(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（Ｉ）の化合物またはその塩：
【化１】
0006795606.tif 000070
（式中、
ＡＡ１は存在しないか、またはＮ−メチル−フェニルアラニン、Ｎ−メチル−トリプトファン、Ｎ−メチル−チロシンおよびＮ−メチル−イソロイシンからなる群から選択されるアミノ酸由来の残部であり、
ＡＡ２は存在しないか、またはＮ−メチル−フェニルアラニン、Ｎ−メチル−アラニン、Ｎ−メチル−β−アラニンおよびＮ−メチル−ロイシンからなる群から選択されるアミノ酸由来の残部であり、
Ｇは、１〜１０個の炭素原子を含む直鎖状または分枝状アルキレン残部であり、ここで、前記残部における１個以上の非隣接メチレン部分（−ＣＨ２−）は、対応する酸素原子（−Ｏ−）によって置き換えられ得、
Ｒ１は、水素およびフェニルからなる群から選択され、
Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は独立して、水素およびフッ素からなる群から選択され、
Ｒ５およびＲ６は独立して、水素およびフッ素からなる群から選択される）。
【請求項２】
ＡＡ１およびＡＡ２が存在しない、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｇが、−ＣＨ２−、−（ＣＨ２）３−、−（ＣＨ２）５−、−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＨ３）−ＣＨ２−、−（ＣＨ２）７−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ３）−、−Ｏ−（ＣＨ２）３−、−（ＣＨ２）１３−および−ＣＨ２−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−ＣＨ２−からなる群から選択される、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１−Ｇが、ＣＨ３−（ＣＨ２）２−、ＣＨ３−ＣＨ（ＣＨ３）−ＣＨ２−、フェニル−Ｏ−（ＣＨ２）３−、ＣＨ３−（ＣＨ２）６−、ＣＨ３−（ＣＨ２）４−およびＣＨ３−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＨ３−ＣＨ２−ＣＨ３）−からなる群から選択される、請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ２、Ｒ３およびＲ４の１個が水素である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ２、Ｒ３およびＲ４の１個が水素であり、他の２個がフッ素原子である、請求項５に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ２、Ｒ３およびＲ４によって置換されている前記フェニル基が３，５−ジフルオロフェニルである、請求項６に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ５およびＲ６が両方とも水素である、上記請求項のいずれかに記載の化合物。
【請求項９】
式：
【化２】
0006795606.tif 000071
の請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１０】
・（２Ｓ）−１−アセチル−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−３−［（４−フルオロベンゾイル）アミノ］−１−（ヒドロキシカルバモイル）プロピル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−Ｎ−メチル−ピロリジン−２−カルボキサミド
・（２Ｓ）−１−アセチル−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−３−［（３，５−ジフルオロベンゾイル）アミノ］−１−（ヒドロキシカルバモイル）プロピル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−Ｎ−メチル−ピロリジン−２−カルボキサミド
・（２Ｓ）−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−３−［（３，５−ジフルオロベンゾイル）アミノ］−１−（ヒドロキシカルバモイル）プロピル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−１−ヘキサノイル−Ｎ−メチル−ピロリジン−２−カルボキサミド
・（２Ｓ）−１−ブタノイル−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−３−［（３，５−ジフルオロベンゾイル）アミノ］−１−（ヒドロキシカルバモイル）プロピル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−Ｎ−メチル−ピロリジン−２−カルボキサミド
・（２Ｓ）−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−３−［（３，５−ジフルオロベンゾイル）アミノ］−１−（ヒドロキシカルバモイル）プロピル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−Ｎ−メチル−１−（３−メチルブタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド
・（２Ｓ）−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−３−［（３，５−ジフルオロベンゾイル）アミノ］−１−（ヒドロキシカルバモイル）プロピル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−Ｎ−メチル−１−オクタノイル−ピロリジン−２−カルボキサミド
・（２Ｓ）−Ｎ−［（１Ｓ，２Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−３−［（３，５−ジフルオロベンゾイル）アミノ］−１−（ヒドロキシカルバモイル）プロピル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−４，４−ジフルオロ−１−ヘキサノイル−Ｎ−メチル−ピロリジン−２−カルボキサミド
・（２Ｓ）−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−３−［（３，５−ジフルオロベンゾイル）アミノ］−１−（ヒドロキシカルバモイル）プロピル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−Ｎ−メチル−１−（２−プロピルペンタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド
・（２Ｓ）−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−３−［（３，５−ジフルオロベンゾイル）アミノ］−１−（ヒドロキシカルバモイル）プロピル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−Ｎ−メチル−１−（４−フェノキシブタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド
・（２Ｓ）−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−３−［（３，５−ジフルオロベンゾイル）アミノ］−１−（ヒドロキシカルバモイル）プロピル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−４，４−ジフルオロ−Ｎ−メチル−１−（４−フェノキシブタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド
・（２Ｓ）−１−［（２Ｓ）−２−［アセチル（メチル）アミノ］−３−フェニル−ブタノイル］−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−３−［（３，５−ジフルオロベンゾイル）アミノ］−１−（ヒドロキシカルバモイル）プロピル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−Ｎ−メチル−ピロリジン−２−カルボキサミド
・（２Ｓ）−１−［（２Ｓ）−２−［アセチル（メチル）アミノ］プロパノイル］−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−３−［（３，５−ジフルオロベンゾイル）アミノ］−１−（ヒドロキシカルバモイル）プロピル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−Ｎ−メチル−ピロリジン−２−カルボキサミド
・（２Ｓ）−１−［３−［アセチル（メチル）アミノ］プロパノイル］−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−３−［（３，５−ジフルオロベンゾイル）アミノ］−１−（ヒドロキシカルバモイル）プロピル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−Ｎ−メチル−ピロリジン−２−カルボキサミド
・（２Ｓ）−１−［（２Ｓ）−２−［［２−［ブタノイル（メチル）アミノ］−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパノイル］−メチル−アミノ］−４−メチル−ペンタノイル］−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−３−［（３，５−ジフルオロベンゾイル）アミノ］−１−（ヒドロキシカルバモイル）プロピル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−Ｎ−メチル−ピロリジン−２−カルボキサミド
・（２Ｓ）−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−３−ベンズアミド−１−（ヒドロキシカルバモイル）プロピル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−Ｎ−メチル−１−ヘキサノイル−ピロリジン−２−カルボキサミド
・（２Ｓ，４Ｒ）−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−３−ベンズアミド−１−（ヒドロキシカルバモイル）プロピル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−４−フルオロ−Ｎ−メチル−１−ペンタノイル−ピロリジン−２−カルボキサミド
またはそれらの薬学的に許容され得る塩、エナンチオマーまたはジアステレオマー、もしくは溶媒和物からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項１１】
請求項１〜１０のいずれか一項に記載の化合物と、薬学的に許容され得る担体、アジュバントまたはビヒクルとを含む、医薬組成物。
【請求項１２】
てんかん、統合失調症、アルツハイマー病、（特に、脆弱性Ｘ症候群に関連する）自閉症、精神遅滞、双極性障害、気分障害、例えば双極性障害、うつ病、血管疾患、例えば虚血性脳卒中およびアテローム性動脈硬化症、炎症性疾患、例えば多発性硬化症および関節リウマチ、および炎症性腸疾患、薬物中毒、神経因性疼痛、肺疾患、例えば喘息および慢性閉塞性肺疾患、癌ならびに敗血症の予防および／または治療のための、請求項１１に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ゼラチナーゼ阻害剤と、それらの調製方法と、それらを含む医薬組成物と、ゼラチナーゼの阻害が有用な症状、例えばてんかん、統合失調症、アルツハイマー病、（特に、脆弱性Ｘ症候群に関連する）自閉症、精神遅滞、気分障害、例えば双極性障害、うつ病、血管疾患、例えば虚血性脳卒中およびアテローム性動脈硬化症、炎症性疾患、例えば多発性硬化症、関節リウマチおよび炎症性腸疾患、薬物中毒、神経因性疼痛、肺疾患、例えば喘息および慢性閉塞性肺疾患、癌ならびに敗血症の治療および／または予防におけるそれらの使用とに関する。
【背景技術】
【０００２】
細胞外マトリックス（ＥＣＭ）は支持構造として作用するだけではなく、神経発達および神経再生、シナプス可塑性、神経興奮ならびにネットワーク活動の恒常性調節にもかなりの影響を及ぼすという証拠が蓄積されている。実際、ＥＣＭは、ネットワーク動作に対して、それ故に認知などの生理学的過程に対して著しい影響を与える。ゼラチナーゼはマトリックスファミリー（ＭＭＰ）に属し、ＥＣＭタンパク質ならびに多数の非ＥＣＭタンパク質、例えば成長因子、サイトカイン、ケモカイン、細胞表面受容体、セリンプロテイナーゼ阻害因子および他のＭＭＰを分解することができる亜鉛依存性エンドペプチダーゼによって形成される。ＭＭＰは、分泌型プロテアーゼまたは膜結合型プロテアーゼのいずれかであり、生殖、成長、発生、血管新生、免疫応答、創傷治癒および脳生理学において主要な生理学的役割を果たす。腫瘍進行、神経変性、脳卒中、炎症およびウイルス感染症を含む多数の病的症状の間には、ＭＭＰ、特にゼラチナーゼ（ＭＭＰ−２またはゼラチナーゼＡおよびＭＭＰ−９またはゼラチナーゼＢ）の発現が増強される。
【０００３】
脳におけるゼラチナーゼＭＭＰ−９に関する最初の研究においては、変性成分を伴う様々な病的症状におけるその果たし得る役割に焦点が当てられた。より最近、ＭＭＰ−９は、脳生理学における重要なプレーヤーとして、特にシナプス可塑性における重要な分子であるとして現れた。これらの知見は、神経精神病学的症状、例えばてんかん、統合失調症、アルツハイマー病、（特に、脆弱性Ｘ症候群に関連する）自閉症、精神遅滞、双極性障害、気分障害、例えば双極性障害、うつ病および薬物中毒にＭＭＰ−９が関与する可能性を実証する研究につながった。
【０００４】
統合失調症においては、異常なシナプス可塑性をもたらすグルタミン酸シグナル伝達の変化が記載されている。ＭＭＰ−９は、グルタミン酸受容体を調節し、生理学的および形態学的なシナプス可塑性をモデュレートすることが示されている。機能的遺伝子多型、抗精神病薬に対する遺伝子応答および血漿レベルによって、最近、ＭＭＰ−９は統合失調症に関係付けられている。この疾患は知覚および認知の障害を伴い、陽性症候、陰性症候および認知症候（これらは、神経回路の改変、シナプス接続の揺らぎおよび樹状突起棘の変化を反映すると考えられる）の三徴に至る。注目すべきことに、ＭＭＰ−９遺伝子が位置する染色体領域２０ｑ１１−１３は、精神障害に関して広く研究されており、統合失調症に関連付けられている。ＭＭＰ−９は、海馬および前頭前野皮質の機能に影響を与え、統合失調症（前頭前野皮質障害が最も一般的な病理学的所見の１つである症状）に潜在的に関与する興味深い候補分子である。さらに、統合失調症に関わる標的候補タンパク質のいくつかは、ＭＭＰ−９またはＭＭＰ−９相互作用タンパク質、例えばとりわけ脳由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ）およびＮ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸（ＮＭＤＡ）受容体のいずれかとの機能的接続を有する。複数の著者によって報告されているように、統合失調症患者の血漿中において、ＭＭＰ−９レベルの異常な上昇が見出されている（Ｙａｍａｍｏｒｉ，Ｈ．ｅｔ  ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  Ｌｅｔｔ．，２０１３，（５５６）：３７−４１）。
【０００５】
てんかんの病因におけるＭＭＰの関与の証拠が蓄積されている。この疾患は、てんかん発作を発生させる永続的な素因と、この症状の神経生物学的、認知的、心理学的および社会的な帰結とを特徴とする脳障害である。長時間の発作は、高血清ＭＭＰ−９レベルに関係することが実証されている。さらに重要なことに、てんかん手術中に得られた脳組織における最近の研究においては、限局性皮質形成異常症（Ｋｏｎｏｐｋａ，Ａ．ｅｔ  ａｌ．，Ｅｐｉｌｅｐｓｙ  Ｒｅｓ．，２０１３，（１−２）：４５−５８）および結節硬化（Ｌｉ，Ｓ．ｅｔ  ａｌ．，Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ，２０１２，（１４５３）：４６−５５）のてんかん病変における、ならびに基礎細胞構築異常を伴わない側頭葉てんかんを有する患者のてんかん皮質病変または海馬病変におけるＭＭＰ−９免疫応答性の増加が報告された。抗体マイクロアレイの中立的なアプローチを使用して、限局性皮質形成異常症を有する患者由来の組織においては、ＭＭＰ−９に加えてＭＭＰ−１、−２、−３、−８、−１０および−１３の発現が上昇していることが見出された（Ｋｏｎｏｐｋａ，Ａ．ｅｔ  ａｌ．，Ｅｐｉｌｅｐｓｙ  Ｒｅｓ．，２０１３，（１−２）：４５−５８）。しかしながら、これらのプロテイナーゼの発現は、ＭＭＰ−９の発現ほど顕著ではなく、および／または患者間で一貫していなかった。これらの他のＭＭＰの中でも特に、成人患者におけるＭＭＰ−２のアップレギュレーションが顕著であった。
【０００６】
自閉症スペクトラム障害（ＡＳＤ）は、３つのコアドメイン（社会的相互作用、言語および利益範囲）の症候群によって特定されるが、ほとんどの場合、それらの病因は不明である。ＦＸＳを有する個体の大部分（４６％）がＡＳＤと同時診断されるので、脆弱性Ｘ症候群（ＦＸＳ）は、自閉症の主要な遺伝的原因である。ＦＸＳを有する個体においては、ＭＭＰ−９の高い血漿活性が報告されているのに対して（Ｌｅｉｇｈ，Ｍ．Ｊ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｄｅｖ  Ｂｅｈａｖ  Ｐｅｄｉａｔｒ，２０１３，（３４）：１８４９−１８５７）、ＡＳＤの母親由来の羊水においては、ＭＭＰ−９のタンパク質量の上昇が検出された（Ａｂｄａｌｌａｈ，Ｍ．Ｗ．ｅｔ  ａｌ．，Ａｕｔｉｓｍ  Ｒｅｓ，２０１２，（５）：４２８−４３３）。したがって、高レベルのＭＭＰ−９とＡＤＳとの間には、明確な関連性が存在する。
【０００７】
ＭＭＰ−９はまた、ヒト薬物中毒、双極性障害およびうつ病に関わっている。機能的であるＣ（−１５６２）ＴのＭＭＰ−９遺伝子多型は、より高いまたはより低いＭＭＰ−９発現をもたらすので、その分析により、関連性の１つが提供される。この多型の頻度は、健常被験体と、双極性障害または統合失調症を患っている患者とを区別することが報告されている（Ｈａｎ，Ｈ．ｅｔ  ａｌ．，Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ  Ｒｅｓ，２０１１，（１９０）：１６３−１６４）。この多型は、アルコール依存症にも関連付けられている（Ｓａｍｏｃｈｏｗｉｅｃ  Ａ  ｅｔ  ａｌ，Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ，２０１０，１３２７：１０３−６）。これに加えて、ＭＭＰ−９遺伝子多型は、双極性男性における前頭前野認知をモデュレートすることが見出されている。双極性うつ病中の若年患者においては、ＭＭＰ−９レベルの増加が報告されている（Ｒｙｂａｋｏｗｓｋｉ，Ｊ．Ｋ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ａｆｆｅｃｔ  Ｄｉｓｏｒｄ，２０１３，（１４６）：２８６−２８９）。うつ病においては、高レベルの血漿中ＭＭＰ−９が検出されており、この血清レベルはうつ病の重症度と相関する（Ｙｏｓｈｉｄａ，Ｔ．ｅｔ  ａｌ．，ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ，２０１２，（７）：ｅ４２６７６）。
【０００８】
ＭＭＰ−９はまた、アルツハイマー病（ＡＤ）などの変性疾患に関連付けられると言われている。ＭＭＰは、ＡＤにおけるＡβペプチドの形成およびクリアランスに関与することが示されている。事実、ＡＤを有する患者の脳組織および血液においては、特に、アミロイド斑を取り囲む反応性星状細胞においては、ＭＭＰ−９レベルの増加が観察されているが、これは、プラーク蓄積に対する局所組織応答を示唆している。いくつかの研究においては、このメタロプロテイナーゼがインビトロおよびインビボにおいてＡβ異化に関与し、インビトロにおいてＡβ原線維を分解し、インサイチューにおいてＡβプラークを分解することができる唯一の酵素であることが立証されている。加えて、ＭＭＰ−９は受容体媒介性ｓＡＰＰ−α放出に関与し、インビボの脳内においてα−セクレターゼ様活性を示すことが報告されている（Ｆｒａｇｋｏｕｌｉ，Ａ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ，２０１２，（１２１）：２３９−２５１）。ＭＭＰ−２／ＭＭＰ−９の合成阻害剤は、初代培養におけるＡβ媒介性ニューロン死を減少させる（Ｍｉｚｏｇｕｃｈｉ，Ｈ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｅｘｐ  Ｔｈｅｒ，２００９，（３３１）：１４−２２）。同じ研究において、ＧＭ６０００１治療は、Ａβの脳室内投与に対して神経保護的であり、マウスの認知を改善した。また、ＭＭＰ−９ＫＯマウスは、野生型マウスにおいてはＡβ注射によって誘導された記憶障害を経験しなかった。
【０００９】
ＭＭＰ−９はまた、シナプス可塑性に関するもの以外の過程および疾患症状に関与することが特定されている。これらの症状としては、血管疾患、肺疾患および炎症性疾患ならびに癌が挙げられる。これに関して、ＭＭＰ−９および比較的程度は低いがＭＭＰ−２は、血管疾患、例えば虚血性脳卒中およびアテローム性動脈硬化症、神経因性疼痛、炎症性疾患、例えば多発性硬化症、関節リウマチおよび炎症性腸疾患、多発性硬化症、敗血症、癌、肺疾患、例えば喘息および慢性閉塞性肺疾患に関連付けられている。
【００１０】
虚血性脳卒中は、（局所血栓症または動脈塞栓症から生じる）血液供給不足の結果であり、組織酸素化の減少をもたらし、その結果、壊死性およびアポトーシス性の両方の細胞死につながり得る生体エネルギー障害をもたらす。一時的な灌流低下後の血液循環の回復は、組織損傷を悪化させ得るロバストな炎症応答をもたらす。次いで、炎症細胞の蓄積は、虚血組織における高レベルの活性酸素種および活性窒素種ならびに炎症性サイトカインの原因となる。その発現および活性のすべてのレベルにおけるＭＭＰ−９の劇的な増加は、脳卒中転帰の特徴である。ＭＭＰ−９は、長期可塑性、血管再構成および血管新生、免疫応答ならびに炎症などの脳卒中後事象に関与する。ＭＭＰ、特にＭＭＰ−９の遮断（ＫＯマウスを含む）は、虚血性脳卒中およびその転帰に対して保護的であることが実証されている（Ｃｈａｔｕｒｖｅｄｉ，Ｍ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．，２０１４，（４９）：５６３−５７３）。
【００１１】
神経因性疼痛の基本的発症機構は依然としてほとんど不明であるので、神経系に対する複数の傷害によってトリガーされる神経因性疼痛の治療は、臨床的な課題である。しかしながら、最近の研究においては、神経傷害後のラットおよびマウスにおける初期および後期神経因性疼痛発症は、異なるＭＭＰを必要とすることが報告されている。脊髄神経傷害後、ＭＭＰ−９は、神経因性疼痛の初期と一致して、傷害後根神経節（ＤＲＧ）一次感覚ニューロンにおける迅速な一過性アップレギュレーションを示すのに対して、ＭＭＰ−２は、神経因性疼痛の後期と一致して、ＤＲＧ衛星細胞および脊髄星状細胞における応答の遅延を示す。ＭＭＰ−９阻害剤またはＴＩＭＰ−１（ＭＭＰ−９の内因性組織阻害因子）のくも膜下投与は、傷害後数日間（＜１０）に機械的アロディニア（疼痛刺激後の中枢性疼痛感作）の発症を遅延させる。しかしながら、ＭＭＰ−９の阻害は、脳傷害後１０日間行ってもアロディニアに対して効果がなく、これは、神経因性疼痛の初期発症におけるＭＭＰ−９の重要な役割を示している。ＭＭＰ−９と比較して、脊髄神経傷害後のＭＭＰ−２アップレギュレーションは、遅延パターンを示す。ＴＩＭＰ−２（ＭＭＰ−２の内因性阻害因子）または小分子ＭＭＰ−２合成阻害剤のくも膜下投与は、傷害後１日目にアロディニアを部分的に減弱させるが、その後１０日以内にアロディニアをほぼ完全に遮断する。これは、神経因性疼痛の後期におけるＭＭＰ−２の関与を示している。（Ｋａｗａｓａｋｉ，Ｙ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，２００８，（３）：３３１−３３６）。
【００１２】
炎症応答の間、基底隔膜を含む組織壁を通る白血球の通過は、これらの細胞が、ＥＣＭをリモデルリングし得る酵素を備える場合にのみ可能である。したがって、ＭＭＰは、炎症細胞の重要なエフェクター分子である。ＭＭＰは、血管疾患においておよび炎症後の再生期においてトリガーされると、自己免疫疾患中の急性炎症および慢性炎症において、スイッチとしてまたは繊細なターナーとして作用し得る。したがって、ＭＭＰ生物学は、急性および慢性の炎症過程および虚血過程の定義段階、実行段階および回復段階において重要であるので、ＭＭＰ阻害剤はこれらを妨害し得る。急性炎症および慢性炎症、例えばエンドトキシンショック、多発性硬化症および関節リウマチの多くの動物モデルにおいて、ＭＭＰ阻害剤が試験されている。現代の病院においては、菌血症、敗血症およびエンドトキシンショックは、最も多い死亡原因である。細菌細胞壁成分は、ｔｏｌｌ様受容体の活性化によって系統的応答を誘導し、炎症性サイトカインおよび酵素の過剰産生をもたらす。ＭＭＰ−９欠損マウスは、細菌誘導性毒性に対する変化した抵抗性を有するのに対して、プロテアーゼ阻害因子欠損マウスは、エンドトキシンショックに対してより感受性である。
【００１３】
多発性硬化症は、遺伝的素因と、環境因子と、中枢神経系を損傷する免疫学的エフェクター機構とによって影響を受ける多因子疾患である。ＭＭＰ−９は、多発性硬化症における免疫エフェクター分子である（Ｏｐｄｅｎａｋｋｅｒ，Ｇ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｌａｎｃｅｔ  Ｎｅｕｒｏｌ．，２００３，（２）：７４７−７５６）。それは、結合組織および血管壁を通る細胞遊走において機能し、血液脳関門を損傷する。それはまた、多発性硬化症および他の神経学的疾患に関連するタンパク質基質、例えばミエリンタンパク質、細胞接着分子、サイトカインおよびケモカインを分解する。炎症性ＣＮＳ損傷におけるＭＭＰ−９の有害な役割を裏付ける証拠は、動物モデルにおいて得られている。マウス実験的自己免疫性脳脊髄炎（ＥＡＥ）は、疾患症候群の発症中にゼラチナーゼＭＭＰ−２およびＭＭＰ−９の両方がアップレギュレートされる多発性硬化症モデルである（Ｇｉｊｂｅｌｓ，ｋ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ｒｅｓ．，１９９３，（３６）：４３２−４４０）。幼若ＭＭＰ−９欠損マウスは、ＥＡＥの発症に対する抵抗性を有する。ダブルＭｍｐ２／Ｍｍｐ９ノックアウトマウスは、ＥＡＥの発症に対して完全に抵抗性である。ＭＭＰ阻害剤を使用したいくつかの研究において、ＭＭＰ活性の薬理学的阻害は、ＥＡＥの経過を改善する（Ｈｅｗｓｏｎ，Ａ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｆｌａｍｍ．Ｒｅｓ．，１９９５，（４４）：３４５−３４９）。ＭＭＰ阻害剤の使用はまた、関節リウマチの治療において有用であり得る。ＭＰＰ−９は、慢性関節リウマチ中のコラーゲンＩＩの分解に関与し、免疫優性エピトープの曝露および放出をもたらす。加えて、ＭＭＰは、炎症性白血球の遊走に重要である。これは、ＭＭＰ阻害剤が関節リウマチの治療において有用であり得ることを示唆しており、これは、異なる動物モデルにおいて確認されている考え方である（Ａｇｒａｗａｌ，Ｓ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，２００６，（２０３）：１００７−１０１９）。
【００１４】
アテローム性動脈硬化症および関連疾患（心筋梗塞および脳卒中を含む）は、慢性炎症性疾患と頻繁に比較されている。これは、泡沫状マクロファージの活性化、サイトカインおよびケモカインの局所産生、ならびにＭＭＰの関与などの組織病理学的所見に基づくものである。動物モデルと遺伝子改変マウス（トランスジェニックおよびノックアウトの両方）との併用により、ＭＭＰは、血管病状において重要な役割を果たすという見解が補強された（Ｊａｎｓｓｅｎｓ，Ｓ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｒｄｉｏｖｓａｃ．Ｒｅｓ．，２００６，（６９）：５８５−５９４およびＴａｙｅｂｊｅｅ，Ｍ．Ｈ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，２００５，（１２）：９１７−９２５）。ＭＭＰ−９レベルは、特発性心房細動の進行と共に増加し（Ｌｉ，Ｍ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｎｔ．Ｍｅｄ．Ｒｅｓ．，２０１４，（１）：２２４−２３０）、大動脈瘤の発症に関連する（Ｎｅｗｍａｎ，Ｋ．Ｍ．，ｅｔ  ａｌ．，Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ  ａｎｄ  ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ：ａ  ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｖａｓｃｕｌａｒ  ｂｉｏｌｏｇｙ，１９９４，（８）：１３１５−１３２０）ことが報告されている。ＭＭＰ−９の阻害は、大動脈瘤の成長を抑制する（Ｌｉｎｄｅｍａｎ，Ｊ．Ｈ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，２００９，（１１９）：２２０９−２２１６）。心筋梗塞後の突然死は、心臓破裂（ＭＭＰが関与する過程）によって起こり得る。マウス研究において、メタロプロテアーゼの内因性組織阻害因子（ＴＩＭＰ）とのバランスにおけるゼラチナーゼの重要な役割が実証されている。心筋梗塞は、ＭＭＰ−２の経口阻害剤を用いてマウスを治療することによって回復し得る（Ｍａｔｓｕｍｕｒａ，Ｓ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．，２００５，（１１５）：５５９−６０９）。
【００１５】
ＭＭＰ−９は、潰瘍性大腸炎およびクローン病を含む慢性炎症性疾患の病因において重要な役割を有し（Ａｂｒａｈａｍ，Ｃ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｎ  Ｅｎｇ  Ｊ  Ｍｅｄ．，２００９，（３６１）：２０６６−２０７８）、結腸組織におけるそのアップレギュレーションは、ヒトにおける炎症性腸疾患の活動性炎症と一致することが示されている（Ｇａｏ，Ｑ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｄｉｇ  Ｌｉｖｅｒ  Ｄｉｓ．，２００５，（３７）：５８４−５９２）。ヒト標本からのデータと一致して、炎症性腸疾患のマウスモデルにおける炎症結腸組織において、ＭＭＰ−２およびＭＭＰ−９タンパク質発現の上昇および活性化が観察されている。また、ＭＭＰ−９ノックアウトマウスならびにＭＭＰ−２およびＭＭＰ−９ダブルノックアウトマウスにおいて、大腸炎が軽減することが示されている。したがって、ＭＭＰ−２およびＭＭＰ−９の同時阻害は、炎症性腸疾患において治療的に有効である（Ｇｒａｇ，Ｐ．，ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔ  Ｌｉｖｅｒ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．，２００９，（２８４）：１５３５３−１５３５７）。
【００１６】
癌の死亡率は主に、転移予防の失敗のためである。新たな証拠は、癌播種の初期局面におけるＭＭＰの役割を強調している（Ｋｅｓｓｅｎｂｒｏｃｋ，Ｋ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｃｅｌｌ，２０１０，（１４１）：５２−６７）。ＥＣＭを分解する酵素は、長い間、腫瘍進行に必須であると見なされていた。腫瘍細胞は、腫瘍を取り囲むマトリックス障壁を破壊する酵素であって、周囲の結合組織への浸潤、血管の出入り、および遠隔器官への転移を可能にする酵素を産生すると想定される。ＭＭＰは、ＥＣＭのすべての構造成分を分解する能力を有する。また、実質的にすべてのヒトおよび動物腫瘍において、ならびにほとんどの腫瘍細胞株において、ＭＭＰはアップレギュレートされている（Ｃｏｕｓｓｅｎｓ，Ｌ．Ｍ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２００２，（２９５）：２３８７−２３９２）。ＭＭＰ−９は、癌の浸潤に関連する。コラーゲンおよびラミニンを分解するＭＭＰ−９の能力は、細胞遊走を調節して血管新生および腫瘍成長を増加させるその能力と相関するので、組織および血液におけるＭＭＰ−９レベルの上昇が癌患者において観察されることは、ＭＭＰ−９を癌治療のための魅力的な標的にする（Ｂｊｏｒｋｌｕｎｄ，Ｍ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｉｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ａｃｔａ，２００５，（１７５５）：３７−６９）。
【００１７】
病的肺症状においては、ＭＭＰおよびそれらの生理学的阻害因子（ＴＩＭＰ）は、異なる構造細胞集団によって気道において異常に過剰発現および産生される。これらの生物学的活性の交互変化は、創傷治癒および細胞輸送においていくつかの劇的な効果を有する。刺激された構造細胞または炎症細胞による様々なＭＭＰの脱調節は、喘息、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、肺線維症および肺癌含む多数の肺疾患の病態生理に関与すると考えられている（Ｄｅｍｅｄｔｓ，Ｉ．Ｋ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，２００５，（５）：２５７−６３）。炎症過程は、細胞外マトリックスリモデリングおよびコラーゲン沈着を特徴とし、そしてＭＭＰ−９レベルの増加を要求する（Ｋｅｌｌｙ，Ｅ．Ａ．，ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ  Ｊ  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｃｒｉｔ  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ，２０００，（１６２）：１１５７−１１６１）。ＣＯＰＤの治療において最近証明されているように、ＭＭＰ−９の選択的阻害は、これらの関連慢性炎症性肺疾患における治療的利益を促進すると考えられている（Ｘｉｅ，Ｓ．Ｓ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｉｎｔ  Ｍｅｄ  Ｒｅｓ，２０１４，（４２）：１２７２−１２８４）。
【００１８】
これらの実験的証拠によれば、ＭＭＰ−２およびＭＭＰ−９の強力な阻害剤であり、コラゲナーゼ（ＭＭＰ−１）、ストロメライシン（ｓｔｒｏｍｌｙｓｉｎｓ）（ＭＭＰ−３）およびマトリリシン（ｍａｔｒｙｌｉｓｉｎｓ）（ＭＭＰ−７）などの他のＭＭＰに関して選択的な新規化合物を見出す必要性が存在する。
【発明の概要】
【００１９】
本発明者らは、式（Ｉ）の化合物のファミリーが、高い効力によってゼラチナーゼＭＭＰ−２およびＭＭＰ−９を阻害することができ、コラゲナーゼ（ＭＭＰ−１）、ストロメリシン（ＭＭＰ−３）およびマトリリシン（ＭＭＰ−７）などの他のＭＭＰを阻害するそれらの能力に関して選択的であることを成功裏に見出した。上記説明のように、ＭＭＰ−２およびＭＭＰ−９は前記疾患に関与することが公知であり、非選択的ゼラチナーゼ阻害剤を使用する場合に生じる副次的効果のレベルを減少させるためには、選択性が所望の特性であることも公知であるので、これら２つの特性により、本発明の化合物は、てんかん、統合失調症、アルツハイマー病、（特に、脆弱性Ｘ症候群に関連する）自閉症、精神遅滞、双極性障害、気分障害、例えば双極性障害、うつ病、血管疾患、例えば虚血性脳卒中およびアテローム性動脈硬化症、炎症性疾患、例えば多発性硬化症、関節リウマチ、および炎症性腸疾患、薬物中毒、神経因性疼痛、肺疾患、例えば喘息および慢性閉塞性肺疾患、癌ならびに敗血症の治療において使用するための理想的な候補となる。
【００２０】
したがって、本発明の１つの態様は、式（Ｉ）：
【化１】
0006795606.tif 000002
（式中、
ＡＡ１は存在しないか、またはＮ−メチル−フェニルアラニン、Ｎ−メチル−トリプトファン、Ｎ−メチル−チロシンおよびＮ−メチル−イソロイシンからなる群から選択されるアミノ酸由来の残部であり、
ＡＡ２は存在しないか、またはＮ−メチル−フェニルアラニン、Ｎ−メチル−アラニン、Ｎ−メチル−β−アラニンおよびＮ−メチル−ロイシンからなる群から選択されるアミノ酸由来の残部であり、
Ｇは、１〜１０個の炭素原子を含む直鎖状または分枝状アルキレン残部であり、ここで、前記残部における１個以上の非隣接メチレン部分（−ＣＨ２−）は、対応する酸素原子（−Ｏ−）によって置き換えられ得、
Ｒ１は、水素およびフェニルからなる群から選択され、
Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は独立して、水素およびフッ素からなる群から選択され、
Ｒ５およびＲ６は独立して、水素およびフッ素からなる群から選択される）を有する化合物またはその塩に関する。
【００２１】
本発明の別の態様は、上記において定義される式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容され得る塩、プロドラッグもしくは溶媒和物を調製するための方法に関する。
【００２２】
本発明の別の態様は、上記において定義される式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容され得る塩、プロドラッグもしくは溶媒和物と、薬学的に許容され得る担体、アジュバントまたはビヒクルとを含む医薬組成物について言及する。
【００２３】
本発明の別の態様は、医薬として使用するための、特に、てんかん、統合失調症、アルツハイマー病、（特に、脆弱性Ｘ症候群に関連する）自閉症、精神遅滞、双極性障害、気分障害、例えば双極性障害、うつ病、血管疾患、例えば虚血性脳卒中およびアテローム性動脈硬化症、炎症性疾患、例えば多発性硬化症、関節リウマチ、および炎症性腸疾患、薬物中毒、神経因性疼痛、肺疾患、例えば喘息および慢性閉塞性肺疾患、癌ならびに敗血症を予防および／または治療するための、上記において定義される式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容され得る塩について言及する。
【００２４】
本発明の別の態様は、好ましくは哺乳動物におけるてんかん、統合失調症、アルツハイマー病、（特に、脆弱性Ｘ症候群に関連する）自閉症、精神遅滞、双極性障害、気分障害、例えば双極性障害、うつ病、血管疾患、例えば虚血性脳卒中およびアテローム性動脈硬化症、炎症性疾患、例えば多発性硬化症、関節リウマチ、および炎症性腸疾患、薬物中毒、神経因性疼痛、肺疾患、例えば喘息および慢性閉塞性肺疾患、癌ならびに敗血症を治療または予防するための方法であって、治療量の上記において定義される式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容され得る塩、プロドラッグもしくは溶媒和物を、前記治療を必要とする患者に投与する方法について言及する。
【００２５】
本発明の別の態様は、医薬を調製するための、特に、てんかん、統合失調症、アルツハイマー病、（特に、脆弱性Ｘ症候群に関連する）自閉症、精神遅滞、双極性障害、気分障害、例えば双極性障害、うつ病、血管疾患、例えば虚血性脳卒中およびアテローム性動脈硬化症、炎症性疾患、例えば多発性硬化症、関節リウマチ、および炎症性腸疾患、薬物中毒、神経因性疼痛、肺疾患、例えば喘息および慢性閉塞性肺疾患、癌ならびに敗血症からなる群から選択される疾患を予防および／または治療するための、上記において定義される式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容され得る塩、プロドラッグもしくは溶媒和物の使用について言及する。
【発明を実施するための形態】
【００２６】
本発明との関連において、式Ｎ（Ｍｅ）Ｈ−Ｒ−ＣＯＯＨの「アミノ酸由来の残部」という用語は、ビラジカル−Ｎ（Ｍｅ）−Ｒ−ＣＯ−として理解すべきである。
【００２７】
本発明との関連において、「アルキレン」という用語は、式−ＣｎＨ２ｎ−の直鎖状または分枝状炭化水素残部を指定するために使用される。
【００２８】
本発明との関連において、アルキレン基において、１個以上の非隣接メチレン（−ＣＨ２−）が対応する酸素原子（−Ｏ−）によって置き換えられると言われる場合、それは、前記メチレンの１個以上が存在せず、その場所が、対応する酸素原子形成およびエーテル（−Ｏ−）結合によって占有されるが、ただし、２個の隣接メチレン基は、酸素原子によって同時に置き換えられ得ない（すなわち、生じる鎖は、ペルオキシド基（−Ｏ−Ｏ−）を含有し得ない）ことを意味する。結果として、前記改変アルキレン残部の実験式は、ＣｍＨ２ｍＯｘであろう。前記基の非限定的な例は、ｎ−プロポキシ、１−［２−（２−エトキシ−エトキシ）−エトキシ］−プロピルおよび２−メトキシ−エトキシメチルである。
【００２９】
本発明との関連において、アミノ酸またはアミノ酸残部について立体異性が示されていない場合、前記アミノ酸またはアミノ酸残部の可能な立体異性体のいずれかについて言及されていると理解すべきである。例えば、イソロイシン（Ｉｌｅ）への言及は、Ｄ−イソロイシンおよびＬ−イソロイシンを含む。
【００３０】
本発明との関連において、いくつかの略語および頭字語が使用されており、それらの意味は以下に提供されている：
【００３１】
Ａｌｌｏｃ：アリルオキシカルボニル
Ｄａｂ：２，４−ジアミノ酪酸
ＤＢＵ：１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン
ＤＣＭ：ジクロロメタン
ＤＩＥＡ：Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＦ：ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド
ＤＩＣ：Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド
ＥＤＣ：１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド
Ｆｍｏｃ：フルオレニルメチルオキシカルボニル
ＨＦＩＰ：ヘキサフルオロ−２−プロパノールまたはヘキサフルオロイソプロパノール
ＨＯＡｔ：１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール
ＨＰＬＣ：高速液体クロマトグラフィー
ＨＰＬＣ−ＭＳ：高速液体クロマトグラフィー−質量分析
ＭｅＯＨ：メタノール
Ｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅ：エチルシアノ（ヒドロキシイミノ）アセテート
ＰｙＢＯＰ：ベンゾトリアゾール−１−イル−オキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート
ＴＢＴＵ：Ｏ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムテトラフルオロ−ボレート
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸
ＴＩＳ：トリイソプロピルシラン
Ｔｒｉｓ：トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタンまたは２−アミノ−２−ヒドロキシメチル−プロパン−１，３−ジオール
【００３２】
「塩」という用語は、本発明に従って使用される活性化合物の任意の形態であって、前記化合物がイオン形態であるか、または帯電して対イオン（カチオンまたはアニオン）にカップリング（会合）しているか、または溶液である任意の形態と理解しなければならない。この定義はまた、第四級アンモニウム塩ならびに活性分子と他の分子およびイオンとの錯体、特にイオン相互作用を介して形成された錯体を含む。この定義は、特に、生理学的に許容され得る塩を含む；この用語は、「薬理学的に許容され得る塩」または「薬学的に許容され得る塩」と同等であると理解されなければならない。
【００３３】
本発明との関連において、「薬学的に許容され得る塩」という用語は、特にヒトおよび／または哺乳動物において適用または使用される治療のために適切な方法によって使用した場合に生理学的に忍容性である任意の塩を意味する（通常、特に対イオンの結果としてそれが毒性ではないことを意味する）。これらの生理学的に許容され得る塩は、カチオンまたは塩基によって形成され得、本発明との関連においては、特にヒトおよび／または哺乳動物に対して使用した場合に、本発明に従って使用される少なくとも１つの化合物（通常は（脱プロトン化された）酸）、例えばアニオンによって形成される塩であると理解される。これらの生理学的に許容され得る塩はまた、アニオンまた酸によって形成され得、本発明との関連においては、特にヒトおよび／または哺乳動物に対して使用した場合に、本発明に従って使用される（通常は（プロトン化された）少なくとも１つの化合物、例えばプロトン化窒素、例えばカチオンおよび少なくとも１つの生理学的に忍容性のアニオンによって形成される塩であると理解される。具体的には、この定義は、本発明との関連においては、特にヒトおよび／または哺乳動物に対して使用した場合に、生理学的に忍容性の酸によって形成される塩、すなわち、特定の活性化合物と生理学的に忍容性の有機酸または無機酸との塩を含む。
【００３４】
薬学的に許容され得る酸としては、無機酸、例えば塩酸、硫酸、リン酸、二リン酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸および硝酸ならびに有機酸、例えばクエン酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、アスコルビン酸、シュウ酸、コハク酸、酒石酸、酢酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸およびｐ−トルエンスルホン酸が挙げられる。薬学的に許容され得る塩基としては、アルカリ金属（例えば、ナトリウムまたはカリウム）、アルカリ土類金属（例えば、カルシウムまたはマグネシウム）の水酸化物および有機塩基（例えば、アルキルアミン、アリールアルキルアミンおよび複素環アミン）が挙げられる。
【００３５】
本発明の他の好ましい塩は、等価のアニオン（Ｘ−）がＮ原子の正電荷と結合した第四級アンモニウム化合物である。Ｘ−は、例えば、様々な鉱酸のアニオン、例えば塩化物、臭化物、ヨウ化物、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩など、または有機酸のアニオン、例えば酢酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、クエン酸塩、シュウ酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、リンゴ酸塩、マンデル酸塩、トリフルオロ酢酸塩、メタンスルホン酸塩およびｐ−トルエンスルホン酸塩であり得る。Ｘ−は、好ましくは、塩化物、臭化物、ヨウ化物、硫酸塩、硝酸塩、酢酸塩、マレイン酸塩、シュウ酸塩、コハク酸塩およびトリフルオロ酢酸塩から選択されるアニオンである。より好ましくは、Ｘ−は、塩化物、臭化物、トリフルオロ酢酸塩またはメタンスルホン酸塩である。
【００３６】
本発明の「溶媒和物」という用語は、本発明の活性化合物の任意の形態であって、前記活性化合物が非共有結合によって別の分子（通常は極性溶媒）に結合した任意の形態（特に、水和物および例えばメタノール和物のようなアルコール和物を含む）を意味すると理解すべきである。好ましい溶媒和物は、水和物である。
【００３７】
式（Ｉ）の化合物のプロドラッグである任意の化合物もまた、本発明の範囲内である。「プロドラッグ」という用語はその最も広い意味において使用され、インビボにおいて本発明の化合物に変換される誘導体を含む。プロドラッグの例としては、限定されないが、生物加水分解性アミド、生物加水分解性エステル、生物加水分解性カルバメート、生物加水分解性カーボネート、生物加水分解性ウレイドおよび生物加水分解性ホスフェート類似体などの生物加水分解性部分を含む式（Ｉ）の化合物の誘導体および代謝産物が挙げられる。好ましくは、カルボキシル官能基を有する化合物のプロドラッグは、カルボン酸の低級アルキルエステルである。好都合には、カルボン酸エステルは、分子上に存在するカルボン酸部分のいずれかをエステル化することによって形成される。プロドラッグは、典型的には、周知の方法、例えばＢｕｒｇｅｒ”Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ６ｔｈ  ｅｄ．（Ｄｏｎａｌｄ，Ｊ．，Ａｂｒａｈａｍ  ｅｄ．，２００１，Ｗｉｌｅｙ）、”Ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ”（Ｈ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄ  ｅｄ．，１９８５，Ｈａｒｗｏｏｄ  Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ）およびＫｒｏｇｓｇａａｒｄ−Ｌａｒｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．”Ｔｅｘｔｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｄｒｕｇ  ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ”Ｔａｙｌｏｒ＆Ｆｒａｎｃｉｓ（Ａｐｒｉｌ  ２００２）に記載されているものを使用して調製され得る。
【００３８】
上記式（Ｉ）によって表される本発明の化合物は、キラル中心の存在に応じて、エナンチオマーおよび／またはジアステレオマーを含み得る。単一異性体、エナンチオマーまたはジアステレオマーおよびそれらの混合物は、本発明の範囲内である。
【００３９】
さらに、本明細書において言及される任意の化合物は、互変異性体として存在し得る。具体的には、互変異性体という用語は、化合物の２つ以上の構造異性体の１つであって、平衡状態において存在し、一方の異性体から別の異性体に容易に変換されるものを指す。一般的な互変異性ペアは、アミン−イミン、アミド−イミド酸、ケト−エノール、ラクタム−ラクティムなどである。
【００４０】
特に指定がない限り、本発明の化合物はまた、同位体標識形態（すなわち、１個以上の同位体濃縮原子の存在のみが異なる化合物）を含むことを意味する。例えば、デューテリウムもしくはトリチウムによる少なくとも１個の水素原子の置換、または１３Ｃ−もしくは１４Ｃ濃縮炭素による少なくとも１個の炭素の置換、または１５Ｎ濃縮窒素による少なくとも１個の窒素の置換を除いて本構造を有する化合物は、本発明の範囲内である。
【００４１】
式（Ｉ）の化合物またはその塩もしくは溶媒和物は、好ましくは、薬学的に許容され得る形態または実質的に純粋な形態である。薬学的に許容され得る形態は、とりわけ、希釈剤および担体などの通常の医薬添加剤を除いて薬学的に許容され得るレベルの純度を有し、通常の投与量レベルにおいて毒性があると考えられる物質を含まないことを意味する。薬物物質の純度レベルは、好ましくは５０％超、より好ましくは７０％超、最も好ましくは９０％超である。好ましい実施形態において、それは、式（Ｉ）の化合物またはその塩、溶媒和物もしくはプロドラッグの９５％超である。
【００４２】
前記のように、「薬学的に許容され得る塩、溶媒和物、プロドラッグ」という用語は、レシピエントに投与すると、本明細書に記載される化合物を提供（直接的または間接的に）することができる任意の塩、溶媒和物または任意の他の化合物を指す。しかしながら、式（Ｉ）の化合物の薬学的に許容され得ない塩、溶媒和物およびプロドラッグもまた、前記化合物の薬学的に許容され得る塩、溶媒和物およびプロドラッグの調製において有用であり得るので、本発明の範囲内であると認識されよう。塩、溶媒和物およびプロドラッグの調製は、当技術分野において公知の方法によって行われ得る。
【００４３】
本発明の１つの実施形態において、基ＡＡ１は、Ｎ−メチル−トリプトファンおよびＮ−メチル−イソロイシンからなる群から選択されるアミノ酸由来の残部である。
【００４４】
本発明の１つの実施形態において、基ＡＡ１およびＡＡ２は存在しない。
【００４５】
本発明の別の実施形態において、Ｇは、−ＣＨ２−、−（ＣＨ２）３−、−（ＣＨ２）５−、−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＨ３）−ＣＨ２−、−（ＣＨ２）７−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ３）−、−Ｏ−（ＣＨ２）３−、−（ＣＨ２）１３−および−ＣＨ２−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−ＣＨ２−からなる群から選択される。
【００４６】
本発明の別の実施形態において、Ｒ１−Ｇは、ＣＨ３−、ＣＨ３−（ＣＨ２）２−、ＣＨ３−ＣＨ（ＣＨ３）−ＣＨ２−、ＣＨ３−（ＣＨ２）６−、ＣＨ３−（ＣＨ２）４−、ＣＨ３−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ３）−、フェニル−Ｏ−（ＣＨ２）３−、ＣＨ３−（ＣＨ２）６−Ｏ−（ＣＨ２）３−および−ＣＨ２−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−ＣＨ２−からなる群から選択される。
【００４７】
本発明の別の実施形態において、Ｒ１−Ｇは、ＣＨ３−（ＣＨ２）２−、ＣＨ３−ＣＨ（ＣＨ３）−ＣＨ２−、フェニル−Ｏ−（ＣＨ２）３−、ＣＨ３−（ＣＨ２）６−、ＣＨ３−（ＣＨ２）４−およびＣＨ３−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＨ３−ＣＨ２−ＣＨ３）−からなる群から選択される。この実施形態において定義される化合物は、血液脳関門を特に良く通過する。
【００４８】
本発明の別の実施形態において、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４の１個は、水素である。
【００４９】
本発明の別の実施形態において、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４の１個は水素であり、他の２個はフッ素原子である。
【００５０】
本発明の別の実施形態において、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４によって置換されているフェニル基は、３，５−ジフルオロフェニルである。
【００５１】
本発明の別の実施形態において、Ｒ５およびＲ６は両方とも、水素である。
【００５２】
本発明の１つの実施形態において、上記において定義される式（Ｉ）の化合物は、以下の式：
【化２】
0006795606.tif 000003
に示されている立体異性を有する。
【００５３】
さらなる好ましい実施形態において、異なる置換基について上記に記載されている好ましいものが組み合わされる。本発明はまた、上記式における好ましい置換のこのような組み合わせを対象とする。
【００５４】
式（Ｉ）に該当する本発明の特定の個々の化合物としては、以下に列挙されている化合物が挙げられる：
・（２Ｓ）−１−アセチル−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−３−［（４−フルオロベンゾイル）アミノ］−１−（ヒドロキシカルバモイル）プロピル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−Ｎ−メチル−ピロリジン−２−カルボキサミド
・（２Ｓ）−１−アセチル−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−３−［（３，５−ジフルオロベンゾイル）アミノ］−１−（ヒドロキシカルバモイル）プロピル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−Ｎ−メチル−ピロリジン−２−カルボキサミド
・（２Ｓ）−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−３−［（３，５−ジフルオロベンゾイル）アミノ］−１−（ヒドロキシカルバモイル）プロピル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−１−ヘキサノイル−Ｎ−メチル−ピロリジン−２−カルボキサミド
・（２Ｓ）−１−ブタノイル−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−３−［（３，５−ジフルオロベンゾイル）アミノ］−１−（ヒドロキシカルバモイル）プロピル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−Ｎ−メチル−ピロリジン−２−カルボキサミド
・（２Ｓ）−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−３−［（３，５−ジフルオロベンゾイル）アミノ］−１−（ヒドロキシカルバモイル）プロピル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−Ｎ−メチル−１−（３−メチルブタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド
・（２Ｓ）−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−３−［（３，５−ジフルオロベンゾイル）アミノ］−１−（ヒドロキシカルバモイル）プロピル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−Ｎ−メチル−１−オクタノイル−ピロリジン−２−カルボキサミド
・（２Ｓ）−Ｎ−［（１Ｓ，２Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−３−［（３，５−ジフルオロベンゾイル）アミノ］−１−（ヒドロキシカルバモイル）プロピル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−４，４−ジフルオロ−１−ヘキサノイル−Ｎ−メチル−ピロリジン−２−カルボキサミド
・（２Ｓ）−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−３−［（３，５−ジフルオロベンゾイル）アミノ］−１−（ヒドロキシカルバモイル）プロピル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−Ｎ−メチル−１−（２−プロピルペンタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド
・（２Ｓ）−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−３−［（３，５−ジフルオロベンゾイル）アミノ］−１−（ヒドロキシカルバモイル）プロピル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−Ｎ−メチル−１−（４−フェノキシブタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド
・（２Ｓ）−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−３−［（３，５−ジフルオロベンゾイル）アミノ］−１−（ヒドロキシカルバモイル）プロピル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−４，４−ジフルオロ−Ｎ−メチル−１−（４−フェノキシブタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド
・（２Ｓ）−１−［（２Ｓ）−２−［アセチル（メチル）アミノ］−３−フェニル−プロパノイル］−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−３−［（３，５−ジフルオロベンゾイル）アミノ］−１−（ヒドロキシカルバモイル）プロピル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−Ｎ−メチル−ピロリジン−２−カルボキサミド
・（２Ｓ）−１−［（２Ｓ）−２−［アセチル（メチル）アミノ］プロパノイル］−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−３−［（３，５−ジフルオロベンゾイル）アミノ］−１−（ヒドロキシカルバモイル）プロピル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−Ｎ−メチル−ピロリジン−２−カルボキサミド
・（２Ｓ）−１−［３−［アセチル（メチル）アミノ］プロパノイル］−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−３−［（３，５−ジフルオロベンゾイル）アミノ］−１−（ヒドロキシカルバモイル）プロピル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−Ｎ−メチル−ピロリジン−２−カルボキサミド
・（２Ｓ）−１−［（２Ｓ）−２−［［２−［ブタノイル（メチル）アミノ］−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパノイル］−メチル−アミノ］−４−メチル−ペンタノイル］−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−３−［（３，５−ジフルオロベンゾイル）アミノ］−１−（ヒドロキシカルバモイル）プロピル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−Ｎ−メチル−ピロリジン−２−カルボキサミド
・（２Ｓ）−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−３−ベンズアミド−１−（ヒドロキシカルバモイル）プロピル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−Ｎ−メチル−１−ヘキサノイル−ピロリジン−２−カルボキサミド
・（２Ｓ，４Ｒ）−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−３−ベンズアミド−１−（ヒドロキシカルバモイル）プロピル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−４−フルオロ−Ｎ−メチル−１−ペンタノイル−ピロリジン−２−カルボキサミド
またはそれらの薬学的に許容され得る塩、異性体、プロドラッグもしくは溶媒和物。
【００５５】
上記において定義される式（Ｉ）の化合物は、以下の一般スキームによって例示されているように、利用可能な合成手順によって得られ得る：
【００５６】
式（Ｉ）の化合物の合成経路の詳細な説明
代替手段Ｉ：
そのカルボニル基を介してＮα−Ｆｍｏｃ−Ｎγ−Ａｌｌｏｃ−２，４−ジアミノ酪酸（Ｆｍｏｃ−Ｄａｂ（Ａｌｌｏｃ）−ＯＨ）にカップリングされるために適切なポリマー支持体であって、２−クロロトリチル樹脂（ＩＩＩ）などのＣ末端カルボン酸基の切断により生じるポリマー支持体を、ポリエチレン多孔質ディスク（反応容器）が取り付けられたシリンジに入れる。適切な有機溶媒、例えばジクロロメタン（ＤＣＭ）およびジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）によって洗浄することによって、樹脂を膨潤させる。
【化３】
0006795606.tif 000004
【００５７】
ポリマー支持体の膨潤後、適切な有機溶媒、例えばＤＭＦ中、アミン塩基、例えばＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ）を使用して、Ｆｍｏｃ−Ｄａｂ（Ａｌｌｏｃ）−ＯＨを樹脂に結合させる。混合物を１時間撹拌する。その後、混合物をろ過せずに無水メタノールを添加して、樹脂の残りの未反応部位をキャッピングする。ろ過および洗浄後、アミン塩基溶液、例えばピペリジンのＤＭＦ溶液および／またはピペリジン／ＤＢＵ／トルエン／ＤＭＦの混合物による処理によって、Ｆｍｏｃを除去して式（ＩＶ）の生成物を得る。ろ液および洗浄液を容量フラスコに収集し、最初のアミノ酸が固定されたら、達成された樹脂のローディングをＵＶ測定によって定量する。また、カイザー試験を使用して、Ｆｍｏｃ除去を評価する。
【化４】
0006795606.tif 000005
【００５８】
適切な有機溶媒、例えばＤＭＦ中、添加剤、例えば１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール（ＨＯＡｔ）およびアミン塩基、例えばＤＩＥＡの存在下または非存在下において、活性化剤、例えばベンゾトリアゾール−１−イル−オキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＰｙＢＯＰ）を使用して、式（Ｖ）：
【化５】
0006795606.tif 000006
の化合物を式（ＩＶ）の化合物に結合させて、式（ＶＩ）
【化６】
0006795606.tif 000007
の生成物を得る。混合物を１〜２時間の総反応時間にわたって撹拌する。カイザー試験を使用してカップリングの程度をモニタリングし得、必要な場合には同じ条件下において再カップリングを行う。
【００５９】
アミン塩基溶液、例えばピペリジンのＤＭＦ溶液および／またはピペリジン／ＤＢＵ／トルエン／ＤＭＦの混合物によって、式（ＶＩ）の化合物からＦｍｏｃ保護基を除去して、式（ＶＩＩａ）の化合物を得る。
【化７】
0006795606.tif 000008
【００６０】
次いで、最初に、式（ＶＩＩａ）の化合物をアミノ保護基、例えばオルト−ニトロベンゼンスルホニル（ｏＮＢＳ）クロリドと反応させて、式（ＶＩＩＩ）の化合物を得る。
【化８】
0006795606.tif 000009
【００６１】
次いで、メチル化剤、例えば７−メチル−１，５，７−トリアザビシクロ［４．４．０］デカ−５−エンおよびパラ−ニトロベンゼンスルホン酸の混合物を使用して、上述の化合物をメチル化して、式（ＩＸ）の生成物を得る。
【化９】
0006795606.tif 000010
【００６２】
続いて、β−メルカプトエタノールおよびＤＢＵによって樹脂を処理することによって、オルト−ニトロベンゼンスルホニル（ｏＮＢＳ）保護基を除去して、式（ＶＩＩ）の化合物を得る。
【化１０】
0006795606.tif 000011
【００６３】
式（Ｖ）の化合物をカップリングおよびメチル化したら、適切な有機溶媒、例えばＤＭＦ中、添加剤、例えばＨＯＡｔおよびアミン塩基、例えばＤＩＥＡの存在下または非存在下において、活性化剤、例えばＰｙＢＯＰを使用して、式（Ｘ）
【化１１】
0006795606.tif 000012
（式中、Ｒ５およびＲ６は、上記において定義されるとおりである）のＦｍｏｃ−プロリン−ＯＨ誘導体をカップリングして、式（ＸＩ）の生成物を得る。混合物を１〜２時間の総反応時間にわたって撹拌する。カイザー試験を使用してカップリングの程度をモニタリングし得、必要な場合には同じ条件下において再カップリングを行う。アミン塩基溶液、例えばピペリジンのＤＭＦ溶液および／またはピペリジン／ＤＢＵ／トルエン／ＤＭＦの混合物によって、式（Ｘ）のプロリン誘導体からＦｍｏｃ保護基を除去して、式（ＸＩ）の化合物を得る。
【化１２】
0006795606.tif 000013
【００６４】
適切な有機溶媒、例えばＤＭＦ中、添加剤、例えばＨＯＡｔおよびアミン塩基、例えばＤＩＥＡの存在下または非存在下において、活性化剤、例えばＰｙＢＯＰを使用して、Ｆｍｏｃ−ＡＡ２−ＯＨ（ＡＡ２は、上記において定義されるとおりである）を式（ＸＩ）の生成物に固定して、式（ＸＩＩ）
【化１３】
0006795606.tif 000014
の生成物を得る。混合物を１〜２時間の総反応時間にわたって撹拌する。クロラニル試験を使用してカップリングの程度をモニタリングし得、必要な場合には同じ条件下において再カップリングを行う。アミン塩基溶液、例えばピペリジンのＤＭＦ溶液および／またはピペリジン／ＤＢＵ／トルエン／ＤＭＦの混合物によって、ＡＡ２からＦｍｏｃ保護基を除去して、式（ＩＩＩ）の化合物を得る。
【化１４】
0006795606.tif 000015
【００６５】
適切な有機溶媒、例えばＤＭＦ中、添加剤、例えばＨＯＡｔおよびアミン塩基、例えばＤＩＥＡの存在下または非存在下において、活性化剤、例えばＰｙＢＯＰを使用して、Ｆｍｏｃ−ＡＡ１−ＯＨ（ＡＡ１は、上記において定義されるとおりである）を式（ＸＩＩ）の生成物に結合させて、式（ＸＩＶ）
【化１５】
0006795606.tif 000016
の生成物を得る。混合物を１〜２時間の総反応時間にわたって撹拌する。カイザー試験を使用してカップリングの程度をモニタリングし得、必要な場合には同じ条件下において再カップリングを行う。アミン塩基溶液、例えばピペリジンのＤＭＦ溶液および／またはピペリジン／ＤＢＵ／トルエン／ＤＭＦの混合物によって、ＡＡ１からＦｍｏｃ保護基を除去して、式（ＸＶ）の化合物を得る。
【化１６】
0006795606.tif 000017
【００６６】
基Ｒ１−ＧＣＯ−を用いて、式（ＸＶ）の化合物のアミノ基をキャッピングして、式（ＸＶＩ）の化合物を得る。添加剤、例えばＨＯＡｔの存在下または非存在下、活性化剤、例えばＰｙＢＯＰの存在下または非存在下、アミン塩基、例えばＤＩＥＡの存在下において、活性化形態のカルボン酸Ｒ１−Ｇ−ＣＯＯＨ、例えば式Ｒ１−Ｇ−ＣＯ−Ｏ−ＣＯ−Ｇ−Ｒ１の無水物または式Ｒ１−ＧＣＯ−Ｘのハロゲン化カルボニル（式中、Ｒ１およびＧは、上記において定義されるとおりであり、Ｘは、好ましくはＣｌ、ＢｒまたはＩである）を用いて、キャッピング手順を実施する。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。
【化１７】
0006795606.tif 000018
【００６７】
式（ＸＶＩ）の化合物を有機溶媒、例えばＤＣＭに懸濁し、Ｎ２を懸濁液に通してバブリングしながら、フェニルシランをそれに添加することによって、式（ＸＶＩ）の化合物からａｌｌｏｃ保護基を除去して、式（ＸＶＩＩ）の化合物を得る。次いで、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）を添加し、Ｎ２バブリングを５分間維持する。その後、反応容器を密封し、１５分間オービタルシェイキングする。この時間の後、反応物をろ過し、樹脂を十分に洗浄する。同じ処理をさらに２回繰り返す。最後の処理後、ＤＣＭ、メタノール（ＭｅＯＨ）およびＤＭＦによって樹脂を十分に洗浄する。カイザー試験を使用して、ａｌｌｏｃ保護基の除去の程度をモニタリングする。
【化１８】
0006795606.tif 000019
【００６８】
続いて、ＤＭＦ中、３当量の式（ＸＶＩＩＩ）の化合物、３当量のＮ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＰＣＤＩ）および３当量のＨＯＡｔを使用して、式（ＸＶＩＩＩ）
【化１９】
0006795606.tif 000020
（式中、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、上記において定義されるとおりである）の生成物を、式（ＸＶＩＩ）の化合物のジアミノ酪酸部分の側鎖のアミノ基にカップリングする。混合物を手動によって断続的に１時間撹拌する。次いで、反応混合物をろ別し、ＤＭＦ、ＭｅＯＨおよびＤＣＭによって樹脂を十分に洗浄する。カイザー試験を使用して、カップリング反応の程度をモニタリングする。比色試験が、カップリング反応が完全に達成されていないことを示す場合、式（ＸＶＩＩＩ）の化合物の再カップリング工程を行う。この工程により、式（ＸＩＸ）
【化２０】
0006795606.tif 000021
の化合物が得られる。
【００６９】
ヘキサフルオロ−２−プロパノール（ＨＦＩＰ）を使用して、樹脂から式（ＸＩＸ）の化合物を切断する。ＤＣＭによって樹脂を数回洗浄し、乾燥させる。ＨＦＩＰ／ＤＣＭ（１：４）混合物を式（ＸＩＸ）の化合物に添加することによって、式（ＸＸ）の化合物を得る。混合物を室温において１５分間撹拌する。反応混合物をろ過し、ＨＦＩＰ／ＤＣＭおよび次いでＤＣＭによってすすぐ。同じ条件下において、切断および洗浄工程をさらに２回繰り返す。その後、得られたろ液をプールし、真空下において溶媒を蒸発させて、式（ＸＸ）の化合物を得る。
【化２１】
0006795606.tif 000022
【００７０】
異なる手順によって、式（ＸＸ）の化合物から式（Ｉ）の化合物を得ることができ、実施例の合成に使用した２つの手順が以下に示されている：
【００７１】
手順Ａ：
ＤＣＭまたは同等の有機溶媒中、５当量のアミン塩基、例えばＮ−メチルモルホリンの存在下において、１．３当量の１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミドヒドロクロリド（ＥＤＣ・ＨＣｌ）および１．３当量の添加剤ＨＯＡｔを使用して、３．５当量の中間体Ｏ−（２，４−ジメトキシベンジル）ヒドロキシルアミンを１当量の式（ＸＸ）の化合物と反応させる。混合物を室温において２０時間反応させて、式（ＸＸＩ）の化合物を得る。ＨＰＬＣおよびＨＰＬＣ−ＭＳを使用して、反応の程度をモニタリングする。反応が完了したら、ＫＨＳＯ４、ＮａＨＣＯ３およびブラインによって反応混合物を洗浄する（各３回）。硫酸マグネシウムを使用して、得られた有機層を乾燥させ、ろ過し、真空下において蒸発させる。
【化２２】
0006795606.tif 000023
【００７２】
最後に、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）／水／トリイソプロピルシラン（ＴＩＳ）（９５：２．５：２．５）の混合物によって式（ＸＸＩ）の化合物を１時間処理することによって、式（Ｉ）の化合物を得る。ＨＰＬＣおよびＨＰＬＣ−ＭＳを使用して、反応の完全性をモニタリングする。必要があれば、ＨＰＬＣを使用して、式（Ｉ）の化合物の粗製物を精製する。
【００７３】
手順Ｂ：
冷（−２０℃）乾燥テトラヒドロフラン中、アミン塩基、例えばＮ−メチルモルホリンの存在下において、１当量の式（ＸＸ）の化合物を１．１当量のクロロギ酸イソブチルおよび２．５当量の新たに調製したヒドロキシルアミン溶液（＊）と混合する。反応物を−２０℃において２時間撹拌して、２時間以内に０℃にし、次いで、それを５℃において一晩放置する。薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）によって、反応の進行をモニタリングする。完了したら、反応物の真空下において溶媒を蒸発させて、式（Ｉ）の化合物を得る。その後、得られた粗製物を酢酸エチルに溶解し、ＫＨＳＯ４、ＮａＨＣＯ３およびブラインによって洗浄する。次いで、硫酸マグネシウムによって有機層を乾燥させ、ろ過し、蒸発させる。
【００７４】
（＊）１当量のＫＯＨと共に３当量のヒドロキシルアミンヒドロクロリドを０℃においてＭｅＯＨに溶解することによって、ヒドロキシアミン溶液を調製する。得られた混合物を０℃において１５分間撹拌する。ＫＣｌが沈殿し、ろ過によって除去する。得られたろ液をそのまま使用する。
【００７５】
代替手段ＩＩ：
そのアルコール基を介してＦｍｏｃ−ＮＨ−ＯＨにカップリングされるために適切なポリマー支持体であって、２−クロロトリチル樹脂（ＩＩＩ）などのヒドロキサム酸基の切断により生じるポリマー支持体を、ポリエチレン多孔質ディスク（反応容器）が取り付けられたシリンジに入れる。適切な有機溶媒、例えばジクロロメタン（ＤＣＭ）およびジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）によって洗浄することによって、樹脂を膨潤させる。
【化２３】
0006795606.tif 000024
【００７６】
ポリマー支持体の膨潤後、適切な有機溶媒、例えばＤＣＭ中、アミド塩基、例えばＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ）を使用して、Ｆｍｏｃ−ＮＨ−ＯＨを樹脂に結合させる。混合物を断続的に２４時間撹拌する。その後、混合物をろ過せずに無水メタノールを添加して、樹脂の残りの未反応部位をキャッピングする。ろ過および洗浄後、アミン塩基溶液、例えばＤＭＦ中ピペリジンおよび／またはピペリジン／ＤＢＵ／トルエン／ＤＭＦの混合物による処理によって、Ｆｍｏｃを除去して式（ＸＸＩＩ）の生成物を得る。ろ液および洗浄液を容量フラスコに収集し、リンカーがポリマー支持体に固定されたら、達成された樹脂のローディングをＵＶ測定によって定量する。また、カイザー試験を使用して、Ｆｍｏｃ除去を評価する。
【化２４】
0006795606.tif 000025
【００７７】
適切な有機溶媒、例えばＤＭＦ中、添加剤、例えばエチルシアノ（ヒドロキシイミノ）アセテート（Ｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅ）の存在下または非存在下において、カップリング剤、例えばＮ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）を使用して、Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎγ−Ａｌｌｏｃ−２，４−ジアミノ酪酸（Ｆｍｏｃ−Ｄａｂ（Ａｌｌｏｃ）−ＯＨ）を式（ＸＸＩＩ）のポリマー支持体に結合させて、式（ＸＸＩＩＩ）の生成物を得る。混合物を１時間の総反応時間にわたって撹拌する。カイザー試験を使用してカップリングの程度をモニタリングし得、必要な場合には同じ条件下において再カップリングを行う。
【化２５】
0006795606.tif 000026
【００７８】
アミン塩基溶液、例えばＤＭＦ中ピペリジンおよび／またはピペリジン／ＤＢＵ／トルエン／ＤＭＦの混合物を使用して、式（ＸＸＩＩＩ）の化合物からＦｍｏｃ保護基を除去して、式（ＸＸＩＶ）の化合物を得る。
【化２６】
0006795606.tif 000027
【００７９】
適切な有機溶媒、例えばＤＭＦ中、添加剤、例えばエチルシアノ（ヒドロキシイミノ）アセテート（Ｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅ）の存在下または非存在下において、活性化剤、例えばＮ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）を使用して、Ｎα−Ｆｍｏｃ−メチルイソロイシン（Ｆｍｏｃ−ＮＭｅＩｌｅ−ＯＨ）を式（ＸＸＩＶ）の化合物に結合させて、式（ＸＸＶ）の生成物を得る。混合物を１時間の総反応時間にわたって撹拌する。カイザー試験を使用してカップリングの程度をモニタリングし得、必要な場合には同じ条件下において再カップリングを行う。
【化２７】
0006795606.tif 000028
【００８０】
アミン塩基溶液、例えばＤＭＦ中ピペリジンおよび／またはピペリジン／ＤＢＵ／トルエン／ＤＭＦの混合物によって、式（ＸＸＶ）の化合物からＦｍｏｃ保護基を除去して、式（ＸＸＶＩ）の化合物を得る。
【化２８】
0006795606.tif 000029
【００８１】
式（ＸＸＶＩ）の化合物が得られたら、適切な有機溶媒、例えばＤＭＦ中、添加剤、例えばエチルシアノ（ヒドロキシイミノ）アセテート（Ｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅ）の存在下または非存在下において、カップリング剤、例えばＮ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）を使用して、式（Ｘ）
【化２９】
0006795606.tif 000030
（式中、Ｒ５およびＲ６は、上記において定義されるとおりである）のＮα−Ｆｍｏｃ−プロリン誘導体をカップリングして、式（ＸＸＶＩＩ）の生成物を得る。混合物を１時間の総反応時間にわたって撹拌する。カイザー試験を使用してカップリングの程度をモニタリングし得、必要な場合には同じ条件下において再カップリングを行う。アミン塩基溶液、例えばＤＭＦ中ピペリジンおよび／またはピペリジン／ＤＢＵ／トルエン／ＤＭＦの混合物によって、式（Ｘ）の化合物からＦｍｏｃ保護基を除去して、式（ＸＸＶＩＩ）の化合物を得る。
【化３０】
0006795606.tif 000031
【００８２】
適切な有機溶媒、例えばＤＭＦ中、添加剤、例えばエチルシアノ（ヒドロキシイミノ）アセテート（Ｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅ）の存在下または非存在下において、カップリング剤、例えばＮ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）を使用して、Ｆｍｏｃ−ＡＡ２−ＯＨ（ＡＡ２は、上記において定義されるとおりである）を式（ＸＸＶＩＩ）の生成物に固定して、式（ＸＸＶＩＩＩ）
【化３１】
0006795606.tif 000032
の生成物を得る。混合物を１時間の総反応時間にわたって撹拌する。クロラニル試験を使用してカップリングの程度をモニタリングし得、必要な場合には同じ条件下において再カップリングを行う。アミン塩基溶液、例えばＤＭＦ中ピペリジンおよび／またはピペリジン／ＤＢＵ／トルエン／ＤＭＦの混合物によって、ＡＡ２からＦｍｏｃ保護基を除去して、式（ＸＸＩＸ）の化合物を得る。
【化３２】
0006795606.tif 000033
【００８３】
適切な有機溶媒、例えばＤＭＦ中、添加剤、例えばエチルシアノ（ヒドロキシイミノ）アセテート（Ｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅ）の存在下または非存在下において、カップリング剤、例えばＮ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）を使用して、Ｆｍｏｃ−ＡＡ１−ＯＨ（ＡＡ１は、上記において定義されるとおりである）を式（ＸＸＩＸ）の生成物に結合させて、式（ＸＸＸ）
【化３３】
0006795606.tif 000034
の生成物を得る。混合物を１時間の総反応時間にわたって撹拌する。カイザー試験を使用してカップリングの程度をモニタリングし得、必要な場合には同じ条件下において再カップリングを行う。アミン塩基溶液、例えばＤＭＦ中ピペリジンおよび／またはピペリジン／ＤＢＵ／トルエン／ＤＭＦの混合物によって、式（ＸＸＸ）の化合物からＦｍｏｃ保護基を除去して、式（ＸＸＸＩ）の化合物を得る。
【化３４】
0006795606.tif 000035
【００８４】
適切な有機溶媒、例えばＤＭＦ中、添加剤、例えばエチルシアノ（ヒドロキシイミノ）アセテート（Ｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅ）の存在下または非存在下において、カップリング剤、例えばＮ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）を使用して、Ｒ１−Ｇ−部分（Ｒ１およびＧは、上記において定義されるとおりである）を式（ＸＸＸＩ）の化合物に結合させる。混合物を１時間の総反応時間にわたって撹拌する。カイザー試験を使用してカップリングの程度をモニタリングし得、化合物（ＸＸＸＩＩ）を得ることが必要な場合には同じ条件下において再カップリングを行う。
【化３５】
0006795606.tif 000036
【００８５】
式（ＸＸＸＩＩ）の化合物を有機溶媒、例えばＤＣＭに懸濁し、Ｎ２を懸濁液に通してバブリングしながら、フェニルシランをそれに添加することによって、式（ＸＸＸＩＩ）の化合物からａｌｌｏｃ保護基を除去して、式（ＸＸＸＩＩＩ）の化合物を得る。次いで、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）を添加し、Ｎ２バブリングを５分間維持する。その後、反応容器を密封し、１５分間オービタルシェイキングする。この時間の後、反応物をろ過し、樹脂を十分に洗浄する。同じ処理をさらに２回繰り返す。最後の処理後、ＤＣＭ、ＭｅＯＨおよびＤＭＦによって樹脂を十分に洗浄する。カイザー試験を使用して、ａｌｌｏｃ保護基の除去の程度をモニタリングする。
【化３６】
0006795606.tif 000037
【００８６】
続いて、適切な有機溶媒、例えばＤＭＦ中、添加剤、例えばエチルシアノ（ヒドロキシイミノ）アセテート（Ｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅ）の存在下または非存在下において、カップリング剤、例えばＮ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）を使用して、式（ＸＶＩＩＩ）
【化３７】
0006795606.tif 000038
（式中、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、上記において定義されるとおりである）の生成物を、化合物（ＸＸＸＩＩＩ）のジアミノ酪酸部分の側鎖のアミノ基にカップリングする。混合物を１時間の総反応時間にわたって撹拌する。次いで、反応混合物をろ別し、ＤＭＦ、ＭｅＯＨおよびＤＣＭによって樹脂を十分に洗浄する。カイザー試験を使用して、カップリング反応の程度をモニタリングする。比色試験が、カップリング反応が完全に達成されていないことを示す場合、式（ＸＶＩＩＩ）の化合物の再カップリング工程を行う。この工程により、式（ＸＸＸＩＶ）の化合物が得られる。
【化３８】
0006795606.tif 000039
【００８７】
酸、例えばＤＣＭ中トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）（ＴＦＡ／ＤＣＭ  ５：９５）を添加することによって、樹脂から式（ＸＸＸＩＶ）の化合物を切断する。混合物を室温において１５分間撹拌する。この時間の後、樹脂をろ別し、ＴＦＡ／ＤＣＭ（５：９５）および次いでＤＣＭによって数回洗浄する。その後、得られたろ液をプールし、真空下において溶媒を蒸発させて、式（Ｉ）の化合物を得る。
【化３９】
0006795606.tif 000040
【実施例】
【００８８】
実施例１：
（２Ｓ）−１−アセチル−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−３−［（４−フルオロベンゾイル）アミノ］−１−（ヒドロキシカルバモイル）プロピル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−Ｎ−メチル−ピロリジン−２−カルボキサミド
【化４０】
0006795606.tif 000041
【００８９】
２ｍＬのＤＭＦ中、０．８当量の市販のＦｍｏｃ−Ｌ−Ｄａｂ（Ａｌｌｏｃ）−ＯＨおよびＤＩＥＡ（４当量）を樹脂に添加する。混合物を手動によって断続的に１時間撹拌する。その後、０．５ｍＬ／ｇのＭｅＯＨを反応混合物に添加して、樹脂の残りの反応点をキャッピングする。１５分後、溶液をろ別し、ＤＣＭ、ＤＭＦおよびＭｅＯＨによって樹脂を十分に洗浄する。２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）によって樹脂を処理することによって、Ｆｍｏｃ除去を達成する。Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｌ−イソロイシン（Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｉｌｅ−ＯＨ）のカップリングのために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＴＢＴＵおよび６当量のＤＩＥＡを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。その後、混合物を樹脂に添加し、反応物を９０分間反応させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。Ｉｌｅ部分のアミノ基のＮ−メチル化のために、ＤＭＦ中、塩基としてコリジン（１０当量）を使用して、オルト−ニトロベンゼンスルホニルクロリド（４当量）によって遊離アミノ基を保護し、これを樹脂と３０分間反応させる。次いで、ＤＭＦおよびＤＣＭによって樹脂をすすぎ、同じ条件下において保護工程を再び繰り返す。カイザー試験を使用して、保護の程度をモニタリングする。ＤＭＦ中、３当量の７−メチル−１，５，７−トリアザビシクロ［４．４．０］デカ−５−エンおよび４当量のパラ−ニトロベンゼンスルホン酸によって樹脂を３０分間処理（３回の処理）することによって、アミノ基のＮ−メチル化を達成する。処理の間に、ＤＭＦおよびＤＣＭによって樹脂を十分に洗浄する。Ｉｌｅアミノ基のＮ−メチル化の後、１０当量のβ−メルカプトエタノールおよび５当量のＤＢＵ（１×１０’および１×４０’）によって樹脂を処理することによって、オルト−ニトロベンゼンスルホニル保護基を除去する。クロラニル試験を使用して、オルト−ニトロベンゼンスルホニル基の除去を評価する。次いで、Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｐｒｏ−ＯＨを結合させ、その目的のために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＴＢＴＵおよび６当量のＤＩＥＡを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。その後、混合物を樹脂に添加し、反応物を９０分間反応させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理およびピペリジン／ＤＢＵ／トルエン／ＤＭＦ（５：５：２０：７０）の混合物（１×５’）によるさらなる処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。ペプチドのＮ末端部のアセチル化のために、２０当量の無水酢酸および２０当量のＤＩＥＡを樹脂に添加する。混合物を３０分間反応させ、クロラニル試験を使用して反応の程度をモニタリングする。Ａｌｌｏｃ基の除去のために、Ｎ２を混合物に通してバブリングしながら、１０当量のフェニルシランのＤＣＭ溶液を樹脂に添加する。次いで、０．１当量のＰｄ（ＰＰｈ３）４を添加し、すべてを十分に混合しながら、Ｎ２バブリングを維持する。次いで、反応容器を密閉��、１５分間振盪する。この時間の後、反応物をろ過し、樹脂を十分に洗浄する。同じ処理をさらに２回繰り返す。最後の処理後、ＤＣＭ、ＭｅＯＨおよびＤＭＦによって樹脂を十分に洗浄する。Ｄａｂ部分の側鎖への４−フルオロ安息香酸のカップリングのために、ＤＭＦ中、３当量の前記酸、３当量のＴＢＴＵおよび６当量のＤＩＥＡを樹脂に添加する。反応物を６０分間反応させる。この時間の後、ＤＭＦおよびＤＣＭによって樹脂を洗浄し、カイザー試験によって反応の程度をモニタリングする。
【００９０】
ペプチドの切断のために、ＤＣＭによって樹脂を数回洗浄し、吸引によって乾燥させる。ＨＦＩＰ／ＤＣＭ（１：４）の溶液を添加することによって、樹脂から線状側鎖保護ペプチドを切断し、混合物を１５分間反応させる。次いで、反応混合物をろ過し、ＨＦＩＰ／ＤＣＭによって樹脂をすすぐ。この切断手順を２回繰り返す。すべてのろ液をプールし、真空下において溶媒を蒸発させる。事前に精製せずに、溶液中におけるヒドロキシアミドの形成のために、粗ペプチドを使用する。ペプチドをＤＣＭに溶解する。その後、３．５当量のＯ−（２，４−ジメトキシベンジル）ヒドロキシルアミン、５当量の４−メチルモルホリン、１．３当量のカップリング剤ＥＤＣ・ＨＣｌおよび１．３当量の添加剤ＨＯＡｔを添加し、Ｎ２雰囲気下において混合物を一晩反応させる。ＨＰＬＣを使用して、反応の程度をモニタリングする。所望の生成物が得られたら、１Ｎ  ＨＣｌ、水およびブラインによって混合物を洗浄する。硫酸マグネシウムによって有機層を脱水し、ろ過し、蒸発させる。その後、ＴＦＡ／水／ＴＩＳ（９５：２．５：２．５）の混合物を粗ペプチドに添加し、混合物を軽く２時間撹拌する。その後、Ｎ２気流下においてＴＦＡを蒸発させて、実施例１を得る。逆相クロマトグラフィーを使用して、化合物を精製する。
【００９１】
実施例２：
（２Ｓ）−１−アセチル−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−３−［（３，５−ジフルオロベンゾイル）アミノ］−１−（ヒドロキシカルバモイル）プロピル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−Ｎ−メチル−ピロリジン−２−カルボキサミド
【化４１】
0006795606.tif 000042
【００９２】
２ｍＬのＤＭＦ中、０．８当量の市販のＦｍｏｃ−Ｌ−Ｄａｂ（Ａｌｌｏｃ）−ＯＨおよびＤＩＥＡ（４当量）を樹脂に添加する。混合物を手動によって断続的に１時間撹拌する。その後、０．５ｍＬ／ｇのＭｅＯＨを反応混合物に添加して、樹脂の残りの反応点をキャッピングする。１５分後、溶液をろ別し、ＤＣＭ、ＤＭＦおよびＭｅＯＨによって樹脂を十分に洗浄する。２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）によって樹脂を処理することによって、Ｆｍｏｃ除去を達成する。Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｉｌｅ−ＯＨのカップリングのために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＴＢＴＵおよび６当量のＤＩＥＡを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。その後、混合物を樹脂に添加し、反応物を９０分間反応させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。Ｉｌｅ部分のアミノ基のＮ−メチル化のために、ＤＭＦ中、塩基としてコリジン（１０当量）を使用して、オルト−ニトロベンゼンスルホニルクロリド（４当量）によって遊離アミノ基を保護し、これを樹脂と３０分間反応させる。次いで、ＤＭＦおよびＤＣＭによって樹脂をすすぎ、同じ条件下において保護工程を再び繰り返す。カイザー試験を使用して、保護の程度をモニタリングする。ＤＭＦ中、３当量の７−メチル−１，５，７−トリアザビシクロ［４．４．０］デカ−５−エンおよび４当量のパラ−ニトロベンゼンスルホン酸によって樹脂を３０分間処理（３回の処理）することによって、アミノ基のＮ−メチル化を達成する。処理の間に、ＤＭＦおよびＤＣＭによって樹脂を十分に洗浄する。Ｉｌｅアミノ基のＮ−メチル化の後、１０当量のβ−メルカプトエタノールおよび５当量のＤＢＵ（１×１０’および１×４０’）によって樹脂を処理することによって、オルト−ニトロベンゼンスルホニル保護基を除去する。クロラニル試験を使用して、オルト−ニトロベンゼンスルホニル基の除去を評価する。次いで、Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｐｒｏ−ＯＨを結合させ、その目的のために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＴＢＴＵおよび６当量のＤＩＥＡを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。その後、混合物を樹脂に添加し、反応物を９０分間反応させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理およびピペリジン／ＤＢＵ／トルエン／ＤＭＦ（５：５：２０：７０）の混合物（１×５’）によるさらなる処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。ペプチドのＮ末端部のアセチル化のために、２０当量の無水酢酸および２０当量のＤＩＥＡを樹脂に添加する。混合物を３０分間反応させ、クロラニル試験を使用して反応の程度をモニタリングする。Ａｌｌｏｃ基の除去のために、Ｎ２を混合物に通してバブリングしながら、１０当量のフェニルシランのＤＣＭ溶液を樹脂に添加する。次いで、０．１当量のＰｄ（ＰＰｈ３）４を添加し、すべてを十分に混合しながら、Ｎ２バブリングを維持する。次いで、反応容器を密閉し、１５分間振盪する。この時間の後、���応物をろ過し、樹脂を十分に洗浄する。同じ処理をさらに２回繰り返す。最後の処理後、ＤＣＭ、ＭｅＯＨおよびＤＭＦによって樹脂を十分に洗浄する。Ｄａｂ部分の側鎖への３，５−ジフルオロ安息香酸のカップリングのために、ＤＭＦ中、３当量の前記酸、３当量のＴＢＴＵおよび６当量のＤＩＥＡを樹脂に添加する。反応物を６０分間反応させる。この時間の後、ＤＭＦおよびＤＣＭによって樹脂を洗浄し、カイザー試験によって反応の程度をモニタリングする。
【００９３】
ペプチドの切断のために、ＤＣＭによって樹脂を数回洗浄し、吸引によって乾燥させる。ＨＦＩＰ／ＤＣＭ（１：４）の溶液を添加することによって、樹脂から線状側鎖保護ペプチドを切断し、混合物を１５分間反応させる。次いで、反応混合物をろ過し、ＨＦＩＰ／ＤＣＭによって樹脂をすすぐ。この切断手順を２回繰り返す。すべてのろ液をプールし、真空下において溶媒を蒸発させる。事前に精製せずに、溶液中におけるヒドロキシアミドの形成のために、粗ペプチドを使用する。ペプチドをＤＣＭに溶解する。その後、３．５当量のＯ−（２，４−ジメトキシベンジル）ヒドロキシルアミン、５当量の４−メチルモルホリン、１．３当量のカップリング剤ＥＤＣ・ＨＣｌおよび１．３当量の添加剤ＨＯＡｔを添加し、Ｎ２雰囲気下において混合物を一晩反応させる。ＨＰＬＣを使用して、反応の程度をモニタリングする。所望の生成物が得られたら、１Ｎ  ＨＣｌ、水およびブラインによって混合物を洗浄する。硫酸マグネシウムによって有機層を脱水し、ろ過し、蒸発させる。その後、ＴＦＡ／水／ＴＩＳ（９５：２．５：２．５）の混合物を粗ペプチドに添加し、混合物を軽く２時間撹拌する。その後、Ｎ２気流下においてＴＦＡを蒸発させて、実施例２を得る。逆相クロマトグラフィーを使用して、化合物を精製する。
【００９４】
実施例３：
（２Ｓ）−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−３−［（３，５−ジフルオロベンゾイル）アミノ］−１−（ヒドロキシカルバモイル）プロピル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−１−ヘキサノイル−Ｎ−メチル−ピロリジン−２−カルボキサミド
【化４２】
0006795606.tif 000043
【００９５】
２ｍＬのＤＭＦ中、０．８当量の市販のＦｍｏｃ−Ｌ−Ｄａｂ（Ａｌｌｏｃ）−ＯＨおよびＤＩＥＡ（４当量）を樹脂に添加する。混合物を手動によって断続的に１時間撹拌する。その後、０．５ｍＬ／ｇのＭｅＯＨを反応混合物に添加して、樹脂の残りの反応点をキャッピングする。１５分後、溶液をろ別し、ＤＣＭ、ＤＭＦおよびＭｅＯＨによって樹脂を十分に洗浄する。２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）によって樹脂を処理することによって、Ｆｍｏｃ除去を達成する。Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｉｌｅ−ＯＨのカップリングのために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＴＢＴＵおよび６当量のＤＩＥＡを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。その後、混合物を樹脂に添加し、反応物を９０分間反応させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。Ｉｌｅ部分のアミノ基のＮ−メチル化のために、ＤＭＦ中、塩基としてコリジン（１０当量）を使用して、オルト−ニトロベンゼンスルホニルクロリド（４当量）によって遊離アミノ基を保護し、これを樹脂と３０分間反応させる。次いで、ＤＭＦおよびＤＣＭによって樹脂をすすぎ、同じ条件下において保護工程を再び繰り返す。カイザー試験を使用して、保護の程度をモニタリングする。ＤＭＦ中、３当量の７−メチル−１，５，７−トリアザビシクロ［４．４．０］デカ−５−エンおよび４当量のパラ−ニトロベンゼンスルホン酸によって樹脂を３０分間処理（３回の処理）することによって、アミノ基のＮ−メチル化を達成する。処理の間に、ＤＭＦおよびＤＣＭによって樹脂を十分に洗浄する。Ｉｌｅアミノ基のＮ−メチル化の後、１０当量のβ−メルカプトエタノールおよび５当量のＤＢＵ（１×１０’および１×４０’）によって樹脂を処理することによって、オルト−ニトロベンゼンスルホニル保護基を除去する。クロラニル試験を使用して、オルト−ニトロベンゼンスルホニル基の除去を評価する。その後、Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｐｒｏ−ＯＨ部分を結合させ、その目的のために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＴＢＴＵおよび６当量のＤＩＥＡを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。その後、混合物を樹脂に添加し、反応物を９０分間反応させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理およびピペリジン／ＤＢＵ／トルエン／ＤＭＦ（５：５：２０：７０）の混合物（１×５’）によるさらなる処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。２０当量の酸、１０当量のカップリング剤ＤＰＣＤＩおよび１０当量の添加剤ＨＯＡｔを樹脂に添加することによって、ヘキサン酸をＰｒｏ部分にカップリングする。混合物を手動によって断続的に６０分間撹拌する。次いで、反応物をろ別し、ＤＭＦおよびＤＣＭによって樹脂を十分にすすぐ。クロラニル試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。Ａｌｌｏｃ基の除去のために、Ｎ２を混合物に通してバブリングしながら、１０当量のフェニルシランのＤＣＭ溶液を樹脂に添加する。次いで、０．１���量のＰｄ（ＰＰｈ３）４を添加し、すべてを十分に混合しながら、Ｎ２バブリングを維持する。次いで、反応容器を密閉し、１５分間振盪する。この時間の後、反応物をろ過し、樹脂を十分に洗浄する。同じ処理をさらに２回繰り返す。最後の処理後、ＤＣＭ、ＭｅＯＨおよびＤＭＦによって樹脂を十分に洗浄する。Ｄａｂ部分の側鎖への３，５−ジフルオロ安息香酸のカップリングのために、ＤＭＦ中、３当量の前記酸、３当量のＴＢＴＵおよび６当量のＤＩＥＡを樹脂に添加する。反応物を６０分間反応させる。この時間の後、ＤＭＦおよびＤＣＭによって樹脂を洗浄し、カイザー試験によって反応の程度をモニタリングする。
【００９６】
ペプチドの切断のために、ＤＣＭによって樹脂を数回洗浄し、吸引によって乾燥させる。ＨＦＩＰ／ＤＣＭ（１：４）の溶液を添加することによって、樹脂から線状側鎖保護ペプチドを切断し、混合物を１５分間反応させる。次いで、反応混合物をろ過し、ＨＦＩＰ／ＤＣＭによって樹脂をすすぐ。この切断手順を２回繰り返す。すべてのろ液をプールし、真空下において溶媒を蒸発させる。事前に精製せずに、溶液中におけるヒドロキシアミドの形成のために、粗ペプチドを使用する。ペプチドをＤＣＭに溶解する。その後、３．５当量のＯ−（２，４−ジメトキシベンジル）ヒドロキシルアミン、５当量の４−メチルモルホリン、１．３当量のカップリング剤ＥＤＣ・ＨＣｌおよび１．３当量の添加剤ＨＯＡｔを添加し、Ｎ２雰囲気下において混合物を一晩反応させる。ＨＰＬＣを使用して、反応の程度をモニタリングする。所望の生成物が得られたら、１Ｎ  ＨＣｌ、水およびブラインによって混合物を洗浄する。硫酸マグネシウムによって有機層を脱水し、ろ過し、蒸発させる。ＴＦＡ／水／ＴＩＳ（９５：２．５：２．５）の混合物を粗ペプチドに添加し、混合物を軽く２時間撹拌する。その後、Ｎ２気流下においてＴＦＡを蒸発させて、実施例３を得る。逆相クロマトグラフィーを使用して、化合物を精製する。
【００９７】
実施例４：
（２Ｓ）−１−ブタノイル−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−３−［（３，５−ジフルオロベンゾイル）アミノ］−１−（ヒドロキシカルバモイル）プロピル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−Ｎ−メチル−ピロリジン−２−カルボキサミド
【化４３】
0006795606.tif 000044
【００９８】
２ｍＬのＤＭＦ中、０．８当量の市販のＦｍｏｃ−Ｌ−Ｄａｂ（Ａｌｌｏｃ）−ＯＨおよびＤＩＥＡ（４当量）を樹脂に添加する。混合物を手動によって断続的に１時間撹拌する。その後、０．５ｍＬ／ｇのＭｅＯＨを反応混合物に添加して、樹脂の残りの反応点をキャッピングする。１５分後、溶液をろ別し、ＤＣＭ、ＤＭＦおよびＭｅＯＨによって樹脂を十分に洗浄する。２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）によって樹脂を処理することによって、Ｆｍｏｃ除去を達成する。Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｉｌｅ−ＯＨのカップリングのために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＴＢＴＵおよび６当量のＤＩＥＡを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。その後、混合物を樹脂に添加し、反応物を９０分間反応させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。Ｉｌｅ部分のアミノ基のＮ−メチル化のために、ＤＭＦ中、塩基としてコリジン（１０当量）を使用して、オルト−ニトロベンゼンスルホニルクロリド（４当量）によって遊離アミノ基を保護し、これを樹脂と３０分間反応させる。次いで、ＤＭＦおよびＤＣＭによって樹脂をすすぎ、同じ条件下において保護工程を再び繰り返す。カイザー試験を使用して、保護の程度をモニタリングする。ＤＭＦ中、３当量の７−メチル−１，５，７−トリアザビシクロ［４．４．０］デカ−５−エンおよび４当量のパラ−ニトロベンゼンスルホン酸によって樹脂を３０分間処理（３回の処理）することによって、アミノ基のＮ−メチル化を達成する。処理の間に、ＤＭＦおよびＤＣＭによって樹脂を十分に洗浄する。Ｉｌｅアミノ基のＮ−メチル化の後、１０当量のβ−メルカプトエタノールおよび５当量のＤＢＵ（１×１０’および１×４０’）によって樹脂を処理することによって、オルト−ニトロベンゼンスルホニル保護基を除去する。クロラニル試験を使用して、オルト−ニトロベンゼンスルホニル基の除去を評価する。その後、Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｐｒｏ−ＯＨ部分を結合させ、その目的のために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＴＢＴＵおよび６当量のＤＩＥＡを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。その後、混合物を樹脂に添加し、反応物を９０分間反応させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理およびピペリジン／ＤＢＵ／トルエン／ＤＭＦ（５：５：２０：７０）の混合物（１×５’）によるさらなる処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。２０当量の酸、１０当量のカップリング剤ＤＰＣＤＩおよび１０当量の添加剤ＨＯＡｔを樹脂に添加することによって、ヘキサン酸をＰｒｏ部分にカップリングする。混合物を手動によって断続的に６０分間撹拌する。次いで、反応物をろ別し、ＤＭＦおよびＤＣＭによって樹脂を十分にすすぐ。クロラニル試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。Ａｌｌｏｃ基の除去のために、Ｎ２を混合物に通してバブリングしながら、１０当量のフェニルシランのＤＣＭ溶液を樹脂に添加する。次いで、０．１���量のＰｄ（ＰＰｈ３）４を添加し、すべてを十分に混合しながら、Ｎ２バブリングを維持する。次いで、反応容器を密閉し、１５分間振盪する。この時間の後、反応物をろ過し、樹脂を十分に洗浄する。同じ処理をさらに２回繰り返す。最後の処理後、ＤＣＭ、ＭｅＯＨおよびＤＭＦによって樹脂を十分に洗浄する。Ｄａｂ部分の側鎖への３，５−ジフルオロ安息香酸のカップリングのために、ＤＭＦ中、３当量の前記酸、３当量のＴＢＴＵおよび６当量のＤＩＥＡを樹脂に添加する。反応物を６０分間反応させる。この時間の後、ＤＭＦおよびＤＣＭによって樹脂を洗浄し、カイザー試験によって反応の程度をモニタリングする。
【００９９】
ペプチドの切断のために、ＤＣＭによって樹脂を数回洗浄し、吸引によって乾燥させる。ＨＦＩＰ／ＤＣＭ（１：４）の溶液を添加することによって、樹脂から線状側鎖保護ペプチドを切断し、混合物を１５分間反応させる。次いで、反応混合物をろ過し、ＨＦＩＰ／ＤＣＭによって樹脂をすすぐ。この切断手順を２回繰り返す。すべてのろ液をプールし、真空下において溶媒を蒸発させる。事前に精製せずに、溶液中におけるヒドロキシアミドの形成のために、粗ペプチドを使用する。ペプチドをＤＣＭに溶解する。その後、３．５当量のＯ−（２，４−ジメトキシベンジル）ヒドロキシルアミン、５当量の４−メチルモルホリン、１．３当量のカップリング剤ＥＤＣ・ＨＣｌおよび１．３当量の添加剤ＨＯＡｔを添加し、Ｎ２雰囲気下において混合物を一晩反応させる。ＨＰＬＣを使用して、反応の程度をモニタリングする。所望の生成物が得られたら、１Ｎ  ＨＣｌ、水およびブラインによって混合物を洗浄する。硫酸マグネシウムによって有機層を脱水し、ろ過し、蒸発させる。ＴＦＡ／水／ＴＩＳ（９５：２．５：２．５）の混合物を粗ペプチドに添加し、混合物を軽く２時間撹拌する。その後、Ｎ２気流下においてＴＦＡを蒸発させて、実施例４を得る。逆相クロマトグラフィーを使用して、化合物を精製する。
【０１００】
実施例５：
（２Ｓ）−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−３−［（３，５−ジフルオロベンゾイル）アミノ］−１−（ヒドロキシカルバモイル）プロピル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−Ｎ−メチル−１−（３−メチルブタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド
【化４４】
0006795606.tif 000045
【０１０１】
２ｍＬのＤＭＦ中、０．８当量の市販のＦｍｏｃ−Ｌ−Ｄａｂ（Ａｌｌｏｃ）−ＯＨおよびＤＩＥＡ（４当量）を樹脂に添加する。混合物を手動によって断続的に１時間撹拌する。その後、０．５ｍＬ／ｇのＭｅＯＨを反応混合物に添加して、樹脂の残りの反応点をキャッピングする。１５分後、溶液をろ別し、ＤＣＭ、ＤＭＦおよびＭｅＯＨによって樹脂を十分に洗浄する。２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）によって樹脂を処理することによって、Ｆｍｏｃ除去を達成する。Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｉｌｅ−ＯＨのカップリングのために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＴＢＴＵおよび６当量のＤＩＥＡを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。その後、混合物を樹脂に添加し、反応物を９０分間反応させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。Ｉｌｅ部分のアミノ基のＮ−メチル化のために、ＤＭＦ中、塩基としてコリジン（１０当量）を使用して、オルト−ニトロベンゼンスルホニルクロリド（４当量）によって遊離アミノ基を保護し、これを樹脂と３０分間反応させる。次いで、ＤＭＦおよびＤＣＭによって樹脂をすすぎ、同じ条件下において保護工程を再び繰り返す。カイザー試験を使用して、保護の程度をモニタリングする。ＤＭＦ中、３当量の７−メチル−１，５，７−トリアザビシクロ［４．４．０］デカ−５−エンおよび４当量のパラ−ニトロベンゼンスルホン酸によって樹脂を３０分間処理（３回の処理）することによって、アミノ基のＮ−メチル化を達成する。処理の間に、ＤＭＦおよびＤＣＭによって樹脂を十分に洗浄する。Ｉｌｅアミノ基のＮ−メチル化の後、１０当量のβ−メルカプトエタノールおよび５当量のＤＢＵ（１×１０’および１×４０’）によって樹脂を処理することによって、オルト−ニトロベンゼンスルホニル保護基を除去する。クロラニル試験を使用して、オルト−ニトロベンゼンスルホニル基の除去を評価する。その後、Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｐｒｏ−ＯＨ部分を結合させ、その目的のために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＴＢＴＵおよび６当量のＤＩＥＡを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。その後、混合物を樹脂に添加し、反応物を９０分間反応させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理およびピペリジン／ＤＢＵ／トルエン／ＤＭＦ（５：５：２０：７０）の混合物（１×５’）によるさらなる処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。２０当量の酸、１０当量のカップリング剤ＤＰＣＤＩおよび１０当量の添加剤ＨＯＡｔを樹脂に添加することによって、３−メチルブタン酸をＰｒｏ部分にカップリングする。混合物を手動によって断続的に６０分間撹拌する。次いで、反応物をろ別し、ＤＭＦおよびＤＣＭによって樹脂を十分にすすぐ。クロラニル試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。Ａｌｌｏｃ基の除去のために、Ｎ２を混合物に通してバブリングしながら、１０当量のフェニルシランのＤＣＭ溶液を樹脂に添加する。次いで���０．１当量のＰｄ（ＰＰｈ３）４を添加し、すべてを十分に混合しながら、Ｎ２バブリングを維持する。次いで、反応容器を密閉し、１５分間振盪する。この時間の後、反応物をろ過し、樹脂を十分に洗浄する。同じ処理をさらに２回繰り返す。最後の処理後、ＤＣＭ、ＭｅＯＨおよびＤＭＦによって樹脂を十分に洗浄する。Ｄａｂ部分の側鎖への３，５−ジフルオロ安息香酸のカップリングのために、ＤＭＦ中、３当量の前記酸、３当量のＴＢＴＵおよび６当量のＤＩＥＡを樹脂に添加する。反応物を６０分間反応させる。この時間の後、ＤＭＦおよびＤＣＭによって樹脂を洗浄し、カイザー試験によって反応の程度をモニタリングする。
【０１０２】
ペプチドの切断のために、ＤＣＭによって樹脂を数回洗浄し、吸引によって乾燥させる。ＨＦＩＰ／ＤＣＭ（１：４）の溶液を添加することによって、樹脂から線状側鎖保護ペプチドを切断し、混合物を１５分間反応させる。次いで、反応混合物をろ過し、ＨＦＩＰ／ＤＣＭによって樹脂をすすぐ。この切断手順を２回繰り返す。すべてのろ液をプールし、真空下において溶媒を蒸発させる。事前に精製せずに、溶液中におけるヒドロキシアミドの形成のために、粗ペプチドを使用する。ペプチドをＤＣＭに溶解する。その後、３．５当量のＯ−（２，４−ジメトキシベンジル）ヒドロキシルアミン、５当量の４−メチルモルホリン、１．３当量のカップリング剤ＥＤＣ・ＨＣｌおよび１．３当量の添加剤ＨＯＡｔを添加し、Ｎ２雰囲気下において混合物を一晩反応させる。ＨＰＬＣを使用して、反応の程度をモニタリングする。所望の生成物が得られたら、１Ｎ  ＨＣｌ、水およびブラインによって混合物を洗浄する。硫酸マグネシウムによって有機層を脱水し、ろ過し、蒸発させる。ＴＦＡ／水／ＴＩＳ（９５：２．５：２．５）の混合物を粗ペプチドに添加し、混合物を軽く２時間撹拌する。その後、Ｎ２気流下においてＴＦＡを蒸発させて、実施例５を得る。逆相クロマトグラフィーを使用して、化合物を精製する。
【０１０３】
実施例６：
（２Ｓ）−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−３−［（３，５−ジフルオロベンゾイル）アミノ］−１−（ヒドロキシカルバモイル）プロピル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−Ｎ−メチル−１−オクタノイル−ピロリジン−２−カルボキサミド
【化４５】
0006795606.tif 000046
【０１０４】
２ｍＬのＤＭＦ中、０．８当量の市販のＦｍｏｃ−Ｌ−Ｄａｂ（Ａｌｌｏｃ）−ＯＨおよびＤＩＥＡ（４当量）を樹脂に添加する。混合物を手動によって断続的に１時間撹拌する。その後、０．５ｍＬ／ｇのＭｅＯＨを反応混合物に添加して、樹脂の残りの反応点をキャッピングする。１５分後、溶液をろ別し、ＤＣＭ、ＤＭＦおよびＭｅＯＨによって樹脂を十分に洗浄する。２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）によって樹脂を処理することによって、Ｆｍｏｃ除去を達成する。Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｉｌｅ−ＯＨのカップリングのために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＴＢＴＵおよび６当量のＤＩＥＡを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。その後、混合物を樹脂に添加し、反応物を９０分間反応させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。Ｉｌｅ部分のアミノ基のＮ−メチル化のために、ＤＭＦ中、塩基としてコリジン（１０当量）を使用して、オルト−ニトロベンゼンスルホニルクロリド（４当量）によって遊離アミノ基を保護し、これを樹脂と３０分間反応させる。次いで、ＤＭＦおよびＤＣＭによって樹脂をすすぎ、同じ条件下において保護工程を再び繰り返す。カイザー試験を使用して、保護の程度をモニタリングする。ＤＭＦ中、３当量の７−メチル−１，５，７−トリアザビシクロ［４．４．０］デカ−５−エンおよび４当量のパラ−ニトロベンゼンスルホン酸によって樹脂を３０分間処理（３回の処理）することによって、アミノ基のＮ−メチル化を達成する。処理の間に、ＤＭＦおよびＤＣＭによって樹脂を十分に洗浄する。Ｉｌｅアミノ基のＮ−メチル化の後、１０当量のβ−メルカプトエタノールおよび５当量のＤＢＵ（１×１０’および１×４０’）によって樹脂を処理することによって、オルト−ニトロベンゼンスルホニル保護基を除去する。クロラニル試験を使用して、オルト−ニトロベンゼンスルホニル基の除去を評価する。その後、Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｐｒｏ−ＯＨ部分を結合させ、その目的のために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＴＢＴＵおよび６当量のＤＩＥＡを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。その後、混合物を樹脂に添加し、反応物を９０分間反応させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理およびピペリジン／ＤＢＵ／トルエン／ＤＭＦ（５：５：２０：７０）の混合物（１×５’）によるさらなる処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。２０当量の酸、１０当量のカップリング剤ＤＰＣＤＩおよび１０当量の添加剤ＨＯＡｔを樹脂に添加することによって、オクタン酸をＰｒｏ部分にカップリングする。混合物を手動によって断続的に６０分間撹拌する。次いで、反応物をろ別し、ＤＭＦおよびＤＣＭによって樹脂を十分にすすぐ。クロラニル試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。Ａｌｌｏｃ基の除去のために、Ｎ２を混合物に通してバブリングしながら、１０当量のフェニルシランのＤＣＭ溶液を樹脂に添加する。次いで、０．１���量のＰｄ（ＰＰｈ３）４を添加し、すべてを十分に混合しながら、Ｎ２バブリングを維持する。次いで、反応容器を密閉し、１５分間振盪する。この時間の後、反応物をろ過し、樹脂を十分に洗浄する。同じ処理をさらに２回繰り返す。最後の処理後、ＤＣＭ、ＭｅＯＨおよびＤＭＦによって樹脂を十分に洗浄する。Ｄａｂ部分の側鎖への３，５−ジフルオロ安息香酸のカップリングのために、ＤＭＦ中、３当量の前記酸、３当量のＴＢＴＵおよび６当量のＤＩＥＡを樹脂に添加する。反応物を６０分間反応させる。この時間の後、ＤＭＦおよびＤＣＭによって樹脂を洗浄し、カイザー試験によって反応の程度をモニタリングする。
【０１０５】
ペプチドの切断のために、ＤＣＭによって樹脂を数回洗浄し、吸引によって乾燥させる。ＨＦＩＰ／ＤＣＭ（１：４）の溶液を添加することによって、樹脂から線状側鎖保護ペプチドを切断し、混合物を１５分間反応させる。次いで、反応混合物をろ過し、ＨＦＩＰ／ＤＣＭによって樹脂をすすぐ。この切断手順を２回繰り返す。すべてのろ液をプールし、真空下において溶媒を蒸発させる。事前に精製せずに、溶液中におけるヒドロキシアミドの形成のために、粗ペプチドを使用する。ペプチドをＤＣＭに溶解する。その後、３．５当量のＯ−（２，４−ジメトキシベンジル）ヒドロキシルアミン、５当量の４−メチルモルホリン、１．３当量のカップリング剤ＥＤＣ・ＨＣｌおよび１．３当量の添加剤ＨＯＡｔを添加し、Ｎ２雰囲気下において混合物を一晩反応させる。ＨＰＬＣを使用して、反応の程度をモニタリングする。所望の生成物が得られたら、１Ｎ  ＨＣｌ、水およびブラインによって混合物を洗浄する。硫酸マグネシウムによって有機層を脱水し、ろ過し、蒸発させる。ＴＦＡ／水／ＴＩＳ（９５：２．５：２．５）の混合物を粗ペプチドに添加し、混合物を軽く２時間撹拌する。その後、Ｎ２気流下においてＴＦＡを蒸発させて、実施例６を得る。逆相クロマトグラフィーを使用して、化合物を精製する。
【０１０６】
実施例７：
（２Ｓ）−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−３−［（３，５−ジフルオロベンゾイル）アミノ］−１−（ヒドロキシカルバモイル）プロピル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−４，４−ジフルオロ−１−ヘキサノイル−Ｎ−メチル−ピロリジン−２−カルボキサミド
【化４６】
0006795606.tif 000047
【０１０７】
２ｍＬのＤＭＦ中、０．８当量の市販のＦｍｏｃ−Ｌ−Ｄａｂ（Ａｌｌｏｃ）−ＯＨおよびＤＩＥＡ（４当量）を樹脂に添加する。混合物を手動によって断続的に１時間撹拌する。その後、０．５ｍＬ／ｇのＭｅＯＨを反応混合物に添加して、樹脂の残りの反応点をキャッピングする。１５分後、溶液をろ別し、ＤＣＭ、ＤＭＦおよびＭｅＯＨによって樹脂を十分に洗浄する。２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）によって樹脂を処理することによって、Ｆｍｏｃ除去を達成する。Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｉｌｅ−ＯＨのカップリングのために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＴＢＴＵおよび６当量のＤＩＥＡを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。その後、混合物を樹脂に添加し、反応物を９０分間反応させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。Ｉｌｅ部分のアミノ基のＮ−メチル化のために、ＤＭＦ中、塩基としてコリジン（１０当量）を使用して、オルト−ニトロベンゼンスルホニルクロリド（４当量）によって遊離アミノ基を保護し、これを樹脂と３０分間反応させる。次いで、ＤＭＦおよびＤＣＭによって樹脂をすすぎ、同じ条件下において保護工程を再び繰り返す。カイザー試験を使用して、保護の程度をモニタリングする。ＤＭＦ中、３当量の７−メチル−１，５，７−トリアザビシクロ［４．４．０］デカ−５−エンおよび４当量のパラ−ニトロベンゼンスルホン酸によって樹脂を３０分間処理（３回の処理）することによって、アミノ基のＮ−メチル化を達成する。処理の間に、ＤＭＦおよびＤＣＭによって樹脂を十分に洗浄する。Ｉｌｅアミノ基のＮ−メチル化の後、１０当量のβ−メルカプトエタノールおよび５当量のＤＢＵ（１×１０’および１×４０’）によって樹脂を処理することによって、オルト−ニトロベンゼンスルホニル保護基を除去する。クロラニル試験を使用して、オルト−ニトロベンゼンスルホニル基の除去を評価する。その後、Ｆｍｏｃ−Ｌ（４，４−ジフルオロ）Ｐｒｏ−ＯＨ部分を結合させ、その目的のために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＴＢＴＵおよび６当量のＤＩＥＡを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。その後、混合物を樹脂に添加し、反応物を９０分間反応させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理およびピペリジン／ＤＢＵ／トルエン／ＤＭＦ（５：５：２０：７０）の混合物（１×５’）によるさらなる処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。２０当量の酸、１０当量のカップリング剤ＤＰＣＤＩおよび１０当量の添加剤ＨＯＡｔを樹脂に添加することによって、ヘキサン酸をＰｒｏ部分にカップリングする。混合物を手動によって断続的に６０分間撹拌する。次いで、反応物をろ別し、ＤＭＦおよびＤＣＭによって樹脂を十分にすすぐ。クロラニル試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。Ａｌｌｏｃ基の除去のために、Ｎ２を混合物に通してバブリングしながら、１０当量のフェニルシランのＤＣＭ溶液を樹脂に添加���る。次いで、０．１当量のＰｄ（ＰＰｈ３）４を添加し、すべてを十分に混合しながら、Ｎ２バブリングを維持する。次いで、反応容器を密閉し、１５分間振盪する。この時間の後、反応物をろ過し、樹脂を十分に洗浄する。同じ処理をさらに２回繰り返す。最後の処理後、ＤＣＭ、ＭｅＯＨおよびＤＭＦによって樹脂を十分に洗浄する。Ｄａｂ部分の側鎖への３，５−ジフルオロ安息香酸のカップリングのために、ＤＭＦ中、３当量の前記酸、３当量のＴＢＴＵおよび６当量のＤＩＥＡを樹脂に添加する。反応物を６０分間反応させる。この時間の後、ＤＭＦおよびＤＣＭによって樹脂を洗浄し、カイザー試験によって反応の程度をモニタリングする。
【０１０８】
ペプチドの切断のために、ＤＣＭによって樹脂を数回洗浄し、吸引によって乾燥させる。ＨＦＩＰ／ＤＣＭ（１：４）の溶液を添加することによって、樹脂から線状側鎖保護ペプチドを切断し、混合物を１５分間反応させる。次いで、反応混合物をろ過し、ＨＦＩＰ／ＤＣＭによって樹脂をすすぐ。この切断手順を２回繰り返す。すべてのろ液をプールし、真空下において溶媒を蒸発させる。事前に精製せずに、溶液中におけるヒドロキシアミドの形成のために、粗ペプチドを使用する。ペプチドをＤＣＭに溶解する。その後、３．５当量のＯ−（２，４−ジメトキシベンジル）ヒドロキシルアミン、５当量の４−メチルモルホリン、１．３当量のカップリング剤ＥＤＣ・ＨＣｌおよび１．３当量の添加剤ＨＯＡｔを添加し、Ｎ２雰囲気下において混合物を一晩反応させる。ＨＰＬＣを使用して、反応の程度をモニタリングする。所望の生成物が得られたら、１Ｎ  ＨＣｌ、水およびブラインによって混合物を洗浄する。硫酸マグネシウムによって有機層を脱水し、ろ過し、蒸発させる。ＴＦＡ／水／ＴＩＳ（９５：２．５：２．５）の混合物を粗ペプチドに添加し、混合物を軽く２時間撹拌する。その後、Ｎ２気流下においてＴＦＡを蒸発させて、実施例７を得る。逆相クロマトグラフィーを使用して、化合物を精製する。
【０１０９】
実施例８：
（２Ｓ）−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−３−［（３，５−ジフルオロベンゾイル）アミノ］−１−（ヒドロキシカルバモイル）プロピル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−Ｎ−メチル−１−（２−プロピルペンタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド
【化４７】
0006795606.tif 000048
【０１１０】
２ｍＬのＤＣＭ中、１．５当量の市販のＦｍｏｃ−ＮＨ−ＯＨおよびＤＩＥＡ（１０当量）を２−クロロトリチル樹脂に添加する。混合物を手動によって断続的に２４時間撹拌する。その後、０．５ｍＬ／ｇのＭｅＯＨを反応混合物に添加して、樹脂の残りの反応点をキャッピングする。１５分後、溶液をろ別し、ＤＣＭ、ＤＭＦおよびＭｅＯＨによって樹脂を十分に洗浄する。２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）によって樹脂を処理することによって、Ｆｍｏｃ除去を達成する。Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎγ−ａｌｌｏｃ−Ｌ−２，４−ジアミノ酪酸（Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｄａｂ（ａｌｌｏｃ）−ＯＨ）のカップリングのために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＤＩＣおよび３当量の添加剤ｏｘｙｍａ０  ｐｕｒｅを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。得られた混合物を樹脂に添加し、反応を６０分間進行させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。その後、Ｆｍｏｃ−Ｎ−メチル−Ｌ−イソロイシン（Ｆｍｏｃ−ＮＭｅ−Ｌ−Ｉｌｅ−ＯＨ）部分を結合させ、その目的のために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＤＩＣおよび３当量のｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。得られた混合物を樹脂に添加し、反応を６０分間進行させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。その後、Ｆｍｏｃ−Ｌ−プロリン（Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｐｒｏ−ＯＨ）部分を結合させ、その目的のために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＤＩＣおよび３当量のｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。得られた混合物を樹脂に添加し、反応を６０分間進行させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理およびピペリジン／ＤＢＵ／トルエン／ＤＭＦ（５：５：２０：７０）の混合物（１×５’）によるさらなる処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。３当量の酸、３当量のカップリング剤ＤＩＣおよび３当量のｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを樹脂に添加することによって、２−プロピルペンタン酸をプロリン部分にカップリングし、少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。得られた混合物を樹脂に添加し、反応を６０分間進行させる。次いで、反応物をろ別し、ＤＭＦおよびＤＣＭによって樹脂を十分にすすぐ。クロラニル試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。Ａｌｌｏｃ基の除去のために、Ｎ２を混合物に通してバブリングしながら、１０当量のフェニルシランのＤＣＭ溶液を樹脂に添加する。次いで、０．１当量のＰｄ（ＰＰｈ３）４を添加し、すべてを十分に混合しながら、Ｎ２バブリングを維持する。次いで、反応容器を密閉し、１５分間振盪する。この時間の後、反応物をろ過し、樹脂を十分に洗浄する。同じ処理をさらに２回繰り返す。最後の処理後、ＤＣＭ、ＭｅＯＨおよびＤＭＦによって樹脂���十分に洗浄する。ジアミノエチル部分の側鎖への３，５−ジフルオロ安息香酸のカップリングのために、３当量の前記酸、３当量のカップリング剤ＤＩＣおよび３当量のｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。得られた混合物を樹脂に添加し、反応を６０分間進行させる。この時間の後、ＤＭＦおよびＤＣＭによって樹脂を洗浄し、カイザー試験によって反応の程度をモニタリングする。
【０１１１】
ペプチドの切断のために、ＤＣＭによって樹脂を数回洗浄し、吸引によって乾燥させる。ＤＣＭ／ＴＦＡ（９５：５）の溶液を添加することによって、樹脂からペプチドを切断し、混合物を１５分間反応させる。次いで、反応混合物をろ過し、ＤＣＭによって樹脂をすすぐ。この切断手順を２回繰り返す。すべてのろ液をプールし、真空下において溶媒を蒸発させて、実施例８を得る。逆相クロマトグラフィーを使用して、化合物を精製する。
【０１１２】
実施例９：
（２Ｓ）−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−３−［（３，５−ジフルオロベンゾイル）アミノ］−１−（ヒドロキシカルバモイル）プロピル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−Ｎ−メチル−１−（４−フェノキシブタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド
【化４８】
0006795606.tif 000049
【０１１３】
２ｍＬのＤＣＭ中、１．５当量の市販のＦｍｏｃ−ＮＨ−ＯＨおよびＤＩＥＡ（１０当量）を２−クロロトリチル樹脂に添加する。混合物を手動によって断続的に２４時間撹拌する。その後、０．５ｍＬ／ｇのＭｅＯＨを反応混合物に添加して、樹脂の残りの反応点をキャッピングする。１５分後、溶液をろ別し、ＤＣＭ、ＤＭＦおよびＭｅＯＨによって樹脂を十分に洗浄する。２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）によって樹脂を処理することによって、Ｆｍｏｃ除去を達成する。Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎγ−ａｌｌｏｃ−Ｌ−２，４−ジアミノ酪酸（Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｄａｂ（ａｌｌｏｃ）−ＯＨ）のカップリングのために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＤＩＣおよび３当量のｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。得られた混合物を樹脂に添加し、反応を６０分間進行させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。その後、Ｆｍｏｃ−Ｎ−メチル−Ｌ−イソロイシン（Ｆｍｏｃ−Ｌ−ＮＭｅＩｌｅ−ＯＨ）部分を結合させ、その目的のために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＤＩＣおよび３当量のｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。得られた混合物を樹脂に添加し、反応を６０分間進行させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。その後、Ｆｍｏｃ−Ｌ−プロリン（Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｐｒｏ−ＯＨ）部分を結合させ、その目的のために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＤＩＣおよび３当量のｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。得られた混合物を樹脂に添加し、反応を６０分間進行させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理およびピペリジン／ＤＢＵ／トルエン／ＤＭＦ（５：５：２０：７０）の混合物（１×５’）によるさらなる処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。３当量の酸、３当量のカップリング剤ＤＩＣおよび３当量のｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを樹脂に添加することによって、４−フェノキシ酪酸（４−ｐｈｅｎｏｘｙｂｕｔｉｒｉｃ  ａｃｉｄ）をプロリン部分にカップリングし、少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。得られた混合物を樹脂に添加し、反応を６０分間進行させる。次いで、反応物をろ別し、ＤＭＦおよびＤＣＭによって樹脂を十分にすすぐ。クロラニル試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。Ａｌｌｏｃ基の除去のために、Ｎ２を混合物に通してバブリングしながら、１０当量のフェニルシランのＤＣＭ溶液を樹脂に添加する。次いで、０．１当量のＰｄ（ＰＰｈ３）４を添加し、すべてを十分に混合しながら、Ｎ２バブリングを維持する。次いで、反応容器を密閉し、１５分間振盪する。この時間の後、反応物をろ過し、樹脂を十分に洗浄する。同じ処理をさらに２回繰り返す。最後の処理後、ＤＣＭ、��ｅＯＨおよびＤＭＦによって樹脂を十分に洗浄する。ジアミノエチル部分の側鎖への３，５−ジフルオロ安息香酸のカップリングのために、３当量の前記酸、３当量のカップリング剤ＤＩＣおよび３当量のｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。得られた混合物を樹脂に添加し、反応を６０分間進行させる。この時間の後、ＤＭＦおよびＤＣＭによって樹脂を洗浄し、カイザー試験によって反応の程度をモニタリングする。
【０１１４】
ペプチドの切断のために、ＤＣＭによって樹脂を数回洗浄し、吸引によって乾燥させる。ＤＣＭ／ＴＦＡ（９５：５）の溶液を添加することによって、樹脂からペプチドを切断し、混合物を１５分間反応させる。次いで、反応混合物をろ過し、ＤＣＭによって樹脂をすすぐ。この切断手順を２回繰り返す。すべてのろ液をプールし、真空下において溶媒を蒸発させて、実施例９を得る。逆相クロマトグラフィーを使用して、化合物を精製する。
【０１１５】
実施例１０：
（２Ｓ）−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−３−［（３，５−ジフルオロベンゾイル）アミノ］−１−（ヒドロキシカルバモイル）プロピル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−４，４−ジフルオロ−Ｎ−メチル−１−（４−フェノキシブタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド
【化４９】
0006795606.tif 000050
【０１１６】
２ｍＬのＤＣＭ中、１．５当量の市販のＦｍｏｃ−ＮＨ−ＯＨおよびＤＩＥＡ（１０当量）を２−クロロトリチル樹脂に添加する。混合物を手動によって断続的に２４時間撹拌する。その後、０．５ｍＬ／ｇのＭｅＯＨを反応混合物に添加して、樹脂の残りの反応点をキャッピングする。１５分後、溶液をろ別し、ＤＣＭ、ＤＭＦおよびＭｅＯＨによって樹脂を十分に洗浄する。２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）によって樹脂を処理することによって、Ｆｍｏｃ除去を達成する。Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎγ−ａｌｌｏｃ−Ｌ−２，４−ジアミノ酪酸（Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｄａｂ（ａｌｌｏｃ）−ＯＨ）のカップリングのために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＤＩＣおよび３当量のｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。得られた混合物を樹脂に添加し、反応を６０分間進行させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。その後、Ｆｍｏｃ−Ｎ−メチル−Ｌ−イソロイシン（Ｆｍｏｃ−ＮＭｅ−Ｌ−Ｉｌｅ−ＯＨ）部分を結合させ、その目的のために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＤＩＣおよび３当量のｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。得られた混合物を樹脂に添加し、反応を６０分間進行させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。その後、Ｆｍｏｃ−４，４−ジフルオロ−Ｌ−プロリン部分を結合させ、その目的のために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＤＩＣおよび３当量のｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。得られた混合物を樹脂に添加し、反応を６０分間進行させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理およびピペリジン／ＤＢＵ／トルエン／ＤＭＦ（５：５：２０：７０）の混合物（１×５’）によるさらなる処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。３当量の酸、３当量のカップリング剤ＤＩＣおよび３当量のｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを樹脂に添加することによって、４−フェノキシ酪酸（４−ｐｈｅｎｏｘｙｂｕｔｉｒｉｃ  ａｃｉｄ）をプロリン部分にカップリングし、少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。得られた混合物を樹脂に添加し、反応を６０分間進行させる。次いで、反応物をろ別し、ＤＭＦおよびＤＣＭによって樹脂を十分にすすぐ。クロラニル試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。Ａｌｌｏｃ基の除去のために、Ｎ２を混合物に通してバブリングしながら、１０当量のフェニルシランのＤＣＭ溶液を樹脂に添加する。次いで、０．１当量のＰｄ（ＰＰｈ３）４を添加し、すべてを十分に混合しながら、Ｎ２バブリングを維持する。次いで、反応容器を密閉し、１５分間振盪する。この時間の後、反応物をろ過し、樹脂を十分に洗浄する。同じ処理をさらに２回繰り返す。最後の処理後、ＤＣＭ、ＭｅＯＨ��よびＤＭＦによって樹脂を十分に洗浄する。ジアミノエチル部分の側鎖への３，５−ジフルオロ安息香酸のカップリングのために、３当量の前記酸、３当量のカップリング剤ＤＩＣおよび３当量のｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。得られた混合物を樹脂に添加し、反応を６０分間進行させる。この時間の後、ＤＭＦおよびＤＣＭによって樹脂を洗浄し、カイザー試験によって反応の程度をモニタリングする。
【０１１７】
ペプチドの切断のために、ＤＣＭによって樹脂を数回洗浄し、吸引によって乾燥させる。ＤＣＭ／ＴＦＡ（９５：５）の溶液を添加することによって、樹脂からペプチドを切断し、混合物を１５分間反応させる。次いで、反応混合物をろ過し、ＤＣＭによって樹脂をすすぐ。この切断手順を２回繰り返す。すべてのろ液をプールし、真空下において溶媒を蒸発させて、実施例１０を得る。逆相クロマトグラフィーを使用して、化合物を精製する。
【０１１８】
実施例１１：
（２Ｓ）−１−［（２Ｓ）−２−［アセチル（メチル）アミノ］−３−フェニル−プロパノイル］−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−３−［（３，５−ジフルオロベンゾイル）アミノ］−１−（ヒドロキシカルバモイル）プロピル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−Ｎ−メチル−ピロリジン−２−カルボキサミド
【化５０】
0006795606.tif 000051
【０１１９】
２ｍＬのＤＣＭ中、１．５当量の市販のＦｍｏｃ−ＮＨ−ＯＨおよびＤＩＥＡ（１０当量）を２−クロロトリチル樹脂に添加する。混合物を手動によって断続的に２４時間撹拌する。その後、０．５ｍＬ／ｇのＭｅＯＨを反応混合物に添加して、樹脂の残りの反応点をキャッピングする。１５分後、溶液をろ別し、ＤＣＭ、ＤＭＦおよびＭｅＯＨによって樹脂を十分に洗浄する。２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）によって樹脂を処理することによって、Ｆｍｏｃ除去を達成する。Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎγ−ａｌｌｏｃ−Ｌ−２，４−ジアミノ酪酸（Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｄａｂ（ａｌｌｏｃ）−ＯＨ）のカップリングのために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＤＩＣおよび３当量のｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。得られた混合物を樹脂に添加し、反応を６０分間進行させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。その後、Ｆｍｏｃ−Ｎ−メチル−Ｌ−イソロイシン（Ｆｍｏｃ−ＮＭｅ−Ｌ−Ｉｌｅ−ＯＨ）部分を結合させ、その目的のために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＤＩＣおよび３当量のｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。得られた混合物を樹脂に添加し、反応を６０分間進行させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。その後、Ｆｍｏｃ−Ｌ−プロリン（Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｐｒｏ−ＯＨ）部分を結合させ、その目的のために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＤＩＣおよび３当量のｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。得られた混合物を樹脂に添加し、反応を６０分間進行させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理およびピペリジン／ＤＢＵ／トルエン／ＤＭＦ（５：５：２０：７０）の混合物（１×５’）によるさらなる処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。その後、Ｆｍｏｃ−Ｎ−メチル−Ｌ−フェニルアラニン（Ｆｍｏｃ−ＮＭｅ−ＬＰｈｅ−ＯＨ）部分を結合させ、その目的のために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＤＩＣおよび３当量のｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。得られた混合物を樹脂に添加し、反応を６０分間進行させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。ペプチドのＮ末端部のアセチル化のために、２０当量の無水酢酸および２０当量のＤＩＥＡを樹脂に添加する。混合物を３０分間反応させ、クロラニル試験を使用して反応の程度をモニタリングする。Ａｌｌｏｃ基の除去のために、Ｎ２を混合物に通してバブリングしながら、１０当量のフェニルシランのＤＣＭ溶液を樹脂に添加する。次いで、０．１当量のＰｄ���ＰＰｈ３）４を添加し、すべてを十分に混合しながら、Ｎ２バブリングを維持する。次いで、反応容器を密閉し、１５分間振盪する。この時間の後、反応物をろ過し、樹脂を十分に洗浄する。同じ処理をさらに２回繰り返す。最後の処理後、ＤＣＭ、ＭｅＯＨおよびＤＭＦによって樹脂を十分に洗浄する。ジアミノエチル部分の側鎖への３，５−ジフルオロ安息香酸のカップリングのために、３当量の前記酸、３当量のカップリング剤ＤＩＣおよび３当量のｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。得られた混合物を樹脂に添加し、反応を６０分間進行させる。この時間の後、ＤＭＦおよびＤＣＭによって樹脂を洗浄し、カイザー試験によって反応の程度をモニタリングする。
【０１２０】
ペプチドの切断のために、ＤＣＭによって樹脂を数回洗浄し、吸引によって乾燥させる。ＤＣＭ／ＴＦＡ（９５：５）の溶液を添加することによって、樹脂からペプチドを切断し、混合物を１５分間反応させる。次いで、反応混合物をろ過し、ＤＣＭによって樹脂をすすぐ。この切断手順を２回繰り返す。すべてのろ液をプールし、真空下において溶媒を蒸発させて、実施例１１を得る。逆相クロマトグラフィーを使用して、化合物を精製する。
【０１２１】
実施例１２：
（２Ｓ）−１−［（２Ｓ）−２−［アセチル（メチル）アミノ］プロパノイル］−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−３−［（３，５−ジフルオロベンゾイル）アミノ］−１−（ヒドロキシカルバモイル）プロピル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−Ｎ−メチル−ピロリジン−２−カルボキサミド
【化５１】
0006795606.tif 000052
【０１２２】
２ｍＬのＤＣＭ中、１．５当量の市販のＦｍｏｃ−ＮＨ−ＯＨおよびＤＩＥＡ（１０当量）を２−クロロトリチル樹脂に添加する。混合物を手動によって断続的に２４時間撹拌する。その後、０．５ｍＬ／ｇのＭｅＯＨを反応混合物に添加して、樹脂の残りの反応点をキャッピングする。１５分後、溶液をろ別し、ＤＣＭ、ＤＭＦおよびＭｅＯＨによって樹脂を十分に洗浄する。２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）によって樹脂を処理することによって、Ｆｍｏｃ除去を達成する。Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎγ−ａｌｌｏｃ−Ｌ−２，４−ジアミノ酪酸（Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｄａｂ（ａｌｌｏｃ）−ＯＨ）のカップリングのために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＤＩＣおよび３当量のｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。得られた混合物を樹脂に添加し、反応を６０分間進行させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。その後、Ｆｍｏｃ−Ｎ−メチル−Ｌ−イソロイシン（Ｆｍｏｃ−ＮＭｅ−Ｌ−Ｉｌｅ−ＯＨ）部分を結合させ、その目的のために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＤＩＣおよび３当量のｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。得られた混合物を樹脂に添加し、反応を６０分間進行させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。その後、Ｆｍｏｃ−Ｌ−プロリン（Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｐｒｏ−ＯＨ）部分を結合させ、その目的のために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＤＩＣおよび３当量のｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。得られた混合物を樹脂に添加し、反応を６０分間進行させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理およびピペリジン／ＤＢＵ／トルエン／ＤＭＦ（５：５：２０：７０）の混合物（１×５’）によるさらなる処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。その後、Ｆｍｏｃ−Ｎ−Ｌ−アラニン（Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ａｌａ−ＯＨ）部分を結合させ、その目的のために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＤＩＣおよび３当量のｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。得られた混合物を樹脂に添加し、反応を６０分間進行させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。ＤＭＦ中、３当量の７−メチル−１，５，７−トリアザビシクロ［４．４．０］デカ−５−エンおよび４当量のパラ−ニトロベンゼンスルホン酸によって樹脂を３０分間処理（３回の処理）することによって、アミノ基のＮ−メチル化を達成する。処理の間に、ＤＭＦおよびＤＣＭによって樹脂を十分に洗浄する。Ａｌａアミノ基のＮ−メチル化の後、１０当量のβ−メルカプトエタノー��および５当量のＤＢＵ（１×１０’および１×４０’）によって樹脂を処理することによって、オルト−ニトロベンゼンスルホニル保護基を除去する。クロラニル試験を使用して、オルト−ニトロベンゼンスルホニル基の除去を評価する。ペプチドのＮ末端部のアセチル化のために、２０当量の無水酢酸および２０当量のＤＩＥＡを樹脂に添加する。混合物を３０分間反応させ、クロラニル試験を使用して反応の程度をモニタリングする。Ａｌｌｏｃ基の除去のために、Ｎ２を混合物に通してバブリングしながら、１０当量のフェニルシランのＤＣＭ溶液を樹脂に添加する。次いで、０．１当量のＰｄ（ＰＰｈ３）４を添加し、すべてを十分に混合しながら、Ｎ２バブリングを維持する。次いで、反応容器を密閉し、１５分間振盪する。この時間の後、反応物をろ過し、樹脂を十分に洗浄する。同じ処理をさらに２回繰り返す。最後の処理後、ＤＣＭ、ＭｅＯＨおよびＤＭＦによって樹脂を十分に洗浄する。ジアミノエチル部分の側鎖への３，５−ジフルオロ安息香酸のカップリングのために、３当量の前記酸、３当量のカップリング剤ＤＩＣおよび３当量のｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。得られた混合物を樹脂に添加し、反応を６０分間進行させる。この時間の後、ＤＭＦおよびＤＣＭによって樹脂を洗浄し、カイザー試験によって反応の程度をモニタリングする。
【０１２３】
ペプチドの切断のために、ＤＣＭによって樹脂を数回洗浄し、吸引によって乾燥させる。ＤＣＭ／ＴＦＡ（９５：５）の溶液を添加することによって、樹脂からペプチドを切断し、混合物を１５分間反応させる。次いで、反応混合物をろ過し、ＤＣＭによって樹脂をすすぐ。この切断手順を２回繰り返す。すべてのろ液をプールし、真空下において溶媒を蒸発させて、実施例１２を得る。逆相クロマトグラフィーを使用して、化合物を精製する。
【０１２４】
実施例１３：
（２Ｓ）−１−［３−［アセチル（メチル）アミノ］プロパノイル］−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−３−［（３，５−ジフルオロベンゾイル）アミノ］−１−（ヒドロキシカルバモイル）プロピル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−Ｎ−メチル−ピロリジン−２−カルボキサミド
【化５２】
0006795606.tif 000053
【０１２５】
２ｍＬのＤＣＭ中、１．５当量の市販のＦｍｏｃ−ＮＨ−ＯＨおよびＤＩＥＡ（１０当量）を２−クロロトリチル樹脂に添加する。混合物を手動によって断続的に２４時間撹拌する。その後、０．５ｍＬ／ｇのＭｅＯＨを反応混合物に添加して、樹脂の残りの反応点をキャッピングする。１５分後、溶液をろ別し、ＤＣＭ、ＤＭＦおよびＭｅＯＨによって樹脂を十分に洗浄する。２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）によって樹脂を処理することによって、Ｆｍｏｃ除去を達成する。Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎγ−ａｌｌｏｃ−Ｌ−２，４−ジアミノ酪酸（Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｄａｂ（ａｌｌｏｃ）−ＯＨ）のカップリングのために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＤＩＣおよび３当量のｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。得られた混合物を樹脂に添加し、反応を６０分間進行させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。その後、Ｆｍｏｃ−Ｎ−メチル−Ｌ−イソロイシン（Ｆｍｏｃ−ＮＭｅ−Ｌ−Ｉｌｅ−ＯＨ）部分を結合させ、その目的のために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＤＩＣおよび３当量のｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。得られた混合物を樹脂に添加し、反応を６０分間進行させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。その後、Ｆｍｏｃ−Ｌ−プロリン（Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｐｒｏ−ＯＨ）部分を結合させ、その目的のために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＤＩＣおよび３当量のｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。得られた混合物を樹脂に添加し、反応を６０分間進行させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理およびピペリジン／ＤＢＵ／トルエン／ＤＭＦ（５：５：２０：７０）の混合物（１×５’）によるさらなる処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。その後、Ｆｍｏｃ−β−アラニン（Ｆｍｏｃ−β−Ａｌａ−ＯＨ）部分を結合させ、その目的のために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＤＩＣおよび３当量のｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。得られた混合物を樹脂に添加し、反応を６０分間進行させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。ＤＭＦ中、３当量の７−メチル−１，５，７−トリアザビシクロ［４．４．０］デカ−５−エンおよび４当量のパラ−ニトロベンゼンスルホン酸によって樹脂を３０分間処理（３回の処理）することによって、アミノ基のＮ−メチル化を達成する。処理の間に、ＤＭＦおよびＤＣＭによって樹脂を十分に洗浄する。β−Ａｌａアミノ基のＮ−メチル化の後、１０当量のβ−メルカプトエタノール��よび５当量のＤＢＵ（１×１０’および１×４０’）によって樹脂を処理することによって、オルト−ニトロベンゼンスルホニル保護基を除去する。クロラニル試験を使用して、オルト−ニトロベンゼンスルホニル基の除去を評価する。ペプチドのＮ末端部のアセチル化のために、２０当量の無水酢酸および２０当量のＤＩＥＡを樹脂に添加する。混合物を３０分間反応させ、クロラニル試験を使用して反応の程度をモニタリングする。Ａｌｌｏｃ基の除去のために、Ｎ２を混合物に通してバブリングしながら、１０当量のフェニルシランのＤＣＭ溶液を樹脂に添加する。次いで、０．１当量のＰｄ（ＰＰｈ３）４を添加し、すべてを十分に混合しながら、Ｎ２バブリングを維持する。次いで、反応容器を密閉し、１５分間振盪する。この時間の後、反応物をろ過し、樹脂を十分に洗浄する。同じ処理をさらに２回繰り返す。最後の処理後、ＤＣＭ、ＭｅＯＨおよびＤＭＦによって樹脂を十分に洗浄する。ジアミノエチル部分の側鎖への３，５−ジフルオロ安息香酸のカップリングのために、３当量の前記酸、３当量のカップリング剤ＤＩＣおよび３当量のｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。得られた混合物を樹脂に添加し、反応を６０分間進行させる。この時間の後、ＤＭＦおよびＤＣＭによって樹脂を洗浄し、カイザー試験によって反応の程度をモニタリングする。
【０１２６】
ペプチドの切断のために、ＤＣＭによって樹脂を数回洗浄し、吸引によって乾燥させる。ＤＣＭ／ＴＦＡ（９５：５）の溶液を添加することによって、樹脂からペプチドを切断し、混合物を１５分間反応させる。次いで、反応混合物をろ過し、ＤＣＭによって樹脂をすすぐ。この切断手順を２回繰り返す。すべてのろ液をプールし、真空下において溶媒を蒸発させて、実施例１３を得る。逆相クロマトグラフィーを使用して、化合物を精製する。
【０１２７】
実施例１４：
（２Ｓ）−１−［（２Ｓ）−２−［［（２Ｓ）−２−［ブタノイル（メチル）アミノ］−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパノイル］−メチル−アミノ］−４−メチル−ペンタノイル］−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−３−［（３，５−ジフルオロベンゾイル）アミノ］−１−（ヒドロキシカルバモイル）プロピル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−Ｎ−メチル−ピロリジン−２−カルボキサミド
【化５３】
0006795606.tif 000054
【０１２８】
２ｍＬのＤＣＭ中、１．５当量の市販のＦｍｏｃ−ＮＨ−ＯＨおよびＤＩＥＡ（１０当量）を２−クロロトリチル樹脂に添加する。混合物を手動によって断続的に２４時間撹拌する。その後、０．５ｍＬ／ｇのＭｅＯＨを反応混合物に添加して、樹脂の残りの反応点をキャッピングする。１５分後、溶液をろ別し、ＤＣＭ、ＤＭＦおよびＭｅＯＨによって樹脂を十分に洗浄する。２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）によって樹脂を処理することによって、Ｆｍｏｃ除去を達成する。Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎγ−ａｌｌｏｃ−Ｌ−２，４−ジアミノ酪酸（Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｄａｂ（ａｌｌｏｃ）−ＯＨ）のカップリングのために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＤＩＣおよび３当量のｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。得られた混合物を樹脂に添加し、反応を６０分間進行させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。その後、Ｆｍｏｃ−Ｎ−メチル−Ｌ−イソロイシン（Ｆｍｏｃ−ＮＭｅ−Ｌ−Ｉｌｅ−ＯＨ）部分を結合させ、その目的のために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＤＩＣおよび３当量のｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。得られた混合物を樹脂に添加し、反応を６０分間進行させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。その後、Ｆｍｏｃ−Ｌ−プロリン（Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｐｒｏ−ＯＨ）部分を結合させ、その目的のために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＤＩＣおよび３当量のｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。得られた混合物を樹脂に添加し、反応を６０分間進行させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理およびピペリジン／ＤＢＵ／トルエン／ＤＭＦ（５：５：２０：７０）の混合物（１×５’）によるさらなる処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。その後、Ｆｍｏｃ−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシン（Ｆｍｏｃ−ＮＭｅＬｅｕ−ＯＨ）部分を結合させ、その目的のために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＤＩＣおよび３当量のｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。得られた混合物を樹脂に添加し、反応を６０分間進行させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。その後、Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎ（ｉｎ）−Ｂｏｃ−Ｎ−メチル−Ｌ−トリプトファン（Ｆｍｏｃ−ＮＭｅ−ＬＴｒｐ（Ｂｏｃ）−ＯＨ）部分を結合させ、その目的のために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＤＩＣおよび３当量のｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。得られた混合物を樹脂に添加し、反応を６０分間進行させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。３当量の酸、３当量のカップリング剤ＤＩＣおよび３当量のｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを樹脂に添加することによって、酪酸をトリプトファン部分にカップリングし、少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。得られた混合物を樹脂に添加し、反応を６０分間進行させる。次いで、反応物をろ別し、ＤＭＦおよびＤＣＭによって樹脂を十分にすすぐ。クロラニル試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。Ａｌｌｏｃ基の除去のために、Ｎ２を混合物に通してバブリングしながら、１０当量のフェニルシランのＤＣＭ溶液を樹脂に添加する。次いで、０．１当量のＰｄ（ＰＰｈ３）４を添加し、すべてを十分に混合しながら、Ｎ２バブリングを維持する。次いで、反応容器を密閉し、１５分間振盪する。この時間の後、反応物をろ過し、樹脂を十分に洗浄する。同じ処理をさらに２回繰り返す。最後の処理後、ＤＣＭ、ＭｅＯＨおよびＤＭＦによって樹脂を十分に洗浄する。ジアミノエチル部分の側鎖への３，５−ジフルオロ安息香酸のカップリングのために、３当量の前記酸、３当量のカップリング剤ＤＩＣおよび３当量のｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。得られた混合物を樹脂に添加し、反応を６０分間進行させる。この時間の後、ＤＭＦおよびＤＣＭによって樹脂を洗浄し、カイザー試験によって反応の程度をモニタリングする。
【０１２９】
ペプチドの切断のために、ＤＣＭによって樹脂を数回洗浄し、吸引によって乾燥させる。ＤＣＭ／ＴＦＡ（９５：５）の溶液を添加することによって、樹脂からペプチドを切断し、混合物を１５分間反応させる。次いで、反応混合物をろ過し、ＤＣＭによって樹脂をすすぐ。この切断手順を２回繰り返す。すべてのろ液をプールし、真空下において溶媒を蒸発させて、実施例１４を得る。逆相クロマトグラフィーを使用して、化合物を精製する。
【０１３０】
実施例１５：
（２Ｓ）−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−３−ベンズアミド−１−（ヒドロキシカルバモイル）プロピル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−Ｎ−メチル−１−ヘキサノイル−ピロリジン−２−カルボキサミド
【化５４】
0006795606.tif 000055
【０１３１】
２ｍＬのＤＣＭ中、１．５当量の市販のＦｍｏｃ−ＮＨ−ＯＨおよびＤＩＥＡ（１０当量）を２−クロロトリチル樹脂に添加する。混合物を手動によって断続的に２４時間撹拌する。その後、０．５ｍＬ／ｇのＭｅＯＨを反応混合物に添加して、樹脂の残りの反応点をキャッピングする。１５分後、溶液をろ別し、ＤＣＭ、ＤＭＦおよびＭｅＯＨによって樹脂を十分に洗浄する。２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）によって樹脂を処理することによって、Ｆｍｏｃ除去を達成する。Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎγ−ａｌｌｏｃ−Ｌ−２，４−ジアミノ酪酸（Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｄａｂ（ａｌｌｏｃ）−ＯＨ）のカップリングのために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＤＩＣおよび３当量のｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。得られた混合物を樹脂に添加し、反応を６０分間進行させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。その後、Ｆｍｏｃ−Ｎ−メチル−Ｌ−イソロイシン（Ｆｍｏｃ−ＮＭｅ−Ｌ−Ｉｌｅ−ＯＨ）部分を結合させ、その目的のために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＤＩＣおよび３当量のｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。得られた混合物を樹脂に添加し、反応を６０分間進行させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。その後、Ｆｍｏｃ−Ｌ−プロリン（Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｐｒｏ−ＯＨ）部分を結合させ、その目的のために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＤＩＣおよび３当量のｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。得られた混合物を樹脂に添加し、反応を６０分間進行させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理およびピペリジン／ＤＢＵ／トルエン／ＤＭＦ（５：５：２０：７０）の混合物（１×５’）によるさらなる処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。３当量の酸、３当量のカップリング剤ＤＩＣおよび３当量のｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを樹脂に添加することによって、ヘキサン酸をプロリン部分にカップリングし、少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。得られた混合物を樹脂に添加し、反応を６０分間進行させる。次いで、反応物をろ別し、ＤＭＦおよびＤＣＭによって樹脂を十分にすすぐ。クロラニル試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。Ａｌｌｏｃ基の除去のために、Ｎ２を混合物に通してバブリングしながら、１０当量のフェニルシランのＤＣＭ溶液を樹脂に添加する。次いで、０．１当量のＰｄ（ＰＰｈ３）４を添加し、すべてを十分に混合しながら、Ｎ２バブリングを維持する。次いで、反応容器を密閉し、１５分間振盪する。この時間の後、反応物をろ過し、樹脂を十分に洗浄する。同じ処理をさらに２回繰り返す。最後の処理後、ＤＣＭ、ＭｅＯＨおよびＤＭＦによって樹脂を十分に洗浄する。ジ���ミノエチル部分の側鎖への安息香酸のカップリングのために、３当量の前記酸、３当量のカップリング剤ＤＩＣおよび３当量のｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。得られた混合物を樹脂に添加し、反応を６０分間進行させる。この時間の後、ＤＭＦおよびＤＣＭによって樹脂を洗浄し、カイザー試験によって反応の程度をモニタリングする。
【０１３２】
ペプチドの切断のために、ＤＣＭによって樹脂を数回洗浄し、吸引によって乾燥させる。ＤＣＭ／ＴＦＡ（９５：５）の溶液を添加することによって、樹脂からペプチドを切断し、混合物を１５分間反応させる。次いで、反応混合物をろ過し、ＤＣＭによって樹脂をすすぐ。この切断手順を２回繰り返す。すべてのろ液をプールし、真空下において溶媒を蒸発させて、実施例１５を得る。逆相クロマトグラフィーを使用して、化合物を精製する。
【０１３３】
実施例１６：
（２Ｓ，４Ｒ）−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−３−ベンズアミド−１−（ヒドロキシカルバモイル）プロピル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−４−フルオロ−Ｎ−メチル−１−ヘキサノイル−ピロリジン−２−カルボキサミド
【化５５】
0006795606.tif 000056
【０１３４】
２ｍＬのＤＣＭ中、１．５当量の市販のＦｍｏｃ−ＮＨ−ＯＨおよびＤＩＥＡ（１０当量）を２−クロロトリチル樹脂に添加する。混合物を手動によって断続的に２４時間撹拌する。その後、０．５ｍＬ／ｇのＭｅＯＨを反応混合物に添加して、樹脂の残りの反応点をキャッピングする。１５分後、溶液をろ別し、ＤＣＭ、ＤＭＦおよびＭｅＯＨによって樹脂を十分に洗浄する。２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）によって樹脂を処理することによって、Ｆｍｏｃ除去を達成する。Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎγ−ａｌｌｏｃ−Ｌ−２，４−ジアミノ酪酸（Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｄａｂ（ａｌｌｏｃ）−ＯＨ）のカップリングのために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＤＩＣおよび３当量のｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。得られた混合物を樹脂に添加し、反応を６０分間進行させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。その後、Ｆｍｏｃ−Ｎ−メチル−Ｌ−イソロイシン（Ｆｍｏｃ−ＮＭｅ−Ｌ−Ｉｌｅ−ＯＨ）部分を結合させ、その目的のために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＤＩＣおよび３当量のｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。得られた混合物を樹脂に添加し、反応を６０分間進行させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。その後、Ｆｍｏｃ−ｔｒａｎｓ−４−フルオロ−Ｌ−プロリン（Ｆｍｏｃ−Ｌ−（Ｆ）Ｐｒｏ−ＯＨ）部分を結合させ、その目的のために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＤＩＣおよび３当量のｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。得られた混合物を樹脂に添加し、反応を６０分間進行させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理およびピペリジン／ＤＢＵ／トルエン／ＤＭＦ（５：５：２０：７０）の混合物（１×５’）によるさらなる処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。３当量の酸、３当量のカップリング剤ＤＩＣおよび３当量のｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを樹脂に添加することによって、ヘキサン酸をプロリン部分にカップリングし、少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。得られた混合物を樹脂に添加し、反応を６０分間進行させる。次いで、反応物をろ別し、ＤＭＦおよびＤＣＭによって樹脂を十分にすすぐ。クロラニル試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。Ａｌｌｏｃ基の除去のために、Ｎ２を混合物に通してバブリングしながら、１０当量のフェニルシランのＤＣＭ溶液を樹脂に添加する。次いで、０．１当量のＰｄ（ＰＰｈ３）４を添加し、すべてを十分に混合しながら、Ｎ２バブリングを維持する。次いで、反応容器を密閉し、１５分間振盪する。この時間の後、反応物をろ過し、樹脂を十分に洗浄する。同じ処理をさらに２回繰り返す。最後の処理後、ＤＣＭ、ＭｅＯＨおよびＤＭＦ���よって樹脂を十分に洗浄する。ジアミノエチル部分の側鎖への安息香酸のカップリングのために、３当量の前記酸、３当量のカップリング剤ＤＩＣおよび３当量のｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。得られた混合物を樹脂に添加し、反応を６０分間進行させる。この時間の後、ＤＭＦおよびＤＣＭによって樹脂を洗浄し、カイザー試験によって反応の程度をモニタリングする。
【０１３５】
ペプチドの切断のために、ＤＣＭによって樹脂を数回洗浄し、吸引によって乾燥させる。ＤＣＭ／ＴＦＡ（９５：５）の溶液を添加することによって、樹脂からペプチドを切断し、混合物を１５分間反応させる。次いで、反応混合物をろ過し、ＤＣＭによって樹脂をすすぐ。この切断手順を２回繰り返す。すべてのろ液をプールし、真空下において溶媒を蒸発させて、実施例１６を得る。逆相クロマトグラフィーを使用して、化合物を精製する。
【０１３６】
比較例
比較例１７：
（２Ｓ）−２−［［（２Ｓ）−１−アセチルピロリジン−２−カルボニル）アミノ］−Ｎ−［（１Ｓ）−２−（ヒドロキシアミノ）−１−（１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−２−オキソ−エチル］ペンタンジアミド
【化５６】
0006795606.tif 000057
【０１３７】
２ｍＬのＤＭＦ中、０．８当量の市販のＮα−Ｆｍｏｃ−Ｎ（ｉｎ）−Ｂｏｃ−Ｌ−トリプトファン（Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−ＯＨ）およびＤＩＥＡ（４当量）を樹脂に添加する。混合物を手動によって断続的に１時間撹拌する。その後、０．５ｍＬ／ｇのＭｅＯＨを反応１０混合物に添加して、樹脂の残りの反応点をキャッピングする。１５分後、溶液をろ別し、ＤＣＭ、ＤＭＦおよびＭｅＯＨによって樹脂を十分に洗浄する。２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）によって樹脂を処理することによって、Ｆｍｏｃ除去を達成する。Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎδ−トリチル−Ｌ−グルタミン（Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ）のカップリングのために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＴＢＴＵおよび６当量のＤＩＥＡを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。その後、混合物を樹脂に添加し、反応物を９０分間反応させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’）による処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。Ｆｍｏｃ−Ｌ−プロリン（Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｐｒｏ−ＯＨ）を結合させ、その目的のために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＴＢＴＵおよび６当量のＤＩＥＡを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。その後、混合物を樹脂に添加し、反応物を９０分間反応させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理およびピペリジン／ＤＢＵ／トルエン／ＤＭＦ（５：５：２０：７０）の混合物（１×５’）によるさらなる処理によって、Ｆｍｏｃ基を１０除去する。ペプチドのＮ末端部のアセチル化のために、２０当量の無水酢酸および２０当量のＤＩＥＡを樹脂に添加する。混合物を３０分間反応させ、クロラニル試験を使用して反応の程度をモニタリングする。ペプチドの切断のために、ＤＣＭによって樹脂を数回洗浄し、吸引によって乾燥させる。ＨＦＩＰ／ＤＣＭ（１：４）の溶液を添加することによって、樹脂から線状側鎖保護ペプチドを切断し、混合物を１５分間反応させる。次いで、反応混合物をろ過し、３０  ＨＦＩＰ／ＤＣＭによって樹脂をすすぐ。この切断手順を２回繰り返す。すべてのろ液をプールし、真空下において溶媒を蒸発させる。事前に精製せずに、溶液中におけるヒドロキシアミドの形成のために、粗ペプチドを使用する。ペプチドをＤＣＭに溶解する。その後、３．５当量のＯ−（２，４−ジメトキシベンジル）ヒドロキシルアミン、５当量の４−メチルモルホリン、１．３当量の５カップリング剤ＥＤＣ・ＨＣｌおよび１．３当量の添加剤ＨＯＡｔを添加し、Ｎ２雰囲気下において混合物を一晩反応させる。ＨＰＬＣを使用して、反応の程度をモニタリングする。所望の生成物が得られたら、１Ｎ  ＨＣｌ、水およびブラインによって混合物を洗浄する。硫酸マグネシウムによって有機層を脱水し、ろ過し、蒸発させる。その後、ＴＦＡ／水／ＴＩＳ（９５：２．５：２．５）の混合物を粗ペプチドに添加し、混合物を軽く２時間撹拌する。その後、Ｎ２気流下においてＴＦＡを蒸発させて、実施例１７を得る。逆相ク��マトグラフィーを使用して、化合物を精製する。
【０１３８】
比較例１８：
（２Ｓ）−２−アセトアミド−Ｎ−［（１Ｓ）−２−［［（１Ｓ）−１−（ヒドロキシカルバモイル）−２−メチル−ブチル］アミノ］−１−（１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−２−オキソ−エチル］ペンタンジアミド
【化５７】
0006795606.tif 000058
【０１３９】
２ｍＬのＤＭＦ中、０．８当量の市販のＦｍｏｃ−Ｌ−イソロイシン（Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｉｌｅ−ＯＨ）およびＤＩＥＡ（４当量）を樹脂に添加する。混合物を手動によって断続的に１時間撹拌する。その後、０．５ｍＬ／ｇのＭｅＯＨを反応１０混合物に添加して、樹脂の残りの反応点をキャッピングする。１５分後、溶液をろ別し、ＤＣＭ、ＤＭＦおよびＭｅＯＨによって樹脂を十分に洗浄する。２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）によって樹脂を処理することによって、Ｆｍｏｃ除去を達成する。Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎ（ｉｎ）−Ｂｏｃ−Ｌ−トリプトファン（Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−ＯＨ）のカップリングのために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＴＢＴＵおよび６当量のＤＩＥＡを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。その後、混合物を樹脂に添加し、反応物を９０分間反応させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’）による処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。次いで、Ｆｍｏｃ−Ｌ−グルタミン酸５−ｔｅｒｔ−ブチルエステル（Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｇｌｕ（ｔＢｕ）−ＯＨ）を結合させ、その目的のために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＴＢＴＵおよび６当量のＤＩＥＡを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。その後、混合物を樹脂に添加し、反応物を９０分間反応させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理およびピペリジン／ＤＢＵ／トルエン／ＤＭＦ（５：５：２０：７０）の混合物（１×５’）によるさらなる処理によって、Ｆｍｏｃ基を１０除去する。ペプチドのＮ末端部のアセチル化のために、２０当量の無水酢酸および２０当量のＤＩＥＡを樹脂に添加する。混合物を３０分間反応させ、クロラニル試験を使用して反応の程度をモニタリングする。
【０１４０】
ペプチドの切断のために、ＤＣＭによって樹脂を数回洗浄し、吸引によって乾燥させる。ＨＦＩＰ／ＤＣＭ（１：４）の溶液を添加することによって、樹脂から線状側鎖保護ペプチドを切断し、混合物を１５分間反応させる。次いで、反応混合物をろ過し、３０  ＨＦＩＰ／ＤＣＭによって樹脂をすすぐ。この切断手順を２回繰り返す。すべてのろ液をプールし、真空下において溶媒を蒸発させる。事前に精製せずに、溶液中におけるヒドロキシアミドの形成のために、粗ペプチドを使用する。ペプチドをＤＣＭに溶解する。その後、３．５当量のＯ−（２，４−ジメトキシベンジル）ヒドロキシルアミン、５当量の４−メチルモルホリン、１．３当量の５カップリング剤ＥＤＣ・ＨＣｌおよび１．３当量の添加剤ＨＯＡｔを添加し、Ｎ２雰囲気下において混合物を一晩反応させる。ＨＰＬＣを使用して、反応の程度をモニタリングする。所望の生成物が得られたら、１Ｎ  ＨＣｌ、水およびブラインによって混合物を洗浄する。硫酸マグネシウムによって有機層を脱水し、ろ過し、蒸発させる。その後、ＴＦＡ／水／ＴＩＳ（９５：２．５：２．５）の混合物を粗ペプチドに添加し、混合物を軽く２時間撹拌する。その後、Ｎ２気流下においてＴＦＡを蒸発させて、実施例１８を得る。逆相クロマトグラフィーを使用して、化合物を精製する。
【０１４１】
比較例１９：
（２Ｓ）−１−［（２Ｓ）−２−アセトアミド−５−アミノ−５−オキソ−ペンタノイル］−Ｎ−［（１Ｓ）−１−（ヒドロキシカルバモイル）−２−メチル−ブチル］ピロリジン−２−カルボキサミド
【化５８】
0006795606.tif 000059
【０１４２】
２ｍＬのＤＭＦ中、０．８当量の市販のＦｍｏｃ−Ｌ−イソロイシン（Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｉｌｅ−ＯＨ）およびＤＩＥＡ（４当量）を樹脂に添加する。混合物を手動によって断続的に１時間撹拌する。その後、０．５ｍＬ／ｇのＭｅＯＨを反応１０混合物に添加して、樹脂の残りの反応点をキャッピングする。１５分後、溶液をろ別し、ＤＣＭ、ＤＭＦおよびＭｅＯＨによって樹脂を十分に洗浄する。２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）によって樹脂を処理することによって、Ｆｍｏｃ除去を達成する。Ｆｍｏｃ−Ｌ−プロリン（Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｐｒｏ−ＯＨ）のカップリングのために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＴＢＴＵおよび６当量のＤＩＥＡを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。その後、混合物を樹脂に添加し、反応物を９０分間反応させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’）による処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。次いで、Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎδ−トリチル−Ｌ−グルタミン（Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ）を結合させ、その目的のために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＴＢＴＵおよび６当量のＤＩＥＡを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。その後、混合物を樹脂に添加し、反応物を９０分間反応させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理およびピペリジン／ＤＢＵ／トルエン／ＤＭＦ（５：５：２０：７０）の混合物（１×５’）によるさらなる処理によって、Ｆｍｏｃ基を１０除去する。ペプチドのＮ末端部のアセチル化のために、２０当量の無水酢酸および２０当量のＤＩＥＡを樹脂に添加する。混合物を３０分間反応させ、クロラニル試験を使用して反応の程度をモニタリングする。
【０１４３】
ペプチドの切断のために、ＤＣＭによって樹脂を数回洗浄し、吸引によって乾燥させる。ＨＦＩＰ／ＤＣＭ（１：４）の溶液を添加することによって、樹脂から線状側鎖保護ペプチドを切断し、混合物を１５分間反応させる。次いで、反応混合物をろ過し、３０  ＨＦＩＰ／ＤＣＭによって樹脂をすすぐ。この切断手順を２回繰り返す。すべてのろ液をプールし、真空下において溶媒を蒸発させる。事前に精製せずに、溶液中におけるヒドロキシアミドの形成のために、粗ペプチドを使用する。ペプチドをＤＣＭに溶解する。その後、３．５当量のＯ−（２，４−ジメトキシベンジル）ヒドロキシルアミン、５当量の４−メチルモルホリン、１．３当量の５カップリング剤ＥＤＣ・ＨＣｌおよび１．３当量の添加剤ＨＯＡｔを添加し、Ｎ２雰囲気下において混合物を一晩反応させる。ＨＰＬＣを使用して、反応の程度をモニタリングする。所望の生成物が得られたら、１Ｎ  ＨＣｌ、水およびブラインによって混合物を洗浄する。硫酸マグネシウムによって有機層を脱水し、ろ過し、蒸発させる。その後、ＴＦＡ／水／ＴＩＳ（９５：２．５：２．５）の混合物を粗ペプチドに添加し、混合物を軽く２時間撹拌する。その後、Ｎ２気流下においてＴＦＡを蒸発させて、実施例１９を得る。逆相クロマトグラフィーを使用して、化合物を精製する。
【０１４４】
比較例２０：
（２Ｓ）−２−［［（２Ｓ）−１−アセチルピロリジン−２−カルボニル］−メチル−アミノ］−Ｎ−［（１Ｓ）−２−（ヒドロキシアミノ）−１−（１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−２−オキソ−エチル］ペンタンジアミド
【化５９】
0006795606.tif 000060
【０１４５】
２ｍＬのＤＭＦ中、０．８当量の市販のＮα−Ｆｍｏｃ−Ｎ（ｉｎ）−Ｂｏｃ−Ｌ−トリプトファン（Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−ＯＨ）およびＤＩＥＡ（４当量）を樹脂に添加する。混合物を手動によって断続的に１時間撹拌する。その後、０．５ｍＬ／ｇのＭｅＯＨを反応１０混合物に添加して、樹脂の残りの反応点をキャッピングする。１５分後、溶液をろ別し、ＤＣＭ、ＤＭＦおよびＭｅＯＨによって樹脂を十分に洗浄する。２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）によって樹脂を処理することによって、Ｆｍｏｃ除去を達成する。Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎδ−トリチル−Ｌ−グルタミン（Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ）のカップリングのために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＴＢＴＵおよび６当量のＤＩＥＡを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。その後、混合物を樹脂に添加し、反応物を９０分間反応させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’）による処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。Ｇｌｎ部分のアミノ基のＮ−メチル化のために、ＤＭＦ中、塩基としてコリジン（１０当量）を使用して、オルト−ニトロベンゼンスルホニルクロリド（４当量）によって遊離アミノ基を保護し、これを樹脂と３０分間反応させる。次いで、ＤＭＦおよびＤＣＭによって樹脂をすすぎ、同じ条件下において保護工程を再び繰り返す。カイザー試験を使用して、保護の程度をモニタリングする。ＤＭＦ中、３当量の７−メチル−１，５，７−トリアザビシクロ［４．４．０］デカ−５−エンおよび４当量のパラ−ニトロベンゼンスルホン酸によって樹脂を３０分間処理（３回の処理）することによって、アミノ基のＮ−メチル化を達成する。処理の間に、ＤＭＦおよび５  ＤＣＭによって樹脂を十分に洗浄する。Ｇｌｎアミノ基のＮ−メチル化の後、１０当量のβ−メルカプトエタノールおよび５当量のＤＢＵ（１×１０’および１×４０’）によって樹脂を処理することによって、オルト−ニトロベンゼンスルホニル保護基を除去する。クロラニル試験を使用して、オルト−ニトロベンゼンスルホニル基の除去を評価する。次いで、Ｆｍｏｃ−Ｌ−プロリン（Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｐｒｏ−ＯＨ）を結合させ、その目的のために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＴＢＴＵおよび６当量のＤＩＥＡを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。その後、混合物を樹脂に添加し、反応物を９０分間反応させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理およびピペリジン／ＤＢＵ／トルエン／ＤＭＦ（５：５：２０：７０）の混合物（１×５’）によるさらなる処理によって、Ｆｍｏｃ基を１０除去する。ペプチドのＮ末端部のアセチル化のために、２０当量の無水酢酸および２０当量のＤＩＥＡを樹脂に添加する。混合物を３０分間反応させ、クロラニル試験を使用して反応の程度をモニタリングする。ペプチドの切断のために、ＤＣＭによって樹脂を数回洗浄し、吸引によって乾燥させる。ＨＦＩＰ／ＤＣＭ（１：４）の溶液を添加することによって、樹脂から線状���鎖保護ペプチドを切断し、混合物を１５分間反応させる。次いで、反応混合物をろ過し、３０  ＨＦＩＰ／ＤＣＭによって樹脂をすすぐ。この切断手順を２回繰り返す。すべてのろ液をプールし、真空下において溶媒を蒸発させる。事前に精製せずに、溶液中におけるヒドロキシアミドの形成のために、粗ペプチドを使用する。ペプチドをＤＣＭに溶解する。その後、３．５当量のＯ−（２，４−ジメトキシベンジル）ヒドロキシルアミン、５当量の４−メチルモルホリン、１．３当量の５カップリング剤ＥＤＣ・ＨＣｌおよび１．３当量の添加剤ＨＯＡｔを添加し、Ｎ２雰囲気下において混合物を一晩反応させる。ＨＰＬＣを使用して、反応の程度をモニタリングする。所望の生成物が得られたら、１Ｎ  ＨＣｌ、水およびブラインによって混合物を洗浄する。硫酸マグネシウムによって有機層を脱水し、ろ過し、蒸発させる。その後、ＴＦＡ／水／ＴＩＳ（９５：２．５：２．５）の混合物を粗ペプチドに添加し、混合物を軽く２時間撹拌する。その後、Ｎ２気流下においてＴＦＡを蒸発させて、実施例２０を得る。逆相クロマトグラフィーを使用して、化合物を精製する。
【０１４６】
比較例２１：
（２Ｓ）−１−アセチル−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−２−（ヒドロキシアミノ）−１−（１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−２−オキソ−エチル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−Ｎ−メチル−ピロリジン−２−カルボキサミド
【化６０】
0006795606.tif 000061
【０１４７】
２ｍＬのＤＭＦ中、０．８当量の市販のＮα−Ｆｍｏｃ−Ｎ（ｉｎ）−Ｂｏｃ−Ｌ−トリプトファン（Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−ＯＨ）およびＤＩＥＡ（４当量）を樹脂に添加する。混合物を手動によって断続的に１時間撹拌する。その後、０．５ｍＬ／ｇのＭｅＯＨを反応１０混合物に添加して、樹脂の残りの反応点をキャッピングする。１５分後、溶液をろ別し、ＤＣＭ、ＤＭＦおよびＭｅＯＨによって樹脂を十分に洗浄する。２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）によって樹脂を処理することによって、Ｆｍｏｃ除去を達成する。Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｌ−イソロイシン（Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｉｌｅ−ＯＨ）のカップリングのために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＴＢＴＵおよび６当量のＤＩＥＡを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。その後、混合物を樹脂に添加し、反応物を９０分間反応させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’）による処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。Ｉｌｅ部分のアミノ基のＮ−メチル化のために、ＤＭＦ中、塩基としてコリジン（１０当量）を使用して、オルト−ニトロベンゼンスルホニルクロリド（４当量）によって遊離アミノ基を保護し、これを樹脂と３０分間反応させる。次いで、ＤＭＦおよびＤＣＭによって樹脂をすすぎ、同じ条件下において保護工程を再び繰り返す。カイザー試験を使用して、保護の程度をモニタリングする。ＤＭＦ中、３当量の７−メチル−１，５，７−トリアザビシクロ［４．４．０］デカ−５−エンおよび４当量のパラ−ニトロベンゼンスルホン酸によって樹脂を３０分間処理（３回の処理）することによって、アミノ基のＮ−メチル化を達成する。処理の間に、ＤＭＦおよび５  ＤＣＭによって樹脂を十分に洗浄する。Ｉｌｅアミノ基のＮ−メチル化の後、１０当量のβ−メルカプトエタノールおよび５当量のＤＢＵ（１×１０’および１×４０’）によって樹脂を処理することによって、オルト−ニトロベンゼンスルホニル保護基を除去する。クロラニル試験を使用して、オルト−ニトロベンゼンスルホニル基の除去を評価する。次いで、Ｆｍｏｃ−Ｌ−プロリン（Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｐｒｏ−ＯＨ）を結合させ、その目的のために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＴＢＴＵおよび６当量のＤＩＥＡを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。その後、混合物を樹脂に添加し、反応物を９０分間反応させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理およびピペリジン／ＤＢＵ／トルエン／ＤＭＦ（５：５：２０：７０）の混合物（１×５’）によるさらなる処理によって、Ｆｍｏｃ基を１０除去する。ペプチドのＮ末端部のアセチル化のために、２０当量の無水酢酸および２０当量のＤＩＥＡを樹脂に添加する。混合物を３０分間反応させ、クロラニル試験を使用して反応の程度をモニタリングする。ペプチドの切断のために、ＤＣＭによって樹脂を数回洗浄し、吸引によって乾燥させる。ＨＦＩＰ／ＤＣＭ（１：４）の溶液を添加することによって、樹脂から線状側鎖保護ペプチドを切断し、混合物を１５分間反応させる。次いで、反応混合物をろ過し、３０  ＨＦＩＰ／ＤＣＭによって樹脂をすすぐ。この切断手順を２回繰り返す。すべてのろ液をプールし、真空下において溶媒を蒸発させる。事前に精製せずに、溶液中におけるヒドロキシアミドの形成のために、粗ペプチドを使用する。ペプチドをＤＣＭに溶解する。その後、３．５当量のＯ−（２，４−ジメトキシベンジル）ヒドロキシルアミン、５当量の４−メチルモルホリン、１．３当量の５カップリング剤ＥＤＣ・ＨＣｌおよび１．３当量の添加剤ＨＯＡｔを添加し、Ｎ２雰囲気下において混合物を一晩反応させる。ＨＰＬＣを使用して、反応の程度をモニタリングする。所望の生成物が得られたら、１Ｎ  ＨＣｌ、水およびブラインによって混合物を洗浄する。硫酸マグネシウムによって有機層を脱水し、ろ過し、蒸発させる。その後、ＴＦＡ／水／ＴＩＳ（９５：２．５：２．５）の混合物を粗ペプチドに添加し、混合物を軽く２時間撹拌する。その後、Ｎ２気流下においてＴＦＡを蒸発させて、実施例２１を得る。逆相クロマトグラフィーを使用して、化合物を精製する。
【０１４８】
比較例２２：
（２Ｓ）−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−２−（ヒドロキシアミノ）−１−（１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−２−オキソ−エチル］カルバモイル］−２−メチル−ブチル］−Ｎ−メチル−１−テトラデカノイル−ピロリジン−２−カルボキサミド
【化６１】
0006795606.tif 000062
【０１４９】
２ｍＬのＤＭＦ中、０．８当量の市販のＮα−Ｆｍｏｃ−Ｎ（ｉｎ）−Ｂｏｃ−Ｌ−トリプトファン（Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−ＯＨ）およびＤＩＥＡ（４当量）を樹脂に添加する。混合物を手動によって断続的に１時間撹拌する。その後、０．５ｍＬ／ｇのＭｅＯＨを反応１０混合物に添加して、樹脂の残りの反応点をキャッピングする。１５分後、溶液をろ別し、ＤＣＭ、ＤＭＦおよびＭｅＯＨによって樹脂を十分に洗浄する。２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）によって樹脂を処理することによって、Ｆｍｏｃ除去を達成する。Ｆｍｏｃ−Ｌ−ロイシン（Ｆｍｏｃ−ＬＬｅｕ−ＯＨ）のカップリングのために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＴＢＴＵおよび６当量のＤＩＥＡを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。その後、混合物を樹脂に添加し、反応物を９０分間反応させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’）による処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。次いで、Ｆｍｏｃ−Ｌ−プロリン（Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｐｒｏ−ＯＨ）を結合させ、その目的のために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＴＢＴＵおよび６当量のＤＩＥＡを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。その後、混合物を樹脂に添加し、反応物を９０分間反応させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理およびピペリジン／ＤＢＵ／トルエン／ＤＭＦ（５：５：２０：７０）の混合物（１×５’）によるさらなる処理によって、Ｆｍｏｃ基を１０除去する。ペプチドのＮ末端部のキャッピングのために、３当量のミリスチル酸、３当量のカップリング剤ＴＢＴＵおよび６当量のＤＩＥＡを樹脂に添加する。混合物を６０分間反応させ、１５クロラニル試験を使用して反応の程度をモニタリングする。ペプチドの切断のために、ＤＣＭによって樹脂を数回洗浄し、吸引によって乾燥させる。ＨＦＩＰ／ＤＣＭ（１：４）の溶液を添加することによって、樹脂から線状側鎖保護ペプチドを切断し、混合物を１５分間反応させる。次いで、反応混合物をろ過し、３０  ＨＦＩＰ／ＤＣＭによって樹脂をすすぐ。この切断手順を２回繰り返す。すべてのろ液をプールし、真空下において溶媒を蒸発させる。事前に精製せずに、溶液中におけるヒドロキシアミドの形成のために、粗ペプチドを使用する。ペプチドをＤＣＭに溶解する。その後、３．５当量のＯ−（２，４−ジメトキシベンジル）ヒドロキシルアミン、５当量の４−メチルモルホリン、１．３当量の５カップリング剤ＥＤＣ・ＨＣｌおよび１．３当量の添加剤ＨＯＡｔを添加し、Ｎ２雰囲気下において混合物を一晩反応させる。ＨＰＬＣを使用して、反応の程度をモニタリングする。所望の生成物が得られたら、１Ｎ  ＨＣｌ、水およびブラインによって混合物を洗浄する。硫酸マグネシウムによって有機層を脱水し、ろ過し、蒸発させる。その後、ＴＦＡ／水／ＴＩＳ（９５：２．５：２．５）の混合物を粗ペプチドに添加し、混合物を軽く２時間撹拌する。その後、Ｎ２気流下においてＴＦＡを蒸発させて、実施例２２を得る。逆相クロマトグラフィーを使用して、化合物を精製する。
【０１５０】
比較例２３：
（２Ｓ）−２−［［（ＳＳ）−１−ヘキサノイルピロリジン−２−カルボニル）−メチル−アミノ］−Ｎ−［（１Ｓ）−２−（ヒドロキシアミノ）−１−（１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−２−オキソ−エチル］ペンタンジアミド
【化６２】
0006795606.tif 000063
【０１５１】
２ｍＬのＤＭＦ中、０．８当量の市販のＮα−Ｆｍｏｃ−Ｎ（ｉｎ）−Ｂｏｃ−Ｌ−トリプトファン（Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−ＯＨ）およびＤＩＥＡ（４当量）を樹脂に添加する。混合物を手動によって断続的に１時間撹拌する。その後、０．５ｍＬ／ｇのＭｅＯＨを反応１０混合物に添加して、樹脂の残りの反応点をキャッピングする。１５分後、溶液をろ別し、ＤＣＭ、ＤＭＦおよびＭｅＯＨによって樹脂を十分に洗浄する。２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）によって樹脂を処理することによって、Ｆｍｏｃ除去を達成する。Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎδ−トリチル−Ｌ−グルタミン（Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ）のカップリングのために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＴＢＴＵおよび６当量のＤＩＥＡを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。その後、混合物を樹脂に添加し、反応物を９０分間反応させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’）による処理によって、Ｆｍｏｃ基を除去する。Ｇｌｎ部分のアミノ基のＮ−メチル化のために、ＤＭＦ中、塩基としてコリジン（１０当量）を使用して、オルト−ニトロベンゼンスルホニルクロリド（４当量）によって遊離アミノ基を保護し、これを樹脂と３０分間反応させる。次いで、ＤＭＦおよびＤＣＭによって樹脂をすすぎ、同じ条件下において保護工程を再び繰り返す。カイザー試験を使用して、保護の程度をモニタリングする。ＤＭＦ中、３当量の７−メチル−１，５，７−トリアザビシクロ［４．４．０］デカ−５−エンおよび４当量のパラ−ニトロベンゼンスルホン酸によって樹脂を３０分間処理（３回の処理）することによって、アミノ基のＮ−メチル化を達成する。処理の間に、ＤＭＦおよび５  ＤＣＭによって樹脂を十分に洗浄する。Ｇｌｎアミノ基のＮ−メチル化の後、１０当量のβ−メルカプトエタノールおよび５当量のＤＢＵ（１×１０’および１×４０’）によって樹脂を処理することによって、オルト−ニトロベンゼンスルホニル保護基を除去する。クロラニル試験を使用して、オルト−ニトロベンゼンスルホニル基の除去を評価する。次いで、Ｆｍｏｃ−Ｌ−プロリン（Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｐｒｏ−ＯＨ）を結合させ、その目的のために、３当量のアミノ酸、３当量のカップリング剤ＴＢＴＵおよび６当量のＤＩＥＡを少量のＤＭＦに溶解し、２分間予混合する。その後、混合物を樹脂に添加し、反応物を９０分間反応させる。カイザー試験を使用して、反応の程度をモニタリングする。次いで、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液（１×５’、１×１０’および１×１５’）による処理およびピペリジン／ＤＢＵ／トルエン／ＤＭＦ（５：５：２０：７０）の混合物（１×５’）によるさらなる処理によって、Ｆｍｏｃ基を１０除去する。ペプチドのＮ末端部のキャッピングのために、３当量のヘキサン酸、３当量のカップリング剤ＴＢＴＵおよび６当量のＤＩＥＡを樹脂に添加する。混合物を６０分間反応させ、クロラニル試験を使用して反応の程度をモニタリングする。ペプチドの切断のために、ＤＣＭによって樹脂を数回洗浄し、吸引によって乾燥させる。ＨＦＩＰ／ＤＣＭ（１：４）の溶液を添���することによって、樹脂から線状側鎖保護ペプチドを切断し、混合物を１５分間反応させる。次いで、反応混合物をろ過し、３０  ＨＦＩＰ／ＤＣＭによって樹脂をすすぐ。この切断手順を２回繰り返す。すべてのろ液をプールし、真空下において溶媒を蒸発させる。事前に精製せずに、溶液中におけるヒドロキシアミドの形成のために、粗ペプチドを使用する。ペプチドをＤＣＭに溶解する。その後、３．５当量のＯ−（２，４−ジメトキシベンジル）ヒドロキシルアミン、５当量の４−メチルモルホリン、１．３当量の５カップリング剤ＥＤＣ・ＨＣｌおよび１．３当量の添加剤ＨＯＡｔを添加し、Ｎ２雰囲気下において混合物を一晩反応させる。ＨＰＬＣを使用して、反応の程度をモニタリングする。所望の生成物が得られたら、１Ｎ  ＨＣｌ、水およびブラインによって混合物を洗浄する。硫酸マグネシウムによって有機層を脱水し、ろ過し、蒸発させる。その後、ＴＦＡ／水／ＴＩＳ（９５：２．５：２．５）の混合物を粗ペプチドに添加し、混合物を軽く２時間撹拌する。その後、Ｎ２気流下においてＴＦＡを蒸発させて、実施例２３を得る。逆相クロマトグラフィーを使用して、化合物を精製する。
【０１５２】
実験：
マトリックスＭＭＰ−２およびＭＭＰ−９に対する新規化合物の阻害効果の決定
一般考察：１０×反応緩衝液から得た１×反応緩衝液中において、すべての実験を行った。１０×反応緩衝液の内容物は、５０ｍＬの０．５Ｍトリス−ＨＣｌ、１．５Ｍ  ＮａＣｌ、５０ｍＭ  ＣａＣｌ２および２ｍＭアジ化ナトリウム（ｐＨ７．６）であった。１×反応緩衝液を得るために、３６ｍＬのＨ２Ｏによって４ｍＬの１０×反応緩衝液を希釈した。
【０１５３】
ＭＭＰ−２阻害アッセイ：
チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞において発現された組換えＭＭＰ−２は、Ｍｅｒｃｋ−Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ（カタログ番号ＰＦ０２３−５ＵＧ）から入手した。ブタ皮膚フルオレセインコンジュゲート由来のＤＱゼラチン（ＭＭＰ−２基質）は、Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（カタログ番号Ｅ１２０５５）から入手した。
【０１５４】
活性アッセイのためのＭＭＰ−２の調製：ＭＭＰ−２は、ストック溶液（０．１ｍｇ／ｍＬ）として提供されたものであった。１×反応緩衝液によって、この酵素を５μｇ／ｍＬの最終濃度に希釈した。
【０１５５】
活性アッセイのためのＤＱゼラチン（基質）溶液の調製：１ｍｇ／ｍＬのストック溶液を得るために、固体形態の基質を水に溶解した。
【０１５６】
手順：複数の反応の同時モニタリングを可能にする９６ウェルマイクロタイタープレート中において、酵素アッセイを実施した。各反応について、８６．３μＬの１×反応緩衝液（ｐＨ７．６）、１．７μＬのＭＭＰ−２（最終濃度８５ｎｇ／ｍＬ）および２μＬの対応する新規化合物を各ウェルに添加した。ＤＭＳＯ中において新規化合物のストック溶液を調製し（１００ｍＭ）、ＤＭＳＯによってこのストック溶液から希釈物を調製した。最後に、各ウェルに含まれる混合物に、１０μＬの基質を添加した（最終濃度５０μｇ／ｍＬ）。オービタルシェーカー（１００ｒｐｍ）中において、反応物を室温において２時間インキュベートした。
【０１５７】
新規化合物の阻害活性を蛍光定量的に測定した。励起波長および発光波長は、それぞれ４８３および５２５ｎｍであった。
【０１５８】
ＭＭＰ−９阻害アッセイ：
発現された組換えＭＭＰ−９は、Ｍｅｒｃｋ−Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ（カタログ番号ＰＦ１４０−５ＵＧ、実施例１〜９および比較例において使用）およびＥｎｚｏ（カタログ番号ＳＥ３６０−００１０、実施例１０〜１６において使用）から入手した。ブタ皮膚フルオレセインコンジュゲート由来のＤＱゼラチン（ＭＭＰ−９基質）は、Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（カタログ番号Ｅ１２０５５）から入手した。
【０１５９】
活性アッセイのためのＭＭＰ−９の調製：ＭＭＰ−９は、ストック溶液（０．１ｍｇ／ｍＬ）として提供されたものであった。１×反応緩衝液によって、この酵素を５μｇ／ｍＬの最終濃度に希釈した。
【０１６０】
活性アッセイのためのＤＱゼラチン（基質）溶液の調製：１ｍｇ／ｍＬのストック溶液を得るために、固体形態の基質を水に溶解した。
【０１６１】
手順：複数の反応の同時モニタリングを可能にする９６ウェルマイクロタイタープレート中において、酵素アッセイを実施した。各反応について、８４．６μＬの１×反応緩衝液（ｐＨ７．６）、３．４μＬのＭＭＰ−９（最終濃度８５ｎｇ／ｍＬ）および２μＬの対応する新規化合物を各ウェルに添加した。ＤＭＳＯ中において新規化合物のストック溶液を調製し（１００ｍＭ）、ＤＭＳＯによってこのストック溶液から希釈物を調製した。最後に、各ウェルに含まれる混合物に、１０μＬの基質を添加した（最終濃度５０μｇ／ｍＬ）。オービタルシェーカー（１００ｒｐｍ）中において、反応物を室温において４時間インキュベートした。
【０１６２】
新規化合物の阻害活性を蛍光定量的に測定した。励起波長および発光波長は、それぞれ４８３および５２５ｎｍであった。
【０１６３】
各化合物について、いくつかの濃度点（１００ｐＭ〜２００μＭ  ＭＭＰの範囲）における阻害活性を測定した。式１に従って、ＭＭＰ−２およびＭＭＰ−９に対する阻害活性を計算した。新たな各化合物について、対応するＭＭＰの存在下（ａ）および非存在下（ｂ）における蛍光を測定した。阻害化合物の非存在下における対応するＭＭＰのサンプルから、最大蛍光（０％阻害活性）を得た。新規化合物の阻害効力を評価するために、化合物の対数濃度に対して活性をプロットし、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍソフトウェアを使用してシグモイド曲線に調整し、得られた曲線からＩＣ５０値（対応するＭＭＰ活性の５０％阻害するため必要な化合物の濃度）を決定した。
【数１】
0006795606.tif 000064
（式中：
ａは、基質＋試験化合物＋ＭＭＰの存在下における蛍光強度に対応し、
ｂは、基質＋試験化合物の存在下における蛍光強度に対応し、
ｃは基質＋ＭＭＰの存在下における蛍光強度に対応し、
ｄは、基質の存在下における蛍光強度に対応する）
【０１６４】
新規化合物は、ＭＭＰ−２およびＭＭＰ−９に対する高い阻害効力を示した。結果は、表１に要約されている。
【表１】
0006795606.tif 000065
【０１６５】
関連ＭＭＰ−２およびＭＭＰ−９プロテアーゼに対する阻害活性：ＭＭＰ−１、ＭＭＰ−３およびＭＭＰ−７阻害アッセイ
一般考察：１０×反応緩衝液から得た１×反応緩衝液中において、すべての実験を行った。１０×反応緩衝液の内容物は、５０ｍＬの０．５Ｍトリス−ＨＣｌ、１．５Ｍ  ＮａＣｌ、５０ｍＭ  ＣａＣｌ２および２ｍＭアジ化ナトリウム（ｐＨ７．６）であった。１×反応緩衝液を得るために、３６ｍＬのＨ２Ｏによって４ｍＬの１０×反応緩衝液を希釈した。
【０１６６】
ＭＭＰ−１阻害アッセイ：
Ｅ．Ｃｏｌｉにおいて発現された組換えＭＭＰ−１は、Ｅｎｚｏ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（カタログ番号ＢＭＬ−ＳＥ１８０）から入手した。Ｍｃａ−ＰＬＧＬ−Ｄｐａ−ＡＲ−ＮＨ２（蛍光発生ペプチド基質）は、Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ（カタログ番号ＥＳ００１）から入手した。
【０１６７】
活性アッセイのためのＭＭＰ−１の調製：ＭＭＰ−１は、ストック溶液（０．５５ｍｇ／ｍＬ）として提供されたものであった。１×反応緩衝液によって、この酵素を２７６ｎＭの最終濃度に希釈した。
【０１６８】
ＭＭＰ−１ペプチド基質は、ＤＭＳＯ中ストック溶液（６ｍＭ）として提供されたものであった。アッセイのために、１×反応緩衝液によって、この基質を１００μＭの濃度に希釈した。
【０１６９】
手順：複数の反応の同時モニタリングを可能にする９６ウェルマイクロタイタープレート中において、酵素アッセイを実施した。各反応について、８６μＬの１×反応緩衝液（ｐＨ７．６）、２μＬのＭＭＰ−１（最終濃度５．５２ｎＭ）および２μＬの対応する新規化合物を各ウェルに添加した。ＤＭＳＯ中において新規化合物のストック溶液を調製し（１００ｍＭ）、ＤＭＳＯによってこのストック溶液から希釈物を調製した。最後に、各ウェルに含まれる混合物に、１０μＬの基質を添加した（最終濃度１０μＭ）。オービタルシェーカー（１００ｒｐｍ）中において、反応物を室温において４時間インキュベートした。
【０１７０】
新規化合物の阻害活性を蛍光定量的に測定した。励起波長および発光波長は、それぞれ３２０および４０５ｎｍであった。
【０１７１】
ＭＭＰ−３阻害アッセイ：
Ｅ．Ｃｏｌｉにおいて発現された組換えＭＭＰ−３は、Ｍｅｒｃｋ−Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ（カタログ番号４４２１７）から入手した。Ｍｃａ−ＲＰＫＰＶＥ−Ｎｖａｌ−ＷＲＫ（Ｄｎｐ）−ＮＨ２（蛍光発生ペプチド基質）は、Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ（カタログ番号ＥＳ００２）から入手した。
【０１７２】
活性アッセイのためのＭＭＰ−３の調製：ＭＭＰ−３は、ストック溶液（０．１ｍｇ／ｍＬ）として提供されたものであった。水によって、この酵素を０．００５ｍｇ／ｍＬの最終濃度に希釈した。
【０１７３】
ＭＭＰ−３ペプチド基質は、ＤＭＳＯ中ストック溶液（４．５ｍＭ）として提供されたものであった。アッセイのために、１×反応緩衝液によって、この基質を１００μＭの濃度に希釈した。
【０１７４】
手順：複数の反応の同時モニタリングを可能にする９６ウェルマイクロタイタープレート中において、酵素アッセイを実施した。各反応について、８４．６μＬの１×反応緩衝液（ｐＨ７．６）、３．４μＬのＭＭＰ−３（最終濃度７．７ｎＭ）および２μＬの対応する新規化合物を各ウェルに添加した。ＤＭＳＯ中において新規化合物のストック溶液を調製し（１００ｍＭ）、ＤＭＳＯによってこのストック溶液から希釈物を調製した。最後に、各ウェルに含まれる混合物に、１０μＬの基質を添加した（最終濃度１０μＭ）。オービタルシェーカー（９０ｒｐｍ）中において、反応物を室温において４時間インキュベートした。
【０１７５】
新規化合物の阻害活性を蛍光定量的に測定した。励起波長および発光波長は、それぞれ３２０および４０５ｎｍであった。
【０１７６】
ＭＭＰ−７阻害アッセイ：
Ｅ．Ｃｏｌｉにおいて発現された組換えＭＭＰ−７は、Ｍｅｒｃｋ−Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ（カタログ番号４４２７０）から入手した。Ｍｃａ−ＰＬＧＬ−Ｄｐａ−ＡＲ−ＮＨ２（蛍光発生ペプチド基質）は、Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ（カタログ番号ＥＳ００１）から入手した。
【０１７７】
活性アッセイのためのＭＭＰ−７の調製：ＭＭＰ−７は、ストック溶液（２．１ｍｇ／ｍＬ）として提供されたものであった。水によって、この酵素を０．００５ｍｇ／ｍＬの最終濃度に希釈した。
【０１７８】
ＭＭＰ−７ペプチド基質は、固体（１ｍｇ）として提供されたものであった。２１４．７μＬのＤＭＳＯを添加することによって、ＤＭＳＯ中基質の４ｍＭストック溶液を得た。その後、１×反応緩衝液によって、基質の１００μＭ溶液を調製した。
【０１７９】
手順：複数の反応の同時モニタリングを可能にする９６ウェルマイクロタイタープレート中において、酵素アッセイを実施した。各反応について、８４．６μＬの１×反応緩衝液（ｐＨ７．６）、３．４μＬのＭＭＰ−７（最終濃度８．３ｎＭ）および２μＬの対応する新規化合物を各ウェルに添加した。ＤＭＳＯ中において新規化合物のストック溶液を調製し（１００ｍＭ）、ＤＭＳＯによってこのストック溶液から希釈物を調製した。最後に、各ウェルに含まれる混合物に、１０μＬの基質を添加した（最終濃度１０μＭ）。オービタルシェーカー（９０ｒｐｍ）中において、反応物を室温において４時間インキュベートした。
【０１８０】
新規化合物の阻害活性を蛍光定量的に測定した。励起波長および発光波長は、それぞれ３２０および４０５ｎｍであった。
【０１８１】
各化合物について、いくつかの濃度点（１、１０、１００および２００μＭ）における阻害活性を測定した。式１に従って、ＭＭＰ−１、ＭＭＰ−３およびＭＭＰ−７に対する阻害活性を計算し、ＭＭＰ−２およびＭＭＰ−９について上記に説明されているように、ＩＣ５０値を計算した。
【０１８２】
ＩＣ５０値は、表２に示されている。
【表２】
0006795606.tif 000066
【０１８３】
（ＭＭＰ−１、ＭＭＰ−３およびＭＭＰ−７に関するＩＣ５０を示す）表２の値と、（ＭＭＰ−２およびＭＭＰ−９に関するＩＣ５０を示す）表１のものとを比較すると容易に分かるように、本発明の化合物は、ＭＭＰ−２およびＭＭＰ−９に対して高度に選択的である。
【０１８４】
化合物の透過特性の決定
並列人工膜透過性アッセイ（ＰＡＭＰＡ）
Ｋａｎｓｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍ．Ｃｈｅｍ．１９９８；４１（７）：１００７−１０に記載されている並列人工膜透過性アッセイ（ＰＡＭＰＡ）を本明細書において使用して、受動拡散による化合物の血液脳関門（ＢＢＢ）通過能力を決定した（Ｄｉ  Ｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００３；３８（３）：２２３−３２）。２００μＭの初期濃度において、化合物の有効透過性（Ｐｅ）を測定した。製造業者の説明書に従って、市販の濃縮液から緩衝溶液を調製した。０．５Ｍ  ＮａＯＨ溶液を使用して、ｐＨを７．４に調整した。ＤＭＳＯ中において新規化合物のストック溶液を調製し、緩衝溶液によって最終濃度２００μＭに希釈した（ＤＭＳＯ含有量０．５％）。ＰＡＭＰＡサンドイッチを分離し、２００μＭの化合物溶液を各ドナーウェルに充填した。アクセプタープレートをドナープレートに入れて、膜の下側が緩衝液と確実に接触するようにした。４μＬのリン脂質（２０ｍｇ／ｍＬ）ドデカン混合液を各ウェルのフィルタに添加し、２００μＬの緩衝溶液を各アクセプターウェルに添加した。プレートをカバーし、１００ｒｐｍにおいてオービタルシェイキングしながら、飽和湿度雰囲気、室温において４時間インキュベートした。４時間後、ＨＰＬＣによって、アクセプターコンパートメントおよびドナーコンパートメントの含有量を分析した：ドナープレートの各ウェルの１５０μＬおよびアクセプタープレートの各ウェルの１５０μＬをＨＰＬＣバイアルに移し、各サンプルを逆相Ｃ１８カラム（１５０ｍｍ×４．６ｍｍ×５μｍ、１００Å）に注入した（アクセプターウェルからの注入１回当たり１００μＬ、ドナーウェルからの注入１回当たり１０μＬ、ｔ０は基準）。また、質量分析（ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ）を使用して、輸送を確認した。
【０１８５】
使用したリン脂質混合物は、Ａｖａｎｔｉ  ｐｏｌａｒ  ｌｉｐｉｄｓによって提供されたブタ極性脳脂質抽出物であり、以下の組成を有していた：１２．６％ホスファチジルコリン（ＰＣ）、３３．１％ホスファチジルエタノールアミン（ＰＥ）、１８．５％ホスファチジルセリン（ＰＳ）、４．１％ホスファチジルイノシトール（ＰＩ）、０．８％ホスファチジン酸および３０．９％の他の化合物。
【０１８６】
式２を使用して４時間後の有効透過性（Ｐｅ）を計算し、式３を使用して輸送率（Ｔ％）を計算した：
【数２】
0006795606.tif 000067
（式中：
ｔは、時間（時）であり；
Ｃａ（ｔ）は、時間ｔにおけるアクセプターウェル中の化合物濃度であり；
Ｃｄ（ｔ０）は、ｔ０におけるドナーウェル中の化合物濃度である）。
【０１８７】
表４に示されている指標Ｐｅ値によれば、新規化合物は、優れたＢＢＢ透過性を示す（表５）。
【表３】
0006795606.tif 000068
【表４】
0006795606.tif 000069