１高（左側パネル）またはＰＤ−Ｌ１低（右側パネル）腫瘍の代表的な画像である。Ｂ）ＰＤ−Ｌ１高（＞５％の細胞がＰＤ−Ｌ１陽性）またはＰＤ−Ｌ１低（＜５％の細胞がＰＤ−Ｌ１陽性）の扁平上皮癌（左側パネル）及び腺癌（右側パネル）における、ＩＣＯＳ細胞密度の定量化である。
【図８Ｂ】図８Ａ及び図８Ｂは、高ＩＣＯＳ発現が、ＰＤ−Ｌ１高ＮＳＣＬＣ腫瘍において観察される。ＰＤ−Ｌ１／ＩＣＯＳ／ＰＤ−１多重ＩＨＣを利用して、本発明者たちは、一連のＮＳＣＬＣ腺癌（ｎ＝１５０）におけるＩＣＯＳ及びＰＤ−Ｌ１のレベルを評価した。Ａ）ＩＣＯＳ、ＰＤ−１及びＰＤ−Ｌ１で染色されたＰＤ−Ｌ１高（左側パネル）またはＰＤ−Ｌ１低（右側パネル）腫瘍の代表的な画像である。Ｂ）ＰＤ−Ｌ１高（＞５％の細胞がＰＤ−Ｌ１陽性）またはＰＤ−Ｌ１低（＜５％の細胞がＰＤ−Ｌ１陽性）の扁平上皮癌（左側パネル）及び腺癌（右側パネル）における、ＩＣＯＳ細胞密度の定量化である。
【図９Ａ−１】図９Ａから図９Ｃは、ヒト腫瘍ＴＩＬ分析が、Ｔｒｅｇ細胞及びＣＤ４エフェクターにおけるＩＣＯＳ発現を示している。Ａ）ＨＮＳＣＣ患者の異なるＴ細胞サブセット（Ｎ＝４）におけるＰＤ−１及びＩＣＯＳ発現の代表的な等高線プロットである。Ｂ）Ｔ細胞区画におけるＩＣＯＳ単独陽性細胞またはＩＣＯＳ  ＰＤ−１二重陽性細胞の頻度が、示されている（ＨＮＳＣＣ  Ｎ＝４、ＮＳＣＬＣ  Ｎ＝３、卵巣  Ｎ＝４）。Ｃ）ＣＤ４Ｔｒｅｇ細胞及びＣＤ４Ｔｅｆｆ細胞におけるＩＣＯＳレベルの比較である。患者腫瘍試料のＣＤ４Ｔ細胞サブセットにおける平均蛍光強度（ＭＦＩ、またはＩＣＯＳの幾何平均）により測定されたＩＣＯＳの染色強度が、プロットされている。
【図９Ａ−２】図９Ａから図９Ｃは、ヒト腫瘍ＴＩＬ分析が、Ｔｒｅｇ細胞及びＣＤ４エフェクターにおけるＩＣＯＳ発現を示している。Ａ）ＨＮＳＣＣ患者の異なるＴ細胞サブセット（Ｎ＝４）におけるＰＤ−１及びＩＣＯＳ発現の代表的な等高線プロットである。Ｂ）Ｔ細胞区画におけるＩＣＯＳ単独陽性細胞またはＩＣＯＳ  ＰＤ−１二重陽性細胞の頻度が、示されている（ＨＮＳＣＣ  Ｎ＝４、ＮＳＣＬＣ  Ｎ＝３、卵巣  Ｎ＝４）。Ｃ）ＣＤ４Ｔｒｅｇ細胞及びＣＤ４Ｔｅｆｆ細胞におけるＩＣＯＳレベルの比較である。患者腫瘍試料のＣＤ４Ｔ細胞サブセットにおける平均蛍光強度（ＭＦＩ、またはＩＣＯＳの幾何平均）により測定されたＩＣＯＳの染色強度が、プロットされている。
【図９Ｂ】図９Ａから図９Ｃは、ヒト腫瘍ＴＩＬ分析が、Ｔｒｅｇ細胞及びＣＤ４エフェクターにおけるＩＣＯＳ発現を示している。Ａ）ＨＮＳＣＣ患者の異なるＴ細胞サブセット（Ｎ＝４）におけるＰＤ−１及びＩＣＯＳ発現の代表的な等高線プロットである。Ｂ）Ｔ細胞区画におけるＩＣＯＳ単独陽性細胞またはＩＣＯＳ  ＰＤ−１二重陽性細胞の頻度が、示されている（ＨＮＳＣＣ  Ｎ＝４、ＮＳＣＬＣ  Ｎ＝３、卵巣  Ｎ＝４）。Ｃ）ＣＤ４Ｔｒｅｇ細胞及びＣＤ４Ｔｅｆｆ細胞におけるＩＣＯＳレベルの比較である。患者腫瘍試料のＣＤ４Ｔ細胞サブセットにおける平均蛍光強度（ＭＦＩ、またはＩＣＯＳの幾何平均）により測定されたＩＣＯＳの染色強度が、プロットされている。
【図９Ｃ】図９Ａから図９Ｃは、ヒト腫瘍ＴＩＬ分析が、Ｔｒｅｇ細胞及びＣＤ４エフェクターにおけるＩＣＯＳ発現を示している。Ａ）ＨＮＳＣＣ患者の異なるＴ細胞サブセット（Ｎ＝４）におけるＰＤ−１及びＩＣＯＳ発現の代表的な等高線プロットである。Ｂ）Ｔ細胞区画におけるＩＣＯＳ単独陽性細胞またはＩＣＯＳ  ＰＤ−１二重陽性細胞の頻度が、示されている（ＨＮＳＣＣ  Ｎ＝４、ＮＳＣＬＣ  Ｎ＝３、卵巣  Ｎ＝４）。Ｃ）ＣＤ４Ｔｒｅｇ細胞及びＣＤ４Ｔｅｆｆ細胞におけるＩＣＯＳレベルの比較である。患者腫瘍試料のＣＤ４Ｔ細胞サブセットにおける平均蛍光強度（ＭＦＩ、またはＩＣＯＳの幾何平均）により測定されたＩＣＯＳの染色強度が、プロットされている。
【図１０Ａ】最適以下の抗ＣＤ３の存在下での血小板結合フォーマットにおける一次ヒトＣＤ４＋Ｔ細胞の繁殖に対する抗ＩＣＯＳ抗体の効果が、示されている。分裂した細胞の率がグラフで表されている。
【図１０Ｂ】最適以下のＰＭＡの存在下での可溶性フォーマットにおけるヒトＣＤ４＋Ｔ細胞の繁殖に対する抗ＩＣＯＳ抗体の効果が、示されている。分裂した細胞の率がグラフで表されている。
【図１０Ｃ】最適以下の抗ＣＤ３の存在下での血小板結合フォーマットにおける一次ヒトＣＤ４＋Ｔ細胞の繁殖に対する抗ＩＣＯＳ抗体３７Ａ１０Ｓ７１３−ｈＩｇＧ１の効果である。
【図１１Ａ】図１１Ａ及び図１１Ｂは、ＮＦ−ｋＢレポーターアッセイにおける抗ＩＣＯＳ抗体の評価が示されている。グラフは、ＧＦＰ＋細胞の率を示している。
【図１１Ｂ】図１１Ａ及び図１１Ｂは、ＮＦ−ｋＢレポーターアッセイにおける抗ＩＣＯＳ抗体の評価が示されている。グラフは、ＧＦＰ＋細胞の率を示している。
【図１２】超抗原（ＳＥＢ）刺激を伴うＰＢＭＣアッセイにおける可溶性抗ＩＣＯＳ抗体の評価が、示されている。読み取りは、ＩＦＮｇ産物である。
【図１３】抗ＩＣＯＳ抗体を、抗ＣＤ３の不在下でヒトＴ細胞繁殖アッセイにおいて潜在的な超作動性（ｓｕｐｅｒａｇｏｎｉｓｍ）について評価した。このアッセイの読み取りは、繁殖率である。
【図１４Ａ】二次架橋剤の存在下または不在下における、ホスホノ−ＡＫＴ（ｐＡＫＴ）アッセイによる抗ＩＣＯＳ抗体の評価である。読み取りは、ｐＡＫＴ陽性であるＣＤ４Ｔ細胞の率である。Ａ）二次架橋剤の不在下での結果である。Ｂ）二次架橋剤の存在下での結果である。二次架橋剤の存在下での結果である。
【図１４Ｂ】二次架橋剤の存在下または不在下における、ホスホノ−ＡＫＴ（ｐＡＫＴ）アッセイによる抗ＩＣＯＳ抗体の評価である。読み取りは、ｐＡＫＴ陽性であるＣＤ４Ｔ細胞の率である。Ａ）二次架橋剤の不在下での結果である。Ｂ）二次架橋剤の存在下での結果である。二次架橋剤の存在下での結果である。
【図１５Ａ】図１５Ａ及び図１５Ｂは、抗ＩＣＯＳ抗体が、Ｓａ１／Ｎ線維肉腫同系腫瘍モデルによって評価したことを示す。腫瘍増殖がｙ軸にプロットされている。Ａ）破線は個別のマウスの腫瘍増殖を示し、実線は群の平均増殖曲線を示す。群毎の無腫瘍マウスの数が示されている。Ｂ）各治療群における平均腫瘍体積である。
【図１５Ｂ】図１５Ａ及び図１５Ｂは、抗ＩＣＯＳ抗体が、Ｓａ１／Ｎ線維肉腫同系腫瘍モデルによって評価したことを示す。腫瘍増殖がｙ軸にプロットされている。Ａ）破線は個別のマウスの腫瘍増殖を示し、実線は群の平均増殖曲線を示す。群毎の無腫瘍マウスの数が示されている。Ｂ）各治療群における平均腫瘍体積である。
【図１６】抗ＩＣＯＳ  ７Ｆ１２により以前に治療された無腫瘍マウスに、Ｓａ１／Ｎ腫瘍を再負荷した。腫瘍増殖がｙ軸にプロットされている。
【図１７】Ｓａ１／Ｎ腫瘍増殖に対する、ｍＧ１及びｍＧ２ａ  Ｆｃを伴うハムスター抗ＩＣＯＳ抗体３７Ａ１０の効果である。破線は個別のマウスの個別の腫瘍増殖を示し、実線は群の平均腫瘍増殖曲線を示す。群毎の無腫瘍マウスの数が示されている。
【図１８】ＣＴ２６同系腫瘍モデルにおける抗ＩＣＯＳ抗体の、単一作用物質としての、または抗ＰＤ１との組み合わせによる評価である。破線は個別のマウスを示し、実線は群の平均増殖曲線を示す。群毎の無腫瘍マウスの数が示されている。
【図１９】抗ＩＣＯＳ抗体治療による、Ｓａ１／Ｎ腫瘍におけるＦｏｘＰ３＋  Ｔｒｅｇの枯渇である。脾臓及び腫瘍おけるＣＤ８とＣＤ４のＴｅｆｆ及びＴｒｅｇ細胞の頻度、ならびに腫瘍１ｍｇあたりのＴｒｅｇの数が示されている。それぞれの形状が個別のマウスを示している。
【図２０】抗ＩＣＯＳ抗体治療による、Ｓａ１／Ｎ腫瘍におけるＴｒｅｇの枯渇及びＴｅｆｆ細胞の活性化である。上側：腫瘍における、ＣＤ８とＣＤ４のＴｅｆｆ及びＴｒｅｇ細胞の頻度、ＣＤ８とＴｒｅｇとの比、ならびにＰＤ−１＋  ＣＤ８  Ｔ細胞の頻度である。下側：腫瘍における、分裂Ｋｉ−６７＋  ＣＤ８及びＣＤ４のＴｅｆｆ細胞、ならびにＣＤ３＋細胞中のＴｂｅｔ＋  ＣＤ４  Ｔｅｆｆ細胞の頻度である。それぞれの形状が個別のマウスを示している。
【図２１】Ｔ細胞枯渇後のＳａ１／Ｎ腫瘍モデルにおける抗ＩＣＯＳ抗体の評価である。経時的な腫瘍増殖がプロットされている。無腫瘍マウスの数が示されている。
【図２２Ａ】ヒト化抗ＩＣＯＳ抗体を用いた治療の際の、ＰＢＭＣアッセイにおけるＴｒｅｇ細胞の低減である。
【図２２Ｂ】Ｔｒｅｇ及びＴｅｆｆ細胞は、ＩＬ−２治療の５日後に類似したレベルのＩＣＯＳを発現する。
【図２３】抗ＩＣＯＳ抗体による治療後の腫瘍再負荷である。左側パネルは、１または２用量の抗ＩＣＯＳ抗体の投与後のマウスにおける腫瘍体積を示す。右側パネルは、腫瘍再負荷後の、対照マウスにおける、または抗ＩＣＯＳ抗体の投与後に無腫瘍になったマウスにおける腫瘍体積を示す。
【図２４Ａ】抗ＩＣＯＳ抗体を投与した、Ｓａ１／Ｎ腫瘍担持マウス（Ａ）及びカニクイザル（Ｂ）におけるＩＣＯＳ発現の増加である。
【図２４Ｂ】抗ＩＣＯＳ抗体を投与した、Ｓａ１／Ｎ腫瘍担持マウス（Ａ）及びカニクイザル（Ｂ）におけるＩＣＯＳ発現の増加である。
【図２５】抗ＩＣＯＳ抗体（右側パネル）または抗ＰＤ−１抗体（左側パネル）による６時間（上側パネル）または２４時間（下側パネル）の肺腫瘍組織の治療後の、Ｔｈ−１ケモカイン及びサイトカイン発現の変化である。
【図２６Ａ】作動薬及び拮抗薬の抗ＩＣＯＳ抗体による治療の後の３匹の異なる供給者における、Ｔｅｆｆ細胞（Ａ、Ｃ、Ｅ）及びＴｒｅｇ細胞（Ｂ、Ｄ、Ｆ）のＮＫｐ４６リガンドレベルである。
【図２６Ｂ】作動薬及び拮抗薬の抗ＩＣＯＳ抗体による治療の後の３匹の異なる供給者における、Ｔｅｆｆ細胞（Ａ、Ｃ、Ｅ）及びＴｒｅｇ細胞（Ｂ、Ｄ、Ｆ）のＮＫｐ４６リガンドレベルである。
【図２６Ｃ】作動薬及び拮抗薬の抗ＩＣＯＳ抗体による治療の後の３匹の異なる供給者における、Ｔｅｆｆ細胞（Ａ、Ｃ、Ｅ）及びＴｒｅｇ細胞（Ｂ、Ｄ、Ｆ）のＮＫｐ４６リガンドレベルである。
【図２６Ｄ】作動薬及び拮抗薬の抗ＩＣＯＳ抗体による治療の後の３匹の異なる供給者における、Ｔｅｆｆ細胞（Ａ、Ｃ、Ｅ）及びＴｒｅｇ細胞（Ｂ、Ｄ、Ｆ）のＮＫｐ４６リガンドレベルである。
【図２６Ｅ】作動薬及び拮抗薬の抗ＩＣＯＳ抗体による治療の後の３匹の異なる供給者における、Ｔｅｆｆ細胞（Ａ、Ｃ、Ｅ）及びＴｒｅｇ細胞（Ｂ、Ｄ、Ｆ）のＮＫｐ４６リガンドレベルである。
【図２６Ｆ】作動薬及び拮抗薬の抗ＩＣＯＳ抗体による治療の後の３匹の異なる供給者における、Ｔｅｆｆ細胞（Ａ、Ｃ、Ｅ）及びＴｒｅｇ細胞（Ｂ、Ｄ、Ｆ）のＮＫｐ４６リガンドレベルである。
【図２７】作動薬抗ＩＣＯＳ抗体により処理されたＮＫ細胞からのＣＤ１６の損失（ＣＤ１６シェディング）である。
【発明を実施するための形態】
【００４０】
ＩＣＯＳに結合する抗体が提供される。ＩＣＯＳに結合する抗体を形成することができる抗体の重鎖及び軽鎖も、提供される。加えて、１つ以上の特定の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む、抗体、重鎖及び軽鎖が提供される。ＩＣＯＳに向かう抗体をコードするポリヌクレオチドが、提供される。抗体の重鎖または軽鎖をコードするポリヌクレオチドも、提供される。ＩＣＯＳに向かう抗体を産生及び／または精製する方法が、提供される。ＩＣＯＳに向かう抗体を使用する治療方法が、提供される。そのような方法には、癌を治療する方法が含まれるが、これに限定されない。ＩＣＯＳを検出する方法が提供される。そのような方法には、抗ＩＣＯＳ抗体による治療によって利益を受けうる個体を特定すること、抗ＩＣＯＳ抗体による個体の治療をモニターすること及び個体において抗ＩＣＯＳ抗体の治療効力を改善することが含まれる。
【００４１】
本明細書に使用される章の見出しは、構成の目的のためだけのものであり、記載される主題を制限するものと解釈されるべきではない。
【００４２】
特許出願、特許公開及びＧｅｎｂａｎｋ受入番号を含む、本明細書に引用される全ての参考文献は、まるでそれぞれ個別の参考文献が、その全体が特定的及び個別に参照として組み込まれるように指示されているかのように、参照として本明細書に組み込まれる。
【００４３】
本明細書に記載または参照されている技術及び手順は、当業者によって一般に十分に理解され、例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ  ３ｒｄ．ｅｄｉｔｉｏｎ（２００１）Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．ＣＵＲＲＥＮＴ  ＰＲＯＴＯＣＯＬＳ  ＩＮ  ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ  ＢＩＯＬＯＧＹ（Ｆ．Ｍ．Ａｕｓｕｂｅｌ，ｅｔ  ａｌ．ｅｄｓ．，（２００３））、ｔｈｅ  ｓｅｒｉｅｓ  ＭＥＴＨＯＤＳ  ＩＮ  ＥＮＺＹＭＯＬＯＧＹ（Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．）：ＰＣＲ  ２：Ａ  ＰＲＡＣＴＩＣＡＬ  ＡＰＰＲＯＡＣＨ（Ｍ．Ｊ．ＭａｃＰｈｅｒｓｏｎ，Ｂ．Ｄ．Ｈａｍｅｓ  ａｎｄ  Ｇ．Ｒ．Ｔａｙｌｏｒ  ｅｄｓ．（１９９５）），Ｈａｒｌｏｗ  ａｎｄ  Ｌａｎｅ，ｅｄｓ．（１９８８）ＡＮＴＩＢＯＤＩＥＳ，Ａ  ＬＡＢＯＲＡＴＯＲＹ  ＭＡＮＵＡＬ，ａｎｄ  ＡＮＩＭＡＬ  ＣＥＬＬ  ＣＵＬＴＵＲＥ（Ｒ．Ｉ．Ｆｒｅｓｈｎｅｙ，ｅｄ．（１９８７））、Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（Ｍ．Ｊ．Ｇａｉｔ，ｅｄ．，１９８４）、Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ、Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｎｏｔｅｂｏｏｋ（Ｊ．Ｅ．Ｃｅｌｌｉｓ，ｅｄ．，１９９８）Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ、Ａｎｉｍａｌ  Ｃｅｌｌ  Ｃｕｌｔｕｒｅ（Ｒ．Ｉ．Ｆｒｅｓｈｎｅｙ），ｅｄ．，１９８７）、Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｔｏ  Ｃｅｌｌ  ａｎｄ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ（Ｊ．Ｐ．Ｍａｔｈｅｒ  ａｎｄ  Ｐ．Ｅ．Ｒｏｂｅｒｔｓ，１９９８）Ｐｌｅｎｕｍ  Ｐｒｅｓｓ、Ｃｅｌｌ  ａｎｄ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ（Ａ．Ｄｏｙｌｅ，Ｊ．Ｂ．Ｇｒｉｆｆｉｔｈｓ，ａｎｄ  Ｄ．Ｇ．Ｎｅｗｅｌｌ，ｅｄｓ．，１９９３−８）Ｊ．Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ、Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（Ｄ．Ｍ．Ｗｅｉｒ  ａｎｄ  Ｃ．Ｃ．Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ，ｅｄｓ．）、Ｇｅｎｅ  Ｔｒａｎｓｆｅｒ  Ｖｅｃｔｏｒｓ  ｆｏｒ  Ｍａｍｍａｌｉａｎ  Ｃｅｌｌｓ（Ｊ．Ｍ．Ｍｉｌｌｅｒ  ａｎｄ  Ｍ．Ｐ．Ｃａｌｏｓ，ｅｄｓ．，１９８７）、ＰＣＲ：Ｔｈｅ  Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ  Ｃｈａｉｎ  Ｒｅａｃｔｉｏｎ，（Ｍｕｌｌｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄｓ．，１９９４）、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（Ｊ．Ｅ．Ｃｏｌｉｇａｎ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄｓ．，１９９１）、Ｓｈｏｒｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ（Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，１９９９）、Ｉｍｍｕｎｏｂｉｏｌｏｇｙ（Ｃ．Ａ．Ｊａｎｅｗａｙ  ａｎｄ  Ｐ．Ｔｒａｖｅｒｓ，１９９７）、Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ（Ｐ．Ｆｉｎｃｈ，１９９７）、Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ（Ｄ．Ｃａｔｔｙ．，ｅｄ．，ＩＲＬ  Ｐｒｅｓｓ，１９８８−１９８９）、Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ（Ｐ．Ｓｈｅｐｈ��ｒｄ  ａｎｄ  Ｃ．Ｄｅａｎ，ｅｄｓ．，Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ，２０００）、Ｕｓｉｎｇ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ（Ｅ．Ｈａｒｌｏｗ  ａｎｄ  Ｄ．Ｌａｎｅ（Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，１９９９）、Ｔｈｅ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ（Ｍ．Ｚａｎｅｔｔｉ  ａｎｄ  Ｊ．Ｄ．Ｃａｐｒａ，ｅｄｓ．，Ｈａｒｗｏｏｄ  Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，１９９５）、及びＣａｎｃｅｒ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ（Ｖ．Ｔ  ＤｅＶｉｔａ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄｓ．，Ｊ．Ｂ．Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｃｏｍｐａｎｙ，１９９３）、ならびにこれらの改訂版に記載されている、広範囲に利用されている方法論などの従来の方法論を使用して、一般的に用いられる。
【００４４】
Ｉ．定義
特に定義されない限り、本開示に関連して使用される化学及び技術用語は、当業者により一般的に理解される意味を有する。更に、文脈から要求されない限り、または明確に指示されない限り、単数の用語は複数を含み、複数の用語は単数を含む。様々な出典または参考文献の間の定義におけるあらゆる競合では、本明細書に提示されている定義が支配する。
【００４５】
本明細書に記載されている実施形態は、実施形態「からなるｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ（からなる）」及び／または「ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ（から実質的になる）」ことを含む、ということが理解される。本明細書に使用されるとき、単数形「ａ」、「ａｎ」及び「ｔｈｅ」は、特に指示されない限り、複数対象を含む。本明細書における用語「または」の使用は、代替案が相互排他的であることを示唆することが意図されない。
【００４６】
本出願において、「または」の使用は、明確に記述されない限り、または当業者によって明確に理解されない限り、「及び／または」意味する。複数の従属クレームの文脈において、「または」使用は、１つを超える先行の独立または従属クレームを指す。
【００４７】
当業者に理解されるように、本明細書における「約」値またはパラメーターへの参照は、値またはパラメーターそれ自体を対象とする実施形態を含む（記載する）。例えば、「約Ｘ」を指す記載は、「Ｘ」の記載を含む。
【００４８】
用語「核酸分子」、「核酸」及び「ポリヌクレオチド」は、交換可能に使用することができ、ヌクレオチドのポリマーを指す。そのようなヌクレオチドのポリマーは、天然及び／または非天然のヌクレオチドを含有することができ、ＤＮＡ、ＲＮＡ及びＰＮＡが含まれるが、これらに限定されない。「核酸配列」は、核酸分子またはポリヌクレオチドを含むヌクレオチドの直鎖状配列を指す。
【００４９】
用語「ポリペプチド」及び「タンパク質」は、アミノ酸残基のポリマーを指すために交換可能に使用され、最小長さに限定されない。そのようなアミノ酸残基のポリマーは、天然または非天然アミノ酸残基を含有することができ、アミノ酸残基のペプチド、オリゴペプチド、二量体、三量体及び多量体が含まれるが、これらに限定されない。完全長タンパク質及びそのフラグメントの両方が、この定義に包含される。この用語は、ポリペプチドの発現後修飾、例えば、グリコシル化、シアリル化、アセチル化、リン酸化なども含む。更に、本開示の目的において、「ポリペプチド」は、タンパク質が望ましい活性を維持する限り、未変性配列に欠失、付加及び置換などの（一般に保存的である）修飾を含むタンパク質を指す。これらの修飾は、部位指定突然変異誘発を介するように意図的なものでありうる、またはＰＣＲ増幅に起因してタンパク質もしくは誤りを産生する宿主の突然変異を介するものなど、偶発的なものでありうる。 
【００５０】
「ＩＣＯＳ」及び「誘導性Ｔ細胞共刺激因子」は、本明細書に使用されるとき、細胞中におけるＩＣＯＳの発現及びプロセシングによってもたらされる任意の未変性ＩＣＯＳを指す。この用語には、特に指示されない限り、霊長類（例えば、ヒト及びカニクイザル）、ならびに齧歯類（例えば、マウス及びラット）などの哺乳動物を含む任意の脊椎動物源からのＩＣＯＳが含まれる。この用語は、ＩＣＯＳの天然に生じる変種、例えばスプライス変種または対立遺伝子変種も含む。シグナル配列を有する例示的なヒトＩＣＯＳ前駆体タンパク質のアミノ酸配列（シグナル配列は、アミノ酸１〜２０である）が、配列番号１に示されている。例示的な成熟ヒトＩＣＯＳのアミノ酸配列が、配列番号２に示されている。シグナル配列を有する例示的なマウスＩＣＯＳ前駆体タンパク質のアミノ酸配列（シグナル配列は、アミノ酸１〜２０である）が、配列番号３に示されている。例示的な成熟マウスＩＣＯＳのアミノ酸配列が、配列番号４に示されている。シグナル配列を有する例示的なラットＩＣＯＳ前駆体タンパク質のアミノ酸配列（シグナル配列は、アミノ酸１〜２０である）が、配列番号１９０に示されている。例示的な成熟ラットＩＣＯＳのアミノ酸配列が、配列番号１９１に示されている。シグナル配列を有する例示的なカニクイザルＩＣＯＳ前駆体タンパク質のアミノ酸配列（シグナル配列は、アミノ酸１〜２０である）が、配列番号５に示されている。例示的な成熟カニクイザルＩＣＯＳのアミノ酸配列が、配列番号６に示されている。
【００５１】
抗原またはエピトープに「特異的に結合する」という用語は、当該技術において十分に理解されている用語であり、そのような特異的結合を決定する方法も、当該技術において良く知られている。分子は、代替的な細胞または物質よりも頻繁に、急速に、長い持続期間にわたって及び／または大きな親和性をもって、特定の細胞または物質と反応または会合する場合に、「特異的結合」または「優先的結合」を示すと言われる。抗体は、他の物質に結合する場合より大きな親和性、結合活性、容易性をもって及び／または長い持続期間にわたって結合する場合に、標的に「特異的に結合する」または「優先的に結合する」。例えば、ＩＣＯＳエピトープに特異的または優先的に結合する抗体は、このエピトープに、他のＩＣＯＳエピトープまたは非ＩＣＯＳエピトープに結合するより大きな親和性、結合活性、容易性をもって及び／又は長い時速期間にわたって結合する抗体である。例えば、第１の標的に特異的または優先的に結合する抗体（または部分もしくはエピトープ）が、第２の標的に特異的または優先的に結合しても、しなくてもよいことも、この定義を読むことによって理解される。このように、「特異的結合」または「優先的結合」は、必ずしも排他的結合を必要しない（しかし、含むことができる）。一般に、結合への参照は、優先的結合を意味するが、これに限られたものではない。「特異的」は、結合タンパク質が抗原に選択的に結合する能力を指す。
【００５２】
本明細書に使用されるとき、「実質的に純粋」は、少なくとも５０％純粋（すなわち、汚染物質を含まない）、より好ましくは少なくとも９０％純粋、より好ましくは少なくとも９５％純粋、なおより好ましくは少なくとも９８％純粋、最も好ましくは少なくとも９９％純粋である材料を指す。
【００５３】
本明細書に使用されるとき、用語「エピトープ」は、抗原結合分子（例えば、抗体、抗体フラグメント、または抗体結合領域を含有する足場タンパク質）が結合する標的分子（例えば、タンパク質、核酸、炭水化物または脂質などの抗原）の部位をさす。エピトープは、多くの場合、アミノ酸、ポリペプチド、または糖側鎖などの化学的に活性な表面をもつ分子群を含み、特定の三次元構造の特徴、また、特定の電荷特徴を有する。エピトープは、標的分子の近接及び／または並列された非近接残基（例えば、アミノ酸、ヌクレオチド、糖、脂質部分）の両方から形成されうる。近接残基（例えば、アミノ酸、ヌクレオチド、糖、脂質部分）から形成されるエピトープは、典型的には変性溶媒への曝露時に保持され、一方、三次折り畳みにより形成されるエピトープは、典型的には変性溶媒による処理によって失われる。エピトープには、少なくとも３個、少なくとも５個、または８〜１０個の残基（例えば、アミノ酸またはヌクレオチド）が含まれうるが、これらに限定されない。いくつかの例において、エピトープは、長さが２０個未満の残基（例えば、アミノ酸またはヌクレオチド）、１５個未満の残基、または１２個未満の残基である。２つの抗体は、これらが抗原に対して競合結合を示す場合、抗原内の同じエピトープに結合することができる。いくつかの実施形態では、エピトープを、抗原結合分子のＣＤＲ残基への特定の最小距離によって特定することができる。いくつかの実施形態では、エピトープを上記に距離によって特定することができ、抗体残基と抗原残基の結合（例えば、水素結合）に関与する残基に更に限定することができる。エピトープを様々な走査によっても特定することができ、例えば、アラニンまたはアルギニン走査は、抗原結合分子が相互作用することができる１個以上の残基を示すことができる。明確に示されない限り、エピトープとしての残基セットは、特定の抗体のエピトープの一部から他の残基を除外しない。むしろ、そのようなセットの存在は、エピトープの最小シリーズ（種のセット）を示す。このように、いくつかの実施形態において、エピトープと特定された残基のセットは、抗原へのエピトープの排他的残基リストではなく、抗原に関連する最小エピトープを示す。
【００５４】
「非直線状エピトープ」または「立体構造エピトープ」は、エピトープに特的な抗体が結合する、抗原タンパク質内の非近接ポリペプチド、アミノ酸及び／または糖を含む。いくつかの実施形態において、少なくとも１個の残基は、エピトープの他の顕著な残基に対して非近接的であるが、１個以上の残基は、他の残基と近接的でもありうる。
【００５５】
「直線状エピトープ」は、エピトープに特的な抗体が結合する、抗原タンパク質内の近接ポリペプチド、アミノ酸及び／または糖を含む。いくつかの実施形態において、直線状エピトープ内の全ての残基が抗体と直接結合する（または、結合に関与する）必要はないことが、留意される。いくつかの実施形態において、直線状エピトープは、直線状エピトープの配列から事実上なるペプチドによる免疫化からのもの、またはタンパク質の残部から（抗体が少なくとも主にその配列セクションのみと相互作用できるように）相対的に単離されているタンパク質の構造部分からのものでありうる。
【００５６】
用語「抗体」は、本明細書において最も広義の意味で使用され、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、多特異性抗体（例えば、二重特異性抗体（二重特異性Ｔ細胞エンゲイジャー（ｅｎｇａｇｅｒ））及び三重特異性（ｔｒｉｓｐｅｃｉｆｉｃ）抗体）、ならびに抗体フラグメントが、望ましい抗原結合活性を示す限り含まれるが、これらに限定されない様々な抗体構造を包含する。
【００５７】
抗体という用語には、Ｆｖ、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、ｄｉ−ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ（単一ドメイン抗体）及び（Ｆａｂ’）２（化学的に連結されたＦ（ａｂ’）２を含む）などの抗原に結合することができるフラグメントが含まれるが、これらに限定されない。抗体のパパイン消化は、「Ｆａｂ」フラグメントと呼ばれ、それぞれ単一の抗原結合部位を有する、２つの同一の抗原結合フラグメント、及びその名称が容易に結晶化する能力を反映する、残留「Ｆｃ」フラグメントを産生する。ペプシン処理は、２つの抗原組み合わせ部位を有し、かつ依然として抗原を架橋することができる、Ｆ（ａｂ’）２フラグメントを生じる。抗体という用語には、キメラ抗体、ヒト化抗体、及びマウス、ヒト、カニクイザルなどの様々な種の抗体も含まれるが、これらに限定されない。更に、本明細書に提供されている全ての抗体構築物では、他の生物体の配列を有する変種も考慮される。したがって、ヒト型抗体が開示される場合、当業者は、ヒト配列に基づいた抗体を、どのようにマウス、ラット、ネコ、イヌ、ウマなどの配列に形質転換するかを理解する。抗体フラグメントには、いずれかの配向の単鎖ｓｃＦｖｓ、タンデムｄｉ−ｓｃＦｖ、二特異性抗体、タンデムｔｒｉ−ｓｄｃＦｖ、ミニボディなども含まれる。抗体フラグメントには、ナノボディ（軽鎖を有さない、一対の重鎖可変ドメインなどの単一のモノマードメインを有する抗体である、ｓｄＡｂ）も含まれる。いくつかの実施形態において、抗体フラグメントを特異的な種（例えば、ヒトｓｃＦｖまたはマウスｓｃＦｖ）と呼ぶことができる。これは、構築物の源ではなく、非ＣＤＲ領域の少なくとも一部の配列を示している。
【００５８】
用語「モノクローナル抗体」は、実質的に同種の抗体個体群の抗体を指し、すなわち、個体群を構成する個別の抗体が、恐らく天然に生じる、少量で存在しうる突然変異を除いて、同一であることを指す。モノクローナル抗体は、高度に特異的であり、単一抗原部位に向けられている。更に、異なる決定因子（エピトープ）に向けられている異なる抗体を典型的に含むポリクローナル抗体調合剤と対照的に、各モノクローナル抗体は、抗原の単一の決定因子に向けられている。したがって、モノクローナル抗体の試料は、抗原の同じエピトープに結合することができる。修飾語「モノクローナル」は、抗体の性質が抗体の実質的に同種の個体群から得たものであることを示しており、任意の特定の方法により抗体を産生することを必要とすると解釈されるべきではない。例えば、モノクローナル抗体は、Ｋｏｈｌｅｒ  ａｎｄ  Ｍｉｌｓｔｅｉｎ，１９７５，Ｎａｔｕｒｅ  ２５６：４９５に最初に記載されたハイブリドーマ法により作製されうる、または米国特許第４，８１６，５６７号に記載のものなどの組み換えＤＮＡ法により作製されうる。モノクローナル抗体は、例えば、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ  ｅｔ  ａｌ．，１９９０，Ｎａｔｕｒｅ  ３４８：５５２−５５４に記載されている技術を使用して生成されたファージライブラリーから単離することもできる。
【００５９】
用語「ＣＤＲ」は、当業者により少なくとも１つの特定方法によって特定される相補性決定領域を示す。いくつかの実施形態において、ＣＤＲは、Ｃｈｏｔｈｉａ番号付けスキーム、Ｋａｂａｔ番号付けスキーム、ＫａｂａｔとＣｈｏｔｈｉａの組み合わせ、ＡｂＭ定義、接触定義、ならびに／またはＫａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａ、ＡｂＭ、及び／もしくは接触定義の組み合わせのいずれかに従って定義することができ、例示的なＣＤＲ（ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３）は、Ｌ１ではアミノ酸残基２４〜３４、Ｌ２ではアミノ酸残基５０〜５６、Ｌ３ではアミノ酸残基８９〜９７、Ｈ１ではアミノ酸残基３１〜３５Ｂ、Ｈ２ではアミノ酸残基５０〜６５及びＨ３ではアミノ酸残基９５〜１０２において生じる。（Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ  Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ（１９９１））。ＡｂＭ定義は、例えば、ＣＤＲ（ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３）を、Ｌ１ではアミノ酸残基２４〜３４、Ｌ２ではアミノ酸残基５０〜５６、Ｌ３ではアミノ酸残基８９〜９７、Ｈ１ではアミノ酸残基Ｈ２６〜Ｈ３５Ｂ、Ｈ２ではアミノ酸残基５０〜５８及びＨ３ではアミノ酸残基９５〜１０２において含む。Ｃｏｎｔａｃｔ定義は、例えば、ＣＤＲ（ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３）を、Ｌ１ではアミノ酸残基３０〜３６、Ｌ２ではアミノ酸残基４６〜５５、Ｌ３ではアミノ酸残基８９〜９６、Ｈ１ではアミノ酸残基３０〜３５、Ｈ２ではアミノ酸残基４７〜５８及びＨ３ではアミノ酸残基９３〜１０１において含む。Ｃｈｏｔｈｉａ定義は、例えば、ＣＤＲ（ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３）を、Ｌ１ではアミノ酸残基２４〜３４、Ｌ２ではアミノ酸残基５０〜５６、Ｌ３ではアミノ酸残基８９〜９７、Ｈ１ではアミノ酸残基２６〜３２．．．３４、Ｈ２ではアミノ酸残基５２〜５６及びＨ３ではアミノ酸残基９５〜１０２において含む。ＣＤＲを、１つ以上の添付図面のいずれかにおいて示されているように提供することもできる。ＶＨのＣＤＲ１を除いて、ＣＤＲは、一般に、超可変ループを形成するアミノ酸残基を含む。抗体内の様々なＣＤＲを適切な数字及び鎖の種類によって指定することができ、限定されることなく、ａ）ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３、ｂ）ＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２、ＣＤＲＬ３、ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３、ｃ）ＬＣＤＲ−１、ＬＣＤＲ−２、ＬＣＤＲ−３、ＨＣＤＲ−１、ＨＣＤＲ−２及びＨＣＤＲ−３、またはｄ）ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３などが含まれる。用語「ＣＤＲ」は、超可変ループを含むＨＶＲまたは「超可変領域」も包含するように本明細書において使用される。例示的な超可変ループは���アミノ酸残基２６〜３２（Ｌ１）、５０〜５２（Ｌ２）、９１〜９６（Ｌ３）、２６〜３２（Ｈ１）、５３〜５５（Ｈ２）及び９６〜１０１（Ｈ３）において生じる。（Ｃｈｏｔｈｉａ  ａｎｄ  Ｌｅｓｋ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１−９１７（１９８７）。
【００６０】
用語「重鎖可変領域」は、本明細書に使用されるとき、少なくとも３つの重鎖ＣＤＲを含む領域を指す。いくつかの実施形態において、重鎖可変領域は、３つのＣＤＲ、ならびに少なくともＦＲ２及びＦＲ３を含む。いくつかの実施形態において、重鎖可変領域は、少なくとも重鎖ＨＣＤＲ１、フレームワーク（ＦＲ）２、ＨＣＤＲ２、ＦＲ３及びＨＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態において、重鎖可変領域は、ＦＲ１の少なくとも一部及び／またはＦＲ４の少なくとも一部も含む。
【００６１】
用語「重鎖定常領域」は、本明細書に使用されるとき、少なくとも３つの重鎖定常ドメインのＣＨ１、ＣＨ２及びＣＨ３を含む領域を指す。当然のことながら、ドメイン内の非機能変更的欠失及び変更は、特に指定されない限り、用語「重鎖定常領域」の範囲内に包含される。非限定的な例示の重鎖定常領域には、γ、δ及びαが含まれる。非限定的な例示の重鎖定常領域にはε及びμも含まれる。各重鎖定常領域は、抗体のアイソタイプに対応する。例えば、γ定常領域を含む抗体は、ＩｇＧ抗体であり、δ定常領域を含む抗体は、ＩｇＤ抗体であり、α定常領域を含む抗体は、ＩｇＡ抗体である。更に、μ定常領域を含む抗体は、ＩｇＭ抗体であり、ε定常領域を含む抗体は、ＩｇＥ抗体である。特定のアイソタイプをサブクラスに更に細分化することができる。例えば、ＩｇＧ抗体には、ＩｇＧ１（γ１定常領域を含む）、ＩｇＧ２（γ２定常領域を含む）抗体、ＩｇＧ３（γ３定常領域を含む）抗体及びＩｇＧ４（γ４定常領域を含む）抗体が含まれるが、これらに限定されず、ＩｇＡ抗体には、ＩｇＡ１（α１定常領域を含む）抗体及びＩｇＡ２（α２定常領域を含む）抗体が含まれるが、これらに限定されず、ＩｇＭ抗体には、ＩｇＭ１及びＩｇＭ２が含まれるが、これらに限定されない。
【００６２】
用語「重鎖」は、本明細書に使用されるとき、リーダー配列を伴って、または伴うことなく、少なくとも重鎖可変領域を含むポリペプチドを指す。いくつかの実施形態において、重鎖は、重鎖定常領域の少なくとも一部を含む。用語「完全長重鎖」は、本明細書に使用されるとき、リーダー配列を伴って、または伴うことなく、重鎖可変領域及び重鎖定常領域を含むポリペプチドを指す。
【００６３】
用語「軽鎖可変領域」は、本明細書に使用されるとき、少なくとも３つの軽鎖ＣＤＲを含む領域を指す。いくつかの実施形態において、軽鎖可変領域は、３つのＣＤＲ、ならびに少なくともＦＲ２及びＦＲ３を含む。いくつかの実施形態において、軽鎖可変領域は、少なくとも軽鎖ＬＣＤＲ１、フレームワーク（ＦＲ）２、ＬＣＤＲ２、ＦＲ３及びＬＣＤＲ３を含む。例えば、軽鎖可変領域は、軽鎖ＣＤＲ１、フレームワーク（ＦＲ）２、ＣＤＲ２、ＦＲ３及びＣＤＲ３を含むことができる。いくつかの実施形態において、軽鎖可変領域は、ＦＲ１の少なくとも一部及び／またはＦＲ４の少なくとも一部も含む。
【００６４】
用語「軽鎖定常領域」は、本明細書に使用されるとき、軽鎖定常ドメインＣＬを含む領域を指す。非限定的な例示の軽鎖定常領域には、λ及びκが含まれる。当然のことながら、ドメイン内の非機能変更的欠失及び変更は、特に指定されない限り、用語「軽鎖定常領域」の範囲内に包含される。
【００６５】
用語「軽鎖」は、本明細書に使用されるとき、リーダー配列を伴って、または伴うことなく、少なくとも軽鎖可変領域を含むポリペプチドを指す。いくつかの実施形態において、軽鎖は、軽鎖定常領域の少なくとも一部を含む。用語「完全長軽鎖」は、本明細書に使用されるとき、リーダー配列を伴って、または伴うことなく、軽鎖可変領域及び軽鎖定常領域を含むポリペプチドを指す。
【００６６】
本明細書の目的において「ヒト受容体フレームワーク」は、下記に定義されているヒト免疫グロブリンフレームワークまたはヒトコンセンサスフレームワークから誘導される軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）フレームワークまたは重鎖可変ドメイン（ＶＨ）フレームワークのアミノ酸配列を含むフレームワークである。ヒト免疫グロブリンフレームワークまたはヒトコンセンサスフレームワークから誘導されるヒト受容体フレームワークは、同じアミノ酸配列を含むことができる、またはアミノ酸配列の変化を含有することができる。いくつかの実施形態において、アミノ酸変化の数は、１０個以下、９個以下、８個以下、７個以下、６個以下、５個以下、４個以下、３個以下、または２個以下である。いくつかの実施形態において、ＶＬヒト受容体フレームワークは、ＶＬヒト免疫グロブリンフレームワーク配列またはヒトコンセンサスフレームワーク配列と配列が同一である。
【００６７】
「親和性」は、分子（例えば、抗体）の単一結合部位とその結合パートナー（例えば、抗原）との非共有相互作用の合計の強度を指す。分子ＸとそのパートナーＹとの親和性は、一般に、解離定数（ＫＤ）により表すことができる。親和性は、当該技術に既知の一般的な方法によって測定することができる（例えば、ＥＬＩＳＡ  ＫＤ、ＫｉｎＥｘＡ、バイオレイヤー干渉法（ＢＬＩ）、及び／または、本明細書に記載されているものを含む表面プラスモン共鳴装置（例えば、ＢＩＡｃｏｒｅ（登録商標）装置））。
【００６８】
用語「ＫＤ」は、本明細書に使用されるとき、抗体抗原相互作用の平衡解離定数を指す。
【００６９】
いくつかの実施形態において、抗体の「ＫＤ」、「Ｋｄ」、「Ｋｄ」、または「Ｋｄ値」は、約１０応答単位（ＲＵ）の固定化抗原ＣＭ５チップを有するＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）−２０００またはＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）−３０００（ＢＩＡｃｏｒｅ，Ｉｎｃ．，Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，Ｎ．Ｊ．）を２５℃で使用する表面プラスモン共鳴アッセイの使用によって、測定される。簡潔には、カルボキシメチル化デキストランバイオセンサーチップ（ＣＭ５、ＢＩＡＣＯＲＥ，Ｉｎｃ．）は、Ｎ−エチル−Ｎ’−（３−ジメチルアミノプロピル）−カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ）及びＮ−ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）により、供給会社の使用説明書に従って活性化される。抗原は、５μＬ／分の流速で注入される前に、共役タンパク質のおよそ１０応答単位（ＲＵ）を達成するため、１０ｍＭの酢酸エチル、ｐＨ４．８により５μｇ／ｍｌ（約０．２μＭ）に希釈される。抗原を注入した後、１Ｍのエタノールアミンを注入して、未反応基を遮断する。動力学的測定のため、ポリペプチド、例えば、完全長抗体の段階希釈液を、０．０５％ＴＷＥＥＮ−２０（商標）界面活性剤（ＰＢＳＴ）を有するＰＢＳに、およそ２５μＬ／分の流速により２５℃で注入する。会合速度（ｋｏｎ）及び解離速度（ｋｏｆｆ）は、簡単な１対１ラングミュア結合モデル（ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）、Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  Ｓｏｆｔｗａｒｅバージョン３．２）を使用して、会合及び解離センサーグラムを同時に当てはめることのより計算される。平衡解離定数（Ｋｄ）は、ｋｏｆｆ／ｋｏｎの比として計算される。例えば、Ｃｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２９３：８６５−８８１（１９９９）を参照すること。上記の表面プラスモン共鳴アッセイにより、ｏｎの速度が１０６Ｍ−１ｓ−１を超える場合、ｏｎの速度は、ストップフローを備えた分光光度計（Ａｖｉｖ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）または撹拌キュベットを有する８０００シリーズのＳＬＭ−ＡＭＩＮＣＯ（商標）分光光度計（ＴｈｅｒｍｏＳｐｅｃｔｒｏｎｉｃ）などの分光計により測定して、増加濃度の抗原の存在下でＰＢＳ、ｐＨ７．２中における２０ｎＭの抗抗原抗体の２５℃での蛍光発光強度（励起＝２９５ｎｍ、発光＝３４０ｎｍ、帯域１６ｎＭ）の増加または減少を測定する、蛍光消光技術を使用して決定することができる。
【００７０】
いくつかの実施形態において、前記の２つの値（例えば、Ｋｄ値）の差は、基準／比較値の関数と実質的に同じであり、例えば、約５０％未満、約４０％未満、約３０％未満、約２０％未満、及び／または約１０％未満である。
【００７１】
いくつかの実施形態において、前記の２つの値（例えば、Ｋｄ値）の差は、基準／比較分子の値の関数と実質的に異なっており、例えば、約１０％を超える、約２０％を超える、約３０％を超える、約４０％を超える、及び／または約５０％を超える。
【００７２】
「表面プラスモン共鳴」は、例えば、ＢＩＡｃｏｒｅ（商標）システム（ＢＩＡｃｏｒｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ＡＢ、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  ｃｏｍｐａｎｙ，Ｕｐｐｓａｌａ，Ｓｗｅｄｅｎ  ａｎｄ  Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，Ｎ．Ｊ．）を使用して、バイオセンサーマトリックス内のタンパク質濃度の変化を検出するリアルタイム生体特異的相互作用の分析を可能にする、光学的現象を示す。更なる記載は、Ｊｏｎｓｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９９３）Ａｎｎ．Ｂｉｏｌ．Ｃｌｉｎ．５１：１９−２６を参照すること。
【００７３】
「バイオレイヤー干渉法」は、バイオセンサーチップに固定化されたタンパク質の層及び内部基準層から反射した光の干渉パターンを分析する光学的分析技術を指す。バイオセンサーチップに結合された分子の数の変化が、リアルタイムで測定することができる干渉パターンにシフトを引き起こす。非限定的な例示のバイオレイヤー干渉法用装置は、ＦｏｒｔｅＢｉｏ  Ｏｃｔｅｔ（登録商標）ＲＥＤ９６システム（Ｐａｌｌ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）である。例えば、Ａｂｄｉｃｈｅ  ｅｔ  ａｌ．，２００８，Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．３７７：２０９−２７７を参照すること。
【００７４】
用語「ｋｏｎ」は、本明細書に使用されるとき、抗体と抗原の会合の速度定数を指す。特に、速度定数（ｋｏｎ及びｋｏｆｆ）、ならびに平衡解離定数は、一価ＩＣＯＳ抗原を有するＩｇＧ（二価）を使用して測定される。「Ｋｏｎ」、「ｋｏｎ」、「会合速度定数」、または「ｋａ」は、本明細書において交換可能に使用される。この値は、標的抗原への結合タンパク質の結合速度、または抗体と抗原の複合体形成速度を示し、方程式：
抗体（「Ａｂ」）＋抗原（「Ａｇ」）→Ａｂ−Ａｇ
により示される。用語「ｋｏｆｆ」は、本明細書に使用されるとき、抗体／抗原複合体からの抗体の解離の速度定数を指す。ｋｏｆｆは、「Ｋｏｆｆ」または「解離速度定数」とも示される。この値は、標的抗原からの抗体の解離速度、またはＡｂ−Ａｇ複合体の、遊離抗体及び抗原への経時的な分離を示し、方程式：
Ａｂ＋Ａｇ←Ａｂ−Ａｇ
により示される。
【００７５】
用語「生物学的活性」は、分子の任意の１つ以上の（インビボに見出されるように天然に存在する、または組み換え手段により提供される、もしくは可能になる）生物学的特性を指す。生物学的特性には、受容体への結合、細胞繁殖の誘導、細胞増殖の阻害、他のサイトカインの誘導、アポトーシスの誘導及び酵素活性が含まれるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態において、ＩＣＯＳタンパク質の生物学的活性には、例えば、Ｔｈ１及びＴｈ２細胞と会合した、Ｔ細胞繁殖及びサイトカイン分泌の共刺激；Ｔｒｅｇ細胞の調節；転写因子遺伝子発現の調節を含む、Ｔ細胞分化に及ぼす影響；ＰＩ３Ｋ及びＡＫＴ経路を介するシグナル伝達の誘導；ならびにＡＤＣＣの媒介が含まれるが、これらに限定されない。
【００７６】
「親和性成熟」抗体は、変更を有さない親抗体と比較して、１つ以上のＣＤＲに１つ以上の変更を有する抗体を指し、そのような変更は、抗原への抗体の親和性の改善によってもたらされる。
【００７７】
「キメラ」抗体は、本明細書に使用されるとき、重及び／または軽鎖の一部が特定の源または種から誘導され、重及び／または軽鎖の残りの少なくとも一部が異なる源または種から誘導される抗体を指す。いくつかの実施形態において、キメラ抗体は、第１の種（例えば、マウス、ラット、カニクイザルなど）から少なくとも１つの可変領域及び第２の種（例えば、ヒト、カニクイザルなど）から少なくとも１つの定常領域を含む抗体を指す。いくつかの実施形態において、キメラ抗体は、少なくとも１つのマウス可変領域及び少なくとも１つのヒト定常領域を含む。いくつかの実施形態において、キメラ抗体は、少なくとも１つのカニクイザル可変領域及び少なくとも１つのヒト定常領域を含む。いくつかの実施形態において、キメラ抗体の全ての可変領域は第１の種からのものであり、キメラ抗体の全ての定常領域は第２の種からのものである。キメラ構築物も、上記に示されているように、機能性フラグメントでありうる。
【００７８】
「ヒト化抗体」は、本明細書に使用されるとき、非ヒト可変領域のフレームワーク領域における少なくとも１個のアミノ酸がヒト可変領域の対応するアミノ酸に置き換えられている抗体を指す。いくつかの実施形態において、ヒト化抗体は、少なくとも１つのヒト定常領域またはそのフラグメントを含む。いくつかの実施形態において、ヒト化抗体は、Ｆａｂ、ｓｃＦｖ、（Ｆａｂ’）２などの抗体フラグメントである。ヒト化という用語は、非ヒト免疫グロブリンの最小配列を含有するキメラ免疫グロブリン、免疫グロブリン鎖、またはそのフラグメント（例えば、抗体のＦｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、もしくは他の抗原結合部分配列）である、非ヒト（例えば、ネズミ）抗体の形態を示す。ヒト化抗体は、受容者の相補性決定領域（ＣＤＲ）の残基が、望ましい特異性、親和性及び能力を有するマウス、ラット、またはウサギなどの非ヒト種（供与者抗体）のＣＤＲの残基に置換されているヒト免疫グロブリン（受容者体抗体）を含むことができる。いくつかの実施形態において、ヒト免疫グロブリンのＦｖフレームワーク領域（ＦＲ）の残基は、対応する非ヒト残基に置き換えられている。更に、ヒト化抗体は、受容者抗体にも、移入ＣＤＲまたはフレームワーク配列にも見出されないが、抗体性能を更に洗練及び最適化するために含まれる残基を含むことができる。一般に、ヒト化抗体は、少なくとも１つ、典型的には２つの可変ドメインを実質的に全て含むことができ、全て、または実質的に全てのＣＤＲ領域は、非ヒト免疫グロブリンのものに対応し、全て、または実質的に全てのＦＲ領域は、ヒト免疫グロブリンコンセンサス配列のものに対応する。いくつかの実施形態において、ヒト化抗体は、免疫グロブリンの定常領域またはドメイン（Ｆｃ）、典型的にはヒト免疫グロブリンのものの、少なくとも一部を含むこともできる。他のヒト化抗体の形態は、１つ以上のＣＤＲ（ＣＤＲ  Ｌ１、ＣＤＲ  Ｌ２、ＣＤＲ  Ｌ３、ＣＤＲ  Ｈ１、ＣＤＲ  Ｈ２、及び／またはＣＤＲ  Ｈ３）を有し、これらは、元の抗体に対して変更されており、元の抗体の１つ以上のＣＤＲ「から誘導された」１つ以上のＣＤＲとも呼ばれる。理解されるように、ヒト化配列は、一次配列により特定することができ、必ずしも抗体を作り出した方法を示しているわけではない。
【００７９】
「ＣＤＲグラフト抗体」は、本明細書に使用されるとき、第１の（非ヒト）種の１つ以上の相補性決定領域（ＣＤＲ）が、第２の（ヒト）種のフレームワーク領域（ＦＲ）にグラフトされているヒト化抗体を指す。
【００８０】
「ヒト抗体」は、本明細書に使用されるとき、ヒトにおいて産生された抗体、ＸｅｎｏＭｏｕｓｅ（登録商標）マウスなど、ヒト免疫グロブリン遺伝子を含む非ヒト動物において産生された抗体、及びファージディスプレイなどのインビトロ法を使用して選択された抗体（Ｖａｕｇｈａｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９６，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，１４：３０９−３１４；Ｓｈｅｅｔｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９８，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．（ＵＳＡ）９５：６１５７−６１６２；Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ  ａｎｄ  Ｗｉｎｔｅｒ，１９９１，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２７：３８１、Ｍａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９１，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１）を包含し、ここで抗体のレパートリーは、ヒト免疫グロブリン配列に基づいている。用語「ヒト抗体」は、ヒト配列の配列属を示す。したがって、この用語は、抗体を作り出す方法を示しているのではなく、関連する配列の属を示している。
【００８１】
「機能性Ｆｃ領域」は、未変性配列Ｆｃ領域の「エフェクター機能」を有する。例示的な「エフェクター機能」には、Ｆｃ受容体結合、Ｃ１ｑ結合、ＣＤＣ、ＡＤＣＣ、食作用、細胞表面受容体（例えば、Ｂ細胞受容体、ＢＣＲ）の下方制御などが含まれる。そのようなエフェクター機能は、一般に、Ｆｃ領域を結合ドメイン（例えば、抗体可変ドメイン）と組み合わせることを必要とし、様々なアッセイを使用して評価することができる。
【００８２】
「未変性配列Ｆｃ領域」は、天然に見出されるＦｃ領域のアミノ酸配列と同一であるアミノ酸配列を含む。未変性配列ヒトＦｃ領域には、未変性配列ヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域（非Ａ及びＡアロタイプ）、未変性配列ヒトＩｇＧ２  Ｆｃ領域、未変性配列ヒトＩｇＧ３  Ｆｃ領域、及び未変性配列ヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域、ならびに天然に生じるこれらの変種が含まれる。
【００８３】
「変種Ｆｃ領域」は、少なくとも１個のアミノ酸修飾によって、未変性配列Ｆｃ領域のものと異なるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、「変種Ｆｃ領域」は、少なくとも１個のアミノ酸修飾によって未変性配列Ｆｃ領域のものと異なるが、未変性配列Ｆｃ領域の少なくとも１つのエフェクター機能を保持している、アミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、変種Ｆｃ領域は、未変性配列Ｆｃ領域または親ペプチドのＦｃ領域と比較して少なくとも１個のアミノ酸置換、例えば、約１〜約１０個のアミノ酸置換、好ましくは約１〜約５個のアミノ酸置換を、未変性配列Ｆｃ領域または親ポリペプチドのＦｃ領域に有する。いくつかの実施形態において、本明細書の変種Ｆｃ領域は、未変性配列Ｆｃ領域及び／または親ポリペプチドのＦｃ領域と少なくとも約８０％の配列同一性、少なくとも約９０％の配列同一性、少なくとも９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％の配列同一性を有する。
【００８４】
「Ｆｃ受容体」または「ＦｃＲ」は、抗体のＦｃ領域に結合する受容体を記載する。いくつかの実施形態において、ＦｃγＲは、未変性ヒトＦｃＲである。いくつかの実施形態において、ＦｃＲは、ＩｇＧ抗体（ガンマ受容体）に結合するものであり、これらの受容体の対立遺伝子変種及び代替的スプライス形態を含む、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ及びＦｃγＲＩＩＩサブクラスの受容体が含まれる。ＦｃγＲＩＩ受容体は、ＦｃγＲＩＩＡ（「活性化受容体」）及びＦｃγＲＩＩＢ（「阻害受容体」）を含み、主に細胞質ドメインが異なる類似したアミノ酸配列を有する。活性化受容体ＦｃγＲＩＩＡは、細胞質ドメインに免疫受容体チロシンに基づいた活性化モチーフ（ＩＴＡＭ）を含有する。阻害受容体ＦｃγＲＩＩＢは、細胞質ドメインに免疫受容体チロシンに基づいた阻害モチーフ（ＩＴＩＭ）を含有する。（例えば、Ｄａｅｒｏｎ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５：２０３−２３４（１９９７））．ＦｃＲｓ  ａｒｅ  ｒｅｖｉｅｗｅｄ，ｆｏｒ  ｅｘａｍｐｌｅ，ｉｎ  Ｒａｖｅｔｃｈ  ａｎｄ  Ｋｉｎｅｔ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ  ９：４５７−９２（１９９１）、Ｃａｐｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｍｅｔｈｏｄｓ  ４：２５−３４（１９９４）及びｄｅ  Ｈａａｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｌｉｎ．Ｍｅｄ．１２６：３３０−４１（１９９５）を参照すること）。今後特定されうるものを含む他のＦｃＲは、本明細書における用語「ＦｃＲ」に包含される。
【００８５】
用語「Ｆｃ受容体」または「ＦｃＲ」には、新生児受容体ＦｃＲｎも含まれ、これは、母系ＩｇＧの胎児への移行（Ｇｕｙｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１１７：５８７（１９７６）及びＫｉｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２４：２４９（１９９４））、ならびに免疫グロブリンの恒常性の制御に関与している。ＦｃＲｎへの結合を測定する方法は知られている（例えば、Ｇｈｅｔｉｅ  ａｎｄ  Ｗａｒｄ．，Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｔｏｄａｙ  １８（１２）：５９２−５９８（１９９７）、Ｇｈｅｔｉｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，１５（７）：６３７−６４０（１９９７）、Ｈｉｎｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７９（８）：６２１３−６２１６（２００４）、ＷＯ２００４／９２２１９（Ｈｉｎｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．）を参照すること）。
【００８６】
「エフェクター機能」は、抗体のＦｃ領域に起因する生物学的活性を指し、抗体のアイソタイプによって異なる。抗体エフェクター機能の例には、Ｃ１ｑ結合及び補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）、Ｆｃ受容体結合、抗体依存性細胞媒介細胞傷害（ＡＤＣＣ）、食作用、細胞表面受容体（例えば、Ｂ細胞受容体）の下方制御、ならびにＢ細胞活性化が含まれる。
【００８７】
「ヒトエフェクター細胞」は、１つ以上のＦｃＲを発現し、かつエフェクター機能を発揮する白血球である。いくつかの実施形態において、この細胞は、少なくともＦｃγＲＩＩＩを発現し、ＡＤＣＣエフェクター機能（複数可）を発揮する。ＡＤＣＣを媒介するヒト白血球の例には、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、単球、細胞傷害性Ｔ細胞及び好中球が含まれる。エフェクター細胞を、未変性源、例えば血液から単離することができる。
【００８８】
「抗体依存性細胞媒介細胞障害」または「ＡＤＣＣ」は、特定の細胞傷害性細胞（例えば、ＮＫ細胞、好中球及びマクロファージ）に存在するＦｃ受容体（ＦｃＲ）に結合した分泌Ｉｇが、これらの細胞傷害性エフェクター細胞が抗原担持標的細胞に特異的に結合し、続いて標的細胞を細胞毒素により死滅させることを可能にする形態の細胞傷害を指す。ＡＤＣＣを媒介する一次細胞であるＮＫ細胞は、ＦｃγＲＩＩＩのみを発現し、一方、単球は、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ及びＦｃγＲＩＩＩを発現する。造血細胞におけるＦｃＲ発現は、Ｒａｖｅｔｃｈ  ａｎｄ  Ｋｉｎｅｔ、Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．９：４５７−４９２（１９９１）の４６４頁の表３にまとめられている。目的の分子のＡＤＣＣ活性を評価するため、米国特許第５，５００，３６２号もしくは同第５，８２１，３３７号、または米国特許第６，７３７，０５６号（Ｐｒｅｓｔａ）に記載されているものなどの、インビトロＡＤＣＣアッセイを実施することができる。そのようなアッセイに有用なエフェクター細胞には、ＰＢＭＣ及びＮＫ細胞が含まれる。代替的または追加的に、目的の分子のＡＤＣＣ活性をインビボにおいて、例えば、Ｃｌｙｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．（ＵＳＡ）９５：６５２−６５６（１９９８）に開示されているものなどの動物モデルにおいて評価してもよい。変更Ｆｃ領域アミノ酸配列を有する追加的なポリペプチド変種（変種Ｆｃ領域を有するポリペプチド）及び増加または減少したＡＤＣＣ活性が、例えば、米国特許第７，９２３，５３８号及び米国特許第７，９９４，２９０号に記載されている。
【００８９】
「補体依存性細胞傷害」または「ＣＤＣ」は、補体の存在下での標的細胞の溶解を指す。伝統的な補体経路の活性化は、補体系の第１の構成要素（Ｃ１ｑ）が、同族抗原に結合した抗体（適切なサブクラスのもの）に結合することによって開始される。補正活性化を評価するため、例えば、Ｇａｚｚａｎｏ−Ｓａｎｔｏｒｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２０２：１６３（１９９６）に記載されている、ＣＤＣアッセイを実施することができる。変更Ｆｃ領域アミノ酸配列を有するポリペプチド変種（変種Ｆｃ領域を有するポリペプチド）及び増加または減少したＣ１ｑ結合能が、例えば、米国特許第６，１９４，５５１Ｂ１号、米国特許第７，９２３，５３８号、米国特許第７，９９４，２９０号及びＷＯ１９９９／５１６４２に記載されている。例えば、Ｉｄｕｓｏｇｉｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６４：４１７８−４１８４（２０００）も参照すること。
【００９０】
「変更」ＦｃＲ結合親和性またはＡＤＣＣ活性を有するポリペプチド変種は、親ポリペプチドまたは未変性配列Ｆｃ領域を含むポリペプチドと比較して、増強または縮小されたＦｃＲ結合活性及び／またはＡＤＣＣ活性のいずれかを有する。ＦｃＲに対して「増強した結合を示す」ポリペプチド変種は、親ポリペプチドより良好な親和性をもって少なくとも１つのＦｃＲと結合する。ＦｃＲに対して「減少した結合を示す」ポリペプチド変種は、親ポリペプチドより低い親和性をもって少なくとも１つのＦｃＲと結合する。そのような、ＦｃＲに対して減少した結合を示す変種は、ＦｃＲに評価可能な結合をほとんど、または全く有さないことがあり、例えば、未変性配列ＩｇＧ  Ｆｃ領域と比較してＦｃＲに対して０〜２０％の結合を有しうる。
【００９１】
親抗体より「有効に抗体依存性細胞媒介細胞障害をヒトエフェクター細胞の存在下で媒介する」ポリペプチド変種は、アッセイに使用されるポリペプチド変種及び親抗体の量が本質的に同じである場合、インビトロまたはインビボにおいてＡＤＣＣの媒介がより有効なものである。一般に、そのような変種は、本明細書に開示されているインビトロＡＤＣＣアッセイを使用して特定することができるが、ＡＤＣＣ活性を、例えば動物モデルなどにおいて決定する他のアッセイまたは方法が考慮される。
【００９２】
用語「実質的に類似している」または「実質的に同じである」は、本明細書に使用されるとき、当業者が、２つ以上の値の差に、その値により測定される生物学的特性の文脈の範囲内でほとんど、または全く生物学的及び／または統計的有意性がないと考慮するほど十分に高い程度の類似性が２つ以上の数値の間にあることを示す。いくつかの実施形態において、２つ以上の実質的に類似した値は、約５％以下、約１０％以下、約１５％以下、約２０％以下、約２５％以下、または約５０％以下のいずれか１つによる差がある。
【００９３】
語句「実質的に異なっている」は、本明細書に使用されるとき、当業者が、２つ以上の値の差に、その値により測定される生物学的特性の文脈の範囲内で統計的有意性があると考慮するほど十分に高い程度の差が２つの数値の間にあることを示す。いくつかの実施形態において、２つの実質的に異なる数値は、約１０％超、約２０％超、約２５％超、約３０％超、約３５％超、約４０％超、約４５％超、約５０％超、約６０％超、約７０％超、約８０％超、約９０％超、または約１００％超のいずれか１つによる差がある。
【００９４】
語句「実質的に低減された」は、本明細書に使用されるとき、当業者が、２つ値の差に、その値により測定される生物学的特性の文脈の範囲内で統計的有意性があると考慮するほど十分に高い程度の低減が数値と基準値の間にあることを示す。いくつかの実施形態において、実質的低減された数値は、基準値と比較して、約１０％超、約２０％超、約２５％超、約３０％超、約３５％超、約４０％超、約４５％超、約５０％超、約６０％超、約７０％超、約８０％超、約９０％超、または約１００％超のいずれか１つによる低減がある。
【００９５】
用語「リーダー配列」は、哺乳類細胞からポリペプチドの分泌を促進するポリペプチドのＮ末端に位置するアミノ酸残基の配列を指す。リーダー配列は、哺乳類細胞からのポリペプチドの搬出の際に切断されて、成熟タンパク質が形成される。リーダー配列は、天然または合成であり、それらが結合するタンパク質と異質または同質でありうる。
【００９６】
「未変性配列」ポリペプチドは、天然に見出されるポリペプチドと同じアミノ酸配列を有するポリペプチドを含む。したがって、未変性配列ポリペプチドは、任意の哺乳動物の天然に生じるポリペプチドのアミノ酸配列を有することができる。そのような未変性配列ポリペプチドを天然のものから単離することができる、または組み換え、もしくは合成手段により産生することができる。用語「未変性配列」ポリペプチドは、天然に生じる切断または分泌形態のポリペプチド（例えば、細胞外ドメイン配列）、ポリペプチドの天然に生じる変種形態（例えば、代替的スプライス形態）及び天然に生じる対立遺伝子変種を特異的に包含する。
【００９７】
ポリペプチド「変種」は、必要であれば配列同一性の最大率を達成するため、配列を整列させ、ギャップを導入した後に、あらゆる保存的置換を配列同一性の一部と考慮しないで、未変性配列ポリペプチドと少なくとも約８０％のアミノ酸配列同一性を有する生物学的に活性なポリペプチドを意味する。そのような変種には、例えば、１個以上のアミノ酸残基がポリペプチドのＮまたはＣ末端に付加または欠失されているポリペプチドが含まれる。いくつかの実施形態において、変種は、少なくとも約８０％のアミノ酸配列同一性を有する。いくつかの実施形態において、変種は、少なくとも約９０％のアミノ酸配列同一性を有する。いくつかの実施形態において、変種は、未変性配列ポリペプチドと少なくとも約９５％のアミノ酸配列同一性を有する。
【００９８】
本明細書に使用されるとき、ペプチド、ポリペプチド、または抗体配列に対する「アミノ酸配列同一性の率（％）」または「相同性」は、必要であれば配列同一性の最大率を達成するため、配列を整列し、ギャップを導入した後の、特定のペプチドまたはポリペプチド配列のアミノ酸残基と同一である候補配列のアミノ酸残基の百分率と定義され、あらゆる保存的置換を配列同一性の一部として考慮していない。アミノ酸配列同一性の率を決定する目的の整列は、当該技術の技能の範囲内の様々な方法により、例えば、ＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ−２、ＡＬＩＧＮ、またはＭＥＧＡＬＩＧＮ（商標）（ＤＮＡＳＴＡＲ）ソフトウエアなどの公開されているコンピューターソフトウエアを使用して達成することができる。当業者は、比較される配列の完全長に対して最大限の整列を達成するために必要な任意のアルゴリズムを含む、整列を測定するのに適切なパラメーターを決定することができる。
【００９９】
アミノ酸置換には、ポリペプチドの１個のアミノ酸が別のアミノ酸に置き換えられていることが含まれうるが、これに限定されない。例示的な置換を表１に示す。アミノ酸置換を目的の抗体に導入し、産物を、所望の活性、例えば、抗原結合の保持／改善、免疫原性の減少、またはＡＤＣＣもしくはＣＤＣの改善について選別することができる。
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【０１００】
アミノ酸を共通の側鎖特性によって分類することができる。
（１）疎水性：ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ；
（２）中立的親水性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ；
（３）酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ；
（４）塩基性：Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ；
（５）鎖配向に影響を及ぼす残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ；
（６）芳香族：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ。
【０１０１】
非保存的置換は、これらのクラスのうちの多数を別のクラスと交換することを必然的に伴う。
【０１０２】
用語「ベクター」は、クローン化ポリヌクレオチドを含有する、または宿主細胞に繁殖されうるポリヌクレオチドを含有するように改変することができるポリヌクレオチドを記載するために使用される。ベクターは、以下の要素の１つ以上を含むことができる。複製起点、目的のポリペプチドの発現を制御する１つ以上の制御配列（例えば、プロモーター及び／もしくはエンハンサーなど）、ならびに／または１つ以上の選択的マーカー遺伝子（例えば、抗生物質抵抗性遺伝子、及び比色アッセイに使用されうる遺伝子、例えばβ−ガラクトシダーゼなど）。用語「発現ベクター」は、宿主細胞において目的のポリペプチドを発現させるために使用されるベクターを指す。
【０１０３】
「宿主細胞」は、ベクターまたは単離ポリヌクレオチドの受容者でありうる、または受容者となっている細胞を指す。宿主細胞は、原核細胞または真核細胞でありうる。例示的な真核細胞には、霊長類または非霊長類の動物細胞などの哺乳類細胞、酵母などの真菌細胞、植物細胞及び昆虫細胞が含まれる。非限定的な例示の哺乳類細胞には、ＮＳＯ細胞、ＰＥＲ．Ｃ６（登録商標）細胞（Ｃｒｕｃｅｌｌ）、ならびに２９３及びＣＨＯ細胞、及びそれぞれ２９３−６Ｅ及びＤＧ４４細胞などのこれらの誘導体が含まれるが、これらに限定されない。宿主細胞には、単一宿主細胞の継代が含まれ、継代は、天然の、偶発的な、または意図的な突然変異に起因して、必ずしも元の親細胞と（形態的に、または遺伝子ＤＮＡ補正的に）完全に同一であるとは限らないことがある。宿主細胞には、本明細書に提供されているポリヌクレオチド（複数可）によりインビボで形質移入された細胞が含まれる。
【０１０４】
用語「単離された」は、本明細書に使用されるとき、天然に典型的に見出される、または産生される構成要素の少なくとも一部から分離されている分子を指す。例えば、ポリペプチドは、それが産生された細胞の構成要素の少なくとも一部から分離されている場合に、「単離された」と呼ばれる。ポリペプチドが発現後に細胞によって分泌され、ポリペプチドが含有されている上澄みを、それが産生された細胞から物理的に分離する場合、ポリペプチドを「単離する」と考慮される。同様に、ポリヌクレオチドは、典型的には天然に見出される大型のポリヌクレオチド（例えば、ＤＮＡポリヌクレオチドの場合、ゲノムＤＮＡもしくはミトコンドリアＤＮＡなど）の一部ではないとき、または例えばＲＮＡポリヌクレオチド場合、産生された細胞の構成要素の少なくとも一部から分離されているとき、「単離された」と呼ばれる。したがって、宿主細胞内のベクターに含有されているＤＮＡポリヌクレオチドを、「単離された」と呼ぶことができる。
【０１０５】
用語「個体」または「対象」は、動物、例えば哺乳動物を指すために、本明細書において交換可能に使用される。いくつかの実施形態では、ヒト、齧歯類、サル、ネコ、イヌ、ウマ、ウシ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、哺乳類実験動物、哺乳類家畜、哺乳類競技用動物（ｓｐｏｒｔ  ａｎｉｍａｌｓ）及び哺乳類愛玩動物が含まれるが、これらに限定されない哺乳動物の治療方法が提供される。いくつかの実施形態において、「個体」または「対象」は、疾患または障害の治療が必要な個体または対象を指す。いくつかの実施形態において、治療を受ける対象は患者であり、対象が治療に関連する障害を有する、または障害に罹患する妥当な危険性があると特定されるという事実を示している。
【０１０６】
「疾患」または「障害」は、本明細書に使用されるとき、治療が必要である、及び／または望ましい状態を指す。
【０１０７】
「癌」及び「腫瘍」は、本明細書に使用されるとき、動物における任意の異常な細胞または組織の増殖または繁殖を指す、交換可能な用語である。本明細書に使用されるとき、用語「癌」及び「腫瘍」は、固形及び血液／リンパ性癌を包含し、悪性、前癌性及び異形成などの良性の増殖も包含する。癌の例には、癌腫、リンパ腫、芽細胞、肉腫及び白血病が含まれるが、これらに限定されない。そのような癌のより詳細な非限定例には、扁平上皮癌、小細胞肺癌、下垂体癌、食道癌、星状細胞腫、軟部組織肉腫、非小細胞肺癌、肺腺癌、肺扁平上皮癌、腹膜癌、肝細胞癌、胃腸癌、膵癌、神経膠芽腫、子宮頸癌、卵巣癌、肝臓癌（ｌｉｖｅｒ  ｃａｎｃｅｒ）、膀胱癌、肝細胞腫、乳癌、結腸癌、結腸直腸癌、子宮内膜または子宮癌、唾液腺癌、腎臓癌（ｋｉｄｎｅｙ  ｃａｎｃｅｒ）、腎癌（ｒｅｎａｌ  ｃａｎｃｅｒ）、肝臓癌（ｌｉｖｅｒ  ｃａｎｃｅｒ）、前立腺癌、外陰部癌、甲状腺癌、肝癌（ｈｅｐａｔｉｃ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、脳癌、子宮内膜癌、精巣癌、胆管細胞癌、胆嚢癌、胃癌、黒色腫及び様々な種類の頭頸部癌が含まれる。
【０１０８】
本明細書に使用されるとき、「治療」は、有益な、または望ましい臨床結果を得る手法である。「治療」は、本明細書に使用されるとき、ヒトを含む哺乳動物の疾患への治療薬の任意の投与または適用を網羅する。本開示の目的において、有益な、または望ましい臨床結果には、１つ以上の症状の寛解、疾患の程度の縮小、疾患の拡散（例えば、転移、例えば肺またはリンパ節への転移）の予防または遅延、疾患の再発の予防または遅延、疾患の進行の遅延または緩徐、疾患状態の寛解、疾患または疾患の進行の抑制、疾患またはその進行の抑制または緩徐、その発生の阻止、及び軽快（部分的または完全な）のいずれか１つ以上が含まれるが、これらに限定されない。繁殖性疾患の病理的帰結の低減も、「治療」に包含される。本明細書に提供されている方法は、これらの治療の態様のいずれか１つ以上を考慮する。上記を踏まえて、治療という用語は、障害の全ての態様の百パーセントの取り除きを必要としない。
【０１０９】
「寛解」は、抗ＩＣＯＳ抗体の投与なしと比較した、１つ以上の症状における軽減または改善を意味する。「寛解」には、症状の持続期間の短縮または低減も含まれる。
【０１１０】
癌の文脈において、用語「治療する」には、癌細胞の増殖を抑制すること、癌細胞の複製を抑制すること、全体的な腫瘍量を軽減すること及び疾患に関連する１つ以上の症状を寛解することのいずれか、または全てが含まれる。
【０１１１】
用語「生物学的試料」は、生物から、または以前は生きていたものからの物質のある特定の量を意味する。そのような物質には、血液（例えば、全血）、血漿、血清、尿、羊水、髄液、内皮細胞、白血球、単球、他の細胞、臓器、組織、骨髄、リンパ節及び脾臓が含まれるが、これらに限定されない。
【０１１２】
「高レベルのＩＣＯＳ」を有する、または「高レベルでＩＣＯＳを発現する」、または「ＩＣＯＳ高」である試料は、当業者が、癌が本明細書に提供されている抗体などの抗ＩＣＯＳ療法によって治療可能でありうると結論づけるようなレベルのＩＣＯＳを意味する。いくつかの実施形態において、「高レベルのＩＣＯＳ」は、腫瘍試料内の細胞の１％がＩＣＯＳの染色を示すものである。いくつかの実施形態において、ＩＣＯＳに関して「高レベル」とは、１％以上の染色、例えば、腫瘍試料内の細胞の１、５、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、または１００％が染色を示すことである。いくつかの実施形態において、ＩＣＯＳレベルは、色素産生性ＩＨＣまたは免疫蛍光ＩＨＣ（Ａｑｕａスコア付け）によって測定することができる。
【０１１３】
「ＩＣＯＳを発現する」、または「ＩＣＯＳの陽性染色」を有する、または「ＩＣＯＳ陽性」である試料は、試料の中の１％以上の細胞が、ＩＣＯＳの染色を示すことを意味する。いくつかの実施形態において、ＩＣＯＳ陽性である試料は、少なくとも弱い、中程度の、及び／または強い細胞染色（ＩＣＯＳの膜発現に基づく）を示す。ＩＣＯＳの中程度または強い細胞染色を有する試料も、「ＩＣＯＳ高」と考慮される。
【０１１４】
「低レベルのＰＤ−Ｌ１」を有する、または「低レベルでＰＤ−Ｌ１」を発現する、または「ＰＤ−Ｌ１低」である試料は、ＰＤ−Ｌ１のレベルが、通常はＰＤ−１療法による治療が指示される癌の閾値レベルまたは発現を下回ることを意味する。いくつかの実施形態において、「低レベルのＰＤ−Ｌ１」は、腫瘍試料内の細胞の５％未満がＰＤ−Ｌ１の膜染色を示すものである。いくつかの実施形態において、ＰＤ−Ｌ１に関して「低レベル」とは、５％未満の染色、例えば、腫瘍の細胞の４％、３％、２％、１％、または０％が染色を示すことである。いくつかの実施形態において、ＰＤ−Ｌ１レベルは、色素産生性ＩＨＣまたは免疫蛍光ＩＨＣ（Ａｑｕａスコア付け）によって測定することができる。検出可能ではないＰＤ−Ｌ１を発現する試料も、「低レベルのＰＤ−Ｌ１を発現する」と言うことができる。したがって、検出可能ではないＰＤ−Ｌ１が、用語「低」の範囲内に包含される。
【０１１５】
「高レベルのＰＤ−Ｌ１」を有する、または「高レベルでＰＤ−Ｌ１を発現する」、または「ＰＤ−Ｌ１高」である試料は、当業者が、癌が抗ＰＤ−１療法によって治療可能でありうると結論づけるようなレベルのＰＤ−Ｌ１を意味する。いくつかの実施形態において、「高レベルのＰＤ−Ｌ１」は、腫瘍の細胞の５％以上がＰＤ−Ｌ１の膜染色を示すものである。いくつかの実施形態において、ＰＤ−Ｌ１に関して「高レベル」とは、５％以上の染色、例えば、腫瘍細胞の５、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、または１００％が染色を示すことである。いくつかの実施形態において、ＰＤ−Ｌ１レベルは、色素産生性ＩＨＣまたは免疫蛍光ＩＨＣ（Ａｑｕａスコア付け）によって測定することができる。
【０１１６】
「ＰＤ−Ｌ１を発現する」、または「ＰＤ−Ｌ１の陽性染色」を有する、またはＰＤ−Ｌ１陽性」である試料は、１％以上の細胞が、ＰＤ−Ｌ１の膜染色を有することを意味する。いくつかの実施形態において、ＰＤ−Ｌ１陽性である試料は、少なくとも弱い、中程度の、及び／または強い細胞染色（ＰＤ−Ｌ１の膜発現に基づく）を示す。ＰＤ−Ｌ１の中程度または強い細胞染色を有する試料も、「ＰＤ−Ｌ１高」と考慮される。
【０１１７】
「ＰＤ−Ｌ１発現を欠いている」、または「ＰＤ−Ｌ１の陰性染色」を有する、または「ＰＤ−Ｌ１陰性」である試料は、試料の細胞表面のＰＤ−Ｌ１発現が、色素産生性ＩＨＣまたは免疫蛍光ＩＨＣ（Ａｑｕａスコア付け）などのＩＨＣにより検出不能であることを意味する。ＰＤ−Ｌ１陰性試料も、「ＰＤ−Ｌ１低」と考慮される。
【０１１８】
いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１のレベルを測定する任意の方法を用いることができる。いくつかの実施形態において、これには、ＰＤ−Ｌ１  ＩＨＣ  ２２Ｃ３  ｐｈａｒｍＤｘ試験（Ｄａｋｏ  Ｉｎｃ．，Ｃａｒｐｉｎｔｅｒｉａ，ＣＡ）の使用が含まれ、これは、ＮＳＣＬＣにおけるＰＤ−Ｌ１の発現を評価する、臨床的に検証され、ＦＤＡにより承認された試験である。ＰＤ−Ｌ１  ＩＨＣ  ２２Ｃ３  ｐｈａｒｍＤｘは、モノクローナルマウス抗ＰＤ−Ｌ１抗体（クローン２２Ｃ３）を使用する定性的免疫組織化学アッセイであり、これを、ホルマリン固定パラフィン包埋（ＦＦＰＥ）非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）組織におけるＰＤ−Ｌ１タンパク質の検出に使用することができる。このアッセイをＡｕｔｏｓｔａｉｎｅｒ  Ｌｉｎｋ  ４８システムにより実施することができ、ＥｎＶｉｓｉｏｎ  ＦＬＥＸシステムを使用して可視化することができる。ＰＤ−Ｌ１タンパク質発現は、Ｔｕｍｏｒ  Ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎ  Ｓｃｏｒｅ（ＴＰＳ）を使用して定量化し、これは、部分的または完全な膜染色を示す生存腫瘍細胞の百分率である。いくつかの実施形態において、試験片は、ＴＰＳ≧５０％の生存腫瘍細胞が任意の強度で膜染色を示す場合に、ＰＤ−Ｌ１陽性である考慮される。ＰＤ−Ｌ１  ＩＨＣ  ２２Ｃ３  ｐｈａｒｍＤｘは、ＮＳＣＬＣ患者をＫＥＹＴＲＵＤＡ（登録商標）（ペムブロリズマブ）による治療のために特定する助けとして示されている。スコア付けシステム及びペムブロリズマブへの応答についての追加的な詳細は、Ｇａｒｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ２０１５；３７２：２０１８−２８）による論文に記載されている。いくつかの実施形態において、ＮＳＣＬＣ患者の試験片は、Ｔｕｍｏｒ  Ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎ  Ｓｃｏｒｅが≧５０％の生存腫瘍細胞が、任意の強度（すなわち、≧１＋）で膜染色（部分的または全体的）を示す場合に、ＰＤ−Ｌ１発現が陽性であると考慮することができる。いくつかの実施形態において、これは、抗体クローン２２Ｃ３に関して特異的でありうる。いくつかの実施形態において、ＴＰＳ＝５％〜５０％の生存腫瘍細胞が任意の強度で膜染色を示す場合、試料及び／または患者は、ＰＤ−Ｌ１陽性であると考慮される。いくつかの実施形態において、ＴＰＳ≧５０％の生存腫瘍細胞が任意の強度で膜染色を示す場合、試料及び／または患者は、ＰＤ−Ｌ１高であると考慮される。
【０１１９】
用語「対照」は、分析物を含有しない（「陰性対照」）または分析物を含有する（「陽性対照」）ことが知られている組成物を指す。陽性対照は、既知の濃度の分析物を含むことができる。「対照」、「陽性対照」及び「標準物質（ｃａｌｉｂｒａｔｏｒ）」は、既知の濃度の分析物を含む組成物を参照するために本明細書において交換可能に使用されうる。「陽性対照」を使用して、アッセイの性能特性を確立することができ、試薬（例えば、分析物）の整合性の指標として有用である。
【０１２０】
「所定のカットオフ」及び「所定レベル」は、所定のカットオフ／レベルが既に様々な臨床パラメーター（例えば、疾患の重篤度、進行／非進行／改善など）と関連または関係づけられている所定のカットオフ／レベルに対するアッセイ結果と比較することによって、診断／予後／治療効力の結果を評価するために使用されるアッセイカットオフ値を一般に指す。本開示は例示的な所定レベルを提供するが、カットオフ値は、免疫アッセイの性質（例えば、用いられる抗体など）に応じて変わりうることが良く知られている。更に、本明細書の開示を他の免疫アッセイに適合させて、本開示に基づいて他の免疫アッセイのために免疫アッセイ特異的カットオフ値を得ることは、十分に当業者の範囲内である。所定のカットオフ／レベルの正確な値は、アッセイの間で変わりうるが、本明細書に記載されている相関関係（存在する場合）が一般に適用可能でありうる。
【０１２１】
用語「抑制」または「抑制する」は、任意の表現型特性の減少もしくは休止、またはその特性の発生、程度、もしくは可能性の減少もしくは休止を指す。「低減する」または「抑制する」ことは、基準と比較して、活性、機能及び／または量を減少する、低減する、または阻止することである。いくつかの実施形態において、「低減する」または「抑制する」とは、２０％以上の全体的な減少を引き起こす能力を意味する。いくつかの実施形態において、「低減する」または「抑制する」とは、５０％以上の全体的な減少を引き起こす能力を意味する。いくつかの実施形態において、「低減する」または「抑制する」とは、７５％、８５％、９０％、９５％、またはそれ以上の全体的な減少を引き起こす能力を意味する。いくつかの実施形態において、上記に示された量は、同じ期間にわたって、対照用量（例えば、プラセボ）と比べて経時的に抑制されている、または減少している。「基準」は、本明細書に使用されるとき、比較の目的に使用される任意の試料、標準、またはレベルを指す。基準は、健康な及び／または非疾患の試料から得ることができる。いくつかの例において、基準は、未処理試料から得ることができる。いくつかの例において、基準は、対象個体の未処理試料の非疾患のものから得られる。いくつかの例において、基準は、対象または患者ではない１体以上の健康な個体から得られる。
【０１２２】
本明細書に使用されるとき、「疾患の発生を遅延する」は、疾患（例えば、癌）の発生の延期、妨害、緩徐、延滞、安定化、抑圧、及び／または順延を意味する。この遅延は、疾患及び／または治療される個体の病歴に応じて異なる時間の長さでありうる。当業者には明らかなように、十分または有意な遅延は、事実、予防を包含し、すなわち、個体が疾患を発生しない。例えば、転移の発生などの後期癌を遅延させることができる。
【０１２３】
「予防」は、本明細書に使用されるとき、疾患に罹患しやすくなっているが、疾患が診断されていない対象において、疾患の出現または再発に関して予防を提供することを含む。特定されない限り、用語「低減する」、「抑制する」、または「予防する」は、常時の完全な予防を示す、または必要とするものではない。
【０１２４】
本明細書に使用されるとき、機能または活性を「抑圧する」とは、目的の条件またはパラメーターを除く以外は同じ条件下で比較した場合、あるいは別の条件下で比較して、機能または活性を低減することである。例えば、腫瘍増殖を抑圧する抗体は、抗体の不在下での腫瘍の増殖速度と比較して、腫瘍の増殖速度を低減する。
【０１２５】
物質／分子、作動薬、または拮抗薬の「治療有効量」は、疾患状態、個体の年齢、性別及び体重、ならびに個体において望ましい応答を発揮する物質／分子、作動薬、または拮抗薬の能力などの要因によって変わりうる。また治療有効量は、物質／分子、作動薬、または拮抗薬の任意の毒性または有害作用を、治療有益効果が上回るものである。治療有効量は、１回以上の投与によって送達されうる。治療有効量は、望ましい治療及び／または予防の結果を、必要な投与量及び期間で達成するのに有効な量を指す。
【０１２６】
「予防有効量」は、望ましい予防の結果を、必要な投与量及び期間で達成するのに有効な量を指す。典型的には、予防用量が対象において疾患の前または初期段階に使用されるので、予防有効量は、治療有効量よりも少ないが、これに限られたものではない。
【０１２７】
用語「薬学的製剤」及び「薬学的組成物」は、活性成分（複数可）の生物学的活性が有効であることを許容するような形態である及び製剤が投与される対象に許容されない毒性がある追加の構成成分を含有しない、調合剤を指す。そのような製剤は、滅菌でありうる。
【０１２８】
「薬学的に許容される担体」は、対象に投与される「薬学的組成物」を一緒になって構成する、治療剤と共に当該技術において慣用的に使用される非毒性で固体、半固体、または液体の充填剤、希釈剤、カプセル化材料、製剤補助剤、または担体を指す。薬学的に許容される担体は、用いられる投与量及び濃度で受容者に対して非毒性であり、製剤の他の成分と適合している。薬学的に許容される担体は、用いられる製剤に適したものである。
【０１２９】
「滅菌」製剤は、無菌である、または生存微生物及びそれらの胞子を実質的に含まない。
【０１３０】
「ＰＤ−１療法」は、ＰＤ−Ｌ１及び／またはＰＤ−Ｌ２へのＰＤ−１の結合を調節する任意の療法を包含する。ＰＤ−１療法は、例えば、ＰＤ−１及び／またはＰＤ−Ｌ１と直接相互作用することができる。いくつかの実施形態において、ＰＤ−１療法は、ＰＤ−１に直接結合する及び／またはＰＤ−１の活性に影響を及ぼす、分子を含む。いくつかの実施形態において、ＰＤ−１療法は、ＰＤ−Ｌ１に直接結合する及び／またはＰＤ−Ｌ１の活性に影響を及ぼす、分子を含む。したがって、ＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１に結合する及びＰＤ−１とＰＤ−Ｌ１の相互作用を遮断する抗体は、ＰＤ−１治療薬である。望ましいＰＤ−１療法のサブタイプが意図される場合、ＰＤ−１と直接相互作用する分子を伴う療法に「ＰＤ−１特異的」、またはＰＤ−Ｌ１と直接相互作用する分子に「ＰＤ−Ｌ１特異的」という語句が、適宜に指定される。特定されない限り、ＰＤ−１療法に関して本明細書に含有されている全ての開示は、ＰＤ−１の一般的療法に、ならびにＰＤ−１特異的及び／またはＰＤ−Ｌ１特異的療法に当てはまる。非限定的な例示のＰＤ−１療法には、ニボルマブ（抗ＰＤ−１抗体、ＢＭＳ−９３６５５８、ＭＤＸ−１１０６、ＯＮＯ−４５３８；ＯＰＤＩＶＯ（登録商標）、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ピディリズマブ（抗ＰＤ−１抗体、ＣｕｒｅＴｅｃｈ）、ペムブロリズマブ（抗ＰＤ−１抗体、ＫＥＹＴＲＵＤＡ（登録商標）、ＭＫ−３４７５、ランブロリズマブ）、デュルバルマブ（抗ＰＤ−Ｌ１抗体、ＭＥＤＩ−４７３６、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ／ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ）、ＲＧ−７４４６、ＭＳＢ−００１０７１８Ｃ、ＡＭＰ−２２４、ＢＭＳ−９３６５５９（抗ＰＤ−Ｌ１抗体、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ＡＭＰ−５１４、ＭＤＸ−１１０５、ＡＮＢ−０１１、抗ＬＡＧ−３／ＰＤ−１、抗ＰＤ−１Ａｂ（ＣｏＳｔｉｍ）、抗ＰＤ−１Ａｂ（Ｋａｄｍｏｎ  Ｐｈａｒｍ．）、抗ＰＤ−１Ａｂ（Ｉｍｍｕｎｏｖｏ）、抗ＴＩＭ−３／ＰＤ−１Ａｂ（ＡｎａｐｔｙｓＢｉｏ）、抗ＰＤ−Ｌ１Ａｂ（ＣｏＳｔｉｍ／Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、アテゾリズマブ（抗ＰＤ−Ｌ１抗体、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／Ｒｏｃｈｅ）、アベルマブ（抗ＰＤ−Ｌ１抗体、ＭＳＢ００１０７１８Ｃ、Ｐｆｉｚｅｒ）、ＫＤ−０３３、ＰＤ−１作動薬（Ａｇｅｎｕｓ）、ＳＴＩ−Ａ１０１０、ＳＴＩ−Ａ１１１０、ＴＳＲ−０４２、及びプログラム死−１（ＤＰ−１）またはプログラム死リガンド１（ＰＤ−Ｌ１）に向けられている他の抗体が含まれる。
【０１３１】
用語「ＩＤＯ阻害剤」は、インドールアミン２，３−ジオキシゲナーゼ（ＩＤＯ）の活性を抑制することができる、それによって、ＩＤＯ媒介免疫抑制を逆転することができる作用物質を指す。ＩＤＯ阻害剤は、ＩＤＯ１及び／またはＩＤＯ２（ＩＮＤＯＬ１）を抑制することができる。ＩＤＯ阻害剤は、可逆的または非可逆的ＩＤＯ阻害剤でありうる。「可逆的ＩＤＯ阻害剤」は、ＩＤＯ酵素活性を、触媒部位または非触媒部位のいずれかにおいて可逆的に抑制する化合物であり、「非可逆的ＩＤＯ阻害剤」は、ＩＤＯ酵素活性を、酵素と共有結合を形成することによって非可逆的に抑制する化合物である。非限定的な例示のＩＤＯ阻害剤には、Ｉｎｄｏｘｉｍｏｄ（Ｎｅｗ  Ｌｉｎｋ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ）、ＩＮＣＢ０２４３６０（Ｉｎｃｙｔｅ  Ｃｏｒｐ）、１−メチル−Ｄ−トリプトファン（Ｎｅｗ  Ｌｉｎｋ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ）及びＧＤＣ−０９１９（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ  Ｃｏｒｐ．）が含まれる。
【０１３２】
「キメラ抗原受容体Ｔ細胞療法」または「ＣＡＲ−Ｔ療法」は、腫瘍細胞により発現された抗原を認識する受容体を発現するように遺伝子修飾されたＴ細胞を含む、治療剤を指す。抗原は、腫瘍により特異的に発現された抗原、または癌性細胞と健康な組織の両方によって発現された抗原でありうる。いくつかの実施形態において、ＣＡＲ−Ｔ療法は、養子ＣＡＲ−Ｔ療法であり、ここでは、患者のＴ細胞が取り出され、キメラ抗原受容体を発現するように修飾され、患者に戻される。例えば、Ｄａｉ  ｅｔ  ａｌ．，２０１６，Ｊ  Ｎａｔｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ，１０８（７）：ｄｊｖ４３９，ｄｏｉ：１０．１０９３／ｊｎｃｉ／ｄｊｖ４３９、Ｇｉｌｌ  ｅｔ  ａｌ．，２０１５，Ｂｌｏｏｄ  Ｒｅｖ，ｐｉｉ：Ｓ０２６８−９６０Ｘ（１５）０００８０−６，ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｂｌｒｅ．２０１５．１０．００３、Ｇｉｌｌ  ｅｔ  ａｌ．，２０１５，Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｒｅｖ，２６３（１）：６８−８９．ｄｏｉ：１０．１１１１／ｉｍｒ．１２２４３を参照すること。
【０１３３】
１つ以上の更なる治療剤「と組み合わせた」投与には、同時（同時発生的）及び任意の順番による連続または順次投与が含まれる。
【０１３４】
用語「同時発生的」は、投与の少なくとも一部分が時間的に重複している、または一方の治療剤の投与が他方の治療の投与よりも短い時間の範囲内である、２つ以上の治療剤の投与を指すために本明細書において使用される。例えば、２つ以上の治療剤は、ほぼ特定の分数を超えない時間間隔で投与される。
【０１３５】
用語「順次」は、１つ以上の作用物質（複数可）の投与が１つ以上の他の作用物質（複数可）の投与の中断後に続けられる、または１つ以上の作用物質（複数可）の投与が１つ以上の他の作用物質（複数可）の投与後に開始される、２つ以上の治療剤の投与を指すために本明細書において使用される。例えば、２つ以上の治療剤の投与は、ほぼ特定の分数を超える時間間隔で投与される。
【０１３６】
本明細書に使用されるとき、「と共に」は、１つの治療様式を別の治療様式に加えて投与することを指す。このように、「と共に」は、１つの治療様式を別の治療様式の投与の前、間、または後に個体に投与することを指す。
【０１３７】
用語「添付文書」は、市販の治療製品の包装に慣用的に含まれる使用説明書を指すために使用され、適応症、用法、投与量、投与、併用療法、禁忌及び／またはそのような治療製品の使用に関する警告を含む。
【０１３８】
「製造品」は、少なくとも１つの試薬、例えば、疾患もしくは障害（例えば、癌）の治療用医薬、または本明細書に記載されているバイオマーカーを特異的に検出するプローブを含む、任意の製造物（例えば、包装もしくは容器）、またはキットである。いくつかの実施形態において、製造物またはキットは、本明細書に記載されている方法を実施する単位として奨励、分布、または販売される。
【０１３９】
用語「標識」及び「検出可能標識」は、特定の結合対のメンバーの間の反応（例えば、結合）を検出可能にする、抗体またはその分析物に結合した部分を意味する。特定の結合対の標識されたメンバーは、「検出可能に標識されている」と呼ばれる。このように、用語「標識結合タンパク質」は、結合タンパク質の特定をもたらす標識が組み込まれたタンパク質を指す。いくつかの実施形態において、標識は、視覚的に、または器具を用いて検出可能なシグナルを生成することができる検出可能マーカーであり、例えば、放射標識アミノ酸の組み込み、またはマーク付きアビジン（例えば、光学的もしくは比色的な方法により検出できる蛍光マーカーもしくは酵素活性を含有するストレプトアビジン）により検出されうるビオチニル部分のポリペプチドへの結合である。ポリペプチドへの標識の例には、以下が含まれるが、これらに限定されない。放射性同位体または放射性核種（例えば、３Ｈ、１４Ｃ、３５Ｓ、９０Ｙ、９９Ｔｃ、１１１Ｉｎ、１２５Ｉ、１３１Ｉ、１７７Ｌｕ、１６６Ｈｏ、または１５３Ｓｍ）、色原体、蛍光標識（例えば、ＦＩＴＣ、ローダミン、ランタニドリン光体）、酵素標識（例えば、ホースラデッシュペルオキシダーゼ、ルシフェラーゼ、アルカリホスファターゼ）、化学発光マーカー、ビオチニル基、二次レポーターにより認識された所定のポリペプチドエピトープ（例えば、ロイシンジッパー対配列、二次抗体の結合部位、金属結合ドメイン、エピトープタグ）及びガドリニウムキレートなどの磁性作用物質。免疫アッセイに一般的に用いられる標識の代表例には、光を生成する部分、例えばアクリジニウム化合物、及び蛍光を生成する部分、例えばフルオレセインが含まれる。この点について、この部分は、それ自体検出可能に標識されていなくてもよく、別の部分との反応によって検出可能になりうる。
【０１４０】
用語「抱合体」は、治療剤または細胞傷害剤などの第２の化学部分に化学的に連結している抗体を指す。用語「作用物質」には、化合物、化合物の混合物、生物学的巨大分子、または生物学的材料から作製された抽出物が含まれる。いくつかの実施形態において、治療剤または細胞傷害剤には、百日咳毒素、タキソール、サイトカラシンＢ、グラミシジンＤ、臭化エチジウム、エメチン、マイトマイシン、エトポシド、テニポシド、ビンクリスチン、ビンブラスチン、コルヒチン、ドキソルビシン、ダウノルビシン、ジヒドロキシアントラセンジオン、ミトキサントロン、ミスラマイシン、アクチノマイシンＤ、１−ジヒドロテストステロン、グルココルチコイド、プロカイン、テトラカイン、リドカイン、プロプラノロール、ならびにピューロマイシン及びその類縁体または相同体が含まれるが、これらに限定されない。免疫アッセイの文脈において用いられるとき、抱合抗体は、検出抗体として使用される検出可能標識抗体でありうる。
【０１４１】
ＩＩ．抗ＩＣＯＳ抗体
ＩＣＯＳに対して向けられた新規抗体が提供される。抗ＩＣＯＳ抗体には、ヒト化抗体、キメラ抗体、マウス抗体、ヒト抗体、ならびに本明細書に考察された重鎖及び／または軽鎖ＣＤＲを含む抗体が含まれるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態において、ＩＣＯＳに結合する単離抗体が提供される。いくつかの実施形態において、ＩＣＯＳに結合するモノクローナル抗体が提供される。いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、作動薬抗ＩＣＯＳ抗体である。いくつかの実施形態において、本明細書に記載されている抗ＩＣＯＳ抗体の投与は、Ｔｅｆｆ細胞の数を増加させる、Ｔｅｆｆ細胞を活性化する、対象においてＴｒｅｇ細胞を枯渇させる、及び／またはＴｅｆｆ細胞とＴｒｅｇ細胞の比を増加させる。いくつかの実施形態において、Ｔｒｅｇ細胞は、ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３＋  Ｔ細胞である。いくつかの実施形態において、Ｔｅｆｆ細胞は、ＣＤ８＋  Ｔ細胞である。いくつかの実施形態において、Ｔｅｆｆ細胞は、ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３−  Ｔ細胞及びＣＤ８＋  Ｔ細胞である。
【０１４２】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（ａ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号１４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３から選択される少なくとも１、２、３、４、５または６つのＣＤＲを含む。
【０１４３】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（ａ）配列番号４２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号４３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号４６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号４７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３から選択される少なくとも１、２、３、４、５または６つのＣＤＲを含む。
【０１４４】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（ａ）配列番号６２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号６３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号６４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号６５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号６６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号６７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含む６つのＣＤＲを含む。
【０１４５】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（ａ）配列番号２２、６２、７２、８２、９２、１０２及び１１２から選択されるアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号２３、６３、７３、８３、９３、１０３及び１１３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号２４、６４、７４、８４、９４、１０４及び１１４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号２５、６５、７５、８５、９５、１０５及び１１５から選択されるアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号２６、６６、７６、８６、９６、１０６及び１１６から選択されるアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、ならびに（ｆ）配列番号２７、６７、７７、８７、９７、１０７及び１１７から選択されるアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３から選択される少なくとも１、２、３、４、５または６つのＣＤＲを含む。
【０１４６】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（ａ）配列番号３２、１６２、１７２及び１８２から選択されるアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号３３、１６３、１７３及び１８３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号３４、１６４、１７４及び１８４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号３５、１６５、１７５及び１８５から選択されるアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号３６、１６６、１７６及び１８６から選択されるアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、ならびに（ｆ）配列番号３７、１６７、１７７及び１８７から選択されるアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３から選択される少なくとも１、２、３、４、５または６つのＣＤＲを含む。
【０１４７】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（ａ）配列番号５２、１２２、１３２、１４２及び１５２から選択されるアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号５３、５３、１２３、１３３、１４３及び１５３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号５４、１２４、１３４、１４４及び１５４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号５５、１２５、１３５、１４５及び１５５から選択されるアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号５６、１２６、１３６、１４６及び１５６から選択されるアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、ならびに（ｆ）配列番号５７、１２７、１３７、１４７及び１５７から選択されるアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３から選択される少なくとも１、２、３、４、５または６つのＣＤＲを含む。
【０１４８】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、重鎖可変領域及び少なくとも一部分の重鎖定常領域を含む少なくとも１つの重鎖と、軽鎖可変領域及び少なくとも一部分の軽鎖定常領域を含む少なくとも１つの軽鎖とを含む。いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、それぞれの重鎖が、重鎖可変領域及び少なくとも一部分の重鎖定常領域を含む２つの重鎖と、それぞれの軽鎖が、軽鎖可変領域及び少なくとも一部分の軽鎖定常領域を含む２つの軽鎖とを含む。本明細書に使用されるとき、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、または例えば６つのＣＤＲ（３つの重鎖ＣＤＲ及び３つの軽鎖ＣＤＲ）を全て含む単一ポリペプチド鎖を含む任意の他の抗体は、重鎖及び軽鎖を有すると考慮される。いくつかの実施形態において、重鎖は、３つの重鎖ＣＤＲを含む抗ＩＣＯＳ抗体の領域である。いくつかの実施形態において、軽鎖は、３つの軽鎖ＣＤＲを含む抗ＩＣＯＳ抗体の領域である。
【０１４９】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（ａ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号１４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含む６つのＣＤＲを含む。
【０１５０】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（ａ）配列番号２２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号２３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号２４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号２５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号２６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号２７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含む６つのＣＤＲを含む。
【０１５１】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（ａ）配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号３４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号３５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号３６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含む６つのＣＤＲを含む。
【０１５２】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（ａ）配列番号４２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号４３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号４６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号４７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含む６つのＣＤＲを含む。
【０１５３】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（ａ）配列番号５２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号５３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号５４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号５５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号５６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号５７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含む６つのＣＤＲを含む。
【０１５４】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（ａ）配列番号７２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号７３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号７４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号７５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号７６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号７７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含む６つのＣＤＲを含む。
【０１５５】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（ａ）配列番号８２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号８３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号８４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号８５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号８６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号８７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含む６つのＣＤＲを含む。
【０１５６】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（ａ）配列番号９２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号９３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号９４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号９５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号９６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号９７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含む６つのＣＤＲを含む。
【０１５７】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（ａ）配列番号１０２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１０３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号１０４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号１０５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１０６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１０７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含む６つのＣＤＲを含む。
【０１５８】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（ａ）配列番号１１２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１１３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号１１４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号１１５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１１６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１１７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含む６つのＣＤＲを含む。
【０１５９】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（ａ）配列番号１２２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１２３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号１２４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号１２５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１２６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１２７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含む６つのＣＤＲを含む。
【０１６０】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（ａ）配列番号１３２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１３３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号１３４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号１３５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１３６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１３７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含む６つのＣＤＲを含む。
【０１６１】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（ａ）配列番号１４２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１４３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１４６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１４７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含む６つのＣＤＲを含む。
【０１６２】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（ａ）配列番号１５２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１５３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号１５４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号１５５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１５６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１５７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含む６つのＣＤＲを含む。
【０１６３】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（ａ）配列番号１６２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１６３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号１６４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号１６５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１６６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１６７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含む６つのＣＤＲを含む。
【０１６４】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（ａ）配列番号１７２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１７３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号１７４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号１７５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１７６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１７７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含む６つのＣＤＲを含む。
【０１６５】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（ａ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号１８５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１８６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１８７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含む６つのＣＤＲを含む。
【０１６６】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、上記に記載された６つのＣＤＲを含み、ＩＣＯＳに結合する。いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、上記に記載された６つのＣＤＲを含み、ＩＣＯＳに結合し、ヒトなどの哺乳動物において、Ｔｅｆｆ細胞の数を増加させる、及び／またはＴｅｆｆ細胞を活性化する、及び／またはＴｒｅｇ細胞の数を減少させる、及び／またはＴｅｆｆ細胞とＴｒｅｇ細胞の比を増加させる。いくつかの実施形態において、Ｔｒｅｇ細胞は、ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３＋Ｔ細胞である。いくつかの実施形態において、Ｔｅｆｆ細胞は、ＣＤ８＋  Ｔ細胞である。いくつかの実施形態において、Ｔｅｆｆ細胞は、ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３−Ｔ細胞及び／またはＣＤ８＋  Ｔ細胞である。
【０１６７】
いくつかの実施形態では、ＩＣＯＳへの結合を本明細書に記載されている抗ＩＣＯＳ抗体と競合する抗ＩＣＯＳ抗体が、提供される。いくつかの実施形態では、本明細書に提供されている抗ＩＣＯＳ抗体のいずれかと結合を競合する抗体を、作製及び／または使用することができる。
【０１６８】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（ａ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＣＤＲ配列を含む。
【０１６９】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（ａ）配列番号２２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号２３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号２４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＣＤＲ配列を含む。
【０１７０】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（ａ）配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号３４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＣＤＲ配列を含む。
【０１７１】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（ａ）配列番号４２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号４３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＣＤＲ配列を含む。
【０１７２】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（ａ）配列番号５２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号５３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号５４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＣＤＲ配列を含む。
【０１７３】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（ａ）配列番号６２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号６３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号６４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＣＤＲ配列を含む。
【０１７４】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（ａ）配列番号７２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号７３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号７４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＣＤＲ配列を含む。
【０１７５】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（ａ）配列番号８２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号８３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号８４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＣＤＲ配列を含む。
【０１７６】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（ａ）配列番号９２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号９３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号９４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＣＤＲ配列を含む。
【０１７７】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（ａ）配列番号１０２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１０３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１０４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＣＤＲ配列を含む。
【０１７８】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（ａ）配列番号１１２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１１３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１１４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＣＤＲ配列を含む。
【０１７９】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（ａ）配列番号１２２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１２３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１２４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＣＤＲ配列を含む。
【０１８０】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（ａ）配列番号１３２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１３３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１３４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＣＤＲ配列を含む。
【０１８１】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（ａ）配列番号１４２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１４３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＣＤＲ配列を含む。
【０１８２】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（ａ）配列番号１５２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１５３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１５４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＣＤＲ配列を含む。
【０１８３】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（ａ）配列番号１６２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１６３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１６４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＣＤＲ配列を含む。
【０１８４】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（ａ）配列番号１７２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１７３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１７４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＣＤＲ配列を含む。
【０１８５】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（ａ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＣＤＲ配列を含む。
【０１８６】
いくつかの実施形態において、抗体は、（ａ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＣＤＲ配列を含む。
【０１８７】
いくつかの実施形態において、抗体は、（ａ）配列番号２５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｂ）配列番号２６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号２７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＣＤＲ配列を含む。
【０１８８】
いくつかの実施形態において、抗体は、（ａ）配列番号３５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｂ）配列番号３６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＣＤＲ配列を含む。
【０１８９】
いくつかの実施形態において、抗体は、（ａ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｂ）配列番号４６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号４７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＣＤＲ配列を含む。
【０１９０】
いくつかの実施形態において、抗体は、（ａ）配列番号５５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｂ）配列番号５６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号５７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＣＤＲ配列を含む。
【０１９１】
いくつかの実施形態において、抗体は、（ａ）配列番号６５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｂ）配列番号６６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号６７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＣＤＲ配列を含む。
【０１９２】
いくつかの実施形態において、抗体は、（ａ）配列番号７５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｂ）配列番号７６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号７７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＣＤＲ配列を含む。
【０１９３】
いくつかの実施形態において、抗体は、（ａ）配列番号８５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｂ）配列番号８６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号８７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＣＤＲ配列を含む。
【０１９４】
いくつかの実施形態において、抗体は、（ａ）配列番号９５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｂ）配列番号９６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号９７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＣＤＲ配列を含む。
【０１９５】
いくつかの実施形態において、抗体は、（ａ）配列番号１０５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１０６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１０７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＣＤＲ配列を含む。
【０１９６】
いくつかの実施形態において、抗体は、（ａ）配列番号１１５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１１６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１１７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＣＤＲ配列を含む。
【０１９７】
いくつかの実施形態において、抗体は、（ａ）配列番号１２５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１２６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１２７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＣＤＲ配列を含む。
【０１９８】
いくつかの実施形態において、抗体は、（ａ）配列番号１３５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１３６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１３７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＣＤＲ配列を含む。
【０１９９】
いくつかの実施形態において、抗体は、（ａ）配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１４６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１４７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＣＤＲ配列を含む。
【０２００】
いくつかの実施形態において、抗体は、（ａ）配列番号１５５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１５６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１５７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＣＤＲ配列を含む。
【０２０１】
いくつかの実施形態において、抗体は、（ａ）配列番号１６５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１６６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１６７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＣＤＲ配列を含む。
【０２０２】
いくつかの実施形態において、抗体は、（ａ）配列番号１７５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１７６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１７７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＣＤＲ配列を含む。
【０２０３】
いくつかの実施形態において、抗体は、（ａ）配列番号１８５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１８６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１８７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＣＤＲ配列を含む。
【０２０４】
いくつかの実施形態では、本明細書に提供されている６つのＣＤＲのいずれかを、副部分として、本明細書に提供されている他のＣＤＲのいずれかと、合計６つのＣＤＲとなるように構築物中に組み合わせることができる。このように、いくつかの実施形態において、第１の抗体の２つのＣＤＲ（例えば、ＨＣＤＲ１及びＨＣＤＲ２）を、第２の抗体の４つのＣＤＲ（ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３）と組み合わせることができる。いくつかの実施形態では、２個以下の残基を、１つ以上のＣＤＲにおいて置き換えて、その変種を得ることができる。いくつかの実施形態では、２個以下の残基を、１、２、３、４、５、または６つのＣＤＲにおいて置き換えることができる。
【０２０５】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（Ｉ）（ａ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＣＤＲ配列を含むＶＨドメイン、ならびに（ＩＩ）（ｄ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＣＤＲ配列を含むＶＬドメイン、を含む。
【０２０６】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（Ｉ）（ａ）配列番号２２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号２３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号２４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＣＤＲ配列を含むＶＨドメイン、ならびに（ＩＩ）（ｄ）配列番号２５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号２６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号２７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＣＤＲ配列を含むＶＬドメイン、を含む。
【０２０７】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（Ｉ）（ａ）配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号３４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＣＤＲ配列を含むＶＨドメイン、ならびに（ＩＩ）（ｄ）配列番号３５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号３６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＣＤＲ配列を含むＶＬドメイン、を含む。
【０２０８】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（Ｉ）（ａ）配列番号４２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号４３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＣＤＲ配列を含むＶＨドメイン、ならびに（ＩＩ）（ｄ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号４６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号４７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＣＤＲ配列を含むＶＬドメイン、を含む。
【０２０９】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（Ｉ）（ａ）配列番号５２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号５３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号５４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＣＤＲ配列を含むＶＨドメイン、ならびに（ＩＩ）（ｄ）配列番号５５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号５６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号５７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＣＤＲ配列を含むＶＬドメイン、を含む。
【０２１０】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（Ｉ）（ａ）配列番号６２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号６３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号６４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＣＤＲ配列を含むＶＨドメイン、ならびに（ＩＩ）（ｄ）配列番号６５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号６６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号６７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＣＤＲ配列を含むＶＬドメイン、を含む。
【０２１１】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（Ｉ）（ａ）配列番号７２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号７３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号７４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＣＤＲ配列を含むＶＨドメイン、ならびに（ＩＩ）（ｄ）配列番号７５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号７６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号７７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＣＤＲ配列を含むＶＬドメイン、を含む。
【０２１２】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（Ｉ）（ａ）配列番号８２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号８３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号８４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＣＤＲ配列を含むＶＨドメイン、ならびに（ＩＩ）（ｄ）配列番号８５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号８６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号８７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＣＤＲ配列を含むＶＬドメイン、を含む。
【０２１３】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（Ｉ）（ａ）配列番号９２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号９３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号９４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＣＤＲ配列を含むＶＨドメイン、ならびに（ＩＩ）（ｄ）配列番号９５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号９６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号９７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＣＤＲ配列を含むＶＬドメイン、を含む。
【０２１４】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（Ｉ）（ａ）配列番号１０２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１０３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１０４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＣＤＲ配列を含むＶＨドメイン、ならびに（ＩＩ）（ｄ）配列番号１０５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１０６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１０７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＣＤＲ配列を含むＶＬドメイン、を含む。
【０２１５】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（Ｉ）（ａ）配列番号１１２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１１３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１１４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＣＤＲ配列を含むＶＨドメイン、ならびに（ＩＩ）（ｄ）配列番号１１５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１１６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１１７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＣＤＲ配列を含むＶＬドメイン、を含む。
【０２１６】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（Ｉ）（ａ）配列番号１２２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１２３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１２４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＣＤＲ配列を含むＶＨドメイン、ならびに（ＩＩ）（ｄ）配列番号１２５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１２６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１２７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＣＤＲ配列を含むＶＬドメイン、を含む。
【０２１７】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（Ｉ）（ａ）配列番号１３２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１３３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１３４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＣＤＲ配列を含むＶＨドメイン、ならびに（ＩＩ）（ｄ）配列番号１３５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１３６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１３７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＣＤＲ配列を含むＶＬドメイン、を含む。
【０２１８】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（Ｉ）（ａ）配列番号１４２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１４３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＣＤＲ配列を含むＶＨドメイン、ならびに（ＩＩ）（ｄ）配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１４６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１４７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＣＤＲ配列を含むＶＬドメイン、を含む。
【０２１９】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（Ｉ）（ａ）配列番号１５２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１５３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１５４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＣＤＲ配列を含むＶＨドメイン、ならびに（ＩＩ）（ｄ）配列番号１５５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１５６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１５７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＣＤＲ配列を含むＶＬドメイン、を含む。
【０２２０】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（Ｉ）（ａ）配列番号１６２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１６３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１６４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＣＤＲ配列を含むＶＨドメイン、ならびに（ＩＩ）（ｄ）配列番号１６５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１６６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１６７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＣＤＲ配列を含むＶＬドメイン、を含む。
【０２２１】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（Ｉ）（ａ）配列番号１７２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１７３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１７４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＣＤＲ配列を含むＶＨドメイン、ならびに（ＩＩ）（ｄ）配列番号１７５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１７６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１７７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＣＤＲ配列を含むＶＬドメイン、を含む。
【０２２２】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（Ｉ）（ａ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＣＤＲ配列を含むＶＨドメイン、ならびに（ＩＩ）（ｄ）配列番号１８５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１８６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１８７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＣＤＲ配列を含むＶＬドメイン、を含む。
【０２２３】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、配列番号１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、または１８０のアミノ酸配列に少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）配列を含む。いくつかの実施形態において、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の同一性を有するＶＨ配列は、基準配列と比べて置換（例えば、保存的置換）、挿入、または欠失を含有するが、その配列を含む抗ＩＣＯＳ抗体は、ＩＣＯＳに結合する能力を保持する。いくつかの実施形態では、合計で１〜１０個のアミノ酸が、配列番号１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、または１８０において置換、挿入及び／または欠失されている。いくつかの実施形態において、置換、挿入、または欠失は、ＣＤＲの外側（すなわち、ＦＲ内）の領域で生じる。場合により、抗ＩＣＯＳ抗体は、配列番号１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、または１８０にＶＨ配列を含み、その配列の翻訳後修飾も含まれる。
【０２２４】
いくつかの実施形態において、ＶＨは、（ａ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、を含む。
【０２２５】
いくつかの実施形態において、ＶＨは、（ａ）配列番号２２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号２３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号２４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、を含む。
【０２２６】
いくつかの実施形態において、ＶＨは、（ａ）配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号３４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、を含む。
【０２２７】
いくつかの実施形態において、ＶＨは、（ａ）配列番号４２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号４３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、を含む。
【０２２８】
いくつかの実施形態において、ＶＨは、（ａ）配列番号５２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号５３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号５４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、を含む。
【０２２９】
いくつかの実施形態において、ＶＨは、（ａ）配列番号６２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号６３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号６４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、を含む。
【０２３０】
いくつかの実施形態において、ＶＨは、（ａ）配列番号７２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号７３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号７４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、を含む。
【０２３１】
いくつかの実施形態において、ＶＨは、（ａ）配列番号８２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号８３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号８４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、を含む。
【０２３２】
いくつかの実施形態において、ＶＨは、（ａ）配列番号９２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号９３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号９４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、を含む。
【０２３３】
いくつかの実施形態において、ＶＨは、（ａ）配列番号１０２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１０３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１０４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、を含む。
【０２３４】
いくつかの実施形態において、ＶＨは、（ａ）配列番号１１２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１１３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１１４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、を含む。
【０２３５】
いくつかの実施形態において、ＶＨは、（ａ）配列番号１２２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１２３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１２４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、を含む。
【０２３６】
いくつかの実施形態において、ＶＨは、（ａ）配列番号１３２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１３３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１３４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、を含む。
【０２３７】
いくつかの実施形態において、ＶＨは、（ａ）配列番号１４２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１４３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、を含む。
【０２３８】
いくつかの実施形態において、ＶＨは、（ａ）配列番号１５２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１５３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１５４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、を含む。
【０２３９】
いくつかの実施形態において、ＶＨは、（ａ）配列番号１６２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１６３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１６４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、を含む。
【０２４０】
いくつかの実施形態において、ＶＨは、（ａ）配列番号１７２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１７３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１７４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、を含む。
【０２４１】
いくつかの実施形態において、ＶＨは、（ａ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、を含む。
【０２４２】
いくつかの実施形態では、抗ＩＣＯＳ抗体が提供され、ここで抗体は、配列番号１１、２１、３１、４１、５１、６１、７１、８１、９１、１０１、１１１、１２１、１３１、１４１、１５１、１６１、１７１、または１８１のアミノ酸配列に少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む。いくつかの実施形態において、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の同一性を有するＶＬ配列は、基準配列と比べて置換（例えば、保存的置換）、挿入、または欠失を含有するが、その配列を含む抗ＩＣＯＳ抗体は、ＩＣＯＳに結合する能力を保持する。いくつかの実施形態では、合計で１〜１０個のアミノ酸が、配列番号１１、２１、３１、４１、５１、６１、７１、８１、９１、１０１、１１１、１２１、１３１、１４１、１５１、１６１、１７１、または１８１において置換、挿入及び／または欠失されている。いくつかの実施形態において、置換、挿入、または欠失は、ＣＤＲの外側（すなわち、ＦＲ内）の領域で生じる。場合により、抗ＩＣＯＳ抗体は、配列番号１１、２１、３１、４１、５１、６１、７１、８１、９１、１０１、１１１、１２１、１３１、１４１、１５１、１６１、１７１、または１８１にＶＬ配列を含み、その配列の翻訳後修飾も含まれる。
【０２４３】
いくつかの実施形態において、ＶＬは、（ａ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含む。
【０２４４】
いくつかの実施形態において、ＶＬは、（ａ）配列番号２５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｂ）配列番号２６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号２７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含む。
【０２４５】
いくつかの実施形態において、ＶＬは、（ａ）配列番号３５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｂ）配列番号３６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含む。
【０２４６】
いくつかの実施形態において、ＶＬは、（ａ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｂ）配列番号４６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号４７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含む。
【０２４７】
いくつかの実施形態において、ＶＬは、（ａ）配列番号５５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｂ）配列番号５６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号５７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含む。
【０２４８】
いくつかの実施形態において、ＶＬは、（ａ）配列番号６５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｂ）配列番号６６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号６７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含む。
【０２４９】
いくつかの実施形態において、ＶＬは、（ａ）配列番号７５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｂ）配列番号７６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号７７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含む。
【０２５０】
いくつかの実施形態において、ＶＬは、（ａ）配列番号８５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｂ）配列番号８６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号８７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含む。
【０２５１】
いくつかの実施形態において、ＶＬは、（ａ）配列番号９５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｂ）配列番号９６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号９７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含む。
【０２５２】
いくつかの実施形態において、ＶＬは、（ａ）配列番号１０５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１０６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１０７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含む。
【０２５３】
いくつかの実施形態において、ＶＬは、（ａ）配列番号１１５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１１６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１１７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含む。
【０２５４】
いくつかの実施形態において、ＶＬは、（ａ）配列番号１２５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１２６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１２７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含む。
【０２５５】
いくつかの実施形態において、ＶＬは、（ａ）配列番号１３５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１３６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１３７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含む。
【０２５６】
いくつかの実施形態において、ＶＬは、（ａ）配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１４６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１４７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含む。
【０２５７】
いくつかの実施形態において、ＶＬは、（ａ）配列番号１５５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１５６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１５７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含む。
【０２５８】
いくつかの実施形態において、ＶＬは、（ａ）配列番号１６５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１６６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１６７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含む。
【０２５９】
いくつかの実施形態において、ＶＬは、（ａ）配列番号１７５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１７６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１７７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含む。
【０２６０】
いくつかの実施形態において、ＶＬは、（ａ）配列番号１８５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１８６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１８７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含む。
【０２６１】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、配列番号１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、または１８０のアミノ酸配列に少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）配列、及び配列番号１１、２１、３１、４１、５１、６１、７１、８１、９１、１０１、１１１、１２１、１３１、１４１、１５１、１６１、１７１、または１８１のアミノ酸配列に少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む。いくつかの実施形態において、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の同一性を有するＶＨ配列は、基準配列と比べて置換（例えば、保存的置換）、挿入、または欠失を含有し、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の同一性を有するＶＬ配列は、基準配列と比べて置換（例えば、保存的置換）、挿入、または欠失を含有するが、その配列を含む抗ＩＣＯＳ抗体は、ＩＣＯＳに結合する能力を保持する。いくつかの実施形態では、合計で１〜１０個のアミノ酸が、配列番号１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、または１８０において置換、挿入及び／または欠失されている。いくつかの実施形態では、合計で１〜１０個のアミノ酸が、配列番号１１、２１、３１、４１、５１、６１、７１、８１、９１、１０１、１１１、１２１、１３１、１４１、１５１、１６１、１７１、または１８１において置換、挿入及び／または欠失されている。いくつかの実施形態において、置換、挿入、または欠失は、ＣＤＲの外側（すなわち、ＦＲ内）の領域で生じる。場合により、抗ＩＣＯＳ抗体は、配列番号１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、または１８０にＶＨ配列、及び配列番号１１、２１、３１、４１、５１、６１、７１、８１、９１、１０１、１１１、１２１、１３１、１４１、１５１、１６１、１７１、または１８１のＶＬ配列を含み、一方または両方の配列の翻訳後修飾も含まれる。
【０２６２】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（Ｉ）（ａ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、を含むＶＨドメイン、ならびに（ＩＩ）（ｄ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含むＶＬドメインを含む。
【０２６３】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（Ｉ）（ａ）配列番号２２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号２３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号２４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、を含むＶＨドメイン、ならびに（ＩＩ）（ｄ）配列番号２５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号２６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号２７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含むＶＬドメインを含む。
【０２６４】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（Ｉ）（ａ）配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号３４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、を含むＶＨドメイン、ならびに（ＩＩ）（ｄ）配列番号３５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号３６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含むＶＬドメインを含む。
【０２６５】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（Ｉ）（ａ）配列番号４２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号４３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、を含むＶＨドメイン、ならびに（ＩＩ）（ｄ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号４６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号４７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含むＶＬドメインを含む。
【０２６６】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（Ｉ）（ａ）配列番号５２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号５３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号５４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、を含むＶＨドメイン、ならびに（ＩＩ）（ｄ）配列番号５５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号５６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号５７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含むＶＬドメインを含む。
【０２６７】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（Ｉ）（ａ）配列番号６２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号６３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号６４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、を含むＶＨドメイン、ならびに（ＩＩ）（ｄ）配列番号６５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号６６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号６７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含むＶＬドメインを含む。
【０２６８】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（Ｉ）（ａ）配列番号７２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号７３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号７４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、を含むＶＨドメイン、ならびに（ＩＩ）（ｄ）配列番号７５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号７６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号７７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含むＶＬドメインを含む。
【０２６９】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（Ｉ）（ａ）配列番号８２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号８３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号８４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、を含むＶＨドメイン、ならびに（ＩＩ）（ｄ）配列番号８５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号８６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号８７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含むＶＬドメインを含む。
【０２７０】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（Ｉ）（ａ）配列番号９２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号９３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号９４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、を含むＶＨドメイン、ならびに（ＩＩ）（ｄ）配列番号９５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号９６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号９７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含むＶＬドメインを含む。
【０２７１】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（Ｉ）（ａ）配列番号１０２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１０３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１０４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、を含むＶＨドメイン、ならびに（ＩＩ）（ｄ）配列番号１０５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１０６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１０７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含むＶＬドメインを含む。
【０２７２】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（Ｉ）（ａ）配列番号１１２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１１３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１１４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、を含むＶＨドメイン、ならびに（ＩＩ）（ｄ）配列番号１１５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１１６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１１７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含むＶＬドメインを含む。
【０２７３】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（Ｉ）（ａ）配列番号１２２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１２３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１２４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、を含むＶＨドメイン、ならびに（ＩＩ）（ｄ）配列番号１２５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１２６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１２７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含むＶＬドメインを含む。
【０２７４】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（Ｉ）（ａ）配列番号１３２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１３３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１３４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、を含むＶＨドメイン、ならびに（ＩＩ）（ｄ）配列番号１３５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１３６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１３７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含むＶＬドメインを含む。
【０２７５】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（Ｉ）（ａ）配列番号１４２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１４３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、を含むＶＨドメイン、ならびに（ＩＩ）（ｄ）配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１４６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１４７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含むＶＬドメインを含む。
【０２７６】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（Ｉ）（ａ）配列番号１５２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１５３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１５４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、を含むＶＨドメイン、ならびに（ＩＩ）（ｄ）配列番号１５５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１５６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１５７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含むＶＬドメインを含む。
【０２７７】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（Ｉ）（ａ）配列番号１６２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１６３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１６４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、を含むＶＨドメイン、ならびに（ＩＩ）（ｄ）配列番号１６５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１６６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１６７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含むＶＬドメインを含む。
【０２７８】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（Ｉ）（ａ）配列番号１７２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１７３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１７４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、を含むＶＨドメイン、ならびに（ＩＩ）（ｄ）配列番号１７５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１７６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１７７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含むＶＬドメインを含む。
【０２７９】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、（Ｉ）（ａ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、を含むＶＨドメイン、ならびに（ＩＩ）（ｄ）配列番号１８５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１８６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２及び（ｆ）配列番号１８７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３、を含むＶＬドメインを含む。
【０２８０】
いくつかの態様において、抗ＩＣＯＳ抗体は、本明細書に提供されている実施形態のいずれかのようなＶＨ及び本明細書に提供されている実施形態のいずれかのようなＶＬを含む。いくつかの実施形態において、抗体は、配列番号１０及び配列番号１１にそれぞれＶＨ及びＶＬ配列を含み、これらの配列の翻訳後修飾も含まれる。いくつかの実施形態において、抗体は、配列番号２０及び配列番号２１にそれぞれＶＨ及びＶＬ配列を含み、これらの配列の翻訳後修飾も含まれる。いくつかの実施形態において、抗体は、配列番号３０及び配列番号３１にそれぞれＶＨ及びＶＬ配列を含み、これらの配列の翻訳後修飾も含まれる。いくつかの実施形態において、抗体は、配列番号４０及び配列番号４１にそれぞれＶＨ及びＶＬ配列を含み、これらの配列の翻訳後修飾も含まれる。いくつかの実施形態において、抗体は、配列番号５０及び配列番号５１にそれぞれＶＨ及びＶＬ配列を含み、これらの配列の翻訳後修飾も含まれる。いくつかの実施形態において、抗体は、配列番号６０及び配列番号６１にそれぞれＶＨ及びＶＬ配列を含み、これらの配列の翻訳後修飾も含まれる。いくつかの実施形態において、抗体は、配列番号７０及び配列番号７１にそれぞれＶＨ及びＶＬ配列を含み、これらの配列の翻訳後修飾も含まれる。いくつかの実施形態において、抗体は、配列番号８０及び配列番号８１にそれぞれＶＨ及びＶＬ配列を含み、これらの配列の翻訳後修飾も含まれる。いくつかの実施形態において、抗体は、配列番号９０及び配列番号９１にそれぞれＶＨ及びＶＬ配列を含み、これらの配列の翻訳後修飾も含まれる。いくつかの実施形態において、抗体は、配列番号１００及び配列番号１０１にそれぞれＶＨ及びＶＬ配列を含み、これらの配列の翻訳後修飾も含まれる。いくつかの実施形態において、抗体は、配列番号１１０及び配列番号１１１にそれぞれＶＨ及びＶＬ配列を含み、これらの配列の翻訳後修飾も含まれる。いくつかの実施形態において、抗体は、配列番号１２０及び配列番号１２１にそれぞれＶＨ及びＶＬ配列を含み、これらの配列の翻訳後修飾も含まれる。いくつかの実施形態において、抗体は、配列番号１３０及び配列番号１３１にそれぞれＶＨ及びＶＬ配列を含み、これらの配列の翻訳後修飾も含まれる。いくつかの実施形態において、抗体は、配列番号１４０及び配列番号１４１にそれぞれＶＨ及びＶＬ配列を含み、これらの配列の翻訳後修飾も含まれる。いくつかの実施形態において、抗体は、配列番号１５０及び配列番号１５１にそれぞれＶＨ及びＶＬ配列を含み、これらの配列の翻訳後修飾も含まれる。いくつかの実施形態において、抗体は、配列番号１６０及び配列番号１６１にそれぞれＶＨ及びＶＬ配列を含み、これらの配列の翻訳後修飾も含まれる。いくつかの実施形態において、抗体は、配列番号１７０及び配列番号１７１にそれぞれＶＨ及びＶＬ配列を含み、これらの配列の翻訳後修飾も含まれる。いくつかの実施形態において、抗体は、配列番号１８０及び配列番号１８１にそれぞれＶＨ及びＶＬ配列を含み、これらの配列の翻訳後修飾も含まれる。
【０２８１】
いくつかの実施形態では、ＩＣＯＳへの結合を本明細書に提供されている抗ＩＣＯＳ抗体と競合する抗体が、提供される。いくつかの実施形態では、ＩＣＯＳのエピトープへの結合を本明細書に提供されている抗ＩＣＯＳ抗体と競合する抗体が、提供される。
【０２８２】
いくつかの実施形態において、競合アッセイを使用して、ＩＣＯＳへの結合を本明細書に記載されている抗ＩＣＯＳ抗体と競合するモノクローナル抗体（例えば、７Ｆ１２、３７Ａ１０、３５Ａ９、３６Ｅ１０、１６Ｇ１０、３７Ａ１０Ｓ７１３、３７Ａ１０Ｓ７１４、３７Ａ１０Ｓ７１５、３７Ａ１０Ｓ７１６、３７Ａ１０Ｓ７１７、３７Ａ１０Ｓ７１８、１６Ｇ１０Ｓ７１、１６Ｇ１０Ｓ７２、１６Ｇ１０Ｓ７３、１６Ｇ１０Ｓ８３、３５Ａ９Ｓ７９、３５Ａ９Ｓ７１０、または３５Ａ９Ｓ８９）を特定することができる。競合アッセイを使用して、２つの抗体が同一もしくは立体的に重複するエピトープを認識することによって、同じエピトープに結合するか、または一方の抗体が他方の抗体の抗原への結合を競合的に阻害するかを決定することができる。いくつかの実施形態において、そのような競合抗体は、本明細書に記載されている抗体が結合している同じエピトープに結合する。例示的な競合アッセイには、Ｈａｒｌｏｗ  ａｎｄ  Ｌａｎｅ（１９８８）Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ  ｃｈ．１４（Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．）に提供されているものなどの日常的なアッセイが含まれるが、これに限定されない。抗体が結合しているエピトープをマッピングする例示的な詳細な方法は、Ｍｏｒｒｉｓ（１９９６）“Ｅｐｉｔｏｐｅ  Ｍａｐｐｉｎｇ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ，”Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ｖｏｌ．６６（Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ）に提供されている。いくつかの実施形態において、２つの抗体は、それぞれが他方の結合を５０％以上遮断する場合に、同じエピトープに結合すると言われる。いくつかの実施形態において、本明細書に記載されている抗ＩＣＯＳ抗体と競合する抗体は、キメラ、ヒト化、またはヒト抗体である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されているキメラ、ヒト化、またはヒト抗ＩＣＯＳ抗体と競合する抗体が、提供される。
【０２８３】
いくつかの実施形態では、本明細書の抗体により提供されるエピトープのいずれか１つ以上に結合する抗体が、提供される。いくつかの実施形態では、本発明の抗体が結合するエピトープに結合及び重複する抗体が、提供される。いくつかの実施形態では、本明細書に提供されている抗体の少なくとも１つと競合する抗体が、提供される。いくつかの実施形態では、本明細書に提供されている抗体の少なくとも２つと競合する抗体が、提供される。いくつかの実施形態では、本明細書に提供されている抗体の少なくとも３つと競合する抗体が、提供される。いくつかの実施形態において、抗体は、本明細書の例に記載されている抗体として、重複エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、全てのエピトープが、競合抗体に結合している及び／または競合抗体によって妨げられている。いくつかの実施形態では、一部のエピトープが、競合抗体に結合している及び／または競合抗体によって妨げられている。いくつかの実施形態では、競合抗体のパラトープが、本明細書に提供されている抗体のエピトープの少なくとも一部と結合する。いくつかの実施形態では、競合抗体のパラトープが標的に結合し、競合抗体の構造の異なる部分が、本明細書に提供されている抗体のエピトープの少なくとも一部を妨げている。
【０２８４】
例示的なキメラ抗体
いくつかの実施形態において、本明細書に提供されている抗体は、キメラ抗体である。特定のキメラ抗体は、例えば、米国特許第４，８１６，５６７号及びＭｏｒｒｉｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８４）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８１：６８５１−６８５５（１９８４）に記載されている。１つの例において、キメラ抗体は、非ヒト可変領域（例えば、マウス、ラット、ハムスター、ウサギ、またはサルなどの非ヒト霊長類から誘導される可変領域）及びヒト定常領域を含む。更なる例において、キメラ抗体は、クラスまたはサブクラスが親抗体と変わっている「クラス切換」抗体である。キメラ抗体には、その抗体結合フラグメントが含まれる。
【０２８５】
非限定的な例示のキメラ抗体には、７Ｆ１２、３７Ａ１０、３５Ａ９、３６Ｅ１０、１６Ｇ１０、３７Ａ１０Ｓ７１３、３７Ａ１０Ｓ７１４、３７Ａ１０Ｓ７１５、３７Ａ１０Ｓ７１６、３７Ａ１０Ｓ７１７、３７Ａ１０Ｓ７１８、１６Ｇ１０Ｓ７１、１６Ｇ１０Ｓ７２、１６Ｇ１０Ｓ７３、１６Ｇ１０Ｓ８３、３５Ａ９Ｓ７９、３５Ａ９Ｓ７１０、または３５Ａ９Ｓ８９から選択される抗体の重鎖及び／または軽鎖可変領域を含むキメラ抗体が含まれる。追加的な非限定的例示のキメラ抗体には、７Ｆ１２、３７Ａ１０、３５Ａ９、３６Ｅ１０、１６Ｇ１０、３７Ａ１０Ｓ７１３、３７Ａ１０Ｓ７１４、３７Ａ１０Ｓ７１５、３７Ａ１０Ｓ７１６、３７Ａ１０Ｓ７１７、３７Ａ１０Ｓ７１８、１６Ｇ１０Ｓ７１、１６Ｇ１０Ｓ７２、１６Ｇ１０Ｓ７３、１６Ｇ１０Ｓ８３、３５Ａ９Ｓ７９、３５Ａ９Ｓ７１０、または３５Ａ９Ｓ８９から選択される抗体の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、ならびに／または軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含むキメラ抗体が含まれる。更なる非限定的な例示のキメラ抗体には、７Ｆ１２、３７Ａ１０、３５Ａ９、３６Ｅ１０、１６Ｇ１０、３７Ａ１０Ｓ７１３、３７Ａ１０Ｓ７１４、３７Ａ１０Ｓ７１５、３７Ａ１０Ｓ７１６、３７Ａ１０Ｓ７１７、３７Ａ１０Ｓ７１８、１６Ｇ１０Ｓ７１、１６Ｇ１０Ｓ７２、１６Ｇ１０Ｓ７３、１６Ｇ１０Ｓ８３、３５Ａ９Ｓ７９、３５Ａ９Ｓ７１０、または３５Ａ９Ｓ８９から選択される抗体の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、ならびに／または軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含むキメラ抗体が含まれる。いくつかの実施形態において、キメラ抗ＩＣＯＳ抗体は、上記に記載された可変領域を含み、ＩＣＯＳに結合する。いくつかの実施形態において、キメラ抗ＩＣＯＳ抗体は、上記に記載された可変領域を含み、ＩＣＯＳに結合し、Ｔｅｆｆ細胞の数を増加させる、及び／またはＴｅｆｆ細胞を活性化する、及び／またはＴｒｅｇ細胞の数を減少させる、及び／またはＴｅｆｆ細胞とＴｒｅｇ細胞の比を増加させる。いくつかの実施形態において、Ｔｒｅｇ細胞は、ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３＋Ｔ細胞である。いくつかの実施形態において、Ｔｅｆｆ細胞は、ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３−Ｔ細胞である。いくつかの実施形態において、Ｔｅｆｆ細胞は、ＣＤ８＋Ｔ細胞である。いくつかの実施形態において、Ｔｅｆｆ細胞は、ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３−  Ｔ細胞及びＣＤ８＋Ｔ細胞である。
【０２８６】
いくつかの実施形態において、キメラ抗ＩＣＯＳ抗体は、配列番号１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、または１８０から選択される配列に、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の同一性がある可変領域配列を含む重鎖を含み、ここで抗体は、ＩＣＯＳに結合する。いくつかの実施形態において、キメラ抗ＩＣＯＳ抗体は、配列番号１１、２１、３１、４１、５１、６１、７１、８１、９１、１０１、１１１、１２１、１３１、１４１、１５１、１６１、１７１、または１８１から選択される配列に、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の同一性がある可変領域配列を含む軽鎖を含み、ここで抗体は、ＩＣＯＳに結合する。いくつかの実施形態において、キメラ抗ＩＣＯＳ抗体は、配列番号１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０及び１８０から選択される配列に、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の同一性がある可変領域配列を含む重鎖、ならびに、配列番号１１、２１、３１、４１、５１、６１、７１、８１、９１、１０１、１１１、１２１、１３１、１４１、１５１、１６１、１７１及び１８１から選択される配列に、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の同一性がある可変領域配列を含む軽鎖を含み、ここで抗体は、ＩＣＯＳに結合する。
【０２８７】
例示的なキメラ抗ＩＣＯＳ抗体には、ＩＣＯＳへの結合を本明細書に記載されている抗体またはそのフラグメントと競合するキメラ抗体も含まれる。したがって、いくつかの実施形態では、７Ｆ１２、３７Ａ１０、３５Ａ９、３６Ｅ１０、１６Ｇ１０、３７Ａ１０Ｓ７１３、３７Ａ１０Ｓ７１４、３７Ａ１０Ｓ７１５、３７Ａ１０Ｓ７１６、３７Ａ１０Ｓ７１７、３７Ａ１０Ｓ７１８、１６Ｇ１０Ｓ７１、１６Ｇ１０Ｓ７２、１６Ｇ１０Ｓ７３、１６Ｇ１０Ｓ８３、３５Ａ９Ｓ７９、３５Ａ９Ｓ７１０及び３５Ａ９Ｓ８９、またはそのフラグメントから選択される抗体とＩＣＯＳへの結合を競合するキメラ抗ＩＣＯＳ抗体が、提供される。いくつかの実施形態において、抗体は、ＩＣＯＳへの結合を競合し、Ｔｅｆｆ細胞の数を増加させる、及び／またはＴｅｆｆ細胞を活性化する、及び／またはＴｒｅｇ細胞の数を減少させる、及び／またはＴｅｆｆ細胞とＴｒｅｇ細胞の比を増加させる。いくつかの実施形態において、Ｔｒｅｇ細胞は、ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３＋Ｔ細胞である。いくつかの実施形態において、Ｔｅｆｆ細胞は、ＣＤ８＋Ｔ細胞である。いくつかの実施形態において、Ｔｅｆｆ細胞は、ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３−Ｔ細胞及びＣＤ８＋Ｔ細胞である。
【０２８８】
いくつかの実施形態において、本明細書に記載されているキメラ抗体は、１つ以上のヒト定常領域を含む。いくつかの実施形態において、ヒト重鎖定常領域は、ＩｇＡ、ＩｇＧ及びＩｇＤから選択されるアイソタイプのものである。いくつかの実施形態において、ヒト軽鎖定常領域は、κ及びλから選択されるアイソタイプのものである。いくつかの実施形態において、本明細書に記載されているキメラ抗体は、ヒトＩｇＧ定常領域を含む。いくつかの実施形態において、本明細書に記載されているキメラ抗体は、ヒトＩｇＧ４重鎖定常領域を含む。いくつかの実施形態において、本明細書に記載されているキメラ抗体は、ヒトＩｇＧ４定常領域及びヒトκ軽鎖を含む。
【０２８９】
上記に示されたように、エフェクター機能が望ましいかは、抗体に対して意図される特定の処理方法によって左右されうる。したがって、いくつかの実施形態では、エフェクター機能が望ましい場合、ヒトＩｇＧ１重鎖定常領域またはヒトＩｇＧ３重鎖定常領域を含むキメラ抗ＩＣＯＳ抗体が選択される。いくつかの実施形態では、エフェクター機能が望ましくない場合、ヒトＩｇＧ４またはＩｇＧ２重鎖定常領域を含むキメラ抗ＩＣＯＳ抗体が選択される。
【０２９０】
例示的なヒト化抗体
いくつかの実施形態において、ＩＣＯＳに結合するヒト化が提供される。ヒト化抗体は治療分子として有用であり、それはヒト化抗体が、抗体治療薬に対する免疫応答（例えば、ヒト抗マウス抗体（ＨＡＭＡ）応答）及び減少した治療薬有効性をもたらしうる非ヒト抗体と比較して、ヒト免疫応答を低減または排除するからである。
【０２９１】
いくつかの実施形態において、キメラ抗体はヒト化抗体である。典型的には、非ヒト抗体はヒト化されて、ヒトに対する免疫原性が低下するが、非ヒト親抗体の特異性及び親和性を保持している。一般に、ヒト化抗体は、ＣＤＲ（または、その一部分）が、非ヒト抗体から誘導され、ＦＲ（または、その一部分）がヒト抗体配列から誘導される、１つ以上の可変ドメインを含む。ヒト化抗体は、場合により、ヒト定常領域の少なくとも一部分も含む。いくつかの実施形態において、ヒト化抗体のいくつかのＦＲ残基は、例えば、抗体特異性または親和性を回復または改善するため、非ヒト抗体（例えば、ＣＤＲ残基が誘導される抗体）の対応する残基で置換される。
【０２９２】
ヒト化抗体及びそれらの作製方法は、例えば、Ａｌｍａｇｒｏ  ａｎｄ  Ｆｒａｎｓｓｏｎ，（２００８）Ｆｒｏｎｔ．Ｂｉｏｓｃｉ．１３：１６１９−１６３３に総説されており、例えば、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８８）Ｎａｔｕｒｅ  ３３２：３２３−３２９、Ｑｕｅｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８９）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ  ＵＳＡ  ８６：１００２９−１００３３、米国特許第５，８２１，３３７号、同第７，５２７，７９１号、同第６，９８２，３２１号及び同第７，０８７，４０９号、Ｋａｓｈｍｉｒｉ  ｅｔ  ａｌ．，（２００５）Ｍｅｔｈｏｄｓ  ３６：２５−３４、Ｐａｄｌａｎ，（１９９１）Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２８：４８９−４９８（「表面再建（ｒｅｓｕｒｆａｃｉｎｇ）」）について記載している）、Ｄａｌｌ’Ａｃｑｕａ  ｅｔ  ａｌ．，（２００５）Ｍｅｔｈｏｄｓ  ３６：４３−６０（「ＦＲシャフリング（ｓｈｕｆｆｌｉｎｇ）」について記載している）、ならびにＯｓｂｏｕｒｎ  ｅｔ  ａｌ．，（２００５）Ｍｅｔｈｏｄｓ  ３６：６１−６８及びＫｌｉｍｋａ  ｅｔ  ａｌ．，（２０００）Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，８３：２５２−２６０（ＦＲシャフリングの「誘導選択（ｇｕｉｄｅｄ  ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ）」について記載している）に更に記載されている。
【０２９３】
ヒト化に使用されうるヒトフレームワーク領域には、「最良適合（ｂｅｓｔ−ｆｉｔ）」法を使用して選択されるフレームワーク（例えば、Ｓｉｍｓ  ｅｔ  ａｌ．（１９９３）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５１：２２９６を参照すること）、ヒト抗体の特定の部分群の軽または重鎖可変領域のコンセンサス配列から誘導されるフレームワーク領域（例えば、Ｃａｒｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（１９９２）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８９：４２８５及びＰｒｅｓｔａ  ｅｔ  ａｌ．（１９９３）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ，１５１：２６２３を参照すること）、ヒト成熟（体細胞性突然変異）フレームワーク領域またはヒト生殖系フレームワーク領域（例えば、Ａｌｍａｇｒｏ  ａｎｄ  Ｆｒａｎｓｓｏｎ，（２００８）Ｆｒｏｎｔ．Ｂｉｏｓｃｉ．１３：１６１９−１６３３を参照すること）、ならびにＦＲライブラリーを選別することにより誘導されるフレームワーク領域（例えば、Ｂａｃａ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９７）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２：１０６７８−１０６８４及びＲｏｓｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９６）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７１：２２６１１−２２６１を参照すること）が含まれるが、これらに限定されない。
【０２９４】
非限定的な例示のヒト化抗体には、本明細書に記載されている７Ａ１０Ｓ７１３、３７Ａ１０Ｓ７１４、３７Ａ１０Ｓ７１５、３７Ａ１０Ｓ７１６、３７Ａ１０Ｓ７１７、３７Ａ１０Ｓ７１８、１６Ｇ１０Ｓ７１、１６Ｇ１０Ｓ７２、１６Ｇ１０Ｓ７３、１６Ｇ１０Ｓ８３、３５Ａ９Ｓ７９、３５Ａ９Ｓ７１０及び３５Ａ９Ｓ８９が含まれる。非限定的な例示のヒト化抗体には、３７Ａ１０Ｓ７１３、３７Ａ１０Ｓ７１４、３７Ａ１０Ｓ７１５、３７Ａ１０Ｓ７１６、３７Ａ１０Ｓ７１７、３７Ａ１０Ｓ７１８、１６Ｇ１０Ｓ７１、１６Ｇ１０Ｓ７２、１６Ｇ１０Ｓ７３、１６Ｇ１０Ｓ８３、３５Ａ９Ｓ７９、３５Ａ９Ｓ７１０及び３５Ａ９Ｓ８９から選択される抗体の重鎖可変領域、ならびに／または３７Ａ１０Ｓ７１３、３７Ａ１０Ｓ７１４、３７Ａ１０Ｓ７１５、３７Ａ１０Ｓ７１６、３７Ａ１０Ｓ７１７、３７Ａ１０Ｓ７１８、１６Ｇ１０Ｓ７１、１６Ｇ１０Ｓ７２、１６Ｇ１０Ｓ７３、１６Ｇ１０Ｓ８３、３５Ａ９Ｓ７９、３５Ａ９Ｓ７１０及び３５Ａ９Ｓ８９から選択される抗体の軽鎖可変領域を含む抗体も含まれる。非限定的な例示のヒト化抗体には、配列番号６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０及び１８０から選択される重鎖可変領域、ならびに／または配列番号６１、７１、８１、９１、１０１、１１１、１２１、１３１、１４１、１５１、１６１、１７１及び１８１から選択される軽鎖可変領域を含む抗体が含まれる。例示的なヒト化抗体には、７Ｆ１２、３７Ａ１０、３５Ａ９、３６Ｅ１０、１６Ｇ１０、３７Ａ１０Ｓ７１３、３７Ａ１０Ｓ７１４、３７Ａ１０Ｓ７１５、３７Ａ１０Ｓ７１６、３７Ａ１０Ｓ７１７、３７Ａ１０Ｓ７１８、１６Ｇ１０Ｓ７１、１６Ｇ１０Ｓ７２、１６Ｇ１０Ｓ７３、１６Ｇ１０Ｓ８３、３５Ａ９Ｓ７９、３５Ａ９Ｓ７１０及び３５Ａ９Ｓ８９から選択される抗体の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、ならびに／または軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含むヒト化抗体も含まれるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態において、ヒト化抗ＩＣＯＳ抗体は、上記に記載されたＣＤＲを含み、ＩＣＯＳに結合する。いくつかの実施形態において、ヒト化抗ＩＣＯＳ抗体は、上記に記載されたＣＤＲを含み、ＩＣＯＳに結合し、Ｔｅｆｆ細胞の数を増加させる、及び／またはＴｅｆｆ細胞を活性化する、及び／またはＴｒｅｇ細胞の数を減少させる、及び／またはＴｅｆｆ細胞とＴｒｅｇ細胞の比を増加させる。いくつかの実施形態において、Ｔｒｅｇ細胞は、ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３＋Ｔ細胞である。いくつかの実施形態において、Ｔｅｆｆ細胞は、ＣＤ８＋Ｔ細胞である。いくつかの実施形態において、Ｔｅｆｆ細胞は、ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３−Ｔ細胞及びＣＤ８＋Ｔ細胞である。
【０２９５】
いくつかの実施形態において、ヒト化抗ＩＣＯＳ抗体は、７Ｆ１２、３７Ａ１０、３５Ａ９、３６Ｅ１０、１６Ｇ１０、３７Ａ１０Ｓ７１３、３７Ａ１０Ｓ７１４、３７Ａ１０Ｓ７１５、３７Ａ１０Ｓ７１６、３７Ａ１０Ｓ７１７、３７Ａ１０Ｓ７１８、１６Ｇ１０Ｓ７１、１６Ｇ１０Ｓ７２、１６Ｇ１０Ｓ７３、１６Ｇ１０Ｓ８３、３５Ａ９Ｓ７９、３５Ａ９Ｓ７１０及び３５Ａ９Ｓ８９から選択される抗体の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、ならびに／または軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含む。
【０２９６】
いくつかの実施形態において、ヒト化抗ＩＣＯＳ抗体は、配列番号６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０及び１８０から選択される配列に、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の同一性がある可変領域配列を含む重鎖を含み、ここで抗体は、ＩＣＯＳに結合する。いくつかの実施形態において、ヒト化抗ＩＣＯＳ抗体は、配列番号６１、７１、８１、９１、１０１、１１１、１２１、１３１、１４１、１５１、１６１、１７１及び１８１から選択される配列に、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の同一性がある可変領域配列を含む軽鎖を含み、ここで抗体は、ＩＣＯＳに結合する。いくつかの実施形態において、ヒト化抗ＩＣＯＳ抗体は、配列番号６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０及び１８０から選択される配列に、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の同一性がある可変領域配列を含む重鎖、ならびに配列番号６１、７１、８１、９１、１０１、１１１、１２１、１３１、１４１、１５１、１６１、１７１及び１８１から選択される配列に、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の同一性がある可変領域配列を含む軽鎖を含み、ここで抗体は、ＩＣＯＳに結合する。
【０２９７】
いくつかの実施形態では、本明細書に提供されているＣＤＲ配列のいずれか１つ以上が維持され、残りの重、軽、または重及び軽鎖領域（すなわち、ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３及びＦＲ４）は、配列番号１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１１、２１、３１、４１、５１、６１、７１、８１、９１、１０１、１１１、１２１、１３１、１４１、１５１、１６１、１７１及び１８１から選択される配列に、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の同一性がある。
【０２９８】
いくつかの実施形態において、ヒト化抗ＩＣＯＳ抗体は、本明細書に考察されている少なくとも１つのＣＤＲを含む。すなわち、いくつかの実施形態において、ヒト化抗ＩＣＯＳ抗体は、本明細書に考察されている重鎖ＣＤＲ１、本明細書に考察されている重鎖ＣＤＲ２、本明細書に考察されている重鎖ＣＤＲ３、本明細書に考察されている軽鎖ＣＤＲ１、本明細書に考察されている軽鎖ＣＤＲ２及び本明細書に考察されている軽鎖ＣＤＲ３から選択される少なくとも１つのＣＤＲを含む。更に、いくつかの実施形態において、ヒト化抗ＩＣＯＳ抗体は、本明細書に考察されているＣＤＲに基づいた少なくとも１つの突然変異ＣＤＲを含み、突然変異ＣＤＲは、本明細書に考察されているＣＤＲと比べて１、２、３、または４個のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態において、１個以上のアミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換である。当業者は、特定のＣＤＲ配列に適した１個以上の保存的アミノ酸置換を選択することができ、適した保存的アミノ酸置換は、突然変異ＣＤＲを含む抗体の結合特性を有意に変更すると予測されない。
【０２９９】
例示的なヒト化抗ＩＣＯＳ抗体には、ＩＣＯＳへの結合を本明細書に記載されている抗体またはそのフラグメントと競合する抗体も含まれる。したがって、いくつかの実施形態では、７Ｆ１２、３７Ａ１０、３５Ａ９、３６Ｅ１０、１６Ｇ１０、３７Ａ１０Ｓ７１３、３７Ａ１０Ｓ７１４、３７Ａ１０Ｓ７１５、３７Ａ１０Ｓ７１６、３７Ａ１０Ｓ７１７、３７Ａ１０Ｓ７１８、１６Ｇ１０Ｓ７１、１６Ｇ１０Ｓ７２、１６Ｇ１０Ｓ７３、１６Ｇ１０Ｓ８３、３５Ａ９Ｓ７９、３５Ａ９Ｓ７１０及び３５Ａ９Ｓ８９から選択される抗体またはそのフラグメントとＩＣＯＳへの結合を競合するヒト化抗ＩＣＯＳ抗体が、提供される。いくつかの実施形態では、７Ｆ１２、３７Ａ１０、３５Ａ９、３６Ｅ１０、１６Ｇ１０、３７Ａ１０Ｓ７１３、３７Ａ１０Ｓ７１４、３７Ａ１０Ｓ７１５、３７Ａ１０Ｓ７１６、３７Ａ１０Ｓ７１７、３７Ａ１０Ｓ７１８、１６Ｇ１０Ｓ７１、１６Ｇ１０Ｓ７２、１６Ｇ１０Ｓ７３、１６Ｇ１０Ｓ８３、３５Ａ９Ｓ７９、３５Ａ９Ｓ７１０及び３５Ａ９Ｓ８９から選択される抗体またはそのフラグメントとＩＣＯＳへの結合を競合するヒト化抗ＩＣＯＳ抗体が提供され、Ｔｅｆｆ細胞の数を増加させる、及び／またはＴｅｆｆ細胞を活性化する、及び／またはＴｒｅｇ細胞の数を減少させる、及び／またはＴｅｆｆ細胞とＴｒｅｇ細胞の比を増加させる。いくつかの実施形態において、Ｔｒｅｇ細胞は、ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３＋Ｔ細胞である。いくつかの実施形態において、Ｔｅｆｆ細胞は、ＣＤ８＋Ｔ細胞である。いくつかの実施形態において、Ｔｅｆｆ細胞は、ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３−Ｔ細胞及びＣＤ８＋Ｔ細胞である。
【０３００】
いくつかの実施形態において、ヒト化抗ＩＣＯＳ抗体は、配列番号１８８のアミノ酸配列を含む重鎖及び配列番号１８９のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０３０１】
例示的なヒト抗体
いくつかの実施形態において、本明細書に提供されている抗ＩＣＯＳ抗体は、ヒト抗体である。ヒト抗体は、当該技術に既知の様々な技術を使用して産生することができる。ヒト化抗体は、一般に、ｖａｎ  Ｄｉｊｋ  ａｎｄ  ｖａｎ  ｄｅ  Ｗｉｎｋｅｌ，（２００１）Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．５：３６８−３７４及びＬｏｎｂｅｒｇ，（２００８）Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０：４５０−４５９に記載されている。いくつかの実施形態において、ヒト抗体は、天然に生じる抗体ではない。いくつかの実施形態において、ヒト抗体はモノクローナル抗体であり、したがって、いくつかの実施形態では、１つのセット中のそれぞれのヒト抗体が、抗原の同じエピトープに結合することができる。
【０３０２】
ヒト抗体は、免疫原を、抗原投与に応答して無傷のヒト抗体またはヒト可変領域を有する無傷の抗体を産生するように修飾された遺伝子導入動物に投与することによって、調製することができる。そのような動物は、典型的にはヒト免疫グロブリン座の全て、または一部分を含有し、ヒト免疫グロブリン座は内在性免疫グロブリン座を交換する、または染色体外に存在する、もしくは動物の染色体に無作為に組み込まれている。そのような遺伝子導入マウスにおいて、内在性免疫グロブリン座は、一般に不活性化されている。遺伝子導入動物からヒト抗体を得る方法についての総説は、Ｌｏｎｂｅｒｇ，（２００５）Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．２３：１１１７−１１２５を参照すること。例えば、ＸＥＮＯＭＯＵＳＥ（商標）技術を記載する米国特許第６，０７５，１８１号及び同第６，１５０，５８４号、ＨＵＭＡＢ（登録商標）技術を記載する米国特許第５，７７０，４２９号、Ｋ−Ｍ  ＭＯＵＳＥ（登録商標）技術を記載する米国特許第７，０４１，８７０号、ならびにＶＥＬＯＣＩＭＯＵＳＥ（登録商標）技術を記載する米国特許出願公開第２００７／００６１９００号も参照すること。そのような動物により生成された無傷の抗体のヒト可変領域を、例えば、異なるヒト定常領域と組み合わせることによって、更に修飾することができる。
【０３０３】
ヒト抗体は、ハイブリドーマに基づいた方法によっても作製することができる。ヒトモノクローナル抗体の産生のためのヒト骨髄腫及びマウス−ヒト異種骨髄腫（ｈｅｔｅｒｏｍｙｅｌｏｍａ）細胞系が記載されている。（例えばＫｏｚｂｏｒ（１９８４）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ，１３３：３００１、Ｂｒｏｄｅｕｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，ｐｐ．５１−６３（Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９８７）及びＢｏｅｒｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ，（１９９１）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４７：８６を参照すること。）ヒトＢ細胞ハイブリドーマ技術により生成されたヒト抗体も、Ｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，（２００６）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１０３：３５５７−３５６２に記載されている。追加的な方法には、例えば、米国特許第７，１８９，８２６号（ハイブリドーマ細胞系からのモノクローナルヒトＩｇＭ抗体の産生について記載している）及びＮｉ，（２００６）Ｘｉａｎｄａｉ  Ｍｉａｎｙｉｘｕｅ，２６（４）：２６５−２６８（ヒト−ヒトハイブリドーマについて記載している）に記載されているものが含まれる。ヒトハイブリドーマ技術（Ｔｒｉｏｍａ技術）も、Ｖｏｌｌｍｅｒｓ  ａｎｄ  Ｂｒａｎｄｌｅｉｎ，（２００５）Ｈｉｓｔｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ，２０（３）：９２７−９３７（２００５）及びＶｏｌｌｍｅｒｓ  ａｎｄ  Ｂｒａｎｄｌｅｉｎ，（２００５）Ｍｅｔｈｏｄｓ  ａｎｄ  Ｆｉｎｄｉｎｇｓ  ｉｎ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２７（３）：１８５−１９１に記載されている。
【０３０４】
ヒト抗体は、ヒト誘導ファージ提示ライブラリーから選択されるＦｖクローン可変ドメイン配列を単離することによっても生成することができる。次にそのような可変ドメイン配列を、望ましいヒト定常ドメインと組み合わせてもよい。抗体ライブラリーからヒト抗体を選択する技術は、下記に記載されている。
【０３０５】
抗体は、望ましい活性により抗体のコンビナトリアルライブラリーを選別することによって単離してもよい。例えば、ファージ提示ライブラリーを生成する及びそのようなライブラリーを、望ましい結合性を有する抗体について選別する様々な方法が、当該技術において知られている。そのような方法は、例えば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ  ｅｔ  ａｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  １７８：１−３７（Ｏ’Ｂｒｉｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎ  Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，２００１）に総説されており、例えば、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ  ｅｔ  ａｌ，（１９９０）Ｎａｔｕｒｅ  ３４８：５５２−５５４、Ｃｌａｃｋｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ，（１９９１）Ｎａｔｕｒｅ  ３５２：６２４−６２８、Ｍａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ，（１９９２）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ  ２２２：５８１−５９７、Ｍａｒｋｓ  ａｎｄ  Ｂｒａｄｂｕｒｙ，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ２４８：１６１−１７５（Ｌｏ，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎ  Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，２００３）、Ｓｉｄｈｕ  ｅｔ  ａｌ，（２００４）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３３８（２）：２９９−３１０、Ｌｅｅ  ｅｔ  ａｌ．，（２００４）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３４０（５）：１０７３−１０９３、Ｆｅｌｌｏｕｓｅ，（２００４）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ１０１（３４）：１２４６７−１２４７２及びＬｅｅ  ｅｔ  ａｌ，（２００４）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２８４（１−２）：１１９−１３２、ならびにＰＣＴ公報第ＷＯ９９／１０４９４号に更に記載されている。
【０３０６】
ある特定のファージ提示方法において、ＶＨ及びＶＬ遺伝子のレパートリーを、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）により別々にクローンし、ファージライブラリーにおいて無作為に組み換え、次にこれらを、Ｗｉｎｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９４）Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１２：４３３−４５５に記載されているように、抗原結合ファージについて選別することができる。ファージは、典型的には抗体フラグメントを、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）フラグメントまたはＦａｂフラグメントのいずれかとして提示する。免疫化された供給源からのライブラリーは、ハイブリドーマを構築する必要なく、免疫原に対して高親和性抗体を提供する。あるいは、Ｇｒｉｆｆｉｔｈｓ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９３）ＥＭＢＯ  Ｊ  １２：７２５−７３４に記載されているように、未変性のレパートリーをクローンして（例えば、ヒトから）、任意の免疫化を行うことなく、広範囲の非自己、また自己抗原に対して抗体の単一供給源を提供することができる。最後に、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ  ａｎｄ  Ｗｉｎｔｅｒ（１９９２），Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ，２２７：３８１−３８８に記載されているように、幹細胞の非再編成Ｖ遺伝子セグメントをクローンし、ランダム配列を含有するＰＣＲプライマーを使用して、高度に可変性のＣＤＲ３領域をコードし、インビトロで再編成を達成することによって、未変性ライブラリーを合成的に作製することもできる。ヒト抗体ファージライブラリーを記載する特許公報には、例えば、米国特許第５，７５０，３７３号、ならびに米国特許公開第２００５／００７９５７４号、同第２００５／０１１９４５５号、同第２００５／０２６６０００号、同第２００７／０１１７１２６号、同第２００７／０１６０５９８号、同第２００７／０２３７７６４号、同第２００７／０２９２９３６号及び同第２００９／０００２３６０号が含まれる。
【０３０７】
いくつかの実施形態において、ヒト抗ＩＣＯＳ抗体は、配列番号１または２の配列を有するポリペプチドに結合する。いくつかの実施形態において、ヒト抗ＩＣＯＳ抗体はＩＣＯＳに結合し、Ｔｅｆｆ細胞の数を増加させる、及び／またはＴｅｆｆ細胞を活性化する、及び／またはＴｒｅｇ細胞の数を減少させる、及び／またはＴｅｆｆ細胞とＴｒｅｇ細胞の比を増加させる。いくつかの実施形態において、Ｔｒｅｇ細胞は、ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３＋Ｔ細胞である。いくつかの実施形態において、Ｔｅｆｆ細胞は、ＣＤ８＋Ｔ細胞である。いくつかの実施形態において、Ｔｅｆｆ細胞は、ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３−Ｔ細胞及びＣＤ８＋  Ｔ細胞である。
【０３０８】
例示的なヒト抗ＩＣＯＳ抗体には、ＩＣＯＳへの結合を本明細書に記載されているヒト抗体またはそのフラグメントと競合する抗体も含まれる。したがって、いくつかの実施形態では、７Ｆ１２、３７Ａ１０、３５Ａ９、３６Ｅ１０、１６Ｇ１０、３７Ａ１０Ｓ７１３、３７Ａ１０Ｓ７１４、３７Ａ１０Ｓ７１５、３７Ａ１０Ｓ７１６、３７Ａ１０Ｓ７１７、３７Ａ１０Ｓ７１８、１６Ｇ１０Ｓ７１、１６Ｇ１０Ｓ７２、１６Ｇ１０Ｓ７３、１６Ｇ１０Ｓ８３、３５Ａ９Ｓ７９、３５Ａ９Ｓ７１０及び３５Ａ９Ｓ８９から選択される抗体またはそのフラグメントとＩＣＯＳへの結合を競合するヒト抗ＩＣＯＳ抗体が、提供される。いくつかの実施形態では、７Ｆ１２、３７Ａ１０、３５Ａ９、３６Ｅ１０、１６Ｇ１０、３７Ａ１０Ｓ７１３、３７Ａ１０Ｓ７１４、３７Ａ１０Ｓ７１５、３７Ａ１０Ｓ７１６、３７Ａ１０Ｓ７１７、３７Ａ１０Ｓ７１８、１６Ｇ１０Ｓ７１、１６Ｇ１０Ｓ７２、１６Ｇ１０Ｓ７３、１６Ｇ１０Ｓ８３、３５Ａ９Ｓ７９、３５Ａ９Ｓ７１０及び３５Ａ９Ｓ８９から選択される抗体またはそのフラグメントとＩＣＯＳへの結合を競合するヒト抗ＩＣＯＳ抗体が提供され、Ｔｅｆｆ細胞の数を増加させる、及び／またはＴｅｆｆ細胞を活性化する、及び／またはＴｒｅｇ細胞の数を減少させる、及び／またはＴｅｆｆ細胞とＴｒｅｇ細胞の比を増加させる。いくつかの実施形態において、Ｔｒｅｇ細胞は、ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３＋Ｔ細胞である。いくつかの実施形態において、Ｔｅｆｆ細胞は、ＣＤ８＋Ｔ細胞である。いくつかの実施形態において、Ｔｅｆｆ細胞は、ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３−Ｔ細胞及びＣＤ８＋Ｔ細胞である。
【０３０９】
いくつかの実施形態では、キメラヒト抗ＩＣＯＳ抗体が提供され、ここで抗体は、ＩＣＯＳに結合するヒト抗体の可変領域及び異なるヒト抗体の定常領域を含む。いくつかの実施形態において、キメラヒト抗ＩＣＯＳ抗体が提供され、ここで抗体は、ＩＣＯＳに結合するヒト抗体のＣＤＲ及び異なるヒト抗体のフレームワークを含む。いくつかの実施形態において、この抗体は、天然に生じるヒト抗体ではない。
【０３１０】
いくつかの実施形態において、ヒト抗ＩＣＯＳ抗体は、１つ以上のヒト定常領域を含む。いくつかの実施形態において、ヒト重鎖定常領域は、ＩｇＡ、ＩｇＧ及びＩｇＤから選択されるアイソタイプのものである。いくつかの実施形態において、ヒト軽鎖定常領域は、κ及びλから選択されるアイソタイプのものである。いくつかの実施形態において、本明細書に記載されているヒト抗体は、ヒトＩｇＧ定常領域を含む。いくつかの実施形態において、本明細書に記載されているヒト抗体は、ヒトＩｇＧ４重鎖定常領域を含む。いくつかの実施形態において、本明細書に記載されているヒト抗体は、ヒトＩｇＧ４定常領域及びヒトκ軽鎖を含む。
【０３１１】
いくつかの実施形態では、エフェクター機能が望ましい場合、ヒトＩｇＧ１重鎖定常領域またはヒトＩｇＧ３重鎖定常領域を含むヒト抗ＩＣＯＳ抗体が選択される。いくつかの実施形態では、エフェクター機能が望ましくない場合、ヒトＩｇＧ４またはＩｇＧ２重鎖定常領域を含むヒト抗ＩＣＯＳ抗体が選択される。
【０３１２】
本明細書に示されているように、用語「ヒト抗体」は、抗体の供給源ではなく、抗体構築物に可能な配列の属を示している。
【０３１３】
例示的な抗体定常領域
いくつかの実施形態において、本明細書に記載されている抗体は、１つ以上のヒト定常領域を含む。いくつかの実施形態において、ヒト重鎖定常領域は、ＩｇＡ、ＩｇＧ及びＩｇＤから選択されるアイソタイプのものである。いくつかの実施形態において、ヒト軽鎖定常領域は、κ及びλから選択されるアイソタイプのものである。いくつかの実施形態において、本明細書に記載されている抗体は、ヒトＩｇＧ定常領域を含む。いくつかの実施形態において、本明細書に記載されている抗体は、ヒトＩｇＧ４重鎖定常領域を含む。いくつかの実施形態において、本明細書に記載されている抗体は、ヒトＩｇＧ４定常領域及びヒトκ軽鎖を含む。
【０３１４】
特に明確に記述されない限り、または当業者に既知でない限り、本明細書及び特許請求の範囲の全体を通して、免疫グロブリン重鎖の残基の番号付けは、参照として本明細書に明確に組み込まれる、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ  Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．（１９９１）のようなＥＵ指標のものである。「ＫａｂａｔのようなＥＵ指標」は、ヒトＩｇＧ１  ＥＵ抗体の残基番号付けを指す。
【０３１５】
上記に示されたように、エフェクター機能が望ましいかは、抗体に対して意図される特定の処理方法によって左右されうる。したがって、いくつかの実施形態では、エフェクター機能が望ましい場合、ヒトＩｇＧ１重鎖定常領域またはヒトＩｇＧ３重鎖定常領域を含む抗ＩＣＯＳ抗体が選択される。いくつかの実施形態では、エフェクター機能が望ましくない場合、ヒトＩｇＧ４またはＩｇＧ２重鎖定常領域を含む抗ＩＣＯＳ抗体が選択される。
【０３１６】
いくつかの実施形態において、抗体は、野生型ＩｇＧまたは野生型抗体のＦｃ領域と比較して、少なくとも１個のアミノ酸置換を有する変種Ｆｃ領域を含む。いくつかの実施形態において、変種Ｆｃ領域は、野生型抗体のＦｃ領域に２個以上のアミノ酸置換を有する。いくつかの実施形態において、変種Ｆｃ領域は、野生型抗体のＦｃ領域に３個以上のアミノ酸置換を有する。いくつかの実施形態において、変種Ｆｃ領域は、本明細書に記載されている少なくとも１個、２個、もしくは３個、またはそれ以上のＦｃ領域アミノ酸置換を有する。いくつかの実施形態において、本明細書の変種Ｆｃ領域は、未変性配列Ｆｃ領域及び／または親ポリペプチドのＦｃ領域と少なくとも約８０％の相同性を有する。いくつかの実施形態において、本明細書の変種Ｆｃ領域は、未変性配列Ｆｃ領域及び／または親ポリペプチドのＦｃ領域と少なくとも約９０％の相同性を有する。いくつかの実施形態において、本明細書の変種Ｆｃ領域は、未変性配列Ｆｃ領域及び／または親ポリペプチドのＦｃ領域と少なくとも約９５％の相同性を有する。
【０３１７】
いくつかの実施形態において、本明細書に提供されている抗体は、抗体がグリコシル化される程度を増加または減少するように変更される。抗体のグリコシル化部位の付加または欠失は、１個以上のグルコシル化部位が作り出される、または除去されるようにアミノ酸配列を変更することによって、都合良く達成されうる。
【０３１８】
抗体がＦｃ領域を含む場合、結合している炭水化物が変更されうる。哺乳類細胞により産生される未変性抗体は、一般にはＦｃ領域のＣＨ２ドメインのＡｓｎ２９７にＮ連結により結合している分枝二本側鎖（ｂｉａｎｔｅｎｎａｒｙ）オリゴ糖を、典型的に含む。例えば、Ｗｒｉｇｈｔ  ｅｔ  ａｌ．ＴＩＢＴＥＣＨ  １５：２６−３２（１９９７）を参照すること。オリゴ糖には、様々な炭水化物、例えば、マンノース、Ｎ−アセチルグルコサミン（ＧｌｃＮＡｃ）、ガラクトース及びシアル酸、ならびに二本側鎖オリゴ糖構造の「幹」のＧｌｃＮＡｃに結合しているフコースが含まれうる。いくつかの実施形態において、抗体のオリゴ糖の修飾は、特定の改善された特性を有する抗体変種を作り出すために行う場合がある。
【０３１９】
いくつかの実施形態では、Ｆｃ領域に（直接的または間接的に）結合したフコースを欠いている炭水化物構造を有する抗体変種が、提供される。例えば、そのような抗体におけるフコースの量は、１％〜８０％、１％〜６５％、５％〜６５％、または２０％〜４０％でありうる。フコースの量は、例えばＷＯ２００８／０７７５４６に記載されているように、ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ質量分析により測定して、Ａｓｎ２９７に結合した全ての糖構造（ｇｌｙｃｏｓｔｒｕｃｔｕｒｅ）（例えば、複合体、ハイブリッド及び高マンノース構造）の合計に対する、Ａｓｎ２９７の糖鎖内のフコースの平均量を計算することによって決定される。Ａｓｎ２９７は、Ｆｃ領域のおよそ２９７位（Ｆｃ領域残基のＥＵ番号付け）に位置するアスパラギン残基を指すが、Ａｓｎ２９７は、２９７位から上流または下流に約±３個のアミノ酸、すなわち抗体における僅かな配列差異に起因して２９４〜３００位の間に位置する場合もある。そのようなフコシル化変種は、改善されたＡＤＣＣ機能を有する場合がある。例えば、米国特許公開第２００３／０１４７１０８号（Ｐｒｅｓｔａ，Ｌ．）、同第２００４／００９３６２１号（Ｋｙｏｗａ−Ｈａｋｋｏ  Ｋｏｇｙｏ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ．）を参照すること。「脱フコシル化」または「フコシル欠乏」抗体変種に関する出版物の例には、ＵＳ２００３／０１５７１０８、ＷＯ２０００／６１７３９、ＷＯ２００１／２９２４６、ＵＳ２００３／０１１５６１４、ＵＳ２００２／０１６４３２８、ＵＳ２００４／００９３６２１、ＵＳ２００４／０１３２１４０、ＵＳ２００４／０１１０７０４、ＵＳ２００４／０１１０２８２、ＵＳ２００４／０１０９８６５、ＷＯ２００３／０８５１１９、ＷＯ２００３／０８４５７０、ＷＯ２００５／０３５５８６、ＷＯ２００５／０３５７７８、ＷＯ２００５／０５３７４２、ＷＯ２００２／０３１１４０、Ｏｋａｚａｋｉ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３３６：１２３９−１２４９（２００４）、Ｙａｍａｎｅ−Ｏｈｎｕｋｉ  ｅｔ  ａｌ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ｂｉｏｅｎｇ．８７：６１４（２００４）が含まれる。脱フコシル化抗体を産生することができる細胞系の例には、タンパク質フコシル化において欠乏しているＬｅｃ１３  ＣＨＯ細胞（Ｒｉｐｋａ  ｅｔ  ａｌ．Ａｒｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．２４９：５３３−５４５（１９８６）、米国特許出願第２００３／０１５７１０８Ａ１号、Ｐｒｅｓｔａ，Ｌ及びＷＯ２００４／０５６３１２Ａ１、Ａｄａｍｓ  ｅｔ  ａｌ．、とりわけ実施例１１）、ならびにアルファ−１，６−フコシルトランスフェラーゼ遺伝子ＦＵＴ８ノックアウトＣＨＯ細胞などのノックアウト細胞系（例えば、Ｙａｍａｎｅ−Ｏｈｎｕｋｉ  ｅｔ  ａｌ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ｂｉｏｅｎｇ．８７：６１４（２００４）、Ｋａｎｄａ，Ｙ．ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｅｎｇ．，９４（４）：６８０−６８８（２００６）及びＷＯ２００３／０８５１０７を参照すること）が含まれる。
【０３２０】
例えば、抗体のＦｃ領域に結合した二本側鎖オリゴ糖がＧｌｃＮＡｃにより二分されている、二分されたオリゴ糖を有する抗体変種が更に提供される。そのような抗体変種は、低減したフコシル化及び／または改善されたＡＤＣＣ機能を有しうる。そのような抗体変種の例は、例えば、ＷＯ２００３／０１１８７８（Ｊｅａｎ−Ｍａｉｒｅｔ  ｅｔ  ａｌ．）、米国特許第６，６０２，６８４号（Ｕｍａｎａ  ｅｔ  ａｌ．）及びＵＳ２００５／０１２３５４６（Ｕｍａｎａ  ｅｔ  ａｌ．）に記載されている。Ｆｃ領域に結合したオリゴ糖に少なくとも１個のガラクトース残基を有する抗体変種も、提供される。そのような抗体変種は、改善されたＣＤＣ機能を有する場合がある。そのような抗体変種は、例えば、ＷＯ１９９７／３００８７（Ｐａｔｅｌ  ｅｔ  ａｌ．）、ＷＯ１９９８／５８９６４（Ｒａｊｕ，Ｓ．）及びＷＯ１９９９／２２７６４（Ｒａｊｕ，Ｓ．）に記載されている。
【０３２１】
アミノ末端リーダー伸長を有する抗体変種も、提供される。例えば、アミノ末端リーダー配列の１個以上のアミノ酸残基が、抗体のいずれか１つ以上の重または軽鎖におけるアミノ末端に存在する。例示的なアミノ末端リーダー伸長は、抗体変種の一方または両方の軽鎖に存在する３個のアミノ酸残基、ＶＨＳを含む、または、からなる。
【０３２２】
ヒトＦｃＲｎ高親和性結合ポリペプチドのインビボまたは血清半減期を、例えば、遺伝子導入マウスにおいて、ヒトにおいて、または変種Ｆｃ領域を有するポリペプチドが投与された非ヒト霊長類においてアッセイすることができる。例えば、Ｐｅｔｋｏｖａ  ｅｔ  ａｌ．Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  １８（１２）：１７５９−１７６９（２００６）も参照すること。
【０３２３】
いくつかの実施形態において、抗体変種は、ヒトエフェクター細胞の存在下でＡＤＣＣを親抗体より有効に媒介する。いくつかの実施形態において、抗体変種は、アッセイに使用されるポリペプチド変種及び親抗体の量が本質的に同じであるとき、インビトロにおいてＡＤＣＣを実質的により有効に媒介する。いくつかの実施形態において、抗体変種は、アッセイに使用されるポリペプチド変種及び親抗体の量が本質的に同じであるとき、インビボにおいてＡＤＣＣを実質的により有効に媒介する。一般に、そのような変種は、本明細書に開示されているインビトロＡＤＣＣアッセイを使用して特定することができるが、ＡＤＣＣ活性を、例えば動物モデルなどにおいて決定する他のアッセイまたは方法が考慮される。
【０３２４】
例示的な抗体抱合体
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、別の分子と抱合する。いくつかの実施形態において、追加の分子は、標識などの検出可能マーカーでありうる。いくつかの実施形態において、追加の分子は、細胞傷害剤などの治療分子でありうる。いくつかの実施形態では、標識及び／または細胞傷害剤を抗体と抱合させることができる。本明細書に使用されるとき、標識とは、抗体の検出を促進する及び／または抗体が結合する分子の検出を促進する部分である。非限定的な例示の標識には、放射性同位体、蛍光基、酵素基、化学発光基、ビオチン、エピトープタグ、金属結合タグなどが含まれるが、これらに限定されない。当業者は、特定の用途に従って適切な標識を選択することができる。
【０３２５】
本明細書に使用されるとき、細胞傷害剤とは、１つ以上の細胞の繁殖能力を低減する部分である。例えば、細胞がアポトーシスを経ている、そうでなければ死を迎えている、細胞が細胞周期を介して進むことに失敗している及び／または分裂に失敗している、細胞が分化している、などの理由で、細胞が繁殖することができなくなっている場合、細胞は、低減された繁殖能力を有する。非限定的な例示の細胞傷害剤には、放射性同位体、毒素及び化学療法剤が含まれるが、これらに限定されない。当業者は、意図される用途に従って適切な細胞傷害剤を選択することができる。いくつかの実施形態において、細胞傷害剤は、代謝拮抗薬、アルキル化剤、抗生物質、増殖因子、サイトカイン、抗血管新生剤、抗有糸分裂剤、アントラサイクリン、毒素、またはアポトーシス剤の少なくとも１つである。
【０３２６】
いくつかの実施形態において、標識及び／または細胞傷害剤は、化学的な方法を使用してインビトロにおいて抗体に抱合される。抱合体についての非限定的な例示の化学的な方法は、当該技術において知られており、例えば、Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｐｒｏｄｕｃｅｓ（旧Ｐｉｅｒｃｅ；Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，Ｉｌｌ．）、Ｐｒｏｚｙｍｅ（Ｈａｙｗａｒｄ，Ｃａｌｉｆ．）、ＳＡＣＲＩ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ（Ｃａｌｇａｒｙ，Ｃａｎａｄａ）、ＡｂＤ  Ｓｅｒｏｔｅｃ（Ｒａｌｅｉｇｈ，Ｎ．Ｃ．）などから販売されている、サービス、方法及び／または試薬が含まれる。いくつかの実施形態において、標識及び／または細胞傷害剤がポリペプチドである場合、標識及び／または細胞傷害剤を、少なくとも１つの抗体鎖を有する同じ発現ベクターにより発現させて、抗体鎖に融合させた標識及び／または細胞傷害剤を含むポリペプチドを産生することができる。当業者は、意図される用途に従って標識及び／または細胞傷害剤を抗体に抱合させるのに適した方法を選択することができる。
【０３２７】
いくつかの実施形態において、抱合は共有結合的でありうる。いくつかの実施形態において、抱合は非共有結合的でありうる。いくつかの実施形態において、抱合は、特定の結合相互作用を介するもの、例えば、二次抗体の結合を介するものでありうる。
【０３２８】
例示的なリーダー配列
一部の分泌タンパク質を大量に発現及び分泌させるためには、異種タンパク質からのリーダー配列が望ましいことがある。いくつかの実施形態において、異種リーダー配列を用いることは、リーダー配列が分泌過程においてＥＲから除去されるので、得られた成熟ポリペプチドが変更されない状態で維持されうるという点において、有利でありうる。異種リーダー配列の付加は、一部のタンパク質を発現及び分泌するために有用でありうる。
【０３２９】
特定の例示的なリーダー配列が、例えば、シンガポール国立大学、生化学科（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｓｉｎｇａｐｏｒｅ）により維持管理されているオンラインのリーダー配列データベースに記載されている。Ｃｈｏｏ  ｅｔ  ａｌ．，ＢＭＣ  Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ，６：２４９（２００５）及びＰＣＴ公報第ＷＯ２００６／０８１４３０号を参照すること。
【０３３０】
ＩＶ．抗体の発現及び産生
抗ＩＣＯＳ抗体をコードする核酸分子
抗ＩＣＯＳ抗体の１つ以上の鎖をコードするポリヌクレオチドを含む核酸分子が、本明細書に提供されている。いくつかの実施形態において、核酸分子は、抗ＩＣＯＳ抗体の重鎖または軽鎖をコードするポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態において、核酸分子は、抗ＩＣＯＳ抗体の重鎖をコードするポリヌクレオチド及び軽鎖をコードするポリヌクレオチドを両方とも含む。いくつかの実施形態において、第１の核酸分子は、重鎖をコードする第１のポリヌクレオチドを含み、第２の核酸分子は、軽鎖をコードする第２のポリヌクレオチドを含む。
【０３３１】
いくつかの実施形態において、重鎖及び軽鎖は、１つの核酸分子から発現する、または２つの核酸分子から２つの別個のポリペプチドとして発現する。いくつかの実施形態において、例えば、抗体がｓｃＦｖである場合、単一のポリヌクレオチドは、一緒に連結している重鎖及び軽鎖の両方を含む単一のポリペプチドをコードする。
【０３３２】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体の重鎖または軽鎖をコードするポリヌクレオチドは、本明細書に提供されているＣＤＲの少なくとも１つをコードするヌクレオチド配列を含む。いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体の重鎖または軽鎖をコードするポリヌクレオチドは、本明細書に提供されているＣＤＲの少なくとも３つをコードするヌクレオチド配列を含む。いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体の重鎖または軽鎖をコードするポリヌクレオチドは、本明細書に提供されているＣＤＲの少なくとも６つをコードするヌクレオチド配列を含む。いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体の重鎖または軽鎖をコードするポリヌクレオチドは、翻訳されたときに重鎖または軽鎖のＮ末端に位置するリーダー配列をコードするヌクレオチド配列を含む。上記に考察されたように、リーダー配列は、未変性の重もしくは軽鎖リーダー配列でありうる、または別の異種リーダー配列でありうる。
【０３３３】
いくつかの実施形態において、核酸は、本明細書における配列表の抗体のアミノ酸配列のいずれかをコードするものである。いくつかの実施形態において、核酸は、本明細書における配列表の抗体のアミノ酸配列のいずれかをコードする核酸に、少なくとも８０％の同一性、例えば、少なくとも８０、８５、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、または９９％の同一性があるものである。いくつかの実施形態において、核酸は、本明細書に提供されている核酸配列にいずれか１つ以上とハイブリッド形成するものである。いくつかの実施形態において、ハイブリッド形成は、穏やかな条件下のものである。いくつかの実施形態において、ハイブリッド形成は、０．１×のＳＳＣ中の約２０％（ｖ／ｖ）のホルマリンによる約４２℃で１０分間の最初の洗浄、０．２×のＳＳＣ及び０．１％のＳＤＳによる６５℃での続く洗浄を用いる、６５℃での少なくとも約６×のＳＳＣ及び１％のＳＤＳなどの極めて厳密な条件下のものである。
【０３３４】
核酸分子は、当該技術に慣用的な組み換えＤＮＡ技術を使用して構築することができる。いくつかの実施形態において、核酸分子は、選択された宿主細胞における発現に適した発現ベクターである。
【０３３５】
ベクター 
抗ＩＣＯＳ重鎖及び／または抗ＩＣＯＳ軽鎖をコードするポリヌクレオチドを含むベクターが、提供される。抗ＩＣＯＳ重鎖及び／または抗ＩＣＯＳ軽鎖をコードするポリヌクレオチドを含むベクターも、提供される。そのようなベクターには、ＤＮＡベクター、ファージベクター、ウイルスベクター、レトロウイルスベクターなどが含まれるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態において、ベクターは、重鎖をコードする第１のポリヌクレオチド及び軽鎖をコードする第２のポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態において、重鎖及び軽鎖は、２つの別個のポリペプチドとしてベクターにより発現される。いくつかの実施形態において、重鎖及び軽鎖は、例えば抗体がｓｃＦｖである場合など、単一のポリペプチドの一部として発現する。
【０３３６】
いくつかの実施形態において、第１のベクターは、重鎖をコードするポリヌクレオチドを含み、第２のベクターは、軽鎖をコードするポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態において、第１のベクター及び第２のベクターは、類似した量（例えば、類似したモル量または類似した質量）で宿主細胞に形質移入される。いくつかの実施形態では、モル比または質量比が５：１〜１：５の第１のベクターと第２のベクターが、宿主細胞に形質移入される。いくつかの実施形態では、重鎖をコードするベクターと軽鎖をコードするベクターとの１：１〜１：５の質量比が、使用される。いくつかの実施形態では、重鎖をコードするベクターと軽鎖をコードするベクターとの１：２の質量比が、使用される。
【０３３７】
いくつかの実施形態では、ＣＨＯもしくはＣＨＯ誘導細胞における、またはＮＳＯ細胞におけるポリペプチドの発現を最適化するベクターが、選択される。例示的なそのようなベクターは、例えば、Ｒｕｎｎｉｎｇ  Ｄｅｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｐｒｏｇ．２０：８８０−８８９（２００４）に記載されている。
【０３３８】
宿主細胞 
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体重鎖及び／または抗ＩＣＯＳ抗体軽鎖は、細菌細胞などの原核細胞、または真菌細胞（例えば、酵母）、植物細胞、昆虫細胞及び哺乳類細胞などの真核細胞に発現することができる。そのような発現は、例えば、当該技術に既知の手順に従って実施することができる。ポリペプチドの発現に使用することができる例示的な真核細胞には、ＣＯＳ７細胞を含むＣＯＳ細胞、２９３−６Ｅ細胞を含む２９３細胞、ＣＨＯ−Ｓ、ＤＧ４４．Ｌｅｃ１３  ＣＨＯ細胞及びＦＵＴ８  ＣＨＯ細胞を含むＣＨＯ細胞、ＰＥＲ．Ｃ６（登録商標）細胞（Ｃｒｕｃｅｌｌ）、ならびにＮＳＯ細胞が含まれるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体重鎖及び／または０ＩＣＯＳ抗体軽鎖は、酵母に発現することができる。例えば、米国特許公開第２００６／０２７００４５Ａ１号を参照すること。いくつかの実施形態において、特定の真核生物宿主細胞は、抗ＩＣＯＳ抗体の重鎖及び／または抗ＩＣＯＳ抗体の軽鎖に望ましい翻訳後修飾を行う能力に基づいて選択される。例えば、いくつかの実施形態において、ＣＨＯ細胞は、２９３細胞に産生された同じポリペプチドより高いレベルのシアリル化を有するポリペプチドを産生する。
【０３３９】
１つ以上の核酸を望ましい宿主細胞に導入することは、リン酸カルシウム形質移入、ＤＥＡＥ−デキストラン媒介形質移入、カチオン性脂質媒介形質移入、電気穿孔、形質導入、感染などが含まれるが、これらに限定されない任意の方法によって達成することができる。非限定的な例示の方法は、例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ，Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，３ｒｄ  ｅｄ．Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ（２００１）に記載されている。核酸を、任意の適切な方法によって望ましい宿主細胞に一時的または安定して形質移入することができる。
【０３４０】
本明細書に記載されている任意のポリヌクレオチドまたはベクターを含む宿主細胞も、提供される。いくつかの実施形態では、抗ＩＣＯＳ抗体を含む宿主細胞が提供される。異種ＤＮＡを過剰発現することができる任意の宿主細胞を、目的の抗体、ポリペプチド、またはタンパク質をコードする遺伝子を単離する目的に使用することができる。哺乳類宿主細胞の非限定例には、ＣＯＳ、ＨｅＬａ及びＣＨＯ細胞が含まれるが、これらに限定されない。ＰＣＴ公報第ＷＯ８７／０４４６２号も参照すること。適切な非哺乳類宿主細胞には、原核細胞（例えば、Ｅ．ｃｏｌｉまたはＢ．ｓｕｂｔｉｌｌｓ）及び酵母（例えば、Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓａｅ、Ｓ．ｐｏｍｂｅ、またはＫ．ｌａｃｔｉｓ）が含まれる。
【０３４１】
抗体の精製
抗ＩＣＯＳ抗体を任意の適切な方法により精製することができる。そのような方法には、親和性マトリックスまたは疎水性相互作用クロマトグラフィーの使用が含まれるが、これらに限定されない。適切な親和性リガンドには、ＲＯＲ１  ＥＣＤ、及び抗体定常領域に結合するリガンドが含まれる。例えば、プロテインＡ、プロテインＧ、プロテインＡ／Ｇ、または抗体親和性カラムを使用して、定常領域に結合させ、抗ＩＣＯＳ抗体を精製することができる。疎水性相互作用クロマトグラフィー、例えば、ブチルまたはフェニルカラムが、抗体などの一部のポリペプチドの精製に適していることもある。イオン交換クロマトグラフィー（例えば、アニオン交換クロマトグラフィー及び／またはカチオン交換クロマトグラフィー）が、抗体などの一部のポリペプチドの精製に適していることもある。混合モードクロマトグラフィー（例えば、逆相／アニオン交換、逆相／カチオン交換、親水性相互作用／アニオン交換、親水性相互作用／カチオン交換など）が、抗体などの一部のポリペプチドの精製に適していることもある。ポリペプチドを精製する多くの方法が、当該技術において知られている。
【０３４２】
抗体の無細胞産生
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、無細胞系において産生される。非限定的な例示の無細胞系は、例えば、Ｓｉｔａｒａｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４９８：２２９−４４（２００９）、Ｓｐｉｒｉｎ，Ｔｒｅｎｄｓ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２２：５３８−４５（２００４）、Ｅｎｄｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ａｄｖ．２１：６９５−７１３（２００３）に記載されている。
【０３４３】
組成物
いくつかの実施形態において、上記に記載された方法により産生された抗体が、提供される。いくつかの実施形態において、抗体は、宿主細胞において調製される。いくつかの実施形態において、抗体は、無細胞系において調製される。いくつかの実施形態において、抗体は、精製される。いくつかの実施形態において、宿主細胞または無細胞系において調製された抗体は、キメラ抗体である。いくつかの実施形態において、宿主細胞または無細胞系において調製された抗体は、ヒト化抗体である。いくつかの実施形態において、宿主細胞または無細胞系において調製された抗体は、ヒト抗体である。いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体を含む細胞培養培地が提供される。いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体を含む宿主細胞培養液が提供される。
【０３４４】
いくつかの実施形態において、上記に記載された方法により調製された抗体を含む組成物が、提供される。いくつかの実施形態において、組成物は、宿主細胞において調製された抗体を含む。いくつかの実施形態において、組成物は、無細胞系において調製された抗体を含む。いくつかの実施形態において、組成物は、精製された抗体を含む。いくつかの実施形態において、組成物は、宿主細胞または無細胞系において調製されたキメラ抗体を含む。いくつかの実施形態において、組成物は、宿主細胞または無細胞系において調製されたヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態において、組成物は、宿主細胞または無細胞系において調製されたヒト抗体を含む。
【０３４５】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体を、約１０ｍｇ／ｍＬ超、約２０ｍｇ／ｍＬ超、約３０ｍｇ／ｍＬ超、約４０ｍｇ／ｍＬ超、約５０ｍｇ／ｍＬ超、約６０ｍｇ／ｍＬ超、約７０ｍｇ／ｍＬ超、約８０ｍｇ／ｍＬ超、約９０ｍｇ／ｍＬ超、約１００ｍｇ／ｍＬ超、約１２５ｍｇ／ｍＬ超、約１５０ｍｇ／ｍＬ超、約１７５ｍｇ／ｍＬ超、約２００ｍｇ／ｍＬ超、約  ２２５ｍｇ／ｍＬ超、または約２５０ｍｇ／ｍＬ超のいずれかの濃度で含む組成物が、提供される。いくつかの実施形態において、組成物は、宿主細胞または無細胞系において調製されたキメラ抗体を含む。いくつかの実施形態において、組成物は、宿主細胞または無細胞系において調製されたヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態において、組成物は、宿主細胞または無細胞系において調製されたヒト抗体を含む。
【０３４６】
Ｖ．治療組成物及び方法
抗ＩＣＯＳ抗体を使用する疾患の治療方法 
抗体及び抗体を含む組成物が、ヒトまたは動物の治療方法における使用のために提供される。抗ＩＣＯＳ抗体を投与することを含む疾患の治療方法も提供される。抗ＩＣＯＳ抗体により治療することができる非限定的な例示の疾患には、癌が含まれるが、これに限定されない。
【０３４７】
いくつかの実施形態では、腫瘍を治療する方法が提供され、腫瘍試料内の細胞は、ＩＣＯＳを発現する。いくつかのそのような実施形態において、腫瘍は、ＩＣＯＳ陽性である、またはＩＣＯＳを発現すると考慮することができる。ＩＣＯＳの発現は、例えば本明細書に考察されているＩＨＣによって決定することができる。いくつかの実施形態において、腫瘍の試料がＩＨＣにより１＋、２＋、または３＋のＩＣＯＳ染色を示す場合、腫瘍はＩＣＯＳを発現すると考慮される。いくつかの実施形態において、腫瘍の試料はＩＨＣにより２＋、または３＋のＩＣＯＳ染色を示す。いくつかの実施形態において、対象の腫瘍試料は、ＩＣＯＳ発現について分析され、対象は、腫瘍試料がＩＣＯＳ発現を示す場合、本明細書に記載されている抗体による治療に選択される。いくつかの実施形態において、対象は、腫瘍試料がＩＣＯＳの高い発現を示す場合に選択される。
【０３４８】
いくつかの実施形態において、対象は、対象の腫瘍がＰＤ−Ｌ１低である場合、本明細書に提供されている抗ＩＣＯＳ抗体による治療に選択される。いくつかの実施形態において、対象は、対象の腫瘍がＩＣＯＳ高／ＰＤ−Ｌ１低である場合、本明細書に提供されている抗ＩＣＯＳ抗体による治療に選択される。いくつかの実施形態において、対象は、対象の腫瘍がＩＣＯＳ高／ＰＤ−Ｌ１高である場合、本明細書に提供されている抗ＩＣＯＳ抗体による治療に選択される。
【０３４９】
抗ＩＣＯＳ抗体を、必要に応じて対象に投与することができる。投与の頻度の決定は、治療される状態、治療される対象の年齢、治療される状態の重篤度、治療される対象の一般的な健康状態などに基づいて、担当医などの当業者によって行うことができる。いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体の有効用量は、対象に１回以上投与される。いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体の有効用量は、対象に、１か月に１回、１か月に１回未満、例えば２か月に１回または３か月に１回などで投与される。いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体の有効用量は、１か月に１回未満、例えば、３週間に１回、２週間に１回、または毎週１回などで投与される。抗ＩＣＯＳ抗体の有効用量は、対象に少なくとも１回投与される。いくつかの実施形態では、抗ＩＣＯＳ抗体の有効用量を、少なくとも１か月間、少なくとも６か月間、または少なくとも１年間にわたって複数回投与することができる。
【０３５０】
いくつかの実施形態において、薬学的組成物は、癌の（予防を含む）治療のための有効量で投与される。治療有効量は、典型的には、治療される対象の体重、健康状態、治療される状態の広がり、または治療される対象の年齢によって決まる。一般に、抗ＩＣＯＳ抗体を、１用量あたり約１０μｇ／ｋｇ体重〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の量で投与することができる。いくつかの実施形態では、抗ＩＣＯＳ抗体を、１用量あたり約５０μｇ／ｋｇ体重〜約５ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の量で投与することができる。いくつかの実施形態では、抗ＩＣＯＳ抗体を、１用量あたり約１００μｇ／ｋｇ体重〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の量で投与することができる。いくつかの実施形態では、抗ＩＣＯＳ抗体を、１用量あたり約１００μｇ／ｋｇ体重〜約２０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の量で投与することができる。いくつかの実施形態では、抗ＩＣＯＳ抗体を、１用量あたり約０．５ｍｇ／ｋｇ体重〜約２０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の量で投与することができる。
【０３５１】
薬理学的組成物は、Ｔｅｆｆ細胞の数を増加させる、Ｔｅｆｆ細胞を活性化する、Ｔｒｅｇ細胞を枯渇させる、及び／またはＴｅｆｆ細胞とＴｒｅｇ細胞の比を増加させるのに有効な量で投与される。いくつかの実施形態において、Ｔｒｅｇ細胞は、ＣＤ４＋  ＦｏｘＰ３＋  Ｔ細胞である。いくつかの実施形態において、Ｔｅｆｆ細胞は、ＣＤ８＋  Ｔ細胞である。いくつかの実施形態において、Ｔｅｆｆ細胞は、ＣＤ４＋  ＦｏｘＰ３−  Ｔ細胞及びＣＤ８＋  Ｔ細胞である。
【０３５２】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体を用いる治療は、ＩＣＯＳリガンド（ＩＣＯＳＬ）の上方制御などの薬物動態読み取りをもたらす。いくつかの実施形態において、ＩＣＯＳＬの上方制御は、Ｂ細胞の表面において観察される。いくつかの実施形態において、ＩＣＯＳＬの上方制御は、顆粒球の表面において観察される。いくつかの実施形態において、ＩＣＯＳＬの上方制御は、好中球の表面において観察される。ＩＣＯＳＬの上方制御は、腫瘍の細胞、脾臓の細胞、末梢血の細胞において観察することができる。細胞表面におけるＩＣＯＳＬの上方制御は、例えばフローサイトメトリーにより検出することができる。いくつかの実施形態において、可溶性ＩＣＯＳＬは、抗ＩＣＯＳ抗体による治療の後、血清中に増加される。可溶性ＩＣＯＳＬは、ＥＬＩＳＡ、ＭＳＤ及び質量分析が含まれるが、これらに限定されない方法によって検出することができる。いくつかの実施形態において、遊離受容体の利用能により測定した、抗ＩＣＯＳ抗体によるＩＣＯＳ標的会合を、薬物動態読み取りとして使用することもできる。いくつかのそのような実施形態では、抗ＩＣＯＳ抗体により治療したときの、追加の抗体に自由に結合するＴリンパ球の表面のＩＣＯＳ受容体の数を定量化することができる。観察された利用可能な受容体の減少は、抗ＩＣＯＳ抗体が標的分子に結合している指標として機能しうる。
【０３５３】
治療有効量は、典型的には、治療される対象の体重、健康状態、治療される状態の広がり、または治療される対象の年齢によって決まる。一般に、抗ＩＣＯＳ抗体を、１用量あたり約１０μｇ／ｋｇ体重〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の量で投与することができる。いくつかの実施形態では、抗ＩＣＯＳ抗体を、１用量あたり約５０μｇ／ｋｇ体重〜約５ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の量で投与することができる。いくつかの実施形態では、抗ＩＣＯＳ抗体を、１用量あたり約１００μｇ／ｋｇ体重〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の量で投与することができる。いくつかの実施形態では、抗ＩＣＯＳ抗体を、１用量あたり約１００μｇ／ｋｇ体重〜約２０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の量で投与することができる。いくつかの実施形態では、抗ＩＣＯＳ抗体を、１用量あたり約０．５ｍｇ／ｋｇ体重〜約２０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の量で投与することができる。
【０３５４】
薬学的組成物
いくつかの実施形態では、抗ＩＣＯＳ抗体を含む組成物が、多種多様な薬学的に許容される担体と共に製剤に提供される（例えば、Ｇｅｎｎａｒｏ，Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ  ｗｉｔｈ  Ｆａｃｔｓ  ａｎｄ  Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｓ：Ｄｒｕｇｆａｃｔｓ  Ｐｌｕｓ，２０ｔｈ  ｅｄ．（２００３）、Ａｎｓｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，７ｔｈ  ｅｄ．，Ｌｉｐｐｅｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ａｎｄ  Ｗｉｌｋｉｎｓ（２００４）、Ｋｉｂｂｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ，３ｒｄ  ｅｄ．，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ（２０００）を参照すること）。ビヒクル、佐剤及び希釈剤を含む様々な薬学的に許容される担体が、利用可能である。更に、ｐＨ調整及び緩衝剤、等張化剤、安定剤、湿潤剤などの様々な薬学的に許容される補助物質も、利用可能である。非限定的な例示の担体には、食塩水、緩衝食塩水、デキストロース、水、グリセロール、エタノール及びこれらの組み合わせが含まれる。
【０３５５】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体を含む薬学的組成物が提供される。いくつかの実施形態において、薬学的組成物は、キメラ抗体を含む。いくつかの実施形態において、薬学的組成物は、ヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態において、薬学的組成物は、本明細書に記載されている宿主細胞または無細胞系において調製された抗体を含む。いくつかの実施形態において、薬学的組成物は、薬学的に許容される担体を含む。
【０３５６】
いくつかの実施形態において、薬学的組成物は、癌の（予防を含む）治療のための有効量で投与される。治療有効量は、典型的には、治療される対象の体重、健康状態、治療される状態の広がり、または治療される対象の年齢によって決まる。一般に、抗ＩＣＯＳ抗体を、１用量あたり約０．０５ｍｇ／ｋｇ体重〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の量で投与することができる。いくつかの実施形態では、抗ＩＣＯＳ抗体を、１用量あたり約１０μｇ／ｋｇ体重〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の量で投与することができる。いくつかの実施形態では、抗ＩＣＯＳ抗体を、１用量あたり約５０μｇ／ｋｇ体重〜約５ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の量で投与することができる。いくつかの実施形態では、抗ＩＣＯＳ抗体を、１用量あたり約１００μｇ／ｋｇ体重〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の量で投与することができる。いくつかの実施形態では、抗ＩＣＯＳ抗体を、１用量あたり約１００μｇ／ｋｇ体重〜約２０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の量で投与することができる。いくつかの実施形態では、抗ＩＣＯＳ抗体を、１用量あたり約０．５ｍｇ／ｋｇ体重〜約２０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の量で投与することができる。いくつかの実施形態では、抗ＩＣＯＳ抗体を、１用量あたり約０．５ｍｇ／ｋｇ体重〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の量で投与することができる。いくつかの実施形態では、抗ＩＣＯＳ抗体を、１用量あたり約０．０５ｍｇ／ｋｇ体重〜約２０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の量で投与することができる。いくつかの実施形態では、抗ＩＣＯＳ抗体を、１用量あたり約０．０５ｍｇ／ｋｇ体重〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の量で投与することができる。いくつかの実施形態では、抗ＩＣＯＳ抗体を、約５ｍｇ／ｋｇ体重以下、例えば、４ｍｇ／ｋｇ未満、３ｍｇ／ｋｇ未満、２ｍｇ／ｋｇ未満、または１ｍｇ／ｋｇ未満の抗体の範囲の量で投与することができる。
【０３５７】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、１用量あたり約５０μｇ／ｋｇ体重〜約５ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の量で存在することができる。例えば、いくつかの実施形態において、２０ｋｇの人間への用量は、約１ｍｇ〜約１００ｍｇの範囲内でありうる。いくつかの実施形態において、用量は、２ｍｇ〜２００ｍｇの抗ＩＣＯＳ抗体の範囲内でありうる。いくつかの実施形態において、用量は、１０ｍｇ〜４００ｍｇの抗ＩＣＯＳ抗体の範囲内でありうる。
【０３５８】
投与経路
いくつかの実施形態では、抗ＩＣＯＳ抗体を、静脈内、動脈内、非経口、腫瘍内、腹腔内、または皮下が含まれるが、これらに限定されない様々な経路を介してインビボで投与することができる。適切な処方及び投与経路は、意図される用途に従って選択することができる。
【０３５９】
併用療法 
抗ＩＣＯＳ抗体を、単独で、または他の治療様式と共に投与することができる。これらを、他の治療様式、例えば、外科手術、化学療法、放射線療法、または別の治療抗体などの生物製剤の投与の前に、それと実質的に同時に、及び／または後に提供することができる。いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、別の抗癌剤と共に投与される。
【０３６０】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、第２の治療剤と同時発生的に与えられる。例えば、２つ以上の治療剤は、約６０分以下、例えば、約３０分以下、約１５分以下、約１０分以下、約５分以下、または約１分以下のいずれかの時間間隔で投与される。いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、第２の治療剤と順次に投与される。例えば、２つ以上の治療剤の投与は、約１５分を超える、例えば、約２０分、約３０分、約４０分、約５０分、もしくは約６０分、約１日、約２日、約３日、約１週間、約２週間、もしくは約１か月間、またはそれ以上の時間間隔で投与される。
【０３６１】
いくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、第２の治療方法と共に投与される。このように、本明細書に提供されている抗体の投与を、別の治療系と組み合わせることができる。
【０３６２】
いくつかの実施形態において、本明細書に提供されている抗ＩＣＯＳ抗体は、ＰＤ−１療法と共に投与される。例示的なＰＤ−１療法には、ニボルマブ（ＯＰＤＩＶＯ（登録商標）、ＢＭＳ−９３６５５８、ＭＤＸ−１１０６、ＯＮＯ−４５３８）、ピディリズマブ、ランブロリズマブ／ペムブロリズマブ（ＫＥＹＴＲＵＤＡ、ＭＫ−３４７５）、デュルバルマブ（抗ＰＤ−Ｌ１抗体、ＭＥＤＩ−４７３６、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ／ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ）、ＲＧ−７４４６、アベルマブ（抗ＰＤ−Ｌ１抗体、ＭＳＢ−００１０７１８Ｃ、Ｐｆｉｚｅｒ）、ＡＭＰ−２２４、ＢＭＳ−９３６５５９（抗ＰＤ−Ｌ１抗体）、ＡＭＰ−５１４、ＭＤＸ−１１０５、ＡＮＢ−０１１、抗ＬＡＧ−３／ＰＤ−１、抗ＰＤ−１抗体（ＣｏＳｔｉｍ）、抗ＰＤ−１抗体（Ｋａｄｍｏｎ  Ｐｈａｒｍ．）、抗ＰＤ−１抗体（Ｉｍｍｕｎｏｖｏ）、抗ＴＩＭ−３／ＰＤ−１抗体（ＡｎａｐｔｙｓＢｉｏ）、抗ＰＤ−Ｌ１抗体（ＣｏＳｔｉｍ／Ｎｏｖａｒｔｉｓ）ＲＧ７４４６／ＭＰＤＬ３２８０Ａ（抗ＰＤ−Ｌ１抗体、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／Ｒｏｃｈｅ）、ＫＤ−０３３、ＰＤ−１作動薬（Ａｇｅｎｕｓ）、ＳＴＩ−Ａ１０１０、ＳＴＩ−Ａ１１１０、ＴＳＲ−０４２、及びプログラム死−１（ＤＰ−１）またはプログラム死リガンド１（ＰＤ−Ｌ１）に向けられている他の抗体が含まれるが、これらに限定されない。
【０３６３】
いくつかの実施形態において、対象は、対象の腫瘍がＰＤ−Ｌ１を発現する場合、本明細書に提供されている抗ＩＣＯＳ抗体及びＰＤ−１療法による治療に選択される。いくつかの実施形態において、対象は、対象の腫瘍がＰＤ−Ｌ１高である場合、本明細書に提供されている抗ＩＣＯＳ抗体及びＰＤ−１療法による治療に選択される。いくつかの実施形態において、対象は、対象の腫瘍がＩＣＯＳ及びＰＤ−Ｌ１を発現する場合、本明細書に提供されている抗ＩＣＯＳ抗体及びＰＤ−１療法による治療に選択される。いくつかの実施形態において、対象は、対象の腫瘍がＩＣＯＳ高／ＰＤ−Ｌ１高である場合、本明細書に提供されている抗ＩＣＯＳ抗体及びＰＤ−１療法による治療に選択される。ＰＤ−Ｌ１及び／またはＩＣＩＯＳのレベルの決定は、例えば、ＩＨＣを使用して決定することができる。いくつかの実施形態において、試料中の腫瘍細胞の１％以上または５％以上がＩＨＣによってＰＤ−Ｌ１膜染色を示している場合、患者の腫瘍はＰＤ−Ｌ１を発現していると考慮される。いくつかの実施形態では、試料中の腫瘍細胞の５０％超がＩＨＣによってＰＤ−Ｌ１膜染色を示している。いくつかのそのような実施形態において、対象の腫瘍は、ＰＤ−Ｌ１高であると考慮される。いくつかの実施形態において、腫瘍試料中の細胞の１％以上がＩＨＣによってＩＣＯＳ染色を示している場合、患者の腫瘍はＩＣＯＳを発現していると考慮される。いくつかの実施形態において、対象は、最初にＰＤ−１療法によって治療され、後に、ＰＤ−１療法を続けながら、または続けることなく、本明細書に提供されている抗ＩＣＯＳ抗体により治療される。このように、本明細書に提供されている方法には、抗ＩＣＯＳ抗体による対象の治療が含まれ、対象は、ＰＤ−１療法によって予め治療されている。
【０３６４】
いくつかの実施形態において、本明細書に提供されている抗ＩＣＯＳ抗体は、作動薬抗ＯＸ４０抗体（例えば、Ｍｅｄｉ６４６９、ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ；ＭＯＸＲ０９１６／ＲＧ７８８８、Ｒｏｃｈ）と共に投与される。いくつかの実施形態において、本明細書に提供されている抗ＩＣＯＳ抗体は、抗ＣＴＬＡ４抗体（例えば、イピリムマブ、ＹＥＲＶＯＹ（登録商標）、ＢＭＳ）と共に投与される。
【０３６５】
いくつかの実施形態において、追加の治療剤は化学療法剤である。本明細書に提供されている抗ＩＣＯＳ抗体と組み合わせてもよい例示的な化学療法剤には、カペシタビン、シクロホスファミド、ダカルバジン、テモゾロミド、シクロホスファミド、ドセタキセル、ドキソルビシン、ダウノルビシン、シスプラチン、カルボプラチン、エピルビシン、エリブリン、５−ＦＵ、ゲムシタビン、イリノテカン、イクサベピロン、メトトレキセート、ミトキサントロン、オキサリプラチン、パクリタキセル、ｎａｂ−パクリタキセル、ＡＢＲＡＸＡＮＥ（登録商標）（タンパク質結合パクリタキセル）、ペメトレキセド、ビノレルビン及びビンクリスチンが含まれるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態において、本明細書に提供されている抗ＩＣＯＳ抗体は、少なくとも１つのキナーゼ阻害剤と共に投与される。非限定的な例示のキナーゼ阻害剤には、エルロチニブ、アファチニブ、ゲフィチニブ、クリゾチニブ、ダブラフェニブ、トラメチニブ、ベムラフェニブ及びコビメチニブが含まれる。
【０３６６】
いくつかの実施形態において、追加の治療剤はＩＤＯ阻害剤である。非限定的な例示のＩＤＯ阻害剤は、例えば、ＵＳ  ２０１６／００６０２３７及びＵＳ２０１５／０３５２２０６に記載されている。非限定的な例示のＩＤＯ阻害剤には、Ｉｎｄｏｘｉｍｏｄ（Ｎｅｗ  Ｌｉｎｋ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ）、ＩＮＣＢ０２４３６０（Ｉｎｃｙｔｅ  Ｃｏｒｐ）、１−メチル−Ｄ−トリプトファン（Ｎｅｗ  Ｌｉｎｋ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ）及びＧＤＣ−０９１９（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）が含まれる。
【０３６７】
いくつかの実施形態において、本明細書に提供されている抗ＩＣＯＳ抗体は、免疫修飾薬（ＩＭｉＤ）と組み合わせて投与される。非限定的な例示のＩＭｉＤには、サリドマイド、レナリドミド及びポマリドミドが含まれる。
【０３６８】
いくつかの実施形態において、追加の治療剤は癌ワクチンである。癌ワクチンは、抗原輸送及び樹状細胞活性化の潜在的な手法として調査されてきた。特に、共刺激経路における免疫チェックポイントまたは作動薬と組み合わせたワクチン接種は、耐性を克服する及び増加した抗腫瘍応答を生成する証拠を示している。腫瘍に対して免疫応答を促進する異なる手法を用いる一連の癌ワクチンが、試験されている（例えば、Ｅｍｅｎｓ  ＬＡ，Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ  Ｅｍｅｒｇ  Ｄｒｕｇｓ  １３（２）：２９５−３０８（２００８）を参照すること）。手法は、腫瘍に対するＢ細胞、Ｔ細胞、またはプロフェッショナル（ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌ）抗原提示細胞の応答を増強するように設計されている。癌ワクチンの例示的な種類には、ペプチド／タンパク質として、または遺伝子改変ＤＮＡベクター、ウイルス、細菌などとして送達されうる、異なる腫瘍抗原の標的化を用いるペプチド系ワクチンが含まれるが、これに限定されず、例えば、不十分に画定されている標的に対する癌ワクチン開発のための細胞生物学的手法には、患者由来の樹状細胞、自己腫瘍細胞または腫瘍細胞溶解産物、同種異系腫瘍細胞などから開発されたワクチンが含まれるが、これに限定されない。
【０３６９】
このように、特定の実施形態において、本明細書に提供されている抗ＩＣＯＳ抗体を、癌ワクチンと組み合わせて使用することができる。例示的な癌ワクチンには、樹状細胞ワクチン、腫瘍崩壊ウイルス、種様細胞ワクチンなどが含まれるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態において、そのようなワクチンは、抗腫瘍応答を増大する。本明細書に提供されている抗ＩＣＯＳ抗体と組み合わせて使用することができる癌ワクチンの例には、ＭＡＧＥ３ワクチン（例えば、黒色腫及び膀胱癌用）、ＭＵＣ１ワクチン（例えば、乳癌用）、ＥＧＦＲｖ３（例えば、Ｒｉｎｄｏｐｅｐｉｍｕｔ、例えば多形神経膠芽腫を含む脳癌用）、またはＡＬＶＡＣ−ＣＥＡ（例えば、ＣＥＡ＋癌用）が含まれるが、これらに限定されない。
【０３７０】
非限定的な例示の癌ワクチンには、Ｓｉｐｕｌｅｕｃｅｌ−Ｔも含まれ、これは抗原提示細胞を含む自己末梢血単核球（ＰＢＭＣ）から誘導される（例えば、Ｋａｎｔｏｆｆ  ＰＷ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ３６３：４１１−２２（２０１０）を参照すること）。Ｓｉｐｕｌｅｕｃｅｌ−Ｔの生成において、患者のＰＢＭＣは、前立腺酸性ホスファターゼ（前立腺抗原）と顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（免疫細胞活性化剤）との組み換え融合タンパク質であるＰＡ２０２４によって、エキソビボで活性化される。候補癌ワクチンのための別の手法は、黒色腫などの腫瘍組織において突然変異した特定のペプチドに対する免疫応答を生成することである（例えば、Ｃａｒｒｅｎｏ  ＢＭ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ３４８：６２３６（２０１５）を参照すること）。そのような突然変異ペプチドを、いくつかの実施形態において、新生抗原と呼ぶことができる。腫瘍ワクチンにおける新生抗原の使用についての非限定例としては、主な組織適合性複合体タンパク質のＨＬＡ−Ａ＊０２：０１に結合すると予測される腫瘍中の新生抗原が、黒色腫などの癌を有する個体患者において特定されている。患者の樹状細胞は、エキソビボにおいて成熟され、次に新生抗原と共にインキュベートされる。次に、活性化された樹状細胞が患者に投与される。いくつかの実施形態では、癌ワクチンの投与後に、新生抗原に対する頑強なＴ細胞免疫性が検出される。
【０３７１】
いくつかのそのような実施形態において、癌ワクチンは、新生抗原を使用して開発される。いくつかの実施形態において、癌ワクチンはＤＮＡワクチンである。いくつかの実施形態において、癌ワクチンは、ＰＲＯＳＴＶＡＣ（ｒｉｌｉｍｏｇｅｎｅ  ｇａｌｖａｃｉｒｅｐｖｅｃ／ｒｉｌｉｍｏｇｅｎｅ  ｇｌａｆｏｌｉｖｅｃ）などの癌抗原を含む改変ウイルスである。いくつかの実施形態において、癌ワクチンは、ＧＶＡＸなどの改変腫瘍細胞を含み、これは、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）遺伝子形質移入腫瘍細胞ワクチンである（例えば、Ｎｅｍｕｎａｉｔｉｓ，２００５，Ｅｘｐｅｒｔ  Ｒｅｖ  Ｖａｃｃｉｎｅｓ，４：２５９−７４を参照すること）。
【０３７２】
いくつかの実施形態において、本明細書に記載されている抗ＩＣＯＳ抗体は、癌ワクチンの前に、それと同時発生的に、及び／または後に投与される。いくつかの実施形態において、新生抗原を使用して開発された癌ワクチンは、本明細書に記載されている抗ＩＣＯＳ抗体と組み合わせて使用される。いくつかのそのような実施形態において、組み合わせは、黒色腫、肺、膀胱、または結腸直腸の癌などの高い突然変異量を有する癌の治療に使用される。
【０３７３】
いくつかの実施形態において、本明細書に提供されている抗ＩＣＯＳ抗体は、キメラ抗原受容体Ｔ細胞療法（ＣＡＲ−Ｔ療法）と組み合わせて投与される。
【０３７４】
診断用途
抗ＩＣＯＳ抗体エピトープ発現（正常な試料に対して増加した、もしくは減少した、ならびに／または通常はエピトープ発現を欠いている組織（複数可）及び／もしくは細胞（複数可）における発現の存在などの不適切な発現）に関連する疾患、障害、または状態の検出、診断及びモニタリングに抗ＩＣＯＳ抗体、ポリペプチド及びポリヌクレオチドを使用する方法が、本明細書に提供される。患者が抗ＩＣＯＳ抗体療法に応答するかを決定する方法が、本明細書に提供される。
【０３７５】
いくつかの実施形態において、この方法は、抗ＩＣＯＳ抗体を使用して、ＩＣＯＳを発現する細胞を患者が有するかを検出することを含む。いくつかの実施形態において、検出方法は、試料を抗体、ペプチド、またはポリヌクレオチドと接触させること及び結合のレベルが基準または比較試料（例えば、対照）と異なるかを決定することを含む。いくつかの実施形態において、この方法は、本明細書に記載されている抗体またはポリペプチドが対象にとって適切な治療であるかを決定するのに有用でありうる。
【０３７６】
いくつかの実施形態では、細胞または細胞／組織溶解産物を抗ＩＣＯＳ抗体と接触させて、抗体と細胞との結合が決定される。試験細胞が同じ種類の組織の基準細胞と比較して結合活性を示す場合、対象には抗ＩＣＯＳ抗体による治療が有益であることを示すことができる。いくつかの実施形態において、試験細胞はヒト組織の細胞である。
【０３７７】
特異的な抗体抗原結合を検出する当該技術に既知の様々な方法を、使用することができる。実施することができる例示的な免疫アッセイには、蛍光偏光免疫アッセイ（ＦＰＩＡ）、蛍光免疫アッセイ（ＦＩＡ）、酵素免疫アッセイ（ＥＩＡ）、比濁阻害免疫アッセイ（ｎｅｐｈｅｌｏｍｅｔｒｉｃ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ）（ＮＩＡ）、酵素結合免疫アッセイ（ＥＬＩＳＡ）及び放射線免疫アッセイ（ＲＩＡ）が含まれる。指標部分または標識基を対象の抗体に結合することができ、これらは、多くの場合にアッセイ機器及び適合する免疫アッセイの手順の利用可能性によって決まる様々な使用方法の要求を満たすように選択される。適切な標識には、限定されることなく、放射性核種（例えば、１２５Ｉ、１３１Ｉ、３５Ｓ、３Ｈ、もしくは３２Ｐ）、酵素（例えば、アルカリホスファターゼ、ホースラデッシュペルオキシダーゼ、ルシフェラーゼ、もしくはβ−ガラクトシダーゼ）、蛍光部分もしくはタンパク質（例えば、フルオレセイン、ローダミン、フィコエリトリン、ＧＦＰ、もしくはＢＦＰ）、または化学発光部分（例えば、Ｑｕａｎｔｕｍ  Ｄｏｔ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｐａｌｏ  Ａｌｔｏ，Ｃａｌｉｆ．から供給されるＱｄｏｔ（商標）ナノ粒子）が含まれる。上記に示された様々な免疫アッセイを実施するために使用される一般的な技術は、当業者に知られている。
【０３７８】
診断の目的において、ポリペプチドを含む抗体を、放射性同位体、蛍光標識及び当該技術に既知の様々な酵素基質標識が含まれるが、これらに限定されない検出可能部分で標識することができる。標識を抗体に抱合させる方法は、当該技術において知られている。
【０３７９】
いくつかの実施形態では、抗ＩＣＯＳ抗体を標識する必要がなく、その存在は、第１の抗ＩＣＯＳ抗体に結合する第２の標識抗体を使用して検出することができる。
【０３８０】
いくつかの実施形態では、抗ＩＣＯＳ抗体を、競合結合アッセイ、直接及び間接的サンドウィッチアッセイ及び免疫沈降アッセイなどの任意の既知のアッセイ方法に用いることができる。Ｚｏｌａ，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｍａｎｕａｌ  ｏｆ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，ｐｐ．１４７−１５８（ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．１９８７）。
【０３８１】
抗ＩＣＯＳ抗体及びポリペプチドを、インビボ画像化などのインビボ診断アッセイに使用することもできる。一般に、目的の細胞または組織が免疫シンチグラフィー（ｉｍｍｕｎｏｓｃｉｎｔｉｏｇｒａｐｈｙ）の使用により局在化されうるように、抗体またはポリペプチドは、放射性核種（例えば、１１１Ｉｎ、９９Ｔｃ、１４Ｃ、１３１Ｉ、１２５Ｉ、３Ｈ、または本明細書に概説されているものが含まれる任意の他の放射性核種標識）により標識される。
【０３８２】
当該技術に周知の技術を使用する病理学において、抗体を染色試薬として使用することもできる。
【０３８３】
いくつかの実施形態において、第１の抗体は診断薬として使用され、第２の抗体は治療薬として使用される。いくつかの実施形態において、第１及び第２の抗体は異なっている。いくつかの実施形態において、第１の抗体は、非ヒトからのものであり、一方、治療薬はヒトからのものである。いくつかの実施形態において、第１及び第２の抗体は、両方とも抗原に同時に結合することができ、結合することによってエピトープを分けることができる。
【０３８４】
キット／製造品
本明細書に記載されているいずれかの方法に使用されるキット、医薬品、組成物及び単位剤形も、本明細書に提供される。
【０３８５】
キットは、抗ＩＣＯＳ抗体（または、単位剤形及び／もしくは製造品）を含む１つ以上の容器を含むことができる。いくつかの実施形態では、単位投与量が提供され、単位投与量は、１つ以上の追加の作用物質を伴って、または伴うことなく、抗ＩＣＯＳ抗体を含む組成物の所定量を含有する。いくつかの実施形態において、そのような単位投与量は、注射用の使い捨てプレフィルドシリンジ（ｓｉｎｇｌｅ−ｕｓｅ  ｐｒｅｆｉｌｌｅｄ  ｓｙｒｉｎｇｅ）に供給される。いくつかの実施形態において、単位投与量に含有されている組成物は、食塩水、スクロースなど、リン酸塩などの緩衝液を含むことができる、及び／または安定した有効なｐＨ範囲内で処方されうる。いくつかの実施形態において、組成物は、適切な液体、例えば滅菌水の添加により再構成されうる凍結乾燥粉末剤として提供することができる。いくつかの実施形態において、組成物は、スクロース及びアルギニンが含まれるが、これらに限定されない、タンパク質凝集を阻害する１つ以上の物質を含む。いくつかの実施形態において、組成物は、ヘパリン及び／またはプロテオグリカンを含む。
【０３８６】
いくつかの実施形態において、単位用量に使用される抗ＩＣＯＳ抗体の量は、記載されている様々な方法及び／または組成物のために本明細書に提供されている量のいずれかでありうる。
【０３８７】
いくつかの実施形態において、キットは、本明細書に記載されているいずれかの方法による癌の治療に使用される使用説明書を更に含む。キットは、治療に適した個体の選択についての記載を更に含むことができる。キットに供給される使用説明書は、典型的には、ラベルまたは添付文書（例えば、キットに含まれる紙シート）による書面の指示であるが、機械読み取り式の使用説明書（例えば、磁気または光学ディスに収容されている使用説明書）も許容される。いくつかの実施形態において、キットは、別の治療剤を更に含む。
【０３８８】
キットは、適切な包装の中にある。適切な包装には、バイアル、ボトル、ジャー、柔軟な包装（例えば、密閉式Ｍｙｌａｒまたはプラスチックバッグ）などが含まれるが、これらに限定されない。キットは、場合により、緩衝液及び説明的な情報などの追加の構成要素を提供してもよい。このように、本出願は製造品も提供し、これにはバイアル（例えば、密閉式バイアル）、ボトル、ジャー、柔軟な包装などが含まれる。
【実施例】
【０３８９】
下記に考察される実施例は、本発明の完全な例示を意図するものであり、本発明をいかようにも制限するものとして考慮されるべきではない。この実施例は、下記の実験が実施した全て、または唯一の実験であることを表すことを意図しない。 使用される数値（例えば、量、温度など）に関する正確さを確実にするために努力がなされているが、いくらかの実験誤差及び偏差は含まれているはずである。特に示されない限り、部は重量部であり、分子量は重量平均分子量であり、温度は摂氏であり、圧力は大気圧または近大気圧である。
【０３９０】
実施例１：ヒト腫瘍におけるＩＣＯＳ  ｍＲＮＡ発現の生物情報学的分析
ＴＣＧＡの一部として収集されたＲＮＡ配列決定データを利用して、約７，５００個の腫瘍におけるＩＣＯＳ発現を、２４の異なる適応症において比較した。高いＩＣＯＳ  ｍＲＮＡのレベルが、頭頸部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）及び三種陰性乳癌（ＴＮＢＣ）のサブセットに見出された。図１Ａを参照すること。
【０３９１】
Ｔ細胞浸潤とＩＣＯＳ発現レベルとの関係を調査した。１２個のケモカイン遺伝子のセットの発現が、高レベルのＴ細胞浸潤及びリンパ節様構造の形成と関連づけられている（Ｍｅｓｓｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２，Ｓｃｉ  Ｒｅｐｏｒｔｓ．２：７６５−７７１）。ケモカイン符号スコアを、これらの１２個のケモカイン遺伝子発現の平均に基づいてそれぞれの試料において計算した。この符号スコアを、全ての頭頸部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）試料において計算した。ケモカイン符号またはＴｒｅｇ細胞マーカー（ＦｏｘＰ３）のレベルとＩＣＯＳレベルは、ＨＮＳＣＣ腫瘍において相関した。図２を参照すること。ケモカイン符号とＩＣＯＳレベルとの間（Ｒ＝０．８３、スピアマンの相関）、またはＩＣＯＳと、Ｔｒｅｇ細胞マーカーであるＦｏｘＰ３との間（Ｒ＝０．８８、スピアマンの相関）に強い相関関係があった。これらのデータは、ＩＣＯＳ発現が、Ｔ細胞浸潤及びＴｒｅｇ細胞と密接に関連することを実証している。同様のデータがＮＳＣＬＣ及びＴＮＢＣにおいて観察された。
【０３９２】
ＨＮＳＣＣ腫瘍では、ＩＣＯＳ発現は、ＣＴＬＡ−４及びＰＤ−１などの他のチェックポイント分子の発現レベルと有意に相関した（それぞれ、Ｒ＝０．９３及び０．７８）。図３を参照すること。ＩＣＯＳとＰＤ−Ｌ１との相関関係は、弱かった（Ｒ＝０．６２）。同様のデータが、ＮＳＣＬＣなどの他の適応症において観察された。これらのデータは、ＩＣＯＳが、ＣＴＬＡ−４及びＰＤ−１などの他のチェックポイント分子を発現している同じＴ細胞に発現しうることを示唆している。ＰＤ−Ｌ１とＩＣＯＳとの弱い相関関係は、ＰＤ−Ｌ１が低い、または陰性でありうる、高ＩＣＯＳ患者のサブセットが存在しうることを示唆している。これらのデータは、ＰＤ−Ｌ１陰性患者への単一作用物質として、またＰＤ−１もしくは抗ＣＴＬＡ−４療法との組み合わせ戦略としてのＩＣＯＳを支持している。
【０３９３】
実施例２：ヒト腫瘍のＩＨＣ分析
ＩＣＯＳタンパク質発現レベルを、免疫組織化学（ＩＨＣ）アッセイの使用により決定した。ウサギ抗ＩＣＯＳモノクローナル抗体（ＳＰ９８、Ｓｐｒｉｎｇ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｐｌｅａｓａｎｔｏｎ，ＣＡ）を使用するこのアッセイを、アッセイの特異性、アッセイの精度（一回（ｉｎｔｒａ−ｒｕｎ）、複数回（ｉｎｔｅｒ−ｒｕｎ）及びロット間再現性）、ならびに感度について検証した。検証研究は、ホルマリン固定パラフィン包埋（ＦＦＰＥ）組織片及び対照細胞系（ヒトＩＣＯＳを発現するように改変されたＣＨＯ（陽性対照）またはＣＨＯベクター対照細胞系を発現する非ＩＣＯＳ（陰性対照））を使用して実施した。このアッセイをＬｅｉｃａ−Ｂｏｎｄ  Ｒｘ自動染色プラットフォームにより実施し、ＩＣＯＳの特異的染色を、陽性対照ＣＨＯ細胞において及び正常なヒト扁桃腺のＴ細胞サブセットにおいて検出した。
【０３９４】
スライドを、熟練の病理学者が以下の色素産生染色基準の使用によってスコア付けした。
2022002520.tif 000004
【０３９５】
１１個の異なる種類の腫瘍の組織マイクロアレイを染色し、このスコア付け系を使用して分類した。図１Ｂを参照すること。ＩＨＣデータは、ＨＮＳＣＣ、ＮＳＣＬＣ及びＴＮＢＣが高いＩＣＯＳ＋免疫細胞浸潤の最大率（すなわち、３＋）を含むという点において、ｍＲＮＡに基づいたデータを確認した。図１Ｂを参照すること。これらの腫瘍に加えて、黒色腫、結腸直腸癌及び胃腺癌の患者のサブセットは、中程度のレベルのＩＣＯＳ陽性細胞浸潤を有した。図１Ｂを参照すること。
【０３９６】
ＩＣＯＳを発現するＴ細胞の蔓延及び性質を評価するため、ＩＣＯＳ、ＦｏｘＰ３及びＣＤ８を検出する多重免疫蛍光ＩＨＣアッセイを開発した。ヒト腫瘍片における核の総数をカウントするために、ＤＮＡマーカー（ＤＡＰＩ）を利用した。
【０３９７】
ＩＣＯＳ発現は、ヒトＩＣＯＳを認識するウサギモノクローナル抗体クローンを用いる免疫組織化学分析の使用によって決定した（Ｓｐｒｉｎｇ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｉｎｃ．Ｐｌｅａｓａｎｔｏｎ，ＣＡ）。ＩＣＯＳ  ＩＨＣアッセイの特異性及び感度は、ＩＣＯＳを構成的に過剰発現しているヒト扁桃腺及び細胞系を使用して確認した。染色強度は、熟練の病理学者が以下の基準を使用してスコア付けした。全ての陽性染色は、少なくとも三分の二の細胞の膜発現に基づいてスコア付けした。
【０３９８】
スコア付けスキームの代表的な画像を図４に示す。スコア付けは、以下の免疫蛍光基準に基づいて実施した。
０（陰性）＝膜染色を有する細胞がない、または０．１％未満の細胞が膜染色を有する。
１＋（弱）＝０．１〜５％の細胞が陽性である。
２＋（中）＝５〜１０％の細胞が陽性である。
３＋（強）＝＞１０〜５０％の細胞が陽性である。
【０３９９】
ＮＳＣＬＣの様々なサブセットまたは隣接する正常な肺試料におけるＩＣＯＳ発現の蔓延について、表２にまとめる。強ＩＣＯＳ発現は、癌患者の隣接正常肺組織において観察されなかった。強ＩＣＯＳ発現は、肺癌の主要なサブタイプにおいて全て観察された。大部分の一般的なＮＳＣＬＣサブタイプ（腺癌または扁平上皮癌）の約２９〜３１％が、強いＩＣＯＳ染色を有した。
2022002520.tif 000005
【０４００】
画像分析ソフトウエア（Ｔｉｓｓｕｅｇｎｏｓｔｉｃｓ  Ｉｎｃ．，Ｔａｒｚａｎａ，ＣＡのＳｔｒａｔａｑｕｅｓｔ）を使用してＩＣＯＳ陽性細胞を測定する、自動化の方法も用いた。腫瘍組織の固定域におけるＩＣＯＳ陽性細胞の密度は、ＤＡＰＩ染色領域により画定されたヒト腫瘍組織の生細胞領域おいてＩＣＯＳ陽性細胞の数を決定することにより決定した。ＩＣＯＳ細胞密度は、およそ５００人の患者の別々のセットから、４つの主な種類の腫瘍において決定された［ＮＳＣＬＣ（Ｎ＝１００）；ＨＮＳＣＣ（Ｎ＝１０２）；乳癌、主要なサブタイプ全て（Ｎ＝９４）；三種陰性乳癌、ＴＮＢＣ（Ｎ＝９５）；卵巣癌（Ｎ＝９４）］。この分析結果の要約を図５に示す。ＩＣＯＳ  ｍＲＮＡ分析と一致して、ＨＮＳＣＣ及びＮＳＣＬＣ腫瘍は、卵巣癌または乳癌と比較して有意に高い密度のＩＣＯＳ陽性腫瘍を有した。ＩＣＯＳ発現は乳癌において低いが、高レベルのＩＣＯＳ発現が、ＴＮＢＣサブタイプにおいて観察され、乳癌の約１０％を構成している。図５を参照すること。この乳癌のＴＮＢＣサブタイプは、最も侵襲性があるサブタイプであり、治療選択肢が限定されており、医療ニーズが最も満たされていないものである。
【０４０１】
高ＩＣＯＳ発現腫瘍型（ＮＳＣＬＣ）の２つの異なる群におけるＩＣＯＳ発現の患者間の変動を、図６Ａ及び６Ｂに示す。一連のＩＣＯＳ細胞密度が、市販の供給者から入手可能な９８個の肺癌試料（図６Ａ）のＮＳＣＬＣにおいて観察された。ＩＣＯＳ発現の類似した多様性が、ＮＳＣＬＣの個別の臨床群（Ｎ＝２０４）を使用して観察された（図６Ｂ）。
【０４０２】
上記に記載されたヒト腫瘍試料からのＩＣＯＳ，ＦｏｘＰ３（Ｔｒｅｇ細胞マーカー）及びＣＤ８を用いる多重ＩＨＣを分析し、画像分析ソフトウエア（Ｔｉｓｓｕｅｇｎｏｓｔｉｃｓ  Ｉｎｃ．，Ｔａｒｚａｎａ，ＣＡのＳｔｒａｔａｑｕｅｓｔ）を使用して定量化した。これらのＴ細胞マーカーを用いる多重ＩＣＯＳ染色の代表的な画像を、図７Ａに示す。ＩＣＯＳ陽性細胞は、ＦｏｘＰ３陽性でもあり、ＩＣＯＳ＋ＣＤ４Ｔｒｅｇ細胞と呼ばれる。ＩＣＯＳ陽性及びＣＤ８陽性細胞は、ＩＣＯＳ＋ＣＤ８細胞と呼ばれる。ＩＣＯＳ陽性であるが、ＣＤ８及びＦｏｘＰ３陰性であるものは、ＩＣＯＳ＋ＣＤ４Ｔｅｆｆと呼ばれる。ＩＣＯＳ陽性Ｔ細胞の異なるサブセットの密度を、上記に記載された画像分析ソフトウエアの使用により定量化した。肺（Ｎ＝１００）及びＴＮＢＣ（Ｎ＝９５）試料では、ＩＣＯＳ陽性であるＣＤ４エフェクター及びＣＤ４  Ｔｒｅｇ細胞の両方とも数が多かった（図７Ｂ）。対照的に、卵巣癌に観察されたＩＣＯＳ陽性細胞は多くなかった（Ｎ＝９４）。ＨＮＳＣＣ腫瘍（Ｎ＝１０２）は、ＩＣＯＳ陽性ＣＤ４Ｔｒｅｇ細胞の大きな個体群を有した。試験した全ての種類の腫瘍において、ＩＣＯＳ陽性ＣＤ８  Ｔ細胞の小さな個体群しか観察されなかった。これらのデータは、ＩＣＯＳがＣＤ８Ｔ細胞と比較して、主にＣＤ４区画に発現すること及びＴｒｅｇ対Ｔｅｆｆの相対的割合における変動が適応症にわたって見られることを示唆している。
【０４０３】
ＩＣＯＳ発現がＰＤ−Ｌ１状態と直接関連するかを理解するため、ＰＤ−Ｌ１レベルとＩＣＯＳ発現との相関関係を評価した。生命情報学的分析は、ＰＤ−Ｌ１発現及びＩＣＯＳレベルが弱く相関していた（Ｒ＝０．６２）ことを示唆した。ＰＤ−Ｌ１、ＩＣＯＳ及びＰＤ−１レベルを多重ＩＨＣにより評価した。ＰＤ−Ｌ１高及び低肺腫瘍の多重ＩＨＣの代表的な画像を示す。図８を参照すること。ＮＳＣＬＣ腫瘍の１５４個の腺癌サブタイプにおけるＰＤ−Ｌ１及びＩＣＯＳを評価した。腫瘍を、ＰＤ−Ｌ１陽性である５％の細胞に基づいて、ＰＤ−Ｌ１高または低腫瘍に細分化した。結果は、ＰＤ−Ｌ１陽性腫瘍が高密度のＩＣＯＳ発現を有したことを示している。
【０４０４】
実施例３：フローサイトメトリー分析
ＩＨＣにより得られたＩＣＯＳ発現データを確認し、異なるＴ細胞個体群に発現したＩＣＯＳの相対的強度を比較するため、腫瘍浸潤性リンパ球におけるＩＣＯＳ発現を多色フローサイトメトリーの使用により評価した。４人のＨＮＳＣＣ患者、３人の肺癌患者及び４人の卵巣癌患者からの試料を分析した。ＩＨＣデータと一致して、ＩＣＯＳ発現が主にＣＤ４Ｔ細胞において観察された。図９（ＨＮＳＣＣ）を参照すること。ＣＤ８個体群におけるＩＣＯＳ陽性細胞の頻度は、これらの腫瘍の大部分において非常に低い。本発明者たちは、大部分のＣＤ４エフェクター細胞がＩＣＯＳとＰＤ−１を同時発現することも観察した。これらのデータは、臨床における単独の、または抗ＰＤ−１療法と組み合わせたＩＣＯＳ治療薬の開発を支持する。ＩＣＯＳ染色の平均蛍光強度（ＭＦＩ）は、異なるＴ細胞個体群におけるＩＣＯＳ発現の測度を提供する。Ｔｒｅｇ細胞におけるＩＣＯＳ陽性細胞のＭＦＩは、ＣＤ４エフェクターより２〜３倍高かった。図９Ｃを参照すること。高いＩＣＯＳ  ＭＦＩを有するＣＤ４エフェクターの小さな個体群に注目するべきである。枯渇に対するＴｅｆｆとＴｒｅｇの異なる感受性を評価する進行中のＡＤＣＣアッセイのデータと組み合わせて、ＴｅｆｆとＴｒｅｇのＩＣＯＳ受容体密度の差を確認すると、Ｔｒｅｇ細胞を潜在的に枯渇させうる活性Ｆｃを有する作動薬抗体の開発が支持される。
【０４０５】
解釈研究は、ヒト腫瘍のサブセット（例えば、ＨＮＳＣＣ、ＮＳＣＬＣなど）における高レベルの腫瘍浸潤ＩＣＯＳ陽性Ｔ細胞を示している。ＩＣＯＳ発現は、ＣＴＬＡ−４及びＰＤ−Ｌ１などの他のチェックポイント制御因子の発現と相関している。Ｔ細胞サブセットの分析は、ＩＣＯＳ発現が、主にＣＤ４Ｔ細胞区画に限定されていることを示した。ＩＣＯＳは、ＦｏｘＰ３陽性Ｔｒｅｇ細胞とＣＤ４Ｔｅｆｆ細胞の両方に発現している。研究は、ＩＣＯＳ発現レベルがＣＤ４  Ｔｅｆｆ細胞と比較してＴｒｅｇ細胞において高いことを示し、文献と一致している。
【０４０６】
実施例４：抗体の生成
試薬
ヒト、マウス、ラット及びカニクイザルの種を提示するＩＣＯＳタンパク質を、ホモ二量体Ｆｃ融合物（ＩｇＧ１主鎖）として産生し、ヒト及びマウスＩＣＯＳ−ｈＦｃを、齧歯類免疫化の抗原として使用した。ヒトＩＣＯＳ−ｈＦｃは、ヒトＩＣＯＳアミノ酸の１〜１４１（成熟構築物では２１〜１４１）を含み、マウスＩＣＯＳ−ｈＦｃは、マウスＩＣＯＳアミノ酸の１〜１４２（成熟構築物では２１〜１４２）を含んだ。
【０４０７】
ＩＣＯＳ−Ｆｃを二価と一価の両方のＦｃ融合分子として生成して、ＩＣＯＳへの抗体の高い一価結合をそれぞれ評価した。
【０４０８】
選別の目的において、完全長ヒトまたはマウスＩＣＯＳを過剰発現するＣＨＯ安定細胞系（ＩＣＯＳ＋ＣＨＯ細胞または「ＣＨＯ−ＩＣＯＳ細胞」）は、完全長カニクイザルまたはラットＩＣＯＳをコードして一時的形質移入後の選別を可能にする構築物として、生成した。
【０４０９】
齧歯類抗体キャンペーン
齧歯類キャンペーンを、Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ  Ａｎｔｉｂｏｄｙによって実施した。マウス（１０匹）、ラット（６匹）、シリアンハムスター（６匹）及びアメリカンハムスター（６匹）を、ｈＩＣＯＳ−ｈＦｃまたはｍＩＣＯＳ−ｈＦｃにより免疫化した。ハイブリドーマを生成し、上澄みをｈＩＣＯＳ及びｍＩＣＯＳへの結合についてＥＬＩＳＡにより選別し、同様に、ＣＨＯ−ｈＩＣＯＳ及びＣＨＯ−ｍＩＣＯＳ細胞への結合についてＦＡＣＳにより多重選別した。ハイブリドーマを、ＣＨＯ−ＩＣＯＳ細胞へのＩＣＯＳＬ結合を遮断する能力について追加的に評価した。マウス及びヒトＩＣＯＳへの結合が陽性とスコア付けされたクローンを、タンパク質精製に選択した。続いて、精製された抗体を結合及び遮断アッセイにおいて再選別し、陽性とスコア付けされた抗体を、下記に概説されているインビトロ評価に進めた。免疫化手法による更なる調査のために選択された抗体は、全てアメリカンハムスター融合物由来であった。
【０４１０】
抗体の生化学的特徴決定
親和性測定を、Ｂｉｏ−Ｌａｙｅｒ  Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｍｅｔｒｙ（ＢＬＩ）技術（ＦｏｒｔｅＢｉｏ  Ｏｃｔｅｔ（登録商標）ＲＥＤ９６）の使用によって実施した。 一価親和性を、一価ヘテロ二量体形態のＩＣＯＳ受容体を有するＩｇＧ型の抗体によって生成した。高い親和性は、完全長ＩｇＧを使用して、ホモ二量体形態のＩＣＯＳ受容体に対して生成した。選択されたハムスター抗体のモノマー及び二価ｈＩＣＯＳ親和性を表３に示す。
2022002520.tif 000006
【０４１１】
カニクイザル、マウス及びラットのＩＣＯＳへの抗体の結合親和性も決定され、抗体は、同等の親和性で全ての種に結合することが見出された。交差反応測定を、ＢＬＩ技術の使用により実施して、抗体パネルは、ヒト、マウス及びカニクイザルＩＣＯＳ−Ｆｃ融合物（ホモ二量体二価形態）への結合について選別された。表４は、ヒト及びカニクイザルＩＣＯＳへのいくつかのハムスター抗体の代表的な結合データを示す。
2022002520.tif 000007
【０４１２】
特異性を評価するため、ヒトＩＣＯＳ＋ＣＨＯ細胞及びマウスＩＣＯＳ＋ＣＨＯ細胞への結合をフローサイトメトリーによって個別に分析した。汎反応性（ｐａｎ−ｒｅａｃｔｉｖｅ）抗体を選別するための対照として、ＩＣＯＳ受容体発現を欠いているＣＨＯ細胞の染色も検査した。選択された抗体は、全て、ヒト及びマウスＩＣＯＳ＋ＣＨＯ細胞に結合したが、ＩＣＯＳ発現を欠いているＣＨＯ細胞には結合しなかった。
【０４１３】
抗ＩＣＯＳ抗体の特異性を更に評価するため、抗体を、ＣＤ２８タンパク質ファミリーの追加のメンバー（ＣＤ２８、ＢＴＬＡ、ＰＤ−１及びＣＴＬＡ−４）への結合について選別した。ヒトまたはマウスＣＤ２８、ＢＴＬＡ、ＰＤ−１、またはＣＴＬＡ−４に対する、選択された抗体の交差反応性は観察されなかった。特に、二量体形態の（ＣＤ２８、ＢＴＬＡ、ＰＤ−Ｌ１及びＣＴＬＡ−４）Ｆｃ融合物への結合を評価し、結合は観察されなかった。 ＣＤ２８ファミリーメンバーのサブセットでは、マウスまたはヒトタンパク質がＨＥＫ２９３及びＣＨＯＫ１細胞の表面に過剰発現した。 非形質導入親細胞に対して上記の背景を持つ抗体の結合は、観察されなかった。
【０４１４】
抗体は、豊富な血清タンパク質にも、血小板にも、または赤血球にも結合しないことも見出された。
【０４１５】
エピトープビニング（ｂｉｎｎｉｎｇ）を、ＢＬＩの使用によって実施した。抗体も、ＩＣＯＳＬ−Ｆｃ融合物（ホモ二量体二価形態）に対してまとめた（ｂｉｎｎｅｄ）。選択された抗体は、全て、同じエピトープビン（ｂｉｎ）において見出され、全て、ＩＣＯＳリガンドへのＩＣＯＳの結合を遮断した。
【０４１６】
ヒト化
選択された抗体は、ヒト及びハムスター由来の抗体可変フレームワーク領域間の相同性研究を実施することによって、ヒト化した。分析の一次設計パネルを準備し、次に抗体を、野生型抗体（ハムスターまたはキメラ形態）との比較のために産生した。ヒト化パネルが産生されると、リードを特徴決定し、親和性及びインビトロ活性に基づいてランク付けした。追加のヒト化設計を実施して、配列の傾向及び低スコア免疫原部位を低減し、その結果、配列変動性が少なくなった。考慮される配列の傾向には、遊離システインの存在、ならびに化学分解（アスパラギン脱アミド化、アスパラギン酸異性化、メチオニン／トリプトファン及び非酵素リシン糖化）の潜在的部位の存在が含まれた。
【０４１７】
ヒト、カニクイザル及びラットのＩＣＯＳのモノマー形態に対する、可変領域３７Ａ１０Ｓ７１３を有するヒト化抗体の親和性を、Ｂｉｏ−Ｌａｙｅｒ  Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｍｅｔｒｙ（ＢＬＩ）技術（ＦｏｒｔｅＢｉｏ  Ｏｃｔｅｔ（登録商標）ＲＥＤ９６）により測定し、ＫＤを表５に示す。ＫＤは、２〜５倍以内であったので、全ての種にわたって同等であると見なされた。結合機能性は、それぞれの種から単離された一次ＣＤ４＋Ｔ細胞の繁殖を誘導する効力を評価することによって確認した。
2022002520.tif 000008
Ａ親和性は、６回の実験の平均±ＳＥＭとして示されている。Ｂ４匹の供与者の範囲が示されている。
【０４１８】
実施例５：抗ＩＣＯＳ抗体のインビトロ機能性特徴決定
細胞に基づいた多数のインビトロアッセイを使用して、抗ＩＣＯＳ  ｍＡｂの活性を評価した。主な目的は、作動薬／共刺激特性を有する抗体を選別することであった。細胞系（形質移入細胞系に対する一次細胞）及び抗体提示の方法（プレート結合または架橋に対する可溶性）が作動薬活性に影響を及ぼすので、多数の異なるアッセイフォーマットを用いた。加えて、望ましくない超作動薬活性を検出するアッセイ（Ｓｕｎｔｈａｒａｌｉｎｇａｍ  ｅｔ  ａｌ．，２００６，Ｎ．Ｅｎｇ．Ｊ．Ｍｅｄ．，３５５：１０１８−２８を参照すること）も使用した。
【０４１９】
抗ＩＣＯＳ  ｍＡｂの作動薬／共刺激活性を探究するように設計されたアッセイを、下記に概説されている細胞型によって実施し、Ｔ細胞への最初のシグナル（シグナル１）は、最適以下の濃度の抗ＣＤ３もしくはＰＭＡのいずれかを使用して提供された、または超抗原（ＳＥＢ）よる刺激を用いるＰＢＭＣアッセイによって提供された。
１．一次ヒトＣＤ４＋Ｔ細胞アッセイ
ａ．抗ＣＤ３で共刺激したプレート結合／架橋抗体フォーマット
ｂ．ＰＭＡで共刺激した可溶性抗体フォーマット
２．ジャーカットアッセイ（形質移入ヒトまたはマウスＩＣＯＳ構築物を有するレポーター細胞系）
ａ．抗ＣＤ３またはＰＭＡのいずれかを用いるプレート結合／架橋フォーマット
ｂ．ＰＭＡで共刺激した可溶性抗体フォーマット
３．ヒトＰＢＭＣアッセイ
ａ．超抗原（ＳＥＢ）を用いる可溶性抗体フォーマット
【０４２０】
ハムスター抗ＩＣＯＳ  ｍＡｂのパネルを上記のアッセイによって選別して、作動薬特性を有する抗体を特定した。プレート結合抗ＩＣＯＳ抗体の添加を伴う最適以下の抗ＣＤ３により共刺激された一次ヒトＣＤ４＋Ｔ細胞を使用するアッセイにおいて観察された作動薬活性の例を、選択されたハムスター抗ＩＣＯＳ抗体によって図１０Ａに示す。このアッセイにおいて、ＰＢＭＣから単離されたヒトＣＤ４＋Ｔ細胞は、プレート結合ハムスター抗ＩＣＯＳ抗体（７Ｆ１２、３７Ａ１０及び１６Ｇ１０）の存在下で最適以下のプレート結合抗ＣＤ３により、４つの濃度（μｇ／ｍ）で活性化される。抗ＣＤ３の存在下でのプレート結合ｈＩＣＯＳＬ及び可溶性抗ＣＤ２８は、陽性対照として使用される。細胞の分裂％がグラフで表される。多数の抗ＩＣＯＳ抗体は、このアッセイにおいて活性を示している。図１０Ｂは、可溶性抗体を使用し、最適以下のＰＭＧによる共刺激を使用するアッセイの結果を示す。ヒトＣＤ４＋Ｔ細胞を、負の選択及びＣＦＳＥによる標識化によって、ＰＢＭＣから単離した。細胞を、最適以下のＰＭＡ（０．２５ｎｇ／ｍｌ）単独により、または抗ＩＣＯＳ抗体３７Ａ１０の異なるＦｃ型（ハムスター、ｍＧ１、ｍｇ２、ｍＧ２ａ、ｍＧ１Ａｇｌｙ、もしくはｈＧ１）の存在下で示された濃度（μｇ／ｍｌ）により、９６ウエルプレートにおいて活性化した。可溶性抗ＣＤ２８抗体を対照として使用した。繁殖を、フローサイトメトリーにより３日目に分析した。マウスＩｇＧ１及びマウスＩｇＧａ−ａｇｌｙ型は、親完全ハムスター抗体と共に、このアッセイにおいて活性を示した。少なくとも抗体３７Ａ１０は、可溶性とプレート結合の両方のフォーマットにおいて作動薬活性を示した。図１０Ａ及び１０Ｂを参照すること。
【０４２１】
図１０Ｃは、一次ヒトＣＤ４＋Ｔ細胞アッセイにおいて、ヒトＩｇＧ１を有する３７Ａ１０Ｓ７１３抗体の作動薬活性を示す。ＣＤ４＋Ｔ細胞を、４人の健康な供与者のＰＢＭＣから単離し、ＣＦＳＥ色素で標識し、次に最適以下濃度の抗ＣＤ３及び様々な濃度の３７Ａ１０Ｓ７１３−ｈＩｇＧ１または陰性対照ヒトＩｇＧ１抗体（抗呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ））が被覆されているプレートにおいてインキュベートした。３日後、分裂細胞の百分率をフローサイトメトリーの使用により決定した。ＥＣ５０値は、試験した４人の供与者では４．２７〜４９．７５ｎＭの範囲であった。繁殖は、分裂細胞の百分率（フローサイトメトリーを使用してＣＦＳＥ希釈により測定）としてプロットされ、繰り返したものの平均である。図１０Ｃは、代表的な供与者からのデータを示す。
【０４２２】
ハムスター抗体が作動薬活性を実証したアッセイの別の例は、ジャーカットレポーターアッセイである。ジャーカットレポーターアッセイは、ｈＩＣＯＳ−ｈＣＤ２８キメラ発現構築物をジャーカットＮＦｋＢレポーター細胞系に形質導入することによって、所内で開発した。ジャーカットｈＩＣＯＳ−ｈＣＤ２８レポーター細胞を、ＰＭＡ及び異なるＦｃ末端を有する可溶性ハムスター抗ＩＣＯＳ  ３７Ａ１０抗体により１１の濃度（μｇ／ｍｌ）で５時間活性化した。可溶性抗ＣＤ２８及びｈＩＣＯＳＬ−Ｆｃは、対照として使用される。ＧＦＰ＋細胞の％がグラフで表される。ハムスター抗ＩＣＯＳ抗体を使用するジャーカットレポーターアッセイの代表的なデータを、図１１に示す。図１１Ａは、示された濃度（μｇ／ｍｌ）による抗ＩＣＯＳ抗体３７Ａ１０（ｈＧ１、ｍＧ１、ｍＧ２ａ、ｍＧ１Ａｇｌｙ）の異なるＦｃ型の結果を示す。ｍＧ１−ａｇｌｙ型（即ち、最小Ｆｃエフェクター機能）を含む抗ＩＣＯＳ抗体の全てのＦｃ型が、このアッセイにおいて活性を示している。図１１Ｂは、示された濃度（μｇ／ｍｌ）によるヒト化抗体３７Ａ１０Ｓ７１３、３７Ａ１０Ｓ７１５、３７Ａ１０Ｓ７１６及び３７Ａ１０Ｓ７１８の結果を示す。試験された４つ全てのヒト化抗体が、このアッセイにおいて作動薬活性を示した。
【０４２３】
作動薬活性を示す別のアッセイフォーマットは、サイトカイン産生（例えば、ＩＦＮｇ）を読み取りとして使用する超抗原ブドウ球菌エンテロトキシンＢ（ＳＥＢ）によるＰＢＭＣアッセイである。このアッセイは、典型的には、サイトカイン放出に対して小さな範囲の１．５〜３倍の効果を有する。公表された抗ＰＤ−１データと一致して、抗ＩＣＯＳ抗体によるサイトカイン誘導は約２倍であるが、多数の供与者にわたるこのアッセイでは再現性良く観察されている。例えば、Ｋｏｒｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１４，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，２：８４６−８５６を参照すること。代表的なアッセイを図１２に示す。健康な供与者からの凍結ＰＢＭＣを、ＳＥＢ及び可溶性抗ＩＣＯＳ  ３７Ａ１０抗体（ｍＧ１、ｍＧ１−ａｇｌｙ、またはｈＧ１のＦｃを有する）により示された濃度（μｇ／ｍｌ）で３日間刺激した。上澄みを収集し、ＩＦＮｇレベルをフローサイトメトリーの使用によりサイトカインビーズアレイで測定した。抗ＣＤ２８及びマウスＩｇＧ１アイソタイプ抗体を対照として使用した。 ＩＦＮｇは、可溶性抗ＩＣＯＳ抗体の存在下でのＳＥＢによる刺激の後、ＰＢＭＣによって誘導される。このアッセイフォーマットにおいて、ｍＧ１−ａｇｌｙ型の３７Ａ１０は、低減された活性を示した。
【０４２４】
あらゆる潜在的な超作動薬を選別するため、一次ヒトＣＤ４＋Ｔ細胞をシグナル１の不在下で可溶性またはプレート結合抗ＩＣＯＳ抗体と共にインキュベートしたアッセイを、陽性対照として既知の抗ＣＤ２８超作動薬抗体を使用して用いた。抗ＣＤ３の不在下で活性化されたヒトＣＤ４Ｔ細胞は、可溶性形態の抗ＣＤ２８超作動薬抗体（クローンＣＤ２８．２／５Ｄ１０）により処理したときだけ繁殖するが、ＩＣＯＳＬ−Ｆｃもしくは抗ＩＣＯＳ抗体３７Ａ１０（ハムスター及びｈＧ１  Ｆｃ型）により、または非超作動薬抗ＣＤ２８（ＣＤ２８．２）抗体により処理したときは、繁殖しない。試験した抗ＩＣＯＳ  ｍＡｂのうち、このアッセイにおいて超作動薬活性を示したものはなかった。代表的なデータを図１３に描く。
【０４２５】
ＩＣＯＳはＡＫＴシグナル伝達経路を介してシグナル伝達できることが、十分に確立されている（Ｓｉｍｐｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２２：３２６−３３２に総説されている）。抗ＩＣＯＳ抗体がＡＫＴを介してシグナル伝達を誘導する能力を、抗体の作動薬活性を実証する追加的な手段として評価した。
【０４２６】
ヒトＰＢＭＣから単離されたＣＤ４Ｔ細胞を、抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８により２４時間刺激し、次に培養培地において２４時間静止させた。次に細胞を、抗マウスＩｇＧ架橋抗体を伴って、または伴うことなく、抗ＩＣＯＳ  ３７Ａ１０−ｍＧ２ａ、ｈＩＣＯＳＬ−ｍＧ２ａ  Ｆｃ、またはＰＢＳと共に、２、５、１５、または３０分間インキュベートした。インキュベートした後、細胞を固定し、透過化処理し、次に抗ホスホノＡＫＴ抗体で染色した。ｐＡＫＴ陽性細胞の百分率を、フローサイトメトリーにより分析した。
【０４２７】
図１４Ａ〜Ｂに示されているように、ｐＡＫＴは、３７Ａ１０−ｍＧ２ａによる処理の後、ｈＩＣＯＳＬ−ｍＧ２ａによる処理と比較して類似した動力学でＣＤ４Ｔ細胞を誘導した。ｐＡＫＴシグナル伝達の誘導は、二次架橋剤の存在下においてのみ観察された。
【０４２８】
実施例６：抗ＩＣＯＳ抗体のインビボ機能性特徴決定
上記に記載された選別アッセイにおいて選択された抗体を、同系腫瘍モデルの使用によってインビボで評価した。
【０４２９】
Ｓａ１Ｎ線維肉腫モデル（Ｏｓｔｒａｎｄ−Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ，２００１，Ｃｕｒｒ．Ｐｒｏｔｏｃ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，Ｃｈａｐｔｅｒ  ２０）を、インビボにおける抗ＩＣＯＳ抗体の評価に使用することができる。Ｓａ１／Ｎマウスモデルの免疫プロファイリングは、ＣＤ４Ｔ細胞が高度に浸潤すること及びＣＤ４Ｔ細胞が高レベルのＩＣＯＳを発現することを示している。この免疫プロファイルは、本発明者たちが高レベルのＣＤ４浸潤を観察し、ＩＣＯＳ発現が主にＣＤ４区画に限定されているＮＳＣＬＣ患者試料の免疫プロファイルと、類似している。
【０４３０】
抗ＩＣＯＳ抗体の有効性の評価に使用される第２のモデルは、ＣＴ２６結腸癌腫モデルである（Ｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，９：４６８５−４６９２）。ＣＴ２６マウスモデルの免疫プロファイリングは、高レベルのＣＤ８浸潤を示した。ＩＣＯＳ発現は、このモデルではＣＤ８Ｔ細胞サブセットに観察された。小さな割合のヒトＮＳＣＬＣ試料も同様に、ＣＤ８Ｔ細胞にＩＣＯＳ発現を示している。
【０４３１】
インビボ評価のための抗体フォーマット
ヒトＩｇＧ１（ｈＩｇＧ１）は、多数のＦｃ受容体にわたって結合することができ、受容体を架橋すること、ならびにＡＤＣＣ及びＣＤＣを媒介することができる活性化Ｆｃ受容体への強力な結合が含まれる。活性化Ｆｃ受容体に結合する能力を考慮すると、ｈＩｇＧ１は、典型的には、高レベルの標的を発現する細胞を枯渇させる能力がある。ｈＩｇＧ１に最も近いマウス同等物は、マウスＩｇＧ２ａ（ｍＩｇＧ２ａ）である。したがって、例として、枯渇能力を有するＩＣＯＳ作動薬抗体を評価するインビボ実験は、ｍＩｇＧ２ａを利用して、ｈＩｇＧ１の特性を模倣させる。
【０４３２】
ヒトＩｇＧ４（ｈＩｇＧ４）は、ｈＩｇＧ４があるレベルの枯渇を行う能力はあるが、枯渇が望ましくない治療状況に利用される。ほぼ例外なく阻害性ＦｃγＲＩＩ受容体に結合し、それによって架橋することができるが、枯渇に関して特に能力があるわけではないマウスＩｇＧ１（ｍＩｇＧ１）に、完全ではなく大まかに整列させる。
【０４３３】
抗ＩＣＯＳ抗体を考慮すると、最初にハムスター抗体を完全ハムスターＡｂとしてインビボで評価した。ハムスターＡｂはハムスターＩｇＧ１を有し、これは、ｍＩｇＧ１に類似したＦｃＲ結合特徴を有する。目的のハムスター抗体を、ｍＩｇＧ２ａまたはｍＩｇＧ１のいずれかのマウスＦｃ領域を有するキメラとしてクローンした。
【０４３４】
Ｓａ１Ｎ線維肉腫モデル
有効性について抗ＩＣＯＳ抗体候補を選別するのに使用される一次インビボモデルは、Ｓａ１Ｎ線維肉腫モデルである。このように、上記に記載された選別アッセイにより選択された抗体を、Ｓａ１Ｎモデルにおいて評価した。初期の研究では、いくつかのハムスター抗体（クローン７Ｆ１２、３６Ｅ１０、３７Ａ１０、１６Ｇ１０及び３５Ａ９）は、Ｓａ１Ｎモデルにおいて８ｍｇ／ｋｇ用量の単一作用物質として投与されたとき、堅牢な抗腫瘍活性を実証した。図１５を参照すること。Ｓａ１Ｎ線維肉腫細胞（１×１０６）を、未処置Ａ／Ｊマウス（６〜８週齢、雌）の右側腹部に皮下注射した。腫瘍体積が７日目に５０〜１００ｍｍ３に達すると、マウスを無作為化した。マウスは、ハムスター抗ＩＣＯＳ（７Ｆ１２、３６Ｅ１０、３７Ａ１０、１６Ｇ１０及び３５Ａ９）、またはハムスターＩｇＧアイソタイプ抗体の用量を、７、１０、１４及び１７日目に腹腔内に受けた。腫瘍増殖を毎週２回モニターした。Ｎ＝１０。
【０４３５】
癌免疫療法薬の潜在的に有益な特徴は、腫瘍に対して持続的で永続的な免疫応答を開始する能力である。抗ＩＣＯＳ抗体で予め治療されたマウスの、腫瘍を後から拒絶する能力を決定した。マウスを８ｍｇ／ｋｇの抗体により７、１０、１４及び１７日目に治療した。続いて無腫瘍のマウスに、６０日目に腫瘍を再移植した。抗ＩＣＯＳ抗体７Ｆ１２（ｎ＝７）で前治療したマウスは、全て、新たに移植された腫瘍を拒絶し、腫瘍が全てのマウスにおいて増殖した未処置マウス（ｎ＝１０）と対照的であった。図１６を参照すること。
【０４３６】
ハムスター抗体を、マウスＦｃ領域（ｍＧ１またはｍＧ２ａ）を有するキメラ抗体としてクローンして、インビボ活性化へのＦｃエフェクター機能の寄与の評価を可能にした。マウスは、１１日目から開始して、４ｍｇ／ｋｇの抗体を２週間に１回、合計４用量で受けた。抗ＣＴＬＡ−４抗体を陽性対照として含めた。初期選別実験を４ｍｇ／ｋｇの用量で実施し、有効性が、ｍＧ１とｍＧ２ａの両方のフォーマットにおいて観察された。ハムスター抗体のうちの１つ、３７Ａ１０の代表的なデータを図１７に示す。
【０４３７】
結腸ＣＴ２６同系腫瘍モデル
結腸ＣＴ２６同系腫瘍モデルを使用して、単一作用物質活性、ならびに抗ＰＤ−１抗体との併用療法の両方を評価した。
【０４３８】
ＣＴ２６モデルにおいて、抗ＩＣＯＳハムスター抗体のうちのいくつか（例えば、７Ｆ１２、３５Ａ９、３６Ｅ１０、３７Ａ１０）は、単一作用物質活性を示した。図１８を参照すること。ＣＴ２６モデルを使用して、抗ＰＤ−１との潜在的な組み合わせ活性も評価した。抗ＩＣＯＳ抗体を抗ＰＤ−１抗体と組み合わせたとき、抗腫瘍有効性が著しく増強された。ＣＴ２６腫瘍担持マウスを、ハムスター抗ＩＣＯＳ抗体（８ｍｇ／ｋｇ）単独により、または抗ＰＤ−１抗体（８ｍｇ／ｋｇ）と組み合わせて、２週間に１回治療した（３日目に４用量を開始した）。注目すべきことに、抗ＰＤ−１と抗ＩＣＯＳ抗体３７Ａ１０との組み合わせは、１０匹中９匹のマウスに無腫瘍をもたらした。図１８を参照すること。
【０４３９】
実施例７：選択的Ｔｒｅｇ枯渇が、抗ＩＣＯＳ抗体の有効性に寄与する
エキソビボ研究を実施して、抗ＩＣＯＳ抗体の投与後の免疫細胞浸潤の状態を特徴決定した。Ｓａ１Ｎモデルによる研究は、７Ｆ１２による治療後にＴｒｅｇ個体群が減少したことを示した。マウスは、８ｍｇ／ｋｇの抗ＩＣＯＳハムスター７Ｆ１２、７Ｆ１２−ｍＧ１、または７Ｆ１２−ｍＧ２ａの２用量を７及び１０日目に受けた。腫瘍及び脾臓を１２日目に採取及び分析した。Ｔｒｅｇに著しい低減があったが、Ｔｅｆｆ細胞にはなく、脾臓またはリンパ節などのリンパ器官におけるＴ細胞個体群には影響がほとんどなかった。図１９を参照すること。
【０４４０】
同様の結果が、３７Ａ１０などの他の抗ＩＣＯＳ抗体によっても観察された。図２０を参照すること。マウスは、８ｍｇ／ｋｇの抗ＩＣＯＳ抗体の２用量を７及び１０日目に受けた。腫瘍を１２日目に採取及び分析した。抗ＩＣＯＳ抗体の投与後のＣＴ２６モデルでは、Ｔｒｅｇ個体群にも同様の低減が観察された。
【０４４１】
まとめると、ＴＩＬ（腫瘍浸潤性リンパ球）研究は、Ｔｒｅｇ細胞が本明細書に記載されている抗ＩＣＯＳ抗体により選択的に枯渇され、対応する枯渇をＴｅｆｆ細胞個体群に起こさず、腫瘍に特異的に起こすが、他の臓器または周辺部に起こさないという仮説を支持している。
【０４４２】
抗ＩＣＯＳ抗体の有効性への免疫系の寄与を正式に実証するため、細胞枯渇実験を腫瘍モデルＳａ１Ｎの文脈で実施した。具体的には、マウスから、ＣＤ８Ｔ細胞、ＣＤ４Ｔ細胞、またはＣＤ４＋ＣＤ８Ｔ細胞の組み合わせを枯渇させた。腫瘍移植の６日及び１３日後に、マウスを抗ＣＤ８、抗ＣＤ４、抗ＣＤ４＋抗ＣＤ８、または対照Ｉｇ抗体（ｎ＝１群あたり１０個）で治療した。抗ＩＣＯＳ抗体７Ｆ１２を、７、１０、１４及び１７日目に８ｍｇ／ｋｇ抗体で投与した。腫瘍増殖を毎週２回モニターした。
【０４４３】
マウスからＣＤ４、ＣＤ８、またはＣＤ４＋ＣＤ８  Ｔ細胞が枯渇されたとき、７Ｆ１２の抗腫瘍有効性における著しい低減が観察された。図２１を参照すること。
【０４４４】
実施例８：ヒト化抗ＩＣＯＳ抗体による選択的Ｔｒｅｇ低減
ヒトＰＢＭＣを、５％ＣＯ２の加湿インキュベーターにより１００ｎｇ／ｍｌの組み換えヒトＩＬ−２と共に３７℃で４８時間インキュベートした。４８時間後、抗体３７Ａ１０Ｓ７１３を示された濃度で加えた。抗体は、ＩＬ−２を含有する培養培地により１０倍の段階希釈で調製した。抗体／細胞混合物を更に７２時間インキュベートした。インキュベートした後、細胞を、標準的な方法によりＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ２５及びＦｏｘＰ３で染色し、フローサイトメトリーにより分析した。Ｔｒｅｇ（ＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＦｏｘＰ３＋）及びＴｅｆｆ（ＣＤ４＋ＣＤ２５−ＦｏｘＰ３−）細胞の定量化を、それぞれの濃度及び処理によって実施した。データを、それぞれの濃度のトラスツズマブ治療群の各サブセットの率に正規化した。
【０４４５】
この実験の結果を図２２Ａに示す。抗体３７Ａ１０Ｓ７１３は、Ｔｒｅｇ細胞の用量依存性低減を引き起こした。図２２Ｂに示されているように、Ｔｅｆｆ及びＴｒｅｇ細胞は、５日間のＩＬ−２治療後に類似したレベルのＩＣＯＳを発現した。
【０４４６】
実施例９：抗ＩＣＯＳ抗体による治療後の腫瘍再負荷
６〜８週齢の雌Ａ／Ｊマウスに、１００μｌのＰＢＳ中の１×１０６のＳａ１／Ｎ細胞を、２７ゲージ針を持つツベルクリンシリンジの使用により右側腹部に皮下接種した。腫瘍増殖をモニターし、７日目に、平均腫瘍体積を各治療群において１００〜１５０ｍｍ３に正規化した後、動物を新たなケージに再分配した。各治療群には１０匹のマウスが含まれた。動物を、０．２５ｍｇ／ｋｇの抗ＩＣＯＳ抗体（マウスＩｇＧ２ａを有する３７Ａ１０Ｓ７１３  ＶＨ及びＶＬ（配列番号６０及び６１））またはアイソタイプ対照の腹腔内注射により治療した。投与を、７日目に単回用量により、または７及び１４日目の２回用量により実施した。腫瘍増殖及び動物の体重を、毎週２回モニターした。腫瘍体積が約２０００ｍｍ３に達したとき、またはＩＡＣＵＣプロトコールに準じた重篤潰瘍などの臨床的に困難な徴候があったときには、マウスを殺処分した。
【０４４７】
図２３の左側パネルは、単回用量の抗ＩＣＯＳ抗体（ｎ＝１０）または２回用量の抗ＩＣＯＳ抗体（ｎ＝１０）が投与されたマウスにおける腫瘍体積を示す。
【０４４８】
腫瘍再負荷実験を実施して、応答の耐久性を評価した。予めＳａ１／Ｎ細胞が負荷され、その腫瘍を単回用量または２回用量の０．２５ｍｇ／ｋｇの３７Ａ１０Ｓ７１３−ｍＩｇＧ２ａ抗体により根絶されている７匹のマウスに、初期腫瘍負荷の１０週間後に、Ｓａ１／Ｎ細胞を反対側の腹部に再負荷した。対照として、未処置マウスにもＳａ１／Ｎ細胞を負荷した（Ｎ＝１０）。動物を腫瘍増殖について２週間毎に評価した。
【０４４９】
図２３の右側パネルに示されているように、腫瘍が予め抗ＩＣＯＳ抗体治療により根絶されたマウスのうち、再負荷試験によって腫瘍増殖を示したものはいなかった。
【０４５０】
実施例１０：抗ＩＣＯＳ抗体を投与した、Ｓａ１／Ｎ腫瘍担持マウス及びカニクイザルにおけるＩＣＯＳリガンド（ＩＣＯＳＬ）の発現
８週齢の雌Ａ／Ｊマウスに、Ｓａ１／Ｎ腫瘍細胞を０日目に接種した。７日目に、腫瘍が約１００ｍｍ３に達したとき、マウスに、マウスＩｇＧ１もしくはＩｇＧ２ａを有する抗体３７Ａ１０、またはアイソタイプ対照抗体の単回の５または１００μｇの腹腔内用量を投与した。マウスに、続く用量の抗体を１０日目に投与し、組織（血液、脾臓及び腫瘍）を１２日目に採取した。組織処理の後、細胞を５％Ｆｃ遮断（５％の再構成正常ラット、マウス及びヒト血清、５％のウシ胎児血清、０．１ｍｇ／ｍＬのＦｃ遮断Ａｂ  ２．４Ｇ２、０．０１％のアジ化ナトリウム）と共に、フロー染色緩衝液（ｆｌｏｗ  ｓｔａｉｎｉｎｇ  ｂｕｆｆｅｒ）（ＦＳＢ：５％のＦＢＳ、１×ＰＢＳ中の０．０１％のアジ化ナトリウム）において氷上で１５分間インキュベートした。Ｆｃ遮断の後、細胞を、ＦＳＢ中の細胞外染色カクテル（抗ＣＤ４５−ＢＶ５１０、抗ＣＤ１９−ＢＶ６０５、抗ＩＣＯＳＬ−ＰＥ、Ｆｉｘａｂｌｅ  Ｖｉａｂｉｌｉｔｙ  Ｄｙｅ  ｅＦｌｕｏｒ  ７８０）により氷上で１時間染色した。細胞をＦＳＢで２回洗浄した。細胞をＦｉｘａｔｉｏｎ／Ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ溶液により氷上で３０分間固定した。細胞を１×Ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ  Ｂｕｆｆｅｒで２回洗浄し、次にＰｅｒｍｅａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ  Ｂｕｆｆｅｒ中の細胞内染色カクテル（抗ＣＤ３−ＢＵＶ４９６）により氷上で１時間染色した。細胞をＰｅｒｍｅａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ  Ｂｕｆｆｅｒで２回洗浄し、次に１．５％のＰＦＡ  ＦＳＢ溶液に再懸濁した。細胞をＢＤ  Ｆｏｒｔｅｓｓａにかけて、データをＦｌｏｗＪｏソフトウエアの使用により分析した。
【０４５１】
試料をＢＤ  Ｆｏｒｔｅｓｓａフローサイトメーターにより分析した。ＩＣＯＳＬ発現の分析のために、ＩＣＯＳＬの染色を生存ＣＤ４５＋ＣＤ３−ＣＤ１９＋Ｂ細胞で分析した。ＩＣＯＳＬ平均蛍光強度（ＭＦＩ）が報告される。
【０４５２】
ヒトＩｇＧ１を有する抗体３７Ａ１０Ｓ７１３を、１時間の静脈内注入により、１用量群あたり３匹のカニクイザルに投与した（０．５ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、７５ｍｇ／ｋｇ及びビヒクルのみ）。血液を、第１の用量の前（１日目）、第１の用量の４８時間後（３日目）、第１の用量の７日目（第２の用量の前、８日目）及び第２の用量の４８時間後（１０日目）に採取した。９５μＬの全血試料を、最初に５μＬのＨｕｍａｎ  ＴｒｕＳｔａｉｎにより氷上で１５分間Ｆｃ遮断した。Ｆｃ遮断の後、抗ＣＤ３  ＦＩＴＣ、抗ＣＤ２０  ＰＥ、抗ＣＤ１４  ＰＥ／Ｃｙ７、生存色素ｅ７８０及びｃｙｎｏＩＣＯＳ−Ｆｃ  ＤｙＬｉｇｈｔ  ６５０を含有する１００μＬの抗体ミックスを加えた。血液及び抗体ミックスを氷上で６０分間インキュベートした。インキュベートした後、試料を５００×ｇで５分間遠心分離した。上澄みを廃棄し、試料を２００μＬのＦＡＣＳ染色緩衝液に再懸濁した。洗浄ステップを３回繰り返し、最終的に２００μＬの染色緩衝液＋０．１％のパラホルムアルデヒドに再懸濁した。
【０４５３】
試料をＢＤ  Ｆｏｒｔｅｓｓａフローサイトメーターにより分析した。ＩＣＯＳＬ発現の分析のため、ＤｙＬｉｇｈｔ  ６５０標識ｃｙｎｏＩＣＯＳ−ＦｃによるＩＣＯＳＬの染色を、生存ＣＤ３−ＣＤ２０＋Ｂ細胞において分析した。ＩＣＯＳＬ  ＭＦＩを、それぞれの時点でビヒクルに正規化した。
【０４５４】
これらの実験の結果を図２４Ａ及び２４Ｂに示す。アイソタイプ対照治療マウスと比べて、ＩＣＯＳ−Ｌ発現の用量依存性増加が、全ての抗体治療及び用量において、ならびに組織において観察された。図２４Ａを参照すること。同様に、ビヒクル及び試験前試料と比べて、ＩＣＯＳ−Ｌ発現の用量依存性増加が、カニクイザルの０．５及び５ｍｇ／ｋｇ用量群の全ての時点において観察された。図２４Ｂを参照すること。ＩＣＯＳＬの誘導は７５ｍｇ／ｋｇ群においても観察されたが、観察された発現は、抗ＩＣＯＳ抗体が染色試薬（ｃｙｎｏＩＣＯＳ−Ｆｃ）と結合することができるので、潜在的な薬物相互干渉に起因して提示不足でありうる。
【０４５５】
ＩＣＯＳ標的会合も、受容体利用可能能アッセイにより測定して評価することができ、例えば以下である。未処置マウスに、アイソタイプ対照ＭｌｇＧ２ａを２．５ｍｇ／ｋｇ、またはマウスＩｇＧ２ａを有する３７Ａ１０Ｓ７１３を２．５ｍｇ／ｋｇで腹腔内注射した。注射後の様々な時点において、血液を顎下から引き出してＥＤＴＡ被覆マイクロチューブに収集した。
【０４５６】
全血を、マウスＴｒｕＳｔａｉｎ（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ）の使用により氷上で５分間Ｆｃ遮断した。インキュベートした後、１００μｌの２×濃縮細胞外染色抗体混合物を各試料に４℃で３０分間加えた。試料を遠心沈殿させ、固定し、Ｆｏｘｐ３染色緩衝液（ｅＢｉｏＳｃｉｅｎｃｅｓ）により４℃で３０分間透過化処理した。次に試料を遠心沈降させ、細胞内抗体染色に４℃で３０分間再懸濁した。試料を遠心沈降させ、０．１％のＰＦＡに再懸濁した。試料をＢＤ  ＬＳＲＩＩ  Ｆｏｒｔｅｓｓａにより分析した。Ｔｒｅｇを生存ＣＤ４５＋ＣＤ３＋  ＣＤ４＋Ｆｏｘｐ３＋として特定した。Ｔｅｆｆ細胞を生存ＣＤ４５＋ＣＤ３＋ＣＤ４＋Ｆｏｘｐ３−として特定した。ＣＤ８＋細胞を生存ＣＤ４５＋ＣＤ３＋ＣＤ８＋として特定した。蛍光標識３７Ａ１０Ｓ７１３−ｍＧ２ａ（ＤｙＬｉｇｈｔ  ６５０抱合体）をＩＣＯＳの染色試薬として使用した。各時点での受容体利用可能能は、以下の式により決定した。
時点ｔで利用可能な受容体の％＝（（時点ｔの３７Ａ１０Ｓ７１３−ｍＧ２ａＤｙ６５０のＭＦＩ−時点ｔのアイソタイプＤｙ６５０のＭＦＩ））／（（試験前の３７Ａ１０Ｓ７１３−ｍＧ２ａＤｙ６５０のＭＦＩ−試験前のアイソタイプＤｙ６５０のＭＦＩ））×１００
【０４５７】
結果は、抗ＩＣＯＳ抗体の投与後に、遊離受容体のレベルが検出不能になったことを示し、抗体が全ての利用可能な標的ＩＣＯＳ分子を飽和したことを示唆している。
【０４５８】
実施例１１：抗ＩＣＯＳ抗体治療後のＴｈ−１ケモカイン及びサイトカインの誘導
新たな患者の肺腫瘍を、手術の２４時間後に得た。軟部組織を腫瘍から手作業で除去し、残った固形腫瘍を、鋳物容器中の４％の低溶融寒天に包埋し、氷上で凝固させた。ゲル包埋腫瘍をｖｉｂｒａｔｏｍｅ（Ｌｅｉｃａ）（速度：２、振動数：９）により切断して、厚さが３００μｍの切片を生じた。腫瘍が柔らかすぎて、ｖｉｂｒａｔｏｍｅにより薄片にできない場合、組織をブレードにより手作業で切断した。
【０４５９】
腫瘍切片を４０μｍのｔｒａｎｓｗｅｌｌフィルター（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）に入れ（約１個の切片／ウエル）、ユニットを、１．５ｍＬの組織培養（ｈｉｓｔｏｃｕｌｔｕｒｅ）培地（完全ＲＰＭＩ  １６４０／ＡＩＭ−Ｖ）を含有している６ウエルプレートのウエルに移動した。次に適切な処理を、対応するウエルの培地に加えた。処理には、アイソタイプ対照としての１０μｇ／ｍＬの抗ＲＳＶ  ｈＩｇＧ１（Ｌａｋｅ  Ｐｈａｒｍａ、ロット番号３０８６−８４９５９８）、ヒトＩｇＧ１（配列番号１８８及び１８９）を有する１０μｇ／ｍＬの抗体３７Ａ１０Ｓ７１３、または１０μｇ／ｍｌの抗ＰＤ−１（ＩｇＧ４）抗体が含まれた。複製プレートを、６〜７２時間の範囲の様々な時点で調製した。このプレートを、３７℃、５％ＣＯ２のインキュベーターに入れた。
【０４６０】
望ましい時点で腫瘍切片を収集し、ＲＮＡＬａｔｅｒ（Ａｍｂｉｏｎ）に浸漬した。ＲＮＡを、製造会社の使用説明書に従ってＲＮｅａｓｙ  Ｍｉｎｉキット（Ｑｉａｇｅｎ、カタログ番号７４１０６）を使用して抽出した。ＲＮＡ抽出の後、１μｇのＲＮＡを、Ｂｉｏ−Ｒａｄ  ｉＳｃｒｉｐｔ  ｃＤＮＡ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  Ｋｉｔ（カタログ番号１７０−８８９１）の使用により逆転写に使用した。ＲＴ産物を７倍に希釈し、３μｌをそれぞれのｑＰＣＲ反応に使用した。ｑＰＣＲは、Ｂｉｏ−Ｒａｄ  Ｒｅａｌ−Ｔｉｍｅ  Ｓｙｓｔｅｍを使用して、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  ＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃのＴａｑＭａｎ  Ｇｅｎｅ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ｍａｓｔｅｒ  Ｍｉｘ（カタログ番号４３６９０１６）の使用によって実施した。使用されるＴａｑＭａｎアッセイを表６に提示する。
【０４６１】
発現を、下記のように計算される倍率変化によりＣＤ４５に正規化した。
2022002520.tif 000009
2022002520.tif 000010
【０４６２】
この実験の結果を図２５に示す。肺腫瘍１の６時間の時点で、抗ＩＣＯＳ抗体は、ＧＺＭａ、ＧＺＭｂ、ＣＳＦ２、ＩＬ２、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１及びＣＸＣＬ１３での発現に増加をもたらした。抗ＰＤ−１抗体も、ＧＺＭａ、ＧＺＭｂ、ＣＳＦ２、ＣＸＣＬ９及びＣＸＣＬ１０での発現を増加したが、程度は少なく、ＣＸＣＬ１１において同様の増加を示した。肺腫瘍２の２４時間の時点では、抗ＩＣＯＳ抗体処理は、ＣＸＣＬ１１において持続的な増加を示し、ＩＬ２、ＣＸＣＬ９及びＣＸＣＬ１０ではいくらかの連続した上昇を示した。抗ＰＤ−１抗体は、ＣＸＣＬ１１において２４時間で僅かな上昇しか示さなかった。
【０４６３】
実施例１２：作動薬抗ＩＣＯＳ抗体治療後のＴｒｅｇ細胞へのＮＫｐ４６リガンドの誘導
末梢血単核細胞を、Ｆｉｃｏｌｌ（ＧＥ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）遠心分離の使用により健康なヒト供与者から単離し（Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｂｌｏｏｄ  Ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ）、ＢａｍＢａｎｋｅｒ（Ｗａｋｏ−Ｃｈｅｍ）に凍結し、使用するまで−１５０℃で保存した。ＰＢＭＣを、可溶性抗体ＩＣＯＳ抗体及びプレート結合抗ヒトＣＤ３（１μｇ／ｍｌの被覆、Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ，ＯＫＴ３）と共に、１０％のウシ胎児血清（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）及び１％のペニシリン／ストレプトマイシン（Ｇｉｂｃｏ）を補充したＲＰＭＩ（Ｇｉｂｃｏ）中において３７℃でインキュベートした。３個の抗体をこのアッセイで試験し、強力な作動薬抗体３７Ａ１０Ｓ７１３、弱い作動薬抗体及び弱い拮抗薬抗体であった。４日後、ＰＢＭＣをプレートから穏やかに削り落とし、１％のウシ胎児血清、０．０５％のアジ化ナトリウム（Ｒｉｃｃｏ）及び２ｍＭのＥＤＴＡ（Ａｍｂｉｏｎ）を含有するＤＰＢＳ（Ｇｉｂｃｏ）で洗浄した。次に細胞をＨｕｍａｎ  ＴｒｕＳｔａｉｎ  ＦｃＸ（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ）で遮断した。ＮＫｐ４６リガンドを検出するため、細胞を、２μｇ／ｍＬのＮＫｐ４６−ｈＩｇＧ１  Ｆｃ（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、１８５０−ＮＫ）と共にインキュベートした。細胞に結合したＮＫｐ４６−ｈＩｇＧ１  Ｆｃを、ＰＥ抱合抗ヒトＩｇＧ（Ｂｉｏｌｅｇｎｅｄ、ポリクローナル）の使用により検出した。細胞を再びＨｕｍａｎ  ＴｒｕＳｔａｉｎ  ＦｃＸで遮断し、次に、抗ヒトＣＤ５６（Ｂｉｏｌｇｅｎｄ、Ｂｒｉｌｌｉａｎｔ  Ｖｉｏｌｅｔ  ７１１、ＨＣＤ５６）、抗ヒトＣＤ１６（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、Ｂｒｉｌｌｉａｎｔ  Ｖｉｏｌｅｔ  ７８５、３Ｇ８）、抗ヒトＣＤ４（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、Ｂｒｉｌｌｉａｎｔ  Ｖｉｏｌｅｔ  ５１０、ＯＫＴ４）、抗ヒトＣＤ８（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、ＢＵＶ３９５、ＲＰＡ−Ｔ８）、抗ヒトＣＤ２５（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、Ｂｒｉｌｌｉａｎｔ  Ｖｉｏｌｅｔ  ６０５、ＢＣ９６）及びｆｉｘａｂｌｅ  ｖｉａｂｉｌｉｔｙ  ｄｙｅ（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ、ｅＦｌｕｏｒ  ７８０）で染色した。染色した後、細胞を固定し、Ｆｏｘｐ３／Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ  Ｆａｃｔｏｒ  Ｓｔａｉｎｉｎｇ  Ｂｕｆｆｅｒ  Ｓｅｔ（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）により透過化処理した。透過化処理した後、細胞を、抗ヒトＣＤ３（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｅｉｎｃｅｓ、ＰＥ−ＣＦ５９４、ＵＣＨＴ１）及び抗ヒトＦｏｘｐ３（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ、ＡＰＣ、ＰＣＨ１０１）で細胞内染色した。次に細胞をパラホルムアルデヒド（Ａｌｆａ  Ａｅｓａｒ）に固定した。データをＢＤ  ＬＳＲＩＩ  Ｆｏｒｔｅｓｓａにより取得し、ＦｌｏｗＪｏ  ｖ１０．１ソフトウエアで分析した。
【０４６４】
この実験の結果を図２６及び図２７に示す。作動薬抗ＩＣＯＳ抗体３７Ａ１０Ｓ７１３による治療は、これらの３人の異なる供与者からのＴｒｅｇ細胞へのＮＫｐ４６リガンドの強力な誘導をもたらした。図２６Ａ〜Ｆを参照すること（図２６Ａ〜Ｂは供与者１からのデータを示し、図２６Ｃ〜Ｄは供与者２からのデータを示し、図２６Ｅ〜Ｆは供与者３からのデータを示す）。Ｔｅｆｆ細胞へのＮＫｐ４６リガンドの誘導は、Ｔｒｅｇ細胞と同じ強さではなかった。図２６Ａ〜Ｆを参照すること。加えて、作動薬抗ＩＣＯＳ抗体３７Ａ１０Ｓ７１３による治療は、ＮＫ細胞によるＣＤ１６の損失（ＣＤ１６シェディング）をもたらし、ＮＫ細胞の活性化を示唆している。図２７を参照すること。
【０４６５】
特定の理論に束縛されることを意図せず、作動薬抗ＩＣＯＳ抗体３７Ａ１０Ｓ７１３はＴｒｅｇ細胞におけるＮＫｐ４６リガンドのレベルを有意に増加し、ＮＫ細胞も活性化し、選択的Ｔｒｅｇ枯渇をもたらすことが、想定される。
【０４６６】
本開示は、その精神または本質的特徴から逸脱することなく、他の特定の形態を組み込むことができる。したがって前述の実施形態は、全ての態様において、本開示を制限するものではなく、例示的なものであると考慮されるべきである。このように本開示の範囲は、前述の記載ではなく、添付の特許請求の範囲により示されており、したがって、特許請求の範囲の同等物の意味及び範囲に入る全ての変化は、包含されることが意図される。
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【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図８Ａ】
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【図８Ｂ】
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【図９Ａ−１】
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【図９Ａ−２】
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【図９Ｂ】
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【図９Ｃ】
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【図１０Ａ】
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【図１０Ｂ】
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【図１０Ｃ】
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【図１１Ａ】
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【図１１Ｂ】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４Ａ】
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【図１４Ｂ】
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【図１５Ａ】
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【図１５Ｂ】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２Ａ】
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【図２２Ｂ】
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【図２３】
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【図２４Ａ】
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【図２４Ｂ】
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【図２５】
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【図２６Ａ】
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【図２６Ｂ】
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【図２６Ｃ】
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【図２６Ｄ】
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【図２６Ｅ】
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【図２６Ｆ】
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【図２７】
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【配列表】
2022002520000001.app
【手続補正書】
【提出日】令和3年10月11日(2021.10.11)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
明細書に記載の発明。
【外国語明細書】
2022002520000001.pdf