(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記の式（１）で示される原形質流動性増加作用を呈するフェノール誘導体。
【化１】
0006704106.tif 000004
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
この発明は原形質流動性増加作用を呈するフェノール誘導体に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
細胞の機能性と正常な増殖には遺伝子の状態が正常であること、細胞内のエネルギーの移動や細胞内情報伝達系が正常であること、物質の移動と細胞骨格の維持などが関与している。特に、これらの細胞機能の維持には原形質流動性が関与している。
【０００３】
原形質流動性は主として細胞骨格をつかさどるチュブリンたんぱく質、マイクロチューブル、中間径フィラメントやアクチン、ミオシンが関与しており、これに加えてＡＴＰの産生、ミトコンドリアの働き、小胞体やカルシウムイオンなどのイオン流動性の他に、水分も含んだトータルの機能と密接に関係している。
【０００４】
原形質流動性自体の発見は２０世紀であり、研究成果としては古いものであるが、その機能性については不明な点も多い。そのため、細胞機能と原形質流動性との関係については研究と産業への利用が進んでいない。また、原形質流動性の活性化剤や抑制に働く物質の同定にはいたっていない。
【０００５】
このうち、たとえば、細胞の原形質に関する発明としては、細胞の原形質体に由来するマイクロベシクルを含む組成物があるものの、この発明の中で原形質流動性に関する説明はない（例えば、特許文献１参照。）。
【０００６】
また、創薬スクリーニング方法および装置に関する発明として原形質流動とブラウン運動を区別し、前記原形質流動に基づいて細胞の活性度を求める方法が発明されているが、しかし、原形質流動性の増加に関する発明ではなく、その活性化に関する物質については記述されていない（例えば、特許文献２参照。）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特表２０１３−５３４８３０
【特許文献２】特許第４５０７０６０号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
既存の物質による原形質流動性増加作用は軽度であり、産業上への利用が限定されるという課題があり、また、化学合成された物質では安全性に問題があり、利用が限られている。
【０００９】
そこで、副作用が弱く優れた原形質流動性増加作用を呈する天然物が望まれている。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
上記の目的を達成するために、請求項１に記載の発明は下記の式（１）で示される原形質流動性増加作用を有するフェノール誘導体に関するものである。
【００１１】
【化１】
0006704106.tif 000002
【発明の効果】
【００１２】
この発明は、以上のように構成されているため、次のような効果を奏する。
【００１３】
請求項１に記載のフェノール誘導体は原形質流動性増加作用に優れている。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
以下、この発明を具体化した実施形態について詳細に説明する。
【００１５】
原形質流動性増加作用を呈するフェノール誘導体とは、下記の式（１）で示される構造からなるものである。
【００１６】
【化２】
0006704106.tif 000003
【００１７】
前記の式（１）のようにヒドロキシセサモールの１分子とエリスリトールの１分子とチロシンの１分子からなる。これらの結合はすべて天然型であり、エステル結合及びエーテル結合を介して結合している。
【００１８】
このフェノール誘導体は化学合成によりヒドロキシセサモール、エリスリトール及びチロシンなどを原料として化学合成して得ることができる。しかし、その化学的な合成では原料のロスが著しいため、産業への利用は限定される。このフェノール誘導体の標準品や微量な試供品を得るためには化学的な合成は好ましい。
【００１９】
このフェノール誘導体の構造を解析することは有効成分の特定ができる点から好ましい。また、製品や製剤に利用して販売する際の有効成分の含有量の指標として利用できることから好ましい。
【００２０】
このフェノール誘導体の構造解析の一例として、たとえば、重水素化クロロホルム中の４００ＭＨｚのＨ−ＮＭＲにより、ピークの位置は３．０７９、３．４３２、３．７８１、３．８１４、５．７２７、６．０２１、６．１３８、６．３０２、６．５４９、６．９５２、７．１３７、７．３７６、７．４６２、７．４８４、７．８４６及び７．９０１ｐｐｍに認められる。
【００２１】
さらに、このフェノール誘導体は高速液体クロマトグラフィーや質量分析装置で解析され、その構造が同定される。
【００２２】
構成成分であるヒドロキシセサモールとはセサモールのヒドロキシ体であり、ゴマなどの植物に含有されるセサミンの構成成分の一つであり、植物や動物に利用されているフェノール類である。その化学式はＣ７Ｈ６Ｏ４である。
【００２３】
このヒドロキシセサモールは複合ベンゼン環の１位と３位に水酸基をもち、２つのフェノール性の水酸基により強い抗酸化性、抗菌性及び酵素活性化作用を有する。このフェノール誘導体ではヒドロキシセサモールの２つの水酸基はいずれも結合しているものの原形質流動性に関係するチュブリン、アクチン、ミオシンと結合してそのアクチンミオシン結合やＡＴＰの利用率を高める働きを呈して原形質流動性増加作用を有する。
【００２４】
このフェノール誘導体ではヒドロキシセサモールの水酸基の一つはチロシンのカルボキシル基とエステル結合している。もう一つの水酸基はエリスリトールの水酸基とエーテル結合している。
【００２５】
ヒドロキシセサモール自体には毒性が少なく、セサモールに比して水溶性と脂溶性の両方の性質を呈することから、細胞膜の透過と原形質での溶解の両方の性質を呈することは好ましい。
【００２６】
また、ヒドロキシセサモール部分はミトコンドリア膜を通過してＡＴＰ産生の際に生じる活性酸素を消去できることは細胞の老化や酸化を抑制する点から好ましい。この抗酸化力により原形質流動性の増加とともに細胞の安定化がもたらされる。
【００２７】
また、酵母や発酵に用いる有用な微生物に対してもそれらの原形質流動性を増加して有用物質の産生作用や発酵促進の働きを有する。この発酵促進の働きは反応性が低い発酵工程や発酵による物質産生に活用できる。すなわち、反応性の乏しい発酵を促進することにより、希少物質の製造を促進できることは好ましい。
【００２８】
また、構成成分であるエリスリトールは化学式Ｃ４Ｈ１０Ｏ４の糖アルコールの一種である。メロンなどの果実、野菜類や納豆、酒や醤油などの発酵物に含まれる天然の低カロリーの甘味物質である。
【００２９】
このエリスリトールは天然物であり、安全性が高いことは好ましい。さらに、エリスリトールの水酸基は還元作用を呈することから活性酸素の除去や物質の安定性に寄与することは成分の安定性の点から好ましい。
【００３０】
このフェノール誘導体ではヒドロキシセサモールのフェノール性水酸基とエリスリトールの水酸基がエーテル結合している。
【００３１】
構成成分であるチロシンは分子式Ｃ９Ｈ１１ＮＯ３であり、Ｌ型であり、天然型である。チロシンはフェニルアラニンにフェノール性水酸基が１つ結合した形であり、非必須アミノ酸に分類される。
【００３２】
チロシンは神経伝達物質であるドーパ、ドーパミンとノルアドレナリンとアドレナリンへと誘導されることから、神経細胞に対する働きに関与している。つまり、チロシン部分は末梢神経や脳機能の保護の点から好ましい。
【００３３】
このフェノール誘導体のチロシンはフェノール性水酸基により抗酸化作用を発揮し、原形質流動性を増加させるために必要である。
【００３４】
このフェノール誘導体は脂溶性と水溶性の両方の性質を呈することから細胞膜及び細胞壁を通過し、細胞内に吸収される。このフェノール誘導体は細胞質内でチュブリン、アクチンとミオシン、オクルディンなどのタイトジャンクションたんぱく質や細胞膜裏打ちたんぱく質と結合し、原形質流動性を増加させる。
【００３５】
このフェノール誘導体はアクチンとミオシンの結合を促進させることにより細胞の骨格を収縮と弛緩を促進させることにより原形質流動性を増加させる。すなわち、このフェノール誘導体のチロシンとヒドロキシセサモールの結合部位でアクチンとミオシンのＡＴＰ反応部位が活性化される。
【００３６】
さらに、このフェノール誘導体のヒドロキシセサモールとエリスリトールの構造によりアクチンとミオシンの滑りと緩みを増加させ、アクチンとミオシンの弛緩と収縮を強くして原形質流動性を増加させる。
【００３７】
さらに、エリスリトールの水酸基とチロシンのアミノ基によりＡＴＰ産生酵素の活性中心を活性化して解糖系のＡＴＰ産生を増加させ、原形質流動性の増加の原動力となる局所のＡＴＰ量を増加させる。
【００３８】
原形質流動性が増加することにより細胞内のＡＴＰ、ビタミン、ミネラル、水、たんぱく質、脂質、糖質などの栄養素、酵素や成長因子、細胞内情報伝達系の成分であるサイクリックＡＭＰやサイクリックＧＭＰなどを移動させる。この栄養素や成長因子の移動により細胞の反応性が増加し、細胞機能が活性化される。
【００３９】
また、原形質流動性の増加は細胞膜の流動性も増加させ、成長因子の受容体の移動と反応性を正常化する。さらに、細胞核孔を移動する転写因子、酵素類やｍＲＮＡなどの遺伝子の動きを活性化して遺伝子情報の適切な伝達に寄与することは細胞機能の正常化と維持につながることからこのフェノール誘導体は好ましい。
【００４０】
病的な細胞や癌細胞では原形質流動性が異常であることから、このフェノール誘導体による原形質流動性の増加により細胞が正常化することにより細胞レベルで癌などの疾患が改善することからこのフェノール誘導体は好ましい。
【００４１】
また、腎臓細胞の上皮細胞や肝臓細胞で毒物や老廃物の排泄に関わる機能にも適しており、原形質流動性を増加させることにより老廃物や酸化物質などの排泄物を細胞外に効率よく排泄する。この排泄により細胞が浄化されるデトックス効果があることからこのフェノール誘導体は好ましい。
【００４２】
さらに、マクロファージ、単球、ランゲルハンス細胞、メサンギウム細胞、クッパー細胞などの食作用を有する細胞の原形質流動性を増加させることにより食組織や食された異物、細菌やウイルスの移動と分解を促進することは免疫機能の増加やアレルギー反応の抑制の点からこのフェノール誘導体は好ましい。
【００４３】
神経細胞においては軸索輸送が原形質流動性と関係していることからＮＧＦなどの成長因子が輸送され、また、神経伝達が活発になることは神経細胞の働きを正常化させることから好ましい。末梢神経障害や認知症などの脳神経細胞における神経伝達の活性化と脳に蓄積されたアミロイドの排泄の点からもこのフェノール誘導体は好ましい。
【００４４】
また、このフェノール誘導体は水酸基を豊富に含有することから優れた水素ガスの発生作用及び抗酸化力をもち、メラニンの産生を抑制して肌の美白作用をもたらすことは、化粧料としての利用が高まることから好ましい。すなわち、このフェノール誘導体の粉末は水溶性溶媒と反応して水素ガスを発生する。この水溶液の水素ガス濃度は１．６ｐｐｍである。
【００４５】
このフェノール誘導体は心筋梗塞においては冠状動脈の梗塞や虚血状態でも心筋細胞の物質移動の活性化により心筋梗塞の予防と治療に効果を発揮する。特に、梗塞部位の血管平滑筋においてこのフェノール誘導体は弛緩作用を発揮して血流と血圧を改善する。水素ガスは虚血再灌流の際に発生する活性酸素を除去することから、水素ガスを発生させることは好ましい。
【００４６】
また、このフェノール誘導体は無呼吸状態で解糖系を介してＡＴＰを産生させることにより運動時の筋肉の活動性を高めることは好ましい。特に、アスリートが筋肉を増強したい場合、筋肉細胞でのグルコース、ビタミンやミネラル、酸素の細胞内移動を高め、ミトコンドリアへの輸送と老廃物と二酸化炭素や活性酸素を排泄することから好ましい。また、ミトコンドリアでは活性酸素が発生することから水素ガスにより消去されることは好ましい。
【００４７】
このフェノール誘導体は生体内では腎臓や肝臓のエステラーゼにより分解され、尿中に排泄される。分解されて構成成分である安全性の高いヒドロキシセサモール、エリスリトールとチロシンに分解される。したがって、このフェノール誘導体は体内に蓄積されることはなく、分解も生体内酵素で行われ、分解物も天然物であることから安全性が高い。
【００４８】
このフェノール誘導体は脂肪細胞膜に浸透しやすく、脂肪細胞の中性脂肪を移動させ、この分解を高め、糖質も分解させる。糖質が消費されることから糖尿病の予防やダイエット対策にも好ましい。
【００４９】
さらに、このフェノール誘導体は皮膚上皮細胞の炎症も抑制し、シワの形成を抑制する。また、角質細胞を安定化させることにより皮膚角質のバリア機能を維持し、異物や刺激物、細菌の侵入を抑制する。この働きは化粧料として利用できる。
【００５０】
このフェノール誘導体は原形質流動性の増加によりマクロファージやリンパ球などの細胞を活性化することから免疫賦活剤や抗アレルギー剤として利用できる。また、このフェノール誘導体は神経細胞に働き、細胞膜の電位と神経の伝導を高めることにより認知症やアルツハイマー症、パーキンソン症の治療剤に適する。
【００５１】
また、このフェノール誘導体は分解された構成成分がすべて自然界に存在する物質であり、その食経験や化粧品としての利用実績が豊富であることから安全性が確認されている。さらに、このフェノール誘導体は眼の角膜細胞、水晶体細胞、網膜細胞の細胞骨格を活性化することにより結膜炎、白内障、緑内障、網膜剥離による細胞の機能を回復させて促進し、視力の回復に利用される。
【００５２】
このフェノール誘導体は天然にも存在しており、ゴマの種子などに極微量認められる。このフェノール誘導体を精製により上記の植物から抽出することは可能である。ただし、精製には大量の原料を必要とし、有機溶媒などを利用することから産業上への利用は制限される。
【００５３】
このフェノール誘導体はゴマ種子を発酵法などにより増加させることは好ましい。発酵法としては大豆と混合して納豆菌やベニコウジ菌により発酵させて得る。この方法は食経験があり、フェノール誘導体の産生量も多いことから好ましい。
【００５４】
得られたフェノール誘導体を医薬品素材として利用する場合、目的とするフェノール誘導体を精製することは、目的とするフェノール誘導体の純度が高まり、不純物を除去できる点から好ましい。
【００５５】
医薬品としては注射剤または経口剤または塗布剤などの非経口剤として利用され、医薬部外品としては錠剤、カプセル剤、ドリンク剤、石鹸、塗布剤、ゲル剤、歯磨き粉等に配合されて利用される。
【００５６】
経口剤としては錠剤、カプセル剤、散剤、シロップ剤、ドリンク剤等が挙げられる。前記の錠剤及びカプセル剤に混和される場合には、結合剤、賦形剤、膨化剤、滑沢剤、甘味剤、香味剤等とともに用いることができる。前記の錠剤はシェラックまたは砂糖などで被覆することもできる。
【００５７】
また、前記のカプセル剤の場合には、上記の材料にさらに油脂等の液体担体を含有させることができる。前記のシロップ剤及びドリンク剤の場合には、甘味剤、防腐剤、色素香味剤等を添加することができる。
【００５８】
非経口剤としては、軟膏剤、クリーム剤、水剤等の外用剤の他に、注射剤が挙げられる。外用剤の基材としては、ワセリン、パラフィン、油脂類、ラノリン、マクロゴールド等が用いられ、通常の方法によって軟膏剤やクリーム剤等とすることができる。
【００５９】
注射剤には、液剤があり、その他、凍結乾燥剤がある。これは使用時、注射用蒸留水や生理食塩液等に無菌的に溶解して用いられる。
【００６０】
食品製剤として原形質流動性を増加させることによる細胞機能性の活性化や免疫改善をもたらすサプリメント、デトックスと滋養強壮系の食品、美白と皮膚の健康を維持する美容サプリメント、神経、肝臓や腎臓の機能を向上させる健康食品、筋肉を増強し、脂肪を分解するダイエットなどを目的とした健康食品や美容食品などに利用される。また、保健機能食品として栄養機能食品や特定保健用食品に利用することは好ましい。
【００６１】
得られた食品製剤をイヌやネコなどのペットや家畜動物に利用する場合、デトックス、全身の上皮組織や筋肉、骨細胞の強化を目的とした飼料やペット用サプリメントとして利用される。
【００６２】
化粧料として常法に従って界面活性化剤、溶剤、増粘剤、賦形剤等とともに用いることができる。例えば、クリーム、毛髪用ジェル、洗顔剤、美容液、化粧水等の形態とすることができる。
【００６３】
化粧料の形態は任意であり、溶液状、クリーム状、ペースト状、ゲル状、ジェル状、固形状または粉末状として用いることができる。
【００６４】
得られた化粧料は低酸素状態でも原形質流動性を活増加することにより皮膚細胞の増殖を促し、ケラチンやコラーゲンの産生を促進することにより、シワを防止し、たるみを防ぐことは好ましい。さらに、抗酸化作用によりメラニンの産生を抑制することによる美白作用が発揮される。
【００６５】
また、このフェノール誘導体はフェノール性の水酸基により抗菌作用と抗酸化作用を発揮し、炎症の抑制、歯肉細胞の増殖を目的とした歯磨き剤、洗口液や歯磨きペーストなどに利用できる。
【００６６】
さらに、有用な微生物や酵母の原形質流動性を増加させることにより発酵を活性化する発酵活性剤として利用することができる。この発酵活性剤により反応性の低い発酵段階を活性化して有用な成分や食品を製造することが可能となる。たとえば、医薬品原料の発酵工程において発酵工程を効率的にすることにより低コストで生産効率を上げることができる。
【００６７】
また、植物細胞の原形質流動性を増加させることにより植物の生育を活発にする植物活性剤として利用することができる。この植物活性剤は希少な蘭や花の生育に利用でき、果実や野菜、穀類の栽培を活性化させる。植物工場における野菜や果実の栽培にも利用でき、栽培効率を上げることができる。
【００６８】
以下、前記実施形態を実施例及び試験例を用いて具体的に説明する。なお、これらは一例であり、素材、原料や検体の違いに応じて常識の範囲内で条件を変更させることが可能である。
【実施例１】
【００６９】
香川県で無農薬栽培された黒ゴマの種子をみちばち一番亭より購入して用いた。この種子を水道水で水洗後、天日で乾燥させ、粉砕機（株式会社奈良機械製作所製のスーパー自由ミル）にて粉砕し、ゴマの種子の乾燥粉末粉砕物を１．１ｋｇ得た。
【００７０】
北海道産の大豆をミキサー（クイジナート製）に供し、大豆の粉砕物１．１ｋｇを得た。前記のゴマの種子と大豆の粉砕物をオートクレーブに供し、１２１℃、２０分間、滅菌した。
【００７１】
これらを清浄な発酵タンク（滅菌された発酵用丸形４０リットルタンク）に入れ、滅菌された水道水５ｋｇを添加し、攪拌した。
【００７２】
これとは別に、納豆本舗製の粉末納豆菌の１１ｇを小型発酵タンクに供し、滅菌した大豆粉末と前培養させた発酵準備液を用意した。
【００７３】
前記の前培養した納豆菌の発酵準備液とゴマの種子の乾燥粉末と大豆とを入れた発酵タンクに添加し、攪拌後、４０〜４２℃の温度範囲で加温し、発酵させた。
【００７４】
発酵過程では、通気によりバブリングと攪拌を行いつつ、発酵液のサンプリングを行い、３日間発酵させた。発酵終了後、発酵タンクより発酵物を取り出し、煮沸滅菌した。この発酵物を濾過布により濾過して、納豆菌による発酵液１．１ｋｇを得た。この発酵液１ｋｇに対して紅麹本舗製のベニコウジ菌の１０ｇを添加して４１℃で６日間発酵させた。
【００７５】
この発酵物にエタノールを添加して煮沸滅菌した。これを濾過し、濾過液を凍結乾燥させて目的とするフェノール誘導体０．５６ｋｇとした。これを検体１とした。また、この検体１の０．１ｇを精製水１０ｍＬに溶解した場合、１．６ｐｐｍの水素ガスが発生することをガスクロマトグラフィー（島津製作所）により測定した。
【００７６】
さらに、構造解析及び実験の目的で精製物を得た。つまり、前述の検体１のフェノール誘導体の２００ｇに５％エタノール含有精製水の１Ｌを添加し、ダイアイオン（三菱化学製）５００ｇを５％エタノール液に懸濁して充填したガラス製カラムに供した。
【００７７】
これに３Ｌの５％エタノール液を添加して清浄し、さらに、７０％エタノール液を２Ｌ添加して目的とするフェノール誘導体を溶出させ、濃縮して精製した。精製されたフェノール誘導体を減圧蒸留により、エタノール部分を除去し、水溶液とした。これをフェノール誘導体の精製物２２ｇを得てこれを検体２とした。また、この検体１の０．１ｇを精製水５ｍＬに溶解した場合、水溶液中に１．６ｐｐｍの水素ガスが発生することをガスクロマトグラフィー（島津製作所）により確認した。
【００７８】
以下に、フェノール誘導体の構造解析に関する試験方法及び結果について説明する。
（試験例１）
【００７９】
上記のように得られた検体２をエタノールに溶解し、質量分析器付き高速液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ、島津製作所）で分析した。
【００８０】
これを核磁気共鳴装置（４００ＭＨｚ、Ｈ−ＮＭＲ、ブルカー製）で解析した結果、検体２からヒドロキシセサモールとエリスリトールとチロシンの各１分子からなるフェノール誘導体が検出された。
【００８１】
すなわち、Ｈ−ＮＭＲの重水素化クロロホルム中、３．０７９、３．４３２、３．７８１、３．８１４、５．７２７、６．０２１、６．１３８、６．３０２、６．５４９、６．９５２、７．１３７、７．３７６、７．４６２、７．４８４、７．８４６及び７．９０１ｐｐｍにシグナルが認められた。
【００８２】
上記の解析結果は、化学的に合成した標準品と同一構造を呈することが判明した。すなわち、検体２からヒドロキシセサモール１分子とエリスリトール１分子とチロシン１分子がエステル結合した目的とするフェノール誘導体であると確認できた。
【００８３】
以下にヒト皮膚上皮細胞を用いた確認試験について述べる。
（試験例２）
【００８４】
クラボウ株式会社より購入したヒト由来皮膚上皮細胞を用いた。培養液として５％牛胎児血清含有ＭＥＭ培地（Ｓｉｇｍａ製）を用いて培養した、１０００個の細胞を３５ｍｍ培養シャーレ（ＦＡＬＣＯＮ製）に播種し、５％炭酸ガス下、３７℃で培養した。これを紫外線照射装置（アイグラフィクス株式会社製）により紫外線照射した。さらに、前記の検体１、検体２及び陽性対照としてＥＧＦ（フナコシ(株)、ヒトタイプ）を０．１ｍｇ／ｍｌの最終濃度で添加した。これを４８時間培養して試験した。
【００８５】
原形質流動性の観察は高感度微分干渉顕微鏡とビデオシステムにより動画を解析することにより行った。すなわち、検体を処理された細胞を培養シャーレに入れたまま、浜松ホトニクス社製（ＯＲＣＡ−Ｆｌａｓｈ  ４．０Ｖ２）とニコン社顕微鏡を用い、倍率１００倍で細胞像を高感度カメラで撮影した。
【００８６】
この細胞の細胞内原形質流動性を１分間観察してビデオに編集し、その画像を低速度で解析して細胞内物質の移動距離と移動頻度から原形質流動性を計数した。なお、シャーレは５枚を用いてその平均値を算出した。溶媒を添加した溶媒対照群と比較した。
【００８７】
その結果、検体１の０．１ｍｇ／ｍｌの添加により皮膚上皮細胞数は溶媒対照群に比して平均値として１４３％に増加した。また、検体２では２１１％に増加した。一方、ＥＧＦでは１４０％の増加であり、検体１及び検体２の方が優れていた。
【００８８】
原形質流動性については検体１により溶媒対照群に比して１６６％に増加した。また、検体２の添加によって溶媒対照の３３４％と、いずれも増加が認められた。ＥＧＦでは１０５％となり、検体１及び検体２による原形質流動性増加作用が著しかった。
【００８９】
原形質流動性増加作用は細胞活性の指標でもあることから、検体１と検体２の処理で解糖系の活性が増加したことは検体１と検体２により細胞活性化作用が確認された。
【００９０】
細胞内ケラチン量については検体１により溶媒対照群に比して１５５％に増加した。また、検体２の添加によっては溶媒対照の１９９％となった。ＥＧＦでは１５１％となり、検体１及び検体２の方がケラチン産生の増加に優れていた。なお、培養液中でも１．６ｐｐｍの水素ガスが発生したことを確認した。
【００９１】
以下にヒト神経細胞の障害モデルを用いた確認試験について述べる。
（試験例３）
【００９２】
コスモバイオから購入したヒト神経細胞（Ｈｕｍａｎ  Ｎｅｕｒｏｎｓ（ＨＮ））を用いた。培養液としては、専用の培養液（神経細胞増殖培地）を用いて培養した、１０００個の細胞を３５ｍｍ培養シャーレに播種し、５％炭酸ガス下、３７℃で培養した。これに１％のアクリルアミド水溶液を添加して神経細胞を弱らせた。
【００９３】
ここに、前記の実施例１で得られた検体１及び検体２、陽性対照としてＮＧＦ（フナコシ(株)、ヒトタイプ）を０．１ｍｇ／ｍｌの最終濃度で添加した。これを４８時間培養した。
【００９４】
培養後、神経細胞を培養シャーレに入れた状態で原形質流動性を前記のとおり顕微鏡観察して計測した。また、細胞数を顕微鏡的に計数した。なお、シャーレは５枚を用いてその平均値を算出した。溶媒を添加した溶媒対照群と比較した。
【００９５】
その結果、検体１の０．１ｍｇ／ｍｌの添加により神経細胞数が溶媒対照群に比して平均値として１３３％に増加した。また、検体２では１９３％に増加した。一方、ＮＧＦでは１３０％の増加であり、検体１及び検体２の方が優れていた。
【００９６】
神経細胞の原形質流動性については検体１により溶媒対照群に比して１６９％に増加した。また、検体２の添加によっては溶媒対照の２６６％と増加した。ＮＧＦでは１５３％となり、検体１及び検体２の方がＮＧＦに比べて原形質流動性増加作用に優れていた。さらに、この培養液で１．６ｐｐｍの水素ガスが発生したことを確認した。
【産業上の利用可能性】
【００９７】
本発明で得られるフェノール誘導体は細胞の原形質流動性を増加させ、水素ガスを発生させることからデトックス機能を高め、皮膚、肝臓、神経などの癌や炎症性疾病や健康障害を軽減し、かつ、副作用が少ないことから、国民のＱＯＬを改善し、健康な労働人口を増加させ、かつ、医療費を削減できる。
【００９８】
本発明で得られるフェノール誘導体は皮膚の炎症を改善する作用を有することから、化粧料としてシワ、たるみなどの肌トラブルに悩む方の肌の改善に貢献し、化粧品業界の発展に寄与する。