(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）
【化１】
0006664329.tif 000062
［式中、
ｎは、０又は１であり；
Ｘは、Ｏ又はＳであり；
Ｙは、ＣＯ基又はＣＨ２基又は結合であり；
Ｒ２及びＲ３は、独立して、Ｈ、アルキル基、シクロアルキル基、ヘテロアルキル基又はヘテロシクロアルキル基であり、前記基はいずれも場合により置換されていてもよく、あるいはＲ２とＲ３は一緒になって式（ＣＨ２）ｍの基を形成し、前記式中、ｍは２、３、４又は５であり；
Ｒ４は、Ｈ、アルキル基、シクロアルキル基、ヘテロアルキル基又はヘテロシクロアルキル基であり、前記基はいずれも場合により置換されていてもよく；
Ｒ５は、Ｈ、アルキル基、シクロアルキル基、ヘテロアルキル基又はヘテロシクロアルキル基であり、前記基はいずれも場合により置換されていてもよく；
Ｒ６は、Ｈ、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、ヘテロアルキル基、アラルキル基又はヘテロアラルキル基であり、前記基はいずれも場合により置換されていてもよく；
Ｒ７は、Ｈ、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、ヘテロアルキル基、アラルキル基又はヘテロアラルキル基であり、前記基はいずれも場合により置換されていてもよく；
Ｒ８は、Ｈ、アルキル基、ヘテロアルキル基、アラルキル基又はヘテロアラルキル基であり、前記基はいずれも場合により置換されていてもよく；
上記に加えて以下のいずれかであり、即ち、
Ｒ１は、以下の基：
【化２】
0006664329.tif 000063
0006664329.tif 000064
から選択され、式中、＊は式（Ｉ）の化合物との結合点を表し；
Ｒ９は、Ｈ、ＯＨ、ＳＨ、ＣＮ、ＮＨ２、ＮＯ２、ハロゲン、アルキル基、ヘテロアルキル基、アリール基、ヘテロアリール基、アリールオキシ基又はヘテロアリールオキシ基であり、前記基はいずれも場合により置換されていてもよく；
Ｒ１０は、ＯＨ、ＮＨ２、ＮＨＮＨ２、Ｏ−ＮＨ２、ヘテロアルキル基、ヘテロアリール基、アリールオキシ基、アラルキルオキシ基、ヘテロアラルキルオキシ基又はヘテロアリールオキシ基であり、前記基はいずれも場合により置換されていてもよく；
あるいは、
Ｒ１は、Ｈ、アルキル基又はヘテロアルキル基であり、前記基はいずれも場合により置換されていてもよく；
Ｒ９は、Ｈ、ＯＨ、ＳＨ、ＣＮ、ＮＨ２、ＮＯ２、ハロゲン、アルキル基、ヘテロアルキル基、アリール基、ヘテロアリール基、アリールオキシ基又はヘテロアリールオキシ基であり、前記基はいずれも場合により置換されていてもよく；
Ｒ１０は、以下の基：
【化３】
0006664329.tif 000065
0006664329.tif 000066
0006664329.tif 000067
0006664329.tif 000068
から選択され、式中、＊は式（Ｉ）の化合物との結合点を表し、又はＹが結合である場合には、Ｒ１０はヘテロアリール基であり；
あるいは、
Ｒ１は、Ｈ、アルキル基又はヘテロアルキル基であり、前記基はいずれも場合により置換されていてもよく；
Ｒ９は、以下の基：
【化４】
0006664329.tif 000069
0006664329.tif 000070
から選択され、式中、＊は式（Ｉ）の化合物との結合点を表し；
Ｒ１０は、ＯＨ、ＮＨ２、ＮＨＮＨ２、Ｏ−ＮＨ２、ヘテロアルキル基、ヘテロアリール基、アリールオキシ基、アラルキルオキシ基、ヘテロアラルキルオキシ基又はヘテロアリールオキシ基であり、前記基はいずれも場合により置換されていてもよい。］
の化合物又はその薬理学的に許容可能な塩、溶媒和物もしくは水和物。
【請求項２】
下式（ＩＩ）：
【化５】
0006664329.tif 000071
（式中、Ｒ１、Ｒ６、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０及びＸは、請求項１に定義した通りである。）を有する、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ６が、Ｃ１−６アルキル基、式−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨの基又は式ＣＨ２ＯＲ６１もしくはＣＨ２ＯＣＯＲ６２の基であり、前記式中、Ｒ６１はＣ１−６アルキル基であり、Ｒ６２は、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ２−Ｃ６アルケニル基、フェニル基又はＣＨ２−フェニル基である、請求項１又は２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ８が、Ｈ、アセチル基、−ＣＨ２ＯＣＨ３基又はＣ１−６アルキル基である、請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ１が、水素、メチル基又は式−ＣＯ−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ３の基であり；及び、Ｒ９が、Ｈ、ＯＨ、ＳＨ、Ｆ、ＣＮ、ＮＨ２、Ｐｈ、Ｍｅ、ＯＭｅ、ＣＦ３、ＯＡｃ、ＮＨＭｅ又はＮＭｅ２である、請求項１から４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ１が、水素、メチル基又は式−ＣＯ−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ３の基であり；及び、Ｒ１０が、ＯＨ、式Ｏ−Ｃ１−６アルキルの基、Ｏ−ＣＨ２−フェニル基又はテトラゾリル基である、請求項１から４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ９が、Ｈ、ＯＨ、ＳＨ、Ｆ、ＣＮ、ＮＨ２、Ｐｈ、Ｍｅ、ＯＭｅ、ＣＦ３、ＯＡｃ、ＮＨＭｅ又はＮＭｅ２であり；及び、Ｒ１０が、ＯＨ、式Ｏ−Ｃ１−６アルキルの基、Ｏ−ＣＨ２−フェニル基又はテトラゾリル基である、請求項１から４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ１が、水素、メチル基又はヘテロアルキル基であり；Ｒ９が、Ｈ、ＯＨ、ＳＨ、Ｆ、ＣＮ、ＮＨ２、Ｐｈ、Ｍｅ、ＯＭｅ、ＣＦ３、ＯＡｃ、ＮＨＭｅ又はＮＭｅ２であり；Ｙが結合であり；Ｒ１０がテトラゾリル基である、請求項１から４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項９】
下式（ＩＩＩ）：
【化６】
0006664329.tif 000072
（式中、ｎ、Ｘ、Ｒ１、Ｒ６、Ｒ８及びＲ９は、請求項１に定義した通りである。）を有する、請求項１、３及び４のいずれか一項に記載の化合物又はその薬理学的に許容可能な塩、溶媒和物もしくは水和物。
【請求項１０】
Ｒ１が、水素、メチル基又はヘテロアルキル基であり；
Ｒ６が、Ｃ１−６アルキル基又は式ＣＨ２ＯＲ６１もしくはＣＨ２ＯＣＯＲ６２の基であり、前記式中、Ｒ６１はＣ１−６アルキル基であり、Ｒ６２は、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ２−Ｃ６アルケニル基、フェニル基又はＣＨ２−フェニル基であり；
Ｒ８が、Ｈ、アセチル基、−ＣＨ２ＯＣＨ３基又はＣ１−６アルキル基であり；
Ｒ９が、Ｈ、ＯＨ、Ｆ、ＣＮ、ＮＨ２、Ｐｈ、Ｍｅ、ＯＭｅ、ＣＦ３、ＯＡｃ、ＮＨＭｅ又はＮＭｅ２であり；
ｎが０又は１であり；
ＸがＳである、請求項９に記載の化合物。
【請求項１１】
下式（ＩＶ）：
【化７】
0006664329.tif 000073
（式中、Ｘ、Ｒ１、Ｒ６、Ｒ８、Ｒ９及びＲ１０は、請求項１に定義した通りであり、Ｒ２はＣ１−６アルキル基であり、Ｒ３はＣ１−６アルキル基である。）を有する、請求項１及び３から７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１２】
以下の化合物：
【化８】
0006664329.tif 000074
0006664329.tif 000075
0006664329.tif 000076
0006664329.tif 000077
0006664329.tif 000078
0006664329.tif 000079
0006664329.tif 000080
0006664329.tif 000081
0006664329.tif 000082
0006664329.tif 000083
0006664329.tif 000084
0006664329.tif 000085
0006664329.tif 000086
0006664329.tif 000087
0006664329.tif 000088
0006664329.tif 000089
0006664329.tif 000090
から選択される、化合物。
【請求項１３】
癌の治療に使用するための又は癌の治療用医薬の製造に使用するための、請求項１から１２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１４】
キャリア又は標的指向性分子とのコンジュゲーションのための、請求項１から１３のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項１５】
前記標的指向性分子が、低分子、高分子及び生体分子から選択される、請求項１４に記載の化合物の使用。
【請求項１６】
前記生体分子が、抗体、タンパク質、ペプチド及び抗体断片から選択される、請求項１５に記載の化合物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は低分子、高分子、ペプチド、タンパク質、抗体、抗体断片等とのペイロードのコンジュゲーションに使用される多種多様なリンカー種を採用することができるため、多種多様なコンジュゲーション法を適用できるように、スペーサー部分で修飾された細胞毒性分子に関する。
【背景技術】
【０００２】
コンジュゲーションに使用される毒素類のうち、ドキソルビシンとその誘導体、ドラスタチンとその誘導体、メイタンシンとその誘導体、カリケアマイシンとその誘導体、アマニチンとその誘導体等の天然物に由来するものは官能基をもたないため、通常ではコンジュゲーションすることが非常に難しく、官能基を使用すると、生物活性が失われてしまう（Ｆ．Ｄｏｓｉｏ  ｅｔ  ａｌ．Ｔｏｘｉｎｓ  ２０１１，３，８４８−８８３とその引用文献）。これに対して、チューブリシンとその合成アナログであるサイトリシンには、カルボキシル基とヒドロキシル基の２個の官能基が元々存在し、Ｎ末端の第３級アミノ基からメチル基を除去することにより第３の官能基を使用することができる。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００３】
【非特許文献１】Ｆ．Ｄｏｓｉｏ  ｅｔ  ａｌ．Ｔｏｘｉｎｓ  ２０１１，３，８４８−８８３
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明の目的は種々の位置にスペーサー系をもつ新規な細胞毒性分子であって、当分野で公知の化学的結合法（ＢｉｏＰｈａｒｍ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ３２−３９，Ｄｅｃｅｍｂｅｒ  ２００３）又はトランスグルタミナーゼ、ソルターゼもしくは他の酵素を使用した酵素的結合等の種々のコンジュゲーション技術を使用することによりコンジュゲーションに直接使用できるもの、あるいは当分野で公知の広く記載されているリンカー系と併用できるものを提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明は式（Ｉ）：
【０００６】
【化１】
0006664329.tif 000002
の１種以上の化合物又はその薬理学的に許容可能な塩、溶媒和物もしくは水和物を提供し、上記式中、
ｎは０又は１であり；
ＸはＯ又はＳであり；
ＹはＣＯ基又はＣＨ２基又は結合であり；
Ｒ２及びＲ３は独立してＨ、アルキル基、シクロアルキル基、ヘテロアルキル基又はヘテロシクロアルキル基であり、前記基はいずれも場合により置換されていてもよく、あるいはＲ２とＲ３は一緒になって式（ＣＨ２）ｍの基を形成し、前記式中、ｍは２、３、４又は５であり；
Ｒ４はＨ、アルキル基、シクロアルキル基、ヘテロアルキル基又はヘテロシクロアルキル基であり、前記基はいずれも場合により置換されていてもよく；
Ｒ５はＨ、アルキル基、シクロアルキル基、ヘテロアルキル基又はヘテロシクロアルキル基であり、前記基はいずれも場合により置換されていてもよく；
Ｒ６はＨ、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、ヘテロアルキル基、アラルキル基又はヘテロアラルキル基であり、前記基はいずれも場合により置換されていてもよく；
Ｒ７はＨ、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、ヘテロアルキル基、アラルキル基又はヘテロアラルキル基であり、前記基はいずれも場合により置換されていてもよく；
Ｒ８はＨ、アルキル基、ヘテロアルキル基（例えば−ＣＯ−アルキル基）、アラルキル基又はヘテロアラルキル基であり、前記基はいずれも場合により置換されていてもよく；
上記に加えて以下のいずれかであり、即ち、
Ｒ１はＨ、ヘテロアルキル基又は式−Ｘ１−Ｌ１−Ａ１もしくは−Ｘ１−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｓ−Ｓ−Ｐｙ（式中、Ｐｙは２−ピリジル基である。）の基であり；
Ｒ９はＨ、ＯＨ、ＳＨ、ＣＮ、ＮＨ２、ＮＯ２、ハロゲン、アルキル基、ヘテロアルキル基（例えばアルキルオキシ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基又はＯ−ＣＯ−アルキル基）、アリール基（例えばフェニル基）、ヘテロアリール基、アリールオキシ基又はヘテロアリールオキシ基であり、前記基はいずれも場合により置換されていてもよく；
Ｒ１０はＯＨ、ＮＨ２、ＮＨＮＨ２、Ｏ−ＮＨ２、ヘテロアルキル基（例えばアルキルオキシ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、Ｏ−アルキルアミノ基、Ｏ−ジアルキルアミノ基又はＯ−ＣＯ−アルキル基）、ヘテロアリール基、アリールオキシ基、アラルキルオキシ基、ヘテロアラルキルオキシ基又はヘテロアリールオキシ基であり、前記基はいずれも場合により置換されていてもよく；
あるいは、
Ｒ１はＨ、アルキル基又はヘテロアルキル基であり、前記基はいずれも場合により置換されていてもよく；
Ｒ９はＨ、ＯＨ、ＳＨ、ＣＮ、ＮＨ２、ＮＯ２、ハロゲン、アルキル基、ヘテロアルキル基（例えばアルキルオキシ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基又はＯ−ＣＯ−アルキル基）、アリール基（例えばフェニル基）、ヘテロアリール基、アリールオキシ基又はヘテロアリールオキシ基であり、前記基はいずれも場合により置換されていてもよく；
Ｒ１０は式−Ｘ２−Ｌ２−Ａ２もしくは−Ｘ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｓ−Ｓ−Ｐｙ（式中、Ｐｙは２−ピリジル基である。）の基であり、又はＹが結合である場合にはヘテロアリール基であり；
あるいは、
Ｒ１はＨ、アルキル基又はヘテロアルキル基であり、前記基はいずれも場合により置換されていてもよく；
Ｒ９は式−Ｘ３−Ｌ３−Ａ３又は−Ｘ３−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｓ−Ｓ−Ｐｙ（式中、Ｐｙは２−ピリジル基である。）の基であり；
Ｒ１０はＯＨ、ＮＨ２、ＮＨＮＨ２、Ｏ−ＮＨ２、ヘテロアルキル基（例えばアルキルオキシ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、Ｏ−アルキルアミノ基、Ｏ−ジアルキルアミノ基又はＯ−ＣＯ−アルキル基）、ヘテロアリール基、アリールオキシ基、アラルキルオキシ基、ヘテロアラルキルオキシ基又はヘテロアリールオキシ基であり、前記基はいずれも場合により置換されていてもよく；
Ｘ１は結合、又は−ＣＯ−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＮＨ−もしくは−ＮＨＣＯ−Ｏ−であり；
Ｘ２は−ＮＨ−ＮＨ−ＣＯ−Ｏ−、−ＮＨ−ＮＨ−ＣＯ−Ｓ−、−ＮＨ−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ−、−ＮＨ−ＣＯ−、−ＮＨ−ＮＨ−、−Ｏ−、−Ｏ−ＮＨ−、−Ｓ−又は−ＮＨ−であり；
Ｘ３は−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−Ｏ−ＮＨ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＨ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＨ−ＣＯ−、−ＮＨ−ＣＯ−Ｏ−、−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ−、−ＮＨＮＨＣＯ−Ｏ−、−ＮＨＮＨＣＯ−Ｓ−又は−ＮＨＮＨＣＯ−ＮＨ−であり；
Ｌ１は分子鎖中の炭素原子数が１〜２０（好ましくは１〜１２、特に好ましくは１〜７）であり、場合により置換された直鎖アルキレン基又は分子鎖中の炭素原子数が１〜５０（例えば１〜２０、好ましくは１〜１２、特に好ましくは１〜７）であり、１〜２０個（例えば１〜１５個、好ましくは１〜１０個、特に好ましくは１〜５個）の酸素、硫黄及び／又は窒素原子（好ましくは酸素及び／又は窒素原子）を含み、場合により置換された直鎖ヘテロアルキレン基であり、前記アルキレン基又はヘテロアルキレン基は好ましくは場合により１個以上のアルキル基、ヘテロアルキル基、＝Ｏ基、ＯＨ基又はＮＨ２基で置換されていてもよく、前記直鎖アルキレン基又はヘテロアルキレン基はその分子鎖中に１個以上（特に１又は２個）のアリーレン基又はヘテロアリーレン基を含んでいてもよく；
Ｌ２は分子鎖中の炭素原子数が１〜２０（好ましくは１〜１２、特に好ましくは１〜７）であり、場合により置換された直鎖アルキレン基又は分子鎖中の炭素原子数が１〜５０（例えば１〜２０、好ましくは１〜１２、特に好ましくは１〜７）であり、１〜２０個（例えば１〜１５個、好ましくは１〜１０個、特に好ましくは１〜５個）の酸素、硫黄及び／又は窒素原子（好ましくは酸素及び／又は窒素原子）を含み、場合により置換された直鎖ヘテロアルキレン基であり、前記アルキレン基又はヘテロアルキレン基は好ましくは場合により１個以上のアルキル基、ヘテロアルキル基、＝Ｏ基、ＯＨ基又はＮＨ２基で置換されていてもよく、前記直鎖アルキレン基又はヘテロアルキレン基はその分子鎖中に１個以上（特に１又は２個）のアリーレン基又はヘテロアリーレン基を含んでいてもよく；
Ｌ３は分子鎖中の炭素原子数が１〜２０（好ましくは１〜１２、特に好ましくは１〜７）であり、場合により置換された直鎖アルキレン基又は分子鎖中の炭素原子数が１〜５０（例えば１〜２０、好ましくは１〜１２、特に好ましくは１〜７）であり、１〜２０個（例えば１〜１５個、好ましくは１〜１０個、特に好ましくは１〜５個）の酸素、硫黄及び／又は窒素原子（好ましくは酸素及び／又は窒素原子）を含み、場合により置換された直鎖ヘテロアルキレン基であり、前記アルキレン基又はヘテロアルキレン基は好ましくは場合により１個以上のアルキル基、ヘテロアルキル基、＝Ｏ基、ＯＨ基又はＮＨ２基で置換されていてもよく、前記直鎖アルキレン基又はヘテロアルキレン基はその分子鎖中に１個以上（特に１又は２個）のアリーレン基又はヘテロアリーレン基を含んでいてもよく；
Ａ１はＯＨ、ＳＨ、ＮＨ２、Ｎ３、ＮＨ−Ｃ１−６アルキル、式−ＮＨ−ＣＯ−ＣＨ２−ＮＨ−（ＣＯ−ＣＨ２−ＮＨ−）ｗＣＯ−ＣＨ２−ＮＨ２の基、Ｃ２−Ｃ６アルキニル基、場合により置換されたヘテロアリール基、場合により置換されたヘテロシクロアルキル基、場合により置換されたヘテロアルキルシクロアルキル基、場合により置換されたヘテロアラルキル基、場合により置換されたアリール基又は場合により置換されたアラルキル基であり、上記式中、ｗは１〜５の整数であり；
Ａ２はＯＨ、ＳＨ、ＮＨ２、Ｎ３、ＮＨ−Ｃ１−６アルキル、式−ＮＨ−ＣＯ−ＣＨ２−ＮＨ−（ＣＯ−ＣＨ２−ＮＨ−）ｗＣＯ−ＣＨ２−ＮＨ２の基、Ｃ２−Ｃ６アルキニル基、場合により置換されたヘテロアリール基、場合により置換されたヘテロシクロアルキル基、場合により置換されたヘテロアルキルシクロアルキル基、場合により置換されたヘテロアラルキル基、場合により置換されたアリール基又は場合により置換されたアラルキル基であり、上記式中、ｗは１〜５の整数であり；
Ａ３はＯＨ、ＳＨ、ＮＨ２、Ｎ３、ＮＨ−Ｃ１−６アルキル、式−ＮＨ−ＣＯ−ＣＨ２−ＮＨ−（ＣＯ−ＣＨ２−ＮＨ−）ｗＣＯ−ＣＨ２−ＮＨ２の基、Ｃ２−Ｃ６アルキニル基、場合により置換されたヘテロアリール基、場合により置換されたヘテロシクロアルキル基、場合により置換されたヘテロアルキルシクロアルキル基、場合により置換されたヘテロアラルキル基、場合により置換されたアリール基又は場合により置換されたアラルキル基であり、上記式中、ｗは１〜５の整数である。
【図面の簡単な説明】
【０００７】
【図１】ＳＫ−ＢＲ−３ヒト乳癌細胞株に対するＴＡＭ３７５ＡＤＣ−１及びＴＡＭ３７５ＡＤＣ−２のインビトロ細胞毒性活性の用量反応曲線を示す。
【発明を実施するための形態】
【０００８】
アルキルなる表記は好ましくは炭素原子数１〜２０、より好ましくは炭素原子数１〜１２、特に炭素原子数１〜６（例えば１、２、３又は４）の飽和の直鎖又は分岐鎖炭化水素基を意味し、例えばメチル（Ｍｅ）、エチル、プロピル、イソプロピル、イソブチル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、２，２−ジメチルプロピル、２−メチルブチル、ｎ−ヘキシル、２，２−ジメチルブチル又は２，３−ジメチルブチルが挙げられる。
【０００９】
アルケニル及びアルキニルなる表記は好ましくは炭素原子数２〜２０、より好ましくは炭素原子数２〜１２、特に炭素原子数２〜６（例えば２、３又は４）の少なくとも部分的に不飽和の直鎖又は分岐鎖炭化水素基を意味し、例えばエテニル基、アリル基、アセチレニル基、プロパルギル基、イソプレニル基又はヘキサ−２−エニル基が挙げられる。好ましくは、アルケニル基は１又は２個（特に好ましくは１個）の二重結合をもち、アルキニル基は１又は２個（特に好ましくは１個）の三重結合をもつ。
【００１０】
更に、アルキル、アルケニル及びアルキニルなる用語は１個以上の水素原子（例えば１、２又は３個の水素原子）をハロゲン原子（好ましくはＦ又はＣｌ）で置換えた基を意味し、例えば２，２，２−トリクロロエチル基やトリフルオロメチル基が挙げられる。
【００１１】
ヘテロアルキルなる表記は１個以上（好ましくは１、２、３、４又は５個）の炭素原子を酸素原子、窒素原子、リン原子、ホウ素原子、セレン原子、ケイ素原子もしくは硫黄原子（好ましくは酸素原子、硫黄原子もしくは窒素原子）又はＳＯ基もしくはＳＯ２基で置換えたアルキル基、アルケニル基又はアルキニル基を意味する。ヘテロアルキルなる表記は更にカルボン酸又はカルボン酸から誘導される基を意味し、例えばアシル（アルキル−ＣＯ−）、アシルアルキル、アルコキシカルボニル、アシルオキシ、アシルオキシアルキル、カルボキシアルキルアミド又はアルコキシカルボニルオキシが挙げられる。更に、ヘテロアルキルなる用語は１個以上の水素原子をハロゲン原子（好ましくはＦ又はＣｌ）で置換えた基を意味する。
【００１２】
好ましくは、ヘテロアルキル基は１〜１２個の炭素原子と、酸素、窒素及び硫黄（特に酸素及び窒素）から選択される１〜４個のヘテロ原子を含む。特に好ましくは、ヘテロアルキル基は１〜６個（例えば１、２、３又は４個）の炭素原子と、酸素、窒素及び硫黄（特に酸素及び窒素）から選択される１、２又は３個（特に１又は２個）のヘテロ原子を含む。
【００１３】
Ｃ１−Ｃ８ヘテロアルキルなる用語は１〜８個の炭素原子と、Ｏ、Ｓ及び／又はＮ（特にＯ及び／又はＮ）から選択される１、２又は３個のヘテロ原子を含むヘテロアルキル基を意味する。Ｃ１−Ｃ６ヘテロアルキルなる用語は１〜６個の炭素原子と、Ｏ、Ｓ及び／又はＮ（特にＯ及び／又はＮ）から選択される１、２又は３個のヘテロ原子を含むヘテロアルキル基を意味する。更に、ヘテロアルキルなる用語は１個以上の水素原子をハロゲン原子（好ましくはＦ又はＣｌ）で置換えた基を意味する。
【００１４】
ヘテロアルキル基の例は式：Ｒａ−Ｏ−Ｙａ−、Ｒａ−Ｓ−Ｙａ−、Ｒａ−Ｎ（Ｒｂ）−Ｙａ−、Ｒａ−ＣＯ−Ｙａ−、Ｒａ−Ｏ−ＣＯ−Ｙａ−、Ｒａ−ＣＯ−Ｏ−Ｙａ−、Ｒａ−ＣＯ−Ｎ（Ｒｂ）−Ｙａ−、Ｒａ−Ｎ（Ｒｂ）−ＣＯ−Ｙａ−、Ｒａ−Ｏ−ＣＯ−Ｎ（Ｒｂ）−Ｙａ−、Ｒａ−Ｎ（Ｒｂ）−ＣＯ−Ｏ−Ｙａ−、Ｒａ−Ｎ（Ｒｂ）−ＣＯ−Ｎ（Ｒｃ）−Ｙａ−、Ｒａ−Ｏ−ＣＯ−Ｏ−Ｙａ−、Ｒａ−Ｎ（Ｒｂ）−Ｃ（＝ＮＲｄ）−Ｎ（Ｒｃ）−Ｙａ−、Ｒａ−ＣＳ−Ｙａ−、Ｒａ−Ｏ−ＣＳ−Ｙａ−、Ｒａ−ＣＳ−Ｏ−Ｙａ−、Ｒａ−ＣＳ−Ｎ（Ｒｂ）−Ｙａ−、Ｒａ−Ｎ（Ｒｂ）−ＣＳ−Ｙａ−、Ｒａ−Ｏ−ＣＳ−Ｎ（Ｒｂ）−Ｙａ−、Ｒａ−Ｎ（Ｒｂ）−ＣＳ−Ｏ−Ｙａ−、Ｒａ−Ｎ（Ｒｂ）−ＣＳ−Ｎ（Ｒｃ）−Ｙａ−、Ｒａ−Ｏ−ＣＳ−Ｏ−Ｙａ−、Ｒａ−Ｓ−ＣＯ−Ｙａ−、Ｒａ−ＣＯ−Ｓ−Ｙａ−、Ｒａ−Ｓ−ＣＯ−Ｎ（Ｒｂ）−Ｙａ−、Ｒａ−Ｎ（Ｒｂ）−ＣＯ−Ｓ−Ｙａ−、Ｒａ−Ｓ−ＣＯ−Ｏ−Ｙａ−、Ｒａ−Ｏ−ＣＯ−Ｓ−Ｙａ−、Ｒａ−Ｓ−ＣＯ−Ｓ−Ｙａ−、Ｒａ−Ｓ−ＣＳ−Ｙａ−、Ｒａ−ＣＳ−Ｓ−Ｙａ−、Ｒａ−Ｓ−ＣＳ−Ｎ（Ｒｂ）−Ｙａ−、Ｒａ−Ｎ（Ｒｂ）−ＣＳ−Ｓ−Ｙａ−、Ｒａ−Ｓ−ＣＳ−Ｏ−Ｙａ−、Ｒａ−Ｏ−ＣＳ−Ｓ−Ｙａ−の基であり、式中、Ｒａは水素原子、Ｃ１−Ｃ６アルキル基、Ｃ２−Ｃ６アルケニル基又はＣ２−Ｃ６アルキニル基であり；Ｒｂは水素原子、Ｃ１−Ｃ６アルキル基、Ｃ２−Ｃ６アルケニル基又はＣ２−Ｃ６アルキニル基であり；Ｒｃは水素原子、Ｃ１−Ｃ６アルキル基、Ｃ２−Ｃ６アルケニル基又はＣ２−Ｃ６アルキニル基であり；Ｒｄは水素原子、Ｃ１−Ｃ６アルキル基、Ｃ２−Ｃ６アルケニル基又はＣ２−Ｃ６アルキニル基であり、Ｙａは直接結合、Ｃ１−Ｃ６アルキレン基、Ｃ２−Ｃ６アルケニレン基又はＣ２−Ｃ６アルキニレン基であり、各ヘテロアルキル基は少なくとも１個の炭素原子を含み、１個以上の水素原子をハロゲン（例えばフッ素又は塩素）原子で置換えてもよい。
【００１５】
ヘテロアルキル基の具体例はメトキシ、トリフルオロメトキシ、エトキシ、ｎ−プロピルオキシ、イソプロピルオキシ、ｔｅｒｔ−ブチルオキシ、メトキシメチル、エトキシメチル、−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ２ＣＨ２ＳＨ、−ＣＨ２ＳＨ、−ＣＨ２ＣＨ２ＳＳＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２、−ＣＨ２ＣＨ２ＳＳＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨ、メトキシエチル、メチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、イソプロピルエチルアミノ、メチルアミノメチル、エチルアミノメチル、ジイソプロピルアミノエチル、エノールエーテル、ジメチルアミノメチル、ジメチルアミノエチル、アセチル、プロピオニル、ブチリルオキシ、アセチルオキシ、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、Ｎ−エチル−Ｎ−メチルカルバモイル又はＮ−メチルカルバモイルである。ヘテロアルキル基のその他の例はニトリル基、イソニトリル基、シアネート基、チオシアネート基、イソシアネート基、イソチオシアネート基及びアルキルニトリル基である。
【００１６】
シクロアルキルなる表記は１個以上（好ましくは１又は２個）の環を含み、環炭素原子数３〜１４、好ましくは環炭素原子数３〜１０（特に３、４、５、６又は７）である飽和又は部分不飽和（例えばシクロアルケニル基）環状基を意味する。シクロアルキルなる表記は更に１個以上の水素原子をフッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子、ＯＨ基、＝Ｏ基、ＳＨ基、＝Ｓ基、ＮＨ２基、＝ＮＨ基、Ｎ３基又はＮＯ２基で置換えた基を意味し、従って、例としては、例えばシクロヘキサノン、２−シクロヘキセノン又はシクロペンタノン等の環状ケトンが挙げられる。シクロアルキル基のその他の具体例はシクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、スピロ［４．５］デカニル基、ノルボルニル基、シクロヘキシル基、シクロペンテニル基、シクロヘキサジエニル基、デカリニル基、ビシクロ［４．３．０］ノニル基、テトラリン基、シクロペンチルシクロヘキシル基、フルオロシクロヘキシル基又はシクロヘキサ−２−エニル基である。
【００１７】
ヘテロシクロアルキルなる表記は上記定義によるシクロアルキル基の１個以上（好ましくは１、２又は３個）の環炭素原子を各々独立して酸素原子、窒素原子、ケイ素原子、セレン原子、リン原子もしくは硫黄原子（好ましくは酸素原子、硫黄原子もしくは窒素原子）又はＳＯ基もしくはＳＯ２基で置換えたものを意味する。ヘテロシクロアルキル基は（好ましくはＣ、Ｏ、Ｎ及びＳから選択される）３〜１０個（特に３、４、５、６又は７個）の環原子を含む環を１又は２個含むことが好ましい。ヘテロシクロアルキルなる表記は更にフッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子、ＯＨ基、＝Ｏ基、ＳＨ基、＝Ｓ基、ＮＨ２基、＝ＮＨ基、Ｎ３基又はＮＯ２基で置換された基を意味する。例はピペリジル基、プロリニル基、イミダゾリジニル基、ピペラジニル基、モルホリニル基、ウロトロピニル基、ピロリジニル基、テトラヒドロチオフェニル基、テトラヒドロピラニル基、テトラヒドロフリル基又は２−ピラゾリニル基であり、更にラクタム、ラクトン、環状イミド及び環状酸無水物も挙げられる。
【００１８】
アルキルシクロアルキルなる表記は上記定義によるシクロアルキル基とアルキル基、アルケニル基又はアルキニル基を併有する基を意味し、例えばアルキルシクロアルキル基、シクロアルキルアルキル基、アルキルシクロアルケニル基、アルケニルシクロアルキル基及びアルキニルシクロアルキル基が挙げられる。アルキルシクロアルキル基は環炭素原子数３〜１０（特に３、４、５、６又は７）の環系を１又は２個含むシクロアルキル基と、炭素原子数１又は２〜６のアルキル基、アルケニル基又はアルキニル基を１又は２個含むものが好ましい。
【００１９】
ヘテロアルキルシクロアルキルなる表記は上記定義によるアルキルシクロアルキル基の１個以上（好ましくは１、２又は３個）の炭素原子を各々独立して酸素原子、窒素原子、ケイ素原子、セレン原子、リン原子又は硫黄原子（好ましくは酸素原子、硫黄原子又は窒素原子）で置換えたものを意味する。ヘテロアルキルシクロアルキル基は環原子数３〜１０（特に３、４、５、６又は７）の環系を１又は２個と、炭素原子数１又は２〜６のアルキル基、アルケニル基、アルキニル基又はヘテロアルキル基を１又は２個含むものが好ましい。このような基の例はアルキルヘテロシクロアルキル、アルキルヘテロシクロアルケニル、アルケニルヘテロシクロアルキル、アルキニルヘテロシクロアルキル、ヘテロアルキルシクロアルキル、ヘテロアルキルヘテロシクロアルキル及びヘテロアルキルヘテロシクロアルケニルであり、環状基は飽和でもよいし、モノ不飽和、ジ不飽和又はトリ不飽和でもよい。
【００２０】
アリール又はＡｒなる表記は環炭素原子数６〜１４、好ましくは環炭素原子数６〜１０（特に６）の環を１個以上含む芳香族基を意味する。アリール（又はＡｒ）なる表記は更にフッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子、ＯＨ基、ＳＨ基、ＮＨ２基、Ｎ３基又はＮＯ２基で置換された基を意味する。例はフェニル基、ナフチル基、ビフェニル基、２−フルオロフェニル基、アニリニル基、３−ニトロフェニル基又は４−ヒドロキシフェニル基である。
【００２１】
ヘテロアリールなる表記は環原子数５〜１４、好ましくは５〜１０（特に５又は６）の環を１個以上含み、更に１個以上（好ましくは１、２、３又は４個）の酸素、窒素、リン又は硫黄環原子（好ましくはＯ、Ｓ又はＮ）を含む芳香族基を意味する。ヘテロアリールなる表記は更にフッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子、ＯＨ基、ＳＨ基、Ｎ３基、ＮＨ２基又はＮＯ２基で置換された基を意味する。例はピリジル基（例えば４−ピリジル基）、イミダゾリル基（例えば２−イミダゾリル基）、フェニルピロリル基（例えば３−フェニルピロリル基）、チアゾリル基、イソチアゾリル基、１，２，３−トリアゾリル基、１，２，４−トリアゾリル基、オキサジアゾリル基、チアジアゾリル基、インドリル基、インダゾリル基、テトラゾリル基、ピラジニル基、ピリミジニル基、ピリダジニル基、オキサゾリル基、イソオキサゾリル基、トリアゾリル基、テトラゾリル基、イソオキサゾリル基、インダゾリル基、インドリル基、ベンゾイミダゾリル基、ベンゾオキサゾリル基、ベンゾイソオキサゾリル基、ベンゾチアゾリル基、ピリダジニル基、キノリニル基、イソキノリニル基、ピロリル基、プリニル基、カルバゾリル基、アクリジニル基、ピリミジル基、２，３’−ビフリル基、ピラゾリル基（例えば３−ピラゾリル基）及びイソキノリニル基である。
【００２２】
アラルキルなる表記は上記定義によるアリール基とアルキル基、アルケニル基、アルキニル基及び／又はシクロアルキル基を併有する基を意味し、例えば、アリールアルキル基、アリールアルケニル基、アリールアルキニル基、アリールシクロアルキル基、アリールシクロアルケニル基、アルキルアリールシクロアルキル基及びアルキルアリールシクロアルケニル基が挙げられる。アラルキルの具体例はトルエン、キシレン、メシチレン、スチレン、ベンジルクロリド、ｏ−フルオロトルエン、１Ｈ−インデン、テトラリン、ジヒドロナフタレン、インダノン、フェニルシクロペンチル、クメン、シクロヘキシルフェニル、フルオレン及びインダンである。アラルキル基は炭素原子数６〜１０の芳香環系（環数１又は２）を１又は２個と、炭素原子数１もしくは２〜６のアルキル基、アルケニル基及び／もしくはアルキニル基を１もしくは２個並びに／又は環炭素原子数５もしくは６のシクロアルキル基を１個含むものが好ましい。
【００２３】
ヘテロアラルキルなる表記は上記定義によるアラルキル基の１個以上（好ましくは１、２、３又は４個）の炭素原子を各々独立して酸素原子、窒素原子、ケイ素原子、セレン原子、リン原子、ホウ素原子又は硫黄原子（好ましくは酸素原子、硫黄原子又は窒素原子）で置換えたものを意味し、即ち夫々上記定義によるアリール基及び／又はヘテロアリール基と、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基及び／又はヘテロアルキル基及び／又はシクロアルキル基及び／又はヘテロシクロアルキル基を併有する基を意味する。ヘテロアラルキル基は環炭素原子数５又は６〜１０の芳香環系（環数１又は２）を１又は２個と、炭素原子数１もしくは２〜６のアルキル基、アルケニル基及び／もしくはアルキニル基を１もしくは２個並びに／又は環炭素原子数５もしくは６のシクロアルキル基を１個含み、これらの炭素原子数の１、２、３又は４を酸素原子、硫黄原子又は窒素原子で置換えたものが好ましい。
【００２４】
例はアリールヘテロアルキル基、アリールヘテロシクロアルキル基、アリールヘテロシクロアルケニル基、アリールアルキルヘテロシクロアルキル基、アリールアルケニルヘテロシクロアルキル基、アリールアルキニルヘテロシクロアルキル基、アリールアルキルヘテロシクロアルケニル基、ヘテロアリールアルキル基、ヘテロアリールアルケニル基、ヘテロアリールアルキニル基、ヘテロアリールヘテロアルキル基、ヘテロアリールシクロアルキル基、ヘテロアリールシクロアルケニル基、ヘテロアリールヘテロシクロアルキル基、ヘテロアリールヘテロシクロアルケニル基、ヘテロアリールアルキルシクロアルキル基、ヘテロアリールアルキルヘテロシクロアルケニル基、ヘテロアリールヘテロアルキルシクロアルキル基、ヘテロアリールヘテロアルキルシクロアルケニル基及びヘテロアリールヘテロアルキルヘテロシクロアルキル基であり、環状基は飽和でもよいし、モノ不飽和、ジ不飽和又はトリ不飽和でもよい。具体例はテトラヒドロイソキノリニル基、ベンゾイル基、２−エチルインドリル基、３−エチルインドリル基、４−メチルピリジノ基、２−メトキシフェニル基、３−メトキシフェニル基、４−メトキシフェニル基、４−エトキシフェニル基、２−カルボキシフェニルアルキル基、３−カルボキシフェニルアルキル基又は４−カルボキシフェニルアルキル基である。
【００２５】
既述した通り、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アルキルシクロアルキル、ヘテロアルキルシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル及びヘテロアラルキルなる表記はフッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子、ＯＨ基、＝Ｏ基、ＳＨ基、＝Ｓ基、ＮＨ２基、＝ＮＨ基、Ｎ３基又はＮＯ２基で置換された基も意味する。
【００２６】
「場合により置換された」なる用語は特に場合によりフッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子、ＯＨ基、＝Ｏ基、ＳＨ基、＝Ｓ基、ＮＨ２基、＝ＮＨ基、Ｎ３基又はＮＯ２基で置換された基を意味する。この用語は更に好ましくは、非置換のＣ１−Ｃ６アルキル基、Ｃ２−Ｃ６アルケニル基、Ｃ２−Ｃ６アルキニル基もしくはＣ１−Ｃ６ヘテロアルキル基、又は環原子数６もしくは１０のアリール基、又は環原子数５もしくは６〜９もしくは１０のヘテロアリール基で単独又は付加的に置換されていてもよい基を意味する。
【００２７】
ハロゲンなる用語は好ましくはＦ、Ｃｌ、Ｂｒ又はＩを意味する。
【００２８】
好ましい実施形態によると、本願に記載する全てのアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、ヘテロアルキル基、アリール基、ヘテロアリール基、シクロアルキル基、ヘテロシクロアルキル基、アルキルシクロアルキル基、ヘテロアルキルシクロアルキル基、アラルキル基及びヘテロアラルキル基は場合により置換されていてもよい。
【００２９】
アリール基、ヘテロアリール基、シクロアルキル基、アルキルシクロアルキル基、ヘテロアルキルシクロアルキル基、ヘテロシクロアルキル基、アラルキル基又はヘテロアラルキル基が２個以上の環を含む場合には、これらの環は単結合又は二重結合により相互に結合していてもよいし、これらの環は縮合していてもよい。
【００３０】
保護基は当業者に公知であり、例えばＰ．Ｊ．Ｋｏｃｉｅｎｓｋｉ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ，Ｇｅｏｒｇ  Ｔｈｉｅｍｅ  Ｖｅｒｌａｇ，Ｓｔｕｔｔｇａｒｔ，１９９４及びＴ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ，Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９９に記載されている。広く知られているアミノ保護基は例えばｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）、ｔ−ブチルジメチルシリル（ＴＢＳ）、ベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ、Ｚ）、ベンジル（Ｂｎ）、ベンゾイル（Ｂｚ）、フルオレニルメチルオキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）、アリルオキシカルボニル（Ａｌｌｏｃ）、トリエチルシリル（ＴＥＳ）、トリクロロエチルオキシカルボニル（Ｔｒｏｃ）、アセチル又はトリフルオロアセチルである。
【００３１】
式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）及び（ＩＶ）の化合物はその置換パターンに応じて複数のキラル中心を含んでいてもよい。本発明は明確に定義されている全てのエナンチオ異性体及びジアステレオ異性体とあらゆる比のその混合物に関する。また、本発明は一般式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）及び（ＩＶ）の化合物の全てのシス／トランス異性体とその混合物に関する。また、本発明は一般式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）及び（ＩＶ）の化合物の全ての互変異性体に関する。式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）及び（ＩＶ）の化合物は天然に存在するチューブリシンＡと同一の立体配置をもつことが好ましい。
【００３２】
好ましくは、Ｒ２はＨ又はＣ１−６アルキル基である。
【００３３】
更に好ましくは、Ｒ３はＨ又はＣ１−６アルキル基である。
【００３４】
特に好ましくは、Ｒ２とＲ３は一緒になって式（ＣＨ２）ｍの基を形成し、式中、ｍは３又は４である。特に好ましくは、ｍは４である。
【００３５】
更に好ましくは、Ｒ４は水素である。
【００３６】
また、好ましくは、Ｒ５はＣ１−６アルキル基である。特に好ましくは、Ｒ５はイソブチル基である。
【００３７】
更に好ましくは、Ｒ７はＣ１−６アルキル基である。特に好ましくは、Ｒ７はイソプロピル基である。
【００３８】
また、好ましくは、ｎは１である。
【００３９】
更に好ましくは、ＹはＣＯ基又はＣＨ２基（特にＣＯ基）である。
【００４０】
更に式（ＩＩ）：
【００４１】
【化２】
0006664329.tif 000003
の化合物又はその薬理学的に許容可能な塩、溶媒和物もしくは水和物が好ましく、式中、Ｒ１、Ｒ６、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０及びＸは式（Ｉ）の化合物について上記に定義した通りである。
【００４２】
式（Ｉ）及び／又は（ＩＩ）の化合物の好ましい実施形態は以下の通りである。
【００４３】
好ましくは、Ｒ６はＣ１−６アルキル基又はＣ１−８ヘテロアルキル基である。
【００４４】
より好ましくは、Ｒ６はＣ１−６アルキル基、式−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨの基又は式ＣＨ２ＯＲ６１もしくはＣＨ２ＯＣＯＲ６２の基であり、前記式中、Ｒ６１はＣ１−６アルキル基であり、Ｒ６２はＣ１−６アルキル基、Ｃ２−Ｃ６アルケニル基、フェニル基又はＣＨ２−フェニル基である。
【００４５】
特に好ましくは、Ｒ６はＣ１−６アルキル基、式−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ１−６アルキルの基、式−ＣＨ２−Ｏ−ＣＯ−Ｃ１−６アルキルの基又は式−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨの基である。
【００４６】
最も好ましくは、Ｒ６はＣ１−Ｃ６アルキル基（特に式−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３の基）である。
【００４７】
また、好ましくは、Ｒ８はＨ、アセチル基（−ＣＯ−ＣＨ３）、−ＣＨ２ＯＣＨ３基又はＣ１−６アルキル基である。
【００４８】
特に好ましくは、Ｒ８はＣ１−６アルキル基（特に式−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３の基）である。
【００４９】
更に好ましくは、ＸはＳである。
【００５０】
更に好ましくは、Ｒ１が式−Ｘ１−Ｌ１−Ａ１又は−Ｘ１−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｓ−Ｓ−Ｐｙの基以外のものである場合には、Ｒ１は水素、メチル基又は式−ＣＯ−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ３の基であり、特に好ましくは水素又はメチル基であり、最も好ましくはメチル基である。
【００５１】
別の好ましい実施形態によると、Ｒ１はヘテロアルキル基（特に式−ＣＯ−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ３の基）である。
【００５２】
また、好ましくは、Ｒ９が式−Ｘ３−Ｌ３−Ａ３又は−Ｘ３−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｓ−Ｓ−Ｐｙの基以外のものである場合には、Ｒ９はＨ、ＯＨ、ＳＨ、Ｆ、ＣＮ、ＮＨ２、Ｐｈ、Ｍｅ、ＯＭｅ、ＣＦ３、ＯＡｃ、ＮＨＭｅ又はＮＭｅ２であり、特にＨ、ＯＨ又はＦである。
【００５３】
また、好ましくは、Ｒ１０が式−Ｘ２−Ｌ２−Ａ２又は−Ｘ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｓ−Ｓ−Ｐｙの基以外のものである場合には、Ｒ１０はＯＨ、式Ｏ−Ｃ１−６アルキルの基、Ｏ−ＣＨ２−フェニル基又はテトラゾリル基（特に５−テトラゾリル基）である。
【００５４】
更に好ましくは、Ｒ１０が式−Ｘ２−Ｌ２−Ａ２又は−Ｘ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｓ−Ｓ−Ｐｙの基以外のものであり、ｎが０又は１であり、ＹがＣＯ又はＣＨ２である場合には、Ｒ１０はＯＨ、式Ｏ−Ｃ１−６アルキルの基又はＯ−ＣＨ２−フェニル基（特にＯＨ）である。
【００５５】
また、好ましくは、Ｒ１０が式−Ｘ２−Ｌ２−Ａ２又はＸ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｓ−Ｓ−Ｐｙの基以外のものであり、ｎが０であり、且つＹが結合である場合には、Ｒ１０はテトラゾリル基（特に５−テトラゾリル基）である。
【００５６】
更に好ましくは、Ｘ１は−ＣＯ−又は−ＣＯ−Ｏ−（特に−ＣＯ−Ｏ−）である。
【００５７】
また、好ましくは、Ｘ２は−ＮＨ−ＮＨ−ＣＯ−Ｏ−、−ＮＨ−ＮＨ−、−ＮＨ−又は−ＮＨ−ＣＯ−（特に−ＮＨ−ＮＨ−ＣＯ−Ｏ−、−ＮＨ−ＮＨ−又は−ＮＨ−）である。最も好ましくは、Ｘ２は−ＮＨ−ＮＨ−ＣＯ−Ｏ−である。
【００５８】
更に好ましくは、Ｘ３は−Ｏ−、−ＮＨ−、−ＮＨ−ＣＯ−又は−Ｏ−ＣＯ−ＮＨ−（特に−Ｏ−又は−ＮＨ−）である。
【００５９】
また、好ましくは、Ｌ１は分子鎖中の炭素原子数が１〜３０（例えば１〜２０、好ましくは１〜１２、特に好ましくは１〜７）であり、１〜１５個（好ましくは１〜１０個、特に好ましくは１〜５個）の酸素及び／又は窒素原子を含み、場合により置換された直鎖ヘテロアルキレン基であり、前記ヘテロアルキレン基は好ましくは場合により１個以上のアルキル基、ヘテロアルキル基、＝Ｏ基、ＯＨ基又はＮＨ２基で置換されていてもよく、前記直鎖アルキレン基又はヘテロアルキレン基はその分子鎖中に１個以上（特に１又は２個）のアリーレン基を含んでいてもよい。
【００６０】
更に好ましくは、Ｌ２は分子鎖中の炭素原子数が１〜３０（例えば１〜２０、好ましくは１〜１２、特に好ましくは１〜７）であり、１〜１５個（好ましくは１〜１０個、特に好ましくは１〜５個）の酸素及び／又は窒素原子を含み、場合により置換された直鎖ヘテロアルキレン基であり、前記ヘテロアルキレン基は好ましくは場合により１個以上のアルキル基、ヘテロアルキル基、＝Ｏ基、ＯＨ基又はＮＨ２基で置換されていてもよく、前記直鎖アルキレン基又はヘテロアルキレン基はその分子鎖中に１個以上（特に１又は２個）のアリーレン基を含んでいてもよい。
【００６１】
また、好ましくは、Ｌ３は分子鎖中の炭素原子数が１〜３０（例えば１〜２０、好ましくは１〜１２、特に好ましくは１〜７）であり、１〜１５個（好ましくは１〜１０個、特に好ましくは１〜５個）の酸素及び／又は窒素原子を含み、場合により置換された直鎖ヘテロアルキレン基であり、前記ヘテロアルキレン基は好ましくは場合により１個以上のアルキル基、ヘテロアルキル基、＝Ｏ基、ＯＨ基又はＮＨ２基で置換されていてもよく、前記直鎖アルキレン基又はヘテロアルキレン基はその分子鎖中に１個以上（特に１又は２個）のアリーレン基を含んでいてもよい。
【００６２】
更に好ましくは、Ｌ１は−（ＣＨ２）ｒ−、−（ＣＯ−ＣＨ２−ＮＨ）ｖ−ＣＯ−ＣＨ２−又は−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｇ−ＣＨ２ＣＨ２−であり、式中、ｒは１〜１０の整数であり、ｖは１〜１０の整数であり、ｇは０〜１２の整数である。
【００６３】
また、好ましくは、Ｌ２は−（ＣＨ２）ｓ−、−（ＣＯ−ＣＨ２−ＮＨ）ｘ−ＣＯ−ＣＨ２−又は−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｐ−ＣＨ２ＣＨ２−であり、式中、ｓは１〜１０の整数であり、ｘは１〜１０の整数であり、ｐは０〜１２の整数である。
【００６４】
更に好ましくは、Ｌ３は−（ＣＨ２）ｏ−、−（ＣＯ−ＣＨ２−ＮＨ）ｙ−ＣＯ−ＣＨ２−又は−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｑ−ＣＨ２ＣＨ２−であり、式中、ｏは１〜１０の整数であり、ｙは１〜１０の整数であり、ｑは０〜１２の整数である。
【００６５】
また、好ましくは、Ｌ１、Ｌ２又はＬ３は式：
−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｇ−ＣＨ２ＣＨ２−ＮＨ−ＣＯ−（ＣＨ２）ｂ−；又は
−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｇ−ＣＨ２ＣＨ２−ＮＨ−ＣＯ−（ＣＨ２）ｄ−ＣＯ−ＮＨ−ＣＨ２−
の基であり、式中、ｂは１〜１０の整数であり、ｄは１〜１０の整数であり、ｇは０〜１２の整数である。
【００６６】
更に好ましくは、Ｌ１、Ｌ２又はＬ３は下式：
【００６７】
【化３】
0006664329.tif 000004
の基であり、式中、好ましくはＡ１、Ａ２又はＡ３はこの基の右側に結合している。
【００６８】
また、好ましくは、Ｌ１、Ｌ２又はＬ３は下式：
【００６９】
【化４】
0006664329.tif 000005
の基であり、式中、ｅは０〜１０（好ましくは１〜５）の整数であり、好ましくはＡ１、Ａ２又はＡ３はこの基の右側に結合している。
【００７０】
また、好ましくは、Ｌ１、Ｌ２又はＬ３は下式：
【００７１】
【化５】
0006664329.tif 000006
の基を含む。
【００７２】
好ましくは、Ａ１はＮＨ２、Ｎ３、ＮＨ−Ｃ１−６アルキル、式−ＮＨ−ＣＯ−ＣＨ２−ＮＨ−（ＣＯ−ＣＨ２−ＮＨ−）ｗＣＯ−ＣＨ２−ＮＨ２の基、Ｃ２−Ｃ６アルキニル基、場合により置換されたヘテロアリール基、場合により置換されたヘテロシクロアルキル基、場合により置換されたヘテロアルキルシクロアルキル基又は場合により置換されたヘテロアラルキル基であり、上記式中、ｗは１〜５の整数である。
【００７３】
更に好ましくは、Ａ２はＮＨ２、Ｎ３、ＮＨ−Ｃ１−６アルキル、式−ＮＨ−ＣＯ−ＣＨ２−ＮＨ−（ＣＯ−ＣＨ２−ＮＨ−）ｗＣＯ−ＣＨ２−ＮＨ２の基、Ｃ２−Ｃ６アルキニル基、場合により置換されたヘテロアリール基、場合により置換されたヘテロシクロアルキル基、場合により置換されたヘテロアルキルシクロアルキル基又は場合により置換されたヘテロアラルキル基であり、上記式中、ｗは１〜５の整数である。
【００７４】
また、好ましくは、Ａ３はＮＨ２、Ｎ３、ＮＨ−Ｃ１−６アルキル、式−ＮＨ−ＣＯ−ＣＨ２−ＮＨ−（ＣＯ−ＣＨ２−ＮＨ−）ｗＣＯ−ＣＨ２−ＮＨ２の基、Ｃ２−Ｃ６アルキニル基、場合により置換されたヘテロアリール基、場合により置換されたヘテロシクロアルキル基、場合により置換されたヘテロアルキルシクロアルキル基又は場合により置換されたヘテロアラルキル基であり、上記式中、ｗは１〜５の整数である。
【００７５】
また、好ましくは、Ａ１は−ＮＨ２、−Ｎ３、−ＮＨＭｅ、−Ｃ≡ＣＨ、マレイミジル基又は下式：
【００７６】
【化６】
0006664329.tif 000007
の基である。
【００７７】
更に好ましくは、Ａ２は−ＮＨ２、−Ｎ３、−ＮＨＭｅ、−Ｃ≡ＣＨ、マレイミジル基又は下式：
【００７８】
【化７】
0006664329.tif 000008
の基である。
【００７９】
また、好ましくは、Ａ３は−ＮＨ２、−Ｎ３、−ＮＨＭｅ、−Ｃ≡ＣＨ、マレイミジル基又は下式：
【００８０】
【化８】
0006664329.tif 000009
の基である。
【００８１】
特に好ましくは、Ｒ１基は以下の基：
【００８２】
【化９】
0006664329.tif 000010
0006664329.tif 000011
から選択され、式中、＊は式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）又は（ＩＶ）の化合物との結合点を表す。
【００８３】
また、特に好ましくは、Ｒ１０基は以下の基：
【００８４】
【化１０】
0006664329.tif 000012
0006664329.tif 000013
0006664329.tif 000014
0006664329.tif 000015
から選択され、式中、＊は式（Ｉ）、（ＩＩ）又は（ＩＶ）の化合物との結合点を表す。
【００８５】
また、特に好ましくは、Ｒ９基は以下の基：
【００８６】
【化１１】
0006664329.tif 000016
から選択され、式中、＊は式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）又は（ＩＶ）の化合物との結合点を表す。
【００８７】
また、式（ＩＩＩ）：
【００８８】
【化１２】
0006664329.tif 000017
の化合物又はその薬理学的に許容可能な塩、溶媒和物もしくは水和物が好ましく、式中、ｎ、Ｘ、Ｒ１、Ｒ６、Ｒ８及びＲ９は式（Ｉ）及び（ＩＩ）の化合物について上記に定義した通りである。
【００８９】
特に式（ＩＩＩ）中、
Ｒ１が水素、メチル基又はヘテロアルキル基（特にメチル基）であり；
Ｒ６がＣ１−６アルキル基又は式ＣＨ２ＯＲ６１もしくはＣＨ２ＯＣＯＲ６２の基であり、前記式中、Ｒ６１はＣ１−６アルキル基であり、Ｒ６２はＣ１−６アルキル基、Ｃ２−Ｃ６アルケニル基、フェニル基又はＣＨ２−フェニル基であり；
Ｒ８がＨ、アセチル基、−ＣＨ２ＯＣＨ３基又はＣ１−６アルキル基であり；
Ｒ９がＨ、ＯＨ、ＳＨ、Ｆ、ＣＮ、ＮＨ２、Ｐｈ、Ｍｅ、ＯＭｅ、ＣＦ３、ＯＡｃ、ＮＨＭｅ又はＮＭｅ２であり；
ｎが０又は１であり；
ＸがＳである化合物が好ましい。
【００９０】
また、式（ＩＶ）：
【００９１】
【化１３】
0006664329.tif 000018
の化合物又はその薬理学的に許容可能な塩、溶媒和物もしくは水和物が好ましく、式中、Ｘ、Ｒ１、Ｒ６、Ｒ８、Ｒ９及びＲ１０は式（Ｉ）及び（ＩＩ）の化合物について上記に定義した通りであり、Ｒ２はＣ１−６アルキル基であり、Ｒ３はＣ１−６アルキル基である。
【００９２】
特に式（ＩＶ）中、Ｒ２がメチル基であり、Ｒ３が式−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ３の基である化合物が好ましい。
【００９３】
また、特に式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）及び（ＩＶ）中、ＸがＳであり、Ｒ６がＣ１−６アルキル基（特にｎ−プロピル基）であり、Ｒ８がＣ１−６アルキル基（特にｎ−プロピル基）である化合物が好ましい。
【００９４】
式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）及び／又は（ＩＶ）の特に好ましい化合物を以下に挙げる。
【００９５】
【化１４】
0006664329.tif 000019
0006664329.tif 000020
0006664329.tif 000021
0006664329.tif 000022
0006664329.tif 000023
0006664329.tif 000024
0006664329.tif 000025
0006664329.tif 000026
0006664329.tif 000027
0006664329.tif 000028
0006664329.tif 000029
0006664329.tif 000030
0006664329.tif 000031
0006664329.tif 000032
0006664329.tif 000033
0006664329.tif 000034
0006664329.tif 000035
【００９６】
好ましくは、国際特許出願ＰＣＴ／ＥＰ２０１３／００２７９０に開示されている化合物は本願又は本特許から除外される。
【００９７】
特に好ましくは、以下の化合物は本願又は本特許から除外される。
【００９８】
【化１５】
0006664329.tif 000036
0006664329.tif 000037
【００９９】
癌又は他の疾患の治療及び／又は予防用の医薬の（例えばコンジュゲーションによる）製造における、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）及び（ＩＶ）の化合物の使用も本発明の主題である。また、本発明の化合物は腫瘍疾患の予防及び／又は治療に有用である。
【０１００】
本発明の化合物及び対応するコンジュゲートにより治療又は予防することができる癌としては、限定されないが、ヒト肉腫及び癌腫、例えば線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨原性肉腫、軟骨腫、血管肉腫、内皮細胞肉腫、リンパ管肉腫、リンパ管内皮細胞肉腫、滑膜腫、中皮腫、ユーイング腫瘍、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、結腸癌、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、扁平上皮癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、脂腺癌、乳頭癌、乳頭腺癌、嚢胞腺癌、髄様癌、気管支原性癌、腎細胞癌、肝細胞癌、胆管癌、絨毛癌、セミノーマ、胎児性癌、ウィルムス腫瘍、子宮頸癌、精巣腫瘍、肺癌、小細胞肺癌、膀胱癌、上皮細胞癌、神経膠腫、星細胞腫、髄芽腫、頭蓋咽頭腫、上衣腫、松果体腫瘍、血管芽細胞腫、聴神経腫瘍、乏突起膠腫、髄膜腫、メラノーマ、神経芽細胞腫、網膜芽細胞腫；白血病、例えば急性リンパ球性白血病及び急性骨髄球性白血病（骨髄芽球性白血病、前骨髄球性白血病、骨髄単球性白血病、単球性白血病及び赤白血病）、慢性白血病（慢性骨髄球性（顆粒球性）白血病及び慢性リンパ球性白血病）、真性多血症、リンパ腫（ホジキン病及び非ホジキン病）、多発性骨髄腫、ワルデンストレームマクログロブリン血症並びに重鎖病が挙げられる。
【０１０１】
白血病の他の例としては、急性及び／又は慢性白血病、例えばリンパ球性白血病（例えば具体例としてｐ３８８（マウス）細胞株）、大顆粒リンパ球性白血病及びリンパ芽球性白血病；Ｔ細胞白血病、例えばＴ細胞白血病（例えば具体例としてＣＥＭ、Ｊｕｒｋａｔ及びＨＳＢ−２（急性）、ＹＡＣ１（マウス）細胞株）、Ｔリンパ球性白血病及びＴリンパ芽球性白血病；Ｂ細胞白血病（例えば具体例としてＳＢ（急性）細胞株）及びＢリンパ芽球性白血病；混合細胞型白血病、例えばＢ細胞／Ｔ細胞白血病及びＢリンパ球／Ｔリンパ球性白血病；骨髄性白血病、例えば顆粒球性白血病、骨髄球性白血病（例えば具体例としてＨＬ−６０（前骨髄球性）細胞株）及び骨髄原性白血病（例えば具体例としてＫ５６２（慢性）細胞株）；好中球性白血病；好酸球性白血病；単球性白血病（例えば具体例としてＴＨＰ−１（急性）細胞株）；骨髄単球性白血病；ネーゲリ型骨髄性白血病；並びに非リンパ球性白血病が挙げられる。白血病の他の例はＴｈｅ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ  Ｓｏｕｒｃｅｂｏｏｋ，Ｍｉｃｈａｅｌ  Ｃ．Ｐｅｒｒｙ  Ｅｄ．，Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｌｉａｍｓ（１９９２）の第６０章とＨｏｌｌａｎｄ  Ｆｒｉｅ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ５ｔｈ  Ｅｄ．，Ｂａｓｔ  ｅｔ  ａｌ．Ｅｄｓ．，Ｂ．Ｃ．Ｄｅｃｋｅｒ  Ｉｎｃ．（２０００）のセクション３６に記載されている。上記参考文献の教示内容全体を本願に援用する。
【実施例】
【０１０２】
例えばＰＣＴ／ＥＰ２００８／００３７６２（ＷＯ ２００８／１３８５６１）に記載されている手順に従って、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）及び（ＩＶ）の各化合物（チューブリシン及び／又はサイトリシン誘導体）の製造に使用される各構成単位の合成を実施した。本願で使用するサイトリシンなる用語はチューブリシンの合成誘導体を意味する。
【０１０３】
本願に記載する全化合物は１Ｈ−ＮＭＲ、１３Ｃ−ＮＭＲ及び質量分析法により特性決定した。純度はＨＰＬＣにより確認した。
【０１０４】
ジスルフィドスペーサーをもつチューブリシン／サイトリシン誘導体の合成の一般手順：
チューブリシン／サイトリシン−Ｓ−Ｓ−Ｐｙの合成：
チューブリシン／サイトリシン又は対応する構成単位：０．１ｍｍｏｌ
ＤＭＦ：７．０ｍＬ
ＨＢＴＵ：０．１２ｍｍｏｌ
ＤＩＥＡ：０．４ｍｍｏｌ
スペーサー−ＨＣｌ：０．１６ｍｍｏｌ
【０１０５】
【化１６】
0006664329.tif 000038
式中、Ｒは当該技術分野で公知の適切な保護基又はこれらに限定するものではないが、例示したチューブリシンもしくはサイトリシン誘導体の対応部分である。
【０１０６】
チューブリシン／サイトリシン又は対応する構成単位とスペーサーの溶液に０℃にて撹拌下にＨＢＴＵとジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ）を加えた。添加の完了後、冷却浴を除去し、反応混合液をＴＬＣ又はＨＰＬＣによりモニターした。約２〜４時間後に反応の完了が確認された後、混合液をカラムに直接注入し、先ず純ＤＣＭ（約７００ｍＬ）で溶出させた後、１〜３％メタノール：ＤＣＭの勾配で溶出させ、純化合物を約６５〜８５％の収率で得た。
【０１０７】
ヒドラジドスペーサーをもつチューブリシン／サイトリシン誘導体の合成の一般手順：
チューブリシン／サイトリシン−ＮＨＮＨＣＯ−（Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−）ｎ−Ｎ３（ヒドラジドスペーサー）の合成：
ＴＡＭ４２４：９２ｍｇ（０．１１９ｍｍｏｌ）
クロロギ酸イソブチル：１６μＬ（０．１２ｍｍｏｌ，１．０１当量）
ＥｔＯＡｃ：２ｍＬ
ＤＩＰＥＡ：７０μＬ
リンカー（例えばＴＡＭ４２２Ｂ）：５０ｍｇ（０．１６ｍｍｏｌ）
【０１０８】
【化１７】
0006664329.tif 000039
【０１０９】
ＴＡＭ４２４の無水ＥｔＯＡｃ溶液に−１５℃にてＤＩＰＥＡとクロロギ酸イソブチルをシリンジで一緒に加えた。アルゴン下で−１５℃にて４５分間撹拌後、ＴＡＭ４２２Ｂの無水ＥｔＯＡｃ（１．０ｍＬ）溶液を反応混合液に加えた。得られた溶液をアルゴン下で−１５℃にて１５分間、室温にて更に４５分間撹拌後、濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル，ＤＣＭ中１−３％ＭｅＯＨ）により精製し、単離収率５３％でＴＡＭ４２６（５９．５ｍｇ，ＨＰＬＣによる純度＞９５％）を得た。
【０１１０】
アルキルアジドスペーサーをもつチューブリシン／サイトリシン誘導体の合成の一般手順：
チューブリシン／サイトリシン−（ＣＨ２）ｎ−Ｎ３の合成：
チューブリシン／サイトリシン：０．１ｍｍｏｌ
ＤＭＦ：５ｍＬ
Ｋ２ＣＯ３：６０ｍｇ
スペーサー：０．２ｍｍｏｌ
【０１１１】
【化１８】
0006664329.tif 000040
式中、Ｒは当該技術分野で公知の適切な保護基又はこれらに限定するものではないが、例示したチューブリシン／サイトリシン誘導体の対応部分である。
【０１１２】
チューブリシン／サイトリシンとＫ２ＣＯ３の溶液に室温にて撹拌下に対応するアルキルアジドスペーサーを加えた。反応混合液を一晩撹拌し、ＴＬＣ又はＨＰＬＣによりモニターした。反応の完了後、溶液を濃縮し、ＤＣＭに再溶解し、飽和塩化アンモニウムで抽出した。水相をＤＣＭで抽出し、有機画分を合わせて硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒の蒸発後、粗生成物をカラムクロマトグラフィー（１−５％メタノール：ＤＣＭ）により精製した。
【０１１３】
エチレンオキシスペーサーをもつチューブリシン／サイトリシン誘導体の合成の一般手順：
チューブリシン／サイトリシン−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−）ｎ−Ｎ３の合成：
チューブリシン／サイトリシン：０．１ｍｍｏｌ
アセトニトリル：２０ｍＬ
Ｋ２ＣＯ３：６０ｍｇ
スペーサー：０．２ｍｍｏｌ
【０１１４】
【化１９】
0006664329.tif 000041
式中、Ｒは当該技術分野で公知の適切な保護基又はこれらに限定するものではないが、例示したチューブリシン／サイトリシン誘導体の対応部分である。
【０１１５】
チューブリシン／サイトリシン又は対応する構成単位とＫ２ＣＯ３の溶液に室温にて撹拌下にメシル化（オリゴ）エチレンオキシアジドスペーサーを加えた後、６０℃まで１８時間加熱した。ＴＬＣ又はＨＰＬＣにより反応をモニターした。反応の完了後、混合液を濾過し、濃縮した。残渣をＤＣＭに再溶解し、飽和塩化アンモニウムで抽出した。水相をＤＣＭで抽出し、有機画分を合わせて飽和ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を除去した後、生成物をカラムクロマトグラフィー（通常は１−５％メタノール：ＤＣＭ）により精製した。
【０１１６】
グリシンスペーサーをもつチューブリシン／サイトリシン誘導体の合成の一般手順：
チューブリシン／サイトリシン−（グリシン）ｎ−ＮＨ２の合成：
【０１１７】
【化２０】
0006664329.tif 000042
式中、Ｒは当該技術分野で公知の適切な保護基（ＰＧ）又はこれらに限定するものではないが、例示したチューブリシン／サイトリシン誘導体の対応部分である。
【０１１８】
グリシン誘導体の数は３〜１０である。対応するグリシン部分を当該技術分野で公知の適切な保護基と併用し、例えばアミノ官能基をカップリング前にＦＭＯＣ又はＢＯＣ誘導体として保護し、カルボキシル末端を通常知られている条件下で除去することが可能なエステルとして保護する。チューブリシン／サイトリシン又は適切な構成単位とカップリングする前に通常知られている脱保護条件を使用してカルボン酸保護を外す。
ＴＡＭ４７０：７８．５ｍｇ（０．１０ｍｍｏｌ）
クロロギ酸イソブチル：１５μＬ（０．１１ｍｍｏｌ，１．０１当量）
ＥｔＯＡｃ：２．０ｍＬ
ＤＩＰＥＡ：７０μＬ
Ｂｏｃ−トリグリシンカルボン酸：３２ｍｇ（０．１１ｍｍｏｌ）
【０１１９】
Ｎ−Ｂｏｃ−トリグリシンの無水ＥｔＯＡｃ溶液に−１５℃にてＤＩＰＥＡとクロロギ酸イソブチルをシリンジで一緒に加えた。アルゴン下で−１５℃にて４５分間撹拌後、ＴＡＭ４７０の無水ＥｔＯＡｃ（１．０ｍＬ）溶液を反応混合液に加えた。得られた溶液をアルゴン下で−１５℃にて１５分間、室温にて更に４５分間撹拌後、濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル，ＤＣＭ中１−３％ＭｅＯＨ）により精製し、単離収率７６％でＢＯＣ保護ヒドラジン誘導体を得た。
【０１２０】
上記のように得られた生成物をＴＨＦ（１ｍｌ）に溶解し、０℃にて塩酸塩のＴＨＦ溶液を加えることによりＢＯＣ基を除去した。反応混合液を室温で３０分間撹拌した。反応混合液をジクロロメタンで希釈し、飽和塩化アンモニウムで洗浄し、乾燥し、濃縮し、８２ｍｇの遊離アミンＴＡＭ４７９を得た（収率８６％）。
【０１２１】
【表１】
0006664329.tif 000043
0006664329.tif 000044
0006664329.tif 000045
0006664329.tif 000046
0006664329.tif 000047
【０１２２】
一般に、本発明の新規分子は０．０１〜４００ｎＭで複数の癌細胞株に対して活性を示す。
【０１２３】
本発明の化合物の可能な化学的及び酵素的結合としては、例えばアミンを介する結合、インテイン又はソルターゼＡを介する結合、ＴＧａｓｅを介する結合、チオールを介する結合及び「クリックケミストリー」を介する結合が挙げられるが、これらに限定するものではない。
【０１２４】
本発明の目的はチューブリシン／サイトリシン誘導体であって、タンパク質、ペプチド、低分子もしくは高分子等の標的指向性分子もしくは生体分子であるか又は標的指向性成分を担持することが可能なキャリアであるかに拘わらず、任意種の輸送担体とのコンジュゲーションに直接使用できるように又は適切なリンカーと併用できるように修飾されたチューブリシン／サイトリシン誘導体を提供することである。
【０１２５】
本願に記載する誘導体でアミノ官能基をもつものは例えばチオール基とのカップリングに有用なバリンシトルリンマレイミドリンカー等の適切なリンカーと結合するために使用することができる（Ｇ．Ｍ．Ｄｕｂｏｗｃｈｉｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ  ２００２，１３，８５５−８６９；Ｓ．Ｃ．Ｊｅｆｆｒｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００５，４８，１３４４−１３５８）。
【０１２６】
マレイミド−ｖａｌ−ｃｉｔ−ＰＡＢＯＣＯ−チューブリシン／サイトリシン−ＴＡＭ４６１の合成：
【０１２７】
【化２１】
0006664329.tif 000048
ＴＡＭ４６１：３０．０ｍｇ（０．０４１ｍｍｏｌ）
ＤＭＦ：３ｍＬ
ＴＡＭ４６５：３５ｍｇ（０．０４５ｍｍｏｌ）
ＨＯＢｔ：１．４ｍｇ
ＤＩＰＥＡ：１０μＬ
【０１２８】
ＴＡＭ４６１とＴＡＭ４６５を乾燥条件下で無水ＤＭＦに溶解し、得られた溶液をＨＯＢｔとＤＩＰＥＡで処理した。反応液を室温で１８時間撹拌した。反応混合液を濃縮し、得られた油状物を２−６％メタノール：ＤＣＭでカラムクロマトグラフィーにより精製し、３５ｍｇ（６４％）のＴＡＭ４６７を白色固体として得た。ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝１３７１［Ｍ＋Ｈ］。
【０１２９】
マレイミド−ｖａｌ−ｃｉｔ−ＰＡＢＯＣＯ−チューブリシン／サイトリシン−ＴＡＭ４７０の合成：
【０１３０】
【化２２】
0006664329.tif 000049
ＴＡＭ４７０（チューブリシン／サイトリシン）：０．０７ｍｍｏｌ
ＤＭＦ：５ｍＬ
ＴＡＭ４６６（リンカー）：５０ｍｇ（０．０６５ｍｍｏｌ）
ＨＯＢｔ：２．４ｍｇ
ＤＩＰＥＡ：１８μＬ
【０１３１】
ＴＡＭ４７０とＴＡＭ４６６を乾燥条件下で無水ＤＭＦに溶解し、得られた溶液をＨＯＢｔとＤＩＰＥＡで処理した。反応液を室温で１８時間撹拌後、ＴＬＣで分析した処、反応の完了が確認された。反応混合液を濃縮し、得られた油状物を４−１２％メタノール：ＤＣＭでカラムクロマトグラフィーにより精製し、５６ｍｇのＴＡＭ４７１を得た（収率：６２％）。ＥＳＩ−ＭＳ：１３８４．６［Ｍ＋１］。
【０１３２】
抗体−薬物コンジュゲートの合成は例えばＧ．Ｍ．Ｄｕｂｏｗｃｈｉｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．２００２，１３，８５５−８６９に記載されているプロトコールに従って適切な還元抗体とＴＡＭ４６７又はＴＡＭ４７１を使用して実施することができる。
【０１３３】
他の例を以下に挙げる：
【０１３４】
【化２３】
0006664329.tif 000050
0006664329.tif 000051
0006664329.tif 000052
0006664329.tif 000053
【０１３５】
チューブリシントリペプチドＴＰＭ２６０とアジド−ＰＥＧ−フェニルアラニンヒドラジンＴＰＭ２８３の反応：
【０１３６】
【化２４】
0006664329.tif 000054
【０１３７】
酸（ＴＰＭ２６０，２７９ｍｇ，０．４７８ｍｍｏｌ）の無水ＤＭＦ（５ｍｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（０．１８ｍｌ，２．１当量）、ＨＯ−Ａｔ（７２ｍｇ，１．１当量）及びＥＷＧ＊ＨＣｌ（９７ｍｇ，１．０５当量）を加えた。溶液を室温で１５分間撹拌し、アミド（ＴＰＭ２８３，２３２ｍｇ）の無水ＤＭＦ（１ｍｌ）溶液を加えた。混合液を室温で２４時間撹拌した。反応混合液をエーテルとブラインで希釈した。有機相を分離し、再びブラインで洗浄した。有機相を合わせて乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、減圧濃縮した。粗生成物をクロマトグラフィー（シリカ，ジクロロメタン：メタノール９７：３→９６：４）に供した。２７９ｍｇのＴＰＭ２８５を得た（６９％収率）。
【０１３８】
アジドＴＰＭ２８５からアミンＴＰＭ２９５への還元：
【０１３９】
【化２５】
0006664329.tif 000055
【０１４０】
アジド（ＴＰＭ２８５，９．６ｍｇ）をＡｒ下で無水エタノール２ｍｌに溶解し、１０％Ｐｄ／Ｃを加えた。Ａｒを水素（１気圧）に置換し、懸濁液を室温で５時間撹拌した。Ｐｄ／Ｃをセライトパッドで濾過し、ジクロロメタンで洗浄した。減圧濃縮し、１２ｍｇのＴＰＭ２９５を得た。
【０１４１】
本願に記載する同一誘導体で第１級アミノ官能基をもつものは、酵素トランスグルタミナーゼを介して適切な位置にグルタミンをもつ生体分子（例えば抗体）と酵素カップリングするために使用することができる（Ｇ．Ｐａｓｕｔ，Ｆ．Ｍ．Ｖｅｒｏｎｅｓｅ，Ｓｔａｔｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｒｔ  ｉｎ  ＰＥＧｙｌａｔｉｏｎ：Ｔｈｅ  ｇｒｅａｔ  ｖｅｒｓａｔｉｌｉｔｙ  ａｃｈｉｅｖｅｄ  ａｆｔｅｒ  ｆｏｒｔｙ  ｙｅａｒｓ  ｏｆ  ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌ．Ｒｅｌｅａｓｅ（２０１２）１６１，４６１−４７２とその引用文献）。
【０１４２】
当業者に公知の手順に従い、１と２の種々の薬物対抗体比（ＤＡＲ）でハーセプチン（ＴＭ）とＴＡＭ３７５とＴＧａｓｅを使用して抗体−薬物コンジュゲートの合成を実施した。
【０１４３】
図１はＳＫ−ＢＲ−３ヒト乳癌細胞株に対するＴＡＭ３７５ＡＤＣ−１及びＴＡＭ３７５ＡＤＣ−２のインビトロ細胞毒性活性の用量反応曲線を示す。ＴＡＭ−３７５ＡＤＣ−１はＩＣ５０［Ｍ］が２．２４６ｅ−０１０であり、ＴＡＭ−３７５ＡＤＣ−２はＩＣ５０［Ｍ］が１．２５７ｅ−０１０である。
【０１４４】
本発明に記載する誘導体でアジド官能基をもつものは、所謂クリックケミストリーを利用するカップリングに使用することができ、従って、反応相手はアルキン官能基をもつ。官能基の位置を逆にして同種の化学反応に使用することもでき、即ちチューブリシン／サイトリシンにアルキンスペーサー基を付け、結合させようとする分子にアジド官能基を付けてもよい（Ｊ．Ｍ．Ｂａｓｋｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＮＡＳ，２００７，１０４（４３），１６７９３−１６７９７；Ｅ．Ｍ．Ｓｌｅｔｔｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１  Ａｃｃ．Ｃｈｅｍ．Ｒｅｓ．２０１１，４４（９）６６６−６７６；Ｍ．Ｋ  Ｓｃｈｕｌｔｚ  ｅｔ  ａｌ．，Ｏｒｇ．Ｌｅｔｔ．２０１０，１２，２３９８−４０１；Ｆ．Ｓｃｈｏｅｎｅｂｅｃｋ  ｅｔ  ａｌ．，ＪＡＣＳ  ２００９，１３１，８１２１−８１３３）。
【０１４５】
本発明に記載する誘導体でチューブリシン／サイトリシンの適切な位置に３〜１０個のグリシンからなるグリシンタグをもつものは、結合させようとする分子に必要な配列ＬＰＸＴＧを付けて酵素ソルターゼを介して酵素カップリングするために使用することができる（参考文献：Ｇ．Ｐａｓｕｔ，Ｆ．Ｍ．Ｖｅｒｏｎｅｓｅ，Ｓｔａｔｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｒｔ  ｉｎ  ＰＥＧｙｌａｔｉｏｎ：Ｔｈｅ  ｇｒｅａｔ  ｖｅｒｓａｔｉｌｉｔｙ  ａｃｈｉｅｖｅｄ  ａｆｔｅｒ  ｆｏｒｔｙ  ｙｅａｒｓ  ｏｆ  ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌ．Ｒｅｌｅａｓｅ（２０１２）１６１，４６１−４７２；Ｍ．Ｗ．−Ｌ．Ｐｏｐｐ，Ｈ．Ｌ．Ｐｌｏｅｇｈ，Ｍａｋｉｎｇ  ａｎｄ  Ｂｒｅａｋｉｎｇ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｂｏｎｄｓ：Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  Ｕｓｉｎｇ  Ｓｏｒｔａｓｅ，Ａｎｇ．Ｃｈｅｍｉｅ  Ｉｎｔ．Ｅｄ．２０１１，５０，５０２４−５０３２）。
【０１４６】
その他の実施例
上記手順と同様に以下の化合物を合成した。
【０１４７】
【表２】
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【図１】
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