(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象においてアルポート症候群を治療または予防するための薬学的組成物であって、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に許容される塩を含む、前記薬学的組成物。
【請求項２】
対象が、正常な対照対象と比較してＡＤＡＭ８、フィブロネクチン、ミオシン１０、ＭＭＰ−２、ＭＭＰ−９、及びポドシンのうちの１つ以上の異常なタンパク質レベル及び／または機能を示し、治療が、前記タンパク質のレベル及び／または機能を回復させる、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項３】
対象におけるアルポート症候群の危険性を低減するための薬学的組成物であって、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に許容される塩を含む、前記薬学的組成物。
【請求項４】
対象が、ＣＯＬ４Ａ３、ＣＯＬ４Ａ４、及びＣＯＬ４Ａ５のうちの１つ以上に突然変異を内包する、請求項３に記載の薬学的組成物。
【請求項５】
６週間以上にわたって毎日投与されることを意図している、および／または、
１２週間以上にわたって毎日投与されることを意図している、および／または、
対象がアルポート症候群を有すると診断されている、さらに、
アルポート症候群の徴候または症状が、血尿症、タンパク尿症、円柱尿症、白血球尿症、高血圧、浮腫、微量アルブミン尿症、糸球体濾過量減少、間質性線維症、間質炎、尿細管損傷、ＧＢＭ超微細構造異常、ネフローゼ症候群、糸球体腎炎、末期腎疾患、慢性貧血、巨大血小板性血小板減少症、骨形成異常症、感覚神経性難聴、前部円錐水晶体、ドットアンドフレック網膜症、後部多形性角膜変性症、再発性角膜びらん、一時黄斑菲薄化、白内障、流涙、羞明、視力喪失、円錐角膜、及び平滑筋腫症のうちの１つ以上を含んでもよく、および／または、
対象はヒトであり、および／または、
経口的に、局所的に、鼻腔内に、全身的に、静脈内に、皮下に、腹腔内に、皮内に、眼内に、イオン泳動的に、経粘膜的に、または筋肉内に投与することが意図されている、
請求項１〜４のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項６】
１つ以上の追加の治療剤と共に、対象に個別に、順次に、または同時に投与することを意図した請求項１〜５のいずれか一項記載の薬学的組成物であって、前記追加の治療剤がアンジオテンシンＩＩ変換酵素阻害剤（ＡＣＥ阻害剤）、アンジオテンシンＩＩ受容体遮断剤（ＡＲＢ）、ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤、アルドステロン阻害剤、アリスキレン、カルシネウリン阻害剤（例えば、シクロスポリンＡ、タクロリムス）、エンドセリン受容体拮抗薬（例えば、シタキセンタン、アンブリセンタン（ＬＥＴＡＩＲＩＳ）、アントラセンタン、ＢＱ−１２３、ジボテンタン、ボセンタン（ＴＲＡＣＬＥＥＲ）、マシテンタン、テゾセンタン、ＢＱ−７８８、及びＡ１９２６２１）、スロデキシド、バソペプチダーゼ阻害剤（例えば、ＡＶＥ７６８８）、抗トランスフォーミング成長因子−β１抗体、ケモカイン受容体１遮断剤、骨形成タンパク質−７、ＰＰＡＲγ作動薬（例えば、ロシグリタゾン、ピオグリタゾン、ＭＲＬ２４、Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｌｅｕ、ＳＲ１６６４、ＳＲ１８２４、ＧＷ００７２、ＭＣＣ５５５、ＣＬＸ−０９２１、ＰＡＴ５Ａ、Ｌ−７６４４０６、ｎＴＺＤｐａ、ＣＤＤＯ（２−シアノ−３，１２−ジオキソオレアナ−１，９−ジエン−２８−オイック酸）、ラガグリタザル、Ｏ−アリールマンデル酸、及びＮＳＡＩＤ）、ならびにＢＡＹ−１２−９５６６からなる群から選択され得る、前記薬学的組成物。
【請求項７】
薬学的に許容される塩が、酢酸塩、酒石酸塩、またはトリフルオロ酢酸塩を含む、および／または、
治療が、未治療のアルポート症候群対象と比較して上昇したＭｆｎ１発現および／または機能をもたらす、
請求項１に記載の薬学的組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１４年８月２１日出願の米国出願第６２／０４０，２３６号の利益及び優先権を主張し、その内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０００２】
本技術は、ＣＯＬ４Ａ３、ＣＯＬ４Ａ４、及びＣＯＬ４Ａ５遺伝子のうちの１つ以上の機能の低減、減少した発現レベル、及び／または欠乏に関連する１つ以上の徴候または症状を予防するか、改善するか、またはその重症度を低減するための組成物及び方法を対象とする。本技術は、概して、アルポート症候群を予防、改善、もしくは治療するため、及び／またはアルポート症候群に関連する１つ以上の危険因子、徴候、もしくは症状の重症度を低減するための組成物及び方法にも関する。追加として、本技術は、有効量の芳香族カチオン性ペプチド、例えば、Ｄ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2を、ＣＯＬ４Ａ３、ＣＯＬ４Ａ４、及びＣＯＬ４Ａ５遺伝子のうちの１つ以上の機能の低減、減少した発現レベル、及び／または欠乏を特徴とする疾患または病態に罹患しているか、またはその危険性がある対象に投与することに関する。いくつかの実施形態では、本技術は、有効量の芳香族カチオン性ペプチド、例えば、Ｄ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2を、アルポート症候群に罹患しているか、またはその危険性がある対象に投与することに関する。
【背景技術】
【０００３】
次の説明は、読者の理解の助けとなるように提供される。提供される情報または引用される参考文献のうちの何一つとして、本発明に開示される組成物及び方法に対する先行技術であると認められるものはない。
【０００４】
アルポート症候群または遺伝性腎炎は、糸球体腎炎、末期腎疾患、及び聴覚喪失を特徴とする遺伝的障害である。血尿（血尿症）及び尿中タンパク質（タンパク尿症）は、この病態の共通特徴である。アルポート症候群は、眼にも影響を及ぼし得、白内障、円錐水晶体、円錐角膜、ならびに黄斑及び中央周縁部の網膜斑点を含む、眼の異常を引き起こす。
【０００５】
アルポート症候群は、コラーゲン生合成に関与するＣＯＬ４Ａ３、ＣＯＬ４Ａ４、及びＣＯＬ４Ａ５遺伝子における突然変異によって引き起こされる。これらの遺伝子のうちのいずれかにおける突然変異は、腎臓、内耳、及び眼の基底膜の重要な構造成分である、ＩＶ型コラーゲンα３−４−５ネットワークの適切な生成または組織化を妨げる。基底膜は、多くの組織内で細胞を分離し、支持する薄いシート状構造である。突然変異がＩＶ型コラーゲン線維の形成を妨害する場合、腎臓の基底膜は、老廃物を血液から濾過すること、及び正常な尿生成を促進することができず、それにより尿中への血液及びタンパク質の放出をもたらす。腎臓基底膜内のＩＶ型コラーゲンの異常は、腎臓の段階的瘢痕化を引き起こし、最終的に末期腎疾患（ＥＳＲＤ）につながる。疾患の進行は、基底膜の菲薄化につながり、糸球体基底膜（ＧＢＭ）、特に緻密層の分裂から「バスケット織り」外観を付与する。腎疾患進行の関数としての、ＧＢＭ内の細胞外基質及びメサンギウムの蓄積は、アルポート症候群を含む様々な糸球体疾患によって共有される特徴である。
【０００６】
アルポート症候群を有する患者は、後期小児期または前期思春期中に内耳の異常によって引き起こされる、感覚神経性聴覚喪失／難聴を頻繁に発症する。罹患した個体は、眼の奇形レンズ（前部円錐水晶体）及び網膜の感光組織の異常着色を有する場合もある。これらの眼の異常が、視覚喪失につながることはめったにない。著しい聴覚喪失、眼の異常、及び進行性腎疾患は、罹患した女性よりもアルポート症候群を有する男性においてより頻繁に見られる。
【０００７】
この病態に対する既知の治療法が存在しないため、治療は、大半が症状の緩和をもたらすことを目的としている。タンパク尿症は、多くの場合、ＡＣＥ阻害剤で治療される。一旦腎不全が発症すると、患者は、透析または手術でそれらの病態を管理しようとする。
【発明の概要】
【０００８】
一態様では、本開示は、アルポート症候群を治療もしくは予防するため、及び／またはアルポート症候群の徴候もしくは症状を治療もしくは予防するための方法を必要とする対象において、治療有効量の、Ｄ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2等の芳香族カチオン性ペプチドまたはその薬学的に許容される塩を対象に投与することによって、アルポート症候群の１つ以上の徴候または症状の予防または治療をもたらす方法を提供する。本技術の方法のいくつかの実施形態では、薬学的に許容される塩は、酢酸塩、酒石酸塩、またはトリフルオロ酢酸塩を含む。
【０００９】
本技術の方法のいくつかの実施形態では、アルポート症候群の徴候または症状は、血尿症、タンパク尿症、円柱尿症、白血球尿症、高血圧、浮腫、微量アルブミン尿症、糸球体濾過量減少、間質性線維症、間質炎、尿細管損傷、ＧＢＭ超微細構造異常、ネフローゼ症候群、糸球体腎炎、末期腎疾患、慢性貧血、巨大血小板性血小板減少症、骨形成異常症、感覚神経性難聴、前部円錐水晶体、ドットアンドフレック網膜症、後部多形性角膜変性症、再発性角膜びらん、一時黄斑菲薄化、白内障、流涙、羞明、視力喪失、円錐角膜、及び平滑筋腫症のうちの１つ以上を含む。
【００１０】
本技術の方法のいくつかの実施形態では、対象は、正常な対照対象と比較してＩＶ型コラーゲンのα−５鎖の低減した発現を示す。本技術の方法のいくつかの実施形態では、対象は、正常な対照対象と比較してＩＶ型コラーゲンのα−４鎖の低減した発現を示す。本技術の方法のいくつかの実施形態では、対象は、正常な対照対象と比較してＩＶ型コラーゲンのα−３鎖の低減した発現を示す。本技術の方法のいくつかの実施形態では、対象は、正常な対照対象と比較してＩＶ型コラーゲンのα−３及びα−４鎖の低減した発現を示す。本技術の方法のいくつかの実施形態では、対象は、正常な対照対象と比較してＩＶ型コラーゲンのα−３及びα−５鎖の低減した発現を示す。本技術の方法のいくつかの実施形態では、対象は、正常な対照対象と比較してＩＶ型コラーゲンのα−４及びα−５鎖の低減した発現を示す。本技術の方法のいくつかの実施形態では、対象は、正常な対照対象と比較してＩＶ型コラーゲンのα−３、α−４、及びα−５鎖の低減した発現を示す。
【００１１】
本技術の方法のいくつかの実施形態では、対象は、ＩＶ型コラーゲンの胎児特異的α−１及びα−２アイソフォームの持続発現を示す。
【００１２】
本技術の方法のいくつかの実施形態では、対象は、正常な対照対象と比較して、ＡＤＡＭ８、フィブロネクチン、ミオシン１０、ＭＭＰ−２、ＭＭＰ−９、及びポドシンのうちの１つ以上の異常レベル及び／または機能を示す。本技術の方法のある特定の実施形態では、ペプチド治療は、該タンパク質のレベル及び／または機能を回復させる。
【００１３】
本技術の方法のいくつかの実施形態では、対象は、アルポート症候群を有すると診断された。本技術の方法のいくつかの実施形態では、対象は、Ｘ連鎖アルポート症候群、常染色体優性アルポート症候群、または常染色体劣性アルポート症候群と診断される。本技術の方法のいくつかの実施形態では、対象は、難聴を伴うＸ連鎖若年性アルポート症候群と診断される。本技術の方法の他の実施形態では、対象は、難聴を伴うＸ連鎖成人性アルポート症候群と診断される。本技術の方法のいくつかの実施形態では、対象は、難聴または他の腎欠陥を伴わないＸ連鎖成人性アルポート症候群と診断される。
【００１４】
本技術の方法の他の実施形態では、対象は、ＣＯＬ４Ａ３、ＣＯＬ４Ａ４、及びＣＯＬ４Ａ５のうちの１つ以上に遺伝的突然変異を担持する。本技術の方法のいくつかの実施形態では、対象は、ヒトである。
【００１５】
本技術の方法のいくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、経口的に、局所的に、鼻腔内に、全身的に、静脈内に、皮下に、腹腔内に、皮内に、眼内に、イオン泳動的に、経粘膜的に、または筋肉内に投与される。
【００１６】
本技術の方法のいくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、１週間以上にわたって毎日投与される。本技術の方法のいくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、２週間以上にわたって毎日投与される。本技術の方法のいくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、３週間以上にわたって毎日投与される。本技術の方法のいくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、４週間以上にわたって毎日投与される。本技術の方法のいくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、６週間以上にわたって毎日投与される。本技術の方法のいくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、１２週間以上にわたって毎日投与される。
【００１７】
いくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドの投与に加えて、本方法は、１つ以上の追加の治療剤を対象に個別に、順次に、または同時に投与することを更に含み、追加の治療剤が、アンジオテンシンＩＩ変換酵素阻害剤（ＡＣＥ阻害剤）、アンジオテンシンＩＩ受容体遮断剤（ＡＲＢ）、ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤、アルドステロン阻害剤、アリスキレン、カルシネウリン阻害剤（例えば、シクロスポリンＡ、タクロリムス）、エンドセリン受容体拮抗薬（例えば、シタキセンタン、アンブリセンタン（ＬＥＴＡＩＲＩＳ）、アントラセンタン、ＢＱ−１２３、ジボテンタン、ボセンタン（ＴＲＡＣＬＥＥＲ）、マシテンタン、テゾセンタン、ＢＱ−７８８、及びＡ１９２６２１）、スロデキシド、バソペプチダーゼ阻害剤（例えば、ＡＶＥ７６８８）、抗トランスフォーミング成長因子−β１抗体、ケモカイン受容体１遮断剤、骨形成タンパク質−７、ＰＰＡＲγ作動薬（例えば、ロシグリタゾン、ピオグリタゾン、ＭＲＬ２４、Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｌｅｕ、ＳＲ１６６４、ＳＲ１８２４、ＧＷ００７２、ＭＣＣ５５５、ＣＬＸ−０９２１、ＰＡＴ５Ａ、Ｌ−７６４４０６、ｎＴＺＤｐａ、ＣＤＤＯ（２−シアノ−３，１２−ジオキソオレアナ−１，９−ジエン−２８−オイック酸）、ラガグリタザル、Ｏ−アリールマンデル酸、及びＮＳＡＩＤ）、ならびにＢＡＹ−１２−９５６６からなる群から選択される。
【００１８】
いくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドの投与に加えて、本方法は、カプトプリル、アラセプリル、リシノプリル、イミダプリル、キナプリル、テモカプリル、デラプリル、ベナゼプリル、シラザプリル、トランドラプリル、エナラプリル、セロナプリル、ホシノプリル、イマダプリル、モベルトプリル、ペリンドプリル、ラミプリル、スピラプリル、ランドラプリル、及びそのような化合物の薬学的に許容される塩からなる群から選択される１つ以上のＡＣＥ阻害剤（アンジオテンシンＩＩ変換酵素阻害剤）を対象に個別に、順次に、または同時に投与することも含む。本技術の方法のいくつかの実施形態では、アルポート症候群の予防または治療に関して、芳香族カチオン性ペプチドとＡＣＥ阻害剤との間に相乗効果が存在する。
【００１９】
いくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドの投与に加えて、本方法は、ロサルタン、カンデサルタン、バルサルタン、エプロサルタン、テルミサルタン、及びイルベサルタンからなる群から選択される１つ以上のＡＲＢ（アンジオテンシンＩＩ受容体遮断剤）を対象に個別に、順次に、または同時に投与することも含む。本技術の方法のいくつかの実施形態では、アルポート症候群の予防または治療に関して、芳香族カチオン性ペプチドとＡＲＢとの間に相乗効果が存在する。
【００２０】
いくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドの投与に加えて、本方法は、ロバスタチン（例えば、ＡＤＶＩＣＯＲ（登録商標）（ナイアシン延長放出／ロバスタチン）（ＡｂｂＶｉｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｃｈｉｃａｇｏ，Ｉｌｌｉｎｏｉｓ）、ＡＬＴＯＰＲＥＶ（商標）（ロバスタチン延長放出）（Ｓｈｉｏｎｇｉ，Ｉｎｃ．，Ａｔｌａｎｔａ，ＧＡ）、ＭＥＶＡＣＯＲ（登録商標）（Ｍｅｒｃｋ，Ｗｈｉｔｅｈｏｕｓｅ  Ｓｔａｔｉｏｎ，ＮＪ）、アトルバスタチン（例えば、ＣＡＤＵＥＴ（登録商標）（アムロジピン及びアトルバスタチン）（Ｐｆｉｚｅｒ，Ｍｏｒｒｉｓｖｉｌｌｅ，ＰＡ）、ＬＩＰＩＴＯＲ（登録商標）（Ｐｆｉｚｅｒ，Ｍｏｒｒｉｓｖｉｌｌｅ，ＰＡ））、ロスバスタチン及び／またはロスバスタチンカルシウム（例えば、ＣＲＥＳＴＯＲ（登録商標）（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ，Ｌｏｎｄｏｎ，Ｅｎｇｌａｎｄ））、シムバスタチン（例えば、ＪＵＶＩＳＹＮＣ（登録商標）（シタグリプチン／シムバスタチン）（Ｍｅｒｃｋ，Ｗｈｉｔｅｈｏｕｓｅ  Ｓｔａｔｉｏｎ，ＮＪ））、ＳＩＭＣＯＲ（登録商標）（ナイアシン延長放出／シムバスタチン）（ＡｂｂＶｉｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｃｈｉｃａｇｏ，Ｉｌｌｉｎｏｉｓ）、ＶＹＴＯＲＩＮ（登録商標）（エゼチミブ／シムバスタチン）（Ｍｅｒｃｋ，Ｗｈｉｔｅｈｏｕｓｅ  Ｓｔａｔｉｏｎ，ＮＪ）、及びＺＯＣＯＲ（登録商標）（Ｍｅｒｃｋ，Ｗｈｉｔｅｈｏｕｓｅ  Ｓｔａｔｉｏｎ，ＮＪ）、フルバスタチン及び／またはフルバスタチンナトリウム（例えば、ＬＥＳＣＯＬ（登録商標）、ＬＥＳＣＯＬ  ＸＬ（フルバスタチン延長放出）（Ｍｙｌａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｍｏｒｇａｎｔｏｗｎ，ＷＶ））、ピタバスタチン（例えば、ＬＩＶＡＬＯ（Ｋｏｗａ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｍｏｎｔｇｏｍｅｒｙ，ＡＬ））、プラバスタチン及び／またはプラバスタチンナトリウム（例えば、ＰＲＡＶＡＣＨＯＬ（登録商標）（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＮＹ））からなる群から選択される１つ以上のＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤（またはスタチン）を対象に個別に、順次に、または同時に投与することも含む。本技術の方法のいくつかの実施形態では、アルポート症候群の予防または治療に関して、芳香族カチオン性ペプチドとＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤との間に相乗効果が存在する。
【００２１】
いくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドの投与に加えて、本方法は、スピロノラクトン（Ａｌｄａｃｔｏｎｅ（登録商標））、エプレレノン（Ｉｎｓｐｒａ（登録商標））、カンレノン（カンレノ酸カリウム）、プロレノン（プロレノ酸カリウム）、及びメキシレノン（メキシレノ酸カリウム）からなる群から選択される１つ以上のアルドステロン阻害剤を対象に個別に、順次に、または同時に投与することも含む。本技術の方法のいくつかの実施形態では、アルポート症候群の予防または治療に関して、芳香族カチオン性ペプチドとアルドステロン阻害剤との間に相乗効果が存在する。
【００２２】
いくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドの投与に加えて、本方法は、基質メタロプロテイナーゼ阻害剤ＢＡＹ−１２−９５６６を対象に個別に、順次に、または同時に投与することも含む。本技術の方法のいくつかの実施形態では、アルポート症候群の予防または治療に関して、芳香族カチオン性ペプチドとＢＡＹ−１２−９５６６との間に相乗効果が存在する。
【００２３】
追加として、または代替として、本方法のいくつかの実施形態では、ペプチド治療は、未治療のアルポート症候群対象と比較して上昇したＭｆｎ１発現及び／または機能をもたらす。
【００２４】
一態様では、本技術は、アルポート症候群を有するか、または有することが疑われる哺乳類対象におけるメサンギウム基質拡大及びＧＢＭ不規則性を特徴とする進行性糸球体腎炎を低減するための方法を提供し、本方法は、治療有効量のペプチド芳香族カチオン性ペプチドＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に許容される塩を該対象に投与することを含む。本技術の方法のいくつかの実施形態では、薬学的に許容される塩は、酢酸塩、酒石酸塩、またはトリフルオロ酢酸塩を含む。
【００２５】
本技術の方法のいくつかの実施形態では、哺乳類対象は、正常な対照対象と比較してＣＯＬ４Ａ３、ＣＯＬ４Ａ４、またはＣＯＬ４Ａ５のうちの１つ以上の減少した発現を有する。
【００２６】
本技術の方法のいくつかの実施形態では、哺乳類対象は、正常な対照対象と比較してメサンギウム細胞内にＭＭＰ−９の増加した発現を有する。本技術の方法のいくつかの実施形態では、哺乳類対象は、正常な対照対象と比較してＡＤＡＭ８、フィブロネクチン、ミオシン１０、ＭＭＰ−２、及びポドシンのうちの１つ以上の変化した尿レベルを有する。
【００２７】
本技術の方法のいくつかの実施形態では、３つの尿バイオマーカーの組み合わせが、正常な対照対象と比較して哺乳類対象において変化する。特定の一実施形態では、哺乳類対象は、正常な対照対象と比較してフィブロネクチン、ミオシン１０、及びＭＭＰ−２の変化した尿レベルを有する。別の実施形態では、哺乳類対象は、正常な対照対象と比較してフィブロネクチン、ミオシン１０、及びＭＭＰ−９の変化した尿レベルを有する。
【００２８】
本技術の方法の他の実施形態では、２つの尿バイオマーカーの組み合わせが、正常な対照対象と比較して哺乳類対象において変化する。特定の一実施形態では、哺乳類対象は、正常な対照対象と比較してミオシン１０及びＭＭＰ−２の変化した尿レベルを有する。別の実施形態では、哺乳類対象は、正常な対照対象と比較してミオシン１０及びＭＭＰ−９の変化した尿レベルを有する。本技術の方法のいくつかの実施形態では、対象は、ヒトである。
【００２９】
追加として、または代替として、本方法のいくつかの実施形態では、ペプチド治療は、未治療のアルポート症候群対象と比較して上昇したＭｆｎ１発現及び／または機能をもたらす。
【００３０】
本技術の方法のいくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、経口的に、局所的に、鼻腔内に、全身的に、静脈内に、皮下に、腹腔内に、皮内に、眼内に、イオン泳動的に、経粘膜的に、または筋肉内に投与される。
【００３１】
本技術の方法のいくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、１週間以上にわたって毎日投与される。本技術の方法のいくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、２週間以上にわたって毎日投与される。本技術の方法のいくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、３週間以上にわたって毎日投与される。本技術の方法のいくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、４週間以上にわたって毎日投与される。本技術の方法のいくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、６週間以上にわたって毎日投与される。本技術の方法のいくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、１２週間以上にわたって毎日投与される。
【００３２】
いくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドの投与に加えて、本方法は、カプトプリル、アラセプリル、リシノプリル、イミダプリル、キナプリル、テモカプリル、デラプリル、ベナゼプリル、シラザプリル、トランドラプリル、エナラプリル、セロナプリル、ホシノプリル、イマダプリル、モベルトプリル、ペリンドプリル、ラミプリル、スピラプリル、ランドラプリル、及びそのような化合物の薬学的に許容される塩からなる群から選択される１つ以上のＡＣＥ阻害剤（アンジオテンシンＩＩ変換酵素阻害剤）を対象に個別に、順次に、または同時に投与することも含む。本技術の方法のいくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチド及びＡＣＥ阻害剤の組み合わせは、進行性糸球体腎炎の低減において相乗効果を有する。
【００３３】
いくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドの投与に加えて、本方法は、ロサルタン、カンデサルタン、バルサルタン、エプロサルタン、テルミサルタン、及びイルベサルタンからなる群から選択される１つ以上のＡＲＢ（アンジオテンシンＩＩ受容体遮断剤）を対象に個別に、順次に、または同時に投与することも含む。本技術の方法のいくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチド及びＡＲＢの組み合わせは、進行性糸球体腎炎の低減において相乗効果を有する。
【００３４】
いくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドの投与に加えて、本方法は、ロバスタチン（例えば、ＡＤＶＩＣＯＲ（登録商標）（ナイアシン延長放出／ロバスタチン）（ＡｂｂＶｉｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｃｈｉｃａｇｏ，Ｉｌｌｉｎｏｉｓ）、ＡＬＴＯＰＲＥＶ（商標）（ロバスタチン延長放出）（Ｓｈｉｏｎｇｉ，Ｉｎｃ．，Ａｔｌａｎｔａ，ＧＡ）、ＭＥＶＡＣＯＲ（登録商標）（Ｍｅｒｃｋ，Ｗｈｉｔｅｈｏｕｓｅ  Ｓｔａｔｉｏｎ，ＮＪ）、アトルバスタチン（例えば、ＣＡＤＵＥＴ（登録商標）（アムロジピン及びアトルバスタチン）（Ｐｆｉｚｅｒ，Ｍｏｒｒｉｓｖｉｌｌｅ，ＰＡ）、ＬＩＰＩＴＯＲ（登録商標）（Ｐｆｉｚｅｒ，Ｍｏｒｒｉｓｖｉｌｌｅ，ＰＡ））、ロスバスタチン及び／またはロスバスタチンカルシウム（例えば、ＣＲＥＳＴＯＲ（登録商標）（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ，Ｌｏｎｄｏｎ，Ｅｎｇｌａｎｄ））、シムバスタチン（例えば、ＪＵＶＩＳＹＮＣ（登録商標）（シタグリプチン／シムバスタチン）（Ｍｅｒｃｋ，Ｗｈｉｔｅｈｏｕｓｅ  Ｓｔａｔｉｏｎ，ＮＪ））、ＳＩＭＣＯＲ（登録商標）（ナイアシン延長放出／シムバスタチン）（ＡｂｂＶｉｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｃｈｉｃａｇｏ，Ｉｌｌｉｎｏｉｓ）、ＶＹＴＯＲＩＮ（登録商標）（エゼチミブ／シムバスタチン）（Ｍｅｒｃｋ，Ｗｈｉｔｅｈｏｕｓｅ  Ｓｔａｔｉｏｎ，ＮＪ）、及びＺＯＣＯＲ（登録商標）（Ｍｅｒｃｋ，Ｗｈｉｔｅｈｏｕｓｅ  Ｓｔａｔｉｏｎ，ＮＪ）、フルバスタチン及び／またはフルバスタチンナトリウム（例えば、ＬＥＳＣＯＬ（登録商標）、ＬＥＳＣＯＬ  ＸＬ（フルバスタチン延長放出）（Ｍｙｌａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｍｏｒｇａｎｔｏｗｎ，ＷＶ））、ピタバスタチン（例えば、ＬＩＶＡＬＯ（Ｋｏｗａ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｍｏｎｔｇｏｍｅｒｙ，ＡＬ））、プラバスタチン及び／またはプラバスタチンナトリウム（例えば、ＰＲＡＶＡＣＨＯＬ（登録商標）（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＮＹ））からなる群から選択される１つ以上のＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤（またはスタチン）を対象に個別に、順次に、または同時に投与することも含む。本技術の方法のいくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチド及びＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤の組み合わせは、進行性糸球体腎炎の低減において相乗効果を有する。
【００３５】
いくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドの投与に加えて、本方法は、スピロノラクトン（Ａｌｄａｃｔｏｎｅ（登録商標））、エプレレノン（Ｉｎｓｐｒａ（登録商標））、カンレノン（カンレノ酸カリウム）、プロレノン（プロレノ酸カリウム）、及びメキシレノン（メキシレノ酸カリウム）からなる群から選択される１つ以上のアルドステロン阻害剤を対象に個別に、順次に、または同時に投与することも含む。本技術の方法のいくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチド及びアルドステロン阻害剤の組み合わせは、進行性糸球体腎炎の低減において相乗効果を有する。
【００３６】
いくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドの投与に加えて、本方法は、基質メタロプロテイナーゼ阻害剤ＢＡＹ−１２−９５６６を対象に個別に、順次に、または同時に投与することも含む。本技術の方法のいくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチド及びＢＡＹ−１２−９５６６の組み合わせは、進行性糸球体腎炎の低減において相乗効果を有する。
【００３７】
一態様では、本技術は、正常な対照対象と比較してＣＯＬ４Ａ３、ＣＯＬ４Ａ４、またはＣＯＬ４Ａ５の減少した発現を有する哺乳類対象におけるアルポート症候群の危険性、徴候、または症状を低減するための方法を提供する。いくつかの実施形態では、本方法は、治療有効量の芳香族カチオン性ペプチドＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に許容される塩を対象に投与することを含み、それによりアルポート症候群の１つ以上の危険性、徴候、または症状の発症の予防または遅延をもたらす。本技術の方法のいくつかの実施形態では、薬学的に許容される塩は、酢酸塩、酒石酸塩、またはトリフルオロ酢酸塩を含む。
【００３８】
本技術の方法のいくつかの実施形態では、アルポート症候群の徴候または症状は、血尿症、タンパク尿症、円柱尿症、白血球尿症、高血圧、浮腫、微量アルブミン尿症、糸球体濾過量減少、間質性線維症、間質炎、尿細管損傷、ＧＢＭ超微細構造異常、ネフローゼ症候群、糸球体腎炎、末期腎疾患、慢性貧血、巨大血小板性血小板減少症、骨形成異常症、感覚神経性難聴、前部円錐水晶体、ドットアンドフレック網膜症、後部多形性角膜変性症、再発性角膜びらん、一時黄斑菲薄化、白内障、流涙、羞明、視力喪失、円錐角膜、及び平滑筋腫症のうちの１つ以上を含む。
【００３９】
本技術の方法の他の実施形態では、対象は、ＣＯＬ４Ａ３、ＣＯＬ４Ａ４、及びＣＯＬ４Ａ５のうちの１つ以上に遺伝的突然変異を担持する。本技術の方法のいくつかの実施形態では、対象は、ヒトである。
【００４０】
追加として、または代替として、本方法のいくつかの実施形態では、ペプチド治療は、未治療のアルポート症候群対象と比較して上昇したＭｆｎ１発現及び／または機能をもたらす。
【００４１】
本技術の方法のいくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、経口的に、局所的に、鼻腔内に、全身的に、静脈内に、皮下に、腹腔内に、皮内に、眼内に、イオン泳動的に、経粘膜的に、または筋肉内に投与される。
【００４２】
本技術の方法のいくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、１週間以上にわたって毎日投与される。本技術の方法のいくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、２週間以上にわたって毎日投与される。本技術の方法のいくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、３週間以上にわたって毎日投与される。本技術の方法のいくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、４週間以上にわたって毎日投与される。本技術の方法のいくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、６週間以上にわたって毎日投与される。本技術の方法のいくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、１２週間以上にわたって毎日投与される。
【００４３】
いくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドの投与に加えて、本方法は、１つ以上の追加の治療剤を対象に個別に、順次に、または同時に投与することを更に含み、追加の治療剤が、アンジオテンシンＩＩ変換酵素阻害剤（ＡＣＥ阻害剤）、アンジオテンシンＩＩ受容体遮断剤（ＡＲＢ）、ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤、アルドステロン阻害剤、アリスキレン、カルシネウリン阻害剤（例えば、シクロスポリンＡ、タクロリムス）、エンドセリン受容体拮抗薬（例えば、シタキセンタン、アンブリセンタン（ＬＥＴＡＩＲＩＳ）、アントラセンタン、ＢＱ−１２３、ジボテンタン、ボセンタン（ＴＲＡＣＬＥＥＲ）、マシテンタン、テゾセンタン、ＢＱ−７８８、及びＡ１９２６２１）、スロデキシド、バソペプチダーゼ阻害剤（例えば、ＡＶＥ７６８８）、抗トランスフォーミング成長因子−β１抗体、ケモカイン受容体１遮断剤、骨形成タンパク質−７、ＰＰＡＲγ作動薬（例えば、ロシグリタゾン、ピオグリタゾン、ＭＲＬ２４、Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｌｅｕ、ＳＲ１６６４、ＳＲ１８２４、ＧＷ００７２、ＭＣＣ５５５、ＣＬＸ−０９２１、ＰＡＴ５Ａ、Ｌ−７６４４０６、ｎＴＺＤｐａ、ＣＤＤＯ（２−シアノ−３，１２−ジオキソオレアナ−１，９−ジエン−２８−オイック酸）、ラガグリタザル、Ｏ−アリールマンデル酸、及びＮＳＡＩＤ）、ならびにＢＡＹ−１２−９５６６からなる群から選択される。
【００４４】
いくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドの投与に加えて、本方法は、カプトプリル、アラセプリル、リシノプリル、イミダプリル、キナプリル、テモカプリル、デラプリル、ベナゼプリル、シラザプリル、トランドラプリル、エナラプリル、セロナプリル、ホシノプリル、イマダプリル、モベルトプリル、ペリンドプリル、ラミプリル、スピラプリル、ランドラプリル、及びそのような化合物の薬学的に許容される塩からなる群から選択される１つ以上のＡＣＥ阻害剤（アンジオテンシンＩＩ変換酵素阻害剤）を対象に個別に、順次に、または同時に投与することも含む。本技術の方法のいくつかの実施形態では、アルポート症候群の危険性、徴候、または症状を低減することに関して、芳香族カチオン性ペプチドとＡＣＥ阻害剤との間に相乗効果が存在する。
【００４５】
いくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドの投与に加えて、本方法は、ロサルタン、カンデサルタン、バルサルタン、エプロサルタン、テルミサルタン、及びイルベサルタンからなる群から選択される１つ以上のＡＲＢ（アンジオテンシンＩＩ受容体遮断剤）を対象に個別に、順次に、または同時に投与することも含む。本技術の方法のいくつかの実施形態では、アルポート症候群の危険性、徴候、または症状を低減することに関して、芳香族カチオン性ペプチドとＡＲＢ阻害剤との間に相乗効果が存在する。
【００４６】
いくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドの投与に加えて、本方法は、ロバスタチン（例えば、ＡＤＶＩＣＯＲ（登録商標）（ナイアシン延長放出／ロバスタチン）（ＡｂｂＶｉｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｃｈｉｃａｇｏ，Ｉｌｌｉｎｏｉｓ）、ＡＬＴＯＰＲＥＶ（商標）（ロバスタチン延長放出）（Ｓｈｉｏｎｇｉ，Ｉｎｃ．，Ａｔｌａｎｔａ，ＧＡ）、ＭＥＶＡＣＯＲ（登録商標）（Ｍｅｒｃｋ，Ｗｈｉｔｅｈｏｕｓｅ  Ｓｔａｔｉｏｎ，ＮＪ）、アトルバスタチン（例えば、ＣＡＤＵＥＴ（登録商標）（アムロジピン及びアトルバスタチン）（Ｐｆｉｚｅｒ，Ｍｏｒｒｉｓｖｉｌｌｅ，ＰＡ）、ＬＩＰＩＴＯＲ（登録商標）（Ｐｆｉｚｅｒ，Ｍｏｒｒｉｓｖｉｌｌｅ，ＰＡ））、ロスバスタチン及び／またはロスバスタチンカルシウム（例えば、ＣＲＥＳＴＯＲ（登録商標）（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ，Ｌｏｎｄｏｎ，Ｅｎｇｌａｎｄ））、シムバスタチン（例えば、ＪＵＶＩＳＹＮＣ（登録商標）（シタグリプチン／シムバスタチン）（Ｍｅｒｃｋ，Ｗｈｉｔｅｈｏｕｓｅ  Ｓｔａｔｉｏｎ，ＮＪ））、ＳＩＭＣＯＲ（登録商標）（ナイアシン延長放出／シムバスタチン）（ＡｂｂＶｉｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｃｈｉｃａｇｏ，Ｉｌｌｉｎｏｉｓ）、ＶＹＴＯＲＩＮ（登録商標）（エゼチミブ／シムバスタチン）（Ｍｅｒｃｋ，Ｗｈｉｔｅｈｏｕｓｅ  Ｓｔａｔｉｏｎ，ＮＪ）、及びＺＯＣＯＲ（登録商標）（Ｍｅｒｃｋ，Ｗｈｉｔｅｈｏｕｓｅ  Ｓｔａｔｉｏｎ，ＮＪ）、フルバスタチン及び／またはフルバスタチンナトリウム（例えば、ＬＥＳＣＯＬ（登録商標）、ＬＥＳＣＯＬ  ＸＬ（フルバスタチン延長放出）（Ｍｙｌａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｍｏｒｇａｎｔｏｗｎ，ＷＶ））、ピタバスタチン（例えば、ＬＩＶＡＬＯ（Ｋｏｗａ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｍｏｎｔｇｏｍｅｒｙ，ＡＬ））、プラバスタチン及び／またはプラバスタチンナトリウム（例えば、ＰＲＡＶＡＣＨＯＬ（登録商標）（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＮＹ））からなる群から選択される１つ以上のＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤（またはスタチン）を対象に個別に、順次に、または同時に投与することも含む。本技術の方法のいくつかの実施形態では、アルポート症候群の危険性、徴候、または症状を低減することに関して、芳香族カチオン性ペプチドとＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤との間に相乗効果が存在する。
【００４７】
いくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドの投与に加えて、本方法は、スピロノラクトン（Ａｌｄａｃｔｏｎｅ（登録商標））、エプレレノン（Ｉｎｓｐｒａ（登録商標））、カンレノン（カンレノ酸カリウム）、プロレノン（プロレノ酸カリウム）、及びメキシレノン（メキシレノ酸カリウム）からなる群から選択される１つ以上のアルドステロン阻害剤を対象に個別に、順次に、または同時に投与することも含む。本技術の方法のいくつかの実施形態では、アルポート症候群の危険性、徴候、または症状を低減することに関して、芳香族カチオン性ペプチドとアルドステロン阻害剤との間に相乗効果が存在する。
【００４８】
いくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドの投与に加えて、本方法は、基質メタロプロテイナーゼ阻害剤ＢＡＹ−１２−９５６６を対象に個別に、順次に、または同時に投与することも含む。本技術の方法のいくつかの実施形態では、アルポート症候群の危険性、徴候、または症状を低減することに関して、芳香族カチオン性ペプチドとＢＡＹ−１２−９５６６との間に相乗効果が存在する。
【００４９】
一態様では、本技術は、ＣＯＬ４Ａ３、ＣＯＬ４Ａ４、及びＣＯＬ４Ａ５遺伝子のうちの１つ以上の機能の低減、減少した発現レベル、及び／または欠乏を特徴とする疾患または病態の治療を必要とする対象における、疾患または病態を治療するための方法であって、治療有効量の芳香族カチオン性ペプチドＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に許容される塩を該対象に投与することを含む、方法を提供する。本技術の方法のいくつかの実施形態では、薬学的に許容される塩は、酢酸塩、酒石酸塩、またはトリフルオロ酢酸塩を含む。
【００５０】
ある特定の実施形態では、疾患または病態は、正常な対照対象と比較してＣＯＬ４Ａ３、ＣＯＬ４Ａ４、及びＣＯＬ４Ａ５のうちの１つ以上の機能の低減を特徴とする。他の実施形態では、疾患または病態は、ＣＯＬ４Ａ３、ＣＯＬ４Ａ４、及びＣＯＬ４Ａ５のうちの１つ以上の欠乏を特徴とする。本技術の方法のいくつかの実施形態では、疾患または病態は、正常な対照対象と比較してＣＯＬ４Ａ３、ＣＯＬ４Ａ４、及びＣＯＬ４Ａ５のうちの１つ以上の減少した発現レベルを特徴とする。
【００５１】
本技術の方法のいくつかの実施形態では、対象は、正常な対照対象と比較してメサンギウム細胞内にＭＭＰ−９の増加した発現を有する。追加として、または代替として、本技術の方法のいくつかの実施形態では、対象は、正常な対照対象と比較してＡＤＡＭ８、フィブロネクチン、ミオシン１０、ＭＭＰ−２、及びポドシンのうちの１つ以上の変化した尿レベルを有する。
【００５２】
本技術の方法のいくつかの実施形態では、３つの尿バイオマーカーの組み合わせが、正常な対照対象と比較して対象において変化する。特定の一実施形態では、本対象は、正常な対照対象と比較してフィブロネクチン、ミオシン１０、及びＭＭＰ−２の変化した尿レベルを有する。別の実施形態では、対象は、正常な対照対象と比較してフィブロネクチン、ミオシン１０、及びＭＭＰ−９の変化した尿レベルを有する。
【００５３】
本技術の方法の他の実施形態では、２つの尿バイオマーカーの組み合わせが、正常な対照対象と比較して対象において変化する。特定の一実施形態では、本対象は、正常な対照対象と比較してミオシン１０及びＭＭＰ−２の変化した尿レベルを有する。別の実施形態では、対象は、正常な対照対象と比較してミオシン１０及びＭＭＰ−９の変化した尿レベルを有する。本技術の方法のいくつかの実施形態では、対象は、ヒトである。
【００５４】
追加として、または代替として、本方法のいくつかの実施形態において、ペプチド治療は、ＣＯＬ４Ａ３、ＣＯＬ４Ａ４、及びＣＯＬ４Ａ５遺伝子のうちの１つ以上の機能の低減、減少した発現レベル、及び／または欠乏を特徴とする疾患または病態を有する未治療の対象と比較して上昇したＭｆｎ１発現及び／または機能をもたらす。
【００５５】
本技術の方法のいくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、経口的に、局所的に、鼻腔内に、全身的に、静脈内に、皮下に、腹腔内に、皮内に、眼内に、イオン泳動的に、経粘膜的に、または筋肉内に投与される。
【００５６】
本技術の方法のいくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、１週間以上にわたって毎日投与される。本技術の方法のいくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、２週間以上にわたって毎日投与される。本技術の方法のいくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、３週間以上にわたって毎日投与される。本技術の方法のいくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、４週間以上にわたって毎日投与される。本技術の方法のいくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、６週間以上にわたって毎日投与される。本技術の方法のいくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、１２週間以上にわたって毎日投与される。
【００５７】
追加として、または代替として、いくつかの実施形態では、本技術の方法は、１つ以上の追加の治療剤を対象に個別に、順次に、または同時に投与することを更に含む。更なる実施形態において、ペプチド及び追加の治療剤の組み合わせは、ＣＯＬ４Ａ３、ＣＯＬ４Ａ４、及びＣＯＬ４Ａ５遺伝子のうちの１つ以上の機能の低減、減少した発現レベル、及び／または欠乏を特徴とする疾患または病態の予防または治療において相乗効果を有する。
【００５８】
本方法のいくつかの実施形態では、追加の治療剤は、アンジオテンシンＩＩ変換酵素阻害剤（ＡＣＥ阻害剤）、アンジオテンシンＩＩ受容体遮断剤（ＡＲＢ）、ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤、アルドステロン阻害剤、アリスキレン、カルシネウリン阻害剤（例えば、シクロスポリンＡ、タクロリムス）、エンドセリン受容体拮抗薬（例えば、シタキセンタン、アンブリセンタン（ＬＥＴＡＩＲＩＳ）、アントラセンタン、ＢＱ−１２３、ジボテンタン、ボセンタン（ＴＲＡＣＬＥＥＲ）、マシテンタン、テゾセンタン、ＢＱ−７８８、及びＡ１９２６２１）、スロデキシド、バソペプチダーゼ阻害剤（例えば、ＡＶＥ７６８８）、抗トランスフォーミング成長因子−β１抗体、ケモカイン受容体１遮断剤、骨形成タンパク質−７、ＰＰＡＲγ作動薬（例えば、ロシグリタゾン、ピオグリタゾン、ＭＲＬ２４、Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｌｅｕ、ＳＲ１６６４、ＳＲ１８２４、ＧＷ００７２、ＭＣＣ５５５、ＣＬＸ−０９２１、ＰＡＴ５Ａ、Ｌ−７６４４０６、ｎＴＺＤｐａ、ＣＤＤＯ（２−シアノ−３，１２−ジオキソオレアナ−１，９−ジエン−２８−オイック酸）、ラガグリタザル、Ｏ−アリールマンデル酸、及びＮＳＡＩＤ）、ならびにＢＡＹ−１２−９５６６からなる群から選択される。
【００５９】
一態様では、本開示は、哺乳類対象におけるアルポート症候群を治療または予防する方法であって、治療有効量の芳香族カチオン性ペプチドを該哺乳類対象に投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、
少なくとも１つの正味正電荷と、
最低４個のアミノ酸と、
最大約２０個のアミノ酸と、
正味正電荷の最小数（ｐｍ）とアミノ酸残基の合計数（ｒ）との間の関係性であって、３ｐｍが、ｒ＋１以下である最大数である、関係性と、芳香族基の最小数（ａ）と正味正電荷の合計数（ｐｔ）との間の関係性であって、ａが１である場合、ｐｔもまた１であってもよいことを除いて、２ａが、ｐｔ＋１以下である最大数である、関係性と、を有するペプチドである。特定の実施形態では、哺乳類対象は、ヒトである。
【００６０】
一実施形態では、２ｐｍは、ｒ＋１以下である最大数であり、ｐｔに等しくてもよい。芳香族カチオン性ペプチドは、最低２つまたは最低３つの正電荷を有する水溶性ペプチドであってもよい。
【００６１】
一実施形態では、ペプチドは、１つ以上の天然に存在しないアミノ酸、例えば、１つ以上のＤ−アミノ酸を含む。いくつかの実施形態では、Ｃ末端におけるアミノ酸のＣ末端カルボキシル基は、アミド化される。ある特定の実施形態では、ペプチドは、最低４個のアミノ酸を有する。ペプチドは、合計約６個、合計約９個、または合計約１２個のアミノ酸を有してもよい。
【００６２】
一実施形態では、ペプチドは、式Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2または２′，６′−Ｄｍｐ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2を有してもよい。特定の実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、式Ｄ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2を有する。
【００６３】
一実施形態では、ペプチドは、式Ｉによって定義され、
【化１】
0006641356.tif 000002
式中、Ｒ1及びＲ2は、各々独立して、
（ｉ）水素、
（ｉｉ）直鎖または分岐鎖Ｃ1〜Ｃ6アルキル、
（ｉｉｉ）
【化２】
0006641356.tif 000003
（式中、ｍ＝１〜３）、
（ｉｖ）
【化３】
0006641356.tif 000004
、
（ｖ）
【化４】
0006641356.tif 000005
から選択され、
Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ8、Ｒ9、Ｒ10、Ｒ11、及びＲ12は、各々独立して、
（ｉ）水素、
（ｉｉ）直鎖または分岐鎖Ｃ1〜Ｃ6アルキル、
（ｉｉｉ）Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、
（ｉｖ）アミノ、
（ｖ）Ｃ1〜Ｃ4アルキルアミノ、
（ｖｉ）Ｃ1〜Ｃ4ジアルキルアミノ、
（ｖｉｉ）ニトロ、
（ｖｉｉｉ）ヒドロキシル、
（ｉｘ）ハロゲンから選択され、「ハロゲン」は、クロロ、フルオロ、ブロモ、及びヨードを包含し、
ｎは、１〜５の整数である。
【００６４】
特定の実施形態では、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ8、Ｒ9、Ｒ10、Ｒ11、及びＲ12は、全て水素であり、ｎは、４である。別の実施形態では、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ8、Ｒ9、及びＲ11は、全て水素であり、Ｒ8及びＲ12は、メチルであり、Ｒ10は、ヒドロキシルであり、ｎは、４である。
【００６５】
一実施形態では、ペプチドは、式ＩＩによって定義され、
【化５】
0006641356.tif 000006
式中、Ｒ1及びＲ2は、各々独立して、
（ｉ）水素、
（ｉｉ）直鎖または分岐鎖Ｃ1〜Ｃ6アルキル、
（ｉｉｉ）
【化６】
0006641356.tif 000007
（式中、ｍ＝１〜３）、
（ｉｖ）
【化７】
0006641356.tif 000008
、
（ｖ）
【化８】
0006641356.tif 000009
から選択され、
Ｒ3及びＲ4は、各々独立して、
（ｉ）水素、
（ｉｉ）直鎖または分岐鎖Ｃ1〜Ｃ6アルキル、
（ｉｉｉ）Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、
（ｉｖ）アミノ、
（ｖ）Ｃ1〜Ｃ4アルキルアミノ、
（ｖｉ）Ｃ1〜Ｃ4ジアルキルアミノ、
（ｖｉｉ）ニトロ、
（ｖｉｉｉ）ヒドロキシル、
（ｉｘ）ハロゲンから選択され、「ハロゲン」は、クロロ、フルオロ、ブロモ、及びヨードを包含し、
Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ8、及びＲ9は、各々独立して、
（ｉ）水素、
（ｉｉ）直鎖または分岐鎖Ｃ1〜Ｃ6アルキル、
（ｉｉｉ）Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、
（ｉｖ）アミノ、
（ｖ）Ｃ1〜Ｃ4アルキルアミノ、
（ｖｉ）Ｃ1〜Ｃ4ジアルキルアミノ、
（ｖｉｉ）ニトロ、
（ｖｉｉｉ）ヒドロキシル、
（ｉｘ）ハロゲンから選択され、「ハロゲン」は、クロロ、フルオロ、ブロモ、及びヨードを包含し、
ｎは、１〜５の整数である。
特定の実施形態では、Ｒ1及びＲ2は、水素であり、Ｒ3及びＲ4は、メチルであり、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ8、及びＲ9は、全て水素であり、ｎは、４である。
いくつかの実施形態では、本技術の芳香族カチオン性ペプチドは、芳香族アミノ酸及びカチオン性アミノ酸交互のコア構造モチーフを有する。例えば、ペプチドは、下に記載される式Ａ〜Ｆのうちのいずれかによって定義されたテトラペプチドであってもよい。
芳香族−カチオン性−芳香族−カチオン性（式Ａ）
カチオン性−芳香族−カチオン性−芳香族（式Ｂ）
芳香族−芳香族−カチオン性−カチオン性（式Ｃ）
カチオン性−カチオン性−芳香族−芳香族（式Ｄ）
芳香族−カチオン性−カチオン性−芳香族（式Ｅ）
カチオン性−芳香族−芳香族−カチオン性（式Ｆ）
【００６６】
式中、芳香族は、Ｐｈｅ（Ｆ）、Ｔｙｒ（Ｙ）、及びＴｒｐ（Ｗ）からなる群から選択される残基である。いくつかの実施形態では、芳香族残基は、芳香族残基の飽和類似体、例えば、シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）で置換されてもよい。いくつかの実施形態では、カチオン性は、Ａｒｇ（Ｒ）、Ｌｙｓ（Ｋ）、及びＨｉｓ（Ｈ）からなる群から選択される残基である。
【図面の簡単な説明】
【００６７】
【図１】Ｋａｓｈｔａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｅｄｉａｔｒ．Ｎｅｐｈｒｏｌ．２８：５−１１（２０１３）から適応される、アルポート腎症の５つの病期を示す。
【図２】Ｃｏｌ４ａ３ヌルマウスモデルにおける腎不全に対するＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2投与の評価のための全体研究設計を示す。
【図３Ａ】水、１ｍｇ／ｋｇのＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、及び５ｍｇ／ｋｇのＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2で処置されたＣｏｌ４ａ３ヌルマウスの生存曲線を示す。
【図３Ｂ】７週齢〜１５週齢の間に水、１ｍｇ／ｋｇのＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、及び５ｍｇ／ｋｇのＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2で処置されたＣｏｌ４ａ３ヌルマウスのＢＵＮレベルを示す。
【図３Ｃ】野生型マウスに対して、１５週齢において水、１ｍｇ／ｋｇのＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、及び５ｍｇ／ｋｇのＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2で処置されたＣｏｌ４ａ３ヌルマウスのＢＵＮレベルを示す。
【図４Ａ】野生型マウスに対して、１５週齢において水、１ｍｇ／ｋｇのＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、及び５ｍｇ／ｋｇのＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2で処置されたＣｏｌ４ａ３ヌルマウスの尿細管病理スコア（尿細管損傷の指標）を示す。
【図４Ｂ】野生型マウスに対して、１５週齢において水、１ｍｇ／ｋｇのＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、及び５ｍｇ／ｋｇのＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2で処置されたＣｏｌ４ａ３ヌルマウスの間質炎スコアを示す。
【図４Ｃ】野生型マウスに対して、１５週齢において水、１ｍｇ／ｋｇのＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、及び５ｍｇ／ｋｇのＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2で処置されたＣｏｌ４ａ３ヌルマウスの間質性線維症スコアを示す。
【図５Ａ】野生型マウスに対して、１５週齢において水、１ｍｇ／ｋｇのＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、及び５ｍｇ／ｋｇのＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2で処置されたＣｏｌ４ａ３ヌルマウスのＭｆｎ１、Ｏｐａ１、Ｄｒｐ１、及びＴｘｎ２のタンパク質発現レベルを示す。
【図５Ｂ】野生型マウスに対して、１５週齢において水、及び５ｍｇ／ｋｇのＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2で処置されたＣｏｌ４ａ３ヌルマウスの対照ＧＡＤＰＨレベルに対するＭＦＮ１タンパク質発現レベルの定量を示す。
【図５Ｃ】野生型マウスに対して、１５週齢において水、及び５ｍｇ／ｋｇのＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2で処置されたＣｏｌ４ａ３ヌルマウスの対照ＧＡＤＰＨレベルに対するＴＸＮ２タンパク質発現レベルの定量を示す。
【図６Ａ】野生型マウスに対して、１５週齢において水、１ｍｇ／ｋｇのＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、及び５ｍｇ／ｋｇのＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2で処置されたＣｏｌ４ａ３ヌルマウスのＳＯＤ１  ｍＲＮＡ発現レベルを示す。
【図６Ｂ】野生型マウスに対して、１５週齢において水、１ｍｇ／ｋｇのＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、及び５ｍｇ／ｋｇのＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2で処置されたＣｏｌ４ａ３ヌルマウスのＳＯＤ２  ｍＲＮＡ発現レベルを示す。
【図７】（ａ）６週齢において５ｍｇ／ｋｇのＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2（群（５））、（ｂ）１５週齢において１ｍｇ／ｋｇのＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、及び（ｃ）１５週齢において５ｍｇ／ｋｇのＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2で処置されたＣｏｌ４ａ３ヌルマウスのＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2血漿レベルを示す。最後の注入後３０分に、Ｄ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2血漿レベルを評価した。
【発明を実施するための形態】
【００６８】
本技術の特定の態様、様式、実施形態、変形形態、及び特徴が、本技術の実質的理解を提供するために様々な詳細度で以下に説明されることを理解されたい。本明細書に使用されるときの特定の用語の定義が、以下に提供される。別段に定義されない限り、本明細書に使用される全ての専門用語及び科学用語は、一般に、本技術が属する当業者によって通常理解されている意味と同一の意味を有する。
【００６９】
本明細書及び添付の特許請求の範囲において使用されるとき、単数形「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」、及び「前記（ｔｈｅ）」は、別途明示的に示されない限り、複数の指示対象を含む。例えば、「１つの細胞（ａ  ｃｅｌｌ）」への言及は、２つ以上の細胞の組み合わせを含み、その他も同様である。
【００７０】
本明細書で使用されるとき、対象への薬剤、薬物、またはペプチドの「投与」は、対象に化合物を導入または送達してその意図する機能を実施する、任意の経路を含む。投与は、経口的、鼻腔内、非経口的（静脈内、筋肉内、腹腔内、または皮下）、全身的、皮内に、眼内に、イオン泳動的に、経粘膜的に、筋肉内にまたは局所的を含む任意の好適な経路によって実行することができる。投与は、自己投与及び他者による投与を含む。
【００７１】
本明細書で使用されるとき、「アミノ酸」という用語は、天然に存在するアミノ酸及び合成アミノ酸、ならびに天然に存在するアミノ酸と同様の様式で機能するアミノ酸類似体及びアミノ酸模倣体を含む。天然に存在するアミノ酸は、遺伝暗号によってコードされるもの、ならびに例えば、ヒドロキシプロリン、γ−カルボキシグルタミン酸、及びＯ−ホスホセリン等、後に修飾されるこれらのアミノ酸である。アミノ酸類似体は、天然に存在するアミノ酸、すなわち、水素、カルボキシル基、アミノ基、及びＲ基（例えば、ホモセリン、ノルロイシン、メチオニンスルホキシド、メチオニンメチルスルホニウム）と結合するα−炭素と同様の塩基性化学構造を有する化合物を指す。このような類似体は、修飾Ｒ基（例えば、ノルロイシン）または修飾ペプチド主鎖を有するが、天然に存在するアミノ酸のような同じ塩基性化学構造を保持する。アミノ酸模倣体は、アミノ酸の一般的な化学構造と異なるが、天然に存在するアミノ酸と同様の様式で機能する構造を有する化学化合物を指す。アミノ酸は、それらの公知の３文字記号、またはＩＵＰＡＣ−ＩＵＢ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ  Ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎによって推奨されている１文字記号のいずれかによって、本明細書で言及され得る。
【００７２】
本明細書で使用されるとき、「有効量」という用語は、所望の治療及び／または予防効果を達成するために十分な量、例えば、腎臓、内耳、及び眼の基底膜の構造完全性及び機能の完全もしくは部分的回復を必要とする対象において、完全もしくは部分的回復をもたらすか、またはアルポート症候群の１つ以上の症状の部分的もしくは完全な改善をもたらす量を指す。治療的または予防的用途の状況では、いくつかの実施形態では、対象に投与される組成物の量は、疾患の種類及び重症度、ならびに全般的な健康状態、年齢、性別、体重及び薬物耐性等の個体の特性に依存するであろう。当業者であれば、これら及び他の要素に応じて適切な投与量を決定することができるであろう。組成物はまた、１つ以上の更なる治療化合物と組み合わせて投与することができる。本明細書に説明される方法では、Ｄ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2等の芳香族カチオン性ペプチド、または酢酸塩、酒石酸塩、もしくはトリフルオロ酢酸塩等のその薬学的に許容される塩が、血尿症、タンパク尿症、円柱尿症、白血球尿症、高血圧、浮腫、微量アルブミン尿症、糸球体濾過量減少、間質性線維症、間質炎、尿細管損傷、ＧＢＭ超微細構造異常、ネフローゼ症候群、糸球体腎炎、末期腎疾患、慢性貧血、巨大血小板性血小板減少症、骨形成異常症、感覚神経性難聴、前部円錐水晶体、ドットアンドフレック網膜症、後部多形性角膜変性症、再発性角膜びらん、一時黄斑菲薄化、白内障、流涙、羞明、視力喪失、円錐角膜、及び平滑筋腫症を含むが、これらに限定されないアルポート症候群の１つ以上の徴候、症状、または危険因子を有する対象に投与されてもよい。例えば、芳香族カチオン性ペプチドの「治療有効量」は、アルポート症候群の１つ以上の徴候、症状、または危険因子の存在、頻度、または重症度が低減または排除されるレベルを含む。いくつかの実施形態では、治療有効量は、アルポート症候群の生理的影響、及び／またはアルポート症候群の危険因子、及び／またはアルポート症候群を発症する可能性を低減または改善する。
【００７３】
本明細書で使用されるとき、「単離した」または「精製した」ポリペプチドまたはペプチドは、細胞材料もしくは薬剤が由来する細胞もしくは組織供給源からの他の混入ポリペプチドを実質的に含まない、または化学的に合成された場合には化学前駆体もしくは他の化学物質を実質的に含まない、ポリペプチドまたはペプチドを指す。例えば、単離芳香族カチオン性ペプチドは、薬剤の診断的または治療的使用に干渉するであろう材料を含まないであろう。このような干渉材料としては、酵素、ホルモン及び他のタンパク質性及び非タンパク質性溶質が挙げられ得る。
【００７４】
本明細書で使用されるとき、「ポリペプチド」、「ペプチド」、及び「タンパク質」という用語は、本明細書に互換的に使用されて、ペプチド結合または修飾ペプチド結合、すなわち、ペプチドイソスターによって互いに結合する２つ以上のアミノ酸を含むポリマーを意味する。ポリペプチドは、ペプチド、グリコペプチド、またはオリゴマーとして通常言及される短鎖、及びタンパク質として一般に言及されるより長い鎖の両方を指す。ポリペプチドは、２０個の遺伝子コードされたアミノ酸以外のアミノ酸を含有し得る。ポリペプチドは、翻訳後プロセス等の自然プロセスによって、または当該技術分野において周知である化学修飾技術によって、のいずれかで修飾されるアミノ酸配列を含有する。
【００７５】
本明細書で使用されるとき、「対象」、「個人」、または「患者」という用語は、個別の生物、脊椎動物、哺乳類、またはヒトであり得る。
【００７６】
本明細書で使用されるとき、「同時」の治療的使用という用語は、同じ経路による、かつ同時または実質的に同時の、少なくとも２つの活性成分の投与を指す。
【００７７】
本明細書で使用されるとき、「別個」の治療的使用という用語は、異なる経路による同時または実質的に同時の、少なくとも２つの活性成分の投与を指す。
【００７８】
本明細書で使用されるとき、「連続」の治療的使用という用語は、投与経路が同一または異なる、異なる時期での少なくとも２つの活性成分の投与を指す。より具体的には、連続使用とは、他のものの投与または他のものが開始する前の活性成分のうちの１つのものの全投与を指す。したがって、他の活性成分または複数の活性成分を投与する前に、数分、数時間、または数日にわたって活性成分のうちの１つを投与することが、可能である。この場合には、同時治療は、存在しない。
【００７９】
「相乗治療効果」は、少なくとも２つの治療剤の組み合わせによって生成され、別様にそれらの薬剤の個別投与から生じるものを超える、より優れた相加治療効果を指す。例えば、より低い用量の１つ以上の治療剤を、アルポート症候群を治療する際に使用することができ、増加した治療有効性及び減少した副作用をもたらす。
【００８０】
本明細書で使用されるとき、「治療する」または「治療」または「軽減」という用語は、治療用の治療を指し、その目的は、標的とする病理的状態または障害を低減、軽減、またはその進行もしくは進展を遅延させる、及び／またはその進行を逆にすることである。本明細書に説明される方法に従い、Ｄ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2等の芳香族カチオン性ペプチド、または酢酸塩、酒石酸塩、もしくはトリフルオロ酢酸塩等のその薬学的に許容される塩を受けた後に、対象が、血尿症、タンパク尿症、円柱尿症、白血球尿症、高血圧、浮腫、微量アルブミン尿症、糸球体濾過量減少、間質性線維症、間質炎、尿細管損傷、ＧＢＭ超微細構造異常、ネフローゼ症候群、糸球体腎炎、末期腎疾患、慢性貧血、巨大血小板性血小板減少症、骨形成異常症、感覚神経性難聴、前部円錐水晶体、ドットアンドフレック網膜症、後部多形性角膜変性症、再発性角膜びらん、一時黄斑菲薄化、白内障、流涙、羞明、視力喪失、円錐角膜、及び平滑筋腫症を含むが、これらに限定されないアルポート症候群の１つ以上の徴候及び症状の観察可能かつ／もしくは測定可能な低減、または不在を示す場合に、対象は、アルポート症候群について良好に「治療される」。
【００８１】
本明細書で使用されるとき、障害または病態の「予防」またはそれらを「予防する」ことは、統計資料において、未処理の対照試料と比較して処理された試料における障害または病態の発生を低減する、または未処理の対照試料と比較して障害または病態の１つ以上の症状の発症を遅延させる、化合物を指す。本明細書で使用されるとき、アルポート症候群を予防することは、アルポート症候群の開始を予防するか、または遅延させることを含む。本明細書で使用されるとき、アルポート症候群の予防は、アルポート症候群の１つ以上の徴候または症状の再発を予防することも含む。
【００８２】
説明されるような医療状態の治療または予防の種々の様式が、「実質的な」ものであることを意味するように意図され、それは、総合的な治療または予防だけではなく総合的な治療または予防未満のものも含み、いくつかの生物学的または医学的に関連した結果が達成されることもまた理解されたい。
芳香族カチオン性ペプチド
【００８３】
本技術は、アルポート症候群を予防するか、または治療することを必要とする対象において、アルポート症候群を予防するか、または治療するため、及び／またはＩＶ型コラーゲンα３−４−５ネットワークの構成要素である遺伝子の機能の低減、減少した発現レベル、及び／もしくは欠乏に関連する１つ以上の徴候もしくは症状を予防するか、改善するか、もしくはその重症度を低減するための方法及び組成物に関する。芳香族カチオン性ペプチドは、アルポート症候群の治療もしくは予防、及び／またはＩＶ型コラーゲンα３−４−５ネットワークの構成要素である遺伝子の機能の低減、減少した発現レベル、及び／もしくは欠乏に関連する１つ以上の徴候もしくは症状を予防するか、改善するか、もしくはその重症度を低減するために有効であるだけでなく、追加の治療剤と組み合わせてのペプチドの投与は、その疾患の治療または予防において相乗効果を有するであろうことが予想される。例えば、アルポート症候群の治療のための従来の薬剤または新たに開発された薬剤と組み合わせてのペプチドの投与は、その疾患の予防または治療においてより優れた相加効果を有するであろう。
【００８４】
いくつかの実施形態では、本方法及び組成物は、対象におけるアルポート症候群の１つ以上の徴候もしくは症状を予防し、及び／またはＩＶ型コラーゲンα３−４−５ネットワークの構成要素である遺伝子の機能の低減、減少した発現レベル、及び／もしくは欠乏に関連する１つ以上の徴候もしくは症状を予防するか、改善するか、もしくはその重症度を低減する。いくつかの実施形態では、本方法及び組成物は、アルポート症候群の危険因子を持つ対象がアルポート症候群の１つ以上の徴候または症状を生じる可能性を低減する。例示の危険因子としては、ＣＯＬ４Ａ３、ＣＯＬ４Ａ４、及びＣＯＬ４Ａ５における突然変異が挙げられるが、これらに限定されない。
【００８５】
一実施形態では、ペプチドは、式Ｉによって定義され、
【化９】
0006641356.tif 000010
式中、Ｒ1及びＲ2は、各々独立して、
（ｉ）水素、
（ｉｉ）直鎖または分岐鎖Ｃ1〜Ｃ6アルキル、
（ｉｉｉ）
【化１０】
0006641356.tif 000011
（式中、ｍ＝１〜３）、
（ｉｖ）
【化１１】
0006641356.tif 000012
、
（ｖ）
【化１２】
0006641356.tif 000013
から選択され、
Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ8、Ｒ9、Ｒ10、Ｒ11、及びＲ12は、各々独立して、
（ｉ）水素、
（ｉｉ）直鎖または分岐鎖Ｃ1〜Ｃ6アルキル、
（ｉｉｉ）Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、
（ｉｖ）アミノ、
（ｖ）Ｃ1〜Ｃ4アルキルアミノ、
（ｖｉ）Ｃ1〜Ｃ4ジアルキルアミノ、
（ｖｉｉ）ニトロ、
（ｖｉｉｉ）ヒドロキシル、
（ｉｘ）ハロゲンから選択され、「ハロゲン」は、クロロ、フルオロ、ブロモ、及びヨードを包含し、
ｎは、１〜５の整数である。
【００８６】
特定の実施形態では、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ8、Ｒ9、Ｒ10、Ｒ11、及びＲ12は、全て水素であり、ｎは、４である。別の実施形態では、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ8、Ｒ9、及びＲ11は、全て水素であり、Ｒ8及びＲ12は、メチルであり、Ｒ10は、ヒドロキシルであり、ｎは、４である。
【００８７】
一実施形態では、ペプチドは、式ＩＩによって定義され、
【化１３】
0006641356.tif 000014
式中、Ｒ1及びＲ2は、各々独立して、
（ｉ）水素、
（ｉｉ）直鎖または分岐鎖Ｃ1〜Ｃ6アルキル、
（ｉｉｉ）
【化１４】
0006641356.tif 000015
（式中、ｍ＝１〜３）、
（ｉｖ）
【化１５】
0006641356.tif 000016
、
（ｖ）
【化１６】
0006641356.tif 000017
から選択され、
Ｒ3及びＲ4は、各々独立して、
（ｉ）水素、
（ｉｉ）直鎖または分岐鎖Ｃ1〜Ｃ6アルキル、
（ｉｉｉ）Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、
（ｉｖ）アミノ、
（ｖ）Ｃ1〜Ｃ4アルキルアミノ、
（ｖｉ）Ｃ1〜Ｃ4ジアルキルアミノ、
（ｖｉｉ）ニトロ、
（ｖｉｉｉ）ヒドロキシル、
（ｉｘ）ハロゲンから選択され、「ハロゲン」は、クロロ、フルオロ、ブロモ、及びヨードを包含し、
Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ8、及びＲ9は、各々独立して、
（ｉ）水素、
（ｉｉ）直鎖または分岐鎖Ｃ1〜Ｃ6アルキル、
（ｉｉｉ）Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、
（ｉｖ）アミノ、
（ｖ）Ｃ1〜Ｃ4アルキルアミノ、
（ｖｉ）Ｃ1〜Ｃ4ジアルキルアミノ、
（ｖｉｉ）ニトロ、
（ｖｉｉｉ）ヒドロキシル、
（ｉｘ）ハロゲンから選択され、「ハロゲン」は、クロロ、フルオロ、ブロモ、及びヨードを包含し、
ｎは、１〜５の整数である。
特定の実施形態では、Ｒ1及びＲ2は、水素であり、Ｒ3及びＲ4は、メチルであり、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ8、及びＲ9は、全て水素であり、ｎは、４である。
いくつかの実施形態では、本技術の芳香族カチオン性ペプチドは、芳香族アミノ酸及びカチオン性アミノ酸交互のコア構造モチーフを有する。例えば、ペプチドは、下に記載される式Ａ〜Ｆのうちのいずれかによって定義されたテトラペプチドであってもよい。
芳香族−カチオン性−芳香族−カチオン性（式Ａ）
カチオン性−芳香族−カチオン性−芳香族（式Ｂ）
芳香族−芳香族−カチオン性−カチオン性（式Ｃ）
カチオン性−カチオン性−芳香族−芳香族（式Ｄ）
芳香族−カチオン性−カチオン性−芳香族（式Ｅ）
カチオン性−芳香族−芳香族−カチオン性（式Ｆ）
【００８８】
式中、芳香族は、Ｐｈｅ（Ｆ）、Ｔｙｒ（Ｙ）、及びＴｒｐ（Ｗ）からなる群から選択される残基である。いくつかの実施形態では、芳香族残基は、芳香族残基の飽和類似体、例えば、シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）で置換されてもよい。いくつかの実施形態では、カチオン性は、Ａｒｇ（Ｒ）、Ｌｙｓ（Ｋ）、及びＨｉｓ（Ｈ）からなる群から選択される残基である。
【００８９】
芳香族カチオン性ペプチドは、水溶性及び高度に極性である。これらの特性にもかかわらず、ペプチドは、細胞膜に容易に浸透できる。芳香族カチオン性ペプチドは、典型的に、ペプチド結合によって共有結合的に結合される最低３個のアミノ酸または最低４個のアミノ酸を含む。芳香族カチオン性ペプチドに存在するアミノ酸の最大数は、ペプチド結合によって共有結合的に結合される約２０個のアミノ酸である。いくつかの実施形態では、アミノ酸の合計数は、約１２、約９、または約６である。
【００９０】
芳香族カチオン性ペプチドのアミノ酸は、任意のアミノ酸であり得る。本明細書で使用されるとき、「アミノ酸」という用語は、少なくとも１つのアミノ基及び少なくとも１つのカルボキシル基を含有する任意の有機分子を指すように使用される。典型的には、少なくとも１つのアミノ基は、カルボキシル基に対するα位にある。アミノ酸は、天然に存在するものであり得る。天然に存在するアミノ酸は、例えば、哺乳類のタンパク質中に通常見出される２０のもっとも一般的な左旋性（Ｌ）アミノ酸、すなわち、アラニン（Ａｌａ）、アルギニン（Ａｒｇ）、アスパラギン（Ａｓｎ）、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、システイン（Ｃｙｓ）、グルタミン（Ｇｌｎ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ）、グリシン（Ｇｌｙ）、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、ロイシン（Ｌｅｕ）、リジン（Ｌｙｓ）、メチオニン（Ｍｅｔ）、フェニルアラニン（Ｐｈｅ）、プロリン（Ｐｒｏ）、セリン（Ｓｅｒ）、スレオニン（Ｔｈｒ）、トリプトファン、（Ｔｒｐ）、チロシン（Ｔｙｒ）、及びバリン（Ｖａｌ）を含む。他の天然に存在するアミノ酸は、例えば、タンパク質合成と関連付けられない代謝プロセスにおいて合成されるアミノ酸を含む。例えば、アミノ酸オルニチン及びシトルリンは、尿素の生成中、哺乳類の代謝において合成される。天然に存在するアミノ酸の別の例は、ヒドロキシプロリン（Ｈｙｐ）を含む。
【００９１】
ペプチドは、任意に、１つ以上の天然に存在しないアミノ酸を含有する。最適には、ペプチドは、天然に存在するアミノ酸を有しない。天然に存在しないアミノ酸は、左旋性（Ｌ−）、右旋性（Ｄ−）、またはこれらの混合物であってもよい。天然に存在しないアミノ酸は、生物の正常な代謝プロセスにおいて典型的に合成されないそれらのアミノ酸であり、タンパク質中で自然発生しない。加えて、天然に存在しないアミノ酸はまた、好適に、共通プロテアーゼによって認識されない。天然に存在しないアミノ酸は、ペプチド中の任意の位置に存在できる。例えば、天然に存在しないアミノ酸は、Ｎ−末端、Ｃ−末端に、またはＮ−末端とＣ−末端との間の任意の位置に存在できる。
【００９２】
非天然アミノ酸は、例えば、天然アミノ酸中に見出されないアルキル基、アリール基、またはアルキルアリール基を含み得る。非天然アルキルアミノ酸のいくつかの例としては、α−アミノ酪酸、β−アミノ酪酸、γ−アミノ酪酸、δ−アミノ吉草酸、及びε−アミノカプロン酸が挙げられる。非天然アリールアミノ酸のいくつかの例としては、オルト−、メタ−、及びパラ−アミノ安息香酸が挙げられる。非天然アルキルアリールアミノ酸のいくつかの例としては、オルト−、メタ−、及びパラ−アミノフェニル酢酸、及びγ−フェニル−β−アミノ酪酸が挙げられる。天然に存在しないアミノ酸は、天然に存在するアミノ酸の誘導体を含む。天然に存在するアミノ酸の誘導体は、例えば、天然に存在するアミノ酸への１つ以上の化学基の添加を含み得る。
【００９３】
例えば、１つ以上の化学基は、フェニルアラニンまたはチロシン残基の芳香族環の２′、３′、４′、５′、または６′位置、またはトリプトファン残基のベンゾ環の４′、５′、６′、または７′のうちの１つ以上に添加され得る。本基は、芳香族環に添加され得る任意の化学基であり得る。このような基のいくつかの例としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、またはｔ−ブチル、Ｃ1〜Ｃ4アルキルオキシ（すなわち、アルコキシ）、アミノ、Ｃ1〜Ｃ4アルキルアミノ及びＣ1〜Ｃ4ジアルキルアミノ（例えば、メチルアミノ、ジメチルアミノ）、ニトロ、ヒドロキシル、ハロ（すなわち、フルオロ、クロロ、ブロモ、またはヨード）等の分岐鎖または非分岐鎖Ｃ1〜Ｃ4アルキルが挙げられる。天然に存在するアミノ酸の天然に存在しない誘導体いくつかの具体的な例としては、ノルバリン（Ｎｖａ）及びノルロイシン（Ｎｌｅ）が挙げられる。
【００９４】
ペプチド中のアミノ酸の修飾の別の例は、アスパラギン酸のカルボキシル基またはペプチドのグルタミン酸残基の誘導体化である。誘導体化の１つの例は、アンモニアを伴うまたはメチルアミン、エチルアミン、ジメチルアミン、またはジエチルアミン等の１級または２級アミンを伴うアミド化である。誘導体化の別の例としては、例えば、メチル、またはエチルアルコールを伴うエステル化が挙げられる。別のこのような修飾としては、リジン、アルギニン、またはヒスチジン残基のアミノ基の誘導体化が挙げられる。例えば、このようなアミノ基は、アシル化され得る。いくつかの好適なアシル基としては、例えば、ベンゾイル基またはアセチルまたはプロピオニル基等の上述のＣ1〜Ｃ4アルキル基のうちの任意のものを含むアルカノイル基が挙げられる。
【００９５】
天然に存在しないアミノ酸は、好適に、共通プロテアーゼに対して耐性であるかまたは非感受性である。プロテアーゼに対して耐性であるかまたは非感受性である天然に存在しないアミノ酸の例としては、上述の天然に存在するＬ−アミノ酸、ならびにＬ−及び／またはＤ−天然に存在しないアミノ酸のうちの任意のものの右旋性（Ｄ−）形態が挙げられる。Ｄ−アミノ酸は、通常、タンパク質中に存在しないが、それらは、細胞の正常なリボソームタンパク質合成機構以外の方法によって合成される特定のペプチド抗生物質において見出される。本明細書で使用されるとき、Ｄ−アミノ酸は、天然に存在しないアミノ酸であると考慮される。
【００９６】
アミノ酸が天然に存在するかまたは天然に存在しないかに関係なく、プロテアーゼ感受性を最小限に抑えるために、ペプチドは、５未満、４未満、３未満、または２未満の共通プロテアーゼによって認識される近接するＬ−アミノ酸を有すべきである。最適には、ペプチドは、Ｄ−アミノ酸、及び非Ｌ−アミノ酸のみを有する。ペプチドがアミノ酸のプロテアーゼ感受性配列を含む場合、アミノ酸のうちの少なくとも１つは、天然に存在しないＤ−アミノ酸であってもよく、よって、プロテアーゼ耐性を与える。プロテアーゼ感受性配列の例としては、エンドペプチダーゼ及びトリプシン等の共通プロテアーゼによって容易に開裂される２つ以上の近接する塩基性アミノ酸が挙げられる。塩基性アミノ酸の例としては、アルギニン、リジン、及びヒスチジンが挙げられる。
【００９７】
芳香族カチオン性ペプチドは、ペプチド中のアミノ酸残基の合計数と比較して生理的ｐＨの最小数の正味正電荷を有するべきである。生理的ｐＨの最小数の正味正電荷は、以下（ｐｍ）として参照されるであろう。ペプチド中のアミノ酸残基の合計数は、以下（ｒ）として参照されるであろう。以下に考察される最小数の正味正電荷は、全て、生理的ｐＨである。本明細書で使用されるとき、「生理的ｐＨ」という用語は、哺乳類の身体の組織及び器官の細胞における正常ｐＨを指す。例えば、ヒトの生理的ｐＨは、通常、約７．４であるが、哺乳類の正常な生理的ｐＨは、約７．０〜約７．８の任意のｐＨであり得る。
【００９８】
本明細書で使用されるとき、「正味電荷」は、ペプチド中に存在するアミノ酸によって担持される正電荷の数及び負電荷の数のバランスを指す。本出願では、正味電荷は、生理的ｐＨで測定されることが理解される。生理的ｐＨで正荷電された天然に存在するアミノ酸としては、Ｌ−リジン、Ｌ−アルギニン、及びＬ−ヒスチジンが挙げられる。生理的ｐＨで負電荷された天然に存在するアミノ酸としては、Ｌ−アスパラギン酸及びＬ−グルタミン酸が挙げられる。
【００９９】
典型的には、ペプチドは、正荷電されたＮ−末端アミノ基及び負電荷されたＣ−末端カルボキシル基を有する。電荷は、生理的ｐＨで互いに相殺する。正味電荷を計算する例としては、ペプチドＴｙｒ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｄ−Ａｒｇは、１つの負電荷されたアミノ酸（すなわち、Ｇｌｕ）及び４つの正荷電されたアミノ酸（すなわち、２つのＡｒｇ残基、１つのＬｙｓ、及び１つのＨｉｓ）を有する。よって、上のペプチドは、３つの正味正電荷を有する。
【０１００】
一実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、生理的ｐＨの正味正電荷の最小数（ｐｍ）とアミノ酸残基の合計数（ｒ）との間に関係性を有し、３ｐｍが、ｒ＋１以下である最大数である。この実施形態では、正味正電荷の最小数（ｐｍ）とアミノ酸残基の合計数（ｒ）との間の関係性は次の通りである：
表２．アミノ酸数及び正味正電荷（３ｐｍ≦ｐ＋１）
0006641356.tif 000018
【０１０１】
別の実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、正味正電荷の最小数（ｐｍ）とアミノ酸残基の合計数（ｒ）との間に関係性を有し、２ｐｍが、ｒ＋１以下である最大数である。この実施形態では、正味正電荷の最小数（ｐｍ）とアミノ酸残基の合計数（ｒ）との間の関係性は次の通りである：
表３．アミノ酸数及び正味正電荷（２ｐｍ≦ｐ＋１）
0006641356.tif 000019
【０１０２】
一実施形態では、正味正電荷の最小数（ｐｍ）及びアミノ酸残基の合計数（ｒ）は、等しい。別の実施形態では、ペプチドは、３つまたは４個のアミノ酸残基、及び最低１つの正味正電荷、好適には、最低２つの正味正電荷、または最低３つの正味正電荷を有する。
【０１０３】
芳香族カチオン性ペプチドが、正味正電荷の合計数（ｐｔ）と比較して最小数の芳香族基を有することもまた重要である。最小数の芳香族基は、以下（ａ）として参照されるであろう。芳香族基を有する天然に存在するアミノ酸としては、アミノ酸ヒスチジン、トリプトファン、チロシン、及びフェニルアラニンが挙げられる。例えば、ヘキサペプチドＬｙｓ−Ｇｌｎ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｔｒｐは、２つの正味正電荷（リジン及びアルギニン残基によって寄与される）及び３つの芳香族基（チロシン、フェニルアラニン、及びトリプトファン残基によって寄与される）を有する。
【０１０４】
芳香族カチオン性ペプチドは、芳香族基の最小数（ａ）と生理的ｐＨでの正味正電荷の合計数（ｐｔ）との間にもまた関係性を有するべきであり、ｐｔが１であり、ａもまた１であり得ることを除いて、３ａが、ｐｔ＋１以下である最大数である。この実施形態では、芳香族基（ａ）の最小数と正味正電荷の合計数（ｐｔ）との間の関係性は、次の通りである：
表４．芳香族基及び正味正電荷（３ａ≦ｐｔ＋１またはａ＝ｐｔ＝１）
0006641356.tif 000020
【０１０５】
別の実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、芳香族基の最小数（ａ）と正味正電荷の合計数（ｐｔ）との間に関係性を有し、２ａが、ｐｔ＋１以下である最大数である。この実施形態では、芳香族アミノ酸残基の最小数（ａ）と正味正電荷の合計数（ｐｔ）との間の関係性は、次の通りである：
表５．芳香族基及び正味正電荷（２ａ≦ｐｔ＋１またはａ＝ｐｔ＝１）
0006641356.tif 000021
【０１０６】
別の実施形態では、芳香族基の数（ａ）及び正味正電荷の合計数（ｐｔ）は、等しい。
【０１０７】
カルボキシル基、特に、Ｃ−末端アミノ酸の末端カルボキシル基は、好適に、Ｃ−末端アミドを形成するために、例えば、アンモニアと一緒にアミド化される。あるいは、Ｃ−末端アミノ酸の末端カルボキシル基は、任意の１級または２級アミンと一緒にアミド化され得る。１級または２級アミンは、例えば、アルキル、特に、分岐鎖または非分岐鎖Ｃ1〜Ｃ4アルキル、またはアリールアミンであり得る。したがって、ペプチドのＣ−終端のアミノ酸は、アミド、Ｎ−メチルアミド、Ｎ−エチルアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミド、Ｎ，Ｎ−ジエチルアミド、Ｎ−メチル−Ｎ−エチルアミド、Ｎ−フェニルアミド、またはＮ−フェニル−Ｎ−エチルアミド基に変換され得る。芳香族カチオン性ペプチドのＣ−末端に存在しないアスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、及びグルタミン酸残基の遊離カルボキシレート基はまた、それらがペプチド内に存在する場合はいつでも、アミド化され得る。これらの内部位置でのアミド化は、アンモニアかまたは上述の１級または２級アミンのうちの任意のものと一緒であり得る。
【０１０８】
一実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、２つの正味正電荷及び少なくとも１つの芳香族アミノ酸を有するトリペプチドである。１つの具体的な実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、２つの正味正電荷及び２つの芳香族アミノ酸を有するトリペプチドである。
【０１０９】
芳香族カチオン性ペプチドとしては、次のペプチド例が挙げられるが、これらに限定されない：
0006641356.tif 000022
0006641356.tif 000023
【０１１０】
一実施形態では、ペプチドは、ミュー−オピオイド受容体アゴニスト活性を有する（すなわち、それらは、ミュー−オピオイド受容体を活性化させる）。ミュー−オピオイド受容体アゴニスト活性を有するペプチドは、典型的に、Ｎ−終端（すなわち、第１のアミノ酸位置）でチロシン残基またはチロシン誘導体を有する、それらのペプチドである。チロシンの好適な誘導体としては、２′−メチルチロシン（Ｍｍｔ）、２′，６′−ジメチルチロシン（２′，６′−Ｄｍｔ）、３′，５′−ジメチルチロシン（３′，５′Ｄｍｔ）、Ｎ，２′，６′−トリメチルチロシン（Ｔｍｔ）、及び２′−ヒドロキシ−６′−メチルチロシン（Ｈｍｔ）が挙げられる。
【０１１１】
一実施形態では、ミュー−オピオイド受容体アゴニスト活性を有するペプチドは、式Ｔｙｒ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2を有する。Ｔｙｒ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2は、アミノ酸チロシン、アルギニン、及びリジンによって寄与される３つの正味正電荷を有し、アミノ酸フェニルアラニン及びチロシンによって寄与される２つの芳香族基を有する。Ｔｙｒ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2のチロシンは、式２′，６′−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2を有する化合物を生成するために２′，６′−ジメチルチロシン等のチロシンの修飾誘導体であり得る。２′，６′−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2は、６４０の分子量を有し、生理的ｐＨの正味の３つの正電荷を担持する。２′，６′−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2は、エネルギー独立様式でいくつかの哺乳類の細胞型の形質膜に容易に浸透する（Ｚｈａｏ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｅｘｐ  Ｔｈｅｒ．，３０４：４２５−４３２，２００３）。
【０１１２】
あるいは、他の事例では、芳香族カチオン性ペプチドは、ミュー−オピオイド受容体アゴニスト活性を有しない。例えば、慢性疾患状況または状態等の長期治療中には、ミュー−オピオイド受容体を活性化させる芳香族カチオン性ペプチドの使用は、禁忌であり得る。これらの事例では、芳香族カチオン性ペプチドの潜在的に有害かまたは依存性効果は、ヒト患者または他の哺乳類の治療計画においてミュー−オピオイド受容体を活性化させる芳香族カチオン性ペプチドの使用を妨げ得る。潜在的に有害な効果は、鎮静作用、便秘症、及び呼吸抑制作用を含み得る。このような事例では、ミュー−オピオイド受容体を活性化しない芳香族カチオン性ペプチドは、適切な治療であり得る。ミュー−オピオイド受容体アゴニスト活性を有しないペプチドは、一般に、Ｎ−終端（すなわち、アミノ酸位置１）でチロシン残基またはチロシンの誘導体を有しない。Ｎ−末端のアミノ酸は、チロシン以外の任意の天然に存在するかまたは天然に存在しないアミノ酸であり得る。一実施形態では、Ｎ−末端のアミノ酸は、フェニルアラニンまたはその誘導体である。フェニルアラニンの例示的な誘導体は、２′−メチルフェニルアラニン（Ｍｍｐ）、２′，６′−ジメチルフェニルアラニン（２′，６′−Ｄｍｐ）、Ｎ，２′，６′−トリメチルフェニルアラニン（Ｔｍｐ）、及び２′−ヒドロキシ−６′−メチルフェニルアラニン（Ｈｍｐ）を含む。
【０１１３】
ミュー−オピオイド受容体アゴニスト活性を有しないこのような芳香族カチオン性ペプチドの例は、式Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2を有する。あるいは、Ｎ−末端フェニルアラニンは、２′，６′−ジメチルフェニルアラニン（２′，６′−Ｄｍｐ）等のフェニルアラニンの誘導体であり得る。アミノ酸位置１の２′，６′−ジメチルフェニルアラニンを含有するＴｙｒ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2は、式２′，６′−Ｄｍｐ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2を有する。一実施形態では、２′，６′−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2のアミノ酸配列は、ＤｍｔがＮ−末端のところではないように、再配列される。ミュー−オピオイド受容体アゴニスト活性を有しないこのような芳香族カチオン性ペプチドの例は、式Ｄ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2を有する。
【０１１４】
本明細書に列挙されるペプチドの好適な置換変異体は、保存的アミノ酸置換を含む。アミノ酸は、それらの物理化学的特性に従って次の通りにグループ化される。
（ａ）非極性アミノ酸：Ａｌａ（Ａ）Ｓｅｒ（Ｓ）Ｔｈｒ（Ｔ）Ｐｒｏ（Ｐ）Ｇｌｙ（Ｇ）Ｃｙｓ（Ｃ）、
（ｂ）酸性アミノ酸：Ａｓｎ（Ｎ）Ａｓｐ（Ｄ）Ｇｌｕ（Ｅ）Ｇｌｎ（Ｑ）、
（ｃ）塩基性アミノ酸：Ｈｉｓ（Ｈ）Ａｒｇ（Ｒ）Ｌｙｓ（Ｋ）、
（ｄ）疎水性アミノ酸：Ｍｅｔ（Ｍ）Ｌｅｕ（Ｌ）Ｉｌｅ（Ｉ）Ｖａｌ（Ｖ）、及び
（ｅ）芳香族アミノ酸：Ｐｈｅ（Ｆ）Ｔｙｒ（Ｙ）Ｔｒｐ（Ｗ）Ｈｉｓ（Ｈ）。
【０１１５】
同じ基中の別のアミノ酸によるペプチド中のアミノ酸の置換は、保存的置換として参照され、元のペプチドの物理化学的特性を保存し得る。対照的に、異なる基中の別のアミノ酸によるペプチド中のアミノ酸の置換は、一般に、元のペプチドの特性を変化させる可能性がより高い。
【０１１６】
ミュー−オピオイド受容体を活性化させるペプチドの例としては、表７に示される芳香族カチオン性ペプチドが挙げられるが、これらに限定されない。
表７．ミュー−オピオイド活性を有するペプチド類似体
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Ｄａｂ＝ジアミノ酪
Ｄａｐ＝ジアミノプロピオン酸
Ｄｍｔ＝ジメチルチロシン
Ｍｍｔ＝２′−メチルチロシン
Ｔｍｔ＝Ｎ，２′，６′−トリメチルチロシン
Ｈｍｔ＝２′−ヒドロキシ，６′−メチルチロシン
ｄｎｓＤａｐ＝β−ダンシル−Ｌ−α，β−ジアミノプロピオン酸
ａｔｎＤａｐ＝β−アントラニロイル−Ｌ−α，β−ジアミノプロピオン酸
Ｂｉｏ＝ビオチン
【０１１７】
ミュー−オピオイド受容体を活性化させないペプチドの例としては、表８に示される芳香族カチオン性ペプチドが挙げられるが、これらに限定されない。
表８．ミュー−オピオイド活性を欠くペプチド類似体
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Ｃｈａ＝シクロヘキシルアラニン
【０１１８】
表５及び６に示されるペプチドのアミノ酸は、Ｌ−またはＤ−構成のいずれかであり得る。
【０１１９】
ペプチドは、当該技術分野において周知の方法のうちの任意のものによって合成され得る。タンパク質を化学的に合成するための好適な方法としては、例えば、Ｓｔｕａｒｔ及びＹｏｕｎｇによってＳｏｌｉｄ  Ｐｈａｓｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｓｅｃｏｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｐｉｅｒｃｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｍｐａｎｙ（１９８４）及びＭｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．，２８９，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９９７）に説明されるものが挙げられる。
アルポート症候群
【０１２０】
アルポート症候群は、腎疾患、聴覚喪失、及び眼の異常を特徴とする遺伝的病態であり、新生児５０，０００人のうち約１人に起こる。
【０１２１】
ＣＯＬ４Ａ３、ＣＯＬ４Ａ４、及びＣＯＬ４Ａ５遺伝子における突然変異が、アルポート症候群を引き起こす。これらの遺伝子は各々、ＩＶ型コラーゲンと呼ばれるタンパク質の一成分を作製するための指示を提供する。このタンパク質は、腎臓において、特に糸球体と呼ばれる構造において重要な役割を果たす。糸球体は、水及び老廃物を血液から除去し、尿を形成する特殊な血管の群である。これらの遺伝子における突然変異は、糸球体内でＩＶ型コラーゲンの異常をもたらし、腎臓が血液を適切に濾過するのを妨害し、血液及びタンパク質を尿中に移るのを許す。腎臓の段階的瘢痕化が起こり、最終的に、アルポート症候群を有する多くの人々において、腎機能の進行的喪失及び末期腎疾患につながる。
【０１２２】
ＩＶ型コラーゲンはまた、内耳構造、特にコルチ器の重要な構成要素であり、音波を脳への神経インパルスに変換する。ＩＶ型コラーゲンにおける変化は、多くの場合、後期小児期または前期思春期中に異常な内耳機能をもたらし、これが感覚神経性難聴につながり得る。眼において、ＩＶ型コラーゲンは、レンズの形状及び網膜の正常な色を維持するために重要である。ＩＶ型コラーゲンを破壊する突然変異は、奇形レンズ（前部円錐水晶体）及び異常に着色した網膜をもたらし得る。著しい聴覚喪失、眼の異常、及び進行性腎疾患は、罹患した女性よりもアルポート症候群を有する男性においてよりよく見られる。
アルポート症候群の遺伝パターン
【０１２３】
アルポート症候群は、遺伝的突然変異に依存する異なる遺伝パターンを有し得る。
【０１２４】
症例の約８０％は、ＣＯＬ４Ａ５遺伝子における突然変異によって引き起こされ、Ｘ連鎖パターンで遺伝する。この遺伝子は、２つの性染色体のうちの１つである、Ｘ染色体上に位置する。男性（Ｘ染色体を１つのみ有する）において、各細胞内のＣＯＬ４Ａ５遺伝子の１つの変化したコピーが、腎不全及びその障害の他の重症症状を引き起こすのに十分である。Ｘ連鎖アルポート症候群を有する少年は、１０代または前期思春期までに腎不全を発症するが、腎不全の発症は、一部の患者において、４０〜５０歳まで遅延し得る。女性（２つのＸ染色体を有する）において、ＣＯＬ４Ａ５遺伝子の１つのコピーにおける突然変異は、通常、血尿症をもたらすに過ぎないが、一部の女性は、より重症の症状を経験する。Ｘ連鎖アルポート症候群を有する女性が加齢するにつれて、腎不全の危険性は増加する。
【０１２５】
症例の約１５％において、アルポート症候群は、ＣＯＬ４Ａ３またはＣＯＬ４Ａ４遺伝子（染色体２上に位置する）両方のコピーにおける突然変異から生じ、常染色体劣性パターンで遺伝する。常染色体劣性形態のこの病態を有する個人の親は、各々が突然変異した遺伝子の１つのコピーを有し、保因者と呼ばれる。罹患しない保因者もいれば、血尿症を特徴とする薄基底膜腎症と呼ばれる重症度の低い病態を発症する者もいる。常染色体劣性形態のアルポート症候群を有する患者は、１０代または青年期までに腎不全を発症する。
【０１２６】
アルポート症候群は、症例の約５％において常染色体優性遺伝を有する。この形態のアルポート症候群を有する人々は、各細胞内にＣＯＬ４Ａ３またはＣＯＬ４Ａ４のいずれかにおいて１つの突然変異を有する。常染色体優性アルポート症候群の臨床特徴は、Ｘ連鎖疾患のものと同様である。しかしながら、腎機能の低減は、よりゆっくり起こる傾向がある。なぜＣＯＬ４Ａ３またはＣＯＬ４Ａ４遺伝子に１つの突然変異を有する一部の個人が、常染色体優性アルポート症候群を有する個人もいれば、薄基底膜腎炎を有する個人もいるのかは、依然として不明である。常染色体優性アルポート症候群を有する患者は、通常、腎不全を発症する前に中年期に入る。
臨床症状
【０１２７】
一般に、アルポート症候群は、ＧＢＭを組織化するコラーゲンにおける突然変異によって主に引き起こされる、糸球体濾過の遺伝的に決定された機能不全を特徴とする。コラーゲンＩＶのα３鎖を欠失するマウス（Ｃｏｌ４ａ３−／−）は、進行性糸球体損傷を発症する。被蓋細胞が正常なＧＢＭを合成できず、コラーゲンＩＶネットワークを不安定かつ容易に分解可能にすると考えられる。被蓋細胞は、糸球体の構造及び機能の維持において重要な役割を果たす、高度に分化した糸球体上皮細胞である。被蓋細胞は、糸球体障壁の統合された部分であり、大分子の漏出を予防することにおいて主要な役割を果たす。被蓋細胞の傷害は、タンパク尿症につながる。
【０１２８】
ＧＢＭ濾過機能不全の早期徴候は、血尿症に続くアルブミン尿症、及び漸増する程度の後次非選択的タンパク尿症である。アルポート症候群患者の尿は、多くの場合、円柱尿症及び白血球尿症を示す。最終的に、ＧＢＭ損傷自体ではなく、尿細管間質及び進行性タンパク尿症から生じる糸球体の両方における炎症促進性及び線維症進行性の影響が、最終的に末期腎疾患の発症につながる。
【０１２９】
明白なタンパク尿症は、典型的に、Ｘ連鎖アルポート症候群（ＸＬＡＳ）を有する男児において不在である。明白なタンパク尿症の特定時の年齢は、家族間の変動性を示し、幼児期から思春期の範囲である。ＸＬＡＳを有するイヌでは、一定期間の微量アルブミン尿症が、明白なタンパク尿症の発症及び尿細管萎縮及び線維症に起因する間質量の定量的増加に先行する。ＸＬＡＳを有するイヌは、細胞傷害に関連付けられたプロセスである、アルブミンの増加した近位尿細管上皮細胞取り込みを呈する。アルポート症候群治療及び転帰レジストリ（ＡＳＴＯＲ）からの予備データは、アルポート症候群を有する少年もまた、明白なタンパク尿症が確立される前に、移行段階の微量アルブミン尿症を呈することを示す。
【０１３０】
アルポート症候群の男性における皮質間質量の測定は、間質性線維症が１０歳前は希であることを示した。皮質間質量は、多くのアルポート症候群の男性において１０代の間に異常になり、糸球体濾過量と逆相関する。これらの観察は、他の慢性糸球体症と同様に、間質性線維症が、腎機能の喪失に対する重要な寄与因子であること、及びアルポート症候群の男性における間質性線維症の予防は、小児期の間の介入を必要とし得ることを示唆する。
【０１３１】
正常な糸球体毛細血管は、ＩＶ型コラーゲンのα−３、α−４、及びα−５鎖が豊富な基底膜を通して血漿を濾過する。これら３つのアイソフォームは、ＸＬＡＳを有する患者の糸球体から生化学的に不在である。代わりに、それらのＧＢＭは、α鎖使用を発達的に切り替えることができないため、ＩＶ型コラーゲンのα−１及びα−２アイソフォームの胎児分布を保持する。ＧＢＭにおけるこれらの胎児アイソフォームの異常持続は、コラーゲナーゼ及びカテプシンによるタンパク質分解攻撃に対する感受性の増加を付与する。したがって、システインに富むα−３、α−４、及びα−５鎖の、ＧＢＭのような特殊な基底膜への組み込みは、糸球体濾過の部位におけるタンパク質分解に対するそれらの耐性を増強するように進化していてもよい。ＸＬＡＳ患者からのＧＢＭにおけるこれらの潜在的に保護的なコラーゲンＩＶアイソフォームの不在は、これらの患者において腎臓が悪化するにつれて、進行性の基底膜分裂及び増加した損傷を説明することができる。
【０１３２】
高血圧は、通常、１０代までに検出可能であり、典型的には、ＸＬＡＳ男性ならびに常染色体劣性及び常染色体優性アルポート症候群患者において出現する。浮腫及びネフローゼ症候群は、アルポート症候群を有する青年の３０〜４０％において存在し、それらは小児期には一般的でないが、それらの発生は、年齢と共に累増する。腎不全の発症と共に、慢性貧血及び骨形成異常の症状が明らかになり得る。
【０１３３】
前部円錐水晶体、後部多形性角膜変性症、再発性角膜びらん、一時黄斑菲薄化、白内障、流涙、羞明、視力喪失、円錐角膜、及びドットアンドフレック網膜症を含む、いくつかの特定の眼の異常が、アルポート症候群を有する患者において起こり得る。前部円錐水晶体を有する一部の患者は、後期思春期または成人期において屈折異常を発症し、一部の成人患者において、白内障除去が必要であり得る。
【０１３４】
他の臨床症状としては、個別に可変である進行性糸球体硬化症、尿毒症、巨大血小板性血小板減少症、糸球体腎炎、両側感覚神経性難聴、ＧＢＭ超微細構造以上（例えば、糸球体基質の蓄積、メサンギウム細胞内の上昇したＭＭＰ−９レベル）、及び食道または女性性器のびまん性平滑筋腫症も挙げられる。
病理
【０１３５】
図１は、第５病期のアルポート腎症を示す。第１病期のアルポート腎症は、出生時に始まり、主に薄く、恐らくは虚弱なＧＢＭに関連する。第１病期から第２病期への移行は、微量アルブミン尿症の発症と共に起こり、３０ｍｇ／ｇ超の微量アルブミン−クレアチニン比として任意に定義される。微量アルブミン−クレアチニン比が、約２００ｍｇ／ｇクレアチンに増加するまで、尿試験紙は、典型的に、アルブミンに対して陰性のままである。１＋以上のタンパク質の尿試験紙の読み取り、または０．２ｍｇ／ｍｇ超の尿タンパク質−クレアチニン比として定義される明白なタンパク尿症が存在すると、患者は第３病期に移った。第２病期及び第３病期の組織学的相関は、内臓上皮細胞（被害細胞）足突起の消滅に関連するＧＢＭの肥厚化及び積層化を含む。糸球体濾過量は、第４病期において減少し始める。クレアチニンクリアランスによって推定される糸球体濾過量は、腎間質の線維症の尺度である、皮質間質量分率と逆に相関する。クレアチニンクリアランスは、皮質間質性線維症が、正常範囲の上限を超えて増加するまで正常範囲内で維持され、腎間質性線維症の抑制が、アルポート患者において腎機能を保護することを示唆する。アルポート症候群を有する少年において、皮質間質量分率は、通常、１０歳までは正常であるが、その後増加し始める。
【０１３６】
全体として、ＸＬＡＳを有する男性の約５０％が２５歳までに、９０％が４０歳までに、及びほぼ１００％が６０歳までに第５病期の末期腎疾患に至る。ＸＬＡＳを有する男性における第５病期のタイミングは、ＣＯＬ４Ａ５によって大きく影響され、欠失及びナンセンス突然変異を有する者は、比較的急速に上記病期を進行するが、ミスセンス突然変異を有する者は、多くの場合、より遅いペースで進行する。Ｘ連鎖アルポート症候群を有する女性の約３０％は、８０歳までに末期の腎疾患に至る。
診断
【０１３７】
早期の正確な診断は、アルポート症候群における早期介入に不可欠である。血尿症を有する対象における診断アプローチは、臨床特徴及び家族歴の慎重な評価に基づき、組織生検及び分子遺伝分析によって補われる。血尿症は、聴覚喪失及び眼の異常が検出可能になるよりもかなり前からアルポート症候群に存在する。したがって、血尿症を有する対象における特徴的な感覚神経性難聴または眼の変化の存在は、アルポート症候群の疑いを増加させるが、通常の聴覚及び眼の検査は、アルポート症候群を除外するには役立たない。疑わしいアルポート症候群の診断は、腎臓または皮膚の生検によって確認することができる。腎生検材料の完全な評価は、光学、免疫蛍光、及び電子顕微鏡検査を必要とする。
【０１３８】
アルポート症候群の診断は、ＧＢＭ超微細構造の疾病特徴的変化及びＩＶ型コラーゲン鎖の腎基底膜発現の異常に基づいて行われる。ＩＶ型コラーゲンのα３、α４、及びα５は、正常な個人のＧＢＭに存在する。しかしながら、ＸＬＡＳ対象において、機能不全のα５鎖の存在は、コラーゲンＩＶ複合体全体の組織化を失敗させ、これらの３つの鎖の何一つとして、糸球体または腎細管基底膜のいずれかにおいて検出可能であるものはない。ＸＬＡＳはまた、ＩＶ型コラーゲンの皮膚生検標本の免疫染色によって診断され得る。特に、α５のみが、皮膚において正常に発現されるため、皮膚生検上のＸＬＡＳのホールマークは、α５染色の不在である。
【０１３９】
したがって、標準診断試験としては、尿分析（血尿症及びタンパク尿症を検出するため）、血液学的試験（腎不全を評価するため）、腎臓または皮膚生検（超微細構造の異常を評価するため）、遺伝子検査（ＣＯＬ４Ａ３、ＣＯＬ４Ａ４、またはＣＯＬ４Ａ５における突然変異のため）、聴力検査（感覚神経性難聴を検出するため）、眼科検査（前部円錐水晶体、円錐角膜、白内障、後部多形性角膜ジストロフィー、網膜斑点、及び他の眼の病変を検出し、監視するため）、ならびに腎超音波法の組み合わせが挙げられる。Ｇｒｅｇｏｒｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｏｎｔｒｉｂ  Ｎｅｐｈｒｏｌ，１１７：１−２８（１９９６）は、以下の１０基準を提供し、アルポート症候群の診断のためには、それらのうちの４つが満たされなければならない。
発端者に対して最も軽度の、または任意の数の女性を通じて関連付けられる男性親類における説明できない血尿症の腎炎の家族歴；
糸球体基底膜疾患、多発性嚢胞腎疾患、またはＩｇＡ腎症等の、別の可能性のある遺伝性腎症の証拠がない持続性血尿症；
２０００〜８０００Ｈｚ範囲の両側感覚神経性難聴；聴覚喪失は段階的に発達し、小児期には存在せず、一般に３０歳前に現れる；
ＣＯＬ４Ａ３、ＣＯＬ４Ａ４、またはＣＯＬ４Ａ５における突然変異；
糸球体、もしくは上皮基底膜、または両方におけるアルポートエピトープの完全または部分的欠失の免疫組織化学的証拠；
広範囲のＧＢＭ超微細構造の異常、特に肥厚化、菲薄化、及び分裂；
前部円錐水晶体、円錐角膜、後嚢下白内障、後部多形性角膜ジストロフィー、及び網膜斑点を含む眼の病変；
少なくとも２つの家族メンバーの発端者における末期腎疾患の段階的進行；
メイ・ヘグリン異常と同様の巨大血小板性血小板減少症または顆粒球包含；及び
食道もしくは女性器、または両方のびまん性平滑筋腫症。
【０１４０】
アルポート症候群患者はまた、正常な対照対象と比較してＡＤＡＭ８、フィブロネクチン、ミオシン１０、ＭＭＰ−２、ＭＭＰ−９、及びポドシンの異常な尿レベルを示す。追加として、尿中の種々のバイオマーカーの組み合わせのレベルは、アルポート症候群患者と健康な対象との間で著しく異なる。例えば、３つ（フィブロネクチン、ミオシン１０、及びＭＭＰ−２またはＭＭＰ−９）及び２つ（ミオシン１０、及びＭＭＰ−２またはＭＭＰ−９）のパラメータのいくつかの組み合わせは、健康な対照とアルポート症候群患者とを明確に区別し、したがってアルポート症候群の早期診断を可能にする。
現在の治療
【０１４１】
一般に、ＡＣＥ阻害剤またはＡＲＢが、高血圧の有無にかかわらず、タンパク尿症を有するアルポート症候群患者に投与される。両群の薬物は、糸球体内圧を減少させることによってタンパク尿症を低減するのを助けるようである。更に、アンジオテンシンＩＩを阻害することによって、糸球体硬化症に関係する成長因子は、硬化症の進行を遅延させることにおいて潜在的な役割を有する。アルポート症候群患者を治療するために使用されたＡＲＢとしては、ロサルタン、カンデサルタン、バルサルタン、エプロサルタン、テルミサルタン、及びイルベサルタンが挙げられるが、それらに限定されない。ＡＣＥ阻害剤の例としては、カプトプリル、アラセプリル、リシノプリル、イミダプリル、キナプリル、テモカプリル、デラプリル、ベナゼプリル、シラザプリル、トランドラプリル、エナラプリル、セロナプリル、フォシノプリル、イマダプリル、モベルトプリル、ペリンドプリル、ラミプリル、スピラプリル、及びランドラプリルが挙げられる。ＡＣＥ阻害剤は、先天性欠損を引き起こし得るため、通常は妊娠患者に処方されない。最も一般的な副作用は、咳、上昇した血中カリウムレベル、低血圧、眩暈、頭痛、眠気、脆弱性、異常な味覚（金気または塩気）、及び発疹である。ＡＣＥ阻害剤の最も深刻であるが希な副作用は、腎不全、アレルギー反応、白血球の減少、及び組織の膨張（血管浮腫）である。
【０１４２】
腎不全における治療的介入は、ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤、アルドステロン阻害剤、アリスキレン、カルシネウリン阻害剤（例えば、シクロスポリンＡ、タクロリムス）、エンドセリン受容体拮抗薬（例えば、シタキセンタン、アンブリセンタン（ＬＥＴＡＩＲＩＳ）、アントラセンタン、ＢＱ−１２３、ジボテンタン、ボセンタン（ＴＲＡＣＬＥＥＲ）、マシテンタン、テゾセンタン、ＢＱ−７８８、及びＡ１９２６２１）、スロデキシド、バソペプチダーゼ阻害剤（例えば、ＡＶＥ７６８８）、抗トランスフォーミング成長因子−β１抗体、ケモカイン受容体１遮断剤、骨形成タンパク質−７、ＰＰＡＲγ作動薬（例えば、ロシグリタゾン、ピオグリタゾン、ＭＲＬ２４、Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｌｅｕ、ＳＲ１６６４、ＳＲ１８２４、ＧＷ００７２、ＭＣＣ５５５、ＣＬＸ−０９２１、ＰＡＴ５Ａ、Ｌ−７６４４０６、ｎＴＺＤｐａ、ＣＤＤＯ（２−シアノ−３，１２−ジオキソオレアナ−１，９−ジエン−２８−オイック酸）、ラガグリタザル、Ｏ−アリールマンデル酸、及びＮＳＡＩＤ）、ならびに基質メタロプロテイナーゼ阻害剤（例えば、ＢＡＹ−１２−９５６６）を投与することによって達成されてもよい。
【０１４３】
ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素の例としては、ロバスタチン（例えば、ＡＤＶＩＣＯＲ（登録商標）（ナイアシン延長放出／ロバスタチン）（ＡｂｂＶｉｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｃｈｉｃａｇｏ，Ｉｌｌｉｎｏｉｓ）、ＡＬＴＯＰＲＥＶ（商標）（ロバスタチン延長放出）（Ｓｈｉｏｎｇｉ，Ｉｎｃ．，Ａｔｌａｎｔａ，ＧＡ）、ＭＥＶＡＣＯＲ（登録商標）（Ｍｅｒｃｋ，Ｗｈｉｔｅｈｏｕｓｅ  Ｓｔａｔｉｏｎ，ＮＪ）、アトルバスタチン（例えば、ＣＡＤＵＥＴ（登録商標）（アムロジピン及びアトルバスタチン）（Ｐｆｉｚｅｒ，Ｍｏｒｒｉｓｖｉｌｌｅ，ＰＡ）、ＬＩＰＩＴＯＲ（登録商標）（Ｐｆｉｚｅｒ，Ｍｏｒｒｉｓｖｉｌｌｅ，ＰＡ））、ロスバスタチン及び／またはロスバスタチンカルシウム（例えば、ＣＲＥＳＴＯＲ（登録商標）（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ，Ｌｏｎｄｏｎ，Ｅｎｇｌａｎｄ））、シムバスタチン（例えば、ＪＵＶＩＳＹＮＣ（登録商標）（シタグリプチン／シムバスタチン）（Ｍｅｒｃｋ，Ｗｈｉｔｅｈｏｕｓｅ  Ｓｔａｔｉｏｎ，ＮＪ））、ＳＩＭＣＯＲ（登録商標）（ナイアシン延長放出／シムバスタチン）（ＡｂｂＶｉｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｃｈｉｃａｇｏ，Ｉｌｌｉｎｏｉｓ）、ＶＹＴＯＲＩＮ（登録商標）（エゼチミブ／シムバスタチン）（Ｍｅｒｃｋ，Ｗｈｉｔｅｈｏｕｓｅ  Ｓｔａｔｉｏｎ，ＮＪ）、及びＺＯＣＯＲ（登録商標）（Ｍｅｒｃｋ，Ｗｈｉｔｅｈｏｕｓｅ  Ｓｔａｔｉｏｎ，ＮＪ）、フルバスタチン及び／またはフルバスタチンナトリウム（例えば、ＬＥＳＣＯＬ（登録商標）、ＬＥＳＣＯＬ  ＸＬ（フルバスタチン延長放出）（Ｍｙｌａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｍｏｒｇａｎｔｏｗｎ，ＷＶ））、ピタバスタチン（例えば、ＬＩＶＡＬＯ（Ｋｏｗａ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｍｏｎｔｇｏｍｅｒｙ，ＡＬ））、プラバスタチン及び／またはプラバスタチンナトリウム（例えば、ＰＲＡＶＡＣＨＯＬ（登録商標）（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＮＹ））が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１４４】
アルドステロン阻害剤としては、スピロノラクトン（Ａｌｄａｃｔｏｎｅ（登録商標））、エプレレノン（Ｉｎｓｐｒａ（登録商標））、カンレノン（カンレノ酸カリウム）、プロレノン（プロレノ酸カリウム）、及びメキシレノン（メキシレノ酸カリウム）が挙げられる。
【０１４５】
腎移植は、通常、末期腎疾患（ＥＳＲＤ）を発症するアルポート症候群患者に提供される。移植された腎臓において再発性疾患は起こらず、これらの患者における同種移植生存率は、他の腎疾患を有する患者におけるそれと同様である。しかしながら、抗糸球体基底膜（抗ＧＢＭ）腎炎は、わずかな割合のアルポート症候群を有する移植患者において発達する。
治療方法
【０１４６】
次の考察は、例としてのみ提示され、限定することを意図しない。
【０１４７】
本技術の一態様は、ＣＯＬ４Ａ３、ＣＯＬ４Ａ４、及びＣＯＬ４Ａ５遺伝子のうちの１つ以上の機能の低減、減少した発現レベル、及び／または欠乏を特徴とする疾患または病態を治療する方法を含む。追加として、または代替として、いくつかの実施形態では、本技術は、アルポート症候群を治療する方法を含む。いくつかの実施形態では、対象は、ＣＯＬ４Ａ３、ＣＯＬ４Ａ４、及びＣＯＬ４Ａ５遺伝子のうちの１つ以上の機能の低減、減少した発現レベル、及び／または欠乏を特徴とする疾患または病態を有するか、有すると疑われるか、または有する危険性があると診断される。追加として、または代替として、いくつかの実施形態では、対象は、アルポート症候群を有すると診断される。治療用途では、Ｄ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2等の芳香族カチオン性ペプチド、または酢酸塩、酒石酸塩、またはトリフルオロ酢酸塩等のその薬学的に許容される塩を含む組成物または薬物が、そのような疾患もしくは病態が疑われるか、または既に罹患している対象（例えば、正常な対照対象と比較してＡＤＡＭ８、フィブロネクチン、ミオシン１０、ＭＭＰ−２、ＭＭＰ−９、及びポドシンのうちの１つ以上の異常なレベル及び／もしくは機能を呈する対象、及び／もしくはＣＯＬ４Ａ３、ＣＯＬ４Ａ４、及びＣＯＬ４Ａ５遺伝子のうちの１つ以上の機能の低減、減少した発現レベル、及び／もしくは欠乏を特徴とする疾患もしくは病態を診断された対象、ならびに／またはアルポート症候群を診断された対象等）に、疾患の発達におけるその合併症及び中間病理学的表現型を含む、疾患の症状を治癒するか、または少なくとも部分的に停止させるのに十分な量で投与される。
【０１４８】
ＣＯＬ４Ａ３、ＣＯＬ４Ａ４、及びＣＯＬ４Ａ５遺伝子のうちの１つ以上の機能の低減、減少した発現レベル、及び／もしくは欠乏を特徴とする疾患または病態に罹患している対象、ならびに／またはアルポート症候群に罹患している対象は、当該技術分野において知られている診断または予後アッセイのうちの任意のものまたは組み合わせによって特定され得る。例えば、アルポート症候群の典型的な症状としては、血尿症、タンパク尿症、円柱尿症、白血球尿症、高血圧、浮腫、微量アルブミン尿症、糸球体濾過量減少、間質性線維症、間質炎、尿細管損傷、ＧＢＭ超微細構造異常、ネフローゼ症候群、糸球体腎炎、末期腎疾患、慢性貧血、巨大血小板性血小板減少症、骨形成異常症、感覚神経性難聴、前部円錐水晶体、ドットアンドフレック網膜症、後部多形性角膜変性症、再発性角膜びらん、一時黄斑菲薄化、白内障、流涙、羞明、視力喪失、円錐角膜、及び平滑筋腫症が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１４９】
いくつかの実施形態では、対象は、正常な対象と比較してＡＤＡＭ８、フィブロネクチン、ミオシン１０、ＭＭＰ−２、ＭＭＰ−９、及びポドシンのうちの１つ以上の異常なレベルまたは機能を呈し得るが、それは、当該技術分野において知られている技法を用いて測定可能である。いくつかの実施形態では、対象は、ＣＯＬ４Ａ３、ＣＯＬ４Ａ４、及びＣＯＬ４Ａ５において１つ以上の突然変異を呈し得、それらは、ＩＶ型コラーゲン線維の生成または組織化に関与し、当該技術分野において知られている技法を用いて検出可能である。
【０１５０】
いくつかの実施形態では、ＣＯＬ４Ａ３、ＣＯＬ４Ａ４、及びＣＯＬ４Ａ５遺伝子のうちの１つ以上の機能の低減、減少した発現レベル、及び／もしくは欠乏を特徴とする疾患または病態を有する対象、ならびに／または芳香族カチオン性ペプチドで治療されたアルポート症候群に罹患した対象は、以下の症状、血尿症、タンパク尿症、円柱尿症、白血球尿症、高血圧、浮腫、微量アルブミン尿症、糸球体濾過量減少、間質性線維症、間質炎、尿細管損傷、ＧＢＭ超微細構造異常、ネフローゼ症候群、糸球体腎炎、末期腎疾患、慢性貧血、巨大血小板性血小板減少症、骨形成異常症、感覚神経性難聴、前部円錐水晶体、ドットアンドフレック網膜症、後部多形性角膜変性症、再発性角膜びらん、一時黄斑菲薄化、白内障、流涙、羞明、視力喪失、円錐角膜、及び平滑筋腫症のうちの１つ以上の改善または排除を示すであろう。ある特定の実施形態では、ＣＯＬ４Ａ３、ＣＯＬ４Ａ４、及びＣＯＬ４Ａ５遺伝子のうちの１つ以上の機能の低減、減少した発現レベル、及び／もしくは欠乏を特徴とする疾患または病態を有する対象、ならびに／または芳香族カチオン性ペプチドで治療されたアルポート症候群を有する対象は、未治療のアルポート症候群対象と比較して、ＡＤＡＭ８、フィブロネクチン、ミオシン１０、ＭＭＰ−２、ＭＭＰ−９、及びポドシンのうちの１つ以上の、少なくとも１０％の正規化を示すであろう。ある特定の実施形態では、ＣＯＬ４Ａ３、ＣＯＬ４Ａ４、及びＣＯＬ４Ａ５遺伝子のうちの１つ以上の機能の低減、減少した発現レベル、及び／もしくは欠乏を特徴とする疾患または病態を有する対象、ならびに／または芳香族カチオン性ペプチドで治療されたアルポート症候群を有する対象は、正常な対照対象において観察されるものと同様である、メサンギウム細胞におけるＭＭＰ−９発現を示すであろう。
予防方法
【０１５１】
一態様では、本技術は、ＣＯＬ４Ａ３、ＣＯＬ４Ａ４、及びＣＯＬ４Ａ５遺伝子のうちの１つ以上の機能の低減、減少した発現レベル、及び／または欠乏を特徴とする疾患または病態の発症を予防するか、または遅延させるための方法を提供する。追加として、または代替として、いくつかの態様では、本技術は、アルポート症候群の発症を予防するか、または遅延させるための方法を提供する。
【０１５２】
正常な対照対象と比較してＡＤＡＭ８、フィブロネクチン、ミオシン１０、ＭＭＰ−２、ＭＭＰ−９、及びポドシンのうちの１つ以上の異常なレベル及び／または機能の危険性がある対象は、ＣＯＬ４Ａ３、ＣＯＬ４Ａ４、及びＣＯＬ４Ａ５遺伝子のうちの１つ以上の機能の低減、減少した発現レベル、及び／または欠乏を特徴とする疾患または病態の危険性があるか、またはそれに対して感受性である対象、ならびに／またはアルポート症候群の危険性があるか、またはそれに対して感受性である対象を含む。そのような対象は、例えば、当該技術分野において知られている診断または予後アッセイのうちの任意のものまたは組み合わせによって特定され得る。予防用途では、Ｄ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2等の芳香族カチオン性ペプチドの薬学的組成物または薬物、または酢酸塩、酒石酸塩、もしくはトリフルオロ酢酸塩等のその薬学的に許容される塩が、ＣＯＬ４Ａ３、ＣＯＬ４Ａ４、及びＣＯＬ４Ａ５遺伝子のうちの１つの機能の低減、減少した発現レベル、及び／または欠乏を特徴とする疾患または病態に対して感受性であるか、または別様にその危険性のある対象に、ならびに／またはアルポート症候群に対して感受性であるか、または別様にその危険性のある対象に、その疾患の生化学的、組織学的、及び／または行動学的症状、その疾患の発生中のその合併症及び中間病理学的表現型を含むその疾患の危険性を排除または低減するか、またはその発症を遅延させるのに十分な量で、投与される。予防芳香族カチオン性ペプチドの投与は、疾患または障害が予防される、あるいは、その進行において遅延されるように、疾患または障害に特有の症状の出現の前に行うことができる。
【０１５３】
いくつかの実施形態では、正常な対照対象と比較してＡＤＡＭ８、フィブロネクチン、ミオシン１０、ＭＭＰ−２、ＭＭＰ−９、及びポドシンのうちの１つ以上の異常なレベル及び／または機能の危険性がある対象は、ＣＯＬ４Ａ３、ＣＯＬ４Ａ４、及びＣＯＬ４Ａ５遺伝子のうちの１つ以上の機能の低減、減少した発現レベル、及び／または欠乏を特徴とする疾患または病態の危険性があるか、またはそれに対して感受性である対象、ならびに／またはアルポート症候群の危険性があるか、またはそれに対して感受性である対象である。
【０１５４】
治療用途及び／または予防用途のために、Ｄ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2等の芳香族カチオン性ペプチド、または酢酸塩、酒石酸塩、もしくはトリフルオロ酢酸塩等のその薬学的に許容される塩が、対象に投与される。いくつかの実施形態では、ペプチド組成物は、１日１回、２回、３回、４回、または５回投与される。いくつかの実施形態では、ペプチド組成物は、１日５回より多く投与される。追加として、または代替として、いくつかの実施形態では、ペプチド組成物は、毎日、１日おき、３日おき、４日おき、５日おき、または６日おきに投与される。いくつかの実施形態では、ペプチド組成物は、週１回、隔週１回、３週間に１回、または月１回投与される。いくつかの実施形態では、ペプチド組成物は、１週間、２週間、３週間、４週間、または５週間の期間にわたって投与される。いくつかの実施形態では、ペプチドは、６週間以上にわたって投与される。いくつかの実施形態では、ペプチドは、１２週間以上にわたって投与される。いくつかの実施形態では、ペプチドは、１年未満の期間にわたって投与される。いくつかの実施形態では、ペプチドは、１年超の期間にわたって投与される。いくつかの実施形態では、ペプチドは、対象の人生を通じて投与される。
【０１５５】
本技術の方法のいくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、１週間以上にわたって毎日投与される。本技術の方法のいくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、２週間以上にわたって毎日投与される。本技術の方法のいくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、３週間以上にわたって毎日投与される。本技術の方法のいくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、４週間以上にわたって毎日投与される。本技術の方法のいくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、６週間以上にわたって毎日投与される。本技術の方法のいくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドは、１２週間以上にわたって毎日投与される。いくつかの実施形態では、ペプチドは、対象の人生を通じて投与される。
【０１５６】
いくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドでの治療は、以下の症状、血尿症、タンパク尿症、円柱尿症、白血球尿症、高血圧、浮腫、微量アルブミン尿症、糸球体濾過量減少、間質性線維症、間質炎、尿細管損傷、ＧＢＭ超微細構造異常、ネフローゼ症候群、糸球体腎炎、末期腎疾患、慢性貧血、巨大血小板性血小板減少症、骨形成異常症、感覚神経性難聴、前部円錐水晶体、ドットアンドフレック網膜症、後部多形性角膜変性症、再発性角膜びらん、一時黄斑菲薄化、白内障、流涙、羞明、視力喪失、円錐角膜、及び平滑筋腫症のうちの１つ以上の発症を予防するか、または遅延させるであろう。ある特定の実施形態では、ＣＯＬ４Ａ３、ＣＯＬ４Ａ４、及びＣＯＬ４Ａ５遺伝子のうちの１つ以上の機能の低減、減少した発現レベル、及び／または欠乏を特徴とする疾患または病態を有する対象、ならびに／またはアルポート症候群を有する対象におけるＡＤＡＭ８、フィブロネクチン、ミオシン１０、ＭＭＰ−２、ＭＭＰ−９、及びポドシンのうちの１つ以上の尿レベル。いくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドで治療された対象の徴候及び症状は、健康な対照において観察されるものに類似する。ある特定の実施形態では、ＣＯＬ４Ａ３、ＣＯＬ４Ａ４、及びＣＯＬ４Ａ５遺伝子のうちの１つ以上の機能の低減、減少した発現レベル、及び／もしくは欠乏を特徴とする疾患または病態、ならびに／または芳香族カチオン性ペプチドで治療されたアルポート症候群を有する対象は、正常な対照対象において観察されるものと同様である、メサンギウム細胞におけるＭＭＰ−９発現を示すであろう。
芳香族カチオン性ペプチドベースの治療の生物学的効果の決定
【０１５７】
種々の実施形態では、好適なインビトロまたはインビボアッセイは、固有の芳香族カチオン性ペプチドベースの治療の効果及びその投与が治療を示すかどうかを決定するように、実施される。種々の実施形態では、インビトロアッセイは、代表的な動物モデルを用いて実施され、所与の芳香族カチオン性ペプチドベースの治療が、ＣＯＬ４Ａ３、ＣＯＬ４Ａ４、及びＣＯＬ４Ａ５遺伝子のうちの１つ以上の機能の低減、減少した発現レベル、及び／もしくは欠乏を特徴とする疾患もしくは病態の徴候及び／もしくは症状を低減もしくは排除することに対して、ならびに／またはアルポート症候群を有することに対して、所望の効果を発揮するかどうかを決定する。治療において使用するための化合物は、ヒト対象において試験する前に、これらに限定されないがラット、マウス、ニワトリ、ウシ、サル、及びウサギ等を含む好適な動物モデル系において試験することができる。同様に、インビボ試験については、当該技術分野において知られている動物モデル系のうちの任意のものが、ヒト対象への投与の前に使用できる。いくつかの実施形態では、インビトロまたはインビボ試験は、Ｄ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、または酢酸塩、酒石酸、もしくはトリフルオロ酢酸塩等のその薬学的に許容される塩の生物学的機能に関する。
【０１５８】
アルポート症候群の動物モデルは、例えば、ＣＯＬ４Ａ３、ＣＯＬ４Ａ４、及びＣＯＬ４Ａ５のうちの１つ以上においてランダムまたは標的された突然変異を生成することを含む、当該技術分野において知られている技法を使用して生成されてもよい。例えば、Ｘ連鎖アルポート症候群及び常染色体劣性アルポート症候群のマウスモデルは、それぞれマウスＣｏｌ４ａ５遺伝子及びマウスＣｏｌ４ａ３遺伝子の標的された破壊によって生成された。Ｒｈｅａｕｌｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ａｍ  Ｓｏｃ  Ｎｅｐｈｒｏｌ．１５（６）：１４６６−７４（２００４）、Ｃｏｓｇｒｏｖｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇｅｎｅｓ  Ｄｅｖ．１０（２３）：２９８１−９２（１９９６）を参照されたい。そのようなモデルを使用して、特定の遺伝子の破壊から生じる病態の予防及び治療において、ならびに所与の状況において何が治療有効量のペプチドを含むかを決定するために、Ｄ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2等の本技術の芳香族カチオン性ペプチドの生物学的効果を明示することができる。
投与の様式及び有効投与量
【０１５９】
細胞、器官、または組織を、Ｄ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2等の本技術の芳香族カチオン性ペプチド、または酢酸塩、酒石酸塩、もしくはトリフルオロ酢酸塩等のその薬学的に許容される塩と接触させるために当業者には知られている任意の方法が用いられてもよい。好適な方法としては、インビトロ、エキソビボ、またはインビボ方法が挙げられる。インビボ方法は、典型的に、上述のもののような芳香族カチオン性ペプチドの、哺乳類、好適に、ヒトへの投与を含む。治療のためにインビボで使用された場合、Ｄ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2等の芳香族カチオン性ペプチド、または酢酸塩、酒石酸塩、もしくはトリフルオロ酢酸塩等のその薬学的に許容される塩は、有効量（すなわち、所望の治療効果を有する量）で対象に投与される。用量及び投与計画は、対象における感染症の程度、等の使用される特定の芳香族カチオン性ペプチドの特性（例えば、その治療指標）、対象、及び対象の病歴に依存するであろう。
【０１６０】
有効量は、内科医及び臨床医によく知られている方法によって前臨床治験及び臨床治験中に決定され得る。方法において有用なペプチドの有効量を、薬学的化合物を投与するための多数の周知の方法のうちの任意のものによって、有効量を必要とする哺乳類に投与することができる。ペプチドは、全身的にまたは局所的に投与され得る。
【０１６１】
ペプチドは、薬学的に許容される塩として配合されてもよい。「薬学的に許容される塩」という用語は、哺乳類等の患者に投与するために許容される塩基または酸から調製される塩（例えば、所与の投与計画に対して許容される哺乳類の安全性を有する塩）を意味する。しかしながら、塩が、患者への投与を意図しない中間体の化合物の塩等の薬学的に許容される塩である必要がないことが理解される。薬学的に許容される塩は、薬学的に許容される無機または有機塩基に由来し得るかまたは薬学的に許容される無機または有機酸に由来し得る。加えて、ペプチドがアミン、ピリジン、またはイミダゾール等の塩基性部分及びカルボン酸またはテトラゾール等の酸性部分の両方を含有する場合、双性イオンは、形成され、本明細書で使用されるとき、「塩」という用語内に含まれる。薬学的に許容される無機塩基由来の塩としては、アンモニウム、カルシウム、銅、三価鉄、二価鉄、リチウム、マグネシウム、マンガン（ｍａｎｇａｎｉｃ）、マンガン（ｍａｎｇａｎｏｕｓ）、カリウム、ナトリウム、及び亜鉛の塩等が挙げられる。薬学的に許容される有機塩基由来の塩としては、アルギニン、ベタイン、カフェイン、コリン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−メチルモルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン、イソプロピルアミン、リジン、メチルグルカミン、モルホリン、ピペラジン、ピペラジン（ｐｉｐｅｒａｄｉｎｅ）、ポリアミン樹脂、プロカイン、プリン、テオブロミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミン、及びトロメタミン等の置換アミン、環式アミン、及び天然に存在するアミン等を含む１級、２級、及び３級アミンの塩が挙げられる。薬学的に許容される無機酸由来の塩としては、ホウ酸、炭酸、ハロゲン化水素酸（臭化水素酸、塩酸、フッ化水素酸、またはヨウ化水素酸）、硝酸、リン酸、スルファミン酸、及び硫酸の塩を含む。薬学的に許容される有機酸由来の塩としては、脂肪族ヒドロキシル酸（例えば、クエン酸、グルコン酸、グリコール酸、乳酸、ラクトビオン酸、リンゴ酸、及び酒石酸）、脂肪族モノカルボン酸（例えば、酢酸、酪酸、ギ酸、プロピオン酸、及びトリフルオロ酢酸）、アミノ酸（例えば、アスパラギン酸及びグルタミン酸）、芳香族カルボン酸（例えば、安息香酸、ｐ−クロロ安息香酸、ジフェニル酢酸、ゲンチジン酸、馬尿酸、及びトリフェニル酢酸）、芳香族ヒドロキシル酸（例えば、ｏ−ヒドロキシ安息香酸、ｐ−ヒドロキシ安息香酸、１−ヒドロキシナフタレン−２−カルボン酸、及び３−ヒドロキシナフタレン−２−カルボン酸）、アスコルビン酸、ジカルボン酸（例えば、フマル酸、マレイン酸、シュウ酸、及びコハク酸）、グルクロン酸、マンデル酸、粘液酸、ニコチン酸、オロト酸、パモ酸（ｐａｍｏｉｃ）、パントテン酸、スルホン酸（例えば、ベンゼンスルホン酸、カンホスルホン酸（ｃａｍｐｈｏｓｕｌｆｏｎｉｃ）、エジシル酸（ｅｄｉｓｙｌｉｃ）、エタンスルホン酸、イセチオン酸、メタンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸、ナフタレン−１，５−ジスルホン酸、ナフタレン−２，６−ジスルホン酸、及びｐ−トルエンスルホン酸）、及びキシナホイ（ｘｉｎａｆｏｉｃ）酸等の塩が挙げられる。いくつかの実施形態では、塩は、酒石酸塩、またはトリフルオロ酢酸塩である。
【０１６２】
Ｄ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2等の本明細書に説明される芳香族カチオン性ペプチド、または酢酸塩、酒石酸塩、もしくはトリフルオロ酢酸塩等のその薬学的に許容される塩は、本明細書に説明される障害の治療または予防のために対象に、単独で、または組み合わせで投与するための薬学的組成物中に組み込まれ得る。このような組成物は、典型的に、活性剤及び薬学的に許容される担体を含む。本明細書で使用されるとき、「薬学的に許容される担体」という用語は、薬学的投与と対応している、生理食塩水、溶媒、分散媒、コーティング、抗菌及び抗真菌剤、及び等張及び吸収遅延剤等を含む。補充性活性化合物もまた、組成物中に組み込まれ得る。
【０１６３】
薬学的組成物は、典型的に、その投与の意図する経路と対応するように配合される。投与の経路の例としては、非経口（例えば、静脈内、皮内、腹腔内、または皮下）、経口、吸入、経皮（局所）、眼内、イオン注入での、及び経粘膜投与が挙げられる。非経口、皮内、または皮下適用のために使用される溶液または懸濁液は、以下の成分、注射のための水、生理食塩水溶液、固定油、ポリエチレングリコール、グリセリン（ｇｌｙｃｅｒｉｎｅ）、プロピレングリコールまたは他の合成溶媒等の無菌の希釈剤；ベンジルアルコールまたはメチルパラベン等の抗菌剤；アスコルビン酸または重亜硫酸ナトリウム等の酸化防止剤；エチレンジアミン四酢酸等のキレート剤；酢酸、クエン酸、またはリン酸等の緩衝剤、及び塩化ナトリウムまたはブドウ糖等の等張の調整のための薬剤を含むことができる。ｐＨは、塩酸または水酸化ナトリウム等の酸または塩基で調整され得る。非経口調製は、アンプル、使い捨てシリンジ、またはガラスまたはプラスチックで作製された複数の用量バイアルに包含され得る。患者または治療する内科医の便宜のため、投与配合物は、治療コース（例えば、７日間の治療）のための全ての必要な装備（例えば、薬物のバイアル、希釈剤のバイアル、シリンジ及びニードル）を含有するキットに提供され得る。
【０１６４】
注射用使用に好適な薬学的組成物は、無菌注射用溶液または分散液の即座の調製のための無菌水溶液（水溶性である）または分散液及び無菌粉末を含むことができる。静脈内投与の場合、好適な担体としては、生理食塩水、静菌水、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ  ＥＬ（商標）（ＢＡＳＦ、Ｐａｒｓｉｐｐａｎｙ、Ｎ．Ｊ．）、またはリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）が挙げられる。全ての場合において、非経口投与のための組成物は、無菌でなければならず、容易なシリンジとしての性能が存在する程度にまで流動性であるべきである。これは、製造及び貯蔵の状態下で安定しているべきであり、細菌及び真菌等の微生物の混入作用に備えて保存されなければならない。
【０１６５】
芳香族カチオン性ペプチド組成物は、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、及び液体ポリエチレングリコール等）、及びその好適な混合物を含有する溶媒または分散媒であり得る、担体を含むことができる。適切な流動度は、例えば、レシチン等のコーティングの使用によって、分散液の場合には必要とされる粒径の維持によって、及び界面活性剤の使用によって、維持できる。微生物の作用の予防は、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、アスコルビン酸、及びチオメラソール（ｔｈｉｏｍｅｒａｓｏｌ）等の種々の抗菌及び抗真菌剤によって達成することができる。グルタチオン及び他の酸化防止剤を、酸化を防ぐように含むことができる。多くの場合、組成物中に例えば、糖、マンニトール等のポリアルコール、ソルビトール、または塩化ナトリウム等の等張剤を含むことが有利であろう。注射用組成物の遷延性吸収は、例えば、モノステアリン酸アルミニウムまたはゼラチン等の吸収を遅延させる薬剤を組成物中に含むことによってもたらされ得る。
【０１６６】
無菌注射用溶液は、上に列挙された成分のうちの１つまたは組み合わせを伴う適切な溶媒中に組み込み、必要に応じて濾過滅菌法が後に続くことによって調製され得る。一般に、分散液は、塩基分散媒及び上に列挙されたもの由来の必要とされる他の成分を含有する無菌ビヒクル中に組み込むことによって調製され得る。無菌注射用溶液の調製のための無菌粉末の場合には、調製の典型的な方法は、真空乾燥及び凍結乾燥を含み、これらは、活性成分、更には任意の追加の所望の成分の粉末を、前に無菌濾過されたその溶液から産生できる。
【０１６７】
経口組成物は、一般に、不活性希釈剤または可食性担体を含む。経口治療投与の目的のため、活性化合物は、賦形剤と一緒に組み込むことができ、錠剤、トローチ剤、またはカプセル剤、例えば、ゼラチンカプセル剤、の形態で使用することができる。経口組成物はまた、口腔洗浄薬として使用するために流体担体を用いても調製することができる。薬学的に適合する結合剤、及び／またはアジュバント材料は、組成物の一部として含むことができる。錠剤、ピル、カプセル剤、及びトローチ剤等は、次の成分のうちのいずれか、または似た性質のものの化合物を含むことができる：結晶セルロース、ガムトラガント、またはゼラチン等の結合剤；スターチまたはラクトース等の賦形剤、アルギン酸、プリモゲル（Ｐｒｉｍｏｇｅｌ）、またはコーンスターチ等の分解剤；ステアリン酸マグネシウムまたはステロテス（Ｓｔｅｒｏｔｅｓ）等の潤滑剤；コロイド状二酸化ケイ素等の流動促進剤（ｇｌｉｄａｎｔ）；ショ糖またはサッカリン等の甘味剤；またはペパーミント、サリチル酸メチル、またはオレンジ香味等の香味料。
【０１６８】
吸入による投与については、化合物は、好適な噴霧剤、例えば二酸化炭素等のガス、を含有する圧縮容器またはディスペンサ、または噴霧器からエアロゾルスプレーの形態で送達することができる。このような方法は、米国特許第６，４６８，７９８号に説明されるものを含む。
【０１６９】
本明細書に説明されるとき治療化合物の全身的投与は、経粘膜または経皮手段によるものであり得る。経粘膜または経皮投与については、バリアを透過させるのに適切な浸透性を、配合物において使用する。このような浸透性は、当該技術分野において一般に知られており、経粘膜投与については、例えば、洗浄剤、胆汁酸塩、及びフシジン酸誘導体を含む。経粘膜投与は、経鼻スプレーの使用を介して達成することができる。経皮投与については、活性化合物は、当該技術分野において一般に知られているように、軟膏、膏薬、ゲル、またはクリームに配合される。一実施形態では、経皮投与はイオン泳動によって実施され得る。
【０１７０】
治療タンパク質またはペプチドは、担体系において配合できる。担体は、コロイド系であり得る。コロイド系は、リポソーム、リン脂質二重層ビヒクルであり得る。一実施形態では、治療ペプチドは、ペプチド完全性を維持しつつリポソーム中にカプセル化される。当業者であれば、リポソームを調製するための様々な方法が存在することを理解するであろう。Ｌｉｃｈｔｅｎｂｅｒｇ，ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ａｎａｌ．，３３：３３７−４６２（１９８８）；Ａｎｓｅｌｅｍ，ｅｔ  ａｌ．，Ｌｉｐｏｓｏｍｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ（１９９３）を参照されたい）。リポソームの配合物は、クリアランスを遅延させて細胞性取り込みを増加させることができる（Ｒｅｄｄｙ，Ａｎｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒ．，３４（７−８）：９１５−９２３（２０００）を参照されたい）。活性剤を、これらに限定されないが、可溶性、不溶性、透過性、不透過性、生分解性または胃保持性ポリマーまたはリポソームを含む薬学的に許容される成分から調製される粒子中に充填することもできる。このような粒子としては、ナノ粒子、生分解性ナノ粒子、マイクロ粒子、生分解性マイクロ粒子、ナノ球体、生分解性ナノ球体、マイクロ球体、生分解性マイクロ球体、カプセル剤、エマルション、リポソーム、ミセル、及びウイルスベクター系が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１７１】
担体はまた、ポリマー、例えば、生分解性、生体適合性ポリマー基質．であり得る。一実施形態では、治療ペプチドを、タンパク質完全性を維持しつつ、ポリマー基質中に包埋することができる。ポリマーは、ポリペプチド、タンパク質、または多糖体等の天然か、またはポリα−ヒドロキシ酸等の合成であってもよい。例としては、例えば、コラーゲン、フィブロネクチン、エラスチン、酢酸セルロース、硝酸セルロース、多糖体、フィブリン、ゼラチン、及びこれらの組み合わせから作製させる担体が挙げられる。一実施形態では、ポリマーは、ポリ−乳酸（ＰＬＡ）またはコポリ乳酸／グリコール酸（ＰＧＬＡ）である。ポリマー基質は、マイクロ球体及びナノ球体を含む様々な形態及び大きさで調製及び単離することができる。ポリマー配合物は、治療効果の遷延性持続期間をもたらすことができる。Ｒｅｄｄｙ，Ａｎｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒ．，３４（７−８）：９１５−９２３（２０００）を参照されたい）。ヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）のためのポリマー配合物は、臨床治験において使用されている。（Ｋｏｚａｒｉｃｈ  ａｎｄ  Ｒｉｃｈ，Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，２：５４８−５５２（１９９８）を参照されたい）。
【０１７２】
ポリマー微小球持続放出製剤の例は、ＰＣＴ公開第９９／１５１５４（Ｔｒａｃｙら）、米国特許第５，６７４，５３４号及び同第５，７１６，６４４号（いずれもＺａｌｅら）、ＰＣＴ公開第９６／４００７３号（Ｚａｌｅら）、及びＰＣＴ公開第００／３８６５１号（Ｓｈａｈら）に説明されている。米国特許第５，６７４，５３４号及び同第５，７１６，６４４号、及びＰＣＴ公開第９６／４００７３号は、塩との集合に対して安定化されたエリスロポエチンのポリマー基質を説明する。
【０１７３】
いくつかの実施形態では、治療化合物を、移植片及びマイクロカプセル化された送達系を含む制御された遊離配合物等の本体からの急速な脱離に対して治療化合物を保護するであろう担体を使って調製する。エチレン酢酸ビニル、ポリ酸無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステル、及びポリ乳酸等の生分解性、生体適合性ポリマーを使用することができる。このような配合物は、既知の技術を用いて調製できる。材料は、例えば、Ａｌｚａ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ及びＮｏｖａ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃから商業的に入手することもできる。リポソーム懸濁液（細胞特異性抗原に対するモノクローナル抗体を有する特定の細胞に標的されたリポソームを含む）を、薬学的に許容される担体として使用することもできる。これらは、例えば、米国特許第４，５２２，８１１号に説明されるように、当業者に知られている方法に従って調製することができる。
【０１７４】
治療化合物はまた、細胞内送達を向上させるために配合することができる。例えば、リポソーム送達系は、当該技術分野において知られており、例えば、Ｃｈｏｎｎ  ａｎｄ  Ｃｕｌｌｉｓ，″Ｒｅｃｅｎｔ  Ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  Ｌｉｐｏｓｏｍｅ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，″Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ６：６９８−７０８（１９９５）、Ｗｅｉｎｅｒ，″Ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ  ｆｏｒ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ：Ｓｅｌｅｃｔｉｎｇ  Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｅ  ａｎｄ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  Ｐｒｏｃｅｓｓｅｓ，″Ｉｍｍｕｎｏｍｅｔｈｏｄｓ，４（３）：２０１−９（１９９４）、及びＧｒｅｇｏｒｉａｄｉｓ，″Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  Ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ  ｆｏｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ：Ｐｒｏｇｒｅｓｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｂｌｅｍｓ，″Ｔｒｅｎｄｓ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，１３（１２）：５２７−３７（１９９５）を参照されたい。Ｍｉｚｇｕｃｈｉ，ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｌｅｔｔ．，１００：６３−６９（１９９６）には、インビボ及びインビトロ両方の細胞にタンパク質を送達するための融合性リポソームの使用が説明されている。
【０１７５】
任意の治療剤の投与量、毒性、及び治療有効性は、例えば、ＬＤ５０（集団の５０％致死量）及びＥＤ５０（集団の５０％治療有効量）を決定するために、細胞培養または実験用動物における標準薬学的手順によって決定することができる。毒性と治療効果との間の用量比は、治療指標であり、ＬＤ５０／ＥＤ５０比として表すことができる。高治療指標を呈する化合物が、有利である。毒性の副作用を呈する化合物を使用できるが、非感染性細胞への潜在的損傷を最小限に抑え、それにより副作用を軽減させるために、発症した組織の部位に対してこのような化合物を標的とする送達系を設計するケアが行われるべきである。
【０１７６】
細胞培養アッセイ及び動物実験から得られたデータを使用して、ヒトにおいて使用するための投与量の範囲を配合することができる。このような化合物の投与量は、ほとんど毒性を持たないか、または毒性を持たないＥＤ５０を含む循環濃度の範囲内に属し得る。投与量は、この範囲内で、用いられる剤形及び利用される投与の経路に応じて変化し得る。本方法において使用される任意の化合物については、治療有効量は、細胞培養アッセイから初期に推定することができる。用量は、細胞培養において決定されるように、ＩＣ５０（すなわち、最大半量の症状の阻害を達成する試験化合物の濃度）を含む循環形質濃度範囲を達成するように、動物モデルにおいて配合することができる。このような情報を使用して、ヒトにおいて有用な用量を正確に決定することができる。形質におけるレベルは、例えば、高速液体クロマトグラフィーによって測定することができる。
【０１７７】
典型的には、治療または予防効果を達成するのに十分な芳香族カチオン性ペプチドの有効量は、１日当たり約０．０００００１ｍｇ／キログラム体重〜１日当たり約１０，０００ｍｇ／キログラム体重の範囲である。好適には、投与量範囲は、１日当たり約０．０００１ｍｇ／キログラム体重〜１日当たり約１００ｍｇ／キログラム体重の範囲である。例えば、投与量は、１ｍｇ／ｋｇ体重または毎日、隔日ごと、または３日ごとに１０ｍｇ／ｋｇ体重、または毎週、隔週ごと、または３週間ごとに１〜１０ｍｇ／ｋｇの範囲内、であり得る。一実施形態では、ペプチドの単一投与量は、０．００１〜１０，０００マイクログラム／キログラム体重の範囲である。一実施形態では、担体中の芳香族カチオン性ペプチド濃度は、送達されたミリリットル当たり０．２〜２０００マイクログラムの範囲である。例示的な治療計画は、１日当たり１回または１週間に１回の投与を必要とする。治療用途では、比較的短い間隔での比較的高い投与量は、時折、疾患の進行が低下するかまたは終了するまで、または対象が疾患の症状の部分的または完全な改善を示すまで必要とされる。したがって、患者は、予防計画を投与することができる。
【０１７８】
いくつかの実施形態では、芳香族カチオン性ペプチドの治療有効量は、１０−１２〜１０−６モル、例えば、約１０−７モルの標的とする組織でペプチドの濃度として定義され得る。この濃度は、０．００１〜１００ｍｇ／ｋｇの全身的用量か、または体表面積による等量用量によって送達することができる。用量のスケジュールは、例えば、単一の毎日または毎週の投与によって標的とする組織で治療濃度を維持するように最適化されるであろうが、連続的投与（例えば、非経口注入または経皮適用）も含むであろう。
【０１７９】
当業者であれば、これらに限定されないが、疾患または障害の重症度、以前の治療、対象の健康全般及び／または年齢、ならびに存在する他の疾患を含むある特定の要素が、対象を効率的に治療するために必要とされる投与量及びタイミングに影響し得ることを理解するであろう。更には、本明細書に説明される治療組成物の治療有効量を用いる対象の治療は、単一の治療または一連の治療を含むことができる。
【０１８０】
本発明の方法に従って治療される哺乳類は、例えば、ヒツジ、ブタ、ウシ、及びウマ等の家畜；イヌ及びネコ等のペット用動物；ラット、マウス、及びウサギなどの実験用動物を含む任意の哺乳類であり得る。いくつかの実施形態では、哺乳類は、ヒトである。
芳香族カチオン性ペプチドとの複合療法
【０１８１】
いくつかの実施形態では、Ｄ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2等の芳香族カチオン性ペプチド、または酢酸塩、酒石酸塩、またはトリフルオロ酢酸塩等のその薬学的に許容される塩は、ＣＯＬ４Ａ３、ＣＯＬ４Ａ４、及びＣＯＬ４Ａ５遺伝子のうちの１つ以上の機能の低減、減少した発現レベル、及び／または欠乏を特徴とする疾患または病態の予防または治療のために、１つ以上の追加の療法と組み合わされてもよい。いくつかの実施形態では、Ｄ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2等の芳香族カチオン性ペプチド、または酢酸塩、酒石酸塩、またはトリフルオロ酢酸塩等のその薬学的に許容される塩は、アルポート症候群の予防または治療のための１つ以上の追加の療法と組み合わされてもよい。追加の治療剤としては、ＡＣＥ阻害剤、ＡＲＢ、ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤、アルドステロン阻害剤、アリスキレン、カルシネウリン阻害剤（例えば、シクロスポリンＡ、タクロリムス）、エンドセリン受容体拮抗薬（例えば、シタキセンタン、アンブリセンタン（ＬＥＴＡＩＲＩＳ）、アントラセンタン、ＢＱ−１２３、ジボテンタン、ボセンタン（ＴＲＡＣＬＥＥＲ）、マシテンタン、テゾセンタン、ＢＱ−７８８、及びＡ１９２６２１）、スロデキシド、バソペプチダーゼ阻害剤（例えば、ＡＶＥ７６８８）、抗トランスフォーミング成長因子−β１抗体、ケモカイン受容体１遮断剤、骨形成タンパク質−７、ＰＰＡＲγ作動薬（例えば、ロシグリタゾン、ピオグリタゾン、ＭＲＬ２４、Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｌｅｕ、ＳＲ１６６４、ＳＲ１８２４、ＧＷ００７２、ＭＣＣ５５５、ＣＬＸ−０９２１、ＰＡＴ５Ａ、Ｌ−７６４４０６、ｎＴＺＤｐａ、ＣＤＤＯ（２−シアノ−３，１２−ジオキソオレアナ−１，９−ジエン−２８−オイック酸）、ラガグリタザル、Ｏ−アリールマンデル酸、及びＮＳＡＩＤ）、ならびにＢＡＹ−１２−９５６６が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１８２】
いくつかの実施形態では、ＡＣＥ阻害剤は、カプトプリル、アラセプリル、リシノプリル、イミダプリル、キナプリル、テモカプリル、デラプリル、ベナゼプリル、シラザプリル、トランドラプリル、エナラプリル、セロナプリル、フォシノプリルイマダプリル、モベルトプリル、ペリンドプリル、ラミプリル、スピラプリル、ランドラプリル、及びそのような化合物の薬学的に許容される塩からなる群から選択される。
【０１８３】
いくつかの実施形態では、ＡＲＢは、ロサルタン、カンデサルタン、バルサルタン、エプロサルタン、テルミサルタン、及びイルベサルタンからなる群から選択される。
【０１８４】
いくつかの実施形態では、ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤（またはスタチン）は、ロバスタチン（例えば、ＡＤＶＩＣＯＲ（登録商標）（ナイアシン延長放出／ロバスタチン）（ＡｂｂＶｉｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｃｈｉｃａｇｏ，Ｉｌｌｉｎｏｉｓ）、ＡＬＴＯＰＲＥＶ（商標）（ロバスタチン延長放出）（Ｓｈｉｏｎｇｉ，Ｉｎｃ．，Ａｔｌａｎｔａ，ＧＡ）、ＭＥＶＡＣＯＲ（登録商標）（Ｍｅｒｃｋ，Ｗｈｉｔｅｈｏｕｓｅ  Ｓｔａｔｉｏｎ，ＮＪ）、アトルバスタチン（例えば、ＣＡＤＵＥＴ（登録商標）（アムロジピン及びアトルバスタチン）（Ｐｆｉｚｅｒ，Ｍｏｒｒｉｓｖｉｌｌｅ，ＰＡ）、ＬＩＰＩＴＯＲ（登録商標）（Ｐｆｉｚｅｒ，Ｍｏｒｒｉｓｖｉｌｌｅ，ＰＡ））、ロスバスタチン及び／またはロスバスタチンカルシウム（例えば、ＣＲＥＳＴＯＲ（登録商標）（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ，Ｌｏｎｄｏｎ，Ｅｎｇｌａｎｄ））、シムバスタチン（例えば、ＪＵＶＩＳＹＮＣ（登録商標）（シタグリプチン／シムバスタチン）（Ｍｅｒｃｋ，Ｗｈｉｔｅｈｏｕｓｅ  Ｓｔａｔｉｏｎ，ＮＪ））、ＳＩＭＣＯＲ（登録商標）（ナイアシン延長放出／シムバスタチン）（ＡｂｂＶｉｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｃｈｉｃａｇｏ，Ｉｌｌｉｎｏｉｓ）、ＶＹＴＯＲＩＮ（登録商標）（エゼチミブ／シムバスタチン）（Ｍｅｒｃｋ，Ｗｈｉｔｅｈｏｕｓｅ  Ｓｔａｔｉｏｎ，ＮＪ）、及びＺＯＣＯＲ（登録商標）（Ｍｅｒｃｋ，Ｗｈｉｔｅｈｏｕｓｅ  Ｓｔａｔｉｏｎ，ＮＪ）、フルバスタチン及び／またはフルバスタチンナトリウム（例えば、ＬＥＳＣＯＬ（登録商標）、ＬＥＳＣＯＬ  ＸＬ（フルバスタチン延長放出）（Ｍｙｌａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｍｏｒｇａｎｔｏｗｎ，ＷＶ））、ピタバスタチン（例えば、ＬＩＶＡＬＯ（登録商標）（Ｋｏｗａ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｍｏｎｔｇｏｍｅｒｙ，ＡＬ））、プラバスタチン及び／またはプラバスタチンナトリウム（例えば、ＰＲＡＶＡＣＨＯＬ（登録商標）（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＮＹ））からなる群から選択される。
【０１８５】
いくつかの実施形態では、アルドステロン阻害剤は、スピロノラクトン（Ａｌｄａｃｔｏｎｅ（登録商標））、エプレレノン（Ｉｎｓｐｒａ（登録商標））、カンレノン（カンレノ酸カリウム）、プロレノン（プロレノ酸カリウム）、及びメキシレノン（メキシレノ酸カリウム）からなる群から選択される。
【０１８６】
一実施形態では、相乗治療効果が生成されるように、追加の治療剤を、芳香族カチオン性ペプチドと組み合わせて対象に投与する。例えば、ＣＯＬ４Ａ３、ＣＯＬ４Ａ４、及びＣＯＬ４Ａ５遺伝子のうちの１つ以上の機能の低減、減少した発現レベル、及び／または欠乏を特徴とする疾患または病態の予防または治療のための、１つ以上の追加の治療剤とのペプチドの投与は、その疾患の予防または治療においてより優れた相加効果を有するであろう。追加として、または代替として、いくつかの実施形態では、アルポート症候群の予防または治療のための１つ以上の追加の治療剤とのペプチドの投与は、その疾患の予防または治療においてより優れた相加効果を有するであろう。例えば、より低い用量の治療剤のうちの１つ以上が、ＣＯＬ４Ａ３、ＣＯＬ４Ａ４、及びＣＯＬ４Ａ５遺伝子のうちの１つ以上の機能の低減、減少した発現レベル、及び／または欠乏を特徴とする疾患または病態を治療または予防する際に用いられてもよく、増加した治療有効性及び減少した副作用をもたらす。追加として、または代替として、より低い用量の治療剤のうちの１つ以上が、アルポート症候群を治療または予防する際に用いられてもよく、増加した治療有効性及び減少した副作用をもたらす。いくつかの実施形態では、ペプチドは、１つ以上のＡＣＥ阻害剤、ＡＲＢ、ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤、アルドステロン阻害剤、アリスキレン、カルシネウリン阻害剤（例えば、シクロスポリンＡ、タクロリムス）、エンドセリン受容体拮抗薬（例えば、シタキセンタン、アンブリセンタン（ＬＥＴＡＩＲＩＳ）、アントラセンタン、ＢＱ−１２３、ジボテンタン、ボセンタン（ＴＲＡＣＬＥＥＲ）、マシテンタン、テゾセンタン、ＢＱ−７８８、及びＡ１９２６２１）、スロデキシド、バソペプチダーゼ阻害剤（例えば、ＡＶＥ７６８８）、抗トランスフォーミング成長因子−β１抗体、ケモカイン受容体１遮断剤、骨形成タンパク質−７、ＰＰＡＲγ作動薬（例えば、ロシグリタゾン、ピオグリタゾン、ＭＲＬ２４、Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｌｅｕ、ＳＲ１６６４、ＳＲ１８２４、ＧＷ００７２、ＭＣＣ５５５、ＣＬＸ−０９２１、ＰＡＴ５Ａ、Ｌ−７６４４０６、ｎＴＺＤｐａ、ＣＤＤＯ（２−シアノ−３，１２−ジオキソオレアナ−１，９−ジエン−２８−オイック酸）、ラガグリタザル、Ｏ−アリールマンデル酸、及びＮＳＡＩＤ）、ならびにＢＡＹ−１２−９５６６と組み合わせて投与され、それにより予防または治療における相乗効果をもたらす。
【０１８７】
いずれの場合にも、複数の治療剤は、任意の順序または更に同時に投与されてもよい。同時の場合、複数の治療剤は、単一、統一形態、または複数の形態で（例としてのみであるが、１つの単一のピルとしてまたは２つの別個のピルとしてのいずれか）提供されてもよい。治療剤のうちの１つが、複数用量で所与され得るか、またはいずれもが、複数用量として所与され得る。同時でない場合は、複数用量の間のタイミングは、ゼロ週を超えて４週未満と変化し得る。加えて、組成物及び配合物の組み合わせ方法は、２つの薬剤のみの使用に限定されない。
【実施例】
【０１８８】
本技術は、以下の実施例によって更に示されるが、いかなる方法によっても限定されるように解釈されない。下の実施例の各々に対して、本明細書に説明される任意の芳香族カチオン性ペプチドを用いることができる。例として、限定されないが、下の実施例で使用される芳香族カチオン性ペプチドは、２′，６′−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2、もしくはＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、または表６、７、及び／もしくは８に示されるペプチドのうちの任意の１つ以上であり得る。
実施例１−ヒトにおけるアルポート症候群の治療での芳香族カチオン性ペプチドの使用
【０１８９】
この実施例は、アルポート症候群の治療におけるＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2等の芳香族カチオン性ペプチド、または酢酸塩、酒石酸塩、もしくはトリフルオロ酢酸塩等のその薬学的に許容される塩の使用を明示する。
方法
【０１９０】
アルポート症候群を有することが疑われるか、またはそれを診断された対象は、Ｄ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2等の芳香族カチオン性ペプチド、または酢酸塩、酒石酸塩、もしくはトリフルオロ酢酸塩等のその薬学的に許容される塩の１％、５％、または１０％溶液の投与を、単独で、またはアルポート症候群の治療もしくは予防のための１つ以上の追加の治療剤と組み合わせて毎日受ける。ペプチド及び／または追加の治療剤は、当該技術分野において知られている方法に従って経口的に、局所的に、鼻腔内に、全身的に、静脈内に、皮下に、腹腔内に、または筋肉内に投与される。対象は、例えば、血尿症、タンパク尿症、円柱尿症、白血球尿症、高血圧、浮腫、微量アルブミン尿症、糸球体濾過量減少、間質性線維症、間質炎、尿細管損傷、ＧＢＭ超微細構造異常、ネフローゼ症候群、糸球体腎炎、末期腎疾患、慢性貧血、巨大血小板性血小板減少症、骨形成異常症、感覚神経性難聴、前部円錐水晶体、ドットアンドフレック網膜症、後部多形性角膜変性症、再発性角膜びらん、一時黄斑菲薄化、白内障、流涙、羞明、視力喪失、円錐角膜、及び平滑筋腫症が挙げられるが、これらに限定されないアルポート症候群に関連する徴候及び症状の存在及び／または重症度について週１回評価される。治療は、アルポート症候群の１つ以上の徴候または症状が改善または排除されるような時期まで維持される。
結果
【０１９１】
アルポート症候群を有することが疑われるか、または診断され、治療有効量の、Ｄ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2等の芳香族カチオン性ペプチド、または酢酸塩、酒石酸塩、もしくはトリフルオロ酢酸塩等のその薬学的に許容される塩を受ける対象が、低減した重症度、またはアルポート症候群に関連する症状の消滅を示すであろうことが予期される。芳香族カチオン性ペプチドで治療されたアルポート症候群対象が、未治療のアルポート症候群対照と比較して、ＡＤＡＭ８、フィブロネクチン、ミオシン１０、ＭＭＰ−２、ＭＭＰ−９、及びポドシン尿レベルのうちの１つ以上の、少なくとも１０％の正規化を示すであろうことも予想される。１つ以上の追加の治療剤と組み合わせてのＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2の投与は、芳香族カチオン性ペプチドまたは追加の治療剤単独で治療された対象において観察されるものと比較して、この点において相乗効果を有するであろうことが更に予想される。
【０１９２】
これらの結果は、Ｄ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2等の芳香族カチオン性ペプチド、または酢酸塩、酒石酸塩、もしくはトリフルオロ酢酸塩等のその薬学的に許容される塩が、アルポート症候群の治療において有用であることを示すであろう。これらの結果は、Ｄ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2等の芳香族カチオン性ペプチド、または酢酸塩、酒石酸塩、もしくはトリフルオロ酢酸塩等のその薬学的に許容される塩が、以下の症状、血尿症、タンパク尿症、円柱尿症、白血球尿症、高血圧、浮腫、微量アルブミン尿症、糸球体濾過量減少、間質性線維症、間質炎、尿細管損傷、ＧＢＭ超微細構造異常、ネフローゼ症候群、糸球体腎炎、末期腎疾患、慢性貧血、巨大血小板性血小板減少症、骨形成異常症、感覚神経性難聴、前部円錐水晶体、ドットアンドフレック網膜症、後部多形性角膜変性症、再発性角膜びらん、一時黄斑菲薄化、白内障、流涙、羞明、視力喪失、円錐角膜、及び平滑筋腫症のうちの１つ以上を改善することにおいて有用であることを示すであろう。したがって、ペプチドは、アルポート症候群の治療のために、芳香族カチオン性ペプチドを、芳香族カチオン性ペプチドの投与を必要とする対象に投与することを含む方法において有用である。
実施例２−ヒトにおけるアルポート症候群の予防での芳香族カチオン性ペプチドの使用
【０１９３】
この実施例は、アルポート症候群の予防におけるＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2等の芳香族カチオン性ペプチド、または酢酸塩、酒石酸塩、もしくはトリフルオロ酢酸塩等のその薬学的に許容される塩の使用を明示する。
方法
【０１９４】
アルポート症候群を有する危険性のある対象は、Ｄ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2等の芳香族カチオン性ペプチド、または酢酸塩、酒石酸塩、もしくはトリフルオロ酢酸塩等のその薬学的に許容される塩の１％、５％、または１０％溶液の投与を、単独で、またはアルポート症候群の治療もしくは予防のための１つ以上の追加の治療剤と組み合わせて毎日受ける。ペプチド及び／または追加の治療剤は、当該技術分野において知られている方法に従って経口的に、局所的に、鼻腔内に、全身的に、静脈内に、皮下に、腹腔内に、または筋肉内に投与される。対象は、例えば、血尿症、タンパク尿症、円柱尿症、白血球尿症、高血圧、浮腫、微量アルブミン尿症、糸球体濾過量減少、間質性線維症、間質炎、尿細管損傷、ＧＢＭ超微細構造異常、ネフローゼ症候群、糸球体腎炎、末期腎疾患、慢性貧血、巨大血小板性血小板減少症、骨形成異常症、感覚神経性難聴、前部円錐水晶体、ドットアンドフレック網膜症、後部多形性角膜変性症、再発性角膜びらん、一時黄斑菲薄化、白内障、流涙、羞明、視力喪失、円錐角膜、及び平滑筋腫症が挙げられるが、これらに限定されないアルポート症候群に関連する徴候及び症状の存在及び／または重症度について週１回評価される。
結果
【０１９５】
アルポート症候群を有する危険性があるか、または診断され、治療有効量の、Ｄ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2等の芳香族カチオン性ペプチド、または酢酸塩、酒石酸塩、もしくはトリフルオロ酢酸塩等のその薬学的に許容される塩を受ける対象が、アルポート症候群の遅延した発症、またはアルポート症候群の発症の予防を示すであろうことが予期される。芳香族カチオン性ペプチドで治療されたアルポート症候群対象におけるＡＤＡＭ８、フィブロネクチン、ミオシン１０、ＭＭＰ−２、ＭＭＰ−９、及びポドシンのうちの１つ以上の尿レベルは、健康な対照に類似するであろうことも予想される。１つ以上の追加の治療剤と組み合わせてのＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2の投与は、芳香族カチオン性ペプチドまたは追加の治療剤単独で治療された対象において観察されるものと比較して、この点において相乗効果を有するであろうことが更に予想される。
【０１９６】
これらの結果は、Ｄ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2等の芳香族カチオン性ペプチド、または酢酸塩、酒石酸塩、もしくはトリフルオロ酢酸塩等のその薬学的に許容される塩が、アルポート症候群の予防において有用であることを示すであろう。これらの結果は、Ｄ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2等の芳香族カチオン性ペプチド、または酢酸塩、酒石酸塩、もしくはトリフルオロ酢酸塩等のその薬学的に許容される塩が、以下の症状、血尿症、タンパク尿症、円柱尿症、白血球尿症、高血圧、浮腫、微量アルブミン尿症、糸球体濾過量減少、間質性線維症、間質炎、尿細管損傷、ＧＢＭ超微細構造異常、ネフローゼ症候群、糸球体腎炎、末期腎疾患、慢性貧血、巨大血小板性血小板減少症、骨形成異常症、感覚神経性難聴、前部円錐水晶体、ドットアンドフレック網膜症、後部多形性角膜変性症、再発性角膜びらん、一時黄斑菲薄化、白内障、流涙、羞明、視力喪失、円錐角膜、及び平滑筋腫症のうちの１つ以上の発症を予防するか、または遅延させることにおいて有用であることを示すであろう。
【０１９７】
したがって、ペプチドは、アルポート症候群の予防のために、芳香族カチオン性ペプチドを、芳香族カチオン性ペプチドの投与を必要とする対象に投与することを含む方法において有用である。
実施例３−マウスモデルにおけるアルポート症候群の治療での芳香族カチオン性ペプチドの使用
【０１９８】
この実施例は、マウスモデルにおいてアルポート症候群を治療することにおける、Ｄ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2等の芳香族カチオン性ペプチド、または酢酸塩、酒石酸塩、もしくはトリフルオロ酢酸塩等のその薬学的に許容される塩のインビボ有効性を明示する。
方法
【０１９９】
ホモ接合性雄Ｃｏｌ４ａ３ヌルマウス及び野生型同腹子を、この研究において使用した。対象を以下の群に分割した。
（１）健康な野生型対照
（２）水で処置されたＣｏｌ４ａ３ヌルマウス
（３）１ｍｇ／ｋｇのＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2で処置されたＣｏｌ４ａ３ヌルマウス
（４）５ｍｇ／ｋｇのＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2で処置されたＣｏｌ４ａ３ヌルマウス
（５）５ｍｇ／ｋｇのＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2で処置されたＣｏｌ４ａ３ヌルマウス（薬物動態群）
【０２００】
図２は、アルポート症候群研究のための一般的なプロトコルを例証する。Ｄ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2を水中で配合し、５週齢から開始して１または５ｍｇ／ｋｇのいずれかで皮下ボーラス注入によって１日１回投与した。群（１）〜（４）は、１６匹のマウスからなり、そのうち１０匹を生存率研究に使用し、６匹を病理及びＲＮＡ／タンパク質分析に用いた。群（５）は、６匹のマウスからなり、そのうち３匹を、７回目の注入後３０分で殺処分し（年齢、６週）、３匹を７回目の注入後２４時間で殺処分した（年齢、６週）。
【０２０１】
尿及び血液（血清）試料を、５、７、９、１１、１３、及び１５週目に２週間ごとに収集した。
【０２０２】
実験群（１）〜（４）からの６動物を、組織収集のために１５週目に殺処分した。タンパク質／ＲＮＡ分析のために各動物から１つの腎臓を採取し、顕微鏡検査による分析用のパラフィン切片のために第２の腎臓を収集した。生存データは、群（１）〜（４）の残りの１０動物に対して収集した。
【０２０３】
腎組織学：光学顕微鏡検査の場合、各群からの腎臓のサブセット（ｎ＝３）を、４％パラホルムアルデヒド中に固定し、パラフィンに埋め込み、切片に切断した。３ミクロン切片を、ヘマトキシリン及びエオシン染料（Ｈ＆Ｅ染料）または過ヨウ素酸−Ｓｃｈｉｆｆ試薬で染色して、糸球体損傷、尿細管損傷、間質炎、及び間質性線維症に関して全体病理スコアを評価した。
【０２０４】
腎機能：腎機能は、血中尿素窒素（ＢＵＮ）及び尿アルブミン／クレアチン比（ＡＣＲ）を測定することによって評価した。
【０２０５】
ミトコンドリア経路の分析腎臓を除去し、ＯＣＴに浸漬して、液体窒素蒸気中で急速冷凍した。５マイクロメートルのクリオスタット切片を、スライド上に置き、アセトン中に後置した。当該技術分野において知られている標準技法を使用して、Ｄｒｐ１、Ｍｆｎ１、ＯＰＡ１、及びＴｘｎ２タンパク質に対する抗体で組織を免疫染色した。追加として、ＳＯＤ１及びＳＯＤ２のｍＲＮＡ発現レベルを、ｑ−ＲＴ−ＰＣＲを介して分析した。
結果
【０２０６】
図３Ａに示されるように、１ｍｇ／ｋｇまたは５ｍｇ／ｋｇのＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2は、Ｃｏｌ４ａ３ヌルマウス（アルポートマウス）の生存率に影響を及ぼさず、ペプチド投与は有害でなかった。未処置のＣｏｌ４ａ３ヌルマウス（アルポートマウス）のＢＵＮレベルは、野生型マウス（図３Ｂ）と比較して７週齢〜１５週齢の間に漸増した。１ｍｇ／ｋｇまたは５ｍｇ／ｋｇのＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2での処置は、１５週齢でのＣｏｌ４ａ３ヌルマウスのＢＵＮレベルに影響を及ぼさなかった。図３Ｂ及び３Ｃを参照されたい。
【０２０７】
図４Ａ〜４Ｃに示されるように、未処置のＣｏｌ４ａ３ヌルマウス（アルポートマウス）は、野生型対照と比較して、尿細管損傷、間質炎、及び間質性線維症を呈した。図４Ａ〜４Ｃは、５ｍｇ／ｋｇのＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2を受けたＣｏｌ４ａ３ヌルマウスが、尿細管損傷、間質炎、及び間質性線維症の重症度の低下を示した。例えば、未処置のＣｏｌ４ａ３ヌルマウス（アルポートマウス）の６６％（４／６）は、３以上の尿細管病理スコアを呈したが、５ｍｇ／ｋｇのＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2で処置されたＣｏｌ４ａ３ヌルマウス（アルポートマウス）の３３％（２／６）のみが、同じスコアを呈した。図４Ａを参照されたい。図４Ｂに従い、未処置のＣｏｌ４ａ３ヌルマウスの６６％（４／６）は、間質炎重症度スコア３を呈した。対照的に、５ｍｇ／ｋｇのＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2で処置されたＣｏｌ４ａ３ヌルマウス（アルポートマウス）のどれもが、間質炎の同じ重症度を呈しなかった（０／６が、間質炎重症度３を有した）。図４Ｃは、未処置のＣｏｌ４ａ３ヌルマウス（アルポートマウス）の６６％（４／６）が、間質性線維症重症度３を呈したが、５ｍｇ／ｋｇのＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2で処置されたＣｏｌ４ａ３ヌルマウス（アルポートマウス）の１７％（１／６）のみが、間質性線維症の同じ重症度スコアを呈したことを示す。
【０２０８】
図５Ａ〜５Ｃは、５ｍｇ／ｋｇのＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2での処置が、未処置のＣｏｌ４ａ３ヌルマウス（アルポートマウス）と比較してＣｏｌ４ａ３ヌルマウス（アルポートマウス）におけるＭｆｎ１及びＴｘｎ２の発現を著しく上昇させることを明示する。
【０２０９】
図６Ａ及び６Ｂに示されるように、未処置のＣｏｌ４ａ３ヌルマウス（アルポートマウス）は、野生型対照と比較して、ＳＯＤ１及びＳＯＤ２  ｍＲＮＡ発現の著しい低減を呈する。１ｍｇ／ｋｇまたは５ｍｇ／ｋｇのＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2での処置は、Ｃｏｌ４ａ３ヌルマウス（アルポートマウス）において観察される低減したＳＯＤ１及びＳＯＤ２  ｍＲＮＡ発現レベルを助けることができなかった。図６Ａ及び６Ｂを参照されたい。
【０２１０】
図７は、（ａ）６週齢において５ｍｇ／ｋｇのＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、（ｂ）１５週齢において１ｍｇ／ｋｇのＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、及び（ｃ）１５週齢において５ｍｇ／ｋｇのＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2で処置されたＣｏｌ４ａ３ヌルマウス（アルポートマウス）のＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2血漿レベルを示す。最後の注入後３０分に、Ｄ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2血漿レベルを評価した。１５週齢において５ｍｇ／ｋｇのＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2の注入を毎日受けたＣｏｌ４ａ３ヌルマウス（アルポートマウス）は、最高のＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2血漿レベルを示した。図７を参照されたい。
【０２１１】
これらの結果は、Ｄ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2等の芳香族カチオン性ペプチド、または酢酸塩、酒石酸塩、もしくはトリフルオロ酢酸塩等のその薬学的に許容される塩が、アルポート症候群の治療において有用であることを示す。これらの結果は、Ｄ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2等の芳香族カチオン性ペプチド、または酢酸塩、酒石酸塩、もしくはトリフルオロ酢酸塩等のその薬学的に許容される塩が、アルポート症候群を発症する危険性のある対象において、尿細管損傷、間質炎、及び間質性線維症の重症度の改善において有用であることも明示する。
【０２１２】
したがって、本技術の芳香族カチオン性ペプチドは、アルポート症候群の治療のために、芳香族カチオン性ペプチドを、芳香族カチオン性ペプチドの投与を必要とする対象に投与することを含む方法において有用である。
実施例４−Ｃｏｌ４ａ４及びＣｏｌ４ａ５の減少した発現を特徴とする病態の治療における芳香族カチオン性ペプチドの使用
【０２１３】
この実施例は、マウスモデルにおいてＣＯＬＡ４Ａ４及びＣＯＬＡ４Ａ５発現の欠乏を治療することにおける、Ｄ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2等の芳香族カチオン性ペプチド、または酢酸塩、酒石酸塩、もしくはトリフルオロ酢酸塩等のその薬学的に許容される塩のインビボ有効性を明示する。
方法
【０２１４】
Ｃｏｌ４ａ４またはＣｏｌ４ａ５のいずれかの減少した発現を有するホモ接合性雄マウス及び野生型同腹子を、この研究に使用する。対象を以下の群に分割する。
（１）健康な野生型対照
（２）水で処置されたＣｏｌ４ａ４及びＣｏｌ４ａ５欠乏マウス
（３）１ｍｇ／ｋｇのＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2で処置されたＣｏｌ４ａ４及びＣｏｌ４ａ５欠乏マウス
（４）５ｍｇ／ｋｇのＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2で処置されたＣｏｌ４ａ４及びＣｏｌ４ａ５欠乏マウス
（５）５ｍｇ／ｋｇのＤ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2で処置されたＣｏｌ４ａ４及びＣｏｌ４ａ５欠乏マウス（薬物動態群）
【０２１５】
Ｄ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2を水中で配合し、５週齢から開始して１または５ｍｇ／ｋｇのいずれかで皮下ボーラス注入によって１日１回投与する。群（１）〜（４）は、１６匹のマウスを含み、そのうち１０匹を生存率研究に使用し、６匹を病理及びＲＮＡ／タンパク質分析に使用する。群（５）は、６匹のマウスを含み、そのうち３匹を、７回目の注入後３０分で殺処分し（年齢、６週）、３匹を７回目の注入後２４時間で殺処分する（年齢、６週）。
【０２１６】
尿及び血液（血清）試料を、２週間ごとに５、７、９、１１、１３、及び１５週目に収集する。
【０２１７】
実験群（１）〜（４）からの６動物を、組織収集のために１５週目に殺処分する。タンパク質／ＲＮＡ分析のために各動物から１つの腎臓を採取し、顕微鏡検査による分析用のパラフィン切片のために第２の腎臓を収集する。生存データは、群（１）〜（４）の残りの１０動物に対して収集する。
【０２１８】
腎組織学：光学顕微鏡検査の場合、各群からの腎臓のサブセット（ｎ＝３）を、４％パラホルムアルデヒド中に固定し、パラフィンに埋め込み、切片に切断する。３ミクロン切片を、ヘマトキシリン及びエオシン染料（Ｈ＆Ｅ染料）または過ヨウ素酸−Ｓｃｈｉｆｆ試薬で染色して、糸球体損傷、尿細管損傷、間質炎、及び間質性線維症に関して全体病理スコアを評価する。
【０２１９】
腎機能：腎機能は、血中尿素窒素（ＢＵＮ）及び尿アルブミン／クレアチン比（ＡＣＲ）を測定することによって評価する。
【０２２０】
ミトコンドリア経路の分析腎臓を除去し、ＯＣＴに浸漬して、液体窒素蒸気中で急速冷凍する。５マイクロメートルのクリオスタット切片を、スライド上に置き、アセトン中に後置する。当該技術分野において知られている標準タンパク質を使用して、Ｄｒｐ１、Ｍｆｎ１、ＯＰＡ１、及びＴｘｎ２タンパク質に対する抗体で組織を免疫染色する。追加として、ＳＯＤ１及びＳＯＤ２のｍＲＮＡ発現レベルを、ｑ−ＲＴ−ＰＣＲを介して分析する。
結果
【０２２１】
これらの結果は、Ｄ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2等の芳香族カチオン性ペプチド、または酢酸塩、酒石酸塩、もしくはトリフルオロ酢酸塩等のその薬学的に許容される塩が、ＣＯＬ４Ａ３、ＣＯＬ４Ａ４、及びＣＯＬ４Ａ５遺伝子のうちの１つ以上の疾患または病態の治療において有用であることを示すであろうことが予期される。これらの結果は、Ｄ−Ａｒｇ−２′，６′−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2等の芳香族カチオン性ペプチド、または酢酸塩、酒石酸塩、もしくはトリフルオロ酢酸塩等のその薬学的に許容される塩が、ＣＯＬ４Ａ３、ＣＯＬ４Ａ４、及びＣＯＬ４Ａ５遺伝子のうちの１つ以上の機能の低減、減少した発現レベル、及び／または欠乏を特徴とする疾患または病態を発症する危険性のある対象において、コラーゲン変形及び／または不規則性、尿細管損傷、間質炎、及び／または間質性線維症のうちの１つ以上の重症度の改善において有用であることも明示するであろう。
【０２２２】
したがって、本技術の芳香族カチオン性ペプチドは、ＣＯＬ４Ａ３、ＣＯＬ４Ａ４、及びＣＯＬ４Ａ５遺伝子のうちの１つ以上の機能の低減、減少した発現レベル、及び／または欠乏を特徴とする疾患または病態の治療のために、芳香族カチオン性ペプチドを、芳香族カチオン性ペプチドを投与することを必要とする対象に投与することを含む方法において有用である。
均等論
【０２２３】
本技術は、本出願に説明される特定の実施形態に関して限定されるわけではなく、本技術の個々の態様の単一の例示であることが意図される。当業者には明らかであるように、本技術の多くの修正及び変形が、本発明の趣旨及び範囲から逸脱することなく行われ得る。本明細書に列挙されるものに加えて、本技術の範囲内の機能的に均等な方法及び装置は、前述の説明から当業者には明らかとなるであろう。このような修正及び変形は、特許請求の範囲内に属することを意図する。本技術は、特許請求の範囲の用語のみによって、このような特許請求の範囲が有している均等論の全ての範囲と共に限定される。本技術は、当然ながら変化し得る特定の方法、試薬、化合物組成物、または生命システムに限定されないことが理解される。本明細書で使用される用語法は、特定の実施形態を説明する目的のみのためであり、限定することを意図しないこともまた理解される。
【０２２４】
加えて、本開示の特徴または態様がマーカッシュグループに関して説明される場合、当業者であれば、本開示が、マーカッシュグループの任意の個々のメンバーまたはメンバーのサブグループに関してもそれによって説明されることを理解するであろう。
【０２２５】
当業者によって理解されるように、いかなる目的及び全ての目的に対しても、具体的には、書面による説明を提供することに関して、本明細書に開示される全ての範囲は、ありとあらゆる可能な部分範囲及びその部分範囲の組み合わせも包含する。いずれの列挙される範囲も、十分に説明し、同じ範囲を少なくとも等しい半分、３分の１、４分の１、５分の１、１０分の１等に分割するのを可能にするものとして容易に認識され得る。非限定例として、本明細書で考察される各範囲は、下３分の１、中３分の１、及び上３分の１等に容易に分割され得る。また当業者によって理解されるように、「最大」、「少なくとも」、「超」、「未満」等の全ての言語は、列挙される数を含み、上述される下位範囲へと後次に分割され得る範囲を指す。最終的には、当業者によって理解されるように、範囲は、各個々のメンバーを含む。したがって、例えば、１〜３の細胞を有する基は、１、２、または３の細胞を有する基を指す。同様に、１〜５の細胞を有する基は、１、２、３、４、または５の細胞等を有する基を指す。
【０２２６】
本明細書に言及されるまたは引用される全ての特許、特許出願、仮特許出願、及び公開は、本明細書の明示的な教示と矛盾しない程度で、その全体が、全ての図面及び表を含んで参照により本明細書に組み込まれる。
【０２２７】
他の実施形態は、以下の特許請求の範囲内に説明される。
【図１】
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【図２】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図３Ｃ】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図４Ｃ】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図５Ｃ】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
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【図７】
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