(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）プシコースを含有する第一糖粉末；および
（ｂ）第一糖粉末の平均粒径１００を基準に平均粒径３０ないし１７０の比率を有し、葡萄糖及び砂糖からなる群より選択された１種以上の第二糖粉末；
を含む混合糖顆粒であって、
前記混合糖顆粒は、前記第一糖粉末及び前記第二糖粉末が、糖粉末の結合剤によって顆粒化されたものであり、
前記混合糖顆粒の吸湿度は、プシコース粉末の吸湿度１００を基準に９０以下であり、
前記混合糖顆粒の糖組成偏差は１％以下であり、
前記混合糖顆粒は、プシコースの遅い甘美の上昇及び後尾の苦味を改善したものである、混合糖顆粒。
【請求項２】
前記混合糖顆粒の流れ性は、プシコース粉末の流れ性１００を基準に１２０ないし２００である請求項１に記載の混合糖顆粒。
【請求項３】
前記第一糖粉末と第二糖粉末の混合重量比（第一糖粉末：第二糖粉末）は、７０：３０ないし５：９５である請求項１に記載の混合糖顆粒。
【請求項４】
前記混合糖顆粒の平均粒径は、前記第一糖粉末の平均粒径１００を基準に１００ないし２５０である請求項１に記載の混合糖顆粒。
【請求項５】
前記第一糖粉末の平均粒径は５０ないし３００μｍであり、前記第二糖粉末の平均粒径は５０ないし７００μｍである請求項１に記載の混合糖顆粒。
【請求項６】
前記混合糖顆粒は、第一糖粉末と第二糖粉末の混合粉末を顆粒化したものである請求項１に記載の混合糖顆粒。
【請求項７】
前記顆粒化は、流動層顆粒機で行われる請求項６に記載の混合糖顆粒。
【請求項８】
前記混合糖顆粒は、糖粉末の結合剤をさらに含む請求項１に記載の混合糖顆粒。
【請求項９】
前記結合剤は、水、Ｃ１−Ｃ６アルコール、Ｃ１−Ｃ６アルコールの水溶液、マルトデキストリン、難消化性マルトデキストリン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣおよびでんぷんからなる群より選択された１種以上である請求項８に記載の混合糖顆粒。
【請求項１０】
前記混合糖顆粒は、顆粒の総重量中、結合剤を０．１ないし５重量％で含む請求項８に記載の混合糖顆粒。
【請求項１１】
前記プシコースは、混合糖の総固形分含有量１００重量部を基準にプシコース１ないし９９．９重量部で含み、果糖、葡萄糖およびオリゴ糖からなる群より選択された１種以上の糖類をさらに含む混合糖である請求項１に記載の混合糖顆粒。
【請求項１２】
（ａ）プシコースを含有する第一糖粉末；および
（ｂ）第一糖粉末の平均粒径１００を基準に平均粒径３０ないし１７０の比率を有し、葡萄糖及び砂糖からなる群より選択された１種以上の第二糖粉末；を顆粒化して混合糖顆粒を製造する段階を含み、
前記顆粒化段階で結合剤を添加して行い、
前記混合糖顆粒の糖組成偏差は１％以下であり、
前記混合糖顆粒は、プシコースの遅い甘美の上昇及び後尾の苦味を改善したものであり、
前記製造された混合糖顆粒の平均粒径は、前記第一糖粉末の平均粒径の１００を基準に１００ないし２００であり、
前記混合糖顆粒の吸湿度は、プシコース粉末の吸湿度１００を基準に９０以下である混合糖顆粒の製造方法。
【請求項１３】
前記顆粒化段階は、前記第一糖粉末と第二糖粉末を混合および４０ないし７０℃の温度範囲で熱風乾燥して行う請求項１２に記載の混合糖顆粒の製造方法。
【請求項１４】
前記顆粒化段階は、流動層顆粒機で第一糖粉末と第二糖粉末を流動化させて結合剤を噴霧しながら行う請求項１２に記載の混合糖顆粒の製造方法。
【請求項１５】
前記流動層顆粒機に提供される乾燥空気は、２５ないし５０％ＲＨ、温度４０ないし７０℃、圧力３０ないし１５０ｍ３／ｈである請求項１４に記載の混合糖顆粒の製造方法。
【請求項１６】
前記第一糖粉末と第二糖粉末の混合重量比（第一糖粉末：第二糖粉末）は、７０：３０ないし５：９５である請求項１２に記載の混合糖顆粒の製造方法。
【請求項１７】
混合糖顆粒の総重量中、結合剤の含有量が、０．１ないし５重量％になるように結合剤を添加する請求項１２に記載の混合糖顆粒の製造方法。
【請求項１８】
前記結合剤は、水、Ｃ１−Ｃ６アルコール、Ｃ１−Ｃ６アルコールの水溶液、マルトデキストリン、難消化性マルトデキストリン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）およびでんぷんからなる群より選択された１種以上である請求項１２に記載の混合糖顆粒の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、プシコースが含まれている混合糖を主成分とする顆粒形態の混合糖組成物およびその製造方法に関し、さらに詳しくは甘美の質および物性が改善されたプシコース含有混合糖の顆粒およびその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
砂糖は食べ物に添加して甘味を出す代表的な甘味料の一つである。砂糖は優れた甘美度を有しており過去から多様な食べ物および加工食品などに添加されて食べ物の味を良くして食欲をかきたてる最も好まれる甘味料として用いられている。しかし、最近、砂糖の有害性が継続して明らかになることによって多様な問題点が提起されており、具体的には、砂糖の過剰摂取が虫歯はもちろん肥満、糖尿病など各種疾患の原因として指摘されている。したがって、砂糖を代替できる甘味料の開発の必要性が全世界的に台頭している実情である。
【０００３】
そのため、砂糖を代替できるほどの甘美度を有しながらも低カロリーであり、さらに、単に糖類の吸収を阻害することだけで糖の過剰摂取を遮断する甘味料でない、より改善された代替甘味料の開発が持続して求められている。
【０００４】
Ｄ−プシコースは糖蜜や異性化糖中に微量含まれているが、Ｄ−果糖からエピメラーゼによって酵素的に生産可能な希少糖の一種であり、体脂肪の蓄積抑制などの生理機能が期待されており、さらに甘美度が砂糖の７０％に至るにもかかわらず、カロリーが殆どなく、かつ溶解性に優れているため、多様な食品への応用が期待される。
【０００５】
しかし、Ｄ−プシコースを食品甘味料として用いる場合、プシコースが砂糖に比べて相対的に低い甘美度を有するという点で、必要な程度の甘美を得るためにＤ−プシコースの使用量が多くなっており、プシコースが濃厚感が過度に高いか、または甘美上昇が遅いなどの問題点があるため、混合使用がさらに好ましい。
【０００６】
これに、プシコースに他の種類の糖類を添加して混合糖を製造したり化学的結合を形成することによって目的とする甘美の質を達成する方法が試みられており、例えば、ステビオール配糖体、スクラロース、アスパルテーム、羅漢果抽出物、甘草抽出物、ソウマチンおよびアガベシロップのような高甘美度甘味料を添加する方法などがある。
【０００７】
混合糖を製造する方法の一例は、砂糖にキシロースを添加する方法として結晶形態の砂糖と粉末状のキシロースを単に「混合」する方式を一見して着眼することができる。しかし、２種類以上の成分が混合されて組成される粒子状または粉末状の食品組成物においては、「構成成分の均一な混合の可否」および「混合後、再分離の可否」が非常に重要な問題である。混合糖類製品において全般的に均一でないか、または再分離が起こり、仮に特定の部位では一定の成分が多く分布され、また他の部位では他の成分が多く分布している場合、全体的に意図した配合比がその特定の部位では達成できず、予想できない副作用をもたらし得るからである。
【０００８】
このような糖類の混合物において均一性の維持および再分離防止の問題は、粒子状または粉末状製品の製造者にとっては重要な問題であり、それに対する解決策が必ず伴われるときに粒子状または粉末状の食品として流通させることができるであろう。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
前記従来技術の問題点のうちの一つとして、糖粉末粒子が微細であるほど流れ性が良くないため、加工面で使用便利性が低下し、プシコースの吸湿性により粉末状態を維持しにくく、かつ不均一混合または再分離発生を解決したプシコースを含む混合糖顆粒およびその製造方法を目的とする。
【００１０】
本発明の他の目的は、単独プシコースの物性および甘美の質がより改善されたプシコースを含む混合糖顆粒およびその製造方法を提供することにある。
【００１１】
本発明の他の目的は、水分の影響を少なく受け、かつ均一な分布の混合糖顆粒を形成することができ、分散性と流れ性が向上して多様な包装を可能にする混合糖顆粒およびその製造方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明の一例は、（ａ）プシコースを含有する第一糖粉末と、（ｂ）第一糖粉末の平均粒径１００を基準に平均粒径３０ないし１７０、好ましくは９０ないし１７０の比率を有し、プシコースを除いた単糖類および二糖類からなる群より選択された１種以上の第二糖粉末を含む混合糖顆粒およびその製造方法に関する。
【００１３】
本発明による混合糖顆粒の吸湿度は、プシコース粉末の吸湿度１００を基準に９０以下、例えば５０ないし９０である。また、混合糖顆粒の流れ性は、プシコース粉末の１００を基準に１２０ないし２００、１２０ないし１９５、１２０ないし１９０、１２０ないし１８５、好ましくは１２０ないし１８０である。前記混合糖顆粒の吸湿度および流れ性は本技術分野で多様な方法で特定することでき、特別な方法に限定されるものではない。
【００１４】
本発明のまた他の一例は、（ａ）プシコースを含有する第一糖粉末と、（ｂ）第一糖粉末の平均粒径１００を基準に平均粒径３０ないし１７０の比率を有し、プシコースを除いた単糖類および二糖類からなる群より選択された１種以上の第二糖粉末に結合剤を添加して顆粒化する段階を含む混合糖顆粒の製造方法に関する。
【００１５】
本発明のさらに他の一例は、前記混合顆粒糖を含む食品組成物として、甘美が付与された食品、医薬品、口腔用組成物などであり、食品の例としては、飲料、キャンディ、氷菓、ヨーグルト、チョコレートなど全般的な甘美製品の組成物を含む。特に、粉末形態の食品（インスタント型粉末食品）、粉末製剤（ビタミン、乳酸菌粉末、抽出物粉末など）に効果的な使用が可能である。
【００１６】
顆粒化（Ｇｒａｎｕｌｅｓ）とは、医薬品や食品を粒状に成形したものであり、粒状の粉末混合物をそのまま、または結合剤を加えて均等に混合して乾燥して大きい粒径の粒子を製造することをいう。本発明の混合糖顆粒は、糖粉末粒子が微細であるほど流れ性が良くないため、架空的な側面で発生する使用便利性の低下、プシコースの吸湿性により粉末状態の維持困難性および不均一混合または再分離が発生する問題点を解決しており、単独プシコースでの物性および甘美の質がより改善されたプシコースを提供することができる。また、本発明の混合糖顆粒は、水分の影響を少なく受け、かつ均一な分布の混合糖顆粒を形成することができ、分散性と流れ性が向上して多様な包装を可能にする長所がある。
【００１７】
以下、本発明をさらに詳しく説明する。
【００１８】
本発明を（ａ）プシコースを含有する第一糖粉末と、（ｂ）第一糖粉末の平均粒径１００を基準に平均粒径３０ないし１７０、好ましくは９０ないし１７０の比率を有し、プシコースを除いた単糖類および二糖類からなる群より選択された１種以上の第二糖粉末を含む混合糖顆粒に関する。
【００１９】
本発明による混合糖顆粒の吸湿度は、プシコース粉末の吸湿度１００を基準に９０以下、例えば５０ないし９０である。また、混合糖顆粒の流れ性は、プシコース粉末の１００を基準に１２０ないし２００、１２０ないし１９５、１２０ないし１９０、１２０ないし１８５、好ましくは１２０ないし１８０である。前記混合糖顆粒の吸湿度および流れ性は、本技術分野で多様な方法で特定することができ、特別な方法に限定されるものではない。
【００２０】
前記混合糖顆粒の平均粒径が、第一糖粉末であるプシコースの平均粒径１００を基準に１００ないし２５０であり得る。また、前記第一糖粉末の平均粒径は、５０ないし３００μｍ単位であり、第二糖粉末の平均粒径は、５０ないし７００μｍ単位であり得る。前記第一糖粉末と第二糖粉末は、顆粒化する前に分級処理を行って平均粒径の標準偏差を減少させたものであり得る。
【００２１】
本発明の一例において、前記混合糖顆粒は、第一糖粉末と第二糖粉末の混合重量比（第一糖粉末：第二糖粉末）は、プシコースの生理活性効果の付与および顆粒の流れ性と甘美の質の向上を考慮して７０：３０ないし５：９５、例えば５０：５０ないし１０：９０であり得る。
【００２２】
前記粉末原料は、プシコースを含む第一糖粉末と、プシコースを除いた単糖類および二糖類からなる群より選択された１種以上を含む第二糖粉末を含み得る。
【００２３】
前記プシコースは、粉末、または他の糖類との混合糖形態で追加されることもできる。前記プシコースは、プシコース粉末、例えば純度９０％以上プシコースを粉末で用いるか、またはさらに他の糖類を含む混合糖であり得、混合糖の例は、果糖、葡萄糖、およびオリゴ糖からなる群より選択された１種以上をさらに含み得る。前記混合糖は、全体固形分含有量１００重量部を基準に１ないし９９．９重量部のプシコースを含有し得、さらに果糖、葡萄糖、およびオリゴ糖からなる群より選択された１種以上をさらに含み得る。
【００２４】
前記プシコース含有混合糖の具体的な例は、混合糖の全体固形分含有量１００重量部を基準に、プシコース２ないし５５重量部、果糖３０ないし８０重量部および葡萄糖２ないし６０重量部、およびオリゴ糖０ないし１５重量部を含むものであり得、オリゴ糖は含まないものであり得る。前記プシコース、果糖および葡萄糖は、好ましくはいずれもＤ型−異性体である。
【００２５】
前記プシコースは、化学的合成、またはプシコースエピマー化酵素を用いた生物学的方法で行うことができ、好ましくは生物学的方法で行うことができる。これに、前記プシコースは、プシコースエピマー化酵素、前記酵素を生産する菌株の菌体、前記菌株の培養物、前記菌株の破砕物、および前記破砕物または培養物の抽出物からなる群より選択された１種以上を含むプシコース生産用組成物を、果糖−含有原料と反応して製造されたものであり得る。
【００２６】
本発明の一例において、生物学的方法によりプシコースを製造する方法は、プシコースエピマー化酵素を生産する菌株またはプシコースエピマー化酵素を暗号化する遺伝子が導入された再組み合わせ菌株を培養して、これより得られたプシコースエピマー化酵素を果糖−含有原料と反応してプシコースを製造することであり得る。前記プシコースエピマー化酵素と果糖−含有原料との反応は、液相反応または固定化酵素を用いた固相反応で行うことができる。
【００２７】
または、プシコースエピマー化酵素を生産する菌株またはプシコースエピマー化酵素を暗号化する遺伝子が導入された再組み合わせ菌株を得て、菌株の菌体、前記菌株の培養物、前記菌株の破砕物、および前記破砕物または培養物の抽出物からなる群より選択された１種以上を含むプシコース生産用組成物を、果糖−含有原料と反応してプシコースを製造することであり得る。プシコースエピマー化酵素を生産する菌株の菌体を用いてプシコースを製造する場合、液相反応または固定化菌体を用いた固相反応で行うことができる。
【００２８】
本発明の具体的一例において、プシコースエピマー化酵素を生産する菌株としては、高い安定性を有しながらも高収率でプシコースエピマー化酵素を生産できる菌株であり得る。前記再組み合わせ菌株は、多様な宿主細胞、例えば、大腸菌、バシラス属菌株、サルモネラ属菌株およびコリネバクテリウム属菌株などを使用できるが、好ましくはＧＲＡＳ菌株であるコリネバクテリウム属菌株であり得、さらに好ましくはコリネバクテリウムグルタミカムであり得る。
【００２９】
再組み合わせ菌株を用いた場合、プシコースエピマー化酵素は、多様な菌株に由来した酵素の暗号化遺伝子を用いることができ、例えば、韓国特許公開２０１４−００２１９７４号に記載されたトレポネーマプリミティア由来酵素、韓国特許公開２０１４−００８０２８２に記載されたルミノコッカストルキース由来酵素、韓国登録特許１０−１３１８４２２号に記載されたクロストリジウムシンデンス由来酵素であり得、またはエンサイファアドヘレンス由来酵素であり得る。
【００３０】
具体的な一例において、本発明によるプシコースエピマー化酵素は、クロストリジウムシンデンス由来酵素であり得る。前記クロストリジウムシンデンス由来酵素は、序列番号７のアミノ酸序列を含むものであり得、序列番号８または序列番号９の核酸序列を含む塩基配列によって暗号化されるものであり得る。序列番号８の核酸序列は、大腸菌最適化核酸序列であり、序列番号９はコリネバクテリウムに適するように変形された核酸序列である。
【００３１】
本発明の一例による再組み合わせ菌株の製造において、前記プシコースエピマー化酵素を暗号化する核酸序列の上部に位置する調節序列を用いて酵素の発現を調節することができ、調節序列は、転写プロモーターを必須的で含み、さらにリボソーム結合領域および／またはスペーサ序列などを含み得る。前記調節序列を構成する要素は、直接連結するか、或いは１個ないし１００個の塩基、例えば、５個ないし８０塩基を有する核酸序列のリンカーを一つ以上含んで連結し得る。
【００３２】
一具体例において、前記転写プロモーターは、コリネバクテリウム属菌株でプシコースエピマー化酵素を暗号化する核酸序列を発現する核酸分子であり得、例えば、ｔａｃ１、ｔａｃ２、ｔｒｃ、ｓｏｄプロモーターであり得る。
【００３３】
前記ｓｏｄプロモーターは、コリネバクテリウムグルタミカム由来プロモーターとして、好ましくは序列番号１の核酸序列をコア領域として含むものであり得る。Ｔｒｃプロモーターは、大腸菌由来プロモーターとして、ｔｒｐプロモーターとｌａｃＵＶ５プロモーターの組み合わせで製造されたものである。Ｔａｃ１プロモーターは、大腸菌由来プロモーターとして、ｔｒｐプロモーターとｌａｃＵＶ５プロモーターの組み合わせで製造されたものである。Ｔａｃ２プロモーターは、大腸菌由来プロモーターとして、ｔｒｐプロモーターとｌａｃＵＶ５プロモーターの組み合わせで製造されたものであって、前記Ｔａｃ１プロモーターの序列を変形して最適化した形態である。
【００３４】
前記リボソーム結合領域とスペーサは、化学的に直接連結されるかまたはその中間にリンカー核酸序列を介在して関節的に連結され得る。本発明の一例において、リボソーム結合領域（ｒｉｂｏｓｏｍｅ  ｂｉｎｄｉｎｇ  ｒｅｇｉｏｎ）およびスペーサ序列は、５’から３’順に順次連結された一つのオリゴヌクレオチドを含み得る。本発明の一例によるプロモーター序列、リボソーム結合領域（ｒｉｂｏｓｏｍｅ  ｂｉｎｄｉｎｇ  ｒｅｇｉｏｎ）およびスペーサ序列の核酸序列を下記表１に示す。下記表１においてボルドアンダーラインで表示された部分は、調節序列中、リボソーム結合領域、スペーサ序列、リンカー序列などを示す。
【００３５】
【表１】
0006698152.tif 000002
【００３６】
本発明によるプシコースエピマー化酵素は、酵素活性および熱安定性に優れたものが好ましく、これに本発明の具体的な例において、転写プロモーターまたは調節序列は、プシコースエピマー化酵素をコーディングする遺伝子との組み合わせが重要であり、本発明に用いられたプシコースエピマー化酵素とはｔａｃ１、ｔａｃ２、ｔｒｃ、ｓｏｄプロモーターのいずれも適正以上の蛋白質の発現を提供することができ、特にｓｏｄプロモーターを用いた場合には、蛋白質のフォールディング（ｆｏｌｄｉｎｇ）が堅いため、熱安定性が高く現れる結果を得ることができるので、さらに好ましい。
【００３７】
再組み合わせ菌株を用いたプシコース生産方法などは、韓国特許公開２０１４−００２１９７４、韓国特許公開２０１４−００８０２８２および韓国登録特許１０−１３１８４２２号に記載された方法により行われ得るが、特に限定されない。
【００３８】
前記プシコース生産方法において、効率的なプシコース生産のため、基質として用いられる果糖の濃度は、全体反応物を基準に４０ないし７５％（ｗ／ｖ）、例えば、５０ないし７５％（ｗ／ｖ）であり得る。果糖の濃度が前記範囲より低ければ経済性が低くなり、前記範囲より高ければ果糖が旨く溶解しないので、果糖の濃度は前記範囲にした方が良い。前記果糖は、緩衝溶液または水（例えば蒸溜水）に溶解した溶液状態で用いることができる。
【００３９】
本発明による前記第二糖粉末は、具体的には、葡萄糖、砂糖、乳糖、マルトース、ガラクトース、タガトース、キシロース、マンノース、アロースおよび果糖からなる群より選択された１種以上であり得る。甘美の質を考慮する時、第二糖粉末は、砂糖と葡萄糖が好ましく、用途または機能性を考慮する時は、多様な糖類をさらに含み得る。前記第二糖粉末は、結晶または粉末形態で存在するので、本発明で提示する粒径条件に適合すれば混合糖を製造することに無理はない。例えば、前記葡萄糖は、無水葡萄糖または含水葡萄糖であり得る。前記砂糖は、精製度によって白砂糖、黄砂糖などであり得、平均粒径によって精白糖、細粒糖、微粒糖、粉糖であり得る。
【００４０】
本発明による混合糖顆粒は、糖粉末の結合剤をさらに含み得、最終得られた混合糖顆粒の総重量中の結合剤含有量が０．１ないし５重量％であり得る。前記結合剤の例は、水、Ｃ1−Ｃ6アルコール、Ｃ1−Ｃ6アルコールの水溶液、マルトデキストリン、難消化性マルトデキストリン、ＨＰＭＣ（ヒドロキシプロピルメチルセルロース）およびでんぷんからなる群より選択された１種以上であり得る。
【００４１】
前記顆粒化段階は、第一糖粉末と第二糖粉末を混合して乾燥して行うか、または流動層顆粒機で流動させて行い得、顆粒化工程では混合糖顆粒の総重量中の結合剤の含有量が０．１ないし５重量％になるように結合剤を添加し得る。
【００４２】
前記結合剤は、原料粉末に噴射して添加し得、結合剤を噴射しながら原料粉末を混合したり、原料粉末を混合した後に噴射し得るが、特に制限されるものではない。一例として、揮発性アルコールまたはこれを含む水溶液の場合、残量が大きくないので、結合剤の残量が０．１ないし５重量％になるように処理量を増加させ得、例えば添加量を混合糖顆粒の総重量中の１０ないし２０重量％で添加し得る。
【００４３】
本発明のまた他の一例は、（ａ）プシコースを含有する第一糖粉末と、（ｂ）第一糖粉末の平均粒径１００を基準に平均粒径３０ないし１７０の比率を有し、プシコースを除いた単糖類および二糖類からなる群より選択された１種以上の第二糖粉末に結合剤を添加して顆粒化する段階を含む混合糖顆粒の製造方法に関する。
【００４４】
前記得られた混合糖顆粒の特性は上述したとおりである。具体的には、前記製造された混合糖顆粒の平均粒径が、前記第一糖粉末の平均粒径１００を基準に１００ないし２００であるか、または混合糖顆粒の吸湿度が、プシコース粉末の吸湿度１００を基準に９０以下、例えば５０ないし９０であるか、または前記混合糖顆粒の流れ性が、プシコース粉末の流れ性１００を基準に１２０ないし２００であり得る。
【００４５】
本発明の一例において、前記顆粒化工程は、混合機で原料粉末を混合および乾燥して顆粒化を行うか、または流動層顆粒機で原料粉末を流動化させて行うことができる。流動層顆粒機は、粉末が下から上に移動している状態で結合剤を添加すると、原料粉末が上下に移動しようとする力（摩擦力）によって、多くの流動粉末の表面が溶けて粉末同士が結合するようになることによって顆粒が行われ、また、顆粒された流動粉末が、摩擦によって表面がなめらかになることで流れ性がさらに改善されるので、流動層顆粒機を用いることがさらに好ましい。
【００４６】
本発明の一例において、混合機で原料粉末を混合および乾燥して顆粒化を行う場合には、前記第一糖粉末と第二糖粉末を混合および４０ないし７０℃の温度範囲（例えば、４５℃（実施例３））で熱風乾燥して行うことができる。
【００４７】
また他の一例において、流動層顆粒機で第一糖粉末と第二糖粉末を流動化させて結合剤を噴霧しながら顆粒化を行う場合、例えば２５ないし５０％ＲＨ、温度４０ないし７０℃、圧力３０ないし１５０ｍ3／ｈの空気を流動層顆粒機に供給して原料粉末を流動させることもできる。
【００４８】
本発明のまた他の一例において、前記混合糖顆粒を含む食品組成物を提供することができ、前記混合糖顆粒は吸湿性が低く、流れ性が改善されるだけでなく、単独プシコースに比べて甘美の質が向上した長所があり、砂糖や甘味料と同じ用途に用いることができ、多様な食品に適用することが可能である。
【００４９】
具体的には、飲料、キャンディ、氷菓、ヨーグルト、チョコレートなど甘美が付与された食品全般に用いることができ、特に粉末形態の食品群で甘美付与用組成物として適して用いることができる。前記式品組成物中、混合糖顆粒の含有量は０．０１ないし５０重量％で含まれることができる。
【発明の効果】
【００５０】
本発明は、プシコースを他の糖類と混合糖顆粒で製造することにより、顆粒の甘美の質および特性の均一性を維持および再分離防止をすることができ、流れ性および吸湿性を改善させることによって粉末状製品の包装、流通、または長期保管時に発生できる問題点を補完することができる。また、官能的にプシコースが有する甘美上昇が遅いという問題と後尾での苦味（異味）が感じられる問題を補完して甘美の質が改善されたプシコース混合組成物を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００５１】
【図１】本発明の製造例１で得られたプシコース粉末を倍率Ｘ１００で測定した走査電子顕微鏡（ＳＥＭ）写真である。
【図２】本発明の製造例１で得られたプシコース粉末を倍率Ｘ４００で測定した実体顕微鏡写真である。
【図３】本発明の製造例１で得られたプシコース結晶のＸ線回折パターングラフである。
【図４】本発明の一実施例によるプシコースと無水葡萄糖の混合糖顆粒を倍率Ｘ４００で測定した実体顕微鏡写真である。
【図５】本発明の一実施例によるプシコースと砂糖の混合糖顆粒の官能評価の結果を示す甘美プロファイルグラフである。
【図６】本発明の一実施例によるプシコースと葡萄糖の混合糖顆粒の官能評価の結果を示す甘美プロファイルグラフである。
【図７】本発明の一実施例によるプシコース−含有混合糖顆粒の流れ性の増加量を示すグラフである。
【図８】本発明の一実施例によるプシコース−含有混合糖顆粒の時間に応じた吸湿増加量を示すグラフである。
【図９】本発明の一実施例によるプシコース−含有混合糖顆粒の吸湿性を比較したグラフである。
【図１０】本発明用いられるプシコースシロップの製造のための発現再組み合わせベクター（ｐＣＥＳ＿ｓｏｄＣＤＰＥ）の一例を示した図面である。
【発明を実施するための形態】
【００５２】
本発明を下記例示的な実施例に基づいて、さらに詳しく説明するが、本発明の保護範囲は、下記の実施例に限定する意図ではない。
【００５３】
製造例１：プシコースの製造
１−１：プシコース生産菌株の製造
クロストリジウムシンデンス（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｉｍ  ｓｃｉｎｄｅｎｓ  ＡＴＣＣ  ３５７０４）に由来したプシコースエピマー化酵素の暗号化遺伝子（ＤＰＥ  ｇｅｎｅ；Ｇｅｎｅ  ｂａｎｋ：ＥＤＳ０６４１１．１）を大腸菌に最適化して変形した形態のポリヌクレオチドで合成してＣＤＰＥと命名する。大腸菌に最適化したポリヌクレオチド（序列番号２）とｐＥＴ２１ａベクターから確保したｓｏｄプロモーターとＴ７ターミネーターをＰＣＲによりそれぞれの鋳型で確保し、これをオーバーラップＰＣＲ法で一つの鋳型で連結してＴ−ｖｅｃｔｏｒ  ｃｌｏｎｉｎｇによりｐＧＥＭＴ−ｅａｓｙ  ｖｅｃｔｏｒにクローニングして、ｓｏｄプロモーター（序列番号１）、最適化ＣＤＰＥ序列（序列番号８）およびＴ７−ターミネーターを含むポリヌクレオチドの序列を確認した。
【００５４】
前記確認された全体ポリヌクレオチドを制限酵素ＮｏｔＩとＸｂａＩ（ＮＥＢ）を用いて発現ベクターであるｐｐＣＥＳ２０８（Ｊ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，１８：６３９−６４７，２００８）の同一の制限酵素の部位に挿入して再組み合わせベクターｐＣＥＳ２０８／プシコースエピマー化酵素（ｐＣＥＳ＿ｓｏｄＣＤＰＥ）を製造した。前記製造された再組み合わせベクター（ｐＣＥＳ＿ｓｏｄＣＤＰＥ）の開裂地図を図１０に開示した。
【００５５】
前記製造された再組み合わせベクター（ｐＣＥＳ＿ｓｏｄＣＤＰＥ）プラスミドを電気穿孔法（ｅｌｅｃｔｒｏｐｏｒａｔｉｏｎ）を用いてコリネバクテリウムグルタミカムを形質転換させた。コロニーをピッキングしてカナマイシン（Ｋａｎａｍｙｃｉｎ）を最終濃度１５ｕｇ／ｍｌで添加したＬＢ培地（トリプトン１０ｇ／Ｌ、ＮａＣｌ１０ｇ／Ｌ、酵母抽出物５ｇ／Ｌ）４ｍｌに接種した後、培養条件３０℃および２５０ｒｐｍで約１６時間の間培養して、前記培養液のうち１ｍｌを収得して１５ｕｇ／ｍｌのカナマイシンを含んでいる１００ｍｌ  ＬＢ培地に接種して本培養を１６時間以上行った。
【００５６】
その後、Ｂｅａｄｂｅａｔｅｒを用いて培養した細胞を溶解（ｌｙｓｉｓ）させた後、上澄液のみを取得してサンプルバッファーと１：１で混合後、１００℃で５分間加熱した。準備されたサンプルを１２％ＳＤＳ−ＰＡＧＥ  ｇｅｌ（組成：ｒｕｎｎｉｎｇ  ｇｅｌ−３．３ｍｌ  Ｈ2Ｏ，４．０ｍｌ  ３０％  ａｃｒｙｌａｍｉｄｅ，２．５ｍｌ  １．５Ｍ  Ｔｒｉｓ  ｂｕｆｆｅｒ（ｐＨ８．８），１００μｌ  １０％  ＳＤＳ，１００μｌ，  １０％  ＡＰＳ，４μｌ  ＴＥＭＥＤ／ｓｔａｃｋｉｎｇ  ｇｅｌ−１．４ｍｌ  Ｈ2Ｏ，０．３３ｍｌ  ３０％  ａｃｒｙｌａｍｉｄｅ，０．２５ｍｌ  １．０Ｍ  Ｔｒｉｓ  ｂｕｆｆｅｒ（ｐＨ６．８），２０μｌ  １０％  ＳＤＳ，  ２０μｌ  １０％  ＡＰＳ，  ２μｌ  ＴＥＭＥＤ）に１８０Ｖで約５０分間の電気泳動して蛋白質（ＣＤＰＥ）の発現を確認した。
【００５７】
ＣＤＰＥの発現をＳＤＳ−ＰＡＧＥ  ｇｅｌ上で確認後、正確な発現量の測定のためにＮｉ−ＮＴＡ  ｒｅｓｉｎを用いたＨｉｓ−ｔａｇ精製を行い、計算式（発現率（％）＝（Ｐｕｒｉｆｉｅｄ  ｐｒｏｔｅｉｎ（ｍｇ）／Ｔｏｔａｌ  ｓｏｌｕｂｌｅ  ｐｒｏｔｅｉｎ（ｍｇ））＊１００）を用いて発現率計算した。前記製造された形質転換コリネバクテリウムグルタミカムは、全体水溶性蛋白質を１６．６２ｍｇおよび精製された酵素蛋白質１．７４ｍｇを生産した。
【００５８】
１−２：プシコースシロップの製造
製造例１−１で得られたプシコースエピマー化酵素を生産する再組み合わせ菌株を用いて果糖からプシコースを製造するため、菌株培養で遠心分離で細胞を回収した。その後、前記細胞懸濁液に最終体積に乳化剤（Ｍ−１６９５）を０．０５％（ｗ／ｖ）処理して３５℃（±５℃）で６０分間処理した。反応が完了した菌体は再び遠心分離機を用いて乳化剤が含まれている上澄液は除去した後、菌体を回収した。
【００５９】
固定化ビードの製造のために、前記回収された菌体はＤ．Ｗ．と混合して最終菌体濃度５％（ｗ／ｖ）に合わせて、水に溶解した４％（ｗ／ｖ）アルギン酸と回収された菌体５％（ｗ／ｖ）を１：１で混合して、混合時生成された気泡を除去するために４℃で冷蔵保管した。前記冷蔵保管された混合液は、Ｎｅｄｄｌｅ（内径０．２０ないし０．３０ｍｍ）により混合液が射出されて滴の形態に形成されて重量によって落下し、落下された混合液は、予め製造された１００ｍＭ塩化カルシウム（ＣａＣｌ2）溶液を浸漬して硬化させて球形または楕円形のビードを（直径２．０ないし２．２ｍｍ）形成した。前記形成されたビードは、１００ｍＭ塩化カルシウム溶液に浸して撹拌機によって均等に混合されながらさらに硬化するようにした。
【００６０】
前記混合液がすべて射出された後に、４ないし６時間冷蔵保管しながらビードをさらに硬化した後、新たな１００ｍＭ塩化カルシウム溶液と取り換えて冷蔵状態で約６時間程度硬化をさせた。硬化が完了したビードは取り出して水気を完全に除去した後、ビード体積に対して３倍体積の水を投入した後１０分間攪拌して、このような過程を３回処理して塩化カルシウム溶液を除去した。
【００６１】
洗浄されたビードはマンガンソーキングのために水気を完全に除去した後、１０ｍＭマンガンが含まれている４０ｂｒｉｘ（％）反応基質をビード体積に対して３倍体積で投入した後１０分間攪拌して、このような処理を３回以上処理して１０ｍＭマンガンが含まれている反応基質に取り換えた。反応基質は、ｐＨ６．８ないし７．２に３Ｎ  ＮａＯＨによって調節され、生産物の種類によって液状果糖または結晶果糖が反応基質になることができる。１０ｍＭマンガンが含まれている反応基質に取り換えられたビードは反応槽に移された後、反応温度５０℃で約３０ないし６０分間反応してマンガンおよび果糖でビードのソーキング作業を完了した。ソーキングが完了したビードは、直径が約１．６ないし１．８ｍｍに減り、強度も増加する。ソーキングが完了したビードの基質を除去した後固定化反応カラムに充填した後、プシコースシロップの生産に用いた。
【００６２】
＜固定化カラムの反応条件＞
反応温度：カラムジャケットの内部温度５０℃
基質流速：０．５  ＳＶ（ｓｐａｃｅ  ｖｅｌｏｃｉｔｙ  Ｌ．ｈ-1）
反応基質：結晶果糖４０ｂｒｉｘ、ｐＨ６．８ないし７．２、
ビード製造：２．５％（ｗ／ｗ）菌体、２％（ｗ／ｗ）アルギン酸混合および１０ｍＭＭｎ2+ｓｏａｋｉｎｇ
前記固定化反応カラムに、原料溶液が７５％の固形分を含み、全体固形分含有量が１００重量部である時、果糖の含有量を９２重量部含む原料を提供してプシコースシロップを製造した。前記反応液から葡萄糖：果糖：プシコース：オリゴ糖の重量比が６：６７：２５：２である２５（ｗ／ｗ）％プシコースシロップを収得した。
【００６３】
１−３：プシコース粉末の製造
製造例１−２で得られたプシコースシロップを有色およびイオン成分などの不純物を除去するために陽イオン交換樹脂、陰イオン交換樹脂および陽イオンと陰イオン交換樹脂が混合された樹脂で充填された常温のカラムに時間当りイオン交換樹脂２倍（１ないし２倍）体積の速度で通液させて脱塩させた後、カルシウム（Ｃａ2+）タイプのイオン交換樹脂で充填されたクロマトグラフィーを用いて高純度プシコース溶液を分離収得した。前記高純度プシコースシロップを８２Ｂｘ（％、ｗ／ｗ）（８０ないし８３Ｂｘ）濃度で濃縮させ、過飽和状態になる温度３５℃（３５ないし４０℃）で徐々に温度１０℃（１０ないし１５℃）まで冷却させて結晶を生成させた。この時、プシコース種晶を添加せず、前記結晶化段階で得られたプシコース結晶は遠心脱水によって母液を除去して結晶を冷却水で洗浄した後、乾燥して回収した。
【００６４】
前記得られたプシコース結晶粉末の平均粒度は２３７μｍであり、粒径範囲は７４ないし４２８μｍで分布しており、結晶構造は斜方晶系の長い直六面体の模様を有する。直六面体結晶の横Ｘ縦の直径比率は、平均１Ｘ４であり、１Ｘ１．５ないし６．９の直径範囲を有する。本発明によるプシコース結晶の走査電子顕微鏡（ＳＥＭ）写真と、プシコース結晶の実体顕微鏡写真（Ｘ４００倍拡大）を図１及び図２に示し、結晶からＸ線回折パターンを分析して主な回折角（θ）は、１５．３５°、１８．８３°、３０．９５°、４７．１５°であることを確認し、これを図３に示した。
【００６５】
実施例１：プシコースと葡萄糖の混合顆粒の製造
１−１：平均粒度が２９５μｍである無水葡萄糖を使用
製造例１−３で製造されたプシコース粉末と平均粒度が２９５μｍである無水葡萄糖粉末を各１５０ｇずつ１：１重量比（ｗ／ｗ）になるように混合した後、ＩｎＬｅｔ温度５０℃、ＯｕｔＬｅｔ温度４０℃、Ａｉｒ圧力３０ｍ2／ｈの条件に設定された流動層顆粒乾燥機（ＦＢＳ、ＨＵＴＴＬＩＮ製、ドイツ）に粉末を投入して顆粒を製造して乾燥した。この時、顆粒が旨く行われるように結合液を純度９５％以上の発酵酒精で全体混合粉末重量の総重量の１０ないし２０％体積だけ１０ｒｐｍの速度で１５分間噴射させた。酒精は噴射されながら揮発されて粉末には存在しないため、含有量に影響を与えないという長所がある。酒精がすべて噴射されると内部温度を３０℃以下に徐々に冷却させた後、顆粒粉末を装備から取り出して回収した。前記得られたプシコースと無水葡萄糖の混合顆粒粉末の実体顕微鏡写真（Ｘ４００倍拡大）を図４に示した。
【００６６】
１−２：平均粒度が２６１μｍになる含水葡萄糖を使用
製造例１−３で製造されたプシコース粉末と平均粒度が２６１μｍになる含水葡萄糖を各１５０ｇずつ１：１比率（ｗ／ｗ）になるように混合した後、実施例１−１と実質的に同様の方法で顆粒を製造した。
【００６７】
実施例２：プシコースと砂糖の混合顆粒の製造
２−１：平均粒度が７２μｍの粉糖を使用
製造例１−３で製造されたプシコース粉末と平均粒度が７２μｍになる粉糖（砂糖を粉砕して製造したものであって、表１に記載されたものである）を各１５０ｇずつ１：１重量比（ｗ／ｗ）になるように混合した後、実施例１と同様の方法で顆粒粉末を製造した。
【００６８】
２−２：平均粒度が２３０μｍの細粒糖を使用
製造例１−３で製造されたプシコース粉末と平均粒度が２３０μｍになる細粒糖（砂糖）を各１５０ｇずつ１：１重量比（ｗ／ｗ）になるように混合した後、実施例１と同様の方法で顆粒粉末を製造した。
【００６９】
２−３：平均粒度が３９２μｍの細粒糖を使用
製造例１−３で製造されたプシコース粉末と平均粒度が３９２μｍになる細粒糖（砂糖）を各１５０ｇずつ１：１重量比（ｗ／ｗ）になるように混合した後、実施例１と同様の方法で顆粒粉末を製造した。
【００７０】
２−４：平均粒度が６８４μｍの精白糖を使用
製造例１−３で製造されたプシコースの粉末と平均粒度が６８４μｍになる精白糖（一般砂糖）を各１５０ｇずつ１：１重量比（ｗ／ｗ）になるように混合した後、実施例１と同様の方法で顆粒粉末を製造した。
【００７１】
実施例３：結合剤を用いたプシコースおよび砂糖混合顆粒の製造
粉末粒子間に均等に顆粒が行われるように結合剤として、ＤＥ１２マルトデキストリン、天然水溶性食物繊維、変性でんぷん、およびヒドロキシプロピルメチルセルロース（Ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｐｙｌ  ｍｅｔｈｙｌｃｅｌｌｕｌｏｓｅ、ＨＰＭＣ）を準備した。マルトデキストリンを３０Ｂｘ濃度になるように水に溶解して溶液を準備して、天然水溶性食物繊維として難消化性マルトデキストリン３０Ｂｘ濃度になるように水に溶解して溶液を製造して、変性でんぷんとしてアルファ−でんぷんを１０％濃度になるように水に溶解して溶液を準備して、ＨＰＭＣを５重量％濃度になるように純度９５％醗酵酒精に溶解して溶液で製造した。
【００７２】
製造例１−３で製造したプシコース粉末を、平均粒度が２３０μｍである砂糖細粒糖をそれぞれ５０ｇずつ１：１重量比率になるように混合した。前記混合物に準備された結合剤溶液を滴加した後、２０ｍｅｓｈの篩を通過させて粉末状の粒子を結合させた。この状態で４５℃で３０ないし６０分間熱風乾燥後、顆粒を均等にふるい分けを行って収得した。前記準備された結合剤溶液として、マルトデキストリン、難消化性マルトデキストリンおよびＨＰＭＣは、顆粒剤の総重量中、結合剤の最終含有量が１重量％になるように添加し、アルファ−でんぷんは、顆粒剤の総重量中、結合剤の最終含有量が０．５重量％になるように添加した。
【００７３】
試験例１：粉末の粒度分析
粒度分析装備（装備名：Ｍａｓｔｅｒｓｉｚｅｒ２０００、Ｍａｌｖｅｒｎ製）は、レーザ回折技術を用いて粒子の大きさを測定するものであり、レーザー光線が分散された微粒子試料を通過する時に散乱される光の強度を測定して粒子の大きさを計算する方式で分析が行われる。この装備を用いて各混合成分間の粒子大きさを測定して、結果は下記表２に記載した。
【００７４】
【表２】
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【００７５】
試験例２：混合糖顆粒の混合度の分析
実施例１−５で製造した顆粒粉末を袋に入れて振動機で１０分間振動後、上中下の３部分の顆粒を部分採取して高速液体クロマトグラフィーで分析して、各サンプルの糖組成を確認した。その結果は表３と表４に示した。顆粒粉末で混合成分間の糖組成偏差が１％以下、水準まで顆粒糖の混合が均一に旨く行われたもので決めた。
【００７６】
【表３】
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【００７７】
表３に示したように、実施例１では混合される二つの成分の平均粒度の比率が、プシコース：葡萄糖＝１．０：１．１ないし１．２（表２を参照）で、二つの成分間の粒子が類似するため、結合液によって顆粒が旨く行われ、単に「ミキシング」混合する方法より組成偏差が少なく、均一な組成の顆粒粉末粒子を製造できることを確認した。
【００７８】
【表４】
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【００７９】
実施例２−４では、砂糖平均粒度の大きさがプシコースより４倍以上大きいため、結合液を用いても均一な組成の混合顆粒粉末を製造することが難しかった。しかし、実施例２−４を除いて、混合される二つの成分の平均粒度の比率が、プシコース：砂糖＝１．０：０．３〜１．７の範囲内にある混合顆粒粉末（実施例２−１、２−２、２−３）では、組成偏差が少なく均一な組成の顆粒粉末を製造できることを確認した。
【００８０】
また、実施例３で結合液の種類別にプシコースと砂糖混合顆粒を製造した結果、結合剤の種類別に若干の差はあるが、大部分は顆粒が旨く行われ、均一な組成の顆粒粉末を製造できることを確認した。
【００８１】
試験例３：プシコース混合顆粒粉末の官能評価
プシコースと砂糖の混合糖顆粒の官能評価のための顆粒粉末サンプルは、結合液を醗酵酒精として単純顆粒方法によって製造した。実施例１−３のプシコースの粉末を砂糖細粒糖と９：１、７：３、５：５（ｗ／ｗ）の比率になるようにそれぞれ混合する。各１００ｇずつを混合して純度９５％以上の発酵酒精を重量の５〜１０％で滴加した後、２０ｍｅｓｈの篩に通過させて粉末状の粒子を互いに結合させる。この状態で４５℃で３０〜６０分間熱風乾燥後、顆粒された粒子粉末を均等にふるい分けを行って収得する。前記得られた混合糖は、プシコースの粉末を砂糖の混合比率により、９：１、７：３、５：５（ｗ／ｗ）の比率によってＳＰ９１、ＳＰ７３およびＳＰ５５と命名した。
【００８２】
プシコースと葡萄糖の混合糖顆粒の官能評価のための顆粒粉末サンプルは、結合液を醗酵酒精として単純顆粒方法によって製造した。実施例１で用いたプシコースの粉末を無水葡萄糖と７：３、５：５、３：７（ｗ／ｗ）の比率になるようにそれぞれ混合する。各１００ｇずつを混合して純度９５％以上の発酵酒精を重量の５〜１０％で滴加した後、２０ｍｅｓｈの篩に通過させて粉末状の粒子を互いに結合させる。この状態で４５℃で３０〜６０分間熱風乾燥後、顆粒された粒子粉末を均等にふるい分けを行って収得した。前記得られた混合糖は、プシコースの粉末を無水葡萄糖と７：３、５：５、３：７（ｗ／ｗ）の比率によってＧＰ７３、ＧＰ５５およびＧＰ３７と命名した。
【００８３】
砂糖または葡萄糖とプシコースが混合された顆粒粉末試料の官能評価を実施した。各試料は、それぞれ０．７ｇずつ採取して提供して、乱数表を用いて無作為に抽出した三桁数字で表示した。試料の提示順序は、常に無作為に定め、検査要員には口をすすぐためのぬるい水を共に提供した。官能検査室は、一定の温度（２５±１℃）と臭くない状態を維持した。
【００８４】
官能検査員は、官能検査に対する理解度が高く、かつ官能試験経験があるパネル１５名を選定した。訓練は１週間に３回ずつ１ヶ月間行い、訓練１回当たり平均３０分ずつ所要した。評価内容および方法は、プシコース混合糖の官能的特性は、甘味、酸味、苦味、清涼感、甘味持続性を評価し、１５ｃｍ線尺度を用いた。
【００８５】
前記官能評価の結果数値を下記表５および６に示し、官能評価の結果の甘美プロファイルグラフは、図５および図６に示した。表５は、プシコース／砂糖混合糖の官能評価の結果であり、表６は、プシコース／葡萄糖混合糖の官能評価の結果である。
【００８６】
【表５】
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【００８７】
【表６】
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【００８８】
プシコースは砂糖の７０％に該当する甘美度を有するが、甘美上昇が遅いことや後尾に苦味または異味を有しており、甘美の質の改善が必要である。したがって、砂糖または葡萄糖と一定比率で混合することによって、プシコースが有する甘美の質の短所を補完して味が改善された甘味料を提供することができる。官能評価の結果を表で示したように、プシコースと砂糖の混合によりプシコース単独より甘味が上昇して異味と苦味が緩和され、特に甘味の持続性が既存砂糖よりもはるかに増加することが分かった。またプシコースと葡萄糖の混合によりプシコース、葡萄糖、それぞれが単独である時より甘味がさらに強く感じられ、異味と苦味もまた既存の葡萄糖と類似する水準にプシコース単独に比べて緩和されることを確認した。特に甘味の持続性が既存の砂糖及び葡萄糖よりもはるかに増加することを確認した。これはプシコース混合糖粉末自体を摂取した時、プシコースが有する清涼感が摂取時に直ちに浮き彫りになり、かつプシコースの特有の異味と苦味を補完して遅れた甘美の上昇が砂糖または葡萄糖の甘味とシナジーを起こして甘味が長く持続され、かつ甘味もまた強く感じられることであると判断される。
【００８９】
試験例４：プシコース混合糖顆粒の物性
（１）流れ性の評価
試料２０ｇを正確に称量して測定用Ｆｕｎｎｅｌ（Ｏｒｉｆｉｃｅ１．５５ｍｍ）に入れて、秤の上に試料２０ｇが全て流れ落ちた時間（秒）を測定して、その結果を下記表７および図７に示した。
（例、Ｆｌｏｗ  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  Ｔｅｓｔｓ  −ｆｌｏｗ  ｔｈｒｏｕｇｈ  ａｎ  ｏｒｉｆｉｃｅ，  ａｎｇｌｅ  ｏｆ  ｒｅｐｏｓｅ，  ｓｈｅａｒ  ｃｅｌｌ）
【００９０】
【表７】
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【００９１】
単独プシコース粉末に比較して混合顆粒粉末の流れ性が、プシコースより１２０ないし１５９％以上の水準まで良くなることを確認した。流れ性が改善されることによって、粒子状または粉末状の製品を出荷する会社立場からは、製品包装および流通段階での多くの利点の提供を受けることができる。
【００９２】
（２）吸湿性の評価
各試料３ｇずつ皿に入れて温度４０℃と相対湿度６０±３％条件の恒温恒湿機で１５０分間保管して、５０分、７０分および１５０分が経過した後にそれぞれ試料の重量を測定して、その結果を図８および図９に示した。また、同一時間での吸湿性の増加率を比較するため、恒温恒湿機に同じ条件で保管した後に、各試料の重量を測定して吸湿増加量を単独プシコース粉末１００％を基準に吸湿性を換算して、下記表８に示した。
【００９３】
【表８】
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【００９４】
図８の吸湿増加量グラフで各試料の吸湿性を比較した結果、混合糖顆粒の吸湿性が単独プシコース粉末１００％を基準に、８４ないし５６％以下の低い吸湿性を示した。ここで、吸湿性が低いということは、粉末状製品の出荷および長期間保管時、周辺環境によって粉末が固まるＣａｋｉｎｇ現象や湿気る危険性が低くなることを意味する。
【００９５】
試験例５：混合糖顆粒および構成糖粉末の示差走査熱量計（ＤＳＣ）の分析
前記製造された混合糖顆粒が、混合糖の構成糖粉末の化学的特性がそのまま維持される糖粉末の混合顆粒状であることを確認するため、実施例１−１および実施例２−２で製造された混合糖顆粒とこれを構成する各構成成分の単独物質の分析対象試料と標準物質に提供されたエネルギーから得られた温度、熱量変化データ（ピークの位置、模様、個数、面積など）から試料の物理的および化学的性質が分かる示差走査熱量計（Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ  Ｓｃａｎｎｉｎｇ  Ｃａｌｏｉｍｅｔｅｒ、ＤＳＣ）分析法を行った。ＤＳＣ測定に用いた試料は、下記のとおりである。
【００９６】
【表９】
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【００９７】
下記のようなＤＳＣ（示差走査熱量計）装備および分析情報を用い、その結果を表１０に示した。
【００９８】
−装備名：ＤＳＣ［ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ  ｓｃａｎｎｉｎｇ  ｃａｌｏｒｉｍｅｔｒｙ］
−製造会社：Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ（パーキンエルマ）
−モデル名：Ｄｉａｍｏｎｄ  ＤＳＣ
−分析条件：常温（ＲＴ）ないし２５０℃１０℃／ｍｉｎ昇温、Ｎ２  ｇａｓ  ｐｕｒｇｅ（基準方法：米国の標準試験法  ＡＳＴＭ  Ｄ  ３４１８を参照）
【００９９】
【表１０】
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【０１００】
前記表１０で確認できるように、本願発明の混合糖顆粒の場合（実施例１−１および実施例２−２）、二つの混合成分の固有の吸熱ピークが検出されることを確認することができた。つまり、本願発明の混合糖顆粒に含まれている糖粉末を単独で分析した結果と混合糖に含まれている構成成分としての結果が、全て同じ吸熱ピーク温度を示し、このような事実は、混合糖顆粒内でも各構成成分の物理／化学的性質をそのまま維持していることを意味する。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【配列表】
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