(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象が、高リスク腺腫または直腸結腸がん（ＣＲＣ）に罹患している、または罹患するリスクがあるかを決定するための方法であって、
（ａ）対象から生物学的試料を得るステップ、
（ｂ）対象からの生物学的試料中のがん胎児性抗原（ＣＥＡ）、サイトケラチン１９フラグメント（ＣＹＦＲＡ）、Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）およびフェリチンのレベルを決定するステップ、
（ｃ）生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンの基準レベルと比較するステップであって、
（ｉ）対象のＣＥＡスコアを提供するステップであって、生物学的試料中のＣＥＡのレベルがＣＥＡの基準レベルより高い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＥＡのレベルがＣＥＡの基準レベルと等しいまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、
（ｉｉ）対象のＣＹＦＲＡスコアを提供するステップであって、生物学的試料中のＣＹＦＲＡのレベルがＣＹＦＲＡの基準レベルより高い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＹＦＲＡのレベルがＣＹＦＲＡの基準レベルと等しいまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、
（ｉｉｉ）対象のＣＲＰスコアを提供するステップであって、生物学的試料中のＣＲＰのレベルがＣＲＰの基準レベルより高い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＲＰのレベルがＣＲＰの基準レベルと等しいまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、および
（ｉｖ）対象のフェリチンスコアを提供するステップであって、生物学的試料中のフェリチンのレベルがフェリチンの基準レベルより低い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のフェリチンのレベルがフェリチンの基準レベルと等しいまたはより高い場合、０のスコアを得るステップ、
（ｄ）ステップ（ｃ）からのスコアを加算して合計スコアを得るステップ、ならびに
（ｅ）合計スコアが基準スコアより高い場合、高リスク腺腫もしくはＣＲＣに罹患している、もしくは罹患するリスクがあるという対象の診断を提供し、または合計スコアが基準スコアと等しいもしくはより低い場合、高リスク腺腫もしくはＣＲＣに罹患していない、もしくは罹患するリスクがないという対象の診断を提供するステップ
を含む方法。
【請求項２】
ステップ（ｂ）において対象の年齢を決定するステップ、ステップ（ｃ）において対象の年齢を基準年齢と比較するステップ、および
（ｖ）対象の年齢スコアを提供するステップであって、対象の年齢が基準年齢と等しいまたはより高い場合、対象は１のスコアを得、対象の年齢が基準年齢より低い場合、０のスコアを得るステップ
をさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
対象が男性または女性である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
（ａ）男性対象において、ＣＥＡの基準レベルが少なくとも約６．５ｎｇ／ｍＬであり、ＣＹＦＲＡの基準レベルが少なくとも約１．９８ｎｇ／ｍＬであり、ＣＲＰの基準レベルが少なくとも約１．８ｍｇ／ｍＬであり、フェリチンの基準レベルが少なくとも約１０９ｎｇ／ｍＬである、および
（ｂ）女性対象において、ＣＥＡの基準レベルが少なくとも約４．８ｎｇ／ｍＬであり、ＣＹＦＲＡの基準レベルが少なくとも約１．７２ｎｇ／ｍＬであり、ＣＲＰの基準レベルが少なくとも約５．５ｍｇ／ｍＬであり、フェリチンの基準レベルが少なくとも約３８ｎｇ／ｍＬである、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
男性対象に対する基準年齢が５４歳であり、女性対象に対する基準年齢が６３歳である、請求項２に記載の方法。
【請求項６】
基準スコアが０、１、２、３、４または５である、請求項１から５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
男性対象に対する基準スコアが２または３であり、女性対象に対する基準スコアが２である、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
男性対象または女性対象に対する２より高い合計スコアは、対象が高リスク腺腫またはＣＲＣに罹患している、または罹患するリスクがあることを指し示す、請求項６または７に記載の方法。
【請求項９】
ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを決定するステップが、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、フェリチンまたはこれらの組合せに特異的に結合することができる少なくとも１つの抗体での免疫学的方法を含む、請求項１から８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
免疫学的方法が、
（ａ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＥＡまたはＣＥＡのフラグメント上のエピトープに結合して、捕捉抗体−ＣＥＡ抗原複合体を形成するステップ、
（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＥＡ抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＥＡ上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＥＡ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および
（ｉｉｉ）試験試料中のＣＥＡレベルを、（ａ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＣＥＡ抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップ
によってＣＥＡのレベルを測定するステップ、
（ｂ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＹＦＲＡまたはＣＹＦＲＡのフラグメント上のエピトープに結合して捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原複合体を形成するステップ、
（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＹＦＲＡ上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および
（ｉｉｉ）試験試料中のＣＹＦＲＡレベルを、（ｂ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップ
によってＣＹＦＲＡのレベルを測定するステップ、
（ｃ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＲＰまたはＣＲＰのフラグメント上のエピトープに結合して捕捉抗体−ＣＲＰ抗原複合体を形成するステップ、
（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＲＰ抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＲＰ上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＲＰ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および
（ｉｉｉ）試験試料中のＣＲＰレベルを、（ｃ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＣＲＰ抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップ
によってＣＲＰのレベルを測定するステップ、ならびに
（ｄ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はフェリチンまたはフェリチンのフラグメント上のエピトープに結合して捕捉抗体−フェリチン抗原複合体を形成するステップ、
（ｉｉ）捕捉抗体−フェリチン抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないフェリチン上のエピトープに結合し、捕捉抗体−フェリチン抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および
（ｉｉｉ）試験試料中のフェリチンレベルを、（ｄ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−フェリチン抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップ
によってフェリチンのレベルを測定するステップ
を含む、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
メチルセプチン９（ｍＳ９）、ガレクチン−３（Ｇａｌ３）、糖化ヘモグロビン（ＨｂＡ１ｃ）、補体成分３（Ｃ３ａ）、カテプシンＸ（ＣａｔＸ）、可溶性ウロキナーゼ受容体（ｓｕＰＡＲ（Ｉ））、プラスミノーゲンアクチベータインヒビター−１（ＰＡＩ−１）、エノラーゼ２（ＥＮＯ２）、またはこれらの組合せから選択される、生物学的試料中のＣＲＣの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーのレベルを決定するステップ、ならびにＣＲＣの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーのレベルを、ＣＲＣの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーの基準レベルと比較するステップをさらに含む、請求項１から１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
生物学的試料が、組織試料、全血、血漿、血清、尿、気管支肺胞洗浄液または細胞培養懸濁液、またはこれらの分画である、請求項１から１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
抗体が、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、ヒト抗体、ジスルフィド連結されているＦｖ、親和性成熟抗体、ｓｃＦｖ、キメラ抗体、単一ドメイン抗体、ＣＤＲグラフト化抗体、ダイアボディ、ヒト化抗体、多特異的抗体、Ｆａｂ、二重可変ドメイン（ＤＶＤ）免疫グロブリン、Ｆａｂ’、二特異的抗体、Ｆ（ａｂ’）２およびＦｖから選択される、請求項９に記載の方法。
【請求項１４】
（ａ）対象の生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを定量するための、ＣＥＡに特異的に結合することができる試薬、ＣＹＦＲＡに特異的に結合することができる試薬、ＣＲＰに特異的に結合することができる試薬、およびフェリチンに特異的に結合することができる試薬、
（ｂ）ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンの基準レベルを指し示す参照標準、および、任意に、
（ｃ）メチルセプチン９（ｍＳ９）、ガレクチン−３（Ｇａｌ３）、糖化ヘモグロビン（ＨｂＡ１ｃ）、補体成分３（Ｃ３ａ）、カテプシンＸ（ＣａｔＸ）、可溶性ウロキナーゼ受容体（ｓｕＰＡＲ（Ｉ））、プラスミノーゲンアクチベータインヒビター−１（ＰＡＩ−１）、エノラーゼ２（ＥＮＯ２）またはこれらの組合せから選択される、少なくとも１つの付加的なバイオマーカーに特異的に結合することができる少なくとも１つの付加的な試薬、および
（ｄ）メチルセプチン９（ｍＳ９）、ガレクチン−３（Ｇａｌ３）、糖化ヘモグロビン（ＨｂＡ１ｃ）、補体成分３（Ｃ３ａ）、カテプシンＸ（ＣａｔＸ）、可溶性ウロキナーゼ受容体（ｓｕＰＡＲ（Ｉ））、プラスミノーゲンアクチベータインヒビター−１（ＰＡＩ−１）、エノラーゼ２（ＥＮＯ２）またはこれらの組合せの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーの基準レベルを指し示す参照標準
を含む、請求項１から１３のいずれか一項に記載の方法を行うためのキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２０１４年８月２２日に出願した米国仮特許出願第６２／０４０，８７４号の利益を主張するものであり、その内容を参照により本明細書に完全に組み込む。
【０００２】
本発明は、患者においてバイオマーカーを検出することによって、患者における高リスク腺腫および直腸結腸がんの予後、診断またはリスク同定を決定するための、または決定するのを助けるための方法およびイムノアッセイプラットホームに関する。バイオマーカーは、直腸結腸がん（ＣＲＣ）を有する患者を同定し、診断し、または同定もしくは診断するのを助けるために、患者がＣＲＣまたは高リスク腺腫に罹患しているか否かを同定し、または同定するのを助けるために、ＣＲＣ構造スクリーニングレジメンおよび／またはＣＲＣ処置レジメンに対する候補として患者を同定するために、または同定するのを助けるために、患者がＣＲＣを発症するリスクを分類するために、ならびに診断、予後、もしくは処置レジメンを決定するために、または決定するのを助けるために、使用され得る。
【背景技術】
【０００３】
直腸結腸がん（ＣＲＣ）は、デンマークで３番目に頻度の高いがん疾患であり、毎年４２００件の新症例を数える。患者の８０％が計画的な治癒的切除を受けるのに関わらず、これらの患者の半数が、その後５年以内に再発性または転移性の疾患と診断される。世界保健機関は、全世界で１００万症例を超えるＣＲＣを報告している。先進国が、症例のうち約３分の２を占める。ＣＲＣの５５−６０％は進行期に診断され、これが高死亡率および医療費の増大をもたらす。ＣＲＣは早期に診断されれば、極めて処置可能である。治癒的手術が可能である個々の段階の５年生存率を比べると、ステージＩ：９０％、ステージＩＩ：７０％、ステージＩＩＩ：３５−４０％であり、これらの事実は、手術時に臨床上および／または検査上の所見が非存在であっても、大部分の患者は、外科的介入時に潜在性の播種性疾患を有するに違いないということを指し示している。確証された播種性疾患であるステージＩＶを有する患者に対する予後は落胆的であり、長期の生存は殆ど実現されない。ＣＲＣと診断された患者のおよそ５０％は、その後５年を生存しない。したがって、ＣＲＣを有する患者に対する全体的な処置戦略を改善するのは急を要する。
【０００４】
ＣＲＣを有する患者の段階依存的分布は、ステージＩ：１０％、ステージＩＩ：３８％、ステージＩＩＩ：３３％およびステージＩＶ：１９％である。より多くの患者が、疾患の初期（ステージＩまたはＩＩ）に同定され得れば、生存率は大幅に改善される。これらの患者群内では、唯一の介入として外科手術が、全患者集団のはるかに大きな集団を治癒する。現在まで、「便潜血」検査（ＦＯＢＴ）と、引き続き内視鏡を使用するだけで、初期の疾患を有する患者の割当てを、それによって全生存率を増大することが可能であった。ＦＯＢＴは特異性が高い（８５％）が、感度はあまり好ましくない（４０−６５％）。しかし、コンプライアンス率はかなり限られている。最近、ＦＯＢＴを受けるよう郵便で案内する、デンマークの２つの実現可能性のスクリーニング試験が、５０％未満のコンプライアンスを示した。これは、試験の感度にはコンプライアンスを乗じなければならないため、臨床上の感度が２０−３３％に制限されることを意味する。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
バイオマーカー分析は、潜在的に、このような診断戦略の１エレメントであるが、腫瘍特異的マーカーの発見および確証は困難であった。したがって、患者における直腸結腸がんを検出およびスクリーニングするのにより正確で精密なマーカーが、依然として大いに必要とされている。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
（発明の要旨）
本発明は、対象が、高リスク腺腫または直腸結腸がん（ＣＲＣ）に罹患している、または罹患するリスクがあるかを決定する方法を対象とする。方法は、（ａ）対象から生物学的試料を得るステップ、（ｂ）対象からの生物学的試料中のがん胎児性抗原（ＣＥＡ）、サイトケラチン１９フラグメント（ＣＹＦＲＡ）、Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）およびフェリチンのレベルを決定するステップ、（ｃ）生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンの基準レベルと比較するステップ、ならびに（ｄ）生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡおよびＣＲＰのレベルがＣＥＡ、ＣＹＦＲＡおよびＣＲＰの基準レベルより高い場合、ならびに生物学的試料中のフェリチンのレベルがフェリチンの基準レベルより低い場合、高リスク腺腫もしくはＣＲＣに罹患している、もしくは罹患するリスクがあるという対象の診断を提供し、または生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡおよびＣＲＰのレベルがＣＥＡ、ＣＹＦＲＡおよびＣＲＰの基準レベルと等しくもしくはより低い場合、ならびに生物学的試料中のフェリチンのレベルがフェリチンの基準レベルと等しくもしくはより高い場合、高リスク腺腫もしくはＣＲＣに罹患していない、もしくは罹患するリスクがないという対象の診断を提供するステップを含む。ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンの基準レベルは、基準群の生物学的試料から適応インデックスモデル法によって決定されるＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのカットオフ値であってよい。ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンの基準レベルは、基準群の生物学的試料から適応インデックスモデル法によって決定されるＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのカットオフ値であってよい。基準群は、対照群またはがん群からなる群から選択されてもよい。対象は男性であってよい。ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンの基準レベルは、ＣＥＡについて血清中５．０ｎｇ／ｍＬ、５．５ｎｇ／ｍＬ、６．０ｎｇ／ｍＬ、６．１ｎｇ／ｍＬ、６．２ｎｇ／ｍＬ、６．３ｎｇ／ｍＬ、６．４ｎｇ／ｍＬ、６．５ｎｇ／ｍＬ、６．６ｎｇ／ｍＬ、６．７ｎｇ／ｍＬ、６．８ｎｇ／ｍＬ、６．９ｎｇ／ｍＬ、７．０ｎｇ／ｍＬ、７．５ｎｇ／ｍＬまたは８．０ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高く、それに組み合わせてＣＹＦＲＡについて血清中１．８０ｎｇ／ｍＬ、１．８５ｎｇ／ｍＬ、１．９０ｎｇ／ｍＬ、１．９５ｎｇ／ｍＬ、１．９６ｎｇ／ｍＬ、１．９７ｎｇ／ｍＬ、１．９８ｎｇ／ｍＬ、１．９９ｎｇ／ｍＬ、２．００ｎｇ／ｍＬ、２．０１ｎｇ／ｍＬ、２．０２ｎｇ／ｍＬ、２．０３ｎｇ／ｍＬ、２．０４ｎｇ／ｍＬ、２．０５ｎｇ／ｍＬ、２．１０ｎｇ／ｍＬ、２．１５ｎｇ／ｍＬまたは２．２０ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベル、ＣＲＰについて血清中１．０ｍｇ／ｍＬ、１．５ｍｇ／ｍＬ、１．６ｍｇ／ｍＬ、１．７ｍｇ／ｍＬ、１．８ｍｇ／ｍＬ、１．９ｍｇ／ｍＬ、２．０ｍｇ／ｍＬまたは２．５ｍｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベル、およびフェリチンについて血清中１２０ｎｇ／ｍＬ、１１５ｎｇ／ｍＬ、１１４ｎｇ／ｍＬ、１１３ｎｇ／ｍＬ、１１２ｎｇ／ｍＬ、１１１ｎｇ／ｍＬ、１１０ｎｇ／ｍＬ、１０９ｎｇ／ｍＬ、１０８ｎｇ／ｍＬ、１０７ｎｇ／ｍＬ、１０６ｎｇ／ｍＬ、１０５ｎｇ／ｍＬまたは１００ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより低いレベルであってよい。ＣＥＡの基準レベルは少なくとも約６．５ｎｇ／ｍＬであってよく、ＣＹＦＲＡの基準レベルは少なくとも約１．９８ｎｇ／ｍＬであってよく、ＣＲＰの基準レベルは少なくとも約１．８ｍｇ／ｍＬであってよく、フェリチンの基準レベルは少なくとも約１０９ｎｇ／ｍＬであってよい。対象は女性であってもよい。ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンの基準レベルは、ＣＥＡについて血清中３．５ｎｇ／ｍＬ、４．０ｎｇ／ｍＬ、４．３ｎｇ／ｍＬ、４．４ｎｇ／ｍＬ、４．５ｎｇ／ｍＬ、４．６ｎｇ／ｍＬ、４．７ｎｇ／ｍＬ、４．８ｎｇ／ｍＬ、４．９ｎｇ／ｍＬ、５．０ｎｇ／ｍＬ、５．１ｎｇ／ｍＬ、５．２ｎｇ／ｍＬ、５．３ｎｇ／ｍＬ、５．５ｎｇ／ｍＬ、６．０ｎｇ／ｍＬまたは７．０ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高くてよく、それに組み合わせてＣＹＦＲＡについて血清中１．５５ｎｇ／ｍＬ、１．６０ｎｇ／ｍＬ、１．６５ｎｇ／ｍＬ、１．６７ｎｇ／ｍＬ、１．６８ｎｇ／ｍＬ、１．６９ｎｇ／ｍＬ、１．７０ｎｇ／ｍＬ、１．７１ｎｇ／ｍＬ、１．７２ｎｇ／ｍＬ、１．７３ｎｇ／ｍＬ、１．７４ｎｇ／ｍＬ、１．７５ｎｇ／ｍＬ、１．７６ｎｇ／ｍＬ、１．７７ｎｇ／ｍＬ、１．８０ｎｇ／ｍＬ、１．８５ｎｇ／ｍＬまたは１．９０ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベル、ＣＲＰについて血清中４．０ｍｇ／ｍＬ、４．５ｍｇ／ｍＬ、５．０ｍｇ／ｍＬ、５．１ｍｇ／ｍＬ、５．２ｍｇ／ｍＬ、５．３ｍｇ／ｍＬ、５．４ｍｇ／ｍＬ、５．５ｍｇ／ｍＬ、５．６ｍｇ／ｍＬ、５．７ｍｇ／ｍＬ、５．８ｍｇ／ｍＬ、５．９ｍｇ／ｍＬ、６．０ｍｇ／ｍＬ、６．５ｍｇ／ｍＬまたは７．０ｍｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベル、およびフェリチンについて血清中５０ｎｇ／ｍＬ、４５ｎｇ／ｍＬ、４４ｎｇ／ｍＬ、４３ｎｇ／ｍＬ、４２ｎｇ／ｍＬ、４１ｎｇ／ｍＬ、４０ｎｇ／ｍＬ、３９ｎｇ／ｍＬ、３８ｎｇ／ｍＬ、３７ｎｇ／ｍＬ、３６ｎｇ／ｍＬ、３５ｎｇ／ｍＬ、３４ｎｇ／ｍＬ、３３ｎｇ／ｍＬ、３２ｎｇ／ｍＬ、３１ｎｇ／ｍＬまたは３０ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより低いレベルであってよい。ＣＥＡの基準レベルは少なくとも約４．８ｎｇ／ｍＬであってよく、ＣＹＦＲＡの基準レベルは少なくとも約１．７２ｎｇ／ｍＬであってよく、ＣＲＰの基準レベルは少なくとも約５．５ｍｇ／ｍＬであってよく、フェリチンの基準レベルは少なくとも約３８ｎｇ／ｍＬであってよい。方法は、ＣＲＣ処置レジメン、ＣＲＣ構造スクリーニングレジメン、またはＣＲＣモニタリングレジメンを、高腺腫またはＣＲＣに罹患している、または罹患するリスクがあると診断された対象に施すステップをさらに含むことができる。ＣＲＣ処置レジメンは、外科手術、放射線医学治療、放射線医学処置、化学療法、標的化治療またはこれらの組合せの少なくとも１つを対象に施すステップを含むことができる。ＣＲＣ構造スクリーニングレジメンは結腸鏡検査またはＳ状結腸鏡検査であってよい。結腸鏡検査は対象の診断を確定し得る。ＣＲＣモニタリングレジメンは、定期的な間隔でＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを決定するステップを含むことができる。ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを決定するステップは、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンに特異的に結合する分子での免疫学的方法を含むことができる。ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンに特異的に結合する分子は、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンに特異的に結合することができる少なくとも１つの抗体を含むことができる。ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを決定するステップは、生物学的試料を、ＣＥＡに特異的に結合する抗体、ＣＹＦＲＡに特異的に結合する抗体、ＣＲＰに特異的に結合する抗体、フェリチンに特異的に結合する抗体、およびこれらの組合せからなる群から選択される少なくとも１つの抗体と接触させるステップを伴うことができる。ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを決定するステップは、少なくとも１つの捕捉抗体、およびシグナルを発生させる検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体を使用するイムノアッセイによって、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンについて生物学的試料をアッセイするステップを伴うことができ、生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンの量の直接的または間接的な指標として検出可能な標識によって発生したシグナルを比較するステップを含み、捕捉抗体および検出可能な標識で標識された抗体は、（ａ）ＣＥＡに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体、（ｂ）ＣＹＦＲＡに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体、（ｃ）ＣＲＰに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体、ならびに（ｄ）フェリチンに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体を含む。免疫学的方法は、（ａ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＥＡまたはＣＥＡのフラグメント上のエピトープに結合して、捕捉抗体−ＣＥＡ抗原複合体を形成するステップ、（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＥＡ抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＥＡ上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＥＡ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および（ｉｉｉ）試験試料中のＣＥＡレベルを、（ａ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＣＥＡ抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってＣＥＡのレベルを測定するステップ、（ｂ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＹＦＲＡまたはＣＹＦＲＡのフラグメント上のエピトープに結合して捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原複合体を形成するステップ、（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＹＦＲＡ上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および（ｉｉｉ）試験試料中のＣＹＦＲＡレベルを、（ｂ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってＣＹＦＲＡのレベルを測定するステップ、（ｃ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＲＰまたはＣＲＰのフラグメント上のエピトープに結合して捕捉抗体−ＣＲＰ抗原複合体を形成するステップ、（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＲＰ抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＲＰ上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＲＰ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および（ｉｉｉ）試験試料中のＣＲＰレベルを、（ｃ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＣＲＰ抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってＣＲＰのレベルを測定するステップ、ならびに（ｄ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はフェリチンまたはフェリチンのフラグメント上のエピトープに結合して捕捉抗体−フェリチン抗原複合体を形成するステップ、（ｉｉ）捕捉抗体−フェリチン抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないフェリチン上のエピトープに結合し、捕捉抗体−フェリチン抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および（ｉｉｉ）試験試料中のフェリチンレベルを、（ｄ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−フェリチン抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってフェリチンのレベルを測定するステップを含むことができる。抗体は、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、ヒト抗体、免疫グロブリン分子、ジスルフィド連結されているＦｖ、モノクローナル抗体、親和性成熟抗体、ｓｃＦｖ、キメラ抗体、単一ドメイン抗体、ＣＤＲグラフト化抗体、ダイアボディ、ヒト化抗体、多特異的抗体、Ｆａｂ、二重特異性抗体、ＤＶＤ、Ｆ
ａｂ’、二特異的抗体、Ｆ（ａｂ’）２およびＦｖからなる群から選択されてよい。方法は、メチルセプチン（Ｍｅｔｈｙｌ  Ｓｅｐｔｉｎ）９（ｍＳ９）、ガレクチン−３（Ｇａｌ３）、糖化ヘモグロビン（ＨｂＡｌｃ）、Ｃ３ａ、カテプシンＸ（ＣａｔＸ）、可溶性ウロキナーゼ受容体（ｓｕＰＡＲ（Ｉ））、プラスミノーゲンアクチベータインヒビター−１（ＰＡＩ−１）、エノラーゼ２（ＥＮＯ２）およびこれらの組合せからなる群から選択される、生物学的試料中のＣＲＣの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーのレベルを決定するステップ、ならびにＣＲＣの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーのレベルを、ＣＲＣがんの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーに対する基準レベルと比較するステップをさらに含むことができる。対象はヒトであってよい。対象の生物学的試料は、組織試料、体液、全血、血漿、血清、尿、気管支肺胞洗浄液および細胞培養懸濁液、またはこれらの分画から選択されてよい。対象の生物学的試料は血漿または血清であってよい。本発明は、前記方法を行うためのキットを対象とする。キットは、（ａ）対象の生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを定量するための、ＣＥＡに特異的に結合することができる試薬、ＣＹＦＲＡに特異的に結合することができる試薬、ＣＲＰに特異的に結合することができる試薬、およびフェリチンに特異的に結合することができる試薬、ならびに（ｂ）ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンの基準レベルを指し示す参照標準を含む。キットは、生物学的試料中の少なくとも１つの付加的なバイオマーカーの濃度を定量するための、生物学的試料中のメチルセプチン９（ｍＳ９）、ガレクチン−３（Ｇａｌ３）、糖化ヘモグロビン（ＨｂＡｌｃ）、Ｃ３ａ、カテプシンＸ（ＣａｔＸ）、可溶性ウロキナーゼ受容体（ｓｕＰＡＲ（Ｉ））、プラスミノーゲンアクチベータインヒビター−１（ＰＡＩ−１）、エノラーゼ２（ＥＮＯ２）またはこれらの組合せの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーに特異的に結合することができる、少なくとも１つの付加的な試薬、ならびに生物学的試料中のメチルセプチン９（ｍＳ９）、ガレクチン−３（Ｇａｌ３）、糖化ヘモグロビン（ＨｂＡｌｃ）、Ｃ３ａ、カテプシンＸ（ＣａｔＸ）、可溶性ウロキナーゼ受容体（ｓｕＰＡＲ（Ｉ））、プラスミノーゲンアクチベータインヒビター−１（ＰＡＩ−１）、エノラーゼ２（ＥＮＯ２）またはこれらの組合せの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーの基準レベルを指し示す参照標準をさらに含むことができる。
【０００７】
本発明は、対象が、高リスク腺腫または直腸結腸がん（ＣＲＣ）に罹患している、または罹患するリスクがあるかを決定する方法を対象とする。方法は、（ａ）対象から生物学的試料を得るステップ、（ｂ）対象からの生物学的試料中のがん胎児性抗原（ＣＥＡ）、サイトケラチン１９フラグメント（ＣＹＦＲＡ）、Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）およびフェリチンのレベルを決定するステップ、（ｃ）生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンの基準レベルと比較するステップであって、（ｉ）ＣＥＡスコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＥＡのレベルがＣＥＡの基準レベルより高い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＥＡのレベルがＣＥＡの基準レベルと等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、（ｉｉ）ＣＹＦＲＡスコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＹＦＲＡのレベルがＣＹＦＲＡの基準レベルより高い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＹＦＲＡのレベルがＣＹＦＲＡの基準レベルと等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、（ｉｉｉ）ＣＲＰスコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＲＰのレベルがＣＲＰの基準レベルより高い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＲＰのレベルがＣＲＰの基準レベルと等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、および（ｉｖ）フェリチンスコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のフェリチンのレベルがフェリチンの基準レベルより低い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のフェリチンのレベルがフェリチンの基準レベルと等しくまたはより高い場合、０のスコアを得るステップ、（ｄ）ステップ（ｃ）からのスコアを加算して合計スコアを得るステップ、ならびに（ｅ）合計スコアが基準スコアより高い場合、高リスク腺腫またはＣＲＣに罹患している、もしくは罹患するリスクがあるという対象の診断を提供し、または合計スコアが基準スコアと等しくもしくはより低い場合、高リスク腺腫もしくはＣＲＣに罹患していない、もしくは罹患するリスクがないという対象の診断を提供するステップを含む。ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンの基準レベルは、基準群の生物学的試料から適応インデックスモデル法によって決定されるＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのカットオフ値であってよい。ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンの基準レベルは、基準群の生物学的試料から適応インデックスモデル法によって決定されるＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのカットオフ値であってよい。基準群は、対照群またはがん群からなる群から選択されてもよい。対象は男性であってよい。ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンの基準レベルは、ＣＥＡについて血清中５．０ｎｇ／ｍＬ、５．５ｎｇ／ｍＬ、６．０ｎｇ／ｍＬ、６．１ｎｇ／ｍＬ、６．２ｎｇ／ｍＬ、６．３ｎｇ／ｍＬ、６．４ｎｇ／ｍＬ、６．５ｎｇ／ｍＬ、６．６ｎｇ／ｍＬ、６．７ｎｇ／ｍＬ、６．８ｎｇ／ｍＬ、６．９ｎｇ／ｍＬ、７．０ｎｇ／ｍＬ、７．５ｎｇ／ｍＬまたは８．０ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高く、それに組み合わせてＣＹＦＲＡについて血清中１．８０ｎｇ／ｍＬ、１．８５ｎｇ／ｍＬ、１．９０ｎｇ／ｍＬ、１．９５ｎｇ／ｍＬ、１．９６ｎｇ／ｍＬ、１．９７ｎｇ／ｍＬ、１．９８ｎｇ／ｍＬ、１．９９ｎｇ／ｍＬ、２．００ｎｇ／ｍＬ、２．０１ｎｇ／ｍＬ、２．０２ｎｇ／ｍＬ、２．０３ｎｇ／ｍＬ、２．０４ｎｇ／ｍＬ、２．０５ｎｇ／ｍＬ、２．１０ｎｇ／ｍＬ、２．１５ｎｇ／ｍＬまたは２．２０ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベル、ＣＲＰについて血清中１．０ｍｇ／ｍＬ、１．５ｍｇ／ｍＬ、１．６ｍｇ／ｍＬ、１．７ｍｇ／ｍＬ、１．８ｍｇ／ｍＬ、１．９ｍｇ／ｍＬ、２．０ｍｇ／ｍＬまたは２．５ｍｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベル、およびフェリチンについて血清中１２０ｎｇ／ｍＬ、１１５ｎｇ／ｍＬ、１１４ｎｇ／ｍＬ、１１３ｎｇ／ｍＬ、１１２ｎｇ／ｍＬ、１１１ｎｇ／ｍＬ、１１０ｎｇ／ｍＬ、１０９ｎｇ／ｍＬ、１０８ｎｇ／ｍＬ、１０７ｎｇ／ｍＬ、１０６ｎｇ／ｍＬ、１０５ｎｇ／ｍＬまたは１００ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより低いレベルであってよい。ＣＥＡの基準レベルは少なくとも約６．５ｎｇ／ｍＬであってよく、ＣＹＦＲＡの基準レベルは少なくとも約１．９８ｎｇ／ｍＬであってよく、ＣＲＰの基準レベルは少なくとも約１．８ｍｇ／ｍＬであってよく、フェリチンの基準レベルは少なくとも約１０９ｎｇ／ｍＬであってよい。対象は女性であってもよい。ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンの基準レベルは、ＣＥＡについて血清中３．５ｎｇ／ｍＬ、４．０ｎｇ／ｍＬ、４．３ｎｇ／ｍＬ、４．４ｎｇ／ｍＬ、４．５ｎｇ／ｍＬ、４．６ｎｇ／ｍＬ、４．７ｎｇ／ｍＬ、４．８ｎｇ／ｍＬ、４．９ｎｇ／ｍＬ、５．０ｎｇ／ｍＬ、５．１ｎｇ／ｍＬ、５．２ｎｇ／ｍＬ、５．３ｎｇ／ｍＬ、５．５ｎｇ／ｍＬ、６．０ｎｇ／ｍＬまたは７．０ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高くてよく、それに組み合わせてＣＹＦＲＡについて血清中１．５５ｎｇ／ｍＬ、１．６０ｎｇ／ｍＬ、１．６５ｎｇ／ｍＬ、１．６７ｎｇ／ｍＬ、１．６８ｎｇ／ｍＬ、１．６９ｎｇ／ｍＬ、１．７０ｎｇ／ｍＬ、１．７１ｎｇ／ｍＬ、１．７２ｎｇ／ｍＬ、１．７３ｎｇ／ｍＬ、１．７４ｎｇ／ｍＬ、１．７５ｎｇ／ｍＬ、１．７６ｎｇ／ｍＬ、１．７７ｎｇ／ｍＬ、１．８０ｎｇ／ｍＬ、１．８５ｎｇ／ｍＬまたは１．９０ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベル、ＣＲＰについて血清中４．０ｍｇ／ｍＬ、４．５ｍｇ／ｍＬ、５．０ｍｇ／ｍＬ、５．１ｍｇ／ｍＬ、５．２ｍｇ／ｍＬ、５．３ｍｇ／ｍＬ、５．４ｍｇ／ｍＬ、５．５ｍｇ／ｍＬ、５．６ｍｇ／ｍＬ、５．７ｍｇ／ｍＬ、５．８ｍｇ／ｍＬ、５．９ｍｇ／ｍＬ、６．０ｍｇ／ｍＬ、６．５ｍｇ／ｍＬまたは７．０ｍｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベル、およびフェリチンについて血清中５０ｎｇ／ｍＬ、４５ｎｇ／ｍＬ、４４ｎｇ／ｍＬ、４３ｎｇ／ｍＬ、４２ｎｇ／ｍＬ、４１ｎｇ／ｍＬ、４０ｎｇ／ｍＬ、３９ｎｇ／ｍＬ、３８ｎｇ／ｍＬ、３７ｎｇ／ｍＬ、３６ｎｇ／ｍＬ、３５ｎｇ／ｍＬ、３４ｎｇ／ｍＬ、３３ｎｇ／ｍＬ、３２ｎｇ／ｍＬ、３１ｎｇ／ｍＬまたは３０ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより低いレベルであってよい。ＣＥＡの基準レベルは少なくとも約４．８ｎｇ／ｍＬであってよく、ＣＹＦＲＡの基準レベルは少なくとも約１．７２ｎｇ／ｍＬであってよく、ＣＲＰの基準レベルは少なくとも約５．５ｍｇ／ｍＬであってよく、フェリチンの基準レベルは少なくとも約３８ｎｇ／ｍＬであってよい。基準スコアは０、１、２、３または４であってよい。対象が男性である場合、基準年齢は５４歳であってよい。対象が女性である場合、基準年齢は６３歳であってよい。基準スコアは０、１、２、３、４または５であってよい。対象が男性である場合、基準スコアは２または３であってよい。対象が男性であり、合計スコアが２より高い場合、対象は高リスク腺腫またはＣＲＣに罹患している、または罹患するリスクがあると診断され得る。対象が男性であり、合計スコアが３より高い場合、対象は高リスク腺腫またはＣＲＣに罹患している、または罹患するリスクがあると診断され得る。対象が女性である場合、基準スコアは２であってよい。対象が女性であり、合計スコアが２より高い場合、対象は高リスク腺腫またはＣＲＣに罹患している、または罹患するリスクがあると診断され得る。方法は、ＣＲＣ処置レジメン、ＣＲＣ構造スクリーニングレジメン、またはＣＲＣモニタリングレジメンを、高腺腫またはＣＲＣに罹患している、または罹患するリスクがあると診断された対象に施すステップをさらに含むことができる。ＣＲＣ処置レジメンは、外科手術、放射線医学治療、放射線医学処置、化学療法、標的化治療またはこれらの組合せの少なくとも１つを対象に施すステップを含むことができる。ＣＲＣ構造スクリーニングレジメンは結腸鏡検査またはＳ状結腸鏡検査であってよい。結腸鏡検査は対象の診断を確定し得る。ＣＲＣモニタリングレジメンは、定期的な間隔でＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを決定するステップを含むことができる。ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを決定するステップは、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンに特異的に結合する分子での免疫学的方法を含むことができる。ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンに特異的に結合する分子は、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンに特異的に結合することができる少なくとも１つの抗体を含むことができる。ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを決定するステップは、生物学的試料を、ＣＥＡに特異的に結合する抗体、ＣＹＦＲＡに特異的に結合する抗体、ＣＲＰに特異的に結合する抗体、フェリチンに特異的に結合する抗体、およびこれらの組合せからなる群から選択される少なくとも１つの抗体と接触させるステップを伴うことができる。ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを決定するステップは、少なくとも１つの捕捉抗体、およびシグナルを発生させる検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体を使用するイムノアッセイによって、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンについて生物学的試料をアッセイするステップを伴うことができ、生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンの量の直接的または間接的な指標として検出可能な標識によって発生したシグナルを比較するステップを含み、捕捉抗体および検出可能な標識で標識された抗体は、（ａ）ＣＥＡに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体、（ｂ）ＣＹＦＲＡに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体、（ｃ）ＣＲＰに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体、ならびに（ｄ）フェリチンに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体を含む。免疫学的方法は、（ａ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＥＡまたはＣＥＡのフラグメント上のエピトープに結合して、捕捉抗体−ＣＥＡ抗原複合体を形成するステップ、（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＥＡ抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＥＡ上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＥＡ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および（ｉｉｉ）試験試料中のＣＥＡレベルを、（ａ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＣＥＡ抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってＣＥＡのレベルを測定するステップ、（ｂ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＹＦＲＡまたはＣＹＦＲＡのフラグメント上のエピトープに結合して捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原複合体を形成するステップ、（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＹＦＲＡ上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および（ｉｉｉ）試験試料中のＣＹＦＲＡレベルを、（ｂ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってＣＹＦＲＡのレベルを測定するステップ、（ｃ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＲＰまたはＣＲＰのフラグメント上のエピトープに結合して捕捉抗体−ＣＲＰ抗原複合
体を形成するステップ、（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＲＰ抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＲＰ上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＲＰ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および（ｉｉｉ）試験試料中のＣＲＰレベルを、（ｃ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＣＲＰ抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってＣＲＰのレベルを測定するステップ、ならびに（ｄ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はフェリチンまたはフェリチンのフラグメント上のエピトープに結合して捕捉抗体−フェリチン抗原複合体を形成するステップ、（ｉｉ）捕捉抗体−フェリチン抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないフェリチン上のエピトープに結合し、捕捉抗体−フェリチン抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および（ｉｉｉ）試験試料中のフェリチンレベルを、（ｄ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−フェリチン抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってフェリチンのレベルを測定するステップを含むことができる。抗体は、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、ヒト抗体、免疫グロブリン分子、ジスルフィド連結されているＦｖ、モノクローナル抗体、親和性成熟抗体、ｓｃＦｖ、キメラ抗体、単一ドメイン抗体、ＣＤＲグラフト化抗体、ダイアボディ、ヒト化抗体、多特異的抗体、Ｆａｂ、二重特異性抗体、ＤＶＤ、Ｆａｂ’、二特異的抗体、Ｆ（ａｂ’）２およびＦｖからなる群から選択されてよい。方法は、メチルセプチン（Ｍｅｔｈｙｌ  Ｓｅｐｔｉｎ）９（ｍＳ９）、ガレクチン−３（Ｇａｌ３）、糖化ヘモグロビン（ＨｂＡｌｃ）、Ｃ３ａ、カテプシンＸ（ＣａｔＸ）、可溶性ウロキナーゼ受容体（ｓｕＰＡＲ（Ｉ））、プラスミノーゲンアクチベータインヒビター−１（ＰＡＩ−１）、エノラーゼ２（ＥＮＯ２）およびこれらの組合せからなる群から選択される、生物学的試料中のＣＲＣの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーのレベルを決定するステップ、ならびにＣＲＣの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーのレベルを、ＣＲＣがんの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーに対する基準レベルと比較するステップをさらに含むことができる。対象はヒトであってよい。対象の生物学的試料は、組織試料、体液、全血、血漿、血清、尿、気管支肺胞洗浄液および細胞培養懸濁液、またはこれらの分画から選択されてよい。対象の生物学的試料は血漿または血清であってよい。本発明は、前記方法を行うためのキットを対象とする。キットは、（ａ）対象の生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを定量するための、ＣＥＡに特異的に結合することができる試薬、ＣＹＦＲＡに特異的に結合することができる試薬、ＣＲＰに特異的に結合することができる試薬、およびフェリチンに特異的に結合することができる試薬、ならびに（ｂ）ＣＥＡ、���ＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンの基準レベルを指し示す参照標準を含む。キットは、生物学的試料中の少なくとも１つの付加的なバイオマーカーの濃度を定量するための、生物学的試料中のメチルセプチン９（ｍＳ９）、ガレクチン−３（Ｇａｌ３）、糖化ヘモグロビン（ＨｂＡｌｃ）、Ｃ３ａ、カテプシンＸ（ＣａｔＸ）、可溶性ウロキナーゼ受容体（ｓｕＰＡＲ（Ｉ））、プラスミノーゲンアクチベータインヒビター−１（ＰＡＩ−１）、エノラーゼ２（ＥＮＯ２）またはこれらの組合せの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーに特異的に結合することができる、少なくとも１つの付加的な試薬、ならびに生物学的試料中のメチルセプチン９（ｍＳ９）、ガレクチン−３（Ｇａｌ３）、糖化ヘモグロビン（ＨｂＡｌｃ）、Ｃ３ａ、カテプシンＸ（ＣａｔＸ）、可溶性ウロキナーゼ受容体（ｓｕＰＡＲ（Ｉ））、プラスミノーゲンアクチベータインヒビター−１（ＰＡＩ−１）、エノラーゼ２（ＥＮＯ２）またはこれらの組合せの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーの基準レベルを指し示す参照標準をさらに含むことができる。
【０００８】
本発明は、対象が、高リスク腺腫または直腸結腸がん（ＣＲＣ）に罹患している、または罹患するリスクがあるかを決定する方法を対象とする。方法は、（ａ）対象から生物学的試料を得るステップ、（ｂ）対象からの生物学的試料中のがん胎児性抗原（ＣＥＡ）、サイトケラチン１９フラグメント（ＣＹＦＲＡ）、Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）およびフェリチンのレベルを決定するステップ、（ｃ）生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンの基準レベルと比較するステップであって、（ｉ）ＣＥＡスコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＥＡのレベルがＣＥＡの基準レベルより高い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＥＡのレベルがＣＥＡの基準レベルと等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、（ｉｉ）ＣＹＦＲＡスコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＹＦＲＡのレベルがＣＹＦＲＡの基準レベルより高い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＹＦＲＡのレベルがＣＹＦＲＡの基準レベルと等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、（ｉｉｉ）ＣＲＰスコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＲＰのレベルがＣＲＰの基準レベルより高い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＲＰのレベルがＣＲＰの基準レベルと等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、および（ｉｖ）フェリチンスコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のフェリチンのレベルがフェリチンの基準レベルより低い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のフェリチンのレベルがフェリチンの基準レベルと等しくまたはより高い場合、０のスコアを得るステップ、（ｄ）ステップ（ｃ）からのスコアを加算して合計スコアを得るステップ、ならびに（ｅ）合計スコアが基準スコアより高い場合、高リスク腺腫またはＣＲＣに罹患している、もしくは罹患するリスクがあるという対象の診断を提供し、または合計スコアが基準スコアと等しくもしくはより低い場合、高リスク腺腫もしくはＣＲＣに罹患していない、もしくは罹患するリスクがないという対象の診断を提供するステップを含む。方法は、ステップ（ｂ）において対象の年齢を決定するステップ、ステップ（ｃ）において、対象の年齢を基準年齢と比較するステップ、および（ｖ）年齢スコアを対象に提供するステップであって、対象の年齢が基準年齢と等しくまたはより高い場合、対象は１のスコアを得、対象の年齢が基準年齢より低い場合、０のスコアを得るステップをさらに含む。ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンの基準レベルは、基準群の生物学的試料から適応インデックスモデル法によって決定されるＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのカットオフ値であってよい。ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンの基準レベルは、基準群の生物学的試料から適応インデックスモデル法によって決定されるＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのカットオフ値であってよい。基準群は、対照群またはがん群からなる群から選択されてもよい。対象は男性であってよい。ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンの基準レベルは、ＣＥＡについて血清中５．０ｎｇ／ｍＬ、５．５ｎｇ／ｍＬ、６．０ｎｇ／ｍＬ、６．１ｎｇ／ｍＬ、６．２ｎｇ／ｍＬ、６．３ｎｇ／ｍＬ、６．４ｎｇ／ｍＬ、６．５ｎｇ／ｍＬ、６．６ｎｇ／ｍＬ、６．７ｎｇ／ｍＬ、６．８ｎｇ／ｍＬ、６．９ｎｇ／ｍＬ、７．０ｎｇ／ｍＬ、７．５ｎｇ／ｍＬまたは８．０ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高く、それに組み合わせてＣＹＦＲＡについて血清中１．８０ｎｇ／ｍＬ、１．８５ｎｇ／ｍＬ、１．９０ｎｇ／ｍＬ、１．９５ｎｇ／ｍＬ、１．９６ｎｇ／ｍＬ、１．９７ｎｇ／ｍＬ、１．９８ｎｇ／ｍＬ、１．９９ｎｇ／ｍＬ、２．００ｎｇ／ｍＬ、２．０１ｎｇ／ｍＬ、２．０２ｎｇ／ｍＬ、２．０３ｎｇ／ｍＬ、２．０４ｎｇ／ｍＬ、２．０５ｎｇ／ｍＬ、２．１０ｎｇ／ｍＬ、２．１５ｎｇ／ｍＬまたは２．２０ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベル、ＣＲＰについて血清中１．０ｍｇ／ｍＬ、１．５ｍｇ／ｍＬ、１．６ｍｇ／ｍＬ、１．７ｍｇ／ｍＬ、１．８ｍｇ／ｍＬ、１．９ｍｇ／ｍＬ、２．０ｍｇ／ｍＬまたは２．５ｍｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベル、およびフェリチンについて血清中１２０ｎｇ／ｍＬ、１１５ｎｇ／ｍＬ、１１４ｎｇ／ｍＬ、１１３ｎｇ／ｍＬ、１１２ｎｇ／ｍＬ、１１１ｎｇ／ｍＬ、１１０ｎｇ／ｍＬ、１０９ｎｇ／ｍＬ、１０８ｎｇ／ｍＬ、１０７ｎｇ／ｍＬ、１０６ｎｇ／ｍＬ、１０５ｎｇ／ｍＬまたは１００ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより低いレベルであってよい。ＣＥＡの基準レベルは少なくとも約６．５ｎｇ／ｍＬであってよく、ＣＹＦＲＡの基準レベルは少なくとも約１．９８ｎｇ／ｍＬであってよく、ＣＲＰの基準レベルは少なくとも約１．８ｍｇ／ｍＬであってよく、フェリチンの基準レベルは少なくとも約１０９ｎｇ／ｍＬであってよい。対象は女性であってもよい。ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンの基準レベルは、ＣＥＡについて血清中３．５ｎｇ／ｍＬ、４．０ｎｇ／ｍＬ、４．３ｎｇ／ｍＬ、４．４ｎｇ／ｍＬ、４．５ｎｇ／ｍＬ、４．６ｎｇ／ｍＬ、４．７ｎｇ／ｍＬ、４．８ｎｇ／ｍＬ、４．９ｎｇ／ｍＬ、５．０ｎｇ／ｍＬ、５．１ｎｇ／ｍＬ、５．２ｎｇ／ｍＬ、５．３ｎｇ／ｍＬ、５．５ｎｇ／ｍＬ、６．０ｎｇ／ｍＬまたは７．０ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高くてよく、それに組み合わせてＣＹＦＲＡについて血清中１．５５ｎｇ／ｍＬ、１．６０ｎｇ／ｍＬ、１．６５ｎｇ／ｍＬ、１．６７ｎｇ／ｍＬ、１．６８ｎｇ／ｍＬ、１．６９ｎｇ／ｍＬ、１．７０ｎｇ／ｍＬ、１．７１ｎｇ／ｍＬ、１．７２ｎｇ／ｍＬ、１．７３ｎｇ／ｍＬ、１．７４ｎｇ／ｍＬ、１．７５ｎｇ／ｍＬ、１．７６ｎｇ／ｍＬ、１．７７ｎｇ／ｍＬ、１．８０ｎｇ／ｍＬ、１．８５ｎｇ／ｍＬまたは１．９０ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベル、ＣＲＰについて血清中４．０ｍｇ／ｍＬ、４．５ｍｇ／ｍＬ、５．０ｍｇ／ｍＬ、５．１ｍｇ／ｍＬ、５．２ｍｇ／ｍＬ、５．３ｍｇ／ｍＬ、５．４ｍｇ／ｍＬ、５．５ｍｇ／ｍＬ、５．６ｍｇ／ｍＬ、５．７ｍｇ／ｍＬ、５．８ｍｇ／ｍＬ、５．９ｍｇ／ｍＬ、６．０ｍｇ／ｍＬ、６．５ｍｇ／ｍＬまたは７．０ｍｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベル、およびフェリチンについて血清中５０ｎｇ／ｍＬ、４５ｎｇ／ｍＬ、４４ｎｇ／ｍＬ、４３ｎｇ／ｍＬ、４２ｎｇ／ｍＬ、４１ｎｇ／ｍＬ、４０ｎｇ／ｍＬ、３９ｎｇ／ｍＬ、３８ｎｇ／ｍＬ、３７ｎｇ／ｍＬ、３６ｎｇ／ｍＬ、３５ｎｇ／ｍＬ、３４ｎｇ／ｍＬ、３３ｎｇ／ｍＬ、３２ｎｇ／ｍＬ、３１ｎｇ／ｍＬまたは３０ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより低いレベルであってよい。ＣＥＡの基準レベルは少なくとも約４．８ｎｇ／ｍＬであってよく、ＣＹＦＲＡの基準レベルは少なくとも約１．７２ｎｇ／ｍＬであってよく、ＣＲＰの基準レベルは少なくとも約５．５ｍｇ／ｍＬであってよく、フェリチンの基準レベルは少なくとも約３８ｎｇ／ｍＬであってよい。基準スコアは０、１、２、３または４であってよい。対象が男性である場合、基準年齢は５４歳であってよい。対象が女性である場合、基準年齢は６３歳であってよい。基準スコアは０、１、２、３、４または５であってよい。対象が男性である場合、基準スコアは２または３であってよい。対象が男性であり、合計スコアが２より高い場合、対象は高リスク腺腫またはＣＲＣに罹患している、または罹患するリスクがあると診断され得る。対象が男性であり、合計スコアが３より高い場合、対象は高リスク腺腫またはＣＲＣに罹患している、または罹患するリスクがあると診断され得る。対象が女性である場合、基準スコアは２であってよい。対象が女性であり、合計スコアが２より高い場合、対象は高リスク腺腫またはＣＲＣに罹患している、または罹患するリスクがあると診断され得る。方法は、ＣＲＣ処置レジメン、ＣＲＣ構造スクリーニングレジメン、またはＣＲＣモニタリングレジメンを、高腺腫またはＣＲＣに罹患している、または罹患するリスクがあると診断された対象に施すステップをさらに含むことができる。ＣＲＣ処置レジメンは、外科手術、放射線医学治療、放射線医学処置、化学療法、標的化治療またはこれらの組合せの少なくとも１つを対象に施すステップを含むことができる。ＣＲＣ構造スクリーニングレジメンは結腸鏡検査またはＳ状結腸鏡検査であってよい。結腸鏡検査は対象の診断を確定し得る。ＣＲＣモニタリングレジメンは、定期的な間隔でＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを決定するステップを含むことができる。ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを決定するステップは、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンに特異的に結合する分子での免疫学的方法を含むことができる。ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンに特異的に結合する分子は、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンに特異的に結合することができる少なくとも１つの抗体を含むことができる。ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを決定するステップは、生物学的試料を、ＣＥＡに特異的に結合する抗体、ＣＹＦＲＡに特異的に結合する抗体、ＣＲＰに特異的に結合する抗体、フェリチンに特異的に結合する抗体、およびこれらの組合せからなる群から選択される少なくとも１つの抗体と接触させるステップを伴うことができる。ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを決定するステップは、少なくとも１つの捕捉抗体、およびシグナルを発生させる検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体を使用するイムノアッセイによって、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンについて生物学的試料をアッセイするステップを伴うことができ、生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンの量の直接的または間接的な指標として検出可能な標識によって発生したシグナルを比較するステップを含み、捕捉抗体および検出可能な標識で標識された抗体は、（ａ）ＣＥＡに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体、（ｂ）ＣＹＦＲＡに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体、（ｃ）ＣＲＰに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体、ならびに（ｄ）フェリチンに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体を含む。免疫学的方法は、（ａ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＥＡまたはＣＥＡのフラグメント上のエピトープに結合して、捕捉抗体−ＣＥＡ抗原複合体を形成するステップ、（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＥＡ抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＥＡ上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＥＡ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および（ｉｉｉ）試験試料中のＣＥＡレベルを、（ａ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＣＥＡ抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってＣＥＡのレベルを測定するステップ、（ｂ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＹＦＲＡまたはＣＹＦＲＡのフラグメント上のエピトープに結合して捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原複合体を形成するステップ、（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＹＦＲＡ上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および（ｉｉｉ）試験試料中のＣＹＦＲＡレベルを、（ｂ）（ｉｉ）において形成され
た捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってＣＹＦＲＡのレベルを測定するステップ、（ｃ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＲＰまたはＣＲＰのフラグメント上のエピトープに結合して捕捉抗体−ＣＲＰ抗原複合体を形成するステップ、（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＲＰ抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＲＰ上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＲＰ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および（ｉｉｉ）試験試料中のＣＲＰレベルを、（ｃ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＣＲＰ抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってＣＲＰのレベルを測定するステップ、ならびに（ｄ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はフェリチンまたはフェリチンのフラグメント上のエピトープに結合して捕捉抗体−フェリチン抗原複合体を形成するステップ、（ｉｉ）捕捉抗体−フェリチン抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないフェリチン上のエピトープに結合し、捕捉抗体−フェリチン抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および（ｉｉｉ）試験試料中のフェリチンレベルを、（ｄ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−フェリチン抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってフェリチンのレベルを測定するステップを含むことができる。抗体は、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、ヒト抗体、免疫グロブリン分子、ジスルフィド連結されているＦｖ、モノクローナル抗体、親和性成熟抗体、ｓｃＦｖ、キメラ抗体、単一ドメイン抗体、ＣＤＲグラフト化抗体、ダイアボディ、ヒト化抗体、多特異的抗体、Ｆａｂ、二重特異性抗体、ＤＶＤ、Ｆａｂ’、二特異的抗体、Ｆ（ａｂ’）２およびＦｖからなる群から選択されてよい。方法は、メチルセプチン（Ｍｅｔｈｙｌ  Ｓｅｐｔｉｎ）９（ｍＳ９）、ガレクチン−３（Ｇａｌ３）、糖化ヘモグロビン（ＨｂＡｌｃ）、Ｃ３ａ、カテプシンＸ（ＣａｔＸ）、可溶性ウロキナーゼ受容体（ｓｕＰＡＲ（Ｉ））、プラスミノーゲンアクチベータインヒビター−１（ＰＡＩ−１）、エノラーゼ２（ＥＮＯ２）およびこれらの組合せからなる群から選択される、生物学的試料中のＣＲＣの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーのレベルを決定するステップ、ならびにＣＲＣの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーのレベルを、ＣＲＣがんの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーに対する基準レベルと比較するステップをさらに含むことができる。対象はヒトであってよい。対象の生物学的試料は、組織試料、体液、全血、血漿、血清、尿、気管支肺胞洗浄液および細胞培養懸濁液、またはこれらの分画から選択されてよい。対象の生物学的試料は血漿または血清であってよい。本発明は、前記方法を行うためのキットを���象とする。キットは、（ａ）対象の生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを定量するための、ＣＥＡに特異的に結合することができる試薬、ＣＹＦＲＡに特異的に結合することができる試薬、ＣＲＰに特異的に結合することができる試薬、およびフェリチンに特異的に結合することができる試薬、ならびに（ｂ）ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンの基準レベルを指し示す参照標準を含む。キットは、生物学的試料中の少なくとも１つの付加的なバイオマーカーの濃度を定量するための、生物学的試料中のメチルセプチン９（ｍＳ９）、ガレクチン−３（Ｇａｌ３）、糖化ヘモグロビン（ＨｂＡｌｃ）、Ｃ３ａ、カテプシンＸ（ＣａｔＸ）、可溶性ウロキナーゼ受容体（ｓｕＰＡＲ（Ｉ））、プラスミノーゲンアクチベータインヒビター−１（ＰＡＩ−１）、エノラーゼ２（ＥＮＯ２）またはこれらの組合せの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーに特異的に結合することができる、少なくとも１つの付加的な試薬、ならびに生物学的試料中のメチルセプチン９（ｍＳ９）、ガレクチン−３（Ｇａｌ３）、糖化ヘモグロビン（ＨｂＡｌｃ）、Ｃ３ａ、カテプシンＸ（ＣａｔＸ）、可溶性ウロキナーゼ受容体（ｓｕＰＡＲ（Ｉ））、プラスミノーゲンアクチベータインヒビター−１（ＰＡＩ−１）、エノラーゼ２（ＥＮＯ２）またはこれらの組合せの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーの基準レベルを指し示す参照標準をさらに含むことができる。
【０００９】
本発明は、対象が、直腸結腸がん（ＣＲＣ）に罹患している、または罹患するリスクがあるかを決定する方法を対象とする。方法は、（ａ）対象から生物学的試料を得るステップ、（ｂ）対象からの生物学的試料中のがん胎児性抗原（ＣＥＡ）、サイトケラチン１９フラグメント（ＣＹＦＲＡ）、Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）、糖鎖抗原１９−９（ＣＡ１９−９）およびフェリチンのレベルを決定するステップ、（ｃ）生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンのレベルを、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９およびフェリチンの基準レベルと比較するステップ、ならびに（ｄ）生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびＣＡ１９−９のレベルがＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびＣＡ１９−９の基準レベルより高い場合、ならびに生物学的試料中のフェリチンのレベルがフェリチンの基準レベルより低い場合、ＣＲＣに罹患している、または罹患するリスクがあるという対象の診断を提供し、または生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、およびＣＡ１９−９のレベルがＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、およびＣＡ１９−９の基準レベルと等しくまたはより低い場合、ならびに生物学的試料中のフェリチンのレベルがフェリチンの基準レベルと等しくまたはより高い場合、罹患していない、または罹患するリスクがないという対象の診断を提供するステップを含む。ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンの基準レベルは、基準群の生物学的試料から適応インデックスモデル法によって決定されるＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンのカットオフ値であってよい。基準群は対照群およびがん群からなる群から選択されてよい。対象は男性であってよい。ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンの基準レベルは、ＣＥＡについて血清中４．５ｎｇ／ｍＬ、４．６ｎｇ／ｍＬ、４．７ｎｇ／ｍＬ、４．８ｎｇ／ｍＬ、４．９ｎｇ／ｍＬ、５．０ｎｇ／ｍＬ、５．１ｎｇ／ｍＬ、５．２ｎｇ／ｍＬ、５．３ｎｇ／ｍＬ、５．４ｎｇ／ｍＬ、５．５ｎｇ／ｍＬ、５．６ｎｇ／ｍＬ、５．７ｎｇ／ｍＬ、５．８ｎｇ／ｍＬ、５．９ｎｇ／ｍＬ、６．０ｎｇ／ｍＬ、６．１ｎｇ／ｍＬ、６．２ｎｇ／ｍＬ、６．３ｎｇ／ｍＬ、６．４ｎｇ／ｍＬ、６．５ｎｇ／ｍＬ、６．６ｎｇ／ｍＬ、６．７ｎｇ／ｍＬ、６．８ｎｇ／ｍＬ、６．９ｎｇ／ｍＬ、７．０ｎｇ／ｍＬ、７．１ｎｇ／ｍＬ、７．２ｎｇ／ｍＬ、７．３ｎｇ／ｍＬ、７．４ｎｇ／ｍＬ、７．５ｎｇ／ｍＬ、７．６ｎｇ／ｍＬ、７．７ｎｇ／ｍＬ、７．８ｎｇ／ｍＬ、７．９ｎｇ／ｍＬまたは８．０ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高く、それに組み合わせてＣＹＦＲＡについて血清中１．５０ｎｇ／ｍＬ、１．６０ｎｇ／ｍＬ、１．７０ｎｇ／ｍＬ、１．８０ｎｇ／ｍＬ、１．９０ｎｇ／ｍＬ、２．００ｎｇ／ｍＬ、２．０１ｎｇ／ｍＬ、２．０２ｎｇ／ｍＬ、２．０３ｎｇ／ｍＬ、２．０４ｎｇ／ｍＬ、２．０５ｎｇ／ｍＬ、２．０６ｎｇ／ｍＬ、２．０７ｎｇ／ｍＬ、２．０８ｎｇ／ｍＬ、２．０９ｎｇ／ｍＬ、２．１０ｎｇ／ｍＬ、２．１１ｎｇ／ｍＬ、２．１２ｎｇ／ｍＬ、２．１３ｎｇ／ｍＬ、２．１４ｎｇ／ｍＬ、２．１５ｎｇ／ｍＬ、２．１６ｎｇ／ｍＬ、２．１７ｎｇ／ｍＬ、２．１８ｎｇ／ｍＬ、２．１９ｎｇ／ｍＬ、２．２０ｎｇ／ｍＬ、２．２１ｎｇ／ｍＬ、２．２２ｎｇ／ｍＬ、２．２３ｎｇ／ｍＬ、２．２４ｎｇ／ｍＬ、２．２５ｎｇ／ｍＬ、２．５０ｎｇ／ｍＬまたは３．００ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベル、ＣＲＰについて血清中１７．０ｍｇ／ｍＬ、１７．１ｍｇ／ｍＬ、１７．２ｍｇ／ｍＬ、１７．３ｍｇ／ｍＬ、１７．４ｍｇ／ｍＬ、１７．５ｍｇ／ｍＬ、１７．６ｍｇ／ｍＬ、１７．７ｍｇ／ｍＬ、１７．８ｍｇ／ｍＬ、１７．９ｍｇ／ｍＬ、１８．０ｍｇ／ｍＬ、１８．１ｍｇ／ｍＬ、１８．２ｍｇ／ｍＬ、１８．３ｍｇ／ｍＬ、１８．４ｍｇ／ｍＬ、１８．５ｍｇ／ｍＬ、１８．６ｍｇ／ｍＬ、１８．７ｍｇ／ｍＬ、１８．８ｍｇ／ｍＬ、１８．９ｍｇ／ｍＬ、１９．０ｍｇ／ｍＬ、１９．５ｍｇ／ｍＬまたは２０．０ｍｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベル、ＣＡ１９−９について血清中２３．０Ｕ／ｍＬ、２３．１Ｕ／ｍＬ、２３．２Ｕ／ｍＬ、２３．３Ｕ／ｍＬ、２３．４Ｕ／ｍＬ、２３．５Ｕ／ｍＬ、２３．６Ｕ／ｍＬ、２３．７Ｕ／ｍＬ、２３．８Ｕ／ｍＬ、２３．９Ｕ／ｍＬ、２４．０Ｕ／ｍＬ、２４．１Ｕ／ｍＬ、２４．２Ｕ／ｍＬ、２４．３Ｕ／ｍＬ、２４．４Ｕ／ｍＬ、２４．５Ｕ／ｍＬ、２４．６Ｕ／ｍＬ、２４．７Ｕ／ｍＬ、２４．８Ｕ／ｍＬ、２４．９Ｕ／ｍＬ、２５．０Ｕ／ｍＬ、２５．１Ｕ／ｍＬ、２５．２Ｕ／ｍＬ、２５．３Ｕ／ｍＬ、２５．４Ｕ／ｍＬ、２５．５Ｕ／ｍＬ、２５．６Ｕ／ｍＬ、２５．７Ｕ／ｍＬ、２５．８Ｕ／ｍＬ、２５．９Ｕ／ｍＬ、２６．０Ｕ／ｍＬ、２６．１Ｕ／ｍＬ、２６．２Ｕ／ｍＬ、２６．３Ｕ／ｍＬ、２６．４Ｕ／ｍＬ、２６．５Ｕ／ｍＬ、２６．６Ｕ／ｍＬ、２６．７Ｕ／ｍＬ、２６．８Ｕ／ｍＬ、２６．９Ｕ／ｍＬ、２７．０Ｕ／ｍＬ、２７．１Ｕ／ｍＬ、２７．２Ｕ／ｍＬ、２７．３Ｕ／ｍＬ、２７．４Ｕ／ｍＬ、２７．５Ｕ／ｍＬ、２７．６Ｕ／ｍＬ、２７．７Ｕ／ｍＬ、２７．８Ｕ／ｍＬ、２７．９Ｕ／ｍＬ、２８．０Ｕ／ｍＬ、２８．５Ｕ／ｍＬまたは２９．０Ｕ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベル、およびフェリチンについて血清中１０５．０ｎｇ／ｍＬ、１０４．０ｎｇ／ｍＬ、１０３．０ｎｇ／ｍＬ、１０２．０ｎｇ／ｍＬ、１０１．０ｎｇ／ｍＬ、１００．０ｎｇ／ｍＬ、９９．０ｎｇ／ｍＬ、９８．０ｎｇ／ｍＬ、９７．０ｎｇ／ｍＬ、９６．０ｎｇ／ｍＬ、９５．０ｎｇ／ｍＬ、９４．０ｎｇ／ｍＬ、９３．０ｎｇ／ｍＬ、９２．０ｎｇ／ｍＬ、９１．０ｎｇ／ｍＬ、９０．０ｎｇ／ｍＬ、８９．０ｎｇ／ｍＬ、８８．０ｎｇ／ｍＬ、８７．０ｎｇ／ｍＬ、８６．０ｎｇ／ｍＬまたは８５．０ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより低いレベルであってよい。ＣＥＡの基準レベルは少なくとも約６．９ｎｇ／ｍＬであってよく、ＣＹＦＲＡの基準レベルは少なくとも約２．１７ｎｇ／ｍＬであってよく、ＣＲＰの基準レベルは少なくとも約１８．３ｍｇ／ｍＬであってよく、ＣＡ１９−９の基準レベルは少なくとも約２６．８Ｕ／ｍＬであってよく、フェリチンの基準レベルは少なくとも約９７ｎｇ／ｍＬであってよい。対象は女性であってよい。ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンの基準レベルは、ＣＥＡについて血清中４．５ｎｇ／ｍＬ、４．６ｎｇ／ｍＬ、４．７ｎｇ／ｍＬ、４．８ｎｇ／ｍＬ、４．９ｎｇ／ｍＬ、５．０ｎｇ／ｍＬ、５．１ｎｇ／ｍＬ、５．２ｎｇ／ｍＬ、５．３ｎｇ／ｍＬ、５．４ｎｇ／ｍＬ、５．５ｎｇ／ｍＬ、５．６ｎｇ／ｍＬ、５．７ｎｇ／ｍＬ、５．８ｎｇ／ｍＬ、５．９ｎｇ／ｍＬ、６．０ｎｇ／ｍＬ、６．１ｎｇ／ｍＬ、６．２ｎｇ／ｍＬ、６．３ｎｇ／ｍＬ、６．４ｎｇ／ｍＬ、６．５ｎｇ／ｍＬ、６．６ｎｇ／ｍＬ、６．７ｎｇ／ｍＬ、６．８ｎｇ／ｍＬ、６．９ｎｇ／ｍＬ、７．０ｎｇ／ｍＬ、７．１ｎｇ／ｍＬ、７．２ｎｇ／ｍＬ、７．３ｎｇ／ｍＬ、７．４ｎｇ／ｍＬ、７．５ｎｇ／ｍＬ、７．６ｎｇ／ｍＬ、７．７ｎｇ／ｍＬ、７．８ｎｇ／ｍＬ、７．９ｎｇ／ｍＬまたは８．０ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高く、それに組み合わせてＣＹＦＲＡについて血清中１．５０ｎｇ／ｍＬ、１．６０ｎｇ／ｍＬ、１．７０ｎｇ／ｍＬ、１．８０ｎｇ／ｍＬ、１．９０ｎｇ／ｍＬ、２．００ｎｇ／ｍＬ、２．０１ｎｇ／ｍＬ、２．０２ｎｇ／ｍＬ、２．０３ｎｇ／ｍＬ、２．０４ｎｇ／ｍＬ、２．０５ｎｇ／ｍＬ、２．０６ｎｇ／ｍＬ、２．０７ｎｇ／ｍＬ、２．０８ｎｇ／ｍＬ、２．０９ｎｇ／ｍＬ、２．１０ｎｇ／ｍＬ、２．１１ｎｇ／ｍＬ、２．１２ｎｇ／ｍＬ、２．１３ｎｇ／ｍＬ、２．１４ｎｇ／ｍＬ、２．１５ｎｇ／ｍＬ、２．１６ｎｇ／ｍＬ、２．１７ｎｇ／ｍＬ、２．１８ｎｇ／ｍＬ、２．１９ｎｇ／ｍＬ、２．２０ｎｇ／ｍＬ、２．２１ｎｇ／ｍＬ、２．２２ｎｇ／ｍＬ、２．２３ｎｇ／ｍＬ、２．２４ｎｇ／ｍＬ、２．２５ｎｇ／ｍＬ、２．５０ｎｇ／ｍＬまたは３．００ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベル、ＣＲＰについて血清中６．５ｍｇ／ｍＬ、６．６ｍｇ／ｍＬ、６．７ｍｇ／ｍＬ、６．８ｍｇ／ｍＬ、６．９ｍｇ／ｍＬ、７．０ｍｇ／ｍＬ、７．１ｍｇ／ｍＬ、７．２ｍｇ／ｍＬ、７．３ｍｇ／ｍＬ、７．４ｍｇ／ｍＬ、７．５ｍｇ／ｍＬ、７．６ｍｇ／ｍＬ、７．７ｍｇ／ｍＬ、７．８ｍｇ／ｍＬ、７．９ｍｇ／ｍＬ、８．０ｍｇ／ｍＬ、８．１ｍｇ／ｍＬ、８．２ｍｇ／ｍＬ、８．３ｍｇ／ｍＬ、８．４ｍｇ／ｍＬ、８．５ｍｇ／ｍＬ、８．６ｍｇ／ｍＬ、８．７ｍｇ／ｍＬ、８．８ｍｇ／ｍＬ、８．９ｍｇ／ｍＬ、９．０ｍｇ／ｍＬ、９．５ｍｇ／ｍＬまたは１０．０ｍｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベル、ＣＡ１９−９について血清中２３．０Ｕ／ｍＬ、２３．１Ｕ／ｍＬ、２３．２Ｕ／ｍＬ、２３．３Ｕ／ｍＬ、２３．４Ｕ／ｍＬ、２３．５Ｕ／ｍＬ、２３．６Ｕ／ｍＬ、２３．７Ｕ／ｍＬ、２３．８Ｕ／ｍＬ、２３．９Ｕ／ｍＬ、２４．０Ｕ／ｍＬ、２４．１Ｕ／ｍＬ、２４．２Ｕ／ｍＬ、２４．３Ｕ／ｍＬ、２４．４Ｕ／ｍＬ、２４．５Ｕ／ｍＬ、２４．６Ｕ／ｍＬ、２４．７Ｕ／ｍＬ、２４．８Ｕ／ｍＬ、２４．９Ｕ／ｍＬ、２５．０Ｕ／ｍＬ、２５．１Ｕ／ｍＬ、２５．２Ｕ／ｍＬ、２５．３Ｕ／ｍＬ、２５．４Ｕ／ｍＬ、２５．５Ｕ／ｍＬ、２５．６Ｕ／ｍＬ、２５．７Ｕ／ｍＬ、２５．８Ｕ／ｍＬ、２５．９Ｕ／ｍＬ、２６．０Ｕ／ｍＬ、２６．１Ｕ／ｍＬ、２６．２Ｕ／ｍＬ、２６．３Ｕ／ｍＬ、２６．４Ｕ／ｍＬ、２６．５Ｕ／ｍＬ、２６．６Ｕ／ｍＬ、２６．７Ｕ／ｍＬ、２６．８Ｕ／ｍＬ、２６．９Ｕ／ｍＬ、２７．０Ｕ／ｍＬ、２７．１Ｕ／ｍＬ、２７．２Ｕ／ｍＬ、２７．３Ｕ／ｍＬ、２７．４Ｕ／ｍＬ、２７．５Ｕ／ｍＬ、２７．６Ｕ／ｍＬ、２７．７Ｕ／ｍＬ、２７．８Ｕ／ｍＬ、２７．９Ｕ／ｍＬ、２８．０Ｕ／ｍＬ、２８．５Ｕ／ｍＬまたは２９．０Ｕ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベル、およびフェリチンについて血清中４５ｎｇ／ｍＬ、４４ｎｇ／ｍＬ、４３ｎｇ／ｍＬ、４２ｎｇ／ｍＬ、４１ｎｇ／ｍＬ、４０ｎｇ／ｍＬ、３９ｎｇ／ｍＬ、３８ｎｇ／ｍＬ、３６ｎｇ／ｍＬ、３５ｎｇ／ｍＬ、３４ｎｇ／ｍＬ、３３ｎｇ／ｍＬ、３２ｎｇ／ｍＬ、３１ｎｇ／ｍＬ、３０ｎｇ／ｍＬまたは２５ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより低いレベルであってよい。ＣＥＡの基準レベルは少なくとも約５．９ｎｇ／ｍＬであってよく、ＣＹＦＲＡの基準レベルは少なくとも約２．０１ｎｇ／ｍＬであってよく、ＣＲＰの基準レベルは少なくとも約７．８ｍｇ／ｍＬであってよく、ＣＡ１９−９の基準レベルは少なくとも約２４．０Ｕ／ｍＬであってよく、フェリチンの基準レベルは少なくとも約３６ｎｇ／ｍＬであってよい。方法は、ＣＲＣ構造スクリーニングレジメン、ＣＲＣ処置レジメン、またはＣＲＣモニタリングレジメンを、ＣＲＣに罹患している、または罹患するリスクがあると診断された対象に施すステップをさらに含むことができる。ＣＲＣ処置レジメンは、外科手術、放射線医学治療、放射線医学処置、化学療法、標的化治療またはこれらの組合せの少なくとも１つを対象に施すステップを含むことができる。ＣＲＣ構造スクリーニングレジメンは結腸鏡検査またはＳ状結腸鏡検査であってよい。結腸鏡検査は対象の診断を確定し得る。ＣＲＣモニタリングレジメンは、定期的な間隔でＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンのレベルを決定するステップを含むことができる。ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンのレベルを決定するステップは、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンに特異的に結合する分子での免疫学的方法を含むことができる。ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンに特異的に結合する分子は、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンに特異的に結合することができる少なくとも１つの抗体を含むことができる。ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンのレベルを決定するステップは、生
物学的試料を、ＣＥＡに特異的に結合する抗体、ＣＹＦＲＡに特異的に結合する抗体、ＣＲＰに特異的に結合する抗体、ＣＡ１９−９に特異的に結合する抗体、フェリチンに特異的に結合する抗体、およびこれらの組合せからなる群から選択される少なくとも１つの抗体と接触させるステップを伴うことができる。ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンのレベルを決定するステップは、少なくとも１つの捕捉抗体、およびシグナルを発生させる検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体を使用するイムノアッセイによって、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンについて生物学的試料をアッセイするステップを伴うことができ、生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンの量の直接的または間接的な指標として検出可能な標識によって発生したシグナルを比較するステップを含み、捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された抗体は、（ａ）ＣＥＡに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体、（ｂ）ＣＹＦＲＡに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体、（ｃ）ＣＲＰに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体、（ｄ）ＣＡ１９−９に特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体、ならびに（ｅ）フェリチンに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体を含む。免疫学的方法は、（ａ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＥＡまたはＣＥＡのフラグメント上のエピトープに結合して、捕捉抗体−ＣＥＡ抗原複合体を形成するステップ、（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＥＡ抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＥＡ上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＥＡ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および（ｉｉｉ）試験試料中のＣＥＡレベルを、（ａ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＣＥＡ抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってＣＥＡのレベルを測定するステップ、（ｂ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＹＦＲＡまたはＣＹＦＲＡのフラグメント上のエピトープに結合して捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原複合体を形成するステップ、（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＹＦＲＡ上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および（ｉｉｉ）試験試料中のＣＹＦＲＡレベルを、（ｂ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってＣＹＦＲＡのレベルを測定するステップ、（ｃ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＲＰまたはＣＲＰのフラグメント上のエピトープに結合して捕捉抗体−ＣＲＰ抗原複合体を形成するステップ、（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＲＰ抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＲＰ上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＲＰ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および（ｉｉｉ）試験試料中のＣＲＰレベルを、（ｃ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＣＲＰ抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってＣＲＰのレベルを測定するステップ、（ｄ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＡ１９−９またはＣＡ１９−９のフラグメント上のエピトープに結合して捕捉抗体−ＣＡ１９−９抗原複合体を形成するステップ、（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＡ１９−９抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＡ１９−９上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＲＰ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および（ｉｉｉ）試験試料中のＣＡ１９−９レベルを、（ｄ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＣＡ１９−９抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってＣＡ１９−９のレベルを測定するステップ、ならびに（ｅ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はフェリチンまたはフェリチンのフラグメント上のエピトープに結合して捕捉抗体−フェリチン抗原複合体を形成するステップ、（ｉｉ）捕捉抗体−フェリチン抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないフェリチン上のエピトープに結合し、捕捉抗体−フェリチン抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および（ｉｉｉ）試験試料中のフェリチンレベルを、（ｅ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−フェリチン抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってフェリチンのレベルを測定するステップを含むことができる。抗体は、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、ヒト抗体、免疫グロブリン分子、ジスルフィド連結されているＦｖ、モノクローナル抗体、親和性成熟抗体、ｓｃＦｖ、キメラ抗体、単一ドメイン抗体、ＣＤＲグラフト化抗体、ダイアボディ、ヒト化抗体、多特異的抗体、Ｆａｂ、二重特異性抗体、ＤＶＤ、Ｆａｂ’、二特異的抗体、Ｆ（ａｂ’）２およびＦｖからなる群から選択され得る。方法は、メチルセプチン９（ｍＳ９）、ガレクチン−３（Ｇａｌ３）、糖化ヘモグロビン（ＨｂＡｌｃ）、Ｃ３ａ、カテプシンＸ（ＣａｔＸ）、可溶性ウロキナーゼ受容体（ｓｕＰＡＲ（Ｉ））、プラスミノーゲンアクチベータインヒビター−１（ＰＡＩ−１）、エノラーゼ２（ＥＮＯ２）、およびこれらの組合せからなる群から選択される、生物学的試料中のＣＲＣの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーのレベルを決定するステップ、ならびにＣＲＣの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーのレベルを、ＣＲＣがんの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーに対する基準レベルと比較するステップをさらに含むことができる。対象はヒトであってよい。対象の生物学的試料は、組織試料、体液、全血、血漿、血清、尿、気管支肺胞洗浄液および細胞培養懸濁液、またはこれらの分画から選択されてよい。対象の生物学的試料は血漿または血清であってよい。本発明は、前記方法を行うためのキットを対象とする。キットは、（ａ）対象の生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンのレベルを定量するための、ＣＥＡに特異的に結合することができる試薬、ＣＹＦＲＡに特異的に結合することができる試薬、ＣＲＰに特異的に結合することができる試薬、ＣＡ１９−９に特異的に結合することができる試薬、およびフェリチンに特異的に結合することができる試薬、ならびに（ｂ）ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンの基準レベルを指し示す参照標準を含む。キットは、生物学的試料中の少なくとも１つの付加的なバイオマーカーの濃度を定量するための、生物学的試料中のメチルセプチン９（ｍＳ９）、ガレクチン−３（Ｇａｌ３）、糖化ヘモグロビン（ＨｂＡｌｃ）、Ｃ３ａ、カテプシンＸ（ＣａｔＸ）、可溶性ウロキナーゼ受容体（ｓｕＰＡＲ（Ｉ））、プラスミノーゲンアクチベータインヒビター−１（ＰＡＩ−１）、エノラーゼ２（ＥＮＯ２）またはこれらの組合せの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーに特異的に結合することができる、少なくとも１つの付加的な試薬、およびメチルセプチン９（ｍＳ９）、ガレクチン−３（Ｇａｌ３）、糖化ヘモグロビン（ＨｂＡｌｃ）、Ｃ３ａ、カテプシンＸ（ＣａｔＸ）、可溶性ウロキナーゼ受容体（ｓｕＰＡＲ（Ｉ））、プラスミノーゲンアクチベータインヒビター−１（ＰＡＩ−１）、エノラーゼ２（ＥＮＯ２）、またはこれらの組合せの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーの基準レベルを指し示す参照標準をさらに含むことができる。
【００１０】
本発明は、対象が、直腸結腸がん（ＣＲＣ）に罹患している、または罹患するリスクがあるかを決定する方法を対象とする。方法は、（ａ）対象から生物学的試料を得るステップ、（ｂ）対象からの生物学的試料中のがん胎児性抗原（ＣＥＡ）、サイトケラチン１９フラグメント（ＣＹＦＲＡ）、Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）、糖鎖抗原１９−９（ＣＡ１９−９）およびフェリチンのレベルを決定するステップ、（ｃ）生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンのレベルを、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンの基準レベルと比較するステップ、（ｄ）ＣＥＡスコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＥＡのレベルがＣＥＡの基準レベルより高い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＥＡのレベルがＣＥＡの基準レベルと等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、（ｅ）ＣＹＦＲＡスコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＹＦＲＡのレベルがＣＹＦＲＡの基準レベルより高い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＹＦＲＡのレベルがＣＹＦＲＡの基準レベルと等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、（ｆ）ＣＲＰスコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＲＰのレベルがＣＲＰの基準レベルより高い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＲＰのレベルがＣＲＰの基準レベルと等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、（ｇ）ＣＡ１９−９スコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＡ１９−９のレベルがＣＡ１９−９の基準レベルより高い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＡ１９−９のレベルがＣＡ１９−９の基準レベルと等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、（ｈ）フェリチンスコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のフェリチンのレベルがフェリチンの基準レベルより低い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のフェリチンのレベルがフェリチンの基準レベルと等しくまたはより高い場合、０のスコアを得るステップ、（ｉ）ＣＥＡスコア、ＣＹＦＲＡスコア、ＣＲＰスコア、ＣＡ１９−９スコアおよびフェリチンスコアを加算して合計スコアを得るステップ、ならびに（ｊ）合計スコアが基準スコアより高い場合、ＣＲＣに罹患している、もしくは罹患するリスクがあるという対象の診断を提供し、または合計スコアが基準スコアに等しくもしくはより低い場合、ＣＲＣに罹患していない、もしくは罹患するリスクがないという対象の診断を提供するステップを含む。ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンの基準レベルは、基準群の生物学的試料から適応インデックスモデル法によって決定されるＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンのカットオフ値であってよい。基準群は対照群およびがん群からなる群から選択されてよい。対象は男性であってよい。ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンの基準レベルは、ＣＥＡについて血清中４．５ｎｇ／ｍＬ、４．６ｎｇ／ｍＬ、４．７ｎｇ／ｍＬ、４．８ｎｇ／ｍＬ、４．９ｎｇ／ｍＬ、５．０ｎｇ／ｍＬ、５．１ｎｇ／ｍＬ、５．２ｎｇ／ｍＬ、５．３ｎｇ／ｍＬ、５．４ｎｇ／ｍＬ、５．５ｎｇ／ｍＬ、５．６ｎｇ／ｍＬ、５．７ｎｇ／ｍＬ、５．８ｎｇ／ｍＬ、５．９ｎｇ／ｍＬ、６．０ｎｇ／ｍＬ、６．１ｎｇ／ｍＬ、６．２ｎｇ／ｍＬ、６．３ｎｇ／ｍＬ、６．４ｎｇ／ｍＬ、６．５ｎｇ／ｍＬ、６．６ｎｇ／ｍＬ、６．７ｎｇ／ｍＬ、６．８ｎｇ／ｍＬ、６．９ｎｇ／ｍＬ、７．０ｎｇ／ｍＬ、７．１ｎｇ／ｍＬ、７．２ｎｇ／ｍＬ、７．３ｎｇ／ｍＬ、７．４ｎｇ／ｍＬ、７．５ｎｇ／ｍＬ、７．６ｎｇ／ｍＬ、７．７ｎｇ／ｍＬ、７．８ｎｇ／ｍＬ、７．９ｎｇ／ｍＬまたは８．０ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高く、それに組み合わせてＣＹＦＲＡについて血清中１．５０ｎｇ／ｍＬ、１．６０ｎｇ／ｍＬ、１．７０ｎｇ／ｍＬ、１．８０ｎｇ／ｍＬ、１．９０ｎｇ／ｍＬ、２．００ｎｇ／ｍＬ、２．０１ｎｇ／ｍＬ、２．０２ｎｇ／ｍＬ、２．０３ｎｇ／ｍＬ、２．０４ｎｇ／ｍＬ、２．０５ｎｇ／ｍＬ、２．０６ｎｇ／ｍＬ、２．０７ｎｇ／ｍＬ、２．０８ｎｇ／ｍＬ、２．０９ｎｇ／ｍＬ、２．１０ｎｇ／ｍＬ、２．１１ｎｇ／ｍＬ、２．１２ｎｇ／ｍＬ、２．１３ｎｇ／ｍＬ、２．１４ｎｇ／ｍＬ、２．１５ｎｇ／ｍＬ、２．１６ｎｇ／ｍＬ、２．１７ｎｇ／ｍＬ、２．１８ｎｇ／ｍＬ、２．１９ｎｇ／ｍＬ、２．２０ｎｇ／ｍＬ、２．２１ｎｇ／ｍＬ、２．２２ｎｇ／ｍＬ、２．２３ｎｇ／ｍＬ、２．２４ｎｇ／ｍＬ、２．２５ｎｇ／ｍＬ、２．５０ｎｇ／ｍＬまたは３．００ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベル、ＣＲＰについて血清中１７．０ｍｇ／ｍＬ、１７．１ｍｇ／ｍＬ、１７．２ｍｇ／ｍＬ、１７．３ｍｇ／ｍＬ、１７．４ｍｇ／ｍＬ、１７．５ｍｇ／ｍＬ、１７．６ｍｇ／ｍＬ、１７．７ｍｇ／ｍＬ、１７．８ｍｇ／ｍＬ、１７．９ｍｇ／ｍＬ、１８．０ｍｇ／ｍＬ、１８．１ｍｇ／ｍＬ、１８．２ｍｇ／ｍＬ、１８．３ｍｇ／ｍＬ、１８．４ｍｇ／ｍＬ、１８．５ｍｇ／ｍＬ、１８．６ｍｇ／ｍＬ、１８．７ｍｇ／ｍＬ、１８．８ｍｇ／ｍＬ、１８．９ｍｇ／ｍＬ、１９．０ｍｇ／ｍＬ、１９．５ｍｇ／ｍＬまたは２０．０ｍｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベル、ＣＡ１９−９について血清中２３．０Ｕ／ｍＬ、２３．１Ｕ／ｍＬ、２３．２Ｕ／ｍＬ、２３．３Ｕ／ｍＬ、２３．４Ｕ／ｍＬ、２３．５Ｕ／ｍＬ、２３．６Ｕ／ｍＬ、２３．７Ｕ／ｍＬ、２３．８Ｕ／ｍＬ、２３．９Ｕ／ｍＬ、２４．０Ｕ／ｍＬ、２４．１Ｕ／ｍＬ、２４．２Ｕ／ｍＬ、２４．３Ｕ／ｍＬ、２４．４Ｕ／ｍＬ、２４．５Ｕ／ｍＬ、２４．６Ｕ／ｍＬ、２４．７Ｕ／ｍＬ、２４．８Ｕ／ｍＬ、２４．９Ｕ／ｍＬ、２５．０Ｕ／ｍＬ、２５．１Ｕ／ｍＬ、２５．２Ｕ／ｍＬ、２５．３Ｕ／ｍＬ、２５．４Ｕ／ｍＬ、２５．５Ｕ／ｍＬ、２５．６Ｕ／ｍＬ、２５．７Ｕ／ｍＬ、２５．８Ｕ／ｍＬ、２５．９Ｕ／ｍＬ、２６．０Ｕ／ｍＬ、２６．１Ｕ／ｍＬ、２６．２Ｕ／ｍＬ、２６．３Ｕ／ｍＬ、２６．４Ｕ／ｍＬ、２６．５Ｕ／ｍＬ、２６．６Ｕ／ｍＬ、２６．７Ｕ／ｍＬ、２６．８Ｕ／ｍＬ、２６．９Ｕ／ｍＬ、２７．０Ｕ／ｍＬ、２７．１Ｕ／ｍＬ、２７．２Ｕ／ｍＬ、２７．３Ｕ／ｍＬ、２７．４Ｕ／ｍＬ、２７．５Ｕ／ｍＬ、２７．６Ｕ／ｍＬ、２７．７Ｕ／ｍＬ、２７．８Ｕ／ｍＬ、２７．９Ｕ／ｍＬ、２８．０Ｕ／ｍＬ、２８．５Ｕ／ｍＬまたは２９．０Ｕ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベル、およびフェリチンについて血清中１０５．０ｎｇ／ｍＬ、１０４．０ｎｇ／ｍＬ、１０３．０ｎｇ／ｍＬ、１０２．０ｎｇ／ｍＬ、１０１．０ｎｇ／ｍＬ、１００．０ｎｇ／ｍＬ、９９．０ｎｇ／ｍＬ、９８．０ｎｇ／ｍＬ、９７．０ｎｇ／ｍＬ、９６．０ｎｇ／ｍＬ、９５．０ｎｇ／ｍＬ、９４．０ｎｇ／ｍＬ、９３．０ｎｇ／ｍＬ、９２．０ｎｇ／ｍＬ、９１．０ｎｇ／ｍＬ、９０．０ｎｇ／ｍＬ、８９．０ｎｇ／ｍＬ、８８．０ｎｇ／ｍＬ、８７．０ｎｇ／ｍＬ、８６．０ｎｇ／ｍＬまたは８５．０ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより低いレベルであってよい。ＣＥＡの基準レベルは少なくとも約６．９ｎｇ／ｍＬであってよく、ＣＹＦＲＡの基準レベルは少なくとも約２．１７ｎｇ／ｍＬであってよく、ＣＲＰの基準レベルは少なくとも約１８．３ｍｇ／ｍＬであってよく、ＣＡ１９−９の基準レベルは少なくとも約２６．８Ｕ／ｍＬであってよく、フェリチンの基準レベルは少なくとも約９７ｎｇ／ｍＬであってよい。対象は女性であってよい。ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンの基準レベルは、ＣＥＡについて血清中４．５ｎｇ／ｍＬ、４．６ｎｇ／ｍＬ、４．７ｎｇ／ｍＬ、４．８ｎｇ／ｍＬ、４．９ｎｇ／ｍＬ、５．０ｎｇ／ｍＬ、５．１ｎｇ／ｍＬ、５．２ｎｇ／ｍＬ、５．３ｎｇ／ｍＬ、５．４ｎｇ／ｍＬ、５．５ｎｇ／ｍＬ、５．６ｎｇ／ｍＬ、５．７ｎｇ／ｍＬ、５．８ｎｇ／ｍＬ、５．９ｎｇ／ｍＬ、６．０ｎｇ／ｍＬ、６．１ｎｇ／ｍＬ、６．２ｎｇ／ｍＬ、６．３ｎｇ／ｍＬ、６．４ｎｇ／ｍＬ、６．５ｎｇ／ｍＬ、６．６ｎｇ／ｍＬ、６．７ｎｇ／ｍＬ、６．８ｎｇ／ｍＬ、６．９ｎｇ／ｍＬ、７．０ｎｇ／ｍＬ、７．１ｎｇ／ｍＬ、７．２ｎｇ／ｍＬ、７．３ｎｇ／ｍＬ、７．４ｎｇ／ｍＬ、７．５ｎｇ／ｍＬ、７．６ｎｇ／ｍＬ、７．７ｎｇ／ｍＬ、７．８ｎｇ／ｍＬ、７．９ｎｇ／ｍＬまたは８．０ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高く、それに組み合わせてＣＹＦＲＡについて血清中１．５０ｎｇ／ｍＬ、１．６０ｎｇ／ｍＬ、１．７０ｎｇ／ｍＬ、１．８０ｎｇ／ｍＬ、１．９０ｎｇ／ｍＬ、２．００ｎｇ／ｍＬ、２．０１ｎｇ／ｍＬ、２．０２ｎｇ／ｍＬ、２．０３ｎｇ／ｍＬ、２．０４ｎｇ／ｍＬ、２．０５ｎｇ／ｍＬ、２．０６ｎｇ／ｍＬ、２．０７ｎｇ／ｍＬ、２．０８ｎｇ／ｍＬ、２．０９ｎｇ／ｍＬ、２．１０ｎｇ／ｍＬ、２．１１ｎｇ／ｍＬ、２．１２ｎｇ／ｍＬ、２．１３ｎｇ／ｍＬ、２．１４ｎｇ／ｍＬ、２．１５ｎｇ／ｍＬ、２．１６ｎｇ／ｍＬ、２．１７ｎｇ／ｍＬ、２．１８ｎｇ／ｍＬ、２．１９ｎｇ／ｍＬ、２．２０ｎｇ／ｍＬ、２．２１ｎｇ／ｍＬ、２．２２ｎｇ／ｍＬ、２．２３ｎｇ／ｍＬ、２．２４ｎｇ／ｍＬ、２．２５ｎｇ／ｍＬ、２．５０ｎｇ／ｍＬまたは３．００ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベル、ＣＲＰについて血清中６．５ｍｇ／ｍＬ、６．６ｍｇ／ｍＬ、６．７ｍｇ／ｍＬ、６．８ｍｇ／ｍＬ、６．９ｍｇ／ｍＬ、７．０ｍｇ／ｍＬ、７．１ｍｇ／ｍＬ、７．２ｍｇ／ｍＬ、７．３ｍｇ／ｍＬ、７．４ｍｇ／ｍＬ、７．５ｍｇ／ｍＬ、７．６ｍｇ／ｍＬ、７．７ｍｇ／ｍＬ、７．８ｍｇ／ｍＬ、７．９ｍｇ／ｍＬ、８．０ｍｇ／ｍＬ、８．１ｍｇ／ｍＬ、８．２ｍｇ／ｍＬ、８．３ｍｇ／ｍＬ、８．４ｍｇ／ｍＬ、８．５ｍｇ／ｍＬ、８．６ｍｇ／ｍＬ、８．７ｍｇ／ｍＬ、８．８ｍｇ／ｍＬ、８．９ｍｇ／ｍＬ、９．０ｍｇ／ｍＬ、９．５ｍｇ／ｍＬまたは１０．０ｍｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベル、ＣＡ１９−９について血清中２３．０Ｕ／ｍＬ、２３．１Ｕ／ｍＬ、２３．２Ｕ／ｍＬ、２３．３Ｕ／ｍＬ、２３．４Ｕ／ｍＬ、２３．５Ｕ／ｍＬ、２３．６Ｕ／ｍＬ、２３．７Ｕ／ｍＬ、２３．８Ｕ／ｍＬ、２３．９Ｕ／ｍＬ、２４．０Ｕ／ｍＬ、２４．１Ｕ／ｍＬ、２４．２Ｕ／ｍＬ、２４．３Ｕ／ｍＬ、２４．４Ｕ／ｍＬ、２４．５Ｕ／ｍＬ、２４．６Ｕ／ｍＬ、２４．７Ｕ／ｍＬ、２４．８Ｕ／ｍＬ、２４．９Ｕ／ｍＬ、２５．０Ｕ／ｍＬ、２５．１Ｕ／ｍＬ、２５．２Ｕ／ｍＬ、２５．３Ｕ／ｍＬ、２５．４Ｕ／ｍＬ、２５．５Ｕ／ｍＬ、２５．６Ｕ／ｍＬ、２５．７Ｕ／ｍＬ、２５．８Ｕ／ｍＬ、２５．９Ｕ／ｍＬ、２６．０Ｕ／ｍＬ、２６．１Ｕ／ｍＬ、２６．２Ｕ／ｍＬ、２６．３Ｕ／ｍＬ、２６．４Ｕ／ｍＬ、２６．５Ｕ／ｍＬ、２６．６Ｕ／ｍＬ、２６．７Ｕ／ｍＬ、２６．８Ｕ／ｍＬ、２６．９Ｕ／ｍＬ、２７．０Ｕ／ｍＬ、２７．１Ｕ／ｍＬ、２７．２Ｕ／ｍＬ、２７．３Ｕ／ｍＬ、２７．４Ｕ／ｍＬ、２７．５Ｕ／ｍＬ、２７．６Ｕ／ｍＬ、２７．７Ｕ／ｍＬ、２７．８Ｕ／ｍＬ、２７．９Ｕ／ｍＬ、２８．０Ｕ／ｍＬ、２８．５Ｕ／ｍＬまたは２９．０Ｕ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベル、およびフェリチンについて血清中４５ｎｇ／ｍＬ、４４ｎｇ／ｍＬ、４３ｎｇ／ｍＬ、４２ｎｇ／ｍＬ、４１ｎｇ／ｍＬ、４０ｎｇ／ｍＬ、３９ｎｇ／ｍＬ、３８ｎｇ／ｍＬ、３６ｎｇ／ｍＬ、３５ｎｇ／ｍＬ、３４ｎｇ／ｍＬ、３３ｎｇ／ｍＬ、３２ｎｇ／ｍＬ、３１ｎｇ／ｍＬ、３０ｎｇ／ｍＬまたは２５ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより低いレベルであってよい。ＣＥＡの基準レベルは少なくとも約５．９ｎｇ／ｍＬであってよく、ＣＹＦＲＡの基準レベルは少なくとも約２．０１ｎｇ／ｍＬであってよく、ＣＲＰの基準レベルは少なくとも約７．８ｍｇ／ｍＬであってよく、ＣＡ１９−９の基準レベルは少なくとも約２４．０Ｕ／ｍＬであってよく、フェリチンの基準レベルは少なくとも約３６ｎｇ／ｍＬであってよい。基準スコアは０、１、２、３、４または５であってよい。対象が
男性である場合、基準スコアは１であってよい。対象が男性であり、合計スコアが１より高い場合、対象はＣＲＣに罹患している、または罹患するリスクがあると診断され得る。対象が女性である場合、基準スコアは１または２であってよい。対象が女性であり、合計スコアが１より高い場合、対象はＣＲＣに罹患している、または罹患するリスクがあると診断され得る。対象が女性であり、合計スコアが２より高い場合、対象はＣＲＣに罹患している、または罹患するリスクがあると診断され得る。方法は、ＣＲＣ構造スクリーニングレジメン、ＣＲＣ処置レジメン、またはＣＲＣモニタリングレジメンを、ＣＲＣに罹患している、または罹患するリスクがあると診断された対象に施すステップをさらに含むことができる。ＣＲＣ処置レジメンは、外科手術、放射線医学治療、放射線医学処置、化学療法、標的化治療またはこれらの組合せの少なくとも１つを対象に施すステップを含むことができる。ＣＲＣ構造スクリーニングレジメンは結腸鏡検査またはＳ状結腸鏡検査であってよい。結腸鏡検査は対象の診断を確定し得る。ＣＲＣモニタリングレジメンは、定期的な間隔でＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンのレベルを決定するステップを含むことができる。ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンのレベルを決定するステップは、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンに特異的に結合する分子での免疫学的方法を含むことができる。ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンに特異的に結合する分子は、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンに特異的に結合することができる少なくとも１つの抗体を含むことができる。ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンのレベルを決定するステップは、生物学的試料を、ＣＥＡに特異的に結合する抗体、ＣＹＦＲＡに特異的に結合する抗体、ＣＲＰに特異的に結合する抗体、ＣＡ１９−９に特異的に結合する抗体、フェリチンに特異的に結合する抗体、およびこれらの組合せからなる群から選択される少なくとも１つの抗体と接触させるステップを伴うことができる。ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンのレベルを決定するステップは、少なくとも１つの捕捉抗体、およびシグナルを発生させる検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体を使用するイムノアッセイによって、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンについて生物学的試料をアッセイするステップを伴うことができ、生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンの量の直接的または間接的な指標として検出可能な標識によって発生したシグナルを比較するステップを含み、捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された抗体は、（ａ）ＣＥＡに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体、（ｂ）ＣＹＦＲＡに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体、（ｃ）ＣＲＰに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体、（ｄ）ＣＡ１９−９に特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体、ならびに（ｅ）フェリチンに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体を含む。免疫学的方法は、（ａ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＥＡまたはＣＥＡのフラグメント上のエピトープに結合して、捕捉抗体−ＣＥＡ抗原複合体を形成するステップ、（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＥＡ抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＥＡ上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＥＡ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および（ｉｉｉ）試験試料中のＣＥＡレベルを、（ａ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＣＥＡ抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってＣＥＡのレベルを測定するステップ、（ｂ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＹＦＲＡまたはＣＹＦＲＡのフラグメント上のエピトープに結合して捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原複合体を形成するステップ、（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＹＦＲＡ上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および（ｉｉｉ）試験試料中のＣＹＦＲＡレベルを、（ｂ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってＣＹＦＲＡのレベルを測定するステップ、（ｃ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＲＰまたはＣＲＰのフラグメント上のエピトープに結合して捕捉抗体−ＣＲＰ抗原複合体を形成するステップ、（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＲＰ抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＲＰ上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＲＰ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および（ｉｉｉ）試験試料中のＣＲＰレベルを、（ｃ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＣＲＰ抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってＣＲＰのレベルを測定するステップ、（ｄ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＡ１９−９またはＣＡ１９−９のフラグメント上のエピトープに結合して捕捉抗体−ＣＡ１９−９抗原複合体を形成するステップ、（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＡ１９−９抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＡ１９−９上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＲＰ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および（ｉｉｉ）試験試料中のＣＡ１９−９レベルを、（ｄ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＣＡ１９−９抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってＣＡ１９−９のレベルを測定するステップ、ならびに（ｅ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はフェリチンまたはフェリチンのフラグメント上のエピトープに結合して捕捉抗体−フェリチン抗原複合体を形成するステップ、（ｉｉ）捕捉抗体−フェリチン抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないフェリチン上のエピトープに結合し、捕捉抗体−フェリチン抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および（ｉｉｉ）試験試料中のフェリチンレベルを、（ｅ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−フェリチン抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってフェリチンのレベルを測定するステップを含むことができる。抗体は、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、ヒト抗体、免疫グロブリン分子、ジスルフィド連結されているＦｖ、モノクローナル抗体、親和性成熟抗体、ｓｃＦｖ、キメラ抗体、単一ドメイン抗体、ＣＤＲグラフト化抗体、ダイアボディ、ヒト化抗体、多特異的抗体、Ｆａｂ、二重特異性抗体、ＤＶＤ、Ｆａｂ’、二特異的抗体、Ｆ（ａｂ’）２およびＦｖからなる群から選択され得る。方法は、メチルセプチン９（ｍＳ９）、ガレクチン−３（Ｇａｌ３）、糖化ヘモグロビン（ＨｂＡｌｃ）、Ｃ３ａ、カテプシンＸ（ＣａｔＸ）、可溶性ウロキナーゼ受容体（ｓｕＰＡＲ（Ｉ））、プラスミノーゲンアクチベータインヒビター−１（ＰＡＩ−１）、エノラーゼ２（ＥＮＯ２）、およびこれらの組合せからなる群から選択される、生物学的試料中のＣＲＣの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーのレベルを決定するステップ、ならびにＣＲＣの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーのレベルを、ＣＲＣがんの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーに対する基準レベルと比較するステップをさらに含むことができる。対象はヒトであってよい。対象の生物学的試料は、組織試料、体液、全血、血漿、血清、尿、気管支肺胞洗浄液および細胞培養懸濁液、またはこれらの分画から選択されてよい。対象の生物学的試料は血漿または血清であってよい。本発明は、前記方法を行うためのキットを対象とする。キットは、（ａ）対象の生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンのレベルを定量するための、ＣＥＡに特異的に結合することができる試薬、ＣＹＦＲＡに特異的に結合することができる試薬、ＣＲＰに特異的に結合することができる試薬、ＣＡ１９−９に特異的に結合することができる試薬、およびフェリチンに特異的に結合することができる試薬、ならびに（ｂ）ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンの基準レベルを指し示す参照標準を含む。キットは、生物学的試料中の少なくとも１つの付加的なバイオマーカーの濃度を定量するための、生物学的試料中のメチルセプチン９（ｍＳ９）、ガレクチン−３（Ｇａｌ３）、糖化ヘモグロビン（ＨｂＡｌｃ）、Ｃ３ａ、カテプシンＸ（ＣａｔＸ）、可溶性ウロキナーゼ受容体（ｓｕＰＡＲ（Ｉ））、プラスミノーゲンアクチベータインヒビター−１（ＰＡＩ−１）、エノラーゼ２（ＥＮＯ２）またはこれらの組合せの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーに特異的に結合することができる、少なくとも１つの付加的な試薬、およびメチルセプチン９（ｍＳ９）、ガレクチン−３（Ｇａｌ３）、糖化ヘモグロビン（ＨｂＡｌｃ）、Ｃ３ａ、カテプシンＸ（ＣａｔＸ）、可溶性ウロキナーゼ受容体（ｓｕＰＡＲ（Ｉ））、プラスミノーゲンアクチベータインヒビター−１（ＰＡＩ−１）、エノラーゼ２（ＥＮＯ２）、またはこれらの組合せの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーの基準レベルを指し示す参照標準をさらに含むことができる。
【００１１】
本発明は、男性対象が、直腸結腸がん（ＣＲＣ）がん以外のがんに罹患している、または罹患するリスクがあるかを決定する方法に対するものであって、男性対象は結腸鏡検査によってＣＲＣを有さないことが確定されており、（ａ）男性対象から生物学的試料を得るステップ、（ｂ）男性対象からの生物学的試料中のサイトケラチン１９フラグメント（ＣＹＦＲＡ）、Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）、メタロプロテイナーゼの組織インヒビター１（ＴＩＭＰ−１）、糖鎖抗原１９−９（ＣＡ１９−９）およびアルファ−フェトプロテイン（ＡＦＰ）のレベルを決定するステップ、（ｃ）生物学的試料中のＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰのレベルを、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰの基準レベルと比較するステップ、ならびに（ｄ）生物学的試料中のＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰのレベルがＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰの基準レベルより高い場合、ＣＲＣ以外のがんに罹患している、または罹患するリスクがあるという男性対象の診断を提供するステップを含む。ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰの基準レベルは、基準群の生物学的試料から適応インデックスモデル法によって決定されるＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰのカットオフ値であってよい。基準群は、対照群またはがん群からなる群から選択され得る。ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰの基準レベルは、ＣＹＦＲＡについて血清中１．０ｎｇ／ｍＬ、１．１ｎｇ／ｍＬ、１．２ｎｇ／ｍＬ、１．３ｎｇ／ｍＬ、１．４ｎｇ／ｍＬ、１．５ｎｇ／ｍＬ、１．６ｎｇ／ｍＬ、１．７ｎｇ／ｍＬ、１．８ｎｇ／ｍＬ、１．９ｎｇ／ｍＬ、２．０ｎｇ／ｍＬ、２．１ｎｇ／ｍＬ、２．２ｎｇ／ｍＬ、２．３ｎｇ／ｍＬ、２．４ｎｇ／ｍＬ、２．５ｎｇ／ｍＬ、３．０ｎｇ／ｍＬまたは３．５ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高く、それに組み合わせてＣＲＰについて血清中１４．０ｍｇ／ｍＬ、１４．１ｍｇ／ｍＬ、１４．２ｍｇ／ｍＬ、１４．３ｍｇ／ｍＬ、１４．４ｍｇ／ｍＬ、１４．５ｍｇ／ｍＬ、１４．６ｍｇ／ｍＬ、１４．７ｍｇ／ｍＬ、１４．８ｍｇ／ｍＬ、１４．９ｍｇ／ｍＬ、１５．０ｍｇ／ｍＬ、１５．１ｍｇ／ｍＬ、１５．２ｍｇ／ｍＬ、１５．３ｍｇ／ｍＬ、１５．４ｍｇ／ｍＬ、１５．５ｍｇ／ｍＬ、１５．６ｍｇ／ｍＬ、１５．７ｍｇ／ｍＬ、１５．８ｍｇ／ｍＬ、１５．９ｍｇ／ｍＬ、１６．０ｍｇ／ｍＬ、１６．１ｍｇ／ｍＬ、１６．２ｍｇ／ｍＬ、１６．３ｍｇ／ｍＬ、１６．４ｍｇ／ｍＬ、１６．５ｍｇ／ｍＬ、１７．０ｍｇ／ｍＬまたは１７．５ｍｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベル、ＴＩＭＰ−１について血清中１４０ｎｇ／ｍＬ、１４１ｎｇ／ｍＬ、１４２ｎｇ／ｍＬ、１４３ｎｇ／ｍＬ、１４４ｎｇ／ｍＬ、１４５ｎｇ／ｍＬ、１４６ｎｇ／ｍＬ、１４７ｎｇ／ｍＬ、１４８ｎｇ／ｍＬ、１４９ｎｇ／ｍＬ、１５０ｎｇ／ｍＬ、１５１ｎｇ／ｍＬ、１５２ｎｇ／ｍＬ、１５３ｎｇ／ｍＬ、１５４ｎｇ／ｍＬ、１５５ｎｇ／ｍＬ、１５６ｎｇ／ｍＬ、１５７ｎｇ／ｍＬ、１５８ｎｇ／ｍＬ、１５９ｎｇ／ｍＬまたは１６０ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベル、ＣＡ１９−９について血清中２４．０Ｕ／ｍＬ、２４．１Ｕ／ｍＬ、２４．２Ｕ／ｍＬ、２４．３Ｕ／ｍＬ、２４．４Ｕ／ｍＬ、２４．５Ｕ／ｍＬ、２４．６Ｕ／ｍＬ、２４．７Ｕ／ｍＬ、２４．８Ｕ／ｍＬ、２４．９Ｕ／ｍＬ、２５．０Ｕ／ｍＬ、２５．１Ｕ／ｍＬ、２５．２Ｕ／ｍＬ、２５．３Ｕ／ｍＬ、２５．４Ｕ／ｍＬ、２５．５Ｕ／ｍＬ、２５．６Ｕ／ｍＬ、２５．７Ｕ／ｍＬ、２５．８Ｕ／ｍＬ、２５．９Ｕ／ｍＬ、２６．０Ｕ／ｍＬまたは２６．５Ｕ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベル、およびＡＦＰについて血清中５．０ｎｇ／ｍＬ、５．１ｎｇ／ｍＬ、５．２ｎｇ／ｍＬ、５．３ｎｇ／ｍＬ、５．４ｎｇ／ｍＬ、５．５ｎｇ／ｍＬ、５．６ｎｇ／ｍＬ、５．７ｎｇ／ｍＬ、５．８ｎｇ／ｍＬ、５．９ｎｇ／ｍＬ、６．０ｎｇ／ｍＬ、６．１ｎｇ／ｍＬ、６．２ｎｇ／ｍＬ、６．３ｎｇ／ｍＬ、６．４ｎｇ／ｍＬ、６．５ｎｇ／ｍＬ、６．６ｎｇ／ｍＬ、６．７ｎｇ／ｍＬ、６．８ｎｇ／ｍＬ、６．９ｎｇ／ｍＬ、７．０ｎｇ／ｍＬ、７．５ｎｇ／ｍＬまたは８．０ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベルであってもよい。ＣＹＦＲＡの基準レベルは少なくとも約２．１３ｎｇ／ｍＬであってよく、ＣＲＰの基準レベルは少なくとも約１５．４ｍｇ／ｍＬであってよく、ＴＩＭＰ−１の基準レベルは少なくとも約１４８ｎｇ／ｍＬであってよく、ＣＡ１９−９の基準レベルは少なくとも約２５．０Ｕ／ｍＬであってよく、ＡＦＰの基準レベルは少なくとも約６．７ｎｇ／ｍＬであってよい。方法は、がん処置レジメンまたはがんモニタリングレジメンを、ＣＲＣ以外のがんに罹患している、または罹患するリスクがあると診断された対象に施すステップをさらに含むことができる。がん処置レジメンは、外科手術、放射線医学治療、放射線医学処置、化学療法、標的化治療またはこれらの組合せの少なくとも１つを対象に施すステップを含むことができる。がんモニタリングレジメンは、定期的な間隔でＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰのレベルを決定するステップを含むことができる。ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰのレベルを決定するステップは、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰに特異的に結合する分子での免疫学的方法を含むことができる。ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰに特異的に結合する分子は、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰに特異的に結合することができる少なくとも１つの抗体を含むことができる。ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰのレベルを決定するステップは、生物学的試料を、ＣＹＦＲＡに特異的に結合する抗体、ＣＲＰに特異的に結合する抗体、ＴＩＭＰ−１に特異的に結合する抗体、ＣＡ１９−９に特異的に結合する抗体、ＡＦＰに特異的に結合する抗体、およびこれらの組合せからなる群から選択される少なくとも１つの抗体と接触させるステップを伴うことができる。ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰのレベルを決定するステップは、少なくとも１つの捕捉抗体、およびシグナルを発生させる検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体を使用するイムノアッセイによって、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰについて生物学的試料をアッセイするステップを伴うことができ、生物学的試料中のＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰの量の直接的または間接的な指標として検出可能な標識によって発生したシグナルを比較するステップを含み、捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された抗体は、（ａ）ＣＹＦＲＡに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体、（ｂ）ＣＲＰに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体、（ｃ）ＴＩＭＰ−１に特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体、（ｄ）ＣＡ１９−９に特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体、ならびに（ｅ）ＡＦＰに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体を含む。免疫学的方法は、（ａ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＹＦＲＡまたはＣＹＦＲＡのフラグメント上のエピトープに結合して捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原複合体を形成するステップ、（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＹＦＲＡ上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および（ｉｉｉ）試験試料中のＣＹＦＲＡレベルを、（ａ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってＣＹＦＲＡのレベルを測定するステップ、（ｂ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＲＰまたはＣＲＰのフラグメント上のエピトープに結合して捕捉抗体−ＣＲＰ抗原複合体を形成するステップ、（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＲＰ抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＲＰ上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＲＰ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および（ｉｉｉ）試験試料中のＣＲＰレベルを、（ｂ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＣＲＰ抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってＣＲＰのレベルを測定するステップ、（ｃ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＴＩＭＰ−１またはＴＩＭＰ−１のフラグメント上のエピトープに結合して捕捉抗体−ＴＩＭＰ−１抗原複合体を形成するステップ、（ｉｉ）捕捉抗体−ＴＩＭＰ−１抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＴＩＭＰ−１上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＴＩＭＰ−１抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および（ｉｉｉ）試験試料中のＴＩＭＰ−１レベルを、（ｃ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＴＩＭＰ−１抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってＴＩＭＰ−１のレベルを測定するステップ、（ｄ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＡ１９−９またはＣＡ１９−９のフラグメント上のエピトープに結合して捕捉抗体−ＣＡ１９−９抗原複合体を形成するステップ、（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＡ１９−９抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＡ１９−９上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＡ１９−９抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および（ｉｉｉ）試験試料中のＣＡ１９−９レベルを、（ｄ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＣＡ１９−９抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってＣＡ１９−９のレベルを測定するステップ、ならびに（ｅ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＡＦＰまたはＡＦＰのフラグメント上のエピトープに結合して捕捉抗体−ＡＦＰ抗原複合体を形成するステップ、（ｉｉ）捕捉抗体−ＡＦＰ抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＡＦＰ上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＡＦＰ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および（ｉｉｉ）試験試料中のＡＦＰレベルを、（ｅ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＡＦＰ抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってＡＦＰのレベルを測定するステップを含むことができる。抗体は、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、ヒト抗体、免疫グロブリン分子、ジスルフィド連結されているＦｖ、モノクローナル抗体、親和性成熟抗体、ｓｃＦｖ、キメラ抗体、単一ドメイン抗体、ＣＤＲグラフト化抗体、ダイアボディ、ヒト化抗体、多特異的抗体、Ｆａｂ、二重特異性抗体、ＤＶＤ、Ｆａｂ’、二特異的抗体、Ｆ（ａ
ｂ’）２およびＦｖからなる群から選択され得る。方法は、メチルセプチン９（ｍＳ９）、ガレクチン−３（Ｇａｌ３）、糖化ヘモグロビン（ＨｂＡｌｃ）、Ｃ３ａ、カテプシンＸ（ＣａｔＸ）、可溶性ウロキナーゼ受容体（ｓｕＰＡＲ（Ｉ））、プラスミノーゲンアクチベータインヒビター−１（ＰＡＩ−１）、エノラーゼ２（ＥＮＯ２）、およびこれらの組合せからなる群から選択される生物学的試料中のＣＲＣ以外のがんの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーのレベルを決定するステップ、ならびにＣＲＣ以外のがんの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーのレベルを、ＣＲＣ以外のがんの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーの基準レベルと比較するステップをさらに含むことができる。がんは、肺、卵巣、乳房、腎臓、肛門管、原発不明、Ｂ細胞リンパ腫、子宮、前立腺、胆嚢、喉頭、悪性メラノーマ、膵臓、ＣＬＬ、悪性ミエローマ、精巣、小腸、膀胱、胃、中皮腫、副腎、神経内分泌または食道のがんであってよい。対象はヒトであってよい。対象の生物学的試料は、組織試料、体液、全血、血漿、血清、尿、気管支肺胞洗浄液および細胞培養懸濁液、またはこれらの分画から選択されてよい。対象の生物学的試料は血漿または血清であってよい。本発明は、前記方法を行うためのキットを対象とする。キットは、（ａ）対象の生物学的試料中のＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰのレベルを定量するための、ＣＹＦＲＡに特異的に結合することができる試薬、ＣＲＰに特異的に結合することができる試薬、ＴＩＭＰ−１に特異的に結合することができる試薬、ＣＡ１９−９に特異的に結合することができる試薬、およびＡＦＰに特異的に結合することができる試薬、ならびに（ｂ）ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰの基準レベルを指し示す参照標準を含む。キットは、生物学的試料中の少なくとも１つの付加的なバイオマーカーの濃度を定量するための、生物学的試料中のメチルセプチン９（ｍＳ９）、ガレクチン−３（Ｇａｌ３）、糖化ヘモグロビン（ＨｂＡｌｃ）、Ｃ３ａ、カテプシンＸ（ＣａｔＸ）、可溶性ウロキナーゼ受容体（ｓｕＰＡＲ（Ｉ））、プラスミノーゲンアクチベータインヒビター−１（ＰＡＩ−１）、エノラーゼ２（ＥＮＯ２）、またはこれらの組合せの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーに特異的に結合することができる、少なくとも１つの付加的な試薬、ならびに生物学的試料中のメチルセプチン９（ｍＳ９）、ガレクチン−３（Ｇａｌ３）、糖化ヘモグロビン（ＨｂＡｌｃ）、Ｃ３ａ、カテプシンＸ（ＣａｔＸ）、可溶性ウロキナーゼ受容体（ｓｕＰＡＲ（Ｉ））、プラスミノーゲンアクチベータインヒビター−１（ＰＡＩ−１）、エノラーゼ２（ＥＮＯ２）、またはこれらの組合せの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーの基準レベルを指し示す参照標準をさらに含むことができる。
【００１２】
本発明は、男性対象が、直腸結腸がん（ＣＲＣ）がん以外のがんに罹患している、または罹患するリスクがあるかを決定する方法に対するものであって、男性対象は、ＣＲＣを有さないと結腸鏡検査によって確定された。方法は、（ａ）男性対象から生物学的試料を得るステップ、（ｂ）男性対象からの生物学的試料中のサイトケラチン１９フラグメント（ＣＹＦＲＡ）、Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）、メタロプロテイナーゼの組織インヒビター１（ＴＩＭＰ−１）、糖鎖抗原１９−９（ＣＡ１９−９）およびアルファ−フェトプロテイン（ＡＦＰ）のレベルを決定するステップ、（ｃ）生物学的試料中のＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰのレベルをＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰの基準レベルと比較するステップ、（ｄ）ＣＹＦＲＡスコアを男性対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＹＦＲＡのレベルがＣＹＦＲＡの基準レベルより高い場合、男性対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＹＦＲＡのレベルがＣＹＦＲＡの基準レベルと等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、（ｅ）ＣＲＰスコアを男性対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＲＰのレベルがＣＲＰの基準レベルより高い場合、男性対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＲＰのレベルがＣＲＰの基準レベルと等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、（ｆ）ＴＩＭＰ−１スコアを男性対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＴＩＭＰ−１のレベルがＴＩＭＰ−１の基準レベルより高い場合、男性対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＴＩＭＰ−１のレベルがＴＩＭＰ−１の基準レベルと等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、（ｇ）ＣＡ１９−９スコアを男性対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＡ１９−９のレベルがＣＡ１９−９の基準レベルより低い場合、男性対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＡ１９−９のレベルがＣＡ１９−９の基準レベルと等しくまたはより高い場合、０のスコアを得るステップ、（ｈ）ＡＦＰスコアを男性対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＡＦＰのレベルがＡＦＰの基準レベルより低い場合、男性対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＡＦＰのレベルがＡＦＰの基準レベルと等しくまたはより高い場合、０のスコアを得るステップ、（ｉ）ＣＹＦＲＡスコア、ＣＲＰスコア、ＴＩＭＰ−１スコア、ＣＡ１９−９スコアおよびＡＦＰスコアを加算して合計スコアを得るステップ、ならびに（ｊ）合計スコアが基準スコアより高い場合、ＣＲＣ以外のがんに罹患している、または罹患するリスクがあるという男性対象の診断を提供するステップを含む。ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰの基準レベルは、基準群の生物学的試料から適応インデックスモデル法によって決定されるＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰのカットオフ値であってよい。基準群は、対照群またはがん群からなる群から選択され得る。ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰの基準レベルは、ＣＹＦＲＡについて血清中１．０ｎｇ／ｍＬ、１．１ｎｇ／ｍＬ、１．２ｎｇ／ｍＬ、１．３ｎｇ／ｍＬ、１．４ｎｇ／ｍＬ、１．５ｎｇ／ｍＬ、１．６ｎｇ／ｍＬ、１．７ｎｇ／ｍＬ、１．８ｎｇ／ｍＬ、１．９ｎｇ／ｍＬ、２．０ｎｇ／ｍＬ、２．１ｎｇ／ｍＬ、２．２ｎｇ／ｍＬ、２．３ｎｇ／ｍＬ、２．４ｎｇ／ｍＬ、２．５ｎｇ／ｍＬ、３．０ｎｇ／ｍＬまたは３．５ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高く、それに組み合わせてＣＲＰについて血清中１４．０ｍｇ／ｍＬ、１４．１ｍｇ／ｍＬ、１４．２ｍｇ／ｍＬ、１４．３ｍｇ／ｍＬ、１４．４ｍｇ／ｍＬ、１４．５ｍｇ／ｍＬ、１４．６ｍｇ／ｍＬ、１４．７ｍｇ／ｍＬ、１４．８ｍｇ／ｍＬ、１４．９ｍｇ／ｍＬ、１５．０ｍｇ／ｍＬ、１５．１ｍｇ／ｍＬ、１５．２ｍｇ／ｍＬ、１５．３ｍｇ／ｍＬ、１５．４ｍｇ／ｍＬ、１５．５ｍｇ／ｍＬ、１５．６ｍｇ／ｍＬ、１５．７ｍｇ／ｍＬ、１５．８ｍｇ／ｍＬ、１５．９ｍｇ／ｍＬ、１６．０ｍｇ／ｍＬ、１６．１ｍｇ／ｍＬ、１６．２ｍｇ／ｍＬ、１６．３ｍｇ／ｍＬ、１６．４ｍｇ／ｍＬ、１６．５ｍｇ／ｍＬ、１７．０ｍｇ／ｍＬまたは１７．５ｍｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベル、ＴＩＭＰ−１について血清中１４０ｎｇ／ｍＬ、１４１ｎｇ／ｍＬ、１４２ｎｇ／ｍＬ、１４３ｎｇ／ｍＬ、１４４ｎｇ／ｍＬ、１４５ｎｇ／ｍＬ、１４６ｎｇ／ｍＬ、１４７ｎｇ／ｍＬ、１４８ｎｇ／ｍＬ、１４９ｎｇ／ｍＬ、１５０ｎｇ／ｍＬ、１５１ｎｇ／ｍＬ、１５２ｎｇ／ｍＬ、１５３ｎｇ／ｍＬ、１５４ｎｇ／ｍＬ、１５５ｎｇ／ｍＬ、１５６ｎｇ／ｍＬ、１５７ｎｇ／ｍＬ、１５８ｎｇ／ｍＬ、１５９ｎｇ／ｍＬまたは１６０ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベル、ＣＡ１９−９について血清中２４．０Ｕ／ｍＬ、２４．１Ｕ／ｍＬ、２４．２Ｕ／ｍＬ、２４．３Ｕ／ｍＬ、２４．４Ｕ／ｍＬ、２４．５Ｕ／ｍＬ、２４．６Ｕ／ｍＬ、２４．７Ｕ／ｍＬ、２４．８Ｕ／ｍＬ、２４．９Ｕ／ｍＬ、２５．０Ｕ／ｍＬ、２５．１Ｕ／ｍＬ、２５．２Ｕ／ｍＬ、２５．３Ｕ／ｍＬ、２５．４Ｕ／ｍＬ、２５．５Ｕ／ｍＬ、２５．６Ｕ／ｍＬ、２５．７Ｕ／ｍＬ、２５．８Ｕ／ｍＬ、２５．９Ｕ／ｍＬ、２６．０Ｕ／ｍＬまたは２６．５Ｕ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベル、およびＡＦＰについて血清中５．０ｎｇ／ｍＬ、５．１ｎｇ／ｍＬ、５．２ｎｇ／ｍＬ、５．３ｎｇ／ｍＬ、５．４ｎｇ／ｍＬ、５．５ｎｇ／ｍＬ、５．６ｎｇ／ｍＬ、５．７ｎｇ／ｍＬ、５．８ｎｇ／ｍＬ、５．９ｎｇ／ｍＬ、６．０ｎｇ／ｍＬ、６．１ｎｇ／ｍＬ、６．２ｎｇ／ｍＬ、６．３ｎｇ／ｍＬ、６．４ｎｇ／ｍＬ、６．５ｎｇ／ｍＬ、６．６ｎｇ／ｍＬ、６．７ｎｇ／ｍＬ、６．８ｎｇ／ｍＬ、６．９ｎｇ／ｍＬ、７．０ｎｇ／ｍＬ、７．５ｎｇ／ｍＬまたは８．０ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベルであってもよい。ＣＹＦＲＡの基準レベルは少なくとも約２．１３ｎｇ／ｍＬであってよく、ＣＲＰの基準レベルは少なくとも約１５．４ｍｇ／ｍＬであってよく、ＴＩＭＰ−１の基準レベルは少なくとも約１４８ｎｇ／ｍＬであってよく、ＣＡ１９−９の基準レベルは少なくとも約２５．０Ｕ／ｍＬであってよく、ＡＦＰの基準レベルは少なくとも約６．７ｎｇ／ｍＬであってよい。基準スコアは０、１、２、３、４または５であってよい。合計スコアが１より高い場合、対象はＣＲＣ以外のがんに罹患している、または罹患するリスクがあると診断され得る。方法は、がん処置レジメンまたはがんモニタリングレジメンを、ＣＲＣ以外のがんに罹患している、または罹患するリスクがあると診断された対象に施すステップをさらに含むことができる。がん処置レジメンは、外科手術、放射線医学治療、放射線医学処置、化学療法、標的化治療またはこれらの組合せの少なくとも１つを対象に施すステップを含むことができる。がんモニタリングレジメンは、定期的な間隔でＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰのレベルを決定するステップを含むことができる。ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰのレベルを決定するステップは、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰに特異的に結合する分子での免疫学的方法を含むことができる。ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰに特異的に結合する分子は、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰに特異的に結合することができる少なくとも１つの抗体を含むことができる。ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰのレベルを決定するステップは、生物学的試料を、ＣＹＦＲＡに特異的に結合する抗体、ＣＲＰに特異的に結合する抗体、ＴＩＭＰ−１に特異的に結合する抗体、ＣＡ１９−９に特異的に結合する抗体、ＡＦＰに特異的に結合する抗体、およびこれらの組合せからなる群から選択される少なくとも１つの抗体と接触させるステップを伴うことができる。ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰのレベルを決定するステップは、少なくとも１つの捕捉抗体、およびシグナルを発生させる検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体を使用するイムノアッセイによって、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰについて生物学的試料をアッセイするステップを伴うことができ、生物学的試料中のＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰの量の直接的または間接的な指標として検出可能な標識によって発生したシグナルを比較するステップを含み、捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された抗体は、（ａ）ＣＹＦＲＡに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体、（ｂ）ＣＲＰに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体、（ｃ）ＴＩＭＰ−１に特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体、（ｄ）ＣＡ１９−９に特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体、ならびに（ｅ）ＡＦＰに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体を含む。免疫学的方法は、（ａ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＹＦＲＡまたはＣＹＦＲＡのフラグメント上のエピトープに結合して捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原複合体を形成するステップ、（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＹＦＲＡ上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および（ｉｉｉ）試験試料中のＣＹＦＲＡレベルを、（ａ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってＣＹＦＲＡのレベルを測定するステップ、（ｂ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＲＰまたはＣＲＰのフラグメント上のエピトープに結合して捕捉抗体−ＣＲＰ抗原複合体を形成するステップ、（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＲＰ抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＲＰ上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＲＰ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および（ｉｉｉ）試験試料中のＣＲＰレベルを、（ｂ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＣＲＰ抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってＣＲＰのレベルを測定するステップ、（ｃ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＴＩＭＰ−１またはＴＩＭＰ−１のフラグメント上のエピトープに結合して捕捉抗体−ＴＩＭＰ−１抗原複合体を形成するステップ、（ｉｉ）捕捉抗体−ＴＩＭＰ−１抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＴＩＭＰ−１上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＴＩＭＰ−１抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および（ｉｉｉ）試験試料中のＴＩＭＰ−１レベルを、（ｃ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＴＩＭＰ−１抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってＴＩＭＰ−１のレベルを測定するステップ、（ｄ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＡ１９−９またはＣＡ１９−９のフラグメント上のエピトープに結合して捕捉抗体−ＣＡ１９−９抗原複合体を形成するステップ、
（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＡ１９−９抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＡ１９−９上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＡ１９−９抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および（ｉｉｉ）試験試料中のＣＡ１９−９レベルを、（ｄ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＣＡ１９−９抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってＣＡ１９−９のレベルを測定するステップ、ならびに（ｅ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＡＦＰまたはＡＦＰのフラグメント上のエピトープに結合して捕捉抗体−ＡＦＰ抗原複合体を形成するステップ、（ｉｉ）捕捉抗体−ＡＦＰ抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＡＦＰ上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＡＦＰ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および（ｉｉｉ）試験試料中のＡＦＰレベルを、（ｅ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＡＦＰ抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってＡＦＰのレベルを測定するステップを含むことができる。抗体は、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、ヒト抗体、免疫グロブリン分子、ジスルフィド連結されているＦｖ、モノクローナル抗体、親和性成熟抗体、ｓｃＦｖ、キメラ抗体、単一ドメイン抗体、ＣＤＲグラフト化抗体、ダイアボディ、ヒト化抗体、多特異的抗体、Ｆａｂ、二重特異性抗体、ＤＶＤ、Ｆａｂ’、二特異的抗体、Ｆ（ａｂ’）２およびＦｖからなる群から選択され得る。方法は、メチルセプチン９（ｍＳ９）、ガレクチン−３（Ｇａｌ３）、糖化ヘモグロビン（ＨｂＡｌｃ）、Ｃ３ａ、カテプシンＸ（ＣａｔＸ）、可溶性ウロキナーゼ受容体（ｓｕＰＡＲ（Ｉ））、プラスミノーゲンアクチベータインヒビター−１（ＰＡＩ−１）、エノラーゼ２（ＥＮＯ２）、およびこれらの組合せからなる群から選択される生物学的試料中のＣＲＣ以外のがんの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーのレベルを決定するステップ、ならびにＣＲＣ以外のがんの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーのレベルを、ＣＲＣ以外のがんの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーの基準レベルと比較するステップをさらに含むことができる。がんは、肺、卵巣、乳房、腎臓、肛門管、原発不明、Ｂ細胞リンパ腫、子宮、前立腺、胆嚢、喉頭、悪性メラノーマ、膵臓、ＣＬＬ、悪性ミエローマ、精巣、小腸、膀胱、胃、中皮腫、副腎、神経内分泌または食道のがんであってよい。対象はヒトであってよい。対象の生物学的試料は、組織試料、体液、全血、血漿、血清、尿、気管支肺胞洗浄液および細胞培養懸濁液、またはこれらの分画から選択されてよい。対象の生物学的試料は血漿または血清であってよい。本発明は、前記方法を行うためのキットを対象とする。キットは、（ａ）対象の生物学的試料中のＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰのレベルを定量するための、ＣＹＦＲＡに特異的に結合することができる試薬、ＣＲＰに特異的に結合することができる試薬、ＴＩＭＰ−１に特異的に結合することができる試薬、ＣＡ１９−９に特異的に結合することができる試薬、およびＡＦＰに特異的に結合することができる試薬、ならびに（ｂ）ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰの基準レベルを指し示す参照標準を含む。キットは、生物学的試料中の少なくとも１つの付加的なバイオマーカーの濃度を定量するための、生物学的試料中のメチルセプチン９（ｍＳ９）、ガレクチン−３（Ｇａｌ３）、糖化ヘモグロビン（ＨｂＡｌｃ）、Ｃ３ａ、カテプシンＸ（ＣａｔＸ）、可溶性ウロキナーゼ受容体（ｓｕＰＡＲ（Ｉ））、プラスミノーゲンアクチベータインヒビター−１（ＰＡＩ−１）、エノラーゼ２（ＥＮＯ２）、またはこれらの組合せの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーに特異的に結合することができる、少なくとも１つの付加的な試薬、ならびに生物学的試料中のメチルセプチン９（ｍＳ９）、ガレクチン−３（Ｇａｌ３）、糖化ヘモグロビン（ＨｂＡｌｃ）、Ｃ３ａ、カテプシンＸ（ＣａｔＸ）、可溶性ウロキナーゼ受容体（ｓｕＰＡＲ（Ｉ））、プラスミノーゲンアクチベータインヒビター−１（ＰＡＩ−１）、エノラーゼ２（ＥＮＯ２）、またはこれらの組合せの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーの基準レベルを指し示す参照標準をさらに含むことができる。
【００１３】
本発明は、女性対象が、直腸結腸がん（ＣＲＣ）がん以外のがんに罹患している、または罹患するリスクがあるかを決定する方法に対するものであって、女性対象は、結腸鏡検査によってＣＲＣを有さないと確定された。方法は、（ａ）女性対象から生物学的試料を得るステップ、（ｂ）女性対象からの生物学的試料中のサイトケラチン１９フラグメント（ＣＹＦＲＡ）、がん胎児性抗原（ＣＥＡ）およびＣ反応性タンパク質（ＣＲＰ）のレベルを決定するステップ、（ｃ）生物学的試料中のＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰのレベルを、ＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰの基準レベルと比較するステップ、ならびに（ｄ）生物学的試料中のＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰのレベルがＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰの基準レベルより高い場合、ＣＲＣ以外のがんに罹患している、または罹患するリスクがあるという女性対象の診断を提供するステップを含む。ＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰの基準レベルは、基準群の生物学的試料から適応インデックスモデル法によって決定されるＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰのカットオフ値であってよい。基準群は対照群およびがん群からなる群から選択されてよい。ＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰの基準レベルは、ＣＹＦＲＡについて血清中１．０ｎｇ／ｍＬ、１．１ｎｇ／ｍＬ、１．２ｎｇ／ｍＬ、１．３ｎｇ／ｍＬ、１．４ｎｇ／ｍＬ、１．５ｎｇ／ｍＬ、１．６ｎｇ／ｍＬ、１．７ｎｇ／ｍＬ、１．８ｎｇ／ｍＬ、１．９ｎｇ／ｍＬ、２．０ｎｇ／ｍＬ、２．１ｎｇ／ｍＬ、２．２ｎｇ／ｍＬ、２．３ｎｇ／ｍＬ、２．４ｎｇ／ｍＬ、２．５ｎｇ／ｍＬ、３．０ｎｇ／ｍＬまたは３．５ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高く、それに組み合わせてＣＥＡについて血清中４．０ｎｇ／ｍＬ、４．１ｎｇ／ｍＬ、４．２ｎｇ／ｍＬ、４．３ｎｇ／ｍＬ、４．４ｎｇ／ｍＬ、４．５ｎｇ／ｍＬ、４．６ｎｇ／ｍＬ、４．７ｎｇ／ｍＬ、４．８ｎｇ／ｍＬ、４．９ｎｇ／ｍＬ、５．０ｎｇ／ｍＬ、５．１ｎｇ／ｍＬ、５．２ｎｇ／ｍＬ、５．３ｎｇ／ｍＬ、５．４ｎｇ／ｍＬ、５．５ｎｇ／ｍＬ、５．６ｎｇ／ｍＬ、５．７ｎｇ／ｍＬ、５．８ｎｇ／ｍＬ、５．９ｎｇ／ｍＬ、６．０ｎｇ／ｍＬ、６．１ｎｇ／ｍＬ、６．２ｎｇ／ｍＬ、６．３ｎｇ／ｍＬ、６．４ｎｇ／ｍＬ、６．５ｎｇ／ｍＬ、６．６ｎｇ／ｍＬ、６．７ｎｇ／ｍＬ、６．８ｎｇ／ｍＬ、６．９ｎｇ／ｍＬ、７．０ｎｇ／ｍＬまたは７．５ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベル、およびＣＲＰについて血清中９．０ｍｇ／ｍＬ、９．１ｍｇ／ｍＬ、９．２ｍｇ／ｍＬ、９．３ｍｇ／ｍＬ、９．４ｍｇ／ｍＬ、９．５ｍｇ／ｍＬ、９．６ｍｇ／ｍＬ、９．７ｍｇ／ｍＬ、９．８ｍｇ／ｍＬ、９．９ｍｇ／ｍＬ、１０．０ｍｇ／ｍＬ、１０．１ｍｇ／ｍＬ、１０．２ｍｇ／ｍＬ、１０．３ｍｇ／ｍＬ、１０．４ｍｇ／ｍＬ、１０．５ｍｇ／ｍＬ、１０．６ｍｇ／ｍＬ、１０．７ｍｇ／ｍＬ、１０．８ｍｇ／ｍＬ、１０．９ｍｇ／ｍＬ、１１．０ｍｇ／ｍＬ、１１．５ｍｇ／ｍＬまたは１２．０ｍｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベルであってよい。ＣＹＦＲＡの基準レベルは少なくとも約２．０６ｎｇ／ｍＬであってよく、ＣＥＡの基準レベルは少なくとも約５．７ｎｇ／ｍＬであってよく、ＣＲＰの基準レベルは少なくとも約１０．４ｍｇ／ｍＬであってよい。基準スコアは０、１、２または３であってよい。合計スコアが１より高い場合、対象はＣＲＣに罹患している、または罹患するリスクがあると診断され得る。方法は、がん処置レジメンまたはがんモニタリングレジメンを、ＣＲＣ以外のがんに罹患している、または罹患するリスクがあると診断された対象に施すステップをさらに含むことができる。がん処置レジメンは、外科手術、放射線医学治療、放射線医学処置、化学療法、標的化治療またはこれらの組合せの少なくとも１つを対象に施すステップを含むことができる。がんモニタリングレジメンは、定期的な間隔でＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰのレベルを決定するステップを含むことができる。ＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰのレベルを決定するステップは、ＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰに特異的に結合する分子での免疫学的方法を含むことができる。ＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰに特異的に結合する分子は、ＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰに特異的に結合することができる少なくとも１つの抗体を含むことができる。ＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰのレベルを決定するステップは、生物学的試料を、ＣＹＦＲＡに特異的に結合する抗体、ＣＥＡに特異的に結合する抗体、ＣＲＰに特異的に結合する抗体、およびこれらの組合せからなる群から選択される少なくとも１つの抗体と接触させるステップを伴うことができる。ＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰのレベルを決定するステップは、少なくとも１つの捕捉抗体、およびシグナルを発生させる検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体を使用するイムノアッセイによって、ＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰに対して生物学的試料をアッセイするステップを伴うことができ、生物学的試料中のＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰの量の直接的または間接的な指標として検出可能な標識によって発生したシグナルを比較するステップを含み、捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された抗体は、（ａ）ＣＹＦＲＡに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体、（ｂ）ＣＥＡに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体、ならびに（ｃ）ＣＲＰに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体を含む。免疫学的方法は、（ａ）（ｉ）試験試料を、少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＹＦＲＡまたはＣＹＦＲＡのフラグメント上のエピトープに結合して捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原複合体を形成するステップ、（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＹＦＲＡ上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および（ｉｉｉ）試験試料中のＣＹＦＲＡレベルを、（ａ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってＣＹＦＲＡのレベルを測定するステップ、（ｂ）（ｉ）試験試料を、少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＥＡまたはＣＥＡのフラグメント上のエピトープに結合して捕捉抗体−ＣＥＡ抗原複合体を形成するステップ、（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＥＡ抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＥＡ上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＥＡ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および（ｉｉｉ）試験試料中のＣＥＡレベルを、（ｂ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＣＥＡ抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってＣＥＡのレベルを測定するステップ、（ｃ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＲＰまたはＣＲＰのフラグメント上のエピトープに結合して、捕捉抗体−ＣＲＰ抗原複合体を形成するステップ、（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＲＰ抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＲＰ上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＲＰ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および（ｉｉｉ）試験試料中のＣＲＰレベルを、（ｃ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＣＲＰ抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってＣＲＰのレベルを測定するステップを含むことができる。抗体は、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、ヒト抗体、免疫グロブリン分子、ジスルフィド連結されているＦｖ、モノクローナル抗体、親和性成熟抗体、ｓｃＦｖ、キメラ抗体、単一ドメイン抗体、ＣＤＲグラフト化抗体、ダイアボディ、ヒト化抗体、多特異的抗体、Ｆａｂ、二重特異性抗体、ＤＶＤ、Ｆａｂ’、二特異的抗体、Ｆ（ａｂ’）２およびＦｖからなる群から選択されてよい。方法は、メチルセプチン９（ｍＳ９）、ガレクチン−３（Ｇａｌ３）、糖化ヘモグロビン（ＨｂＡｌｃ）、Ｃ３ａ、カテプシンＸ（ＣａｔＸ）、可溶性ウロキナーゼ受容体（ｓｕＰＡＲ（Ｉ））、プラスミノーゲンアクチベータインヒビター−１（ＰＡＩ−１）、エノラーゼ２（ＥＮＯ２）、およびこれらの組合せからなる群から選択される、生物学的試料中のＣＲＣ以外のがんの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーのレベルを決定するステップ、ならびにＣＲＣ以外のがんの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーのレベルを、ＣＲＣ以外のがんの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーの基準レベルと比較するステップをさらに含むことができる。がんは、肺、卵巣、乳房、腎臓、肛門管、原発不明、Ｂ細胞リンパ腫、子宮、前立腺、胆嚢、喉頭、悪性メラノーマ、膵臓、ＣＬＬ、悪性ミエローマ、精巣、小腸、膀胱、胃、中皮腫、副腎、神経内分泌または食道のがんであってよい。対象はヒトであってよい。対象の生物学的試料は、組織試料、体液、全血、血漿、血清、尿、気管支肺胞洗浄液および細胞培養懸濁液、またはこれらの分画から選択されてよい。対象の生物学的試料は血漿または血清であってよい。本発明は、前記方法を行うためのキットにも対する。キットは、（ａ）対象の生物学的試料中のＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰのレベルを定量するための、ＣＹＦＲＡに特異的に結合することができる試薬、ＣＥＡに特異的に結合することができる試薬、およびＣＲＰに特異的に結合することができる試薬、ならびに（ｂ）ＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰの基準レベルを指し示す参照標準を含む。キットは、生物学的試料中の少なくとも１つの付加的なバイオマーカーの濃度を定量するための、生物学的試料中のメチルセプチン９（ｍＳ９）、ガレクチン−３（Ｇａｌ３）、糖化ヘモグロビン（ＨｂＡｌｃ）、Ｃ３ａ、カテプシンＸ（ＣａｔＸ）、可溶性ウロキナーゼ受容体（ｓｕＰＡＲ（Ｉ））、プラスミノーゲンアクチベータインヒビター−１（ＰＡＩ−１）、エノラーゼ２（ＥＮＯ２）またはこれらの組合せの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーに特異的に結合することができる少なくとも１つの付加的な試薬、ならびに生物学的試料中のメチルセプチン９（ｍＳ９）、ガレクチン−３（Ｇａｌ３）、糖化ヘモグロビン（ＨｂＡｌｃ）、Ｃ３ａ、カテプシンＸ（ＣａｔＸ）、可溶性ウロキナーゼ受容体（ｓｕＰＡＲ（Ｉ））、プラスミノーゲンアクチベータインヒビター−１（ＰＡＩ−１）、エノラーゼ２（ＥＮＯ２）またはこれらの組合せの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーの基準レベルを指し示す参照標準をさらに含むことができる。
【００１４】
本発明は、女性対象が、直腸結腸がん（ＣＲＣ）がん以外のがんに罹患している、または罹患するリスクがあるかを決定する方法に対するものであって、女性対象は結腸鏡検査によってＣＲＣを有さないと確定された。方法は、（ａ）女性対象から生物学的試料を得るステップ、（ｂ）女性対象からの生物学的試料中のサイトケラチン１９フラグメント（ＣＹＦＲＡ）、がん胎児性抗原（ＣＥＡ）およびＣ反応性タンパク質（ＣＲＰ）のレベルを決定するステップ、（ｃ）生物学的試料中のＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰのレベルを、ＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰの基準レベルと比較するステップ、（ｄ）ＣＹＦＲＡスコアを女性対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＹＦＲＡのレベルがＣＹＦＲＡの基準レベルより高い場合、女性対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＹＦＲＡのレベルがＣＹＦＲＡの基準レベルと等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、（ｅ）ＣＥＡスコアを女性対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＥＡのレベルがＣＥＡの基準レベルより高い場合、女性対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＥＡのレベルがＣＥＡの基準レベルと等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、（ｆ）ＣＲＰスコアを女性対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＲＰのレベルがＣＲＰの基準レベルより高い場合、女性対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＲＰのレベルがＣＲＰの基準レベルと等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、（ｇ）ＣＹＦＲＡスコア、ＣＥＡスコアおよびＣＲＰスコアを加算して合計スコアを得るステップ、ならびに（ｈ）合計スコアが基準スコアより高い場合、ＣＲＣ以外のがんに罹患している、または罹患するリスクがあるという女性対象の診断を提供するステップを含む。ＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰの基準レベルは、基準群の生物学的試料から適応インデックスモデル法によって決定されるＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰのカットオフ値であってよい。基準群は対照群およびがん群からなる群から選択されてよい。ＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰの基準レベルは、ＣＹＦＲＡについて血清中１．０ｎｇ／ｍＬ、１．１ｎｇ／ｍＬ、１．２ｎｇ／ｍＬ、１．３ｎｇ／ｍＬ、１．４ｎｇ／ｍＬ、１．５ｎｇ／ｍＬ、１．６ｎｇ／ｍＬ、１．７ｎｇ／ｍＬ、１．８ｎｇ／ｍＬ、１．９ｎｇ／ｍＬ、２．０ｎｇ／ｍＬ、２．１ｎｇ／ｍＬ、２．２ｎｇ／ｍＬ、２．３ｎｇ／ｍＬ、２．４ｎｇ／ｍＬ、２．５ｎｇ／ｍＬ、３．０ｎｇ／ｍＬまたは３．５ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高く、それに組み合わせてＣＥＡについて血清中４．０ｎｇ／ｍＬ、４．１ｎｇ／ｍＬ、４．２ｎｇ／ｍＬ、４．３ｎｇ／ｍＬ、４．４ｎｇ／ｍＬ、４．５ｎｇ／ｍＬ、４．６ｎｇ／ｍＬ、４．７ｎｇ／ｍＬ、４．８ｎｇ／ｍＬ、４．９ｎｇ／ｍＬ、５．０ｎｇ／ｍＬ、５．１ｎｇ／ｍＬ、５．２ｎｇ／ｍＬ、５．３ｎｇ／ｍＬ、５．４ｎｇ／ｍＬ、５．５ｎｇ／ｍＬ、５．６ｎｇ／ｍＬ、５．７ｎｇ／ｍＬ、５．８ｎｇ／ｍＬ、５．９ｎｇ／ｍＬ、６．０ｎｇ／ｍＬ、６．１ｎｇ／ｍＬ、６．２ｎｇ／ｍＬ、６．３ｎｇ／ｍＬ、６．４ｎｇ／ｍＬ、６．５ｎｇ／ｍＬ、６．６ｎｇ／ｍＬ、６．７ｎｇ／ｍＬ、６．８ｎｇ／ｍＬ、６．９ｎｇ／ｍＬ、７．０ｎｇ／ｍＬまたは７．５ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベル、およびＣＲＰについて血清中９．０ｍｇ／ｍＬ、９．１ｍｇ／ｍＬ、９．２ｍｇ／ｍＬ、９．３ｍｇ／ｍＬ、９．４ｍｇ／ｍＬ、９．５ｍｇ／ｍＬ、９．６ｍｇ／ｍＬ、９．７ｍｇ／ｍＬ、９．８ｍｇ／ｍＬ、９．９ｍｇ／ｍＬ、１０．０ｍｇ／ｍＬ、１０．１ｍｇ／ｍＬ、１０．２ｍｇ／ｍＬ、１０．３ｍｇ／ｍＬ、１０．４ｍｇ／ｍＬ、１０．５ｍｇ／ｍＬ、１０．６ｍｇ／ｍＬ、１０．７ｍｇ／ｍＬ、１０．８ｍｇ／ｍＬ、１０．９ｍｇ／ｍＬ、１１．０ｍｇ／ｍＬ、１１．５ｍｇ／ｍＬまたは１２．０ｍｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベルであってよい。ＣＹＦＲＡの基準レベルは少なくとも約２．０６ｎｇ／ｍＬであってよく、ＣＥＡの基準レベルは少なくとも約５．７ｎｇ／ｍＬであってよく、ＣＲＰの基準レベルは少なくとも約１０．４ｍｇ／ｍＬであってよい。基準スコアは０、１、２または３であってよい。合計スコアが１より高い場合、対象はＣＲＣに罹患している、または罹患するリスクがあると診断され得る。方法は、がん処置レジメンまたはがんモニタリングレジメンを、ＣＲＣ以外のがんに罹患している、または罹患するリスクがあると診断された対象に施すステップをさらに含むことができる。がん処置レジメンは、外科手術、放射線医学治療、放射線医学処置、化学療法、標的化治療またはこれらの組合せの少なくとも１つを対象に施すステップを含むことができる。がんモニタリングレジメンは、定期的な間隔でＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰのレベルを決定するステップを含むことができる。ＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰのレベルを決定するステップは、ＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰに特異的に結合する分子での免疫学的方法を含むことができる。ＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰに特異的に結合する分子は、ＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰに特異的に結合することができる少なくとも１つの抗体を含むことができる。ＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰのレベルを決定するステップは、生物学的試料を、ＣＹＦＲＡに特異的に結合する抗体、ＣＥＡに特異的に結合する抗体、ＣＲＰに特異的に結合する抗体、およびこれらの組合せからなる群から選択される少なくとも１つの抗体と接触させるステップを伴うことができる。ＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰのレベルを決定するステップは、少なくとも１つの捕捉抗体、およびシグナルを発生させる検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体を使用するイムノアッセイによって、ＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰに対して生物学的試料をアッセイするステップを伴うことができ、生物学的試料中のＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰの量の直接的または間接的な指標として検出可能な標識によって発生したシグナルを比較するステップを含み、捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された抗体は、（ａ）ＣＹＦＲＡに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体、（ｂ）ＣＥＡに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体、ならびに（ｃ）ＣＲＰに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体を含む。免疫学的方法は、（ａ）（ｉ）試験試料を、少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＹＦＲＡまたはＣＹＦＲＡのフラグメント上のエピトープに結合して捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原複合体を形成するステップ、（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＹＦＲＡ上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および（ｉｉｉ）試験試料中のＣＹＦＲＡレベルを、（ａ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってＣＹＦＲＡのレベルを測定するステップ、（ｂ）（ｉ）試験試料を、少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＥＡまたはＣＥＡのフラグメント上のエピトープに結合して捕捉抗体−ＣＥＡ抗原複合体を形成するステップ、（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＥＡ抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＥＡ上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＥＡ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および（ｉｉｉ）試験試料中のＣＥＡレベルを、（ｂ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＣＥＡ抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってＣＥＡのレベルを測定するステップ、（ｃ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＲＰまたはＣＲＰのフラグメント上のエピトープに結合して、捕捉抗体−ＣＲＰ抗原複合体を形成するステップ、（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＲＰ抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＲＰ上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＲＰ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および（ｉｉｉ）試験試料中のＣＲＰレベルを、（ｃ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＣＲＰ抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってＣＲＰのレベルを測定するステップを含むことができる。抗体は、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、ヒト抗体、免疫グロブリン分子、ジスルフィド連結されているＦｖ、モノクローナル抗体、親和性成熟抗体、ｓｃＦｖ、キメラ抗体、単一ドメイン抗体、ＣＤＲグラフト化抗体、ダイアボディ、ヒト化抗体、多特異的抗体、Ｆａｂ、二重特異性抗体、ＤＶＤ、Ｆａｂ’、二特異的抗体、Ｆ（ａｂ’）２およびＦｖからなる群から選択されてよい。方法は、メチルセプチン９（ｍＳ９）、ガレクチン−３（Ｇａｌ３）、糖化ヘモグロビン（ＨｂＡｌｃ）、Ｃ３ａ、カテプシンＸ（ＣａｔＸ）、可溶性ウロキナーゼ受容体（ｓｕＰＡＲ（Ｉ））、プラスミノーゲンアクチベータインヒビター−１（ＰＡＩ−１）、エノラーゼ２（ＥＮＯ２）、およびこれらの組合せからなる群から選択される、生物学的試料中のＣＲＣ以外のがんの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーのレベルを決定するステップ、ならびにＣＲＣ以外のがんの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーのレベルを、ＣＲＣ以外のがんの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーの基準レベルと比較するステップをさらに含むことができる。がんは、肺、卵巣、乳房、腎臓、肛門管、原発不明、Ｂ細胞リンパ腫、子宮、前立腺、胆嚢、喉頭、悪性メラノーマ、膵臓、ＣＬＬ、悪性ミエローマ、精巣、小腸、膀胱、胃、中皮腫、副腎、神経内分泌または食道のがんであってよい。対象はヒトであってよい。対象の生物学的試料は、組織試料、体液、全血、血漿、血清、尿、気管支肺胞洗浄液および細胞培養懸濁液、またはこれらの分画から選択されてよい。対象の生物学的試料は血漿または血清であってよい。本発明は、前記方法を行うためのキットにも対する。キットは、（ａ）対象の生物学的試料中のＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰのレベルを定量するための、ＣＹＦＲＡに特異的に結合することができる試薬、ＣＥＡに特異的に結合することができる試薬、およびＣＲＰに特異的に結合することができる試薬、ならびに（ｂ）ＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰの基準レベルを指し示す参照標準を含む。キットは、生物学的試料中の少なくとも１つの付加的なバイオマーカーの濃度を定量するための、生物学的試料中のメチルセプチン９（ｍＳ９）、ガレクチン−３（Ｇａｌ３）、糖化ヘモグロビン（ＨｂＡｌｃ）、Ｃ３ａ、カテプシンＸ（ＣａｔＸ）、可溶性ウロキナーゼ受容体（ｓｕＰＡＲ（Ｉ））、プラスミノーゲンアクチベータインヒビター−１（ＰＡＩ−１）、エノラーゼ２（ＥＮＯ２）またはこれらの組合せの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーに特異的に結合することができる少なくとも１つの付加的な試薬、ならびに生物学的試料中のメチルセプチン９（ｍＳ９）、ガレクチン−３（Ｇａｌ３）、糖化ヘモグロビン（ＨｂＡｌｃ）、Ｃ３ａ、カテプシンＸ（ＣａｔＸ）、可溶性ウロキナーゼ受容体（ｓｕＰＡＲ（Ｉ））、プラスミノーゲンアクチベータインヒビター−１（ＰＡＩ−１）、エノラーゼ２（ＥＮＯ２）またはこれらの組合せの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーの基準レベルを指し示す参照標準をさらに含むことができる。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】アウトカム１の試験の分布および男性対象を示す図である。
【図２】アウトカム５の試験の分布および男性対象を示す図である。
【図３】アウトカム１２の試験の分布および男性対象を示す図である。
【図４】アウトカム１の試験の分布および女性対象を示す図である。
【図５】アウトカム５の試験の分布および女性対象を示す図である。
【図６】アウトカム１２の試験の分布および女性対象を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
本発明は、直腸結腸がんを同定し、診断し、処置することを必要とする対象において、直腸結腸がんを同定し、診断し、処置するために、アルファ−フェトプロテイン（ＡＦＰ）、がん胎児性抗原（ＣＥＡ）、フェリチン、ＣＹＦＲＡ２１−１（ＣＹＦＲＡ）、糖鎖抗原１９−９（ＣＡ１９−９）、メタロプロテイナーゼの組織インヒビター−１（ＴＩＭＰ−１）、ガレクチン−３（Ｇａｌ３）およびＣ反応性タンパク質（ＣＲＰ）のレベルを分析することに対するものである。バイオマーカーは、直腸結腸がんを有する患者を同定または診断するのを助けることを含む、同定または診断のために、患者が直腸結腸がんまたは高リスク腺腫に罹患しているか否かを同定し、または同定するのを助けるために、ＣＲＣ構造スクリーニングレジメンまたはＣＲＣ処置レジメンに対する候補として患者を同定し、または同定するのを助けるために、直腸結腸がんを発症する患者のリスクを分類するために、および診断、予後診断もしくは処置レジメンを決定し、または決定するのを助けるために使用され得る。本明細書に記載する方法は、同定および診断のために、他のバイオマーカー、ならびに年齢および／または他の疾患との同時罹患率のような他の因子と組み合わせて使用され得、高リスク腺腫および／またはＣＲＣに罹患している患者を同定または診断するのを助けるステップを含む。本明細書に記載する方法は、自動化システムまたは半自動化システムにおいて使用するように適用され得る。本発明の方法は、同定および診断するためにＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３およびＣＲＰのバイオマーカーの独特の組合せを使用することによって、以前の直腸結腸がんの診断方法を凌いで異なり、直腸結腸がんに罹患している患者を同定または診断する上での助けを含む。これらの方法は、対象における直腸結腸がんのリスクを正確に予想し、決定することができる。これらの方法は、確定のために結腸鏡検査に照会されるべき高リスク患者に対してスクリーニングするために、および結腸鏡検査を必要としない低リスク患者に対してもスクリーニングするためにも使用され得る。結腸鏡検査を、ＣＲＣを有するリスクのある個体に制限することは、全体のスクリーニング手順の対費用効果を改善する。
【００１７】
本セクションにおいて使用されるセクションの表題および本明細書の全体的な開示は、単に編成上の目的にすぎず、限定的なものを意図するものではない。
【００１８】
１．定義
別段の規定がなければ、本明細書で使用される技術用語および科学用語は全て、当業者によって通常理解されるのと同じ意味を有する。抵触の場合には、定義を含めて、本明細書が規制する。好ましい方法および材料は以下に記載されるものであるが、本明細書に記載する方法および材料と同様または等価の方法および材料が、本発明の実践または試験において使用され得る。本明細書に言及される全ての出版物、特許出願、特許および他の参考文献は全文が参照により組み込まれる。本明細書に開示される材料、方法および例は例示にすぎず、限定的なものを意図するものではない。
【００１９】
本明細書で使用される、単数形の「一つの（ａ）」、「一つの（ａｎ）」および「その（ｔｈｅ）」は、文脈が他の点で明らかに指示しなければ、複数の指示対象を含む。本明細書における数値範囲の列挙に対して、その間に介在する各数が、同程度の正確さで明らかに企図される。例えば、６−９という範囲に対して、６および９に加えて７および８という数が企図され、６．０−７．０という範囲に対して、６．０、６．１、６．２、６．３、６．４、６．５、６．６、６．７、６．８、６．９および７．０という数が明らかに企図される。
【００２０】
「または」の使用は、別段の記載がなければ「および／または」を意味する。さらに、「含めた（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」および「有する（ｈａｖｉｎｇ）」の語の使用は、「含む（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）」、「含まれる（ｉｎｃｌｕｄｅｄ）」、「有する（ｈａｓ）」および「有する（ｈａｖｅ）」のようなこれらの語の他の形態同様、限定的ではない。
【００２１】
本明細書および特許請求の範囲を通して使用される以下の語は、以下の意味を有する：
「腺腫」の語は、良性でも、または悪性でもよい、腺を起源とする上皮細胞の成長を意味する。これらは腺腫性ポリープとも呼ばれる。腺腫は有茎（ｐｅｄｕｎｃｕｌａｔｅｄ）（細い柄を有する大型の頭部）でも、または無茎（幅広い基部）でもよい。腺腫は、管状腺腫、腺管絨毛腺腫、絨毛腺腫および扁平腺腫と分類され得る。腺腫は腺癌腫でもよい。腺腫は、ヒト患者からの腺腫であってよく、１０ｃｍを超える大型腺腫でも、５ｃｍ未満の小型腺腫でも、または長さ０．５ｃｍから１５ｃｍの間の腺腫でもよい。腺腫は、腺上皮から生じ、形成異常の形態を有する。これら腺腫のうちいくつかは大型のポリープに成熟し、異常な成長および発生を経験し、最終的にＣＲＣに進行する。
【００２２】
「結腸の腺腫」は腺腫様ポリープまたは管状腺腫とも呼ばれ、極めて蔓延しており、通常結腸鏡検査で見出される。切除されるポリープのうち約７０％がこのタイプである。腺腫は、がんのリスクを有し、リスクはポリープがより大きく成長するに従って生じる。腺腫様ポリープは通常、症状を引き起こさないが、早期検出された場合、いかなるがん細胞が形成する前に結腸鏡検査の間に除去され得る。これらのポリープは徐々に成長し、がんに変わるのに数年かかることがある。これらは悪性になり、おそらく結腸がんをまねく傾向があるため、除去される。
【００２３】
絨毛腺腫および腺管絨毛腺腫は、除去されるポリープのうち約１５％を占める。これらは最も重症なタイプのポリープであり、より大型に成長するためがんのリスクは非常に高い。しばしば、これらは無茎であり（柄がない）、そのため除去がより困難になる。より小型のものは、ときに数回の結腸鏡検査にわたって、小片において除去され得る。大型の無茎の絨毛腺腫は、完全に除去するのに外科手術を必要とし得る。
【００２４】
本明細書において交換可能に使用される、「アルファ−フェトプロテイン」または「ＡＦＰ」は、ヒトのＡＦＰ遺伝子によってコードされるタンパク質を意味する。ＡＦＰはときに、α−フェトプロテイン、アルファ−１−フェトプロテイン、アルファ−フェトグロブリンおよびアルファ胎児性タンパクとして知られる。ＡＦＰ遺伝子は、第４染色体のｑアーム上に位置する。ＡＦＰは、胎児発生の間、卵黄嚢および肝臓によって生成される主要な血漿タンパク質である。これは胎児型の血清アルブミンであると考えられている。ＡＦＰは、銅、ニッケル、脂肪酸およびビリルビンに結合し、単量体、二量体および三量体の形態で見出される。ＡＦＰはアミノ酸５９１個および炭水化物モイエティの糖タンパク質である。ＡＦＰは、Ａｂｂｏｔｔ  ＡＲＣＨＩＴＥＣＴ（登録商標）ＡＦＰを使用して検出および定量され得る。
【００２５】
「曲線下面積」または「ＡＵＣ」はＲＯＣ曲線下の面積を意味する。ＲＯＣ曲線下のＡＵＣは、正確さの尺度である。面積が１であれば試験が完璧であることを表し、面積が０．５であれば試験は意味がないことを表す。好ましいＡＵＣは、少なくともおよそ０．７００、少なくともおよそ０．７５０、少なくともおよそ０．８００、少なくともおよそ０．８５０、少なくともおよそ０．９００、少なくともおよそ０．９１０、少なくともおよそ０．９２０、少なくともおよそ０．９３０、少なくともおよそ０．９４０、少なくともおよそ０．９５０、少なくともおよそ０．９６０、少なくともおよそ０．９７０、少なくともおよそ０．９８０、少なくともおよそ０．９９０、または少なくともおよそ０．９９５であってよい。
【００２６】
本明細書で使用される、「Ｃ３ａ」は、補体成分３の切断によって形成されるタンパク質のうちの１つを意味し、その他はＣ３ｂである。Ｃ３ａは、肥満細胞の脱顆粒を刺激し、よって免疫応答を引き起こす。Ｃ３ａは化学走性において重要な役割を果たす。Ｃ３ａはアナフィラトキシンでもあり、カルボキシペプチダーゼＢとの相互作用を介した重要なサイトカイン（アディポカイン）であるＡＳＰの前駆物質である。
【００２７】
本明細書で使用される、「がん」は、身体における異常な細胞の非制御および非調節性の成長を意味する。がん性細胞は悪性細胞とも呼ばれる。がんは、身体の近傍部分に浸潤し得、リンパ系または血流を介して身体のより遠位部分にやはり広がり得る。がんは、副腎皮質癌腫、肛門がん、膀胱がん、脳腫瘍、乳がん、カルチノイド腫瘍、消化管、原発不明の癌腫、頸部がん、結腸がん、子宮内膜がん、食道がん、肝外胆管がん、ユーイングファミリーの腫瘍（ＰＮＥＴ）、頭蓋外胚細胞腫瘍、眼内メラノーマ、眼がん、胆嚢がん、胃がん（胃）、性腺外生殖細胞腫瘍、妊娠性絨毛性腫瘍、頭部および頸部のがん、下咽頭がん、島細胞癌腫、腎臓がん（腎細胞がん）、喉頭がん、急性リンパ性白血病、白血病、急性骨髄性、慢性リンパ性白血病、慢性骨髄性白血病、ヘアリー細胞白血病、舌および口腔のがん、肝臓がん、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、ＡＩＤＳ関連リンパ腫、中枢神経系（原発）リンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、ホジキン病リンパ腫、非ホジキン病リンパ腫、悪性中皮腫、メラノーマ、メルケル細胞癌腫、原発不明の転移性扁平上皮頸部がん（Ｍｅｔａｓａｔｉｃ  Ｓｑｕａｍｏｕｓ  Ｎｅｃｋ  Ｃａｎｃｅｒ  ｗｉｔｈ  Ｏｃｃｕｌｔ  Ｐｒｉｍａｒｙ）、多発性骨髄腫および他の形質細胞新生物、菌状息肉腫、骨髄異形成症候群、骨髄増殖性障害、鼻咽腔がん、神経芽細胞腫（ｅｕｒｏｂｌａｓｔｏｍａ）、口腔がん、中咽頭がん、骨肉腫、卵巣上皮がん、卵巣胚細胞腫瘍、膵臓がん、外分泌、膵臓がん、島細胞癌腫、副鼻腔および鼻腔のがん、副甲状腺がん、陰茎がん、下垂体がん、形質細胞新生物、前立腺がん、横紋筋肉腫、直腸がん、腎細胞がん（腎臓のがん）、移行細胞腎盂および尿管、唾液腺がん、セザリー症候群、皮膚がん、小腸がん、軟部組織肉腫、精巣がん、悪性胸腺腫、甲状腺がん、尿道がん、子宮がん、小児期の異常ながん、膣がん、外陰がんおよびウィルムス腫瘍を含む。
【００２８】
本明細書で使用される、「がん対象」の語は、ＣＲＣ、高リスク腺腫、および／またはＣＲＣ以外のがんの臨床的な徴候もしくは症状を有する対象を意味する。がん対象は、ＣＲＣ、高リスク腺腫、および／またはＣＲＣ以外のがんの徴候または症状に対して臨床的に評価され、この評価は、ルーチンの身体検査および／または臨床検査を含むことができる。本明細書で使用される、「がん群」は、がん対象、またはＣＲＣ、高リスク腺腫、および／もしくはＣＲＣ以外のがんの臨床的な徴候もしくは症状を有する対象の群を意味する。
【００２９】
本明細書で交換可能に使用される、「糖鎖抗原１９−９」、「ＣＡ１９−９」または「ＣＡ１９−９」は、ヒト直腸結腸がん細胞系に由来するムチン−糖タンパク質を意味する。これは、ルイス血液型タンパク質に関連し、胃、胆嚢、膵臓および前立腺の上皮組織に存在する。ＣＡ１９−９は、膵臓がんのマネージメントにおける助けとして使用するのにＦＤＡに認可されており、ＣＴおよびＭＲＩの画像化手順のような他の診断情報と組み合わせて使用されることが意図される。ＣＡ１９−９は、シアル酸付加されたルイス血液型抗原に属する。ある個体はルイス抗原陰性であるため、ＣＡ１９−９が検出不可能であることがある。血清ＣＡ１９−９の増大は、膵炎および他の消化器障害のような非悪性状態を有する患者においてやはり上昇し得る（Ａｂｂｏｔｔ  ＡＲＣＨＩＴＥＣＴ  ＣＡ１９−９  ＸＲ添付文書０１５−５５０  １１／０５）。ＣＡ１９−９レベルの上昇は、いくつかのＣＲＣがんに対して参考になり得る。ＣＡ１９−９は、Ａｂｂｏｔｔ  ＡＲＣＨＩＴＥＣＴ（登録商標）ＣＡ１９−９  ＸＲを使用して検出および定量され得る。
【００３０】
本明細書で交換可能に使用される、「がん胎児性抗原」または「ＣＥＡ」は、グリコシルホスファチジルイノシトール（ＧＰＩ）−細胞表面係留糖タンパク質を意味し、この糖タンパク質の特化されたシアロフコシル化糖型が、機能的な結腸癌腫のＬ−セクレチンおよびＥ−セクレチンのリガンドとして働く。ＣＥＡは細胞接着に関与する。ＣＥＡは、サイズおよそ２００ｋＤａである糖タンパク質によって特徴付けられる腫瘍関連抗原である。ＣＥＡはＦＤＡに認可されており、ＣＥＡの濃度が変化する患者における、がん患者の予後およびマネージメントにおける助けとして使用されることが意図される。ＣＥＡは、ＣＲＣに関連するマーカーであり、ＣＲＣを含めたＧＩがんのモニタリングに臨床的に認可されている。ＣＥＡがいくつかのＣＲＣを検出する性能は特徴付けられている。臨床上の関連性は、直腸結腸がん、胃がん、肺がん、前立腺がん、膵臓がんおよび卵巣がんにおいて示されている（Ａｂｂｏｔｔ  ＡＲＣＨＩＴＥＣＴ  ＣＥＡ添付文書３４−４０６７／Ｒ４）。ＣＥＡは、Ａｂｂｏｔｔ  ＡＲＣＨＩＴＥＣＴ（登録商標）ＣＥＡを使用して、検出および定量され得る。
【００３１】
本明細書で交換可能に使用される、「心血管疾患」、「心血管障害」または「ＣＶＤ」の語は、心臓および循環器系に影響を及ぼす数々の疾患を意味する。心血管疾患は、それだけには限定されないが、動脈硬化症、アテローム性動脈硬化症、心筋梗塞、急性冠動脈症候群、狭心症、うっ血性心不全、大動脈瘤、大動脈解離、腸骨または大腿動脈瘤、肺塞栓症、本態性高血圧、心房細動、発作、一過性虚血発作、収縮不全、拡張不全、心筋炎、心房性頻脈、心室細動、心内膜炎、動脈症、血管炎、動脈硬化性プラーク、不安定プラーク、急性冠動脈症候群、急性虚血性発作、突然心臓死、末梢血管疾患、冠動脈疾患（ＣＡＤ）、末梢動脈疾患（ＰＡＤ）および脳血管疾患を含めた疾患および状態を包含する。
【００３２】
本明細書で交換可能に使用される、「カテプシンＸ」または「ＣａｔＸ」は、悪性進行のメカニズムに関与する、リソソームのシステインプロテアーゼを意味し、免疫系の障害および神経変性疾患に関連する。ＣａｔＸは、カテプシンＢ２、システイン型カルボキシペプチダーゼ、カテプシンＩＶ、カテプシンＺ、酸カルボキシペプチダーゼ、およびリソソームのカルボキシペプチダーゼＢとしても知られる。ＣａｔＸは、腫瘍細胞から酵素前駆体として分泌され、がん患者に対する疾患状態および死亡のリスクを予想するように、ならびに特定の処置の応答性を予想するように働き得る。ＣａｔＸが高血清レベルであることは、直腸結腸患者の全生存がより短いことに相関する。
【００３３】
本明細書で交換可能に使用される、「直腸結腸がん」または「ＣＲＣ」は、大腸（結腸）または直腸（結腸の終端）に生じるがんを意味する。ほぼ全てのＣＲＣが、非がん性（良性）のポリープとして始まり、徐々にがんに発達する。本明細書で使用される、「結腸がん」は、大腸（結腸）のがんを意味する。本明細書で使用される、「直腸がん」は、肛門につながる結腸の最後の数インチのがんを意味する。
【００３４】
本明細書で使用される、「対照の対象」の語は、健常対象、すなわち、ＣＲＣ、高リスク腺腫、またはＣＲＣ以外のがんの臨床上の徴候または症状のない対象を意味する。対照の対象は、低リスク腺腫を有し得るが、ＣＲＣを含めたあらゆるがん、または高リスク腺腫を有さない。対照の対象は、ＣＲＣ、高リスク腺腫、またはＣＲＣ以外のがんの、他の方法では非検出の徴候または症状に対して臨床的に評価されており、この評価は、ルーチンの身体検査および／または臨床検査を含むことができる。本明細書で使用される、「対照群」は、対照の対象または健常対象の群、すなわち、ＣＲＣ、高リスク腺腫、またはＣＲＣ以外のがんの臨床上の徴候または症状を有さない対象の群を意味する。
【００３５】
本明細書で交換可能に使用される、「Ｃ反応性タンパク質」または「ＣＲＰ」は、血漿中に見出される環状五量体タンパク質を意味する。ＣＲＰは、そのレベルが炎症に応答して上昇する、急性期タンパク質である。ＣＲＰは、Ｃ１Ｑ複合体によって補体系を活性化するために、死滅した細胞または死滅しつつある細胞（およびいくつかのタイプの細菌）の表面上に発現されるホスホコリンに結合する。ＣＲＰは、マクロファージおよび脂肪細胞（アディポサイト）によって遊離される因子に応答して、肝臓によって合成される。ＣＲＰはアミノ酸２２４個を有し、単量体分子量２５１０６Ｄａを有し、環状五量体の円盤形状を有する。レーザー比濁分析計を使用して低レベルのＣＲＰを測定するのに、高感度ＣＲＰ（ｈｓ−ＣＲＰ）検査が使用され得る。検査は、２５分で結果を生じ、感度は０．０４ｍｇ／Ｌである。炎症は、がん発生における初期の特質であり、ＣＲＰ測定は、がんに対する患者のリスクを評価する上で助けとなり得る。
【００３６】
本明細書で交換可能に使用される、「ＣＹＦＲＡ２１−１」または「ＣＹＦＲＡ」は、血清中に可溶であり、有用な循環性の腫瘍マーカーであり得る、サイトケラチン１９フラグメントを意味する。サイトケラチンは、その発現が悪性転換の間に失われない、上皮性タンパク質である。全ての体液中で発現されるが、ＣＹＦＲＡの主な出現は肺中である。上皮細胞に関連する癌腫を有する患者においてレベルが顕著に上昇する。ＣＹＦＲＡおよび他のサイトケラチンフラグメントは、多くのＣＲＣ患者において上昇し得る。ＣＹＦＲＡは、Ａｂｂｏｔｔ  ＡＲＣＨＩＴＥＣＴ（登録商標）ＣＹＦＲＡ２１−１を使用して検出および定量され得る。
【００３７】
本明細書で交換可能に使用される、「糖尿病」または「糖尿病状態」は、身体がインスリンを正しく生成または使用しない疾患を意味する。糖尿病状態は、自己免疫性および特発性１型糖尿病および２型糖尿病を含めた様々なタイプの糖尿病を含む。糖尿病は、世界保健機構によって、空腹時血漿グルコース濃度が７．０ｍｍｏｌ／１（１２６ｍｇ／ｄｌ）に等しくもしくはそれより高く、または２時間グルコースレベルが１１．１ｍｍｏｌ／ｌ（２００ｍｇ／ｄｌ）に等しくもしくはそれより高いと定義される。１型糖尿病は、身体が実際にいかなるインスリンも生成することができない、自己免疫疾患である。１型糖尿病はベータ細胞の完全な喪失によって特徴付けられ、そのため患者は注射によるインスリンを必要とする。１型糖尿病は、全糖尿病の１０−１５％を占める。１型糖尿病は自己抗体に強く関連付けられ、この関連が１型糖尿病の定義／分類の一部となっている。２型糖尿病は、身体が十分なインスリンを作ることができず、または適切に使用することができないことに起因する代謝障害である。２型糖尿病は、最も一般的な形態の疾患であり、糖尿病の８５−９０％を占める。糖尿病状態は糖尿病前症も含むことができ、糖尿病前症は、患者のグルコースレベルが正常を超えるが、未だ糖尿病に確立されるレベルではない生理学的状態を意味する。最終的に２型糖尿病を発症する、糖尿病前症と診断される個体はいくらか存在するが、糖尿病前症状態を有する多くの個体は転換しない。
【００３８】
本明細書で使用される、「有効量」の語は、所望の治療結果を実現するのに必要な期間の間、有効である薬物の用量を意味する。有効量は、当業者によって決定されてもよく、個体の疾患状態、年齢、性別および体重のような因子、ならびに個体において所望の応答を誘発する薬物の能力に従って変動し得る。
【００３９】
本明細書で交換可能に使用される、「エノラーゼ２」、「ガンマ−エノラーゼ」または「ＥＮＯ２」は、ヒトにおいてＥＮＯ２遺伝子によってコードされる酵素を意味する。ＥＮＯ２は、ニューロン特異的エノラーゼとしても知られ、成熟ニューロン、およびニューロン起源の細胞において見出される、ホスホピルベートヒドラターゼである。アルファエノラーゼからガンマエノラーゼへの切り替えは、ラットおよび霊長動物における発達の間、神経組織において生じる。ＥＮＯ２の抗体での検出は、神経細胞、および神経内分泌分化を有する細胞を同定するのに使用され得る。ＥＮＯ２は、起源が神経内分泌である小細胞癌腫によって生成される。ＥＮＯ２は、肺がん患者に有用な腫瘍マーカーである。
【００４０】
本明細書で使用される、「フェリチン」は、鉄を貯蔵し、それを制御された様式で遊離する、広範に分布する細胞内タンパク質を意味する。このタンパク質は、藻類、細菌、高等植物および動物を含めた殆ど全ての生存する生物体によって生成される。ヒトでは、フェリチンは、鉄欠乏症および鉄過剰症に対するバッファーとして作用する。フェリチンは、殆どの組織中でサイトゾルタンパク質として見出されるが、少量が血清中に分泌され、そこで鉄の担体として機能する。血漿フェリチンは、身体中に貯蔵される鉄の合計量の間接的なマーカーでもあり、ゆえに血清フェリチンは、鉄欠乏性貧血に対する診断試験として使用される。フェリチンは、タンパク質２４個のサブユニットからなる、球状のタンパク質複合体であり、鉄を可溶性で非毒性の形態において維持する、原核生物および真核生物の両方における主要な細胞内鉄貯蔵タンパク質である。鉄と結びついていないフェリチンはアポフェリチンと呼ばれる。フェリチンはＣＲＰ同様、急性期反応物と考えられ、感染症およびがんを含めた様々な臨床状態においてレベルが上昇する。脊椎動物におけるいくつかのフェリチン複合体は、物理学的特徴がわずかに異なる、高度に関連する２つの遺伝子生成物のヘテロオリゴマーである。複合体中の２つの相同のタンパク質の比率は、２つの遺伝子の相対的発現レベルに依存する。フェリチンは、Ａｂｂｏｔｔ  ＡＲＣＨＩＴＥＣＴ（登録商標）フェリチンを使用して検出および定量され得る。
【００４１】
本明細書で交換可能に使用される、「ガレクチン−３」または「Ｇａｌ３」は、腫瘍の進行および転移に関与する、多機能性β−ガラクトシド結合性タンパク質を意味する。Ｇａｌ３はがんにおいて増大し、Ｇａｌ３の結合パートナーであるガレクチン−３リガンドは直腸結腸がんにおいて上昇する。Ｇａｌ３は、タンパク質のファミリー、すなわちガレクチンファミリーのメンバーであり、ガレクチンファミリーは、Ｎ−アセチルラクトサミン（Ｇａｌβ１−３ＧｌｃＮＡｃまたはＧａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃ）のようなβ−ガラクトシド糖に対する結合特異性によって定義されるが、この糖はＮ連結またはＯ連結されたいずれかのグリコシル化によってタンパク質に結合され得る。大半のレクチンと異なり、ガレクチンは膜に結合していないが、細胞内および細胞外両方の機能を有する可溶性タンパク質である。ガレクチンは、固有であるが重複性の分布を有するが、サイトゾル、核、細胞外マトリクス中に、または循環中に主に見出される。Ｇａｌ３は、Ａｂｂｏｔｔ  ＡＲＣＨＩＴＥＣＴ（登録商標）ガレクチン−３を使用して検出および定量され得る。
【００４２】
本明細書で交換可能に使用される、「糖化ヘモグロビン」または「ＨｂＡ１ｃ」は、主に長期間にわたって平均血漿グルコース濃度を同定するために測定されるヘモグロビンの形態を意味する。ＨｂＡ１ｃは、ヘモグロビンを血漿グルコースに暴露することにより、非酵素性の糖化経路において形成される。正常レベルのグルコースは正常量の糖化ヘモグロビンを生成する。血漿グルコースの平均量が増大すると、糖化ヘモグロビンの分画が、予想可能に増大する。これが、測定前の数か月にわたる平均血中グルコースレベルに対するマーカーとして働く。
【００４３】
本明細書で使用される、「高リスク腺腫」は、１ｃｍを超える管状腺腫、３個以上の腺腫、絨毛要素、または高悪性度の新形成（病理学による）を有する患者を意味する。高リスク腺腫は、前がん性病変とみなされ得る。
【００４４】
本明細書で使用される、「正常対照」または「健常対照」の語は、対象から、またはＣＲＣもしくはいかなるがんも有さない、もしくはがんを発症するリスクのない実際の対象から採取した試料もしくは検体を意味する。
【００４５】
本明細書で使用される、「低リスク腺腫」は、直径１ｃｍ未満の環状腺腫を１−２個有し、高悪性度の異形成のない患者を意味する。
【００４６】
本明細書で交換可能に使用される、「メチルセプチン９」または「ｍＳ９」は、ＣＲＣの早期検出における手助けに関連する臨床徴候を有するマーカーを意味する。セプチン９のプロモーター領域のメチル化はエピジェネティック修飾とも呼ばれ、直腸結腸がんに関連している。異常ＤＮＡのメチル化による遺伝子発現の制御は、腫瘍生物学において十分に特徴付けられているイベントであり、ＣＲＣに対して広範に記載されているため、エピジェネティックなイベントの決定は、疾患の早期検出に有用なツールである。健常対照に比べた、がん患者の血中の細胞フリーの循環性メチル化ＤＮＡのレベルの上昇は報告されており、ＣＲＣ検出に対する標的として使用され得る。Ａｂｂｏｔｔ  ＲｅａｌＴｉｍｅ  ｍＳ９直腸結腸がんアッセイは、血漿中のメチル化セプチン９の存在を定量的に検出するための、インビトロのポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）試験である。
【００４７】
本明細書で使用される、「新生物」は、組織の異常な成長を意味する。新生物は通常、腫瘍と呼ばれる。異常な成長は、必ずではないが通常、塊を形成する。本明細書で使用される、「直腸結腸の新生物」は、結腸または直腸における異常な成長を意味する。
【００４８】
本明細書で交換可能に使用される、「非ＣＲＣ悪性腫瘍」または「非ＣＲＣがん」は、ＣＲＣではないがんを意味する。
【００４９】
本明細書で交換可能に使用される、「プラスミノーゲンアクチベータインヒビター−１」または「ＰＡＩ−１」は、ヒトにおいてＳＥＲＰＩＮＥＩ遺伝子によってコードされるタンパク質を意味する。ＰＡＩ−１は、内皮プラスミノーゲンアクチベータインヒビターまたはセルピンＥ１としても知られる。ＰＡＩ−１は、組織プラスミノーゲンアクチベータ（ｔＰＡ）およびウロキナーゼ（ｕＰＡ）の主要なインヒビター、プラスミノーゲン、よって繊維素溶解（血液凝固の生理学的分解）のアクチベータとして機能する、セリンプロテアーゼインヒビター（セルピン）である。ＰＡＩ−１は、プラスミノーゲンアクチベータの主要なインヒビターである。
【００５０】
本明細書で使用される、「予め決定されたカットオフ」、「カットオフ」、「予め決定されたレベル」および「基準レベル」は、予め決定されたカットオフ／レベルがすでに、様々な臨床上のパラメータ（例えば、疾患の存在、疾患の状態、疾患の重症度、進行、非進行もしくは疾患の改善など）にリンクし、または関連していた場合、アッセイ結果を予め決定されたカットオフ／レベルに対して比較することによって、診断、予後または治療有効性の結果を評価するのに使用されるアッセイカットオフ値を意味する。本開示は、例示的な、予め決定されたレベルおよび基準レベルを提供する。しかし、カットオフ値が、イムノアッセイの性質（例えば、使用される抗体、反応条件、試料の純度など）に応じて変動し得ることはよく知られている。さらに、本開示によって提供される記載に基づいて、本明細書の開示を他のイムノアッセイに適用して、これら他のイムノアッセイに対するイムノアッセイ特異的なカットオフ値を得ることは、当業者の範囲内に十分ある。予め決定されたカットオフ／レベルの正確な値はアッセイ間で変動し得るが、本明細書に記載する相関が一般的に適用可能でなければならない。
【００５１】
本明細書で使用される、対象（例えば、患者）の「リスク評価」、「リスク分類」、「リスク同定」または「リスク層別化」は、対象に関する処置の決定が、より多くの情報に基づいてなされ得るように、疾患の開始または疾患の進行を含めた将来のイベントの発生のリスクを予想するための、バイオマーカーを含めた因子の評価を意味する。
【００５２】
本明細書で使用される、「試料」、「生物学的試料」、「試験試料」、「検体」、「対象からの試料」および「患者試料」は交換可能に使用されてよく、血液、組織、尿、血清、血漿、羊水、脳脊髄液、胎盤の細胞もしくは組織、内皮細胞、白血球または単球の試料であってよい。試料は、患者から得て直接使用されてもよく、または本明細書で論じたいくつかの様式において、もしくは当技術分野において公知である他の方法で、試料の特徴を修飾するために、濾過、蒸留、抽出、濃縮、遠心分離、妨害成分の不活性化、試薬の添加などのような前処理をされてもよい。
【００５３】
あらゆる細胞型、組織または体液が、試料を得るために利用されてよい。このような細胞型、組織および液体は、生検および剖検試料のような組織の切片、組織学的目的で採取された凍結切片、血液（例えば、全血）、血漿、血清、痰、糞便、涙液、粘液、唾液、気管支肺胞洗浄（ＢＡＬ）液、毛髪、皮膚、赤血球、血小板、間質液、眼のレンズの液（ｏｃｕｌａｒ  ｌｅｎｓ  ｆｌｕｉｄ）、脳脊髄液、汗、鼻汁（ｎａｓａｌ  ｆｌｕｉｄ）、滑液、月経、羊水、精液などを含み得る。細胞型および組織は、リンパ液、腹水（ａｓｃｅｔｉｃ  ｆｌｕｉｄ）、婦人科液、尿、腹水、脳脊髄液、膣をすすぐことによって採集した液体、または膣を流すことによって採集した液体も含むことができる。組織または細胞型は、細胞の試料を動物から除去することによって提供され得るが、以前に単離された細胞（例えば、別の者により、別の時間に、および／または別の目的で単離された）を使用することによって、やはり達成され得る。処置またはアウトカムの履歴のあるもののような、長期保存の組織も使用され得る。タンパク質またはヌクレオチドの単離および／または精製は、必要でないこともある。
【００５４】
尿、血液、血清および血漿、ならびに他の体液を採集し、取り扱い、処理加工するための当技術分野では周知の技術が、本開示の実践において使用される。試験試料は、抗体、抗原、ハプテン、ホルモン、薬物、酵素、受容体、タンパク質、ペプチド、ポリペプチド、オリゴヌクレオチドまたはポリヌクレオチドのような目的の分析物に加えて、さらなるモイエティを含むことができる。例えば、試料は、対象から得た全血試料であってよい。試験試料、特に全血は、本明細書に記載するイムノアッセイの前に、例えば、前処理試薬で処理されるのが必要であり得、または望ましくあり得る。前処理が必要でない場合でも（例えば、殆どの尿試料、予め処理加工された長期保存の試料など）、試料の前処理は、単なる便宜上（例えば、市販のプラットホーム上のプロトコールの一部として）行われ得る選択肢である。試料は、対象から得て直接使用されてもよく、または試料の特徴を修飾するように前処理後に使用されてもよい。前処理は、抽出、濃縮、妨害化合物の不活性化、および／または試薬の添加を含むことができる。
【００５５】
本明細書で使用される、「感度」の語は、真陽性の数を、真陽性の数プラス偽陰性の数によって除したものを意味し、感度（「ｓｅｎｓ」）は、０＜ｓｅｎｓ＜１の範囲内であってよい。本明細書の方法の実施形態が、対象が実際に腺腫を有する場合に腺腫を有さないと誤って同定されないように、ゼロに等しくまたはゼロに等しいに近い偽陰性の数を有するのが理想的である。その反対に、感度に相補的な測定値である、陰性を正しく分類するための予想アルゴリズムの能力の評価がしばしばなされる。
【００５６】
本明細書で使用される、「特異性」の語は、真陰性の数を、真陰性の数プラス偽陽性の数によって除したものを意味し、特異性（「ｓｐｅｃ」）は、０＜ｓｐｅｃ＜１の範囲内であってよい。本明細書に記載する方法が、対象が実際に腺腫を有さない場合に腺腫を有すると誤って同定されないように、ゼロに等しくまたはゼロに等しいに近い偽陽性の数を有するのが理想的である。それゆえ、感度および特異性の両方が１、または１００％に等しい方法が好ましい。
【００５７】
本明細書で交換可能に使用される、「対象」、「患者」または「方法における対象」の語は、それだけには限定されないが、哺乳動物（例えば、ウシ、ブタ、ラクダ、ラマ、ウマ、ヤギ、ウサギ、ヒツジ、ハムスター、モルモット、ネコ、イヌ、ラットおよびマウス）、非ヒト霊長動物（例えば、カニクイザルまたはアカゲザルのようなサル、チンパンジーなど）、ならびにヒトを含めた、あらゆる脊椎動物を意味する。一部の実施形態において、対象または対象は、ヒトまたは非ヒトであってよい。一部の実施形態において、対象は、高リスク腺腫、ＣＲＣおよび／もしくはＣＲＣ以外のがんのリスクがあり、または発症するリスクがあることが疑われ、またはすでに有するヒト対象であってよい。一部の実施形態において、対象は、心血管疾患および／もしくは糖尿病を有し得、高リスク腺腫、ＣＲＣおよび／もしくはＣＲＣ以外のがんを発症するリスクがあり得、またはすでに有し得る、ヒト対象であってよい。
【００５８】
本明細書で交換可能に使用される、「可溶性ウロキナーゼ受容体」または「ｓｕＰＡＲ（Ｉ）」は、ウロキナーゼ（ｕＰＡ）に対する膜結合型受容体である、可溶型のｕＰＡＲを意味する。ｓｕＰＡＲ（Ｉ）は、ｓｕＰＡＲ、および可溶性ウロキナーゼ型プラスミノーゲンアクチベータ受容体としても知られる。ｓｕＰＡＲは、膜結合型ｕＰＡＲの切断および遊離に起因する。ｓｕＰＡＲ濃度は、免疫系の活性化レベルに正に相関し、血漿、尿、血液、血清および脳脊髄液中に存在する。ｓｕＰＡＲは、炎症および免疫系の活性化に対するバイオマーカーである。ｓｕＰＡＲレベルは、腫瘍壊死因子α、白血球数およびＣ反応性タンパク質のような炎症誘発性バイオマーカーと正に相関する。ｓｕＰＡＲレベルの上昇は、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、がん、巣状分節性糸球体硬化症、心血管疾患、２型糖尿病、感染性疾患、ＨＩＶおよび死亡率のリスクの増大に関連する。ｓｕＰＡＲｎｏｓｔｉｃは、血漿中のｓｕＰＡＲレベルを検出するのに使用される予後検査である。
【００５９】
本明細書で交換可能に使用される、「メタロプロテイナーゼの組織インヒビター−１」または「ＴＩＭＰ−１」は、ＴＩＭＰファミリーのメンバーであり、生物体のいくつかの組織から発現される糖タンパク質を意味する。ＴＩＭＰ−１は、成長、浸潤および播種の過程内で機能を有する分子である。ＴＩＭＰ−１は、細胞外マトリクスの変性に関与する一群のペプチダーゼである、マトリクスメタロプロテイナーゼ（ＭＭＰ）の天然のインヒビターである。加えて、コードされるタンパク質は、広範囲の細胞型において細胞の増殖を促進することができ、抗アポトーシス機能も有し得る。ＴＩＭＰ−１は、他の悪性疾患または炎症性疾患に比べて、および疾患のない個体に比べて、ＣＲＣに対する外科手術を受ける予定である患者の８５％を超えて上昇することが見出された。ＴＩＭＰ−１は、多くのＣＲＣ患者の血清中で上昇し得る。ＴＩＭＰ−１は、Ａｂｂｏｔｔ  ＡＲＣＨＩＴＥＣＴ（登録商標）メタロプロテイナーゼの組織インヒビター−１（ＴＩＭＰ−１）を使用して検出および定量され得る。
【００６０】
本明細書で使用される、「処置」、「処置される」または「処置する」の語は、その目的が、望ましくない生理学的状態、障害もしくは疾患を減速する（減らす）ことであり、または有益なもしくは所望の臨床結果を得ることである治療を意味する。本発明の目的では、有益な、または所望の臨床結果は、それだけには限定されないが、検出できても、もしくは検出できなくても、または状態、障害もしくは疾患の増強でも、もしくは改善でも、症状の緩和；状態、障害もしくは疾患の程度の減少；状態、障害もしくは疾患の状態の安定化（すなわち、悪化ではない）；状態、障害もしくは疾患の発症の遅延もしくは進行の緩徐化；状態、障害もしくは疾患状態の緩和；ならびに寛解（部分的でも、もしくは全体的でも）を含む。処置は、処置を受けていない場合に予想される生存に比べた、生存の延長も含む。
【００６１】
本明細書において別段の規定がなければ、本開示に関連して使用される科学用語および技術用語は、当業者によって通常理解される意味を有する。例えば、本明細書に記載する、細胞および組織培養、分子生物学、免疫学、微生物学、遺伝学、ならびにタンパク質および核酸の化学、ならびにハイブリダイゼーションに関連して使用されるあらゆる命名法、およびこれらの技術は、当技術分野では周知であり、通常使用されるものである。用語の意味および範囲は明確でなければならないが、いかなる不明確さが潜在する場合には、本明細書に提供される定義が、あらゆる辞書上または非本質的な定義より優先される。さらに、文脈による別段の要求がなければ、単数形の語は複数形を含み、複数形の語は単数形を含む。
【００６２】
２．バイオマーカーの組合せ
本発明は、結腸および直腸の新生物（例えば、高悪性度の腺腫）ならびに初期段階の直腸結腸がん（ＣＲＣ）を検出するためのバイオマーカーの組合せを使用する方法に対するものである。これらのバイオマーカー、すなわち、ＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３およびＣＲＰのバイオマーカーは、相互に、および／または他の因子と組み合わされて、（１）対象が高リスク腺腫および／もしくはＣＲＣに罹患している、または罹患するリスクがあるか否かを同定および決定し、（２）男性対象または女性対象がＣＲＣ以外のがんに罹患している、または罹患するリスクがあるか否かを同定および決定し、（３）対象における高リスク腺腫および／またはＣＲＣの診断または診断する助けを提供し、（４）高リスク腺腫および／またはＣＲＣを有し、または疑われる対象において、高リスク腺腫および／またはＣＲＣの診断、予後診断および／またはリスク層別化を提供し、または提供するのを助け、（５）高リスク腺腫および／またはＣＲＣを有する対象と、低リスク腺腫を有する、および／またはがんを有さない対象との間を鑑別し、（６）ＣＲＣを有する対象とがんを有さない対象との間を鑑別し、ならびに（７）対象におけるＣＲＣの進行をモニタリングするための本発明の方法において使用されてよい。
【００６３】
例えば、ＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３およびＣＲＰのバイオマーカーの群から選択される、少なくとも２つのバイオマーカー、少なくとも３つのバイオマーカー、少なくとも４つのバイオマーカー、少なくとも５つのバイオマーカー、少なくとも６つのバイオマーカー、少なくとも７つのバイオマーカー、または少なくとも８つのバイオマーカーが、以下に記載する方法において使用されてよい。例えば、バイオマーカーの組合せは、ＡＦＰ、およびＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３もしくはＣＲＰの少なくとも１つ、少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つ、少なくとも５つ、少なくとも６つもしくは少なくとも７つ；ＣＥＡ、およびＡＦＰ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３もしくはＣＲＰの少なくとも１つ、少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つ、少なくとも５つ、少なくとも６つもしくは少なくとも７つ；フェリチン、およびＡＦＰ、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３もしくはＣＲＰの少なくとも１つ、少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つ、少なくとも５つ、少なくとも６つもしくは少なくとも７つ；ＣＹＦＲＡ、およびＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３もしくはＣＲＰの少なくとも１つ、少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つ、少なくとも５つ、少なくとも６つもしくは少なくとも７つ；ＣＡ１９−９、およびＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３もしくはＣＲＰの少なくとも１つ、少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つ、少なくとも５つ、少なくとも６つもしくは少なくとも７つ；ＴＩＭＰ−１、およびＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、Ｇａｌ３もしくはＣＲＰの少なくとも１つ、少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つ、少なくとも５つ、少なくとも６つもしくは少なくとも７つ；Ｇａｌ３、およびＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、  もしくはＣＲＰの少なくとも１つ、少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つ、少なくとも５つ、少なくとも６つもしくは少なくとも７つ；またはＣＲＰ、およびＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、Ｇａｌ３もしくはＴＩＭＰ−１の少なくとも１つ、少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つ、少なくとも５つ、少なくとも６つもしくは少なくとも７つを含むことができる。
【００６４】
方法は、対象から生物学的試料を得るステップ、生物学的試料中の選択されたバイオマーカーの組合せのレベルを決定するステップ、および生物学的試料中の選択されたバイオマーカーのレベルを選択されたバイオマーカーの基準レベルと比較するステップを含む。生物学的試料中の選択されたバイオマーカーと基準レベルとの間のレベルの差が、対象の診断を提供するのに使用され得る。
【００６５】
方法は、対象から生物学的試料を得るステップ、生物学的試料中の選択されたバイオマーカーの組合せのレベルを決定するステップ、および生物学的試料中の選択されたバイオマーカーのレベルを選択されたバイオマーカーの基準レベルと比較するステップを含む。生物学的試料中の選択されたバイオマーカーと基準レベルとの間のレベルの差が、スコアを得るのに使用され得、このスコアが対象の診断を提供するのに使用される。特定のバイオマーカーに対して、生物学的試料中のバイオマーカーのレベルがバイオマーカーの基準レベルより高い、または低い場合、１または０のスコアが与えられる。各々のバイオマーカーに対して産生されたスコアを一緒に加算して合計スコアを得る。合計スコアが基準スコアと比較され、対象の診断は、合計スコアが基準スコアより高いか否かに基づく。基準スコアは、０と、バイオマーカーの特定の組合せに可能な最大の合計スコアとの間の数であってよい。バイオマーカーの特定の組合せに対する最大合計スコアは、方法において使用されるバイオマーカーの数である。例えば、２つのバイオマーカーの組合せに対して基準スコアは０、１または２であってよく、３つのバイオマーカーの組合せに対して基準スコアは０、１、２または３であってよく、４つのバイオマーカーの組合せに対して基準スコアは０、１、２、３または４であってよく、５つのバイオマーカーの組合せに対して基準スコアは０、１、２、３、４または５であってよく、６つのバイオマーカーの組合せに対して基準スコアは０、１、２、３、４、５または６であってよく、７つのバイオマーカーの組合せに対して基準スコアは０、１、２、３、４、５、６または７であってよく、８つのバイオマーカーの組合せに対して基準スコアは０、１、２、３、４、５、６、７または８であってよく、９つのバイオマーカーの組合せに対して基準スコアは０、１、２、３、４、５、６、７、８または９であってよく、または１０個のバイオマーカーの組合せに対して基準スコアは０、１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０であってよい。バイオマーカーの組合せは、合計スコアに含まれるスコアを各々産生し得る、他のバイオマーカーおよび／または因子と使用され得る。
【００６６】
対象の性別が、バイオマーカーの組合せ、バイオマーカーの基準レベル、および／または対象の診断に使用される基準スコアを決定し得る。バイオマーカーに対する基準レベルを有するバイオマーカーの組合せが、男性対象を診断するのに使用されてもよい。バイオマーカーの同じ組合せおよびバイオマーカーに対する同じ基準レベルが、女性対象を診断するのに使用されてもよい。バイオマーカーの同じ組合せおよびバイオマーカーに対する異なる基準レベルが、女性対象を診断するのに使用されてもよい。バイオマーカーの異なる組合せおよび基準レベルが、女性対象を診断するのに使用されてもよい。男性対象を診断するのに使用される基準スコアは、女性対象を診断するのに使用される基準スコアと同じでも、または異なっていてもよい。
【００６７】
バイオマーカーの組合せが、全てのステージのＣＲＣを診断するのに使用されてもよい。Ｄｕｋｅｓのシステム、およびより詳細な、がんに対する国際連合−ＴＮＭ段階づけシステムに対するアメリカ合同委員会（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｕｎｉｏｎ  ａｇａｉｎｓｔ  Ｃａｎｃｅｒ−  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｊｏｉｎｔ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ  ｏｎ  Ｃａｎｃｅｒ  ＴＮＭ  ｓｔａｇｉｎｇ  ｓｙｓｔｅｍ）を含めた、いくつかの分類システムが、ＣＲＣの程度を段階づけるのに考案されている。ＴＮＭシステムは、臨床上または病理学上いずれかの段階づけに使用されており、４つの段階に分割され、その各段階が、原発腫瘍（Ｔ）、局所リンパ節（Ｎ）、および遠隔転移（Ｍ）に関してがんの成長の程度を評価する。このシステムは、腫瘍の腸壁中への浸潤の程度、隣接構造の浸潤、冒されている局所リンパ節の数、および遠隔転移が生じているか否かに注目する。
【００６８】
ステージ０はインサイチュー癌腫（Ｔｉｓ）によって特徴付けられ、インサイチュー癌腫では、がん細胞が腺性の基底膜の内側（上皮内）または固有層の内側（粘膜内）に位置する。このステージでは、がんは局所リンパ節に広がっておらず（Ｎ０）、遠隔転移は存在しない（Ｍ０）。ステージＩでは、がんの局所リンパ節への広がり、および遠隔転移はまだ存在しないが、腫瘍は、粘膜下に浸潤し（Ｔ１）、またはさらに進行して固有筋に浸潤している（Ｔ２）。ステージＩＩも、がんの局所リンパ節への広がり、および遠隔転移を伴わないが、腫瘍は漿膜下、もしくは腹膜に覆われていない結腸周囲もしくは直腸周囲の組織に浸潤しており（Ｔ３）、または進行して他の器官もしくは構造に浸潤し、および／または臓側腹膜に穿孔している（Ｔ４）。ステージＩＩＩは、あらゆるＴのサブステージ、遠隔転移なし、および１から３つの局所リンパ節への拡大（Ｎ１）または４つ以上の局所リンパ節への拡大（Ｎ２）によって特徴付けられる。最後に、ステージＩＶは、あらゆるＴまたはＮのサブステージ、および遠隔転移を伴う（Ｍ１ａもしくはＭ１ｂ）。内科医はやはりグレードを割り当て、すなわち、Ｇ１（十分に分化している、殆ど正常）からＧ４（非分化、非常に異常）までの範囲の細胞の外観に基づいてＣＲＣを特徴付け、高悪性度は予後不良を指し示す。
【００６９】
３．さらなる因子
本明細書に記載する方法は、上記に論じた特定のバイオマーカーの組合せ（すなわち、ＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰの組合せ）と組み合わせて使用するために、付加的な因子を定量または決定するステップをさらに含むことができる。これらの付加的な因子は、ＣＲＣの付加的なバイオマーカー、分析物、年齢、疾患の同時罹患率、および／またはＣＲＣの他のスクリーニング方法を含むことができる。これらの付加的な因子は、（１）対象が高リスク腺腫および／またはＣＲＣに罹患している、または罹患するリスクがあるか否かを同定および決定し、（２）男性対象または女性対象がＣＲＣ以外のがんに罹患している、または罹患するリスクがあるか否かを同定および決定し、（３）対象における高リスク腺腫および／またはＣＲＣを診断または診断する助けを提供し、（４）高リスク腺腫および／またはＣＲＣを有し、または疑われる対象において高リスク腺腫および／またはＣＲＣの診断、予後診断および／またはリスク層別化を提供し、または提供するのを助け、（５）高リスク腺腫および／またはＣＲＣを有する対象と、低リスク腺腫を有する、および／またはがんを有さない対象との間を鑑別し、（６）ＣＲＣを有する対象とがんを有さない対象との間を鑑別し、（７）対象におけるＣＲＣの進行をモニタリングするための、本発明の方法において使用されてよい。これら付加的な因子は、合計スコアを決定するのに使用され得る。
【００７０】
ａ．ＣＲＣの付加的なバイオマーカー
本明細書に記載する方法は、上記に論じた特定のバイオマーカーの組合せ（すなわち、ＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰの組合せ）と組み合わせて使用するための、ＣＲＣの付加的なバイオマーカーを定量または決定するステップをさらに含むことができる。一部の実施形態において、方法は、生物学的試料中のＣＲＣの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーのレベルを定量または決定するステップ、ならびにＣＲＣの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーのレベルを生物学的試料中のＣＲＣの少なくとも１つのバイオマーカーに対する基準レベルと比較するステップをさらに含むことができる。ＣＲＣの付加的なバイオマーカーは、ｍＳ９、ＨｂＡｌｃ、Ｃ３ａ、ＣａｔＸ、ｓｕＰＡＲ（Ｉ）、ＰＡＩ−１、ＥＮＯ２またはこれらのあらゆる組合せであってよい。ｍＳ９、ＨｂＡｌｃ、Ｃ３ａ、ＣａｔＸ、ｓｕＰＡＲ（Ｉ）、ＰＡＩ−１、ＥＮＯ２およびこれらの組合せの少なくとも１つの基準レベルに等しく、またはより高いレベルが、本発明の方法において使用されてよい。ＣＲＣレベルの付加的なバイオマーカーまたは分析物が、合計スコアを決定するのに使用されてよい。
【００７１】
ｂ．年齢
本明細書に記載する方法は、対象の年齢を決定するステップをさらに含むことができる。高齢の個体ほど、高リスク腺腫および／またはＣＲＣを有するリスクがより高くなり得る。対象の年齢が、合計スコアを決定するために使用されてよい。対象が男性である場合、基準年齢は、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９または７０歳であってよい。例えば、対象が男性である場合、基準年齢は５４歳であってよい。対象が女性である場合、基準年齢は、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９または７０歳であってよい。例えば、対象が女性である場合、基準年齢は６３歳であってよい。
【００７２】
ｃ．同時罹患率
本明細書に記載する方法は、対象における疾患の同時罹患率を決定するステップをさらに含むことができる。バイオマーカーを有する疾患の同時罹患率が、合計スコアを決定するのに使用されてよい。心疾患、すなわち心臓血管疾患（ＣＶＤ）を有する個体は、直腸結腸がんを有するより高い確率を有し得る。心臓血管疾患（ＣＶＤ）の同時罹患率が、合計スコアを決定するのに使用されてよい。２型糖尿病は結腸がんにつながっている。糖尿病（ＩまたはＩＩ）を有する患者は、結腸の新生物のリスクが高いことがある。糖尿病の同時罹患率が、合計スコアを決定するのに使用されてよい。カテゴリー変数としての同時罹患率総数（０、１または２＋）が、合計スコアを決定するのに使用されてよい。例えば、Ｉ型糖尿病、ＩＩ型糖尿病、心虚血、肺塞栓症、くも膜下出血、脳出血、脳梗塞、卒中、前大脳（ｐｒｅ−ｃｅｒｅｂｒａｌ）動脈における血栓、および／または破裂のない脳動脈瘤との同時罹患率が、合計スコアを決定するのに使用されてよい。
【００７３】
ｄ．他の分析物
本明細書に記載する方法は、循環性の腫瘍細胞、循環性のフリーＤＮＡ、血漿ｍｉＲＮＡ、血漿ＳＮＰ、ヌクレオソーム、メチルビメンチン、および他のメチル化された遺伝子生成物を定量または決定するステップをさらに含むことができる。分析物を測定するためのアッセイは、Ｃｅｌｌ  Ｄｅａｔｈ  Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎｐｌｕｓ−ＥＬＩＳＡ（Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）およびＣｏｌｏｇｕａｒｄ（商標）ｓＤＮＡ−ベースＣＲＣスクリーニング試験（Ｅｘａｃｔ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）を含む。
【００７４】
ｅ．スクリーニング方法
本明細書に記載する方法は、対象に対してＣＲＣスクリーニング方法またはレジメンを行うステップをさらに含むことができる。対象は、糞便検査および／またはＣＲＣ構造スクリーニングレジメン、すなわち構造試験検査によってスクリーニングされてもよい。糞便検査の例は、（ｉ）便潜血検査（「ＦＯＢＴ」）、（ｉｉ）便免疫化学検査（「ＦＩＴ」）、および（ｉｉｉ）糞便ＤＮＡ（「ｓＤＮＡ」）検査である。構造試験検査は、（ｉ）結腸鏡検査、（ｉｉ）軟性（ｆｌｅｘｉｂｌｅ）Ｓ状結腸鏡検査、（ｉｉｉ）二重造影バリウム注腸（「ＤＣＢＥ」）、（ｉｖ）ＣＴコロノグラフィー（仮想結腸鏡検査）および（ｖ）カプセル内視鏡検査である。現在の便試験は、正確さ、精密さ、個体間および個体内変動、ならびに患者が試料採取に不快であることによるコンプライアンスの問題に悩んでいる。便検査が陽性であれば、患者は、適宜、徹底的な試験および介入（腺腫の除去）のために結腸鏡検査に照会されるのが典型的である。構造試験検査は、患者の腸を一掃すること、および結腸中に空気を組み入れて視覚化を助けることの両方を必要とする。ＣＲＣスクリーニング方法の結果は、合計スコアを決定するのに使用され得る。
【００７５】
（１）便血液検査
ＦＯＢＴおよびＦＩＴの両方とも、糞便中の血液の量を検出することにより、ＣＲＣに対してスクリーニングするものである。試験は、新生物組織、特に悪性組織が、典型的な粘膜よりも多く出血し、出血量は、ポリープのサイズおよびがんのステージとともに増大するという前提に基づくものである。出血は間欠的であるため、複数の試験が推奨される。便血液検査は、下部結腸における早期の腫瘍をいくつか検出し得るが、（ｉ）あらゆる血液が代謝されるため、上部結腸におけるＣＲＣ、および／または（ｉｉ）より小さい腺腫様ポリープを検出することができず、よって偽陽性を作り出す。痔核、裂肛、炎症性障害（潰瘍性大腸炎、クローン病）、感染性疾患、さらに長距離の漏出による胃腸管のあらゆる出血が偽陽性を作り出す。
【００７６】
（２）便潜血検査（「ＦＯＢＴ」）
ＦＯＢＴはグアヤクをベースとし、ヘムまたはヘモグロビンのペルオキシダーゼ活性を測定するものである。ＦＯＢＴは安価であり、管理が比較的容易である。市販製品として、ＨｅｍｅＯｃｃｕｌｔ（登録商標）ＩＩ、およびＨｅｍｅＯｃｃｕｌｔ（登録商標）Ｓｅｎｓａ（登録商標）（Ｂｅｃｋｍａｎ−Ｃｏｕｌｔｅｒ  Ｉｎｃ．、Ｌｏｓ  Ａｎｇｅｌｅｓ、Ｃａｌｉｆ）がある。上記に言及した偽陽性および偽陰性に加えて、ペルオキシダーゼ活性を有するある種の食物（非調理の果物および野菜、赤身の肉）も偽陽性を作り出す。
【００７７】
（３）便免疫化学検査（「ＦＩＴ」）
ＦＩＴは全般的にＦＯＢＴより正確である。血液からヘムを検出するＦＯＢＴの化学反応よりむしろ、ＦＩＴは抗体を使用してヘモグロビンのような血液関連のタンパク質を検出する。市販製品として、ＩｎＳｕｒｅ（登録商標）（Ｅｎｔｅｒｉｘ  Ｉｎｃ．、Ｑｕｅｓｔ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ  ｃｏｍｐａｎｙ、Ｌｙｎｄｈｕｒｓｔ、Ｎ．Ｊ．）、Ｈｅｍｏｃｃｕｌｔ（登録商標）−ＩＣＴ（Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ，Ｉｎｃ．）、ＭｏｎｏＨａｅｍ（Ｃｈｅｍｉｃｏｎ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｉｎｃ．、Ｔｅｍｅｃｕｌａ、Ｃａｌｉｆ）、ＯＣ  Ａｕｔｏ  Ｍｉｃｒｏ８０（Ｐｏｌｙｍｅｄｃｏ、Ｃｏｒｔｌａｎｄ  Ｍａｎｏｒ．ＮＹ）およびＭａｇｓｔｒｅａｍ  １０００／Ｈｅｍ  ＳＰ（富士レビオ株式会社、東京、日本）がある。糞便中の血液および／または代謝に関連する偽陽性または偽陰性からの問題に加えて、グロブリンタンパク質のあらゆる代謝上の変性もしくは消化、またはグロブリンのエピトープを変性する採集後の試料の取り扱いが、ＦＩＴに対する偽陰性を作り出す。
【００７８】
（４）糞便ＤＮＡ（「ｓＤＮＡ」）試験
ｓＤＮＡ試験は、患者によって採集された糞便試料から、試験室において測定される様々なＤＮＡマーカーを測定するものである。Ｅｘａｃｔ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｃｏｒｐ．（Ｍａｄｉｓｏｎ、Ｗｉｓ．）から入手できる１つのｓＤＮＡ試験は、Ｋ−ｒａｓ、ＡＰＣ、Ｐ５３遺伝子における変異；ＢＡＴ−２６（ＭＳＩマーカー）、ＤＮＡ一体性に対するマーカー、およびビメンチン遺伝子のメチル化を測定する。いくつかの指針がｓＤＮＡ試験を推奨しているが、他の指針はより保守的でありｓＤＮＡ試験を推奨しない。ｓＤＮＡ試験のあるバージョンはＦＯＢＴより優れている可能性があるが、それでも進行型腺腫の１５％しか検出しなかった。
【００７９】
（５）結腸鏡検査およびＳ状結腸鏡検査
結腸鏡検査は結腸の直接的な視覚化を可能にし、腺腫様ポリープを検出し、生検し、除去することができるようにする。結腸鏡検査は、結腸がんに対する「黄金律」の診断である。これらの利点に関わらず、マイナス面が存在する。上記に論じた患者の不快感に加えて、結腸鏡検査は比較的高価な手順であり、可能な腸の穿孔および出血のリスクが存在する。さらに、医師の技術および経験は変動し、いくつかの研究は、大型の腺腫（＝１０ｍｍ）の６−１２％が行方不明になり、症例の５％ではがんを検出することができなかったことを報告している。
【００８０】
軟性Ｓ状結腸鏡検査は、定義上、Ｓ状結腸に限定される。Ｓ状結腸鏡は長さ約６０ｃｍ（およそ２フィート）である。よって、医師は、直腸、および結腸の下部半分しか検査できない。Ｓ状結腸鏡検査は、結腸鏡検査と同じ準備および浸潤性を必要とし、これらの欠点がある。試験されるポーションにとって、軟性Ｓ状結腸鏡検査には結腸鏡検査の利点がある。しかし、軟性Ｓ状結腸鏡検査は半分の仕事しかしない。
【００８１】
（６）二重造影バリウム注腸およびＣＴコロノグラフィー
二重造影バリウム注腸（「ＤＣＢＥ」）は、二重造影注腸（ａｉｒ−ｃｏｎｔｒａｓｔ  ｅｎｅｍａ）とも呼ばれる。これは、患者の結腸を一掃するために結腸鏡検査と同じ準備を必要とし、患者の結腸はバリウム造影剤とエックス線を使用して画像化される。ＤＣＢＥは殆どの指針によって推奨されるが、準備および試験の間の患者の不快感に悩み、何か疑わしいものが見られた場合に生検またはポリープ切除に対する機会を提供するものではない。よって、陽性の試験結果が存在した場合、患者は結腸鏡検査のフォローアップを必要とする。ＣＴコロノグラフィーは、仮想結腸鏡検査としても知られ、コンピュータ断層撮影法（ＣＴまたはＣＡＴ）スキャンを使用して直腸および結腸を画像化するものである。これは結腸の準備を必要とするが、浸潤性は最小であり、受容性を得ている。残念なことに、ＤＣＢＥ同様、試験陽性は、適宜、調査および介入のために結腸鏡検査を必要とする。
【００８２】
（７）カプセル内視鏡
カプセル内視鏡は、各終端にビデオカメラを有する小型カプセルの経口摂取を伴う。このカプセルが結腸を通過するとき、画像が送信され、記録される。いくつかの研究は、進行型腺腫の７３％の検出およびＣＲＣ症例の７４％の検出を報告した。同様の患者の準備を必要とし、陽性の結果は引き続き結腸鏡検査を必要とするため、欠点はＤＣＢＥまたはＣＴコロノグラフィーに同様である。加えて、バッテリーの寿命が不十分であり、速やかな運動の期間の画像が不十分であることが、現世代のカプセル内視鏡製品に対する短所である。
【００８３】
４．高リスク腺腫および／または直腸結腸がんに罹患している、または罹患するリスクがある対象を同定および決定する方法
一実施形態において、本発明は、以下のマーカーの組合せ：ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを定量または決定することによって、高リスク腺腫および／またはＣＲＣに罹患している、または罹患するリスクがある対象を同定することを対象とする。本明細書に記載する通り、対象が好ましくない濃度または量のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンを実証する場合、対象は高リスクの個体であり得る。方法は以下のステップを含むことができる：（１）対象から生物学的試料を得るステップ、（２）対象からの生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを決定するステップ、（３）生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンの基準レベルと比較するステップ、ならびに（４）生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡおよびＣＲＰのレベルがＣＥＡ、ＣＹＦＲＡおよびＣＲＰの基準レベルより高いまたは基準レベルに関して好ましくない場合、ならびに生物学的試料中のフェリチンのレベルがフェリチンの基準レベルより低いまたは基準レベルに関して好ましくない場合、対象が高リスク腺腫および／またはＣＲＣに罹患している、または罹患するリスクがあることを決定または同定するステップ。生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡおよびＣＲＰのレベルがＣＥＡ、ＣＹＦＲＡおよびＣＲＰの基準レベルより低いまたは基準レベルに関して好ましい場合、ならびに生物学的試料中のフェリチンのレベルがフェリチンの基準レベルより高いまたは基準レベルに関して好ましい場合、対象はＣＲＣに罹患していない、または罹患するリスクがないと決定または同定される。
【００８４】
対象が、他のバイオマーカーおよび／または因子とともに、本明細書に記載する通り、好ましくない濃度または量のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンによって決定されるように、好ましくないスコアを実証する場合、対象は高リスクの個体であり得る。方法は、（１）対象から生物学的試料を得るステップ、（２）対象からの生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを決定するステップ、（３）生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンの基準レベルと比較するステップであって、（ｉ）ＣＥＡスコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＥＡのレベルがＣＥＡの基準レベルより高い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＥＡのレベルがＣＥＡの基準レベルと等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、（ｉｉ）ＣＹＦＲＡスコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＹＦＲＡのレベルがＣＹＦＲＡの基準レベルより高い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＹＦＲＡのレベルがＣＹＦＲＡの基準レベルと等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、（ｉｉｉ）ＣＲＰスコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＲＰのレベルがＣＲＰの基準レベルより高い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＲＰのレベルがＣＲＰの基準レベルと等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、および（ｉｖ）フェリチンスコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のフェリチンのレベルがフェリチンの基準レベルより低い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のフェリチンのレベルがフェリチンの基準レベルと等しくまたはより高い場合、０のスコアを得るステップ、（４）ステップ（３）からのスコアを加算して合計スコアを得るステップ、ならびに（５）合計スコアが基準スコアより高い場合、高リスク腺腫および／またはＣＲＣに罹患している、もしくは罹患するリスクがあるという対象の診断を提供し、または合計スコアが基準スコアと等しくもしくはより低い場合、高リスク腺腫および／もしくはＣＲＣに罹患していない、もしくは罹患するリスクがないという対象の診断を提供するステップを含むことができる。バイオマーカーに対する基準レベルは、男性対象および女性対象に対して同じでも、または異なっていてもよい。基準スコアは０、１、２、３または４であってよい。基準スコアは、男性対象および女性対象に対して同じでも、または異なっていてもよい。方法は、対象の年齢を決定するステップ、対象の年齢を基準年齢と比較するステップ、および対象に年齢スコアを提供するステップをさらに含むことができ、対象の年齢が基準年齢に等しくまたはより高い場合、対象は１のスコアを得、対象の年齢が基準年齢より低い場合、０のスコアを得る。基準年齢は、男性対象および女性対象に対して同じでも、または異なっていてもよい。基準スコアは０、１、２、３、４または５であってよい。基準スコアは、男性対象および女性対象に対して同じでも、または異なっていてもよい。
【００８５】
方法は、ＣＲＣ構造スクリーニングレジメンによって、高リスク腺腫および／またはＣＲＣの診断またはリスクを確定するステップをさらに含むことができる。方法は、ＣＲＣ処置および／またはＣＲＣモニタリングレジメンのステップをいっそうさらに含むことができる。
【００８６】
５．ＣＲＣに罹患している、または罹患するリスクがある対象を同定および決定する方法
一実施形態において、本発明は、以下のマーカーの組合せ：ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンのレベルを定量または決定することによって、ＣＲＣに罹患している、または罹患するリスクがある対象を同定することにも対する。本明細書に記載する通り、対象が、好ましくない濃度または量のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンを実証する場合、対象は高リスクの個体であり得る。方法は、以下のステップを含むことができる：（１）対象から生物学的試料を得るステップ、（２）対象からの生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンのレベルを決定するステップ、（３）生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンのレベルを、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンの基準レベルと比較するステップ、ならびに（４）生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびＣＲＰのレベルがＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびＣＡ１９−９の基準レベルより高いまたは基準レベルに関して好ましくない場合、ならびに生物学的試料中のフェリチンのレベルがフェリチンの基準レベルより低いまたは基準レベルに関して好ましくない場合、ＣＲＣに罹患している、または罹患するリスクがある診断を対象に提供するステップ。生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびＣＡ１９−９のレベルがＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびＣＡ１９−９の基準レベルより低いまたは基準レベルに関して好ましい場合、ならびに生物学的試料中のフェリチンのレベルがフェリチンの基準レベルより高いまたは基準レベルに関して好ましい場合、対象はＣＲＣに罹患していない、または罹患するリスクがないと決定される。
【００８７】
対象が、他のバイオマーカーおよび／または因子とともに、本明細書に記載する通り、好ましくない濃度または量のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンによって決定されるように、好ましくないスコアを実証する場合、対象は高リスクの個体であり得る。方法は、（１）対象から生物学的試料を得るステップ、（２）対象からの生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンのレベルを決定するステップ、（３）生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンのレベルを、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンの基準レベルと比較するステップ、（４）ＣＥＡスコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＥＡのレベルがＣＥＡの基準レベルより高い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＥＡのレベルがＣＥＡの基準レベルと等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、（５）ＣＹＦＲＡスコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＹＦＲＡのレベルがＣＹＦＲＡの基準レベルより高い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＹＦＲＡのレベルがＣＹＦＲＡの基準レベルと等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、（６）ＣＲＰスコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＲＰのレベルがＣＲＰの基準レベルより高い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＲＰのレベルがＣＲＰの基準レベルと等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、（７）ＣＡ１９−９スコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＡ１９−９のレベルがＣＡ１９−９の基準レベルより高い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＡ１９−９のレベルがＣＡ１９−９の基準レベルと等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、（８）フェリチンスコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のフェリチンのレベルがフェリチンの基準レベルより低い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のフェリチンのレベルがフェリチンの基準レベルと等しくまたはより高い場合、０のスコアを得るステップ、（９）ステップ（４）−（８）からのスコアを加算して合計スコアを得るステップ、ならびに（１０）合計スコアが基準スコアより高い場合、ＣＲＣに罹患している、もしくは罹患するリスクがあるという対象の診断を提供し、または合計スコアが基準スコアに等しくもしくはより低い場合、ＣＲＣに罹患していない、もしくは罹患するリスクがないという対象の診断を提供するステップを含む。バイオマーカーに対する基準レベルは、男性対象および女性対象に対して同じでも、または異なっていてもよい。基準スコアは０、１、２、３、４または５であってよい。基準スコアは、男性対象および女性対象に対して同じでも、または異なっていてもよい。
【００８８】
方法は、ＣＲＣ構造スクリーニングレジメンによって、ＣＲＣの診断またはリスクを確定するステップをさらに含むことができる。方法は、ＣＲＣ処置および／またはＣＲＣモニタリングレジメンのステップをいっそうさらに含むことができる。
【００８９】
６．ＣＲＣ以外のがんに罹患している、または罹患するリスクがある男性対象を同定および決定する方法
一実施形態において、本発明は、男性対象が、直腸結腸がん（ＣＲＣ）がん以外のがんに罹患している、または罹患するリスクがあるかを決定することにも対し、男性対象は結腸鏡検査によってＣＲＣを有さないと確定された。方法は、以下のマーカーの組合せ：ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰのレベルを定量または決定するステップを含む。本明細書に記載する通り、対象が、好ましくない濃度または量のＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰを実証する場合、対象は高リスクの個体であり得る。方法は、以下を含むことができる：（１）男性対象から生物学的試料を得るステップ、（２）男性対象からの生物学的試料中のサイトケラチン１９フラグメント（ＣＹＦＲＡ）、Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）、メタロプロテイナーゼの組織インヒビター−１（ＴＩＭＰ−１）、糖鎖抗原１９−９（ＣＡ１９−９）およびアルファ−フェトプロテイン（ＡＦＰ）のレベルを決定するステップ、（３）生物学的試料中のＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰのレベルを、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰの基準レベルと比較するステップ、ならびに（４）生物学的試料中のＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰのレベルがＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰの基準レベルより高い場合、ＣＲＣ以外のがんに罹患している、または罹患するリスクがあるという男性対象の診断を提供するステップ。
【００９０】
対象が、他のバイオマーカーおよび／または因子とともに、本明細書に記載する通り、好ましくない濃度または量のＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰによって決定されるように、好ましくないスコアを実証する場合、対象は高リスクの個体であり得る。方法は、以下を含むことができる：男性対象から生物学的試料を得るステップ、（１）男性対象からの生物学的試料中のサイトケラチン１９フラグメント（ＣＹＦＲＡ）、Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）、メタロプロテイナーゼの組織インヒビター１（ＴＩＭＰ−１）、糖鎖抗原１９−９（ＣＡ１９−９）およびアルファ−フェトプロテイン（ＡＦＰ）のレベルを決定するステップ、（２）生物学的試料中のＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰのレベルをＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰの基準レベルと比較するステップ、（３）ＣＹＦＲＡスコアを男性対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＹＦＲＡのレベルがＣＹＦＲＡの基準レベルより高い場合、男性対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＹＦＲＡのレベルがＣＹＦＲＡの基準レベルと等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、（４）ＣＲＰスコアを男性対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＲＰのレベルがＣＲＰの基準レベルより高い場合、男性対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＲＰのレベルがＣＲＰの基準レベルと等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、（５）ＴＩＭＰ−１スコアを男性対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＴＩＭＰ−１のレベルがＴＩＭＰ−１の基準レベルより高い場合、男性対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＴＩＭＰ−１のレベルがＴＩＭＰ−１の基準レベルと等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、（６）ＣＡ１９−９スコアを男性対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＡ１９−９のレベルがＣＡ１９−９の基準レベルより低い場合、男性対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＡ１９−９のレベルがＣＡ１９−９の基準レベルと等しくまたはより高い場合、０のスコアを得るステップ、（７）ＡＦＰスコアを男性対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＡＦＰのレベルがＡＦＰの基準レベルより低い場合、男性対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＡＦＰのレベルがＡＦＰの基準レベルと等しくまたはより高い場合、０のスコアを得るステップ、（８）ＣＹＦＲＡスコア、ＣＲＰスコア、ＴＩＭＰ−１スコア、ＣＡ１９−９スコアおよびＡＦＰスコアを加算して合計スコアを得るステップ、ならびに（９）合計スコアが基準スコアより高い場合、ＣＲＣ以外のがんに罹患している、または罹患するリスクがあるという男性対象の診断を提供するステップ。基準スコアは０、１、２、３、４または５であってよい。
【００９１】
方法は、がん処置および／またはがんモニタリングレジメンのステップをいっそうさらに含むことができる。
【００９２】
７．ＣＲＣ以外のがんに罹患している、または罹患するリスクがある女性対象を同定および決定する方法
一実施形態において、本発明は、女性対象が、直腸結腸がん（ＣＲＣ）がん以外のがんに罹患している、または罹患するリスクがあるかを決定することにも対し、女性対象は結腸鏡検査によってＣＲＣを有さないと確定された。方法は、以下のマーカーの組合せ：ＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰのレベルを定量または決定するステップを含む。本明細書に記載する通り、対象が、好ましくない濃度または量のＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰを実証する場合、対象は高リスクの個体であり得る。方法は、以下を含むことができる：（１）女性対象から生物学的試料を得るステップ、（２）女性対象からの生物学的試料中のサイトケラチン１９フラグメント（ＣＹＦＲＡ）、がん胎児性抗原（ＣＥＡ）およびＣ反応性タンパク質（ＣＲＰ）のレベルを決定するステップ、（３）生物学的試料中のＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰのレベルを、ＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰの基準レベルと比較するステップ、ならびに（４）生物学的試料中のＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰのレベルがＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰの基準レベルより高い場合、ＣＲＣ以外のがんに罹患している、または罹患するリスクがあるという女性対象の診断を提供するステップ。
【００９３】
対象が、他のバイオマーカーおよび／または因子とともに、本明細書に記載する通り、好ましくない濃度または量のＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰによって決定されるように、好ましくないスコアを実証する場合、対象は高リスクの個体であり得る。方法は、以下を含むことができる：女性対象から生物学的試料を得るステップ、（１）女性対象からの生物学的試料中のサイトケラチン１９フラグメント（ＣＹＦＲＡ）、がん胎児性抗原（ＣＥＡ）およびＣ反応性タンパク質（ＣＲＰ）のレベルを決定するステップ、（２）生物学的試料中のＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰのレベルを、ＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰの基準レベルと比較するステップ、（３）ＣＹＦＲＡスコアを女性対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＹＦＲＡのレベルがＣＹＦＲＡの基準レベルより高い場合、女性対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＹＦＲＡのレベルがＣＹＦＲＡの基準レベルと等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、（４）ＣＥＡスコアを女性対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＥＡのレベルがＣＥＡの基準レベルより高い場合、女性対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＥＡのレベルがＣＲＰの基準レベルと等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、（５）ＣＲＰスコアを女性対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＲＰのレベルがＣＲＰの基準レベルより高い場合、女性対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＲＰのレベルがＣＲＰの基準レベルと等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、（６）ＣＹＦＲＡスコア、ＣＥＡスコアおよびＣＲＰスコアを加算して合計スコアを得るステップ、ならびに（７）合計スコアが基準スコアより高い場合、ＣＲＣ以外のがんに罹患している、または罹患するリスクがあるという女性対象の診断を提供するステップ。基準スコアは０、１、２または３であってよい。
【００９４】
方法は、がん処置および／またはがんモニタリングレジメンのステップをいっそうさらに含むことができる。
【００９５】
８．ＣＲＣの診断、予後診断および／またはリスク層別化のための方法
一実施形態において、本発明は、（１）対象からの生物学的試料中のＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰの少なくとも２つのレベルを定量または決定することにより、ＣＲＣを有し、または有することが疑われる対象において、高リスク腺腫および／またはＣＲＣ、特にＣＲＣの、診断、予後診断および／またはリスク層別化を提供することにも対する。ＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰの少なくとも２つのレベルを測定することによって、方法は、他の市販のアッセイに比べて、ＣＲＣの早期検出がより正確に診断され、引き続きより上首尾に処置されるのを可能にする。
【００９６】
方法は、対象から生物学的試料を得るステップ、生物学的試料中のＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰの少なくとも２つのレベルを決定するステップ、低リスク腺腫を有する、もしくはがんを有さない対象、または代替的に高リスク腺腫および／またはＣＲＣを有する対象における、生物学的試料中のＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰの少なくとも２つのレベルを、それぞれのマーカーの組合せのレベルと比較するステップ（すなわち、生物学的試料中のＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰの少なくとも２つを、ＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰの少なくとも２つの基準レベルと比較する）ステップ、ならびに生物学的試料中のＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰの少なくとも２つのレベルが、ＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰの少なくとも２つの基準レベルより高いまたは基準レベルに関して好ましくない場合、対象におけるＣＲＣの診断、予後診断および／またはリスク層別化を提供するステップを含む。方法は、ＣＲＣ（特に早期ＣＲＣ）の診断またはリスクを確定するステップをさらに含むことができる。方法は、ＣＲＣ処置および／またはＣＲＣモニタリングレジメンのステップをいっそうさらに含むことができる。
【００９７】
９．高リスク腺腫および／またはＣＲＣを有する対象と、低リスク腺腫を有する、および／またはがんを有さない対象との間を鑑別する方法
一実施形態において、本発明は、以下のマーカーの組合せ：ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを定量または決定することによって、高リスク腺腫および／またはＣＲＣを有する対象と、低リスク腺腫を有する、および／またはがんを有さない対象との間を鑑別する方法を対象とする。本明細書に記載する通り、対象が、好ましくない濃度または量のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンを実証する場合、対象は高リスク腺腫および／またはＣＲＣを有し得る。方法は、（１）対象から生物学的試料を得るステップ、（２）対象からの生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを決定するステップ、（３）生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンの基準レベルと比較するステップ、ならびに（４）生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡおよびＣＲＰのレベルが、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡおよびＣＲＰの基準レベルより高いまたは基準レベルに関して好ましくない場合、ならびに生物学的試料中のフェリチンのレベルが、フェリチンの基準レベルより低いまたは基準レベルに関して好ましくない場合、高リスク腺腫および／またはＣＲＣを有する、または有するリスクがある対象を決定または同定するステップを含むことができる。生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡおよびＣＲＰのレベルが、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡおよびＣＲＰの基準レベルより低いまたは基準レベルに関して好ましい場合、ならびに生物学的試料中のフェリチンのレベルが、フェリチンの基準レベルより高いまたは基準レベルに関して好ましい場合、対象は、低リスク腺腫を有する、および／またはがんを有さないと決定または同定される。
【００９８】
対象が、他のバイオマーカーおよび／または因子とともに、本明細書に記載する通り、好ましくない濃度または量のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンによって決定されるように、好ましくないスコアを実証する場合、対象は高リスク腺腫および／またはＣＲＣを有し得る。方法は、（１）対象から生物学的試料を得るステップ、（２）対象からの生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを決定するステップ、（３）生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンの基準レベルと比較するステップであって、（ｉ）ＣＥＡスコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＥＡのレベルがＣＥＡの基準レベルより高い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＥＡのレベルがＣＥＡの基準レベルに等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、（ｉｉ）ＣＹＦＲＡスコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＹＦＲＡのレベルがＣＹＦＲＡの基準レベルより高い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＹＦＲＡのレベルがＣＹＦＲＡの基準レベルに等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、（ｉｉｉ）ＣＲＰスコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＲＰのレベルがＣＲＰの基準レベルより高い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＲＰのレベルがＣＲＰの基準レベルに等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、および（ｉｖ）フェリチンスコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のフェリチンのレベルがフェリチンの基準レベルより低い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のフェリチンのレベルがフェリチンの基準レベルに等しくまたはより高い場合、０のスコアを得るステップ、（４）ステップ（３）からのスコアを加算して合計スコアを得るステップ、ならびに（５）合計スコアが基準スコアより高い場合、対象は高リスク腺腫および／もしくはＣＲＣを有し、もしくは有するリスクが高い診断を、または合計スコアが基準スコアに等しくもしくはより低い場合、対象は低リスク腺腫を有する、および／もしくはがんを有さない診断を提供するステップを含むことができる。バイオマーカーに対する基準レベルは、男性対象および女性対象に対して同じでも、または異なっていてもよい。基準スコアは０、１、２、３または４であってよい。基準スコアは、男性対象および女性対象に対して同じでも、または異なっていてもよい。方法は、対象の年齢を決定するステップ、および対象の年齢を基準年齢と比較するステップ、および対象に対する年齢スコアを提供するステップであって、対象の年齢が基準年齢に等しくまたはより高い場合、対象は１のスコアを得、対象の年齢が基準年齢より低い場合、０のスコアを得るステップをさらに含むことができる。基準年齢は、男性対象および女性対象に対して同じでも、または異なっていてもよい。基準スコアは０、１、２、３、４または５であってよい。基準スコアは、男性対象および女性対象に対して同じでも、または異なっていてもよい。
【００９９】
方法は、ＣＲＣ構造スクリーニングレジメンによって、高リスク腺腫および／またはＣＲＣの診断またはリスクを確定するステップをさらに含むことができる。方法は、ＣＲＣ処置および／またはＣＲＣモニタリングレジメンのステップをいっそうさらに含むことができる。
【０１００】
１０．ＣＲＣを有する対象とがんを有さない対象との間を鑑別する方法
一実施形態において、本発明は、以下のマーカーの組合せ：ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンのレベルを定量または決定することによって、対象が、ＣＲＣを有するか、もしくは罹患しているか、またはがんを有さないかを鑑別することにも対象とする。
【０１０１】
方法は、（１）対象から生物学的試料を得るステップ、（２）対象からの生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンのレベルを決定するステップ、（３）生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンのレベルを、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンの基準レベルと比較するステップ、ならびに（４）生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびＣＡ１９−９のレベルが、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびＣＡ１９−９の基準レベルより高いまたは基準レベルに関して好ましくない場合、ならびに生物学的試料中のフェリチンのレベルが、フェリチンの基準レベルより低いまたは基準レベルに関して好ましくない場合、ＣＲＣを有するという対象の診断を提供するステップを含むことができる。生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびＣＡ１９−９のレベルが、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびＣＡ１９−９の基準レベルより低いまたは基準レベルに関して好ましい場合、ならびに生物学的試料中のフェリチンのレベルが、フェリチンの基準レベルより高いまたは基準レベルに関して好ましい場合、対象はがんを有さないと決定される。
【０１０２】
方法は、（１）対象から生物学的試料を得るステップ、（２）対象からの生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンのレベルを決定するステップ、（３）生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンのレベルを、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンの基準レベルと比較するステップ、（４）ＣＥＡスコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＥＡのレベルがＣＥＡの基準レベルより高い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＥＡのレベルがＣＥＡの基準レベルと等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、（５）ＣＹＦＲＡスコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＹＦＲＡのレベルがＣＹＦＲＡの基準レベルより高い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＹＦＲＡのレベルがＣＹＦＲＡの基準レベルと等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、（６）ＣＲＰスコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＲＰのレベルがＣＲＰの基準レベルより高い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＲＰのレベルがＣＲＰの基準レベルと等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、（７）ＣＡ１９−９スコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＡ１９−９のレベルがＣＡ１９−９の基準レベルより高い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＡ１９−９のレベルがＣＡ１９−９の基準レベルと等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、（８）フェリチンスコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のフェリチンのレベルがフェリチンの基準レベルより低い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のフェリチンのレベルがフェリチンの基準レベルと等しくまたはより高い場合、０のスコアを得るステップ、（９）ステップ（４）−（８）からのスコアを加算して合計スコアを得るステップ、ならびに（１０）合計スコアが基準スコアより高い場合、対象はＣＲＣを有する診断を、または合計スコアが基準スコアに等しくもしくはより低い場合、対象はがんを有さない診断を提供するステップを含むことができる。バイオマーカーに対する基準レベルは、男性対象および女性対象に対して同じでも、または異なっていてもよい。基準スコアは０、１、２、３、４または５であってよい。基準スコアは、男性対象および女性対象に対して同じでも、または異なっていてもよい。
【０１０３】
方法は、ＣＲＣ構造スクリーニングレジメンによって、ＣＲＣの診断またはリスクを確定するステップをさらに含むことができる。方法は、ＣＲＣ処置および／またはＣＲＣモニタリングレジメンのステップをいっそうさらに含むことができる。
【０１０４】
１１．ステージＩまたはＩＩのＣＲＣを有する対象とがんを有さない対象との間を鑑別する方法
一実施形態において、本発明は、以下のマーカーの組合せ：ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを定量または決定することによって、ステージＩまたはＩＩのＣＲＣを有する対象と、低リスク腺腫を有する、および／またはがんを有さない対象との間を鑑別する方法を対象とする。本明細書に記載する通り、対象が、好ましくない濃度または量のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンを実証する場合、対象はステージＩまたはＩＩのＣＲＣを有し得る。方法は、（１）対象から生物学的試料を得るステップ、（２）対象からの生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを決定するステップ、（３）生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンの基準レベルと比較するステップ、ならびに（４）生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡおよびＣＲＰのレベルが、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡおよびＣＲＰの基準レベルより高いまたは基準レベルに関して好ましくない場合、ならびに生物学的試料中のフェリチンのレベルが、フェリチンの基準レベルより低いまたは基準レベルに関して好ましくない場合、ステージＩまたはＩＩのＣＲＣを有する、または有するリスクがある対象を決定または同定するステップを含むことができる。生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡおよびＣＲＰのレベルが、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡおよびＣＲＰの基準レベルより低いまたは基準レベルに関して好ましい場合、ならびに生物学的試料中のフェリチンのレベルが、フェリチンの基準レベルより高いまたは基準レベルに関して好ましい場合、対象は、低リスク腺腫を有する、および／またはがんを有さないと決定または同定される。
【０１０５】
対象が、他のバイオマーカーおよび／または因子とともに、本明細書に記載する通り、好ましくない濃度または量のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンによって決定されるように、好ましくないスコアを実証する場合、対象はステージＩまたはＩＩのＣＲＣを有し得る。  方法は、（１）対象から生物学的試料を得るステップ、（２）対象からの生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを決定するステップ、（３）生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンの基準レベルと比較するステップであって、（ｉ）ＣＥＡスコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＥＡのレベルがＣＥＡの基準レベルより高い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＥＡのレベルがＣＥＡの基準レベルに等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、（ｉｉ）ＣＹＦＲＡスコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＹＦＲＡのレベルがＣＹＦＲＡの基準レベルより高い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＹＦＲＡのレベルがＣＹＦＲＡの基準レベルに等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、（ｉｉｉ）ＣＲＰスコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＲＰのレベルがＣＲＰの基準レベルより高い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＲＰのレベルがＣＲＰの基準レベルに等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、および（ｉｖ）フェリチンスコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のフェリチンのレベルがフェリチンの基準レベルより低い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のフェリチンのレベルがフェリチンの基準レベルに等しくまたはより高い場合、０のスコアを得るステップ、（４）ステップ（３）からのスコアを加算して合計スコアを得るステップ、ならびに（５）合計スコアが基準スコアより高い場合、対象はステージＩまたはＩＩのＣＲＣを有し、もしくは有するリスクが高い診断を、または合計スコアが基準スコアに等しくもしくはより低い場合、対象は低リスク腺腫を有する、および／もしくはがんを有さない診断を提供するステップを含むことができる。バイオマーカーに対する基準レベルは、男性対象および女性対象に対して同じでも、または異なっていてもよい。基準スコアは０、１、２、３または４であってよい。基準スコアは、男性対象および女性対象に対して同じでも、または異なっていてもよい。方法は、対象の年齢を決定するステップ、および対象の年齢を基準年齢と比較するステップ、および対象に対する年齢スコアを提供するステップであって、対象の年齢が基準年齢に等しくまたはより高い場合、対象は１のスコアを得、対象の年齢が基準年齢より低い場合、０のスコアを得るステップをさらに含むことができる。基準年齢は、男性対象および女性対象に対して同じでも、または異なっていてもよい。基準スコアは０、１、２、３、４または５であってよい。基準スコアは、男性対象および女性対象に対して同じでも、または異なっていてもよい。
【０１０６】
方法は、ＣＲＣ構造スクリーニングレジメンによって、ステージＩまたはＩＩのＣＲＣの診断またはリスクを確定するステップをさらに含むことができる。方法は、ＣＲＣ処置および／またはＣＲＣモニタリングレジメンのステップをいっそうさらに含むことができる。
【０１０７】
１２．ステージＩＩＩまたはＩＶのＣＲＣを有する対象とがんを有さない対象との間を鑑別する方法
一実施形態において、本発明は、以下のマーカーの組合せ：ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを定量または決定することによって、ステージＩＩＩまたはＩＶのＣＲＣを有する対象と、低リスク腺腫を有する、および／またはがんを有さない対象との間を鑑別する方法を対象とする。本明細書に記載する通り、対象が、好ましくない濃度または量のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンを実証する場合、対象はステージＩＩＩまたはＩＶのＣＲＣを有し得る。方法は、（１）対象から生物学的試料を得るステップ、（２）対象からの生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを決定するステップ、（３）生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンの基準レベルと比較するステップ、ならびに（４）生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡおよびＣＲＰのレベルが、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡおよびＣＲＰの基準レベルより高いまたは基準レベルに関して好ましくない場合、ならびに生物学的試料中のフェリチンのレベルが、フェリチンの基準レベルより低いまたは基準レベルに関して好ましくない場合、ステージＩＩＩまたはＩＶのＣＲＣを有する、または有するリスクがある対象を決定または同定するステップを含むことができる。生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡおよびＣＲＰのレベルが、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡおよびＣＲＰの基準レベルより低いまたは基準レベルに関して好ましい場合、ならびに生物学的試料中のフェリチンのレベルが、フェリチンの基準レベルより高いまたは基準レベルに関して好ましい場合、対象は、低リスク腺腫を有する、および／またはがんを有さないと決定または同定される。
【０１０８】
対象が、他のバイオマーカーおよび／または因子とともに、本明細書に記載する通り、好ましくない濃度または量のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンによって決定されるように、好ましくないスコアを実証する場合、対象はステージＩＩＩまたはＩＶのＣＲＣを有し得る。方法は、（１）対象から生物学的試料を得るステップ、（２）対象からの生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを決定するステップ、（３）生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンの基準レベルと比較するステップであって、（ｉ）ＣＥＡスコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＥＡのレベルがＣＥＡの基準レベルより高い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＥＡのレベルがＣＥＡの基準レベルに等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、（ｉｉ）ＣＹＦＲＡスコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＹＦＲＡのレベルがＣＹＦＲＡの基準レベルより高い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＹＦＲＡのレベルがＣＹＦＲＡの基準レベルに等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、（ｉｉｉ）ＣＲＰスコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＲＰのレベルがＣＲＰの基準レベルより高い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＲＰのレベルがＣＲＰの基準レベルに等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、および（ｉｖ）フェリチンスコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のフェリチンのレベルがフェリチンの基準レベルより低い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のフェリチンのレベルがフェリチンの基準レベルに等しくまたはより高い場合、０のスコアを得るステップ、（４）ステップ（３）からのスコアを加算して合計スコアを得るステップ、ならびに（５）合計スコアが基準スコアより高い場合、対象はステージＩＩＩまたはＩＶのＣＲＣを有し、もしくは有するリスクが高い診断を、または合計スコアが基準スコアに等しくもしくはより低い場合、対象は低リスク腺腫を有する、および／もしくはがんを有さない診断を提供するステップを含むことができる。バイオマーカーに対する基準レベルは、男性対象および女性対象に対して同じでも、または異なっていてもよい。基準スコアは０、１、２、３または４であってよい。基準スコアは、男性対象および女性対象に対して同じでも、または異なっていてもよい。方法は、対象の年齢を決定するステップ、および対象の年齢を基準年齢と比較するステップ、および対象に対する年齢スコアを提供するステップであって、対象の年齢が基準年齢に等しくまたはより高い場合、対象は１のスコアを得、対象の年齢が基準年齢より低い場合、０のスコアを得るステップをさらに含むことができる。基準年齢は、男性対象および女性対象に対して同じでも、または異なっていてもよい。基準スコアは０、１、２、３、４または５であってよい。基準スコアは、男性対象および女性対象に対して同じでも、または異なっていてもよい。
【０１０９】
方法は、ＣＲＣ構造スクリーニングレジメンによって、ステージＩＩＩまたはＩＶのＣＲＣの診断またはリスクを確定するステップをさらに含むことができる。方法は、ＣＲＣ処置および／またはＣＲＣモニタリングレジメンのステップをいっそうさらに含むことができる。
【０１１０】
１３．非ＣＲＣがんを有する対象とがんを有さない対象との間を鑑別する方法
一実施形態において、本発明は、以下のマーカーの組合せ：ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを定量または決定することによって、非ＣＲＣを有する、もしくは非ＣＲＣを有するリスクのある対象と、低リスク腺腫を有する、および／またはがんを有さない対象との間を鑑別する方法を対象とする。本明細書に記載する通り、対象が、好ましくない濃度または量のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンを実証する場合、対象は非ＣＲＣを有し得る。方法は、（１）対象から生物学的試料を得るステップ、（２）対象からの生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを決定するステップ、（３）生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンの基準レベルと比較するステップ、ならびに（４）生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡおよびＣＲＰのレベルが、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡおよびＣＲＰの基準レベルより高いまたは基準レベルに関して好ましくない場合、ならびに生物学的試料中のフェリチンのレベルが、フェリチンの基準レベルより低いまたは基準レベルに関して好ましくない場合、非ＣＲＣを有する、または有するリスクがある対象を決定または同定するステップを含むことができる。生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡおよびＣＲＰのレベルが、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡおよびＣＲＰの基準レベルより低いまたは基準レベルに関して好ましい場合、ならびに生物学的試料中のフェリチンのレベルが、フェリチンの基準レベルより高いまたは基準レベルに関して好ましい場合、対象は、低リスク腺腫を有する、および／またはがんを有さないと決定または同定される。
【０１１１】
対象が、他のバイオマーカーおよび／または因子とともに、本明細書に記載する通り、好ましくない濃度または量のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンによって決定されるように、好ましくないスコアを実証する場合、対象は非ＣＲＣを有し得る。方法は、（１）対象から生物学的試料を得るステップ、（２）対象からの生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを決定するステップ、（３）生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンの基準レベルと比較するステップであって、（ｉ）ＣＥＡスコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＥＡのレベルがＣＥＡの基準レベルより高い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＥＡのレベルがＣＥＡの基準レベルに等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、（ｉｉ）ＣＹＦＲＡスコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＹＦＲＡのレベルがＣＹＦＲＡの基準レベルより高い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＹＦＲＡのレベルがＣＹＦＲＡの基準レベルに等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、（ｉｉｉ）ＣＲＰスコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＲＰのレベルがＣＲＰの基準レベルより高い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＲＰのレベルがＣＲＰの基準レベルに等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、および（ｉｖ）フェリチンスコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のフェリチンのレベルがフェリチンの基準レベルより低い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のフェリチンのレベルがフェリチンの基準レベルに等しくまたはより高い場合、０のスコアを得るステップ、（４）ステップ（３）からのスコアを加算して合計スコアを得るステップ、ならびに（５）合計スコアが基準スコアより高い場合、対象は非ＣＲＣを有し、もしくは有するリスクが高い診断を、または合計スコアが基準スコアに等しくもしくはより低い場合、対象は低リスク腺腫を有する、および／もしくはがんを有さない診断を提供するステップを含むことができる。バイオマーカーに対する基準レベルは、男性対象および女性対象に対して同じでも、または異なっていてもよい。基準スコアは０、１、２、３または４であってよい。基準スコアは、男性対象および女性対象に対して同じでも、または異なっていてもよい。方法は、対象の年齢を決定するステップ、および対象の年齢を基準年齢と比較するステップ、および対象に対する年齢スコアを提供するステップであって、対象の年齢が基準年齢に等しくまたはより高い場合、対象は１のスコアを得、対象の年齢が基準年齢より低い場合、０のスコアを得るステップをさらに含むことができる。基準年齢は、男性対象および女性対象に対して同じでも、または異なっていてもよい。基準スコアは０、１、２、３、４または５であってよい。基準スコアは、男性対象および女性対象に対して同じでも、または異なっていてもよい。
【０１１２】
方法は、ＣＲＣ構造スクリーニングレジメンによって、非ＣＲＣの診断またはリスクを確定するステップをさらに含むことができる。方法は、ＣＲＣ処置および／またはＣＲＣモニタリングレジメンのステップをいっそうさらに含むことができる。
【０１１３】
１４．対象におけるＣＲＣの進行をモニタリングする方法
本明細書に記載する方法は、対象におけるＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰのレベルを決定することによって、対象におけるＣＲＣ、特に早期ＣＲＣの進行をモニタリングするのに使用され得る。方法は、（ａ）対象からの試験試料中のＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰの濃度または量を決定するステップ、（ｂ）対象からの最近の試験試料中のＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰの濃度または量を決定するステップ、ならびに（ｃ）ステップ（ｂ）において決定されたＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰの濃度または量を、ステップ（ａ）において決定されたＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰの濃度または量と比較するステップであって、ステップ（ｂ）において決定された濃度または量が、ステップ（ａ）において決定されたＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰの濃度または量と比較した場合、より高い、非変化、または好ましくない場合、対象における疾患は、継続し、進行し、または悪化していると決定されるステップを含むことができる。比較すると、ステップ（ｂ）において決定されたＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰの濃度または量が、ステップ（ａ）において決定されたＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰの濃度または量と比較した場合、より低い、または好ましい場合、対象におけるＣＲＣが、中断し、退行し、または改善していると決定される。一部の実施形態において、バイオマーカーのスコアは、バイオマーカーの基準レベルと比較した試料中のバイオマーカーのレベル間の差に基づいて各バイオマーカーに対して産生され、合計スコアはこれらのバイオマーカーのスコアから産生される。合計スコアは基準スコアに対して比較され、診断はこの比較に基づく。
【０１１４】
任意選択的に、方法は、ステップ（ｂ）において決定された、ＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰの濃度または量を、例えば、予め決定されたレベルと比較するステップをさらに含む。さらに、任意選択的に、方法は、比較が、ステップ（ｂ）において決定されたＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰの濃度または量が、例えば、予め決定されたレベルに関してより高い、または好ましくなく改変されていることを示す場合、ある期間、対象を、１つ以上の処置レジメン（すなわち、外科手術、化学療法、放射線医学治療、放射線医学処置、標的化治療またはこれらの組合せ）で処置するステップを含む。
【０１１５】
いっそうさらに、方法は、外科手術、化学療法、放射線医学治療、放射線医学処置、標的化治療またはこれらの組合せ（集合的に「処置レジメン」）の１つ以上での処置を受けている対象をモニタリングするのに使用され得る。具体的に、このような方法は、対象が１つ以上の処置レジメンを施されていた前、対象からの第１の試験試料を提供するステップを伴う。次に、対象からの第１の試験試料中のＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰの濃度または量が決定される（例えば、当技術分野では公知の方法を使用して）。ＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰの濃度または量が決定された後、任意選択的に、ＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰの濃度または量が、次いで、予め決定されたレベルと比較される。第１の試験試料中の決定されたＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰの濃度または量が、予め決定されたレベルより低いまたはレベルに関して好ましい場合、対象は１つ以上の処置レジメンで処置されず、または代替的に対象は１つ以上の処置レジメンで処置されてもよい。第１の試験試料中の決定されたＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰの濃度または量が、予め決定されたレベルより高いまたはレベルに関して好ましくない場合、対象は、ある期間、１つ以上の処置レジメンで処置され、または代替的に、対象は１つ以上の処置レジメンで処置されない。対象が１つ以上の処置レジメンで処置される期間は、当業者によって決定されてよい（例えば、期間は、約７日から約２年、好ましくは約１４日から約１年であってよい。）。
【０１１６】
１つ以上の処置レジメンでの処置の経過の間、第２および後続の試験試料が、次いで対象から得られる。試験試料の数、および前記試験試料が対象から得られる時間は、重要ではない。例えば、第２の試験試料は、対象が１つ以上の処置レジメンを最初に施された７日後に得られてもよく、第３の試験試料は、対象が１つ以上の処置レジメンを最初に施された２週間後に得られてもよく、第４の試験試料は、対象が１つ以上の処置レジメンを最初に施された３週間後に得られてもよく、第５の試験試料は、対象が１つ以上の処置レジメンを最初に施された４週間後に得られてもよい、などである。
【０１１７】
第２または後続の各試験試料が対象から得られた後、ＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰの濃度または量が、第２または後続の試験試料中で決定される（例えば、当技術分野では公知の方法を使用して）。第２または後続の各試験試料中で決定されたＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰの濃度または量が、次いで、第１の試験試料中（例えば、もともと、予め決定されたレベルと任意選択的に比較した試験試料）で決定されたＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰの濃度または量と比較される。ステップ（ｃ）において決定されたＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰの濃度または量が、ステップ（ａ）において決定されたＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰの濃度または量と比較した場合、より低いまたは好ましい場合、対象における疾患は、中断し、退行し、または改善していると決定され、対象は、１つまたはステップ（ｂ）の処置レジメンを引き続き施されるべきである。しかし、ステップ（ｃ）において決定された濃度または量が、ステップ（ａ）において決定されたＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰの濃度または量に比べた場合、より高い、非変化、または好ましくない場合、対象における疾患は、持続し、進行し、または悪化していると決定され、対象は、ステップ（ｂ）において対象に投与されるより高濃度の１つ以上の処置レジメンで処置されるべきであり、または対象はステップ（ｂ）において対象に投与される１つ以上の処置レジメンと異なる１つ以上の処置レジメンで処置されるべきである。具体的に、対象は、前記対象のＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰのレベルを低減し、または低下させるために対象が以前に受けていた１つ以上の処置レジメンと異なる１つ以上の処置レジメンで処置されてもよい。
【０１１８】
さらに、上記のアッセイは、第１の試験試料が、尿、血清または血漿のような１つの供給源から得られる場合、対象から得た第１の試験試料を使用して行われてもよい。任意選択的に、上記のアッセイは、次いで、第２の試験試料が別の供給源から得られる場合、対象から得た第２の試験試料を使用して繰り返されてもよい。例えば、第１の試験試料が尿から得られた場合、第２の試験試料は血清または血漿から得られてもよい。第１の試験試料および第２の試験試料を使用してアッセイから得た結果は、比較されてよい。比較は、対象における疾患または状態の状況を評価するために使用されてよい。
【０１１９】
１５．基準レベル
本明細書に記載する方法は、（１）対象が、高リスク腺腫および／またはＣＲＣに罹患している、または罹患するリスクがあるか否かを同定および決定し、（２）男性対象または女性対象が、ＣＲＣ以外のがんに罹患している、または罹患するリスクがあるか否かを同定および決定し、（３）対象における高リスク腺腫および／またはＣＲＣの診断を提供し、（４）高リスク腺腫および／またはＣＲＣを有する、または疑われる対象における、高リスク腺腫および／またはＣＲＣの診断、予後診断および／またはリスク層別化を提供し、または提供するのを助け、（５）高リスク腺腫および／またはＣＲＣを有する対象と、低リスク腺腫を有する、および／またはがんを有さない対象との間を鑑別し、（６）ＣＲＣを有する対象とがんを有さない対象との間を鑑別し、ならびに（７）対象におけるＣＲＣの進行をモニタリングするために、対象のＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰの基準レベルを使用する。ＡＦＰ、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／もしくはＣＲＰの基準レベルと等しくもしくはより高いレベル、ならびに／またはフェリチンの基準レベルと等しくもしくはより低いレベルは、患者が高リスク腺腫および／もしくはＣＲＣを有する、または高リスク腺腫および／もしくはＣＲＣを有し、もしくは発症するリスクがあると同定する。ＡＦＰ、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／もしくはＣＲＰの基準レベルより低いレベル、ならびに／またはフェリチンの基準レベルより高いレベルは、患者が、低リスク腺腫を有する、および／またはがんを有さないと同定する。ＡＦＰ、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／もしくはＣＲＰの基準レベルと等しくもしくはより高いレベル、ならびに／またはフェリチンの基準レベルと等しくもしくはより低いレベルも、ＣＲＣ以外のがんを有する、またはＣＲＣ以外のがんを有する、もしくは発症するリスクがあると患者を同定し得る。ＡＦＰ、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／もしくはＣＲＰの基準レベルより低いレベル、ならびに／またはフェリチンの基準レベルより高いレベルも、がんを有さないと患者を同定し得る。
【０１２０】
ａ．ＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰのマーカーに対する基準レベル
一般的に、ＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰに対して試験試料をアッセイする際に得られた結果を評価するための指標として、予め決定されたレベルまたは基準レベルが使用されてよい。一般的に、このような比較を行う上で、存在する分析物、量もしくは濃度の特定の段階とのつながりもしくは関連、またはＣＲＣのエンドポイントの特定の兆候（ｉｎｄｉｃｉａ）とのつながりもしくは関連がつくられ得るように、十分な回数、および好適な条件下で特定のアッセイを行うことによって、予め決定されたレベルが得られる。予め決定されたレベルが、基準対象（または対象の集団）のアッセイで得られるのが典型的である。基準対象は、対照の対象またはがん対象であってよい。基準集団または基準群は、対照群またはがん群であってよい。測定されたＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰは、ＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰ、これらのフラグメント、これらの分解生成物、および／またはこれらの酵素切断生成物を含むことができる。
【０１２１】
特に、疾患の進行および／または処置のモニタリングに使用される予め決定されたレベルに関して、ＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／もしくはＣＲＰ、またはＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／もしくはＣＲＰフラグメントの量または濃度は、「非変化」、「好ましい」（もしくは「好ましく改変されている」）、または「好ましくない」（もしくは「好ましくなく改変されている」）であってよい。「上昇」または「増大」は、対照群もしくはがん群に見出される典型的な、もしくは正常なレベルのような、典型的な、もしくは正常なレベルもしくは範囲（例えば、予め決定されたレベル）より高い、もしくはそれを超える試験試料中の量もしくは濃度を意味し、または別の基準レベルもしくは範囲（例えば、より早期の、もしくはベースラインの試料）より高い、もしくはそれを超える。「低下」または「低減」の語は、対照群もしくはがん群に見出される典型的もしくは正常なレベルのような、典型的もしくは正常なレベルもしくは範囲（例えば、予め決定されたレベル）より低い、もしくはそれ未満である試験試料中の量もしくは濃度を意味し、または別の基準レベルもしくは範囲（例えば、より早期の、もしくはベースラインの試料）より低い、もしくはそれ未満である。「改変」の語は、対照群もしくはがん群において、または別の基準レベルもしくは範囲（例えば、より早期の、もしくはベースラインの試料）にわたって見出される典型的または正常なレベルのような、典型的または正常なレベルまたは範囲（例えば、予め決定されたレベル）にわたって改変されている（増大もしくは低減されている）試料中の量または濃度を意味する。
【０１２２】
ＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰに対する典型的または正常なレベルまたは範囲は、標準実施法（ｓｔａｎｄａｒｄ  ｐｒａｃｔｉｃｅ）に従って規定される。いわゆる改変されたレベルまたは改変は、典型的もしくは正常なレベルもしくは範囲、または実験誤差もしくは試料の変動によって説明され得ない基準のレベルもしくは範囲に比べて、あらゆる正味の変化が存在する場合に生じているとみなされ得る。一部の実施形態において、特定の試料中で測定されるレベルが、いわゆる正常対象、すなわち対照の対象からの同様の試料中で決定されるレベルまたはレベルの範囲と比較される。この文脈において、例えば、「正常」（ときに「対照の」または「健常」と呼ばれる）対象は、検知できるがんがない個体であり、「正常」患者または集団は、検知できるがんを表さない個体である。「見かけ上の正常対象」は、ＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰが評価されておらず、または評価中であるものである。分析物が、通常検知不可能であるが（例えば、正常レベルがゼロであり、または正常集団の約２５から約７５パーセンタイルまでの範囲内である）試験試料中で検出される場合、および試験試料中に正常レベルより高い分析物が存在する場合、分析物のレベルは「上昇」していると言われる。一部の実施形態において、特定の試料中で測定されたレベルが、がん対象から同様の試料中で決定されたレベルまたはレベルの範囲と比較される。
【０１２３】
例えば、一態様において、ＣＥＡについて血清中３．５ｎｇ／ｍＬ、４．０ｎｇ／ｍＬ、４．３ｎｇ／ｍＬ、４．４ｎｇ／ｍＬ、４．５ｎｇ／ｍＬ、４．６ｎｇ／ｍＬ、４．７ｎｇ／ｍＬ、４．８ｎｇ／ｍＬ、４．９ｎｇ／ｍＬ、５．０ｎｇ／ｍＬ、５．１ｎｇ／ｍＬ、５．２ｎｇ／ｍＬ、５．３ｎｇ／ｍＬ、５．４ｎｇ／ｍＬ、５．５ｎｇ／ｍＬ、５．６ｎｇ／ｍＬ、５．７ｎｇ／ｍＬ、５．８ｎｇ／ｍＬ、５．９ｎｇ／ｍＬ、６．０ｎｇ／ｍＬ、６．１ｎｇ／ｍＬ、６．２ｎｇ／ｍＬ、６．３ｎｇ／ｍＬ、６．４ｎｇ／ｍＬ、６．５ｎｇ／ｍＬ、６．６ｎｇ／ｍＬ、６．７ｎｇ／ｍＬ、６．８ｎｇ／ｍＬ、６．９ｎｇ／ｍＬ、７．０ｎｇ／ｍＬ、７．１ｎｇ／ｍＬ、７．２ｎｇ／ｍＬ、７．３ｎｇ／ｍＬ、７．４ｎｇ／ｍＬ、７．５ｎｇ／ｍＬ、７．６ｎｇ／ｍＬ、７．７ｎｇ／ｍＬ、７．８ｎｇ／ｍＬ、７．９ｎｇ／ｍＬまたは８．０ｎｇ／ｍＬに等しくまたはより高い（もしくは超える）基準レベル、ＣＹＦＲＡについて血清中１．５０ｎｇ／ｍＬ、１．５５ｎｇ／ｍＬ、１．６０ｎｇ／ｍＬ、１．６５ｎｇ／ｍＬ、１．６７ｎｇ／ｍＬ、１．６８ｎｇ／ｍＬ、１．６９ｎｇ／ｍＬ、１．７０ｎｇ／ｍＬ、１．７１ｎｇ／ｍＬ、１．７２ｎｇ／ｍＬ、１．７３ｎｇ／ｍＬ、１．７４ｎｇ／ｍＬ、１．７５ｎｇ／ｍＬ、１．７６ｎｇ／ｍＬ、１．７７ｎｇ／ｍＬ、１．８０ｎｇ／ｍＬ、１．８５ｎｇ／ｍＬ、１．９０ｎｇ／ｍＬ、１．９５ｎｇ／ｍＬ、１．９６ｎｇ／ｍＬ、１．９７ｎｇ／ｍＬ、１．９８ｎｇ／ｍＬ、１．９９ｎｇ／ｍＬ、２．００ｎｇ／ｍＬ、２．０１ｎｇ／ｍＬ、２．０２ｎｇ／ｍＬ、２．０３ｎｇ／ｍＬ、２．０４ｎｇ／ｍＬ、２．０５ｎｇ／ｍＬ、２．０６ｎｇ／ｍＬ、２．０７ｎｇ／ｍＬ、２．０８ｎｇ／ｍＬ、２．０９ｎｇ／ｍＬ、２．１０ｎｇ／ｍＬ、２．１１ｎｇ／ｍＬ、２．１２ｎｇ／ｍＬ、２．１３ｎｇ／ｍＬ、２．１４ｎｇ／ｍＬ、２．１５ｎｇ／ｍＬ、２．１６ｎｇ／ｍＬ、２．１７ｎｇ／ｍＬ、２．１８ｎｇ／ｍＬ、２．１９ｎｇ／ｍＬ、２．２０ｎｇ／ｍＬ、２．２１ｎｇ／ｍＬ、２．２２ｎｇ／ｍＬ、２．２３ｎｇ／ｍＬ、２．２４ｎｇ／ｍＬ、２．２５ｎｇ／ｍＬ、２．５０ｎｇ／ｍＬまたは３．００ｎｇ／ｍＬに等しくまたはより高い基準レベル、ＣＲＰについて血清中１．０ｍｇ／ｍＬ、１．５ｍｇ／ｍＬ、１．６ｍｇ／ｍＬ、１．７ｍｇ／ｍＬ、１．８ｍｇ／ｍＬ、１．９ｍｇ／ｍＬ、２．０ｍｇ／ｍＬ、２．５ｍｇ／ｍＬ、４．０ｍｇ／ｍＬ、４．５ｍｇ／ｍＬ、５．０ｍｇ／ｍＬ、５．１ｍｇ／ｍＬ、５．２ｍｇ／ｍＬ、５．３ｍｇ／ｍＬ、５．４ｍｇ／ｍＬ、５．５ｍｇ／ｍＬ、５．６ｍｇ／ｍＬ、５．７ｍｇ／ｍＬ、５．８ｍｇ／ｍＬ、５．９ｍｇ／ｍＬ、６．０ｍｇ／ｍＬ、６．５ｍｇ／ｍＬ、６．６ｍｇ／ｍＬ、６．７ｍｇ／ｍＬ、６．８ｍｇ／ｍＬ、６．９ｍｇ／ｍＬ、７．０ｍｇ／ｍＬ、７．１ｍｇ／ｍＬ、７．２ｍｇ／ｍＬ、７．３ｍｇ／ｍＬ、７．４ｍｇ／ｍＬ、７．５ｍｇ／ｍＬ、７．６ｍｇ／ｍＬ、７．７ｍｇ／ｍＬ、７．８ｍｇ／ｍＬ、７．９ｍｇ／ｍＬ、８．０ｍｇ／ｍＬ、８．１ｍｇ／ｍＬ、８．２ｍｇ／ｍＬ、８．３ｍｇ／ｍＬ、８．４ｍｇ／ｍＬ、８．５ｍｇ／ｍＬ、８．６ｍｇ／ｍＬ、８．７ｍｇ／ｍＬ、８．８ｍｇ／ｍＬ、８．９ｍｇ／ｍＬ、９．０ｍｇ／ｍＬ、９．５ｍｇ／ｍＬ、１０．０ｍｇ／ｍＬ、１５．０ｍｇ／ｍＬ、１７．０ｍｇ／ｍＬ、１７．１ｍｇ／ｍＬ、１７．２ｍｇ／ｍＬ、１７．３ｍｇ／ｍＬ、１７．４ｍｇ／ｍＬ、１７．５ｍｇ／ｍＬ、１７．６ｍｇ／ｍＬ、１７．７ｍｇ／ｍＬ、１７．８ｍｇ／ｍＬ、１７．９ｍｇ／ｍＬ、１８．０ｍｇ／ｍＬ、１８．１ｍｇ／ｍＬ、１８．２ｍｇ／ｍＬ、１８．３ｍｇ／ｍＬ、１８．４ｍｇ／ｍＬ、１８．５ｍｇ／ｍＬ、１８．６ｍｇ／ｍＬ、１８．７ｍｇ／ｍＬ、１８．８ｍｇ／ｍＬ、１８．９ｍｇ／ｍＬ  １９．０ｍｇ／ｍＬ、１９．５ｍｇ／ｍＬまたは２０．０ｍｇ／ｍＬに等しくまたはより高い基準レベル、フェリチンについて血清中１２０．０ｎｇ／ｍＬ、１１５．０ｎｇ／ｍＬ、１１４．０ｎｇ／ｍＬ、１１３．０ｎｇ／ｍＬ、１１２．０ｎｇ／ｍＬ、１１１．０ｎｇ／ｍＬ、１１０．０ｎｇ／ｍＬ、１０９．０ｎｇ／ｍＬ、１０８．０ｎｇ／ｍＬ、１０７．０ｎｇ／ｍＬ、１０６．０ｎｇ／ｍＬ、１０５．０ｎｇ／ｍＬ、１０４．０ｎｇ／ｍＬ、１０３．０ｎｇ／ｍＬ、１０２．０ｎｇ／ｍＬ、１０１．０ｎｇ／ｍＬ、１００．０ｎｇ／ｍＬ、９９．０ｎｇ／ｍＬ、９８．０ｎｇ／ｍＬ、９７．０ｎｇ／ｍＬ、９６．０ｎｇ／ｍＬ、９５．０ｎｇ／ｍＬ、９４．０ｎｇ／ｍＬ、９３．０ｎｇ／ｍＬ、９２．０ｎｇ／ｍＬ、９１．０ｎｇ／ｍＬ、９０．０ｎｇ／ｍＬ、８９．０ｎｇ／ｍＬ、８８．０ｎｇ／ｍＬ、８７．０ｎｇ／ｍＬ、８６．０ｎｇ／ｍＬ、８５．０ｎｇ／ｍＬ、８０．０ｎｇ／ｍＬ、７５．０ｎｇ／ｍＬ、７０．０ｎｇ／ｍＬ、６５．０ｎｇ／ｍＬ、６０．０ｎｇ／ｍＬ、５５．０ｎｇ／ｍＬ、５０．０ｎｇ／ｍＬ、４５．０ｎｇ／ｍＬ、４４．０ｎｇ／ｍＬ、４３．０ｎｇ／ｍＬ、４２．０ｎｇ／ｍＬ、４１．０ｎｇ／ｍＬ、４０．０ｎｇ／ｍＬ、３９．０ｎｇ／ｍＬ、３８．０ｎｇ／ｍＬ、３７．０ｎｇ／ｍＬ、３６．０ｎｇ／ｍＬ、３５．０ｎｇ／ｍＬ、３４．０ｎｇ／ｍＬ、３３．０ｎｇ／ｍＬ、３２．０ｎｇ／ｍＬ、３１．０ｎｇ／ｍＬ、３０．０ｎｇ／ｍＬまたは２５．０ｎｇ／ｍＬに等しくまたはより低い基準レベル、ＣＡ１９−９について血清中２３．０Ｕ／ｍＬ、２３．１Ｕ／ｍＬ、２３．２Ｕ／ｍＬ、２３．３Ｕ／ｍＬ、２３．４Ｕ／ｍＬ、２３．５Ｕ／ｍＬ、２３．６Ｕ／ｍＬ、２３．７Ｕ／ｍＬ、２３．８Ｕ／ｍＬ、２３．９Ｕ／ｍＬ、２４．０Ｕ／ｍＬ、２４．１Ｕ／ｍＬ、２４．２Ｕ／ｍＬ、２４．３Ｕ／ｍＬ、２４．４Ｕ／ｍＬ、２４．５Ｕ／ｍＬ、２４．６Ｕ／ｍＬ、２４．７Ｕ／ｍＬ、２４．８Ｕ／ｍＬ、２４．９Ｕ／ｍＬ、２５．０Ｕ／ｍＬ、２５．１Ｕ／ｍＬ、２５．２Ｕ／ｍＬ、２５．３Ｕ／ｍＬ、２５．４Ｕ／ｍＬ、２５．５Ｕ／ｍＬ、２５．６Ｕ／ｍＬ、２５．７Ｕ／ｍＬ、２５．８Ｕ／ｍＬ、２５．９Ｕ／ｍＬ、２６．０Ｕ／ｍＬ、２６．１Ｕ／ｍＬ、２６．２Ｕ／ｍＬ、２６．３Ｕ／ｍＬ、２６．４Ｕ／ｍＬ、２６．５Ｕ／ｍＬ、２６．６Ｕ／ｍＬ、２６．７Ｕ／ｍＬ、２６．８Ｕ／ｍＬ、２６．９Ｕ／ｍＬ、２７．０Ｕ／ｍＬ、２７．１Ｕ／ｍＬ、２７．２Ｕ／ｍＬ、２７．３Ｕ／ｍＬ、２７．４Ｕ／ｍＬ、２７．５Ｕ／ｍＬ、２７．６Ｕ／ｍＬ、２７．７Ｕ／ｍＬ、２７．８Ｕ／ｍＬ、２７．９Ｕ／ｍＬ、２���．０Ｕ／ｍＬ、２８．５Ｕ／ｍＬまたは２９．０Ｕ／ｍＬに等しくまたはより高い基準レベル、またはこれらの組合せは、対象が、高リスク腺腫および／またはＣＲＣを有すると同定する。別の態様において、ＣＥＡについて血清中３．５から８．０ｎｇ／ｍＬに等しくまたはより高い（もしくは超える）基準レベル、ＣＹＦＲＡについて血清中１．５０から３．００ｎｇ／ｍＬに等しくまたはより高い基準レベル、ＣＲＰについて血清中１．０から２０．０ｍｇ／ｍＬに等しくまたはより高い基準レベル、フェリチンについて血清中１２０．０から２５．０ｎｇ／ｍＬに等しくまたはより低い基準レベル、ＣＡ１９−９について血清中２３．０から２９．０Ｕ／ｍＬに等しくまたはより高い基準レベル、またはこれらの組合せは、対象が、高リスク腺腫および／またはＣＲＣを有すると同定する。
【０１２４】
例えば、一態様において、ＣＹＦＲＡについて血清中１．０ｎｇ／ｍＬ、１．１ｎｇ／ｍＬ、１．２ｎｇ／ｍＬ、１．３ｎｇ／ｍＬ、１．４ｎｇ／ｍＬ、１．５ｎｇ／ｍＬ、１．６ｎｇ／ｍＬ、１．７ｎｇ／ｍＬ、１．８ｎｇ／ｍＬ、１．９ｎｇ／ｍＬ、２．０ｎｇ／ｍＬ、２．１ｎｇ／ｍＬ、２．２ｎｇ／ｍＬ、２．３ｎｇ／ｍＬ、２．４ｎｇ／ｍＬ、２．５ｎｇ／ｍＬ、３．０ｎｇ／ｍＬまたは３．５ｎｇ／ｍＬに等しくまたはより高い基準レベル、ＣＲＰについて血清中９．０ｍｇ／ｍＬ、９．１ｍｇ／ｍＬ、９．２ｍｇ／ｍＬ、９．３ｍｇ／ｍＬ、９．４ｍｇ／ｍＬ、９．５ｍｇ／ｍＬ、９．６ｍｇ／ｍＬ、９．７ｍｇ／ｍＬ、９．８ｍｇ／ｍＬ、９．９ｍｇ／ｍＬ、１０．０ｍｇ／ｍＬ、１０．１ｍｇ／ｍＬ、１０．２ｍｇ／ｍＬ、１０．３ｍｇ／ｍＬ、１０．４ｍｇ／ｍＬ、１０．５ｍｇ／ｍＬ、１０．６ｍｇ／ｍＬ、１０．７ｍｇ／ｍＬ、１０．８ｍｇ／ｍＬ、１０．９ｍｇ／ｍＬ、１１．０ｍｇ／ｍＬ、１１．５ｍｇ／ｍＬ、１２．０ｍｇ／ｍＬ、１４．０ｍｇ／ｍＬ、１４．１ｍｇ／ｍＬ、１４．２ｍｇ／ｍＬ、１４．３ｍｇ／ｍＬ、１４．４ｍｇ／ｍＬ、１４．５ｍｇ／ｍＬ、１４．６ｍｇ／ｍＬ、１４．７ｍｇ／ｍＬ、１４．８ｍｇ／ｍＬ、１４．９ｍｇ／ｍＬ、１５．０ｍｇ／ｍＬ、１５．１ｍｇ／ｍＬ、１５．２ｍｇ／ｍＬ、１５．３ｍｇ／ｍＬ、１５．４ｍｇ／ｍＬ、１５．５ｍｇ／ｍＬ、１５．６ｍｇ／ｍＬ、１５．７ｍｇ／ｍＬ、１５．８ｍｇ／ｍＬ、１５．９ｍｇ／ｍＬ、１６．０ｍｇ／ｍＬ、１６．１ｍｇ／ｍＬ、１６．２ｍｇ／ｍＬ、１６．３ｍｇ／ｍＬ、１６．４ｍｇ／ｍＬ、１６．５ｍｇ／ｍＬ、１７．０ｍｇ／ｍＬまたは１７．５ｍｇ／ｍＬに等しくまたはより高い基準レベル、ＴＩＭＰ−１について血清中１４０ｎｇ／ｍＬ、１４１ｎｇ／ｍＬ、１４２ｎｇ／ｍＬ、１４３ｎｇ／ｍＬ、１４４ｎｇ／ｍＬ、１４５ｎｇ／ｍＬ、１４６ｎｇ／ｍＬ、１４７ｎｇ／ｍＬ、１４８ｎｇ／ｍＬ、１４９ｎｇ／ｍＬ、１５０ｎｇ／ｍＬ、１５１ｎｇ／ｍＬ、１５２ｎｇ／ｍＬ、１５３ｎｇ／ｍＬ、１５４ｎｇ／ｍＬ、１５５ｎｇ／ｍＬ、１５６ｎｇ／ｍＬ、１５７ｎｇ／ｍＬ、１５８ｎｇ／ｍＬ、１５９ｎｇ／ｍＬまたは１６０ｎｇ／ｍＬに等しくまたはより高い基準レベル、ＣＡ１９−９について血清中２４．０Ｕ／ｍＬ、２４．１Ｕ／ｍＬ、２４．２Ｕ／ｍＬ、２４．３Ｕ／ｍＬ、２４．４Ｕ／ｍＬ、２４．５Ｕ／ｍＬ、２４．６Ｕ／ｍＬ、２４．７Ｕ／ｍＬ、２４．８Ｕ／ｍＬ、２４．９Ｕ／ｍＬ、２５．０Ｕ／ｍＬ、２５．１Ｕ／ｍＬ、２５．２Ｕ／ｍＬ、２５．３Ｕ／ｍＬ、２５．４Ｕ／ｍＬ、２５．５Ｕ／ｍＬ、２５．６Ｕ／ｍＬ、２５．７Ｕ／ｍＬ、２５．８Ｕ／ｍＬ、２５．９Ｕ／ｍＬ、２６．０Ｕ／ｍＬまたは２６．５Ｕ／ｍＬに等しくまたはより高い基準レベル、ＡＦＰについて血清中５．０ｎｇ／ｍＬ、５．１ｎｇ／ｍＬ、５．２ｎｇ／ｍＬ、５．３ｎｇ／ｍＬ、５．４ｎｇ／ｍＬ、５．５ｎｇ／ｍＬ、５．６ｎｇ／ｍＬ、５．７ｎｇ／ｍＬ、５．８ｎｇ／ｍＬ、５．９ｎｇ／ｍＬ、６．０ｎｇ／ｍＬ、６．１ｎｇ／ｍＬ、６．２ｎｇ／ｍＬ、６．３ｎｇ／ｍＬ、６．４ｎｇ／ｍＬ、６．５ｎｇ／ｍＬ、６．６ｎｇ／ｍＬ、６．７ｎｇ／ｍＬ、６．８ｎｇ／ｍＬ、６．９ｎｇ／ｍＬ、７．０ｎｇ／ｍＬ、７．５ｎｇ／ｍＬまたは８．０ｎｇ／ｍＬに等しくまたはより高い基準レベル、ＣＥＡについて血清中４．０ｎｇ／ｍＬ、４．１ｎｇ／ｍＬ、４．２ｎｇ／ｍＬ、４．３ｎｇ／ｍＬ、４．４ｎｇ／ｍＬ、４．５ｎｇ／ｍＬ、４．６ｎｇ／ｍＬ、４．７ｎｇ／ｍＬ、４．８ｎｇ／ｍＬ、４．９ｎｇ／ｍＬ、５．０ｎｇ／ｍＬ、５．１ｎｇ／ｍＬ、５．２ｎｇ／ｍＬ、５．３ｎｇ／ｍＬ、５．４ｎｇ／ｍＬ、５．５ｎｇ／ｍＬ、５．６ｎｇ／ｍＬ、５．７ｎｇ／ｍＬ、５．８ｎｇ／ｍＬ、５．９ｎｇ／ｍＬ、６．０ｎｇ／ｍＬ、６．１ｎｇ／ｍＬ、６．２ｎｇ／ｍＬ、６．３ｎｇ／ｍＬ、６．４ｎｇ／ｍＬ、６．５ｎｇ／ｍＬ、６．６ｎｇ／ｍＬ、６．７ｎｇ／ｍＬ、６．８ｎｇ／ｍＬ、６．９ｎｇ／ｍＬ、７．０ｎｇ／ｍＬまたは７．５ｎｇ／ｍＬに等しくまたはより高い基準レベル、またはこれらの組合せは、対象が、ＣＲＣ以外のがんを有すると同定する。別の態様において、ＣＹＦＲＡについて血清中１．０から３．５ｎｇ／ｍＬに等しくまたはより高い基準レベル、ＣＲＰについて血清中９．０から１７．５ｍｇ／ｍＬに等しくまたはより高い基準レベル、ＴＩＭＰ−１について血清中１４０．０から１６０ｎｇ／ｍＬに等しくまたはより高い基準レベル、ＣＡ１９−９について血清中２４．０から２６．５Ｕ／ｍＬに等しくまたはより高い基準レベル、ＡＦＰについて血清中５．０から８．０ｎｇ／ｍＬに等しくまたはより高い基準レベル、ＣＥＡについて血清中４．０から７．５ｎｇ／ｍＬに等しくまたはより高い基準レベル、またはこれらの組合せは、対象が、ＣＲＣ以外のがんを有すると同定する。
【０１２５】
カットオフ値（または予め決定されたカットオフ値）は、適応インデックスモデル（ＡＩＭ）法によって決定され得る。カットオフ値（または予め決定されたカットオフ値）は、患者群の生物学的試料から受診者動作曲線（ｒｅｃｅｉｖｅｒ  ｏｐｅｒａｔｉｎｇ  ｃｕｒｖｅ）（ＲＯＣ）分析によって決定され得る。ＲＯＣ分析は、生物学の技術分野では一般的に公知である通り、例えば、ＣＲＣを有する患者を同定する上で各マーカーの性能を決定するために、一条件を別の一条件と鑑別する試験の能力の決定である。本開示に従って適用されるＲＯＣ分析の記述は、その全文を参照により本明細書に組み込む、Ｐ．Ｊ．Ｈｅａｇｅｒｔｙら、Ｔｉｍｅ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ＲＯＣ  ｃｕｒｖｅｓ  ｆｏｒ  ｃｅｎｓｏｒｅｄ  ｓｕｒｖｉｖａｌ  ｄａｔａ  ａｎｄ  ａ  ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ  ｍａｒｋｅｒ、Ｂｉｏｍｅｔｒｉｃｓ、５６：３３７−４４（２０００）に提供される。代替的に、カットオフ値は、患者群の生物学的試料を四分位値分析することによって決定され得る。例えば、カットオフ値は、第２５−第７５パーセンタイル範囲におけるあらゆる値に対応する値、好ましくは、第２５パーセンタイル、第５０パーセンタイルまたは第７５パーセンタイル、より好ましくは第７５パーセンタイルに対応する値を選択することによって決定され得る。
【０１２６】
このような統計学的分析は、当技術分野では公知のあらゆる方法を使用して行われてよく、あらゆる数の市販のソフトウエアパッケージ（例えば、Ａｎａｌｙｓｅ−ｉｔ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｌｔｄ．、Ｌｅｅｄｓ、ＵＫ；ＳｔａｔａＣｏｒｐ  ＬＰ、Ｃｏｌｌｅｇｅ  Ｓｔａｔｉｏｎ、ＴＸ；ＳＡＳ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  Ｉｎｃ．、Ｃａｒｙ、ＮＣから）によって実行され得る。
【０１２７】
ｂ．付加的なバイオマーカーに対する基準レベル
一般的に、予め決定されたレベルまたは基準レベルは、それに対してｍＳ９、ＨｂＡｌｃ、Ｃ３ａ、ＣａｔＸ、ｓｕＰＡＲ（Ｉ）、ＰＡＩ−１、ＥＮＯ２、またはこれらのあらゆる組合せに対して試験試料をアッセイする際に得られる結果を評価するための指標として使用され得る。一般的に、このような比較を行う上で、存在する分析物、量もしくは濃度の特定の段階とのつながりもしくは関連、またはＣＲＣのエンドポイントの特定の兆候（ｉｎｄｉｃｉａ）とのつながりもしくは関連がつくられ得るように、十分な回数、および好適な条件下で特定のアッセイを行うことによって、予め決定されたレベルが得られる。予め決定されたレベルが、基準対象（または対象の集団）のアッセイで得られるのが典型的である。基準対象は、対照の対象またはがん対象であってよい。基準集団または基準群は、対照群またはがん群であってよい。測定されたｍＳ９、ＨｂＡｌｃ、Ｃ３ａ、ＣａｔＸ、ｓｕＰＡＲ（Ｉ）、ＰＡＩ−１および／またはＥＮＯ２は、ｍＳ９、ＨｂＡｌｃ、Ｃ３ａ、ＣａｔＸ、ｓｕＰＡＲ（Ｉ）、ＰＡＩ−１および／またはＥＮＯ２、これらのフラグメント、これらの分解生成物、および／またはこれらの酵素切断生成物を含むことができる。
【０１２８】
特に、疾患の進行および／または処置のモニタリングに使用される予め決定されたレベルに関して、ｍＳ９、ＨｂＡｌｃ、Ｃ３ａ、ＣａｔＸ、ｓｕＰＡＲ（Ｉ）、ＰＡＩ−１および／またはＥＮＯ２、またはｍＳ９、ＨｂＡｌｃ、Ｃ３ａ、ＣａｔＸ、ｓｕＰＡＲ（Ｉ）、ＰＡＩ−１および／またはＥＮＯ２フラグメントの量または濃度は、「非変化」、「好ましい」（もしくは「好ましく改変されている」）、または「好ましくない」（もしくは「好ましくなく改変されている」）であってよい。「上昇」または「増大」は、対照群もしくはがん群に見出される典型的な、もしくは正常なレベルのような、典型的な、もしくは正常なレベルもしくは範囲（例えば、予め決定されたレベル）より高い、もしくはそれを超える試験試料中の量もしくは濃度を意味し、または別の基準レベルもしくは範囲（例えば、より早期の、もしくはベースラインの試料）より高い、もしくはそれを超える。「低下」または「低減」の語は、対照群もしくはがん群に見出される典型的もしくは正常なレベルのような、典型的もしくは正常なレベルもしくは範囲（例えば、予め決定されたレベル）より低い、もしくはそれ未満である試験試料中の量もしくは濃度を意味し、または別の基準レベルもしくは範囲（例えば、より早期の、もしくはベースラインの試料）より低い、もしくはそれ未満である。「改変」の語は、対照群もしくはがん群において、または別の基準レベルもしくは範囲（例えば、より早期の、もしくはベースラインの試料）にわたって見出される典型的または正常なレベルのような、典型的または正常なレベルまたは範囲（例えば、予め決定されたレベル）にわたって改変されている（増大もしくは低減されている）試料中の量または濃度を意味する。
【０１２９】
ｍＳ９、ＨｂＡｌｃ、Ｃ３ａ、ＣａｔＸ、ｓｕＰＡＲ（Ｉ）、ＰＡＩ−１および／またはＥＮＯ２に対する典型的または正常なレベルまたは範囲は、標準実施法に従って規定される。いわゆる改変されたレベルまたは改変は、典型的もしくは正常なレベルもしくは範囲、または実験誤差もしくは試料の変動によって説明され得ない基準のレベルもしくは範囲に比べて、あらゆる正味の変化が存在する場合に生じているとみなされ得る。よって、特定の試料中で測定されるレベルが、いわゆる正常対象からの同様の試料中で決定されるレベルまたはレベルの範囲と比較される。この文脈において、例えば、「正常」（ときに「対照の」または「健常」と呼ばれる）対象は、検知できるがんがない個体であり、「正常」患者または集団は、検知できるがんを表さない個体である。「見かけ上の正常対象」は、ｍＳ９、ＨｂＡｌｃ、Ｃ３ａ、ＣａｔＸ、ｓｕＰＡＲ（Ｉ）、ＰＡＩ−１および／またはＥＮＯ２が評価されておらず、または評価中であるものである。分析物が、通常検知不可能であるが（例えば、正常レベルがゼロであり、または正常集団の約２５から約７５パーセンタイルまでの範囲内である）試験試料中で検出される場合、および試験試料中に正常レベルより高い分析物が存在する場合、分析物のレベルは「上昇」していると言われる。一部の実施形態において、特定の試料中で測定されたレベルが、がん対象から同様の試料中で決定されたレベルまたはレベルの範囲と比較される。
【０１３０】
カットオフ値（または予め決定されたカットオフ値）は、適応インデックスモデル（ＡＩＭ）法によって決定され得る。カットオフ値（または予め決定されたカットオフ値）は、患者群の生物学的試料から受診者動作曲線（ｒｅｃｅｉｖｅｒ  ｏｐｅｒａｔｉｎｇ  ｃｕｒｖｅ）（ＲＯＣ）分析によって決定され得る。ＲＯＣ分析は、生物学の技術分野では一般的に公知である通り、例えば、ＣＲＣを有する患者を同定する上で各マーカーの性能を決定するために、一条件を別の一条件と鑑別する試験の能力の決定である。本開示に従って適用されるＲＯＣ分析の記述は、その全文を参照により本明細書に組み込む、Ｐ．Ｊ．Ｈｅａｇｅｒｔｙら、Ｔｉｍｅ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ＲＯＣ  ｃｕｒｖｅｓ  ｆｏｒ  ｃｅｎｓｏｒｅｄ  ｓｕｒｖｉｖａｌ  ｄａｔａ  ａｎｄ  ａ  ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ  ｍａｒｋｅｒ、Ｂｉｏｍｅｔｒｉｃｓ、５６：３３７−４４（２０００）に提供される。
【０１３１】
代替的に、カットオフ値は、患者群の生物学的試料を四分位値分析することによって決定され得る。例えば、カットオフ値は、第２５−第７５パーセンタイル範囲におけるあらゆる値に対応する値、好ましくは、第２５パーセンタイル、第５０パーセンタイルまたは第７５パーセンタイル、より好ましくは第７５パーセンタイルに対応する値を選択することによって決定され得る。
【０１３２】
このような統計学的分析は、当技術分野では公知のあらゆる方法を使用して行われてよく、あらゆる数の市販のソフトウエアパッケージ（例えば、Ａｎａｌｙｓｅ−ｉｔ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｌｔｄ．、Ｌｅｅｄｓ、ＵＫ；ＳｔａｔａＣｏｒｐ  ＬＰ、Ｃｏｌｌｅｇｅ  Ｓｔａｔｉｏｎ、ＴＸ；ＳＡＳ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  Ｉｎｃ．、Ｃａｒｙ、ＮＣから）によって実行され得る。
【０１３３】
１６．対象のＣＲＣの状況を確認するための手段
上記に論じた値より高いＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰのレベルを有すると、上記に記載した方法において同定された対象は、高リスク腺腫および／またはＣＲＣに罹患している患者と同定される。次いで、対象は、ＣＲＣの状況を確証するための手段を施され得る。ＣＲＣの状況を確証するための手段は、上記に論じた通り、便検査およびＣＲＣ構造スクリーニング試験のようなＣＲＣスクリーニング方法を行うことを含むことができる。ＣＲＣの段階は、切除した結腸の病理学的試験、Ｓ状結腸鏡検査、結腸鏡検査、および様々な画像化技術、ならびに近位リンパ節評価、センチネルリンパ節評価、胸部／腹部／骨盤ＣＴ、ＭＲＩスキャン、ポジトロン放出断層撮影（「ＰＥＴ」）スキャン、肝機能検査（肝臓転移に対して）、および血液検査（全血球計算値（「ＣＢＣ」）、がん胎児性抗原（「ＣＥＡ」）、ＣＡ１９−９によって確認され得る。
【０１３４】
１７．対象のＣＲＣの状況をモニタリングするための手段
上記に記載した方法において、論じた値より高いＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰのレベルを有すると同定された対象は、ＣＲＣまたはＣＲＣ以外のがんに罹患している患者と同定される。多くの患者が、外科切除後、特に最初の２年または３年に、ＣＲＣの再発を発症し得る。したがって、ＣＲＣ患者は、治療に対する応答を決定するために、ならびに持続的な、または再発性の疾患および転移を検出するために、詳細にモニタリングされなければならない。
【０１３５】
対象は、次いで、ＣＲＣまたはがんのモニタリングレジメン上に置かれてよい。具体的に、対象は、がんを処置するため、および疾患の進行（または欠如）を評価するために使用されている、あらゆる処置レジメン（外科手術、放射線医学治療、放射線医学処置、化学療法、標的化治療またはこれらの組合せのような）の有効性をモニタリングするための手段を施され得る。ＣＲＣまたはがんのモニタリングレジメンは、周期的な間隔で（週１回、月１回、２か月毎に１回、３か月毎に１回、４か月毎に１回、５か月毎に１回、６か月毎に１回、７か月毎に１回、８か月毎に１回、９か月毎に１回、１０か月毎に１回、１１か月毎に１回および１年に１回であるような周期的に）またはこれらのあらゆる組合せで、ＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰの決定を行うことを伴い得る。
【０１３６】
１８．処置レジメン
上記に記載した方法において、論じた値より高いＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰのレベルを有すると同定された対象は、高リスク腺腫、ＣＲＣ、および／またはＣＲＣ以外のがんに罹患している患者と同定される。対象は、次いで、高リスク腺腫、ＣＲＣおよび／またはがんに対して処置される。あらゆる数々の、または様々な処置レジメンが使用され得る。例えば、このような処置レジメンは、外科手術、化学療法、放射線医学治療、放射線医学処置、標的化治療またはこれらの組合せの１つ以上を含むことができる。
【０１３７】
ａ．がんの処置
化学療法は、１つ以上の化学療法剤の使用を伴う。本明細書で使用される、「化学療法剤」の句は、がんの処置または緩和に有効であることが当業者には公知のあらゆる化学療法剤を意味するものとされる。化学療法剤は、それだけには限定されないが、小分子、合成薬物、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、核酸（例えば、それだけには限定されないが、アンチセンスヌクレオチド配列、三重らせん、および生物学的に活性なタンパク質、ポリペプチドもしくはペプチドをコードするヌクレオチド配列を含めた、ＤＮＡおよびＲＮＡヌクレオチド）、抗体、合成または天然の無機分子、偽薬剤（ｍｉｍｅｔｉｃ  ａｇｅｎｔ）、ならびに合成または天然の有機分子を含む。有用であることが知られている、またはがんの処置もしくは緩和に使用されていた、もしくは現在使用されているあらゆる薬剤が、本明細書に記載する本発明にしたがって、活性ビタミンＤ化合物と併用して使用され得る。例えば、がんの処置または緩和に使用されていた、または現在使用されている治療薬剤に関する情報には、Ｈａｒｄｍａｎら編集、１９９６、Ｇｏｏｄｍａｎ  ＆  Ｇｉｌｍａｎ’ｓ  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  Ｏｆ  Ｂａｓｉｓ  Ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、第９版、ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、Ｎ．Ｙ．を参照されたい。
【０１３８】
化学療法剤は、アルキル化剤、代謝拮抗物質、有糸分裂阻害剤、エピポドフィロトキシン、抗生物質、ホルモンおよびホルモンアンタゴニスト、酵素、白金配位錯体、アントラセンジオン、置換されている尿素、メチルヒドラジン誘導体、イミダゾテトラジン誘導体、細胞保護剤、ＤＮＡトポイソメラーゼインヒビター、生物学的応答修飾物質、レチノイド、治療用抗体、分化誘導剤、免疫調節剤ならびに血管新生阻害剤を含むことができる。
【０１３９】
使用され得る化学療法剤の例は、ＣＲＣの処置または緩和に、使用されていた薬剤、現在使用されている薬剤、または有用であることが知られている薬剤を含む。好ましい薬剤は、それだけには限定されないが、シスプラチン、カルボプラチン、パクリタキセル、ドセタキセル、エトポシド、ビンクリスチン、ビンブラスチン、シクロホスファミド、ドキソルビシン、ビノレルビン、トポテカン、ゲムシタビン、イリノテカン、ゲフィチニブ、イホスファミド、タルセバ、オブリメルセンおよびＴＬＫ２８６を含む。
【０１４０】
使用され得る他の化学療法剤は、アバレリクス、アルデスロイキン、アレムツズマブ、アリトレチノイン、アロプリノール、アルトレタミン、アミホスチン、アナストロゾール、アナストロゾール、三酸化二砒素、アスパラギナーゼ、アザシチジン、ＢＣＧ生、ベバシズマブ（ｂｅｖａｃｅｉｚｕｍａｂ）、ベキサロテン、ブレオマイシン、ボルテゾミブ、ブスルファン、カルステロン、カンプトテシン、カペシタビン、カルボプラチン、カルムスチン、セレコキシブ、セツキシマブ、クロラムブシル、シナカルセト、シスプラチン、クラドリビン、シクロホスファミド、シタラビン、ダカルバジン、ダクチノマイシン、ダーベポエチンアルファ、ダウノルビシン、デニロイキン  ディフティトックス、デキストラゾキサン、ドセタキセル、ドキソルビシン、ドロモスタノロン、ＥｌｌｉｏｔｔのＢ溶液、エピルビシン、エポエチンアルファ、エストラムスチン、エトポシド、エキセメスタン、フィルグラスチム、フロクスウリジン、フルダラビン、フルオロウラシル、フルベストラント、ゲムシタビン、ゲムツズマブ  オゾガマイシン、ゲフィチニブ、ゴセレリン、ヒドロキシ尿素、イブリツモマブ  チウキセタン、イダルビシン、イホスファミド、イマチニブ、インターフェロンアルファ−２ａ、インターフェロンアルファ−２ｂ、イリノテカン、レトロゾール、ロイコボリン、レバミソール、ロムスチン、メクロレタミン、メゲストロール、メルファラン、メルカプトプリン、メスナ、メトトレキセート、メトキサレン、メチルプレドニゾロン、マイトマイシンＣ、ミトタン、ミトキサントロン、ナンドロロン、ノフェツモマブ、オブリメルセン、オプレルベキン、オキサリプラチン、パクリタキセル、パミドロネート、ペガデマーゼ、ペガスパルガーゼ、ペグフィルグラスチム、ペメトレキセド、ペントスタチン、ピポブロマン、プリカマイシン、ポリフェプロサン、ポルフィマー、プロカルバジン、キナクリン、ラスブリカーゼ、リツキシマブ、サルグラモスチム、ＳＮ−３８、ストレプトゾシン、タルク、タモキシフェン、タルセバ、テモゾロミド、テニポシド、テストラクトン、チオグアニン、チオテパ、トポテカン、トレミフェン、トシツモマブ、トラスツズマブ、トレチノイン、ウラシルマスタード、バルルビシン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビノレルビンおよびゾレドロネートを含む。
【０１４１】
化学療法剤は、炎症を緩和するのに有用であることが知られている抗炎症薬も含む。適切な抗炎症薬は、それだけには限定されないが、サリチレート（アスピリン、コリンマグネシウムトリサリチレートサリチル酸メチル、サルサレートおよびジフルニサルのような）、酢酸（インドメタシン、スリンダク、トルメチン、アセクロフェナクおよびジクロフェナクのような）、２−アリールプロピオン酸またはプロフェン（イブプロフェン、ケトプロフェン、ナプロキセン、フェノプロフェン、フルルビプロフェンおよびオキサプロジンのような）、Ｎ−アリールアントラニル酸またはフェナム酸（メフェナム酸、フルフェナム酸およびメクロフェナメートのような）、エノール酸（ｅｎｏｌｉｃ  ａｃｉｄ）またはオキシカム（ピロキシカムおよびメロキシカムのような）、ｃｏｘインヒビター（セレコキシブ、ロフェコキシブ（市場から撤回された）、バルデコキシブ、パレコキシブおよびエトリコキシブのような）、ニメスリドのようなスルホンアニリド、ナフチルアルカノン（ナブメトンのような）、ピラノカルボン酸（エトドラクのような）およびピロール（ケトロラクのような）を含む。
【０１４２】
化学療法剤は免疫調節剤をさらに含む。本明細書で使用される、「免疫調節剤」の句、およびそれだけには限定されないが、免疫調節剤、イムノモジュラント（ｉｍｍｕｎｏｍｏｄｕｌａｎｔ）、免疫調節物質または免疫調節薬を含めたこれらの変形は、宿主の免疫系を調節する薬剤を意味する。特に、免疫調節剤は、１つ以上の外来の抗原に応答する対象の免疫系の能力を改変する薬剤である。一態様において、免疫調節剤は、対象の免疫応答の一側面を、例えば、Ｔｈ１からＴｈ２の応答までの免疫応答に移行する薬剤である。別の態様において、免疫調節剤は、対象の免疫系を阻害または低減する薬剤（すなわち、免疫抑制剤）である。いっそうある特定の他の態様において、免疫調節剤は、対象の免疫系を活性化または増大する薬剤（すなわち、免疫賦活剤）である。
【０１４３】
使用され得る免疫調節剤は、小分子、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、核酸（例えば、それだけには限定されないが、アンチセンスヌクレオチド配列、三重らせん、および生物学的に活性なタンパク質、ポリペプチドもしくはペプチドをコードするヌクレオチド配列を含めた、ＤＮＡおよびＲＮＡヌクレオチド）、抗体、合成または天然の無機分子、偽薬剤、ならびに合成または天然の有機分子を含む。特に有用な免疫調節剤はサリドマイドである。
【０１４４】
本発明の方法において使用され得る免疫調節剤の例は、グルココルチコイド受容体アゴニスト（例えば、コルチゾン、デキサメタゾン、ヒドロコルチゾン、ベタメタゾン）、カルシニュリンインヒビター（例えば、タクロリムスおよびピメクロリムスのようなマクロライド）、イムノフィリン（例えば、シクロスポリンＡ）ならびにｍＴＯＲインヒビター（例えば、ＷｙｅｔｈによってＲＡＰＡＭＵＮＥ（登録商標）として市販されているシロリムス）を含む。本発明に有用な免疫賦活剤は、インターフェロンおよびジドブジン（ＡＺＴ）を含む。
【０１４５】
化学療法剤は、当業者によってＣＲＣの処置に有効であると認められる用量が投与され得る。
【０１４６】
放射線医学治療は、１つ以上の放射線治療剤の使用を伴う。本明細書で使用される、「放射線治療剤」の句は、制限なく、がんの処置または緩和に有効であることが当業者には公知である、あらゆる放射線治療剤を意味するものとされる。例えば、放射線治療剤は、放射線核種治療において投与されるもののような薬剤であってよい。
【０１４７】
放射線核種治療は、制限なく、がんの処置または緩和において有効であることが当業者には公知である、あらゆるスケジュール、用量または方法に従って施され得る。一般的に、放射線核種治療は、がん性細胞の表面に優先的に蓄積し、または表面に結合する放射性同位元素の全身投与を含む。放射性核種の優先的な蓄積は、それだけには限定されないが、速やかに増殖する細胞中への放射性核種の取込み、特殊な標的化のないがん性組織による放射性核種の特異的な蓄積、または新生物に特異的な生体分子に対する放射性核種のコンジュゲーションを含めた、数々のメカニズムによって媒介され得る。
【０１４８】
放射性核種治療において施され得る代表的な放射性核種は、それだけには限定されないが、リン３２、イットリウム９０、ジスプロシウム１６５、インジウム１１１、ストロンチウム８９、サマリウム１５３、レニウム１８６、ヨウ素１３１、ヨウ素１２５、ルテチウム１７７およびビスマス２１３を含む。これらの放射性同位元素は全て、標的化の特異性を提供する生体分子に連結され得るが、ヨウ素１３１、インジウム１１１、リン３２、サマリウム１５３およびレニウム１８６は、このようなコンジュゲーションなしで全身投与され得る。当業者であれば、その新生物上に存在する細胞表面分子に基づいて、放射性核種療法に対して特定の新生物を標的化する上で使用するのに特異的な生体分子を選択することができる。特定の細胞に特異性を提供する生体分子の例は、その全文を参照により本明細書に組み込む、Ｔｈｏｍａｓ、Ｃａｎｃｅｒ  Ｂｉｏｔｈｅｒ．Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．、１７：７１−８２（２００２）による文献に概説されている。さらに、放射性核種療法に有用な投与方法および組成物は、各々その全文を参照により本明細書に組み込む、米国特許第６，４２６，４００号、第６，３５８，１９４号、第５，７６６，５７１号および第５，５６３，２５０号において見出され得る。
【０１４９】
本明細書で使用される、「放射線医学処置」は、制限なく、がんの処置または緩和に有効であることが当業者に公知である、あらゆる放射線医学処置を意味するものとされる。例えば、放射線医学処置は、外照射療法、温熱療法、放射線手術、荷電粒子線治療、中性子線治療または光線力学的治療であってよい。
【０１５０】
外照射療法は、制限なく、がんの処置または緩和において有効であることが当業者には公知である、あらゆるスケジュール、用量または方法に従って施されてよい。一般的に、外照射療法は、対象内の規定された体積を高エネルギービームで照射し、それによってその体積内に細胞死を引き起こすことを含む。照射された体積が、処置しようとするがん全体を含むのが好ましく、できるだけ少ない健常組織を含むのが好ましい。外照射療法に有用な、投与方法および装置および組成物は、各々その全文を参照により本明細書に組み込む、米国特許第６，４４９，３３６号、第６，３９８，７１０号、第６，３９３，０９６号、第６，３３５，９６１号、第６，３０７，９１４号、第６，２５６，５９１号、第６，２４５，００５号、第６，０３８，２８３号、第６，００１，０５４号、第５，８０２，１３６号、第５，５９６，６１９号および第５，５２８，６５２に見出すことができる。
【０１５１】
温熱療法は、制限なく、がんの処置または緩和において有効であることが当業者には公知である、あらゆるスケジュール、用量または方法に従って施されてよい。ある特定の実施形態において、温熱療法は冷凍アブレーション療法であってよい。他の実施形態において、温熱療法は高体温（ｈｙｐｅｒｔｈｅｍｉｃ）療法であってよい。いっそう他の実施形態において、温熱療法は、腫瘍の温度を、高体温療法におけるより高く上昇させる治療法であってよい。
【０１５２】
冷凍アブレーション療法は、新生物の塊の凍結を伴い、細胞内および細胞外の氷晶の堆積、細胞膜、タンパク質およびオルガネラの破壊、ならびに高浸透圧性の環境の誘導をまねき、それによって細胞死を引き起こす。冷凍アブレーション療法のための方法および有用な装置は、各々その全文を参照により本明細書に組み込む、Ｍｕｒｐｈｙら、Ｓｅｍ．Ｕｒｏｌ．Ｏｎｃｏｌ．、１９：１３３−１４０（２００１）および米国特許第６，３８３，１８１号、第６，３８３，１８０号、第５，９９３，４４４号、第５，６５４，２７９号、第５，４３７，６７３号および第５，１４７，３５５号に記載されている。
【０１５３】
高体温療法は、新生物塊の温度を約４２℃から約４４℃までの範囲に上昇させることを伴うのが典型的である。がんの温度はこの温度を超えてさらに上昇され得る；しかし、このような温度は、周囲の健常組織に対する傷害を増大し得る一方で、処置しようとする腫瘍内の細胞死の増大は引き起こさない。腫瘍は、高体温療法において、制限なく、当業者には公知のあらゆる手段によって加熱されてよい。例えば、限定的ではなく、腫瘍は、マイクロ波、高密度焦点式超音波、強磁性熱シード、局在性電流場（ｌｏｃａｌｉｚｅｄ  ｃｕｒｒｅｎｔ  ｆｉｅｌｄ）、赤外線照射、湿潤または乾燥高周波アブレーション、レーザー光凝固、レーザー間質温熱療法および電気焼灼器によって加熱されてよい。マイクロ波および高周波は、導波管アプリケーター、ホーン、スパイラル、電流シートおよびコンパクトアプリケーターによって産生され得る。
【０１５４】
腫瘍の温度を上昇させるための、他の方法および装置および組成物は、各々その全文を参照により本明細書に組み込む、Ｗｕｓｔら、Ｌａｎｃｅｔ  Ｏｎｃｏｌ．、３：４８７−９７（２００２）による文献に概説されており、米国特許第６，４７０，２１７号、第６，３７９，３４７号、第６，１６５，４４０号、第６，１６３，７２６号、第６，０９９，５５４号、第６，００９，３５１号、第５，７７６，１７５号、第５，７０７，４０１号、第５，６５８，２３４号、第５，６２０，４７９号、第５，５４９，６３９号および第５，５２３，０５８号に記載されている。
【０１５５】
放射線手術は、制限なく、がんの処置または緩和において有効であることが当業者には公知である、あらゆるスケジュール、用量または方法に従って施されてよい。一般的に、放射線手術は、対象内の規定された体積を、手操作で指示される放射性源に暴露し、それによってその体積内に細胞死を引き起こすことを含む。照射される体積が、処置しようとするがん全体を含むのが好ましく、できるだけ少ない健常組織を含むのが好ましい。処置しようとする組織が従来の外科技術を使用して最初に暴露され、次いで放射性源がその領域に外科医によって手操作で指示されるのが典型的である。代替的に、放射性源は、例えば腹腔鏡を使用して、照射しようとする組織の付近に配置されてよい。放射線手術に有用な方法および装置は、各々その全文を参照により本明細書に組み込む、Ｖａｌｅｎｔｉｎｉら、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｓｕｒｇ．Ｏｎｃｏｌ．、２８：１８０−１８５（２００２）、ならびに米国特許第６，４２１，４１６号、第６，２４８，０５６号および第５，５４７，４５４号にさらに記載されている。
【０１５６】
荷電粒子線治療は、制限なく、がんの処置または緩和において有効であることが当業者には公知である、あらゆるスケジュール、用量または方法に従って施されてよい。ある特定の実施形態において、荷電粒子線治療は、陽子線放射線治療であってよい。他の実施形態において、荷電粒子線治療は、ヘリウムイオン放射線治療であってよい。一般的に、荷電粒子線治療は、対象内の規定された体積を荷電粒子線で照射し、それによってその体積内に細胞死を引き起こすことを含む。照射される体積が、処置しようとするがん全体を含むのが好ましく、できるだけ少ない健常組織を含むのが好ましい。荷電粒子線治療を投与するための方法は、その全文を参照により本明細書に組み込む、米国特許第５，６６８，３７１号に記載されている。
【０１５７】
中性子線治療は、制限なく、がんの処置または緩和において有効であることが当業者には公知である、あらゆるスケジュール、用量または方法に従って施されてよい。ある特定の実施形態において、中性子線治療は中性子捕捉治療であってよい。このような実施形態において、中性子で衝撃されると放射線を放射し、新生物塊に優先的に蓄積する化合物が、対象に投与される。引き続き、腫瘍が低エネルギー中性子線で照射され、化合物を活性化し、がん性細胞を死滅させる崩壊生成物を化合物に放射させる。活性化しようとする化合物は、上記に記載する通り、または各々その全文を参照により本明細書に組み込む、Ｌａｒａｍｏｒｅ、Ｓｅｍｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．２４：６７２−６８５（１９９７）ならびに米国特許第６，４００，７９６号、第５，８７７，１６５号、第５，８７２，１０７号および第５，６５３，９５７号に記載される方法において、放射性核種の標的化に有用なあらゆる方法に従って、標的組織における優先的な蓄積を引き起こし得る。
【０１５８】
他の実施形態において、中性子照射療法は速中性子療法であってよい。一般的に、速中性子療法は、対象内の規定された体積を中性子線で照射し、それによってその体積内に細胞死を引き起こすことを含む。
【０１５９】
光線力学的治療は、制限なく、がんの処置または緩和において有効であることが当業者には公知である、あらゆるスケジュール、用量または方法に従って施されてよい。一般的に、光線力学的治療は、新生物塊に優先的に蓄積し、新生物を光に感作する感光剤を投与し、次いで腫瘍を好適な波長の光に暴露することを含む。このような曝露の際、感光剤は、例えば一重項酸素のような、がん細胞を死滅させる細胞毒性剤の生成を触媒する。光線力学的治療に有用な投与方法および装置および組成物は、各々その全文を参照により本明細書に組み込む、Ｈｏｐｐｅｒ、Ｌａｎｃｅｔ  Ｏｎｃｏｌ．、１：２１２−２１９（２０００）、ならびに米国特許第６，２８３，９５７号、第６，０７１，９０８号、第６，０１１，５６３号、第５，８５５，５９５号、第５，７１６，５９５号および第５，７０７，４０１号に開示されている。
【０１６０】
放射線治療は、外科手術の前または後、化学療法の前または後、およびときには化学療法の間に、腫瘍細胞を破壊するために施されてもよい。放射線治療は、がんの症状を軽減するための対症の理由で、例えば、痛みを軽くするために施されてもよい。放射線治療を使用して処置され得る腫瘍のタイプの中には、完全に切除され得ず、転移する限局性腫瘍、およびその完全な切除が許容できない機能上もしくは美容上の欠損を引き起こし、または許容できない外科的なリスクに関連する腫瘍がある。
【０１６１】
ＣＲＣの処置において利用しようとする特定の放射線量、および施す方法は両方とも、様々な因子に依存することが理解されよう。よって、本発明の方法に従って使用され得る放射線の線量は、各状況の特定の要件によって決定される。線量は、腫瘍のサイズ、腫瘍の位置、患者の年齢および性別、線量の頻度、他の腫瘍の存在、可能な転位などのような因子に依存する。放射線治療の技術者であれば、各々参照により本明細書に組み込む、Ｈａｌｌ，Ｅ．Ｊ．、Ｒａｄｉｏｂｉｏｌｏｇｙ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｒａｄｉｏｂｉｏｌｏｇｉｓｔ、第５版、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ、Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ、Ｐａ．、２０００；Ｇｕｎｄｅｒｓｏｎ，Ｌ．Ｌ．およびＴｅｐｐｅｒ  Ｊ．Ｅ．編集、Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｒａｄｉａｔｉｏｎ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，  Ｃｈｕｒｃｈｉｌｌ  Ｌｉｖｉｎｇｓｔｏｎｅ、Ｌｏｎｄｏｎ、Ｅｎｇｌａｎｄ、２０００；およびＧｒｏｓｃｈ，Ｄ．Ｓ．、Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  Ｒａｄｉａｔｉｏｎ、第２版、Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ、Ｓａｎ  Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ、Ｃａｌｉｆ、１９８０を参照することによって、あらゆる特定の腫瘍に対する線量および施す方法を容易に確認することができる。
【０１６２】
ｂ．ＣＲＣ処置
ＣＲＣの処置に対して、外科的切除は、およそ５０％の患者における治癒をもたらす。直腸結腸がんに対する外科手術方法は、開腹結腸切除術（結腸半切除、部分的結腸切除または区域切除としても知られる）、腹腔鏡補助下大腸切除術、ならびにポリープ切除および局所切除を含めた結腸手術、ならびにポリープ切除および局所切除、局所経肛門切除（全層切除）、経肛門内視鏡小手術（ＴＥＭ）、低位前方切除、結腸直腸吻合術を有する直腸切除、腹会陰式切除術（ＡＰＲ）および骨盤内容除去を含めた直腸手術を含む。他の処置は、高周波アブレーション、エタノール（アルコール）アブレーション（経皮的エタノール注射（ＰＥＩ）としても知られる）、冷凍外科手術（寒冷療法）および総肝動脈塞栓術を含む。
【０１６３】
化学療法および照射は、ＣＲＣの処置において、手術前（ネオアジュバント）および手術後（アジュバント）の両方に使用され得る。化学療法剤、特に５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）は、ＣＲＣを処置する上で強力な武器である。他の薬剤は、オキサリプラチン（Ｅｌｏｘａｔｉｎ（登録商標））、イリノテカン（Ｃａｍｐｔｏｓａｒ（登録商標））、ロイコボリン、カペシタビン（Ｘｅｌｏｄａ（登録商標））、ベバシズマブ（Ａｖａｓｔｉｎ（登録商標））、セツキシマブ（Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標））およびパニツムマブ（Ｖｅｃｔｉｂｉｘ（登録商標））を含む。これらの薬物は頻繁に組み合わされる。よくある組合せは、ＦＯＬＦＯＸ（５−ＦＵ、ロイコボリン、オキサリプラチン）；ＦＯＬＦＩＲＩ（５−ＦＵ、ロイコボリン、イリノテカン）；およびＦＯＬＦＯＸＩＲＩ（５−ＦＵ、ロイコボリン、イリノテカン、オキサリプラチン）である。ベバシズマブは、標的化治療であり、具体的に、血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）に結合して腫瘍の周囲の血管の形成を妨げるモノクローナル抗体である。セツキシマブおよびパニツムマブは、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）を標的化するモノクローナル抗体である。
【０１６４】
１９．マーカーを測定するためのイムノアッセイ
上記に記載した方法は、ＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰからなる群から選択される以下のマーカーの組合せのレベルを定量する。バイオマーカー、すなわち、ＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰは、イムノアッセイを使用して、上記に記載した方法に対して分析されてもよい。マーカーの存在または量は、各マーカー（すなわち、ＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰ、ならびにこのような付加的な分析物が使用される場合は、あらゆる付加的な分析物）に特異的に結合する抗体を使用して決定され得る。使用され得る抗体の例は、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、ヒト抗体、免疫グロブリン分子、ジスルフィド連結したＦｖ、モノクローナル抗体、親和性成熟した、ｓｃＦｖ、キメラ抗体、単一ドメイン抗体、ＣＤＲグラフト化抗体、ダイアボディ、ヒト化抗体、多特異的抗体、Ｆａｂ、二重特異性抗体、ＤＶＤ、Ｆａｂ’、二特異的抗体、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖおよびこれらの組合せを含む。例えば、免疫学的方法は、（ａ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＡＦＰまたはＡＦＰのフラグメント上のエピトープに結合して捕捉抗体−ＡＦＰ抗原複合体を形成するステップ、（ｉｉ）捕捉抗体−ＡＦＰ抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＡＦＰ上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＡＦＰ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および（ｉｉｉ）試験試料中のＡＦＰレベルを、（ａ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＡＦＰ抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってＡＦＰのレベルを測定するステップ、（ｂ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＥＡまたはＣＥＡのフラグメント上のエピトープに結合して、捕捉抗体−ＣＥＡ抗原複合体を形成するステップ、（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＥＡ抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＥＡ上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＥＡ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および（ｉｉｉ）試験試料中のＣＥＡレベルを、（ｂ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＣＥＡ抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってＣＥＡのレベルを測定するステップ、（ｃ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体は、フェリチンまたはフェリチンのフラグメント上のエピトープに結合して捕捉抗体−フェリチン抗原複合体を形成するステップ、（ｉｉ）捕捉抗体−フェリチン抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないフェリチン上のエピトープに結合し、捕捉抗体−フェリチン抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および（ｉｉｉ）試験試料中のフェリチンレベルを、（ｃ）（ｉｉ）において形成した捕捉抗体−フェリチン抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってフェリチンのレベルを測定するステップ、（ｄ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＹＦＲＡまたはＣＹＦＲＡのフラグメント上のエピトープに結合して、捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原複合体を形成するステップ、（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＹＦＲＡ上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および（ｉｉｉ）試験試料中のＣＹＦＲＡレベルを、（ｄ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってＣＹＦＲＡのレベルを測定するステップ、（ｅ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＡ１９−９またはＣＡ１９−９のフラグメント上のエピトープに結合して、捕捉抗体−ＣＡ１９−９抗原複合体を形成するステップ、（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＡ１９−９抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＡ１９−９上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＡ１９−９抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および（ｉｉｉ）試験試料中のＣＡ１９−９レベルを、（ｅ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＣＡ１９−９抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってＣＡ１９−９のレベルを測定するステップ、（ｆ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＴＩＭＰ−１またはＴＩＭＰ−１のフラグメント上のエピトープに結合して、捕捉抗体−ＴＩＭＰ−１抗原複合体を形成するステップ、（ｉｉ）捕捉抗体−ＴＩＭＰ−１抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＴＩＭＰ−１上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＴＩＭＰ−１抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および（ｉｉｉ）試験試料中のＴＩＭＰ−１レベルを、（ｆ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＴＩＭＰ−１抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってＴＩＭＰ−１のレベルを測定するステップ、（ｇ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＧＡＬ３またはＧＡＬ３のフラグメント上のエピトープに結合して、捕捉抗体−ＧＡＬ３抗原複合体を形成するステップ、（ｉｉ）捕捉抗体−ＧＡＬ３抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＧＡＬ３上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＧＡＬ３抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および（ｉｉｉ）試験試料中のＧＡＬ３レベルを、（ｇ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＧＡＬ３抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってＧＡＬ３のレベルを測定するステップ、ならびに／または（ｈ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＲＰまたはＣＲＰのフラグメント上のエピトープに結合して、捕捉抗体−ＣＲＰ抗原複合体を形成するステップ、（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＲＰ抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＲＰ上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＲＰ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および（ｉｉｉ）試験試料中のＣＲＰレベルを、（ｈ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＣＲＰ抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってＣＲＰのレベルを測定するステップを含むことができる。
【０１６５】
あらゆるイムノアッセイが利用され得る。イムノアッセイは、例えば、酵素結合免疫吸着検定法（ＥＬＩＳＡ）、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）、フォワードもしくはリバース競合的阻害アッセイのような競合的阻害アッセイ、蛍光偏光アッセイまたは競合的結合アッセイであってよい。ＥＬＩＳＡは、サンドイッチＥＬＩＳＡであってよい。抗体の、マーカーに対する特異的な免疫学的結合は、蛍光もしくは発光タグのような直接標識、抗体に付着している金属および放射性核種、またはアルカリホスファターゼもしくはセイヨウワサビのペルオキシダーゼのような間接的な標識によって検出され得る。
【０１６６】
固定化された抗体またはそのフラグメントの使用がイムノアッセイに組み入れられてもよい。抗体は、磁性またはクロマトグラフィーのマトリクス粒子のような様々な支持体、アッセイプレート（マイクロタイターウエルのような）の表面、固体基質材料の片などの上に固定されてよい。アッセイストリップは、固体支持体上に一ならびの抗体または複数の抗体をコーティングすることによって調製されてもよい。このストリップは、次いで生物学的試験試料中に浸漬され、次いで、着色されたスポットのような測定可能なシグナルを発生させるための洗浄および検出のステップを介して速やかに処理加工されてもよい。
【０１６７】
サンドイッチＥＬＩＳＡは、２層の抗体（すなわち、捕捉抗体と検出抗体と（これらは検出可能な標識で標識されていてよい））の間の抗原の量を測定する。測定しようとするマーカー、すなわち、ＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰは、抗体に結合することができる少なくとも２つの抗原性部位を含むことができる。サンドイッチＥＬＩＳＡにおけるモノクローナル抗体またはポリクローナル抗体のいずれかが、捕捉抗体および検出抗体として使用されてよい。
【０１６８】
一般的に、試験試料または生物学的試料中のマーカー、すなわち、ＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰ（およびあらゆる付加的な分析物）を分離および定量するのに、少なくとも２つの抗体が使用される。より具体的に、少なくとも２つの抗体がマーカーの、あるエピトープに結合し、「サンドイッチ」と呼ばれる免疫複合体を形成する。試験試料中のマーカーを捕捉するのに、１つ以上の抗体が使用され得（これらの抗体は頻繁に「捕捉」抗体と呼ばれる）、検出可能な（すなわち、定量可能な）標識をサンドイッチに結合するのに１つ以上の抗体が使用される（これらの抗体は頻繁に「検出」抗体と呼ばれる）。サンドイッチアッセイにおいて、両方の抗体のそれらのエピトープに対する結合は、アッセイにおけるあらゆる他の抗体をそれぞれのエピトープに結合することによって低減され得ない。換言すると、抗体は、マーカーを含むことが疑われる試験試料と接触させられた１つ以上の第１の抗体が、第２または後続の抗体によって認識されるエピトープの全てまたは一部に結合せず、それによって１つ以上の第２の検出抗体がマーカーに結合する能力を妨害しないように選択され得る。
【０１６９】
好ましい実施形態において、マーカー、すなわち、ＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰを含むことが疑われる試験試料または生物学的試料は、少なくとも１つの第１の捕捉抗体および少なくとも１つの第２の検出抗体と、同時にまたは逐次的のいずれかで接触され得る。サンドイッチアッセイのフォーマットにおいて、マーカーを含むことが疑われる試験試料は最初に、第１の抗体−マーカー複合体の形成を許す条件下、特定のエピトープに特異的に結合する少なくとも１つの第１の捕捉と接触させられる。１つを超える捕捉抗体が使用される場合、第１の複数の捕捉抗体−マーカー複合体が形成される。サンドイッチアッセイでは、抗体、好ましくは少なくとも１つの捕捉抗体が、試験試料中に予想される最大量のマーカーのモル過剰量において使用される。
【０１７０】
任意選択的に、試験試料を少なくとも１つの第１の捕捉抗体と接触させる前、少なくとも１つの第１の捕捉抗体が、第１の抗体−マーカー複合体が試験試料から分離するのを促進する固体支持体に結合していてよい。それだけには限定されないが、ウェル、チューブまたはビーズの形態のポリマー材料から作られた固体支持体を含めた、当技術分野では公知のあらゆる固体支持体が使用されてよい。このような結合が、マーカーに結合する抗体の能力を妨害しないのであれば、抗体（または抗原）は、吸着によって、化学カップリング剤を使用して共有結合によって、または当技術分野では公知の他の手段によって、固体支持体に結合していてよい。さらに、適宜、固体支持体は、抗体上の様々な官能基との反応性を許すように誘導体化されてもよい。このような誘導体化は、それだけには限定されないが、無水マレイン酸、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドおよび１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミドのようなある種のカップリング剤の使用を必要とする。
【０１７１】
マーカーを含むことが疑われる試験試料が、少なくとも１つの第１の捕捉抗体と接触させられた後、第１の捕捉抗体（または複数の抗体）−マーカー複合体の形成を許すために、試験試料がインキュベートされる。インキュベートは、約４．５から約１０．０までのｐＨで、約２℃から約４５℃までの温度で、少なくとも約１分から約１８時間、約２−６分、または約３−４分の期間行われてよい。
【０１７２】
第１の／複数の捕捉抗体−マーカー複合体の形成後、複合体は、次いで、少なくとも１つの第２の検出抗体と接触させられる（第１の／複数の抗体−マーカー第２の抗体複合体の形成を許す条件下）。第１の抗体−マーカー複合体が、１つを超える検出抗体と接触させられた場合、第１の／複数の捕捉抗体−マーカー−複数の抗体検出複合体が形成される。第１の抗体同様、少なくとも第２の（および後続の）抗体が第１の抗体−マーカー複合体と接触させられる場合、上記に記載した条件と同様の条件下のインキュベートの期間が、第１の／複数の抗体−マーカー−第２の／複数の抗体複合体の形成に必要とされる。少なくとも１つの第２の抗体が、検出可能な抗体を含むのが好ましい。検出可能な標識は、第１の／複数の抗体−マーカー−第２の／複数の抗体複合体の形成前、形成と同時に、または形成後、少なくとも１つの第２の抗体に結合していてもよい。当技術分野では公知のあらゆる検出可能な標識が使用され得る。
【０１７３】
２０．方法を行うためのキット
本明細書に、上記に記載した方法を行うのに使用され得るキットが提供される。キットは、（１）対象から単離された生物学的試料中のＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰのマーカーのレベルを定量するための、ＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰの各々のマーカーに特異的に結合することができる試薬、ならびに（２）ＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰの各々のマーカーの基準レベルを指し示す参照標準を提供することができ、少なくとも１つの試薬は、好適なマーカーに特異的に結合することができる少なくとも１つの抗体を含む。キットは、生物学的試料中の各バイオマーカーの濃度を定量するための、ＡＦＰに特異的に結合することができる試薬、ＣＥＡに特異的に結合することができる試薬、フェリチンに特異的に結合することができる試薬、ＣＹＦＲＡに特異的に結合することができる試薬、ＣＡ１９−９に特異的に結合することができる試薬、ＴＩＭＰ−１に特異的に結合することができる試薬、Ｇａｌ３に特異的に結合することができる試薬、および／またはＣＲＰに特異的に結合することができる試薬、ならびに生物学的試料中の各々のバイオマーカー（すなわち、ＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰ）の基準レベルを指し示す参照標準を含むことができる。キットは、ｍＳ９、ＨｂＡ１ｃ、Ｃ３ａ、ＣａｔＸ、ｓｕＰＡＲ（Ｉ）、ＰＡＩ−１および／もしくはＥＮＯ２の少なくとも１つの付加的なバイオマーカー、またはこれらのあらゆる組合せに特異的に結合することができる少なくとも１つの試薬（すなわち、抗体）、ならびに存在する場合、少なくとも１つの付加的なＣＲＣのバイオマーカーの基準レベルを指し示す参照標準をさらに含むことができる。
【０１７４】
キットは、抗体、および抗体を投与するための手段を含むことができる。キットは、キットを使用し、分析を行い、モニタリングし、または処置するための指示書をさらに含むことができる。
【０１７５】
キットは、バイアルまたはビンのような１つ以上の容器も含むことができ、各容器は別々の試薬を含む。キットは、分析を行いもしくは解釈し、モニタリングし、処置する方法、または本明細書に記載する方法を記載し得る書面の指示書をさらに含むことができる。
【０１７６】
例えば、キットは、イムノアッセイ、例えば、化学発光微粒子イムノアッセイによって、ＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰに対して試験試料をアッセイするための指示書を含むことができる。指示書は、紙の形態であっても、またはディスク、ＣＤ、ＤＶＤなどのようなコンピュータで読むことができる形態であってもよい。抗体は、ＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／もしくはＣＲＰの捕捉抗体でも、ならびに／またはＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／もしくはＣＲＰの検出抗体（検出可能な標識で標識された抗体を意味する。）でもよい。例えば、キットは、ＡＦＰに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、ＣＥＡに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、フェリチンに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、ＣＹＦＲＡに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、ＣＡ１９−９に特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、ＴＩＭＰ−１に特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、Ｇａｌ３に特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および／またはＣＲＰに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体を含むことができる。キットは、各捕捉抗体に対するコンジュゲート抗体（検出可能な標識で標識された抗体のような）（すなわち、ＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰそれぞれに特異的に結合する各々の捕捉抗体に対するコンジュゲート抗体）も含むことができる。代替的に、または加えて、キットは、例えば、精製され、任意選択的に凍結乾燥されたキャリブレータまたは対照（例えば、ＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／もしくはＣＲＰ）、ならびに／またはアッセイを行うための少なくとも１つの容器（例えば、抗−ＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／もしくはＣＲＰのモノクローナル抗体ですでにコーティングされていてもよい、チューブ、マイクロタイタープレートもしくはストリップ）、ならびに／またはアッセイバッファーもしくは洗浄バッファーのようなバッファー（これらのうちいずれか１つは濃縮溶液、検出可能な標識（例えば、酵素標識）に対する基質溶液、もしくは停止溶液として供給されてもよい。）を含むことができる。キットが、全ての構成成分、すなわち、アッセイを行うのに必要である、試薬、標準、バッファー、希釈液などを含むのが好ましい。指示書は、標準曲線を産生するための指示書、またはＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／もしくはＣＲＰを定量する目的で参照標準も含むことができる。
【０１７７】
上記に暗示した通り、ＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰに特異的な組換え抗体のような、キット中に提供されるあらゆる抗体は、フルオロフォア、放射性モイエティ、酵素、ビオチン／アビジン標識、発色団、化学発光標識などのような検出可能な標識を組み入れることができ、またはキットは、抗体を標識するための試薬、もしくは抗体を検出するための試薬（例えば、検出抗体）、および／もしくは分析物を標識するための試薬、もしくは分析物を検出するための試薬を含むことができる。抗体、キャリブレータおよび／または対照は、別々の容器において提供されてもよく、または好適なアッセイフォーマット中、例えばマイクロタイタープレート中に予め分配されてもよい。
【０１７８】
任意選択的に、キットは、精度管理の構成成分（例えば、感受性パネル、キャリブレータおよび陽性対照）を含む。精度管理試薬の調製は、当技術分野では周知であり、様々な免疫診断生成物用の挿入シート上に記載されている。感受性パネルのメンバーが、任意選択的に、アッセイ性能の特徴を確立するために使用され、さらに任意選択的に、イムノアッセイキット試薬の一体性およびアッセイの標準化の有用な指標である。
【０１７９】
キットは、診断アッセイを行い、またはバッファー、塩、酵素、酵素の補助因子、基質、検出試薬などのような精度管理の評価を促進するのに必要とされる他の試薬も任意選択的に含むことができる。バッファー、ならびに試験試料を単離および／または処理するための溶液（例えば、前処理試薬）のような他の構成成分も、キットに含まれてよい。キットは、１つ以上の他の対照を付加的に含むことができる。キットの１つ以上の構成成分は凍結乾燥されていてよく、この場合、キットは、凍結乾燥されている構成成分の再構成に適する試薬をさらに含むことができる。
【０１８０】
キットの様々な構成成分は、適宜、適切な容器、例えばマイクロタイタープレートにおいて任意選択的に提供される。キットは、試料を保持または貯蔵するための容器（例えば、血液試料用の容器またはカートリッジ）をさらに含むことができる。必要に応じて、キットは、反応容器、混合容器、および試薬または試験試料の調製を促進する他の構成成分も任意選択的に含むことができる。キットは、シリンジ、ピペット、ピンセット、計測スプーンなどのような、試験試料を得るのを助けるための１つ以上の器具も含むことができる。
【０１８１】
検出可能な標識が少なくとも１つのアクリジニウム化合物である場合、キットは、少なくとも１つのアクリジニウム−９−カルボキシレート、少なくとも１つのアクリジニウム−９−カルボキシレートアリールエステル、またはこれらのあらゆる組合せを含むことができる。検出可能な標識が少なくとも１つのアクリジニウム化合物である場合、キットは、バッファー、溶液、および／または少なくとも１つの塩基溶液のような、過酸化水素の供給源も含むことができる。
【０１８２】
所望により、キットは、磁性粒子、ビーズ、試験管、マイクロタイタープレート、キュベット、膜、骨格分子、フィルム、濾紙、水晶、ディスクまたはチップのような固相を含むことができる。キットはまた、検出抗体として機能する抗体のような、抗体であってよく、または抗体にコンジュゲートしている、検出可能な標識も含むことができる。検出可能な標識は、例えば、直接標識であってよく、直接標識は、酵素、オリゴヌクレオチド、ナノ粒子、ケミルミノフォア、フルオロフォア、蛍光クエンチャ、化学発光クエンチャまたはビオチンであってよい。キットは、任意選択的に、標識を検出するのに必要とされる、あらゆる付加的な試薬を含むことができる。
【０１８３】
所望により、キットは、試験試料を別の分析物に対してアッセイするために、１つ以上の構成成分を、単独で、または指示書とのさらなる組合せにおいてさらに含むことができ、別の分析物は、がんのバイオマーカーのようなバイオマーカーであってよい。分析物の例は、それだけには限定されないが、ＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰ、ならびにＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰのフラグメント、ならびに本明細書で論じる、または当技術分野において別の方法で知られている、他の分析物およびバイオマーカーを含む。一部の実施形態において、試験試料をＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰに対してアッセイするための１つ以上の構成成分は、ＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰの存在、量または濃度の決定を可能にする。血清試料のような試料が、ＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰに対して、ＴＯＦ−ＭＳおよび内部標準を使用してやはりアッセイされ得る。
【０１８４】
キット（またはその構成成分）、ならびに本明細書に記載するイムノアッセイによって試験試料中のＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰの濃度を決定する方法は、例えば、米国特許第５，０８９，４２４号および第５，００６，３０９号に記載される通り、ならびに例えば、Ａｂｂｏｔｔ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ａｂｂｏｔｔ  Ｐａｒｋ、ＩＬ．）によりＡＲＣＨＩＴＥＣＴ（登録商標）として市販される、様々な自動化および半自動化のシステム（固相が微粒子を含むものを含めて）において使用するために適用され得る。
【０１８５】
自動化または半自動化のシステムを、非自動化システム（例えば、ＥＬＩＳＡ）と比べた間の違いのいくつかは、それに対して第１の特異的な結合パートナー（例えば、分析物の抗体または捕捉抗体）が付着している（これがサンドイッチの形成および分析物の反応性に影響を及ぼし得る。）基質、ならびに捕捉、検出、および／またはあらゆる任意選択的な洗浄ステップの長さおよびタイミングを含む。ＥＬＩＳＡのような非自動化のフォーマットは、試料および捕捉試料との比較的長いインキュベーション時間を必要とし得る（例えば、約２時間）が、自動化または半自動化のフォーマット（例えば、ＡＲＣＨＩＴＥＣＴ（登録商標）およびあらゆる後続のプラットホーム、Ａｂｂｏｔｔ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）は比較的短いインキュベーション時間を有し得る（例えば、ＡＲＣＨＩＴＥＣＴ（登録商標）ではおよそ１８分）。同様に、ＥＬＩＳＡのような非自動化のフォーマットは、コンジュゲート試薬のような検出抗体を、比較的長いインキュベーション時間（例えば、約２時間）の間インキュベートし得るが、自動化または半自動化のフォーマット（例えば、ＡＲＣＨＩＴＥＣＴ（登録商標）およびあらゆる後続のプラットホーム）は比較的短いインキュベーション時間を有し得る（例えば、ＡＲＣＨＩＴＥＣＴ（登録商標）およびあらゆる後続のプラットホームではおよそ４分）。
【０１８６】
Ａｂｂｏｔｔ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓから入手できる他のプラットホームは、それだけには限定されないが、ＡｘＳＹＭ（登録商標）、ＩＭｘ（登録商標）（例えば、その全文を参照により本明細書に組み込む、米国特許第５，２９４，４０４号を参照されたい。）、ＰＲＩＳＭ（登録商標）、ＥＩＡ（ビーズ）、およびＱｕａｎｔｕｍ（商標）ＩＩ、および他のプラットホームを含む。加えて、アッセイ、キット、およびキットの構成成分は、他のフォーマットにおいて、例えば、電気化学的または他のハンドヘルドまたはポイントオブケアのアッセイシステム上で使用され得る。本開示は、例えば、サンドイッチイムノアッセイを行う、市販のＡｂｂｏｔｔ  Ｐｏｉｎｔ  ｏｆ  Ｃａｒｅ（ｉ−ＳＴＡＴ（登録商標）、Ａｂｂｏｔｔ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）電気化学的イムノアッセイシステムに適用できる。イムノセンサ、および単回使用（ｓｉｎｇｌｅ−ｕｓｅ）の試験装置におけるこれらの製造方法および操作方法は、例えば、その全文を参照により、それに関するこれらの教示に対して組み込む、米国特許第５，０６３，０８１号、米国特許出願公開第２００３／０１７０８８１号、米国特許出願公開第２００４／００１８５７７号、米国特許出願公開第２００５／００５４０７８号および米国特許出願公開第２００６／０１６０１６４号に記載されている。
【０１８７】
特に、アッセイのＩ−ＳＴＡＴ（登録商標）システムへの適用に関して、以下の立体配置が好ましい。微細加工されたシリコンチップが、１対の金電流測定作用電極および銀−塩化銀基準電極で製造される。一方の作用電極上で、捕捉抗体を固定化したポリスチレンビーズ（直径０．２ｍｍ）が、電極にわたって形作られたポリビニルアルコールのポリマーコーティングに付着している。このチップを、イムノアッセイに適する流体力学のフォーマットで、Ｉ−ＳＴＡＴ（登録商標）カートリッジに組み立てる。カートリッジの試料保持チャンバーの壁のポーション上に、アルカリホスファターゼ（または他の標識）で標識された検出抗体を含む層が存在する。カートリッジの液体パウチ内に、ｐ−アミノフェノールホスフェートを含む水性試薬がある。
【０１８８】
操作において、ＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰを含むことが疑われる試料が、試験カートリッジの保持チャンバーに添加され、カートリッジがＩ−ＳＴＡＴ（登録商標）リーダー中に挿入される。第２の抗体（検出抗体）が試料中に溶解された後、カートリッジ内のポンプエレメントが、試料を、チップを含む導管中に強制的に入れる。ここで、これが振動して、第１の捕捉抗体、ＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰと、標識された第２の検出抗体との間にサンドイッチの形成を促進する。アッセイの最後から２番目のステップにおいて、液体がパウチから強制的に出され導管に入れられて、試料をチップから洗浄し、廃棄チャンバー中に入れる。アッセイの最終ステップにおいて、アルカリホスファターゼ標識がｐ−アミノフェノールホスフェートと反応してホスフェート基を切断し、遊離したｐ−アミノフェノールを、作用電極で電気化学的に酸化させる。測定された電流に基づいて、リーダーは、埋め込まれているアルゴリズムおよび製造所で決定された検量線によって、試料中のＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ＣＹＦＲＡ、ＣＡ１９−９、ＴＩＭＰ−１、Ｇａｌ３および／またはＣＲＰの量を計算することができる。
【０１８９】
当業者には、本明細書に記載する本開示の他の適切な修飾および方法の適応が、容易に適用可能であり、理解でき、本開示、または本明細書に開示する態様および実施形態の範囲から逸脱せずに、適切な同等物を使用して行われ得ることが容易に明らかである。ここに本開示を詳しく記載してきたが、本開示は、以下の実施例を参照することによってより明らかに理解されるが、以下の実施例は、本開示のいくつかの態様および実施形態を説明することだけを単に意図するものであり、本開示の範囲を限定するものとみなしてはならない。本明細書において言及される全ての雑誌の参考文献、米国特許および出版物は、その全文が参照により本明細書に組み込まれる。
【０１９０】
本発明は、以下の非限定的な実施例によって説明される、複数の態様を有する。
【実施例】
【０１９１】
［実施例１］
材料と方法
Ｈｖｉｄｏｖｒｅ  Ｈｏｓｐｉｔａｌ内視鏡検査ＩＩ相臨床試験の患者の血漿検体からの、臨床母集団（患者合計４６９８人中４５２１人に対して一次分析）を使用した。１群（３６１０人）：低リスク腺腫２９０人および他の非がん集団３３２０人；２群（９１１人）：高リスク腺腫３９９人、ＣＲＣ（初期段階およそ５０％）５１２人−ステージ分け情報：Ｓ１（１０７人）、Ｓ２（１６３人）、Ｓ３（１３９人）、Ｓ４（１０８人）、およびステージ欠落１人。３群（１７７人）：他の非ＣＲＣ悪性病変：合計１７６人（ＣＲＣではない）（表１を参照されたい。）、３群は一次分析に対して排除された。臨床上の系統：デンマーク国家登録およびデータを「監査する」能力。客観的な／信用されるパラメータに注目して、１１０の臨床パラメータを採集した。
【０１９２】
【表１】
0006750140.tif 000002
【０１９３】
参加したデンマークの病院６所のうちの１所でＳ字結腸鏡検査および／または結腸鏡検査に照会された、ＣＲＣの症状を有する個体が、試験に含まれた（全員が試験参加の一部として結腸鏡検査を受けた。）。リクルートの間、データが記録され、ベースライン時の試料が採集された。ベースラインデータが集計された（平均値±標準偏差、または連続的なデータに対する中央値および４分位間範囲、ならびにカテゴリーデータに対する比率）。適宜、独立ｔ検定、マンホイットニーＵ検定、カイ二乗（χ２）検定、またはフィッシャー直接確率法を使用した統計上の差を使用して、群間の統計上の差を検定した。組入れ基準および除外基準を表２に示す。
【０１９４】
【表２】
0006750140.tif 000003
【０１９５】
スクリーニング関連の新生物およびがんを、スクリーニングされた患者におけるこれらの所見と定義した：
ａ．高悪性度の形成異常を有する腺腫（病理学者の評価）−デンマーク悪性転換グレードによって規定された（高悪性度のみ）
ｂ．１ｃｍに等しくまたはより大きい腺腫
ｃ．腸におけるポリープ数（３個に等しくまたはそれより多い）
ｄ．全ステージのＣＲＣ
血液５４ｍｌを末梢肘正中静脈から採集した、実施例２を参照されたい。血液試料は全て、結腸鏡検査の前に採取した。採集した血液試料中のバイオマーカーのレベルを決定した。残りの試料は、Ｈｖｉｄｏｂｒｅ  Ｈｏｓｐｉｔａｌのバイオバンク（ｂｉｏｂａｎｋ）において−８０℃で貯蔵し、−８０℃の冷凍庫は全て、週７日あたり２４時間、電子的な監視下におかれた。
【０１９６】
［実施例２］
血液試料−採血および取扱い
採血用装置、採血管、ピペット、貯蔵用バイアルなどは全て、プロトコール管理によって送達された。装置および管は全て、内毒素、ＤＮＡ’ｓｅおよびＲＮＡ’ｓｅフリーであった。
【０１９７】
試料を、軽量止血帯を使用して室温で採集し、遠心分離前は室温で貯蔵し、２時間以内に３２００×Ｇで１０分間遠心分離し、バフィーコート（試験の序文に示す、白色帯）上０．５ｃｍの血漿／血清を乱さずに注意深く分離した。遠心分離終了直後に試料を分離した。
【０１９８】
１．末梢前腕静脈から血液３０ｍｌをＥＤＴＡ管各１０ｍｌ（紫色）３本。管１からの上清を、ＣＭ−ｌａｂバイアル４本に各管中およそ１ｍｌ移し、バーコード１−４で印をつけた。管２プラス管３からの上清を、ＣＭ−ｌａｂ管に各管中およそ２ｍｌ移し、バーコード５−８で印をつけた。
２．血液２０ｍｌを各１０ｍｌ２本−添加剤なし（赤色）。２本の管からの上清を、ＣＭ−ｌａｂバイアル６本に各管中およそ１．５ｍｌ移し、バーコード９−１４で印をつけた。
３．血液９ｍｌをクエン酸添加剤入り２本−各管４．５ｍｌ（淡青色）。２本の管からの上清を、ＣＭ−ｌａｂバイアル４本に各管中およそ１．２ｍｌ移し、バーコード１５−１８で印をつけた。
４．ＥＤＴＡ管３本からのバフィーコート。各管からのバフィーコートを、各々ＣＭ−ｌａｂバイアル１本に移した（合計３本）。滅菌の等張ＮａＣｌを、１：１の希釈比で加え、８−１０回転倒混和し、バーコード１９−２１で印をつけた。
【０１９９】
全てのバイアルを直ちに、プロトコールにおける−８０℃の冷凍庫中、配布された貯蔵箱（５．５×５．５×１３ｃｍ）を使用して貯蔵した。貯蔵したバイアルは、−８０℃の長期貯蔵用に、２４／７電子的監視下、Ｈｖｉｄｏｂｒｅ  Ｈｏｓｐｉｔａｌの貯蔵所に頻繁に移送された。
【０２００】
［実施例３］
統計学的評価
分析は、ＳＡＳ  ｖ９．２、Ｒ  ｖ３．０．３またはＪＭＰ  Ｐｒｏ  ｖｌ  １を使用して行われた。変数の、多変数の統計学的評価が、ＡＩＭ（適応インデックスモデル）を使用して行われた（Ｔｉａｎ  Ｌｕ、Ｔｉｂｓｈｉｒａｎｉ  Ｒｏｂｅｒｔ．、Ａｄａｐｔｉｖｅ  Ｉｎｄｅｘ  ｍｏｄｅｌｓ  ｆｏｒ  ｍａｒｋｅｒ−ｂａｓｅｄ  ｒｉｓｋ  ｓｔｒａｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ．、Ｂｉｏｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ（２０１１）、１２、１、６８−８６頁）。
【０２０１】
［実施例４］
バイオマーカーの選択
バイオマーカーの組合せが、結腸および直腸の新生物（例えば、高悪性度腺腫）ならびに早期の直腸結腸がん（ＣＲＣ）の検出における手助けとして、新たな臨床上の有用性のために調査された。試験母集団は合計４６９８人の対象を含んでいた。
【０２０２】
アルゴリズムの開発。適応インデックスモデル（ＡＩＭ）法が、変数およびそのカットオフの最適なサブセットを同定するために選択されたが、カットオフは、アルゴリズム（「インデックス」）として組み合わせると、評価中のアウトカムに対する高リスクの者を選択することができた。表７はアウトカム番号を記載する。この手順において、二進法ルールの特定された最大数まで一連の適応インデックスモデルを連続的に推定するのに、ロジスティック回帰分析モデルが使用された。この手順は、変数の順方向選択（ｆｏｒｗａｒｄ  ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ）およびそれらのカットオフを使用して、二進法ルールの増大数で、この連続するセットのインデックスを構築するものであった。インデックスに含まれるべき二進法ルールの最適数または変数が、ｋ倍交差検証によって選択された。ｋ倍交差検証は、データをランダムに選ばれたｋ個のセグメントに分解する、サンプル再利用方法である。各反復に対して、ｋ個のセグメントのうち１個が「テスト」データセットとして使用され、組み合わされた他のｋ−１個のセグメントが「トレーニング」データセットとして使用された。その結果、手順がｋ回繰り返された。手順の各反復に対して、スコアテストの統計が、アウトカムと、トレーニングデータを使用して構築されたインデックスとの間の関連を試験するためのテストデータセットにおいて推定された。インデックスに含まれるべき、許容される二進法ルールの最適数、または変数が、交差検証された（最大平均）スコア統計値によって決定された。
【０２０３】
データは、上記に記載した手順を使用したアルゴリズム開発に使用されるべき内部データセットと、アルゴリズム開発において全く使用されないが、各アウトカムに対するアルゴリズム性能の独立的な評価として働く外部データセットとにランダムに分割された。内部データセットおよび外部データセットのこの方法は、実世界の筋書きを模倣するのに好ましかった。内部データセットからの各アウトカムに評価可能なデータを全て使用して、交差検証によってモデル１−モデル６が構築され、変数の最適数、および性別によるそれらのカットオフが同定された。アウトカム１、アウトカム５およびアウトカム１２が評価された。評価下のパラメータは以下を含んでいた：マーカーＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ガレクチン−３、ＣＹＦＲＡ２１−１、ＣＡ１９−９ＸＲ、ＴＩＭＰ−１およびｈｓＣＲＰ；年齢、カテゴリー変数としての同時罹患率総数（０、１または２＋）、ならびにデンマークコードによって計測したＣＶＤおよび糖尿病の同時罹患率。表３は、各モデルに対する判定基準を示す。
【０２０４】
【表３】
0006750140.tif 000004
【０２０５】
加えて、内部データセットおよび外部データセット両方において、同定されたインデックスからＡＩＭスコアが、対象に対して算出された。ＡＩＭスコアは、カットオフ判定基準が満たされるインデックスからの変数の数である。このＡＩＭスコアは、０からＪまで別個の値をとる（Ｊは、インデックスにおいて同定される変数の最適数の数である。）。スコア０は、その者が、インデックスにおけるあらゆる変数に対してカットオフ判定基準を満たさないことを指し示す。スコア１は、その者が、インデックスにおける１つの変数のみに対してカットオフ判定基準を満たすことを指し示す。Ｊのカットオフ判定基準のうちどれが満たされるかは問題ではない。スコアＪは、その者が、インデックスにおけるあらゆる変数に対してカットオフ判定基準を満たすことを指し示す。次いで、１からＪまでのＡＩＭスコアの各値に対して、そのスコア値を閾値として使用して、混同行列（誤分類率、正確さ、感度、特異性、負の予測値および正の予測値）が算出され得る。その閾値に等しい、またはより高いスコアを有する対象を、目的のアウトカムに対する「陽性」とみなした。その推定される混同行列パラメータに関して臨床上有用である閾値が選択された。内部データセットおよび外部データセットに対して混同行列を算出することによって、過剰適合に起因する楽観性の程度（ｄｅｇｒｅｅ  ｏｆ  ｏｐｔｉｍｉｓｍ）が、内部データセットと外部データセットとの間の測定の差において見られた。
【０２０６】
表４は、ＡＩＭ法を示し、リストは：マーカーＡＦＰ、ＣＥＡ、フェリチン、ガレクチン−３、ＣＹＦＲＡ２１−１、ＣＡ１９−９ＸＲ、ＴＩＭＰ−１およびｈｓＣＲＰ；年齢、ＣＶＤ同時罹患率、糖尿病の同時罹患率、ならびにカテゴリー変数として同時罹患率総数（０、１または２＋）である。
【０２０７】
【表４】
0006750140.tif 000005
【０２０８】
モデル性能：定義
閾値：「スコア」の潜在的なレベル
誤分類％：アルゴリズムが、真の分類先と反対に分類した人々の比率
感度（ＳＥ）：試験時に陽性である、疾患を有する人々の比率
特異性（ＳＰ）：試験時に陰性である、疾患のない人々の比率
正の予測値（ＰＰＶ）：試験陽性の者が疾患を有する確率
負の予測値（ＮＰＶ）：試験陰性の者が疾患を有さない確率
正確さ：診断が正しい比率
陽性尤度比（ＬＲ＋）：疾患を有する者における試験結果陽性の確率の、疾患を有さない者における試験結果陽性の確率に対する比率
陰性尤度比（ＬＲ−）：疾患を有する者における試験結果陰性の確率の、疾患を有さない者における試験結果陰性の確率に対する比率
試験後確率（事後ＰＲ＋）：疾患の有病率および試験陽性の尤度を考慮した、疾患を有する確率
【０２０９】
［実施例５］
結果−男性
男性に対する混同行列を表５に示す。アウトカム１  試料数：内部＝１３７３、外部＝７６９（陽性１７８）；アウトカム５  試料数：内部＝１２３６、外部＝６９０（陽性３８、小）；アウトカム１２  試料数：内部＝１１０１、外部＝６１８（陽性３３、小）。影付きは、特異性６０％および／または感度６０％に近い閾値を指し示す。
混同行列の解釈。例として表５から、アウトカム１、外部データセット、閾値≧３を使用：
誤分類％：対象の２５％が誤分類される（がんを有さない場合にがんを有すると予想され、またはがんを有する場合にがんを有さないと予想される、いずれか）；全体の誤り率。
正確さ：全体の正しい診断の７５％。
ＳＥ：疾患を有する人々の５５％が、このアルゴリズムにおける変数のカットオフの少なくとも３つを満たす（スコア少なくとも３）。
ＳＰ：疾患を有さない人々の８１％が３未満のスコアを有する。
ＰＰＶ：少なくとも３のスコアを有する人々の４７％が実際に疾患を有する。
ＮＰＶ：３未満のスコアを有する人々の８６％が疾患を有さない。
ＬＲ＋：２．９６＞１は、少なくとも３のスコアを有する者は、疾患を有する確率が増大することを示す。
ＬＲ−：０．５５＜１は、３未満のスコアを有する者は、疾患を有する確率が低減することを示す。
事後ＰＲ＋：少なくとも３のスコアを有すると、疾患を有する確率が２０％（有病率＊）から４３％に増大する。
＊この試験において見られた実際の比率に基づいて、有病率２０％がアウトカム１に使用され、１２％がアウトカム５に使用され、５％がアウトカム１２に使用された。
【０２１０】
【表５】
0006750140.tif 000006
【０２１１】
［実施例６］
結果−女性
女性に対する混同行列を表６に示す。アウトカム１  試料数：内部＝１５２６、外部＝８５１（陽性１３３）；アウトカム５  試料数：内部＝１４０９、外部＝７８５（陽性７３）；アウトカム１２  試料数：内部＝１３２８、外部＝７３８（陽性３２、小）。影付きは、特異性６０％および／または感度６０％に近い閾値を指し示す。
混同行列の解釈。例として表６から、アウトカム１、外部データセット、閾値≧３を使用：
誤分類％：対象の２０％が誤分類される（がんを有さない場合にがんを有すると予想され、またはがんを有する場合にがんを有さないと予想される、いずれか）；全体の誤り率。
正確さ：全体の正しい診断の８０％。
ＳＥ：疾患を有する人々の２８％が、このアルゴリズムにおける変数のカットオフの少なくとも３つを満たす（少なくとも３のスコア）。
ＳＰ：疾患を有さない人々の９０％が３未満のスコアを有する。
ＰＰＶ：少なくとも３のスコアを有する人々の３４％が実際に疾患を有する。
ＮＰＶ：３未満のスコアを有する人々の８７％が、疾患を有さない。
ＬＲ＋：２．７７＞１は、少なくとも３のスコアを有する者は、疾患を有する確率が増大することを示す。
ＬＲ−：０．８０＜１は、３未満のスコアを有する者は、疾患を有する確率が低減することを示す。
事後ＰＲ＋：少なくとも３のスコアを有すると、疾患を有する確率が２０％（有病率＊）から４１％に増大する。
＊この試験において見られた実際の比率に基づいて、有病率２０％がアウトカム１に使用され、１２％がアウトカム５に使用され、５％がアウトカム１２に使用された。
【０２１２】
【表６】
0006750140.tif 000007
【０２１３】
［実施例７］
ステージおよび年齢の評価
表７は、アウトカム番号を記載する。アウトカム１（高リスク腺腫＋全ＣＲＣ対全非がん）のアルゴリズムを使用して、表８に示す「疾患群」対「対照群」を評価し、予想した。表８は、主要評価項目（他のがんのないその他全て対高リスク腺腫＋全ＣＲＣ）のアルゴリズムを使用したサブ評価を示す。加えて、アウトカム１のアルゴリズムは、全高リスク腺腫対低リスク腺腫の比較群においてやはり使用された。
【０２１４】
【表７】
0006750140.tif 000008
【０２１５】
【表８】
0006750140.tif 000009
【０２１６】
表８に示す通り、アウトカム１のアルゴリズムは、対照群と比較した場合、疾患のアウトカムを予想するのに十分に働く。特に、男性および女性における、全ステージのがん群（「全高リスク腺腫およびＣＲＣ」）対非がん群（「全ての非がん」）のベースラインを比較するのに使用された、アウトカム１のアルゴリズムは、２を超えるスコアを使用した場合、それぞれ陽性８５．３９％および６２．４１％を予想した。男性および女性における、ステージＩおよびＩＩのＣＲＣ対非がん群（「全ての非がん」）を比較するのに使用されたアウトカム１のアルゴリズムは、２を超えるスコアを使用した場合、それぞれ陽性９５．５１％および７６．８５％を予想した。男性および女性におけるステージＩＩＩおよびＩＶのＣＲＣ対非がん群（「全ての非がん」）を比較するのに使用されたアウトカム１のアルゴリズムは、２を超えるスコアを使用した場合、それぞれ陽性９４．６７％および７９．３８％を予想した。男性および女性における他のがん（表１に列挙したがんを含む）対非がん群（「全ての非がん」）を比較するのに使用されたアウトカム１のアルゴリズムは、２を超えるスコアを使用した場合、それぞれ陽性９１．９２％および８０．７７％を予想し、アウトカム１のアルゴリズムが、直腸結腸がん以外の他のがんを検出するのに用いられ得ることを指し示した。
【０２１７】
前述の発明を実施するための形態および添付の実施例は説明にすぎず、本発明の範囲に対する制限と解釈してはならず、本発明の範囲は、添付の特許請求の範囲およびその同等物によってのみ規定されることが理解される。
【０２１８】
開示する実施形態に対する様々な変更および修飾は、当業者には明らかである。制限なく、化学構造、置換基、誘導体、中間体、合成、組成物、製剤または本発明を使用する方法を含めた、このような変更および修飾は、その精神および範囲から逸脱せずに行うことができる。
【０２１９】
完璧さの理由から、本発明の様々な態様を、以下の番号を付けた項において記載する。
【０２２０】
項１．
対象が、高リスク腺腫または直腸結腸がん（ＣＲＣ）に罹患している、または罹患するリスクがあるかを決定する方法であって、
（ａ）対象から生物学的試料を得るステップ、
（ｂ）対象からの生物学的試料中のがん胎児性抗原（ＣＥＡ）、サイトケラチン１９フラグメント（ＣＹＦＲＡ）、Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）およびフェリチンのレベルを決定するステップ、
（ｃ）生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンの基準レベルと比較するステップ、ならびに
（ｄ）生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡおよびＣＲＰのレベルが、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡおよびＣＲＰの基準レベルより高い場合、ならびに生物学的試料中のフェリチンのレベルがフェリチンの基準レベルより低い場合、高リスク腺腫もしくはＣＲＣに罹患している、もしくは罹患するリスクがあるという対象の診断を提供し、または生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡおよびＣＲＰのレベルがＣＥＡ、ＣＹＦＲＡおよびＣＲＰの基準レベルと等しくもしくはより低い場合、ならびに生物学的試料中のフェリチンのレベルがフェリチンの基準レベルと等しくもしくはより高い場合、高リスク腺腫もしくはＣＲＣに罹患していない、もしくは罹患するリスクがないという対象の診断を提供するステップ
を含む方法。
【０２２１】
項２．
対象が、高リスク腺腫または直腸結腸がん（ＣＲＣ）に罹患している、または罹患するリスクがあるかを決定する方法であって、
（ａ）対象から生物学的試料を得るステップ、
（ｂ）対象からの生物学的試料中のがん胎児性抗原（ＣＥＡ）、サイトケラチン１９フラグメント（ＣＹＦＲＡ）、Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）およびフェリチンのレベルを決定するステップ、
（ｃ）生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンの基準レベルと比較するステップであって、
（ｉ）ＣＥＡスコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＥＡのレベルがＣＥＡの基準レベルより高い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＥＡのレベルがＣＥＡの基準レベルと等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、
（ｉｉ）ＣＹＦＲＡスコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＹＦＲＡのレベルがＣＹＦＲＡの基準レベルより高い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＹＦＲＡのレベルがＣＹＦＲＡの基準レベルと等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、
（ｉｉｉ）ＣＲＰスコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＲＰのレベルがＣＲＰの基準レベルより高い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＲＰのレベルがＣＲＰの基準レベルと等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、および
（ｉｖ）フェリチンスコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のフェリチンのレベルがフェリチンの基準レベルより低い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のフェリチンのレベルがフェリチンの基準レベルと等しくまたはより高い場合、０のスコアを得るステップ、
（ｄ）ステップ（ｃ）からのスコアを加算して合計スコアを得るステップ、ならびに
（ｅ）合計スコアが基準スコアより高い場合、高リスク腺腫もしくはＣＲＣに罹患している、もしくは罹患するリスクがあるという対象の診断を提供し、または合計スコアが基準スコアと等しくもしくはより低い場合、高リスク腺腫もしくはＣＲＣに罹患していない、もしくは罹患するリスクがないという対象の診断を提供するステップ
を含む方法。
【０２２２】
項３．
ステップ（ｂ）において対象の年齢を決定するステップ、ステップ（ｃ）において対象の年齢を基準年齢と比較するステップ、および
（ｖ）年齢スコアを対象に提供するステップであって、対象の年齢が基準年齢と等しく
またはより高い場合、対象は１のスコアを得、対象の年齢のレベルが基準年齢より低い場合、０のスコアを得るステップ
をさらに含む、項２に記載の方法。
【０２２３】
項４．
ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンの基準レベルが、基準群の生物学的試料から適応インデックスモデル法によって決定されるＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのカットオフ値である、項１または２に記載の方法。
【０２２４】
項５．
基準群が対照群またはがん群からなる群から選択される、項４に記載の方法。
【０２２５】
項６．
対象が男性である、項１から５のいずれか一項に記載の方法。
【０２２６】
項７．
ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンの基準レベルが、ＣＥＡについて血清中５．０ｎｇ／ｍＬ、５．５ｎｇ／ｍＬ、６．０ｎｇ／ｍＬ、６．１ｎｇ／ｍＬ、６．２ｎｇ／ｍＬ、６．３ｎｇ／ｍＬ、６．４ｎｇ／ｍＬ、６．５ｎｇ／ｍＬ、６．６ｎｇ／ｍＬ、６．７ｎｇ／ｍＬ、６．８ｎｇ／ｍＬ、６．９ｎｇ／ｍＬ、７．０ｎｇ／ｍＬ、７．５ｎｇ／ｍＬまたは８．０ｎｇ／ｍＬに等しくまたはより高く、それに組み合わせてＣＹＦＲＡについて血清中１．８０ｎｇ／ｍＬ、１．８５ｎｇ／ｍＬ、１．９０ｎｇ／ｍＬ、１．９５ｎｇ／ｍＬ、１．９６ｎｇ／ｍＬ、１．９７ｎｇ／ｍＬ、１．９８ｎｇ／ｍＬ、１．９９ｎｇ／ｍＬ、２．００ｎｇ／ｍＬ、２．０１ｎｇ／ｍＬ、２．０２ｎｇ／ｍＬ、２．０３ｎｇ／ｍＬ、２．０４ｎｇ／ｍＬ、２．０５ｎｇ／ｍＬ、２．１０ｎｇ／ｍＬ、２．１５ｎｇ／ｍＬまたは２．２０ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベル、ＣＲＰについて血清中１．０ｍｇ／ｍＬ、１．５ｍｇ／ｍＬ、１．６ｍｇ／ｍＬ、１．７ｍｇ／ｍＬ、１．８ｍｇ／ｍＬ、１．９ｍｇ／ｍＬ、２．０ｍｇ／ｍＬまたは２．５ｍｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベル、およびフェリチンについて血清中１２０ｎｇ／ｍＬ、１１５ｎｇ／ｍＬ、１１４ｎｇ／ｍＬ、１１３ｎｇ／ｍＬ、１１２ｎｇ／ｍＬ、１１１ｎｇ／ｍＬ、１１０ｎｇ／ｍＬ、１０９ｎｇ／ｍＬ、１０８ｎｇ／ｍＬ、１０７ｎｇ／ｍＬ、１０６ｎｇ／ｍＬ、１０５ｎｇ／ｍＬまたは１００ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより低いレベルである、項１から６のいずれか一項に記載の方法。
【０２２７】
項８．
ＣＥＡの基準レベルが少なくとも約６．５ｎｇ／ｍＬであり、ＣＹＦＲＡの基準レベルが少なくとも約１．９８ｎｇ／ｍＬであり、ＣＲＰの基準レベルが少なくとも約１．８ｍｇ／ｍＬであり、フェリチンの基準レベルが少なくとも約１０９ｎｇ／ｍＬである、項１から７のいずれか一項に記載の方法。
【０２２８】
項９．
対象が女性である、項１から５いずれか一項に記載の方法。
【０２２９】
項１０．
ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンの基準レベルが、ＣＥＡについて血清中３．５ｎｇ／ｍＬ、４．０ｎｇ／ｍＬ、４．３ｎｇ／ｍＬ、４．４ｎｇ／ｍＬ、４．５ｎｇ／ｍＬ、４．６ｎｇ／ｍＬ、４．７ｎｇ／ｍＬ、４．８ｎｇ／ｍＬ、４．９ｎｇ／ｍＬ、５．０ｎｇ／ｍＬ、５．１ｎｇ／ｍＬ、５．２ｎｇ／ｍＬ、５．３ｎｇ／ｍＬ、５．５ｎｇ／ｍＬ、６．０ｎｇ／ｍＬまたは７．０ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高く、それに組み合わせてＣＹＦＲＡについて血清中１．５５ｎｇ／ｍＬ、１．６０ｎｇ／ｍＬ、１．６５ｎｇ／ｍＬ、１．６７ｎｇ／ｍＬ、１．６８ｎｇ／ｍＬ、１．６９ｎｇ／ｍＬ、１．７０ｎｇ／ｍＬ、１．７１ｎｇ／ｍＬ、１．７２ｎｇ／ｍＬ、１．７３ｎｇ／ｍＬ、１．７４ｎｇ／ｍＬ、１．７５ｎｇ／ｍＬ、１．７６ｎｇ／ｍＬ、１．７７ｎｇ／ｍＬ、１．８０ｎｇ／ｍＬ、１．８５ｎｇ／ｍＬまたは１．９０ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベル、ＣＲＰについて血清中４．０ｍｇ／ｍＬ、４．５ｍｇ／ｍＬ、５．０ｍｇ／ｍＬ、５．１ｍｇ／ｍＬ、５．２ｍｇ／ｍＬ、５．３ｍｇ／ｍＬ、５．４ｍｇ／ｍＬ、５．５ｍｇ／ｍＬ、５．６ｍｇ／ｍＬ、５．７ｍｇ／ｍＬ、５．８ｍｇ／ｍＬ、５．９ｍｇ／ｍＬ、６．０ｍｇ／ｍＬ、６．５ｍｇ／ｍＬまたは７．０ｍｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベル、およびフェリチンについて血清中５０ｎｇ／ｍＬ、４５ｎｇ／ｍＬ、４４ｎｇ／ｍＬ、４３ｎｇ／ｍＬ、４２ｎｇ／ｍＬ、４１ｎｇ／ｍＬ、４０ｎｇ／ｍＬ、３９ｎｇ／ｍＬ、３８ｎｇ／ｍＬ、３７ｎｇ／ｍＬ、３６ｎｇ／ｍＬ、３５ｎｇ／ｍＬ、３４ｎｇ／ｍＬ、３３ｎｇ／ｍＬ、３２ｎｇ／ｍＬ、３１ｎｇ／ｍＬまたは３０ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより低いレベルである、項１から５、および９のいずれか一項に記載の方法。
【０２３０】
項１１．
ＣＥＡの基準レベルが少なくとも約４．８ｎｇ／ｍＬであり、ＣＹＦＲＡの基準レベルが少なくとも約１．７２ｎｇ／ｍＬであり、ＣＲＰの基準レベルが少なくとも約５．５ｍｇ／ｍＬであり、フェリチンの基準レベルが少なくとも約３８ｎｇ／ｍＬである、項１から５、９、および１０のいずれか一項に記載の方法。
【０２３１】
項１２．
基準スコアが０、１、２、３または４である、項２および４から１１のいずれか一項に記載の方法。
【０２３２】
項１３．
対象が男性である場合、基準年齢が５４歳である、項３から８のいずれか一項に記載の方法。
【０２３３】
項１４．
対象が女性である場合、基準年齢が６３歳である、項３から５および９から１１のいずれか一項に記載の方法。
【０２３４】
項１５．
基準スコアが０、１、２、３、４または５である、項１３または１４に記載の方法。
【０２３５】
項１６．
対象が男性である場合、基準スコアが２または３である、項１３または１５に記載の方法。
【０２３６】
項１７．
対象が男性であり、合計スコアが２より高い場合、対象は高リスク腺腫またはＣＲＣに罹患している、または罹患するリスクがあると診断される、項１３、１５または１６に記載の方法。
【０２３７】
項１８．
対象が男性であり、合計スコアが３より高い場合、対象は高リスク腺腫またはＣＲＣに罹患している、または罹患するリスクがあると診断される、項１３、１５または１６に記載の方法。
【０２３８】
項１９．
対象が女性である場合、基準スコアが２である、項１４または１５に記載の方法。
【０２３９】
項２０．
対象が女性であり、合計スコアが２より高い場合、対象は高リスク腺腫またはＣＲＣに罹患している、または罹患するリスクがあると診断される、項１４、１５または１９に記載の方法。
【０２４０】
項２１．
ＣＲＣ処置レジメン、ＣＲＣ構造スクリーニングレジメン、またはＣＲＣモニタリングレジメンを、高腺腫またはＣＲＣに罹患している、または罹患するリスクがあると診断された対象に施すステップをさらに含む、項１から２０のいずれか一項に記載の方法。
【０２４１】
項２２．
ＣＲＣ処置レジメンが、外科手術、放射線医学治療、放射線医学処置、化学療法、標的化治療またはこれらの組合せの少なくとも１つを対象に施すステップを含む、項２１に記載の方法。
【０２４２】
項２３．
ＣＲＣ構造スクリーニングレジメンが結腸鏡検査またはＳ状結腸鏡検査である、項２１に記載の方法。
【０２４３】
項２４．
結腸鏡検査が対象の診断を確定する、項２３に記載の方法。
【０２４４】
項２５．
ＣＲＣモニタリングレジメンが、定期的な間隔でＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを決定するステップを含む、項２１に記載の方法。
【０２４５】
項２６．
ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを決定するステップが、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンに特異的に結合する分子での免疫学的方法を含む、項１から２５のいずれか一項に記載の方法。
【０２４６】
項２７．
ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンに特異的に結合する分子が、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンに特異的に結合することができる少なくとも１つの抗体を含む、項２６に記載の方法。
【０２４７】
項２８．
ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを決定するステップが、生物学的試料を、ＣＥＡに特異的に結合する抗体、ＣＹＦＲＡに特異的に結合する抗体、ＣＲＰに特異的に結合する抗体、フェリチンに特異的に結合する抗体、およびこれらの組合せからなる群から選択される少なくとも１つの抗体と接触させるステップを伴う、項１から２７のいずれか一項に記載の方法。
【０２４８】
項２９．
ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを決定するステップが、少なくとも１つの捕捉抗体、およびシグナルを発生させる検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体を使用するイムノアッセイによって、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンについて生物学的試料をアッセイするステップを伴い、生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンの量の直接的または間接的な指標として、検出可能な標識によって発生したシグナルを比較するステップを含み、捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された抗体は、
（ａ）ＣＥＡに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体、
（ｂ）ＣＹＦＲＡに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体、
（ｃ）ＣＲＰに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体、ならびに
（ｄ）フェリチンに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体を含む、項１から２５のいずれか一項に記載の方法。
【０２４９】
項３０．
免疫学的方法が、
（ａ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＥＡまたはＣＥＡのフラグメント上のエピトープに結合して、捕捉抗体−ＣＥＡ抗原複合体を形成するステップ、
（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＥＡ抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＥＡ上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＥＡ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および
（ｉｉｉ）試験試料中のＣＥＡレベルを、（ａ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＣＥＡ抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってＣＥＡのレベルを測定するステップ、
（ｂ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＹＦＲＡまたはＣＹＦＲＡのフラグメント上のエピトープに結合して捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原複合体を形成するステップ、
（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＹＦＲＡ上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および
（ｉｉｉ）試験試料中のＣＹＦＲＡレベルを、（ｂ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってＣＹＦＲＡのレベルを測定するステップ、
（ｃ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＲＰまたはＣＲＰのフラグメント上のエピトープに結合して捕捉抗体−ＣＲＰ抗原複合体を形成するステップ、
（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＲＰ抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＲＰ上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＲＰ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および
（ｉｉｉ）試験試料中のＣＲＰレベルを、（ｃ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＣＲＰ抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップによってＣＲＰのレベルを測定するステップ、ならびに
（ｄ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はフェリチンまたはフェリチンのフラグメント上のエピトープに結合して捕捉抗体−フェリチン抗原複合体を形成するステップ、
（ｉｉ）捕捉抗体−フェリチン抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないフェリチン上のエピトープに結合し、捕捉抗体−フェリチン抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および
（ｉｉｉ）試験試料中のフェリチンレベルを、（ｄ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−フェリチン抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップ
によってフェリチンのレベルを測定するステップ
を含む、項２９に記載の方法。
【０２５０】
項３１．
メチルセプチン９（ｍＳ９）、ガレクチン−３（Ｇａｌ３）、糖化ヘモグロビン（ＨｂＡｌｃ）、Ｃ３ａ、カテプシンＸ（ＣａｔＸ）、可溶性ウロキナーゼ受容体（ｓｕＰＡＲ（Ｉ））、プラスミノーゲンアクチベータインヒビター−１（ＰＡＩ−１）、エノラーゼ２（ＥＮＯ２）、およびこれらの組合せからなる群から選択される、生物学的試料中のＣＲＣの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーのレベルを決定するステップ、ならびにＣＲＣの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーのレベルを、ＣＲＣがんの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーの基準レベルと比較するステップをさらに含む、項１から３０のいずれか一項に記載の方法。
【０２５１】
項３２．
対象が、直腸結腸がん（ＣＲＣ）に罹患している、または罹患するリスクがあるかを決定する方法であって、
（ａ）対象から生物学的試料を得るステップ、
（ｂ）対象からの生物学的試料中のがん胎児性抗原（ＣＥＡ）、サイトケラチン１９フラグメント（ＣＹＦＲＡ）、Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）、糖鎖抗原１９−９（ＣＡ１９−９）およびフェリチンのレベルを決定するステップ、
（ｃ）生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンのレベルを、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンの基準レベルと比較するステップ、ならびに
（ｄ）生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびＣＡ１９−９のレベルがＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびＣＡ１９−９の基準レベルより高い場合、ならびに生物学的試料中のフェリチンのレベルがフェリチンの基準レベルより低い場合、ＣＲＣに罹患している、もしくは罹患するリスクがあるという対象の診断を提供し、または生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡおよびＣＡ１９−９のレベルがＣＥＡ、ＣＹＦＲＡおよびＣＡ１９−９の基準レベルと等しくもしくはより低い場合、ならびに生物学的試料中のフェリチンのレベルがフェリチンの基準レベルと等しくもしくはより高い場合、罹患していない、もしくは罹患するリスクがないという対象の診断を提供するステップ
を含む方法。
【０２５２】
項３３．
対象が、直腸結腸がん（ＣＲＣ）に罹患している、または罹患するリスクがあるかを決定する方法であって、
（ａ）対象から生物学的試料を得るステップ、
（ｂ）対象からの生物学的試料中のがん胎児性抗原（ＣＥＡ）、サイトケラチン１９フラグメント（ＣＹＦＲＡ）、Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）、糖鎖抗原１９−９（ＣＡ１９−９）およびフェリチンのレベルを決定するステップ、
（ｃ）生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンのレベルを、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンの基準レベルと比較するステップ、
（ｄ）ＣＥＡスコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＥＡのレベルがＣＥＡの基準レベルより高い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＥＡのレベルがＣＥＡの基準レベルと等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、（ｅ）ＣＹＦＲＡスコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＹＦＲＡのレベルがＣＹＦＲＡの基準レベルより高い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＹＦＲＡのレベルがＣＹＦＲＡの基準レベルと等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、
（ｆ）ＣＲＰスコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＲＰのレベルがＣＲＰの基準レベルより高い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＲＰのレベルがＣＲＰの基準レベルと等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、（ｇ）ＣＡ１９−９スコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＡ１９−９のレベルがＣＡ１９−９の基準レベルより高い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＡ１９−９のレベルがＣＡ１９−９の基準レベルと等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、
（ｈ）フェリチンスコアを対象に提供するステップであって、生物学的試料中のフェリチンのレベルがフェリチンの基準レベルより低い場合、対象は１のスコアを得、生物学的試料中のフェリチンのレベルがフェリチンの基準レベルと等しくまたはより高い場合、対象は０のスコアを得るステップ、
（ｉ）ＣＥＡスコア、ＣＹＦＲＡスコア、ＣＲＰスコア、ＣＡ１９−９スコアおよびフェリチンスコアを加算して合計スコアを得るステップ、ならびに
（ｊ）合計スコアが基準スコアより高い場合、ＣＲＣに罹患している、もしくは罹患するリスクがあるという対象の診断を提供し、または合計スコアが基準スコアに等しくもしくはより低い場合、ＣＲＣに罹患していない、もしくは罹患するリスクがないという対象の診断を提供するステップ
を含む方法。
【０２５３】
項３４．
ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンの基準レベルが、基準群の生物学的試料から適応インデックスモデル法によって決定されるＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンのカットオフ値である、項３２または３３に記載の方法。
【０２５４】
項３５．
基準群が対照群およびがん群からなる群から選択される、項３４に記載の方法。
【０２５５】
項３６．対象が男性である、項３２から３５のいずれか一項に記載の方法。
【０２５６】
項３７．
ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンの基準レベルが、ＣＥＡについて血清中４．５ｎｇ／ｍＬ、４．６ｎｇ／ｍＬ、４．７ｎｇ／ｍＬ、４．８ｎｇ／ｍＬ、４．９ｎｇ／ｍＬ、５．０ｎｇ／ｍＬ、５．１ｎｇ／ｍＬ、５．２ｎｇ／ｍＬ、５．３ｎｇ／ｍＬ、５．４ｎｇ／ｍＬ、５．５ｎｇ／ｍＬ、５．６ｎｇ／ｍＬ、５．７ｎｇ／ｍＬ、５．８ｎｇ／ｍＬ、５．９ｎｇ／ｍＬ、６．０ｎｇ／ｍＬ、６．１ｎｇ／ｍＬ、６．２ｎｇ／ｍＬ、６．３ｎｇ／ｍＬ、６．４ｎｇ／ｍＬ、６．５ｎｇ／ｍＬ、６．６ｎｇ／ｍＬ、６．７ｎｇ／ｍＬ、６．８ｎｇ／ｍＬ、６．９ｎｇ／ｍＬ、７．０ｎｇ／ｍＬ、７．１ｎｇ／ｍＬ、７．２ｎｇ／ｍＬ、７．３ｎｇ／ｍＬ、７．４ｎｇ／ｍＬ、７．５ｎｇ／ｍＬ、７．６ｎｇ／ｍＬ、７．７ｎｇ／ｍＬ、７．８ｎｇ／ｍＬ、７．９ｎｇ／ｍＬまたは８．０ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高く、それに組み合わせてＣＹＦＲＡについて血清中１．５０ｎｇ／ｍＬ、１．６０ｎｇ／ｍＬ、１．７０ｎｇ／ｍＬ、１．８０ｎｇ／ｍＬ、１．９０ｎｇ／ｍＬ、２．００ｎｇ／ｍＬ、２．０１ｎｇ／ｍＬ、２．０２ｎｇ／ｍＬ、２．０３ｎｇ／ｍＬ、２．０４ｎｇ／ｍＬ、２．０５ｎｇ／ｍＬ、２．０６ｎｇ／ｍＬ、２．０７ｎｇ／ｍＬ、２．０８ｎｇ／ｍＬ、２．０９ｎｇ／ｍＬ、２．１０ｎｇ／ｍＬ、２．１１ｎｇ／ｍＬ、２．１２ｎｇ／ｍＬ、２．１３ｎｇ／ｍＬ、２．１４ｎｇ／ｍＬ、２．１５ｎｇ／ｍＬ、２．１６ｎｇ／ｍＬ、２．１７ｎｇ／ｍＬ、２．１８ｎｇ／ｍＬ、２．１９ｎｇ／ｍＬ、２．２０ｎｇ／ｍＬ、２．２１ｎｇ／ｍＬ、２．２２ｎｇ／ｍＬ、２．２３ｎｇ／ｍＬ、２．２４ｎｇ／ｍＬ、２．２５ｎｇ／ｍＬ、２．５０ｎｇ／ｍＬまたは３．００ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベル、ＣＲＰについて血清中１７．０ｍｇ／ｍＬ、１７．１ｍｇ／ｍＬ、１７．２ｍｇ／ｍＬ、１７．３ｍｇ／ｍＬ、１７．４ｍｇ／ｍＬ、１７．５ｍｇ／ｍＬ、１７．６ｍｇ／ｍＬ、１７．７ｍｇ／ｍＬ、１７．８ｍｇ／ｍＬ、１７．９ｍｇ／ｍＬ、１８．０ｍｇ／ｍＬ、１８．１ｍｇ／ｍＬ、１８．２ｍｇ／ｍＬ、１８．３ｍｇ／ｍＬ、１８．４ｍｇ／ｍＬ、１８．５ｍｇ／ｍＬ、１８．６ｍｇ／ｍＬ、１８．７ｍｇ／ｍＬ、１８．８ｍｇ／ｍＬ、１８．９ｍｇ／ｍＬ、１９．０ｍｇ／ｍＬ、１９．５ｍｇ／ｍＬまたは２０．０ｍｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベル、ＣＡ１９−９について血清中２３．０Ｕ／ｍＬ、２３．１Ｕ／ｍＬ、２３．２Ｕ／ｍＬ、２３．３Ｕ／ｍＬ、２３．４Ｕ／ｍＬ、２３．５Ｕ／ｍＬ、２３．６Ｕ／ｍＬ、２３．７Ｕ／ｍＬ、２３．８Ｕ／ｍＬ、２３．９Ｕ／ｍＬ、２４．０Ｕ／ｍＬ、２４．１Ｕ／ｍＬ、２４．２Ｕ／ｍＬ、２４．３Ｕ／ｍＬ、２４．４Ｕ／ｍＬ、２４．５Ｕ／ｍＬ、２４．６Ｕ／ｍＬ、２４．７Ｕ／ｍＬ、２４．８Ｕ／ｍＬ、２４．９Ｕ／ｍＬ、２５．０Ｕ／ｍＬ、２５．１Ｕ／ｍＬ、２５．２Ｕ／ｍＬ、２５．３Ｕ／ｍＬ、２５．４Ｕ／ｍＬ、２５．５Ｕ／ｍＬ、２５．６Ｕ／ｍＬ、２５．７Ｕ／ｍＬ、２５．８Ｕ／ｍＬ、２５．９Ｕ／ｍＬ、２６．０Ｕ／ｍＬ、２６．１Ｕ／ｍＬ、２６．２Ｕ／ｍＬ、２６．３Ｕ／ｍＬ、２６．４Ｕ／ｍＬ、２６．５Ｕ／ｍＬ、２６．６Ｕ／ｍＬ、２６．７Ｕ／ｍＬ、２６．８Ｕ／ｍＬ、２６．９Ｕ／ｍＬ、２７．０Ｕ／ｍＬ、２７．１Ｕ／ｍＬ、２７．２Ｕ／ｍＬ、２７．３Ｕ／ｍＬ、２７．４Ｕ／ｍＬ、２７．５Ｕ／ｍＬ、２７．６Ｕ／ｍＬ、２７．７Ｕ／ｍＬ、２７．８Ｕ／ｍＬ、２７．９Ｕ／ｍＬ、２８．０Ｕ／ｍＬ、２８．５Ｕ／ｍＬまたは２９．０Ｕ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベル、およびフェリチンについて血清中１０５．０ｎｇ／ｍＬ、１０４．０ｎｇ／ｍＬ、１０３．０ｎｇ／ｍＬ、１０２．０ｎｇ／ｍＬ、１０１．０ｎｇ／ｍＬ、１００．０ｎｇ／ｍＬ、９９．０ｎｇ／ｍＬ、９８．０ｎｇ／ｍＬ、９７．０ｎｇ／ｍＬ、９６．０ｎｇ／ｍＬ、９５．０ｎｇ／ｍＬ、９４．０ｎｇ／ｍＬ、９３．０ｎｇ／ｍＬ、９２．０ｎｇ／ｍＬ、９１．０ｎｇ／ｍＬ、９０．０ｎｇ／ｍＬ、８９．０ｎｇ／ｍＬ、８８．０ｎｇ／ｍＬ、８７．０ｎｇ／ｍＬ、８６．０ｎｇ／ｍＬまたは８５．０ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより低いレベルである、項３２から３６のいずれか一項に記載の方法。
【０２５７】
項３８．
ＣＥＡの基準レベルが少なくとも約６．９ｎｇ／ｍＬであり、ＣＹＦＲＡの基準レベルが少なくとも約２．１７ｎｇ／ｍＬであり、ＣＲＰの基準レベルが少なくとも約１８．３ｍｇ／ｍＬであり、ＣＡ１９−９の基準レベルが少なくとも約２６．８Ｕ／ｍＬであり、フェリチンの基準レベルが少なくとも約９７ｎｇ／ｍＬである、項３２から３７のいずれか一項に記載の方法。
【０２５８】
項３９．
対象が女性である、項３２から３５のいずれか一項に記載の方法。
【０２５９】
項４０．
ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンの基準レベルが、ＣＥＡについて血清中４．５ｎｇ／ｍＬ、４．６ｎｇ／ｍＬ、４．７ｎｇ／ｍＬ、４．８ｎｇ／ｍＬ、４．９ｎｇ／ｍＬ、５．０ｎｇ／ｍＬ、５．１ｎｇ／ｍＬ、５．２ｎｇ／ｍＬ、５．３ｎｇ／ｍＬ、５．４ｎｇ／ｍＬ、５．５ｎｇ／ｍＬ、５．６ｎｇ／ｍＬ、５．７ｎｇ／ｍＬ、５．８ｎｇ／ｍＬ、５．９ｎｇ／ｍＬ、６．０ｎｇ／ｍＬ、６．１ｎｇ／ｍＬ、６．２ｎｇ／ｍＬ、６．３ｎｇ／ｍＬ、６．４ｎｇ／ｍＬ、６．５ｎｇ／ｍＬ、６．６ｎｇ／ｍＬ、６．７ｎｇ／ｍＬ、６．８ｎｇ／ｍＬ、６．９ｎｇ／ｍＬ、７．０ｎｇ／ｍＬ、７．１ｎｇ／ｍＬ、７．２ｎｇ／ｍＬ、７．３ｎｇ／ｍＬ、７．４ｎｇ／ｍＬ、７．５ｎｇ／ｍＬ、７．６ｎｇ／ｍＬ、７．７ｎｇ／ｍＬ、７．８ｎｇ／ｍＬ、７．９ｎｇ／ｍＬまたは８．０ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高く、それに組み合わせてＣＹＦＲＡについて血清中１．５０ｎｇ／ｍＬ、１．６０ｎｇ／ｍＬ、１．７０ｎｇ／ｍＬ、１．８０ｎｇ／ｍＬ、１．９０ｎｇ／ｍＬ、２．００ｎｇ／ｍＬ、２．０１ｎｇ／ｍＬ、２．０２ｎｇ／ｍＬ、２．０３ｎｇ／ｍＬ、２．０４ｎｇ／ｍＬ、２．０５ｎｇ／ｍＬ、２．０６ｎｇ／ｍＬ、２．０７ｎｇ／ｍＬ、２．０８ｎｇ／ｍＬ、２．０９ｎｇ／ｍＬ、２．１０ｎｇ／ｍＬ、２．１１ｎｇ／ｍＬ、２．１２ｎｇ／ｍＬ、２．１３ｎｇ／ｍＬ、２．１４ｎｇ／ｍＬ、２．１５ｎｇ／ｍＬ、２．１６ｎｇ／ｍＬ、２．１７ｎｇ／ｍＬ、２．１８ｎｇ／ｍＬ、２．１９ｎｇ／ｍＬ、２．２０ｎｇ／ｍＬ、２．２１ｎｇ／ｍＬ、２．２２ｎｇ／ｍＬ、２．２３ｎｇ／ｍＬ、２．２４ｎｇ／ｍＬ、２．２５ｎｇ／ｍＬ、２．５０ｎｇ／ｍＬまたは３．００ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベル、ＣＲＰについて血清中６．５ｍｇ／ｍＬ、６．６ｍｇ／ｍＬ、６．７ｍｇ／ｍＬ、６．８ｍｇ／ｍＬ、６．９ｍｇ／ｍＬ、７．０ｍｇ／ｍＬ、７．１ｍｇ／ｍＬ、７．２ｍｇ／ｍＬ、７．３ｍｇ／ｍＬ、７．４ｍｇ／ｍＬ、７．５ｍｇ／ｍＬ、７．６ｍｇ／ｍＬ、７．７ｍｇ／ｍＬ、７．８ｍｇ／ｍＬ、７．９ｍｇ／ｍＬ、８．０ｍｇ／ｍＬ、８．１ｍｇ／ｍＬ、８．２ｍｇ／ｍＬ、８．３ｍｇ／ｍＬ、８．４ｍｇ／ｍＬ、８．５ｍｇ／ｍＬ、８．６ｍｇ／ｍＬ、８．７ｍｇ／ｍＬ、８．８ｍｇ／ｍＬ、８．９ｍｇ／ｍＬ、９．０ｍｇ／ｍＬ、９．５ｍｇ／ｍＬまたは１０．０ｍｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベル、ＣＡ１９−９について血清中２３．０Ｕ／ｍＬ、２３．１Ｕ／ｍＬ、２３．２Ｕ／ｍＬ、２３．３Ｕ／ｍＬ、２３．４Ｕ／ｍＬ、２３．５Ｕ／ｍＬ、２３．６Ｕ／ｍＬ、２３．７Ｕ／ｍＬ、２３．８Ｕ／ｍＬ、２３．９Ｕ／ｍＬ、２４．０Ｕ／ｍＬ、２４．１Ｕ／ｍＬ、２４．２Ｕ／ｍＬ、２４．３Ｕ／ｍＬ、２４．４Ｕ／ｍＬ、２４．５Ｕ／ｍＬ、２４．６Ｕ／ｍＬ、２４．７Ｕ／ｍＬ、２４．８Ｕ／ｍＬ、２４．９Ｕ／ｍＬ、２５．０Ｕ／ｍＬ、２５．１Ｕ／ｍＬ、２５．２Ｕ／ｍＬ、２５．３Ｕ／ｍＬ、２５．４Ｕ／ｍＬ、２５．５Ｕ／ｍＬ、２５．６Ｕ／ｍＬ、２５．７Ｕ／ｍＬ、２５．８Ｕ／ｍＬ、２５．９Ｕ／ｍＬ、２６．０Ｕ／ｍＬ、２６．１Ｕ／ｍＬ、２６．２Ｕ／ｍＬ、２６．３Ｕ／ｍＬ、２６．４Ｕ／ｍＬ、２６．５Ｕ／ｍＬ、２６．６Ｕ／ｍＬ、２６．７Ｕ／ｍＬ、２６．８Ｕ／ｍＬ、２６．９Ｕ／ｍＬ、２７．０Ｕ／ｍＬ、２７．１Ｕ／ｍＬ、２７．２Ｕ／ｍＬ、２７．３Ｕ／ｍＬ、２７．４Ｕ／ｍＬ、２７．５Ｕ／ｍＬ、２７．６Ｕ／ｍＬ、２７．７Ｕ／ｍＬ、２７．８Ｕ／ｍＬ、２７．９Ｕ／ｍＬ、２８．０Ｕ／ｍＬ、２８．５Ｕ／ｍＬまたは２９．０Ｕ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベル、およびフェリチンについて血清中４５ｎｇ／ｍＬ、４４ｎｇ／ｍＬ、４３ｎｇ／ｍＬ、４２ｎｇ／ｍＬ、４１ｎｇ／ｍＬ、４０ｎｇ／ｍＬ、３９ｎｇ／ｍＬ、３８ｎｇ／ｍＬ、３６ｎｇ／ｍＬ、３５ｎｇ／ｍＬ、３４ｎｇ／ｍＬ、３３ｎｇ／ｍＬ、３２ｎｇ／ｍＬ、３１ｎｇ／ｍＬ、３０ｎｇ／ｍＬまたは２５ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより低いレベルである、項３２から３５および３９のいずれか一項に記載の方法。
【０２６０】
項４１．
ＣＥＡの基準レベルが少なくとも約５．９ｎｇ／ｍＬであり、ＣＹＦＲＡの基準レベルが少なくとも約２．０１ｎｇ／ｍＬであり、ＣＲＰの基準レベルが少なくとも約７．８ｍｇ／ｍＬであり、ＣＡ１９−９の基準レベルが少なくとも約２４．０Ｕ／ｍＬであり、フェリチンの基準レベルが少なくとも約３６ｎｇ／ｍＬである、項３２から３５、３９および４０のいずれか一項に記載の方法。
【０２６１】
項４２．
基準スコアが０、１、２、３、４または５である、項３３から４１のいずれか一項に記載の方法。
【０２６２】
項４３．
対象が男性である場合、基準スコアが１である、項３３から３８および４２のいずれか一項に記載の方法。
【０２６３】
項４４．
対象が男性であり、合計スコアが１より高い場合、対象はＣＲＣに罹患している、または罹患するリスクがあると診断される、項３３から３８、４２および４３のいずれか一項に記載の方法。
【０２６４】
項４５．
対象が女性である場合、基準スコアが１または２である、項３３から３５および３９から４２のいずれか一項に記載の方法。
【０２６５】
項４６．
対象が女性であり、合計スコアが１より高い場合、対象はＣＲＣに罹患している、または罹患するリスクがあると診断される、項３３から３５、３９から４２および４５のいずれか一項に記載の方法。
【０２６６】
項４７．
対象が女性であり、合計スコアが２より高い場合、対象はＣＲＣに罹患している、または罹患するリスクがあると診断される、項３３から３５、３９から４２および４５のいずれか一項に記載の方法。
【０２６７】
項４８．
ＣＲＣ構造スクリーニングレジメン、ＣＲＣ処置レジメン、またはＣＲＣモニタリングレジメンを、ＣＲＣに罹患している、または罹患するリスクがあると診断された対象に施すステップをさらに含む、項３２から４７のいずれか一項に記載の方法。
【０２６８】
項４９．ＣＲＣ処置レジメンが、外科手術、放射線医学治療、放射線医学処置、化学療法、標的化治療またはこれらの組合せの少なくとも１つを対象に施すステップを含む、項４８に記載の方法。
【０２６９】
項５０．
ＣＲＣ構造スクリーニングレジメンが結腸鏡検査またはＳ状結腸鏡検査である、項４８に記載の方法。
【０２７０】
項５１．
結腸鏡検査が対象の診断を確定する、項５０に記載の方法。
【０２７１】
項５２．
ＣＲＣモニタリングレジメンが、定期的な間隔でＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンのレベルを決定するステップを含む、項４８に記載の方法。
【０２７２】
項５３．
ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンのレベルを決定するステップが、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンに特異的に結合する分子での免疫学的方法を含む、項３２から５２のいずれか一項に記載の方法。
【０２７３】
項５４．
ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンに特異的に結合する分子が、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンに特異的に結合することができる少なくとも１つの抗体を含む、項５３に記載の方法。
【０２７４】
項５５．
ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンのレベルを決定するステップが、生物学的試料を、ＣＥＡに特異的に結合する抗体、ＣＹＦＲＡに特異的に結合する抗体、ＣＲＰに特異的に結合する抗体、ＣＡ１９−９に特異的に結合する抗体、フェリチンに特異的に結合する抗体、およびこれらの組合せからなる群から選択される少なくとも１つの抗体と接触させるステップを伴う、項３２から５４のいずれか一項に記載の方法。
【０２７５】
項５６．
ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンのレベルを決定するステップが、少なくとも１つの捕捉抗体、およびシグナルを発生させる検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体を使用するイムノアッセイによって、ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンについて生物学的試料をアッセイするステップを伴い、生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンの量の直接的または間接的な指標として検出可能な標識によって発生したシグナルを比較するステップを含み、捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された抗体は、
（ａ）ＣＥＡに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体、
（ｂ）ＣＹＦＲＡに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体、
（ｃ）ＣＲＰに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体、
（ｄ）ＣＡ１９−９に特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体、ならびに
（ｅ）フェリチンに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体
を含む、項３２から５２のいずれか一項に記載の方法。
【０２７６】
項５７．
免疫学的方法が、
（ａ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＥＡまたはＣＥＡのフラグメント上のエピトープに結合して、捕捉抗体−ＣＥＡ抗原複合体を形成するステップ、
（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＥＡ抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＥＡ上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＥＡ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および
（ｉｉｉ）試験試料中のＣＥＡレベルを、（ａ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＣＥＡ抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップ
によってＣＥＡのレベルを測定するステップ、
（ｂ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＹＦＲＡまたはＣＹＦＲＡのフラグメント上のエピトープに結合して捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原複合体を形成するステップ、
（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＹＦＲＡ上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および
（ｉｉｉ）試験試料中のＣＹＦＲＡレベルを、（ｂ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップ
によってＣＹＦＲＡのレベルを測定するステップ、
（ｃ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＲＰまたはＣＲＰのフラグメント上のエピトープに結合して捕捉抗体−ＣＲＰ抗原複合体を形成するステップ、
（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＲＰ抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＲＰ上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＲＰ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および
（ｉｉｉ）試験試料中のＣＲＰレベルを、（ｃ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＣＲＰ抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップ
によってＣＲＰのレベルを測定するステップ、
（ｄ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＡ１９−９またはＣＡ１９−９のフラグメント上のエピトープに結合して捕捉抗体−ＣＡ１９−９抗原複合体を形成するステップ、
（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＡ１９−９抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＡ１９−９上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＲＰ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および
（ｉｉｉ）試験試料中のＣＡ１９−９レベルを、（ｄ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＣＡ１９−９抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップ
によってＣＡ１９−９のレベルを測定するステップ、ならびに
（ｅ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はフェリチンまたはフェリチンのフラグメント上のエピトープに結合して捕捉抗体−フェリチン抗原複合体を形成するステップ、
（ｉｉ）捕捉抗体−フェリチン抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないフェリチン上のエピトープに結合し、捕捉抗体−フェリチン抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および
（ｉｉｉ）試験試料中のフェリチンレベルを、（ｅ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−フェリチン抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップ
によってフェリチンのレベルを測定するステップを含む、
項５６に記載の方法。
【０２７７】
項５８．
メチルセプチン９（ｍＳ９）、ガレクチン−３（Ｇａｌ３）、糖化ヘモグロビン（ＨｂＡｌｃ）、Ｃ３ａ、カテプシンＸ（ＣａｔＸ）、可溶性ウロキナーゼ受容体（ｓｕＰＡＲ（Ｉ））、プラスミノーゲンアクチベータインヒビター−１（ＰＡＩ−１）、エノラーゼ２（ＥＮＯ２）およびこれらの組合せからなる群から選択される、生物学的試料中のＣＲＣの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーのレベルを決定するステップ、ならびにＣＲＣの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーのレベルを、少なくとも１つの付加的なＣＲＣがんのバイオマーカーに対する基準レベルと比較するステップをさらに含む、項３２から５７のいずれか一項に記載の方法。
【０２７８】
項５９．
男性対象が、直腸結腸がん（ＣＲＣ）がん以外のがんに罹患している、または罹患するリスクがあるかを決定する方法であって、男性対象は、ＣＲＣを有さないことが結腸鏡検査によって確定されており、
（ａ）男性対象から生物学的試料を得るステップ、
（ｂ）男性対象からの生物学的試料中のサイトケラチン１９フラグメント（ＣＹＦＲＡ）、Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）、メタロプロテイナーゼの組織インヒビター１（ＴＩＭＰ−１）、糖鎖抗原１９−９（ＣＡ１９−９）およびアルファ−フェトプロテイン（ＡＦＰ）のレベルを決定するステップ、
（ｃ）生物学的試料中のＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰのレベルを、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰの基準レベルと比較するステップ、ならびに
（ｄ）生物学的試料中のＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰのレベルが、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰの基準レベルより高い場合、ＣＲＣ以外のがんに罹患している、または罹患するリスクがあるという男性対象の診断を提供するステップ
を含む方法。
【０２７９】
項６０．
男性対象が、直腸結腸がん（ＣＲＣ）がん以外のがんに罹患している、または罹患するリスクがあるかを決定する方法であって、男性対象は、ＣＲＣを有さないことが結腸鏡検査によって確定されており、
（ａ）男性対象から生物学的試料を得るステップ、
（ｂ）男性対象からの生物学的試料中のサイトケラチン１９フラグメント（ＣＹＦＲＡ）、Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）、メタロプロテイナーゼの組織インヒビター１（ＴＩＭＰ−１）、糖鎖抗原１９−９（ＣＡ１９−９）およびアルファ−フェトプロテイン（ＡＦＰ）のレベルを決定するステップ、
（ｃ）生物学的試料中のＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰのレベルを、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰの基準レベルと比較するステップ、
（ｄ）ＣＹＦＲＡスコアを男性対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＹＦＲＡのレベルがＣＹＦＲＡの基準レベルより高い場合、男性対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＹＦＲＡのレベルがＣＹＦＲＡの基準レベルと等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、
（ｅ）ＣＲＰスコアを男性対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＲＰのレベルがＣＲＰの基準レベルより高い場合、男性対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＲＰのレベルがＣＲＰの基準レベルと等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、
（ｆ）ＴＩＭＰ−１スコアを男性対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＴＩＭＰ−１のレベルがＴＩＭＰ−１の基準レベルより高い場合、男性対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＴＩＭＰ−１のレベルがＴＩＭＰ−１の基準レベルと等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、
（ｇ）ＣＡ１９−９スコアを男性対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＡ１９−９のレベルがＣＡ１９−９の基準レベルより低い場合、男性対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＡ１９−９のレベルがＣＡ１９−９の基準レベルと等しくまたはより高い場合、０のスコアを得るステップ、
（ｈ）ＡＦＰスコアを男性対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＡＦＰのレベルがＡＦＰの基準レベルより低い場合、男性対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＡＦＰのレベルがＡＦＰの基準レベルと等しくまたはより高い場合、０のスコアを得るステップ、
（ｉ）ＣＹＦＲＡスコア、ＣＲＰスコア、ＴＩＭＰ−１スコア、ＣＡ１９−９スコアおよびＡＦＰスコアを加算して合計スコアを得るステップ、ならびに
（ｊ）合計スコアが基準スコアより高い場合、ＣＲＣ以外のがんに罹患している、または罹患するリスクがあるという男性対象の診断を提供するステップ
を含む方法。
【０２８０】
項６１．
ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰの基準レベルが、基準群の生物学的試料から適応インデックスモデル法によって決定されるＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰのカットオフ値である、項５９または６０に記載の方法。
【０２８１】
項６２．
基準群が対照群およびがん群からなる群から選択される、項６１に記載の方法。
【０２８２】
項６３．
ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰの基準レベルが、ＣＹＦＲＡについて血清中１．０ｎｇ／ｍＬ、１．１ｎｇ／ｍＬ、１．２ｎｇ／ｍＬ、１．３ｎｇ／ｍＬ、１．４ｎｇ／ｍＬ、１．５ｎｇ／ｍＬ、１．６ｎｇ／ｍＬ、１．７ｎｇ／ｍＬ、１．８ｎｇ／ｍＬ、１．９ｎｇ／ｍＬ、２．０ｎｇ／ｍＬ、２．１ｎｇ／ｍＬ、２．２ｎｇ／ｍＬ、２．３ｎｇ／ｍＬ、２．４ｎｇ／ｍＬ、２．５ｎｇ／ｍＬ、３．０ｎｇ／ｍＬまたは３．５ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高く、それに組み合わせてＣＲＰについて血清中１４．０ｍｇ／ｍＬ、１４．１ｍｇ／ｍＬ、１４．２ｍｇ／ｍＬ、１４．３ｍｇ／ｍＬ、１４．４ｍｇ／ｍＬ、１４．５ｍｇ／ｍＬ、１４．６ｍｇ／ｍＬ、１４．７ｍｇ／ｍＬ、１４．８ｍｇ／ｍＬ、１４．９ｍｇ／ｍＬ、１５．０ｍｇ／ｍＬ、１５．１ｍｇ／ｍＬ、１５．２ｍｇ／ｍＬ、１５．３ｍｇ／ｍＬ、１５．４ｍｇ／ｍＬ、１５．５ｍｇ／ｍＬ、１５．６ｍｇ／ｍＬ、１５．７ｍｇ／ｍＬ、１５．８ｍｇ／ｍＬ、１５．９ｍｇ／ｍＬ、１６．０ｍｇ／ｍＬ、１６．１ｍｇ／ｍＬ、１６．２ｍｇ／ｍＬ、１６．３ｍｇ／ｍＬ、１６．４ｍｇ／ｍＬ、１６．５ｍｇ／ｍＬ、１７．０ｍｇ／ｍＬまたは１７．５ｍｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベル、ＴＩＭＰ−１について血清中１４０ｎｇ／ｍＬ、１４１ｎｇ／ｍＬ、１４２ｎｇ／ｍＬ、１４３ｎｇ／ｍＬ、１４４ｎｇ／ｍＬ、１４５ｎｇ／ｍＬ、１４６ｎｇ／ｍＬ、１４７ｎｇ／ｍＬ、１４８ｎｇ／ｍＬ、１４９ｎｇ／ｍＬ、１５０ｎｇ／ｍＬ、１５１ｎｇ／ｍＬ、１５２ｎｇ／ｍＬ、１５３ｎｇ／ｍＬ、１５４ｎｇ／ｍＬ、１５５ｎｇ／ｍＬ、１５６ｎｇ／ｍＬ、１５７ｎｇ／ｍＬ、１５８ｎｇ／ｍＬ、１５９ｎｇ／ｍＬまたは１６０ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベル、ＣＡ１９−９について血清中２４．０Ｕ／ｍＬ、２４．１Ｕ／ｍＬ、２４．２Ｕ／ｍＬ、２４．３Ｕ／ｍＬ、２４．４Ｕ／ｍＬ、２４．５Ｕ／ｍＬ、２４．６Ｕ／ｍＬ、２４．７Ｕ／ｍＬ、２４．８Ｕ／ｍＬ、２４．９Ｕ／ｍＬ、２５．０Ｕ／ｍＬ、２５．１Ｕ／ｍＬ、２５．２Ｕ／ｍＬ、２５．３Ｕ／ｍＬ、２５．４Ｕ／ｍＬ、２５．５Ｕ／ｍＬ、２５．６Ｕ／ｍＬ、２５．７Ｕ／ｍＬ、２５．８Ｕ／ｍＬ、２５．９Ｕ／ｍＬ、２６．０Ｕ／ｍＬまたは２６．５Ｕ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベル、およびＡＦＰについて血清中５．０ｎｇ／ｍＬ、５．１ｎｇ／ｍＬ、５．２ｎｇ／ｍＬ、５．３ｎｇ／ｍＬ、５．４ｎｇ／ｍＬ、５．５ｎｇ／ｍＬ、５．６ｎｇ／ｍＬ、５．７ｎｇ／ｍＬ、５．８ｎｇ／ｍＬ、５．９ｎｇ／ｍＬ、６．０ｎｇ／ｍＬ、６．１ｎｇ／ｍＬ、６．２ｎｇ／ｍＬ、６．３ｎｇ／ｍＬ、６．４ｎｇ／ｍＬ、６．５ｎｇ／ｍＬ、６．６ｎｇ／ｍＬ、６．７ｎｇ／ｍＬ、６．８ｎｇ／ｍＬ、６．９ｎｇ／ｍＬ、７．０ｎｇ／ｍＬ、７．５ｎｇ／ｍＬまたは８．０ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベルである、項５９から６２のいずれか一項に記載の方法。
【０２８３】
項６４．
ＣＹＦＲＡの基準レベルが少なくとも約２．１３ｎｇ／ｍＬであり、ＣＲＰの基準レベルが少なくとも約１５．４ｍｇ／ｍＬであり、ＴＩＭＰ−１の基準レベルが少なくとも約１４８ｎｇ／ｍＬであり、ＣＡ１９−９の基準レベルが少なくとも約２５．０Ｕ／ｍＬであり、ＡＦＰの基準レベルが少なくとも約６．７ｎｇ／ｍＬである、項５９から６３のいずれか一項に記載の方法。
【０２８４】
項６５．
基準スコアが０、１、２、３、４または５である、項６０から６４のいずれか一項に記載の方法。
【０２８５】
項６６．
合計スコアが１より高い場合、対象はＣＲＣ以外のがんに罹患している、または罹患するリスクがあると診断される、項６０から６５のいずれか一項に記載の方法。
【０２８６】
項６７．
がん処置レジメンまたはがんモニタリングレジメンを、ＣＲＣ以外のがんに罹患している、または罹患するリスクがあると診断された対象に施すステップをさらに含む、項５９から６６のいずれか一項に記載の方法。
【０２８７】
項６８．
がん処置レジメンが、外科手術、放射線医学治療、放射線医学処置、化学療法、標的化治療またはこれらの組合せの少なくとも１つを対象に施すステップを含む、項６７に記載の方法。
【０２８８】
項６９．
がんモニタリングレジメンが、定期的な間隔でＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰのレベルを決定するステップを含む、項６７に記載の方法。
【０２８９】
項７０．
ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰのレベルを決定するステップが、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰに特異的に結合する分子での免疫学的方法を含む、項６０から６９のいずれか一項に記載の方法。
【０２９０】
項７１．
ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰに特異的に結合する分子が、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰに特異的に結合することができる少なくとも１つの抗体を含む、項７０に記載の方法。
【０２９１】
項７２．
ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰのレベルを決定するステップが、生物学的試料を、ＣＹＦＲＡに特異的に結合する抗体、ＣＲＰに特異的に結合する抗体、ＴＩＭＰ−１に特異的に結合する抗体、ＣＡ１９−９に特異的に結合する抗体、ＡＦＰに特異的に結合する抗体、およびこれらの組合せからなる群から選択される少なくとも１つの抗体と接触させるステップを伴う、項６０から７１のいずれか一項に記載の方法。
【０２９２】
項７３．
ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰのレベルを決定するステップが、少なくとも１つの捕捉抗体、およびシグナルを発生させる検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体を使用するイムノアッセイによって、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰについて生物学的試料をアッセイするステップを伴い、生物学的試料中のＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰの量の直接的または間接的な指標として検出可能な標識によって発生したシグナルを比較するステップを含み、捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された抗体は、
（ａ）ＣＹＦＲＡに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体、
（ｂ）ＣＲＰに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体、
（ｃ）ＴＩＭＰ−１に特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体、
（ｄ）ＣＡ１９−９に特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体、ならびに
（ｅ）ＡＦＰに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体
を含む、項６０から６９のいずれか一項に記載の方法。
【０２９３】
項７４．
免疫学的方法が、
（ａ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＹＦＲＡまたはＣＹＦＲＡのフラグメント上のエピトープに結合して捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原複合体を形成するステップ、
（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＹＦＲＡ上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および
（ｉｉｉ）試験試料中のＣＹＦＲＡレベルを、（ａ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップ
によってＣＹＦＲＡのレベルを測定するステップ、
（ｂ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＲＰまたはＣＲＰのフラグメント上のエピトープに結合して捕捉抗体−ＣＲＰ抗原複合体を形成するステップ、
（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＲＰ抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＲＰ上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＲＰ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および
（ｉｉｉ）試験試料中のＣＲＰレベルを、（ｂ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＣＲＰ抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップ
によってＣＲＰのレベルを測定するステップ、
（ｃ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＴＩＭＰ−１またはＴＩＭＰ−１のフラグメント上のエピトープに結合して、捕捉抗体−ＴＩＭＰ−１抗原複合体を形成するステップ、
（ｉｉ）捕捉抗体−ＴＩＭＰ−１抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＴＩＭＰ−１上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＴＩＭＰ−１抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および
（ｉｉｉ）試験試料中のＴＩＭＰ−１レベルを、（ｃ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＴＩＭＰ−１抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップ
によってＴＩＭＰ−１のレベルを測定するステップ、
（ｄ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＡ１９−９またはＣＡ１９−９のフラグメント上のエピトープに結合して、捕捉抗体−ＣＡ１９−９抗原複合体を形成するステップ、
（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＡ１９−９抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＡ１９−９上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＡ１９−９抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および
（ｉｉｉ）試験試料中のＣＡ１９−９レベルを、（ｄ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＣＡ１９−９抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップ
によってＣＡ１９−９のレベルを測定するステップ、ならびに
（ｅ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＡＦＰまたはＡＦＰのフラグメント上のエピトープに結合して、捕捉抗体−ＡＦＰ抗原複合体を形成するステップ、
（ｉｉ）捕捉抗体−ＡＦＰ抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＡＦＰ上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＡＦＰ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および
（ｉｉｉ）試験試料中のＡＦＰレベルを、（ｅ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＡＦＰ抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップ
によってＡＦＰのレベルを測定するステップを含む、項７３に記載の方法。
【０２９４】
項７５．
メチルセプチン９（ｍＳ９）、ガレクチン−３（Ｇａｌ３）、糖化ヘモグロビン（ＨｂＡｌｃ）、Ｃ３ａ、カテプシンＸ（ＣａｔＸ）、可溶性ウロキナーゼ受容体（ｓｕＰＡＲ（Ｉ））、プラスミノーゲンアクチベータインヒビター−１（ＰＡＩ−１）、エノラーゼ２（ＥＮＯ２）およびこれらの組合せからなる群から選択される、生物学的試料中のＣＲＣ以外のがんの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーのレベルを決定するステップ、ならびにＣＲＣ以外のがんの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーのレベルを、ＣＲＣ以外のがんの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーの基準レベルと比較するステップをさらに含む、項５９から７４のいずれか一項に記載の方法。
【０２９５】
項７６．
女性対象が、直腸結腸がん（ＣＲＣ）がん以外のがんに罹患している、または罹患するリスクがあるかを決定する方法であって、女性対象は、ＣＲＣを有さないことが結腸鏡検査によって確定されており、
（ａ）女性対象から生物学的試料を得るステップ、
（ｂ）女性対象からの生物学的試料中のサイトケラチン１９フラグメント（ＣＹＦＲＡ）、がん胎児性抗原（ＣＥＡ）およびＣ反応性タンパク質（ＣＲＰ）のレベルを決定するステップ、
（ｃ）生物学的試料中のＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰのレベルを、ＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰの基準レベルと比較するステップ、ならびに
（ｄ）生物学的試料中のＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰのレベルがＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰの基準レベルより高い場合、ＣＲＣ以外のがんに罹患している、または罹患するリスクがあるという女性対象の診断を提供するステップ
を含む方法。
【０２９６】
項７７．
女性対象が、直腸結腸がん（ＣＲＣ）がん以外のがんに罹患している、または罹患するリスクがあるかを決定する方法であって、女性対象は、ＣＲＣを有さないことが結腸鏡検査によって確定されており、
（ａ）女性対象から生物学的試料を得るステップ、
（ｂ）女性対象からの生物学的試料中のサイトケラチン１９フラグメント（ＣＹＦＲＡ）、がん胎児性抗原（ＣＥＡ）およびＣ反応性タンパク質（ＣＲＰ）のレベルを決定するステップ、
（ｃ）生物学的試料中のＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰのレベルをＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰの基準レベルと比較するステップ、
（ｄ）ＣＹＦＲＡスコアを女性対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＹＦＲＡのレベルがＣＹＦＲＡの基準レベルより高い場合、女性対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＹＦＲＡのレベルがＣＹＦＲＡの基準レベルと等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、
（ｅ）ＣＥＡスコアを女性対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＥＡのレベルがＣＥＡの基準レベルより高い場合、女性対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＥＡのレベルがＣＥＡの基準レベルと等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、
（ｆ）ＣＲＰスコアを女性対象に提供するステップであって、生物学的試料中のＣＲＰのレベルがＣＲＰの基準レベルより高い場合、女性対象は１のスコアを得、生物学的試料中のＣＲＰのレベルがＣＲＰの基準レベルと等しくまたはより低い場合、０のスコアを得るステップ、
（ｇ）ＣＹＦＲＡスコア、ＣＥＡスコアおよびＣＲＰスコアを加算して合計スコアを得るステップ、ならびに
（ｈ）合計スコアが基準スコアより高い場合、ＣＲＣ以外のがんに罹患している、または罹患するリスクがあるという女性対象の診断を提供するステップ
を含む方法。
【０２９７】
項７８．
ＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰの基準レベルが、基準群の生物学的試料から適応インデックスモデル法によって決定されるＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰのカットオフ値である、項７６または７７に記載の方法。
【０２９８】
項７９．
基準群が対照群およびがん群からなる群から選択される、項７８に記載の方法。
【０２９９】
項８０．
ＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰの基準レベルが、ＣＹＦＲＡについて血清中１．０ｎｇ／ｍＬ、１．１ｎｇ／ｍＬ、１．２ｎｇ／ｍＬ、１．３ｎｇ／ｍＬ、１．４ｎｇ／ｍＬ、１．５ｎｇ／ｍＬ、１．６ｎｇ／ｍＬ、１．７ｎｇ／ｍＬ、１．８ｎｇ／ｍＬ、１．９ｎｇ／ｍＬ、２．０ｎｇ／ｍＬ、２．１ｎｇ／ｍＬ、２．２ｎｇ／ｍＬ、２．３ｎｇ／ｍＬ、２．４ｎｇ／ｍＬ、２．５ｎｇ／ｍＬ、３．０ｎｇ／ｍＬまたは３．５ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高く、それに組み合わせてＣＥＡについて血清中４．０ｎｇ／ｍＬ、４．１ｎｇ／ｍＬ、４．２ｎｇ／ｍＬ、４．３ｎｇ／ｍＬ、４．４ｎｇ／ｍＬ、４．５ｎｇ／ｍＬ、４．６ｎｇ／ｍＬ、４．７ｎｇ／ｍＬ、４．８ｎｇ／ｍＬ、４．９ｎｇ／ｍＬ、５．０ｎｇ／ｍＬ、５．１ｎｇ／ｍＬ、５．２ｎｇ／ｍＬ、５．３ｎｇ／ｍＬ、５．４ｎｇ／ｍＬ、５．５ｎｇ／ｍＬ、５．６ｎｇ／ｍＬ、５．７ｎｇ／ｍＬ、５．８ｎｇ／ｍＬ、５．９ｎｇ／ｍＬ、６．０ｎｇ／ｍＬ、６．１ｎｇ／ｍＬ、６．２ｎｇ／ｍＬ、６．３ｎｇ／ｍＬ、６．４ｎｇ／ｍＬ、６．５ｎｇ／ｍＬ、６．６ｎｇ／ｍＬ、６．７ｎｇ／ｍＬ、６．８ｎｇ／ｍＬ、６．９ｎｇ／ｍＬ、７．０ｎｇ／ｍＬまたは７．５ｎｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベル、およびＣＲＰについて血清中９．０ｍｇ／ｍＬ、９．１ｍｇ／ｍＬ、９．２ｍｇ／ｍＬ、９．３ｍｇ／ｍＬ、９．４ｍｇ／ｍＬ、９．５ｍｇ／ｍＬ、９．６ｍｇ／ｍＬ、９．７ｍｇ／ｍＬ、９．８ｍｇ／ｍＬ、９．９ｍｇ／ｍＬ、１０．０ｍｇ／ｍＬ、１０．１ｍｇ／ｍＬ、１０．２ｍｇ／ｍＬ、１０．３ｍｇ／ｍＬ、１０．４ｍｇ／ｍＬ、１０．５ｍｇ／ｍＬ、１０．６ｍｇ／ｍＬ、１０．７ｍｇ／ｍＬ、１０．８ｍｇ／ｍＬ、１０．９ｍｇ／ｍＬ、１１．０ｍｇ／ｍＬ、１１．５ｍｇ／ｍＬまたは１２．０ｍｇ／ｍＬに等しくまたはそれより高いレベルである、項７６から７９のいずれか一項に記載の方法。
【０３００】
項８１．
ＣＹＦＲＡの基準レベルが少なくとも約２．０６ｎｇ／ｍＬであり、ＣＥＡの基準レベルが少なくとも約５．７ｎｇ／ｍＬであり、ＣＲＰの基準レベルが少なくとも約１０．４ｍｇ／ｍＬである、項７６から８０のいずれか一項に記載の方法。
【０３０１】
項８２．
基準スコアが０、１、２または３である、項７７から８１のいずれか一項に記載の方法。
【０３０２】
項８３．
合計スコアが１より高い場合、対象はＣＲＣに罹患している、または罹患するリスクがあると診断される、項７７から８２のいずれか一項に記載の方法。
【０３０３】
項８４．
がん処置レジメンまたはがんモニタリングレジメンを、ＣＲＣ以外のがんに罹患している、または罹患するリスクがあると診断された対象に施すステップをさらに含む、項７６から８３のいずれか一項に記載の方法。
【０３０４】
項８５．
がん処置レジメンが、外科手術、放射線医学治療、放射線医学処置、化学療法、標的化治療またはこれらの組合せの少なくとも１つを対象に施すステップを含む、項８４に記載の方法。
【０３０５】
項８６．
がんモニタリングレジメンが、定期的な間隔でＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰのレベルを決定するステップを含む、項８４に記載の方法。
【０３０６】
項８７．
ＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰのレベルを決定するステップが、ＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰに特異的に結合する分子での免疫学的方法を含む、項７６から８６のいずれか一項に記載の方法。
【０３０７】
項８８．
ＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰに特異的に結合する分子が、ＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰに特異的に結合することができる少なくとも１つの抗体を含む、項８７に記載の方法。
【０３０８】
項８９．
ＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰのレベルを決定するステップが、生物学的試料を、ＣＹＦＲＡに特異的に結合する抗体、ＣＥＡに特異的に結合する抗体、ＣＲＰに特異的に結合する抗体、およびこれらの組合せからなる群から選択される少なくとも１つの抗体と接触させるステップを伴う、項７６から８８のいずれか一項に記載の方法。
【０３０９】
項９０．
ＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰのレベルを決定するステップが、少なくとも１つの捕捉抗体、およびシグナルを発生させる検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体を使用するイムノアッセイによって、ＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰに対して生物学的試料をアッセイするステップを伴い、生物学的試料中のＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰの量の直接的または間接的な指標として検出可能な標識によって発生したシグナルを比較するステップを含み、捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された抗体は、
（ａ）ＣＹＦＲＡに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体、
（ｂ）ＣＥＡに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体、ならびに
（ｃ）ＣＲＰに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体、および検出可能な標識で標識された少なくとも１つの抗体を含む、項７６から８６のいずれか一項に記載の方法。
【０３１０】
項９１．
免疫学的方法が、
（ａ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＹＦＲＡまたはＣＹＦＲＡのフラグメント上のエピトープに結合して捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原複合体を形成するステップ、
（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＹＦＲＡ上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および
（ｉｉｉ）試験試料中のＣＹＦＲＡレベルを、（ａ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＣＹＦＲＡ抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップ
によってＣＹＦＲＡのレベルを測定するステップ、
（ｂ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＥＡまたはＣＥＡのフラグメント上のエピトープに結合して捕捉抗体−ＣＥＡ抗原複合体を形成するステップ、
（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＥＡ抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＥＡ上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＥＡ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および
（ｉｉｉ）試験試料中のＣＥＡレベルを、（ｂ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＣＥＡ抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップ
によってＣＥＡのレベルを測定するステップ、ならびに
（ｃ）（ｉ）試験試料を少なくとも１つの捕捉抗体と接触させるステップであって、捕捉抗体はＣＲＰまたはＣＲＰのフラグメント上のエピトープに結合して、捕捉抗体−ＣＲＰ抗原複合体を形成するステップ、
（ｉｉ）捕捉抗体−ＣＲＰ抗原複合体を、検出可能な標識を含む少なくとも１つの検出抗体と接触させるステップであって、検出抗体は、捕捉抗体によって結合されていないＣＲＰ上のエピトープに結合し、捕捉抗体−ＣＲＰ抗原−検出抗体複合体を形成するステップ、および
（ｉｉｉ）試験試料中のＣＲＰレベルを、（ｃ）（ｉｉ）において形成された捕捉抗体−ＣＲＰ抗原−検出抗体複合体中の検出可能な標識によって発生したシグナルに基づいて決定するステップ
によってＣＲＰのレベルを測定するステップを含む、項９０に記載の方法。
【０３１１】
項９２．
メチルセプチン９（ｍＳ９）、ガレクチン−３（Ｇａｌ３）、糖化ヘモグロビン（ＨｂＡｌｃ）、Ｃ３ａ、カテプシンＸ（ＣａｔＸ）、可溶性ウロキナーゼ受容体（ｓｕＰＡＲ（Ｉ））、プラスミノーゲンアクチベータインヒビター−１（ＰＡＩ−１）、エノラーゼ２（ＥＮＯ２）およびこれらの組合せからなる群から選択される、生物学的試料中のＣＲＣ以外のがんの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーのレベルを決定するステップ、ならびにＣＲＣ以外のがんの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーのレベルを、ＣＲＣ以外のがんの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーの基準レベルと比較するステップをさらに含む、項７６から９１のいずれか一項に記載の方法。
【０３１２】
項９３．
がんが、肺、卵巣、乳房、腎臓、肛門管、原発不明、Ｂ細胞リンパ腫、子宮、前立腺、胆嚢、喉頭、悪性メラノーマ、膵臓、ＣＬＬ、悪性ミエローマ、精巣、小腸、膀胱、胃、中皮腫、副腎、神経内分泌または食道のがんである、項５９から９２のいずれか一項に記載の方法。
【０３１３】
項９４．
対象がヒトである、項１から９３のいずれか一項に記載の方法。
【０３１４】
項９５．
対象の生物学的試料が、組織試料、体液、全血、血漿、血清、尿、気管支肺胞洗浄液および細胞培養懸濁液、またはこれらの分画から選択される、項１から９４のいずれか一項に記載の方法。
【０３１５】
項９６．
対象の生物学的試料が血漿または血清である、項１から９５のいずれか一項に記載の方法。
【０３１６】
項９７．
抗体が、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、ヒト抗体、免疫グロブリン分子、ジスルフィド連結されているＦｖ、モノクローナル抗体、親和性成熟抗体、ｓｃＦｖ、キメラ抗体、単一ドメイン抗体、ＣＤＲグラフト化抗体、ダイアボディ、ヒト化抗体、多特異的抗体、Ｆａｂ、二重特異性抗体、ＤＶＤ、Ｆａｂ’、二特異的抗体、Ｆ（ａｂ’）２およびＦｖからなる群から選択される、項２７から３０、５４から５７、７１から７４および８８から９１に記載の方法。
【０３１７】
項９８．
（ａ）対象の生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンのレベルを定量するための、ＣＥＡに特異的に結合することができる試薬、ＣＹＦＲＡに特異的に結合することができる試薬、ＣＲＰに特異的に結合することができる試薬、およびフェリチンに特異的に結合することができる試薬、ならびに
（ｂ）ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰおよびフェリチンの基準レベルを指し示す参照標準を含む、項１から３１および９４から９７のいずれか一項に記載の方法を行うためのキット。
【０３１８】
項９９．
（ａ）対象の生物学的試料中のＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンのレベルを定量するための、ＣＥＡに特異的に結合することができる試薬、ＣＹＦＲＡに特異的に結合することができる試薬、ＣＲＰに特異的に結合することができる試薬、ＣＡ１９−９に特異的に結合することができる試薬、およびフェリチンに特異的に結合することができる試薬、ならびに
（ｂ）ＣＥＡ、ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＣＡ１９−９およびフェリチンの基準レベルを指し示す参照標準
を含む、項３２から５８および９４から９７のいずれか一項に記載の方法を行うためのキット。
【０３１９】
項１００．
（ａ）対象の生物学的試料中のＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰのレベルを定量するための、ＣＹＦＲＡに特異的に結合することができる試薬、ＣＲＰに特異的に結合することができる試薬、ＴＩＭＰ−１に特異的に結合することができる試薬、ＣＡ１９−９に特異的に結合することができる試薬、およびＡＦＰに特異的に結合することができる試薬、ならびに
（ｂ）ＣＹＦＲＡ、ＣＲＰ、ＴＩＭＰ−１、ＣＡ１９−９およびＡＦＰの基準レベルを指し示す参照標準
を含む、項５９から７５および９３から９７のいずれか一項に記載の方法を行うためのキット。
【０３２０】
項１０１．
（ａ）対象の生物学的試料中のＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰのレベルを定量するための、ＣＹＦＲＡに特異的に結合することができる試薬、ＣＥＡに特異的に結合することができる試薬、およびＣＲＰに特異的に結合することができる試薬、ならびに
（ｂ）ＣＹＦＲＡ、ＣＥＡおよびＣＲＰの基準レベルを指し示す参照標準
を含む、項７６から９７のいずれか一項に記載の方法を行うためのキット。
【０３２１】
項１０２．
生物学的試料中の少なくとも１つの付加的なバイオマーカーの濃度を定量するための、生物学的試料中のメチルセプチン９（ｍＳ９）、ガレクチン−３（Ｇａｌ３）、糖化ヘモグロビン（ＨｂＡｌｃ）、Ｃ３ａ、カテプシンＸ（ＣａｔＸ）、可溶性ウロキナーゼ受容体（ｓｕＰＡＲ（Ｉ））、プラスミノーゲンアクチベータインヒビター−１（ＰＡＩ−１）、エノラーゼ２（ＥＮＯ２）またはこれらの組合せの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーに特異的に結合することができる少なくとも１つの付加的な試薬、および生物学的試料中のメチルセプチン９（ｍＳ９）、ガレクチン−３（Ｇａｌ３）、糖化ヘモグロビン（ＨｂＡｌｃ）、Ｃ３ａ、カテプシンＸ（ＣａｔＸ）、可溶性ウロキナーゼ受容体（ｓｕＰＡＲ（Ｉ））、プラスミノーゲンアクチベータインヒビター−１（ＰＡＩ−１）、エノラーゼ２（ＥＮＯ２）またはこれらの組合せの少なくとも１つの付加的なバイオマーカーの基準レベルを指し示す参照標準をさらに含む、項９８から１０１のいずれか一項に記載のキット。
【図１】
0006750140.tif 000010
【図２】
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【図３】
0006750140.tif 000012
【図４】
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【図５】
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【図６】
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