(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
乾燥処理及び機械的処理の少なくとも一方の処理がなされたユーグレナを含有する堆肥発酵促進剤。
【請求項２】
堆肥原料に乾燥処理及び機械的処理の少なくとも一方の処理がなされたユーグレナを添加して発酵を行うことを特徴とする堆肥製造方法。
【請求項３】
堆肥原料に乾燥処理及び機械的処理の少なくとも一方の処理がなされたユーグレナを添加して発酵を行うことを特徴とする堆肥発酵方法。
【請求項４】
堆肥原料と、乾燥処理及び機械的処理の少なくとも一方の処理がなされたユーグレナとを含有する堆肥化資材。
【請求項５】
堆肥原料と、乾燥処理及び機械的処理の少なくとも一方の処理がなされたユーグレナとの堆肥発酵産物。
【請求項６】
堆肥原料と、乾燥処理及び機械的処理の少なくとも一方の処理がなされたユーグレナとの堆肥発酵産物を含有する培養土。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、堆肥発酵促進剤、堆肥製造方法、堆肥発酵方法、堆肥化資材、及び堆肥発酵産物に関し、ユーグレナ含有する堆肥発酵促進剤、堆肥製造方法、堆肥発酵方法、堆肥化資材、堆肥発酵産物及び培養土に関する。
【背景技術】
【０００２】
食糧、飼料、燃料等としての利用が有望視されている生物資源として、ユーグレナ（属名：Ｅｕｇｌｅｎａ、和名：ミドリムシ）が注目されている。ユーグレナは、ビタミン，ミネラル，アミノ酸，不飽和脂肪酸など、人間が生きていくために必要な栄養素の大半に該当する５９種類もの栄養素を備え、多種類の栄養素をバランスよく摂取するためのサプリメントとしての利用や、必要な栄養素を摂取できない貧困地域での食糧供給源としての利用の可能性が提案されている。
【０００３】
ユーグレナは、食物連鎖の第一次生産者に位置し、捕食者により捕食されることや、光、温度条件、撹拌速度などの培養条件が他の微生物に比べて難しいなどの理由から、大量培養が難しいとされてきたが、近年、本発明者らの鋭意研究によって、大量培養技術が確立され、ユーグレナ及びユーグレナから抽出されるパラミロン等、ユーグレナ由来物質の大量供給の途が開かれた。
【０００４】
特許文献１には、ユーグレナ藻体を有効成分として含有し、麹菌の酵素産生を促進するために用いられる麹菌の酵素産生促進剤が記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特許第６２５１４３６号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
特許文献１には、ユーグレナに麹菌の発酵促進作用があることが記載されているものの、麹菌以外の菌に対する作用や食品や化粧料以外の分野への応用は検討されておらず、ユーグレナの食品、飼料、化粧料、バイオ燃料以外の分野への利用が望まれていた。
【０００７】
本発明は、上記の課題に鑑みてなされたものであり、本発明の目的は、ユーグレナを含有する堆肥発酵促進剤、ユーグレナを利用した堆肥製造方法、堆肥発酵方法、堆肥化資材、堆肥発酵産物及び培養土を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、鋭意研究した結果、ユーグレナに堆肥原料の発酵促進作用があることを見出した。より詳細には、ユーグレナが、堆肥製造における発酵を促進する堆肥発酵促進剤として機能することや、得られる堆肥が優れた肥効を発揮することを明らかにして、本発明をするに至った。
【０００９】
したがって、前記課題は、本発明によれば、乾燥処理及び機械的処理の少なくとも一方の処理がなされたユーグレナを含有する堆肥発酵促進剤により解決される。
このように、ユーグレナを堆肥原料の発酵に用いることで、堆肥原料の発酵を促進することができる。
【００１０】
このとき、牛糞、豚糞、鶏糞、馬糞及びこれらの混合物から選択される畜産排泄物１００重量部に対して前記ユーグレナが１重量部以上１００重量部未満となるように用いられるとよい。
【００１１】
また、前記課題は、本発明によれば、堆肥原料に乾燥処理及び機械的処理の少なくとも一方の処理がなされたユーグレナを添加して発酵を行うことを特徴とする堆肥製造方法により解決される。
【００１２】
また、前記課題は、本発明によれば、堆肥原料に乾燥処理及び機械的処理の少なくとも一方の処理がなされたユーグレナを添加して発酵を行うことを特徴とする堆肥発酵方法により解決される。
【００１３】
また、前記課題は、本発明によれば、堆肥原料と、乾燥処理及び機械的処理の少なくとも一方の処理がなされたユーグレナとを含有する堆肥化資材により解決される。
【００１４】
また、前記課題は、本発明によれば、堆肥原料と、乾燥処理及び機械的処理の少なくとも一方の処理がなされたユーグレナとの堆肥発酵産物により解決される。
【００１５】
また、前記課題は、本発明によれば、堆肥原料と、乾燥処理及び機械的処理の少なくとも一方の処理がなされたユーグレナとの堆肥発酵産物を含有する培養土により解決される。
【発明の効果】
【００１６】
本発明によれば、ユーグレナの新たな利用方法となるユーグレナを含有する堆肥発酵促進剤、ユーグレナを有効利用した堆肥製造方法、堆肥発酵方法、堆肥化資材、堆肥発酵産物及び培養土を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
【図１】試験１における各試験区のコンテナ内温度測定の結果を示すグラフである。
【図２】試験２において得られた堆肥上清のｐＨを示すグラフである。
【図３】試験２において測定した堆肥発酵過程における各成分の量を示す図である。
【図４】試験３において測定した各試験区の発芽率を示すグラフである。
【図５】試験３において測定した各試験区の幼植物根長を示すグラフである。
【図６】試験３において測定した各試験区の幼植物地上部長を示すグラフである。
【図７】試験４において測定した各試験区のコマツナの収量を示すグラフである。
【図８】試験５における各試験区のコンテナ内温度測定の結果を示すグラフである。
【図９】試験５において測定した各試験区の発芽率を示すグラフである。
【図１０】試験５において測定した各試験区の幼植物根長を示すグラフである。
【図１１】試験５において測定した各試験区の幼植物地上部長を示すグラフである。
【図１２】試験５において測定した堆肥発酵過程における各成分の量を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
以下、本発明の実施形態について、図１乃至図１２を参照しながら説明する。
本実施形態は、ユーグレナを有効成分として含有する堆肥発酵促進剤、ユーグレナを利用した堆肥製造方法、堆肥発酵方法、堆肥化資材、及び堆肥発酵産物に関するものである。
【００１９】
＜ユーグレナ＞
実施形態において、「ユーグレナ」とは、分類学上、ユーグレナ属（Euglena）に分類される微生物、その変種、その変異種及びユーグレナ科（Euglenaceae）の近縁種を含む。ここで、ユーグレナ属（Euglena）とは、真核生物のうち、エクスカバータ、ユーグレノゾア門、ユーグレナ藻綱、ユーグレナ目、ユーグレナ科に属する生物の一群である。
【００２０】
ユーグレナ属に含まれる種として、具体的には、Euglena chadefaudii、Euglena deses、Euglena gracilis、Euglena granulata、Euglena mutabilis、Euglena proxima、Euglena spirogyra、Euglena viridisなどが挙げられる。ユーグレナとして、ユーグレナ・グラシリス（E. gracilis），特に、ユーグレナ・グラシリス（E. gracilis）Ｚ株を用いることができるが、そのほか、ユーグレナ・グラシリス（E. gracilis）Ｚ株の変異株ＳＭ−ＺＫ株（葉緑体欠損株）や変種のE. gracilis var. bacillaris、これらの種の葉緑体の変異株等の遺伝子変異株、Astasia longa等のその他のユーグレナ類であってもよい。
【００２１】
ユーグレナ属は、池や沼などの淡水中に広く分布しており、これらから分離して使用しても良く、また、既に単離されている任意のユーグレナ属を使用してもよい。ユーグレナ属は、その全ての変異株を包含する。また、これらの変異株の中には、遺伝的方法、たとえば組換え、形質導入、形質転換等により得られたものも含有される。
【００２２】
（ユーグレナ藻体）
本実施形態では、ユーグレナとしてユーグレナ藻体を用いることが可能である。ユーグレナ藻体として、遠心分離，濾過又は沈降等によって分離したユーグレナ生細胞をそのまま用いることができる。ユーグレナ生細胞は、培養槽から収穫後そのままの状態で使用することもできるが、水若しくは生理食塩水で洗浄するのが好ましい。また、ユーグレナ藻体が水などの液体に分散した分散液の状態で用いてもよい。本実施形態において、ユーグレナ生細胞を凍結乾燥処理やスプレー乾燥処理して得たユーグレナの乾燥藻体（ユーグレナ粉末）をユーグレナ藻体として用いると好適である。
【００２３】
更に、ユーグレナ生細胞を超音波照射処理や、ホモゲナイズ等の機械処理を行うことにより得た藻体の機械的処理物をユーグレナ藻体として用いてもよい。また、機械的処理物に乾燥処理を施した機械的処理物乾燥物をユーグレナ藻体として用いてもよい。
【００２４】
＜堆肥発酵促進剤＞
本実施形態の堆肥発酵促進剤は、ユーグレナを有効成分として含有し、堆肥原料の発酵を促進する作用を有する。
【００２５】
本明細書において、「堆肥」とは、家畜排せつ物、生ごみ、食品工業残渣、その他の有機物を、制御された方法で堆積又は攪拌し、腐熟した有機質資材のことを言う。堆肥は、腐熟の過程で発生する熱により微生物学的に安定化し、植物の生育並びに土壌の改良に有効で、取扱いが容易となるように加工されている。
【００２６】
また、「堆肥化」とは、有機物を堆積し、攪拌、通気して好気性状態とし、原料中の有機物が微生物により分解され、この分解により発生する熱により、水分は蒸発し、病原菌や寄生虫卵や雑草種子等が死滅あるいは不活性化して、安全で衛生的、かつ安定化させることを言う。
【００２７】
有機物の分解過程は、易分解性有機物が主として分解する一次発酵と、可分解性有機物の分解と腐植化が進行する二次発酵に分かれる。ここで、「堆肥原料の発酵を促進する」とは、堆肥化における有機物の分解過程を促進することを言う。
【００２８】
後述する実施例で示されるように、被発酵原料として、畜産排泄物を用いる場合には、牛糞、豚糞、鶏糞、馬糞及びこれらの混合物から選択される畜産排泄物１００重量部に対して堆肥発酵促進剤の有効成分であるユーグレナが１重量部以上１００重量部未満となるように用いられると好適である。
【００２９】
＜堆肥化資材＞
本実施形態では、堆肥原料及びユーグレナを含有する堆肥化資材を、原料として発酵を行う。堆肥原料は、被発酵原料と、副資材と、を含む堆肥化の原料である。
【００３０】
（被発酵原料）
本発明の発酵促進剤を用いて堆肥を製造する際の被発酵原料（主資材）の種類は特に制限されず、堆肥化が可能な有機質肥料原料（有機性廃棄物）であれば使用可能である。被発酵原料としては、例えば、畜産排泄物、食品残渣、活性汚泥、木質残渣、漁業廃棄物などを挙げることができる。その中でも、本実施形態の発酵促進剤は、畜産排泄物、食品残渣、活性汚泥などの水分含量が多い有機質廃棄物の堆肥化に有効である。
【００３１】
畜産排泄物の例としては、牛糞、豚糞、鶏糞、馬糞及びこれらの混合物が例示される。食品残渣としては、残飯、生ごみ、野菜くず、おから、コーヒーかす、茶かす、果汁かす、ビールかす、焼酎かす、かん詰加工かす、食品加工汚泥及びこれらの混合物が例示される。漁業廃棄物としては、魚のあら、魚かす、貝類かす、海藻残渣及びこれらの混合物が例示される。
【００３２】
（副資材）
副資材は、被発酵原料の性状を調整する資材である。副資材の例としては、有機資材（もみ殻、稲わら、麦わら、おがくず、バークなどの粗大有機物）や無機質資材材（ゼオライト、バーミキュライト、パーライトなど）が例示される。
【００３３】
（発酵菌）
通常、畜産排泄物、生ごみなどの食品残渣、汚泥などの有機性廃棄物は、発酵菌などの添加などをしなくとも、発酵設備投入時の発酵条件を整えて、通気などの発酵管理を行えば良好な好気性発酵が行われることが知られているが、堆肥原料は、任意追加的に種菌としての発酵菌を含んでいても良い。発酵菌の例としては、バチルス属微生物などの細菌、放線菌、糸状菌、亜硝酸菌、硝酸菌、セルロース分解菌などが例示されるが、これらに限定されるものではない。
【００３４】
（Ｃ／Ｎ比）
堆肥原料におけるＣ／Ｎ比は、１０以上３０以下、好ましくは１５以上２５以下、より好ましくは１８以上２２以下、特に好ましくは１９以上２１以下（約２０）に調整される。ここで、Ｃ／Ｎ比とは、堆肥原料に含まれている炭素（Ｃ）量と窒素（Ｎ）量の比率である。
【００３５】
＜堆肥製造方法（堆肥発酵方法）＞
本実施形態の堆肥製造方法（堆肥発酵方法）は、堆肥原料にユーグレナを添加して発酵を行うことを特徴とする。具体的には、本実施形態の堆肥製造方法（堆肥発酵方法）は、ユーグレナと堆肥原料を混合して堆肥化資材を調製する前処理工程（ステップＳ１）と、前記堆肥化資材を発酵させる発酵工程（ステップＳ２）と、を行うことを特徴とする。
【００３６】
（前処理工程）
前処理工程では、ユーグレナと堆肥原料を混合して堆肥化資材を調製する（ステップＳ１）。このとき、堆肥化資材の通気性の改善や水分、ｐＨの調整などを行う。一般的には堆肥原料の受入供給設備と前処理設備が設けられる。受入供給設備は堆肥原料及び添加する副資材を一旦貯留し、前処理設備へ安定的に供給する設備である。前処理設備は、原料の性状を改善して、発酵工程において、微生物が活動し易くなり、良好な発酵が進行する条件に原料を調整する設備であり、原料と二次発酵設備からの返送堆肥を混合したり、もみ殻、おがくずその他の副資材を添加したり、また、副資材などの破砕、乾燥などを行う。
【００３７】
（発酵工程）
発酵工程では、前処理工程で調整したユーグレナと堆肥原料を含有する堆肥化資材を、所定の発酵条件で発酵させる（ステップＳ２）。発酵工程は、堆肥化の基本をなす工程であり、製造される堆肥の品質を決める重要な工程でもある。発酵工程は、一次発酵、二次発酵の二段階に分けるのが一般であるが明確な区分があるとはいえない。発酵工程においては、発酵設備投入物全体の均一な発酵を図るために、投入物の切返し、移動、通気を行う。
【００３８】
発酵工程では、発酵温度、水分蒸発量、ｐＨ、期間（発酵日数）、切り返し頻度、通気量、などの条件を適宜選択した所定の発酵条件下で種菌による堆肥化資材の発酵が行われる。各種発酵の条件は、期間を通じて一定であってもよいが、発酵を促進させるために、発酵期間に応じて各種発酵条件を変化させることも可能である。
【００３９】
堆肥製造方法（堆肥発酵方法）で用いる発酵設備は、特に限定されるものではなく、例えば、堆積式（箱式、うね溝式、静置堆積式、容器式）の設備や、機械切返し式（横形平面式、横形円形式、横形楕円形式、立形単段式、立形多段式、回転式）の発酵設備を用いることが可能である。
【００４０】
＜堆肥発酵産物＞
本実施形態の堆肥発酵産物は、堆肥原料及びユーグレナの堆肥発酵産物であり、本実施形態の堆肥原料及びユーグレナを含有する堆肥化資材を原料として、本実施形態の堆肥製造方法（堆肥発酵方法）によって発酵させて得られる。
【００４１】
ここで、堆肥発酵産物には、堆肥化資材を発酵させて得られる発酵産物そのものが含まれるが、それ以外にも、発酵産物を適宜処理して得られる、粉末、乾燥物、抽出乾燥物などの固形物、抽出液、分散液、搾り汁、濾液などの液体のような、発酵産物の処理物も含まれる。
【００４２】
以下の実施例に示されるように、本実施形態の堆肥発酵産物を堆肥として用いる場合、
堆肥発酵促進剤としてのユーグレナ添加によって、硝酸態窒素及び水溶性リン酸が増加しており、良好な発芽率、優れた肥効を発揮する。
【００４３】
＜培養土＞
本実施形態の堆肥発酵産物は、堆肥として用いる場合、良好な発芽率、優れた肥効を発揮するため、培養土における堆肥として好適に利用することが可能である。ここで、「培養土」とは、用土や肥料が配合された土のことを意味し、土壌の代わりに植物を生育させるための基盤として用いられる資材である。
【００４４】
培養土は、植物栽培用の容器に詰められ、種子や植物の苗を植えて使用されるものであってもよいし、田畑の改良や新規農地の開拓等において、既存の土地への客土材料として使用されてもよい。
【実施例】
【００４５】
以下、具体的実施例に基づいて本発明を具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【００４６】
ユーグレナは細胞壁がないことから容易に土壌細菌により分解され、土壌細菌が発酵する際に必要なアミノ酸を幅広く含むため発酵が促進することが期待できる。また、それに伴って土壌細菌叢の存在パターンに違いが生じると予想されることから、従来とは異なる堆肥の特徴を持つと予想される。
【００４７】
そこで、以下の実施例では、堆肥を製造する際にユーグレナ粉末を施用することで発酵が促進されるのかを検討した。また、ユーグレナ粉末を添加しない区と比較した際の違いを検証した。
【００４８】
（堆肥原料）
堆肥原料として、以下の資材を用いた。表１に各資材の情報を示し、表２に堆肥化に必要な資材量を示す。乾燥鶏糞ペレットは、主資材であり、窒素源として使用した。もみ殻は、通気性確保・炭素源として使用し、単独ではほぼ発酵されない資材である。牛糞堆肥は、種菌として使用した。
【００４９】
【表１】
0006746020.tif 000002
【００５０】
【表２】
0006746020.tif 000003
【００５１】
（発酵促進資材）
発酵促進資材として、ユーグレナ粉末及び市販の発酵促進剤（コンポスト用廃菌床）を用いた。
【００５２】
（試験区概要）
試験区について、発酵促進資材としてユーグレナ粉末を用いた６試験区（０．０１ｋｇ／０．１ｋｇ／０．５ｋｇ／１ｋｇ／１．５ｋｇ／２ｋｇ）と無添加および発酵促進剤（コンポスト用廃菌床０．０２ｋｇ）を用いた２試験区の合計８試験区とした（８０Ｌコンテナ使用）。
【００５３】
各試験区のサンプルラベルは、以下の通りとした。
・サンプル１：無添加
・サンプル２：コンポスト用廃菌床２０ｇ
・サンプル３：ユーグレナ１０ｇ
・サンプル４：ユーグレナ１００ｇ
・サンプル５：ユーグレナ５００ｇ
・サンプル６：ユーグレナ１ｋｇ
・サンプル７：ユーグレナ１．５ｋｇ
・サンプル８：ユーグレナ２ｋｇ
【００５４】
（測定項目）
試験では、以下の項目を測定した。外気温は、温度計にて定時計測した。地熱は、毎日定時に測定した。毒性試験では、コマツナ種子の発芽率を測定した、肥料成分分析は、ＰＡＣ試験を実施した。
【００５５】
＜試験１：各試験区の発酵熱推移＞
図１に、各試験区のコンテナ内温度測定の結果を示す。図１のグラフは、発酵熱の推移を示しており、矢印は切り返しを実施したタイミングである。８０Ｌという小スケールにも関わらず、ユーグレナ粉末を５００ｇ入れた試験区（サンプル５）では仕込み翌日に６０℃以上の発酵熱を記録した。また、ユーグレナ１０ｇの試験区（サンプル３）及び１００ｇの試験区（サンプル４）においても、無添加区（サンプル１）やコンポスト用廃菌床添加区（サンプル２）と比較してコンテナ内の温度が６〜８℃高かった。
【００５６】
試験１の結果から、ユーグレナ添加量依存的に一次発酵が促進され、堆肥原料中の有機物が微生物の働きにより無機化されることが示唆された。また、この現象は、１．５ｋｇ以上の添加で頭打ちになることが示された。
【００５７】
＜試験２：化学的性質＞
図２に得られた堆肥上清のｐＨを示す。いずれの試験区においても経時的にｐＨが上昇していた。発酵過程においてアンモニアが発生し、アルカリ性に偏ることを考えると妥当な結果であった。どの試験区分においても１か月後のｐＨは７以上８と中性域であり、堆肥として利用しても問題ないことが示唆された。
【００５８】
発酵過程における窒素の形態変化は、一般的に、アンモニア態窒素(ＮＨ４)→亜硝酸態窒素(ＮＯ２)→硝酸態窒素(ＮＯ３)のように変化すると考えられている。硝酸態窒素まで酸化された窒素が植物根から吸収され、窒素同化される。すなわち、硝酸態窒素(ＮＯ３)が含まれていると肥効が高いと考えられる。また、上述の過程において水溶性リン酸(ＰＯ４)が並行して発生し、堆肥の無機化を図るための尺度として捉えることができる。水溶性リン酸は、即効性肥料として利用される肥料成分の１つであり、肥効にも関与することから水溶性リン酸の生成は堆肥化・肥効という点においても重要である。図３に堆肥発酵過程における各成分の量を測定した結果を示す。
【００５９】
ユーグレナ粉末の添加は、対象区と比較して硝酸態窒素（ＮＯ３）及び水溶性リン酸（ＰＯ４）の発生量が増加傾向であった。この結果から、ユーグレナ添加は微生物の発酵を活性化させ、有機物から無機物への分解を促進したことが示唆された。
【００６０】
＜試験３：幼植物毒性試験−発芽率＞
未熟堆肥を施用した際、そこに含まれるフェノール性酸や有機酸によって植物根に障害が生じ発育・発芽が抑制されることが知られている。そこで、堆肥の腐熟度を測ることを目的に、幼植物試験を実施した。
【００６１】
（実験方法）
サンプル３ｇをファルコンチューブにとり、そこに３０ｍＬのイオン交換水を加えた。６０℃で３時間抽出を行った。その際、３０分毎にボルテックスにて攪拌した。上清をろ過し、堆肥上清とした。コマツナ種子５０粒をシャーレに並べ、そこに堆肥上清１０ｍＬを静かに加えた。対象区として、水道水を用いた。２６℃、４日間静置した。根長・地上部長測定時は、１０本の植物体を取り測定を行った（Ｎ＝１０）。
【００６２】
発芽率測定の結果を図４に示す。鶏糞は易分解性であることから、仕込み１か月後のサンプルではいずれの試験区も水道水とほぼ同等の発芽率を示した。しかし、サンプル１及びサンプル２においては仕込み２週間後の時点では発芽率が約８０％であるにも関わらず、ユーグレナ添加区(サンプル３〜６)では、水道水とほぼ同等の発芽率となり、未熟堆肥で観察される発芽阻害が解消されたことが示唆された。つまり、ユーグレナ添加区では仕込み２週間後において毒性が低減されることが示唆された。
【００６３】
図５に幼植物根長の測定結果を示す。仕込み２週間後において、無添加区（サンプル１）およびコンポスト用廃菌床添加区（サンプル２）では、根の成長が阻害される傾向にあった。ユーグレナ添加区では、根の成長が対象区とほぼ同等であった。
【００６４】
図６に幼植物地上部長の測定結果を示す。対象区である水道水やサンプル１、サンプル２と比べて、サンプル３〜６で優位に地上部長の生育が促進されていた。
【００６５】
＜試験１〜３のまとめ＞
試験１〜３では、堆肥製造の際のユーグレナ粉末施用による効果を検証することを目的に、鶏糞と、もみ殻の混合物を堆肥原料として発酵熱の継時変化、成分分析、幼植物試験を行った。以上の試験結果を総合すると、ユーグレナを主資材である鶏糞１ｋｇ（１００重量部)に対して、５０重量部以上加えると、速やかな一次発酵熱が生じることが分かった（図１）。また、鶏糞１ｋｇ（１００重量部)に対し１重量部のユーグレナを加えた際、硝酸態窒素及び水溶性リン酸が増加することから微生物の活性化による発酵促進が示唆された（図３）。
【００６６】
さらに、幼植物試験においても仕込み２週間後から未熟堆肥としての毒性は低減し、発芽率の改善が観察されるだけでなく、肥効も観察された（図４〜６）。
【００６７】
＜試験４：作物栽培への影響の検証＞
上記の試験では、鶏糞と、もみ殻の混合物を堆肥原料として、ユーグレナ粉末を加えると腐熟が促進し、かつ、コマツナ幼植物試験から対象区と比較して肥効が示されることが示唆された。次に、得られた堆肥を実際に施与した際に、コマツナの生育に与える影響を検証した。
【００６８】
（試験の概要）
ユーグレナを添加して得られた堆肥の作物栽培への影響を検証するため、播種から収穫までの期間が短く、さらに肥料登録にも用いられるコマツナ種子を用いた栽培試験を行った。
【００６９】
家庭用プランターを用いて、コマツナ種子からコマツナの生育を実施した。その際の試験区は以下のとおりとした。再現性の検証を目的に各試験区における反復数は２とした。プランター配置の際は、場所による影響を防ぐため統計解析言語Ｒを用いた完全ランダム配置とした。
【００７０】
・試験区１：無施肥
・試験区２：鶏糞もみ殻堆肥（無添加、市販堆肥）
・試験区３：鶏糞もみ殻堆肥＋コンポスト用廃菌床添加区
・試験区４：鶏糞もみ殻堆肥＋ユーグレナ粉末１０ｇ  （０．０１２５％）
・試験区５：鶏糞もみ殻堆肥＋ユーグレナ粉末１００ｇ  （０．１２５％）
・試験区６：鶏糞もみ殻堆肥＋ユーグレナ粉末５００ｇ  （０．６２５％）
・試験区７：鶏糞もみ殻堆肥＋ユーグレナ粉末２ｋｇ  （２．５％）
・試験区８：化成肥料（Ｎ：Ｐ：Ｋ＝８：８：８）施肥（メーカー指定量）
【００７１】
栽培期間：９月５日〜１０月４日（一か月間）
使用土壌：黒ぼく土、約２０Ｌ／プランター
施肥量：４Ｌ／プランター
【００７２】
図７に各試験区におけるコマツナの収量を示す。ユーグレナを堆肥原料体積に対し０．１２５％（試験区５）、０．６２５％（試験区６）、２．５％（試験区７）添加した発酵促進堆肥区では、鶏糞もみ殻堆肥（無添加、試験区２）に対して約４１％の収量増加、コンポスト用廃菌床添加区（試験区３）に対しては約２３％の収量増加が観測された。この結果から、ユーグレナ粉末の堆肥原料への添加は、堆肥発酵促進だけではなく、得られる堆肥の肥効も優れることが示された。
【００７３】
＜試験５：堆肥原料の検討＞
上記の試験では、鶏糞と、もみ殻の混合物を堆肥原料としたが、堆肥原料について、他の組み合わせについても検討を行った。
【００７４】
（堆肥原料）
牛糞おがくず堆肥（初発Ｃ／Ｎ比＝３０）の堆肥原料として、以下の資材を用い、均一になるよう良く混合した。
牛糞：５０ｋｇ／区
おがくず：１３．３１ｋｇ／区（約２７Ｌ）
牛糞堆肥（種菌）：０．１ｋｇ／区
【００７５】
（試験区概要）
試験区について、発酵促進資材としてユーグレナ粉末を用いた２試験区（０．０１ｋｇ／０．５ｋｇ）と無添加および発酵促進剤（コンポスト用廃菌床０．０２ｋｇ）を用いた２試験区の合計４試験区とした（８０Ｌコンテナ使用）。
【００７６】
各試験区のサンプルラベルは、以下の通りとした。
・サンプル１：無添加（発酵促進剤、ユーグレナ粉末無し）
・サンプル２：コンポスト用廃菌床２０ｇ
・サンプル３：ユーグレナ０．０１ｋｇ
・サンプル４：ユーグレナ０．５ｋｇ
【００７７】
上記の試験と同様の手順で各測定を実施した。結果を以下に示す。
（発酵熱推移）
図８に、各試験区のコンテナ内温度測定の結果を示す。牛糞と、おがくずを用いた堆肥でも、鶏糞と、もみ殻を用いた場合と同様に、ユーグレナ添加区(サンプル４、主原料比１０％)において、明らかな発酵促進が観察された(図９の矢印)。次に、堆肥の成熟度を検証するために、コマツナ幼植物毒性・生育試験を実施した。
【００７８】
（コマツナ幼植物発芽率）
発芽率測定の結果を図９に示す。発酵開始２週間後の時点で、ユーグレナ添加区（サンプル３と４）は、発芽率が対象区（水道水試験区）と比較しても差がなく、堆肥の成熟が進行していることが示唆された。
【００７９】
（コマツナ幼植物毒性・生育試験）
幼植物根長（図１０）及び幼植物地上部長（図１１）の両方で、ユーグレナ添加区(サンプル３と４)で有意な成長促進が観察された。
【００８０】
（堆肥成分分析結果）
図１２に堆肥発酵過程における各成分の量を測定した結果を示す。ユーグレナを１０ｇ添加した試験区では、亜硝酸態窒素(ＮＯ２)の増加量が著しく、ユーグレナ添加は微生物の発酵を活性化させ、有機物から無機物への分解を促進したことが示唆された。
【要約】
【課題】ユーグレナを含有する堆肥発酵促進剤、ユーグレナを利用した堆肥製造方法、堆肥発酵方法、堆肥化資材、堆肥発酵産物及び培養土を提供する。
【解決手段】ユーグレナを含有する堆肥発酵促進剤、堆肥原料にユーグレナを添加して発酵を行う堆肥製造方法、堆肥原料にユーグレナを添加して発酵を行う堆肥発酵方法、堆肥原料及びユーグレナを含有する堆肥化資材、堆肥原料及びユーグレナの堆肥発酵産物、堆肥原料及びユーグレナの堆肥発酵産物を含有する培養土である。
【選択図】図３【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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