(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
葛茎からプエラリンを主体とするサプリメント用葛抽出物の製造方法であって、葛茎の粉砕物を乾燥し、この乾燥粉砕物を水またはアルコール抽出を行い、抽出物をアルカリ処理することを特徴とするプエラリンを主体とするサプリメント用葛抽出物の製造方法。
【請求項２】
請求項１において、アルコールがエタノール濃度３０％（Ｗ／Ｗ）であることを特徴とするプエラリンを主体とするサプリメント用葛抽出物の製造方法。
【請求項３】
請求項１または２において、抽出物のアルカリ処理を原材料の葛茎のＢｒｉｘに応じてアルカリ濃度及び処理時間を調整することを特徴とするプエラリンを主体とするサプリメント用葛抽出物の製造方法。
【請求項４】
請求項３において、葛茎原料のＢｒｉｘ２０において、アルカリ濃度０．６Ｎ以上で７２時間以上の抽出処理することを特徴とするプエラリンを主体とするサプリメント用葛抽出物の製造方法。
【請求項５】
請求項３において、葛茎原料のＢｒｉｘ３０において、アルカリ濃度０．６Ｎ以上で２４時間以上の抽出処理することを特徴とするプエラリンを主体とするサプリメント用葛抽出物の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は閉経後女性の体重増加や骨量減少を抑え、抗酸化能を有する葛茎を原料とする抽出物の製造方法、より詳しくはプエラリン以外のイソフラボンの含有量を抑制しプエラリン含有量が相対的に高い葛茎抽出物の製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
葛はマメ科の多年草で、その根からデンプンや葛根と呼ばれる漢方薬の原料が作られて利用されている。
葛の根は食薬区分で医薬品に分類されており食用とはできないが、葛の茎・蔓は食品として使用できるとされている。葛の有効成分としてイソフラボンのプエラリンが挙げられる。
本明細書において、葛蔓、葛茎を一括して葛茎と表記する。
プエラリンは、大豆に含まれる代表的なイソフラボンのダイジンと類似の構造を有する物質で、閉経後の骨粗しょう症の予防、体重増加抑制、不定愁訴の改善に効果があることが知られている。また、抗酸化作用やエネルギー代謝の改善などの作用も報告されている。
【０００３】
大豆イソフラボンにも同様の効能が報告されており、大豆イソフラボンは女性ホルモンであるエストロゲン様の作用で効果を発揮しているものと考えられている。
ダイジンは消化管内でグルコースが取れてアグリコンであるダイゼインに変化し、その後腸内細菌によってエクオールと呼ばれる物質に変換され、エストロゲン受容体に結合する。
腸内細菌叢にエクオール産生菌株を持つ人にとって、大豆イソフラボンを摂取することによってエストロゲン様作用が発揮されるため、多量に摂取すると健康被害が発生する可能性があり、厚労省からは一日摂取量の上限を７０〜７５ｍｇとする通知が出されている。なお、食品安全委員会の、「大豆イソフラボンを含む特定保健用食品の安全性評価の基本的な考え方」においては、大豆イソフラボンアグリコンの一日摂取目安量の上限値、７０〜７５ｍｇ／日は、この量を毎日欠かさず長期間摂取する場合の平均値としての上限値であること、また、大豆食品からの摂取量がこの上限値を超えることにより、直ちに、健康被害に結びつくというものではないことを強調している。
【０００４】
更に葛根から抽出されたプエラリンを有効成分として含む葛根の抽出物が、肌の保湿や美白作用を有することは、例えば、特許文献１ 、２ 等により知られており、また、プエラリンを有効成分として含有する葛の根の抽出物が育毛・養毛効果、髪質の改善効果、及び頭皮の炎症予防・改善等の効果を発揮する毛髪化粧料の有効成分として利用することについても知られている。
しかし、葛茎には、様々な有用成分が含まれているにもかかわらず、葛茎を食品、サプリメントおよび皮膚外用剤として利用することについては、深く検討されていない。
【０００５】
プエラリンは、ダイゼインの８−Ｃのグルコシドであり、また、ダイジンは７−Ｏのグルコシドであり、分子量も同じで構造的にも非常に似た形をしている。
しかし、プエラリンは、ダイジンとは異なり、消化管内ではアグリコンにはならず、そのままの構造を保っており、大豆イソフラボンとは異なった機序で作用していると思われる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特開２０１５−１４３１９２号公報
【特許文献２】特許第５４６０８７４号公報
【特許文献３】特許第５６７１６２２号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
従来、葛根からの抽出物のプエラリンは美白剤や養毛剤として利用されてきているが、本発明は、食用可能な葛茎を原料とし、葛茎の抽出物を主にサプリメント成分として利用するための抽出方法である。
プエラリンは、エストロゲン様作用がなく、多量の摂取量であっても大豆イソフラボンよりは人体への影響が少ない安全性が高いものと考えられる。
しかし、葛茎にはプエラリン以外にもダイジン、ダイゼイン等大豆イソフラボンと同じ物質が含まれており、体内に入るものであるサプリメント用抽出物としては、できるだけ安全性の高いものが望ましいものであり、葛茎抽出物中のプエラリン以外のイソフラボンを極力少なくすることが望ましいといえる。
本発明は葛茎抽出物中のプエラリン以外のイソフラボンの含有量を抑え、プエラリンを主体とし、プエラリンの含有量が相対的に高いサプリメント用の抽出物を葛茎から得ることを課題とするものである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
葛茎からプエラリンを主体とするサプリメント用葛抽出物の製造方法であって、葛茎を粉砕して乾燥し、この乾燥粉砕物を水またはアルコール抽出を行い、更にアルカリ処理するプエラリンを主体とするサプリメント用葛抽出物の製造方法である。
より詳しくは、葛茎を粉砕して乾燥させた乾燥物を水またはアルコール抽出を行い、抽出後、濾布を用いて濾過し、固形分が約５０〜６０％になるまで抽出液を濃縮し、その後加熱乾燥して粉末とするサプリメント用葛抽出物の製造方法である。濃縮方法は加熱濃縮でもよく、また、乾燥方法は加熱乾燥以外の乾燥方法、例えば、凍結乾燥（フリーズドライ）や噴霧乾燥（スプレードライ）などの手段を採用することができる。
抽出物を得るためのアルコール抽出に使用できるアルコールは、低級アルコール、例えばメタノール、エタノール、プロパノール、ブタノールの単独又はこれらと水との混合物を用いることができる。
抽出時に超音波撹拌することによって抽出物の収率を挙げることができるので必要に応じて採用する。
本発明において抽出を行う葛茎の原材料は、破砕物、乾燥物、または、粉末にしたものから抽出処理を行うことができる。
【発明の効果】
【０００９】
葛茎を水またはアルコール抽出、更にアルカリ処理を行うことによって水またはアルコールによる抽出処理だけの葛抽出物に比較してプエラリンの含有量が１５〜２５％程度高いものを得ることができた。
水またはアルコール抽出で得られた抽出物を更にアルカリ処理することによってエストロゲン作用のあるイソフラボンの抽出物の含有量が相対的に少なくなるのでサプリメント用として好ましいプエラリンの含有量が多い抽出物を葛茎から得ることができる。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】（ａ）水またはエタノール抽出した葛茎抽出物中のプエラリンを含むイソフラボン類の割合を示すグラフ。（ｂ）アルカリ処理した葛茎抽出物中のプエラリンの割合を示すグラフ。
【図２】水抽出、Ｂｒｉｘ２０におけるイソフラボン類含有量とプエラリン比、プエラリン損失率のグラフ。
【図３】１０％エタノール抽出、Ｂｒｉｘ２０におけるイソフラボン類含有量とプエラリン比、及びプエラリン損失率のグラフ。
【図４】３０％エタノール抽出、Ｂｒｉｘ２０におけるイソフラボン類含有量とプエラリン比、及びプエラリン損失率のグラフ。
【図５】５０％エタノール抽出、Ｂｒｉｘ２０におけるイソフラボン類含有量とプエラリン比、及びプエラリン損失率のグラフ。
【図６】水抽出、Ｂｒｉｘ３０におけるイソフラボン類含有量とプエラリン比、及びプエラリン損失率のグラフ。
【図７】３０％エタノール抽出、Ｂｒｉｘ３０におけるイソフラボン類含有量とプエラリン比、及びプエラリン損失率のグラフ。
【図８】５０％エタノール抽出、Ｂｒｉｘ３０におけるイソフラボン類含有量とプエラリン比、及びプエラリン損失率のグラフ。
【図９】アルカリ加熱処理によるイソフラボン類含有量とプエラリン比、及びプエラリン損失率のグラフ。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
（１）水またはアルコール抽出
葛茎の粉砕物を乾燥した原材料に対してその重量の１０倍量の水またはアルコール溶液で抽出を行う。抽出溶媒として水の場合は温度８５℃〜９５℃の水、アルコール抽出の場合は、エタノール濃度１０％、３０％、５０％（Ｗ／Ｗ）の抽出液で抽出を実施した。得られた抽出物には、プエラリン（Ｐｕｅｒａｒｉｎ）、ダイゼイン（Ｄａｉｄｚｅｉｎ）、ダイジン（Ｄａｉｄｚｉｎ）などのイソフラボノイド又はその配糖体や、マロニルダイジン（Ｍａｌｏｎｙｌ  ｄａｉｄｚｉｎ）などのマロニルイソフラボン配糖体が含まれている。
抽出時間は、水による抽出の場合は２時間、エタノール抽出の場合は、常温で約１８〜２０時間で抽出をおこなった。得られた抽出物のイソフラボン類の抽出物における割合を図１（ａ）に、また、原材料に対するイソフラボン類の割合を図１（ｂ）に示す。
抽出物中のイソフラボン類を含めた各成分の定量は抽出物を高速液体クロマトグラフフィーによってプエラリンを含むイソフラボン類の同定をおこない、含有率を計算した。
【００１２】
図１に示されるように、水またはアルコール溶液で抽出を行う抽出方法で得られたプエラリン量は、抽出に使用した原材料の葛茎の抽出物の重量当たりではアルコール濃度が高くなるほどイソフラボン類の抽出率の上昇が認められた。原材料の葛茎の重量あたりでは３０％エタノールでの抽出量が多いことが認められた。
【００１３】
（２）アルカリ処理
前記の水またはアルコール溶液で抽出を行う抽出方法で抽出されたプエラリンを含むイソフラボン類の抽出物をアルカリで処理することにより抽出物中のイソフラボン類は徐々に破壊される。しかし、プエラリンは他のイソフラボン類と比較すると破壊される率が少ないという性質があるため、葛茎の抽出物をアルカリ処理することによって抽出物中のプエラリンの含有比率を高くすることができる。
プエラリンの含有比率を高めるための最適条件を検討するため、アルカリ処理によるプエラリンの抽出率に影響を与える要因として抽出温度、抽出時間、アルカリ濃度、及び原材料の葛茎のＢｒｉｘをパラメータとして検討した。その結果を図２〜図７の棒グラフで示す。
【００１４】
前記のアルカリ濃度及びＢｒｉｘの各要因がプレラリンの収率に与える影響を検討した結果、抽出処理時間については有意な差異が認められず、抽出時間はプエラリンの収率に影響を与える因子とはいえない。
プエラリンの抽出率について得られたデータを検討した結果、原材料の葛茎のＢｒｉｘが抽出率に最も大きく影響するものであると結論付けた。次いで、抽出率に影響するのはアルカリ濃度、抽出処理温度の順であった。
【００１５】
各要因の影響の度合いについては、アルカリ処理を行って得られたサンプルのイソフラボン類の量を測定し、総イソフラボン量に対するプエラリンの比（以下、プエラリン比）、及びプエラリンの損失率を求め、総イソフラボン量と損失率によって影響度を求め、プエラリン比を高くするための最適条件を検討した。
損失率は、アルカリ処理によって失われたプエラリン量のアルカリ処理前の抽出物中のプエラリン量に対する百分率であり、以下の式によるものである。
損失率＝１００-（アルカリ処理後のプエラリン量÷処理前のプエラリン量×１００）
プエラリン比とプエラリン損失率は図２〜図７のグラフにおいて折れ線で示している。
同グラフにおいて、プエラリン比がアルカリ処理によって５％以上増加し、かつ、プエラリン損失率２０％以下となったものについては棒グラフの基部を黒塗りとし、凡例として「判定」と示し、この条件がアルカリ処理の効果があるものと判断した。
【００１６】
アルカリ処理を行わない場合、プエラリン比は６０〜７０％であるが、水またはアルコールによる葛茎抽出物をアルカリ処理することによってプエラリン比を６５〜７５％に高めることができることが認められ、アルカリ処理によってプエラリン比を５％以上増加させることができた。
【００１７】
以上の結果から、実用的にはプエラリン損失率が２０％以下という条件で検討したところ、Ｂｒｉｘ２０では、アルカリ濃度０．６Ｎで７２時間以上の処理、Ｂｒｉｘ３０ではアルカリ濃度０．６Ｎ以上で２４時間以上の処理で最大のプエラリン含有率の抽出物が得られたことから好ましい抽出条件であると判断した。
【００１８】
原料の葛茎の糖度(Ｂｒｉｘ)とアルカリ処理におけるアルカリ濃度には強い相関関係があるため、Ｂｒｉｘが高いとより高いアルカリ濃度が必要となる。
Ｂｒｉｘ２０の場合、イソフラボン含有量を１０％とすると２０ｍｇ／ｍｌとなり、Ｂｒｉｘ３０の場合は３０ｍｇ／ｍｌとなる。
これらに対してそれぞれ水酸化ナトリウムが０．２４ｇ（０．６Ｎ）、０．４ｇ（１Ｎ）必要となる。これらのことから、アルカリ処理はイソフラボン１０ｍｇ当たり０．１２〜０．１３ｇのアルカリが必要となる。また、これらの処理を抽出と同時おこなうことも可能である。
【００１９】
図９のグラフは、アルカリ加熱処理の実施例の結果であり、以下の条件で抽出をおこなった。
葛茎乾粉砕燥物サンプル濃度：Ｂｒｉｘ３０
処理時間２、４、８時間
アルカリ濃度０．６、０．８、１Ｎ
図９のグラフによれば、アルカリ濃度が高いほど、また、抽出処理時間が長くなるにつれてプエラリン抽出量が増加することが認められた。
アルカリ濃度については有意な差異が認められたが、抽出処理時間については、有意差は認められなかった。
以上の結果から、常温による抽出では７２時間ほどの時間が必要であるが、抽出処理温度を１００℃とすることによって抽出時間を大幅に短縮することができた。
【要約】
【課題】葛茎抽出物中のプエラリン以外のイソフラボンの含有量を抑え、プエラリンを主体とし、プエラリンの含有量が相対的に高いサプリメント用に適した抽出物を葛茎から得る。
【解決手段】葛茎を粉砕、乾燥して水またはアルコール抽出を行い、アルカリ処理するプエラリンを主体とするサプリメント用葛抽出物の製造方であり、抽出後、濾布を用いて濾過し、固形分が約５０〜６０％になるまで抽出液を減圧加熱濃縮し、その後加熱乾燥して粉末とする方法であって、アルカリ処理することによってプエラリンの含有量が相対的に多いサプリメント用の抽出物が得られる。
【選択図】図３【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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