(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
固定していない生体試料の三次元画像を取得することと、
前記三次元画像から前記生体試料の標的部分の三次元座標を特定することと、
前記生体試料を切断する深紫外レーザー光である切断レーザー光を発し、前記標的部分の三次元座標に基づき、前記生体試料の標的部分の周囲が切断されるよう、前記生体試料に対する前記切断レーザー光の入射位置及び入射角を変化させることと、
前記切断レーザー光で単離された標的部分をマニピュレーターで回収することと、
を備え、
前記マニピュレーターが、前記標的部分を含む液体が毛細管現象により内部を上昇するキャピラリーを備え、
前記キャピラリーの内壁が親水性である、
レーザーマイクロダイセクション方法。
【請求項２】
前記キャピラリーの内壁に凹凸が設けられている、請求項１に記載のレーザーマイクロダイセクション方法。
【請求項３】
前記キャピラリーの内壁が粗面化されている、請求項１に記載のレーザーマイクロダイセクション方法。
【請求項４】
前記キャピラリーの内壁において、親水性の程度が導入口から奥に向けて上昇する、請求項１から３のいずれか１項に記載のレーザーマイクロダイセクション方法。
【請求項５】
前記三次元画像から得られる、前記標的部分の断面形状に基づき、前記生体試料に対する前記切断レーザー光の入射角を変化させる、請求項１から４のいずれか１項に記載のレーザーマイクロダイセクション方法。
【請求項６】
前記三次元画像から得られる、前記標的部分の断面形状の輪郭に沿って、前記生体試料に対する前記切断レーザー光の入射角を変化させる、請求項１から５のいずれか１項に記載のレーザーマイクロダイセクション方法。
【請求項７】
前記切断レーザー光の光学系を駆動して、前記生体試料に対する前記切断レーザー光の入射位置及び入射角を変化させる、請求項１から６のいずれか１項に記載のレーザーマイクロダイセクション方法。
【請求項８】
前記生体試料が載せられるステージを傾斜させることにより、前記生体試料に対する前記切断レーザー光の入射角を変化させる、請求項１から７のいずれか１項に記載のレーザーマイクロダイセクション方法。
【請求項９】
前記生体試料に対する前記切断レーザー光の入射角が０°以上９０°以下の範囲で変化する、請求項１から８のいずれか１項に記載のレーザーマイクロダイセクション方法。
【請求項１０】
前記切断レーザー光の波長範囲が２００ｎｍ以上３００ｎｍ以下である、請求項１に記載のレーザーマイクロダイセクション方法。
【請求項１１】
前記切断レーザー光の焦点サイズが４００ｎｍ以上１０μｍ以下である、請求項１又は１０に記載のレーザーマイクロダイセクション方法。
【請求項１２】
前記生体試料の画像を取得する顕微鏡が、共焦点レーザー顕微鏡、共焦点ラマン顕微分光装置、光学顕微鏡、蛍光顕微鏡、及び電子顕微鏡からなる群から選択されるいずれかである、請求項１から１１のいずれか１項に記載のレーザーマイクロダイセクション方法。
【請求項１３】
前記生体試料が生体組織である、請求項１から１２のいずれか１項に記載のレーザーマイクロダイセクション方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は微細加工技術に関し、レーザーマイクロダイセクター及びレーザーマイクロダイセクション方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
病理検査は、疾患の診断において信頼度の高い検査方法である。例えば、がんの診断においては、病理診断が必要とされることが多い。病理検査は、組織検査と、細胞診検査と、に分類される。特に組織検査は、組織から様々な情報を得ることができるため、病理検査の中でも有用な検査方法である。組織検査においては、体内から採取した組織を数ミクロンの厚さにスライスして得られた病理切片を顕微鏡下で観察する。しかし、病理切片といえども、大部分が正常細胞や検査対象外の細胞から構成されていることが多い。そのため、病理切片に含まれる、検査対象となる病変細胞はごくわずかである。現状、病変細胞の分析手法は、顕微鏡下での観察が主であるが、病変細胞がごくわずかである場合、病変細胞の分析は困難である。
【０００３】
そのため、単に病変細胞を顕微鏡観察するだけではなく、組織から病変細胞を切除、及び採取し、例えば質量分析装置のような分析装置を用いて病変細胞を分析し、疾患を診断する方法が提案されている。
【０００４】
組織からの病変細胞の切除及び採取には、レーザーマイクロダイセクション法が用いられる。レーザーマイクロダイセクション法は、顕微鏡に接続したレーザー照射装置を用いて、顕微鏡下で組織切片を観察しながら標的とする病変細胞塊をレーザー光によって切り出し、採取、及び回収するための手法である（例えば、特許文献１から３参照。）。この方法は、複雑に混ざり合った組織標本の中から標的となる細胞群や単一細胞のみを回収することができるため、疾患や生命現象の解明にとって有用である。また、レーザーマイクロダイセクション法は、医療用途に限らず、工業製品等の試料から微小な標的部分を切り出すためにも用いられている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２０１４−７８００８号公報
【特許文献２】特表２０１５−５１７６６９号公報
【特許文献３】特開２０１３−６３３３６号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、試料の標的部分の周囲を正確に切断可能なレーザーマイクロダイセクター及びレーザーマイクロダイセクション方法を提供することを目的の一つとする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明の態様によれば、（ａ）試料が載せられるステージと、（ｂ）試料の三次元画像を取得する顕微鏡と、（ｃ）三次元画像から試料の標的部分の三次元座標を特定する標的部分特定部と、（ｄ）試料を切断する切断レーザー光を発する切断レーザー光源と、（ｅ）標的部分の三次元座標に基づき、試料の標的部分の周囲が切断されるよう、試料に対する切断レーザーの入射位置及び入射角を変化させる位置制御機構と、を備える、レーザーマイクロダイセクターが提供される。
【０００８】
上記のレーザーマイクロダイセクターにおいて、三次元画像から得られる、標的部分の断面形状に基づき、試料に対する切断レーザー光の入射角を変化させてもよい。三次元画像から得られる、標的部分の断面形状の輪郭に沿って、試料に対する切断レーザー光の入射角を変化させてもよい。
【０００９】
上記のレーザーマイクロダイセクターにおいて、位置制御機構が、切断レーザー光の光学系を駆動して、試料に対する切断レーザー光の入射位置及び入射角を変化させてもよい。位置制御機構が、ステージを傾斜させることにより、試料に対する切断レーザー光の入射角を変化させてもよい。
【００１０】
上記のレーザーマイクロダイセクターにおいて、試料に対する切断レーザー光の入射角が０°以上９０°以下の範囲で変化してもよい。
【００１１】
上記のレーザーマイクロダイセクターにおいて、切断レーザー光が深紫外レーザー光であってもよい。切断レーザー光の波長範囲が２００ｎｍ以上３００ｎｍ以下であってもよい。切断レーザー光の焦点サイズが４００ｎｍ以上１０μｍ以下であってもよい。
【００１２】
上記のレーザーマイクロダイセクターが、切断レーザー光で単離された標的部分を回収するマニピュレーターをさらに備えていてもよい。マニピュレーターが、標的部分を含む液体が毛細管現象により内部を上昇するキャピラリーを備えていてもよいし、標的部分を採取するカンチレバーを備えていてもよい。マニピュレーターが磁力を用いて標的部分を回収してもよいし、分子間の親和力を用いて標的部分を回収してもよい。
【００１３】
上記のレーザーマイクロダイセクターにおいて、顕微鏡が、共焦点レーザー顕微鏡、共焦点ラマン顕微分光装置、光学顕微鏡、蛍光顕微鏡、及び電子顕微鏡からなる群から選択されるいずれかであってもよい。
【００１４】
上記のレーザーマイクロダイセクターにおいて、試料が生体試料であってもよいし、生体組織であってもよい。
【００１５】
本発明の態様によれば、（ａ）試料の三次元画像を取得することと、（ｂ）三次元画像から試料の標的部分の三次元座標を特定することと、（ｃ）試料を切断する切断レーザー光を発し、標的部分の三次元座標に基づき、試料の標的部分の周囲が切断されるよう、試料に対する切断レーザーの入射位置及び入射角を変化させることと、を備える、レーザーマイクロダイセクション方法が提供される。
【００１６】
上記のレーザーマイクロダイセクション方法において、三次元画像から得られる、標的部分の断面形状に基づき、試料に対する切断レーザー光の入射角を変化させてもよい。三次元画像から得られる、標的部分の断面形状の輪郭に沿って、試料に対する切断レーザー光の入射角を変化させてもよい。
【００１７】
上記のレーザーマイクロダイセクション方法において、切断レーザー光の光学系を駆動して、試料に対する切断レーザー光の入射位置及び入射角を変化させてもよい。試料が載せられるステージを傾斜させることにより、試料に対する切断レーザー光の入射角を変化させてもよい。
【００１８】
上記のレーザーマイクロダイセクション方法において、試料に対する切断レーザー光の入射角が０°以上９０°以下の範囲で変化してもよい。
【００１９】
上記のレーザーマイクロダイセクション方法において、切断レーザー光が深紫外レーザー光であってもよい。切断レーザー光の波長範囲が２００ｎｍ以上３００ｎｍ以下であってもよい。切断レーザー光の焦点サイズが４００ｎｍ以上１０μｍ以下であってもよい。
【００２０】
上記のレーザーマイクロダイセクション方法が、切断レーザー光で単離された標的部分をマニピュレーターで回収することを更に備えていてもよい。マニピュレーターが、標的部分を含む液体が毛細管現象により内部を上昇するキャピラリーを備えていてもよいし、標的部分を採取するカンチレバーを備えていてもよい。マニピュレーターが磁力を用いて標的部分を回収してもよいし、分子間の親和力を用いて標的部分を回収してもよい。
【００２１】
上記のレーザーマイクロダイセクション方法において、試料の画像を取得する顕微鏡が、共焦点レーザー顕微鏡、共焦点ラマン顕微分光装置、光学顕微鏡、蛍光顕微鏡、及び電子顕微鏡からなる群から選択されるいずれかであってもよい。
【００２２】
上記のレーザーマイクロダイセクション方法において、試料が生体試料であってもよいし、生体組織であってもよい。
【発明の効果】
【００２３】
本発明によれば、試料の標的部分の周囲を正確に切断可能なレーザーマイクロダイセクター及びレーザーマイクロダイセクション方法を提供可能である。
【図面の簡単な説明】
【００２４】
【図１】本発明の第１の実施の形態に係るレーザーマイクロダイセクターの模式図である。
【図２】本発明の第１の実施の形態に係るレーザーマイクロダイセクターのステージの模式図である。
【図３】本発明の第１の実施の形態に係る切断される前の試料の模式的断面図である。
【図４】本発明の第１の実施の形態に係る切断された試料の模式的断面図である。
【図５】本発明の第１の実施の形態に係るレーザーマイクロダイセクターで切断される前の試料の模式的断面図である。
【図６】本発明の第１の実施の形態の比較例に係るレーザーマイクロダイセクターで切断された試料の模式的断面図である。
【図７】本発明の第１の実施の形態に係るレーザーマイクロダイセクターで切断されている試料の模式的断面図である。
【図８】本発明の第１の実施の形態に係るレーザーマイクロダイセクターで切断されている試料の模式的断面図である。
【図９】本発明の第２の実施の形態に係るレーザーマイクロダイセクターの模式図である。
【図１０】本発明の第３の実施の形態に係るレーザーマイクロダイセクターの模式図である。
【図１１】本発明の第３の実施の形態に係るキャピラリーの模式図である。
【図１２】本発明の第３の実施の形態に係るキャピラリーの模式図である。
【図１３】本発明の第３の実施の形態に係るマニピュレーターの模式図である。
【図１４】本発明の第４の実施の形態に係るレーザーマイクロダイセクターの模式図である。
【図１５】本発明の第４の実施の形態に係るカンチレバーの模式図である。
【図１６】本発明のその他の実施の形態に係る磁石の模式図である。
【発明を実施するための形態】
【００２５】
以下に本発明の実施の形態を説明する。以下の図面の記載において、同一又は類似の部分には同一又は類似の符号で表している。但し、図面は模式的なものである。したがって、具体的な寸法等は以下の説明を照らし合わせて判断するべきものである。また、図面相互間においても互いの寸法の関係や比率が異なる部分が含まれていることは勿論である。
【００２６】
（第１の実施の形態）
本発明の第１の実施の形態に係るレーザーマイクロダイセクターは、図１に示すように、試料１が載せられるステージ１０と、試料１の三次元画像を取得する顕微鏡２０と、三次元画像から試料１の標的部分の三次元座標を特定する標的部分特定部３０１と、試料１を切断する切断レーザー光を発する切断レーザー光源４１と、標的部分の三次元座標に基づき、試料１の標的部分の周囲が切断されるよう、試料１に対する切断レーザーの入射位置及び入射角を変化させる位置制御機構４７と、を備える。
【００２７】
試料は、例えば、培養細胞及びスライスされた生体組織等の生体試料である。ステージ１０には、例えば、ステージ１０を移動させるステージ駆動機構が接続される。ステージ駆動機構は、ステージ１０を、ステージ１０表面と平行方向（ｘ方向及びｙ方向）に移動させたり、ステージ１０表面に対して垂直方向（ｚ方向）に移動させたりする。さらに、ステージ駆動装置は、ステージ１０を、ｚ方向を軸として傾斜させる。
【００２８】
顕微鏡２０としては、例えば共焦点ラマン顕微分光装置が使用可能である。顕微鏡２０は、励起光源２１を備える。励起光源２１は、ラマン散乱光を励起するレーザー光を照射するレーザーである。ラマン散乱光を励起するレーザー光の波長は、例えば５３２ｎｍ、６３３ｎｍ、及び７８５ｎｍであるが、これらに限定されない。励起光源２１から発せられた励起レーザー光は、例えば、ラインフィルター２２を通過する。
【００２９】
顕微鏡２０は、試料１に対して励起レーザー光を下方から照射するための倒立型の励起光光路と、試料１に対して励起レーザー光を上方から照射するための透過型の励起光光路と、の両方を備えていてもよい。
【００３０】
倒立型の励起光光路において、例えば、励起レーザー光は、反射鏡２３で、ステージ１０に対して垂直方向下側に反射され、さらに反射鏡２４で、ステージ１０と略平行方向に反射される。反射鏡２４で反射された励起レーザー光は、レンズ２５で集光される。レンズ２５で集光された励起レーザー光は、励起レーザー光を反射し、ラマン散乱光を透過させるハーフミラー２６で、ステージ１０に向けて反射され、対物レンズ２７を経てステージ１０上の試料１に集光される。
【００３１】
透過型の励起光光路において、例えば、励起レーザー光は、反射鏡２３で、ステージ１０に対して垂直方向上側に反射され、さらに反射鏡４４で、ステージ１０と平行方向に反射される。励起レーザー光は、ｘｙθアパーチャー４５を経て、レンズ４６で集光され、例えばガルバノスキャナーを備える位置制御機構４７を経て、対物レンズ４８に入射し、試料１に集光される。後述するように、透過型の励起光光路は、切断レーザー光の光路と少なくとも一部重複していてもよい。
【００３２】
励起レーザー光を照射された試料１で生じたラマン散乱光は、対物レンズ２７を経てハーフミラー２６を透過し、反射鏡２８でステージ１０と平行方向に反射される。反射鏡２８で反射されたラマン散乱光は、レイリー散乱光を除去するバンドパスフィルタ２９を透過し、レンズ３０で集光されて、ラマン分光器５０に入射する。
【００３３】
ラマン分光器５０において、ラマン散乱光はレンズ５１で集光され、対物レンズ２７の焦点で生じたラマン散乱光のみがピンホール５２を通過する。さらにラマン散乱光は反射鏡５３で反射され、凹面反射鏡５４で平行光にされる。平行光にされたラマン散乱光は回折格子５５で分光され、分光されたラマン散乱光は凹面反射鏡５６で集光される。集光されたラマン散乱光は、分光したラマン散乱光を波長ごとに検出可能なＣＣＤ（電荷結合素子）イメージセンサ等の検出器５７で受光される。検出器５７は、受光したラマン散乱光を光電変換し、電気信号を出力する。
【００３４】
ラマン分光器５０の検出器５７は、中央演算処理装置（ＣＰＵ）３００に接続されている。ＣＰＵ３００は、画像生成部３０２を備える。画像生成部３０２は、検出器５７から電気信号を受け取り、試料１の三次元画像を生成する。試料１の三次元画像は、三次元座標（ｘ，ｙ，ｚ）情報を含んでいる。ＣＰＵ３００には、表示装置４０１が接続されている。表示装置４０１は、試料１の三次元画像を表示する。
【００３５】
ＣＰＵ３００には、さらに入力装置４０２が接続されている。使用者は、マウス等の入力装置４０２を用いて、表示装置４０１に表示された試料１の三次元画像の任意の標的部分の輪郭をマウスポインタでなぞり、標的部分を三次元形状で取り囲む。ＣＰＵ３００に含まれる標的部分特定部３０１は、マウスポインタの軌跡である三次元形状の三次元座標を特定し、試料１の標的部分の輪郭の三次元座標として、記憶装置４０３に保存する。あるいは、標的部分特定部３０１は、パターン認識、及び明度の判別等により、標的部分の輪郭の三次元座標を自動的に抽出してもよい。
【００３６】
切断レーザー光源４１は、例えば、波長範囲が２００ｎｍ以上３００ｎｍ以下である深紫外（ＤＵＶ）レーザー光を切断レーザー光として発する。切断レーザー光源４１から発せられた切断レーザー光は、例えば、ラインフィルター４２を通過する。切断レーザー光は、反射鏡４３で、ステージ１０に対して垂直方向上側に反射され、さらに反射鏡４４で、ステージ１０と平行方向に反射される。切断レーザー光は、ｘｙθアパーチャー４５を経て、レンズ４６で集光され、例えばガルバノスキャナーを備える位置制御機構４７を経て、対物レンズ４８に入射し、試料１の切断位置で集光される。
【００３７】
切断レーザー光がＤＵＶ光である場合、レンズ４６等で、切断レーザー光の焦点サイズ（直径）は、例えば４００ｎｍ以上１０μｍ以下に集束される。これにより、試料をより正確に切断することが可能となる。なお、切断レーザー光の焦点サイズは、標的部分の大きさに応じて変化させてもよい。
【００３８】
位置制御機構４７は、試料１の三次元画像から得られる標的部分の断面形状に基づき、例えばガルバノスキャナーを駆動して、試料１に対する切断レーザーの入射位置及び入射角を変化させる。例えば、位置制御機構４７は、記憶装置４０３から、試料１の標的部分の輪郭の三次元座標の情報を読み取り、切断レーザー光の焦点が試料１の標的部分の輪郭に沿って移動するよう、ガルバノミラー等を駆動する。ここで、試料１の標的部分の断面形状の輪郭がステージ１０の表面に対して垂直であれば、位置制御機構４７は、切断レーザー光を試料１に対して垂直に入射させる。また、試料１の標的部分の断面形状の輪郭がステージ１０の表面に対して傾斜していれば、位置制御機構４７は、切断レーザー光を試料１に対して斜めに入射させる。
【００３９】
ステージ１０を移動させるステージ駆動機構が位置制御機構４７に含まれていてもよい。図２に示すように、ステージ駆動機構がステージ１０を傾斜させることによっても、試料１に対する切断レーザー光の入射角を変化させることが可能である。ステージ１０とステージ駆動機構の組み合わせとしては、ゴニオステージ等が使用可能である。ガルバノスキャナーとステージ駆動機構が協調して、試料１に対する切断レーザーの入射位置及び入射角を変化させてもよい。試料１に対する切断レーザー光の入射角は、例えば０°以上９０°以下の範囲で変化する。
【００４０】
例えば、図３に示すように、試料の二次元上面画像で観察された標的部分の輪郭が、試料の深さ方向において変化する場合がある。試料の深さ方向において、標的部分の輪郭が大きくなる場合、試料の二次元上面画像で観察された標的部分の輪郭に沿って試料を切断すると、深さ方向において輪郭が大きくなった部分を採取できない。
【００４１】
また、試料の二次元上面画像で観察された標的部分の輪郭からマージンをとって、周囲の部分を幅広く含むように試料を切断すると、採取された標的部分の周囲に、標的部分ではない不要な部分が付着する。例えば標的部分が正常細胞に囲まれた異常細胞である場合、採取された異常細胞に正常細胞が付着していると、異常細胞に含まれるタンパク質や核酸について分析する際に、正常細胞からのタンパク質や核酸が混在し、異常細胞のタンパク質や核酸を正確に分析することができない。
【００４２】
これに対し、図４に示すように、標的部分の深さ方向においても、標的の輪郭に沿って試料を切断レーザー光で切断することにより、試料から標的部分を正確に切り出すことが可能となる。
【００４３】
また、例えば、図５に示すように、標的部分が試料の断面方向に埋もれている場合も、切断レーザー光で試料を垂直に切断すると、図６に示すように、標的部分の上下に、標的部分以外の試料が付着する。これに対し、図７に示すように、ステージを傾斜させたり、図８に示すように、切断レーザー光の光学系を駆動させたりすることにより、標的部分の深さ方向の輪郭に沿って試料を切断レーザー光で切断して、試料から標的部分を正確に切り出すことが可能となる。
【００４４】
以上説明したように、第１の実施の形態に係るレーザーマイクロダイセクターによれば、標的部分の深さ方向において、標的の輪郭が四角のみならず、円や三角、多角形状であっても、正確に試料を切断することが可能となる。
【００４５】
また、切断レーザー光として、波長が３５５ｎｍの紫外（ＵＶ）光を用いると、切断レーザー光を照射された試料の部分の温度が上昇し、高温により試料内の分子間結合が破壊され、試料が切断される。これに対し、切断レーザー光として、波長が２６６ｎｍ等のＤＵＶ光を用いると、試料内の分子間結合がＤＵＶ光によって直接切断される。そのため、ＤＵＶ光による切断部位は、ＵＶ光による切断部位と比較して、発熱が抑制され、切削空間分解能が向上する。また、ＵＶ光により試料を切断する場合は、発熱を伴うため、パラフィン等により試料を固定する必要があるが、ＤＵＶ光により試料を切断する場合は、試料を固定しなくともよい。
【００４６】
（第２の実施の形態）
第１の実施の形態では、図１に示すように、顕微鏡２０として共焦点ラマン顕微分光装置を使用する例を説明した。これに対し、第２の実施の形態に係るレーザーマイクロダイセクターでは、図９に示すように、顕微鏡２０として共焦点顕微鏡ではない三次元画像を取得可能な光学顕微鏡を用いてもよい。
【００４７】
光源１２１は、レーザー光又は白色光等の照明光を照射するレーザー又はハロゲンランプである。照明光は、例えば、対物レンズ４８を経て、試料１に照射される。試料１を透過した透過照明光は、対物レンズ１２７を経て、反射鏡１２８でステージ１０と平行方向に反射される。反射鏡１２８で反射された透過照明光は、レンズ１３０で集光されて、検出器１３１で受光される。検出器１３１は、受光した透過照明光を光電変換し、電気信号を出力する。
【００４８】
第２の実施の形態において、画像生成部３０２は、検出器１３１から電気信号を受け取り、試料１の二次元画像をまず生成する。さらに、画像生成部３０２は、デコンボリューション法等により、試料１の二次元画像から、試料１の三次元画像を生成する。ここで、デコンボリューション法とは、非焦点面以外で生じる光の拡散から、点像分布関数（ＰＳＦ）を用いた数学的な演算により、二次元画像から三次元画像を生成する手法である。ＰＳＦは、例えばビーズ等の形状の分かっている物体の二次元画像を取得し、二次元画像における光のぼけ具合から得ることができる。
【００４９】
第２の実施の形態に係るレーザーマイクロダイセクターのその他の構成要素は、第１の実施の形態と同様である。共焦点顕微鏡の照明光又は励起光よりも、共焦点顕微鏡ではない顕微鏡の照明光又は励起光は、エネルギーが弱い傾向にある。そのため、試料１の三次元画像を取得する際に、共焦点顕微鏡ではない顕微鏡を用いれば、試料１へのダメージを抑制することが可能となる。
【００５０】
（第３の実施の形態）
第３の実施の形態に係るレーザーマイクロダイセクターは、図１０に示すように、切断レーザー光で単離された標的部分を採取及び回収するマニピュレーター６０をさらに備える。マニピュレーター６０は、例えば図１１に示すように、標的部分を含む液体が毛細管現象により内部を上昇するキャピラリー６１を備える。キャピラリー６１は、例えば、アクリル樹脂、及びポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）等の透明材料からなる。
【００５１】
標的部分がキャピラリー６１の内壁に付着しないよう、キャピラリー６１の内壁は親水性であることが好ましい。例えば、図１２に示すように、キャピラリー６１の内壁に微細な凹凸を設けたり、粗面化したりすることにより、キャピラリー６１の内壁を親水性にすることができる。あるいは、プラズマ処理及び化学蒸着（ＣＶＤ）等によりキャピラリー６１の内壁を親水性にしてもよい。また、親水性の程度を、キャピラリー６１の導入口から奥に向けて上昇させることにより、標的部分を含む液体が毛細管現象によりキャピラリー６１内部の奥深くまで上昇することが可能となる。
【００５２】
図１３に示すように、マニピュレーター６０は、例えば、図１０に示す記憶装置４０３から試料１の標的部分の輪郭の三次元座標の情報を読み取り、標的部分の近傍に図１３に示すキャピラリー６１の導入口を近づけてもよい。第３の実施の形態に係るレーザーマイクロダイセクターのその他の構成要素は、第１又は第２の実施の形態と同様である。
【００５３】
（第４の実施の形態）
第４の実施の形態に係るレーザーマイクロダイセクターは、図１４に示すように、切断レーザー光で単離された標的部分を採取及び回収するマニピュレーター６０が、図１５に示すカンチレバー６２を備える。カンチレバー６２としては、原子間力顕微鏡（ＡＦＭ）で使用されるカンチレバーが使用可能である。
【００５４】
例えば、標的部分と特異的に結合する分子でカンチレバー６２のチップを修飾することにより、分子間の親和力を用いて標的部分を回収することが可能である。例えば、予め、標的部分をビオチンで修飾し、カンチレバー６２のチップをアビジンで修飾して、標的部分にカンチレバー６２のチップを近づけることにより、ビオチン−アビジン結合により、標的部分を採取及び回収することが可能である。標的部分を採取及び回収には、その他のタンパク質相互作用、及び核酸相互作用等を用いてもよい。また、あるいは、標的部分を磁性粒子で修飾し、磁性を付与されたカンチレバー６２のチップで標的部分を採取及び回収してもよい。
【００５５】
図１４に示すマニピュレーター６０は、例えば、記憶装置４０３から試料１の標的部分の輪郭の三次元座標の情報を読み取り、標的部分の近傍に図１５に示すカンチレバー６２のチップを近づけてもよい。第４の実施の形態に係るレーザーマイクロダイセクターのその他の構成要素は、第１又は第２の実施の形態と同様である。
【００５６】
（その他の実施の形態）
上記のように本発明を実施の形態によって記載したが、この開示の一部をなす記述及び図面はこの発明を限定するものであると理解するべきではない。この開示から当業者には様々な代替実施の形態、実施例及び運用技術が明らかになるはずである。例えば、第１の実施の形態では、顕微鏡として共焦点ラマン顕微分光装置を用いた例を示したが、三次元画像を取得可能な共焦点レーザー顕微鏡、蛍光顕微鏡、及び電子顕微鏡等を用いてもよい。例えば、標的物質を蛍光物質や色素で染色すると、試料の三次元画像において、標的部分の表面のみが光って観察される。例えば、三次元画像を、明度に関して所定の値を基準にして二値化し、明るい部分のみを抽出することによって、標的部分の三次元座標を得ることが可能となる。また、試料は、生体試料以外の人工物であってもよい。さらに、例えば、図１６に示すように、標的部分を磁性粒子で修飾し、マニピュレーターとしての電磁石６３で標的物質を回収してもよい。試料から複数単離された標的物質を、幅広の電磁石６３で一度に回収してもよい。このように、本発明はここでは記載していない様々な実施の形態等を包含するということを理解すべきである。
【符号の説明】
【００５７】
１     試料
１０   ステージ
２０   顕微鏡
２１   励起光源
２２   ラインフィルター
２３、２４、２８、４３、４４、５３    反射鏡
２５、３０、４６、５１        レンズ
２６   ハーフミラー
２７、４８     対物レンズ
２９   バンドパスフィルタ
４１   切断レーザー光源
４２   ラインフィルター
４５   アパーチャー
４７   位置制御機構
５０   ラマン分光器
５２   ピンホール
５４、５６     凹面反射鏡
５５   回折格子
５７   検出器
６０   マニピュレーター
６１   キャピラリー
６２   カンチレバー
６３   電磁石
１２１ 光源
１２７ 対物レンズ
１２８ 反射鏡
１３０ レンズ
１３１ 検出器
３０１ 標的部分特定部
３０２ 画像生成部
４０１ 表示装置
４０２ 入力装置
４０３ 記憶装置
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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