(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
【化３６−１】
0006782250.tif 000123
【化３６−２】
0006782250.tif 000124
0006782250.tif 000125
【化３６−３】
0006782250.tif 000126
0006782250.tif 000127
【化３７−１】
0006782250.tif 000128
0006782250.tif 000129
【化３７−２】
0006782250.tif 000130
0006782250.tif 000131

［式中、Ｐｇは、Ｈ、アシル、ＰＯ３Ｈ２、炭水化物、アミノ酸またはペプチドである］
から選択される、
化合物、または薬学的に許容できるその塩もしくは溶媒和物。
【請求項２】
【化３８−１】
0006782250.tif 000132
の化合物、または薬学的に許容できるその塩もしくは溶媒和物。
【請求項３】
【化４４−１】
0006782250.tif 000133
【化４４−２】
0006782250.tif 000134
【化４４−３】
0006782250.tif 000135
【化４４−４】
0006782250.tif 000136
【化４４−１３】
0006782250.tif 000137
【化４４−１４】
0006782250.tif 000138

［式中、ＡＢは、抗体である］
から選択される、化合物、または薬学的に許容できるその塩もしくは溶媒和物。
【請求項４】
前記抗体ＡＢが、トラスツズマブ、トラスツズマブ突然変異体、オレゴボマブ、エドレコロマブ、セツキシマブ、ビトロネクチン受容体（αｖβ３）に対するヒト化モノクローナル抗体、アレムツズマブ、抗ＨＬＡ  ＤＲ抗体、１３１Ｉ  Ｌｙｍ  １、抗ＨＬＡ  Ｄｒ１０抗体、抗ｃｄ３３抗体、抗ｃｄ２２抗体、ラベツズマブ、ベバシズマブ、イブリツモマブチウキセタン、オファツムマブ、パニツムマブ、リツキシマブ、トシツモマブ、イピリムマブおよびゲムツズマブから選択される、請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
【化４４−１６】
0006782250.tif 000139
［式中、Ｘは、ＩＬ１３Ｒα２−ＡＢ０８−ｖ１．０、ＣＤ３３−１１Ａ１−ｖ１４１７−ｈＧ１−（Ｃ）、ＣＤ３３−１１Ａ１−ｖ１４１７−Ｋ３３４Ｃ−Ｋ３９２Ｃ−ｈＧ１−（Ｃ３３４＋Ｃ３９２）および
ＣＤ３３−１１Ａ１−ｖ１４１７−Ｋ３３４Ｃ−ｈＧ１−（Ｃ３３４）からなる抗体から選択される、請求項３に記載の化合物または薬学的に許容できるその塩もしくは溶媒和物。
【請求項６】
請求項１に記載の化合物または薬学的に許容できるその塩もしくは溶媒和物を含むリンカーペイロードもしくは抗体−薬物コンジュゲート。
【請求項７】
請求項２に記載の化合物または薬学的に許容できるその塩もしくは溶媒和物を含む抗体−薬物コンジュゲート。
【請求項８】
請求項１から５のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容できるその塩もしくは溶媒和物と、薬学的に許容できる添加剤とを含む、医薬組成物。
【請求項９】
請求項６または７に記載のリンカーペイロードまたは抗体−薬物コンジュゲートおよび薬学的に許容できる添加剤を含む医薬組成物。
【請求項１０】
がんを治療するための、請求項８または９に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
前記がんが、膀胱がん、乳がん、子宮頸がん、結腸がん、子宮内膜がん、腎臓がん、肺がん、食道がん、卵巣がん、前立腺がん、膵臓がん、皮膚がん、胃がん、精巣がん、白血病およびリンパ腫である、請求項１０に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、増殖性疾患の治療に有用な、新規二官能性ＣＴＩ−ＣＴＩおよびＣＢＩ−ＣＴＩ二量体を対象とする。本発明の二量体は、独立型薬物、抗体−薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）におけるペイロード、およびそのようなＡＤＣの生成または投与との関連で有用なリンカーペイロード化合物として、機能することができる。本発明はさらに、前述の二量体、リンカーペイロードおよびＡＤＣを含む組成物、ならびに、これらの二量体、リンカーペイロードおよびＡＤＣを使用して、がんを含む病理学的状態を治療するための方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
２つの活性ＤＮＡアルキル化モチーフ（すなわち、ＣＢＩまたはＣＰＩ）を含有する二官能性類似体は、一緒に縮合している２つのアルキル化（例えば、２つのＣＰＩモチーフ）を含有する。２つの反応性アルキル化モチーフの存在により、これらの化合物は活性ＤＮＡ架橋剤であり、これに対し、１つのアルキル化モチーフ（例えば、デュオカルマイシン）しか持たない化合物は、ＤＮＡモノアルキル化剤である。
【０００３】
【化１】
0006782250.tif 000002
【０００４】
上記で示した化合物は、文献からの代表的な例であり、強力な細胞毒素であることが報告されている：Ａ（「Ｇｌｙｃｏｓｉｄｉｃ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ  ｏｆ  Ｈｉｇｈｌｙ  Ｐｏｔｅｎｔ  Ｂｉｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｄｕｏｃａｒｍｙｃｉｎ  Ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ  ｆｏｒ  Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ」、Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．編、２０１０、４９、７３３６〜７３３９；「Ｄｕｏｃａｒｍｙｃｉｎ  Ａｎａｌｏｇｕｅｓ  Ｔａｒｇｅｔ  Ａｌｄｅｈｙｄｅ  Ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ  １  ｉｎ  ＬｕｎｇＣａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌｓ」、Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．編、２０１２、５１、２８７４〜２８７７；「Ｂｉｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ｐｒｏｄｒｕｇｓ  ａｎｄ  ｄｒｕｇｓ」、ＷＯ２０１１／０５４８３７、ＤＥ１０２００９０５１７９９；「Ｔｈｅ  Ｔｗｏ  Ｆａｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｏｔｅｎｔ  Ａｎｔｉｔｕｍｏｒ  Ｄｕｏｃａｒｍｙｃｉｎ−Ｂａｓｅｄ  Ｄｒｕｇｓ：Ａ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ  Ｄｉｓｓｅｃｔｉｏｎ  Ｒｅｖｅａｌｓ  Ｄｉｓｐａｒａｔｅ  Ｍｏｔｉｆｓ  ｆｏｒ  ＤＮＡ  ｖｅｒｓｕｓ  Ａｌｄｅｈｙｄｅ  Ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ  １  Ａｆｆｉｎｉｔｙ」、Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．編、２０１３、５２、１〜６；Ｂ（「Ｉｎｔｅｒｓｔｒａｎｄ  ＤＮＡ  Ｃｒｏｓｓ−ｌｉｎｋｉｎｇ  ｗｉｔｈ  Ｄｉｍｅｒｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｓｐｉｒｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐｙｌ  Ａｌｋｙｌａｔｉｎｇ  Ｍｏｉｅｔｙ  ｏｆ  ＣＣ−１０６５」、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．ＳＯＣ．１９８９、１１  １、６４２８〜６４２９；「ＣＣ−１０６５  ａｎａｌｏｇｓ  ｈａｖｉｎｇ  ｔｗｏ  ＣＰＩ  ｓｕｂｕｎｉｔｓ  ｕｓｅｆｕｌ  ａｓ  ａｎｔｉｔｕｍｏｒ  ａｇｅｎｔｓ  ａｎｄ  ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ  ｌｉｇｈｔ  ａｂｓｏｒｂｅｒｓ」、Ｅｕｒ．Ｐａｔ．Ａｐｐｌ．（１９９０）、ＥＰ３５９４５４、また化合物ＣおよびＤについても；Ｃ（「Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ａｎｄ  ＤＮＡ  Ｃｒｏｓｓ−Ｌｉｎｋｉｎｇ  ｂｙ  ａ  Ｒｉｇｉｄ  ＣＰＩ  Ｄｉｍｅｒ」、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．ＳＯＣ．１９９１、１１３、８９９４〜８９９５；「Ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  Ｐｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓ  ｆｏｒ  ＤＮＡ  Ｉｎｔｅｒｓｔｒａｎｄ  Ｃｒｏｓｓ−Ｌｉｎｋｉｎｇ  Ｉｎｄｕｃｅｄ  ｂｙ  ｔｈｅ  Ｃｙｃｌｏｐｒｏｐｙｌｐｙｒｒｏｌｏｉｎｄｏｌｅ  Ａｎａｌｏｇｕｅ  Ｕ−７７，７７９」、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  １９９３、３２、２５９２〜２６００；「Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ  Ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｌ  Ｇｕａｎｉｎｅ−Ｃｙｔｏｓｉｎｅ  Ｂａｓｅ  Ｐａｉｒ  ｉｎ  Ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  Ｓｅｖｅｎ−Ｂａｓｅ−Ｐａｉｒ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ｃｒｏｓｓ−Ｌｉｎｋｅｄ  ｂｙ  Ｂｉｚｅｌｅｓｉｎ」、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  １９９５、３４、１１００５〜１１０１６；「Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｍｏｎｏａｌｋｙｌａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｃｒｏｓｓ−Ｌｉｎｋｉｎｇ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ  ｏｆ  Ｂｉｚｅｌｅｓｉｎ，ａ  Ｂｉｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ａｌｋｙｌａｔｉｏｎ  ＡｇｅｎｔＲｅｌａｔｅｄ  ｔｏ  （＋）−ＣＣ−１０６５」、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ���ＳＯＣ．１９９３、１１５、５９２５〜５９３３；「Ｍａｐｐｉｎｇ  ｏｆ  ＤＮＡ  Ａｌｋｙｌａｔｉｏｎ  Ｓｉｔｅｓ  Ｉｎｄｕｃｅｄ  ｂｙ  Ａｄｏｚｅｌｅｓｉｎ  ａｎｄ  Ｂｉｚｅｌｅｓｉｎ  ｉｎ  Ｈｕｍａｎ  Ｃｅｌｌｓ  ｂｙ  Ｌｉｇａｔｉｏｎ−Ｍｅｄｉａｔｅｄ  Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ  Ｃｈａｉｎ  Ｒｅａｃｔｉｏｎ」、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  １９９４、３３、６０２４〜６０３０；「ＤＮＡ  Ｉｎｔｅｒｓｔｒａｎｄ  Ｃｒｏｓｓ−Ｌｉｎｋｓ  Ｉｎｄｕｃｅｄ  ｂｙ  ｔｈｅ  Ｃｙｃｌｏｐｒｏｐｙｌｐｙｒｒｏｌｏｉｎｄｏｌｅ  Ａｎｔｉｔｕｍｏｒ  Ａｇｅｎｔ  Ｂｉｚｅｌｅｓｉｎ  Ａｒｅ  Ｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  ｕｐｏｎ  Ｅｘｐｏｓｕｒｅ  ｔｏ  Ａｌｋａｌｉ」、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  １９９３、３２、９１０８〜９１１４；「Ｒｅｐｌａｃｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｂｉｚｅｌｅｓｉｎ  Ｕｒｅａｄｉｙｌ  Ｌｉｎｋａｇｅ  ｂｙ  ａ  Ｇｕａｎｉｄｉｎｉｕｍ  Ｍｏｉｅｔｙ  Ｒｅｔａｒｄｓ  Ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎ  ｆｒｏｍ  Ｍｏｎｏａｌｋｙｌａｔｉｏｎ  ｔｏ  Ｃｒｏｓｓ−Ｌｉｎｋｉｎｇ  Ｓｉｔｅｓ  ｏｎ  ＤＮＡ」、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９９７、１１９、３４３４〜３４４２；「ＤＮＡ  ｉｎｔｅｒｓｔｒａｎｄ  ｃｒｏｓｓ−ｌｉｎｋｉｎｇ，ＤＮＡ  ｓｅｑｕｅｎｃｅ  ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ，ａｎｄ  ｉｎｄｕｃｅｄ  ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎａｌ  ｃｈａｎｇｅｓ  ｐｒｏｄｕｃｅｄ  ｂｙ  ａ  ｄｉｍｅｒｉｃ  ａｎａｌｏｇ  ｏｆ  （＋）−ＣＣ−１０６５」、Ａｎｔｉ−Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ（１９９１）、６、４２７〜４５２；「Ａ  ｐｈａｓｅ  Ｉ  ｓｔｕｄｙ  ｏｆ  ｂｉｚｅｌｅｓｉｎ，ａ  ｈｉｇｈｌｙ  ｐｏｔｅｎｔ  ａｎｄ  ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ＤＮＡｉｎｔｅｒａｃｔｉｖｅ  ａｇｅｎｔ，ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ａｄｖａｎｃｅｄ  ｓｏｌｉｄ  ｍａｌｉｇｎａｎｃｉｅｓ」、Ａｎｎ  Ｏｎｃｏｌ．２００３年５月；１４（５）：７７５〜７８２；「Ａ  Ｐｈａｓｅ  Ｉ  ｓｔｕｄｙ  ｏｆ  ｂｉｚｅｌｅｓｉｎ（ＮＳＣ６１５２９１）  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ａｄｖａｎｃｅｄ  ｓｏｌｉｄ  ｔｕｍｏｒｓ」、Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．２００２、３、７１２〜７１７；「Ｓｏｌｕｔｉｏｎ  ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ｂｉｚｅｌｅｓｉｎ  Ａ−ｔｒａｃｔ  ｄｕｐｌｅｘ  ａｄｄｕｃｔ：ＤＮＡ−ＤＮＡ  ｃｒｏｓｓ−ｌｉｎｋｉｎｇ  ｏｆ  ａｎ  Ａ−ｔｒａｃｔ  ｓｔｒａｉｇｈｔｅｎｓ  ｏｕｔ  ｂｅｎｔ  ＤＮＡ」、Ｊ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ．１９９５、２５２、８６〜１０１；「Ｐｒｅｃｌｉｎｉｃａｌ  ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ｏｆ  ｂｉｚｅｌｅｓｉｎ，ａ  ｐｏｔｅｎｔ  ｂｉｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ａｎａｌｏｇ  ｏｆ  ｔｈｅ  ＤＮＡ−ｂｉｎｄｉｎｇ  ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ  ＣＣ−１０６５」、Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１９９４、３４、３１７〜３２２；およびＤ（「ＣＣ−１０６５  ａｎａｌｏｇｓ  ｈａｖｉｎｇ  ｔｗｏ  ＣＰＩ  ｓｕｂｕｎｉｔｓ  ｕｓｅｆｕｌ  ａｓ  ａｎｔｉｔｕｍｏｒ  ａｇｅｎｔｓ  ａｎｄ  ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ  ｌｉｇｈｔ  ａｂｓｏｒｂｅｒｓ」、欧州特許出願（１９９０）第ＥＰ３５９４５４号。活性ＤＮＡアル���ル化モチーフは、原則として、生体媒質中で活性薬物に変換するプロドラッグ形態、または、さらなる変換を必要としないその活性状態のいずれかで存在することができる。二官能性架橋剤についてのプロドラッグから活性薬物への変換は、以下に示すＣＢＩ二量体が例示される：
【０００５】
【化２】
0006782250.tif 000003
【０００６】
それらのプロドラッグ状態で存在するすべての二官能性架橋剤について、対応する変換が起こる。
【０００７】
他の関連二官能性架橋剤が報告されている。（「Ｃｈｅｍｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｅｘｐｌｏｒａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｆａｍｉｌｙ  ｏｆ  ＣＣ−１０６５  ａｎｄ  ｔｈｅ  Ｄｕｏｃａｒｍｙｃｉｎ  Ｎａｔｕｒａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ」、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｔｏｐｉｃｓ  ｉｎ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、２００９、９、１４９４〜１５２４；「ＤＮＡ  ｉｎｔｅｒｓｔｒａｎｄ  ｃｒｏｓｓ−ｌｉｎｋｉｎｇ  ａｇｅｎｔｓ  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌ」、Ｃｕｒｒ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ．２０１２、１９、３６４〜３８５；「Ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  ａ  Ｎｏｖｅｌ  ＤＮＡ−ＤＮＡ  Ｉｎｔｅｒｓｔｒａｎｄ  Ａｄｅｎｉｎｅ−Ｇｕａｎｉｎｅ  Ｃｒｏｓｓ−Ｌｉｎｋｉｎｇ  Ａｇｅｎｔ」、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．２００１、１２３、４８６５〜４８６６；「Ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ｂａｓｅ  ｓｅｑｕｅｎｃｅ  ｏｎ  ｔｈｅ  ＤＮＡ  ｃｒｏｓｓ−ｌｉｎｋｉｎｇ  ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ｏｆ  ｐｙｒｒｏｌｏｂｅｎｚｏｄｉａｚｅｐｉｎｅ（ＰＢＤ）ｄｉｍｅｒｓ」、Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．２０１１、３９、５８００〜５８１２；「Ｓｅｑｕｅｎｃｅ−ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｄｕｐｌｅｘ  ＤＮＡ  ｔｈｒｏｕｇｈ  ｃｏｖａｌｅｎｔ  ｉｎｔｅｒｓｔｒａｎｄ  ｃｒｏｓｓ−ｌｉｎｋｉｎｇ：ｋｉｎｅｔｉｃ  ａｎｄ  ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｍｏｄｅｌｉｎｇ  ｓｔｕｄｉｅｓ  ｗｉｔｈ  ｐｙｒｒｏｌｏｂｅｎｚｏｄｉａｚｅｐｉｎｅ  ｄｉｍｅｒｓ」、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．２００３、４２、８２３２〜８２３９；「Ｂｉｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ａｌｋｙｌａｔｉｎｇ  ａｇｅｎｔｓ  ｄｅｒｉｖｅｄ  ｆｒｏｍ  ｄｕｏｃａｒｍｙｃｉｎ  ＳＡ：ｐｏｔｅｎｔ  ａｎｔｉｔｕｍｏｒ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｗｉｔｈ  ａｌｔｅｒｅｄ  ｓｅｑｕｅｎｃｅ  ｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙ」、Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  Ｌｅｔｔ．２０００、１０、４９５〜４９８；「Ｄｅｓｉｇｎ，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ａｎｄ  Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  １−Ｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈｙｌ−５−ｈｙｄｒｏｘｙ−１，２−ｄｉｈｙｄｒｏ−３Ｈ−ｂｅｎｚ［ｅ］ｉｎｄｏｌｅ（ｓｅｃｏ−ＣＢＩ）Ｄｉｍｅｒｓ」、Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ＆Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ２０００、８、１６０７〜１６１７。
【０００８】
細胞毒素を含有する単量体セコ−ＣＢＩに対するホスフェートプロドラッグ戦略は、Ｚｈａｏら（「Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ａｎｄ  ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ  ｏｆ  ｐｈｏｓｐｈａｔｅ  ｐｒｏｄｒｕｇｓ  ｏｆ  ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ  ＤＮＡ  ａｌｋｙｌａｔｏｒｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｔａｒｇｅｔｅｄ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｃａｎｃｅｒ」、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２０１２、５５、７６６〜７８２）およびＺｈａｎｇら（「Ｉｍｍｕｎｏｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ  ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  ｐｈｏｓｐｈａｔｅ−ｐｒｏｄｒｕｇｇｅｄ  ＤＮＡ  ｍｉｎｏｒ  ｇｒｏｏｖｅ  ｂｉｎｄｉｎｇ  ａｇｅｎｔｓ，ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ  ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  ｔｈｅｍ，ａｎｄ  ｍｅｔｈｏｄｓ  ｏｆ  ｍａｋｉｎｇ  ｔｈｅｍ  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  ｕｓｅ  ｆｏｒ  ｔｒｅａｔｉｎｇ  ｃａｎｃｅｒ」、ＷＯ２０１２／１６２４８２）によって記述されている。
【０００９】
ある特定のＣＢＩ二量体は、ＡＤＣペイロードとして有用であると記述された（「Ｉ−（Ｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）−２，３−Ｄｉｈｙｄｒｏ−ＩＨ−Ｂｅｎｚｏ［ｅ］ｉｎｄｏｌｅ  Ｄｉｍｅｒ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ−Ｄｒｕｇ  Ｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ，ａｎｄ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｏｆ  Ｕｓｅ  ａｎｄ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ」、ＷＯ２０１５／０２３３５５）。
【００１０】
直接的またはリンカーを介してのいずれかの薬物と抗体とのコンジュゲーションは、薬物のコンジュゲーションのための化学基の同定および位置、薬物放出の機構、薬物放出を提供する構造上の要素、ならびに放出された遊離薬物への構造的修飾を含む、様々な要因の考慮を伴う。加えて、薬物が抗体内在化後に放出されるならば、薬物放出の機構は、コンジュゲートの細胞内移動と一致していなければならない。
【００１１】
抗体による送達のために若干数の異なる薬物クラスが試みられてきたが、好適な毒性プロファイルを維持しながら、抗体薬物コンジュゲートとして効果的な薬物クラスは、ごくわずかしか判明していない。１つのそのようなクラスは、天然生成物ドラスタチン１０の誘導体であるアウリスタチンである。代表的なアウリスタチンは、（Ｎ−メチルバリン−バリン−ドライソロイイン−ドラプロイン−ノルエフェドリン）および（Ｎ−メチルバリン−バリン−ドライソロイイン−ドラプロイン−フェニルアラニン）を含む。他の関連チューブリン結合剤は、メイタンシンを含む（例えば、ＷＯ２００５／０３７９９２として公開された、「Ｃｅｌｌ−ｂｉｎｄｉｎｇ  ａｇｅｎｔ−ｍａｙｔａｎｓｉｎｏｉｄ  ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ  ｌｉｎｋｅｄ  ｖｉａ  ａ  ｎｏｎｃｌｅａｖａｂｌｅ  ｌｉｎｋｅｒ，ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ  ｍｅｔｈｏｄｓ，ａｎｄ  ｍｅｔｈｏｄｓ  ｕｓｉｎｇ  ｔｈｅｍ  ｆｏｒ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｃｅｌｌ  ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ」を参照）。抗体との結合において用いられてきた他の細胞毒性薬は、配列特異的二重鎖ＤＮＡ開裂を引き起こすカリケアマイシン等のＤＮＡ結合薬を含む。ＡＤＣにおいて用いられる別のクラスのＤＮＡ結合細胞毒性薬は、二量体ピロロベンゾジアゼピンを含む（例えば、ＷＯ２０１３／０４１６０６として公開された、「Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｕｎｓｙｍｍｅｔｒｉｃａｌ  ｐｙｒｒｏｌｏｂｅｎｚｏｄｉａｚｅｐｉｎｅｓ  ｄｉｍｅｒｓ  ｆｏｒ  ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ  ｉｎ  ｔａｒｇｅｔｅｄ  ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ」を参照）。抗体送達が試みられている場合の別のそのようなクラスの薬物は、デュオカルマイシン類似体ＣＣ−１０６５等のＤＮＡ結合アルキル化剤（ＷＯ２０１０／０６２１７１として公開された、「Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ＣＣ−１０６５  ａｎａｌｏｇｓ  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ  ｆｏｒ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｃａｎｃｅｒ」を参照）および関連化合物（ＷＯ２００７／０３８６５８として公開された、「Ａｎｔｉｂｏｄｙ−ｄｒｕｇ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ  ｆｏｒ  ｕｓｅ  ａｓ  ｃｙｔｏｔｏｘｉｎｓ  ｉｎ  ｃａｎｃｅｒ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ」、およびＷＯ２０１２／１６２４８２として公開された、「Ｉｍｍｕｎｏｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ  ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  ｐｈｏｓｐｈａｔｅ−ｐｒｏｄｒｕｇｇｅｄ  ＤＮＡ  ｍｉｎｏｒ  ｇｒｏｏｖｅ  ｂｉｎｄｉｎｇ  ａｇｅｎｔｓ，ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ  ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  ｔｈｅｍ，ａｎｄ  ｍｅｔｈｏｄｓ  ｏｆ  ｍａｋｉｎｇ  ｔｈｅｍ  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  ｕｓｅ  ｆｏｒ  ｔｒｅａｔｉｎｇ  ｃａｎｃｅｒ」を参照）である。しかしながら、これらの薬物はいずれも、疾患兆候および治療プロファイルに関係する限界を有し、故に、抗体コンジュゲーションを介して送達可能な、改善された特性を持つ追加の薬物が依然として必要である。したがって、本発明は、ペイロードとして二量体を持つ新規ＡＤＣを提供する。
【００１２】
強力なＤＮＡアルキル化モチーフであることが公知である別のヘテロ環は、「ＣＴＩ」基によって代表される（ＣＴＩ：１，２，８，８ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−シクロプロパ［ｃ］チエノ［３，２−ｅ］インドール−４−オン、「Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ  ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓ  ｂｅｔｗｅｅｎ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，ｒｅａｃｔｉｖｉｔｙ，ａｎｄ  ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｄｕｏｃａｒｍｙｃｉｎｓ  ａｎｄ  ＣＣ−１０６５」、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００９、５２（１９）、５７７１〜５７８０、「Ｒａｔｉｏｎａｌ  Ｄｅｓｉｇｎ，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，ａｎｄ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｋｅｙ  Ａｎａｌｏｇｕｅｓ  ｏｆ  ＣＣ−１０６５  ａｎｄ  ｔｈｅ  Ｄｕｏｃａｒｍｙｃｉｎｓ」、Ｊ．ＡＭ．ＣＨＥＭ．ＳＯＣ．２００７、１２９、１４０９２〜１４０９９）。ＣＴＩ含有デュオカルマイシン単量体は、ＡＤＣペイロードとして記述されてきた（「Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｉｚｅｄ  ｔｈｉｅｎｏ−ｉｎｄｏｌｅ  ｄｅｒｉｖｓ．ｏｐｔｉｏｎａｌｌｙ  ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  ａ  ｐｅｐｔｉｄｉｃ  ｒｅｓｉｄｕｅ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｃａｎｃｅｒ  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  ｕｓｅ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ」、ＷＯ２０１３／１４９９４６、「Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｎｅｗ  ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｉｚｅｄ  ａｌｋｙｌａｔｉｎｇ  ａｇｅｎｔｓ  ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  ａ  ｔｈｉｅｎｏ−ｉｎｄｏｌｅ  ｍｏｉｅｔｙ  ｌｉｎｋｅｄ  ｔｏ  ａ  ＤＮＡ−ｂｉｎｄｉｎｇ  ｍｏｉｅｔｙ  ｆｏｒ  ｔｒｅａｔｉｎｇ  ｃａｎｃｅｒｓ  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  ｕｓｅ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｐｒｅｐｎ．ｏｆ  ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ」、ＷＯ２０１３／１４９９４８）。「ＣＢＩ」、「ＣＰＩ」および「ＣＴＩ」の間の構造差を、下記の図面において描写する：
【００１３】
【化３】
0006782250.tif 000004
【００１４】
ＣＢＩ、ＣＰＩおよびＣＴＩは、第１の芳香族環が異なり、ＣＢＩがフェニル、ＣＰＩがピロール、およびＣＴＩがチオフェンヘテロ環をそれぞれ有する。図面は、塩化物プロドラッグも示す。これらのプロドラッグは、生体媒質中で塩化水素を失い活性薬物に変換される。したがって、塩化物プロドラッグおよび活性シクロプロピル種はいずれも、それらの生物学的活性に関して同等とみなす必要がある。ＣＢＩ、ＣＰＩおよび関連基についての塩化物プロドラッグの概念は、文献において十分に証明されてきた（「Ｄｅｓｉｇｎ，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，ａｎｄ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｄｕｏｃａｒｍｙｃｉｎ  Ｏ−Ａｍｉｎｏ  Ｐｈｅｎｏｌ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ  Ｓｕｂｊｅｃｔ」、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２０１０、５３、７７３１〜７７３８、およびその中の参考文献８）。
【００１５】
ＣＴＩ基に関して、２つの構造バリエーション、すなわち、下記の図面に示すＭｅ−ＣＴＩおよびイソ−Ｍｅ−ＣＴＩ基に特に関心が持たれる：
【００１６】
【化４】
0006782250.tif 000005
【００１７】
Ｍｅ−ＣＴＩおよびイソ−Ｍｅ−ＣＴＩ基はいずれも、デュオカルマイシンの文脈で記述されてきた（「Ｃｈｅｍｉｃａｌ  ａｎｄ  ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ｅｘｐｌｏｒａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｆａｍｉｌｙ  ｏｆ  ＣＣ−１０６５  ａｎｄ  ｔｈｅ  ｄｕｏｃａｒｍｙｃｉｎ  ｎａｔｕｒａｌ  ｐｒｏｄｕｃｔｓ」、Ｃｕｒｒ  Ｔｏｐ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ．２００９、９（１６）、１４９４〜１５２４）。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１８】
本発明は、ＣＴＩモチーフに基づく新たな構造的二量体類似体について記述する。本発明は、対応するＣＴＩ二量体およびＣＢＩ−ＣＴＩ混合構造のためのスペーサー要素についても記述する。ＣＢＩおよびＣＴＩという用語は、塩化物プロドラッグバージョンおよび活性シクロプロピル種の両方に使用される。加えて、これらの二量体種へのリンカー置換および抗体薬物コンジュゲートの調製が記述される。
【００１９】
ＣＴＩモチーフを含有する二量体は公知でなく、本発明におけるＣＴＩ二量体の使用は、先に記述した二量体種と比較して、化学反応性および生物学的特性における著しい変化をもたらす。それ故、ＣＴＩ種を用いて調製された二量体は、弁別的な薬物エンティティを表す。本発明において、本発明者らは、２つのＣＴＩ基または１つのＣＢＩおよび１つのＣＴＩ基を担持するハイブリッドのいずれかを含有する新たな二量体について記述する。さらに、本発明者らは、これらの二量体種が、抗体との結合のために、好適なリンカー分子と如何にして接続されるかについて開示する。
【００２０】
より具体的には、本発明は、ＣＴＩ／ＣＴＩベースおよび／またはＣＴＩ／ＣＢＩベースの（本明細書において詳述されている通り、ＣＢＩおよびＣＴＩのセコ形態を含む）二量体を含む細胞毒性二量体、そのような二量体を含む抗体薬物コンジュゲート、ならびにそれらを使用してがんおよび他の適応症を治療するための方法を対象とする。ＣＴＩおよびＣＢＩ構造はいずれも、それらのセコ形態によって表すことができ、本明細書において詳述されている通り、置換および誘導体化することができる。加えて、セコ形態のフェノール官能基は、アセテート基で誘導体化することができる。フェノール性アセテート官能基は、アセテート基が容易に加水分解して生体媒質中で遊離フェノールを生ずることから、フェノールと機能的に同等である。
【課題を解決するための手段】
【００２１】
故に、本発明は、化合物およびそれらを含有する医薬組成物、それらの調製、ならびに、主として抗がん剤であるがそれだけではない化合物の使用に関する。一態様によれば、本発明は、式Ｉの「ペイロード」化合物：
Ｆ１−Ｌ１−Ｔ−Ｌ２−Ｆ２      （式Ｉ）
または薬学的に許容できるその塩もしくは溶媒和物［式中、
Ｆ１およびＦ２は、環系Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、ＧおよびＨ：
【００２２】
【化５−１】
0006782250.tif 000006
【００２３】
【化５−２】
0006782250.tif 000007
からそれぞれ独立して選択され、
ここで、
環系Ａ、Ｂ、ＣおよびＤのうちの少なくとも１つが存在し、
各Ｒは、Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ２０アルキル、−Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、−Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、ハロ、重水素、ヒドロキシル、アルコキシ、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）２、−ＮＯ２、−Ｃ６〜Ｃ１４アリールおよび−Ｃ６〜Ｃ１４ヘテロアリールからなる群から独立して選択され、ここで、２つ以上のＲは、接合して環を形成していてもよく、前記−Ｃ６〜Ｃ１４アリールおよび−Ｃ６〜Ｃ１４ヘテロアリールは、Ｒが出現する各環系について、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、−Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、−ハロ、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキルチオ、−トリフルオロメチル、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）２、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）２、−Ｃ１〜Ｃ３アルキルチオ、−ＮＯ２または−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクリルから独立して選択される１から５つの置換基で置換されていてもよく、
各Ｖ１は、Ｖ１が出現する各環系について、独立して、結合、Ｏ、Ｎ（Ｒ）またはＳであり、
各Ｖ２は、Ｖ２が出現する各環系について、独立して、Ｏ、Ｎ（Ｒ）またはＳであり、
Ｗ１およびＷ２は、Ｗ１およびＷ２が出現する各環系について、それぞれ独立して、Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ５アルキル、−フェニル、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、−Ｃ（Ｏ）ＳＲ、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＮ（Ｒ）２または−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２であり、
各Ｘは、Ｘが出現する各環系について、独立して、−ＯＨ、−Ｏ−アシル、アジド、ハロ、シアネート、チオシアネート、イソシアネート、チオイソシアネートまたは
【００２４】
【化６】
0006782250.tif 000008
であり、
各Ｙは、Ｙが出現する各環系について、Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−ＲＡ、−Ｃ（Ｏ）ＲＡ、−Ｃ（Ｓ）ＲＡ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲＡ、−Ｓ（Ｏ）２ＯＲＡ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２、−Ｃ（Ｓ）Ｎ（ＲＡ）２、炭水化物、グリコシル、−ＮＯ２、−ＰＯ（ＯＲＡ）２、アミノ酸およびペプチド（例えば、カテプシンおよびマトリックスメタロプロテアーゼ等のプロテアーゼによって開裂されるペプチド）からなる群から独立して選択され、ここで、各ＲＡは、Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ２０アルキル、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキル、−Ｃ６〜Ｃ１４アリール、アラルキル、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクリル、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリルおよび−Ｃ１〜Ｃ２０アルキルＮ（Ｒ）２からなる群から独立して選択され、ここで、前記−Ｃ１〜Ｃ２０アルキル、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキル、−Ｃ６〜Ｃ１４アリール、アラルキル、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクリル、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリルおよび−Ｃ１〜Ｃ２０アルキルＮ（Ｒ）２は、Ｒから独立して選択される１から３つの置換基で置換されていてもよく、
各Ｚは、Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキル、−Ｃ６〜Ｃ１４アリール、−アラルキル、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクリル、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリル、−Ｃ（Ｏ）ＯＣ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）２、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＮＨ２および−Ｃ（Ｏ）−ハロからなる群から独立して選択され、ここで、前記Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキル、−Ｃ６〜Ｃ１４アリール、−アラルキル、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクリル、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリル、−Ｃ（Ｏ）ＯＣ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）２、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＮＨ２および−Ｃ（Ｏ）−ハロは、Ｚが出現する各環系について、Ｒから独立して選択される１から３つの置換基でそれぞれ置換されていてもよく、
Ｌ１およびＬ２は、直接結合、カルボニル、またはアシル部分でＦ１もしくはＦ２と結合しているカルボニルアシル基からそれぞれ独立して選択され、ここで、カルボニルアシル基は、
【００２５】
【化７】
0006782250.tif 000009
｛式中、
Ｕ１は、Ｈ、−ＣＨ３、−ＯＨ、−ＯＣＨ３、−ＮＯ２、−ＮＨ２、−ＮＨＮＨＡｃ、−ＮＨＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ３、−ＮＨＣ（Ｏ）フェニルまたは−ハロから選択され、
Ｕ２は、Ｈ、−ＯＨまたは−ＯＣＨ３であり、
Ｕ３は、Ｈ、−ＣＨ３または−Ｃ２Ｈ５であり、
Ｕ４は、ＨまたはＣＨ３Ｓ−であり、
Ｕ５およびＵ６は、Ｈ、−ハロ、−Ｃ１〜Ｃ４アルキル、−Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、−Ｃ１〜Ｃ６ジアルキルアミノ、−ＮＯ２、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ３または−ＮＨＣ（Ｏ）フェニルからそれぞれ独立して選択され、
Ｑ１は、−Ｏ−、−Ｓ−または−ＮＨ−であり、
Ｑ２およびＱ３は、それぞれ独立して、−ＣＨ−または−Ｎ−である｝
からなる群から選択され、
Ｔは、
−ＮＨＣ（Ｏ）−、
−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、
−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、
−ＯＣ（Ｏ）−、
−ＮＲＢ−Ｔ１−ＮＲＣ−｛ここで、ＲＢおよびＲＣは、それぞれ独立して、Ｈもしくは−Ｃ１〜Ｃ８アルキルであるか、または、ＲＢおよびＲＣが一緒に接合して、環を形成しており、一緒になって（ＣＨ２）２〜３であり、Ｔ１は、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）（ＣＨ２）ｎＣ（Ｏ）−（ここで、ｎは、０から５０までの整数である）および−Ｃ（Ｏ）ＰｈＣ（Ｏ）−（ここで、Ｐｈは、１，３−または１，４−フェニレンである）からなる群から選択され、Ｔ１は、１〜２つのＲで置換されていてもよい｝、
−Ｃ（Ｏ）ｈｅｔＣ（Ｏ）−｛ここで、ｈｅｔは、Ｏ、Ｎ、Ｓ、ＰおよびＢから独立して選択される１、２または３個のヘテロ原子を含有する、５から１２員の単、二または三環式ヘテロアリールであり、ここで、ｈｅｔは、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキル、−Ｃ６〜Ｃ１４アリール、アラルキル、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクリル、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリル、−ＮＨ２、−ＮＨＲＤおよび−ＮＯ２からなる群からそれぞれ独立して選択される１から８つの置換基で置換されていてもよく、ｈｅｔ上の前記任意選択の置換基は、ＲＥで置換されていてもよく、
ここで、各ＲＤは、Ｈ、ＲＥで置換されていてもよい、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキル、−Ｃ６〜Ｃ１４アリール、−アラルキル、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクリル、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリル、−Ｃ（Ｏ）ＯＣ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）２および−Ｃ（Ｏ）−ハロからなる群から独立して選択され、
ここで、各ＲＥは、Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキル、−Ｃ６〜Ｃ１４アリール、−アラルキル、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクリル、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリル、−Ｃ（Ｏ）ＯＣ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）２および−Ｃ（Ｏ）−ハロからなる群から独立して選択され、各ＲＥは、Ｒから独立して選択される１から３つの置換基で置換されていてもよい｝、
−Ｃ（Ａ１）Ｘ１−Ｔ２−Ｘ１Ｃ（Ｂ１）−｛ここで、Ｔ２は、
【００２６】
【化８】
0006782250.tif 000010
であり、
各Ｘ１は、独立して、結合、−ＮＲＥ−、−Ｏ−または−Ｓ−であり、Ａ１およびＢ１は、それぞれ独立して、＝Ｏまたは＝Ｓであり、ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、ＲＥであるか、または、Ｒ１およびＲ２が、環系を形成するか、または、Ｒ３およびＲ４が、環系を形成するか、または、Ｒ１およびＲ２、ならびにＲ３およびＲ４の両方が、それぞれ独立して、環系を形成するか、または、Ｒ１およびＲ３が、環系を形成するか、または、Ｒ２およびＲ４が、環系を形成するか、または、Ｒ１およびＲ３、ならびにＲ２およびＲ４の両方が、それぞれ独立して、環系を形成し、
ここで、前記環系は、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクリルもしくは−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリルから独立して選択されるか、または、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、Ｄ上の異なる炭素とそれぞれ結合しており、ここで、ｇおよびｊは、それぞれ独立して、０から５０までの整数であり、ｍは、１から５０までの整数であり、Ｄは、結合であるか、または、−Ｓ−、−Ｃ１〜Ｃ８アルキレン−、−Ｃ６〜Ｃ１４アリーレン−、−Ｃ６〜Ｃ１４ヘテロアリーレン−、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキレン−、−アラルキレン、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクロおよび−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロからなる群から選択され、ここで、前記−Ｃ１〜Ｃ８アルキレン−、−Ｃ６〜Ｃ１４アリーレン−、−Ｃ６〜Ｃ１４ヘテロアリーレン−、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキレン−、−アラルキレン、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクロおよび−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロは、−ＲＥ、−Ｃ（Ｏ）ＲＥ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲＥ、−Ｎ（ＲＥ）２、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）ＲＥまたは−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）ＯＲＥで置換されていてもよく、Ｄは、１から２つのＲによって追加で置換されていてもよい｝、および
−Ｇ１−Ｔ２−Ｇ２−｛ここで、Ｇ１およびＧ２は、それぞれ独立して、−Ｓ（Ｏ）Ｘ１−または−Ｓ（Ｏ）２Ｘ１−である｝
から選択される］
に関する。
【００２７】
本発明の実施形態において、変数ｎは、０から５０、好ましくは０から２５、好ましくは０から１０、および好ましくは１〜５である。好ましくは、変数ｎは、０、１、２、３、４または５であってよい。
【００２８】
本発明の他の実施形態において、変数−Ｙ−は、Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２またはＣ（Ｓ）Ｎ（ＲＡ）２であり、ここで、一方のＲＡは、水素または−Ｃ１〜Ｃ２０アルキルであり、他方のＲＡは、−Ｃ１〜Ｃ２０アルキル−Ｎ（Ｒ）２であり、そのため、構造：
【００２９】
【化９】
0006782250.tif 000011
が形成される［式中、Ａは、酸素または硫黄である］。
【００３０】
上記で注記した通り、本発明の実施形態は、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４が、それぞれ、Ｄ上の異なる炭素との結合であるものを含む。Ｄが６員の炭素環式環である場合（太字、以下）、この実施形態は、キュバン：
【００３１】
【化１０】
0006782250.tif 000012
の形態をとってよい。
【００３２】
他の形態のキュバン（例えば、本明細書において概説されている通りの置換形態）および非キュバンも可能であり、本発明に含まれる。
【００３３】
本発明の別の態様によれば、式ＩＩＡの「リンカーペイロード」化合物：
Ｌ−Ｐ（式ＩＩＡ）
または薬学的に許容できるその塩もしくは溶媒和物［式中、
Ｐは、
Ｆ１−Ｌ１−Ｔ−Ｌ２−Ｆ２
であり、ここで、
Ｆ１およびＦ２は、環系Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、ＧおよびＨ：
【００３４】
【化１１−１】
0006782250.tif 000013
【００３５】
【化１１−２】
0006782250.tif 000014
からそれぞれ独立して選択され、
ここで、
環系Ａ、Ｂ、ＣおよびＤのうちの少なくとも１つが存在し、
各Ｒは、Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ２０アルキル、−Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、−Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、ハロ、重水素、ヒドロキシル、アルコキシ、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）２、−ＮＯ２、−Ｃ６〜Ｃ１４アリールおよび−Ｃ６〜Ｃ１４ヘテロアリールからなる群から独立して選択され、ここで、２つ以上のＲは、接合して環を形成していてもよく、前記−Ｃ６〜Ｃ１４アリールおよび−Ｃ６〜Ｃ１４ヘテロアリールは、Ｒが出現する各環系について、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、−Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、−ハロ、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキルチオ、−トリフルオロメチル、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）２、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）２、−Ｃ１〜Ｃ３アルキルチオ、−ＮＯ２または−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクリルから独立して選択される１から５つの置換基で置換されていてもよく、
各Ｖ１は、Ｖ１が出現する各環系について、独立して、結合、Ｏ、Ｎ（Ｒ）またはＳであり、
各Ｖ２は、Ｖ２が出現する各環系について、独立して、Ｏ、Ｎ（Ｒ）またはＳであり、
Ｗ１およびＷ２は、Ｗ１およびＷ２が出現する各環系について、それぞれ独立して、Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ５アルキル、−フェニル、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、−Ｃ（Ｏ）ＳＲ、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＮ（Ｒ）２または−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２であり、
各Ｘは、Ｘが出現する各環系について、−ＯＨ、−Ｏ−アシル、アジド、ハロ、シアネート、チオシアネート、イソシアネート、チオイソシアネートまたは
【００３６】
【化１２】
0006782250.tif 000015
から独立して選択され、
各Ｙは、Ｙが出現する各環系について、結合、Ｈ、−Ｃ（Ｏ）ＲＡ、−Ｃ（Ｓ）ＲＡ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲＡ、−Ｓ（Ｏ）２ＯＲＡ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２、−Ｃ（Ｓ）Ｎ（ＲＡ）２、グリコシル等の炭水化物、−ＮＯ２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＡ）２、アミノ酸およびペプチド（特に、カテプシンおよびマトリックスメタロプロテアーゼ等のプロテアーゼによって開裂されるペプチド）から独立して選択され、ここで、各ＲＡは、Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ２０アルキル、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキル、−Ｃ６〜Ｃ１４アリール、アラルキル、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクリル、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリル、−Ｃ１〜Ｃ２０アルキルＮ（Ｒ）２、−Ｃ１〜Ｃ２０アルキレン、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキレン、−Ｃ６〜Ｃ１４アリーレン、アラルキレン、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクロ、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロおよび−Ｃ１〜Ｃ２０アルキルＮ（Ｒ）−ならびにＲＦから独立して選択され、ここで、前記ＲＡは、Ｒから独立して選択される１から３つの置換基で置換されていてもよく、１つのＹは二価であり、Ｌと結合しており、
ＲＦは、−Ｎ（Ｒ６）ＱＮ（Ｒ５）Ｃ（Ｏ）−であり、カルボニル隣接Ｎ（Ｒ５）でＬと結合しており、ここで、Ｒ５およびＲ６は、Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキル、−Ｃ６〜Ｃ１４アリール、−アラルキル、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクリルおよび−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリルからなる群からそれぞれ独立して選択されるか、または、Ｒ５もしくはＲ６は、Ｑ上の置換炭素と接合して、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロ環式もしくは−Ｃ６〜Ｃ１４ヘテロアリール環を形成するか、または、Ｒ５およびＲ６が一緒に接合して、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロ環式もしくは−Ｃ６〜Ｃ１４ヘテロアリール環系を形成しており、Ｑは、−Ｃ１〜Ｃ８アルキレン−、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキレン−、−Ｃ６〜Ｃ１４アリーレン−、−アラルキレン−、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクロ−または−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ−であり、ここで、Ｑ、Ｒ５およびＲ６は、Ｒから独立して選択される１から３つの置換基でそれぞれ独立して置換されていてもよく、
各Ｚは、Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキル、−Ｃ６〜Ｃ１４アリール、−アラルキル、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクリル、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリル、−Ｃ（Ｏ）ＯＣ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）２、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＮＨ２および−Ｃ（Ｏ）−ハロからなる群から独立して選択され、ここで、前記Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキル、−Ｃ６〜Ｃ１４アリール、−アラルキル、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクリル、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリル、−Ｃ（Ｏ）ＯＣ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）２、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＮＨ２および−Ｃ（Ｏ）−ハロは、Ｚが出現する各環系について、Ｒから独立して選択される１から３つの置換基でそれぞれ置換されていてもよく、
Ｌ１およびＬ２は、直接結合、カルボニル、またはアシル部分でＦ１もしくはＦ２と結合しているカルボニルアシル基からそれぞれ独立して選択され、ここで、カルボニルアシル基は、
【００３７】
【化１３】
0006782250.tif 000016
｛式中、
Ｕ１は、Ｈ、−ＣＨ３、−ＯＨ、−ＯＣＨ３、−ＮＯ２、−ＮＨ２、−ＮＨＮＨＡｃ、−ＮＨＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ３、−ＮＨＣ（Ｏ）フェニルまたは−ハロから選択され、
Ｕ２は、Ｈ、−ＯＨまたは−ＯＣＨ３であり、
Ｕ３は、Ｈ、−ＣＨ３または−Ｃ２Ｈ５であり、
Ｕ４は、ＨまたはＣＨ３Ｓ−であり、
Ｕ５およびＵ６は、Ｈ、−ハロ、−Ｃ１〜Ｃ４アルキル、−Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、−Ｃ１〜Ｃ６ジアルキルアミノ、−ＮＯ２、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ３または−ＮＨＣ（Ｏ）フェニルからそれぞれ独立して選択され、
Ｑ１は、−Ｏ−、−Ｓ−または−ＮＨ−であり、
Ｑ２およびＱ３は、それぞれ独立して、−ＣＨ−または−Ｎ−である｝
からなる群から選択され、
Ｔは、
−ＮＨＣ（Ｏ）−、
−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、
−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、
−ＯＣ（Ｏ）−、
−ＮＲＢ−Ｔ１−ＮＲＣ−｛ここで、ＲＢおよびＲＣは、それぞれ独立して、Ｈもしくは−Ｃ１〜Ｃ８アルキルであるか、または、ＲＢおよびＲＣが一緒に接合して、環を形成しており、一緒になって（ＣＨ２）２〜３であり、Ｔ１は、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）（ＣＨ２）ｎＣ（Ｏ）−（ここで、ｎは、０から５０までの整数である）および−Ｃ（Ｏ）ＰｈＣ（Ｏ）−（ここで、Ｐｈは、１，３−または１，４−フェニレンである）からなる群から選択され、Ｔ１は、１〜２つのＲで置換されていてもよい｝、
−Ｃ（Ｏ）ｈｅｔＣ（Ｏ）−｛ここで、ｈｅｔは、Ｏ、Ｎ、Ｓ、ＰおよびＢから独立して選択される１、２または３個のヘテロ原子を含有する、５から１２員の単、二または三環式ヘテロアリールであり、ここで、ｈｅｔは、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキル、−Ｃ６〜Ｃ１４アリール、アラルキル、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクリル、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリル、−ＮＨ２、−ＮＨＲＤおよび−ＮＯ２からなる群からそれぞれ独立して選択される１から８つの置換基で置換されていてもよく、ｈｅｔ上の前記任意選択の置換基は、ＲＥで置換されていてもよく、
ここで、各ＲＤは、Ｈ、ＲＥで置換されていてもよい、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキル、−Ｃ６〜Ｃ１４アリール、−アラルキル、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクリル、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリル、−Ｃ（Ｏ）ＯＣ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）２および−Ｃ（Ｏ）−ハロからなる群から独立して選択され、
ここで、各ＲＥは、Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキル、−アリール、−アラルキル、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクリル、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリル、−Ｃ（Ｏ）ＯＣ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）２および−Ｃ（Ｏ）−ハロからなる群から独立して選択され、各ＲＥは、Ｒから独立して選択される１から３つの置換基で置換されていてもよい｝、
−Ｃ（Ａ１）Ｘ１−Ｔ２−Ｘ１Ｃ（Ｂ１）−｛ここで、Ｔ２は、
【００３８】
【化１４】
0006782250.tif 000017
であり、
各Ｘ１は、独立して、結合、−ＮＲＥ−、−Ｏ−または−Ｓ−であり、Ａ１およびＢ１は、それぞれ独立して、＝Ｏまたは＝Ｓであり、ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、ＲＥであるか、または、Ｒ１およびＲ２が、環系を形成するか、または、Ｒ３およびＲ４が、環系を形成するか、または、Ｒ１およびＲ２、ならびにＲ３およびＲ４の両方が、それぞれ独立して、環系を形成するか、または、Ｒ１およびＲ３が、環系を形成するか、または、Ｒ２およびＲ４が、環系を形成するか、または、Ｒ１およびＲ３、ならびにＲ２およびＲ４の両方が、それぞれ独立して、環系を形成し、ここで、前記環系は、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクリルもしくは−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリルから独立して選択されるか、または、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、Ｄ上の異なる炭素とそれぞれ結合しており、ここで、ｇおよびｊは、それぞれ独立して、０から５０までの整数であり、ｍは、１から５０までの整数であり、Ｄは、結合であるか、または、−Ｓ−、−Ｃ１〜Ｃ８アルキレン−、−Ｃ６〜Ｃ１４アリーレン−、−Ｃ６〜Ｃ１４ヘテロアリーレン−、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキレン−、−アラルキレン、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクロおよび−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロからなる群から選択され、ここで、前記−Ｃ１〜Ｃ８アルキレン−、−Ｃ６〜Ｃ１４アリーレン−、−Ｃ６〜Ｃ１４ヘテロアリーレン−、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキレン−、−アラルキレン、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクロおよび−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロは、−ＲＥ、−Ｃ（Ｏ）ＲＥ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲＥ、−Ｎ（ＲＥ）２、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）ＲＥまたは−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）ＯＲＥで置換されていてもよく、Ｄは、１から２つのＲによって追加で置換されていてもよい｝、および
−Ｇ１−Ｔ２−Ｇ２−｛ここで、Ｇ１およびＧ２は、それぞれ独立して、−Ｓ（Ｏ）Ｘ１−または−Ｓ（Ｏ）２Ｘ１−である｝
から選択され、
Ｌは、ＬＡ−ＬＢ−（ＬＣ）１〜３｛ここで、ＬＡは、−ハロ、−Ｎ（Ｒ）２、−ＣＯＮ（Ｒ）２、−ＮＯ２または−ＣＯＮ（Ｒ）２で置換されていてもよい−Ｓ−アリール、−ＮＯ２で置換されていてもよい−Ｓ−ヘテロアリール、アルキル−ＳＯ２−ヘテロアリール、アリールＳＯ２−ヘテロアリール−、
【００３９】
【化１５】
0006782250.tif 000018
からなる群から選択され、
ＬＢは、ＬＢ１−ＬＢ２−ＬＢ３であり、ここで、ＬＢ１は、存在しないか、または、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ−、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲＣ１〜Ｃ６アルキル−、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜６−、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキルＮＲＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜６−、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜６−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−Ｓ−Ｓ−Ｃ１〜Ｃ６アルキルＮＲＣ（Ｏ）ＣＨ２−、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜６ＮＲＣ（Ｏ）ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル−ＮＲＣ（Ｏ）Ｃ１〜６アルキル−、−Ｎ＝ＣＲ−フェニル−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−、−Ｎ＝ＣＲ−フェニル−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜６ＮＲＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル−フェニル（ＮＲ−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル）１〜４−、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜６−ＮＲＣ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル−、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−、−Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ（ＮＲ−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル）−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−および（−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−）１〜２０からなる群から選択される１つまたは複数の構成要素であり、
ＬＢ２は、ＡＡ０〜１２であり、ここで、ＡＡは、天然アミノ酸、非天然アミノ酸または−（ＣＲ１５）ｏ−Ｓ−Ｓ−（ＣＲ１５）ｐ（ここで、ｏおよびｐは、それぞれ独立して、１から２０までの整数である）であり、
ＬＢ３は、−ＰＡＢＡ−、−ＰＡＢＣ−、−Ｃ（Ｏ）（ＣＨ２）ｎＣ（Ｏ）−であるか、または存在せず、
ＬＣは、存在しないか、または、−Ｃ１〜Ｃ６アルキレン−、−ＮＲＣ３〜Ｃ８−ヘテロシクリルＮＲ−、−ＮＲＣ３〜Ｃ８−カルボシクリルＮＲ−、−ＮＲＣ１〜Ｃ６アルキルＮＲ−、−ＮＲＣ１〜Ｃ６アルキレン−、−Ｓ−、−ＮＲ−、−ＮＲＮＲ−、−Ｏ（ＣＲ２）１〜４Ｓ−Ｓ（ＣＲ２）１〜４Ｎ（Ｒ）−、−ＮＲＣ１〜Ｃ６−アルキレンフェニレンＮＲ−、−ＮＲＣ１〜Ｃ６アルキレンフェニレンＳＯ２ＮＲ−、−ＯＣ１〜Ｃ６アルキルＳ−ＳＣ１〜Ｃ６アルキルＣ（ＣＯＯＲ）ＮＲ−、−ＮＲＣ（ＣＯＯＲ）Ｃ１〜Ｃ６アルキルＳ−ＳＣ１〜Ｃ６アルキルＯ−、
【００４０】
【化１６】
0006782250.tif 000019
（式中、
ＸＡは、ＣＲまたはＮであり、
ＸＢは、ＣＨ、ＣＲ（Ｃ（Ｒ）２）１〜３ＮＲ、ＣＲ（Ｃ（Ｒ）２）１〜３Ｏ、ＣＲ（Ｃ（Ｒ）２）１〜３Ｃ（Ｏ）ＮＲ、ＣＲ−（Ｃ（Ｒ）２）１〜３Ｃ（Ｏ）ＮＲＮＲ、ＣＲ（Ｃ（Ｒ）２）１〜３ＳＯ２ＮＲ、ＣＲ（Ｃ（Ｒ）２）１〜３ＮＲＮＲ、ＣＲ（Ｃ（Ｒ）２）１〜３ＮＲＣ（Ｏ）またはＮであり、
各ＸＣは、Ｒであり、
各ＸＤは、−（ＣＨ２）１〜５−であるか、または存在せず、
ＸＥは、Ｏ、Ｓ、Ｃ（Ｒ）２、Ｃ（Ｒ）（Ｃ（Ｒ）２）１〜３−ＮＲ２またはＮＲであり、
各ＸＦは、（Ｃ（Ｒ）２）１〜３−ＮＲまたはＣ（Ｒ）２−（Ｃ（Ｒ）２）１〜３−Ｏである）
からなる群から独立して選択される｝
である］
が提供される。
【００４１】
本発明の他の実施形態において、変数−Ｙ−は、Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２またはＣ（Ｓ）Ｎ（ＲＡ）２であり、ここで、一方のＲＡは、水素または−Ｃ１〜Ｃ２０アルキルであり、他方のＲＡは、−Ｃ１〜Ｃ２０アルキル−Ｎ（Ｒ）−であり、そのため、構造：
【００４２】
【化１７】
0006782250.tif 000020
が形成される［式中、各Ａは、独立して、酸素または硫黄である］。
【００４３】
本発明のまた別の態様によれば、式ＩＩＩＡの抗体薬物コンジュゲート化合物：
ＡＢ−（Ｌ−Ｐ）１〜２０      （式ＩＩＩＡ）
または薬学的に許容できるその塩もしくは溶媒和物［式中、
ＡＢは、抗体であり、
Ｐは、
Ｆ１−Ｌ１−Ｔ−Ｌ２−Ｆ２
であり、ここで、
Ｆ１およびＦ２は、環系Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、ＧおよびＨ：
【００４４】
【化１８−１】
0006782250.tif 000021
【００４５】
【化１８−２】
0006782250.tif 000022
からそれぞれ独立して選択され、
ここで、
環系Ａ、Ｂ、ＣおよびＤのうちの少なくとも１つが存在し、
各Ｒは、Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ２０アルキル、−Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、−Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、ハロ、重水素、ヒドロキシル、アルコキシ、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）２、−ＮＯ２、−Ｃ６〜Ｃ１４アリールおよび−Ｃ６〜Ｃ１４ヘテロアリールからなる群から独立して選択され、ここで、２つ以上のＲは、接合して環を形成していてもよく、前記−Ｃ６〜Ｃ１４アリールおよび−Ｃ６〜Ｃ１４ヘテロアリールは、Ｒが出現する各環系について、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、−Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、−ハロ、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキルチオ、−トリフルオロメチル、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）２、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）２、−Ｃ１〜Ｃ３アルキルチオ、−ＮＯ２または−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクリルから独立して選択される１から５つの置換基で置換されていてもよく、
各Ｖ１は、Ｖ１が出現する各環系について、独立して、結合、Ｏ、Ｎ（Ｒ）またはＳであり、
各Ｖ２は、Ｖ２が出現する各環系について、独立して、Ｏ、Ｎ（Ｒ）またはＳであり、
Ｗ１およびＷ２は、Ｗ１およびＷ２が出現する各環系について、それぞれ独立して、Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ５アルキル、−フェニル、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、−Ｃ（Ｏ）ＳＲ、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＮ（Ｒ）２または−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２であり、
各Ｘは、Ｘが出現する各環系について、−ＯＨ、−Ｏ−アシル、アジド、ハロ、シアネート、チオシアネート、イソシアネート、チオイソシアネートまたは
【００４６】
【化１９】
0006782250.tif 000023
から独立して選択され、
各Ｙは、Ｙが出現する各環系について、結合、Ｈ、−Ｃ（Ｏ）ＲＡ、−Ｃ（Ｓ）ＲＡ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲＡ、−Ｓ（Ｏ）２ＯＲＡ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２、−Ｃ（Ｓ）Ｎ（ＲＡ）２、グリコシル等の炭水化物、−ＮＯ２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＡ）２、アミノ酸、およびペプチド（特に、カテプシンおよびマトリックスメタロプロテアーゼ等のプロテアーゼによって開裂されるペプチド）から独立して選択され、ここで、各ＲＡは、Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ２０アルキル、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキル、−Ｃ６〜Ｃ１４アリール、アラルキル、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクリル、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリル、−Ｃ１〜Ｃ２０アルキルＮ（Ｒ）２、−Ｃ１〜Ｃ２０アルキレン、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキレン、−Ｃ６〜Ｃ１４アリーレン、アラルキレン、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクロ、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロおよび−Ｃ１〜Ｃ２０アルキルＮ（Ｒ）−ならびにＲＦから独立して選択され、ここで、前記ＲＡは、Ｒから独立して選択される１から３つの置換基で置換されていてもよく、１つのＹは二価であり、Ｌと結合しており、
ＲＦは、−Ｎ（Ｒ６）ＱＮ（Ｒ５）Ｃ（Ｏ）−であり、カルボニル隣接Ｎ（Ｒ５）でＬと結合しており、ここで、Ｒ５およびＲ６は、Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキル、−Ｃ６〜Ｃ１４アリール、−アラルキル、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクリルおよび−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリルからなる群からそれぞれ独立して選択されるか、または、Ｒ５もしくはＲ６は、Ｑ上の置換炭素と接合して、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロ環式もしくは−Ｃ６〜Ｃ１４ヘテロアリール環を形成するか、または、Ｒ５およびＲ６が一緒に接合して、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロ環式もしくは−Ｃ６〜Ｃ１４ヘテロアリール環系を形成しており、Ｑは、−Ｃ１〜Ｃ８アルキレン−、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキレン−、−Ｃ６〜Ｃ１４アリーレン−、−アラルキレン−、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクロ−または−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ−であり、ここで、Ｑ、Ｒ５およびＲ６は、Ｒから独立して選択される１から３つの置換基でそれぞれ独立して置換されていてもよく、
各Ｚは、Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキル、−Ｃ６〜Ｃ１４アリール、−アラルキル、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクリル、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリル、−Ｃ（Ｏ）ＯＣ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）２、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＮＨ２および−Ｃ（Ｏ）−ハロからなる群から独立して選択され、ここで、前記−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキル、−Ｃ６〜Ｃ１４アリール、−アラルキル、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクリル、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリル、−Ｃ（Ｏ）ＯＣ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）２、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＮＨ２および−Ｃ（Ｏ）−ハロは、Ｚが出現する各環系について、Ｒから独立して選択される１から３つの置換基でそれぞれ置換されていてもよく、
Ｌ１およびＬ２は、直接結合、カルボニル、またはアシル部分でＦ１もしくはＦ２と結合しているカルボニルアシル基からそれぞれ独立して選択され、ここで、カルボニルアシル基は、
【００４７】
【化２０】
0006782250.tif 000024
｛式中、
Ｕ１は、Ｈ、−ＣＨ３、−ＯＨ、−ＯＣＨ３、−ＮＯ２、−ＮＨ２、−ＮＨＮＨＡｃ、−ＮＨＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ３、−ＮＨＣ（Ｏ）フェニルまたは−ハロから選択され、
Ｕ２は、Ｈ、−ＯＨまたは−ＯＣＨ３であり、
Ｕ３は、Ｈ、−ＣＨ３または−Ｃ２Ｈ５であり、
Ｕ４は、ＨまたはＣＨ３Ｓ−であり、
Ｕ５およびＵ６は、Ｈ、−ハロ、−Ｃ１〜Ｃ４アルキル、−Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、−Ｃ１〜Ｃ６ジアルキルアミノ、−ＮＯ２、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ３または−ＮＨＣ（Ｏ）フェニルからそれぞれ独立して選択され、
Ｑ１は、−Ｏ−、−Ｓ−または−ＮＨ−であり、
Ｑ２およびＱ３は、それぞれ独立して、−ＣＨ−または−Ｎ−である｝
からなる群から選択され、
Ｔは、
−ＮＨＣ（Ｏ）−、
−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、
−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、
−ＯＣ（Ｏ）−、
−ＮＲＢ−Ｔ１−ＮＲＣ−｛ここで、ＲＢおよびＲＣは、それぞれ独立して、Ｈもしくは−Ｃ１〜Ｃ８アルキルであるか、または、ＲＢおよびＲＣが一緒に接合して、環を形成しており、一緒になって（ＣＨ２）２〜３であり、Ｔ１は、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）（ＣＨ２）ｎＣ（Ｏ）−（ここで、ｎは、０から５０までの整数である）、および−Ｃ（Ｏ）ＰｈＣ（Ｏ）−（ここで、Ｐｈは、１，３−または１，４−フェニレンである）からなる郡から選択され、Ｔ１は、１〜２つのＲで置換されていてもよい｝、
−Ｃ（Ｏ）ｈｅｔＣ（Ｏ）−｛ここで、ｈｅｔは、Ｏ、Ｎ、Ｓ、ＰおよびＢから独立して選択される１、２または３個のヘテロ原子を含有する、５から１２員の単、二または三環式ヘテロアリールであり、ここで、ｈｅｔは、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキル、−Ｃ６〜Ｃ１４アリール、アラルキル、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクリル、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリル、−ＮＨ２、−ＮＨＲＤおよび−ＮＯ２からなる群からそれぞれ独立して選択される１から８つの置換基で置換されていてもよく、ｈｅｔ上の前記任意選択の置換基は、ＲＥで置換されていてもよく、
ここで、各ＲＤは、Ｈ、またはＲＥで置換されていてもよい、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキル、−Ｃ６〜Ｃ１４アリール、−アラルキル、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクリル、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリル、−Ｃ（Ｏ）ＯＣ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）２および−Ｃ（Ｏ）−ハロからなる群から独立して選択され、
ここで、各ＲＥは、Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキル、−アリール、−アラルキル、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクリル、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリル、−Ｃ（Ｏ）ＯＣ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）２および−Ｃ（Ｏ）−ハロからなる群から独立して選択され、各ＲＥは、Ｒから独立して選択される１から３つの置換基で置換されていてもよい｝、
−Ｃ（Ａ１）Ｘ１−Ｔ２−Ｘ１Ｃ（Ｂ１）−｛ここで、Ｔ２は、
【００４８】
【化２１】
0006782250.tif 000025
であり、
各Ｘ１は、独立して、結合、−ＮＲＥ−、−Ｏ−または−Ｓ−であり、Ａ１およびＢ１は、それぞれ独立して、＝Ｏまたは＝Ｓであり、ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、ＲＥであるか、または、Ｒ１およびＲ２が、環系を形成するか、または、Ｒ３およびＲ４が、環系を形成するか、または、Ｒ１およびＲ２、ならびにＲ３およびＲ４の両方が、それぞれ独立して、環系を形成するか、または、Ｒ１およびＲ３が、環系を形成するか、または、Ｒ２およびＲ４が、環系を形成するか、または、Ｒ１およびＲ３、ならびにＲ２およびＲ４の両方が、それぞれ独立して、環系を形成し、ここで、前記環系は、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクリルもしくは−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリルから独立して選択されるか、または、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、Ｄ上の異なる炭素とそれぞれ結合しており、ここで、ｇおよびｊは、それぞれ独立して、０から５０までの整数であり、ｍは、１から５０までの整数であり、Ｄは、結合であるか、または、−Ｓ−、−Ｃ１〜Ｃ８アルキレン−、−Ｃ６〜Ｃ１４アリーレン−、−Ｃ６〜Ｃ１４ヘテロアリーレン−、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキレン−、−アラルキレン、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクロおよび−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロからなる群から選択され、ここで、前記−Ｃ１〜Ｃ８アルキレン−、−Ｃ６〜Ｃ１４アリーレン−、−Ｃ６〜Ｃ１４ヘテロアリーレン−、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキレン−、−アラルキレン、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクロおよび−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロは、−ＲＥ、−Ｃ（Ｏ）ＲＥ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲＥ、−Ｎ（ＲＥ）２、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）ＲＥまたは−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）ＯＲＥで置換されていてもよく、Ｄは、１から２つのＲによって追加で置換されていてもよい｝、および
−Ｇ１−Ｔ２−Ｇ２−｛ここで、Ｇ１およびＧ２は、それぞれ独立して、−Ｓ（Ｏ）Ｘ１−または−Ｓ（Ｏ）２Ｘ１−である｝
から選択され、
Ｌは、ＬＡ−ＬＢ−（ＬＣ）１〜３
｛ＬＡは、ＡＢとの結合、−ＮＲ−（ＡＢとの結合）、−ヘテロアリール−（ＡＢとの結合）、
【００４９】
【化２２】
0006782250.tif 000026
から選択され、
ＬＢは、ＬＢ１−ＬＢ２−ＬＢ３であり、
ここで、ＬＢ１は、存在しないか、または、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ−、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲＣ１〜Ｃ６アルキル−、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜６−、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキルＮＲＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜６−、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜６−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−Ｓ−Ｓ−Ｃ１〜Ｃ６アルキルＮＲＣ（Ｏ）ＣＨ２−、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜６ＮＲＣ（Ｏ）ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル−ＮＲＣ（Ｏ）Ｃ１〜６アルキル−、−Ｎ＝ＣＲ−フェニル−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−、−Ｎ＝ＣＲ−フェニル−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜６ＮＲＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル−フェニル（ＮＲ−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル）１〜４−、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜６−ＮＲＣ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル−、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−、−Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ（ＮＲ−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル）−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−および（−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−）１〜２０からなる群から選択される１つまたは複数の構成要素であり、
ＬＢ２は、ＡＡ０〜１２であり、ここで、ＡＡは、天然アミノ酸、非天然アミノ酸または−（ＣＲ１５）ｏ−Ｓ−Ｓ−（ＣＲ１５）ｐ（ここで、ｏおよびｐは、それぞれ独立して、１から２０までの整数である）であり、
ＬＢ３は、−ＰＡＢＡ−、−ＰＡＢＣ−、−Ｃ（Ｏ）（ＣＨ２）ｎＣ（Ｏ）−であるか、または存在せず、
ＬＣは、存在しないか、または、−Ｃ１〜Ｃ６アルキレン−、−ＮＲＣ３〜Ｃ８−ヘテロシクリルＮＲ−、−ＮＲＣ３〜Ｃ８−カルボシクリルＮＲ−、−ＮＲＣ１〜Ｃ６アルキルＮＲ−、−ＮＲＣ１〜Ｃ６アルキレン−、−Ｓ−、−ＮＲ−、−ＮＲＮＲ−、−Ｏ（ＣＲ２）１〜４Ｓ−Ｓ（ＣＲ２）１〜４Ｎ（Ｒ）−、−ＮＲＣ１〜Ｃ６−アルキレンフェニレンＮＲ−、−ＮＲＣ１〜Ｃ６アルキレンフェニレンＳＯ２ＮＲ−、−ＯＣ１〜Ｃ６アルキルＳ−ＳＣ１〜Ｃ６アルキルＣ（ＣＯＯＲ）ＮＲ−、−ＮＲＣ（ＣＯＯＲ）Ｃ１〜Ｃ６アルキルＳ−ＳＣ１〜Ｃ６アルキルＯ−、
【００５０】
【化２３】
0006782250.tif 000027
（式中、
ＸＡは、ＣＲまたはＮであり、
ＸＢは、ＣＨ、ＣＲ（Ｃ（Ｒ）２）１〜３ＮＲ、ＣＲ（Ｃ（Ｒ）２）１〜３Ｏ、ＣＲ（Ｃ（Ｒ）２）１〜３Ｃ（Ｏ）ＮＲ、ＣＲ−（Ｃ（Ｒ）２）１〜３Ｃ（Ｏ）ＮＲＮＲ、ＣＲ（Ｃ（Ｒ）２）１〜３ＳＯ２ＮＲ、ＣＲ（Ｃ（Ｒ）２）１〜３ＮＲＮＲ、ＣＲ（Ｃ（Ｒ）２）１〜３ＮＲＣ（Ｏ）またはＮであり、
各ＸＣは、Ｒであり、
各ＸＤは、−（ＣＨ２）１〜５−であるか、または存在せず、
ＸＥは、Ｏ、Ｓ、Ｃ（Ｒ）２、Ｃ（Ｒ）（Ｃ（Ｒ）２）１〜３−ＮＲ２またはＮＲであり、
各ＸＦは、（Ｃ（Ｒ）２）１〜３−ＮＲまたはＣ（Ｒ）２−（Ｃ（Ｒ）２）１〜３−Ｏである）
からなる群から独立して選択される｝
である］が提供される。
【００５１】
本発明の別の態様によれば、式ＩＩＢの「リンカーペイロード」化合物：
【００５２】
【化２４】
0006782250.tif 000028
または薬学的に許容できるその塩もしくは溶媒和物［式中、
Ｆ１およびＦ２は、環系Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、ＧおよびＨ：
【００５３】
【化２５−１】
0006782250.tif 000029
【００５４】
【化２５−２】
0006782250.tif 000030
からそれぞれ独立して選択され、
ここで、
環系Ａ、Ｂ、ＣおよびＤのうちの少なくとも１つが存在し、
各Ｒは、Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ２０アルキル、−Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、−Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、ハロ、重水素、ヒドロキシル、アルコキシ、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）２、−ＮＯ２、−Ｃ６〜Ｃ１４アリールおよび−Ｃ６〜Ｃ１４ヘテロアリールからなる群から独立して選択され、ここで、２つ以上のＲは、接合して環を形成していてもよく、前記−Ｃ６〜Ｃ１４アリールおよび−Ｃ６〜Ｃ１４ヘテロアリールは、Ｒが出現する各環系について、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、−Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、−ハロ、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキルチオ、−トリフルオロメチル、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）２、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）２、−Ｃ１〜Ｃ３アルキルチオ、−ＮＯ２または−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクリルから独立して選択される１から５つの置換基で置換されていてもよく、
各Ｖ１は、Ｖ１が出現する各環系について、独立して、結合、Ｏ、Ｎ（Ｒ）またはＳであり、
各Ｖ２は、Ｖ２が出現する各環系について、独立して、Ｏ、Ｎ（Ｒ）またはＳであり、
Ｗ１およびＷ２は、Ｗ１およびＷ２が出現する各環系について、それぞれ独立して、Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ５アルキル、−フェニル、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、−Ｃ（Ｏ）ＳＲ、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＮ（Ｒ）２または−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２であり、
各Ｘは、Ｘが出現する各環系について、独立して、−ＯＨ、−Ｏ−アシル、アジド、ハロ、シアネート、チオシアネート、イソシアネート、チオイソシアネートまたは
【００５５】
【化２６】
0006782250.tif 000031
であり、
各Ｙは、Ｙが出現する各環系について、Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−ＲＡ−Ｃ（Ｏ）ＲＡ、−Ｃ（Ｓ）ＲＡ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲＡ、−Ｓ（Ｏ）２ＯＲＡ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２、−Ｃ（Ｓ）Ｎ（ＲＡ）２、グリコシル等の炭水化物、−ＮＯ２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＡ）２、アミノ酸およびペプチド（特に、カテプシンおよびマトリックスメタロプロテアーゼ等のプロテアーゼによって開裂されるペプチド）からなる群から独立して選択され、ここで、各ＲＡは、Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ２０アルキル、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキル、−Ｃ６〜Ｃ１４アリール、アラルキル、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクリル、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリルおよび−Ｃ１〜Ｃ２０アルキルＮ（Ｒ）２からなる群から独立して選択され、ここで、前記−Ｃ１〜Ｃ２０アルキル、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキル、−Ｃ６〜Ｃ１４アリール、アラルキル、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクリル、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリルおよび−Ｃ１〜Ｃ２０アルキルＮ（Ｒ）２は、Ｒから独立して選択される１から３つの置換基で置換されていてもよく、
各Ｚは、Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキル、−Ｃ６〜Ｃ１４アリール、−アラルキル、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクリル、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリル、−Ｃ（Ｏ）ＯＣ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）２、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＮＨ２および−Ｃ（Ｏ）−ハロからなる群から独立して選択され、ここで、前記Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキル、−Ｃ６〜Ｃ１４アリール、−アラルキル、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクリル、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリル、−Ｃ（Ｏ）ＯＣ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）２、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＮＨ２および−Ｃ（Ｏ）−ハロは、Ｚが出現する各環系について、Ｒから独立して選択される１から３つの置換基でそれぞれ置換されていてもよく、
Ｌ１およびＬ２は、直接結合、カルボニル、またはアシル部分でＦ１もしくはＦ２と結合しているカルボニルアシル基からそれぞれ独立して選択され、ここで、カルボニルアシル基は、
【００５６】
【化２７】
0006782250.tif 000032
｛式中、
Ｕ１は、Ｈ、−ＣＨ３、−ＯＨ、−ＯＣＨ３、−ＮＯ２、−ＮＨ２、−ＮＨＮＨＡｃ、−ＮＨＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ３、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）フェニルまたは−ハロから選択され、
Ｕ２は、Ｈ、−ＯＨまたは−ＯＣＨ３であり、
Ｕ３は、Ｈ、−ＣＨ３または−Ｃ２Ｈ５であり、
Ｕ４は、ＨまたはＣＨ３Ｓ−であり、
Ｕ５およびＵ６は、Ｈ、−ハロ、−Ｃ１〜Ｃ４アルキル、−Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、−Ｃ１〜Ｃ６ジアルキルアミノ、−ＮＯ２、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ３または−ＮＨＣ（Ｏ）フェニルからそれぞれ独立して選択され、
Ｑ１は、−Ｏ−、−Ｓ−または−ＮＨ−であり、
Ｑ２およびＱ３は、それぞれ独立して、−ＣＨ−または−Ｎ−である｝
からなる群から選択され、
Ｔは、
−Ｃ（Ａ１）Ｘ１−Ｔ２−Ｘ１Ｃ（Ｂ１）−｛ここで、Ｔ２は、
【００５７】
【化２８】
0006782250.tif 000033
であり、
各Ｘ１は、独立して、結合、−ＮＲＥ−、−Ｏ−または−Ｓ−であり、Ａ１およびＢ１は、それぞれ独立して、＝Ｏまたは＝Ｓであり、ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、ＲＥであるか、または、Ｒ１およびＲ２が、環系を形成するか、または、Ｒ３およびＲ４が、環系を形成するか、または、Ｒ１およびＲ２、ならびにＲ３およびＲ４の両方が、それぞれ独立して、環系を形成するか、または、Ｒ１およびＲ３が、環系を形成するか、または、Ｒ２およびＲ４が、環系を形成するか、または、Ｒ１およびＲ３、ならびにＲ２およびＲ４の両方が、それぞれ独立して、環系を形成し、ここで、環系は、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクリルまたは−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリルから独立して選択されるか、または、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、Ｄ上の異なる炭素とそれぞれ結合しており、ここで、ｇおよびｊは、それぞれ独立して、０から５０までの整数であり、ｍは、１から５０までの整数であり、Ｄは、−Ｃ１〜Ｃ８アルキレン−、−Ｃ６〜Ｃ１４アリーレン−、−Ｃ６〜Ｃ１４ヘテロアリーレン−、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキレン−、−アラルキレン、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクロおよび−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロからなる群から選択され、ここで、前記−Ｃ１〜Ｃ８アルキレン−、−Ｃ６〜Ｃ１４アリーレン−、−Ｃ６〜Ｃ１４ヘテロアリーレン−、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキレン−、−アラルキレン、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクロおよび−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロは、Ｎ（ＲＥ）Ｃ（Ｏ）−（ここで、カルボニルはＬと結合している）および−Ｃ（Ｏ）−（ここで、カルボニルはＬと結合している）から選択される基の１員で置換されており、１から２つのＲによって追加で置換されていてもよく、
ここで、各ＲＥは、Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキル、−アリール、−アラルキル、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクリル、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリル、−Ｃ（Ｏ）ＯＣ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）２および−Ｃ（Ｏ）−ハロからなる群から独立して選択され、各ＲＥは、Ｒから独立して選択される１から３つの置換基で置換されていてもよい｝
から選択され、
Ｌは、ＬＡ−ＬＢ−（ＬＣ）１〜３
｛ＬＡは、−ハロ、−Ｎ（Ｒ）２、−ＣＯＮ（Ｒ）２、−ＮＯ２または−ＣＯＮＲ２で置換されていてもよい−Ｓ−アリール、−ＮＯ２で置換されていてもよい−Ｓ−ヘテロアリール、アルキル−ＳＯ２−ヘテロアリール、アリールＳＯ２−ヘテロアリール−、
【００５８】
【化２９】
0006782250.tif 000034
から選択され、
ＬＢは、ＬＢ１−ＬＢ２−ＬＢ３であり、
ここで、ＬＢ１は、存在しないか、または、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ−、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲＣ１〜Ｃ６アルキル−、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜６−、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキルＮＲＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜６−、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜６−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−Ｓ−Ｓ−Ｃ１〜Ｃ６アルキルＮＲＣ（Ｏ）ＣＨ２−、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜６ＮＲＣ（Ｏ）ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル−ＮＲＣ（Ｏ）Ｃ１〜６アルキル−、−Ｎ＝ＣＲ−フェニル−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−、−Ｎ＝ＣＲ−フェニル−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜６ＮＲＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル−フェニル（ＮＲ−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル）１〜４−、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜６−ＮＲＣ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル−、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−、−Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ（ＮＲ−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル）−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−および（−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−）１〜２０からなる群から選択される１つまたは複数の構成要素であり、
ＬＢ２は、ＡＡ０〜１２であり、ここで、ＡＡは、天然アミノ酸、非天然アミノ酸または−（ＣＲ１５）ｏ−Ｓ−Ｓ−（ＣＲ１５）ｐ（ここで、ｏおよびｐは、それぞれ独立して、１から２０までの整数である）であり、
ＬＢ３は、−ＰＡＢＡ−、−ＰＡＢＣ−、−Ｃ（Ｏ）（ＣＨ２）ｎＣ（Ｏ）−であるか、または存在せず、
ＬＣは、存在しないか、または、−Ｃ１〜Ｃ６アルキレン−、−ＮＲＣ３〜Ｃ８−ヘテロシクリルＮＲ−、−ＮＲＣ３〜Ｃ８−カルボシクリルＮＲ−、−ＮＲＣ１〜Ｃ６アルキルＮＲ−、−ＮＲＣ１〜Ｃ６アルキレン−、−Ｓ−、−ＮＲ−、−ＮＲＮＲ−、−Ｏ（ＣＲ２）１〜４Ｓ−Ｓ（ＣＲ２）１〜４Ｎ（Ｒ）−、−ＮＲＣ１〜Ｃ６−アルキレンフェニレンＮＲ−、−ＮＲＣ１〜Ｃ６アルキレンフェニレンＳＯ２ＮＲ−、−ＯＣ１〜Ｃ６アルキルＳ−ＳＣ１〜Ｃ６アルキルＣ（ＣＯＯＲ）ＮＲ−、−ＮＲＣ（ＣＯＯＲ）Ｃ１〜Ｃ６アルキルＳ−ＳＣ１〜Ｃ６アルキルＯ−、
【００５９】
【化３０】
0006782250.tif 000035
（式中、
ＸＡは、ＣＲまたはＮであり、
ＸＢは、ＣＨ、ＣＲ（Ｃ（Ｒ）２）１〜３ＮＲ、ＣＲ（Ｃ（Ｒ）２）１〜３Ｏ、ＣＲ（Ｃ（Ｒ）２）１〜３Ｃ（Ｏ）ＮＲ、ＣＲ−（Ｃ（Ｒ）２）１〜３Ｃ（Ｏ）ＮＲＮＲ、ＣＲ（Ｃ（Ｒ）２）１〜３ＳＯ２ＮＲ、ＣＲ（Ｃ（Ｒ）２）１〜３ＮＲＮＲ、ＣＲ（Ｃ（Ｒ）２）１〜３ＮＲＣ（Ｏ）またはＮであり、
各ＸＣは、Ｒであり、
各ＸＤは、−（ＣＨ２）１〜５−であるか、または存在せず、
ＸＥは、Ｏ、Ｓ、Ｃ（Ｒ）２、Ｃ（Ｒ）（Ｃ（Ｒ）２）１〜３−ＮＲ２またはＮＲであり、
各ＸＦは、（Ｃ（Ｒ）２）１〜３−ＮＲまたはＣ（Ｒ）２−（Ｃ（Ｒ）２）１〜３−Ｏである）
からなる群から独立して選択される｝
である］
が提供される。
【００６０】
本発明のまた別の態様によれば、式ＩＩＩＢの抗体薬物コンジュゲート化合物：
【００６１】
【化３１】
0006782250.tif 000036
または薬学的に許容できるその塩もしくは溶媒和物［式中、
ＡＢは、抗体であり、
Ｆ１およびＦ２は、環系Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、ＧおよびＨ：
【００６２】
【化３２−１】
0006782250.tif 000037
【００６３】
【化３２−２】
0006782250.tif 000038
からそれぞれ独立して選択され、
ここで、
環系Ａ、Ｂ、ＣおよびＤのうちの少なくとも１つが存在し、
各Ｒは、Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ２０アルキル、−Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、−Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、ハロ、重水素、ヒドロキシル、アルコキシ、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）２、−ＮＯ２、−Ｃ６〜Ｃ１４アリールおよび−Ｃ６〜Ｃ１４ヘテロアリールからなる群から独立して選択され、ここで、２つ以上のＲは、接合して環を形成していてもよく、前記−Ｃ６〜Ｃ１４アリールおよび−Ｃ６〜Ｃ１４ヘテロアリールは、Ｒが出現する各環系について、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、−Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、−ハロ、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキルチオ、−トリフルオロメチル、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）２、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）２、−Ｃ１〜Ｃ３アルキルチオ、−ＮＯ２または−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクリルから独立して選択される１から５つの置換基で置換されていてもよく、
各Ｖ１は、Ｖ１が出現する各環系について、独立して、結合、Ｏ、Ｎ（Ｒ）またはＳであり、
各Ｖ２は、Ｖ２が出現する各環系について、独立して、Ｏ、Ｎ（Ｒ）またはＳであり、
Ｗ１およびＷ２は、Ｗ１およびＷ２が出現する各環系について、それぞれ独立して、Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ５アルキル、−フェニル、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、−Ｃ（Ｏ）ＳＲ、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＮ（Ｒ）２または−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２であり、
各Ｘは、Ｘが出現する各環系について、独立して、−ＯＨ、−Ｏ−アシル、アジド、ハロ、シアネート、チオシアネート、イソシアネート、チオイソシアネートまたは
【００６４】
【化３３】
0006782250.tif 000039
であり、
各Ｙは、Ｙが出現する各環系について、Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−ＲＡ−Ｃ（Ｏ）ＲＡ、−Ｃ（Ｓ）ＲＡ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲＡ、−Ｓ（Ｏ）２ＯＲＡ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２、−Ｃ（Ｓ）Ｎ（ＲＡ）２、グリコシル等の炭水化物、−ＮＯ、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＡ）２、アミノ酸、およびペプチド（特に、カテプシンおよびマトリックスメタロプロテアーゼ等のプロテアーゼによって開裂されるペプチド）からなる群から独立して選択され、ここで、各ＲＡは、Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ２０アルキル、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキル、−Ｃ６〜Ｃ１４アリール、アラルキル、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクリル、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリルおよび−Ｃ１〜Ｃ２０アルキルＮ（Ｒ）２からなる群から独立して選択され、ここで、前記−Ｃ１〜Ｃ２０アルキル、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキル、−Ｃ６〜Ｃ１４アリール、アラルキル、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクリル、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリルおよび−Ｃ１〜Ｃ２０アルキルＮ（Ｒ）２は、Ｒから独立して選択される１から３つの置換基で置換されていてもよく、
各Ｚは、Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキル、−Ｃ６〜Ｃ１４アリール、−アラルキル、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクリル、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリル、−Ｃ（Ｏ）ＯＣ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）２、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＮＨ２および−Ｃ（Ｏ）−ハロからなる群から独立して選択され、ここで、前記−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキル、−Ｃ６〜Ｃ１４アリール、−アラルキル、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクリル、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリル、−Ｃ（Ｏ）ＯＣ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）２、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＮＨ２および−Ｃ（Ｏ）−ハロは、Ｚが出現する各環系について、Ｒから独立して選択される１から３つの置換基でそれぞれ置換されていてもよく、
Ｌ１およびＬ２は、直接結合、カルボニル、またはアシル部分でＦ１もしくはＦ２と結合しているカルボニルアシル基からそれぞれ独立して選択され、ここで、カルボニルアシル基は、
【００６５】
【化３４】
0006782250.tif 000040
｛式中、
Ｕ１は、Ｈ、−ＣＨ３、−ＯＨ、−ＯＣＨ３、−ＮＯ２、−ＮＨ２、−ＮＨＮＨＡｃ、−ＮＨＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ３、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）フェニルまたは−ハロから選択され、
Ｕ２は、Ｈ、−ＯＨまたは−ＯＣＨ３であり、
Ｕ３は、Ｈ、−ＣＨ３または−Ｃ２Ｈ５であり、
Ｕ４は、ＨまたはＣＨ３Ｓ−であり、
Ｕ５およびＵ６は、Ｈ、−ハロ、−Ｃ１〜Ｃ４アルキル、−Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、−Ｃ１〜Ｃ６ジアルキルアミノ、−ＮＯ２、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ３または−ＮＨＣ（Ｏ）フェニルからそれぞれ独立して選択され、
Ｑ１は、−Ｏ−、−Ｓ−または−ＮＨ−であり、
Ｑ２およびＱ３は、それぞれ独立して、−ＣＨ−または−Ｎ−である｝
からなる群から選択され、
Ｔは、
−Ｃ（Ａ１）Ｘ１−Ｔ２−Ｘ１Ｃ（Ｂ１）−｛ここで、Ｔ２は、
【００６６】
【化３５】
0006782250.tif 000041
であり、
各Ｘ１は、独立して、結合、−ＮＲＥ−、−Ｏ−または−Ｓ−であり、Ａ１およびＢ１は、それぞれ独立して、＝Ｏまたは＝Ｓであり、ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、ＲＥであるか、または、Ｒ１およびＲ２が、環系を形成するか、または、Ｒ３およびＲ４が、環系を形成するか、または、Ｒ１およびＲ２、ならびにＲ３およびＲ４の両方が、それぞれ独立して、環系を形成するか、または、Ｒ１およびＲ３が、環系を形成するか、または、Ｒ２およびＲ４が、環系を形成するか、または、Ｒ１およびＲ３、ならびにＲ２およびＲ４の両方が、それぞれ独立して、環系を形成し、ここで、環系は、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクリルまたは−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリルから独立して選択されるか、または、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、Ｄ上の異なる炭素とそれぞれ結合しており、ここで、ｇおよびｊは、それぞれ独立して、０から５０までの整数であり、ｍは、１から５０までの整数であり、Ｄは、−Ｃ１〜Ｃ８アルキレン−、−Ｃ６〜Ｃ１４アリーレン−、−Ｃ６〜Ｃ１４ヘテロアリーレン−、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキレン−、−アラルキレン、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクロおよび−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロからなる群から選択され、ここで、前記−Ｃ１〜Ｃ８アルキレン−、−Ｃ６〜Ｃ１４アリーレン−、−Ｃ６〜Ｃ１４ヘテロアリーレン−、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキレン−、−アラルキレン、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクロおよび−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロは、Ｎ（ＲＥ）Ｃ（Ｏ）−（ここで、カルボニルはＬと結合している）および−Ｃ（Ｏ）−（ここで、カルボニルはＬと結合している）から選択される基の１員で置換されており、１から２つのＲによって追加で置換されていてもよく、
ここで、各ＲＥは、Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキル、−アリール、−アラルキル、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクリル、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリル、−Ｃ（Ｏ）ＯＣ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）２および−Ｃ（Ｏ）−ハロからなる群から独立して選択され、各ＲＥは、Ｒから独立して選択される１から３つの置換基で置換されていてもよい｝
から選択され、
Ｌは、ＬＡ−ＬＢ−（ＬＣ）１〜３
｛ＬＡは、ＡＢとの結合、−ＮＲ−（ＡＢとの結合）、−ヘテロアリール−（ＡＢとの結合）、
【００６７】
【化３６】
0006782250.tif 000042
から選択され、
ＬＢは、ＬＢ１−ＬＢ２−ＬＢ３であり、
ここで、ＬＢ１は、存在しないか、または、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ−、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ６アルキル−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲＣ１〜Ｃ６アルキル−、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜６−、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキルＮＲＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜６−、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜６−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−Ｓ−Ｓ−Ｃ１〜Ｃ６アルキルＮＲＣ（Ｏ）ＣＨ２−、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜６ＮＲＣ（Ｏ）ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル−ＮＲＣ（Ｏ）Ｃ１〜６アルキル−、−Ｎ＝ＣＲ−フェニル−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−、−Ｎ＝ＣＲ−フェニル−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜６ＮＲＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル−フェニル（ＮＲ−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル）１〜４−、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜６−ＮＲＣ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル−、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−、−Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ（ＮＲ−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル）−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−および（−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−）１〜２０からなる群から選択される１つまたは複数の構成要素であり、
ＬＢ２は、ＡＡ０〜１２であり、ここで、ＡＡは、天然アミノ酸、非天然アミノ酸または−（ＣＲ１５）ｏ−Ｓ−Ｓ−（ＣＲ１５）ｐ（ここで、ｏおよびｐは、それぞれ独立して、１から２０までの整数である）であり、
ＬＢ３は、−ＰＡＢＡ−、−ＰＡＢＣ−、−Ｃ（Ｏ）（ＣＨ２）ｎＣ（Ｏ）−であるか、または存在せず、
ＬＣは、存在しないか、または、−Ｃ１〜Ｃ６アルキレン−、−ＮＲＣ３〜Ｃ８−ヘテロシクリルＮＲ−、−ＮＲＣ３〜Ｃ８−カルボシクリルＮＲ−、−ＮＲＣ１〜Ｃ６アルキルＮＲ−、−ＮＲＣ１〜Ｃ６アルキレン−、−Ｓ−、−ＮＲ−、−ＮＲＮＲ−、−Ｏ（ＣＲ２）１〜４Ｓ−Ｓ（ＣＲ２）１〜４Ｎ（Ｒ）−、−ＮＲＣ１〜Ｃ６−アルキレンフェニレンＮＲ−、−ＮＲＣ１〜Ｃ６アルキレンフェニレンＳＯ２ＮＲ−、−ＯＣ１〜Ｃ６アルキルＳ−ＳＣ１〜Ｃ６アルキルＣ（ＣＯＯＲ）ＮＲ−、−ＮＲＣ（ＣＯＯＲ）Ｃ１〜Ｃ６アルキルＳ−ＳＣ１〜Ｃ６アルキルＯ−、
【００６８】
【化３７】
0006782250.tif 000043
（式中、
ＸＡは、ＣＲまたはＮであり、
ＸＢは、ＣＨ、ＣＲ（Ｃ（Ｒ）２）１〜３ＮＲ、ＣＲ（Ｃ（Ｒ）２）１〜３Ｏ、ＣＲ（Ｃ（Ｒ）２）１〜３Ｃ（Ｏ）ＮＲ、ＣＲ−（Ｃ（Ｒ）２）１〜３Ｃ（Ｏ）ＮＲＮＲ、ＣＲ（Ｃ（Ｒ）２）１〜３ＳＯ２ＮＲ、ＣＲ（Ｃ（Ｒ）２）１〜３ＮＲＮＲ、ＣＲ（Ｃ（Ｒ）２）１〜３ＮＲＣ（Ｏ）またはＮであり、
各ＸＣは、Ｒであり、
各ＸＤは、−（ＣＨ２）１〜５−であるか、または存在せず、
ＸＥは、Ｏ、Ｓ、Ｃ（Ｒ）２、Ｃ（Ｒ）（Ｃ（Ｒ）２）１〜３−ＮＲ２またはＮＲであり、
各ＸＦは、（Ｃ（Ｒ）２）１〜３−ＮＲまたはＣ（Ｒ）２−（Ｃ（Ｒ）２）１〜３−Ｏである）
からなる群から独立して選択される｝
である］
が提供される。
【００６９】
本発明の追加の態様は、
各Ｒが、Ｈ、重水素、−Ｃ１〜Ｃ２０アルキルおよび−ＮＨ２からなる群から独立して選択され、
各Ｖ１が、Ｖ１が出現する各環系について、独立して、ＯまたはＮ（Ｒ）であり、
各Ｖ２が、Ｖ２が出現する各環系について、独立して、ＯまたはＮ（Ｒ）であり、
Ｗ１およびＷ２が、Ｗ１およびＷ２が出現する各環系について、それぞれ独立して、Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ５アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＯＲまたは−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２であり、
各Ｘが、Ｘが出現する各環系について、独立して、ハロであり、
各Ｙが、Ｙが出現する各環系について、Ｈ、−Ｃ（Ｏ）ＲＡ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２、グリコシル等の炭水化物、−ＮＯ２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＡ）２、アミノ酸およびペプチド（特に、カテプシンおよびマトリックスメタロプロテアーゼ等のプロテアーゼによって開裂されるペプチド）からなる群から独立して選択され、ここで、各ＲＡは、Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ２０アルキル、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキル、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリルおよび−Ｃ１〜Ｃ２０アルキルＮ（Ｒ）２からなる群から独立して選択され、ここで、前記−Ｃ１〜Ｃ２０アルキル、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキル、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリルおよび−Ｃ１〜Ｃ２０アルキルＮ（Ｒ）２は、Ｒから独立して選択される１から３つの置換基で置換されていてもよく、
Ｌ１およびＬ２が、直接結合およびカルボニルからそれぞれ独立して選択され、
Ｔが、
−ＮＲＢ−Ｔ１−ＮＲＣ−［ここで、ＲＢおよびＲＣは、それぞれ独立して、Ｈまたは−Ｃ１〜Ｃ８アルキルである］、
−Ｃ（Ｏ）ｈｅｔＣ（Ｏ）−［ここで、ｈｅｔは、Ｏ、ＮおよびＳから独立して選択される１または２個のヘテロ原子を含有する、５から１２員の単環式ヘテロアリールであり、ここで、ｈｅｔは、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−ＮＨ２および−ＮＨ２からなる群からそれぞれ独立して選択される１から８つの置換基で置換されていてもよく、ｈｅｔ上の前記任意選択の置換基は、−Ｃ１〜Ｃ８アルキルで置換されていてもよい］、および
−Ｃ（Ａ１）Ｘ１−Ｔ２−Ｘ１Ｃ（Ｂ１）−［ここで、Ｔ２は、
【００７０】
【化３８】
0006782250.tif 000044
であり、
各Ｘ１は、結合であり、ここで、Ａ１およびＢ１は、それぞれ独立して、＝Ｏであり、ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、Ｈであるか、または、Ｒ１およびＲ２が、環系を形成するか、または、Ｒ３およびＲ４が、環系を形成するか、または、Ｒ１およびＲ２、ならびにＲ３およびＲ４の両方が、それぞれ独立して、環系を形成するか、または、Ｒ１およびＲ３が、環系を形成するか、または、Ｒ２およびＲ４が、環系を形成するか、または、Ｒ１およびＲ３、ならびにＲ２およびＲ４の両方が、それぞれ独立して、環系を形成し、ここで、前記環系は、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクリルもしくは−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリルから独立して選択され、Ｄは、結合であるか、または、−Ｓ−、−Ｃ１〜Ｃ８アルキレン−、−Ｃ６〜Ｃ１４アリーレン−、−Ｃ６〜Ｃ１４ヘテロアリーレン−、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクロおよび−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロからなる群から選択され、ここで、前記−Ｃ１〜Ｃ８アルキレン−、−Ｃ６〜Ｃ１４アリーレン−、−Ｃ６〜Ｃ１４ヘテロアリーレン−、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクロおよび−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロは、−ＮＨ２、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）Ｈまたは−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）ＯＨで置換されていてもよい］
から選択される、
本明細書において言及されているもの等の化合物を含む。
【００７１】
本発明の追加の態様は、２つ以上のＲが、接合して環を形成していてもよい、本明細書において言及されているもの等の化合物を含む。
【００７２】
本発明の追加の態様は、
各Ｒが、Ｈ、重水素、−Ｃ１〜Ｃ２０アルキルおよび−ＮＨ２からなる群から独立して選択され、
各Ｖ１が、Ｖ１が出現する各環系について、独立して、ＯまたはＮ（Ｒ）であり、
各Ｖ２が、Ｖ２が出現する各環系について、独立して、ＯまたはＮ（Ｒ）であり、
Ｗ１およびＷ２が、Ｗ１およびＷ２が出現する各環系について、それぞれ独立して、Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ５アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＯＲまたは−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２であり、
各Ｘが、Ｘが出現する各環系について、独立して、ハロであり、
各Ｙが、Ｙが出現する各環系について、結合、Ｈ、−Ｃ（Ｏ）ＲＡ、−Ｃ（Ｓ）ＲＡ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲＡ、−Ｓ（Ｏ）２ＯＲＡ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２、−Ｃ（Ｓ）Ｎ（ＲＡ）２、グリコシル等の炭水化物、−ＮＯ２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＡ）２、アミノ酸、およびペプチド（特に、カテプシンおよびマトリックスメタロプロテアーゼ等のプロテアーゼによって開裂されるペプチド）から独立して選択され、ここで、各ＲＡは、Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ２０アルキル、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキル、−Ｃ６〜Ｃ１４アリール、アラルキル、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクリル、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリル、−Ｃ１〜Ｃ２０アルキルＮ（Ｒ）２、−Ｃ１〜Ｃ２０アルキレン、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキレン、−Ｃ６〜Ｃ１４アリーレン、アラルキレン、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクロ、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロおよび−Ｃ１〜Ｃ２０アルキルＮ（Ｒ）−ならびにＲＦから独立して選択され、ここで、前記ＲＡは、Ｒから独立して選択される１から３つの置換基で置換されていてもよく、１つのＹは二価であり、Ｌと結合しており、
ＲＦは、−Ｎ（Ｒ６）ＱＮ（Ｒ５）Ｃ（Ｏ）−であり、カルボニル隣接Ｎ（Ｒ５）でＬと結合しており、ここで、Ｒ５およびＲ６は、Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ８アルキルおよび−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキルからなる群からそれぞれ独立して選択されるか、または、Ｒ５またはＲ６は、Ｑ上の置換炭素と接合して、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロ環式もしくは−Ｃ６〜Ｃ１４ヘテロアリール環を形成するか、または、Ｒ５およびＲ６が一緒に接合して、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロ環式もしくは−Ｃ６〜Ｃ１４ヘテロアリール環系を形成しており、Ｑは、−Ｃ１〜Ｃ８アルキレン−、−Ｃ６〜Ｃ１４アリーレン−または−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ−であり、ここで、Ｑ、Ｒ５およびＲ６は、Ｒから独立して選択される１から３つの置換基でそれぞれ独立して置換されていてもよく、
Ｌ１およびＬ２が、直接結合およびカルボニルからそれぞれ独立して選択され、
Ｔが、
−ＮＲＢ−Ｔ１−ＮＲＣ−［ここで、ＲＢおよびＲＣは、それぞれ独立して、Ｈまたは−Ｃ１〜Ｃ８アルキルである］、
−Ｃ（Ｏ）ｈｅｔＣ（Ｏ）−［ここで、ｈｅｔは、Ｏ、ＮおよびＳから独立して選択される１または２個のヘテロ原子を含有する、５から１２員の単環式ヘテロアリールであり、ここで、ｈｅｔは、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−ＮＨ２および−ＮＨ２からなる群からそれぞれ独立して選択される１から８つの置換基で置換されていてもよく、ｈｅｔ上の前記任意選択の置換基は、−Ｃ１〜Ｃ８アルキルで置換されていてもよい］、および
−Ｃ（Ａ１）Ｘ１−Ｔ２−Ｘ１Ｃ（Ｂ１）−［ここで、Ｔ２は、
【００７３】
【化３９】
0006782250.tif 000045
であり、
各Ｘ１は、結合であり、ここで、Ａ１およびＢ１は、それぞれ独立して、＝Ｏであり、ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、Ｈであるか、または、Ｒ１およびＲ２が、環系を形成するか、または、Ｒ３およびＲ４が、環系を形成するか、または、Ｒ１およびＲ２、ならびにＲ３およびＲ４の両方が、それぞれ独立して、環系を形成するか、または、Ｒ１およびＲ３が、環系を形成するか、または、Ｒ２およびＲ４が、環系を形成するか、または、Ｒ１およびＲ３、ならびにＲ２およびＲ４の両方が、それぞれ独立して、環系を形成し、ここで、前記環系は、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクリルもしくは−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリルから独立して選択され、Ｄは、結合であるか、または、−Ｓ−、−Ｃ１〜Ｃ８アルキレン−、−Ｃ６〜Ｃ１４アリーレン−、−Ｃ６〜Ｃ１４ヘテロアリーレン−、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクロおよび−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロからなる群から選択され、ここで、前記−Ｃ１〜Ｃ８アルキレン−、−Ｃ６〜Ｃ１４アリーレン−、−Ｃ６〜Ｃ１４ヘテロアリーレン−、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクロおよび−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロは、−ＮＨ２、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）Ｈまたは−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）ＯＨで置換されていてもよい］
から選択される、
本明細書において言及されているもの等の化合物を含む。
【００７４】
本発明の追加の態様は、
各Ｒが、Ｈ、重水素、−Ｃ１〜Ｃ２０アルキルおよび−ＮＨ２からなる群から独立して選択され、
各Ｖ１が、Ｖ１が出現する各環系について、独立して、ＯまたはＮ（Ｒ）であり、
各Ｖ２が、Ｖ２が出現する各環系について、独立して、ＯまたはＮ（Ｒ）であり、
Ｗ１およびＷ２が、Ｗ１およびＷ２が出現する各環系について、それぞれ独立して、Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ５アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＯＲまたは−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２であり、
各Ｘが、Ｘが出現する各環系について、独立して、ハロであり、
各Ｙが、Ｙが出現する各環系について、Ｈ、−Ｃ（Ｏ）ＲＡ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２、グリコシル等の炭水化物、−ＮＯ２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＡ）２、アミノ酸、およびペプチド（特に、カテプシンおよびマトリックスメタロプロテアーゼ等のプロテアーゼによって開裂されるペプチド）からなる群から独立して選択され、ここで、各ＲＡは、Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ２０アルキル、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキル、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリルおよび−Ｃ１〜Ｃ２０アルキルＮ（Ｒ）２からなる群から独立して選択され、ここで、前記−Ｃ１〜Ｃ２０アルキル、−Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキル、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリルおよび−Ｃ１〜Ｃ２０アルキルＮ（Ｒ）２は、Ｒから独立して選択される１から３つの置換基で置換されていてもよく、
Ｌ１およびＬ２が、直接結合およびカルボニルからそれぞれ独立して選択され、
Ｔが、−Ｃ（Ａ１）Ｘ１−Ｔ２−Ｘ１Ｃ（Ｂ１）−［ここで、Ｔ２は、
【００７５】
【化４０】
0006782250.tif 000046
であり、
各Ｘ１は、結合であり、ここで、Ａ１およびＢ１は、それぞれ独立して、＝Ｏであり、ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、Ｈであるか、または、Ｒ１およびＲ２が、環系を形成するか、または、Ｒ３およびＲ４が、環系を形成するか、または、Ｒ１およびＲ２、ならびにＲ３およびＲ４の両方が、それぞれ独立して、環系を形成するか、または、Ｒ１およびＲ３が、環系を形成するか、または、Ｒ２およびＲ４が、環系を形成するか、または、Ｒ１およびＲ３、ならびにＲ２およびＲ４の両方が、それぞれ独立して、環系を形成し、ここで、前記環系は、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクリルもしくは−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリルから独立して選択され、Ｄは、結合であるか、または、−Ｓ−、−Ｃ１〜Ｃ８アルキレン−、−Ｃ６〜Ｃ１４アリーレン−、−Ｃ６〜Ｃ１４ヘテロアリーレン−、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクロおよび−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロからなる群から選択され、ここで、前記−Ｃ１〜Ｃ８アルキレン−、−Ｃ６〜Ｃ１４アリーレン−、−Ｃ６〜Ｃ１４ヘテロアリーレン−、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクロおよび−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロは、−ＮＨ２、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）Ｈまたは−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）ＯＨで置換されていてもよい］
である、
本明細書において言及されているもの等の化合物を含む。
【００７６】
本発明の追加の態様は、
ＬＡが、−ハロ、−Ｎ（Ｒ）２、−ＣＯＮ（Ｒ）２、−ＮＯ２または−ＣＯＮ（Ｒ）２で置換されていてもよい−Ｓ−アリール、−ＮＯ２で置換されていてもよい−Ｓ−ヘテロアリール、アルキル−ＳＯ２−ヘテロアリール、アリールＳＯ２−ヘテロアリール−、および
【００７７】
【化４１】
0006782250.tif 000047
からなる群から選択され、
ＬＢが、ＬＢ１−ＬＢ２−ＬＢ３であり、ここで、ＬＢ１は、存在しないか、または、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ−、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲＣ１〜Ｃ６アルキル−、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜６−、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキルＮＲＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜６−、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜６−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−Ｓ−Ｓ−Ｃ１〜Ｃ６アルキルＮＲＣ（Ｏ）ＣＨ２−、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜６ＮＲＣ（Ｏ）ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル−ＮＲＣ（Ｏ）Ｃ１〜６アルキル−、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜６ＮＲＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル−フェニル（ＮＲ−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル）１〜４−、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜６−ＮＲＣ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル−、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−、−Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ（ＮＲ−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル）−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−および（−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−）１〜２０からなる群から選択される１つまたは複数の構成要素であり、
ＬＢ２は、ＡＡ０〜１２であり、ここで、ＡＡは、天然アミノ酸、非天然アミノ酸または−（ＣＲ１５）ｏ−Ｓ−Ｓ−（ＣＲ１５）ｐ（ここで、ｏおよびｐは、それぞれ独立して、１から２０までの整数である）であり、ＬＢ３は、−ＰＡＢＡ−、−ＰＡＢＣ−、−Ｃ（Ｏ）（ＣＨ２）ｎＣ（Ｏ）−であるか、または存在せず、
ＬＣが、存在しない、
本明細書において言及されているもの等の化合物を含む。
【００７８】
本発明の追加の態様は、ＬＡが、ＡＢとの結合、−ＮＲ−（ＡＢとの結合）、−ヘテロアリール−（ＡＢとの結合）、
【００７９】
【化４２】
0006782250.tif 000048
から選択され、
ＬＢが、ＬＢ１−ＬＢ２−ＬＢ３であり、ここで、ＬＢ１は、存在しないか、または、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ−、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲＣ１〜Ｃ６アルキル−、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜６−、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキルＮＲＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜６−、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜６−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−Ｓ−Ｓ−Ｃ１〜Ｃ６アルキルＮＲＣ（Ｏ）ＣＨ２−、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜６ＮＲＣ（Ｏ）ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル−ＮＲＣ（Ｏ）Ｃ１〜６アルキル−、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜６ＮＲＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル−フェニル（ＮＲ−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル）１〜４−、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜６−ＮＲＣ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル−、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−、−Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ（ＮＲ−Ｃ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ６アルキル）−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−および（−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−）１〜２０からなる群から選択される１つまたは複数の構成要素であり、
ＬＢ２は、ＡＡ０〜１２であり、ここで、ＡＡは、天然アミノ酸、非天然アミノ酸または−（ＣＲ１５）ｏ−Ｓ−Ｓ−（ＣＲ１５）ｐ（ここで、ｏおよびｐは、それぞれ独立して、１から２０までの整数である）であり、ＬＢ３は、−ＰＡＢＡ−、−ＰＡＢＣ−、−Ｃ（Ｏ）（ＣＨ２）ｎＣ（Ｏ）−であるか、または存在しない、
本明細書において言及されているもの等の抗体薬物コンジュゲートを含む。
【００８０】
本発明の追加の態様は、ＲＦが、
【００８１】
【化４３】
0006782250.tif 000049
［式中、ｑは、１〜１０であり、各ｂは、独立して、ＣＲＤ、Ｎ、ＮＲＤ、ＯまたはＳである］
から選択される、
本明細書において言及されているもの等の化合物を含む。
【００８２】
本発明の追加の態様は、１つまたは複数のＷが、Ｃ１〜Ｃ３アルキルである、本明細書において言及されているもの等の化合物を含む。
【００８３】
本発明の追加の態様は、Ｘが、クロロである、本明細書において言及されているもの等の化合物を含む。
【００８４】
本発明の追加の態様は、１つのＹが、Ｈまたは−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ１０アルキルである、本明細書において言及されているもの等の化合物を含む。
【００８５】
本発明の追加の態様は、１つまたは複数のＺが、Ｈである、本明細書において言及されているもの等の化合物を含む。
【００８６】
本発明の追加の態様は、Ｔが、アミド、または式−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−もしくは−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ｈｅｔ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−のアミノ−テザー−アミノから選択される、本明細書において言及されているもの等の化合物を含む。
【００８７】
本発明の追加の態様は、アミドが、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−または−ＮＨＣ（Ｏ）−である、本明細書において言及されているもの等の化合物を含む。
【００８８】
本発明の追加の態様は、ｈｅｔが、ピロール−２−，５−ジイル−、フラ−２，５−ジイル−、インドール−２，５−ジイル、ベンゾフラン−２，５−ジイルおよび３，６−ジヒドロベンゾ［１，２−ｂ：４，３−ｂ］ジピロール−２，７−ジイルから選択されるヘテロアリールである、本明細書において言及されているもの等の化合物を含む。
【００８９】
本発明の追加の態様は、Ｌ１およびＬ２が、カルボニル、２−カルボニルインドール−５−イル、２−カルボニル−６−ヒドロキシ−７−メトキシインドール−５−イル、２−カルボニル−１，２，３，６−テトラヒドロベンゾ［１，２−ｂ：４，３−ｂ］ジピロール−７−イル、２−カルボニル−４−ヒドロキシ−５−メトキシ−１，２，３，６−テトラヒドロベンゾ［１，２−ｂ：４，３−ｂ’］ジピロール−７−イルおよび２−カルボニル−４−ヒドロキシ−５−メトキシ−１，２，３，６−テトラヒドロベンゾ［１，２−ｂ：４，３−ｂ’］ジピロール−７−イルから選択される、本明細書において言及されているもの等の化合物を含む。
【００９０】
本発明の追加の態様は、下記：Ｗが、メチルである、Ｘが、ハロゲンである、Ｙが、水素または−ＣＯＲであり、ここで、Ｒは、Ｃ１〜Ｃ１０アルキルである、およびＺが、水素である、の１つまたは複数が当てはまる、本明細書において列挙されている化合物である。
【００９１】
本発明は、Ｔが、アミド（すなわち、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−または−ＮＨＣ（Ｏ）−）、または式−ＮＨ−Ｔ’−ＮＨのアミノ−テザー−アミノ［式中、Ｔ’は、カルボニルまたは−Ｃ−（Ｏ）−ｈｅｔ−Ｃ（Ｏ）−である］から選択される、本明細書において記述されている通りの化合物も含む。Ｔが、式ＮＨ−Ｔ’−ＮＨのアミノ−テザー−アミノである場合、Ｔ’は、カルボニル（すなわち、−Ｃ−（Ｏ）−）または−Ｃ（Ｏ）−ｈｅｔ−Ｃ（Ｏ）−であってよく、ここで、ｈｅｔは、ピロール−２−，５−ジイル−、フラ−２，５−ジイル−、インドール−２，５−ジイル、ベンゾフラン−２，５−ジイルまたは３，６−ジヒドロベンゾ［１，２−ｂ：４，３−ｂ］ジピロール−２，７−ジイルから選択されるヘテロアリールである。
【００９２】
Ｌ１およびＬ２が、２−カルボニルインドール−５−イル、２−カルボニル−６−ヒドロキシ−７−メトキシインドール−５−イル、２−カルボニル−１，２，３，６−テトラヒドロベンゾ［１，２−ｂ：４，３−ｂ］ジピロール−７−イル、２−カルボニル−４−ヒドロキシ−５−メトキシ−１，２，３，６−テトラヒドロベンゾ［１，２−ｂ：４，３−ｂ’］ジピロール−７−イルおよび２−カルボニル−４−ヒドロキシ−５−メトキシ−１，２，３，６−テトラヒドロベンゾ［１，２−ｂ：４，３−ｂ’］ジピロール−７−イルから選択される、本明細書において記述されている（ｄｅｃｒｉｂｅｄ）通りの化合物も、本発明の実施形態に含まれる。
【００９３】
本発明の別の態様は、ＬＡが、
【００９４】
【化４４】
0006782250.tif 000050
である、本明細書において記述されている通りの化合物を含む。
【００９５】
本発明は、リンカーペイロード、または本明細書において記述されているペイロード化合物のラジカルを含む抗体−薬物コンジュゲートも含む。
【００９６】
重要なことには、本発明は、本明細書において記述されている、化合物および任意の薬学的に許容できるその塩または溶媒和物の医薬組成物を含み、ここで、医薬組成物は、薬学的に許容できる添加剤を含む。
【００９７】
本発明はさらに、がんを治療する方法であって、それを必要とする患者に、治療有効量の、本明細書において記述されている１つもしくは複数の化合物、またはこれらの化合物の１つもしくは複数を含む医薬組成物を投与するステップを含む方法に関する。
【００９８】
本明細書において描写されている、ペイロード、リンカーペイロードおよびＡＤＣを含むいくつかの化合物を、具体的な立体異性形態で示す。しかしながら、本発明は、これらの化合物のすべての立体異性形態（ｆｏｒｎｓ）を含むようになっている。例えば、２つの立体異性中心を持つ化合物は、化合物のＲ，Ｓ形態として描写され得るが、本発明は、すべての立体異性形態、例えば、Ｒ，Ｒ、Ｒ，Ｓ、Ｓ，ＲおよびＳ，Ｓを伝える。
【発明を実施するための形態】
【００９９】
本発明は、細胞毒性二官能性化合物、前記細胞毒性二官能性化合物を含む抗体薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）、ならびにこれらを使用してがんおよび他の病理学的状態を治療するための方法を対象とする。本発明は、そのような化合物および／またはコンジュゲートを、哺乳類細胞または関連する病理学的状態の検出、診断または治療のために、インビトロ、インサイチュおよびインビボで使用する方法にも関する。
【０１００】
定義および略語
別段の定めがない限り、下記の用語および語句は、本明細書において使用される場合、下記の意味を有するよう意図されている。商標名が本明細書において使用される場合、該商標名は、文脈上別段の指示がない限り、商標名製品の、製品処方、ジェネリック医薬品および医薬品有効成分を含む。
【０１０１】
用語「抗体」（または「Ａｂ」）は、本明細書において、最も広い意味で使用され、具体的には、インタクトなモノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、単一特異性抗体、多特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）、および所望の生物学的活性を呈する抗体断片を網羅する。インタクトな抗体は、主として２つの領域：可変領域および定常領域を有する。可変領域は、標的抗原と結合し、相互作用する。可変領域は、特定の抗原上の特異的結合部位を認識し、それと結合する相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む。定常領域は、免疫系によって認識され、それと相互作用することができる（例えば、Ｊａｎｅｗａｙら、２００１、Ｉｍｍｕｎｏ．Ｂｉｏｌｏｇｙ、第５版、Ｇａｒｌａｎｄ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋを参照）。抗体は、いずれの種類またはクラス（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤおよびＩｇＡ）またはサブクラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１およびＩｇＡ２）のものであってもよい。抗体は、任意の好適な種に由来し得る。いくつかの実施形態において、抗体は、ヒトまたはネズミ起源のものである。抗体は、例えば、ヒト、ヒト化またはキメラであってよい。
【０１０２】
用語「特異的に結合する」および「特異的結合」は、所定の抗原との抗体結合を指す。典型的には、抗体は、少なくとも約１×１０７Ｍ−１の親和性で結合し、所定の抗原または近縁の抗原以外の非特異的抗原（例えば、ＢＳＡ、カゼイン）と結合するためのその親和性よりも少なくとも２倍大きい親和性で、所定の抗原と結合する。
【０１０３】
用語「モノクローナル抗体」は、本明細書において使用される場合、実質的に均質な抗体の集団から取得された抗体を指す、すなわち、集団を構成する個々の抗体は、少量で存在し得る、考えられる自然発生の突然変異を除いて同一である。モノクローナル抗体は、高度に特異的な、単一抗原部位に対するものである。修飾語「モノクローナル」は、抗体の実質的に均質な集団から取得されたものとしての抗体の特徴を示し、任意の特定の方法による抗体の生成を必要とするものとして解釈されるべきではない。
【０１０４】
用語「モノクローナル抗体」は、具体的には、重および／または軽鎖の一部が、特定の種に由来するまたは特定の抗体クラスもしくはサブクラスに属する抗体の対応配列と同一または相同であるのに対し、鎖の残りは、別の種に由来するまたは別の抗体クラスもしくはサブクラスに属する抗体の対応配列と同一または相同である、「キメラ」抗体、ならびに、それらが所望の生物学的活性を呈する限り、そのような抗体の断片を含む。
【０１０５】
「インタクトな抗体」は、抗原結合可変領域、ならびに軽鎖定常ドメイン（ＣＬ）および重鎖定常ドメイン、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３およびＣＨ４を、抗体クラスに適切なものとして含むものである。定常ドメインは、天然配列定常ドメイン（例えば、ヒト天然配列定常ドメイン）またはそのアミノ酸配列変異体であってよい。
【０１０６】
インタクトな抗体は、抗体のＦｃ領域（例えば、天然配列Ｆｃ領域またはアミノ酸配列変異体Ｆｃ領域）に起因するそれらの生物活性を指す１つまたは複数の「エフェクター機能」を有し得る。抗体エフェクター機能の例は、補体依存性細胞傷害、抗体依存性細胞媒介性細胞傷害（ＡＤＣＣ）および抗体依存性細胞媒介性食作用を含む。
【０１０７】
「抗体断片」は、好ましくは抗原結合またはその可変領域を含む、インタクトな抗体の一部を含む。抗体断片の例は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２およびＦｖ断片、二重特異性抗体、三重特異性抗体、四重特異性抗体、線状抗体、一本鎖抗体分子、ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ−Ｆｃ、抗体断片から形成された多特異性抗体断片、Ｆａｂ発現ライブラリーによって生成された断片、または標的抗原（例えば、がん細胞抗原、ウイルス抗原または微生物抗原）と免疫特異的に結合している上記のいずれかのエピトープ結合断片を含む。
【０１０８】
用語「可変」は、抗体の文脈において、配列が広く異なり、その特定の抗原に対する各特定の抗体の結合および特異性において使用される、抗体の可変ドメインのある特定の部分を指す。この可変性は、軽鎖および重鎖可変ドメインにおける「超可変領域」と呼ばれる３つのセグメントに集中している。可変ドメインの、より高度に保存された部分は、フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれる。天然重および軽鎖の可変ドメインは、３つの超可変領域によって接続された４つのＦＲをそれぞれ含む。
【０１０９】
用語「超可変領域」は、本明細書において使用される場合、抗原結合を司る抗体のアミノ酸残基を指す。超可変領域は、概して、「相補性決定領域」もしくは「ＣＤＲ」からのアミノ酸残基（例えば、軽鎖可変ドメインにおける残基２４〜３４（Ｌ１）、５０〜５６（Ｌ２）および８９〜９７（Ｌ３）ならびに重鎖可変ドメインにおける３１〜３５（Ｈ１）、５０〜６５（Ｈ２）および９５〜１０２（Ｌ３）；Ｋａｂａｔら（Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ、第５版、Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ、Ｂｅｔｈｅｓｄａ、Ｍｄ．（１９９１））および／または「超可変ループ」からの残基（例えば、軽鎖可変ドメインにおける残基２６〜３２（Ｌ１）、５０〜５２（Ｌ２）および９１〜９６（Ｌ３）ならびに重鎖可変ドメインにおける２６〜３２（Ｈ１）、５３〜５５（１４２）および９６〜１０１（Ｈ３）；ＣｈｏｔｈｉａおよびＬｅｓｋ、１９８７、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１〜９１７）を含む。ＦＲ残基は、本明細書において定義されている通りの超可変領域残基以外の可変ドメイン残基である。
【０１１０】
「一本鎖Ｆｖ」または「ｓｃＦｖ」抗体断片は、抗体のＶ．ｓｕｂ．ＨおよびＶ．ｓｕｂ．Ｌドメインを含み、ここで、これらのドメインは単一ポリペプチド鎖中に存在する。典型的には、Ｆｖポリペプチドは、Ｖ．ｓｕｂ．ＨおよびＶ．ｓｕｂ．Ｌドメインの間に、ｓｃＦｖが抗原結合のための所望の構造を形成できるようにするポリペプチドリンカーをさらに含む。ｓｃＦｖの総説については、Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ  ｉｎ  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ、第１１３巻、ＲｏｓｅｎｂｕｒｇおよびＭｏｏｒｅ編、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、２６９〜３１５頁（１９９４）を参照されたい。
【０１１１】
用語「二重特異性抗体」は、２つの抗原結合部位を持つ小型抗体断片を指し、その断片は、同じポリペプチド鎖中の可変軽ドメイン（ＶＬ）と接続された可変重ドメイン（ＶＨ）を含む。同じ鎖上の２つのドメイン間の対合を可能にするには短すぎるリンカーを使用することにより、ドメインは、別の鎖の相補性ドメインと対合せざるを得ず、２つの抗原結合部位を作成する。二重特異性抗体は、例えば、ＥＰ０４０４０９７；ＷＯ９３／１１１６１；およびＨｏｌｌｉｎｇｅｒら、１９９３、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９０：６４４４〜６４４８において、より詳細に記述されている。
【０１１２】
非ヒト（例えば、げっ歯類）抗体の「ヒト化」形態は、非ヒト免疫グロブリンに由来する最小配列を含有するキメラ抗体である。大半について、ヒト化抗体は、レシピエントの超可変領域からの残基が、所望の特異性、親和性および容量を有する、マウス、ラット、ウサギまたは非ヒト霊長類等の非ヒト種の超可変領域からの残基（ドナー抗体）によって置きかえられている、ヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体）である。場合によっては、ヒト免疫グロブリンのフレームワーク領域（ＦＲ）残基は、対応する非ヒト残基によって置きかえられている。さらに、ヒト化抗体は、レシピエント抗体にもドナー抗体にも見られない残基を含んでいてよい。これらの修飾は、抗体性能をさらに改良するために為される。概して、ヒト化抗体は、少なくとも１つ、典型的には２つの可変ドメインの実質的にすべてを含むことになり、ここで、超可変ループのすべてまたは実質的にすべては、非ヒト免疫グロブリンのものに対応し、ＦＲのすべてまたは実質的にすべては、ヒト免疫グロブリン配列のものである。ヒト化抗体は、免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）の少なくとも一部、典型的にはヒト免疫グロブリンのものも含んでいる。さらなる詳細については、Ｊｏｎｅｓら、１９８６、Ｎａｔｕｒｅ  ３２１：５２２〜５２５；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎら、１９８８、Ｎａｔｕｒｅ  ３３２：３２３〜３２９；およびＰｒｅｓｔａ、１９９２、Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．２：５９３〜５９６を参照されたい。
【０１１３】
本明細書において使用される場合、「単離される」は、（ａ）植物もしくは動物の細胞もしくは細胞培養物等の天然源、または（ｂ）合成有機化学反応混合物の、他の成分から分離されることを意味する。本明細書において使用される場合、「精製される」は、単離された場合に、単離物が、該単離物の重量の少なくとも９５％、別の態様においては少なくとも９８％の化合物（例えば、コンジュゲート）を含有することを意味する。
【０１１４】
「単離された」抗体は、同定され、その自然環境の成分から分離および／または回収されたものである。その自然環境の汚染物質成分は、抗体の診断的または治療的使用を妨げるであろう材料であり、酵素、ホルモン、および他のタンパク質性または非タンパク質性溶質を含んでよい。好ましい実施形態において、抗体は、（１）ローリー法によって決定した際に、抗体の９５重量％より大きく、最も好ましくは９９重量％超まで、（２）スピニングカップシークエネーターの使用によって、Ｎ−末端もしくは内部アミノ酸配列の少なくとも１５残基を取得するのに十分な程度まで、または（３）ＳＤＳ−ＰＡＧＥによって、還元または非還元条件下、クマシーブルーもしくは好ましくは銀染色を使用して、均質になるまで、精製されることになる。単離された抗体は、抗体の自然環境の少なくとも１つの成分が存在しないことになるため、組み換え細胞内に抗体をインサイチュで含む。しかしながら、通常、単離された抗体は、少なくとも１つの精製ステップによって調製されることになる。
【０１１５】
「アポトーシスを誘導する」抗体は、アネキシンＶの結合、ＤＮＡの断片化、細胞収縮、小胞体の拡張、細胞断片化、および／または膜ベシクル（アポトーシス小体と呼ばれる）の形成によって決定した際に、プログラム細胞死を誘導するものである。細胞は、腫瘍細胞、例えば、乳房、卵巣、胃、子宮内膜、唾液腺、肺、腎臓、結腸、甲状腺、膵臓または膀胱の細胞である。アポトーシスに関連する細胞的事象を評定するために、種々の方法が利用可能である。例えば、ホスファチジルセリン（ＰＳ）転座はアネキシン結合によって測定することができ、ＤＮＡ断片化はＤＮＡラダリングによって評定することができ、ＤＮＡ断片化に伴う核／クロマチン凝縮は低二倍体細胞のあらゆる増大によって評定することができる。
【０１１６】
用語「治療有効量」は、哺乳動物において疾患または障害を治療するのに有効な薬物の量を指す。がんの場合、治療有効量の薬物は、がん細胞の数を低減させ、腫瘍サイズを低減させ、末梢器官へのがん細胞浸潤を阻害し（すなわち、ある程度減速させ、好ましくは停止し）、腫瘍転移を阻害し（すなわち、ある程度減速させ、好ましくは停止し）、腫瘍成長をある程度阻害し、かつ／またはがんに関連する症状の１つもしくは複数をある程度緩和することができる。薬物が、現存するがん細胞の成長を阻害および／または死滅させ得る程度まで、細胞増殖抑制性かつ／または細胞毒性であってよい。がん療法では、効能は、例えば、疾患進行までの時間（ＴＴＰ）を評価し、かつ／または奏効率（ＲＲ）を決定することによって測定することができる。
【０１１７】
用語「相当量」は、混合物または試料の大部分、すなわち集団の５０％超を指す。
【０１１８】
用語「細胞内代謝物」は、抗体−薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）上の細胞内での代謝プロセスまたは反応によって生じる化合物を指す。代謝プロセスまたは反応は、ＡＤＣのペプチドリンカーのタンパク質分解的開裂等の酵素プロセスであってよい。細胞内代謝物は、細胞への侵入、拡散、取り込みまたは輸送の後に細胞内開裂を経た抗体および遊離薬物を含むがこれらに限定されない。
【０１１９】
用語「細胞内で開裂された」および「細胞内開裂」は、ＡＤＣ等の上の細胞内での代謝プロセスまたは反応を指し、それにより、薬物部分と抗体との間の共有結合、例えばリンカーが切断され、遊離薬物、または細胞内の抗体から解離したコンジュゲートの他の代謝物をもたらす。故に、ＡＤＣの開裂された部分は細胞内代謝物である。
【０１２０】
用語「バイオアベイラビリティ」は、患者に投与された所与の量の薬物の全身アベイラビリティ（すなわち、血中／血漿中レベル）を指す。バイオアベイラビリティは、投与された剤形から全身循環に到達する薬物の時間（速度）および総量（程度）の両方の測定を示す絶対項である。
【０１２１】
用語「細胞毒性活性」は、ＡＤＣの、または前記ＡＤＣの細胞内代謝物の、細胞死滅、細胞増殖抑制性または抗増殖効果を指す。細胞毒性活性は、ＩＣ５０値として表現することができ、これは、細胞の半分が生存する単位体積当たりの濃度（モル濃度または質量）である。
【０１２２】
「障害」は、薬物または抗体−薬物コンジュゲートによる治療から便益を得るであろう任意の状態である。これは、哺乳動物が問題の障害に罹りやすくする病理学的状態を含む慢性および急性の障害または疾患を含む。本明細書において治療される障害の非限定的な例は、良性および悪性がん；白血病およびリンパ性悪性腫瘍、ニューロンの、グリアの、星状細胞の（ａｓｔｒｏｃｙｔａｌ）、視床下部のおよび他の腺の、マクロファージ、上皮、間質および胞胚腔（ｂｌａｓｔｏｃｏｅｌｉｃ）障害；ならびに炎症、血管新生および免疫学的障害を含む。
【０１２３】
用語「がん」および「がん性」は、典型的には無調節な細胞成長を特徴とする、哺乳動物における生理学的状態または障害を指すまたは記述する。「腫瘍」は、１つまたは複数のがん性細胞を含む。
【０１２４】
「患者」の例は、ヒト、ラット、マウス、モルモット、サル、ブタ、ヤギ、雌ウシ、ウマ、イヌ、ネコ、鳥および家禽を含むがこれらに限定されない。例示的な実施形態において、患者はヒトである。
【０１２５】
用語「治療する」または「治療」は、文脈上別段の指示がない限り、再発を予防するための治療的処置および予防的手段を指し、ここで、目的は、がんの発症または広がり等の望ましくない生理学的変化または障害を阻害するまたは遅くする（低下させる）ことである。本発明の目的のために、有益なまたは所望の臨床結果は、検出可能か不可能かにかかわらず、症状の軽減、疾患の程度の減少、疾患の安定した（すなわち、悪化しない）状態、疾患進行の遅延または減速、疾患状態の寛解または緩和、および緩解（部分的であるか全体であるかにかかわらず）を含むがこれらに限定されない。「治療」は、治療を受けない場合に予想される生存期間と比較して長い生存期間を意味してもよい。治療を必要とする人々は、状態または障害を既に有する人々および状態または障害を有しやすい人々を含む。
【０１２６】
がんの文脈において、用語「治療すること」は、腫瘍細胞、がん細胞または腫瘍の成長を阻害すること、腫瘍細胞またはがん細胞の複製を阻害すること、全身腫瘍組織量の低下、またはがん性細胞の数を減らすこと、および疾患に関連する１つまたは複数の症状を寛解させることのいずれかまたはすべてを含む。
【０１２７】
自己免疫疾患の文脈において、用語「治療すること」は、自己免疫性抗体を生成する細胞を含むがこれに限定されない自己免疫疾患状態に関連する細胞の複製を阻害すること、自己免疫性抗体組織量を低下させること、および自己免疫疾患の１つまたは複数の症状を寛解させることのいずれかまたはすべてを含む。
【０１２８】
感染性疾患の文脈において、用語「治療すること」は、感染性疾患を引き起こす病原体の成長、繁殖または複製を阻害すること、および感染性疾患の１つまたは複数の症状を寛解させることのいずれかまたはすべてを含む。
【０１２９】
用語「添付文書」は、そのような治療薬の使用に関する、指示、使用法、投薬量、投与、禁忌および／または警告についての情報を含有する、治療薬の商品包装に通例含まれる説明書を指すために使用される。
【０１３０】
本明細書において使用される場合、用語「細胞」、「細胞株」および「細胞培養物」は、交換可能に使用され、すべてのそのような呼称は後代を含む。「形質転換体」および「形質転換細胞」という語は、初代対象細胞、および継代の数を問わず、それに由来する培養物または後代を含む。すべての後代は、意図的なまたは不測の突然変異により、ＤＮＡ含有量において正確に同一でない場合があることも理解される。最初に形質転換された細胞においてスクリーニングされたものと同じ機能または生物学的活性を有する突然変異体後代が含まれる。異なる呼称が意図されている場合、それは文脈から明らかとなるであろう。
【０１３１】
本明細書において使用される場合、ＣＢＩは、１，２，９，９ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−ベンゾ［ｅ］シクロプロパ［ｃ］インドール−４−オン、またはその置換もしくは誘導体化形態を指す。ＣＢＩは、ＣＢＩのセコ形態またはセコ−ＣＢＩを指す場合もあり、これは、１−（クロロメチル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−５−オール、またはその置換もしくは誘導体化形態としても公知である。
【０１３２】
本明細書において使用される場合、ＣＰＩは、１，２，８，８ａ−テトラヒドロシクロプロパ［ｃ］ピロロ［３，２−ｅ］インドール−４（５Ｈ）−オン、またはその置換もしくは誘導体化形態を指す。ＣＰＩは、ＣＰＩのセコ形態またはセコ−ＣＰＩを指す場合もあり、これは、８−（クロロメチル）−１−メチル−３，６，７，８−テトラヒドロピロロ［３，２−ｅ］インドール−４−オール、またはその置換もしくは誘導体化形態としても公知である。
【０１３３】
別段の指示がない限り、用語「アルキル」は、それ自体が、または別の用語の一部として、指示されている数の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖状の、飽和炭化水素を指す（例えば、「Ｃ１〜Ｃ８」アルキルは、１から８個までの炭素原子を有するアルキル基を指す）。アルキル基は、典型的には、１から２０個までの炭素原子、好ましくは１から８個までの炭素原子、より好ましくは１から４個までの炭素原子を含む。炭素原子の数が指示されていない場合、アルキル基は、１から８個までの炭素原子を有する。代表的な直鎖Ｃ１〜Ｃ８アルキルは、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｎ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、ｎ−ヘプチルおよびｎ−オクチルを含むがこれらに限定されず、一方、分枝鎖状のＣ１〜Ｃ８アルキルは、−イソプロピル、−ｓｅｃ−ブチル、−イソブチル、−ｔｅｎｔ−ブチル、−イソペンチルおよび−２−メチルブチルを含むがこれらに限定されず、不飽和Ｃ２〜Ｃ８アルキルは、ビニル、アリル、１−ブテニル、２−ブテニル、イソブチレニル、１−ペンテニル、２−ペンテニル、３−メチル−１−ブテニル、２−メチル−２−ブテニル、２，３−ジメチル−２−ブテニル、１−ヘキシル、２−ヘキシル、３−ヘキシル、アセチレニル、プロピニル、１−ブチニル、２−ブチニル、１−ペンチニル、２−ペンチニルおよび３−メチル−１−ブチニルを含むがこれらに限定されない。本明細書における「アルキル」への言及は、上述した通りの非置換および置換部分を指す。
【０１３４】
別段の指示がない限り、「アルキレン」は、それ自体が、または別の用語の一部として、定められた数の炭素原子、典型的には１〜１８個の炭素原子の、親アルカンの同じまたは２個の異なる炭素原子からの２個の水素原子の除去によって誘導される２つの一価ラジカル中心を有する、飽和、分枝鎖もしくは直鎖または環状炭化水素ラジカルを指す。アルキレン基は、典型的には、１から１８個までの炭素原子、好ましくは１から１０個までの炭素原子、より好ましくは１から８個までの炭素原子、最も好ましくは１から４個までの炭素原子を含む。典型的なアルキレンラジカルは、メチレン（−ＣＨ２−）、１，２−エチレン（−ＣＨ２ＣＨ２−）、１，３−プロピレン（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）、１，４−ブチレン（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）等を含むがこれらに限定されない。「Ｃ１〜Ｃ１０」直鎖アルキレンは、式−（ＣＨ２）１〜１０−の、直鎖、飽和炭化水素基である。Ｃ１〜Ｃ１０アルキレンの例は、メチレン、エチレン、プロピレン、ブチレン、ペンチレン、ヘキシレン、ヘプチレン、オクチレン、ノニレンおよびデカレンを含む。本明細書における「アルキレン」への言及は、上述した通りの非置換および置換部分を指す。
【０１３５】
別段の指示がない限り、用語「ヘテロアルキル」は、それ自体が、または別の用語と組み合わせて、別段の定めがない限り、完全飽和した、または定められた数の炭素原子からなる１から３不飽和度ならびにＯ、Ｎ、ＳｉおよびＳからなる群から選択される１から３個までのヘテロ原子を含有する、安定な直鎖もしくは分枝鎖炭化水素、またはそれらの組合せを意味し、ここで、窒素および硫黄原子は酸化されていてもよく、窒素ヘテロ原子は四級化されていてもよい。ヘテロ原子Ｏ、ＮおよびＳは、ヘテロアルキル基の任意の内部位置に位置していてよい。ヘテロ原子Ｓｉは、アルキル基が分子の残りに結合している位置を含むヘテロアルキル基の任意の位置に位置していてよい。最大２個のヘテロ原子が連続的であってよい。ヘテロアルキル基は、典型的には、１から１５個までの炭素原子、好ましくは１から１２個までの炭素原子、より好ましくは１から８個までの炭素原子、最も好ましくは１から４個までの炭素原子を含む。本明細書における「ヘテロアルキル」への言及は、上述した通りの非置換および置換部分を指す。
【０１３６】
別段の指示がない限り、用語「ヘテロアルキレン」は、それ自体が、または別の置換基の一部として、ヘテロアルキル（上記で論じた通り）に由来する二価の基を意味する。ヘテロアルキレン基では、ヘテロ原子は、鎖末端の一方または両方を占めることもできる。本明細書における「ヘテロアルキレン」への言及は、上述した通りの非置換および置換部分を指す。
【０１３７】
Ｈまたは水素という用語は、本明細書において、典型的には、単一のプロトンを含みニュートロンを含まない水素原子を指すが、単一のプロトンおよび単一のニュートロンを含む重水素として公知の水素同位体も含む。
【０１３８】
別段の指示がない限り、「アリール」は、それ自体が、または別の用語の一部として、親芳香族環系の単一の炭素原子からの１個の水素原子の除去によって誘導される、５〜２０個、好ましくは５〜１４個または６〜１４個の炭素原子の、置換または非置換一価炭素環式芳香族炭化水素ラジカルを意味する。典型的なアリール基は、ベンゼン、置換ベンゼン、ナフタレン、アントラセン、ビフェニル等に由来するラジカルを含むがこれらに限定されない。置換炭素環式芳香族基（例えば、アリール基）は、下記の群：Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ９、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ９、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ’、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）２、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ’、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ’、−Ｓ（Ｏ）Ｒ’、−ＯＨ、ハロゲン、−Ｎ３、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｒ９）、−Ｎ（Ｒ９）２および−ＣＮの１つまたは複数、好ましくは１から５つで置換されていてよく、ここで、各Ｒ９は、−Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキルおよび非置換アリールから独立して選択される。いくつかの実施形態において、置換炭素環式芳香族基は、−ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２、−ＮＨＣＯＮＨ２、−Ｓ（＝Ｏ）２Ｒ９および−ＳＲ９の１つまたは複数をさらに含むことができる。「アリーレン」は、対応する二価部分である。
【０１３９】
「置換アルキル」（または「置換アルキレン」、「置換ヘテロアルキル」または「置換ヘテロアルキレン」）は、１個または複数の水素原子が置換基でそれぞれ独立して置きかえられている、上記で論じた通りの関連アルキルアルキル含有基またはラジカルを意味する。典型的な置換基は、−Ｘ、−Ｒ１０、−Ｏ−、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｓ−、−ＮＲ１０２、−ＮＲ１０３、＝ＮＲ１０、−ＣＸ３、−ＣＮ、−ＯＣＮ、−ＳＣＮ、−Ｎ＝Ｃ＝Ｏ、−ＮＣＳ、−ＮＯ、−ＮＯ２、＝Ｎ２、−Ｎ３、−ＮＲ１０Ｃ（＝Ｏ）Ｒ１０Ｒ１０、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ１０２、−ＳＯ３−、−ＳＯ３Ｈ、−Ｓ（＝Ｏ）２Ｒ１０、−ＯＳ（＝Ｏ）２ＯＲ１０、−Ｓ（＝Ｏ）２ＮＲ１０、−Ｓ（＝Ｏ）Ｒ１０、−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲ１０）２、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＰＯ３２−、ＰＯ３Ｈ２、−ＡｓＯ２Ｈ２、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（＝Ｏ）Ｘ、−Ｃ（＝Ｓ）Ｒ１０、−ＣＯ２Ｒ１０、−ＣＯ２−、−Ｃ（＝Ｓ）ＯＲ１０、−Ｃ（＝Ｏ）ＳＲ１０、−Ｃ（＝Ｓ）ＳＲ１０、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ１０２、−Ｃ（＝Ｓ）ＮＲ１０２または−Ｃ（＝ＮＲ１０）ＮＲ１０２を含むがこれらに限定されず、ここで、各Ｘは、独立して、ハロゲン：−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒまたは−Ｉであり、各Ｒ１０は、独立して、−Ｈ、Ｃ１〜Ｃ２０アルキル、Ｃ１〜Ｃ２０ヘテロアルキル、Ｃ６〜Ｃ２０アリール、Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロシクリル、保護基またはプロドラッグ部分である。上述した通りの、アリール、アルキレンおよびヘテロアルキレン基も同様に置換されていてもよい。
【０１４０】
別段の指示がない限り、「アラルキル」は、それ自体が、または別の用語の一部として、上記で定義した通りのアリール基で置換されている上記で定義した通りのアルキル基を意味する。
【０１４１】
別段の指示がない限り、「Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクリル」は、それ自体が、または別の用語の一部として、２から１０個、２から１４個、または２〜２０個の炭素原子、好ましくは３から８個の炭素原子（環員とも称される）およびＮ、Ｏ、ＰまたはＳから独立して選択される１から４個のヘテロ原子環員を有し、親環系の環原子からの１個の水素原子の除去によって誘導される、一価置換または非置換の芳香族または非芳香族単環式、二環式または三環式環系を指す。ヘテロシクリル中の１個または複数のＮ、ＣまたはＳ原子は、酸化されていてよい。ヘテロ原子を含む環は、芳香族であっても非芳香族であってもよい。芳香族ヘテロ環は、時に、ヘテロアリールと称される。別段の注記がない限り、ヘテロシクリルは、任意のヘテロ原子または炭素原子においてそのペンダント基に結合しており、これが安定構造をもたらす。Ｃ２〜Ｃ１０ヘテロシクリルの代表的な例は、テトラヒドロフラニル、オキセタニル、ピラニル、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、ベンゾフラニル、ベンゾチオフェン、ベンゾチアゾリル、インドリル、ベンゾピラゾリル、ピロリル、チオフェニル（チオフェン）、フラニル、チアゾリル、イミダゾリル、ピラゾリル、トリアゾリル、１，２，３，４−テトラヒドロ−キノリニル等の部分を含むキノリニル、ピリミジニル、ピリジニル、ピリドニル、ピラジニル、ピリダジニル、イソチアゾリル、イソオキサゾリル、テトラゾリル、エポキシド、オキセタンおよびボディピー（置換または非置換）を含むがこれらに限定されない。Ｃ２〜Ｃ１０ヘテロシクリルは、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキル、−ＯＲ１１、アリール、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１１、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１１、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ１１、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１１）２、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１１、−Ｓ（＝Ｏ）２Ｒ１１、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１１、ハロゲン、−Ｎ３、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｒ１１）、−Ｎ（Ｒ１１）２および−ＣＮを含むがこれらに限定されない最大７つの基で置換されていてよく、ここで、各Ｒ１１は、−Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキルおよびアリールから独立して選択される。いくつかの実施形態において、置換ヘテロシクリルは、−ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２、−ＮＨＣＯＮＨ２、−Ｓ（＝Ｏ）２Ｒ１１および−ＳＲ１１の１つまたは複数も含むことができる。ヘテロシクロまたはＣ２〜Ｃ１０ヘテロシクロは、対応する二価部分である。二価芳香族ヘテロ環は、本明細書において、時に、ヘテロアリーレンまたはＣ２〜Ｃ１０ヘテロアリーレンと称される。
【０１４２】
上記で注記した通り、芳香族ヘテロ環は、本明細書において、時に、ヘテロアリールと称され、好ましくは、ヘテロ原子に加えて、５〜１４個、６〜１４個、または６〜２０個の炭素原子を含有する。ヘテロアリールは、単環式、二環式または三環式環系であってよい。代表的なヘテロアリールは、トリアゾリル、テトラゾリル、オキサジアゾリル、ピリジル、フリル、ベンゾフラニル、チオフェニル、ベンゾチオフェニル、キノリニル、ピロリル、インドリル、オキサゾリル、ベンゾオキサゾリル、イミダゾリル、ベンズイミダゾリル、チアゾリル、ベンゾチアゾリル、イソオキサゾリル、ピラゾリル、イソチアゾリル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、トリアジニル、シンノリニル、フタラジニル、キナゾリニル、ピリミジル、アゼピニル、オキセピニルおよびキノキサリニルを含むがこれらに限定されない。ヘテロアリールは、置換されていてもよい。典型的な置換基は、−Ｘ、−Ｒｈ、−Ｏ−、−ＯＲｈ、−ＳＲｈ、−Ｓ−、−ＮＲｈ２、−ＮＲｈ３、＝ＮＲｈ、−ＣＸ３、−ＣＮ、−ＯＣＮ、−ＳＣＮ、−Ｎ＝Ｃ＝Ｏ、−ＮＣＳ、−ＮＯ、−ＮＯ２、＝Ｎ２、−Ｎ３、−ＮＲｈＣ（＝Ｏ）Ｒｈ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｈ２、−ＳＯ３−、−ＳＯ３Ｈ、−Ｓ（＝Ｏ）２Ｒｈ、−ＯＳ（＝Ｏ）２ＯＲｈ、−Ｓ（＝Ｏ）２ＮＲｈ、−Ｓ（＝Ｏ）Ｒｈ、−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲｈ）２、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲｈ）２、−ＰＯ３２−、ＰＯ３Ｈ２、−ＡｓＯ２Ｈ２、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒｈ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｘ、−Ｃ（＝Ｓ）Ｒｈ、−ＣＯ２Ｒｈ、−ＣＯ２−、−Ｃ（＝Ｓ）ＯＲｈ、−Ｃ（＝Ｏ）ＳＲｈ、−Ｃ（＝Ｓ）ＳＲｈ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｈ２、−Ｃ（＝Ｓ）ＮＲｈ２、−Ｃ（＝ＮＲ）ＮＲｈ２、Ｃ１〜Ｃ２０ヘテロアルキル、Ｃ６〜Ｃ２０アリール、Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクリル、保護基またはプロドラッグ部分を含むがこれらに限定されず、ここで、各Ｘは、独立して、ハロゲン：−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒまたは−Ｉであり、各Ｒｈは、独立して、−ＨまたはＣ１〜Ｃ６アルキルである。二価芳香族ヘテロ環は、本明細書において、時に、ヘテロアリーレンまたはＣ１〜Ｃ１０ヘテロアリーレンと称される。
【０１４３】
別段の指示がない限り、「ヘテロアラルキル」は、それ自体が、または別の用語の一部として、上記で定義した通りの芳香族ヘテロシクリル基で置換されている上記で定義した通りのアルキル基を意味する。ヘテロアラルキロは、対応する二価部分である。
【０１４４】
別段の指示がない限り、「Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリル」は、それ自体が、または別の用語の一部として、親環系の環原子からの１個の水素原子の除去によって誘導される、３、４、５、６、７または８員の一価、置換または非置換の、飽和または不飽和非芳香族単環式または二環式炭素環式環である。代表的なＣ３〜Ｃ８カルボシクリルは、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロペンタジエニル、シクロヘキシル、シクロヘキセニル、１，３−シクロヘキサジエニル、１，４−シクロヘキサジエニル、シクロヘプチル、１，３−シクロヘプタジエニル、１，３，５−シクロヘプタトリエニル、シクロオクチル、シクロオクタジエニル、ビシクロ（１．１．１．）ペンタンおよびビシクロ（２．２．２．）オクタンを含むがこれらに限定されない。Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリル基は、非置換であっても、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキル、−ＯＲ１１、アリール、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１１、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１１、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ１１、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１１）２、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１１、−Ｓ（＝Ｏ）２Ｒ１１、−Ｓ（＝Ｏ）Ｒ１１、−ＯＨ、−ハロゲン、−Ｎ３、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｒ１１）、−Ｎ（Ｒ１１）２および−ＣＮを含むがこれらに限定されない最大７つの基で置換されていてもよく、ここで、各Ｒ１１は、−Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヘテロアルキルおよびアリールから独立して選択される。「Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ」は、対応する二価部分である。
【０１４５】
本明細書において使用される場合、アジド置換基は、−Ｎ＝Ｎ＝Ｎを指し、シアネート置換基は、−Ｏ−ＣＮを指し、チオシアネート置換基は、−Ｓ−ＣＮを指し、イソシアネート置換基は、−Ｎ＝Ｃ＝Ｏを指し、チオイソシアネート置換基は、−Ｓ−Ｎ＝Ｃ＝Ｏを指す。
【０１４６】
用語「キラル」は、鏡像パートナーと重ね合わせることができないという特性を有する分子を指すのに対し、用語「アキラル」は、それらの鏡像パートナー上に重ね合わせることができる分子を指す。
【０１４７】
用語「立体異性体」は、同一の化学構成を有するが、空間における原子または基の配置に関しては異なる化合物を指す。
【０１４８】
「ジアステレオマー」は、２つ以上のキラリティー中心を持ち、その分子が互いに鏡像ではない立体異性体を指す。ジアステレオマーは、異なる物理的特性、例えば、融点、沸点、スペクトル特性および反応性を有する。ジアステレオマーの混合物は、電気泳動法およびクロマトグラフィー等の高分解能分析手順下で分離することができる。
【０１４９】
「グリコシル」は、構造：
【０１５０】
【化４５】
0006782250.tif 000051
またはその置換形態を指し、例えば、置換されて、
【０１５１】
【化４６】
0006782250.tif 000052
ならびに他多数
等の構造を形成する参照構造を含む。
【０１５２】
本明細書において使用される立体化学的な定義および慣例は、概して、Ｓ．Ｐ．Ｐａｒｋｅｒ編、ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｔｅｒｍｓ、ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ  Ｂｏｏｋ  Ｃｏｍｐａｎｙ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９８４）；ならびにＥｌｉｅｌおよびＷｉｌｅｎ、Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９９４）に準拠する。多くの有機化合物が光学活性形態で存在する、すなわち、それらは平面偏光面を回転させる能力を有する。光学活性化合物を記述する際、接頭辞ＤおよびＬ、またはＲおよびＳは、そのキラル中心周囲の分子の絶対配置を表すために使用される。接頭辞ｄおよびｌまたは（＋）および（−）は、化合物による平面偏光の回転の記号を指定するために用いられ、（−）または１は、化合物が左旋性であることを意味する。（＋）またはｄの接頭辞が付いた化合物は右旋性である。所与の化学構造について、これらの立体異性体は、それらが互いに鏡像であることを除いて同一である。特定の立体異性体は鏡像異性体と称される場合もあり、そのような異性体の混合物は、多くの場合、鏡像異性混合物と呼ばれる。鏡像異性体の５０：５０混合物は、ラセミ混合物またはラセミ体と称され、これは、化学反応またはプロセスにおいて立体選択も立体特異性もなかった場合に発生し得る。用語「ラセミ混合物」および「ラセミ体」は、光学活性を欠いている２つの鏡像異性種の等モル混合物を指す。
【０１５３】
本明細書において使用される場合、「−ＰＡＢＡ−」または「ＰＡＢＡ」は、ｐ−アミノ安息香酸およびそれに由来する部分、例えば、構造：
【０１５４】
【化４７】
0006782250.tif 000053
またはその変異体を指す。
【０１５５】
本明細書において使用される場合、「−ＰＡＢＣ−」または「ＰＡＢＣ」は、ｐ−アミノベンジルオキシカルボニルおよびそれに由来する部分、例えば、構造：
【０１５６】
【化４８】
0006782250.tif 000054
またはその変異体を指す。
【０１５７】
アミノ酸「誘導体」は、例えば、アルキル化、グリコシル化、アセチル化、リン酸化等によるもの等、親アミノ酸の共有結合による置換または修飾を有するアミノ酸を含む。「誘導体」の定義内にさらに含まれるのは、例えば、置換結合、および当技術分野において公知である他の修飾を持つ、アミノ酸の１つまたは複数の類似体である。
【０１５８】
「天然アミノ酸」は、文脈上別段の指示がない限り、アルギニン、グルタミン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファン、リジン、グリシン、アラニン、ヒスチジン、セリン、プロリン、グルタミン酸、アスパラギン酸、トレオニン、システイン、メチオニン、ロイシン、アスパラギン、イソロイシンおよびバリンを指す。
【０１５９】
「保護基」は、分子中の反応性基に結合すると、その反応性をマスクする、低減させるまたは防止する部分を指す。保護基の例は、Ｔ．Ｗ．ＧｒｅｅｎｅおよびＰ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、第３版、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、１９９９、ならびにＨａｒｒｉｓｏｎおよびＨａｒｒｉｓｏｎら、Ｃｏｍｐｅｎｄｉｕｍ  ｏｆ  Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｍｅｔｈｏｄｓ、第１〜８巻（Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ、１９７１〜１９９６）において見ることができ、これらは参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。代表的なヒドロキシ保護基は、アシル基、ベンジルおよびトリチルエーテル、テトラヒドロピラニルエーテル、トリアルキルシリルエーテルならびにアリルエーテルを含む。代表的なアミノ保護基は、ホルミル、アセチル、トリフルオロアセチル、ベンジル、ベンジルオキシカルボニル（ＣＢＺ）、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）、トリメチルシリル（ＴＭＳ）、２−トリメチルシリル−エタンスルホニル（ＳＥＳ）、トリチルおよび置換トリチル基、アリルオキシカルボニル、９−フルオレニルメチルオキシカルボニル（ＦＭＯＣ）、ニトロ−ベラトリルオキシカルボニル（ＮＶＯＣ）等を含む。
【０１６０】
「ヒドロキシル保護基」の例は、メトキシメチルエーテル、２−メトキシエトキシメチルエーテル、テトラヒドロピラニルエーテル、ベンジルエーテル、ｐ−メトキシベンジルエーテル、トリメチルシリルエーテル、トリエチルシリルエーテル、トリイソプロピルシリルエーテル、ｔ−ブチルジメチルシリルエーテル、トリフェニルメチルシリルエーテル、酢酸エステル、置換酢酸エステル、ピバロエート（ｐｉｖａｌｏａｔｅ）、ベンゾエート、メタンスルホネートおよびｐ−トルエンスルホネートを含むがこれらに限定されない。
【０１６１】
「脱離基」は、別の官能基によって置換され得る官能基を指す。そのような脱離基は当技術分野において周知であり、例は、ハロゲン化物（例えば、塩化物、臭化物、ヨウ化物）、メタンスルホニル（メシル）、ｐ−トルエンスルホニル（トシル）、トリフルオロメチルスルホニル（トリフレート）およびトリフルオロメチルスルホネートを含むがこれらに限定されない。
【０１６２】
語句「薬学的に許容できる塩」は、本明細書において使用される場合、化合物の薬学的に許容できる有機または無機塩を指す。化合物は、典型的には、少なくとも１つのアミノ基を含有し、したがって、このアミノ基と酸付加塩が形成され得る。例示的な塩は、硫酸塩、クエン酸塩、酢酸塩、シュウ酸塩、塩化物、臭化物、ヨウ化物、硝酸塩、重硫酸塩、リン酸塩、酸性リン酸塩、イソニコチン酸塩、乳酸塩、サリチル酸塩、酸性クエン酸塩、酒石酸塩、オレイン酸塩、タンニン酸塩、パントテン酸塩、酒石酸水素塩、アスコルビン酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、リンゴ酸塩、ゲンチシン酸塩、フマル酸塩、グルコン酸塩、グロクロン酸塩、糖酸塩、ギ酸塩、安息香酸塩、グルタミン酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、およびパモ酸塩（すなわち、１，１’−メチレン−ビス−（２−ヒドロキシ−３−ナフトエート））を含むがこれらに限定されない。薬学的に許容できる塩は、酢酸イオン、コハク酸イオンまたは他の対イオン等の別の分子の包含を伴ってよい。対イオンは、親化合物上の電荷を安定させる任意の有機または無機部分であってよい。さらに、薬学的に許容できる塩は、その構造中に１個を超える荷電原子を有してよい。多数の荷電原子が薬学的に許容できる塩の一部である場合、多数の対イオンを有し得る。それ故、薬学的に許容できる塩は、１個もしくは複数の荷電原子および／または１個もしくは複数の対イオンを有してよい。
【０１６３】
「薬学的に許容できる溶媒和物」または「溶媒和物」は、１つまたは複数の溶媒分子と本発明の化合物またはコンジュゲートとの会合を指す。薬学的に許容できる溶媒和物を形成する溶媒の例は、水、イソプロパノール、エタノール、メタノール、ＤＭＳＯ、酢酸エチル、酢酸およびエタノールアミンを含むがこれらに限定されない。
【０１６４】
用語「ローディング」または「薬物ローディング」または「ペイロードローディング」は、ＡＤＣ分子中における抗体当たりのペイロード（「ペイロード」は、本明細書において、「薬物」と交換可能に使用される）の平均数を表す、または指す。薬物ローディングは、抗体当たり１から２０までの薬物の範囲であってよい。これは時に、ＤＡＲ、または薬物対抗体比と称される。本明細書において記述されているＡＤＣの組成物は、１〜２０、ある特定の実施形態において、１〜８、２〜８、２〜６、２〜５および２〜４のＤＡＲを有する。典型的なＤＡＲ値は、２、４、６および８である。抗体当たりの薬物の平均数、またはＤＡＲ値は、ＵＶ／可視分光法、質量分析法、ＥＬＩＳＡアッセイおよびＨＰＬＣ等の従来の手段によって特徴付けることができる。定量的ＤＡＲ値を決定することもできる。場合によっては、特定のＤＡＲ値を有する均質なＡＤＣの、分離、精製および特徴付けは、逆相ＨＰＬＣまたは電気泳動法等の手段によって実現することができる。ＤＡＲは、抗体上の結合部位の数によって限定され得る。例えば、結合がシステインチオールである場合、抗体は、唯一もしくは数種のシステインチオール基のみを有し得るか、またはそれを経由してリンカー単位が結合することができる唯一もしくは数種の充分に反応性のチオール基を有し得る。いくつかの実施形態において、システインチオールは、鎖間ジスルフィド結合を形成するシステイン残基のチオール基である。いくつかの実施形態において、システインチオールは、鎖間ジスルフィド結合を形成しないシステイン残基のチオール基である。典型的には、理論上の最大数よりも少ない薬物部分が、コンジュゲーション反応中に抗体とコンジュゲートする。抗体は、例えば、リンカーともリンカー中間体とも反応しない多くのリジン残基を含有し得る。最も反応性の高いリジン基のみが反応性リンカー試薬と反応し得る。
【０１６５】
概して、抗体は、もしあれば、リンカーを介して薬物と連結していてよい遊離および反応性システインチオール基を、多くは含有しない。抗体中のほとんどのシステインチオール残基は、ジスルフィド架橋として存在し、ジチオスレイトール（ＤＴＴ）等の還元剤で還元されなくてはならない。抗体を変性条件に供して、リジンまたはシステイン等の反応性求核基を露わにすることができる。ＡＤＣのローディング（薬物／抗体比）は、（ｉ）抗体に対してモル過剰の薬物−リンカーを限定すること、（ｉｉ）コンジュゲーション反応時間または温度を限定すること、および（ｉｉｉ）システインチオール修飾のための部分的または限定的還元条件を含む数種の異なる様式で制御することができる。１つを超える求核基が薬物−リンカーと反応する場合、得られる生成物は、抗体当たり１つまたは複数の薬物部分の分布を持つ、ＡＤＣの混合物である。抗体当たりの薬物の平均数は、混合物から、例えば、抗体に対して特異的かつ薬物に対して特異的なデュアルＥＬＩＳＡ抗体アッセイによって算出することができる。個々のＡＤＣは、質量分析によって混合物中で同定することができ、ＨＰＬＣ、例えば疎水性相互作用クロマトグラフィーによって分離することができる。
【０１６６】
以下は、本出願において別様には定義または記述され得ない略語および定義の一覧である：ＤＭＳＯ（ジメチルスルホキシドを指す）、ＨＲＭＳ（高分解能質量分析を指す）、ＤＡＤ（ダイオードアレイ検出を指す）、ＴＦＡ（２，２，２−トリフルオロ酢酸またはトリフルオロ酢酸を指す）、ＴＦＦ（接線流濾過を指す）、ＥｔＯＨ（エタノールを指す）、ＭＷ（分子量を指す）、ＨＰＬＣ（高速液体クロマトグラフィーを指す）、ｐｒｅｐ  ＨＰＬＣ（分取高速液体クロマトグラフィーを指す）、ｅｔｃ．（等を指す）、トリチル（１，１’，１’’−エタン−１，１，１−トリイルトリベンゼンを指す）、ＴＨＦ（テトラヒドロフランを指す）、ＮＨＳ（１−ヒドロキシ−２，５−ピロリジンジオンを指す）、Ｃｂｚ（カルボキシベンジルを指す）、ｅｑ．（当量を指す）、ｎ−ＢｕＬｉ（ｎ−ブチルリチウムを指す）、ＯＡｃ（アセテートを指す）、ＭｅＯＨ（メタノールを指す）、ｉ−Ｐｒ（イソプロピルまたはプロパン−２−イルを指す）、ＮＭＭ（４−メチルモルホリンを指す）、および「−」（表中においては、この時点で該当データなしを指す）。
【０１６７】
本明細書において使用される二価部分および置換基は、いずれかの方向または両方向に結合または連結している前記部分または置換基を指すようになっている。例えば、部分−Ｃ（Ｏ）ＮＲ−（ＬＢ１の定義などにおいて）は、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ−および−ＮＲＣ（Ｏ）−を伝えるようになっており、部分−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル−は、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル−および−Ｃ１〜Ｃ６アルキルＣ（Ｏ）−を伝えるようになっている等である。より一般的には、その「左」および「右」側で連結している非対称（ｎｏｎ−ｓｙｍｅｔｒｉｃａｌ）二価部分の記述は、提示されている通りの部分（記載されている通りの左側で連結している部分の左側、記載されている通りの右側で連結している部分の右側）および提示されている通りの部分の逆（記載されている通りの右側で連結している部分の左側、記載されている通りの左側で連結している部分の右側）の両方を伝えるようになっている。
【０１６８】
用語「結合」および「存在しない」は、いずれも本明細書において、原子を含まない変数を記述するために使用される。故に、二価の変数が「存在しない」ところとは、隣接する部分が互いに結合していることを意味すると理解される。例えば、ＬＢ２が存在しないならば、ＬＢ１はＬＢ３と結合していてよいと理解され、または、ＬＢ１およびＬＢ２がいずれも存在しないならば、ＬＡはＬＢ３と結合していてよいと理解される。同様に、二価の変数が「結合」であるとして定義されているならば、これは、原子が存在せず、隣接する部分が互いに結合していることを意味すると理解される。故に、例えば、変数「Ｄ」が結合であるとして定義されている場合、（Ｔ２を定義している構造中で）炭素隣接Ｄが互いに結合していることが分かる。存在しない一価変数は、さらに共有結合できる水素または電子対であると理解される。
【０１６９】
抗体単位（Ａ、ＡｂまたはＡＢ）
上記で注記した通り、用語「抗体」（または「Ａ」、「Ａｂ」もしくは「ＡＢ」）は、本明細書において、最も広い意味で使用され、具体的には、インタクトなモノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、単一特異性抗体、多特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）、および所望の生物学的活性を呈する抗体断片を網羅する。加えて、本明細書において記述されている本発明のある特定の態様は抗体薬物コンジュゲートを指すが、コンジュゲートの抗体部分は、受容体、抗原、または所与の標的細胞集団に関連する他の受容性部分と、特異的に結合するまたは反応的に会合するもしくは錯体形成する何かで置きかえられるかもしれないことが、さらに想定される。例えば、抗体を含有する代わりに、本発明のコンジュゲートは、治療的にまたは別様に生物学的に修飾されることが求められる細胞集団の、受容体、抗原または他の受容性部分と、結合する、錯体形成する、または反応する、標的分子を含有し得る。そのような分子の例は、より低分子量のタンパク質、ポリペプチドもしくはペプチド、レクチン、糖タンパク質、非ペプチド、ビタミン、栄養素輸送分子（トランスフェリン等であるがこれに限定されない）、または任意の他の細胞結合分子もしくは物質を含む。ある特定の態様において、抗体または他のそのような標的分子は、抗体または他の標的分子が相互作用する特定の標的細胞集団に、薬物を送達するように作用する。
【０１７０】
別の態様において、本発明は、式ＩＩＩＡまたはＩＩＩＢの抗体薬物コンジュゲート化合物に関し、ここで、抗体ＡＢは、トラスツズマブ、トラスツズマブ突然変異体（例えば、本明細書または国際特許出願第ＰＣＴ／ＩＢ２０１２／０５６２３４号において開示されているトラスツズマブ突然変異体）、オレゴボマブ、エドレコロマブ、セツキシマブ、ビトロネクチン受容体（αｖβ３）に対するヒト化モノクローナル抗体、アレムツズマブ、非ホジキンリンパ腫の治療用のヒト化抗ＨＬＡ−ＤＲ抗体、１３１Ｉ  Ｌｙｍ−１を含む抗ＨＬＡ−ＤＲ抗体、非ホジキンリンパ腫の治療用のネズミ抗ＨＬＡ−Ｄｒ１０抗体を含む抗ＨＬＡ−Ｄｒ１０抗体、抗ｃｄ３３抗体、ホジキン病または非ホジキンリンパ腫の治療用のヒト化抗ＣＤ２２ｍＡｂを含む抗ｃｄ２２抗体、ラベツズマブ、ベバシズマブ、イブリツモマブチウキセタン、オファツムマブ、パニツムマブ、リツキシマブ、トシツモマブ、イピリムマブ、およびゲムツズマブから選択される。
【０１７１】
抗体単位上に存在し得るヘテロ原子は、硫黄（一実施形態において、抗体のスルフヒドリル基から）、酸素（一実施形態において、抗体のカルボニル、カルボキシルまたはヒドロキシル基から）および窒素（一実施形態において、抗体の第一級または第二級アミノ基から）を含む。これらのヘテロ原子は、抗体の自然な状態である抗体、例えば自然発生の抗体上に存在してもよく、または化学修飾を介して抗体に導入されてもよい。
【０１７２】
一実施形態において、抗体単位はスルフヒドリル基を有し、該抗体単位は該スルフヒドリル基の硫黄原子を介して結合している。
【０１７３】
別の実施形態において、抗体は、活性化エステル（そのようなエステルは、Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミド（ｈｙｄｒｏｘｙｓｕｃｃｉｎｉｍｄｅ）、ペンタフルオロフェニルおよびｐ−ニトロフェニルエステルを含むがこれらに限定されない）と反応することができ、故に、抗体単位の窒素原子およびカルボニルからなるアミド結合を形成することができる、リジン残基を有する。
【０１７４】
また別の態様において、抗体単位は、１つまたは複数のスルフヒドリル基を導入するように化学修飾することができる、１つまたは複数のリジン残基を有する。リジンを修飾するために使用することができる試薬は、Ｎ−スクシンイミジルＳ−アセチルチオアセテート（ＳＡＴＡ）および２−イミノチオラン塩酸塩（トラウト試薬）を含むがこれらに限定されない。
【０１７５】
別の実施形態において、抗体単位は、１つまたは複数のスルフヒドリル基を有するように化学修飾することができる、１つまたは複数の炭水化物基を有し得る。
【０１７６】
また別の実施形態において、抗体単位は、酸化されてアルデヒド基を提供することができる、１つまたは複数の炭水化物基を有し得る（例えば、Ｌａｇｕｚｚａら、１９８９、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３２（３）：５４８〜５５を参照）。対応するアルデヒドは、例えば、ヒドラジンおよびヒドロキシルアミン等の反応性部位と結合を形成することができる。薬物の結合または会合のためのタンパク質の修飾の他のプロトコールは、Ｃｏｌｉｇａｎら、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｃｉｅｎｃｅ、第２巻、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ（２００２）（参照により本明細書に組み込まれる）において記述されている。
【０１７７】
コンジュゲートが、抗体の代わりに非免疫反応性タンパク質、ポリペプチドまたはペプチド単位を含む場合、有用な非免疫反応性タンパク質、ポリペプチドまたはペプチド単位は、トランスフェリン、上皮成長因子（「ＥＧＦ」）、ボンベシン、ガストリン、ガストリン放出ペプチド、血小板由来成長因子、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＴＧＦ−αおよびＴＧＦ−β等の形質転換成長因子（「ＴＯＰ」）、ワクシニア成長因子（「ＶＧＦ」）、インスリンならびにインスリン様成長因子ＩおよびＩＩ、ソマトスタチン、レクチン、ならびに低比重リポタンパク質からのアポタンパク質を含むがこれらに限定されない。
【０１７８】
有用なポリクローナル抗体は、免疫動物の血清に由来する抗体分子の不均質集団である。有用なモノクローナル抗体は、特定の抗原決定基（例えば、がん細胞抗原、ウイルス抗原、微生物抗原、タンパク質、ペプチド、炭水化物、化学物質、核酸、またはそれらの断片）に対する抗体の均質集団である。関心対象の抗原に対するモノクローナル抗体（ｍＡｂ）は、培養中の連続的な細胞株による抗体分子の生成を提供する、当技術分野において公知である任意の技術を使用することによって調製することができる。
【０１７９】
有用なモノクローナル抗体は、ヒトモノクローナル抗体、ヒト化モノクローナル抗体、抗体断片またはキメラモノクローナル抗体を含むがこれらに限定されない。ヒトモノクローナル抗体は、当技術分野において公知の多数の技術（例えば、Ｔｅｎｇら、１９８３、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ．８０：７３０８〜７３１２；Ｋｏｚｂｏｒら、１９８３、Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  Ｔｏｄａｙ  ４：７２〜７９；およびＯｌｓｓｏｎら、１９８２、Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．９２：３〜１６）のいずれかによって作製され得る。
【０１８０】
抗体は、二重特異性抗体であってもよい。二重特異性抗体を作製するための方法は、当技術分野において公知であり、下記で論じる。
【０１８１】
抗体は、標的細胞（例えば、がん細胞抗原、ウイルス抗原または微生物抗原）と免疫特異的に結合している抗体、または腫瘍細胞もしくはマトリックスと結合している他の抗体の、機能的に活性な断片、誘導体または類似体であってよい。これに関して、「機能的に活性な」は、断片、誘導体または類似体が、該断片、誘導体または類似体の由来源である抗体を認識するのと同じ抗原を認識する抗抗イディオタイプ抗体を導き出せることを意味する。具体的には、例示的な実施形態において、免疫グロブリン分子のイディオタイプの抗原性は、フレームワークおよびＣ末端から抗原を特異的に認識するＣＤＲ配列までのＣＤＲ配列の欠失によって増強することができる。いずれのＣＤＲ配列が抗原と結合するのかを決定するために、ＣＤＲ配列を含有する合成ペプチドを、抗原を用いる結合アッセイにおいて、当技術分野で公知である任意の結合アッセイ方法（例えば、ＢＩＡコアアッセイ）により使用してよい（ＣＤＲ配列の位置については、例えば、Ｋａｂａｔら、１９９１、Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ、第５版、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ、Ｂｅｔｈｅｓｄａ、Ｍｄ．；Ｋａｂａｔ  Ｅら、１９８０、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  １２５（３）：９６１〜９６９を参照）。
【０１８２】
他の有用な抗体は、Ｆ（ａｂ’）２断片、Ｆａｂ断片、Ｆｖｓ、一本鎖抗体、二重特異性抗体、三重特異性抗体、四重特異性抗体、ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ−ＦＶ、または抗体と同じ特異性を持つ任意の他の分子等であるがこれらに限定されない抗体の断片を含む。
【０１８３】
加えて、標準的な組み換えＤＮＡ技術を使用して作製できるヒトおよび非ヒト部分の両方を含むキメラおよびヒト化モノクローナル抗体等の組み換え抗体は、有用な抗体である。キメラ抗体は、例えば、ネズミモノクローナルに由来する可変領域およびヒト免疫グロブリン定常領域を有するもの等、異なる部分が異なる動物種に由来する分子である。（例えば、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる、米国特許第４，８１６，５６７号および米国特許第４，８１６，３９７号を参照。）ヒト化抗体は、非ヒト種からの１つまたは複数の相補性決定領域（ＣＤＲ）およびヒト免疫グロブリン分子からのフレームワーク領域を有する非ヒト種からの抗体分子である。（例えば、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる、米国特許第５，５８５，０８９号を参照。）そのようなキメラおよびヒト化モノクローナル抗体は、当技術分野において公知の組み換えＤＮＡ技術によって、例えば、国際公開第ＷＯ８７／０２６７１号；欧州特許公開第０１８４１８７号；欧州特許公開第０１７１４９６号；欧州特許公開第０１７３４９４号；国際公開第ＷＯ８６／０１５３３号；米国特許第４，８１６，５６７号；欧州特許公開第０１２０２３号；Ｂｅｒｔｅｒら、１９８８、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４０：１０４１〜１０４３；Ｌｉｕら、１９８７、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８４：３４３９〜３４４３；Ｌｉｕら、１９８７、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３９：３５２１〜３５２６；Ｓｕｎら、１９８７、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８４：２１４〜２１８；Ｎｉｓｈｉｍｕｒａら、１９８７、Ｃａｎｃｅｒ．Ｒｅｓ．４７：９９９〜１００５；Ｗｏｏｄら、１９８５、Ｎａｔｕｒｅ  ３１４：４４６〜４４９；およびＳｈａｗら、１９８８、Ｊ．Ｎａｔｌ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ．８０：１５５３〜１５５９；Ｍｏｒｒｉｓｏｎ、１９８５、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２２９：１２０２〜１２０７；Ｏｉら、１９８６、ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ４：２１４；米国特許第５，２２５，５３９号；Ｊｏｎｅｓら、１９８６、Ｎａｔｕｒｅ  ３２１：５５２〜５２５；Ｖｅｒｈｏｅｙａｎら、１９８８、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２３９：１５３４；およびＢｅｉｄｌｅｒら、１９８８、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４１：４０５３〜４０６０に記述されている方法を使用して生成することができ、これらのそれぞれは、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０１８４】
完全ヒト抗体が特に望ましく、内因性免疫グロブリン重鎖および軽鎖遺伝子を発現することはできないがヒト重鎖および軽鎖遺伝子を発現することができるトランスジェニックマウスを使用して生成することができる。トランスジェニックマウスは、通常の方式において、選択された抗原、例えば、本発明のポリペプチドのすべてまたは一部で免疫化される。抗原に対するモノクローナル抗体は、従来のハイブリドーマテクノロジーを使用して取得することができる。トランスジェニックマウスが抱えているヒト免疫グロブリン導入遺伝子は、Ｂ細胞分化中に再配置し、その後、クラススイッチおよび体細胞変異を経る。故に、そのような技術を使用して、治療上有用なＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭおよびＩｇＥ抗体を生成することが可能である。ヒト抗体を生成するためのこのテクノロジーの概要については、ＬｏｎｂｅｒｇおよびＨｕｓｚａｒ、１９９５、Ｉｎｔ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３：６５〜９３を参照されたい。ヒト抗体およびヒトモノクローナル抗体を生成するためのこのテクノロジーならびにそのような抗体を生成するためのプロトコールの詳細な考察については、例えば、米国特許第５，６２５，１２６号；同第５，６３３，４２５号；同第５，５６９，８２５号；同第５，６６１，０１６号；同第５，５４５，８０６号を参照されたく、これらのそれぞれは、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。他のヒト抗体は、例えば、Ａｂｇｅｎｉｘ，Ｉｎｃ．（現在はＡｍｇｅｎ、Ｆｒｅｅｍｏｎｔ、Ｃａｌｉｆ．）およびＭｅｄａｒｅｘ（Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ、Ｎ．Ｊ．）から市販のものを入手することができる。
【０１８５】
選択されたエピトープを認識する完全ヒト抗体は、「誘導選択」と称される技術を使用して発生させることができる。このアプローチにおいて、同じエピトープを認識する完全ヒト抗体の選択を誘導するために、選択された非ヒトモノクローナル抗体、例えばマウス抗体が使用される（例えば、Ｊｅｓｐｅｒｓら、１９９４、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １２：８９９〜９０３を参照）。ヒト抗体は、ファージディスプレイライブラリーを含む、当技術分野において公知である種々の技術を使用して生成することもできる（例えば、ＨｏｏｇｅｎｂｏｏｍおよびＷｉｎｔｅｒ、１９９１、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２７：３８１；Ｍａｒｋｓら、１９９１、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１；ＱｕａｎおよびＣａｒｔｅｒ、２００２、Ｔｈｅ  ｒｉｓｅ  ｏｆ  ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ａｓ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、Ｉｎ  Ａｎｔｉ−ＩｇＥ  ａｎｄ  Ａｌｌｅｒｇｉｃ  Ｄｉｓｅａｓｅ、ＪａｒｄｉｅｕおよびＦｉｃｋ編、Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、Ｎ．Ｙ．、第２０章、４２７〜４６９頁を参照）。
【０１８６】
他の実施形態において、抗体は、抗体の融合タンパク質、または機能的に活性なその断片であり、ここで、例えば、抗体は、共有結合（例えば、ペプチド結合）を介して、Ｎ末端またはＣ末端のいずれかで、抗体からのものではない別のタンパク質のアミノ酸配列（またはその部分、好ましくはタンパク質の少なくとも１０、２０または５０アミノ酸部分）と縮合している。好ましくは、抗体またはその断片は、定常ドメインのＮ末端で他のタンパク質と共有結合している。
【０１８７】
抗体は、いずれか、すなわち、そのような共有結合が、抗体がその抗原結合免疫特異性を保持するのを可能にする限り、任意の種類の分子の共有結合によって修飾された、類似体および誘導体を含む。例えば、限定するものとしてではないが、抗体の誘導体および類似体は、例えば、グリコシル化、アセチル化、ペグ化、リン酸化、アミド化、公知の保護／ブロッキング基による誘導体化、タンパク質分解的開裂、細胞抗体単位または他のタンパク質との連結等によってさらに修飾されているものを含む。多数の化学修飾のいずれかは、特異的な化学開裂、アセチル化、ホルミル化、ツニカマイシンの存在下における代謝合成等を含むがこれらに限定されない公知の技術によって行うことができる。加えて、類似体または誘導体は、１つまたは複数の非天然アミノ酸を含有していてよい。
【０１８８】
抗体は、Ｆｃ受容体と相互作用するアミノ酸残基における修飾（例えば、置換、欠失または付加）を有し得る。特に、抗体は、抗ＦｃドメインとＦｃＲｎ受容体との間の相互作用に関与するとして同定されているアミノ酸残基における修飾を有し得る（例えば、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる、国際公開第ＷＯ９７／３４６３１号を参照）。
【０１８９】
がん細胞抗原に対して免疫特異的な抗体は、市販のものを入手するか、または例えば化学合成もしくは組み換え発現技術等、当業者に公知である任意の方法によって生成することができる。がん細胞抗原に対して免疫特異的な抗体をコードするヌクレオチド配列は、例えば、ジーンバンクデータベースもしくはそのようなデータベース、文献刊行物から、または日常的なクローニングおよびシークエンシングによって入手することができる。
【０１９０】
具体的な実施形態において、がんの治療用の公知の抗体を使用してよい。がん細胞抗原に対して免疫特異的な抗体は、市販のものを入手するか、または例えば組み換え発現技術等、当業者に公知である任意の方法によって生成することができる。がん細胞抗原に対して免疫特異的な抗体をコードするヌクレオチド配列は、例えば、ジーンバンクデータベースもしくはそのようなデータベース、文献刊行物から、または日常的なクローニングおよびシークエンシングによって入手することができる。がんの治療に利用可能な抗体の例は、卵巣がんの治療のためのネズミ抗体であるＯＶＡＲＥＸ；結腸直腸がんの治療のためのネズミＩｇＧ２ａ抗体であるＰＡＮＯＲＥＸ（Ｇｌａｘｏ  Ｗｅｌｌｃｏｍｅ、ＮＣ）；頭頸部がん等の上皮成長因子陽性がんの治療のための抗ＥＧＦＲ  ＩｇＧキメラ抗体であるセツキシマブＥＲＢＩＴＵＸ（Ｉｍｃｌｏｎｅ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  Ｉｎｃ．、ＮＹ）；肉腫の治療のためのヒト化抗体であるビタキシン（ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ，Ｉｎｃ．、ＭＤ）；慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）の治療のためのヒト化ＩｇＧ１抗体であるＣＡＭＰＡＴＨ  Ｉ／Ｈ（Ｌｅｕｋｏｓｉｔｅ、ＭＡ）；非ホジキンリンパ腫の治療のためのヒト化抗ＨＬＡ−ＤＲ抗体であるＳＭＡＲＴ  ＩＩＤ１０（Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｄｅｓｉｇｎ  Ｌａｂｓ，Ｉｎｃ．、ＣＡ）；非ホジキンリンパ腫の治療のための放射性標識ネズミ抗ＨＬＡ−Ｄｒ１０抗体であるＯＮＣＯＬＹＭ（Ｔｅｃｈｎｉｃｌｏｎｅ，Ｉｎｃ．、ＣＡ）；ホジキン病または非ホジキンリンパ腫の治療のためのヒト化抗ＣＤ２  ｍＡｂであるＡＬＬＯＭＵＮＥ（ＢｉｏＴｒａｎｓｐｌａｎｔ、ＣＡ）；ならびに、結腸直腸がんの治療のためのヒト化抗ＣＥＡ抗体であるＣＥＡＣＩＤＥ（Ｉｍｍｕｎｏｍｅｄｉｃｓ、ＮＪ）を含むがこれらに限定されない。
【０１９１】
がん診断および療法用の有効な細胞内標的を発見するための試みにおいて、研究者らは、１つまたは複数の正常な非がん性細胞と比較して、１つまたは複数の特定種類のがん細胞の表面上に特異的に発現される膜貫通または別様の腫瘍関連ポリペプチドを同定することを求めた。多くの場合、そのような腫瘍関連ポリペプチドは、非がん性細胞の表面上と比較して、がん細胞の表面上により豊富に発現される。そのような腫瘍関連細胞表面抗原ポリペプチドの同定は、抗体ベースの療法による破壊のためにがん細胞を特異的に標的とする能力を生じさせた。
【０１９２】
リンカー単位（Ｌ）
リンカー（本明細書においては時に「［リンカー］」と称される）は、薬物および抗体を連結して抗体薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）を形成するために使用され得る二官能性化合物である。そのようなコンジュゲートは、例えば、腫瘍関連抗原に対するイムノコンジュゲートの形成において有用である。そのようなコンジュゲートは、腫瘍細胞への細胞毒性薬の選択的送達を可能にする。
【０１９３】
ＡＤＣにおいて、リンカーは、ペイロードを抗体と結合するのに役立つ。
【０１９４】
一態様において、第二の反応性部位、例えば、抗体単位（例えば、抗体）上に存在する求核基に対して反応性である求電子基を有するリンカー単位の第二の切片を導入する。抗体上の有用な求核基は、スルフヒドリル、ヒドロキシルおよびアミノ基を含むがこれらに限定されない。抗体の求核基のヘテロ原子は、リンカー単位上の求電子基に対して反応性であり、リンカー単位と共有結合を形成する。有用な求電子基は、マレイミドおよびハロアセトアミド基を含むがこれらに限定されない。求電子基は、好都合な部位に抗体結合を提供する。
【０１９５】
別の実施形態において、リンカー単位は、抗体上に存在する求電子基に対して反応性である求核基を有する反応性部位を有する。抗体上の有用な求電子基は、アルデヒドおよびケトンカルボニル基を含むがこれらに限定されない。リンカー単位の求核基のヘテロ原子は、抗体上の求電子基と反応し、抗体と共有結合を形成することができる。リンカー単位上の有用な求核基は、ヒドラジド、オキシム、アミノ、ヒドラジン、チオセミカルバゾン、ヒドラジンカルボキシレートおよびアリルヒドラジドを含むがこれらに限定されない。抗体上の求電子基は、好都合な部位にリンカー単位との結合を提供する。
【０１９６】
アミノ官能基も、カルボン酸、または化合物の活性化エステルと反応してアミド結合を形成することができるため、リンカー単位に有用な反応性部位である。典型的には、本発明のペプチドベース化合物は、２つ以上のアミノ酸および／またはペプチド断片の間にペプチド結合を形成することによって調製できる。そのようなペプチド結合は、例えば、ペプチド化学の分野においては周知である液相合成方法（例えば、ＳｃｈｒｏｄｅｒおよびＬｕｂｋｅ、「Ｔｈｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ」、第１巻、７６〜１３６頁、１９６５、Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓを参照）に従って調製することができる。
【０１９７】
特に、Ｌ１、Ｌ２（Ｌ２Ａ、Ｌ２ＢおよびＬ２Ｃを含む）およびＬ３等のリンカー構成要素であるがこれらに限定されない本発明の文脈において、「の１つまたは複数から選択される」または「の１つまたは複数」という言い回しは、同じであっても異なっていてもよい多数の構成要素が、順次に配置されているまたはされていてよいことを示す。故に、例えば、Ｌ３は、−Ｃ１〜６アルキル−、−ＮＲ−または他の個々に収載されている成分であってよいが、−Ｃ１〜６アルキル−ＮＲ−、または２つ以上の収載されている構成要素の任意の他の組合せであってもよい。
【０１９８】
別の実施形態において、リンカー単位は、システイン等の抗体求核試薬と反応することができる反応性部位を有する。反応性部位は、スルホンで置換されているヘテロ環から構成される。次いで、スルホンは、抗体求核試薬（すなわち、システイン）によって置きかえられ、抗体とヘテロ環との間に新たに形成された結合は、抗体をリンカーと接続する。ＷＯ２０１４／１４４８７８を参照されたい。
【０１９９】
化合物およびその抗体薬物コンジュゲートの合成
本発明の化合物およびコンジュゲートは、例示において以下で概説される合成手順を使用して作製することができる。以下でさらに詳細に記述する通り、本発明の化合物およびコンジュゲートは、化合物と結合するための反応性部位を有するリンカー単位の切片を使用して調製することができる。一態様において、第二の反応性部位、例えば、抗体単位（例えば、抗体）上に存在する求核基に対して反応性である求電子基を有するリンカー単位の第二の切片を導入する。抗体上の有用な求核基は、スルフヒドリル、ヒドロキシルおよびアミノ基を含むがこれらに限定されない。抗体の求核基のヘテロ原子は、リンカー単位上の求電子基に対して反応性であり、リンカー単位と共有結合を形成する。有用な求電子基は、マレイミドおよびハロアセトアミド基を含むがこれらに限定されない。求電子基は、好都合な部位に抗体結合を提供する。
【０２００】
別の実施形態において、リンカー単位は、抗体上に存在する求電子基に対して反応性である求核基を有する反応性部位を有する。抗体上の有用な求電子基は、アルデヒドおよびケトンカルボニル基を含むがこれらに限定されない。リンカー単位の求核基のヘテロ原子は、抗体上の求電子基と反応し、抗体と共有結合を形成することができる。リンカー単位上の有用な求核基は、ヒドラジド、オキシム、アミノ、ヒドラジン、チオセミカルバゾン、ヒドラジンカルボキシレートおよびアリルヒドラジドを含むがこれらに限定されない。抗体上の求電子基は、好都合な部位にリンカー単位との結合を提供する。
【０２０１】
アミノ官能基も、カルボン酸、または化合物の活性化エステルと反応してアミド結合を形成することができるため、リンカー単位に有用な反応性部位である。典型的には、本発明のペプチドベース化合物は、２つ以上のアミノ酸および／またはペプチド断片の間にペプチド結合を形成することによって調製できる。そのようなペプチド結合は、例えば、ペプチド化学の分野においては周知である液相合成方法（例えば、ＳｃｈｒｏｄｅｒおよびＬｕｂｋｅ、「Ｔｈｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ」、第１巻、７６〜１３６頁、１９６５、Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓを参照）に従って調製することができる。
【０２０２】
以下でさらに詳細に記述する通り、コンジュゲートは、本発明の化合物と結合するための反応性部位を有するリンカーの切片を使用し、抗体に対する反応性部位を有するリンカー単位の別の切片を導入することによって調製することができる。一態様において、リンカー単位は、抗体等の抗体単位上に存在する求核基と反応性である求電子基を有する反応性部位を有する。求電子基は、好都合な部位に抗体結合を提供する。抗体上の有用な求核基は、スルフヒドリル、ヒドロキシルおよびアミノ基を含むがこれらに限定されない。抗体の求核基のヘテロ原子は、リンカー単位上の求電子基に対して反応性であり、リンカー単位と共有結合を形成する。有用な求電子基は、マレイミドおよびハロアセトアミド基を含むがこれらに限定されない。
【０２０３】
別の実施形態において、リンカー単位は、抗体単位上に存在する求電子基と反応性である求核基を有する反応性部位を有する。抗体上の求電子基は、好都合な部位にリンカー単位との結合を提供する。抗体上の有用な求電子基は、アルデヒドおよびケトンカルボニル基を含むがこれらに限定されない。リンカー単位の求核基のヘテロ原子は、抗体上の求電子基と反応し、抗体と共有結合を形成することができる。リンカー単位上の有用な求核基は、ヒドラジド、オキシム、アミノ、ヒドラジン、チオセミカルバゾン、ヒドラジンカルボキシレートおよびアリルヒドラジドを含むがこれらに限定されない。
【０２０４】
本発明の別の実施形態において、本発明の結合は、改変抗体の定常ドメインポリペプチドまたはその一部を用い、ここで、改変定常ドメインは、コンジュゲーションに有用なシステイン残基を導入するための少なくとも１つのアミノ酸置換を含み、定常ドメインポリペプチドは、カバットのＥＵインデックスによれば、Ｋ２４６、Ｄ２４９、Ｄ２６５、Ｓ２６７、Ｄ２７０、Ｎ２７６、Ｙ２７８、Ｅ２８３、Ｒ２９２、Ｅ２９３、Ｅ２９４、Ｙ３００、Ｖ３０２、Ｖ３０３、Ｌ３１４、Ｎ３１５、Ｅ３１８、Ｋ３２０、Ｉ３３２、Ｅ３３３、Ｋ３３４、１３３６、Ｅ３４５、Ｑ３４７、Ｓ３５４、Ｒ３５５、Ｍ３５８、Ｋ３６０、Ｑ３６２、Ｋ３７０、Ｙ３７３、Ｄ３７６、Ａ３７８、Ｅ３８０、Ｅ３８２、Ｑ３８６、Ｅ３８８、Ｎ３９０、Ｋ３９２、Ｔ３９３、Ｄ４０１、Ｆ４０４、Ｔ４１１、Ｄ４１３、Ｋ４１４、Ｒ４１６、Ｑ４１８、Ｑ４１９、Ｎ４２１、Ｍ４２８、Ａ４３１、Ｌ４３２、Ｔ４３７、Ｑ４３８、Ｋ４３９、Ｌ４４３およびＳ４４４からなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸置換を含む、改変ヒトＩｇＧ重鎖定常ドメイン（Ｃｙ）ポリペプチドまたはその一部である。
【０２０５】
本発明の別の実施形態において、本発明の結合は、改変抗体の定常ドメインポリペプチドまたはその一部を用い、ここで、改変定常ドメインは、コンジュゲーションに有用なシステイン残基を導入するための少なくとも１つのアミノ酸置換を含み、定常ドメインポリペプチドは、カバットの番号付けによれば、Ｋ１１０、Ａ１１１、Ｌ１２５、Ｋ１４９Ｃ、Ｖ１５５、Ｇ１５８、Ｔ１６１、Ｑ１８５、Ｓ１８８、Ｈ１８９、Ｓ１９１、Ｔ１９７、Ｖ２０５、Ｅ２０６、Ｋ２０７、Ｔ２０８およびＡ２１０からなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸置換を含む、改変ヒトラムダ軽鎖定常ドメイン（ＣＡ）ポリペプチドまたはその一部である。
【０２０６】
本発明のまた別の実施形態において、本発明の結合は、改変抗体の定常ドメインポリペプチドまたはその一部を用い、ここで、改変定常ドメインは、コンジュゲーションに有用なシステイン残基を導入するための少なくとも１つのアミノ酸置換を含み、定常ドメインポリペプチドは、カバットの番号付けによれば、Ａ１１１、Ｋ１８３およびＮ２１０からなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸置換を含む、改変ヒトカッパ軽鎖定常ドメイン（ＣＫ）ポリペプチドまたはその一部である。
【０２０７】
本発明のまた別の実施形態において、本発明の結合は、改変抗体の定常ドメインポリペプチドまたはその一部を用い、ここで、改変定常ドメインは、コンジュゲーションに有用なシステイン残基を導入するための少なくとも１つのアミノ酸置換を含み、定常ドメインポリペプチドは、ＷＯ２０１３／０９３８０９において開示されている通りの配列番号９７〜１００、１０２、１０４、１０７〜１２７および１２９〜１６３のアミノ酸配列からなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸配列を含む改変Ｃｙポリペプチドまたはその一部であり、この参考文献は、その全体が本明細書に組み込まれる。
【０２０８】
本発明のさらに別の実施形態において、本発明の結合は、改変抗体の定常ドメインポリペプチドまたはその一部を用い、ここで、改変定常ドメインは、コンジュゲーションに有用なシステイン残基を導入するための少なくとも１つのアミノ酸置換を含み、定常ドメインポリペプチドは、ＷＯ２０１３／０９３８０９において開示されている通りの配列番号９０、９２、９５、１６４、１６６および１６９のアミノ酸配列からなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸配列を含む改変ＣＫポリペプチドまたはその一部であり、この参考文献は、その全体が本明細書に組み込まれる。
【０２０９】
本発明のさらに別の実施形態において、本発明の結合は、改変抗体の定常ドメインポリペプチドまたはその一部を用い、ここで、改変定常ドメインは、コンジュゲーションに有用なシステイン残基を導入するための少なくとも１つのアミノ酸置換を含み、定常ドメインポリペプチドは、ＷＯ２０１３／０９３８０９において開示されている通りの配列番号１７２〜１８６のアミノ酸配列からなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸配列を含む改変ＣＡポリペプチドまたはその一部であり、この参考文献は、その全体が本明細書に組み込まれる。
【０２１０】
本発明の別の実施形態において、上記で言及した改変Ｃｙポリペプチドは、カバットのＥＵインデックスによれば、アミノ酸位置２８４、２８７、Ａ３２７、Ｎ３８４、Ｌ３９８およびＶ４２２における突然変異からなる群から選択される少なくとも１つの突然変異をさらに含む。
【０２１１】
トランスグルタミナーゼとのコンジュゲーション
ある特定の実施形態において、本発明の化合物は、アシル供与体グルタミン含有タグ（例えば、Ｇｌｎ含有ペプチドタグまたはＱ−タグ）または内因性グルタミンで改変されて反応性になった（すなわち、アミンおよびトランスグルタミナーゼの存在下でアシル供与体として共有結合を形成する能力）Ｆｃ含有またはＦａｂ含有ポリペプチドと、トランスグルタミナーゼの存在下でのポリペプチド改変によって（例えば、ポリペプチド上での、アミノ酸欠失、挿入、置換、突然変異、またはそれらの任意の組合せを介して）、共有結合的に架橋することができ、但し、本発明の化合物は、アミン供与剤（例えば、反応性アミンを含むまたはそれに結合している低分子）を含み、それにより、アシル供与体グルタミン含有タグまたは露出した／アクセス可能な／反応性の内因性グルタミンを経由して、Ｆｃ含有またはＦａｂ含有ポリペプチドと部位特異的にコンジュゲートしているアミン供与剤と、改変されたＦｃ含有ポリペプチドコンジュゲートの、安定かつ均質な集団を形成する。例えば、本発明の化合物は、国際特許出願第ＰＣＴ／ＩＢ２０１１／０５４８９９号において記述されている通りにコンジュゲートされていてよく、その内容全体は、参照により本明細書に組み込まれる。ある特定の実施形態において、本発明の化合物と、アシル供与体グルタミン含有タグまたは内因性グルタミンで改変されて反応性になったＦｃ含有またはＦａｂ含有ポリペプチドとの、トランスグルタミナーゼの存在下でのポリペプチド改変によるコンジュゲーションを容易にするために、ＺはＮＨ２である。
【０２１２】
ヒト軽鎖カッパドメイン定常領域とのコンジュゲーション
ある特定の実施形態において、本発明の化合物は、ヒト軽鎖カッパドメイン定常領域（ＣＬκ）のＫ１８８（カバットに従う完全軽鎖番号付け）の側鎖と共有結合することができる。例えば、本発明の化合物は、米国特許出願第１３／１８０，２０４号において記述されている通りにコンジュゲートされてよく、その内容全体は参照により本明細書に組み込まれる。ある特定の実施形態において、Ｋ１８８  ＣＬκとのコンジュゲーションを容易にするために、Ｚは、
【０２１３】
【化４９】
0006782250.tif 000055
であり、Ｒ７は、それぞれの出現について、Ｆ、Ｃｌ、Ｉ、Ｂｒ、ＮＯ２、ＣＮおよびＣＦ３からなる群から独立して選択され、ｈは、１、２、３、４または５である。
【０２１４】
ある特定の実施形態において、本発明は、抗体（またはその抗原結合部分）と共有結合的にコンジュゲートしている本発明の化合物を含む組成物を提供し、ここで、該組成物中の本発明の化合物の少なくとも約５０％、または少なくとも約６０％、または少なくとも約７０％、または少なくとも約８０％、または少なくとも約９０％は、Ｋ１８８ＣＬκで抗体またはその抗原結合部分とコンジュゲートしている。
【０２１５】
ある特定の実施形態において、本発明の化合物は、アルドラーゼ抗体等の触媒抗体またはその抗原結合部分の組合せ部位とコンジュゲートしていてよい。アルドラーゼ抗体は、（例えばコンジュゲーションによって）重荷から解放されると、脂肪族ケトン供与体とアルデヒドアクセプターとの間のアルドール付加反応を触媒する、組合せ部位部分を含有する。米国特許出願公開第ＵＳ２００６／２０５６７０号の内容、特に、リンカーについて記述した７８〜１１８頁、ならびに抗体、有用な断片、変異体およびその修飾、ｈ３８Ｃ２、組合せ部位および相補性（ｃｏｍｐｌｉｍｅｎｔａｒｙ）決定領域（ＣＤＲ）、ならびに関連する抗体テクノロジーついて記述した段落［０１５３］〜［０２３３］は、参照により本明細書に組み込まれる。用語「組合せ部位」は、抗原結合に関与するＣＤＲおよび隣接するフレームワーク残基を含む。
【０２１６】
組成物および投与の方法
他の実施形態において、本発明の別の態様は、有効量の本発明の化合物および／またはその抗体薬物コンジュゲートと、薬学的に許容できる担体またはビヒクルとを含む、医薬組成物に関する。ある特定の実施形態において、組成物は、獣医学的またはヒト投与に好適である。
【０２１７】
本発明の医薬組成物は、組成物を患者に投与することを可能にする任意の形態であってよい。例えば、組成物は、固体または液体の形態であってよい。典型的な投与経路は、非経口、眼内および腫瘍内を含むがこれらに限定されない。非経口投与は、皮下注射、静脈内、筋肉内または胸骨内注射または注入技術を含む。一態様において、組成物は非経口的に投与される。具体的な実施形態において、組成物は静脈内に投与される。
【０２１８】
医薬組成物は、患者への組成物の投与時に、本発明の化合物および／またはその抗体薬物コンジュゲートをバイオアベイラブルにできるように製剤化され得る。組成物は、１つまたは複数の投薬量単位の形態をとることができ、ここで、例えば、錠剤は単一投薬単位であってよく、液体形態の本発明の化合物および／またはその抗体薬物コンジュゲートの容器は、複数の投薬量単位を収容することができる。
【０２１９】
医薬組成物を調製する際に使用される材料は、使用される量では非毒性であることができる。医薬組成物中における活性成分の最適投薬量は、様々な要因によって決まることが、当業者には明白であろう。関連要因は、動物の種類（例えば、ヒト）、本発明の化合物および／またはその抗体薬物コンジュゲートの特定の形態、投与様式、ならびに用いられる組成物を含むがこれらに限定されない。
【０２２０】
薬学的に許容できる担体またはビヒクルは、固体であっても微粒子であってもよいため、組成物は、例えば錠剤または散剤形態である。担体は液体であってよい。加えて、担体は微粒子であってよい。
【０２２１】
組成物は、液体、例えば、液剤、乳剤または懸濁剤の形態であってよい。注射による投与用の組成物中に、界面活性剤、保存剤、湿潤剤、分散剤、懸濁化剤、緩衝剤、安定剤および等張剤の１つまたは複数も含まれていてよい。
【０２２２】
液体組成物は、液剤、懸濁剤または他の類似の形態のいずれであるかにかかわらず、下記の１つまたは複数も含んでいてよい：注射用水、食塩水、好ましくは生理食塩水、リンゲル液、等張塩化ナトリウム等の無菌賦形剤、溶媒または懸濁化媒質として役立つことができる合成モノまたはジグリセリド等の固定油、ポリエチレングリコール、グリセリン、シクロデキストリン、プロピレングリコールまたは他の溶媒；ベンジルアルコールまたはメチルパラベン等の抗菌剤；アスコルビン酸または重亜硫酸ナトリウム等の抗酸化剤；エチレンジアミン四酢酸等のキレート剤；酢酸塩、クエン酸塩、リン酸塩またはアミノ酸等の緩衝剤、および塩化ナトリウムまたはデキストロース等の張性の調整のための作用物質。非経口組成物は、ガラス、プラスチックまたは他の材料製の、アンプル、使い捨てシリンジまたは複数回用量バイアルに封入されていてよい。生理食塩水は、例示的なアジュバントである。注射用組成物は、好ましくは無菌である。
【０２２３】
特定の障害または状態の治療において有効な本発明の化合物および／またはその抗体薬物コンジュゲートの量は、該障害または状態の性質によって決まることになり、標準的な臨床技術によって決定することができる。加えて、最適投薬量範囲を同定するのを支援するために、インビトロまたはインビボアッセイを用いてもよい。組成物において用いられる正確な用量は、投与経路および疾患または障害の重篤度に応じても決まることになり、医師の判断および各患者の状況に従って決められるべきである。
【０２２４】
組成物は、好適な投薬量が取得されるような有効量の本発明の化合物および／またはその抗体薬物コンジュゲートを含む。典型的には、この量は、組成物の少なくとも約０．０１重量％の本発明の化合物および／またはその抗体薬物コンジュゲートである。例示的な実施形態において、医薬組成物は、非経口投薬量単位が、約０．０１重量％から約２重量％の量の本発明の化合物および／またはその抗体薬物コンジュゲートを含有するように調製される。
【０２２５】
静脈内投与では、組成物は、患者の体重１ｋｇ当たり約０．０１から約１００ｍｇまでの本発明の化合物および／またはその抗体薬物コンジュゲートを含み得る。一態様において、組成物は、患者の体重１ｋｇ当たり約１から約１００ｍｇまでの本発明の化合物および／またはその抗体薬物コンジュゲートを含み得る。別の態様において、投与される量は、体重１ｋｇ当たり約０．１から約２５ｍｇまでの範囲の本発明の化合物および／またはその抗体薬物コンジュゲートとなる。
【０２２６】
概して、患者に投与される本発明の化合物および／またはその抗体薬物コンジュゲートの投薬量は、典型的には、患者の体重１ｋｇ当たり約０．０１ｍｇから約２０ｍｇである。一態様において、患者に投与される投薬量は、患者の体重１ｋｇ当たり約０．０１ｍｇから約１０ｍｇの間である。別の態様において、患者に投与される投薬量は、患者の体重１ｋｇ当たり約０．１ｍｇから約１０ｍｇの間である。また別の態様において、患者に投与される投薬量は、患者の体重１ｋｇ当たり約０．１ｍｇから約５ｍｇの間である。また別の態様において、投与される投薬量は、患者の体重１ｋｇ当たり約０．１ｍｇから約３ｍｇの間である。また別の態様において、投与される投薬量は、患者の体重１ｋｇ当たり約１ｍｇから約３ｍｇの間である。
【０２２７】
本発明の化合物および／またはその抗体薬物コンジュゲートは、任意の好都合な経路によって、例えば注入またはボーラス注射によって投与され得る。投与は全身であっても局所的であってもよい。例えば、リポソーム、微粒子（ｍｉｅｒｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ）、マイクロカプセル、カプセル中への封入等、種々の送達系が公知であり、本発明の化合物および／またはその抗体薬物コンジュゲートを投与するために使用され得る。ある特定の実施形態において、１つを超える本発明の化合物（ｏｍｐｏｕｎｄ）および／またはその抗体薬物コンジュゲートが患者に投与される。
【０２２８】
具体的な実施形態において、１つまたは複数の本発明の化合物および／またはその抗体薬物コンジュゲートを、治療を必要とする領域に局所的に投与することが望ましい場合がある。これは、例えば、限定するものとしてではないが、外科手術中における局所注入によって；局所適用、例えば、外科手術後の創傷包帯と併せて；注射によって；カテーテルを利用して；または、移植片であって、シラスティック（ｓｉａｌａｓｔｉｃ）膜等の膜または繊維を含む、多孔質、非多孔質またはゼラチン状材料のものである移植片を利用して、実現され得る。一実施形態において、投与は、がん、腫瘍または新生物もしくは新生物発生前の組織の部位（または元部位）における直接注射によるものであってよい。別の実施形態において、投与は、自己免疫疾患の徴候の部位（または元部位）における直接注射によるものであってよい。
【０２２９】
また別の実施形態において、本発明の化合物および／またはその抗体薬物コンジュゲートは、ポンプ等であるがこれらに限定されない制御放出系で送達することができ、または種々のポリマー性材料を使用することができる。また別の実施形態において、制御放出系は、本発明の化合物および／またはその抗体薬物コンジュゲートの標的、例えば肝臓に近接して置くことができ、故に、全身用量のごく一部しか必要としない（例えば、上記のＧｏｏｄｓｏｎ、Ｍｅｄｉｃａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ、第２巻、１１５〜１３８頁（１９８４）を参照）。Ｌａｎｇｅｒによる総説（Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４９：１５２７〜１５３３（１９９０））において論じられている他の制御放出系を使用してよい。
【０２３０】
用語「担体」は、化合物またはその抗体薬物コンジュゲートとともに投与される賦形剤、アジュバントまたは添加剤を指す。そのような医薬担体は、水、および石油、動物、植物または合成起源のものを含む油等の液体であってよい。担体は、食塩水等であってよい。加えて、助剤、安定化剤および他の作用物質を使用してよい。一実施形態において、患者に投与される際、化合物またはコンジュゲートおよび薬学的に許容できる担体は、無菌である。化合物またはコンジュゲートが静脈内に投与される場合、水は例示的な担体である。食塩水ならびにデキストロースおよびグリセロール水溶液は、特に注射溶液のための液体担体として用いることもできる。本発明の組成物は、所望ならば、少量の湿潤もしくは乳化剤、またはｐＨ緩衝剤を含有してもよい。
【０２３１】
本発明の組成物は、液剤、ペレット剤、散剤、持続放出製剤の形態、または使用に好適な任意の他の形態をとることができる。好適な医薬担体の他の例は、「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ」、Ｅ．Ｗ．Ｍａｒｔｉｎ著において記述されている。
【０２３２】
ある実施形態において、本発明の化合物および／またはその抗体薬物コンジュゲートは、日常的な手順に従い、動物、特にヒトへの静脈内投与に適合する医薬組成物として製剤化される。典型的には、静脈内投与用の担体またはビヒクルは、無菌等張緩衝水溶液である。必要ならば、組成物は、溶解補助剤も含んでよい。静脈内投与用の組成物は、注射部位の痛みを和らげるために、リグノカイン等の局部麻酔薬を含んでいてもよい。概して、成分は、別個にまたは単位剤形中に一緒に混合してのいずれかで、例えば、活性剤の分量を指示するアンプルまたはサシェ等の密閉容器中の凍結乾燥粉末または無水濃縮物として、供給される。本発明の化合物および／またはその抗体薬物コンジュゲートが注入によって投与される場合、例えば、無菌医薬品等級水または食塩水を含有する注入ボトルで分注され得る。本発明の化合物および／またはその抗体薬物コンジュゲートが注射によって投与される場合、無菌注射用水または食塩水のアンプルは、成分が投与前に混合され得るように設けられていてよい。
【０２３３】
組成物は、固体または液体投薬量単位の物理的形態を修飾する種々の材料を含み得る。例えば、組成物は、活性成分の周囲にコーティングシェルを形成する材料を含み得る。コーティングシェルを形成する材料は、典型的には不活性であり、例えば、砂糖、セラックおよび他の腸溶性コーティング剤から選択され得る。代替として、活性成分は、ゼラチンカプセル剤に入れられてよい。
【０２３４】
固体または液体形態のいずれであるかにかかわらず、本発明の組成物は、がんの治療において使用される薬理学的作用物質を含み得る。
【０２３５】
化合物およびその抗体薬物コンジュゲートの治療的（Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）使用
本発明の別の態様は、がんを治療するために、本発明の化合物およびその抗体薬物コンジュゲートを使用する方法に関する。
【０２３６】
本発明の化合物および／またはその抗体薬物コンジュゲートは、腫瘍もしくはがん細胞においてアポトーシスを引き起こす腫瘍細胞もしくはがん細胞の繁殖を阻害するため、または患者においてがんを治療するために有用である。本発明の化合物および／またはその抗体薬物コンジュゲートは、したがって、動物のがんの治療のための様々な状況において使用され得る。前記コンジュゲートは、本発明の化合物を腫瘍細胞またはがん細胞へ送達するために使用することができる。理論に縛られることなく、一実施形態において、コンジュゲートの抗体は、がん細胞または腫瘍細胞関連抗原と結合または会合し、コンジュゲートは、受容体媒介性エンドサイトーシスまたは他の内在化機構を経由して腫瘍細胞またはがん細胞内に取り込まれる（内在化する）ことができる。抗原は、腫瘍細胞もしくはがん細胞に結合していてもよく、または腫瘍細胞もしくはがん細胞に会合した細胞外マトリックスタンパク質であってもよい。ある特定の実施形態において、一旦細胞内へ入ると、１つまたは複数の特定のペプチド配列が、１つまたは複数の腫瘍細胞またはがん細胞関連プロテアーゼによって酵素的にまたは加水分解的に開裂され、コンジュゲートからの本発明の化合物の放出をもたらす。次いで、放出された本発明の化合物は、細胞内を自由に移動し、細胞毒性または細胞増殖抑制活性を誘導する。コンジュゲートを細胞内プロテアーゼによって開裂して、本発明の化合物を放出することもできる。代替的な実施形態において、本発明の化合物は、腫瘍細胞またはがん細胞の外側でコンジュゲートから開裂され、本発明の化合物はその後、細胞に浸透する。
【０２３７】
ある特定の実施形態において、コンジュゲートは、コンジュゲーション特異的腫瘍またはがん薬物標的化を提供し、故に、本発明の化合物の一般毒性を低減させる。
【０２３８】
別の実施形態において、抗体単位は、腫瘍細胞またはがん細胞と結合する。
【０２３９】
別の実施形態において、抗体単位は、腫瘍細胞またはがん細胞の表面上にある腫瘍細胞またはがん細胞抗原と結合する。
【０２４０】
別の実施形態において、抗体単位は、腫瘍細胞またはがん細胞に会合した細胞外マトリックスタンパク質である腫瘍細胞またはがん細胞抗原と結合する。
【０２４１】
特定の腫瘍細胞またはがん細胞に対する抗体単位の特異性は、最も有効に治療される腫瘍またはがんを決定するために重要となり得る。
【０２４２】
本発明の化合物および／またはその抗体薬物コンジュゲートで治療することができる特定の種類のがんは、膀胱、乳房、頸部、結腸、子宮内膜、腎臓、肺、食道、卵巣、前立腺、膵臓、皮膚、胃および精巣の癌；ならびに白血病およびリンパ腫を含むがこれらに限定されない血液のがんを含むがこれらに限定されない。
【０２４３】
がんのための集学的療法。腫瘍、転移、または制御されない細胞成長を特徴とする他の疾患もしくは障害を含むがこれらに限定されないがんは、本発明の化合物および／またはその抗体薬物コンジュゲートの投与によって治療または阻害することができる。
【０２４４】
他の実施形態において、それを必要とする患者に、有効量の本発明の化合物および／またはその抗体薬物コンジュゲートおよび化学療法剤を投与するステップを含む、がんを治療するための方法が提供される。一実施形態において、化学療法剤は、それによるがんの治療が難治性であることが分かっていないものである。別の実施形態において、化学療法剤は、それによるがんの治療が難治性であることが分かっているものである。本発明の化合物および／またはその抗体薬物コンジュゲートは、がんの治療として、外科手術も経た患者に投与され得る。
【０２４５】
いくつかの実施形態において、患者は、放射線療法等のさらなる治療も受ける。具体的な実施形態において、本発明の化合物および／またはその抗体薬物コンジュゲートは、化学療法剤と、または放射線療法と同時に投与される。別の具体的な実施形態において、化学療法剤または放射線療法は、本発明の化合物および／またはその抗体薬物コンジュゲートの投与の前または後に投与される。
【０２４６】
化学療法剤は、一連のセッションにわたって投与され得る。ケア化学療法剤の標準等の化学療法剤のいずれか１つまたは組合せを投与してよい。
【０２４７】
加えて、本発明の化合物および／またはその抗体薬物コンジュゲートによるがんの治療方法は、化学療法または放射線療法が、治療されている対象にとって毒性が強過ぎる、例えば、許容できないまたは耐え難い副作用をもたらすと判明しているまたは判明し得る場合に、化学療法または放射線療法の代替として提供される。治療されている患者は、どの治療が許容できるまたは耐えられると判明しているかに応じて、外科手術、放射線療法または化学療法等の別のがん治療で治療されていてよい。
【０２４８】
本発明の化合物および／またはその抗体薬物コンジュゲートは、白血病およびリンパ腫を含むがこれらに限定されないある特定のがんの治療のため等、インビトロまたはエクスビボ方式で使用することもでき、そのような治療は、自家幹細胞移植を伴う。これは、多段階プロセスを伴うことができ、該プロセスでは、動物の自家造血幹細胞が採取され、すべてのがん細胞のものがパージされ、次いで、動物の残った脊髄細胞集団が、高線量放射線療法が付随するまたは付随しない高用量の本発明の化合物および／またはその抗体薬物コンジュゲートの投与を介して根絶され、幹細胞移植片が動物に注入して戻される。次いで、支持ケアが提供され、その間に、骨髄機能が修復され、患者が回復する。
【０２４９】
下記の実施例において本発明をさらに記述するが、これらは本発明の範囲を限定することを意図するものではない。
【０２５０】
一般的方法
合成実験手順：
実験は、概して、特に酸素または水分感受性の試薬または中間体を用いる場合には、不活性雰囲気（窒素またはアルゴン）下で行った。適切な場合には無水溶媒を含む市販の溶媒および試薬（概して、Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｍｐａｎｙ、Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ、Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ製のＳｕｒｅ−Ｓｅａｌ（商標）製品）を、概してさらに精製することなく使用した。質量分析データは、液体クロマトグラフィー質量分析（ＬＣ−ＭＳ）または大気圧化学イオン化（ＡＰＣＩ）のいずれかから記録される。核磁気共鳴（ＮＭＲ）データの化学シフトは、用いた重水素化溶媒からの残存ピークを参照して、百万分率（ｐｐｍ、６）で表現される。
【０２５１】
他の実施例または方法における手順を参照する合成では、反応プロトコール（反応の長さおよび温度）は変動し得る。概して、反応に続いて、薄層クロマトグラフィー、ＬＣ−ＭＳまたはＨＰＬＣを行い、適切な場合には、ワークアップに供した。精製は、実験間で変動してよく、概して、溶媒および溶離液／勾配に使用する溶媒比は、適切な保持時間を提供するように選択した。別段の定めがない限り、逆相ＨＰＬＣ画分は、凍結乾燥／フリーズドライを介して濃縮した。中間体および最終化合物は、窒素下、密封バイアルまたはフラスコ内、（０℃）または室温で貯蔵した。化合物名は、ＡＣＤ  Ｌａｂｓソフトウェアで生成した。
【０２５２】
溶媒および／または試薬を表す略語を、米国化学会ガイドラインに基づき、以下に抜粋する：
Ａｃ＝アセチル
Ｂｏｃ＝Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル
ＣＤＩ＝Ｎ，Ｎ’−カルボニルジイミダゾール
ＤＣＣ＝１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド
ＤＣＥ＝ジクロロエタン
ＤＣＭ＝ジクロロメタン
ＤＥＡ＝Ｎ，Ｎ−ジエチルアミン
ＤＥＡＤ＝アゾジカルボン酸ジエチル
ＤＩＡＤ＝アゾジカルボン酸ジイソプロピル
ＤＩＢＡＬ−Ｈ＝水素化ジイソブチルアルミニウム
ＤＩＰＥＡ（または）ヒューニッヒ塩基＝Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＡ＝ジメチルアセトアミド
ＤＭＡＰ＝４−ジメチルアミノピリジン
ＤＭＥ＝ジメトキシエタン
ＤＭＦ＝Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ＝ジメチルスルホキシド
ＤＰＰＡ＝ジフェニルホスホリルアジド
ＥＤＣＩ＝１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド
ＥｔＯＡｃ＝酢酸エチル
Ｆｍｏｃ＝フルオレニルメチルオキシカルボニル
ｈ＝時間
ＨＡＴＵ＝ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−ｔｅ−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート
ＨＢＴＵ＝Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチル−Ｏ−（１Ｈ−ベンゾトリアゾ−ル−１−イル）ウロニウムヘキサフルオロホスフェート
ＨＯＡｃ＝酢酸
ＨＯＡｔ＝１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール
ＨＯＢｔ＝１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物
ＬＤＡ＝リチウムジイソプロピルアミド
Ｍｅ＝メチル
ＭＳ＝分子篩
ＭＴＢＥ＝メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル
ｎ−ＢｕＬｉ＝ｎ−ブチルリチウム
ＮＢＳ＝Ｎ−ブロモスクシンイミド
ＮＭＭ＝Ｎ−メチルモルホリン
Ｐｈ＝フェニル
ＰＰＴＳ＝ｐ−トルエンスルホン酸ピリジニウム
ｐ−ＴｓＯＨ＝ｐ−トルエンスルホン酸
ｒｔ＝室温
ＴＢＡＩ＝ヨウ化テトラブチルアンモニウム
ＴＥＡ＝トリエチルアミン
Ｔｆ＝トリフルオロメタンスルホネート
ＴＦＡ＝ＴＦＡ
ＴＨＦ＝テトラヒドロフラン
ＴＰＴＵ＝Ｏ−（２−オキソ−１（２Ｈ）ピリジル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ，’Ｎ’−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート
【０２５３】
分析に使用したＨＰＬＣおよびＬＣ−ＭＳ条件
プロトコールＡ：カラム：ＷａｔｅｒｓアクイティＵＰＬＣ  ＨＳＳ  Ｔ３、２．１ｍｍ×５０ｍｍ、Ｃ１８、１．７μｍ；移動相Ａ：水中０．１％ギ酸（ｖ／ｖ）；移動相Ｂ：アセトニトリル中０．１％ギ酸（ｖ／ｖ）；勾配：０．１分にわたって５％Ｂ、２．５分にわたって５％から９５％Ｂ、０．３５分にわたって９５％Ｂ；流速：１．２５ｍＬ／分。温度：６０℃；検出：２００〜４５０ｎｍ；ＭＳ（＋）範囲１００〜２０００ダルトン；注入体積：５μＬ；機器：Ｗａｔｅｒｓアクイティ。
【０２５４】
プロトコールＢ：カラム：ＷａｔｅｒｓアクイティＵＰＬＣ  ＨＳＳ  Ｔ３、Ｃ１８、２．１×５０ｍｍ、１．７μｍ；移動相Ａ：水中０．１％ギ酸（ｖ／ｖ）；移動相Ｂ：アセトニトリル中０．１％ギ酸（ｖ／ｖ）；勾配：０．１分にわたって５％Ｂ、１．５分にわたって５％から９５％Ｂ、０．３５分にわたって９５％Ｂ；流速：１．２５ｍＬ／分。温度：６０℃；検出：２００〜４５０ｎｍ；ＭＳ（＋）範囲１００〜２０００ダルトン；注入体積：５μＬ；機器：Ｗａｔｅｒｓアクイティ。
【０２５５】
精製に使用したＨＰＬＣ条件
方法Ａ：カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘルナフェニルヘキシル１５０×２１．２ｍｍ、５μｍ；移動相Ａ：水中０．０２％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）；移動相Ｂ：アセトニトリル中０．０２％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）；勾配：１．５分にわたって２０％Ｂ、８．５分にわたって２０％Ｂから１００％Ｂ、次いで、２．０分にわたって１００％Ｂ；流速：２７ｍＬ／分。温度：制御されず；検出：ＤＡＤ２１０〜３６０ｎｍ；ＭＳ（＋）範囲１５０〜２０００ダルトン；機器：３０５ＲＰ  ＷａｔｅｒｓフラクショナルリンクスＬＣＭＳ
【０２５６】
方法Ｂ：カラム：ＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘルナＣ１８、１００×３０ｍｍ、５μｍ；移動相Ａ：水中０．０２％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）；移動相Ｂ：アセトニトリル中０．０２％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）；勾配：１．５分にわたって２０％Ｂ、８．５分にわたって２０％Ｂから１００％Ｂ、次いで、２．０分にわたって９５％Ｂ；流速：３０ｍＬ／分。温度：制御されず；検出：ＵＶ２１５ｎｍ；機器：Ｇｉｌｓｏｎ
【０２５７】
方法Ｃ：ＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘルナＣ１８、１００×３０ｍｍ、５μｍ；移動相Ａ：水中０．０２％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）；移動相Ｂ：アセトニトリル中０．０２％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）；勾配：可変、１０から２０分にわたってＡ中Ｂの増加勾配。流速：２７から３０ｍＬ／分。温度：制御されず；検出：ＵＶ２１５ｎｍ；機器：Ｇｉｌｓｏｎ
【０２５８】
一般的手順：
一般的手順Ａ：０℃の、ＴＨＦ、ジクロロメタン、または両方の混合物中の、一または二酸の攪拌溶液に、塩化オキサリル（１〜２．５当量）、続いて、触媒量のＤＭＦを添加した。反応物を０℃で数分間にわたって攪拌させた後、室温に加温させ、次いで、室温で３０分から数時間にわたって攪拌させた。次いで、反応物を真空で濃縮した。いくつかの事例において、次いで、粗材料を、ヘプタンまたは他の関連溶媒と、１から数回共沸させた。次いで、粗材料を高真空で乾燥させた後、次のステップにおいて使用した。
【０２５９】
一般的手順Ｂ：０℃の、ＴＨＦ、ジクロロメタン、または両方の混合物（またはいくつかの事例において、他の関連溶媒）中の、アミン（２〜２．５当量）の攪拌溶液に、酸塩化物または二酸塩化物、続いて、ピリジン（３〜６当量）、トリエチルアミン（３〜６当量）または他の関連塩基（３〜６当量）を添加した。反応物を０℃で数秒から数分間にわたって攪拌させた後、室温に加温させ、次いで、室温で１０分から数時間にわたって攪拌させた。次いで、反応物を真空で濃縮した。いくつかの事例において、次いで、粗材料を、ヘプタンまたは他の関連溶媒と、１から数回共沸させた。ほとんどの事例において、次いで、粗材料を、シリカクロマトグラフィーまたは中圧逆相Ｃ１８クロマトグラフィー等の記述されている方法によって精製した。
【実施例】
【０２６０】
（Ｓ）−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−４−イルアセテート（４）の調製。
【０２６１】
【化５０】
0006782250.tif 000056
ステップ１：ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−８−（クロロメチル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−カルボキシレート（２）の合成。ＴＨＦ（１．５ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル（８Ｓ）−４−（ベンジルオキシ）−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−カルボキシレート（１）［Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．、２００７、１２９、１４０９２〜１４０９９において記述されている通りに調製したもの］（１００ｍｇ、０．２２５ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、１０％Ｐｄ／Ｃ（３３ｍｇ）、続いて、ギ酸アンモニウムの２５％水溶液（０．１５ｍＬ）を添加した。溶液を２時間にわたって攪拌した。溶液をエーテル（６ｍＬ）で希釈し、硫酸ナトリウムを添加した。混合物をセライトに通して濾過し、溶媒を真空で除去して、所望生成物２を白色固体（７９ｍｇ、１００％）として提供した。
【０２６２】
ステップ２：ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−４−アセトキシ−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−カルボキシレート（３）の合成。ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−８−（クロロメチル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−カルボキシレート（２，６９ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（２ｍｌ）に溶解した。ピリジン（４６ｍｇ、０．５８５ｍｍｏｌ）。塩化アセチル（１６ｍＬ、０．２３４ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を２時間にわたって攪拌した。溶媒を真空で除去した。粗残留物をフラッシュクロマトグラフィー（０〜１００％ＥｔＯＡｃ／ヘプタン）によって精製して、所望生成物（４５ｍｇ、５８％）を提供した。
【０２６３】
ステップ３：（Ｓ）−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−４−イルアセテート（４）の合成：ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−４−アセトキシ−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−カルボキシレート（３）（４５ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）をジオキサン（１ｍＬ）に溶かした。ジオキサン中４Ｎ  ＨＣｌ（１ｍＬ）を添加し、溶液を２時間にわたって攪拌した。溶媒を除去して、粗製の標的材料を定量的収率で提供し、材料をそのまま直ちに使用した。
【０２６４】
ビシクロ［１．１．１］−１，３−ジカルボン酸クロリド（６）の調製
【０２６５】
【化５１】
0006782250.tif 000057
ビシクロ［１．１．１］ペンタン−１，３−ジカルボン酸（５０ｍｇ）をバイアルに入れ、ＴＨＦ（１ｍＬ）に溶かし、１滴のＤＭＦを添加した。二塩化オキサリル（１２２ｍｇ、０．９６１ｍｍｏｌ、０．０８２５ｍＬ）をゆっくりと添加し、溶液を急速に泡立たせた。２時間後、溶媒を除去し、二酸塩化物６をその後の反応においてそのまま使用した。
【０２６６】
（８Ｓ，８’Ｓ）−（ビシクロ［１．１．１］ペンタン−１，３−ジカルボニル）ビス（８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６，４−ジイル）ジアセテート（７）の調製。
【０２６７】
【化５２】
0006782250.tif 000058
ステップ１：（８Ｓ，８’Ｓ）−（ビシクロ［１．１．１］ペンタン−１，３−ジカルボニル）ビス（８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６，４−ジイル）ジアセテート（７）：表題化合物は、４（２０．０ｍｇ、０．０６０ｍｍｏｌ）、６（５．８１ｍｇ、０．０３０１ｍｍｏｌ、０．０３０１ｍＬ、ＴＨＦ中１Ｍ）、ピリジン（１４．３  ０．１８１ｍｍｏｌ）およびＴＨＦ（１．０ｍＬ）を使用する一般的手順Ｂ、ならびに中圧逆相Ｃ１８クロマトグラフィー（勾配：各相において０．０２％ＴＦＡを加えた水中０％から８０％アセトニトリル）を使用する精製に準拠して調製し、所望生成物７（８．０ｍｇ、２０％）を提供した。LC-MS (プロトコールB): m/z 711.3 [M+H]+,
保持時間 = 1.12分
【０２６８】
（Ｒ）−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−４−イルアセテート（１１）の調製。
【０２６９】
【化５３】
0006782250.tif 000059
ステップ１：ｔｅｒｔ−ブチル（Ｒ）−８−（クロロメチル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−カルボキシレート（９）の合成。ＴＨＦ（１．５ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル（８Ｒ）−４−（ベンジルオキシ）−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−カルボキシレート（８）［Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．、２００７、１２９、１４０９２〜１４０９９において記述されている通りに調製したもの］（１００ｍｇ、０．２２５ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、１０％Ｐｄ／Ｃ（３３ｍｇ）、続いて、ギ酸アンモニウムの２５％水溶液（０．１５ｍＬ）を添加した。溶液を２時間にわたって攪拌した。溶液をエーテル（６ｍＬ）で希釈し、硫酸ナトリウムを添加した。混合物をセライトに通して濾過し、溶媒を真空で除去して、所望生成物９を白色固体（７９ｍｇ、１００％）として提供した。
【０２７０】
ステップ２：ｔｅｒｔ−ブチル（Ｒ）−４−アセトキシ−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−カルボキシレート（１０）の合成：ｔｅｒｔ−ブチル（Ｒ）−８−（クロロメチル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−カルボキシレート（２）（６９ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（２ｍｌ）に溶解した。ピリジン（４６ｍｇ、０．５８５ｍｍｏｌ）を添加した。塩化アセチル（１６ｍＬ、０．２３４ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を２時間にわたって攪拌した。溶媒を真空で除去した。粗残留物をフラッシュクロマトグラフィー（０〜１００％ＥｔＯＡｃ／ヘプタン）によって精製して、所望生成物１０（５３ｍｇ、６９％）を提供した。
【０２７１】
ステップ３：（Ｒ）−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−４−イルアセテート（１１）の合成：ｔｅｒｔ−ブチル（Ｒ）−４−アセトキシ−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−カルボキシレート（１０）（５３ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）をジオキサン（１ｍＬ）に溶かした。ジオキサン中４Ｎ  ＨＣｌ（１ｍＬ）を添加し、溶液を２時間にわたって攪拌した。溶媒を除去して、粗製の標的材料を定量的収率で提供し、材料をそのまま直ちに使用した。（８Ｒ，８’Ｒ）−（ビシクロ［１．１．１］ペンタン−１，３−ジカルボニル）ビス（８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６，４−ジイル）ジアセテート（１１）の調製。
【０２７２】
（８Ｒ，８’Ｒ）−（ビシクロ［１．１．１］ペンタン−１，３−ジカルボニル）ビス（８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６，４−ジイル）ジアセテート（１２）の調製
【０２７３】
【化５４】
0006782250.tif 000060
ステップ１：（８Ｒ，８’Ｒ）−（ビシクロ［１．１．１］ペンタン−１，３−ジカルボニル）ビス（８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６，４−ジイル）ジアセテート（１２）の合成。
表題化合物は、１１（２０．０ｍｇ、０．０６０ｍｍｏｌ）および６（５．８１ｍｇ、０．０３０１ｍｍｏｌ、０．０３０１ｍＬ、ＴＨＦ中１Ｍ）、ピリジン（１４．３  ０．１８１ｍｍｏｌ）およびＴＨＦ（１．０ｍＬ）を使用する一般的手順Ｂ、ならびに中圧逆相Ｃ１８クロマトグラフィー（勾配：各相において０．０２％ＴＦＡを加えた水中０％から８０％アセトニトリル）を使用する精製に準拠して調製し、所望生成物１２（５．９ｍｇ、１４％）を提供した。LC-MS (プロトコールB): m/z 711.2 [M+H]+,
保持時間 = 1.12分
【０２７４】
（Ｓ）−８−（クロロメチル）−２−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［２，３−ｅ］インドール−４−イルアセテート（１６）の調製：
【０２７５】
【化５５】
0006782250.tif 000061
ステップ１：ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−８−（クロロメチル）−４−ヒドロキシ−２−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［２，３−ｅ］インドール−６−カルボキシレート（１４）の合成：ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−４−（ベンジルオキシ）−８−（クロロメチル）−２−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［２，３−ｅ］インドール−６−カルボキシレート（１３）［Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．、２００７、１２９、１４０９２〜１４０９９において記述されている通りに調製したもの］（２５０ｍｇ、０．５６３ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（５．６３ｍＬ）に溶かした。１０％Ｐｄ／Ｃ（８０ｍｇ）を添加した。新たに調製した２５％ギ酸アンモニウム塩水溶液（５００ｍｇ、２ｍｍｏｌ、０．５ｍＬ）を添加し、反応物を３０分間にわたって攪拌した。反応混合物をエーテル（１５ｍＬ）で希釈し、Ｎａ２ＳＯ４を添加した。溶液をセライトに通して濾過し、溶媒を真空で除去して、表題化合物１４（１９１ｍｇ、９５％）を提供した。
【０２７６】
ステップ２：ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−４−アセトキシ−８−（クロロメチル）−２−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［２，３−ｅ］インドール−６−カルボキシレート（１５）の合成：ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−８−（クロロメチル）−４−ヒドロキシ−２−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［２，３−ｅ］インドール−６−カルボキシレート（１４、１７１ｍｇ、０．４８３ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（５．０ｍＬ）に溶解した。ピリジン（Ｐｙｒｄｉｎｅ）（２１３ｍｇ、２．６９ｍｍｏｌ）、続いて、塩化アセチル（１１４ｍｇ、１．４５ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を終夜攪拌すると、溶液は橙色／褐色になった。溶媒を真空で除去すると、粗製の橙色固体が残った。粗残留物をフラッシュクロマトグラフィー（０〜１００％ＥｔＯＡｃ／ヘプタン）によって精製して、溶媒除去後に、所望生成物１５（１７１．０ｍｇ、８９．４％）を提供した。
【０２７７】
ステップ３：（Ｓ）−８−（クロロメチル）−２−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［２，３−ｅ］インドール−４−イルアセテート（１６）の合成：ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−４−アセトキシ−８−（クロロメチル）−２−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［２，３−ｅ］インドール−６−カルボキシレート（１５、２０ｍｇ、０．０５１ｍｍｏｌ）をジオキサン中４Ｎ  ＨＣｌ（１ｍＬ）に溶かした。反応物を終夜静置させ、溶媒を除去して、粗製の標的材料１６を定量的収率で提供し、材料を直ちに使用した。
【０２７８】
ビシクロ［１．１．１］ペンタン−１，３−ジイルビス［カルボニル（８Ｓ）−８−（クロロメチル）−２−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［２，３−ｅ］インドール−６，４−ジイル］ジアセテート（１７）の調製
【０２７９】
【化５６】
0006782250.tif 000062
ステップ１：ビシクロ［１．１．１］ペンタン−１，３−ジイルビス［カルボニル（８Ｓ）−８−（クロロメチル）−２−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［２，３−ｅ］インドール−６，４−ジイル］ジアセテート（１７）の合成：表題化合物は、１６（１７ｍｇ、０．０５１）および６（４．９４ｍｇ、０．０２６ｍｍｏｌ、０．０３０１ｍＬ、ＴＨＦ中１Ｍ）、ピリジン（１４．３  ０．１８１ｍｍｏｌ）およびＴＨＦ（１．０ｍＬ）を使用する一般的手順Ｂ、ならびに中圧逆相Ｃ１８クロマトグラフィー（勾配：各相において０．０２％ＴＦＡを加えた水中０％から８０％アセトニトリル）を使用する精製に準拠して調製し、所望生成物１７（１０．０ｍｇ、２７％）を提供した。LC-MS (プロトコールB): m/z 711.1 [M+H]+,
保持時間 = 1.12分
【０２８０】
（Ｒ）−８−（クロロメチル）−２−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［２，３−ｅ］インドール−４−イルアセテート（２１）の調製
【０２８１】
【化５７】
0006782250.tif 000063
ステップ１：ｔｅｒｔ−ブチル（Ｒ）−８−（クロロメチル）−４−ヒドロキシ−２−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［２，３−ｅ］インドール−６−カルボキシレート（１９）の合成：ｔｅｒｔ−ブチル（Ｒ）−４−（ベンジルオキシ）−８−（クロロメチル）−２−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［２，３−ｅ］インドール−６−カルボキシレート（１８）［Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．、２００７、１２９、１４０９２〜１４０９９において記述されている通りに調製したもの］（２５０ｍｇ、０．５６３ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（５．６３ｍＬ）に溶かした。１０％Ｐｄ／Ｃ（８０ｍｇ）を添加した。新たに調製した２５％ギ酸アンモニウム塩水溶液（５００ｍｇ、２ｍｍｏｌ、０．５ｍＬ）を添加し、反応物を３０分間にわたって攪拌した。反応混合物をエーテル（１５ｍＬ）で希釈し、Ｎａ２ＳＯ４を添加した。溶液をセライトに通して濾過し、溶媒を真空で除去すると、粗製物１９の白色固体（１５６ｍｇ、７８％）が残った。
【０２８２】
ステップ２：ｔｅｒｔ−ブチル（Ｒ）−４−アセトキシ−８−（クロロメチル）−２−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［２，３−ｅ］インドール−６−カルボキシレート（２０）の合成：ｔｅｒｔ−ブチル（Ｒ）−８−（クロロメチル）−４−ヒドロキシ−２−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［２，３−ｅ］インドール−６−カルボキシレート（１９、１３６ｍｇ、０．３８４ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（５．０ｍＬ）に溶解した。ピリジン（２１３ｍｇ、２．６９ｍｍｏｌ）、続いて、塩化アセチル（１１４ｍｇ、１．４５ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を終夜攪拌すると、溶液は橙色／褐色になった。溶媒を真空で除去すると、粗製の橙色固体が残った。粗残留物をフラッシュクロマトグラフィー（０〜１００％ＥｔＯＡｃ／ヘプタン）によって精製して、溶媒除去後に所望生成物２０（１１３．０ｍｇ、７４％）を提供した。
【０２８３】
ステップ３：（Ｒ）−８−（クロロメチル）−２−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［２，３−ｅ］インドール−４−イルアセテート（２１）の合成：ｔｅｒｔ−ブチル（Ｒ）−４−アセトキシ−８−（クロロメチル）−２−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［２，３−ｅ］インドール−６−カルボキシレート（２０、２５ｍｇ、０．０５１ｍｍｏｌ）をジオキサン中４Ｎ  ＨＣｌ（１ｍＬ）に溶かした。反応物を終夜静置させ、溶媒を除去して、粗製の標的材料２１を定量的収率で提供し、材料を直ちに使用した。
【０２８４】
ビシクロ［１．１．１］ペンタン−１，３−ジイルビス［カルボニル（８Ｒ）−８−（クロロメチル）−２−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［２，３−ｅ］インドール−６，４−ジイル］ジアセテート（２２）の調製
【０２８５】
【化５８】
0006782250.tif 000064
ステップ１：ビシクロ［１．１．１］ペンタン−１，３−ジイルビス［カルボニル（８Ｒ）−８−（クロロメチル）−２−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［２，３−ｅ］インドール−６，４−ジイル］ジアセテート（２２）の合成：表題化合物は、２１（１７ｍｇ、０．０５１ｍｍｏｌ）および６（４．９４ｍｇ、０．０２６ｍｍｏｌ、０．０３０１ｍＬ、ＴＨＦ中１Ｍ）、ピリジン（１４．３  ０．１８１ｍｍｏｌ）およびＴＨＦ（１．０ｍＬ）を使用する一般的手順Ｂ、ならびに中圧逆相Ｃ１８クロマトグラフィー（勾配：各相において０．０２％ＴＦＡを加えた水中０％から８０％アセトニトリル）を使用する精製に準拠して調製し、所望生成物２２（８．６ｍｇ、１９％）を提供した。LC-MS (プロトコールB): m/z 711.1 [M+H]+,
保持時間 = 1.12分
【０２８６】
（８Ｓ，８’Ｓ）−グルタロイルビス（８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６，４−ジイル）ジアセテート（２４）の調製
【０２８７】
【化５９】
0006782250.tif 000065
ステップ１：（８Ｓ，８’Ｓ）−グルタロイルビス（８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６，４−ジイル）ジアセテート（２４）の合成：３の溶液（１０ｍｇ、０．０２５ｍｍｏｌ）を、４Ｍ  ＨＣｌ（ジオキサン中０．５ｍＬ）で室温にて１時間にわたって処理し、真空で濃縮した。残留物をＴＨＦ（２ｍＬ）に溶解し、塩化グルタリル（２．１３ｍｇ、０．０１２５ｍｍｏｌ）、続いて、ＤＩＰＥＡ（１３ｕＬ、０．０７４ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を室温で３０分間にわたって攪拌した。反応混合物を濃縮し、残留物を、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ（０〜１０％）を使用するシリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、生成物をオフホワイトの固体として得て、これを、ＭｅＯＨで処理し、濾過して、生成物２４をオフホワイトの固体６ｍｇ（７０％）として得た。LC-MS (プロトコールB): m/z 687.1 [M+H]+,
保持時間=1.11分.
1H NMR
(400MHz, CDCl3) δ =
8.24 (s, 2H), 7.13 (s, 2H), 4.36 (d, J = 10.5 Hz, 2H), 4.17 (m, 2H), 4.06 (m,
2H), 3.74 (d, J = 10.9 Hz, 2H), 3.39 (t, J = 10.9 Hz, 2H), 2.80 (m, 2H), 2.66
(m, 2H), 2.55 (s, 6H), 2.37 (s, 6H), 2.22 (m, 2H).
【０２８８】
（８Ｒ，８’Ｒ）−グルタロイルビス（８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６，４−ジイル）ジアセテート（２５）の調製：
【０２８９】
【化６０】
0006782250.tif 000066
ステップ１：（８Ｒ，８’Ｒ）−グルタロイルビス（８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６，４−ジイル）ジアセテート（２５）の合成：
１０の溶液（１０ｍｇ、０．０２５ｍｍｏｌ）を、４Ｍ  ＨＣｌ（ジオキサン中０．５ｍＬ）で室温にて１時間にわたって処理し、真空で濃縮した。残留物をＴＨＦ（２ｍＬ）に溶解し、塩化グルタリル（２．１３ｍｇ、０．０１２５ｍｍｏｌ）、続いて、ピリジン（１２ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を室温で４時間にわたって攪拌し、真空で濃縮し、残留物を逆相ＨＰＬＣ（方法Ｃ）によって精製して、生成物２５をオフホワイトの固体１．５ｍｇ（１７％）として得た。LC-MS (プロトコールB): m/z 687.1 [M+H]+,
保持時間=1.11
1H NMR
(400MHz, CDCl3) δ =
8.24 (s, 2H), 7.13 (s, 2H), 4.37 (d, J = 10.5 Hz, 2H), 4.18 (m, 2H), 4.06 (m,
2H), 3.73 (d, J = 10.9 Hz, 2H), 3.39 (t, J = 10.9 Hz, 2H), 2.77 (m, 2H), 2.66
(m, 2H), 2.55 (s, 6H), 2.37 (s, 6H), 2.22 (m, 2H).
【０２９０】
（８Ｓ，８’Ｓ）−グルタロイルビス（８−（クロロメチル）−２−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［２，３−ｅ］インドール−６，４−ジイル）ジアセテート（２６）の調製
【０２９１】
【化６１】
0006782250.tif 000067
ステップ１：（８Ｓ，８’Ｓ）−グルタロイルビス（８−（クロロメチル）−２−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［２，３−ｅ］インドール−６，４−ジイル）ジアセテート（２６）：１５の溶液（１２ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ）を、４Ｍ  ＨＣｌ（ジオキサン中０．５ｍＬ）で室温にて１時間にわたって処理し、真空で濃縮した。残留物をＴＨＦ（２ｍＬ）に溶解し、塩化グルタリル（２．５ｍｇ、０．０１５ｍｍｏｌ）、続いて、ＤＩＰＥＡ（１６ｕＬ、０．０９ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を室温で３０分間にわたって攪拌し、真空で濃縮し、残留物を、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ（０〜１０％）を使用するＩＳＣＯによって精製して、生成物２６をオフホワイトの固体６ｍｇ（６０％）として得た：LC-MS (プロトコールB): m/z 687.1 [M+H]+,
保持時間=1.11.
1H NMR
(400MHz, CDCl3) δ =
8.12 (s, 2H), 6.84 (s, 2H), 4.32 (m, 2H), 4.2 (m, 2H), 4.05 (d, J = 10.9 Hz,
2H), 3.93 (m, 2H), 3.62 (m, 2H), 2.68 (br.s., 4H), 2.56 (s, 6H), 2.37 (s, 6H),
2.19 (br.s., 2H).
【０２９２】
（８Ｓ）−８−（クロロメチル）−６−［（３−｛［（８Ｓ）−８−（クロロメチル）−１−メチル−４−（ホスホノオキシ）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−イル］カルボニル｝ビシクロ［１．１．１］ペンタ−１−イル）カルボニル］−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−４−イル４−ニトロフェニルカーボネート（３３）の調製。
【０２９３】
【化６２】
0006782250.tif 000068
ステップ１：ｔｅｒｔ−ブチル（８Ｓ）−８−（クロロメチル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−カルボキシレート（２）の合成。０℃の１８ｍＬのＴＨＦ中のｔｅｒｔ−ブチル（８Ｓ）−４−（ベンジルオキシ）−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−カルボキシレート１［Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．、２００７、１２９、１４０９２〜１４０９９において記述されている通りに調製したもの］（５７５ｍｇ、１．３０ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、パラジウム１０ｗｔ．％炭素（２５０ｍｇ）を添加し、続いて、２．０ｍＬの水中２５％ギ酸アンモニウムをゆっくりと滴下添加した。反応物を０℃で約９０分間にわたって攪拌させた。反応物をエーテルで希釈し、続いて、硫酸ナトリウムを添加した。反応物を薄いセライトのパッドに通して濾過し、次いで、これをエーテルで２回洗浄した。有機物を合わせ、次いで、縮小した後、真空下に置いて、２（４５８ｍｇ、定量的）をオフホワイトの固体として産出した。LC-MS (プロトコールA): m/z 352.2 [M-H], 保持時間 = 1.96分.
【０２９４】
ステップ２：（８Ｓ）−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−４−イルアセテート（４）の合成。０℃の８ｍＬのジクロロメタン中の２（２０９ｍｇ、０．５９１ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、塩化アセチル（０．０４６２ｍＬ、０．６５０ｍｍｏｌ）、続いて直ちに、ピリジン（０．０７１４ｍＬ、０．８８６ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を０℃で約１０分間にわたって攪拌させた。反応物をシリカ上に縮小した。次いで、シリカクロマトグラフィーを実施した（ｐｒｅｆｏｒｍｅｄ）（勾配：ヘプタン中０％〜１５％アセトン）。適切な試験管を濃縮し、高真空下に置いて、白色固体を生成した。この白色固体に、ジオキサン中４Ｍ  ＨＣｌ（１０ｍＬ、４０ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を室温で約９０分間にわたって攪拌させた。反応物をヘプタンで希釈し、真空で濃縮し、次いで、高真空下に置いて、４（１７０ｍｇ、８０％収率、２ステップ）を薄橙色固体として生成した。LC-MS (プロトコールA): m/z 296.1 [M+H]+,
保持時間=1.56分.  1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.53 (s, 1H), 7.05 (s, 1H), 4.27-4.19 (m,
1H), 3.93-3.86 (m, 1H), 3.80-3.75 (m, 1H), 3.72-3.64 (m, 2H), 2.54 (s, 3H),
2.37 (s, 3H).
【０２９５】
ステップ３：メチル３−（クロロカルボニル）ビシクロ［１．１．１］ペンタン−１−カルボキシレート（２８）の合成。３−（メトキシカルボニル）ビシクロ［１．１．１］ペンタン−１−カルボン酸２７（８６．８ｍｇ、０．５１０ｍｍｏｌ）、塩化オキサリル（０．０５２５ｍＬ、０．６１２ｍｍｏｌ）、ＴＨＦ（６ｍＬ）および１滴のＤＭＦを使用する一般的手順Ａに準拠し、２８を白色固体（９７ｍｇ、定量的）として調製した。粗製物２８を、さらに精製することなくそのまま使用した。
【０２９６】
ステップ４：ジベンジル（８Ｓ）−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−４−イルホスフェート（２９）の合成。８ｍＬのＴＨＦおよび８ｍＬのアセトニトリル中の２（４．５ｇ、１３．４ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、四塩化炭素（０．９９７ｍＬ、１０．３ｍｍｏｌ）、続いて、ヒューニッヒ塩基（０．５１２ｍＬ、２．９４ｍｍｏｌ）、亜リン酸ジベンジル（０．９７４ｍＬ、４．４１ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（１８ｍｇ、０．１４７ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で約１０分間にわたって攪拌させた。反応物をシリカ上に縮小した。次いで、シリカクロマトグラフィーを実施した（勾配：ヘプタン中０％〜２５％アセトン）。適切な試験管を濃縮し、高真空下に置いて、白色固体を生成した。粗材料を５ｍＬのジクロロメタンに溶解し、続いて、トリフルオロ酢酸（５ｍＬ、７０ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で６０秒間にわたって攪拌させ、直ちに真空で濃縮し、次いで、高真空下に置いて、２９（３２１ｍｇ、７０％収率、２ステップ）を、白色および透明の油および固体混合物として生成した。LC-MS (プロトコールA): m/z 514.1 [M+H]+,
保持時間 = 2.14分。
【０２９７】
ステップ５：３−｛［（８Ｓ）−４−｛［ビス（ベンジルオキシ）ホスホリル］オキシ｝−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−イル］カルボニル｝ビシクロ［１．１．１］ペンタン−１−カルボン酸（３０）の合成。２９（３１５ｍｇ、０．５０２ｍｍｏｌ）、２８（９４．６ｍｇ、０．５０２ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（０．２１０ｍＬ、１．５０ｍｍｏｌ）およびＴＨＦ（２０ｍＬ）を使用する一般的手順Ｂ、ならびにシリカゲルクロマトグラフィー（勾配：ヘプタン中０％から３５％アセトン）を使用する精製に準拠した。適切な試験管を合わせ、真空で濃縮して、白色固体を生成した。材料をＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解し、続いて、２．５ｍＬの水に溶解した水酸化リチウムを添加した。反応物を室温で約４５分間にわたって攪拌させた。反応物をジクロロメタンで希釈し、１Ｎ  ＨＣｌ（水溶液）の添加を介してクエンチした。反応物を分液漏斗に移した。有機層を分離し、水性層をジクロロメタンで２回洗浄した。有機層を合わせ、ブラインで１回洗浄し、水で１回洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮し、次いで、高真空下に置いて、３０（１７８ｍｇ、５７％収率、２ステップ）を生成した。LC-MS (プロトコールA): m/z 652.2 [M+H]+,
保持時間 = 1.97分。
【０２９８】
ステップ６：ジベンジル（８Ｓ）−６−｛［３−（クロロカルボニル）ビシクロ［１．１．１］ペンタ−１−イル］カルボニル｝−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−４−イルホスフェート（３１）の合成。３０（１７４ｍｇ、０．２６７ｍｍｏｌ）、塩化オキサリル（０．０２９８ｍＬ、０．３４７ｍｍｏｌ）、ＴＨＦ（５ｍＬ）、ジクロロメタン（１ｍＬ）および１滴のＤＭＦを使用する一般的手順Ａに準拠し、３１を白色固体（１８２ｍｇ、定量的）として調製した。粗製物３１を、さらに精製することなくそのまま使用した。
【０２９９】
ステップ７：（８Ｓ）−６−［（３−｛［（８Ｓ）−４−｛［ビス（ベンジルオキシ）ホスホリル］オキシ｝−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−イル］カルボニル｝ビシクロ［１．１．１］ペンタ−１−イル）カルボニル］−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−４−イルアセテート（３２）の合成。３１（１６７ｍｇ、０．２４９ｍｍｏｌ）、４（９９．３ｍｇ、０．２９９ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（０．１０４ｍＬ、０．７４７ｍｍｏｌ）およびＴＨＦ（２０ｍＬ）を使用する一般的手順Ｂ、ならびにシリカゲルクロマトグラフィー（勾配：ヘプタン中０％から５０％アセトン）を使用する精製に準拠した。適切な試験管を合わせ、真空で濃縮して、３２（１０３ｍｇ、４５％）を白色固体として生成した。LC-MS (プロトコールA): m/z 929.3 [M+H]+,
保持時間=2.44分.  1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.37 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.54-7.50 (m,
2H), 7.39-7.33 (m, 10H), 5.23-5.14 (m, 4H), 4.53-4.46 (m, 2H), 4.38-4.25 (m,
4H), 4.02-3.95 (m, 2H), 3.78-3.69 (m, 2H), 2.63 (s, 6H), 2.57-2.53 (m, 6H),
2.39 (s, 3H).
【０３００】
ステップ８：（８Ｓ）−８−（クロロメチル）−６−［（３−｛［（８Ｓ）−８−（クロロメチル）−１−メチル−４−（ホスホノオキシ）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−イル］カルボニル｝ビシクロ［１．１．１］ペンタ−１−イル）カルボニル］−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−４−イル４−ニトロフェニルカーボネート（３３）の合成。６ｍＬのメタノール中の３２（９９ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、ジオキサン中４Ｍ  ＨＣｌ（６．０ｍＬ、２０ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で約１５分間にわたって攪拌させた。反応物を低減させ、次いで、高真空下に置いた。０℃の６ｍＬのジクロロメタンおよび６ｍＬのＴＨＦ中の粗材料の攪拌溶液に、クロロギ酸ｐ−ニトロフェニル（３８．６ｍｇ、０．１９２ｍｍｏｌ）、続いて直ちに、トリエチルアミン（０．０７４２ｍＬ、０．５３２ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を０℃で約５分間にわたって攪拌させ、次いで、攪拌しながら室温に加温させた。反応物を室温で約１０分間にわたって攪拌させた。反応物を縮小した。３ｍＬのジクロロメタン中の粗材料の攪拌溶液に、３ｍＬのジクロロメタン中のＴＦＡ（３．０ｍＬ、３９ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、続いて、チオフェノール（０．１０９ｍＬ、１．０６ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で約６時間にわたって攪拌させた。反応物を縮小した。粗材料を数ミリリットルのＤＭＳＯで希釈し、次いで、２５ｇのＣ１８プレカラム（アセトニトリル、次いで各相において０．０２％ＴＦＡを加えた水で予め平衡化したもの）上に注入した。材料を中圧逆相Ｃ１８クロマトグラフィー（勾配：各相において０．０２％ＴＦＡを加えた水中２０％から６５％アセトニトリル）によって精製し、適切な試験管を、ジーンバックを使用して濃縮して、３３（３７ｍｇ、４０％、３ステップ）を白色固体として生成した。LC-MS (プロトコールA): m/z 872.3 [M+H]+,
保持時間=1.86分.  1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.44 (s, 1H), 8.40-8.33 (m, 3H), 7.78-7.72
(m, 2H), 7.59 (m, 1H), 7.47 (m, 1H), 4.53-4.44 (m, 2H), 4.38-4.22 (m, 4H),
4.04-3.94 (m, 2H), 3.81-3.75 (m, 1H), 3.72-3.65 (m, 1H), 2.62 (s, 6H), 2.58 (s,
3H), 2.54 (s, 3H).
【０３０１】
Ｎ−［１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２１−オキソ−３，６，９，１２，１５，１８−ヘキサオキサヘニコサン−２１−イル］−Ｌ−バリル−Ｎ５−カルバモイル−Ｎ−｛４−［（｛メチル［２−（メチルアミノ）エチル］カルバモイル｝オキシ）メチル］フェニル｝−Ｌ−オルニチンアミド（４０）の調製
【０３０２】
【化６３】
0006782250.tif 000069
ステップ１：Ｎ−［１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２１−オキソ−３，６，９，１２，１５，１８−ヘキサオキサヘニコサン−２１−イル］−Ｌ−バリル−Ｎ５−カルバモイル−Ｎ−［４−（ヒドロキシメチル）フェニル］−Ｌ−オルニチンアミド（３６）の合成。１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３，６，９，１２，１５，１８−ヘキサオキサヘニコサン−２１−オイック酸を含有する丸底フラスコに、３４（６２８ｍｇ、１．４５ｍｍｏｌ）、２０ｍＬのジクロロメタン、２ｍＬのＤＭＦ、ＨＡＴＵ（５０１ｍｇ、１．３２ｍｍｏｌ）およびヒューニッヒ塩基（０．９２ｍＬ、５．３ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で２分間にわたって攪拌させた後、Ｌ−バリル−Ｎ５−カルバモイル−Ｎ−［４−（ヒドロキシメチル）フェニル］−Ｌ−オルニチンアミド、３５（５００ｍｇ、１．３２ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で約９０分間にわたって攪拌させた後、ＴＦＡの添加を介してクエンチした。反応物を濃縮して、より小さい体積とし、数ｍＬのＤＭＳＯで希釈し、次いで、２５ｇのＣ１８プレカラム（アセトニトリル、次いで各相において０．０２％ＴＦＡを加えた水で予め平衡化したもの）上に注入した。材料を中圧逆相Ｃ１８クロマトグラフィー（勾配：各相において０．０２％ＴＦＡを加えた水中５％から４０％アセトニトリル）によって精製し、適切な試験管を、ジーンバックを使用して濃縮して、３６（５１４ｍｇ、４９％）を透明固体として生成した。LC-MS (プロトコールA): m/z 795.5 [M+H]+,
保持時間 = 1.01分.
【０３０３】
ステップ２：Ｎ−［１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２１−オキソ−３，６，９，１２，１５，１８−ヘキサオキサヘンイコサン−２１−イル］−Ｌ−バリル−Ｎ５−カルバモイル−Ｎ−［４−（｛［（４−ニトロフェノキシ）カルボニル］オキシ｝メチル）フェニル］−Ｌ−オルニチンアミド（３７）の合成。４ｍＬのＤＭＦ中の３６（２１０ｍｇ、０．２６４ｍｍｏｌ）および炭酸ビス（４−ニトロフェニル）（１６１ｍｇ、０．５２８ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、ヒューニッヒ塩基（０．０９６ｍＬ、０．５５４ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で約２時間にわたって攪拌させた。反応物を２５ｇのＣ１８プレカラム（アセトニトリル、次いで各相において０．０２％ＴＦＡを加えた水で予め平衡化したもの）上に注入した。材料を中圧逆相Ｃ１８クロマトグラフィー（勾配：各相において０．０２％ＴＦＡを加えた水中５％から５５％アセトニトリル）によって精製し、適切な試験管を、ジーンバックを使用して濃縮して、３７（１８０ｍｇ、７１％）を固体として生成した。LC-MS (プロトコールA): m/z 960.5 [M+H]+,
保持時間 = 1.48分.
【０３０４】
ステップ３：Ｎ−［１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２１−オキソ−３，６，９，１２，１５，１８−ヘキサオキサヘンイコサン−２１−イル］−Ｌ−バリル−Ｎ５−カルバモイル−Ｎ−［４−（４，７，１０，１０−テトラメチル−３，８−ジオキソ−２，９−ジオキサ−４，７−ジアザウンデカ−１−イル）フェニル］−Ｌ−オルニチンアミド（３９）の合成。６ｍＬのＤＭＡ中の３７（６４０ｍｇ、０．６６７ｍｍｏｌ）および３８［Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９２、３３、５５９〜５６７において記述されている通りに調製したもの］（１２７ｍｇ、０．６７４ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、２，６−ルチジン（０．１５４ｍＬ、１．３３ｍｍｏｌ）、続いて、ヒューニッヒ塩基（０．２３２ｍＬ、１．３３ｍｍｏｌ）およびＨＯＡＴ（９．１ｍｇ、０．６７ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で約１５分間にわたって攪拌させた。反応物を２５ｇのＣ１８プレカラム（アセトニトリル、次いで各相において０．０２％ＴＦＡを加えた水で予め平衡化したもの）上に注入した。材料を中圧逆相Ｃ１８クロマトグラフィー（勾配：各相において０．０２％ＴＦＡを加えた水中５％から４０％アセトニトリル）によって精製し、適切な試験管を、ジーンバックを使用して濃縮して、３９（５６４ｍｇ、８４％）をワックス様白色固体として生成した。LC-MS (プロトコールA): m/z 1009.7 [M+H]+,
保持時間 = 1.43分.
【０３０５】
ステップ４：Ｎ−［１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２１−オキソ−３，６，９，１２，１５，１８−ヘキサオキサヘンイコサン−２１−イル］−Ｌ−バリル−Ｎ５−カルバモイル−Ｎ−｛４−［（｛メチル［２−（メチルアミノ）エチル］カルバモイル｝オキシ）メチル］フェニル｝−Ｌ−オルニチンアミド（４０）の合成。６ｍＬのジクロロメタン中の３９（４７０ｍｇ、０．４６６ｍｍｏｌ）の攪拌混合物に、ＴＦＡ（３．０ｍＬ、４０ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で約１０分間にわたって攪拌させた。反応物を縮小した。残留物を中圧逆相Ｃ１８クロマトグラフィー（勾配：各相において０．０２％ＴＦＡを加えた水中５％から３０％アセトニトリル）によって精製し、適切な試験管を、ジーンバックを使用して濃縮して、４０（３２６ｍｇ、６８％）を白色油／固体混合物として生成した。LC-MS (プロトコールA): m/z 909.8 [M+H]+,
保持時間 = 0.91分.
【０３０６】
Ｎ−［１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２１−オキソ−３，６，９，１２，１５，１８−ヘキサオキサヘニコサン−２１−イル］−Ｌ−バリル−Ｎ５−カルバモイル−Ｎ−［４−（｛［（２−｛［（｛（８Ｓ）−８−（クロロメチル）−６−［（３−｛［（８Ｓ）−８−（クロロメチル）−１−メチル−４−（ホスホノオキシ）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−イル］カルボニル｝ビシクロ［１．１．１］ペンタ−１−イル）カルボニル］−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−４−イル｝オキシ）カルボニル］（メチル）アミノ｝エチル）（メチル）カルバモイル］オキシ｝メチル）フェニル］−Ｌ−オルニチンアミド（４１）の調製。
【０３０７】
【化６４】
0006782250.tif 000070
ステップ１：Ｎ−［１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２１−オキソ−３，６，９，１２，１５，１８−ヘキサオキサヘニコサン−２１−イル］−Ｌ−バリル−Ｎ５−カルバモイル−Ｎ−［４−（｛［（２−｛［（｛（８Ｓ）−８−（クロロメチル）−６−［（３−｛［（８Ｓ）−８−（クロロメチル）−１−メチル−４−（ホスホノオキシ）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−イル］カルボニル｝ビシクロ［１．１．１］ペンタ−１−イル）カルボニル］−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−４−イル｝オキシ）カルボニル］（メチル）アミノ｝エチル）（メチル）カルバモイル］オキシ｝メチル）フェニル］−Ｌ−オルニチンアミド（４１）の合成。３３（８．０ｍｇ、０．００９２ｍｍｏｌ）および４０（１０．３ｍｇ、０．０１０１ｍｍｏｌ）を含有する２ドラムバイアルに、１．０ｍＬのＤＭＡ、続いて、ヒューニッヒ塩基（０．００６３９ｍＬ、０．０３６７ｍｍｏｌ）、２，６−ルチジン（０．００４２５ｍＬ、０．０３６７ｍｍｏｌ）およびＨＯＡＴ（１．２５ｍｇ、０．０３６７ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で約５分間にわたって攪拌させた。粗反応物を、４ｇのＣ１８プレカラム（アセトニトリル、次いで各相において０．０２％ＴＦＡを加えた水で予め平衡化したもの）上に注入した。材料を、中圧逆相Ｃ１８クロマトグラフィー（勾配：各相において０．０２％ＴＦＡを加えた水中１５％から５０％アセトニトリル）、続いて、方法Ａによる第二の精製によって精製し、適切な試験管を、ジーンバックを使用して濃縮して、４１（８．９ｍｇ、５９％）を白色固体として生成した。LC-MS (プロトコールA): m/z 1642.9 [M+2H]+,
保持時間 = 1.61分。
【０３０８】
ＬＰ：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−６−（（（Ｓ）−８−（クロロメチル）−６−（５−（（Ｓ）−８−（クロロメチル）−４−（（（２−（（（（４−（（２３Ｓ，２６Ｓ）−１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２３−イソプロピル−２１，２４−ジオキソ−２６−（３−ウレイドプロピル）−３，６，９，１２，１５，１８−ヘキサオキサ−２２，２５−ジアザヘプタコサン−２７−アミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エチル）（メチル）カルバモイル）オキシ）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−イル）−５−オキソペンタノイル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−４−イル）オキシ）−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−カルボン酸（４９）の調製
【０３０９】
【化６５】
0006782250.tif 000071
ステップ１：ｔｅｒｔ−ブチル５−クロロ−５−オキソペンタノエート（４４）の合成：ＴＨＦ（３ｍＬ）中の５−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−５−オキソペンタン酸（１１０ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ）の溶液に、塩化オキサリル（０．５８ｍＬ、１．２ｍｍｏｌ、ＤＣＭ中２Ｍ）を０℃で、続いて、１滴のＤＭＦを添加した。混合物を０℃で３０分間にわたって攪拌し、真空で濃縮して、対応する酸塩化物４４を白色固体として得た。
【０３１０】
ステップ２。（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（（（Ｓ）−６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−４−イル）オキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（４３）の合成
ＤＣＭ（２３ｍＬ）中の２（２２６ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ）の溶液に、４ＡのＭＳ（１．１７ｇ、粉末、５マイクロ未満、活性化）を添加し、混合物を室温で３０分間にわたって攪拌した。反応混合物に、アルファ−Ｄ−グルクロニドメチルエステル２，３，４−トリアセテート１−２，２，２−トリクロロエタンイミデート（４２、３６７ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を−２５℃に冷却した。ＤＣＭ（１０ｍＬ）中のＢＦ３・Ｅｔ２Ｏ（０．１３ｍＬ、０．３２ｍｍｏｌ）の溶液をゆっくりと添加し、混合物を−２０℃未満で１時間にわたって攪拌した。反応混合物を濾過し、溶液を真空で濃縮した。残留物を、ヘプタン中０〜６０％ＥｔＯＡｃの勾配を使用するシリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、生成物４３を黄色固体２６１ｍｇ（６１％）として得た。
LC-MS (プロトコールB):
m/z 692.1 (M+Na), 保持時間=1.09分.
1H NMR (400MHz, クロロホルム-d) δ = 7.29 (s, 1H), 7.13 (s, 1H), 5.40 (br.
s., 3H), 4.30 (d, J=7.4 Hz, 2H), 4.06 - 3.92 (m, 2H), 3.85 - 3.73 (m, 4H), 3.69
(d, J=10.5 Hz, 1H), 3.36 (t, J=10.5 Hz, 1H), 2.56 (s, 3H), 2.10 (s, 6H), 2.08
(s, 3H), 1.62 (s, 9H).
【０３１１】
ステップ２。（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（（（Ｓ）−６−（５−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−５−オキソペンタノイル）−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−４−イル）オキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（４５）の合成
４３の溶液（２６１ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）を、ジオキサン中４Ｍ  ＨＣｌ（３ｍＬ）で１時間にわたって処理した。真空で濃縮し、残留物をＴＨＦ（３．０ｍＬ）に溶解し、ＴＨＦ（３．０ｍＬ）中の酸塩化物４４（０．５８ｍｍｏｌ）の溶液、続いて、ＴＥＡ（０．１６３ｍＬ、１．２ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を０℃で３０分間にわたって攪拌した。混合物を濃縮し、残留物を、ヘプタン中ＥｔＯＡｃ（０〜７０％）の勾配を使用するシリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、生成物をオフホワイトの固体２２４ｍｇ（７８％）として得た。LC-MS (プロトコールB): m/z 740.2 [M+H]+,
保持時間=1.07分. 1H NMR
(400MHz, クロロホルム-d) δ = 8.26 (br. s., 1H), 7.13 (s, 1H), 5.45 - 5.25 (m, 4H), 4.32 (d,
J=9.0 Hz, 2H), 4.12 (t, J=8.8 Hz, 1H), 4.05 (d, J=8.6 Hz, 1H), 3.79 - 3.66 (m,
5H), 3.33 (t, J=10.9 Hz, 1H), 2.63 (d, J=7.0 Hz, 1H), 2.58 - 2.47 (m, 4H), 2.45
- 2.35 (m, 2H), 2.06 (m, 11H), 1.47 (s, 9H).
【０３１２】
ステップ３。（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（（（Ｓ）−８−（クロロメチル）−６−（５−（（Ｓ）−８−（クロロメチル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−イル）−５−オキソペンタノイル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−４−イル）オキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（４６）の合成
４５の溶液（１１６ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（１．５ｍＬ）およびＴＦＡ（１ｍＬ）で室温にて１時間にわたって処理し、真空で濃縮し、残留物をＴＨＦに０℃で溶解し、塩化オキサリル（０．１６ｍＬ、０．３２ｍｍｏｌ、ＤＣＭ中２Ｍ）およびＤＭＦ（１滴）を添加した。混合物を０℃で３０分間にわたって攪拌し、真空で濃縮して、対応する酸塩化物を得た。
【０３１３】
別個のバイアル中、化合物２（８３ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）を、ジオキサン中４Ｍ  ＨＣｌ（２ｍＬ）で室温にて１時間にわたって処理し、真空で濃縮し、残留物をＴＨＦ（５ｍＬ）に０℃で溶解し、Ｅｔ３Ｎ（１００ｕＬ、０．７８ｍｍｏｌ）、続いて、ＴＨＦ中の上記の酸塩化物の溶液（５ｍＬ）を添加した。混合物を０℃で２０分間にわたって攪拌した。混合物を濃縮し、残留物を、ヘプタン中ＥｔＯＡｃ（０〜１００％）の勾配を使用するシリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、生成物４６をオフホワイトの固体１１４ｍｇ（７９％）として得た。LC-MS (プロトコールB): m/z 919.1 [M+H]+,
保持時間=1.05分, 1H NMR
(400MHz, DMSO-d6) δ = 10.41 (s,
1H), 8.22 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 5.81 - 5.70 (m,
4H), 5.63 - 5.52 (m, 1H), 5.19 (t, J=8.6 Hz, 1H), 5.12 (t, J=9.8 Hz, 1H), 4.76
(d, J=9.8 Hz, 1H), 4.30 - 4.16 (m, 3H), 3.86 (m, 2H), 3.68 (s, 3H), 3.64 - 3.51
(m, 2H), 2.73 (br. s., 1H), 2.62 (m, 2H), 2.50 (s, 6H), 2.10 -2.02 (m, 12H).
【０３１４】
ステップ４。（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（（（Ｓ）−６−（５−（（Ｓ）−４−（（（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エチル）（メチル）カルバモイル）オキシ）−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−イル）−５−オキソペンタノイル）−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−４−イル）オキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（４７）の合成：０℃のＴＨＦ（３ｍＬ）中の４６（５０ｍｇ、０．０５４ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＣＭ（０．５ｍＬ）中のクロロギ酸４−ニトロフェニル（２２ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）の溶液、続いて、ＤＩＰＥＡ（５７ｕＬ、０．３３ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を０℃で１時間にわたって攪拌した。上記の混合物に、ＴＨＦ（０．５ｍＬ）中の３８［Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９２、３３、５５９〜５６７において記述されている通りに調製したもの］（３１ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、混合物を０℃で３０分間にわたって攪拌し、真空で濃縮し、残留物を、ヘプタン中ＥｔＯＡｃ（０〜１００％）の勾配を使用するシリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、生成物４７を白色固体５６ｍｇ（９１％）として得た。LC-MS (プロトコールB): m/z 1150.2 [M+NH4],
保持時間 = 1.14分
【０３１５】
ステップ５。（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−６−（（（Ｓ）−６−（５−（（Ｓ）−４−（（（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エチル）（メチル）カルバモイル）オキシ）−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−イル）−５−オキソペンタノイル）−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−４−イル）オキシ）−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−カルボン酸（４８）の合成：０℃のＴＨＦ／ＭｅＯＨ（１／１、６ｍＬ）中の４７（５６ｍｇ、０．０４９ｍｍｏｌ）の溶液に、水（０．５ｍＬ）中のＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏ（２１ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。混合物を０℃で１時間にわたって攪拌した。酢酸（５０ｍｇ）を添加し、反応物を真空で濃縮して、粗生成物４８を白色固体４５ｍｇ（９０％）として得た。LC-MS (プロトコールB): m/z 1014.9 [M+Na], 保持時間 = 1.0分
【０３１６】
ステップ６：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−６−（（（Ｓ）−８−（クロロメチル）−６−（５−（（Ｓ）−８−（クロロメチル）−４−（（（２−（（（（４−（（２３Ｓ，２６Ｓ）−１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２３−イソプロピル−２１，２４−ジオキソ−２６−（３−ウレイドプロピル）−３，６，９，１２，１５，１８−ヘキサオキサ−２２，２５−ジアザヘプタコサン−２７−アミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エチル）（メチル）カルバモイル）オキシ）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−イル）−５−オキソペンタノイル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−４−イル）オキシ）−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−カルボン酸（４９）および（８Ｓ）−８−（クロロメチル）−６−｛５−［（８Ｓ）−８−（クロロメチル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−イル］−５−オキソペンタノイル｝−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−４−イルベータ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（５７）の合成：化合物４８（２３ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）を、予め冷却したＴＦＡ（１ｍＬ）で０℃にて５分間にわたって処理し、真空で濃縮した。残留物をＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解し、化合物３７（１９ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）、ルチジン（１４ｕＬ、０．１２ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（２１ｕＬ、０．１２ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（２．７ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を３０℃で１時間にわたって攪拌した。混合物を逆相ＨＰＬＣ（方法Ｃ）によって精製して、化合物４９をオフホワイトの固体８ｍｇ（２０％）として、LC-MS (プロトコールB): m/z 1714.6 [M+H]+,
保持時間 = 0.89分、および化合物５７をガム状物７ｍｇ（５０％）として得た: LC-MS (プロトコールB): m/z 779.1 [M+H]+,
保持時間 = 0.90分
【０３１７】
（Ｓ）−８−（クロロメチル）−６−（５−（（Ｓ）−８−（クロロメチル）−１−メチル−４−（ホスホノオキシ）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−イル）−５−オキソペンタノイル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−４−イル（４−（（２３Ｓ，２６Ｓ）−１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２３−イソプロピル−２１，２４−ジオキソ−２６−（３−ウレイドプロピル）−３，６，９，１２，１５，１８−ヘキサオキサ−２２，２５−ジアザヘプタコサン−２７−アミド）ベンジル）エタン−１，２−ジイルビス（メチルカルバメート）（５６）の調製
【０３１８】
【化６６】
0006782250.tif 000072
ステップ１：メチル５−クロロ−５−オキソペンタノエート（５１）の合成：５−メトキシ−５−オキソペンタン酸（１２８ｍｇ、０．８８ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（５ｍＬ）に０℃で溶解し、塩化オキサリル（０．９ｍＬ、１．８ｍｍｏｌ、ＤＣＭ中２Ｍ）およびＤＭＦ（１滴）を添加し、混合物を０℃で３０分間にわたって攪拌した。真空で濃縮して、対応する（ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄ）酸塩化物５１を白色固体として得て、これを、さらに精製することなく使用した。
【０３１９】
ステップ２。ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−４−（（ビス（ベンジルオキシ）ホスホリル）オキシ）−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−カルボキシレート（５０）の合成
ＡＣＮ（８ｍＬ）およびＴＨＦ（８ｍＬ）中の２（２６０ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ）の溶液に、ＣＣｌ４（１ｍＬ）、ＤＩＰＥＡ（０．５２ｍＬ、２．９４ｍｍｏｌ）、亜リン酸ジベンジル（ｄｉｂｅｎｙｌｐｈｏｓｐｈｉｔｅ）（１．０３ｍＬ、４．４１ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（１８ｍｇ）を添加した。混合物を室温で１５分間にわたって攪拌し、真空で濃縮し、残留物を、ヘプタン中ＥｔＯＡｃの勾配（０〜６０％）を使用するシリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、生成物５０を無色油３６５ｍｇ（８１％）として得た。LC-MS (プロトコールB): m/z 631.2 [M+H]+,
保持時間 = 1.18分
【０３２０】
ステップ３。メチル（Ｓ）−５−（４−（（ビス（ベンジルオキシ）ホスホリル）オキシ）−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−イル）−５−オキソペンタノエート（５２）の合成
ＤＣＭ（３ｍＬ）中の５０（３６５ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＦＡ（３ｍＬ）を添加し、混合物を室温で２分間にわたって攪拌し、真空で濃縮した。残留物をＴＨＦ（５．０ｍＬ）に溶解し、ＴＨＦ（５．０ｍＬ）中の酸塩化物５１（０．８８ｍｍｏｌ）の溶液、続いて、Ｅｔ３Ｎ（０．３７ｍＬ、０．２４ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を０℃で３０分間にわたって攪拌した。反応物を濃縮し、残留物を、ヘプタン中ＥｔＯＡｃの勾配（０〜８０％）を使用するシリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、生成物５２を無色油２４０ｍｇ（６４％）として得た。LC-MS (プロトコールB): m/z 642.1 [M+H]+,
保持時間 = 1.09分
【０３２１】
ステップ４。（Ｓ）−５−（４−（（ビス（ベンジルオキシ）ホスホリル）オキシ）−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−イル）−５−オキソペンタン酸（５３）の合成
０℃のＴＨＦ（１０ｍＬ）中の５２（２３５ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）の溶液に、水（２．５ｍＬ）中のＬｉＯＨ／Ｈ２Ｏ（１５５ｍｇ、３．７ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、混合物を０℃で１．５時間にわたって攪拌した。混合物をＤＣＭで希釈し、１Ｍ  ＨＣｌによって酸性化し、有機層を分離し、水性相をＤＣＭで２回（ｔｏｗ  ｔｉｍｅｓ）抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で乾燥させた。混合物を真空で濃縮し、残留物を逆相ＨＰＬＣ（方法Ｃ）によって精製して、生成物５３をオフホワイトの泡状物２７ｍｇ（１２％）として得た。LC-MS (プロトコールB): m/z 628.1 [M+H]+,
保持時間 = 1.01分
【０３２２】
ステップ５。ジベンジル（（Ｓ）−８−（クロロメチル）−６−（５−（（Ｓ）−８−（クロロメチル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−イル）−５−オキソペンタノイル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−４−イル）ホスフェート（５４）の合成
０℃のＴＨＦ（５ｍＬ）中の５３（２７ｍｇ、０．０４３ｍｍｏｌ）の溶液に、塩化オキサリル（０．０４３ｍＬ、０．０８６ｍｍｏｌ、ＤＣＭ中２Ｍ）およびＤＭＦ（１滴）を添加した。混合物を０℃で３０分間にわたって攪拌し、真空で濃縮して、対応する酸塩化物を黄色泡状物として得た。
【０３２３】
別個のバイアル中、化合物２（２３ｍｇ、０．０６４ｍｍｏｌ）を、４Ｍ  ＨＣｌ（１ｍＬ）で室温にて１時間にわたって処理し、真空で濃縮した。残留物をＴＨＦ（５ｍＬ）に溶解し、０℃に冷却し、ＴＨＦ（５ｍＬ）中の上記の酸塩化物の溶液およびＥｔ３Ｎ（０．０１８ｍＬ、０．１３ｍｍｏｌ）に添加した。混合物を真空で濃縮し、残留物を、逆相ＨＰＬＣ（方法Ｃ）によって精製して、生成物５４をオフホワイトの固体２８ｍｇ（７５％）として得た。LC-MS (プロトコールB): m/z 863.2 [M+H]+,
保持時間 = 1.16分
【０３２４】
ステップ６。（Ｓ）−８−（クロロメチル）−６−（５−（（Ｓ）−８−（クロロメチル）−１−メチル−４−（ホスホノオキシ）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−イル）−５−オキソペンタノイル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−４−イル（４−ニトロフェニル）カーボネート（５５）および（８Ｓ）−８−（クロロメチル）−６−｛５−［（８Ｓ）−８−（クロロメチル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−イル］−５−オキソペンタノイル｝−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−４−イル二水素ホスフェート（６１）の合成
０℃のＴＨＦ（５ｍＬ）中の５４（４０ｍｇ、０．０４６ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＣＭ（０．５ｍＬ）中のクロロギ酸４−ニトロフェニル（１９．４ｍｇ、０．０９２ｍｍｏｌ）の溶液およびＤＩＰＥＡ（０．０４９ｍＬ、０．２８ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を０℃で３０分間にわたって攪拌した。反応物を真空で濃縮し、残留物を、ヘプタン中アセトンの勾配（０〜６０％）を使用するシリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、中間体ＰＮＰカーボネートを白色固体４８ｍｇとして得た。これをＤＣＭ（２ｍＬ）に溶解し、ＴＦＡ（２ｍＬ）およびチオフェノール（０．０４７ｍＬ、０．４６ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で３時間にわたって攪拌した。反応物を真空で濃縮し、残留物を逆相ＨＰＬＣ（方法Ｃ）によって精製して、１７．８ｍｇ（４６％）の生成物５５を白色固体（１７．８ｍｇ、４６％）として、LC-MS (プロトコールB): m/z 848.2 [M+H]+,
保持時間 = 1.09分、および５．２ｍｇ（１７％）の生成物６１をガム状物として得た。LC-MS (プロトコールB): m/z 683.2 [M+H]+,
保持時間 = 0.93分
【０３２５】
ステップ７。（Ｓ）−８−（クロロメチル）−６−（５−（（Ｓ）−８−（クロロメチル）−１−メチル−４−（ホスホノオキシ）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−イル）−５−オキソペンタノイル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−４−イル（４−（（２３Ｓ，２６Ｓ）−１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２３−イソプロピル−２１，２４−ジオキソ−２６−（３−ウレイドプロピル）−３，６，９，１２，１５，１８−ヘキサオキサ−２２，２５−ジアザヘプタコサン−２７−アミド）ベンジル）エタン−１，２−ジイルビス（メチルカルバメート）（５６）の合成
ＤＭＦ（１ｍＬ）中の５５（１０．５ｍｇ、０．０１２ｍｍｏｌ）の溶液に、４０（１３．９ｍｇ、０．０１４ｍｍｏｌ）、ルチジン（０．００９ｍＬ、０．０７４ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（０．０１３ｍＬ、０．０７４ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（１．７ｍｇ、０．０１２ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で２０分間にわたって攪拌し、真空で濃縮し、残留物を逆相ＨＰＬＣ（方法Ｃ）によって精製して、生成物５６を白色泡状物１２ｍｇ（６０％）として得た。LC-MS (プロトコールB): m/z 1619.6 [M+2H]+,
保持時間 = 0.95分
【０３２６】
ペンタシクロ［４．２．０．０２，５．０３，８．０４，７］オクタン−１，４−ジイルビス［カルボニル（８Ｓ）−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６，４−ジイル］ジアセテート（６０）の調製
【０３２７】
【化６７】
0006782250.tif 000073
ステップ１：ペンタシクロ［４．２．０．０２，５．０３，８．０４，７］オクタン−１，４−ジイルビス［カルボニル（８Ｓ）−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６，４−ジイル］ジアセテート（６０）の合成：３の溶液（４７ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）を、４Ｍ  ＨＣｌ（ジオキサン中１．５ｍＬ）で室温にて９０分間にわたって処理し、真空で濃縮し、残留物をＤＣＭ（４ｍＬ）およびＴＥＡ（０．０２５ｍＬ）に溶解し、１，４−キュバンジカルボン酸の溶液（１１．５ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ、７２）に添加し、１ｍＬの無水ジクロロメタンに溶解し、続いて、ＨＡＴＵ（４７ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で１６時間にわたって攪拌した。混合物を、逆相ＨＰＬＣカラム：（ＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘカラムルナＣ１８  ５ｕ  １５０×２１．５ｍｍ、勾配２０％〜９０％ＡｃＣＮ／水（それぞれ０．０２％ＡｃＯＨを加えたもの）によって２０分間（これに加えて、０．０２％を加えた２０％ＡｃＣＮ／水）で最初の６分のイソクラティック時間）にわたって精製して、３．１ｍｇの６０（白色固体、７％）を生じさせた。LC-MS (プロトコールA) : m/z: 747.1 (M+H)+, 保持時間 = 2.39分
【０３２８】
（Ｓ）−８−（クロロメチル）−６−（５−（（Ｓ）−１−（クロロメチル）−５−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド）−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−３−イル）−５−オキソペンタノイル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−４−イル二水素ホスフェート（６２）の調製
【０３２９】
【化６８−１】
0006782250.tif 000074
【０３３０】
【化６８−２】
0006782250.tif 000075
ステップ１：（Ｓ）−４−（ベンジルオキシ）−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール（６３）の合成：乾燥ＤＣＭ（５ｍＬ）中の化合物１（３００ｍｇ、０．６７６ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、ＥｔＯＡｃ中４．０Ｍ  ＨＣｌ（５ｍＬ）を０℃で滴下添加した。添加後、混合物を室温で１．５時間にわたって攪拌した。混合物を真空で濃縮し、次いで、ＤＣＭと１回共蒸発させて、生成物６３（２６０ｍｇ、１００％）を得て、次のステップにおいてそのまま使用した。
【０３３１】
ステップ２：ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−５−（４−（ベンジルオキシ）−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−イル）−５−オキソペンタノエート（６３）の合成
ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−４−（ベンジルオキシ）−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−カルボキシレート（１）（５００ｍｇ、１．１３ｍｍｏｌ）を含有する丸底フラスコ内に、ＤＣＭ中２５％ＴＦＡ（１０ｍＬ）を添加した。反応物を３０分間にわたって攪拌した。反応物を濃縮し、３０分間にわたって真空下に置いて、脱ｂｏｃ残留物６３を得て、これを、５ｍＬのＤＣＭに溶かし、以下のステップにおいて使用した。
【０３３２】
５ｍＬの無水ＤＣＭ中の５−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−５−オキソペンタン酸（２１２ｍｇ、１．１３ｍｍｏｌ）を含有する、Ｎ２でパージした丸底フラスコ内に、塩化オキサリル（０．１０１ｍＬ、１．１３ｍｍｏｌ）を添加した。この溶液に、１滴のＤＭＦを添加し、系を３時間にわたって攪拌した。ガス形成が直ちに認められた。反応物を真空によって濃縮して、粗製の酸塩化物４４を得て、これをＤＣＭに溶かし、上述の脱保護した残留物６３およびＴＥＡ（０．１４４ｍＬ）を含有する丸底フラスコに添加した。反応物を室温で２時間にわたって攪拌した。粗反応混合物を真空によって濃縮し、２５ｍＬのＤＣＭに溶かし、分液漏斗に移した。有機層を、１Ｍ  ＨＣｌ（３×）、水（３×）およびブライン（２×）で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液を濃縮して、粗固体とした。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（勾配：ＤＣＭ中０％から１０％ＭｅＯＨ）によって精製して、６４を黄色固体（５２５ｍｇ、９０％）として得た。LC-MS (プロトコールA): m/z 514 [M+H]+, 保持時間 = 2.43分。
【０３３３】
ステップ３：ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−５−（（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）プロパンアミド）−１−（クロロメチル）−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−３−カルボキシレート（６６）の合成。
１５ｍＬのＤＣＭ中のｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−５−アミノ−１−（クロロメチル）−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−３−カルボキシレート（１０００ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ、６５）（ＷＯ２０１５０２３３５５において記述されている通りに調製したもの）を含有する丸底フラスコ内に、（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル（Ｓ）−（１−クロロ−１−オキソプロパン−２−イル）カルバメート（９９１ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ）、続いて、１．２ｍＬのヒューニッヒ塩基を添加した。反応物を１時間にわたって攪拌し、濃縮して、粗製ガラスとした。粗反応混合物をシリカゲルクロマトグラフィー（勾配：ＤＣＭ中０％から１０％ＭｅＯＨ）によって精製して、６６を白色固体（１５２９ｍｇ、８０％）として得た。LC-MS (プロトコールA): m/z 626 [M+H]+, 保持時間 = 2.32分。
【０３３４】
ステップ４：（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−３−（５−（（Ｓ）−４−（ベンジルオキシ）−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−イル）−５−オキソペンタノイル）−１−（クロロメチル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−５−イル）アミノ）−１−オキソプロパン−２−イル）カルバメート（６７）の合成。
１０ｍＬのＤＣＭ中のｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−５−（４−（ベンジルオキシ）−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−イル）−５−オキソペンタノエート（５００ｍｇ、０．９７３ｍｍｏｌ、６４）の攪拌溶液に、２．５ｍＬのＴＦＡを添加し、反応物を３時間にわたって攪拌した。完了したら、反応物を真空下で濃縮して、淡白色固体とした。次いで、固体を５ｍＬの無水ＤＣＭおよび塩化オキサリル（０．３２ｍＬ、０．９３ｍｍｏｌ）に溶かした。反応物を３時間にわたって攪拌し、真空下で濃縮して、白色固体とした。ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−５−（（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）プロパンアミド）−１−（クロロメチル）−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−３−カルボキシレート（０．９７３ｍｍｏｌ、６６）をＤＣＭ中２５％ＴＦＡ（５ｍＬ）に溶かし、３０分間にわたって攪拌した。反応物を真空下で濃縮し、再び５ｍＬのＤＣＭに溶かした。ヒューニッヒ塩基（０．３２ｍＬ）、続いて、先に記述した酸塩化物を添加した。反応物を２時間にわたって攪拌した。完了したら、反応混合物を真空下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（勾配：ＤＣＭ中０％から１０％ＭｅＯＨ）によって精製して、６７を白色固体（５１０ｍｇ、５４％）として得た。LC-MS (プロトコールA): m/z 965 [M+H]+, 保持時間 = 2.61分。
【０３３５】
ステップ５：ｔｅｒｔ−ブチル（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−３−（５−（（Ｓ）−４−（ベンジルオキシ）−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−イル）−５−オキソペンタノイル）−１−（クロロメチル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−５−イル）アミノ）−１−オキソプロパン−２−イル）アミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）カルバメート（６８）の合成。
５ｍＬのＤＣＭ中の（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−３−（５−（（Ｓ）−４−（ベンジルオキシ）−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−イル）−５−オキソペンタノイル）−１−（クロロメチル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−５−イル）アミノ）−１−オキソプロパン−２−イル）カルバメート（５００ｍｇ、０．５１８ｍｍｏｌ、６７）の攪拌溶液に、５ｍＬのジエチルアミンを添加した。反応物を３時間にわたって攪拌し、真空下で濃縮して、黄色固体とした。黄色の粗固体を、１０ｍＬの無水ＴＨＦ、続いて、２，５−ジオキソピロリジン−１−イル（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−バリネート（１６３ｍｇ、０．５１８ｍｍｏｌ）、続いて、ＴＥＡ（０．２ｍＬ）に溶かした。反応物をセ氏７０度で４時間にわたって攪拌した。完了したら、反応混合物を真空下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（勾配：ＤＣＭ中０％から１０％ＭｅＯＨ）によって精製して、６８を白色固体（１９８ｍｇ、４０％）として得た。LC-MS (プロトコールA): m/z 942 [M+H]+, 保持時間 = 2.49分。
【０３３６】
ステップ６：ｔｅｒｔ−ブチル（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（クロロメチル）−３−（５−（（Ｓ）−８−（クロロメチル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−イル）−５−オキソペンタノイル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−５−イル）アミノ）−１−オキソプロパン−２−イル）アミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）カルバメート（６９）の合成。
窒素下、７ｍＬのＴＨＦ中のｔｅｒｔ−ブチル（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−３−（５−（（Ｓ）−４−（ベンジルオキシ）−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−イル）−５−オキソペンタノイル）−１−（クロロメチル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−５−イル）アミノ）−１−オキソプロパン−２−イル）アミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）カルバメート（３２５ｍｇ、０．３４５ｍｍｏｌ、６８）の攪拌溶液を、氷浴を使用して０℃に冷却した。次いで、パラジウム１０ｗｔ．％活性炭（１０ｍｇ）を添加し、続いて、０．５ｍＬの水中２５％ギ酸アンモニウムをゆっくりと滴下添加した。反応物を０℃で１時間にわたって攪拌させた。完了したら、反応混合物をセライトのパッドに通して濾過し、濾液を真空下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（勾配：ＤＣＭ中０％から１０％ＭｅＯＨ）によって精製して、６９を黄色固体（１８１ｍｇ、６１％）として得た。LC-MS (プロトコールA): m/z 852 [M+H]+, 保持時間 = 2.18分。
【０３３７】
ステップ７：ｔｅｒｔ−ブチル（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−３−（５−（（Ｓ）−４−（（ビス（ベンジルオキシ）ホスホリル）オキシ）−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−イル）−５−オキソペンタノイル）−１−（クロロメチル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−５−イル）アミノ）−１−オキソプロパン−２−イル）アミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）カルバメート（７０）の合成。
１０ｍＬのＴＨＦおよび１０ｍＬのＡｃＣＮ中のｔｅｒｔ−ブチル（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（クロロメチル）−３−（５−（（Ｓ）−８−（クロロメチル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−イル）−５−オキソペンタノイル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−５−イル）アミノ）−１−オキソプロパン−２−イル）アミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）カルバメート（１６５ｍｇ、０．１９３ｍｍｏｌ、６９）の攪拌溶液に、四塩化炭素（２．０４ｍＬ、２１．０ｍｍｏｌ）、続いて、ヒューニッヒ塩基（Ｈｕｅｎｉｇ’ｓ  ｂａｓｅ）（１．１２ｍＬ、６．４５ｍｍｏｌ）、亜リン酸ジベンジル（３２０ｍｇ、１．１６ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（触媒）を添加した。反応物を室温で２０分間にわたって攪拌させた。反応物を濃縮して、粗製ガラスとした。粗反応混合物をシリカゲルクロマトグラフィー（勾配：ＤＣＭ中０％から１０％ＭｅＯＨ）によって精製して、７０を白色ガラス（５１ｍｇ、２４％）として得た。LC-MS (プロトコールA): m/z 1113 [M-H]-,
保持時間 = 2.50分。
【０３３８】
ステップ８：（Ｓ）−８−（クロロメチル）−６−（５−（（Ｓ）−１−（クロロメチル）−５−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド）−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−３−イル）−５−オキソペンタノイル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−４−イル二水素ホスフェート（６２）の合成。
攪拌子を備えた丸底フラスコ内、ｔｅｒｔ−ブチル（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−３−（５−（（Ｓ）−４−（（ビス（ベンジルオキシ）ホスホリル）オキシ）−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−イル）−５−オキソペンタノイル）−１−（クロロメチル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−５−イル）アミノ）−１−オキソプロパン−２−イル）アミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）カルバメート（４０ｍｇ  ０．０３６ｍｍｏｌ、７０）を５ｍＬのＤＣＭに溶かした。ＴＦＡ（２．５ｍＬ）および２滴のチオフェノールを添加し、反応物を６時間にわたって攪拌した。粗材料を真空下で濃縮した。粗残留物を３ｍＬのＤＭＦに溶かし、ペンタフルオロフェニル６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノエート（７１）（１３．６ｍｇ、０．０３６ｍｍｏｌ）、続いて、ＴＥＡ（０．０３６ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を１時間にわたって攪拌した。反応物を真空下で濃縮し、ＨＰＬＣ方法によって精製して、６２を白色固体（２５ｍｇ、６８％）として得た。保持時間 = 7.115分。 LC-MS (プロトコールA): m/z 1025 [M+H]+, 保持時間 = 2.01分
【０３３９】
Ｎ２−アセチル−Ｎ６−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−リシル−Ｌ−バリル−Ｎ５−カルバモイル−Ｎ−｛４−［（｛メチル［２−（メチルアミノ）エチル］カルバモイル｝オキシ）メチル］フェニル｝−Ｌ−オルニチンアミド（７４）の調製：
【０３４０】
【化６９】
0006782250.tif 000076
ステップ１：Ｎ２−アセチル−Ｎ６−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−リシル−Ｌ−バリル−Ｎ５−カルバモイル−Ｎ−［４−（４，７，１０，１０−テトラメチル−３，８−ジオキソ−２，９−ジオキサ−４，７−ジアザウンデカ−１−イル）フェニル］−Ｌ−オルニチンアミド（７２Ａ）の合成：ＤＭＦ（２０ｍＬ）中のＮ２−アセチル−Ｎ６−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−リシル−Ｌ−バリル−Ｎ５−カルバモイル−Ｎ−［４−（｛［（４−ニトロフェノキシ）カルボニル］オキシ｝メチル）フェニル］−Ｌ−オルニチンアミド（７２）（ＵＳ９１６９２６４において記述されている通りに調製したもの）（１．００ｇ、１．０７ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、３８［Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９２、３３、５５９〜５６７において記述されている通りに調製したもの］（２４１ｍｇ、１．２８ｍｍｏｌ）を、Ｎ２バルーン下、０℃で添加した。得られた混合物を０℃で３０分間にわたって攪拌した。混合物をＴＢＭＥ（２００ｍＬ）に注ぎ入れた。得られた白色懸濁液を濾過し、ＴＢＭＥ（２００ｍＬ）で洗浄して、表題化合物７２Ａ（７５０ｍｇ、７１．３％）を黄色固体として生じさせた。
【０３４１】
ステップ２：Ｎ２−アセチル−Ｎ６−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−リシル−Ｌ−バリル−Ｎ５−カルバモイル−Ｎ−｛４−［（｛メチル［２−（メチルアミノ）エチル］カルバモイル｝オキシ）メチル］フェニル｝−Ｌ−オルニチンアミド（７４）の合成：ＤＣＭ（６０．０ｍＬ）中の化合物７２Ａ（１０．００ｇ、１０．１ｍｍｏｌ）の攪拌懸濁液に、ＴＦＡ（５０．０ｍＬ）を０℃で添加した。得られた溶液を０℃で４０分間にわたって攪拌した。得られた懸濁液を濾過した。濾過ケーキをＴＢＭＥ（２００ｍＬ）で洗浄し、真空で濃縮乾固して、粗生成物を生じさせた。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘシナジーマックス−ＲＰ  ２５０×５０ｍｍ、１０ｕｍ、勾配：１７．５分にわたって各相において０．１％ＴＦＡを加えた水中２５％から５５％アセトニトリル、および０．１％ＴＦＡを含有する水中１００％アセトニトリルで８分間にわたって保持、流速：８０ｍＬ／分）によって精製して、表題化合物７４（５．２ｇ、５１．３％収率）を白色固体として得た。
1H NMR
(400MHz, DMSO-d6) δ 10.03 (s,
1H), 8.47 (br. s., 2H), 8.10 (d, J=7.0 Hz, 1H), 8.03 (d, J=7.8 Hz, 1H), 7.89
(d, J=7.5 Hz, 2H), 7.69 (d, J=7.3 Hz, 3H), 7.60 (d, J=8.5 Hz, 2H), 7.45 - 7.38
(m, 2H), 7.36 - 7.29 (m, 4H), 7.26 (t, J=5.4 Hz, 1H), 6.02 (br. s., 1H), 5.01
(s, 2H), 4.43 - 4.33 (m, 1H), 4.32 - 4.16 (m, 5H), 3.49 (t, J=6.0 Hz, 2H),
3.06-2.92 (m., 6H) 2.86 (s, 3H), 2.62 - 2.53 (m, 3H), 1.99 (dd, J=6.5, 13.3 Hz,
1H), 1.85 (s, 3H), 1.76 -1.27 (m, 10H), 0.83 (d, J=6.8 Hz, 3H), 0.86 (d, J=6.8
Hz, 3H)
【０３４２】
ＬＰ：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−６−（（（Ｓ）−６−（５−（（Ｓ）−４−（（（２−（（（（４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−アセトアミド−６−アミノヘキサンアミド）−３−メチルブタンアミド）−５−ウレイドペンタンアミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エチル）（メチル）カルバモイル）オキシ）−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−イル）−５−オキソペンタノイル）−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−４−イル）オキシ）−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−カルボン酸（７６）の調製
【０３４３】
【化７０】
0006782250.tif 000077
ステップ１：（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（（（Ｓ）−８−（クロロメチル）−６−（５−（（Ｓ）−８−（クロロメチル）−１−メチル−４−（（（４−ニトロフェノキシ）カルボニル）オキシ）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−イル）−５−オキソペンタノイル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−４−イル）オキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（７３）の合成
０℃のＴＨＦ（５ｍＬ）中の４６（１２０ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＣＭ（０．５ｍＬ）中のクロロギ酸４−ニトロフェニル（５５ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）の溶液、続いて、Ｅｔ３Ｎ（１０９ｕＬ、０．７８ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を０℃で３０分間にわたって攪拌した。混合物を真空で濃縮し、残留物を逆相ＨＰＬＣ（方法Ｃ）によって精製して、生成物７３を白色固体１０９ｍｇ（７７％）として得た。LC-MS (プロトコールB ): m/z 1086.5 (m+H), 保持時間 =  1.24分
【０３４４】
ステップ２：（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（（（Ｓ）−６−（５−（（Ｓ）−４−（（（２−（（（（４−（（９Ｓ，１２Ｓ，１５Ｓ）−９−アセトアミド−１−（９Ｈ−フルオレン−９−イル）−１２−イソプロピル−３，１０，１３−トリオキソ−１５−（３−ウレイドプロピル）−２−オキサ−４，１１，１４−トリアザヘキサデカン−１６−アミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エチル）（メチル）カルバモイル）オキシ）−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−イル）−５−オキソペンタノイル）−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−４−イル）オキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（７５）の合成
化合物７３（５０ｍｇ、０．０４６ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解し、これに、４−（（９Ｓ，１２Ｓ，１５Ｓ）−９−アセトアミド−１−（９Ｈ−フルオレン−９−イル）−１２−イソプロピル−３，１０，１３−トリオキソ−１５−（３−ウレイドプロピル）−２−オキサ−４，１１，１４−トリアザヘキサデカン−１６−アミド）ベンジルメチル（２−（メチルアミノ）エチル）カルバメート（７４、５５ｍｇ、０．０５５ｍｍｏｌ）、ルチジン（０．０２１ｍＬ、０．１８ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（０．０３２ｍＬ、０．１８ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（６ｍｇ、０．０４６ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で１時間にわたって攪拌した。混合物を真空で濃縮し、残留物を逆相ＨＰＬＣ（方法Ｃ）によって精製して、生成物７５をフリーズドライ後に白色粉末７２ｍｇ（８５％）として得た。LC-MS (プロトコールB ): m/z 1833.3 (M+H)保持時間=1.17分 1H
NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 10.02
(br. s., 1H), 8.22 (s, 1H), 8.19 - 8.13 (m, 1H), 8.10 (d, J=6.6 Hz, 1H), 8.02
(d, J=7.8 Hz, 1H), 7.89 (d, J=7.4 Hz, 2H), 7.69 (d, J=7.0 Hz, 3H), 7.57 (d,
J=7.0 Hz, 2H), 7.54 - 7.38 (m, 5H), 7.37 - 7.30 (m, 3H), 7.26 (br. s., 3H),
5.99 (br. s., 1H), 5.74 (d, J=7.0 Hz, 1H), 5.64 - 5.49 (m, 1H), 5.20 (t, J=8.8
Hz, 1H), 5.13 (t, J=9.6 Hz, 1H), 5.04 (br. s., 1H), 5.00 (br. s., 1H), 4.81 -
4.70 (m, 1H), 4.39 (br.s., 2H), 4.32 - 4.11 (m, 14H), 3.95 - 3.80 (m, 3H), 3.62
(br. s., 1H), 3.56 (br. s., 1H), 3.48 (br. s., 2H), 3.12 (br. s., 1H), 3.03
(br. s., 2H), 3.00 - 2.91(m, 6H), 2.88 (br. s., 3H), 2.82 - 2.67 (m, 4H), 2.67
- 2.55 (m, 7H), 2.10 (s, 1H), 2.08 - 1.91 (m, 14H), 1.85 (s, 3H), 1.79 - 1.64
(m, 2H), 1.61 (br. s.,2H), 1.54 - 1.32 (m, 5H), 1.31 - 1.23 (m, 2H), 1.23 -
1.12 (m, 2H), 0.84 (d, J=6.6 Hz, 3H), 0.87 (d, J=6.6 Hz, 3H).
【０３４５】
ステップ３。ＬＰ：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−６−（（（Ｓ）−６−（５−（（Ｓ）−４−（（（２−（（（（４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−アセトアミド−６−アミノヘキサンアミド）−３−メチルブタンアミド）−５−ウレイドペンタンアミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エチル）（メチル）カルバモイル）オキシ）−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−イル）−５−オキソペンタノイル）−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−４−イル）オキシ）−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−カルボン酸（７６）の調製
化合物７５（４４ｍｇ、０．０２４ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１ｍＬ）およびＴＨＦ（５ｍＬ）およびＭｅＯＨ（１ｍＬ）に溶解し、０℃に冷却し、ＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏ（１０ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を０℃で６０分間にわたって攪拌した。ＨＯＡｃ（３０ｕＬ）を添加することによって混合物を酸性化し、真空で濃縮した。残留物を逆相ＨＰＬＣ（方法Ｃ）によって精製して、２５．０ｍｇ（６６％）の生成物７６を白色粉末として得た。
LC-MS (プロトコールB): m/z 1471.1 (M+2H)+ 保持時間=0.75分  1H
NMR (500MHz, DMSO-d6) δ = 8.09
(br. s., 2H), 7.97 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.68 (br. s., 2H), 7.48 (d, J=7.6 Hz,
1H), 7.44 - 7.39 (m, 1H), 7.39 -7.31 (m, 2H), 7.22 - 7.12 (m, 1H), 5.97 (br.
s., 1H), 5.45 - 5.32 (m, 2H), 5.18 (br. s., 1H), 5.06 (d, J=5.6 Hz, 1H), 4.98
(br. s., 1H), 4.92 (br. s., 1H), 4.31 (br. s., 1H), 4.26 - 4.05 (m, 8H), 3.82
(d, J=10.0 Hz, 1H), 3.76 (d, J=10.5 Hz, 1H), 3.70 (d, J=7.6 Hz, 1H), 3.66 -
3.57 (m, 1H), 3.57 - 3.44 (m, 5H), 3.43 - 3.36 (m, 2H), 3.36 - 3.28 (m, 3H),
3.12 - 3.07 (m, 2H), 3.05 (br. s., 1H), 3.00 - 2.91 (m, 2H), 2.88 (d, J=9.8 Hz,
3H), 2.80 (s, 2H), 2.72 - 2.59 (m, 4H), 2.59 - 2.37 (m, 22H), 2.02 (s, 2H),
1.97 - 1.83 (m, 3H), 1.78 (s, 3H), 1.69 (td, J=3.2, 6.4 Hz, 2H), 1.66 - 1.48
(m, 3H), 1.47 - 1.32 (m, 4H), 1.32 - 1.14 (m, 4H), 0.76 (d, J=6.4 Hz, 3H),
0.79(d, J=5.9 Hz, 3H).
【０３４６】
４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−アセトアミド−６−アミノヘキサンアミド）−３−メチルブタンアミド）−５−ウレイドペンタンアミド）ベンジル（（Ｓ）−８−（クロロメチル）−６−（５−（（Ｓ）−８−（クロロメチル）−１−メチル−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリヒドロキシ−６−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−イル）−５−オキソペンタノイル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−４−イル）エタン−１，２−ジイルビス（メチルカルバメート）（７７）の調製
【０３４７】
【化７１】
0006782250.tif 000078
ステップ１。（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（アセトキシメチル）−６−（（（Ｓ）−６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−４−イル）オキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（７８）の合成
化合物２（３００ｍｇ、０．８５ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（３０ｍＬ）に溶解し、４ÅのＭＳ（１．５ｇ、粉末状、５マイクロ未満、活性化）を添加し、混合物を室温で３０分間にわたって攪拌した。反応混合物に、アルファ−Ｄ−ガラクトピラノース（ｇａｌａｃｔｏｐａｎｏｓｅ），２，３，４，６−テトラアセテート１−２，２，２−トリクロロエタンイミデート（４４９ｍｇ、９３％、０．８５ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を−１５℃に冷却し、ＤＣＭ（５ｍＬ）中のＢＦ３・Ｅｔ２Ｏ（０．０５２ｍＬ、０．４２ｍｍｏｌ）の溶液をゆっくりと添加し、反応混合物を−１５℃〜−２０℃で１時間にわたって攪拌した。反応混合物をセライトのパッドに通して濾過除去し、アセトンで洗浄し、濃縮して、残留物を得た。残留物をＭｅＯＨで処理し、真空で濃縮して、５８０ｍｇ（１００％）の生成物７８をオフホワイトの固体として得た。
LC-MS (プロトコールB) :
m/z: 706.4 (M+Na) 保持時間 = 1.09分
【０３４８】
ステップ２。（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（アセトキシメチル）−６−（（（Ｓ）−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−４−イル）オキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（７９）の合成
化合物７８（５８０ｍｇ、０．８５ｍｍｏｌ）を、ジオキサン中４Ｍ  ＨＣｌの溶液（５ｍＬ）で３０分間にわたって処理し、混合物を真空で濃縮して、粗生成物７９を緑色固体として得て、これを、さらに精製することなく使用した。
LC-MS (プロトコールB ):
m/z 584.3 (M+H), 保持時間=0.94分. 1H
NMR (400MHz, メタノール-d4) δ = 7.53 (s, 1H), 7.22 (s, 1H), 5.57 - 5.46 (m, 3H), 5.34 (dd, J=2.0,
9.0 Hz, 1H), 4.53 (d, J=6.6 Hz, 2H), 4.42 (t, J=6.4 Hz, 1H), 4.25 (dt, J=6.4,
11.2 Hz, 2H), 4.18 - 4.01 (m, 5H), 3.74 (dd, J=8.6, 11.7 Hz, 2H), 3.69 (s,
14H), 2.68 - 2.58 (m, 4H), 2.23 (s, 3H), 2.19 - 2.14 (m, 2H), 2.14 - 2.07 (m,
7H), 2.07 - 1.94 (m, 6H), 1.33 (s, 3H).
【０３４９】
ステップ３。（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（アセトキシメチル）−６−（（（Ｓ）−６−（５−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−５−オキソペンタノイル）−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−４−イル）オキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（８０）の合成
ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の５−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−５−オキソペンタン酸（４４、１９１ｍｇ、１．０２ｍｍｏｌ）の溶液を０℃に冷却し、塩化オキサリル（１．０２ｍＬ、ＤＣＭ中２Ｍ）、続いて、１滴のＤＭＦを添加した。混合物を０℃で３０分間にわたって攪拌し、真空で濃縮して、対応する酸塩化物をワックスとして得た。これをＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解し、ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の７９（５２６ｍｇ、０．８５ｍｍｏｌ）の溶液、続いて、Ｅｔ３Ｎ（０．３５４ｍＬ、２．５４ｍｍｏｌ）に添加した。混合物を０℃で３０分間にわたって攪拌した。混合物を濃縮し、残留物を、ヘプタン中０％から７０％酢酸エチルの勾配を使用するシリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、４４８ｍｇ（７０％）の生成物８０をオフホワイトの固体として得た。
LC-MS (プロトコールB):
m/z 754.4 (M+H), 保持時間 = 1.06分
【０３５０】
ステップ４。（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（アセトキシメチル）−６−（（（Ｓ）−８−（クロロメチル）−６−（５−（（Ｓ）−８−（クロロメチル）−４−ヒドロキシ−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−イル）−５−オキソペンタノイル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−４−イル）オキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（８４）の合成
化合物８０の溶液（４４８ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（３ｍＬ）およびＴＦＡ（２ｍＬ）で室温にて１時間にわたって処理し、混合物を真空で濃縮して、遊離酸８１を緑色固体２１２ｍｇとして得た。酸８１（１６７ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（５ｍＬ）に溶解し、溶液を０℃に冷却し、塩化オキサリル（０．２４ｍＬ、ＤＣＭ中２Ｍ）、続いて、ＤＭＦ（１滴）を添加した。混合物を０℃で３０分間にわたって攪拌し、真空で濃縮して、対応する酸塩化物８２を得て、これを、さらに精製することなく次のステップにおいて使用した。
【０３５１】
ジオキサン中４Ｍ  ＨＣｌ（２ｍＬ）中の化合物２（１０２ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で１時間にわたって攪拌し、混合物を真空で濃縮して、化合物８３を緑色固体として得て、これをＴＨＦ（５ｍＬ）に溶解し、０℃に冷却した。ＴＥＡ（０．２ｍＬ、１．４４ｍｍｏｌ）、続いて、ＴＨＦ（５ｍＬ）中の粗製の酸塩化物８２の溶液を添加し、混合物を０℃で２０分間にわたって攪拌した。混合物を濃縮し、残留物を、ヘプタン中０％から７０％アセトンの勾配を使用するシリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、１９６ｍｇ（８８％）の生成物８４を黄色固体として得た。
LC-MS (プロトコールB ):
m/z 933.5 (M+H), 保持時間=1.05分. 1H
NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 8.26
(s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.39 (s, 1H), 5.51 (d, J=7.8 Hz, 1H), 5.42
- 5.26 (m, 3H), 4.59 - 4.46 (m, 1H), 4.33 - 4.23 (m, 2H), 4.23 - 4.15 (m, 4H),
4.15 - 4.07 (m, 2H), 4.04 (s, 4H), 3.87 (dd, J=10.5, 18.0 Hz, 2H), 3.67 (t,
J=9.8 Hz, 1H), 3.57 (t, J=10.1 Hz, 1H), 3.33 (s, 1H), 3.31 (s, 1H), 2.83 - 2.67
(m, 2H), 2.60 (dd, J=6.4, 16.2 Hz, 3H), 2.19 (s, 3H), 2.15 - 2.09 (m, 4H), 2.07
(s, 4H), 1.97 (s, 6H).
【０３５２】
ステップ５：（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（アセトキシメチル）−６−（（（Ｓ）−８−（クロロメチル）−６−（５−（（Ｓ）−８−（クロロメチル）−１−メチル−４−（（（４−ニトロフェノキシ）カルボニル）オキシ）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−イル）−５−オキソペンタノイル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−４−イル）オキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（８５）の合成
０℃のＴＨＦ（５ｍＬ）中の８４（１００ｍｇ、０．１０７ｍｍｏｌ）の溶液に、クロロギ酸４−ニトロフェニル（４５ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）、続いて、Ｅｔ３Ｎ（０．０６０ｍＬ、０．４３ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を０℃で６０分間にわたって攪拌した。混合物を真空で濃縮して、粗生成物を黄色泡状物１４２ｍｇとして得て、これを、逆相ＨＰＬＣ（方法Ｃ）によって精製して、５０ｍｇ（４３％）の生成物８５をオフホワイトの固体として得た。LC-MS (プロトコールB): m/z 1098.5 (M+H), 保持時間 = 1.05分
【０３５３】
ステップ６：（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｒ）−２−（（（Ｓ）−６−（５−（（Ｓ）−４−（（（２−（（（（４−（（９Ｓ，１２Ｓ，１５Ｓ）−９−アセトアミド−１−（９Ｈ−フルオレン−９−イル）−１２−イソプロピル−３，１０，１３−トリオキソ−１５−（３−ウレイドプロピル）−２−オキサ−４，１１，１４−トリアザヘキサデカン−１６−アミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エチル）（メチル）カルバモイル）オキシ）−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−イル）−５−オキソペンタノイル）−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−４−イル）オキシ）−６−（アセトキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（８６）の合成：ＤＭＦ（２ｍＬ）中の８５（５０ｍｇ、０．０４５ｍｍｏｌ）の溶液に、４−（（９Ｓ，１２Ｓ，１５Ｓ）−９−アセトアミド−１−（９Ｈ−フルオレン−９−イル）−１２−イソプロピル−３，１０，１３−トリオキソ−１５−（３−ウレイドプロピル）−２−オキサ−４，１１，１４−トリアザヘキサデカン−１６−アミド）ベンジルメチル（２−（メチルアミノ）エチル）カルバメート（７４４５ｍｇ、０．０４５ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．０２４ｍＬ、０．１３６ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で６０分間にわたって攪拌し、逆相ＨＰＬＣ（方法Ｃ）を使用して精製して、２６ｍｇ（３１％）の生成物８６を白色固体として得た：LC-MS (プロトコールB ): m/z 1847.1 (M+H), 保持時間=1.06分  1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 10.01 (br. s., 1H), 8.25 (s, 1H), 8.20 - 8.12 (m, 1H), 8.09 (d,
J=6.6 Hz, 1H), 8.02 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.89 (d, J=7.8 Hz, 2H), 7.69 (d, J=7.0
Hz, 3H), 7.57 (d, J=7.4 Hz, 2H), 7.47 - 7.37 (m, 4H), 7.37 - 7.30 (m, 3H), 7.26
(br. s., 3H), 5.98 (br. s., 1H), 5.50 (d, J=7.0 Hz, 1H), 5.46 - 5.27 (m, 5H),
5.02 (d, J=19.1 Hz, 2H), 4.52 (br. s., 1H), 4.39 (br. s., 1H), 4.32 - 4.14 (m,
13H), 4.14 - 4.03 (m, 1H), 3.95 - 3.81 (m, 2H), 3.75 - 3.59 (m, 6H), 3.56 (br.
s., 2H), 3.48 (br. s., 2H), 3.12 (br. s., 1H), 3.03 (br. s., 2H), 2.94 (s, 3H),
2.97 (s, 2H), 2.87 (br. s., 2H), 2.83 - 2.67 (m, 3H), 2.66 - 2.54 (m, 7H), 2.19
(s, 4H), 2.12 (s, 3H), 2.09 - 2.03 (m, 4H), 2.03 - 1.90 (m, 7H), 1.85 (s, 3H),
1.78 (t, J=6.4 Hz, 1H), 1.68 (d, J=7.8 Hz, 1H), 1.61 (br. s., 2H), 1.53 - 1.33
(m, 5H), 1.32 - 1.18 (m, 2H), 0.84 (d, J=7.0 Hz, 3H), 0.87 (d, J=6.6 Hz, 3H).
【０３５４】
ステップ７。ＬＰ：４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−アセトアミド−６−アミノヘキサンアミド）−３−メチルブタンアミド）−５−ウレイドペンタンアミド）ベンジル（（Ｓ）−８−（クロロメチル）−６−（５−（（Ｓ）−８−（クロロメチル）−１−メチル−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリヒドロキシ−６−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−イル）−５−オキソペンタノイル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−４−イル）エタン−１，２−ジイルビス（メチルカルバメート）（７７）の合成：０℃のＴＨＦ（２ｍＬ）およびＭｅＯＨ（２ｍＬ）中の８６（２４ｍｇ、０．０１３ｍｍｏｌ）の溶液に、水中のＬｉＯＨ（１Ｍ、０．２６ｍＬ、０．２６ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、混合物を０℃から室温で２時間にわたって攪拌した。酢酸（２０ｕＬ）を添加し、混合物を濃縮し、残留物を逆相ＨＰＬＣ（方法Ｃ）によって精製して、１４ｍｇ（６９％）の生成物７７を白色泡状物として得た：LC-MS (プロトコールB): m/z 1456.9 (M+2H)+,
保持時間=0.75分 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ = 10.07 - 9.96 (m, 1H), 8.29 - 8.18 (m, 1H), 8.18 - 8.09 (m, 2H),
8.06 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.73 (d, J=8.6 Hz, 1H), 7.66 (br. s., 3H), 7.56 (d,
J=7.8 Hz, 2H), 7.50 (d, J=9.3 Hz, 1H), 7.47 - 7.39 (m, 2H), 7.35 (d, J=7.6 Hz,
1H), 7.32 - 7.25 (m, 2H), 6.04 (br. s., 1H), 5.11 (d, J=6.4 Hz, 1H), 5.05 (br.
s., 1H), 5.01 (br. s., 1H), 4.40 (br. s., 1H), 4.36 - 4.16 (m, 10H), 4.10 (d,
J=11.7 Hz, 3H), 4.00 (br. s., 3H), 3.96 - 3.80 (m, 10H), 3.77 (br. s., 4H),
3.73 - 3.55 (m, 11H), 3.52 (br. s., 1H), 3.48 (br. s., 3H), 3.12 (br. s., 1H),
3.05 (br. s., 2H), 3.01 - 2.91 (m, 4H), 2.88 (br. s., 2H), 2.86 - 2.72 (m, 4H),
2.72 - 2.53 (m, 13H), 2.45 (t, J=7.5 Hz, 1H), 2.06 - 1.92 (m, 3H), 1.86 (s,
4H), 1.71 - 1.56 (m, 3H), 1.56 - 1.42 (m, 4H), 1.42 - 1.23 (m, 4H), 0.85 (dd,
J=6.6, 14.7 Hz, 6H).
【０３５５】
４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−メチルブタンアミド）−５−ウレイドペンタンアミド）ベンジルメチル（２−（メチルアミノ）エチル）カルバメート（９６）の調製
【０３５６】
【化７２】
0006782250.tif 000079
ステップ１。２，５−ジオキソピロリジン−１−イル（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−Ｌ−バリネート（８８）の合成。
ＴＨＦ（１８００ｍＬ）中の化合物８７（１５０ｇ、０．４４２ｍｏｌ）およびＨＯＳｕ（５６ｇ、０．４８７ｍｏｌ）の溶液に、ＤＣＣ（１００ｇ、０．４８７ｍｏｌ）を、氷浴下、小分けにして添加した。添加後、反応物を室温で終夜攪拌した。反応物を−５℃に冷却し、濾過し、冷ＴＨＦで洗浄し、濾液を真空で濃縮し、残留物をＭＴＢＥから再結晶させて、化合物８８を白色固体１７５ｇ（９１％）として得た。
【０３５７】
ステップ２。（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−メチルブタンアミド）−５−ウレイドペンタン酸（９０）の合成
水（７５０ｍＬ）中の化合物８９（４０．１４ｇ、０．２２９ｍｏｌ）およびＮａＨＣＯ３（１９．２３ｇ、０．２２９ｍｏｌ）の溶液に、ＤＭＥ（７５０ｍＬ）中の化合物８８（１００ｇ、０．２２９ｍｏｌ）の溶液を、氷浴下、滴下添加した。添加中に、白色懸濁液が形成された。追加のＴＨＦ（４００ｍＬ）を添加して、溶解度を改善した。添加後、溶液を２５〜３０℃で２日間にわたって攪拌した。反応物に、飽和Ｋ２ＣＯ３水溶液を添加して、ｐＨを８〜９に調整し、次いで、ＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ×５）で抽出した。クエン酸水溶液で水性層のｐＨを３〜４に調整した。ゼラチン状材料が形成され、濾過した。湿ったケーキをＴＨＦ（１．５Ｌ）に溶解した。メタノールを、固体が溶解するまで添加した。溶液を真空で濃縮して、溶媒の３０％を除去し、次いで、室温に冷却した。ＴＢＭＥ（２Ｌ）を溶液に添加し、混合物を室温で終夜攪拌した。混合物を濾過し、湿ったケーキを真空で乾燥させて、化合物９０を白色固体６０ｇ（５３％）として得た。
【０３５８】
ステップ３。（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（（４−（ヒドロキシメチル）フェニル）アミノ）−１−オキソ−５−ウレイドペンタン−２−イル）アミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）カルバメート（９２）の合成
ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（１Ｌ／５００ｍＬ）中の化合物９０（７０ｇ、０．１４１ｍｏｌ）の懸濁液に、化合物９１（３４．７ｇ、０．２８２ｍｏｌ）、続いて、ＥＥＤＱ（６９．７ｇ、０．２８２ｍｏｌ）を添加した。混合物を４０℃で終夜攪拌した。反応混合物を濾過し、湿ったケーキをＥｔＯＡｃ／ＴＢＭＥ（５００ｍＬ／２００ｍＬ）に懸濁し、３０分間にわたって攪拌し、次いで、濾過した。固体をＥｔＯＡｃ／ＴＢＭＥで洗浄して、化合物９２をオフホワイトの固体６５ｇ（７７％）として提供した。1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 9.98 (s, 1H), 8.11 (d, 1H), 7.87 (d,
2H), 7.77 (m, 2H), 7.52 (d, 2H), 7.39 (m, 3H), 7.30 (m, 2H), 7.21 (d, 2H), 5.97
(m, 1H), 5.41 (s, 2H), 5.10 (m, 1H), 4.42 (m, 3H), 4.22 (m, 3H), 3.90 (m, 1H),
2.93 (m, 2H), 1.98 (m, 1H), 1.50 (m, 2H), 1.30 (m, 2H), 0.84 (m, 6H).
【０３５９】
ステップ４。（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル（（Ｓ）−３−メチル−１−（（（Ｓ）−１−（（４−（（（（４−ニトロフェノキシ）カルボニル）オキシ）メチル）フェニル）アミノ）−１−オキソ−５−ウレイドペンタン−２−イル）アミノ）−１−オキソブタン−２−イル）カルバメート（９４）の合成
無水ＤＭＦ（１２０ｍＬ）中の（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（（４−（ヒドロキシメチル）フェニル）アミノ）−１−オキソ−５−ウレイドペンタン−２−イル）アミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）カルバメート（３．７４ｇ、８．３１ｍｍｏｌ、９２）の溶液に、ビス（４−ニトロフェニル）カーボネート（３．７８ｇ、１２．４ｍｍｏｌ、９３）を小分けにして、続いて、ＤＩＰＥＡ（１．２１ｇ、９．３２ｍｍｏｌ）を０℃で滴下添加した。反応混合物を室温で終夜攪拌した。ＴＬＣ（ＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２＝１：１０）は、反応が完了したことを示した。反応混合物を、攪拌しながらＭＴＢＥ（２．５Ｌ）に滴下添加した。粗生成物を濾過によって収集した。濾過ケーキ（ｆｉｌｔｒａｔｅ  ｃａｋｅ）をＭＴＢＥで洗浄し、高真空下で乾燥させて、化合物９４を褐色固体２．７ｇ（５７％）として生じさせた。
【０３６０】
ステップ５。４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−メチルブタンアミド）−５−ウレイドペンタンアミド）ベンジルｔｅｒｔ−ブチルエタン−１，２−ジイルビス（メチルカルバメート）（９５）の合成
ＤＭＡ（１５ｍＬ）中の化合物９４（１．７ｇ、２．２１７ｍｍｏｌ）の溶液に、ＨＯＡＴ（３３２ｍｇ、２．４４ｍｍｏｌ）、２，６−ルチジン（９５０ｍｇ、８．８７ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。混合物を０℃で５分間にわたって攪拌した。次いで、ｔｅｒｔ−ブチルメチル（２−（メチルアミノ）エチル）カルバメート（３８、４５９ｍｇ、２．４４ｍｍｏｌ）を混合物に０℃で、続いて、ＤＩＰＥＡ（８６０ｍｇ、６．６５ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。混合物を室温で１時間にわたって攪拌し、ＴＢＭＥ（８００ｍＬ）に注ぎ入れ、３０分間にわたって攪拌し、濾過し、濾過ケーキを真空で濃縮して、粗生成物（１．０６ｇ）を黄色固体として得た。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（勾配：ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝１００：１〜１０：１）によって精製して、生成物９５を白色固体６００ｍｇ（３３％）として得た。
【０３６１】
ステップ６。４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−メチルブタンアミド）−５−ウレイドペンタンアミド）ベンジルメチル（２−（メチルアミノ）エチル）カルバメート（９６）の合成
乾燥ＤＣＭ（１０ｍＬ）中の化合物９５（６００ｍｇ、０．７３５ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、ＴＦＡ（５ｍＬ）を０℃で添加し、０℃で１時間にわたって攪拌した。混合物を真空で濃縮して、表題化合物９６を白色固体５５０ｍｇ（１００％）として得た。1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 10.09 (br, 1H), 8.40 (s, 2H), 8.14 (d,
1H), 7.90 (d, 2H), 7.74 (m, 2H), 7.61 (d, 2H), 7.43 (m, 3H), 7.33 (m, 4H), 6.00
(s, 1H), 5.43 (s, 2H), 5.02 (s, 2H), 4.42-4.23 (m, 4H), 3.93 (m, 1H), 3.50 (m,
2H), 3.08-2.94 (m, 4H), 2.88 (s, 3H), 2.59 (m, 3H), 1.99 (m, 1H), 1.69-1.59 (m,
2H), 1.46-1.39 (m, 2H), 0.90-0.85 (m, 6H).
【０３６２】
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−６−（（（Ｓ）−８−（クロロメチル）−６−（５−（（Ｓ）−８−（クロロメチル）−４−（（（２−（（（（４−（（２３Ｓ，２６Ｓ）−１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２３−イソプロピル−２１，２４−ジオキソ−２６−（３−ウレイドプロピル）−３，６，９，１２，１５，１８−ヘキサオキサ−２２，２５−ジアザヘプタコサン−２７−アミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）−エチル）（メチル）カルバモイル）オキシ）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−イル）−５−オキソペンタノイル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−４−イル）オキシ）−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−カルボン酸（４９）の代替調製
【０３６３】
【化７３】
0006782250.tif 000080
ステップ１：（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（（（Ｓ）−６−（５−（（Ｓ）−４−（（（２−（（（（４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−メチルブタンアミド）−５−ウレイドペンタンアミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エチル）（メチル）カルバモイル）オキシ）−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−イル）−５−オキソペンタノイル）−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−４−イル）オキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（９７）の合成
ＤＭＦ（１．５ｍＬ）中の化合物７３（２６ｍｇ、０．０２４ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｆｍｏｃ−ＶＣＰＡＢＣ−ＤＭＥＡリンカー９６（２４ｍｇ、０．０２９ｍｍｏｌ）、２，６−ルチジン（０．０１６７ｍＬ、０．１４ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（０．０２５３ｍＬ、０．１４ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（３．３ｍｇ、０．０２４ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で３０分間にわたって攪拌し、真空で濃縮して、残留物を得た。粗製物をＨＰＬＣ精製（方法Ｃ）に供して、生成物９７を白色固体３３ｍｇ（８３％）として得た。LC-MS (プロトコールB):m/z 1660.9 (M+H), 保持時間 = 1.11分。
【０３６４】
ステップ２：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−６−（（（Ｓ）−６−（５−（（Ｓ）−４−（（（２−（（（（４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−アミノ−３−メチルブタンアミド）−５−ウレイドペンタンアミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）−エチル）（メチル）カルバモイル）オキシ）−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−イル）−５−オキソペンタノイル）−８−（クロロメチル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−４−イル）オキシ）−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−カルボン酸（９８）の合成：０℃に冷却したＴＨＦ（３ｍＬ）およびＭｅＯＨ（３ｍＬ）中の９７（４６ｍｇ、０．０２８ｍｍｏｌ）の溶液に、水（０．５ｍＬ）中のＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏ（１２ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。混合物を０℃で１時間にわたって攪拌した。ＡｃＯＨ（０．０３ｍＬ）を添加して混合物を中和し、真空で濃縮して、白色固体残留物を得た。これをＨＰＬＣ（方法Ｃ）によって精製して、生成物９８をオフホワイトの固体２８ｍｇ（７２％）として得た。LC-MS (プロトコールB): m/z 1300.6 (M+H), 保持時間=0.78分. 1H NMR (400MHz, DMF) δ = 10.33 - 10.21 (m, 1H), 8.84 (d, J=7.4
Hz, 1H), 8.63 (br. s., 3H), 8.41 - 8.28 (m, 2H), 8.05 (s, 1H), 7.81 - 7.63 (m,
2H), 7.57 - 7.41 (m, 3H), 7.38 (br. s., 2H), 6.52 (br. s., 1H), 5.39 (d, J=6.6
Hz, 1H), 5.17 (br. s., 1H), 5.12 (br. s., 1H), 4.74 (br. s., 1H), 4.48 - 4.28
(m, 5H), 4.24 (br. s., 1H), 4.09 (s, 4H), 4.04 - 3.89 (m, 2H), 3.84 - 3.67 (m,
6H), 3.67 - 3.52 (m, 4H), 3.32 (s, 9H), 3.26 (br. s., 2H), 3.19 (br. s., 1H),
3.14 - 3.04 (m, 4H), 3.00 (s, 2H), 2.94 (br. s., 2H), 2.85 (br. s., 2H), 2.79 -
2.68 (m, 5H), 2.62 (s, 4H), 2.64 (s, 3H), 2.42 - 2.29 (m, 1H), 2.23 - 2.05 (m,
11H), 1.92 (br. s., 1H), 1.78 (br. s., 1H), 1.60 (br. s., 2H), 1.15 (br. S.,
6H).
【０３６５】
ステップ３：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−６−（（（Ｓ）−８−（クロロメチル）−６−（５−（（Ｓ）−８−（クロロメチル）−４−（（（２−（（（（４−（（２３Ｓ，２６Ｓ）−１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２３−イソプロピル−２１，２４−ジオキソ−２６−（３−ウレイドプロピル）−３，６，９，１２，１５，１８−ヘキサオキサ−２２，２５−ジアザヘプタコサン−２７−アミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エチル）（メチル）カルバモイル）オキシ）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−イル）−５−オキソペンタノイル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−４−イル）オキシ）−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−カルボン酸（４９）の合成：ＤＭＦ（１ｍＬ）に溶解した９８（１０ｍｇ、０．００７ｍｍｏｌ）の溶液に、ペルフルオロフェニル１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３，６，９，１２，１５，１８−ヘキサオキサヘニコサン−２１−オエート（５．６ｍｇ、０．００９ｍｍｏｌ、９９）およびＤＩＰＥＡ（０．００７ｍＬ、０．０４２ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で３０分間にわたって攪拌した。混合物をＨＰＬＣ（方法Ｃ）によって精製して、生成物４９を白色泡状物１０ｍｇ（８２％）として得た。LC-MS (プロトコールB): m/z 1715.7 (M+H), 保持時間=0.89分. 1H NMR (400MHz, アセトニトリル-d3) δ = 8.21 (br.
s., 2H), 7.56 (d, J=7.4 Hz, 1H), 7.31 - 7.10 (m, 4H), 6.78 (s, 2H), 5.25 (br. S., 1H), 5.11 (br. s., 1H), 5.02 (br.s., 1H), 4.50 (br. S., 1H),
4.18 (br. s., 2H), 3.77 (br. s., 2H), 3.71 (br. s., 3H), 3.66 - 3.42 (m), 3.37
- 3.24 (m, 4H), 3.16 (br. s., 1H), 3.12 - 2.95 (m, 4H), 2.93 (s, 2H), 2.77 -
2.47 (m, H), 2.22 - 2.02 (m, 4H), 1.51 (br. s., 2H), 0.95 (br. S., 6H).
【０３６６】
４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−アセトアミド−６−アミノヘキサンアミド）−３−メチルブタンアミド）−５−ウレイドペンタンアミド）ベンジル（（Ｓ）−８−（クロロメチル）−６−（５−（（Ｓ）−８−（クロロメチル）−１−メチル−４−（ホスホノオキシ）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−イル）−５−オキソペンタノイル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−４−イル）エタン−１，２−ジイルビス（メチルカルバメート）（１００）の調製
【０３６７】
【化７４】
0006782250.tif 000081
ステップ１：４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−アセトアミド−６−アミノヘキサンアミド）−３−メチルブタンアミド）−５−ウレイドペンタンアミド）ベンジル（（Ｓ）−８−（クロロメチル）−６−（５−（（Ｓ）−８−（クロロメチル）−１−メチル−４−（ホスホノオキシ）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−６−イル）−５−オキソペンタノイル）−１−メチル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］インドール−４−イル）エタン−１，２−ジイルビス（メチルカルバメート）（１００）の合成：ＤＭＦ（３ｍＬ）中の５５（３５ｍｇ、０．０４１ｍｍｏｌ）の溶液に、７４（４５ｍｇ、０．０４５ｍｍｏｌ）、ルチジン（０．０１９ｍＬ、０．１６ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（０．０２９ｍＬ、０．１６ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（５．６ｍｇ、０．０４１ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で３時間にわたって攪拌した。得られた混合物に、ピペリジン（０．３ｍＬ、３ｍｍｏｌ）を室温で２０分間にわたって攪拌した。混合物を真空で濃縮し、残留物をＨＰＬＣ（方法Ｃ）によって精製して、生成物１００をフリーズドライ後に白色粉末３５ｍｇ（６２％）として得た。LC-MS (プロトコールB): m/z 1374.8 (M+H), 保持時間=0.92分. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 8.45 (d, J=13.7 Hz, 1H), 8.14 (s, 1H),
8.17 (s, 1H), 8.05 (d, J=7.4 Hz, 1H), 7.76 (br. s., 3H), 7.58 (d, J=8.2 Hz,
1H), 7.52 - 7.39 (m, 2H), 7.30 - 7.16 (m, 1H), 6.09 (br. s., 1H), 5.15 - 4.94
(m, 2H), 4.40 (br. s., 1H), 4.35 - 4.08 (m, 8H), 3.95 - 3.79 (m, 2H), 3.69 (br.
s., 1H), 3.60 (d, J=10.5 Hz, 3H), 3.49 (br. s., 3H), 3.13 (br. s., 1H), 3.06
(br. s., 1H), 3.03 - 2.91 (m, 4H), 2.88 (s, 2H), 2.76 (br. s., 4H), 2.61 (d, J=6.6
Hz, 2H), 2.56 (s, 6H), 1.98 (m, 3H), 1.86 (s, 3H), 1.65 (m, 3H), 1.58 - 1.49
(m, 3H), 1.46 (m, 2H), 1.40 - 1.20 (m, 3H), 0.85 (m, 6H).
【０３６８】
本明細書において述べた通り、表１および２中に記述されている化合物は、それらのアセテートまたはフェノールプロドラッグ段階において存在してよく、これらはいずれも、ビスシクロプロピル活性薬物種に急速に変換される。この相互変換は、アッセイ培地中で急速に発生する。それ故、３つすべての化合物形態は機能的に同等であり、がん細胞増殖アッセイにおいて同じ成長阻害値をもたらす。故に、化合物を「ビス−アセテート」として記述することは、それらの機能的に同等のフェノールおよびビスシクロプロピル種としての記述も含意する。
【０３６９】
【化７５】
0006782250.tif 000082
【０３７０】
下記のペイロードを調製した。すべてのペイロードは、一般的手順ＡおよびＢを使用して、または指示されている方法によってのいずれかで調製した。
【０３７１】
【表１−１】
0006782250.tif 000083
【０３７２】
【表１−２】
0006782250.tif 000084
【０３７３】
【表１−３】
0006782250.tif 000085
【０３７４】
【表１−４】
0006782250.tif 000086
【０３７５】
【表２−１】
0006782250.tif 000087
【０３７６】
【表２−２】
0006782250.tif 000088
【０３７７】
【表２−３】
0006782250.tif 000089
【０３７８】
【表２−４】
0006782250.tif 000090
【０３７９】
【表２−５】
0006782250.tif 000091
【０３８０】
上記の例において、変数Ｐｇは、Ｈ、アシル、リン酸ＰＯ３Ｈ２、炭水化物、アミノ酸またはペプチド（ならびに、特にカテプシンおよびマトリックスメタロプロテアーゼ等のプロテアーゼによって開裂されるペプチド）である。
【０３８１】
下記のリンカー／ペイロードを調製した：
【０３８２】
【表３−１】
0006782250.tif 000092
【０３８３】
【表３−２】
0006782250.tif 000093
【０３８４】
表４：下記のリンカー／ペイロードは、表３に示されているリンカー／ペイロード類似体の調製について上述した手順を使用して調製する。
【０３８５】
表４についてのリンカー構造
【０３８６】
【化７６】
0006782250.tif 000094
式中、
Ｐは、前記ペイロードとの結合点を表し、
各Ｒ７は、独立して、Ｈまたは−Ｃ１〜Ｃ２０アルキルであり、
Ｒ８は、−Ｃ１〜Ｃ２０アルキル、−Ｃ６〜Ｃ１４アリールまたは−Ｃ６〜Ｃ１４ヘテロアリールであり、
ｎ＝０〜２０であり、
ｍ＝０〜２０である。
【０３８７】
【表４−１】
0006782250.tif 000095
【０３８８】
【表４−２】
0006782250.tif 000096
【０３８９】
【表４−３】
0006782250.tif 000097
【０３９０】
【表４−４】
0006782250.tif 000098
【０３９１】
表４中、Ｐｇは、Ｈ、アシル、リン酸ＰＯ３Ｈ２、炭水化物、アミノ酸またはペプチド（特に、カテプシンおよびマトリックスメタロプロテアーゼ等のプロテアーゼによって開裂されるペプチド）である。
【０３９２】
表５についてのリンカー構造
【０３９３】
【化７７】
0006782250.tif 000099
から、
式中、
Ｐは、前記ペイロードとの結合点を表し、
各Ｒ７は、独立して、Ｈまたは−Ｃ１〜Ｃ２０アルキルであり、
Ｒ８は、−Ｃ１〜Ｃ２０アルキル、−Ｃ６〜Ｃ１４アリールまたは−Ｃ６〜Ｃ１４ヘテロアリールであり、
ｎ＝０〜２０であり、
ｍ＝０〜２０である。
【０３９４】
【表５−１】
0006782250.tif 000100
【０３９５】
【表５−２】
0006782250.tif 000101
【０３９６】
【表５−３】
0006782250.tif 000102
【０３９７】
表５中、Ｐｇは、Ｈ、アシル、リン酸ＰＯ３Ｈ、炭水化物、アミノ酸またはペプチド（特に、カテプシンおよびマトリックスメタロプロテアーゼ等のプロテアーゼによって開裂されるペプチド）である。
【０３９８】
ペイロードおよび抗体薬物コンジュゲートの生物学的評価のための実験手順
ペイロード生存アッセイのための細胞株
がん細胞株は、ＡＴＣＣ（Ｍａｎａｓｓａｓ、ＶＡ）から入手した。Ｎ８７（転移性肝臓部位に由来するヒト胃癌）、ＨＬ６０（白血病）およびＭＤＡ−ＭＢ−３６１ＤＹＴ２（ヒト乳癌ＭＤＡ−ＭＢ−３６１）を、ＲＰＭＩ１６４０培地中で成長させた。すべての培地に、１０％ウシ胎仔血清、１％ピルビン酸ナトリウムおよび１％Ｌ−グルタミン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ｇｒａｎｄ  Ｉｓｌａｎｄ、ＮＹ）を補充した。ヒト臍帯静脈内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）は、Ｌｏｎｚａ（Ａｌｌｅｎｄａｌｅ、ＮＪ）から入手し、ＥＧＭ−２シングルクオット（Ｌｏｎｚａ  ＣＣ−４１７６番）を補充したＥＧＭ２培地中で維持した。すべての細胞を加湿インキュベーター（３７℃、５％ＣＯ２）内で維持した。
【０３９９】
ペイロードのための細胞毒性アッセイ手順
１００μｌの培地中の細胞を、９６ウェルプレート内で培養した。５０μｌの３倍ストックを２連にて１０の濃度で添加することにより、示されている化合物でがん細胞株を処理した。細胞を化合物とともに４日間にわたってインキュベートし、次いで、３０μｌのＣｅｌｌＴｉｔｅｒ（登録商標）９６アクオスワンＭＴＳ溶液（Ｐｒｏｍｅｇａ  カタログ番号Ｇ３５８２）を細胞に添加し、３７℃で１．５時間インキュベートし、次いで、ビクタープレートリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ、Ｗａｌｔｈａｍ、ＭＡ）上、４９０ｎｍで吸光度を測定した。相対細胞生存を、未処置の対照ウェルの百分率として決定した。ＩＣ５０値は、ＸＬフィットｖ４．２（ＩＤＢＳ、Ｇｕｉｌｄｆｏｒｄ、Ｓｕｒｒｙ、ＵＫ）を用いる４パラメーターロジスティックモデル２０３番を使用して算出した。
【０４００】
抗ＩＬ１３Ｒα２  ＡＤＣのための細胞毒性アッセイ手順
使用した細胞株：Ａ３７５（メラノーマ）、ＰＣ３ＭＭ２（前立腺）、ＰＣ３（前立腺）
細胞を、９６ウェルプレート内に終夜播種した後、漸増濃度の抗ＩＬ１３Ｒα２  ＡＤＣまたは対照ＡＤＣに曝露した。４日後、各培養物の生存を対照細胞に対して評価した。ＩＣ５０値を、ロジスティック非線形回帰によって算出した。
【０４０１】
抗ＣＤ３３  ＡＤＣのための細胞毒性（Ｃｙｔｏｔｏｘｃｉｔｙ）アッセイ手順
ヒトＡＭＬ細胞株（ＨＬ６０、ＮＢ４、ＨＥＬ９２．１．７およびＲａｊｉ）は、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（Ｍａｎａｓｓａｓ、ＶＡ）から入手した。細胞を、１０％ＦＢＳ、１％ペニシリン／ストレプトマイシンおよびＬ−グルタミン混合物、１ｍＭピルビン酸ナトリウム、１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳならびに０．２７％グルコースを補充したＲＰＭＩ培地（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、Ｃａｒｌｓｂａｄ、ＣＡ）中で成長させた。細胞株を、Ｐ−糖タンパク質の内因性活性レベルについて試験し、市販のフローサイトメトリーキット（ｅＦＬＵＸＸ−ＩＤ；ＥＮＺＯ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｐｌｙｍｏｕｔｈ  Ｍｅｅｔｉｎｇ、ＰＡ）を使用して、多剤耐性タンパク質および乳がん耐性タンパク質を決定した。
【０４０２】
ｃｙｔｏｔｏｘアッセイのために、細胞を９６ウェル不透明プレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ）内で平板培養し、種々の濃度の化合物で４日間にわたって処置した。生存は、セルタイターグロー発光細胞生存アッセイキット（Ｐｒｏｍｅｇａ、Ｍａｄｉｓｏｎ、ＷＩ）を使用して決定し、ビクターＸ３プレートリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  Ｗａｌｔｈａｍ、ＭＡ）を使用して測定した。データを対照群（ＤＭＳＯまたはＰＢＳ）に対して正規化した。ＩＣ５０値は、５０％成長阻害を引き起こす濃度として定義された。ＩＣ５０値は、ＸＬフィットｖ４．２（ＩＤＢＳ、Ｇｕｌｄｆｏｒｄ、Ｓｕｒｒｙ、ＵＫ）を用いるロジスティック非線形回帰モデル２０３番を使用して算出した。すべての実験点を２つの複製ウェル内に設定し、２連にて独立して実施した。
【０４０３】
抗トラスツズマブＡＤＣのための細胞毒性アッセイ
標的発現Ｎ８７（胃がん）、ＭＤＡ−ＭＢ−３６１−ＤＹＴ２（乳がん）または非発現（ＨＴ−２９）細胞を、処置前２４時間にわたって９６ウェル細胞培養プレート内に播種した。細胞を、３倍連続希釈した抗体−薬物コンジュゲートで処置した。細胞生存は、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ９６（登録商標）アクオスワンソリューション細胞増殖ＭＴＳアッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ、Ｍａｄｉｓｏｎ  ＷＩ）によって処置９６時間後に決定した。相対細胞生存を、未処置の対照の百分率として決定した。ＩＣ５０値は、ＸＬフィットｖ４．２（ＩＤＢＳ、Ｇｕｉｌｄｆｏｒｄ、Ｓｕｒｒｙ、ＵＫ）を用いる４パラメーターロジスティックモデル２０３番を使用して算出した。
【０４０４】
ペイロードおよびＡＤＣの細胞毒性の結果を、表６および１０に示す。
【０４０５】
【表６】
0006782250.tif 000103
【０４０６】
抗体薬物コンジュゲートの例示
方法Ｄ：内部ジスルフィドを介する抗体とリンカーペイロードとのコンジュゲーションのための一般的手順
ダルベッコリン酸緩衝溶液（ＰＢＳ、Ｌｏｎｚａ、ｐＨ７．４）中の治療抗体の溶液を、３．０〜３．５当量のトリス（２−カルボキシエチル）ホスフィン塩酸塩（ＴＣＥＰ、ＰＢＳ中５ｍＭ溶液）の添加によって還元した。反応物を３７℃で１〜２時間にわたってインキュベートし、次いで、周囲温度に冷却させた。７当量のリンカーペイロード［Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）中１０ｍＭ溶液］の添加によってコンジュゲーションを実施した。追加のＤＭＡを反応混合物に添加して、最終反応混合物中における１５％（ｖ／ｖ）の全有機溶媒成分を実現した。反応物を周囲温度で１時間にわたってインキュベートした。周囲温度で１時間後、粗反応物は、ＧＥセファデックス脱塩カラムを介してＰＢＳに緩衝液交換するか、または１０当量のシステイン（ＰＢＳ中２０ｍＭ溶液）の添加を介して過剰なリンカーペイロードをクエンチした。次いで、いずれの場合も、粗材料をサイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ、プロトコールＣ）によって精製した。単量体画分をプールし、必要ならば濃縮して、ＡＤＣを得た。
【０４０７】
方法Ｅ：改変システイン残基を含有するトラスツズマブ抗体とのリンカーペイロードの部位特異的コンジュゲーション
改変システイン残基（カバット番号付け、ＷＯ２０１３０９３８０９を参照）を含有する治療抗体の溶液を、５０ｍＭリン酸緩衝溶液、ｐＨ７．４中で調製した。ＰＢＳ、ＥＤＴＡ（０．５Ｍストック）およびＴＣＥＰ（０．５Ｍストック）を、最終タンパク質濃度が約１０ｍｇ／ｍＬ、最終ＥＤＴＡ濃度が約２０ｍＭおよび最終ＴＣＥＰ濃度がおよそ６．６ｍＭ（１００モル当量）となるように添加した。反応物を室温で２〜４８時間にわたって静置させ、次いで、ＧＥ  ＰＤ−１０セファデックスＧ２５カラムをメーカーの説明書に従って使用して、ＰＢＳに緩衝液交換した。特定の状況においては、血液透析濾過または透析等の代替的な方法も有用である。得られた溶液を、およそ５０当量のデヒドロアスコルベート（１：１  ＥｔＯＨ／水中５０ｍＭストック）で処理した。抗体を４℃で終夜静置させ、その後、ＧＥ  ＰＤ−１０セファデックスＧ２５カラムをメーカーの説明書に従って使用して、ＰＢＳに緩衝液交換した。同じく、特定の状況においては、血液透析濾過または透析等の代替的な方法も有用である。
【０４０８】
このようにして調製された抗体とのコンジュゲーションは、１０当量のリンカーペイロード［Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）中１０ｍＭ溶液］の添加によって実施した。追加のＤＭＡを反応混合物に添加して、最終反応混合物中における１５％（ｖ／ｖ）の全有機溶媒成分を実現した。場合によっては、追加のＰＢＳを添加して、５〜１０ｍｇ／ｍＬの反応物中における最終全抗体濃度を実現した。室温で１〜２時間後、反応混合物を（上記に従って）ＰＢＳに緩衝液交換し、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ、プロトコールＤ）によって精製した。単量体画分をプールし、必要ならば濃縮して、ＡＤＣを得た。次いで、場合によっては、ＡＤＣをその後、ＳＥＣ精製後に０．５〜１．０ｇのバイオビーズＳＭ−２吸着剤（Ｂｉｏ−Ｒａｄ）とともに２３〜３７℃で４〜１８時間にわたってインキュベートし、濾過し、次いで、必要ならば濃縮した。
【０４０９】
方法Ｆ：反応性グルタミン残基を伴う抗体との酵素媒介性コンジュゲーション：
トランスグルタミン酵素−反応性グルタミン残基を伴う治療抗体を、滅菌水（Ｌｏｎｚａ）中に透析した。トランスグルタミナーゼ媒介性コンジュゲーションは、水中５．０〜１５ｍｇ／ｍＬのトランスグルタミナーゼ反応性グルタミン含有抗体を、３０ｍＭリン酸カリウムｐＨ７．４  ＤＩＬＵＴ−ＩＴ溶解培地濃縮物（Ｊ．Ｔ．Ｂａｋｅｒ）、１５０ｍＭ塩化ナトリウム（ＮａＣｌ）、１５．０〜２０．０倍モル過剰のアミノアルキルリンカー担持ペイロード（ＤＭＳＯ中１０〜３０ｍＭ溶液）および３０〜６０ｍｇ／ｍＬのトランスグルタミナーゼ酵素粉末（味の素アクティバＴＩ）と混合することによって行った。加えて、ＤＭＳＯを反応混合物に添加して、最終反応混合物中における５〜１０％（ｖ／ｖ）の全有機溶媒成分を実現した。場合によっては、追加の水を添加して、５〜１０ｍｇ／ｍＬの反応物中における最終全抗体濃度を実現した。得られた混合物を、周囲温度で５〜６時間にわたってインキュベートした。次に、別の３０〜６０ｍｇ／ｍＬのトランスグルタミナーゼ固体を添加し、混合物を、周囲温度で追加の１８時間にわたってさらにインキュベートした。終夜後、粗反応物を、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅセファデックス緩衝液交換カラムをメーカーの説明書に従って使用して、ダルベッコリン酸緩衝溶液（ＰＢＳ、ｐＨ７．４、Ｌｏｎｚａ）に緩衝液交換した。粗材料を、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ、プロトコールＤ）または疎水性相互作用クロマトグラフィー（ＨＩＣ、プロトコールＧ）のいずれかによって精製した。精製後、単量体画分をプールし、必要ならば濃縮して、ＡＤＣを得た。ＡＤＣをＨＩＣによって精製した例において、プールされた画分を、次いで、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅセファデックス緩衝液交換カラムをメーカーの説明書に従って使用して、ダルベッコリン酸緩衝溶液（ＰＢＳ、ｐＨ７．４、Ｌｏｎｚａ）に緩衝液交換した。次いで、場合によっては、ＡＤＣをその後、精製後に０．５〜１．０ｇのバイオビーズＳＭ−２吸着剤（Ｂｉｏ−Ｒａｄ）とともに２３〜３７℃で４〜１８時間にわたってインキュベートし、濾過し、次いで、必要ならば濃縮した。
【０４１０】
ＡＤＣを、精製のためのサイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）および疎水性相互作用クロマトグラフィー（ＨＩＣ）、ならびに液体クロマトグラフィーエレクトロスプレーイオン化タンデム質量分析（ＬＣ−ＥＳＩ  ＭＳ）を介して特徴付けて、薬物−抗体比（ＤＡＲ、ローディング）を算出した。
【０４１１】
プロトコールＣ：カラム：Ａｇｉｌｅｎｔポロシェル３００ＳＢ−Ｃ８、７５×２．１ｍｍ、２．６μｍ；移動相Ａ：水中０．１％ギ酸（ｖ／ｖ）；移動相Ｂ：アセトニトリル中０．１％ギ酸（ｖ／ｖ）；勾配：初期条件：４分にわたって２０％Ｂから４５％Ｂ；流速：１．０ｍＬ／分。温度：６０℃；検出：２２０ｎｍ；ＭＳ（＋）範囲４００〜２０００Ｄａ；注入体積：１０μＬ；機器：Ａｇｉｌｅｎｔ１１００ＬＣ、ＷａｔｅｒｓマイクロマスＺＱ  ＭＳ。マックスエント１を使用してデコンボリューションを実施した。
【０４１２】
プロトコールＤ：カラム：ＧＥスーパーデックス２００（１０／３００ＧＬ）；移動相：リン酸緩衝溶液（ＰＢＳ、１×、ｐＨ７．４）；アイソクラティック；流速：１．０ｍＬ／分。温度：室温；機器：ＧＥアクタエクスプローラー。
【０４１３】
プロトコールＥ：カラム＝Ｗａｔｅｒｓ  ＢＥＨ３００−Ｃ４、２．１×１００ｍｍ（Ｐ／Ｎ＝１８６００４４９６）；機器＝ＳＱＤ２質量分析検出器付きアクイティＵＰＬＣ；流速＝０．７ｍＬ／分；温度＝８０℃；緩衝液Ａ＝水＋０．１％ギ酸；緩衝液Ｂ＝アセトニトリル＋０．１％ギ酸。勾配は、２分にわたって３％Ｂから９５％Ｂに移動し、０．７５分間にわたって９５％Ｂで保持し、次いで、３％Ｂで再度平衡化する。注射直前に、試料をＴＣＥＰまたはＤＴＴで還元する。溶離物をＬＣＭＳ（４００〜２０００ダルトン）によってモニターし、ＭａｘＥｎｔ１を使用してタンパク質ピークをデコンボリューションする。ＤＡＲは、先に記述した通り、重量平均ローディングとして記録される。
【０４１４】
プロトコールＦ：カラム：ＴＳＫＧｅｌブチルＮＰＲ、４．６ｍｍ×３．５ｃｍ（Ｐ／Ｎ＝Ｓ０５５７−８３５）；緩衝液Ａ＝１０ｍＭホスフェートを含有する１．５Ｍ硫酸アンモニウム、ｐＨ７；緩衝液Ｂ＝１０ｍＭホスフェート、ｐＨ７＋２０％イソプロピルアルコール；流速＝０．８ｍＬ／分；温度＝周囲；勾配＝１２分にわたって０％Ｂから１００％Ｂ、１００％Ｂで２分間にわたって保持、次いで、１００％Ａで再度平衡化する；機器：Ａｇｉｌｅｎｔ１１００ＨＰＬＣ。
【０４１５】
プロトコールＧ：カラム：ＧＥ  ＨｉＴｒａｐブチルＨＰ、５ｍＬ；移動相：１Ｍリン酸カリウム、５０ｍＭトリス−ＨＣｌ、ｐＨ７（緩衝液Ａ）；５０ｍＭトリス−ＨＣｌ、ｐＨ７（緩衝液Ｂ）；勾配溶離：１０〜２０カラム体積にわたって０〜１００％緩衝液Ｂ；流速：５．０ｍＬ／分。温度：室温；機器：ＧＥアクタエクスプローラー。
【０４１６】
【表７】
0006782250.tif 000104
【０４１７】
【表８】
0006782250.tif 000105
【０４１８】
【表９】
0006782250.tif 000106
【０４１９】
【表１０】
0006782250.tif 000107
【０４２０】
所望の抗体とコンジュゲートされた表４および５に示されているリンカー／ペイロードを含む下記のＡＤＣは、適切なコンジュゲーション方法を使用して調製される：
【０４２１】
【化７８−１】
0006782250.tif 000108
【０４２２】
【化７８−２】
0006782250.tif 000109
【０４２３】
【化７８−３】
0006782250.tif 000110
【０４２４】
【化７８−４】
0006782250.tif 000111
【０４２５】
【化７８−５】
0006782250.tif 000112
【０４２６】
【化７８−６】
0006782250.tif 000113
【０４２７】
【化７８−７】
0006782250.tif 000114
【０４２８】
【化７８−８】
0006782250.tif 000115
【０４２９】
【化７８−９】
0006782250.tif 000116
【０４３０】
【化７８−１０】
0006782250.tif 000117
【０４３１】
【化７８−１１】
0006782250.tif 000118
【０４３２】
【化７８−１２】
0006782250.tif 000119
【０４３３】
【化７８−１３】
0006782250.tif 000120
【０４３４】
【化７８−１４】
0006782250.tif 000121
【０４３５】
【化７８−１５】
0006782250.tif 000122